(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
２〜６０重量％の固体の硝酸塩と４０〜９８重量％の乾燥牧草と、からなる組成物に対して、１〜１０重量％の穀物粉を含有し、
前記硝酸塩の１日投与量が９．４ｍｍｏｌ／ｋｇ体重以上となるように用いられることを特徴とする野生の反芻動物駆除用組成物。
【請求項２】
２〜６０重量％の固体の硝酸塩と、４０〜９８重量％のアルファルファと、からなる組成物に対して、１〜１０重量％の小麦粉を含有する請求項１に記載の野生の反芻動物駆除用組成物。
【請求項３】
前記硝酸塩がマイクロカプセル化されて含有されていることを特徴とする請求項１又は２に記載の野生の反芻動物駆除用組成物。
【請求項４】
前記反芻動物が、シカ、キョン、ヤギ又はカモシカであることを特徴とする請求項１〜３のいずれか１項に記載の野生の反芻動物駆除用組成物。
【請求項５】
硝酸態窒素を３００〜５０００ｐｐｍ含有する飼料を野生の反芻動物に摂食させた後に、
２〜６０重量％の固体の硝酸塩を含有する反芻動物駆除用組成物を、前記硝酸塩の１日投与量が９．４ｍｍｏｌ／ｋｇ体重以上となるように前記反芻動物に摂食させることを特徴とする野生の反芻動物の駆除方法。
【請求項６】
前記反芻動物駆除用組成物には、２〜６０重量％の固体の硝酸塩と、４０〜９８重量％の乾燥牧草が含有されていることを特徴とする請求項５に記載の野生の反芻動物の駆除方法。
【請求項７】
前記反芻動物駆除用組成物には、２〜６０重量％の固体の硝酸塩と、４０〜９８重量％の乾燥牧草とからなる組成物に対し、さらに、１〜１０重量％の穀物粉が含有されていることを特徴とする請求項６に記載の野生の反芻動物の駆除方法。
【請求項８】
前記硝酸態窒素を３００〜５０００ｐｐｍ含有する飼料がマメ科又はイネ科の植物であることを特徴とする請求項５〜７のいずれか１項に記載の野生の反芻動物の駆除方法。
【請求項９】
前記反芻動物が、シカ、キョン、ヤギ又はカモシカであることを特徴とする請求項５〜８のいずれか１項に記載の野生の反芻動物の駆除方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、野生の反芻動物、特に野生のシカ、キョン、野ヤギ又はカモシカの駆除や捕獲のために用いられる組成物及びそれを用いた駆除方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、シカやキョン、野ヤギ等の森林等に生息する野生動物の個体数が急激に増加しており、それによる農林産物や森林生態系への食害が深刻となっている。例えば、非特許文献１に記載されているように、シカは１日あたり、３〜５ｋｇ（メス、体重４０ｋｇ）もの植物を採食することから、生息密度が高くなると森林の下層に生えている植物を食べ尽くしてしまい、樹皮まで剥いで採食するため、森林が荒廃することが指摘されている。この樹皮剥ぎ被害は生息密度が１頭／ｋｍ２未満でも生じることが報告されているが、静岡県内におけるシカの森林内の生息密度は２０〜３５頭／ｋｍ２と非常に高密度な状態であり、森林生態系への被害が懸念される状態にある。また、森林に近い農地や牧草地にシカが侵入し、農作物を採食する被害も報告されている（非特許文献１）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】”静岡のシカ問題と捕獲Ｑ＆Ａ”、[online]、静岡県公式ホームページ、［平成26年11月20日検索］、インターネット＜ＵＲＬ：http://www.agri-exp.pref.shizuoka.jp/info00031.html＞
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
上述のような野生動物の高密度化による被害を防ぐため、これら野生動物の捕獲等による駆除が進められている。野生動物の駆除方法としては、銃器やわなを用いる方法があるが、いずれの方法においても、狩猟者の高齢化や銃器の使用規制の強化、作業の困難性及び専門性、駆除費用等の様々な問題があり、生息密度が低減するまでの個体数削減には至っていない。さらに、銃器を用いた方法は、銃の誤射や暴発等の人身事故の危険性を有しており、わなを用いた方法は、ツキノワグマ等の捕獲対象以外の動物が捕獲されてしまうおそれを有している。
【０００５】
本発明は上述した点に鑑み案出されたもので、その目的は、従来の銃器やわなを用いた駆除方法とは異なる、新たな野生動物の駆除方法を提供することにある。
【０００６】
また、本発明の他の目的は、駆除作業を安全に行うことができ、他の動物に対する影響が少なく、複雑な作業を必要とせずに野生動物を駆除することのできる組成物及びそれを用いた野生動物の駆除方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上記課題を解決するため、本発明の野生の反芻動物駆除用組成物は、硝酸イオン又は硝酸塩を有効成分として含有する。
【０００８】
本発明の組成物を野生の反芻動物が経口摂取すると、反芻動物の第一胃（ルーメン）内において、組成物中の硝酸イオンから亜硝酸イオンが生成される。この亜硝酸イオンの生成は、反芻動物の第一胃内の微生物叢中に含まれる硝酸還元菌によるものである。第一胃内で生成した亜硝酸イオンは血中に取り込まれ、赤血球中のヘモグロビンと結合してメトヘモグロビンを形成する。これにより、ヘモグロビンの酸素運搬能力が失われるため、体内細胞への酸素供給量が減少して酸素欠乏状態となり、本発明の組成物を摂取した反芻動物の運動能力は低下する。さらに、メトヘモグロビンの飽和度が上昇し、体内の酸素消費量が酸素供給量を上回る状態が継続することにより、死に至る。
【０００９】
また、本発明の野生の反芻動物駆除用組成物の硝酸イオン又は硝酸塩の一日投与量は４．７ｍｍｏｌ／ｋｇ体重以上であることも好ましい。これにより、野生の反芻動物を駆除するための、本発明の組成物の有効投与量が選択される。
【００１０】
また、本発明の野生の反芻動物駆除用組成物は、２〜６０重量％の固体の硝酸塩と、４０〜９８重量％の乾燥牧草とを混合して得られることも好ましい。これにより、有効成分である固体の硝酸塩が乾燥牧草成分中に分散された状態となり、硝酸塩成分による刺激や独特の風味が緩和されるため、本発明の組成物の嗜好性が高まり、野生の反芻動物が自発的に摂取し易い組成物を得ることができる。
【００１１】
さらに、本発明の野生の反芻動物駆除用組成物は、１〜１０重量％の穀物粉を混合して得られることも好ましい。穀物粉が添加されることにより、固体の硝酸塩成分による刺激や独特の風味がマスキングされて緩和されるため、本発明の組成物の嗜好性がさらに高まり、野生の反芻動物が自発的に摂取し易い組成物を得ることができる。
【００１２】
また、本発明の野生の反芻動物駆除用組成物は、硝酸イオン又は硝酸塩がマイクロカプセル化されて含有されていることも好ましい。硝酸イオン又は硝酸塩がマイクロカプセル化されることにより、摂取した動物の舌に直接これらの成分が触れにくくなるため、本発明の組成物の嗜好性がさらに高まり、野生の反芻動物が自発的に摂取し易い組成物を得ることができる。
【００１３】
さらに、本発明の野生の反芻動物の駆除方法は、硝酸態窒素を３００〜５０００ｐｐｍ含有する飼料を野生の反芻動物に摂食させた後に、前述した反芻動物駆除用組成物をその反芻動物に摂食させる。この方法では、本発明の組成物を野生の反芻動物に与える前に、予め、３００〜５０００ｐｐｍの硝酸態窒素を含む飼料を経口摂取させる。これにより、反芻動物の第一胃内の微生物叢中に含まれる硝酸還元菌が増殖する等して硝酸還元活性が向上する。この状態で本発明の組成物を反芻動物に与えることにより、第一胃内での硝酸イオンから亜硝酸イオンへの還元反応が速やかに生じ、致死までの所要時間が短縮される。
【００１４】
さらに、本発明の野生の反芻動物の駆除方法は、硝酸態窒素を３００〜５０００ｐｐｍ含有する飼料がマメ科又はイネ科の植物であることも好ましい。マメ科又はイネ科の植物は、硝酸態窒素を蓄積しやすく、他の植物よりも多く硝酸態窒素が含まれているため、第一胃内での硝酸還元活性向上のための飼料として好適に使用することができる。また、これらの植物は、反芻動物の嗜好性も高く、自発的に摂取される。
【００１５】
また、本発明の駆除用組成物及び駆除方法の対象である野生の反芻動物は、シカ、キョン、ヤギ又はカモシカであることが好ましい。本発明の組成物により駆除される好適な野生の反芻動物として、個体数の削減が求められている野生のシカ、キョン、ヤギ又はカモシカが選択される。
【発明の効果】
【００１６】
本発明によれば、以下のような優れた効果を有する、野生の反芻動物駆除用組成物及び野生の反芻動物の駆除方法を提供することができる。
（１）本発明の反芻動物駆除用組成物は、駆除対象動物である反芻動物に対して有効に作用し、駆除対象外の酸性胃を持つ動物に対しては有効に作用しないため、駆除対象外の動物への悪影響や錯誤捕獲が生じにくい。
（２）本発明の反芻動物駆除用組成物を野生の反芻動物の生息地域に設置するのみで、野生の反芻動物を駆除することができるため、複雑な作業や人手を必要とせず、危険性の高い銃器やわなを使用する必要もなく、安全に駆除を行うことができる。
（３）銃器での駆除が危険な場所やわなを設置することができない山の斜面などでも本発明の反芻動物駆除用組成物を設置して野生の反芻動物を駆除することができるため、有効に駆除を行うことができる。
（４）野生の反芻動物の採食嗜好性を備えた組成物であるため、自発的な摂食を生じさせ、駆除効率を高めることができる。
（５）本発明の反芻動物駆除用組成物を摂取させる前に、硝酸態窒素を一定濃度含む飼料を摂取させることにより、本発明の組成物による作用効果が向上し、致死までの所要時間を短縮させることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】実施例１における（ａ）硝酸ナトリウム０．４ｇ／ｋｇ体重を胃内投与した際のＭｅｔ−Ｈｂ割合（％）、アンモニア濃度（ｍｇ／Ｌ）、硝酸イオン濃度（ｇ／Ｌ）及び亜硝酸イオン濃度（ｍｇ／ｄＬ）の血中動態を示すグラフ、（ｂ）硝酸ナトリウム０．８ｇ／ｋｇ体重を胃内投与した際のＭｅｔ−Ｈｂ割合（％）、アンモニア濃度（ｍｇ／Ｌ）、硝酸イオン濃度（ｇ／Ｌ）及び亜硝酸イオン濃度（ｍｇ／ｄＬ）の血中動態を示すグラフである。
【図２】実施例２における一部の試験個体の硝酸ナトリウムを投与する前と投与した後のＭｅｔ−Ｈｂ割合（％）を示すグラフである。
【図３】実施例２における一部の試験個体の硝酸ナトリウムを投与する前と投与した後の血清コルチゾール値（μｇ／ｄＬ）を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
以下、本発明の野生の反芻動物駆除用組成物について詳細に説明する。本発明の野生の反芻動物駆除用組成物には、有効成分として、硝酸イオン又は硝酸塩が含まれる。このうち、硝酸塩としては、電離した際に硝酸イオンを生じる化合物であればよく、特に限定されないが、硝酸ナトリウム、硝酸カリウム、硝酸リチウム、硝酸アンモニウム、硝酸マグネシウム、硝酸カルシウム又は硝酸鉄等が挙げられるが、安全性の高さや取り扱いのし易さの観点から、硝酸ナトリウム、硝酸カリウム又は硝酸カルシウム四水和物が好適に用いられ、硝酸ナトリウムが特に好ましい。
【００１９】
本発明の組成物の有効成分である硝酸イオン又は硝酸塩は、反芻動物に摂取されると第一胃内で亜硝酸イオンに変化する。反芻動物の第一胃のｐＨは中性で嫌気条件下にあり、さまざまな発酵微生物が存在して微生物叢を形成している。ここに存在する硝酸還元菌により、組成物中に含まれる硝酸イオンは、亜硝酸イオンに還元される。生成した亜硝酸イオンは血中に取り込まれ、赤血球中のヘモグロビンと結合してメトヘモグロビンを形成し、メトヘモグロビン血症を生じさせる。これにより体内細胞への酸素供給量が減少して酸素欠乏状態となり、本発明の組成物を摂取した反芻動物の運動能力は低下する。さらに、メトヘモグロビンの飽和度が上昇し、体内の酸素消費量が酸素供給量を上回る状態が継続すると死に至る。
【００２０】
本発明の組成物による反芻動物の駆除、すなわち、捕獲又は致死のための有効摂取量は、駆除対象の反芻動物の種類や性別、年齢によって感受性が多少変化するものと考えられるため、特に限定されないが、一日の経口投与量としては、有効成分として４．７ｍｍｏｌ／ｋｇ体重以上（硝酸ナトリウムの場合：０．４ｇ／ｋｇ体重以上）であり、好ましくは７．１ｍｍｏｌ／ｋｇ体重以上（硝酸ナトリウムの場合：０．６ｇ／ｋｇ体重以上）であり、さらに好ましくは９．４ｍｍｏｌ／ｋｇ体重以上（硝酸ナトリウムの場合：０．８ｇ／ｋｇ体重以上）である。
【００２１】
また、本発明において、野生の反芻動物とは、反芻胃（第一胃）を有する動物であって、野生化している動物のことをいう。特に、駆除対象の野生の反芻動物としては、個体数が急増しているシカ、野ヤギ、キョン及びカモシカ等が挙げられる。
【００２２】
本発明の野生の反芻動物駆除用組成物は、作用効果が失われない範囲において、他の成分をさらに含有させたり、種々の形態に調製することが可能である。他の成分としては、各種配合飼料、各種単味飼料、植物材料、タンパク質、糖類、香料、色素又は安定剤等を含有させることができる。組成物の形態としては、駆除対象の反芻動物が自発的に経口摂取できる形態が好ましく、板状、ペレット状、キューブ状、カプセル状、粉状、粒状又はゼリー状などの固形状の形態が挙げられるほか、液体に溶解させた液状とすることも可能である。また、この場合、賦形剤、滑沢剤、分散剤、崩壊剤、緩衝剤、溶剤、増量剤、保存剤、香料又は安定化剤などの添加剤を加えて製剤化することができる。
【００２３】
一実施態様として、本発明の反芻動物駆除用組成物は、固体の硝酸塩と乾燥牧草を混合して得られる。具体的には、２〜６０重量％の固体の硝酸塩と４０〜９８重量％の乾燥牧草を混合し、固体の硝酸塩を乾燥牧草中に十分に分散させて得られる。硝酸塩の配合割合は、駆除対象の反芻動物の種類や性別、年齢によって適宜調整することができ、それに伴い、乾燥牧草の配合割合も変化させることができる。固体の硝酸塩と乾燥牧草を混合させた組成物は、ペレット状又はキューブ状に圧縮成形することにより、駆除対象の反芻動物が採食しやすい形態とすることができる。また、乾燥牧草としては、一般的に家畜等の動物用飼料として使用される植物であればよく、特に限定されないが、アルファルファ、ライグラス、チモシー、スーダングラス、バミューダ、フェスク、麦又は綿実等の植物及びこれらの加工品等が挙げられる。このように反芻動物が好む乾燥牧草と有効成分である硝酸塩を混合し、よく分散させた組成物とすることによって、嗜好性が高まり、有効摂取量までの自発的な採食が行われる。また、この組成物の嗜好性をさらに高める観点から、固体の硝酸塩と乾燥牧草に加えて、１〜１０％の穀物粉を添加混合し、本発明の組成物を得ることも好ましい。添加された穀物粉により、硝酸塩特有の風味がマスキングされるため、刺激性が緩和されて嗜好性が高められると共に、穀物粉が硝酸塩と乾燥牧草との間のつなぎのような役割も果たし、圧縮成形等で成形された組成物の形状が保たれるため、取り扱いが容易となる。穀物粉としては、特に限定されないが、小麦粉、トウモロコシ粉、米粉、オオムギ粉、ライ麦粉、ソバ粉又はモロコシ粉などが挙げられる。なお、本態様の組成物には、上述したように、他の成分をさらに含有させたり、種々の形態に調製することが可能である。
【００２４】
また、他の実施態様として、本発明の反芻動物駆除用組成物は、有効成分である硝酸イオン又は硝酸塩がマイクロカプセル化された状態で含有されていることも好ましい。この場合、芯物質は硝酸イオン又は硝酸塩であり、カプセル壁には、ゼラチンやポリマー等の公知のマイクロカプセルを形成する物質を用いることができる。これにより、摂取した動物の舌に硝酸塩が直接触れにくくなるため、本発明の組成物の嗜好性が高められる。
【００２５】
次に、本発明の野生の反芻動物の駆除方法、すなわち、上述した反芻動物駆除用組成物の使用方法について説明する。上述したように、野生の反芻動物が本発明の反芻動物駆除用組成物を所定量以上経口摂取すると、摂取した反芻動物は致死し、駆除される。よって、駆除対象となる野生の反芻動物の生息場所や野生の反芻動物による被害のあった場所等に反芻動物駆除用組成物を配置し、野生の反芻動物に採食させることによって、反芻動物を駆除することができる。反芻動物駆除用組成物の配置に当たっては、地面に直接撒くことの他に、給餌器や給餌台を設置してその中に本発明の組成物を入れて配置することができる。
【００２６】
本発明者らは、本発明の反芻動物駆除用組成物を駆除対象の反芻動物に与える前に、前もって低濃度の硝酸イオンを経口摂取させておくことにより、本発明の組成物の作用効果が向上し、致死までの所要時間が短縮されることを見いだした。これは、低濃度の硝酸イオンを予め経口摂取しておくことにより、反芻動物の第一胃内の微生物叢中に含まれる硝酸還元菌が増殖する等して硝酸還元活性が向上するためと推測される。この状態で本発明の組成物をさらに経口摂取することにより、第一胃内での硝酸イオンから亜硝酸イオンへの還元反応が速やかに生じるため、致死までの所要時間が短縮される。これにより、駆除対象の反芻動物の苦痛軽減となり、また、メトヘモグロビン血症状態下で運動能力が低下した個体による事故等のおそれも低減される。
【００２７】
具体的には、まず、硝酸態窒素を３００〜５０００ｐｐｍ含有する飼料を駆除対象の野生の反芻動物に経口摂取させる。硝酸態窒素を３００〜５０００ｐｐｍ含有する飼料としては、硝酸イオンや硝酸塩を人工的に添加した飼料や、硝酸態窒素を蓄積して所定量の硝酸態窒素を含有する植物又はその加工物からなる飼料を用いることができる。特に、マメ科又はイネ科の植物は植物体内の硝酸態窒素の含有量が多く、一例として、アルファルファ、イタリアンライグラス、スーダングラスといった植物からなる飼料は、硝酸態窒素の含有量が５００ｐｐｍ前後とされている。そのため、マメ科又はイネ科の植物飼料を予め反芻動物に摂食させる飼料として使用することが好ましい。
【００２８】
硝酸態窒素を３００〜５０００ｐｐｍ含有する飼料を野生の反芻動物に摂食させる期間は、第一胃内の硝酸還元菌が増殖する等して硝酸還元活性が元の状態と比べて向上する程度の期間であればよく、特に限定されないが、１〜７日間程度の期間が好ましく、２〜７日間程度の期間がより好ましい。なお、野生の反芻動物は、人工的な飼料に慣れておらず、野外に設置された飼料に馴化して摂食するまでには時間がかかる可能性があるため、飼料の摂食状況等により、摂食期間を判断することが好ましい。
【００２９】
野生の反芻動物に硝酸態窒素を所定量含有する飼料を一定期間摂食させると、第一胃内の硝酸還元活性が上昇し、第一胃内での硝酸イオンから亜硝酸イオンへの還元が速やかに生じるようになる。この状態で、本発明の反芻動物駆除用組成物を摂食させると、組成物中に含まれる硝酸イオンから亜硝酸イオンが速やかに生成してメトヘモグロビン血症が生じ、致死までの所要時間が短縮される。このとき、駆除対象の反芻動物に本発明の組成物を抵抗なく摂食させるため、本発明の組成物は、硝酸態窒素を所定量含有する馴化した飼料と同じ形態に成形することが好ましい。また、風味についても馴化した飼料と類似した内容にしておくことが好ましく、本発明の組成物は、馴化した飼料において、所定量まで硝酸イオン又は硝酸塩を高めて含有させたものとすることができる。
【実施例】
【００３０】
以下、本発明を実施例により具体的に説明するが、本発明は、これらの実施例に特に限定されるものではない。
【００３１】
［実施例１］
１．硝酸塩の胃内投与による血中薬物動態試験
富士山西麓地域に生息する野生シカをわなで生体捕獲した。捕獲したシカは、圧縮成形牧草であるアルファルファヘイキューブ（エッケンバーグファームズ社製品、硝酸態窒素含有量；約５００ｐｐｍ）及び水を自由摂取させて２〜７日間飼育し、馴化させた。なお、馴化の状態は、給餌したアルファルファヘイキューブの摂取量で判断し、給餌したアルファルファヘイキューブを積極的に一定量以上摂取した個体を馴化個体とした。必要に応じて抗生物質及び炭酸水素ナトリウム（２００ｍｇ当量）を腹腔内投与し、飼育施設にて１日以上安静にした後に試験に供した。
【００３２】
試験シカ（成獣メス２頭）を補綴具にて不動化し、蒸留水に溶解させた硝酸ナトリウム溶液を各試験シカの第一胃内に直接注射器にて投与した。投与量は、硝酸ナトリウム量として０．４ｇ／ｋｇ体重及び０．８ｇ／ｋｇ体重とした。投与直後から１２時間後まで１時間毎に採血し、血中のメトヘモグロビン（Ｍｅｔ−Ｈｂ）割合、亜硝酸イオン、硝酸イオン及びアンモニア濃度を測定した。メトヘモグロビン割合の測定は、Ｅｖｅｌｙｎ＆Ｍａｌｌｏｙの方法（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、第１２６巻、１９３８年、ｐ．６５５−６６２）に従って行った。また、亜硝酸イオン及び硝酸イオンの測定は、高速液体クロマトグラフィにより行い、アンモニア濃度の測定は、酵素サイクリング法により行った。硝酸ナトリウムの投与量が０．４ｇ／ｋｇ体重の結果を図１（ａ）に、投与量が０．８ｇ／ｋｇ体重の結果を図１（ｂ）に示す。各グラフの横軸は投与後の経過時間（ｈ）を、縦軸は測定された数値（濃度）を示している。
【００３３】
投与量が０．４ｇ／ｋｇ体重の個体については、試験期間中の血中の亜硝酸イオン濃度は検出限界以下であったが、血中のＭｅｔ−Ｈｂ割合は漸次上昇した（図１（ａ）参照）。他方、投与量が０．８ｇ／ｋｇ体重の個体については、投与直後から２時間後までは血中の亜硝酸イオン濃度は低値で推移したものの、その後上昇し続け、１０時間後には１２ｍｇ／ｄＬもの高濃度の値を示した。この亜硝酸イオンの濃度上昇に連動して血中のＭｅｔ−Ｈｂ割合も上昇し、Ｍｅｔ−Ｈｂ割合をプロットしたグラフの傾きは０．４ｇ／ｋｇ体重投与区のものよりも大きかった（図１（ｂ）参照）。以上から、硝酸塩投与による第一胃内での亜硝酸イオンの発生は投与した硝酸塩の濃度に比例することが示唆された。
【００３４】
［実施例２］
２．硝酸塩の胃内投与による行動及び反応試験
富士山西麓地域に生息する野生シカをわなで生体捕獲した。必要に応じて抗生物質及び炭酸水素ナトリウム（２００ｍｇ当量）を腹腔内投与し、飼育施設にて１日以上安静にした後に試験に供した。なお、馴化のためにアルファルファヘイキューブ（エッケンバーグファームズ社製品、硝酸態窒素含有量；約５００ｐｐｍ）及び水を自由摂取させて２〜７日間飼育し、馴化させた。なお、わなで生体捕獲後２日後に試験に供した試験シカ（成獣メス１頭）については、試験開始までにアルファルファヘイキューブを給餌したが、積極的に摂取しなかったため、非馴化個体とした。
【００３５】
試験シカ（成獣メス６頭、幼獣オス１頭）を補綴具にて不動化し、蒸留水に溶解させた硝酸ナトリウム溶液を各試験シカの第一胃内に直接注射器にて投与した。投与量は、硝酸ナトリウム量として０．４ｇ／ｋｇ体重及び０．８ｇ／ｋｇ体重とした。なお、０．８ｇ／ｋｇ体重の投与区の試験シカ４頭のうち、１頭は非馴化個体であった。投与後、ケージ（１００ｃｍ×２１０ｃｍ×高さ１５０ｃｍ）内に放獣し、各試験シカの行動を監視カメラで２４時間まで観察した。また、一部の試験シカについては、投与前と投与後に採血を行い、血中のＭｅｔ−Ｈｂ割合（％）とストレス評価のため血清コルチゾール（μｇ／ｄＬ）を測定した。なお、投与後の採血は死亡個体については死亡直後、生存個体については投与１２時間後に行った。各個体の硝酸ナトリウム投与による効果を以下表１に示す。また、投与前後の一部個体の血中のＭｅｔ−Ｈｂ割合を図２に、血清コルチゾール値を図３に示す。図２及び図３における横軸の番号は、以下表１に示す試験シカの個体番号を示している。
【００３６】
【表１】
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【００３７】
０．４ｇ／ｋｇ投与区では、試験シカ３頭中１頭が死亡し、０．８ｇ／ｋｇ投与区では、試験シカ４頭全てが死亡した。図２に示すように、投与前後のＭｅｔ−Ｈｂ割合については、死亡個体（Ｎｏ．１、５及び６）は投与後のＭｅｔ−Ｈｂ割合の値が投与前の値と比較して高く、おおむね９０％以上に達していたが、０．４ｇ／ｋｇ投与区の生存個体（Ｎｏ．２及び３）については投与前後でＭｅｔ−Ｈｂ割合に変化は無かった。このことより、死亡個体は、メトヘモグロビン血症により、死亡したことがわかった。これら実施例１及び２から、確実に硝酸塩投与の効果を得るには０．８ｇ／ｋｇ体重程度の摂取が必要であることがわかった。さらに、投与から死亡までの所要時間をみると、馴化個体はこの所要時間が短縮される傾向を示した。これは、馴化飼料として用いたアルファルファヘイキューブに植物としては比較的高濃度の硝酸態窒素が含有されており、この硝酸態窒素が馴化個体中の第一胃内の微生物叢に作用して、硝酸還元菌を増殖させ、硝酸還元菌の活性を向上させたためと考えられる。このことより、対象個体に前もって低濃度の硝酸イオンを経口摂取させておくことにより、硝酸塩投与の効果が向上することが示された。
【００３８】
また、監視カメラの映像により硝酸ナトリウム投与後の各試験シカの行動を確認したところ、死亡個体は、投与から死亡３０分前までは平静であったが、徐々に酩酊状態を呈した後に意識が混濁して死亡し、苦悶したり暴れるような兆候は認められなかった。また、コルチゾールは、強いストレスが発生している際に分泌量が増加するホルモンの一種であるが、本実施例においては、図３に示すように、死亡個体（Ｎｏ．１及び５）の血清コルチゾール値は２頭中１頭では上昇せず、生存個体（Ｎｏ．２及び３）の血清コルチゾール値も２頭中１頭では上昇しなかった。これらのことから、硝酸塩投与により死亡に至る際には、死亡個体は苦悶せず、比較的穏やかな行動・反応を示すことが示された。
【００３９】
［実施例３］
３．硝酸塩含有飼料の採食性・嗜好性の検討（１）
富士山西麓地域に生息する野生シカ（成獣メス１頭；体重３９．５ｋｇ）をわなで生体捕獲した。必要に応じて抗生物質及び炭酸水素ナトリウム（２００ｍｇ当量）を腹腔内投与し、飼育施設にて１日以上安静にした後に試験に供した。試験に使用する硝酸塩含有飼料は以下のようにして作製した。粉砕したアルファルファヘイキューブ（エッケンバーグファームズ社製品）に対し、硝酸ナトリウム含量が３．７重量％（低濃度区）又は７．４重量％（高濃度区）となるようにそれぞれ硝酸ナトリウム水溶液を周囲から噴霧し、６０℃環境下で２時間乾燥させて試験飼料とした。
【００４０】
試験シカ（成獣メス１頭；体重３９．５ｋｇ）を個別飼育ケージに収容した。試験飼料の給餌前３日間は、アルファルファヘイキューブ（エッケンバーグファームズ社製品、硝酸態窒素含有量；約５００ｐｐｍ）を３ｃｍ角に破砕したものを給餌して飼育した。試験当日朝９：００に試験飼料である硝酸塩添加飼料を給餌し、水は自由摂取とした。２４時間後、試験個体の状態を目視で確認し、残飼料から採食量を求めた。また、対照区として、別の成獣メス１頭（体重４９．０ｋｇ）に粉砕したアルファルファヘイキューブ（エッケンバーグファームズ社製品）のみからなる飼料を給餌した。試験終了後に各個体から採血し、血中のＭｅｔ−Ｈｂ割合を測定した。結果を以下表２に示す。
【００４１】
【表２】
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【００４２】
表２に示されるように、対照区と比べて、低濃度区及び高濃度区の両区とも対照区の飼料（アルファルファヘイキューブ）に対して嗜好性が低下し、対照区の採食量に対して低濃度区は２４％、高濃度区は１４％の採食量となった。実施例１及び２に示すように、シカに対する硝酸ナトリウムの有効な致死摂取量は０．８ｇ／ｋｇ体重であるところ、本実施例の試験シカの体重は３９．５ｋｇであることから、致死効果が発揮されるには低濃度区飼料は約８５５ｇ、高濃度区飼料は約４３０ｇ採食される必要があるが、いずれの試験区も約半分程度の採食量にとどまった。また、本試験シカの硝酸ナトリウムとしての推定致死摂取量は、３１．６ｇであるところ、両試験区とも硝酸ナトリウムの摂取量はその半量程度（１５．５ｇ又は１７．８ｇ）であった。試験飼料を給餌された個体は生存し、行動にも特に異常は認められなかった。このように嗜好性が低下した理由としては、本試験飼料は、アルファルファヘイキューブの表面のみに硝酸塩が付着しているため、採食したとたんに硝酸塩が直接的に動物の舌に触れ、硝酸塩特有の風味や刺激が添加濃度以上に強く感じられるためと推測された。
【００４３】
［実施例４］
４．硝酸塩含有飼料の採食性・嗜好性の検討（２）
富士山西麓地域に生息する野生シカ（成獣メス３頭；体重３８．０ｋｇ、４５．５ｋｇ及び３８．５ｋｇ）をわなで生体捕獲した。必要に応じて抗生物質及び炭酸水素ナトリウム（２００ｍｇ当量）を腹腔内投与し、飼育施設にて１日以上安静にした後に試験に供した。シカは甘味に嗜好性を示すことから、本実施例では、市販粒餡に対し、硝酸ナトリウム含量が６．３重量％（低濃度区）、９．１重量％（中濃度区）及び１２重量％（高濃度区）となるように固体の硝酸ナトリウムを添加してよく混ぜたものを試験飼料とした。
【００４４】
試験シカ３頭（成獣メス３頭；体重３８．０ｋｇ、４５．５ｋｇ及び３８．５ｋｇ）をそれぞれ個別飼育ケージに収容した。試験飼料の給餌前３日間は、アルファルファヘイキューブ（エッケンバーグファームズ社製品、硝酸態窒素含有量；約５００ｐｐｍ）を３ｃｍ角に破砕させたものを給餌して飼育した。試験当日朝９：００に試験飼料である硝酸塩含有飼料を給餌し、水は自由摂取とした。４８時間後、試験個体の状態を目視で確認し、残飼量から試験飼料の採食量を求めた。試験終了後に各個体から採血し、血中のＭｅｔ−Ｈｂ割合を測定した。結果を以下表３に示す。
【００４５】
【表３】
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【００４６】
表３に示されるように、低濃度区については、試験飼料は全量採食され、嗜好性が高いことが示された。しかしながら、試験個体の採食量が６４０ｇであり、推定致死摂取量４８３ｇを上回っているにもかかわらず、血中Ｍｅｔ−Ｈｂ割合は上昇せず、試験個体は生存し、試験期間中の行動に特に異常は認められなかった。他方、中濃度区及び高濃度区については、低濃度区と比べて試験飼料の嗜好性が低下し、採食量は推定致死摂取量に達さなかった。試験個体も低濃度試験区同様に生存し、行動等にも特に異常は認められなかったが、高濃度区では血中Ｍｅｔ−Ｈｂ割合の上昇がやや認められた。低濃度区において、推定致死摂取量を超えた量を採食したにもかかわらず、効果が得られなかった一因としては、飼料中に含まれる糖分により反芻胃内の微生物叢が変化し、硝酸還元菌により生成した亜硝酸イオンが速やかにアンモニアに還元される割合が多くなることが考えられた。
【００４７】
［実施例５］
５．硝酸塩含有飼料の採食確認試験（１）
マイクロカプセル化した硝酸ナトリウム含有飼料を用いて、野外給餌試験を行った。試験飼料は次のようにして作製した。マイクロカプセル化した硝酸ナトリウムを寒天に溶解し、硝酸ナトリウム濃度が３．２％（飼料１）、１．６％（飼料２）、０．８％（飼料３）となるようにそれぞれ３ｃｍ角に破砕したアルファルファヘイキューブ（エッケンバーグファームズ社製品）の外周に塗布した。また、対照区飼料として、３ｃｍ角に破砕したアルファルファヘイキューブのみ（エッケンバーグファームズ社製品）を用いた。
【００４８】
上記飼料１〜３及び対照区飼料をそれぞれ５００ｇずつ給餌器に収容し、野生のシカが生息する静岡県賀茂郡東伊豆町白田地区の所定場所に設置して一晩放置した。その結果、対照区飼料だけでなく、硝酸塩を添加した飼料１〜３も全量摂取された。この結果により、マイクロカプセル化した硝酸塩含有飼料をシカが不嗜好性を示さず、摂食することが分かった。
【００４９】
［実施例６］
６．硝酸塩含有飼料の採食確認試験（２）
以下表４に示す組成の飼料ａ、飼料ｂ及び飼料ｃを用いて、野外給餌試験を行った。飼料ａ及びｂについては、各成分の所定量をよく混合して分散させたのち、圧縮成形機にてペレット状に圧縮成形することにより作製した。
【００５０】
【表４】
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【００５１】
上記飼料ａ〜ｃをそれぞれ５０ｇずつ給餌器に収容し、野生のシカが生息する静岡県賀茂郡東伊豆町白田地区の所定場所に設置して２４時間放置した。その結果、硝酸塩を含まない飼料ｂ及び飼料ｃだけでなく、硝酸ナトリウムを４０％もの高濃度で含む飼料ａも全量摂取された。この結果により、アルファルファ粉末、硝酸ナトリウム（固体）及び小麦粉からなる硝酸塩含有飼料をシカが不嗜好性を示さず、摂食することが分かった。
【００５２】
［実施例７］
７．硝酸塩含有飼料の野外給餌試験
実施例６で嗜好性が良好であることが確認された表４に示す硝酸塩含有飼料の飼料ａについて、野外給餌試験を行った。飼料ａについては、死亡個体の飼料採食量を把握するため、１個あたり約１０ｇのペレットを選び、プラスチック片１個をでんぷん糊で接着させて試験飼料とした。硝酸塩含有飼料である飼料ａの給餌に先立ち、給餌器に表４に示す飼料ｂ、すなわち、硝酸ナトリウムを添加していない飼料を入れ、野生のシカが生息する静岡県賀茂郡東伊豆町白田地区の試験場所Ａ〜Ｃの三箇所に給餌器を３台ずつ設置し、自由に摂食させて馴化させた。馴化は２〜５日にわたって行い、給与した飼料ｂが一定量以上採食された状態を馴化された状態と判断した。
【００５３】
試験日の１５：００に、試験場所Ａ〜Ｃに３台ずつ設置されている給餌器から飼料ｂを除去し、飼料ａに入れ替えた。その後、試験翌日の朝まで放置し、飼料ａを自由摂取させた。また、給餌器周辺にセンサーカメラを取り付け、飼料を採食するシカを撮影した。翌朝に給餌器から飼料ａを回収し、残量から採食量を求めた。また、カメラの画像から給餌器に集まった野生個体数を算出した。さらに、給餌器周辺で死亡が確認されたシカについては、胃内容物を採取・分析し、回収されたプラスチック片の数から採食量を算出した。また、死亡個体の血清中の硝酸イオン濃度をＲＱフレックス（株式会社メルク製品）で測定した。試験は同じ試験場所にて１週間の間隔をあけ、２回行った。結果を表５及び表６に示す。なお、血清中の硝酸イオン濃度の対照区として、富士地域においてくくりわなで捕獲したシカの血清を用いた。
【００５４】
【表５】
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【００５５】
センサーカメラの画像で確認された給餌器に集まった個体数と、飼料ａの残量から、１頭あたりの飼料ａの平均採食量は５３．５ｇであり、硝酸ナトリウム摂取量は２１．４ｇであることがわかった。また、本実施例において確認された死亡個体７頭の各種測定値を以下表６に示す。死亡個体Ｎｏ．１〜７のうち、Ｎｏ．５及び７以外の胃内容物にはプラスチック片が含まれていた。このプラスチック片の数から推定すると、Ｎｏ．１〜３の個体は、推定致死摂取量と同程度の量が摂取されたことが分かった。また、Ｎｏ．４及び６の個体については、推定致死摂取量を超える量の飼料ａの採食がみられた。
【００５６】
【表６】
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【００５７】
この結果より、本発明の反芻動物駆除用組成物を野外に設置することにより、野生の反芻動物に自発的に採食され、その結果駆除対象動物である反芻動物が致死すること、本発明の反芻動物駆除用組成物を野生の反芻動物の駆除に用いることができることが示された。
【００５８】
本発明は、上記の実施形態又は実施例に限定されるものでなく、特許請求の範囲に記載された発明の要旨を逸脱しない範囲内での種々、設計変更した形態も技術的範囲に含まれるものである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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