(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
チロシンキナーゼを抑制する活性成分と外用製剤の添加剤を含む皮膚外用医薬組成物であって、前記活性成分がイコチニブ遊離塩基、イコチニブ塩酸塩、イコチニブマレイン酸塩、又はイコチニブリン酸塩であることと、前記添加剤に、分散媒、乳化剤及び／又はその他の薬学的に許容される外用製剤の添加剤のうち一種又は複数種が含まれており、
前記活性成分の含有量が０．３〜５質量％であり、
前記分散媒が水溶性基剤及び／又は油性基剤であり、
前記水溶性基剤の含有量が４０〜１００質量％であり、
前記油性基剤の含有量が９〜１１質量％であり、
前記乳化剤の含有量が１０〜１５質量％であることとを特徴とする、医薬組成物。
【請求項２】
前記活性成分の含有量が０．９〜４．３質量％であることを特徴とする、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記水溶性基剤に、水、グリセリン、ゼラチン、エタノール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、ＤＭＳＯ、及び／又はセルロース誘導物が含まれることを特徴とする、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記水溶性基剤の含有量が６５〜８５質量％であることを特徴とする、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記油性基剤に、炭化水素系基剤、油脂系基剤、脂質系基剤、及び／又は有機ケイ素酸化物の重合体が含まれることを特徴とする、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記炭化水素系基剤に、セチルアルコール、ステアリルアルコール、及び／又は液体パラフィンが含まれることと、前記油脂系基剤に、大豆油、ヒマシ油、モノ・ジステアリン酸グリセリル、及び／又はワセリンが含まれることと、前記脂質系基剤に、ラノリン及び／又は蜜蝋が含まれることと、前記有機ケイ素酸化物の重合体はジメチルシロキサンの重合体であることとを特徴とする、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記乳化剤がアニオン系乳化剤及び／又はノニオン系乳化剤であることを特徴とする、請求項１−６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記アニオン系乳化剤が一価石鹸類及び／又は脂肪族アルコール硫酸エステル類であることと、前記ノニオン系乳化剤が高級脂肪酸ポリオールエステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、及び／又はポリオキシエチレンエーテル誘導物であることとを特徴とする、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記一価石鹸類がステアリン酸ナトリウムであることと、前記脂肪族アルコール硫酸エステル類がドデシル硫酸ナトリウム及び／又はセチル硫酸ナトリウムであることと、前記高級脂肪酸ポリオールエステルがセチルアルコール、ステアリルアルコール、ステアリン酸グリセリル、ポロキサマー、ポリソルベート８０、ポリソルベート６０、及び／又はポリソルベート８５であることと、前記ポリオキシエチレンエーテル誘導物がＰｅｒｅｇａｌ  Ｏであることと、前記ポリエチレングリコール脂肪酸エステルがポリエチレングリコール‐７‐ステアレート及び／又はオレイン酸マクロゴールグリセリドであることとを特徴とする、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記その他の薬学的に許容される外用製剤の添加剤が懸濁化剤であることを特徴とする、請求項１〜９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記懸濁化剤が高分子懸濁化剤であることを特徴とする、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記高分子懸濁化剤がカルボマー、ポリビニルピロリドン、グルカン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース及び／又はメチルセルロースであることを特徴とする、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記懸濁化剤の含有量が０〜８．５質量％であることを特徴とする、請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記懸濁化剤の含有量が０〜０．１質量％であることを特徴とする、請求項１０〜１３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記その他の薬学的に許容される外用製剤の添加剤がｐＨ調節剤であることを特徴とする、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記ｐＨ調節剤が塩基、酸、及び／又は緩衝液であることを特徴とする、請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記塩基が水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、及び／又は水酸化アンモニウムから選択されることと、前記緩衝液が弱塩基と弱酸からなる緩衝対から選択されることとを特徴とする、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
前記弱酸がクエン酸、フタル酸水素カリウム、及び／又は酢酸から選択されることと、前記弱塩基がトリエタノールアミン、ジエタノールアミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、クエン酸ナトリウム、及び／又は酢酸ナトリウムから選択されることとを特徴とする、請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記ｐＨ調節剤の含有量が０〜１２．８質量％であることを特徴とする、請求項１５〜１８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前記ｐＨ調節剤の含有量が０．２〜１．５質量％であることを特徴とする、請求項１５〜１９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
前記その他の薬学的に許容される外用製剤の添加剤が防腐剤であることを特徴とする、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
前記防腐剤がパラオキシ安息香酸エステル類及び／又はソルビン酸及びその塩類から選択されることを特徴とする、請求項２１に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
前記防腐剤がエチルパラベン、メチルパラベン、プロピルパラベン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、クロロクレゾール、及び／又はトリクロロ‐ｔｅｒｔ‐ブタノールから選択されることを特徴とする、請求項２１又は２２に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
前記防腐剤の含有量が０〜０．３質量％であることを特徴とする、請求項２１〜２３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
前記その他の薬学的に許容される外用製剤の添加剤が皮膚透過吸収促進剤であり、前記皮膚透過吸収促進剤がＴｒａｎｓｃｕｔｏｌ  Ｐ及び／又はＬａｂｒａｓｏｌから選択されることを特徴とする、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
前記皮膚透過吸収促進剤の含有量が１５〜３０質量％であることを特徴とする、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
前記医薬組成物が軟膏剤であることを特徴とする、請求項１〜２６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
前記軟膏剤がクリームであることを特徴とする、請求項２７に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
前記医薬組成物がゲル剤であることを特徴とする、請求項１〜２６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
前記ゲル剤が透明ゲル剤であることを特徴とする、請求項２９に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
請求項１〜３０のいずれか一項に記載の医薬組成物を含む、非悪性の過形成症又は腫瘍、及びその合併症を治療するための医薬。
【請求項３２】
前記非悪性の過形成症が良性の表皮過形成であることを特徴とする、請求項３１に記載の医薬。
【請求項３３】
前記非悪性の過形成症が皮膚病であることを特徴とする、請求項３１又は３２に記載の医薬。
【請求項３４】
前記皮膚病に、乾癬、硬皮症、及び／又は糖尿病による皮膚病が含まれることを特徴とする、請求項３３に記載の医薬。
【請求項３５】
前記皮膚病が乾癬であることを特徴とする、請求項３３又は３４に記載の医薬。
【請求項３６】
前記腫瘍及びその合併症が皮膚腫瘍及びその合併症であることを特徴とする、請求項３１に記載の医薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、イコチニブ又はその薬学的に許容される塩を含む皮膚外用医薬組成物及びその応用に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚病は皮膚に関する疾患で、ヒトの健康に大きく影響する一般病、多発病の一つであり、例えば、ハンセン病、疥癬、真菌症、乾癬、皮膚細菌感染などが挙げられる。皮膚病とは、皮膚（毛髪と爪を含む）が内因・外因に影響されて、その形態、構造及び機能がいずれも変化して病理過程が生じ、また、各種の対応する臨床発現が次々と生じたものである。皮膚病は、発病率が高く、病症が軽く、通常は健康に影響を与えないが（ただし、病症が重くなり、生命にかかわる場合も稀にある）、患者の外貌に及ぼす影響が大きく、患者に大きな心理的負担をかけ、さらに患者の日常生活や仕事にも影響する。
【０００３】
乾癬は、よく見られる慢性炎症性皮膚病で、その発病率は欧米諸国で約２％、アジアで概ね０．３％であるが、近年は急増している。乾癬は、典型的な皮膚発現が銀白色の鱗屑を有する境界明瞭な紅斑であり、患者の外貌に及ぼす影響が大きい。そのため、乾癬は生命にかかわらないが、患者に大きな精神的負担をかけ、さらに患者の日常生活や仕事にも影響を与えることになる。適切に治療しないと、病状がひどくなるとともに、患者の精神的・経済的負担を増加させる。紅皮症と膿疱性乾癬は、全身の代謝を乱して、心血管や肺などの多臓器の合併症及び感染などを出現させ、生命を脅かす。紅皮症と膿疱性乾癬の発生・悪化については、一部は病因が不明である以外、多くの場合、不適切な治療によるものと判明している。
【０００４】
初期の研究では、乾癬の病理学的機構は主に表皮の増殖・分化の異常及び免疫系の活性化であると考えられていた。２００８年の中国乾癬治療指南では、タザロテン（ビタミンＡ酸類）、中程度の効力及び強い効力の糖コルチコイド、カルシポトリオール（ＶｉｔＤ３誘導物）が局部治療の推薦医薬品として挙げられている。しかしながら、皮質ステロイドホルモンを長期間使用すると、皮膚萎縮、毛細血管拡張、毛嚢炎、色素沈着又は色素減退などの副反応を引き起こすことになる。強いコルチコイド製剤を大面積かつ長期間使用すると、全身の反応を引き起こし、さらには投薬完了後に膿疱性又は紅皮症型の乾癬を誘発してしまう。ビタミンＡ酸類は皮膚・粘膜刺激症状を有し、それらは特にアレルギー体質の患者に発生しやすい。カルシポトリオールについてよく見られる副作用は、掻痒症、皮膚刺激、焼灼感、ヒリヒリ感、皮膚乾燥、紅斑及び皮疹であり、また、カルシウム代謝にもある程度影響する。そのため、効果が顕著かつ副作用が小さいもので、患者の選択に供しうる製品は非常に限られている。
【０００５】
新たな研究によって、健康な人の表皮各層でＥＧＦＲ（上皮成長因子受容体）の発現は一致しておらず、分裂の活発な基底層及びそれと接近する一部の有棘細胞層に多くのＥＧＦＲが存在していることが発見されている。尋常性乾癬の場合では、各層でいずれも陽性発現し、有棘細胞層の上の各層では、その発現が健康な人より８倍以上高くなる。尋常性乾癬の皮膚損害においてＥＧＦＲは過度に発現するため、乾癬の表皮細胞の過増殖、分化異常と関連があると考えられる。その異常発現を是正することで、乾癬治療のための新たな方法を開発し、新しい医薬品を提供することができる。
【０００６】
チロシンキナーゼ受容体は、シグナルの変換に参与するトランスメンブランたんぱく質であり、成長、変異、血管形成などを制御し、アポトーシスを抑制するような重要な機能を有する増殖因子シグナルを、細胞表面から細胞内に伝達する。その一種のチロシンキナーゼ受容体が上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）チロシンキナーゼである。現在、市場には、チロシンキナーゼ抑制剤を使用した成熟した乾癬治療薬はまだ存在していない。
【発明の概要】
【０００７】
本発明は、従来技術の空白に対してなされたものであり、チロシンキナーゼを抑制する外用医薬組成物及びその調製方法を提供する。
【０００８】
まず、本発明は、チロシンキナーゼを抑制する活性成分と外用製剤の添加剤を含む皮膚外用医薬組成物であって、前記活性成分がイコチニブ又はその薬学的に許容される塩であることと、前記添加剤が分散媒、乳化剤及び／又はその他の薬学的に許容される外用製剤の添加剤のうち一種又は複数種を含むこととを特徴とする、皮膚外用医薬組成物を提供する。
【０００９】
さらに、本発明は、上記の技術的解決手段のうちの好ましいものを提供する。
【００１０】
好ましくは、前記活性成分はイコチニブ遊離塩基、イコチニブ塩酸塩、イコチニブマレイン酸塩、又はイコチニブリン酸塩である。
【００１１】
好ましくは、前記活性成分の含有量は、０．１〜１１質量％であり、より好ましくは０．３〜５質量％であり、さらに好ましくは０．９〜４．３質量％であり、特に好ましくは１〜１．５質量％である。
【００１２】
好ましくは、前記分散媒は水溶性基剤及び／又は油性基剤に分けられる。
【００１３】
好ましくは、前記水溶性基剤に、水、グリセリン、ゼラチン、エタノール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、ＤＭＳＯ、及び／又はセルロース誘導物が含まれる。
【００１４】
好ましくは、前記水溶性基剤の含有量は、４０〜１００質量％であり、より好ましくは６５〜８５質量％である。
【００１５】
好ましくは、前記油性基剤に、炭化水素系基剤、油脂系基剤、脂質系基剤、及び／又は有機ケイ素酸化物の重合体が含まれる。
【００１６】
好ましくは、前記炭化水素系基剤に、セチルアルコール、ステアリルアルコール、及び／又は液体パラフィンが含まれ、前記油脂系基剤に、大豆油、ヒマシ油、モノ・ジステアリン酸グリセリル、及び／又はワセリンが含まれ、前記脂質系基剤にラノリン及び／又は蜜蝋が含まれ、前記有機ケイ素酸化物の重合体はジメチルシロキサンの重合体である。
【００１７】
好ましくは、前記油性基剤の含有量は、０〜２５質量％であり、より好ましくは９〜１１質量％である。
【００１８】
好ましくは、前記乳化剤は、アニオン系乳化剤及び／又はノニオン系乳化剤であり、より好ましくはノニオン系乳化剤である。
【００１９】
好ましくは、前記アニオン系乳化剤は一価石鹸類及び／又は脂肪族アルコール硫酸エステル類であり、前記ノニオン系乳化剤は高級脂肪酸ポリオールエステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、及び／又はポリオキシエチレンエーテル誘導物である。
【００２０】
好ましくは、前記一価石鹸類はステアリン酸ナトリウムであり、前記脂肪族アルコール硫酸エステル類はトデシル硫酸ナトリウム及び／又はセチル硫酸ナトリウムであり、前記高級脂肪酸ポリオールエステルはセチルアルコール、ステアリルアルコール、ステアリン酸グリセリル、ポロキサマー、ポリソルベート８０、ポリソルベート６０、及び／又はポリソルベート８５であり、前記ポリオキシエチレンエーテル誘導物はＰｅｒｅｇａｌＯであり、前記ポリエチレングリコール脂肪酸エステルはポリエチレングリコール‐７‐ステアレート及び／又はオレイン酸マクロゴールグリセリドである。
【００２１】
好ましくは、前記乳化剤の含有量は、０〜２３質量％であり、より好ましくは１０〜１５質量％である。
【００２２】
好ましくは、前記その他の薬学的に許容される外用製剤の添加剤が懸濁化剤である。
【００２３】
好ましくは、前記懸濁化剤は高分子懸濁化剤である。
【００２４】
好ましくは、前記高分子懸濁化剤はカルボマー、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ‐Ｋ３０）、グルカン、カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ‐Ｎａ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（Ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌ  Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ、ＨＰＭＣ）、及び／又はメチルセルロースである。
【００２５】
好ましくは、前記懸濁化剤の含有量は、０〜８．５質量％であり、より好ましくは０〜０．１質量％である。
【００２６】
好ましくは、前記その他の薬学的に許容される外用製剤の添加剤はｐＨ調節剤である。
【００２７】
好ましくは、前記ｐＨ調節剤は塩基、酸、及び／又は緩衝液である。
【００２８】
好ましくは、前記塩基は水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、及び／又は水酸化アンモニウムから選択され、前記緩衝液は弱塩基と弱酸からなる緩衝対から選択される。
【００２９】
好ましくは、前記弱酸はクエン酸（枸櫞酸）、フタル酸水素カリウム、及び／又は酢酸から選択され、前記弱塩基はトリエタノールアミン、ジエタノールアミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、クエン酸ナトリウム、及び／又は酢酸ナトリウムから選択される。
【００３０】
好ましくは、前記ｐＨ調節剤の含有量は、０〜１２．８質量％であり、より好ましくは０．２〜１．５質量％である。
【００３１】
好ましくは、前記その他の薬学的に許容される外用製剤の添加剤は防腐剤である。
【００３２】
好ましくは、前記防腐剤は、パラオキシ安息香酸エステル類及び／又はソルビン酸及びその塩類から選択される。
【００３３】
好ましくは、前記防腐剤はエチルパラベン（ｐ‐ヒドロキシ安息香酸エチル）、メチルパラベン、プロピルパラベン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、クロロクレゾール、及び／又はトリクロロ‐ｔｅｒｔ‐ブタノールから選択される。
【００３４】
好ましくは、前記防腐剤の含有量は０〜０．３質量％である。
【００３５】
好ましくは、前記その他の薬学的に許容される外用製剤の添加剤は皮膚透過吸収促進剤である。
【００３６】
好ましくは、前記皮膚透過吸収促進剤がＴｒａｎｓｃｕｔｏｌＰ及び／又はＬａｂｒａｓｏｌから選択される。
【００３７】
好ましくは、前記皮膚透過吸収促進剤の含有量は、０〜４５質量％であり、より好ましくは１５〜３０質量％である。
【００３８】
また、本発明は、上記外用医薬組成物を軟膏剤の調製に用いる用途を提供する。
【００３９】
好ましくは、前記軟膏剤はクリームである。
【００４０】
さらに、本発明は、上記外用医薬組成物をゲル剤の調製に用いる用途を提供する。
【００４１】
好ましくは、前記ゲル剤は透明ゲル剤である。
【００４２】
さらに、本発明は、上記外用医薬組成物を非悪性の過形成症又は腫瘍、及びその合併症の治療用医薬の調製に用いるための応用を提供する。
【００４３】
さらに、本発明は上記の技術的解決手段のうちの好ましいものを提供する。
【００４４】
好ましくは、前記非悪性の過形成症は良性の表皮過形成である。
【００４５】
好ましくは、前記非悪性の過形成症は皮膚病である。
【００４６】
好ましくは、前記皮膚病に、乾癬、硬皮症、及び／又は糖尿病による皮膚病が含まれる。
【００４７】
好ましくは、前記皮膚病は乾癬である。
【００４８】
好ましくは、前記腫瘍及びその合併症は皮膚腫瘍及びその合併症である。
【００４９】
さらに、本発明は、組織過形成症を有する患者に対して上記医薬組成物を治療有効量で投与することを含む、哺乳動物の組織過形成症を治療する方法を、提供する。
【００５０】
さらに、本発明は、上記の技術的解決手段のうちの好ましいものを提供する。
【００５１】
好ましくは、前記組織過形成症は皮膚病又は皮膚腫瘍、及びそれらの合併症である。
【００５２】
好ましくは、前記皮膚病は乾癬、硬皮症、及び／又は糖尿病による皮膚病である。
【００５３】
好ましくは、前記皮膚病は乾癬である。
【００５４】
特に、本発明で提供する皮膚外用医薬組成物における活性組成は、イコチニブ遊離塩基でありうる。当該イコチニブ遊離塩基は、次のような方法で調製される。イコチニブ塩酸塩をエタノールと水の混合物に溶解させ、反応混合液のｐＨ値≧１３となるまで一定の温度で水酸化ナトリウムを水に溶解してなる溶液をイコチニブ塩酸塩の溶液に一滴ずつ滴下して、反応溶液を攪拌し、室温まで冷却して生じる沈殿を濾過し、純水で洗浄し、一定の温度より低い条件で真空乾燥して、イコチニブ遊離塩基が得られる。しかし、イコチニブ遊離塩基は、この調製方法によって調製されるものに限定されない。イコチニブ遊離塩基の構造は次のように示される。
0006463745.tif 000002
【００５５】
特に、本発明で提供する外用医薬組成物における活性組成には、イコチニブ塩酸塩、すなわち塩酸イコチニブが用いられるが、塩酸イコチニブ結晶体Ｉを使用することが好ましい。当該結晶体Ｉは、国際出願ＷＯ２０１０／００３３１３Ａ１に開示されている調製方法で調製できるが、その調製方法で調製されるものに限定されない。塩酸イコチニブの構造は次のように示される。
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【００５６】
特に、本発明で提供する外用医薬組成物における活性組成には、イコチニブマレイン酸塩が用いられる。イコチニブマレイン酸塩は、次のような方法で調製される。まず、イコチニブ遊離塩基をアセトンに溶解してイコチニブ溶液を得る。一方、マレイン酸をアセトンに溶解してマレイン酸溶液を得る。マレイン酸溶液をイコチニブ溶液に加えて、得られる反応混合物を攪拌しながら反応させ、分離してイコチニブマレイン酸塩が得られる。イコチニブマレイン酸塩は、この調製方法で調製されるものに限定されない。イコチニブマレイン酸塩の構造は次のように示される。
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【００５７】
特に、本発明で提供する外用医薬組成物における活性組成には、イコチニブリン酸塩が用いられる。イコチニブリン酸塩は、次のような方法で調製される。イコチニブ遊離塩基をイソプロピルアルコールに溶解してイコチニブ溶液を形成する。一方、リン酸溶液をイソプロピルアルコールに加えてリン酸溶液を調製する。リン酸溶液をイコチニブ溶液に加えて、得られる反応混合物を攪拌し、分離してイコチニブリン酸塩が得られる。イコチニブリン酸塩は、この調製方法で調製されるものに限定されない。イコチニブリン酸塩の構造は次のように示される。
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【００５８】
特に、本発明にいうイコチニブ又はその薬学的に許容される塩とは、薬学的に容認し得て、イコチニブ構造を含むあらゆる物質であり、イコチニブ自由塩基、イコチニブ塩酸塩、イコチニブマレイン酸塩、イコチニブリン酸塩、イコチニブ溶媒化物、イコチニブ含有キレート化合物、イコチニブの水和物、及びこれらの物質の各種結晶体などが含まれるが、これらには限定されない。
【００５９】
本発明にいうイコチニブ又はその薬学的に許容される塩は、キラル中心、キラリティー軸とキラリティー面（ジョン・ワイリー＆サンズ出版社（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ、ニューヨーク市）から１９９４年に出版された『炭素化合物の立体化学（Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｃａｒｂｏｎ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ）』（ＥＸ．Ｅｌｉｅｌ、Ｓ．Ｈ．ｗｉｌｅｎ編）の第１１１９〜１１９０頁を参照）を含有しうる。また、ラセミ体、ラセミ混合物、個々のジアステレオマーのほか、光学異性体及び本発明に含まれるすべてのこれらの種類の立体異性体を含むすべての可能な異性体及びその混合物が、存在しうる。このほか、本願にいうイコチニブ又はその薬学的に許容される塩は、互変異性体が存在してもよく、互変異性体のすべてが本発明の保護範囲内に包含される。
【００６０】
本発明にいうイコチニブ又はその薬学的に許容される塩には、異なる多形性結晶形が多く存在しうる。
【００６１】
あらゆる医薬品は、臨床使用に供されるとき、様々な医療と予防応用に適する形態に調製されなければならない。これらの形態はいずれも剤型と呼ばれ、各種剤型は医薬品製剤と通称される。治療効果が高く、有害な副作用が小さく、服用・貯蔵・輸送に便利で、品質の安定した医薬品の剤型と製剤を開発し調製することのためには、生産技術、生産設備、調製プロセス、品質管理なども関係するが、それは主に薬剤添加剤によって決まる。あらゆる製剤は、活性組成（主薬）以外の残りすべてが薬剤添加剤であるので、薬剤添加剤の品質の優劣、選択する添加剤の配合の科学性と合理性などが、製剤の品質に直接影響する。
【００６２】
イコチニブ又はその薬学的に許容される塩の外用医薬組成物は、医薬を放出し、それに表皮を透過させ、その後皮膚内で治療作用を発揮させる必要がある。全身を覆う皮膚は、体内水分、電解質及びその他の物質が喪失することを防止するとともに、外部物質の侵入に抵抗するバリアとなり、人体に重要な保護作用を果たしている。皮膚のバリア機能は主に角質層によって担われている。角質層は一定の機械的な強度を有する薄膜層で、医薬の皮膚透過・吸収の重大な障害となる。一般的に、角質層は濃度が適当な水溶性物質と脂溶性物質を収容でき、分子量が小さい医薬品は、細胞隙間を通って内層に分散し侵入することができるとされている。角質層は毛嚢と腺管に貫通されているので、医薬品吸収のもう一つの経路を提供している。
【００６３】
医薬の皮膚透過・吸収は、例えば、生理的要素、医薬品の物理化学特性と基剤のタイプ、及びその組成などの、多くの要素に影響される。医薬品自体に固有の活性がその治療用途を決める最も重要な要素であるが、医薬品の放出と皮膚への透過・吸収は基剤によって大きく影響される。
【００６４】
イコチニブ（化学名は４‐［（３‐エチニルフェニル）アミノ］‐６‐７‐ベンゾ‐１２‐クラウン‐キノリン）又はその薬学的に許容される塩が、本製剤の活性成分である。
【００６５】
ＴｒａｎｓｃｕｔｏｌＰ：化学名はジエチレングリコールモノエチルエーテル、英語化学名はｄｉｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｇｌｙｃｏｌ  ｍｏｎｏｅｔｈｙｌ  ｅｔｈｅｒである。製剤学において活性医薬品の溶剤と皮膚透過吸収促進剤に用いられる。
【００６６】
Ｌａｂｒａｓｏｌ：化学名はカプリロカプロイルマクロゴール−８グリセリド、英語名はＣａｐｒｙｌｏｃａｐｒｏｙｌ  ｍａｃｒｏｇｏｌ−８  ｇｌｙｃｅｒｉｄｅｓで、比率が特定されるモノ、ジ、トリグリセリドとモノ、ジ脂肪酸ポリエチレングリコールエステルからなる混合物であり、製剤学において乳化剤と皮膚透過吸収促進剤によく使用される。
【００６７】
Ｃａｒｂｏｐｏｌ：ｃａｒｂｏｍｅｒとも呼ばれ、日本語名はカルボマーといい、酸性、吸水性と軽い特殊な匂いを有する白い「絨毛状」の粉末で、アリルスクロース又はペンタエリスリトールアリルエーテルで架橋されたアクリル酸の高分子重合体であり、よく使用されるゲル骨格である。
【００６８】
Ｔｅｆｏｓｅ６３(R)：化学名はポリエチレングリコール‐７ステアレートで、ポリエチレングリコール‐６ステアレート（ＰＥＧ‐６ｓｔｅａｒａｔｅ）、パルミトステアリン酸エチレングリコール（ｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｇｌｙｃｏｌ  ｐａｌｍｉｔｏｓｔｅａｒａｔｅ）、及びポリエチレングリコール‐３２ステアレート（ＰＥＧ‐３２ｓｔｅａｒａｔｅ）の混合物である。
【００６９】
ＬａｂｒａｆｉｌＭ１９４４(R)：化学名はオレイン酸マクロゴールグリセリド（ＥＰ）で、比率が特定されるモノ、ジ、トリグリセリドとモノ、ジ脂肪酸ポリエチレングリコールエステルからなる混合物である。
【００７０】
ＤＭＳＯ：化学名はジメチルスルホキシドで、無色の液体である。多くの有機溶剤及び水と相互に溶解可能なものである。
【００７１】
本発明で提供する製剤を調製する場合、添加剤同士の配合禁忌に注意しなければならない。例えば、カルボマーは、レゾルシノールによって変色し、また、フェノール、陽イオン重合体、強酸及び高濃度の電解質と相互に溶解することができない。微量の鉄又はその他の遷移金属がカルボマー分散液を触媒分解することができる。カルボマーは、アンモニア、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム又は強塩基性有機アミンのような強塩基性物質と接触すると、大量の熱を生じる。ある種のアミノ基の官能基を含有する医薬品がカルボマーと水溶性の錯体を形成することできる。一般的に、適当なアルコール又は多価酸によって液体の溶解度パラメータを調節することで、このような状況の発生を防止することができるとされている。
【００７２】
本製剤に応用される添加剤及びその配合禁忌は、いずれも当該分野で公知の常識であり、『医薬品添加物ハンドブック』（［英国］Ｒ．Ｃ．Ｒｏｗｅ、［米国］Ｐ．Ｊ．Ｓｈｅｓｋｅｙ、［英国］Ｐ．Ｊ．Ｗａｌｔｅｒ編、鄭俊民主訳、化学工業出版社出版）、『常用医薬品添加物ハンドブック』（Ｊｉ  Ｊｉｅｗｅｉ、劉吉祥主編、第二軍医大学出版社出版）及『薬剤添加物大全』（羅明生、高天惠主編、四川科学技術出版社出版）などに見ることができるので、ここでは説明しない。
【００７３】
本発明は、イコチニブ又はその薬学的に許容される塩を含む外用製剤及びその調製方法を提供する。本発明で提供する外用製剤は、皮膚への刺激が弱く、掻痒症、焼灼感、ヒリヒリ感、皮膚乾燥、紅斑や皮疹などの不良な反応がなく、長期間使用しても皮膚萎縮、色素沈着又は色素減退などのホルモン様の副作用が生じず、服薬を中断した後にも関連する皮膚病の症状がないものである。当該調製方法は、簡単で、運用及び制御がしやすく、工業化しやすいなどの利点がある。
【発明を実施するための形態】
【００７４】
下記の実施例は、当業者が本発明を実施することができるように、本発明の具体的な実施形態を説明するためにのみ用いられ、本発明の保護範囲を制限するために用いられるものではない。本発明の具体的な実施形態において、特に説明されていない技術的手段又は方法などは、この技術分野における通常の技術的手段又は方法などである。
【００７５】
本発明で提供する外用製剤の具体的な実施例を下記に示す。なお、実施例における数値は特に明記しない限り、「質量％」を示す。
【００７６】
実施例１〜１０
１．配合（表１を参照）
0006463745.tif 000006
【００７７】
２．実施例１〜１０の調製方法
（１）処方量のカルボマーを称量し、プロピレングリコールに完全膨潤させる。
（２）処方量のイコチニブ塩酸塩、ＴｒａｎｓｃｕｔｏｌＰ及び／又はＬａｂｒａｓｏｌをそれぞれ称量し、均一に混合する。
（３）ステップ（２）で得られた混合物を、ステップ（１）で得られる膨潤したカルボマー溶液に加える。
（４）ステップ（３）で得られた混合物を透明になるまで室温で撹拌する。
【００７８】
実施例１１〜１４
１．配合（表２を参照）
0006463745.tif 000007
【００７９】
２．実施例１１〜１４の調製方法
（１）処方量のイコチニブ塩酸塩、ＴｒａｎｓｃｕｔｏｌＰとＬａｂｒａｓｏｌをそれぞれ称量し、均一に混合する。
（２）ステップ（１）で得られた混合物をプロピレングリコール溶液に加える。
（３）ステップ（２）で得られた混合物を透明になるまで室温で撹拌する。
【００８０】
実施例１５〜２０
１．配合（表３を参照）
0006463745.tif 000008
【００８１】
２．実施例１５〜２０の調製方法
（１）処方量のカルボマーとエチルパラベンをそれぞれ称量し、プロピレングリコールに完全膨潤させる。
（２）処方量のイコチニブ塩酸塩、ＴｒａｎｓｃｕｔｏｌＰとＬａｂｒａｓｏｌをそれぞれ称量し、均一に混合する。
（３）ステップ（２）で得られた混合物を、ステップ（１）で得られる膨潤したカルボマー溶液に加える。
（４）ステップ（３）で得られた混合物を透明になるまで室温で撹拌して、目的物質を得る。
【００８２】
実施例２１〜２４
１．配合（表４を参照）
0006463745.tif 000009
【００８３】
２．実施例２１〜２４の調製方法
（１）処方量のカルボマーを称量し、プロピレングリコールに完全膨潤させる。
（２）処方量のイコチニブ塩酸塩、ＴｒａｎｓｃｕｔｏｌＰとＬａｂｒａｓｏｌをそれぞれ称量し、均一に混合する。
（３）ステップ（２）で得られた混合物を、ステップ（１）で得られた膨潤したカルボマー溶液に加える。
（４）処方量に従って、ステップ（３）で得られた混合物にグリセリン又はエタノールを加え、透明になるまで室温で撹拌して、目的物質を得る。
【００８４】
実施例２５〜２９
１．配合（表５を参照）
0006463745.tif 000010
【００８５】
２．実施例２５〜２９的調製方法
（１）処方量のＰＶＰ‐Ｋ３０、カルボマー、ＣＭＣ‐Ｎａ及び／又はＨＰＭＣをそれぞれ称量し、プロピレングリコールに完全膨潤させる。
（２）処方量のイコチニブ塩酸塩、ＴｒａｎｓｃｕｔｏｌＰとＬａｂｒａｓｏｌをそれぞれ称量し、均一に混合する。
（３）ステップ（２）で得られた混合物を、ステップ（１）で得られた膨潤したカルボマー溶液に加え、透明になるまで室温で撹拌して、目的物質を得る。
【００８６】
実施例３０〜３６
１．配合（表６を参照）
0006463745.tif 000011
【００８７】
２．調製方法
Ａ、実施例３０〜３２的調製方法
（１）処方量のＴｅｆｏｓｅ６３、ＬａｂｒａｆｉｌＭ１９４４、ワセリン、ステアリルアルコール、セチルアルコール、エチルパラベン及び／又は液体パラフィンをそれぞれ称量し、撹拌して混合させ、溶融するまで７５〜８０℃に加熱する。
（２）また、処方量のイコチニブ塩酸塩、水及び／又はグリセリンをそれぞれ称量し、撹拌して混合させ、６０〜７０℃に加熱して均一に撹拌する。
（３）ステップ（２）で得られた混合物を、ステップ（１）で得られる混合物に加えて２０分間乳化し、室温まで水浴で冷却して、目的物質を得る。
【００８８】
Ｂ、実施例３３〜３６の調製方法
（１）処方量のワセリン、ステアリルアルコール、液体パラフィン、及びエチルパラベンをそれぞれ称量し、撹拌して混合させ、溶融するまで７５〜８０℃に加熱する。
（２）また、処方量のグリセリン、トデシル硫酸ナトリウム、水、ＤＭＳＯ及び／又はプロピレングリコールをそれぞれ称量し、撹拌して混合させ、６０〜７０℃に加熱して均一に撹拌する。
（３）ステップ（２）で得られた混合物を、ステップ（１）で得られた混合物に加えて１０〜３０分間乳化する。
（４）ステップ（３）で得られた混合物に処方量のイコチニブ塩酸塩を加えて、引き続き１０分間乳化し、室温まで冷却して、目的物質を得る。
【００８９】
実施例３７〜４３
１．配合（表７を参照）
0006463745.tif 000012
【００９０】
２．実施例３７〜４３の調製方法
（１）処方量のカルボマーを称量し、水で溶解させ、トリエタノールアミンを加えて、完全膨潤するまで撹拌する。
（２）また、処方量のイコチニブ塩酸塩を称量し、水を加えて、４０℃で撹拌し、称量される処方量の水酸化ナトリウムを加えて、均一に撹拌する。
（３）さらに、処方量のクエン酸及び／又は残りのトリエタノールアミンをそれぞれ称量し、水で溶解させ、ステップ（２）で得られた溶液に滴下し、さらにステップ（１）で得られたカルボマー溶液を加えて、５分間乳化してから６０〜７０℃に加熱する。
（４）さらに、処方量のＴｅｆｏｓｅ６３、ＬａｂｒａｆｉｌＭ１９４４、トデシル硫酸ナトリウム、ステアリルアルコール、セチルアルコール、液体パラフィン、エチルパラベン及び／又はグリセリンをそれぞれ称量して、均一に撹拌し、溶融するまで７５〜８０℃に加熱する。それをステップ（３）で得られた溶液に加えて１５分間乳化し、水浴で撹拌して室温まで冷却して、目的物質を得る。
【００９１】
実施例４４〜５０
１．配合（表８を参照）
0006463745.tif 000013
【００９２】
２．Ａ、実施例４４〜４７の調製方法
（１）それぞれ処方量のＴｅｆｏｓｅ６３、ＬａｂｒａｆｉｌＭ１９４４、ワセリン、ステアリルアルコール、セチルアルコール、大豆油、ステアリン酸、エチルパラベン及び／又は液体パラフィンをそれぞれ称量し、撹拌して混合させ、溶融するまで７５〜８０℃に加熱する。
（２）また、処方量のイコチニブ遊離塩基、トリエタノールアミン、クエン酸、クエン酸ナトリウム、水及び／又はカルボマーをそれぞれ称量し、撹拌して混合させ、６０〜７０℃に加熱する。
（３）ステップ（２）で得られた混合物を、ステップ（１）で得られた混合物に加えて２０分間乳化し、室温まで水浴で冷却して、目的物質を得る。
【００９３】
Ｂ、実施例４８〜５０の調製方法
（１）処方量のワセリン、ステアリルアルコール、液体パラフィンとエチルパラベンをそれぞれ称量し、撹拌して混合させ、溶融するまで７５〜８０℃に加熱する。
（２）また、処方量のクエン酸、カルボマー、水及び／又はトリエタノールアミンをそれぞれ称量し、撹拌して混合させ、６０〜７０℃に加熱する。
（３）ステップ（２）で得られた混合物を、ステップ（１）で得られた混合物に加えて１０分間乳化する。
（４）ステップ（３）で得られた混合物に処方量のイコチニブ遊離塩基を加えて、引き続き１０分間乳化し、室温まで冷却して、目的物質を得る。
【００９４】
実施例５１〜５６
１．配合（表９を参照）
0006463745.tif 000014
【００９５】
２．実施例５１〜５６の調製方法
（１）処方量のＴｅｆｏｓｅ６３、ＬａｂｒａｆｉｌＭ１９４４、蜜蝋、ポリジメチルシロキサン、ステアリルアルコール、液体パラフィン、エチルパラベン、安息香酸、トリクロロ‐ｔｅｒｔ‐ブタノール及び／又はクロロクレゾールをそれぞれ称量し、撹拌して混合させ、溶融するまで７５〜８０℃に加熱する。
（２）また、処方量のイコチニブ塩酸塩、イコチニブマレイン酸塩、イコチニブリン酸塩、トリエタノールアミン、クエン酸、クエン酸ナトリウム、水及び／又はトデシル硫酸ナトリウムをそれぞれ称量し、撹拌して混合させ、６０〜７０℃に加熱する。
（３）ステップ（２）で得られた混合物を、ステップ（１）で得られた混合物に加えて２０分間乳化し、室温まで冷却して、目的物質を得る。
【００９６】
実施例５７．イコチニブ遊離塩基の調製
イコチニブ塩酸塩１００ｇをエタノール３００ｍｌと水２００ｍｌの混合溶剤に溶解させ、６０℃で反応混合物のｐＨの測定値が１３となるまで水酸化ナトリウムの水溶液（ＮａＯＨ１１．２ｇ、水１００ｍｌ）を一滴ずつ滴下する。１時間撹拌して室温まで冷却し、濾過して沈殿を純水で洗浄し、６０℃より低い温度で８時間真空乾燥すると、イコチニブ遊離塩基９０ｇが得られる。
【００９７】
実施例５８．イコチニブマレイン酸塩の調製
まず、イコチニブ遊離塩基１０ｍｇをアセトン１ｍｌに溶解させるとイコチニブ溶液が得られる。また、マレイン酸３４．８２ｍｇをアセトン３ｍｌに溶解すると０．１ｍｏｌ／Ｌのマレイン酸溶液が得られる。０．１ｍｏｌ／Ｌのマレイン酸溶液０．２６ｍｌをイコチニブ溶液に加えて、得られた反応混合物を２４時間撹拌して反応させ、分離してイコチニブマレイン酸塩が得られる。
【００９８】
実施例５９．イコチニブリン酸塩の調製
イコチニブ遊離塩基１０ｍｇをイソプロピルアルコール１ｍｌに溶解させるとイコチニブ溶液が形成される。また、リン酸溶液１８．９μＬをイソプロピルアルコール３ｍｌに加えると０．１ｍｏｌ／Ｌのリン酸溶液が調製される。０．１ｍｏｌ／Ｌのリン酸溶液０．２６ｍｌをイコチニブ溶液に加えて、得られた反応混合物を２４時間撹拌して、分離してイコチニブリン酸塩が得られる。
【００９９】
実施例Ａ．イコチニブ塩酸塩クリームのマウス尾表皮顆粒層形成に対する影響の試験
試験材料：
試験医薬品：イコチニブ塩酸塩クリーム製剤、規格１ｇ／１００ｍｌ（１％）。
空白クリーム基剤群：活性組成（イコチニブ塩酸塩）を含有せずに他の各成分が同一である試験医薬品を選択した。
陽性対照薬：ハロメタゾンクリーム、規格１５ｇ：７．５ｍｇ、香港澳美製薬廠、調製番号０９１１５０１。
試験動物：ＩＣＲマウス、オス、３０匹。
試験設備：オリンパス生物顕微鏡。
【０１００】
試験方法：
ＩＣＲマウス３０匹（すべてオス）を３つの群にランダムに分けて、各群１０匹とした。この３つの群は、空白クリーム基剤群、陽性薬ハロメタゾン軟膏群、及び１％イコチニブ塩酸塩クリーム群である。医薬品は尾部皮膚に塗られた。なお、毎回投薬する前に綿棒と水でマウス尾を軽く拭いた。各群のマウス尾部に毎回１層の薄層を塗布した。毎日２回、１４日間連続投薬した。投薬が完了した後にマウスを殺処分して、マウス尾根部から１〜２ｃｍ離れた箇所で約１．５ｃｍ×０．２ｃｍの大きさの皮膚を取って、４％ホルマリンで固定し、パラフィン包埋、切片、ＨＥ染色を行った。
【０１０１】
生物顕微鏡を使用してマウス尾の皮膚角化層、顆粒層、有棘細胞層、基底細胞層、真皮層、及び毛嚢などの変化を観察した。２つの隣接する毛嚢間表皮（すなわち、鱗片状表皮）が連続した顆粒層細胞を有するものは、いずれも顆粒層含有鱗片と呼ばれた。マウス１匹ごとに５０個の鱗片を観察し、顆粒層が形成された鱗片の数（ＳＧ）を計算したところ、そのデータは表Ａに示すとおりとなった。
0006463745.tif 000015
【０１０２】
表Ａから分かるように、空白基剤群と比較して、イコチニブ塩酸塩クリーム製剤は、マウス尾部の鱗片顆粒層の形成を明らかに促進することができる上、その作用は、陽性対照ハロメタゾン群よりも強かった。
【０１０３】
実施例Ｂ．イコチニブ塩酸塩ゲル製剤のマウス尾表皮顆粒層形成に対する影響の試験
試験材料：
試験医薬品：イコチニブ塩酸塩ゲル製剤：規格１ｇ／１００ｍｌ（１％）、規格１．５ｇ／１００ｍｌ（１．５％）。
空白ゲル基剤群：活性組成（イコチニブ塩酸塩）を含有せずに他の各成分が同一である試験医薬品を選択した。
陽性対照薬：クロベタゾールプロピオン酸エステルクリーム、規格１０ｇ：２ｍｇ（０．０２％）、広東順峰薬業有限公司、調製番号２０１１０３０４。
試験動物：ＩＣＲマウス、オス、４０匹。
試験設備：生物顕微鏡。
【０１０４】
試験方法：
ＩＣＲマウス４０匹（すべてオス）を、空白ゲル基剤群、１％イコチニブ塩酸塩ゲル群、１．５％イコチニブ塩酸塩ゲル群、陽性薬クロベタゾールプロピオン酸エステルクリーム群という４つの群にランダムに分けて、各群１０匹とした。医薬品は尾部皮膚に塗られた。なお、毎回投薬する前に綿棒と水でマウス尾を軽く拭いた。各群のマウス尾部に毎回１層の薄層を塗布した。毎日２回、１４日連続投薬した。投薬が完了した後にマウスを殺処分して、マウス尾根部から１〜２ｃｍ離れた箇所で約１．５ｃｍ×０．２ｃｍの大きさの皮膚を取って、４％中性ホルマリンで固定し、パラフィン包埋、切片、ＨＥ染色を行った。
【０１０５】
生物顕微鏡を使用してマウス尾の皮膚角化層、顆粒層、有棘細胞層、基底細胞層、真皮層、及び毛嚢などの変化を観察した。２つの隣接する毛嚢間表皮（すなわち、鱗片状表皮）が連続した顆粒層細胞を有するものは、いずれも顆粒層含有鱗片と呼ばれた。マウスを１匹ずつ観察して、すべての鱗片の数のうち顆粒層が形成された鱗片の数の割合を計算したところ、そのデータは表Ｂに示すとおりとなった。
0006463745.tif 000016
【０１０６】
１％イコチニブ塩酸塩ゲル群及び１．５％イコチニブ塩酸塩ゲル群では、いずれもマウス尾の顆粒層鱗片の数が増加するという作用が見られた。
【０１０７】
実施例Ｃ．イコチニブ塩酸塩クリームの、塩酸プロプラノロールによるモルモットの耳部皮膚の銀屑様皮損モデルに対する影響の試験
試験材料：
試験医薬品：イコチニブ塩酸塩クリーム製剤：規格１ｇ／１００ｍｌ（１％）、規格２ｇ／１００ｍｌ（２％）、規格４ｇ／１００ｍｌ（４％）。
空白クリーム基剤群：活性組成（イコチニブ塩酸塩）を含有せず他の各成分が同一である試験医薬品を選択した。
陽性対照薬：カルシポトリオール軟膏、製造番号ＥＨ４１２９、アイルランド・レオ社。
試験動物：モルモット、２５０〜３００ｇ、雌雄が半々で７０匹。
試験設備：生物顕微鏡。
【０１０８】
試験方法：
５％プロプラノロール擦剤：塩酸プロプラノロール５ｇを適量の５０％エタノールに溶解させて、ラウロカプラム（Ａｚｏｎｅ‐プロピレングリコール）５ｍｌを複合促進剤として加え、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ‐Ｋ３０）５ｇを成膜材料として加え、最後に１００ｍｌとなるように５０％エタノール液を加えて、均一に撹拌して得られたものである。
【０１０９】
健康で成熟したモルモット７０匹のうち、１０匹（雌雄が半々）を正常対照群としてランダムに選択し、残りのモルモットは、両側の耳廓の後ろの皮膚に５％塩酸プロプラノロールクリームの擦剤を塗られた（８０μｌ／耳）。毎日朝晩各１回、２週間これを続けた。モデル作成が完了した後、モデル群モルモットをモデル群、空白基剤群、１％イコチニブ塩酸塩クリーム群，ｂｉｄ．、２％イコチニブ塩酸塩クリーム群，ｂｉｄ．、４％イコチニブ塩酸塩クリーム群，ｂｉｄ．、及びカルシポトリオール軟膏群，ｂｉｄという６つの群にランダムに分けた。モデル群では、左右の耳にいずれも薬が塗られず、空白基剤群では、左右の耳にいずれも空白基剤が塗られ、投薬群モルモットでは、左右の耳にいずれも薬が塗られた。施薬してから２週間後、ＣＯ２麻酔でモルモットを殺処分して、各群ごとにモルモットの左右両側の耳廓皮膚の中間にある１０ｍｍ×５ｍｍの組織を取って、４％中性ホルマリンで固定し、パラフィン包埋、ＨＥ染色を行った。生物顕微鏡を使用してモルモット耳廓の皮膚角化層、顆粒層、有棘細胞層、基底細胞層、真皮層などの変化を観察して、１００倍の倍率で表皮層の厚みを測定したところ、２５×２５目のマイクロメーター目数をカウントし、目数×０．０２１２＝厚み（ｍｍ）となった。
【０１１０】
生物顕微鏡を使用してモルモット耳廓の皮膚角化層、顆粒層、有棘細胞層、基底細胞層、真皮層などの変化を観察して、表皮層の厚みを１００倍の倍率で測定したところ、２５×２５目のマイクロメーター目数をカウントし、目数×０．０２１２＝厚み／ｍｍとなった。そのデータは表Ｃに示すとおりである。（注：正常対照群と２％イコチニブ塩酸塩クリーム群ではモルモット１匹が死亡し、モデル群とカルシポトリオール群ではモルモット１匹の切片がうまく切れなかった）
0006463745.tif 000017
【０１１１】
Ｐ値：
群２ｖｓ．群３＝０．５６０；群２ｖｓ．群４＝０．０００；群２ｖｓ．群５＝０．０００；群２ｖｓ．群６＝０．０００；群２ｖｓ．群７＝０．００８；
群３ｖｓ．群４＝０．０００；群３ｖｓ．群５＝０．０００；群３ｖｓ．群６＝０．０００；群３ｖｓ．群７＝０．００１；
群４ｖｓ．群５＝０．２５０；群４ｖｓ．群６＝０．００３；群４ｖｓ．群７＝０．０００；
群５ｖｓ．群６＝０．０７５；群５ｖｓ．群７＝０．０００。
【０１１２】
モデル作成が完了してから１週間後には、耳部の毛髪が脱落し、局部の皮膚が赤く腫れて、銀白色の細かい鱗屑が少量あった。モデル作成が完了してから１週間〜２週間の間には、モルモットの耳廓にびらん及び結痂、脱皮が生じたが、対照群のモルモットの両耳は正常であった。投薬してから２週間後には、モデル群と投薬群のモルモットで、両耳皮膚のびらんや脱皮などが改善された。イコチニブ塩酸塩クリーム投薬群では耳の表面に毛髪が新たに生えていたが、モデル群では毛髪が新たに生えたものはなかった。
【０１１３】
生物顕微鏡で観察したところ、正常対照群では、表皮角質層が完全かつ均質で、顆粒層が単層線状、基底層が単層円柱細胞となり、真表皮の境界が波浪状となって、毛細血管に充血がなく、構造が正常であった。モデル群では、角化層が不完全又は過度に角化して、有棘細胞層が厚くなり、表皮が棒状に突出延伸して、毛乳頭が上方へ伸びて杆状となり、耳部の表皮厚みが正常対照群より明らかに増加した（Ｐ＜０．０１）。
【０１１４】
１％、２％及び４％のイコチニブ塩酸塩クリームを投薬した後は、過度又は不完全な角化が減軽して、有棘層が薄くなり、表皮が突出延伸して、毛乳頭が上方へ伸びることが明らかに減軽し、表皮厚みがモデル群より明らかに減少した（Ｐ＜０．０１）。
【０１１５】
２％のクリーム群と１％のクリーム群を比較すると、表皮厚みの減少に明らかな差異は見られなかったが（Ｐ＝０．２５０）、４％のクリーム群と１１％のクリーム群を比較すると、表皮厚みは明らかに減少していた（Ｐ＜０．０１）。
【０１１６】
上記の実施例は、本発明を十分に説明するのに列挙した具体的な実施例であるにすぎず、本発明の保護範囲は、特許請求の範囲の内容に準じ、上記の具体的な実施形態に限定されるものではない。当業者が本発明を基礎として行う、本発明の実質的な内容から逸脱しない同等な置換又は変換はすべて、本発明の保護範囲内に含まれる。