(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式Ｉの化合物：
【化１】
0006457816.tif 000037
（式中、
Ｙは、Ｏ、ＮＨ、または共有結合を表し、
Ｐ1は、Ｙ保護基もしくはＹ活性化基、またはスペーサー基を表し（但し、Ｙが共有結合の場合はＰ１はＹ活性化基またはスペーサー基を表し）、
Ｐ2、Ｐ3は、互いに独立して、Ｈ、アミノ保護基もしくはスペーサー基を表し、または、  Ｐ2とＰ3は、それらが結合しているＮと一緒になって、環構造を形成し、
ＹがＯの場合のＹ保護基は、ベンズヒドリル、ベンジル、ｏ−ニトロベンジル、ｐ−ニトロベンジル、ｐ−メトキシベンジル、メチル、ｔ−ブチル、４−ピリジルメチル、２−ナフチルメチル、２,２−トリクロロエチル、２−トリメチルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル、ｔ−ブチルジフェニルシリル、２−(トリメチルシリル)エチル、オルト酢酸トリメチル、オルト酢酸トリエチル、オキサゾリン、アリル、２−クロロアリル、フェナシル、アセトニル、及びｐ−メトキシフェニルから選ばれ、
ＹがＮＨの場合のＹ保護基、及びＰ2、Ｐ3におけるアミノ保護基は、Ｂｏｃ(ｔ−ブチルオキシカルボニル)、Ｃｂｚ(ベンジルオキシカルボニル)、Ｆｍｏｃ(フルオレニルメチルオキシカルボニル)、ａｌｌｏｃ(アリルオキシカルボニル)、トリチル、ベンジル、ベンジリデン、トシル、スクシンイミド、フタルイミド、ホルミル、アセチル、ベンゾイル、ｔ−ブチルジメチルシリル、及びトリイソプロピルシリルから選ばれ、
Ｙ活性化基は、アルキル、アリール、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アラルキルカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロシクリルカルボニル、Ｃ（Ｓ）Ｏ−アリール、Ｃ（Ｓ）Ｏ−アルキル、シリル、置換アルキルカルボニル、ペンタハロフェニル、アセチル、トリフルオロアセチル、カルボキシル置換アルキルカルボニル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、ヒドロキシベンゾトリアゾール、イミダゾール、ニトロフェノール、ペンタクロロフェノール、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、ジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−メトキシアミン、酢酸無水物、ギ酸無水物、スルホン酸無水物、メタンスルホン酸無水物、エタンスルホン酸無水物、ベンゼンスルホン酸無水物、ｐ−トリルスルホン酸無水物、酸塩化物、酸臭化物、酸ヨウ化物、イソチオシアネート、イソシアナート、モノクロロトリアジン、ジクロロトリアジン、モノハロゲン置換ピリジン、ジハロゲン置換ピリジン、モノハロ置換ジアジン、ジハロ置換ジアジン、マレイミド、アジリジン、スルホニルハロゲン化物、酸ハロゲン化物、ヒドロキシスクシンイミドエステル、ヒドロキシスルホスクシンイミドエステル、イミドエステル、ヒドラジン、アジドニトロフェニル、アジ化物、３−（２−ピリジルジチオ）プロピオンアミド(3-(2-pyridyl dithio)proprionamide)、グリオキサール、及びアルデヒドから選ばれ、
Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３におけるスペーサー基は、ポリエチレングリコールまたはエンドキャップされたポリエチレングリコールから選択され、
Ｌは、式（ａ）の基であり：
【化２】
0006457816.tif 000038
（式中、
破線は、Ｎへの結合を表し、
Ｒ1は、Ｈまたは式−（ＣＨ2）2−ＯＲb1の基を表し、
Ｒ1'は、Ｈまたは式−（ＣＨ2）2−ＯＲb2の基を表し、
Ｒ2は、Ｈまたは式−ＣＨ2−ＯＲcの基を表し、
Ｒ2'は、Ｈまたは式−ＯＲdまたは−ＣＨ2−ＯＲdの基を表す）
Ｒ3は、Ｈまたは式−（ＣＨ2）2−ＯＲeもしくは−（ＣＨ2）3−ＯＲｅの基を表し、
Ｒa、Ｒb1、Ｒb2、Ｒc、Ｒd、Ｒeは、互いに独立して、直鎖または分枝状のＣ（１０〜２２）アルキル、Ｃ（１０〜２２）一不飽和または多不飽和のアルケニルまたは一不飽和または多不飽和のＣ（１０〜２２）アルキニルを表し、
ｍは、１、２または３であり、
ただし、
Ｒ1、Ｒ1'、Ｒ2、Ｒ2'、Ｒ3の少なくとも１つは、Ｈでないことを条件とする）。
【請求項２】
Ｒ3が、Ｈであり、
Ｌが、式（ｂ）または（ｃ）の基である：
【化３】
0006457816.tif 000039
（式中、
破線は、Ｎへの結合を表し、
Ｒ1、Ｒ1'、Ｒ2、Ｒ2'、およびＲaは、請求項１に記載の通りであり、
ただし、
式（ｂ）において、Ｒ2およびＲ2'の１つは、Ｈでなく、
式（ｃ）において、Ｒ1およびＲ1'の１つは、Ｈでないことを条件とする）ことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｌが、式（ｂ１）、（ｂ２）、（ｂ３）または（ｂ４）の基である：
【化４】
0006457816.tif 000040
（式中、
破線は、Ｎへの結合を表し、
Ｒa、ＲcおよびＲdは、請求項１に記載の通りである）ことを特徴とする、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｌが、式（ｃ１）または（ｃ２）の基である：
【化５】
0006457816.tif 000041
（式中、
破線は、Ｎへの結合を表し、
Ｒa、Ｒb1、Ｒb2は、請求項１に記載の通りである）ことを特徴とする、請求項２に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ1、Ｒ1'、Ｒ2、Ｒ2'が、Ｈであり、
Ｒ3が、式−（ＣＨ2）2−ＯＲeまたは−（ＣＨ2）3−ＯＲeの基であり、
Ｐ1、Ｐ2、Ｐ3、Ｙ、Ｒa、Ｒeおよびｍが、請求項１に記載の通りであることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
式ＩＩまたはＩＩＩを有する：
【化６】
0006457816.tif 000042
（式中、
Ｙは、Ｏ、ＮＨ、または共有結合を表し、
Ｐ1は、Ｙ保護基もしくはＹ活性化基、またはスペーサー基を表し（但し、Ｙが共有結合の場合はＰ１はＹ活性化基またはスペーサー基を表し）、
Ｐ2、Ｐ3は、互いに独立して、Ｈ、アミノ保護基、もしくはスペーサー基を表し、または、
Ｐ2とＰ3は、それらが結合しているＮと一緒になって、環構造を形成し、
Ｒ1は、Ｈまたは式−（ＣＨ2）2−ＯＲb1の基を表し、
Ｒ1'は、Ｈまたは式−（ＣＨ2）2−ＯＲb2の基を表し、
Ｒ2は、Ｈまたは式−ＣＨ2−ＯＲcの基を表し、
Ｒ2'は、Ｈまたは式−ＯＲdもしくは−ＣＨ2−ＯＲdの基を表し、
Ｒa、Ｒb1、Ｒb2、Ｒc、Ｒdは、互いに独立して、直鎖または分枝状のＣ（１０〜２２）アルキル、Ｃ（１０〜２２）一不飽和または多不飽和のアルケニルまたは一不飽和または多不飽和のＣ（１０〜２２）アルキニルを表し、
ｍは、１、２または３であり、
ただし、
式ＩＩにおいて、Ｒ2およびＲ2'の１つは、Ｈでなく、
式ＩＩＩにおいて、Ｒ1およびＲ1'の１つは、Ｈでないことを条件とする）
ことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
式ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩｃまたはＩＩｄを有する：
【化７】
0006457816.tif 000043
（式中、
Ｙは、Ｏ、ＮＨ、または共有結合を表し、
Ｐ1は、Ｙ保護基もしくはＹ活性化基、またはスペーサー基を表し（但し、Ｙが共有結合の場合はＰ１はＹ活性化基またはスペーサー基を表し）、
Ｐ2、Ｐ3は、互いに独立して、Ｈ、アミノ保護基、もしくはスペーサー基を表し、または、
Ｐ2とＰ3は、それらが結合しているＮと一緒になって、環構造を形成し、
Ｒa、Ｒc、Ｒdは、互いに独立して、直鎖または分枝状のＣ（１０〜２２）アルキル、Ｃ（１０〜２２）一不飽和または多不飽和のアルケニルまたは一不飽和または多不飽和のＣ（１０〜２２）アルキニルを表し、
ｍは、１、２または３である）ことを特徴とする、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
式ＩＩＩａまたはＩＩＩｂを有する：
【化８】
0006457816.tif 000044
（式中、
Ｙは、Ｏ、ＮＨ、または共有結合を表し、
Ｐ1は、Ｙ保護基もしくはＹ活性化基、またはスペーサー基を表し（但し、Ｙが共有結合の場合はＰ１はＹ活性化基またはスペーサー基を表し）、
Ｐ2、Ｐ3は、互いに独立して、Ｈ、アミノ保護基、もしくはスペーサー基を表し、または、
Ｐ2とＰ3は、それらが結合しているＮと一緒になって、環構造を形成し、
Ｒa、Ｒb1、Ｒb2は、互いに独立して、直鎖または分枝状のＣ（１０〜２２）アルキル、Ｃ（１０〜２２）一不飽和または多不飽和のアルケニルまたは一不飽和または多不飽和のＣ（１０〜２２）アルキニルを表し、
ｍは、１、２または３である）ことを特徴とする、請求項６に記載の化合物。
【請求項９】
式ＩＶａまたはＩＶｂを有する：
【化９】
0006457816.tif 000045
（式中、
Ｙは、Ｏ、ＮＨ、または共有結合を表し、
Ｐ1は、Ｙ保護基もしくはＹ活性化基、またはスペーサー基を表し（但し、Ｙが共有結合の場合はＰ１はＹ活性化基またはスペーサー基を表し）、
Ｐ2、Ｐ3は、互いに独立して、Ｈ、アミノ保護基、もしくはスペーサー基を表し、または、
Ｐ2とＰ3は、それらが結合しているＮと一緒になって、環構造を形成し、
Ｒa、Ｒeは、互いに独立して、直鎖または分枝状のＣ（１０〜２２）アルキル、Ｃ（１０〜２２）一不飽和または多不飽和のアルケニルまたは一不飽和または多不飽和のＣ（１０〜２２）アルキニルを表し、
ｍは、１、２または３である）ことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｃ（１０〜２２）一不飽和または多不飽和のアルケニルおよびＣ（１０〜２２）一不飽和または多不飽和のアルキニルは、１、２、３または４個の不飽和結合を有することを特徴とする、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｃ（１０〜２２）一不飽和または多不飽和のアルケニルおよびＣ（１０〜２２）一不飽和または多不飽和のアルキニルは、１または２個の不飽和結合を有することを特徴とする、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｐ1、Ｐ2、Ｐ3の少なくとも１つが、スペーサー基であることを特徴とする、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１３】
式Ｉの請求項１〜１２のいずれか一項に記載の少なくとも１つの化合物を、任意選択で１つまたは複数の他の小胞形成性化合物と混合して、含む、小胞型組成物。
【請求項１４】
薬物送達系用、または抗原表示系用である請求項１３に記載の小胞型組成物。
【請求項１５】
前記小胞型組成物は、リポソーム、ミセルまたはナノ粒子であることを特徴とする、請求項１３または１４に記載の小胞型組成物。
【請求項１６】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物、または請求項１３〜１５のいずれか一項に記載の小胞型組成物を含むキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、新種の脂質、さらに詳細には極性の頭部基を有するエーテル−脂質、およびこれらの脂質を含む小胞、これらの調製方法、ならびにこれらの医療用途における使用を対象にする。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
受容体−リガンド(receptor Ligand)、抗原−抗体、ＤＮＡ−タンパク質、糖質−レクチン、ＲＮＡ−リボソーム間などの分子認識は、多くの生物系を支える重要な原理であり、医療用途において、例えば、重合ビーズ、小胞型脂質(vesicular lipid)、マイクロエマルションなどを含めた人工の(マイクロ−またはナノ−)微粒子系などにおいて使用するために人工的に創出される多くの生物系に応用されている。
【０００３】
分子認識に基づいた適用の重要な一例は、抗ウイルス剤、化学療法剤またはイメージング剤などの診断用または治療用化合物の特異的部位への標的指向型送達の使用であり、これは、非特異的送達に伴う限界（生体内クリアランス時間、潜在毒性、作用剤の膜輸送に伴う問題など）を克服することを可能にし、したがってそれらの有用性が大幅に向上する。認識に基づいた様々な戦略を使用して、化合物の生物活性を発揮する標的細胞の細胞内環境（すなわち、特異的細胞区画）への化合物の送達、特に、ウイルスベクター、ポリリシンおよびポリアルギニンなどのカチオンポリマー（例えば、ＷＯ７９／００５１５、ＷＯ９８／５２６１４を参照のこと）、脂質担体ならびに様々な他のコンジュゲート系などの生物担体または人工担体の使用を伴う特異的トランスポーターを介した送達が改良されてきた。
【０００４】
広く使用されている一手法は、人工担体、例えば、リポソーム、ミセル、ナノ粒子としての脂質小胞の使用を伴うものであり、それらの人工担体は、生理活性物質の全身曝露を低減し、それによって分解、溶解度などに伴う問題を克服し、血液循環時間の増加をもたらす能力のため、薬物送達担体として広範囲にわたって開発および分析されてきた。生物活性物質の能動的標的指向型送達は、生体内投与後に、がん細胞、または肝細胞など特定の組織および器官に特異的な細胞などの特異的細胞型に小胞を向ける（または標的指向する）働きをする標的指向リガンドを用いた、（小胞形成の前または後に）脂質小胞の脂質の誘導体化を伴うものである（例えば、ＵＳ６，３１６，０２４およびＵＳ６，２１４，３８８；Ａｌｌｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ，１２３７：９９−１０８（１９９５）；Ｂｌｕｍｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ，１１４９：１８０−１８４（１９９３）を参照）。これは、例えば(乳房腫瘍、卵巣腫瘍、頸部腫瘍、結腸直腸腫瘍、腎腫瘍および鼻咽頭腫瘍(nasoparyngeal tumor)を含めて種々の腫瘍性組織に過剰発現している)葉酸受容体、(組織非形成性甲状腺癌ならびに乳房腫瘍および肺腫瘍に過剰発現している)上皮増殖因子受容体(ＥＧＦＲ)、(甲状腺乳頭癌に過剰発現している)メタスチン受容体、(乳癌のかなりの部分に過剰発現している)ＥｒｂＢファミリー受容体チロシンキナーゼ、(乳癌に過剰発現している)ヒト上皮増殖因子受容体−２(Ｈｅｒ２／ｎｅｕ)、(肉腫様腎癌に過剰発現している)チロシンキナーゼ−１８−受容体(ｃ−キット)、(食道腺癌に過剰発現している)ＨＧＦ受容体ｃ−Ｍｅｔ、(乳癌に過剰発現している)ＣＸＣＲ４およびＣＣＲ７、(前立腺癌に過剰発現している)エンドセリン−Ａ受容体、(大部分の結腸直腸癌腫瘍に過剰発現している)ペルオキシソーム増殖剤活性化受容体δ(ＰＰＡＲ−δ)、(卵巣癌に過剰発現している)ＰＤＧＦＲ  Ａ、(様々な肺癌に過剰発現している)ＢＡＧ−１、(膵癌に過剰発現している)可溶性ＴＧＦβＩＩ型受容体、アシアロ糖タンパク質受容体(肝細胞上に過剰発現している)、(増殖腫瘍血管系(growing tumor vascularture)に過剰発現している)αｖβ３インテグリン受容体、などを含めて、特異的細胞型に過剰発現している受容体を利用することによって行うことができる。
【０００５】
処理または分析対象のこのような特異的受容体細胞または組織に選択的に結合する作用剤であればいずれも、脂質小胞に結合し、標的指向リガンドまたは受容体リガンドとして働くことができる。典型的には、このような標的指向リガンドは、長鎖(例えば重合体)リンカーを介して脂質または脂質小胞の表面に結合するものである。例えば、葉酸に基づいたコンジュゲートを使用して、治療用化合物の必要用量の低減を可能にし、疾患の治療および／または診断に有用である治療用化合物の標的指向型送達手法を実現した(例えば、ＷＯ０２／０９４１８５、ＵＳ６３３５４３４、ＷＯ９９／６６０６３、ＵＳ５４１６０１６を参照)。同様に、ガラクトースに基づいたコンジュゲートおよびガラクトサミンに基づいたコンジュゲートを使用して、外因性化合物を細胞膜を通過させて輸送することにより、治療に必要とされた治療用化合物の必要用量の低減を可能にしながら、ＨＢＶ感染やＨＣＶ感染または肝細胞癌などの肝疾患の治療への標的指向型送達手法を実現することができる(例えばＵＳ６０３０９５４を参照)。
【０００６】
分子認識に基づいた適用の重要な別の例は、Ｔ細胞活性化、修飾または寛容を引き起こす、免疫系に対する「自己」と「外来」の両タンパク質(抗原)の提示を伴う抗原表示系の使用である。所望の免疫応答の有無に寄与する抗原提示系における受容体−リガンド相互作用は、リガンド密度、補助受容体の存在、受容体−リガンド親和性および表面状態などの様々なパラメータの影響を受けて、複雑であり、評価するのが困難である。したがって、広く使用されている手法は、主機能が抗原処理および提示であるヒト自然発生細胞(またはその一部分)を使用するものであった。しかし、生細胞に基づいた系は、所望の寛容誘発または免疫応答誘発を実現する細胞間相互作用を模倣するのに最適であり得るものの、多分追加の「同時刺激」分子および／または接着分子のその表面膜における十分な治療レベルの発現を含めて、表面分子の調節された発現に依存している。現在公知の人工系は、抗原提示およびＴリンパ球活性化または抑制に必要とされた分子を表面に有する遺伝子工学により作製された細胞内抗原提示小胞(ＷＯ０３／０３９５９４(特許文献１))から、細胞サイズの生分解性ミクロスフェアに基づいた抗原提示系を主体とする系(ＷＯ０７／０８７３４１(特許文献２))まで、多岐にわたる。
【０００７】
明らかに、上記の分子認識に基づいた技術には未だ欠点があり、当技術分野においては、標的指向型送達または抗原提示などの分子認識に基づいた応用に使用するための多用途で効率的な人工担体系が、それらの簡便で経済的な調製方法を含めて、依然として求められている。
【０００８】
本出願は、上述する限界の克服を可能にする担体または表示系として使用するための新しい種類の脂質およびこれらの脂質を含む小胞を提供する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】国際公開第２００３／０３９５９４号パンフレット
【特許文献２】国際公開第２００７／０８７３４１号パンフレット
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は、様々な医療用途に使用するための新しい種類の脂質、およびこれらの脂質を含む小胞を対象にする。さらに詳細には、本発明は、少なくとも２つのエーテル結合炭化水素鎖と、遊離型、保護型もしくは活性型のまたは少なくとも１つのスペーサー基で任意選択で誘導体化された、炭素原子数６までの短い直鎖アミノ酸を含む頭部基とによって特徴付けられるエーテル−脂質化合物を対象にする。具体的には、一実施形態において、本発明は一般式Ｉの化合物に関する：
【００１１】
【化１】
0006457816.tif 000002
【００１２】
（式中、
Ｙは、Ｏ、Ｎ、Ｓまたは共有結合を表し、
Ｐ１は、Ｈ、Ｙ保護基もしくはＹ活性化基またはスペーサー基を表し、
Ｐ２、Ｐ３は、互いに独立して、Ｈ、アミノ保護基もしくはスペーサー基を表し、またはＰ２とＰ３はそれらが結合しているＮと一緒になって、環構造を形成し、
Ｌは、式（ａ）の基であり：
【００１３】
【化２】
0006457816.tif 000003
【００１４】
（式中、破線はＮへの結合を表し、
Ｒ１は、Ｈまたは式−（ＣＨ２）２−ＯＲｂ１の基を表し、
Ｒ１’は、Ｈまたは式−（ＣＨ２）２−ＯＲｂ２の基を表し、
Ｒ２は、Ｈまたは式−ＣＨ２−ＯＲｃの基を表し、
Ｒ２’は、Ｈまたは式−ＯＲｄもしくは−ＣＨ２−ＯＲｄの基を表す。）、
Ｒ３は、Ｈまたは式−（ＣＨ２）２−ＯＲｅもしくは−（ＣＨ２）３−ＯＲｅの基を表し、
Ｒａ、Ｒｂ１、Ｒｂ２、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｅは、互いに独立して、飽和または不飽和で直鎖または分枝状の炭化水素鎖を表し、
ｍは、１、２または３であり、
ただし、Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２、Ｒ２’、Ｒ３の少なくとも１つはＨではない。）。
【００１５】
本発明の化合物は、幾何異性体、例えばＺおよびＥ異性体(シスおよびトランス異性体)ならびに光学異性体、例えばジアステレオマーおよび鏡像異性体など化合物の考え得るすべての立体異性体を純粋な形またはそれらの混合物として包含する。
【００１６】
一実施形態において、本発明は、いずれのＰ１、Ｐ２、Ｐ３もスペーサー基ではない非誘導体化脂質化合物を対象にする。さらに詳細には、非誘導体化脂質化合物は、（ｉ）遊離型の脂質化合物（式中、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３はいずれも、活性化基でも保護基でもない）、（ｉｉ）保護型の脂質化合物（式中、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３の少なくとも１つは保護基である）、および（ｉｉｉ）活性型の脂質化合物（式中、Ｐ１は活性化基である）を包含する。
【００１７】
別の実施形態において、本発明は、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３の少なくとも１つはスペーサー基である、脂質−スペーサー誘導体を対象にする。
【００１８】
本発明の化合物は、そのＲ１、Ｒ１’、Ｒ２、Ｒ２’、Ｒ３基およびＲａ、Ｒｂ１、Ｒｂ２、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｅ部分構造の考え得るすべての並び替えを含む。
【００１９】
式Ｉの化合物の第１の実施形態において、Ｒ３基はＨである。さらに詳細には、（ｉ）Ｒ３はＨであり、Ｒ１とＲ１’は共にＨであり、または（ｉｉ）Ｒ３はＨであり、Ｒ２とＲ２’は共にＨである。したがって、本発明は式Ｉａの化合物を対象にする：
【００２０】
【化３】
0006457816.tif 000004
【００２１】
（式中、Ｌは式（ａ）の基であり：
【００２２】
【化４】
0006457816.tif 000005
【００２３】
Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｙ、Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２、Ｒ２’、Ｒａおよびｍは、式Ｉの化合物について上記に定義される通りである）。
【００２４】
さらに詳細には、本発明は、式Ｉａの化合物であり、Ｌは式（ｂ）または（ｃ）の基である化合物を対象にする：
【００２５】
【化５】
0006457816.tif 000006
【００２６】
（式中、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｙ、Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２、Ｒ２’、Ｒａおよびｍは、上記に定義される通りであり、ただし、式（ｂ）において、Ｒ２およびＲ２’の１つはＨでなく、式（ｃ）において、Ｒ１およびＲ１’の１つはＨでないことを条件とする）。
【００２７】
第２の実施形態において、Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２、Ｒ２’はＨであり、Ｒ３は式−（ＣＨ２）２−ＯＲｅまたは−（ＣＨ２）３−ＯＲｅの基である。したがって、本発明は式Ｉｂの化合物を対象にする：
【００２８】
【化６】
0006457816.tif 000007
【００２９】
（式中、Ｒ３は式−（ＣＨ２）２−ＯＲｅまたは−（ＣＨ２）３−ＯＲｅの基であり、
Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｙ、Ｒａ、Ｒｅおよびｍは、式Ｉの基について上記に定義される通りである）。
【００３０】
別の態様において、本発明は小胞の形態の組成物（本組成物）、例えばリポソーム、ミセル、ナノ粒子などを対象にする。本発明の小胞は、本発明の少なくとも１つの化合物または本発明の様々な化合物の混合物を、１つまたは複数の他の小胞形成性化合物と任意選択で混合して、含む。
【００３１】
別の態様において、本発明は、本発明の化合物および組成物を調製する方法を対象にする。
【００３２】
本発明の別の態様は、本発明の化合物または組成物を好ましくは凍結乾燥された形で含むキットに関する。
【００３３】
本発明の化合物および組成物は、例えば１つもしくは複数の生物活性剤の標的指向型送達または抗原表示系における使用のための送達担体として使用される。本化合物および組成物のこの態様は、同時出願された国際出願の一部であり、その全体が本明細書に組み込まれる。
【００３４】
本発明のこれらのおよびその他の態様は、以下の明細書および特許請求の範囲からさらに明らかになる。
【発明を実施するための形態】
【００３５】
上記および開示全体を通して使用されているように、いくつかの用語は、別段の示唆のない限り、以下の意味を有すると理解されているものとする。
【００３６】
本明細書では用語「化合物」は（単独でまたは「本(present)」もしくは「本発明の」もしくは「脂質」と組み合わせて）、線状２官能アミノ酸、さらに詳細にはアスパラギン酸、グルタミン酸などの２−アミノ−アルカン二酸（６個までの炭素原子を有する）を頭部基に含む本発明の化合物を指す。本発明の化合物は、遊離型（「遊離型(脂質)化合物」）、保護型（「保護型(脂質)化合物」）または活性型（「活性型(脂質)化合物」）であり、したがって、共有結合しているスペーサー基を有しない「非誘導体化(脂質)化合物」も、非誘導体化(脂質)化合物と１つまたは複数のスペーサー基とのコンジュゲートである「誘導体化(脂質)化合物」（または「脂質スペーサー誘導体」）も包含する。
【００３７】
保護型または活性型（脂質）化合物はそれぞれ、保護基または活性化基を含むように部位特異的に改変された本発明の化合物を指す。改変は、頭部基、さらに詳細にはアミノ酸の反応部位、より好ましくはＮ基および／またはＹ基においてそれぞれ、当技術分野で公知の適切な保護基または活性化基（例えば、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３の形）を用いて行われる。
【００３８】
「脂質−スペーサー誘導体」は、スペーサー基を含むように部位特異的に改変された本発明の化合物を指す。改変は、頭部基、さらに詳細にはアミノ酸の反応部位、より好ましくはＮ基および／またはＹ基（または、Ｙが共有結合であればＣＯ基）において、当技術分野で公知の適切なスペーサー基（例えば、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３の形）を用いて公知のカップリング技法で行われる。
【００３９】
「組成物」または「本組成物」という用語は、本発明の少なくとも１つの化合物を含む組成物を指す。例示的な組成物としては、小胞または小胞型組成物が挙げられ、広義の解釈によると、本発明の少なくとも１つの脂質化合物と他の材料および構造物との会合であればいずれでも含まれる。したがって、適切な小胞型組成物としては、リポソーム、ミセル、ミクロスフェア、ナノ粒子などが挙げられるが、これらに限定されない。特定の一実施形態において、小胞型組成物は、内部空隙または中実コアを有する球状の単位を指す。小胞は、本発明の１つまたは複数の化合物およびその混合物を含めて、合成または天然の脂質から調製することができる。所与の任意の小胞において、脂質は単層または二重層の形をとることができる。１つを超える単層または二重層の場合、単層または二重層は同心である。脂質小胞は、通常、リポソーム（すなわち、内部空隙を有する同心円状に配置された１つまたは複数の脂質二重層を含む小胞）、ミセル（すなわち、内部空隙を有する単一の脂質単層を含む小胞）、ナノスフェアなどと呼ばれるような実体を含む。したがって、脂質を使用して、ユニラメラ小胞（１つの単層または二重層を含む）、オリゴラメラ小胞（約２つまたは約３つの単層または二重層を含む）またはマルチラメラ小胞（約３つを超える単層または二重層を含む）を形成することができる。あるいは、脂質を使用して、ナノ粒子などの既存の小胞、例えばナノスフェアを被覆することができる。小胞の内部空隙を、例えば水性液体を含めた液体、気体、気体の前駆体、および／または例えば１つもしくは複数の生物活性物質を含めた固体材料で充填することができる。別の特定の実施形態において、小胞型組成物は、クラスター、チューブなどの形の組成物を指す。
【００４０】
本発明の組成物は、そこに埋め込まれもしくは封入された、または(共有および非共有)結合している１つまたは複数の生物活性物質を含むことができる。さらに詳細には、本発明の小胞型組成物は、内部空隙に(送達機能としての)１つもしくは複数の生物活性物質を含んでもよく、かつ／または表面が(標的指向機能または表示機能としての)１つまたは複数の生物活性物質で誘導体化されていてもよい。これは、同時出願された出願の一部であり、その全体が本明細書に組み込まれる。
【００４１】
本明細書では「共脂質」または「小胞形成性(共)脂質」という用語は、本発明の脂質組成物において追加の脂質として任意選択で存在してもよい脂質を指し、非環式および環式で飽和または不飽和の、天然または合成由来の脂質を包含することができる。本明細書では、共脂質は中性脂質、カチオン性脂質またはアニオン性脂質であってもよい。カチオン性脂質は正の実効電荷を有するものであり、Ｎ−［１−（２，３−ジオレオイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウム塩、例えばメチル硫酸塩（ＤＯＴＡＰ）、ＤＤＡＢ、臭化ジメチルジオクタデシルアンモニウム；１，２−ジアシルオキシ−３−トリメチルアンモニウムプロパン（ジオレオイル、ジミリストイル、ジラウロイル、ジパルミトイルおよびジステアロイルを含むが、これらに限定されない；また異なる２つのアシル鎖がグリセロール主鎖に結合していることがある）；Ｎ−［１−（２，３−ジオレオイルオキシ(dioloyloxy)）プロピル］−Ν，Ν−ジメチルアミン(ＤＯＤＡＰ)；１，２−ジアシルオキシ−３−ジメチルアンモニウムプロパン(ジオレオイル、ジミリストイル、ジラウロイル、ジパルミトイルおよびジステアロイルを含むが、これらに限定されない；また異なる２つのアシル鎖がグリセロール主鎖に結合していることがある)；塩化Ｎ−［１−（２，３−ジオレイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウム（ＤＯＴＭＡ）；１，２−ジアルキルオキシ−３−ジメチルアンモニウムプロパン（ジオレイル、ジミリスチル、ジラウリル、ジパルミチルおよびジステアリルを含むが、これらに限定されない；また異なる２つのアルキル鎖がグリセロール主鎖に結合していることがある）；ジオクタデシルアミドグリシルスペルミン(ＤＯＧＳ)；３β−［Ν−（Ν’，Ν’−ジメチルアミノ−エタン）カルバモイル］コレステロール（ＤＣ−Ｃｈｏｌ）；２，３−ジオレオイルオキシ−Ｎ−（２−（スペルミンカルボキサミド）エチル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−プロパンアミニウムトリフルオロ酢酸塩(ＤＯＳＰＡ)；β−アラニルコレステロール；臭化セチルトリメチルアンモニウム(ＣＴＡＢ)；ジＣ１４−アミジン；Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ’−テトラデシル−３−テトラデシルアミノ−プロピオンアミジン；１４Ｄｅａ２；Ｎ−（α−トリメチルアンモニオアセチル）ジドデシル−Ｄ−グルタマートクロリド(ＴＭＡＧ)；Ｏ，Ｏ’−ジテトラデカノイル−Ｎ−（トリメチルアンモニオ−アセチル）ジエタノールアミンクロリド；１，３−ジオレオイルオキシ−２−（６−カルボキシ−スペルミル）−プロピルアミド(ＤＯＳＰＥＲ)；ヨウ化Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−Ｎ，Ｎ’−ビス（２−ヒドロキシルエチル）−２，３−ジオレオイルオキシ−１，４−ブタンジアンモニウム；塩化１−［２−（９（Ｚ）−オクタデセノイルオキシ）エチル］−２−（８（Ｚ）−ヘプタデセニル−３−（２−ヒドロキシエチル）イミダゾリニウム(ＤＯＴＩＭ)、塩化１−［２−（ヘキサデカノイルオキシ）エチル］−２−ペンタデシル−３−（２−ヒドロキシエチル）イミダゾリニウム(ＤＰＴＩＭ)などの塩化１−［２−（アシルオキシ）エチル］２−アルキル（アルケニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）−イミダゾリニウム誘導体（Ｓｏｌｏｄｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９５）Ｂｉｏｃｈｅｍ．４３：１３５３７−１３５４４に記載）、臭化１，２−ジオレオイル−３−ジメチル−ヒドロキシエチルアンモニウム(ＤＯＲＩ)、臭化１，２−ジオレイルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシエチルアンモニウム(ＤＯＲＩＥ)、臭化１，２−ジオレイルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシプロピルアンモニウム(ＤＯＲＩＥ−ＨＰ)、臭化１，２−ジオレイルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシブチルアンモニウム（ＤＯＲＩＥ−ＨＢ）、臭化１，２−ジオレイルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシペンチルアンモニウム（ＤＯＲＩＥ−Ｈｐｅ）、臭化１，２−ジミリスチルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシルエチルアンモニウム(ＤＭＲＩＥ)、臭化１，２−ジパルミチルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシエチルアンモニウム（ＤＰＲＩＥ）、臭化１，２−ジステアリルオキシプロピル(disteryloxypropyl)−３−ジメチル−ヒドロキシエチルアンモニウム(ＤＳＲＩＥ)などの第四級アミン上にヒドロキシアルキル部分を含む２，３−ジアルキルオキシプロピル第四級アンモニウム化合物誘導体（例えば、Ｆｅｌｇｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９９４，２６９，２５５０−２５６１を参照のこと）；アシルカルニチンのカチオン性エステル（Ｓａｎｔａｎｉｅｌｌｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｕ．Ｓ．Ｐａｔ．Ｎｏ．５４９８６３３により報告）；ホスファチジルコリンのカチオン性トリエステル、すなわち１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロール−３−エチルホスホコリンなどの脂質を挙げることができ、ただし炭化水素鎖は、鎖長Ｃ１２〜Ｃ２４で、飽和または不飽和であり、分枝状または非分枝状とすることができ、２つのアシル鎖は必ずしも同一である必要はない。中性またはアニオン性脂質はそれぞれ、中性または陰イオンの実効電荷を有する。これらは、中性または負の実行電荷(net change)をもつコレステロール、リン脂質、リゾ脂質、リゾリン脂質、スフィンゴ脂質またはＰＥＧ化脂質などのステロールまたは脂質から選択することができる。それによって、有用な中性およびアニオン性脂質としては、ホスファチジルセリン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシトール(特定の糖に限定されない)、脂肪酸、カルボン酸基を含むステロール、例えば、コレステロール、コレステロール硫酸およびコレステロールヘミスクシナート；ＤＯＰＥを含むがこれに限定されない１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−ジアシル−グリセロ−３−ホスホコリン、およびスフィンゴミエリンが挙げられる。グリセロール主鎖に結合している脂肪酸は、特定の長さに限定されず、二重結合も特定の数に限定されない。リン脂質は異なる２つの脂肪酸を有するものであってもよい。
【００４２】
本発明は、様々な医療用途に使用するための新しい種類の脂質およびこれらの脂質を含む小胞を対象にする。さらに詳細には、本発明は、エーテル−脂質化合物Ｈ−Ｌであって、Ｌは少なくとも２つのエーテル結合炭化水素鎖を含む脂質基であり、Ｈは６個までの炭素原子を有する短い直鎖アミノ酸（ω−アミノ酸）およびその誘導体を含む頭部基である化合物を対象にする。
【００４３】
さらに詳細には、本発明は一般式Ｉの化合物に関する：
【００４４】
【化７】
0006457816.tif 000008
【００４５】
（式中、
Ｙは、Ｏ、Ｎ、Ｓまたは共有結合を表し、
Ｐ１は、Ｈ、Ｙ保護基もしくはＹ活性化基またはスペーサー基を表し、
Ｐ２、Ｐ３は、互いに独立して、Ｈ、アミノ保護基もしくはスペーサー基を表し、またはＰ２とＰ３はそれらが結合しているＮと一緒になって、環構造を形成し、
Ｌは、式（ａ）の基であり：
【００４６】
【化８】
0006457816.tif 000009
【００４７】
（式中、破線はＮへの結合を表し、
Ｒ１は、Ｈまたは式−（ＣＨ２）２−ＯＲｂ１の基を表し、
Ｒ１’は、Ｈまたは式−（ＣＨ２）２−ＯＲｂ２の基を表し、
Ｒ２は、Ｈまたは式−ＣＨ２−ＯＲｃの基を表し、
Ｒ２’は、Ｈまたは式−ＯＲｄもしくは−ＣＨ２−ＯＲｄの基を表す。）、
Ｒ３は、Ｈまたは式−（ＣＨ２）２−ＯＲｅもしくは−（ＣＨ２）３−ＯＲｅの基を表し、
Ｒａ、Ｒｂ１、Ｒｂ２、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｅは、互いに独立して、飽和または不飽和で直鎖または分枝状の炭化水素鎖を表し、
ｍは、１、２または３であり、
ただし、Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２、Ｒ２’、Ｒ３の少なくとも１つはＨでない。）。
【００４８】
式Ｉの化合物の第１の実施形態において、Ｒ３基はＨである。さらに詳細には、（ｉ）Ｒ３はＨであり、Ｒ１およびＲ１’はＨであり、または（ｉｉ）Ｒ３はＨであり、Ｒ２およびＲ２’はＨである。
【００４９】
したがって、この第１の実施形態において、本発明は式Ｉａの化合物を対象にする：
【００５０】
【化９】
0006457816.tif 000010
【００５１】
（式中、Ｌは式（ａ）の基であり：
【００５２】
【化１０】
0006457816.tif 000011
【００５３】
Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｙ、Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２、Ｒ２’、Ｒａ、およびｍは、式Ｉの化合物について上記に定義される通りである）。
【００５４】
さらに詳細には、本発明は、式Ｉａの化合物であって、Ｌは式（ｂ）または（ｃ）の基である化合物を対象にする：
【００５５】
【化１１】
0006457816.tif 000012
【００５６】
（式中、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｙ、Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２、Ｒ２’、Ｒａは、上記に定義される通りであり、ただし、式（ｂ）において、Ｒ２およびＲ２’の１つはＨでなく、式（ｃ）において、Ｒ１およびＲ１’の１つはＨでないことを条件とする）。
【００５７】
（ｂ）基の好ましい一実施形態において、Ｒ２はＨであり、Ｒ２’は−ＯＲｄまたは−ＣＨ２−ＯＲｄである。（ｂ）基の別の好ましい実施形態において、Ｒ２は−ＣＨ２−ＯＲｃであり、Ｒ２’は−ＯＲｄまたは−ＣＨ２−ＯＲｄである。
【００５８】
したがって、本発明は、好ましくは、式Ｉａの化合物であって、Ｌは式（ｂ１）、（ｂ２）、（ｂ３）または（ｂ４）の基である化合物を対象にする：
【００５９】
【化１２】
0006457816.tif 000013
【００６０】
（式中、破線はＮへの結合を表し、
Ｒａ、ＲｃおよびＲｄは互いに独立して、飽和または不飽和で直鎖または分枝状の炭化水素鎖である）。
【００６１】
（ｃ）基の好ましい一実施形態において、Ｒ１およびＲ１’の一方はＨである。（ｃ）基の別の好ましい実施形態において、Ｒ１もＲ１’もＨではない。
【００６２】
したがって、本発明は、好ましくは、Ｌが式（ｃ１）または（ｃ２）の基である化合物も対象にする：
【００６３】
【化１３】
0006457816.tif 000014
【００６４】
（式中、Ｒａ、Ｒｂ１、Ｒｂ２は上記に定義した通りである）。
【００６５】
式Ｉの化合物の第２の実施形態において、Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２、Ｒ２’基はＨであり、Ｒ３は式−（ＣＨ２）２−ＯＲｅまたは−（ＣＨ２）３−ＯＲｅの基である。
【００６６】
したがって、この第２の実施形態において、本発明は、式Ｉｂの化合物を対象にする：
【００６７】
【化１４】
0006457816.tif 000015
【００６８】
（式中、Ｒ３は式−（ＣＨ２）２−ＯＲｅまたは−（ＣＨ２）３−ＯＲｅの基であり、
Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｙ、Ｒａ、Ｒｅおよびｍは、式Ｉの基について上記に定義される通りである）。
【００６９】
したがって、本発明の好ましい実施形態は、式ＩＩまたはＩＩＩの化合物で表される式Ｉ（または式Ｉａ）の化合物である：
【００７０】
【化１５】
0006457816.tif 000016
【００７１】
（式中、
ＹはＯ、Ｎ、Ｓまたは共有結合を表し、
Ｐ１は、Ｈ、Ｙ保護基もしくはＹ活性化基またはスペーサー基を表し、
Ｐ２、Ｐ３は、互いに独立して、Ｈ、アミノ保護基もしくはスペーサー基を表し、またはＰ２とＰ３はそれらが結合しているＮと一緒になって、環構造を形成し、
Ｒ１は、Ｈまたは式−（ＣＨ２）２−ＯＲｂ１の基を表し、
Ｒ１’は、Ｈまたは式−（ＣＨ２）２−ＯＲｂ２の基を表し、
Ｒ２は、Ｈまたは式−ＣＨ２−ＯＲｃの基を表し、
Ｒ２’は、Ｈまたは式−ＯＲｄもしくは−ＣＨ２−ＯＲｄの基を表し、
Ｒａ、Ｒｂ１、Ｒｂ２、Ｒｃ、Ｒｄは、互いに独立して、飽和または不飽和で直鎖または分枝状の炭化水素鎖を表し、
ｍは、１、２または３であり、
ただし、式ＩＩにおいて、Ｒ２およびＲ２’の１つはＨでなく、式ＩＩＩにおいて、Ｒ１およびＲ１’の１つはＨではない。）。
【００７２】
式ＩＩの化合物のさらに特定の実施形態は、式ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩｃまたはＩＩｄの化合物である：
【００７３】
【化１６】
0006457816.tif 000017
【００７４】
（式中、
Ｙは、Ｏ、Ｎ、Ｓまたは共有結合を表し、
Ｐ１は、Ｈ、Ｙ保護基もしくはＹ活性化基またはスペーサー基を表し、
Ｐ２、Ｐ３は、互いに独立して、Ｈ、アミノ保護基もしくはスペーサー基を表し、またはＰ２とＰ３はそれらが結合しているＮと一緒になって、環構造を形成し、
Ｒａ、Ｒｃ、Ｒｄは、互いに独立して、飽和または不飽和で直鎖または分枝状の炭化水素鎖を表し、
ｍは１、２または３である）。
【００７５】
式ＩＩＩの化合物のさらに特定の実施形態は、式ＩＩＩａまたはＩＩＩｂの化合物である：
【００７６】
【化１７】
0006457816.tif 000018
【００７７】
（式中、
ＹはＯ、Ｎ、Ｓまたは共有結合を表し、
Ｐ１はＨ、Ｙ保護基もしくはＹ活性化基またはスペーサー基を表し、
Ｐ２、Ｐ３は互いに独立して、Ｈ、アミノ保護基もしくはスペーサー基を表し、またはＰ２とＰ３はそれらが結合しているＮと一緒になって、環構造を形成し、
Ｒａ、Ｒｂ１、Ｒｂ２は互いに独立して、飽和または不飽和で直鎖または分枝状の炭化水素鎖を表し、
ｍは１、２または３である）。
【００７８】
式Ｉ（または式Ｉｂ）の化合物の他の好ましい実施形態は、式ＩＶａおよびＩＶｂの化合物で表される：
【００７９】
【化１８】
0006457816.tif 000019
【００８０】
（式中、
ＹはＯ、Ｎ、Ｓまたは共有結合を表し、
Ｐ１はＨ、Ｙ保護基もしくはＹ活性化基またはスペーサー基を表し、
Ｐ２、Ｐ３は互いに独立して、Ｈ、アミノ保護基もしくはスペーサー基を表し、またはＰ２とＰ３はそれらが結合しているＮと一緒になって、環構造を形成し、
Ｒａ、Ｒｅは互いに独立して、飽和または不飽和で直鎖または分枝状の炭化水素鎖を表し、
ｍは１、２または３である）。
【００８１】
当業者は、本発明の化合物が１個または複数のキラル中心および／または二重結合を含み、したがって二重結合異性体(すなわち、幾何異性体、例えばＺ／Ｅ異性体またはシス／トランス異性体)、鏡像異性体またはジアステレオマーなどの立体異性体として存在する可能性があることを理解する。したがって、キラル中心における立体化学が指定されていないとき、本明細書に示された化学構造は、立体異性体として純粋(例えば、幾何異性体として純粋、鏡像異性体として純粋またはジアステレオマーとして純粋)な形、富化(例えば、幾何異性体富化、鏡像異性体富化またはジアステレオマー富化)された形、ならびに鏡像異性体混合物および立体異性体混合物を含めて、キラル中心において考え得るすべての配置を包含する。個々の異性体は、出発材料の対応する異性体の形を使用して得ることができる。あるいは、当業者に周知である分割技法またはキラル合成技法を使用して、鏡像異性体混合物および立体異性体混合物を、それらの構成成分の鏡像異性体または立体異性体に分割することができる。本明細書に記載される本発明の化合物は、エノール形、ケト形およびそれらの混合物を含めていくつかの互変異性形として存在することもある。したがって、本明細書に示された構造は、示された化合物の考え得るすべての互変異性形を包含する。
【００８２】
本明細書では「飽和または不飽和で直鎖または分枝状の炭化水素鎖」という用語は、６〜３０個、好ましくは１０〜２２個の炭素原子を有する飽和または不飽和で直鎖または分枝状の炭化水素鎖を指す。
【００８３】
「飽和」という用語を炭化水素鎖と組み合わせて、６〜３０個、好ましくは１０〜２２個の炭素原子を含む直鎖または分枝状のアルキル鎖を指す。例としては、カプリル(デシル)、ウンデシル、ラウリル(ドデシル)、ミリスチル(テトラデシル)、セチル(ヘキサデシル)、ステアリル(オクタデシル)、ノナデシル、アラキジル(エイコシル)、ヘンエイコシル、ベヘニル(ドコシル)、トリコシル、テトラコシル、ペンタコシル、およびそれらの分枝状の異性体、例えば、イソラウリル、アンテイソラウリル、イソミリスチル、アンテイソミリスチル、イソパルミチル、アンテイソパルミチル、イソステアリル、アンテイソステアリルまたはフィタニル(３,７,１１,１５−テトラメチル−ヘキサデカニル)が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８４】
「不飽和」という用語を炭化水素鎖と組み合わせて、可能な最大限の数を下回る数の水素原子が鎖中の各炭素に結合し、１個または複数の炭素−炭素二重結合または三重結合を生じることを示す。好ましい実施形態において、不飽和炭化水素鎖中の不飽和結合の数は、１、２、３または４個、好ましくは１または２個である。
【００８５】
アルケニル基の例としては、デセニル、ウンデセニル、ドデセニル、パルミトレイル、ヘプタデセニル、オクタデセニル(エライジル、オレイル、リシノレイル(ricinolenyl))、ノナデセニル、エイコセニル、ヘニコセニル、ドコセニル(エルシル)、トリコセニル、テトラコセニル、ペンタコセニル、およびその分枝鎖異性体などの一不飽和アルケニル、ならびにオクタデカ−９,１２−ジエニル(リノレイル、エライドリノレイル)、オクタデカ−９,１２,１５−トリエニル(リノレニル、エライドリノレニル)、９(Ｚ),１１(Ｅ),１３(Ｅ)−オクタデカトリエニル(エレオステアリル)、およびエイコサ−５,８,ｌｌ,１４−テトラエニルなどの多不飽和アルケニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００８６】
アルキニル基の例としては、ヘキサデカ−７−イニルおよびオクタデカ−９−イニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００８７】
炭化水素と組み合わせた「分枝状」という用語は、線状の一連の炭素原子を主鎖とし、１個または複数の炭素原子を有する少なくとも１つの置換基を側鎖(subordinate chain) (または分枝基)として有する炭化水素鎖を指す。側鎖の例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシルなど１つもしくは複数の(Ｃ１〜６)アルキル基、ビニル、アリル、プロペニル、イソプロペニル、２−ブテニルなど１つもしくは複数の(Ｃ１〜６)アルケニル基、またはエチニル、プロピニル、ブチニルなど１つもしくは複数の(Ｃ１−６)アルキニル基が挙げられる。好ましい側鎖は(Ｃ１〜６)アルキル基であり、最も好ましくはメチルおよびエチルである。
【００８８】
本発明の化合物は、好ましくは少なくとも２つの炭化水素鎖、好ましくは２、３、４、５または６つの炭化水素鎖、最も好ましくは２または３つの炭化水素鎖を含み、炭化水素鎖の主鎖は同じであるか異なり、好ましくは同じであり、アルキル鎖、アルケニル鎖およびアルキニル鎖、好ましくはアルキル鎖およびアルケニル鎖から選択される。好ましい一実施形態において、本発明の化合物は２つのアルキル鎖を有し、それらのアルキル鎖は同じでも異なってもよく、好ましくは同じである。
【００８９】
本発明の化合物の特定の実施形態において、炭化水素鎖Ｒａ、Ｒｂ１、Ｒｂ２、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｅは、好ましくはミリスチル、パルミチル、ステアリル、オレイル、リノレイルおよびフィタニル(phytanoyl)から選択される。
【００９０】
Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３基に関連して本明細書で用いられる「アルキル」、「アルコキシ」、「アルケニル」、「アルキニル」という用語は、以下の意味を有する。
【００９１】
「アルキル」という用語は、１〜１２個、好ましくは１〜８個の炭素原子を含む直鎖または分枝状のアルキル鎖を指す。アルキル基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチルおよびｔ−ブチルが挙げられるが、これらに限定されない。「アルコキシ」という用語は、−Ｏ−アルキル基を指す。アルコキシ基の例としては、メトキシ、エトキシおよびブトキシが挙げられるが、これらに限定されない。「アルケニル」という用語は、１個または複数の炭素−炭素二重結合を有する直鎖または分枝状の不飽和アルキル基を指す。上記のアルキル、アルケニルおよびアルコキシ基は、別の基で任意選択で置換されていてもよい。置換基の例としては、ハロ、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、ニトロ、メルカプト、アルコキシカルボニル、アミド、カルボキシ、アルキルスルホニル、アルキルカルボニル、カルバミド、カルバミル、カルボキシル、チオウレイド、チオシアナト、スルホンアミド、アリール、ヘテロアリール、シクリルおよびヘテロシクリルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００９２】
「アリール」という用語は、約６〜約１０個、好ましくは５〜７個の炭素原子を含む芳香族炭素環式基を指す。アリール基は、同じでも異なってもよい１つまたは複数のアリール基置換基で、任意選択で置換されていてもよく、「アリール基置換基」としては、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、カルボキシ、アロイル、ハロ、ニトロ、トリハロメチル、シアノ、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、アラルコキシカルボニル、アシルオキシ、アシルアミノ、アロイルアミノ、カルバモイル、アルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、アリールチオ、アルキルチオ、アルキレンおよび−ＮＲＲ’（ただし、ＲおよびＲ’はそれぞれ独立して、水素、アルキル、アリールおよびアラルキルである）が挙げられる。例示的なアリール基としては、置換または非置換のフェニル、ナフチル、ピレニル、アントリルおよびフェナントリルが挙げられる。
【００９３】
「ヘテロアリール」という用語は、少なくとも１個のヘテロ原子（例えば、Ｎ、ＯまたはＳ）を有する上記に定義されたアリール部分を指す。ヘテロアリール部分の例としては、フリル、フリレン、フルオレニル、ピロリル、チエニル、オキサゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、ピリジル、ピリミジニル、キナゾリニル、キノリル、イソキノリルおよびインドリルが挙げられる。
【００９４】
「(ヘテロ)アリールオキシ」という用語は(ヘテロ)アリール−Ｏ−基を指し、(ヘテロ)アリール基は以前に説明した通りである。例示的なアリールオキシ基としては、フェノキシおよびナフトキシが挙げられる。「(ヘテロ)アラルキル」という用語は(ヘテロ)アリール−アルキル基を指し、(ヘテロ)アリールおよびアルキルは以前に説明した通りである。例示的なアラルキル基としては、ベンジル、フェニルエチルおよびナフチルメチルが挙げられる。「(ヘテロ)アラルキルオキシ」という用語は(ヘテロ)アラルキル−Ｏ−基を指し、(ヘテロ)アラルキル基は以前に説明した通りである。例示的なアラルキルオキシ基はベンジルオキシである。
【００９５】
「シクロアルキル」という用語は、シクロヘキシルまたはシクロヘキセン−３−イルなど６〜１０個の炭素原子を有する飽和または不飽和の非芳香族環式炭化水素部分を指す。「ヘテロシクロアルキル」という用語は、４−テトラヒドロピラニルまたは４−ピラニルなど少なくとも１個の環ヘテロ原子（例えば、Ｎ、ＯまたはＳ）を有する本明細書に定義されたシクロアルキルを指す。
【００９６】
本明細書に記載されたアリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルは、別段の指定のない限り、置換部分と非置換部分の両方を含む。シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールおよびヘテロアリール上の可能な置換基としては、(Ｃ１〜Ｃ１０)アルキル、(Ｃ２〜Ｃ１０)アルケニル、(Ｃ２〜Ｃ１０)アルキニル、(Ｃ３〜Ｃ８)シクロアルキル、(Ｃ５〜Ｃ８)シクロアルケニル、(Ｃ１〜Ｃ１０)アルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、アミノ、(Ｃ１〜Ｃ１０)アルキルアミノ(Ｃ１〜Ｃ２０)ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、ヒドロキシル、ハロゲン、チオ、(Ｃ１〜Ｃ１０)アルキルチオ、アリールチオ、(Ｃ１〜Ｃ１０)アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アシルアミノ、アミノアシル、アミジノ、グアニジン、ウレイド、シアノ、ニトロ、アシル、アシルオキシ、カルボキシル、およびカルボン酸エステルが挙げられる。シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールは、互いに縮合していてもよい。
【００９７】
Ｙ基はＯ、Ｎ、Ｓまたは共有結合であり、好ましくはＯまたはＮであり、最も好ましくはＮである。Ｙ基が共有結合である場合、−Ｓ１−Ｘ１はＣＯ−基に直接結合していることが理解される。
【００９８】
「保護基」は、分子中の特定の化学反応性官能基が望ましくない化学反応に関与しないように、選択的にその化学反応性官能基と結合し、かつそれから脱離することができる部分である。保護基は、保護される化学反応性基の種類ならびに使用できる反応条件および分子中における追加の反応性基または保護基の存在に応じて異なる。「保護基」という用語は、本化合物の１つにおいてＮ基に関して使用される場合（ＹがＮである場合のＰ１、Ｐ２またはＰ３など）アミノ保護基であり、本化合物の１つにおいてＣＯＯ基に関して使用される場合（ＹがＯである場合のＰ１など）カルボキシル保護基であり、本化合物の１つにおいてＣＯ基に関して使用される場合（Ｙが共有結合である場合のＰ１など）カルボニル保護基であり、本化合物の１つにおいてＳ基に関して使用される場合（ＹがＳである場合のＰ１など）硫黄保護基であることが理解されよう。
【００９９】
例えばカルボン酸基、アミノ基、ヒドロキシル基、チオール基、カルボニル基など様々な官能基の代表的保護基は当業者に周知であり、例えばＴ．Ｗ．ＧｒｅｅｎｅおよびＧ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ，Ｎ．Ｙ．，１９９９、ならびにその中に引用されている参考文献に記載されている。
【０１００】
本発明の化合物では、「カルボキシル保護基」（例えば、ＹがＯである場合のＰ１基）としては、ベンズヒドリル、ベンジル、およびｏ−またはｐ−ニトロベンジル、ｐ−メトキシベンジルなどのベンジルエステル、メチル、ｔ−ブチル、４−ピリジルメチル、２−ナフチルメチル、２,２−トリクロロエチルなどのアルキルエステル、２−トリメチルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル、ｔ−ブチルジフェニルシリル、２−(トリメチルシリル)エチルなどのシリルエステル；オルト酢酸トリメチルまたはトリエチルなどのオルトエステル；オキサゾリン、アリル、２−クロロアリル、フェナシル、アセトニル、ｐ−メトキシフェニルが挙げられるが、これらに限定されない。好ましい基としては、ベンジル、ｔ−ブチルが挙げられる。
【０１０１】
アミド保護基（例えば、ＹがＮである場合のＰ１基）としては、フタルイミドまたはトリフルオロアセトアミド保護基が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０２】
「アミノ保護基」は、非環式保護基だけでなく環式保護基（Ｐ２およびＰ３）も包含し、例えばＰ２基およびＰ３基はそれぞれ、同じでも異なってもよい保護基を表すことができ、またはＰ２およびＰ３はそれらが結合しているＮと一緒になって、環式保護基を形成する。典型的な基としては、Ｂｏｃ(ｔ−ブチルオキシカルボニル)、Ｃｂｚ(カルボキシベンジル)、Ｆｍｏｃ(フルオレニルメチルオキシカルボニル)、ａｌｌｏｃ(アリルオキシカルボニル)、メチルおよびエチルカルバマートなどのカルバマート；トリチル、ベンジル、ベンジリデン、トシルなど；スクシンイミドやフタルイミドなどの環状イミド誘導体；ホルミル、（非）置換アセチル、およびベンゾイルなどのアミド；ならびにｔ−ブチルジメチルシリルおよびトリイソプロピルシリルなどのトリアルキルシリル基が挙げられるが、これらに限定されない。好ましいアミノ保護基としては、Ｂｏｃ、Ｃｂｚ、Ｆｍｏｃ、ベンジル、アセチル、ベンゾイル、トリチルなどが挙げられる。
【０１０３】
例えば、「基」、「アミン基」、「カルボキシル基」、「スペーサー基」という用語のいずれかと共に使用される「活性化された(activated)」または「活性化する(activating)」という用語は、化学官能基のある反応条件下における改変に対する感受性を、活性化された化学官能基が適切な条件下で第２の化学基と反応することができ、それによって共有結合が形成されるように高める化学的部分を指す。
【０１０４】
例えば、活性化基は、劣った脱離基を良好な脱離基に変換し、または求核攻撃もしくは他の化学転換に対する感受性を高める（もしくは下げる）ことができる。
【０１０５】
したがって、「カルボキシル活性化基」は、カルボキシル基の水素またはヒドロキシルと置換し、それによってカルボキシル基の化学特性および電子特性をカルボキシル基の求核攻撃または置換に対する感受性が高まるように変更する部分を指すことになっている。
【０１０６】
カルボキシル基の水素が置換される実施形態において、例示的なカルボキシル活性化基としては、例えばアルキル、アリール、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アラルキルカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロシクリルカルボニル、Ｃ（Ｓ）Ｏ−アリール、Ｃ（Ｓ）Ｏ−アルキル、シリルまたは置換アルキルカルボニルが挙げられる。アリールカルボキシル活性化基の例はペンタフルオロフェニルなどのペンタハロフェニルであり、アルキルカルボニルカルボキシル活性化基の例はアセチルまたはトリフルオロアセチルである。カルボキシル活性化基は、任意選択で置換されていてもよい。置換カルボキシル活性化基の例は、置換アルキルカルボニル、例えばカルボキシル置換アルキルカルボニル、具体的にはスクシニル（３−カルボキシルプロピオニル）などである。
【０１０７】
−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨ基の水素が置換されるカルボキシル活性化は、求核付加反応を促進する部分、すなわち正味の電子吸引効果をカルボニルに及ぼす置換基であるカップリング剤の使用を必要とすることもある。このような基は、カルボキシラート基と、反応性官能基を有する化合物、例えばアミド官能基の形成などにおけるアミノ基を含む求核試薬とのカップリングを助けるもしくは促進する、またはそのカップリング率を改善するように働く。カップリング剤は当業者に周知であり、例えばＬａｒｏｃｋ，Ｒ．Ｃ．，Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ，ＶＣＨ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｉｎｃ．，ＮＹ（１９８９）、ならびにＣａｒｅｙ，Ｆ．Ａ．，ａｎｄ  Ｓｕｎｄｂｅｒｇ，Ｒ．Ｊ．，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ，ＮＹ（１９９０）に記載されており、それぞれの開示内容は参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【０１０８】
−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨ基のヒドロキシル基が置換されるカルボキシル活性化は、例えばヒドロキシルをフルオロ、クロロ、ブロモまたはヨードなどのハロ基などの部分で置換し、求核攻撃または置換に対する感受性がより高いカルボン酸ハロゲン化物を生成するステップを含む。
【０１０９】
したがって、典型的な活性化基またはカップリング基としては、ヒドロキシベンゾトリアゾール、イミダゾール、ニトロフェノール、ペンタクロロフェノール、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、ジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−メトキシアミンなどのエステルおよびアミド；酢酸、ギ酸、スルホン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、またはｐ−トリルスルホン酸無水物などの酸無水物；および酸塩化物、臭化物またはヨウ化物などの酸ハロゲン化物が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１０】
活性化されたカルボニル化合物は、選択された反応性部分とカルボニル化合物を標準手順で反応させることによって得られる。活性化されたカルボニル化合物は現場で生成させてもよく、または適宜単離した形で用意してもよい。上記の活性化された化合物を得るための例示的な反応性部分としては、イソチオシアネート、イソシアナート、モノクロロトリアジン、ジクロロトリアジン、モノハロゲンまたはジハロゲン置換ピリジン、モノハロまたはジハロ置換ジアジン、マレイミド、アジリジン、スルホニルハロゲン化物、酸ハロゲン化物、ヒドロキシスクシンイミドエステル、ヒドロキシスルホスクシンイミドエステル、イミドエステル、ヒドラジン、アジドニトロフェニル、アジ化物、３−（２−ピリジルジチオ）プロピオンアミド(3-(2-pyridyl dithio)proprionamide)、グリオキサールおよびアルデヒドを含むそれぞれの基が挙げられる。
【０１１１】
「スペーサー」または「スペーサー基」という用語は、本明細書でＰ１、Ｐ２、Ｐ３基と共に用いられて、本発明の化合物を、別の部分、すなわち生物活性の基と、化合物と別の部分との望ましくない相互作用をいずれも除去しかつ／または別の部分の生物活性（リガンドのそれらの受容体との親和性結合など）に影響を及ぼす可能性がある（化合物自体または他の何らかの隣接分子によって引き起こされる）立体障害をいずれも低減するのに十分な距離で、結合させることができる２価の分枝または非分枝状の化学基を指す。エーテル−脂質と生物活性リガンドのコンジュゲートの所期の使用に応じて、スペーサー基は長さが異なってもよく、（加水分解的、酵素的および化学的に）安定であってもよく、または切断可能な結合を含んでもよい。本発明の切断可能な結合は、何らかの形態、例えば化学的、酵素的、加水分解的などの切断可能な化学的挙動を経て切断するように選択することができる。例示的な切断可能なリンカーとしては、プロテアーゼ切断ペプチドリンカー、ヌクレアーゼ感受性核酸リンカー、リパーゼ感受性脂質リンカー、グリコシダーゼ感受性炭水化物リンカー、ｐＨ感受性リンカー、低酸素感受性リンカー、光切断リンカー、熱不安定性リンカー、酵素切断リンカー、超音波感受性リンカー、Ｘ線切断リンカーなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１２】
Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３基は互いに独立して、Ｈ、保護基またはスペーサー基を表す。さらに詳細には、Ｐ１はＨ、Ｙ保護基もしくはＹ活性化基またはスペーサー基Ｓ１を表し、Ｐ２はＨ、アミノ保護基またはスペーサー基Ｓ２を表し、Ｐ３はＨ、アミノ保護基またはスペーサー基Ｓ３を表し、あるいはＰ２とＰ３はそれらが結合しているＮと一緒になって、環構造を形成する。
【０１１３】
スペーサーは、スペーサーで改変された本発明の化合物が生物活性の基など別の部分に結合できるように活性化された末端基であってもなくてもよいことが理解される。
【０１１４】
特定の実施形態において、「スペーサー基」（Ｓ１、Ｓ２、Ｓ３基とも呼ばれる）は、短いスペーサー基、またはケトン、エステル、エーテル、アミノ、アミド、アミジン、イミド、カルバマートもしくはチオカルバマート官能基、グリセロール、尿素、チオ尿素、二重結合または芳香族環から選択される基の１つまたは複数を任意選択で含むアルキレン鎖から選択される長鎖スペーサー基を表す。
【０１１５】
さらに詳細には、短いスペーサー基（またはＳ１、Ｓ２、Ｓ３基）は、(Ｃ１〜Ｃ１２)アルキル、(Ｃ２〜Ｃ１２)アルケニル、アリール、アラルキル、ヘテロアリールから選択することができる。
【０１１６】
長鎖スペーサー基（またはＳ１、Ｓ２、Ｓ３基）は式−Ｗ−（ＣＨ２−）ｋ−Ｗ’−の重合体基から選択することができ、式中、ｋは１３から３０００の間の整数であり、ＷおよびＷ’はアミノ、カルボキシル、ヒドロキシまたはチオ基と反応することができる反応性基であり、非隣接ＣＨ２基の１つまたは複数は独立して、アリール、ヘテロアリール、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−；または−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ο−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、および−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−から選択される親水性(または極性)基で置換されていてもよく、式中、Ｒ’は水素または(Ｃ１〜Ｃ１２)アルキルを表す。１つを超える非隣接ＣＨ２基の同じ基による置換は、特定の繰返し単位を有する重合体鎖（例えば、ポリエステル、ポリエーテル、ポリイミドなど）において行われることが理解される。
【０１１７】
好ましいスペーサー基としては、（水溶液に対して増大した親和性を有する）親水性重合体基、すなわちアルキレン主鎖中に上記の親水性（または極性）基の１つまたは複数を含む繰返し構造単位を含む重合体が挙げられる。親水性重合体基の典型的な例としては、ポリオキシ（Ｃ２〜Ｃ３）アルキレン（例えば、ポリエチレングリコール(ＰＥＧ)またはポリプロピレングリコール(ＰＰＧ)）、多糖（例えば、デキストラン、プルラン、キトサン、ヒアルロン酸)、ポリアミド（例えば、ポリアミノ酸、半合成ペプチドおよびポリヌクレオチド）；ポリシアル酸、ポリエステル（例えば、ポリラクチド(ＰＬＡ）、ポリラクチド−コ−グリコリド(ＰＬＧＡ)）、ポリカルボナート、ポリエチレンイミン(ＰＥＩ)、ポリイミド、ポリ酢酸ビニル(ＰＶＡ)が挙げられる。
【０１１８】
好ましいスペーサーは、「ＰＥＧ」または「ポリエチレングリコール」であり、いずれの水溶性ポリ（エチレンオキシド）も包含する。典型的には、「ＰＥＧ」は−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−である副単位の大部分、例えば＞５０％を含む重合体を意味する。様々な形態のＰＥＧは、分子量、構造または幾何形状（例えば、分枝状、線状、櫛形ＰＥＧ、多機能性など）が異なる。本発明において使用するためのＰＥＧは、好ましくは次の２つの構造の一方を含むことができる：「−Ｏ(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｍ−」または「−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｍ−ＣＨ２ＣＨ２−」、ここで、ｍは３〜３０００であり、末端基およびＰＥＧ全体の構造は異なってもよい。以上に示したように、使用に応じて、ＰＥＧはエンドキャップされた形をとることができる。ＰＥＧが「−Ｏ(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｍ−」と定義される場合、エンドキャップ基は、典型的には１〜２０個の炭素を含む炭素含有基であることが一般的であり、好ましくはアルキル（例えば、メチル、エチルまたはベンジル）であるが、その飽和および不飽和の形、ならびにアリール、ヘテロアリール、シクリル、ヘテロシクリル、および前述のいずれかの置換された形も考えられる。ＰＥＧが「−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｍ−ＣＨ２ＣＨ２−」と定義される場合、エンドキャップ基は炭素含有基であることが一般的であり、典型的には１〜２０個の炭素原子および基に共有結合している酸素原子を含み、ＰＥＧの一端に共有結合するのに利用できる。この場合、基は典型的にはアルコキシ（例えば、メトキシ、エトキシまたはベンジルオキシ）であり、炭素含有基に関して、任意選択で飽和および不飽和であり、アリール、ヘテロアリール、シクリル、ヘテロシクリル、および前述のいずれかの置換された形とすることができる。（「エンドキャップされていない」）他端は、典型的にはヒドロキシル、アミン、またはＰＥＧが「−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｍ−ＣＨ２ＣＨ２−」と定義される場合に別の化学修飾を施すことができる活性基である。さらに、エンドキャップ基はシランとすることもできる。
【０１１９】
様々な末端基官能化または活性化ＰＥＧの調製に関する概説は当技術分野において公知である（例えば、Ｚａｌｉｐｓｋｙ  Ｓ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．  Ｃｈｅｍ．，６，１５０−１６５（１９９５）を参照のこと）。
【０１２０】
好ましい実施形態において、本発明は次式Ｖ、ＶＩおよびＶＩＩの化合物を対象にする：
【０１２１】
【化１９】
0006457816.tif 000020
【０１２２】
（式中、
ＹはＯ、Ｎ、Ｓまたは共有結合を表し、
Ｐ１はＨ、Ｙ保護基もしくはＹ活性化基またはスペーサー基を表し、
Ｐ２、Ｐ３は互いに独立して、Ｈ、アミノ保護基もしくはスペーサー基を表し、またはＰ２とＰ３はそれらが結合しているＮと一緒になって、環構造を形成し、
ｐ１、ｑ１、ｐ２、ｑ２、ｐ３、ｑ３は互いに独立して、１〜２３であり、ただし、ｐ１およびｑ１、ｐ２およびｑ２、ｐ３およびｑ３の合計が１２〜２４であることを条件とする）。
【０１２３】
別の態様において、本発明は本発明の化合物を調製する方法を対象にする。
【０１２４】
本発明の化合物は、特に、リポソーム、ミセルおよび(脂質被覆)ナノ粒子などの小胞型組成物の調製における使用に適している。
【０１２５】
したがって、別の態様において、本発明は、本発明の少なくとも１つの化合物から構成される小胞型組成物を対象にする。このような小胞は、スペーサー基またはその混合物を含む非誘導体化化合物または誘導体化化合物を含む。任意選択で、小胞型組成物は、１つまたは複数の他の小胞形成性脂質を含んでもよい。
【０１２６】
一実施形態において、小胞は、本発明の脂質−スペーサー誘導体および他の小胞形成性脂質（共脂質）を好ましくは１：２００〜２００：１の比で含んでもよい。
【０１２７】
当業者が本発明を入手すれば、脂質被覆ナノ粒子、リポソーム、ミセルまたは他の小胞の形の小胞型組成物は、当技術分野において公知である標準状態を使用して本発明の化合物から容易に調製できることを認識する。
【０１２８】
所望の物理的諸特性に応じて、小胞型組成物は、任意選択で安定化脂質を含めて１つまたは複数の共脂質と組み合わせて、本発明の化合物から調製してもよい。最終的に本化合物と組み合わせる特定の安定化化合物は、得られる組成物の特性を最適化するように所望に応じて選択することができる（過度の実験なしに当業者が容易に特定可能である）。
【０１２９】
本発明の小胞型組成物は、特に生物活性剤送達用の担体または抗原提示担体として有効である。
【０１３０】
本明細書では「生物活性剤」という用語は、標的指向剤、抗原剤、治療剤または診断剤など生物活性を有する（遊離型、塩型または溶媒和もしくは水和型の）任意の合成化合物または天然化合物、好ましくは治療剤または診断剤を指す。
【０１３１】
本明細書では「抗原提示系」という（「抗原表示系」とも呼ばれる）用語は、（ｉ）少なくとも１つの抗原(またはその一部分)を、Ｔ細胞表面の免疫エフェクター分子、例えばＴ細胞抗原受容体が認識または結合することができるように提示することができ、あるいは（ｉｉ）少なくとも１つの抗原(またはその一部分)を免疫系の特異的エフェクター細胞が認識できる抗原−ＭＨＣ複合体の形で提示し、それによって提示される抗原(またはその一部分)に対して有効な細胞免疫応答を誘導することができる天然系もしくは合成系を指す。
【０１３２】
本発明によるミセル小胞型組成物は、当業者に明らかである通常の様々なミセル調製方法のいずれか１つを使用して調製することができる。これらの方法は、典型的には脂質化合物の有機溶媒への懸濁、溶媒の蒸発、水性媒体への再懸濁、超音波処理および遠心を伴う。前述の方法および他の方法が、例えばＣａｎｆｉｅｌｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．  １８９，ｐｐ．４１８−４２２（１９９０）；Ｅｌ−Ｇｏｒａｂ  ｅｔ  ａｌ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ，Ｖｏｌ．３０６，ｐｐ．５８−６６（１９７３）；Ｃｏｌｌｏｉｄａｌ  Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ，Ｓｈｉｎｏｄａ，  ｅｔ  ａｌ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙ．（１９６３）（特に、”Ｔｈｅ  Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍｉｃｅｌｌｅｓ”，Ｓｈｉｎｏｄａ，Ｃｈａｐｔｅｒ  １，ｐｐ．１−８８）；Ｃａｔａｌｙｓｉｓ  ｉｎ  Ｍｉｃｅｌｌａｒ  ａｎｄ  Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｆｅｎｄｌｅｒ  ａｎｄ  Ｆｅｎｄｌｅｒ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙ．（１９７５）に記載されている。前述の各刊行物の開示内容は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【０１３３】
本発明の化合物と組み合わせて、それから生成するミセル組成物を安定化させる任意選択の安定化材料としては、臭化ラウリルトリメチルアンモニウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム、臭化ミリスチルトリメチルアンモニウム、塩化(Ｃ１２〜Ｃ１６)アルキルジメチルベンジルアンモニウム、臭化および塩化セチルピリジニウム、ラウリル硫酸などが挙げられる。以上に例示した材料に加えて、ミセル組成物を安定化させる他の材料は、本開示に基づいて当業者に明らかである。
【０１３４】
リポソーム小胞型組成物は、１つもしくは複数の非誘導体化化合物および／または（スペーサー基を有する）１つもしくは複数の誘導体化化合物を、１つもしくは複数の別の共脂質および／または１つもしくは複数の安定化化合物と任意選択で組み合わせて含んでもよい。本化合物は（共脂質と任意選択で組み合わされて）、単層または二重層の形をとることがある。１つを超える単層または二重層の場合、単層または二重層は略同心円状である。したがって、本化合物（および任意選択で共脂質）を使用して、ユニラメラリポソーム（１つの単層または二重層を含む）、オリゴラメラリポソーム（２または３つの単層または二重層を含む）またはマルチラメラリポソーム（３つを超える単層または二重層を含む）を形成することができる。
【０１３５】
本化合物と組み合わせて、本発明のリポソーム小胞型組成物の形成において使用することができる(共)脂質としては、好ましくはカチオン性脂質、ホスファチジルコリン(ＰＣ)、ホスファチジル−ＤＬ−グリセロール(ＰＧ)、Ｌ−α−ホスファチジルエタノールアミン(ＰＥ)、コレステロール、ヘミコハク酸コレステリルトリス塩(cholesteryl hemisuccinate tri salt)(ＣＨＥＭＳ)、１，２−ジオレオイル−３−トリメチルアンモニウム−プロパン(ＤＯＴＡＰ)が挙げられる。
【０１３６】
以上に例示した材料に加えて、本発明のリポソーム小胞型組成物の調製に使用する他の材料は、本開示に基づいて当業者に明らかである。
【０１３７】
本化合物と組み合わせられる例えば追加の両親媒性化合物などの安定化材料の量は、選択された本発明の本化合物の特定構造、選択された特定の安定化材料、安定化材料の特定の使用目的、送達の様式などを含めて、種々の因子に応じて異なってもよい。本化合物と組み合わせられる安定化材料の量および安定化材料と本化合物の比は様々であり、本開示に基づいて当業者が容易に決定できる。典型的には、本化合物と安定化脂質の比は約４：１、３：１または２：１を超えることが好ましい。
【０１３８】
本発明のリポソーム小胞型組成物の調製における適切な共脂質および安定化化合物の選択は当業者に明らかであるはずであり、過度の実験なしに本開示に基づいて実現することができる。
【０１３９】
本発明のリポソーム小胞型組成物の調製に関して、多種多様な方法を利用できる。したがって、当業者に明らかな通常の種々のリポソーム調製技法のいずれか１つを使用して、リポソームを調製することができる。これらの技法としては、エタノール注射、薄膜法、均質化、溶媒透析、強制水和、逆相蒸発、マイクロ乳化、および例えば通常のマイクロ乳化機器を使用する単純な凍結融解が挙げられる。本発明のリポソーム小胞型組成物を本発明の化合物から調製する追加の方法としては、例えば超音波処理、キレート透析、均質化、溶媒注入、自発的形成、溶媒気化、制御界面活性剤透析(controlled detergent dialysis)などが挙げられ、それぞれ、リポソームを様々な方式で調製するものである。典型的には、本発明のリポソーム組成物の本発明の化合物からの調製に関して、エタノール注入、薄膜法、均質化および押出を伴う方法が好ましい。
【０１４０】
リポソームのサイズは、所望により、押出、濾過、超音波処理および均質化を含めて種々の技法で調整することができる。リポソームのサイズを調整し、得られたリポソームの生体内分布およびリポソームのクリアランスを調節する他の方法は、本開示に基づいて当業者に明らかである。好ましくは、リポソームのサイズは、加圧下で所定のサイズの細孔を通して押し出すことによって調整される。本発明のリポソーム組成物はいずれのサイズでもよく、好ましくは外径約２００ナノメートル（ｎｍ）未満である。
【０１４１】
ナノ微粒子小胞型組成物またはナノ粒子は、典型的には直径１ミクロン未満、好ましくは約２５〜１０００ｎｍの範囲、より好ましくは約５０〜３００ｎｍの範囲、最も好ましくは約６０〜２００ｎｍの範囲の小粒子であることが一般的である。ナノ粒子は、任意の形状および任意の形態を有することができる。ナノ粒子の例としては、ナノ粉末、ナノクラスター、ナノ結晶、ナノスフェア、ナノ繊維、および他の幾何形状が挙げられる。ナノ重合体は、重合中に集合して、例えばナノロッド、ナノ繊維、またはナノスフェアなどのナノ粒子を形成する重合体を指す。ナノスフェアは、形状がおよそ球状であり、中空コアまたは中実コアを有することができる種類のナノ粒子を指す。
【０１４２】
一実施形態において、ナノ粒子は、金属などの無機材料および生理学的に許容される重合体を含む重合体などの有機材料を含めて、すべての種類の材料および構造を用いて形成することができるマトリクスコア構造を有する。このような重合体の例として限定されるものではないが、例えばポリエステル（ポリ(乳酸)、ポリ(Ｌ−リシン)、ポリ(グリコール酸)およびポリ(乳酸−コ−グリコール酸)など）、ポリ(乳酸−コ−リシン)、ポリ(乳酸−グラフト−リシン)、ポリ酸無水物（ポリ(脂肪酸二量体)、ポリ(フマル酸)、ポリ(セバシン酸)、ポリ(カルボキシフェノキシプロパン)、ポリ(カルボキシフェノキシヘキサン)、これらの単量体の共重合体など）、ポリ(無水物−コ−イミド)、ポリ(アミド)、ポリ(オルトエステル)、ポリ(イミノカルボナート)、ポリ(ウレタン)、ポリ(オルガノホスファゼン(organophasphazene））、ポリ(ホスファート)、ポリ(エチレン酢酸ビニル)と他のアシル置換酢酸セルロースおよびそれらの誘導体、ポリ(カプロラクトン)、ポリ(カルボナート)、ポリ(アミノ酸)、ポリ(アクリラート)、ポリアセタール、ポリ(シアノアクリラート)、ポリ(スチレン)、ポリ(塩化ビニル)、ポリ(フッ化ビニル)、ポリ(ビニルイミダゾール)、クロロスルホン化ポリオレフィン、ポリエチレンオキシド、共重合体、ポリスチレン、ならびにそれらのブレンドまたは共重合体などが挙げられる。ナノ粒子としては、ヒドロキシプロピルセルロース(ＨＰＣ)、Ｎ−イソプロピルアクリルアミド(ＮＩＰＡ)、ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール(ＰＶＡ)、ポリエチレンイミン、キトサン、キチン、デキストラン硫酸、ヘパリン、コンドロイチン硫酸、ゼラチンなど、ならびにそれらの誘導体、共重合体、および混合物も挙げることができる。ナノ粒子を作製する方法としては限定されるものではないが、例えばＵ．Ｓ．Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ２００３／０１３８４９０に記載されている。別の実施形態において、コア材料は、金属、合金、半金属、金属酸化物などの金属化合物、無機化合物、および炭素系材料、特にカーボンナノチューブ、１次元フラーレンＣ６０ナノ粒子、および３次元フラーレンＣ７０ナノ粒子から選択することができる。
【０１４３】
金属の適切な例としては、Ａｇ、Ａｕ、Ｐｄ、Ｐｔ、Ｒｈ、Ｉｒ、ＲｕおよびＯｓなどの貴金属または白金属、Ｔｉ、Ｃｒ、Ｍｎ、Ｆｅ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｃｕ、Ｚｎ、Ｚｒ、Ｎｂ、Ｍｏ、Ｔａ、Ｗ、Ｒｅなどの遷移金属、ならびにＡｌ、Ｇａ、Ｉｎ、Ｓｉ、Ｇｅ、Ｓｎ、Ｓｂ、Ｂｉ、Ｔｅなどの典型金属が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの典型金属、特にＳｉおよびＧｅは、よく半金属とも呼ばれることを理解されたい。合金の適切な例としては、貴金属または白金属と遷移金属の合金、特にＡｇ／Ｎｉ、Ａｇ／Ｃｕ、Ａｇ／Ｃｏなどの銀と遷移金属の合金、およびＰｔ／Ｃｕなどの白金と遷移金属の合金、またはＲｕ／Ｐｔなどの貴金属もしくは白金合金が挙げられるが、これらに限定されない。無機の化合物は限定されるものではないが、例えば、ＳｉＯ２、金属化合物、特にＴｉＯ２や酸化鉄などの金属酸化物などが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１４４】
当業者は、材料の選択がナノ粒子の所期の使用に依存することを知っている。
【０１４５】
ナノ粒子は、リンカーなど他の化合物をナノ粒子の表面に共有結合させるため、例えば、カルボキシル、スルフヒドリル(sulhydryl)、ヒドロキシルまたはアミノ基などの官能基を任意選択で含む。他の実施形態において、リンカーなどの化合物は、ファン・デル・ワールス力、イオン相互作用、疎水相互作用など他の分子間力によりナノ粒子に会合することができる。
【０１４６】
いくつかの実施形態において、ナノ粒子は、生物活性剤と会合することができる（例えば、表面に絡み、埋め込まれ、組み込まれ、被包され、結合され、またはその他の方法で、ナノ粒子と会合する）。
【０１４７】
好ましくは、このような生物活性剤は、生物活性剤とナノ粒子との間のリンカーとして働く本発明の化合物により、ナノ粒子に会合する。本化合物およびその組成物のこれらの態様は、同時出願された国際出願の一部であり、その全体が本明細書に組み込まれる。
【０１４８】
ナノ粒子を（任意選択で、分散剤と共に）寄せ集めて、ナノクラスターを形成することもできる。クラスター形成前の各ナノ粒子型の独立した形態(formulation)およびクラスター内のナノ粒子の特別配置は、生物活性成分の持続時間および濃度の制御を可能にすることができる。
【０１４９】
本発明の一実施形態において、本発明の１つまたは複数の非誘導体化化合物または誘導体化化合物をナノ粒子に組み込み、結合させ、吸着させることができる。好ましくは、脂質被覆ナノ粒子(ＬＣＮ)をナノサイズのコア粒子および本発明の１つまたは複数の化合物および任意選択で１つまたは複数の共脂質から形成することができる。所与の任意の脂質被覆ナノ粒子において、脂質は単層または二重層の形をとることができる。１つを超える単層または二重層の場合、単層または二重層は略同心円状である。ナノ粒子の被覆は、本発明の化合物を含む溶液中で、（当技術分野において公知である技法を使用して；例えばＪｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，Ｖｏｌ  １３７（１），６９−７７，２００９を参照）化合物がナノ粒子を被覆できるように十分な時間を与えることによって実施することが好ましい。所与の任意の脂質被覆ナノ粒子において、脂質は単層または二重層の形をとることができる。１つを超える単層または二重層の場合、単層または二重層は略同心円状である。
【０１５０】
様々な方法を用いて、適切なサイズのナノ粒子を作製することができる。これらの方法としては、気化方法（例えば、自由噴流膨張、レーザー気化、スパーク腐食、電気爆発および化学蒸着）、機械的摩砕(例えば、パールミリング技術、Ｅｌａｎ  Ｎａｎｏｓｙｓｔｅｍｓ社(アイルランド))を伴う物理的方法、および溶媒置換後の界面析出が挙げられる。
【０１５１】
当業者が認識するように、本化合物および本発明の化合物を含む小胞型組成物のいずれかを、生物活性剤と共にまたはなしで、貯蔵のため凍結乾燥し、例えば水性媒体（滅菌水またはリン酸緩衝溶液または生理食塩水溶液）中、好ましくは激しい撹拌下で再構成することができる。必要なら、凍結乾燥の結果である脂質の凝集または融合を防止するために添加剤を含めてもよい。有用な添加剤としては制限なく、ソルビトール、マンニトール、塩化ナトリウム、グルコース、トレハロース、ポリビニルピロリドンおよびポリ（エチレングリコール）、例えばＰＥＧ４００が挙げられる。
【０１５２】
以上に示したように、本化合物、特に本発明のリポソーム組成物は、特に生物活性剤の標的指向型送達の担体としてまたは抗原表示系としての使用の担体として使用するのに適している。したがって、本発明の化合物は、特に１つもしくは複数の特異的生物活性物質の標的指向型送達が望ましくまたは必要とされている疾患の治療方法における試験管内および／または生体内での使用ならびに試験管内／生体内診断応用方法における使用に応用可能である。本化合物およびその組成物のこれらの態様は、同時出願された国際出願の一部であり、その全体が本明細書に組み込まれる。
【０１５３】
別の態様において、本発明は、キットの様々な要素を保持するために区画化された容器を備えるキットに関する。一区画には、所定量の本発明の化合物またはその小胞型組成物を含めることができる。小胞型組成物の場合、これらは、組成物のｐＨを生理的範囲の約７〜約８に調整するためのｐＨ緩衝剤を含みまたは尽くまず、あるいは凍結乾燥またはフリーズドライされた形をとり、使用時に再構成することができる。また、キット内に他の試薬および使用指示書も含める。
【実施例】
【０１５４】
本発明を下記の例でさらに説明する。
【０１５５】
例
材料：コレステロールおよびＰＯＰＣは、Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ社(Ａｌａｂａｓｔｅｒ、ＡＬ)から購入する。保護アミノ酸はすべて、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社から入手する。ジフェニルジアゾメタン樹脂Ｄ−２２３０はＢａｃｈｅｍ  ＡＧ社から入手する。他の化学薬品および溶媒はすべて、Ａ．Ｒ．グレード以上である。
【０１５６】
２，３−ビス（テトラデシルオキシ）プロパン−１−アミンは、Ｋｏｋｏｔｏｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ−Ａ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ，２０００，ｖｏｌ．６，＃２２，４２１１−４２１７に従って合成する。同様に、ビス（３−（（Ｚ）−オクタデカ−９−エニルオキシ）プロピル）アミンは、メタンスルホン酸オレイルおよびビス（３−ヒドロキシプロピル）アミンから得られる（ＭａＧｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０００，ｖｏｌ．６５，＃２４，８３６７−８３７１を参照）。
【０１５７】
（例１）  （２Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−グルタミン酸−α−ｔｅｒｔ−ブチルエステル−γ−２，３−ビス（テトラデシルオキシ）プロピル−アミドの合成
【０１５８】
【化２０】
0006457816.tif 000021
【０１５９】
１５ｇのＦｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＳｕ）ＯｔＢｕ（（２Ｓ）−Ｎα−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−グルタミン酸α−ｔｅｒｔ−ブチルエステルγ−Ν−ヒドロキシスクシンイミドエステル）をジクロロメタンに室温で溶解する。１５．３ｇの２，３−ビス（テトラデシルオキシ）プロパン−１−アミンを添加した後、混合物を１７時間撹拌し、蒸発乾固する。残渣を最少量のジクロロメタンに溶解し、カラムクロマトグラフィーで固相としてＳｉＯ２および溶離液としてメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル／ヘキサン／７：３を使用して精製する。生成物画分の蒸発後、２５．５ｇの（２Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−グルタミン酸−α−ｔｅｒｔ−ブチルエステル−γ−２，３−ビス（テトラデシルオキシ）プロピル−アミドが無色固体として得られる。
【０１６０】
【数１】
0006457816.tif 000022
【０１６１】
（例２）  （２Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−グルタミン酸−γ−２，３−ビス（テトラデシルオキシ）プロピル−アミドの合成
【０１６２】
【化２１】
0006457816.tif 000023
【０１６３】
４．６ｇ（５．１ｍｍｏｌ）の（２Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−グルタミン酸−α−ｔｅｒｔ−ブチルエステル−γ−２，３−ビス（テトラデシルオキシ）プロピル−アミドを、１００ｍｌのフラスコ中で２５ｍｌのジクロロメタンに溶解し、２５ｍｌのトリフルオロ酢酸で処理する。１時間後、エステル基が完全に切断されると、溶液を５０ｍｌの冷水に注ぎ込む。有機層を抽出し、中性ｐＨになるまで水洗し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水する。有機層を濾取し、溶媒を蒸発させて、４．２ｇの所望の生成物を得る（５．０ｍｍｏｌ、収率９８％、ＴＬＣ：ＭｔＢＥ／ヘキサン  ７：３；Ｒｆ＝０．４３。
【０１６４】
（例３）  （２Ｓ）−グルタミン酸−γ−（２，３−ビス（テトラデシルオキシ）プロピル）アミドの合成
【０１６５】
【化２２】
0006457816.tif 000024
【０１６６】
５ｇの（２Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−グルタミン酸−α−ｔｅｒｔ−ブチルエステル−γ−２，３−ビス（テトラデシルオキシ）プロピル−アミドを、８５ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに添加する。この混合物に、２．６ｍｌのピペリジンを添加する。混合物を室温で３時間撹拌し、次いで真空下で蒸発乾固して、５．２ｇの（２Ｓ）−グルタミン酸−γ−（２，３−ビス（テトラデシルオキシ）プロピル）アミドを無色固体として得る。これを脂質小胞の調製または活性剤もしくはスペーサー基による前誘導体化に使用することができる。
【０１６７】
（例４）  （Ｒ）−２−アミノ−Ｎ１−（２−（４−メトキシベンズアミド）エチル）−Ｎ４，Ｎ４−ビス（３−（（Ｚ）−オクタデカ−９−エニルオキシ）プロピル）スクシンアミドの合成
（ａ）Ｎ−（２−アミノエチル）−４−メトキシベンズアミドの合成
【０１６８】
【化２３】
0006457816.tif 000025
【０１６９】
３．０ｇの塩化４−メトキシベンゾイルを−７８℃でジクロロメタン中３０ｍＬの１，２−ジアミノエタンに添加し、続いて２３℃まで温める。水性酸−塩基ワークアップおよび真空下での蒸発乾固により、１．６５ｇのＮ−（２−アミノエチル）−４−メトキシベンズアミド（淡黄色油）が得られる。
【０１７０】
【数２】
0006457816.tif 000026
【０１７１】
（ｂ）（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−４−（２−（４−メトキシベンズアミド）エチルアミノ）−４−オキソブタノアートの合成
【０１７２】
【化２４】
0006457816.tif 000027
【０１７３】
３．０ｇのＮ−（２−アミノエチル）−４−メトキシベンズアミド(ステップ(ａ)で得られた)およびＤＭＦ中１．７０ｍＬのＮ−メチルモルホリン（０℃）を、６．３５ｇのＦｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、１．７０ｍＬのＮ−メチルモルホリンおよび酢酸エチル中２．００ｍＬのイソブチルクロロホルマート（−１２℃）の溶液に添加し、２３℃まで温まらせながら、３時間撹拌する。得られた懸濁液を酢酸エチルで希釈し、その後に続いて水性酸−塩基ワークアップおよび真空下で蒸発乾固すると、９．５５ｇの（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（９Ｈ−フルオレン−９−ｙｌ）メトキシ）カルボニルアミノ）−４−（２−（４−メトキシベンズアミド）エチルアミノ）−４−オキソブタノアートが得られる。この粗材料をイソプロピルエーテルに２３時間懸濁し、次いで濾取し、乾燥して、４．４７ｇの（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−４−（２−（４−メトキシベンズアミド）エチルアミノ）−４−オキソブタノアートを白色結晶として得る。
【０１７４】
【数３】
0006457816.tif 000028
【０１７５】
（ｃ）（Ｒ）−３−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−４−（２−（４−メトキシベンズアミド）エチルアミノ）−４−オキソブタン酸酢酸ナトリウムの合成
【０１７６】
【化２５】
0006457816.tif 000029
【０１７７】
３０．０ｍｌのトリフルオロ酢酸を、２３℃でジクロロメタン中３．０ｇの（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（９Ｈ−フルオレン−９−ｙｌ）メトキシ）カルボニルアミノ）−４−（２−（４−メトキシベンズアミド）エチルアミノ）−４−オキソブタノアート(ステップ(ｂ)で得られた)に添加する。反応が完了次第、ＮａＨＣＯ３水溶液を添加すると、白色沈殿物が得られる。これをジクロロメタンで洗浄し、乾燥して、２．５５ｇの（Ｒ）−３−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−４−（２−（４−メトキシベンズアミド）エチルアミノ）−４−オキソブタン酸酢酸ナトリウムを白色粉末として得る。
【０１７８】
【数４】
0006457816.tif 000030
【０１７９】
（ｄ）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（Ｒ，Ｚ）−１−（４−メトキシフェニル）−１０−（３−（（Ｚ）−オクタデカ−９−エニルオキシ）プロピル）−１，６，９−トリオキソ−１４−オキサ−２，５，１０−トリアザドトリアコンタ−２３−エン−７−イルカルバマートの合成
【０１８０】
【化２６】
0006457816.tif 000031
【０１８１】
ジメチルホルムアミド中０．４８ｇの（Ｒ）−３−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−４−（２−（４−メトキシベンズアミド）エチルアミノ）−４−オキソブタン酸酢酸ナトリウム(ステップ(ｃ)で得られた)を１０℃に冷却し、次いで０．４６ｇのビス（３−（（Ｚ）−オクタデカ−９−エニルオキシ）プロピル）アミン、０．３７ｇのＣＯＭＵおよび０．２０ｇのＤＩＰＥＡを続けて添加する。２３℃で２０時間撹拌した後、溶液をＡｌｏｘパッドに通して濾過し、これをわずかなジメチルホルムアミドですすぐ。濾液を酢酸エチルで希釈し、水で洗浄し、真空下で蒸発乾固して、１．１２ｇの橙色油を得る。この油をカラムクロマトグラフィー精製して、０．４１ｇの（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（Ｒ，Ｚ）−１−（４−メトキシフェニル）−１０−（３−（（Ｚ）−オクタデカ−９−エニルオキシ）プロピル）−１，６，９−トリオキソ−１４−オキサ−２，５，１０−トリアザドトリアコンタ−２３−エン−７−イル−カルバマートを得る。
【０１８２】
【数５】
0006457816.tif 000032
【０１８３】
（ｅ）（Ｒ）−２−アミノ−Ｎ１−（２−（４−メトキシベンズアミド）エチル）−Ｎ４，Ｎ４−ビス（３−（（Ｚ）−オクタデカ−９−エニルオキシ）プロピル）スクシンアミドの合成
【０１８４】
【化２７】
0006457816.tif 000033
【０１８５】
０．７５ｇのジエチルアミンを、ジクロロエタン中２．１２ｇの（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（Ｒ，Ｚ）−１−（４−メトキシフェニル）−１０−（３−（（Ｚ）−オクタデカ−９−エニルオキシ）プロピル）−１，６，９−トリオキソ−１４−オキサ−２，５，１０−トリアザドトリアコンタ−２３−エン−７−イル−カルバマート(ステップ(ｄ)で得られた)に添加し、２６時間撹拌し、その後に続いて真空下で蒸発乾固して、１．９０ｇの粗材料を得る。これを２０ｇのＤｏｗｅｘモノスフィアーへの吸着およびその後のエタノール中アンモニアによる脱着により精製して、１．０９ｇの（Ｒ）−２−アミノ−Ｎ１−（２−（４−メトキシベンズアミド）エチル）−Ｎ４，Ｎ４−ビス（３−（（Ｚ）−オクタデカ−９−エニルオキシ）プロピル）スクシンアミドを得る。
【０１８６】
【数６】
0006457816.tif 000034
【０１８７】
（例５）  （４１Ｓ）−１−アミノ−４１−（３−（（２，３−ビス（テトラデシルオキシ）プロピル）アミノ）−３−オキソプロピル）−３９−オキソ−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６−ドデカオキサ−４０−アザドテトラコンタン−４２−オイック酸の合成
【０１８８】
【化２８】
0006457816.tif 000035
【０１８９】
（ａ）Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＤＭＡ）−ＯｔＢｕ樹脂の合成
３．８５ｇのジフェニルジアゾメタン樹脂（３．３ｍｍｏｌ）を１００ｍｌのＳＰＰＳ反応器中３０ｍｌのＤＣＭで２回洗浄し、３０ｍｌのＤＣＭ中４．２ｇの（２Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−グルタミン酸−γ−２，３−ビス（テトラデシルオキシ）プロピル−アミド（例２を参照、１．５当量、５．０ｍｍｏｌ）溶液で終夜処理する。溶液を濾取し、残渣をＤＣＭで４回洗浄する。最終的に未反応のジフェニルジアゾメタンを破壊するために、残渣を３０ｍｌのＤＣＭ中１２５μｌの酢酸（０．５当量、２．２ｍｍｏｌ）で１５分間処理し、その後３０ｍｌのジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に３回洗浄する。残渣をジイソプロピルエーテルで２回洗浄し、真空で終夜乾燥する。所望の生成物が６．７ｇ得られる（＞理論値の１００％、理論上の収量６．５ｇ）。残渣の負荷量をＦｍｏｃ切断生成物の３０４ｎｍにおけるＵＶ測定により０．４９ｍｍｏｌ／ｇに決定する（理論上の最大負荷量０．５１ｍｍｏｌ／ｇ）。
【０１９０】
（ｂ）Ｈ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ−ＮＨ−ＰＥＧ１１−Ｇｌｕ（ＤＭＡ）−ジフェニルメチル樹脂の合成：
Ｈ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ−ＮＨ−ＰＥＧ１１−Ｇｌｕ（ＤＭＡ）−ジフェニルメチル樹脂は、通常の固相合成により以下の反応順序で得られる：
１）ＤＭＦ中ピペリジンによるＦｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＤＭＡ）−ＯｔＢｕ樹脂のＦｍｏｃ基の切断
（２）ＤＭＦおよびＤＩＰＥＡ中ＨＴＢＵを使用するＦｍｏｃ−ＮＨ−ＰＥＧ１１−ＣＯＯＨとの縮合
（３）ＤＭＦ中ピペリジンによるＦｍｏｃ−ＮＨ−ＰＥＧ１１−Ｇｌｕ（ＤＭＡ）−ＯｔＢｕ樹脂のＦｍｏｃ基の切断
（ｃ）Ｈ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ−ＮＨ−ＰＥＧ１１−Ｇｌｕ（ＤＭＡ）−ジフェニルメチル樹脂の切断および脱保護：
所望の化合物は、樹脂からの切断、例えばトリフルオロ酢酸(Trifluaroacetic acid)およびトリイソプロピルシランでの処理によって得ることができる。
【０１９１】
（例６）  アニスアミドで修飾されたリポソームの調製
４７０ｍｇのＰＯＰＣ、６０ｍｇのＣｈｏｌおよび１３．５ｍｇのアニスアミド脂質（実施例４を参照）を５５℃で７５０μｌのエタノール（９６％）に溶解し、４．２５ｍＬのＰＢＳ（ｐＨ７．４）に注入する。脂質の使用モル比は７７．９９：１８．８３：１．０２：０．２７である。１００ｎｍのポリカルボナート膜を通して押し出した後、リポソームの平均サイズは１１０ｎｍであり、ＰＤＩは０．０６８である。ＨＰＬＣ分析によれば、アニスアミド脂質含有量は理論値の７２％である。
【０１９２】
（例７）  ＮＨ２−ＰＥＧ８−ＰＡ−Ｇｌｕ（ＤＭＡ）−アミドの合成
【０１９３】
【化２９】
0006457816.tif 000036
【０１９４】
（ａ）Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＤＭＡ）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂の合成：（例１６を参照）
（ｂ）ＮＨ２−ＰＥＧ８−ＰＡ−Ｇｌｕ（ＤＭＡ）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂の合成：
ＮＨ２−ＰＥＧ８−ＰＡ−Ｇｌｕ（ＤＭＡ）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂は、通常の固相合成により以下の反応順序で得られる：
（１）ＤＭＦ中ピペリジンによるＦｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＤＭＡ）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂のＦｍｏｃ基の切断
（２）ＤＭＦおよびＤＩＰＥＡ中ＨＴＢＵを使用するＦｍｏｃ−ＮＨ−ＰＥＧ８−ＰＡとの縮合、最後に
（３）ＤＭＦ中ピペリジンによるＦｍｏｃ−ＮＨ−ＰＥＧ８−ＰＡ−Ｇｌｕ（ＤＭＡ）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂のＦｍｏｃ基の切断
（ｃ）ＮＨ２−ＰＥＧ８−ＰＡ−Ｇｌｕ（ＤＭＡ）−アミドの合成：
生成物は、ジクロロメタン中トリフルオロ酢酸を使用してＮＨ２−ＰＥＧ８−ＰＡ−Ｇｌｕ（ＤＭＡ）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂から切断される。ＥＳＩ−ＭＳ：モノアイソトピックＭｗ（計算値）＝１０３４．８、Ｍｗ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１０３５．９。