(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
毛髪の損傷を評価する方法であって、毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量を毛髪の損傷の指標として用い、前記毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量に基づき、当該毛髪の損傷を評価することを特徴とする毛髪の損傷の評価方法。
【請求項２】
毛髪の損傷を評価する方法であって、質量顕微鏡、液体クロマトグラフ法、ガスクロマトグラフ法、液体クロマトグラフ−質量分析法およびガスクロマトグラフ−質量分析法からなる群より選ばれた少なくとも１種の方法によって毛髪における炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度を測定し、得られたシグナルの強度を毛髪の損傷の指標として用い、前記シグナルの強度に基づき、当該毛髪の損傷を評価することを特徴とする毛髪の損傷の評価方法。
【請求項３】
被験試料が毛髪に与える損傷を評価する被験試料の評価方法であって、毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量を毛髪の損傷の指標として用い、被験試料との接触前後の毛髪における前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの含有量の変化に基づき、前記被験試料が毛髪に与える損傷を評価することを特徴とする被験試料の評価方法。
【請求項４】
被験試料が毛髪に与える損傷を評価する被験試料の評価方法であって、質量顕微鏡、液体クロマトグラフ法、ガスクロマトグラフ法、液体クロマトグラフ−質量分析法およびガスクロマトグラフ−質量分析法からなる群より選ばれた少なくとも１種の方法によって被験試料との接触前後の毛髪における炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度を測定し、得られたシグナルの強度を毛髪の損傷の指標として用い、被験試料との接触前後の毛髪における前記シグナルの強度の変化に基づき、前記被験試料が毛髪に与える損傷を評価することを特徴とする被験試料の評価方法。
【請求項５】
前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドが、ベヘニン酸アミド、パルミチン酸アミドおよびステアリン酸アミドからなる群より選ばれた少なくとも１種である請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、毛髪の損傷の評価方法に関する。さらに詳しくは、本発明は、毛髪化粧料の開発、毛髪化粧料の評価などに有用な毛髪の損傷の評価方法および被験試料の評価方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、毛髪へのパーマ、ブリーチなどの化学施術が一般化したことに伴い、毛髪の損傷に対する意識が高まっている。
【０００３】
毛髪の損傷の評価方法として、例えば、毛髪と水との接触角を指標として評価する方法が知られている（例えば、特許文献１参照）。
【０００４】
しかし、前記毛髪の損傷の評価方法には、前記毛髪と水との接触角の測定に際し、多くの毛髪を必要とするという欠点がある。また、前記毛髪と水との接触角は、測定時の測定環境条件による影響を受けやすく、しかも測定者の測定技術の熟練度による測定結果のバラつきが生じやすいことから、前記毛髪の損傷の評価方法には、再現性が低いという欠点がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００４−５９５５９号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、前記従来技術に鑑みてなされたものであり、少量の毛髪を用いた場合であっても、高い再現性で毛髪の損傷を評価することができる毛髪の損傷の評価方法および少量の毛髪を用いた場合であっても、高い再現性で被験試料が毛髪に与える損傷を評価することができる被験試料の評価方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
すなわち、本発明の要旨は、
（１）毛髪の損傷を評価する方法であって、毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量を毛髪の損傷の指標として用い、前記毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量に基づき、当該毛髪の損傷を評価することを特徴とする毛髪の損傷の評価方法、
（２）毛髪の損傷を評価する方法であって、質量顕微鏡法、液体クロマトグラフ法、ガスクロマトグラフ法、液体クロマトグラフ−質量分析法およびガスクロマトグラフ−質量分析法からなる群より選ばれた少なくとも１種の方法によって毛髪における炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度を測定し、得られたシグナルの強度を毛髪の損傷の指標として用い、前記シグナルの強度に基づき、当該毛髪の損傷を評価することを特徴とする毛髪の損傷の評価方法、
（３）被験試料が毛髪に与える損傷を評価する被験試料の評価方法であって、毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量を毛髪の損傷の指標として用い、被験試料との接触前後の毛髪における前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの含有量の変化に基づき、前記被験試料が毛髪に与える損傷を評価することを特徴とする被験試料の評価方法、
（４）被験試料が毛髪に与える損傷を評価する被験試料の評価方法であって、質量顕微鏡法、液体クロマトグラフ法、ガスクロマトグラフ法、液体クロマトグラフ−質量分析法およびガスクロマトグラフ−質量分析法からなる群より選ばれた少なくとも１種の方法によって被験試料との接触前後の毛髪における炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度を測定し、得られたシグナルの強度を毛髪の損傷の指標として用い、被験試料との接触前後の毛髪における前記シグナルの強度の変化に基づき、前記被験試料が毛髪に与える損傷を評価することを特徴とする被験試料の評価方法、ならびに
（５）前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドが、ベヘニン酸アミド、パルミチン酸アミドおよびステアリン酸アミドからなる群より選ばれた少なくとも１種である前記（１）〜（４）のいずれかに記載の方法
に関する。
【発明の効果】
【０００８】
本発明の毛髪の損傷の評価方法によれば、少量の毛髪を用いた場合であっても、高い再現性で毛髪の損傷を評価することができるという優れた効果が奏される。また、本発明の被験試料の評価方法によれば、少量の毛髪を用いた場合であっても、高い再現性で被験試料が毛髪に与える損傷を評価することができるという優れた効果が奏される。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】（ａ）は調製例１で得られた健常毛のマススペクトルを示す図、（ｂ）は調製例４で得られた損傷毛３のマススペクトルを示す図である。
【図２】（ａ）は試験例２で得られた測定試料におけるｍ／ｚ＝３４０．４０のマスクロマトグラムをを示す図、（ｂ）は試験例２で得られた測定試料における親イオンｍ／ｚ＝３４０．４０の娘イオンｍ／ｚ＝８７．８のマスクロマトグラムを示す図、（ｃ）は試験例２で得られたベヘニン酸アミドの標準品を含有する対照試料におけるｍ／ｚ＝３４０．４０のマスクロマトグラムを示す図、（ｄ）は試験例２で得られたベヘニン酸アミドの標準品を含有する対照試料における親イオンｍ／ｚ＝３４０．４０の娘イオンｍ／ｚ＝８７．８のマスクロマトグラムを示す図である。
【図３】実施例１において、健常毛および損傷毛１〜４のそれぞれにおけるｍ／ｚ＝３４０．３９のピークに対応する化合物の分布を調べた結果を示す図面代用写真である。
【図４】実施例２において、被験対象の毛髪におけるベヘニン酸アミドの含有量の残存度を調べた結果を示すグラフである。
【図５】実施例２において、毛髪の種類と接触角との関係を調べた結果を示すグラフである。
【図６】実施例３において、毛髪におけるベヘニン酸アミドの含有量を調べた結果を示すグラフである。
【図７】実施例３において、毛髪におけるパルミチン酸アミドの含有量を調べた結果を示すグラフである。
【図８】実施例３において、毛髪におけるステアリン酸アミドの含有量を調べた結果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
１．毛髪の損傷の評価方法
本発明の毛髪の損傷の評価方法は、１つの側面では、毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量を毛髪の損傷の指標として用い、前記毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量に基づき、当該毛髪の損傷を評価することを特徴とする。
【００１１】
損傷毛に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量は、健常毛に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量と比べて少なくなっている。また、健常毛に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量と比べて損傷毛に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量が少ないほど、毛髪の損傷度が大きい傾向にある。したがって、毛髪の損傷の指標として毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量を用いることにより、毛髪の損傷を評価することができる。また、毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量は、試料の毛髪が少量であっても測定することができることから、本発明の毛髪の損傷の評価方法によれば、少量の毛髪を用いた場合であっても、毛髪の損傷を評価することができる。さらに、毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの測定は、当該脂肪酸アミドの量の測定時の環境条件による影響を受け難く、しかも測定者の測定技術の熟練度による測定結果のバラつきが生じ難いことから、本発明の毛髪の損傷の評価方法によれば、高い再現性で毛髪の損傷を評価することができる。
【００１２】
前記脂肪酸アミドの炭素数は、毛髪の損傷度との相関が高いため、毛髪の損傷を適確に評価することができることから、１６以上であり、ヒトの毛髪などに多く存在する脂肪酸に由来する脂肪酸アミドであるため、ヒトの毛髪における指標として用いやすいことから、２２以下である。前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドとしては、例えば、パルミチン酸アミド、ステアリン酸アミド、オレイン酸アミド、アラキジン酸アミド、ベヘニン酸アミド、パルミトレイン酸アミドなどが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。これらの炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドのなかでは、毛髪の損傷を適確に評価する観点から、パルミチン酸アミド、ステアリン酸アミドおよびベヘニン酸アミドが好ましく、ステアリン酸アミドおよびベヘニン酸アミドがより好ましい。本発明においては、前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドを単独で用いてもよく、２種類以上を用いてもよい。
【００１３】
毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量の測定方法としては、例えば、
（Ａ）毛髪から炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドを適切な溶媒に抽出し、得られた抽出物に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量に基づき、毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量を算出する方法；
（Ｂ）毛髪から得られた観察用試料を質量顕微鏡に供して毛髪における前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに対応する質量電荷比のシグナルの強度を測定し、当該シグナルの強度に基づき、毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量を算出する方法などが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。前記（Ｂ）の方法には、少量の毛髪を用いた場合であっても毛髪の損傷を適確に評価することができるとともに、毛髪における種々の部位の損傷を評価することができる利点がある。また、前記（Ｂ）の方法には、毛髪における特定部位での断面の顕微鏡画像から当該断面上の特定箇所に限定して当該特定箇所に存在する前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドを調べることができるという利点がある。このような利点から、前記測定方法のなかでは、前記（Ｂ）の方法が好ましい。
【００１４】
前記（Ａ）の方法において、毛髪からの炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの抽出は、例えば、毛髪を破砕して得られた破砕物をメタノールなどの溶媒に浸漬させることなどによって行なうことができる。
【００１５】
前記抽出物に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量の測定は、例えば、液体クロマトグラフ法、ガスクロマトグラフ法、液体クロマトグラフ−質量分析法、ガスクロマトグラフ−質量分析法などによって行なうことができるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。
【００１６】
前記（Ｂ）の方法において、前記質量顕微鏡は、通常、顕微鏡部とイオン源と質量分析部と検出部とを備えている。前記イオン源は、前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドを含む試料をイオン化させる。前記イオン源に用いられるイオン化法としては、例えば、レーザー脱離イオン化法、マトリックス支援レーザー脱離イオン化法、高速原子衝突法などが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。これらのイオン化法のなかでは、毛髪中の評価対象部位に存在する前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドを解析が容易な分子にイオン化することができることから、マトリックス支援レーザー脱離イオン化法が好ましい。前記質量分析部は、前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するイオンを高い質量精度で分析できる観点から、四重極型イオントラップ装置と飛行時間型質量分析計とから構成されている四重極型イオントラップ飛行時間型質量分析計が好ましい。前記四重極イオントラップ装置は、イオン化された試料から特定範囲の質量電荷比のイオンを分離する。前記飛行時間型質量分析計は、四重極イオントラップ装置によって分離された特定範囲の質量電荷比のイオンを加速して一定距離を飛行させ、当該イオンの飛行時間を測定する。前記飛行時間型質量分析計によれば、前記飛行時間に基づき、前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの質量情報を得ることができる。また、前記検出部は、分離されたイオンに由来するシグナルの強度、当該イオンの位置情報などを得る。前記質量顕微鏡においては、炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドを効果的に分析できる観点から、マトリックス支援レーザー脱離イオン化法と四重極型イオントラップ飛行時間型質量分析計とが組み合わせて用いられていることが特に好ましい。
【００１７】
前記観察用試料は、例えば、毛髪の評価対象部位を含む切片に前処理を施すことなどによって得ることができる。前記前処理は、前記イオン源のイオン化法などによって異なるので、一概には決定することができないことから、前記イオン源のイオン化法などに応じて適宜決定することが望ましい。例えば、イオン源のイオン化法が、前記マトリックス支援レーザー脱離イオン化法である場合、前記前処理は、マトリックスによる前記切片の表面のコーティングである。前記マトリックスは、前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドをイオン化するのに適したイオン化補助剤であればよい。前記マトリックスとしては、例えば、ゲンチジン酸、α−シアノ−４−ヒドロキシケイ皮酸、シナピン酸、９−アミノアクリジンなどのイオン化補助剤が挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。
【００１８】
前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに対応する質量電荷比は、前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの種類などによって異なるので、一概には決定することができないことから、前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの種類などに応じて適宜決定することが望ましい。
【００１９】
本発明の毛髪の損傷の評価方法では、前記毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量に基づき、毛髪の損傷の有無、毛髪の損傷度などを評価することができる。
【００２０】
毛髪の損傷の有無は、被験対象の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量と対照の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量とを比較することによって評価することができる。被験対象の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量が、対照の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量よりも少ない場合、被験対象の毛髪が損傷を有すると判断することができる。被験対象の毛髪および対照の毛髪は、毛髪の損傷の有無を適確に判断することができることから、同一のヒトの同一の毛髪であること、具体的には、同一の毛髪において、互いに異なる部位から取得された毛髪であることが好ましい。対照の毛髪は、損傷を受けにくいことから、被験対象の毛髪の取得部位よりも根元に近い部分から取得された毛髪であることが好ましい。
【００２１】
毛髪の損傷度は、例えば、被験対象の毛髪における炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの残存度；対照の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量から被験対象の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量を減じた値などに基づき、評価することができる。前記被験対象の毛髪における炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの残存度は、式（Ｉ）：
【００２２】
〔被験対象の毛髪における炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの残存度〕
＝〔［被験対象の毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量］／［対照の毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量］〕                        （Ｉ）
【００２３】
に基づいて算出することができる。［被験対象の毛髪における炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの残存度］が小さいほど、被験対象の毛髪の損傷度が大きいと評価することができる。また、［対照の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量から被験対象の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量を減じた値］が大きいほど、被験対象の毛髪の損傷度が大きいと評価することができる。
【００２４】
なお、毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量を、質量顕微鏡を用いた測定方法（以下、「質量顕微鏡法」ともいう）、液体クロマトグラフ法、ガスクロマトグラフ法、液体クロマトグラフ−質量分析法、ガスクロマトグラフ−質量分析法などによって測定する場合、毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量は、これらの測定方法で得られたクロマトグラムまたはスペクトルにおける前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度に比例する。したがって、本発明においては、毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量の指標として前記クロマトグラムまたはスペクトルにおける前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度を用いることができる。
【００２５】
本発明の毛髪の損傷の評価方法は、他の側面では、質量顕微鏡法、液体クロマトグラフ法、ガスクロマトグラフ法、液体クロマトグラフ−質量分析法およびガスクロマトグラフ−質量分析法からなる群より選ばれた少なくとも１種の方法によって毛髪における炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度を測定し、得られたシグナルの強度を毛髪の損傷の指標として用い、前記シグナルの強度に基づき、当該毛髪の損傷を評価することを特徴とする。
【００２６】
前記シグナル強度を用いる場合、対照の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度に対する被験対象の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度が小さいほど、被験対象の毛髪の損傷度が大きいと評価することができる。したがって、前記シグナル強度を用いる場合、毛髪の損傷度は、例えば、式（Ｉａ）：
【００２７】
〔被験対象の毛髪における炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの残存度〕
＝〔［被験対象の毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度］／［対照の毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度］〕                                                              （Ｉａ）
【００２８】
に基づいて算出される被験対象の毛髪における炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの残存度；対照の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度から被験対象の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度を減じた値などに基づき、評価することができる。前記シグナル強度を用いる場合、〔被験対象の毛髪における炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの残存度〕が小さいほど、被験対象の毛髪の損傷度が大きいと評価することができる。また、前記〔対照の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度から被験対象の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度を減じた値〕が大きいほど、被験対象の毛髪の損傷度が大きいと評価することができる。
【００２９】
以上説明したように、本発明の毛髪の損傷の評価方法によれば、少量の毛髪を用いた場合であっても、高い再現性で毛髪の損傷を評価することができる。したがって、本発明の毛髪の損傷の評価方法は、毛髪化粧料の開発、毛髪化粧料の評価、毛髪の損傷をケアするのに適した毛髪化粧料の選択基準の情報の提供などに用いられることが期待されるものである。
【００３０】
２．被験試料の評価方法
本発明の被験試料の評価方法は、１つの側面では、被験試料が毛髪に与える損傷を評価する被験試料の評価方法であって、毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量を毛髪の損傷の指標として用い、被験試料との接触前後の毛髪における前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの含有量の変化に基づき、前記被験試料が毛髪に与える損傷を評価することを特徴とする。
【００３１】
このように、本発明の被験試料の評価方法には、毛髪の損傷の指標として毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量が用いられている点に１つの大きな特徴がある。毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量は、前記したように、少量の毛髪を用いることによって測定することができることから、本発明の被験試料の評価方法によれば、少量の毛髪を用いた場合であっても、被験試料が毛髪に与える損傷を評価することができる。さらに、毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量の測定は、前記したように、当該脂肪酸アミドの量の測定時の環境条件による影響を受け難く、しかも測定者の測定技術の熟練度による測定結果のバラつきが生じ難いことから、本発明の被験試料の評価方法によれば、高い再現性で被験試料が毛髪に与える損傷を評価することができる。
【００３２】
本発明の被験試料の評価方法では、被験試料との接触前後の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量の変化を求める。
【００３３】
被験試料と毛髪との接触は、被験試料中に毛髪を浸漬させること、被験試料を毛髪に塗布することなどによって行なうことができる。被験試料と毛髪との接触の際の温度、湿度および接触時間は、評価対象の被験試料の種類、評価結果の用途などによって異なるので、一概には決定することができないことから、評価対象の被験試料の種類、評価結果の用途などに応じて適宜決定することが望ましい。
【００３４】
被験試料が毛髪に与える損傷の評価は、被験試料との接触前後の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量の変化に基づいて行なわれる。被験試料との接触前後の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量の変化は、例えば、被験試料との接触前の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量に対する被験試料との接触後の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量の比；被験試料との接触前後の毛髪における前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの含有量の変化率などを用いることによって調べることができる。〔被験試料との接触前の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量に対する被験試料との接触後の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量の比〕が小さいほど、被験試料が毛髪に与える損傷が大きいと評価することができる。また、〔被験試料との接触前後の毛髪における前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの含有量の変化率〕が大きいほど、被験試料が毛髪に与える損傷が大きいと評価することができる。前記被験試料との接触前後の毛髪における炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの含有量の変化率は、式（ＩＩ）：
【００３５】
〔被験試料との接触前後の毛髪における炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの含有量の変化率〕
＝［｛〔脂肪酸アミドの含有量Ａ〕−〔脂肪酸アミドの含有量Ｂ〕｝÷〔脂肪酸アミドの含有量Ａ〕］×１００                                                （ＩＩ）
【００３６】
（式中、〔脂肪酸アミドの含有量Ａ〕は、被験試料との接触前の毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量、〔脂肪酸アミドの含有量Ｂ〕は、被験試料との接触後の毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量を示す）
に基づいて算出することができる。
【００３７】
本発明の被験試料の評価方法は、他の側面では、質量顕微鏡法、液体クロマトグラフ法、ガスクロマトグラフ法、液体クロマトグラフ−質量分析法およびガスクロマトグラフ−質量分析法からなる群より選ばれた少なくとも１種の方法によって被験試料との接触前後の毛髪における炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度を測定し、得られたシグナルの強度を毛髪の損傷の指標として用い、被験試料との接触前後の毛髪における前記シグナルの強度の変化に基づき、前記被験試料が毛髪に与える損傷を評価することを特徴とする。
【００３８】
前記シグナルの強度を用いる場合、被験試料との接触前の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度に対する被験試料との接触後の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度が小さいほど、前記被験試料が毛髪に与える損傷度が大きいと評価することができる。
【００３９】
前記シグナル強度を用いる場合、被験試料との接触前後の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度の変化は、例えば、被験試料との接触前の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度に対する被験試料との接触後の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度の比；被験試料との接触前後の毛髪における前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度の変化率などを用いることによって調べることができる。
【００４０】
前記〔被験試料との接触前の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度に対する被験試料との接触後の毛髪に含まれる前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度の比〕が小さいほど、被験試料が毛髪に与える損傷が大きいと評価することができる。
【００４１】
前記〔被験試料との接触前後の毛髪における炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度の変化率〕は、式（ＩＩａ）：
【００４２】
〔被験試料との接触前後の毛髪における炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度の変化率〕
＝［｛〔脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度Ａ〕−〔脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度Ｂ〕｝÷〔脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度Ａ〕］×１００
（ＩＩａ）
【００４３】
（式中、〔脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度Ａ〕は、被験試料との接触前の毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度、〔脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度Ｂ〕は、被験試料との接触後の毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度を示す）
に基づいて算出することができる。前記〔被験試料との接触前後の毛髪における前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度の変化率〕が大きいほど、被験試料が毛髪に与える損傷が大きいと評価することができる。
【００４４】
被験試料との接触前の毛髪および被験試料との接触後の毛髪は、被験物質が毛髪に与える損傷を適確に判断することができることから、同一のヒトの毛髪であることが好ましい。また、被験試料との接触前の毛髪および被験試料との接触後の毛髪は、被験物質が毛髪に与える損傷をより適確に判断することができることから、同一の毛髪であることが好ましい。
【００４５】
以上説明したように、本発明の被験試料の評価方法によれば、少量の毛髪を用いた場合であっても、高い再現性で被験試料が毛髪に与える損傷を評価することができる。したがって、本発明の被験試料の評価方法は、毛髪化粧料の開発、毛髪化粧料の評価、毛髪のダメージケアに適した物質のスクリーニングなどに用いられることが期待されるものである。
【実施例】
【００４６】
以下に実施例により本発明をさらに詳しく説明するが、本発明は、かかる実施例のみに限定されるものではない。なお、以下の評価に用いられた健常毛および損傷毛は、個人差に起因する毛髪における脂肪酸アミドの含有量の測定データのバラつきを抑えるために、同一人物由来の単一人毛を用いて調製した。
【００４７】
調製例１
毛髪長約３０ｃｍの単一人毛からなる毛束２．５ｇを、約４０℃の０．５質量％ラウリル硫酸ナトリウム水溶液２００ｇ中に３０分間浸漬させた後、前記毛束を約４０℃の大過剰の水道水中に３分間浸漬させた。水道水への毛束の浸漬の操作を合計３回繰り返した。水道水への浸漬後の毛束を自然乾燥させ、健常毛を得た。
【００４８】
調製例２〜５
調整例１で得られた健常毛０．５ｇを、表１に示される組成を有する第１剤と第２剤とを等量混合したブリーチ剤中に室温で１５分間浸漬させた。つぎに、浸漬後の毛髪を水で洗浄した後、約４０℃の０．２５質量％ポリオキシエチレンラウリルエーテル硫酸ナトリウム水溶液２００ｇ中に５分間浸漬させた。その後、前記毛髪を約４０℃の大過剰の水道水中に３分間浸漬させた。水道水への毛髪の浸漬の操作を合計３回繰り返した。水道水への浸漬後の毛髪を自然乾燥させ、損傷毛１〜４を得た。なお、第１剤のＩ液およびＩＩ液ならびに第２剤のＡ液およびＢ液の組成を表２に示す。
【００４９】
【表１】
0006570472.tif 000002
【００５０】
【表２】
0006570472.tif 000003
【００５１】
試験例１
（１）観察用試料の調製
調製例１で得られた健常毛および調製例２〜５で得られた損傷毛それぞれを凍結包埋法にしたがって包埋して包埋試料を得た。クライオスタットを用いて前記包埋試料の横断面切片を作製した。前記横断面切片をスライドガラス上に接着させた後、前記横断面切片にマトリックス（ゲンチジン酸）を蒸着させ、観察用試料を得た。
【００５２】
（２）質量顕微鏡による試料の観察および質量分析
試験例１（１）で得られた観察用試料をイメージング質量顕微鏡〔（株）島津製作所製、商品名：ｉＭＳｃｏｐｅ〕に供し、前記観察用試料を観察するとともに、当該観察用試料について、ｍ／ｚ２００〜１５００の範囲のマススペクトルを測定した。分析条件は、以下のとおりである。
【００５３】
＜分析条件＞
イオン化法：マトリックス支援レーザー脱離イオン化法
測定モード：正イオン測定モード
レーザー強度：３０％
レーザー繰り返し周波数：１０００Ｈｚ
質量分析計：四重極型イオントラップ飛行時間型質量分析計
【００５４】
得られた測定結果を、解析ソフトウェア〔（株）島津製作所製、商品名：Ｉｍａｇｉｎｇ  ＭＳ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ〕を用いて解析した。得られた光学顕微鏡像に基づき、健常毛および損傷毛それぞれの対象領域（Ｒｅｇｉｏｎ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ。以下、「ＲＯＩ」ともいう）を設定し、ピークを抽出した。健常毛のＲＯＩの単位面積あたりのシグナルの平均強度と、損傷毛のＲＯＩの単位面積あたりのシグナルの平均強度とを比較し、Ｍａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ（マン・ホイットニー）のＵ検定を行なった。つぎに、健常毛におけるシグナルの強度と比べ、すべての損傷毛において、シグナルの強度が減少するｍ／ｚ値を抽出し、同定した。
【００５５】
調製例１で得られた健常毛のマススペクトルを図１（ａ）、調製例４で得られた損傷毛３のマススペクトルを図１（ｂ）に示す。
【００５６】
図１に示された結果から、損傷毛３のマススペクトルにおける質量電荷比（ｍ／ｚ）＝３４０．３９のピークは、健常毛のマススペクトルにおけるｍ／ｚ＝３４０．３９のピークと比べて減少していることがわかる。
【００５７】
また、損傷毛１、２および４のそれぞれのマススペクトルと健常毛のマススペクトルとを比較したところ、損傷毛１、２および４のマススペクトルにおける質量電荷比（ｍ／ｚ）＝３４０．３９のピークは、健常毛のマススペクトルにおけるｍ／ｚ＝３４０．３９のピークと比べて減少していることがわかる。
【００５８】
マススペクトルにおけるｍ／ｚ＝３４０．３９のピークについて、種々の化合物のデータベースを調べた結果、前記ｍ／ｚ＝３４０．３９のピークは、ベヘニン酸アミドに由来するピークであることが予想される。
【００５９】
試験例２
（１）測定試料の調製
調製例１で得られた健常毛５００ｍｇを液体窒素中で凍結させ、得られた凍結健常毛を乳鉢で破砕した。得られた健常毛の破砕物にメタノール１５ｍＬを添加した。得られた混合物を室温で１日振盪させた。振盪後の混合物を遠心分離に供して不溶物を沈降させ、上清を回収した。得られた上清を、メタノールで１０倍希釈し、測定試料を得た。
【００６０】
（２）対照試料の調製
試験例１の結果から、マススペクトルにおけるｍ／ｚ＝３４０．３９のピークは、ベヘニン酸アミドに由来することが予想された。そこで、ベヘニン酸アミドの標準品をその濃度が１００ｎｇ／ｍＬになるように試験例２（１）で得られた測定試料に添加し、対照試料を得た。
【００６１】
（３）化合物の同定
測定試料、対照試料およびベヘニン酸アミドの標準品それぞれと、トリプル四重極リニアイオントラップ質量分析システム〔（株）エービーサイエックス（ＡＢＳＣＩＥＸ）製、商品名：４０００  ＱＴＲＡＰ  ＬＣ／ＭＳ／ＭＳシステム〕とを用い、液体クロマトグラフ−質量分析法によって、測定試料に含まれる前記ｍ／ｚ＝３４０．３９（試験例１のマススペクトルおけるｍ／ｚ）のピークに対応する化合物の同定を行なった。測定条件は、以下のとおりである。
【００６２】
＜液体クロマトグラフィー条件＞
使用カラム：ジーエルサイエンス社製、商品名：Ｉｎｅｒｔｓｉｌ  ＯＤＳ−３（内径２．１ｍｍ、長さ１５０ｍｍ）
カラム温度：３５℃
流速：０．２ｍＬ／ｍｉｎ
移動相Ａ：０．１体積％ギ酸水溶液
移動相Ｂ：アセトニトリル
グラジエント条件：
開始後０分から開始後５分経過時まで：
Ａ／Ｂ（体積比）＝５／９５
開始後５分経過時から開始後１５分経過時まで：
Ａ／Ｂ（体積比）＝０／１００
開始後１５．０１分経過時から開始後２５分経過時まで：
Ａ／Ｂ（体積比）＝５／９５
【００６３】
＜質量分析条件＞
装置：トリプル四重極リニアイオントラップＬＣ／ＭＳ／ＭＳシステム（４０００ＱＴＲＡＰ  ＡＢ  Ｓｃｉｅｘ）
イオン化法：ＥＳＩ
解析：プロダクトイオンスキャンモードおよびＭＲＭ（Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｒｅａｃｔｉｏｎ  Ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ）
【００６４】
なお、前記試験例１のマススペクトルおけるｍ／ｚ＝３４０．３９は、本試験例２においては、測定機器の違いにより、ｍ／ｚ＝３４０．４０に対応する。
【００６５】
試験例２で得られた測定試料におけるｍ／ｚ＝３４０．４０のマスクロマトグラムを図２（ａ）、試験例２で得られた測定試料における親イオンｍ／ｚ＝３４０．４０の娘イオンｍ／ｚ＝８７．８のマスクロマトグラムを図２（ｂ）、試験例２で得られたベヘニン酸アミドの標準品を含有する対照試料におけるｍ／ｚ＝３４０．４０のマスクロマトグラムを図２（ｃ）、試験例２で得られたベヘニン酸アミドの標準品を含有する対照試料における親イオンｍ／ｚ＝３４０．４０の娘イオンｍ／ｚ＝８７．８のマスクロマトグラムを図２（ｄ）に示す。
【００６６】
図２に示された結果から、測定試料における親イオンｍ／ｚ＝３４０．４０のピークの溶出時間および測定試料における娘イオンｍ／ｚ＝８７．８のピークの溶出時間は、いずれも１４．３分であることがわかる。また、測定試料に標準品に添加した対照試料の親イオンｍ／ｚ＝３４０．４０および娘イオンｍ／ｚ＝８７．８は、いずれも単一のピークであり、親イオンｍ／ｚ＝３４０．４０および娘イオンｍ／ｚ＝８７．８の溶出時間も１４．３分で一致していることがわかる。これらの結果から、測定試料におけるｍ／ｚ＝３４０．４０のピークに対応する化合物がベヘニン酸アミドであることがわかる。
【００６７】
実施例１
（１）観察用試料の調製
試験例１（１）と同様の操作を行ない、調製例１で得られた健常毛および調製例２〜５で得られた損傷毛１〜４それぞれの観察用試料を得た。
【００６８】
（２）毛髪におけるベヘニン酸アミドの分布の視覚化
実施例１（１）で得られた観察用試料をイメージング質量顕微鏡〔（株）島津製作所製、商品名：ｉＭＳｃｏｐｅ〕に供し、調製例１で得られた健常毛および調製例２〜５で得られた損傷毛１〜４それぞれにおけるｍ／ｚ＝３４０．３９（試験例１のマススペクトルにおけるｍ／ｚ）のピークに対応する化合物であるベヘニン酸アミドの分布を視覚化した。分析条件は、試験例１（２）で用いられた分析条件と同様である。
【００６９】
実施例１において、健常毛および損傷毛１〜４のそれぞれにおけるｍ／ｚ＝３４０．３９のピークに対応する化合物の分布を調べた結果を図３に示す。図中、（ａ）は調製例１で得られた健常毛および調製例５で得られた損傷毛４のそれぞれにおけるｍ／ｚ＝３４０．３９のピークに対応する化合物の分布、（ｂ）は調製例１で得られた健常毛および調製例３で得られた損傷毛２のそれぞれにおけるｍ／ｚ＝３４０．３９のピークに対応する化合物の分布、（ｃ）は調製例１で得られた健常毛および調製例４で得られた損傷毛３のそれぞれにおけるｍ／ｚ＝３４０．３９のピークに対応する化合物の分布、（ｄ）は調製例１で得られた健常毛および調製例２で得られた損傷毛１のそれぞれにおけるｍ／ｚ＝３４０．３９のピークに対応する化合物の分布を示す。また、図中、１は健常毛におけるｍ／ｚ＝３４０．３９のピークに対応する化合物の分布、２は損傷毛におけるｍ／ｚ＝３４０．３９のピークに対応する化合物の分布を示す。図３（ａ）および（ｂ）のスケールバーは５０μｍ、図３（ｃ）および（ｄ）のスケールバーは２０μｍを示す。
【００７０】
図３に示された結果から、損傷毛１〜４におけるベヘニン酸アミドのシグナルの検出強度は、健常毛におけるベヘニン酸アミドのシグナルの検出強度と比べて小さいことがわかる。これらの結果から、毛髪の損傷に伴い、毛髪におけるベヘニン酸アミドの含有量が減少することがわかる。したがって、これらの結果から、毛髪に含まれるベヘニン酸アミドの量は、毛髪の損傷の指標として用いることができることがわかる。
【００７１】
実施例２
試験例１（１）と同様の操作を行ない、調製例１で得られた健常毛および調製例２〜５で得られた損傷毛それぞれの観察用試料を得た。
【００７２】
得られた観察用試料をイメージング質量顕微鏡〔（株）島津製作所製、商品名：ｉＭＳｃｏｐｅ〕に供し、調製例１で得られた健常毛および調製例２〜５で得られた損傷毛それぞれに含まれるベヘニン酸アミドを定量した。つぎに、被験対象の毛髪におけるベヘニン酸アミドの残存度を、式（Ｉｂ）：
【００７３】
〔被験対象の毛髪におけるベヘニン酸アミドの残存度〕
＝〔［被験対象の毛髪に含まれるベヘニンアミドに由来するシグナルの強度］÷［健常毛に含まれるベヘニンアミドに由来するシグナルの強度］〕                （Ｉｂ）
【００７４】
に基づいて算出した。分析条件は、試験例１（２）で用いられた分析条件と同様である。
【００７５】
実施例２において、被験対象の毛髪におけるベヘニン酸アミドの残存度を調べた結果を図４に示す。図中、（ａ）は損傷毛１におけるベヘニン酸アミドの残存度を調べた結果、（ｂ）は損傷毛２におけるベヘニン酸アミドの残存度を調べた結果、（ｃ）は損傷毛３におけるベヘニン酸アミドの残存度を調べた結果、（ｄ）は損傷毛４におけるベヘニン酸アミドの残存度を調べた結果を示す。
【００７６】
一方、調製例１で得られた健常毛（長さ３０ｍｍ）を相対湿度６０％で２３℃に保たれた恒温恒湿槽内に４８時間以上静置し、測定用試料を得た。得られた測定用試料を自動接触角計〔協和界面科学（株）製、商品名：ＤＭ−５００〕を用いて水の接触角を測定した。各測定用試料につき、２か所で測定された値の平均値を該測定用試料の接触角とした。測定に用いた測定用試料は３０本である。
【００７７】
また、前記において、調製例１で得られた健常毛（長さ３０ｍｍ）を用いる代わりに調製例２〜５で得られた損傷毛１〜４（長さ３０ｍｍ）を用いたことを除き、前記と同様の操作を行い、毛髪と水との接触角を求めた。
【００７８】
実施例２において、毛髪の種類と接触角との関係を調べた結果を図５に示す。図５（ａ）中、レーン１は健常毛と水との接触角、レーン２は損傷毛１と水との接触角、レーン３は損傷毛２と水との接触角を示す。また、図５（ｂ）中、レーン１は健常毛と水との接触角、レーン２は損傷毛３と水との接触角、レーン３は損傷毛４と水との接触角を示す。
【００７９】
図４に示された結果から、健常毛におけるベヘニン酸アミドの残存度と比べて損傷毛１〜４におけるベヘニン酸アミドの残存度が小さいことがわかる。したがって、これらの結果から、毛髪に含まれるベヘニン酸アミドの量は、毛髪の損傷の指標として用いることができることがわかる。
【００８０】
また、損傷毛２および４それぞれの調製の際に用いられたブリーチ剤の第１剤（Ｉ液）におけるアンモニア水の含有量は、損傷毛１および３それぞれの調製の際に用いられたブリーチ剤の第１剤（ＩＩ液）におけるアンモニア水の含有量よりも多い。そのため、損傷毛２の調製の際に用いられたブリーチ剤は、損傷毛１の調製の際に用いられたブリーチ剤よりも毛髪に対して大きい損傷を与えることが予想される。また、同様の観点から、損傷毛４の調製の際に用いられたブリーチ剤は、損傷毛３の調製の際に用いられたブリーチ剤よりも毛髪に対して大きい損傷を与えることが予想される。
【００８１】
図４に示された結果から、損傷毛１におけるベヘニン酸アミドの残存度〔図４（ａ）参照〕に比べて損傷毛２におけるベヘニン酸アミドの残存度〔図４（ｂ）参照〕が小さいことがわかる。また、図５（ａ）に示された結果から、健常毛と水との接触角が最も大きく、損傷毛１および損傷毛２の順で毛髪と水との接触角が低下していることがわかる（健常毛と水との接触角＞損傷毛１と水との接触角＞損傷毛２と水との接触角）。したがって、健常毛の損傷度が最も小さく、損傷毛１および損傷毛２の順で毛髪の損傷度が増加していること（健常毛の損傷度＜損傷毛１の損傷度＜損傷毛２の損傷度）がわかる。よって、毛髪に含まれるベヘニン酸の量と、毛髪と水との接触角とは、相関していることがわかる。
【００８２】
さらに、図４に示された結果から、損傷毛３におけるベヘニン酸アミドの残存度〔図４（ｃ）参照〕に比べ、損傷毛４におけるベヘニン酸アミドの残存度〔図４（ｄ）参照〕が小さいことがわかる。また、図５（ｂ）に示された結果から、健常毛と水との接触角が最も大きく、損傷毛３および損傷毛４の順で毛髪と水との接触角が低下していることがわかる（健常毛と水との接触角＞損傷毛３と水との接触角＞損傷毛４と水との接触角）。したがって、健常毛の損傷度が最も小さく、損傷毛３および損傷毛４の順で毛髪の損傷度が増加していること（健常毛の損傷度＜損傷毛３の損傷度＜損傷毛４の損傷度）がわかる。よって、毛髪に含まれるベヘニン酸の量と、毛髪と水との接触角とは、相関していることがわかる。
【００８３】
これらの結果から、健常毛に含まれるベヘニン酸アミドの量に比べて被験対象の毛髪に含まれるベヘニン酸アミドの量が少ないほど、被験対象の毛髪の損傷度が大きいことがわかる。また、被験試料が毛髪に与えるダメージが大きいほど、毛髪に含まれるベヘニン酸アミドの量が少ないことから、毛髪に含まれるベヘニン酸の量を指標として被験試料が毛髪に与える損傷を評価することができることがわかる。
【００８４】
実施例３
試験例１（１）と同様の操作を行ない、調製例４で得られた損傷毛４および調製例１で得られた健常毛それぞれの観察用試料を得た。
【００８５】
得られた観察用試料をイメージング質量顕微鏡〔（株）島津製作所製、商品名：ｉＭＳｃｏｐｅ〕に供し、調製例４で得られた損傷毛４および調製例１で得られた健常毛それぞれのＲＯＩの単位面積あたりにおけるベヘニン酸アミドに対応する質量電荷比（ｍ／ｚ＝３４０．４）のピークに由来するシグナルの強度を求めることにより、毛髪におけるベヘニン酸アミドの含有量を調べた。また、前記において、ベヘニン酸アミドに由来するシグナルの強度を求める代わりに、パルミチン酸アミドに対応する質量電荷比（ｍ／ｚ＝２５３．２８）のピークに由来するシグナルの強度およびステアリン酸アミドに対応する質量電荷比（ｍ／ｚ＝２８４．３３）のピークに由来するシグナルの強度を求めたことを除き、前記と同様の操作を行ない、毛髪におけるパルミチン酸アミドの含有量および毛髪におけるステアリン酸アミドの含有量を調べた。
【００８６】
実施例３において、毛髪におけるベヘニン酸アミドの含有量を調べた結果を図６、毛髪におけるパルミチン酸アミドの含有量を調べた結果を図７、毛髪におけるステアリン酸アミドの含有量を調べた結果を図８に示す。
【００８７】
図６〜８に示された結果から、健常毛におけるベヘニン酸アミド、パルミチン酸アミドおよび毛髪におけるステアリン酸アミドそれぞれの含有量と比べて損傷毛におけるベヘニン酸アミド、パルミチン酸アミドおよびステアリン酸アミドそれぞれの含有量が減少していることがわかる。
【００８８】
なお、実施例３において、毛髪におけるベヘニン酸アミドの含有量を用いる代わりに毛髪におけるパルミチン酸アミドの含有量および毛髪におけるステアリン酸アミドの含有量を用いた場合にも、ベヘニン酸アミドの場合と同様に、毛髪におけるパルミチン酸アミドの含有量の減少度および毛髪におけるステアリン酸アミドの含有量の減少度が大きいほど、毛髪の損傷度が大きい傾向がみられる。
【００８９】
したがって、これらの結果から、毛髪に含まれるベヘニン酸アミド、パルミチン酸アミド、ステアリン酸アミドなどの炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量は、毛髪の損傷の指標として用いることができることがわかる。また、毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量を指標として被験試料が毛髪に与える損傷を評価することができることがわかる。
【００９０】
以上説明したように、健常毛における炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの含有量と比べて損傷毛における炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの含有量が少ないほど、毛髪の損傷度が大きいことから、毛髪に含まれる炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量を毛髪の損傷の指標として用い、前記炭素数１６〜２２の脂肪酸アミドの量に基づき、当該毛髪の損傷および被験試料が毛髪に与える損傷を評価することができることが示唆される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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