(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩：
【化１】
0006534389.tif 000150
［式中、
ｐは、０および１から選択され、
ｑは、０および１から選択され、
Ｙ１は、ＣＨおよびＮから選択され、
Ｙ２は、ＣＲ６およびＮから選択され、
Ｒ１は、−ＸＲ１ａであり（ここで、Ｒ１ａは、フェニル又はピリジルであり；Ｒ１ａの前記フェニル又はピリジルは、ハロ、アミノ、ヒドロキシ、Ｎ３、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、ジメチル−アミノ、ヒドロキシ置換Ｃ１〜４アルキル、ハロ置換Ｃ１〜４アルキル、アミノ置換Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２および−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１０から独立に選択される１〜５個のＲ９基で置換されており；Ｒ１０は、水素、フェニルおよびナフチルから選択され（ここで、Ｒ１０の前記フェニルは、非置換であるか、またはメトキシで置換されている）；Ｘは、単結合又はＳである）、
Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立に、水素、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ１〜４アルキル−アミノから選択され、
Ｒ３ａおよびＲ３ｂは、独立に、水素、ハロ、カルボニル、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ１〜４アルキル−アミノから選択され、
Ｒ４ａおよびＲ４ｂは、独立に、水素、ハロ、カルボニル、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ１〜４アルキル−アミノから選択され、
Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立に、水素、カルボニル、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ１〜４アルキル−アミノから選択され（ここで、Ｒ２ａ、Ｒ２ｂ、Ｒ３ａ、Ｒ３ｂ、Ｒ４ａ、Ｒ４ｂ、Ｒ５ａ、Ｒ５ｂおよびＲ７から選択されるいずれか２個の基は、５〜６員の不飽和または部分的に飽和の環を形成していてもよい）、
Ｒ６は、水素、ハロ、シアノ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ−カルボニル、ハロ置換Ｃ１〜４アルキル、ハロ置換Ｃ１〜４アルコキシ、ヒドロキシ置換Ｃ１〜４アルキル、アミノ置換Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ（Ｏ）１−２Ｒ６ａ、−Ｃ（Ｓ）Ｒ６ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ６ａＲ６ｂ、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲ６ａＲ６ｂおよび−ＮＲ６ａＣ（Ｏ）Ｒ６ｂから選択され（ここで、Ｒ６ａおよびＲ６ｂは、独立に、水素およびＣ１〜４アルキルから選択される）、
Ｒ７およびＲ８は、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、Ｃ（Ｏ）、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから独立に選択される１〜３個のヘテロ原子または基を任意に含有していてもよい、３〜７員の飽和または部分的に不飽和の環を形成している（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、非置換であってもよく、またはアミノ、ヒドロキシ、メトキシ、ハロ、メチル、アミノ−メチル、メチル−アミノおよびイソブチリルオキシから独立に選択される１〜３個の基で置換されていてもよい）；
但し、Ｒ１ａがピリジルである場合は前記Ｒ１中のＸ又はピラジンが前記ピリジルの３位又は４位に結合しており、Ｒ７とＲ８が一緒になって環を形成し、当該環はアミノで置換されている］。
【請求項２】
Ｒ７およびＲ８が、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、Ｏ、Ｃ（Ｏ）およびＳ（Ｏ）ｍから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子または基を任意に含有していてもよい、５員の飽和または部分的に不飽和の環を形成している（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、アミノ、ヒドロキシ、メトキシ、ハロ、メチル、アミノ−メチル、メチル−アミノおよびイソブチリルオキシから独立に選択される１〜３個の基で置換されている）、請求項１に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
【請求項３】
【表１−１】
0006534389.tif 000151
【表１−２】
0006534389.tif 000152
【表１−３】
0006534389.tif 000153
【表１−４】
0006534389.tif 000154
【表１−５】
0006534389.tif 000155
【表１−６】
0006534389.tif 000156
【表１−７】
0006534389.tif 000157
【表１−８】
0006534389.tif 000158
【表１−９】
0006534389.tif 000159
から選択される、請求項２に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
【請求項４】
Ｒ７およびＲ８が、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから選択されるヘテロ原子を任意に含有していてもよい、６員の飽和または部分的に不飽和の環を形成している（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、アミノで置換されている）、請求項１に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
【請求項５】
【表２】
0006534389.tif 000160
である、請求項４に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
【請求項６】
Ｒ７およびＲ８が、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから選択されるヘテロ原子を任意に含有していてもよい、４員の飽和または部分的に不飽和の環を形成している（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、アミノ、アミノ−メチルおよびメチル−アミノから選択される基で置換されている）、請求項１に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
【請求項７】
【表３】
0006534389.tif 000161
から選択される、請求項６に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
【請求項８】
ｐおよびｑが共に０である、請求項１に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
【請求項９】
【表４】
0006534389.tif 000162
から選択される、請求項８に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
【請求項１０】
式ＩＩで表される、請求項１に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩：
【化３】
0006534389.tif 000163
［式中、
ｐは、０および１から選択され、
ｑは、０および１から選択され、
Ｙ１は、ＣＨおよびＮから選択され、
Ｙ２は、ＣＲ６およびＮから選択され、
Ｒ１は、−ＸＲ１ａであり、Xは単結合であり、Ｒ１ａはフェニル又はピリジルであり（ここで、Ｒ１ａの前記フェニル又はピリジルは、ハロ、アミノ、ヒドロキシ、Ｎ３、Ｃ１〜４アルキル、ヒドロキシ置換Ｃ１〜４アルキル、ハロ置換Ｃ１〜４アルキル、アミノ置換Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０および−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１０から独立に選択される１〜５個のＲ９基で置換されており；Ｒ１０は、水素、フェニルおよびナフチルから選択され（ここで、Ｒ１０の前記フェニルは、非置換であるか、またはメトキシで置換されている））、
Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立に、水素、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ１〜４アルキル−アミノから選択され、
Ｒ３ａおよびＲ３ｂは、独立に、水素、ハロ、カルボニル、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ１〜４アルキル−アミノから選択され、
Ｒ４ａおよびＲ４ｂは、独立に、水素、ハロ、カルボニル、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ１〜４アルキル−アミノから選択され、
Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立に、水素、カルボニル、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ１〜４アルキル−アミノから選択され（ここで、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６ａおよびＲ７ａから選択されるいずれか２個の基は、５〜６員の不飽和または部分的に不飽和の環を形成していてもよい）、
Ｒ６は、水素、ハロ、シアノ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ−カルボニル、ハロ置換Ｃ１〜４アルキル、ハロ置換Ｃ１〜４アルコキシ、ヒドロキシ置換Ｃ１〜４アルキルおよびアミノ置換Ｃ１〜４アルキルから選択され、
Ｒ７およびＲ８は、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから選択されるヘテロ原子を任意に含有していてもよい、３〜７員の飽和または部分的に不飽和の環を形成している（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、非置換であってもよく、またはアミノ、ハロ、ヒドロキシ、アミノ−メチルおよびメチル−アミノから独立に選択される１〜３個の基で置換されていてもよい）］。
【請求項１１】
式ＩＩａで表される、請求項１０に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩：
【化４】
0006534389.tif 000164
［式中、
ｎは、１、２、３および４から選択され、
ｐは、０および１から選択され、
ｑは、０および１から選択され、
Ｙ１は、ＣＨおよびＮから選択され、
Ｙ２は、ＣＲ６およびＮから選択され、
Ｙ４は、ＮおよびＣＲ９から選択され、
Ｒ６は、水素、ハロ、メチルおよびアミノ−カルボニルから選択され、
Ｒ７およびＲ８は、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから選択されるヘテロ原子を任意に含有していてもよい、３〜７員の飽和または部分的に不飽和の環を形成しており（ここで、ｍは、０、１および２から選択され、Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、非置換であってもよく、またはアミノ、アミノ−メチルおよびメチル−アミノから選択される基で置換されていてもよい）、
Ｒ９は、ハロ、アミノ、ヒドロキシ、Ｎ３、Ｃ１〜４アルキル、ハロ置換Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２および−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１０から選択され、
Ｒ１０は、水素、フェニルおよびナフチルから選択される（ここで、Ｒ１０の前記フェニルは、非置換であるか、またはメトキシで置換されている）］。
【請求項１２】
Ｒ７およびＲ８が、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから選択されるヘテロ原子を任意に含有していてもよい、５員の飽和または部分的に不飽和の環を形成している（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、アミノで置換されている）、請求項１１に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
【請求項１３】
【表５】
0006534389.tif 000165
から選択される、請求項１２に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
【請求項１４】
Ｒ７およびＲ８が、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから選択されるヘテロ原子を任意に含有していてもよい６員の飽和環を形成している（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、アミノで置換されている）、請求項１１に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
【請求項１５】
【表６】
0006534389.tif 000166
である、請求項１４に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
【請求項１６】
Ｒ７およびＲ８が、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから選択されるヘテロ原子を任意に含有していてもよい４員の飽和環を形成している（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、アミノで置換されている）、請求項１１に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
【請求項１７】
【表７】
0006534389.tif 000167
から選択される、請求項１６に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
【請求項１８】
ｐおよびｑが共に０である、請求項１１に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
【請求項１９】
【表８】
0006534389.tif 000168
から選択される、請求項１８に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
【請求項２０】
請求項１〜１９のいずれか１項に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩、および少なくとも１つの薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
【請求項２１】
ＳＨＰ２の活性によって媒介される疾患または障害を治療するための、請求項２０に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
ＳＨＰ２の活性によって媒介される前記疾患または障害が、ヌーナン症候群、レオパード症候群、若年性骨髄単球性白血病、神経芽細胞腫、黒色腫、急性骨髄性白血病、乳がん、食道がん、肺がん、結腸がん、頭部がん、神経芽細胞腫、頭部および頸部の扁平上皮癌、胃癌、未分化大細胞リンパ腫、ならびに膠芽腫から選択される、請求項２１に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
下記式で表される、(3S,4S)-8-(6-アミノ-5-((2-アミノ-3-クロロピリジン-4-イル)チオ)ピラジン-2-イル)-3-メチル-2-オキサ-8-アザスピロ[4.5]デカン-4-アミンまたは薬学的に許容されるその塩。
【化５】
0006534389.tif 000169
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＳＨＰ２の活性を阻害することができる化合物に関する。本発明はさらに、本発明の化合物を調製する方法、このような化合物を含む医薬調製物、ならびにＳＨＰ２の異常な活性と関連する疾患または障害の管理においてこのような化合物および組成物を使用する方法を提供する。
【背景技術】
【０００２】
Ｓｒｃ相同性−２ホスファターゼ（ＳＨＰ２）は、増殖、分化、細胞周期維持および遊走を含む複数の細胞機能に寄与するＰＴＰＮ１１遺伝子によってコードされた非受容体タンパク質チロシンホスファターゼである。ＳＨＰ２は、Ｒａｓ−マイトジェン活性化タンパク質キナーゼ、ＪＡＫ−ＳＴＡＴまたはホスホイノシトール３−キナーゼ−ＡＫＴ経路を介するシグナル伝達に関与する。
【０００３】
ＳＨＰ２は、２つのＮ−末端Ｓｒｃ相同性の２つのドメイン（Ｎ−ＳＨ２およびＣ−ＳＨ２）、触媒ドメイン（ＰＴＰ）、およびＣ−末端尾部を有する。２つのＳＨ２ドメインは、ＳＨＰ２の細胞内局在および機能的制御を調節する。その分子は、Ｎ−ＳＨ２ドメインとＰＴＰドメインの両方に由来する残基を含む結合網によって安定化された、不活性な自己阻害型立体構造で存在する。例えば、サイトカインまたは成長因子による刺激によって触媒部位が曝露されて、ＳＨＰ２が酵素的に活性化される。
【０００４】
ＰＴＰＮ１１遺伝子の突然変異およびその後のＳＨＰ２の突然変異は、ヒトのいくつかの疾患、例えばヌーナン症候群、レオパード症候群、若年性骨髄単球性白血病、神経芽細胞腫、黒色腫、急性骨髄性白血病、ならびに乳房、肺および結腸のがんにおいて同定されている。したがって、ＳＨＰ２は、様々な疾患を処置する新規な治療を開発するための非常に魅力的な標的となっている。本発明の化合物は、ＳＨＰ２の活性を阻害する小分子の必要性を満たすものである。
【発明の概要】
【０００５】
一態様では、本発明は、式Ｉの化合物を提供する。
【０００６】
【化１】
0006534389.tif 000002
式中、ｐは、０および１から選択され；ｑは、０および１から選択され；Ｙ１は、ＣＨおよびＮから選択され；Ｙ２は、ＣＲ６およびＮから選択され；Ｒ１は、−ＸＲ１ａであり（ここで、Ｒ１ａは、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ３〜８シクロアルケニル、ならびにＮ、Ｃ（Ｏ）、ＯおよびＳから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子または基を含有する５〜９員のヘテロアリール基から選択され；Ｒ１ａの前記アリールまたはヘテロアリールは、ハロ、アミノ、ヒドロキシ、Ｎ３、Ｃ１〜４アルキル、ジメチル−アミノ、ヒドロキシ置換Ｃ１〜４アルキル、ハロ置換Ｃ１〜４アルキル、アミノ置換Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０および−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１０から独立に選択される１〜５個のＲ９基で置換されており；Ｘは、結合、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｏ、Ｃ（Ｏ）、ＣＯＲ１１、ＣＲ１０ａＲ１０ｂ、ＮＲ１１から選択され；ｍは、０、１および２から選択され；各Ｒ１０ａおよびＲ１０ｂは、独立に、ハロおよびＣ１〜４アルキルから選択され；Ｒ１１は、水素およびＣ１〜４アルキルから選択される）；Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立に、水素、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ１〜４アルキル−アミノから選択され；Ｒ３ａおよびＲ３ｂは、独立に、ハロ、カルボニル、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ１〜４アルキル−アミノから選択され；Ｒ４ａおよびＲ４ｂは、独立に、水素、ハロ、カルボニル、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ１〜４アルキル−アミノから選択され；Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立に、水素、カルボニル、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ１〜４アルキル−アミノから選択され（ここで、Ｒ２ａ、Ｒ２ｂ、Ｒ３ａ、Ｒ３ｂ、Ｒ４ａ、Ｒ４ｂ、Ｒ５ａ、Ｒ５ｂおよびＲ７から選択されるいずれか２個の基は、５〜６員の不飽和または部分的に飽和の環を形成していてもよい）；Ｒ６は、水素、ハロ、シアノ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ−カルボニル、ハロ置換Ｃ１〜４アルキル、ハロ置換Ｃ１〜４アルコキシ、ヒドロキシ置換Ｃ１〜４アルキル、アミノ置換Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ（Ｏ）１−２Ｒ６ａ、−Ｃ（Ｓ）Ｒ６ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ６ａＲ６ｂ、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲ６ａＲ６ｂおよび−ＮＲ６ａＣ（Ｏ）Ｒ６ｂから選択され（ここで、Ｒ６ａおよびＲ６ｂは、独立に、水素およびＣ１〜４アルキルから選択される）；Ｒ７およびＲ８は、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、Ｃ（Ｏ）、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから独立に選択される１〜３個のヘテロ原子または基を任意にで含有していてもよい、３〜７員の飽和または部分的に不飽和の環を形成している（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、非置換であってもよく、またはアミノ、ヒドロキシ、メトキシ、ハロ、メチル、メチル−アミノおよびイソブチリルオキシから独立に選択される１〜３個の基で置換されていてもよい）。
【０００７】
第２の態様では、本発明は、式Ｉの化合物もしくはそのＮ−オキシド誘導体、互変異性体、個々の異性体および異性体混合物、または薬学的に許容されるその塩を、１つ以上の適切な添加剤との混合物として含有する医薬組成物を提供する。
【０００８】
第３の態様では、本発明は、ＳＨＰ２の活性をモジュレートすることによって疾患の病変および／または症候を予防する、阻害する、または寛解させることができる、動物の疾患を処置する方法を提供し、この方法は、動物に、治療有効量の式Ｉの化合物もしくはそのＮ−オキシド誘導体、個々の異性体および異性体混合物、または薬学的に許容されるその塩を投与するステップを含む。
【０００９】
第４の態様では、本発明は、ＳＨＰ２の活性をモジュレートすることによって疾患の病変および／または症候を予防する、阻害する、または寛解させることができる、動物の疾患を処置する方法を提供し、この方法は、動物に、治療有効量の式Ｉの化合物もしくはそのＮ−オキシド誘導体、個々の異性体および異性体混合物、または薬学的に許容されるその塩を、抗がん治療剤と同時にまたは逐次的に組み合わせて投与するステップを含む。
【００１０】
第５の態様では、本発明は、ＳＨＰ２活性が疾患の病変および／または症候に寄与する動物の疾患を処置するための医薬の製造における、式Ｉの化合物の使用を提供する。
【００１１】
第６の態様では、本発明は、式Ｉの化合物ならびにそのＮ−オキシド誘導体、プロドラッグ誘導体、保護された誘導体、個々の異性体および異性体混合物、ならびに薬学的に許容されるその塩を調製する方法を提供する。
【００１２】
定義
本明細書を通して使用される一般用語は、好ましくは本開示の文脈において、別段指定されない限り以下の意味を有し、ここでより一般的な用語は、それがどこで使用されていても、互いに独立により具体的な定義によって置き換えることができ、またはそのままであってもよく、したがって本発明のより詳細な実施形態を定義することができる。
【００１３】
「アルキル」は、２０個までの炭素原子を有する、完全に飽和の分岐または非分岐の炭化水素部分を指す。別段提示されない限り、アルキルは、１〜７個の炭素原子を有する炭化水素部分（Ｃ１〜７アルキル）、または１〜４個の炭素原子を有する炭化水素部分（Ｃ１〜４アルキル）を指す。アルキルの代表例として、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｎ−ヘキシル、３−メチルヘキシル、２，２−ジメチルペンチル、２，３−ジメチルペンチル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル、ｎ−デシル等が挙げられるが、それらに限定されない。置換アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシまたはアルコキシ基から選択される１つ以上、例えば１個、２個または３個の置換基を含有するアルキル基である。ハロ置換アルキルおよびハロ置換アルコキシは、直鎖または分岐のいずれかであってよく、それには、メトキシ、エトキシ、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ等が含まれる。
【００１４】
「アリール」は、６〜１０個の環炭素原子を含有する単環式または縮合二環式芳香族環の集合体を意味する。例えば、アリールは、フェニルまたはナフチル、好ましくはフェニルであり得る。「アリーレン」は、アリール基から導出された二価の基を意味する。
【００１５】
「ヘテロアリール」は、先のアリールについて定義されている通りであり、その環員の１つ以上は、ヘテロ原子である。例えば、Ｃ５〜１０ヘテロアリールは、炭素原子によって示される通り最小５員であるが、これらの炭素原子は、ヘテロ原子によって置き換えることができる。結果的に、Ｃ５〜１０ヘテロアリールには、ピリジル、インドリル、インダゾリル、キノキサリニル、キノリニル、ベンゾフラニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、ベンゾ［１，３］ジオキソール、イミダゾリル、ベンゾ−イミダゾリル、ピリミジニル、フラニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピラゾリル、チエニル等が含まれる。
【００１６】
「シクロアルキル」は、示されている数の環原子を含有している、飽和または部分的に不飽和の単環式、縮合二環式または架橋多環式環の集合体を意味する。例えば、Ｃ３〜１０シクロアルキルには、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル等が含まれる。
【００１７】
「ヘテロシクロアルキル」は、本願で定義されているシクロアルキルを意味し、ただし示されている環炭素の１つ以上は、−Ｏ−、−Ｎ＝、−ＮＲ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−または−Ｓ（Ｏ）２−から選択される部分によって置き換えられており、Ｒは、水素、Ｃ１〜４アルキルまたは窒素保護基である。例えば、本発明の化合物を説明するために本願で使用されるＣ３〜８ヘテロシクロアルキルには、モルホリノ、ピロリジニル、ピロリジニル−２−オン、ピペラジニル、ピペリジニル、ピペリジニルオン（piperidinylone）、１，４−ジオキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−８−イル、チオモルホリノ、スルファノモルホリノ、スルホノモルホリノ等が含まれる。
【００１８】
「ハロゲン」（またはハロ）は、好ましくは、クロロまたはフルオロを表すが、ブロモまたはヨードであってもよい。
【００１９】
「ＳＨＰ２」は、「Ｓｒｃ相同性−２ホスファターゼ」を意味し、ＳＨ−ＰＴＰ２、ＳＨ−ＰＴＰ３、Ｓｙｐ、ＰＴＰ１Ｄ、ＰＴＰ２Ｃ、ＳＡＰ−２またはＰＴＰＮ１１としても公知である。
【００２０】
がんを有する「ＰＴＰＮ１１突然変異」には、Ｎ５８Ｙ；Ｄ６１Ｙ、Ｖ；Ｅ６９Ｋ；Ａ７２Ｖ、Ｔ、Ｄ；Ｅ７６Ｇ、Ｑ、Ｋ（ＡＬＬ）；Ｇ６０Ａ；Ｄ６１Ｙ；Ｅ６９Ｖ；Ｆ７１Ｋ；Ａ７２Ｖ；Ｔ７３Ｉ；Ｅ７６Ｇ、Ｋ；Ｒ２８９Ｇ；Ｇ５０３Ｖ（ＡＭＬ）；Ｇ６０Ｒ、Ｄ６１Ｙ、Ｖ、Ｎ；Ｙ６２Ｄ；Ｅ６９Ｋ；Ａ７２Ｔ、Ｖ；Ｔ７３Ｉ；Ｅ７６Ｋ、Ｖ、Ｇ、Ａ、Ｑ；Ｅ１３９Ｄ；Ｇ５０３Ａ、Ｒ；Ｑ５０６Ｐ（ＪＭＭＬ）；Ｇ６０Ｖ；Ｄ６１Ｖ；Ｅ６９Ｋ；Ｆ７１Ｌ；Ａ７２Ｖ；Ｅ７６Ａ（ＭＤＳ）；Ｙ６３Ｃ（ＣＭＭＬ）；Ｙ６２Ｃ；Ｅ６９Ｋ；Ｔ５０７Ｋ（神経芽細胞腫）；Ｖ４６Ｌ；Ｎ５８Ｓ；Ｅ７６Ｖ（肺がん）；Ｒ１３８Ｑ（黒色腫）；Ｅ７６Ｇ（結腸がん）が含まれるが、それらに限定されない。
【００２１】
式Ｉの化合物は、異なる異性体形態を有することができる。例えば、いかなる不斉炭素原子も、（Ｒ）−、（Ｓ）−または（Ｒ，Ｓ）−立体構造、好ましくは（Ｒ）−または（Ｓ）−立体構造で存在することができる。二重結合、または特に環における置換基は、シス−（＝Ｚ−）またはトランス（＝Ｅ−）形態で存在することができる。したがって、化合物は、異性体混合物として、または好ましくは純粋な異性体として、好ましくは純粋なジアステレオマーまたは純粋なエナンチオマーとして存在することができる。
【００２２】
複数の形態（例えば、複数の化合物、複数の塩）が使用される場合、この形態は、単数（例えば、単一の化合物、単一の塩）を含む。「化合物」は、（例えば、医薬製剤において）式Ｉの２つ以上の化合物（またはその塩）が存在することを除外せず、「ａ」は、単に不定冠詞を表す。したがって「ａ」は、好ましくは「１つ以上」と読み取ることができ、あるいは、あまり好ましくはないが「１つ」と読み取ることができる。
【００２３】
式Ｉの１つ以上の化合物に言及する場合、その化合物は、このような化合物のＮ−オキシドおよび／またはそれらの互変異性体もさらに含むことを意図する。
【００２４】
用語「および／またはそのＮ−オキシド、その互変異性体および／または（好ましくは薬学的に許容される）その塩」は、特に、式Ｉの化合物が、そのまま存在するか、あるいはそのＮ−オキシドとの混合物において、互変異性体として存在するか（例えば、ケト−エノール、ラクタム−ラクチム、アミド−イミド酸またはエナミン−イミン互変異性に起因して）、もしくはその互変異性体との（例えば、引き起こされた等価反応）混合物において、または式Ｉの化合物の塩、ならびに／またはこれらの形態のいずれかもしくはこのような形態の２つもしくはそれを超える混合物として存在し得ることを意味する。
【００２５】
以下の化合物に関して、ピラジン環に結合しているＮＨ２基は、効力に関して非常に重要である。結晶学的構造の分析は、ＳＨＰ２残基Ｅ２５０の主鎖カルボニル基との分子内相互作用におけるＮＨ２基を示している。
【００２６】
【表１】
0006534389.tif 000003
【００２７】
本発明はまた、本発明の化合物または薬学的に許容されるその塩のすべての適切な同位体変形を含む。本発明の化合物または薬学的に許容されるその塩の同位体変形は、少なくとも１つの原子が、同じ原子番号を有するが、通常自然に見出される原子質量とは異なる原子質量を有する原子によって置き換えられているものと定義される。本発明の化合物および薬学的に許容されるその塩に取り込むことができる同位体の例として、水素、炭素、窒素および酸素の同位体、例えば２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１７Ｏ、１８Ｏ、３５Ｓ、１８Ｆ、３６Ｃｌおよび１２３Ｉが挙げられるが、それらに限定されない。本発明の化合物および薬学的に許容されるその塩の、ある特定の同位体変形、例えば放射性同位体、例えば３Ｈまたは１４Ｃが取り込まれたものは、薬物および／または基質の組織分布研究において有用である。特定の例では、調製および検出を容易にするために、３Ｈおよび１４Ｃ同位体を使用することができる。他の例では、２Ｈなどの同位体による置換は、より高い代謝安定性から得られる特定の治療上の利点、例えばインビボ半減期の増大または必要投与量の低減をもたらすことができる。本発明の化合物または薬学的に許容されるその塩の同位体変形は、一般に、適切な試薬の適切な同位体変動を使用して、従来の手順によって調製することができる。例えば、本発明の化合物は、以下に示す重水素化形態で存在することができる。
【００２８】
【化２】
0006534389.tif 000004
【発明を実施するための形態】
【００２９】
本発明は、ＳＨＰ２の活性を阻害することができる化合物に関する。式Ｉの化合物に関する本発明の一態様では、−ＸＲ１ａは、−ＳＲ１ａであり、
【００３０】
【化３】
0006534389.tif 000005
から選択される。
【００３１】
本発明の別の態様では、−ＸＲ１ａは、−ＳＲ１ａであり、
【００３２】
【化４】
0006534389.tif 000006
から選択される。
【００３３】
式Ｉの化合物に関する本発明の別の態様では、
【００３４】
【化５】
0006534389.tif 000007
は、
【００３５】
【化６】
0006534389.tif 000008
から選択される。
【００３６】
式Ｉの化合物に関する別の態様では、式Ｉａ
【００３７】
【化７】
0006534389.tif 000009
［式中、ｎは、１、２、３および４から選択され；ｐは、０および１から選択され；ｑは、０および１から選択され；Ｙ１は、ＣＨおよびＮから選択され；Ｙ２は、ＣＲ６およびＮから選択され；Ｙ４は、独立に、Ｎ、Ｃ（Ｏ）およびＣＲ９から選択され（ここで、一方のＹ４は、Ｃ（Ｏ）である）；Ｒ６は、水素、ハロ、メチルおよびアミノ−カルボニルから選択され、Ｒ７およびＲ８は、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから選択されるヘテロ原子を任意に含有していてもよい、３〜７員の飽和または部分的に不飽和の環を形成しており（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、非置換であってもよく、またはアミノ、アミノ−メチルおよびメチル−アミノから選択される基で置換されていてもよい）；Ｒ９は、ハロ、アミノ、ジメチル−アミノ、ヒドロキシ、Ｎ３、Ｃ１〜４アルキル、ハロ置換Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０および−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１０から選択され、Ｒ１０は、水素、フェニルおよびナフチルから選択される（ここで、Ｒ１０の前記フェニルは、非置換であり、またはメトキシで置換されている）］
の化合物または薬学的に許容されるその塩が提供される。
【００３８】
本発明のさらなる一態様では、Ｒ７およびＲ８が、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、Ｏ、Ｃ（Ｏ）およびＳ（Ｏ）ｍから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子または基を任意に含有していてもよい５員の飽和または部分的に不飽和の環を形成している（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、アミノ、ヒドロキシ、メトキシ、ハロ、メチル、メチル−アミノおよびイソブチリルオキシから独立に選択される１〜３個の基で置換されている）化合物または薬学的に許容されるその塩が提供される。
【００３９】
本発明のさらなる一態様では、
【００４０】
【表２−１】
0006534389.tif 000010
【００４１】
【表２−２】
0006534389.tif 000011
【００４２】
【表２−３】
0006534389.tif 000012
【００４３】
【表２−４】
0006534389.tif 000013
【００４４】
【表２−５】
0006534389.tif 000014
【００４５】
【表２−６】
0006534389.tif 000015
【００４６】
【表２−７】
0006534389.tif 000016
【００４７】
【表２−８】
0006534389.tif 000017
【００４８】
【表２−９】
0006534389.tif 000018
から選択される化合物または薬学的に許容されるその塩が提供される。
【００４９】
本発明の別の態様では、Ｒ７およびＲ８が、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから選択されるヘテロ原子を任意に含有していてもよい６員の飽和または部分的に不飽和の環を形成している（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、アミノ、アミノ−メチルおよびメチル−アミノから選択される基で置換されている）化合物または薬学的に許容されるその塩が提供される。
【００５０】
本発明のさらなる一態様では、
【００５１】
【表３】
0006534389.tif 000019
から選択される化合物または薬学的に許容されるその塩が提供される。
【００５２】
本発明の別の態様では、Ｒ７およびＲ８が、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから選択されるヘテロ原子を任意に含有していてもよい４員の飽和または部分的に不飽和の環を形成している（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、アミノ、アミノ−メチルおよびメチル−アミノから選択される基で置換されている）化合物または薬学的に許容されるその塩が提供される。
【００５３】
本発明のさらなる一態様では、
【００５４】
【表４】
0006534389.tif 000020
から選択される化合物または薬学的に許容されるその塩が提供される。
【００５５】
本発明の別の態様では、ｐおよびｑが共に０である化合物または薬学的に許容されるその塩が提供される。
【００５６】
本発明のさらなる一態様では、
【００５７】
【表５】
0006534389.tif 000021
から選択される化合物または薬学的に許容されるその塩が提供される。
【００５８】
本発明の別の態様では、式ＩＩの化合物
【００５９】
【化８】
0006534389.tif 000022
［式中、ｐは、０および１から選択され；ｑは、０および１から選択され；Ｙ１は、ＣＨおよびＮから選択され；Ｙ２は、ＣＲ６およびＮから選択され；Ｒ１は、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ３〜８シクロアルケニル、ならびにＮ、ＯおよびＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を含有する５〜９員のヘテロアリール基から選択され（ここで、Ｒ１ａの前記アリールまたはヘテロアリールは、ハロ、アミノ、ヒドロキシ、Ｎ３、Ｃ１〜４アルキル、ヒドロキシ置換Ｃ１〜４アルキル、ハロ置換Ｃ１〜４アルキル、アミノ置換Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０および−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１０から独立に選択される１〜５個のＲ９基で置換されており；ｍは、０、１および２から選択され；各Ｒ１０ａおよびＲ１０ｂは、独立に、ハロおよびＣ１〜４アルキルから選択され；Ｒ１１は、水素およびＣ１〜４アルキルから選択される）；Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立に、水素、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ１〜４アルキル−アミノから選択され；Ｒ３ａおよびＲ３ｂは、独立に、ハロ、カルボニル、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ１〜４アルキル−アミノから選択され；Ｒ４ａおよびＲ４ｂは、独立に、水素、ハロ、カルボニル、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ１〜４アルキル−アミノから選択され；Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立に、水素、カルボニル、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ１〜４アルキル−アミノから選択され（ここで、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６ａおよびＲ７ａから選択されるいずれか２個の基は、５〜６員の不飽和または部分的に不飽和の環を形成していてもよい）；Ｒ６は、水素、ハロ、シアノ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ−カルボニル、ハロ置換Ｃ１〜４アルキル、ハロ置換Ｃ１〜４アルコキシ、ヒドロキシ置換Ｃ１〜４アルキルおよびアミノ置換Ｃ１〜４アルキルから選択され；Ｒ７およびＲ８は、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから選択されるヘテロ原子を任意に含有していてもよい、３〜７員の飽和または部分的に不飽和の環を形成している（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、非置換であってもよく、またはアミノ、アミノ−メチルおよびメチル−アミノから選択される基で置換されていてもよい）］または薬学的に許容されるその塩が提供される。
【００６０】
本発明のさらなる一態様では、式ＩＩａの化合物
【００６１】
【化９】
0006534389.tif 000023
［式中、ｎは、１、２、３および４から選択され；ｐは、０および１から選択され；ｑは、０および１から選択され；Ｙ１は、ＣＨおよびＮから選択され；Ｙ２は、ＣＲ６およびＮから選択され；Ｙ４は、ＮおよびＣＲ９から選択され；Ｒ６は、水素、ハロ、メチルおよびアミノ−カルボニルから選択され；Ｒ７およびＲ８は、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから選択されるヘテロ原子を任意に含有していてもよい、３〜７員の飽和または部分的に不飽和の環を形成しており（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、非置換であってもよく、またはアミノ、アミノ−メチルおよびメチル−アミノから選択される基で置換されていてもよい）；Ｒ９は、ハロ、アミノ、ヒドロキシ、Ｎ３、Ｃ１〜４アルキル、ハロ置換Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０および−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１０から選択され；Ｒ１０は、水素、フェニルおよびナフチルから選択される（ここで、Ｒ１０の前記フェニルは、非置換であるか、またはメトキシで置換されている）］または薬学的に許容されるその塩が提供される。
【００６２】
本発明のさらなる一態様では、Ｒ７およびＲ８が、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから選択されるヘテロ原子を任意に含有していてもよい５員の飽和環を形成している（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成された前記飽和環は、アミノ、アミノ−メチルおよびメチル−アミノから選択される基で置換されている）化合物または薬学的に許容されるその塩が提供される。
【００６３】
本発明のさらなる一態様では、
【００６４】
【表６】
0006534389.tif 000024
から選択される化合物または薬学的に許容されるその塩が提供される。
【００６５】
本発明の別の態様では、Ｒ７およびＲ８が、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから選択されるヘテロ原子を任意に含有していてもよい６員の飽和環を形成している（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、アミノ、アミノ−メチルおよびメチル−アミノから選択される基で置換されている）化合物または薬学的に許容されるその塩が提供される。
【００６６】
本発明のさらなる一態様では、
【００６７】
【表７】
0006534389.tif 000025
から選択される化合物または薬学的に許容されるその塩が提供される。
【００６８】
本発明の別の態様では、Ｒ７およびＲ８が、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから選択されるヘテロ原子を任意に含有していてもよい４員の飽和環を形成している（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、アミノで置換されている）化合物または薬学的に許容されるその塩が提供される。
【００６９】
本発明のさらなる一態様では、
【００７０】
【表８】
0006534389.tif 000026
から選択される化合物または薬学的に許容されるその塩が提供される。
【００７１】
本発明の別の態様では、ｐおよびｑが共に０である化合物または薬学的に許容されるその塩が提供される。
【００７２】
本発明のさらなる一態様では、
【００７３】
【表９】
0006534389.tif 000027
から選択される化合物または薬学的に許容されるその塩が提供される。
【００７４】
薬理および有用性
Ｓｒｃ相同性−２ホスファターゼ（ＳＨＰ２）は、増殖、分化、細胞周期維持および遊走を含む複数の細胞機能に寄与するＰＴＰＮ１１遺伝子によってコードされたタンパク質チロシンホスファターゼである。ＳＨＰ２は、Ｒａｓ−マイトジェン活性化タンパク質キナーゼ、ＪＡＫ−ＳＴＡＴまたはホスホイノシトール３−キナーゼ−ＡＫＴ経路を介するシグナル伝達に関与する。ＳＨＰ２は、受容体チロシンキナーゼ、例えばＥｒｂＢ１、ＥｒｂＢ２およびｃ−Ｍｅｔによって、Ｅｒｋ１およびＥｒｋ２（Ｅｒｋ１／２、Ｅｒｋ）ＭＡＰキナーゼの活性化を媒介する。
【００７５】
ＳＨＰ２は、２つのＮ−末端Ｓｒｃ相同性の２つのドメイン（Ｎ−ＳＨ２およびＣ−ＳＨ２）、触媒ドメイン（ＰＴＰ）、およびＣ−末端尾部を有する。２つのＳＨ２ドメインは、ＳＨＰ２の細胞内局在および機能的制御を調節する。その分子は、Ｎ−ＳＨ２ドメインとＰＴＰドメインの両方に由来する残基を含む結合網によってそれ自体の活性を阻害する、不活性な立体構造で存在する。成長因子刺激への応答において、ＳＨＰ２は、ドッキングタンパク質、例えばＧａｂ１およびＧａｂ２上の特定のチロシン−リン酸化部位に、そのＳＨ２ドメインを介して結合する。これによって立体構造変化が誘発され、それによりＳＨＰ２が活性化される。
【００７６】
ＰＴＰＮ１１の突然変異は、ヒトのいくつかの疾患、例えばヌーナン症候群、レオパード症候群、若年性骨髄単球性白血病、神経芽細胞腫、黒色腫、急性骨髄性白血病、ならびに乳房、肺および結腸のがんにおいて同定されている。ＳＨＰ２は、血小板由来成長因子の受容体（ＰＤＧＦ−Ｒ）、線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ−Ｒ）および上皮成長因子（ＥＧＦ−Ｒ）を含む様々な受容体チロシンキナーゼにとって重要な下流シグナル伝達分子である。またＳＨＰ２は、がん発生の必須条件である細胞形質転換をもたらすおそれがある、マイトジェン活性化タンパク質（ＭＡＰ）キナーゼ経路を活性化するために重要な下流シグナル伝達分子である。ＳＨＰ２のノックダウンは、ＳＨＰ２突然変異またはＥＭＬ４／ＡＬＫ転位を有する肺がん細胞株の細胞成長、ならびにＥＧＦＲ増幅した乳がんおよび食道がんを著しく阻害した。またＳＨＰ２は、胃癌、未分化大細胞リンパ腫および膠芽腫の癌遺伝子の下流で活性化される。
【００７７】
ヌーナン症候群（ＮＳ）およびレオパード症候群（ＬＳ）−ＰＴＰＮ１１突然変異は、ＬＳ（複数の黒子）、心伝導異常、両眼隔離症、肺動脈弁狭窄症、生殖器異常、成長遅滞、感音難聴）およびＮＳ（心臓欠陥、頭蓋顔面奇形および低身長を含む先天性異常）を引き起こす。両方の障害は、正常な細胞の成長および分化に必要な、ＲＡＳ／ＲＡＦ／ＭＥＫ／ＥＲＫマイトジェン活性化タンパク質キナーゼ経路の構成成分の生殖系列突然変異によって引き起こされる常染色体優性症候群ファミリーの一部である。この経路の異常な制御は、特に心臓の発達に対して深刻な作用をもたらして、弁膜中隔（valvuloseptal）の欠損および／または肥大型心筋症（ＨＣＭ）を含む様々な異常をもたらす。ＭＡＰＫシグナル伝達経路の撹乱は、これらの障害の中心となるものとして確立されており、ＫＲＡＳ、ＮＲＡＳ、ＳＯＳ１、ＲＡＦ１、ＢＲＡＦ、ＭＥＫ１、ＭＥＫ２、ＳＨＯＣ２およびＣＢＬの突然変異を含む、この経路に沿ったいくつかの候補遺伝子が、ヒトにおいて同定されてきた。ＮＳおよびＬＳにおいて最も一般的に変異した遺伝子は、ＰＴＰＮ１１である。ＰＴＰＮ１１の生殖系列突然変異（ＳＨＰ２）は、ＮＳの症例、およびある特定の特色をＮＳと共有しているＬＳを有するほとんどすべての患者の症例の約５０％において見出されている。ＮＳについて、タンパク質におけるＹ６２ＤおよびＹ６３Ｃ置換は、ほとんどインバリアントであり、最も一般的な突然変異の１つである。これらの両方の突然変異は、ホスファターゼとそのリン酸化シグナル伝達パートナーとの結合を撹乱することなく、ＳＨＰ２の触媒作用的に不活性な立体構造に影響を及ぼす。
【００７８】
若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）−ＰＴＰＮ１１の体細胞の突然変異（ＳＨＰ２）は、ＪＭＭＬ、小児期骨髄増殖性障害（ＭＰＤ）を有する患者の約３５％において生じる。これらの機能獲得型の突然変異は、典型的に、Ｎ−ＳＨ２ドメインまたはホスファターゼドメインにおける点突然変異であり、それによって触媒ドメインとＮ−ＳＨ２ドメインの間の自己阻害を防止して、ＳＨＰ２活性をもたらす。
【００７９】
急性骨髄性白血病−ＰＴＰＮ１１突然変異は、小児急性白血病、例えば骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）の約１０％、Ｂ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）の約７％、および急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）の約４％において同定されている。
【００８０】
ＮＳおよび白血病突然変異は、自己阻害型ＳＨＰ２立体構造のＮ−ＳＨ２およびＰＴＰドメインによって形成された界面に位置するアミノ酸の変化を引き起こし、分子内の阻害性相互作用を撹乱して、触媒ドメインの活動亢進をもたらす。
【００８１】
ＳＨＰ２は、受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）シグナル伝達における正の制御因子として作用する。ＲＴＫ変化（ＥＧＦＲａｍｐ、Ｈｅｒ２ａｍｐ、ＦＧＦＲａｍｐ、Ｍｅｔａｍｐ、転位／活性化ＲＴＫ、すなわちＡＬＫ、ＢＣＲ／ＡＢＬ）を含有するがんには、食道、乳房、肺、結腸、胃、神経膠腫、頭部および頸部のがんが含まれる。
【００８２】
食道（esophageal）がん（または食道（oesophageal）がん）は、食道の悪性腫瘍である。様々なサブタイプ、主に扁平上皮がん（＜５０％）および腺癌が存在する。食道腺癌および扁平上皮がんでは、ＲＴＫの発現率が高い。したがって、本発明のＳＨＰ２阻害剤は、革新的な処置戦略のために用いることができる。
【００８３】
乳がんは、女性の主要なタイプのがんであり、主な死亡原因であり、患者は、現在の薬物に対して耐性を生じる。管腔Ａ、管腔Ｂ、Ｈｅｒ２様、およびトリプルネガティブ／基底様を含む４つの主なサブタイプの乳がんがある。トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）は、特定の標的治療が存在しない侵襲性の乳がんである。上皮成長因子受容体Ｉ（ＥＧＦＲ）は、ＴＮＢＣにおける有望な標的として出現してきた。ＳＨＰ２を介するＨｅｒ２ならびにＥＧＦＲの阻害は、乳がんにおいて有望な治療となり得る。
【００８４】
肺がん−ＮＳＣＬＣは、現在、がんに関係する死亡の主な原因となっており、肺がん（主に腺癌および扁平上皮癌）の約８５％を占める。細胞傷害性の化学療法は、まだ処置の重要な一部ではあるが、腫瘍におけるＥＧＦＲおよびＡＬＫなどの遺伝的変化に基付く標的治療は、標的治療から利益を得られる可能性がより高い。
【００８５】
結腸がん−結腸直腸腫瘍のおよそ３０％〜５０％は、変異型（異常な）ＫＲＡＳを有することが知られており、ＢＲＡＦ突然変異は、結腸直腸がんの１０〜１５％において生じる。結腸直腸腫瘍が、ＥＧＦＲを過剰発現することが実証されている患者のサブセットについて、これらの患者は、抗ＥＧＦＲ治療に対して、好ましい臨床応答を呈する。
【００８６】
胃がんは、最も蔓延しているがんタイプの１つである。胃がん細胞において異常なチロシンリン酸化によって反映されるチロシンキナーゼの異常発現は、当技術分野で知られている。ｃ−ｍｅｔ（ＨＧＦ受容体）、ＦＧＦ受容体２、およびｅｒｂＢ２／ｎｅｕの３つの受容体−チロシンキナーゼは、しばしば胃癌において増幅される。したがって、異なるシグナル経路の破壊は、異なるタイプの胃がんの進行に寄与し得る。
【００８７】
神経芽細胞腫は、小児期がんの約８％を占める、発達中の交感神経系の小児腫瘍である。未分化リンパ腫キナーゼ（ＡＬＫ）遺伝子のゲノム変化は、神経芽細胞腫の病変形成に寄与すると想定されている。
【００８８】
頭部および頸部の扁平上皮癌（ＳＣＣＨＮ）。高レベルのＥＧＦＲ発現は、様々ながん、主に頭部および頸部の扁平上皮癌（ＳＣＣＨＮ）における予後不良および放射線治療に対する耐性と相関性がある。ＥＧＦＲシグナル伝達の妨害は、受容体刺激、細胞増殖を阻害し、侵襲性および転移を低減する。したがって、ＥＧＦＲは、ＳＣＣＨＮにおける新しい抗がん治療の主要標的である。
【００８９】
本発明は、ＳＨＰ２の活性を阻害することができる化合物に関する。本発明はさらに、本発明の化合物およびこのような化合物を含む医薬調製物を調製する方法を提供する。本発明の別の態様は、治療有効量の本発明の概要に定義されている式Ｉの化合物を、それを必要としている患者に投与するステップを含む、ＳＨＰ２媒介性障害を処置する方法に関する。
【００９０】
ある特定の実施形態では、本発明は、前記ＳＨＰ２媒介性障害が、それに限定されるものではないが、ＪＭＭＬ、ＡＭＬ、ＭＤＳ、Ｂ−ＡＬＬ、神経芽細胞腫、食道がん、乳がん、肺がん、結腸がん、胃がん、頭部および頸部がんから選択されるがんである、前述の方法に関する。
【００９１】
本発明の化合物はまた、ＳＨＰ２の異常な活性に関する他の疾患または状態の処置に有用となり得る。したがってさらなる一態様として、本発明は、ＮＳ、ＬＳ、ＪＭＭＬ、ＡＭＬ、ＭＤＳ、Ｂ−ＡＬＬ、神経芽細胞腫、食道がん、乳がん、肺がん、結腸がん、胃がん、頭部および頸部がんから選択される障害を処置する方法に関する。
【００９２】
本発明のＳＨＰ２阻害剤は、特にがんの処置において、もう１つの薬理学的に活性な化合物または２つもしくはそれを超える他の薬理学的に活性な化合物と、有用に組み合わせることができる。例えば、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩は、先に定義した通り、化学療法剤、例えば有糸分裂阻害剤、例えばタキサン、ビンカアルカロイド、パクリタキセル、ドセタキセル、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビンまたはビンフルニン、および他の抗がん剤、例えばシスプラチン、５−フルオロウラシルまたは５−フルオロ−２−４（１Ｈ，３Ｈ）−ピリミジンジオン（５ＦＵ）、フルタミドまたはゲムシタビンから選択される１つ以上の薬剤と組み合わせて、同時、逐次または別個に投与することができる。
【００９３】
このような組合せは、治療において、相乗効果のある活性を含む重要な利点を付与することができる。
【００９４】
ある特定の実施形態では、本発明は、前記化合物が非経口投与される前述の方法に関する。
【００９５】
ある特定の実施形態では、本発明は、前記化合物が筋肉内、静脈内、皮下、経口、肺、髄腔内、局所または鼻腔内投与される前述の方法に関する。
【００９６】
ある特定の実施形態では、本発明は、前記化合物が全身投与される前述の方法に関する。
【００９７】
ある特定の実施形態では、本発明は、前記患者が哺乳動物である前述の方法に関する。
【００９８】
ある特定の実施形態では、本発明は、前記患者が霊長類である前述の方法に関する。
【００９９】
ある特定の実施形態では、本発明は、前記患者がヒトである前述の方法に関する。
【０１００】
別の態様では、本発明は、治療有効量の化学療法剤を、治療有効量の本発明の概要に定義されている式Ｉの化合物と組み合わせて、それを必要としている患者に投与するステップを含む、ＳＨＰ２媒介性障害を処置する方法に関する。
【０１０１】
医薬組成物
別の態様では、本発明は、１つ以上の薬学的に許容される担体（添加物）および／または賦形剤と一緒に製剤化された、治療有効量の前述の化合物の１つ以上を含む薬学的に許容される組成物を提供する。以下に詳説する通り、本発明の医薬組成物は、（１）経口投与、例えば水薬（水性または非水性溶液剤または懸濁液剤）、錠剤、例えば頬側、舌下および全身吸収を標的にしたもの、ボーラス剤、散剤、顆粒剤、舌に適用するためのペースト剤、（２）非経口投与、例えば皮下、筋肉内、静脈内もしくは硬膜外注射によるもの、例えば滅菌溶液剤もしくは懸濁液剤、または持続放出製剤として、（３）局所適用、例えば皮膚に適用されるクリーム剤、軟膏剤、または徐放パッチ剤もしくはスプレー剤、（４）腟内もしくは直腸内、例えばペッサリー剤、クリーム剤もしくは発泡剤として、（５）舌下、（６）眼、（７）経皮、（８）経鼻、（９）肺、あるいは（１０）髄腔内に合わせて適合させたものを含む固体または液体形態で投与するために、特別に製剤化され得る。
【０１０２】
「治療有効量」という句は、本明細書で使用される場合、少なくとも動物細胞の亜集団において、任意の医学的処置に適用できる妥当な損益比でいくつかの所望の治療効果をもたらすのに有効な、本発明の化合物、材料または化合物を含む組成物の量を意味する。
【０１０３】
「薬学的に許容される」という句は、本明細書では、良好な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー応答、または他の問題もしくは合併症なしに、ヒトおよび動物の組織と接触させて使用するのに適しており、妥当な損益比に見合う化合物、材料、組成物および／または剤形を指すために用いられる。
【０１０４】
「薬学的に許容される担体」という句は、本明細書で使用される場合、薬学的に許容される材料、組成物またはビヒクル、例えば液体または固体充填剤、賦形剤、添加剤、製造助剤（例えば、滑沢剤、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムもしくはステアリン酸亜鉛、またはステアリン酸）、または身体のある臓器もしくは一部から身体の別の臓器もしくは一部に対象化合物を運搬または輸送する被包性溶媒材料を意味する。各担体は、製剤の他の成分と適合性があり、患者にとって有害でないという意味で「許容され」なければならない。薬学的に許容される担体として働くことができる材料のいくつかの例として、（１）糖、例えばラクトース、グルコースおよびスクロース、（２）デンプン、例えばトウモロコシデンプンおよびバレイショデンプン、（３）セルロースおよびその誘導体、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロース、（４）粉末化トラガント、（５）麦芽、（６）ゼラチン、（７）タルク、（８）添加剤、例えばカカオバターおよび坐剤ワックス、（９）油、例えばピーナッツ油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油および大豆油、（１０）グリコール、例えばプロピレングリコール、（１１）ポリオール、例えばグリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコール、（１２）エステル、例えばオレイン酸エチルおよびラウリン酸エチル、（１３）寒天、（１４）緩衝剤、例えば水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウム、（１５）アルギン酸、（１６）発熱物質を含まない水、（１７）等張食塩水、（１８）リンガー溶液、（１９）エチルアルコール、（２０）ｐＨ緩衝液、（２１）ポリエステル、ポリカーボネートおよび／またはポリ酸無水物、ならびに（２２）医薬製剤に用いられる他の非毒性の適合性のある物質が挙げられる。
【０１０５】
前述の通り、本化合物のある特定の実施形態は、塩基性官能基、例えばアミノまたはアルキルアミノを含有していてもよく、したがって、薬学的に許容される酸と共に薬学的に許容される塩を形成していてもよい。これに関して、用語「薬学的に許容される塩」は、本発明の化合物の相対的に非毒性の、無機および有機酸付加塩を指す。これらの塩は、投与ビヒクルもしくは剤形の製造方法において現場で調製することができ、またはその遊離塩基形態の本発明の精製化合物を、適切な有機または無機酸と別個に反応させ、こうして形成された塩を、その後の精製中に単離することによって調製することができる。代表的な塩には、臭化水素酸塩、塩酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、酢酸塩、吉草酸塩、オレイン酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、ラウリン酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、リン酸塩、トシル酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ナプシル酸塩、メシル酸塩、グルコヘプトン酸塩、ラクトビオン酸塩、およびラウリルスルホン酸塩等が含まれる。（例えば、Berge et al. (1977) “Pharmaceutical Salts” J. Pharm. Sci. 66:1-19参照）。
【０１０６】
対象化合物の薬学的に許容される塩には、例えば非毒性の有機または無機酸由来の化合物の従来の非毒性の塩または第四級アンモニウム塩が含まれる。例えば、このような従来の非毒性の塩には、無機酸、例えば塩酸塩、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸等に由来する塩、および有機酸、例えば酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パルミチン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２−アセトキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イセチオン酸等から調製された塩が含まれる。
【０１０７】
他の場合には、本発明の化合物は、１つ以上の酸性官能基を含有していてもよく、したがって、薬学的に許容される塩基と共に薬学的に許容される塩を形成していてもよい。このような場合、用語「薬学的に許容される塩」は、本発明の化合物の相対的に非毒性の、無機および有機塩基付加塩を指す。これらの塩は、投与ビヒクルもしくは剤形の製造方法において現場で同様に調製することができ、あるいはその遊離酸形態の精製化合物を、適切な塩基、例えば薬学的に許容される金属カチオンの水酸化物、炭酸塩もしくは重炭酸塩、アンモニア、または薬学的に許容される第一級、第二級もしくは第三級有機アミンと別個に反応させることによって調製することができる。代表的なアルカリまたはアルカリ土類塩には、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、およびアルミニウム塩等が含まれる。塩基付加塩を形成するのに有用な代表的な有機アミンには、エチルアミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン等が含まれる。（例えば、上記Berge et al.を参照されたい）。
【０１０８】
湿潤剤、乳化剤および滑沢剤、例えばラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウム、ならびに着色剤、放出剤、コーティング剤、甘味剤、香味剤および賦香剤、保存剤、ならびに抗酸化剤が、組成物中に存在することもできる。
【０１０９】
薬学的に許容される抗酸化剤の例として、（１）水溶性抗酸化剤、例えばアスコルビン酸、システイン塩酸塩、硫酸水素ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム等、（２）油溶性抗酸化剤、例えばパルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、アルファ−トコフェロール等、および（３）金属キレート剤、例えばクエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸等が挙げられる。
【０１１０】
本発明の製剤には、経口、経鼻、局所（頬側および舌下を含む）、直腸、膣内および／または非経口投与に適した製剤が含まれる。製剤は、好都合には単位剤形で提示することができ、調剤分野で周知の任意の方法によって調製することができる。単一の剤形を生成するために担体材料と組み合わせることができる活性成分の量は、処置を受ける宿主、特定の投与方法に応じて変わる。単一の剤形を生成するために担体材料と組み合わせることができる活性成分の量は、一般に、治療効果をもたらす化合物の量である。一般にこの量は、１００パーセントのうち、活性成分が約０．１パーセント〜約９９パーセント、好ましくは約５パーセント〜約７０パーセント、最も好ましくは約１０パーセント〜約３０パーセントの範囲である。
【０１１１】
ある特定の実施形態では、本発明の製剤は、シクロデキストリン、セルロース、リポソーム、ミセル形成剤、例えば胆汁酸およびポリマー性担体、例えばポリエステルおよびポリ酸無水物からなる群から選択される添加剤、ならびに本発明の化合物を含む。ある特定の実施形態では、前述の製剤は、本発明の化合物を経口で生体利用可能にする。
【０１１２】
これらの製剤または組成物を調製する方法は、本発明の化合物を、担体、および任意に１つ以上の補助成分と会合させるステップを含む。一般に、製剤は、本発明の化合物を液体担体、または微粉砕した固体担体、またはその両方と、均一かつ十分に会合させ、次に必要に応じて生成物を成形することによって調製される。
【０１１３】
経口投与に適した本発明の製剤は、それぞれ活性成分として所定量の本発明の化合物を含有する、カプセル剤、カシェ剤、丸剤、錠剤、ロゼンジ剤（フレーバーベース、通常スクロースおよびアカシアまたはトラガントを使用する）、散剤、顆粒剤、または水性もしくは非水性液体中の溶液剤もしくは懸濁液剤として、または水中油もしくは油中水液体エマルジョンとして、またはエリキシル剤もしくはシロップ剤として、またはトローチ剤（不活性なベース、例えばゼラチンおよびグリセリン、またはスクロースおよびアカシアを使用する）として、および／または洗口剤等の形態であってもよい。また本発明の化合物は、ボーラス剤、舐剤またはペースト剤として投与することができる。
【０１１４】
経口投与のための本発明の固体剤形（カプセル剤、錠剤、丸剤、糖衣錠、散剤、顆粒剤、トローチ剤等）では、活性成分は、１つ以上の薬学的に許容される担体、例えばクエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウム、ならびに／または（１）充填剤もしくは増量剤、例えばデンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、および／もしくはケイ酸、（２）結合剤、例えばカルボキシメチルセルロース、アルギネート、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロースおよび／もしくはアカシアなど、（３）保湿剤、例えばグリセロール、（４）崩壊剤、例えば寒天、炭酸カルシウム、バレイショもしくはタピオカデンプン、アルギン酸、ある特定のシリケート、および炭酸ナトリウム、（５）溶解遅延剤、例えばパラフィン、（６）吸収促進物質、例えば第四級アンモニウム化合物および界面活性剤、例えばポロキサマーおよびラウリル硫酸ナトリウム、（７）湿潤剤、例えばセチルアルコール、グリセロールモノステアレート、および非イオン性界面活性剤など、（８）吸収剤、例えばカオリンおよびベントナイト粘土、（９）滑沢剤、例えばタルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸、およびこれらの混合物、（１０）着色剤、ならびに（１１）徐放剤、例えばクロスポビドンもしくはエチルセルロースのいずれかと混合される。カプセル剤、錠剤および丸剤の場合、医薬組成物は、緩衝剤を含むこともできる。類似のタイプの固体組成物も、ラクトースまたは乳糖、ならびに高分子量ポリエチレングリコールなどの添加剤を使用する軟質および硬質シェル型ゼラチンカプセル中の充填剤として用いることができる。
【０１１５】
錠剤は、任意に１つ以上の補助成分と共に圧縮または成型することによって作成され得る。圧縮錠剤は、結合剤（例えば、ゼラチンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース）、滑沢剤、不活性賦形剤、保存剤、崩壊剤（例えば、デンプングリコール酸ナトリウムまたは架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム）、表面活性剤または分散化剤を使用して調製することができる。成型錠剤は、不活性な液体賦形剤で水分を与えた粉末化化合物の混合物を、適切な機械で成型することによって作成することができる。
【０１１６】
本発明の医薬組成物の錠剤および他の固体剤形、例えば糖衣錠、カプセル剤、丸剤および顆粒剤は、任意に刻み目をつけることができ、またはコーティングおよびシェル、例えば腸溶コーティングおよび医薬製剤分野で周知の他のコーティングを用いて調製することができる。またこれらの製剤は、それに含まれる活性成分を、例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース、他のポリマーマトリックス、リポソームおよび／またはミクロスフェアを、所望の放出プロファイルをもたらす異なる割合で使用して、緩徐放出または徐放するために製剤化することができる。これらの製剤は、急速放出に合わせて製剤化することができ、例えば凍結乾燥させることができる。これらの製剤は、例えば細菌保持フィルタを介して濾過することによって、または滅菌水もしくはいくつかの他の注入可能な滅菌媒体に、使用直前に溶解させることができる滅菌固体組成物の形態に滅菌剤を取り込むことによって、滅菌することができる。これらの組成物は、任意に乳白剤を含有することもでき、活性成分（複数可）だけを、または活性成分（複数可）を優先的に、胃腸管のある特定の部分に任意に遅延方式により放出させる組成物であり得る。使用できる包埋組成物の例として、ポリマー物質およびワックスが挙げられる。また活性成分は、適切な場合、前述の添加剤の１つ以上を伴うマイクロ被包形態であってもよい。
【０１１７】
本発明の化合物の経口投与のための液体剤形には、薬学的に許容されるエマルジョン剤、マイクロエマルジョン剤、溶液剤、懸濁液剤、シロップ剤およびエリキシル剤が含まれる。液体剤形は、活性成分に加えて、当技術分野で一般に使用される不活性賦形剤、例えば水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例えばエチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、油（特に、綿実、落花生、トウモロコシ、胚芽、オリーブ、ヒマシおよびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにこれらの混合物などを含有することができる。
【０１１８】
経口組成物は、不活性賦形剤に加えて、アジュバント、例えば湿潤剤、乳化剤および懸濁化剤、甘味剤、香味剤、着色剤、賦香剤、ならびに保存剤を含むこともできる。
【０１１９】
懸濁液剤は、活性化合物に加えて、懸濁化剤を、例えばエトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微結晶性セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、寒天およびトラガント、ならびにこれらの混合物として含有することができる。
【０１２０】
直腸または膣内投与のための本発明の医薬組成物の製剤は、坐剤として提示することができ、この坐剤は、本発明の１つ以上の化合物を、例えばカカオバター、ポリエチレングリコール、坐剤ワックスまたはサリチレートを含み、室温で固体であるが体温で液体になり、したがって直腸または膣腔内で溶融し、活性化合物を放出させる、１つ以上の適切な非刺激性の添加剤または担体と混合することによって調製することができる。
【０１２１】
また、膣内投与に適した本発明の製剤には、当技術分野で適していることが知られているような担体を含有する、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、発泡剤またはスプレーの製剤が含まれる。
【０１２２】
本発明の化合物の局所または経皮投与のための剤形には、散剤、スプレー剤、軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤、ローション剤、ゲル剤、溶液剤、パッチ剤および吸入剤が含まれる。活性化合物は、滅菌条件下で、薬学的に許容される担体、および必要とされ得る任意の保存剤、緩衝液または噴霧剤と混合することができる。
【０１２３】
軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤およびゲル剤は、本発明の活性化合物に加えて、添加剤、例えば動物性および植物性脂肪、油、ワックス、パラフィン、デンプン、トラガント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルクならびに酸化亜鉛、またはこれらの混合物を含有することができる。
【０１２４】
散剤およびスプレー剤は、本発明の化合物に加えて、添加剤、例えばラクトース、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウムおよびポリアミド粉末、またはこれらの物質の混合物を含有することができる。スプレー剤は、さらに通例の噴霧剤、例えばクロロフルオロ炭化水素および揮発性の非置換炭化水素、例えばブタンおよびプロパンを含有することができる。
【０１２５】
経皮パッチ剤は、本発明の化合物の身体への送達を調節できるという追加の利点を有する。このような剤形は、化合物を適切な媒体に溶解または分散させることによって作成することができる。また、皮膚を介する化合物の流動を増大するために、吸収促進剤を使用することができる。このような流動の速度は、律速膜を提供するか、または化合物をポリマーマトリックスもしくはゲルに分散させることによって調節することができる。
【０１２６】
眼科用製剤、目の軟膏剤、散剤、溶液剤等も、本発明の範囲に含まれることが意図される。
【０１２７】
非経口投与に適した本発明の医薬組成物は、本発明の１つ以上の化合物を、１つ以上の薬学的に許容される滅菌の等張水性もしくは非水性溶液剤、分散剤、懸濁液剤もしくはエマルジョン剤、または使用直前に注入可能な滅菌溶液剤もしくは分散剤に再構成することができる滅菌散剤と組み合わせて含み、これらは、糖、アルコール、抗酸化剤、緩衝液、静菌剤、製剤を所期のレシピエントの血液と等張にする溶質、または懸濁化剤もしくは増粘剤を含有することができる。
【０１２８】
本発明の医薬組成物において用いることができる、適切な水性および非水性の担体の例として、水、エタノール、ポリオール（例えばグリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等）、ならびに適切なこれらの混合物、植物油、例えばオリーブ油、ならびに注射可能な有機エステル、例えばオレイン酸エチルが挙げられる。適切な流動性は、例えばコーティング材料、例えばレシチンを使用することによって、分散剤の場合には必要な粒径を維持することによって、および界面活性剤を使用することによって維持することができる。
【０１２９】
これらの組成物は、アジュバント、例えば保存剤、湿潤剤、乳化剤および分散化剤を含有することもできる。対象化合物に対する微生物作用の防止は、様々な抗菌剤および抗真菌剤、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸等を含有させることによって確保することができる。等張剤、例えば糖、塩化ナトリウム等を、組成物に含有させることが望ましい場合もある。さらに、注射可能な医薬形態の延長吸収は、遅延吸収させる薬剤、例えばモノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンを含有させることによってもたらすことができる。
【０１３０】
ある場合には、薬物の効果を延長するために、皮下または筋肉内注射によって薬物の吸収を緩徐させることが望ましい。これは、水溶性が低い結晶性または非晶質性材料の懸濁液を使用することによって達成することができる。次に、薬物の吸収速度は、その溶解速度に応じて決まり、溶解速度は、結晶の大きさおよび結晶形に応じて決まり得る。あるいは、非経口投与される薬物形態の遅延吸収は、油ビヒクルに薬物を溶解または懸濁させることによって達成される。
【０１３１】
注射可能なデポー形態は、生分解性ポリマー、例えばポリラクチド−ポリグリコリド中の対象化合物のマイクロ被包マトリックスを形成することによって作成される。薬物とポリマーの比、および用いられる特定のポリマーの性質に応じて、薬物放出速度を調節することができる。他の生分解性ポリマーの例として、ポリ（オルトエステル）およびポリ（無水物）が含まれる。また、注射可能なデポー製剤は、身体組織と適合性があるリポソームまたはマイクロエマルジョンに薬物を捕捉することによって調製される。
【０１３２】
本発明の化合物は、ヒトおよび動物に治療薬として投与される場合、それ自体で、または例えば０．１〜９９％（より好ましくは１０〜３０％）の活性成分を薬学的に許容される担体と組み合わせて含有する医薬組成物として与えることができる。
【０１３３】
本発明の調製物は、経口、非経口、局所または直腸内で投与することができる。調製物は、当然のことながら、各投与経路に適した形態で与えられる。例えば、錠剤またはカプセル剤の形態で、注射剤、吸入剤、目のローション剤、軟膏剤、坐剤等、注射、注入または吸入による投与により、局所にはローションまたは軟膏によって、および直腸には坐剤によって投与される。経口投与が好ましい。
【０１３４】
「非経口投与」および「非経口で投与される」という句は、本明細書で使用される場合、経腸および局所投与以外の、通常は注射による投与方法を意味し、それには、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、嚢下、くも膜下、脊髄内および胸骨内の注射および注入が含まれるが、それらに限定されない。
【０１３５】
「全身投与」、「全身的に投与される」、「末梢投与」および「末梢に投与される」という句は、本明細書で使用される場合、患者の系に入り、したがって代謝および他の類似のプロセスを受けるように、中枢神経系に直接的に投与する以外の、化合物、薬物または他の材料の投与、例えば皮下投与を意味する。
【０１３６】
これらの化合物は、経口、経鼻、例えばスプレーによって、直腸内、腟内、非経口、嚢内および局所として、散剤、軟膏剤または液滴剤によって、頬側および舌下を含む、任意の適切な投与経路によって、治療のためにヒトおよび他の動物に投与することができる。
【０１３７】
選択された投与経路に関わらず、適切な水和形態で使用され得る本発明の化合物および／または本発明の医薬組成物は、当業者に公知の従来の方法によって、薬学的に許容される剤形に製剤化される。
【０１３８】
本発明の医薬組成物における活性成分の実際の投与量レベルは、特定の患者、組成物および投与方法に合った望ましい治療応答を、患者への毒性なしに達成するのに有効な活性成分の量を得るために、変わり得る。
【０１３９】
選択された投与量レベルは、用いられる本発明の特定の化合物またはそのエステル、塩もしくはアミドの活性、投与経路、投与時間、用いられる特定の化合物の排出速度または代謝、吸収の速度および程度、処置期間、用いられる特定の化合物と組み合わせて使用される他の薬物、化合物および／または材料、処置を受ける患者の年齢、性別、体重、状態、全体的な健康状態および過去の既往歴、ならびに医術で周知の同様の因子を含む様々な因子に応じて決まる。
【０１４０】
医師または獣医は、必要な医薬組成物の有効量を容易に決定し、処方することができる。例えば医師または獣医は、医薬組成物において用いられる本発明の化合物の用量を、所望の治療効果を達成するために必要なレベルよりも低いレベルで開始し、所望の効果が達成されるまで投与量を徐々に増大することができる。
【０１４１】
一般に、本発明の化合物の適切な１日用量は、治療効果をもたらすのに有効な最低用量である化合物の量となる。このような有効用量は、一般に、前述の因子に応じて変わることになる。一般に、患者のための本発明の化合物の経口、静脈内、脳室内および皮下用量は、示された鎮痛効果のために使用される場合、１日に体重１キログラム当たり約０．０００１〜約１００ｍｇの範囲である。
【０１４２】
所望に応じて、活性化合物の有効な１日用量は、１日を通して適切な間隔で別個に投与される２つ、３つ、４つ、５つ、６つまたはそれを超える下位用量として、任意に単位剤形により投与することができる。好ましい投与は、１日１回の投与である。
【０１４３】
本発明の化合物は、単独で投与することが可能であるが、化合物を医薬製剤（組成物）として投与することが好ましい。
【０１４４】
本発明による化合物は、他の治療薬と同様に、ヒトまたは動物用医薬において使用するのに好都合な任意の方法で投与するために製剤化することができる。
【０１４５】
別の態様では、本発明は、１つ以上の薬学的に許容される担体（添加剤）および／または賦形剤と一緒に製剤化された、治療有効量の前述の対象化合物の１つ以上を含む薬学的に許容される組成物を提供する。以下に詳説する通り、本発明の医薬組成物は、（１）経口投与、例えば水薬（水性または非水性溶液剤または懸濁液剤）、錠剤、ボーラス剤、散剤、顆粒剤、舌に適用するためのペースト剤、（２）非経口投与、例えば皮下、筋肉内もしくは静脈内注射によるもの、例えば滅菌溶液剤もしくは懸濁液剤として、（３）局所適用、例えば皮膚、肺もしくは粘膜に適用されるクリーム剤、軟膏剤もしくはスプレー剤として、または（４）腟内もしくは直腸内、例えばペッサリー剤、クリーム剤もしくは発泡剤として、（５）舌下もしくは頬側、（６）眼、（７）経皮、あるいは（８）経鼻に合わせて適合させたものを含む固体または液体形態で投与するために、特別に製剤化され得る。
【０１４６】
用語「処置」は、予防、治療および治癒を包含することも意図する。
【０１４７】
この処置を受ける患者は、霊長類、特にヒト、および他の哺乳動物、例えばウマ、ウシ、ブタおよびヒツジ、ならびに一般に家禽およびペットを含む、処置を必要としている任意の動物である。
【０１４８】
本発明の化合物は、そのままで、または薬学的に許容される担体との混合物で投与することができ、抗菌剤、例えばペニシリン、セファロスポリン、アミノグリコシドおよびグリコペプチドと併用して投与することもできる。したがって、併用治療は、最初に投与された治療剤の治療効果が、その後の治療剤が投与されるまでに完全に消失してしまわないように、活性化合物を逐次的、同時および別個に投与することを含む。
【０１４９】
マイクロ乳化技術は、親油性（水不溶性）のいくつかの医薬品のバイオアベイラビリティを改善することができる。その例として、トリメトリン（Trimetrine）（Dordunoo, S. K., et al., Drug Development and Industrial Pharmacy, 17（12）, 1685-1713, 1991およびＲＥＶ５９０１（Sheen, P. C., et al., J Pharm Sci 80（7）, 712-714, 1991）が挙げられる。数ある中でも、マイクロ乳化は、吸収を循環系の代わりにリンパ系に優先的に直接方向付けることによって肝臓を迂回し、肝胆道循環における化合物の破壊を防止することによって、バイオアベイラビリティを促進する。
【０１５０】
すべての適切な両親媒性担体が意図されるが、現在好ましいとされる担体は、一般に、一般に安全と認められる（ＧＲＡＳ）状態のものであり、本発明の化合物を可溶化することができ、溶液が複合水相（ヒトの胃腸管において見出されるものなど）と接触する後の段階において、本発明の化合物をマイクロ乳化することができるものである。通常、これらの要件を満たす両親媒性成分は、ＨＬＢ（親水性と親油性のバランス）値が２〜２０であり、それらの構造は、Ｃ−６〜Ｃ−２０の範囲の直鎖脂肪族基を含有している。それらの例は、ポリエチレン−グリコール化脂肪グリセリドおよびポリエチレングリコールである。
【０１５１】
Ｇｅｌｕｃｉｒｅシリーズ、Ｌａｂｒａｆｉｌ、Ｌａｂｒａｓｏｌ、またはＬａｕｒｏｇｌｙｃｏｌ（すべて、Ｇａｔｔｅｆｏｓｓｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｓａｉｎｔ  Ｐｒｉｅｓｔ、フランスによって製造され、流通されている）、ＰＥＧ−モノオレエート、ＰＥＧ−ジオレエート、ＰＥＧ−モノラウレートおよびジラウレート、レシチン、ポリソルベート８０等（米国および世界中のいくつかの企業によって生成され、流通されている）を含む、市販の両親媒性担体が、特に意図される。
【０１５２】
本発明において使用するのに適した親水性ポリマーは、容易に水に可溶化し、小胞形成脂質に共有結合により結合することができ、毒性作用をもたらさずにインビボで耐容性を示す（すなわち生体適合性がある）ものである。適切なポリマーには、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリ乳酸（ポリラクチドとも呼ばれる）、ポリグリコール酸（ポリグリコリドとも呼ばれる）、ポリ乳酸−ポリグリコール酸コポリマー、およびポリビニルアルコールが含まれる。好ましいポリマーは、分子量が約１００または１２０ダルトンから約５，０００または１０，０００ダルトンまで、より好ましくは約３００ダルトン〜約５，０００ダルトンのものである。特に好ましい一実施形態では、ポリマーは、分子量が約１００〜約５，０００ダルトン、より好ましくは分子量が約３００〜約５，０００ダルトンのポリエチレングリコールである。特に好ましい一実施形態では、ポリマーは、７５０ダルトンのポリエチレングリコール（ＰＥＧ（７５０））である。またポリマーは、それに含まれるモノマーの数によって定義することができる。本発明の好ましい一実施形態は、少なくとも約３つのモノマーからなるポリマー、例えば３つのモノマーからなるＰＥＧポリマー（およそ１５０ダルトン）を利用する。
【０１５３】
本発明で使用するのに適し得る他の親水性ポリマーには、ポリビニルピロリドン、ポリメトキサゾリン（polymethoxazoline）、ポリエチルオキサゾリン、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミド、ポリメタクリルアミド、ポリジメチルアクリルアミド、および誘導体化セルロース、例えばヒドロキシメチルセルロースまたはヒドロキシエチルセルロースが含まれる。
【０１５４】
ある特定の実施形態では、本発明の製剤は、ポリアミド、ポリカーボネート、ポリアルキレン、アクリル酸エステルとメタクリル酸エステルのポリマー、ポリビニルポリマー、ポリグリコリド、ポリシロキサン、ポリウレタンおよびそれらのコポリマー、セルロース、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリスチレン、乳酸とグリコール酸のポリマー、ポリ酸無水物、ポリ（オルト）エステル、ポリ（酪酸）、ポリ（吉草酸）、ポリ（ラクチド−ｃｏ−カプロラクトン）、ポリサッカライド、タンパク質、ポリヒアルロン酸、ポリシアノアクリレート、ならびにそれらのブレンド、混合物またはコポリマーからなる群から選択される生体適合性ポリマーを含む。
【０１５５】
シクロデキストリンは、６個、７個または８個のグルコース単位からなる、それぞれギリシア文字のアルファ、ベータまたはガンマによって指定される環式オリゴ糖である。６個未満のグルコース単位を有するシクロデキストリンは、存在するかどうか未知である。グルコース単位は、アルファ−１，４−グルコシド結合によって連結する。糖単位のいす形配座の結果、すべての第二級ヒドロキシル基（Ｃ−２、Ｃ−３における）は、環の一方の側に位置し、Ｃ−６におけるすべての第一級ヒドロキシル基は、他方の側に位置する。その結果、外側面は親水性となり、シクロデキストリンは水溶性になる。それとは対照的に、シクロデキストリンの空洞は、原子Ｃ−３およびＣ−５の水素、およびエーテル様の酸素によって覆われているので、疎水性である。これらのマトリックスは、例えばステロイド化合物、例えば１７ベータ−エストラジオールを含む相対的に疎水性の様々な化合物と複合体を形成する（例えば、van Uden et al. Plant Cell Tiss. Org. Cult. 38:1-3-113（1994）参照）。複合体形成は、ファンデルワールス相互作用および水素結合形成によって行われる。シクロデキストリンの化学的性質の総説については、Wenz, Agnew. Chem. Int. Ed. Engl., 33:803-822 （1994）を参照されたい。
【０１５６】
シクロデキストリン誘導体の物理化学的特性は、置換の種類および度合いに強く依存して決まる。例えば、それらの水溶性は、不溶性（例えば、トリアセチル−ベータ−シクロデキストリン）から、１４７％の可溶性（ｗ／ｖ）（Ｇ−２−ベータ−シクロデキストリン）の範囲にある。さらに、それらは多くの有機溶媒に可溶性を示す。シクロデキストリンの特性は、様々な製剤構成成分の可溶性を増大または低減することによって、それらの可溶性を調節することができる。
【０１５７】
数々のシクロデキストリンおよびそれらの調製方法が記載されている。例えば、Parmeter（Ｉ）、ら（米国特許第３，４５３，２５９号）およびGrameraら（米国特許第３，４５９，７３１号）は、電気的に中性のシクロデキストリンを記載している。他の誘導体には、カチオン特性を有するシクロデキストリン［Parmeter（ＩＩ）、米国特許第３，４５３，２５７号］、不溶性架橋シクロデキストリン（Solms、米国特許第３，４２０，７８８号）、およびアニオン特性を有するシクロデキストリン［Parmeter（ＩＩＩ）、米国特許第３，４２６，０１１号］が含まれる。アニオン特性を有するシクロデキストリン誘導体の中でも、カルボン酸、亜リン酸、亜ホスフィン酸、ホスホン酸、リン酸、チオホスホン酸、チオスルフィン酸、およびスルホン酸は、親シクロデキストリンに付加されている［上記Parmeter（ＩＩＩ）参照］。さらに、スルホアルキルエーテルシクロデキストリン誘導体は、Stellaら（米国特許第５，１３４，１２７号）によって記載されている。
【０１５８】
リポソームは、水性内部区画を囲い込む少なくとも１つの脂質二層膜からなる。リポソームは、膜のタイプおよびサイズによって特徴付けることができる。小型単層小胞（ＳＵＶ）は、単一の膜を有し、典型的に直径が０．０２〜０．０５μｍの範囲である。大型単層小胞（ＬＵＶ）は、典型的に０．０５μｍよりも大きい。少数層の大型小胞および多層小胞は、複数の、通常は同心円状の膜層を有し、典型的に０．１μｍよりも大きい。同心円状ではないいくつかの膜、すなわちより大きい小胞内に含有されているいくつかのより小さい小胞を有するリポソームは、多胞体小胞と呼ばれる。
【０１５９】
本発明の一態様は、本発明の化合物を含有するリポソームを含む製剤に関し、ここでリポソーム膜は、担持能力が高いリポソームを提供するように製剤化される。あるいはまたはさらに、本発明の化合物は、リポソームのリポソーム二層内に含有されるか、またはリポソームのリポソーム二層上に吸着され得る。本発明の化合物は、脂質界面活性剤と凝集体を形成し、リポソームの内部空間内に担持されていてもよい。こうした場合、リポソーム膜は、活性薬剤と界面活性剤の凝集体による破壊作用に抵抗するように製剤化される。
【０１６０】
本発明の一実施形態によれば、リポソームの脂質二層は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）によって誘導体化された脂質を含有し、したがってＰＥＧ鎖は、脂質二層の内表面からリポソームによって囲い込まれた内部空間に延び、脂質二層の外部から取り囲む環境に延びる。
【０１６１】
本発明のリポソーム内に含有されている活性薬剤は、可溶化された形態である。界面活性剤と活性薬剤の凝集体（例えば、対象となる活性薬剤を含有するエマルジョンまたはミセル）は、本発明によるリポソームの内部空間内に捕捉され得る。界面活性剤は、活性薬剤を分散させ、可溶化するように作用し、それに限定されるものではないが、様々な鎖長（例えば約Ｃ１４〜約Ｃ２０）の生体適合性のあるリゾホスファチジルコリン（ＬＰＣ）を含む、任意の適切な脂肪族、脂環式または芳香族の界面活性剤から選択することができる。またＰＥＧ−脂質などのポリマー誘導体化脂質は、ミセル／膜の融合を阻害するように作用し、ポリマーを界面活性剤分子に添加すると、界面活性剤のＣＭＣを低減し、ミセルの形成を助けるので、ミセルの形成に利用することができる。マイクロモル範囲のＣＭＣを有する界面活性剤が好ましい。より高いＣＭＣの界面活性剤を利用して、本発明のリポソーム内に捕捉されたミセルを調製することができるが、ミセル界面活性剤モノマーは、リポソームの二層安定性に影響を及ぼすことができ、所望の安定性を有するリポソームを設計する際の因子となる。
【０１６２】
本発明によるリポソームは、当技術分野で公知の様々な技術のいずれかによって調製され得る。例えば米国特許第４，２３５，８７１号、ＰＣＴ出願公開第ＷＯ９６／１４０５７号；New RRC, Liposomes：A practical approach, IRL Press, Oxford (1990), pages 33-104；Lasic DD, Liposomes from physics to applications, Elsevier Science Publishers BV, Amsterdam, 1993参照。
【０１６３】
例えば、本発明のリポソームは、親水性ポリマーを用いて誘導体化された脂質を、予め形成しておいたリポソーム内に拡散させることによって、例えば予め形成しておいたリポソームを、脂質グラフト化ポリマーから構成されたミセルに曝露することによって、リポソームにおいて望ましい誘導体化脂質の最終的なモルパーセントに相当する脂質濃度で調製することができる。親水性ポリマーを含有するリポソームは、当技術分野で公知の通り、均質化、脂質−電場による水和（lipid-field hydration）または押出技術によっても形成され得る。
【０１６４】
本発明の一態様では、リポソームは、選択されたサイズ範囲の実質的に均質なサイズを有するように調製される。サイズ分類する１つの有効な方法では、選択された均一な細孔径を有する一連のポリカーボネート膜を介して、リポソームの水性懸濁液を押し出す。膜の細孔径は、その膜を介して押し出すことによって生成したほぼ最大サイズのリポソームに相当する。例えば米国特許第４，７３７，３２３号（１９８８年４月１２日）参照。
【０１６５】
本発明の製剤の放出特徴は、被包材料、被包された薬物の濃度、および放出調整剤の存在に依存して変わる。例えば、放出は、例えば胃内のような低ｐＨでのみ放出するか、または腸内のようなより高いｐＨでのみ放出するｐＨ感受性コーティングを使用して、ｐＨに依存するように操作することができる。胃を通過するまで放出しないようにするために、腸溶コーティングを使用することができる。複数のコーティングまたは異なる材料に被包されたシアンアミドの混合物を使用して、胃内で初めて放出させ、その後腸内で放出させることができる。放出はまた、カプセルからの拡散によって水分の取込みまたは薬物の放出を増大することができる塩または細孔形成剤を含有させることによって操作することができる。薬物の可溶性を改変する添加剤を使用して、放出速度を調節することもできる。マトリックスの分解またはマトリックスからの放出を促進する薬剤を取り込むこともできる。それらの薬剤は、薬物に添加し、別個の相として（すなわち微粒子として）添加し、または化合物に応じてポリマー相に共に溶解させることができる。あらゆる場合において、その量は、０．１〜３０パーセント（ｗ／ｗポリマー）とすべきである。分解促進剤のタイプには、無機塩、例えば硫酸アンモニウムおよび塩化アンモニウム、有機酸、例えばクエン酸、安息香酸およびアスコルビン酸、無機塩基、例えば炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸カルシウム、炭酸亜鉛および水酸化亜鉛、ならびに有機塩基、例えば硫酸プロタミン、スペルミン、コリン、エタノールアミン、ジエタノールアミンおよびトリエタノールアミン、ならびに界面活性剤、例えばＴｗｅｅｎ（登録商標）およびＰｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）が含まれる。マトリックスに微細構造を加える細孔形成剤（すなわち水溶性化合物、例えば無機塩および糖）は、微粒子として添加される。その範囲は、１〜３０パーセント（ｗ／ｗポリマー）とすべきである。
【０１６６】
また取込みは、腸内の粒子の滞留時間を変えることによって操作することができる。これは、例えば粒子を粘膜接着性ポリマーでコーティングすることによって、または被包材料として粘膜接着性ポリマーを選択することによって達成することができる。その例として、遊離カルボキシル基を有するほとんどのポリマー、例えばキトサン、セルロース、特にポリアクリレートが挙げられる（本明細書で使用される場合、ポリアクリレートは、アクリレート基および修飾アクリレート基、例えばシアノアクリレートおよびメタクリレートを含むポリマーを指す）。
【０１６７】
薬学的組合せ
本発明は、特に、式Ｉの化合物（または式Ｉの化合物を含む医薬組成物）を、本明細書に列挙する疾患の１つ以上の処置に使用することに関する。処置に対する応答は、例えば、疾患の症状の１つ以上を、完全に治癒または寛解するまで部分的または完全に除去することによって実証される場合に有益となる。
【０１６８】
式（Ｉ）の化合物はまた、以下の化合物と抗体−薬物コンジュゲートの組合せにおいて使用することができる。
【０１６９】
ＢＣＲ−ＡＢＬ阻害剤：イマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標））；塩酸イニロチニブ（Inilotinib）；ニロチニブ（Ｔａｓｉｇｎａ（登録商標））；ダサチニブ（ＢＭＳ−３４５８２５）；ボスチニブ（ＳＫＩ−６０６）；ポナチニブ（ＡＰ２４５３４）；バフェチニブ（ＩＮＮＯ４０６）；ダヌセルチブ（ＰＨＡ−７３９３５８）、ＡＴ９２８３（ＣＡＳ１１３３３８５−８３−７）；サラカチニブ（ＡＺＤ０５３０）；ならびにＮ−［２−［（１Ｓ，４Ｒ）−６−［［４−（シクロブチルアミノ）−５−（トリフルオロメチル）−２−ピリミジニル］アミノ］−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−１，４−イミン−９−イル］−２−オキソエチル］−アセトアミド（ＰＦ−０３８１４７３５、ＣＡＳ９４２４８７−１６−３）；ならびにＬＧＸ８１８。
【０１７０】
ＡＬＫ阻害剤：ＰＦ−２３４１０６６（ＸＡＬＫＯＲＩ（登録商標）；クリゾチニブ）；５−クロロ−Ｎ４−（２−（イソプロピルスルホニル）フェニル）−Ｎ２−（２−メトキシ−４−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピペリジン−１−イル）フェニル）ピリミジン−２，４−ジアミン；ＧＳＫ１８３８７０５Ａ；およびＣＨ５４２４８０２。
【０１７１】
ＢＲＡＦ阻害剤：ベムラフェニブ（ＰＬＸ４０３２）；およびダブラフェニブ。
【０１７２】
ＦＬＴ３阻害剤−リンゴ酸スニチニブ（Ｐｆｉｚｅｒから商標Ｓｕｔｅｎｔ（登録商標）で販売されている）；ＰＫＣ４１２（ミドスタウリン）；タヌチニブ（tanutinib）、ソラフェニブ、スニチニブ、ミドスタウリン、レスタウルチニブ、ＫＷ−２４４９、キザルチニブ（ＡＣ２２０）およびクレノラニブ（crenolanib）。
【０１７３】
ＭＥＫ阻害剤−トラメチニブ。
【０１７４】
血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）受容体阻害剤：ベバシズマブ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅから商標アバスチン（登録商標）で販売されている）、アキシチニブ、（Ｎ−メチル−２−［［３−［（Ｅ）−２−ピリジン−２−イルエテニル］−１Ｈ−インダゾール−６−イル］スルファニル］ベンズアミド、ＡＧ０１３７３６としても公知であり、ＰＣＴ公開第ＷＯ０１／００２３６９号に記載されている）、ブリバニブアラニネート（（Ｓ）−（（Ｒ）−１−（４−（４−フルオロ−２−メチル−１Ｈ−インドール−５−イルオキシ）−５−メチルピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−６−イルオキシ）プロパン−２−イル）２−アミノプロパノエート、ＢＭＳ−５８２６６４としても公知）、モテサニブ（Ｎ−（２，３−ジヒドロ−３，３−ジメチル−１Ｈ−インドール−６−イル）−２−［（４−ピリジニルメチル）アミノ］−３−ピリジンカルボキサミド、ＰＣＴ公開第ＷＯ０２／０６６４７０号に記載されている）、パシレオチド（ＳＯＭ２３０としても公知であり、ＰＣＴ公開第ＷＯ０２／０１０１９２号に記載されている）、ソラフェニブ（商標Ｎｅｘａｖａｒ（登録商標）で販売されている）；
【０１７５】
ＨＥＲ２受容体阻害剤：トラスツズマブ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅから商標Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）で販売されている）、ネラチニブ（ＨＫＩ−２７２、（２Ｅ）−Ｎ−［４−［［３−クロロ−４−［（ピリジン−２−イル）メトキシ］フェニル］アミノ］−３−シアノ−７−エトキシキノリン−６−イル］−４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エナミドとしても公知であり、ＰＣＴ公開第ＷＯ０５／０２８４４３号に記載されている）、ラパチニブまたはジトシル酸ラパチニブ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅから商標Ｔｙｋｅｒｂ（登録商標）で販売されている）；トラスツズマブエムタンシン（米国では、アド−トラスツズマブエムタンシン、商標Ｋａｄｃｙｌａ）−細胞傷害剤メルタンシン（ＤＭ１）に連結しているモノクローナル抗体トラスツズマブ（ハーセプチン）からなる抗体−薬物コンジュゲート；
【０１７６】
ＣＤ２０抗体：リツキシマブ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅから商標Ｒｉｕｘａｎ（登録商標）およびＭａｂＴｈｅｒａ（登録商標）で販売されている）、トシツモマブ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅから商標Ｂｅｘｘａｒ（登録商標）で販売されている）、オファツムマブ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅから商標Ａｒｚｅｒｒａ（登録商標）で販売されている）；
【０１７７】
チロシンキナーゼ阻害剤：塩酸エルロチニブ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅから商標Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標）で販売されている）、リニファニブ（Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素、ＡＢＴ８６９としても公知であり、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈから利用可能である）、リンゴ酸スニチニブ（Ｐｆｉｚｅｒから商標Ｓｕｔｅｎｔ（登録商標）で販売されている）、ボスチニブ（４−［（２，４−ジクロロ−５−メトキシフェニル）アミノ］−６−メトキシ−７−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）プロポキシ］キノリン−３−カルボニトリル、ＳＫＩ−６０６としても公知であり、米国特許第６，７８０，９９６号に記載されている）、ダサチニブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂから商標Ｓｐｒｙｃｅｌ（登録商標）で販売されている）、アルマラ（armala）（パゾパニブとしても公知であり、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅから商標Ｖｏｔｒｉｅｎｔ（登録商標）で販売されている）、イマチニブおよびメシル酸イマチニブ（Ｎｏｖａｒｔｉｓから商標Ｇｉｌｖｅｃ（登録商標）およびＧｌｅｅｖｅｃ（登録商標）で販売されている）；
【０１７８】
ＤＮＡ合成阻害剤：カペシタビン（Ｒｏｃｈｅから商標Ｘｅｌｏｄａ（登録商標）で販売されている）、塩酸ゲムシタビン（Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙから商標Ｇｅｍｚａｒ（登録商標）で販売されている）、ネララビン（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（２−アミノ−６−メトキシ−プリン−９−イル）−５−（ヒドロキシメチル）オキソラン−３，４−ジオール、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅから商標Ａｒｒａｎｏｎ（登録商標）およびＡｔｒｉａｎｃｅ（登録商標）で販売されている）；
【０１７９】
抗悪性腫瘍薬：オキサリプラチン（Ｓａｎｏｆｉ−Ａｖｅｎｔｉｓ腫から商標Ｅｌｏｘａｔｉｎ（登録商標）で販売されており、米国特許第４，１６９，８４６号に記載されている）；
【０１８０】
上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）阻害剤：ゲフィチニブ（商標Ｉｒｅｓｓａ（登録商標）で販売されている）、Ｎ−［４−［（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ］−７−［［（３”Ｓ”）−テトラヒドロ−３−フラニル］オキシ］−６−キナゾリニル］−４（ジメチルアミノ）−２−ブテンアミド、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍから商標Ｔｏｖｏｋ（登録商標）で販売されている）、セツキシマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂから商標Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標）で販売されている）、パニツムマブ（Ａｍｇｅｎから商標Ｖｅｃｔｉｂｉｘ（登録商標）で販売されている）；
【０１８１】
ＨＥＲ二量体化阻害剤：ペルツズマブ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈから商標Ｏｍｎｉｔａｒｇ（登録商標）で販売されている）；
【０１８２】
ヒト顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）モジュレーター：フィルグラスチム（Ａｍｇｅｎから商標Ｎｅｕｐｏｇｅｎ（登録商標）で販売されている）；
【０１８３】
免疫モジュレーター：アフツズマブ（Ｒｏｃｈｅ（登録商標）で利用可能である）、ペグフィルグラスチム（Ａｍｇｅｎから商標Ｎｅｕｌａｓｔａ（登録商標）で販売されている）、レナリドミド（ＣＣ−５０１３としても公知であり、商標Ｒｅｖｌｉｍｉｄ（登録商標）で販売されている）、サリドマイド（商標Ｔｈａｌｏｍｉｄ（登録商標）で販売されている）；
【０１８４】
ＣＤ４０阻害剤：ダセツズマブ（ＳＧＮ−４０またはｈｕＳ２Ｃ６としても公知であり、Ｓｅａｔｔｌｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，Ｉｎｃから利用可能である）；
【０１８５】
アポトーシス促進性受容体アゴニスト（ＰＡＲＡ）：デュラネルミン（Dulanermin）（ＡＭＧ−９５１としても公知であり、Ａｍｇｅｎ／Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈから利用可能である）；
【０１８６】
ヘッジホッグアンタゴニスト：２−クロロ−Ｎ−［４−クロロ−３−（２−ピリジニル）フェニル］−４−（メチルスルホニル）−ベンズアミド（ＧＤＣ−０４４９としても公知であり、ＰＣＴ公開第ＷＯ０６／０２８９５８号に記載されている）；
【０１８７】
ＰＩ３Ｋ阻害剤：４−［２−（１Ｈ−インダゾール−４−イル）−６−［［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］メチル］チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−イル］モルホリン（ＧＤＣ０９４１としても公知であり、ＰＣＴ公開第ＷＯ０９／０３６０８２号およびＷＯ０９／０５５７３０号に記載されている）、２−メチル−２−［４−［３−メチル−２−オキソ−８−（キノリン−３−イル）−２，３−ジヒドロイミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル］フェニル］プロピオニトリル（ＢＥＺ２３５またはＮＶＰ−ＢＥＺ２３５としても公知であり、ＰＣＴ公開第ＷＯ０６／１２２８０６号に記載されている）；
【０１８８】
ホスホリパーゼＡ２阻害剤：アナグレリド（商標Ａｇｒｙｌｉｎ（登録商標）で販売されている）；
【０１８９】
ＢＣＬ−２阻害剤：４−［４−［［２−（４−クロロフェニル）−５，５−ジメチル−１−シクロヘキサエン−１−イル］メチル］−１−ピペラジニル］−Ｎ−［［４−［［（１Ｒ）−３−（４−モルホリニル）−１−［（フェニルチオ）メチル］プロピル］アミノ］−３−［（トリフルオロメチル）スルホニル］フェニル］スルホニル］ベンズアミド（ＡＢＴ−２６３としても公知であり、ＰＣＴ公開第ＷＯ０９／１５５３８６号に記載されている）；
【０１９０】
マイトジェン活性化タンパク質キナーゼ（ＭＥＫ）阻害剤：ＸＬ−５１８（Ｃａｓ番号１０２９８７２−２９−４、ＡＣＣ  Ｃｏｒｐ．から利用可能である）；
【０１９１】
アロマターゼ阻害剤：エキセメスタン（Ｐｆｉｚｅｒから商標Ａｒｏｍａｓｉｎ（登録商標）で販売されている）、レトロゾール（Ｎｏｖａｒｔｉｓから商標Ｆｅｍａｒａ（登録商標）で販売されている）、アナストロゾール（商標Ａｒｉｍｉｄｅｘ（登録商標）で販売されている）；
【０１９２】
トポイソメラーゼＩ阻害剤：イリノテカン（Ｐｆｉｚｅｒから商標Ｃａｍｐｔｏｓａｒ（登録商標）で販売されている）、塩酸トポテカン（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅから商標Ｈｙｃａｍｔｉｎ（登録商標）で販売されている）；
【０１９３】
トポイソメラーゼＩＩ阻害剤：エトポシド（ＶＰ−１６およびリン酸エトポシドとしても公知であり、商標Ｔｏｐｏｓａｒ（登録商標）、ＶｅＰｅｓｉｄ（登録商標）およびＥｔｏｐｏｐｈｏｓ（登録商標）で販売されている）、テニポシド（ＶＭ−２６としても公知であり、商標Ｖｕｍｏｎ（登録商標）で販売されている）；
【０１９４】
ｍＴＯＲ阻害剤：テムシロリムス（Ｐｆｉｚｅｒから商標Ｔｏｒｉｓｅｌ（登録商標）で販売されている）、リダフォロリムス（以前はデフォロリムスとして公知であり、（１Ｒ，２Ｒ，４Ｓ）−４−［（２Ｒ）−２［（１Ｒ，９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｒ，１６Ｅ，１８Ｒ，１９Ｒ，２１Ｒ、２３Ｓ，２４Ｅ，２６Ｅ，２８Ｚ，３０Ｓ，３２Ｓ，３５Ｒ）−１，１８−ジヒドロキシ−１９，３０−ジメトキシ−１５，１７，２１，２３、２９，３５−ヘキサメチル−２，３，１０，１４，２０−ペンタオキソ−１１，３６−ジオキサ−４−アザトリシクロ［３０．３．１．０４，９］ヘキサトリアコンタ−１６，２４，２６，２８−テトラエン−１２−イル］プロピル］−２−メトキシシクロヘキシルジメチルホスフィネート、ＡＰ２３５７３およびＭＫ８６６９としても公知であり、ＰＣＴ公開第ＷＯ０３／０６４３８３号に記載されている）、エベロリムス（Ｎｏｖａｒｔｉｓから商標Ａｆｉｎｉｔｏｒ（登録商標）で販売されている）；
【０１９５】
破骨細胞性骨吸収阻害剤：１−ヒドロキシ−２−イミダゾール−１−イル−ホスホノエチル）ホスホン酸一水和物（Ｎｏｖａｒｔｉｓから商標Ｚｏｍｅｔａ（登録商標）で販売されている）；
【０１９６】
ＣＤ３３抗体薬物コンジュゲート：ゲムツズマブオゾガマイシン（Ｐｆｉｚｅｒ／Ｗｙｅｔｈから商標Ｍｙｌｏｔａｒｇ（登録商標）で販売されている）；
【０１９７】
ＣＤ２２抗体薬物コンジュゲート：イノツズマブオゾガマイシン（ＣＭＣ−５４４およびＷＡＹ−２０７２９４とも呼ばれ、Ｈａｎｇｚｈｏｕ  Ｓａｇｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．から利用可能である）；
【０１９８】
ＣＤ２０抗体薬物コンジュゲート：イブリツモマブチウキセタン（商標Ｚｅｖａｌｉｎ（登録商標）で販売されている）；
【０１９９】
ソマトスタチン類似体：オクトレオチド（酢酸オクトレオチドとしても公知であり、商標Ｓａｎｄｏｓｔａｔｉｎ（登録商標）およびＳａｎｄｏｓｔａｔｉｎ  ＬＡＲ（登録商標）で販売されている）；
【０２００】
合成インターロイキン−１１（ＩＬ−１１）：オプレルベキン（Ｐｆｉｚｅｒ／Ｗｙｅｔｈから商標Ｎｅｕｍｅｇａ（登録商標）で販売されている）；
【０２０１】
合成エリスロポエチン：ダルベポエチンアルファ（Ａｍｇｅｎから商標Ａｒａｎｅｓｐ（登録商標）で販売されている）；
【０２０２】
核内因子κＢの受容体活性化因子（ＲＡＮＫ）阻害剤：デノスマブ（Ａｍｇｅｎから商標Ｐｒｏｌｉａ（登録商標）で販売されている）；
【０２０３】
トロンボポエチン模倣薬ペプチボディ（peptibody）：ロミプロスチム（Ａｍｇｅｎから商標Ｎｐｌａｔｅ（登録商標）で販売されている；
【０２０４】
細胞成長刺激物質：パリフェルミン（Ａｍｇｅｎから商標Ｋｅｐｉｖａｎｃｅ（登録商標）で販売されている）；
【０２０５】
抗インスリン様成長因子−１受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）抗体：フィギツムマブ（ＣＰ−７５１，８７１としても公知であり、ＡＣＣ  Ｃｏｒｐから利用可能である）、ロバツムマブ（robatumumab）（ＣＡＳ番号９３４２３５−４４−６）；
【０２０６】
抗ＣＳ１抗体：エロツズマブ（ＨｕＬｕｃ６３、ＣＡＳ番号９１５２９６−００−３）；
【０２０７】
ＣＤ５２抗体：アレムツズマブ（商標Ｃａｍｐａｔｈ（登録商標）で販売されている）；
【０２０８】
ＣＴＬＡ−４阻害剤：トレメリムマブ（以前はチシリムマブ（ticilimumab）、ＣＰ−６７５，２０６として公知である、Ｐｆｉｚｅｒから利用可能なＩｇＧ２モノクローナル抗体）、イピリムマブ（ＣＴＬＡ−４抗体、ＭＤＸ−０１０としても公知である、ＣＡＳ番号４７７２０２−００−９）；
【０２０９】
ＰＤ１阻害剤：例えばＵＳ８，００８，４４９に開示されており、その特許文書に開示されている配列（またはそれと実質的に同一または類似の配列、例えばＵＳ８，００８，４４９に特定されている配列と少なくとも８５％、９０％、９５％またはそれを超える同一性を有する配列）を有する、ニボルマブ（本明細書ではＭＤＸ−１１０６、ＭＤＸ−１１０６−０４、ＯＮＯ−４５３８、ＢＭＳ０９３６５５８とも呼ばれる、ＣＡＳ登録番号９４６４１４−９４−４）；例えばＵＳ８，３５４，５０９およびＷＯ２００９／１１４３３５に開示されており、その特許文書に開示されている配列（またはそれと実質的に同一または類似の配列、例えばＵＳ８，３５４，５０９およびＷＯ２００９／１１４３３５に特定されている配列と少なくとも８５％、９０％、９５％またはそれを超える同一性を有する配列）を有する、ペンブロリズマブ（本明細書ではランブロリズマブ、ＭＫ−３４７５、ＭＫ０３４７５、ＳＣＨ−９００４７５またはＫＥＹＴＲＵＤＡとも呼ばれる）；イムノアドヘシン（例えば、定常領域（例えば、免疫グロブリン配列のＦｃ領域）と縮合したＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２の細胞外またはＰＤ−１結合部分を含むイムノアドヘシン；ピディリズマブ（ＣＴ−０１１；Ｃｕｒｅ  Ｔｅｃｈ）は、ＰＤ１に結合するヒト化ＩｇＧ１ｋモノクローナル抗体である（ピディリズマブおよび他のヒト化抗ＰＤ−１モノクローナル抗体は、ＷＯ２００９／１０１６１１に開示されている）；ならびにＷＯ２０１０／０２７８２７およびＷＯ２０１１／０６６３４２に開示のＡＭＰ−２２４（Ｂ７−ＤＣＩｇ；Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）は、ＰＤ１とＢ７−Ｈ１の相互作用を妨害するＰＤ−Ｌ２Ｆｃ可溶性融合受容体である；他のＰＤ−１阻害剤、例えばＵＳ８，６０９，０８９、ＵＳ２０１００２８３３０および／またはＵＳ２０１２０１１４６４９に開示の抗ＰＤ１抗体。
【０２１０】
ＰＤＬ１阻害剤：ＭＳＢ００１０７１８Ｃ（Ａ０９−２４６−２とも呼ばれる；Ｍｅｒｃｋ  Ｓｅｒｏｎｏ）は、ＰＤ−Ｌ１に結合するモノクローナル抗体であり、例えばＷＯ２０１３／０１７９１７４に開示されている（それと実質的に同一または類似の配列、例えばＷＯ２０１３／０１７９１７４に特定されている配列と少なくとも８５％、９０％、９５％またはそれを超える同一性を有する配列を有する）；ならびにＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（Ｇｅｎｅｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅ）から選択される抗ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１に結合するヒトＦｃ最適化ＩｇＧ１モノクローナル抗体である（ＰＤ−Ｌ１に対するＭＤＰＬ３２８０Ａおよび他のヒトモノクローナル抗体は、米国特許第７，９４３，７４３号および米国特許出願第２０１２００３９９０６号に開示されている）；ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ−００１０７１８ＣまたはＭＤＸ−１１０５（ＢＭＳ−９３６５５９としても公知であるＭＤＸ−１１０５は、ＷＯ２００７／００５８７４に記載の抗ＰＤ−Ｌ１抗体である；抗体ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０は、ＷＯ２０１０／０７７６３４に記載の抗ＰＤ−Ｌ１である）；
【０２１１】
ＬＡＧ−３阻害剤：ＢＭＳ−９８６０１６（ＢＭＳ９８６０１６とも呼ばれる；Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）は、ＬＡＧ−３に結合するモノクローナル抗体である。ＢＭＳ−９８６０１６および他のヒト化抗ＬＡＧ−３抗体は、ＵＳ２０１１／０１５０８９、ＷＯ２０１０／０１９５７０、およびＷＯ２０１４／００８２１８に開示されている。
【０２１２】
ＧＩＴＲアゴニスト：例示的なＧＩＴＲアゴニストとして、例えばＧＩＴＲ融合タンパク質および抗ＧＩＴＲ抗体（例えば、二価の抗ＧＩＴＲ抗体）、例えば米国特許第６，１１１，０９０号、欧州特許第０９０５０５Ｂ１号、米国特許第８，５８６，０２３号、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１０／００３１１８号および同第２０１１／０９０７５４号に記載のＧＩＴＲ融合タンパク質、または例えば米国特許第７，０２５，９６２、欧州特許第１９４７１８３Ｂ１号、米国特許第７，８１２，１３５号、米国特許第８，３８８，９６７号、米国特許第８，５９１，８８６号、欧州特許第ＥＰ１８６６３３９号、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１１／０２８６８３号、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１３／０３９９５４号、ＰＣＴ公開第ＷＯ２００５／００７１９０号、ＰＣＴ公開第ＷＯ２００７／１３３８２２号、ＰＣＴ公開第ＷＯ２００５／０５５８０８号、ＰＣＴ公開第ＷＯ９９／４０１９６号、ＰＣＴ公開第ＷＯ２００１／０３７２０号、ＰＣＴ公開第ＷＯ９９／２０７５８号、ＰＣＴ公開第ＷＯ２００６／０８３２８９号、ＰＣＴ公開第ＷＯ２００５／１１５４５１号、米国特許第７，６１８，６３２号、およびＰＣＴ公開第ＷＯ２０１１／０５１７２６号に記載の抗ＧＩＴＲ抗体が挙げられる。
【０２１３】
ヒストンデアセチラーゼ阻害剤（ＨＤＩ）：ボリノスタット（Ｍｅｒｃｋから商標Ｚｏｌｉｎｚａ（登録商標）で販売されている）。
【０２１４】
抗ＣＴＬＡ４抗体には、トレメリムマブ（以前はチシリムマブとして公知である、Ｐｆｉｚｅｒから利用可能なＩｇＧ２モノクローナル抗体、ＣＰ−６７５，２０６）；およびイピリムマブ（ＭＤＸ−０１０としても公知であるＣＴＬＡ−４抗体、ＣＡＳ番号４７７２０２−００−９）が含まれる。
【０２１５】
抗ＴＩＭ−３抗体またはその抗原結合フラグメント。
【０２１６】
アルキル化剤：テモゾロミド（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ／Ｍｅｒｃｋから商標Ｔｅｍｏｄａｒ（登録商標）およびＴｅｍｏｄａｌ（登録商標）で販売されている）、ダクチノマイシン（アクチノマイシン−Ｄとしても公知であり、商標Ｃｏｓｍｅｇｅｎ（登録商標）で販売されている）、メルファラン（Ｌ−ＰＡＭ、Ｌ−サルコリシン、およびフェニルアラニンマスタードとしても公知であり、商標Ａｌｋｅｒａｎ（登録商標）で販売されている）、アルトレタミン（ヘキサメチルメラミン（ＨＭＭ）としても公知であり、商標Ｈｅｘａｌｅｎ（登録商標）で販売されている）、カルムスチン（商標ＢｉＣＮＵ（登録商標）で販売されている）、ベンダムスチン（商標Ｔｒｅａｎｄａ（登録商標）で販売されている）、ブスルファン（商標Ｂｕｓｕｌｆｅｘ（登録商標）およびＭｙｌｅｒａｎ（登録商標）で販売されている）、カルボプラチン（商標Ｐａｒａｐｌａｔｉｎ（登録商標）で販売されている）、ロムスチン（ＣＣＮＵとしても公知であり、商標ＣｅｅＮＵ（登録商標）で販売されている）、シスプラチン（ＣＤＤＰとしても公知であり、商標Ｐｌａｔｉｎｏｌ（登録商標）およびＰｌａｔｉｎｏｌ（登録商標）−ＡＱで販売されている）、クロラムブシル（商標Ｌｅｕｋｅｒａｎ（登録商標）で販売されている）、シクロホスファミド（商標Ｃｙｔｏｘａｎ（登録商標）およびＮｅｏｓａｒ（登録商標）で販売されている）、ダカルバジン（ＤＴＩＣ、ＤＩＣおよびイミダゾールカルボキサミドとしても公知であり、商標ＤＴＩＣ−Ｄｏｍｅ（登録商標）で販売されている）、アルトレタミン（ヘキサメチルメラミン（ＨＭＭ）としても公知であり、商標Ｈｅｘａｌｅｎ（登録商標）で販売されている）、イホスファミド（商標Ｉｆｅｘ（登録商標）で販売されている）、プロカルバジン（商標Ｍａｔｕｌａｎｅ（登録商標）で販売されている）、メクロレタミン（ナイトロジェンマスタード、ムスチンおよび塩酸メクロレタミンとしても公知であり、商標Ｍｕｓｔａｒｇｅｎ（登録商標）で販売されている）、ストレプトゾシン（商標Ｚａｎｏｓａｒ（登録商標）で販売されている）、チオテパ（チオホスホアミド、ＴＥＳＰＡおよびＴＳＰＡとしても公知であり、商標Ｔｈｉｏｐｌｅｘ（登録商標）で販売されている；
【０２１７】
生物学的応答調整剤：カルメットゲラン桿菌（商標ｔｈｅｒａＣｙｓ（登録商標）およびＴＩＣＥ（登録商標）ＢＣＧで販売されている）、デニロイキンジフチトクス（商標Ｏｎｔａｋ（登録商標）で販売されている）；
【０２１８】
抗腫瘍抗生物質：ドキソルビシン（商標Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ（登録商標）およびＲｕｂｅｘ（登録商標）で販売されている）、ブレオマイシン（商標ｌｅｎｏｘａｎｅ（登録商標）で販売されている）、ダウノルビシン（塩酸ダウノルビシン、ダウノマイシン、および塩酸ルビドマイシンとしても公知であり、商標Ｃｅｒｕｂｉｄｉｎｅ（登録商標）で販売されている）、ダウノルビシンリポソーム（ダウノルビシンクエン酸塩リポソーム、商標ＤａｕｎｏＸｏｍｅ（登録商標）で販売されている）、ミトキサントロン（ＤＨＡＤとしても公知であり、商標Ｎｏｖａｎｔｒｏｎｅ（登録商標）で販売されている）、エピルビシン（商標Ｅｌｌｅｎｃｅ（商標）で販売されている）、イダルビシン（商標Ｉｄａｍｙｃｉｎ（登録商標）、Ｉｄａｍｙｃｉｎ  ＰＦＳ（登録商標）で販売されている）、マイトマイシンＣ（商標Ｍｕｔａｍｙｃｉｎ（登録商標）で販売されている）；
【０２１９】
抗微小管剤：エストラムスチン（商標Ｅｍｃｙｌ（登録商標）で販売されている）；
【０２２０】
カテプシンＫ阻害剤：オダナカチブ（ＭＫ−０８２２、Ｎ−（１−シアノシクロプロピル）−４−フルオロ−Ｎ２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミドとしても公知であり、Ｌａｎｚｈｏｕ  Ｃｈｏｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、ＡＣＣ  Ｃｏｒｐ．、およびＣｈｅｍｉｅＴｅｋから利用可能であり、ＰＣＴ公開第ＷＯ０３／０７５８３６号に記載されている）；
【０２２１】
エポチロンＢ類似体：イクサベピロン（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂから商標Ｌｘｅｍｐｒａ（登録商標）で販売されている）；
【０２２２】
熱ショックタンパク質（ＨＳＰ）阻害剤：タネスピマイシン（１７−アリルアミノ−１７−デメトキシゲルダナマイシン、ＫＯＳ−９５３および１７−ＡＡＧとしても公知であり、ＳＩＧＭＡから利用可能であり、米国特許第４，２６１，９８９号に記載されている）；
【０２２３】
ＴｐｏＲアゴニスト：エルトロンボパグ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅから商標Ｐｒｏｍａｃｔａ（登録商標）およびＲｅｖｏｌａｄｅ（登録商標）で販売されている）；
【０２２４】
抗有糸分裂剤：ドセタキセル（Ｓａｎｏｆｉ−Ａｖｅｎｔｉｓから商標Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標）で販売されている）；
【０２２５】
副腎ステロイド阻害剤：アミノグルテチミド（商標Ｃｙｔａｄｒｅｎ（登録商標）で販売されている）；
【０２２６】
抗アンドロゲン剤：ニルタミド（商標Ｎｉｌａｎｄｒｏｎ（登録商標）およびＡｎａｎｄｒｏｎ（登録商標）で販売されている）、ビカルタミド（商標Ｃａｓｏｄｅｘ（登録商標）で販売されている）、フルタミド（商標Ｆｕｌｅｘｉｎ（商標）で販売されている）；
【０２２７】
アンドロゲン：フルオキシメステロン（商標Ｈａｌｏｔｅｓｔｉｎ（登録商標）で販売されている）；
【０２２８】
プロテアソーム阻害剤：ボルテゾミブ（商標Ｖｅｌｃａｄｅ（登録商標）で販売されている）；
【０２２９】
ＣＤＫ１阻害剤：アルボシジブ（フラボピリドールまたはＨＭＲ−１２７５、２−（２−クロロフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−［（３Ｓ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−１−メチル−４−ピペリジニル］−４−クロメノンとしても公知であり、米国特許第５，６２１，００２号に記載されている）；
【０２３０】
ゴナドトロピン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）受容体アゴニスト：ロイプロリドまたは酢酸ロイプロリド（Ｂａｙｅｒ  ＡＧから商標Ｖｉａｄｕｒｅ（登録商標）で販売されており、Ｓａｎｏｆｉ−ＡｖｅｎｔｉｓからＥｌｉｇａｒｄ（登録商標）で販売されており、Ａｂｂｏｔｔ  ＬａｂからＬｕｐｒｏｎ（登録商標）で販売されている）；
【０２３１】
タキサン抗悪性腫瘍剤：カバジタキセル（１−ヒドロキシ−７β，１０β−ジメトキシ−９−オキソ−５β，２０−エポキシタキサ−１１−エン−２α，４，１３α−トリイル−４−アセテート−２−ベンゾエート−１３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］アミノ｝−２−ヒドロキシ−３−フェニルプロパノエート）、ラロタキセル（（２α，３ξ，４α，５β，７α，１０β，１３α）−４，１０−ビス（アセチルオキシ）−１３−（｛（２Ｒ，３Ｓ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−ヒドロキシ−３−フェニルプロパノイル｝オキシ）−１−ヒドロキシ−９−オキソ−５，２０−エポキシ−７，１９−シクロタキサ−１１−エン−２−イルベンゾエート）；
【０２３２】
５ＨＴ１ａ受容体アゴニスト：キサリプロデン（ＳＲ５７７４６、１−［２−（２−ナフチル）エチル］−４−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］−１，２，３，６−テトラヒドロピリジンとしても公知であり、米国特許第５，２６６，５７３号に記載されている）；
【０２３３】
ＨＰＣワクチン：ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅからＣｅｒｖａｒｉｘ（登録商標）で販売されており、ＭｅｒｃｋからＧａｒｄａｓｉｌ（登録商標）で販売されている；
【０２３４】
鉄キレート剤：デフェラシロクス（Ｎｏｖａｒｔｉｓから商標Ｅｘｊａｄｅ（登録商標）で販売されている）；
【０２３５】
代謝拮抗物質：クラドリビン（２−クロロデオキシアデノシン、商標ｌｅｕｓｔａｔｉｎ（登録商標）で販売されている）、５−フルオロウラシル（商標Ａｄｒｕｃｉｌ（登録商標）で販売されている）、６−チオグアニン（商標Ｐｕｒｉｎｅｔｈｏｌ（登録商標）で販売されている）、ペメトレキセド（商標Ａｌｉｍｔａ（登録商標）で販売されている）、シタラビン（アラビノシルシトシン（Ａｒａ−Ｃ）としても公知であり、商標Ｃｙｔｏｓａｒ−Ｕ（登録商標）で販売されている）、シタラビンリポソーム（リポソームＡｒａ−Ｃとしても公知であり、商標ＤｅｐｏＣｙｔ（商標）で販売されている）、デシタビン（商標Ｄａｃｏｇｅｎ（登録商標）で販売されている）、ヒドロキシ尿素（商標Ｈｙｄｒｅａ（登録商標）、Ｄｒｏｘｉａ（商標）およびＭｙｌｏｃｅｌ（商標）で販売されている）、フルダラビン（商標Ｆｌｕｄａｒａ（登録商標）で販売されている）、フロクスウリジン（商標ＦＵＤＲ（登録商標）で販売されている）、クラドリビン（２−クロロデオキシアデノシン（２−ＣｄＡ）としても公知であり、商標Ｌｅｕｓｔａｔｉｎ（商標）で販売されている）、メトトレキセート（アメトプテリン、メトトレキサートナトリウム（ＭＴＸ）としても公知であり、商標Ｒｈｅｕｍａｔｒｅｘ（登録商標）およびＴｒｅｘａｌｌ（商標）で販売されている）、ペントスタチン（商標Ｎｉｐｅｎｔ（登録商標）で販売されている）；
【０２３６】
ビスホスフォネート：パミドロネート（商標Ａｒｅｄｉａ（登録商標）で販売されている）、ゾレドロン酸（商標Ｚｏｍｅｔａ（登録商標）で販売されている）；
【０２３７】
脱メチル化剤：５−アザシチジン（商標Ｖｉｄａｚａ（登録商標）で販売されている）、デシタビン（商標Ｄａｃｏｇｅｎ（登録商標）で販売されている）；
【０２３８】
植物性アルカロイド：タンパク質に結合したパクリタキセル（商標Ａｂｒａｘａｎｅ（登録商標）で販売されている）、ビンブラスチン（硫酸ビンブラスチン、ビンカロイコブラスチンおよびＶＬＢとしても公知であり、商標Ａｌｋａｂａｎ−ＡＱ（登録商標）およびＶｅｌｂａｎ（登録商標）で販売されている）、ビンクリスチン（硫酸ビンクリスチン、ＬＣＲ、およびＶＣＲとしても公知であり、商標Ｏｎｃｏｖｉｎ（登録商標）およびＶｉｎｃａｓａｒ  Ｐｆｓ（登録商標）で販売されている）、ビノレルビン（商標Ｎａｖｅｌｂｉｎｅ（登録商標）で販売されている）、パクリタキセル（商標ＴａｘｏｌおよびＯｎｘａｌ（商標）で販売されている）；
【０２３９】
レチノイド：アリトレチノイン（商標Ｐａｎｒｅｔｉｎ（登録商標）で販売されている）、トレチノイン（全トランスレチノイン酸、ＡＴＲＡとしても公知であり、商標Ｖｅｓａｎｏｉｄ（登録商標）で販売されている）、イソトレチノイン（１３−ｃｉｓ−レチノイン酸、商標Ａｃｃｕｔａｎｅ（登録商標）、Ａｍｎｅｓｔｅｅｍ（登録商標）、Ｃｌａｒａｖｉｓ（登録商標）、Ｃｌａｒｕｓ（登録商標）、Ｄｅｃｕｔａｎ（登録商標）、Ｉｓｏｔａｎｅ（登録商標）、Ｉｚｏｔｅｃｈ（登録商標）、Ｏｒａｔａｎｅ（登録商標）、Ｉｓｏｔｒｅｔ（登録商標）、およびＳｏｔｒｅｔ（登録商標）で販売されている）、ベキサロテン（商標Ｔａｒｇｒｅｔｉｎ（登録商標）で販売されている）；
【０２４０】
糖質コルチコステロイド：ヒドロコルチゾン（コルチゾン、コハク酸ヒドロコルチゾンナトリウム、リン酸ヒドロコルチゾンナトリウムとしても公知であり、商標Ａｌａ−Ｃｏｒｔ（登録商標）、リン酸ヒドロコルチゾン、Ｓｏｌｕ−Ｃｏｒｔｅｆ（登録商標）、Ｈｙｄｒｏｃｏｒｔ  Ａｃｅｔａｔｅ（登録商標）およびＬａｎａｃｏｒｔ（登録商標）で販売されている）、デキサメタゾン（（８Ｓ，９Ｒ，１０Ｓ，１１Ｓ，１３Ｓ，１４Ｓ，１６Ｒ，１７Ｒ）−９−フルオロ−１１，１７−ジヒドロキシ−１７−（２−ヒドロキシアセチル）−１０，１３，１６−トリメチル−６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−ドデカヒドロ−３Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−オン）、プレドニゾロン（商標Ｄｅｌｔａ−Ｃｏｒｔｅｌ（登録商標）、Ｏｒａｐｒｅｄ（登録商標）、Ｐｅｄｉａｐｒｅｄ（登録商標）およびＰｒｅｌｏｎｅ（登録商標）で販売されている）、プレドニゾン（商標Ｄｅｌｔａｓｏｎｅ（登録商標）、Ｌｉｑｕｉｄ  Ｒｅｄ（登録商標）、Ｍｅｔｉｃｏｒｔｅｎ（登録商標）およびＯｒａｓｏｎｅ（登録商標）で販売されている）、メチルプレドニゾロン（６−メチルプレドニゾロン、酢酸メチルプレドニゾロン、コハク酸メチルプレドニゾロンナトリウムとしても公知であり、商標Ｄｕｒａｌｏｎｅ（登録商標）、Ｍｅｄｒａｌｏｎｅ（登録商標）、Ｍｅｄｒｏｌ（登録商標）、Ｍ−Ｐｒｅｄｎｉｓｏｌ（登録商標）およびＳｏｌｕ−Ｍｅｄｒｏｌ（登録商標）で販売されている）；
【０２４１】
サイトカイン：インターロイキン−２（アルデスロイキンおよびＩＬ−２としても公知であり、商標Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）で販売されている）、インターロイキン−１１（オプレルベキンとしても公知であり、商標Ｎｅｕｍｅｇａ（登録商標）で販売されている）、アルファインターフェロンアルファ（ＩＦＮ−アルファとしても公知であり、商標Ｉｎｔｒｏｎ（登録商標）Ａ、およびＲｏｆｅｒｏｎ−Ａ（登録商標）で販売されている）；
【０２４２】
エストロゲン受容体下方制御因子：フルベストラント（商標Ｆａｓｌｏｄｅｘ（登録商標）で販売されている）；
【０２４３】
抗エストロゲン薬：タモキシフェン（商標Ｎｏｖａｌｄｅｘ（登録商標）で販売されている）；
【０２４４】
トレミフェン（商標Ｆａｒｅｓｔｏｎ（登録商標）で販売されている）；
【０２４５】
選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）：ラロキシフェン（商標Ｅｖｉｓｔａ（登録商標）で販売されている）；
【０２４６】
黄体ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）アゴニスト：ゴセレリン（商標Ｚｏｌａｄｅｘ（登録商標）で販売されている）；
【０２４７】
プロゲステロン：メゲストロール（酢酸メゲストロールとしても公知であり、商標Ｍｅｇａｃｅ（登録商標）で販売されている）；
【０２４８】
種々の細胞傷害剤：三酸化ヒ素（商標Ｔｒｉｓｅｎｏｘ（登録商標）で販売されている）、アスパラギナーゼ（Ｌ−アスパラギナーゼ、エルウィニアＬ−アスパラギナーゼとしても公知であり、商標Ｅｌｓｐａｒ（登録商標）およびＫｉｄｒｏｌａｓｅ（登録商標）で販売されている）；
【０２４９】
式（Ｉ）の化合物は、以下の補助治療剤と組み合わせて使用することもできる。
【０２５０】
制吐薬：ＮＫ−１受容体アンタゴニスト：カソピタント（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅから商標Ｒｅｚｏｎｉｃ（登録商標）およびＺｕｎｒｉｓａ（登録商標）で販売されている）；および
【０２５１】
細胞保護剤：アミホスチン（商標Ｅｔｈｙｏｌ（登録商標）で販売されている）、ロイコボリン（ロイコボリンカルシウム、シトロボラム因子およびフォリン酸としても公知である）。
【０２５２】
免疫チェックポイント阻害剤：一実施形態では、本明細書に開示の併用治療は、免疫チェックポイント分子の阻害性分子の阻害剤を含む。用語「免疫チェックポイント」は、ＣＤ４およびＣＤ８Ｔ細胞の細胞表面上にある分子群を指す。これらの分子は、抗腫瘍免疫応答を下方にモジュレートし、または阻害するための「ブレーキ」として有効に働くことができる。免疫チェックポイント分子には、直接的に免疫細胞を阻害する、プログラム死１（ＰＤ−１）、細胞傷害性Ｔ−リンパ球抗原４（ＣＴＬＡ−４）、Ｂ７Ｈ１、Ｂ７Ｈ４、ＯＸ−４０、ＣＤ１３７、ＣＤ４０、およびＬＡＧ３が含まれるが、それらに限定されず、本発明の方法において有用な免疫チェックポイント阻害剤として作用することができる免疫療法剤には、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＣＴＬＡ４、ＴＩＭ３、ＬＡＧ３、ＶＩＳＴＡ、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、ＬＡＩＲ１、ＣＤ１６０、２Ｂ４および／またはＴＧＦＲベータの阻害剤が含まれるが、それらに限定されない。阻害性分子の阻害は、ＤＮＡ、ＲＮＡまたはタンパク質レベルにおける阻害によって実施することができる。いくつかの実施形態では、阻害性核酸（例えば、ｄｓＲＮＡ、ｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ）は、阻害性分子の発現を阻害するために使用することができる。他の実施形態では、阻害性シグナルの阻害剤は、阻害性分子に結合するポリペプチド、例えば可溶性リガンド、または抗体もしくはその抗原結合フラグメントである。
【０２５３】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載の抗ＰＤ−１分子は、当技術分野で公知のＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１および／またはＰＤ−Ｌ２の他の１つ以上の阻害剤と組み合わせて投与される。アンタゴニストは、抗体、その抗原結合フラグメント、イムノアドヘシン、融合タンパク質、またはオリゴペプチドであり得る。
【０２５４】
ある特定の実施形態では、本明細書に開示の併用治療は、共刺激分子または阻害性分子のモジュレーター、例えば同時阻害性のリガンドまたは受容体を含む。
【０２５５】
一実施形態では、共刺激モジュレーター、例えば共刺激分子のアゴニストは、ＯＸ４０、ＣＤ２、ＣＤ２７、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ−１、ＬＦＡ−１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＧＩＴＲ、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＢＡＦＦＲ、ＨＶＥＭ、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０、ＣＤ１６０、Ｂ７−Ｈ３またはＣＤ８３リガンドのアゴニスト（例えば、アゴニスト抗体もしくはその抗原結合フラグメント、または可溶性融合体）から選択される。
【０２５６】
別の実施形態では、本明細書に開示の併用治療は、ＣＤ２８、ＣＤ２７、ＩＣＯＳおよびＧＩＴＲの共刺激ドメインを含む陽性シグナルと関連する共刺激分子、例えばアゴニストを含む。
【０２５７】
一実施形態では、抗ＰＤ−１抗体分子は、処置後に、例えば黒色腫の処置後に、抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば、イピリムマブ）と共に、ＢＲＡＦ阻害剤（例えば、ベムラフェニブまたはダブラフェニブ）と共にまたはそれなしに投与される。使用することができる例示的な用量には、約１〜１０ｍｇ／ｋｇ、例えば３ｍｇ／ｋｇの抗ＰＤ−１抗体分子の用量、および約３ｍｇ／ｋｇの抗ＣＴＬＡ−４抗体、例えばイピリムマブの用量が含まれる。
【０２５８】
別の実施形態では、抗ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１抗体分子は、抗ＬＡＧ−３抗体またはその抗原結合フラグメントと組み合わせて投与される。別の実施形態では、抗ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１抗体分子は、抗ＴＩＭ−３抗体またはその抗原結合フラグメントと組み合わせて投与される。さらなる他の実施形態では、抗ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１抗体分子は、抗ＬＡＧ−３抗体および抗ＴＩＭ−３抗体、またはそれらの抗原結合フラグメントと組み合わせて投与される。本明細書で列挙される抗体の組合せは、別個に、例えば別個の抗体として投与することができ、または例えば二重特異性もしくは三重特異性抗体分子として連結することができる。一実施形態では、抗ＰＤ−１もしくはＰＤ−Ｌ１抗体分子、および抗ＴＩＭ−３もしくは抗ＬＡＧ−３抗体、またはそれらの抗原結合フラグメントを含む二重特異性抗体が投与される。ある特定の実施形態では、本明細書で列挙される抗体の組合せは、がん、例えば本明細書に記載のがん（例えば固形腫瘍）を処置するために使用される。前述の組合せの有効性は、当技術分野で公知の動物モデルで試験することができる。例えば、抗ＰＤ−１および抗ＬＡＧ−３の相乗効果を試験するための動物モデルは、例えばWoo et al. (2012) Cancer Res. 72 (4):917-27）に記載されている。
【０２５９】
一部の実施形態では、本明細書に開示の併用治療（例えば、抗ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１抗体分子単独で、またはもう１つの免疫調節薬（例えば、抗ＬＡＧ−３または抗ＴＩＭ−３抗体分子）と組み合わせて使用される。一実施形態では、抗ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１抗体分子は、抗ＬＡＧ−３抗体またはその抗原結合フラグメントと組み合わせて投与される。別の実施形態では、抗ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１抗体分子は、抗ＴＩＭ−３抗体またはその抗原結合フラグメントと組み合わせて投与される。さらなる他の実施形態では、抗ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１抗体分子は、抗ＬＡＧ−３抗体および抗ＴＩＭ−３抗体、またはそれらの抗原結合フラグメントと組み合わせて投与される。本明細書で列挙される抗体の組合せは、別個に、例えば別個の抗体として投与することができ、または例えば二重特異性もしくは三重特異性抗体分子として連結することができる。一実施形態では、抗ＰＤ−１もしくはＰＤ−Ｌ１抗体分子、および抗ＴＩＭ−３もしくは抗ＬＡＧ−３抗体、またはそれらの抗原結合フラグメントを含む二重特異性抗体が投与される。ある特定の実施形態では、本明細書で列挙される抗体の組合せは、がん、例えば本明細書に記載のがん（例えば固形腫瘍）を処置するために使用される。前述の組合せの有効性は、当技術分野で公知の動物モデルで試験することができる。例えば、抗ＰＤ−１および抗ＬＡＧ−３の相乗効果を試験するための動物モデルは、例えばWoo et al. (2012) Cancer Res. 72 (4):917-27）24に記載されている。
【０２６０】
ある特定の実施形態では、抗体分子は、二重特異性または多重特異性抗体分子の形態である。一実施形態では、二重特異性抗体分子は、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１と第１の結合特異性を有し、第２の結合特異性、例えばＴＩＭ−３、ＬＡＧ−３、またはＰＤ−Ｌ２と第２の結合特異性を有する。一実施形態では、二重特異性抗体分子は、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１およびＴＩＭ−３に結合する。別の実施形態では、二重特異性抗体分子は、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１およびＬＡＧ−３に結合する。別の実施形態では、二重特異性抗体分子は、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１に結合する。さらに別の実施形態では、二重特異性抗体分子は、ＰＤ−１およびＰＤ−Ｌ２に結合する。別の実施形態では、二重特異性抗体分子は、ＴＩＭ−３およびＬＡＧ−３に結合する。前述の分子の任意の組合せは、多重特異性抗体分子、例えばＰＤ−１またはＰＤ−１との第１の結合特異性を含み、ＴＩＭ−３、ＬＡＧ−３、またはＰＤ−Ｌ２の２つまたはそれを超えるものとの第２および第３の結合特異性を含む三重特異性抗体で作成され得る。
【０２６１】
本開示に記載の参考文献の引用のいずれも、引用したそれらの参考文献が本発明の特許性に悪影響を及ぼし得る先行技術であることを承認するものと理解されるべきではない。
【０２６２】
本発明の化合物を作成する方法
本発明はまた、本発明の化合物を調製する方法を含む。記載の反応では、反応性官能基、例えばヒドロキシ、アミノ、イミノ、チオまたはカルボキシ基が、最終生成物において望ましい場合、それらを保護して、反応における望ましくない関与を回避する必要があり得る。従来の保護基は、標準技法に従って使用することができ、例えばT.W. Greene and P. G. M. Wuts in “Protective Groups in Organic Chemistry”, John Wiley and Sons, 1991を参照されたい。
【０２６３】
式Ｉの化合物は、以下の反応スキームＩのように進行することによって調製することができる。
【０２６４】
【化１０】
0006534389.tif 000028
式中、ｐ、ｑ、Ｙ１、Ｙ２、Ｒ２ａ、Ｒ２ｂ、Ｒ３ａ、Ｒ３ｂ、Ｒ４ａ、Ｒ４ｂ、Ｒ５ａ、Ｒ５ｂ、Ｒ７およびＲ８は、本発明の概要において式Ｉに定義した通りであり、Ｑは、ハロゲン（例えば臭素）またはチオール、ボロネートもしくはスタンネートであり、これらは化合物５上にあるハロゲンと反応し、Ｘは、Ｑ（例えば、ボロネート、スタンナン、アルコール、チオール、ハロゲン等）と反応する反応基である。化合物４は、化合物２を化合物３と、適切な酸または塩基条件下で、遷移金属が存在する状態または存在しない状態で周囲温度において、または熱条件もしくはマイクロ波条件下で反応させることによって、調製することができる。あるいは、化合物２のハロゲンは、他のハロゲンまたは適切な活性化基、例えばトリフレート、メシレート、トシレート、ノナフレート、ボロネート、有機スタンナン、有機シリル、有機亜鉛、リチウム、マグネシウム等によって置き換えることができる。
【０２６５】
式Ｉの化合物は、化合物４を、Ｘに応じて適切なカップリングパートナー（例えば化合物５）と反応させることによって調製することができる。例えば、化合物５は、反応スキームＩにおいて、Ｘを介して連結した置換フェニル基として示されている。あるいは、化合物５は、アリール−アルコール、アリール−チオ、アリール−ボロネート、アリール−スタンネート、ヘテロアリール−アルコール、アリール−チオール、ヘテロアリール−チオール、アリール−ボロネート、アリール−スタンナン、オレフィンまたは他のアリール−金属もしくはヘテロアリール−金属等であり得る。カップリングパートナーは、置換されていてもよい。この反応は、適切な酸または塩基条件下で、パラジウムなどの遷移金属が存在する状態または存在しない状態で周囲温度において、または熱条件もしくはマイクロ波条件下で実施することができる。他のハロゲンまたは適切な活性化基（例えば、トリフレート、メシレート、トシレート、およびノナフレート）は、これらの変換ではＢｒの代わりに使用することができる。
【０２６６】
あるいは、カップリングパートナーは、逆転させることができ、化合物２は、スタンナン、ボロネート、有機亜鉛、有機リチウム、有機マグネシウム、有機ケイ素、有機銅塩に誘導体化し、適切なアリール−ハロゲン化物、ヘテロアリール−ハロゲン化物、オレフィンまたは適切な反応性官能基（例えば、トリフレート、メシレート、トシレートおよびノナフレート）等とカップリングさせることができる。
【０２６７】
これらの反応は、様々な溶媒、温度、圧力の下で、適切な雰囲気下で、記載の順序または逆の順序で実施することができる。反応は、酸、塩基、および／または遷移金属条件下で実施することができる。
【０２６８】
式Ｉの化合物の合成の詳細な例は、以下の実施例に見出すことができる。
【０２６９】
本発明の化合物の追加の作成方法
本発明の化合物は、化合物の遊離塩基形態を、薬学的に許容される無機または有機酸と反応させることによって、薬学的に許容される酸付加塩として調製することができる。あるいは、本発明の化合物の薬学的に許容される塩基付加塩は、化合物の遊離酸形態を、薬学的に許容される無機または有機塩基と反応させることによって調製することができる。
【０２７０】
式Ｉの化合物はまた、適切な官能基を付加して修飾して、選択的な生物学的特性を促進することができる。この種類の修飾は、当技術分野で公知であり、それには、所与の生物系（例えば、血液、リンパ系、中枢神経系、精巣）への浸透を増大し、バイオアベイラビリティを増大し、可溶性を増大して非経口投与（例えば、注射、注入）を可能にし、代謝を変化させ、かつ／または分泌速度を変化させる修飾が含まれる。このタイプの修飾の例として、例えばポリエチレングリコールを用いるエステル化、ピバロイルオキシまたは脂肪酸置換基を用いる誘導体化、カルバメートへの変換、芳香環のヒドロキシル化、および芳香族環におけるヘテロ原子の置換が挙げられるが、それらに限定されない。式Ｉの化合物、ならびに／またはそのＮ−オキシド、互変異性体および／または（好ましくは薬学的に許容される）塩がどこで言及されようと、これは、このような修飾された式を含むと同時に、好ましくは式Ｉの分子、それらのＮ−オキシド、それらの互変異性体および／またはそれらの塩を意味する。
【０２７１】
あるいは、本発明の化合物の塩形態は、出発材料または中間体の塩を使用して調製することができる。遊離形態の新規な式Ｉの化合物と、例えば新規な化合物の精製または同定において中間体として使用できる塩を含む、それらの塩の形態の式Ｉの化合物の間の密接な関係を考慮すると、式Ｉの１つ以上の化合物に関するいかなる言及も、本明細書を通して、遊離形態の化合物、および／または適切で好都合な場合、それらの１つ以上の塩、ならびに１つ以上の溶媒和物、例えば水和物に言及すると理解されるべきである。
【０２７２】
塩は、例えば、好ましくは有機または無機酸を用いて、塩基性窒素原子を有する式Ｉの化合物から酸付加塩として、特に薬学的に許容される塩として形成される。適切な無機酸は、例えばハロゲン酸、例えば塩酸、硫酸またはリン酸である。適切な有機酸は、例えばカルボン酸、ホスホン酸、スルホン酸もしくはスルファミン酸、例えば酢酸、プロピオン酸、オクタン酸、デカン酸、ドデカン酸、グリコール酸、乳酸、フマル酸、コハク酸、マロン酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アミノ酸、例えばグルタミン酸もしくはアスパラギン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、メチルマレイン酸、シクロヘキサンカルボン酸、アダマンタンカルボン酸、安息香酸、サリチル酸、４−アミノサリチル酸、フタル酸、フェニル酢酸、マンデル酸、ケイ皮酸、メタン−もしくはエタン−スルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、４−トルエンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、１，５−ナフタレン−ジスルホン酸、２−もしくは３−メチルベンゼンスルホン酸、メチル硫酸、エチル硫酸、ドデシル硫酸、Ｎ−シクロヘキシルスルファミン酸、Ｎ−メチル−、Ｎ−エチル−もしくはＮ−プロピル−スルファミン酸、または他の有機プロトン酸、例えばアスコルビン酸である。
【０２７３】
単離または精製する目的では、製剤上許容されない塩、例えばピクリン酸塩または過塩素酸塩を使用することも可能である。治療上の使用では、薬学的に許容される塩または遊離化合物だけが用いられ（医薬調製物の形態で適用できる場合）、したがってこれらが好ましい。
【０２７４】
本発明の化合物の遊離酸または遊離塩基形態は、それぞれ対応する塩基付加塩または酸付加塩形態から調製することができる。例えば、酸付加塩形態の本発明の化合物は、適切な塩基（例えば、水酸化アンモニウム溶液、水酸化ナトリウム等）を用いて処理することによって、対応する遊離塩基に変換することができる。塩基付加塩形態の本発明の化合物は、適切な酸（例えば、塩酸等）を用いて処理することによって、対応する遊離酸に変換することができる。
【０２７５】
未酸化形態の本発明の化合物は、本発明の化合物のＮ−オキシドから、還元剤（例えば、硫黄、二酸化硫黄、トリフェニルホスフィン、水素化ホウ素リチウム、水素化ホウ素ナトリウム、三塩化リン、三臭化物等）を用いて、適切な不活性有機溶媒（例えば、アセトニトリル、エタノール、ジオキサン水溶液等）中で０〜８０℃において処理することによって調製することができる。
【０２７６】
本発明の化合物のプロドラッグ誘導体は、当業者に公知の方法によって調製することができる（例えば、さらなる詳細については、Saulnier et al., (1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, p. 1985を参照されたい）。例えば、適切なプロドラッグは、本発明の非誘導体化化合物を、適切なカルバミル化剤（例えば、１，１−アシルオキシアルキルカルバノクロリデート（acyloxyalkylcarbanochloridate）、炭酸パラ−ニトロフェニル等）と反応させることによって調製することができる。
【０２７７】
本発明の化合物の保護された誘導体は、当業者に公知の手段によって作成することができる。保護基の創作およびそれらの除去に適用できる技術の詳細な説明は、T. W. Greene, “Protecting Groups in Organic Chemistry”, 3rd edition, John Wiley and Sons, Inc., 1999に見出すことができる。
【０２７８】
本発明の化合物は、好都合には、本発明のプロセス中に、溶媒和物（例えば水和物）として調製または形成することができる。本発明の化合物の水和物は、好都合には、水性／有機溶媒の混合物から再結晶化させることによって、有機溶媒、例えばダイオキシン、テトラヒドロフランまたはメタノールを使用して調製することができる。
【０２７９】
本発明の化合物は、化合物のラセミ混合物を光学的に活性な分割剤と反応させて、一対のジアステレオマー化合物を形成し、ジアステレオマーを分離し、光学的に純粋なエナンチオマーを回収することによって、それらの個々の立体異性体として調製することができる。エナンチオマーの分割は、本発明の化合物の共有結合性のジアステレオマー誘導体を使用して実施することができるが、解離できる複合体が好ましい（例えば、結晶性ジアステレオマー塩）。ジアステレオマーは、明確な物理的特性（例えば、融点、沸点、可溶性、反応性等）を有し、これらの相違点を利用することによって容易に分離することができる。ジアステレオマーは、クロマトグラフィーによって、または好ましくは可溶性の差異に基づく分離／分割技術によって分離することができる。次に、ラセミ化を生じるおそれがない任意の実用的な手段によって、分割剤と共に光学的に純粋なエナンチオマーを回収する。化合物の立体異性体をそれらのラセミ混合物から分割するのに適用できる技術のより詳細な説明は、Jean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, “Enantiomers, Racemates and Resolutions”, John Wiley And Sons, Inc., 1981に見出すことができる。
【０２８０】
つまり、式Ｉの化合物は、
（ａ）反応スキームＩの方法、ならびに
（ｂ）任意に、本発明の化合物を、薬学的に許容される塩に変換すること、
（ｃ）任意に、本発明の化合物の塩形態を、塩ではない形態に変換すること、
（ｄ）任意に、本発明の化合物の未酸化形態を、薬学的に許容されるＮ−オキシドに変換すること、
（ｅ）任意に、本発明の化合物のＮ−オキシド形態を、その未酸化形態に変換すること、
（ｆ）任意に、本発明の化合物の個々の異性体を、異性体混合物から分割すること、
（ｇ）任意に、本発明の非誘導体化化合物を、薬学的に許容されるプロドラッグ誘導体に変換すること、および
（ｈ）任意に、本発明の化合物のプロドラッグ誘導体を、その非誘導体化形態に変換すること
を含む方法によって作成することができる。
【０２８１】
出発材料の生成について特に記載されない限り、化合物は、公知のものであり、または当技術分野で公知の方法と同様にもしくは以下の実施例に開示されている通りに調製することができる。
【０２８２】
当業者は、先の変換が、本発明の化合物を調製する方法の単に代表的なものであり、他の周知の方法を同様に使用できることを理解されよう。
【実施例】
【０２８３】
以下の実施例および中間体は、本発明の範囲を限定することなく、本発明を説明するのに役立つものである。実施例で使用するいくつかの略語は以下の通りである：酢酸（ＡｃＯＨ）；トリエチルアミン（ＴＥＡ）；テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）；水性（ａｑ．）；気圧（ａｔｍ．）；２，２’−ビス−ジフェニルホスファニル−［１，１’］ビナフタレニル（ＢＩＮＡＰ）；４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）；ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）；１，１−カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）；二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（ＢＯＣ２Ｏ）；ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−（ジメチルアミノ）−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＯＰ）；ジクロロメタン（ＤＣＭ）；ジエチルエーテル（Ｅｔ２Ｏ）；ｐ−トルエンスルホン酸（ＰＴＳＡ）；酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）；エタノール（ＥｔＯＨ）；リチウムビス（トリメチルシリル）アミド（ＬＨＭＤＳ）；アゾジカルボン酸ジイソプロピル（ＤＩＡＤ）；Ｎ，Ｎ−ジイソプロピル−エチルアミン（ＤＩＥＡまたはＤＩＰＥＡ）；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）；ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）；ジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰＡ）；時間（ｈ）；２−（１Ｈ−７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）；高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）；水素化アルミニウムリチウム（ＬＡＨ）；質量分析を連結した液体クロマトグラフィー（ＬＣＭＳ）；リチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）；メタノール（ＭｅＯＨ）；ミリリットル（ｍＬ）；分（ｍｉｎ）；マイクロ波（ＭＷ）；ｎ−ブチルリチウム（ｎ−ＢｕＬｉ）；１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）−フェロセンジクロロパラジウム（ＩＩ）（ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ））；トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（Ｐｄ２（ｄｂａ）３）；ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（ＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２）；室温（ＲＴ）；トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）；テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）；薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）；保持時間（ｔＲ）；および４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテン（キサントホス）。
【０２８４】
中間体１
６−クロロ−３−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−アミン
【０２８５】
【化１１】
0006534389.tif 000029
【０２８６】
ステップａ：
ジオキサン（１２ｍＬ）中の３−ブロモ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン（１．０ｇ、４．４２ｍｍｏｌ）、キサントホス（２５６ｍｇ、０．４４２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（２０３ｍｇ、０．２２１ｍｍｏｌ）の溶液に、２−エチルヘキシル−３−メルカプトプロパノエート（１．１ｍＬ、４．８７ｍｍｏｌ）を（室温でおよびＮ２下で）添加し、続いてＤＩＰＥＡ（１．５５ｍＬ、８．８５ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液をマイクロ波反応器内１１０℃で１時間撹拌した。室温に冷却した後、反応物をセライトのパッドに通して濾過し、続いてＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を濃縮し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から３０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、２−エチルヘキシル３−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）プロパノエート（１．４１ｇ、３．８８ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ３６４．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２８７】
ステップｂ：
ＴＨＦ（８ｍＬ）中の２−エチルヘキシル３−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）プロパノエート（１．０ｇ、２．７５ｍｍｏｌ）の溶液に、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（ＴＨＦ中１Ｍ、８．２５ｍＬ、８．２５ｍｍｏｌ）を−７８℃でおよびＮ２下で添加した。−７８℃で２０分間激しく撹拌した後、反応をＫ２ＣＯ３水溶液（２Ｍ、５００μＬ）でクエンチし、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物を、Ｋ２ＣＯ３水溶液（２Ｍ、３０ｍＬ）を含有する分液漏斗に注ぎ入れ、これをＥｔ２Ｏ（２×２０ｍＬ）で抽出した。水相をｐＨ４になるまで６Ｍ  ＨＣｌで酸性化し、得られた濁った懸濁液をＣＨＣｌ３：ＩＰＡ（９：１；３×２０ｍＬ）で抽出して、２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−チオール（３８０ｍｇ、２．１２ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ１８０．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２８８】
ステップｃ：
ジオキサン（２ｍＬ）中の２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−チオール（２８５ｍｇ、１．５９１ｍｍｏｌ）、３−ブロモ−６−クロロピラジン−２−アミン（４１４ｍｇ、１．９８８ｍｍｏｌ）、キサントホス（１０１ｍｇ、０．１７５ｍｍｏｌ）およびＰｄ２（ｄｂａ）３（７２．８ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（５５６μＬ、３．１８ｍｍｏｌ）を（室温でおよびＮ２下で）添加した。得られた溶液をマイクロ波反応器内１３０℃で１．５時間撹拌した。室温に冷却した後、反応物をＥｔＯＡｃで希釈し、これをセライトのパッドに通して濾過し、続いてＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を濃縮し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から３０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、６−クロロ−３−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−アミン（１．４１ｇ、３．８８ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 8.64 (dd, J=4.55, 1.26 Hz, 1 H), 7.90 (s, 1 H), 7.82 (dd, J=8.08, 0.76 Hz, 1 H), 7.46 (dd, J=8.08, 4.80 Hz, 1 H); 19F NMR (376 MHz, クロロホルム-d) δ ppm -64.34 (s, 1 F).ＭＳｍ／ｚ３０７．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２８９】
中間体２
６−（４−アミノ−４−メチルピペリジン−１−イル）−３−（２，３−ジクロロフェニル）ピラジン−２−アミン
【０２９０】
【化１２】
0006534389.tif 000030
【０２９１】
ＭｅＣＮ：Ｈ２Ｏ（９：１、１５ｍＬ、脱気）中の３−ブロモ−６−クロロピラジン−２−アミン（１．２ｇ、５．７６ｍｍｏｌ）、（２，３−ジクロロフェニル）ボロン酸（１．１ｇ、５．７６ｍｍｏｌ）、リン酸カリウム（３．６７ｇ、１７．２７ｍｍｏｌ）およびＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）・ＤＣＭ付加物（２３５ｍｇ、０．２８８ｍｍｏｌ）の懸濁液を、マイクロ波反応器内１２０℃で４時間撹拌した。室温に冷却した後、反応物をセライトのパッドに通して濾過し、続いてＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を濃縮し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から３０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、６−（４−アミノ−４−メチルピペリジン−１−イル）−３−（２，３−ジクロロフェニル）ピラジン−２−アミン（６３３ｍｇ、２．３０６ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ２７６．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２９２】
中間体３
６−クロロ−３−（（２，３−ジクロロフェニル）チオ）ピラジン−２−アミン
【０２９３】
【化１３】
0006534389.tif 000031
【０２９４】
ジオキサン（５０ｍＬ、脱気）中の３−ブロモ−６−クロロピラジン−２−アミン（５．０ｇ、２３．９９ｍｍｏｌ）、２，３−ジクロロベンゼンチオール（６．４４ｇ、３６．０ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（９１４ｍｇ、４．８０ｍｍｏｌ）、リン酸カリウム（１０．１８ｇ、４８．０ｍｍｏｌ）および１，１０−フェナントロリン（１．７３ｍｇ、９．５９ｍｍｏｌ）の混合物を、８５℃で１６時間撹拌した。室温に冷却した後、反応物をＥｔＯＡｃで希釈し、これをセライトのパッドに通して濾過し、続いてＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で洗浄した。揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から２５％の勾配のＤＣＭ／トルエン）により精製して、６−クロロ−３−（（２，３−ジクロロフェニル）チオ）ピラジン−２−アミン（３．７ｇ、１２．０７ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ３０６．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２９５】
中間体４
（Ｒ）および（Ｓ）−２−（７−アザスピロ［３．５］ノナン−１−イル）イソインドリン−１，３−ジオン
【０２９６】
【化１４】
0006534389.tif 000032
【０２９７】
ステップａ：
トルエン（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル１−アミノ−７−アザスピロ［３．５］ノナン−７−カルボキシレート（２５０ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）、無水フタル酸（１９３ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）、活性化モレキュラーシーブ（３オングストローム、２５０ｍｇ）およびＤＩＰＥＡ（５４５μＬ、３．１２ｍｍｏｌ）の懸濁液を、１０５℃で１６時間撹拌した。室温に冷却した後、混合物をセライトのパッドに通して濾過し、続いてＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で洗浄した。揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（５から４０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル１−（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）−７−アザスピロ［３．５］ノナン−７−カルボキシレート（２３３ｍｇ、０．６２９ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ３７０．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２９８】
ステップｂ：
ジオキサン（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル１−（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）−７−アザスピロ［３．５］ノナン−７−カルボキシレート（２３３ｍｇ、０．６２９ｍｍｏｌ）およびＨＣｌ（ジオキサン中４Ｍ、８００μＬ、３．２１ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で１６時間撹拌した。揮発物をｒｏｔａｖａｐ上で除去して、表題化合物のＨＣｌ塩（１９５ｍｇ、０．６３６ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ２７０．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２９９】
ステップｃ：
キラルＳＦＣ精製を、以下の条件下、すなわち；カラム：Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ  ＬＵＸ−２  ２１×２５０ｍｍ、流速：７５ｇ／分、移動相：ＣＯ２中５０％ＭｅＯＨおよび１０ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ、検出：２２０ｎｍ  ＵＶで行って、２つのピーク、Ｒｔ（Ｐ１）＝３．６分（エナンチオマーＲ）；Ｒｔ（Ｐ２）＝７．４分（エナンチオマーＳ）を得た。
【０３００】
中間体５
２−（１，１−ジオキシド−１−チア−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−イル）イソインドリン−１，３−ジオン
【０３０１】
【化１５】
0006534389.tif 000033
【０３０２】
ステップａ：
トルエン（３７ｍＬ）中の８−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１−チア−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−カルボン酸１，１−ジオキシド（Carreira et al., Org Lett., 2011, 13, 6134-6136に記載されている通りに４ステップでｔｅｒｔ−ブチル４−オキソピペリジン−１−カルボキシレートから調製した；２．００ｇ、６．００ｍｍｏｌ）、ジフェニルホスホルアジデート（diphenyl phosphorazidate）（２．０ｇ、７．２６ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（１．０ｍＬ、７．２６ｍｍｏｌ）の溶液を、１１５℃で１．５時間撹拌した。ベンジルアルコール（１．５０ｍＬ、１４．５２ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を１００℃で１６時間撹拌した。室温に冷却した後、反応混合物を、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液（３０ｍＬ）を含有する分液漏斗に注ぎ入れ、これをＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（１０から９０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−１−チア−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート１，１−ジオキシド（１．５７ｇ．３．５８ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。ＭＳｍ／ｚ３３９．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３０３】
ステップｂ：
ＴＨＦ（８ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−１−チア−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート１，１−ジオキシド（５７０ｍｇ．１．３０ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（木炭上１０％、１３８ｍｇ）の懸濁液を、Ｈ２雰囲気下で１６時間激しく撹拌した。反応物をセライトのプラグに通して濾過し、続いてＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で洗浄した。揮発物を減圧下で除去して、ｔｅｒｔ−ブチル４−アミノ−１−チア−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート１，１−ジオキシドを得、これをさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。
【０３０４】
ステップｃ：
トルエン（７ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−アミノ−１−チア−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート１，１−ジオキシド（４１５ｍｇ、１．３６３ｍｍｏｌ）、無水フタル酸（２５２ｍｇ、１．７０４ｍｍｏｌ）および活性化モレキュラーシーブ（３オングストローム、５００ｍｇ）の懸濁液を、１１５℃で１６時間激しく撹拌した。室温に冷却した後、混合物をセライトのパッドに通して濾過し、続いてＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で洗浄し、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から１０％の勾配のＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）−１−チア−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート１，１−ジオキシド（３８５ｍｇ、０．８８６ｍｍｏｌ）を白色泡状物として得た。ＭＳｍ／ｚ４３３．１（Ｍ−Ｈ）−。
【０３０５】
ステップｄ：
ジオキサン（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）−１−チア−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート１，１−ジオキシド（３８５ｍｇ、０．８８６ｍｍｏｌ）およびＨＣｌ（ジオキサン中４Ｍ、２．２２ｍＬ、８．８６ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で１６時間撹拌した。混合物をジオキサン（２０ｍＬ）で希釈し、濾過して、２−（１，１−ジオキシド−１−チア−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（ＨＣｌ塩、３２８ｍｇ、０．８８４ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。ＭＳｍ／ｚ３３５．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３０６】
中間体６
（Ｒ）−２−メチル−Ｎ−（（Ｓ）−７−アザスピロ［３．５］ノナン−１−イル）プロパン−２−スルフィンアミド
【０３０７】
【化１６】
0006534389.tif 000034
【０３０８】
ステップａ：
ＴＨＦ（９９ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル１−オキソ−７−アザスピロ［３．５］ノナン−７−カルボキシレート（５．２４ｇ、２１．９ｍｍｏｌ）、チタン（ＩＶ）イソプロポキシド（１６．２ｍＬ、５４．７ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（３．４５ｇ、２８．５ｍｍｏｌ）の溶液を、６５℃で１２時間撹拌した。−７８℃に冷却した後、ＭｅＯＨ（９．９ｍＬ）、続いて水素化ホウ素リチウム（１．４３ｇ、６５．７ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を−７８℃で３時間および室温で１時間撹拌した。ＭｅＯＨをゆっくりと添加して過剰のホウ水素化物（borohydride）をクエンチし、続いてブラインを添加した。得られた混合物を１５分間撹拌し、次いでセライトに通して濾過した。水性混合物をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から５０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−７−アザスピロ［３．５］ノナン−７−カルボキシレート（４．７９ｇ．１３．９０ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。ＭＳｍ／ｚ３４５．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３０９】
ステップｂ：
ＤＣＭ（３．５ｍＬ）中の（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−７−アザスピロ［３．５］ノナン−７−カルボキシレート（０．４ｇ、１．１６ｍｍｏｌ）およびＴＦＡ（４５０μＬ、５．８１ｍｍｏｌ）の溶液を、４０℃で３０分間撹拌した。ｐＨ１１になるまでＮａ２ＣＯ３飽和水溶液を添加し、水性混合物をＤＣＭ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去して、（Ｒ）−２−メチル−Ｎ−（（Ｓ）−７−アザスピロ［３．５］ノナン−１−イル）プロパン−２−スルフィンアミド（２３７ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。ＭＳｍ／ｚ２４５．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３１０】
中間体７
Ｎ−（４−メトキシベンジル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン
【０３１１】
【化１７】
0006534389.tif 000035
【０３１２】
ステップａ：
ＤＣＥ（７ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（１．８ｇ、７．１１ｍｍｏｌ）および（４−メトキシフェニル）メタンアミン（１．０７ｇ、７．８２ｍｍｏｌ）の溶液に、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（２．２３ｇ、３５．５ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加し、室温で６５時間撹拌した。混合物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液（１０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、濃縮した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から２％の勾配のＭｅＯＨ／ＤＣＭ、０．２５％Ｅｔ３Ｎで修飾、続いて０から５０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル１−（（４−メトキシベンジル）アミノ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（１．１ｇ、２．９４ｍｍｏｌ）を無色ロウ状物として得た。ＭＳｍ／ｚ３７５．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３１３】
ステップｂ：
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル１−（（４−メトキシベンジル）アミノ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（１．１ｇ、２．９４ｍｍｏｌ）およびＴＦＡ（２ｍＬ）の溶液を、０℃で１５分間撹拌した。揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をＮａＨＣＯ３水溶液（１０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（４×１０ｍＬ）で抽出して、Ｎ−（４−メトキシベンジル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（０．８ｇ、２．９２ｍｍｏｌ）を無色油状物として得た。ＭＳｍ／ｚ２７５．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３１４】
ｔｅｒｔ−ブチル７−オキソ−３−アザスピロ［５．５］ウンデカン−３−カルボキシレートから出発し、上記手順に従って、Ｎ−（４−メトキシベンジル）−３−アザスピロ［５．５］ウンデカン−７−アミンを得た。
【０３１５】
中間体８
Ｎ−（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン
【０３１６】
【化１８】
0006534389.tif 000036
【０３１７】
ステップａ：
ＤＣＥ（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（１．１５ｇ、４．５４ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エタンアミン（９６１ｍｇ、６．３６ｍｍｏｌ）の溶液に、シアノ水素化ホウ素ナトリウムを少量ずつ添加し、室温で１６時間撹拌した。混合物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液（５ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、濃縮した。ジアステレオマーの９：１混合物を含有する得られた残留物を、シリカクロマトグラフィー（０から２０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、純粋なｔｅｒｔ−ブチル１−（（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）アミノ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（主ジアステレオマー；４３１ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.18-7.24 (m, 2 H), 6.81-6.86 (m, 2 H), 3.76 (d, J=13.64 Hz, 1 H), 3.72 (s, 3 H), 3.64-3.70 (m, 2 H), 2.65-2.92 (m, 2 H), 2.05-2.14 (m, 1 H), 1.80-1.91 (m, 1 H), 1.65-1.75 (m, 1 H), 1.42-1.60 (m, 4 H), 1.40 (s, 9 H), 1.28-1.35 (m, 1 H), 1.20 (d, J=6.57 Hz, 3 H), 1.09-1.17 (m, 2 H), 0.80 (d, J=11.37 Hz, 1 H).ＭＳｍ／ｚ３８９．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３１８】
ステップｂ：
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル１−（（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）アミノ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（主ジアステレオマー；４３１ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（２ｍＬ）を添加し、室温で１０分間撹拌した。ＤＣＭをさらに添加して反応物を濃縮し、次いで飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で希釈し、ＤＣＭ（３×２０ｍＬ）で抽出した。有機物をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、Ｎ−（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンを得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ 7.25 (d, J=8.6 Hz, 2 H), 6.87 (d, J=8.7 Hz, 2 H), 3.85-3.78 (m, 1 H), 3.78 (s, 3 H), 3.35 (m, 1 H), 3.28 (m, 1 H), 3.03 (m, 2 H), 2.63 (dd, J=9.6, 7.3 Hz, 1 H), 2.06-1.85 (m, 2 H), 1.83-1.69 (m, 2 H), 1.62 (m, 1 H), 1.54-1.38 (m, 4 H), 1.33 (d, J=6.6 Hz, 3 H), 1.31-1.23 (m, 1 H).ＭＳｍ／ｚ２８９．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３１９】
中間体９
Ｎ−（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−アミン
【０３２０】
【化１９】
0006534389.tif 000037
【０３２１】
ステップａ：
ＤＣＥ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−オキソ−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（Carreira et al., Org Lett., 2013, 15, 4766-4769に記載されている通りに３ステップでｔｅｒｔ−ブチル４−オキソピペリジン−１−カルボキシレートから調製した；２００ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エタンアミン（４７４ｍｇ、３．１３ｍｍｏｌ）の溶液に、シアノ水素化ホウ素ナトリウムを少量ずつ添加した（３９３ｍｇ、３．１３ｍｍｏｌ）。得られた反応物を室温で１６時間撹拌した。水素化ホウ素リチウム（３４ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で３０分間撹拌した。混合物をＭｅＯＨ（２ｍＬ）で希釈し、揮発物を減圧下で除去した（２回）。ＮａＨＣＯ３飽和水溶液（５ｍＬ）を添加し、混合物をＤＣＭ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去した。得られたジアステレオマーの９：１混合物をシリカクロマトグラフィー（０から４０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ジアステレオマー的に純粋なｔｅｒｔ−ブチル４−（（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）アミノ）−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（６５ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を得た。主ジアステレオマー：1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.15 (d, J=8.6 Hz, 2 H), 6.79 (d, J=8.6 Hz, 2 H), 3.96-3.76 (m, 2 H), 3.77-3.66 (m, 5 H), 3.60 (t, J=8.1 Hz, 1 H), 2.98 (m, 2 H), 2.76 (t, J=7.8 Hz, 1 H), 1.95 (m, 1 H), 1.67-1.41 (m, 4 H), 1.40 (s, 9 H), 1.33 (d, J=3.1 Hz, 1 H), 1.21 (d, J=6.5 Hz, 3 H), 1.08-0.92 (m, 1 H).ＭＳｍ／ｚ３９１．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３２２】
ステップｂ：
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）アミノ）−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（主ジアステレオマー、６５ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）およびＴＦＡ（２ｍＬ）の溶液を、室温で１０分間撹拌した。揮発物を減圧下で除去し、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液（５ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去して、Ｎ−（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−アミン（４０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）を得、これをさらに精製することなく使用した。ＭＳｍ／ｚ２９１．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３２３】
中間体１０
３−（（２−アミノ−３−クロロピリジン−４−イル）チオ）−６−クロロピラジン−２−アミン
【０３２４】
【化２０】
0006534389.tif 000038
【０３２５】
ステップａ：
市販の２，３−ジクロロ−４−ヨードピリジンを、Marie et al., Molecules, 2012, 17,10683-10707に記載されている手順ａにより、３−クロロ−４−ヨードピリジン−２−アミンに変換した。
【０３２６】
ステップｂ：
ジオキサン（３ｍＬ）中の３−アミノ−５−クロロピラジン−２−チオール（１００ｍｇ、０．６１９ｍｍｏｌ）、３−クロロ−４−ヨードピリジン−２−アミン（３１５ｍｇ、１．２３８ｍｍｏｌ）、キサントホス（３５．８ｍｇ、０．０６２ｍｍｏｌ）およびＰｄ２（ｄｂａ）３（２８．３ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（３２４μＬ、１．８５６ｍｍｏｌ）を（室温でおよびＮ２下で）添加した。得られた溶液をマイクロ波反応器内１００℃で２．５時間撹拌した。室温に冷却した後、反応物をＥｔＯＡｃで希釈し、これをセライトのパッドに通して濾過し、続いてＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を濃縮し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から５％の勾配のＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により精製して、３−（（２−アミノ−３−クロロピリジン−４−イル）チオ）−６−クロロピラジン−２−アミン（１．４１ｇ、３．８８ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm 7.88 (s, 1 H), 7.68 (d, J=5.56 Hz, 1 H), 6.06 (d, J=5.56 Hz, 1 H), 1.35-1.43 (m, 2 H).ＭＳｍ／ｚ２８８．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３２７】
中間体１１
３−アミノ−５−クロロピラジン−２−チオール
【０３２８】
【化２１】
0006534389.tif 000039
【０３２９】
ステップａ：
ジオキサン（１１９ｍＬ）中の３−ブロモ−６−クロロピラジン−２−アミン（４．９５ｇ、２３．７４ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素で１０分間スパージした。次いで、２−エチルヘキシル３−メルカプトプロパノエート（３．７９ｍＬ、２４．９２ｍｍｏｌ）、キサントホス（１．３７ｇ、２．３７ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１．０８ｇ、１．１９ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（８．２９ｍＬ、４７．５ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を１０５℃で２４時間撹拌し、反応混合物をセライトに通して濾過し、濃縮した。粗製物をシリカクロマトグラフィー（０〜４０％勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、２−エチルヘキシル３−（（３−アミノ−５−クロロピラジン−２−イル）チオ）プロパノエート（６．２４ｇ、１８．０４ｍｍｏｌ）を黄色油状物として得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 7.82 (s, 1 H), 4.93 (br. s., 2 H), 4.14-3.96 (m, 2 H), 3.47 (t, J=6.9 Hz, 2 H), 2.78 (t, J=6.9 Hz, 2 H), 1.67-1.51 (m, 1 H), 1.44-1.20 (m, 8 H), 0.90 (t, J=7.4 Hz, 6 H).ＭＳｍ／ｚ３４６．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３３０】
ステップｂ：
−７８℃のＴＨＦ（３３ｍＬ）中の２−エチルヘキシル３−（（３−アミノ−５−クロロピラジン−２−イル）チオ）プロパノエート（２．３ｇ、６．６５ｍｍｏｌ）の溶液に、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（ＴＨＦ中１Ｍ、１９．９５ｍＬ、１９．９５ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を−７８℃で１時間撹拌した。ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）を添加し、得られた混合物を濃縮した。粗製物をＭｅＯＨに溶解し、濾過し、ＨＰＬＣ（勾配溶出５〜２０％、水中アセトニトリル、０．１％ＴＦＡ修飾剤（modifier））により精製して、３−アミノ−５−クロロピラジン−２−チオール（ＴＦＡ塩：１．３ｇ、４．７２ｍｍｏｌ）を黄色固体として得た。ＭＳｍ／ｚ１６２．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３３１】
中間体１２
６−クロロ−３−（（３−クロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−アミン
【０３３２】
【化２２】
0006534389.tif 000040
【０３３３】
ジオキサン（４．９ｍＬ）中の３−アミノ−５−クロロピラジン−２−チオール（ＴＦＡ塩：０．１５８ｇ、０．９７８ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素で１０分間スパージした。次いで、３−クロロ−４−ヨードピリジン（０．４６８ｇ、１．９５５ｍｍｏｌ）、キサントホス（０．０５７ｇ、０．０９８ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（０．０４５ｇ、０．０４９ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．５１２ｍＬ、２．９３ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を１０５℃で１０時間撹拌し、セライトに通して濾過し、濃縮した。粗製物をシリカクロマトグラフィー（０〜４０％勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン；ヘプタンは２％のＥｔ３Ｎを含有）により精製して、６−クロロ−３−（（３−クロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−アミン（７５ｍｇ、０．２７４ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 8.46 (s, 1 H), 8.22 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 7.96 (s, 1 H), 6.68 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 5.17 (br. s., 2 H).ＭＳｍ／ｚ２７３．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３３４】
中間体１３
６−クロロ−３−（（２−クロロピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−アミン
【０３３５】
【化２３】
0006534389.tif 000041
【０３３６】
ジオキサン（６．２ｍＬ）中の３−アミノ−５−クロロピラジン−２−チオール（ＴＦＡ塩：０．２ｇ、１．２３８ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素で１０分間スパージした。次いで、２−クロロ−３−ヨードピリジン（０．５９３ｇ、２．４７５ｍｍｏｌ）、キサントホス（０．０７２ｇ、０．１２４ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（０．０５７ｇ、０．０６２ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．６５ｍＬ、３．７１ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を１０５℃で１０時間撹拌し、セライトに通して濾過し、濃縮した。粗製物をシリカクロマトグラフィー（０〜４０％勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン、２％のＥｔ３Ｎを含有）により精製して、６−クロロ−３−（（２−クロロピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−アミン（９５ｍｇ、０．３４８ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 8.28-8.38 (m, 1 H), 7.91 (s, 1 H), 7.51-7.59 (m, 1 H), 7.22 (dd, J=7.9, 4.6 Hz, 1 H), 5.25 (br. s., 2 H).ＭＳｍ／ｚ２７３．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３３７】
中間体１４
６−クロロ−３−（（２，３−ジクロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−アミン
【０３３８】
【化２４】
0006534389.tif 000042
【０３３９】
ジオキサン（９０ｍＬ）中の３−アミノ−５−クロロピラジン−２−チオール（ＴＦＡ塩：０．５０ｇ、１．８１４ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素で１０分間脱気した。次いで、２，３−ジクロロ−４−ヨードピリジン（０．０．９９ｇ、３．６３ｍｍｏｌ）、キサントホス（０．１０５ｇ、０．１８１ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（０．０８３ｇ、０．０９１ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．９５ｍＬ、５．４４ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を１０５℃で１０時間撹拌し、セライトに通して濾過し、濃縮した。粗製物をシリカクロマトグラフィー（０〜１０％勾配のＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ）により精製した。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.13 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 7.95 (s, 1 H), 7.30 (br. s, 2 H), 6.83 (d, J=5.3 Hz, 1 H).ＭＳｍ／ｚ３０６．９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３４０】
中間体１５
６−クロロ−３−（（３−クロロ−２−フルオロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−アミン
【０３４１】
【化２５】
0006534389.tif 000043
【０３４２】
ジオキサン（１．８ｍＬ）中の３−アミノ−５−クロロピラジン−２−チオール（ＴＦＡ塩：５０ｍｇ、０．１８１ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素で１０分間スパージした。次いで、３−クロロ−２−フルオロ−４−ヨードピリジン（０．１４０ｇ、０．５４４ｍｍｏｌ）、キサントホス（１１ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（８ｍｇ、０．００９ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（９５μＬ、０．５４４ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を１００℃で１０時間撹拌し、セライトに通して濾過し、濃縮した。粗製物をシリカクロマトグラフィー（０から４０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン；ヘプタンは２％のＥｔ３Ｎを含有）により精製して、６−クロロ−３−（（３−クロロ−２−フルオロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−アミン（４１ｍｇ、０．１３７ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 8.06 (s, 1 H), 7.91 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 6.63 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 5.30 (br. s, 2 H).ＭＳｍ／ｚ２９１．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３４３】
中間体１７
２−（２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−イル）イソインドリン−１，３−ジオン
【０３４４】
【化２６】
0006534389.tif 000044
【０３４５】
Ｄｉｒａｔら、ＰＣＴ国際出願第２００４４０７８７５０号、２００４年９月１６日の手順に従って、４ステップで、１−ｔｅｒｔ−ブチル４−エチルピペリジン−１，４−ジカルボキシレートからｔｅｒｔ−ブチル４−ヒドロキシ−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート、1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ 4.13 (dd, J=10.1, 4.6 Hz, 1 H), 4.03 (dd, J=4.6, 2.0 Hz, 1 H), 3.78-3.71 (m, 2 H), 3.69 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 3.67-3.58 (m, 2 H), 3.29 (m, 1 H), 3.16 (m, 1 H), 1.78 (m, 2 H), 1.58 (m, 1 H), 1.50 (m, 2 H), 1.47 (s, 9 H).ＭＳｍ／ｚ２５８．１（Ｍ−Ｈ）＋を調製し、次いで、以下のように２ステップで、２−（２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−イル）イソインドリン−１，３−ジオンに変換した。
【０３４６】
ステップａ：
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−ヒドロキシ−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（３０６ｍｇ、１．１９ｍｍｏｌ）、フタルイミド（２６２ｍｇ、１．７８ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（４６８ｍｇ、１．７８ｍｍｏｌ）の溶液に、ジイソプロピルアザジカルボキシレート（０．３７４ｍＬ、１．７８ｍｍｏｌ）を添加し、１６時間撹拌した。濃縮し、シリカクロマトグラフィー（０から５０％の勾配の酢酸エチル／ヘプタン）により精製して、ラセミｔｅｒｔ−ブチル４−（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（１９０ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ 7.88 (dd, J=5.4, 3.0 Hz, 2 H), 7.77 (dd, J=5.5, 3.0 Hz, 2 H), 4.65 (dd, J=8.7, 5.6 Hz, 1 H), 4.40 (dd, J=9.5, 5.6 Hz, 1 H), 4.26 (t, J=9.0 Hz, 1 H), 4.08 (d, J=8.5 Hz, 1 H), 3.98 (d, J=8.5 Hz, 1 H), 3.84 (m, 1 H), 3.58 (m, 1 H), 3.20 (m, 1 H), 2.94 (m, 1 H), 1.73 (m, 2 H), 1.56 (s, 9 H), 1.42-1.36 (m, 2 H).
【０３４７】
ステップｂ：
ジクロロメタン（３ｍＬ）中のラセミｔｅｒｔ−ブチル４−（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（１９０ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）の溶液に、トリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を添加した。ジクロロメタン、次いでアセトニトリルをさらに添加して濃縮して、２−（２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−イル）イソインドリン−１，３−ジオンをＴＦＡ塩（定量的）として得た。ＭＳｍ／ｚ２８７．０（Ｍ＋Ｈ）＋。さらに特性決定することなく使用した。
【０３４８】
中間体１８
２−クロロ−３−メルカプトベンズアミド
【０３４９】
【化２７】
0006534389.tif 000045
【０３５０】
ステップａ：
ＤＭＦ（１００ｍＬ）中の２−クロロ−３−フルオロベンゾニトリル（３．１５ｇ、２０．２５ｍｍｏｌ）、２−メチルプロパン−２−チオール（２．２８３ｍＬ、２０．２５ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（６．５９８ｇ、２０．２５ｍｍｏｌ）の混合物を、２２℃で４８時間撹拌した。反応混合物を水（２００ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で希釈した。ＥｔＯＡｃ層を水（３×３００ｍＬ）、ブライン（３×１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。得られた残留物をＨＰＬＣ（勾配溶出：水中４５から７０％のアセトニトリル、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）により精製して、３−（ｔｅｒｔ−ブチルチオ）−２−クロロベンゾニトリル（１．３３ｇ、５．８９ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ２２６．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３５１】
ステップｂ：
ＭｅＯＨ（１１ｍＬ）中の３−（ｔｅｒｔ−ブチルチオ）−２−クロロベンゾニトリル（２１７ｍｇ、０．９６１ｍｍｏｌ）およびＮａＯＨ（１Ｎ、２．８８ｍＬ、２．８８ｍｍｏｌ）の混合物に、マイクロ波反応器内９０℃で３５分間照射を行った。室温に冷却した後、反応物を濃縮し、ＭｅＯＨに溶解した。固体を濾別し、濾液をほとんど乾固するまで濃縮し、ＨＰＬＣ（勾配溶出：水中２５から５０％のアセトニトリル、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）により精製して、３−（ｔｅｒｔ−ブチルチオ）−２−クロロベンズアミド（９３．６ｍｇ、０．３８４ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ２４４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３５２】
ステップｃ：
３−（ｔｅｒｔ−ブチルチオ）−２−クロロベンズアミド（１９０ｍｇ、０．７７９ｍｍｏｌ）および濃ＨＣｌ（２．３６ｍＬ、７８ｍｍｏｌ）の混合物を、８５℃で４５分間撹拌した。室温に冷却した後、反応物を濃縮乾固して、粗製の２−クロロ−３−メルカプトベンズアミド（ＨＣｌ塩：１５６ｍｇ、０．６５１ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ１８８（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３５３】
中間体１９
２−（８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−イル）イソインドリン−１，３−ジオン
【０３５４】
【化２８】
0006534389.tif 000046
【０３５５】
２−（２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−イル）イソインドリン−１，３−ジオンＴＦＡ塩を、上記の標準的な手順を用いて、６−クロロ−３−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−アミン（１５１ｍｇ、０．４９２ｍｍｏｌ）とカップリングさせた。ＤＣＭで希釈し、シリカクロマトグラフィー（０から６０％の勾配の酢酸エチル／ヘプタン）により精製して、２−（８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（０．１４０ｇ、０．１７８ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ５５７．１（Ｍ＋Ｈ）＋。キラルＳＦＣ精製を、以下の通り、すなわち；カラム：ＯＪ−Ｈ  ２１×２５０ｍｍ、流速：８０ｇ／分、移動相：ＣＯ２中４５％ＭｅＯＨおよび５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ、検出：マストリガーを行って、単一エナンチオマー  ピーク１（Ｐ１）、Ｒｔ：２．７７分  ＭＳｍ／ｚ５５７．１（Ｍ＋Ｈ）＋、およびピーク２（Ｐ２）、Ｒｔ：３．９１分  ＭＳｍ／ｚ５５７．２（Ｍ＋Ｈ）＋を得た。さらに特性決定することなく、フタルイミド脱保護を各エナンチオマーに別々に行った。
【０３５６】
中間体２０
３−クロロ−４−ヨード−Ｎ，Ｎ−ジメチルピリジン−２−アミン
【０３５７】
【化２９】
0006534389.tif 000047
【０３５８】
ＤＭＳＯ（３．４ｍＬ）中の３−クロロ−２−フルオロ−４−ヨードピリジン（０．２６ｇ、１．０１ｍｍｏｌ）およびジメチルアミン（ＴＨＦ中２Ｍ、１．５ｍｌ、３．０３ｍｍｏｌ）の溶液を、７０℃で２時間撹拌した。室温に冷却した後、水を添加し、水性混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相を水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、３−クロロ−４−ヨード−Ｎ，Ｎ−ジメチルピリジン−２−アミン（０．２６ｇ、０．９２２ｍｍｏｌ）を無色油状物として得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 7.75 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 7.33 (d, J=5.0 Hz, 1 H), 3.00 (s, 6 H).ＭＳｍ／ｚ２８２．９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３５９】
中間体２１
３−クロロ−４−ヨード−２−メトキシピリジン
【０３６０】
【化３０】
0006534389.tif 000048
【０３６１】
ＤＭＳＯ（１．９ｍＬ）中の３−クロロ−２−フルオロ−４−ヨードピリジン（１５０ｍｇ、０．５７１ｍｍｏｌ）およびＮａＯＭｅ（ＭｅＯＨ中０．５Ｍ、３．４ｍｌ、１．７１ｍｍｏｌ）の溶液を、７０℃で１時間撹拌した。室温に冷却した後、水を添加し、水性混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相を水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、３−クロロ−４−ヨード−２−メトキシピリジン（１２３ｍｇ、０．４５６ｍｍｏｌ）を無色油状物として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.81 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 7.55 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 3.92 (s, 3 H).ＭＳｍ／ｚ２６９．９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３６２】
中間体２２
６−クロロ−３−（（３−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−アミン
【０３６３】
【化３１】
0006534389.tif 000049
【０３６４】
ジオキサン（脱気、５０ｍＬ）中の３−アミノ−５−クロロピラジン−２−チオール（７５０ｍｇ、４．０９ｍｍｏｌ）、４−ブロモ−３−（トリフルオロメチル）ピリジン（１．６３ｇ、５．３１ｍｍｏｌ）、キサントホス（２３６ｍｇ、０．４０９ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１８７ｍｇ、０．２０４ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２．１４ｍＬ、１２．２６ｍｍｏｌ）の混合物を、１００℃で１６時間撹拌した。室温に冷却した後、反応物をセライトのパッドに通して濾過し、続いてＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を減圧下で濃縮し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から４０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ）により精製して、６−クロロ−３−（（３−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−アミン（７２２ｍｇ、２．３５ｍｍｏｌ）を薄黄色固体として得た。ＭＳｍ／ｚ３０７．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３６５】
以下の化合物は、上記手順または上記手順を変更したものを用い、対応するヨードピリジルまたはブロモピリジルおよびチオレートを使用して合成した。
【０３６６】
【表１０】
0006534389.tif 000050
【０３６７】
中間体２３
６−クロロ−３−（（３−クロロピリダジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−アミン
【０３６８】
【化３２】
0006534389.tif 000051
【０３６９】
ＭｅＣＮ（５．５ｍＬ）中の３−アミノ−５−クロロピラジン−２−チオール（１００ｍｇ、０．５４５ｍｍｏｌ）、３，４−ジクロロピリダジン（８１ｍｇ、０．５４５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．１４２ｍＬ、０．８１７ｍｍｏｌ）の混合物を、５０℃で１２時間撹拌した。室温に冷却した後、沈殿物を真空濾過により収集して、６−クロロ−３−（（３−クロロピリダジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−アミン（１０１ｍｇ、０．３６８ｍｍｏｌ）を茶色固体として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.90 (d, J=5.4 Hz, 1 H), 7.95 (s, 1 H), 7.31 (s, 2 H), 7.15 (d, J=5.3 Hz, 1 H).ＭＳｍ／ｚ２７４．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３７０】
中間体２４
ｔｅｒｔ−ブチル１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−カルボキシレート
【０３７１】
【化３３】
0006534389.tif 000052
【０３７２】
ステップａ：
ＤＭＦ（３２８ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−ホルミルピペリジン−１−カルボキシレート（３５．０ｇ、１６４ｍｍｏｌ）、リチウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１５．７７ｇ、１９７ｍｍｏｌ）およびアリルブロミド（１１．５４ｍＬ、１８９ｍｍｏｌ）の混合物を、０℃で１時間撹拌した。混合物を、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液：Ｈ２Ｏ（１：１、５００ｍＬ）を含有する分液漏斗に注ぎ入れ、これをＥｔ２Ｏ（５×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から２５％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−アリル−４−ホルミルピペリジン−１−カルボキシレート（２４ｇ、９５ｍｍｏｌ）を無色油状物として得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 9.52 (s, 1 H), 5.53-5.76 (m, 1 H), 4.96-5.19 (m, 2 H), 3.80 (br. s., 2 H), 2.97 (t, J=11.49 Hz, 2 H), 2.26 (d, J=7.33 Hz, 2 H), 1.95 (dt, J=13.71, 3.13 Hz, 2 H), 1.38-1.58 (m, 11 H).
【０３７３】
ステップｂ：
ＴＨＦ（３００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−アリル−４−ホルミルピペリジン−１−カルボキシレート（２４ｇ、９５ｍｍｏｌ）の溶液に、臭化ビニルマグネシウム（ＴＨＦ中１Ｍ、１１８ｍＬ、１１８ｍｍｏｌ）を（−７８℃でおよびＮ２下で）添加した。得られた溶液を１時間以内でゆっくりと室温まで加温した。混合物を、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（２５０ｍＬ）を含有する分液漏斗に注ぎ入れ、これをＥｔＯＡｃ（４×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去して、ｔｅｒｔ−ブチル４−アリル−４−（１−ヒドロキシアリル）ピペリジン−１−カルボキシレート（２６．７ｇ、９５ｍｍｏｌ）を無色油状物として得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 9.52 (s, 1 H), 5.56-5.75 (m, 1 H), 5.05-5.18 (m, 2 H), 3.80 (br. s., 2 H), 2.97 (t, J=11.49 Hz, 2 H), 2.26 (d, J=7.33 Hz, 2 H), 1.96 (dt, J=13.83, 3.06 Hz, 2 H), 1.49-1.60 (m, 2 H), 1.41-1.49 (m, 9 H).この化合物をさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。
【０３７４】
ステップｃ：
ＤＣＭ（３８０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−アリル−４−（１−ヒドロキシアリル）ピペリジン−１−カルボキシレート（２６．７ｇ、９５ｍｍｏｌ）およびデス−マーチンペルヨージナン（４４．３ｇ、１０５ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で１時間撹拌した。混合物を、ＮａＨＣＯ３：Ｎａ２ＳＯ３飽和水溶液（１：１、３００ｍＬ）を含有する分液漏斗に注ぎ入れ、これをＤＣＭ（４×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去して、白色固体を得た。この固体をヘプタン（２５０ｍＬ）中に懸濁させ、５分間超音波処理した。白色懸濁液をセライトのパッドに通して濾過し、揮発物を減圧下で除去して、ｔｅｒｔ−ブチル４−アクリロイル−４−アリルピペリジン−１−カルボキシレート（２６．５ｇ、９５ｍｍｏｌ）を黄色油状物として得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 6.81 (dd, J=16.93, 10.36 Hz, 1 H), 6.40 (dd, J=16.80, 1.89 Hz, 1 H), 5.71 (dd, J=10.36, 2.02 Hz, 1 H), 5.46-5.66 (m, 1 H), 4.91-5.14 (m, 2 H), 3.78 (br. s., 2 H), 2.96 (br. s., 2 H), 2.25-2.39 (m, 2 H), 1.97-2.15 (m, 2 H), 1.37-1.57 (m, 11 H).この化合物をさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。
【０３７５】
ステップｄ：
トルエン（脱気、８５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−アクリロイル−４−アリルピペリジン−１−カルボキシレート（２６．５ｇ、９５ｍｍｏｌ）の溶液に、トルエン（脱気、１００ｍＬ）中のＧｒｕｂｂｓ  ＩＩ触媒（２．０２ｇ、２．３８ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を８５℃で４５分間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から４０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−カルボキシレート（２０．７６ｇ、８３ｍｍｏｌ）を茶色固体として得た。トルエン（５４０ｍＬ）中のこの化合物およびＤＤＱ（５６５ｍｇ、２．４９ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で１５分間撹拌した。得られた明赤色溶液をセライトのパッドに通して濾過した。木炭（２００ｇ）を添加し、得られた懸濁液を室温で２時間撹拌した。混合物をセライトのパッドに通して濾過し、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から４０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−カルボキシレート（１５．６ｇ、６２．３ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 7.63-7.74 (m, 1 H), 6.20 (dt, J=5.81, 2.15 Hz, 1 H), 3.99-4.25 (m, 2 H), 2.92 (t, J=11.62 Hz, 2 H), 2.63 (s, 2 H), 1.72-1.86 (m, 2 H), 1.49 (s, 9 H), 1.29 (d, J=12.88 Hz, 2 H).
【０３７６】
中間体２５
ｔｅｒｔ−ブチル１−（１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート
【０３７７】
【化３４】
0006534389.tif 000053
【０３７８】
ステップａ：
Ｅｔ２Ｏ（１００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−カルボキシレート（４．２ｇ、１６．７１ｍｍｏｌ）およびＣｕＩ（６．３７ｇ、３３．４ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ＭｅＬｉ（ＴＨＦ中１．６Ｍ、３１．３ｍＬ、５０．１ｍｍｏｌ）を（０℃でおよびＮ２下で）添加した。０℃で９０分間撹拌した後、混合物を、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液を含有する分液漏斗に注ぎ入れ、これをＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から５０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−メチル−１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−カルボキシレート（４．２３ｇ、１５．８２ｍｍｏｌ）を無色油状物として得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 3.89-4.00 (m, 1 H), 3.83 (d, J=13.39 Hz, 1 H), 3.11 (ddd, J=13.64, 10.36, 3.28 Hz, 1 H), 2.99 (ddd, J=13.58, 10.42, 3.54 Hz, 1 H), 2.47-2.59 (m, 1 H), 2.19-2.36 (m, 2 H), 1.74-1.97 (m, 2 H), 1.50-1.65 (m, 2 H), 1.48 (s, 9 H), 1.33-1.44 (m, 2 H), 1.17 (d, J=6.32 Hz, 3 H).
【０３７９】
ステップｂ：
ＴＨＦ（１２．５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル３−メチル−１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−カルボキシレート（５０２ｍｇ、１．８７８ｍｍｏｌ）、チタン（ＩＶ）エトキシド（１．５７ｍＬ、７．５１ｍｍｏｌ）および２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（４５５ｍｇ、３．７６ｍｍｏｌ）の溶液を、６５℃で１６時間撹拌した。０℃に冷却した後、ＭｅＯＨ（３ｍＬ）、続いて水素化ホウ素リチウム（１２３ｍｇ、５．６３ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を０℃で１時間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液をゆっくりと添加して過剰のホウ水素化物をクエンチし、続いてＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）を添加した。得られた混合物を１５分間激しく撹拌し、次いでセライトのパッドに通して濾過した。揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から７５％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル１−（１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（４６３ｍｇ、１．２４３ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。
【０３８０】
中間体２６ａ／ｂ
（１Ｒ，３Ｓ）−ベンジル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレートおよび（１Ｒ，３Ｒ）−ベンジル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート
【０３８１】
【化３５】
0006534389.tif 000054
【０３８２】
ステップａ：
ＤＣＭ（８０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル３−メチル−１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−カルボキシレート（４．２３ｇ、１５．８２ｍｍｏｌ）およびＴＦＡ（１７ｍＬ）の混合物を、室温で３０分間撹拌した。揮発物を減圧下で除去した。ＤＣＭ（８０ｍＬ）中の得られた残留物、ＤＩＰＥＡ（１３．８２ｍＬ、７９ｍｍｏｌ）およびクロロギ酸ベンジル（３．３９ｍＬ、２３．７３ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で１６時間撹拌した。混合物を、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液を含有する分液漏斗に注ぎ入れ、これをＤＣＭ（３×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から４０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ベンジル３−メチル−１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（４．５８ｇ、１５．２０ｍｍｏｌ）を薄黄色油状物として得た。ＭＳｍ／ｚ３０２．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３８３】
ステップｂ：
ベンジル３−メチル−１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（４．５８ｇ、１５．２０ｍｍｏｌ）を、キラルＳＦＣにより、以下の通り、すなわち：カラム：ＩＡ  ２１×２５０ｍｍ、流速：７０ｇ／分、移動相：ＣＯ２中４５％（９：１  ＥｔＯＨ：ＭｅＣＮ）、検出：２２０ｎｍ  ＵＶでさらに精製して、（Ｒ）−ベンジル３−メチル−１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（２．０２ｇ、６．７０ｍｍｏｌ）、Ｒｔ：２．０分；および（Ｓ）−ベンジル３−メチル−１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（２．１１ｇ、７．０ｍｍｏｌ）、Ｒｔ：３．６分を得た。
【０３８４】
ステップｃ：
ＴＨＦ（６７ｍＬ）中の（Ｒ）−ベンジル３−メチル−１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（２．０２ｇ、６．７０ｍｍｏｌ）、チタン（ＩＶ）エトキシド（５．６２ｍＬ、２６．８ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（１．６２５ｇ、１３．４ｍｍｏｌ）の溶液を、６５℃で１６時間撹拌した。−７８℃に冷却した後、ＭｅＯＨ（１２ｍＬ）、続いて水素化ホウ素リチウム（０．４３８ｇ、２０．１１ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を−７８℃から室温で１６時間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液をゆっくりと添加して過剰のホウ水素化物をクエンチし、続いてＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）を添加した。得られた混合物を１５分間激しく撹拌し、次いでセライトのパッドに通して濾過した。揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（５から９０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、（１Ｒ，３Ｒ）−ベンジル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（１．９４ｇ、４．７７ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。ＭＳｍ／ｚ４０７．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３８５】
ステップｃ（エナンチオマーから）：
同じ手順に従って、（Ｓ）−ベンジル３−メチル−１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレートから出発して、（１Ｒ，３Ｓ）−ベンジル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレートを得た。
【０３８６】
中間体２７
（１Ｒ，３Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート）
【０３８７】
【化３６】
0006534389.tif 000055
【０３８８】
ステップａ：
ＴＨＦ（６０ｍＬ）中のＣｕＣｌ（１４２ｍｇ、１．４３２ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−ＴｏｌＢＩＮＡＰ（９７２ｍｇ、１．４３２ｍｍｏｌ）およびナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１３８ｍｇ、１．４３２ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で３０分間撹拌した。ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のＢ２ｐｉｎ２（１３．３４ｇ、５２．５ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を室温で１０分間撹拌した。ＴＨＦ（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−カルボキシレート（１２．０ｇ、４７．７ｍｍｏｌ）を、続いてＭｅＯＨ（３．９ｍＬ、９５ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。Ｈ２Ｏ（１５０ｍＬ）、続いて過ホウ酸ナトリウム（３６．７ｇ、２３９ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を室温で１時間激しく撹拌した。得られた緑色懸濁液をセライトのパッドに通して濾過し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液：飽和Ｎａ２ＳＯ３水溶液（１：１、３００ｍＬ）を含有する分液漏斗に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃ（４×４０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去して、粗製の（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−ヒドロキシ−１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレートを得た。この混合物のエナンチオマーの定量は、９０％ｅｅを示す（Ｒｔ（Ｓ）：１．５９分、Ｒｔ（Ｒ）：１．８０分；キラルＳＦＣ；カラム：ＩＡ  ４．６×１００ｍｍ、流速：７０ｇ／分、移動相：ＣＯ２中５〜５５％ＭｅＯＨ、検出：２２０ｎｍ  ＵＶ）。
【０３８９】
ＤＭＦ（１２０ｍＬ）中の粗製の（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−ヒドロキシ−１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（理論上４７．７ｍｍｏｌ）、イミダゾール（４．８７ｇ、７１．６ｍｍｏｌ）およびＴＢＳＣｌ（８．９９ｇ、５９．６ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で１６時間撹拌した。反応混合物を、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液：Ｈ２Ｏ（１：１、２５０ｍＬ）を含有する分液漏斗に注ぎ入れ、これをＥｔ２Ｏ（５×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から３０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（１３．１１５ｇ、３４．２ｍｍｏｌ）を無色油状物として得、これは静置すると固化する。
【０３９０】
ステップｂ：
ＴＨＦ（１００ｍＬ）中の（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（８ｇ、２０．８６ｍｍｏｌ）、チタン（ＩＶ）エトキシド（１７．４９ｍＬ、８３．０ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（５．０６ｇ、４１．７ｍｍｏｌ）の溶液を、６５℃で１６時間撹拌した。−７８℃に冷却した後、ＭｅＯＨ（１５ｍＬ）、続いて水素化ホウ素リチウム（１．３６３ｇ、６２．６ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を−７８℃で１６時間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液をゆっくりと添加して過剰のホウ水素化物をクエンチし、続いてＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）を添加した。得られた混合物を１５分間激しく撹拌し、次いでセライトのパッドに通して濾過した。揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から５０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、（１Ｒ，３Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（５．３ｇ、１０．８４ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。ＭＳｍ／ｚ４８９．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３９１】
中間体２８
（１Ｒ，３Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−ヒドロキシ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート）
【０３９２】
【化３７】
0006534389.tif 000056
【０３９３】
ステップａ：
ＴＨＦ（４０ｍＬ）中の（１Ｒ，３Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（３．８４ｇ、７．８６ｍｍｏｌ）およびＴＢＡＦ（ＴＨＦ中１Ｍ；８．６４ｍＬ、８．６４ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で３０分間撹拌した。揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から１０％の勾配のＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により精製して、（１Ｒ、３Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−ヒドロキシ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（２．９４ｇ、７．８６ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ３７５．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３９４】
ステップｂ：
ＴＨＦ（８０ｍＬ）中の（１Ｒ，３Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−ヒドロキシ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（３．０ｇ、８．０１ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（４．２ｇ、１６．０２ｍｍｏｌ）およびイソキノリン−１−カルボン酸（４．１６ｇ、２４．０３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＡＤ（３．１ｍＬ、１６．０２ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温で１時間撹拌した。反応物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、セライトのパッドに通して濾過し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を含有する分液漏斗に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃ（３×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から４％の勾配のＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により精製して、（２Ｓ，４Ｒ）−８−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−８−アザスピロ［４．５］デカン−２−イルイソキノリン−１−カルボキシレート（３．６５ｇ、６．８９ｍｍｏｌ）を橙色固体として得た。ＭＳｍ／ｚ５３０．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３９５】
ステップｃ：
ＴＨＦ：Ｈ２Ｏ（１：１、７０ｍＬ）中の（２Ｓ，４Ｒ）−８−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−８−アザスピロ［４．５］デカン−２−イルイソキノリン−１−カルボキシレート（３．６５ｇ、６．８９ｍｍｏｌ）および水酸化リチウム（２．９５ｇ、６８．９ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で２時間撹拌した。混合物を、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液を含有する分液漏斗に注ぎ入れ、これをＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から１０％の勾配のＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により精製して、（１Ｒ，３Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−ヒドロキシ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（２．３５ｇ、６．２７ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。ＭＳｍ／ｚ２７５．２（Ｍ＋Ｈ−Ｂｏｃ）＋。
【０３９６】
中間体２９
（１Ｒ，３Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−（イソブチリルオキシ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート）
【０３９７】
【化３８】
0006534389.tif 000057
【０３９８】
ＴＨＦ（５ｍＬ）中の（１Ｒ，３Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−ヒドロキシ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（２００ｍｇ、０．５３４ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（２８０ｍｇ、１．０６８ｍｍｏｌ）およびイソ酪酸（１４６μＬ、１．６０２ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＡＤ（２０８μＬ、１．０６８ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。反応物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、セライトのパッドに通して濾過し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を含有する分液漏斗に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃ（３×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から７％の勾配のＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により精製して、（１Ｒ，３Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−（イソブチリルオキシ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート）（２３７ｍｇ、０．５３４ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ３４５．３（Ｍ＋Ｈ−Ｂｏｃ）＋。
【０３９９】
中間体３０ａ／ｂ／ｃ
（１Ｒ，３Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−Ｎ，２−ジメチルプロパン−２−イルスルフィンアミド）−３−ヒドロキシ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート、（１Ｒ，３Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−メトキシ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレートおよび（１Ｒ，３Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−Ｎ，２−ジメチルプロパン−２−イルスルフィンアミド）−３−メトキシ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート
【０４００】
【化３９】
0006534389.tif 000058
【０４０１】
ＴＨＦ中の（１Ｒ，３Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−ヒドロキシ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（１４２ｍｇ、０．３７８ｍｍｏｌ）およびＮａＨ（鉱油中６０％分散、１９ｍｇ、０．４７３ｍｍｏｌ）の混合物を、０℃で２０分間撹拌した。ヨードメタン（４７μＬ、０．７５６ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を室温で４時間撹拌した。揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をＨＰＬＣ（勾配溶出、水中２５〜５０％アセトニトリル、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）により精製して、（１Ｒ，３Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−Ｎ，２−ジメチルプロパン−２−イルスルフィンアミド）−３−ヒドロキシ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（１５．０ｍｇ、０．０３９ｍｍｏｌ）、ＭＳｍ／ｚ２８９．２（Ｍ＋Ｈ−Ｂｏｃ）＋；（１Ｒ，３Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−メトキシ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート、ＭＳｍ／ｚ２８９．２（Ｍ＋Ｈ−Ｂｏｃ）＋；および（１Ｒ，３Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−Ｎ，２−ジメチルプロパン−２−イルスルフィンアミド）−３−メトキシ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート、ＭＳｍ／ｚ３０３．２（Ｍ＋Ｈ−Ｂｏｃ）＋を得た。
【０４０２】
中間体３１
（１Ｒ，３Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−メトキシ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート
【０４０３】
【化４０】
0006534389.tif 000059
【０４０４】
ＤＣＭ（５ｍＬ）中の（１Ｒ，３Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−ヒドロキシ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（５００ｍｇ、１．３３５ｍｍｏｌ）、酸化銀（Ｉ）（３４０ｍｇ、１．４６８ｍｍｏｌ）およびヨードメタン（２５０μＬ、４．０ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で２４時間および４５℃で２４時間撹拌した（光から保護した）。室温に冷却した後、混合物をセライトのパッドに通して濾過し、揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から５％の勾配のＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により精製して、（１Ｒ，３Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−メトキシ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（２４８ｍｇ、０．６３８ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ２８９．２（Ｍ＋Ｈ−Ｂｏｃ）＋。
【０４０５】
中間体３２
ラセミｔｅｒｔ−ブチル１−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，３−ジフルオロ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート
【０４０６】
【化４１】
0006534389.tif 000060
【０４０７】
ステップａ：
ＭｅＯＨ（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル３−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−１−（１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（３６５ｍｇ、０．７４６ｍｍｏｌ）およびＨＣｌ（ジオキサン中４Ｍ、１．８６ｍＬ、７．４６ｍｍｏｌ）の混合物を、４０℃で１時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去して、白色固体を得た。ＭＳｍ／ｚ１７１．１（Ｍ＋Ｈ）＋。ＴＨＦ（１５ｍＬ）中のこの残留物、ＤＩＰＥＡ（２．６ｍＬ、１４．９２ｍｍｏｌ）およびＢｏｃ２Ｏ（４０７ｍｇ、１．８６５ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で１６時間撹拌した。混合物を、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液を含有する分液漏斗に注ぎ入れ、これをＥｔ２Ｏ（５×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（１０から８０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル１−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−ヒドロキシ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（２７５ｍｇ、０．７４２ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ２７１．３（Ｍ＋Ｈ−Ｂｏｃ）＋。
【０４０８】
ステップｂ：
ＤＣＭ（７．５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル１−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−ヒドロキシ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（２７５ｍｇ、０．７４２ｍｍｏｌ）およびデス−マーチンペルヨージナン（４７２ｍｇ、１．１１３ｍｍｏｌ）の混合物を、０℃で２時間撹拌した。混合物を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を含有する分液漏斗に注ぎ入れ、これをＤＣＭ（３×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（５から７５％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル１−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（１３５ｍｇ、０．３６６ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 4.57 (d, J=9.09 Hz, 1 H), 4.16 (d, J=8.08 Hz, 1 H), 3.89-4.08 (m, 2 H), 2.77-2.93 (m, 2 H), 2.71 (dd, J=18.95, 8.08 Hz, 1 H), 2.50 (d, J=18.19 Hz, 1 H), 2.07-2.24 (m, 2 H), 1.76 (td, J=12.82, 4.67 Hz, 1 H), 1.58-1.70 (m, 1 H), 1.42-1.53 (m, 18 H), 1.25-1.38 (m, 1 H).
【０４０９】
ステップｃ：
ＤＣＭ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル１−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（９５ｍｇ、０．２５８ｍｍｏｌ）およびＤｅｏｘｏＦｌｕｏｒ（１９０μＬ、１．０３１ｍｍｏｌ）の混合物を、５０℃で４８時間撹拌した。混合物を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液／氷を含有する分液漏斗に注ぎ入れ、これをＥｔＯＡｃ（３×５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から３０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル１−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，３−ジフルオロ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（５２ｍｇ、０．１３３ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 4.55 (d, J=9.35 Hz, 1 H), 3.78-4.02 (m, 3 H), 2.64-2.86 (m, 2 H), 2.38-2.59 (m, 1 H), 2.10-2.32 (m, 1 H), 1.79-2.10 (m, 2 H), 1.58 (qd, J=12.72, 3.79 Hz, 1 H), 1.27-1.52 (m, 21 H).
【０４１０】
以下の化合物は、上記手順または上記手順を変更したものを用い、キラル的に純粋な（１Ｒ，３Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレートを出発物質として使用して合成した。
【０４１１】
【表１１】
0006534389.tif 000061
【０４１２】
中間体３３
１−アミノ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−１−エン−３−オン
【０４１３】
【化４２】
0006534389.tif 000062
【０４１４】
ステップａ：
ＴＨＦ（４ｍＬ）中のジイソプロピルアミン（０．３２０ｍＬ、２．２４５ｍｍｏｌ）の溶液を−７８℃に冷却し、ｎ−ブチルリチウム（１．３ｍＬ、２．０８０ｍｍｏｌ）で処理し、次いで−７８℃で５分間撹拌し、０℃に加温して、その後に使用するＬＤＡの溶液を得た。ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−シアノピペリジン−１−カルボキシレート（１５３ｍｇ、０．７２８ｍｍｏｌ）の−７８℃溶液に、調製しておいたＬＤＡの溶液（２．８ｍＬ）を滴下添加し、得られた混合物を、−７８℃で１０分間、次いで−１０℃で１０分間撹拌した。反応物を−７８℃に再冷却し、ＴＨＦ（２ｍＬ）中のアリル−Ｂｒ（８０μＬ、０．９２４ｍｍｏｌ）の溶液を滴下添加した。得られた反応混合物を室温で１時間撹拌し、揮発物を減圧下で除去した。水性物をＥｔＯＡｃで抽出し、合わせた有機相を水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカクロマトグラフィー（０から５０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−アリル−４−シアノピペリジン−１−カルボキシレート（４０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を無色油状物として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 5.99-5.70 (m, 1 H), 5.23 (q, J=1.1 Hz, 1 H), 5.20 (dtd, J=3.3, 2.1, 1.1 Hz, 1 H), 3.96 (d, J=13.7 Hz, 2 H), 2.86 (s, 2 H), 2.36 (dt, J=7.5, 1.3 Hz, 2 H), 1.84 (dq, J=13.7, 2.6 Hz, 2 H), 1.40 (s, 11 H).
【０４１５】
ステップｂ：
ＤＣＭ（１．５ｍＬ）およびＮａＯＨ（ＭｅＯＨ中２．５Ｍ、０．１７６ｍＬ、０．４３９ｍｍｏｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−アリル−４−シアノピペリジン−１−カルボキシレート（２２ｍｇ、０．０８８ｍｍｏｌ）の溶液に、−７８℃で３０分間オゾンを通気した（拡散エアレーター）。反応物を酸素でパージし、次いで水とＤＣＭとの間で分配した。相を分離し、有機物を収集し、水性物をＤＣＭ（２×５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を減圧下で濃縮した。得られた残留物をＭｅＯＨに溶かし、６５℃で２４時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から７０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−シアノ−４−（２−メトキシ−２−オキソエチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（２１ｍｇ、０．０７４ｍｍｏｌ）を無色油状物として得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 4.14 (s, 2 H), 3.75 (s, 3 H), 3.08 (t, J=12.9 Hz, 2 H), 2.62 (s, 2 H), 2.15-2.02 (m, 2 H), 1.59-1.48 (m, 2 H), 1.46 (s, 9 H).ＴＬＣ（５０％ＥｔＯＡｃ／ヘプタン（ＫＭｎＯ４で染色）、Ｒｆ＝０．５）。
【０４１６】
ステップｃ：
ＭｅＯＨ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−シアノ−４−（２−メトキシ−２−オキソエチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（２８７ｍｇ、１．０１７ｍｍｏｌ）およびＮＨ３（ＭｅＯＨ中７Ｎ、３．０ｍＬ、２１．００ｍｍｏｌ）の溶液を、密封管内１２０℃で４８時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去して、白色固体を得た。固体をＥｔＯＡｃで摩砕し、濾過して、ｔｅｒｔ−ブチル１−アミノ−３−オキソ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−１−エン−８−カルボキシレート（１５７ｍｇ、０．５８７ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.44 (s, 1 H), 8.02 (s, 1 H), 3.98 (d, J=13.3 Hz, 2 H), 2.71 (s, 2 H), 2.34 (s, 2 H), 1.81 (td, J=12.9, 4.6 Hz, 2 H), 1.49-1.30 (m, 11 H).ＭＳｍ／ｚ２６８（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４１７】
中間体３４ａ／ｂ
ラセミｔｅｒｔ−ブチル２−フルオロ−１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレートおよびｔｅｒｔ−ブチル２，２−ジフルオロ−１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート
【０４１８】
【化４３】
0006534389.tif 000063
【０４１９】
ＮａＨＭＤＳの−７８℃溶液（ＴＨＦ中１Ｍ、８．６８ｍＬ、８．６８ｍｍｏｌ）に、ＴＨＦ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（２．０ｇ、７．８９ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。この温度で３０分間撹拌した後、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のＮ−フルオロベンゼンスルホンアミド（２．４９ｇ、７．８９ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。−７８℃で３時間撹拌した後、これを飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１００ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から２５％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ラセミｔｅｒｔ−ブチル２−フルオロ−１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（３５１ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）、ＭＳｍ／ｚ２７２．１（Ｍ＋Ｈ）＋およびジフルオロケトンを得、これは出発物質と共溶出する。合わせたジフルオロケトン／出発物質の共溶出画分をシリカクロマトグラフィー（０から５％の勾配のＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により再精製して、ｔｅｒｔ−ブチル２，２−ジフルオロ−１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（５７３ｍｇ、１．９８ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ２９０．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４２０】
中間体３５
（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート
【０４２１】
【化４４】
0006534389.tif 000064
【０４２２】
ステップａ：
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−ヒドロキシ−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（５４４ｍｇ、２．１１ｍｍｏｌ）およびデス−マーチンペルヨージナン（１．３９ｇ、３．１７ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃で２時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液：飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液（１：１、１０ｍＬ）を添加し、有機相を分離し、水相をＤＣＭ（３×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から５０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−オキソ−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（４７０ｍｇ、１．８４ｍｍｏｌ）を無色油状物として得、これは静置すると結晶化した。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 4.08 (s, 2 H), 4.05 (s, 2 H), 3.88 (dt, J = 13.7, 4.9 Hz, 2 H), 3.12 (ddd, J = 13.6, 9.8, 3.6 Hz, 2 H), 1.75 (ddd, J = 13.9, 9.7, 4.2 Hz, 2 H), 1.58-1.51 (m, 2 H), 1.48 (s, 9 H).ＭＳｍ／ｚ２５６．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４２３】
ステップｂ：
ＴＨＦ（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−オキソ−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（２２０ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）、チタン（ＩＶ）エトキシド（７２５μＬ、３．４５ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（２０９ｍｇ、１．７２ｍｍｏｌ）の溶液を、９０℃で１時間撹拌した。０℃に冷却した後、水素化ホウ素リチウム（２３ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）を添加した。３０分間撹拌した後、反応混合物をＭｅＯＨの添加によりクエンチした。揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をブラインで希釈し、これをＥｔＯＡｃ（４×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から１００％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（１７０ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ３６１．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４２４】
以下の化合物は、上記手順または上記手順を変更したものを用い、対応するケトンおよびスルホンアミドを使用して合成した。
【０４２５】
【表１２】
0006534389.tif 000065
【０４２６】
中間体３６
（１Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−２−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート
【０４２７】
【化４５】
0006534389.tif 000066
【０４２８】
ステップａ：
ＴＨＦ（２４ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（２．２ｇ、８．６８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＬｉＨＭＤＳ（ＴＨＦ中１Ｍ、８．６８ｍＬ、８．６８ｍｍｏｌ）を０〜５℃で添加した。混合物をこの温度で３０分間撹拌した後、ヨードメタン（０．５４３ｍＬ、８．６８ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温に加温し、２時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液でクエンチした。有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた茶色油状物をシリカクロマトグラフィー（０から２５％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル２−メチル−１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（１．３ｇ、４．８６ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ２６８．１。（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４２９】
ステップｂ：
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル２−メチル−１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（２６７ｍｇ、０．９９９ｍｍｏｌ）、チタン（ＩＶ）エトキシド（８３７μＬ、３．９９ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（２４２ｍｇ、１．９９７ｍｍｏｌ）の溶液を、８５℃で２４時間撹拌した。−７８℃に冷却した後、ＭｅＯＨ（１２ｍＬ）、続いて水素化ホウ素リチウム（６５．３ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を−７８℃から室温で１６時間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液をゆっくりと添加して過剰のホウ水素化物をクエンチし、続いてＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）を添加した。得られた混合物を１５分間激しく撹拌し、次いでセライトのパッドに通して濾過した。揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から６０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン（０．２５％のＥｔ３Ｎを含有））により精製して、（１Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−２−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（９２ｍｇ、０．２４７ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ３７３．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４３０】
中間体３７ａ／ｂ
（３Ｓ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−メチル−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレートおよび（３Ｒ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−メチル−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート
【０４３１】
【化４６】
0006534389.tif 000067
【０４３２】
ステップａ：
ＴＨＦ（２４ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−オキソ−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−（２．４７ｇ、９．６７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＬｉＨＭＤＳ（ＴＨＦ中１Ｍ、９．６７ｍＬ、９．６７ｍｍｏｌ）を−７８℃で添加した。混合物をこの温度で３０分間撹拌した後、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のヨードメタン（０．６０５ｍＬ、９．６７ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温に加温し、１時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液でクエンチした。有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた茶色油状物をシリカクロマトグラフィー（０から２０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−メチル−４−オキソ−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（３１８ｍｇ、１．１８１ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ２７０．２。（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４３３】
ステップｂ：
ＴＨＦ（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル３−メチル−４−オキソ−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（３１８ｍｇ、１．１８１ｍｍｏｌ）、チタン（ＩＶ）エトキシド（９９０μＬ、４．７２ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（２８６ｍｇ、２．３６１ｍｍｏｌ）の溶液を、９０℃で９０分間撹拌した。０℃に冷却した後、水素化ホウ素リチウム（６５．３ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）を一度に添加し、得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液をゆっくりと添加して過剰のホウ水素化物をクエンチし、続いてＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）を添加した。得られた混合物を１５分間激しく撹拌し、次いでセライトのパッドに通して濾過した。有機相を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から１００％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、（４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−メチル−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（８８ｍｇ、０．２３５ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ３７５．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４３４】
ステップｃ：
ジアステレオマーを、キラルＳＦＣにより、以下の通り、すなわち：カラム：ＬＵＸＣ４  ３０×２５０ｍｍ、流速：８０ｇ／分、移動相：ＣＯ２中２０％ＭｅＯＨ、検出：２１０ｎｍで分離して、（３Ｒ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−メチル−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート、Ｒｔ＝４．０分；および（３Ｓ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−メチル−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート、Ｒｔ＝４．５５分を得た。
【０４３５】
中間体３８
（３Ｓ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−メチル−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート
【０４３６】
【化４７】
0006534389.tif 000068
【０４３７】
ステップａ：
ＴＨＦ（２２０ｍＬ）中のジイソプロピルアミン（２３．４ｍＬ、１６６ｍｍｏｌ）の−１０℃溶液に、ｎＢｕＬｉ（ヘキサン中２．５Ｍ、６４．１ｍＬ、１６０ｍｍｏｌ）を滴下添加した。この温度で３０分間撹拌した後、ＴＨＦ（５０ｍＬ）中の１−ｔｅｒｔ−ブチル４−エチルピペリジン−１，４−ジカルボキシレート（２７．５ｇ、１０７ｍｍｏｌ）を滴下添加し、得られた混合物を０℃で３０分間撹拌した。（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）プロパナール（２０．４７ｍＬ、１０２ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を０℃で１時間および室温で１時間撹拌した。反応物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液：Ｈ２Ｏ（１：４、１２５ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）を添加し、相を分離した。水相をＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）でさらに抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。得られた残留物をさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。ＭＳｍ／ｚ３４６．４（Ｍ＋Ｈ−Ｂｏｃ）＋。
【０４３８】
ステップｂ：
ＴＨＦ（６００ｍＬ）中の粗製の１−ｔｅｒｔ−ブチル４−エチル４−（（２Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−１−ヒドロキシプロピル）ピペリジン−１，４−ジカルボキシレート（９５ｇ、２１４ｍｍｏｌ）の溶液に、ＬｉＢＨ４（７．０ｇ、３２１ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加し、得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。０℃に冷却した後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液：Ｈ２Ｏ（１：２、１５０ｍＬ）を添加し、得られた混合物を、発泡がもはや観察されなくなるまで激しく撹拌した。ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）を添加し、混合物を濾過し、相を分離し、水相をＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）でさらに抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（（２Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−１−ヒドロキシプロピル）−４−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（６４．８ｇ、１６１ｍｍｏｌ）を得、これをさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。
【０４３９】
ステップｃ：
ＴＨＦ（５００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（（２Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−１−ヒドロキシプロピル）−４−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（６４．８ｇ、１６１ｍｍｏｌ）およびＴＢＡＦ（ＴＨＦ中１Ｍ、２４２ｍＬ、２４２ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で２時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液：Ｈ２Ｏ（１：２、１５０ｍＬ）を添加し、相を分離し、水相をＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）でさらに抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（２０から１００％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（（２Ｓ）−１，２−ジヒドロキシプロピル）−４−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（３９．２５ｇ、１３６ｍｍｏｌ）を半固体の無色油状物として得た。
【０４４０】
ステップｄ：
ＴＨＦ（６００ｍＬ）中のＮａＨ（１０．６０ｇ、４２４ｍｍｏｌ）の０℃懸濁液に、ＴＨＦ（２００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（（２Ｓ）−１，２−ジヒドロキシプロピル）−４−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（３５．０６ｇ、１２１ｍｍｏｌ）およびＴｓＣｌ（２３．１０ｇ、１２１ｍｍｏｌ）の溶液を滴下添加した。得られた混合物を０℃で１時間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（約５ｍＬ）を−２０℃でゆっくりと添加し、反応物を、発泡がもはや観察されなくなるまで激しく撹拌した。この時点で、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１００ｍＬ）、続いてブライン（１００ｍＬ）を添加し、混合物をＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で除去して、（３Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−ヒドロキシ−３−メチル−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（３２．１９ｇ、１１９ｍｍｏｌ）を得、これをさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。ＭＳｍ／ｚ１７１．１（Ｍ−Ｂｏｃ）−。
【０４４１】
ステップｅ：
ＤＣＭ（３００ｍＬ）中の（３Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−ヒドロキシ−３−メチル−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（３２．１９ｇ、１１９ｍｍｏｌ）およびデス−マーチンペルヨージナン（６７．４ｇ、１５４ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃で２時間撹拌した。室温に加温した後、揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から４０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−メチル−４−オキソ−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（２７．６８ｇ、９２ｍｍｏｌ）を淡黄色油状物として得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 4.09 (d, J=9.60 Hz, 1 H), 3.66-3.86 (m, 4 H), 3.03 (ddd, J=13.77, 9.73, 3.79 Hz, 1 H), 2.90 (ddd, J=13.64, 10.23, 3.41 Hz, 1 H), 1.68 (ddd, J=13.83, 9.92, 4.29 Hz, 1 H), 1.41-1.59 (m, 2 H), 1.30-1.40 (m, 10 H), 1.20-1.25 (m, 3 H).
【０４４２】
ステップｆ：
ＴＨＦ（３００ｍＬ）中の（３Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−メチル−４−オキソ−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（２２．５２ｇ  ｍｇ、８４ｍｍｏｌ）、チタン（ＩＶ）エトキシド（７０．１ｍＬ、３３４ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（２１ｇ、１７３ｍｍｏｌ）の溶液を、９０℃で２１時間撹拌した。−４℃に冷却した後、ＭｅＯＨ（３０ｍＬ）を添加し、続いて水素化ホウ素リチウム（１．８２ｇ、８４ｍｍｏｌ）を滴下添加（反応温度を２℃未満に維持しながら）し、得られた混合物を−４℃で１時間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液をゆっくりと添加して過剰のホウ水素化物をクエンチし（ゼラチンタイプが形成された）、続いてＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）を添加した。得られた混合物を室温で１５分間激しく撹拌し、次いでセライトのパッドに通して濾過し、続いてＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で洗浄した。揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から１００％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、（３Ｓ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−メチル−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレートを９５：５のジアステレオマー混合物（副ジアステレオマーは（３Ｒ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−メチル−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート）として得た。
【０４４３】
ステップｇ：
ジアステレオマーを、キラルＳＦＣにより、以下の通り、すなわち：カラム：ＬＣ−４  ３０×２５０ｍｍ、流速：１００ｇ／分、移動相：ＣＯ２中３０％ＭｅＯＨ、検出：２２５ｎｍ、Ｒｔ：０．９５分（副ジアステレオマーＲｔ：０．５５分）で分離して、（３Ｓ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−メチル−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（１９ｇ、５０．６８ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ３７５．２。
【０４４４】
中間体３９
（４Ｒ）−４−アミノ−２−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−２−オール
【０４４５】
【化４８】
0006534389.tif 000069
【０４４６】
ステップａ：
Ｈ２Ｏ（５ｍＬ）中の（２Ｒ，４Ｒ）−４−アミノ−８−アザスピロ［４．５］デカン−２−オール二塩酸塩（６２３ｍｇ、２．５６ｍｍｏｌ）、Ｎａ２ＣＯ３（１３５７ｍｇ、１２．８０ｍｍｏｌ）およびＣｂｚＣｌ（１０４８ｍｇ、６．１４ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で３０分間激しく撹拌した。ＴＨＦ（０．５ｍＬ）を添加し、得られた混合物を室温で１８時間撹拌した。混合物を水およびＤＣＭで希釈した。分離した水相をＤＣＭ（２×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から１００％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、（１Ｒ，３Ｒ）−ベンジル１−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−ヒドロキシ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（９４０ｍｇ、２．１４ｍｍｏｌ）を白色泡状物として得た。ＭＳｍ／ｚ４３９．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４４７】
ステップｂ：
ＤＣＭ（６ｍＬ）中の（１Ｒ，３Ｒ）−ベンジル１−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−ヒドロキシ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（４４０ｍｇ、１．００３ｍｍｏｌ）およびデス−マーチンペルヨージナン（６３８ｍｇ、１．５０５ｍｍｏｌ）の混合物を、０℃で１時間および室温で１８時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液：飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液（１：１、２５ｍＬ）で希釈した。分離した水相をＤＣＭ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から７０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、（Ｒ）−ベンジル１−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（４１５ｍｇ、０．９５１ｍｍｏｌ）を白色泡状物として得た。ＭＳｍ／ｚ４３７．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４４８】
ステップｃ：
ＴＨＦ（１５ｍＬ）中のＭｅＬｉ（ＴＨＦ中１．２Ｍ、２．６１ｍＬ、３．１３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＨＦ（５ｍＬ）中の（Ｒ）−ベンジル１−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（４１５ｍｇ、０．９５１ｍｍｏｌ）を−３０から−４０℃で滴下添加した。得られた混合物を−３０から−４０℃で２０分間撹拌した。混合物をＮａＨＳＯ４（Ｈ２Ｏ中１０％溶液）で希釈し、ＥｔＯＡｃで希釈し、激しく撹拌しながら室温まで加温した。混合物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で希釈し、分離した水相をＥｔＯＡｃ（１×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。水（１０ｍＬ）およびＴＨＦ（１ｍＬ）中の得られた残留物（３１３ｍｇ）、Ｎａ２ＣＯ３（４９８ｍｇ、４．７０ｍｍｏｌ）およびＣｂｚＣｌ（２９５ｍｇ、１．７２９ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で３日間激しく撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、分離した水相をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を減圧下で濃縮した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から５０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、２つのジアステレオマー：ジアステレオマーＡ（１１２ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を無色半固体、ＭＳｍ／ｚ４５３．３（Ｍ＋Ｈ）＋として、ジアステレオマーＢ（４５ｍｇ、０．０１０ｍｍｏｌ）を白色泡状物／固体、ＭＳｍ／ｚ４５３．３（Ｍ＋Ｈ）＋として得た。
【０４４９】
ステップｄ：
ＭｅＯＨ（８ｍＬ）中のジアステレオマーＡ（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０重量％；１２ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）の混合物を、水素雰囲気下で２時間激しく撹拌した。セライトを添加し、混合物をセライトのパッドに通して濾過し、続いてＤＣＭで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮して、（４Ｒ）−４−アミノ−２−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−２−オールを無色固体として得、これをさらに精製することなく使用した。ＭＳｍ／ｚ１８５．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４５０】
中間体４０
（１Ｒ，３Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−フルオロ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート
【０４５１】
【化４９】
0006534389.tif 000070
【０４５２】
ＤＣＭ（８．５ｍＬ）中の（１Ｒ，３Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−ヒドロキシ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（４００ｍｇ、１．０６８ｍｍｏｌ）およびＤＡＳＴ（ＤＣＭ中１Ｍ、１．８７ｍＬ、１．８７ｍｍｏｌ）の混合物を、０℃で９０分間撹拌した。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５ｍＬ）の添加によりクエンチした。０℃で１０分間撹拌した後、相を分離し、水性物をＤＣＭ（２×５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去して、（１Ｒ，３Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−フルオロ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレートを得、これをさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。ＭＳｍ／ｚ２７７．２（Ｍ＋Ｈ−Ｂｏｃ）＋。
【０４５３】
中間体４１
（１Ｒ，３Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−フルオロ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート
【０４５４】
【化５０】
0006534389.tif 000071
【０４５５】
ＤＣＭ（５ｍＬ）中の（１Ｒ，３Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−ヒドロキシ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（２００ｍｇ、０．５３４ｍｍｏｌ）およびＤＡＳＴ（ＤＣＭ中１Ｍ、９３４μＬ、０．９３４ｍｍｏｌ）の混合物を、０℃で９０分間撹拌した。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５ｍＬ）の添加によりクエンチした。室温で１０分間撹拌した後、相を分離し、水性物をＤＣＭ（２×５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去して、（１Ｒ，３Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−フルオロ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレートを得、これをさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。ＭＳｍ／ｚ２７７．２（Ｍ＋Ｈ−Ｂｏｃ）＋。
【０４５６】
中間体４２
３−（（６−アミノ−２，３−ジクロロピリジン−４−イル）チオ）−６−クロロピラジン−２−アミン
【０４５７】
【化５１】
0006534389.tif 000072
【０４５８】
ステップａ：
ＴＨＦ（５ｍＬ）中の５，６−ジクロロピリジン−２−アミン（５９０ｍｇ、３．６２ｍｍｏｌ）の溶液に、ＬｉＨＭＤＳ（ＴＨＦ中１Ｍ、７．９６ｍＬ、７．９６ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応物を０℃で１０分間撹拌し、次いでＴＨＦ（５ｍＬ）中のＢｏｃ２Ｏ（８６９ｍｇ、３．９８ｍｍｏｌ）の溶液を反応混合物に添加した。得られた溶液を０℃で１５分間撹拌し、次いで１Ｍ  ＨＣｌの添加によりｐＨ４にした。溶液をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から４０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル（５，６−ジクロロピリジン−２−イル）カルバメート（７９０ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 7.86 (d, J=8.7 Hz, 1 H), 7.70 (d, J=8.7 Hz, 1 H), 7.20 (br s, 1 H), 1.51 (s, 9 H).ＭＳｍ／ｚ２３２．９（Ｍ＋Ｈ−ｔＢｕ）＋。
【０４５９】
ステップｂ：
ＴＨＦ（５ｍＬ）中のジイソプロピルアミン（１ｍＬ、７．０７ｍｍｏｌ）の溶液に、ｎ−ＢｕＬｉ（ヘキサン中２．５Ｍ、２．８３ｍＬ、７．０７ｍｍｏｌ）を−７８℃で添加し、得られた溶液をこの温度で１時間撹拌した。ＴＨＦ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（５，６−ジクロロピリジン−２−イル）カルバメート（９３０ｍｇ、３．５３ｍｍｏｌ）を−７８℃で添加した。この温度で２時間撹拌した後、ＴＨＦ（５ｍＬ）中のヨウ素（９８７ｍｇ、３．８９ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を−７８℃で３０分間撹拌した。室温に加温した後、反応混合物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から４０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル（５，６−ジクロロ−４−ヨードピリジン−２−イル）カルバメート（８１３ｍｇ、２．０９ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 8.45 (s, 1 H), 7.12 (s, 1 H), 1.52 (s, 9 H).ＭＳｍ／ｚ３３２．９（Ｍ＋Ｈ−ｔＢｕ）＋。
【０４６０】
ステップｃ：
ジオキサン（７．８ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（５，６−ジクロロ−４−ヨードピリジン−２−イル）カルバメート（６１０ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ）、ナトリウム３−アミノ−５−クロロピラジン−２−チオレート（３０２ｍｇ、１．６５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（７２ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）、キサントホス（９１ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．５５ｍＬ、３．１４ｍｍｏｌ）の混合物を、１１０℃で８時間撹拌した。室温に冷却した後、反応混合物をセライトのパッドに通して濾過し、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から４０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル（４−（（３−アミノ−５−クロロピラジン−２−イル）チオ）−５，６−ジクロロピリジン−２−イル）カルバメート（４７０ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, DMSO) δ ppm 10.24 (s, 1 H), 7.96 (s, 1 H), 7.31 (br s, 2 H), 7.16 (s, 1 H), 1.38 (s, 9 H).ＭＳｍ／ｚ３２１．９（Ｍ＋Ｈ−Ｂｏｃ）＋。
【０４６１】
ステップｄ：
ｔｅｒｔ−ブチル（４−（（３−アミノ−５−クロロピラジン−２−イル）チオ）−５，６−ジクロロピリジン−２−イル）カルバメート（４７０ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）およびＨＣｌ（ジオキサン中４Ｍ、５．５６ｍＬ、２２．２４ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で１時間撹拌した。揮発物を減圧下で除去して、３−（（６−アミノ−２，３−ジクロロピリジン−４−イル）チオ）−６−クロロピラジン−２−アミン二塩酸塩（４１１ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を得、これをさらに精製することなく使用した。ＭＳｍ／ｚ３２４．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４６２】
実施例１：（Ｓ）および（Ｒ）８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン
【０４６３】
【化５２】
0006534389.tif 000073
【０４６４】
ステップａ：
ＤＩＰＥＡ（３ｍＬ）中の６−クロロ−３−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−アミン（２００ｍｇ、０．６５２ｍｍｏｌ）およびＮ−（４−メトキシベンジル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（３５８ｍｇ、１．３０４ｍｍｏｌ）の溶液を、１３０℃で６０時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をＴＦＡ（３ｍＬ）に溶解し、溶液をマイクロ波反応器内１６０℃で１時間および１８０℃で１５分間撹拌した。揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をＨＰＬＣ（勾配溶出、水中２５〜５０％アセトニトリル、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）により精製して、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（７３ｍｇ、０．４８２ｍｍｏｌ；ＨＲＭＳに基づく純度８３％）を得た。この化合物の１９ｍｇをＨＰＬＣ（勾配溶出、水中２５〜５０％アセトニトリル、０．１％ＴＦＡ修飾剤）によりさらに精製して、純粋な表題化合物（９．５ｍｇ）を得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm 8.29 (dd, J=4.42, 1.39 Hz, 1 H), 7.48 (s, 1 H), 7.19-7.41 (m, 2 H), 4.06-4.26 (m, 2 H), 2.89-3.14 (m, 2 H), 2.71 (t, J=7.33 Hz, 1 H), 1.86-2.00 (m, 1 H), 1.73-1.84 (m, 1 H), 1.43-1.72 (m, 5 H), 1.27-1.42 (m, 2 H), 1.17-1.27 (m, 1 H). 19F NMR (376 MHz, メタノール-d4) δ ppm -66.45 (s).Ｃ１９Ｈ２４Ｎ６Ｆ３Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４２５．１７３５、実測値４２５．１７５３。ＩＣ５０は０．０２３μＭである。
【０４６５】
ステップｂ：
上記表題化合物のキラルＳＦＣ精製を、以下の通り、すなわち；カラム：ＩＤ  ２１×２５０ｍｍ、流速：７５ｇ／分、移動相：ＣＯ２中３５％ＭｅＯＨおよび１０ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ、検出：２７０ｎｍ  ＵＶで行って、単一エナンチオマー、Ｒｔ（Ｐ１）＝４．９分；（ＩＣ５０は０．０１１μＭ）およびＲｔ（Ｐ２）＝６．４分；（ＩＣ５０は０．１６７μＭ）を得た。
【０４６６】
表４において同定されている以下の式Ｉの化合物は、上記手順または上記手順を変更したものを用い、対応するチオピラジン−２−アミン誘導体および保護されたアミンを使用して作製した。
【０４６７】
【表１３−１】
0006534389.tif 000074
【０４６８】
【表１３−２】
0006534389.tif 000075
【０４６９】
実施例８：（Ｒ）および（Ｓ）−２−（６−アミノ−５−（（２，３−ジクロロフェニル）チオ）ピラジン−２−イル）−２−アザスピロ［３．３］ヘプタン−５−アミン
【０４７０】
【化５３】
0006534389.tif 000076
【０４７１】
ステップａ：
ＤＩＰＥＡ（１ｍＬ）中の６−クロロ−３−（（２，３−ジクロロフェニル）チオ）ピラジン−２−アミン（１４０ｍｇ、０．４５７ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル２−アザスピロ［３．３］ヘプタン−５−イルカルバメート（ＨＣｌ塩、１２５ｍｇ、０．５０２ｍｍｏｌ）の溶液を、１３０℃で２４時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をＤＣＭ（５ｍＬ）に溶解し、ＴＦＡ（０．５ｍＬ）を添加し、得られた混合物を室温で３０分間撹拌した。揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をＨＰＬＣ（勾配溶出、水中２５〜５０％アセトニトリル、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）により精製して、２−（６−アミノ−５−（（２，３−ジクロロフェニル）チオ）ピラジン−２−イル）−２−アザスピロ［３．３］ヘプタン−５−アミン（７５ｍｇ、０．１８６ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm 7.31 (dd, J=8.03, 1.51 Hz, 1 H), 7.18 (s, 1 H), 7.11 (t, J=8.03 Hz, 1 H), 6.60 (dd, J=8.03, 1.51 Hz, 1 H), 4.45 (d, J=8.78 Hz, 1 H), 4.03 (d, J=9.03 Hz, 1 H), 3.96 (d, J=9.03 Hz, 1 H), 3.90 (d, J=8.78 Hz, 1 H), 3.34-3.39 (溶媒と一部重複, m, 1 H), 2.12-2.25 (m, 1 H), 1.90-2.11 (m, 2 H), 1.52-1.67 (m, 1 H).Ｃ１６Ｈ１８Ｃｌ２Ｎ５Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値３８２．０６６０、実測値３８２．０５８５。ＩＣ５０は５．３６μＭである。
【０４７２】
ステップｂ：
２−（６−アミノ−５−（（２，３−ジクロロフェニル）チオ）ピラジン−２−イル）−２−アザスピロ［３．３］ヘプタン−５−アミン（５３．９ｍｇ、０．１４１ｍｍｏｌ）を、キラルＳＦＣ；カラム：ＯＪ−Ｈ  ２１×２５０ｍｍ、流速：８０ｇ／分、移動相：ＣＯ２中２６％ＭｅＯＨおよび１０ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ、検出：２６９ｎｍ  ＵＶによりさらに精製して、単一エナンチオマー、Ｒｔ（Ｐ１）＝３．７分；（ＩＣ５０は１７．４９μＭ）およびＲｔ（Ｐ２）＝４．７分；（ＩＣ５０は３．３１μＭ）を得た。
【０４７３】
表５において同定されている以下の式Ｉの化合物は、上記手順または上記手順を変更したものを用い、対応するピラジン−２−アミン誘導体および保護されたアミンを使用して作製した。
【０４７４】
【表１４−１】
0006534389.tif 000077
【０４７５】
【表１４−２】
0006534389.tif 000078
【０４７６】
【表１４−３】
0006534389.tif 000079
【０４７７】
実施例１４：７−（６−アミノ−５−（（２，３−ジクロロフェニル）チオ）ピラジン−２−イル）−７−アザスピロ［３．５］ノナン−１−アミン
【０４７８】
【化５４】
0006534389.tif 000080
【０４７９】
ＤＩＰＥＡ（１ｍＬ）中の６−クロロ−３−（（２，３−ジクロロフェニル）チオ）ピラジン−２−アミン（１４０ｍｇ、０．４５７ｍｍｏｌ）および２−（７−アザスピロ［３．５］ノナン−１−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（ＨＣｌ塩、１５４ｍｇ、０．５０２ｍｍｏｌ）の溶液を、１３０℃で１６時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去した。ＴＨＦ：ＭｅＯＨ（１：１、１ｍＬ）中の得られた残留物およびヒドラジン水和物（２９μＬ、０．６０２ｍｍｏｌ）の溶液を、５５℃で１６時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をＨＰＬＣ（勾配溶出、水中３５〜６０％アセトニトリル、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）により精製して、表題化合物（７８ｍｇ、０．５０２ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm 7.59 (s, 1 H), 7.31 (dd, J=8.03, 1.51 Hz, 1 H), 7.12 (t, J=8.03 Hz, 1 H), 6.62 (dd, J=8.03, 1.51 Hz, 1 H), 4.37 (d, J=13.55 Hz, 1 H), 4.26 (d, J=13.55 Hz, 1 H), 3.24-3.30 (溶媒と一部重複, m, 1 H), 3.07-3.20 (m, 1 H), 2.92 3.06 (m, 1 H), 2.26-2.39 (m, 1 H), 1.87-2.07 (m, 2 H), 1.57-1.87 (m, 4 H), 1.34-1.42 (m, 1 H).Ｃ１８Ｈ２２Ｃｌ２Ｎ５Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４１０．０９７３、実測値４１０．１０１８；（ラセミ）。ＩＣ５０は０．０５６μＭである。
【０４８０】
上記表題化合物のキラルＳＦＣ精製を、以下の通り、すなわち；カラム：ＡＤ−Ｈ  ２１×２５０ｍｍ、流速：８０ｇ／分、移動相：ＣＯ２中４６％ＭｅＯＨおよび１０ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ、検出：２７４ｎｍ  ＵＶで行って、単一エナンチオマー、Ｒｔ（Ｐ１）＝４．０分およびＲｔ（Ｐ２）＝５．５分を得た。（Ｐ１（Ｓ−エナンチオマー（Ｘ線により決定））；ＩＣ５０は０．０１９μＭである；（Ｐ２（Ｒ−エナンチオマー））；ＩＣ５０は０．４１４μＭである。
【０４８１】
表６において同定されている以下の式Ｉの化合物は、上記手順または上記手順を変更したものを用い、対応するピラジン−２−アミン誘導体およびフタルアミド保護されたアミンを使用して作製した。
【０４８２】
【表１５−１】
0006534389.tif 000081
【０４８３】
【表１５−２】
0006534389.tif 000082
【０４８４】
実施例２０：（Ｓ）−７−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−７−アザスピロ［３．５］ノナン−１−アミン
【０４８５】
【化５５】
0006534389.tif 000083
【０４８６】
ステップａ：
ＤＩＰＥＡ（３．７ｍＬ）中の６−クロロ−３−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−アミン（２３０ｍｇ、０．７５０ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−２−メチル−Ｎ−（（Ｓ）−７−アザスピロ［３．５］ノナン−１−イル）プロパン−２−スルフィンアミド（２３８ｍｇ、０．９７５ｍｍｏｌ）の混合物を、１０５℃で１０時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（５から７０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、（Ｒ）−Ｎ−（（Ｓ）−７−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−７−アザスピロ［３．５］ノナン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（１７２ｍｇ、０．３３４ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。ＭＳｍ／ｚ５１５．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４８７】
ステップｂ：
ＤＣＭ（１．４ｍＬ）中の（Ｒ）−Ｎ−（（Ｓ）−７−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−７−アザスピロ［３．５］ノナン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（１４２ｍｇ、０．３７６ｍｍｏｌ）およびＨＣｌ（ジオキサン中４Ｍ、４１４μＬ、１．６６ｍｍｏｌ）の溶液を、４０℃で２０分間撹拌した。室温に冷却した後、ＨＣｌ（Ｈ２Ｏ中１Ｍ）を添加し、得られた水性混合物をＤＣＭで抽出した。水相をｐＨ１２になるまでＮＨ４ＯＨ（Ｈ２Ｏ中２８％）で塩基性化し、これをＤＣＭ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去して、（Ｓ）−７−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−７−アザスピロ［３．５］ノナン−１−アミン（９３ｍｇ、０．２２７ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.40-8.53 (m, 1 H), 7.61-7.69 (m, 1 H), 7.55 (dd, J=8.0, 4.5 Hz, 1 H), 7.29 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 6.19 (s, 2 H), 4.11-4.24 (m, 1 H), 3.99-4.06 (m, 1 H), 3.06-3.20 (m, 2 H), 2.90-3.06 (m, 2 H), 1.50-1.74 (m, 4 H), 1.33-1.49 (m, 2 H).Ｃ１８Ｈ２１Ｆ３Ｎ６Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４１１．１５６６、実測値４１１．１５７９。ＩＣ５０は０．０３８μＭである。
【０４８８】
実施例２１：（Ｓ）−５−アミノ−３−（１−アミノ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）−６−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−カルボキサミド
【０４８９】
【化５６】
0006534389.tif 000084
【０４９０】
ステップａ：
ＤＣＭ（３０ｍＬ）中の６−クロロ−３−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−アミン（１．２ｇ、２．１１９ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮＢＳ（７４５ｍｇ、４．１９ｍｍｏｌ）を０℃で一度に添加した。得られた混合物を０℃で３０分間および室温で１時間激しく撹拌した。透明溶液を水でクエンチし、ＤＣＭで抽出した。その後、合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から５０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、５−ブロモ−６−クロロ−３−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−アミン（９３８ｍｇ、２．５１ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ３８７．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４９１】
ステップｂ：
ＤＭＦ（７ｍＬ）中の５−ブロモ−６−クロロ−３−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−アミン（７５０ｍｇ、１．９４５ｍｍｏｌ）およびシアン化銅（Ｉ）（３４８ｍｇ、３．８９ｍｍｏｌ）の混合物を、１２０℃で１４時間撹拌した。室温に冷却した後、反応物をセライトのパッドに通して濾過し、続いてＭｅＯＨ（５０ｍＬ）で洗浄した。揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から１００％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、５−アミノ−３−クロロ−６−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−カルボニトリル（３０１ｍｇ、０．９０７ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ３３２．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４９２】
ステップｃ：
ＤＩＰＥＡ（０．２４６ｍＬ）中の５−アミノ−３−クロロ−６−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−カルボニトリル（５２ｍｇ、０．１５７ｍｍｏｌ）および（Ｓ）−Ｎ−（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（９０ｍｇ、０．３１４ｍｍｏｌ）の混合物を、１３５℃で１時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から１００％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、５−アミノ−３−（（Ｓ）−１−（（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）アミノ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）−６−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−カルボニトリル（７７ｍｇ、０．１３２ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ５８４．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４９３】
ステップｄ：
ＭｅＯＨ（３．５ｍＬ）中の５−アミノ−３−（（Ｓ）−１−（（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）アミノ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）−６−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−カルボニトリル（７７ｍｇ、０．１３２ｍｍｏｌ）およびＮａＯＨ（Ｈ２Ｏ中１Ｍ、１．４５１ｍＬ、１．４５１ｍｍｏｌ）の混合物を、マイクロ波反応器内１１０℃で３５分間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去して、５−アミノ−３−（（Ｓ）−１−（（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）アミノ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）−６−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−カルボキサミド（７９ｍｇ、０．１３２ｍｍｏｌ）を得、これをさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。ＭＳｍ／ｚ６０２．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４９４】
ステップｅ：
ＴＦＡ（１．２ｍＬ、１５．７６ｍｍｏｌ）中の５−アミノ−３−（（Ｓ）−１−（（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）アミノ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）−６−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−カルボキサミド（７９ｍｇ、０．１３２ｍｍｏｌ）の溶液を、マイクロ波反応器内１００℃で、出発物質が残らなくなるまで（３時間、ＬＣＭＳによりモニターした）撹拌した。揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をＨＰＬＣ（勾配溶出、水中２５〜５０％アセトニトリル、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）により精製して、（Ｓ）−５−アミノ−３−（１−アミノ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）−６−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−カルボキサミド（１８．８ｍｇ、０．０３９ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm 8.43 (dd, J=4.5, 1.4 Hz, 1 H), 7.57 (dd, J=8.1, 1.3 Hz, 1 H), 7.46 (dd, J=8.2, 4.5 Hz, 1 H), 3.92-3.88 (m, 2 H), 3.20-3.08 (m, 2 H), 2.77 (t, J=7.4 Hz, 1 H), 2.04-1.96 (m, 1 H), 1.829-1.82 (m, 1 H), 1.78-1.61 (m, 4 H), 1.53 (ddd, J=12.3, 9.2, 5.7 Hz, 1 H), 1.43 (ddd, J=9.8, 4.9, 2.0 Hz, 1 H), 1.39-1.32 (m, 1 H), 1.30-1.23 (m, 1 H).Ｃ２０Ｈ２５Ｆ３Ｎ７ＯＳ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４６８．１７１５、実測値４６８．１７６１；ＩＣ５０は０．０１０μＭである。
【０４９５】
表７において同定されている以下の式Ｉの化合物は、上記手順または上記手順を変更したものを用い、対応するアミンおよびアミン脱保護法を使用して作製した。
【０４９６】
【表１６】
0006534389.tif 000085
【０４９７】
実施例２３：（Ｓ）−８−（５−アミノ−６−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）−１，２，４−トリアジン−３−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン
【０４９８】
【化５７】
0006534389.tif 000086
【０４９９】
ステップａ：
ＭｅＣＮ（１ｍＬ）およびＮＭＰ（０．１ｍＬ）中の３−クロロ−１，２，４−トリアジン−５−アミン（７０ｍｇ、０．５３６ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−Ｎ−（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（２４７ｍｇ、０．６４４ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（１７７μＬ、１．６０９ｍｍｏｌ）の混合物に、マイクロ波反応器内９０℃で４５分間照射を行った。室温に冷却した後、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から５％の勾配のＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により直接精製して、（Ｓ）−８−（５−アミノ−１，２，４−トリアジン−３−イル）−Ｎ−（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンを得、これをさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。ＭＳｍ／ｚ３８３．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５００】
ステップｂ：
ＤＣＭ（８ｍＬ）中の（Ｓ）−８−（５−アミノ−１，２，４−トリアジン−３−イル）−Ｎ−（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（１９４ｍｇ、０．５０７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮＢＳ（９７ｍｇ、０．５４３ｍｍｏｌ）を０℃で一度に添加した。０℃で２０分間撹拌した後、透明溶液を数滴のＮａ２ＣＯ３水溶液でクエンチし、これをＤＣＭで抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から１００％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、（Ｓ）−８−（５−アミノ−６−ブロモ−１，２，４−トリアジン−３−イル）−Ｎ−（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（７７．９ｍｇ、０．１６９ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ４６３．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５０１】
ステップｃ：
ジオキサン（１ｍＬ）中の（Ｓ）−８−（５−アミノ−６−ブロモ−１，２，４−トリアジン−３−イル）−Ｎ−（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（５４．１ｍｇ、０．１１７ｍｍｏｌ）、２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−チオール（２１ｍｇ、０．１１７ｍｍｏｌ）、キサントホス（７．４６ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（５．３７ｍｇ、０．００５８ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．０４１ｍＬ、０．２３４ｍｍｏｌ）の混合物を、マイクロ波反応器内１３０℃で１．５時間撹拌した。室温に冷却した後、反応物をセライトのパッドに通して濾過し、続いてＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で洗浄した。揮発物を減圧下で除去して、（Ｓ）−８−（５−アミノ−６−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）−１，２，４−トリアジン−３−イル）−Ｎ−（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（６５ｍｇ、０．１１６ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ５６０．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５０２】
ステップｄ：
ＴＦＡ（１．２５３ｍＬ、１６．２６ｍｍｏｌ）中の（Ｓ）−８−（５−アミノ−６−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）−１，２，４−トリアジン−３−イル）−Ｎ−（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（６５ｍｇ、０．１１６ｍｍｏｌ）の溶液を、出発物質が残らなくなるまで（１．５時間、ＬＣ／ＭＳによりモニターした）１００℃で撹拌し、揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物を水で希釈し、これをＥｔ２Ｏ（３×１０ｍＬ）で抽出した。水層を、ＮＨ４ＯＨ（水中２８％）を用いてｐＨ１２に塩基性化し、これをＤＣＭ（３×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をＨＰＬＣ（勾配溶出、水中２５〜５０％アセトニトリル、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）により精製して、（Ｓ）−８−（５−アミノ−６−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）−１，２，４−トリアジン−３−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（１４．５ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm 8.50-8.45 (m, 1 H), 7.60-7.54 (m, 1 H), 7.53-7.46 (m, 1 H), 4.64-4.50 (m, 2 H), 3.22-3.09 (m, 2 H), 2.88 (t, J=7.3 Hz, 1 H), 2.11-2.00 (m, 1 H), 1.94-1.86 (m, 1 H), 1.84-1.74 (m, 1 H), 1.74-1.63 (m, 3 H), 1.59-1.46 (m, 2 H), 1.45-1.39 (m, 1 H), 1.39-1.31 (m, 1 H).Ｃ１８Ｈ２３Ｆ３Ｎ７Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４２６．１６８８、実測値４２６．１６６７。ＩＣ５０は０．２９０μＭである。
【０５０３】
実施例２４：（Ｓ）−８−（４−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピリミジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン
【０５０４】
【化５８】
0006534389.tif 000087
【０５０５】
ステップａ：
ジオキサン（１ｍＬ）中の２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−チオール（１５０ｍｇ、０．８３７ｍｍｏｌ）、２−クロロ−５−ヨードピリミジン−４−アミン（２６７ｍｇ、１．０４７ｍｍｏｌ）、キサントホス（５３．３ｍｇ、０．０９２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（３８．３ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．２９２ｍＬ、１．６７４ｍｍｏｌ）の混合物を、マイクロ波反応器内１３０℃で１．５時間撹拌した。室温に冷却した後、反応物をセライトのパッドに通して濾過し、続いてＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で洗浄した。揮発物を減圧下で除去して、２−クロロ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピリミジン−４−アミン（１４１ｍｇ、０．４６０ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ３０７．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５０６】
ステップｂ：
ＤＩＰＥＡ（０．３５９ｍＬ）中の２−クロロ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピリミジン−４−アミン（７０ｍｇ、０．２２８ｍｍｏｌ）および（Ｓ）−Ｎ−（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（１０５ｍｇ、０．２７４ｍｍｏｌ）の混合物を、マイクロ波反応器内１３５℃で１．５時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去して、（Ｓ）−８−（４−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピリミジン−２−イル）−Ｎ−（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（１２８ｍｇ、０．２２８ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ５５９．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５０７】
ステップｃ：
ＴＦＡ（２．４７１ｍＬ、３２．１ｍｍｏｌ）中の（Ｓ）−８−（４−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピリミジン−２−イル）−Ｎ−（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（１２８ｍｇ、０．２２９ｍｍｏｌ）の溶液を、出発物質が残らなくなるまで（１．５時間、ＬＣＭＳによりモニターした）１００℃で撹拌し、揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物を水で希釈し、次いでこれをＥｔ２Ｏ（３×１０ｍＬ）で抽出した。水層を、ＮＨ４ＯＨ（水中２８％）を用いてｐＨ１２に塩基性化し、これをＤＣＭ（３×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をＨＰＬＣ（勾配溶出、水中３５〜６０％アセトニトリル、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）により精製して、（Ｓ）−８−（４−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピリミジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（３２ｍｇ、０．０７２ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400MHz, メタノール-d4) δ ppm 8.41-8.35 (m, 1 H), 8.00 (s, 1 H), 7.47-7.43 (m, 2 H), 4.66-4.45 (m, 2 H), 3.18-3.06 (m, 2 H), 2.81 (t, J=7.3 Hz, 1 H), 2.09-1.97 (m, 1 H), 1.94-1.86 (m, 1 H), 1.81-1.72 (m, 1 H), 1.69-1.62 (m, 2 H), 1.59-1.53 (m, 2 H), 1.49-1.44 (m, 1 H), 1.40-1.35 (m, 1 H), 1.33-1.25 (m, 1 H).Ｃ１９Ｈ２４Ｆ３Ｎ６Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４２５．１７３５、実測値４２５．１７４１；ＩＣ５０は２．７８μＭである。
【０５０８】
実施例２５：（Ｒ）−５−アミノ−３−（１−アミノ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）−６−（（３−クロロ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−カルボキサミド
【０５０９】
【化５９】
0006534389.tif 000088
【０５１０】
ステップａ：
ＤＩＰＥＡ（１０μＬ）およびＮＭＰ（５ｍＬ）中の５−アミノ−３−クロロピラジン−２−カルボニトリル（１．５５ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−Ｎ−（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（２．８８ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）の溶液を、１１０℃で１６時間撹拌した。室温に冷却した後、反応混合物を、ＮａＨＣＯ３水溶液を含有する分液漏斗に注ぎ入れ、これをＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から５％の勾配のＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により精製して、５−アミノ−３−（（Ｒ）−１−（（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）アミノ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）ピラジン−２−カルボニトリル（２．７４ｇ、６．７４ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ４０７．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５１１】
ステップｂ：（注：この反応は各５００ｍｇの４バッチで行った）。
ＭｅＯＨ（８ｍＬ）およびＮａＯＨ（Ｈ２Ｏ中２．５Ｍ、５ｍＬ、１２．３ｍｍｏｌ）中の５−アミノ−３−（（Ｒ）−１−（（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）アミノ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）ピラジン−２−カルボニトリル（５００ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）の溶液を、マイクロ波反応器内１３０℃で９０分間撹拌した。室温に冷却した後、得られた混合物をＨＰＬＣ（３５〜６０％勾配のアセトニトリル／水、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）により精製して、５−アミノ−３−（（Ｒ）−１−（（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）アミノ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）ピラジン−２−カルボキサミド（１６０ｍｇ／１回の反応、合計６４０ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ４２５．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５１２】
ステップｃ：
ＴＦＡ（１１ｍＬ）中の５−アミノ−３−（（Ｒ）−１−（（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）アミノ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）ピラジン−２−カルボキサミド（６１５ｍｇ、１．４５ｍｍｏｌ）の溶液を、１００℃で１時間撹拌した。揮発物を減圧下で除去した。ＤＣＭ（１５ｍＬ）中の得られた残留物、ＤＩＰＥＡ（１．２ｍＬ、６．８９ｍｍｏｌ）およびＢｏｃ２Ｏ（３３０ｍｇ、１．５１６ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で２時間撹拌した。揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（１から１０％の勾配のＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により精製して、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（８−（６−アミノ−３−カルバモイルピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）カルバメート（５３８ｍｇ、１．３７８ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ３９１．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５１３】
ステップｄ：
ＤＣＭ（５ｍＬ）中の（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（８−（６−アミノ−３−カルバモイルピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）カルバメート（５３８ｍｇ、１．３７８ｍｍｏｌ）およびＮＢＳ（２７０ｍｇ、１．５１６ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃で２０分間撹拌した。反応混合物をＭｅＯＨ（２ｍＬ）でクエンチし、室温で２０分間撹拌した。得られた混合物を、ＮａＨＣＯ３水溶液を含有する分液漏斗に注ぎ入れ、これをＤＣＭで抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、揮発物を減圧下で除去して、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（８−（６−アミノ−５−ブロモ−３−カルバモイルピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）カルバメート（６２７ｍｇ、１．３３６ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ４７１．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５１４】
ステップｅ：
ジオキサン（３ｍＬ）中の（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（８−（６−アミノ−５−ブロモ−３−カルバモイルピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）カルバメート（６２７ｍｇ、１．３３６ｍｍｏｌ）、キサントホス（７７ｍｇ、０．１３４ｍｍｏｌ）およびＰｄ２（ｄｂａ）３（６１．２ｍｇ、０．０６７ｍｍｏｌ）の溶液に、２−エチルヘキシル−３−メルカプトプロパノエート（３３４μＬ、１．４６９ｍｍｏｌ）を（室温でおよびＮ２下で）添加し、続いてＤＩＰＥＡ（４６７μＬ、２．６７ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液をマイクロ波反応器内９０℃で１時間撹拌した。室温に冷却した後、反応物をセライトのパッドに通して濾過し、続いてＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を濃縮し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から１０％の勾配のＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により精製して、２−エチルヘキシル３−（（３−アミノ−５−（（Ｒ）−１−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）−６−カルバモイルピラジン−２−イル）チオ）プロパノエート（５７４ｍｇ、０．９４６ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ６０７．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５１５】
ステップｆ：
ＴＨＦ（３ｍＬ）中の２−エチルヘキシル３−（（３−アミノ−５−（（Ｒ）−１−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）−６−カルバモイルピラジン−２−イル）チオ）プロパノエート（５７４ｍｇ、０．９４６ｍｍｏｌ）の溶液に、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（ＴＨＦ中１Ｍ、２．８４ｍＬ、２．８４ｍｍｏｌ）を（−７８℃でおよびＮ２下で）添加した。−７８℃で１０分間激しく撹拌した後、反応をＫ２ＣＯ３水溶液（２Ｍ、５００μＬ）でクエンチし、揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をＨＰＬＣ（１５から４０％の勾配のアセトニトリル／水、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）により精製して、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（８−（６−アミノ−３−カルバモイル−５−メルカプトピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）カルバメート（２８０ｍｇ、０．６６３ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ４２３．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５１６】
ステップｇ：
ジオキサン（０．５ｍＬ）中の（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（８−（６−アミノ−３−カルバモイル−５−メルカプトピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）カルバメート（８８ｍｇ、０．２０８ｍｍｏｌ）、３−クロロ−４−ヨード−２−（トリフルオロメチル）ピリジン（８０ｍｇ、０．２６０ｍｍｏｌ）、キサントホス（１２．１ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ）およびＰｄ２（ｄｂａ）３（９．６ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（１１０μＬ、０．６２５ｍｍｏｌ）を（室温でおよびＮ２下で）添加した。得られた溶液をマイクロ波反応器内９０℃で１時間撹拌した。室温に冷却した後、反応物をＥｔＯＡｃで希釈し、これをセライトのパッドに通して濾過し、続いてＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を濃縮し、真空下で乾燥させた。ＤＣＭ（１ｍＬ）およびＴＦＡ（４００μＬ）中の得られた残留物の溶液を、室温で１０分間撹拌した。揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をＨＰＬＣ（勾配溶出、水中２５〜５０％アセトニトリル、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）により精製して、（Ｒ）−５−アミノ−３−（１−アミノ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）−６−（（３−クロロ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−カルボキサミド（６０ｍｇ、０．１２０ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm 8.18 (d, J=5.05 Hz, 1 H). 6.85 (d, J=5.31 Hz, 1 H). 3.87 (t, J=13.89 Hz, 2 H). 2.98-3.14 (m, 2 H), 2.72 (t, J=7.33 Hz, 1 H). 1.86-2.02 (m, 1 H). 1.73-1.81 (m, 1 H). 1.43-1.72 (m, 5 H). 1.17-1.41 (m, 3 H).  19F NMR (376 MHz, メタノール-d4) δ ppm -67.22 (s, 1 F).Ｃ２０Ｈ２４ＣｌＦ３Ｎ７ＯＳ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値５０２．１４０４、実測値５０２．１３９８。ＩＣ５０は０．０５８μＭである。
【０５１７】
実施例２６：（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（２−アミノ−３−クロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン
【０５１８】
【化６０】
0006534389.tif 000089
【０５１９】
ＤＩＰＥＡ（２ｍＬ）中の３−（（２−アミノ−３−クロロピリジン−４−イル）チオ）−６−クロロピラジン−２−アミン（６７ｍｇ、０．２３３ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−２−メチル−Ｎ−（（Ｒ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）プロパン−２−スルフィンアミド（１２０ｍｇ、０．４６５ｍｍｏｌ）の混合物を、１３０℃で５時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去した。ジオキサン（５ｍＬ）およびＨＣｌ（ジオキサン中４Ｍ、１ｍＬ）中の得られた残留物の溶液を、４０℃で１時間撹拌した。揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をＨＰＬＣ（勾配溶出、水中２５〜５０％アセトニトリル、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）により精製した。得られた残留物をＳＦＣ（Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ  ＤＥＡＰ  ２０×１５０ｍｍ、流速：８０ｇ／分、移動相：５．７分以内でＣＯ２中２０〜４０％ＭｅＯＨ、マストリガーコレクション、オーブン温度４０℃、背圧１２０ｂａｒ）によりさらに精製して、（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（２−アミノ−３−クロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（２３ｍｇ、０．０５７ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm 7.50-7.64 (m, 2 H), 5.91 (d, J=5.77 Hz, 1 H), 4.26 (t, J=13.18 Hz, 2 H), 3.03-3.20 (m, 2 H), 2.79 (t, J=7.53 Hz, 1 H), 1.95-2.11 (m, 1 H), 1.83-1.95 (m, 1 H), 1.52-1.82 (m, 5 H), 1.37-1.52 (m, 2 H), 1.32 (dd, J=13.30, 2.01 Hz, 1 H).Ｃ１８Ｈ２５ＣｌＮ７Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４０６．１５８１、実測値４０６．１５７６。ＩＣ５０は０．０１４μＭである。
【０５２０】
以下の化合物は、上記手順または上記手順を変更したものを用い、対応するアミン保護されたアミンを使用して合成した。
【０５２１】
【表１７】
0006534389.tif 000090
【０５２２】
実施例２８：（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（３−クロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン
【０５２３】
【化６１】
0006534389.tif 000091
【０５２４】
ステップａ：
ＤＩＰＥＡ（２ｍＬ）中の６−クロロ−３−（（３−クロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−アミン（５３ｍｇ、０．１９４ｍｍｏｌ）の懸濁液に、（Ｒ）−２−メチル−Ｎ−（（Ｒ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）プロパン−２−スルフィンアミド（６５ｍｇ、０．２５２ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を９０℃で１０時間撹拌し、次いで濃縮した。粗製物をシリカクロマトグラフィー（０〜５０％勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン；ＥｔＯＡｃは１０％のＭｅＯＨを含有、ヘプタンは２％のＥｔ３Ｎを含有）により精製して、（Ｒ）−Ｎ−（（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（３−クロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（４０ｍｇ、０．０８１ｍｍｏｌ）をオフホワイトの固体として得た。ＭＳｍ／ｚ４９５．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５２５】
ステップｂ：
ＤＣＭ（０．８ｍＬ）中の（Ｒ）−Ｎ−（（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（３−クロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（４０ｍｇ、０．０８１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＣｌの溶液（ジオキサン中４Ｍ、１０１μＬ、０．４０４ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を４０℃で１時間撹拌した。ＨＣｌの水溶液（２Ｍ、２ｍＬ）を添加し、得られた混合物をＤＣＭ（２×）で抽出した。水性混合物をｐＨ＝１２になるまで水酸化アンモニウム（水中２８％）で塩基性化し、これをＤＣＭ（３×）で抽出した。有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（３−クロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（２４ｍｇ、０．０６１ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.49 (s, 1 H), 8.25 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 7.66 (s, 1 H), 6.56 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 6.24 (s, 2 H), 4.07-4.26 (m, 2 H), 2.98-3.13 (m, 2 H), 2.70 (t, J=7.4 Hz, 1 H), 1.11-1.94 (m, 10 H).Ｃ１８Ｈ２４ＣｌＮ６Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値３９１．１４７２、実測値３９１．１４８０。ＩＣ５０は０．０２３μＭである。
【０５２６】
実施例２９：（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（２−クロロピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン
【０５２７】
【化６２】
0006534389.tif 000092
【０５２８】
ステップａ：
ＤＩＰＥＡ（１．６ｍＬ）中の６−クロロ−３−（（２−クロロピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−アミン（８５ｍｇ、０．３１１ｍｍｏｌ）の懸濁液に、（Ｒ）−２−メチル−Ｎ−（（Ｒ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）プロパン−２−スルフィンアミド（１０５ｍｇ、０．４０５ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を９０℃で１０時間撹拌し、次いで濃縮した。粗製物をシリカクロマトグラフィー（０〜５０％勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン；ＥｔＯＡｃは１０％のＭｅＯＨを含有、ヘプタンは２％のＥｔ３Ｎを含有）により精製して、（Ｒ）−Ｎ−（（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（２−クロロピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（４０ｍｇ、０．０８１ｍｍｏｌ）をオフホワイトの固体として得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 8.15 (dd, J=4.5, 1.8 Hz, 1 H), 7.64 (s, 1 H), 7.01-7.18 (m, 2 H), 4.87 (br. s, 2 H), 4.24 (s, 2 H), 3.29-3.45 (m, 1 H), 3.20 (d, J=5.8 Hz, 1 H) 2.98-3.13 (m, 2 H), 1.98-2.21 (m, 1 H), 1.36-1.94 (m, 9 H), 1.22 (s, 9 H).ＭＳｍ／ｚ４９５．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５２９】
ステップｂ：
ＤＣＭ（２ｍＬ）中の（Ｒ）−Ｎ−（（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（２−クロロピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（６６ｍｇ、０．１３３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＣｌの溶液（ジオキサン中４Ｍ、１６７μＬ、０．６６７ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を４０℃で１時間撹拌した。ＨＣｌの水溶液（２Ｍ、２ｍＬ）を添加し、得られた混合物をＤＣＭ（２×）で抽出した。水性混合物をｐＨ＝１２になるまで水酸化アンモニウム（水中２８％）で塩基性化し、これをＤＣＭ（３×）で抽出した。有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（２−クロロピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（２４ｍｇ、０．０６２ｍｍｏｌ）を黄褐色固体として得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm 8.01 (dd, J=4.8, 1.8 Hz, 1 H), 7.43-7.52 (m, 1 H), 7.12 (dd, J=7.9, 4.6 Hz, 1 H), 7.00 (dd, J=7.9, 1.6 Hz, 1 H), 4.11-4.26 (m, 2 H), 2.96-3.10 (m, 2 H), 2.67-2.81 (m, 1 H), 1.06-2.05 (m, 10 H).Ｃ１８Ｈ２４ＣｌＮ６Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値３９１．１４７２、実測値３９１．１４７０。ＩＣ５０は０．０１５μＭである。
【０５３０】
実施例３０：（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（２，３−ジクロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン
【０５３１】
【化６３】
0006534389.tif 000093
【０５３２】
ステップａ：
ＤＩＰＥＡ（０．５５ｍＬ）中の６−クロロ−３−（（２，３−ジクロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−アミン（３４ｍｇ、０．１１１ｍｍｏｌ）の懸濁液に、（Ｒ）−２−メチル−Ｎ−（（Ｒ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）プロパン−２−スルフィンアミド（３７ｍｇ、０．１４４ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を９０℃で１０時間撹拌し、次いで濃縮した。粗製物をシリカクロマトグラフィー（０〜５０％勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン；ＥｔＯＡｃは１０％のＭｅＯＨを含有、ヘプタンは２％のＥｔ３Ｎを含有）により精製して、（Ｒ）−Ｎ−（（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（２，３−ジクロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（３３ｍｇ、０．０６２ｍｍｏｌ）をオフホワイトの固体として得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 8.02 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 7.66 (s, 1 H), 6.60 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 4.82 (s, 2 H), 4.21-4.34 (m, 2 H), 3.34-3.42 (m, 1 H), 3.20 (d, J=5.8 Hz, 1 H), 2.99-3.15 (m, 2 H), 2.08-2.21 (m, 1 H), 1.26-1.97 (m, 9 H), 1.23 (s, 9 H).ＭＳｍ／ｚ５２９．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５３３】
ステップｂ：
ＤＣＭ（０．３８ｍＬ）中の（Ｒ）−Ｎ−（（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（２，３−ジクロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（２０ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＣｌの溶液（ジオキサン中４Ｍ、４７μＬ、０．１８９ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を４０℃で１時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、ＭｅＯＨに溶解した。粗製物をＨＰＬＣ（勾配溶出、水中１５〜４０％アセトニトリル、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）により精製して、（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（２，３−ジクロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（７ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm 7.91-8.04 (m, 1 H), 7.52-7.65 (m, 1 H), 6.61 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 4.29 (t, J=14.2 Hz, 2 H), 3.06-3.22 (m, 2 H), 2.88 (t, J=7.4 Hz, 1 H), 1.21-2.17 (m, 10 H).Ｃ１８Ｈ２３Ｃｌ２Ｎ６Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４２５．１０８２、実測値４２５．１０９５。ＩＣ５０は０．００３μＭである。
【０５３４】
実施例３１：（Ｓ）−７−（６−アミノ−５−（（２，３−ジクロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−７−アザスピロ［３．５］ノナン−１−アミン
【０５３５】
【化６４】
0006534389.tif 000094
【０５３６】
ステップａ：
ＤＩＰＥＡ（１．８ｍＬ）中の６−クロロ−３−（（２，３−ジクロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−アミン（５４ｍｇ、０．１７６ｍｍｏｌ）の懸濁液に、（Ｒ）−２−メチル−Ｎ−（（Ｒ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）プロパン−２−スルフィンアミド（８６ｍｇ、０．３５１ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を９０℃で１０時間撹拌し、次いで濃縮した。粗製物をシリカクロマトグラフィー（０〜５０％勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン；ＥｔＯＡｃは１０％のＭｅＯＨを含有、ヘプタンは２％のＥｔ３Ｎを含有）により精製して、（Ｒ）−Ｎ−（（Ｓ）−７−（６−アミノ−５−（（２，３−ジクロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−７−アザスピロ［３．５］ノナン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（５２ｍｇ、０．１０２ｍｍｏｌ）をオフホワイトの固体として得た。ＭＳｍ／ｚ５１４．９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５３７】
ステップｂ：
ＤＣＭ（０．３８ｍＬ）中の（Ｒ）−Ｎ−（（Ｓ）−７−（６−アミノ−５−（（２，３−ジクロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−７−アザスピロ［３．５］ノナン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（２０ｍｇ、０．０３９ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＣｌの溶液（ジオキサン中４Ｍ、４７μＬ、０．１８９ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を４０℃で１時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、ＭｅＯＨに溶解した。粗製物をＨＰＬＣ（勾配溶出、水中１５〜４０％アセトニトリル、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）により精製して、（Ｓ）−７−（６−アミノ−５−（（２，３−ジクロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−７−アザスピロ［３．５］ノナン−１−アミン（７ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm 7.89 (d, J=5.5 Hz, 1 H), 7.50 (s, 1 H), 6.51 (d, J=5.5 Hz, 1 H), 3.94-4.31 (m, 2 H), 2.76-3.11 (m, 3 H), 2.06-2.24 (m, 1 H), 1.36-1.82 (m, 7 H).Ｃ１７Ｈ２１Ｃｌ２Ｎ６Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４１１．０９２５、実測値４１１．０９３８。ＩＣ５０は０．０２８μＭである。
【０５３８】
実施例３２：（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（２，３−ジクロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン
【０５３９】
【化６５】
0006534389.tif 000095
【０５４０】
ステップａ：
ＤＩＰＥＡ（１．５ｍＬ）中の３−（（３−アミノ−２−クロロフェニル）チオ）−６−クロロピラジン−２−アミン（６０ｍｇ、０．２０９ｍｍｏｌ）の懸濁液に、（Ｒ）−２−メチル−Ｎ−（（Ｒ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）プロパン−２−スルフィンアミド（７０ｍｇ、０．２７２ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を９０℃で１０時間撹拌し、次いで濃縮した。粗製物をシリカクロマトグラフィー（０〜５０％勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン；ヘプタンは２％のＥｔ３Ｎを含有）により精製して、（Ｒ）−Ｎ−（（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（３−アミノ−２−クロロフェニル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（３１ｍｇ、０．０６１ｍｍｏｌ）をオフホワイトの固体として得た。ＭＳｍ／ｚ５０９．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５４１】
ステップｂ：
ＤＣＭ（０．６ｍＬ）中の（Ｒ）−Ｎ−（（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（３−アミノ−２−クロロフェニル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（３１ｍｇ、０．０６１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＣｌの溶液（ジオキサン中４Ｍ、７６μＬ、０．３０４ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を４０℃で１時間撹拌した。ＨＣｌの水溶液（２Ｍ、２ｍＬ）を添加し、得られた混合物をＤＣＭ（２×）で抽出した。水性混合物をｐＨ＝１２になるまで水酸化アンモニウム（水中２８％）で塩基性化し、これをＤＣＭ（３×）で抽出した。有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（３−アミノ−２−クロロフェニル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（１８ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）を黄色固体として得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm 7.40 (s, 1 H), 6.73 (t, J=8.0 Hz, 1 H), 6.50 (dd, J=8.1, 1.3 Hz, 1 H), 5.90 (dd, J=7.8, 1.3 Hz, 1 H), 4.02-4.18 (m, 2 H), 3.21 (dt, J=3.2, 1.5 Hz, 1 H), 2.98 (d, J=11.4 Hz, 2 H), 2.67 (t, J=7.5 Hz, 1 H), 1.04-2.02 (m, 10 H).Ｃ１９Ｈ２６ＣｌＮ６Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４０５．１６２８、実測値４０５．１６３９。ＩＣ５０は０．０１１μＭである。
【０５４２】
実施例３３：（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（３−クロロ−２−フルオロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン
【０５４３】
【化６６】
0006534389.tif 000096
【０５４４】
ＤＩＰＥＡ（０．７ｍＬ）中の６−クロロ−３−（（３−クロロ−２−フルオロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−アミン（４０ｍｇ、０．１３７ｍｍｏｌ）の懸濁液に、（Ｒ）−２−メチル−Ｎ−（（Ｒ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）プロパン−２−スルフィンアミド（７１ｍｇ、０．０２７５ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を９０℃で１０時間撹拌し、次いで濃縮した。粗製物をＤＣＭ（０．７ｍＬ）に溶解し、ＨＣｌの溶液（ジオキサン中４Ｍ、３４μＬ、０．１３７ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を４０℃で１時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、粗製物をＨＰＬＣ（勾配溶出、水中１５から４０％のアセトニトリル、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製して、（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（３−クロロ−２−フルオロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（ＴＦＡ塩：１７ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.94 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 7.79 (br. s., 3 H), 7.69 (br. s., 1 H), 6.51 (d, J=5.5 Hz, 1 H), 6.34 (br. s., 2 H), 4.12-4.32 (m, 2 H), 2.99-3.24 (m, 3 H), 2.00-2.12 (m, 1 H), 1.30-1.90 (m, 9 H).Ｃ１８Ｈ２３ＣｌＦＮ６Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４０９．１３７７、実測値４０９．１３８５。ＩＣ５０は０．００５μＭである。
【０５４５】
実施例３４
【化６７】
0006534389.tif 000097
【０５４６】
ステップａ：
ジクロロメタン（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル２−オキソ−１，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（３００ｍｇ、１．１８０ｍｍｏｌ）の室温溶液に、五硫化リン（１１０ｍｇ、０．４９５ｍｍｏｌ）、続いてヘキサメチルジシロキサン（２．２５６ｍＬ、１０．６２ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で３時間撹拌し、次いでＥｔＯＡｃで希釈し、セライトに通して濾過した。濾液を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカクロマトグラフィー（０から８０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル１−チオキソ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（０．２９０ｇ、１．０７ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.39 (s, 1 H), 3.66 (dt, J=13.6, 4.9 Hz, 2 H), 3.09 (s, 2 H), 2.78 (t, J=7.8 Hz, 2 H), 1.95 (t, J=7.8 Hz, 2 H), 1.57 (dd, J=6.6, 4.8 Hz, 4 H), 1.39 (s, 9 H).ＭＳｍ／ｚ２７１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５４７】
ステップｂ：
ＴＨＦ（３ｍＬ）中の１−チオキソ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（１００ｍｇ、０．３７０ｍｍｏｌ）の溶液に、ヨードメタン（０．２３１ｍＬ、３．７０ｍｍｏｌ）を滴下添加した。得られた溶液を室温で１６時間撹拌した。反応過程全体を通じて、混合物の色はゆっくりと黄色が強くなり、割り当てられた反応時間撹拌した後、結果として薄黄色沈殿物を得た。反応混合物を濃縮し、真空下で乾燥させて、黄色固体を得た。黄色固体をＭｅＯＨ（２ｍＬ）に溶かし、メタノール中７Ｍアンモニア（３ｍＬ）で処理し、次いで密封管内で１００℃に８時間加熱した。反応物を室温に冷却し、減圧下で濃縮して、固体を得、これをアセトニトリルとともに超音波処理し、濾過した。濾液を濃縮し、残留物をシリカクロマトグラフィー（０から３０％の勾配のＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル１−アミノ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−１−エン−８−カルボキシレート（８７ｍｇ、０．３４３ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.38 (s, 1 H), 8.81 (d, J=25.2 Hz, 2 H), 3.98 (s, 2 H), 3.55 (t, J=7.0 Hz, 2 H), 2.82 (s, 2 H), 2.12 (t, J=7.1 Hz, 2 H), 1.74 (td, J=12.9, 4.7 Hz, 2 H), 1.57 (d, J=12.7 Hz, 2H), 1.41 (s, 9 H).ＭＳｍ／ｚ２５４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５４８】
ステップｃ：
ＤＣＭ（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル１−アミノ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−１−エン−８−カルボキシレート（８６ｍｇ、０．３３９ｍｍｏｌ）の溶液に、ジオキサン中ＨＣｌ（４Ｍ、０．５００ｍＬ、２．０ｍｍｏｌ）を室温で添加し、反応物を１６時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、残留物をアセトニトリルで摩砕し、濾過して、２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−１−エン−１−アミン（５７．７ｍｇ、０．２５４ｍｍｏｌ）を黄褐色固体として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.64 (s, 1 H), 9.39-9.23 (m, 1 H), 9.15 (s, 1 H), 9.07 (s, 1 H), 8.70 (d, J=12.5 Hz, 1 H), 3.54 (t, J=6.9 Hz, 2 H), 3.32 (d, J=13.3 Hz, 2 H), 3.05-2.88 (m, 2 H), 2.18 (t, J=6.9 Hz, 2 H), 2.01 (td, J=13.7, 4.3 Hz, 2 H), 1.80 (d, J=13.8 Hz, 2 H).ＭＳｍ／ｚ１５４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５４９】
ステップｄ：
Ｎ−メチル−２−ピロリジノン（４ｍＬ）中の６−クロロ−３−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−アミン（２５０ｍｇ、０．８１５ｍｍｏｌ）および２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−１−エン−１−アミン（２１０ｍｇ、１．３７１ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ＤＩＰＥＡ（１．４ｍＬ、８．０２ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を１４０℃に１６時間加熱した。得られた暗色混合物を室温に冷却し、ＥｔＯＡｃおよび水で希釈した。層を分配し、有機物を廃棄した。水層を２０％イソプロパノール／クロロホルム混合物（２×３０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機物をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。粗残留物を、分取ＨＰＬＣ（勾配溶出、水中５から４０％のＡＣＮ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）を用いて精製し、プールした画分の半分を凍結乾燥して、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−１−エン−１−アミン（ＴＦＡ塩：６１．４ｍｇ、０．０８２ｍｍｏｌ）を得た。残りの画分を合わせ、５０％飽和ＮａＨＣＯ３と共に１０分間激しく撹拌することにより中和した。得られた溶液を２０％イソプロパノール／クロロホルム混合物（３×３０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機物をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−１−エン−１−アミン（２２ｍｇ、０．０５２ｍｍｏｌ）を遊離塩基として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.46 (d, J=4.4 Hz, 1 H), 7.67 (s, 1 H), 7.55 (dd, J=8.2, 4.5 Hz, 1 H), 7.31 (d, J=8.1 Hz, 1 H), 6.19 (s, 2 H), 5.74 (s, 2 H), 4.40 (d, J=13.4 Hz, 2 H), 3.43 - 3.34 (m, 2 H), 2.90 (t, J=12.2 Hz, 2 H), 1.97-1.89 (m, 2 H), 1.83 (td, J=13.0, 4.1 Hz, 2 H), 1.36 (d, J=12.9 Hz, 2 H).ＭＳｍ／ｚ４２４．１５４１（Ｍ＋Ｈ）＋。ＩＣ５０は０．０３２μＭである。
【０５５０】
以下の化合物は、上記アミンを使用して作製し、本明細書に記載の標準的な手順を用いてカップリングさせた。
【０５５１】
【表１８】
0006534389.tif 000098
【０５５２】
実施例３６：ラセミ−８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−アミン
【０５５３】
【化６８】
0006534389.tif 000099
【０５５４】
ラセミ−２−（８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（４０ｍｇ、０．０７２ｍｍｏｌ）を、５ｍＬの円錐形マイクロ波バイアル内のエタノール（１ｍＬ）に溶解し、ヒドラジン水和物（０．０７０ｍＬ、１．４４ｍｍｏｌ）を添加し、蓋をし、９０℃のアルミニウムビーズバス上で２時間加熱した。懸濁液を０．４５μｍ  ＰＴＦＥ膜に通して真空濾過し、エタノールで洗浄した。ＨＰＬＣ精製（勾配溶出、水中１５から４０％のアセトニトリル、０．１％ＴＦＡ修飾剤）を行い、次いでＥｔＯＡｃで希釈し、飽和重炭酸塩水溶液、次いでブラインで洗浄した。濃縮し、１ｍＬのＤＣＭで希釈し、ＨＣｌ（１００μＬ、ジオキサン中４Ｍ）を添加して、沈殿物を得た。濃縮して、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−アミン（ＨＣｌ塩：１ｍｇ、０．００２ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ 8.43-8.39 (m, 1 H), 7.65 (s, 1 H), 7.46-7.39 (m, 2 H), 4.35-4.14 (m, 2 H), 3.98 (d, J=9.2 Hz, 1 H), 3.90 (d, J=9.2 Hz, 1 H), 3.58 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 3.29-3.12 (m, 3 H), 1.76 (m, 4 H).Ｃ１８Ｈ２２Ｆ３Ｎ６ＯＳ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４２７．１５２８、実測値４２７．１５３７。ＩＣ５０は０．０７μＭである。
【０５５５】
実施例３７：（Ｒ）および（Ｓ）−８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−アミン
【０５５６】
【化６９】
0006534389.tif 000100
【０５５７】
単一エナンチオマーＰ１、２−（８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（４９ｍｇ、０．０８８ｍｍｏｌ）を、５ｍＬの円錐形マイクロ波バイアル内のエタノール（１ｍＬ）に溶解し、ヒドラジン水和物（０．０８０ｍＬ、１．６５ｍｍｏｌ）を添加し、蓋をし、９０℃のアルミニウムビーズバス上で２時間加熱した。懸濁液を０．４５μｍ  ＰＴＦＥ膜に通して真空濾過し、エタノールで洗浄した。ＨＰＬＣ精製（勾配溶出、水中１５から４０％のアセトニトリル、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）の結果、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−アミン（１３ｍｇ、０．０２９ｍｍｏｌ）が単離された。キラル分析ＨＰＬＣ：ＬＣ−３  ４．６×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：１０ｍＭアンモニア含有４５％ＭｅＯＨ、５ｍＬ／分、単一エナンチオマーピーク１（Ｐ１）、Ｒｔ：０．８８分、＞９９％単一エナンチオマー。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ 8.39 (dd, J=4.3, 1.6 Hz, 1 H), 7.60 (s, 1 H), 7.41 (m, 2 H), 4.21-4.07 (m, 3 H), 3.86 (d, J=8.7 Hz, 1 H), 3.79 (d, J=8.7 Hz, 1 H), 3.51 (dd, J=9.0, 5.2 Hz, 1 H), 3.24 (m, 2 H), 3.15 (m, 1 H), 1.73 (m, 2 H), 1.59 (m, 1.8 Hz, 2 H).Ｃ１８Ｈ２２Ｆ３Ｎ６ＯＳ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４２７．１５２８、実測値４２７．１５４２。ＩＣ５０は０．０２５μＭである。
【０５５８】
実施例３８：（Ｒ）および（Ｓ）−８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−アミン
【０５５９】
【化７０】
0006534389.tif 000101
【０５６０】
単一エナンチオマーＰ２、２−（８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（４２ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）を、５ｍＬの円錐形マイクロ波バイアル内のエタノール（１ｍＬ）に溶解し、ヒドラジン水和物（０．０８０ｍＬ、１．６５ｍｍｏｌ）を添加し、蓋をし、９０℃のアルミニウムビーズバス上で２時間加熱した。懸濁液を０．４５μｍ  ＰＴＦＥ膜に通して真空濾過し、エタノールで洗浄した。ＨＰＬＣ精製（勾配溶出、水中１５から４０％のアセトニトリル、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）の結果、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−アミン（１３ｍｇ、０．０２９ｍｍｏｌ）が単離された。キラル分析ＨＰＬＣ：ＬＣ−３  ４．６×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：１０ｍＭアンモニア含有４５％ＭｅＯＨ、５ｍＬ／分、単一エナンチオマーピーク２（Ｐ２）、Ｒｔ：１．３３分、＞９９％単一エナンチオマー。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ 8.39 (dd, J=4.3, 1.6 Hz, 1 H), 7.60 (s, 1 H), 7.41 (m, 2 H), 4.21-4.07 (m, 3 H), 3.86 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 3.79 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 3.50 (dd, J=9.0, 5.2 Hz, 1 H), 3.24 (m, 2 H), 3.15 (m, 1 H), 1.80-1.67 (m, 2 H), 1.64-1.50 (m, 2 H).Ｃ１８Ｈ２２Ｆ３Ｎ６ＯＳ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４２７．１５２８、実測値４２７．１５３６。ＩＣ５０は０．９８３μＭである。
【０５６１】
実施例３９：（Ｒ）−６−アミノ−２−（１−アミノ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ニコチンアミド
【０５６２】
【化７１】
0006534389.tif 000102
【０５６３】
ステップａ：
１−メチルピロリジノン（７ｍＬ）中の２，６−ジクロロピリジン−３−カルボキサミド（０．７２８ｇ、３．８１ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ−メチルモルホリン（１．１４ｍＬ、１０．４０ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−Ｎ−（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（１ｇ、３．４７ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を還流条件下で１００℃に２４時間加熱した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、濃重炭酸ナトリウムで処理し、濾過した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた暗赤色油状物をシリカクロマトグラフィー（０から５０％の勾配の酢酸エチル／ヘプタン、０．２５％のトリエチルアミンを含有）により精製して、６−クロロ−２−（（Ｒ）−１−（（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）アミノ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）ニコチンアミド（０．９９８ｇ、２．２５ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ 7.81 (d, J=7.8 Hz, 1 H), 7.26 (d, J=8.6 Hz, 2 H), 6.86 (m, 3 H), 3.82 (m, 1 H), 3.77 (s, 3 H), 3.75-3.63 (m, 2 H), 3.03 (m, 2 H), 2.59 (m, 1 H), 2.01-1.92 (m, 1 H), 1.88-1.52 (m, 5 H), 1.51-1.36 (m, 3 H), 1.32 (d, J=6.5 Hz, 3 H), 1.25 (m, 2 H).ＭＳｍ／ｚ４４２．９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５６４】
ステップｂ：
トルエン（１１ｍＬ）中の６−クロロ−２−（（Ｒ）−１−（（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）アミノ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）ニコチンアミド（２４２ｍｇ、０．５４６ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（９７ｍｇ、０．１６９ｍｍｏｌ）および（オキシビス（２，１−フェニレン））ビス（ジフェニルホスフィン）（１０３ｍｇ、０．１９１ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を窒素でスパージし、ベンゾフェノンイミン（０．１１ｍＬ、０．６５６ｍｍｏｌ）およびカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（０．７１０ｍＬ、テトラヒドロフラン中１Ｍ、０．７１０ｍｍｏｌ）を窒素下で添加した。反応混合物を８０℃に２時間加熱し、混合物を室温に冷却し、セライトのパッドに通して濾過し、酢酸エチルで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮し、残留物をシリカクロマトグラフィー（０から５０％の勾配の酢酸エチル／ヘプタン）により精製して、６−（（ジフェニルメチレン）アミノ）−２−（（Ｒ）−１−（（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）アミノ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）ニコチンアミド（２５０ｍｇ、０．４２５ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ５８８．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５６５】
ステップｃ：
ＴＨＦ（６ｍＬ）中の６−（（ジフェニルメチレン）アミノ）−２−（（Ｒ）−１−（（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）アミノ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）ニコチンアミド（１３０ｍｇ、０．２２１ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ＨＣｌ（２Ｍ、０．１ｍＬ、０．２００ｍｍｏｌ）を添加し、得られた溶液を室温で３０分間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残留物をシリカクロマトグラフィー（０から５０％の勾配の酢酸エチル／ヘプタン、０．２５％のトリエチルアミンを含有）により精製して、６−アミノ−２−（（Ｒ）−１−（（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）アミノ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）ニコチンアミド（４３ｍｇ、０．１０２ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ４２４．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５６６】
ステップｄ：
トリフルオロ酢酸（３ｍＬ）中の６−アミノ−２−（（Ｒ）−１−（（（Ｒ）−１−（４−メトキシフェニル）エチル）アミノ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）ニコチンアミド（１９９ｍｇ、０．４７０ｍｍｏｌ）の溶液を、１００℃に３０分間加熱した。混合物を減圧下で濃縮し、残留物をさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。（Ｒ）−６−アミノ−２−（１−アミノ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）ニコチンアミド。ＭＳｍ／ｚ２９０．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５６７】
ステップｅ：
ジクロロメタン（２ｍＬ）中の（Ｒ）−６−アミノ−２−（１−アミノ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）ニコチンアミドの溶液に、トリエチルアミン（０．１９６ｍＬ、１．４１０ｍｍｏｌ）および二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（１１３ｍｇ、０．５１７ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残留物をシリカクロマトグラフィー（０から５０％の勾配の酢酸エチル／ヘプタン、０．２５％のトリエチルアミンを含有）により精製して、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（８−（６−アミノ−３−カルバモイルピリジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）カルバメート（１４７ｍｇ、０．３７７ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ 7.88 (d, J=8.5 Hz, 1 H), 6.19 (d, J=8.5 Hz, 1 H), 3.66 (t, J=7.7 Hz, 1 H), 3.27-3.15 (m, 2 H), 2.98 (t, J=12.4 Hz, 2 H), 2.05-1.94 (m, 1 H), 1.86-1.46 (m, 8 H), 1.45 (s, 9 H), 1.41 (d, J=6.0 Hz, 1 H).ＭＳｍ／ｚ３９０．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５６８】
ステップｆ：
氷浴上で冷却したジクロロメタン（５ｍＬ）中の（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（８−（６−アミノ−３−カルバモイルピリジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）カルバメート（１３６ｍｇ、０．３４９ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ−ヨードスクシンイミド（８６ｍｇ、０．３８４ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を５℃で２時間撹拌した。反応を２ｍＬのメタノールの添加によりクエンチし、混合物を室温まで加温した。溶媒を減圧下で除去した。粗生成物をジクロロメタンで抽出し、ブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（８−（６−アミノ−３−カルバモイル−５−ヨードピリジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）カルバメート（１７０ｍｇ、０．３３０ｍｍｏｌ）を得、これをさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。ＭＳｍ／ｚ５１６．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５６９】
ステップｇ：
ジオキサン（１０ｍＬ）中の（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（８−（６−アミノ−３−カルバモイル−５−ヨードピリジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）カルバメート（１７７ｍｇ、０．３４３ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（３１．４ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）、（９，９−ジメチル−９Ｈ−キサンテン−４，５−ジイル）ビス（ジフェニルホスフィン）（３９．７ｍｇ、０．０６９ｍｍｏｌ）、２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−チオール（６７．７ｍｇ、０．３７８ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１２０ｍＬ、０．６８７ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を１２０℃に２時間加熱し、次いで室温に冷却した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、セライトの短いパッドに通して濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、シリカクロマトグラフィー（０から５０％の勾配の酢酸エチル／ヘプタン、０．２５％のトリエチルアミンを含有）により精製して、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（８−（６−アミノ−３−カルバモイル−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピリジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）カルバメート（１１５ｍｇ、０．２０３ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ５６７．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５７０】
ステップｈ：
ジクロロメタン（２ｍＬ）中の（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（８−（６−アミノ−３−カルバモイル−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピリジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）カルバメート（１１０ｍＬ、０．１９４ｍｍｏｌ）の溶液に、トリフルオロ酢酸（２ｍＬ、２６ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を室温で１時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残留物をＨＰＬＣ（勾配溶出：水中３５から６０％のアセトニトリル、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）により精製して、（Ｒ）−６−アミノ−２−（１−アミノ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ニコチンアミド（４０ｍｇ、０．０８４ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ 8.38 (dd, J=4.1, 1.9 Hz, 1 H), 7.93 (s, 1 H), 7.56-7.31 (m, 2 H), 3.77-3.55 (m, 2 H), 3.16-2.98 (m, 2 H), 2.82 (t, J=7.4 Hz, 1 H), 2.03 (m, 1 H), 1.94-1.60 (m, 5 H), 1.60-1.20 (m, 4 H).  19F NMR (376 MHz, メタノール-d4) δ -66.48.Ｃ２１Ｈ２６Ｆ３Ｎ６ＯＳ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４６７．１８４１、実測値４６７．１８３７。ＩＣ５０は０．１１８μＭである。
【０５７１】
実施例４０：（Ｒ）−３−（（３−アミノ−５−（１−アミノ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）ピラジン−２−イル）チオ）−２−クロロベンズアミド
【０５７２】
【化７２】
0006534389.tif 000103
【０５７３】
ステップａ：
ジオキサン（５ｍＬ、脱気）中の２−クロロ−３−メルカプトベンズアミド（ＨＣｌ塩、１４５ｍｇ、０．６４７ｍｍｏｌ）、３−ブロモ−６−クロロピラジン−２−アミン（２９９ｍｇ、１．４３６ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（４９．３ｍｇ、０．２５９ｍｍｏｌ）、リン酸カリウム（４１２ｍｇ、１．９４１ｍｍｏｌ）および１，１０−フェナントロリン（５８．３ｍｇ、０．３２４ｍｍｏｌ）の混合物を、マイクロ波反応器内１３０℃で４時間撹拌した。室温に冷却した後、反応物をセライトのパッドに通して濾過し、続いてＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を濃縮し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から１００％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、３−（（３−アミノ−５−クロロピラジン−２−イル）チオ）−２−クロロベンズアミド（１４０ｍｇ、０．４４４ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ３１５．０（Ｍ＋Ｈ）＋
【０５７４】
ステップｂ：
ＤＩＰＥＡ（０．６４８ｍＬ）中の３−（（３−アミノ−５−クロロピラジン−２−イル）チオ）−２−クロロベンズアミド（１３０ｍｇ、０．４１２ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−２−メチル−Ｎ−（（Ｒ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）プロパン−２−スルフィンアミド（１３９ｍｇ、０．５３６ｍｍｏｌ）の混合物を、マイクロ波反応器内９５℃で１４時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から１００％の勾配のＭｅＯＨ／ＤＣＭ、０．２５％ＴＥＡを含有）により精製して、３−（（３−アミノ−５−（（Ｒ）−１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）ピラジン−２−イル）チオ）−２−クロロベンズアミド（６５ｍｇ、０．１２１ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ５３７．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５７５】
ステップｃ：
３−（（３−アミノ−５−（（Ｒ）−１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）ピラジン−２−イル）チオ）−２−クロロベンズアミド（６５ｍｇ、０．１２１ｍｍｏｌ）を、ＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、０．１２１ｍＬ、０．４８４ｍｍｏｌ）に溶解し、出発物質が残らなくなるまで（１時間、ＬＣＭＳによりモニターした）２２℃で撹拌した。揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をＨＰＬＣ（勾配溶出：水中２５から５０％のアセトニトリル、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）により精製して、Ｒ）−３−（（３−アミノ−５−（１−アミノ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）ピラジン−２−イル）チオ）−２−クロロベンズアミド（２５．５ｍｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 7.90 (s, 1 H), 7.63 (s, 1 H), 7.62 (br. s., 1 H), 7.28-7.18 (m, 1 H), 7.18-7.09 (m, 1 H), 6.64 (dd, J=1.6, 7.9 Hz, 1 H), 6.08 (s, 2 H), 4.18-4.07 (m, 2 H), 3.12-2.95 (m, 2 H), 2.74-2.64 (m, 1 H), 1.91-1.73 (m, 2 H), 1.66-1.47 (m, 4 H), 1.39-1.14 (m, 4 H).Ｃ２０Ｈ２６ＣｌＮ６ＯＳ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４３３．１５７７、実測値４３３．１５９８；ＩＣ５０は０．０１６μＭである。
【０５７６】
実施例４１：（２Ｒ，４Ｒ）−４−アミノ−８−（６−アミノ−５−（（２−アミノ−３−クロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−２−オール
【０５７７】
【化７３】
0006534389.tif 000104
【０５７８】
ステップａ：
ＭｅＯＨ（１ｍＬ）中の（１Ｒ，３Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（１００ｍｇ、０．２０５ｍｍｏｌ）およびＨＣｌ（ジオキサン中４Ｍ、５１０μＬ、２．０５ｍｍｏｌ）の混合物を、４０℃で１時間撹拌した。揮発物を減圧下で除去し、得られた白色残留物を真空下で１時間脱水した。ＭＳｍ／ｚ１７１．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５７９】
ステップｂ：
ＤＩＰＥＡ：ＮＭＰ（２：１；１．５ｍＬ）中のこの白色残留物および３−（（２−アミノ−３−クロロピリジン−４−イル）チオ）−６−クロロピラジン−２−アミン（６５ｍｇ、０．２２６ｍｍｏｌ）の混合物を、１００℃で４０時間激しく撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去し、得られた粗製物をＨＰＬＣ（勾配溶出、水中７．５〜２０％アセトニトリル、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をＨＰＬＣ（勾配溶出、水中１５〜４０％アセトニトリル、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）によりさらに精製して、（２Ｒ，４Ｒ）−４−アミノ−８−（６−アミノ−５−（（２−アミノ−３−クロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−２−オール（４４ｍｇ、０．１０２ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm 7.51-7.64 (m, 2 H), 5.92 (d, J=5.56 Hz, 1 H), 4.16-4.39 (m, 3 H), 3.00-3.21 (m, 2 H), 2.80 (dd, J=8.08, 7.07 Hz, 1 H), 2.33 (dt, J=13.45, 6.79 Hz, 1 H), 1.95 (dd, J=13.89, 7.58 Hz, 1 H), 1.83 (dd, J=14.02, 4.17 Hz, 1 H), 1.61-1.74 (m, 3 H), 1.56 (ddd, J=13.39, 8.08, 5.81 Hz, 1 H), 1.30 (d, J=13.14 Hz, 1 H).Ｃ１８Ｈ２５ＣｌＮ７ＯＳ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４２２．１５５７、実測値４２２．１５６９。ＩＣ５０は０．００７μＭである。
【０５８０】
以下の表９の化合物は、上記手順または上記手順を変更したものを用い、対応する保護されたアミンおよびクロロ−ピラジン中間体を使用して合成した。
【０５８１】
【表１９−１】
0006534389.tif 000105
【０５８２】
【表１９−２】
0006534389.tif 000106
【０５８３】
【表１９−３】
0006534389.tif 000107
【０５８４】
【表１９−４】
0006534389.tif 000108
【０５８５】
【表１９−５】
0006534389.tif 000109
【０５８６】
【表１９−６】
0006534389.tif 000110
【０５８７】
【表１９−７】
0006534389.tif 000111
【０５８８】
実施例６８：（３Ｒ，４Ｓ）−８−（６−アミノ−５−（（２−アミノ−３−クロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−３−メチル−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−アミン
【０５８９】
【化７４】
0006534389.tif 000112
【０５９０】
ステップａ：
ＭｅＯＨ（５ｍＬ）中の（３Ｒ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−メチル−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（５３ｍｇ、０．１４２ｍｍｏｌ）およびＨＣｌ（ジオキサン中４Ｍ、３５４μＬ、１．４１５ｍｍｏｌ）の混合物を、４０℃で１時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去して、（３Ｒ，４Ｓ）−３−メチル−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−アミンを得、これをさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。ＭＳｍ／ｚ１７１．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５９１】
ステップｂ：
ＤＭＳＯ（６００μＬ）中の粗製の（３Ｒ，４Ｓ）−３−メチル−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−アミン、３−（（２−アミノ−３−クロロピリジン−４−イル）チオ）−６−クロロピラジン−２−アミン（３５．５ｍｇ、０．１２３ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１９３μＬ、１．１１ｍｍｏｌ）の混合物を、１００℃で１６時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をＨＰＬＣ（勾配溶出、水中１５〜４０％アセトニトリル、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）により精製して、（３Ｒ，４Ｓ）−８−（６−アミノ−５−（（２−アミノ−３−クロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−３−メチル−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−アミン（１３ｍｇ、０．０３０ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm 7.72-7.51 (m, 2 H), 5.92 (d, J=5.5 Hz, 1 H), 4.31 (m, 2 H), 4.01-3.78 (m, 2 H), 3.58 (dq, J=8.1, 6.0 Hz, 1 H), 3.04 (m, 2 H), 2.48 (d, J=8.1 Hz, 1 H), 1.75 (m, 2 H), 1.61-1.47 (m, 2 H), 1.31 (d, J=6.1 Hz, 3 H).Ｃ１８Ｈ２５ＣｌＮ７ＯＳ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４２２．１５３０、実測値４２２．１５０５。ＩＣ５０は０．０１０μＭである。
【０５９２】
実施例６９：（３Ｓ，４Ｓ）−８−（６−アミノ−５−（（２−アミノ−３−クロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−３−メチル−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−アミン
【０５９３】
【化７５】
0006534389.tif 000113
【０５９４】
ステップａ：
ＭｅＯＨ（５ｍＬ）中の（３Ｓ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−メチル−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（５１ｍｇ、０．１３６ｍｍｏｌ）およびＨＣｌ（ジオキサン中４Ｍ、３４０μＬ、１．３６２ｍｍｏｌ）の混合物を、４０℃で１時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去して、（３Ｓ，４Ｓ）−３−メチル−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−アミンを得、これをさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。ＭＳｍ／ｚ１７１．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５９５】
ステップｂ：
ＤＭＳＯ（６００μＬ）中の粗製の（３Ｓ，４Ｓ）−３−メチル−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−アミン、３−（（２−アミノ−３−クロロピリジン−４−イル）チオ）−６−クロロピラジン−２−アミン（３５．５ｍｇ、０．１２３ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１９３μＬ、１．１１ｍｍｏｌ）の混合物を、１００℃で１６時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をＨＰＬＣ（勾配溶出、水中１５〜４０％アセトニトリル、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）により精製して、（３Ｓ，４Ｓ）−８−（６−アミノ−５−（（２−アミノ−３−クロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−３−メチル−２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−４−アミン（１１ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm 7.67-7.47 (m, 2 H), 5.91 (d, J=5.5 Hz, 1 H), 4.22 (qd, J=6.4, 4.8 Hz, 1 H), 4.03 (ddt, J=13.5, 8.9, 4.7 Hz, 2 H), 3.86 (d, J=8.7 Hz, 1 H), 3.71 (d, J=8.7 Hz, 1 H), 3.37 (td, J=9.9, 4.9 Hz, 1 H), 3.29-3.23 (m, 1 H), 3.00 (d, J=5.0 Hz, 1H) 1.91-1.56 (m, 4 H), 1.21 (d, J=6.4 Hz, 3 H).Ｃ１８Ｈ２５ＣｌＮ７ＯＳ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４２２．１５３０、実測値４２２．１５１４。ＩＣ５０は０．０１０μＭである。
【０５９６】
実施例７０：（１Ｒ，３Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（２−アミノ−３−クロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−３−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン
【０５９７】
【化７６】
0006534389.tif 000114
【０５９８】
ステップａ：
ＭｅＯＨ（１．５ｍＬ）中の（１Ｒ，３Ｒ）−ベンジル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（１００ｍｇ、０．２４６ｍｍｏｌ）およびＨＣｌ（ジオキサン中４Ｍ、１．５ｍＬ、６．５ｍｍｏｌ）の混合物を、マイクロ波反応器内１４０℃で１４時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去して、（１Ｒ，３Ｒ）−３−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンを得、これをさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。ＭＳｍ／ｚ１６９．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５９９】
ステップｂ：
ＤＩＰＥＡ（１ｍＬ）およびＤＭＳＯ（０．５ｍＬ）中の粗製の（１Ｒ，３Ｒ）−３−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（理論上０．２４６ｍｍｏｌ）および３−（（２−アミノ−３−クロロピリジン−４−イル）チオ）−６−クロロピラジン−２−アミン（７０．９ｍｇ、０．２４６ｍｍｏｌ）の混合物を、１３０℃で２時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をＨＰＬＣ（勾配溶出、水中１５〜４０％アセトニトリル、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）により精製して、（１Ｒ，３Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（２−アミノ−３−クロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−３−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（２３ｍｇ、０．０５５ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm 7.51-7.64 (m, 2 H), 5.91 (d, J=5.31 Hz, 1 H), 4.18-4.37 (m, 2 H), 3.02-3.18 (m, 2 H), 2.82 (dd, J=9.60, 6.32 Hz, 1 H), 2.09-2.20 (m, 1 H), 2.00-2.09 (m, 1 H), 1.91-2.00 (m, 1 H), 1.58-1.74 (m, 2 H), 1.24-1.48 (m, 3 H), 1.09-1.20 (m, 1 H), 1.01-1.09 (m, 3 H).Ｃ１９Ｈ２７ＣｌＮ７Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４２０．１７３７、実測値４２０．１７１９。ＩＣ５０は０．００５μＭである。
【０６００】
実施例７１：（１Ｒ，３Ｓ）−８−（６−アミノ−５−（（２−アミノ−３−クロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−３−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン
【０６０１】
【化７７】
0006534389.tif 000115
【０６０２】
ステップａ：
ＥｔＯＡｃ：ＴＨＦ（１：２  ７５ｍＬ）中の（１Ｒ，３Ｓ）−ベンジル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−３−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（６００ｍｇ、１．４７６ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＨ）２（１０４ｍｇ、０．１４８ｍｍｏｌ）の懸濁液を、Ｈ２雰囲気下で４８時間激しく撹拌した。反応混合物をセライトのパッドに通して濾過し、続いてＭｅＯＨ（５０ｍＬ）で洗浄した。揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物およびＨＣｌ（ジオキサン中４Ｍ、１．０ｍＬ、４．０ｍｍｏｌ）の溶液を、４５℃で２時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去した。ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中の得られた残留物およびＰｄ／Ｃ（木炭中１０％、２００ｍｇ）の懸濁液を、６０ｐｓｉのＨ２雰囲気下で２時間振盪した。反応混合物をセライトのパッドに通して濾過し、続いてＭｅＯＨ（５０ｍＬ）で洗浄した。揮発物を減圧下で除去して、（１Ｒ，３Ｓ）−３−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンを得、これをさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。ＭＳｍ／ｚ１６９．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０６０３】
ステップｂ：
ＤＩＰＥＡ（３．２ｍＬ）およびＤＭＡ（６ｍＬ）中の粗製の（１Ｒ，３Ｓ）−３−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（０．７２９ｍｍｏｌ）および３−（（２−アミノ−３−クロロピリジン−４−イル）チオ）−６−クロロピラジン−２−アミン（１５０ｍｇ、０．５２１ｍｍｏｌ）の混合物を、１００℃で１４時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をＨＰＬＣ（勾配溶出、水中１０〜３０％アセトニトリル、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製して、粗固体を得た。この粗固体をＨＰＬＣ（勾配溶出、水中１５〜４０％アセトニトリル、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）によりさらに精製して、（１Ｒ，３Ｓ）−８−（６−アミノ−５−（（２−アミノ−３−クロロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−３−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（８０ｍｇ、０．１８９ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm 7.65-7.49 (m, 2 H), 5.91 (d, J=5.5 Hz, 1 H), 4.30 (ddt, J=12.4, 9.7, 3.6 Hz, 2 H), 3.34 (s, 1 H), 3.19-2.95 (m, 1 H), 2.92-2.80 (m, 1 H), 2.34-2.16 (m, 2 H), 1.85-1.49 (m, 4 H), 1.41 (dq, J=13.5, 2.7 Hz, 1 H), 1.30 (dq, J=13.5, 2.6 Hz, 1 H), 1.13-0.92 (m, 4 H).Ｃ１９Ｈ２７ＣｌＮ７Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４２０．１７３７、実測値４２０．１７１６。ＩＣ５０は０．００５μＭである。
【０６０４】
実施例７２：８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−２−アミン
【０６０５】
【化７８】
0006534389.tif 000116
【０６０６】
ステップａ：
ＮＭＰ（１ｍＬ）中の６−クロロ−３−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−アミン（７０ｍｇ、０．３０４ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル（（４−ヒドロキシピペリジン−４−イル）メチル）カルバメート（１０３ｍｇ、０．３３６ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２．０ｍＬ、１１．４５ｍｍｏｌ）の溶液を、１２０℃で３時間撹拌した。室温に冷却した後、反応物をＥｔＯＡｃで希釈し、有機相を水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、揮発物を減圧下で除去して、茶色の油状残留物を得た。この残留物をＤＣＭ（５ｍＬ）に溶かし、ＨＣｌ（ジオキサン中４Ｍ；７６０μＬ、３．０４ｍｍｏｌ）を２回に分けて（半分を反応の開始時に、残りの半分を３時間後に）添加した。反応物を合計で４時間撹拌した。揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をＭｅＣＮで摩砕し、茶色固体を得た。得られた粗製物を、５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ中に懸濁させて飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を添加して遊離塩基化した。得られた層を分離し、水性物を再度５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭで抽出した。合わせた有機相を減圧下で濃縮して、１−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−４−（アミノメチル）ピペリジン−４−オール（６５ｍｇ、０．１４９ｍｍｏｌ）をオフホワイトの黄褐色固体として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.47 (dd, J=4.6, 1.4 Hz, 1 H), 7.68 (s, 1 H), 7.55 (dd, J=8.3, 4.5 Hz, 1H) 7.32 (dd, J=8.3, 1.4 Hz, 1 H), 4.04 (dt, J=13.8, 4.2 Hz, 2 H), 3.38-3.28 (m, 2 H), 2.83 (s, 2 H), 1.70-1.48 (m, 4 H).ＭＳｍ／ｚ４０１．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０６０７】
ステップｂ：
ＥｔＯＨ（３ｍＬ）中の１−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−４−（アミノメチル）ピペリジン−４−オール（６５ｍｇ、０．１６２ｍｍｏｌ）の溶液を、臭化シアン（０．５４１ｍＬ、１．６２３ｍｍｏｌ）、続いてＮａＨＣＯ３（６８．２ｍｇ、０．８１２ｍｍｏｌ）で連続して処理し、得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をＨＰＬＣ（勾配溶出、水中１５〜４０％アセトニトリル、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）により精製して、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−２−アミン（１２．５ｍｇ、０．０２９ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.46 (dd, J=4.5, 1.4 Hz, 1 H), 7.68 (s, 1 H), 7.55 (dd, J=8.3, 4.6 Hz, 1 H), 7.31 (dd, J=8.2, 1.5 Hz, 1 H), 6.22 (s, 2 H), 5.78 (s, 2 H), 3.94-3.73 (m, 2 H), 3.64-3.45 (m, 2 H), 3.36 (s, 2 H), 1.88-1.56 (m, 4 H).Ｃ１７Ｈ１９Ｆ３Ｎ７ＯＳ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４２６．１３１８、実測値４２６．１２９６。ＩＣ５０は０．１９３μＭである。
【０６０８】
以下の表１０の化合物は、上記手順または上記手順を変更したものを用い、対応する保護されたアミンおよびクロロ−ピラジン中間体を使用して合成した。
【０６０９】
【表２０】
0006534389.tif 000117
【０６１０】
実施例７５：（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（３−クロロ−２−（ジメチルアミノ）ピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン
【０６１１】
【化７９】
0006534389.tif 000118
【０６１２】
ステップａ：
ＤＩＰＥＡ（２．６ｍＬ）中の６−ブロモ−３−（（３−クロロ−２−（ジメチルアミノ）ピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−アミン（１２４ｍｇ、０．３９２ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−２−メチル−Ｎ−（（Ｒ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）プロパン−２−スルフィンアミド（１１１ｍｇ、０．４３１ｍｍｏｌ）の混合物を、９０℃で１０時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から１０％の勾配のＥｔＯＡｃ（１０％のＭｅＯＨを含有）／ヘプタン（２５のＥｔ３Ｎを含有））により精製して、（Ｒ）−Ｎ−（（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（３−クロロ−２−（ジメチルアミノ）ピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（７５ｍｇ、０．１３９ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ５３８．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０６１３】
ステップｂ：
ＤＣＭ（２ｍＬ）中の（Ｒ）−Ｎ−（（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（３−クロロ−２−（ジメチルアミノ）ピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（７５ｍｇ、０．１３９ｍｍｏｌ）およびＨＣｌ（ジオキサン中４Ｍ、１７４μＬ、０．６９７ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で３０分間撹拌した。揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をＨＰＬＣ（勾配溶出、水中３５〜６０％アセトニトリル、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）により精製して、（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（３−クロロ−２−（ジメチルアミノ）ピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（２８ｍｇ、０．０６４ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.85-7.92 (m, 1 H), 7.63 (s, 1 H), 6.16 (br. s, 2 H), 6.04-6.10 (m, 1 H), 4.06-4.23 (m, 2 H), 2.97-3.15 (m, 2 H), 2.87 (s, 6 H), 2.64-2.73 (m, 1 H), 1.11-1.97 (m, 10 H).Ｃ２０Ｈ２９ＣｌＮ７Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４３４．１８９４、実測値４３４．１８８３。ＩＣ５０は０．０１０μＭである。
【０６１４】
以下の表１１の化合物は、上記手順または上記手順を変更したものを用い、対応する保護されたアミンおよびクロロ−ピラジン中間体を使用して合成した。
【０６１５】
【表２１】
0006534389.tif 000119
【０６１６】
実施例８１：（Ｒ）−４−（（３−アミノ−５−（１−アミノ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）ピラジン−２−イル）チオ）−３−クロロピリジン−２（１Ｈ）−オン
【０６１７】
【化８０】
0006534389.tif 000120
【０６１８】
ＤＭＳＯ（０．３ｍＬ）中の（Ｓ）−Ｎ−（（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（３−クロロ−２−フルオロピリジン−４−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（１７ｍｇ、０．０３３ｍｍｏｌ）、水酸化リチウム（２ｍｇ、０．０４０ｍｍｏｌ）および水（０．０７ｍＬ）の混合物を、マイクロ波反応器内９０℃で４５分間撹拌した。室温に冷却した後、ＭｅＯＨ（０．５ｍＬ）、続いてＨＣｌ（ジオキサン中４Ｍ、２．０ｍＬ、８．０ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を４０℃で１時間撹拌した。揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をＨＰＬＣ（勾配溶出、水中１５〜４０％アセトニトリル、５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ修飾剤）により精製して、（Ｒ）−４−（（３−アミノ−５−（１−アミノ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル）ピラジン−２−イル）チオ）−３−クロロピリジン−２（１Ｈ）オン（５ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm 7.53-7.61 (m, 1 H), 7.19 (d, J=7.1 Hz, 1 H), 5.72 (d, J=7.1 Hz, 1 H), 4.26 (t, J=13.1 Hz, 2 H), 3.06-3.20 (m, 2 H), 2.81 (t, J=7.5 Hz, 1 H), 1.27-2.11 (m, 10 H).Ｃ１８Ｈ２４ＣｌＮ６ＯＳ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４０７．１４４８、実測値４０７．１４３３。ＩＣ５０は０．０２０μＭである。
【０６１９】
実施例８２：ラセミ−８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−２，２−ジフルオロ−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン
【０６２０】
【化８１】
0006534389.tif 000121
【０６２１】
ステップａ：
ＴＨＦ（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル２，２−ジフルオロ−１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（２２０ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ）、ラセミ２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（１８４ｍｇ、１．５２ｍｍｏｌ）およびチタン（ＩＶ）エトキシド（０．６４０ｍＬ、３．０ｍｍｏｌ）の溶液を、９０℃で３０分間撹拌した。０℃に冷却した後、水素化ホウ素リチウム（３３ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）を一度に添加した。３０分間撹拌した後、反応混合物をＭｅＯＨの添加によりクエンチした。揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をブラインで希釈し、これをＥｔＯＡｃ（４×１０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（１０から５０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル１−（１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−２，２−ジフルオロ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレートを白色粉末（１９０ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）として得た。ＭＳｍ／ｚ３９５．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０６２２】
ステップｂ：
ＤＣＭ（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル１−（１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−２，２−ジフルオロ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（１９０ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）およびＴＦＡ（１ｍＬ）の溶液を、０℃で２０分間撹拌した。揮発物を減圧下で除去して、Ｎ−（２，２−ジフルオロ−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミドを得、これをさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。
【０６２３】
ステップｃ：
ＤＩＰＥＡ（０．８ｍＬ）中のＮ−（２，２−ジフルオロ−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（理論上０．４８ｍｍｏｌ）および６−クロロ−３−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−アミン（１４８ｍｇ、０．４８０ｍｍｏｌ）の溶液を、１００℃で１時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から１００％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、Ｎ−（８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−２，２−ジフルオロ−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（１７４ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を橙色粉末として得た。この物質の一部でステップｄに進み、残りの物質はキラルクロマトグラフィーにより分離した（実施例８３を参照）。
【０６２４】
ステップｄ：
ＤＣＭ（１ｍＬ）中のＮ−（８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−２，２−ジフルオロ−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（５４ｍｇ、０．０９６ｍｍｏｌ）およびＨＣｌ（ジオキサン中４Ｍ、０．２３９ｍＬ、０．９６ｍｍｏｌ）の溶液を、４０℃で３０分間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去した。この残留物をＭｅＣＮで摩砕し、ラセミ−８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−２，２−ジフルオロ−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（ＨＣｌ塩、３８ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）を淡黄褐色粉末として得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm 8.52-8.38 (m, 1 H), 7.71 (s, 1 H), 7.50-7.43 (m, 2 H), 4.44 (dd, J=21.0, 14.2 Hz, 2 H), 3.67 (dd, J=15.1, 11.2 Hz, 1 H), 3.23-3.08 (m, 2 H), 2.47-2.34 (m, 2 H), 2.27 (dt, J=14.6, 7.4 Hz, 1 H), 2.01-1.88 (m, 2 H), 1.75-1.54 (m, 3 H).Ｃ１９Ｈ２２Ｆ５Ｎ６Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４６１．１５４７、実測値４６１．１５４０。ＩＣ５０は０．３８０μＭである。
【０６２５】
実施例８３ａ／ｂ：（Ｒ）および（Ｓ）−８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−２，２−ジフルオロ−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン
【０６２６】
【化８２】
0006534389.tif 000122
【０６２７】
ステップａ：
Ｎ−（８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−２，２−ジフルオロ−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（１００ｍｇ、０．１７７ｍｍｏｌ）を、キラルＳＦＣにより、以下の通り、すなわち：カラム：ＷＨＯ−１  ２１×２５０ｍｍ、流速：８０ｇ／分、移動相：ＣＯ２中４５％ＭｅＯＨおよび５ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ、検出：マストリガーを行って、単一エナンチオマー、Ｒｔ（エナンチオマーＲ）：２．６分（４４ｍｇ、０．０７８ｍｍｏｌ）およびＲｔ（エナンチオマーＳ）：５．８分（４１ｍｇ、０．０７３ｍｍｏｌ）を得た。
【０６２８】
ステップｂ：
ＤＣＭ（２ｍＬ）中の純粋エナンチオマーおよびＨＣｌ（ジオキサン中４Ｍ、２００μＬ、０．８ｍｍｏｌ）の混合物を、４０℃で１時間撹拌した。揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をＭｅＣＮで摩砕し、表題化合物をＨＣｌ塩として得た：
【０６２９】
（Ｒ）−エナンチオマー：1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm 8.46 (dd, J=3.7, 2.3 Hz, 1 H), 7.73 (s, 1 H), 7.53-7.45 (m, 2 H), 4.52-4.36 (m, 2 H), 3.68 (dd, J=15.0, 11.2 Hz, 1 H), 3.24-3.09 (m, 2 H), 2.47-2.34 (m, 2 H), 2.32-2.21 (m, 1 H), 2.05-1.90 (m, 2 H), 1.74-1.55 (m, 3 H). 19F NMR (376 MHz, メタノール-d4) δ -66.19, -98.51 (d, J=234.5 Hz), -101.83 (d, J=234.6 Hz).Ｃ１９Ｈ２２Ｆ５Ｎ６Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４６１．１５４７、実測値４６１．１５４０。ＩＣ５０は０．８８２μＭである。
【０６３０】
（Ｓ）−エナンチオマー：1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm 8.50-8.41 (m, 1 H), 7.70 (s, 1 H), 7.47 (m, 2 H), 4.52-4.35 (m, 2 H), 3.67 (dd, J=15.1, 11.2 Hz, 1 H), 3.24-3.05 (m, 2 H), 2.49-2.32 (m, 2 H), 2.31-2.19 (m, 1 H), 2.02-1.88 (m, 2 H), 1.73-1.51 (m, 3 H). 19F NMR (376 MHz, メタノール-d4) δ -66.24, -98.47 (d, J=234.4 Hz), -101.77 (d, J=234.6 Hz).Ｃ１９Ｈ２２Ｆ５Ｎ６Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ計算値４６１．１５４７、実測値４６１．１５４１。ＩＣ５０は０．３０６μＭである。
【０６３１】
実施例８４：８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−２−フルオロ−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン
【０６３２】
【化８３】
0006534389.tif 000123
【０６３３】
ステップａ：
ＴＨＦ（１．５ｍＬ）中のラセミｔｅｒｔ−ブチル２−フルオロ−１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（７８ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）、チタン（ＩＶ）エトキシド（２３５μＬ、１．１ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（６８ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）の溶液を、９０℃で１時間撹拌した。０℃に冷却した後、水素化ホウ素リチウム（１２ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）を一度に添加した。３０分間撹拌した後、反応混合物をＭｅＯＨの添加によりクエンチした。揮発物を減圧下で除去した。得られた残留物をブラインで希釈し、これをＥｔＯＡｃ（４×１０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から５０％の勾配のＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−２−フルオロ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（６４ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳｍ／ｚ３７７．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０６３４】
ステップｂ：
ＤＣＭ（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−２−フルオロ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（６４ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）およびＴＦＡ（１ｍＬ）の混合物を、０℃で１０分間撹拌した。揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。
【０６３５】
ステップｃ：
ＤＩＰＥＡ（０．３ｍＬ）中の先の残留物および６−クロロ−３−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−アミン（５１ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）の混合物を、１００℃で２時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をシリカクロマトグラフィー（０から１０％の勾配のＭｅＯＨ／ＤＣＭ（０．２５％のＥｔ３Ｎを含有））により精製して、Ｎ−（８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−２−フルオロ−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（４１ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）、ＭＳｍ／ｚ５４７．２（Ｍ＋Ｈ）＋をジアステレオマーの混合物として得た。キラルＳＦＣを用いるさらなる精製を、以下の通り、すなわち：カラム：ＩＤ  ２１×２５０ｍｍ、流速：８０ｇ／分、移動相：ＣＯ２中４５％ｉＰｒＯＨおよび１０ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ、検出：マストリガーを行って、単一エナンチオマーＲｔ（Ｐ１）＝２．７分（１７ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）およびＲｔ（エナンチオマー−Ｐ１）＝４．４分（１７ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）を得た。
【０６３６】
ステップｄ：
ＤＣＭ（０．１ｍＬ）中の各純粋異性体およびＨＣｌ（ジオキサン中４Ｍ、１００μＬ、０．４ｍｍｏｌ）の溶液を、４０℃で１時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をＭｅＣＮで摩砕し、表題化合物をＨＣｌ塩として得た。
【０６３７】
【表２２】
0006534389.tif 000124
【０６３８】
実施例８６ａ／ｂ：（１Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−２−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン
【０６３９】
【化８４】
0006534389.tif 000125
【０６４０】
ステップａ：
ＤＣＭ（２ｍＬ）中の（１Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（（Ｒ）−１，１−ジメチルエチルスルフィンアミド）−２−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシレート（３２ｍｇ、０．０８６ｍｍｏｌ）およびＴＦＡ（０．２ｍＬ、２．６０ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で３０分間撹拌した。揮発物を減圧下で除去して、（Ｒ）−２−メチル−Ｎ−（（１Ｒ）−２−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）プロパン−２−スルフィンアミドを得た。ＭＳｍ／ｚ２７３．０（Ｍ＋Ｈ）＋。粗生成物をさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。
【０６４１】
ステップｂ：
ＤＩＰＥＡ（１ｍＬ）中の（Ｒ）−２−メチル−Ｎ−（（１Ｒ）−２−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）プロパン−２−スルフィンアミド（２３ｍｇ、０．０８４ｍｍｏｌ）、６−クロロ−３−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−アミン（２３ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）およびＮＭＰ（０．１ｍＬ）の混合物を、１１５℃で６時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去して、（Ｒ）−Ｎ−（（１Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−２−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミドを黒色油状物として得、これを精製することなく次のステップにおいて使用した。
【０６４２】
ステップｃ：
ＤＣＭ（２ｍＬ）中の（Ｒ）−Ｎ−（（１Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−２−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミドおよびＨＣｌ（ジオキサン中４Ｍ、８４μＬ、０．３３８ｍｍｏｌ）の混合物を、４０℃で１時間撹拌した。室温に冷却した後、揮発物を減圧下で除去し、得られた残留物をＨＰＬＣ（勾配溶出、水中３５〜６０％アセトニトリル、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製して、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−２−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンＴＦＡ塩を得た。Ｃ２０Ｈ２６Ｆ３Ｎ６ＳのＨＲＭＳ計算値４３９．１８９２（Ｍ＋Ｈ）＋、実測値４３９．１８７２。ＩＣ５０は０．００１０μＭである。
【０６４３】
ステップｄ：キラル分離（詳細については表１３を参照）。
【０６４４】
【表２３−１】
0006534389.tif 000126
【０６４５】
【表２３−２】
0006534389.tif 000127
【０６４６】
以下の表１４の実施例は、上記方法および適切な出発物質を使用して作製することができる：
【０６４７】
【表２４−１】
0006534389.tif 000128
【０６４８】
【表２４−２】
0006534389.tif 000129
【０６４９】
アッセイ
本発明の化合物を、ＳＨＰ２活性を選択的に阻害するそれらの能力について評価した。本明細書に記載の本発明の化合物の阻害特性は、以下のアッセイのいずれか１つを試験することによって明らかになり得る。
【０６５０】
ＳＨＰ２アロステリック阻害アッセイ
ＳＨＰ２は、ビス−チロシル−リン酸化ペプチドとそのＳｒｃ相同性２（ＳＨ２）ドメインの結合を介して、アロステリックに活性化される。後の活性化ステップによって、ＳＨＰ２の自己阻害性界面が放出され、それによってＳＨＰ２タンパク質チロシンホスファターゼ（ＰＴＰ）は活性になり、基質認識および反応触媒作用に利用可能になる。ＳＨＰ２の触媒活性は、迅速な蛍光アッセイ型式において代替基質ＤｉＦＭＵＰを使用してモニターした。
【０６５１】
より具体的には、ホスファターゼ反応を、室温において、３８４ウェルの黒色ポリスチレンプレートの平底低フランジの非結合表面（Ｃｏｒｎｉｎｇ、カタログ番号３５７５）内で、最終的な反応体積２５μＬおよび以下のアッセイバッファー条件：６０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．２、７５ｍＭのＮａＣｌ、７５ｍＭのＫＣｌ、１ｍＭのＥＤＴＡ、０．０５％Ｐ−２０、５ｍＭのＤＴＴを使用して実施した。
【０６５２】
本発明の化合物（０．００３〜１００μＭで変わる濃度）によるＳＨＰ２の阻害を、アッセイを使用してモニターし、このアッセイでは、０．５ｎＭのＳＨＰ２を、０．５μＭのペプチドＩＲＳ１＿ｐＹ１１７２（ｄＰＥＧ８）ｐＹ１２２２（配列：Ｈ２Ｎ−ＬＮ（ｐＹ）ＩＤＬＤＬＶ（ｄＰＥＧ８）ＬＳＴ（ｐＹ）ＡＳＩＮＦＱＫ−アミド）と共にインキュベートした。２５℃で３０〜６０分インキュベートした後、代替基質ＤｉＦＭＵＰ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カタログ番号Ｄ６５６７）を反応物に添加し、２５℃で３０分間インキュベートした。次に、ｂｐＶ（Ｐｈｅｎ）（Ｅｎｚｏ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓカタログ番号ＡＬＸ−２７０−２０４）の１６０μＭ溶液５μｌを添加することによって、反応をクエンチした。蛍光シグナルを、マイクロプレートリーダー（Ｅｎｖｉｓｉｏｎ、Ｐｅｒｋｉ−Ｅｌｍｅｒ）を使用して、それぞれ励起波長および発光波長３４０ｎｍおよび４５０ｎｍを使用してモニターした。阻害剤の用量応答曲線を、正規化ＩＣ５０回帰曲線フィッティングを使用し、対照をベースとする正規化を用いて分析した。本発明の化合物のＩＣ５０の結果は、先の実施例および表１〜７に示されている。
【０６５３】
ｐ−ＥＲＫ細胞アッセイ
ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ（登録商標）ＳｕｒｅＦｉｒｅ（商標）ホスホ−ＥＲＫ１／２キット（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を使用するｐ−ＥＲＫ細胞アッセイ：ＫＹＳＥ−５２０細胞（３０，０００個の細胞／ウェル）を、９６ウェルプレート培養物中で終夜成長させ、２０、６．６、２．２、０．７４、０．２４，０．０８、０．０２７μＭの濃度のＳｈｐ２阻害剤で、３７℃において２時間処理した。インキュベーションを、ＳｕｒｅＦｉｒｅホスホ−細胞外シグナル制御キナーゼ（ｐＥＲＫ）アッセイキット（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を用いて供給した溶解バッファー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）３０μＬを添加することによって終了させた。試料を、製造者の指示に従って処理した。ｐＥＲＫからの蛍光シグナルを、２１０１マルチラベルリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｅｎｖｉｓｉｏｎ）を使用して二重に測定した。阻害百分率を、全ＥＲＫシグナルによって正規化し、ＤＭＳＯビヒクル対照と比較した。
【０６５４】
コロニー形成アッセイおよび細胞増殖アッセイ
ＫＹＳＥ−５２０細胞（１５００個の細胞／ウェル）を、２４ウェルプレートの培地３００μＬ（１０％ＦＢＳを含有するＲＰＭＩ−１６４０、Ｌｏｎｚａ）に蒔いた。薬物処置では、様々な濃度（２０、１０、５、２．５、１．２５μＭ）の本発明の化合物を、細胞を蒔いてから２４時間後および５日後に添加した。１１日目に、コロニーを、０．２％クリスタルバイオレット（ＭＰ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌｓ）で染色し、その後、Ｓｐｅｃｔｒａｍａｘリーダー（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して定量化するために、２０％酢酸に溶解させた。細胞増殖アッセイにおいて、細胞（１５００個の細胞／ウェル）を、９６ウェルプレートの培地１００μＬ（１０％ＦＢＳを含有するＲＰＭＩ−１６４０、Ｌｏｎｚａ）に蒔いた。６日目に、Ｃｅｌｌｔｉｔｅｒ−Ｇｌｏ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）５０μＬを添加し、発光シグナルを、供給者の指示（Ｐｒｏｍｅｇａ）に従って決定した。
【０６５５】
本明細書に記載の実施例および実施形態は、単に例示目的であり、それらに照らして様々な改変および変更が当業者には示唆され、それらは、本願の精神および範囲、ならびに添付の特許請求の範囲に含まれるべきであることを理解されたい。
以下に、本願の当初の特許請求の範囲に記載された発明を付記する。
［１］  式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩：
【化８５】
0006534389.tif 000130
［式中、
ｐは、０および１から選択され、
ｑは、０および１から選択され、
Ｙ１は、ＣＨおよびＮから選択され、
Ｙ２は、ＣＲ６およびＮから選択され、
Ｒ１は、−ＸＲ１ａであり（ここで、Ｒ１ａは、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ３〜８シクロアルケニル、ならびにＮ、Ｃ（Ｏ）、ＯおよびＳから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子または基を含有する５〜９員のヘテロアリール基から選択され；Ｒ１ａの前記アリールまたはヘテロアリールは、ハロ、アミノ、ヒドロキシ、Ｎ３、Ｃ１〜４アルキル、ジメチル−アミノ、ヒドロキシ置換Ｃ１〜４アルキル、ハロ置換Ｃ１〜４アルキル、アミノ置換Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０および−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１０から独立に選択される１〜５個のＲ９基で置換されており；Ｘは、結合、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｏ、Ｃ（Ｏ）、ＣＯＲ１１、ＣＲ１０ａＲ１０ｂ、ＮＲ１１から選択され；ｍは、０、１および２から選択され；各Ｒ１０ａおよびＲ１０ｂは、独立に、ハロおよびＣ１〜４アルキルから選択され；Ｒ１１は、水素およびＣ１〜４アルキルから選択される）、
Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立に、水素、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ１〜４アルキル−アミノから選択され、
Ｒ３ａおよびＲ３ｂは、独立に、ハロ、カルボニル、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ１〜４アルキル−アミノから選択され、
Ｒ４ａおよびＲ４ｂは、独立に、水素、ハロ、カルボニル、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ１〜４アルキル−アミノから選択され、
Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立に、水素、カルボニル、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ１〜４アルキル−アミノから選択され（ここで、Ｒ２ａ、Ｒ２ｂ、Ｒ３ａ、Ｒ３ｂ、Ｒ４ａ、Ｒ４ｂ、Ｒ５ａ、Ｒ５ｂおよびＲ７から選択されるいずれか２個の基は、５〜６員の不飽和または部分的に飽和の環を形成していてもよい）、
Ｒ６は、水素、ハロ、シアノ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ−カルボニル、ハロ置換Ｃ１〜４アルキル、ハロ置換Ｃ１〜４アルコキシ、ヒドロキシ置換Ｃ１〜４アルキル、アミノ置換Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ（Ｏ）１−２Ｒ６ａ、−Ｃ（Ｓ）Ｒ６ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ６ａＲ６ｂ、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲ６ａＲ６ｂおよび−ＮＲ６ａＣ（Ｏ）Ｒ６ｂから選択され（ここで、Ｒ６ａおよびＲ６ｂは、独立に、水素およびＣ１〜４アルキルから選択される）、
Ｒ７およびＲ８は、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、Ｃ（Ｏ）、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから独立に選択される１〜３個のヘテロ原子または基を任意に含有していてもよい、３〜７員の飽和または部分的に不飽和の環を形成している（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、非置換であってもよく、またはアミノ、ヒドロキシ、メトキシ、ハロ、メチル、メチル−アミノおよびイソブチリルオキシから独立に選択される１〜３個の基で置換されていてもよい）］。
［２］  式Ｉａで表される、［１］に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩：
【化８６】
0006534389.tif 000131
［式中、
ｎは、１、２、３および４から選択され、
ｐは、０および１から選択され、
ｑは、０および１から選択され、
Ｙ１は、ＣＨおよびＮから選択され、
Ｙ２は、ＣＲ６およびＮから選択され、
各Ｙ４は、独立に、Ｎ、Ｃ（Ｏ）およびＣＲ９から選択され（ここで、一方のＹ４は、Ｃ（Ｏ）である）、
Ｒ６は、水素、ハロ、メチルおよびアミノ−カルボニルから選択され、
Ｒ７およびＲ８は、それらの両方が付着している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから選択されるヘテロ原子を任意に含有していてもよい、３〜７員の飽和または部分的に不飽和の環を形成しており（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、非置換であってもよく、またはアミノ、ハロ、ヒドロキシ、アミノ−メチルおよびメチル−アミノから独立に選択される１〜３個の基で置換されていてもよい）、
Ｒ９は、ハロ、アミノ、ヒドロキシ、Ｎ３、ジメチル−アミノ、Ｃ１〜４アルキル、ハロ置換Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０および−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１０から選択され、
Ｒ１０は、水素、フェニルおよびナフチルから選択される（ここで、Ｒ１０の前記フェニルは、非置換であるか、またはメトキシで置換されている）］。
［３］  Ｒ７およびＲ８が、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、Ｏ、Ｃ（Ｏ）およびＳ（Ｏ）ｍから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子または基を任意に含有していてもよい、５員の飽和または部分的に不飽和の環を形成している（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、アミノ、ヒドロキシ、メトキシ、ハロ、メチル、メチル−アミノおよびイソブチリルオキシから独立に選択される１〜３個の基で置換されている）、［２］に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
［４］
【表２５−１】
0006534389.tif 000132
【表２５−２】
0006534389.tif 000133
【表２５−３】
0006534389.tif 000134
【表２５−４】
0006534389.tif 000135
【表２５−５】
0006534389.tif 000136
【表２５−６】
0006534389.tif 000137
【表２５−７】
0006534389.tif 000138
【表２５−８】
0006534389.tif 000139
【表２５−９】
0006534389.tif 000140
から選択される、［３］に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
［５］  Ｒ７およびＲ８が、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから選択されるヘテロ原子を任意に含有していてもよい、６員の飽和または部分的に不飽和の環を形成している（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、アミノで置換されている）、［２］に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
［６］
【表２６】
0006534389.tif 000141
から選択される、［５］に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
［７］  Ｒ７およびＲ８が、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから選択されるヘテロ原子を任意に含有していてもよい、４員の飽和または部分的に不飽和の環を形成している（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、アミノ、アミノ−メチルおよびメチル−アミノから選択される基で置換されている）、［２］に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
［８］
【表２７】
0006534389.tif 000142
から選択される、［７］に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
［９］  ｐおよびｑが共に０である、［２］に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
［１０］
【表２８】
0006534389.tif 000143
から選択される、［９］に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
［１１］  式ＩＩで表される、［１］に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩：
【化８７】
0006534389.tif 000144
［式中、
ｐは、０および１から選択され、
ｑは、０および１から選択され、
Ｙ１は、ＣＨおよびＮから選択され、
Ｙ２は、ＣＲ６およびＮから選択され、
Ｒ１は、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ３〜８シクロアルケニル、ならびにＮ、ＯおよびＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を含有する５〜９員のヘテロアリール基から選択され（ここで、Ｒ１ａの前記アリールまたはヘテロアリールは、ハロ、アミノ、ヒドロキシ、Ｎ３、Ｃ１〜４アルキル、ヒドロキシ置換Ｃ１〜４アルキル、ハロ置換Ｃ１〜４アルキル、アミノ置換Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０および−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１０から独立に選択される１〜５個のＲ９基で置換されており；ｍは、０、１および２から選択され；各Ｒ１０ａおよびＲ１０ｂは、独立に、ハロおよびＣ１〜４アルキルから選択され；Ｒ１１は、水素およびＣ１〜４アルキルから選択される）、
Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立に、水素、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ１〜４アルキル−アミノから選択され、
Ｒ３ａおよびＲ３ｂは、独立に、ハロ、カルボニル、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ１〜４アルキル−アミノから選択され、
Ｒ４ａおよびＲ４ｂは、独立に、水素、ハロ、カルボニル、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ１〜４アルキル−アミノから選択され、
Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立に、水素、カルボニル、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ１〜４アルキル−アミノから選択され（ここで、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６ａおよびＲ７ａから選択されるいずれか２個の基は、５〜６員の不飽和または部分的に不飽和の環を形成していてもよい）、
Ｒ６は、水素、ハロ、シアノ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノ−カルボニル、ハロ置換Ｃ１〜４アルキル、ハロ置換Ｃ１〜４アルコキシ、ヒドロキシ置換Ｃ１〜４アルキルおよびアミノ置換Ｃ１〜４アルキルから選択され、
Ｒ７およびＲ８は、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから選択されるヘテロ原子を任意に含有していてもよい、３〜７員の飽和または部分的に不飽和の環を形成している（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、非置換であってもよく、またはアミノ、ハロ、ヒドロキシ、アミノ−メチルおよびメチル−アミノから独立に選択される１〜３個の基で置換されていてもよい）］。
［１２］  式ＩＩａで表される、［１１］に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩：
【化８８】
0006534389.tif 000145
［式中、
ｎは、１、２、３および４から選択され、
ｐは、０および１から選択され、
ｑは、０および１から選択され、
Ｙ１は、ＣＨおよびＮから選択され、
Ｙ２は、ＣＲ６およびＮから選択され、
Ｙ４は、ＮおよびＣＲ９から選択され、
Ｒ６は、水素、ハロ、メチルおよびアミノ−カルボニルから選択され、
Ｒ７およびＲ８は、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから選択されるヘテロ原子を任意に含有していてもよい、３〜７員の飽和または部分的に不飽和の環を形成しており（ここで、ｍは、０、１および２から選択され、Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、非置換であってもよく、またはアミノ、アミノ−メチルおよびメチル−アミノから選択される基で置換されていてもよい）、
Ｒ９は、ハロ、アミノ、ヒドロキシ、Ｎ３、Ｃ１〜４アルキル、ハロ置換Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０および−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１０から選択され、
Ｒ１０は、水素、フェニルおよびナフチルから選択される（ここで、Ｒ１０の前記フェニルは、非置換であるか、またはメトキシで置換されている）］。
［１３］  Ｒ７およびＲ８が、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから選択されるヘテロ原子を任意に含有していてもよい、５員の飽和または部分的に不飽和の環を形成している（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、アミノで置換されている）、［１２］に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
［１４］
【表２９】
0006534389.tif 000146
から選択される、［１３］に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
［１５］  Ｒ７およびＲ８が、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから選択されるヘテロ原子を任意に含有していてもよい６員の飽和環を形成している（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、アミノで置換されている）、［１２］に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
［１６］
【表３０】
0006534389.tif 000147
から選択される、［１５］に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
［１７］  Ｒ７およびＲ８が、それらの両方が結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳ（Ｏ）ｍから選択されるヘテロ原子を任意に含有していてもよい４員の飽和環を形成している（ここで、ｍは、０、１および２から選択され；Ｒ７およびＲ８によって形成される前記飽和環は、アミノで置換されている）、［２］に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
［１８］
【表３１】
0006534389.tif 000148
から選択される、［１７］に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
［１９］  ｐおよびｑが共に０である、［１２］に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
［２０］
【表３２】
0006534389.tif 000149
から選択される、［１９］に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
［２１］  ［１］に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩、および少なくとも１つの薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
［２２］  ［１］に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩を、ＳＨＰ２の活性によって媒介される疾患または障害を予防的または治療的に処置するのに有効な量で、このような処置を必要としているヒトに投与することを含む、処置方法。
［２３］  ＳＨＰ２の活性によって媒介される前記疾患または障害が、ヌーナン症候群、レオパード症候群、若年性骨髄単球性白血病、神経芽細胞腫、黒色腫、急性骨髄性白血病、乳がん、食道がん、肺がん、結腸がん、頭部がん、神経芽細胞腫、頭部および頸部の扁平上皮癌、胃癌、未分化大細胞リンパ腫、ならびに膠芽腫から選択される、［２２］に記載の方法。