(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ）で表されるブロック共重合体を有効成分として含んでなる紫外線による皮膚傷害を予防または治療するための経口用調製物。
【化１】
0006614928.tif 000008
式中、
Ａは、非置換または置換Ｃ1−Ｃ12アルコキシを表し、置換されている場合の置換基は、ホルミル基、式Ｒ1Ｒ2ＣＨ−基を表し、ここで、Ｒ1およびＲ2は独立してＣ1−Ｃ4アルコキシまたはＲ1とＲ2は一緒になって−ＯＣＨ2ＣＨ2Ｏ−、−Ｏ（ＣＨ2）3Ｏ−もしくは−Ｏ（ＣＨ2）4Ｏ−を表し、
Ｌは、パラキシリレンまたはメタキシリレンであり、
Ｚは−（ＣＨ2）a−ＮＨ−（ＣＨ2）a−または−（ＣＨ2）a−Ｏ−（ＣＨ2）a−を介して共有結合した式
【化３】
0006614928.tif 000009
で表される基から選ばれ、Ｚはｍの総数の少なくとも５０％まで存在することができ、存在しない場合には、残りのＺはＨ、ハロゲン原子またはヒドロキシ基であり、
ＹはＨまたはＳ（Ｃ＝Ｓ）−Ｐｈであり、Ｐｈは１または２個のメチルまたはメトキシで置換されていてもよいフェニルを表し、
ａは、各独立して０〜５の整数であり、
ｂは２〜６の整数であり、
ｃは１〜５の整数であり、
ｍは３〜５００の整数を表し、
ｎは２〜１０，０００の整数を表す。
【請求項２】
式（Ｉ）で表されるブロック共重合体が水中で可溶化したミセルの形態にある、請求項１に記載の調製物。
【請求項３】
紫外線がＵＶＡ（３２０〜４００ｎｍ）またはＵＶＢ（２９０〜３２０ｎｍ）である、請求項１または２に記載の調製物。
【請求項４】
皮膚傷害が皮膚の水腫、紅班または光老化である、請求項１〜３のいずれかに記載の調製物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はポリマー化環状ニトロキシドラジカルの皮膚科学的または化粧料分野での用途発明に関し、具体的には、ポリマー化環状ニトロキシドラジカルは親水性セグメントとしてポリエチレングリコールと環状ニトロキシドラジカルを側鎖もしくはペンダントとして有する疎水性セグメントを含むブロック共重合体である。
【背景技術】
【０００２】
ヒトをはじめとする哺乳類は、日常生活でも多くの紫外線を浴びることにより徐々に皮膚に傷害を受けると考えられている。このような傷害を防止し、または治癒するために、局所投与剤や食品グレードの抗酸化化合物を含む経口サプリメント等、多種多様な皮膚科学的組成物または化粧料が提案され、現に使用されている。これらの中で一定の効果の認められているものもあるが、未だ、生物学的利用能に乏しいとか、防護効果が認められる期間が短すぎるとか、の課題が存在する。
【０００３】
一方、本発明者等は、レドックス作用物質ともいえ、抗酸化化合物にも分類できる環状ニトロキシドラジカルを高分子化することにより、生体内で安定であり、かつ、安全に使用できる化合物を創製することに成功し、提案した（特許文献１）。こうして提供された高分子化環状ニトロキシドラジカルは、例えば、静脈投与により長期にわたる血中滞留性が達成され、一定の炎症性疾患を予防または治療できることが示されている。また、一定の高分子化環状ニトロキシドラジカルは経口投与により、実質的に低毒性を示すにすぎない上に関節炎モデル動物やアルツハイマーモデル動物に効能を示すことも知られている（特許文献２）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】ＷＯ２００９／１３３６４７
【特許文献２】特開２０１３−１５９５６０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の目的は、安全で、効果的な皮膚傷害の予防（もしくは防護）または治療を可能にする物質を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者等は、前述した親水性セグメントとしてポリエチレングリコール（また、ＰＥＧと略記する場合あり。）と環状ニトロキシドラジカルを側鎖もしくはペンダントとして有する疎水性セグメントを含むブロック共重合体の哺乳動物の生態内での挙動について精査してきた。その結果、意外なことに、当該ブロック共重合体は水中で会合した分子集合体を形成し、ミセル（または高分子ミセル）として水に可溶化された状態で存在し得る。すなわち、かようなミセル粒子は疎水性セグメントがコア（核）となり、極めて親水性の高いＰＥＧから構成されたセグメントがコアを取り囲む形態をとるシェル（殻）部分を構成するものと推察される。このような特徴を有するにもかかわらず、かようなミセル粒子は経口投与により皮膚の比較的浅い部位である表皮に生じる事象に作用することが確認された。具体的には、前記ミセル粒子はＵＶＢをヒトの皮膚に暴露させたときに生じる傷害である水腫や紅班を経口摂取することにより予防または治療できることが見出された。理論により拘束されるものでないが、ＵＶＢへの暴露により表皮内で発生した活性酸素等が皮膚に傷害を与えることは当該技術分野で公知であるが、前記ミセル粒子を経口摂取する
とかような傷害を防止できることが確認された。してみると、むしろ、皮膚においてＵＶＢの到達する部位より深部では、前記ミセル粒子はより確実に作用を及ぼし得ることは明らかであるから、当然なことに、当該深部まで到達することが知られているＵＶＡへの暴露によって生じる活性酸素等に起因する皮膚傷害も前記ミセル粒子により予防または治療できることも明白であろう。また、当該ミセルは特許文献１または特許文献２に記載されているとおり生体内及び生理学的水性液内で安定に存在することが知られている。
【０００７】
したがって、本発明によれば、下記式（Ｉ）で表されるブロック共重合体を有効成分として含んでなる紫外線による皮膚傷害を予防または治療するための経口用調製物を提供することにより、前述の課題を解決できる。
【０００８】
【化１】
0006614928.tif 000002
【０００９】
式中、
Ａは、非置換または置換Ｃ1−Ｃ12アルコキシを表し、置換されている場合の置換基は、ホルミル基、式Ｒ1Ｒ2ＣＨ−基を表し、ここで、Ｒ1およびＲ2は独立してＣ1−Ｃ4アルコキシまたはＲ1とＲ2は一緒になって−ＯＣＨ2ＣＨ2Ｏ−、−Ｏ（ＣＨ2）3Ｏ−もしくは−Ｏ（ＣＨ2）4Ｏ−を表し、
Ｌは、式
【００１０】
【化２】
0006614928.tif 000003
【００１１】
で表される基から選ばれるか、あるいは
−（ＣＨ2）2−Ｏ−Ｌ−は、結合、−（ＣＨ2）cＳ−、−ＣＯ（ＣＨ2）cＳ−、−（ＣＨ2）cＮＨ−、−（ＣＨ2）cＣＯ−、−ＣＯ−、−ＯＣＯＯ−、−ＣＯＮＨ−からなる群より選ばれ連結基により置換されていてもよく、
Ｚは−（ＣＨ2）a−ＮＨ−（ＣＨ2）a−または−（ＣＨ2）a−Ｏ−（ＣＨ2）a−を介して共有結合した式
【００１２】
【化３】
0006614928.tif 000004
【００１３】
で表される基から選ばれ、Ｚはｍの総数の少なくとも５０％、好ましくは７０％まで、より好ましくは９５％まで存在することができ、存在しない場合には、残りのＺはＨ、ハロゲン原子またはヒドロキシ基であり、
ＹはＨまたはＳ（Ｃ＝Ｓ）−Ｐｈであり、Ｐｈは１または２個のメチルまたはメトキシで置換されていてもよいフェニルを表し、
ａは、各独立して０〜５の整数であり、
ｂは２〜６の整数であり、
ｃは１〜５の整数であり、
ｍは３〜５００の整数を表し、
ｎは２〜１０，０００の整数を表す。
【００１４】
なお、本発明で用いるブロック共重合体の構造式中のＬ等の結合の方向性は、特記しない限り表示されている方向性にある。
【００１５】
こうして、本発明は、紫外線への暴露により生じる皮膚傷害を効果的に防止（もしくは予防）でき、また、既に生じた皮膚傷害を治療できる手段を提供できる。
【００１６】
発明の詳細な記述：
本発明に従えば、ＵＶＢおよびＵＶＡに限定されることなく紫外線の範疇に入る照射線により活性酸素等の産生により皮膚に悪影響を及ぼす事象であれば如何なる傷害も予防または治療の対処となるものと理解されている。
【００１７】
前記式（Ｉ）で表されるブロック共重合体の一部は、前述の特許文献１に記載されているかまた、記載されている方法により製造できる。
【００１８】
一方、式（Ｉ）におけるＬが式
【００１９】
【化４】
0006614928.tif 000005
【００２０】
で表される基から選ばれるか共重合体は、文献未載であるが、後述する製造例を参照し、次の反応スキームにより製造できる。
【００２１】
【化５】
0006614928.tif 000006
【００２２】
式（Ｉ）で表されるブロック共重合体は、特許文献１に記載されているか、記載されている方法により、水性媒体中でミセル（または高分子ミセル）を形成でき、このようなミセルを調製した分子集合体を、必要により凍結乾燥した後、有効成分として経口用調製物に含めることが好ましい。
【００２３】
式（Ｉ）における変動子（Ａ、Ｌ、Ｙ、Ｚ、ｍ，ｎ等）は、本発明の目的に沿う限り、定義した範囲内にあることができるが、例えば、ｍは３〜５００、好ましくは５〜５００、より好ましくは１０〜３００の整数であることができ、また、ｎは２〜１０，０００、好ましくは２０〜５，０００、より好ましくは２０〜３，０００の整数であることができる。
【００２４】
本発明の経口調製物は、本発明の目的に沿う限り、当該技術分野の経口製剤に使用できること知られている如何なる希釈剤、賦形剤、その他の添加物を含めることができる。ここにいう、本発明の目的とは、限定されるものでないが、例えば、式（Ｉ）のブロック共重合体から形成されるミセルの安定性に悪影響を与えないこと等が包含される。
【００２５】
かような調製物が固形である場合、式（Ｉ）のブロック共重合体をショ糖、乳糖、マンニトール、セルロース、トレハロース、マルトール、デキストラン、澱粉、寒天、ゼラチン、カゼイン、アルブミン、グリセリン、等から選ばれる１種以上の組み合わせ物を含むことができる。また、かような調製物は、当該技術分野既知の錠剤、粉剤、乳剤、シロップ、エリキシル剤、懸濁剤、等であることができる。
【００２６】
式（Ｉ）のブロック共重合体は、必要があれば、例えば、後述の試験例に記載するような哺乳動物を用いた試験等の結果を参照し、専門医等がその有効量を決定することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】ＣＨ3Ｏ−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）nＣＨ2ＰｈＣＨ2（ＣＨ2ＣＨ（ＰｈＣＨ2Ｃｌ））mＨのプロトン核磁気共鳴スペクトル（1Ｈ−ＮＭＲ）
【図２】ＣＨ3Ｏ−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）nＣＨ2ＰｈＣＨ2（ＣＨ2ＣＨ（ＰｈＣＨ2ＮＨ−ＴＥＭＰＯ））mＨのプロトン核磁気共鳴スペクトル（1Ｈ−ＮＭＲ）
【図３】ＰＥＧ−ｂ−ＰＭＮＴのミセル（ＲＮＰN）のＤＬＳスペクトル。
【図４】防護効果確認試験群からの代表的なＫｕｄ：Ｈｒ−ヘアーレスマウスの写真。
【図５】同試験におけるＵＶＢ処置Ｋｕｄ：Ｈｒ−ヘアーレスマウスの背面皮膚のひだ厚についてのデータに基づくグラフ。
【図６】同試験におけるＵＶＢ処置Ｋｕｄ：Ｈｒ−ヘアーレスマウスの耳厚についてのデータに基づくグラフ。
【図７】同試験におけるＵＶＢ処置Ｋｕｄ：Ｈｒ−ヘアーレスマウスの光老化の等級についてのデータに基づくグラフ。
【図８】同試験におけるＵＶＢ処置Ｋｕｄ：Ｈｒ−ヘアーレスマウスの背面皮膚の皮膚損傷についてのデータに基づくグラフ。
【図９】同試験のＫｕｄ：Ｈｒ−ヘアーレスマウスにおけるＵＶＢで誘導された耳の紅班についてのデータに基づくグラフ。
【図１０】同試験のＫｕｄ：Ｈｒ−ヘアーレスにおけるＵＶＢで誘導された背面皮膚の紅班についてのデータに基づくグラフ。
【実施例】
【００２８】
以下、本発明について、より具体的に説明するが、本発明をこれらの例に限定することを意味するものではない。
【００２９】
製造例１：ＣＨ3Ｏ−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−ＣＨ2ＰｈＣＨ2−Ｓ（Ｃ＝Ｓ）−Ｐｈ（ＰＥＧ−ＣＴＡ：連鎖移動剤）の合成  （なお、式中：Ｐｈはベンゼン環を表す）
真空下で、ＣＨ3０−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）nＨ〔ＭｅＯ−ＰＥＧ−ＯＨ、分子量５，０００、Ｆｌｕｋａ〕の５０ｇを２〜１２時間または残存水も湿分も存在しなくなるまで撹拌した。安定化のため撹拌は６５℃にて１時間Ｎ2存在下でインキュベートした。ゆっくりテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）２００ｍＬを加え、次いでブチルリチウム（ＢｕＬｉ）１０ｍＬ（１．６Ｍ、ヘキサン溶液）加えた後、ａ，ａ’−ジブロモ−ｐ−キシリレン（ＤＰＸ）を２５ｇ加え、６５℃、２４時間（必要があれば、最大２〜３日）撹拌反応させた。反応混合液を５００ｍＬの冷イソプロパノールを加えポリマーを沈殿させ、遠心分離した沈殿物のメタノール溶液を得、再度イソプロパノールを用いて沈殿させる操作を繰り返し、ポリマーを精製した。精製したポリマーのＴＨＦ溶液は透明であった。
【００３０】
別に、１００ｍＬフラスコにＴＨＦ５０ｍＬ二硫化炭素（ＣＳ2）４ｍＬおよび臭化フ
ェニルマグネシウム６．７ｍＬ（３Ｍ  ジエチルエーテル溶液）を加え、ジチオ安息香酸ブロモマグネシウム（ＰｈＣ（＝Ｓ）ＳＭｇＢｒ）を作製した。
【００３１】
５００ｍＬフラスコ中に上記で合成したポリマーの５０ｇ、ＴＨＦ２００ｍＬを加え、別途、上で作製したジチオ安息香酸ブロモマグネシウムのＴＨＦ溶液を加え、４０℃、２４時間反応させた。反応混合液を５００ｍＬの冷２−プロパノールに沈殿させ、遠心分離（４℃、９０００ｒｐｍ、２分）後、減圧乾燥した。こうして、標題のＰＥＧ−ＣＴＡの５０ｇを得た。
【００３２】
製造例２：ＣＨ3Ｏ−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）nＣＨ2ＰｈＣＨ2（ＣＨ2ＣＨ（ＰｈＣＨ2Ｃｌ））mＨ（ＰＥＧ−ｂ−ＰＣＭＳ））の合成
５００ｍＬフラスコに（ＭｅＯ−ＰＥＧ−ＣＴＡ）を３６ｇ、アゾビスイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）２４０ｍｇ、ｍ，ｐ−クロロメチルスチレン（ＣＭＳ）５６ｍＬ、トルエン２００ｍＬを加え、窒素ガスを３分間フローした後、７０℃で２４時間重合を行った。反応混合液を５００ｍＬの冷２−プロパノールに沈殿させ、遠心分離（４℃、９０００ｒｐｍ、２分）後、減圧乾燥した。得られたＰＥＧ−ｂ−ＰＣＭＳの1Ｈ  ＮＭＲを図１に示す。ＰＣＭＳセグメントの重合度ｍ＝２２
【００３３】
製造例３：ＣＨ3Ｏ−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）nＣＨ2ＰｈＣＨ2（ＣＨ2ＣＨ（ＰｈＣＨ2ＮＨ−ＴＥＭＰＯ））mＨ  （ＰＥＧ−ｂ−ＰＭＮＴ）の合成（ＴＥＭＰＯは２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−１−オキシルを表す）
５００ｍＬフラスコ中、製造例２で合成した（ＰＥＧ−ｂ−ＰＣＭＳ）の１０ｇを、ジメチルフォルムアミド（ＤＭＦ）を５０ｍＬ、４−アミン−ＴＥＭＰＯの１７ｇ（５倍当量）を加え、１時間撹拌しポリマーを完全に溶解した。この溶液を２４時間室温で反応させた。反応混合液を５００ｍＬの冷２−プロパノールに沈殿させ、遠心分離（４℃、９０００ｒｐｍ、２分）後、減圧乾燥した。こうして得られたＰＥＧ−ｂ−ＰＭＮＴ中のクロロから４−アミン−ＴＥＭＰＯの置換度はほぼ１００％であった。得られたＰＥＧ−ｂ−ＰＭＮＴのＮＭＲを図２に示す。
【００３４】
製造例４：ＰＥＧ−ｂ−ＰＭＮＴのミセル（ＲＮＰN）の調製
高分子ミセルは透析法により調製した。ＰＥＧ−ｂ−ＰＭＮＴをＤＭＦ中に溶解し３０分間撹拌し、次いで１分間超音波処理し、３５００：ＭＷＣＯ，直径２９ｍｍ（Ｓｐｅｃｔｒａ／Ｐｏｒ（登録商標）Ｄｉａｌｙｓｉｓ  Ｍｅｍｂｒａｎｅ）中で蒸留水に対し２４時間透析した。動的光散乱（ＤＬＳ）法を用いて測定したところ調製されたミセルの平均直径は約２５ｎｍであり、単峰形のピークＤＬＳグラフを持つことが確認された。当該測定結果を図３に示す。
【００３５】
試験：防護効果の確認
ヘアーレスマウスにおけるＵＶＢ誘導性皮膚傷害及び光老化についての実験を以下の表に概述するところに基づき、ＵＢＶ暴露の期間中ＲＮＰNを自由飲食摂取させることによりＫｕｄ：Ｈｒ−ヘアーレスマウスを処置することで実施した。
【００３６】
【表１】
0006614928.tif 000007
【００３７】
加速ＵＮＢ皮膚感作：８週齢Ｋｕ：Ｈｒ−ヘアーレスマウス（雌）の皮膚にＵＶＢを照射した（照射装置：ＵＶＭ−５７手づかみ型ＵＶランプ，６Ｗ／３０２ｎｍ／０．２０Ａ／１００Ｖ／５０−６０Ｈｚ，ＵＶＰ，ＬＬＣ，Ｕｐｌａｎｄ，ＣＡ，ＵＳＡ）。
【００３８】
・照射手順：
１．マウスをランダム化し、適宜グループ分けする。
２．照射４日前に耳に標識を付ける。
３．目の保護具を備えたパイ型マウス保持装置にマウスを固定化する。
４．マウスを予め決定した線量のＵＶＢに暴露する。
５．マウス（６匹）を特別なクリーンルーム条件下のケージに入れ飼う。
６．背面の皮膚の厚さの測定及びフォトドキュメンテーション。
７．最後に、肉眼的、組織学的評価、並びにＲＯＳ産生の評価。
【００３９】
・処置群：
１）対照（無処置）、３匹
２）対照（照射）、６匹
１週：
３）４−アミノＴＥＭＰＯ（０．１５ｍｇ／ｍＬ）、６匹
４）ＲＮＰN（０．５ｍｇ／ｍＬ）、５匹
４週：
３）４−アミノＴＥＭＰＯ（０．３０ｍｇ／ｍＬ）、６匹
４）ＲＮＰN（１ｍｇ／ｍＬ）、５匹
【００４０】
・自由飲食摂取：
・〜１０ｍＬ／日／マウス
・２４０ｍＬ／４日／６マウス
・滅菌水中薬剤を４日で取り替える。
【００４１】
試験の結果：
＜Ａ＞  それぞれの試験群からの代表的なＫｕｄ：Ｈｒ−ヘアーレスマウスの写真を図４に示す。写真ａ）は無処置対照マウスであり、ｂ）はＵＶＢ処理済みマウスであり、ｃ）はＵＶＢ＋低分子化合物４−アミノ−ＴＥＭＰＯ処置マウスであり、ｄ）はＵＶＢ＋ＲＮＰN処置マウスである。写真中のグリッドはミリメーター（ｍｍ）による。
【００４２】
＜Ｂ＞  ＵＶＢ処置Ｋｕｄ：Ｈｒ−ヘアーレスの背面皮膚のひだ厚についてのデータを図５に示す。総蓄積ＵＶＢ線量はマウス当たり１．８６ｍＪ／ｃｍ2であり、薬剤の総蓄積用量は、ＲＮＰＮについてはマウス当たり３３０ｍｇ、ＴＥＭＰＯについては９９ｍｇ
であった（ＴＥＭＰＯ換算で同じモル数）。値は平均±ＳＥＭ（ｎ＝３〜６）で表示している。試験後ワンウエイ分散分析（テューキュー・クレーマー（Ｔｕｋｅｙ−ｋｒａｍｅｒ）一段階多重比較法）を用い平均値を比較した。＃は対照群（＃＃ｐ＜０．００１）と比較したところの統計的有意差を示す。＊はＵＶＢ処置群（＊Ｐ＜０．０５）と比較したところの統計的有意差を示す。皮膚のひだ厚はデジタルノギスを用いて測定した。
【００４３】
＜Ｃ＞  ＵＶＢ処置Ｋｕｄ：Ｈｒ−ヘアーレスの耳厚についてのデータを図６に示す。総蓄積ＵＶＢ線量、薬剤の総蓄積用量、値及び試験後ワンウエイ分散分析は上記＜Ｂ＞に同じ。＃は対照群（＃ｐ＜０．０５）と比較したところの統計的有意差を示す。＊はＵＶＢ処置群（＊＊Ｐ＜０．０１）と比較したところの統計的有意差を示す。耳厚はデジタルノギスを用いて測定した。
【００４４】
＜Ｄ＞  ＵＶＢ処置Ｋｕｄ：Ｈｒ−ヘアーレスの光老化の等級についてのデータを図７に示す。総蓄積ＵＶＢ線量、薬剤の総蓄積用量、値及び試験後ワンウエイ分散分析は上記＜Ｂ＞に同じ。＃は対照群（＃ｐ＜０．０５）と比較したところの統計的有意差を示す。＊はＵＶＢ処置群（＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１）と比較したところの統計的有意差を示す。
光老化の評価の等級分けスケールは次に従った。
等級    評価基準                                          
０    しわ若しくはたるみなし、身体のきれいな縦筋
１    きれいな筋
２    きれいな筋全ての消失
３    皮相なしわ
４    数本の深いしわ及びたるみ
５    増大した深いしわ
６    ひどいしわ、腫瘍／損傷の出現                      
０：正常な皮膚、６：ひどい光傷害を受けた皮膚
（参考文献：Ｋｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１５．  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｇｅｒｏｎｔｏｌｏｇｙ，  ６１：  １４７−１５５）
【００４５】
＜Ｅ＞  ＵＶＢ処置Ｋｕｄ：Ｈｒ−ヘアーレスの背面皮膚の皮膚損傷についてのデータを図８に示す。総蓄積ＵＶＢ線量、薬剤の総蓄積用量、値及び試験後ワンウエイ分散分析は上記＜Ｂ＞に同じ。＃は対照群（＃ｐ＜０．０５）と比較したところの統計的有意差を示す。＊はＵＶＢ処置群（＊Ｐ＜０．０５）と比較したところの統計的有意差を示す。
【００４６】
＜Ｆ＞  Ｋｕｄ：Ｈｒ−ヘアーレスにおけるＵＶＢで誘導された耳の紅班についてのデータを図９に示す。総蓄積ＵＶＢ線量、薬剤の総蓄積用量、値及び試験後ワンウエイ分散分析は上記＜Ｂ＞に同じ。＃は対照群（＃ｐ＜０．０５）と比較したところの統計的有意差を示す。＊はＵＶＢ処置群（＊＊＊Ｐ＜０．００１）と比較したところの統計的有意差を示す。
なお、図９に関し、評価の等級分けスケールは次に従った。
等級    評価基準                                        
０    紅班なし
１    非常にわずかな紅班（ほとんど認識できな）
２    輪郭のはっきりした紅班
３    中程度から苛酷な紅班
４    苛酷な紅班（ビート根のような赤さ）              
【００４７】
＜Ｇ＞  Ｋｕｄ：Ｈｒ−ヘアーレスにおけるＵＶＢで誘導された背面皮膚の紅班についてのデータを図１０に示す。総蓄積ＵＶＢ線量、薬剤の総蓄積用量、値及び試験後ワンウエイ分散分析は上記＜Ｂ＞に同じ。＃は対照群（＃＃ｐ＜０．００１）と比較したところの統計的有意差を示す。＊はＵＶＢ処置群（＊＊Ｐ＜０．０１）と比較したところの統計的有意差を示す。
【００４８】
以上より、ＲＮＰNの経口投与によりモデルマウスの水腫、紅斑及び皮膚損傷のひどさが有意に低減することがわかる。さらに、ＵＶＢ誘導性光老化もＲＮＰN処置群で有意に低減した。これらの結果は、ＵＶＢ−誘導性皮膚傷害及び光老化の予防用の効果的な抗炎症剤としてのＲＮＰNの高い効能を示唆する。
【図１】
0006614928.tif 000010
【図２】
0006614928.tif 000011
【図３】
0006614928.tif 000012
【図４】
0006614928.tif 000013
【図５】
0006614928.tif 000014
【図６】
0006614928.tif 000015
【図７】
0006614928.tif 000016
【図８】
0006614928.tif 000017
【図９】
0006614928.tif 000018
【図１０】
0006614928.tif 000019