(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の：
固定されたヘパリン部分を含んでいる第一のコーティング層、並びに
溶出可能なパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層、
を含むコーティングを有する表面を備えた埋め込み型医療用デバイスであって、ここで、該第二の微粒子コーティング層の少なくとも一部が該第一のコーティング層の少なくとも一部に接触しており、
前記の単独若しくはそれぞれの有機添加物の２５℃にて決定されるハンセン溶解度パラメーターの分散成分が１６〜２１ＭＰａ0.5である、埋め込み型医療用デバイス。
【請求項２】
固定されたヘパリン部分を含んでいる第一のコーティング層、並びに
溶出可能なパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層、
を含むコーティングを有する表面を備えた埋め込み型医療用デバイスであって、ここで、
前記第二の微粒子コーティング層の少なくとも一部が前記第一のコーティング層の少なくとも一部に接触しており、
前記の単独若しくはそれぞれの有機添加物が、アスコルビン酸、メチルパラベン、カフェイン、サリチル酸カルシウム、テオブロミン、コハク酸、アジピン酸、グルタル酸、及びテオフィリンから成る一覧から独立に選択される、埋め込み型医療用デバイス。
【請求項３】
前記医療用デバイスが、管状の医療用デバイスである、請求項１又は２に記載の埋め込み型医療用デバイス。
【請求項４】
前記第一のコーティング層が高分子を含んでおり、適切には、前記ヘパリン部分が、高分子に共有結合しており、例えば、その還元末端を通して末端で共有結合している、請求項１〜３のいずれか１項に記載の埋め込み型医療用デバイス。
【請求項５】
前記高分子が陽イオン性高分子である、請求項４に記載の埋め込み型医療用デバイス。
【請求項６】
前記の単独若しくはそれぞれの有機添加物が、非高分子であり、且つ、加水分解に対して安定である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の埋め込み型医療用デバイス。
【請求項７】
前記のパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層の少なくとも一部が、純粋な形のパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物の融点より低い温度で単一相として溶解し、そして／あるいは
前記第二の微粒子コーティング層が界面活性剤を含んでおらず、そして／あるいは
前記第二の微粒子コーティング層が高分子を含んでおらず、そして／あるいは
単独若しくはそれぞれの有機添加物が結晶形態である、
請求項１〜６のいずれか１項に記載の埋め込み型医療用デバイス。
【請求項８】
前記埋め込み型医療用デバイスがステントであり、適切には、合金、例えば、ニチノール又はステンレスで構成され、あるいは、前記埋め込み型医療用デバイスがステント‐グラフトであって、該ステント‐グラフトがステント部材とグラフト部材を含んでいる、請求項１〜７のいずれか１項に記載の埋め込み型医療用デバイス。
【請求項９】
前記コーティングが、延伸ポリテトラフルオロエチレン（ｅＰＴＦＥ）で構成されているデバイスの表面に適用される、請求項１〜８のいずれか１項に記載の埋め込み型医療用デバイス。
【請求項１０】
前記第二の微粒子コーティング層の少なくとも一部が、前記第一のコーティング層の少なくとも一部の最上部に適用される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の埋め込み型医療用デバイス。
【請求項１１】
前記第一のコーティング層が、第二の微粒子コーティング層の前に医療用デバイスに適用される、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の埋め込み型医療用デバイス。
【請求項１２】
前記第二の微粒子コーティング層が、溶媒中にパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を溶解して溶液を形成し、該溶液を医療用デバイスに適用し、次に、該溶媒を留去することによって医療用デバイスに適用され、前記溶媒が、適切には、水、アセトン、及びその混合物から選択される、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の埋め込み型医療用デバイス。
【請求項１３】
人体血管の狭穿又は再狭窄の予防又は処置に使用するための、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の埋め込み型医療用デバイス。
【請求項１４】
以下のステップ：
ｉ）医療用デバイスを処理して、固定されたヘパリン部分を含んでいる第一のコーティング層を提供し；そしてさらに
ｉｉ）医療用デバイスを処理して、溶出可能なパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層を提供すること、
を含む、コーティングされた埋め込み型医療用デバイスを調製する方法であって、
ここで、該第二の微粒子コーティング層の少なくとも一部が該第一のコーティング層の少なくとも一部に接触しており、
前記の単独若しくはそれぞれの有機添加物の２５℃にて決定されるハンセン溶解度パラメーターの分散成分が１６〜２１ＭＰａ0.5である、方法。
【請求項１５】
前記ステップｉ）が、以下のステップ：
ａ）医療用デバイスを処理して、高分子コーティグ層を提供し；次に
ｂ）前記高分子層をヘパリン部分と反応させて、該ヘパリン部分を該高分子コーティグ層に固定することを含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記ステップｉｉ）において、前記第二の微粒子コーティング層が、溶媒中にパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を溶解して溶液を形成し、該溶液を医療用デバイスに適用し、次に、該溶媒を留去することによって医療用デバイスに適用され、前記溶媒が、適切には、水、アセトン、及びその混合物から選択される、請求項１４又は１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記ヘパリン部分が、高分子コーティグ層に共有結合しており、適切には、高分子コーティグ層に末端で共有結合しており、前記末端結合ヘパリン部分が、還元末端を通して接続されている、請求項１５に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、固定されたヘパリン部分や溶出可能なパクリタキセルを含むコーティングを備えた埋め込み型医療用デバイス、及び斯かるコーティングデバイスを作製する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
埋め込み型医療用デバイスは、患者の解剖学的構造的構造を処置するために頻繁に使用される。斯かるデバイスは、解剖学的構造的構造に永久的又は半永久的に埋め込んで、患者に処置を提供する。斯かるデバイスの例としては、ステント、グラフト、ステント‐グラフト、フィルター、弁、オクルーダー、マーカー、マッピングデバイス、治療薬送達デバイス、プロテーゼ、ポンプ、包帯、その組み合わせ、並びに他の管腔内及び埋め込み型デバイスが挙げられる。
【０００３】
埋め込み型医療用デバイスは、埋め込んだものの周囲に治療薬を送達するのに使用されて、それによって、全身送達ではなく局所的な送達を提供し得る。斯かるデバイスは薬剤溶出デバイスと説明されることもできる。例えば、局所的な血管疾患の場合には、薬剤が処置すべきではない身体部分に対して好ましくない効果を有し得るか、又は病気の血管系が全身投与では達成できない高濃度の薬剤を必要とするので、薬剤の全身投与が望ましくない可能性がある。そのため、局所的な様式で薬剤を血管組織に投与することが望ましいことが多い。
【０００４】
溶出可能な薬剤でコーティングされたステント又はステント‐グラフトを含めた局所的な薬剤送達のためのいくつかのデバイスが知られている。
血管疾患の局所処置、特に再狭窄の予防及び処置に一般的に使用される薬剤は、パクリタキセルである。パクリタキセルは、さまざまなコーティング技術を使用したデバイスの表面にコーティングされる。ある技術は、粉末法を使用した乾燥形態、溶液、又は溶媒法を使用した懸濁液の賦形剤とパクリタキセルとを組み合わせることを伴う。次に、パクリタキセル‐賦形剤組み合わせ物は、粉末の形態で又は乾燥ステップがあとに続く、溶液若しくは懸濁液の塗布を介してデバイスの表面に塗布される。
【０００５】
パクリタキセル‐賦形剤組み合わせ物を作るときや、医療用デバイスにその組み合わせ物をコーティングするときに考慮されなければならない多数の要因が存在する。一般に、薬剤と賦形剤を組み合わせることや薬剤‐賦形剤組み合わせ物を医療用デバイスにコーティングすることは、複雑な技術分野である。それらは、（拡張状態でコーティングされる場合）圧縮後にも医療用デバイスへの薬剤の接着を維持すること、並びに標的部位に達するまで接着を維持することと及びその後に所望の放出及び吸収動態で標的組織に薬剤を送達すること（すなわち、留置とその後の溶出）といった追加的な課題と一緒に、経口の又は注射可能な医薬品の課題などの普通の製剤の課題にも関与する。また、保管によるパクリタキセル及び賦形剤の化学分解も考慮されなければならないので、更なる主要な要件は、埋め込み型医療用デバイスにコーティング中に処方されたときに、パクリタキセルが滅菌工程、特にエチレンオキシド滅菌工程を実質的に無傷で乗り切らなければならないということである。
【０００６】
これにより、血管疾患の局所的処置に、適切なパクリタキセル‐賦形剤組み合わせ物を開発する必要がある。特に、製造工程や操作中にデバイスへの良好な接着性を有するが、標的血管組織に埋め込まれたときに、最適なパクリタキセル放出特性を示すコーティングを開発する必要がある。
【０００７】
医療デバイスが体内に埋め込まれる場合、多くの異なる反応が動き始め、その一部によって炎症が引き起こされ、そして、一部がデバイス表面と接触している血液の凝固をもたらす。これらの深刻な有害作用に対抗するために、医療デバイスが患者の体内に設置される前に、又は医療デバイスが患者の体液と接触する時に、抗凝固作用を提供するために、古くから周知の抗凝固化合物であるヘパリンが、患者に全身投与されている。また、ヘパリンコーティング表面は、生物学的に適合する傾向があり、それによって、炎症を予防／軽減する。
【０００８】
トロンビンは、ともに作用して血液と接触した表面上で血栓の形成を引き起こす数種の凝固因子のうちの１つである。アンチトロンビン（アンチトロンビンＩＩＩとしても知られている）（「ＡＴＩＩＩ」）は、最も有名な凝固インヒビターである。これは、トロンビンや他の凝固因子の作用を中和し、血液凝固を限定又は制限する。ヘパリンは、アンチトロンビンが凝固因子を阻害する速度を劇的に上昇させる。ヘパリンコファクターＩＩ（「ＨＣＩＩ」）は、ヘパリンの存在下で急速にトロンビンを阻害する別の血液凝固因子である。
【０００９】
しかしながら、高用量のヘパリンによる全身処置は、しばしば、出血が主体となる深刻な副作用を伴う。まれであるが深刻な、ヘパリン療法の別の合併症は、血栓症（静脈性と動脈性の両方）を引き起こす可能性のある、ヘパリン誘発性血小板減少症と呼ばれるアレルギー応答の発生である。また、高用量の全身性ヘパリン療法（例えば、手術中）は、活性化凝固時間（ヘパリン療法をモニター及びコントロールするために使用される）の頻繁なモニタリングを必要とし、対応する用量調整が必要である。
【００１０】
従って、患者の全身性ヘパリン処置が不要になるか、又はこれを制限することができる解決策が求められている。これは、ヘパリンの抗凝固性を利用する医療デバイスの表面修飾により達成できると考えられた。すなわち、医療デバイスの表面にヘパリン層を結合させ、これにより医療デバイスの表面を非血栓性にするために、概ね成功を収めている数多くの技術が開発されている。長期の生物活性が必要なデバイスについては、ヘパリンが浸出及び分解に対して抵抗性であることが望ましい。
【００１１】
ヘパリンは、負電荷の硫酸基及びカルボン酸基を糖単位上に有する多糖である。ポリ陽イオン性表面へのヘパリンのイオン結合が試みられているが、表面修飾は、ヘパリンが表面から浸出するため、安定性を欠き、機能の喪失に悩まされた。その後に開発された異なる表面修飾法では、ヘパリンが表面上の基に共有結合されている。
【００１２】
医療デバイスを非血栓形成性にするための最も成功している方法の１つは、デバイスの修飾表面へのヘパリンフラグメントの共有結合である。その一般的方法及び改良法は、様々な特許に記載されている（ＥＰ Ｂ‐００８６１８６、ＥＰ‐Ｂ‐００８６１８７、ＥＰ‐Ｂ‐０４９５８２０、及びＵＳ６,４６１,６６５を参照のこと、そのそれぞれを全体として本明細書中に援用する）。
【００１３】
これらの特許には、第一級アミノ基を担持するように改変された医療用デバイスの表面と、末端アルデヒド基を担持するように改変されたヘパリンとを反応させることによるヘパリン化表面の調製が記載されている。その場で還元されて安定した第二級アミンリンカーを形成し、それによって、ヘパリンを共有結合によって固定する中間体であるシッフ塩基が形成される。
ヘパリンを、その生理活性を維持しながら共有結合的に表面に接着するための更なる方法がＷＯ２０１０／０２９１８９、ＷＯ２０１１／１１０６８４、及びＷＯ２０１２／１２３３８４に記載されている（そのそれぞれを全体として本明細書中に援用する）。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１４】
一態様において、本発明は、以下の：
固定されたヘパリン部分を含んでいる第一のコーティング層、並びに
溶出可能なパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層、
を含むコーティングを有する表面を備えた埋め込み型医療用デバイスであって、ここで、該第二の微粒子コーティング層の少なくとも一部が該第一のコーティング層の少なくとも一部に接触している、埋め込み型医療用デバイスを提供する。
【００１５】
別の態様において、本発明は、以下のステップ：
ｉ）医療用デバイスを処理して、固定されたヘパリン部分を含んでいる第一のコーティング層を提供し；そしてさらに
ｉｉ）医療用デバイスを処理して、溶出可能なパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層を提供すること、
を含み、
ここで、該第二の微粒子コーティング層の少なくとも一部が該第一のコーティング層の少なくとも一部に接触している、コーティングされた埋め込み型医療用デバイスを調製する工程を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】血液接触評価試験後の本発明のステント‐グラフトと比較器の血小板消費を示す（実施例２０）；
【図２】血液接触評価試験後の本発明のステント‐グラフト上での血栓形成の不存在を示す（実施例２０）；
【図３】操作前の本発明のステント‐グラフト表面のＳＥＭ画像を示す（実施例２１）；
【図４】操作後の本発明のステント‐グラフト表面のＳＥＭ画像を示す（実施例２１）；
【図５】：  固定されたヘパリンのコーティング（第一のコーティング層）を備えた及び備えていないステント‐グラフトの色素‐溶液流延を示す（実施例２３）；
【図６】（ＵＳ２００９／０１８２４１３に記載の）相互接続フルオロポリマーウェブを備えたステントを示す；
【図７】ステント部材及びグラフト部材から成るステント‐グラフトを示す；
【図８】本発明のステント‐グラフト及び比較器の圧縮前、圧縮後、及び拡張後のパクリタキセル含有量を示す（実施例５）；
【図９】管状デバイスが両端を第二の微粒子コーティング層でコーティングされているコーティング配置を示す；
【図１０】本発明の実施形態における、いくつかの可能性がある第一のコーティング層と第二の微粒子コーティング層の配置を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
本発明の詳細な説明
埋め込み型医療用デバイスと材料
埋め込み型（implantable)医療用デバイスは、治療効果を提供するために解剖学的構造、例えば血管又は他の体内の管腔、空間又は腔内に埋め込まれるデバイスである。埋め込み型デバイスは、それらを送達するための即時外科的処置後に解剖学的構造内に一部又は全部が残される。医療用バルーン（例えば、経皮経管的血管形成術（ＰＴＡ）中に血管系に挿入されるもの）などの処置領域内に挿入される（すなわち、同じ外科的処置で挿入され、その後取り除かれる）デバイスは、本発明との関連において埋め込み型医療用デバイスと見なされない。従って、埋め込み型医療用デバイスは医療用バルーンでない。
【００１８】
一実施形態において、埋め込み型医療用デバイスは管状医療用デバイスである。好適なことには、埋め込み型医療用デバイスは、埋め込み型管腔内医療用デバイス、特に埋め込み型血管内医療用デバイスである。
埋め込み型医療用デバイスの例としては、ステント、グラフト、ステント‐グラフト、留置フィルター、弁、オクルーダー、マーカー、マッピングデバイス、治療薬送達デバイス、プロテーゼ、ポンプ及び包帯、並びに他の管腔内及び埋め込み型デバイスが挙げられる。
【００１９】
埋め込み型医療用デバイスの追加の例としては、留置モニタリング持続輸液ライン、動脈ライン、持続的なくも膜下への注入デバイス、栄養チューブ、ＣＮＳシャント（例えば、脳室胸膜シャント、脳室心房（ＶＡ）シャント、又は脳室腹腔（ＶＰ）シャント）、心室腹腔シャント、心室心房シャント、門脈体循環シャント及び腹水用シャント、血管から塞栓や血栓などの障害物の濾過又は除去のためのデバイス、閉塞した体内経路の開通性を復元するための膨張デバイス、経路又は空間を塞ぐか又は埋める手段を選択的に送達するための閉塞デバイス、並びにカテーテルのような経管的装置のためのセンタリング機構デバイスが挙げられる。
【００２０】
本発明の埋め込み型医療用デバイスに関する更なる例はカテーテルである。カテーテルの例としては、これだけに限定されるものではないが、中心静脈カテーテル、末梢静脈カテーテル、血液透析カテーテル、例えば心臓中又は末梢静脈及び動脈中においての血管造影法、血管形成術、又は超音波手法に有用な埋め込み式静脈カテーテル、挿入型静脈カテーテル、冠状動脈カテーテルを包含するコーティングカテーテル、肝動脈注入カテーテル、ＣＶＣ（中心静脈カテーテル）、末梢静脈カテーテル、末梢挿入型中心静脈カテーテル（ＰＩＣライン）、フローダイレクトバルーンが先端についた肺動脈カテーテル、完全静脈栄養カテーテル、在宅持続カテーテル（例えば、在宅持続腸カテーテル及び在宅持続尿生殖器カテーテル）、腹膜透析カテーテル、ＣＰＢカテーテル（心肺バイパス）、尿路カテーテル及びマイクロカテーテル（例えば、頭蓋内用のアプリケーション）などのカテーテルが挙げられる。
【００２１】
一実施形態において、埋め込み型医療用デバイスはステントである。別の実施形態において、埋め込み型医療用デバイスはステント‐グラフトである。
一実施形態において、埋め込み型医療用デバイスは、二股ステント、バルーン拡張型ステント又は自己を拡張型ステントなどのステントである。ステントは、ブレード、巻き線形態、レーザーカット形態、堆積物、３Ｄプリントされた構築物、又はその組み合わせとして構成されるか、又は管腔壁又は領域に対して支持体を提供する長さ可変性を有するものを含めた他の構造形態をとる。ステントは、金属、合金、例えばステンレス鋼やニッケル‐チタン合金など（ＮｉＴｉ又はニチノール）、高分子、セラミック、生分解性材料（例えば生分解性高分子、セラミック、金属及び合金など）、又は組み合わせを含めた生体適合材から構築される。ステントは、実質的に単一の形態のものであっても、又は別個の構成要素、例えばリングを含んでもよい。ステント構造物は、単一であっても又は複数の構成要素からできていても、支柱、ヒンジ、コネクター、又は該ステントを全体的に又は部分的に裏打ちするか又は覆う材料によって一つに結合され得る。一実施形態において、ステント構造物は、ＵＳ２００９／０１８２４１３（Gore Enterprise Holdings, Inc.、参照によって本明細書中に援用する）に記載され、そして、図６で例示される「ウェブ」を形成するフルオロポリマーと結合されている。
【００２２】
一実施形態において、医療用デバイスは、金属、合金、高分子、セラミック、生分解性材料、又はそれらの組み合わせ、特に金属又は合金から形成されたステントである。一実施形態において、ステントはステンレスから形成される。別の実施形態において、ステントはニチノールから形成される。
ステント‐グラフトは一般的にステント部材とグラフト部材を含んでいる。ステントに関して先に記載した態様はステント‐グラフトのステント部材に対して同じように適用される。グラフトは、閉鎖型の壁又は開口部を有する壁を有する管部材として一般的に構成される。グラフト材料としては、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）や延伸ポリテトラフルオロエチレン（ｅＰＴＦＥ）を含めた、フルオロポリマーなどの生体適合材が挙げられる。他の好適なグラフト材料としては、ポリエチレンテレフタラートや超高分子量ポリエチレン（ＵＨＭＷＰＥ）などの高分子が挙げられる。グラフト材料は、異なった強度、密度、寸法、多孔度、及び他の機能的特性を有するように作製されてよく、且つ、フィルム、押し出し成型品、電界紡糸材、コーティング、堆積物、又は鋳造品の形態をとる。グラフトは単独で使用されてもよく、又はグラフト材料は、ステント構造物を完全に又は部分的に裏打ちしても、又は覆っていてもよい。
【００２３】
一実施形態において、ステント‐グラフトは、ＵＳ５,８７６,４３２（Gore Enterprise Holdings, Inc.、参照によって本明細書中に援用する）に記載の形態をとり得る。典型的なステント‐グラフト構造は図７で例示されている。
別の実施形態において、ステント‐グラフトは、ＵＳ２００９／００７６５８７（Gore Enterprise Holdings, Inc.、参照によって本明細書中に援用する）に記載のように、その全長の一部にステントを組み込んだ人工血管である。
【００２４】
一実施形態において、埋め込み型医療用デバイスはステント‐グラフトであって、ここで、ステント部材はニチノールを含んでいる。別の実施形態において、埋め込み型医療用デバイスは、グラフト部材が高分子、好適には生体適合高分子から形成されるステント‐グラフトである。好適なことには、グラフト部材は、例えば延伸ポリテトラフルオロエチレン（ｅＰＴＦＥ）などのフルオロポリマーから形成される。一実施形態において、グラフト部材はｅＰＴＦＥで構成される。
一実施形態において、埋め込み型医療用デバイスは、ステント部材とグラフト部材を含んでいるステント‐グラフトであって、ここで、該ステント部材はニチノールを含んでいて、且つ、該グラフト部材はｅＰＴＦＥを含んでいる。
【００２５】
第一のコーティング層及び第二の微粒子コーティング層でのコーティング前に、ステント、ステント‐グラフト、及びグラフトは、例えば高分子やプライマー層などの様々な材料で上塗りされてもよい。ある実施形態において、ステント又はグラフト構造物は、デバイスが該デバイスに適用された治療薬、特にパクリタキセルを保持する又は放出する能力を高めるように改変される。例えば、その中に治療薬が添加されるピット又は止まり穴がステント支柱に形成されてもよい。
ＵＳ２０１０／０１５２８４１（Dave et al.、参照によって本明細書中に援用する）には、複数の有益な作用物質の送達のための開口部及び抗血栓薬の表面コーティングを備えた、ヒト又は動物の体内管腔中に埋め込まれることができる拡張可能で、除去不可能な医療用デバイスを記載されている。抗血栓薬コーティングと他の治療薬／高分子マトリックスの間に使用するためのプライマーコーティングもまた記載されている。
【００２６】
一実施形態において、埋め込み型医療用デバイスは、コーティング前に、多孔性物質を伴った表面を含んでいるか又は多孔性物質で覆われている。ある実施形態において、この多孔性物質は、例えばポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、延伸ＰＴＦＥ（ｅＰＴＦＥ）、フッ化エチレン‐プロピレン（ＦＥＰ）、ペルフルオロカーボンコポリマー、例えば、テトラフルオロエチレンペルフルオロアルキルビニルエーテル（ＴＦＥ／ＰＡＶＥ）コポリマー、テトラフルオロエチレン（ＴＦＥ）とペルフルオロメチルビニルエーテル（ＰＭＶＥ）のコポリマー、アセタート、アルコール、アミン、アミド、スルホナート、及び米国特許番号第８,６５８,７０７号（W.L. Gore and Associates、参照によって本明細書中に援用する）に記載の官能基などを含む官能性モノマーを有するＴＦＥのコポリマー、並びにその組み合わせなどのフルオロポリマーである。原繊維によって相互接続されたノードを特徴とする延伸ＰＴＦＥの構造は、米国特許番号第３,９５３,５６６号及び同第４,１８７,３９０号（W. L. Gore & Associates Inc.；共に参照によって本明細書中に援用する）に教示されている。一実施形態において、多孔性物質は原繊維又は原繊維とノードを備えた材料構造を有するｅＰＴＦＥを含む。別の実施形態において、埋め込み型医療用デバイスの覆いの寸法が変更されるとき、原繊維又は原繊維とノードはサイズ、寸法、又は方向が変化する。別の実施形態において、多孔性物質は、編まれた、織られた又組まれた（braided）ポリエステルである。
【００２７】
一実施形態において、コーティングされた埋め込み型医療用デバイスは、コーティングの少なくとも一部の周りに配置された覆いを有する。斯かる覆いは、一般的に拘束又はシースと記述され、そして、ステント又はステント‐グラフトなどの医療用デバイスのトラッキング及び送達を助けるのに使用される。拘束は、本発明の埋め込み型医療用デバイスとは別個の存在であると考えられる。一実施形態において、拘束は、コーティングされた埋め込み型医療用デバイスの上に配置される。拘束は、あらゆる可能性のある多孔度又は透過性も含めた任意の生体適合材を含み得る。一実施形態において、材料が変形されるか又は別の方法で寸法が変更されるとき、多孔度又は透過性が変化する。
【００２８】
拘束材料の（単数若しくは複数の）表面又は外側の形状は、質感、突起、ワイヤー、ブレード、スパイク、切り込み、くぼみ、溝、コーティング、微粒子などで改変され得る。これらの修飾は、様々な目的、例えば治療薬が送達される（又は送達された）組織を改変する、本発明の埋め込み型医療用デバイスのシステムの配置を制御する、及び体液移行を指示する役目を果たし得る。斯かる質感は、より深い組織上への、より深くへの及び／又はより深い組織内への治療薬の増強された移行の助けとなり得る。斯かる質感は、覆材の質感に含まれても、又は追加材料の質感に含まれてもよい。
拘束は、Ｘ線不透過性マーカーを含んでも、それでマークされても、又は全体としてＸ線不透過性であるように構成されてもよい。斯かるＸ線不透過性指標は、本発明の拡張型医療用デバイスを適切に追跡し、位置決定するために臨床医によって使用される。ＵＳ８,７５３,３８６（Shaw、参照によって本明細書中に援用する）に記載のように、ステント‐グラフトの最適な位置決定は、現在既知の又はまだ未知の様々な技術で決定され得る。
【００２９】
埋め込み型医療用デバイス、特に埋め込み型医療用デバイスの表面は、本明細書中で先に記載したように、１若しくは複数の材料で構成される。埋め込み型医療用デバイスは、とりわけ、金属、又は合成若しくは天然の有機若しくは無機高分子又はセラミック材料を含んでもよく、それらから成ってもよく、実質的にそれらから成ってもよく、又はそれらから形成されてもよい。
【００３０】
これにより、一実施形態において、埋め込み型医療用デバイス、特に埋め込み型医療用デバイスの表面は、合成又は天然の有機又は無機高分子、或いはこれだけに限定されるものではないが、ポリオレフィン、ポリエステル、ポリウレタン、ポリアミド、ポリエーテルブロックアミド、ポリイミド、ポリカーボネート、ポリフェニレンサルファイド、ポリフェニレンオキシド、ポリエーテル、シリコーン、ポリカーボネート、ポリヒドロキシエチルメタクリラート、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ゴム、シリコーンゴム、ポリヒドロキシ酸、ポリアリルアミン、ポリアリルアルコール、ポリアクリルアミド、及びポリアクリル酸、スチレンポリマー、ポリテトラフルオロエチレン及びそのコポリマー、延伸ポリテトラフルオロエチレン及びそのコポリマー、その誘導体、並びにその混合物などを含めた材料で構成される。これらのクラスの中には、熱硬化性高分子としても熱可塑性高分子としても利用可能なものもある。本明細書中に使用されるとき、「コポリマー」という用語は、２つ以上のモノマー、例えば２、３、４、５その他諸々から形成された任意の高分子を指すのに使用されるものとする。ポリ（Ｄ，Ｌ‐ラクチド）及びポリグリコリド及びこれらのコポリマー等の生体吸収性材料もまた有用である。ポリ（グリコリド‐コ‐トリメチレンカーボナート）トリブロックコポリマー（ＰＧＡ：ＴＭＣ）などのトリブロックコポリマーを含めた不織の、生体吸収性ウェブ材料も有用である（ＵＳ７,６５９,２１９に記載のとおり、Biran et al.）。有用なポリアミドとしては、ナイロン１２、ナイロン１１、ナイロン９、ナイロン６／９及びナイロン６／６が挙げられるが、限定されることはない。係る材料の幾つかのコポリマーの例としては、Philadelphia, Pa.のElf  Atochem  North  AmericaからＰＥＢＡＸ（登録商標）の商品名で入手できるポリエーテル-ブロック-アミドが挙げられる。別の好適なコポリマーは、ポリエーテルエステルアミドである。好適なポリエステルコポリマーとしては、例えば、ポリエチレンテレフタレート及びポリブチレンテレフタレート、ポリエステルエーテル及びデラウェア州ウィルミントンのDupontからＨＹＴＲＥＬ．ＲＴＭの商品名で入手できるもの等のポリエステルエラストマーコポリマーが挙げられる。スチレン末端ブロック、及びブタジエン、イソプレン、エチレン/ブチレン、エチレン/プロペン等から形成される中間ブロックを有するコポリマーのようなブロックコポリマーエラストマーを、本開示で用いてよい。他のスチレン系ブロックコポリマーとしては、アクリロニトリル‐スチレン及びアクリロニトリル‐ブタジエン‐スチレンブロックコポリマーが挙げられる。また、ブロックコポリマーであって、ブロックコポリマーが、ポリエステル又はポリアミドのハードセグメント及びポリエーテルのソフトセグメントで構成されている特定のブロックコポリマー熱可塑性エラストマーであるブロックコポリマーを、本開示で用いてもよい。他の有用な基材は、ポリスチレン、ポリ（メチル）メタクリレート、ポリアクリロニトリル、ポリ（ビニルアセテート）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ塩化ビニル等の塩素含有ポリマー、ポリオキシメチレン、ポリカーボネート、ポリアミド、ポリイミド、ポリウレタン、フェノール樹脂、アミノエポキシ樹脂、ポリエステル、シリコーン、セルロースベースプラスチック、及びゴム状プラスチックである。これらの材料の組み合わせは、架橋あり及びなしで用いることができる。高分子材料は、高分子材料のＸ線不透過性を与えるために、例えば金、バリウム、又はタンタル増量剤などの増量剤、及び／又は着色料と適宜混ぜ合わせられてもよい。高分子材料は、適宜、例えば酸又は塩基エッチング、加水分解、アミノリシス、プラズマ修飾、プラズマグラフティング、コロナ放電修飾、化学蒸着、イオン注入、イオンスパッタリング、オゾン処理、光修飾、電子ビーム修飾、ガンマ線修飾などの当該技術分野で知られている方法を使用して、バルク特性を保持したままそれらの表面が改変されてもよい。一実施形態において、医療用デバイスの表面はナイロンで構成される。
【００３１】
埋め込み型医療用デバイス、特に埋め込み型医療用デバイスの表面は、フルオロポリマー、例えば、延伸ポリテトラフルオロエチレン（ｅＰＴＦＥ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、フッ化エチレン‐プロピレン（ＦＥＰ）、ペルフルオロカーボンコポリマー、例えば、テトラフルオロエチレンペルフルオロアルキルビニルエーテル（ＴＦＥ／ＰＡＶＥ）コポリマー、テトラフルオロエチレン（ＴＦＥ）とペルフルオロメチルビニルエーテル（ＰＭＶＥ）のコポリマー、アセタート、アルコール、アミン、アミド、スルホナート、及び米国特許番号第８,６５８,７０７号（W.L. Gore and Associates、参照によって本明細書中に援用する）に記載の官能基などを含む官能性モノマーを有するＴＦＥのコポリマー、並びにその組み合わせなどのフッ化ポリマーで構成され得る。高分子鎖、発泡ポリエチレン、ポリ塩化ビニル、ポリウレタン、シリコーン、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリウレタン、ポリグリコール酸、ポリエステル、ポリアミド、エラストマーとそれらの混合物、混ぜ合わせ及びコポリマー又はその誘導体の間の架橋を伴った、或いは架橋を伴わない上記組み合わせも企図される。ｅＰＴＦＥには、本発明の医療用デバイスで特に有用な多孔性微細構造がある。一実施形態において、埋め込み型医療用デバイスはｅＰＴＦＥを含んでいる。好適なことには、埋め込み型医療用デバイスの表面はｅＰＴＦＥで構成される。ｅＰＴＦＥで構成されたデバイスの正確な多孔度はｅＰＴＦＥ成分の性質とデバイスが加工される様式に依存する。ｅＰＴＦＥで構成されたデバイスの多孔度は、ＵＳ２０１３／０２３１７３３（W. L. Gore & Associates Inc.、参照によって本明細書中に援用する）に記載の様々な方法とパラメーターを使用することで評価され得る。
【００３２】
埋め込み型医療用デバイス、特に埋め込み型医療用デバイスの表面はまた、これだけに限定されるものではないが、生体適合性金属であるチタニウム、ステンレス、高窒素ステンレス、金、銀、ロジウム、亜鉛、プラチナ、ルビジウム、銅及びマグネシウム、並びにその組み合わせを含めた金属で構成されてもよい。好適な合金としては、例えばＬ‐６０５、ＭＰ３５Ｎ、Ｅｌｇｉｌｏｙなどのコバルト‐クロム合金を含めたコバルト合金、（ニチノールなどの）ニッケル‐チタン合金を含めたチタン合金、タンタル、並びにＮｂ‐１％ Ｚｒなどのニオブ合金、並びに他のものが挙げられる。一実施形態において、医療用デバイスはステントであり、ステンレス、タンタル、チタン合金及びコバルト合金から選択される生体適合性金属で構成される。埋め込み型医療用デバイス、特に埋め込み型医療用デバイスの表面はまた、これだけに限定されるものではないが、酸化シリコーン、酸化アルミニウム、アルミナ、シリカ、ヒドロキシアパタイト、ガラス、生石灰、ポリシラノール、及び酸化リンを含んでいるセラミック基板で構成されてもよい。
【００３３】
コーティング層
本発明の埋め込み型医療用デバイス上のコーティングは、固定されたヘパリン部分を含んでいる第一のコーティング層及び溶出可能なパクリタキセルと少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層を備えている。
【００３４】
第一のコーティング層
第一のコーティング層は固定されたヘパリン部分を含んでいる。用語「ヘパリン部分（heparin moiety）」は、ヘパリン分子、ヘパリン分子のフラグメント、又はヘパリンの誘導体もしくは類似体を意味する。ヘパリン誘導体は、ヘパリンの任意の機能変種又は構造変種でもよい。代表的変種としては、ヘパリンのアルカリ金属塩又はアルカリ土類金属塩、例えば、ヘパリンナトリウム（例えば、Hepsal又はPularin）、ヘパリンカリウム（例えば、Clarin）、ヘパリンリチウム、ヘパリンカルシウム（例えば、Calciparine）、ヘパリンマグネシウム（例えば、Cutheparine）、及び低分子量ヘパリン（例えば、酸化的脱重合、脱重合、酵素的分解、又は脱アミノ切断により調製されるもの、例えばArdeparin sodium、tinzaparin又はDalteparin）が挙げられる。他の例としては、ヘパラン硫酸、ヘパリノイド、ヘパリン系化合物、及び疎水性対イオンを有するヘパリンが挙げられる。他の所望の抗凝固物質としては、Ｘａ因子のアンチトロンビン介在阻害に関与する「フォンダパリヌクス（fondaparinux）」組成物（例えば、GlaxoSmithKline社製のArixtra）と呼ばれる合成ヘパリン組成物が挙げられる。ヘパリンの追加の誘導体としては、例えば、穏和な亜硝酸分解（ＵＳ４，６１３，６６５号）又は過ヨウ素酸酸化（ＵＳ６，６５３，４５７号）及びヘパリン部分の生物活性が保存される当該分野で公知の他の修飾反応により修飾されたヘパリン類及びヘパリン部分が挙げられる。また、ヘパリン部分としては、後述のようにリンカー又はスペーサーに結合した成分が挙げられる。
【００３５】
一実施形態において、ヘパリン部分は完全長ヘパリンである。
脱硫酸ヘパリン、又は、例えばウロン酸成分のカルボン酸基を介して官能化されたヘパリンは、他の型のヘパリンと比較して抗凝固性が一般的に低下しているため、他の型のヘパリンほど適さない。よって、一実施形態において、ヘパリン部分は脱硫酸ヘパリンでない。カルボン酸基のモノ官能化又は低度の官能化は、ヘパリンの生物活性が保存される限り、許容することができる。
ＵＳ６,４６１,６６５（Scholander；参照によって本明細書中に援用する）には、固定前にヘパリンを処置することによって固定されたヘパリンの表面‐抗血栓性活性が開示されている。改善は、高温又は高ｐＨにおいてヘパリンを処置するか、或いはヘパリンを、例えばアミン、アルコール、チオール又は固定されたアミノ、ヒドロキシル若しくはチオール基などの求核性触媒と接触させることによって達成される。
【００３６】
ヘパリン部分は、実質的にそのすべてがデバイスの耐用年数の間、（第一のコーティング層の一部として）デバイスへの結合を維持するという意味で「固定されている」。ヘパリン部分は、第一のコーティング層から実質的に溶出もしないし、浸出もしない。以下で考察されるように、ヘパリン部分は様々な方法で固定され得る。好ましくは、ヘパリン部分は共有結合によって固定される。
ヘパリン部分は、好ましくは高分子への固定を介して埋め込み型医療用デバイスの表面で固定される。よって、一実施形態において、第一のコーティング層は高分子を含む。別の実施形態において、第一のコーティング層は高分子を含み、ヘパリン部分が該高分子に取り付けられている。この実施形態において、高分子は医療用デバイスに適用され、続いてヘパリン部分がその高分子に固定され得る。あるいは、ヘパリン部分がまず最初に高分子に固定され、そして次に、固定された高分子‐ヘパリン部分コンジュゲートが埋め込み型医療用デバイスの表面に適用されてもよい。
【００３７】
よって、一実施形態において、第一のコーティング層は、以下のステップ：
ａ）医療用デバイスを処理して、高分子コーティグ層を提供し；次に
ｂ）前記高分子層をヘパリン部分と反応させて、該ヘパリン部分を高分子コーティグ層に固定する、
を含む工程によって形成される。
別の実施形態において、第一のコーティング層は、以下のステップ：
ａ）高分子をヘパリン部分と反応させ、それによって、該ヘパリン部分が高分子に固定された高分子‐ヘパリン部分コンジュゲートを形成し；
ｂ）医療用デバイスをステップａ）の高分子‐ヘパリン部分コンジュゲートで処理する、
を含む工程によって形成される。
【００３８】
ヘパリン部分は様々な方法によって高分子に固定され得る。一実施形態において、ヘパリン部分は高分子に共有結合される。好適なことには、ヘパリン部分は、好ましくは該ヘパリン部分の還元末端（還元末端のＣ１位）を通して接続され、高分子に共有結合によって末端点結合している。
代表的な末端点取り付け工程は、有機オリゴマー物質又は有機高分子物質の、第一級アミノ基を含んでいる異なった型の基質への共有結合のための工程を開示するＥＰ‐Ｂ‐００８６１８６（Larm；参照によって本明細書中に援用する）に記載されている。連結される物質（ヘパリンであってもよい）は、ジアゾ化による分解を受けて、遊離の端末アルデヒド基を有する物質断片を形成する。次に、物質断片はそのアルデヒド基を通して基質のアミノ基と反応して、シッフ塩基を形成し、次に、そしてそれが、（還元によって）第二級アミンに変換される。ヘパリンの末端点取り付け、特に（ＥＰ‐Ｂ‐００８６１８６で先に記載の）還元末端点取り付けの利点は、ヘパリン部分の他の場所での取り付けと比較して、ヘパリン部分の生物学的活性がアンチトロンビン相互作用部位の高められた利用可能性のため、最大化される点にある。
【００３９】
ヘパリン部分が固定される高分子の性質は、得られるヘパリン部分の生物学的活性に影響を与える。ＥＰ‐Ｂ‐００８６１８７（Golander et al.；参照によって本明細書中に援用する）には、第一級アミン基及び架橋剤としてのジアルデヒドを含んでいる高分子陽イオン界面活性剤の錯体を担持する基質への、ヘパリンを含めた陰イオン性化合物の固定が記載されている。ジアルデヒドの添加は界面活性剤の特徴の改善をもたらし、陰イオン性化合物との驚異的に強固な静電結合を導き得る。ヘパリンが共有結合又はイオン結合を介して錯体にしっかり結合される例が記載されている。Golanderらの教示に基づくＥＰ‐Ｂ‐０４９５８２０（Larm et al.；参照によって本明細書中に援用する）には、グルタルアルデヒドよりむしろ錯体の架橋剤としてクロトンアルデヒドが使用されることが記載されており、（上記ＥＰ‐Ｂ‐００８６１８６に記載の）表面に共有結合されたヘパリンは活性が改善した。
よって、一実施形態において、第一のコーティング層は、陽イオン性高分子、一般的にポリアミンを含む。別の実施形態において、陽イオン性高分子は架橋される。
【００４０】
ヘパリン部分は、先のＥＰ‐Ｂ‐００８６１８６に記載の第二級アミン以外のリンカーを介して高分子に共有結合されてもよい。ＷＯ２０１０／０２９１８９（Carmeda AB）には、共有結合的が１,２,３‐トリアゾール連結を介した表面へのヘパリンなどの抗凝血物質の取り付けが記載されている。文献には、ポリイミンのアジド‐又はアルキン官能化；アルキン‐及びアジド官能化ヘパリンの調製（天然及び亜硝酸分解されたヘパリンの両方）；及び１,２,３‐トリアゾールリンカーを介して誘導体化ヘパリンを誘導体化高分子に連結する反応が記載されている。ＷＯ２０１１／１１０６８４（Carmeda AB et al.）には、チオエーテルを含んでいるリンカーを介した高分子表面へのヘパリンなどの抗凝血物質の共有結合による取り付けが記載されている。
【００４１】
ＷＯ２０１２／１２３３８４（Gore Enterprise Holdings, Inc. et al.、参照によって本明細書中に援用する）には、抗凝血物質、特にヘパリンを担持する複数の超分岐高分子を含んでいるコーティングを備えたデバイスが開示されている。
ヘパリン部分が固定される高分子、特にヘパリン部分が共有結合される陽イオン性高分子は、それ自身が陽イオン性高分子と陰イオン性高分子から成る１若しくは複数のコーティング二重層上に配置されてもよい。
よって、一実施形態において、第一のコーティング層は、陽イオン性高分子と陰イオン性高分子から成る１若しくは複数のコーティング二重層を含んでいて、最も内側の層は陽イオン性高分子層であり、そして最も外側の層はヘパリン部分が共有結合で取り付けられている陽イオン性高分子の外側コーティング層である。
【００４２】
第一のコーティング層は、好ましくは（抗血栓性であることが望ましい）表面の一部又は対象の表面全体が覆われるような、１若しくは複数のコーティング二重層、例えば２以上、又は３、４若しくは５つ、例えば最大２０個のコーティング二重層を含み得る（Multilayer Thin Films ISBN: 978‐3‐527‐30440‐0）。二重層の最適な数は、対象が作られている材料のタイプ、及び表面の企図された用途に依存する。所望であれば、表面は層ごとに作製される。表面の完全なコーティングを提供するのに必要な二重層の数と性質は、当業者によって容易に決定できる。（単数若しくは複数の）コーティング二重層が、高平均分子量の陽イオン性高分子である固形対象、例えば、ポリアミン（例えば、ＥＰ０４９５８２０Ｂ１（Norsk Hydro A/S；参照によって本明細書中に援用する）の実施例で使用されているような、例えばポリエチレンイミン）の表面上への吸着によって形成されてもよく、必要であれば、例えばクロトンアルデヒド及び／又はグルタルアルデヒド（上記ＥＰ‐Ｂ‐００８６１８７及びＥＰ‐Ｂ‐０４９５８２０を参照のこと）などのアルデヒド架橋剤と、ポリアミンとを連結し、それに続いて陰イオン性高分子の溶液、例えば、陰イオン性多糖、例えば、硫酸デキストランを適用して、少なくとも１つの多糖の吸着層を得る。従って、第一のコーティング層は、高平均分子量ポリアミンの層と陰イオン性多糖の層を含み得る。より一般に、第一のコーティング層は、陽イオン性高分子（例えば、ポリアミン）と陰イオン性高分子（例えば、陰イオン性多糖）から成る１若しくは複数のコーティング二重層を含んでいてもよく、最も内側の層は陽イオン性高分子層であり、そして、外側の層はヘパリン部分が固定されている陽イオン性高分子層であってもよい。このコーティング手順は、実質的にＥＰ‐Ｂ‐０４９５８２０に記載のとおり実施される（上記を参照のこと）。よって、理論的に、唯一のそれは、固定されたヘパリン部分を含んでいるのは（第一のコーティング層の中の）外側コーティング層のみである。典型的には、（第一のコーティング層の）ヘパリン部分が固定される外側コーティング層は架橋されない。しかしながら、ＥＰ‐Ｂ‐０４９５８２０（上記を参照のこと）の手順は、以下に記載のとおり、次に（第一のコーティング層の）外側の層をヘパリン部分実体が固定されているポリアミンと反応させる陰イオン性多糖であるように改変されてもよい。
【００４３】
第一のコーティング層を調製するための様々な方法が実施例１に記載されている。
第一のコーティング層が高分子を含んでいる代替の実施形態において、該高分子はアルブミンなどの陰イオン性高分子である。ＵＳ４,５２６,７１４（Cordis Europa N.V.；参照によって本明細書中に援用する）には、ヘパリン‐アルブミンコンジュゲートの調製が記載されている。
【００４４】
一実施形態において、第一のコーティング層は高分子とヘパリン部分から成って、好適なことには、ここで、前記ヘパリン部分は該高分子に共有結合で連結している。
典型的には、第一のコーティング層は、約５ｎｍ〜約１０００ｎｍ、例えば約１０ｎｍ〜約５００ｎｍといった平均全体厚を有する。コーティングの厚さは、好適なコーティング厚分析装置又はゲージを使用して評価されるか、又は表面分析を伴ったＸ線光電子分光法を使用して評価され得る（評価方法を参照のこと）。
【００４５】
第二の微粒子コーティング層
第二の微粒子コーティング層は、溶出可能なパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる。
パクリタキセルは、様々な癌の処置、並びに再狭窄の予防及び処置のための製薬で市販されている。パクリタキセルは、非晶質、ガラス状及び結晶形態を含めたいくつかの異なった物理的形態で存在することが知られており、前記結晶形態はさらに多くの異なった多形体に分類できる。さらに、結晶性パクリタキセルは、無水形態として、又は例えば、パクリタキセル二水和物として、水和形態で存在し得る。一実施形態において、パクリタキセルは無水パクリタキセルである。別の実施形態において、パクリタキセルはパクリタキセル水和物である。別の実施形態において、パクリタキセルはパクリタキセル二水和物である。代替の実施形態において、無水形態と水和形態の両方のパクリタキセルが使用されてもよい。パクリタキセルが水性又は部分的に水性の溶媒中に溶解されるとき、それが溶解される溶液の全体的な水分含量と比較して、２つの形態間の水分含量の相違は最小限なので、開始パクリタキセルが水和物の形態であるか、無水物の形態であるかが事実上、重要なことではないことに留意すべきである。
【００４６】
結晶性パクリタキセルの認められている融点は約２２０℃にてあるが、加熱条件や多形体の形態に依存する（Liggins et al. "Solid-state characterization of paclitaxel", J. Pharm. Sci. 1997, Vol. 86, pages 1458-1463；参照によって本明細書中に援用する）。パクリタキセルの特定の形態が、固体のときに薬剤の物理特性に影響することが知られている。特に、表面へのパクリタキセルの接着は、表面から周囲へのその溶解（すなわち、溶出）速度がそうであり得るように、その物理的形態によって影響され得る。よって、固形送達のためにパクリタキセルを処方することは、最初の段階では簡単ではなく、賦形剤を伴って固体でパクリタキセルを処方する影響を容易に予測することはできない。
【００４７】
第二の微粒子コーティング層はまた、少なくとも１つの有機添加物も含んでいる。有機添加物はまた、本明細書中において「賦形剤」と呼ばれることもある。有機添加物は好ましくは非高分子である。一実施形態において、第二の微粒子コーティング層は、高分子を含んでいない。「非高分子」という用語は、複数の反復モノマー単位を含まない物質を意味すると当業者に明らかであろう。典型的には、高分子は少なくとも５つの反復モノマー単位、例えば、少なくとも６、少なくとも７、少なくとも８又は少なくとも９つの反復モノマー単位から成る。高分子への言及はコポリマーを含むことを意図している。高分子物質の例としては、よって、本発明での使用のための有機添加物として好適でないタンパク質が挙げられる。ポリ（乳酸‐コ‐グリコール）酸（ＰＬＧＡ）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ）及びポロキサマーは、本発明で使用するための有機添加物として好適でない高分子の例である。特にポリ（乳酸‐コ‐グリコール）酸（ＰＬＧＡ）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）又はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）は有機添加物としての使用に好適でない。高分子であって、そのため第二の微粒子コーティング層の有機添加物として好適でない材料の更なる例はセラックである。
【００４８】
一実施形態において、有機添加物は可塑剤でない。別の実施形態において、第二の微粒子コーティング層は可塑剤不含である、すなわち、可塑剤を含んでいない。可塑剤（分散剤としても知られている）は、本明細書中に材料、通常高分子の可塑性又は流動性を高める化合物と定義される。可塑剤は、モノマー形態、オリゴマー形態又はポリマー形態である。可塑剤の例としては、酢酸、ギ酸、１‐ブタノール、２‐ブタノール、エタノール、２‐メチル‐１‐ブタノール、２‐メチル‐１‐プロパノール、１‐ペンタノール、１‐プロパノール、２‐プロパノール、酢酸エチル、ギ酸エチル、酢酸イソプロピル、酢酸メチル、酢酸プロピル、アニソール、ｔｅｒｔ‐ブチルメチルエーテル、エチルエーテル、クメン、ヘプタン、ペンタン、アセトン、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、ジメチルスルホキシド、グリセリン、ポリエチレングリコール、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル、ソルビトール、ソルビタン、クエン酸アセチルトリブチル、クエン酸アセチルトリエチル、クエン酸トリブチル、クエン酸トリエチルなどを含めたシトラートエステル、ヒマシ油、ジアセチル化モノグリセリド、セバシン酸ジブチル、フタル酸ジエチル、トリアセチン、分画ヤシ油、及びアセチル化モノグリセリドが挙げられる。
【００４９】
有機添加物は、好ましくは加水分解に対して安定である、すなわち、水の存在下で化学反応／分解に対して耐性がある。加水分解に対して安定でない化合物は、水溶液中で不可逆的な化学変換、例えば、エステル、アミド又は無水物の加水分解を受ける。逆に、加水分解に対して安定である化合物は、水溶液中で不可逆的な変化を受けない。化合物は、可逆的なプロトン交換又は可逆的な水和物生成を受けても、まだ加水分解に対して安定であるとみなされ得る。化合物が水溶液に晒されて、結果として化学変換が生じ、そして、簡単なｐＨ変更によって得られた化合物（分解物）が本来の化合物に変換されて戻ることができない場合、本来の化合物は加水分解に対して安定でない。
【００５０】
一実施形態において、ｐＨ７．４にて１〜２４ｈ（例えば、５ｈ、１０ｈ、１５ｈ又は２４ｈ）緩衝食塩水に晒された場合、超高性能液体クロマトグラフィー（ＵＰＬＣ；評価方法を参照のこと）又は高速液体クロマトグラフィーで分析して化学反応又は分解が示されないのであれば、化合物は加水分解に対して安定である。
一実施形態において、先の処置後に、少なくとも８０％、例えば少なくとも９０％又は９５％の化合物が未分解形態で回収された場合、化合物が加水分解に対して安定であると見なされる。
【００５１】
特定の化合物が加水分解に対して安定であるかどうかはｐＨに依存する。一実施形態において、有機添加物は生理的ｐＨで加水分解に対して安定である。一実施形態において、生理的ｐＨはｐＨ７．４である。
エステル、特にスクシンイミジルエステル、スルホスクシンイミジルエステル、ハロゲン化アシル、アセタール、ヘミアセタール、及び無水物などの特定の化学官能基は、加水分解に傾向があることが知られているので、そのため斯かる官能性を含んでいる化合物は、最初の段階では、有機添加物として好適ではないと思われる。しかしながら、斯かる官能基の加水分解の安定性は、例えば、隣接している官能基の立体障害又は電子効果によって、化合物の官能性を維持することによって高めることも可能である。よって、最初の評価において、加水分解される傾向があることが知られている官能基の存在は、化合物が有機添加物であるために不適切であることを示してもよいが、化合物は全体として評価されなければならない。それらは加水分解に対して安定でないので、少なくとも以下の物質：グルコノラクトン、無水マレイン酸、無水ジグリコール酸、無水酢酸、は本発明における使用のための有機添加物として好適でない。
【００５２】
初期実験は、それが溶液中で容易に分解されるので、バニリンが有機添加物としての使用に不適切であることを示した。よって、バニリンは、本発明のための有機添加物として好適でない。一実施形態において、第二の微粒子コーティング層はバニリンを含んでいない。一実施形態において、有機添加物はフェノールアルデヒド官能性を有していない。別の実施形態において、第二の微粒子コーティング層はフェノールアルデヒド官能性を有する化合物を含んでいない。
【００５３】
ハンセン溶解度パラメーターの使用は、２つ以上の成分を含んでいる組成物の挙動の理解又は合理化の助けとなり得る（Mohammed et al. International Journal of Pharmaceutics 201 1, Vol. 407 pp 63-71及びAlbers et al. Journal of Pharmaceutical Sciences 201 1, Vol. 100 pp 667-680；共に参照によって本明細書中に援用する）。一実施形態において、有機添加物は、２５℃にて決定されるハンセン溶解度パラメーターの分散成分の値がパクリタキセルのものと実質的に同じである物質である。一実施形態において、「実質的に同じ」とは、（２５℃にて決定される）パクリタキセルに関するハンセン溶解度パラメーターの分散成分の±３．０ＭＰａ０．５の範囲内の値であることを意味する。好適なことには、２５℃にて決定される有機添加物に関するハンセン溶解度パラメーターの分散成分は１６〜２１ＭＰａ０．５である。
有機添加物は典型的には低分子量を有するであろう。例えば、有機添加物は、１２００Ｄａ未満、９９０Ｄａ未満、７５０Ｄａ未満、５００Ｄａ未満、４００Ｄａ未満又は３００Ｄａ未満の分子量を有する。一実施形態において、有機添加物は約５０Ｄａ〜約４００Ｄａ、例えば約８０Ｄａ〜約３５０Ｄａの分子量を有する。有機添加物はタンパク質でない。一実施形態において、第二の微粒子被覆層はタンパク質を含んでいない。更なる実施形態において、有機添加物は治療薬でない。ある実施形態において、有機添加物はアスピリンでない。
【００５４】
有機添加物は典型的には、純粋な形では、８０℃超、例えば９０℃超、１００℃超、１１０℃超又は１２０℃超の融点を有する。純粋な形で、８０℃より低い融点を有する化合物は、一般に分子間相互作用が弱く、物理的に不安定である化合物へと潜在的につながる。パクリタキセル及び／又は有機添加物を伴って水和物などの良く調整された溶媒和物を形成することができる化合物は、典型的には物理的安定性を有している。
【００５５】
一実施形態において、単独若しくはそれぞれの（少なくとも１つ）の有機添加物は、ｐ‐アミノ安息香酸、サッカリン、アスコルビン酸、メチルパラベン、カフェイン、サリチル酸カルシウム、ペンテト酸、クレアチニン、エチル尿素、アセトアミノフェン、アスピリン、テオブロミン、トリプトファン、コハク酸、アジピン酸、グルタル酸、テオフィリン、及びサッカリンナトリウムから成る一覧から独立に選択される。有機添加物としてカフェイン又はコハク酸を使用する第二の微粒子コーティング層の形成は、実施例２、３、３ａ、３ｂ、及び３ｃに記載されている。好適には、単独若しくはそれぞれ（少なくとも１つ）の有機添加物は、ｐ‐アミノ安息香酸、メチルパラベン、カフェイン、サリチル酸カルシウム、及びコハク酸から成る一覧から独立に選択される。一実施形態において、有機添加物はコハク酸である。別の実施形態において、有機添加物はカフェインである。
【００５６】
ある実施形態において、有機添加物はサリチル酸ナトリウムでない。ある実施形態において、有機添加物はサリチル酸カルシウムでない。ある実施形態において、有機添加物はサリチル酸マグネシウムでない。ある実施形態において、第二の微粒子コーティング層はサリチル酸ナトリウムを含んでいない。ある実施形態において、第二の微粒子コーティング層はサリチル酸カルシウムを含んでいない。ある実施形態において、第二の微粒子コーティング層はサリチル酸マグネシウムを含んでいない。
ある実施形態において、有機添加物は、マグネシウムイオン、すなわち、マグネシウム塩を含んでいる物質でない。ある実施形態において、第二の微粒子コーティング層は、マグネシウムイオン、すなわち、マグネシウム塩を含んでいない。
【００５７】
ある実施形態において、有機添加物は、アスコルビン酸又はその塩、例えばＬ‐アスコルビン酸又はその塩ではない。一実施形態において、第二の微粒子コーティング層は、Ｌ‐アスコルビン酸又はその塩を含んでいない。
第二の微粒子コーティング層（及び実際はコーティング層全体）に処方されると、パクリタキセルは好適には、滅菌工程を事実上無傷で耐えることができなければならない。よって、一実施形態において、単独若しくはそれぞれの有機添加物が第二の微粒子コーティング層に処方される場合、パクリタキセルは滅菌に対して安定である。第一級アミド（‐Ｃ（Ｏ）ＮＨ2）や第一級アルキルアミン（アルキル‐ＮＨ2）などの特定の官能基を有する化合物は、固形コーティングとして一緒に処方され、且つ、エチレンオキシド滅菌にかけられた場合、パクリタキセルと相性が悪いことが観察された。斯かる化合物の例はニコチンアミドであり、そしてそれは、パクリタキセルと共に処方され、そして、バルーンにコーティングされた場合に、該バルーンがエチレンオキシド滅菌されたときに、ほぼ完璧なパクリタキセル分解をもたらした。よって、斯かる官能性を有している化合物は、エチレンオキシド滅菌下でパクリタキセルの分解を引き起こすかもしれないので、そのため、本発明の埋め込み型医療用デバイスの有機添加物として好適でない可能性がある。しかしながら、パクリタキセルと斯かる化合物の相互作用は、分子の維持されている官能性によって変更され得、例えば、芳香族官能性に隣接した第一級アミド又は第一級アルキルアミン基の反応性は、斯かる化合物がエチレンオキシド殺菌条件下でパクリタキセルの分解を引き起こさない程度に抑えられる。それらはエチレンオキシド滅菌条件下でパクリタキセルの分解を引き起こすので、少なくとも以下の物質：ニコチンアミド及びサリチル酸ナトリウムは、本発明における使用のための有機添加物として好適でない。
【００５８】
よって、有機添加物は、ニコチンアミド（ニコチンアミドとしても知られている）ではなく、またサリチル酸ナトリウムでもない。一実施形態において、第二の微粒子コーティング層は、ニコチンアミド又はサリチル酸ナトリウムを含んでいない。
以下の更なる詳細で考察されるように、本発明の埋め込み型医療用デバイスは、パクリタキセルと少なくとも１つの有機添加物を含んでいる溶液中に（好適には、固定されたヘパリン部分を含んでいる第一のコーティング層で事前にコーティングした）医療用デバイスを浸すことによって調製できる。この方法を使用すると、両成分が溶液中に可溶性でない限り、好適なコーティングを達成するのは難しい。本発明者らは、有機添加物が溶媒系中に難溶性である場合にコーティングを形成することが可能でないことがわかった。例えば、チアミン‐ＨＣｌは、アセトン、エタノール、及び水性混合物中に難溶性なので、バルーンに対するパクリタキセル‐チアミン‐ＨＣｌコーティングを処方する試みは失敗した。よって、一実施形態において、有機添加物はチアミン‐ＨＣｌでない。別の実施形態において、第二の微粒子コーティング層はチアミン‐ＨＣｌを含まない。
【００５９】
好適なことには、有機添加物はデクスパンテノールでない。好適なことには、有機添加物はリシノール酸でない。好適なことには、有機添加物はレゾルシンでない。好適なことには、有機添加物はイソマルト（isomalt）でない。好適なことには、第二の微粒子コーティング層は、デクスパンテノール、リシノール酸、レゾルシン又はイソマルトを含んでいない。
【００６０】
一実施形態において、有機添加物は界面活性剤でない。一実施形態において、第二の微粒子コーティング層は、界面活性剤不含である、すなわち、界面活性剤を含んでいない。界面活性剤は、両親媒性であり、且つ、疎水基と親水基の両方を含む化合物であると本明細書中では定義され、そして、イオン性、非イオン性、双イオン性の、脂肪族及び芳香族界面活性剤が挙げられる。界面活性剤は、モノマー、オリゴマー又はポリマーの形態である。界面活性剤の例としては、これだけに限定されるものではないが、ポリソルベート（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）４０、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）６０）、ＰＥＧ‐脂肪酸エステル、ＰＥＧメガ‐３脂肪酸エステル、ＰＥＧエーテル（Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ‐１００／オクトキシノール‐９など）及びアルコール（チロキサポールなど）、グリセロール脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ＰＥＧ、グリセリル脂肪酸エステル、ＰＥＧソルビタン脂肪酸エステル、ＰＥＧ糖エステル、ポロキサマー（Ｓｙｎｐｅｒｏｎｉｃｓ（登録商標）、Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ（登録商標）、及びＫｏｌｌｉｐｈｏｒ（登録商標）の商品名で販売され得る）、アスコルビルパルミタート、及びｐ‐イソノニルフェノキシポリグリシドール（Ｏｌｉｎ １０‐Ｇ（登録商標）又はＳｕｒｆａｃｔａｎｔ １０‐Ｇ（登録商標））が挙げられる。
【００６１】
一実施形態において、第二の微粒子コーティング層は、シクロデキストリン不含である。
一実施形態において、第二の微粒子コーティング層は、無機成分（例えば、無機陽イオン及び無機陰イオンの両方を有する塩）不含である。好適なことには、第二の微粒子コーティング層は、生体吸収性であるか又は生体安定性である。
一実施形態において、第二の微粒子コーティング層は、パクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物から成る。この実施形態において、第二の微粒子コーティング層は、パクリタキセル及び本明細書中に記載した（単数若しくは複数の）前記又は各有機添加物以外の成分を含まない。
【００６２】
一実施形態において、第二の微粒子コーティング層は、１つの有機添加物を含んでいる。一実施形態において、第二の微粒子コーティング層は、パクリタキセル及び本明細書中に記載した１つの有機添加物から成る。この実施形態において、第二の微粒子コーティング層は、（実施例２、３、３ａ、３ｂ、及び３ｃに記載の）バイナリ組成物である。一実施形態において、有機添加物はコハク酸である。別の実施形態において、有機添加物はカフェインである。
一実施形態において、第二の微粒子コーティング層は、２つの有機添加物を含んでいる。一実施形態において、第二の微粒子コーティング層は、パクリタキセル及び本明細書中に記載した２つの有機添加物から成る。この実施形態において、第二の微粒子コーティング層は、三成分組成物である。一実施形態において、２つの有機添加物は、カフェインとコハク酸である。一実施形態において、第二の微粒子コーティング層は、３つ以上の有機添加物を含んでいる。
【００６３】
別の実施形態において、第二の微粒子コーティング層は、三成分組成物でない、すなわち、第二の微粒子コーティング層は、３つ超又は３つ未満の成分から成る。別の実施形態において、第二の微粒子コーティング層は、四成分組成物でない、すなわち、第二の微粒子コーティング層は、４つ超又は４つ未満の成分から成る。
第二の微粒子コーティング層の微粒子特性は、該コーティングが目視により巨視的に調べられるとき、明白であってもよい。一実施形態において、コーティング表面が、好適な倍率、例えば５０００×にて走査電子顕微鏡法（ＳＥＭ）などの顕微鏡手法を使用して分析されるとき、多数の約１μｍの長さの個々の粒子が観察される。
一般に、体内の医療用デバイスのコーティングからの余分な粒子の放出は、特に高分子粒子のインビボにおける放出が患者の健康リスク（例えば、炎症と血栓）を引き起こし得るので、避けるべきである。しかしながら、通常、これらの潜在的な問題は、例えば、直径＞１０μｍの高分子粒子の放出に関連していて、そしてそれは、血流中で不溶性又は難溶性である。
【００６４】
本明細書中に記載した第二の微粒子コーティング層は、処置部位に送達されるように可溶性の、典型的には非高分子ベースの粒子で構成され、そのため、パクリタキセルコーティングがデバイス表面から溶出するとき、斯かる粒子状物の放出は（パクリタキセルに関連する）治療効果だけを有し、そして、先に言及した有害影響を有しないであろう。
一実施形態において、パクリタキセル及び単独若しくはそれぞれの有機添加物は結晶形態で存在する。
【００６５】
本発明の一実施形態において、パクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層の特徴は、第二の微粒子層の少なくとも１部が低い融解吸熱を呈する点である。融解吸熱は、実施例４に記載のとおり、示差走査熱量計（ＤＳＣ）計測によって観察できる。よって、本明細書中で言及される場合、「融点」と「ピーク融解吸熱」は同等であるとみなされなければならない。「低い融解吸熱」は、パクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層の一部が、純粋な形のパクリタキセル又は少なくとも１つの有機添加物のいずれかの融点より低い温度にて単一相として溶解するときに観察される。第二の微粒子コーティング層が２つ以上の有機添加物を含んでいる場合には、低い融解吸熱は該第二の層中に存在するすべての有機添加物の融点より低い。
【００６６】
よって、一実施形態において、パクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層の少なくとも一部が、純粋な形のパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物の融点より低い温度で単一相として溶解する。
低い融点を呈する第二の微粒子コーティング層の「少なくとも一部」への言及は、パクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層全体が低い融点を呈するとき、その状況を網羅することを意図している、すなわち、第二の微粒子コーティング層の（定義された「一部」を除いた）残存部分もまた同じ低い融点を呈する。
低い融点を呈するパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層の一部は、単一相としてより低い温度にて溶解する、すなわち、その点でパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物の両方が同時に溶解する単一の低い融点が観察される。
【００６７】
いくつかの実施形態において、パクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層は、主に結晶形態である。
【００６８】
第二の微粒子コーティング層は、共融混合物の形態のパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物から成る結晶状粒子を含んでもよく、ここで、該共融混合物は低い融点を呈する。共融混合物は、その成分のいずれか又はすべてがより低い融点を有する単一相として溶解する（好適には、ここで、少なくとも１つ、好ましくは該成分のすべてが結晶性である）２つ以上の成分の密に混ぜ合わせた物理的混合物と本明細書中では定義される。共融混合物は、２つの（それより多い）異なった結晶性成分が分子サイズ又は分子形状に関して不適合であるときに、粘着性相互作用よりも凝集性相互作用が比較的強く、新しい格子構造よりむしろ２つ以上の格子構造の凝集につながるように形成する傾向がある。そのため、斯かるパクリタキセル‐有機添加物コーティングのＸ線粉末回折（「ＸＲＰＤ」）パターンは、パクリタキセル及び有機添加物個々のＸＲＰＤの重複画像と同一か又は実質的に類似したＸＲＰＤパターンを有すると予想される。斯かるコーティングのＸＲＰＤパターンは、個々の成分と異なる独特な格子配置を有することはなく、そのため、パクリタキセル及び有機添加物に対応するもの以外のピークが見られることはないであろう（Cherukuvada et al. , 2014, Chem. Comm, Vol. 50, pages 906-923；参照により本明細書中に援用する）。いかなる理論にも縛られることを望むものではないが、発明者らは、共融薬剤コーティング組成物の束一性及び高い熱力学関数（例えば、エネルギー、エンタルピー、及びエントロピーを解放する）が、周囲組織への移行前のコーティングからの薬剤の不特定な損失を最小にする一方で、コーティングから周囲組織への薬剤の迅速な移行を可能にできると考えている。
【００６９】
あるいは、第二の微粒子コーティング層は、「共結晶」と呼ばれることもある、パクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる結晶物質の粒子を含んでいてもよく、ここで、該結晶物質は低い融点を呈する。２つの（又はそれより多い）個々の成分が実質的にただ一つの連続的な結晶相に通じる強い粘着性相互作用を有するとき、共融系よりむしろ共結晶がより形成されやすい。共結晶質パクリタキセル‐有機添加物の第二の層は、そのため、パクリタキセル又は有機添加物のものとは異なる独特なＸＲＰＤパターンを呈すると予想される（Cherukuvada et al. , 2014, Chem. Comm, Vol. 50, pages 906-923）。
【００７０】
凝集性相互作用が（共融を与えるような）粘着性相互作用を超えて優位に立つ、（共結晶を与えるような）逆もまた同様である点について基本規則も又は構造指針もないことは広く認識されている。第二の微粒子コーティング層（すなわち、共融、共結晶又はその混合物）の正確な構造的性質は、第二の微粒子コーティング層が低い融点を呈するそれらの実施形態においてでさえ、本発明の実施に関して理解される必要がないことに注意しなければならない。
この特定の実施形態において、第二の微粒子コーティング層中のパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物の相対量は、第二の微粒子コーティング層の少なくとも一部が低い融点を呈するようなものでなければならない。これは、少なくとも１つの有機添加物の性質にある程度依存するが、２つの成分の比を変更し、そして、ＤＳＣによって得られた第二の微粒子コーティング層コーティングを分析して、低い融点が存在するか否かを判定することによって容易に可能である。
【００７１】
第二の微粒子コーティング層は、本発明のコーティングデバイスから第二の微粒子コーティング層のサンプルを掻き取ることにより、第一のコーティング層とは独立に分析できる（実施例４を参照のこと）。あるいは、非固形物分析が実施できる場合には、第二の微粒子コーティング層は、、該第二の微粒子コーティング層を溶液中に溶解させて、第一のコーティング層を医療用デバイス表面に完全なまま残すように、好適な溶剤、例えば、メタノール中の０．２％の酢酸中に埋め込み型医療用デバイスを浸すことによって抽出できる（試験方法Ｃ‐ＩＩを参照のこと）。
【００７２】
一実施形態において、パクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層の実質的にすべてが、純粋な形でのパクリタキセル又は少なくとも１つの有機添加物のいずれかの融点より低い温度にて単一相として溶解する。この実施形態において、第二の微粒子コーティング層のＤＳＣサーモグラムは、単一の低い融点を示し、且つ、純粋なパクリタキセル又は少なくとも１つの純粋な有機添加物の溶解に相当する目に見える吸熱を示さないと予想される。
【００７３】
一実施形態において、第二の微粒子コーティング層の２０〜１００（重量）％が低い融点（すなわち、純粋な形のパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物の融点より低い温度の融点）を呈し、例えば第二の微粒子コーティング層の３０〜１００％、４０〜１００％、５０〜１００％、６０〜１００％、７０〜１００％、８０〜１００％、９０〜１００％など又は実質的にすべてが低い融点を呈する。実施形態において、第二の微粒子コーティング層の１００％未満が低い融点を呈する形態である場合、残っている物質は、純粋な形のパクリタキセル又は（存在するのであれば）純粋な形の少なくとも１つの有機添加物、或いはその混合物であろう。
【００７４】
一実施形態において、パクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層の一部は、純粋な形のパクリタキセル又は少なくとも１つの有機添加物のいずれかの融点より低い温度で単一相として溶解し、そして、残存しているパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層は、純粋な形の少なくとも１つの有機添加物の融点にて又はその付近で融解する。この実施形態において、第二の微粒子コーティング層のＤＳＣサーモグラムは、単独の低い融点及びなくとも１つの純粋な有機添加物の既知の融点又はその付近の吸熱を示すことが予想された。一実施形態において、既知の融点「付近」とは、純粋な有機添加物の既知の融点の±１０℃以内、例えば、±５℃以内、±４℃以内、±３℃以内、±２℃以内又は±１℃以内を意味する。この実施形態において、純粋な形の有機添加物の融点若しくはその付近の温度で融解する有機添加物の一部は、単一の低い融点で融解するパクリタキセル‐有機添加物材料中の一部の有機添加物より好適に低い。２つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層では、ＤＳＣサーモグラムは、単一の低い融点、及び純粋な形の一方又は両方の有機添加物の既知の融点に相当する１又は２つの吸熱を示してもよい。
【００７５】
第二の微粒子の層が低い融点を呈するある実施形態において、純粋な形の有機添加物の融点若しくはその付近の温度にて融解する有機添加物の一部は、第二の微粒子コーティング層中の有機添加物の１〜８０％（ｗｔ.％）、例えば、１〜７０％、１〜６０％、１〜５０％、１〜４０％、１〜３０％、１〜２０％、１〜１０％、１〜５％又は１〜２％である。
第二の微粒子層が低い融点を示す更なる実施形態において、パクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層の一部は、純粋な形のパクリタキセル又は少なくとも１つの有機添加物のいずれかの融点より低い温度にて単一相として溶解し、そして、残存しているパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層は、純粋な形のパクリタキセルの融点若しくはその付近にて融解する。この実施形態において、第二の微粒子コーティング層のＤＳＣサーモグラムは、単一の低い融点、及びパクリタキセルの既知の融点若しくはその付近の吸熱を示すであろう。この実施形態において、純粋な形のパクリタキセルの融点若しくはその付近の温度にて融解するパクリタキセルの一部は、単一の低い融点で融解するパクリタキセル‐有機添加物材料中のパクリタキセルの一部より好適に低い。
【００７６】
一実施形態において、純粋な形のパクリタキセルの融点若しくはその付近の温度にて融解するパクリタキセルの一部は、第二の微粒子コーティング層のパクリタキセルの１〜８０％（ｗｔ.％）、例えば、１〜７０％、１〜６０％、１〜５０％、１〜４０％、１〜３０％、１〜２０％、１〜１０％、１〜５％又は１〜２％である。
より一層更なる実施形態において、パクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層の一部は、純粋な形のパクリタキセル又は少なくとも１つの有機添加物のいずれかの融点より低い温度にて単一相として融解し、そして、残存しているパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層は、２つの融解吸熱：一方が純粋な形のパクリタキセルの融点若しくはその付近の温度、もう片方が純粋な形の少なくとも１つの有機添加物の融点若しくはその付近の温度、を示す。この実施形態において、第二の微粒子コーティング層のＤＳＣサーモグラムは、単一の低い融点、並びにパクリタキセルの既知の融点若しくはその付近の１つの吸熱及び少なくとも１つの有機添加物の既知の融点若しくはその付近の別の吸熱を示す。この実施形態において、純粋な形のパクリタキセルの融点若しくはその付近の温度にて融解するパクリタキセルの一部は、単一の低い融点にて融解するパクリタキセル‐有機添加物材料中のパクリタキセルの一部より好適に低く、且つ、純粋な形の少なくとも１つの有機添加物の融点若しくはその付近の温度にて融解する有機添加物の一部は、単一の低い融点にて融解するパクリタキセル‐有機添加物材料中の有機添加物の一部より好適に低い。
【００７７】
１）低い融点を呈するパクリタキセル／有機添加物組成物；及び２）純粋なパクリタキセル及び／又は有機添加物の融点若しくはその付近に融点を有するパクリタキセル／有機添加物組成物の相対比率は、ＤＳＣ分析によって決定できる。なぜなら、関連吸熱下面積が、（重量に関して、必要であれば、モル比に変換できる）全体として第二の微粒子コーティング層中の成分１）又は２）それぞれの相対量に相関し得るからである。
先に言及したとおり、第二の微粒子コーティング層は、該第二の微粒子コーティング層中のパクリタキセルの量を決定するために、超高性能液体クロマトグラフィー（ＵＰＬＣ‐試験方法Ｃ‐ＩＩ及び評価方法を参照のこと）及び／又は質量分析法によって分析できる。第二の微粒子コーティング層中のパクリタキセルの重量％がわかっているとき、二成分の第二の微粒子コーティング層（すなわち、パクリタキセル＋１つの有機添加物のみ）などの場合、有機添加物の重量％は１００−パクリタキセルｗｔ.％として容易に決定できる。
【００７８】
一実施形態において、第二の微粒子コーティング層中のパクリタキセルの重量％は、約５ｗｔ.％〜約９５ｗｔ.％、例えば約１０ｗｔ.％〜約９５ｗｔ、約２０ｗｔ.％〜約９５ｗｔ.％、約３０ｗｔ.％〜約９０ｗｔ.％、約４５ｗｔ.％〜約８５ｗｔ.％、約５５ｗｔ.％〜約７０ｗｔ.％、約４０ｗｔ.％〜約８０ｗｔ.％、約２５ｗｔ.％〜約９５ｗｔ.％、約３０ｗｔ.％〜約８５ｗｔ.％、約７０ｗｔ.％〜約９５ｗｔ.％、７０ｗｔ.％〜約８０ｗｔ.％又は約７５ｗｔ.％〜約８０ｗｔ.％である。
一実施形態において、有機添加物はカフェインであり、そして、第二の微粒子コーティング層中のパクリタキセルの重量％が約７０ｗｔ.％〜約９５ｗｔ.％、例えば約７５ｗｔ.％〜約９０ｗｔ.％である。一実施形態において、有機添加物はカフェインであり、そして、第二の微粒子コーティング層中のカフェイン：パクリタキセルの比（ｗｔ.％）は、約７：３〜約９５：５、例えば約３：１〜約９：１ｗｔ.％である。
【００７９】
一実施形態において、有機添加物はコハク酸であり、そして、第二の微粒子コーティング層のパクリタキセルの重量％が約７０ｗｔ.％〜約９０ｗｔ.％、例えば約７５ｗｔ.％〜約８５ｗｔ％である。一実施形態において、有機添加物はコハク酸であり、そして、第二の微粒子コーティング層中のパクリタキセル：コハク酸の比（ｗｔ.％）は、約７：３〜約９：１、例えば、約３：１ｗｔ.％〜６：１である。
一実施形態において、有機添加物はｐ‐アミノ安息香酸（ＰＡＢＡ）、サッカリン、アスコルビン酸、メチルパラベン、カフェイン、サリチル酸カルシウム、ペンテト酸、クレアチニン、エチル尿素、アセトアミノフェン、アスピリン、テオブロミン、トリプトファン、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、テオフィリン、及びサッカリンナトリウムから成る群から選択され、そして、第二の微粒子コーティング層中のパクリタキセルの重量％は約３０ｗｔ.％〜約９０ｗｔ.％、例えば約５０ｗｔ.％〜約９０ｗｔ％などである。
【００８０】
一実施形態において、有機添加物は、ｐ‐アミノ安息香酸、サッカリン、アスコルビン酸、メチルパラベン、カフェイン、サリチル酸カルシウム、ペンテト酸、クレアチニン、エチル尿素、アセトアミノフェン、アスピリン、テオブロミン、トリプトファン、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、テオフィリン、及びサッカリンナトリウムから成る群から選択され、そして、第二の微粒子コーティング層中のパクリタキセル：有機添加物の比（ｗｔ.％）は約３：７〜約９：１、例えば約１：１〜約９：１などである。
一実施形態において、有機添加物は、ｐ‐アミノ安息香酸、メチルパラベン、カフェイン、サリチル酸カルシウム、及びコハク酸から成る群から選択され、そして、第二の微粒子コーティング層中のパクリタキセルの重量％は、約３０ｗｔ.％〜約９０ｗｔ.％、例えば約５０ｗｔ.％〜約９０ｗｔ％などである。
【００８１】
一実施形態において、有機添加物は、ｐ‐アミノ安息香酸、メチルパラベン、カフェイン、サリチル酸カルシウム、及びコハク酸から成る一覧から選択され、そして、第二の微粒子コーティング層中のパクリタキセル：有機添加物の比（ｗｔ.％）は、約３：７〜約９：１、例えば約１：１〜約９：１などである。
第二の微粒子コーティング層は複数の方法によって調製できる。第二の微粒子コーティング層を調製する１つの方法は、コーティングすべき表面に塗布されたパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物の溶液の留去による。
【００８２】
よって、一態様において、本発明は、本明細書中に記載した埋め込み型医療用デバイスを提供するが、ここで、第二の微粒子コーティング層は、溶媒中にパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を溶解して、溶液を形成し、医療用デバイスに該溶液を適用し、医療用デバイス（すなわち、コーティングすべき医療用デバイスの表面、そしてそれは、好適には第一のコーティング層で事前にコーティングされる）に該溶液を適用し、該溶液で該デバイスをコーティングし、そして、該溶媒を留去することによって医療用デバイスに適用される。
【００８３】
パクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物の溶液の留去による第二の微粒子コーティング層を形成するための様々な方法が使用できる。パクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物の溶液は、デバイスの外面上にピペッティングで適用でき、例えば一度に９０〜１００μｌのコーティング溶液をデバイス上でピペッティングすることで、それ自体が循環する。あるいは、デバイスを、単純にパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物の溶液中に浸し、取り出し、そして風乾する。浸漬及び乾燥工程は、所望のコーティング厚又はパクリタキセルの添加量を達成するのに必要なだけ何回も反復してもよい。代表的な手順は、実施例２、３、３ａ、３ｂ、及び３ｃに記載されている。鋳造、スピニング、スプレーイング、インクジェットプリンティング、静電気技術、ペインティング、分散液コーティング、粉末コーティング又はその組み合わせなどの他の技術がコーティングを形成するのに使用されてもよい。
【００８４】
好適なことには、第二の微粒子コーティング層は、回転させながらシリンジポンプを使用して、パクリタキセル、有機添加物及び溶媒を含んでいるコーティング溶液をコーティングすべきデバイス表面に分配することによって適用される。この方法を使用することで、（「ドロップ鋳造」によって）既知の体積及び溶液濃度がデバイス上にコーティングされたときに、実施例３に説明したように、コーティング中に適用したパクリタキセルの量又は添加量を見積もることができる。
好適なことには、パクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物の溶液は、水、アセトン、及びその混合物、例えば約５０／５０、約９５／５、約６０／４０〜約９０／１０、約７０／３０〜約９０／１０又は約７０／３０〜約７５／２５のアセトン／水（ｖ／ｖ）、例えば９０／１０、７５／２５、又は７０／３０のアセトン／水（ｖ／ｖ）などから選択される溶媒の溶液である。
【００８５】
コーティング溶液の適用に続いて、乾燥ステップが必要であってもよい。コーティング乾燥環境は、例えば空気組成、流量及び流動パターン、空気温度、局所的な加熱（例えば、加熱ランプ）などを制御又は調節し、それによって、コーティングの物理特性を制御するなどして時間の関数として制御されてもよい。
よって、一実施形態において、第二の微粒子コーティング層は、以下のステップ：
Ａ）パクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を溶媒中に溶解して溶液を形成し； 
Ｂ）該溶液を埋め込み型医療用デバイスに適用し；そして、
Ｃ）溶媒を留去すること、
を含む工程によって形成される。
【００８６】
工程は、適宜、コーティングを乾燥させる追加ステップＤ）を含む。
第一のコーティング層、並びにパクリタキセル及びカフェインの第二の微粒子コーティング層でステントをコーティングする方法は、実施例２に記載されている。パクリタキセル及びカフェイン又はコハク酸の第二の微粒子コーティング層で（第一のコーティング層で事前にコーティングした）ステント‐グラフトをコーティングする方法は、実施例３、３ａ、３ｂ、及び３ｃに記載されており、そのそれぞれが異なったパクリタキセル添加量（それぞれ５００μｇ、２５μｇ、及び１５０μｇ）を利用する。これらの方法は他の埋め込み型デバイスに適合させることができる。
【００８７】
一実施形態において、前記若しくはある有機添加物はカフェインであり、そして、（加え固形成分の総重量に基づく）ピペッティング／浸漬溶液のパクリタキセルの重量％は、約７０ｗｔ.％〜約９５ｗｔ.％、例えば、約７５ｗｔ.％〜約９０ｗｔ％である。
一実施形態において、前記若しくはある有機添加物はカフェインであり、そして、（加え固形成分の総重量に基づく）ピペッティング／浸漬溶液のパクリタキセル：カフェインの比（ｗｔ.％）は約７：３〜約９５：５、例えば、約３：１〜約９：１ｗｔ.％である。
【００８８】
一実施形態において、前記若しくはある有機添加物はカフェインであり、そして、（加え固形成分の総重量に基づく）ピペッティング／浸漬溶液中のパクリタキセル：カフェインの比（ｗｔ.％）は、約７：３〜約９５：５、例えば、約３：１〜約９：１であり、ここで、該浸漬／ピペッティング溶液は、約７０／３０〜約９０／１０のアセトン／水（ｖ／ｖ）の溶液である。
一実施形態において、前記若しくはある有機添加物はコハク酸であり、そして、（加え固形成分の総重量に基づく）ピペッティング／浸漬溶液中のパクリタキセルの重量％は、約７０ｗｔ.％〜約９０ｗｔ.％、例えば、約７５コハク酸ｗｔ.％〜約８５ｗｔ％である。一実施形態において、前記若しくはある有機添加物はであり、そして、（加え固形成分の総重量に基づく）ピペッティング／浸漬溶液中のパクリタキセル：コハク酸の比（ｗｔ.％）は、約７：３〜約９：１、例えば、約３：１ｗｔ.％〜約６：１である。
【００８９】
一実施形態において、前記若しくはある有機添加物はコハク酸であり、そして、（加え固形成分の総重量に基づく）ピペッティング／浸漬溶液中のパクリタキセル：コハク酸の比（ｗｔ.％）は、約７：３〜約９：１、例えば、約３：１ｗｔ.％〜６：１であり、ここで、該浸漬／ピペッティング溶液は、約７０／３０〜約９０／１０のアセトン／水（ｖ／ｖ）の溶液である。
一実施形態において、少なくとも１つの有機添加物は、ｐ‐アミノ安息香酸、サッカリン、アスコルビン酸、メチルパラベン、カフェイン、サリチル酸カルシウム、ペンテト酸、クレアチニン、エチル尿素、アセトアミノフェン、アスピリン、テオブロミン、トリプトファン、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、テオフィリン、及びサッカリンナトリウムから成る群から独立に選択され、そして、（加え固形成分の総重量に基づく）ピペッティング／浸漬溶液中のパクリタキセルの重量％は、約３０ｗｔ.％〜約９０ｗｔ.％、例えば約５０ｗｔ.％〜約９０ｗｔ％などである。
【００９０】
一実施形態において、少なくとも１つの有機添加物は、ｐ‐アミノ安息香酸、サッカリン、アスコルビン酸、メチルパラベン、カフェイン、サリチル酸カルシウム、ペンテト酸、クレアチニン、エチル尿素、アセトアミノフェン、アスピリン、テオブロミン、トリプトファン、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、テオフィリン、及びサッカリンナトリウムから成る群から独立に選択され、そして、（加え固形成分の総重量に基づく）ピペッティング／浸漬溶液中のパクリタキセル：有機添加物（合計）の比（ｗｔ.％）は、約３：７〜約９：１、例えば約１：１〜約９：１などである。
【００９１】
一実施形態において、少なくとも１つの有機添加物は、ｐ‐アミノ安息香酸、サッカリン、アスコルビン酸、メチルパラベン、カフェイン、サリチル酸カルシウム、ペンテト酸、クレアチニン、エチル尿素、アセトアミノフェン、アスピリン、テオブロミン、トリプトファン、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、テオフィリン、及びサッカリンナトリウムから成る群から独立に選択され、そして、（加え固形成分の総重量に基づく）ピペッティング／浸漬溶液のパクリタキセル：有機添加物（合計）の比（ｗｔ.％）は、約３：７〜約９：１、例えば約１：１〜約９：１であり、ここで、該浸漬／ピペッティング溶液は、約７０／３０〜約９０／１０のアセトン／水（ｖ／ｖ）の溶液である。
【００９２】
一実施形態において、少なくとも１つの有機添加物は、ｐ‐アミノ安息香酸、メチルパラベン、カフェイン、サリチル酸カルシウム、及びコハク酸から成る一覧から独立に選択され、そして、（加え固形成分の総重量に基づく）ピペッティング／浸漬溶液中のパクリタキセルの重量％は、約３０ｗｔ.％〜約９０ｗｔ.％、例えば約５０ｗｔ.％〜約９０ｗｔ％などである。
一実施形態において、少なくとも１つの有機添加物は、ｐ‐アミノ安息香酸、メチルパラベン、カフェイン、サリチル酸カルシウム、及びコハク酸から成る一覧から独立に選択され、そして、（加え固形成分の総重量に基づく）ピペッティング／浸漬溶液中のパクリタキセル：有機添加物（合計）の比（ｗｔ.％）は、約３：７〜約９：１、例えば約１：１〜約９：１などである。
【００９３】
一実施形態において、少なくとも１つの有機添加物は、ｐ‐アミノ安息香酸、メチルパラベン、カフェイン、サリチル酸カルシウム、及びコハク酸から成る一覧から独立に選択され、そして、（加え固形成分の総重量に基づく）ピペッティング／浸漬溶液中のパクリタキセル：有機添加物（合計）の比（ｗｔ.％）は、約３：７〜約９：１、例えば約１：１〜約９：１などであり、ここで、該浸漬／ピペッティング溶液は、約７０／３０〜約９０／１０のアセトン／水（ｖ／ｖ）の溶液である。
一実施形態において、有機添加物はカフェインであり、そして、（加え固形成分の総重量に基づく）ピペッティング／浸漬溶液中のパクリタキセル：カフェインの比（ｗｔ.％）は、約３：１〜約６：１であり、ここで、該浸漬／ピペッティング溶液は、約７０／３０〜約９０／１０のアセトン／水（ｖ／ｖ）の溶液である。
【００９４】
一実施形態において、有機添加物はコハク酸であり、そして、（加え固形成分の総重量に基づく）ピペッティング／浸漬溶液中のパクリタキセル：コハク酸の比（ｗｔ.％）は、約３：１〜約６：１であり、ここで、該浸漬／ピペッティング溶液は、約７０／３０〜約９０／１０のアセトン／水（ｖ／ｖ）の溶液である。
典型的には、第二の微粒子コーティング層は、約０．１μｍ〜約２００μｍ、例えば０．２μｍ〜約１００μｍの平均総厚を有する。コーティング厚は、好適なコーティング厚分析装置又はゲージを使用して、又は表面分析を伴ったＸ線光電子分光法を使用することによって計測できる（評価方法を参照のこと）。
【００９５】
あるいは、第二の微粒子コーティング層は、最小量の溶媒を伴うか又は実際には溶媒を伴わない方法を使用して埋め込み型医療用デバイスに適用されてもよい。例えば、デバイスに適用する前に粉末形態でパクリタキセルと少なくとも１つの有機添加物を組み合わせて、固形粒子組成物を形成し、適宜続けて熱処理することを伴う乾燥粉末法が使用されてもよい。パクリタキセルと少なくとも１つの有機添加物の粉末混合物が、好適には、（本明細書中で先に記載したように）適宜接着層を含むデバイス上にスプレーされ、そしてそれは、続いて熱処理されて、例えば、（好適には第一のコーティング層で事前にコーティングした）デバイス表面に層を貼り付ける。
よって、一実施形態において、第二の微粒子コーティング層は、粉末形態でパクリタキセルと少なくとも１つの有機添加物を組み合わせ、次に、（好適には、第一のコーティング層であらかじめコーティングされた）埋め込み型医療用デバイスに粉末を適用して、固形粒子組成物を形成するステップを含む工程によって形成される。例えば医療用デバイスの表面にコーティングを貼り付けるために、追加の熱処理ステップが続いて適用され得る。
【００９６】
追加のコーティング層
第一のコーティング層は、典型的には、第二の微粒子コーティング層の前に埋め込み型医療用デバイスに適用される。しかしながら、第一のコーティング層は、埋め込み型医療用デバイスの表面に直接適用される必要はない。埋め込み型医療用デバイスはまた、第一のコーティング層と第二の微粒子コーティング層の下にある又は上にある追加のコーティングを含み得る。斯かる追加のコーティングは、第一のコーティング層及び第二の微粒子コーティング層とは別個であり、且つ、異なって、そして、第一のコーティング層のヘパリン部分の生理活性、及び第二の微粒子コーティング層から溶出するパクリタキセルの能力を維持しながら、追加の利益を提供する。これらの追加のコーティングは、単独又は様々な賦形剤若しくは担体と組み合わせて他の治療薬を含み得る。一実施形態において、追加のコーティングの量又は厚さは、埋め込み型医療用デバイスの表面上で変更され得る。追加のコーティング層は、デバイス表面全体に連続的に存在しても、或いは不連続的に存在しても、又はデバイスの一部若しくは別個の部分だけを覆ってもよい。追加のコーティング層はまた、所望の表面トポグラフィー又は凹凸を作成するために「彫刻」されても又は改変されてもよい。
【００９７】
一実施形態において、接着層は、第一のコーティング層と埋め込み型医療用デバイス表面材料との間に挿入される。第一のコーティング層及び第二の微粒子コーティング層の下にある別個の、異なった層である接着層は、第一のコーティング層の埋め込み型医療用デバイス表面への接着を提供し、さらに、特に処置されるべき組織への輸送中にコーティングの完全性を維持する。一実施形態において、接着層は高分子を含んでいて、その高分子は、好適には生体適合性であって、体組織の刺激を回避する。斯かる高分子の例としては、これだけに限定されるものではないが、ポリオレフィン、ポリイソブチレン、エチレン‐α‐オレフィンコポリマー、アクリルポリマー及びコポリマー、塩化ポリビニル、ポリビニルメチルエーテル、ポリフッ化ビニリデン及びポリ塩化ビニリデン、フルオロポリマー、例えば、延伸ポリテトラフルオロエチレン（ｅＰＴＦＥ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、フッ化プロピレン‐エチレン（ＦＥＰ）、ペルフルオロカーボンコポリマー、例えばテトラフルオロエチレン・ペルフルオロアルキルビニルエーテル（ＴＦＥ／ＰＡＶＥ）コポリマー、テトラフルオロエチレン（ＴＦＥ）及びペルフルオロメチルビニルエーテル（ＰＭＶＥ）のコポリマー、米国特許番号第８,６５８,７０７号（W. L. Gore & Associates、参照によって本明細書中に援用する）に記載のアセタート、アルコール、アミン、アミド、スルホネート、官能基及びその組み合わせなどを含めた官能性モノマーを伴ったＴＦＥのコポリマー、ポリアクリロニトリル、ポリビニルケトン、ポリスチレン、酢酸ビニル、エチレン‐メチルメタクリラートコポリマー、アクリロニトリル‐スチレンコポリマー、ＡＢＳ樹脂、Ｎｙｌｏｎ１２及びそのブロックコポリマー、ポリカプロラクトン、ポリオキシメチレン、ポリエーテル、エポキシ樹脂、ポリウレタン、レーヨン‐トリアセテート、セルロース、酢酸セルロース、酪酸セルロース、セロハン（登録商標）、硝酸セルロース、セルロースプロピオネート、セルロースエーテル、カルボキシメチルセルロース、キチン質、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ乳酸ポリエチレンオキシドコポリマー、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリビニルアルコール、シリコーン（例えば、ポリシロキサンと置換ポリシロキサン）、ポリウレタン、熱可塑性エラストマー、エチレン酢酸ビニルコポリマー、ポリオレフィンエラストマー、ＥＰＤＭゴム並びにその混合物などの弾性高分子が挙げられる。
【００９８】
デバイス表面と第一のコーティング層の間の追加の接着層は、それに続いて適用された第一のコーティング層のヘパリン部分の生理活性に影響を与えないことに基づいて当業者によって選択される。ヘパリン生理活性は、例えば試験方法Ｊ又はＫに従って評価され得る。
別の実施形態において、パクリタキセル以外の治療薬を含む追加のコーティング層は、第一のコーティング層と埋め込み型医療用デバイスの表面材料との間に挿入されるか、或いは第一のコーティング層及び／又は第二の微粒子コーティング層の少なくとも一部に適用される。前記追加のコーティング層は、第一のコーティング層及び第二の微粒子コーティング層と別個の、異なった層であり、そして、パクリタキセル及びヘパリン部分によって提供された利益に加えて治療効果を提供し得る、すなわち、パクリタキセル‐有機添加物及びヘパリン部分に組み合わせられる補助療法を許容する。
【００９９】
一実施形態において、埋め込み型医療用デバイスはさらに、第二の微粒子コーティング層の表面、又は第一のコーティング層及び第二の微粒子コーティング層の上にある保護的な上塗りを含む。上塗りは、それが標的組織と接触する前、デバイスの組み立て及び包装中、輸送中、又は該デバイスがステント若しくはステント‐グラフトであれば、第二の微粒子コーティング層が標的組織との直接接触を強いられる前の拡張の最初の瞬間中に、コーティング層、特に第二の微粒子コーティング層（パクリタキセル‐有機添加物層）の損失をさらに最小にし得る。
【０１００】
本発明の埋め込み型医療用デバイスが追加の層を含んでいる実施形態において、斯かる追加層は、固定されたヘパリン部分を含んでいる第一のコーティング層、並びにパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層とは異なる、別個の層であると考えられる。例えば、本発明の特定の実施形態において、第二の微粒子コーティング層は界面活性剤不含及び／又は高分子不含と規定されるが、埋め込み型医療用デバイスは、界面活性剤及び／又は高分子を含む、第一のコーティング層及び／又は第二の微粒子コーティング層の下にある若しくは上にある、又は第一のコーティング層と第二の微粒子コーティング層の一部の間に常駐する、異なり、且つ、別個のコーティング層をまだ有し得る。同様に、一実施形態において、第二の微粒子コーティング層はタンパク質を含んでいないが、埋め込み型医療用デバイスは、第一のコーティング層及び／又は第二の微粒子コーティング層の下にある若しくは上にある、又は第一のコーティング層と第二の微粒子コーティング層の一部の間に常駐する、更なるコーティング層を有してもよく、そしてそれはタンパク質を含んでいる。よって、追加のコーティング層中の成分は、第一のコーティング層又は第二の微粒子コーティング層の一部を形成しない。
【０１０１】
医療用デバイスが本発明のコーティング層に加えて複数のコーティング層を有する状態では、第二の微粒子コーティング層が低い融点を呈する実施形態において、これは確認することが難しい可能性がある。しかしながら、この状態では、コーティング成分のいずれにも該当しない融点の存在は、特にパクリタキセル及び有機賦形剤に相当する独特の融解吸熱も欠く場合、低い融点を呈するパクリタキセル‐有機賦形剤材料の形成が示唆される。
いずれかの追加のコーティング層（特に追加の上部コーティング）は、標的組織に接触した時点で、パクリタキセルが第二の微粒子コーティング層から溶出するのをさらに可能にしなければならない。デバイスからのパクリタキセルの溶出速度は次の試験方法Ｍに従って評価され得る。第一のコーティング層のヘパリン部分の生理活性はまた、任意の追加のコーティングの適用によって著しく悪影響を受けてはならない。
一実施形態において、埋め込み型医療用デバイスは、本明細書中に記載の第一のコーティング層及び第二の微粒子コーティング層から成るコーティングを有する、すなわち、該デバイスは追加のコーティング層を有していない。
【０１０２】
第一のコーティング層を適用する前に、接着及び表面コーティング率を改良するために埋め込み型医療用デバイスの表面を洗浄してもよい。適切な洗浄剤としては、エタノール又はイソプロパノール（ＩＰＡ）等の溶媒、高いｐＨを有する溶液、例えばアルコールと水酸化物化合物（例えば、水酸化ナトリウム）の水溶液との混合液、水酸化ナトリウム溶液、水酸化テトラメチルアンモニウム（ＴＭＡＨ）、酸性Ｐｉｒａｎｈａ（硫酸と過酸化水素との混合液）のような酸性溶液、及び他の酸化剤、例えば硫酸と過マンガン酸カリウムとの組み合わせ、又は異なる種類のペルオキシ硫酸又はペルオキシ二硫酸溶液（また、アンモニウム塩、ナトリウム塩、及びカリウム塩としても）が挙げられる。
【０１０３】
コーティング層の組成物と特性
第一のコーティング層及び第二の微粒子コーティング層は、第二の微粒子コーティング層の少なくとも一部が第一のコーティング層の少なくとも一部に接触しているように、埋め込み型医療用デバイスの表面に適用される。
第一のコーティング層は、第二の微粒子コーティング層の適用前に埋め込み型医療用デバイスの表面に適用され、そして、好ましくは第二の微粒子コーティング層は、第一のコーティング層で既に覆われた埋め込み型医療用デバイスの表面に適用される、すなわち、（図１０で例示されるように）好ましくは第二の微粒子のコーティングは第一のコーティング層の少なくとも一部の上に適用される。
【０１０４】
よって、本発明は、コーティングされた埋め込み型医療用デバイスを調製するための工程であって、以下のステップ：
ｉ）該医療用デバイスを処理して、固定されたヘパリン部分を含んでいる第一のコーティング層を提供し；さらに
ｉｉ）該医療用デバイスを処理して、溶出可能なパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層を提供すること、
を含み、
ここで、該第二の微粒子コーティング層の少なくとも一部が、第一のコーティング層の少なくとも一部に接触している、工程を提供する。
【０１０５】
一実施形態において、第一のコーティング層は、第二の微粒子コーティング層の前に医療用デバイスに適用される。別の実施形態において、第二の微粒子コーティング層の少なくとも一部が、第一のコーティング層の少なくとも一部の上に適用される（例えば、この実施形態に該当する第一のコーティング層と第二の微粒子コーティング層のいくつかの可能性のある配置を示している図９及び１０を参照のこと）。
第一のコーティング層（ステップｉ））及び第二の微粒子コーティング層（ステップｉｉ））の調製に関して先に別個に記載した実施形態は、全体的なコーティングステップ（すなわち、ステップｉ）及びｉｉ））を記載している実施形態に等しく適用される。第一のコーティング層及び第二のコーティング層の組成物に関して先に記載した実施形態は、すべての工程に関する実施形態に等しく適用される。
【０１０６】
目標の領域、すなわちパクリタキセルによって処置されるべき領域に埋め込まれたときに、埋め込み型医療用デバイスのコーティング層から（特に第二の微粒子コーティング層から）放出されるという意味で、パクリタキセルは「溶出可能」である。パクリタキセルの溶出は、第二の微粒子コーティング層の分解及び／又は消散をもたらす、すなわち、パクリタキセルが溶出した時点で、第二の微粒子コーティング層はもう存在していない。この文脈において分解とは、コーティング成分の化学的分解よりむしろ、全体としてのコーティング構造の分解を指すことに注意しなければならない。
【０１０７】
一実施形態において、試験方法Ｃ‐ＩＩに記載のとおり、メタノール中の０．２％の酢酸に浸漬したときに、１５分以内に、第二の微粒子コーティング層が溶液まで完全に溶解した場合に、パクリタキセルが溶出可能であると見なされる。
先に述べたように、医療用デバイス用の溶出可能な薬剤コーティングを開発するときの特定の課題は、コーティングが輸送中に失われない／損害を受けないようにデバイスへの十分な接着を持たせ、さらに薬剤がコーティングから標的組織に移される（溶出する）ように好適な放出特性を持たせるバランスを実現することである、すなわち、コーティングの接着が強過ぎた場合には、コーティングは耐久性があるが、不十分な量の薬剤しか放出されず、準最適な有効性しかもたらさない。反対に、コーティングは優れた放出特性を有していてもよいが、コーティングがデバイスに対して十分に接着していないと、不十分な量の薬剤しか標的組織に達しないので、標的組織以外の領域における薬剤の意図しない放出が患者にとって有害になる可能性がある。
【０１０８】
本発明の第二の微粒子コーティング層は、それによって、デバイスの操作中のコーティングの損失を最小にするか又は排除さえする、埋め込み型医療用デバイスに対する良好な接着の良好なバランス、並びにパクリタキセルが有効で効果的な様式で標的組織に送達されるような好適な放出特性を提供する。
本発明者らは、固定されたヘパリン部分を含む第一のコーティング層（それには第二の微粒子コーティング層の少なくとも一部が接触している）の性質が第二の微粒子コーティング層の接着及び放出特性にも影響を与えることがわかった。
図３及び４（実施例２１）に示されているとおり、本発明のデバイスは、操作後でも維持されている平滑且つ平坦な外側コーティング層を有する。この平坦なコーティング層は、（それには第二の微粒子コーティング層の少なくとも一部が接触している）第一のコーティング層の固定されたヘパリンの湿潤性に少なくとも一部で貢献し、そしてそれは、図５（実施例２３）で例示されている。
【０１０９】
本発明のデバイスのパクリタキセル放出特性は実施例１０で調査された。最も高い放出速度は、最初の時点までの初期期間（０．２５ｈ）で観察され、一定、且つ、持続した（低い）放出速度が、観察の残りの期間（最大２４ｈ）で観察された。滅菌は、実施例１１で観察されるように、放出特性に有意に影響を与えなかった。
実施例２で調製されたコーティングステントの耐用年数は、圧縮と拡張の前後でコーティングの質量を比較することによって実施例６に記載のとおり評価された。コーティングステントは高い耐用年数を有することがわかった。実施例３、３ａ、３ｂ、及び３ｃに従って調製されたコーティングステント‐グラフトの耐用年数は、実施例７に記載の異なった方法を介して評価され、ここで、該デバイスのパクリタキセル含有量が圧縮と拡張の前後で評価された。コーティングステント‐グラフトもまた、高い耐用年数を有することがわかった。
【０１１０】
当該実施例では、パクリタキセル‐有機添加物層（第二の微粒子コーティング層）は、ポリアミン表面上に固定されたヘパリンで構成された第一のコーティング層上に適用される。先に述べたように、パクリタキセルはアミン官能性の存在下で不安定であることが知られており、そのため、第一のコーティング層上へのコーティング、並びにその後の保管及び操作の後までパクリタキセル含有物が実質的に分解されていない事実は、驚くべきことである（例えば、操作後のパクリタキセルの良好な保持率を示している実施例７を参照のこと）。
【０１１１】
一実施形態において、埋め込み型医療用デバイスはステントであり、そして、第二の微粒子コーティング層は、試験方法Ｈ‐Ｉのあとに続いて試験方法Ｈ‐ＩＩを使用した操作中に４０％未満、例えば試験方法Ｃ‐Ｉ又はＣ‐ＩＩを使用して測定した場合には、３０％未満、２５％未満、２０％未満、１５％未満、１０％未満又は５％未満のパクリタキセル（ｗｔ.％）が失われるような好適な接着を有する。
一実施形態において、埋め込み型医療用デバイスはステント‐グラフトであり、そして、第二の微粒子コーティング層は、試験方法Ｉ‐Ｉあとに続いて試験方法Ｉ‐ＩＩを使用した操作中に４０％未満、例えば試験方法Ｃ‐Ｉ又はＣ‐ＩＩを使用して測定した場合には、３０％未満、２５％未満、２０％未満、１５％未満、１０％未満又は５％未満のパクリタキセル（ｗｔ.％）が失われるような好適な接着を有する。
【０１１２】
本発明のステント‐グラフトのコーティング表面の耐用年数は、実施例３ｃに従って調製したステント‐グラフトの操作前後のＳＥＭ画像（実施例２１）である図３及び４にさらに示されている。
よって、本発明の埋め込み型医療用デバイスは耐久性があると同時に、望ましいパクリタキセル放出特性も有している。
【０１１３】
そこに第一のコーティング層、又は第一のコーティング層及び第二の微粒子コーティング層がコーティングされている医療用デバイスの表面のトポグラフィーは、第二の微粒子コーティング層の接着及び放出特性を更に高める。本発明者らは、第一のコーティング層及び第二の微粒子コーティング層がｅＰＦＴＥなどの多孔構造を有する表面にコーティングされたとき、接着及び放出特性が特に有利であることを観察した。いかなる理論にも縛られることを望むものではないが、細孔を有する表面が第一のコーティング層及び第二の微粒子コーティング層でコーティングされるとき、パクリタキセル‐有機添加物層が該細孔の中に含まれ得ると考えられる。これが、デバイス処置中のパクリタキセルを安定させるという効果を有する場合があり、それによって、コーティングの耐用年数を向上させ、且つ、使用されるデバイスにおけるパクリタキセルの少ない添加量の使用を可能にする。実施例７に示されているように、少ない初期添加量のパクリタキセルを含む発明のステント‐グラフトでは、高い添加量と比較して、デバイスの操作後により少量（ｗｔ.％）のパクリタキセルしか失わないことが観察された。これはまた、医療用デバイスが埋め込まれた時点で、標的組織にパクリタキセルの放出を遅くする効果を有し、それによって、デバイスから標的組織へのパクリタキセルの持続的放出を提供する可能性もある。
【０１１４】
よって、コーティングされるデバイスの表面が多孔性であり、例えば該表面がｅＰＴＦＥ、又は編まれた、織られた、若しくは組まれたポリエステルで構成される実施形態において、第一のコーティング層の固定されたヘパリン部分可湿性の性質及び表面の多孔性の性質が、特に有利な接着及び放出特性を埋め込み型医療用デバイスに提供できる。
本発明の埋め込み型医療用デバイス、特に該デバイスの第二の微粒子コーティング層は、（試験方法Ａに従って計測される）２４時間の時点における組織内の計測薬剤濃度が、少なくとも１μｇ薬剤／ｇ組織（μｇ／ｇ）、例えば少なくとも２．５μｇ／ｇ、少なくとも５μｇ／ｇ、少なくとも１０μｇ／ｇ、少なくとも５０μｇ／ｇ又は少なくとも１００μｇ／ｇであるような、好適なパクリタキセル放出及び組織移行特性を有する。
【０１１５】
一実施形態において、埋め込み型医療用デバイスはステントであり、そして、該デバイスの第二の微粒子コーティング層は、試験方法Ａを使用して、２４時間の時点において組織内の計測薬剤濃度が、少なくとも１μｇ薬剤／ｇ組織（μｇ／ｇ）、例えば、少なくとも２．５μｇ／ｇ、少なくとも５μｇ／ｇ又は少なくとも１０μｇ／ｇであるような、好適なパクリタキセル放出及び組織移行特性を有する。
一実施形態において、埋め込み型医療用デバイスはステント‐グラフトであり、そして、該デバイスの第二の微粒子コーティング層は、試験方法Ａを使用して、２４時間の時点において組織内の計測薬剤濃度が、少なくとも１μｇ薬剤／ｇ組織（μｇ／ｇ）単位、例えば少なくとも１０μｇ／ｇ、少なくとも５０μｇ／ｇ又は少なくとも１００μｇ／ｇであるような、好適なパクリタキセル放出及び組織移行特性を有する。
【０１１６】
パクリタキセル放出特性は、埋め込み型医療用デバイス上の第一のコーティング層及び第二の微粒子コーティング層の位置を考慮することによって、さらに高められる可能性がある。
埋め込み型医療用デバイスは、好適には、外面及び内面を有し、そのいずれか又はその両方が第一のコーティング層及び第二の微粒子コーティング層でコーティングされている。
例えば、これだけに限定されるものではないが、人工血管、血管グラフト、ステント、及びステント‐グラフトを含めた円筒状基板は、内面（管腔の面／側面）を有し、そしてそれは、外面（反管腔側面の面／側面）からを独立にコーティングされ得る。内面及び外面を含んでいるデバイスは、外面がコーティングされることだけを必要としてもよい。逆に、内面だけが本発明のコーティングを必要としてもよい。あるいは、内面及び外面の両方がコーティングするのを必要とするが、しかし、異なったコーティング又はコーティングの異なった組み合わせを必要としてもよい。
【０１１７】
それぞれのコーティング層の量又は厚さは、医療用デバイスの表面にわたって独立に変更され得る。それぞれのコーティング層は、（例えば、図１０で例示されるように）デバイス表面全体にわたって独立に連続しても、又は不連続であっても、及びデバイスの一部若しくは離れた部分だけを覆っていてもよい。
一実施形態において、デバイスの外面及び内面の両方が第一のコーティング層でコーティングされる。別の実施形態において、デバイスの外面の一部だけが第二の微粒子コーティング層でコーティングされる。
一実施形態において、第一のコーティング層は、埋め込み型医療用デバイスの表面積の最大１００％、例えば最大９９％、９５％、９０％、７５％、５０％又は２５％に適用される。
【０１１８】
一実施形態において、埋め込み型医療用デバイスは、管腔側面と反管腔側面がある管状の埋め込み型医療用デバイスである。この実施形態において、好適なことには、第一のコーティング層は医療用デバイスの管腔側面の一部と反管腔側面の一部に適用され；第二の微粒子コーティング層は該デバイスの反管腔側面の一部だけに適用される。本明細書中で言及される場合に「一部」とは、側面全体が網羅され得るような「少なくとも一部」を意味すると解釈されるべきである。
一実施形態において、埋め込み型医療用デバイスは管状の医療用デバイスであり、そして、第一のコーティング層は、管腔側面の最大１００％、例えば最大９９％、９５％、９０％、７５％、５０％又は２５％に適用され、且つ、反管腔側面の最大１００％、例えば最大９９％、９５％、９０％、７５％、５０％又は２５％に適用される。好適なことには、管状の医療用デバイスは、ステント又はステント‐グラフトである。
【０１１９】
一実施形態において、第一のコーティング層は医療用デバイスの管腔側面と反管腔側面の全体に適用される。一実施形態において、第二の微粒子コーティング層は医療用デバイスの反管腔側面の全体に適用される。
一実施形態において、第二の微粒子コーティング層は、埋め込み型医療用デバイスの表面積の最大１００％、例えば最大９９％、９５％、９０％、７５％、５０％又は２５％に適用される。
一実施形態において、埋め込み型医療用デバイスは管状の埋め込み型医療用デバイスであり、ここで、第二の微粒子コーティング層が、埋め込み型医療用デバイスの反管腔側面の最大１００％、例えば最大９９％、９５％、９０％、７５％、５０％又は２５％に適用される。
【０１２０】
別の実施形態において、埋め込み型医療用デバイスはステント‐グラフトであり、そして、第一のコーティング層が独立に、ステント‐グラフトの管腔側面及び反管腔側面の最大１００％、例えば最大９９％、９５％、９０％、７５％、５０％又は２５％に適用され、ここで、第二の微粒子コーティング層が、グラフト部材、特にステント部材を直接覆っている又は接触しているグラフト部材の反管腔側面の最大９５％、９０％、７５％、５０％又は２５％に適用される。
【０１２１】
一実施形態において、第一のコーティング層は埋め込み型医療用デバイスの表面積全体（１００％）に適用され、次に、第二の微粒子コーティング層で全体的に上塗りコーティングされる（すなわち、第二のコーティング層もまた、第一のコーティング層で事前にコーティングされた医療用デバイスの表面の１００％に適用される）。
別の実施形態において、埋め込み型医療用デバイスはステント又はステント‐グラフトであり、そして、第一のコーティング層がデバイスの管腔及び反管腔側面の全体に適用され、且つ、第二の微粒子コーティング層が、デバイスの反管腔側面の最大１００％、例えば最大９９％、９５％、９０％、７５％、５０％又は２５％だけに適用される。この実施形態において、好適なことには、デバイスはステント‐グラフトである。
【０１２２】
上記の実施形態及び以下のそれらにおいて、表面積は、多孔性物質で構成されたデバイスを踏まえた多孔度を考慮していない点に注意しなければならない。デバイスの表面が多孔性である場合、表面積に対する多孔度の効果は考慮されない。例えば、管状のグラフトの内面を含んでいる円筒形の管状ｅＰＴＦＥ製血管グラフト（多孔性物質で作られている）の表面積は、２πｒＬ｛式中、ｒはグラフトの内径であり；Ｌは軸の長さであり；そして、πは数字のパイである｝として任意の円筒形状の場合と同様に計算される。
一実施形態において、第二の微粒子コーティング層は、埋め込み型医療用デバイスの反管腔側面の一部だけに適用される。
一実施形態において、第二の微粒子コーティング層は、埋め込み型医療用デバイスの反管腔側面の片端だけに適用される。デバイスが指定された近位及び遠位末端を有する場合、この実施形態において、好適なことには、第二の微粒子コーティング層は埋め込み型医療用デバイスの近位端だけに適用される。デバイスの近位端は、それが埋め込まれた時点でデバイスを通過する血流を考慮することによって指定され得る。埋め込まれた時点で、血液はデバイスの近位端から遠位端へと流れる。
【０１２３】
埋め込み型医療用デバイスが、ステント又はステント‐グラフトなどの管状の医療用デバイスであるときに、一実施形態において、片端（指定されるのであれば近位端）から最大１〜２０ｍｍ、例えば最大２〜１０ｍｍ、例えば最大３〜７ｍｍの反管腔側面の部分が、第二の微粒子コーティング層でコーティングされる。デバイスの末端が不均等、例えば波打った扇形（scalloped）である場合、この距離は、コーティングされるべき末端の一番はずれから計測される。
【０１２４】
第二の微粒子コーティング層を埋め込み型医療用デバイスの近位端だけに適用すると、近位端における血管組織へのパクリタキセルの送達は局在化するが、更に「下流」、すなわち、デバイスの近位端から遠位端の間の血管の長さに沿った、パクリタキセルの移動もまた可能にする。斯かる実施形態において、「上流」への特定の量のパクリタキセルの移動が観察されるだろう。
一実施形態において、第二の微粒子コーティング層は、埋め込み型医療用デバイスの両端、特に埋め込み型医療用デバイスの反管腔側面の両端に適用される。
図９は、デバイスの管腔側面及び反管腔側面を覆う第一のコーティング層、及びデバイスの反管腔側面の両端を覆う第二の微粒子コーティング層を有する管状の埋め込み型医療用デバイスを例示している。
【０１２５】
埋め込み型医療用デバイスがステント又はステント‐グラフトなどの管状の医療用デバイスであるときに、一実施形態において、デバイスの各末端から最大１〜２０ｍｍ、例えば最大２〜１０ｍｍ、例えば最大３〜７ｍｍの反管腔側面の部分が、第二の微粒子コーティング層で独立にコーティングされる。
固定されたヘパリン部分は、哺乳類の血液に接触すると、例えば、血管内の埋め込み型医療用デバイスの管腔側面にコーティングされると、生物適合性及び抗血栓効果を提供する。驚いたことに、固定されたヘパリン部分を有する第一のコーティング層は、医療用デバイスの処理後にも、まだ抗血栓効果を提供する、すなわち、実施例１４で例示されるように、ヘパリン部分の生理活性が、その後のコーティングステップ（第二の微粒子コーティング層の適用）中にも保持される。ヘパリン部分の敏感な性質を考えると、本発明の医療用デバイス、特に第一のコーティング層が治療的有効なヘパリン部分の生理活性を埋め込み後にも保持すると予測できなかった。
【０１２６】
ヘパリン部分の生理活性、特にヘパリンの生理活性は、ヘパリン部分が既知の量のアンチトロンビンＩＩＩ（ＡＴＩＩＩ）（試験方法Ｋに記載のとおり）又は既知の量のヘパリンコファクターＩＩ（ＨＣＩＩ）（試験方法Ｊに記載のとおり）に結合するの能力又は容量を計測することも含め、様々な手段で定量化できる。
一実施形態において、埋め込み型医療用デバイスには、試験方法Ｋによると、埋め込み前に１ｐｍｏｌ／ｃｍ2表面超のＡＴＩＩＩ結合活性がある。別の実施形態において、埋め込み型医療用デバイスには、試験方法Ｋによると、埋め込み前に少なくとも５ｐｍｏｌ／ｃｍ2、例えば少なくとも１０ｐｍｏｌ／ｃｍ2表面などのＡＴＩＩＩ結合活性がある。
【０１２７】
一実施形態において、埋め込み型医療用デバイスには、試験方法Ｊによると、埋め込み前に１ｐｍｏｌ／ｃｍ2表面超のＨＣＩＩ結合活性がある。別の実施形態において、埋め込み型医療用デバイスには、試験方法Ｊによると、埋め込み前に少なくとも５ｐｍｏｌ／ｃｍ2、例えば少なくとも１０ｐｍｏｌ／ｃｍ2表面などのＨＣＩＩ結合活性がある。
一実施形態において、埋め込み型医療用デバイスには、試験方法Ｋによると、パクリタキセルの溶出後に１ｐｍｏｌ／ｃｍ2表面超のＡＴＩＩＩ結合活性がある。別の実施形態において、埋め込み型医療用デバイスには、試験方法Ｋによると、パクリタキセルの溶出後に少なくとも５ｐｍｏｌ／ｃｍ2、例えば少なくとも１０ｐｍｏｌ／ｃｍ2表面などのＡＴＩＩＩ結合活性がある。
【０１２８】
一実施形態において、埋め込み型医療用デバイスには、試験方法Ｊによると、パクリタキセルの溶出後に１ｐｍｏｌ／ｃｍ2表面超のＨＣＩＩ結合活性がある。別の実施形態において、埋め込み型医療用デバイスには、試験方法Ｊによると、パクリタキセルの溶出後に少なくとも５ｐｍｏｌ／ｃｍ2、例えば少なくとも１０ｐｍｏｌ／ｃｍ2表面などのＨＣＩＩ結合活性がある。
一実施形態において、埋め込み型医療用デバイスには、試験方法Ｋによると、試験方法Ｃ‐ＩＩに従った第二の微粒子コーティング層の除去後に１ｐｍｏｌ／ｃｍ2表面超のＡＴＩＩＩ結合活性がある。別の実施形態において、埋め込み型医療用デバイスには、試験方法Ｋによると、試験方法Ｃ‐ＩＩに従った第二の微粒子コーティング層の除去後に少なくとも５ｐｍｏｌ／ｃｍ2、例えば少なくとも１０ｐｍｏｌ／ｃｍ2表面などのＡＴＩＩＩ結合活性がある。
【０１２９】
一実施形態において、埋め込み型医療用デバイスには、試験方法Ｊによると、試験方法Ｃ‐ＩＩに従った第二の微粒子コーティング層の除去後に１ｐｍｏｌ／ｃｍ2表面超のＨＣＩＩ結合活性がある。別の実施形態において、埋め込み型医療用デバイスには、試験方法Ｊによると、試験方法Ｃ‐ＩＩに従った第二の微粒子コーティング層の除去後に少なくとも５ｐｍｏｌ／ｃｍ2、例えば少なくとも１０ｐｍｏｌ／ｃｍ2表面などのＨＣＩＩ結合活性がある。
ヘパリン部分の生理活性はまた、試験方法Ｂに記載の血液接触活性法を使用しても実証できる。実施例２０に示されたとおり、本発明のステント‐グラフトは、固定されたヘパリンの第一のコーティング層を有するが、第二の微粒子コーティング層がない基準ステント‐グラフトと比較して同様の保存を有し、第二の微粒子コーティング層の適用が第一のコーティング層の抗血栓性に顕著な形で悪影響を与えることなく、それは驚くべきことに、ヘパリンの敏感な性質を与えた。
更に、第一のコーティング層だけを有する基準ステント‐グラフト（左側）と比較して、本発明のステント‐グラフト（右側）の染色を示す図５で例示されるように、第二の微粒子コーティング層の適用は、固定されたヘパリンの第一のコーティング層の一定のコーティングに影響を与えない（実施例２２）。
【０１３０】
よって、標的組織に埋め込まれると、本発明の医療用デバイスは凝固又は血栓形成を予防できる。
血液に接触していないときでさえ、第一のコーティング層が、Lappegard, K. T 2008, J. Biomed. Mater. Res. Vol 87, 129-135（参照によって本明細書中に援用する）によって実証されるように（異種表面に相当する）移植片の埋め込みに関係する好ましくない効果を低減する生体適合性表面を提供することが予想される。よって、パクリタキセルの埋め込み及び溶出（及び有機添加物、すなわち、第二の微粒子コーティング層の消散）後に、残存している表面が、例えば、試験方法Ｏを使用して実証されるように、生体適合性であることが予想される。
【０１３１】
よって、実施例１４及び１９で例示されるように、本発明の埋め込み型医療用デバイスは二重活性を呈する‐第二の微粒子コーティング層中の溶出可能なパクリタキセルが治療効果、典型的には抗再狭窄効果を提供する一方で、固定されたヘパリンを含む第一のコーティング層は抗血栓効果を呈する。第一のコーティング層は、生体適合性表面を有する埋め込み型医療用デバイスを更に提供する。
実施例８に示されているように、本発明の埋め込み型医療用デバイスは滅菌に対して安定している。特に、パクリタキセルは、第二の微粒子コーティング層中に処方されたとき、滅菌工程を実質的に無傷で乗り切る。
【０１３２】
好適な滅菌工程としては、これだけに限定されるものではないが、エチレンオキシド、蒸気過酸化水素、プラズマ相過酸化水素、乾熱、オートクレーブ蒸気滅菌、二酸化塩素滅菌、ガンマ線滅菌又は電子ビーム滅菌を使用した滅菌が挙げられる。一実施形態において、パクリタキセルは、エチレンオキシド滅菌、蒸気過酸化水素滅菌、プラズマ相過酸化水素滅菌又は電子ビーム滅菌後に実質的に無傷である。一実施形態において、治療薬は、エチレンオキシド滅菌、蒸気過酸化水素滅菌、プラズマ相過酸化水素滅菌又は電子ビーム滅菌（或いは、実際には複数の滅菌方法）に対して安定である。滅菌の方法は、医療用デバイス材料の組成に基づいて典型的には選択され、そして、コーティング成分、例えばｅＰＦＴＥはガンマ放射線で分解される。エチレンオキシドを使用した滅菌は、例えばステントやステント‐グラフトなどの埋め込み型医療用デバイスのための最も一般的に利用され、実績のある、そして、容易に利用可能な滅菌技術である。よって、一実施形態において、パクリタキセルは、エチレンオキシドを使用した滅菌後に実質的に無傷である。別の実施形態において、パクリタキセルはエチレンオキシド滅菌に対して安定している。
【０１３３】
パクリタキセルは、劣化することなく滅菌後に２０％未満の分解、例えば（重量によって）１５％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％又は１％未満の分解を呈するのであれば、滅菌後に実質的に無傷であると規定されるか又は滅菌に対して安定していると見なされる。パクリタキセルは、それが滅菌後に化学的に変更されるのであれば、分解されると見なされる。逆に、第二の微粒子コーティング層中のパクリタキセルは、コーティングが滅菌後にパクリタキセルの化学的含有量の少なくとも８０％、例えば滅菌後にパクリタキセル化学的含有量（すなわち、重量）の少なくとも８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は実質的にすべて保持しているのであれば、滅菌後に実質的に無傷であると規定されるか又は滅菌に対して安定していると見なされる。
【０１３４】
滅菌後のコーティング中の無傷なパクリタキセルの量は、例えば、評価方法の項に記載のＵＰＬＣ法を使用した、超高性能液体クロマトグラフィー（ＵＰＬＣ）などの高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）技術を使用して、及び／又はマススペクトル法によって決定できる。コーティング中のパクリタキセルの特定の定量法は、試験方法Ｃ‐Ｉ及びＣ‐ＩＩに提供されている。
具体的な評価方法である「試験方法Ｄ」、「試験方法Ｅ」、「試験方法Ｆ」及び「試験方法Ｇ」は、それぞれエチレンオキシド、電子ビーム、蒸気過酸化水素、及びプラズマ過酸化水素を使用した滅菌に対する安定性を評価するために試験方法の項に提供されている。
一実施形態において、パクリタキセルの化学的含有量の少なくとも８０％、例えば少なくとも８５％、９０％又は９５％（試験方法Ｃ‐ＩＩを使用して測定した）が、試験方法Ｄを使用した滅菌後に維持される。
【０１３５】
本発明の一態様において、滅菌、例えばエチレンオキシド滅菌された本明細書中に記載の埋め込み型医療用デバイスが提供される。
実施例８に示されたとおり、試験方法Ｄに従ってエチレンオキシドを使用した滅菌後に、実施例３ａ、３ｂ、及び３ｃに従ってコーティングした本発明のステント‐グラフトについて実質的に分解されていないパクリタキセルが観察された。ステント‐グラフトを操作し、続いて滅菌にかけたとき、実施例９に記載のとおり、パクリタキセル活性のいずれの損失も操作ステップに起因すると考えられた。本発明のステント‐グラフトのパクリタキセル放出特性を比較した実施例１０と１１はまた、ステント‐グラフトがエチレンオキシドによる滅菌によって影響を受けないことも示している。
【０１３６】
治療方法
本明細書中で先に記載した埋め込み型医療用デバイスは、薬剤療法に有用である。
本発明の一態様において、ヒト又は動物の体内で組織を処置するのに使用するための、本明細書中で先に記載した埋め込み型医療用デバイスが提供される。処置されるべき組織としては、例えば血管、尿路、腸管、鼻腔、神経シース、椎骨間領域、骨小腔、食道、子宮内の空間、膵管や胆管、直腸、及び血管グラフト、ステント、プロテーゼ、又は他のタイプの医療用移植片が埋め込まれた以前に介入された体内空間といった任意の体腔、空間、又は（単数若しくは複数の）中空臓器経路が挙げられる。
【０１３７】
本明細書中に記載の埋め込み型医療用デバイスは、咬合した体内経路への開通性を回復するための膨張デバイスとして、経路若しくは空間を選択的に塞ぐか若しくは埋めるための手段を送達する閉塞デバイスとして、並びにカテーテルの様な経管的装置のセンタリング機構として、血管から、例えば塞栓や血栓などの障害物の除去に有用である。
【０１３８】
本発明の一態様において、人体の血管における狭穿又は再狭窄の予防又は処置に使用するための、本明細書中で先に記載した埋め込み型医療用デバイスを提供する。本発明の他の側面において、以前に配置した溶出構築物が失敗した人体の血管における狭穿又は再狭窄の予防又は処置に使用するための本明細書中で先に記載した埋め込み型医療用デバイスを提供する。別の実施形態において、本明細書中で先に記載した埋め込み型医療用デバイスは、例えば腎臓透析中に使用される、動静脈接触部位を確立又は維持するのに使用され得る。更なる実施形態において、血管グラフト又はステント‐グラフトは、閉塞又は血管狭窄領域の周りの血流を方向転換するのに使用されてもよい。別の実施形態において、ステント‐グラフトは、病変血管領域に開通性を復元するか、又は動脈瘤を除去するために留置されてもよい。更に別の実施形態において、ステントデバイスは、血管形成術後に病変血管を補強するために留置されてもよい。
【０１３９】
一実施形態において、本明細書中で先に記載した前記埋め込み型医療用デバイスは、末梢動脈の閉塞性疾患を患っている患者の経皮経管的血管形成術（ＰＴＡ）に使用されてもよい。
本発明の他の側面において、狭穿又は再狭窄の予防又は処置するための方法であって、人体内の前記血管内に本明細書中で先に記載した医療用デバイスを埋め込むことを含む方法を提供する。
埋め込み型医療用デバイスの第二の微粒子コーティング層は、単独添加のパクリタキセルを含んでいる。送達されたパクリタキセルの用量は、塗布面積、デバイスが標的組織と接触していた時間、及びコーティング内のパクリタキセルの量を含めた多くの要因に依存する。好適なことには、医療用デバイスは、平均０．１〜１０μｇ／ｍｍ2のパクリタキセル、例えば０．２〜８μｇ／ｍｍ2、０．５〜５μｇ／ｍｍ2、又は１〜４μｇ／ｍｍ2など、例えば０．５μｇ／ｍｍ2、１μｇ／ｍｍ2、２μｇ／ｍｍ2、３μｇ／ｍｍ2又は４μｇ／ｍｍ2のパクリタキセルを含んでいる第二の微粒子コーティング層を有する。
【０１４０】
見掛け上のコーティング表面積は、多孔性基板材料の多孔度を考慮していない。基板材料が多孔性である場合、表面積に対する多孔度の効果は、これらの計算に関して考慮されない。例えば、管状のグラフトの内面を含んでいる第二の微粒子コーティング層を備えた円筒形の管状ｅＰＴＦＥ製血管グラフト（多孔性物質で作られている）の見掛け上の表面積は、２πｒＬ｛式中、ｒはグラフトの内径であり；Ｌは軸の長さであり；そして、πは数字のパイである｝として任意の円筒形状の場合と同様に計算される。ｅＰＴＦＥ及び、例えば編まれた、織られた又は組まれたポリエステルなどの同様の多孔性物質の多孔性の性質、並びに表面積に対するそれらの効果が、本明細書中に説明されていない点に注意することが重要である。従って、分析のために四角く切り出された多孔性及び無孔性の基板材料の両方が、長さに幅を掛けた表面積を有した。
【０１４１】
本発明の埋め込み型医療用デバイスは、典型的には、合計で０．０２５〜３００ｍｇのパクリタキセル、例えば合計で０．０２５〜２５０ｍｇ、０．０５〜２００ｍｇ、０．０５〜１５０ｍｇ、０．０５〜１００ｍｇ、０．１〜９０ｍｇ、０．１〜８０ｍｇ、０．１〜７０ｍｇ、０．１〜６０ｍｇ、０．１〜５０ｍｇ、０．１〜４０ｍｇ、０．１〜３０ｍｇ、０．２〜２０ｍｇ、０．２〜１０ｍｇ又は０．２〜５ｍｇ、例えば０．１〜３００ｍｇ、０．１〜２５０ｍｇ、０．１〜２００ｍｇ、０．１〜１５０ｍｇ、０．１〜１００ｍｇ、０．１〜９０ｍｇ、０．１〜８０ｍｇ、０．１〜７０ｍｇ、０．１〜６０ｍｇ、０．１〜５０ｍｇ、０．１〜４０ｍｇ、０．１〜３０ｍｇ、０．２〜２０ｍｇ、０．２〜１０ｍｇ又は０．２〜５ｍｇのパクリタキセルを含んでいる。
【０１４２】
一実施形態において、コーティング医療用デバイスはステントであり、そして、該コーティング層は合計で１０ｍｇのパクリタキセルを含んでいる。一実施形態において、コーティング医療用デバイスはステント‐グラフトであり、そして、該コーティング層は合計で１０ｍｇのパクリタキセルを含んでいる。一実施形態において、コーティング医療用デバイスはステント‐グラフトであり、そして、該コーティング層は合計で２５ｍｇのパクリタキセルを含んでいる。
一実施形態において、本発明の医療用デバイス上に最初に添加したパクリタキセルの少なくとも８０％（重量による）が、埋め込みの２８日後にはデバイスから溶出している。別の実施形態において、本発明の医療用デバイス上に最初に添加したパクリタキセルの少なくとも５０％（重量による）が、埋め込みの２４時間後にはデバイスから溶出している。
【０１４３】
本発明の更なる実施形態
以下の：
固定されたヘパリン部分を含んでいる第一のコーティング層；及び
溶出可能なパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層、
を含むコーティングを有する表面を備えた埋め込み型医療用デバイスであって、
ここで、該第一のコーティング層が、該医療用デバイスの管腔側面の一部及び反管腔側面の一部に適用され；且つ、
ここで、該第二の微粒子コーティング層の少なくとも一部が、該第一のコーティング層の少なくとも一部に接触している、埋め込み型医療用デバイス。
【０１４４】
以下の：
固定されたヘパリン部分を含んでいる第一のコーティング層；及び
溶出可能なパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層、
を含むコーティングを有しているステント又はステント‐グラフトであって、
ここで、該第一のコーティング層が、該ステント又はステント‐グラフトの管腔側面の一部及び反管腔側面の一部に適用され、及び該第二の微粒子コーティング層が、該ステント又はステント‐グラフトの反管腔側面の一部だけに適用され；且つ
ここで、該第二の微粒子コーティング層の少なくとも一部が、該第一のコーティング層の少なくとも一部に接触している、ステント又はステント‐グラフト。
【０１４５】
以下の：
固定されたヘパリン部分を含んでいる第一のコーティング層；及び
溶出可能なパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層、
を含むコーティングを有しているステント又はステント‐グラフトであって、
ここで、該第二の微粒子コーティング層の少なくとも一部が、該第一のコーティング層の少なくとも一部に接触しており；且つ
ここで、該有機添加物が、ｐ‐アミノ安息香酸、サッカリン、アスコルビン酸、メチルパラベン、カフェイン、サリチル酸カルシウム、ペンテト酸、クレアチニン、エチル尿素、アセトアミノフェン、アスピリン、テオブロミン、トリプトファン、コハク酸、アジピン酸、グルタル酸、テオフィリン、及びサッカリンナトリウムから成る一覧から独立に選択される、ステント又はステント‐グラフト。
【０１４６】
以下の：
固定されたヘパリン部分を含んでいる第一のコーティング層；及び
溶出可能なパクリタキセル、並びにカフェイン及びコハク酸から選択される少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層、
を含むコーティングを有しているステント又はステント‐グラフトであって、
ここで、該第二の微粒子コーティング層の少なくとも一部が、該第一のコーティング層の少なくとも一部に接触している、ステント又はステント‐グラフト。
【０１４７】
以下の：
固定されたヘパリン部分を含んでいる第一のコーティング層；及び
溶出可能なパクリタキセル、並びにカフェイン及びコハク酸から選択される少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層、
を含むコーティングを有する埋め込み型医療用デバイスであって、
ここで、該第二の微粒子コーティング層が、該第一のコーティング層の少なくとも一部の最上部に適用される、埋め込み型医療用デバイス。
【０１４８】
以下の：
固定されたヘパリン部分を含んでいる第一のコーティング層；及び
溶出可能なパクリタキセル、並びにカフェイン及びコハク酸から選択される少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層、
を含むコーティングを有しているステント又はステント‐グラフトであって、
ここで、該第二の微粒子コーティング層が、該第一のコーティング層の少なくとも一部の最上部に適用される、ステント又はステント‐グラフト。
【０１４９】
以下の：
固定されたヘパリン部分を含んでいる第一のコーティング層；及び
溶出可能なパクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を含んでいる第二の微粒子コーティング層、
を含むコーティングを有しているステント又はステント‐グラフトであって、
ここで、該第一のコーティング層が、該ステント又はステント‐グラフトの管腔側面の全体及び反管腔側面の全体に適用され；及び該第二の微粒子コーティング層が、該ステント又はステント‐グラフトの反管腔側面の一部だけに適用され；且つ
ここで、該第二の微粒子コーティング層の少なくとも一部が、該第一のコーティング層の少なくとも一部に接触している、ステント又はステント‐グラフト。
【０１５０】
以下のステップ：
ｉ）
ａ）医療用デバイスを処理して、高分子コーティグ層を提供し；次に
ｂ）前記高分子層をヘパリン部分と反応させて、ヘパリン部分を高分子コーティグ層に固定し；更に
ｉｉ）
Ａ）パクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を溶媒中に溶解して、溶液を形成し；次に
Ｂ）該溶液を埋め込み型医療用デバイスの適用し；次に
Ｃ）溶媒を留去すること、
を含み、
ここで、該第二の微粒子コーティング層の少なくとも一部が、該第一のコーティング層の少なくとも一部に接触している、コーティングされた埋め込み型医療用デバイスを調製するための方法。
【０１５１】
以下のステップ：
ｉ）
ａ）医療用デバイスを処理して、高分子コーティグ層を提供し；次に
ｂ）前記高分子層をヘパリン部分と反応させて、ヘパリン部分を高分子コーティグ層に固定し；更に
ｉｉ）
Ａ）パクリタキセル及び少なくとも１つの有機添加物を溶媒中に溶解して、溶液を形成し；次に
Ｂ）該溶液をステップ（ｉ）にて覆われた埋め込み型医療用デバイスの少なくとも一部に適用し；次に
Ｃ）溶媒を留去すること、
を含むコーティングされた埋め込み型医療用デバイスを調製するための方法。
【０１５２】
利点
本発明による移植された医療用デバイスは、少なくともいくつかの実施形態において、以下のメリット又は利点のうちの１つ若しくは複数を有することが予想される：
・試験方法Ｈ‐Ｉ又は試験方法Ｉ‐Ｉを使用して計測した場合に、圧縮及び拘束後のパクリタキセルの損失が最小限であり、それによって、パクリタキセル投薬量を利用するのを可能にするような、良好なコーティング接着（特に第二の微粒子コーティング層）；
・試験方法Ｈ‐Ｉ又は試験方法Ｉ‐Ｉを使用して計測した場合に、留置中のパクリタキセルの損失が最小限であり、それによって、パクリタキセル投薬量を利用するのを可能にするような、良好なコーティング接着（特に第二の微粒子コーティング層）；
・良好なコーティング耐用年数（良好なコーティング接着で示したとおり）；
【０１５３】
・固定されたヘパリン部分を含まないコーティング層、例えばポリアミンのコーティング層などの高分子のみのコーティング層、又はコーティング層をもたないデバイス、又はただ洗浄しただけのデバイスにコーティングされた第二の微粒子コーティング層と比較して、固定されたヘパリンの層（第一のコーティング層）の上にコーティングするとき、第二の微粒子コーティング層は改善された接着性を呈すると予想される；
・固定されたヘパリン部分を含んでいる第一のコーティング層は、「湿潤」又は「浸漬」表面として機能し（すなわち、液体移行に対して低い抵抗性を有する表面に提供する）、そしてそれは、第二の微粒子コーティング層が固定されたヘパリン部分を含んでいる第一のコーティング層上に適用されるとき、平滑且つ平坦な、結果として生じるコーティング層を提供する；
【０１５４】
・（例えば、ＳＥＭ視覚化技術を使用して測定した場合に）操作後でさえ、平滑且つ平坦なコーティング表面化；
・好適なパクリタキセル放出特性、特に、例えば試験方法Ａで計測した場合の、標的組織との接触による均一なパクリタキセルの組織への移行及び分配；
・医療用デバイスが埋め込まれた時点での、標的組織内へのパクリタキセルの徐放性；
・例えば、試験方法Ｄ（エチレンオキシド滅菌）、試験方法Ｅ（電子ビーム殺菌）、試験方法Ｆ（蒸気過酸化水素滅菌）又は試験方法Ｇ（プラズマ過酸化水素滅菌）を使用して計測されるような、滅菌に対する良好なコーティング（特に第二の微粒子コーティング層、特にその中のパクリタキセル）の安定性；
【０１５５】
・埋め込み後の良好な抗血栓活性、そしてそれは、第二の微粒子コーティング層放出後にも維持される；（例えば、試験方法Ｊ又は試験方法Ｋの後）；
・埋め込み後の第二の微粒子コーティング層の最終的な完全な分解及び／又は消散；
・埋め込み型医療用デバイスへのパクリタキセルの比較的低い初期添加量（用量）；
・例えば（例えば、試験方法Ｏ後の）炎症を軽減する能力によって証明される、第二の微粒子コーティング層の分解及び／又は消散の後ですら良好な生物学的適合性。
本発明は、指示した基及び先に引用した基の実施形態のすべての組み合わせを包含する。
本明細書中で言及したすべての特許及び特許出願は、参照によりその全体を本明細書中に援用する。
【０１５６】
本明細書と以下の特許請求の範囲を通して、特に明記しない場合は、用語「含む（comprise）」及びその変形である「含む（「comprises」及び「comprising」）」は、記載された整数、工程、整数群又は工程群を含むことを示すが、他の整数、工程、整数群又は工程群を排除するものではない。
【０１５７】
定義と略語
ＤＳＣ            示差走査熱量計測
ｅＰＴＦＥ        延伸ポリテトラフルオロエチレン
ｈ                時間
ＨＰＬＣ          高速液体クロマトグラフィー
ＮＤ              測定せず
Ｎ／Ｔ            試験せず
ＰＡＢＡ          ｐ‐アミノ安息香酸
ＰＥＧ            ポリエチレングリコール
ＰＢＳ            リン酸緩衝生理食塩水
ＰＬＧＡ          ポリ（乳酸‐コ‐グリコール）酸
ＰＶＰ            ポリビニルピロリドン
ＳＥＭ            走査電子顕微鏡法
ＵＰＬＣ          超高性能液体クロマトグラフィー
ＰＴＸ            パクリタキセル
【実施例】
【０１５８】
一般的な手法
化学物質
無水結晶パクリタキセルをIndenaから購入した。パクリタキセル二水和物をSigma-Aldrichから購入できる。Patent Blue VをFlukaから購入した。無水カフェインＵＳＰ９８．５〜１０１．０％をSpectrum chemicals MFG. CORPから購入した。コハク酸ＡＣＳ試薬≧９９．０％をSigma-Aldrichからを購入した。
【０１５９】
溶媒
アセトン（＜０．５％の水を含んでいる「無水」）をSigmaから購入した。水は使用前にイオンを除去した。
材料
直径５ｍｍ及び長さ６ｍｍ、並びに直径２５ｍｍ及び長さ２５ｍｍの寸法を有する、固定されたヘパリンコーティングを含んでいるステント‐グラフトを、W. L. Gore & Associates Inc.から得た。
直径５ｍｍ及び長さ２５ｍｍの寸法を有する固定されたヘパリンコーティングを含んでいないステント‐グラフトを、W. L. Gore & Associates Inc.から得た。ブタの頚動脈を、Lovsta Kott AB（Uppsala, Sweden）から得た。
【０１６０】
評価方法
各方法によって評価されるパラメーターを、括弧内に与える。
示差走査熱量計測（ＤＳＣ）分析（ピーク融解吸熱測定）
固形サンプルをＤＳＣ皿に加える。サンプルの質量を計量し、そして皿をピンホールリッドで密封した。サンプルを、２５℃にて平衡化し、１００℃まで１０℃／分で昇温し、１００℃にて２０分間滞留し（すべての痕跡溶媒、特にアセトン又はアセトン：水を取り除くため）、２２５℃まで１０℃／分で昇温することによってＤＳＣ（モデル#Q2000、TA Instruments）を使用して調査する。
【０１６１】
超高性能液体クロマトグラフィー（ＵＰＬＣ）分析（パクリタキセル濃度）
ＵＰＬＣ分析を、Ｗａｔｅｒｓ装置（モデル#ACQUITY Ｈ‐クラス）を使用して実施する。パクリタキセルの識別を、パクリタキセルの保持時間によって決定する。パクリタキセルの濃度は統合ピーク面積に正比例していて、そしてそれを外部標準によって決定した。サンプルを、サンプル希釈剤中に溶解するか又は抽出溶媒中に沈め、そして１５分間、超音波処理する。パクリタキセル標準を、サンプル希釈剤中に溶解した純粋なパクリタキセルの段階希釈によって調製する。すべてのサンプル及び標準は、調製中、光から保護する。ＵＰＬＣクロマトグラフィーパラメータ：フェニルカラム（１．７ｕｍ、２．１×５０ｍｍ）；移動相 水：アセトニトリル；流量 ０．７ｍｌ／分；ランタイム １２分；注入体積 ３μｌ；パージ溶媒 アセトニトリル：水（５：９５ ｖ／ｖ）；洗浄溶媒 イソプロパノール；カラム温度 ３５℃；ＵＶ検出器波長 ２２７．０±１．２ｎｍ；サンプル速度 ２０ポイント／秒。
エネルギー分散Ｘ線分光分析を用いた走査電子顕微鏡法（コーティングのコーティング率及び均一性）
本発明のコーティングデバイスのＳＥＭ画像を、Hitachi TM3000テーブルトップＳＥＭを使用してキャプチャする。
【０１６２】
深さ方向分析を含むＸ線光電子分光法（ＸＰＳ）（コーティングの厚み）
Ｘ線光電子分光法（ＸＰＳ又はＥＳＣＡ）は、固対材料の非破壊の化学分析を提供する最も広く用いられている表面のキャラクタリゼーション法である。サンプルを、サンプル表面の上端１〜１０ｎｍから放出されるべき光電子を発生させる単一エネルギーのＸ線で照射する。電子エネルギー分析は、光電子の結合エネルギーを評価する。水素及びヘリウムを除く全ての元素の定性的及び定量的な分析が可能であり、検出限界は約０．１〜０．２アトミックパーセントである。分析のスポットサイズは１０μｍ〜１．４ｍｍの範囲である。元素及び化学状態のマッピングを用いて性状の表面イメージを作製することも可能である。深さ方向分析は、角度依存測定を用いて表面の上端１０ｎｍ以内の非破壊分析、又はイオンエッチング等の破壊分析を用いてコーティング深さ全幅について得ることが可能である。
【０１６３】
試験方法
試験方法Ａ‐パクリタキセルのインビトロにおける組織移行及び取り込み試験
ステント又はステント‐グラフトなどのコーティングした埋め込み型医療用デバイスを、Liao （D. Liao et al., Biochem Biophys Res Commun, 372(4): 668-673, 2008. 「Vascular smooth cell proliferation in perfusion culture of porcine carotid arteries」）によって基本的に記載されたインビトロモデルにおいてステント‐グラフト表面から血管組織にパクリタキセルを移行するそれらの能力について調査する。埋め込み型医療用デバイスがステント又はステント‐グラフトであるときに使用され得る手順は、以下の通りである。コーティングステント又はステント‐グラフトを、それぞれ試験方法Ｈ‐Ｉ又はＩ‐Ｉに従って直径方向に圧縮する。圧縮したステント又はステント‐グラフトを、血管の中央までブタ血管の近位端に挿入し、そして、それぞれ試験方法Ｈ‐ＩＩ又はＩ‐ＩＩに従ってそれらの拡張状態に留置する。Ｌｕｅｒ金具を、ワックス糸を用いて血管の近位端及び遠位端に取り付ける。チューブを近位及び遠位の金具に接続し、そして、血管を６０ｍｌ／分にて２４時間、３７℃にてＰＢＳでフラッシュする。ステント又はステント‐グラフトを取り出し、そして評価方法に記載のＵＰＬＣ技術を使用して、パクリタキセル含有量について血管を分析した。
【０１６４】
試験方法Ｂ‐血液接触評価（血小板の損失）
本発明の埋め込み型デバイス、特に第一の層と第二の層の両方でコーティングした埋め込み型デバイスに対して、その抗血栓性特性を評価するために血液接触評価を実施する。埋め込み型医療用デバイスがステント‐グラフトであるときに用いられ得る手順は以下の通りである。まず、ステント‐グラフトを０．１５Ｍの生理的食塩溶液で１５分間洗浄して完全に濡れた状態を確保する。濡れたステント‐グラフトを、全血が入ったヘパリン化ＰＶＣチューブ内に入れ、２０ｒｐｍの循環ループで回転させた（代表的な手順に関してEkdahl K. N., Advances in Experimental Medicine and Biology, 2013, 735, 257-270を参照のこと）。未処理の血液からの血小板と、そして、チューブから回収した血液からの血小板とを、細胞計数器でカウントして、血小板の損失を計測する。血小板の多大な損失はデバイス、特に第一のコーティング層の乏しい抗血栓性性能を示す。逆に、血小板の最小限の損失は、抗血栓性デバイス、特に抗血栓性の第一のコーティング層を示す。
陰性対照は、全くデバイスが入っていないヘパリン化ＰＶＣチューブの空のループである。これはインキュベートした血液が、最小限の血小板の損失を実証するだけでなくてはならない抗血栓性対照を表す。陽性対照は、全くデバイスの入っていない非ヘパリン化ＰＶＣの空のループである。これは血小板の多大な損失が観察されなければならない血栓性対照を表す。対照は、実験と血液の特質を確実にするために含まれている。
【０１６５】
試験方法Ｃ‐操作後の第二の微粒子コーティング層中のパクリタキセル含有量の決定
これらの試験は、コーティングデバイス（特に第二の微粒子コーティング層）上のパクリタキセル量を測定できるようにする。デバイス操作前後のデバイス上のパクリタキセル量を比較することによって、コーティング、特に第二の微粒子コーティング層の耐用性を評価する。
【０１６６】
試験方法Ｃ‐Ｉ‐重量
コーティングデバイスを、操作（例えば、試験方法Ｈ又はＩによる操作）前後に計量する。そのため、操作中に失われた第二の微粒子コーティング層の重量を決定できる。操作前のコーティング組成が知られている場合（例えばここで、第二の微粒子コーティング層はパクリタキセル及び単独の有機添加物から成り、且つ、コーティング中のそれぞれの存在量（及び分子量）が知られている）、次に、パクリタキセルの重量が損失を、損失パクリタキセルの％及びデバイス上の残存パクリタキセルの％のように計算できる。
【０１６７】
試験方法Ｃ‐ＩＩ‐抽出
デバイスを（例えば、試験方法Ｈ又はＩに従って）操作し、次に、操作後にデバイス（第二の微粒子コーティング層）上に残存したパクリタキセルを、酸性化メタノール（５ｍＬのメタノール中に０．２ｖ％の酢酸）にデバイスを１５分間浸すことによって抽出する。パクリタキセル含有メタノール溶液を、ＵＰＬＣ技術（評価方法に記載）を使用して評価して、パクリタキセル含有量を決定する。これは操作前のデバイス上のパクリタキセルの既知の添加量、及び％パクリタキセル損失、及びデバイス上に残存しているパクリタキセルの％を比較し得る。この方法はまた、（操作ステップなしに）第二の微粒子コーティング層のパクリタキセルが「溶出可能」であると見なされる場合、測定するために使用することもできる。
【０１６８】
試験方法Ｄ‐エチレンオキシドに対する安定性
本発明の埋め込み医療用デバイスを、通気性ポリエチレン袋（例えば、タイベック製の袋）中に入れ、そして、５０℃及び６０％の相対湿度にてプレコンディショニングに少なくとも１２時間晒し、続いて３６６ｍＢａｒの圧力及び５０℃にてエチレンオキシドに２時間晒す。次に、チャンバーを５０℃にて少なくとも１０時間脱気する。エチレンオキシドによる滅菌は、Synergy Health Ireland Ltd.にて実施してもよい。
滅菌後に、デバイスのパクリタキセル含有量を、評価方法の項に記載のＵＰＬＣ定量化を使用して評価する（デバイス抽出による、すなわちデバイス全体の抽出溶媒中への液浸）。各デバイスに関しては、滅菌後のパクリタキセル回収パーセンテージを、滅菌前にデバイスに添加した理論上のパクリタキセル量によって、抽出されたパクリタキセル量を標準化することによって計算した。
【０１６９】
試験方法Ｅ‐電子ビーム滅菌に対する安定性
本発明の埋め込み型医療用デバイスを滅菌する更なる方法は電子ビーム滅菌である。デバイスを、通気性のポリエチレン袋（例えば、タイベック製の袋）の中に入れ、SterigenicsのInternational, Inc. （Deerfield, Illinois）などの商業的殺菌プロバイダーを使用して、１５〜４０ｋＧｒａｙの線量を周囲条件下で照射する。電子ビーム滅菌後に、デバイスのパクリタキセル含有量を、試験方法Ｃ‐ＩＩについて記載したように評価する。
【０１７０】
試験方法Ｆ‐蒸気過酸化水素滅菌に対する安定性
本発明の埋め込み型医療用デバイスを滅菌する更なる方法は蒸気過酸化水素滅菌である。デバイスを、通気性のポリエチレン袋（例えば、タイベック製の袋）の中に入れ、製造業者の推奨するプロトコールに従って、ＶＨＰ‐ＭＤ８８０システムなどの市販の滅菌チャンバー（Steris Corp., Mentor, Ohio）を使用して蒸気過酸化水素に晒す。蒸気過酸化水素滅菌後に、デバイスのパクリタキセル含有量を、試験方法Ｃ‐ＩＩについて記載したように評価する。
【０１７１】
試験方法Ｇ‐プラズマ過酸化水素滅菌に対する安定性
本発明の埋め込み型医療用デバイスを滅菌する更なる方法はプラズマ相過酸化水素滅菌である。埋め込み型医療用デバイスを、通気性のポリエチレン袋（例えば、タイベック製の袋）の中に入れ、製造業者の推奨するプロトコールに従って、Ｓｔｅｒｒａｄ １００ＮＸシステムなどの市販の滅菌チャンバー（Advanced Sterilization Products, Irvine, California）を使用してプラズマ相過酸化水素に晒す。
プラズマ相過酸化水素滅菌後に、デバイスのパクリタキセル含有量を、試験方法Ｃ‐ＩＩについて記載したように評価する。
【０１７２】
試験方法Ｈ‐Ｉ、Ｈ‐ＩＩ、Ｉ‐Ｉ、及びＩ‐ＩＩ‐ステント及びステント‐グラフトの操作
（例えば、典型的な製造工程と次の埋め込み中の）ステント又はステント‐グラフトに対する操作の影響を、例えば、操作の前後にステント又はステント‐グラフト全体の重量、或いは、（試験方法Ｃ‐Ｉ又はＣ‐ＩＩを使用した）操作の前後にステント又はステント‐グラフトのパクリタキセル量を比較することによって評価できる。ステントを試験方法Ｈ‐Ｉ又は試験方法Ｈ‐Ｉに続いて試験方法Ｈ‐ＩＩに従って、ステント‐グラフトを試験方法Ｉ‐Ｉ又は試験方法Ｉ‐Ｉに続いて試験方法Ｉ‐ＩＩに従って操作した。
【０１７３】
試験方法Ｈ‐Ｉ‐ステントの圧縮と拘束
ステントを、直径方向に自己拡張するステント及びステント‐グラフトの当業者に既知の手段を使用して３．３６ｍｍの外径まで圧縮する。試験方法Ｈ‐ＩＩに従って、いったん圧縮すると、ステントを３．６ｍｍの内径有する拘束チューブ内に圧縮した状態で拘束する。
【０１７４】
試験方法Ｈ‐ＩＩ‐ステントの留置
ステントを、プッシュロッドを使用して封じ込めチューブから留置する。ステントを封じ込めチューブから押し出すとき、ステントは封じ込めチューブ内面をはぎ取る。
試験方法Ｉ‐Ｉ‐ステント‐グラフトの圧縮と拘束
ステント‐グラフトを、直径方向に自己拡張するステント‐グラフトの当業者に既知の手段を使用して３．０ｍｍの外径まで圧縮する。試験方法Ｉ‐Ｉに従って、いったん圧縮すると、ステント‐グラフトを３．０ｍｍの内径有する拘束チューブ内に圧縮した状態で拘束する。
【０１７５】
試験方法Ｉ‐ＩＩ‐ステント‐グラフトの留置
ステントを、プッシュロッドを使用して封じ込めチューブから留置する。ステントを封じ込めチューブから押し出すとき、ステントは封じ込めチューブ内面をはぎ取る。
試験方法Ｊ‐ＨＣＩＩ結合活性によるヘパリン部分生理活性の計測（定量的なヘパリン機能）
【０１７６】
デバイス、特に固定したヘパリン部分を含んでいる第一のコーティング層の、ヘパリン生理活性を、Larsen M.L. , et al., in "Assay of plasma heparin using thrombin and the chromogenic substrate H-D-Phe-Pip- Arg-pNA (S- 2238)." Thromb Res 13:285-288 (1978)及びPasche B., et al., in "A binding of antithrombin to immobilized heparin under varying flow conditions." Artif. Organs 1991 ; 15:281 - 491)によって記載のアッセイを使用して既知数のヘパリンコファクターＩＩ（ＨＣＩＩ）に結合するヘパリン部分の能力又は容量を計測することによって、ＷＯ２００９／０６４３７２（Gore Enterprise Holdings, Inc.；参照によって本明細書中に援用する）に従って計測する。結果をデバイスの表面の見掛け上の平方センチメートルあたりに結合したヘパリンコファクターＩＩ（ＨＣＩＩ）のピコモル単位で表す（ｐｍｏｌ ＨＣＩＩ／ｃｍ2デバイス表面）。見掛け上のデバイス表面積は、複数の覆われた表面も、多孔性物質で構成されたデバイスも多孔度を考慮していない。デバイスの表面が多孔性であっても、表面積への多孔度の効果はこれらの計算には考慮されない。例えば、管状のグラフト内面を含む基板材料にヘパリンが固定されている円筒の管状のｅＰＴＦＥ人工血管（多孔性物質で作られている）の見掛け上の表面積は、２πｒＬ｛式中、ｒはグラフトの内径であり；Ｌは軸の長さであり；そして、πは数字のパイである｝として任意の円筒形状の場合と同様に計算される。
【０１７７】
試験方法Ｋ‐ＡＴＩ１１結合活性によるのヘパリン部分生理活性の計測（定量的なヘパリン機能）
デバイス、特に固定したヘパリン部分を含んでいる第一のコーティング層の、ヘパリン生理活性を、Pasche, et al. in "A binding of antithrombin to immobilized heparin under varying flow conditions" (Artif. Organs 1991 ; 15:281 -491 )及びLarsen M. L , et al. in "Assay of plasma heparin using thrombin and the chromogenic substrate H-D-Phe-Pip-Arg-pNA" (S-2238) (Thromb. Res. 1978; 13:285-288)に記載のとおり、アンチトロンビンＩＩＩ（ＡＴＩＩＩ）に結合する表面結合ヘパリンの容量として計測する。洗浄したサンプルを溶液中の過剰なアンチトロンビンと一緒にインキュベートし、ヘパリン表面のすべての利用可能なアンチトロンビン結合部位をすべて飽和状態にする。非特異的結合アンチトロンビンを、塩類溶液を使用して洗い流す。それに続いて、表面結合ヘパリンに特異的に結合したアンチトロンビンを、高濃度にてヘパリン溶液とインキュベートすることによって放出する。最後に、ヘパリン表面から放出したアンチトロンビンは、色素トロンビン基質に基づいたトロンビン阻害分析によって計測される。結果をデバイスの表面の見掛け上の平方センチメートルあたりに結合したアンチトロンビンＩＩＩ（ＡＴＩＩＩ）のピコモル単位で表す（ｐｍｏｌＡＴＩＩＩ／ｃｍ2デバイス表面）。見掛け上のデバイス表面積は、複数の覆われた表面も、多孔性物質で構成されたデバイスも多孔度を考慮していない。デバイスの表面が多孔性であっても、表面積への多孔度の効果はこれらの計算には考慮されない。例えば、管状のグラフト内面を含む基板材料にヘパリンが固定されている円筒の管状のｅＰＴＦＥ人工血管（多孔性物質で作られている）の見掛け上の表面積は、２πｒＬ｛式中、ｒはグラフトの内径であり；Ｌは軸の長さであり；そして、πは数字のパイである｝として任意の円筒形状の場合と同様に計算される。
【０１７８】
試験方法Ｌ‐ヘパリン部分の密度（定量的なヘパリン結合）の計測
表面に固定されたヘパリンの定量化を、ヘパリンの完全な分解と、続く溶液中への放出された反応生成物の比色定量によって実施する。分解は、酸性条件下でヘパリン表面と過剰量の亜硝酸ナトリウムとを反応させることによって達成される。分解生成物（主に二糖）は、基本的にSmith R.L. and Gilkerson E (1979), Anal Biochem 98, 478-480に記載されているとおり、ＭＢＴＨ（３‐メチル‐２‐ベンゾチアゾリノンヒドラゾンヒドロクロリド）との反応による呈色反応により定量化する。前記文献の全体を参照により本明細書中に援用する。
【０１７９】
試験方法Ｍ‐パクリタキセル溶出特性のインビトロ計測
インビトロにおけるデバイス、特に第二の微粒子コーティング層からのパクリタキセルの放出速度を試験するために、加速溶出特性を試験できる。このために、コーティングデバイスを、定温の好適なバッファー溶液に入れる。溶出したパクリタキセルを、必要な濃度まで水中でのパクリタキセルの溶解性を増強するシクロデキストリンを含んでいるパクリタキセルを含む水性緩衝液中に溶解する。指定した時点でのサンプルの消退、つまり、パクリタキセル含有量を（評価方法と試験方法Ｃ‐ＩＩに記載の）ＵＰＬＣ技術によるパクリタキセル含有量の分析し、時間に対するパクリタキセルのプロッティングにより、溶出特性を作成する。
【０１８０】
試験方法Ｎ‐染色法
本発明のデバイスは、２分間、溶液に浸し、続いて大量の水ですすぐことによって、トルイジンブルー染色溶液（水に２００ｍｇ／Ｌ）を受けることができる。ブルー又はバイオレットの色は正味の負電荷を含む表面、例えば、固定されたヘパリン部分で観察される。
【０１８１】
試験方法Ｏ‐表面の生体適合性
第一のコーティング層及び第二の微粒子コーティング層を備えた本発明の埋め込み型医療用デバイスの表面の生物学的適合性は、Lappegard, K. T 2008, J. Biomed. Mater. Res. Vol 87, 129-135（参照によって本明細書中に援用する）に記載のとおり計測され得る。（試験方法Ｃ‐ＩＩによる）第二の微粒子コーティング層の除去後の本発明のステント‐グラフトの炎症反応を計測するのに使用され得る手順は以下の通りである。まず、ステント‐グラフトを１５分間、０．１５Ｍの生理的食塩溶液で洗浄する。濡れたステント‐グラフトを、全血を含んでいるヘパリン化ＰＶＣチューブ内に置き、そして、２０ｒｐｍにて循環ループにより回転させる（代表的な手順に関して、Ekdahl K. N., Advances in Experimental Medicine and Biology, 2013, 735, 257-270（参照によって本明細書中に援用する））。インキュベーション後に、血液を１５分間、４℃、３２２０ｇにて遠心分離する。後のサイトカイン分析のために、血漿を−７０℃にてアリコートで冷凍する。血漿サンプルを、Lappegardら（上記）によって記載された方法に従ってマルチプレックスサイトカインアッセイ（Bio-Plex Human Cytokine 27-Plex Panel, Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA）を使用して分析する。
【０１８２】
陰性対照は、全くデバイスが入っていないヘパリン化ＰＶＣチューブの空のループである。これはインキュベートした血液が、最少量の炎症性マーカーを実証するだけでなくてはならない非炎症性対照を表す。陽性対照は、全くデバイスの入っていない非ヘパリン化ＰＶＣの空のループである。これは炎症性マーカー量の増大が観察されなければならない炎症性対照を表す。対照は、実験と血液の特質を確実にするために含まれている。
【０１８３】
実施例１：埋め込み型医療用デバイス上の固定されたヘパリンコーティング（第一のコーティング層）の調製方法
コーティングすべき医療用デバイスの表面をイソプロパノールと酸化剤によって掃除する。次に、表面を、ＥＰ‐Ｂ‐００８６１８６及びＥＰ‐Ｂ‐４９５８２０内のLarmらによって記載の方法を使用して処置して、硫酸化多糖の層を備えたコーティング二重層を形成する。
二重層を、陽性荷電ポリアミン（ポリエチレンイミン（例えば、ＥＰ０４９５８２０Ｂ１の実施例で使用される）及び陰性荷電硫酸化多糖（硫酸デキストラン）の吸着性を変更することによって構築する。ポリエチレンイミンを水で希釈し、原液を調製する（５ｇポリエチレンイミンを２０ｍＬの精製水に加えた）。ポリアミンを二官能性アルデヒド（クロトンアルデヒド）を用いて架橋する。ポリアミンと硫酸化多糖のすべての対が１つの二重層と呼ばれる。デバイスの表面には４つの二重層が用意され、最後の層がヘパリン部分を固定するその後の方法に依存する。
【０１８４】
ＥＰ‐Ｂ‐００８６１８６に記載の‐還元的アミノ化を介したヘパリンの固定。ヘパリンをジアゾ化によって分解し、末端（末端点）を含まないアルデヒド基を形成し、それに続いて、アルデヒドを介して埋め込み型医療用デバイスの表面にあるアミノ基と反応させて、還元により第二級アミンリンカーに変換されるシッフ塩基を形成する。
３００ｍｌの水中のヘパリン（１ｇ）の溶液を、氷浴上で０℃に冷やる。亜硝酸ナトリウム（１０ｍｇ）を撹拌しながら加える。次に、酢酸（２ｍｌ）を滴下して加える。溶液を、０℃にて２時間超、撹拌したまま静置する。反応混合物を蒸留水に対する透析によって仕上げ、そして凍結乾燥して、末端点アルデヒド官能化ヘパリンを得る。
ヘパリン化されるべきデバイス表面を先に記載したように４つの二重層で下塗りし、（例えば、ＥＰ０４９５８２０Ｂ１の実施例で使用した）ポリエチレンイミンの最終層を最後にした。すすぎに続いて、コーティングされるべき表面を、リン酸緩衝液中の末端点アルデヒド官能化ヘパリン（２〜２０ｍｇ／ｍＬ）及びシアノ水素化ホウ素ナトリウム（０．５ｍｇ／ｍｌ）の溶液と一緒に室温にてｐＨ７．０で２４時間インキュベートする。ヘパリン化の表面を水で慎重にすすぐ。
【０１８５】
ＷＯ２０１１／１１０６８４に記載‐チオエーテルリンカーを介した固定。チオール官能化ヘパリンをマレイミド官能化ポリアミン表面と反応させる。
チオール官能化ヘパリンを次のようにして調製する。（先に記載したように調製した）末端点アルデヒド基を有する亜硝酸塩分解ヘパリン（５．００ｇ、１．０ｍｍｏｌ）、システアミン塩酸塩（０．５７ｇ、５．０ｍｍｏｌ）、及び塩化ナトリウム（０．６ｇ）を精製水中に溶解する。１ＭのＮａＯＨ（ａｑ）及び１ＭのＨＣｌ（ａｑ）でｐＨを６．０に調整する。溶液に３．１ｍｌの５％（ａｑ.）ＮａＣＮＢＨ3（０．１６ｇ、２．５ｍｍｏｌ）を加え、そして反応物を室温で一晩撹拌する。１ＭのＮａＯＨ（ａｑ.）でｐＨを１１．０に調整し、得られた生成物を、ＳｐｅｃｔｒａＰｏｒ透析膜ｍｗｃｏ１ｋＤ（折り径４５ｍｍ）を用いて精製水に対して３日間透析する。次に、反応混合物を濃縮し、凍結乾燥して、白い飛散性粉末として２．６ｇの（Ｃ１の還元末端にて）チオール官能化ヘパリンを得た。
【０１８６】
マレイミド‐官能化ポリエチレンイミン（ＥＰ０４９５８２０Ｂ１（上記の）の実施例で使用するポリエチレンイミン）を次のようにして調製する。４‐マレイミドブチル酸（０．５０ｇ、２．７ｍｍｏｌ）及びＮ‐ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）（０．３２ｇ、２．７ｍｍｏｌ）を３ｍＬのジクロロメタン中に溶解し、０℃にて撹拌する。３ｍＬのジクロロメタン中のＮ,Ｎ’‐ジシクロヘキシルカルボジイミド（０．５６ｇ、２．７ｍｍｏｌ）の溶液を０℃にてゆっくりと反応混合物に加える。反応混合物を一晩撹拌し、副産物は濾別し、そして、ＮＨＳ活性化４‐マレイミドブチル酸を濃縮し、減圧下で乾燥させる。乾燥ＮＨＳ活性化４‐マレイミドブチル酸を、３０ｍＬの精製水で溶解し、０℃にてポリエチレンイミン原液７．６ｍＬと混ぜ、室温で一晩反応させて、マレイミド官能化ポリエチレンイミンの１％溶液を得る。
【０１８７】
ヘパリン化すべきデバイスの表面を、先に記載した４つの二重層で下塗りし、陰性荷電硫酸化多糖（硫酸デキストラン）の最終層で終わらせた。次に、次のコーティングステップは、ｐＨ８．０にて１０００ｍＬの０．０４Ｍ／０．０４Ｍボラート／リン酸緩衝液中のマレイミド官能化ポリエチレンイミンの１％溶液、１０ｍＬの溶液を使用する。スルファート表面へのマレイミド官能化ポリエチレンイミンの取り付けを、室温で２０分間実施する。２分間の水でのすすぎを実施し、余分な高分子がすすぎ流される。５００ｍｇのチオール官能化ヘパリンを、１０００ｍＬの脱イオン水、５０ｍｇのｔｒｉｓ（２‐カルボキシエチル）ホスフィンヒドロクロリド、５００ｍｇ４，４’‐アゾビス（４‐シアノバレリアン酸性）中に溶解し、そして２．９ｇのＮａＣＩを加えた。１ＭのＨＣｌ（ａｑ）でｐＨを３．７に調整する。
【０１８８】
チオール官能化ヘパリンの溶液とマレイミド官能化ポリエチレンイミン表面との間の反応を７０℃３ｈ実施する。精製を、ｐＨ８．０にて０．０４Ｍ／０．０４Ｍボラート／リン酸緩衝液を使用して１０分間、非共有結合ヘパリンをすすぐことによって実施する。脱イオン水による２分間の最終的なすすぎを実施して、バッファー塩残基を洗い流す。全工程を通じて１００ｍＬ／分の流量を使用する。
【０１８９】
実施例２：有機添加物がカフェインであるステント上にパクリタキセル‐有機添加物層（第二の微粒子コーティング層）を調製するための方法
耐久性がある、生体適合性延伸ポリテトラフルオロエチレン（ｅＰＴＦＥ）構造と相互接続された単線ニチノールステントから構成された二元的な部品設計を特徴とする血管ステント（５ｍｍ×３０ｍｍ）を、ＵＳ２００９／０１８２４１３Ａ１（Gore Enterprise Holdings, Inc.；参照によってその全体を本明細書中に援用する）に従って作製した。耐久性がある、生物適合性延伸ｅＰＴＦＥ構造物を、米国特許第６,４６１,６６５号に記載のヘパリン‐接着面で（第一のコーティング層を形成する還元的アミノ化を介して）コーティングした（参照によりその全体を本明細書中に援用する）。
【０１９０】
前述のヘパリンコーティング血管ステントを、次のとおり、拡張状態で、パクリタキセル及びカフェインを含んでいるパクリタキセル賦形剤コーティングで上塗りた（第二の微粒子コーティング層）。重量比で７５：２５のパクリタキセル（無水物）及びカフェインを、９０／１０（ｖ／ｖ）のアセトン／水で溶解して、２０ｍｇ／ｍｌパクリタキセル溶液を得た。
前述のヘパリンコーティング血管ステントを、取り扱いのためにコーティングステップ中、片端を糸に接続した。それらを、パクリタキセル‐カフェイン液に浸し、取り出し、そして風乾し；コーティング手順をさらに１０〜３０回反復して、３個のコーティングステントを得た。コーティング手順の最後に、ＤＳＣを使用して調査される前に、それぞれのコーティングステントを計量した（ステントデバイス１は０．５８８ｍｇのコーティング重量を有し、ステント２は０．６４２ｍｇのコーティング重量を有し、及びステント３は１．２ｍｇのコーティング重量を有した）。ステントを、高質量ＤＳＣ皿内に圧縮し、ｏ‐環及びリッド（TA Instruments、部品＃９００８２５．９０２）で封をし、（サンプルを１００℃のて滞留しなかったのを除いて）一般手順に記載のＤＳＣ法を使用して分析し；コーティングの施していない血管ステントを参考として分析した。
１３２℃にて単独の低い融解吸熱を、パクリタキセル‐カフェイン固形組成物について観察した。
【０１９１】
実施例３：ステント‐グラフト上のパクリタキセル‐有機添加物層（第二の微粒子コーティング層）を調製するための方法
Heparin Bioactive Surface（「ステント‐グラフト」‐「材料」に記載）を用いたＧＯＲＥ（登録商標）ＶＩＡＢＡＨＮ（登録商標）を、固定されたヘパリンの第一のコーティング層で事前にコーティングしたステント‐グラフトである、すなわち、購入した固定されたヘパリンで事前にコーティングされている。
前述の事前にコーティングデバイスは、拡張状態で、第二の微粒子コーティング層としてパクリタキセル及びコハク酸、又はパクリタキセル及びカフェインを含んでいるパクリタキセル‐有機添加物コーティングで上塗りされた。パクリタキセル（無水物）及び有機添加物を、５／５（ｖ／ｖ）のアセトン／水で同時に溶解し、表１に記載のとおり（ここで、「賦形剤」は有機添加物を指す）、事前コーティングデバイスに適用したコーティング溶液を形成する。特異的なコーティング組成物を以下の実施例３ａ、３ｂ、及び３ｃに記載する。
【０１９２】
表１‐コーティング溶液の組成
【表１】
0006599882.tif 000002
★コーティング溶液の固形成分内のパクリタキセルの％（ｗｔ.％）
【０１９３】
ステント‐グラフトを、回転させながら、（２５〜５０μｌの溶液、シリンジポンプを使用して）コーティング溶液を分配することによって（近位端から５ｍｍまでの部分を覆う）近位端をコーティングした。すべてのデバイスに関する塗布面の最終的な薬剤負荷量は、約０．３２〜６．３７μｇ／ｍｍ2であった（既知のパクリタキセル濃度を有する既知の溶液体積を分配することによって見積もった）。コーティングステント‐グラフトは、試験方法Ｄ、Ｆ又はＧに従って滅菌できる。
【０１９４】
実施例３ａ：５００μｇのパクリタキセル負荷量を有するステント‐グラフト上にパクリタキセル‐カフェイン層（第二の微粒子コーティング層）を調製するための方法
１００ｍｇのパクリタキセル及び３３ｍｇのカフェインをガラスバイアルに加えた。アセトン（９．５ｍＬ）及び水（０．５ｍＬ）の混合物を添加し、溶液を形成して、そしてそれを室温にて撹拌しながら溶解させた。得られたコーティング溶液（１０ｍｇパクリタキセル／ｍＬ）を、実施例３に記載のとおり、ステント‐グラフトの末端に５０μＬを分配することによって、シリンジポンプを使用してステント‐グラフトに適用した。コーティングステント‐グラフトはその後、室温にて一晩乾燥させた。
【０１９５】
実施例３ｂ：２５μｇのパクリタキセル負荷量を有するステント‐グラフト上にパクリタキセル‐カフェイン層（第二の微粒子コーティング層）を調製するための方法
１００ｍｇのパクリタキセル及び３３ｍｇのカフェインをガラスバイアルに加えた。アセトン（９．５ｍＬ）及び水（０．５ｍＬ）の混合物を添加し、溶液を形成して、そしてそれを室温にて撹拌しながら溶解させた。得られたコーティング溶液を×１０に希釈して、１ｍｇパクリタキセル／ｍＬの濃度を有する最終的なコーティング溶液を得、そしてそれを、実施例３に記載のとおり、ステント‐グラフトの末端に２５μＬを分配することによって、シリンジポンプを使用してステント‐グラフトに適用した。コーティングステント‐グラフトはその後、室温にて一晩乾燥させた。
【０１９６】
実施例３ｃ：１５０μｇのパクリタキセル負荷量を有するステント‐グラフト上にパクリタキセル‐コハク酸層（第二の微粒子コーティング層）を調製するための方法
３０ｍｇのパクリタキセル及び１０ｍｇのコハク酸をガラスバイアルに加えた。アセトン（９．５ｍＬ）及び水（０．５ｍＬ）の混合物を添加し、溶液を形成して、そして室温にて該溶液を撹拌しながら溶解させた。得られた溶液（３ｍｇパクリタキセル／ｍＬ）を、実施例３に記載のとおり、ステント‐グラフトの末端に５０μＬを分配することによって、シリンジポンプを使用してステント‐グラフトに適用した。ステント‐グラフトはその後、室温にて一晩乾燥させた。
【０１９７】
実施例４：埋め込み型医療用デバイスの第二の微粒子コーティング層の熱理分析
本発明のコーティングした埋め込み型医療用デバイスを、一般手順に記載の方法を使用してＤＳＣによって調査する。特に、第二の微粒子コーティング層の熱的挙動が分析できる。ステンレス製のへらでコーティングを掻き取ることによって、第二の微粒子コーティング層のサンプルを入手する。次に、微粒子サンプルをあらかじめ計量しておいたＤＳＣ皿に入れ、そして、ＤＳＣ分析を実施した。
特定の実施形態において、本発明の埋め込み型医療用デバイスから得られた第二の微粒子コーティング層のサンプルは、低い融解吸熱、すなわち、パクリタキセル及び単独若しくはそれぞれの有機添加物の両方で観察される融点より低い融点を呈すると予想される。
【０１９８】
実施例５：実施例３ｃに従って調製したステント‐グラフトの第二の微粒子コーティング層の接着試験解析
実施例３ｃに従って調製したステント‐グラフトのパクリタキセル‐コハク酸層（第二の微粒子コーティング層）の接着は調査した。接着は、（試験方法Ｉ‐ＩとＩ‐ＩＩに従って）圧縮及び拘束の前後に（試験方法Ｃ‐Ｉ及びＣ‐ＩＩに従って）ステント‐グラフトのパクリタキセルの重量と含有量を比較することによって評価した。（試験方法Ｃ‐Ｉ及びＣ‐ＩＩの両方で決定される）より低い％のパクリタキセル損失は、より良好な接着及びより耐久性があるデバイスを示し、そして特に、より良好な接着及びより耐久性がある第二の微粒子コーティング層を示す。比較参考を提供するために、固定されたヘパリンコーティング層がない（すなわち、第一のコーティング層がない）又はその他のコーティング層がないステント‐グラフトも実施例３ｃに従って調製した。結果を表２及び図８にまとめる。
【０１９９】
表２‐圧縮及び留置（試験）前後のパクリタキセル（ＰＴＸ）含有量
【表２】
0006599882.tif 000003
★試験方法Ｃ‐ＩＩに従って決定したパクリタキセル含有量
★★試験方法Ｃ‐Ｉに従って決定したパクリタキセル含有量
★★★既知濃度及び既知体積に基づいてデバイスに添加したパクリタキセル
【０２００】
パクリタキセル‐コハク酸層（第二の微粒子コーティング層）を固定されたヘパリンを含まない表面に適用されたステント‐グラフトは、パクリタキセル‐コハク酸層（第二の微粒子コーティング層）が固定されたヘパリン（第一のコーティング層）の表面に適用されたステント‐グラフトと（試験方法Ｃ‐Ｉ及びＣ‐ＩＩの両方を使用して）比較して、圧縮後のより高いパクリタキセル含有量を有することが、表２と図８から明白である。
【０２０１】
そのため、固定されたヘパリン部分を含んでいる第一のコーティング層が、第二の微粒子コーティング層の接着を高めることは明白である。
いかなる理論にも縛られることを望むものではないが、固定されたヘパリンを含んでいる第一のコーティング層が、医療用デバイスの表面への第二の微粒子コーティング層のより良好な接触を可能にする該表面の濡れを助けると、本発明者らは考えている。
当業者は、第二のコーティング層で覆われているより広い表面積を有するコーティングされた埋め込み型デバイスを設計できるであろう。接着に関して同様の結果が予想される。
【０２０２】
実施例６：第二の微粒子コーティング層の耐久性解析‐コーティングステント
実施例２のコーティングステントを、コーティング層、特に第二の微粒子コーティング層の耐用年数とロバスト性を調べるために圧縮及び留置に供した。耐用年数を、圧縮及び留置の前後でコーティング重量を比較することによって決定した。
実施例２のコーティングステントを、圧縮し、試験方法Ｈ‐Ｉに従って拘束し、次に、試験方法Ｈ‐ＩＩに従って留置した。留置後に、ステントを計量し、そして、圧縮前の重量と比較した。結果を表３に示す。
【０２０３】
表３‐コーティング耐用年数の概要
【表３】
0006599882.tif 000004
【０２０４】
平均コーティング質量減少は９．８％であり、そしてこれは、高度の耐用年数を表すことが決定した。この耐用年数は、コーティングステントの圧縮及び張のみを考慮しているのではなく、封じ込めチューブから押し出されるステントもまた考慮し、ここで、該ステントは該封じ込めチューブ内面をはぎ取る。
【０２０５】
実施例７：第二の微粒子コーティング層の耐久性解析‐コーティングステント‐グラフト
実施例３ａ、３ｂ、及び３ｃのコーティングステント‐グラフトを、コーティング層、特に第二の微粒子コーティング層の試験耐用年数及びロバスト性を調査するために、圧縮をかけ、拘束し、そして留置した。耐用年数を、圧縮及び留置（操作）の前後でコーティング中のパクリタキセル重量を比較することによって決定した。
実施例３ａ、３ｂａ、及び３ｃのコーティングステント‐グラフトを、試験方法Ｉ‐Ｉに従って圧縮及び拘束し、次に、試験方法Ｉ‐ＩＩに従って留置した。留置後に、コーティング中のパクリタキセル量を、試験方法Ｃ‐ＩＩを使用して測定した。結果を表４に示す。
【０２０６】
表４‐圧縮、拘束、及び留置（試験）前後のパクリタキセル（ＰＴＸ）含有量
【表４】
0006599882.tif 000005
★試験方法Ｃ‐ＩＩによるパクリタキセル含有量
★★試験方法Ｉ‐Ｉとそれに続く試験方法Ｉ‐ＩＩ
【０２０７】
ステント‐グラフトは、操作中に少量のパクリタキセルしか失われないことで示される内部応力に対する良好な抵抗性を示す。平均では、ステント‐グラフトは、操作後にコーティング中のパクリタキセルの２１％を失い、高度の耐用年数を示した。
【０２０８】
実施例８：第二の微粒子コーティング層の滅菌安定性分析‐コーティングステント‐グラフト
実施例３ａ、３ｂ、及び３ｃのコーティングステントを、試験方法Ｄが開始できるようにエチレンオキシドを使用して殺菌した。滅菌後に、コーティング中のパクリタキセルの量を（試験方法Ｃ‐ＩＩに記載の）ＵＰＬＣを使用して決定して、埋め込み型医療用デバイスの安定性、特に第二の微粒子コーティング層の安定性を決定した。結果を表５に示す。
【０２０９】
表５‐滅菌前後のパクリタキセル（ＰＴＸ）含有量
【表５】
0006599882.tif 000006
★試験方法Ｃ‐ＩＩによるパクリタキセル含有量
★★試験方法Ｄに従って滅菌する。
【０２１０】
滅菌後に、パクリタキセルの分解は実質的に観察されず、実施例３ａ、３ｂ、及び３ｃのデバイスが、エチレンオキシド滅菌後に優れたパクリタキセル安定性を有することが示された。
【０２１１】
実施例９：滅菌後の第二の微粒子コーティング層の耐用年数‐コーティングステント‐グラフト
実施例３ａ、３ｂ、及び３ｃのコーティングステントを、試験方法Ｄが開始できるように、エチレンオキシドを使用して殺菌した。滅菌後に、ステント‐グラフトを、試験方法Ｉ‐Ｉに従って圧縮し、拘束し、次に、試験方法Ｉ‐ＩＩに従って留置した。留置後に、コーティング中のパクリタキセルの量を、試験方法Ｃ‐ＩＩを使用して測定した。結果を表６に示す。
【０２１２】
表６‐滅菌、その後の圧縮、拘束、及び留置（試験）前後のパクリタキセル（ＰＴＸ）含有量
【表６】
0006599882.tif 000007
★試験方法Ｃ‐ＩＩによるパクリタキセル含有量
★★試験方法Ｄに従って滅菌する。
★★★試験方法Ｉ‐Ｉ及びＩ‐ＩＩによる圧縮、拘束、及び留置
【０２１３】
平均すると、コーティングステントは、滅菌、そして、圧縮、拘束、及び留置後に、コーティング中のパクリタキセルの１７％を失う。実施例８の表５に基づいて、本実施例におけるパクリタキセルの損失は、滅菌よりむしろ操作工程に起因すると考えられる。パクリタキセルの１７％の損失は、高度の耐用年数を表すと見なされる。
【０２１４】
実施例１０：パクリタキセル‐有機添加物の放出特性‐コーティングステント‐グラフト
実施例３ｂ及び３ｃのコーティングステント‐グラフトを、３０％のシクロデキストリンを含んでいる酢酸緩衝水溶液に浸した。デバイスからのパクリタキセルの放出特性を、試験方法Ｍに従って、３７℃にて２４時間、計測し、そして、結果を表７に示す。
【０２１５】
表７‐媒質中のパクリタキセル含有量
【表７】
0006599882.tif 000008
Ｎ＝２の平均
★試験方法Ｍ及びＣ‐ＩＩによる媒質中の含有量
【０２１６】
パクリタキセル放出の最も高い放出速度は、最初の時点までの初期期間（０．２５ｈ）で観察され、一定、且つ、持続した（低い）放出速度が、観察の残りの期間（最大２４ｈ）で観察された。コーティングしたステント‐グラフトのＰＴＸ添加量のうちの平均８０％が２４ｈ後に回収された（実施例３ｂ及び３ｃのデバイスはそれぞれ２５μｇ及び１５０μｇが最初に添加されている。実施例３ｂ及び３ｃを参照のこと）。
【０２１７】
実施例１１：滅菌後のパクリタキセル‐有機添加物の放出特性‐コーティングステント‐グラフト
実施例３ａ、３ｂ、及び３ｃのコーティングステントを、試験方法Ｄが開始できるようにエチレンオキシドを使用して殺菌した。滅菌後に、ステント‐グラフトを３０％のシクロデキストリンを含んでいる酢酸緩衝水溶液中に浸した。デバイスからのパクリタキセルの放出特性を、試験方法Ｍに従って、３７℃にて２４時間、計測し、そして、結果を表８に示す。
【０２１８】
表８‐媒質中のパクリタキセル含有量‐滅菌後
【表８】
0006599882.tif 000009
Ｎ＝２の平均
★試験方法Ｍ及びＣ‐ＩＩによる媒質中の含有量
【０２１９】
驚いたことに、コーティングステント‐グラフトのＰＴＸ添加量のうちの平均８６％が回収され、（実施例１０の非滅菌デバイスの放出特性と比較して）滅菌がパクリタキセル放出特性に重大な影響を及ぼさないことを示した。
【０２２０】
実施例１２：第一のコーティング層のヘパリン活性‐コーティングステント
実施例６の圧縮及び留置ステントの下にあるヘパリン接着面（第一のコーティング層）のヘパリン活性を、ＷＯ２００９／０６４３７２（試験方法Ｊ）に従って計測した。前記文献の全体を参照により本明細書中に援用する。パクリタキセル‐カフェインコーティング（第二の微粒子コーティング層）を、最初に、４０℃にて１時間、３００ｒｐｍで振盪しながら、メタノール中の０．２％酢酸が入ったガラスバイアル中に浸して、血管ステント表面から抽出した。洗浄したステントは、１ｐｍｏｌ／ｃｍ2超の治療的に有効なヘパリン活性を実証した。
これらの結果は、パクリタキセル‐有機添加物層（第二の微粒子コーティング層）でのコーティング条件、圧縮及び拡張を含めた機械的応力、及び留置を含めた機械的剪断下での、ヘパリン‐接着面（第一のコーティング層）の驚くべきな活性を証明する。
【０２２１】
実施例１３：滅菌後の第一のコーティング層のヘパリン活性‐コーティングステント
実施例２のようにコーティングしたステントを、エチレンオキシドによって滅菌する。そのステントを続いて、ヘパリン活性の保持率を伴うコーティングの耐用年数及びロバスト性を調べるために圧縮及び留置した。
【０２２２】
実施例１４：二元的な活性試験：第二の微粒子コーティング層の急性組織移行；及び第一のコーティング層のヘパリン活性‐コーティングステント
実施例６のステントデバイスＮｏ．３について、試験方法Ａに記載のインビトロモデルにおいてステント表面から血管組織へのパクリタキセルの移行能力を調べた。ステントを取り除き、そして、血管をパクリタキセル含有量について一般手順に従ってＭＳ‐ＬＣ／ＭＳを使用して分析した。組織１グラムあたりの約１６μｇのパクリタキセルが、ステント表面からブタ血管組織に移行した。
【０２２３】
これらのパクリタキセル組織レベルは、文献に記載のとおり、２４時間にてグラム組織あたり２０μｇのパクリタキセルのパクリタキセルコーティング血管ステントの報告されている治療範囲内にある（M.D. Dake et al. , J Vase Interven Rad, 22(5): 603-610, 2011, "Polymer-free Paclitaxel-coated Zilver PTX Stents - Evaluation of Pharmacokinetics and Comparative Safety in Porcine Arteries"）。
血管からそれが取り除かれた後の、ステントのヘパリン活性を、実施例１２に従って計測し、そして、１ｐｍｏｌｅ／ｃｍ2超の治療的に有効なヘパリン活性であることを測定した。
よって、パクリタキセル‐有機添加物（第二の微粒子コーティング層）で上塗りコーティングした固定されたヘパリン（第一のコーティング層）のコーティングを備えた血管ステントを血管組織と接触させたとき、治療量のパクリタキセルがコーティングから血管組織に移行し、治療的に有効なヘパリン活性をヘパリン‐接着面に保持していた。よって、本発明の埋め込み型医療用デバイスには、ステントにヘパリンを含む第一のコーティングが適用され、続いてパクリタキセル‐有機添加物コーティング層の上塗りコーティングが適用されたとき、二元的な治療活性を呈する可能性がある。
【０２２４】
実施例１５：第一のコーティング層のヘパリン生理活性に対する第二の微粒子コーティング層の影響；滅菌前後‐コーティングステント‐グラフト
実施例３ａ、３ｂ、及び３ｃに記載のとおり調製したステント‐グラフトのヘパリン生理活性を、試験方法Ｋに従って測定し、そして、ヘパリン基準とも呼ばれる、固定されたヘパリンコーティング（第一のコーティング層）を備えているが、パクリタキセル‐有機添加物層（第二の微粒子コーティング層）がないステント‐グラフトのヘパリン生理活性と比較した。結果を表９に示す。
【０２２５】
表９‐ヘパリン基準と比較した本発明のステント‐グラフトの相対ヘパリン生理活性
【表９】
0006599882.tif 000010
Ｎ＝２の平均
★試験方法Ｋによるヘパリン生理活性
【０２２６】
（固定されたヘパリンの第一のコーティング層だけを備えたヘパリン基準と比較して）ヘパリン生理活性のわずかな減少（平均１４．７％）が第二の微粒子コーティング層でコーティングしたステント‐グラフトに関して観察されたのは、表９の結果から明白である。
ステント‐グラフトのヘパリン活性はまた、試験方法Ｄに従ってエチレンオキシドを使用した滅菌後にも測定した。結果を表１０に示す。
【０２２７】
表１０‐滅菌前後のヘパリン生理活性
【表１０】
0006599882.tif 000011
Ｎ＝２の平均
★試験方法Ｋによるヘパリン生理活性
★★試験方法Ｄに従った滅菌
★★★Ｎ＝４の平均
【０２２８】
驚いたことに、続いてエチレンオキシドを使用した滅菌にかけられたステント‐グラフトに関して、ヘパリン生理活性の損失は実質的に観察されなかった。固定されたヘパリン部分でコーティングされたＰＶＣチューブから成るＥＯ基準サンプルは、試験方法Ｄにかけたときに、そのヘパリン生理活性の７０％が失われた。
【０２２９】
実施例１６：  滅菌前後の第一のコーティング層のヘパリン密度‐コーティングステント‐グラフト
実施例３ａ、３ｂ及び３ｃに記載のとおり調製したステント‐グラフトを、（試験方法Ｄに従って）エチレンオキシドを用いた滅菌前後で、それらのヘパリン密度に関して試験方法Ｌを使用して比較した。結果を表１１に示す。
【０２３０】
表１１‐滅菌前後のヘパリン密度
【表１１】
0006599882.tif 000012
値はＮ＝２の平均
★試験方法Ｌによるヘパリン密度
★★試験方法Ｄに従って滅菌
【０２３１】
驚いたことに、ヘパリン密度における比較的わずかな損失は、滅菌にかけたステント‐グラフトについて観察された。
【０２３２】
実施例１７：第二の微粒子コーティング層の急性組織移行‐コーティングステント‐グラフト
実施例３ａ、３ｂ、及び３ｃに従って調製したステント‐グラフトを、試験方法Ａに記載のインビトロモデルにおいて、ステント‐グラフト表面（具体的には、第二の特定のコーティング層）から血管組織にパクリタキセルを移行するそれらの能力について調べた。２４ｈ後の血管からのステント‐グラフトの除去に続いて、ＵＰＬＣ技術（試験方法Ｃ‐ＩＩ）を使用して、血管をパクリタキセル含有量について分析した。
【０２３３】
表１２‐デバイスから血管組織へのパクリタキセル（ＰＴＸ）の移行
【表１２】
0006599882.tif 000013
【０２３４】
値はＮ＝２の平均
★試験方法Ｃ‐ＩＩによるＰＴＸ含有量
★★試験方法Ａによるデバイスから組織へのＰＴＸの移行
表１２に見られるように、グラム組織あたり約８．２〜２５μｇのパクリタキセルをステント‐グラフト表面からブタ血管組織に移した。パクリタキセルが埋め込み型デバイスから血管壁へと、治療に関連するレベルで移動することを前記試験は示している。
【０２３５】
実施例１８：第二の微粒子コーティング層の急性組織移行‐コーティングステント‐グラフト、滅菌後
実施例３ａ、３ｂ、及び３ｃに従って調製したステント‐グラフトを、試験方法Ｄを使用して殺菌し、次に、試験方法Ａに従ってステント‐グラフト表面からパクリタキセルを移行するそれらの能力を調べた。表１３から分かるように、グラム組織あたり約１８〜４１μｇのパクリタキセルがステント‐グラフト表面からブタ血管組織に移行した。
【０２３６】
表１３‐滅菌後の、デバイスから血管組織へのパクリタキセル（ＰＴＸ）の移行
【表１３】
0006599882.tif 000014
値はＮ＝２の平均
★試験方法Ｃ‐ＩＩによるＰＴＸ含有量
★★試験方法Ａに従ったデバイスから組織へのＰＴＸの移行
【０２３７】
試験では、パクリタキセルが治療に関連するレベルで埋め込み型デバイスから血管壁に移動し得ることが示される。パクリタキセルの移動もまた、試験方法Ｄに従った滅菌によって影響を受けない。
【０２３８】
実施例１９：操作したステント‐グラフトのヘパリン生理活性、及び滅菌前後のインビトロにおける組織移行及び取り込み
実施例３ａ、３ｂ及び３ｃに記載のとおり調製したステント‐グラフトのヘパリン生理活性を、試験方法Ｋに従って分析した。実施例３ａ、３ｂ及び３ｃに記載のとおり調製したステント‐グラフトを、試験方法Ｉ‐Ｉ及びＩ‐ＩＩに従って操作し、次に、試験方法Ａにかけた。同様に、試験方法Ｋに従ってヘパリン生理活性は分析した。両実験のヘパリン生理活性の結果を表１４に示す。
【０２３９】
表１４‐試験方法Ｉ‐Ｉ及びＩ‐ＩＩ、続く試験方法Ａによる操作前後のステント‐グラフトのヘパリン生理活性
【表１４】
0006599882.tif 000015
値はＮ＝２の平均
★試験方法Ｋによるヘパリン生理活性
【０２４０】
実験を反復したが、実施例３ａ、３ｂ、及び３ｃに記載の調製したステント‐グラフトは、試験方法Ｉ‐Ｉ、Ｉ‐ＩＩ及び試験方法Ａに供される前に試験方法Ｄに従ってエチレンオキシドを使用して殺菌した。結果は表１５に示す。
【０２４１】
表１５‐試験方法Ｄによる滅菌、次に、試験方法Ｉ‐Ｉ及びＩ‐ＩＩによる操作とそれに続く、試験方法Ａ：前後のステント‐グラフトのヘパリン生理活性
【表１５】
0006599882.tif 000016
値はＮ＝２の平均。
★試験方法Ｋによるヘパリン生理活性
【０２４２】
表１４及び１５の結果から、試験したステント‐グラフトが、圧縮、拘束、留置（試験方法Ｉ‐Ｉ及びＩ‐ＩＩ）、その後のインビトロ組織移行及び取り込み試験（試験方法Ａ）後に、それらの初期ヘパリン生理活性の高い割合を保持したことは明白である。（試験方法Ｄを使用して）事前に殺菌したステント‐グラフトと、そうでないものとの間に実質的な相違は観察されず、デバイスが試験方法Ｉ‐Ｉ及びＩ‐ＩＩ、続いて試験方法Ａに供されたとき、ヘパリン生理活性の主な損失が起こった。
【０２４３】
よって、本発明のコーティングステント‐グラフトは、二元的な治療活性：固定されたヘパリン表面（第一のコーティング層）で治療に有用な量のヘパリン生理活性を保持しながら、（試験方法Ａによって例示され、実施例１７によって証明されるように）血管組織への（第二の微粒子コーティング層からの）治療量のパクリタキセルの移行、を呈する可能性がある。滅菌は保持したヘパリン生理活性に有意に影響しない。
【０２４４】
実施例２０：血液接触活性化
実施例３ａ、３ｂ及び３ｃに記載のとおりに調製したステント‐グラフトを、試験方法Ｂに従って評価した。本発明のこれらのステント‐グラフトの血小板消費を、基準ステント‐グラフト（第一のコーティング層だけでパクリタキセル‐有機添加物（第二の微粒子コーティング層）がないステント‐グラフト）及びプレサンプル（ヘパリン化ＰＶＣチューブ）の血小板レベルと比較し、そして、結果を図１に示す。どのステント‐グラフトにも血栓形成がなかったことがわかった。すべてのステント‐グラフトが同様の血小板保存を有し、そして、実施例３ａ、３ｂ、及び３ｃに従ってコーティングしたものと基準ステント‐グラフトとの間には、相違が全くなかった。また、ステント‐グラフトの管腔側面の視覚検査は、図２に示すように、血栓形成を全く示さなかった。図２に示した番号付けは、本発明の異なったコーティングに関連する。Ｎｏ．９及び１０は実施例３ａに従ってコーティングされ、Ｎｏ．５及び６は実施例３ｂに従ってコーティングされ、Ｎｏ．７及び８は実施例３ｃに従ってコーティングされ、そして、Ｎｏ．３及び４は、固定されたヘパリン部分の第一のコーティング層だけでコーティングされた基準デバイスである。よって、実施例３ａ、３ｂ、及び３ｃに従ってコーティングしたものと比較して、基準ステント‐グラフトの間には相違がなく、第二の微粒子コーティング層は、第一のコーティング層の凝結抵抗性に顕著な影響を及ぼさないことを示した。
【０２４５】
実施例２１：操作前後のステント‐グラフトのＳＥＭ分析
走査電子顕微鏡法を評価方法の下で記載した技術に従って実施した。実施例３ｃに従って調製したステント‐グラフトを、試験方法Ｉ‐ＩＩ及びＩ‐ＩＩによる操作前後に分析した。操作前の、第一及び第二のコーティング層を担持する埋め込み型デバイスの反管腔側面を図３に示し、そして、操作後の（第一の第二のコーティング層を担持する）埋め込み型デバイスの反管腔側面を図４に示す。操作後に目に見える損傷が明らかではないという事実は、操作工程中にコーティングにかかる内部応力の量を考慮すると、驚いたことに、コーティングの接着が良好であることを示している。
【０２４６】
実施例２２：本発明のステント‐グラフトのトルイジンブルー染色
実施例３ｃに記載のとおり調製したステント‐グラフトを、試験方法Ｎに従って評価し、そして、基準ステント‐グラフト（固定されたヘパリン（第一のコーティング層）のコーティングを備えているが第二の微粒子コーティング層がないステント‐グラフト）と比較した。２つのステント‐グラフトが管腔側面で等しく暗く染色されるので（暗い領域は固定されたヘパリンを暗示している）、管腔側面上の固定されたヘパリン層（第一のコーティング層）の均一なコーティングは、反管腔側面側への第二の微粒子コーティング層の追加によって損害を受けないことを観察した。暗い染色はデバイスの全体の管腔側面において見られた。
【０２４７】
実施例２３：固定されたヘパリンの第一のコーティング層を備えた又はそれを持たないステント‐グラフトへの色素溶媒製剤の適用
固定されたヘパリン（第一のコーティング層）の層を有するステント‐グラフトを、色素溶媒配合物の適用によって湿潤性と分配について評価した。実質的に実施例３ｃに記載のとおり配合物の適用を実施したが、第二の微粒子コーティング層をPatent Blue Vで交換した。結果を図５に示し、ここで、ＰＴＸ‐賦形剤溶解に使用した溶媒の乏しい湿潤性、及び第一の層をもたない埋め込み型デバイスへの配合物の流し込み（左側のステント‐グラフト）が、使用するデバイス上に形成された高い色素濃度の部分によって例示される。色素は、固定されたヘパリンの第一のコーティング層を含むデバイス（右側のステント‐グラフト）でより均等に分配される。この実施例は、固定されたヘパリンを含む第一のコーティング層が、その後のコーティングのデバイスへの同等の分配を改善することができることを明確に示し、そしてそれは、パクリタキセルを含む第二の微粒子コーティング層の分配を推定し得ることが見込まれる。これは周辺組織へのパクリタキセルの改善された均一な分配を可能にするはずである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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