(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
光源と、反応液を収容するセルと、前記光源から前記セルに照射され当該セル内の反応液によって散乱された光を検出する検出器とを有する自動分析装置の散乱光測定光学系評価用の標準液であって、
前記セルに分注されたとき透過率が１０％〜５０％の範囲となる濃度で不溶性担体を含有する標準液。
【請求項２】
前記セルに分注されたとき透過率が１８％〜４０％の範囲となる濃度で前記不溶性担体を含有する請求項１記載の標準液。
【請求項３】
前記セルに分注されたとき透過率が２２．４％〜３１．６％の範囲となる濃度で前記不溶性担体を含有する請求項１記載の標準液。
【請求項４】
前記セルは光路長が５ｍｍであり、光路長５ｍｍにおいて透過率が１０％〜５０％の範囲となる濃度で前記不溶性担体を含有する請求項１記載の標準液。
【請求項５】
溶媒の比重が前記不溶性担体の比重の±２５％以内である請求項１記載の標準液。
【請求項６】
前記不溶性担体は粒径が２５０〜３５０ｎｍのラテックス粒子である請求項１記載の標準液。
【請求項７】
溶媒がグリセリンを１５〜２５重量％含有するグリセリン水溶液である請求項６記載の標準液。
【請求項８】
界面活性剤を含む請求項７記載の標準液。
【請求項９】
前記セルの光路長が３ｍｍ〜１０ｍｍであり、光路長３ｍｍ〜１０ｍｍにおいて透過率が１０％〜５０％の範囲となる濃度で前記不溶性担体を含有する請求項１記載の標準液。
【請求項１０】
前記光源から前記セルに照射される波長７００ｎｍの光の透過率が１０％〜５０％の範囲となる濃度で前記不溶性担体を含有する請求項１記載の標準液。
【請求項１１】
光源と、反応液を収容するセルと、前記光源から前記セルに照射され当該セル内の反応液によって散乱された光を検出する検出器とを有する自動分析装置の前記光源の光量を調整する方法であって、
前記セルに請求項１記載の標準液を分注する工程と、
前記標準液が分注された前記セルに前記光源から光照射し、当該セル内の前記標準液によって散乱された光を前記検出器で検出する工程と、
前記検出器の出力が予め定められた値となるように前記光源の光量を調整する工程と、を有する方法。
【請求項１２】
請求項１記載の標準液の代わりに請求項６記載の標準液を用いる請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
請求項１記載の標準液の代わりに請求項７記載の標準液を用いる請求項１１記載の方法。
【請求項１４】
請求項１記載の標準液の代わりに請求項８記載の標準液を用いる請求項１１記載の方法。
【請求項１５】
前記セルの光路長が３ｍｍ〜１０ｍｍである請求項１１記載の方法。
【請求項１６】
前記光源から前記セルに照射される前記光の波長が７００ｎｍである請求項１１記載の方法。
【請求項１７】
試料を収容する試料カップが配置される試料ディスクと、
試薬を収容する試薬ボトルが配置される試薬ディスクと、
試料と試薬を混合した反応液を収容するセルが配置される反応ディスクと、
前記試料カップから前記セルに試料を分注する試料分注機構と、
前記試薬ボトルから前記セルに試薬を分注する試薬分注機構と、
光源と、
前記光源から前記セル中の反応液に照射された光の散乱光量を測定する散乱光検出器と、を有する自動分析装置において、
調整モードを有し、
前記調整モードでは、前記セルに前記反応液に代えて不溶性担体を透過率が１０％〜５０％の範囲となる濃度で含有する標準液を収容し、前記散乱光検出器の出力が予め定めた値となるように前記光源の光量を調整する、自動分析装置。
【請求項１８】
前記標準液は、溶媒がグリセリンを１５〜２５重量％含有するグリセリン水溶液であり、界面活性剤を含み、前記不溶性担体は粒径が２５０〜３５０ｎｍのラテックス粒子である請求項１７記載の自動分析装置。
【請求項１９】
前記光源はＬＥＤであり、前記光源の光量調整が前記ＬＥＤの駆動電流調整である請求項１７記載の自動分析装置。
【請求項２０】
前記セルの光路長が３ｍｍ〜１０ｍｍである請求項１７記載の自動分析装置。
【請求項２１】
前記光源から前記セルに照射される前記光の波長が７００ｎｍである請求項１７記載の自動分析装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血液や尿等の試料に含まれる成分量を分析する自動分析装置、自動分析装置の散乱光測定光学系評価用標準液、それを用いた自動分析装置の調整方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
血清や尿等の検体と試薬とを混合した反応液に光源からの光を照射し、特定波長における透過光量の変化から吸光度を算出し、ランベルト・ベールの法則に従い測定物質の濃度を定量する自動分析装置が広く用いられている（特許文献１）。
【０００３】
自動分析装置で測定される反応としては、主に基質と酵素の反応による呈色反応と、抗原と抗体の免疫凝集反応の２種類がある。前者の反応を用いた分析は生化学分析と呼ばれ、検査項目として酵素、脂質、窒素化合物などがある。後者の反応を用いた分析は免疫分析と呼ばれ、検査項目の中には、微量タンパク（ＣＲＰ）や腫瘍マーカー、ホルモン、血中薬物などがある。免疫分析の検査項目の中には、低濃度領域における高感度な検出が要求される検査項目や、その定量値が臨床診断に対して重要な検査項目が存在する。これらの検査項目では、表面に抗体を感作（結合）させたラテックス粒子を増感剤として用いたラテックス免疫比濁法などが用いられる。ラテックス免疫比濁法では、検体内の測定物質を介して試薬に含まれるラテックス粒子同士が凝集し凝集塊を生成する。
【０００４】
自動分析装置上では検体と試薬を混合した反応液に光を照射し、散乱されずに透過した透過光量の変化を測定し、検体内に存在する測定物質濃度を定量する。光量変化は測定物質の濃度が高いほど大きくなる。近年は免疫分析項目の測定ニーズが増加しており、免疫分析項目での性能向上が求められている。そのため透過光の光量変化ではなく、より大きな光量変化を捉えやすい散乱光の光量変化を用いて高感度に濃度を定量する方法などが用いられている（特許文献２）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】U.S. Patent 4,451,433
【特許文献２】特許第5318206号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
自動分析装置では、多数のセルを円周上に配置し、それぞれのセル内で検体と試薬を反応させ検体内の測定物質濃度を定量する。未知の濃度の測定物質を測定する前に、予め既知の濃度の測定物質を測定し、測定物質濃度と光量変化との関係を調べたキャリブレーションカーブを作成する。これにより装置間で散乱光量のばらつきを持っていたとしても検体内の測定物質濃度を正確に定量することができるが、装置状態を管理し異常を検知するためには、どの装置、どのセルにおいても同じ散乱体は同じ散乱光量を示すことが望まれていた。例えば特開２０１４−１１９４２５号公報においては散乱光量をセルごとに補正することが行われていた。
【０００７】
しかし、その自動分析装置上においてばらつきを評価するための好適な散乱体は知られていなかった。市販の散乱体としてはオパール拡散板、結晶化ガラス、テフロン系材料を用いた固体散乱体がある。これらは固体であるため自動分析装置上で通常の分析動作を用いての反応液位置への設置が困難であるといった問題があった。また、固体散乱体は個体ごとのばらつきが大きいという問題があった。そのため液体の散乱体が望まれていた。
【０００８】
濁度計等に用いられている濁度標準液は、液体散乱体であることから通常の分析動作を用いた反応液位置への設置は容易であり、その点有用である。しかし、例えば濁度計標準液１００度では粒径０．５μｍ，１．０μｍ，２．０μｍ，５．０μｍ，１０．０μｍなど大きな粒子が混合されており、自動分析装置用のラテックス試薬として使用されている粒径０．３μｍ程度の粒子が混合されていないこと、長時間放置すると粒子が沈降すること、自動分析装置上の試薬は冷蔵保存が一般的であり、セルに分注した際に恒温槽（３７℃一定）により昇温されて溶存酸素が発泡し、セルの壁面に気泡が発生しやすいこと、といった課題があった。このように、自動分析装置用ラテックス試薬の反応による光量変化を測定するための、光散乱光度計の光学系評価用散乱体（標準液）は公知でなかった。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明では、光源と、反応液を収容するセルと、光源からセルに照射され当該セル内の反応液によって散乱された光を検出する検出器とを有する自動分析装置の散乱光測定光学系評価用の標準液として、セルに分注されたとき透過率が１０％〜５０％の範囲となる濃度で不溶性担体を含有した標準液を用いる。標準液は、セルに分注されたとき透過率が１８％〜４０％の範囲となる濃度で不溶性担体を含有するとより好ましく、セルに分注されたとき透過率が２２．４％〜３１．６％の範囲となる濃度で不溶性担体を含有すると更に好ましい。セルの光路長は例えば５ｍｍとすることができ、不溶性担体は粒径が２５０〜３５０ｎｍのラテックス粒子とすることができる。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によると、標準液の濃度の誤差の影響を低減して光源や検出器を含む散乱光測定光学系全体を評価することができる。これにより信頼性の高い散乱光測定装置を臨床サイドに提供することが可能となる。
上記した以外の、課題、構成及び効果は、以下の実施形態の説明により明らかにされる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】光散乱光度計の構成例を示す模式図。
【図２】ラテックス溶液の散乱光量の吸光度依存性を表す実験結果を示す図。
【図３】散乱光量の吸光度依存性傾向の説明図。
【図４】光路長ごとの溶液の透過率と溶液の吸光度の関係を示す図。
【図５】ラテックス溶液の散乱光量の吸光度依存性の実験結果と計算結果の比較図。
【図６】光路長５ｍｍセルで測定した場合の溶液の吸光度と透過率の関係を示す図。
【図７】自動分析装置の全体構成例を示す概略図。
【図８】吸光度測定部の構成例を示す模式図。
【図９】散乱光測定部の構成例を示す模式図。
【図１０】吸光光度計にて濁度標準液を測定したデータを示す図。
【図１１】散乱光度計にて濁度標準液を測定したデータを示す図。
【図１２】市販ラテックス試薬の散乱光の揺らぎの吸光度依存性を示す図。
【図１３】光学系評価用の標準液を吸光度測定部にて測定した結果を示す図。
【図１４】光学系評価用の標準液を散乱光測定部にて測定した結果を示す図。
【図１５】光量調整用のＬＥＤ光量調整画面の例を示す模式図。
【図１６】装置間における測定値のばらつきの評価結果を示す図。
【図１７】ラテックス粒子の粒径と散乱光受光器の出力の関係を示す図。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下、図面を参照して本発明の実施の形態を説明する。
【００１３】
図１は、散乱光の光量を測定する光散乱光度計の構成例を示す模式図である。散乱光測定用の光源４１からの光４２を、恒温流体１５で温調されたセル８の中の溶液７に照射する。透過光４４を透過光受光器４６にて受光するとともに、２０°方向の散乱光４３を散乱光受光器４５で受光する。
【００１４】
図２は、溶液７にラテックス溶液を用い、濃度を変化させて散乱光量を測定した実験結果を示す図である。溶液７を入れるセル８には光路長５ｍｍのセルを用いた。ただし、本明細書中では溶液の吸光度はすべて光路長１０ｍｍで測定した場合の吸光度に換算する。例えばある溶液の透過率が光路長５ｍｍセルにおいて１０％であったとしても、溶液の吸光度の表記は光路長１０ｍｍで測定した場合に換算するため、２.０absとして表記する。ラテックス溶液に含有させるラテックス粒子には粒径１００ｎｍ，２００ｎｍ，３００ｎｍ，４００ｎｍの粒子を用いた。図２から、どの粒径においても１．１５abs近辺で散乱光量が最大になり、そのときには粒子の濃度（吸光度）が変化しても散乱光量が大きく変化しないことがわかる。
【００１５】
図３は、散乱光量の粒子濃度依存性の考え方を示した説明図である。粒子の数（吸光度）に比例して発生する散乱光（理想の散乱光強度）は増加するが、散乱光は他の粒子により更に散乱され、溶液の透過率分のみが透過し受光器に受光される。ある方向の散乱光受光器にて測定される理想の散乱光強度をＩideal，溶液の透過率をＴとすると、受光される散乱光Is(θ)は式１にて表される。
【００１６】
［式１］
0006576843.tif 000002
【００１７】
ここでは多重散乱を考えず、単純に一回散乱した散乱光のみが受光されると考える。溶液中の粒子の単位体積あたりの数密度をｎ、照射光が照射され計測される溶液の体積をＶ、粒子一つが受ける光のエネルギーに対してθ方向に散乱する効率をｉ(θ)、散乱光の受光効率（立体角分）をＥr、反応液への照射光量をＩ0とすると、Ｉidealは、式２にて表される。
【００１８】
［式２］
0006576843.tif 000003
【００１９】
一方透過率Ｔは、散乱光受光器までの溶液中の光路長をＬs，溶液の吸光度をＡとして以下の式３で表される。
【００２０】
［式３］
0006576843.tif 000004
【００２１】
式２と式３から、式１は式４のように表される。
【００２２】
［式４］
0006576843.tif 000005
【００２３】
式４を微分し、傾きが０であり散乱光量が最大となる溶液の吸光度Ａ1を求めると、Ａ1は式５で表される。
【００２４】
［式５］
0006576843.tif 000006
【００２５】
式５より、多重散乱の影響を考えなければ、例えば光路長５ｍｍの場合は、吸光度０．８６８６absにおいて散乱光量が最大になると算出される。散乱光受光器までの溶液中の光路長は、直進する光に対して角度をもつため光路長（セルの光路長）よりも若干長くなるが、ここでは無視しセルの光路長と同じとした。また、上記計算では散乱光量が最大となる溶液の吸光度を算出したが、この吸光度は透過率で考えると１／ｅ（≒透過率３６．８％）と算出できる。
【００２６】
図４は、セルの光路長１０ｍｍ，５ｍｍ，３ｍｍそれぞれにおける、透過率（％）と溶液の吸光度（光路長１０ｍｍ換算）の関係を示す図である。透過率３６．８％となる溶液の吸光度は溶液を通過する光路長に依存するため、セルの光路長が変われば、極大を示す溶液の吸光度は変わるが、透過率３６．８％において極大を示す計算結果は変わらない。たとえば散乱光の受光角度が２０°でなく９０°であっても溶液を通過する光路長が５ｍｍであれば０．８６８６absにおいて散乱光量が最大となる傾向は同じである。
【００２７】
図５は、図２において粒径３００ｎｍの実験結果と計算結果を比較して示したグラフである。ただし、縦軸は、希釈系列No.１のプロットにおいて実験結果（実測）と計算結果の散乱光量が一致するように規格化した。
【００２８】
図５における実験結果と計算結果の乖離分は多重散乱の影響と考えられる。ピーク位置は計算値の０．８６８６absより１．１５absと吸光度にして１．３倍ほどずれている。図２及び図５より実測ではラテックス粒径に関わらず、概ね１．１５abs近傍、すなわち１．０〜１．３absの範囲でピークをもつことが分かった。図２より０．８〜１．５abs程度であれば散乱光量にほぼ濃度依存性がなく、さらに高濃度側は濃度依存性が少ないため、実用的には０．６〜２．０abs程度であれば濃度依存性が少なく使用することができると考えられる。
【００２９】
図６は、光路長５ｍｍのセルにおける溶液の吸光度と透過率の関係を示す図である。吸光度は光路長５ｍｍのセルで測定し、光路長１０ｍｍ換算での吸光度を示している。図６から、上述の吸光度を透過率に換算すると実用的には透過率１０％〜５０％の範囲で測定できれば良く、精度を良くするには透過率１８％〜４０％で測定できれば良く、さらに高精度には透過率２２．４％から３１．６％となるような溶液濃度で測定することで、散乱光量の濃度依存性が少なく安定した測定が可能になる。
【００３０】
次に、溶液の散乱光を測定し、その時間変化に基づいて検体中の測定物質の濃度を定量する自動分析装置の具体例について説明する。図７は、本実施例に係る自動分析装置の全体構成例を示す概略図である。
【００３１】
本実施例に係る自動分析装置は、試料ディスク３、試薬ディスク６、反応ディスク９の３種類のディスクと、これらのディスク間で試料や試薬を移動させる分注機構１０，１１、これらを制御する制御回路２３、反応液の吸光度を測定する吸光度測定回路２４、反応液からの散乱光を測定する散乱光測定回路２５、各測定回路で測定されたデータを処理するデータ処理部２６、データ処理部２６とのインターフェースである入力部２７及び出力部２８、散乱光光源の光量を調整できる散乱用光源駆動回路２９を備える。なお、データ処理部２６は、データ格納部２６０１と解析部２６０２を有する。データ格納部２６０１には、制御データ、測定データ、データ解析に用いるデータ、解析結果データ等が格納される。入力部２７及び出力部２８は、データ格納部２６０１との間でデータを入出力する。図７の例では、入力部２７がキーボードの場合を表しているが、タッチパネル、テンキーその他の入力装置でも良い。
【００３２】
試料ディスク３の円周上には、試料１の収容容器である試料カップ２が複数配置される。試料１は例えば血液である。試薬ディスク６の円周上には、試薬４の収容容器である試薬ボトル５が複数配置される。反応ディスク９の円周上には、試料１と試薬４を混合させた反応液７の収容容器であるセル８が複数配置される。試料分注機構１０は、試料カップ２からセル８に試料１を一定量移動させる際に使用する機構である。試料分注機構１０は、例えば溶液を吐出又は吸引するノズルと、ノズルを所定位置に位置決め及び搬送するロボット、溶液をノズルから吐出又はノズルに吸引するポンプで構成される。試薬分注機構１１は、試薬ボトル５からセル８に試薬４を一定量移動させる際に使用する機構である。試薬分注機構１１も、例えば溶液を吐出又は吸引するノズルと、ノズルを所定位置に位置決め及び搬送するロボット、溶液をノズルから吐出又はノズルに吸引するポンプで構成される。攪拌部１２は、セル８内で、試料１と試薬４を攪拌し混合させる機構部である。洗浄部１４は、分析処理が終了したセル８から反応液７を排出し、その後、セル８を洗浄する機構部である。洗浄終了後のセル８には、再び、試料分注機構１０から次の試料１が分注され、試薬分注機構１１から新しい試薬４が分注され、別の反応処理に使用される。反応ディスク９において、セル８は、温度及び流量が制御された恒温槽内の恒温流体１５に浸漬されている。このため、セル８及びその中の反応液７は、反応ディスク９による移動中も、その温度は一定に保たれる。本実施例の場合、恒温流体１５として水を使用し、その温度は制御回路２３により３７±０．１℃に温度調整される。勿論、恒温流体１５として使用する媒体や温度は一例である。反応ディスク９の円周上の一部には、吸光度測定部１３と散乱光測定部１６が配置される。吸光度測定部１３は吸光光度計、散乱光測定部１６は散乱光度計とも称する。
【００３３】
図８は、吸光度測定部１３の構成例を示す模式図である。図８に示す吸光度測定部１３は、ハロゲンランプ光源３１から射出された光をセル８に照射し、セル８を透過した光３２を回折格子３３で分光し、フォトダイオードアレイ３４で受光する構造を有している。フォトダイオードアレイ３４で受光する波長は一例として、３４０ｎｍ，４０５ｎｍ，４５０ｎｍ，４８０ｎｍ，５０５ｎｍ，５４６ｎｍ，５７０ｎｍ，６００ｎｍ，６６０ｎｍ，７００ｎｍ，７５０ｎｍ，８００ｎｍである。これら受光器による受光信号は、吸光度測定回路２４を通じ、データ処理部２６のデータ格納部２６０１に送信される。ここで、吸光度測定回路２４は、一定期間毎に各波長域の受光信号を取得し、取得された光量値をデータ処理部２６に出力する。
【００３４】
図９は、散乱光測定部１６の構成例を示す模式図である。本実施例の場合、光源４１には、例えばＬＥＤ光源ユニットを使用する。ＬＥＤ光源ユニットから射出された照射光４２はその光路上に位置するセル８に照射され、セル８を透過した透過光４４が透過光受光器４６において受光される。照射光の波長には、例えば７００ｎｍを使用する。本実施例では、光源４１としてＬＥＤ光源ユニットを使用したが、レーザ光源、キセノンランプ、ハロゲンランプ等を用いても良い。
【００３５】
散乱光測定部１６は、照射光４２又は透過光４４の光軸に対し、空気中において角度２０°だけ離れた方向の散乱光４３ａを散乱光受光器４５ａで受光する。また、散乱光測定部１６は、照射光４２又は透過光４４の光軸に対し、空気中において角度３０°だけ離れた方向の散乱光４３ｂを散乱光受光器４５ｂで受光する。散乱光受光器４５ａ，４５ｂは、例えばフォトダイオードで構成する。これら散乱光受光器４５ａ，４５ｂの受光信号は、散乱光測定回路２５を通じ、データ処理部２６のデータ格納部２６０１に送信される。散乱光測定回路２５も、一定期間毎に受光角度が異なる２つの受光信号を取得し、取得された光量値をデータ処理部２６に出力する。
【００３６】
散乱光受光器４５ａ，４５ｂは、反応ディスク９の回転によるセル８の移動方向に対して概ね垂直である面内に配置される。ここでは、受光角度の基準位置（散乱の起点）を、セル８内を通過する光の光路の中央部に設定している。
【００３７】
図９では、受光角度２０°と３０°にそれぞれ対応するように散乱光受光器４５ａ及び４５ｂを配置する場合について説明したが、受光器を内部に多数保持する単体のリニアアレイを配置し、複数角度の散乱光を一度に受光する構成であってもよい。リニアアレイを用いることにより、受光角度の選択肢を広げることができる。また、受光器でなく、ファイバやレンズなどの光学系を配置し、別位置に配置された散乱光受光器に光を導いても良い。また散乱光受光器が一つであっても良い。
【００３８】
検体（試料）１に含まれる測定物質濃度の定量は、次の手順により行われる。まず、制御回路２３は、洗浄部１４を駆動し、セル８を洗浄する。次に、制御回路２３は、試料分注機構１０を駆動し、試料カップ２内の試料１をセル８に一定量分注する。次に、制御回路２３は、試薬分注機構１１を駆動し、試薬ボトル５内の試薬４をセル８に一定量分注する。各溶液の分注時、制御回路２３は、それぞれに対応する駆動部により、試料ディスク３、試薬ディスク６、反応ディスク９を回転駆動させる。この際、試料カップ２、試薬ボトル５、セル８は、それぞれに対応する分注機構の駆動タイミングに応じ、所定の分注位置に位置決めされる。続いて、制御回路２３は、攪拌部１２を制御して、セル８内に分注された試料１と試薬４とを攪拌し、反応液７を生成する。反応ディスク９の回転により、反応液７を収容するセル８は、吸光度測定部１３が配置された測定位置と散乱光測定部１６が配置された測定位置をそれぞれ通過する。セル８が測定位置を通過するたび、その中の反応液７からの透過光又は散乱光は、それぞれ対応する吸光度測定部１３又は散乱光測定部１６によって測定される。本実施例の場合、各測定時間は約１０分である。吸光度測定部１３及び散乱光測定部１６による測定データはデータ格納部２６０１に順次出力され、反応過程データとして蓄積される。
【００３９】
この反応過程データの蓄積の間、必要であれば、別の試薬４を試薬分注機構１１によりセル８に追加で分注し、攪拌部１２により攪拌し、さらに一定時間測定する。これにより、一定の時間間隔で取得された反応過程データが、データ格納部２６０１に格納される。
【００４０】
濃度定量はユーザーが予め選択した散乱光受光器４５ａ又は散乱光受光器４５ｂのどちらかの散乱角度でのデータ格納部２６０１に蓄積された反応過程データから算出される。どちらの散乱角度の散乱光受光器を用いるかは測定項目ごとに指定される。
【００４１】
図１０は、検体・試薬として濁度標準液１００度の溶液を自動分析装置に設置し、装置上の分析動作によりセル位置において吸光度測定部１３にて測定したデータを示す図である。濁度標準液１００度の組成は粒径０．５μｍ，１．０μｍ，２．０，μｍ，５．０μｍ，１０．０μｍの粒子の混合であり、溶液の吸光度は０．２２abs程度である。なお、この溶液の光路長５ｍｍセルでの透過率は７７．６％となる。図１０の横軸に示す測光ポイントは反応過程データが測定された順番を表しており、１ポイント目から３４ポイント目までで約１０分間である。図１０の縦軸は吸光度測定回路２４で測定された吸光度を示している。また、図１１は、同じ溶液を散乱光測定部１６にて測定した結果を示す図である。図１１の縦軸は散乱光測定回路２５で測定された散乱光量を示している。
【００４２】
図１０、図１１ともに２０個のセルに対する測定を重ね書きしているが、一つの測定において時間が経つにつれて測定値が増加しドリフトしているものが見られる。これはセル壁面に付着した気泡が成長し、散乱光量が増大したためと考えられる。また、図１１の散乱光測定の結果から測定値のゆらぎを、測光ポイント２０〜３４までの測定データの標準偏差（Ｎ）を平均値（Ｂ）で割ったものを反応過程内ノイズ割合（Ｎ／Ｂ）として算出すると、Ｎ／Ｂは０．１７％であった。反応過程内ノイズ割合（Ｎ／Ｂ）は低いほうが高精度に測光でき、再現性が向上するため好ましい。
【００４３】
本実施例の自動分析装置において、生理食塩水を検体として市販ラテックス試薬を混合し、反応させない状態で散乱光測定部１６にて測光した反応過程データのノイズ割合Ｎ／Ｂ（％）を算出した。図１２は、横軸を吸光度にしてプロットしたデータを示す図である。図１２からベース吸光度、すなわち反応前の吸光度が大きくなるほどＮ／Ｂが低減していることがわかった。吸光度０．６abs〜２．０abs程度であればＮ／Ｂは０．０４％以下であり、測定値の揺らぎが少なく高精度に測光できることがわかった。これらは固定ノイズ成分が、濃度が高くなることにより減少する効果とともに、散乱光量の濃度依存性が少ない図２における散乱光のピーク位置近傍においては、対流などによる測定体積内の粒子の濃度むらの影響が少ないことを示唆しており、測定値の揺らぎが最小になったと考えられる。
【００４４】
そこで自動分析装置の散乱光測定光学系評価用の標準液として本実施例では、不溶性担体として粒径３００ｎｍのラテックス粒子を含む、吸光度１．１３absのラテックス溶液を用いた。不溶性担体である比重１．０５のラテックス粒子を分散させる溶媒には、比重調整用溶液として比重１．２６のグリセリンを２０重量％含有したグリセリン水溶液を用いた。比重調整用溶液は、不溶性担体を分散させる溶媒の比重を不溶性担体の比重に概ね一致するようにするためのものである。溶媒の比重を不溶性担体の比重に対して例えば±２５％以内として両者の比重をほぼ一致させることによって、標準液中での不溶性担体の沈降を防止することができる。具体的にはラテックス粒子を分散させる溶媒として１５〜２５重量％のグリセリンを含有する水溶液を用いても、ラテックス粒子の原料であるポリスチレンと比重を概ね一致させることができ、ラテックス粒子の沈降抑制効果が得られる。また、界面活性剤としてTritonX-100を０．５％混合させた。標準液に界面活性剤を混合することにより、セル壁面の濡れ性を向上させ、セルに溶液を分注した後の気泡の成長による光量変化を抑制でき、安定した散乱光測光が可能となる。
【００４５】
図１３は、この散乱光測定光学系評価用の標準液をセル８に分注して吸光度測定部１３にて測定した結果を示す図である。また、図１４は、この散乱光測定光学系評価用の標準液をセル８に分注して散乱光測定部１６にて測定した結果を示す図である。どちらにおいても標準液に界面活性剤を混合させたため、セル壁面に気泡が付着して成長することが無く、測定値にドリフトは見られない。また、測光ポイント２０〜３４までの測定データから求められるＮ／Ｂは０．０３％と低く抑えられていることがわかった。これにより本実施例の標準液を用いると、不溶性担体粒子の濃度むらの影響なく、高精度に光学系を評価できることがわかる。なお、図１３及び図１４において最初の数点の測定ポイントにみられる出力変動は、分注及び攪拌に起因して生じた出力変動である。
【００４６】
標準液に含有されるラテックス粒子等の不溶性担体の濃度は、セルに分注されたとき吸光度０．６〜２．０absの濃度あるいは透過率が１０％〜５０％の範囲となる濃度であればよく、より好ましくは吸光度０．８〜１．５absの濃度あるいは透過率が１８％〜４０％の範囲となる濃度で、更に好ましくは吸光度１．０〜１．３absの濃度あるいは透過率が２２．４％〜３１．６％の範囲となる濃度で不溶性担体を含有するとよい。また、ラテックス粒子の粒径は２５０〜３５０ｎｍとするのが好ましい。
【００４７】
図１５は、出力部２８に表示される光量調整用のＬＥＤ光量調整画面の例を示す模式図である。本実施例の自動分析装置は通常の分析モードに加えて光源光量調整モードを有し、調整モードを選択したとき図１５に示したＬＥＤ光量調整画面が表示される。
【００４８】
光源光量調整モードでは、自動分析装置の反応液を収容するセルに散乱光測定光学系評価用の標準液、すなわちセルに分注されたとき吸光度０．６〜２．０absとなる濃度あるいは透過率が１０％〜５０％の範囲となる濃度で不溶性担体を含有する標準液を分注し、標準液が分注されたセルに光源から光照射し、当該セル内の標準液によって散乱された光を散乱光検出器で検出し、散乱光検出器の出力が予め定められた値となるように光源の光量を調整する。
【００４９】
本実施例のＬＥＤ光量調整画面には、散乱光測定部１６の透過光受光器４６及び散乱光受光器４５ａ，４５ｂで受光した光量に対して回路上の固定値であるベースカウント（光量が０のときの値）６６６７を足した値がデジタル表示される。ここでは粒径３００ｎｍ、濃度１．１３absの評価用ラテックス溶液を測定した場合に散乱角２０°におけるＡＤＣ回路の出力値が１４０００±１００になるように散乱用光源駆動回路２９のＬＥＤ駆動電流値を調整した。ＬＥＤ駆動電流値の調整はソフト上で装置画面から自動で行うことでも達成でき、その場合は変更が容易であるメリットがある。
【００５０】
図１６は、本実施例で用いたのと同じ構造の３台の自動分析装置において光源の光量調整を行う前と後での散乱角２０°及び３０°における散乱光量の値を示す図である。光源光量調整前には乖離率（（ＭＡＸ−ＭＩＮ）／ＭＩＮ×１００（％））が１８％程度ありばらついていたが、光量調整により乖離率を６％程度に抑制することができた。光量調整には２０°の散乱光受光器を用いて出力値が±２％以下になるように調整した。受光角度ごとに設置した受光器の感度ばらつき等があるため、完全には一致しないが、光量ばらつきを低減することができた。このように、本実施例の標準液を用いて自動分析装置の出荷時や光源交換時に光源として用いるＬＥＤの光量調整を行うことにより、出荷時や光源交換時の装置間差を低減することができる。
【００５１】
また、上記実施例では不溶性担体として粒径３００ｎｍのラテックス粒子を用いたが、粒径２５０ｎｍから３５０ｎｍの粒子を用いれば、自動分析装置上で測定するラテックス試薬と粒径が一致し、散乱光量も一致しやすいので好ましい。
【００５２】
なお、粒径の違いによる散乱光量の違いを予め測定しておき、粒径と散乱光量の関係を把握しておけば、粒径が微小に変化するラテックス粒子のロット間差においても補正により対応することができる。図１７は、ラテックス粒子の粒径と散乱光受光器からの信号のＡＤＣ出力値の関係を示す図である。ラテックス粒子の粒径が３１０ｎｍの場合にＬＥＤ駆動電流を変化させＡＤＣ出力値を１４３８５に合わせれば、粒径３００ｎｍのときにＡＤＣ出力値１４０００にあわせるのと同じことがわかる。また本実施例ではＬＥＤ駆動電流を調整し装置間差をなくしたが、回路のアンプ倍率等を補正することで装置間差を無くすことも可能である。
【００５３】
なお、本発明は上記した実施例に限定されるものではなく、様々な変形例が含まれる。例えば、上記した実施例は本発明を分かりやすく説明するために詳細に説明したものであり、必ずしも説明した全ての構成を備えるものに限定されるものではない。また、ある実施例の構成の一部を他の実施例の構成に置き換えることが可能であり、また、ある実施例の構成に他の実施例の構成を加えることも可能である。また、各実施例の構成の一部について、他の構成の追加・削除・置換をすることが可能である。
【符号の説明】
【００５４】
２  試料カップ
３  試料ディスク
５  試薬ボトル
６  試薬ディスク
８  セル
９  反応ディスク
１３  吸光度測定部
１６  散乱光測定部
２６  データ処理部
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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