(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
狭窄した血管の外科的処置を受けた又は受けると予想されるヒト対象で主要臨床有害事象が起こる可能性を低下させるための医薬品の製造における抗ＩＬ−１α抗体の使用であって、前記主要臨床有害事象が、３０日死亡、脳卒中、心筋梗塞／不安定狭心症、緊急の外科的血管再生術、標的肢の著しい塞栓形成、標的血管の血栓症又は慢性的な虚血肢の症状の悪化であることを特徴とする使用。
【請求項２】
請求項１に記載の使用において、前記抗ＩＬ−１α抗体がモノクローナル抗体であることを特徴とする使用。
【請求項３】
請求項２に記載の使用において、前記モノクローナル抗体がＩｇＧ１であることを特徴とする使用。
【請求項４】
請求項２に記載の使用において、前記モノクローナル抗体がＭＡＢｐ１の相補性決定領域を含むことを特徴とする使用。
【請求項５】
請求項２に記載の使用において、前記モノクローナル抗体がＭＡＢｐ１であることを特徴とする使用。
【請求項６】
狭窄した血管の外科的処置を受けた又は受けると予想されるヒト対象で再狭窄が起こる可能性を低下させるための医薬品の製造における抗ＩＬ−１α抗体の使用。
【請求項７】
請求項６に記載の使用において、前記抗ＩＬ−１α抗体がモノクローナル抗体であることを特徴とする使用。
【請求項８】
請求項７に記載の使用において、前記モノクローナル抗体がＩｇＧ１であることを特徴とする使用。
【請求項９】
請求項７に記載の使用において、前記モノクローナル抗体がＭＡＢｐ１の相補性決定領域を含むことを特徴とする使用。
【請求項１０】
請求項７に記載の使用において、前記モノクローナル抗体がＭＡＢｐ１であることを特徴とする使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、「Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｔｒｅａｔｉｎｇ  Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ」という表題で２０１２年１０月４日に出願された米国仮特許出願第６１／７０９，７５４号明細書の優先権を主張する。
【０００２】
本発明は全体として、医学、血管生物学及び免疫学の分野に関する。より具体的には、本発明は、血管疾患に関連する合併症を予防するための、インターロイキン１α（ＩＬ−１α）に特異的に結合する抗体（Ａｂ）等の薬剤の使用、及び合併症の処置に関する。
【背景技術】
【０００３】
バルーン血管形成術後の及びステント留置後の冠状動脈の再狭窄は、介入的心臓病学での罹患の主な原因の内の１つである。再狭窄は、手術（即ちバルーン血管形成術）から持続する損傷に対する炎症反応及びステント自体に対する反応に起因すると考えられる。実際に、ステント留置後の再狭窄率を低下させたいという要望により、近年では薬剤溶出ステント（ＤＥＳ）が登場している。冠状動脈中でシロリムスを溶出するステント及びパクリタキセルを溶出するステントの研究では、ベアメタルステントと比較して再狭窄率の低下が示されているが、より最近のメタアナリシスでは、これらのステントでの遅発性ステント血栓症及び死亡の割合の見かけ上の増加について懸念が生じている。
【０００４】
再狭窄に必須である新生内膜過形成のプロセスを妨げるだけでなく、ＤＥＳには、ステントの管腔表面の再内皮化を制限するという望ましくない傾向がある。結果として永久に曝されるステント表面により、抗凝固療法の休止と同時に遅発性血栓形成が患者に生じやすくなると思われる。継続中の抗凝固療法はそれ自体に相当な罹患率がないわけではないことから、ステントの配置によって誘発される新生内膜過形成を制限するためのその他の機構はとても興味深い。
【０００５】
血管再生術後の冠状動脈の再狭窄の原因となる炎症プロセスは、末梢動脈疾患への介入後の血管開存性の消失にも関与する。浅大腿動脈は介入が特に頻繁な部位であり、再狭窄率が高い。病変の長さ、下肢の血管に関連する異常なトルク及び抗凝固の必要性に起因して、大腿膝窩動脈系が必ずしもステント留置に理想的に適しているとは限らない。バルーン血管形成術のみにより、又はステント留置を伴う若しくは伴わないアテローム切除術により、血管再生術を行なうことができる。再狭窄は、血管再生術に対する免疫反応の結果として起こる。
【発明の概要】
【０００６】
本発明は、ＩＬ−１αを特異的に標的とする薬剤が、狭窄した血管への外科的処置（例えば、ステント留置術、バルーン血管形成術及びアテローム切除術）を受けた患者での主要臨床有害事象（ＭＡＣＥ）及び再狭窄の割合を低下させることができるという発見に基づく。
【０００７】
従って、本発明は、狭窄した血管の外科的処置を受けた又は受けると予想される哺乳類対象で主要臨床有害事象が起こる可能性又はこの哺乳類対象で起こる主要臨床有害事象の重症度を低下させる方法において、薬学的に許容される基剤と、ある量の、対象で主要臨床有害事象が起こる可能性又は対象で起こる主要臨床有害事象の重症度を低下させるのに有効な、抗ＩＬ−１α抗体（Ａｂ）等のＩＬ−１α標的剤とを含む医薬組成物を対象に投与するステップを含む方法を特徴とする。
【０００８】
また、狭窄した血管の外科的処置を受けた又は受けると予想される哺乳類対象で再狭窄が起こる可能性を低下させる（又は再狭窄が起こるまでの時間を延ばす）方法において、薬学的に許容される基剤と、ある量の、血管が再狭窄する可能性を低下させるのに有効な、抗ＩＬ−１αＡｂ等のＩＬ−１α標的剤とを含む医薬組成物を対象に投与するステップを含む方法も本発明の範囲内である。
【０００９】
さらに、本発明は、狭窄した血管の外科的処置を受けた又は受けると予想されるヒト対象で主要臨床有害事象が起こる可能性を低下させるための、抗ＩＬ−１αＡｂ等のＩＬ−１α標的剤の使用と、狭窄した血管の外科的処置を受けた又は受けると予想されるヒト対象で再狭窄が起こる可能性を低下させるための、抗ＩＬ−１αＡｂ等のＩＬ−１α標的剤の使用とに関する。
【００１０】
ＩＬ−１α標的剤は、抗ＩＬ−１αモノクローナルＡｂ（ｍＡｂ）等の抗ＩＬ−１αＡｂであることができる。抗ＩＬ−１αＡｂは、ＭＡＢｐ１（この抗体の説明に関して２０１１年９月２日に出願された米国特許出願第１３／２２５，０２９号明細書を参照）と命名されたｍＡｂ等のＩｇＧ１又はＭＡＢｐ１の１つ又は複数の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含むｍＡｂであることができる。
【００１１】
ＩＬ−１α標的剤を、皮下への、静脈内への又は筋肉内への注射により対象に投与することができる医薬組成物に製剤化することができる。本方法では、患者に投与される用量は、少なくとも０．５（例えば、少なくとも０．５、１、２、２．５、３、３．７５、４又は５）ｍｇ／ｋｇ体重であることができる。
【００１２】
別途定義しない限り、本明細書で使用する全ての技術用語は、本発明が属する分野の当業者によって一般に理解されているのと同じ意味を有する。生物学的用語の一般に理解されている定義を、Ｒｉｅｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｌｏｓｓａｒｙ  ｏｆ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ：Ｃｌａｓｓｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ，５ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９１及びＬｅｗｉｎ，Ｇｅｎｅｓ  Ｖ，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９４に見出すことができる。医学用語の一般に理解されている定義を、Ｓｔｅｄｍａｎ’ｓ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ，２７ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，２０００に見出すことができる。
【００１３】
本明細書で使用する場合、「抗体」又は「Ａｂ」とは、免疫グロブリン（Ｉｇ）、同種の若しくは異種のＩｇの溶液又はＩｇの混合物のことである。「Ａｂ」はまた、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片及びＦ（ａｂ’）２断片等のＩｇの断片及び改変型、並びにｓｃＦｖ’、ヘテロ抱合Ａｂ、及び抗原特異性を付与するためにＩｇ由来のＣＤＲを利用する同様の人工分子を指すことができる。「モノクローナル抗体」又は「ｍＡｂ」とは、１つのクローンＢ細胞株により発現されたＡｂである、又は特定の抗原の特定のエピトープと免疫反応することが可能な１種の抗原結合部位のみを含有するＡｂ分子の集団のことである。「ポリクローナル抗体」又は「ポリクローナルＡｂ」とは、異種Ａｂの混合物のことである。典型的には、ポリクローナルＡｂは、特定の抗原に結合する無数の異なるＡｂ分子を含むことができ、その異なるＡｂの内の少なくとも一部が、その抗原の異なるエピトープと免疫反応する。本明細書で使用する場合、ポリクローナルＡｂは、２種以上のｍＡｂの混合物であることができる。
【００１４】
Ａｂの「抗原結合部分」とは、ＡｂのＦａｂ部分の可変領域内に含まれ、Ａｂに抗原特異性を付与するＡｂの部分（即ち、典型的にはＡｂの重鎖及び軽鎖のＣＤＲにより形成される三次元ポケット）のことである。「Ｆａｂ部分」又は「Ｆａｂ領域」とは、パパインで消化したＩｇの抗原結合部分を含有する、そのＩｇのタンパク質分解断片のことである。「非Ｆａｂ部分」とは、Ｆａｂ部分内ではないＡｂの部分のことであり、例えば「Ｆｃ部分」又は「Ｆｃ領域」のことである。Ａｂの「定常領域」とは、可変領域外のＡｂの部分のことである。定常領域内に一般に包含されるのは「Ａｂのエフェクター部分」であり、エフェクター部分とは、免疫反応を促進するその他の免疫系成分への結合に関与するＡｂの部分のことである。そのため、例えば、（Ａｂの抗原結合部分を介さずに）補体成分又はＦｃ受容体に結合するＡｂの部位は、そのＡｂのエフェクター部分である。
【００１５】
Ａｂ等のタンパク質分子に言及する場合、「精製されている」とは、そのような分子を天然に伴う成分から分離されていることを意味する。典型的には、Ａｂ又はタンパク質が、天然に付随する非Ａｂタンパク質又はその他の天然に存在する有機分子を少なくとも約１０重量％（例えば、９重量％、１０重量％、２０重量％、３０重量％、４０重量％、５０重量％、６０重量％、７０重量％、８０重量％、９０重量％、９５重量％、９８重量％、９９重量％、９９．９重量％及び１００重量％）含まない場合には、Ａｂ又はタンパク質は精製されている。任意の適切な方法により、例えばカラムクロマトグラフィー、ポリアクリルアミドゲル電気泳動又はＨＰＬＣ分析により、純度を測定することができる。化学的に合成したタンパク質、又はその他の組み換えタンパク質が天然に存在する細胞型以外の細胞型で産生されたその他の組み替えタンパク質は「精製されている」。
【００１６】
「結合」、「結合する」又は「と反応する」とは、試料中において一分子が特定の別の分子を認識してその分子に接着するが、試料中においてその他の分子を実質的に認識しない又はその他の分子に実質的に接着しないことを意味する。一般的に、別の分子に「特異的に結合する」Ａｂは、その他の分子に対して約１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１０１０、１０１１又は１０１２リットル／モル超であるＫｄを有する。
【００１７】
「治療上有効な量」とは、処置した動物又はヒトにおいて医学的に望ましい結果（例えば、疾患の若しくは疾患の症状の改善若しくは予防、又は生存性若しくは寿命の拡大）を生じさせることが可能な量のことである。
【００１８】
本明細書に記載したものと同様の又は等価の方法及び材料を本発明の実施又は試験で使用することができるが、適切な方法及び材料を以下に記載する。さらに、以下で論じる特定の実施形態は例示にすぎず、限定することを意図するものではない。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
本発明は、狭窄した血管の外科的処置を受けた又は受けると予想されるヒト対象での合併症を予防する又は遅延させるための組成物及び方法を包含する。以下に記載する好ましい実施形態は、これらの組成物及び方法の適応を例示する。しかしながら、以下に示す記載に基づいて、これらの実施形態の記載から本発明のその他の態様を構成する及び／又は実行することができる。
【００２０】
一般的方法論
本明細書には、従来の免疫学的技法及び分子生物学的技法を含む方法が記載されている。免疫学的方法（例えば、抗原−Ａｂ複合体の検出及び位置特定のためのアッセイ、免疫沈降法、免疫ブロット法等）は当技術分野で一般に知られており、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｃｏｌｉｇａｎ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄ．，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ等の方法論の論文に記載されている。分子生物学の技法は、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，２ｎｄ  ｅｄ．，ｖｏｌ．１−３，Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄ．，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．，２００１及びＣｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄ．，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  ａｎｄ  Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ等の論文に詳細に記載されている。Ａｂ法は、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ａｂｓ，Ｄｕｂｅｌ，Ｓ．，ｅｄ．，Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，２００７に記載されている。医学的処置の一般的な方法は、ＭｃＰｈｅｅ  ａｎｄ  Ｐａｐａｄａｋｉｓ，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ２０１０，４９ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｍｅｄｉｃａｌ，２０１０及びＦａｕｃｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１７ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ，２００８に記載されている。
【００２１】
ＭＡＣＥ及び再狭窄の低下
本明細書に記載の組成物及び方法は、狭窄した血管の外科的処置を受けた又は受けると予想される哺乳類対象でＭＡＣＥが起こる可能性又はこの哺乳類対象で起こるＭＡＣＥの重症度を低下させるのに、及びこの対象で再狭窄が起こる可能性を低下させるのに又はこの対象で再狭窄が起こるまでの時間を延ばすのに有用である。哺乳類対象は、ヒト、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ヒツジ、ヤギ及びブタ等の血管疾患を患う任意のものであることができる。ヒト対象は、男性、女性、成人、小児又は高齢者（６５歳以上）であることができる。哺乳類対象は、末梢動脈疾患、冠動脈疾患、腎動脈疾患、バージャー病、アテローム性動脈硬化症又は虚血を有するものであることができる。対象はまた、抗凝固薬、スタチン、抗高血圧剤、シロスタゾール及び／又はペントキシフィリンにより処置中である又は処置されているものであることもできる。狭窄した血管の外科的処置として、血管形成術、バイパス手術、アテローム切除術及び／又は（ベアメタルステント若しくは薬剤溶出ステントによる）ステント留置術を挙げることができる。
【００２２】
ＭＡＣＥとして、３０日死亡、脳卒中、心筋梗塞／不安定狭心症、緊急の外科的血管再生術、標的肢の著しい塞栓形成、標的血管の血栓症又は慢性的な虚血肢の症状の悪化を挙げることができる。パーセントで測定可能な場合、低下又は増加は、少なくとも１、２、３、４、５、１０、１５、２０、２５、３０、４０、５０、６０、７０、８０又は９０％であることができる。
【００２３】
ＩＬ−１αを標的とする抗体及びその他の薬剤
ＩＬ−１αに特異的に結合し、狭窄した血管の外科的処置を受けた又は受けると予想されるヒト対象での合併症を予防する又は遅延させる任意の適切なタイプのＡｂ又はその他の生物学的薬剤（例えば、ＩＬ−１受容体等のＩＬ−１α結合成分を含む融合タンパク質）を本発明で使用することができる。例えば、使用する抗ＩＬ−１αＡｂは、ｍＡｂ、ポリクローナルＡｂ、ｍＡｂの混合物又はＡｂ断片又はｓｃＦｖ等の改変Ａｂ様分子であることができる。ＡｂのＫａは好ましくは、少なくとも１×１０９Ｍ−１又はそれ以上である（例えば、９×１０１０Ｍ−１超である、８×１０１０Ｍ−１超である、７×１０１０Ｍ−１超である、６×１０１０Ｍ−１超である、５×１０１０Ｍ−１超である、４×１０１０Ｍ−１超である、３×１０１０Ｍ−１超である、２×１０１０Ｍ−１超である、又は１×１０９Ｍ−１超である）。好ましい実施形態では、本発明は、（ｉ）ヒトＩＬ−１αに対して（例えば少なくともナノモルの又はピコモルの）非常に高い結合親和性を示す抗原結合可変領域と（ｉｉ）定常領域とを含む完全なヒトｍＡｂ又は真のヒトｍＡｂを利用する。ヒトＡｂは好ましくはＩｇＧ１であるが、ＩｇＭ、ＩｇＡ若しくはＩｇＥ等の様々なアイソタイプ、又はＩｇＧ２、ＩｇＧ３若しくはＩｇＧ４等のサブクラスであることができる。特に有用なｍＡｂの一例はＭＡＢｐ１であり、即ち２００９年６月１日に出願された米国特許出願第１２／４５５，４５８号明細書に記載されたＩＬ−１α特異的ＩｇＧ１ｍＡｂである。その他の有用なｍＡｂは、ＭＡＢｐ１の少なくとも１つのＣＤＲを含むが好ましくは全てのＣＤＲを含むｍＡｂである。例えばＯｆｒａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１８１：６２３０，２００８及びＡｎｔｉｂｏｄｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｖｏｌｕｍｅ２，２ｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｋｏｎｔｅｒｍａｎ  ａｎｄ  Ｄｕｂｅｌ（ｅｄｓ），Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，２０１０に記載された既知の方法に従って、ＣＤＲを決定することができる。
【００２４】
ヒトにはヒトＩＬ−１αに特異的なＩｇを発現するＢリンパ球が天然に存在することから、ｍＡｂを産生させるための現在好ましい方法は、初めにそのようなＢリンパ球を対象から単離し、次いで培養中にＢリンパ球を連続的に増殖させることができるようにＢリンパ球を不死化することである。ヒトＩＬ−１αに特異的なＩｇを発現する、天然に存在するＢリンパ球が多くない対象を１種又は複数種のヒトＩＬ−１α抗原で免疫化し、そのようなＢリンパ球の数を増加させることができる。ヒトＡｂ分泌細胞（例えばヒト形質細胞）を不死化させることにより、ヒトｍＡｂを調製する。例えば米国特許第４，６３４，６６４号明細書を参照。
【００２５】
例示的な方法では、１人又は複数人の（例えば、５人の、１０人の、２５人の、５０人の、１００人の、１０００人の又はそれ以上の）ヒト対象を、彼らの血液中でのそのようなヒトＩＬ−１α特異的Ａｂの存在についてスクリーニングする。次いで、所望のＡｂを発現する対象をＢリンパ球ドナーとして使用することできる。１つの可能な方法では、ヒトＩＬ−１α特異的Ａｂを発現するＢリンパ球を保持するヒトドナーから末梢血液を得る。次いで、そのようなＢリンパ球を例えば細胞選別（例えば、蛍光活性化細胞選別「ＦＡＣＳ」又は磁気ビーズ細胞選別）により血液サンプルから単離し、ヒトＩＬ−１α特異的Ｉｇを発現するＢリンパ球を選択する。次いで、既知の技法に従った、（例えばＥＢＶを使用する）ウイルス形質転換により又はヒト骨髄腫等の別の不死化細胞への融合により、この細胞を不死化することができる。次いで、ヒトＩＬ−１αに特異的なＩｇを発現するこの集団内のＢリンパ球を、限界希釈法により単離することができる（例えば、マイクロタイタープレートのウェル中においてヒトＩＬ−１αに特異的なＩｇに対して陽性である細胞を選択し、継代培養し、所望のクローン株を単離することができるまでこのプロセスを繰り返す）。例えば、Ｇｏｄｉｎｇ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，ｐｐ．５９−１０３，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，１９８６を参照。ヒトＩＬ−１αに対して少なくともナノモルの又はピコモルの結合親和性を有するＩｇを発現するクローン細胞株が好ましい。このクローン細胞株から分泌されたＭＡｂを、塩析（ｓａｌｔ  ｃｕｔｓ）、サイズ排除、イオン交換分離及び親和性クロマトグラフィー等の従来のＩｇ精製法により、培地又は体液（例えば腹水）から単離することができる。
【００２６】
不死化したＢリンパ球をインビトロでの培養で使用してｍＡｂを直接産生することができるが、特定の場合では、異種発現系を使用してｍＡｂを産生することが望ましい場合がある。例えば、米国特許出願第１１／７５４，８９９号明細書に記載された方法を参照。例えば、ヒトＩＬ−１αに特異的なｍＡｂをコードする遺伝子をクローニングし、異種宿主細胞（例えば、ＣＨＯ細胞、ＣＯＳ細胞、骨髄腫細胞及び大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）細胞）中で発現させるための発現ベクター（例えばプラスミド系発現ベクター）に導入することができる。Ｉｇは重（Ｈ）鎖及び軽（Ｌ）鎖をＨ２Ｌ２構造で含むことから、それぞれをコードする遺伝子を別々に単離し、異なるベクター中で発現させることができる。
【００２７】
対象が抗Ａｂ反応を発症する可能性がより高いために一般にはあまり好ましくはないが、異なる動物種由来の異なる部分（例えば、ヒトＩｇの定常領域に融合したマウスＩｇの可変領域）を有する抗原結合分子であるキメラｍＡｂ（例えば「ヒト化」ｍＡｂ）を本発明で使用することができる。そのようなキメラＡｂを当技術分野で既知の方法により調製することができる。例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１，１９８４、Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３１２：６０４，１９８４、Ｔａｋｅｄａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３１４：４５２，１９８４を参照。同様に、当技術分野で既知の方法によりＡｂをヒト化することができる。例えば、様々な業者により、又は米国特許第５，６９３，７６２号明細書、米国特許第５，５３０，１０１号明細書又は米国特許第５，５８５，０８９号明細書に記載されているように、所望の結合特異性を有するｍＡｂをヒト化することができる。
【００２８】
ＶＨ及びＶＬドメインシャッフリング（Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ１０：７７９−７８３，１９９２）、超可変領域（ＨＶＲ）及び／又はフレームワーク残基のランダム変異誘発（Ｂａｒｂａｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９１：３８０９−３８１３，１９９４、Ｓｃｈｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｇｅｎｅ  １６９：１４７−１５５，１９９５、Ｙｅｌｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５５：１９９４−２００４，１９９５、Ｊａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５４（７）：３３１０−９，１９９５及びＨａｗｋｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２６：８８９−８９６，１９９２等の既知の方法により、本明細書に記載のｍＡｂを親和性成熟させてｍＡｂの結合特異性を増強する又は変更することができる。Ａｂをコードするヌクレオチド配列に適切な変化を導入することにより、Ａｂのアミノ酸配列多様体を調製することができる。さらに、特定の発現系でのｍＡｂの産生を増強するために、（例えば、ｍＡｂのアミノ酸配列を変えることなく）ｍＡｂをコードする核酸配列への修飾を変更することができる（例えば、所与の発現系のためのイントロンの削除及び／又はコドンの最適化）。別のタンパク質（例えば別のｍＡｂ）又は非タンパク質分子への抱合により、本明細書に記載のｍＡｂを修飾することもできる。例えば、ｍＡｂをポリエチレングリコール等の水溶性ポリマー又はカーボンナノチューブに抱合させることができる（例えば、Ｋａｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １０２：１１６００−１１６０５，２００５を参照）。米国特許出願第１１／７５４，８９９号明細書を参照。
【００２９】
好ましくは、高力価のヒトＩＬ−１α特異的ｍＡｂを最小の副作用で対象に投与することができることを確実にするために、本発明のｍＡｂ組成物は、少なくとも０．５重量％の、１重量％の、２重量％の、３重量％の、４重量％の、５重量％の、６重量％の、７重量％の、８重量％の、９重量％の、１０重量％の、１１重量％の、１２重量％の、１３重量％の、１４重量％の、１５重量％の、２０重量％の、２５重量％の、３０重量％の、３５重量％の、４０重量％の、４５重量％の、５０重量％の、６０重量％の、７０重量％の、８０重量％の、９０重量％の、９５重量％の、９６重量％の、９７重量％の、９８重量％の、９９重量％の、９９．９重量％の又はそれ以上の純度（いずれも賦形剤を除く）である。本発明のｍＡｂ組成物は、１種類のｍＡＢ（即ち、単一のクローンＢリンパ球株から産生されたｍＡｂ）のみを含むことができる、又は２つ以上の（例えば、２つの、３つの、４つの、５つの、６つの、７つの、８つの、９つの、１０の若しくはそれ以上の）異なる種類のｍＡｂの混合物を含むことができる。
【００３０】
前述したＩＬ−１α特異的Ａｂが本発明での使用に好ましいが、場合によっては、ＩＬ−１αを特異的に標的とするその他の薬剤を、その投与が、狭窄した血管の外科的処置を受けた又は受けると予想されるヒト対象での合併症の予防又は遅延をもたらす限りにおいて使用することができる。このその他の薬剤として、ＩＬ−１αに特異的に結合する、小有機分子、アプタマー、ペプチド及びタンパク質を挙げることができる。
【００３１】
医薬組成物及び方法
抗ＩＬ−１αＡｂ組成物を、投与の様式及び経路並びに標準的な薬務に基づいて選択される薬学的に許容される基剤（例えば無菌生理食塩水）中で動物又はヒトに投与することができる。薬学的に許容される基剤及び医薬製剤のリストを、本分野での標準的なテキストであるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓに及びＵＳＰ／ＮＦに見出すことができる。本組成物にその他の物質を添加することができ、本組成物を安定化させる及び／若しくは保存するために、並びに／又は本組成物の対象への投与を容易にするために、その他の手段を採用することができる。
【００３２】
例えば、Ａｂ組成物を凍結乾燥させることができる（Ｄｒａｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ．１８１：３７，１９９５及びＰＣＴ／ＵＳ９０／０１３８３を参照）、ナトリウムイオン及び塩化物イオンを含む溶液に溶解させることができる、アルブミン、グルコース、マルトース、スクロース、ソルビトール、ポリエチレングリコール及びグリシン等の１種若しくは複数種の安定化剤を含む溶液に溶解させることができる、（例えば０．４５及び／若しくは０．２ミクロンのフィルタを使用して）ろ過することができる、ベータ−プロピオラクトンと接触させることができる、並びに／又は殺菌剤（例えば、界面活性剤、有機溶媒及び界面活性剤と有機溶媒との混合物を含む溶液に溶解させることができる。
【００３３】
任意の適切な技法により、Ａｂ組成物を動物又はヒトに投与することができる。典型的には、そのような投与は非経口（例えば、静脈内導入、皮下導入、筋肉内導入又は腹腔内導入）であることができる。例えば注射により、本組成物を標的部位に直接投与することもできる。当技術分野ではその他の送達方法が知られており、例えばリポソーム送達又は本組成物を含浸させたデバイスからの拡散が知られている。単回ボーラスで、頻回注射で、又は（例えば、静脈内への若しくは腹腔透析による）持続注入により、本組成物を投与することができる。
【００３４】
治療上有効な量とは、処置した動物で又はヒトにおいて医学的に望ましい結果を生じさせることが可能な量のことである。抗ＩＬ−１αＡｂ組成物の有効量とは、前述した特徴の内の１つ又は複数の改善により評価される、患者における臨床的有効性を示す量のことである。医学分野では公知であるように、任意の１匹の動物又は１人のヒトへの投薬量は、対象のサイズ、体表面積、年齢、投与される特定の組成物、性別、投与の時間及び経路、身体全体の健康状態並びに同時に投与されるその他の薬剤等の多くの因子に依存する。好ましい用量は、約０．２〜２０（例えば、０．０５、０．１０、０．１５、０．２、０．３、０．４、０．５、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０又は４０）ｍｇ／ｋｇ体重の範囲である。この用量を繰り返し投与することができ、例えば１時間に１回、１日に１回、１週に２回、１週に１回、２週に１回、３週に１回又は１ヶ月に１回投与することができる。好ましくは、用量を２回以上（例えば、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、１０回又はそれ以上）投与する。
【実施例】
【００３５】
実施例１：ＣＶ−１８Ｃ３は、安定化等張緩衝液中のＭＡＢｐ１の無菌の注射可能な液体製剤である。
【００３６】
実施例２：経皮大腿膝窩動脈血管再生術を受けている患者での再狭窄のリスクを低下させる場合の抗炎症性治療抗体の安全性、薬物動態及び予備的有効性に関する第２相非盲検無作為化試験の解析。
【００３７】
血管疾患を有する被験者を２つ群の内の一方に無作為に割り当てた。両群が標準的な治療処置（例えば、ベアメタルステント留置術、バルーン血管形成術及び／又はアテローム切除術）を受けるように計画した。試験群をＭＡＢｐ１でも処置した（０日目に並びに２週目に、４週目に及び６週目に３．７５ｍｇ／ｋｇを静脈内へ、続いて２ヶ月目に開始して４週毎に２００ｍｇを皮下へ）が、コントロール群にはＭＡＢｐ１を投与しなかった。２つの群の間での血管の外科的な再介入率の差異を解析した。主要心血管有害事象（「ＭＡＣＥ」：３０日死亡、脳卒中、心筋梗塞／不安定狭心症、緊急の外科的血管再生術、標的肢の著しい塞栓形成、標的血管の血栓症又は慢性的な虚血肢／再狭窄の症状の悪化と定義する）も同様に解析した。評価した４３例の被験者の内、２２例が試験群に属し、２１例がコントロール群に属した。
【００３８】
無作為に割り当てたにもかかわらず、両群のベースライン特性はバランスが取れていなかった。ＭＡＢｐ１群の患者は、コントロールと比較して再狭窄のリスクが相当に高く（糖尿病の有病率（５９％対２４％）、より頻繁なアテローム切除術（４１％対２９％））、手術後の足関節上腕血圧指数（ＡＢＩ）の改善がより低かった（表１）。
【００３９】
１５週目の経過観察の時点で、コントロール群の２４％（２１例の内の５例）と比較して、ＭＡＢｐ１で処置した患者の９％（２２例の内の２例）がＭＡＣＥを経験した（ｐ＝０．２４）。この時点で、コントロール群の患者は、ＭＡＢｐ１群と比較してＭＡＣＥを経験する可能性が３倍高かった（オッズ比３．１、９５％ＣＩ０．５３〜１８．３）。
【００４０】
血管造影により再狭窄を確認しつつ、末梢血管疾患（跛行）の臨床症状に基づいて開存性を評価した。最初の１５週にわたり、コントロール群の２例の患者（９．５％）に、再介入が必要である標的血管の再狭窄が認められた。一方、ベースラインのリスクがより高いにもかかわらず、ＭＡＢｐ１を投与している全ての患者で介入後１５週の期間にわたり再狭窄が報告されず、血管の開存性が維持された。
【００４１】
0006460993.tif 000002
【００４２】
その他の実施形態
本発明をその詳細な説明と共に記載しているが、前述の説明は本発明の範囲を例示することを意図するものであり、本発明の範囲を限定することを意図するものではなく、本発明の範囲は、添付した特許請求の範囲により定義されることを理解すべきである。以下の特許請求の範囲には、その他の態様、利点及び変更が含まれる。