(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（１）
【化１】
0006542799.tif 000037
〔式中、Ｒ1は、単結合、−Ｎ（Ｒ3）（ＣＨ2)n1ＣＯ−、又は−Ｎ（Ｒ4）（ＣＨ2）n2Ｎ（Ｒ5）ＣＯ（ＣＨ2）n3ＣＯ−（ここで、Ｒ3は水素原子又はアルキル基を示し、Ｒ4及びＲ5は同一又は異なって水素原子又はアルキル基を示すか、Ｒ4とＲ5が一緒になって炭素数１〜４のアルキレン基を示し、ｎ１、ｎ２及びｎ３は同一又は異なって１〜３の整数を示す）を示し；
Ｒ2は、２’−シアノ−２’−デオキシ−β−Ｄ−アラビノフラノシルシトシン、３’−エチニル−β−Ｄ−アラビノフラノシルシトシン、式（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）、（ｅ）又は（ｆ）
【化２】
0006542799.tif 000038
で表される基（ここで、Ｒ11はハロゲン原子又はエチニル基を示し、Ｒ12は水素原子又はハロゲン原子を示し、Ｒ13はアルキル基又はアルコキシアルキル基を示し、Ｒ14はアルコキシアルキル基又はモルホリノアルキル基を示し、Ｒ15はアルキル基を示し、Ｒ16は水素原子又はアルカノイル基を示す。）を示し；
ｍは１０〜１０００の数を示し；
矢印は結合部位を示す。〕
で表される化合物又はその塩。
【請求項２】
Ｒ1が、単結合、−ＮＨ（ＣＨ2）n1ＣＯ−、−ＮＨ（ＣＨ2）n2ＮＨＣＯ（ＣＨ2）n3ＣＯ−、又は
【化３】
0006542799.tif 000039
（ｎ１、ｎ２及びｎ３は前記と同じ）
である請求項１記載の化合物又はその塩。
【請求項３】
請求項１又は２記載の化合物又はその塩を含有する医薬。
【請求項４】
悪性腫瘍治療薬である請求項３記載の医薬。
【請求項５】
請求項１又は２記載の化合物又はその塩、及び薬学的に許容される塩を含有する医薬組成物。
【請求項６】
Ｒ2が、２’−シアノ−２’−デオキシ−β−Ｄ−アラビノフラノシルシトシンである、請求項１記載の化合物又はその塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、悪性腫瘍治療薬として有用な新規ＰＥＧ誘導体及びそれを含有する医薬品に関する。
【背景技術】
【０００２】
シタラビン、１−（２’−シアノ−２’−デオキシ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）シトシン、ゲムシタビン、デシタビン、５−アザシチジン、ＲＸ−３１１７（Ｒｅｘａｈｎ）、ＳＧＩ−１１０（Ａｓｔｅｘ）等のシトシン誘導体は、癌のＤＮＡポリメラーゼを阻害し、或いは、癌の細胞周期を調節（Ｇ２／Ｍアレスト）し、白血病細胞の分化を誘導する作用を有することから、急性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫、膵臓癌、肺癌、乳癌等の悪性腫瘍治療薬として有用である（特許文献１、非特許文献１〜３）。これらのシトシン誘導体による悪性腫瘍の治療法は、通常数時間〜数週間の持続点滴静脈内注射の投与が行なわれる（非特許文献１等）。【０００３】
また、マイトマイシンＣは、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、胃癌、結腸・直腸癌、肺癌、膵癌、肝癌、子宮頸癌、子宮体癌、頭頸部腫瘍、膀胱腫瘍の治療に用いられる抗がん剤である。しかし、マイトマイシンＣも通常連日静脈内投与が行なわれる。またゲフィチニブ、エルロチニブは、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）のチロシンキナーゼを選択的に阻害する分子標的抗がん剤であり、非小細胞肺癌、膵癌、脳神経膠芽腫、頭頚部扁平上皮癌等に用いられる。さらに、ラパチニブ、スニチニブもチロシンキナーゼ阻害剤であり、乳癌等に用いられている。しかし、これらの分子標的薬も、急性肺障害、間質性肺炎等の副作用が問題となっている。【０００４】
また、パクリタキセル、ドセタキセルは、肺癌、卵巣癌、乳癌、頭頸部癌、進行性カポジ肉腫等の治療に用いられる抗がん剤である。しかし、これらタキサン系の抗がん剤も白血球減少などの骨髄抑制、末梢神経障害等の副作用がある他、水溶性が乏しく、止む無く、溶解補助剤のクレモフォールを使用しているものの、重篤なアレルギー症状が出る為、ヒスタミンＨ１、Ｈ２の拮抗剤による前処置が不可欠であり、投薬の際に煩雑な作業が臨床現場で要請されている。また、溶解補助剤としてヒト血清アルブミンを使用する場合もあるが、ヒト血清アルブミン不足やエイズ等のウィルス感染の恐れ等が懸念されている。【０００５】
従来の低分子化合物からなる抗がん剤は、静脈内投与や経口投与等で臨床応用されているが、その有効利用率は極めて低く、投与された量の極一部の量しか腫瘍に到達していないのが現状である。また、全身に分布する結果、全身毒性が問題となり、効果と毒性のバランスで用量が決まるため、全身毒性が生じ、薬効発現に必要十分な量の抗がん剤の投与ができていない場合が殆どである。
近年、以上の問題を克服する目的で、幾つかのドラッグデリバリーシステムが開発されている。例えば、生体許容性の素材成分から成るリン脂質リポソーム、高分子ミセル或いは水溶性高分子に低分子の抗がん剤を物理的に包埋したり化学的に共有結合したりする方法でのドラッグデリバリーシステム（以下、ＤＤＳと言う）がその代表例である。【０００６】
静脈内投与用のリポソーム製剤の場合は、毛細血管内を問題なく通過させるため、また、腫瘍近傍の新生血管を通過できる様に、２００〜３００ｎｍに粒子サイズが制御されている他、リポソーム粒子の膜表面が分子量２，０００程度のポリエチレングリコール（以下、ＰＥＧと言う）により被覆されているので、生体内の貪食細胞への取り込みが概ね回避できている。
高分子ミセル製剤の場合では、５０ｎｍに粒子径が制御されており、また、該粒子の膜表面がＰＥＧで被覆されているので、生体内の貪食細胞への取り込みが概ね避けられており、腫瘍の近傍の新生血管を通過でき易いとの報告がある。
しかしながら、以上のナノ微粒子を用いた製剤の血中半減期は比較的短く、腫瘍へのターゲッティングも不十分であり、本来の目的が十分には達成できていないのが現状である。【０００７】
一方、生体適合性が高く、水溶性も高い合成高分子のＰＥＧ、特に、高粘度溶液になり難い４本鎖のＰＥＧ（分子量が４万）に抗がん剤を化学的に共有結合した誘導体の臨床応用試みが最近なされ始めている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】J. Med. Chem. 1991年, 34巻，2917-2919
【非特許文献２】J. Med. Chem. 1993年, 36巻，4813-4819
【非特許文献３】キロサイドTM注  添付文書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
しかしながら、該ＰＥＧと抗がん剤の間の化学結合は、血中内での徐放を意識する余り、血中内のエステラーゼやカルボキシラーゼ等の分解酵素で比較的分解され易いエステル結合やカルバメート結合に限られており、血中での長時間の安定性が乏しく、腫瘍組織へのターゲッティング効率も余り良くなく、ＤＤＳ本来の目的が達成できていない。
また、最近、酸やアルカリで分解され難いカルバメート結合により、４本鎖のＰＥＧと抗がん剤（ＣＰＴ−１１）の活性成分であるＳＮ−３８を共有結合させた報告があるが、カルバメート結合の弱点をある程度克服したに過ぎない。又、カルバメート結合体を合成する場合の化学反応の条件が過酷（強アルカリ条件）であり、分子内にエステル結合やアルカリに敏感な抗がん剤の結合には不適である。
従って、本発明の課題は、重篤な消化管毒性や骨髄毒性等の副作用が少なく、抗腫瘍効果が持続し、投与手段、投与回数を改善できる新たな悪性腫瘍治療薬を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
そこで本発明者等は、ＰＥＧ誘導体の血中での持続性及び腫瘍組織への高い集積性に着目し、抗腫瘍剤の作用持続性を向上させるべく、血中内の酵素分解に伴う血中での徐放性を鑑み、ＣＰＴ−１１の活性物質であるＳＮ−３８等の水酸基へのポリエチレングリコールへのエステル結合やカルバメート結合での修飾等を検討してきたが、血中内での抗腫瘍活性物質の放出が、ヒトでは予想以上に早く、該ポリエチレングリコール誘導体の大量投与が必要であり、十分な作用持続性の向上効果も安全性向上も得られなかった。
さらに検討を重ねた結果、シトシン誘導体やマイトマイシンＣやパクリタキセル等の抗腫瘍剤やゲフィチニブ、エルロチニブ、ラパチニブ、スニチニブ等のがんの分子標的薬の一級又は二級アミノ基に、末端にメチルカルボキシル基を導入した４本鎖のポリエチレングリコールを直接、又はβ−アラニン等のアミノ酸系スペーサーを介してアミド結合させた式（１）で表される化合物が、抗腫瘍効果の持続性に優れ、かつ安全性も高く、従来の抗腫瘍剤に比べて少ない投与量と少ない投与回数でより優れた悪性腫瘍治療効果を奏することを見出し、本発明を完成した。【００１１】
すなわち、本発明は、次の〔１〕〜〔１１〕を提供するものである。【００１２】
〔１〕一般式（１）【００１３】
【化１】
0006542799.tif 000002
【００１４】
〔式中、Ｒ1は、単結合、−Ｎ（Ｒ3）（ＣＨ2)n1ＣＯ−、又は−Ｎ（Ｒ4）（ＣＨ2）n2Ｎ（Ｒ5）ＣＯ（ＣＨ2）n3ＣＯ−（ここで、Ｒ3は水素原子又はアルキル基を示し、Ｒ4及びＲ5は同一又は異なって水素原子又はアルキル基を示すか、Ｒ4とＲ5が一緒になって炭素数１〜４のアルキレン基を示し、ｎ１、ｎ２及びｎ３は同一又は異なって１〜３の整数を示す）を示し；
Ｒ2は、式（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）、（ｅ）又は（ｆ）【００１５】
【化２】
0006542799.tif 000003
【００１６】
で表される基（ここで、Ｒ6はヒドロキシ基、シアノ基又はハロゲン原子を示し、Ｒ7は水素原子又はハロゲン原子を示し、Ｒ8は水素原子又はエチニル基を示し、Ｒ9とＲ10は同一又は異なって水素原子又はトリアルキルシリル基を示すか、Ｒ9とＲ10が一緒になってテトラアルキルシロキシシリル基を示し、Ｒ11はハロゲン原子又はエチニル基を示し、Ｒ12は水素原子又はハロゲン原子を示し、Ｒ13はアルキル基又はアルコキシアルキル基を示し、Ｒ14はアルコキシアルキル基又はモルホリノアルキル基を示し、Ｒ15はアルキル基を示し、Ｒ16は水素原子又はアルカノイル基を示す。）を示し；
ｍは１０〜１０００の数を示し；
矢印は結合部位を示す。〕
で表される化合物又はその塩。
〔２〕Ｒ2が式（ａ）又は（ｂ）で示される基である〔１〕記載の化合物又はその塩。
〔３〕Ｒ2が式（ａ）で示される基である〔１〕又は〔２〕記載の化合物又はその塩。
〔４〕Ｒ2が式（ａ）で示される基であり、Ｒ6がヒドロキシ基、シアノ基又はハロゲン原子であり、Ｒ7が水素原子又はハロゲン原子であり、Ｒ8が水素原子又はエチニル基であり、Ｒ9及びＲ10が水素原子である〔１〕〜〔３〕のいずれか１項記載の化合物又はその塩。
〔５〕Ｒ1が、単結合、−ＮＨ（ＣＨ2）n1ＣＯ−、−ＮＨ（ＣＨ2）n2ＮＨＣＯ（ＣＨ2）n3ＣＯ−、又は【００１７】
【化３】
0006542799.tif 000004
【００１８】
（ｎ１、ｎ２及びｎ３は前記と同じ）
である〔１〕〜〔４〕のいずれか１項記載の化合物又はその塩。
〔６〕〔１〕〜〔５〕のいずれか１項記載の化合物又はその塩を含有する医薬。
〔７〕悪性腫瘍治療薬である〔６〕記載の医薬。
〔８〕〔１〕〜〔５〕のいずれか１項記載の化合物又はその塩、及び薬学的に許容される塩を含有する医薬組成物。
〔９〕悪性腫瘍治療薬製造のための、〔１〕〜〔５〕のいずれか１項記載の化合物又はその塩の使用。
〔10〕悪性腫瘍治療に用いるための、〔１〕〜〔５〕のいずれか１項記載の化合物又はその塩。
〔11〕〔１〕〜〔５〕のいずれか１項記載の化合物又はその塩の有効量を投与することを特徴とする悪性腫瘍の治療方法。
【発明の効果】
【００１９】
本発明化合物（１）は、優れた抗悪性腫瘍効果を有し、かつその作用持続性が優れているため、従来の抗腫瘍剤に比べて少ない投与量（元の抗腫瘍剤の活性物質の量で換算）、少ない投与回数、少ない投与頻度で優れた抗悪性腫瘍作用を発揮し、かつ副作用も少ない。従って、本発明化合物（１）を用いた悪性腫瘍治療によれば、患者の負担及び医療関係者の負担も軽減され、優れた抗悪性腫瘍効果が得られる。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】化合物（１ａ）のＮＭＲスペクトルチャートを示す。
【図２】化合物（１ｂ）のＮＭＲスペクトルチャートを示す。
【図３】化合物（１ｃ）のＮＭＲスペクトルチャートを示す。
【図４】化合物（１ｄ）のＮＭＲスペクトルチャートを示す。
【図５】化合物（１ｅ）のＮＭＲスペクトルチャートを示す。
【図６】化合物（１ｆ）のＮＭＲスペクトルチャートを示す。
【図７】化合物（１ｇ）のＮＭＲスペクトルチャートを示す。
【図８】化合物（１ｈ）のＮＭＲスペクトルチャートを示す。
【図９】化合物（１ｉ）のＮＭＲスペクトルチャートを示す。
【図１０】化合物（１ｊ）のＮＭＲスペクトルチャートを示す。
【図１１】腫瘍移植後の腫瘍体積の変化を示す。投与量のカッコ内は、ＤＦＰ−１０９１７換算の投与量を示す。
【図１２】腫瘍移植後の体重変化率（％）を示す。投与量のカッコ内は、ＤＦＰ−１０９１７換算の投与量を示す。
【図１３】腫瘍移植後の腫瘍体積の変化を示す。投与量のカッコ内は、ＭＭＣ換算の投与量を示す。
【図１４】腫瘍移植後の体重変化率（％）を示す。投与量のカッコ内は、ＭＭＣ換算の投与量を示す。
【図１５】腫瘍移植後の腫瘍体積の変化を示す。
【図１６】腫瘍移植後の体重変化率（％）を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
一般式（１）中、Ｒ1は、単結合、−Ｎ（Ｒ3）（ＣＨ2)n1ＣＯ−、又は−Ｎ（Ｒ4）（ＣＨ2）n2Ｎ（Ｒ5）ＣＯ（ＣＨ2）n3ＣＯ−（ここで、Ｒ3は水素原子又はアルキル基を示し、Ｒ4及びＲ5は同一又は異なって水素原子又はアルキル基を示すか、Ｒ4とＲ5が一緒になって炭素数１〜４のアルキレン基を示し、ｎ１、ｎ２及びｎ３は同一又は異なって１〜３の整数を示す）を示す。
【００２２】
Ｒ3、Ｒ4及びＲ5で示される基としては、水素原子が好ましく、アルキル基の場合は、炭素数１〜６の直鎖又は分岐鎖のアルキル基が挙げられる。このうち、炭素数１〜４の直鎖又は分岐鎖のアルキル基が好ましく、メチル基、エチル基、イソプロピル基等がより好ましい。
また、Ｒ4及びＲ5が一緒になって形成する炭素数１〜４のアルキレン基としては、メチレン基、エチレン基、トリメチレン基又はテトラメチレン基が挙げられ、エチレン基がより好ましい。
【００２３】
Ｒ3としては、水素原子がより好ましい。Ｒ4及びＲ5としては、両方が水素原子を示すか、Ｒ4及びＲ5がＣ1-3アルキレン基を形成するのがより好ましい。
【００２４】
ｎ１、ｎ２及びｎ３は、それぞれ１、２又は３の整数を示すが、このうち２がより好ましい。
【００２５】
Ｒ1のより好ましい例を挙げれば、単結合、−ＮＨ（ＣＨ2）n1ＣＯ−、−ＮＨ（ＣＨ2)n2ＮＨＣＯ（ＣＨ2）n3ＣＯ−、又は
【００２６】
【化４】
0006542799.tif 000005
【００２７】
が挙げられる。Ｒ1のさらに好ましい具体例は、単結合、−ＮＨＣＨ2ＣＨ2ＣＯ−、又は
【００２８】
【化５】
0006542799.tif 000006
【００２９】
である。
【００３０】
Ｒ2は、式（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）、（ｅ）又は（ｆ）
【００３１】
【化６】
0006542799.tif 000007
【００３２】
で表される基（ここで、Ｒ6はヒドロキシ基、シアノ基又はハロゲン原子を示し、Ｒ7は水素原子又はハロゲン原子を示し、Ｒ8は水素原子又はエチニル基を示し、Ｒ9とＲ10は同一又は異なって水素原子又はトリアルキルシリル基を示すか、Ｒ9とＲ10が一緒になってテトラアルキルシロキシシリル基を示し、Ｒ11はハロゲン原子又はエチニル基を示し、Ｒ12は水素原子又はハロゲン原子を示し、Ｒ13はアルキル基又はアルコキシアルキル基を示し、Ｒ14はアルコキシアルキル基又はモルホリノアルキル基を示し、Ｒ15はアルキル基を示し、Ｒ16は水素原子又はアルカノイル基を示し、矢印は結合部位を示す。）を示す。
【００３３】
Ｒ6は、ヒドロキシ基、シアノ基又はハロゲン原子を示すが、シアノ基が特に好ましい。Ｒ7は水素原子又はハロゲン原子を示す。ここで、ハロゲン原子としては、フッ素原子が好ましい。
【００３４】
Ｒ8は、水素原子又はエチニル基を示す。
【００３５】
Ｒ9及びＲ10で示されるトリアルキルシリル基としては、トリメチルシリル基、トリエチルシリル基、トリイソプロピルシリル基、ジメチルブチルシリル基、ジメチルペンチルシリル基等が挙げられる。またＲ9とＲ10が一緒になって形成するテトラアルキルシロキシシリル基としては、次式（ｇ）
【００３６】
【化７】
0006542799.tif 000008
【００３７】
（ここで、Ｒ17、Ｒ18、Ｒ19、Ｒ20は、アルキル基を示し、メチル基、エチル基、イソプロピル基、ブチル基、ペンチル基等が好ましい。）
で表される基が好ましい。
【００３８】
Ｒ11は、ハロゲン原子又はエチニル基を示す。Ｒ12は水素原子又はハロゲン原子を示す。
【００３９】
Ｒ13はアルキル基又はアルコキシアルキル基を示す。ここで、アルキル基としては、炭素数１〜６のアルキル基が好ましく、メチル基がより好ましい。アルコキシアルキル基としては、Ｃ1-6アルコキシＣ1-6アルキル基が好ましく、メトキシエチル基、メトキシプロピル基、エトキシエチル基等がより好ましく、メトキシエチル基が特に好ましい。
【００４０】
Ｒ14はアルコキシアルキル基又はモルホリノアルキル基を示す。ここで、アルコキシアルキル基としては、Ｃ1-6アルコキシＣ1-6アルキル基が好ましく、メトキシエチル基、メトキシプロピル基、エトキシエチル基がより好ましく、メトキシエチル基が特に好ましい。モルホリノアルキル基としては、モルホリノＣ1-4アルキル基が好ましく、モルホリノプロピル基がより好ましい。
【００４１】
Ｒ15としては、Ｃ1-6アルキル基が好ましく、メチル基、エチル基、プロピル基、ブチル基がより好ましい。
【００４２】
Ｒ16としては、水素原子又は炭素数２〜６のアルカノイル基が好ましく、水素原子又はアセチル基がより好ましい。
【００４３】
式（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）、（ｅ）及び（ｆ）で示される基は、抗がん剤由来の基である。式（ａ）は、アラビノフラノシルシトシン系の抗がん剤由来の基である。式（ｂ）は、マイトマイシンＣ由来の基である。式（ｃ）は、ゲフィニチブ、エルロチニブ等のＥＧＦＲのチロシンキナーゼ阻害剤由来の基である。式（ｄ）は、スニチニブ等のＰＤＧＦＲのチロシンキナーゼ阻害剤由来の基である。式（ｅ）は、ラパチニブ等のＥＧＦＲのチロシンキナーゼ阻害剤由来の基である。式（ｆ）は、パクリタクセル、ドセタキセル等のタキサン系の抗がん剤由来の基である。
【００４４】
式（ａ）で示される構造の好ましい例としては、β−Ｄ−アラビノフラノシルシトシン、２’−シアノ−２’−デオキシ−β−Ｄ−アラビノフラノシルシトシン、２’−デオキシ−２’，２’−ジフルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシルシトシン、３’−エチニル−β−Ｄ−アラビノフラノシルシトシンが挙げられる。
【００４５】
なお、式（ｃ）で示される基の具体例としては、式（ｃ１）又は式（ｃ２）で示される基が挙げられる。
【００４６】
【化８】
0006542799.tif 000009
【００４７】
式（ｆ）で示される基の具体例としては、式（ｆ１）又は式（ｆ２）で示される基が挙げられる。
【００４８】
【化９】
0006542799.tif 000010
【００４９】
ｍは１０〜１０００の数を示す。より好ましいｍは１００〜５００であり、さらに好ましいｍは２００〜３００である。なお、ｍはポリエチレングリコール基に由来する数であり、通常平均の数である。
【００５０】
本発明化合物（１）の塩としては、薬学的に許容される塩であれば特に限定されないが、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩等の無機酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、シュウ酸塩、リンゴ酸塩等の有機酸塩が挙げられる。また、本発明化合物（１）又はその塩には、不整炭素原子が存在するので、立体異性体が存在し、それらの光学活性体、エナンチオマー、それらの混合物が含まれる。
【００５１】
本発明化合物（１）又はその塩は、例えば次の反応式に従って製造することができる。
【００５２】
【化１０】
0006542799.tif 000011
【００５３】
（式中、Ｘは、ヒドロキシ基、ハロゲン原子又はカルボキシル基の活性エステル残基を示し、Ｒ1、Ｒ2及びｍは前記と同じ）
【００５４】
すなわち、式（２）で表されるテトラカルボン酸誘導体のカルボキシル基と式（３）で表される化合物のアミノ基とを結合させることにより、本発明化合物（１）又はその塩が製造できる。
【００５５】
テトラカルボン酸誘導体（２）は、例えばペンタエリスリトールにエチレンオキサイドを反応させ、次いでカルボキシメチル化し、さらにカルボキシル基をハロゲン化又は活性エステル化することにより得られる。ハロゲン原子としては、塩素原子、臭素原子が挙げられる。また、活性エステルとしては、スクシンイミド、混合酸無水物等が挙げられる。
【００５６】
化合物（３）のうち、Ｒ1が−Ｎ（Ｒ3）（ＣＨ2)n1ＣＯ−、又は−Ｎ（Ｒ4）（ＣＨ2）n2Ｎ（Ｒ5）ＣＯ（ＣＨ2）n3ＣＯ−である化合物は、例えばＲ1が単結合である化合物（３）にＨＮ（Ｒ3）（ＣＨ2）n1ＣＯＹ又はＨＮ（Ｒ4）（ＣＨ2）n2Ｎ（Ｒ5）ＣＯ（ＣＨ2）n3ＣＯＹを反応させることにより得られる。ここで、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、ｎ１、ｎ２及びｎ３は前記と同じであり、Ｙは水酸基、ハロゲン原子又は活性エステル残基を示す。
この反応は、カルボン酸アミド形成反応であり、塩基の存在下、ＨＢＴＵ、ＤＣＣ等の縮合剤を用いて行うことができる。
【００５７】
テトラカルボン酸誘導体（２）と化合物（３）との反応は、カルボン酸アミド形成反応であり、通常のアミド化反応条件で実施することができる。例えば、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン等のアミン類の存在下、０℃〜１５０℃の条件で行うことができる。
【００５８】
反応終了後は、洗浄、再結晶、各種クロマトグラフィー等の手段により目的物を精製、単離することができる。
【００５９】
本発明化合物（１）又はその塩は、優れた抗悪性腫瘍活性を有し、体重減少などの副作用が低く、かつ数時間以上に及ぶ持続注入を必要とせずに優れた抗悪性腫瘍効果が得られる。従って、患者及び医療関係者に対する負担の少ない優れた悪性腫瘍治療薬として有用である。
【００６０】
本発明化合物（１）又はその塩は、ＰＥＧと抗がん剤との間の結合がアミド結合だけであり、エステラーゼやカルボキシラーゼ等の血中の分解酵素による迅速な分解が避けられる他、貪食細胞の攻撃対象になり易い微粒子製剤のリポソームや高分子ミセルとは異なり、それ自体の分子サイズが非常に小さく、又、ＰＥＧの特性からも貪食細胞による攻撃を受け難く、血中で頗る安定であり、又、分子量が大きいので腎排泄速度も極めて遅いことから、腫瘍へのターゲッティングが高率的である。その結果、従来の静脈内投与や経口投与等の方法で行われていた低分子の抗がん剤の場合と比較して、投与量を極めて少なくでき、又、投与回数も大きく減らせられるばかりでなく、従来、長時間の持続点滴に頼っていた抗がん剤も一回当たりの投与時間は３０分程度で済ませられる。
【００６１】
本発明化合物（１）又はその塩の適用対象となる悪性腫瘍としては、頭頚部癌、食道癌、胃癌、結腸癌、直腸癌、肝臓癌、胆嚢・胆管癌、胆道癌、膵臓癌、肺癌、乳癌、卵巣癌、子宮頸癌、子宮体癌、腎癌、膀胱癌、前立腺癌、精巣腫瘍、骨・軟部肉腫、白血病、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫、皮膚癌、脳腫瘍、中皮腫等が挙げられる。
【００６２】
本発明化合物（１）又はその塩を医薬として用いるにあたっては、必要に応じて薬学的に許容される担体を配合して種々の形態の医薬組成物とすることができる。医薬組成物の形態としては、経口剤、注射剤、坐剤、貼付剤、軟膏剤が挙げられるが、注射剤とするのが好ましい。
【００６３】
薬学的に許容される担体としては、製剤素材として慣用の各種有機或いは無機担体物質が用いられ、固形製剤における賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、液状製剤における溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤、無痛化剤等として配合される。また、必要に応じて防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤、安定化剤等の製剤添加物を用いることもできる。
経口用固形製剤を調製する場合は、本発明化合物（１）に賦形剤、必要に応じて賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味・矯臭剤等を加えた後、常法により錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等を製造することができる。
注射剤を調製する場合は、本発明化合物（１）にpH調節剤、緩衝剤、安定化剤、等張化剤、局所麻酔剤等を添加し、常法により皮下、筋肉内及び静脈内用注射剤を製造することができる。
【００６４】
本発明の医薬を血液系の悪性腫瘍の治療に使用する場合、１時間以内の静脈内投与又は、生理食塩水や糖質輸液等に希釈して数時間以内での点滴静注のように投与するのが好ましい。
【実施例】
【００６５】
以下に実施例、試験例によって本発明を具体的に説明するが、これらは例示の目的で記載されているものであり、本発明の範囲を限定するものではない。【００６６】
実施例１
窒素雰囲気下、１−（２’−シアノ−２’−デオキシ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）シトシン塩酸塩５．０モル、トリエチルアミン１０．０モル及びジメチルホルムアミド８モルを反応容器に加え、さらにテトラ（スクシンイミジルカルボキシメチルポリエチレングリコール）ペンタエリスリトール１．０モルを加えた。１００℃に加熱し、３時間反応撹拌した。２０〜２５℃に冷却後、反応混合物をメチル  ｔｅｒｔ−ブチルエーテル１００ｍＬ中に投入し、１時間撹拌して原料を濾別した。５０〜６０°でエタノールを加えて撹拌後２０±５℃に冷却し１６時間撹拌し、メチル  ｔｅｒｔ−ブチルエーテルで洗浄する操作を繰り返し、エタノール溶液を冷却して化合物（１ａ）（ｍ＝平均２３０）を白色粉末として得た（収率８８％）。融点５４℃。化合物（１ａ）のＮＭＲスペクトルチャートを図１に示す。【００６７】
【化１１】
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【００６８】
実施例２
（１）窒素雰囲気下、１−（２’−シアノ−２’−デオキシ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）シトシン塩酸塩１モル及びビリジン１００ｍＬを反応容器に投入し、テトライソプロピルジシロキサンジクロリド１．２モルを２０〜２５℃で滴下した。４５±５℃に加熱し、２時間撹拌した。２０〜２５℃でヘキサンを加え、生成物を固体として単離した。２０〜２５℃で水中に投入し、１時間３０分撹拌し、濾過後水及びヘキサンで洗浄し、蒸発乾固して化合物（３ａ）を得た。【００６９】
【化１２】
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【００７０】
（２）窒素雰囲気下、反応容器にＮ−ｔ−ブトキシカルボニルアラニン１．２モル、ＨＢＴＵ１．５モル、トリエチルアミン２．０モル及びジクロロメタン３００ｍＬを投入し、２０〜２５℃で１時間撹拌した。化合物（３ａ）１モルを２０〜２５℃で添加し、３５±５℃に加熱し、１６時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ3水溶液を添加し、有機相を分離した。有機相を、飽和ＮａＨＣＯ3水溶液、飽和ＮＨ4Ｃｌ及び生理食塩水でそれぞれ洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥した。濾過後減圧濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチルで溶出）に付し、化合物（３ｂ）を得た（収率７７％）。【００７１】
【化１３】
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【００７２】
（３）窒素雰囲気下、反応容器に化合物（３ｂ）１モル、酢酸２モル、及びテトラヒドロフラン２００ｍＬを投入し、０±５℃に冷却後フッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム（ＴＢＡＦ）１．５モルを０±５℃で加えた。１時間反応させた後、溶媒を留去した。
窒素雰囲気下、反応容器に上記反応混合物及び酢酸エチル３００ｍＬを投入し、２５±５℃でＨＣｌ／酢酸エチル  ２Ｍを加えた。出発物質が濃ＨＣｌ／酢酸エチル溶液に速やかに溶解し、５分後に目的物が固形分として分離し始める。１時間撹拌し、濾過後酢酸エチルで洗浄し化合物（３ｃ）を得た。【００７３】
【化１４】
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【００７４】
（４）化合物（３ｃ）とテトラ（スクシンイミジルカルボキシメチルポリエチレングリコール）ペンタエリスリトールエーテルを実施例１と同様に反応させ、目的化合物（１ｂ）（ｍ＝平均２３０）を白色粉末として得た（収率８３％）。化合物（１ｂ）のＮＭＲスペクトルチャートを図２に示す。【００７５】
【化１５】
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【００７６】
実施例３
（１）窒素雰囲気下、実施例２（１）で得られた化合物（３ａ）１モル、無水コハク酸４モル及びピリジン５０ｍＬを反応容器に投入し、４０±５℃に加熱し２時間撹拌した。反応混合物を水及び酢酸エチルの混合物に添加し、１Ｍ塩酸でpHを５に調整し、３０±５℃で３０分撹拌した。有機相を分離し、水相から酢酸エチルで３回抽出し、有機相を合わせ、生理食塩水で洗浄した。無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過後、濾液を減圧濃縮後乾燥し、化合物（３ｄ）を得た。【００７７】
【化１６】
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【００７８】
（２）窒素雰囲気下、化合物（３ｄ）１モル、ＨＢＴＵ２モル、トリエチルアミン４モル及びジメチルホルムアミド１００ｍＬを反応容器に投入し、３０±５℃で５分撹拌した。ピペリジン４モルを添加し、３０±５℃で１時間撹拌した。酢酸エチル及び水を加え、有機相を分離し、有機相を生理食塩水で２回洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥した。濾過後濾液を減圧濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、ジクロロメタン／ＭｅＯＨで溶出した。溶出画分を減圧乾固し、化合物（３ｅ）を得た。【００７９】
【化１７】
0006542799.tif 000018
【００８０】
（３）化合物（３ｅ）とテトラ（スクシンイミジルカルボキシメチルポリエチレングリコール）ペンタエリスリトールエーテルを実施例１と同様に反応させ、目的化合物（１ｃ）（ｍ＝平均２３０）を白色粉体として得た（収率９４％）。化合物（１ｃ）のＮＭＲスペクトルチャートを図３示す。【００８１】
【化１８】
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【００８２】
実施例４
（１）窒素雰囲気下、反応容器に実施例３（２）の化合物（３ｅ）１モル、酢酸２．３モル及びジメチルホルムアミド５０ｍＬを投入し、０±５℃に冷却した。０±５℃でフッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム（ＴＢＡＦ）１．６モルを加え、１時間撹拌し、化合物（３ｇ）を製造した。【００８３】
【化１９】
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【００８４】
（２）化合物（３ｇ）とテトラ（スクシンイミジルカルボキシメチルポリエチレングリコール）ペンタエリスリトールエーテルを実施例１と同様に反応させ、化合物（１ｄ）（ｍ＝平均２３０）を得た。化合物（１ｄ）のＮＭＲスペクトルチャートを図４に示す。【００８５】
【化２０】
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【００８６】
実施例５
窒素雰囲気下、テトラ（カルボキシメチルポリエチレングリコール）ペンタエリスリトール１．０モル、マイトマイシンＣ４．８モル、ＨＢＴＵ５．０モル、トリエチルアミン８モル、ジメチルホルムアミド３００ｍＬを反応容器に加え、４０±５℃で３時間反応させた。２０〜２５℃に冷却後、実施例１と同様に処理して、化合物（１ｅ）を白色粉末として得た（ｍ＝平均２３０）（収率９１．４％）。化合物（１ｅ）のＮＭＲスペクトルチャートを図５に示す。【００８７】
【化２１】
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【００８８】
実施例６
（１）化合物（３ａ）に代えてマイトマイシンＣを用い、実施例３（１）と同様にして、化合物（３ｈ）を得た。【００８９】
【化２２】
0006542799.tif 000023
【００９０】
（２）化合物（３ｅ）に代えて化合物（３ｈ）を用い、実施例４（１）と同様にして化合物（３ｉ）を得た。【００９１】
【化２３】
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【００９２】
（３）化合物（３ｇ）に代えて化合物（３ｉ）を用い、実施例４（２）と同様にして化合物（１ｆ）を得た（ｍ＝平均２３０）。化合物（１ｆ）のＮＭＲスペクトルチャートを図６に示す。【００９３】
【化２４】
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【００９４】
実施例７
ゲムシタビン及びテトラ（スクシンイミジルカルボキシメチルポリエチレングリコール）ペンタエリスリトールを用い、実施例１と同様にして、化合物（１ｇ）（ｍ＝平均２３０）を白色粉末として得た（収率８２．３％）。融点５７℃。1Ｈ−ＮＭＲスペクトルチャートを図７に示す。【００９５】
【化２５】
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【００９６】
実施例８
スニチニブの脱エチル体及びテトラ（スクシンイミジルカルボキシメチルポリエチレングリコール）ペンタエリスリトールを用い、実施例１と同様にして、化合物（１ｈ）（ｍ＝平均２３０）を黄色粉末として得た（収率８７％）。融点５５℃。1Ｈ−ＮＭＲスペクトルチャートを図８に示す。【００９７】
【化２６】
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【００９８】
実施例９
ラパチニブ、テトラ（カルボキシメチルポリエチレングリコール）ペンタエリスリトール及びＨＢＴＵを用い、実施例４と同様にして化合物（１ｉ）を白色粉末として得た（収率８７．８％）。融点５６℃。1Ｈ−ＮＭＲスペクトルチャートを図９に示す。【００９９】
【化２７】
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【０１００】
実施例１０
（１）パクリタキセルにトリフルオロ酢酸を反応させて、パクリタキセルのｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を脱離させた。
（２）パクリタキセル−ｔ−ブトキシカルボニル脱離体及びテトラ（スクシンイミジルカルボキシメチルポリエチレングリコール）ペンタエリスリトールを用い、実施例１と同様にして化合物（１ｊ）を得た（収率８４．２％）。1Ｈ−ＮＭＲチャートを図１０に示す。【０１０１】
【化２８】
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【０１０２】
試験例１
ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスの右側腹部に膵臓がん細胞を５×１０6細胞移植し、７日後平均腫瘍が１００ｍｍ3に達した時点で薬物投与を開始した。薬物投与から２９日後までマウスの体重及び腫瘍体積を測定した。その結果を図１１、図１２及び表１に示す。１−（２’−シアノ−２’−デオキシ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）シトシン塩酸塩（ＤＦＰ−１０９１７）は、マウスの体内に埋め込んだミクロポンプを用いて４．５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙを皮下への持続注入を２週間連続して行った。一方、化合物（１ａ）は、１００ｍｇ／ｋｇ、２００ｍｇ／ｋｇ又は３００ｍｇ／ｋｇを週１回静脈内投与した。この化合物（１ａ）の投与量は、ＤＦＰ−１０１９７に換算して２．４ｍｇ／ｋｇ、４．８ｍｇ／ｋｇ及び７．２ｍｇ／ｋｇの週１回投与である。コントロールは、酢酸ナトリウムの緩衝液（ｐＨ＝５．０）を投与した。【０１０３】
図１１及び図１２より、化合物（１ａ）は、週１回の静脈内投与により、体重をほとんど減少させることなく、優れた腫瘍治療効果を示すことが確認された。【０１０４】
【表１】
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【０１０５】
試験例２
試験例１と同様にして、マイトマイシンＣ及び化合物（１ｅ）の抗腫瘍作用を検討した。マイトマイシンＣ（ＭＭＣ）は、３ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙを週一回静脈内投与した。一方、化合物（１ｅ）は、２５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ及び２００ｍｇ／ｋｇを週１回静脈内投与した。この化合物（１ｅ）の投与量は、ＭＭＣに換算して０．８ｍｇ／ｋｇ、１．７ｍｇ／ｋｇ、３．３ｍｇ／ｋｇ及び６．７ｍｇ／ｋｇの週１回投与である。【０１０６】
図１３及び図１４より、化合物（１ｅ）は、週１回の静脈内投与により、体重をほとんど減少させることなく、優れた腫瘍治療効果を示すことが確認された。【０１０７】
試験例３
ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスの右側腹部にヒト肺がん細胞Ａ５４９を５×１０6細胞移植し、１４日後平均腫瘍が１２７ｍｍ3に達した時点で薬物投与を開始した。化合物（１ａ）は、２００ｍｇ／ｋｇ（ＤＦＰ−１０９１７換算量は４．８ｍｇ／ｋｇ）を１週間に１回静脈内投与し、肺がんの標準薬であるペメトレキセドは３００ｍｇ／ｋｇを１週間に１回腹腔内投与した。コントロールは、生理食塩水を１週間に１回静脈内投与した。観察は２週間（合計２回投与）とした。
その結果、化合物（１ａ）は、ＤＦＰ−１０９１７換算量４．８ｍｇ／ｋｇの投与で、ペメトレキセド３００ｍｇ／ｋｇ投与群と同等の腫瘍治療効果を示した。【０１０８】
【表２】
0006542799.tif 000031
【０１０９】
試験例４
ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスの右側腹部にヒト乳がん細胞ＢＴ４７４を１×１０7細胞移植し、試験例３と同様にして薬物投与したＤＦＰ−１０９１７及び化合物（１ａ）は、１週間に１回計２回静脈内投与した。コントロールは、生理食塩水を１週間に１回投与した。【０１１０】
その結果、（表３）に示すように、化合物（１ａ）は、ＤＦＰ−１０９１７そのものに比べて１７．６／２００のＤＦＰ−１０９１７換算量の投与にもかかわらず、ゲムシタビンと同等の抗腫瘍効果を示した。【０１１１】
【表３】
0006542799.tif 000032
【０１１２】
試験例５
ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスの右側腹部にヒト膵臓がん細胞Ｐａｎｃ−１を５×１０6細胞移植し、試験例３と同様にして薬物投与した。化合物（１ｇ）は、１週間に１回計２回又は１週間に２回静脈内投与した。ゲムシタビンは１００ｍｇ／ｋｇを３日間で４回に分けて投与し、これを計４回静脈内投与した。コントロールは、生理食塩水を１週間に１回投与した。【０１１３】
その結果を（表４）に示すように、化合物（１ｇ）は、ゲムシタビンそのものに比べて１／３５〜１／４０のゲムシタビン換算量の投与にもかかわらず、ゲムシタビンの約１／２の抗腫瘍効果を示した。【０１１４】
【表４】
0006542799.tif 000033
【０１１５】
試験例５
ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスの右側腹部にヒト肺がん細胞Ａ５４９細胞を移植し、１１日後平均腫瘍が２００ｍｍ3に達した時点で薬投与を開始した。投与スケジュールは表５、表６に示す。【０１１６】
その結果を表５、表６及び図１５、図１６に示す。【０１１７】
【表５】
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【０１１８】
【表６】
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【０１１９】
表５より、化合物（１ｈ）は、スニチニブ換算量で４／５０〜８／５０の投与量で、スニチニブ脱エチル体と同等の抗腫瘍効果を示した。また、表６及び図１５より、化合物（１ｉ）は、ラパチニブ換算量で１１．６／１００〜１７．４／１００の投与量でラパチニブよりも優れた抗腫瘍効果を示した。
また、化合物（１ｈ）及び化合物（１ｉ）は、上記の投与量で何ら体重減少が認められず、安全性も高いことが確認された（図１６）。【０１２０】
試験例６
ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスの右側腹部にヒト乳がん細胞ＢＴ４７４を１×１０7細胞移植し、腫瘍体積が１００〜１５０ｍｍ3になったときに薬物投与した。投与は、１週間に１回、２週間投与した。【０１２１】
その結果、（表７）に示すように、化合物（１ｊ）は、３６％〜３７．５％の腫瘍増殖阻害率を示し、対照のパクリタキセルの２９．８％と同等或いはそれ以上の効果を示し、効果と安全性のバランスに優れた化合物であること、また、それ自体で高い水溶性を有し、水に難溶性のパクリタキセルに比べ、臨床上の投与手段を大きく改善できる新たな悪性腫瘍治療薬になり得ることが確認できた。【０１２２】
【表７】
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【図１】
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【図２】
0006542799.tif 000041
【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
0006542799.tif 000049
【図１１】
0006542799.tif 000050
【図１２】
0006542799.tif 000051
【図１３】
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【図１４】
0006542799.tif 000053
【図１５】
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【図１６】
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