(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
構成的に活性化されたＳｔａｔ３を有する腫瘍細胞を選択的に処置することにおける使用のための医薬組成物であって、有効量の以下：
【化７】
0006570512.tif 000007
（式中、
Ｘ１〜Ｘ５はフッ素である；
Ｒ１は、−ＮＨ−ＯＨである）
の構造を有する化合物、あるいはその医薬的に許容され得る塩、結晶または多形体と、医薬的に許容され得る賦形剤とを含み、
該化合物が、１つまたは複数の用量で投与され、該化合物の用量が０．０５ｍｇ／ｋｇ〜５ｇ／ｋｇの範囲である、
医薬組成物。
【請求項２】
がん、過形成または新生物からなる群から選択される状態を処置することにおける使用のための医薬組成物であって、有効量の以下：
【化８】
0006570512.tif 000008
（式中、
Ｘ１〜Ｘ５はフッ素である；
Ｒ１は、−ＮＨ−ＯＨである）
の構造を有する化合物、あるいはその医薬的に許容され得る塩、結晶または多形体と、医薬的に許容され得る賦形剤とを含み、
該化合物が、１つまたは複数の用量で投与され、該化合物の用量が０．０５ｍｇ／ｋｇ〜５ｇ／ｋｇの範囲である、医薬組成物。
【請求項３】
請求項２に記載の組成物であって、該組成物によって腫瘍進行が阻害されるか、または低下させられ、あるいは、ＭＤＲが阻害されるか、または低下させられる、組成物。
【請求項４】
前記組成物によって、Ｂｃｌ−２、Ｂｃｌ−ｘＬ、サイクリンＤ１、ｃ−Ｍｙｃまたはサバイビンの発現がダウンレギュレーションされる、請求項２に記載の組成物。
【請求項５】
前記化合物、あるいはその医薬的に許容され得る塩、結晶または多形体の有効用量が０．０５ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇの範囲である、請求項２に記載の組成物。
【請求項６】
前記化合物、あるいはその医薬的に許容され得る塩、結晶または多形体の用量が、０．０８ｍｇ／ｋｇ〜０．５ｍｇ／ｋｇ、０．０８ｍｇ／ｋｇ〜０．２４ｍｇ／ｋｇ、または、０．２４ｍｇ／ｋｇ〜０．５ｍｇ／ｋｇ、または、０．０８ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇである、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記化合物またはその医薬的に許容され得る塩が経口投与されることを特徴とする、請求項２に記載の組成物。
【請求項８】
前記化合物またはその医薬的に許容され得る塩が、皮下投与、静脈内投与または筋肉内投与されることを特徴とする、請求項２に記載の組成物。
【請求項９】
前記がんが固形腫瘍である、請求項２に記載の組成物。
【請求項１０】
前記固形腫瘍が、神経膠腫、乳がんまたは膵臓がんを含む、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
前記がんが、肺、乳房、前立腺、膵臓、卵巣、膀胱、頭頸部、甲状腺、脳、皮膚および腎臓からなる群から選択される、請求項２に記載の組成物。
【請求項１２】
前記がんが、脳腫瘍、神経膠腫、髄芽細胞腫、脳髄膜腫、乳房、前立腺、膵臓、卵巣、膀胱、頭頸部、悪性黒色腫、多発性骨髄腫、以下を含むリンパ腫、未分化大細胞型Ｔ細胞リンパ腫、セザリー症候群、ＥＢＶ関連バーキットリンパ腫、ＨＳＶ  Ｓａｉｍｉｒｉ依存性（Ｔ細胞）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、菌状息肉腫、以下を含む白血病、ＨＴＬＶ−Ｉ依存性白血病、赤白血病、急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、巨核球性白血病および大顆粒リンパ球（ＬＧＬ）白血病、あるいは、甲状腺、皮膚、肺または腎臓のがんからなる群から選択される、請求項２に記載の組成物。
【請求項１３】
前記がんが、腎細胞癌腫、膵臓腺がん、卵巣癌腫、頭頸部の扁平上皮癌腫およびホジキンリンパ腫からなる群から選択される、請求項２に記載の組成物。
【請求項１４】
前記化合物またはその医薬的に許容され得る塩の有効量が０．０８ｍｇ／ｋｇ〜０．５ｍｇ／ｋｇ未満の間であり、かつ、該化合物が、経口経路、皮内経路、筋肉内経路、腹腔内経路、静脈内経路、局所的経路、皮下経路および硬膜外経路からなる群から選択される送達経路によって投与される、請求項２に記載の組成物。
【請求項１５】
がん、過形成または新生物からなる群から選択される状態を処置することにおける使用のための組成物であって、１つまたは複数の用量の以下の式：
【化９】
0006570512.tif 000009
（式中、
Ｘ１〜Ｘ５はフッ素である；
Ｒ１は、−ＮＨ−ＯＨまたは−ＯＲ２からなる群から選択される；
Ｒ２は、水素である）
を有する化合物、あるいはその医薬的に許容され得る塩、結晶または多形体を含み、
該化合物のそれぞれの用量が、０．０８ｍｇ／ｋｇ〜５．０ｍｇ／ｋｇの範囲である、組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、国立衛生研究所によって与えられる補助金番号Ｒ０１ＣＡ１２８８６５および同Ｒ０１ＣＡ１６１９３１のもとでの政府援助によりなされた。政府は本発明において一定の権利を有する。
【０００２】
本開示は一般には、式Ｉの新規な強力かつ選択的なＳｔａｔ３阻害剤およびその医薬的に許容され得る塩に関する。本開示はまた、前記阻害剤を含有する医薬組成物、ならびに、ＳＴＡＴ−３の活性化が関係するがんおよび他の病原性状態の処置または防止におけるその使用に関連する。一例として、本開示は、ＳＴＡＴ−３を調節することによってがんを処置するための方法および組成物を提供する。
【背景技術】
【０００３】
下記には、本開示の様々な局面および実施形態を理解することにおいて有用であり得る情報が含まれる。下記は、本明細書中に提供される情報のどれもが先行技術であること、または、現時点で記載もしくは主張されている発明に関連していること、あるいは、具体的または暗黙的に参照されるどのような刊行物または文書も先行技術であることを認めるものではない。
【０００４】
シグナル伝達・転写活性化因子（Ｓｔａｔ）ファミリーのタンパク質は、細胞の成長および分化を促進させることを含めてサイトカインおよび増殖因子に対する応答、ならびに、炎症応答および免疫応答を媒介することにおける重要な役割を有する細胞質転写因子である。Ｂｒｏｍｂｅｒｇ、Ｓｉｇｎａｌ  ｔｒａｎｓｄｕｃｅｒｓ  ａｎｄ  ａｃｔｉｖａｔｏｒｓ  ｏｆ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ａｓ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ  ｏｆ  ｇｒｏｗｔｈ，ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ａｎｄ  ｂｒｅａｓｔ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ、Ｂｒｅａｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、２：８６−９０（２０００）；Ｄａｒｎｅｌｌ、Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ｆａｃｔｏｒｓ  ａｓ  ｔａｒｇｅｔｓ  ｆｏｒ  ｃａｎｃｅｒ  ｔｈｅｒａｐｙ、Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ、２：７４０−７４９（２００２）。古典的には、ＪａｎｕｓキナーゼまたはＳｒｃファミリーのキナーゼを含めて、増殖因子受容体チロシンキナーゼまたは細胞質チロシンキナーゼによる非常に重要なチロシル残基におけるＳｔａｔのリン酸化により、相反的なホスホチロシン−Ｓｒｃホモロジー（ＳＨ）２ドメイン相互作用を介した２つのＳｔａｔ単量体の間における二量体化、核への移行、および、遺伝子発現を調節するための標的遺伝子のプロモーターにおける特異的なＤＮＡ応答エレメントへの結合が促進される。これに対して、異常に活性なＳｔａｔ３（Ｓｔａｔファミリーメンバーの１つ）が多くのヒト腫瘍において関係しており、薬物発見のための魅力的な標的となっている。Ｓｔａｔ３の異常な活性化が、神経膠腫、乳がん、前立腺がん、卵巣がんおよび多くの他のヒトがんにおいて生じており、したがって、Ｓｔａｔ３の異常な活性化は悪性進行を促進させている。Ｙｕ＆Ｊｏｖｅ、Ｔｈｅ  ＳＴＡＴＳ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ−Ｎｅｗ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｔａｒｇｅｔｓ  ｃｏｍｅ  ｏｆ  ａｇｅ、Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ、４：９７−１０５（２００４）；Ｙｕｅ＆Ｔｕｒｋｓｏｎ、Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ＳＴＡＴ３  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ：ｈｏｗ  ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌ  ａｒｅ  ｗｅ？、Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇ  Ｄｒｕｇｓ、１８：４５−５６（２００９）。構成的に活性なＳｔａｔ３が腫瘍形成を媒介する機構には、腫瘍細胞の制御されない成長および生存を引き起こす遺伝子発現の調節異常、高まった腫瘍血管形成、ならびに、転移、および、腫瘍免疫監視の抑制が含まれる。Ｙｕ＆Ｊｏｖｅ（２００４）；Ｂｒｏｍｂｅｒｇ＆Ｄａｒｎｅｌｌ、Ｔｈｅ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ＳＴＡＴｓ  ｉｎ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ  ｃｏｎｔｒｏｌ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｉｍｐａｃｔ  ｏｎ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、１９：２４６８−２４７３（２０００）；Ｂｏｗｍａｎら、ＳＴＡＴｓ  ｉｎ  ｏｎｃｏｇｅｎｅｓｉｓ、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、１９：２４７４−２４８８（２０００）；Ｔｕｒｋｓｏｎ  Ｊ＆Ｊｏｖｅ、ＳＴＡＴ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ：ｎｏｖｅｌ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｔａｒｇｅｔｓ  ｆｏｒ  ｃａｎｃｅｒ  ｄｒｕｇ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、１９：６６１３−６６２６（２０００）；Ｔｕｒｋｓｏｎ、ＳＴＡＴ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ａｓ  ｎｏｖｅｌ  ｔａｒｇｅｔｓ  ｆ���ｒ  ｃａｎｃｅｒ  ｄｒｕｇ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ  Ｔｈｅｒ  Ｔａｒｇｅｔｓ、８：４０９−４２２（２００４）；Ｗａｎｇら、Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｉｎｎａｔｅ  ａｎｄ  ａｄａｐｔｉｖｅ  ｉｍｍｕｎｅ  ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ  ｂｙ  Ｓｔａｔ−３  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｉｎ  ｔｕｍｏｒ  ｃｅｌｌｓ、Ｎａｔ  Ｍｅｄ、１０：４８−５４（２００４）。
近年の証拠はまた、ミトコンドリアの機能、および、悪性表現型を促進させる他のタンパク質（例えば、ＮＦ−κＢなど）とのＳｔａｔ３のクロストークを調節することにおけるＳｔａｔ３の役割を明らかにしている。多くのヒト腫瘍が、異常に活性なシグナル伝達・転写活性化因子（Ｓｔａｔ）３のシグナル伝達を含んでおり、実験モデルにおける研究は、構成的に活性なＳｔａｔ３を含んでいる腫瘍細胞および腫瘍がＳｔａｔ３シグナル伝達調節剤に対して応答性であることを示している。Ｇｏｕｇｈら、Ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ  ＳＴＡＴ３  Ｓｕｐｐｏｒｔｓ  Ｒａｓ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｏｎｃｏｇｅｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ、Ｓｃｉｅｎｃｅ、３２４：１７１３（２００９）；Ｙｕら、ＳＴＡＴｓ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｍｍｕｎｉｔｙ：ａ  ｌｅａｄｉｎｇ  ｒｏｌｅ  ｆｏｒ  ＳＴＡＴ３、Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｃａｎｃｅｒ、９：７９８−８０９（２００９）；Ｇｒｉｖｅｎｎｉｋｏｖ＆Ｋａｒｉｎ、Ｄａｎｇｅｒｏｕｓ  ｌｉａｉｓｏｎｓ：ＳＴＡＴ３  ａｎｄ  ＮＦ−ｋＢ  ｃｏｌｌａｂｏｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｒｏｓｓｔａｌｋ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ、Ｃｙｔｏｋｉｎｅ＆Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｒｅｖｉｅｗｓ、２１：１１−１９（２０１０）を参照のこと。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｂｒｏｍｂｅｒｇ、Ｓｉｇｎａｌ  ｔｒａｎｓｄｕｃｅｒｓ  ａｎｄ  ａｃｔｉｖａｔｏｒｓ  ｏｆ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ａｓ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ  ｏｆ  ｇｒｏｗｔｈ，ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ａｎｄ  ｂｒｅａｓｔ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ、Ｂｒｅａｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、２：８６−９０（２０００）
【非特許文献２】Ｄａｒｎｅｌｌ、Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ｆａｃｔｏｒｓ  ａｓ  ｔａｒｇｅｔｓ  ｆｏｒ  ｃａｎｃｅｒ  ｔｈｅｒａｐｙ、Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ、２：７４０−７４９（２００２）。
【非特許文献３】Ｙｕ＆Ｊｏｖｅ、Ｔｈｅ  ＳＴＡＴＳ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ−Ｎｅｗ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｔａｒｇｅｔｓ  ｃｏｍｅ  ｏｆ  ａｇｅ、Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ、４：９７−１０５（２００４）
【非特許文献４】Ｙｕｅ＆Ｔｕｒｋｓｏｎ、Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ＳＴＡＴ３  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ：ｈｏｗ  ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌ  ａｒｅ  ｗｅ？、Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇ  Ｄｒｕｇｓ、１８：４５−５６（２００９）
【非特許文献５】Ｂｒｏｍｂｅｒｇ＆Ｄａｒｎｅｌｌ、Ｔｈｅ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ＳＴＡＴｓ  ｉｎ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ  ｃｏｎｔｒｏｌ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｉｍｐａｃｔ  ｏｎ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、１９：２４６８−２４７３（２０００）
【非特許文献６】Ｂｏｗｍａｎら、ＳＴＡＴｓ  ｉｎ  ｏｎｃｏｇｅｎｅｓｉｓ、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、１９：２４７４−２４８８（２０００）
【非特許文献７】Ｔｕｒｋｓｏｎ  Ｊ＆Ｊｏｖｅ、ＳＴＡＴ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ：ｎｏｖｅｌ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｔａｒｇｅｔｓ  ｆｏｒ  ｃａｎｃｅｒ  ｄｒｕｇ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、１９：６６１３−６６２６（２０００）
【非特許文献８】Ｔｕｒｋｓｏｎ、ＳＴＡＴ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ａｓ  ｎｏｖｅｌ  ｔａｒｇｅｔｓ  ｆｏｒ  ｃａｎｃｅｒ  ｄｒｕｇ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ  Ｔｈｅｒ  Ｔａｒｇｅｔｓ、８：４０９−４２２（２００４）
【非特許文献９】Ｗａｎｇら、Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｉｎｎａｔｅ  ａｎｄ  ａｄａｐｔｉｖｅ  ｉｍｍｕｎｅ  ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ  ｂｙ  Ｓｔａｔ−３  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｉｎ  ｔｕｍｏｒ  ｃｅｌｌｓ、Ｎａｔ  Ｍｅｄ、１０：４８−５４（２００４）。
【非特許文献１０】Ｇｏｕｇｈら、Ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ  ＳＴＡＴ３  Ｓｕｐｐｏｒｔｓ  Ｒａｓ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｏｎｃｏｇｅｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ、Ｓｃｉｅｎｃｅ、３２４：１７１３（２００９）
【非特許文献１１】Ｙｕら、ＳＴＡＴｓ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｍｍｕｎｉｔｙ：ａ  ｌｅａｄｉｎｇ  ｒｏｌｅ  ｆｏｒ  ＳＴＡＴ３、Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｃａｎｃｅｒ、９：７９８−８０９（２００９）
【非特許文献１２】Ｇｒｉｖｅｎｎｉｋｏｖ＆Ｋａｒｉｎ、Ｄａｎｇｅｒｏｕｓ  ｌｉａｉｓｏｎｓ：ＳＴＡＴ３  ａｎｄ  ＮＦ−ｋＢ  ｃｏｌｌａｂｏｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｒｏｓｓｔａｌｋ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ、Ｃｙｔｏｋｉｎｅ＆Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｒｅｖｉｅｗｓ、２１：１１−１９（２０１０）
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
１つの局面において、本発明は、がん治療剤として有用である新規な選択的かつ強力なＳｔａｔ３阻害剤に関連する。いくつかの局面において、本発明の化合物は、悪性形質転換、腫瘍の発達および進行を阻害するために有用である。
【０００７】
１つの局面において、本発明は、Ｓｔａｔ３を選択的に阻害する式Ｉの化合物に関連する：
【化１】
0006570512.tif 000002
【０００８】
１つの局面において、Ｘ１〜Ｘ５は独立して、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、ＩまたはＢｒ）またはＨであり、かつ、Ｒ１は、−ＮＨ−ＯＨまたは−ＯＲ２（式中、Ｒ２はＨまたは低級アルキルから選択される）からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、Ｘ１〜Ｘ５はＦであり、かつ、Ｒ１は−ＮＨ−ＯＨまたは−ＯＲ２（式中、Ｒ２はＨである）から選択され、例えば、式ＩＩ（ＳＨ５−０７）および式ＩＩＩにおいて示される通りである。
【化２】
0006570512.tif 000003
【０００９】
いくつかの実施形態において、Ｘ１〜Ｘ５がＦであり、かつ、Ｒ１が−ＯＲ２であるとき、Ｒ２はエチルではない。
【００１０】
１つの局面において、本発明の化合物はＳｔａｔ３を阻害し、一方で、Ｓｔａｔ１またはＳｔａｔ５の阻害をＳｔａｔ３阻害についてのＩＣ５０の少なくとも２倍の濃度においてほとんど示さないか、または全く示さない。本発明の化合物は、ｓｔａｔ３：ｓｔａｔ３の二量体界面における３つのサブポケットとの独特の相互作用を示し、このことは、以前に記載された他のＳｔａｔ３阻害剤（これらは２つだけのサブポケットと相互作用するだけである）とは対照的である。本発明の阻害剤がその効果を発揮する独特かつ特異的な機能の結果として、本発明の化合物はより強力であり、かつ、毒性がより少ない。本発明の化合物はまた驚くべきことに、Ｓｔａｔ３の活性化された形態と選択的に結合し、これを阻害し、結果として、Ｓｔａｔ３の機能をがん細胞において弱める。本発明の化合物は、例えば、がん細胞の成長、生存、遊走および／または転移を阻害するために有用である。
【００１１】
１つの局面において、本発明は、Ｓｔａｔ３のＤＮＡ結合活性を４μＭまたはそれ未満のＩＣ５０により優先的に阻害し、しかし、Ｓｔａｔ１またはＳｔａｔ５のＤＮＡ結合活性の破壊を２０μＭまでの濃度においてほとんど示さないか、または全く示さない化合物（例えば、ＳＨ５−０７およびＳＨ４−５４など）に関連する。１つの局面において、本発明は、がんの成長を阻害するために有用な組成物および配合物に関連する。いくつかの局面において、化合物の抗がん活性を、ヒト乳がんおよびヒト非小細胞肺がんのマウス異種移植片の成長を阻害する能力によって求めることができる。
【００１２】
Ｓｔａｔ３の二量体化がＳＨ２−ホスホチロシルペプチドの相互作用を介して生じる。Ｓｈｕａｉら、Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ｆａｃｔｏｒ  Ｓｔａｔ９１  ｉｎｖｏｌｖｅｓ  ｄｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ＳＨ２−ｐｈｏｓｐｈｏｔｙｒｏｓｙｌ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ、Ｃｅｌｌ、７６：８２１−８２８（１９９４）；Ｍｉｋｌｏｓｓｙら、Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｍｏｄｕｌａｔｏｒｓ  ｏｆ  ＳＴＡＴ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｆｏｒ  ｈｕｍａｎ  ｄｉｓｅａｓｅｓ、Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ、１２：６１１−６２９（２０１３）；１５−２３  Ｔｕｒｋｓｏｎら、Ｎｏｖｅｌ  ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  ｓｉｇｎａｌ  ｔｒａｎｓｄｕｃｅｒ  ａｎｄ  ａｃｔｉｖａｔｏｒ  ｏｆ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ３  ｄｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ、Ｍｏｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ、３：２６１−２６９（２００４）；Ｔｕｒｋｓｏｎら、Ｐｈｏｓｐｈｏｔｙｒｏｓｙｌ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｂｌｏｃｋ  Ｓｔａｔ３−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ＤＮＡ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ａｃｔｉｖｉｔｙ，ｇｅｎｅ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｅｌｌ  ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２７６：４５４４３−４５４５５（２００１）；Ｓｉｄｄｉｑｕｅｅら、Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｐｒｏｂｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  Ｓｔａｔ３，ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−ｂａｓｅｄ  ｖｉｒｔｕａｌ  ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ，ｉｎｄｕｃｅｓ  ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  ａｃｔｉｖｉｔｙ、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ、１０４：７３９１−７３９６（２００７）を参照のこと。Ｓｉｄｄｉｑｕｅｅ  ＫＡＺ、ＳＴＡＴ３  ａｓ  ａ  ｔａｒｇｅｔ  ｆｏｒ  ｉｎｄｕｃｉｎｇ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｉｎ  ｓｏｌｉｄ  ａｎｄ  ｈｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌ  ｔｕｍｏｒｓ、Ｃｅｌｌ  Ｒｅｓ．、１８：２５４−２６７（２００８）；Ｓｉｄｄｉｑｕｅｅら、Ａｎ  Ｏｘａｚｏｌｅ−Ｂａｓｅｄ  Ｓｍａｌｌ−Ｍｏｌｅｃｕｌｅ  Ｓｔａｔ３  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  Ｍｏｄｕｌａｔｅｓ  Ｓｔａｔ３  Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  ａｎｄ  Ｉｎｄｕｃｅｓ  Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  Ｃｅｌｌ  Ｅｆｆｅｃｔｓ、ＡＣＳ  Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．、２：７８７−７９８（２００７）；Ｃｏｌｅｍａｎら、Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔｓ  ｏｆ  ｐｈｏｓｐｈｏｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｔａｒｇｅｔｅｄ  ｔｏ  ｔｈｅ  ＳＲＣ  ｈｏｍｏｌｏｇｙ  ２  ｄｏｍａｉｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｓｉｇｎａｌ  ｔｒａｎｓｄｕｃｅｒ  ａｎｄ  ａｃｔｉｖａｔｏｒ  ｏｆ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ３．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ａ  ｈｉｇｈ−ａｆｆｉｎｉｔｙ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ、Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ、４８（６６６１−７０）（２００５）。
【００１３】
１つの局面において、本発明は、２つの単量体の間での二量体化を妨げるＳｔａｔ３阻害剤の本発明者らの設計、および、このことが、Ｓｔａｔ３の活性化および機能を阻害する薬物を開発するための魅力的な戦略となっているという本発明者らの認識に関連する。
【００１４】
ＢＰ−１−１０２が、Ｓｔａｔ３阻害活性を有することが以前に報告された。Ｚｈａｎｇら、Ｏｒａｌｌｙ  ｂｉｏａｖａｉｌａｂｌｅ  ｓｍａｌｌ−ｍｏｌｅｃｕｌｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ｆａｃｔｏｒ  Ｓｔａｔ３  ｒｅｇｒｅｓｓｅｓ  ｈｕｍａｎ  ｂｒｅａｓｔ  ａｎｄ  ｌｕｎｇ  ｃａｎｃｅｒ  ｘｅｎｏｇｒａｆｔｓ、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ、１０９：９６２３−８（２０１２）を参照のこと。本発明では、Ｓｔａｔ３のＳＨ２ドメインに結合するＢＰ−１−１０２のコンピューター計算モデル化から得られる構造情報が、新規なＳｔａｔ３阻害剤を設計するために、例えば、式Ｉの化合物（これには、例示的アナログのＳＨ５−０７およびＳＨ４−５４が含まれる）などを設計するために本明細書中において本発明者らによって使用された。式ＩＩおよび式ＩＩＩに示されるように、ＳＨ５−０７およびＳＨ４−５４はヒドロキサム酸成分およびカルボン酸成分をそれぞれ含み、ＩＣ５０値がおよそ３．３μＭまたはそれ未満である。１つの局面において、本発明は、経口により生物学的利用可能なＳｔａｔ３阻害剤としてのＳＨ５−０７の設計ならびにインビトロおよびインビボでの特徴づけに関連する。本発明の化合物は驚くべきことに、サリチル酸成分を有する阻害剤と比較して、改善されたＳｔａｔ３阻害活性を示す。例えば、本発明の化合物は、ＢＰ−１−１０２の１／２〜１／１０であるＩＣ５０または活性を有する。
【００１５】
本開示は、新規な選択的ＳＴＡＴ−３阻害剤、ならびに、該阻害剤を含む医薬配合物およびキットを提供する。本発明の化合物および医薬配合物は、異常に活性なＳＴＡＴ−３、すなわち、増殖因子受容体チロシンキナーゼまたは細胞質チロシンキナーゼ（ＪａｎｕｓキナーゼまたはＳｒｃファミリーのキナーゼを含む）のための基質によって媒介されるがんおよび他の状態のための治療剤として有用である。いくつかの局面において、本発明の化合物および組成物によって阻害されるプロセスには、増殖、生存、血管形成、遊走／転移／侵入および免疫が含まれる。
【００１６】
本発明の化合物は、構成的なＳＴＡＴ−３活性化から生じる活性を阻害するために有用であり、この場合、そのような活性には、ａ）増殖を、ｃ−Ｍｙｃおよび／またはサイクリンＤ１／Ｄ２の発現を増大させることによって、ならびに／あるいは、ｐ５３の発現を低下させることによって刺激すること；ｂ）生存を、サバイビン、Ｂｃｌ−ｘ／Ｂｃｌ−２、Ｍｃｌ−１および／またはＡｋｔ−２の発現を増大させることによって増大させること；血管形成を、ＶＥＧＦの発現を増大させることによって増大させること；ならびに／あるいは、遊走／転移または侵入を、ＭＭＰ−２またはＭＭＰ−９の発現を増大させることによって増大させることが含まれる。
【００１７】
式Ｉ〜式ＩＩＩの化合物は、本明細書中に記載されるような本発明の組成物および方法において使用することができる。
【００１８】
１つの局面において、本開示は、がん、過形成および新生物からなる群から選択される状態を処置するための医薬品の調製のための、式Ｉ〜式ＩＩＩのいずれかの化合物の使用を提供する。１つの実施形態において、腫瘍の進行（転移および／または成長を含む）がそれにより阻害され、かつ／または低下させられる。１つの実施形態において、多剤耐性がそれにより阻害され、かつ／または低下させられる。
【００１９】
別の局面において、本開示は、がんを処置する方法であって、それを必要とする対象に式Ｉ〜式ＩＩＩのいずれかの化合物を含む治療有効量の医薬組成物を、投与することを含み、それにより、がんが処置され、がんの進行が停止させられ、または遅くさせられ、ならびに／あるいは、ＳＴＡＴ−３が阻害される方法を提供する。
【００２０】
１つの実施形態において、ＳＴＡＴ−３活性のレベルががん細胞において低下させられる。１つの局面において、ＳＴＡＴ−３阻害剤の有効用量が、．０５ｍｇ／ｋｇ〜４ｍｇ／ｋｇの範囲である用量で投与される。治療有効用量は、例えば、約０．０５ｍｇ／ｋｇ、０．０６ｍｇ／ｋｇ、０．０７ｍｇ／ｋｇ、０．０８ｍｇ／ｋｇ、０．０９ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．７ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、０．９ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、１．１ｍｇ／ｋｇ、１．２ｍｇ／ｋｇ、１．３ｍｇ／ｋｇ、１．４ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、１．６ｍｇ／ｋｇ、１．７ｍｇ／ｋｇ、１．８ｍｇ／ｋｇ、１．９ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、２．１ｍｇ／ｋｇ、２．２ｍｇ／ｋｇ、２．３ｍｇ／ｋｇ、２．４ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、２．６ｍｇ／ｋｇ、２．７ｍｇ／ｋｇ、２．９ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、３．１ｍｇ／ｋｇ、３．２ｍｇ／ｋｇ、３．３ｍｇ／ｋｇ、３．４ｍｇ／ｋｇ、３．５ｍｇ／ｋｇ、３．６ｍｇ／ｋｇ、３．７ｍｇ／ｋｇ、３．８ｍｇ／ｋｇ、３．９ｍｇ／ｋｇまたは約４．０ｍｇ／ｋｇ、あるいは、どのような範囲であれ、これらの示された用量のいずれか２つの間における範囲である場合がある。いくつかの実施形態において、用量は、．０８ｍｇ／ｋｇ〜約０．５ｍｇ／ｋｇ、約．０８ｍｇ／ｋｇ〜約．２４ｍｇ／ｋｇ、または、約．２４ｍｇ／ｋｇ〜約．５ｍｇ／ｋｇであろう。別の局面において、上記有効用量のＳＴＡＴ−３阻害剤が１つまたは複数の用量で与えられる。例えば、の治療的は、例えば、それぞれの用量について、．０８ｍｇ／ｋｇ、．２４ｍｇ／ｋｇまたは．５ｍｇ／ｋｇである。１つの実施形態において、上記用量が、腹腔内経路、皮内経路、筋肉内経路、腹腔内経路、静脈内経路、局所的経路、皮下経路、鼻腔内経路および硬膜外経路からなる群から選択される送達経路によって投与される。１つの実施形態において、上記１つまたは複数の有効用量のＳＴＡＴ−３阻害剤が、経口投与、静脈内投与、筋肉内投与または皮下投与される。１つの実施形態において、上記１つまたは複数の有効用量のＳＴＡＴ−３阻害剤が経口投与される。１つの実施形態において、上記１つまたは複数の有効用量のＳＴＡＴ−３阻害剤が静脈内投与される。ある特定の実施形態において、上記１つまたは複数の有効用量のＳＴＡＴ−３阻害剤が皮下投与される。１つの実施形態において、上記１つまたは複数の有効用量のＳＴＡＴ−３阻害剤が筋肉内投与される。
【００２１】
１つの局面において、本開示は、処置を必要とする対象に、本発明のＳｔａｔ３阻害剤を含む有効量の医薬組成物を投与することを含む処置方法を提供する。１つの実施形態において、対象は、神経膠腫、乳がんまたは膵臓がんを有する。いくつかの実施形態において、対象は固形腫瘍がんを有する。別の局面において、固形腫瘍は、肉腫、癌腫またはリンパ腫を含む。１つの実施形態において、がんは、脳腫瘍、例えば、神経膠腫、髄芽細胞腫、脳髄膜腫（ｍｅｎａｎｇｉｏｍａ）など、乳房、前立腺、膵臓、卵巣、膀胱、頭頸部、悪性黒色腫、多発性骨髄腫、リンパ腫（未分化大細胞型Ｔ細胞リンパ腫、セザリー症候群、ＥＢＶ関連バーキットリンパ腫、ＨＳＶ  Ｓａｉｍｉｒｉ依存性（Ｔ細胞）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫を含む）、菌状息肉腫、白血病（ＨＴＬＶ−Ｉ依存性白血病、赤白血病、急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、巨核球性白血病および大顆粒リンパ球（ＬＧＬ）白血病を含む）、あるいは、甲状腺、皮膚、肺または腎臓のがんからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、がんは、腎細胞癌腫、膵臓腺がん、卵巣癌腫、頭頸部の扁平上皮癌腫（ｓｕａｍｏｕｓ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、または、ホジキンリンパ腫である場合がある。
【００２２】
本発明の１つの局面によれば、式Ｉ〜式ＩＩＩによって表される化合物、それらの医薬的に許容され得る塩、および、それらを含有する医薬組成物、または、その混合物を含む新規な組成物が提供される。
【００２３】
本明細書中において記載される発明および主張される発明は多くの属性および実施形態を有しており、これらの属性および実施形態には、本概略において示される、または記載される、または参照される属性および実施形態が含まれるが、これらに限定されない。本概要は、包括的であることは意図されず、本明細書中において記載される発明および主張される発明は本概要に限定されず、あるいは、本概要において特定される特徴または実施形態によって限定されない。なお、本概要は、限定目的のためではなく、例示目的のみのために含まれる。さらなる実施形態が下記の詳細な説明において開示される場合がある。
一実施形態において、例えば、以下の項目が提供される。
（項目１）
式Ｉ：
【化４】
0006570512.tif 000004
（式中、
Ｘ１〜Ｘ５はハロゲンである；
Ｒ１は、−ＮＨ−ＯＨまたは−ＯＲ２からなる群から選択される；かつ
Ｒ２は、Ｈまたは低級アルキルから選択される）
によって表される化合物、あるいはその医薬的に許容され得る塩、結晶または多形体であって、さらに、Ｘ１〜Ｘ５がＦであり、かつ、Ｒ１が−ＯＲ２であるとき、Ｒ２はエチルではない化合物、あるいはその医薬的に許容され得る塩、結晶または多形体。
（項目２）
Ｘ１〜Ｘ５がＦであり、かつ、Ｒ１が−ＮＨ−ＯＨまたは−ＯＲ２から選択され、Ｒ２がＨである、項目１に記載の化合物、あるいはその医薬的に許容され得る塩、結晶または多形体。
（項目３）
式ＩＩまたは式ＩＩＩ
【化５】
0006570512.tif 000005
における化合物である項目２に記載の化合物、あるいはその医薬的に許容され得る塩、結晶または多形体。
（項目４）
項目１〜３のいずれか一項に記載の化合物、塩、結晶または多形体と、医薬的に許容され得る賦形剤とを含む医薬組成物。
（項目５）
構成的に活性化されたＳｔａｔ３を有する腫瘍細胞を選択的に処置することにおける使用のための組成物であって、有効量の式ＩのＳｔａｔ３阻害剤を含む組成物。
（項目６）
実質的に純粋な結晶性の式ＩのＳｔａｔ３阻害剤を含む組成物であって、ＧＧＣＩ分子およびベシラート分子（ベシラート塩）の交互層を有する組成物。
（項目７）
がん、過形成または新生物からなる群から選択される状態を処置するための医薬品の調製のための、項目１〜３のいずれか一項に記載の化合物の使用。
（項目８）
項目７に記載の使用であって、該使用によって腫瘍進行が阻害されるか、または低下させられ、あるいは、ＭＤＲが阻害されるか、または低下させられる、使用。
（項目９）
がんを処置する方法であって、それを必要とする対象に、式ＩのＳｔａｔ３阻害剤またはその医薬的に許容され得る塩を含む治療有効量の医薬組成物を投与する工程を含む方法。
（項目１０）
前記Ｓｔａｔ３阻害剤が式ＩＩまたは式ＩＩＩの構造あるいはその医薬的に許容され得る塩を有する、項目７に記載の方法。
（項目１１）
Ｂｃｌ−２、Ｂｃｌ−ｘＬ、サイクリンＤ１、ｃ−Ｍｙｃまたはサバイビンの発現がダウンレギュレーションされる、項目７に記載の方法。
（項目１２）
前記Ｓｔａｔ３阻害剤の有効用量が約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜約５ｇ／ｋｇの範囲である、項目７に記載の方法。
（項目１３）
Ｓｔａｔ３の有効用量が約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜約５ｇ／ｋｇの１つまたは複数の用量で与えられる、項目１２に記載の方法。
（項目１４）
Ｓｔａｔ３の有効用量が、約．０８ｍｇ／ｋｇ〜約０．５ｍｇ／ｋｇ、約．０８ｍｇ／ｋｇ〜約．２４ｍｇ／ｋｇ、または、約．２４ｍｇ／ｋｇ〜約．５ｍｇ／ｋｇ、または、約０．０８ｍｇ／ｋｇ〜０．５ｍｇ／ｋｇである、項目１２に記載の方法。
（項目１５）
１つまたは複数の有効用量のＳｔａｔ３が経口投与される、項目９に記載の方法。
（項目１６）
１つまたは複数の有効用量のＳｔａｔ３が、皮下投与、静脈内投与または筋肉内投与される、項目９に記載の方法。
（項目１７）
前記がんが固形腫瘍である、項目９に記載の方法。
（項目１８）
固形腫瘍が、神経膠腫、乳がんまたは膵臓がんを含む、項目９に記載の方法。
（項目１９）
前記がんが、肺、乳房、前立腺、膵臓、卵巣、膀胱、頭頸部、甲状腺、脳、皮膚および腎臓からなる群から選択される、項目９に記載の方法。
（項目２０）
前記がんが、脳腫瘍、神経膠腫、髄芽細胞腫、脳髄膜腫、乳房、前立腺、膵臓、卵巣、膀胱、頭頸部、悪性黒色腫、多発性骨髄腫、以下を含むリンパ腫、未分化大細胞型Ｔ細胞リンパ腫、セザリー症候群、ＥＢＶ関連バーキットリンパ腫、ＨＳＶ  Ｓａｉｍｉｒｉ依存性（Ｔ細胞）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、菌状息肉腫、以下を含む白血病、ＨＴＬＶ−Ｉ依存性白血病、赤白血病、急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、巨核球性白血病および大顆粒リンパ球（ＬＧＬ）白血病、あるいは、甲状腺、皮膚、肺または腎臓のがんからなる群から選択される、項目９に記載の方法。いくつかの実施形態においては、前記がんは、腎細胞癌腫、膵臓腺がん、卵巣癌腫、頭頸部の扁平上皮癌腫、または、ホジキンリンパ腫である場合がある。
（項目２１）
前記Ｓｔａｔ３阻害剤のそれぞれの用量が約０．０８ｍｇ／ｋｇ〜約０．５ｍｇ／ｋｇ未満の間であり、かつ、該用量が、経口経路、皮内経路、筋肉内経路、腹腔内経路、静脈内経路、局所的経路、皮下経路および硬膜外経路からなる群から選択される送達経路によって投与される、項目９に記載の方法。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】図１は、ＳＨ５−０７およびＳＨ４−５４の化学構造ならびにＳＴＡＴのＤＮＡ結合活性に対するそれらの阻害活性を示す。図１（Ａ）はＳＨ５−０７およびＳＨ４−５４の構造を示す；（ＢおよびＣ）等しい総タンパク質の核抽出物で、活性化されたＳｔａｔ３を含有する核抽出物（Ｂ）、または、Ｓｔａｔ１およびＳｔａｔ５を含有する核抽出物（Ｃ）を、増大する濃度のＳＨ５−０７またはＳＨ４−５４を伴って、または伴うことなく室温で３０分間インキュベーションし、その後、（Ｃ）Ｓｔａｔ３と結合する放射能標識されたｈＳＩＥプローブ、または、（Ｂ）Ｓｔａｔ１およびＳｔａｔ５と結合する放射能標識されたＭＧＦｅプローブとインキュベーションし、ＥＭＳＡ分析に供した。ＳＴＡＴ：ＤＮＡ複合体の位置が標識される；コントロールレーン（０）は、０．０５％のＤＭＳＯにより処理される核抽出物を表す。データは、３回〜４回の独立した測定を代表するものである。
【００２５】
【図２−ＣＤ】図２は、Ｓｔａｔ３のリン酸化、ＤＮＡ結合および転写活性に対する影響、ならびに、Ｓｔａｔ３非依存的なシグナル伝達に対するＳＨ５−０７およびＳＨ４−５４の影響を示す。（ＡおよびＢ）構成的に活性なＳｔａｔ３を含んでいる悪性細胞から調製され、（Ａ）増大する濃度の（ｉ）ＳＨ５−０７または（ｉｉ）ＳＨ４−５４により１時間、あるいは、（Ｂ）示された時間にわたって５μＭまたは８μＭの（ｉ）ＳＨ５−０７または（ｉｉ）ＳＨ４−５４により処理された核抽出物を、放射能標識されたｈＳＩＥプローブを使用するインビトロＤＮＡ結合アッセイに供し、ＥＭＳＡによって分析した；（Ｃ、ＤおよびＥ）構成的に活性なＳｔａｔ３を含んでいる示された悪性細胞から調製され、（Ｃ）増大する濃度の（ｉ）ＳＨ５−０７または（ｉｉ）ＳＨ４−５４により１時間、あるいは、（Ｄ）５μＭまたは８μＭの（ｉ）ＳＨ５−０７または（ｉｉ）ＳＨ４−５４により０〜２４時間、あるいは、（Ｅ）５μＭのＳＨ５−０７により５時間での再投与（５＋１）を伴って０〜９時間処理され、ｐＹ７０５Ｓｔａｔ３またはＳｔａｔ３についてプローブ探査する等しい総タンパク質の全細胞溶解物のＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびウエスタンブロッティングによる分析；（Ｆ）正常なＮＩＨ３Ｔ３細胞を、ｖ−Ｓｒｃおよび（ｉ）Ｓｔａｔ３依存的ルシフェラーゼレポーター（ｐＬｕｃＴＫＳ３）または（ｉｉ）Ｓｔａｔ３非依存的ルシフェラーゼレポーター（ｐＬｕｃＳＲＥ）をコードするプラスミドにより２４時間、一過性に共トランスフェクションし、０〜８μＭのＳＨ５−０７によりさらに２４時間にわたって処理した。ルシフェラーゼレポーター活性を、ルミノメーターを用いて細胞質ゾル抽出物においてアッセイした。（Ｇ）０〜１０ＭのＳＨ５−０７により１時間処理され、ｐＹ１０６８ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲ、ｐＪＡＫ２、ＪＡＫ２、ｐＳｒｃ、Ｓｒｃ、ｐＥＲＫＭＡＰＫ、ＥＲＫＭＡＰＫ、ｐＡｋｔ、Ａｋｔおよびβ−アクチンについてプローブ探査する、ヒト乳がん細胞株（管癌腫）のＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞（ｉ）およびヒト神経膠腫細胞株のＵ２５１ＭＧ細胞（ｉｉ）から調製される等しい総タンパク質の全細胞溶解物のＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびウエスタンブロッティングによる分析。ＳＴＡＴ：ＤＮＡ複合体またはタンパク質のゲル内での位置が標識される；コントロールレーン（０）は、０．０５％のＤＭＳＯにより処理される核抽出物、あるいは、０．０５％のＤＭＳＯにより処理された細胞から調製される核抽出物または全細胞溶解物を表す。それぞれのパネルにおいて示される値は、三連でそれぞれが行われる少なくとも４回の独立したトランスフェクションの平均＋標準偏差である。それぞれのトランスフェクションについて、ルシフェラーゼ活性を、β−Ｇａｌ活性を内部コントロールとしてトランスフェクション効率に対して正規化した。＊−＜０．０５．データは、３回〜４回の独立した測定を代表するものである。図２（Ｈ）。Ｓｔａｔ３活性化の細胞内レベルの別の一例。図２（Ｉ）。本開示のｓｔａｔ３阻害剤による例示的な腫瘍細胞の内部におけるＳｔａｔ３リン酸化の濃度依存的阻害の別の一例。２（Ｊ）腫瘍細胞の内部におけるｓｔａｔ３リン酸化の時間依存��阻害の別の一例。
【図２−ＥＦ】同上
【図２−Ｇ】同上
【図２−Ｈ】同上
【図２−Ｉ】同上
【図２−Ｊ】同上
【００２６】
【図３】図３は、ＳＨ５−０７が、Ｓｔａｔ３がＥＧＦＲに結合することを乱し、それにより、ＥＧＦ誘導によるＳｔａｔ３リン酸化を阻害することを示す。（ＡおよびＢ）（Ａ）ＥＧＦＲの免疫複合体、あるいは、（Ｂ）ＥＧＦＲ（１００ｎｇ／ｍｌ、１２分）による刺激を受けない、または受け、示された時間にわたる１０μＭのＳＨ５−０７による処理に供されない、または供されるＮＩＨ３Ｔ３／ｈＥＧＦＲ細胞から調製される全細胞溶解物の、ｐＹ１０６８ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲ、ｐＹ７０５Ｓｔａｔ３またはＳｔａｔ３についてプローブ探査する免疫ブロッティング。タンパク質のゲル内における位置が標識される。コントロールレーン（０）は、０．０５％のＤＭＳＯにより処理された細胞から調製される全細胞溶解物またはＥＧＦＲ免疫沈殿物を表す。データは、３回〜４回の独立した測定を代表するものである。
【００２７】
【図４】図４は、ＳＨ４−５４がＳｔａｔ３と相互作用することを示す。（Ａ）ＳＨ４−５４の精製Ｓｔａｔ３タンパク質との相互作用の表面プラズモン共鳴分析；（Ｂ）溶液中でのＳＨ４−５４とのＳｔａｔ３の相互作用の核磁気共鳴（ＮＭＲ）分析、および、Ｓｔａｔ３タンパク質のイソロイシン残基の観測された化学シフト。データは、２回〜３回の独立した測定を代表するものである。
【００２８】
【図５−Ａ】図５は、ＳＨ５−０７およびＳＨ４−５が示差的に、異常なＳｔａｔ３活性を有する悪性細胞の生存性、成長、細胞周期、コロニー生存および遊走を抑制し、当該悪性細胞のアポトーシスを誘導することを示す。（Ａ）培養されたヒト乳がん細胞株（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１およびＳＫＢＲ３）、ヒト前立腺がん細胞株（ＤＵ１４５）、ならびに、様々な程度の構成的に活性なＳｔａｔ３を含んでいるヒト膵臓がん細胞株（Ｐａｎｃ−１）およびヒト神経膠腫細胞株（Ｕ３７３ＭＧ、ＳＦ２９５、Ｕ２５１ＭＧおよびＵ８７ＭＧ）、ならびに、正常なマウス線維芽細胞ＮＩＨ３Ｔ３、Ｓｔａｔ３ヌルマウス胚性線維芽細胞（Ｓｔａｔ３−／−ＭＥＦ）、ならびに、Ｓｔａｔ３を発現しないヒト乳がんＭＣＦ７細胞を、２μＭ〜１０μＭの（ｉ）ＳＨ５−０７または（ｉｉ）ＳＨ４−５４により７２時間にわたって１回処理し、または処理しなかった。細胞を、ＣｙＱｕａｎｔ細胞増殖キットを使用して生存性についてアッセイした；（Ｂ）ヒト乳がん（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１）細胞または神経膠腫（Ｕ２５１ＭＧ）細胞を培養において播種し、５μＭまたは８μＭのＳＨ５−０７を用いて、または用いることなく９６時間に至るまで１回処理し、細胞を、位相差顕微鏡法を用いるトリパンブルー排除による細胞計数のために２４時間間隔で集めた；（Ｃ）ヒト乳がん（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１）細胞および神経膠腫（Ｕ２５１ＭＧ）細胞を単一細胞培養として播種し、０〜５μＭのＳＨ５−０７により１回処理し、大きいコロニーが視認されるまで培養させ、その後、コロニーをクリスタルバイオレットにより染色し、コロニー数を数えた；（Ｄ）３μＭ〜８μＭのＳＨ５−０７により２４時間または４８時間処理され、または処理されず、ＤＮＡ含有量のフローサイトメトリー分析のためのヨウ化プロピジウム（ＰＩ）染色によって処理されるヒト乳がんＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞または神経膠腫Ｕ２５１ＭＧ細胞の細胞周期分布分析；（Ｅ）３μＭ〜８μＭのＳＨ５−０７により２４時間処理され、または処理されず、フローサイトメトリーによって分析されるＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞またはＵ２５１ＭＧ細胞におけるＰＩ染色を伴うアネキシンＶ結合；（Ｆ）ＭＤＡ−ＭＢ−２３１またはＵ２５１ＭＧに対する０〜８ＭのＳＨ５−０７による毎日の処理の軟寒天コロニー形成アッセイおよび影響；（Ｇ）ヒト乳がん（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１）細胞または神経膠腫（Ｕ２５１ＭＧ）細胞を傷つけ、８μＭのＳＨ５−０７により２２時間にわたって１回処理し、剥脱領域に遊走させた。ＩＣ５０値をグラフ描写から導き出した。値は３回〜４回の独立した測定の平均およびＳ．Ｄ．である。データは、３回の独立した測定を代表するものである。図５（Ｈ）。腫瘍細胞生存性におけるＳＨ５０７による効力および選択的阻害の別の一例。図５（Ｉ）。ＳＨ４−５４およびＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を使用するＩＣ５０値を求めるための例示的アッセイ。
【図５−ＢＣ】同上
【図５−Ｄ】同上
【図５−ＥＦ】同上
【図５−Ｇ】同上
【図５−Ｈ】同上
【図５−Ｉ】同上
【００２９】
【図６−Ａ】図６Ａは、ＳＨ５−０７が、Ｂｃｌ−２、Ｂｃｌ−ｘＬ、サイクリンＤ１、ｃ−Ｍｙｃおよびサバイビンの発現を抑制することを示す。ヒト乳がんＭＤＡ−ＭＢ−２３１および神経膠腫Ｕ２５１ＭＧ（ＤＭＳＯ、コントロール）から調製されるか、または、５マイクロモル濃度（ｕＭ）のＳＨ−０７により６時間〜２４時間処理され、抗Ｂｃｌ−２抗体、抗Ｂｃｌ−ｘＬ抗体、抗サイクリンＤ１抗体、抗ｃ−Ｍｙｃ抗体および抗サバイビン抗体または抗β−アクチン抗体を用いてプローブ探査する全細胞溶解物のＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびウエスタンブロッティングによる分析。タンパク質のゲル内における位置が示される。データは、３回の独立した測定を代表するものである。
【００３０】
【図６−Ｂ】図６Ｂは、ＳＨ５−０７がＦＡＫおよびＩｋＢａのリン酸化を阻害することを示す。非処理（ＤＭＳＯ、コントロール）、または、６時間〜２４時間にわたる５マイクロモル濃度（ｕＭ）（ＳＨ５０７）による処理に供されるヒト乳がんＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞および神経膠腫Ｕ２５１ＭＧ細胞から調製され、抗ｐ−ＦＡＫ抗体、抗ｐ−ＩｋＢａ抗体、抗ＩｋＢａ抗体を用いてプローブ探査する全細胞溶解物のＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびウエスタンブロッティングによる分析を使用する別の一例。タンパク質のゲル内における位置が示される。
【００３１】
【図７−Ａ】図７は、ＳＨ５−０７のヒト神経膠腫腫瘍異種移植片に対する抗腫瘍効果およびインビボ薬物動態学的性質を示す。（Ａ）Ｕ２５１ＭＧ皮下腫瘍異種移植片を有するマウスに、ＳＨ５−０７を経口胃管法により３ｍｇ／ｋｇで、またははビヒクル（０．０５％のＤＭＳＯ）を示された期間にわたって毎日投与した。腫瘍サイズ（２日後または３日後に測定される）を腫瘍体積に変換し、処理日数に対してプロットした；（Ｂ）経口胃管法による３ｍｇ／ｋｇの単回服用の０分後、１０分後または６０分後でマウスから採取される（ｉ）血漿サンプルまたは（ｉｉ）腫瘍組織サンプルにおいて分析されるＳＨ５−０７レベルのグラフ表示。値、平均±Ｓ．Ｄ．、ｎ＝６。
【図７−Ｂ】図７は、ＳＨ５−０７のヒト神経膠腫腫瘍異種移植片に対する抗腫瘍効果およびインビボ薬物動態学的性質を示す。（Ａ）Ｕ２５１ＭＧ皮下腫瘍異種移植片を有するマウスに、ＳＨ５−０７を経口胃管法により３ｍｇ／ｋｇで、またははビヒクル（０．０５％のＤＭＳＯ）を示された期間にわたって毎日投与した。腫瘍サイズ（２日後または３日後に測定される）を腫瘍体積に変換し、処理日数に対してプロットした；（Ｂ）経口胃管法による３ｍｇ／ｋｇの単回服用の０分後、１０分後または６０分後でマウスから採取される（ｉ）血漿サンプルまたは（ｉｉ）腫瘍組織サンプルにおいて分析されるＳＨ５−０７レベルのグラフ表示。値、平均±Ｓ．Ｄ．、ｎ＝６。
【００３２】
【図８】図８は、ＳＨ４−５４の構造および予測されるＮＭＲ化学シフトならびに溶液における２００μＭのＳＨ４−５４のＮＭＲスペクトルを示す。２００ｕＭの濃度の溶液を作製することが意図されたとき、沈殿が認められ、およそ２０ｕＭの化合物のシグナルが観測された。
【００３３】
【図９】図９は、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞またはＵ２５１ＭＧ細胞に対するＳＨ５−０７のコロニー生存アッセイおよび影響を示す。
【００３４】
【図１０】図１０は、ＳＨ５−０７の代表的な細胞内レベルを示す表である。
【発明を実施するための形態】
【００３５】
本開示は一般には、新規で、強力かつ選択的なＳｔａｔ３阻害剤に関連する。構成的に活性化されたＳｔａｔ３は、非がん性起源の細胞と比較して、がん性細胞、ならびに、がん性細胞の実質的により速い増殖、浸襲性および速度において役割を果たすことが見出されている。いくつかの実施形態において、本発明の選択的Ｓｔａｔ３阻害剤は、がん細胞の成長、増殖、生存、血管形成、遊走／侵入および／または免疫性を抑制することができる。Ｓｔａｔ３の阻害を、Ｓｔａｔ３の二量体化を阻害することによって達成することができる。
【００３６】
Ｓｔａｔ３：Ｓｌａｔ３タンパク質複合体が、相反するｐＴｙｒ７０５ＳＨ２ドメイン相互作用を介して媒介される。Ｓｔａｔ３を標的とするほとんどの薬物が、ｐＴｙｒ７０５を模倣するためにホスホリル基を含む。ホスファート官能基が、ＳＨ２ドメインを標的化するために必須であると見なされるが、ホスファート官能基は、不良な細胞浸透性および代謝性分解に悩まされるので、薬物発見のためには適していない。本明細書中に記載されるように、驚くべきことに、式Ｉ〜式ＩＩＩの化合物が、これまでに特定される最も攻撃的な脳がん細胞のいくつかに対するナノモル濃度の効力を有する非常に極力なＳｔａｔ３阻害剤であることが見出された。
【００３７】
構成的に活性なＳｔａｔ３がヒト腫瘍において広く見られることにより、ますますの重要性が、新規な抗がん薬物としての好適なＳｔａｔ３−阻害剤の発見に置かれている；しかしながら、多くのＳｔａｔ３阻害様式が報告されているにもかかわらず、Ｓｔａｔ３の小分子阻害剤薬物はどれもが未だ臨床に達していない。Ｍｉｋｌｏｓｓｙら、Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｍｏｄｕｌａｔｏｒｓ  ｏｆ  ＳＴＡＴ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｆｏｒ  ｈｕｍａｎ  ｄｉｓｅａｓｅｓ、Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ、１２：６１１−６２９（２０１３）。本明細書中に記載されるように、式Ｉ〜式ＩＩＩの化合物、例えば、ＳＨ５−０７およびＳＨ４−５４（これらはそれぞれ、Ｓｔａｔ３の以前に報告された阻害剤であるＢＰ−１−１０２のヒドロキサム酸誘導体および安息香酸誘導体である）は、２倍改善されたインビトロでのＳｔａｔ３阻害効力を示す。両方の薬剤が、優先的な抗腫瘍細胞応答をヒト神経膠腫腫瘍細胞に対してインビトロにおいて誘導することは注目すべきことである。本明細書中に記載されるように、これらの化合物はまた、乳がん細胞および膵臓細胞または前立腺がん細胞あるいはｖ−Ｓｒｃ形質転換マウス線維芽細胞に対する抗腫瘍細胞応答を低いマイクロモル濃度において示す。さらに、ＳＨ５−０７は、改善された標的選択性を呈示し、また、Ｓｒｃ、Ｊａｋ２、Ｓｈｃ、ＥＲＫ１／２ＭＡＰＫまたはＡｋｔのリン酸化に対する最小阻害影響を、これらの他のタンパク質の活性化を引き起こす機構に関与するＳＨ２ドメインが存在するにもかかわらず、細胞内Ｓｔａｔ３活性化を阻害する濃度（３μＭ〜１０μＭ）において示した。
【００３８】
実質的な証拠により、異常なＳｔａｔ３活性ががん細胞の成長および生存を促進させ、また、腫瘍の血管形成および転移を誘導することが明らかにされる。Ｓｔａｔ３活性化の阻害剤は抗腫瘍細胞影響を促進させ、だが、これらの多くは効力が低い。Ｔｕｒｋｓｏｎら、Ｎｏｖｅｌ  ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  ｓｉｇｎａｌ  ｔｒａｎｓｄｕｃｅｒ  ａｎｄ  ａｃｔｉｖａｔｏｒ  ｏｆ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ３  ｄｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ、Ｍｏｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ、３：２６１−２６９（２００４）；Ｔｕｒｋｓｏｎら、Ｐｈｏｓｐｈｏｔｙｒｏｓｙｌ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｂｌｏｃｋ  Ｓｔａｔ３−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ＤＮＡ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ａｃｔｉｖｉｔｙ，ｇｅｎｅ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｅｌｌ  ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２７６：４５４４３−４５４５５（２００１）；Ｇａｒｃｉａら、Ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｔａｔ３  ｂｙ  ｔｈｅ  Ｓｒｃ  ａｎｄ  ＪＡＫ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｋｉｎａｓｅｓ  ｐａｒｔｉｃｉｐａｔｅｓ  ｉｎ  ｇｒｏｗｔｈ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｃｅｌｌｓ、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、２０：２４９９−２５１３（２００１）；Ｃａｔｌｅｔｔ−Ｆａｌｃｏｎｅら、Ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｔａｔ３  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｃｏｎｆｅｒｓ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  Ｕ２６６  ｍｙｅｌｏｍａ  ｃｅｌｌｓ、Ｉｍｍｕｎｉｔｙ、１０：１０５−１１５（１９９９）；Ｍｏｒａら、Ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｔａｔ３  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｔｕｍｏｒｓ  ａｎｄ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅｓ：ｄｉｒｅｃｔ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｔａｔ３  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｉｎｄｕｃｅｓ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｏｆ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ、６２：６６５９−６６（２００２）；Ｎｉｕら、Ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅ  Ｓｔａｔ３  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｕｐ−ｒｅｇｕｌａｔｅｓ  ＶＥＧＦ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ａｎｄ  ｔｕｍｏｒ  ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉ、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、２１：２０００−２００８（２００２）；Ｗｅｉら、Ｓｔａｔ３  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｒｅｇｕｌａｔｅｓ  ｔｈｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｖａｓｃｕｌａｒ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ａｎｄ  ｈｕｍａｎ  ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｃａｎｃｅｒ  ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、２２：３１９−２９（２００３）；Ｘｉｅら、Ｓｔａｔ３  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｒｅｇｕｌａｔｅｓ  ｔｈｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ−２  ａｎｄ  ｔｕｍｏｒ  ｉｎｖａｓｉｏｎ  ａｎｄ  ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、２３：３５５０−６０（２００４）を参照のこと。
【００３９】
本開示は、以前に報告されたＳｔａｔ３阻害剤のある特定の構造的に異なったアナログが予想外の強化された治療活性を有したという驚くべき発見に基づく。ＳＨ５−０７は、インビトロでのより改善された効力を、ＢＰ−１−１０２および報告された小分子Ｓｔａｔ３阻害剤の多くと比較して、構成的な活性なＳｔａｔ３を含んでいるヒト乳がん細胞および神経膠腫細胞の生存性、コロニー生存および遊走を抑制することにおいて示す。Ｓｔａｔ３阻害剤としてのＳＨ５−０７の生物学的影響に対する機構的洞察が、Ｂｃｌ−２、Ｂｃｌ−ｘＬ、サイクリンＤ１、ｃ−Ｍｙｃおよびサバイビンを含めて、細胞の成長および生存を制御する、Ｓｔａｔ３遺伝子によって調節される遺伝子の構成的発現が抑制されるという本明細書中に開示される証拠によってもたらされる。Ｓｏｎｇら、Ａ  ｌｏｗ−ｍｏｌｅｃｕｌａｒ−ｗｅｉｇｈｔ  ｃｏｍｐｏｕｎｄ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｅｄ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｖｉｒｔｕａｌ  ｄａｔａｂａｓｅ  ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ  ｉｎｈｉｂｉｔｓ  Ｓｔａｔ３  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ、１０２：４７００−５（２００５）；Ｚｈａｎｇら、Ｏｒａｌｌｙ  ｂｉｏａｖａｉｌａｂｌｅ  ｓｍａｌｌ−ｍｏｌｅｃｕｌｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ｆａｃｔｏｒ  Ｓｔａｔ３  ｒｅｇｒｅｓｓｅｓ  ｈｕｍａｎ  ｂｒｅａｓｔ  ａｎｄ  ｌｕｎｇ  ｃａｎｃｅｒ  ｘｅｎｏｇｒａｆｔｓ、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ、１０９：９６２３−８（２０１２）；Ｃａｔｌｅｔｔ−Ｆａｌｃｏｎｅら、Ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｔａｔ３  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｃｏｎｆｅｒｓ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  Ｕ２６６  ｍｙｅｌｏｍａ  ｃｅｌｌｓ、Ｉｍｍｕｎｉｔｙ、１０：１０５−１１５（１９９９）；Ｇｒｉｔｓｋｏら、Ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｔ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｓｔａｔ３  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｉｎｄｕｃｅｓ  ｓｕｒｖｉｖｉｎ  ｇｅｎｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｏｎｆｅｒｓ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ、Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ、１２：１１−９（２００６）。全体的には、本研究は、インビトロでのヒト乳がん細胞および神経膠腫細胞に対する抗腫瘍細胞影響を引き起こす悪性細胞における構成的に活性なＳｔａｔ３の阻害についての証拠を提供する。
【００４０】
定義
用語「アルキル」は、飽和した脂肪族基を包含し、これには、直鎖アルキル基（例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシルなど）、分岐鎖アルキル基（イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソブチルなど）、シクロアルキル（脂環式）基（シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル）、アルキル置換されたシクロアルキル基およびシクロアルキル置換されたアルキル基が含まれる。アルキルの用語はさらに、炭化水素骨格の１つまたは複数の炭素に取って代わる酸素原子、窒素原子、イオウ原子またはリン原子を含むアルキル基を包含する。用語「芳香族アルキル」は、１つまたは複数のアリール基により置換されるアルキル基を包含する。用語「低級アルキル」は、本明細書中で使用される場合、４個または４個未満の炭素を示す。
【００４１】
用語「アリール」は、芳香族性を有する基を包含し、これには、０個〜４個のヘテロ原子を含むことがある５員および６員の単環芳香族基、同様にまた、少なくとも１つの芳香族環を有する多環系が含まれる。アリール基の例には、ベンゼン、フェニル、ピロール、フラン、チオフェン、チアゾール、イソチアゾール、イミダゾール、トリアゾール、テトラゾール、ピラゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジンおよびピリミジンなどが含まれる。その上、用語「アリール」は多環式アリール基を包含し、例えば、三環式、二環式のアリール基、例えば、ナフタレン、ベンゾオキサゾール、ベンゾジオキサゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾイミダゾール、ベンゾチオフェン、メチレンジオキシフェニル、キノリン、イソキノリン、ナフチリジン（ｎａｐｔｈｒｉｄｉｎｅ）、インドール、ベンゾフラン、プリン、ベンゾフラン、デアザプリンまたはインドリジンを包含する。ヘテロ原子を環構造に有するそれらのアリール基はまた、「アリール複素環」、「複素環」、「ヘテロアリール」または「ヘテロ芳香族」として示される場合がある。芳香族環は、上記で記載されるような置換基により、例えば、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、カルボキシラート、アルキルカルボニル、アルキルアミノカルボニル、アラルキルアミノカルボニル、アルケニルアミノカルボニル、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アラルキルカルボニル、アルケニルカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、ホスファート、ホスホナト、ホスフィナト、シアノ、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノおよびアルキルアリールアミノを含む）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイルおよびウレイドを含む）、アミジノ、イミノ、スルフヒドリル、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシラート、スルファート、アルキルスルフィニル、スルホナト、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、ヘテロシクリル、アルキルアリールあるいは芳香族成分またはヘテロ芳香族成分により１つまたは複数の環位置において置換されることが可能である。アリール基はまた、芳香族でない脂環式環または複素環式環との縮合、あるいは、芳香族でない脂環式環または複素環式環による架橋が可能であり、その結果、多環系（例えば、テトラリン、メチレンジオキシフェニル）を形成する。
【００４２】
用語「アルキレン」は二価の飽和した脂肪族基を示し、直鎖基および分岐鎖基の両方を包含する。
【００４３】
用語「アルケニレン」は、二重結合を有する二価の脂肪族基を示し、直鎖基および分岐鎖基の両方を包含する。
【００４４】
本明細書中で使用される場合、「対象」は、処置、観察または実験の対象物である動物を示す。「動物」には、冷血および温血の脊椎動物ならびに無脊椎動物が含まれ、例えば、魚類、甲殻類、爬虫類、および、特に哺乳動物などが含まれる。「哺乳動物」には、限定されないが、マウス；ラット；ウサギ；モルモット；イヌ；ネコ；ヒツジ；ヤギ；ウシ；ウマ；霊長類、例えば、サル、チンパンジー、無尾猿、ならびに、出生前、小児および成体のヒトが含まれる。
【００４５】
本明細書中で使用される場合、「防止する」または「保護する」は、全体的または部分的に防止すること、あるいは、改善すること、または抑制することを意味する。
【００４６】
本明細書中で使用される場合、用語「処置する」は、治療的処置と、予防的措置または防止的措置との両方、あるいは、治療的可能性を有することが疑われる作用因を投与することを示す。この用語は、防止的（例えば、予防的）処置および待機的処置を包含する。
【００４７】
用語「医薬有効量」は、本明細書中で使用される場合、活性な化合物または医薬作用因の量であって、処置されている疾患の症状の緩和または寛解を含む、探し求められている組織、系、動物またはヒトにおける生物学的応答または医学的応答を誘発するそのような量、ならびに／あるいは、有用性を有し、かつ、所望される治療終点をもたらすために十分である量を意味する。がんの場合、薬物の治療有効量は、がん細胞の数を減らすこと；腫瘍サイズを縮小させること；末梢器官へのがん細胞浸潤を阻害すること（すなわち、ある程度遅らせること、好ましくは停止させること）；腫瘍転移を阻害すること（すなわち、ある程度遅らせること、好ましくは停止させること）；腫瘍成長をある程度阻害すること；および／または、がんに伴う症状の１つまたは複数をある程度緩和することをもたらす場合がある。薬物は、成長を妨げること、および／または、存在するがん細胞を殺すことをもたらすことがあるという範囲で、当該薬物は細胞増殖抑制性および／または細胞毒性である場合がある。がん治療については、効力を、例えば、疾患進行に至る時間を評価すること、および／または、応答速度を求めることによって測定することができる。
【００４８】
用語「医薬的に許容され得る」は、本明細書中で使用される場合、当該物質または組成物が、配合物を構成する他の成分、および／または、配合物により処置されている哺乳動物と化学的および／または毒物学的に適合可能でなければならないことを意味する。
【００４９】
用語「がん」は、調節されない細胞成長および／または過剰増殖性活性によって典型的に特徴づけられる哺乳動物における病理学的状態を示すか、または記述する。「腫瘍」は１つまたは複数のがん性細胞を含む。がんの例には、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫および白血病またはリンパ系悪性腫瘍が含まれるが、これらに限定されない。１つの実施形態において、がんは固形腫瘍である。そのようながんのより具体的な例には、乳がん、子宮頸がん、卵巣がん、膀胱がん、子宮内膜癌腫または子宮癌腫、前立腺がん、神経膠腫および他の脳がんまたは脊髄がん、扁平上皮がん（例えば、上皮性扁平上皮がん）、肺がん（小細胞肺がん、非小細胞肺がん（「ＮＳＣＬＣ」）、肺の腺がんおよび肺の扁平上皮癌腫を含む）、腹膜のがん、肝細胞がん、胃（ｇａｓｔｒｉｃまたはｓｔｏｍａｃｈ）のがん（胃腸がんを含む）、膵臓がん、神経膠芽細胞腫、肝臓がん、ヘパトーマ、結腸がん、直腸がん、結腸直腸がん、唾液腺癌腫、腎臓がんまたは腎がん、外陰部がん、甲状腺がん、肝癌腫、肛門癌腫、陰茎癌腫、同様にまた、頭頸部がんが含まれる。１つの実施形態において、処置は、固形腫瘍の処置を含む。１つの実施形態において、腫瘍は、肉腫、癌腫またはリンパ腫を含む。
【００５０】
いくつかの実施形態において、がんは、脳腫瘍、例えば、神経膠腫、髄芽細胞腫、脳髄膜腫（ｍｅｎａｎｇｉｏｍａ）など、膵臓がん、悪性黒色腫、多発性骨髄腫、リンパ腫（未分化大細胞型Ｔ細胞リンパ腫、セザリー症候群、ＥＢＶ関連バーキットリンパ腫、ＨＳＶ  Ｓａｉｍｉｒｉ依存性（Ｔ細胞）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫を含む）、菌状息肉腫、白血病（ＨＴＬＶ−Ｉ依存性白血病、赤白血病、急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、巨核球性白血病および大顆粒リンパ球（ＬＧＬ）白血病を含む）、甲状腺がん、脳がん、皮膚がん、肺がんおよび腎臓がんからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、がんは、腎細胞癌腫、膵臓腺がん、卵巣癌腫またはホジキンリンパ腫である場合がある。
【００５１】
「化学療法剤」は、作用機構にかかわらず、がんの処置において有用である化学化合物である。化学療法剤の様々なクラスには、アルキル化剤、代謝拮抗剤、紡糸体毒植物アルカロイド、細胞毒性（ｃｙｔｏｘｉｃ）／抗腫瘍抗生物剤、トポイソメラーゼ阻害剤、抗体、光感受性物質およびキナーゼ阻害剤が含まれるが、これらに限定されない。化学療法剤には、「標的化治療」および従来型化学療法において使用される化合物が含まれる。化学療法剤の例には、下記のものが含まれる：トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、エルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／ＯＳＩ  Ｐｈａｒｍ．）、ドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）、Ｓａｎｏｆｉ−Ａｖｅｎｔｉｓ）、５−ＦＵ（フルオロウラシル、５−フルオロウラシル、ＣＡＳ  Ｎｏ．５１−２１−８）、ゲムシタビン（ＧＥＭＺＡＲ（登録商標）、Ｌｉｌｌｙ）、ＰＤ−０３２５９０１（ＣＡＳ  Ｎｏ．３９１２１０−１０−９、Ｐｆｉｚｅｒ）、シスプラチン（ｃｉｓ−ジアミン，ジクロロ白金（ＩＩ）、ＣＡＳ  Ｎｏ．１５６６３−２７−１）、カルボプラチン（ＣＡＳ  Ｎｏ．４１５７５−９４−４）、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（登録商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ、Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ、Ｎ．Ｊ．）、ペメトレキセド（ＡＬＩＭＴＡ（登録商標）、Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙ）、テモゾロミド（４−メチル−５−オキソ−２，３，４，６，８−ペンタアザビシクロ［４．３．０］ノナ−２，７，９−トリエン−９−カルボキサミド、ＣＡＳ  Ｎｏ．８５６２２−９３−１、ＴＥＭＯＤＡＲ（登録商標）、ＴＥＭＯＤＡＬ（登録商標）、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  Ｐｌｏｕｇｈ）、タモキシフェン（（Ｚ）−２−［４−（１，２−ジフェニルブタ−１−エニル）フェノキシ］−Ｎ，Ｎ−ジメチルエタンアミン、ＮＯＬＶＡＤＥＸ（登録商標）、ＩＳＴＵＢＡＬ（登録商標）、ＶＡＬＯＤＥＸ（登録商標））、ならびに、ドキソルビシン（ＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ（登録商標））、Ａｋｔｉ−１／２、ＨＰＰＤおよびラパマイシン。
【００５２】
化学療法剤のより多くの例には、下記のものが含まれる：オキサリプラチン（ＥＬＯＸＡＴＩＮ（登録商標）、Ｓａｎｏｆｉ）、ボルテゾミブ（ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標）、Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ  Ｐｈａｒｍ．）、スーテント（ｓｕｔｅｎｔ）（ＳＵＮＩＴＩＮＩＢ（登録商標）、ＳＵ１１２４８、Ｐｆｉｚｅｒ）、レトロゾール（ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、イマチニブメシラート（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＸＬ−５１８（Ｍｅｋ阻害剤、Ｅｘｅｌｉｘｉｓ、ＷＯ２００７／０４４５１５）、ＡＲＲＹ−８８６（Ｍｅｋ阻害剤、ＡＺＤ６２４４、Ａｒｒａｙ  ＢｉｏＰｈａｒｍａ、Ａｓｔｒａ  Ｚｅｎｅｃａ）、ＳＦ−１１２６（ＰＩ３Ｋ阻害剤、Ｓｅｍａｆｏｒｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＢＥＺ−２３５（ＰＩ３Ｋ阻害剤、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＸＬ−１４７（ＰＩ３Ｋ阻害剤、Ｅｘｅｌｉｘｉｓ）、ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、フルベストラント（ＦＡＳＬＯＤＥＸ（登録商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、ロイコボリン（フォリン酸）、ラパマイシン（シロリムス、ＲＡＰＡＭＵＮＥ（登録商標）、Ｗｙｅｔｈ）、ラパチニブ（ＴＹＫＥＲＢ（登録商標）、ＧＳＫ５７２０１６、Ｇｌａｘｏ  Ｓｍｉｔｈ  Ｋｌｉｎｅ）、ロナファルニブ（ＳＡＲＡＳＡＲ（商標）、ＳＣＨ６６３３６、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  Ｐｌｏｕｇｈ）、ソラフェニブ（ＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標）、ＢＡＹ４３−９００６、Ｂａｙｅｒ  Ｌａｂｓ）、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、イリノテカン（ＣＡＭＰＴＯＳＡＲ（登録商標）、ＣＰＴ−１１、Ｐｆｉｚｅｒ）、チピファルニブ（ｔｉｐｉｆａｒｎｉｂ）（ＺＡＲＮＥＳＴＲＡ（商標）、Ｊｏｈｎｓｏｎ＆Ｊｏｈｎｓｏｎ）、ＡＢＲＡＸＡＮＥ（商標）（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ非含有）、パクリタキセルのアルブミン操作ナノ粒子配合物（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐａｒｔｎｅｒｓ、Ｓｃｈａｕｍｂｅｒｇ，ＩＩ）、バンデタニブ（ｒＩＮＮ、ＺＤ６４７４、ＺＡＣＴＩＭＡ（登録商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、クロラムブシル（ｃｈｌｏｒａｎｍｂｕｃｉｌ）、ＡＧ１４７８、ＡＧ１５７１（ＳＵ５２７１；Ｓｕｇｅｎ）、テムシロリムス（ＴＯＲＩＳＥＬ（登録商標）、Ｗｙｅｔｈ）、パゾパニブ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、カンフォスファミド（ｃａｎｆｏｓｆａｍｉｄｅ）（ＴＥＬＣＹＴＡ（登録商標）、Ｔｅｌｉｋ）、チオテパおよびシクロホスファミド（ｃｙｃｌｏｓｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）（ＣＹＴＯＸＡＮ（登録商標）、ＮＥＯＳＡＲ（登録商標））；アルキルスルホナート、例えば、ブスルファン、インプロスルファンおよびピポスルファンなど；アジリジン系、例えば、ベンゾドパ（ｂｅｎｚｏｄｏｐａ）、カルボコン、メツレデパ（ｍｅｔｕｒｅｄｏｐａ）およびウレドパ（ｕｒｅｄｏｐａ）など；エチレンイミン系およびメチルアメラミン系（ｍｅｔｈｙｌａｍｅｌａｍｉｎｅｓ）（アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミドおよびトリメチロメラミンを含む）；アセトゲニン類（とりわけ、ブラタシン（ｂｕｌｌａｔａｃｉ���）およびブラタシノン（ｂｕｌｌａｔａｃｉｎｏｎｅ））；カンプトテシン（合成アナログのトポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン（ｃａｌｌｙｓｔａｔｉｎ）；ＣＣ−１０６５（その合成アナログのアドゼレシン、カルゼレシン（ｃａｒｚｅｌｅｓｉｎ）およびビゼレシンを含む）；クリプトフィシン類（特にクリプトフィシン１およびクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成アナログのＫＷ−２１８９およびＣＢ１−ＴＭ１を含む）；エリュテロビン；パンクラチスタチン（ｐａｎｃｒａｔｉｓｔａｔｉｎ）；サルコジクチン（ｓａｒｃｏｄｉｃｔｙｉｎ）；スポンギスタチン（ｓｐｏｎｇｉｓｔａｔｉｎ）；ナイトロジェンマスタード系、例えば、クロラムブシル、クロルナファジン（ｃｈｌｏｒｎａｐｈａｚｉｎｅ）、クロロホスファミド（ｃｈｌｏｒｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノベムビチン（ｎｏｖｅｍｂｉｃｈｉｎ）、フェネステリン（ｐｈｅｎｅｓｔｅｒｉｎｅ）、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード；ニトロソウレア系、例えば、カルムスチン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチンおよびラニムヌスチン（ｒａｎｉｍｎｕｓｔｉｎｅ）など；抗生物剤、例えば、エンジイン系抗生物剤（例えば、カリケアミシン、カリケアミシンガンマ１Ｉ、カリケアミシンオメガＩ１（Ａｎｇｅｗ  Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．（１９９４）  ３３：１８３−１８６）；ジネミシン（ｄｙｎｅｍｉｃｉｎ）、ジネミシンＡ；ビスホスホナート系、例えば、クロドロン酸塩など；エスペラミシン類；同様にまた、ネオカルチノスタチンクロモフォアおよび関連色素タンパク質エンジイン系抗生物性クロモフォア）、アクラシノマイシン（ａｃｌａｃｉｎｏｍｙｓｉｎ）類、アクチノマシン、オートラマイシン（ａｕｔｈｒａｍｙｃｉｎ）、アザセリン、ブレオマイシン類、カクチノマイシン、カラビシン（ｃａｒａｂｉｃｉｎ）、カミノマイシン（ｃａｍｉｎｏｍｙｃｉｎ）、カルジノフィリン、クロモマイシン類（ｃｈｒｏｍｏｍｙｃｉｎｉｓ）、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン（ｄｅｔｏｒｕｂｉｃｉｎ）、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシンおよびデオキシドキソルビシン）、エピルビシン、エソルビシン（ｅｓｏｒｕｂｉｃｉｎ）、イダルビシン、ネモルビシン（ｎｅｍｏｒｕｂｉｃｉｎ）、マルセロマイシン（ｍａｒｃｅｌｌｏｍｙｃｉｎ）、マイトマイシン類（例えば、マイトマイシンＣなど）、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン類、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン、ピューロマイシン、ケラマイシン（ｑｕｅｌａｍｙｃｉｎ）、ロドルビシン（ｒｏｄｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン；代謝拮抗物質、例えば、メトトレキサートおよび５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）など；葉酸アナログ、例えば、デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサートなど；プリンアナログ、例えば、フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン（ｔｈｉａｍｉｐｒｉｎｅ）、チオグアニンなど；ピリミジンアナログ、例えば、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジンなど；アンドロゲン類、例えば、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンなど；抗副腎剤（ａｎｔｉ−ａｄｒｅｎａｌ）、例えば、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタンなど；葉酸補充剤、例えば、フロリン酸（ｆｒｏｌｉｎｉｃ  ａｃｉｄ）など；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル（ｂｅｓｔｒａｂｕｃｉｌ）；ビスアントレン（ｂｉｓａｎｔｒｅｎｅ）；エダトラキサート（ｅｄａｔｒａｘａｔｅ）；デホファミン（ｄｅｆｏｆａｍｉｎｅ）；デメコルチン；ジアジクオン；エルホルミチン（ｅｌｆｏｒｍｉｔｈｉｎｅ）；酢酸エリプチニウム（ｅｌｌｉｐｔｉｎｉｕｍ）；エポチロン類；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダイニン（ｌｏｎｉｄａｉｎｉｎｅ）；メイタンシノイド（例えば、メイタンシンなど）およびアンサミトシン（ａｎｓａｍｉｔｏｃｉｎ）類；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモール（ｍｏｐｉｄａｎｍｏｌ）；ニトラエリン（ｎｉｔｒａｅｒｉｎｅ）；ペントスタチン；フェナメト（ｐｈｅｎａｍｅｔ）；ピラルビシン；ロソキサントロン（ｌｏｓｏｘａｎｔｒｏｎｅ）；ポドフィリン酸（ｐｏｄｏｐｈｙｌｌｉｎｉｃ  ａｃｉｄ）；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖複合体（ＪＨＳ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ、Ｅｕｇｅｎｅ、Ｏｒｅｇ．）；ラゾキサン；リゾキシン（ｒｈｉｚｏｘｉｎ）；シゾフィラン；スピロゲルマニウム（ｓｐｉｒｏｇｅｒｍａｎｉｕｍ）；テヌアゾン酸；トリアジコン；２，２’，２”−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン類（とりわけ、Ｔ−２毒素、ベラクリン（ｖｅｒｒａｃｕｒｉｎ）Ａ、ロリジンＡおよびアンギジン（ａｎｇｕｉｄｉｎｅ））；ウレタン（ｕｒｅｔｈａｎ）；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン（ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；白金アナログ、例えば、シスプラチンおよびカルボプラチンなど；ビンブラスチン；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン（ＮＡＶＥＬＢＩＮＥ（登録商標））；ノバントロン；テニポシド；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；カペシタビン（ＸＥＬＯＤＡ（登録商標）、Ｒｏｃｈｅ）；イバンドロナート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイド、例えば、レチノイン酸など；ならびに上記のいずれかの医薬的に許容され得る塩、酸および誘導体。
【００５３】
「化学療法剤」の定義に同様に含まれるものが下記のものである：（ｉ）腫瘍に対するホルモン作用を調節または阻害するように作用する抗ホルモン剤、例えば、抗エストロゲン剤および選択的エストロゲン受容体調節剤（ＳＥＲＭ）、これらには、例えば、タモキシフェン（ＮＯＬＶＡＤＥＸ（登録商標）、クエン酸タモキシフェンを含む）；ラロキシフェン、ドロロキシフェン、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン（ｔｒｉｏｘｉｆｅｎｅ）、ケオキシフェン（ｋｅｏｘｉｆｅｎｅ）、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン（ｏｎａｐｒｉｓｔｏｎｅ）およびＦＡＲＥＳＴＯＮ（登録商標）（クエン酸トレミフェン）が含まれる；（ｉｉ）副腎におけるエストロゲン産生を調節する酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤、例えば、４（５）−イミダゾール類、アミノグルテチミド、ＭＥＧＡＳＥ（登録商標）（酢酸メゲストロール）、ＡＲＯＭＡＳＩＮ（登録商標）（エキセメスタン；Ｐｆｉｚｅｒ）、ホルメスタン（ｆｏｒｍｅｓｔａｎｉｅ）；ファドロゾール、ＲＩＶＩＳＯＲ（登録商標）（ボロゾール）、ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）（レトロゾール；Ｎｏｖａｒｔｉｓ）およびＡＲＩＭＩＤＥＸ（登録商標）（アナストロゾール；ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）；（ｉｉｉ）抗アンドロゲン剤、例えば、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリドおよびゴセレリンなど；同様にまた、トロキサシタビン（１，３−ジオキソランヌクレオシドシトシンアナログ）；（ｉｖ）プロテインキナーゼ阻害剤、例えば、ＭＥＫ阻害剤（ＷＯ２００７／０４４５１５）など；（ｖ）脂質キナーゼ阻害剤；（ｖｉ）アンチセンスオリゴヌクレオチド、特に、異常な細胞増殖に関係するシグナル伝達経路における遺伝子（例えば、ＰＫＣ−アルファ、ＲａｆおよびＨ−Ｒａｓなど）の発現を阻害するアンチセンスオリゴヌクレオチド、例えば、オブリメルセン（ＧＥＮＡＳＥＮＳＥ（登録商標）、Ｇｅｎｔａ  Ｉｎｃ．）など；（ｖｉｉ）リボザイム、例えば、ＶＥＧＦ発現阻害剤（例えば、ＡＮＧＩＯＺＹＭＥ（登録商標））およびＨＥＲ２発現阻害剤など；（ｖｉｉｉ）ワクチン、例えば、遺伝子治療ワクチンなど、例えば、ＡＬＬＯＶＥＣＴＩＮ（登録商標）、ＬＥＵＶＥＣＴＩＮ（登録商標）およびＶＡＸＩＤ（登録商標）；ＰＲＯＬＥＵＫＩＮ（登録商標）ｒＩＬ−２；トポイソメラーゼ１阻害剤、例えば、ＬＵＲＴＯＴＥＣＡＮ（登録商標）など；ＡＢＡＲＥＬＩＸ（登録商標）ｒｍＲＨ；（ｉｘ）抗血管新生剤、例えば、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）など；ならびに、上記のいずれかの医薬的に許容され得る塩、酸および誘導体。
【００５４】
「化学療法剤」の定義に同様に含まれるものが下記の治療抗体である：例えば、アレムツズマブ（Ｃａｍｐａｔｈ）、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）；セツキシマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標）、Ｉｍｃｌｏｎｅ）；パニツムマブ（ＶＥＣＴＩＢＩＸ（登録商標）、Ａｍｇｅｎ）、リツキシマブ（ＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｂｉｏｇｅｎ  Ｉｄｅｃ）、ペルツズマブ（ＯＭＮＩＴＡＲＧ（商標）、２Ｃ４、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、トシツモマブ（Ｂｅｘｘａｒ、Ｃｏｒｉｘｉａ）、および、抗体薬物コンジュゲートのゲムツズマブオゾガミシン（ＭＹＬＯＴＡＲＧ（登録商標）、Ｗｙｅｔｈ）。
【００５５】
化学療法剤としての治療可能性を本発明のガンマ−グルタミル阻害剤との組合せで有するヒト化モノクローナル抗体には、下記のものが含まれる：アレムツズマブ、アポリズマブ、アセリズマブ（ａｓｅｌｉｚｕｍａｂ）、アトリズマブ（ａｔｌｉｚｕｍａｂ）、バピネウズマブ、ベバシズマブ、ビバツズマブメルタンシン（ｂｉｖａｔｕｚｕｍａｂ  ｍｅｒｔａｎｓｉｎｅ）、カンツズマブメルタンシン、セデリズマブ（ｃｅｄｅｌｉｚｕｍａｂ）、セルトリズマブペゴール、シドフシツズマブ（ｃｉｄｆｕｓｉｔｕｚｕｍａｂ）、シドツズマブ（ｃｉｄｔｕｚｕｍａｂ）、ダクリズマブ、エクリズマブ、エファリズマブ、エプラツズマブ、エルリズマブ（ｅｒｌｉｚｕｍａｂ）、フェルビズマブ（ｆｅｌｖｉｚｕｍａｂ）、フォントリズマズ、ゲムツズマブオゾガミシン、イノツズマブ（ｉｎｏｔｕｚｕｍａｂ）オゾガミシン、イピリムマブ、ラベツズマブ、リンツズマブ、マツズマブ、メポリズマブ、モタビズマブ、モトビズマブ（ｍｏｔｏｖｉｚｕｍａｂ）、ナタリズマブ、ニモツズマブ（ｎｉｍｏｔｕｚｕｍａｂ）、ノロビズマブ（ｎｏｌｏｖｉｚｕｍａｂ）、ヌマビズマブ（ｎｕｍａｖｉｚｕｍａｂ）、オクレリズマブ、オマリズマブ、パリビズマブ、パスコリズマブ（ｐａｓｃｏｌｉｚｕｍａｂ）、ペクフシツズマブ（ｐｅｃｆｕｓｉｔｕｚｕｍａｂ）、ペクツズマブ（ｐｅｃｔｕｚｕｍａｂ）、ペルツズマブ、ペキセリズマブ（ｐｅｘｅｌｉｚｕｍａｂ）、ラリビズマブ（ｒａｌｉｖｉｚｕｍａｂ）、ラニビズマブ、レスリビズマブ、レシビズマブ（ｒｅｓｙｖｉｚｕｍａｂ）、ロベリズマブ（ｒｏｖｅｌｉｚｕｍａｂ）、ルピリズマブ（ｒｕｐｌｉｚｕｍａｂ）、シブロツズマブ（ｓｉｂｒｏｔｕｚｕｍａｂ）、シプリズマブ、ソンツズマブ（ｓｏｎｔｕｚｕｍａｂ）、タカツズマブテトラキセタン（ｔａｃａｔｕｚｕｍａｂ  ｔｅｔｒａｘｅｔａｎ）、タドシズマブ（ｔａｄｏｃｉｚｕｍａｂ）、タリズマブ、テフィバズマブ（ｔｅｆｉｂａｚｕｍａｂ）、トシリズマブ、トロリズマブ（ｔｏｒａｌｉｚｕｍａｂ）、トラスツズマブ、ツコツズマブセルモロイキン（ｔｕｃｏｔｕｚｕｍａｂ  ｃｅｌｍｏｌｅｕｋｉｎ）、ツクシツズマブ（ｔｕｃｕｓｉｔｕｚｕｍａｂ）、ウマビズマブ（ｕｍａｖｉｚｕｍａｂ）、ウルトキサズマブおよびビシリズマブ（ｖｉｓｉｌｉｚｕｍａｂ）。
【００５６】
「代謝産物」は、指定された化合物またはその塩の体内での代謝から生じる生成物である。化合物の様々な代謝産物が、この技術分野において知られている日常的な技術を使用して特定される場合があり、また、それらの活性が、様々な試験を使用して、例えば、本明細書中に記載される試験などを使用して求められる場合がある。そのような生成物は、例えば、投与された化合物の酸化、還元、加水分解、アミド化、脱アミノ化、エステル化、脱エステル化および酵素的切断などから生じる場合がある。したがって、本発明は、本発明の化合物を、その代謝生成物をもたらすために十分な期間にわたって哺乳動物と接触させることを含むプロセスによって産生される化合物を含めて、本発明の化合物の代謝産物を包含する。
【００５７】
用語「添付文書」は、治療用製造物の商用包装物において通例的に含まれる説明書で、そのような治療用製造物の使用に関する適応症、用法、投薬量、投与、禁忌および／または警告に関する情報を含有する説明書を示すために使用される。
【００５８】
表現「医薬的に許容され得る塩」は、本明細書中で使用される場合、本発明の化合物の医薬的に許容され得る有機塩または無機塩を示す。例示的な塩には、硫酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸リン酸塩、イソニコチン酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、酸クエン酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸塩、パントテン酸塩、重酒石酸塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチシン酸塩（ｇｅｎｔｉｓｉｎａｔｅ）、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、サッカラート、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩「メシラート」、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩およびパモ酸塩（すなわち、１，１’−メチレン−ビス（２−ヒドロキシ−３−ナフトエ酸塩））の各塩が含まれるが、これらに限定されない。医薬的に許容され得る塩は、別の分子（例えば、酢酸塩イオン、コハク酸塩イオンまたは他の対イオンなど）の包含を伴う場合がある。対イオンは、親化合物における電荷を安定化するどのような有機成分または無機成分であってもよい。その上、医薬的に許容され得る塩は１つを超える荷電原子をその構造において有する場合がある。多数の荷電原子が医薬的に許容され得る塩の一部である場合、医薬的に許容され得る塩は多数の対イオンを有することができる。したがって、医薬的に許容され得る塩は１つまたは複数の荷電原子ならびに／あるいは１つまたは複数の対イオンを有することができる。
【００５９】
本発明の化合物が塩基であるならば、その所望される医薬的に許容され得る塩が、どのような方法であれ、この技術分野において利用可能である好適な方法によって、例えば、フリー塩基の処理を、無機酸を用いて、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、メタンスルホン酸、リン酸など）を用いて、または、有機酸を用いて、例えば、酢酸、トリフルオロ酢酸、マレイン酸、コハク酸、マンデル酸、フマル酸、マロン酸、ピルビン酸、シュウ酸、グリコール酸、サリチル酸、ピラノシジル酸（ｐｙｒａｎｏｓｉｄｙｌ  ａｃｉｄ）（例えば、グルクロン酸またはガラクツロン酸など）、アルファヒドロキシ酸（例えば、クエン酸または酒石酸など）、アミノ酸（例えば、アスパラギン酸またはグルタミン酸など）、芳香族酸（例えば、安息香酸またはケイ皮酸など）、スルホン酸（例えば、ｐ−トルエンスルホン酸またはエタンスルホン酸など）など用いて行うことによって調製される場合がある。
【００６０】
本発明の化合物が酸であるならば、その所望される医薬的に許容され得る塩が、どのような方法であれ、好適な方法によって、例えば、フリー酸の処理を、無機塩基または有機塩基を用いて、例えば、アミン（一級、二級または三級）、アルカリ金属水酸化物またはアルカリ土類金属水酸化物などを用いて行うことによって調製される場合がある。好適な塩の例示的な例には、アミノ酸（例えば、グリシンおよびアルギニンなど）、アンモニア、第一級アミン、第二級アミンおよび第三級アミン、ならびに、環状アミン（例えば、ピペリジン、モルホリンおよびピペラジンなど）に由来する有機塩、また、ナトリウム、カルシウム、カリウム、マグネシウム、マンガン、鉄、銅、亜鉛、アルミニウムおよびリチウムに由来する無機塩が含まれるが、これらに限定されない。
【００６１】
「溶媒和物」は、１つまたは複数の溶媒分子と本発明の化合物との会合物または複合体を示す。溶媒和物を形成する溶媒の例には、水、イソプロパノール、エタノール、メタノール、ＤＭＳＯ、酢酸エチル、酢酸およびエタノールアミンが含まれるが、これらに限定されない。
【００６２】
式Ｉの化合物の投与
本発明の式Ｉの化合物は、どのような経路であれ、処置されるための状態に対して適切である経路によって投与される場合がある。好適な経路には、経口、非経口（皮下、筋肉内、静脈内、動脈内、皮内、クモ膜下腔内および硬膜外を含む）、腹腔内（ＩＰ）、経皮、直腸、鼻腔、局所的（口内および舌下を含む）、膣、肺内および鼻腔内が含まれる。局所的処置のために、化合物が、腫瘍を阻害剤により灌流するか、または他の場合には腫瘍を阻害剤と接触させることを含めて、腫瘍内投与によって投与される場合がある。好ましい経路が、例えば、レシピエントの状態により変わる場合があることが理解されるであろう。化合物が経口投与される場合、化合物は、医薬的に許容され得るキャリアまたは賦形剤を伴うピル剤、カプセル剤、錠剤などとして配合される場合がある。化合物が非経口投与される場合、化合物は、下記で詳しく記載されるように、医薬的に許容され得る非経口用ビヒクルを伴って、かつ、単位投薬量の注射可能な形態で配合される場合がある。
【００６３】
ヒト患者を処置するための用量が、式Ｉの化合物の約１ｍｇ〜約１０００ｍｇの範囲である場合がある。用量は、式Ｉ〜式ＩＩＩの化合物の約１ｍｇ、２ｍｇ、２．５ｍｇ、４ｍｇ、５ｍｇ、７．５ｍｇ、１０ｍｇ、１２．５ｍｇ、１５ｍｇ、１７，５ｍｇ、２０ｍｇ、２５ｍｇ、３０ｍｇ、４０ｍｇ、５０ｍｇ、６０ｍｇ、７０ｍｇ、７５ｍｇ、８０ｍｇ、９０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇ、５５０ｍｇ、６００ｍｇ、６５０ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、８００ｍｇ、８５０ｍｇ、９００ｍｇ、９５０ｍｇ、１０００ｍｇ、または、どのような用量であれ、そのような用量のいずれか２つの間に及ぶ用量である場合がある。
【００６４】
所定の用量が、特定の化合物の吸収、分布、代謝および排出を含めて薬物動態学的性質および薬力学的性質に依存して、１日あたり１回（ＱＩＤ）、１日あたり２回（ＢＩＤ）またはより頻繁に投与される場合がある。加えて、毒性要因が投薬量および投与レジメンに影響を与える場合がある。経口投与されるときの典型的な用量、ピル剤、カプセル剤または錠剤が、指定された期間にわたって毎日またはより少ない頻度で摂取される場合がある。このレジメンが何回かの治療サイクルにわたって繰り返される場合がある。
【００６５】
式Ｉの化合物による処置の方法
本発明の式Ｉの化合物は、がん（これに限定されない）を含めて様々な過剰増殖性の疾患、状態および／または障害を処置するために有用である。したがって、本発明の１つの局面は、Ｓｔａｔ３を阻害することによって処置または防止することができる疾患または状態を処置する、または防止する方法を包含する。１つの実施形態において、本発明の方法は、当該方法を必要とする対象に、治療有効量の式Ｉの化合物またはその医薬的に許容され得る塩を投与することを含む。１つの実施形態において、ヒト患者が、式Ｉの化合物および医薬的に許容され得るキャリア、補助剤またはビヒクルにより処置され、ただし、この場合、式Ｉの前記化合物が、がんを処置するための、および／または、Ｓｔａｔ３活性を検出可能に阻害するための量で存在する。
【００６６】
本発明の方法に従って処置することができるがんには、神経膠腫、神経膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、乳房、卵巣、子宮頸部、前立腺、精巣、泌尿生殖路、食道、喉頭、胃、皮膚、ケラトアカントーマ、肺、類表皮癌腫、大細胞癌腫、非小細胞肺癌腫（ＮＳＣＬＣ）、小細胞癌腫、肺腺がん、骨、結腸、腺腫、膵臓、腺がん、甲状腺、濾胞状癌腫、未分化癌腫、乳頭状癌腫、セミノーマ、黒色腫、肉腫、膀胱癌腫、肝臓癌腫および胆汁通路、腎臓癌腫、骨髄系障害、リンパ系障害、ヘアリー細胞、口腔および咽頭（口部）、口唇、舌、口、咽頭、小腸、結腸直腸、大腸、直腸、脳および中枢神経系、ホジキンおよび白血病が含まれるが、これらに限定されない。
【００６７】
式Ｉの化合物は、哺乳動物の細胞、生物または関連する病理学的状態（例えば、過剰増殖性疾患および／またはがんなど）の、インビトロ、インシトゥーおよびインビボでの診断または処置において有用である場合がある。
【００６８】
式Ｉの化合物は、血液脳関門を横断する輸送を必要とする脳および中枢神経系の状態を処置するために有用である場合がある。ある特定の式Ｉの化合物は、脳への送達のための好都合な浸透特性を有する。式Ｉの化合物により効果的に処置されることがある脳の障害には、転移性および原発性の脳腫瘍、例えば、神経膠芽細胞腫および黒色腫などが含まれる。
【００６９】
式Ｉの化合物は、眼への限局化された送達によって眼のがんを処置するために有用である場合がある。ある特定の式Ｉの化合物は、眼への送達および眼内への取り込みのための好都合な浸透特性を有する。ある特定の式Ｉの化合物は、湿性ＡＭＤをラニビズマブ（ＬＵＣＥＮＴＩＳ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．）およびベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．）との組合せで処置するための効力および長期に及ぶ応答持続期間を高める場合がある。
【００７０】
本発明の別の局面により、本明細書中に記載される疾患または状態を、そのような疾患または状態に罹患する対象（例えば、ヒト）において処置する際に使用されるための本発明の化合物が提供される。また、本明細書中に記載される疾患または状態を、そのような障害に罹患する温血動物において、例えば、哺乳動物などにおいて、例えば、ヒトにおいて処置するための医薬品の調製における本発明の化合物の使用も提供される。
【００７１】
医薬配合物／組成物および使用
式Ｉの化合物を、ヒトを含む哺乳動物の治療的処置（予防的処置を含む）のために使用するために、式Ｉの化合物は通常、医薬組成物として標準的な製薬慣例に従って配合される。本発明のこの局面によれば、本発明の化合物を医薬的に許容され得る希釈剤またはキャリアと連携して含む医薬組成物が提供される。
【００７２】
典型的な配合物が、式Ｉの化合物と、キャリア、希釈剤または賦形剤とを混合することによって調製される。様々な好適なキャリア、希釈剤および賦形剤が当業者には広く知られており、これらには、炭水化物、ワックス、水溶性ポリマーおよび／または水膨潤性ポリマー、親水性物質または疎水性物質、ゼラチン、オイル、溶媒ならびに水などの物質が含まれる。使用される特定のキャリア、希釈剤または賦形剤は、本発明の化合物が適用される手段および目的に依存するであろう。様々な溶媒が一般には、哺乳動物に投与されるために安全であるとして当業者によって認識される（ＧＲＡＳ）溶媒に基づいて選択される。一般に、安全な溶媒は、水において可溶性または混和性である非毒性の水性溶媒（例えば、水など）および他の非毒性溶媒である。好適な水性溶媒には、水、エタノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ３００）など、および、それらの混合物が含まれる。配合物はまた、薬物（すなわち、本発明の化合物またはその医薬組成物）の的確な提示を提供するための、または、医薬製造物（すなわち、医薬品）の製造を助けるための１つまたは複数の緩衝剤、安定化剤、界面活性剤、湿潤化剤、滑剤、乳化剤、懸濁化剤、保存剤、酸化防止剤、不透明化剤、流動促進剤、加工助剤、着色剤、甘味剤、芳香剤、香味矯臭剤および他の知られている添加物を含む場合がある。
【００７３】
配合物は、従来の溶解手順および混合手順を使用して調製される場合がある。例えば、原体薬物物質（すなわち、本発明の化合物または式Ｉの化合物の安定化された形態（例えば、シクロデキストリン誘導体または他の知られている複合体形成剤との複合体））が、上記で記載される賦形剤の１つまたは複数の存在下、好適な溶媒に溶解される。本発明の化合物は典型的には、薬物の容易に制御可能な投薬を提供するための、また、処方されたレジメンに関する患者の遵守を可能にするための医薬用投薬形態物に配合される。
【００７４】
適用されるための医薬組成物（または配合物）は、薬物を投与するために使用される方法に依存する様々な様式で包装される場合がある。一般に、配布用物品は、医薬配合物が適切な形態で入れられる容器を含む。様々な好適な容器が当業者には広く知られており、これらには、ビン（プラスチック製およびガラス製）、小袋、アンプル、ビニール袋および金属シリンダーなどのものが含まれる。容器はまた、包装物の内容物への軽率な接触を防止するための不正開封防止組み立てを含む場合がある。加えて、容器には、容器の内容物を記載するラベルが貼付される。ラベルはまた、適切な警告を含む場合がある。
【００７５】
本発明の化合物の医薬配合物が投与の様々な経路および形式のために調製される場合がある。例えば、所望される程度の純度を有する式Ｉの化合物が必要に応じて、凍結乾燥配合物、粉砕粉末または水溶液の形態で、医薬的に許容され得る希釈剤、キャリア、賦形剤または安定剤（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１９８０）、第１６版、Ｏｓｏｌ，Ａ．編）と混合される場合がある。配合が、周囲温度で、適切なｐＨで、かつ、所望される程度の純度で、生理学的に許容され得るキャリアと、すなわち、用いられる投薬量および濃度においてレシピエントに対して非毒性であるキャリアと混合することによって行われる場合がある。配合物のｐＨは、主に化合物の特定の使用および濃度に依存し、しかし、約３〜約８の範囲である場合がある。ｐＨ５での酢酸緩衝液における配合が、好ましい実施形態である。
【００７６】
本明細書中における使用のための本発明の化合物は好ましくは無菌である。特に、インビボ投与のために使用されるための配合物は無菌でなければならない。そのような無菌化が、無菌のろ過膜に通すろ過によって容易に達成される。
【００７７】
化合物は通常、固体の組成物、すなわち、凍結乾燥された配合物として、または、水溶液（例えば、生理的食塩水における水溶液）として貯蔵することができる。
【００７８】
式Ｉの化合物を含む本発明の医薬組成物は、良好な医療慣行と一致する様式で、すなわち、良好な医療慣行と一致する量、濃度、スケジュール、経過、ビヒクルおよび投与経路で配合され、服用され、投与されるであろう。この関連で考慮されるための要因には、処置される特定の障害、処置される特定の哺乳動物、個体患者の臨床的状態、障害の原因、薬剤の送達部位、投与方法、投与スケジュールの決定、および、医療行為実施者には知られている他の要因が含まれる。本明細書中に提供される化合物および塩形態物に加えて、本発明は、非経口用および経口用の送達形態物および配合物のための錠剤、カプセル剤、溶液および懸濁物を含めて、医薬的に許容され得るキャリアと、治療有効量の本明細書中に提供されるＳｔａｔ３阻害剤の１つまたは複数とを含む医薬組成物を包含する。Ｓｔａｔ３阻害剤の医薬組成物は塩および水和物を含むことができる。
【００７９】
がんを処置するためのヒトおよび動物の治療において、例えば、本明細書中に記されるがんならびに他の関連する障害、疾患および状態を処置することにおいて、本明細書中に記載され、また提供される様々な化合物およびそれらの結晶形態物、それらの医薬的に許容され得る塩、ならびに、どちらかの実体の医薬的に許容され得る溶媒和物は単独で投与することができ、しかし、一般には、意図された投与経路および標準的な製薬慣行に関して選択される医薬用キャリアとの混合で投与されることになる。好ましくは、それらは、医薬的に許容され得る賦形剤（例えば、デンプンまたはラクトースなど）を含有する錠剤の形態で、あるいは、単独で、または賦形剤との混合でのどちらかでのカプセルまたはオブール（ｏｖｕｌｅ）で、あるいは、矯味矯臭剤または着色剤を含有するエリキシル剤、溶液または懸濁物の形態で経口投与される。それらはまた、非経口的に、例えば、静脈内、筋肉内または皮下に注射することができる。非経口投与のために、それらは、他の物質、例えば、溶液を血液と等張性にするための十分な塩または単糖を含有する場合がある無菌の水溶液の形態で最も良く使用される。口内投与または舌下投与のために、それらは、従来の様式で配合され得る錠剤または口内錠の形態で投与される場合がある。
【００８０】
一般的な提案として、１回の服用あたり非経口投与される式Ｉの化合物の最初の医薬有効量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、０．０１ｍｇ／ｋｇ〜１．０ｍｇ／ｋｇ、あるいは、１．０ｍｇ／ｋｇ〜１０．０ｍｇ／ｋｇ、または、１０．０ｍｇ／ｋｇ〜１００．０ｍｇ／ｋｇの範囲であろう。１回の服用あたり非経口投与される式Ｉの化合物の量はまた、１日あたり約０．０５ｍｇ／ｋｇ患者体重〜５ｍｇ／ｋｇ患者体重である場合があり、だが、使用される化合物の典型的な最初の範囲は０．０５ｍｇ／ｋｇ／日〜１０ｍｇ／ｋｇ／日である。典型的な用量が、化合物の１日あたり１回、２回または４回での約１ｍｇ〜約３０．０ｍｇである場合がある。いくつかの実施形態において、用量は、約０．０５ｍｇ／ｋｇ、０．０６ｍｇ／ｋｇ、０．０７ｍｇ／ｋｇ、０．０８ｍｇ／ｋｇ、０．０９ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．７ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、０．９ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、１．１ｍｇ／ｋｇ、１．２ｍｇ／ｋｇ、１．３ｍｇ／ｋｇ、１．４ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、１．６ｍｇ／ｋｇ、１．７ｍｇ／ｋｇ、１．８ｍｇ／ｋｇ、１．９ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、２．１ｍｇ／ｋｇ、２．２ｍｇ／ｋｇ、２．３ｍｇ／ｋｇ、２．４ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、２．６ｍｇ／ｋｇ、２．７ｍｇ／ｋｇ、２．９ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、３．１ｍｇ／ｋｇ、３．２ｍｇ／ｋｇ、３．３ｍｇ／ｋｇ、３．４ｍｇ／ｋｇ、３．５ｍｇ／ｋｇ、３．６ｍｇ／ｋｇ、３．７ｍｇ／ｋｇ、３．８ｍｇ／ｋｇ、３．９ｍｇ／ｋｇまたは約４．０ｍｇ／ｋｇ、あるいは、どのような範囲であれ、これらの示された用量のいずれか２つの間における範囲である場合がある。いくつかの実施形態において、用量は、．０８ｍｇ／ｋｇ〜約０．５ｍｇ／ｋｇ、約．０８ｍｇ／ｋｇ〜約．２４ｍｇ／ｋｇ、または、約．２４ｍｇ／ｋｇ〜約．５ｍｇ／ｋｇであろう。別の局面において、上記有効用量のＳＴＡＴ−３阻害剤が１つまたは複数の用量で与えられる。例えば、治療的は、例えば、それぞれの用量について．０８ｍｇ／ｋｇ、．２４ｍｇ／ｋｇまたは．５ｍｇ／ｋｇである場合がある。
【００８１】
許容され得る希釈剤、キャリア、賦形剤および安定剤は、用いられる投薬量および濃度においてレシピエントに対して非毒性であり、これらには、生理的食塩水および／または緩衝剤（例えば、リン酸塩、クエン酸塩および他の有機酸など）；酸化防止剤（アスコルビン酸およびメチオニンを含む）；保存剤（例えば、オクタデシルジメチルベンジルアンモニウム塩化物；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム；フェノール、ブチルアルコールまたはベンジルアルコール；アルキルパラベン、例えば、メチルパラベンまたはプロピルパラベンなど；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３−ペンタノール；およびｍ−クレゾールなど）；低分子量（約１０残基未満）のポリペプチド；タンパク質、例えば、血清アルブミン、ゼラチンまたは免疫グロブリンなど；親水性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドンなど；アミノ酸、例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニンまたはリシンなど；単糖、二糖および他の炭水化物（グルコース、マンノースまたはデキストリンを含む）；キレート化剤、例えば、ＥＤＴＡなど；糖、例えば、スクロース、マンニトール、トレハロースまたはソルビトールなど；塩形成対イオン、例えば、ナトリウムなど；金属複合体（例えば、Ｚｎ−タンパク質複合体など）；ならびに／あるいは非イオン性界面活性剤、例えば、ＴＷＥＥＮ（商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などが含まれる。活性な医薬成分はまた、例えば、コアセルベーション技術によって、または界面重合によって調製されるマイクロカプセルにおいて、例えば、それぞれ、ヒドロキシメチルセルロースマイクロカプセルまたはゼラチン−マイクロカプセルおよびポリ（メチルメタクリラート）マイクロカプセルにおいて、コロイド薬物送達システム（例えば、リポソーム、アルブミン微小球体、マイクロエマルション、ナノ粒子およびナノカプセル）において、あるいは、マクロエマルションにおいて封入される場合がある。そのような技術が、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１６版、Ｏｓｏｌ，Ａ．編（１９８０）に開示される。
【００８２】
式Ｉの化合物の持続放出調製物が調製される場合がある。持続放出調製物の好適な例には、式Ｉの化合物を含有する固体の疎水性ポリマーの半透過性マトリックスが含まれ、ただし、この場合、そのようなマトリックスは形状化品（例えば、フィルムまたはマイクロカプセル）の形態である。持続放出マトリックスの例には、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリラート）またはポリ（ビニルアルコール））、ポリラクチド（米国特許第３，７７３，９１９号）、Ｌ−グルタミン酸およびガンマ−エチル−Ｌ−グルタマートのコポリマー、非分解性のエチレン−酢酸ビニル、分解性の乳酸−グリコール酸コポリマー（例えば、ＬＵＰＲＯＮ  ＤＥＰＯＴ（商標）（乳酸−グリコール酸コポリマーおよび酢酸ロイプロリドから構成される注射可能な微小球体）など）およびポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸が含まれる。
【００８３】
配合物には、本明細書中に詳述される投与経路のために好適である配合物が含まれる。配合物は好都合には単位投薬形態物で提示される場合があり、製薬の技術分野では広く知られている方法のいずれかによって調製される場合がある。様々な技術および配合物が一般には、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、Ｐａ．）において見出される。そのような方法は、有効成分を、１つまたは複数の補助的成分を構成するキャリアと連携させる工程を含む。一般に、配合物は、有効成分を液体キャリアまたは微細に分割された固体キャリアまたは両者と均一かつ均質に連携させ、その後、必要ならば、製造物を形状化することによって調製される。
【００８４】
経口投与のために好適である式Ｉ〜式ＩＩＩの化合物の配合物が、所定量の式Ｉ〜式ＩＩＩの化合物をそれぞれが含有する個別の単位物（例えば、ピル、カプセル、サシェ（ｃａｃｈｅｔ）または錠剤など）として調製される場合がある。
【００８５】
圧縮錠剤が、易流動性形態（例えば、粉末または顆粒など）での有効成分を、必要な場合にはバインダー、滑剤、不活性な希釈剤、保存剤、表面活性剤または分散化剤と混合されて、好適な装置において圧縮することによって調製される。湿製錠剤が、不活性な液体希釈剤により湿らされる粉末化された有効成分の混合物を好適な装置において成形することによって製造される場合がある。これらの錠剤は、必要に応じて被覆または刻み目が施される場合があり、また、必要に応じて、有効成分のゆっくりした放出または制御された放出を提供するように配合される。
【００８６】
錠剤、トローチ錠、口内錠、水性懸濁物または油性懸濁物、分散性の粉末剤または顆粒剤、エマルション、硬質カプセルまたは軟質カプセル（例えば、ゼラチンカプセル）、シロップ剤あるいはエリキシル剤が、経口使用のために調製される場合がある。経口使用のために意図される式Ｉの化合物の配合物が、医薬組成物を製造するためにこの技術分野で知られているいずれかの方法に従って調製される場合があり、そのような組成物は、口当たりがいい調製物を提供するために、甘味剤、香味矯臭剤、着色剤および保存剤を含む１つまたは複数の薬剤を含有する場合がある。有効成分を錠剤の製造のために好適である非毒性の医薬的に許容され得る賦形剤との混合で含有する錠剤が受け入れられ得る。これらの賦形剤は、例えば、不活性な希釈剤、例えば、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウムまたはリン酸ナトリウムなど；造粒剤および崩壊剤、例えば、トウモロコシデンプンまたはアルギン酸など；結合剤、例えば、デンプン、ゼラチンまたはアラビアゴムなど；および滑剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはタルクなどである場合がある。錠剤は被覆されていなくてもよく、または、胃腸管における崩壊および吸着を遅らせ、それにより、持続した作用をより長期間にわたって提供するためのマイクロカプセル化を含めて様々な知られている技術によって被覆される場合がある。例えば、時間遅延材料、例えば、単独での、またはワックスを伴うグリセリルモノステアラートまたはグリセリルジステアラートなどが用いられる場合がある。
【００８７】
眼または他の外部組織（例えば、口および皮膚）を処置するために、配合物が、有効成分を、例えば、０．０７５％〜２０％（ｗ／ｗ）の量で含有する局所用の軟膏またはクリームとして適用される場合がある。軟膏で配合されるとき、有効成分が、パラフィン系軟膏基剤または水混和性軟膏基剤のどちらかとともに用いられる場合がある。代替において、有効成分が、水中油型のクリーム基剤とのクリームで配合される場合がある。
【００８８】
所望されるならば、クリーム基剤の水相は、多価アルコール、すなわち、２つまたはそれを超えるヒドロキシル基を有するアルコール、例えば、プロピレングリコール、ブタン１，３−ジオール、マンニトール、ソルビトール、グリセロールおよびポリエチレングリコール（ＰＥＧ４００を含む）ならびにそれらの混合物を含む場合がある。局所用配合物は望ましくは、皮膚または他の患部領域を介する有効成分の吸収または浸透を高める化合物を含む場合がある。そのような皮膚浸透強化剤の例には、ジメチルスルホキシドおよび関連アナログが含まれる。
【００８９】
本発明のエマルションの油相が、知られている成分から、知られている様式で構成される場合がある。油相が単に乳化剤を含む場合があるが、油相は望ましくは、少なくとも１つの乳化剤の、脂肪またはオイルとの混合物、あるいは、脂肪およびオイルの両方との混合物を含む場合がある。好ましくは、親水性の乳化剤が、安定剤として作用する親油性の乳化剤と一緒に含まれる。オイルおよび脂肪の両方を含むこともまた好ましい。まとめると、安定剤を伴う、または伴わない乳化剤は、いわゆる乳化性ワックスを構成し、オイルおよび脂肪を一緒に伴うワックスは、クリーム配合物の油性分散相を形成するいわゆる乳化性軟膏基剤を構成する。本発明の配合物における使用のために好適である乳化剤および乳化安定剤には、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）６０、Ｓｐａｎ（登録商標）８０、セトステアリルアルコール、ベンジルアルコール、ミリスチルアルコール、グリセリルモノステアラートおよびラウリル硫酸ナトリウムが含まれる。
【００９０】
式Ｉ〜式ＩＩＩの化合物の水性懸濁物は、活性な物質を水性懸濁物の製造のために好適な賦形剤との混合で含有する。そのような賦形剤には、懸濁化剤、例えば、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、クロスカルメロース、ポビドン、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴムおよびアラビアゴムなど、ならびに、分散化剤または湿潤化剤、例えば、天然に存在するホスファチド（例えば、レシチン）、アルキレンオキシドの脂肪酸との縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンステアラート）、エチレンオキシドの長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物（例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール）、エチレンオキシドの、脂肪酸およびヘキシトール無水物に由来する部分エステルとの縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレアート）などが含まれる。水性懸濁物はまた、１つまたは複数の保存剤（例えば、ｐ−パラヒドロキシ安息香酸エチルまたはｐ−パラヒドロキシ安息香酸ｎ−プロピルなど）、１つまたは複数の着色剤、１つまたは複数の香味矯臭剤、および、１つまたは複数の甘味剤（例えば、スクロースまたはサッカリンなど）を含有する場合がある。
【００９１】
式Ｉ〜式ＩＩＩの化合物の医薬組成物は、無菌の注射可能な調製物の形態（例えば、無菌の注射可能な水性懸濁物または油性懸濁物など）である場合がある。この懸濁物は、上記で述べられているそのような好適な分散化剤または湿潤化剤および懸濁化剤を使用して、知られている技術に従って配合される場合がある。無菌の注射可能な調製物はまた、非経口的に許容され得る非毒性の希釈剤または溶媒における無菌の注射可能な溶液または懸濁物である場合があり、例えば、凍結乾燥粉末として調製される１，３−ブタンジオールにおける溶液などである場合がある。用いられることがある許容され得るビヒクルおよび溶媒には、水、リンゲル液および等張性塩化ナトリウム溶液が含まれる。加えて、無菌の固定油が、溶媒または懸濁用媒体として従来から用いられる場合がある。この目的のために、無刺激性の固定油はどれも用いられる場合があり、これには、合成されたモノグリセリドまたはジグリセリドが含まれる。加えて、脂肪酸（例えば、オレイン酸など）が同様に、注射物の調製において使用される場合がある。
【００９２】
単一の投薬形態物を製造するためにキャリア材料と組み合わされることがある有効成分の量は、処置される宿主および特定の投与様式に依存して変化するであろう。例えば、ヒトへの経口投与のために意図される時間放出配合物は、およそ１ｍｇ〜１０００ｍｇの活性物質を、総組成物の約５％〜約９５％（重量：重量）にまで変化することがある適切かつ好都合な量のキャリア物質と配合されて含有する場合がある。医薬組成物は、投与のための容易に測定可能な量を提供するために調製することができる。例えば、静脈内注入のために意図される水溶液は、約３０ｍＬ／ｈｒの速度での好適な体積の注入が生じることが可能であるために１ミリリットルの溶液あたり約１０μｇ〜１０，０００μｇの有効成分を含有する場合がある。
【００９３】
非経口投与のために好適である配合物には、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤、および、配合物を意図されたレシピエントの血液と等張性にする溶質を含有する場合がある水性および非水性の無菌の注射溶液、ならびに、懸濁化剤および増粘剤を含む場合がある水性および非水性の無菌の懸濁物が含まれる。
【００９４】
眼に対する局所投与のために好適である配合物にはまた、有効成分が好適なキャリア（とりわけ、有効成分のための水性溶媒）に溶解または懸濁される点眼薬が含まれる。有効成分が好ましくは、約０．５％ｗ／ｗ〜２０％ｗ／ｗの濃度で、約０．５％ｗ／ｗ〜１０％ｗ／ｗの濃度で、または、約１．５％ｗ／ｗの濃度でそのような配合物に存在する。
【００９５】
口における局所投与のために好適である配合物には、有効成分を風味付けされた基剤において、通常の場合にはスクロースおよびアラビアゴムまたはトラガカントにおいて含む口内錠；有効成分を不活性な基剤において、例えば、ゼラチンおよびグリセリン、または、スクロースおよびアラビアゴムなどにおいて含む香錠；ならびに、有効成分を好適な液体キャリアにおいて含む口腔洗浄剤が含まれる。
【００９６】
直腸投与のための配合物が、例えば、カカオバターまたはサリチル酸系化合物を含む好適なキャリアを伴う坐薬として提示される場合がある。
【００９７】
肺内投与または鼻腔投与のために好適である配合物は、粒子サイズが、例えば、０．１ミクロン〜５００ミクロンの範囲にあり（０．５ミクロン、１ミクロン、３０ミクロン、３５ミクロンなどの増分ミクロンでの０．１ミクロンと５００ミクロンとの間における粒子サイズを含む）、配合物は、肺胞嚢に到達するように鼻腔経路を介した迅速な吸入によって、または、口を介した吸入によって投与される。好適な配合物には、有効成分の水性または油性の溶液が含まれる。エアロゾル投与または乾燥粉末投与のために好適である配合物が従来の方法に従って調製される場合があり、そのような配合物は他の治療剤とともに、例えば、下記で記載されるような障害の処置または予防において従来から使用される化合物などとともに送達される場合がある。
【００９８】
膣投与のために好適である配合物が、有効成分に加えて、適切であることがこの技術分野では知られているようなキャリアを含有する膣座薬、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォームまたは噴霧配合物として提示される場合がある。
【００９９】
配合物は、単位用量容器または複数回用量容器において、例えば、密封されたアンプルおよびバイアルにおいて包装される場合があり、使用直前に注射用の無菌の液体キャリア（例えば、水など）の添加のみを必要とする冷凍乾燥（凍結乾燥）された状態で貯蔵される場合がある。即時注射用の溶液および懸濁物が、前記で記載される種類の無菌の粉末剤、顆粒剤および錠剤から調製される。好ましい単位投薬配合物が、有効成分の本明細書中上記で示されるような一日用量または単位的な一日亜用量あるいはそれらの適切な分割を含有するものである。
【０１００】
本発明はさらに、上記で定義されるような少なくとも１つの有効成分をそのための獣医学用キャリアと一緒に含む獣医学用組成物を提供する。獣医学用キャリアは、組成物を投与するという目的のために有用である物質であり、他の場合には獣医学の技術分野において不活性または許容可能であり、有効成分との適合性を有する固体、液体または気体状の物質である場合がある。これらの獣医学用組成物は、非経口によって、経口によって、または、どのような経路であれ、他の所望される経路によって投与される場合がある。
【０１０１】
併用療法
式Ｉの化合物は、本明細書中に記載される疾患または障害を処置するために、例えば、過剰増殖性障害（例えば、がん）などを処置するために、単独または他の治療剤との組合せで用いられる場合がある。ある特定の実施形態において、式Ｉの化合物が、医薬用の併用配合物において、または、併用療法としての服用レジメンにおいて、抗過剰増殖特性を有する第２の化合物、または、過剰増殖性障害（例えば、がん）を処置するために有用である第２の化合物と組み合わされる。医薬用併用配合物または服用レジメンの第２の化合物は好ましくは、互いに悪影響を及ぼさないように式Ｉの化合物に対する相補的な活性を有する。そのような化合物が好適には、意図される目的のために効果的である量で組合せにおいて存在する。１つの実施形態において、本発明の組成物は、式Ｉの化合物を、例えば、本明細書中に記載されるような化学療法剤との組合せで含む。
【０１０２】
併用療法が同時レジメンまたは逐次レジメンとして施される場合がある。逐次的に施されるときには、組合せが２回またはそれを超える投与で施される場合がある。組み合わされた投与には、共投与、別個の配合物または単一の医薬配合物を使用すること、および、いずれかの順での連続投与が含まれ、ただし、この場合、好ましくは、両方（またはすべて）の活性な薬剤が同時にそれらの生物学的活性を及ぼす期間が存在する。
【０１０３】
上記の共投与された薬剤のいずれについてもその好適な投薬量は、現在使用される投薬量であり、また、新しく特定された薬剤および他の化学療法剤または化学療法処置の組み合わされた作用（相乗作用）のために少なくされる場合がある。
【０１０４】
併用療法は「相乗作用」をもたらし、かつ、「相乗的」であると判明することがある。すなわち、有効成分が一緒に使用されるときに達成される効果が、化合物を別々に使用することから生じる効果の和よりも大きい。有効成分が、（１）共配合されて、投与されるか、または、組み合わされた単位投薬配合物で同時に送達されるときに、あるいは、（２）別個の配合物として交互によって、または並行して送達されるときに、あるいは、（３）何らかの他のジメンによってであるときに、相乗効果が得られる場合がある。交互療法で送達されるときには、化合物が、例えば、別個のシリンジでの異なる注射によって、別個のピルまたはカプセルによって、あるいは、別個の注入によって逐次的に投与さまたは送達されるときに、相乗効果が得られる場合がある。一般に、交互療法の期間中において、それぞれの有効成分の効果的な投薬量が逐次的に、すなわち、連続して投与され、これに対して、併用療法では、２つまたはそれを超える有効成分の効果的な投薬量が一緒に投与される。
【０１０５】
抗がん治療の１つの特定の実施形態において、式Ｉの化合物あるいはその立体異性体、幾何異性体、互変異性体、溶媒和物、代謝産物または医薬的に許容される塩もしくはプロドラッグが、他の化学療法剤、ホルモン剤または抗体薬剤（例えば、本明細書中に記載されるものなど）と組み合わされる場合があり、同様にまた、外科治療および放射線療法と組み合わされる場合がある。したがって、本発明による併用療法は、少なくとも１つの式Ｉの化合物あるいはその立体異性体、幾何異性体、互変異性体、溶媒和物、代謝産物または医薬的に許容される塩もしくはプロドラッグを投与すること、および、少なくとも１つの他のがん処置方法を使用することを含む。式Ｉの化合物および他の医薬活性な化学療法剤の量ならびに投与の相対的時期が、所望される組み合わされた治療効果を達成するために選択されるであろう。
【０１０６】
式Ｉの化合物の代謝産物
本発明の範囲にはまた、本明細書中に記載される式Ｉのインビボ代謝生成物が含まれる。そのような生成物は、例えば、投与された化合物の縮合、酸化、還元、加水分解、アミド化、脱アミノ化、エステル化、脱エステル化および酵素的切断などから生じる場合がある。したがって、本発明は、本発明の化合物を、その代謝生成物をもたらすために十分な期間にわたって哺乳動物と接触させることを含むプロセスによって産生される化合物を含めて、式Ｉの化合物の代謝産物を包含する。
【０１０７】
代謝産物生成物が典型的には、本発明の化合物の放射能標識された（例えば、１４Ｃまたは３Ｈ）同位体を調製すること、それを検出可能な用量（例えば、約０．５ｍｇ／ｋｇを超える用量）で動物（例えば、ラット、マウス、モルモット、サルなど）に、またはヒトに投与すること、代謝が生じるための十分な時間（典型的には約３０秒〜３０時間）を許すこと、および、その転換生成物を尿、血液または他の生物学的サンプルから単離することによって特定される。これらの生成物は、標識されるので容易に単離される（他の生成物が、代謝産物中に残存するエピトープと結合することができる抗体の使用によって単離される）。代謝産物の構造が、従来の様式で、例えば、ＭＳ分析、ＬＣ／ＭＳ分析またはＮＭＲ分析によって決定される。一般には、代謝産物の分析が、当業者には広く知られている従来の薬物代謝研究と同じ方法で行われる。これらの代謝産物生成物は、他の場合においてインビボで見出されない限り、本発明の化合物の治療的服用のための診断アッセイにおいて有用である場合がある。
【０１０８】
製造品／キット
本発明の別の実施形態において、上記で記載される疾患および障害の処置のために有用である材料を含有する製造品または「キット」が提供される。キットは、式Ｉの化合物を含む容器を含む。キットはさらに、ラベルまたは添付文書を容器上に、または容器に付随して含む場合がある。用語「添付文書」は、治療用製造物の商用包装物において通例的に含まれる説明書で、そのような治療用製造物の使用に関する適応症、用法、投薬量、投与、禁忌および／または警告に関する情報を含有する説明書を示すために使用される。好適な容器には、例えば、ビン、バイアル、シリンジ、ブリスターパックなどが含まれる。容器は様々な材料（例えば、ガラスまたはプラスチックなど）から形成される場合がある。容器は、状態を処置するために効果的である式Ｉの化合物またはその配合物を収容する場合があり、また、無菌アクセスポートを有する場合がある（例えば、容器は、皮下注射針によって突き通すことができる栓を有する静脈内溶液バッグまたはバイアルである場合がある）。組成物における少なくとも１つの活性な薬剤が式Ｉの化合物である。ラベルまたは添付文書により、組成物が、選ばれた状態（例えば、がん）を処置するために使用されることが示される。加えて、ラベルまたは添付文書により、処置されるための患者が、障害（例えば、過剰増殖性障害など）を有する患者であることが示される場合がある。１つの実施形態において、ラベルまたは添付文書は、式Ｉの化合物を含む組成物が、異常な細胞成長から生じる障害を処置するために使用され得ることを示す。ラベルまたは添付文書はまた、組成物が、他の障害を処置するために使用され得ることを示す場合がある。代替において、または加えて、製造品はさらに、医薬的に許容され得る緩衝剤（例えば、注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸塩緩衝化生理的食塩水、リンゲル液およびデキストロース溶液など）を含む第２の容器を含む場合がある。製造品はさらに、他の緩衝剤、希釈剤、フィルター、ニードルおよびシリンジを含めて、商業的観点および使用者観点から望ましい他の材料を含む場合がある。
【０１０９】
キットはさらに、式Ｉの化合物、および、存在するならば、第２の医薬配合物の投与のための説明書を含む場合がある。例えば、キットが、式Ｉの化合物を含む第１の組成物と、第２の医薬配合物とを含むならば、キットはさらに、第１および第２の医薬組成物を、それを必要とする患者に同時に、逐次的に、または別々に投与するための説明書を含む場合がある。
【０１１０】
別の実施形態において、キットは、式Ｉ〜式ＩＩＩの化合物の固体の経口形態物（例えば、錠剤またはカプセルなど）を送達するために好適である。そのようなキットは好ましくは、多数の単位投薬物を含む。そのようなキットは、前記多数の投薬物がそれらの意図された使用の順序で置かれているカードを含むことができる。そのようなキットの一例が「ブリスターパック」である。ブリスターパックは包装業界では広く知られており、医薬用の単位投薬形態物を包装するために広範囲に使用される。所望されるならば、記憶補助物が、例えば、数字、文字または他の印の形態で、あるいは、カレンダー挿入物により提供されることが可能であり、これにより、投薬物が投与され得る処置スケジュールにおける日が指定される。
【０１１１】
１つの実施形態によれば、キットは、（ａ）式Ｉ〜式ＩＩＩの化合物が含有される第１の容器と、必要に応じて、（ｂ）第２の医学配合物が含有される第２の容器とを含む場合があり、ただし、この場合、第２の医学配合物は、抗過剰増殖活性を有する第２の化合物を含む。代替において、または加えて、キットはさらに、医薬的に許容され得る緩衝剤（例えば、注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸塩緩衝化生理的食塩水、リンゲル液およびデキストロース溶液など）を含む第３の容器を含む場合がある。キットはさらに、他の緩衝剤、希釈剤、フィルター、ニードルおよびシリンジを含めて、商業的観点および使用者観点から望ましい他の材料を含む場合がある。
【０１１２】
ある特定の他の実施形態において、キットが式Ｉの組成物および第２の治療剤を含む場合、キットは、別個の組成物を含有するための容器（例えば、分割されたビンまたは分割されたホイルポケットなど）を含む場合があり、しかしながら、別個の組成物はまた、シリンジ（分割されない容器）に含有される場合がある。典型的には、キットは、別個の成分を投与するための説明書を含む。キット形態は、別個の成分が好ましくは、異なる投薬形態物（例えば、経口および非経口）で投与され、また、異なる投薬間隔で投与されるときに、あるいは、組合せの個々の成分の力価決定が処方医によって望まれるときには特に好都合である。
【０１１３】
本発明は、本明細書中に提供されるＳｔａｔ３阻害剤を含有する１つまたは複数の投薬形態物を含有する包装材を含む製造品を包含し、ただし、この場合、包装材は、投薬形態物が、本明細書中に記載されるか、または本明細書中で参照される疾患、障害および／または状態のいずれかを有する対象、そのような疾患、障害および／または状態のいずれかを有することが疑われる対象、あるいは、そのような疾患、障害および／または状態のいずれかに対する素因を有する対象のために使用され得ることを示すラベルを有する。そのような投薬形態物には、例えば、非経口送達用および経口送達用の形態物および配合物のための錠剤、カプセル剤、溶液および懸濁物が含まれる。
【０１１４】
本発明のさらに別の局面が、（ａ）単位投薬形態物における少なくとも１つのＳｔａｔ３阻害剤あるいはその塩または結晶ならびに医薬的に許容され得るキャリア、賦形剤および／または添加物と、（ｂ）この単位形態物を含有するための手段とを含むキットである。本発明は、本明細書中に記載される疾患／状態を有効成分との組合せにより処置することに関連する局面を有するので、本発明はまた、別個の医薬組成物をキット形態において組み合わせることにも関連する。キットは、本明細書中に記載されるようなＳｔａｔ３阻害剤あるいはその塩または結晶を単独で、または、本明細書中に記載されるような第２の化合物と一緒でのどちらかで含む医薬組成物を含有する場合がある。
【０１１５】
本発明の別の具体的な実施形態において、一日用量を１つずつ、それらの意図された使用の順序で分配するために設計されるディスペンサーが提供される。好ましくは、ディスペンサーには、記憶補助物が備わり、その結果、レジメンに関する遵守をさらに容易にするようにされる。そのような記憶補助物の一例が、分配された一日用量の数を示す機械的カウンターである。そのような記憶補助物の別の一例が、液晶読み取り表示装置につながれる電池式のマイクロチップメモリ、あるいは、例えば、前回の一日用量が摂取された日時を読み出す、かつ／または、次回の用量が摂取されることなる日時を思い出させる音響式の注意喚起シグナルである。
【化３】
0006570512.tif 000006
【０１１６】
上記反応スキームは、本発明のＳｔａｔ３阻害剤（これには、Ｓｔａｔ３阻害剤塩が含まれる場合がある）を調製するための例示的な反応スキームの概要を示す。
【０１１７】
有機酸には、脂肪族カルボン酸および芳香族カルボン酸の両方が含まれ、例えば、当業者には知られている脂肪族モノカルボン酸、脂肪族ジカルボン酸、脂肪族トリカルボン酸、芳香族モノカルボン酸、芳香族ジカルボン酸、芳香族トリカルボン酸および他の有機酸が含まれる。
【０１１８】
脂肪族カルボン酸は飽和または不飽和である場合がある。好適な脂肪族カルボン酸には、２個〜約１０個の炭素原子を有する脂肪族カルボン酸が含まれる。
【０１１９】
脂肪族モノカルボン酸には、飽和脂肪族モノカルボン酸および不飽和脂肪族モノカルボン酸が含まれる。飽和モノカルボン酸の例には、酢酸、プロピオン（ｐｒｏｐｒｏｎｉｃ）酸、酪酸、吉草酸、カプロン酸、エナント酸、カプリル酸、ペラルゴン酸およびカプリン（ｃａｐｒｙｎｉｃ）酸が含まれる。不飽和脂肪族モノカルボン酸の例には、アクリル酸、プロピオル酸、メタクリル酸、クロトン酸およびイソクロトン酸が含まれる。
【０１２０】
脂肪族ジカルボン酸には、飽和脂肪族ジカルボン酸および不飽和脂肪族ジカルボン酸が含まれる。飽和脂肪族ジカルボン酸の例には、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸およびセバシン酸が含まれる。不飽和脂肪族ジカルボン酸の例には、マレイン酸、フマル酸、シトラコン酸、メサコン酸およびイタコン酸などが含まれる。
【０１２１】
ある特定の局面において、結晶性のＳｔａｔ３阻害剤およびその塩が記載される。これらには、結晶性のＳｔａｔ３阻害剤マレアート、Ｓｔａｔ３阻害剤フマラートおよびＳｔａｔ３阻害剤スクシナートが含まれる。種々のＳｔａｔ３阻害剤結晶物には、幾何学的構造、単位格子構造および構造的座標を含むものが含まれる。
【０１２２】
高純度のＳｔａｔ３阻害剤塩、それらの調製方法、および、Ｓｔａｔ３阻害剤塩を含む投薬形態物もまた記載される。
【０１２３】
医薬組成物は、例えば、経口投与または非経口投与のために好適である１つまたは複数の医薬的に許容され得る賦形剤、キャリアおよび／または添加物を含む場合がある。
【０１２４】
記載されたプロセスによって形成される生成物は実質的に純粋であり、すなわち、どのような他の化合物であっても実質的に含んでいない。好ましくは、生成物は１０％未満の不純物を含有し、より好ましくは約５％未満の不純物を含有し、一層より好ましくは約１％未満の不純物を含有する。そのように形成される生成物はまた、好ましくは実質的に純粋であり、すなわち、１０％未満の不純物を含有し、より好ましくは約５％未満の不純物を含有し、さらにより好ましくは約１％未満の不純物を含有する。本発明はまた、Ｓｔａｔ３阻害剤ジスクシナートの実質的に純粋な無水結晶形態を包含する。用語「実質的に純粋な」は、Ｓｔａｔ３阻害剤ジスクシナートの関連する無水結晶性形態のサンプルが、９０％を超える１つだけの多型形態を含有し、より好ましくは９５％を超える１つだけの多型形態を含有し、さらにより好ましくは９９％を超える１つだけの多型形態を含有することを意味する。  
【０１２５】
用量
いくつかの実施形態において、本明細書中の化合物ならびにそれらの医薬的に許容され得る塩および溶媒和物の治療有効量は、式Ｉの化合物の約１ｍｇ〜約１０００ｍｇである場合がある。用量は、式Ｉ〜式ＩＩＩの化合物の約１ｍｇ、２ｍｇ、２．５ｍｇ、４ｍｇ、５ｍｇ、７．５ｍｇ、１０ｍｇ、１２．５ｍｇ、１５ｍｇ、１７，５ｍｇ、２０ｍｇ、２５ｍｇ、３０ｍｇ、４０ｍｇ、５０ｍｇ、６０ｍｇ、７０ｍｇ、７５ｍｇ、８０ｍｇ、９０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇ、５５０ｍｇ、６００ｍｇ、６５０ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、８００ｍｇ、８５０ｍｇ、９００ｍｇ、９５０ｍｇ、１０００ｍｇ、または、どのような用量であれ、そのような用量のいずれか２つの間に及ぶ用量である場合がある。
【０１２６】
いくつかの実施形態において、典型的な用量が、化合物の１日あたり１回、２回または４回での約１ｍｇ〜約３０．０ｍｇである場合がある。いくつかの実施形態において、用量は、約０．０５ｍｇ／ｋｇ、０．０６ｍｇ／ｋｇ、０．０７ｍｇ／ｋｇ、０．０８ｍｇ／ｋｇ、０．０９ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．７ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、０．９ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、１．１ｍｇ／ｋｇ、１．２ｍｇ／ｋｇ、１．３ｍｇ／ｋｇ、１．４ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、１．６ｍｇ／ｋｇ、１．７ｍｇ／ｋｇ、１．８ｍｇ／ｋｇ、１．９ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、２．１ｍｇ／ｋｇ、２．２ｍｇ／ｋｇ、２．３ｍｇ／ｋｇ、２．４ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、２．６ｍｇ／ｋｇ、２．７ｍｇ／ｋｇ、２．９ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、３．１ｍｇ／ｋｇ、３．２ｍｇ／ｋｇ、３．３ｍｇ／ｋｇ、３．４ｍｇ／ｋｇ、３．５ｍｇ／ｋｇ、３．６ｍｇ／ｋｇ、３．７ｍｇ／ｋｇ、３．８ｍｇ／ｋｇ、３．９ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｋｇ、６．０ｍｇ／ｋｇ、７．０ｍｇ／ｋｇ、８．０ｍｇ／ｋｇ、９．０ｍｇ／ｋｇ、１０．０ｍｇ／ｋｇ、１１．０ｍｇ／ｋｇ、１２．０ｍｇ／ｋｇ、１３．０ｍｇ／ｋｇ、１４．０ｍｇ／ｋｇ、１５．０ｍｇ／ｋｇ、１６．０ｍｇ／ｋｇ、１７．０ｍｇ／ｋｇ、１８．０ｍｇ／ｋｇ、１９．０ｍｇ／ｋｇ、２０．０ｍｇ／ｋｇ、２２．５ｍｇ／ｋｇ、２５．０ｍｇ／ｋｇ、２７．５ｍｇ／ｋｇ、３０．０ｍｇ／ｋｇ、３２．５ｍｇ／ｋｇ、３５．０ｍｇ／ｋｇ、３７．５ｍｇ／ｋｇまたは約４０．０ｍｇ／ｋｇ、あるいは、どのような範囲であれ、これらの示された用量のいずれか２つの間における範囲である場合がある。いくつかの実施形態において、用量は、．０８ｍｇ／ｋｇ〜約０．５ｍｇ／ｋｇ、約．０８ｍｇ／ｋｇ〜約．２４ｍｇ／ｋｇ、または、約．２４ｍｇ／ｋｇ〜約．５ｍｇ／ｋｇであろう。別の局面において、上記有効用量のＳＴＡＴ−３阻害剤が１つまたは複数の用量で与えられる。例えば、治療的は、例えば、それぞれの用量について．０８ｍｇ／ｋｇ、．２４ｍｇ／ｋｇまたは．５ｍｇ／ｋｇである場合がある。
【０１２７】
本明細書中における化合物ならびにそれらの医薬的に許容され得る塩および溶媒和物の一日用量レベルが、（単回用量または分割用量で）１日あたり約１ｍｇ〜１日あたり約５ｇ、または１日あたり約５０ｇまでである場合がある。他の治療有効用量範囲には、例えば、１日あたり約５ｍｇ〜約２５ｍｇ、約５ｍｇ〜約１５ｍｇ、約４ｍｇ〜約３５ｍｇ、約３５ｍｇ〜約５０ｍｇ、約５０ｍｇ〜約１００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約２００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約５００ｍｇ、または、約５００ｍｇ〜約１０００ｍｇが含まれる。
【０１２８】
本明細書中に記載される化合物ならびにそれらの医薬的に許容され得る塩および溶媒和物はまた、本明細書中に記載される用量の１／１０、１／５０、１／１００、１／２００、１／３００、１／４００、１／５００およびそれどころか１／１０００の程度での用量において効果的であろう。
【０１２９】
本発明のいくつかの実施形態において、治療有効量は、約０．０１ｍｇ／Ｌ〜約２０ｍｇ／Ｌの、約０．０１ｍｇ／Ｌ〜約１５ｍｇ／Ｌの、約０．１ｍｇ／Ｌ〜１０ｍｇ／Ｌの、約０．５ｍｇ／Ｌ〜約９ｍｇ／Ｌの、約１ｍｇ／Ｌ〜約８ｍｇ／Ｌの、約２ｍｇ／Ｌ〜約７ｍｇ／Ｌの、または、約３ｍｇ／Ｌ〜約６ｍｇ／Ｌの、本明細書中に提供される化合物ならびにそれらの医薬的に許容され得る塩および溶媒和の血漿中濃度を引き起こすために効果的な量である。
【０１３０】
本明細書中に記載される用量が単回用量または多回用量で投与される場合がある。例えば、様々な用量が、１日あたり１回、２回、３回、４回またはより多くの回数で、あるいは、１週間あたり１回、２回、３回、４回、５回または６回で投与される場合がある。
【０１３１】
医師は、個々の患者のために最も好適であろう実際の投薬量を決定するであろうし、実際の投薬量は、特定の患者の年齢、体重および応答により変化するであろう。上記投薬量は平均的な場合の例示である；当然のことではあるが、より大きい投薬量範囲またはより少ない投薬量範囲が用いられて当然である個々の事例が存在する可能性があり、そのような投薬量範囲も本発明の範囲の範囲内である。
【０１３２】
一般に、ヒトにおいては、本発明の化合物のＩＰ投与が、好ましい経路である。典型的なヒトのためのがん処置における好ましい経口服用レジメンが、要求されるときには１日あたり約１ｍｇ〜約１０００ｍｇの化合物である。防止的用量はそれよりも少なく、典型的には１日あたり約０．３ｍｇ〜１００ｍｇ〜約１ｍｇ〜５０ｍｇである。
【０１３３】
獣医学的使用のために、本明細書中に提供される化合物、またはその獣医学的に許容され得る塩、またはいずれかの実体の獣医学的に許容され得る溶媒和物が、好適に許容され得る配合物として投与される。
【０１３４】
したがって、本発明は、Ｓｔａｔ３阻害剤を含む医薬組成物を提供する（Ｓｔａｔ３阻害剤（これには、Ｓｔａｔ３阻害剤塩が含まれる場合がある）を調製するための例示的な反応スキームの概要）。
【０１３５】
本明細書中に提供される化合物、またはその医薬的に許容され得る塩、またはいずれかの実体の医薬的に許容され得る溶媒和物を、医薬的に許容され得る希釈剤またはキャリアと一緒に。
【０１３６】
本発明はさらに、本明細書中に提供されるＳｔａｔ３阻害剤、またはその獣医学的に許容され得る塩、またはいずれかの実体の獣医学的に許容され得る溶媒和物を獣医学的に許容され得る希釈剤またはキャリアと一緒に含む獣医学用配合物を提供する。
【０１３７】
本発明はまた、ヒト医薬品として使用されるための本明細書中に提供されるＳｔａｔ３阻害剤、またはその医薬的に許容され得る塩、またはいずれかの実体の医薬的に許容され得る溶媒和物、または前記のいずれかを含有する医薬組成物を提供する。
【０１３８】
加えて、本発明は、動物医薬品として使用されるための本明細書中に提供されるＳｔａｔ３阻害剤化合物、またはその獣医学的に許容され得る塩、またはいずれかの実体の獣医学的に許容され得る溶媒和物、または前記のいずれかを含有する獣医学用組成物を提供する。
【０１３９】
さらに別の局面において、本発明は、Ｓｔａｔ３阻害剤が適応される医学的状態の治癒的処置または予防的処置のためのヒト医薬品を製造するための、本明細書中に提供されるＳｔａｔ３阻害剤、またはその医薬的に許容され得る塩、またはいずれかの実体の医薬的に許容され得る溶媒和物の使用を提供する。
【０１４０】
本発明はまた、Ｓｔａｔ３阻害剤が適応される医学的状態の治癒的処置または予防的処置のための動物医薬品を製造するための、本明細書中に提供されるＳｔａｔ３阻害剤化合物、またはその獣医学的に許容され得る塩、またはいずれかの実体の獣医学的に許容され得る溶媒和物の使用を提供する。
【０１４１】
その上、本発明は、過剰増殖性疾患（例えば、がんなど）（これに限定されない）を含めて様々な疾患、障害および状態を全体的または部分的に処置および／または防止するための方法のための、本明細書中に提供される化合物および組成物の使用を包含する。
【０１４２】
本発明はまた、医薬的に許容され得るキャリアと、治療有効量の本明細書中に提供されるようなＳｔａｔ３阻害剤とを含む医薬組成物（これには、錠剤およびカプセル剤ならびに他の経口送達用の形態物および配合物が含まれる）を包含する。
【０１４３】
本発明は、治療有効量の本明細書中に提供されるＳｔａｔ３阻害剤を医薬品の製造において使用するための方法を包含する。そのような医薬品には、例えば、非経口送達用および経口送達用の形態物および配合物のための錠剤、カプセル剤、溶液および懸濁物が含まれる。そのような医薬品には、本明細書中に開示されるような、対象を処置するための医薬品が含まれる。
【０１４４】
本発明の化合物、特にＳｔａｔ３阻害剤塩および水和物、例えば、開示された結晶形態でのＳｔａｔ３阻害剤塩および水和物もまた、別の抗がん剤とともに調製される場合がある。
【０１４５】
本明細書中に提供されるようなそのようなＳｔａｔ３阻害剤、塩および／または溶媒和物についての様々な用量が、例えば、対象においてがんを阻害するために、腫瘍進行を遅らせるために、および／または、対象における多剤耐性を低下させるために、治療有効量で投与されることが想定される。
【０１４６】
本発明は、本明細書中に提供されるＳｔａｔ３阻害剤を、グルタチオン輸送を対象の身体において低下させるために効果的な量で含む配合物を包含する。そのような配合物には、例えば、非経口送達用および経口送達用の形態物および配合物のための錠剤、カプセル剤、溶液および懸濁物が含まれる。
【０１４７】
Ｓｔａｔ３阻害剤の投与方法
本発明は、本発明のＳｔａｔ３阻害剤が、抗腫瘍活性を有する強力かつ選択的なＳｔａｔ３阻害剤であるという驚くべき、しかも予想外の発見に基づく。加えて、本発明の様々な局面が、本発明の強力かつ選択的なＳｔａｔ３阻害剤は、例えば、がん細胞の転移を抑制し、かつ／または防止するためにがんを処置することができるという驚くべき発見に基づく。
【０１４８】
本開示の目的のために、下記の定義は全体として、技術的用語を定義するために、また、保護が請求項において求められる事柄の構成の範囲を定義するために使用されるものとする。
【０１４９】
本開示は、１つまたは複数の有効用量のＳｔａｔ３阻害剤を、所望される治療効果を達成するために所定の継続期間にわたって対象に投与することによる処置方法を提供する。対象は好ましくは、ウシ、ブタ、ウマ、ニワトリ、ネコ、イヌなどの動物（これらに限定されない）を含めて、哺乳動物であり、最も好ましくはヒトである。
【０１５０】
様々な送達システムが知られており、これらを、Ｓｔａｔ３阻害剤を本発明の方法（例えば、リポソームにおけるカプセル化、マイクロ粒子またはマイクロカプセル）に従って投与するために使用することができる。導入方法には、局所的経路、皮下経路、皮内経路、筋肉内経路、腹腔内経路、静脈内経路、皮下経路、鼻腔内経路、硬膜外経路および経口経路が含まれるが、これらに限定されない。ある特定のがんを処置するために、局所的送達、皮下送達、皮内送達および全身的送達が特に有効である可能性がある。
【０１５１】
Ｓｔａｔ３阻害剤は、どのような経路であれ、好都合な経路によって投与することができ、例えば、注入またはボーラス注射によって、上皮内層または粘膜皮膚内層（例えば、口腔粘膜、直腸粘膜および腸粘膜など）を介した吸収によって投与することができ、また、他の生物学的に活性な薬剤と一緒に投与される場合がある。投与は全身的または局所的であることが可能である。加えて、Ｓｔａｔ３阻害剤を含む医薬組成物を、脳室内注射およびクモ膜下腔内注射を含めて、どのような経路であれ、好適な経路によって中枢神経系に導入することが望ましい場合がある；脳室内注射が、例えば、リザーバー（例えば、Ｏｍｍａｙａリザーバーなど）に取り付けられる脳室内カテーテルによって容易にされる場合がある。肺投与もまた、例えば、吸入器またはネブライザーの使用、および、エアロゾル化剤を用いた配合によって用いることができる。Ｓｔａｔ３阻害剤を含む医薬組成物を、処置を必要とする領域に対して局所的に投与することが望ましい場合がある；このことが、例えば、限定としてではなく、局所的適用によって、注射によって、カテーテルの手段によって、座薬の手段によって、または、インプラント（ただし、前記インプラントは、膜（例えば、ｓｉｌａｓｔｉｃ（商標）膜など）または繊維を含めて、多孔性材料、非多孔性材料またはゼラチン様材料のものである）の手段によって達成される場合がある。
【０１５２】
Ｓｔａｔ３阻害剤を投与するそれでもなお他の様式では、制御放出シスステムでの送達が伴う。ある特定の実施形態において、ポンプが使用される場合がある（Ｌａｎｇｅｒ、上掲；Ｓｅｆｔｏｎ、ＣＲＣ  Ｃｒｉｔ．Ｒｅｆ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｅｎｇ．、１４：２０１（１９８７）；Ｂｕｃｈｗａｌｄら、Ｓｕｒｇｅｒｙ、８８：５０７（１９８０）；Ｓａｕｄｅｋら、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．、３２１：５７４（１９８９）を参照のこと）。加えて、ポリマー状材料を使用することができ（Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ、ＬａｎｇｅｒおよびＷｉｓｅ（編）、ＣＲＣ  Ｐｒｅｓ、Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ、Ｆｌａ．（１９７４）；Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ，Ｄｒｕｇ  Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ、ＳｍｏｌｅｎおよびＢａｌｌ（編）、Ｗｉｌｅｙ、Ｎ．Ｙ．（１９８４）；ＲａｎｇｅｒおよびＰｅｐｐａｓ、Ｊ．Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｓｃｉ．Ｒｅｖ．Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２３：６１（１９８３）を参照のこと；また、Ｌｅｖｙら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２２８：１９０（１９８５）；Ｄｕｒｉｎｇら、Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．、２５：３５１（１９８９）；Ｈｏｗａｒｄら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．、７１：１０５（１９８９）も参照のこと）、または、制御放出システムを治療標的の近傍に、すなわち、脳に置くことができ、したがって、これは、全身用量のほんの一部を必要とするだけである（例えば、Ｇｏｏｄｓｏｎ、Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ、上掲、第２巻、ｐｐ．１１５−１３８（１９８４）を参照のこと）。他の制御放出システムが、Ｌａｎｇｅｒ（Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４９：１５２７−１５３３（１９９０））による総説において議論される。
【０１５３】
ＳＴＡＴ−３阻害剤を含む組成物の形態および投薬量
本明細書中で使用されるように、がん処置については、注射のために好適である凍結乾燥配合物および液体配合物が特に有効である。本発明の実施形態において使用されるためのＳｔａｔ３阻害剤の好適な投薬形態物は、本来的に非毒性かつ非治療的である生理学的／医薬的に許容され得るキャリアを包含する。そのようなキャリアの例には、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質（例えば、ヒト血清アルブミンなど）、緩衝剤物質（例えば、リン酸塩など）、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物脂肪酸の不完全グリセリド混合物、水、塩または電解質（例えば、硫酸プロタミン、リン酸水素二カリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩など）、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース系物質、Ｐ６Ｎ（Ｎｅｕｍｅｄｉｃｉｎｅｓ、Ｐａｓａｄｅｎａ、Ｃａ．）およびＰＥＧが含まれる。Ｓｔａｔ３阻害剤の局所用形態物またはゲル型形態物のためのキャリアには、多糖（例えば、ナトリウムカルボキシメチルセルロースまたはメチルセルロースなど）、ポリビニルピロリドン、ポリアクリラート、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ＰＥＧおよびウッドワックス（ｗｏｏｄ  ｗａｘ）アルコールが含まれる。すべての投与のために、従来のデポー形態物が好適に使用される。そのような形態物には、例えば、マイクロカプセル、ナノカプセル、リポソーム、プラスター、吸入形態物、鼻腔スプレー物、舌下錠剤および持続放出調製物が含まれる。
【０１５４】
持続放出調製物の好適な例には、ポリペプチドを含有する固体の疎水性ポリマーの半透過性マトリックスが含まれ、ただし、この場合、そのようなマトリックスは形状化品（例えば、フィルムまたはマイクロカプセル）の形態である。持続放出マトリックスの例には、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、Ｌａｎｇｅｒら（上掲）およびＬａｎｇｅｒ（上掲）によって記載されるようなポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリラート）、またはポリ（ビニルアルコール））、ポリラクチド（米国特許第３，７７３，９１９号）、Ｌ−グルタミン酸および．ガンマ．−エチル−Ｌ−グルタマートのコポリマー（Ｓｉｄｍａｎら、上掲）、非分解性のエチレン−酢酸ビニル（Ｌａｎｇｅｒら、上掲）、分解性の乳酸−グリコール酸コポリマー（例えば、Ｌｕｐｒｏｎ  Ｄｅｐｏｔ（商標）（乳酸−グリコール酸コポリマーおよび酢酸ロイプロリドから構成される注射可能な微小球体））およびポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸が含まれる。ポリマー（例えば、エチレン−酢酸ビニルおよび乳酸−グリコール酸など）は分子の放出を１００日超にわたって可能にするが、ある特定のヒドロゲルはタンパク質をより短い期間にわたって放出する。カプセル封入されたＳｔａｔ３阻害剤が長期間にわたって体内に留まるとき、カプセル封入されたＳｔａｔ３阻害剤は、３７℃で水分にさらされる結果として変性または凝集し、その結果、生物学的活性の喪失および免疫原性における起こり得る変化が生じる場合がある。様々な合理的戦略を、関与する機構に依存して、安定化のために考案することができる。例えば、凝集機構が、チオ−ジスルフィド交換を介した分子間のＳ−Ｓ結合形成であると認められるならば、安定化が、スルフヒドリル残基を修飾すること、酸性溶液から凍結乾燥すること、水分含有量を制御すること、適切な添加物を使用すること、および、特定のポリマーマトリックス組成を開発することによって達成される場合がある。
【０１５５】
数日間またはそれよりも長い期間にわたる投与の場合には、状態に依存して、処置が、疾患症状の所望される抑制が生じるまで持続される。しかしながら、他の投薬レジメンが有用である場合がある。この治療の進行が従来の技術およびアッセイによって容易にモニターされる。
【０１５６】
Ｓｔａｔ３阻害剤を含む治療配合物が、Ｓｔａｔ３阻害剤（これは、所望される程度の純度を有する）を凍結乾燥ケークまたは水溶液の形態で、必要に応じた生理学的に許容され得るキャリア、賦形剤または安定剤（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１６版、Ｏｓｏｌ，Ａ．編（１９８０））と混合することによって貯蔵のために調製される。許容され得るキャリア、賦形剤または安定剤は、用いられ投薬量および濃度においてレシピエントに対して非毒性であり、これらには、緩衝剤、例えば、リン酸塩、クエン酸塩および他の有機酸など；酸化防止剤（アスコルビン酸を含む）；低分子量（約１０残基未満）のポリペプチド；タンパク質、例えば、血清アルブミン、ゼラチンまたは免疫グロブリンなど；親水性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドンなど；アミノ酸、例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニンまたはリシンなど；単糖、二糖および他の炭水化物（グルコース、マンノースまたはデキストリンを含む）；キレート化剤、例えば、ＥＤＴＡなど；糖アルコール、例えば、マンニトールまたはソルビトールなど；塩形成対イオン、例えば、ナトリウムなど；ならびに／あるいは非イオン性界面活性剤、例えば、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）、Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ（商標）またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などが含まれる。
【０１５７】
用語「緩衝剤」は、本明細書中で使用される場合、医薬調製物のｐＨを安定化させる医薬的に許容され得る賦形剤を意味する。好適な緩衝剤がこの技術分野では広く知られており、また、文献において見出され得る。医薬的に許容され得る緩衝剤には、ヒスチジン緩衝剤、クエン酸緩衝剤、コハク酸緩衝剤、酢酸緩衝剤、リン酸緩衝剤、アルギニン緩衝剤またはそれらの混合物が含まれるが、これらに限定されない。上記緩衝剤は一般には、約１ｍＭ〜約１００ｍＭの量で、約５ｍＭ〜約５０ｍＭの量で、また、約１０ｍＭ〜２０ｍＭの量で使用される。緩衝化された溶液のｐＨは、少なくとも４．０、少なくとも４．５、少なくとも５．０、少なくとも５．５または少なくとも６．０であることが可能である。緩衝化された溶液のｐＨは、７．５未満、７．０未満または６．５未満であることが可能である。緩衝化された溶液のｐＨは、この技術分野において知られている酸または塩基（例えば、塩酸、酢酸、リン酸、硫酸およびクエン酸、水酸化ナトリウムおよび水酸化カリウム）を用いて約４．０〜約７．５、約５．５〜約７．５、約５．０〜約６．５、および、約５．５〜約６．５であることが可能である。ｐＨを記載するときに本明細書中で使用される場合、「約」はプラス０．２ｐＨ単位またはマイナス０．２ｐＨ単位を意味する。
【０１５８】
本明細書中で使用される場合、用語「界面活性剤」には、タンパク質配合物を撹拌および剪断のような機械的応力から保護するために使用される医薬的に許容され得る賦形剤が含まれ得る。医薬的に許容され得る界面活性剤の例には、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル（Ｔｗｅｅｎ）、ポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ｂｒｉｊ）、アルキルフェノールポリオキシエチレンエーテル（Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ）、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマー（Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ）およびドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）が含まれる。好適な界面活性剤には、ポリオキシエチレンソルビタン−脂肪酸エステルが含まれ、例えば、ポリソルベート２０（これはＴｗｅｅｎ２０（登録商標）の商標で販売される）およびポリソルベート８０（これはＴｗｅｅｎ８０（登録商標）の商標で販売される）などが含まれる。好適なポリエチレン−ポリプロピレンコポリマーが、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ６８またはＰｏｌｏｘａｍｅｒ１８８（登録商標）の名称で販売されるものである。好適なポリオキシエチレンアルキルエーテルが、商標Ｂｒｉｊ（登録商標）で販売されるものである。好適なアルキルフェノールポリオキシエチレンエーテルが、商標Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘで販売されるものである。ポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ２０（登録商標））およびポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ８０（登録商標））が使用されるとき、それらは一般には、約０．００１％〜約１％の濃度範囲で、約０．００５％〜約０．２％の濃度範囲で、また、約０．０１％〜約０．１％ｗ／ｖ（重量／体積）の濃度範囲で使用される。
【０１５９】
本明細書中で使用される場合、用語「安定剤」には、活性な医薬成分および／または配合物を、製造期間中、貯蔵期間中および適用期間中の化学的および／または物理的な分解から保護する医薬的に許容され得る賦形剤が含まれ得る。タンパク質医薬品の化学的分解経路および物理的分解経路が、Ｃｌｅｌａｎｄら、Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｔｈｅｒ．Ｄｒｕｇ  Ｃａｒｒｉｅｒ  Ｓｙｓｔ．、７０（４）：３０７−７７（１９９３）；Ｗａｎｇ、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．、７Ｓ５（２）：１２９−８８（１９９９）；Ｗａｎｇ、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．、２０３（１−２）：１−６０（２０００）；およびＣｈｉら、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．、２０（９）：１３２５−３６（２００３）によって総説される。安定剤には、下記で定義されるような糖、アミノ酸、ポリオール、シクロデキストリン（例えば、ヒドロキシプロピル−ベータ−シクロデキストリン、スルホブチルエチル−ベータ−シクロデキストリン、ベータ−シクロデキストリン）、ポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ３０００、ＰＥＧ３３５０、ＰＥＧ４０００、ＰＥＧ６０００）、アルブミン、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、塩（例えば、塩化ナトリウム、塩化マグネシウム、塩化カルシウム）、キレーター（例えば、ＥＤＴＡ）が含まれるが、これらに限定されない。本明細書中上記で述べられるように、安定剤は、約１０ｍＭ〜約５００ｍＭの量で、約１０ｍＭ〜約３００ｍＭの量で、または、約１００ｍＭ〜約３００ｍＭの量で配合物に存在させることができる。いくつかの実施形態において、例示的なＳＴＡＴ−３阻害剤を、当該ＳＴＡＴ−３阻害剤が安定である適切な医薬配合物に溶解することができる。
【０１６０】
Ｓｔａｔ３阻害剤はまた、例えば、コアセルベーション技術によって、または界面重合によって調製されるマイクロカプセル（例えば、それぞれ、ヒドロキシメチルセルロースマイクロカプセルまたはゼラチン−マイクロカプセルおよびポリ（メチルメタクリラート）マイクロカプセル）において、コロイド薬物送達システム（例えば、リポソーム、アルブミン微小球体、マイクロエマルション、ナノ粒子およびナノカプセル）において、あるいは、マクロエマルションにおいて封入される場合がある。そのような技術が、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（上掲）に開示される。
【０１６１】
インビボ投与のために使用されるためのＳｔａｔ３阻害剤は無菌でなければならない。このことが、無菌のろ過膜に通すろ過を凍結乾燥および再構成の前または後で行うことによって容易に達成される。Ｓｔａｔ３阻害剤は通常、凍結乾燥された形態で、または溶液で貯蔵されるであろう。治療用のＳｔａｔ３阻害剤組成物は一般には、無菌アクセスポートを有する容器に入れられ、例えば、皮下注射針によって突き通すことができる栓を有する静脈内溶液バッグまたはバイアルに入れられる。
【０１６２】
局所適用されるとき、Ｓｔａｔ３阻害剤は好適には、他の成分（例えば、キャリアおよび／または補助剤など）と組み合わされる。そのような他の成分の性質に関しては何ら制限はなく、ただし、それらはそれらの意図された投与のために生理学的に許容可能かつ有効でなければならず、また、組成物の有効成分の活性を損なう可能性がない。好適なビヒクルの例には、精製されたコラーゲンを伴って、または伴うことなく、軟膏、クリーム、ゲルまたは懸濁物が含まれる。組成物はまた、好ましくは液体形態または半液体形態で、経皮パッチ、絆創膏および包帯に含浸される場合がある。
【０１６３】
ゲル配合物を得るために、液体組成物に配合されるＳｔａｔ３阻害剤は、局所適用されるための適正な粘度のゲルを形成するための有効量の水溶性の多糖または合成ポリマー（例えば、ＰＥＧなど）と混合される場合がある。使用されることがある多糖には、例えば、セルロース誘導体、例えば、エーテル化されたセルロース誘導体（アルキルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロースおよびアルキルヒドロキシアルキルセルロース、例えば、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよびヒドロキシプロピルセルロースなどを含む）；デンプンおよび分画化デンプン；寒天；アルギン酸およびアルギン酸塩；アラビアゴム；プルラン；アガロース；カラギーナン；デキストラン；デキストリン；フルクタン；イヌリン；マンナン；キシラン；アラビナン；キトサン；グリコーゲン；グルカン；ならびに合成バイオポリマー；同様にまた、ガム、例えば、キサンタンガムなど；グアーガム；ローカストビーンガム；アラビアゴム；トラガカントガム；およびカラヤゴム；ならびにそれらの誘導体および混合物が含まれる。本明細書中における好ましいゲル化剤は、生物学的系に対して不活性であり、非毒性であり、調製が簡便であり、かつ、粘性が低すぎることがなく、または大きすぎることがなく、また、内部に保持されるＳｔａｔ３阻害剤分子を脱安定化することがないものである。
【０１６４】
好ましくは、多糖は、エーテル化されたセルロース誘導体であり、より好ましくは、十分に定義され、精製され、米国薬局方に収載されるセルロース誘導体であり、例えば、メチルセルロース、ならびに、ヒドロキシアルキルセルロース誘導体、例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロースおよびヒドロキシプロピルメチルセルロースなどである。本明細書中で最も好ましいものがメチルセルロースである。
【０１６５】
ゲル化のために有用であるポリエチレングリコールは典型的には、適正な粘度を得るための低分子量ＰＥＧと高分子量ＰＥＧとの混合物である。例えば、分子量が４００〜６００のＰＥＧと、分子量が１５００のＰＥＧとの混合物が、ペーストを得るための適正な比率で混合されるとき、この目的のために効果的であると思われる。
【０１６６】
用語「水溶性（の）」は、多糖およびＰＥＧに対して適用される場合、コロイド状の溶液および分散物を包含することが意味される。一般に、セルロース誘導体の溶解性がエーテル基の置換の程度によって決定され、本明細書中において有用である安定化誘導体は、誘導体を水溶性にするために、セルロース鎖におけるアンヒドログルコース単位あたり十分な量のそのようなエーテル基を有しなければならない。アンヒドログルコース単位あたり少なくとも０．３５個のエーテル基のエーテル置換の程度が一般には十分である。加えて、セルロース誘導体はアルカリ金属塩（例えば、Ｌｉ塩、Ｎａ塩、Ｋ塩またはＣｓ塩）の形態である場合がある。
【０１６７】
メチルセルロースがゲルにおいて用いられるならば、好ましくは、メチルセルロースはゲルの約２％〜５％を含み、より好ましくはゲルの約３％を含み、Ｓｔａｔ３阻害剤が、溶解性の限界に基づいて、１ｍｌのゲルあたり約５ｍｇ〜１００ｍｇの量で、または、（ＰＢＳまたはＨ２Ｏ（Ｈ２０）における）０．５％のＤＭＳＯにおいて０．５ｍＭまででの量で存在する。
【０１６８】
治療的に用いられるためのＳｔａｔ３阻害剤の有効量は、例えば、治療対象物、投与経路および患者の状態に依存するであろう。したがって、治療専門家が、最適な治療効果を得るために要求されるように投薬量を力価決定し、投与経路を変更することが必要となるであろう。典型的には、臨床医は、Ｓｔａｔ３阻害剤を、所望の効果を達成する投薬量に達するまで投与するであろう。ある特定の実施形態において、適切な服用が、罹患領域の表面積あたり投与されるＳｔａｔ３阻害剤の量に基づいて決定され得る。
【０１６９】
「処置施与時の近く」は、Ｓｔａｔ３阻害剤を、処置を施す前および／または処置を施した後のどちらかで、どのような期間であれ、妥当な期間において、例えば、約１ヶ月、約３週間、約２週間、約１週間、数日、約１２０時間、約９６時間、約７２時間、約４８時間、約２４時間、約２０時間、数時間、約１時間または数分などにおいて投与することを示す。処置施与時の近くはまた、処置およびＳｔａｔ３阻害剤の同時またはほぼ同時のどちらかでの投与、すなわち、数分以内〜１日以内での投与を示す場合がある。
【０１７０】
「化学療法」は、医療技術分野において現在知られている、または開発されることになる天然薬剤または合成薬剤を含むどのような治療法であっても示す。化学療法の例には、現在利用可能である数多くのがん薬物が含まれる。しかしながら、化学療法にはまた、どのような薬物であれ、疾患状態を処置するために意図される薬物（天然物または合成物）が含まれる。本発明のある特定の実施形態において、化学療法は、疾患状態を処置するために意図されるいくつかの最先端薬物を投与することを含む場合がある。例には、頭部の局所的に進行した扁平上皮癌腫の患者のための、ドセタキセル、シスプラチンおよび５−フルオロウラシルとの併用化学療法（Ｔｓｕｋｕｄａ，Ｍ．ら、Ｉｎｔ  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ、２００４、Ｊｕｎｅ；９（３）：１６１−６）、ならびに、不応性および再発した緩慢性リンパ腫におけるフルダラビンおよびベンダムスチンとの併用化学療法（Ｋｏｎｉｇｓｍａｎｎ  Ｍら、Ｌｅｕｋ  Ｌｙｍｐｈｏｍａ、２００４；４５（９）：１８２１−１８２７）が含まれる。
【０１７１】
本明細書中で使用される場合、治療的または偶発的なイオン化放射線の例示的な供給源には、例えば、アルファ源、ベータ源、ガンマ源、ｘ線源および中性子源が含まれ得る。
【０１７２】
「放射線療法」は、どのような形態の放射線でも、疾患状態を処置するために使用されるどのような治療法であっても示す。放射線療法のための放射線を生じさせる装置は、現在利用可能なそのような装置、または、将来において利用可能となるそのような装置のどちらでもある。
【０１７３】
「化学的防護または放射線防護」は、疾患状態を標的とするために意図される処置の関連した造血毒性からの保護、または、疾患状態を標的とするために意図される処置の関連した造血毒性における明らかな低下を示す。
【０１７４】
「固形腫瘍」は一般には、血液、骨髄またはリンパ系とは異なる身体組織のがんの存在を示す。
【実施例】
【０１７５】
本発明が次に、下記の様々な実施例を参照することにより記載される。これらの実施例は例示目的だけのために提供されており、本発明はこれらの実施例に限定されるのではなく、むしろ、本明細書中に提供される教示の結果として明白であるすべての変化を包含する。
【０１７６】
下記の実施例は、式１〜式ＩＩＩの強力かつ選択的なＳＴＡＴ−３阻害剤が、がんおよび他の増殖性疾患を処置するための効力を有することを明らかにする。本開示の様々な局面および実施形態が、ある特定のＳＴＡＴ−３阻害剤配合物が対象に投与されたとき、該ＳＴＡＴ−３阻害剤配合物は、驚くべきかつ予想外の有用性および効力を有するという予想外の発見から生じている。
【０１７７】
本発明の治療効果的なＳＴＡＴ−３阻害剤は、上記で概略される合成スキームに従って調製することができる。しかしながら、本発明はその方法に限定されない。組成物もまた、構造的に関連した化合物について文献に記載されるように調製される場合がある。
実施例１：ＳＨ５−０７およびＳＨ４−５４によるＳｔａｔ３のＤＮＡ結合活性の選択的阻害。
【０１７８】
経口により生物学的に利用可能なＳｔａｔ３阻害剤として使用されるためのＳＨ５−０７およびＳＨ４−５４のインビトロおよびインビボにおける特徴づけが、ヒト乳がんおよび非小細胞肺がんのマウス異種移植片の成長を阻害する能力を含めて、本明細書により記載される。
【０１７９】
核磁気共鳴（ＮＭＲ）構造分析は様々な薬剤のＳｔａｔ３との相互作用の生物物理学的研究を裏付けており、また、より注目すべきことに、ＳＨ４−５４がＳＨ２ドメインおよびＤＮＡ結合ドメインの両方の内部において３つの部位でＳｔａｔ３と相互作用することを明らかにしており、このことから、以前には不明であったＳｔａｔ３タンパク質における別の結合部位が示唆される。異常に活性なＳｔａｔ３を含んでいるモデルのヒト神経膠腫細胞株（Ｕ２５１ＭＧおよびＵ３７３ＭＧ）、乳がん細胞株（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１）、非小細胞肺がん細胞株（Ａ５４９）および前立腺がん細胞株（ＤＵ１４５）において、ＳＨ５−０７またはＳＨ−４−５４は、構成的なＳｔａｔ３リン酸化、ＤＮＡ結合活性または転写活性を時間依存的様式で１μＭ〜１０μＭの低い濃度において阻害した。
【０１８０】
対照的に、両方の薬剤は、Ｓｔａｔ１またはＳｔａｔ５のＤＮＡ結合活性に対する影響、あるいは、ｐＳｒｃ、ｐＪａｎｕｓキナーゼ（ＪＡＫ）２、ｐＳｈｃ、ｐＡｋｔおよびｐＥＲＫ１／２ＭＡＰＫ（細胞外シグナル制御キナーゼ／マイトジェン活性化プロテインキナーゼ）のレベルに対する影響、あるいは、Ｓｔａｔ３非依存性の転写事象に対する影響をほとんど有していなかったか、または全く有していなかった。さらに、ＳＨ５−０７またはＳＨ−４−５４は細胞の生存性および成長を選択的に阻害し、また、細胞周期の停止およびアポトーシスを誘導し、また、異常なＳｔａｔ３活性を含んでいるヒト乳がん細胞および神経膠腫細胞のインビトロでの遊走を阻害した。ＳＨ５−０７またはＳＨ４−５４によるヒト神経膠腫細胞または乳がん細胞の処理は、Ｂｃｌ−２、Ｂｃｌ−ｘＬ、サイクリンＤ１、ｃ−Ｍｙｃおよびサバイビンを含めて、既知のＳｔａｔ３調節される遺伝子の発現をダウンレギュレーションした。ＳＨ５−０７の経口胃管投与はヒト神経膠腫異種移植片の成長を阻害する。本明細書中に記載される研究により、ＳＨ５−０７およびＳＨ４−５４が、抗腫瘍細胞効果をインビトロにおいて誘導し、抗腫瘍効果をインビボにおいて誘導する強力かつ選択的なＳｔａｔ３阻害剤として特定される。
【０１８１】
ＳＨ５−０７およびＳＨ４−５４によるＳｔａｔ３のＤＮＡ結合活性の選択的阻害。
ｖ−Ｓｒｃ形質転換されたマウス線維芽細胞（ＮＩＨ３Ｔ３／ｖ−Ｓｒｃ）から調製される活性化Ｓｔａｔ３を含有する核抽出物を、増大する濃度のＳＨ５−０７またはＳＨ４−５４と室温で３０分間プレインキュベーションし、その後、Ｓｔａｔ３およびＳｔａｔ１に結合する放射能標識された高親和性ｓｉｓ誘導性エレメント（ｈＳＩＥ）プローブとインキュベーションし、電気泳動移動度シフトアッセイ（ＥＭＳＡ）分析に供した（これらはいつも行われる通りであった）。Ｓｉｄｄｉｑｕｅｅら、Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｐｒｏｂｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  Ｓｔａｔ３，ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−ｂａｓｅｄ  ｖｉｒｔｕａｌ  ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ，ｉｎｄｕｃｅｓ  ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  ａｃｔｉｖｉｔｙ、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ、１０４：７３９１−７３９６（２００７）；Ｓｉｄｄｉｑｕｅｅら、Ａｎ  Ｏｘａｚｏｌｅ−Ｂａｓｅｄ  Ｓｍａｌｌ−Ｍｏｌｅｃｕｌｅ  Ｓｔａｔ３  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  Ｍｏｄｕｌａｔｅｓ  Ｓｔａｔ３  Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  ａｎｄ  Ｉｎｄｕｃｅｓ  Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  Ｃｅｌｌ  Ｅｆｆｅｃｔｓ、ＡＣＳ  Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．、２：７８７−７９８（２００７）；Ｚｈａｎｇら、Ｏｒａｌｌｙ  ｂｉｏａｖａｉｌａｂｌｅ  ｓｍａｌｌ−ｍｏｌｅｃｕｌｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ｆａｃｔｏｒ  Ｓｔａｔ３  ｒｅｇｒｅｓｓｅｓ  ｈｕｍａｎ  ｂｒｅａｓｔ  ａｎｄ  ｌｕｎｇ  ｃａｎｃｅｒ  ｘｅｎｏｇｒａｆｔｓ、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ、１０９：９６２３−８（２０１２年６月１２日）を参照のこと。
【０１８２】
細胞および試薬。
正常なマウス線維芽細胞（ＮＩＨ３Ｔ３）、および、ｖ−Ｓｒｃによって形質転換された対応体（ＮＩＨ３Ｔ３／ｖ−Ｓｒｃ）、または、ヒト上皮増殖因子（ＥＧＦ）受容体を過剰発現する対応体（ＮＩＨ３Ｔ３／ｈＥＧＦＲ）、ならびに、ヒト乳がん細胞（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１）および膵臓がん細胞（Ｐａｎｃ−１）はすべてが以前に報告されている。Ｔｕｒｋｓｏｎら、Ｐｈｏｓｐｈｏｔｙｒｏｓｙｌ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｂｌｏｃｋ  Ｓｔａｔ３−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ＤＮＡ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ａｃｔｉｖｉｔｙ，ｇｅｎｅ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｅｌｌ  ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２７６：４５４４３−４５４５５（２００１）；Ｊｏｈｎｓｏｎら、Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  ｐｐ６０ｃ−ｓｒｃ  ｃａｎ  ｉｎｄｕｃｅ  ｆｏｃｕｓ  ｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈｏｕｔ  ｃｏｍｐｌｅｔｅ  ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＮＩＨ  ３Ｔ３  ｃｅｌｌｓ、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．、５：１０７３−１０８３（１９８５）；Ｙｕら、Ｅｎｈａｎｃｅｄ  ＤＮＡ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ａ  Ｓｔａｔ３−ｒｅｌａｔｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｉｎ  ｃｅｌｌｓ  ｔｒａｎｓｆｏｒｍｅｄ  ｂｙ  ｔｈｅ  Ｓｒｃ  ｏｎｃｏｐｒｏｔｅｉｎ、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２６９：８１−８３（１９９５）；Ｇａｒｃｉａら、Ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｔａｔ３  ｂｙ  ｔｈｅ  Ｓｒｃ  ａｎｄ  ＪＡＫ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｋｉｎａｓｅｓ  ｐａｒｔｉｃｉｐａｔｅｓ  ｉｎ  ｇｒｏｗｔｈ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｃｅｌｌｓ、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、２０：２４９９−２５１３（２００１）を参照のこと。Ｓｔａｔ３依存性のルシフェラーゼレポーターｐＬｕｃＴＫＳ３、および、ｃ−ｆｏｓプロモーターの血清応答エレメント（ＳＲＥ）によって駆動されるＳｔａｔ３非依存性の対応体（ｐＬｕｃＳＲＥ）は以前に報告されている（１５、３３）。細胞を、１０％の熱不活化ウシ胎児血清を含有するダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）において成長させた。Ｓｔａｔ３、ｐＹ７０５Ｓｔａｔ３、Ｓｒｃ、ｐＹ４１６Ｓｒｃ、Ｅｒｋ１／２およびｐＥｒｋ１／２に対する抗体が、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（Ｄａｎｖｅｒｓ、ＭＡ）から得られる。
【０１８３】
核抽出物の調製、ゲルシフトアッセイおよびデンシトメトリー分析。
核抽出物の調製および電気泳動移動度シフトアッセイ（ＥＭＳＡ）を以前に記載されたように行った。Ｙｕら、１９９５；Ｔｕｒｋｓｏｎら、Ｓｔａｔ３  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｓｒｃ  ｉｎｄｕｃｅｓ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｇｅｎｅ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｓ  ｒｅｑｕｉｒｅｄ  ｆｏｒ  ｃｅｌｌ  ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．、１８：２５４５−２５５２（１９９８）。使用される３２Ｐ標識されたオリゴヌクレオチドプローブは、Ｓｔａｔ１およびＳｔａｔ３と結合するｈＳＩＥ（ｃ−ｆｏｓ遺伝子（ｍ６７変化体）に由来する高親和性ｓｉｓ誘導性エレメント、５’−ＡＧＣＴＴＣＡＴＴＴＣＣＣＧＴＡＡＡＴＣＣＣＴＡ）と、Ｓｔａｔ１およびＳｔａｔ５が結合するためのＭＧＦｅ（ウシカゼイン遺伝子プロモーターに由来する乳腺因子エレメント、５’−ＡＧＡＴＴＴＣＴＡＧＧＡＡＴＴＣＡＡ）とであった。Ｗａｇｎｅｒら、Ｔｈｅ  ＳＩＦ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｅｌｅｍｅｎｔ  ｃｏｎｆｅｒｓ  ｓｉｓ／ＰＤＧＦ  ｉｎｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ  ｏｎｔｏ  ｔｈｅ  ｃ−ｆｏｓ  ｐｒｏｍｏｔｅｒ、ＥＭＢＯ  Ｊ．、９：４４７７−４４８４（１９９０）；Ｇｏｕｉｌｌｅｕｘら、Ｐｒｏｌａｃｔｉｎ  ａｎｄ  ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−２  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｉｎ  Ｔ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ  ｓｉｇｎａｌ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ａ  ＭＧＦ−ＳＴＡＴ５−ｌｉｋｅ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ｆａｃｔｏｒ、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ、１３６：５７００−５７０８（１９９５）。示される場合を除き、核抽出物を化合物と室温で３０分間プレインキュベーションし、その後、放射能標識されたプローブと３０℃で３０分間インキュベーションし、その後、ＥＭＳＡ分析に供した。ＤＮＡ結合活性に対応するバンドを、ＩｍａｇｅＱｕａｎｔを使用して化合物のそれぞれの濃度について走査し、定量化し、化合物の濃度に対してコントロール（ビヒクル）のパーセントとしてプロットし、このプロットからＩＣ５０値を得た（これらは以前に報告された通りであった）。Ｔｕｒｋｓｏｎら、Ａ  ｎｏｖｅｌ  ｐｌａｔｉｎｕｍ  ｃｏｍｐｏｕｎｄ  ｉｎｈｉｂｉｔｓ  ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅ  Ｓｔａｔ３  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ａｎｄ  ｉｎｄｕｃｅｓ  ｃｅｌｌ  ｃｙｃｌｅ  ａｒｒｅｓｔ  ａｎｄ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｏｆ  ｍａｌｉｇｎａｎｔ  ｃｅｌｌｓ、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ、２８０：３２９７９−３２９８８（２００５）。
【０１８４】
これらの研究の結果から、Ｓｔａｔ３のＤＮＡ結合活性がＳＨ５−０７およびＳＨ４−５４の両方によって用量依存的様式で阻害されたことが示され（図１Ｂの（ｉ）および（ｉｉ））、平均ＩＣ５０値がそれぞれ、３．９±０．６μＭおよび４．４±０．３μＭであり、このことは、ＢＰ−１−１０２の値（６．８μＭのＩＣ５０）で割って１．５倍〜２倍の改善を表している。Ｚｈａｎｇら（２０１２）。対照的に、両方の化合物は、ＥＧＦ刺激されたＮＩＨ３Ｔ３／ｈＥＧＦＲ（ヒト上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）を過剰発現するマウス線維芽細胞）から調製される活性化されたＳｔａｔ１およびＳｔａｔ５を含有する核抽出物と、乳腺因子エレメント（ＭＧＦｅ）プローブとを使用するＥＭＳＡ分析による類似するＤＮＡ結アッセイ（これは以前に行われた通りであった）において、Ｓｔａｔ１：Ｓｔａｔ１またはＳｔａｔ５：Ｓｔａｔ５のＤＮＡ結合活性に対する最小限の影響を示した（図１Ｃ）。Ｓｉｄｄｉｑｕｅｅら、Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｐｒｏｂｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  Ｓｔａｔ３，ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−ｂａｓｅｄ  ｖｉｒｔｕａｌ  ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ，ｉｎｄｕｃｅｓ  ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  ａｃｔｉｖｉｔｙ、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ、１０４：７３９１−７３９６（２００７）。したがって、これらの結果はさらに、本発明の化合物がＳＴＡＴ−３の強力かつ選択的な阻害剤であることを明らかにする。
【０１８５】
表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）分析もまた、Ｓｔａｔ３に対するＳＴＡＴ−３阻害剤の影響をさらに調べるために行った。結果は、ＳＨ４−５４がＳｔａｔ３に結合し、親和性（ＫＤ）が２．４であったことを示した（図４Ａ）。核磁気共鳴（ＮＭＲ）アプローチを、Ｓｔａｔ３に対するＳＨ４−５４の結合を確認するためにさらに使用した。ＤＭＳＯ中の２００μＭのＳＨ４−５４の１Ｄ  １Ｈ  ＮＭＲスペクトルは、有効濃度が沈殿のためにそれぞれの場合において２０μＭであることを示唆する（補足図Ｓ１）。イソロイシン（Ｉｌｅ）残基の１Ｈおよび１３Ｃの化学シフトに基づく、Ｓｔａｔ３の遊離状態およびＳＨ４−５４との結合状態の比較により、Ｉｌｅ６３４およびＩｌｅ５９７、ならびに、Ｉｌｅ３６８、Ｉｌｅ３８６、Ｉｌｅ４３９でのＳｔａｔ３のＳＨ２ドメインおよびＤＮＡ結合ドメインにおける変化の証拠が示される（図４Ｂ）。
実施例２：構成的Ｓｔａｔ３活性化の阻害。
【０１８６】
Ｓｔａｔ３が、ヒト乳がん細胞、神経膠腫細胞、前立腺がん細胞および膵臓がん細胞を含めて様々な悪性細胞において構成的に活性化される。Ｙｕｅ＆Ｔｕｒｋｓｏｎ、Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ＳＴＡＴ３  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ：ｈｏｗ  ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌ  ａｒｅ  ｗｅ？、Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇ  Ｄｒｕｇｓ、１８：４５−５６（２００９）；Ｔｕｒｋｓｏｎ、ＳＴＡＴ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ａｓ  ｎｏｖｅｌ  ｔａｒｇｅｔｓ  ｆｏｒ  ｃａｎｃｅｒ  ｄｒｕｇ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ  Ｔｈｅｒ  Ｔａｒｇｅｔｓ、８：４０９−４２２（２００４）。核抽出物調製物のＥＭＳＡ分析により、ヒト神経膠腫細胞（Ｕ２５１ＭＧおよびＵ３７３ＭＧ）、乳がん細胞（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１）、非小細胞肺がん細胞（Ａ５４９）、前立腺がん細胞（ＤＵ１４５）および膵臓がん細胞（Ｐａｎｃ−１）、または、ｖ−Ｓｒｃ形質転換されたマウス形質転換線維芽細胞（ＮＩＨ３Ｔ３／ｖ−Ｓｒｃ）のＳＨ５−０７またはＳＨ４−５４による処理はＳｔａｔ３のＤＮＡ結合活性を用量依存的様式（図２Ａ）および時間依存的様式（図２Ｂ）で阻害することが示される。構成的Ｓｔａｔ３活性の阻害の証拠が１μＭの濃度において見られ（図２Ａ）、また、１時間もの早い処理において見られる（図２Ｂ）。並行して、全細胞溶解物のＳＤＳ−ＰＡＧＥ／ウエスタンブロッティング分析では、Ｕ２５１ＭＧ細胞、Ｕ３７３ＭＧ細胞およびＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の類似する処理はｐＹ７０５Ｓｔａｔ３を時間依存的および用量依存的な様式で有意に阻害したことが示された（図２Ｃおよび図２Ｄ）。揺り戻しが、Ｓｔａｔ３のＤＮＡ結合活性（図２Ｂ）およびｐＹ７０５Ｓｔａｔ３（図２Ｄ）におけるいくつかの場合において６時間およびそれ以降で認められた。この観測結果の背後にある機構は現時点では不明であり、部分的には化合物の低下した細胞内レベルに起因するかもしれない。しかしながら、免疫ブロッティング研究では、９時間にまで達する持続した阻害が、５μＭのＳＨ５−０７により１回処理され、５時間で再投薬されたＵ２５１ＭＧ細胞において示された（図２Ｅ）。
【０１８７】
ルシフェラーゼレポーター研究を、Ｓｔａｔ３転写活性に対するＳＨ５−０７の影響をさらに評価するために行った。この場合、正常なマウスＮＩＨ３Ｔ３線維芽細胞を、Ｓｔａｔ３依存性ルシフェラーゼレポーター（ｐＬｕｃＴＫＳ３）と、ｖ−Ｓｒｃをコードするベクターとにより一過性に共トランスフェクションした。Ｔｕｒｋｓｏｎら、Ｎｏｖｅｌ  ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  ｓｉｇｎａｌ  ｔｒａｎｓｄｕｃｅｒ  ａｎｄ  ａｃｔｉｖａｔｏｒ  ｏｆ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ３  ｄｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ、Ｍｏｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ、３：２６１−２６９（２００４）；Ｔｕｒｋｓｏｎら、Ｐｈｏｓｐｈｏｔｙｒｏｓｙｌ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｂｌｏｃｋ  Ｓｔａｔ３−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ＤＮＡ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ａｃｔｉｖｉｔｙ，ｇｅｎｅ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｅｌｌ  ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２７６：４５４４３−４５４５５（２００１）；Ｔｕｒｋｓｏｎら、Ｓｔａｔ３  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｓｒｃ  ｉｎｄｕｃｅｓ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｇｅｎｅ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｓ  ｒｅｑｕｉｒｅｄ  ｆｏｒ  ｃｅｌｌ  ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．、１８：２５４５−２５５２（１９９８）；Ｔｕｒｋｓｏｎら（１９９９）、Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔ  ｆｏｒ  Ｒａｓ／Ｒａｃ１−Ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｐ３８  ａｎｄ  ｃ−Ｊｕｎ  Ｎ−Ｔｅｒｍｉｎａｌ  Ｋｉｎａｓｅ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｉｎ  Ｓｔａｔ３  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  Ｉｎｄｕｃｅｄ  ｂｙ  ｔｈｅ  Ｓｒｃ  Ｏｎｃｏｐｒｏｔｅｉｎ、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．、１９：７５１９−７５２８（１９９９）。Ｓｔａｔ３特異的ルシフェラーゼレポーターｐＬｕｃＴＫＳ３のｖ−Ｓｒｃによる誘導（図２Ｆ（ｉ）、レーン２対レーン１）が、３μＭまたは５μＭのＳＨ５−０７による処理によって有意（ｐ＜０．０１）に阻害された（図２Ｆ（ｉ）、レーン３およびレーン４対レーン２）。対照的に、Ｓｔａｔ３非依存性ルシフェラーゼレポーターｐＬｕｃＳＲＥおよびｖ−Ｓｒｃにより一過性に共トランスフェクションされた正常なＮＩＨ３Ｔ３線維芽細胞の類似した処理は、ｐＬｕｃＳＲＥの誘導に対する弱化影響が全くなかった（図２Ｆ（ｉｉ））。Ｔｕｒｋｓｏｎら、Ｎｏｖｅｌ  ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  ｓｉｇｎａｌ  ｔｒａｎｓｄｕｃｅｒ  ａｎｄ  ａｃｔｉｖａｔｏｒ  ｏｆ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ３  ｄｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ、Ｍｏｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ、３：２６１−２６９（２００４）；Ｔｕｒｋｓｏｎら、Ｓｔａｔ３  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｓｒｃ  ｉｎｄｕｃｅｓ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｇｅｎｅ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｓ  ｒｅｑｕｉｒｅｄ  ｆｏｒ  ｃｅｌｌ  ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．、１８：２５４５−２５５２（１９９８）；Ｔｕｒｋｓｏｎら、Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔ  ｆｏｒ  Ｒａｓ／Ｒａｃ１−Ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｐ３８  ａｎｄ  ｃ−Ｊｕ���  Ｎ−Ｔｅｒｍｉｎａｌ  Ｋｉｎａｓｅ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｉｎ  Ｓｔａｔ３  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  Ｉｎｄｕｃｅｄ  ｂｙ  ｔｈｅ  Ｓｒｃ  Ｏｎｃｏｐｒｏｔｅｉｎ、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．、１９：７５１９−７５２８（１９９９）；Ｔｕｒｋｓｏｎら、Ｐｈｏｓｐｈｏｔｙｒｏｓｙｌ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｂｌｏｃｋ  Ｓｔａｔ３−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ＤＮＡ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ａｃｔｉｖｉｔｙ，ｇｅｎｅ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｅｌｌ  ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２７６：４５４４３−４５４５５（２００１）。そのうえ、免疫ブロッティング研究では、Ｓｔａｔ３活性化を阻害する濃度におけるＳＨ５−０７によるＵ２５１ＭＧ細胞およびＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の処理は、ｐＹ１０６８ＥＧＦＲ、ｐＹ４１６Ｓｒｃ、ｐＪａｋ２、ｐＳｈｃ、ｐＥｒｋ１／２およびｐＳ４７３Ａｋｔまたはそれらの発現レベルに対する影響がほとんどなかったことが示された（図２Ｇ）。したがって、ＳＨ５−０７はＳｔａｔ３の構成的活性化を選択的に阻害する。
実施例３：増殖因子受容体によるＳＴＡＴ３会合の破壊。
【０１８８】
ＳＨ５−０７およびＳＨ４−５４がＳｔａｔ３リン酸化を阻害することを明らかにするために、ＥＧＦ受容体とＳｔａｔ３との間における相互作用を、共免疫沈殿（ｃｏ−ＩＰ）分析および免疫ブロッティング分析を行うことによって詳しく調べた。全細胞溶解物からの免疫沈殿およびＳＤＳ／ＰＡＧＥ・ウエスタンブロッティング分析を以前に記載されたように行った。Ｔｕｒｋｓｏｎら、Ｓｔａｔ３  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｓｒｃ  ｉｎｄｕｃｅｓ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｇｅｎｅ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｓ  ｒｅｑｕｉｒｅｄ  ｆｏｒ  ｃｅｌｌ  ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ、１８：２５４５−２５５２（１９９８）；Ｚｈａｎｇら、Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｔａｔ３  ｉｎ  ｖ−Ｓｒｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍｅｄ  Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ  Ｒｅｑｕｉｒｅｓ  Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｊａｋ１  Ｋｉｎａｓｅ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２７５：２４９３５−２４９４４（２０００）。使用される一次抗体が、抗Ｓｔａｔ３、抗ｐＹ７０５Ｓｔａｔ３、抗ｐＹ４１６Ｓｒｃ、抗Ｓｒｃ、抗ｐＥｒｋ１／２、抗Ｅｒｋ１／２、抗ＥＧＦＲ、抗ｐＥＧＦＲ、ｐＪＡＫ２抗、抗ｃ−Ｍｙｃ、抗Ｂｃｌ−ｘＬ、抗Ｂｃｌ−２、抗サバイビンおよび抗β−アクチン（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ、Ｄａｎｖｅｒｓ）、ならびに、抗ＶＥＧＦ（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ）であった。
【０１８９】
ＥＧＦ受容体を過剰発現する休止マウス線維芽細胞（ＮＩＨ３Ｔ３／ＥＧＦＲ）において、ＥＧＦによる刺激はＥＧＦ受容体とＳｔａｔ３との間におけるｃｏ−ＩＰを促進させ（図３Ａ、レーン３〜レーン７対レーン２、ｐＹ７０５Ｓｔａｔ３）、しかし、このｃｏ−ＩＰは、５分間〜２４時間にわたるＳＨ５−０７による細胞の前処理によって抑制された（図３Ａ、レーン７対レーン３）。ＳＨ５−０７の影響に対する能力をさらに特徴づけるために、ｐＹ７０５Ｓｔａｔ３のレベルを同じ条件のもとでプローブ探査した。これにより、ＥＧＦ受容体の誘導（図３Ｂ、レーン２対レーン１、ｐＹ１０６８ＥＧＦＲ）はＳｔａｔ３のリン酸化を引き起こしたことが示され（図３Ｂ、レーン２対レーン１、ｐＹ７０５Ｓｔａｔ３）、しかし、Ｓｔａｔ３のリン酸化は、細胞がＳＨ５−０７により２４時間にわたって前処理されたときには阻害された（図３Ｂ、レーン６対レーン２、ｐＹ７０５Ｓｔａｔ３）。まとめると、これらのデータは、ＳＨ５−０７がＳｔａｔ３のＥＧＦ受容体との相互作用を阻止し、それにより、Ｓｔａｔ３のＥＧＦ／ＥＧＦＲ誘導されたデノボでのチロシンリン酸化を阻害することを示した。
実施例４：ＳＨ５−０７およびＳＨ４−５４は、構成的に活性化されたＳｔａｔ３を含んでいる細胞の成長、生存性、生存および遊走を阻止する。
【０１９０】
異常に活性なＳｔａｔ３はまた、悪性細胞の増殖および生存ならびに悪性形質転換を促進させる。Ｙｕら、Ｔｈｅ  ＳＴＡＴＳ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ−Ｎｅｗ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｔａｒｇｅｔｓ  ｃｏｍｅ  ｏｆ  ａｇｅ、Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ、４：９７−１０５（２００４）；Ｙｕｅ＆Ｔｕｒｋｓｏｎ（２００９）；Ｚｈａｎｇら（２０１２）；Ｚｈａｎｇら、Ａ  ｎｏｖｅｌ  ｓｍａｌｌ−ｍｏｌｅｃｕｌｅ  ｄｉｓｒｕｐｔｓ  Ｓｔａｔ３  ＳＨ２  ｄｏｍａｉｎ−ｐｈｏｓｐｈｏｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｓｔａｔ３−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｔｕｍｏｒ  ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ、Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、７９：１３９８−４０９（２０１０）。悪性細胞をＳｔａｔ３阻害剤に対する感受性について生存性アッセイで試験した。
【０１９１】
細胞生存性アッセイおよび細胞増殖アッセイを下記のように行った。９６ウエルプレートで培養されている細胞を、ＳＨ５−０７またはＳＨ４−５４を用いて、または用いることなく７２時間処理し、ＣｙＱｕａｎｔ細胞増殖アッセイ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｃｏｒｐ／Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｃｏｒｐ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）に供した。コロニー生存アッセイを以前に報告されたように行った。Ｚｈａｎｇら（２０１２）。簡単に記載すると、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞またはＵ２５１ＭＧ細胞を６ｃｍのディッシュに単一細胞として播種し（５００細胞／ウエル）、翌日にＳＨ５−０７により４８時間にわたって１回処理し、大きいコロニーが視認されるまで成長させた。コロニーをクリスタルバイオレットにより４時間染色し、計数した。
【０１９２】
増大する濃度のＳＨ５−０７またはＳＨ４−５４による処理は生存性の喪失を誘導し、Ｕ２５１ＭＧおよびＵ８７ＭＧについてはＩＣ５０が１μＭ〜３μＭであり（図５Ａ）、神経膠腫のＵ３７３ＭＧ株およびＳＦ２９５株、乳がん細胞ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、前立腺がんＤＵ１４５細胞、ならびに、ｖ−Ｓｒｃ形質導入された線維芽細胞ＮＩＨ３Ｔ３／ｖ−ＳｒｃについてはＩＣ５０が３μＭ〜６．５μＭであり（図５Ａ）、膵臓がんＰａｎｃ−１細胞についてはＩＣ５０が１０．３μＭであった（図５Ａ）。対照的に、両方の薬剤は、異常なＳｔａｔ３活性を含んでいないＭＣＦ−７細胞、ＮＩＨ３Ｔ３細胞およびＳｔａｔ３ヌルＭＥＦ（Ｓｔａｔ３−／−ＭＥＦ）細胞の生存性を弱く阻害し、ＩＣ５０が８．８μＭ〜１０．８μＭであった（図５Ａ）。これらのデータは、異常に活性なＳｔａｔ３を含んでいる悪性細胞はＳＨ５−０７およびＳＨ４−５４に対する定まらない感受性を有したことを示した。注目すべきことに、相関が、腫瘍細胞のＳｔａｔ３活性の状態と、腫瘍細胞における構成的に活性なＳｔａｔ３の阻害と、ＳＨ５−０７またはＳＨ４−５４に対する悪性細胞の生存性の感受性との間において認められた（図２Ａ〜図２Ｄおよび図５）。このことと一致して、位相差顕微鏡法を用いたトリパンブルー排除による生細胞計数では、ＳＨ５−０７による処理は、異常に活性なＳｔａｔ３を含んでいるヒト神経膠腫細胞および乳がん細胞の成長を用量依存的様式で優先的に抑制したことが示された（図５Ｂ）。これらの研究は、以前に報告されたように行われる足場依存的細胞成長および足場非依存的細胞成長に対するＳＨ５−０７の影響を調べるために拡大された。Ｚｈａｎｇら、Ａ  ｎｏｖｅｌ  ｓｍａｌｌ−ｍｏｌｅｃｕｌｅ  ｄｉｓｒｕｐｔｓ  Ｓｔａｔ３  ＳＨ２  ｄｏｍａｉｎ−ｐｈｏｓｐｈｏｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｓｔａｔ３−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｔｕｍｏｒ  ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ、Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、７９：１３９８−４０９（２０１０）を参照のこと。培養された単一細胞を、非処理、または、薬剤による１回の処理に供し、大きいコロニーが視認されるまで成長させ、その後、コロニーを染色し、コロニー数を数えた。結果は、クローン原性アッセイにおけるＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞およびＵ２５１ＭＧ細胞のコロニー数の優先的な抑制を示し、この場合、その抑制は、ＭＣＦ−７に対する影響と比較して、用量依存的様式で生じた（図５Ｃ）。
実施例５：ＳＨ５−０７およびＳＨ４−５４は創傷治癒アッセイにおいてＳｔａｔ３依存的成長を阻止する。
【０１９３】
Ｓｔａｔ３は、重要な役割を細胞周期進行および細胞生存において果たしており、構成的に活性なＳｔａｔ３の阻害は細胞成長の停止およびアポトーシスを引き起こす。Ｚｈａｎｇら（２０１２）；Ｎｉｕら、Ｒｏｌｅｓ  ｏｆ  ａｃｔｉｖａｔｅｄ  Ｓｒｃ  ａｎｄ  Ｓｔａｔ３  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｉｎ  ｍｅｌａｎｏｍａ  ｔｕｍｏｒ  ｃｅｌｌ  ｇｒｏｗｔｈ、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、２１：７００１−７０１０（２００２）。フローサイトメトリーによる細胞周期プロフィル分析を、悪性細胞に対する阻害剤の影響をさらに調べるために行った。異常に活性なＳｔａｔ３を含んでいる悪性細胞（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１およびＵ２５１ＭＧ）の５μＭ〜８μＭでのＳＨ５−０７による処理は、Ｇ０期〜Ｇ１期における細胞の蓄積を２４時間または４８時間までに誘導し（図５Ｄ）、しかし、低下が、８μＭの処理に対する応答において、Ｇ１期、Ｓ期およびＧ２／Ｍ期にある細胞集団において認められた（図５Ｄ（ｉ））。さらには、アネキシンＶ染色およびフローサイトメトリー分析では、８μＭのＳＨ５−０７による処理が有意なアポトーシスをＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞およびＵ２５１ＭＧ細胞の両方において誘導したことが示された（図５Ｅ）。これらのデータは、細胞周期の阻止およびアポトーシスが、ＳＨ５−０７によって誘導される腫瘍細胞生存性の喪失の一因であったことを明らかにする。軟寒天コロニー形成アッセイでもまた、ＳＨ５−０７による処理が、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞およびＵ２５１ＭＧ細胞の足場依存性成長の用量依存的な抑制を誘導したことが示された（図５Ｆおよび補足図Ｓ２）。これらの知見は、ＳＨ５−０７が、異常なＳｔａｔ３を含んでいる悪性細胞の成長を優先的に抑制することを示している。
【０１９４】
ＳＨ５−０７およびＳＨ４−５４がＳｔａｔ３依存的な腫瘍進行プロセスを阻止し得るかをさらに詳しく調べるために、創傷治癒研究を本明細書中に記載されるように行った。創傷を、６ウエルプレートにおける細胞の単層培養物においてピペットの先端を使用して作製した。細胞を、増大する濃度のＳＨ５−０７を用いて、または用いることなく処理し、剥脱領域内に１２時間〜２４時間にわたって遊走させた。細胞の遊走を、Ａｘｉｏｖｅｒｔ２００倒立型蛍光顕微鏡（Ｚｅｉｓｓ、Ｇｏｔｔｉｎｇｅｎ、ドイツ）を使用して１０Ｘの倍率で可視化し、写真を、取り付けられたＣａｎｏｎ  Ｐｏｗｅｒｓｈｏｔ  Ａ６４０デジタルカメラ（Ｃａｎｏｎ  ＵＳＡ、Ｌａｋｅ  Ｓｕｃｃｅｓｓ、ＮＹ）を使用して撮影した。剥脱領域内に遊走した細胞を定量化した。
【０１９５】
ＳＨ５−０７またはＳＨ４−５４による２２時間の処理は、剥脱領域内に遊走するＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞、Ｕ２５１ＭＧ細胞、Ｕ８７ＭＧ細胞およびＤＵ１４５細胞の数を、細胞生存性に対する最小限の影響を伴って抑制した（図５Ｇ）。このことから、本発明の化合物はがん細胞の遊走および転移を阻害することができることが裏付けられる。
実施例６：ＳＨ５−０７は、ｃ−Ｍｙｃ、Ｂｃｌ−ｘＬ、Ｂｃｌ−２、サイクリンＤ１およびサバイビンの発現を阻害する。
【０１９６】
Ｓｔａｔ３は、悪性表現型の維持において非常に重要である既知の標的遺伝子の発現を促進させる。Ｙｕｅ＆Ｔｕｒｋｓｏｎ（２００９）；Ｔｕｒｋｓｏｎ、ＳＴＡＴ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ａｓ  ｎｏｖｅｌ  ｔａｒｇｅｔｓ  ｆｏｒ  ｃａｎｃｅｒ  ｄｒｕｇ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ  Ｔｈｅｒ  Ｔａｒｇｅｔｓ、８：４０９−４２２（２００４）。異常なＳｔａｔ３シグナル伝達に対するＳＨ５−０７の阻害影響を検証するために、既知のＳｔａｔ３下流側標的遺伝子の発現を明らかにした。構成的に活性なＳｔａｔ３を含んでいるヒト乳がん細胞株（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１）および神経膠腫細胞株（Ｕ２５１）において、さらなる研究（免疫ブロッティングを含む）および全細胞溶解物の分析により、ＳＨ５−０７による処理は既知のＳｔａｔ３調節される遺伝子（例えば、Ｂｃｌ−２、Ｂｃｌ−ｘＬ、サイクリンＤ１、ｃ−Ｍｙｃおよびサバイビン）の誘導を抑制し、しかし、この場合、それらの誘導が２４時間の処理に対する応答において有意に抑制されたことが示された（図６）。これらのデータは、ＳＨ５−０７が、Ｓｔａｔ３により調製される遺伝子の構成的な誘導を有意に抑え、それにより、異常に活性なＳｔａｔ３によって促進される成長および生存の調節不全を阻止することを明らかにする。
実施例７：効力および安全性の実証：ＳＨ５−０７はマウスにおけるヒト乳腫瘍異種移植片および神経膠腫異種移植片の成長を抑制する。
【０１９７】
ヒト乳房および神経膠腫の処理におけるＳＨ５−０７の効力で、マウス異種移植片モデルを使用した場合の効力を明らかにした。これらの研究では、ＳＨ５−０７を投与することは、経口胃管法により３ｍｇ／ｋｇの用量で毎日送達されたときには、異常なＳｔａｔ３活性を含んでいるヒト乳腫瘍（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１）のマウス皮下異種移植片の成長を阻害したことが示された（図７Ａ）。
【０１９８】
これらの研究を行うために、６週齢のメスの無胸腺ヌードマウスをＨａｒｌａｎから購入し、アメリカ実験動物管理認定協会（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ａｃｃｒｅｄｉｔａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ）によって承認される施設内動物施設で維持した。無胸腺ヌードマウスに、５×１０６個のヒト乳がんＵ２５１ＭＧ細胞を１００ＬのＰＢＳにおいて左わき腹に皮下注射した。直径が３ｍｍの腫瘍が確立されたとき、動物を、すべての群における平均腫瘍サイズがほぼ同一であるように群に分け、その後、ＳＨ５−０７を経口により３ｍｇ／ｋｇで２７日間にわたって毎日与え、動物を２日毎または３日毎にモニターし、腫瘍サイズをカリパスにより測定した。腫瘍体積を下記の式に従って計算した：Ｖ＝０．５２×ａ２×ｂ、式中、ａは表面的な最小直径であり、ｂは表面的な最大直径である。それぞれの処理群について、測定のそれぞれの組についての腫瘍体積をコントロール（非処理）群との比較で統計学的に分析した。統計学的分析−統計学的分析を、Ｐｒｉｓｍ  ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．（Ｌａ  Ｊｏｌｌａ、ＣＡ）を使用して平均値に対して行った。群間の違いの有意性を、ｐ＜０．０５＊、ｐ＜０．０１＊＊およびｐ＜０．００１＊＊＊でペアードｔ検定によって求めた。
【０１９９】
結果は、ＳＨ５−０７を投与することにより、異常なＳｔａｔ３活性を含んでいるヒト乳腫瘍（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１）移植片の成長が阻害されたことを明らかにした（図７Ａ）。体重における有意な変化または毒性の明白な兆候（例えば、食欲不振、低下した活動または嗜眠など）は研究期間中に何ら認められなかった。
実施例８：ＳＨ５−０７投与後の細胞内レベルおよび組織レベルの決定ならびに薬物動態学。
【０２００】
ＳＨ５−０７の細胞内レベルおよび組織レベルを１回の処理の後で調べた。培養中のＵ２５１細胞を５μＭのＳＨ５−０７により１回処理し、その後１時間、６時間および２４時間で、細胞抽出物を薬剤のレベルのためのＬＣ−ＭＳ分析のために調製した。結果は、ＳＨ５−０７の細胞内レベルが１時間において１，２３８±１８１ｎＭであり、この細胞内レベルが６時間において２７．６ｎＭに劇的に低下し、２４時間ではバックグラウンドレベルに低下したことを示した（表１）。このデータは、ＳＨＳ５−０７が、Ｓｔａｔ３活性を阻害するために十分なレベルで経口により利用可能であることを示す。
【０２０１】
そのうえ、ＳＨ５−０７のインビボ薬物動態学的分析を、血清サンプルおよび脳組織サンプルを非処理マウスから、または、ＳＨ５−０７の尾静脈注射の単回服用（３ｍｇ／ｋｇ）の１０分後および６０分後における処理マウスから集めることによって行った。結果（図７Ｂ）は、ＳＨ５−０７の血清中の平均レベルが服用後１０分において１３．５４ｎＭであり、これが６０分までに４．６７ｎＭに低下し、これに対して、脳組織における対応する平均レベルがそれぞれ、７．７６ｆｍｏｌｅ／ｍｇ組織および８．１９ｆｍｏｌｅ／ｍｇ組織であったことを示した。
実施例８：がんの処置。
【０２０２】
神経膠腫、乳がんまたは膵臓がんを有する対象が、０．０８ｍｇ／ｋｇ〜０．４ｍｇ／ｋｇの間における用量でのＳＨ５−０７の静脈内投与または経口投与によって処置され、さらなる用量が必要に応じて投与される。対象の状態がモニターされ、腫瘍の収縮、または、腫瘍成長の進行の鈍化が観測される。結果から、本発明の例示的なＳｔａｔ３阻害剤の驚くべき効力が示されており、また、確認される。
【０２０３】
本明細書中で参照または言及される特許、特許出願、刊行物、科学論文、書籍、ウエブサイト、ならびに他の文書および資料は、本発明が関連する技術分野における当業者の技能レベルを示すものである。それぞれのそのような参照された文書および資料が、それぞれが全体として参照によって個々に組み込まれていたかのような場合と同じ程度に、または示されていたかのような場合と同じ程度に、または全体として本明細書中に転載されていたかのような場合と同じ程度に参照によって本明細書により組み込まれる。加えて、本出願およびすべての優先権出願におけるすべての請求項が、当初請求項（これらに限定されない）を含めて、本発明の記載された説明に全体として本明細書により組み込まれ、また、本発明の記載された説明の一部を形成する。出願人らは、そのような特許、出願、刊行物、科学論文、ウエブサイト、電子的に入手可能な情報および他の参照された資料または文書に由来するすべての資料および情報を本明細書に物理的に組み込む権利を留保する。出願人らは、本文書（記載された説明のどのような部分であっても含む）および上記で参照される請求項（どのような当初請求項（これらに限定されない）であっても含む）のどのような部分にでも物理的に組み込む権利を留保する。
【０２０４】
様々な発明が本明細書中に幅広く、かつ、包括的に記載されている。包括的開示に含まれるより狭い種概念および下位概念集団のそれぞれもまた、これらの発明の一部を形成する。このことは、それぞれの発明の包括的記載であって、発明に対するどのような請求項であっても含めて、どのような主題であっても類概念から除く、または、どのような主題であっても類概念から除くことを場合により可能にする但し書きまたは負の限定を、削除されたものまたは選択項目がこのように本明細書中に具体的に示され、または特定されたか否かにかかわりなく本明細書により包含するそれぞれの発明の包括的記載を包含し、すべてのそのような変形が発明の当初記載された説明の一部を形成する。加えて、ある発明の特徴または局面がマーカッシュ群によって記載される場合、当該発明はそれによって、マーカッシュ群のありとあらゆる、また、どのようなものであれ、個々の要素または要素の部分群によって記載されることが理解されなければならない。
【０２０５】
発明が、様々なＧＧＣＩおよびＧＧＣＩ塩の合成に関して記載されているにもかかわらず、開示において記載される経路、工程および中間体はＣＧＩの合成に対して適用可能であることが認識されなければならない。
【０２０６】
本明細書中に例示的に記載され、また主張される発明は、どのような要素および限定であれ、必須であるとして本明細書中に具体的に開示されない、または本明細書中に記載されない要素、限定の非存在下で好適に実施することができる。したがって、例えば、用語“ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ”（含む）、用語“ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ”（含む、包含する）、用語“ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ”（含有する）および用語“ｆｏｒ  ｅｘａｍｐｌｅ”（例えば）などは、拡大可能に、かつ、非限定的に読み取られなければならない。用語“ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ”は、“ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ  ｂｕｔ  ｎｏｔ  ｌｉｍｉｔｅｄ  ｔｏ”（含むが、［これらに］限定されない）を意味する。表現“ｆｏｒ  ｅｘａｍｐｌｅ”は、この表現の後に続く項目に限定されず、または、この表現の後に続く項目によって限定されない。「この技術分野において知られている」ことに対するすべての参照は、現在知られているか、または後で発見されるかにかかわらず、すべてのそのようなことならびに均等物および代替物を包含する。
【０２０７】
本発明者らの発明を主張することにおいて、本発明者らは、いずれかの移行句をいずれかの他の移行句で置き換える権利を留保しており、発明は、そのような置き換えられた移行表現を包含すること、また、当該発明の当初記載された説明の一部を形成することが理解されなければならない。したがって、例えば、用語“ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ”は、移行句“ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ”（から本質的になる）または移行句“ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ”（からなる）のどちらかにより置き換えられる場合がある。
【０２０８】
本明細書中に例示的に記載される方法およびプロセスは、異なる工程順序で好適に実施される場合がある。本明細書中に例示的に記載される方法およびプロセスは、本明細書中または請求項において示される工程順序に必ずしも限定されない。
【０２０９】
いかなる状況のもとであっても、本特許は、本明細書中に具体的に開示される具体的な例または実施形態または方法に限定されるように解釈され得ない。いかなる状況のもとであっても、本特許は、どのような表明であれ、特許商標庁のいかなる審査官あるいはいかなる他の公務員または職員によってであってもなされる表明によって限定されるように解釈され得ない。ただし、そのような表明が、本特許に至った出願に具体的に関連する応答書において出願人らによってその発行の前に、具体的に、また、限定または留保を伴うことなく、明示的に受け入れられた場合には、この限りではない。
【０２１０】
本明細書中で用いられる用語および表現は、限定の用語としてではなく、記述の用語として使用されており、そのような用語および表現の使用またはそれらのどのような一部分の使用においても、現在知られているか、または後で開発されるどのような均等物であっても除外することは、そのような均等物が本明細書中に説明され、または示され、または記載されるか否かにかかわりなく、あるいは、そのような均等物が予測可能であると見なされるか否かにかかわりなく、全く意図されない。しかし、様々な改変が、特許請求される発明の範囲の範囲内であることが、そのような請求項が、いかなる理由のためであれ変更または補正を伴って、または伴うことなく発行されたか否かにかかわりなく認識される。したがって、本発明が、好ましい実施形態および場合に応じた特徴によって具体的に開示されてはいるが、開示されているそれらまたは本明細書中において具体化される発明の様々な改変および変化が当業者によって用いられ得ること、また、そのような改変および変化は、本明細書中において開示および特許請求される発明の範囲の範囲内であると見なされることが理解されなければならない。
【０２１１】
本明細書中に記載される具体的な方法および組成物は、好ましい実施形態を代表するものであり、本発明の範囲を例示しており、本発明の範囲に対する限定として意図されない。他の目的、局面および実施形態が、本明細書を検討したとき、当業者には思いつくであろうし、これらは、請求項の範囲によって定義されるような発明の精神の範囲に包含される。様々な例が与えられる場合、その記載は、そのような例のみに限定されるのではなく、そのような例のみを包含するように解釈されなければならない。様々な置換および改変が、発明の範囲および精神から、また、発明の記載（本明細書中に例示的に示される置換および改変を含む）から逸脱することなく、本明細書中に開示される発明に対してなされ得ることが、当業者には容易に明らかであろうし、様々な改変および均等物が、本発明の概念を実行するために、その範囲から逸脱することなく使用され得ることが明らかである。当業者は、様々な変更が、発明の精神および範囲から逸脱することなく形態および細部において行われ得ることを認識するであろう。記載された実施形態はすべての点で、例示的であり、限定的でないと見なされるものとする。したがって、例えば、さらなる実施形態が発明の範囲の範囲内であり、かつ、下記の請求項の範囲の範囲内である。
【０２１２】
本発明が、具体的な実施形態を参照して開示されているが、本発明の他の実施形態および変化が、本発明の真の精神および範囲から逸脱することなく当業者によって考案され得ることが明らかである。添付された請求項はすべてのそのような実施形態および均等的変化を包含する。
【図１Ａ】
0006570512.tif 000010
【図１Ｂ】
0006570512.tif 000011
【図１Ｃ】
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【図２−ＡＢ】
0006570512.tif 000013
【図２−ＣＤ】
0006570512.tif 000014
【図２−ＥＦ】
0006570512.tif 000015
【図２−Ｇ】
0006570512.tif 000016
【図２−Ｈ】
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【図２−Ｉ】
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【図２−Ｊ】
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【図３】
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【図４】
0006570512.tif 000021
【図５−Ａ】
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【図５−ＢＣ】
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【図５−Ｄ】
0006570512.tif 000024
【図５−ＥＦ】
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【図５−Ｇ】
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【図５−Ｈ】
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【図５−Ｉ】
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【図６−Ａ】
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【図６−Ｂ】
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【図７−Ａ】
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【図７−Ｂ】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【配列表】
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