(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
播種から収穫までの栽培条件を制御するためのウコギ科薬用植物の栽培方法であって、
播種した芽切り種子を、閉鎖型栽培施設で育成させて、実生苗とする第１の工程と、
前記実生苗を、気温１０℃〜２５℃、相対湿度３０％〜９０％、明期１２時間〜２０時間の閉鎖型栽培施設で所定の期間、水耕栽培して薬用栽培物とする第２の工程と、
を含む、栽培方法。
【請求項２】
前記第１の工程が、播種した芽切り種子を、気温１０℃〜２５℃、相対湿度３０％〜９０％、明期１０時間〜１８時間の閉鎖型栽培施設で、１ヶ月間〜２ヶ月間育成させて実生苗とする工程であり、
前記第２の工程が、前記実生苗を、水耕栽培装置へ移植して、気温１０℃〜２５℃、相対湿度３０％〜９０％、明期１２時間〜２０時間の閉鎖型栽培施設でさらに４ヶ月間〜１２ヶ月間以上栽培して薬用栽培物とする工程である、
請求項１に記載の栽培方法。
【請求項３】
前記第１の工程は、照度が最大でも５０００ルクスであり、前記第２の工程は、照度が５００ルクス〜１００００ルクス、ＣＯ２濃度が３５０ｐｐｍ〜１５００ｐｐｍである、請求項１または２に記載の栽培方法。
【請求項４】
前記第１の工程は、気温１０℃〜２５℃、相対湿度４５％〜７５％、明期１２時間〜１６時間であり、前記第２の工程は、気温１０℃〜２５℃、相対湿度４５％〜７５％、明期１２時間〜１８時間である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の栽培方法。
【請求項５】
前記第１の工程は、給水に水または養液を用い、前記第２の工程は、給水に養液を用いる、請求項１〜４のいずれか一項に記載の栽培方法。
【請求項６】
前記第１の工程は、自動ポンプで一日１回１０分〜３０分間給水する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の栽培方法。
【請求項７】
前記第２の工程は、底面灌水方式、バブリング方式、または、ミスト方式で水耕栽培する、請求項１〜６のいずれか一項に記載の栽培方法。
【請求項８】
前記底面灌水方式は、栽培容器の底面に養液を満たすことで前記植物へ養液を供給して栽培する方法であり、前記バブリング方式は、前記植物の地下部へ空気バブル含有の養液を供給して栽培する方法であり、前記ミスト方式は、養液を植物の地下部へ噴霧して栽培する方法である、請求項７に記載の栽培方法。
【請求項９】
前記ウコギ科薬用植物は、トチバニンジン属植物である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の栽培方法。
【請求項１０】
前記第２の工程は、前記閉鎖型栽培施設内の気温を１０℃〜１７℃として栽培する期間を含む、請求項１〜９のいずれか一項に記載の栽培方法。
【請求項１１】
播種から収穫までを人工的に栽培する、ウコギ科薬用植物の栽培方法であって、以下の（ａ）〜（ｃ）の種子から育苗する工程と、（ｄ）〜（ｅ）の水耕栽培する工程とを、含むことを特徴とする栽培方法。
（ａ）芽切り種子を実生栽培容器に播種する工程、
（ｂ）前記種子を、気温２０℃、相対湿度６０％、最大５０００ルクス以下、明期１４時間の閉鎖型栽培施設で、自動潅水装置によって給水しながら育成する工程、
（ｃ）播種後１ヶ月目に前記自動潅水装置で養液または水を供給しつつ、播種後２ヶ月目〜３ヶ月目まで育成を継続する工程、
（ｄ）前記種子から育成した実生苗を、水耕栽培装置に移植する工程、
（ｅ）前記実生苗を、気温２０℃、相対湿度６０％、ＣＯ２濃度８００ｐｐｍ〜１０００ｐｐｍ、１０００ルクス〜１４００ルクス、明期１６時間の閉鎖型栽培施設で、養液を供給しながら栽培する工程。
【請求項１２】
前記工程（ｄ）で移植した後、前記工程（ｅ）は、その後少なくとも４ヶ月間〜１２ヶ月間栽培する、請求項１１に記載の栽培方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ウコギ科薬用植物の栽培方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ウコギ科（Ａｒａｌｉａｃｅａｅ）は双子葉植物の科の一つで、木本、大型草本、およびつる性植物からなり、約６０属９００種を含む。【０００３】
ウコギ科植物は、民間薬、漢方薬として利用されるものが多く、例えば、トチバニンジン属（栃葉人参属、学名Ｐａｎａｘ）の植物は、塊根を持ちゆっくりと成長するのが特徴で、薬用成分ギンセノシドを含み、薬用植物として利用される。
トチバニンジン属の学名Ｐａｎａｘはギリシャ語で「全てを癒す」という意味で、漢方での用途を知っていたリンネが命名したためである。【０００４】
トチバニンジン属の種の多くは北半球の冷涼な地域（主に中華人民共和国、シベリア、朝鮮半島）に自生する。【０００５】
主に根が東洋医学の生薬として重用され、栽培されたものよりも野生のものの方が薬効が強いとされるため、野生の個体群はしばしば乱獲されて数を減らしてきた。【０００６】
この様に、ウコギ科植物のトチバニンジン属は、主に根が東洋医学の生薬として重用されるが、その中でも最も有名な種は、オタネニンジンである。【０００７】
オタネニンジン（学名：Ｐａｎａｘ  ｇｉｎｓｅｎｇ  Ｃ．Ａ．  Ｍｅｙｅｒ）は、前述のように、その根（生薬「人参」及び「紅参」）が漢方薬、健康食品等として使用される薬用植物である。
なお、野菜のニンジンはセリ科であり、本種の近類種ではなく全く別の種である。【０００８】
オタネニンジンは、古代から主に東アジア地域を中心に野生品が産出されていたが、近年の資源の枯渇化に伴い、圃場（ほじょう：作物を栽培する田畑、農園）での栽培化が進められている。現在、全体の７０％以上が韓国と中国で圃場栽培されており日本もこれらの国々からの輸入に大きく依存している。【０００９】
オタネニンジンは、歴史的には、奈良時代に日本に伝来したといわれているが、圃場栽培に何とか成功したのは江戸時代になってからで、現在は、主に長野県でわずかに圃場栽培が行われているにすぎない。【００１０】
オタネニンジンは、良好に栽培できたものは、根は肥大して、茎は直立し、葉は掌状複葉で、数枚輪生し、花は小さく散形状で初夏に咲き、果実は夏に紅熟する。【００１１】
生薬「人参」としては、抗疲労、抗糖尿、抗癌、抗ストレス、老化防止及び抗酸化作用など、その確かな薬理効果により非常に人気が高いことから、需要は伸びており、現代人が抱える様々な心身的問題に対して、特効薬となる可能性を秘めている。【００１２】
しかし、生産となると、通常、農家におけるオタネニンジンの圃場栽培には、播種から収穫までに少なくとも４〜６年程度の栽培期間を要し、さらに、以下に示す困難性のため、多くの難しい（秘伝の）ノウハウと共に、土壌作りから取り組まなければならない。また、収穫後は土地の栄養が失われ、１０〜１５年程度は何も育てることが出来なくなるため、１０〜２０年という長いサイクルで栽培計画を立てていく必要がある。【００１３】
オタネニンジンは、直射日光と過湿を嫌い、病害虫に弱く、また、根腐れ病菌等に弱いため連作障害が発生しやすい等のマイナス要因が重なり、非常に栽培が困難で、収穫率の低い植物である。【００１４】
根腐れ病は、カビ、線虫、病原菌等の繁殖によるもので、オタネニンジンはこれらに弱いため、一度この病気になってしまった場合、その後連作することは出来ず、土壌を消毒するか別の作物を植える等して対応せざるを得ないのが現状である。【００１５】
オタネニンジンには、多くの薬用成分が含まれるが、その成分組成及び含量は、生育環境により大きく左右され、収穫時期や乾燥・保管及び加工条件も収穫物の薬用成分含量に影響を与えるため、安定した収穫を確保することも難しい。
また、外国で圃場栽培された輸入品については、残留農薬や重金属成分が検出されるものもあり、その安全性の問題も存在する。【００１６】
この様に、オタネニンジンは、その確かな薬理効果から社会的な需要が伸びているにもかかわらず、栽培年数が長い上、栽培が難しく費やす労力が大きいため、農業労働者の高齢化が進む中では栽培が敬遠される傾向が強くなり、実際、栽培農家が著しく減少している。【００１７】
さらに、２０１１年３月の東日本大震災によって、一大産地であった福島県会津地方が壊滅的打撃を受けて生産停止となっているのが現状である。【００１８】
この様な状況を踏まえて、最近、オタネニンジンの圃場栽培の改良法として、例えば、川の上流の山間部の斜面を利用して、種子から１〜３年生育させた苗を流水中に斜めに設置して礫で固定し、非循環水を供給することにより、オタネニンジンの病害虫被害、連作障害を防止する方法が提示されている（特許文献１）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１９】
【特許文献１】国際公開第２０１２／０４６６０１号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２０】
しかしながら、上記方法は、１〜３年生育させたオタネニンジンの苗を用いて、１３ヶ月以上圃場栽培をする栽培方法であるため、手間も年数も掛かる。また、上記方法は、基本的には、苗の生育状態や、厳しい自然現象等の影響を受けるため、圃場栽培に関する土壌の質や種々の栽培条件の管理の困難性、収穫量の不安定性、収穫物の安全性担保の必要性などの問題が依然として存在する。
従って、圃場栽培に纏わる種々の困難性から解放され、栽培条件等を容易にコントロール可能で、短期間に収穫が出来、生薬として使用することのできるウコギ科薬用植物を得るのに好適な新たな栽培方法が求められている。【００２１】
この発明は、上記問題に鑑みてなされたもので、栽培が困難なウコギ科薬用植物に関して、圃場栽培に頼らず、栽培し易く、かつ、安全で品質の安定した収穫物を、より多く安定的に供給することのできる栽培方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００２２】
上記の目的を達成するため、本発明の第１の観点に係る栽培方法は、播種から収穫までの栽培条件を制御するためのウコギ科薬用植物の栽培方法であって、播種した芽切り種子を、閉鎖型栽培施設で育成させて、実生苗とする第１の工程と、前記実生苗を、気温１０℃〜２５℃、相対湿度３０％〜９０％、明期１２時間〜２０時間の閉鎖型栽培施設で所定の期間、水耕栽培して薬用栽培物とする第２の工程と、を含む。【００２３】
上記の目的を達成するため、本発明の他の観点に係る栽培方法は、
播種から収穫までを人工的に栽培する、ウコギ科薬用植物の栽培方法であって、以下の（ａ）〜（ｃ）の種子から育苗する工程と、（ｄ）〜（ｅ）の水耕栽培する工程とを、含む。
（ａ）芽切り種子を実生栽培容器に播種する工程、
（ｂ）前記種子を、気温２０℃、相対湿度６０％、最大５０００ルクス以下、明期１４時間の閉鎖型栽培施設で、自動潅水装置によって給水しながら育成する工程、
（ｃ）播種後１ヶ月目に前記自動潅水装置で養液または水を供給しつつ、播種後２ヶ月目〜３ヶ月目まで育成を継続する工程、
（ｄ）前記種子から育成した実生苗を、水耕栽培装置に移植する工程、
（ｅ）前記実生苗を、気温２０℃、相対湿度６０％、ＣＯ２濃度８００ｐｐｍ〜１０００ｐｐｍ、１０００ルクス〜１４００ルクス、明期１６時間の閉鎖型栽培施設で、養液を供給しながら栽培する工程。
【発明の効果】
【００２４】
本発明によれば、栽培が困難なウコギ科薬用植物に関して、従来の圃場栽培よりも非常に短期間の栽培、例えば、１／６〜１／４の短期間の栽培で、気象条件や自然災害の影響を受けることなく、病害虫、農薬、重金属等の汚染の少ない、安心・安全な薬用植物（生薬）を安定して生産できる。
そして、地下部組織（以下、「地下部」という）が十分に生育して、薬用成分を蓄積した薬用植物を効率的に供給することができる。
なお、本明細書では、地下部とは、根、根茎、塊茎等、地上部とは、葉、葉柄、茎、果茎、花等をいう。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】実施例４に係るオタネニンジン実生苗（播種後７０日目）の地下部の生育状況を示す写真である。図１の（ａ）は、播種後３１日目から養液供給を開始した実生苗の地下部、図１の（ｂ）は、養液供給は行わず、水供給のみで生育した実生苗の地下部である。
【図２】実施例４に係るオタネニンジン実生苗（播種後７０日目）の地下部サンプルのＨＰＬＣによる、ギンセノシドＲｂ１、Ｒｃ、Ｒｄの各分析結果例を示す図である。
【図３】実施例４に係るオタネニンジン実生苗（播種後７０日目）サンプルのＨＰＬＣによる、ギンセノシドＲｂ１、Ｒｃ、Ｒｄ含量の定量結果を示すグラフである。
【図４】実施例４に係るオタネニンジン実生苗（播種後７０日目）の地下部サンプルのＨＰＬＣによる、ギンセノシドＲｇ１、Ｒｅの分析結果例を示す図である。
【図５】実施例５に係るオタネニンジン実生苗（播種後３５１日目）の地下部サンプルのＨＰＬＣによる、ギンセノシドＲｇ１、Ｒｂ１、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｅ等の分析結果例を示す図である。
【図６】実施例５に係るオタネニンジン実生苗（播種後３５１日目）の地下部サンプルのＲｇ１含量（％乾燥重量）およびＲｂ１含量（％乾燥重量）を示すグラフである。図６の（ａ）は、Ｒｇ１含量（％乾燥重量）、図６の（ｂ）は、Ｒｂ１含量（％乾燥重量）を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
以下、本発明を詳細に説明する。本明細書の全体にわたり、単数系の表現は、特に言及しない限り、その複数形の概念をも含むことが理解されるべきである。また、本明細書において使用される用語は、特に言及しない限り、当該分野で通常用いられる意味で用いられることが理解されるべきである。したがって、他に定義されない限り、本明細書中で使用される全ての専門用語及び科学技術用語は、本発明の属する分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。矛盾する場合、定義を含めて本明細書が優先する。
【００２７】
本実施形態に係るウコギ科植物の栽培方法は、従来のウコギ科薬用植物においては実現されていない、閉鎖型栽培施設を利用した、水耕栽培による栽培方法であり、環境を人為的に制御できるものである。
【００２８】
（用語の定義）
以下に本明細書において特に使用される用語の定義を列挙する。これ以外は、本明細書の必要な箇所で定義されている。
【００２９】
本発明において、「薬用植物」とは、原則として「医薬として用い、また、医薬の原料とする植物。例えば、日本薬局方（第１６改正日本薬局方）に収載されているものを含む」をいう。
【００３０】
本発明において、「ウコギ科薬用植物」とは、ウコギ科（Ａｒａｌｉａｃｅａｅ）に属する上記「薬用植物」を指す。ウコギ科薬用植物は特に限定されないが、具体的には、例えば、オタネニンジン、トチバニンジン（Panax japonicus）、アメリカニンジン（Panax quinquefolius）等のトチバニンジン属（Panax属）に属する薬用植物；エゾウコギ（Eleutherococcus senticosus)等のウコギ属（Eleutherococcus属）に属する薬用植物；等があげられ、中でもトチバニンジン属に属する薬用植物が好ましい。
【００３１】
本発明において、「支持体」とは、植物を栽培するために、種子または実生苗を植付け、植物の地下部組織を保持するために使用されるものをいう。「支持体」の種類は特に限定されないが、土壌代替物であることが好ましく、土壌代替物としては、例えばバーミキュライト等の人工土；例えばロックウール等の天然または人工繊維からなる支持体；が挙げられる。
【００３２】
「養液」とは、植物の成長に必要な窒素、りん、カリ、金属などの栄養となる成分を含む液体をいう。栄養となる成分とは、より具体的には植物の必須元素（多量必須元素及び微量必須元素）の中から適宜選択されるものであるが、必須元素以外の元素を含んでいてもよい。なお、特に限定されないが、トチバニンジン属の植物を含めウコギ科薬用植物では養液の濃度が低いことが成長に好ましい場合があり、例えば、養液の標準処方の濃度以下であることが好ましい場合があり、より具体的には、例えば、標準処方の濃度の０．８倍以下、０．６倍以下、０．５倍以下、０．４倍以下、０．３倍以下、０．２倍以下、または０．１５倍以下の濃度であることが好ましい場合がある。養液の濃度の下限は、特に限定されないが、例えば、標準処方の濃度の０．０５倍以上、または０．１倍以上の濃度であることが好ましい場合もある。なお、トチバニンジン属に関すれば、必須元素の中では、窒素、リン、カリの他には、カルシウム及びマグネシウムの要求性が比較的高い。なお「養液」は、栄養となる成分としていわゆる化学肥料（無機肥料）を含むものが好ましいが、有機養液栽培を行う場合には有機肥料を含むものであり得る。
【００３３】
「栽培容器」とは、前記支持体を入れるための容器をいう。
【００３４】
（発明の概要）
本発明に係るウコギ科薬用植物の栽培方法は、播種した芽切り種子を、閉鎖型栽培施設で育成させて、実生苗とする第１の工程と、前記実生苗を、気温１０℃〜２５℃、相対湿度３０％〜９０％、明期１２時間〜２０時間の閉鎖型栽培施設で所定の期間、水耕栽培して薬用栽培物とする第２の工程とを含む、栽培方法である。この方法によれば、優れた品質の薬用植物を、外界の影響を実質的に遮断しつつ、従来の圃場栽培と比較して非常に短期間の栽培で得ることが出来る。
【００３５】
上記第１の工程における栽培条件は、実生苗を育成可能な条件であれば特に限定されないが、気温は１０℃〜２５℃の範囲内であることが好ましく、例えば、１０℃〜２３℃の範囲内であってもよく、１２℃〜２３℃の範囲内であってもよく、１５℃〜２０℃の範囲内であってもよい。第１の工程における相対湿度は、３０％〜９０％の範囲内であることが好ましく、例えば、４５％〜７５％の範囲内であってもよく、５０％〜７０％の範囲内であってもよく、５２％〜６５％の範囲内であってもよく、５５％〜６０％の範囲内であってもよい。第１の工程における明期は、１０時間〜１８時間（１日あたり）の範囲内であることが好ましく、例えば、１２時間〜１６時間の範囲内であってもよい。第１の工程における栽培期間は、実生苗が、水耕栽培へ適用可能な程度の大きさに成育する期間であれば特に限定されないが、例えば、少なくとも３週間以上であればよく、好ましくは少なくとも１ヶ月間〜２ヶ月間（日数換算で約２８日〜６２日）であればよい。なお、栽培期間は２カ月を超えるものであってもよい。第１の工程における照度は、実生苗の育成が可能な範囲であれば特に限定されないが、好ましくは最大でも５０００ルクスであり、例えば、１０００ルクス〜５０００ルクスの範囲内である。
【００３６】
なお、第１の工程は、芽切り種子および実生苗に対する給水に水または養液を用いる。また、給水は、自動ポンプで行うことが好ましく、この場合は、例えば、一日１回１０分〜３０分間給水すればよい。芽切り種子は、例えば上記「支持体」に播種される。
【００３７】
上記第２の工程における栽培条件は、第１の工程で得られた実生苗を引き続き育成して植物体が薬効成分を蓄積可能な条件であれば特に限定されないが、気温は１０℃〜２５℃の範囲内であることが好ましく、例えば、１０℃〜２３℃の範囲内であってもよく、１２℃〜２３℃の範囲内であってもよく、１５℃〜２０℃の範囲内であってもよい。また、第２の工程において、萌芽誘導を目的として栽培する場合は、気温は１０℃〜１７℃の範囲内であることが好ましく、１０℃〜１６℃の範囲内であることがより好ましく、１０℃〜１５℃の範囲内であることがさらに好ましい。第２の工程における相対湿度は、３０％〜９０％の範囲内であることが好ましく、例えば、４５％〜７５％の範囲内であってもよく、５０％〜７０％の範囲内であってもよく、５２％〜６５％の範囲内であってもよく、５５％〜６０％の範囲内であってもよい。第２の工程における明期は、１２時間〜２０時間（１日あたり）の範囲内であることが好ましく、例えば、１２時間〜１８時間の範囲内であってもよく、１３時間〜１７時間の範囲内であってもよく、１４時間〜１６時間の範囲内であってもよい。第２の工程における栽培期間は、所望する程度に充分な薬効成分を蓄えた薬用栽培物が得られる期間であれば特に限定されないが、４ヶ月間〜１２ヶ月間（約１２０日〜３６５日）以上であることが好ましい。また、萌芽誘導を目的として栽培する場合は、例えば、約２ヶ月間〜６カ月間（約６０日〜約１８０日）、あるいは約３ヶ月間〜６カ月間程度（約９０日〜約１８０日）であってもよい。なお、特に限定されないが、第２の工程は、照度が５００ルクス〜１００００ルクスの範囲内でかつ、ＣＯ２濃度が３５０ｐｐｍ〜１５００ｐｐｍの範囲内で行うことが好ましい。なお、第２の工程において、照度は、５００ルクス〜５０００ルクスの範囲内、５００ルクス〜３０００ルクスの範囲内、５００ルクス〜２５００ルクスの範囲内、９００ルクス〜２５００ルクスの範囲内、あるいは９００ルクス〜１５００ルクスの範囲内であってもよい。ＣＯ２濃度はより好ましくは６００ｐｐｍ〜１５００ｐｐｍの範囲内である。
【００３８】
なお、第２の工程は、実生苗に対する給水に水または養液を用いてよいが、好ましくは養液を用いる。また、特に限定されないが、給水は、自動ポンプで行うことが好ましい。なお、第２の工程における水耕栽培の方式（給水の方式）は特に限定されないが、具体的には例えば、底面灌水方式、バブリング方式、または、ミスト方式の何れかであることが好ましい。なお、底面灌水方式は、栽培容器の底面に水または養液を満たすことで植物へ水または養液を供給して栽培する方法である。バブリング方式は、植物の地下部へ空気バブル含有の水または養液を供給して栽培する方法である。ミスト方式は、水または養液を植物の地下部へ噴霧して栽培する方法である。なお、第２の工程は、第１の工程で得られた実生苗を別の栽培容器や水耕栽培装置に移植して行ってもよく、特に水耕栽培装置を用いることは好ましい一例である。水耕栽培装置の一例では、植物に対する、水または養液の供給を、自動化または半自動化してなる。
【００３９】
以下に、本発明に係るウコギ科植物の栽培方法の実施の形態を、実施例にも基づき、より詳細に説明する。
【００４０】
（実施例１）オタネニンジン芽切り種子の播種（植付け）
キムタオルに包まれたオタネニンジン芽切り種子（長野県産）より、雑菌に汚染された、あるいは損傷したものを除き、発根・発芽したもの、発根のみのものを選別した。
実生栽培容器（例えば、アラシステム（モデル植物のシロイヌナズナ用の屋内育成・種子回収キット：株式会社バイオメディカルサイエンス）のバスケット）に支持体（例えばバーミキュライト）を半分程度詰め、水で湿らせた後、発芽（発根）種子を植付け、支持体を被せた。
以下、この様な芽切り種子の植付けを、「播種」という。
【００４１】
（実施例２）閉鎖温室に播種したオタネニンジン実生苗の観察（播種後約１ヶ月目）（表１、参照）
上記のように実生栽培容器に播種（植付け）した種子を、閉鎖温室（２０℃、相対湿度６０％、１４時間明期（太陽光＋補光照明で６：００〜２０：００、最大５０００ｌｕｘ以下になるように遮光））にて、自動潅水装置ＥＹ４１００（Ｎａｔｉｏｎａｌ）を用いて一日１回１０分間給水しながら育成した。上記給水は、一日１回１０分〜３０分でもよい。
なお、すでに発芽した実生は、そのまま植付けると地上部が枯死する株が多かったため、ラップをかぶせて加湿しながら約１週間馴化した。
【００４２】
播種後約１ヶ月目（２８日目又は３１日目）の実生を観察したところ、以下の結果が得られた。
（１）播種時に発根のみの株、発芽もしている株、いずれも良好に生育した。
（２）平均活着率は、６７％（３７％〜８８％）である。（本葉展開後も、一部株は、根腐れをおこして枯死した。）
（３）本葉が枯れても、地下部が生存していれば、１ヶ月前後で新たな葉が展開してきた。
（４）頻度は少ないが、２芽出てくる株も認められた。ただし、そのいずれも形態は、初出葉と同様であった。
【００４３】
上記「活着率」は、活着率＝［観察時の活着（生存）株数／植出し実生（種子）数］×１００の式から算出する。なお、ここで、植出し実生（種子）数とは、播種した芽切り種子の全数と同義である。
ここで、地上部は枯れても、新芽ができてくる部分（根と葉柄の境目付近）が生きていれば、再生可能であるので、葉の生死にかかわらず、根を含む新芽ができる部分より下が生きている株すべてを「活着株」としてカウントした。つまり、表１の「本葉展開＋本葉枯れ＋本葉未伸長」の合計を「活着株数」としている。
【００４４】
表１は、播種後約１ヶ月（４０日目／３１日目／２８日目）の実験１〜１０の活着率を示している。
実験１〜１０のうち、実験１は、播種後４０日目、実験２〜５は、播種後３１日目、実験６〜１０は、播種後２８日目で観察したものである。
【００４５】
【表１】
0006551998.tif 000002
表１から、播種後２８日目、３１日目でも活着率が充分高いことが分かった。
【００４６】
なお、上記栽培条件に関しては、上記に限定するものではなく、例えば、気温は１０℃〜２５℃、相対湿度は３０％〜９０％、明期は１０時間〜１８時間、照度は５００ルクス〜５０００ルクスであってもよい。
【００４７】
（実施例３）オタネニンジン実生苗の生育比較１（播種後１ヶ月目に移植して養液供給を開始し、開始時又は約２週間経過後における地上部の生育比較）（表２、参照）
表１の播種後約１ヶ月（３１日目／２８日目）の実験２〜１０においてそれぞれ生育の良好な５１株ずつの生育状況をコントロールとして記録したのち移植して、その後、例えば、自動水やりタイマーＥＹ４２００Ｐ−Ｈ（Ｐａｎａｓｏｎｉｃ）を用いて、実生栽培容器（例えば、前記アラシステム）へ、容器あたり、約５００ｍＬの養液（大塚Ａ処方１／８濃度）を一日一回供給して２週間栽培したものの生育と、自動潅水装置で一日１回１０分間水のみを供給して２週間栽培したものの生育と、養液供給開始前の生育とを、比較した。なお、養液供給を開始したか否かという点を除いて、移植の前後において栽培条件の変更はしていない。
【００４８】
上記で用いた養液「大塚Ａ処方１／８濃度」（大塚アグリテクノ株式会社）とは、１．５ｇ（大塚ハウス１号）＋１．０ｇ（大塚ハウス２号）／８Ｌとしたものをいう。この濃度は、商品カタログに記載されている標準処方(大塚Ａ処方の標準培養液）の濃度の１／８の濃度である。
【００４９】
養液の組成及び濃度は、上記に限定するものではなく、目的とするウコギ科植物に応じて、あるいは植物の成長過程に伴って、適宜変更することができる。また、上記養液の処方でなくとも、他の市販の水耕用養液を用いることもできる。例えば、市販養液の通常の使用濃度を１００％とした場合に、ウコギ科植物の播種直後から１〜２ヶ月程度では、養液の濃度を１０％〜２５％程度とし、その後、植物の高さや葉の枚数が、２〜３倍程度になる等の植物の成長に合わせて、養液の濃度を５０％以上と段階的に変更してもよい。
【００５０】
【表２】
0006551998.tif 000003
表２において、数値の単位は、ｍｍであり、表中の、養液（３１）、養液（２８）、水（３１）、水（２８）は、播種後３１日または２８日目に、養液を供給して、又は水の供給のみのまま、栽培したことを示し、また、栽培日数（０、１５／１６）は、播種後約１ヶ月後に移植し、その後上記条件で養液又は水を供給した日数が、０日か、１５又は１６日（約２週間）であるかを示す。
【００５１】
この結果、播種後３１日目に、移植した株では、養液供給の場合（養液育苗）、水供給の場合（水育苗）、ともに約２週間後（「１５／１６」）における地上部の大きさに顕著な変化は認めらなかった。これは、播種した芽切り種子が、移植時に既に十分育っていたためと思われる。
一方、播種後２８日目に移植した株（上記播種後３１日目のよりやや小さい株）では、その後の約２週間の栽培で成長が認められ、その度合いは養液を供給した方が大きかった。この様に、小さめの株では生育初期に養液供給した方がその後の生育が速くなる傾向が見られた。
【００５２】
（実施例４）オタネニンジン実生苗の生育比較２（播種後３１日目に移植して養液又は水供給を行い、その後の３９日目（播種後７０日目）における生育）（表３〜表６、図１〜図４、参照）
養液又は水の供給方法は、実施例３と同様である。また、養液又は水の供給方法以外の点においても、栽培条件は、実施例３と同様である。
上記水供給のみで生育した水育苗、および、養液供給で生育した養液育苗について、それぞれ５株ずつをサンプリングし、葉及び根の大きさ、新鮮重量などを指標に生育を比較した（１）。
さらに、地上部と地下部に分け、凍結乾燥後、ＨＰＬＣによりギンセノシド類を分析した（２）。
【００５３】
（１）生育分析
【表３】
0006551998.tif 000004
（新鮮重量）：水育苗に比して養液育苗で有意に増加した（表３、ｔ検定：ｐ＝０．０００４４〜０．０３２５０）。特に地下部でその傾向は顕著であった（表３、ｔ検定：ｐ＝０．０００２３）。
（根の生育）：養液育苗では、根の先端が褐変化し、主根の伸長が止まり、根の基部が水育苗に比べ有意に肥大化（表３、ｔ検定：ｐ＝０．００００００２）して、側根が伸長していた（図１の（ａ））のに対し、水育苗では、主根の伸長が続き、養液育苗と比べて基部はあまり肥大しなかった（図１の（ｂ））。
つまり、最大根長は水育苗で、最大根径は養液育苗で大型化していた。
なお、圃場栽培で生薬として良好に栽培できたものは、基部が肥大化して薬効成分が蓄積されている。
（地上部の生育）：葉の大きさ、草丈に顕著な違いは認められなかった。
（葉色）：養液育苗では、緑色であるのに対し、水育苗では、栽培１ヶ月程度より葉の緑が抜けはじめ、黄緑から黄色に変化した。特に葉脈間の色が抜け、ところどころ、赤の斑紋が認められた。
なお、例えば、地上部を料理のツマなどで利用する場合には、約１ヶ月目までは、水育苗だけでも見た目は良く、葉色が綺麗である。
【００５４】
（２）ＨＰＬＣ分析
収穫したオタネニンジンを、地上部と地下部に分け、ミルロック凍結真空乾燥機ＴＥＭＰＯ８５（ミルロック社）を用いて２日間凍結乾燥した。得られた凍結乾燥物の全量をビーズ破砕装置（ＭＳ−１００、株式会社トミー精工）を用いて破砕し、６０％メタノール２ｍＬを加えて、１５分間振り混ぜ、遠心し、上清を分取した。さらに残留物に６０％メタノール２ｍＬを加えて同様の操作を行い、上清を合わせたのち、５ｍＬにメスアップした。この液２．５ｍＬをとり、０．１ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム溶液７５０μＬを加えて３０分間放置した後、０．１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を７５０μＬ加え、さらに６０％メタノールで５ｍＬとした。このうち５００μＬを、Ｕｌｔｒａｆｒｅｅ（登録商標）−ＭＣ  Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ  Ｆｉｌｔｅｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ（ミリポア社）にアプライし、１２，０００×ｇで１〜２分間遠心分離した。得られた溶出液のうち、２５μＬ（地下部）あるいは５０μＬ（地上部）をＨＰＬＣ分析に供した。
今回は、凍結乾燥物でＨＰＬＣ分析を行ったが、これに限定されず、通常の乾燥物でＨＰＬＣ分析を行っても良い。
【００５５】
（乾燥重量）
【表４】
0006551998.tif 000005
【００５６】
養液育苗の方が、水育苗に比べ、有意に乾燥重量が増加した（地上部：Ｐ＜０．０５、地下部：Ｐ＜０．０１（ｔ検定））。
【００５７】
（ＨＰＬＣ：ギンセノシドＲｂ１、Ｒｃ、Ｒｄの分析）図２
Ｗａｔｅｒｓ  Ａｌｌｉａｎｃｅ  ＨＰＬＣ  ｓｙｓｔｅｍ（２７９５  ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ  ｍｏｄｕｌｅ、２９９６  ｐｈｏｔｏｄｉｏｄｅ  ａｒｒａｙ  ｄｅｔｅｃｔｏｒ）（Ｗａｔｅｒｓ社）にて、以下の条件で分析した。
測定波長：２０３ｎｍ、カラム：ＴＳＫｇｅｌ  ＯＤＳ−１００Ｖ（４．６ｍｍ×１５ｃｍ、５μｍ；東ソー株式会社）、ガードカラム：ＴＳＫｇｅｌ  ｇｕａｒｄｇｅｌ  ＯＤＳ−１００Ｖ  ５μｍ（３．２ｍｍ×１．５ｃｍ；東ソー株式会社）、流速１．０ｍｌ／ｍｉｎ、カラム温度：４０℃、移動相：（Ａ）水／アセトニトリル混液（４：１）、（Ｂ）アセトニトリル、グラジエント条件：０→２０ｍｉｎ：（Ａ）１００→０％、２０→２２ｍｉｎ：（Ａ）０％、２２→２３ｍｉｎ：（Ａ）０→１００％、２３→２５ｍｉｎ：（Ａ）１００％
【００５８】
（ギンセノシドＲｂ１、Ｒｃ、Ｒｄ定量結果）表５、図３
グラジエントをかける方法により、ＨＰＬＣ分析を行い、ギンセノシドＲｂ１、Ｒｃ、Ｒｄ、それぞれの標品を用いて作成した検量線をもとに、オタネニンジン凍結乾燥物の上記ギンセノシド含量を定量した（ｎ＝５、ＨＰＬＣ反復回数＝３）。
なお、図３の棒グラフは、左からＲｂ１、Ｒｃ、Ｒｄの順で、縦軸は、これらギンセノシドの含量（％乾燥重量）を示す。
【００５９】
【表５】
0006551998.tif 000006
表５の数値の単位は、％乾燥重量である。
【００６０】
表５、図３からも分かるように、播種後７０日目で、Ｒｂ１、Ｒｃ、Ｒｄの各ギンセノシド含量は、全般的に、地上部よりも地下部で高く、特に、Ｒｄ含量は、地下部で顕著に高まる傾向が見られた。
一方、地上部におけるギンセノシド含量は、水育苗よりも養液育苗の方が、高い傾向が認められた。
【００６１】
Ｒｂ１含量は、地下部では、養液育苗、水育苗、いずれも、０．０８％程度と、両者に差は見られなかった。なお、この値は、日本薬局方の規格値、０．２％の半分程度である。
【００６２】
（ＨＰＬＣ：ギンセノシドＲｇ１の分析）図４
上記のＷａｔｅｒｓ  Ａｌｌｉａｎｃｅ  ＨＰＬＣ  ｓｙｓｔｅｍにて、以下の条件で分析した。
測定波長：２０３ｎｍ、カラム：ＴＳＫｇｅｌ  ＯＤＳ−１００Ｖ（４．６ｍｍ×１５ｃｍ、５μｍ）、ガードカラム：ＴＳＫｇｅｌ  ｇｕａｒｄｇｅｌ  ＯＤＳ−１００Ｖ  ５μｍ（３．２ｍｍ×１．５ｃｍ）、カラム温度：３０℃、移動相：水／アセトニトリル混液（４：１）。
流速１．２ｍｌ／ｍｉｎにて、日本薬局方に従った条件で、Ｒｇ１が２８分付近に溶出し、Ｒｅと分離可能であった（図４）。
【００６３】
（ギンセノシドＲｇ１定量結果）表６
日本薬局方に準拠した方法により、ＨＰＬＣ分析を行い、ギンセノシドＲｇ１の標品を用いて作成した検量線をもとに、ギンセノシドＲｇ１含量を定量した（ｎ＝５、ＨＰＬＣ反復回数＝１）。
【００６４】
【表６】
0006551998.tif 000007
表６の数値の単位は、％乾燥重量である。
【００６５】
水育苗、養液育苗、いずれも、地下部のギンセノシドＲｇ１含量は日本薬局方の規格値０．１％程度であった。
地下部の含量は、養液育苗と水育苗で違いはなかったが、地上部の含量は、養液育苗の方が、水育苗よりも高い傾向にあった。
【００６６】
（実施例５）オタネニンジン実生苗の水耕栽培（播種〜１４４日目までの育苗（播種〜２８日目までは水供給、２８日目〜１０２日目までは養液又は水を供給、１０２日目〜１４４日目までは養液を供給）後の、２０７日間（１４４日目〜３５１日目）の水耕栽培装置による水耕栽培での生育）（表７〜表１２、図５、図６、参照）
【表７】
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生育条件について、播種〜１４４日目までは、実施例２、３と同様であり、１４４日目からの水耕栽培においては、気温２０℃、相対湿度６０％、ＣＯ２濃度８００ｐｐｍ〜１０００ｐｐｍ、１０００ルクス〜１４００ルクスで明期１６時間の閉鎖型栽培施設で栽培した。
なお、上記水耕栽培の条件は、上記に限定するものではなく、例えば、気温１０℃〜２５℃、相対湿度３０％〜９０％、明期１２時間〜２０時間、５００ルクス〜１００００ルクス、ＣＯ２濃度３５０ｐｐｍ〜１５００ｐｐｍとしてもよい。
【００６７】
（Ａ）養液育苗区は、芽切り種子の播種（０日目）→養液供給開始（２８日目）→水耕栽培装置へ移植（１４４日目）→収穫成分分析（３５１日目）の手順で行った。
なお、播種後、養液供給開始までは、水のみが供給され（実施例２参照）、播種後２８日目に養液を供給（実施例３参照）後は、収穫時まで養液の供給を継続した。
【００６８】
（Ｂ）水育苗区は、芽切り種子の播種（０日目）→養液供給開始（１０２日目）→水耕栽培装置へ移植（１４４日目）→収穫成分分析（３５１日目）の手順で行った。
なお、播種後１０２日目の養液供給開始までは、水のみが供給され、１０２日目以降は、収穫時まで養液の供給を継続した。
【００６９】
（Ａ）養液育苗区、（Ｂ）水育苗区、共に、播種後１４４日目に水耕栽培装置へ移植した後、３５１日目に収穫するまでの２０７日間、以下の３方式のいずれかで養液を供給しつつ水耕栽培を行った。
【００７０】
（ａ）底面潅水方式：天然ヤシ繊維から作ったポット（コイヤー（登録商標）ポット：トミタテクノロジー株式会社）に充填した支持体（バーミキュライト）上に移植し、ポットの底面約１ｃｍが養液に浸かるように調整して栽培した。この方法は、以下の（ｂ）、（ｃ）の方式の基本型ともいえる。この際、根全体が養液を吸収したバーミキュライトに接している。
（ｂ）バブリング方式：実生苗の地下部を、約３ｃｍ×９ｃｍに切った底面給水マット（アクアサプライヤｆマットＳＲ１８０：ふじもと農材企画）で包み込み、スポンジで挟んで、発泡スチロール板に固定し、ｏｎ：１５ｍｉｎ、ｏｆｆ：３０ｍｉｎの条件でポンプを運転して養液に空気を送り込んだ。養液育苗の苗は根が短かったので養液には先端のみが浸かっている状態である。
（ｃ）ミスト方式：実生苗をスポンジで挟んで、発泡スチロール板に固定し、ｏｎ：２ｍｉｎ、ｏｆｆ：５ｍｉｎの条件でポンプを運転して、養液を実生苗の地下部に対して噴霧した。養液循環ポンプ条件は、ｏｎ：１５ｍｉｎ、ｏｆｆ：１５ｍｉｎとした。
【００７１】
（１）生育分析：オタネニンジン実生苗地下部（根）の水耕栽培方式（ａ）〜（ｃ）の違いによる生育の比較（表７、８、参照）
上記（Ａ）養液育苗区、（Ｂ）水育苗区のそれぞれについて、１４４日目に水耕栽培装置へ移植し、水耕栽培装置栽培期間（１４４日目〜３５１日目（２０７日間））中に（ａ）〜（ｃ）方式にて養液を供給しながら栽培した場合の生育状況を、比較した。
【００７２】
【表８】
0006551998.tif 000009
表８で、育苗「養液」は養液育苗区、育苗「水」は、水育苗区によるものを意味する。また、「新鮮」は、植物が新鮮な状態で各項目を測定したことを、「乾燥」は、植物を乾燥させた状態で各項目を測定したことを意味する。肥大根長は、５ｍｍ以上肥大した根の長さを意味する。
【００７３】
（新鮮：最大根長、最大根幅、肥大根長について）
最大根長については、播種後１０２日目まで水供給で育成した水育苗の場合、その後収穫まで養液供給する際に、基本型の（ａ）方式（底面灌水）（表８の栽培法４．に該当）をはじめ、（ｂ）方式（バブリング）（表８の栽培法５．に該当）、（ｃ）方式（ミスト）（表８の栽培法６．に該当）のどの方式で水耕栽培しても、総じて最大根長が長い傾向であった（平均７３．０ｍｍ、９７．０ｍｍ、８４．９ｍｍ）が、播種後２８日目から養液供給で育成した養液育苗の場合は、（ａ）方式（表８の栽培法１．に該当）又は（ｂ）方式（表８の栽培法２．に該当）で水耕栽培を行った場合は、最大根長は、上記水育苗の場合に比べてあまり長くならず（平均４１．３ｍｍ、４９．３ｍｍ）、（ｃ）方式（ミスト）の場合は、９６．２ｍｍと充分長く成長していた。
一方、最大根幅については、水育苗の場合は、（ａ）方式だけでなく、（ｂ）、（ｃ）の方式でも、５．２ｍｍ〜６．３ｍｍ程度であったが、養液育苗の場合は、（ａ）方式では７．６ｍｍ、（ｂ）方式では、９．４ｍｍ、（ｃ）方式では１０．６ｍｍと、総じて最大根幅が大きくなっていた。なお、根幅は、根径ともいう。
また、肥大（根幅５ｍｍ以上）根長については、水育苗の場合は、（ａ）方式では３．１ｍｍ、（ｂ）方式では、８．６ｍｍ、（ｃ）方式では９．３ｍｍと、（ａ）方式に比べて、（ｂ）、（ｃ）方式による方が、顕著に長いとの結果を得た。一方、養液育苗の場合は、（ａ）方式では１１．６ｍｍ、（ｂ）方式では、１７．９ｍｍ、（ｃ）方式では１２．５ｍｍと、（ｂ）方式が（ａ）、（ｃ）方式に比べて、顕著に長いとの結果であった。
【００７４】
（全体新鮮重量、根乾燥重量について）
表８の、全体新鮮重量については、水育苗は、基本型（ａ）方式の２９７ｍｇに比較して、（ｂ）、（ｃ）方式では、４２３ｍｇ、４１３ｍｇと増加し、養液育苗は、（ａ）方式４６０ｍｇに比較して、（ｂ）、（ｃ）方式では、８３９ｍｇ、７２９ｍｇと、２倍近く増量した。
一方、根乾燥重量については、水育苗は、（ａ）方式の６７ｍｇに比較して、（ｂ）、（ｃ）方式では、９７ｍｇ、１０８ｍｇと増加し、他方、養液育苗は、（ａ）方式の９８ｍｇに比較して、（ｂ）、（ｃ）方式では、１８８ｍｇ、１８４ｍｇと、約２倍も増加するという優れた結果を得た。
【００７５】
まとめると、播種後２８日目より養液で育苗した苗（養液育苗）では、方式（ａ）の底面潅水栽培での根の成長に比して、方式（ｃ）のミスト栽培では細根の伸長が促進し、方式（ｂ）のバブリング（不織布）栽培では根肥大部の伸長が促進され、根の乾燥重量が増加していた。
一方、播種から１０２日目までは水のみ供給して育成した水育苗で、播種後１０２日目から養液を供給する、底面潅水方式（ａ）による栽培では顕著な根の成長は認められず、ミスト方式（ｃ）やバブリング（不織布）方式（ｂ）による栽培では根肥大部の伸長が促進され、根の乾燥重量がやや増加した。
【００７６】
以上のことから、全体としては、（ａ）底面灌水方式（表８の栽培法１．、４．）と比較した場合、（ｂ）バブリング方式（表８の栽培法２．、５．）や（ｃ）ミスト方式（表８の栽培法３．、６．）により栽培を行った場合は、最大根幅、最大根長、肥大根長、新鮮重量、根乾燥重量の全ての指標で増加していた。
また、養液育苗（表８の栽培法１．〜３．）は、水育苗（表８の栽培法４．〜６．）より、総じて最大根幅、肥大根長、新鮮重量、根乾燥重量が増大した。
【００７７】
ここで、日本薬局方（第１６改正）には、生薬「人参」として、「人参」性状（径０．５ｃｍ以上）と薬用成分規格値（ギンセノシドＲｇ１：０．１０％以上、ギンセノシドＲｂ１：０．２０％以上）とを満たすことが規定されている。
なお、上記径（根径）とは、乾燥状態での根径（根幅）を意味する。
【００７８】
薬用成分規格値については後述することとし、ここでは、日本薬局方に規定されている生薬「人参」としての性状である、「根径５ｍｍ以上」を満たすか否かについて検討すると、乾燥根の径（最大根幅）が、水育苗の場合は、平均で、（ａ）底面潅水方式（表８の栽培法４．）では３．７ｍｍ、（ｂ）バブリング方式（表８の栽培法５．）では４．３ｍｍ、（ｃ）ミスト方式（表８の栽培法６．）では４．３ｍｍと、日本薬局方の基準に満たないレベルであるが、養液育苗の場合は、平均で、（ａ）方式（表８の栽培法１．に該当）では４．９ｍｍ、（ｂ）方式（表８の栽培法２．）では６．１ｍｍ、（ｃ）方式（表８の栽培法３．）では６．７ｍｍと、（ｂ）方式、あるいは、（ｃ）方式にて水耕栽培することで日本薬局方の規定を満たしていた。
【００７９】
以上の結果から、圃場栽培での２〜６年という長期の栽培期間に対して、本実施例では、「２．養液−バブリング」栽培法（養液育苗した後、バブリング方式で水耕栽培する方法）、および、「３．養液−ミスト」栽培法（養液育苗した後、ミスト方式で水耕栽培する方法）により、播種から３５１日という短い栽培期間で、日本薬局方規定の径５ｍｍ以上の肥大根を有する収穫物を得ることが出来、これら方法が、水育苗を水耕栽培した場合（「４．〜６．」の栽培法）よりも、最大根幅および肥大根長がさらに顕著に増大する、より優れた栽培法であることが判明した。
【００８０】
（２）ＨＰＬＣ分析：播種後３５１日（栽培装置移植後２０７日後）のオタネニンジンのギンセノシド類の分析
（ギンセノシド類の抽出）
オタネニンジンサンプルを５０℃の乾燥機で２日間乾燥（重量変化がなくなるまで）→乾燥物全量を２５００ｒｐｍ、３０ｓｅｃ×３の条件でビーズ破砕（トミー精工ＭＳ−１００）→破砕物のうち、１００ｍｇ（満たない場合は全量使用）に６０％メタノール３ｍＬを数回に分けて加えて、１５分間振り混ぜる→遠心分離し、上清を新しいプラスチックチューブへ、残留物には６０％メタノール２ｍＬを加えて同様の操作を繰り返す→遠心分離した上清を合わせ、６０％メタノールを加えて正確に５ｍＬにメスアップ→そのうち２．５ｍＬを正確にとり、０．１ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム溶液７５０μＬを加えて３０分間放置→０．１ｍｏｌ／Ｌの塩酸７５０μＬを加えて、中和→中和後、６０％メタノールを加えて正確に５ｍＬにメスアップ→このうち５００μＬをＵｌｔｒａｆｒｅｅ（登録商標）−ＭＣ  Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ  Ｆｉｌｔｅｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ（ミリポア社）にアプライ→１２，０００×ｇで１〜２分間遠心分離し、溶出液を別容器にとる→溶出液のうち２００μＬをポリプロピレンバイアルに移し、２０μＬを分析。
（使用標品）
ギンセノシドＲｂ１、Ｒｂ２、Ｒｂ３、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｆ、Ｒｇ１、Ｒｇ２、Ｒｈ１、Ｆ１、Ｆ２（合計１２種）
（ＨＰＬＣ分析条件）
使用機器：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｌｌｉａｎｃｅ  ＨＴ  ＨＰＬＣ  ｓｙｓｔｅｍ（２７９５  ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ  ｍｏｄｕｌｅ、２９９６  ｐｈｏｔｏｄｉｏｄｅ  ａｒｒａｙ  ｄｅｔｅｃｔｏｒ）
カラム：ＴＳＫｇｅｌ  ＯＤＳ−１００Ｖ（４．６ｍｍ×２５ｃｍ、５μｍ；東ソー株式会社）
ガードカラム：ＴＳＫｇｅｌ  ｇｕａｒｄｇｅｌ  ＯＤＳ−１００Ｖ  ５μｍ（３．２ｍｍ×１．５ｃｍ；東ソー株式会社）
カラム温度：４０℃、流速：０．６ｍＬ／ｍｉｎ、測定波長：２０３ｎｍ、移動相：（Ａ）アセトニトリルと（Ｂ）ＭｉｌｌｉＱ水のグラジエント
【００８１】
図５は、解析例として、標品１２種のスタンダードミックス（図５下）および水耕栽培オタネニンジン（養液育苗−底面潅水）（図５上）の、２０３ｎｍのＨＰＬＣクロマトグラムを示している。
【００８２】
（ＨＰＬＣ解析による、ギンセノシドＲｅ、Ｒｇ１、Ｒｆ、Ｒｂ１、Ｒｃ、Ｒｂ３、Ｒｄの含量および収量の結果）
（ａ）水育苗での各ギンセノシドの含量（％乾燥重量）および収量（ｍｇ／根）
【表９】
0006551998.tif 000010
【００８３】
（ｂ）養液育苗での各ギンセノシドの含量（％乾燥重量）および収量（ｍｇ／根）
【表１０】
0006551998.tif 000011
【００８４】
上記表９、表１０の各ギンセノシドＲｅ、Ｒｇ１、Ｒｂ１、Ｒｃ、Ｒｄの含量結果をまとめると、表１１、図６の様になる。
【表１１】
0006551998.tif 000012
【００８５】
（ｃ）市場品生薬試料及び圃場栽培品での各ギンセノシドの含量（％乾燥重量）
従来の圃場栽培から得られた、長野県産６年生根（６年間圃場で栽培した圃場栽培品）、長野県産５年生根、長野県産３年生根、長野県産２年生根、茨城県産２年生根の、各圃場栽培品、及び、市場品生薬試料（市販のニンジン生薬）の、各ギンセノシドの含量結果を、表１２に示した。
【表１２】
0006551998.tif 000013
【００８６】
（各ギンセノシドの含量（％乾燥重量）に関する、水育苗または養液育苗による水耕栽培品と、市場品生薬試料及び圃場栽培品の比較と検討）表１１、図６、表１２、参照。
ここで、前述したように、日本薬局方（第１６改正）には、生薬「人参」として、「人参」性状（径０．５ｃｍ以上）を有することの他に、薬用成分規格値（ギンセノシドＲｇ１：０．１０％以上、ギンセノシドＲｂ１：０．２０％以上）を満たすことが規定されている。
【００８７】
表１１、図６を検討すると、水育苗、養液育苗のいずれの場合でも、また、水耕栽培法が底面灌水方式、バブリング方式、ミスト方式のいずれの場合でも、本実施例の水耕栽培法により得られた水耕栽培品（根）は、上記日本薬局方規格値を確実にクリアしていることが判明した。
【００８８】
本実施例による水耕栽培品の各ギンセノシド成分含量（表１１、図６）は、実際の圃場栽培品である２〜６年生根のそれら（表１２）と比較しても遜色のない、ほぼ同等の値を有していた。
【００８９】
以上の結果から、本発明に係る水耕栽培法を用いれば、栽培条件を人工的にコントロールすることで、圃場栽培による感染、労力、収穫の不安定性などに関する種々様々な困難性を解消することができ、有効成分である複数のギンセノシド成分に関して、第１６改正日本薬局方記載の「人参」の薬用成分規格値（ギンセノシドＲｇ１：０．１０％以上、ギンセノシドＲｂ１：０．２０％以上）を満たす生薬「人参」を、短期間に、安定的に提供出来ることが示された。
【００９０】
以下、まとめると、
（１）本実施例の水耕栽培品は、わずか、播種後３５１日という栽培期間で、上記日本薬局方記載の「人参」性状（径０．５ｃｍ以上）と薬用成分規格値（ギンセノシドＲｇ１：０．１０％以上、ギンセノシドＲｂ１：０．２０％以上）を達成することができただけでなく、上記日本薬局方の規格値に対して、Ｒｇ１は、２．５倍〜３．８倍、Ｒｂ１は２．１倍〜３．４倍というかなり高い含量が得られた（表１１、図６参照）。
なお、本実施例の水耕栽培のうち、Ｒｇ１含量は、水育苗法で上記日本薬局方規格値の２．５倍〜３．８倍、養液育苗法で上記規格値の３．４倍〜３．７倍、また、Ｒｂ１含量は、水育苗法で上記日本薬局方規格値の１．９倍〜３．２倍、養液育苗法で上記規格値の２．１倍〜３．４倍となり、水育苗法、養液育苗法の違いに関わらず、上記規格値より一層高い含量を得ることが出来た（表１１、図６）。
（２）本実施例の水耕栽培品において、底面灌水方式、バブリング方式、ミスト方式の各栽培法による顕著な含量の違いはないが、バブリング方式では全体的に含量が高く、底面潅水方式では含量が低い傾向にあった（表１１、図６）。
（３）本実施例の水耕栽培品は、従来の２年〜６年生の圃場栽培品や市場品生薬試料に匹敵する値の各ギンセノシド含量を有する（表１１、図６、表１２、参照）。
（４）水耕栽培品は、全体としてＲｅ含量が高く、その意味においては２年生根（圃場栽培）のギンセノシド組成に近い傾向にあった（表１１、１２、参照）。
（５）各ギンセノシド含量に関して全体的に成績が良かったのは、養液育苗でバブリング方式により栽培した場合であった。
（６）収量に関して、特にＲｇ１、Ｒｂ１については、水育苗法（表９）と養液育苗法（表１０）の平均値を検討すると、水育苗法あるいは養液育苗法の中では、底面灌水式栽培より、バブリング方式、ミスト方式の方がより多い収量を示しており、また、水育苗法と養液育苗法とを比較すると、養液育苗法が全体的に多い収量を示し、特に、バブリング方式、次にミスト方式での収量の増大が顕著であった（表９、表１０）。
（７）圃場栽培品に関しては、２〜６年生の圃場栽培品の成分比較を行うと、Ｒｇ１は栽培年数が増えると増加し、Ｒｅ、Ｒｃ、Ｒｄは逆に減少し、Ｒｂ１は年生に依存しない傾向にあった（表１２）。
（８）本実施例の、わずか、播種後３５１日という栽培期間で、日本薬局方記載の生薬「人参」性状（径０．５ｃｍ以上）と薬用成分規格値（ギンセノシドＲｇ１：０．１０％以上、ギンセノシドＲｂ１：０．２０％以上）を全て達成することができたのは、養液育苗を、バブリング方式、あるいは、ミスト方式により水耕栽培した場合であった。
水育苗を用いる方法を含めて、上記以外の方法は、上記薬用成分規格値は３５１日目で既にクリアしているため、さらに栽培を続けて、最大根幅（根径）が５ｍｍ以上となるのを待って収穫することもできる。
【００９１】
（各ギンセノシドの効能例）
ギンセノシドとは、サポニンの一種で、高麗人参（オタネニンジン）などの有効成分として知られている。ギンセノシドの効能の仕組みはあまり明らかになっていないが、様々な効果があるとされ、歴史的にも臨床試験的にもその効能はかなり高いと考えられている。実際、ギンセノシドの効果・効能としては、免疫力強化、脳機能の活性化、記憶力向上などがあるとされている。
【００９２】
生薬人参に含まれる有効成分の各種ギンセノシドの効能について、その一例を示す（第十六改正日本薬局方解説書  第１分冊（通則／生薬総則／製剤総則／一般試験法）（廣川書店、２０１１）等、参照）。
（１）Ｒｇ１：記憶学習機能改善作用、中枢神経興奮作用、抗疲労・疲労回復作用、抗血栓効果、性機能改善効果（血管拡張効果）等。
（２）Ｒｂ１：中枢神経抑制作用、催眠作用、鎮痛作用、精神安定作用等。
（３）Ｒｅ：抗高血糖効果、肝臓の損傷を保護する効果、骨髄細胞分裂促進作用等。
（４）Ｒｃ：鎮痛作用、高脂血または糖尿病の改善効果、中枢神経抑制作用、蛋白質および脂質の合成促進等。
（５）Ｒｄ：副腎皮質ホルモン分泌促進作用等。
【００９３】
このように、オタネニンジンのような薬用人参は、独自のギンセノシドを数種類以上含有し、各ギンセノシドはそれぞれ個別に有用な効能を有している。
【００９４】
（実施例６）オタネニンジン実生苗の水耕栽培での萌芽誘導（１）
播種後３５１日目までは、実施例５に示すものと同じ条件で、オタネニンジン実生苗を育成し、水耕栽培をした。播種後３５１日目以降は、引き続き同じ水耕栽培装置と閉鎖型栽培施設とを用いて、相対湿度６０％、ＣＯ２濃度８００ｐｐｍ〜１０００ｐｐｍ、１０００ルクス〜１４００ルクスで明期１６時間の条件下で、オタネニンジン実生苗の水耕栽培を行った。但し、温度条件については、播種後３５３日目に２０℃から１０℃へ変更し、さらに、播種後４６５日目に１０℃から１５℃へ変更をして栽培をした。そして、温度条件を１０℃に変更後、１１２日目（播種後４６５日目）、１２３日目（播種後４７６日目）、１４５日目（播種後４９８日目）、１６７日目（播種後５２０日目）に、オタネニンジンの成育調査を行った。栽培条件等は、以下の表１３に示す通りであり、表１３中の用語のうち表７と同じ用語は、表７と同じ意味である。また、栽培した個体数は、後述の表１４中にｎとして示している。
【００９５】
【表１３】
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【００９６】
オタネニンジンの成育調査は、萌芽率（％）、葉数（枚）、小葉数（枚）、葉身長（ｍｍ）、葉身幅（ｍｍ）、頂小葉の小葉身長（ｍｍ）、頂小葉の小葉身幅（ｍｍ）、葉柄長（ｍｍ）、及び、茎長（ｍｍ）の各項目を観察するという観点で行った。なお、萌芽率（％）以外の項目は、平均値（mean)と標準偏差（ＳＤ）とを求めて評価した。また、萌芽率（％）は、一度地上部が枯死した状態となった個体数（ｎ）のうちの何％に、新芽の萌芽が見られたかを表す。なお、播種後３５３日目に２０℃から１０℃へ温度を変更した時点で、すべての個体の地上部は枯死状態にあった。成育調査の結果を、以下の表１４に示す。なお、表１４において、頂小葉の小葉身長、および、頂小葉の小葉身幅はそれぞれ、小葉身長、および、小葉身幅として示す。
【００９７】
【表１４】
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【００９８】
表１４に示すように、温度条件を１０℃に変更する低温処理を開始後３カ月程度から萌芽が見られるようになり、低温処理を開始後４カ月から５カ月目にかけて特に旺盛に萌芽し、最終的に、平均で６割以上の個体が萌芽した。そして、さらに栽培期間を延ばすことにより萌芽率がさらに高まることが期待される。
【００９９】
（実施例７）オタネニンジン実生苗の水耕栽培での萌芽誘導（２）
オタネニンジン芽切り種子を、バーミキュライト（有限会社タカムラ）を充填したツリーポット（株式会社山利製作所）に播種し、適宜、水を供給しながら、肥料分を加えずに育成した。播種後約２カ月を経過した後に、芽切り種子が順次発芽し、播種から約７カ月後に、成育の比較的揃った１２株（播種から約５カ月後に発芽した株：すなわち、約２カ月育成した実生苗）を、バーミキュライトを充填した別のツリーポットに移植し、「大塚Ａ処方１／８濃度」を養液として、底面潅水方式に準じて水耕栽培を行った。なお、水耕栽培の途中において、カビ、虫等が発生することを防止するため、充填したバーミキュライトの上面に、より排水性の高いビーナスライト（芙蓉パーライト株式会社）を約１ｃｍの厚さで充填した。
【０１００】
なお、播種の工程を含め、全て同一の閉鎖型栽培施設の中で共通の栽培条件で栽培をした。栽培条件は、温度１５℃、相対湿度５５％、ＣＯ２濃度は制御せず（約３５０ｐｐｍ〜約５００ｐｐｍ）、２０００ルクスで明期１４時間の条件である。水耕栽培の結果、播種から１０〜１３カ月後（上記１２株の発芽から５〜８カ月後）に、オタネニンジンの地上部は全て枯死したが、播種から約１３カ月後に１株（萌芽率８．３％）で新芽が萌芽し、播種から約１４カ月後に５株（萌芽率４１．７％）で新芽が萌芽し、播種から約１６カ月後に９株（萌芽率７５．０％）で新芽が萌芽し、播種から約２２カ月後に１０株（萌芽率８３．３％）で新芽が萌芽した。
オタネニンジンは自然環境下では、秋に地上部が枯死して、翌春に新芽が萌芽して成育するが、この際、冬の低温に晒されることが萌芽誘導の引き金となっていることが知られていた。また、３〜５℃で９０日〜１２０日程度の低温処理を施すことで、高い確率で萌芽が誘導されることも知られていた。しかしながら、実施例６及び７では、オタネニンジンの地上部の成育が可能な１０℃〜１５℃という温度条件において、高い確率で新芽の萌芽も誘導できることが示された。なお、萌芽の誘導が可能になれば、新葉の展開および成長によって、オタネニンジンの地下部のさらなる肥大や伸長を誘導し得る。
【０１０１】
以上説明したように、本発明に係る水耕栽培法を用いれば、環境を人為的に制御できる閉鎖系栽培施設を利用して、薬用として用いるウコギ科植物を栽培することができ、従来の１／６〜１／４の短期間の栽培で、気象条件や自然災害の影響を受けることなく、病害虫、農薬、重金属等の汚染の少ない、安心・安全な薬用植物（生薬）を生産できる。
つまり、栽培条件を人工的にコントロールすることで、従来の圃場栽培に関する種々様々な問題を解消することができ、複数のギンセノシド成分含量と根径に関して、日本薬局方で規定された基準値を満たす栽培品を、安全性の高い高品質の状態で、短期間に、安定して供給することが出来る。
さらに、本発明によれば、適切な栽培管理を行うことにより、無農薬栽培や多角栽培が可能となり、薬用のウコギ科植物の国内生産の活性化を推進することが可能であり、また、労働人口の確保にも繋がり得る。
【０１０２】
本発明に係る栽培方法は、以下のような方法であってもよい。
１）播種から収穫までの栽培条件を制御するためのウコギ科薬用植物の栽培方法であって、播種した芽切り種子を、気温１０℃〜２５℃、相対湿度３０％〜９０％、明期１０時間〜１８時間の閉鎖型栽培施設で、１ヶ月間〜２ヶ月間育成させて実生苗とする第１の工程、前記実生苗を、水耕栽培装置へ移植して、気温１０℃〜２５℃、相対湿度３０％〜９０％、明期１２時間〜２０時間の閉鎖型栽培施設でさらに４ヶ月間〜１２ヶ月間以上栽培して薬用栽培物とする第２の工程、を含む、栽培方法。
２）上記１）の栽培方法において、前記第１の工程は、気温２０℃、相対湿度６０％、明期１４時間であり、前記第２の工程は、気温２０℃、相対湿度６０％、明期１６時間である、栽培方法。
【０１０３】
なお、この発明は上記実施の形態に限定されず、種々の変形及び応用が可能である。
例えば、気温、照度などの栽培条件、水や養液の供給方法、養液の組成や濃度、苗や水耕栽培開始後の栽培日数などは、栽培技術・養液の組成・分析技術の進展等により、適宜、修正や追加することが可能である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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