(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ）によって表される、抗体抗原性を有する環状ペプチド。
ＲＮ−Ｘｇ−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｈ−ＲＣ    ・・・（Ｉ）
式（Ｉ）中、
ＲＮは、Ｎ末端基を表し；
ＲＣは、Ｃ末端基を表し；
ＸａおよびＸｂは、それぞれ独立に、Ｌ−ホモシステインまたはＤ−ホモシステインに由来するアミノ酸残基を表し、かつ、ジスルフィド結合を介して結合している、または、一方が、Ｌ−ホモシステインまたはＤ−ホモシステインに由来するアミノ酸残基を表し、他方が、側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、かつ、チオエーテル結合を介して結合している；
Ｘｇは、Ｄ、Ｋ−Ｋ−Ｄ、Ｓ、Ｔ、Ｈｍｓ、または、Ｅを表し；
Ｘｈは、Ｔ−Ｋ−Ｋ、Ｔ、Ｓ−Ｋ−Ｋ、ＨｍＳ−Ｋ−Ｋ、ＨｍＹ−Ｋ−Ｋ、Ｄ−Ｋ−Ｋ、Ｅ−Ｋ−Ｋ、または、Ｙ−Ｋ−Ｋを表し；
アミノ酸部分配列Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎは、Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｒ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ａ−Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ａ−Ａ−Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ｓ−Ｙ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ｔ−Ｙ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｆ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｈ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｖ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｍ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｙ−Ｙ−Ｌ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｙ−Ｗ−Ｌ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｍ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｆ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｈ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｖ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｉ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｎ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｗ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｌ−Ｄ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｌ−Ｅ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｄ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｋ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｒ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｈ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｍ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｎ−Ｌ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｅ−Ｉ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｅ−Ｍ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｅ−Ｋ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｅ−Ｒ−Ｖ−Ｗ、Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｉ−Ｗ、または、Ａ−Ｗ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗを表し；
ＡはＬ−アラニン残基を表し；
ＤはＬ−アスパラギン酸残基を表し；
ＥはＬ−グルタミン酸残基を表し；
ＦはＬ−フェニルアラニン残基を表し；
Ｇはグリシン残基を表し；
ＨはＬ−ヒスチジン残基を表し；
ＩはＬ−イソロイシン残基を表し；
ＫはＬ−リシン残基を表し；
ＬはＬ−ロイシン残基を表し；
ＭはＬ−メチオニン残基を表し；
ＮはＬ−アスパラギン残基を表し；
ＲはＬ−アルギニン残基を表し；
ＳはＬ−セリン残基を表し；
ＴはＬ−トレオニン残基を表し；
ＶはＬ−バリン残基を表し；
ＷはＬ−トリプトファン残基を表し；
ＹはＬ−チロシン残基を表し；
ＨｍｓはＬ−ホモセリンに由来するアミノ酸残基を表し：
ＨｍＹはＬ−ホモチロシンに由来するアミノ酸残基を表す。
【請求項２】
前記Ｘａが、（２Ｓ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｓ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｌ−オルニチン、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｄ−オルニチン、Ｎ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシン、およびＮ−ε−クロロアセチル−Ｄ−リシンからなる群から選択される側鎖にクロロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基であり、
前記Ｘｂが、Ｌ−ホモシステインまたはＤ−ホモシステインに由来するアミノ酸残基であり、
前記Ｘａおよび前記Ｘｂは、チオエーテル結合を介して結合している、請求項１に記載の環状ペプチド。
【請求項３】
前記Ｘａが、Ｌ−ホモシステインまたはＤ−ホモシステインに由来するアミノ酸残基であり、
前記Ｘｂが、（２Ｓ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｓ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｌ−オルニチン、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｄ−オルニチン、Ｎ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシン、およびＮ−ε−クロロアセチル−Ｄ−リシンからなる群から選択される側鎖にクロロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基であり、
前記Ｘａおよび前記Ｘｂは、チオエーテル結合を介して結合している、請求項１に記載の環状ペプチド。
【請求項４】
下記式（Ｉ’）によって表される、抗体抗原性を有する環状ペプチド。
ＲＮ−Ｘｇ−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｈ−ＲＣ    ・・・（Ｉ’）
式（Ｉ’）中、
ＲＮは、Ｎ末端基を表し；
ＲＣは、Ｃ末端基を表し；
ＸａおよびＸｂは、一方が、Ｌ−システインまたはＤ−システインに由来するアミノ酸残基を表し、他方が、側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、かつ、チオエーテル結合を介して結合している、または、一方が、Ｌ−ペニシラミンまたはＤ−ペニシラミンに由来するアミノ酸残基を表し、他方が、側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、かつ、チオエーテル結合を介して結合している；
Ｘｇは、Ｄを表し；
Ｘｈは、Ｔ−Ｋ−Ｋ、または、ＨｍＳ−Ｋ−Ｋを表し；
アミノ酸部分配列Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎは、Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗを表し；
ＡはＬ−アラニン残基を表し；
ＤはＬ−アスパラギン酸残基を表し；
ＥはＬ−グルタミン酸残基を表し；
Ｇはグリシン残基を表し；
ＨはＬ−ヒスチジン残基を表し；
ＫはＬ−リシン残基を表し；
ＬはＬ−ロイシン残基を表し；
ＴはＬ−トレオニン残基を表し；
ＶはＬ−バリン残基を表し；
ＷはＬ−トリプトファン残基を表し；
ＹはＬ−チロシン残基を表し；
ＨｍｓはＬ−ホモセリンに由来するアミノ酸残基を表す。
【請求項５】
前記Ｘａが、（２Ｓ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｓ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｌ−オルニチン、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｄ−オルニチン、Ｎ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシン、およびＮ−ε−クロロアセチル−Ｄ−リシンからなる群から選択される側鎖にクロロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基であり、
前記Ｘｂが、Ｌ−システインもしくはＤ−システインに由来するアミノ酸残基、またはＬ−ペニシラミンもしくはＤ−ペニシラミンに由来するアミノ酸残基であり、
前記Ｘａおよび前記Ｘｂは、チオエーテル結合を介して結合している、請求項４に記載の環状ペプチド。
【請求項６】
前記Ｘａが、Ｌ−システインもしくはＤ−システインに由来するアミノ酸残基、またはＬ−ペニシラミンもしくはＤ−ペニシラミンに由来するアミノ酸残基であり、
前記Ｘｂが、（２Ｓ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｓ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｌ−オルニチン、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｄ−オルニチン、Ｎ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシン、およびＮ−ε−クロロアセチル−Ｄ−リシンからなる群から選択される側鎖にクロロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基であり、
前記Ｘａおよび前記Ｘｂは、チオエーテル結合を介して結合している、請求項４に記載の環状ペプチド。
【請求項７】
抗体結合性リガンドである、請求項１〜６のいずれか１項に記載の環状ペプチド。
【請求項８】
抗体標識用リンカーである、請求項１〜６のいずれか１項に記載の環状ペプチド。
【請求項９】
抗体薬物複合体用リンカーである、請求項１〜６のいずれか１項に記載の環状ペプチド。
【請求項１０】
薬物運搬体である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の環状ペプチド。
【請求項１１】
水不溶性担体および請求項１〜６のいずれか１項に記載の環状ペプチドを含み、
前記水不溶性担体と前記環状ペプチドとが直接的または間接的に結合している、アフィニティクロマトグラフィー担体。
【請求項１２】
抗体、標識化合物および請求項１〜６のいずれか１項に記載の環状ペプチドを含み、
前記抗体と前記標識化合物とが前記環状ペプチドを介して結合している、標識化抗体。
【請求項１３】
抗体、薬物、および請求項１〜６のいずれか１項に記載の環状ペプチドを含み、
前記抗体と前記薬物とが前記環状ペプチドを介して結合している、抗体薬物複合体。
【請求項１４】
前記薬物が、リポソーム化、高分子ミセル化、またはＰＥＧ化された薬物である、請求項１３に記載の抗体薬物複合体。
【請求項１５】
薬物および請求項１〜６のいずれか１項に記載の環状ペプチドを含み、
前記薬物と前記環状ペプチドとが直接または間接的に結合している、医薬製剤。
【請求項１６】
前記薬物が、リポソーム化、高分子ミセル化、またはＰＥＧ化された薬物である、請求項１５に記載の医薬製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、環状ペプチド、アフィニティクロマトグラフィー担体、標識化抗体、抗体薬物複合体、および医薬製剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在、抗体医薬は、最も確実性の高い分子標的医薬として注目されており、新しい医薬品分野を急速に拡大している。現在開発中または使用されている抗体医薬のほとんどはＩｇＧ（Immunoglobulin G；免疫グロブリンＧ）クラスに属する抗体を用いるものである。
【０００３】
従来、ＩｇＧ抗体の精製には、黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus；スタフィロコッカス・アウレウス）由来のプロテインＡまたはプロテインＧタンパク質が用いられている。これらのタンパク質は、マウス、ウサギのＩｇＧにも結合するため、研究試薬のレベルでのＩｇＧ精製に多用されてきたが、近年ヒトＩｇＧ１を中心とした抗体医薬が、医薬分野に利用されるようになり、工業的、製薬的な利用における重要性がますます高まっている。特に、プロテインＡカラムは、抗体医薬の精製においても中心的な役割を果たしており、多くの抗体医薬の製造メーカは、このカラムを中心とした精製システムを導入している。
【０００４】
しかしながら、このプロテインＡカラムは、いくつかの問題点が指摘されている。１つには、精製抗体中へのプロテインＡの混入の問題である。プロテインＡはバクテリア由来のタンパク質であり、人体投与後の免疫原性が高く、またエンドトキシンの混入が危惧される。このような医薬品精製に用いるアフィニティリガンドとしては、不都合な物質の混入が起こらないよう、リガンドとしてのプロテインＡには高い精製度が求められており、これが医薬品精製に利用するプロテインＡカラムのコストを上げている要因になっている。
【０００５】
このような問題を解決すべく、新たなＩｇＧ抗体の精製システムの開発が行われている。
【０００６】
例えば、特許文献１には、Ｒ１−Ｘ０１−Ｘ０２−Ｘ０３−Ｘ０４−Ｘ０５−Ｘ０６−Ｘ０７−Ｘ０８−Ｘ０９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｒ２のアミノ酸配列を持つ１１〜１３残基程度のイムノグロブリン結合性ポリペプチドが記載されている。このポリペプチドは、Ｘ０２とＸ１２との間でジスルフィド結合（Ｘ０２＝Ｘ１２＝Ｃである場合）またはアミド結合（Ｘ０２およびＸ１２の一方がＤｐｒ、Ｄａｂ、Ｋ、またはＯｒｎであり、他方がＤまたはＥである場合；ただし、Ｄａｂはジアミノブタン酸、Ｄｐｒはジアミノプロピオン酸、Ｏｒｎはオルニチンを表す）を形成して環化した環状ペプチドであってもよいことが記載されている（［００１７］〜［００３４］）。
【０００７】
また、例えば、特許文献２には、（Ｘ１−３）−Ｃ−（Ｘ２）−Ｈ−Ｒ−Ｇ−（Ｘａａ１）−Ｌ−Ｖ−Ｗ−Ｃ−（Ｘ１−３）で表される１３〜１７アミノ酸残基からなるＩｇＧ結合性ポリペプチドが記載されている。このポリペプチドは、２つのシステイン（Ｃ）残基間でジスルフィド結合を形成した環状ペプチドであってもよいことが記載されている（［００４２］〜［００４４］）。
【０００８】
さらに、例えば、特許文献３には、式Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｃｙｓ−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３を有する１１から２０のアミノ酸を有するＩｇＧ−Ｆｃ結合性のペプチドが記載されている（請求項３９）。このペプチドはジスルフィド結合またはラクタム結合の形成により環化できること、ジスルフィド結合を形成することのできる残基は、Ｃｙｓ、Ｐｅｎ、Ｍｐｒ、およびＭｐｐ等であり、ラクタム結合を形成することのできる残基は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、αβ−ジアミノブチル酸、ジアミノ酢酸、アミノ安息香酸、およびメルカプト安息香酸等であることが記載されている（［００３９］）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】米国特許出願公開第２００４／００８７７６５号明細書
【特許文献２】国際公開第２０１３／０２７７９６号
【特許文献３】特開２００７−２８９２００号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明者が、立体構造を制御して抗体結合性を改善することに着目して、特許文献１〜３に記載された抗体結合性環状ペプチドの結合活性および薬品耐性を検討したところ、結合活性または薬品耐性に改善の余地があることを知見した。
【００１１】
そこで、本発明は、抗体結合性に優れ、しかも薬品耐性が改善された環状ペプチド、アフィニティクロマトグラフィー担体、標識化抗体、抗体薬物複合体、および医薬製剤を提供すること目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者は、上記目的を達成すべく鋭意検討を重ねた結果、架橋部アミノ酸残基が薬品耐性に重要な役割を果たすことを知見し、本発明を完成させた。
【００１３】
すなわち、本発明は、以下の［１］〜［５０］を提供する。
［１］  下記式（Ｉ）によって表される環状ペプチド。
ＲＮ−Ｘｇ−［Ｘｉ−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｊ］ｋ−Ｘｈ−ＲＣ    ・・・（Ｉ）
式（Ｉ）中、
ＲＮは、Ｎ末端基を表し；
ＲＣは、Ｃ末端基を表し；
Ｘ１は、Ｌ−ロイシン残基、Ｌ−イソロイシン残基、Ｌ−メチオニン残基、Ｌ−リシン残基、またはＬ−アルギニン残基を表し；
Ｘ２は、Ｌ−バリン残基またはＬ−イソロイシン残基を表し；
Ｘ３は、Ｌ−トリプトファン残基を表し；
ＸａおよびＸｂは、それぞれ独立に、Ｌ−システインおよびＤ−システイン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、かつ、ジスルフィド結合を介して結合している、または、一方が、Ｌ−システインおよびＤ−システイン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、他方が、側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、かつ、チオエーテル結合を介して結合している；
Ｘｇ、Ｘｈ、Ｘｉ、Ｘｊ、Ｘｍ、およびＸｎは、それぞれ、連続するｇ個のＸ、連続するｈ個のＸ、連続するｉ個のＸ、連続するｊ個のＸ、連続するｍ個のＸ、および連続するｎ個のＸを表し；
Ｘは、アミノ酸残基を表し、Ｘが複数である場合は、複数のＸは互いに同一であっても異なっていてもよく；
ｇ、ｈ、ｉ、およびｊは、それぞれ独立に、０以上の整数であり；
ｍおよびｎは、０≦ｍ≦９、０≦ｎ≦９、および３≦ｍ＋ｎ≦９を同時に満たす整数であり；
ｋは、１以上の整数であり、ｋ≧２である場合は、繰返し単位［Ｘｉ−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｊ］中のＸ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘａ、Ｘｂ、Ｘｉ、Ｘｊ、Ｘｍ、およびＸｎは、それぞれ、各繰返し単位間で同一であってもよいし、相違していてもよい。
［２］  下記式（ＩＡ）によって表される、上記［１］に記載の環状ペプチド。
ＲＮ−Ｘｇ−［Ｘｐ２−Ｘ４ｒ−Ｘｐ１−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｑ１−Ｘ５ｓ−Ｘｑ２］ｋ−Ｘｈ−ＲＣ    ・・・（ＩＡ）
式（ＩＡ）中、
ＲＮ、ＲＣ、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘａ、Ｘｂ、Ｘｇ、Ｘｈ、Ｘｍ、Ｘｎ、Ｘ、ｇ、ｈ、ｍ、ｎ、およびｋは、上記式（Ｉ）中におけるものと同義であり；
Ｘ４ｒ、Ｘ５ｓ、Ｘｐ１、Ｘｐ２、Ｘｑ１、およびＸｑ２は、それぞれ、連続するｒ個のＸ４、連続するｓ個のＸ５、連続するｐ１個のＸ、連続するｐ２個のＸ、連続するｑ１個のＸ、および連続するｑ２個のＸを表し；
Ｘ４およびＸ５は、それぞれ独立に、側鎖にカルボキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基または側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、Ｘ４またはＸ５が複数である場合は、複数のＸ４またはＸ５は互いに同一であっても異なっていてもよく；
ｐ１、ｐ２、ｑ１、およびｑ２は、それぞれ独立に、０以上の整数であり；
ｒおよびｓは、それぞれ、０≦ｒ≦５、０≦ｓ≦５、および、１≦Ｍａｘ（ｒ，ｓ）≦５を満たす整数であり、ただし、Ｍａｘ（ｒ，ｓ）は、ｒ≠ｓであるとき、ｒとｓの２数のうち大きい方を表し、ｒ＝ｓであるとき、ｒまたはｓを表し；
ｋ≧２である場合は、繰返し単位［Ｘｐ２−Ｘ４ｒ−Ｘｐ１−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｑ１−Ｘ５ｓ−Ｘｑ２］中のＸ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘａ、Ｘｂ、Ｘ４ｒ、Ｘ５ｓ、Ｘｍ、Ｘｎ、Ｘｐ２、Ｘｐ１、Ｘｑ１、およびＸｑ２は、それぞれ、各繰返し単位間で同一であってもよいし、相違していてもよい。
［３］  下記式（ＩＢ）によって表される、上記［１］に記載の環状ペプチド。
ＲＮ−Ｘｖ１−Ｘ６ｔ−Ｘｖ２−［Ｘｉ−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｊ］ｋ−Ｘｗ２−Ｘ７ｕ−Ｘｗ１−ＲＣ    ・・・（ＩＢ）
式（ＩＢ）中、
ＲＮ、ＲＣ、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘａ、Ｘｂ、Ｘｉ、Ｘｊ、Ｘｍ、Ｘｎ、Ｘ、ｉ、ｊ、ｍ、ｎ、およびｋは、上記式（Ｉ）中におけるものと同義であり；
Ｘ６ｔ、Ｘ７ｕ、Ｘｖ１、Ｘｖ２、Ｘｗ１、およびＸｗ２は、それぞれ、連続するｔ個のＸ６、連続するｕ個のＸ７、連続するｖ１個のＸ、連続するｖ２個のＸ、連続するｗ１個のＸ、および連続するｗ２個のＸを表し；
Ｘ６およびＸ７は、それぞれ独立に、側鎖に固定化官能基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、Ｘ６またはＸ７が複数である場合は、複数のＸ６またはＸ７は互いに同一であっても異なっていてもよく；
ｔおよびｕは、それぞれ、０≦ｔ≦５、０≦ｕ≦５、および、１≦Ｍａｘ（ｔ，ｕ）≦５を満たす整数であり、ただし、Ｍａｘ（ｔ，ｕ）は、ｔ≠ｕであるとき、ｔとｕの２数のうち大きい方を表し、ｔ＝ｕであるとき、ｔまたはｕを表し；
ｖ１、ｖ２、ｗ１、およびｗ２は、それぞれ独立に、０以上の整数であり；
ｋ≧２である場合は、繰返し単位［Ｘｉ−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｊ］中のＸ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘａ、Ｘｂ、Ｘｉ、Ｘｊ、Ｘｍ、およびＸｎは、それぞれ、各繰返し単位間で同一であってもよいし、相違していてもよい。
［４］  下記式（ＩＣ）によって表される、上記［１］〜［３］のいずれか１つに記載の環状ペプチド。
ＲＮ−Ｘｖ１−Ｘ６ｔ−Ｘｖ２−［Ｘｐ２−Ｘ４ｒ−Ｘｐ１−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｑ１−Ｘ５ｓ−Ｘｑ２］ｋ−Ｘｗ２−Ｘ７ｕ−Ｘｗ１−ＲＣ    ・・・（ＩＣ）
式（ＩＣ）中、
ＲＮ、ＲＣ、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘａ、Ｘｂ、Ｘｍ、Ｘｎ、Ｘ、ｍ、ｎ、およびｋは、上記式（Ｉ）中におけるものと同義であり；
Ｘｐ１、Ｘｐ２、Ｘｑ１、Ｘｐ２、Ｘ４ｒ、Ｘ５ｓ、Ｘ６ｔ、Ｘ７ｕ、Ｘｖ１、Ｘｖ２、Ｘｗ１、およびＸｗ２は、それぞれ、連続するｐ１個のＸ，連続するｐ２個のＸ、連続するｑ１個のＸ、連続するｑ２個のＸ、連続するｒ個のＸ４、連続するｓ個のＸ５、連続するｔ個のＸ６、連続するｕ個のＸ７、連続するｖ１個のＸ，連続するｖ２個のＸ、連続するｗ１個のＸ、および連続するｗ２個のＸを表し；
Ｘ４およびＸ５は、それぞれ独立に、側鎖にカルボキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基または側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、Ｘ４またはＸ５が複数である場合は、複数のＸ４またはＸ５は互いに同一であっても異なっていてもよく；
Ｘ６およびＸ７は、それぞれ独立に、側鎖に固定化官能基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、Ｘ６またはＸ７が複数である場合は、複数のＸ６またはＸ７は互いに同一であっても異なっていてもよく；
ｐ１、ｐ２、ｑ１、およびｑ２は、それぞれ独立に、０以上の整数であり；
ｒおよびｓは、それぞれ、０≦ｒ≦５、０≦ｓ≦５、および、１≦Ｍａｘ（ｒ，ｓ）≦５を満たす整数であり、ただし、Ｍａｘ（ｒ，ｓ）は、ｒ≠ｓであるとき、ｒとｓの２数のうち大きい方を表し、ｒ＝ｓであるとき、ｒまたはｓを表し；
ｔおよびｕは、それぞれ、０≦ｔ≦５、０≦ｕ≦５、および、１≦Ｍａｘ（ｔ，ｕ）≦５を満たす整数であり、ただし、Ｍａｘ（ｔ，ｕ）は、ｔ≠ｕであるとき、ｔとｕの２数のうち大きい方を表し、ｔ＝ｕであるとき、ｔまたはｕを表し；
ｖ１、ｖ２、ｗ１、およびｗ２は、それぞれ独立に、０以上の整数であり；
ｋ≧２である場合は、繰返し単位［Ｘｐ２−Ｘ４ｒ−Ｘｐ１−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｑ１−Ｘ５ｓ−Ｘｑ２］中のＸ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘａ、Ｘｂ、Ｘ４ｒ、Ｘ５ｓ、Ｘｍ、Ｘｎ、Ｘｐ２、Ｘｐ１、Ｘｑ１、およびＸｑ２は、それぞれ、各繰返し単位間で同一であってもよいし、相違していてもよい。
［５］  ８≦ｇ＋ｈ＋ｋ×（ｉ＋ｊ＋ｍ＋ｎ＋５）≦５０である、上記［１］に記載の環状ペプチド。
［６］  ８≦ｇ＋ｈ＋ｋ×（ｍ＋ｎ＋ｐ１＋ｐ２＋ｑ１＋ｑ２＋５）≦５０である、上記［２］に記載の環状ペプチド。
［７］  ８≦ｖ１＋ｖ２＋ｗ１＋ｗ２＋ｔ＋ｕ＋ｋ×（ｉ＋ｊ＋ｍ＋ｎ＋５）≦５０である、上記［３］に記載の環状ペプチド。
［８］  ８≦ｖ１＋ｖ２＋ｗ１＋ｗ２＋ｔ＋ｕ＋ｋ×（ｍ＋ｎ＋ｐ１＋ｐ２＋ｑ１＋ｑ２＋５）≦５０である、上記［４］に記載の環状ペプチド。
［９］  上記側鎖にカルボキシ基を有するアミノ酸が、Ｌ−アスパラギン酸、Ｄ−アスパラギン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−グルタミン酸、Ｌ−ホモグルタミン酸、およびＤ−ホモグルタミン酸からなる群から選択される少なくとも１種のアミノ酸であり、上記側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸が、Ｌ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、Ｄ−ホモセリン、Ｌ−チロシン、Ｄ−チロシン、Ｌ−トレオニン、Ｄ−トレオニン、Ｌ−アロトレオニン、およびＤ−アロトレオニンからなる群から選択される少なくとも１種のアミノ酸である、上記［２］、［４］、［６］、または［８］に記載の環状ペプチド。
［１０］  上記側鎖にカルボキシ基を有するアミノ酸がＬ−アスパラギン酸であり、上記側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸がＬ−トレオニンである、上記［９］に記載の環状ペプチド。
［１１］  上記固定化官能基がアミノ基またはチオール基である、上記［３］、［４］、［７］、または［８］に記載の環状ペプチド。
［１２］  上記側鎖に固定化官能基を有するアミノ酸が、Ｌ−リシン、Ｄ−リシン、Ｌ−システイン、Ｄ−システイン、Ｌ−ホモシステインおよびＤ−ホモシステインからなる群から選択される少なくとも１種のアミノ酸である、上記［３］、［４］、［７］、または［８］に記載の環状ペプチド。
［１３］  上記Ｘａが、（２Ｓ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｓ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｌ−オルニチン、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｄ−オルニチン、Ｎ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシン、およびＮ−ε−クロロアセチル−Ｄ−リシンからなる群から選択される側鎖にクロロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基であり、
上記Ｘｂが、Ｌ−ホモシステインまたはＤ−ホモシステインに由来するアミノ酸残基であり、
上記Ｘａおよび上記Ｘｂは、チオエーテル結合を介して結合している、上記［１］〜［１２］のいずれか１つに記載の環状ペプチド。
［１４］  上記Ｘａが、Ｌ−ホモシステインまたはＤ−ホモシステインに由来するアミノ酸残基であり、
上記Ｘｂが、（２Ｓ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｓ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｌ−オルニチン、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｄ−オルニチン、Ｎ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシン、およびＮ−ε−クロロアセチル−Ｄ−リシンからなる群から選択される側鎖にクロロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基であり、
上記Ｘａおよび上記Ｘｂは、チオエーテル結合を介して結合している、上記［１］〜［１２］のいずれか１つに記載の環状ペプチド。
［１５］  上記式（Ｉ）、（ＩＡ）、（ＩＢ）、または（ＩＣ）中のアミノ酸部分配列Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎが、下記式（１）で表されるアミノ酸配列（配列番号１）と、７０％以上の配列相同性を有する、上記［１］〜［１４］のいずれか１つに記載の環状ペプチド。
Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ  ・・・（１）
式（１）中、
ＡはＬ−アラニン残基を表し；
ＹはＬ−チロシン残基を表し；
ＨはＬ−ヒスチジン残基を表し；
ＬはＬ−ロイシン残基を表し；
Ｇはグリシン残基を表し；
ＥはＬ−グルタミン酸残基を表し；
ＶはＬ−バリン残基を表し；
ＷはＬ−トリプトファン残基を表す。
［１６］  上記式（Ｉ）、（ＩＡ）、（ＩＢ）、または（ＩＣ）において、ｋ＝１である、上記［１］〜［１５］のいずれか１つに記載の環状ペプチド。
［１７］  下記式（ＩＩ）によって表される、上記［１］に記載の環状ペプチド。
ＲＮ−Ｘｖ０−Ｘ６ｔ０−Ｘｅ０−Ｘ４ｒ０−Ｘｐ０−Ｘａ−Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｘ８−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ−Ｘｂ−Ｘｑ０−Ｘ５ｓ０−Ｘｆ０−Ｘ７ｕ０−Ｘｗ０−ＲＣ    ・・・（ＩＩ）
式（ＩＩ）中、
Ｘａ、Ｘｂ、Ｘ、ＲＮ、およびＲＣは、上記式（Ｉ）中におけるものと同義であり；
Ｘ４およびＸ５は、それぞれ独立に、側鎖にカルボキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基または側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、Ｘ４またはＸ５が複数である場合は、複数のＸ４またはＸ５は互いに同一であっても異なっていてもよく；
Ｘ６およびＸ７は、それぞれ独立に、側鎖に固定化官能基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、Ｘ６またはＸ７が複数である場合は、複数のＸ６またはＸ７は互いに同一であっても異なっていてもよく；
Ｘ８はＬ−ロイシン残基、Ｄ−ロイシン残基、Ｌ−アルギニン残基、またはＤ−アルギニン残基を表し；
ｅ０およびｆ０は、それぞれ、０≦ｅ０≦１０、および、０≦ｆ０≦１０を満たす整数であり；
ｐ０およびｑ０は、それぞれ、０≦ｐ０≦５、および、０≦ｑ０≦５を満たす整数であり；
ｒ０およびｓ０は、それぞれ、０≦ｒ０≦５、および、０≦ｓ０≦５を満たす整数であり；
ｔ０およびｕ０は、それぞれ、０≦ｔ０≦５、および、０≦ｕ０≦５を満たす整数であり；
ｖ０およびｗ０は、それぞれ、０≦ｖ０≦５、および、３≦ｗ０≦５を満たす整数であり；
さらに、ｐ０、ｑ０、ｒ０、ｓ０、ｔ０、ｕ０、ｖ０、およびｗ０は、０≦ｐ０＋ｑ０＋ｒ０＋ｓ０＋ｔ０＋ｕ０＋ｖ０＋ｗ０≦３９を満たし；
ＡはＬ−アラニン残基またはＤ−アラニン残基を表し；
ＹはＬ−チロシン残基またはＤ−チロシン残基を表し；
ＨはＬ−ヒスチジン残基またはＤ−ヒスチジン残基を表し；
Ｇはグリシン残基を表し；
ＥはＬ−グルタミン酸残基またはＤ−グルタミン酸残基を表し；
ＬはＬ−ロイシン残基を表し；
ＶはＬ−バリン残基を表し；
ＷはＬ−トリプトファン残基を表す。
［１８］  上記Ｘ６および上記Ｘ７が、それぞれ独立に、Ｌ−リシン、Ｄ−リシン、Ｌ−システイン、Ｄ−システイン、Ｌ−ホモシステインおよびＤ−ホモシステインからなる群から選択されるアミノ酸に由来するアミノ酸残基である、上記［１７］に記載の環状ペプチド。
［１９］  上記Ｘａが、（２Ｓ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｓ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｌ−オルニチン、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｄ−オルニチン、Ｎ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシン、およびＮ−ε−クロロアセチル−Ｄ−リシンからなる群から選択される側鎖にクロロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基であり、
上記Ｘｂが、Ｌ−ホモシステインまたはＤ−ホモシステインに由来するアミノ酸残基であり、
上記Ｘａおよび上記Ｘｂは、チオエーテル結合を介して結合している、上記［１７］または［１８］に記載の環状ペプチド。
［２０］  上記Ｘａが、Ｌ−ホモシステインまたはＤ−ホモシステインに由来するアミノ酸残基であり、
上記Ｘｂが、（２Ｓ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｓ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｌ−オルニチン、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｄ−オルニチン、Ｎ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシン、およびＮ−ε−クロロアセチル−Ｄ−リシンからなる群から選択される側鎖にクロロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基であり、
上記Ｘａおよび上記Ｘｂは、チオエーテル結合を介して結合している、上記［１７］または［１８］に記載の環状ペプチド。
［２１］  下記式（Ｉ’）によって表される環状ペプチド。
ＲＮ−Ｘｇ−［Ｘｉ−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｊ］ｋ−Ｘｈ−ＲＣ    ・・・（Ｉ’）
式（Ｉ’）中、
ＲＮは、Ｎ末端基を表し；
ＲＣは、Ｃ末端基を表し；
Ｘ１は、Ｌ−ロイシン残基、Ｌ−イソロイシン残基、Ｌ−メチオニン残基、Ｌ−リシン残基、またはＬ−アルギニン残基を表し；
Ｘ２は、Ｌ−バリン残基またはＬ−イソロイシン残基を表し；
Ｘ３は、Ｌ−トリプトファン残基を表し；
ＸａおよびＸｂは、一方が、Ｌ−システインまたはＤ−システインに由来するアミノ酸残基を表し、他方が、側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、かつ、チオエーテル結合を介して結合している、または、一方が、Ｌ−ペニシラミンまたはＤ−ペニシラミンに由来するアミノ酸残基を表し、他方が、側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、かつ、チオエーテル結合を介して結合している；
Ｘｇ、Ｘｈ、Ｘｉ、Ｘｊ、Ｘｍ、およびＸｎは、それぞれ、連続するｇ個のＸ、連続するｈ個のＸ、連続するｉ個のＸ、連続するｊ個のＸ、連続するｍ個のＸ、および連続するｎ個のＸを表し；
Ｘは、
ＸａおよびＸｂの一方がＬ−システインまたはＤ−システインに由来するアミノ酸残基を表すときは、Ｌ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、Ｄ−ホモセリン、Ｌ−アルギニン、およびＤ−アルギニン以外のアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、
ＸａおよびＸｂの一方がＬ−ペニシラミンまたはＤ−ペニシラミンに由来するアミノ酸残基を表すときは、Ｌ−セリンおよびＤ−セリン以外のアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、
Ｘが複数である場合は、複数のＸは互いに同一であっても異なっていてもよく；
ｇ、ｈ、ｉ、およびｊは、それぞれ独立に、０以上の整数であり；
ｍおよびｎは、０≦ｍ≦９、０≦ｎ≦９、および３≦ｍ＋ｎ≦９を同時に満たす整数であり；
ｋは、１以上の整数であり、ｋ≧２である場合は、繰返し単位［Ｘｉ−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｊ］中のＸ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘａ、Ｘｂ、Ｘｉ、Ｘｊ、Ｘｍ、およびＸｎは、それぞれ、各繰返し単位間で同一であってもよいし、相違していてもよい。
［２２］  下記式（Ｉ’Ａ）によって表される、上記［２１］に記載の環状ペプチド。
ＲＮ−Ｘｇ−［Ｘｐ２−Ｘ４ｒ−Ｘｐ１−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｑ１−Ｘ５ｓ−Ｘｑ２］ｋ−Ｘｈ−ＲＣ    ・・・（Ｉ’Ａ）
式（Ｉ’Ａ）中、
ＲＮ、ＲＣ、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘａ、Ｘｂ、Ｘｇ、Ｘｈ、Ｘｍ、Ｘｎ、ｇ、ｈ、ｍ、ｎ、およびｋは、上記式（Ｉ’）中におけるものと同義であり；
Ｘ４ｒ、Ｘ５ｓ、Ｘｐ１、Ｘｐ２、Ｘｑ１、およびＸｑ２は、それぞれ、連続するｒ個のＸ４、連続するｓ個のＸ５、連続するｐ１個のＸ、連続するｐ２個のＸ、連続するｑ１個のＸ、および連続するｑ２個のＸを表し；
Ｘは、
ＸａおよびＸｂの一方がＬ−システインまたはＤ−システインに由来するアミノ酸残基を表すときは、Ｌ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、Ｄ−ホモセリン、Ｌ−アルギニン、およびＤ−アルギニン以外のアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、
ＸａおよびＸｂの一方がＬ−ペニシラミンまたはＤ−ペニシラミンに由来するアミノ酸残基を表すときは、Ｌ−セリンおよびＤ−セリン以外のアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、
Ｘが複数である場合は、複数のＸは互いに同一であっても異なっていてもよく；
Ｘ４およびＸ５は、
ＸａおよびＸｂの一方がＬ−システインまたはＤ−システインに由来するアミノ酸残基を表すときは、それぞれ独立に、側鎖にカルボキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基、またはＬ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、およびＤ−ホモセリン以外の側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、
ＸａおよびＸｂの一方がＬ−ペニシラミンまたはＤ−ペニシラミンに由来するアミノ酸残基を表すときは、それぞれ独立に、側鎖にカルボキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基、またはＬ−セリンおよびＤ−セリン以外の側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、
Ｘ４またはＸ５が複数である場合は、複数のＸ４またはＸ５は互いに同一であっても異なっていてもよく；
ｐ１、ｐ２、ｑ１、およびｑ２は、それぞれ独立に、０以上の整数であり；
ｒおよびｓは、それぞれ、０≦ｒ≦５、０≦ｓ≦５、および、１≦Ｍａｘ（ｒ，ｓ）≦５を満たす整数であり、ただし、Ｍａｘ（ｒ，ｓ）は、ｒ≠ｓであるとき、ｒとｓの２数のうち大きい方を表し、ｒ＝ｓであるとき、ｒまたはｓを表し；
ｋ≧２である場合は、繰返し単位［Ｘｐ２−Ｘ４ｒ−Ｘｐ１−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｑ１−Ｘ５ｓ−Ｘｑ２］中のＸ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘａ、Ｘｂ、Ｘ４ｒ、Ｘ５ｓ、Ｘｍ、Ｘｎ、Ｘｐ２、Ｘｐ１、Ｘｑ１、およびＸｑ２は、それぞれ、各繰返し単位間で同一であってもよいし、相違していてもよい。
［２３］  下記式（Ｉ’Ｂ）によって表される、上記［２１］に記載の環状ペプチド。
ＲＮ−Ｘｖ１−Ｘ６ｔ−Ｘｖ２−［Ｘｉ−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｊ］ｋ−Ｘｗ２−Ｘ７ｕ−Ｘｗ１−ＲＣ    ・・・（Ｉ’Ｂ）
式（Ｉ’Ｂ）中、
ＲＮ、ＲＣ、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘａ、Ｘｂ、Ｘｉ、Ｘｊ、Ｘｍ、Ｘｎ、ｉ、ｊ、ｍ、ｎ、およびｋは、上記式（Ｉ’）中におけるものと同義であり；
Ｘ６ｔ、Ｘ７ｕ、Ｘｖ１、Ｘｖ２、Ｘｗ１、およびＸｗ２は、それぞれ、連続するｔ個のＸ６、連続するｕ個のＸ７、連続するｖ１個のＸ、連続するｖ２個のＸ、連続するｗ１個のＸ、および連続するｗ２個のＸを表し；
Ｘは、
ＸａおよびＸｂの一方がＬ−システインまたはＤ−システインに由来するアミノ酸残基を表すときは、Ｌ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、Ｄ−ホモセリン、Ｌ−アルギニン、およびＤ−アルギニン以外のアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、
ＸａおよびＸｂの一方がＬ−ペニシラミンまたはＤ−ペニシラミンに由来するアミノ酸残基を表すときは、Ｌ−セリンおよびＤ−セリン以外のアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、
Ｘが複数である場合は、複数のＸは互いに同一であっても異なっていてもよく；
Ｘ６およびＸ７は、
ＸａおよびＸｂの一方がＬ−システインまたはＤ−システインに由来するアミノ酸残基を表すときは、それぞれ独立に、Ｌ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、Ｄ−ホモセリン、Ｌ−アルギニン、およびＤ−アルギニン以外の側鎖に固定化官能基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、それぞれ独立に、側鎖に固定化官能基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、
ＸａおよびＸｂの一方がＬ−ペニシラミンまたはＤ−ペニシラミンに由来するアミノ酸残基を表すときは、それぞれ独立に、Ｌ−セリンおよびＤ−セリン以外の側鎖に固定化官能基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、
Ｘ６またはＸ７が複数である場合は、複数のＸ６またはＸ７は互いに同一であっても異なっていてもよく；
ｔおよびｕは、それぞれ、０≦ｔ≦５、０≦ｕ≦５、および、１≦Ｍａｘ（ｔ，ｕ）≦５を満たす整数であり、ただし、Ｍａｘ（ｔ，ｕ）は、ｔ≠ｕであるとき、ｔとｕの２数のうち大きい方を表し、ｔ＝ｕであるとき、ｔまたはｕを表し；
ｖ１、ｖ２、ｗ１、およびｗ２は、それぞれ独立に、０以上の整数であり；
ｋ≧２である場合は、繰返し単位［Ｘｉ−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｊ］中のＸ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘａ、Ｘｂ、Ｘｉ、Ｘｊ、Ｘｍ、およびＸｎは、それぞれ、各繰返し単位間で同一であってもよいし、相違していてもよい。
［２４］  下記式（Ｉ’Ｃ）によって表される、上記［２１］〜［２３］のいずれか１つに記載の環状ペプチド。
ＲＮ−Ｘｖ１−Ｘ６ｔ−Ｘｖ２−［Ｘｐ２−Ｘ４ｒ−Ｘｐ１−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｑ１−Ｘ５ｓ−Ｘｑ２］ｋ−Ｘｗ２−Ｘ７ｕ−Ｘｗ１−ＲＣ    ・・・（Ｉ’Ｃ）
式（Ｉ’Ｃ）中、
ＲＮ、ＲＣ、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘａ、Ｘｂ、Ｘｍ、Ｘｎ、ｍ、ｎ、およびｋは、上記式（Ｉ’）中におけるものと同義であり；
Ｘｐ１、Ｘｐ２、Ｘｑ１、Ｘｐ２、Ｘ４ｒ、Ｘ５ｓ、Ｘ６ｔ、Ｘ７ｕ、Ｘｖ１、Ｘｖ２、Ｘｗ１、およびＸｗ２は、それぞれ、連続するｐ１個のＸ，連続するｐ２個のＸ、連続するｑ１個のＸ、連続するｑ２個のＸ、連続するｒ個のＸ４、連続するｓ個のＸ５、連続するｔ個のＸ６、連続するｕ個のＸ７、連続するｖ１個のＸ，連続するｖ２個のＸ、連続するｗ１個のＸ、および連続するｗ２個のＸを表し；
Ｘは、
ＸａおよびＸｂの一方がＬ−システインまたはＤ−システインに由来するアミノ酸残基を表すときは、Ｌ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、Ｄ−ホモセリン、Ｌ−アルギニン、およびＤ−アルギニン以外のアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、
ＸａおよびＸｂの一方がＬ−ペニシラミンまたはＤ−ペニシラミンに由来するアミノ酸残基を表すときは、Ｌ−セリンおよびＤ−セリン以外のアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、
Ｘが複数である場合は、複数のＸは互いに同一であっても異なっていてもよく；
Ｘ４およびＸ５は、
ＸａおよびＸｂの一方がＬ−システインまたはＤ−システインに由来するアミノ酸残基を表すときは、それぞれ独立に、側鎖にカルボキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基、またはＬ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、およびＤ−ホモセリン以外の側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、
ＸａおよびＸｂの一方がＬ−ペニシラミンまたはＤ−ペニシラミンに由来するアミノ酸残基を表すときは、それぞれ独立に、側鎖にカルボキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基、またはＬ−セリンおよびＤ−セリン以外の側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、
Ｘ４またはＸ５が複数である場合は、複数のＸ４またはＸ５は互いに同一であっても異なっていてもよく；
Ｘ６およびＸ７は、
ＸａおよびＸｂの一方がＬ−システインまたはＤ−システインに由来するアミノ酸残基を表すときは、それぞれ独立に、Ｌ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、Ｄ−ホモセリン、Ｌ−アルギニン、およびＤ−アルギニン以外の側鎖に固定化官能基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、それぞれ独立に、側鎖に固定化官能基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、
ＸａおよびＸｂの一方がＬ−ペニシラミンまたはＤ−ペニシラミンに由来するアミノ酸残基を表すときは、それぞれ独立に、Ｌ−セリンおよびＤ−セリン以外の側鎖に固定化官能基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基」を表し、
Ｘ６またはＸ７が複数である場合は、複数のＸ６またはＸ７は互いに同一であっても異なっていてもよく；
ｐ１、ｐ２、ｑ１、およびｑ２は、それぞれ独立に、０以上の整数であり；
ｒおよびｓは、それぞれ、０≦ｒ≦５、０≦ｓ≦５、および、１≦Ｍａｘ（ｒ，ｓ）≦５を満たす整数であり、ただし、Ｍａｘ（ｒ，ｓ）は、ｒ≠ｓであるとき、ｒとｓの２数のうち大きい方を表し、ｒ＝ｓであるとき、ｒまたはｓを表し；
ｔおよびｕは、それぞれ、０≦ｔ≦５、０≦ｕ≦５、および、１≦Ｍａｘ（ｔ，ｕ）≦５を満たす整数であり、ただし、Ｍａｘ（ｔ，ｕ）は、ｔ≠ｕであるとき、ｔとｕの２数のうち大きい方を表し、ｔ＝ｕであるとき、ｔまたはｕを表し；
ｖ１、ｖ２、ｗ１、およびｗ２は、それぞれ独立に、０以上の整数であり；
ｋ≧２である場合は、繰返し単位［Ｘｐ２−Ｘ４ｒ−Ｘｐ１−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｑ１−Ｘ５ｓ−Ｘｑ２］中のＸ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘａ、Ｘｂ、Ｘ４ｒ、Ｘ５ｓ、Ｘｍ、Ｘｎ、Ｘｐ２、Ｘｐ１、Ｘｑ１、およびＸｑ２は、それぞれ、各繰返し単位間で同一であってもよいし、相違していてもよい。
［２５］  ８≦ｇ＋ｈ＋ｋ×（ｉ＋ｊ＋ｍ＋ｎ＋５）≦５０である、上記［２１］に記載の環状ペプチド。
［２６］  ８≦ｇ＋ｈ＋ｋ×（ｍ＋ｎ＋ｐ１＋ｐ２＋ｑ１＋ｑ２＋５）≦５０である、上記［２２］に記載の環状ペプチド。
［２７］  ８≦ｖ１＋ｖ２＋ｗ１＋ｗ２＋ｔ＋ｕ＋ｋ×（ｉ＋ｊ＋ｍ＋ｎ＋５）≦５０である、上記［２３］に記載の環状ペプチド。
［２８］  ８≦ｖ１＋ｖ２＋ｗ１＋ｗ２＋ｔ＋ｕ＋ｋ×（ｍ＋ｎ＋ｐ１＋ｐ２＋ｑ１＋ｑ２＋５）≦５０である、上記［２４］に記載の環状ペプチド。
［２９］  上記側鎖にカルボキシ基を有するアミノ酸が、Ｌ−アスパラギン酸、Ｄ−アスパラギン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−グルタミン酸、Ｌ−ホモグルタミン酸、およびＤ−ホモグルタミン酸からなる群から選択される少なくとも１種のアミノ酸であり、
ＸａおよびＸｂの一方がＬ−システインまたはＤ−システインに由来するアミノ酸残基を表すときは、上記Ｌ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、およびＤ−ホモセリン以外の側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸が、Ｌ−チロシン、Ｄ−チロシン、Ｌ−トレオニン、Ｄ−トレオニン、Ｌ−アロトレオニン、およびＤ−アロトレオニンからなる群から選択される少なくとも１種のアミノ酸であり、
ＸａおよびＸｂの一方がＬ−システインまたはＤ−システインに由来するアミノ酸残基を表すときは、上記Ｌ−セリンおよびＤ−セリン以外の側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸が、Ｌ−ホモセリン、Ｄ−ホモセリン、Ｌ−チロシン、Ｄ−チロシン、Ｌ−トレオニン、Ｄ−トレオニン、Ｌ−アロトレオニン、およびＤ−アロトレオニンからなる群から選択される少なくとも１種のアミノ酸である、
上記［２２］、［２４］、［２６］、または［２８］に記載の環状ペプチド。
［３０］  上記側鎖にカルボキシ基を有するアミノ酸がＬ−アスパラギン酸であり、
上記Ｌ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、およびＤ−ホモセリン以外の側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸、ならびに上記Ｌ−セリンおよびＤ−セリン以外の側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基が、Ｌ−トレオニンである、
上記［２２］、［２４］、［２６］、または［２８］に記載の環状ペプチド。
［３１］  上記固定化官能基がアミノ基またはチオール基である、上記［２３］、［２４］、［２７］、または［２８］に記載の環状ペプチド。
［３２］  上記Ｌ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、Ｄ−ホモセリン、Ｌ−アルギニン、およびＤ−アルギニン以外の側鎖に固定化官能基を有するアミノ酸、ならびに上記Ｌ−セリンおよびＤ−セリン以外の側鎖に固定化官能基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基が、Ｌ−リシン、Ｄ−リシン、Ｌ−システイン、Ｄ−システイン、Ｌ−ホモシステインおよびＤ−ホモシステインからなる群から選択される少なくとも１種のアミノ酸である、上記［２３］、［２４］、［２７］、または［２８］に記載の環状ペプチド。
［３３］  上記Ｘａが、（２Ｓ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｓ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｌ−オルニチン、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｄ−オルニチン、Ｎ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシン、およびＮ−ε−クロロアセチル−Ｄ−リシンからなる群から選択される側鎖にクロロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基であり、
上記Ｘｂが、Ｌ−システインもしくはＤ−システインに由来するアミノ酸残基、またはＬ−ペニシラミンもしくはＤ−ペニシラミンに由来するアミノ酸残基であり、
上記Ｘａおよび上記Ｘｂは、チオエーテル結合を介して結合している、上記［２１］〜［３２］のいずれか１つに記載の環状ペプチド。
［３４］  上記Ｘａが、Ｌ−システインもしくはＤ−システインに由来するアミノ酸残基、またはＬ−ペニシラミンもしくはＤ−ペニシラミンに由来するアミノ酸残基であり、
上記Ｘｂが、（２Ｓ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｓ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｌ−オルニチン、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｄ−オルニチン、Ｎ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシン、およびＮ−ε−クロロアセチル−Ｄ−リシンからなる群から選択される側鎖にクロロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基であり、
上記Ｘａおよび上記Ｘｂは、チオエーテル結合を介して結合している、上記［２１］〜［３２］のいずれか１つに記載の環状ペプチド。
［３５］  上記式（Ｉ’）、（Ｉ’Ａ）、（Ｉ’Ｂ）、または（Ｉ’Ｃ）中のアミノ酸部分配列Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎが、下記式（１）で表されるアミノ酸配列（配列番号１）と、７０％以上の配列相同性を有する、上記［２１］〜［３４］のいずれか１つに記載の環状ペプチド。
Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ  ・・・（１）
式（１）および式（２）中、
ＡはＬ−アラニン残基を表し；
ＹはＬ−チロシン残基を表し；
ＨはＬ−ヒスチジン残基を表し；
ＬはＬ−ロイシン残基を表し；
Ｇはグリシン残基を表し；
ＥはＬ−グルタミン酸残基を表し；
ＶはＬ−バリン残基を表し；
ＷはＬ−トリプトファン残基を表す。
［３６］  上記式（Ｉ’）、（Ｉ’Ａ）、（Ｉ’Ｂ）、または（Ｉ’Ｃ）において、ｋ＝１である、上記［２１］〜［３５］のいずれか１つに記載の環状ペプチド。
［３７］  下記式（ＩＩ’）によって表される、上記［２１］に記載の環状ペプチド。
ＲＮ−Ｘｖ０−Ｘ６ｔ０−Ｘｅ０−Ｘ４ｒ０−Ｘｐ０−Ｘａ−Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｘ８−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ−Ｘｂ−Ｘｑ０−Ｘ５ｓ０−Ｘｆ０−Ｘ７ｕ０−Ｘｗ０−ＲＣ    ・・・（ＩＩ’）
式（ＩＩ’）中、
Ｘａ、Ｘｂ、Ｘ、ＲＮ、およびＲＣは、上記式（Ｉ’）中におけるものと同義であり；
Ｘ４およびＸ５は、
ＸａおよびＸｂの一方がＬ−システインまたはＤ−システインに由来するアミノ酸残基を表すときは、それぞれ独立に、側鎖にカルボキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基、またはＬ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、およびＤ−ホモセリン以外の側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、
ＸａおよびＸｂの一方がＬ−ペニシラミンまたはＤ−ペニシラミンに由来するアミノ酸残基を表すときは、それぞれ独立に、側鎖にカルボキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基、またはＬ−セリンおよびＤ−セリン以外の側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、
Ｘ４またはＸ５が複数である場合は、複数のＸ４またはＸ５は互いに同一であっても異なっていてもよく；
Ｘ６およびＸ７は、
ＸａおよびＸｂの一方がＬ−システインまたはＤ−システインに由来するアミノ酸残基を表すときは、それぞれ独立に、Ｌ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、Ｄ−ホモセリン、Ｌ−アルギニン、およびＤ−アルギニン以外の側鎖に固定化官能基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、それぞれ独立に、側鎖に固定化官能基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、
ＸａおよびＸｂの一方がＬ−ペニシラミンまたはＤ−ペニシラミンに由来するアミノ酸残基を表すときは、それぞれ独立に、Ｌ−セリンおよびＤ−セリン以外の側鎖に固定化官能基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、
Ｘ６またはＸ７が複数である場合は、複数のＸ６またはＸ７は互いに同一であっても異なっていてもよく；
Ｘ８は、
ＸａおよびＸｂの一方がＬ−システインまたはＤ−システインに由来するアミノ酸残基を表すときは、Ｌ−ロイシン残基またはＤ−ロイシン残基を表し、
ＸａおよびＸｂの一方がＬ−ペニシラミンまたはＤ−ペニシラミンに由来するアミノ酸残基を表すときは、Ｌ−ロイシン残基、Ｄ−ロイシン残基、Ｌ−アルギニン残基、またはＤ−アルギニン残基を表し；
ｅ０およびｆ０は、それぞれ、０≦ｅ０≦１０、および、０≦ｆ０≦１０を満たす整数であり；
ｐ０およびｑ０は、それぞれ、０≦ｐ０≦５、および、０≦ｑ０≦５を満たす整数であり；
ｒ０およびｓ０は、それぞれ、０≦ｒ０≦５、および、０≦ｓ０≦５を満たす整数であり；
ｔ０およびｕ０は、それぞれ、０≦ｔ０≦５、および、０≦ｕ０≦５を満たす整数であり；
ｖ０およびｗ０は、それぞれ、０≦ｖ０≦５、および、３≦ｗ０≦５を満たす整数であり；
さらに、ｐ０、ｑ０、ｒ０、ｓ０、ｔ０、ｕ０、ｖ０、およびｗ０は、０≦ｐ０＋ｑ０＋ｒ０＋ｓ０＋ｔ０＋ｕ０＋ｖ０＋ｗ０≦３９を満たし；
ＡはＬ−アラニン残基またはＤ−アラニン残基を表し；
ＹはＬ−チロシン残基またはＤ−チロシン残基を表し；
ＨはＬ−ヒスチジン残基またはＤ−ヒスチジン残基を表し；
Ｇはグリシン残基を表し；
ＥはＬ−グルタミン酸残基またはＤ−グルタミン酸残基を表し；
ＬはＬ−ロイシン残基を表し；
ＶはＬ−バリン残基を表し；
ＷはＬ−トリプトファン残基を表す。
［３８］  上記Ｘ６および上記Ｘ７が、それぞれ独立に、Ｌ−リシン、Ｄ−リシン、Ｌ−システイン、Ｄ−システイン、Ｌ−ホモシステインおよびＤ−ホモシステインからなる群から選択されるアミノ酸に由来するアミノ酸残基である、上記［３７］に記載の環状ペプチド。
［３９］  上記Ｘａが、（２Ｓ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｓ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｌ−オルニチン、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｄ−オルニチン、Ｎ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシン、およびＮ−ε−クロロアセチル−Ｄ−リシンからなる群から選択される側鎖にクロロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基であり、
上記Ｘｂが、Ｌ−システインもしくはＤ−システインに由来するアミノ酸残基、またはＬ−ペニシラミンもしくはＤ−ペニシラミンに由来するアミノン酸残基であり、
上記Ｘａおよび上記Ｘｂは、チオエーテル結合を介して結合している、上記［３７］または［３８］に記載の環状ペプチド。
［４０］  上記Ｘａが、Ｌ−システインもしくはＤ−システインに由来するアミノ酸残基、またはＬ−ペニシラミンもしくはＤ−ペニシラミンに由来するアミノン酸残基であり、
上記Ｘｂが、（２Ｓ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｓ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｌ−オルニチン、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｄ−オルニチン、Ｎ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシン、およびＮ−ε−クロロアセチル−Ｄ−リシンからなる群から選択される側鎖にクロロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基であり、
上記Ｘａおよび上記Ｘｂは、チオエーテル結合を介して結合している、上記［３７］または［３８］に記載の環状ペプチド。
［４１］  抗体結合性リガンドである、上記［１］〜［４０］のいずれか１つに記載の環状ペプチド。
［４２］  抗体標識用リンカーである、上記［１］〜［４０］のいずれか１つに記載の環状ペプチド。
［４３］  抗体薬物複合体用リンカーである、上記［１］〜［４０］のいずれか１つに記載の環状ペプチド。
［４４］  薬物運搬体である、上記［１］〜［４０］のいずれか１つに記載の環状ペプチド。
［４５］  水不溶性担体および上記［１］〜［４０］のいずれか１つに記載の環状ペプチドを含み、
上記水不溶性担体と上記環状ペプチドとが直接的または間接的に結合している、アフィニティクロマトグラフィー担体。
［４６］  抗体、標識化合物および上記［１］〜［４０］のいずれか１つに記載の環状ペプチドを含み、
上記抗体と上記標識化合物とが上記環状ペプチドを介して結合している、標識化抗体。
［４７］  抗体、薬物、および上記［１］〜［４０］のいずれか１つに記載の環状ペプチドを含み、
上記抗体と上記薬物とが上記環状ペプチドを介して結合している、抗体薬物複合体。
［４８］  上記薬物が、リポソーム化、高分子ミセル化、またはＰＥＧ化された薬物である、上記［４７］に記載の抗体薬物複合体。
［４９］  薬物および上記［１］〜［４０］のいずれか１つに記載の環状ペプチドを含み、
上記薬物と上記環状ペプチドとが直接または間接的に結合している、医薬製剤。
［５０］  上記薬物が、リポソーム化、高分子ミセル化、またはＰＥＧ化された薬物である、上記［４９］に記載の医薬製剤。
【発明の効果】
【００１４】
本発明によれば、抗体結合性に優れ、しかも薬品耐性が改善された環状ペプチド、アフィニティクロマトグラフィー担体、標識化抗体、抗体薬物複合体、および医薬製剤が提供される。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
［本発明の環状ペプチド］
まず、本発明の従来技術に無い特徴を記載する。
特許文献１〜３には、２つのシステイン残基間でジスルフィド結合を形成して環化した環状ペプチドが記載されている。しかし、後述する比較例２の相対結合活性および耐薬品性の評価結果によれば、２つのシステイン残基間のジスルフィド結合により環化した環状ペプチドは、抗体結合性は優れるものの、耐薬品性が劣り、所望の性能を得ることができない。
また、特許文献１には、２つのアミノ酸残基間で側鎖アミノ基と側鎖カルボキシ基との反応によりアミド結合を形成して環化した環状ペプチドが記載され、特許文献３には、Ｎ末端アミノ基または側鎖アミノ基と側鎖カルボキシ基とがラクタム結合（アミド結合）を形成して環化した環状ペプチドが記載されている。しかし、後述する比較例１の相対結合活性および耐薬品性の評価結果によれば、側鎖アミノ基および側鎖カルボキシ基間のアミド結合により環化した環状ペプチドは、薬品耐性は改善するものの、抗体結合性が劣り、所望の性能を得ることができない。
これに対して、本発明では、後述する構成を採用したことによって、抗体結合性に優れ、しかも薬品耐性が改善された環状ペプチドを得ることができた。
【００１６】
なお、本明細書において、数値範囲について「〜」を使用する場合、「〜」の左右の数値をその数値範囲に含むものとする。
【００１７】
〈アミノ酸およびアミノ酸残基〉
本発明において、アミノ酸は、原則として、国際純正・応用化学連合と国際生化学・分子生物学連合による共同命名委員会（ＩＮＴＥＲＮＡＴＩＯＮＡＬ  ＵＮＩＯＮ  ＯＦ  ＰＵＲＥ  ＡＮＤ  ＡＰＰＬＩＥＤ  ＣＨＥＭＩＳＴＲＹ  ａｎｄ  ＩＮＴＥＲＮＡＴＩＯＮＡＬ  ＵＮＩＯＮ  ＯＦ  ＢＩＯＣＨＥＭＩＳＴＲＹ  ＡＮＤ  ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＢＩＯＬＯＧＹ  ＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ  Ｊｏｉｎｔ  Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ  ｏｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ  （ＪＣＢＮ））で採用された名称、略号等を用いて表す。また、アミノ酸残基は、そのアミノ酸残基が由来するアミノ酸の略号を用いて表す。なお、アミノ酸残基には、Ｎ末端アミノ酸（Ｎ末端残基）およびＣ末端アミノ酸（Ｃ末端残基）を含む。
【００１８】
特に明示しない限り、ペプチドまたはタンパク質のアミノ酸配列（「１次構造」ともいう。）は、左端から右端にかけてＮ末端からＣ末端となるようにアミノ酸残基を１列に並べて表す。ペプチドまたはタンパク質のアミノ酸配列中のアミノ酸残基を位置も含めて特定する場合には、アミノ酸残基の略号の右側にＮ末端側からの何番目のアミノ酸残基であるかを示す数字を付して表す場合がある。例えば、Ｎ末端から２番目のＬ−リシンをＬｙｓ２と表す場合がある。
【００１９】
また、アミノ酸をその名称を用いて表した場合であって、エナンチオマーの関係にある異性体、すなわち、Ｌ体およびＤ体が存在するときは、Ｌ体およびＤ体の別を明示的に示した場合を除いて、原則としてＬ体を表すものとする。例えば、「イソロイシン」は「Ｌ−イソロイシン」を表すものとし、「イソロイシン」のエナンチオマーは「Ｄ−イソロイシン」と表すものとする。アミノ酸残基についても同様である。
【００２０】
また、アミノ酸をその略号（３文字略号または１文字略号）を用いて表した場合であって、エナンチオマーの関係にある異性体、すなわち、Ｌ体およびＤ体が存在するときは、Ｌ体およびＤ体の別を明示的に示した場合を除いて、原則としてＬ体を表すものとする。ただし、任意のアミノ酸を表す「Ｘ」はこの限りではない。例えば、「Ｌｙｓ」および「Ｌ−Ｌｙｓ」はいずれも「Ｌ−リシン」を表すものとし、「Ｄ−Ｌｙｓ」は「Ｄ−リシン」を表すものとする。アミノ酸残基についても同様である。
【００２１】
また、アミノ酸をその名称を用いて表した場合であって、ジアステレオマーの関係にある異性体が存在する場合は、その名称により特定されるアミノ酸には含まれないものとする。ジアステレオマーは接頭辞「アロ」を用いて異なる種類のアミノ酸として扱う。例えば、「トレオニン」および「Ｌ−トレオニン」は「Ｌ−アロトレオニン」を含まず、「Ｄ−トレオニン」は「Ｄ−アロトレオニン」を含まないものとする。アミノ酸残基についても同様である。
【００２２】
１文字略号および３文字略号が公式に認められたアミノ酸の名称および略号（１文字略号、３文字略号）を表１に示す。
【００２３】
【表１】
0006554452.tif 000002
【００２４】
アミノ酸は、表１に挙げるものに限定されず、異常アミノ酸と称されるアミノ酸を使用することもできる。異常アミノ酸の例は以下の表２に挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００２５】
【表２】
0006554452.tif 000003
【００２６】
〈本発明の環状ペプチド（Ｉ）の構造〉
以下、本発明の環状ペプチドについて詳細に説明する。
本発明の環状ペプチドは、下記式（Ｉ）によって表される環状ペプチドである。
ＲＮ−Ｘｇ−［Ｘｉ−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｊ］ｋ−Ｘｈ−ＲＣ    ・・・（Ｉ）
【００２７】
式（Ｉ）中、例えば、Ｘｎは、ｎ個のＸが連結していることを意図する。言い換えれば、−（Ｘ）ｎ−ともいえる。なお、Ｘｇ、Ｘｈ、Ｘｉ、Ｘｊ、およびＸｍの定義も、上記Ｘｎと同様である。
【００２８】
《環状部、直鎖部、架橋部、および抗体結合部》
本発明の環状ペプチドにおいて、ポリペプチド鎖のうち、架橋によって閉じた環の部分を環状部、環状部に含まれない部分を直鎖部という。また、環状部のうち、本発明の環状ペプチドの分子内架橋構造を形成している部分を架橋部といい、本発明の環状ペプチドの抗体結合性に強く寄与する分を抗体結合部という。
式（Ｉ）によって表される環状ペプチドの環状部は「Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ」部分であり、直鎖部は「Ｘｇ」、「Ｘｈ」、「Ｘｉ」、および「Ｘｊ」であり、架橋部は「Ｘａ」および「Ｘｂ」であり、抗体結合部は「Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３」である。
また、式（１）中、［Ｘｉ−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｊ］を繰返し部という場合がある。
【００２９】
《Ｎ末端基》
式（Ｉ）中、ＲＮは、Ｎ末端基を表す。
上記Ｎ末端基としては、例えば、アミノ基が挙げられ、当該アミノ基は、Ｎ−アセチル化、Ｎ−ホルミル化、またはＮ−アシル化等のＮ末端修飾がされていてもよい。
【００３０】
《Ｃ末端基》
式（Ｉ）中、ＲＣは、Ｃ末端基を表す。
上記Ｃ末端基としては、例えば、カルボキシ基が挙げられ、当該カルボキシ基は、アミド化等のＣ末端修飾がされていてもよい。
【００３１】
《Ｘ１、Ｘ２、およびＸ３》
式（Ｉ）において、Ｘ１は、Ｌ−ロイシン残基、Ｌ−イソロイシン残基、Ｌ−メチオニン残基、Ｌ−リジン残基、またはＬ−アルギニン残基であり、好ましくはＬ−ロイシン残基またはＬ−イソロイシン残基であり、より好ましくはＬ−ロイシン残基である。
また、式（Ｉ）において、Ｘ２は、Ｌ−バリン残基またはＬ−イソロイシン残基であり、好ましくはＬ−バリン残基である。
また、式（Ｉ）において、Ｘ３は、Ｌ−トリプトファン残基である。
【００３２】
《ＸａおよびＸｂ》
式（Ｉ）において、ＸａおよびＸｂは、以下の第１〜第４の態様に記載するとおりである。
【００３３】
（第１の態様）
式（Ｉ）において、ＸａおよびＸｂは、それぞれ独立に、Ｌ−システインおよびＤ−システイン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、かつ、ジスルフィド結合を介して結合している。
【００３４】
((アミノ酸およびアミノ酸残基の種類))
上記Ｌ−システインおよびＤ−システイン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸は、Ｌ−システインおよびＤ−システイン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸であれば、特に限定されないが、例えば、下記式で表されるアミノ酸が挙げられる。
【００３５】
【化１】
0006554452.tif 000004
【００３６】
ただし、上記式において、
ｎは、２以上の整数であり、好ましくは２≦ｎ≦４を満たす整数であり、より好ましくは２≦ｎ≦３を満たす整数であり、さらに好ましくはｎ＝２である。
上記式で表されるアミノ酸は、Ｌ体であってもよいし、Ｄ体であってもよいが、好ましくはＬ体である。
【００３７】
上記Ｌ−システインおよびＤ−システイン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸としては、具体的には、例えば、Ｌ−ホモシステイン、Ｄ−ホモシステイン、Ｌ−ビスホモシステイン、およびＤ−ビスホモシステインなどが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
また、上記Ｌ−システインおよびＤ−システイン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸としては、好ましくはＬ−ホモシステインまたはＤ−ホモシステインであり、より好ましくはＬ−ホモシステインである。
【００３８】
上記Ｌ−システインおよびＤ−システイン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基としては、例えば、下記式で表されるアミノ酸残基が挙げられる。
【００３９】
【化２】
0006554452.tif 000005
【００４０】
ただし、上記式において、
ｎは、２以上の整数であり、好ましくは２≦ｎ≦４を満たす整数であり、より好ましくは２≦ｎ≦３を満たす整数であり、さらに好ましくはｎ＝２であり；
＊は結合点を表す。
上記式で表されるアミノ酸残基は、Ｌ−アミノ酸に由来するものであってもよいし、Ｄ−アミノ酸に由来するものであってもよいが、好ましくはＬ−アミノ酸に由来するものである。
【００４１】
上記Ｌ−システインおよびＤ−システイン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基としては、具体的には、例えば、Ｌ−ホモシステイン、Ｄ−ホモシステイン、Ｌ−ビスホモシステイン、またはＤ−ビスホモシステインなどに由来するアミノ酸残基が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
また、上記Ｌ−システインおよびＤ−システイン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基としては、好ましくはＬ−ホモシステインまたはＤ−ホモシステインに由来するアミノ酸残基であり、より好ましくはＬ−ホモシステインに由来するアミノ酸残基である。
【００４２】
((ジスルフィド結合))
本発明の環状ペプチドの第１の態様において、ＸａとＸｂとの間には、側鎖ジスルフィド基間で形成されたジスルフィド結合により架橋構造が形成されている。すなわち、Ｌ−システインおよびＤ−システイン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸に由来する第１のアミノ酸残基の側鎖チオール基と、Ｌ−システインおよびＤ−システイン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸に由来する第２のアミノ酸残基の側鎖チオール基との間で、ジスルフィド結合が形成されている。
【００４３】
下記式は、Ｌ−システインおよびＤ−システイン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸に由来する２つのアミノ酸残基の側鎖チオール基間でジスルフィド結合が形成され、架橋構造が形成されている例である。
【００４４】
【化３】
0006554452.tif 000006
【００４５】
ただし、上記式において、
ｍは、２以上の整数であり、好ましくは２≦ｍ≦４を満たす整数であり、より好ましくは２≦ｍ≦３を満たす整数であり、さらに好ましくはｍ＝２であり；
ｎは、２以上の整数であり、好ましくは２≦ｎ≦４を満たす整数であり、より好ましくは２≦ｎ≦３を満たす整数であり、さらに好ましくはｎ＝２であり；
特に好ましくはｍ＝ｎ＝２であり；
＊は結合点を表す。
【００４６】
（第２の態様）
式（Ｉ）において、ＸａおよびＸｂは、一方が、Ｌ−システイン、Ｄ−システイン、Ｌ−ペニシラミンおよびＤ−ペニシラミン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、他方が、側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、かつ、チオエーテル結合を介して結合している。
【００４７】
((アミノ酸およびアミノ酸残基の種類))
上記Ｌ−システイン、Ｄ−システイン、Ｌ−ペニシラミン、およびＤ−ペニシラミン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸は、Ｌ−システイン、Ｄ−システイン、Ｌ−ペニシラミン、およびＤ−ペニシラミン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸であれば、特に限定されないが、例えば、下記式で表されるアミノ酸が挙げられる。
【００４８】
【化４】
0006554452.tif 000007
【００４９】
ただし、上記式において、
ｎは、２以上の整数であり、好ましくは２≦ｎ≦４を満たす整数であり、より好ましくは２≦ｎ≦３を満たす整数であり、さらに好ましくはｎ＝２である。
上記式で表されるアミノ酸は、Ｌ体であってもよいし、Ｄ体であってもよいが、好ましくはＬ体である。
【００５０】
上記Ｌ−システイン、Ｄ−システイン、Ｌ−ペニシラミン、およびＤ−ペニシラミン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸としては、具体的には、例えば、Ｌ−ホモシステイン、Ｄ−ホモシステイン、Ｌ−ビスホモシステイン、およびＤ−ビスホモシステインなどが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
上記Ｌ−システイン、Ｄ−システイン、Ｌ−ペニシラミン、およびＤ−ペニシラミン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸としては、経済性の観点からは、好ましくはＬ−ホモシステインまたはＤ−ホモシステインであり、より好ましくはＬ−ホモシステインである。
【００５１】
上記Ｌ−システイン、Ｄ−システイン、Ｌ−ペニシラミン、およびＤ−ペニシラミン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基としては、例えば、下記式で表されるアミノ酸残基が挙げられる。
【００５２】
【化５】
0006554452.tif 000008
【００５３】
ただし、上記式において、
ｎは、２以上の整数であり、好ましくは２≦ｎ≦４を満たす整数であり、より好ましくは２≦ｎ≦３を満たす整数であり、さらに好ましくはｎ＝２であり；
＊は結合点を表す。
上記式で表されるアミノ酸残基は、Ｌ−アミノ酸に由来するものであってもよいし、Ｄ−アミノ酸に由来するものであってもよいが、好ましくはＬ−アミノ酸に由来するものである。
【００５４】
上記Ｌ−システイン、Ｄ−システイン、Ｌ−ペニシラミン、およびＤ−ペニシラミン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基としては、具体的には、例えば、Ｌ−ホモシステイン、Ｄ−ホモシステイン、Ｌ−ビスホモシステイン、またはＤ−ビスホモシステインなどに由来するアミノ酸残基が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
また、上記Ｌ−システイン、Ｄ−システイン、Ｌ−ペニシラミン、およびＤ−ペニシラミン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基としては、経済性の観点からは、好ましくはＬ−ホモシステインまたはＤ−ホモシステインに由来するアミノ酸残基であり、より好ましくはＬ−ホモシステインに由来するアミノ酸残基である。
【００５５】
上記側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸は、側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸であれば、特に限定されないが、例えば、下記式で表されるアミノ酸が挙げられる。
【００５６】
【化６】
0006554452.tif 000009
【００５７】
ただし、上記式において、
ｍは、１以上の整数であり、好ましくは１≦ｍ≦４を満たす整数であり、より好ましくは３≦ｍ≦４を満たす整数であり、さらに好ましくはｍ＝４であり；
Ｘはハロゲン原子を表し、好ましくは塩素原子または臭素原子を表し、より好ましくは塩素原子を表す。
上記式で表されるアミノ酸は、Ｌ体であってもよいし、Ｄ体であってもよいが、好ましくはＬ体である。
【００５８】
ｎ＝１であるとき、上記式は、Ｎ３−ハロアセチル−２，３−ジアミノプロパン酸〔２−アミノ−３−［（２−ハロアセチル）アミノ］プロパン酸〕を表し；
ｎ＝２であるとき、上記式は、Ｎ４−ハロアセチル−２，４−ジアミノブタン酸〔２−アミノ−４−［（２−ハロアセチル）アミノ］ブタン酸〕を表し；
ｎ＝３であるとき、上記式は、Ｎ−δ−ハロアセチルオルニチンを表し；
ｎ＝４であるとき、上記式は、Ｎ−ε−ハロアセチルリシンを表す。
ただし、上記側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸は、これらに限定されるものではない。
【００５９】
上記側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基としては、例えば、下記式で表されるアミノ酸残基が挙げられる。
【００６０】
【化７】
0006554452.tif 000010
【００６１】
ただし、上記式において、
ｍは、１以上の整数であり、好ましくは１≦ｍ≦４を満たす整数であり、より好ましくは３≦ｍ≦４を満たす整数であり、さらに好ましくはｍ＝４であり；
Ｘはハロゲン原子を表し、好ましくは塩素原子または臭素原子を表し、より好ましくは塩素原子を表し；
＊は結合点を表す。
上記式で表されるアミノ酸残基は、Ｌ−アミノ酸に由来するものであってもよいし、Ｄ−アミノ酸に由来するものであってもよいが、好ましくはＬ−アミノ酸に由来するものである。
【００６２】
上記側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基としては、具体的には、例えば、（２Ｓ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｓ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｌ−オルニチン、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｄ−オルニチン、Ｎ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシン、およびＮ−ε−クロロアセチル−Ｄ−リシンなどに由来するアミノ酸残基が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
また、上記側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基としては、経済性の観点からは、好ましくはＮ−δ−クロロアセチル−Ｌ−オルニチン、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｄ−オルニチン、Ｎ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシン、またはＮ−ε−クロロアセチル−Ｄ−リシンに由来するアミノ酸残基であり、より好ましくはＮ−ε−クロロアセチル−Ｄ−リシンに由来するアミノ酸残基である。
【００６３】
((チオエーテル結合))
本発明の環状ペプチドの第２の態様において、ＸａとＸｂとの間には、側鎖チオール基と側鎖ハロアセチル基との間で形成されたチオエーテル結合により架橋構造が形成されている。すなわち、Ｌ−システイン、Ｄ−システイン、Ｌ−ペニシラミンおよびＤ−ペニシラミン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸に由来する第１のアミノ酸残基のチオール基と、側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来する第２のアミノ酸残基のハロアセチル基との間で、チオエーテル結合が形成されている。
【００６４】
下記式は、Ｌ−システイン、Ｄ−システイン、Ｌ−ペニシラミンおよびＤ−ペニシラミン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基の側鎖チオール基と側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基の側鎖ハロアセチル基との間でチオエーテル結合が形成されている例である。
【００６５】
【化８】
0006554452.tif 000011
【００６６】
【化９】
0006554452.tif 000012
【００６７】
ただし、上記式において、
ｍは、１以上の整数であり、好ましくは１≦ｍ≦４を満たす整数であり、より好ましくは３≦ｍ≦４を満たす整数であり、さらに好ましくはｍ＝４であり；
ｎは、２以上の整数であり、好ましくは２≦ｎ≦４を満たす整数であり、より好ましくは２≦ｎ≦３を満たす整数であり、さらに好ましくはｎ＝２であり；
特に好ましくはｍ＝４かつｎ＝２であり；
＊は結合点を表す。
【００６８】
上記ＸａおよびＸｂは、
Ｘａが側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミン酸残基であり、ＸｂがＬ−システイン、Ｄ−システイン、Ｌ−ペニシラミン、およびＤ−ペニシラミン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基であってもよいし；
ＸａがＬ−システイン、Ｄ−システイン、Ｌ−ペニシラミン、およびＤ−ペニシラミン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基であり、Ｘｂが側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミン酸残基であってもよい。
【００６９】
チオエーテル結合は、ジスルフィド結合に比べて、より安定な結合であることが知られている。
【００７０】
（第３の態様）
式（Ｉ）において、ＸａおよびＸｂは、一方が、Ｌ−システインまたはＤ−システインに由来するアミノ酸残基を表し、他方が、側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、かつ、チオエーテル結合を介して結合している。
【００７１】
((アミノ酸およびアミノ酸残基の種類))
上記側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸は、側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸であれば、特に限定されないが、例えば、下記式で表されるアミノ酸が挙げられる。
【００７２】
（第４の態様）
式（Ｉ）において、ＸａおよびＸｂは、一方が、Ｌ−ペニシラミンまたはＤ−ペニシラミンに由来するアミノ酸残基を表し、他方が、側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、かつ、チオエーテル結合を介して結合している。
【００７３】
【化１０】
0006554452.tif 000013
【００７４】
ただし、上記式において、
ｍは、１以上の整数であり、好ましくは１≦ｍ≦４を満たす整数であり、より好ましくは３≦ｍ≦４を満たす整数であり、さらに好ましくはｍ＝４であり；
Ｘはハロゲン原子を表し、好ましくは塩素原子または臭素原子を表し、より好ましくは塩素原子を表す。
上記式で表されるアミノ酸は、Ｌ体であってもよいし、Ｄ体であってもよいが、好ましくはＬ体である。
【００７５】
ｎ＝１であるとき、上記式は、Ｎ３−ハロアセチル−２，３−ジアミノプロパン酸〔２−アミノ−３−［（２−ハロアセチル）アミノ］プロパン酸〕を表し；
ｎ＝２であるとき、上記式は、Ｎ４−ハロアセチル−２，４−ジアミノブタン酸〔２−アミノ−４−［（２−ハロアセチル）アミノ］ブタン酸〕を表し；
ｎ＝３であるとき、上記式は、Ｎ−δ−ハロアセチルオルニチンを表し；
ｎ＝４であるとき、上記式は、Ｎ−ε−ハロアセチルリシンを表す。
ただし、上記側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸は、これらに限定されるものではない。
【００７６】
上記側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基としては、例えば、下記式で表されるアミノ酸残基が挙げられる。
【００７７】
【化１１】
0006554452.tif 000014
【００７８】
ただし、上記式において、
ｍは、１以上の整数であり、好ましくは１≦ｍ≦４を満たす整数であり、より好ましくは３≦ｍ≦４を満たす整数であり、さらに好ましくはｍ＝４であり；
Ｘはハロゲン原子を表し、好ましくは塩素原子または臭素原子を表し、より好ましくは塩素原子を表し；
＊は結合点を表す。
上記式で表されるアミノ酸残基は、Ｌ−アミノ酸に由来するものであってもよいし、Ｄ−アミノ酸に由来するものであってもよいが、好ましくはＬ−アミノ酸に由来するものである。
【００７９】
上記側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基としては、具体的には、例えば、（２Ｓ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｓ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｌ−オルニチン、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｄ−オルニチン、Ｎ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシン、およびＮ−ε−クロロアセチル−Ｄ−リシンなどに由来するアミノ酸残基が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
また、上記側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基としては、経済性の観点からは、好ましくはＮ−δ−クロロアセチル−Ｌ−オルニチン、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｄ−オルニチン、Ｎ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシン、またはＮ−ε−クロロアセチル−Ｄ−リシンに由来するアミノ酸残基であり、より好ましくはＮ−ε−クロロアセチル−Ｄ−リシンに由来するアミノ酸残基である。
【００８０】
((チオエーテル結合))
本発明の環状ペプチドの第３の態様において、ＸａとＸｂとの間には、側鎖チオール基と側鎖ハロアセチル基との間で形成されたチオエーテル結合により架橋構造が形成されている。すなわち、Ｌ−システインまたはＤ−システインに由来する第１のアミノ酸残基のチオール基と、側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来する第２のアミノ酸残基のハロアセチル基との間で、チオエーテル結合が形成されている。
【００８１】
下記式は、Ｌ−システインまたはＤ−システインに由来するアミノ酸残基の側鎖チオール基と側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基の側鎖ハロアセチル基との間でチオエーテル結合が形成されている例である。
【００８２】
【化１２】
0006554452.tif 000015
【００８３】
【化１３】
0006554452.tif 000016
【００８４】
ただし、上記式において、
ｍは、１以上の整数であり、好ましくは１≦ｍ≦４を満たす整数であり、より好ましくは３≦ｍ≦４を満たす整数であり、さらに好ましくはｍ＝４であり；
＊は結合点を表す。
【００８５】
上記ＸａおよびＸｂは、
Ｘａが側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミン酸残基であり、ＸｂがＬ−システインまたはＤ−システインに由来するアミノ酸残基であってもよいし；
ＸａがＬ−システインまたはＤ−システインに由来するアミノ酸残基であり、Ｘｂが側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミン酸残基であってもよい。
【００８６】
チオエーテル結合は、ジスルフィド結合に比べて、より安定な結合であることが知られている。
【００８７】
((アミノ酸およびアミノ酸残基の種類))
上記側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸は、側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸であれば、特に限定されないが、例えば、下記式で表されるアミノ酸が挙げられる。
【００８８】
【化１４】
0006554452.tif 000017
【００８９】
ただし、上記式において、
ｍは、１以上の整数であり、好ましくは１≦ｍ≦４を満たす整数であり、より好ましくは３≦ｍ≦４を満たす整数であり、さらに好ましくはｍ＝４であり；
Ｘはハロゲン原子を表し、好ましくは塩素原子または臭素原子を表し、より好ましくは塩素原子を表す。
上記式で表されるアミノ酸は、Ｌ体であってもよいし、Ｄ体であってもよいが、好ましくはＬ体である。
【００９０】
ｎ＝１であるとき、上記式は、Ｎ３−ハロアセチル−２，３−ジアミノプロパン酸〔２−アミノ−３−［（２−ハロアセチル）アミノ］プロパン酸〕を表し；
ｎ＝２であるとき、上記式は、Ｎ４−ハロアセチル−２，４−ジアミノブタン酸〔２−アミノ−４−［（２−ハロアセチル）アミノ］ブタン酸〕を表し；
ｎ＝３であるとき、上記式は、Ｎ−δ−ハロアセチルオルニチンを表し；
ｎ＝４であるとき、上記式は、Ｎ−ε−ハロアセチルリシンを表す。
ただし、上記側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸は、これらに限定されるものではない。
【００９１】
上記側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基としては、例えば、下記式で表されるアミノ酸残基が挙げられる。
【００９２】
【化１５】
0006554452.tif 000018
【００９３】
ただし、上記式において、
ｍは、１以上の整数であり、好ましくは１≦ｍ≦４を満たす整数であり、より好ましくは３≦ｍ≦４を満たす整数であり、さらに好ましくはｍ＝４であり；
Ｘはハロゲン原子を表し、好ましくは塩素原子または臭素原子を表し、より好ましくは塩素原子を表し；
＊は結合点を表す。
上記式で表されるアミノ酸残基は、Ｌ−アミノ酸に由来するものであってもよいし、Ｄ−アミノ酸に由来するものであってもよいが、好ましくはＬ−アミノ酸に由来するものである。
【００９４】
上記側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基としては、具体的には、例えば、（２Ｓ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−３−［（２−クロロアセチル）アミノ］プロパン酸、（２Ｓ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、（２Ｒ）−２−アミノ−４−［（２−クロロアセチル）アミノ］ブタン酸、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｌ−オルニチン、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｄ−オルニチン、Ｎ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシン、およびＮ−ε−クロロアセチル−Ｄ−リシンなどに由来するアミノ酸残基が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
また、上記側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基としては、経済性の観点からは、好ましくはＮ−δ−クロロアセチル−Ｌ−オルニチン、Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｄ−オルニチン、Ｎ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシン、またはＮ−ε−クロロアセチル−Ｄ−リシンに由来するアミノ酸残基であり、より好ましくはＮ−ε−クロロアセチル−Ｄ−リシンに由来するアミノ酸残基である。
【００９５】
((チオエーテル結合))
本発明の環状ペプチドの第４の態様において、ＸａとＸｂとの間には、側鎖チオール基と側鎖ハロアセチル基との間で形成されたチオエーテル結合により架橋構造が形成されている。すなわち、Ｌ−ペニシラミンまたはＤ−ペニシラミンに由来する第１のアミノ酸残基のチオール基と、側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来する第２のアミノ酸残基のハロアセチル基との間で、チオエーテル結合が形成されている。
【００９６】
下記式は、Ｌ−ペニシラミンまたはＤ−ペニシラミンに由来するアミノ酸残基の側鎖チオール基と側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基の側鎖ハロアセチル基との間でチオエーテル結合が形成されている例である。
【００９７】
【化１６】
0006554452.tif 000019
【００９８】
【化１７】
0006554452.tif 000020
【００９９】
ただし、上記式において、
ｍは、１以上の整数であり、好ましくは１≦ｍ≦４を満たす整数であり、より好ましくは３≦ｍ≦４を満たす整数であり、さらに好ましくはｍ＝４であり；
＊は結合点を表す。
【０１００】
上記ＸａおよびＸｂは、
Ｘａが側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミン酸残基であり、ＸｂがＬ−ペニシラミンまたはＤ−ペニシラミンに由来するアミノ酸残基であってもよいし；
ＸａがＬ−ペニシラミンまたはＤ−ペニシラミンに由来するアミノ酸残基であり、Ｘｂが側鎖にハロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミン酸残基であってもよい。
【０１０１】
チオエーテル結合は、ジスルフィド結合に比べて、より安定な結合であることが知られている。
【０１０２】
《Ｘｇ、Ｘｈ、Ｘｉ、Ｘｊ、Ｘｍ、およびＸｎ》
式（Ｉ）において、Ｘｇ、Ｘｈ、Ｘｉ、Ｘｊ、Ｘｍ、およびＸｎは、それぞれ、連続するｇ個のＸ、連続するｈ個のＸ、連続するｉ個のＸ、連続するｊ個のＸ、連続するｍ個のＸ、および連続するｎ個のＸを表す。
【０１０３】
式（Ｉ）において、Ｘは、アミノ酸残基を表し、Ｘが複数である場合は、複数のＸは互いに同一であっても異なっていてもよい。
式（Ｉ）において、Ｘは、アミノ酸残基であればよく、特に限定されないが、表１に示すアミノ酸（Ｂ、ＺおよびＸを除く。）および表２に示すアミノ酸からなる群から選択されるアミノ酸に由来するアミノ酸残基であることが好ましく、表１に示すアミノ酸（Ｂ、ＺおよびＸを除く。）からなる群から選択されるアミノ酸に由来するアミノ酸残基であることがより好ましい。また、存在する場合には、これらのアミノ酸のエナンチオマーまたはジアステレオマーに由来するアミノ酸残基であってもよい。
【０１０４】
式（Ｉ）において、ｇ、ｈ、ｉ、およびｊは、それぞれ独立に、０以上の整数である。
ｇは、好ましくは０≦ｇ≦２０を満たし、より好ましくは０≦ｇ≦１０を満たし、さらに好ましくは０≦ｇ≦５を満たす。
ｈは、好ましくは０≦ｈ≦２０を満たし、より好ましくは０≦ｈ≦１０を満たし、さらに好ましくは０≦ｈ≦５を満たす。
ｉは、好ましくは０≦ｉ≦２０を満たし、より好ましくは０≦ｉ≦１０を満たし、さらに好ましくは０≦ｉ≦５を満たす。
ｊは、好ましくは０≦ｊ≦２０を満たし、より好ましくは０≦ｊ≦１０を満たし、さらに好ましくは０≦ｊ≦５を満たす。
【０１０５】
式（Ｉ）において、ｍおよびｎは、０≦ｍ≦９および０≦ｎ≦９を満たす整数であり、さらに、３≦ｍ＋ｎ≦９を満たし、好ましくは４≦ｍ＋ｎ≦８を満たし、より好ましくは５≦ｍ＋ｎ≦７を満たす。
【０１０６】
《環状部のアミノ酸残基数》
上記式（Ｉ）において、環状部［Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ］のアミノ酸残基数［（ｍ＋ｎ＋５）残基］は、８〜１４酸基であり、好ましくは９〜１３残基であり、より好ましくは１０〜１２残基である。
環状部のアミノ酸残基数がこの範囲内であると、環状ペプチドの分子内ひずみが大きくなり過ぎず、αヘリックス等の高次構造が安定化するため、本発明の環状ペプチドの抗体結合性が優れる。
【０１０７】
《繰り返し単位の数》
ｋは、ｋ≧１を満たす整数であり、好ましくは１≦ｋ≦３であり、より好ましくは１≦ｋ≦２であり、さらに好ましくはｋ＝１である。
繰返し単位の数は、特に限定されるものではないが、繰返し単位の数が多いほど環状部を多く含むことができるため、環状ペプチドの抗体結合性を向上させることができる可能性があり、繰返し単位の数が少ないほど総アミノ酸残基数を少なくできるため、環状ペプチドの抗原性を抑制することができる可能性がある。環状ペプチドの合成コストの観点からは、アミノ酸残基数が少ない方が好ましく、繰返し単位の数の少ないことが好ましい。
【０１０８】
また、ｋ≧２である場合、すなわち、式（Ｉ）によって表される環状ペプチドが繰返し単位［Ｘｉ−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｊ］を２個以上含む場合は、繰返し単位中のＸ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘａ、Ｘｂ、Ｘｉ、Ｘｊ、Ｘｍ、およびＸｎは、それぞれ、繰返し単位間で同一であってもよいし、相違していてもよい。
【０１０９】
《環状ペプチドの総アミノ酸残基数》
さらに、上記式（Ｉ）において、環状ペプチドの総アミノ酸残基数は、好ましくは８〜５０残基であり、より好ましくは９〜４０残基であり、さらに好ましくは１０〜３０残基であり、いっそう好ましくは１０〜２０残基である。
すなわち式（Ｉ）中、ｇ、ｈ、ｊ、ｊ、ｍ、ｎ、およびｋは、好ましくは８≦ｇ＋ｈ＋（ｉ＋ｊ＋ｍ＋ｎ＋５）×ｋ≦５０を満たし、より好ましくは９≦ｇ＋ｈ＋（ｉ＋ｊ＋ｍ＋ｎ＋５）×ｋ≦４０を満たし、さらに好ましくは１０≦ｇ＋ｈ＋（ｉ＋ｊ＋ｍ＋ｎ＋５）×ｋ≦３０を満たし、いっそう好ましくは１０≦ｇ＋ｈ＋（ｉ＋ｊ＋ｍ＋ｎ＋５）×ｋ≦２０を満たす。
通常、アミノ酸残基数が多くなるほど製造コストが高くなるため、経済的な観点からは、アミノ酸残基の総数は少ない方が好ましい。
【０１１０】
《環状ペプチドの分子量》
また、上記式（Ｉ）によって表される環状ペプチドの分子量は、特に限定されるものではないが、抗原性の観点から、本発明の環状ペプチドの分子量は、好ましくは約５０００以下であり、より好ましくは約４０００以下であり、さらに好ましくは約３０００以下であり、最も好ましくは約２０００以下である。ここで、「約」は±２％の範囲を含むことを意味する。
【０１１１】
《第３の態様における例外》
本発明の第３の態様において：
上記式（Ｉ）中のＸは、Ｌ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、Ｄ−ホモセリン、Ｌ−アルギニン、およびＤ−アルギニン以外のアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、Ｘが複数である場合は、複数のＸは互いに同一であっても異なっていてもよい。
本発明の第３の態様においては、この相違点があるため、式（Ｉ）を式（Ｉ’）と称する場合がある。
【０１１２】
《第４の態様における例外》
本発明の第４の態様において：
上記式（Ｉ）中のＸは、Ｌ−セリンおよびＤ−セリン以外のアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、Ｘが複数である場合は、複数のＸは互いに同一であっても異なっていてもよい。
本発明の第４の態様においては、この相違点があるため、式（Ｉ）を式（Ｉ’）と称する場合がある。
【０１１３】
〈本発明の環状ペプチド（ＩＡ）の構造〉
また、本発明の環状ペプチドは、好ましくは、下記式（ＩＡ）によって表される環状ペプチドである。
ＲＮ−Ｘｇ−［Ｘｐ２−Ｘ４ｒ−Ｘｐ１−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｑ１−Ｘ５ｓ−Ｘｑ２］ｋ−Ｘｈ−ＲＣ    ・・・（ＩＡ）
【０１１４】
式（ＩＡ）中、ＲＮ、ＲＣ、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘａ、Ｘｂ、Ｘｇ、Ｘｈ、Ｘｍ、Ｘｎ、Ｘ、ｇ、ｈ、ｍ、ｎ、およびｋは、いずれも、上記式（Ｉ）中におけるものと同義である。
また、式（ＩＡ）中、Ｘｎは、式（Ｉ）中のＸｎと同様に、Ｘがｎ個連結していることを意図する。Ｘｍ、Ｘｐ１、Ｘｐ２、Ｘｑ１、およびＸｑ２についても同様である。
さらに、式（ＩＡ）中、Ｘ４ｒおよびＸ５ｓは、それぞれ、Ｘ４がｒ個連結していること、および、Ｘ５がｓ個連結していること、を意図する。
【０１１５】
《環状部、直鎖部、架橋部、および抗体結合部》
式（ＩＡ）によって表される環状ペプチドの直鎖部は「Ｘｇ」、「Ｘｈ」、「Ｘｐ２−Ｘ４ｒ−Ｘｐ１」、および「Ｘｑ１−Ｘ５ｓ−Ｘｑ２」である。環状部、架橋部、および抗体結合部は式（Ｉ）で表される環状ペプチドと同様である。
また、式（ＩＡ）中、繰返し単位は［Ｘｐ２−Ｘ４ｒ−Ｘｐ１−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｑ１−Ｘ５ｓ−Ｘｑ２］である。
【０１１６】
《Ｘ４ｒおよびＸ５ｓ》
式（ＩＡ）において、Ｘ４ｒおよびＸ５ｓは、それぞれ、連続するｒ個のＸ４、および、連続するｓ個のＸ５を表す。
【０１１７】
式（ＩＡ）において、Ｘ４およびＸ５は、それぞれ独立に、側鎖にカルボキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基または側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表す。
Ｘ４またはＸ５が複数である場合は、複数のＸ４またはＸ５は互いに同一であっても異なっていてもよい。
【０１１８】
式（ＩＡ）において、ｒおよびｓは、それぞれ、０≦ｒ≦５、０≦ｓ≦５、および、１≦Ｍａｘ（ｒ，ｓ）≦５を満たす整数であり、好ましくは、０≦ｒ≦４、０≦ｓ≦４、および、１≦Ｍａｘ（ｒ，ｓ）≦４を満たす整数であり、より好ましくは、０≦ｒ≦３、０≦ｓ≦３、および、１≦Ｍａｘ（ｒ，ｓ）≦３を満たす整数である。
ただし、Ｍａｘ（ｒ，ｓ）は、ｒ≠ｓであるとき、ｒとｓの２数のうち大きい方を表し、ｒ＝ｓであるとき、ｒまたはｓを表す。
【０１１９】
（側鎖にカルボキシ基を有するアミノ酸）
上記側鎖にカルボキシ基を有するアミノ酸としては、例えば、Ｌ−アスパラギン酸、Ｄ−アスパラギン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−グルタミン酸、Ｌ−ホモグルタミン酸、およびＤ−ホモグルタミン酸等が挙げられる。
【０１２０】
（側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸）
上記側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸としては、例えば、Ｌ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、Ｄ−ホモセリン、Ｌ−チロシン、Ｄ−チロシン、Ｌ−トレオニン、Ｄ−トレオニン、Ｌ−アロトレオニン、およびＤ−アロトレオニン等が挙げられる。
【０１２１】
（好ましいアミノ酸残基）
上記Ｘ４およびＸ５は、好ましくは、それぞれ独立に、Ｌ−セリン残基、Ｄ−セリン残基、Ｌ−ホモセリン残基、Ｄ−ホモセリン残基、Ｌ−アスパラギン酸残基、Ｄ−アスパラギン酸残基、Ｌ−グルタミン酸残基、Ｄ−グルタミン酸残基、Ｌ−ホモグルタミン酸残基、Ｄ−ホモグルタミン酸残基、Ｌ−チロシン残基、Ｄ−チロシン残基、Ｌ−ホモチロシン残基、Ｄ−ホモチロシン残基、Ｌ−トレオニン残基、Ｄ−トレオニン残基、Ｌ−アロトレオニン残基、およびＤ−アロトレオニン残基からなる群から選択されるアミノ酸残基であり、より好ましくは、それぞれ独立に、Ｌ−アスパラギン酸残基、Ｄ−アスパラギン酸残基、Ｌ−トレオニン残基およびＤ−トレオニン残基からなる群から選択されるアミノ酸残基であり、さらに好ましくは、Ｘ４がＬ−アスパラギン酸残基であり、かつ、Ｘ５がＬ−トレオニン残基である。
【０１２２】
上記Ｘ４およびＸ５が、それぞれ独立に、側鎖にカルボキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基または側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基であると、環状部の抗体結合部と抗体とが水素結合および／または静電相互作用により、さらに強く相互作用することができ、抗体結合性が改善すると考えられる。
【０１２３】
《Ｘｐ１、Ｘｐ２、Ｘｑ１、およびＸｑ２》
式（ＩＡ）において、Ｘｐ１、Ｘｐ２、Ｘｑ１、およびＸｑ２は、それぞれ、連続するｐ１個のＸ、連続するｐ２個のＸ、連続するｑ１個のＸ、および連続するｑ２個のＸを表す。
式（ＩＡ）において、ｐ１、ｐ２、ｑ１、およびｑ２は、それぞれ独立に、０以上の整数である。
ｐ１は、好ましくは０≦ｐ１≦２０を満たし、より好ましくは０≦ｐ１≦１０を満たし、さらに好ましくは０≦ｐ１≦５を満たし、いっそう好ましくは０≦ｐ１≦２を満たす。
ｐ２は、好ましくは０≦ｐ２≦２０を満たし、より好ましくは０≦ｐ２≦１０を満たし、さらに好ましくは０≦ｐ２≦５を満たし、いっそう好ましくは０≦ｐ２≦２を満たす。
ｑ１は、好ましくは０≦ｑ１≦２０を満たし、より好ましくは０≦ｑ１≦１０を満たし、さらに好ましくは０≦ｑ１≦５を満たし、いっそう好ましくは０≦ｑ１≦２を満たす。
ｑ２は、好ましくは０≦ｑ２≦２０を満たし、より好ましくは０≦ｑ２≦１０を満たし、さらに好ましくは０≦ｑ２≦５を満たし、いっそう好ましくは０≦ｑ２≦２を満たす。
【０１２４】
《環状部のアミノ酸残基数》
上記式（ＩＡ）において、環状部［Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ］のアミノ酸残基数［（ｍ＋ｎ＋５）残基］は、上記式（Ｉ）と同様に、８〜１４酸基であり、好ましくは９〜１３残基であり、より好ましくは１０〜１２残基である。
環状部のアミノ酸残基数がこの範囲内であると、環状ペプチドの分子内ひずみが大きくなり過ぎず、αヘリックス等の高次構造が安定化するため、本発明の環状ペプチドの抗体結合性が優れる。
【０１２５】
《繰り返し単位の数》
また、ｋ≧２である場合、すなわち、式（ＩＡ）によって表される環状ペプチドが繰返し単位［Ｘｐ２−Ｘ４ｒ−Ｘｐ１−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｑ１−Ｘ５ｓ−Ｘｑ２］を２個以上含む場合は、繰返し単位中のＸ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘａ、Ｘｂ、Ｘ４ｒ、Ｘ５ｓ、Ｘｍ、Ｘｎ、Ｘｐ２、Ｘｐ１、Ｘｑ１、およびＸｑ２は、それぞれ、繰返し単位間で同一であってもよいし、相違していてもよい。
【０１２６】
《環状ペプチドの総アミノ酸残基数》
さらに、上記式（ＩＡ）において、環状ペプチドの総アミノ酸残基数は、好ましくは８〜５０残基であり、より好ましくは９〜４０残基であり、さらに好ましくは１０〜３０残基であり、いっそう好ましくは１０〜２０残基である。
すなわち、式（ＩＡ）中、ｇ、ｈ、ｍ、ｎ、ｐ１、ｐ２、ｑ１、ｑ２、ｒ、ｓ、およびｋは、好ましくは８≦ｇ＋ｈ＋（ｍ＋ｎ＋ｐ１＋ｐ２＋ｑ１＋ｑ２＋ｒ＋ｓ＋５）×ｋ≦５０を満たし、より好ましくは９≦ｇ＋ｈ＋（ｍ＋ｎ＋ｐ１＋ｐ２＋ｑ１＋ｑ２＋ｒ＋ｓ＋５）×ｋ≦４０を満たし、さらに好ましくは１０≦ｇ＋ｈ＋（ｍ＋ｎ＋ｐ１＋ｐ２＋ｑ１＋ｑ２＋ｒ＋ｓ＋５）×ｋ≦３０を満たし、いっそう好ましくは１０≦ｇ＋ｈ＋（ｍ＋ｎ＋ｐ１＋ｐ２＋ｑ１＋ｑ２＋ｒ＋ｓ＋５）×ｋ≦２０を満たす。
通常、アミノ酸残基数が多くなるほど製造コストが高くなるため、経済的な観点からは、アミノ酸残基の総数は少ない方が好ましい。
【０１２７】
《第３の態様における例外》
本発明の第３の態様において：
上記式（ＩＡ）中のＸは、Ｌ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、Ｄ−ホモセリン、Ｌ−アルギニン、およびＤ−アルギニン以外のアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、Ｘが複数である場合は、複数のＸは互いに同一であっても異なっていてもよく；
上記式（ＩＡ）中のＸ４およびＸ５は、それぞれ独立に、「側鎖にカルボキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基」または「『Ｌ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、およびＤ−ホモセリン以外の』側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基」を表し、Ｘ４またはＸ５が複数である場合は、複数のＸ４またはＸ５は互いに同一であっても異なってもよい。
本発明の第３の態様においては、これらの相違点があるため、式（ＩＡ）を式（Ｉ’Ａ）と称する場合がある。
【０１２８】
《第４の態様における例外》
本発明の第４の態様において：
上記式（ＩＡ）中のＸは、Ｌ−セリンおよびＤ−セリン以外のアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、Ｘが複数である場合は、複数のＸは互いに同一であっても異なっていてもよく；
上記式（ＩＡ）中のＸ４およびＸ５は、それぞれ独立に、「側鎖にカルボキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基」または「『Ｌ−セリンおよびＤ−セリン以外の』側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基」を表し、Ｘ４またはＸ５が複数である場合は、複数のＸ４またはＸ５は互いに同一であっても異なってもよい。
本発明の第４の態様においては、これらの相違点があるため、式（ＩＡ）を式（Ｉ’Ａ）と称する場合がある。
【０１２９】
〈本発明の環状ペプチド（ＩＢ）の構造〉
また、本発明の環状ペプチドは、好ましくは下記式（ＩＢ）によって表される環状ペプチドである。
ＲＮ−Ｘｖ１−Ｘ６ｔ−Ｘｖ２−［Ｘｉ−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｊ］ｋ−Ｘｗ２−Ｘ７ｕ−Ｘｗ１−ＲＣ    ・・・（ＩＢ）
【０１３０】
式（ＩＢ）中、ＲＮ、ＲＣ、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘａ、Ｘｂ、Ｘｉ、Ｘｊ、Ｘｍ、Ｘｎ、Ｘ、ｉ、ｊ、ｍ、ｎ、およびｋは、いずれも、上記式（Ｉ）中におけるものと同義である。
また、式（ＩＢ）中、Ｘｎは、式（Ｉ）中のＸｎと同様に、Ｘがｎ個連結していることを意図する。Ｘｍ、Ｘｖ１、Ｘｖ２、Ｘｗ１、およびＸｗ２についても同様である。
さらに、式（ＩＢ）中、Ｘ６ｔおよびＸ７ｕは、それぞれ、Ｘ６がｔ個連結していること、および、Ｘ７がｕ個連結していること、を意図する。
【０１３１】
《環状部、直鎖部、架橋部、および抗体結合部》
式（ＩＢ）によって表される環状ペプチドの直鎖部は「Ｘｉ」、「Ｘｊ」、「Ｘｖ１−Ｘ６ｔ−Ｘｖ２」、および「Ｘｗ２−Ｘ７ｕ−Ｘｗ１」である。環状部、架橋部、および抗体結合部は式（Ｉ）で表される環状ペプチドと同様である。
また、式（ＩＢ）中、繰返し単位は、式（Ｉ）と同様に、［Ｘｉ−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｊ］である。
【０１３２】
《Ｘ６ｔおよびＸ７ｕ》
式（ＩＢ）において、Ｘ６ｔおよびＸ７ｕは、それぞれ、連続するｔ個のＸ６、および、連続するｕ個のＸ７を表す。
【０１３３】
式（ＩＢ）において、Ｘ６およびＸ７は、それぞれ独立に、側鎖に固定化官能基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表す。
Ｘ６またはＸ７が複数である場合は、複数のＸ６またはＸ７は互いに同一であっても異なっていてもよい。
【０１３４】
式（ＩＢ）において、ｔおよびｕは、それぞれ、０≦ｔ≦５、０≦ｕ≦５、および、１≦Ｍａｘ（ｔ，ｕ）≦５を満たす整数であり、好ましくは０≦ｔ≦４、０≦ｕ≦４、１≦Ｍａｘ（ｔ，ｕ）≦４を満たす整数であり、より好ましくは０≦ｔ≦３、０≦ｕ≦３、１≦Ｍａｘ（ｔ，ｕ）≦３を満たす整数である。
ただし、Ｍａｘ（ｔ，ｕ）は、ｔ≠ｕであるとき、ｔとｕの２数のうち大きい方を表し、ｔ＝ｕであるとき、ｔまたはｕを表す。
【０１３５】
（固定化官能基）
上記「固定化官能基」とは、担体（後述する）上の官能基と反応して共有結合を形成することができる官能基をいう。
このような固定化官能基としては、例えば、アミノ基、カルボキシ基、ヒドロキシ基、チオール基、アルデヒド基（ホルミル基）、カルバモイル基、アジド基、および、アルキニル基等が挙げられる。
本発明の環状ペプチドが有する固定化官能基と担体上の官能基の組合せとしては、アミノ基とカルボキシ基（アミド結合形成反応）、アミノ基とアルデヒド基（還元的アミノ化反応）、アミノ基とエポキシ基、ヒドロキシ基とエポキシ基、カルボキシ基とヒドロキシ基（エステル結合形成反応）、チオール基とチオール基（ジスルフィド結合）、チオール基とエポキシ基、および、アジド基とアルキニル基（ヒュスゲン環化付加反応）等が挙げられる。
本発明の環状ペプチドが有する固定化官能基と担体上の官能基とが反応して共有結合を形成することにより、本発明の環状ペプチドが担体に固定化される。なお、本発明の環状ペプチドが有する固定化官能基の少なくとも一部が担体上の官能基と反応して共有結合を形成すればよく、すべての固定化官能基が担体上の官能基と反応しなくてもよい。
【０１３６】
上記側鎖に固定化官能基を有するアミノ酸において、固定化官能基は、好ましくはアミノ基、チオール基およびアルデヒド基からなる群から選択される少なくとも１つであり、より好ましくはアミノ基およびチオール基からなる群から選択される少なくとも１つである。
【０１３７】
（側鎖に固定化官能基を有するアミノ酸）
上記側鎖に固定化官能基を有するアミノ酸は、好ましくは、Ｌ−リシン、Ｄ−リシン、Ｌ−システイン、Ｄ−システイン、Ｌ−ホモシステインおよびＤ−ホモシステインからなる群から選択される少なくとも１種のアミノ酸である。
【０１３８】
アミノ基を固定化官能基として用いることによって、担体上のカルボキシ基とアミド結合を介して結合することができ、容易にアフィニティリガンドとしての本発明の環状ペプチドを固定化することができる。
【０１３９】
また、チオール基を固定化官能基として使用することによって、担体上のエポキシ基と共有結合を介して結合することができ、容易にアフィニティリガンドとしての本発明の環状ペプチドを固定化することができる。
【０１４０】
側鎖にアミノ基を有するアミノ酸として、Ｌ−リシン、およびＤ−リシン等があり、側鎖にチオール基を有するアミノ酸として、Ｌ−システイン、Ｄ−システインがあり、これらは比較的安価であることから、本発明の環状ペプチドの製造コストを抑制することができるため、経済的な観点から好ましい。
【０１４１】
（担体）
なお、本発明において「担体」とは、本発明の環状ペプチドを固定化することができる基材をいう。担体は本発明の環状ペプチドが有する固定化官能基と反応して共有結合を形成することができる官能基を有する。この官能基は固定化官能基によって適宜選択される。
【０１４２】
（担体を構成する材料）
担体を構成する材料としては、例えば、アガロース、デキストラン、デンプン、セルロース、プルラン、キチン、キトサン、三酢酸セルロース、および、二酢酸セルロース等の多糖類およびその誘導体、ならびに、ポリアクリルアミド、ポリメタクリルアミド、ポリアクリレート、ポリメタクリレート、ポリアルキルビニルエーテル、および、ポリビニルアルコール等のビニル系重合体等が挙げられる。これらの材料は、機械的強度を確保できることから、架橋構造を形成していてもよい。担体はこれらのうち１種類または２種類以上の材料からなることが好ましい。
また、担体は好ましくは多孔質であり、より好ましくは多孔質膜または多孔質粒子であり、さらに好ましくは多孔質粒子である。
【０１４３】
《Ｘｖ１、Ｘｖ２、Ｘｗ１、およびＸｗ２》
式（ＩＢ）において、Ｘｖ１、Ｘｖ２、Ｘｗ１、およびＸｗ２は、それぞれ、連続するｖ１個のＸ、連続するｖ２個のＸ、連続するｗ１個のＸ、および連続するｗ２個のＸを表す。
式（ＩＢ）において、ｖ１、ｖ２、ｗ１、およびｗ２は、それぞれ独立に、０以上の整数である。
ｖ１は、好ましくは０≦ｖ１≦２０を満たし、より好ましくは０≦ｖ１≦１０を満たし、さらに好ましくは０≦ｖ１≦５を満たし、いっそう好ましくは０≦ｖ１≦２を満たす。
ｖ２は、好ましくは０≦ｖ２≦２０を満たし、より好ましくは０≦ｖ２≦１０を満たし、さらに好ましくは０≦ｖ２≦５を満たし、いっそう好ましくは０≦ｖ２≦２を満たす。
ｗ１は、好ましくは０≦ｗ１≦２０を満たし、より好ましくは０≦ｗ１≦１０を満たし、さらに好ましくは０≦ｗ１≦５を満たし、いっそう好ましくは０≦ｗ１≦２を満たす。
ｗ２は、好ましくは０≦ｗ２≦２０を満たし、より好ましくは０≦ｗ２≦１０を満たし、さらに好ましくは０≦ｗ２≦５を満たし、いっそう好ましくは０≦ｗ２≦２を満たす。
【０１４４】
《環状部のアミノ酸残基数》
上記式（ＩＢ）において、環状部［Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ］のアミノ酸残基数［（ｍ＋ｎ＋５）残基］は、上記式（Ｉ）と同様に、８〜１４酸基であり、好ましくは９〜１３残基であり、より好ましくは１０〜１２残基である。
環状部のアミノ酸残基数がこの範囲内であると、環状ペプチドの分子内ひずみが大きくなり過ぎず、αヘリックス等の高次構造が安定化するため、本発明の環状ペプチドの抗体結合性が優れる。
【０１４５】
《繰り返し単位の数》
また、ｋ≧２である場合、すなわち、式（ＩＢ）によって表される環状ペプチドが繰返し単位［Ｘｉ−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｊ］を２個以上含む場合は、繰返し単位中のＸ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘａ、Ｘｂ、Ｘｍ、Ｘｎ、Ｘｉ、およびＸｊは、それぞれ、繰返し単位間で同一であってもよいし、相違していてもよい。
【０１４６】
《環状ペプチドの総アミノ酸残基数》
さらに、上記式（ＩＢ）において、環状ペプチドの総アミノ酸残基数は、好ましくは８〜５０残基であり、より好ましくは９〜４０残基であり、さらに好ましくは１０〜３０残基であり、いっそう好ましくは１０〜２０残基である。
すなわち、式（ＩＢ）中、ｉ、ｊ、ｍ、ｎ、ｔ、ｕ、ｖ１、ｖ２、ｗ１、ｗ２、およびｋは、好ましくは８≦（ｉ＋ｊ＋ｍ＋ｎ＋５）×ｋ＋ｔ＋ｕ＋ｖ１＋ｖ２＋ｗ１＋ｗ２≦５０を満たし、より好ましくは（ｉ＋ｊ＋ｍ＋ｎ＋５）×ｋ＋ｔ＋ｕ＋ｖ１＋ｖ２＋ｗ１＋ｗ２≦４０を満たし、さらに好ましくは１０≦（ｉ＋ｊ＋ｍ＋ｎ＋５）×ｋ＋ｔ＋ｕ＋ｖ１＋ｖ２＋ｗ１＋ｗ２≦３０を満たし、いっそう好ましくは１０≦（ｉ＋ｊ＋ｍ＋ｎ＋５）×ｋ＋ｔ＋ｕ＋ｖ１＋ｖ２＋ｗ１＋ｗ２≦２０を満たす。
通常、アミノ酸残基数が多くなるほど製造コストが高くなるため、経済的な観点からは、アミノ酸残基の総数は少ない方が好ましい。
【０１４７】
《第３の態様における例外》
本発明の第３の態様において：
上記式（ＩＢ）中のＸは、Ｌ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、Ｄ−ホモセリン、Ｌ−アルギニン、およびＤ−アルギニン以外のアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、Ｘが複数である場合は、複数のＸは互いに同一であっても異なっていてもよく；
上記式（ＩＢ）中のＸ６およびＸ７は、それぞれ独立に、「『Ｌ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、Ｄ−ホモセリン、Ｌ−アルギニン、およびＤ−アルギニン以外の』側鎖に固定化官能基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基」を表し、Ｘ６またはＸ７が複数である場合は、複数のＸ６またはＸ７は互いに同一であっても異なってもよい。
本発明の第３の態様においては、これらの相違点があるため、式（ＩＢ）を式（Ｉ’Ｂ）と称する場合がある。
【０１４８】
《第４の態様における例外》
本発明の第４の態様において：
上記式（ＩＢ）中のＸは、Ｌ−セリンおよびＤ−セリン以外のアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、Ｘが複数である場合は、複数のＸは互いに同一であっても異なっていてもよく；
上記式（ＩＢ）中のＸ６およびＸ７は、それぞれ独立に、「『Ｌ−セリンおよびＤ−セリン以外の』側鎖に固定化官能基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基」を表し、Ｘ６またはＸ７が複数である場合は、複数のＸ６またはＸ７は互いに同一であっても異なってもよい。
本発明の第４の態様においては、これらの相違点があるため、式（ＩＢ）を式（Ｉ’Ｂ）と称する場合がある。
【０１４９】
〈本発明の環状ペプチド（ＩＣ）の構造〉
さらに、本発明の環状ペプチドは、より好ましくは下記式（ＩＣ）によって表される環状ペプチドである。
ＲＮ−Ｘｖ１−Ｘ６ｔ−Ｘｖ２−［Ｘｐ２−Ｘ４ｒ−Ｘｐ１−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｑ１−Ｘ５ｓ−Ｘｑ２］ｋ−Ｘｗ２−Ｘ７ｕ−Ｘｗ１−ＲＣ    ・・・（ＩＣ）
【０１５０】
式（ＩＣ）中、ＲＮ、ＲＣ、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘａ、Ｘｂ、Ｘｍ、Ｘｎ、Ｘ、ｍ、ｎ、およびｋは、いずれも、上記式（Ｉ）中におけるものと同義であり、Ｘ４、Ｘ５、ｐ１、ｐ２、ｑ１、ｑ２、ｒ、およびｓは、いずれも、式（ＩＡ）中におけるものと同義であり、Ｘ６、Ｘ７、ｔ、ｕ、ｖ１、ｖ２、ｗ１、およびｗ２は、いずれも、式（ＩＢ）中におけるものと同義である。
また、式（ＩＣ）中、Ｘｎは、式（Ｉ）中のＸｎと同様に、Ｘがｎ個連結していることを意図する。Ｘｍ、Ｘｐ１、Ｘｐ２、Ｘｑ１、Ｘｑ２、Ｘｖ１、Ｘｖ２、Ｘｗ１、およびＸｗ２についても同様である。
さらに、式（ＩＣ）中、Ｘ４ｒ、Ｘ５ｓ、Ｘ６ｔ、およびＸ７ｕは、それぞれ、Ｘ４がｒ個連結していること、Ｘ５がｓ個連結していること、Ｘ６がｔ個連結していること、および、Ｘ７がｕ個連結していること、を意図する。
【０１５１】
《環状部、直鎖部、架橋部、および抗体結合部》
式（ＩＣ）によって表される環状ペプチドの直鎖部は「Ｘｖ１−Ｘ６ｔ−Ｘｖ２」、「Ｘｗ２−Ｘ７ｕ−Ｘｗ１」、「Ｘｐ２−Ｘ４ｒ−Ｘｐ１」、および「Ｘｑ１−Ｘ５ｓ−Ｘｑ２」である。環状部、架橋部、および抗体結合部は式（Ｉ）で表される環状ペプチドと同様である。
また、式（ＩＣ）中、繰返し単位は、式（ＩＡ）と同様に、［Ｘｐ２−Ｘ４ｒ−Ｘｐ１−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｑ１−Ｘ５ｓ−Ｘｑ２］である。
【０１５２】
《環状部のアミノ酸残基数》
上記式（ＩＣ）において、環状部［Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ］のアミノ酸残基数［（ｍ＋ｎ＋５）残基］は、上記式（Ｉ）と同様に、８〜１４酸基であり、好ましくは９〜１３残基であり、より好ましくは１０〜１２残基である。
環状部のアミノ酸残基数がこの範囲内であると、環状ペプチドの分子内ひずみが大きくなり過ぎず、αヘリックス等の高次構造が安定化するため、本発明の環状ペプチドの抗体結合性が優れる。
【０１５３】
《繰り返し単位の数》
また、ｋ≧２である場合、すなわち、式（ＩＣ）によって表される環状ペプチドが繰返し単位［Ｘｐ２−Ｘ４ｒ−Ｘｐ１−Ｘａ−Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎ−Ｘｂ−Ｘｑ１−Ｘ５ｓ−Ｘｑ２］を２個以上含む場合は、繰返し単位中のＸ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘａ、Ｘｂ、Ｘ４ｒ、Ｘ５ｓ、Ｘｍ、Ｘｎ、Ｘｐ２、Ｘｐ１、Ｘｑ１、およびＸｑ２は、それぞれ、繰返し単位間で同一であってもよいし、相違していてもよい。
【０１５４】
《環状ペプチドの総アミノ酸残基数》
さらに、上記式（ＩＣ）において、環状ペプチドの総アミノ酸残基数は、好ましくは８〜５０残基であり、より好ましくは９〜４０残基であり、さらに好ましくは１０〜３０残基であり、いっそう好ましくは１０〜２０残基である。
すなわち、式（ＩＣ）中、ｍ、ｎ、ｐ１、ｐ２、ｑ１、ｑ２、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖ１、ｖ２、ｗ１、ｗ２、およびｋは、好ましくは８≦（ｍ＋ｎ＋ｐ１＋ｐ２＋ｑ１＋ｑ２＋ｒ＋ｓ＋５）×ｋ＋ｔ＋ｕ＋ｖ１＋ｖ２＋ｗ１＋ｗ２≦５０を満たし、より好ましくは９≦（ｍ＋ｎ＋ｐ１＋ｐ２＋ｑ１＋ｑ２＋ｒ＋ｓ＋５）×ｋ＋ｔ＋ｕ＋ｖ１＋ｖ２＋ｗ１＋ｗ２≦４０を満たし、さらに好ましくは１０≦（ｍ＋ｎ＋ｐ１＋ｐ２＋ｑ１＋ｑ２＋ｒ＋ｓ＋５）×ｋ＋ｔ＋ｕ＋ｖ１＋ｖ２＋ｗ１＋ｗ２≦３０を満たし、いっそう好ましくは１０≦（ｍ＋ｎ＋ｐ１＋ｐ２＋ｑ１＋ｑ２＋ｒ＋ｓ＋５）×ｋ＋ｔ＋ｕ＋ｖ１＋ｖ２＋ｗ１＋ｗ２≦２０を満たす。
通常、アミノ酸残基数が多くなるほど製造コストが高くなるため、経済的な観点からは、アミノ酸残基の総数が少ない方が好ましい。
【０１５５】
《第３の態様における例外》
本発明の第３の態様において：
上記式（ＩＣ）中のＸは、Ｌ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、Ｄ−ホモセリン、Ｌ−アルギニン、およびＤ−アルギニン以外のアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、Ｘが複数である場合は、複数のＸは互いに同一であっても異なっていてもよく；
上記式（ＩＣ）中のＸ４およびＸ５は、それぞれ独立に、「側鎖にカルボキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基」または「『Ｌ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、およびＤ−ホモセリン以外の』側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基」を表し、Ｘ４またはＸ５が複数である場合は、複数のＸ４またはＸ５は互いに同一であっても異なってもよく；
上記式（ＩＣ）中のＸ６およびＸ７は、それぞれ独立に、「『Ｌ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、Ｄ−ホモセリン、Ｌ−アルギニン、およびＤ−アルギニン以外の』側鎖に固定化官能基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基」を表し、Ｘ６またはＸ７が複数である場合は、複数のＸ６またはＸ７は互いに同一であっても異なってもよい。
本発明の第３の態様においては、これらの相違点があるため、式（ＩＣ）を式（Ｉ’Ｃ）と称する場合がある。
【０１５６】
《第４の態様における例外》
本発明の第４の態様において：
上記式（ＩＣ）中のＸは、Ｌ−セリンおよびＤ−セリン以外のアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、Ｘが複数である場合は、複数のＸは互いに同一であっても異なっていてもよく；
上記式（ＩＣ）中のＸ４およびＸ５は、それぞれ独立に、「側鎖にカルボキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基」または「『Ｌ−セリンおよびＤ−セリン以外の』側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基」を表し、Ｘ４またはＸ５が複数である場合は、複数のＸ４またはＸ５は互いに同一であっても異なってもよく；
上記式（ＩＣ）中のＸ６およびＸ７は、それぞれ独立に、「『Ｌ−セリンおよびＤ−セリン以外の』側鎖に固定化官能基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基」を表し、Ｘ６またはＸ７が複数である場合は、複数のＸ６またはＸ７は互いに同一であっても異なってもよい。
本発明の第４の態様においては、これらの相違点があるため、式（ＩＣ）を式（Ｉ’Ｃ）と称する場合がある。
【０１５７】
〈好ましいアミノ酸部分配列〉
さらには、上記式（Ｉ）、（ＩＡ）、（ＩＢ）、または（ＩＣ）中のアミノ酸部分配列Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎは、下記式（１）で表されるアミノ酸配列（配列番号１）と、好ましくは７０％以上の、より好ましくは７５％以上の、さらに好ましくは８５％以上の、いっそう好ましくは９０％以上の配列相同性を有する。
Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ  ・・・（１）
式（１）中、
ＡはＬ−アラニン残基を表し；
ＹはＬ−チロシン残基を表し；
ＨはＬ−ヒスチジン残基を表し；
ＬはＬ−ロイシン残基を表し；
Ｇはグリシン残基を表し；
ＥはＬ−グルタミン酸残基を表し；
ＶはＬ−バリン残基を表し；および、
ＷはＬ−トリプトファン残基を表す。
【０１５８】
また、上記式（Ｉ）、（ＩＡ）、（ＩＢ）、または（ＩＣ）中のアミノ酸部分配列Ｘｍ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘｎは、下記式（２）で表されるアミノ酸配列（配列番号２）と、好ましくは７０％以上の、より好ましくは７５％以上の、さらに好ましくは８５％以上の、いっそう好ましくは９０％以上の配列相同性を有する。
Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｒ−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ  ・・・（２）
式（２）中、
ＡはＬ−アラニン残基を表し；
ＹはＬ−チロシン残基を表し；
ＨはＬ−ヒスチジン残基を表し；
ＲはＬ−アルギニン残基を表し；
Ｇはグリシン残基を表し；
ＥはＬ−グルタミン酸残基を表し；
ＬはＬ−ロイシン残基を表し；
ＶはＬ−バリン残基を表し；および、
ＷはＬ−トリプトファン残基を表す。
【０１５９】
ここで、２つのアミノ酸配列の配列相同性は、次のようにして求める。
（ｉ）２つのアミノ酸配列のアラインメントを行う
一致（マッチ）は＋１、不一致（ミスマッチ）は−１、ギャップは−１のスコアを与え、アラインメント・スコアが最大となるようにアラインメントを行う。
（ｉｉ）配列相同性を計算する
得られたアラインメントに基づいて、次式により配列相同性を計算する。
配列相同性［％］＝（一致ポジション数／全ポジション数）×１００［％］
全ポジション数はアラインメントの長さであり、一致ポジション数はアミノ酸の種類が一致するポジションの数である。
ここで、アミノ酸残基の種類が一致するか否かの判断は、そのアミノ酸残基の元になるアミノ酸の側鎖（アミノ酸側鎖）の構造が同一であるか否かによるものとする。なお、エナンチオマーの関係にあるアミノ酸の側鎖の構造は同一ではない。
（ｉｉｉ）配列相同性の計算例
例えば、次のアミノ酸配列を考える。
配列Ａ  ＡＹＨＲＧＥＬＶＷ
配列Ｂ  ＡＷＨＧＥＬＶＷ
これを、上記した条件の下でアラインメントすると、次のようになる。ここで、配列Ａ、Ｂ間でアミノ酸（残基）の種類が一致する箇所には、見やすくするため、ホモロジー・ストリング「｜」を付けている。また、「−」はギャップである。
配列Ａ  ＡＹＨＲＧＥＬＶＷ
｜  ｜  ｜｜｜｜｜
配列Ｂ  ＡＷＨＬＧＥＬＶＷ
このアラインメントのスコアは、一致（＋１）×７＋不一致（−１）×１＋ギャップ（−１）×１＝５である。
この例では、全ポジション数は９であり、一致ポジション数は７であるから、上記式に従って算出した配列相同性は、７／９×１００＝７７．８％である。
【０１６０】
〈繰返し単位の好ましい数〉
本発明においては、上記式（Ｉ）〜（ＩＣ）において、好ましくはｋ＝１である。
【０１６１】
環状部を含む部分が１つであると、環状ペプチドの全長を短くすることができ、合成が容易となる。また、環化する際のヒュスゲン反応によって、意図しない箇所で架橋を形成することを回避することができる。
【０１６２】
〈本発明の環状ペプチド（ＩＩ）の構造〉
本発明の環状ペプチドとして、特に好ましくは、下記式（ＩＩ）によって表される環状ペプチドである。
ＲＮ−Ｘｖ０−Ｘ６ｔ０−Ｘｅ０−Ｘ４ｒ０−Ｘｐ０−Ｘａ−Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｘ８−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ−Ｘｂ−Ｘｑ０−Ｘ５ｓ０−Ｘｆ０−Ｘ７ｕ０−Ｘｗ０−ＲＣ    ・・・（ＩＩ）
式（ＩＩ）中、Ｘａ、Ｘｂ、ＲＮ、およびＲＣは、上記式（Ｉ）中におけるものと同義である。
【０１６３】
《環状部、直鎖部、架橋部、および抗体結合部》
式（ＩＩ）によって表される環状ペプチドの環状部は「Ｘａ−Ａ−Ｙ−Ｈ−Ｘ８−Ｇ−Ｅ−Ｌ−Ｖ−Ｗ−Ｘｂ」であり、直鎖部は「Ｘｖ０−Ｘ６ｔ０−Ｘｅ０−Ｘ４ｒ０−Ｘｐ０−」および「Ｘｑ０−Ｘ５ｓ０−Ｘｆ０−Ｘ７ｕ０−Ｘｗ０」であり、架橋部は「Ｘａ」および「Ｘｂ」であり、抗体結合部は「Ｌ−Ｖ−Ｗ」である。
【０１６４】
《Ｘ４ｒ０およびＸ５ｓ０》
式（ＩＩ）において、Ｘ４ｒ０およびＸ５ｓ０は、それぞれ、連続するｒ０個のＸ４および連続するｓ０個のＸ５を表す。
式（ＩＩ）において、Ｘ４およびＸ５は、上記式（ＩＡ）中におけるものと同義である。
式（ＩＩ）において、ｒ０および上記ｓ０は、それぞれ、０≦ｒ０≦５、および、０≦ｓ０≦５を満たす整数である。
ｒ０は、好ましくは０≦ｒ０≦３を満たし、より好ましくは０≦ｒ０≦２を満たす。
ｓ０は、好ましくは０≦ｓ０≦３を満たし、より好ましくは０≦ｓ０≦２を満たす。
【０１６５】
《Ｘ６ｔ０およびＸ７ｕ０》
式（ＩＩ）において、Ｘ６ｔ０およびＸ７ｕ０は、それぞれ、連続するｔ０個のＸ６および連続するｕ０個のＸ７を表す。
式（ＩＩ）において、Ｘ６およびＸ７は、上記式（ＩＢ）中におけるものと同義である。
式（ＩＩ）において、ｔ０およびｕ０は、それぞれ、０≦ｔ０≦５、および、０≦ｕ０≦５を満たす整数である。
ｔ０は、好ましくは０≦ｔ０≦３を満たし、より好ましくは０≦ｔ０≦２を満たす。
ｕ０は、好ましくは０≦ｕ０≦３を満たし、より好ましくは０≦ｕ０≦２を満たす。
【０１６６】
《Ｘｅ０、Ｘｆ０、Ｘｐ０、Ｘｑ０、Ｘｖ０、およびＸｗ０》
Ｘｅ０、Ｘｆ０、Ｘｐ０、Ｘｑ０、Ｘｖ０、およびＸｗ０は、それぞれ、連続するｅ０個のＸ、連続するｆ０個のＸ、連続するｐ０個のＸ、連続するｑ０個のＸ、連続するｖ０個のＸ、および連続するｗ０個のＸを表す。
上記Ｘは、上記式（Ｉ）中におけるものと同義である。
上記ｅ０および上記ｆ０は、それぞれ、０≦ｅ０≦１０、および、０≦ｆ０≦１０を満たす整数である。
ｅ０は、好ましくは０≦ｅ０≦５を満たし、より好ましくは０≦ｅ０≦３を満たし、さらに好ましくは０≦ｅ０≦２を満たす。
ｆ０は、好ましくは０≦ｆ０≦５を満たし、より好ましくは０≦ｆ０≦３を満たし、さらに好ましくは０≦ｆ０≦２を満たす。
上記ｐ０および上記ｑ０は、それぞれ、０≦ｐ０≦５、および、０≦ｑ０≦５を満たす整数である。
ｐ０は、好ましくは０≦ｐ０≦３を満たし、より好ましくは０≦ｐ０≦２を満たす。
ｑ０は、好ましくは０≦ｑ０≦３を満たし、より好ましくは０≦ｑ０≦２を満たす。
上記ｖ０および上記ｗ０は、それぞれ、０≦ｖ０≦５、および、３≦ｗ０≦５を満たす整数である。
ｖ０は、好ましくは０≦ｖ０≦３を満たし、より好ましくは０≦ｖ０≦２を満たす。
ｗ０は、好ましくは０≦ｗ０≦３を満たし、より好ましくは０≦ｗ０≦２を満たす。
【０１６７】
Ｘ８は、Ｌ−ロイシン残基、Ｄ−ロイシン残基、Ｌ−アルギニン残基、またはＤ−アルギニン残基を表す。
【０１６８】
上記（ＩＩ）式中、
ＡはＬ−アラニン残基またはＤ−アラニン残基を表し；
ＹはＬ−チロシン残基またはＤ−チロシン残基を表し；
ＨはＬ−ヒスチジン残基またはＤ−ヒスチジン残基を表し；
Ｌ−アルギニン残基、またはＤ−アルギニン残基を表し；
Ｇはグリシン残基を表し；
ＥはＬ−グルタミン酸残基またはＤ−グルタミン酸残基を表し；
ＬはＬ−ロイシン残基を表し；
ＶはＬ−バリン残基を表し；
ＷはＬ−トリプトファン残基を表す。
【０１６９】
《環状ペプチドの総アミノ酸残基数》
さらに、上記式（ＩＩ）において、環状ペプチドの総アミノ酸残基数は、１１〜５０残基であり、好ましくは１１〜４０残基であり、より好ましくは１１〜３０残基であり、さらに好ましくは１１〜２０残基である。
すなわち、式（ＩＩ）中、ｅ０、ｆ０、ｐ０、ｑ０、ｒ０、ｓ０、ｔ０、ｕ０、ｖ０、およびｗ０は、０≦ｅ０＋ｆ０＋ｐ０＋ｑ０＋ｒ０＋ｓ０＋ｔ０＋ｕ０＋ｖ０＋ｗ０≦３９を満たし、好ましくは０≦ｅ０＋ｆ０＋ｐ０＋ｑ０＋ｒ０＋ｓ０＋ｔ０＋ｕ０＋ｖ０＋ｗ０≦２９を満たし、より好ましくは０≦ｅ０＋ｆ０＋ｐ０＋ｑ０＋ｒ０＋ｓ０＋ｔ０＋ｕ０＋ｖ０＋ｗ０≦１９を満たし、さらに好ましくは０≦ｅ０＋ｆ０＋ｐ０＋ｑ０＋ｒ０＋ｓ０＋ｔ０＋ｕ０＋ｖ０＋ｗ０≦９を満たす。
【０１７０】
〈抗体結合性〉
本発明の環状ペプチドは抗体結合性に優れる。抗体結合性とは、抗体および／または抗体誘導体との結合活性をいう。結合活性が高いほど、抗体精製用アフィニティクロマトグラフィー用のアフィニティリガンドとして使用した際に、抗体の吸着量が多く、一度に多量の抗体を精製できる。抗体とは、免疫グロブリンまたはその類縁体、フラグメントもしくは融合体をいう。ここで、類縁体とは、免疫グロブリンの構造または機能が少なくとも部分的に保持された、天然の、または人工的に作製された、タンパク質またはタンパク質コンジュゲートをいう。また、フラグメントとは、酵素的な処理または遺伝子工学的な設計によって作製された、免疫グロブリンの部分構造を有するタンパク質をいう。また、融合体とは、各種サイトカイン、サイトカイン受容体等の生物活性を有するタンパク質の機能部分を、免疫グロブリンの全体または一部と遺伝子工学的に融合させて作製したタンパク質をいう。また、抗体としては、モノクローナル抗体または免疫グロブリンのＦｃ領域を有する融合体が好ましく、モノクローナル抗体がより好ましい。なお、本発明において、免疫グロブリンは、ＩｇＧ（Immunoglobulin G；免疫グロブリンＧ）、ＩｇＭ（Immunoglobulin M；免疫グロブリンＭ）、ＩｇＡ（Immunoglobulin A；免疫グロブリンＡ）、ＩｇＤ（Immunoglobulin D；免疫グロブリンＤ）およびＩｇＥ（Immunoglobulin E；免疫グロブリンＥ）の５種類のクラス（アイソタイプ）のいずれでもよいが、ＩｇＧまたはＩｇＭが好ましく、ＩｇＧがより好ましい。
【０１７１】
〈耐アルカリ性〉
さらに、本発明の環状ペプチドは経時安定性や薬品耐性、特に耐アルカリ性に優れる。耐薬品性に優れることで、例えば、本発明の環状ペプチドをアフィニティリガンドとして用いるアフィニティクロマトグラフィー用担体を抗体精製に使用した際に、薬品、特にアルカリによる洗浄を繰り返し行っても抗体結合性が維持され、抗体精製コストをさらに低減することができる。
【０１７２】
《第３の態様における例外》
本発明の第３の態様において：
上記式（ＩＩ）中のＸは、Ｌ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、Ｄ−ホモセリン、Ｌ−アルギニン、およびＤ−アルギニン以外のアミノ酸に由来するアミノ酸残基を表し、Ｘが複数である場合は、複数のＸは互いに同一であっても異なっていてもよく；
上記式（ＩＩ）中のＸ４およびＸ５は、それぞれ独立に、「側鎖にカルボキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基」または「『Ｌ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、およびＤ−ホモセリン以外の』側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基」を表し、Ｘ４またはＸ５が複数である場合は、複数のＸ４またはＸ５は互いに同一であっても異なってもよく；
上記式（ＩＩ）中のＸ６およびＸ７は、それぞれ独立に、「『Ｌ−セリン、Ｄ−セリン、Ｌ−ホモセリン、Ｄ−ホモセリン、Ｌ−アルギニン、およびＤ−アルギニン以外の』側鎖に固定化官能基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基」を表し、Ｘ６またはＸ７が複数である場合は、複数のＸ６またはＸ７は互いに同一であっても異なってもよく；
上記式（ＩＩ）中のＸ８は、Ｌ−ロイシン残基またはＤ−ロイシン残基を表す。
本発明の第３の態様においては、この相違点があるため、式（ＩＩ）を式（ＩＩ’）と称する場合がある。
【０１７３】
《第４の態様における例外》
本発明の第４の態様において：
上記式（ＩＩ）中のＸは、Ｌ−セリンおよびＤ−セリン以外のアミノ酸に由来するアミノ酸残基であり、Ｘが複数である場合は、複数のＸは互いに同一であっても異なっていてもよく；
上記式（ＩＩ）中のＸ４およびＸ５は、それぞれ独立に、「側鎖にカルボキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基」または「『Ｌ−セリンおよびＤ−セリン以外の』側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基」を表し、Ｘ４またはＸ５が複数である場合は、複数のＸ４またはＸ５は互いに同一であっても異なってもよく；
上記式（ＩＩ）中のＸ６およびＸ７は、それぞれ独立に、「『Ｌ−セリンおよびＤ−セリン以外の』側鎖に固定化官能基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基」を表し、Ｘ６またはＸ７が複数である場合は、複数のＸ６またはＸ７は互いに同一であっても異なってもよい。
本発明の第４の態様においては、この相違点があるため、式（ＩＩ）を式（ＩＩ’）と称する場合がある。
【０１７４】
［環状ペプチドの合成方法］
本発明の環状ペプチドの合成方法は特に限定されるものではないが、例えば、有機合成化学的ペプチド合成方法または遺伝子工学的ペプチド合成方法によって合成することができる。
有機合成化学的ペプチド合成方法としては、液相合成法、固相合成法のいずれも用いることができる。本発明のポリペプチドの合成方法としては、自動ペプチド合成装置を用いた固相合成法が簡便であり好ましい。
遺伝子工学的ペプチド合成方法は、細胞に遺伝子導入し、ペプチドを合成する方法である。細胞としては、細菌、線虫細胞、昆虫細胞、哺乳類細胞、動物細胞等が用いられる。
例えば、４塩基コドン法を用いて、非天然アミノ酸を導入して合成することが可能である。また、鎖状ペプチドを合成し、環状部に導入されたアミノ酸残基の側鎖の架橋性官能基を反応させることにより環化し、合成できる。
ジスルフィド結合を形成する場合は、例えば、側鎖にチオール基を有するアミノ酸に由来する２つのアミノ酸残基の側鎖チオール基を酸化条件下で反応させてジスルフィド結合を形成することができる。具体的には、例えば、２つのＬ−ホモシステイン残基の側鎖チオール基間でジスルフィド結合を形成させることにより、直鎖状ポリペプチドを環化することができる。
チオエーテル結合を形成する場合は、例えば、側鎖にチオール基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基の側鎖チオール基と、側鎖にクロロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基の側鎖クロロアセチル基とを反応させてチオール結合を形成することができる。具体的には、例えば、Ｌ−ホモシステイン残基の側鎖チオール基とＮ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシン残基の側鎖クロロアセチル基との間でチオール結合を形成させることにより、直鎖状ポリペプチドを環化することができる。
なお、側鎖にクロロアセチル基等のハロアセチル基を有するアミノ酸の代わりに、側鎖にクロロプロピオニル基等の、ハロアセチル基よりもメチレン単位の数が多いハロアルカノイル基を有するアミノ酸を用いることも可能であるが、メチレン単位の数が少ないものほど環化効率が高いため好ましい。例えば、ハロプロピオニル基（−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ２）２−Ｘ；Ｘはハロゲン原子、メチレン単位の数２）よりもアセチル基（−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｘ；Ｘはハロゲン原子、メチレン単位の数１）の方が環化効率が高いため、好ましい。
【０１７５】
［本発明の環状ペプチドの用途］
本発明の環状ペプチドは、抗体結合性リガンド、抗体標識用リンカー、抗体薬物複合体用リンカー、および薬物運搬体（医薬品用リンカー）等として用いることができる。ただし、これらに限定されるものではない。
【０１７６】
〈抗体結合性リガンドおよびアフィニティクロマトグラフィー担体〉
本発明の環状ペプチドの用途は、アフィニティクロマトグラフィーの技術領域における抗体結合性リガンドとしての用途がある。
本発明の環状ペプチドの抗体結合性リガンド用途のアプリケーションとしては、例えば、本発明の環状ペプチドを水不溶性担体に固定化した、抗体または抗体誘導体の吸着材料、およびアフィニティクロマトグラフィー担体を挙げることができる。
【０１７７】
「水不溶性担体」とは、水に実質的に不溶性である担体をいう。このような担体としては、例えば、結晶性セルロース、架橋セルロース、架橋アガロース、架橋デキストラン、および、架橋プルラン等の多糖類、アクリレート系重合体、および、スチレン系重合体等の有機担体、ガラスビーズ、および、シリカゲル等の無機担体、さらにはこれらの組合せによって得られる、有機−有機、有機−無機等の複合担体等が挙げられる。水不溶性担体としては、アルカリ耐性の観点から、多糖類またはアクリレート系重合体がより好ましく、アガロースまたはセルロース等の多糖類がさらに好ましい。水不溶性担体として用いることができる市販品としては、例えば、多孔質セルロースゲルであるセルファイン（Ｃｅｌｌｕｆｉｎｅ）  ＧＣＬ２０００（ＪＮＣ社製）（ＣＥＬＬＵＦＩＮＥは登録商標）、セルファインＭＡＸ（Ｃｅｌｌｆｉｎｅ  ＭＡＸ）（ＪＮＣ社製）、アリルデキストランとメチレンビスアクリルアミドとを共有結合で架橋したセファクリル（Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ）  Ｓ−１０００  ＳＦ（ＧＥヘルスケア社製）（ＳＥＰＨＡＣＲＹＬは登録商標）、アクリレート系の担体であるトヨパール（ＴＯＹＯＰＥＡＲＬ）（東ソー社製）（トヨパールおよびＴＯＹＯＰＥＡＲＬは登録商標）、トヨパール（ＴＯＹＯＰＥＡＲＬ）  ＡＦ−Ｃａｒｂｏｘｙ−６５０  （東ソー社製）、トヨパール（ＴＯＹＯＰＥＡＲＬ）  ＧｉｇａＣａｐ  ＣＭ−６５０  （東ソー社製）、アガロース系の架橋担体であるセファロース（Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ）  ＣＬ４Ｂ（ＧＥヘルスケア社製）（ＳＥＰＨＡＲＯＳＥは登録商標）、および、エポキシ基で活性化されたポリメタクリルアミドであるオイパーギット（Ｅｕｐｅｒｇｉｔ）  Ｃ２５０Ｌ（シグマアルドリッチ社製）（ＥＵＰＥＲＧＩＴは登録商標）等が挙げられる。ただし、本発明における水不溶性担体は、これらの担体または活性化担体にのみ限定されるものではない。また、本発明に用いる水不溶性担体は、本吸着材料の使用目的および方法からみて、表面積が大きいことが好ましく、適当な大きさの細孔を多数有する多孔質であることが好ましい。担体の形態としては、特に限定されるものではないが、ビーズ状、繊維状、膜状、および、中空糸状等、いずれも可能であり、任意の形態を選ぶことができる。
【０１７８】
本発明の環状ペプチドを水不溶性担体に固定化する方法は特に限定されるものではないが、一般にタンパク質またはポリペプチドを担体に固定化する場合に採用される方法を例示する。
担体を臭化シアン、エピクロロヒドリン、ジグリシジルエーテル、トシルクロライド、トレシルクロライド、および、ヒドラジン等と反応させて担体を活性化または担体表面に反応性官能基を導入し、リガンドとして固定化する化合物と反応、固定化する方法、また、担体とリガンドとして固定化する化合物が存在する系にカルボジイミドのような縮合試薬、またはグリセルアルデヒドのように分子中に複数の官能基を持つ試薬を加えて縮合、架橋することによる固定化が挙げられる。
【０１７９】
本発明において、「リガンド」とは、特定の物質に、ある親和性をもって結合する分子をいう。上記特定の物質は、特に限定されるものではないが、好ましくは抗体または抗体誘導体である。リガンドと抗体または抗体誘導体との結合部位は、特に限定されるものではないが、汎用性の観点から好ましくは抗体または抗体誘導体の定常領域である。定常領域は、特に限定されないが、好ましくはＦｃ（fragment crystallizable；結晶化可能断片）領域、ＣＬ領域（constant regions of a light chain；軽鎖の定常領域）、またはＣＨ領域（constant regions of a heavy chain；重鎖の定常領域）である。本発明においては、抗体または抗体誘導体と結合性を有するリガンドを「抗体結合性リガンド」という場合がある。
【０１８０】
リガンドを担体に固定化する際には、リガンドを水系溶媒（水系分散媒）または有機系溶媒（有機系分散媒）に溶解（分散）することが好ましい。水系溶媒（水系分散媒）としは、特に限定されるものではないが、例えば、ＨＥＰＥＳ（4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid；ヘペス）緩衝液、酢酸緩衝液、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液、トリス−塩酸緩衝液等を挙げることができる。有機系溶媒（有機系分散媒）は、特に限定されるものではないが、極性有機溶媒が好ましく、殊にＤＭＳＯ（dimethyl sulfoxide；ジメチルスルホキシド）、ＤＭＦ（N,N-dimethylformamide；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド）、または、アルコールが好ましく、例えば、メタノール、エタノール、ＩＰＡ（isopropyl alcohol；イソプロピルアルコール）、ＴＦＥ（2,2,2-trifluoroethanol；２，２，２−トリフルオロエタノール）、および、ＨＦＩＰ（1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-propanol；１，１，１，３，３，３−ヘキサフルオロ−２−プロパノール）等が挙げられる。
リガンドを固定化する際のｐＨ条件は特に限定されず、酸性、中性、および、アルカリ性のいずれでもよく、例えば、使用する溶媒（分散媒）に合わせて適宜設定することができる。
例えば、アルカリ性にする場合は、ＤＢＵ（diazabicycloundecene；ジアザビシクロウンデセン）等の塩基をＤＭＳＯ（dimethyl sulfoxide；ジメチルスルホキシド）やアルコールに添加してもよい。
【０１８１】
上記吸着材料をアフィニティクロマトグラフィー用充填剤とする場合の抗体結合性リガンド密度は特に限定されないが、０．１〜１０００ｍｍｏｌ／充填剤１Ｌが好ましく、０．１〜１００ｍｍｏｌ／充填剤１Ｌがより好ましく、０．５〜２０ｍｍｏｌ／充填剤１Ｌがさらに好ましい。この範囲内であると、抗体結合性リガンドの使用量と抗体精製性能のバランスがよく、より低コストで、効率よく抗体を精製することができる。
【０１８２】
〈抗体標識用リンカーおよび標識化抗体〉
本発明の環状ペプチドの用途は、イムノアッセイの技術領域においては、抗体標識用リンカーとしての用途がある。
本発明の環状ペプチドの抗体標識用リンカーとしての用途のアプリケーションとしては、抗体、標識化合物および本発明の環状ペプチドを含み、抗体と標識化合物とが本発明の環状ペプチドを介して結合している標識化抗体を挙げることができる。
イムノアッセイは、免疫反応（抗原抗体反応）を利用して、微量物質の検出および定量を行う分析方法であり、特異性が高く高感度であるという特徴を持つ。
イムノアッセイにおいて、微量物質（抗原）に結合した抗体（一次抗体）を検出するには、一次抗体に直接標識する方法、および、一次抗体に結合する抗体（二次抗体）に標識する方法等がある。本発明の環状ペプチドは、一次抗体に標識物質を結合させるためのリンカーとして用いることができるし、二次抗体に標識物質を結合させるためのリンカーとして用いることもできる。本発明の環状ペプチドは抗体結合性（ＩｇＧ（Immunoglobulin G；免疫グロブリンＧ）結合性）を有するので、標識した本発明の環状ペプチドを、標識した二次抗体の代わりに用いることも可能である。
また、標識には多種あり、ラジオアイソトープを標識として用いる系を放射免疫測定法（ＲＩＡ；radio immunoassay）、ペルオキシダーゼ等の酵素を標識として用いる系をＥＩＡ（enzyme immunoassay；酵素免疫測定法）、ルミノール等の化学発光物質を標識として用いる系をＣＬＩＡ（chemiluminescent immunoassay；化学発光免疫測定法）、ＦＩＴＣ（fluorescein isothiocyanate；フルオレセインイソチオシアネート）等の蛍光発光物質（蛍光色素）を標識物質として用いる系をＦＩＡ（fluorescent immunoassay；蛍光免疫測定法）という。本発明の環状ペプチドは、いずれの系においても、抗体標識用リンカーとして使用することができる。
イムノアッセイの検出感度を上げるためには、抗体１分子に多数の標識を付けることが必要であるが、従来の抗体標識用リンカーでは、多数結合した際に抗体の結合活性の低下を招き、かえってイムノアッセイの利点である特異性および感度を損なう可能性があった。しかし、本発明の環状ペプチドは、抗体に多数結合した場合であっても、抗体の構造的完全性を保持することができ、抗体の結合活性を低下させないので、多数結合した際にも、イムノアッセイの利点である特異性および感度を損なわず、検出感度を上げることが期待される。また、抗原抗体反応による結合であることから、従来困難であった標識後の分離も可能となり、標識の可逆操作が実現できる。
【０１８３】
〈抗体薬物複合体用リンカーおよび抗体薬物複合体〉
本発明の環状ペプチドの用途は、抗体薬物複合体の技術領域においては、抗体薬物複合体用リンカーとしての用途がある。
本発明の環状ペプチドの抗体薬物複合体用リンカーとしての用途のアプリケーションとしては、例えば、抗体、薬物、および本発明の環状ペプチドを含み、抗体と薬物とが本発明の環状ペプチドを介して結合している抗体薬物複合体を挙げることができる。
ＡＤＣ（Antibody Drug Conjugate；抗体薬物複合体）は、別名、武装抗体（Armed Antibody）とも呼ばれ、細胞を認識する抗体と活性本体である薬物（低分子薬物）とを、適切なリンカーで結合した医薬である。抗体薬物複合体の作用機序は、概ね、以下のとおりである。
(1)標的細胞表面の標的分子に抗体薬物複合体の抗体部分が結合する。
(2)抗体薬物複合体が細胞内に取り込まれる。
(3)細胞内で抗体薬物複合体のリンカーが切断される。
(4)細胞内で薬物（低分子薬物）の薬効が発揮される。
抗体薬物複合体では、抗体が標的とする分子が発現している細胞でのみ薬効が発揮されるため、全身の副作用を抑え、標的細胞に集中して薬効を発揮できるため、薬物単体に比べて、よく効き、副作用が少ない。例えば、細胞分裂が盛んながん細胞を攻撃することを目的として開発された抗がん剤は、同様に盛んな細胞分裂で機能を維持している細胞、具体的には、免疫を担当する細胞、消化管の細胞、毛根の細胞等も攻撃してしまうため、副作用として、感染症に弱くなり、下痢を起こし、頭髪が抜け落ちる等の症状が現れることがある。しかし、抗体薬物複合体では、標的のがん細胞に選択的に抗がん剤を運搬することができるので、抗がん剤が標的細胞以外の細胞を攻撃することによる副作用を抑えることができる。
【０１８４】
抗体薬物複合体用リンカーは、抗体薬物複合体の抗体部分と薬物部分とをつなぎ、血中では安定し、細胞内で抗体と薬物を切断して放出することが要求されるだけではなく、抗体の結合活性を損なわないことも要求される。薬物の運搬効率を上げるためには、抗体１分子に多数の薬物を付けることが必要であるが、従来の抗体薬物複合体用リンカーでは、多数結合した際に抗体の結合活性の低下を招き、かえって抗体薬物複合体の利点である選択性を損ない、標的細胞への薬物運搬効率が低下する可能性があった。しかし、本発明の環状ペプチドは、抗体に多数結合した場合であっても、抗体の構造的完全性を保持することができ、抗体の結合活性を低下させないので、多数結合した際にも、抗体薬物複合体の利点である選択性を損なわず、標的細胞への薬物運搬効率を上げることが期待される。また、従来の環状ペプチドよりも経時安定性が高いことから、血中での安定性も向上することが期待される。さらに、環状部であるジスルフィド結合の側鎖部分を変更することにより、細胞内での薬物放出性を制御することが期待される。
【０１８５】
なお、薬物は、リポソーム化された薬物、高分子ミセル化された薬物、またはＰＥＧ（ポリエチレングリコール）化された薬物であってもよい。
薬物は、リポソーム化、高分子ミセル化、またはＰＥＧ化されることにより、多くの場合において有効成分の生体内安定性、組織移行性プロファイルをはじめとする薬物動態、および細胞内動態等の改善が図られる。
【０１８６】
〈薬物運搬体および医薬製剤〉
本発明の環状ペプチドの用途は、ドラッグデリバリーシステムにおける薬物運搬体としての用途がある。
本発明の環状ペプチドの薬物運搬体としての用途のアプリケーションとしては、例えば、薬物および本発明の環状ペプチドを含み、薬物と本発明の環状ペプチドとが直接または間接的に結合している医薬製剤を挙げることができる。
本発明の環状ペプチドが生体内に存在するＩｇＧに結合することにより、上記した抗体医薬複合体と同様の効果を期待することができる。薬物はそのまま環状ペプチドと結合していてもよいし、リポソーム化、高分子ミセル化、またはＰＥＧ（ポリエチレングリコール）化された薬物として、環状ペプチドと結合していてもよい。また、デキストランのような多糖類や親水性ポリマーを介して環状ペプチドと結合していてもよい。
【０１８７】
また、本発明の環状ペプチドに薬物を結合する方法としては、架橋部アミノ酸残基間のジスルフィド結合を利用することが考えられる。
具体的には、ジスルフィド結合（−Ｓ−Ｓ−）を還元して開裂させ（−Ｓ−  Ｓ−−）、２つのイオウを架橋するように化合物を付加する方法である。
このような方法としては、例えば、ＴｈｉｏＢｒｉｄｇｅ（商標）が知られている。
【実施例】
【０１８８】
以下に実施例に基づいて本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例によって限定されるものではない。
【０１８９】
［実施例１］
（１）環状ペプチドの合成
下記式（３）で表される環状ペプチド（配列番号３；以下、この環状ペプチドを「環状ペプチド１」という場合がある。）を、全自動ペプチド合成装置（ＰＳＳＭ−８、島津製作所社製）を用いて合成した。
ＤＸａＡＹＨＲＧＥＬＶＷＸｂＴＫＫ      ・・・（３）
ただし、ＸａはＮ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシンに由来するアミノ酸残基であり、ＸｂはＬ−ホモシステインに由来するアミノ酸残基であり、Ｘａ−Ｘｂ間には、Ｎ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシンの側鎖クロロアセチル基とＬ−ホモシステインの側鎖チオール基との反応によりチオエーテル結合が形成されている。
【０１９０】
（２）リガンドの固定
ＧＥヘルスケア社製の表面プラズモン共鳴装置であるＢｉａｃｏｒｅ３０００（Ｂｉａｃｏａは登録商標）に市販のＣＭ５（カルボキシメチルデキストラン導入タイプ、ＧＥヘルスケア社製））センサーチップをセットし、ＳＰＲ（surface plasmon resonance；表面プラズモン共鳴）用ＨＥＰＥＳ（4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid；ヘペス）緩衝液（２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ−ＨＣｌ、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ７．４）を１０μＬ／ｍｉｎの流速で安定させ、０．２ＭのＥＤＣ（1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide；１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド）と０．０４ＭのＮＨＳ（N-Hydroxysuccinimide；Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド）混合水溶液を７０μＬ添加した。その後、ＨＥＰＥＳ緩衝液にて０．２ｇ／Ｌに希釈し、０．２０μｍ径のＰＴＦＥ（polytetrafluoroethylene）フィルター（ＡＤＶＡＮＴＥＣ社製）で処理した環状ペプチド１の試料液１０５０μＬをセンサーチップに供給し、その後、エタノールアミン溶液によってブロッキング処理を施し、水酸化ナトリウム水溶液にて洗浄して、固定化を行った。同様に、同センサーチップの別流路に試料を固定化せず、０．２ＭのＥＤＣと０．０４ＭのＮＨＳ混合水溶液を７０μＬ添加した後、ブロッキング処理と洗浄処理を行った。得られた固定化センサーチップを、以下「固定化センサーチップＡ」という。
【０１９１】
（３）結合活性の評価
上記（１）で作製した固体化センサーチップＡに、２５℃にて３０００ｎＭのヒトＩｇＧ（Immunoglobulin G；免疫グロブリンＧ）抗体を１０分間添加し、添加直後の抗体結合量を測定し、環状ペプチドを固定化した流路と未固定の流路の差分と環状ペプチドの固定化量から環状ペプチドの活性を算出し、さらに、比較例１の環状ペプチド５の活性を１とした時のヒトIｇＧ抗体との相対結合活性を算出した。
（相対結合活性の評価基準）
相対結合活性が２０倍超・・・・・・・・・・・・・・Ｓ
相対結合活性が８倍超・・・・・・・・・・・・・・・Ａ
相対結合活性が４倍超、８倍以下・・・・・・・・・・Ｂ
相対結合活性が２倍超、４倍以下・・・・・・・・・・Ｃ
相対結合活性が１倍超、２倍以下・・・・・・・・・・Ｄ
相対結合活性が１倍以下・・・・・・・・・・・・・・Ｅ
評価Ａ、ＢおよびＣは本固定化による改善効果が十分であることを表し、評価ＤおよびＥは十分な結合活性が見られないことを表す。評価Ｓは評価Ａのうちでも特に優れた改善効果を奏したことを表し、「Ａ（Ｓ）」として示す。
十分な結合活性を示す環状ペプチドを用いることにより、抗体と特異的に結合することが出来、より効率的に抗体を精製することが可能となり、抗体の精製コストをより低減することができる。
【０１９２】
（４）リガンドの固定
HiTrap NHS-activated HP Columns（リガンド固定化用カップリングカラム、ＧＥヘルスケア社製））（ＨＩＴＲＡＰは登録商標）１ｍＬに環状ペプチド１を固定化バッファー（２００ｍＭ  ＮａＨＣＯ３、５００ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ８．３）に溶解して調製した１０ｍｇ／ｍＬ環状ペプチド液１ｍＬを２５℃で１時間反応させる。これをエタノールアミン水溶液でブロッキング、洗浄し、環状ペプチド１の固定化担体を得た。得られた固定化担体を、以下「固定化担体Ａ」という。
【０１９３】
（５）薬品耐性の評価
上記（４）で作製した固体化担体Ａに、クロマトシステムＡＫＴＡ  ａｖａｎｔ  ２５（ＧＥヘルスケア社製）（ＡＫＴＡＡＶＡＮＴは登録商標）に接続し、抗体結合容量の測定を行った。カラムを平衡化液（２０ｍＭリン酸バッファー、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ７．４）で平衡化した後に、ヒトＩｇＧ抗体を標準バッファー（２０ｍＭリン酸バッファー、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ７．４）で５ｍｇ／ｍＬに調整した溶液１５ｍＬを流速０．２１ｍＬ／ｍｉｎにて添加した。その後、負荷後洗浄液（２０ｍＭリン酸バッファー、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ７．４）を同じ流速で５ｍＬ流して洗浄した後に、溶出前洗浄液（２０ｍＭリン酸バッファー、１Ｍ  ＮａＣｌ、ｐＨ７．４）を同じ流速で５ｍＬ流した。その後、溶出液（１００ｍＭクエン酸バッファー、ｐＨ３．２）を同じ流速で５ｍＬ流した。さらに連続して、ＣＩＰ（cleaning in place；定置洗浄）液（０．１Ｍ水酸化ナトリウム）を同じ流速で５ｍＬを流し、その後再平衡化液（２０ｍＭリン酸バッファー、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ７．４）同じ流速で５ｍＬ流した。このとき、２８０ｎｍの吸光度をモニタリングして得られたＩｇＧ（Immunoglobulin G；免疫グロブリンＧ）溶出ピークより、抗体原液の１０％が担体から漏れ出すまでに担体に抗体が結合した量を抗体結合容量として測定した。次に、本固定化担体Ａを０．２Ｍ  ＮａＯＨ水溶液に２５℃で６時間満たして静置した後、同様に担体の抗体結合容量を測定し、アルカリ処理前後の抗体結合量から結合量変化率を算出した。
（結合量変化率の評価基準）
結合量変化率が９０％超・・・・・・・・・・・・・・・Ａ
結合量変化率が８０％超、９０％以下・・・・・・・・・Ｂ
結合量変化率が７０％超、８０％以下・・・・・・・・・Ｃ
結合量変化率が５０％超、７０％以下・・・・・・・・・Ｄ
結合量変化率が５０％以下・・・・・・・・・・・・・・Ｅ
評価Ａ、ＢおよびＣは薬品耐性が十分であることを表し、評価ＤおよびＥは十分な薬品耐性が見られないことを表す。十分な薬品耐性を示す環状ペプチドを用いることにより、洗浄後も抗体と特異的に繰り返し結合することが出来、長期間、抗体を精製することが可能となり、抗体の精製コストをより低減することができる。
【０１９４】
表３に、実施例１の環状ペプチドの構造、ならびに相対結合活性および薬品耐性の評価結果を示す。
【０１９５】
［実施例２、６］
実施例１に準じて、環状ペプチド２および環状ペプチド６を合成し、相対結合活性および薬品耐性を評価した。
なお、表３中、以下の略号は、それぞれ、以下に記載するものを意味する。
Ｈｃｙ：  Ｌ−ホモシステインに由来するアミノ酸残基
架橋部アミノ酸残基は、側鎖チオール基どうしの反応により、ジスルフィド結合が形成されて、架橋している。
表３に、実施例２および実施例６の環状ペプチドの構造、ならびに相対結合活性および薬品耐性の評価結果を示す。
【０１９６】
［実施例３〜５］
実施例１に準じて、環状ペプチド３〜５を合成し、相対結合活性および薬品耐性を評価した。
なお、表３中、以下の略号は、それぞれ、以下に記載するものを意味する。
Ｈｃｙ：  Ｌ−ホモシステインに由来するアミノ酸残基
Ｏｒｎ（ａｃｅｔｙｌ）：  Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｌ−オルニチンに由来するアミノ酸残基
Ｌｙｓ（ａｃｅｔｙｌ）：  Ｎ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシンに由来するアミノ酸残基
架橋部アミノ酸残基は、クロロアセチル基とチオール基との反応により、チオエーテル結合が形成されて、架橋している。
表３に、実施例３〜５の環状ペプチドの構造、ならびに相対結合活性および薬品耐性の評価結果を示す。
【０１９７】
［実施例７〜１２］
実施例１に準じて、環状ペプチド７〜１２を合成し、相対結合活性および薬品耐性を評価した。
なお、表３中、以下の略号は、それぞれ、以下に記載するものを意味する。
Ｄａｐ（ａｃｅｔｙｌ）：  Ｎ３−ハロアセチル−Ｌ−２，３−ジアミノプロパン酸〔（２Ｓ）−２−アミノ−３−［（２−ハロアセチル）アミノ］プロパン酸〕に由来するアミノ酸残基
Ｄａｂ（ａｃｅｔｙｌ）：  Ｎ４−ハロアセチル−Ｌ−２，４−ジアミノブタン酸〔（２Ｓ）−２−アミノ−４−［（２−ハロアセチル）アミノ］ブタン酸〕に由来するアミノ酸残基
Ｏｒｎ（ａｃｅｔｙｌ）：  Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｌ−オルニチンに由来するアミノ酸残基
Ｌｙｓ（ａｃｅｔｙｌ）：  Ｎ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシンに由来するアミノ酸残基
Ｈｃｙ：  Ｌ−ホモシステインに由来するアミノ酸残基
架橋部アミノ酸残基は、クロロアセチル基とチオール基との反応により、チオエーテル結合が形成されて、架橋している。
表３に、実施例７〜１２の環状ペプチドの構造、ならびに相対結合活性および薬品耐性の評価結果を示す。
【０１９８】
【表３】
0006554452.tif 000021
【０１９９】
［実施例１３〜２２］
実施例１に準じて、環状ペプチド１３〜２２を合成し、相対結合活性および薬品耐性を評価した。
なお、表４中、以下の略号は、それぞれ、以下に記載するものを意味する。
Ｌｙｓ（ａｃｅｔｙｌ）：  Ｎ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシンに由来するアミノ酸残基
Ｈｃｙ：  Ｌ−ホモシステインに由来するアミノ酸残基
ＨｍＳ：  Ｌ−ホモセリンに由来するアミノ酸残基
ＨｍＹ：  Ｌ−ホモチロシンに由来するアミノ酸残基
架橋部アミノ酸残基は、クロロアセチル基とチオール基との反応により、チオエーテル結合が形成されて、架橋している。
表４に、実施例１３〜２２の環状ペプチドの構造、ならびに相対結合活性および薬品耐性の評価結果を示す。
【０２００】
【表４】
0006554452.tif 000022
【０２０１】
［実施例２３〜５３］
実施例１に準じて、環状ペプチド２３〜５３を合成し、相対結合活性および薬品耐性を評価した。
なお、表５中、以下の略号は、それぞれ、以下に記載するものを意味する。
Ｌｙｓ（ａｃｅｔｙｌ）：  Ｎ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシンに由来するアミノ酸残基
Ｈｃｙ：  Ｌ−ホモシステインに由来するアミノ酸残基
架橋部アミノ酸残基は、クロロアセチル基とチオール基との反応により、チオエーテル結合が形成されて、架橋している。
表５に、実施例２３〜５３の環状ペプチドの構造、ならびに相対結合活性および薬品耐性の評価結果を示す。
【０２０２】
【表５】
0006554452.tif 000023
【０２０３】
［実施例５４〜７１］
実施例１に準じて、環状ペプチド５４〜７１を合成し、相対結合活性および薬品耐性を評価した。
なお、表６中、以下の略号は、それぞれ、以下に記載するものを意味する。
Ｈｃｙ：  Ｌ−ホモシステインに由来するアミノ酸残基
架橋部アミノ酸残基は、側鎖チオール基どうしの反応により、ジスルフィド結合が形成されて、架橋している。
表６に、実施例５４〜７１の環状ペプチドの構造、ならびに相対結合活性および薬品耐性の評価結果を示す。
【０２０４】
［比較例１］
実施例１に準じて、環状ペプチド９１を合成し、相対結合活性および薬品耐性を評価した。
なお、表６中、以下の略号は、それぞれ、以下に記載するものを意味する。
Ｇｌｕ：  Ｌ−グルタミン酸に由来するアミノ酸残基
Ｌｙｓ：  Ｌ−リシンに由来するアミノ酸残基
架橋部アミノ酸残基は、カルボキシ基とアミノ基との反応により、アミド結合が形成されて、架橋している。
表６に、比較例１の環状ペプチドの構造、ならびに相対結合活性および薬品耐性の評価結果を示す。
【０２０５】
［比較例２］
実施例１に準じて、環状ペプチド９２を合成し、相対結合活性および薬品耐性を評価した。
なお、表６中、以下の略号は、それぞれ、以下に記載するものを意味する。
Ｃｙｓ：  Ｌ−システインに由来するアミノ酸残基
架橋部アミノ酸残基は、側鎖チオール基どうしの反応により、ジスルフィド結合が形成されて、架橋している。
表６に、比較例２の環状ペプチドの構造、ならびに相対結合活性および薬品耐性の評価結果を示す。
【０２０６】
【表６】
0006554452.tif 000024
【０２０７】
［実施例７２〜７５および比較例３］
実施例１に準じて、環状ペプチド７２〜７５、および環状ペプチド９３を合成し、相対結合活性および薬品耐性を評価した。
なお、表７中、以下の略号はそれぞれ、以下に記載するものを表す。
Ｌｙｓ（ａｃｅｔｙｌ）：  Ｎ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシンに由来するアミノ酸残基
Ｐｅｎ：  Ｌ−ペニシラミンに由来するアミノ酸残基
ＨｍＳ：  Ｌ−ホモセリンに由来するアミノ酸残基
架橋部アミノ酸残基は、クロロアセチル基とチオール基との反応によりチオエーテル結合が形成されて、架橋している。
表７に、実施例７２〜７５および比較例３の環状ペプチドの構造、ならびに相対結合活性および薬品耐性の評価結果を示す。
【０２０８】
［実施例７６〜８３および比較例４〜６］
実施例１に準じて、環状ペプチド７８〜９１を合成し、相対結合活性および薬品耐性を評価した。
なお、表７中、以下の略号はそれぞれ、以下に記載するものを表す。
Ｄａｐ（ａｃｅｔｙｌ）：  Ｎ３−ハロアセチル−Ｌ−２，３−ジアミノプロパン酸〔（２Ｓ）−２−アミノ−３−［（２−ハロアセチル）アミノ］プロパン酸〕に由来するアミノ酸残基
Ｄａｂ（ａｃｅｔｙｌ）：  Ｎ４−ハロアセチル−Ｌ−２，４−ジアミノブタン酸〔（２Ｓ）−２−アミノ−４−［（２−ハロアセチル）アミノ］ブタン酸〕に由来するアミノ酸残基
Ｏｒｎ（ａｃｅｔｙｌ）：  Ｎ−δ−クロロアセチル−Ｌ−オルニチンに由来するアミノ酸残基
Ｌｙｓ（ａｃｅｔｙｌ）：  Ｎ−ε−クロロアセチル−Ｌ−リシンに由来するアミノ酸残基
ＨｍＳ：  Ｌ−ホモセリンに由来するアミノ酸残基
架橋部アミノ酸残基は、クロロアセチル基とチオール基との反応によりチオエーテル結合が形成されて、架橋している。
表７に、実施例７２、７３、７４、７５、および比較例３の環状ペプチドの構造、ならびに相対結合活性および薬品耐性の評価結果を示す。
【０２０９】
【表７】
0006554452.tif 000025
【０２１０】
［実施例・比較例の結果の説明］
〈実施例１〜６〉
実施例１〜６の環状ペプチド１〜６は、いずれも、相対結合活性がＡ評価であり、優れていた。
また、実施例１〜６の環状ペプチド１〜６のうち、実施例２の環状ペプチド２以外は、薬品耐性もＡ評価であり、優れていた。
実施例２の環状ペプチド２と実施例６の環状ペプチド６は、いずれも、架橋構造がジスルフィド結合によるものであるが、薬品耐性の評価が、前者はＢ、後者はＡと異なるものとなった。これは、環状部アミノ酸配列が、前者はＡＹＨＲＧＥＬＶＷであるのに対し、後者はＡＹＨＬＧＥＬＶＷであることによるものと考えられるが、薬品耐性が異なるメカニズムについては現在のところ明確な説明をすることができない。
【０２１１】
〈実施例７〜１２〉
実施例７〜９および実施例１０〜１２は、それぞれ、側鎖にクロロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基の種類を変更したものであり、実施例７〜９と実施例１０〜１２とは、側鎖にクロロアセチル基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基とＬ−システインおよびＤ−システイン以外の側鎖にチオール基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基の位置を入れ換えた関係にあるものである。
実施例７〜１２の環状ペプチド７〜１２は、いずれも、相対結合活性および薬品耐性がともにＡ評価であり、優れていた。
【０２１２】
〈実施例１３〜２２〉
実施例１３〜２２の環状ペプチド１３〜２２は、環状部の外側の側鎖にカルボキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基または側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸に由来するアミノ酸残基を変更した例である。
Ｌ−セリン（側鎖にヒドロキシ基を有するアミノ酸）に由来するアミノ酸残基を環状部のＣ末端側に有する環状ペプチド１３（実施例１３）およびＮ末端側に有する環状ペプチド１９（実施例１９）の薬品耐性がＢ評価であった以外は、環状ペプチド１４〜１８（実施例１４〜１８）および環状ペプチド２０〜２２（実施例２０〜２２）のすべてについて、相対結合活性および薬品耐性がともにＡ評価であり、優れていた。
【０２１３】
〈実施例２３〜５３〉
実施例２３〜５３の環状ペプチド２３〜５３は、架橋構造がチオエーテル結合である場合に、環状部の内側のアミノ酸残基の種類を変更した実施例である。
【０２１４】
〈実施例５４〜７１〉
実施例５４〜７１の環状ペプチド５４〜７１は、架橋構造がジスルフィド結合である場合に、環状部の内側のアミノ酸残基の種類を変更した実施例である。
【０２１５】
〈実施例７２〜７５、比較例３〉
実施例７２〜７５の環状ペプチド７２〜７５および比較例３の環状ペプチド９３は、架橋構造がチオエーテル結合である場合の例であるが、側鎖にチオール基を有するアミノ酸がＬ−ペニシラミンであるものである。
環状部にＬ−セリンを含む比較例３の環状ペプチド９３は、相対結合活性はＡ評価であるが、薬品耐性がＤ評価であった。
【０２１６】
〈実施例７６〜８３、比較例４〜６〉
実施例７６〜８３の環状ペプチド７６〜８３および比較例４〜６の環状ペプチド９４〜９６は、架橋構造がチオエーテル結合である場合の例であるが、側鎖にチオール基を有するアミノ酸がＬ−システインであるものである。
環状部にＬ−セリンを含む比較例４、環状部にＬ−アスパラギン酸を含む比較例５、および環状部のＮ末端側の外側にＬ−ホモセリン含む比較例６は、いずれも薬品耐性がＥ評価であり、劣悪であった。
これらのアミノ酸残基が側鎖に有するヒドロキシ基および／またはカルボキシ基の影響によるものと考えられるが、実施例７６〜８３に比べて薬品耐性が大幅に悪化することの明確な説明をすることは現時点ではできない。
【０２１７】
〈まとめ〉
全体的な傾向として、架橋構造として、Ｌ−ホモシステイン残基が関与するチオエーテル結合の安定性が最も高く、次いで、Ｌ−ホモシステイン残基間のジスルフィド結合の安定性が高く、その次がＬ−ペニシラミンが関与するチオエーテル結合の安定性が高く、そのさらに次がＬ−システインが関与するチオエーテル結合の安定性が高い。
【０２１８】
［実施例Ａ］
〈ヒト血漿での実験結果〉
《血漿安定性の評価》
実施例５で製造した環状ペプチド５のヒト血漿（ＰｒｏＭｅｄＤｘ社製）中での安定性を評価した。
各ペプチドは５μＭの水溶液に調整し、２０μＬのヒト血漿にそれぞれ２μＬ添加し、室温で２０分間放置した。２０分後、メタノール（和光純薬工業社製）を１００μＬ添加させ反応を停止した。撹拌後、遠心分離し上清を採取し、これを２０分サンプルとした。一方、２０μＬのヒト血漿にメタノールを１００μＬ添加した後、ペプチド水溶液を２μＬ添加、撹拌、遠心分離し上清を採取したものを０分サンプルとした。
それぞれのサンプルは、質量分析装置ＴＲＩＰＬＥ  ＱＵＡＤ  ５５００（ＡＢ  ＳＣＩＥＸ社製）を用いて定量した。０分サンプル定量値を１００％としたときの２０分サンプル定量値を残存率として算出した。
【０２１９】
（残存率の評価基準）
結合量変化率が９０％超・・・・・・・・・・・・・・・Ａ
結合量変化率が８０％超、９０％以下・・・・・・・・・Ｂ
結合量変化率が７０％超、８０％以下・・・・・・・・・Ｃ
結合量変化率が５０％超、７０％以下・・・・・・・・・Ｄ
結合量変化率が５０％以下・・・・・・・・・・・・・・Ｅ
環状ペプチドの構造および評価結果を表５の該当欄に示す。
【０２２０】
［実施例Ｂ］
実施例６で製造した環状ペプチド６のヒト血漿中での安定性を、実施例Ａと同様にして評価した。環状ペプチドの構造および評価結果を表５の該当欄に示す。
【０２２１】
［比較例Ｃ］
比較例１で製造した環状ペプチド９１のヒト血漿中での安定性を、実施例Ａと同様にして評価した。環状ペプチドの構造および評価結果を表５の該当欄に示す。
【０２２２】
【表８】
0006554452.tif 000026
【０２２３】
《結果の説明》
環状ペプチド５（実施例Ａ）および環状ペプチド６（実施例Ｂ）は、ヒト血漿中での結合量変化率（残存率）が９０％超であり、ヒト血漿中での安定性が優れていた。
これに対し、環状ペプチド９１（比較例Ｃ）の結合量変化率（残存率）は５０％以下であり、ヒト血漿中での安定性が劣っていた。
ヒト血漿中での安定性は、本発明の環状ペプチドを抗体薬物複合体または医薬製剤として利用する場合の重要な特性であり、結合量変化率（残存率）が大きいほど、血液中で薬物と解離しにくくなるため、標的への正確な薬物輸送、および副作用の抑制のために有利である。
【配列表】
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