(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
白花豆抽出物を含有するタンパク質溶解剤。
【請求項２】
白花豆抽出物を含有する角質除去剤。
【請求項３】
白花豆抽出物を含有する皮膚外用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、角質柔軟剤に関する。更に詳しくは、角質のタンパク質を溶解・軟化させることの出来る角質除去剤、タンパク質溶解剤、皮膚外用剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
人の皮膚では、加齢に伴い、正常な新陳代謝においては垢となって落屑するはずの角質層（以後老化角質と称する）が、落屑せず滞留する現象がしばしば見られるようになる。老化角質が落屑せず滞留すると、角質層全体としても固く肥厚した状態となり、皮膚は潤いや滑らかさを失い、更には透明感の低下したくすみのある外観へと変化する。
【０００３】
上記のような状況から、老化角質を除去することにより皮膚に本来の潤い、滑らかさを取り戻し、くすみを改善することが望まれている。
【０００４】
従来から、老化角質除去を目的とした皮膚外用剤は数多く市販されている。このような皮膚外用剤の多くは乳酸、グリコール酸などに代表されるα−ヒドロキシ酸やサリチル酸等の角質剥離成分を配合している(特許文献1、特許文献２)。しかしながら、これらの角質剥離成分を配合した皮膚外用剤は、角質除去効果には優れているものの肌への負担が大きい。
【０００５】
上記のような従来の問題点を解消するために、肌への負担が少ない尿素やアルギニンを配合する方法が提案されているが、尿素は使用を続けるとピリピリ感や紅斑を引き起こすという報告(非特許文献1)があり、十分に肌への負担が小さいとはいえない。アルギニンに関しては肌への負担は小さくなるものの角質除去効果が十分に得られない。
【０００６】
一方、マメ科植物はアルギニンを含むことが知られているものの、その含有量は種により大きく異なる（非特許文献２）。
【０００７】
マメ科植物の抽出物は主に、保湿作用（特許文献３）、その他成分と併用することで角質形成細胞成長促進作用（特許文献４）、皮膚角質量減少作用（特許文献５）が知られているが、マメ科植物単独での角質除去作用については知られていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開２００４−２７７２９５号公報
【特許文献２】特開平１１−２６３７０７号公報
【特許文献３】特開２００２-２６５３２４号公報
【特許文献４】特表２００９−５２３７８５号公報
【特許文献５】特開２０１２-１７１９６０号公報
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】KEGG MEDICUSデータベース（金久ラボラトリーズ）「尿素」の項、ttp://www.kegg.jp/medicus-bin/japic_med?japic_code=00065706
【非特許文献２】文部科学省食品成分データベース  「まめ乾燥物アルギニン量」の項、  http://fooddb.mext.go.jp/index.pl
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本願発明者らは、上述の課題解決の為に、鋭意研究を行った結果、特定のマメ科植物抽出物中に含まれるアルギニン以外の成分に角質柔軟効果を発見し、発明の完成に至った。
本発明の課題は、肌への負担なく、加齢等による角質の肥厚を予防・改善することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
白花豆、紫花豆、小豆、ヒヨコ豆、緑豆、なた豆の抽出物を用いることで、上記課題を解決した。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、優れた角質柔軟、角質除去、タンパク質溶解効果が得られ、加齢等によるターンオーバー遅延による角質の肥厚の予防・改善を行うことが出来る。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】各種マメ科植物抽出物のタンパク質溶解作用
【図２】白花豆抽出物のタンパク質溶解作用とアルギニン量との関係
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明では、以下のマメ科植物の抽出物を有効成分とする。
【００１５】
本発明に用いる白花豆はマメ（Ｆａｂａｃｅａｅ）科インゲンマメ（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ）属ベニバナインゲンの変種（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ. ｃｏｃｃｉｎｅｕｓ Ｌ．ｖａｒ．ａｌｂｕｓ  Ｂａｉｌｅｙ）である。
使用部位は、特に限定されないが、全草、花、葉、茎、根、種子が使用できるが、種子が特に好ましい。
【００１６】
本発明に用いる紫花豆はマメ（Ｆａｂａｃｅａｅ）科インゲンマメ（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ）属ベニバナインゲン（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ. ｃｏｃｃｉｎｅｕｓ Ｌ.）である。
使用部位は、特に限定されないが、全草、花、葉、茎、根、種子が使用できるが、種子が特に好ましい。
【００１７】
本発明に用いる小豆はマメ（Ｆａｂａｃｅａｅ）科ササゲ（Ｖｉｇｎａ）属アズキ（Ｖｉｇｎａ  ａｎｇｕｌａｒｉｓ）である。
使用部位は、特に限定されないが、全草、花、葉、茎、根、種子が使用できるが、種子が特に好ましい。
【００１８】
本発明に用いるヒヨコ豆はマメ（Ｆａｂａｃｅａｅ）科ヒヨコマメ（Ｃｉｃｅｒ）属ヒヨコマメ（Cｉｃｅｒ  ａｒｉｅｔｉｎｕｍ  Ｌ．）である。
使用部位は、特に限定されないが、全草、花、葉、茎、根、種子が使用できるが、種子が特に好ましい。
【００１９】
本発明に用いる緑豆はマメ（Ｆａｂａｃｅａｅ）科ササゲ（Ｖｉｇｎａ）属ヤエナリ（Ｖｉｇｎａ  ｒａｄｉａｔａ）である。
使用部位は、特に限定されないが、全草、花、葉、茎、根、種子が使用できるが、種子が特に好ましい。
【００２０】
本発明に用いるなた豆はマメ（Ｆａｂａｃｅａｅ）科ナタマメ（Ｃａｎａｖａｌｉａ）属ナタマメ（Ｃａｎａｖａｌｉａ  ｇｌａｄｉａｔａ）である。
使用部位は、特に限定されないが、全草、花、葉、茎、根、種子が使用できるが、種子が特に好ましい。
【００２１】
各マメ科植物抽出物の調製方法は特に限定されないが、例えば種々の適当な溶媒を用いて、低温下から加温下で抽出される。抽出溶媒としては、例えば、水；メチルアルコール、エチルアルコール等の低級１価アルコール；グリセリン、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール等の液状多価アルコール；アセトン、メチルエチルケトン等のケトン；酢酸エチルなどのアルキルエステル；ベンゼン、ヘキサン等の炭化水素；ジエチルエーテル等のエーテル類；ジクロルメタン、クロロホルム等のハロゲン化アルカン等の１種または２種以上を用いることができる。就中、水、エチルアルコール、１，３−ブチレングリコールの１種または２種以上の混合溶媒が特に好適である。
【００２２】
本発明に用いることのできる各マメ科植物抽出物の抽出方法は特に限定されないが、例えば乾燥したものであれば質量比で１〜１０００倍量、特に１０〜１００倍量の溶媒を用い、０℃以上、特に２０℃〜４０℃で１時間以上、特に３〜７日間行うのが好ましい。また、６０〜１００℃で3時間、加熱抽出しても良い。
【００２３】
以上のような条件で得られる上記各マメ科植物抽出物は、抽出された溶液のまま用いても良いが、さらに必要により、濾過等の処理をして、濃縮、粉末化したものを適宜使い分けて用いることができる。或いは、皮膚刺激等を低減するため、タンパク質除去を行っても良い。
【００２４】
本発明の各剤における各マメ科植物抽出物の配合量は、有効量存在すれば良い。
一般的には各剤における組成物全体に対して蒸発乾燥分に換算して０．０００１〜１００質量％が好ましく、特に０．００１〜１０．０質量％の範囲が最適である。
【００２５】
本発明の各剤は、特に化粧料、医薬品、医薬部外品等の分野において好適に用いることができる。
【００２６】
本発明の各剤は、本発明の効果を損なわない範囲で、通常化粧品や医薬品等の皮膚外用剤に用いられる成分、たとえば、油脂、ロウ類、炭化水素油、エステル油、高級アルコール、シリコーン油、紫外線吸収剤、紫外線散乱剤、保湿剤、界面活性剤、水溶性高分子、増粘剤、粉体、皮膚保護剤、美白剤、シワ改善剤、老化防止剤、植物抽出物、防腐剤、消炎剤、pH調整剤、金属イオン封鎖剤、酸化防止剤などを配合することができる。
【００２７】
本発明の各剤の剤型は、たとえば、軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック等いずれでもよく、剤型は特に問わない。
【実施例】
【００２８】
以下、本発明を実施例によりさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例により限定されるものではない。また、特記しない限り配合量は質量％で示す。
【００２９】
＜各マメ科植物抽出物のタンパク質溶解試験＞
各マメ科植物抽出物のタンパク質溶解効果を確認した。角質は主にタンパク質で構成されている。タンパク質溶解作用が確認出来れば、その効果の程度により当然角質柔軟作用、角質除去作用が期待出来ると言える。
以下に、タンパク質溶解効果の試験方法とその結果について述べる。
[被験物質の調製]
（１）被験物質の植物抽出物は、白花豆、紫花豆、小豆、ヒヨコ豆、緑豆、なた豆、虎豆、大豆（いずれも種子）の乾燥物それぞれ１ｇに対し８倍質量の水を加え、１晩浸漬した。ホモジナイザーにかけペースト状にした後、８０℃下にて３時間抽出した。抽出後、濾過をし、不溶物を取り除いた後、エタノール濃度が７０%(ｖ／ｖ)となるようにエタノールを加え２日間静置した。その後、沈殿物を濾過後、エバポレーターにてエタノールを留去し、凍結乾燥することにより乾燥物を得た。
（２）得られた乾燥物を３０%1，3-ブチレングリコール水溶液にて、乾燥物含有量が10％となるように希釈した植物抽出液を得た。
（３）さらに、リン酸緩衝液(ｐＨ７．２)にて２００倍希釈したものを被験物質として用いた。
[ＢＣＡ試薬]
(１)ＢＣＡ試薬Ａ；ビシンコニン酸５ｇ、Ｎａ２ＣＯ３１０ｇ、酒石酸０．８ｇ、ＮａＯＨ２ｇ、ＮａＨＣＯ3４．７５ｇを取って水にて５００ｍＬにメスアップした。
(２)ＢＣＡ試薬Ｂ；ＣｕＳＯ4・5Ｈ２Ｏを４ｇ取って水にて１００ｍＬにメスアップした。
(３)ＢＣＡ試薬Ａ：ＢＣＡ試薬Ｂが５０：1の割合になるように混合した。
[タンパク質溶解試験]
（１）１．５ｍＬチューブにカゼイン（ Ｈａｍｍａｒｓｔｅｎ処方）（和光純薬）を０．０５ｇ取り、被験物質を５００μＬ加えた後、ボルテックスにてよく撹拌した。
（２）３７℃下１８時間置いた後、遠心分離し上清を得た。
（３）９６ｗｅｌｌプレートに2Ｎ ＮａＯＨ５μＬと得られた上清あるいは被験物質あるいはリン酸緩衝液（ｐH７．２）にて段階希釈を行ったウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）溶液４０μＬを各ｗｅｌｌに注入した後、ＢＣＡ試薬を２００μＬ/ｗｅｌｌ添加した。
（４）３７℃下３０分間置いた後５４０ｎｍにおける吸光度を測定した。
[溶解したタンパク質量の計算]
（１）   段階希釈したＢＳＡ溶液の５４０ｎｍにおける吸光度と濃度から検量線を作成した。
（２）   検量線に「式1」にて求めた吸光度値を代入し、被験物質とカゼインを供した上清中の溶解タンパク質濃度を算出した。
【式１】
【００３０】
0006590655.tif 000002
【００３１】
＜マメ科植物抽出物のタンパク質溶解効果とアルギニン量との関係＞
マメ科植物抽出物のタンパク質溶解効果とアルギニン量との関係について白花豆を例に確認した。方法と結果を以下に示す。
[被験物質の調製]
（１）被験物質の調製は、白花豆（種子）の乾燥物１ｇに対し20倍質量の水を加え、１晩浸漬した。吸水した白花豆を粉砕し、８０℃下にて３時間抽出した。抽出後エタノール濃度が７０%(ｖ／ｖ)となるようにエタノールを加え、濾過により不溶部を除去した。その後、エバポレーターにてエタノールを留去し、３０％１，３ブチレングリコール水溶液となるように１，３ブチレングリコールを加え、白花豆抽出液を得た。
（２）上記白花豆抽出液中のアルギニン量をアミノ酸自動分析法を用いて定量した。
（３）定量結果から、上記溶液中のアルギニン濃度が１５、３０ｐｐｍとなるように上記白花豆抽出液を３０％１，３ブチレングリコール水溶液（ｐＨ７．１）にて希釈し、被験物質とした。
（４）Ｌ−アルギニン（和光純薬）を３０％１，３ブチレングリコール水溶液（ｐＨ７．１）にて１５、３０、５０、１００ｐｐｍとなるように溶解し、被験物質とした。
[タンパク質溶解試験]
〔００２９〕と同様にタンパク質溶解試験を行った。ただし、被験物質とカゼインの反応は１８時間ではなく６時間とした。
[溶解したタンパク質量の計算]
〔００２９〕と同様に、被験物質とカゼインを供した上清中の溶解タンパク質濃度を算出した。被験物質が溶解したタンパク質量を算出した。
【００３２】
本タンパク質溶解試験では、「式１」の計算式を用いることにより被験物質が本測定に与える影響を排除している。
また、タンパク質の溶解性はタンパク質の等電点と溶液のｐＨの差が大きいほどよくなることが知られているので、本試験においては被験物質のｐＨはそろえている。
【００３３】
図１に示したマメ科植物抽出物のタンパク質溶解試験の結果より、一般にアルギニン含有量が多いとされる大豆抽出物にはタンパク質溶解作用が認められなかったが、白花豆、紫花豆、小豆、ヒヨコ豆、緑豆、なた豆の抽出物は、高い効果を示した。
【００３４】
図２は、白花豆抽出物中のアルギニンの影響を確認するため、白花豆抽出物中のアルギニン量と試薬のアルギニン量を一定量に調整した場合のタンパク質溶解効果を示している。図２の結果より、被験物質中のアルギニン含有量が等量であるにもかかわらず、タンパク質溶解作用について効果の差が見られた。このことからも、本願の効果はアルギニンの量に起因するものではないことが示唆された。
なお、紫花豆、小豆、緑豆、なた豆抽出物においても同様の傾向が見られた。
【００３５】
以下、本発明に係る各剤の処方例を示す。なお、含有量は質量％である。製法は、常法による。
【００３６】
＜処方例１＞  化粧水
１，３−ブチレングリコール  １０．００
グリセリン  ２．００
モノラウリン酸ポリオキシエチレンソルビタン（２０Ｅ．Ｏ．）  ０．１５
エタノール  ５．００
白花豆抽出物（乾燥物）  ０．０１
防腐剤  適量
精製水  残部
【００３７】
＜処方例２＞乳液
白花豆抽出物（乾燥物）  ０．０１
紫花豆抽出物（乾燥物）  ０．０１
小豆抽出物（乾燥物）  ０．０１
スクワラン  ８．００
ワセリン  ２．００
ミツロウ  ０．５０
ソルビタンセスキオレエート  ０．８０
ポリオキシエチレンオレイルエーテル（２０Ｅ．０．）  １．２０
カルボキシビニルポリマー  ０．２０
プロピレングリコール  ０．５０
水酸化カリウム  ０．１０
エタノール  5．００
防腐剤・酸化防止剤  適量
香料  適量
精製水  残部
【００３８】
＜処方例３＞軟膏
白花豆抽出物（乾燥物）  ０．０１
緑豆抽出物（乾燥物）  ０．０１
ヒヨコ豆抽出物（乾燥物）  ０．０１
パラジメチルアミノ安息香酸オクチル  ４．００
ブチルメトキシベンゾイルメタン  ４．００
ステアリルアルコール  １８．００
モクロウ  ２０．００
グリセリンモノステアリン酸エステル  ０．３０
ワセリン  ３３．００
香料  適 量
防腐剤・酸化防止剤  適 量
精製水  残 部
【００３９】
＜処方例４＞ピールオフタイプパック                                            
紫花豆抽出物（乾燥物）  ０．０１
なた豆抽出物（乾燥物）  ０．０１
ポリ酢酸ビニルエマルジョン  １５．００
ポリビニルアルコール  １０．００
ソルビトール  ５．００
ポリエチレングリコール４００  ５．００
ホホバ油  ３．００
スクワラン  １．００
ＰＯＥソルビタンモノステアリン酸エステル  １．００
酸化チタン  ５．００
タルク  １０．００
エタノール   ８．００
香料  適量
防腐剤  適量
精製水  残部
【００４０】
上記実施例では、各マメ科植物抽出物は各種子の水抽出物を用いて実験を行ったが、他の部位、抽出溶媒も使用することができる。
【産業上の利用可能性】
【００４１】
本発明によれば、角質を軟化・除去する効果が得られるので、老化角質除去効果を期待するふきとり用化粧料、カカト等の角質柔軟剤等に利用できる。
【図１】
0006590655.tif 000003
【図２】
0006590655.tif 000004