(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式：
【化１】
0006538656.tif 000013
（式中、
同じであっても、異なっていてもよいＲ１およびＲ２は、互いに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アシル（−ＣＯＲ９）、アミノ（−ＮＨ２）、アルキルアミノ（−ＮＨＲ９）、ジアルキルアミノ（−ＮＲ９Ｒ’９）、アシルアミノ（−ＮＨＣＯＲ９）、ジアシルアミノ（−Ｎ（ＣＯＲ９）（ＣＯＲ’９））、トリフルオロメチル（−ＣＦ３）、ハロゲン、ヒドロキシル（−ＯＨ）、アルコキシ（−ＯＲ９）、チオ（−ＳＨ）またはチオアルキル（−ＳＲ９）を表し、ここで、
同じであっても、異なっていてもよいＲ９およびＲ’９は、互いに独立して、アルキル、アルケニル、アルキニルまたはアリールを表し、
Ｚは、プリンのＮ７およびＮ９位置のいずれかにあり、水素、ベンジル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、−ＣＯＲ９、ハロゲン、−（ＣＨ２）ｎ−ＯＲ５、−（ＣＨ２）ｎ１−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ２Ｒ５、−（ＣＨ２）ｎ’−ＣＯＯＲ５または−（ＣＨ２）ｎ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ６）（ＯＲ７）を表し、ここで、
同じであっても、異なっていてもよいｎ、ｎ１およびｎ２は、互いに独立して、１〜１０の範囲の整数を表し、ｎ’は０〜１０の範囲の整数を表し、
Ｒ５は、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールまたは−ＣＯＲ９を表し、
同じであっても、異なっていてもよいＲ６およびＲ７は、互いに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、−ＣＯＲ９、有機カチオンまたは金属カチオンを表し、
Ｘは、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝Ｓ、Ｃ＝ＮＲ８またはＳＯ２から選択される２価の基を表し、ここで、
Ｒ８は、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、−ＯＨまたは−ＯＲ９を表し、
Ｙは、Ｒ５と同じ意味を有し、
Ａｒは、置換基Ｒ３で置換されていてもよいビフェニルを表し、
Ｒ３は、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、−ＮＨ２、−ＮＨＲ９、−ＮＲ９Ｒ’９、−ＯＨ、−ＯＲ９、アリールオキシ、ベンジルオキシ（−ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５）；Ｎ、ＯまたはＳから選択される１つ以上のヘテロ原子を含む５員または６員の芳香族または非芳香族複素環を表し、前記５員または６員の複素環はまた、置換基Ｒ４で置換されていてもよく、ここで
Ｒ４は、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、−ＣＯＲ９、−（ＣＨ２）ｎ−ＯＲ５、−（ＣＨ２）ｎ１−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ２Ｒ５、−（ＣＨ２）ｎ’−ＣＯＯＲ５または−（ＣＨ２）ｎ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ６Ｒ７）を表し、
Ｒ３は、オルト、メタまたはパラ位においてＡｒに結合し、
Ｘは、オルト、メタまたはパラ位においてＡｒに結合する）
を有するが、化合物９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４−カルボキサミドを除く、６−アミノプリン骨格を有する化合物。
【請求項２】
置換基Ｒ３が、水素またはＮ、ＯもしくはＳから選択される１つ以上のヘテロ原子を含む５員もしくは６員の芳香族もしくは非芳香族複素環を表し、前記複素環は請求項１に定義される置換基Ｒ４で置換されていてもよい、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記５員の複素環がピロールまたはイミダゾールを表し、前記ピロールまたはイミダゾールが、水素または請求項１に定義される−（ＣＨ２）ｎ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ６）（ＯＲ７）から選択される置換基Ｒ４で置換されていてもよい、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１が、水素、（−ＮＨ２）、（−ＮＨＲ９）、（−ＮＲ９Ｒ’９）、（−ＮＨＣＯＲ９）、（−Ｎ（ＣＯＲ９）（ＣＯＲ’９））を表し、
Ｒ２が、水素、ベンジルまたはフェニルを表し、
Ｚが、水素、ベンジル、フェニル、−（ＣＨ２）ｎ−ＯＲ５、−（ＣＨ２）ｎ１−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ２Ｒ５、−（ＣＨ２）ｎ’−ＣＯＯＲ５または−（ＣＨ２）ｎ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ６）（ＯＲ７）を表し、ここで、
同じであっても、異なっていてもよいｎ、ｎ１、ｎ２およびｎ’は、互いに独立して、１または２の整数を表し、
Ｒ５は、水素、エチル、アセチル（−ＣＯＣＨ３）またはフェニルを表し、
同じであっても、異なっていてもよいＲ６およびＲ７は、互いに独立して、水素、メチル、エチル、ナトリウムカチオン（Ｎａ＋）またはリチウムカチオン（Ｌｉ＋）を表し、
Ｘが、Ｃ＝Ｏ、ＳＯ２を表し、
Ｙが水素を表す、
請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｎ−ピロール−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｎ−ピロール−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｎ−ピロール−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｎ−ピロール−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｎ−ピロール−４−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｎ−ピロール−４−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｎ−イミダゾール−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｎ−イミダゾール−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｎ−イミダゾール−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｎ−イミダゾール−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｃ４−イミダゾール−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｃ４−イミダゾール−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｃ４−イミダゾール−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｃ４−イミダゾール−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｃ４−（Ｎ１−エトキシホスフィニルメチル）イミダゾール−３−カルボキサミド、
−７−（フェニルメチル）−７Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−９−（フェニルメチル）−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−７−［（フェニルメトキシ）メチル］−７Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−９−［（フェニルメトキシ）メチル］−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−９−［２−（アセチルオキシ）エチル］−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−９−（２−ヒドロキシエチル）−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−エチル２−［（１，１’−ビフェニル）−３−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル］アセテート、
−２−［（１，１’−ビフェニル）−３−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル］酢酸、
−ジエチル［（１，１’−ビフェニル）−３−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル］メチルホスホネート、
−［（１，１’−ビフェニル）−３−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル］メチルホスホン酸、
およびそれらの混合物
を含む群から選択される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
がん治療用医薬を製造するための、式（Ｉ）：
【化２】
0006538656.tif 000014
（式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｘ、ＹおよびＺは、請求項１〜５のいずれか一項に定義されている通りであり、
Ａｒは、ビフェニルまたはナフチルを表し、前記ビフェニルまたはナフチルは置換基Ｒ３で置換されていてもよく、
Ｒ３は、オルト、メタまたはパラ位においてＡｒと結合し、
Ｘは、オルト、メタまたはパラ位においてＡｒと結合する）
を有する、６−アミノプリン骨格を有する化合物の使用。
【請求項７】
前記式（Ｉ）の化合物が、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｎ−ピロール−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｎ−ピロール−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｎ−ピロール−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｎ−ピロール−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｎ−ピロール−４−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｎ−ピロール−４−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｎ−イミダゾール−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｎ−イミダゾール−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｎ−イミダゾール−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｎ−イミダゾール−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｃ４−イミダゾール−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｃ４−イミダゾール−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｃ４−イミダゾール−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｃ４−イミダゾール−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｃ４−（Ｎ１−エトキシホスフィニルメチル）イミダゾール−３−カルボキサミド、
−７−（フェニルメチル）−７Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−９−（フェニルメチル）−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−７−［（フェニルメトキシ）メチル］−７Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−９−［（フェニルメトキシ）メチル］−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−９−［２−（アセチルオキシ）エチル］−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−９−（２−ヒドロキシエチル）−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−エチル２−［（１，１’−ビフェニル）−３−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル］アセテート、
−２−［（１，１’−ビフェニル）−３−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル］酢酸、
−ジエチル［（１，１’−ビフェニル）−３−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル］メチルホスホネート、
−［（１，１’−ビフェニル）−３−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル］メチルホスホン酸、
−９Ｈ−プリン−６−イルナフタレン−１−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イルナフタレン−２−カルボキサミド、
−（ナフタレン−１−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル）メチルホスホン酸、
−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル）メチルホスホン酸、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４−スルホンアミド、
およびそれらの混合物
を含む群から選択される、請求項６に記載の使用。
【請求項８】
前記式（Ｉ）の化合物が、細胞質５’−ヌクレオチダーゼＩＩ（ｃＮ−ＩＩ）、細胞質５’−ヌクレオチダーゼＩＡ（ｃＮ−ＩＡ）、細胞質５’−ヌクレオチダーゼＩＢ（ｃＮ−ＩＢ）、細胞質５’−ヌクレオチダーゼＩＩＩＡ（ｃＮ−ＩＩＩＡ）、細胞質５’−ヌクレオチダーゼＩＩＩＢ（ｃＮ−ＩＩＩＢ）、エクト−５’−ヌクレオチダーゼ（ｅＮ、ＣＤ７３）、細胞質５’（３’）−デオキシヌクレオチダーゼ（ｃｄＮ）またはミトコンドリア５’（３’）−デオキシヌクレオチダーゼ（ｍｄＮ）から選択される少なくとも１つの５’−ヌクレオチダーゼを阻害するためである、請求項６または７に記載の使用。
【請求項９】
前記式（Ｉ）の化合物が、ヌクレオシド類似体および／または核酸塩基類似体の抗がん作用を促進するために、少なくとも１つのヌクレオシド類似体および／または少なくとも１つの核酸塩基類似体と組み合わされる、請求項６〜８のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１０】
前記ヌクレオシド類似体が、クラドリビン、フルダラビン、クロファラビン、シタラビン、ゲムシタビン、ネララビン、フロキシウリジンまたはペントスタチンから選択され、
前記核酸塩基類似体が、フルオロウラシル、６−メルカプトプリンまたは６−チオグアノシンから選択される、請求項９に記載の使用。
【請求項１１】
式（Ｉ）の少なくとも１つの化合物：
【化３】
0006538656.tif 000015
（式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｘ、ＹおよびＺは、請求項１〜５のいずれか一項に定義されている通りであり、
Ａｒはビフェニルまたはナフチルを表し、前記ビフェニルまたはナフチルは、置換基Ｒ３で置換されていてもよく、
Ｒ３は、オルト、メタまたはパラ位においてＡｒと結合し、
Ｘは、オルト、メタまたはパラ位においてＡｒと結合する）
を、
クラドリビン、フルダラビン、クロファラビン、シタラビン、ゲムシタビン、ネララビン、フロキシウリジンまたはペントスタチンから選択される少なくとも１つのヌクレオシド類似体および／または
フルオロウラシル、６−メルカプトプリンまたは６−チオグアノシンから選択される少なくとも１つの核酸塩基類似体
ならびに任意の少なくとも１つの薬学的に許容可能な賦形剤
と組み合わせて含む、がんの治療における医薬としての使用のための組成物。
【請求項１２】
前記式（Ｉ）の化合物が、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｎ−ピロール−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｎ−ピロール−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｎ−ピロール−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｎ−ピロール−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｎ−ピロール−４−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｎ−ピロール−４−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｎ−イミダゾール−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｎ−イミダゾール−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｎ−イミダゾール−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｎ−イミダゾール−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｃ４−イミダゾール−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｃ４−イミダゾール−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｃ４−イミダゾール−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｃ４−イミダゾール−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｃ４−（Ｎ１−エトキシホスフィニルメチル）イミダゾール−３−カルボキサミド、
−７−（フェニルメチル）−７Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−９−（フェニルメチル）−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−７−［（フェニルメトキシ）メチル］−７Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−９−［（フェニルメトキシ）メチル］−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−９−［２−（アセチルオキシ）エチル］−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−９−（２−ヒドロキシエチル）−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−エチル２−［（１，１’−ビフェニル）−３−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル］アセテート、
−２−［（１，１’−ビフェニル）−３−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル］酢酸、
−ジエチル［（１，１’−ビフェニル）−３−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル］メチルホスホネート、
−［（１，１’−ビフェニル）−３−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル］メチルホスホン酸、
−９Ｈ−プリン−６−イルナフタレン−１−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イルナフタレン−２−カルボキサミド、
−（ナフタレン−１−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル）メチルホスホン酸、
−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル）メチルホスホン酸、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４−スルホンアミド
およびそれらの混合物
を含む群から選択される、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
がんの治療における同時、個別または連続投与のための請求項１１または１２に記載の組成物。
【請求項１４】
前記がんが、
固形腫瘍または
急性血液疾患、慢性骨髄増殖性症候群および慢性リンパ球増殖性症候群、慢性リンパ性白血病、ヘアリー細胞リンパ腫および多発性骨髄腫
から選択される、請求項１１〜１３のいずれか一項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、５’−ヌクレオチダーゼ阻害剤、特に細胞質５’−ヌクレオチダーゼＩＩ（ｃＮ−ＩＩ）阻害剤として６−アミノプリン骨格を有する新規化合物に関する。本発明はまた、抗がん化学療法における単独またはヌクレオシドおよび／もしくは核酸塩基類似体と組み合わせた前記化合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヌクレオシド類似体は、悪性血液疾患および固形腫瘍の治療において広範に使用される治療剤のクラスを表す。それらの作用様式は、核酸生合成に関与する酵素系（ポリメラーゼ、リボヌクレオチドレダクターゼ、チミジル酸シンターゼなど）を阻害するリン酸化誘導体（ヌクレオチド）内での細胞内代謝に基づく。
【０００３】
したがって、成人および子供における急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄芽球性白血病および慢性骨髄性白血病を治療するために６−メルカプトプリン誘導体などの核酸塩基類似体がこれまで記載されている１。小児科において経口投与される抗がん剤はほとんど存在しないが、そのような薬物は、白血病、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、脳腫瘍などの悪性病理の様々な場合に頻繁に使用される。それらの作用様式はヌクレオシド類似体と同様である。
【０００４】
それにも関わらず、ヌクレオシド類似体の使用が、特に、キナーゼと５’−ヌクレオチダーゼの細胞内発現の間で酵素異常調節を含む抵抗現象の発生に対して行われる。したがって、診断における５’−ヌクレオチダーゼ活性の高発現は、がんを罹患している患者の生存に好ましくない独立した予測因子であることが知られている。例として、細胞質５’−ヌクレオチダーゼＩＩ（ｃＮ−ＩＩ）の高発現が、他の患者より悪い全生存率を有する急性骨髄性白血病を罹患している患者において臨床的に観察される。さらに、最近の研究２ａ、ｂにより、小児科において使用される６−メルカプトプリンおよび６−チオグアニンによる治療に対して増加した抵抗をもたらすヒトｃＮ−ＩＩの活性を刺激する変異の存在が示されている。
【０００５】
しかしながら、これまで、５’−ヌクレオチダーゼの発現または過剰発現から生じるヌクレオチド濃度の調節に対する治療の答は提供されていなかった。
【０００６】
特許文献１は、ドライアイ疾患、呼吸器系疾患、嚢胞性線維症、炎症性疾患、免疫系の疾患、消化器疾患、腎疾患、がんおよび脳疾患などの異なり、多様な疾患を治療するためのエクトヌクレオチダーゼ阻害剤を記載している。
【０００７】
しかしながら、この文献における薬理学的標的は膜標的であり（細胞質ではない）、意図する用途は極端に広い。
【０００８】
非特許文献１は、ラットの肝臓および心臓抽出物に存在する細胞質５’−ヌクレオチダーゼ阻害剤を記載しており、これらの化合物は、５’−デオキシ−５’−アルキルチオヌクレオシドファミリー、特にアデノシン誘導体およびイノシン誘導体に属する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】米国特許出願公開第２０１０／０２０４１８２号明細書
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．（１９８９）２６２、２０３−８
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明の目的の１つは、特に、がんの治療に使用され得る５’−ヌクレオチダーゼ阻害化合物を提供することである。
【００１２】
本発明の別の目的は、通常、抗がん化学療法に使用される細胞毒性ヌクレオシド類似体および／または核酸塩基類似体と組み合わせて使用される場合、５’−ヌクレオチダーゼ阻害化合物を提供し、前記細胞毒性ヌクレオシド類似体および／または核酸塩基類似体の治療効果を増強することである。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
したがって、本発明の主題は、以下の式：
【化１】
0006538656.tif 000002
（式中、
同じであっても、異なっていてもよいＲ１およびＲ２は、互いに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アシル（−ＣＯＲ９）、アミノ（−ＮＨ２）、アルキルアミノ（−ＮＨＲ９）、ジアルキルアミノ（−ＮＲ９Ｒ’９）、アシルアミノ（−ＮＨＣＯＲ９）、ジアシルアミノ（−Ｎ（ＣＯＲ９）（ＣＯＲ’９））、トリフルオロメチル（−ＣＦ３）、ハロゲン、ヒドロキシル（−ＯＨ）、アルコキシ（−ＯＲ９）、チオ（−ＳＨ）またはチオアルキル（−ＳＲ９）を表し、ここで、
同じであっても、異なっていてもよいＲ９およびＲ’９は、互いに独立して、アルキル、アルケニル、アルキニルまたはアリールを表し、
Ｚは、プリンのＮ７およびＮ９位置のいずれかにあり、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、−ＣＯＲ９、ハロゲン、−（ＣＨ２）ｎ−ＯＲ５、−（ＣＨ２）ｎ１−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ２Ｒ５、−（ＣＨ２）ｎ’−ＣＯＯＲ５または−（ＣＨ２）ｎ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ６）（ＯＲ７）を表し、ここで、
同じであっても、異なっていてもよいｎ、ｎ１およびｎ２は、互いに独立して、１〜１０の範囲の整数を表し、ｎ’は０〜１０の範囲の整数を表し、
Ｒ５は、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールまたは−ＣＯＲ９を表し、
同じであっても、異なっていてもよいＲ６およびＲ７は、互いに独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、−ＣＯＲ９、有機カチオンまたは金属カチオンを表し、
Ｘは、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝Ｓ、Ｃ＝ＮＲ８またはＳＯ２から選択される２価の基を表し、ここで、
Ｒ８は、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、−ＯＨまたは−ＯＲ９を表し、
Ｙは、Ｒ５と同じ意味を有し、
Ａｒは、置換基Ｒ３で置換されていてもよいビフェニルを表し、
Ｒ３は、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、−ＮＨ２、−ＮＨＲ９、−ＮＲ９Ｒ’９、−ＯＨ、−ＯＲ９、アリールオキシ、ベンジルオキシ（−ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５）；Ｎ、ＯまたはＳから選択される１つ以上のヘテロ原子を含む５員または６員の芳香族または非芳香族複素環を表し、前記５員または６員の複素環はまた、置換基Ｒ４で置換されていてもよく、ここで
Ｒ４は、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、−ＣＯＲ９、−（ＣＨ２）ｎ−ＯＲ５、−（ＣＨ２）ｎ１−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ２Ｒ５、−（ＣＨ２）ｎ’−ＣＯＯＲ５または−（ＣＨ２）ｎ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ６）（ＯＲ７）を表し、ここで、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、ｎ、ｎ１、ｎ２およびｎ’は以前に定義されている通りであり、
Ｒ３は、オルト、メタまたはパラ位においてＡｒに結合し、
Ｘは、オルト、メタまたはパラ位においてＡｒに結合する）
を有するが、化合物９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４−カルボキサミドを除く、６−アミノプリン骨格を有する化合物である。
【００１４】
本出願において、「アルキル」という用語は、有益には、１〜１２個の炭素原子、好ましくは１〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝炭化水素に基づいた基、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ネオペンチルまたはｎ−ヘキシルを示す。
【００１５】
「アルケニル」という用語は、有益には、１つまたは２つの二重結合を有する２〜１２個の炭素原子、好ましくは２〜６個の炭素原子を有する１つ以上の炭素−炭素二重結合を含む直鎖または分枝炭化水素に基づいた基を示す。
【００１６】
「アルキニル」という用語は、有益には、１つまたは２つの三重結合を有する２〜１２個の炭素原子、好ましくは２〜６個の炭素原子を有する１つ以上の炭素−炭素三重結合を含む直鎖または分枝炭化水素に基づいた基を示す。
【００１７】
「アリール」という用語は、６〜１８個の炭素原子を有する単環、二環または三環芳香族炭化水素に基づいた系を示す。例として、フェニル（Ｃ６Ｈ５）、ベンジル（Ｃ６Ｈ５ＣＨ２）、フェネチル（Ｃ６Ｈ５ＣＨ２ＣＨ２）、トリル（Ｃ６Ｈ４ＣＨ３）、キシリル（Ｃ６Ｈ３（ＣＨ３）２）、ベンジリデン（Ｃ６Ｈ５ＣＨ＝ＣＨ）、ベンゾイル（Ｃ６Ｈ５ＣＯ）、ビフェニル（またはジフェニル）（Ｃ１２Ｈ９）およびナフチル（Ｃ１０Ｈ７）が挙げられ得る。
【００１８】
この「アリール」という用語は、本出願において、上記の一般式または本明細書以下に定義される式（Ｉ）に表される略語「Ａｒ」と区別されなければならず、具体的には、一方でビフェニルまたは他方でビフェニルもしくはナフチルを示し、各々は置換基Ｒ３（ここでＲ３は以前に定義されている通りである）で置換されていてもよい。
【００１９】
本出願において定義されているアルキル、アルケニル、アルキニル、アリールはまた、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、−ＮＨ２、−ＮＨＲ９、−ＮＲ９Ｒ’９、−ＯＨ、−ＯＲ９、アリールオキシ、ベンジルオキシ（−ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５）およびＮ、ＯまたはＳから選択される１つ以上のヘテロ原子を含む５員または６員芳香族または非芳香族複素環から選択される１つ以上の置換基で置換されていてもよい。
【００２０】
「ハロゲン」という用語は、フッ素、塩素、ヨウ素または臭素原子を示す。
【００２１】
有機カチオンの例として、アンモニウム、トリアルキルアンモニウムまたはピリジニウムカチオンが挙げられ得る。金属カチオンの例として、ナトリウム（Ｎａ＋）、リチウム（Ｌｉ＋）またはカリウム（Ｋ＋）カチオンが挙げられ得る。
【００２２】
Ｒ６および／またはＲ７が有機または金属カチオンを示す場合、基−（ＣＨ２）ｎ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ６）（ＯＲ７）は、以下の３つの式：
−（ＣＨ２）ｎ−Ｐ（＝Ｏ）（Ｏ−「カチオン」）（ＯＲ７）、−（ＣＨ２）ｎ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ６）（Ｏ−「カチオン」）または−（ＣＨ２）ｎ−Ｐ（＝Ｏ）（Ｏ−「カチオン」）（Ｏ−「カチオン」）のうちの１つによって表され得、「カチオン」という指定は必ず正電荷を示す。
【００２３】
「アリールオキシ」という用語は、酸素原子に結合したアリール基を示す。
【００２４】
Ｎ、ＯまたはＳから選択される１つ以上のヘテロ原子を含む５員芳香族または非芳香族複素環は、例えば、ピロール、イミダゾール、フラン、ピロリン、ピロリジン、テトラヒドロフラン、チオフェン、テトラヒドロチオフェン、ピラゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、ピラゾリン、イミダゾリン、ピラゾリジン、イミダゾリジン、ジオキソラン、チアゾール、チアゾリジン、イソオキサゾリジン、トリアゾール、オキサジアゾール、フラザン、チアジアゾールまたはテトラゾールを示す。
【００２５】
Ｎ、ＯまたはＳから選択される１つ以上のヘテロ原子を含む６員芳香族または非芳香族複素環は、例えば、ピリジン、ピラン、ジヒドロピラン、ピペリジン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、オキサジン、ジオキシン、ピペラジン、モルホリン、ジオキサン、チアジン、チオモルホリン、オキサチアン、ジチアン、トリアジン、トリオキサン、チアジアジン、ジチアジンまたはトリチアンを示す。
【００２６】
本発明の一実施形態によれば、上記の化合物について、置換基Ｒ３は、水素またはＮ、ＯもしくはＳから選択される１つ以上のヘテロ原子を含む５員もしくは６員芳香族もしくは非芳香族複素環を表し、前記複素環は上記に定義される置換基Ｒ４で置換されていてもよい。
【００２７】
５員複素環の例として、ピロールまたはイミダゾールが挙げられ得、前記ピロールまたはイミダゾールは、Ｈまたは上記に定義される−（ＣＨ２）ｎ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ６）（ＯＲ７）から選択される置換基Ｒ４で置換されていてもよい。
【００２８】
本発明のさらなる実施形態によれば、上記の化合物について：
Ｒ１は、水素、（−ＮＨ２）、（−ＮＨＲ９）、（−ＮＲ９Ｒ’９）、（−ＮＨＣＯＲ９）または（−Ｎ（ＣＯＲ９）（ＣＯＲ’９））を表し、
Ｒ２は、水素、ベンジルまたはフェニルを表し、
Ｚは、水素、ベンジル、フェニル、−（ＣＨ２）ｎ−ＯＲ５、−（ＣＨ２）ｎ１−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ２Ｒ５、−（ＣＨ２）ｎ’−ＣＯＯＲ５または−（ＣＨ２）ｎ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ６）（ＯＲ７）を表し、ここで、
同じであっても、異なっていてもよいｎ、ｎ１、ｎ２およびｎ’は、互いに独立して、１または２の整数を表し、
Ｒ５は、水素、エチル、アセチル（−ＣＯＣＨ３）またはフェニルを表し、
同じであっても、異なっていてもよいＲ６およびＲ７は、互いに独立して、水素、メチル、エチル、ナトリウムカチオン（Ｎａ＋）またはリチウムカチオン（Ｌｉ＋）を表し、
Ｘは、Ｃ＝Ｏ、ＳＯ２を表し、
Ｙは水素を表す。
【００２９】
本発明の主題は、より具体的には、上記に定義される化合物であり、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｎ−ピロール−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｎ−ピロール−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｎ−ピロール−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｎ−ピロール−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｎ−ピロール−４−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｎ−ピロール−４−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｎ−イミダゾール−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｎ−イミダゾール−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｎ−イミダゾール−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｎ−イミダゾール−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｃ４−イミダゾール−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｃ４−イミダゾール−２−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｃ４−イミダゾール−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｃ４−イミダゾール−３−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｃ４−（Ｎ１−エトキシホスフィニルメチル）イミダゾール−３−カルボキサミド、
−７−（フェニルメチル）−７Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−９−（フェニルメチル）−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−７−［（フェニルメトキシ）メチル］−７Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−９−［（フェニルメトキシ）メチル］−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−９−［２−（アセチルオキシ）エチル］−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−９−（２−ヒドロキシエチル）−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド、
−エチル２−［（１，１’−ビフェニル）−３−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル］アセテート、
−２−［（１，１’−ビフェニル）−３−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル］酢酸、
−ジエチル［（１，１’−ビフェニル）−３−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル］メチルホスホネート、
−［（１，１’−ビフェニル）−３−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル］メチルホスホン酸、
およびそれらの混合物
を含む群から選択されることを特徴とする。
【００３０】
本発明はまた、医薬として使用するため、好ましくががんの治療における使用のための上記に定義される化合物に関する。
【００３１】
本発明の主題はまた、式（Ｉ）：
【化２】
0006538656.tif 000003
（式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｘ、ＹおよびＺは、以前に定義されている通りであり、
Ａｒは、ビフェニルまたはナフチルを表し、前記ビフェニルまたはナフチルは置換基Ｒ３（ここでＲ３は以前に定義されている通りである）で置換されていてもよく、
Ｒ３は、オルト、メタまたはパラ位においてＡｒと結合し、
Ｘは、オルト、メタまたはパラ位においてＡｒと結合する）
を有する６−アミノプリン骨格を有する化合物であり、前記式（Ｉ）の化合物はがんの治療における使用を意図する。
【００３２】
化合物９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４−カルボキサミドは明確に上記および本発明に係る一般式（Ｉ）の範囲内であり、がんの治療における使用を意図することが理解されるべきである。
【００３３】
有益には、がんの治療に使用され得る化合物（Ｉ）の例としては、具体的に挙げられている上記の２７の化合物に加えて、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−ナフタレン−１−カルボキサミド、
−９Ｈ−プリン−６−イル−ナフタレン−２−カルボキサミド、
−（ナフタレン−１−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル）メチルホスホン酸、
−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル）メチルホスホン酸、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４−スルホンアミド
およびそれらの混合物
が挙げられ得る。
【００３４】
式（Ｉ）の化合物を使用して治療され得るがんの例としては、
固形腫瘍、例えば、腺管、皮膚、間葉、生殖器および神経学的細胞腫瘍、または
急性血液疾患（例えば、急性骨髄芽球性白血病および急性リンパ芽球性白血病）、慢性骨髄増殖性症候群および慢性リンパ球増殖性症候群（例えば、ホジキンまたは非ホジキン悪性リンパ腫）、慢性リンパ性白血病、ヘアリー細胞白血病および多発性骨髄腫
から選択されるものが挙げられ得る。
【００３５】
本発明の主題はまた、上記に定義される使用のため、より特には、細胞質５’−ヌクレオチダーゼＩＩ（ｃＮ−ＩＩ）、細胞質５’−ヌクレオチダーゼＩＡ（ｃＮ−ＩＡ）、細胞質５’−ヌクレオチダーゼＩＢ（ｃＮ−ＩＢ）、細胞質５’−ヌクレオチダーゼＩＩＩＡ（ｃＮ−ＩＩＩＡ）、細胞質５’−ヌクレオチダーゼＩＩＩＢ（ｃＮ−ＩＩＩＢ）、エクト−５’−ヌクレオチダーゼ（ｅＮ、ＣＤ７３）、細胞質５’（３’）−デオキシヌクレオチダーゼ（ｃｄＮ）またはミトコンドリア５’（３’）−デオキシヌクレオチダーゼ（ｍｄＮ）、特に細胞質５’−ヌクレオチダーゼＩＩから選択される、少なくとも１つの５’−ヌクレオチダーゼを阻害するための式（Ｉ）の化合物である。
【００３６】
本発明の一実施形態によれば、式（Ｉ）の少なくとも１つの化合物は、ヌクレオシド類似体および／または核酸塩基類似体の抗がん作用を促進するために、少なくとも１つのヌクレオシド類似体および／または少なくとも１つの核酸塩基類似体と組み合わされて使用されてもよい。したがって、本発明は、前記式（Ｉ）の化合物が、ヌクレオシド類似体および／または核酸塩基類似体の抗がん作用を促進するために、少なくとも１つのヌクレオシド類似体および／または少なくとも１つの核酸塩基類似体と組み合わされることを特徴とする、上記に定義される使用のための式（Ｉ）の化合物に関する。
【００３７】
式（Ｉ）の化合物と組み合わせて使用されるヌクレオシド類似体は、例えば、クラドリビン、フルダラビン、クロファラビン、シタラビン、ゲムシタビン、ネララビン、フロキシウリジンまたはペントスタチンから選択されてもよい。
【００３８】
式（Ｉ）の化合物と組み合わせて使用される核酸塩基類似体は、例えば、フルオロウラシル、６−メルカプトプリンまたは６−チオグアノシンから選択されてもよい。
【００３９】
本発明の主題はまた、
クラドリビン、フルダラビン、クロファラビン、シタラビン、ゲムシタビン、ネララビン、フロキシウリジンもしくはペントスタチンから選択される少なくとも１つのヌクレオシド類似体、および／または
フルオロウラシル、６−メルカプトプリンもしくは６−チオグアノシンから選択される少なくとも１つの核酸塩基類似体、
ならびに任意に少なくとも１つの薬学的に許容可能な賦形剤
と組み合わされる、以前に定義される式（Ｉ）の少なくとも１つの化合物を含む組成物である。
【００４０】
本明細書の残りにおいて、「本発明の組成物」という表現は上記の組成物を示す。
【００４１】
有益には、本発明の組成物に使用され得る式（Ｉ）の化合物は、より特には、具体的に上記に挙げられている組成物である。
【００４２】
本発明の主題はまた、好ましくはがんの治療における医薬として使用するための上記の組成物である。
【００４３】
典型的には、上記の本発明の組成物は、がんの治療において同時、個別または連続投与のために使用されてもよい。
【００４４】
より特には、本発明の組成物を使用して治療され得るがんの例は上記のがん、すなわち：
固形腫瘍、例えば、腺管、皮膚、間葉、生殖器および神経学的細胞腫瘍、または
急性血液疾患（例えば、急性骨髄芽球性白血病および急性リンパ芽球性白血病）、慢性骨髄増殖性症候群および慢性リンパ球増殖性症候群（例えば、ホジキンまたは非ホジキン悪性リンパ腫）、慢性リンパ性白血病、ヘアリー細胞白血病および多発性骨髄腫である。
【００４５】
医薬組成物の形態、それらの投与経路、それらの投薬量およびそれらの投薬レジメンは、もちろん、病状の重症度、その進行段階、治療される対象の年齢、性別および体重などに応じる。
【００４６】
したがって、当業者は、治療される患者に応じて投薬量を適合するために注意を払うであろう。
【００４７】
本発明に係る医薬組成物は、局所、経口、全身、皮膚、経皮、非経口（すなわち、静脈内、筋肉内、皮下、皮内）投与などのために製剤化されてもよい。投与様式に応じて、本発明に係る組成物はガレヌス製剤のいずれかであってもよい。
【００４８】
経口投与のために、本発明の組成物は、錠剤、ゲルカプセル剤、糖衣錠、シロップ剤、懸濁剤、液剤、粉剤、顆粒、エマルションまたは脂質もしくは重合体ミクロスフェアもしくはナノスフィアまたは制御放出を可能にするベシクルの形態であってもよい。
【００４９】
非経口投与のために、本発明に係る組成物は、特に、ローションまたは血清型の水溶液または分散液の形態であってもよく、バイアル、ドリップボトルなどの形態でパッケージ化される。
【００５０】
これらの組成物は当業者に公知の通常の方法に従って調製される。
【００５１】
本発明はさらに、
がんの治療において同時、個別または連続投与するための
式（Ｉ）の化合物、
クラドリビン、フルダラビン、クロファラビン、シタラビン、ゲムシタビン、ネララビン、フロキシウリジンまたはペントスタチンから選択されるヌクレオシド類似体、
フルオロウラシル、６−メルカプトプリンまたは６−チオグアノシンから選択される核酸塩基類似体、
およびそれらの混合物
を含む群から選択される少なくとも１つの化合物と組み合わせて、上記の式（Ｉ）の化合物に関する。
【００５２】
本発明の主題はまた、医薬、特にがんの治療を意図する医薬を製造するための式（Ｉ）の化合物の使用である。
【００５３】
本発明の別の主題はまた、がん、特に上記に定義されるがんを罹患している対象を治療する方法であって、治療有効量の式（Ｉ）の少なくとも１つの化合物または本発明の組成物を前記個体に投与する工程を含む、方法に関する。
【００５４】
「治療有効量」という用語は、前記がんの進行を治療および／または停止するのに十分な量を意味する。
【００５５】
本発明の主題はまた、
式（ＩＩ）の６−アミノプリン化合物：
【化３】
0006538656.tif 000004
（式中、Ｒ１、Ｒ２およびＺは以前に定義されている通りである）
を、式（ＩＩＩ）の化合物：
Ｒ１０−Ａｒ−Ｒ３  （ＩＩＩ）
（式中、Ａｒはビフェニルまたはナフチルであり、前記ビフェニルまたはナフチルは、その環の１つにおいて置換基Ｒ３で置換され、その他の環において置換基Ｒ１０で置換される、すなわち、式（ＩＩＩ）の化合物は、以下の式：
【化４】
0006538656.tif 000005
（式中、Ｒ３は上記に定義されている通りであり、Ｒ１０は、−ＣＯＯＲ１１、−ＣＯＲ１１または−ＳＯ２Ｒ１１を表し、ここでＲ１１は水素、アルキル、アリールまたはハロゲンを表す）の１つによって表される）
と反応させることを特徴とする、式（Ｉ）の化合物を調製する方法に関する。
【００５６】
より特には、Ａｒが、
ビフェニルを表す場合、Ｒ１０は−ＣＯＯＲ１１または−ＳＯ２Ｒ１１を表し、
ナフチルを表す場合、Ｒ１０は−ＣＯＲ１１を表し、
ここでＲ１１は以前に定義されている通りである。
【００５７】
本発明は、以下の非限定的で、単に例示的な実施例を考慮してより明確に理解されるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００５８】
【図１】式（Ｉ）（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｘ、Ｙ、Ｚ、ＡｒおよびＲ３は以前に定義されている通りである）の化合物についての一般的な合成スキームを例示する。式（ＩＩＩ）の化合物は以前に定義されている通りである。
【図２】式（ＩＩＩ）（式中、Ａｒはビフェニルを表す）の化合物の割り当てを例示する。より具体的には、図２ａおよび２ｂは、式（ＩＩＩ）（式中、ビフェニルはその環の１つにおいて置換基Ｒ３で置換され、その他の環において置換基ＣＯＯＲ１１で置換されている）の化合物を調製するための２つの可能な合成経路を例示する。
【図３】式（ＩＩＩ）（式中、Ａｒはビフェニルを表す）の化合物の割り当てを例示する。より具体的には、図３において、ビフェニルはその環の１つにおいて置換基Ｒ３で置換され、その他の環において置換基ＣＯＯＨで置換されている。
【図４】種々の式（Ｉ）（式中、Ｙ＝Ｈであり、Ｘ＝（Ｃ＝Ｏ）またはＳＯ２であり、Ａｒ＝任意に置換基Ｒ３で置換されていてもよいビフェニルまたはナフチルであり、Ｒ１、Ｒ２、ＺおよびＲ３は以前に定義されている通りである）の化合物を調製するプロセスを示す。より具体的には、図４ａおよび４ｂは、本発明の化合物（Ｉ）（式中、Ｙ＝Ｈであり、Ｘ＝（Ｃ＝Ｏ）であり、Ａｒ＝ビフェニルである）の調製を例示する。図４ｃは化合物（Ｉ）（式中、Ｙ＝Ｈであり、Ｘ＝ＳＯ２であり、Ａｒ＝ビフェニルである）を調製するプロセスを例示する。図４ｄは、化合物（Ｉ）（式中、Ｙ＝Ｈであり、Ｘ＝（Ｃ＝Ｏ）であり、Ａｒ＝ナフチルである）を調製するプロセスを例示する。
【図５】Ｌ１２１０細胞を受け、  シクロデキストリンのみ（■）  フルダラビン（１００ｍｇ／ｋｇ）（●）、  本発明の化合物（２）のみ（３．９４ｍｇ／ｋｇ）（▲）またはフルダラビン（１００ｍｇ／ｋｇ）と組み合わせた本発明の化合物（２）（△）、  本発明の化合物（２）のみ（７．８９ｍｇ／ｋｇ）（◆）またはフルダラビン（１００ｍｇ／ｋｇ）と組み合わせた本発明の化合物（２）（◇）で処置したＢ６Ｄ２Ｆ１マウスの生存率を示す。
【図６】ＤＭＳＯ、フルダラビン（１０μＭ）、シタラビン（１００μＭ）または本発明の化合物（２）（１００μＭ）の存在下でインキュベートした、ＣＬＬ（図６Ａ）およびＡＭＬ（図６Ｂ）患者の細胞についてのＡｎｎｅｘｉｎ  Ｖ標識化の百分率を示す。
【実施例】
【００５９】
実施例１：上記に定義した式（Ｉ）に対応する３３の化合物の例示
以下の表１〜４は、本発明者らによって合成され、本明細書の以下においてそれぞれ（１）〜（３３）と示された式（Ｉ）の３３の化合物を例示する。
【００６０】
表１の化合物（１）〜（１８）において、
Ｒ１＝Ｒ２＝Ｙ＝Ｚ＝Ｈであり、Ｘ＝（Ｃ＝Ｏ）（カルボニル）であり、Ａｒ＝ビフェニルであり、前記ビフェニルは置換基Ｒ３で置換されていてもよく、前記置換基Ｒ３は、水素、ピロールまたはイミダゾールから選択され、前記イミダゾールは置換基Ｒ４で置換されていてもよい。
【００６１】
化合物（１）〜（１８）の化合物名はそれぞれ以下の通りである：
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−２−カルボキサミド（１）、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド（２）、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４−カルボキサミド（３）、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｎ−ピロール−２−カルボキサミド（４）、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｎ−ピロール−２−カルボキサミド（５）、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｎ−ピロール−３−カルボキサミド（６）、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｎ−ピロール−３−カルボキサミド（７）、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｎ−ピロール−４−カルボキサミド（８）、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｎ−ピロール−４−カルボキサミド（９）、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｎ−イミダゾール−２−カルボキサミド（１０）、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｎ−イミダゾール−２−カルボキサミド（１１）、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｎ−イミダゾール−３−カルボキサミド（１２）、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｎ−イミダゾール−３−カルボキサミド（１３）、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｃ４−イミダゾール−２−カルボキサミド（１４）、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｃ４−イミダゾール−２−カルボキサミド（１５）、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３’−Ｃ４−イミダゾール−３−カルボキサミド（１６）、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｃ４−イミダゾール−３−カルボキサミド（１７）、
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４’−Ｃ４−（Ｎ１−エトキシホスフィニルメチル）イミダゾール−３−カルボキサミド（１８）。
【００６２】
−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）−基およびＲ３基について表１に示される配向（オルト、メタまたはパラ）はそれぞれ、ビフェニルに対するそれらの基の各々の位置に関する。
【００６３】
【表１】
0006538656.tif 000006
【００６４】
表２の化合物（１９）〜（２８）において、
Ｒ１＝Ｒ２＝Ｙ＝Ｈであり、Ｘ＝（Ｃ＝Ｏ）（カルボニル）であり、Ａｒ＝非置換ビフェニルである。
【００６５】
化合物（１９）〜（２８）の化合物名はそれぞれ以下の通りである：
−７−（フェニルメチル）−７Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド（１９）、
−９−（フェニルメチル）−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド（２０）、
−７−［（フェニルメトキシ）メチル］−７Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド（２１）、
−９−［（フェニルメトキシ）メチル］−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド（２２）、
−９−［２−（アセチルオキシ）エチル］−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド（２３）、
−９−（２−ヒドロキシエチル）−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミド（２４）、
−エチル２−［（１，１’−ビフェニル）−３−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル］アセテート（２５）、
−２−［（１，１’−ビフェニル）−３−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル］アセテート（２６）、
−ジエチル［（１，１’−ビフェニル）−３−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル］メチルホスホネート（２７）、
−［（１，１’−ビフェニル）−３−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル］メチルホスホン酸（２８）。
【００６６】
示される−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）−基の配向（オルト、メタまたはパラ）は、ビフェニルに対する前記基の位置に関する。
【００６７】
【表２】
0006538656.tif 000007
【００６８】
表３の化合物（２９）〜（３２）において、
Ｒ１＝Ｒ２＝Ｙ＝Ｈであり、Ｘ＝（Ｃ＝Ｏ）（カルボニル）であり、Ａｒ＝非置換ナフチルである。
【００６９】
Ｚの定義は化合物（２９）〜（３２）の各々について表３に示される。化合物（２９）〜（３２）の化合物名はそれぞれ以下の通りである：
−９Ｈ−プリン−６−イル−ナフタレン−１−カルボキサミド（２９）、
−９Ｈ−プリン−６−イル−ナフタレン−２−カルボキサミド（３０）、
−（ナフタレン−１−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル）メチルホスホン酸（３１）、
−（ナフタレン−２−カルボニルアミノ−９Ｈ−プリン−６−イル）メチルホスホン酸（３２）。
【００７０】
表３に示される−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）−基の配向（１または２）は、ナフチルに対する前記基の位置に関する。
【００７１】
【表３】
0006538656.tif 000008
【００７２】
表４の化合物（３３）において、
Ｒ１＝Ｒ２＝Ｙ＝Ｈであり、Ｘ＝（ＳＯ２）（スルホニル）であり、Ａｒ＝非置換ビフェニルである。
【００７３】
化合物（３３）の化合物名は以下の通りである：
−９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−４−スルホンアミド（３３）。
【００７４】
【表４】
0006538656.tif 000009
【００７５】
表４に示される−ＮＨ−（ＳＯ２）−基の配向（パラ）は、ビフェニルに対する前記基の位置に関する。
【００７６】
実施例２：式（Ｉ）の化合物の合成
図１は、以下に記載される工程の全てを要約し、一般化する合成スキームである。
【００７７】
式（Ｉ）（式中、Ｙ＝Ｈであり、Ｘ＝（Ｃ＝Ｏ）またはＳＯ２であり、Ａｒ＝任意に置換基Ｒ３で置換されていてもよいビフェニルまたはナフチルである）の化合物の合成
１）式（ＩＩＩ）（式中、Ｒ１０＝ＣＯＯＲ１１である）のビフェニル化合物の調製（図２ａおよび２ｂ）
置換基Ｒ３またはＲ１０の定義に従って、当業者は以下に記載される実験条件を調整するであろう。
【００７８】
化合物（ＩＩＩ）（式中、Ａｒ＝ビフェニルである）の合成（図２ａ）
Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム）（０．１当量）、ＤＭＦ（ジメチルホルムアミド）およびＲ３で置換された臭化フェニル（１当量）（図２ａ）を、窒素雰囲気下で３つ口丸底フラスコに加える。
【００７９】
次いで炭酸カリウムＫ２ＣＯ３（３当量）および対応するエトキシカルボニルベンゼンボロン酸誘導体（１．７当量）を連続して加える。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）により、開始生成物が消費されることが明らかになるまで、混合物を１００℃にてアルゴン下で撹拌する。混合物を周囲温度に冷やし、水で希釈し、生成物を酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）で抽出する。合わせた有機相をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム（Ｎａ２ＳＯ４）で乾燥させ、濾過する。溶媒を真空下で除去し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、溶出を例えばジクロロメタン／メタノール混合物（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ：１００／０〜９５／５）で実施して、油の形態で予想されるメチルエステルまたはエチルエステル化合物（ＩＩＩ）が得られる。
【００８０】
化合物（ＩＩＩ）（式中、Ａｒ＝ビフェニルである）の合成（図２ｂ）
Ｐｄ２（ｄｂａ）３（トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム）（０．１当量）、ＤＭＦ（ジメチルホルムアミド）およびメチルまたはエチルベンゾエートブロミド（１当量）（図２ｂ）を、窒素雰囲気下で３つ口丸底フラスコに加える。
【００８１】
次いで炭酸カリウムＫ２ＣＯ３（３当量）およびＲ３で置換されたベンゼンボロン酸誘導体（１．２当量）を連続して加える。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）により、開始生成物が消費されることが明らかになるまで、混合物を１００℃にてアルゴン下で撹拌する。混合物を周囲温度に冷やし、水で希釈し、塩酸溶液（１Ｍ）を加えることによって中和し、生成物を酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）で抽出する。合わせた有機相をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム（Ｎａ２ＳＯ４）で乾燥させ、濾過する。溶媒を真空下で除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、溶出を例えば石油エーテル／ジクロロメタン混合物（ＰＥ／ＤＣＭ：１００／０〜２０／８０）で行い、油の形態で予想されるメチルエステルまたはエチルエステル化合物（ＩＩＩ）を得る（図２ｂ）。
【００８２】
２）ビフェニル化合物（ＩＩＩ）（式中、Ｒ１０＝ＣＯＯＨである）の調製（図３）
水酸化ナトリウム水溶液（２ＭのＮａＯＨ）を、１，４−ジオキサン／エタノール混合物（２／１、ｖ／ｖ）中の上記の以前の工程（ポイント１）で得られたメチルまたはエチルエステル化合物（ＩＩＩ）の溶液または懸濁液に滴下して加える。ＴＬＣにより、反応が完了することが明らかになるまで、混合物を５０℃にて撹拌する。次いでｐＨが３に等しくなるまで塩酸水溶液（１ＭのＨＣｌ）を加え、混合物をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機物の面をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過する。溶媒を真空下で除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、溶出を例えばＤＣＭ／ＭｅＯＨ（１００／０〜９０／１０）で実施して、白色粉末の形態で予想されるカルボン酸化合物（ＩＩＩ）を得る（図３）。
【００８３】
３）式（Ｉ）（式中、Ｙ＝Ｈであり、Ｘ＝ＣＯであり、Ａｒ＝ビフェニルである）の化合物の調製（図４ａおよび４ｂ）
置換基Ｒ１、Ｒ２、ＺおよびＲ３の定義に従って、当業者は開始生成物を選択し、必要な場合、以下に記載される実験条件を調整するであろう。
【００８４】
図４ａに例示される化合物（Ｉ）の合成
適切なカップリング試薬、例えばカルボニルジイミダゾール／ジメチルアミノピリジン混合物（ＣＤＩ（２当量）／ＤＭＡＰ（０．２当量））を、撹拌しながら、周囲温度にてＤＭＦ中の上記の以前の工程（ポイント２）で得られたカルボン酸化合物（ＩＩＩ）（１当量）の溶液に加える。５分後、式（ＩＩ）の２−アミノプリン誘導体（２当量）を加え、反応の終了まで混合物を１００℃にて撹拌する。次いで溶媒を真空下で除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、溶出を例えばＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物（１００／０〜９０／１０）で実施して、本発明の式（Ｉ）（式中、Ｙ＝Ｈであり、Ｘ＝ＣＯである）の化合物を得る（図４ａ）。
【００８５】
図４ｂに例示される化合物（Ｉ）の合成
所望の市販の酸塩化物化合物（ＩＩＩ）（１当量）を、撹拌しながら、周囲温度にてピリジン中の式（ＩＩ）の２−アミノプリン誘導体（１．２５当量）の溶液に加える。反応の終了まで反応混合物を１００℃にて撹拌する。次いで溶媒を真空下で除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、溶出を例えばＤＣＭ／ＭｅＯＨ（１００／０〜９０／１０）で実施して、予想される化合物（Ｉ°）を得る（図４ｂ）。
【００８６】
４）式（Ｉ）（式中、Ｙ＝Ｈであり、Ｘ＝ＳＯ２であり、Ａｒ＝ビフェニルである）の化合物の調製（図４ｃ）
所望の市販の塩化スルフリル化合物（ＩＩＩ）（１当量）を、撹拌しながら、周囲温度にてピリジン中の式（ＩＩ）の２−アミノプリン誘導体（１．２５当量）の溶液に加える。反応の終了まで反応混合物を１００℃にて撹拌する。次いで溶媒を真空下で除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、溶出は例えばＤＣＭ／ＭｅＯＨ（１００／０〜９０／１０）で実施して、予想される化合物（Ｉ°）を得る（図４ｃ）。
【００８７】
５）式（Ｉ）（式中、Ｙ＝Ｈであり、Ｘ＝ＣＯであり、Ａｒ＝ナフチルである）の化合物の調製（図４ｄ）
所望の市販の酸塩化物化合物（ＩＩＩ）（式中、Ａｒ＝ナフチルである、図４ｄを参照のこと）（１当量）を、撹拌しながら、周囲温度にてピリジン中の式（ＩＩ）の２−アミノプリン誘導体の溶液（１．２５当量）に加える。反応の終了まで反応混合物を１００℃にて撹拌する。次いで溶媒を真空下で除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、溶出は例えばＤＣＭ／ＭｅＯＨ（１００／０〜９０／１０）で実施して、予想される化合物（Ｉ°）を得る（図４ｄ）。
【００８８】
実施例３：本発明の化合物（Ｉ）の阻害特性および細胞毒性活性の決定
本発明の化合物（Ｉ）の阻害特性は、精製した組換え標的酵素ｃＮ−ＩＩに対して決定した（５’−ヌクレオチダーゼ活性の阻害の決定）。
【００８９】
本発明の化合物の細胞毒性活性は種々の腫瘍細胞株において評価した（ＩＣ５０の決定）。これらの生物学データの選択は本明細書以下に提示し、阻害活性を、インビトロだが、細胞培養物中でも測定した本発明の化合物（Ｉ）に関する：細胞毒性効果および／またはクラドリビン、フルダラビン、クロファラビン、シタラビン、ゲムシタビン、ネララビン、フロキシウリジンまたはペントスタチン（すなわちヌクレオシド類似体）から選択される抗がん分子のうちの１つとの相乗効果。
【００９０】
使用される略語は以下に示す：
ｃＮ−ＩＩ：細胞質５’−ヌクレオチダーゼＩＩ、
ＲＬ：細胞毒性試験のために使用されるヒト濾胞性リンパ腫細胞株（ＣＣＲＦ−ＣＥＭおよびＭＤＡ−ＭＢ−２３１などの他の株もまた、本発明の特定の化合物（Ｉ）について試験した）、
相乗効果ＭＴＴ：本発明のｃＮ−ＩＩ阻害化合物（Ｉ）と公知の抗がん剤（すなわち、クラドリビン、フルダラビン、クロファラビン、シタラビン、ゲムシタビン、ネララビン、フロキシウリジンまたはペントスタチンから選択される細胞毒性ヌクレオシド類似体）との間の細胞生存阻害相乗効果を評価するための試験。
【００９１】
本明細書以下に記載されるＭＴＴ試験は、効果が以下であるかどうかを評価することができる：
１）性質に「相加」：本発明の化合物（Ｉ）（ｃＮ−ＩＩ阻害剤）および公知の抗がん剤の独立した効果、
２）性質に「拮抗」：本発明の化合物（Ｉ）および公知の抗がん剤と逆の効果、
３）性質に「相乗」：本発明のｃＮ−ＩＩ阻害化合物（Ｉ）による公知の抗がん剤に対する増強効果。
この第３の点（相乗効果）は本明細書以下で調べられる。
【００９２】
ｃＮ−ＩＩ阻害試験の実験手順
酵素反応の間に生成した無機リン酸塩の出現を追跡することによってｃＮ−ＩＩの活性をインビトロで測定した。精製した組換えｃＮ−ＩＩ酵素は、その選択的基質であるイノシン５’−一リン酸（ＩＭＰ）の存在下で使用される。加水分解反応の間、イノシンおよび無機リン酸塩はＩＭＰから生成される。次いでこのリン酸塩はマラカイトグリーン（Ｇｅｎｔａｕｒ社によって販売されているキット）を使用して比色分析法によってアッセイされる：６３０ｎｍにおける吸光度の読み取りにより、無機リン酸塩を定量できる。
【００９３】
本発明の５’−ヌクレオチダーゼ阻害化合物（Ｉ）（０〜２ｍＭの濃度範囲）の存在下で同じ実験を実施する。この「広範な」スクリーニング試験により、試験した濃度範囲の化合物（Ｉ）によるｃＮ−ＩＩの阻害パーセントを決定できる。
【００９４】
実験条件：
使用される試薬は、５０ｍＭのイミダゾール緩衝液、ｐＨ＝６．５、５００ｍＭのＮａＣｌおよび１０ｍＭのＭｇＣｌ２である。酵素（ｃＮ−ＩＩ）濃度は０．１μＭであり、ＩＭＰ濃度は１００μＭである。
【００９５】
３７℃でのインキュベーションを２〜５分間実施し、次いで強酸を含有するマラカイトグリーン試薬を加えることによって停止させる。リン酸塩濃度範囲は、反応の間に生成されるリン酸塩を定量するために並行して実施する。
【００９６】
この第１の試験で強力な阻害を実証した本発明の化合物について、第２の阻害試験を、酵素反応速度を測定することによって実施する。このより長い試験により、阻害様式を特徴付け、阻害定数（Ｋｉ）を決定することができる。
【００９７】
「相乗効果ＭＴＴ」試験の実験手順：
ｃＮ−ＩＩ阻害化合物（Ｉ）と細胞毒性ヌクレオシド類似体との間の相乗効果の試験について、細胞を、種々の濃度の阻害剤（Ｉ）のみ、ヌクレオシド類似体のみまたは一定の割合（各化合物のみについてのＩＣ５０値の割合に近い）の２つの化合物の混合物を含有する９６ウェルプレート内に播種する。７２時間のインキュベーション後、ＭＴＴ試薬を使用して生存細胞を定量する。
【００９８】
ＣｏｍｐｕＳｙｎソフトウェア１．０（ＣｏｍｂｏＳｙｎ，Ｉｎｃ．、ＵＳＡ）を用いて阻害濃度５０（ＩＣ５０）および組み合わせ指数（ＣＩ９５）を計算する。
【００９９】
ＩＣ５０は細胞の５０％生存を可能にする化合物の濃度に対応する。
【０１００】
ＣＩ９５は、２つの化合物の濃度およびこれらの濃度で影響される部分（すなわち死細胞）を考慮に入れた式を用いてＣｈｏｕおよびＴａｌａｌａｙ３の方法に従って計算される。文献４およびソフトウェアマニュアル（Ｃｏｍｐｕｓｙｎのユーザーガイド）における慣習によれば、０．９未満のＣＩ９５値は２つの化合物の間の相乗効果を示し、０．９〜１．１の値は相加性を示し、１．１超の値は拮抗を示す。この方法は分子間相互作用の評価における参照方法である３；５；６；７。
【０１０１】
以下の表５は、本発明の式（Ｉ）の約２０の化合物の阻害活性に関して得た実験データの全てをまとめている。
【０１０２】
【表５−１】
0006538656.tif 000010
【０１０３】
【表５−２】
0006538656.tif 000011
【０１０４】
結論
化合物（２）、（９）、（１２）、（１６）、（１７）、（１９）、（２０）および（２１）は、従来技術の３つの抗がん剤の少なくとも１つと相乗効果を示す。
【０１０５】
化合物（２）、（４）、（６）、（１２）、（１７）および（２１）はまた、使用した細胞モデルに対して内因性細胞毒性活性を示し、約数マイクロモル〜数十マイクロモルのＩＣ５０値を有する。
【０１０６】
実施例４：本発明の化合物のインビボでの抗腫瘍活性およびエキソビボでの細胞毒性活性の評価
本発明の化合物（２）、すなわち９Ｈ−プリン−６−イル−［１，１’−ビフェニル］−３−カルボキサミドの抗腫瘍特性を、マウスにおける腹腔内腫瘍の同種モデルにおいて決定した。
【０１０７】
インビボ評価の実験手順
インビボ評価に適合する濃度で化合物（２）の溶液を得るために、２，６−ジＯ−メチル−ベータ−シクロデキストリンを使用して化合物（２）を１０ｍＭにて可溶化する。Ｌ１２１０マウス白血病細胞（１００万個）を、１日目の４週齢Ｂ６Ｄ２Ｆ１マウス（１群当たり３匹のマウス）の腹腔内空洞内に注射し、２、４、７、９および１１日目にマウスを、フルダラビン（１００ｍｇ／ｋｇ）、化合物（２）（７．８９ｍｇ／ｋｇまたは３．９４ｍｇ／ｋｇ）、フルダラビンと化合物（２）の組み合わせまたはシクロデキストリン溶液のみで処置する。マウスの生存を実験の最終点として使用する（図５を参照のこと）。
【０１０８】
結論：
３．９４から７．８９ｍｇ／ｋｇの化合物（２）の用量の増加により、マウスの生存を延ばすことができ、この範囲の用量効果が示される。
【０１０９】
特に７．８９ｍｇ／ｋｇにおける化合物（２）と１００ｍｇ／ｋｇにおけるフルダラビンとの組み合わせにより、フルダラビンのみと比較してマウスの生存を延ばすことができ、この組み合わせの増強効果が示される。
【０１１０】
エキソビボ評価の実験手順
慢性リンパ芽球性白血病（ＬＬＣ）または急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を患っている患者から末梢血をヘパリン化チューブ内に回収した。赤血球の溶解後、血液を、ＤＭＳＯ、１０μＭのフルダラビン、１００μＭのシタラビンまたは１００μＭの本発明の化合物（２）の存在下で２４時間インキュベートし、その後、フローサイトメトリーによりＡｎｎｅｘｉｎ  Ｖおよびヨウ化プロピジウム標識を用いてアポトーシス誘導および細胞死を測定する。インキュベーションの効果を経験した細胞を、Ａｎｎｅｘｉｎ  Ｖのみまたはヨウ化プロピジウムで標識する（図６を参照のこと）。
【０１１１】
結論：
ＣＬＬの例の全ては、１０μＭのフルダラビンとのインキュベーションより１００μＭの本発明の化合物（２）とのインキュベーションに対して感受性があり（４５．８％と比較して６５．３％）、したがってこれらの細胞について化合物（２）の良好な細胞毒性が示される。
【０１１２】
ＡＭＬ試料に関して、５つのうちの２つが、１００μＭのシタラビンより１００μＭの化合物（２）に対して感受性があり、シタラビンで選択した５つの試料を超える平均を有する（３８．６％と比較して４４．５％）。
【０１１３】
全体的な結論
本発明の独創性は薬理学的標的（細胞質および非膜）の性質に基づく。ヒト病態の治療における細胞内（細胞質）５’−ヌクレオチダーゼ阻害剤は、今まで記載されていない。
【０１１４】
本発明の化合物である５’−ヌクレオチダーゼ阻害剤、特にｃＮ−ＩＩ阻害剤と、現時点で知られている細胞毒性ヌクレオシド類似体とのこれまで公開されていない組み合わせは、いくつかの機構：（１）アポトーシスの機構を誘導するｃＮ−ＩＩの内因性阻害、（２）抗増殖活性に関与するヌクレオシド類似体のリン酸化（ヌクレオチド）型の細胞内濃度の増加、（３）ｃＮ−ＩＩの過剰発現に関連する細胞抵抗性の特定の機構に反応できることによりこの薬物クラスの有効性を増加させることが可能となる。
【０１１５】
参考文献
【表６】
0006538656.tif 000012
【図１】
0006538656.tif 000016
【図２ａ】
0006538656.tif 000017
【図２ｂ】
0006538656.tif 000018
【図３】
0006538656.tif 000019
【図４ａ】
0006538656.tif 000020
【図４ｂ】
0006538656.tif 000021
【図４ｃ】
0006538656.tif 000022
【図４ｄ】
0006538656.tif 000023
【図５】
0006538656.tif 000024
【図６】
0006538656.tif 000025