(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
4〜6のpHを有する、治療有効量のリポ酸コリンエステル、グリセロール、アミノ酸、保存剤及び水を含む水性医薬組成物であって、25℃、40%の相対湿度で3か月保存した後、HPLCで測定してリポ酸コリンエステルの少なくとも95%が前記医薬組成物中に存在する、医薬組成物（但し、クエン酸を含まない）。
【請求項２】
25℃、40%の相対湿度で3か月保存した後のリポ酸コリンエステルの分解率が2%未満である、請求項1に記載の医薬組成物。
【請求項３】
25℃、40%の相対湿度で3か月保存した後のHPLCで決定される曲線下面積に基づく全薬物関連不純物が12%未満である、請求項1又は2に記載の医薬組成物。
【請求項４】
25℃、40%の相対湿度で3か月保存した後のHPLCで決定される曲線下面積に基づく薬物関連不純物が7%未満であり、
前記薬物関連不純物の相対保持時間が1.12〜1.14であることを特徴とする、請求項1から3のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
25℃、40%の相対湿度で3か月保存した後のHPLCで決定される曲線下面積に基づく薬物関連不純物が4%未満であり、
前記薬物関連不純物の相対保持時間が0.65〜0.66であることを特徴とする、請求項1から4のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
以下：
(a)リポ酸コリンエステルの濃度が前記組成物の1質量%〜10質量%であること、
(b)保存剤の濃度が前記組成物の0.005質量%〜0.1質量%であること、
(c)アミノ酸が前記組成物の0.1質量%〜5質量%であること、及び
(d)グリセロールの濃度が前記組成物の0.5質量%〜5質量%であること、
の1つ又は複数を特徴とする、請求項1から5のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記保存剤が塩化ベンザルコニウムであり、前記アミノ酸がアラニンである、請求項6に記載の医薬組成物。
【請求項８】
リポ酸コリンエステルと非水賦形剤を含む非水組成物。
【請求項９】
前記非水賦形剤がアルコール又は半フッ素化アルカンである、請求項8に記載の非水組成物。
【請求項１０】
リポ酸コリンエステルの濃度が前記組成物の0.1%〜40質量%の範囲である、請求項8又は9に記載の非水組成物。
【請求項１１】
水溶液中で混合される請求項8から10のいずれか一項に記載の非水組成物を含む眼科製剤。
【請求項１２】
生物化学的に許容されるエネルギー源、保存剤、緩衝剤、等張化剤、界面活性剤、粘度調節剤、及び酸化防止剤からなる群から選択される少なくとも1つの成分を含む、請求項11に記載の眼科製剤。
【請求項１３】
以下:
(a)リポ酸コリンエステル又はその誘導体の濃度が前記製剤の1質量%〜10質量%であること、
(b)保存剤の濃度が前記製剤の0.005質量%〜0.1質量%であること、
(c)4〜6のpHを有すること、
(d)生物化学的エネルギー源が前記製剤の0.1質量%〜5質量%であること、
(e)グリセロールの濃度が前記製剤の0.5質量%〜5質量%であること、及び
(f)3か月を超える保存安定性を有すること
の1つ又は複数を特徴とする、請求項11又は12に記載の眼科製剤。
【請求項１４】
前記保存剤が塩化ベンザルコニウムであり、前記生物化学的エネルギー源がアラニンである、請求項13に記載の眼科製剤。
【請求項１５】
水晶体における調節幅を改善する方法において水晶体に投与される、請求項1〜7のいずれか一項に記載の医薬組成物、請求項8から10のいずれか一項に記載の非水組成物又は請求項11から14のいずれか一項に記載の眼科製剤。
【請求項１６】
老眼を治療し又は予防する方法において対象の眼に投与される、請求項1から7のいずれか一項に記載の医薬組成物、請求項8から10のいずれか一項に記載の非水組成物又は請求項11から14のいずれか一項に記載の眼科製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は概して、リポ酸コリンエステル又はその誘導体と非水賦形剤を含む医薬組成物及び眼科疾患又は障害(たとえば老眼)を治療するためのその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
老眼及び調節幅
人は加齢とともに水晶体が生理学的な変化を受け、そのため近くの物体に焦点を合わせることが段々と難しくなる。これが、殆どの人が35〜40歳の早期に読書用眼鏡が必要になる理由である。眼が焦点力を変化させる能力は、調節幅としても公知であるが、年齢とともに顕著に低下する。調節幅は小児及び若い成人では20ジオプターであるが、25歳までに10ジオプターに低下し、60歳までに1ジオプター以下になる。近くの物体に焦点を合わせる能力の年齢に関係する低下は老眼と呼ばれる。人は全て老眼になり、新たな治療法が見つからなければ補正レンズを用いることになる。
【０００３】
老眼の原因には多くの因子が関わっている。老眼においてアクアポリン-0による調節の間に形成される水晶体線維細胞液層の関与が考えられてきた(図1参照)。図示するように、毛様筋が収縮する際(Helmholtzの調節理論)、小体に加わる張力が緩和され、水晶体カプセルに蓄えられていたポテンシャルエネルギーが放出されて、水晶体の赤道面に運動力が発生する。水晶体の有限要素解析によって示されるように、この力は水晶体近傍の赤道位置における小体と水晶体の付着部位付近で発生する。水晶体は表面で作られた「新規な」細胞と長線維細胞から作られている。これらの線維細胞は「チューブ」に似た微小流路を形成する。これは水晶体の調節機能を維持するように働く。機能を失った「古い」線維細胞は内方へと移動させられる。これにより、小体の張力が緩和された際に外側の「流体区画」の流体を水晶体の中央部(中心光学軸)の方向に移動させて幾何学的曲率(光学パワー)を増大させる効率的な手段が提供される。この流体の動きは、微小毛細管(10μm未満)を通る血流について報告されたものと同様の特別な現象によって促進される。血管の周囲に沿って薄い血漿層(Fahraeus-Lindqvistによって記載された現象)が形成される。これにより、見掛けの、又は効果的な測定されたヘマトクリット粘度が低下し、低い背圧で血流が改善される。
【０００４】
水晶体線維細胞(これも直径約10μm)の内部では、同様の現象が作用しているようである。水晶体線維細胞中の細胞壁/膜をライニングしている多量のアクアポリン-0によって、近見焦点のための調節の間の細胞からの水の流出が可能になる。これらの同じ間質水流路を通して、溶解した微小栄養素(治療用薬物を含む)が水晶体に供給される。さらに、水晶体の幾何形状を変化させるために上述の流体の動きを必要とする調節幅は、文献には記載されていない固有の機能の一部によって促進される。細胞内線維細胞膜壁に沿って形成された水層はインピーダンス又は抵抗を低下させ、内部核サイトゾルタンパク質を「潤滑」する。これは従来見過ごされていた現象である。(水晶体線維細胞の内部の)タンパク質コアの固有粘度は高いであろうが、「潤滑因子」又はコアと内部膜との間に形成された微小層(1nm未満)は、(血液の見掛けのヘマトクリット粘度と同様に)外因性粘度を顕著に低下させる。これにより、水晶体のサイトゾルは限界のある小体の力の制限の中で中心視軸に向かって前進し、光学パワーを増大させることができる。
【０００５】
この水層の喪失は、流体を赤道から光学路に動かす(幾何学的曲率-光学パワーを増大させる)ために、より大きな力が必要になることを意味している。同様に、加齢による酸化ストレスの結果としてコアタンパク質にジスルフィド結合が生成することによってアクアポリン-0の構造-機能が低下する場合には、この機能層の機能が低下し、作用しなくなる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】米国特許第8410462号
【特許文献２】米国特許第8410162号
【特許文献３】米国特許出願公開第2013/0046014号
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Draizeら、J. Pharmacol. & Exp. Therapeutics, 82:377-390 (1944)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明者らは、リポ酸コリンエステル(「LACE」)(米国特許第8410462号参照)が、流体の動きに関与するこの重要な流体層を回復させ、近見視力を回復させて、ジスルフィド架橋によって影響されるコア水晶体サイトゾルのモジュラスを低下させることができることを見出した。したがって、重要な流体層が失われた又はジスルフィド架橋が問題となっている眼科疾患又は障害(たとえば老眼)を治療するためには、LACE製剤が必要である。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
種々の実施形態において、本発明は治療有効量のリポ酸コリンエステル又はその誘導体と非水賦形剤を含む医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態において、治療有効量のリポ酸コリンエステル及び非水賦形剤は4〜8(たとえば4.0、4.2、4.4、4.6、4.8、5.0、5.2、5.4、5.6、5.8、6.0、6.2、6.4、6.6、6.8、7.0、7.2、7.4、7.6、7.8、8.0、又はこれらの特定した数値に基づく任意の範囲)のpHを有する水溶液中で混合される。いくつかの実施形態において、水溶液は緩衝剤を含む。いくつかの実施形態において、医薬組成物は緩衝剤を含まない。
【００１０】
いくつかの実施形態において、医薬組成物は4〜6のpHを有する水溶液中で混合される治療有効量のリポ酸コリンエステル及び非水賦形剤を含み、25℃、40%の相対湿度で3か月保存した後、HPLCで測定してリポ酸コリンエステルの少なくとも95%が医薬組成物中に存在する。いくつかの実施形態において、医薬組成物は25℃、40%の相対湿度で3か月保存した後の組成物中のリポ酸コリンエステルの分解率が2%未満であることを特徴とする。いくつかの実施形態において、医薬組成物は25℃、40%の相対湿度で3か月保存した後のHPLCで決定される曲線下面積に基づく医薬組成物の全薬物関連不純物が12%未満であることを特徴とする。いくつかの実施形態において、医薬組成物は25℃、40%の相対湿度で3か月保存した後のHPLCで決定される曲線下面積に基づく医薬組成物の薬物関連不純物が7%未満であることを特徴とし、薬物関連不純物は相対保持時間が1.12〜1.14であることを特徴とする。いくつかの実施形態において、医薬組成物は25℃、40%の相対湿度で3か月保存した後のHPLCで決定される曲線下面積に基づく医薬組成物の薬物関連不純物が4%であることを特徴とし、薬物関連不純物は相対保持時間が0.65〜0.66であることを特徴とする。
【００１１】
いくつかの実施形態において、医薬組成物は以下:
(a)リポ酸コリンエステルの濃度が組成物の1質量%〜10質量%であること、
(b) 保存剤の濃度が組成物の0.005質量%〜0.1質量%であること、
(c) 生物化学的エネルギー源が組成物の0.1質量%〜5質量%であること、及び
(d) グリセロールの濃度が組成物の0.5質量%〜5質量%であること
の1つ又は複数を特徴とする。
いくつかの実施形態において、保存剤は塩化ベンザルコニウムであり、生物化学的エネルギー源はアラニンである。いくつかの実施形態において、リポ酸コリンエステルは塩素イオン、臭素イオン、ヨウ素イオン、硫酸イオン、メタンスルホン酸イオン、硝酸イオン、マレイン酸イオン、酢酸イオン、クエン酸イオン、フマル酸イオン、フマル酸水素イオン、酒石酸イオン(たとえば(+)-酒石酸イオン、(-)-酒石酸イオン、又はそれらの混合物)、コハク酸イオン、安息香酸イオン、及びグルタミン酸等のアミノ酸のアニオンからなる群から選択される対イオンを有する。
【００１２】
いくつかの実施形態において、医薬組成物は治療有効量のリポ酸コリンエステルと非水賦形剤を連続的に又は同時に水溶液と混合することによって調製される。いくつかの実施形態において、医薬組成物は治療有効量のリポ酸コリンエステルと非水賦形剤を最初に混合して非水組成物を形成し、次いで非水組成物を水溶液と混合することによって調製される。いくつかの実施形態において、非水組成物はリポ酸コリンエステルと非水賦形剤を混合することによって形成される溶液、エマルジョン、又は懸濁液であってよい。混合は持続した時間、加熱下に行なうことができる。いずれかの方法によって調製された医薬組成物は少なくとも3か月(たとえば3か月、6か月、9か月、1年、又は1年超)の保存安定性を有し得る。
【００１３】
いくつかの実施形態において、本発明はリポ酸コリンエステル又はその誘導体と非水賦形剤を含む非水組成物を提供する。いくつかの実施形態において、非水賦形剤は水と実質的に混和性である。いくつかの実施形態において、非水賦形剤は非加水分解性溶媒である。いくつかの実施形態において、非水賦形剤はアルコールである。いくつかの実施形態において、アルコールはポリオール、たとえばグリセロール又はプロピレングリコールである。いくつかの実施形態において、非水賦形剤は半フッ素化アルカンである。
【００１４】
いくつかの実施形態において、非水組成物はリポ酸コリンエステルを非水賦形剤と混合することによって得られる非水溶液を含む。いくつかの実施形態において、混合は20℃〜100℃の温度で行なわれる。いくつかの実施形態において、混合は37℃〜80℃の温度で行なわれる。
【００１５】
いくつかの実施形態において、非水組成物中のリポ酸コリンエステル又はその誘導体の濃度は0.1質量%〜40質量%の範囲である。いくつかの実施形態において、リポ酸コリンエステルは塩素イオン、臭素イオン、ヨウ素イオン、硫酸イオン、メタンスルホン酸イオン、硝酸イオン、マレイン酸イオン、酢酸イオン、クエン酸イオン、フマル酸イオン、フマル酸水素イオン、酒石酸イオン(たとえば(+)-酒石酸イオン、(-)-酒石酸イオン、又はそれらの混合物)、コハク酸イオン、安息香酸イオン、及びグルタミン酸等のアミノ酸のアニオンからなる群から選択される対イオンを有する。
【００１６】
いくつかの実施形態において、本発明は水溶液中で混合される非水組成物を含む眼科製剤を提供する。いくつかの実施形態において、水溶液は緩衝剤を含む。いくつかの実施形態において、眼科製剤は4〜8のpHを有する。いくつかの実施形態において、眼科製剤は4.5のpHを有する。いくつかの実施形態において、眼科製剤は生物化学的に許容されるエネルギー源、保存剤、緩衝剤、等張化剤、界面活性剤、粘度調節剤、及び酸化防止剤からなる群から選択される少なくとも1つの成分を含む。いくつかの実施形態において、非水組成物は水溶液中で混合される前に滅菌される。いくつかの実施形態において、水溶液は無菌溶液である。
【００１７】
いくつかの実施形態において、眼科製剤は以下:
(a)リポ酸コリンエステル又はその誘導体の濃度が製剤の1質量%〜10質量%であること、
(b)保存剤の濃度が製剤の0.005質量%〜0.1%質量であること、
(c)4〜6のpHを有すること、
(d)生物化学的エネルギー源が製剤の0.1質量%〜5質量%であること、
(e)グリセロールの濃度が製剤の0.5質量%〜5質量%の濃度であること、及び
(f)3か月を超える保存安定性を有すること
の1つ又は複数を特徴とする。
いくつかの実施形態において、保存剤は塩化ベンザルコニウムであり、生物化学的エネルギー源はアラニンである。
【００１８】
いくつかの実施形態において、本発明はまた、非水組成物を水溶液から分離して、たとえば(たとえば本明細書に記載した)2パートデバイス又はキットに保存することによる医薬組成物の長期保存のシステム又は方法を提供する。分離保存された非水組成物は次いで使用前に水溶液と混合することができる。
【００１９】
いくつかの実施形態において、システムは第1の区画、第2の区画、及び第1の区画と第2の区画を分離するシールを含み、第1の区画は活性成分及び非水賦形剤の非水組成物を含み、第2の区画は水溶液を含み、システムはシールを破壊して非水溶液を水溶液と混合することによって活性化される。いくつかの実施形態において、活性成分はリポ酸コリンエステル又はその誘導体であり、非水賦形剤は眼科的に許容される賦形剤である。いくつかの実施形態において、水溶液は緩衝剤を含む。いくつかの実施形態において、非水組成物と水溶液の両方は滅菌されている。いくつかの実施形態において、システム中の活性成分は3か月を超える保存安定性を有する。いくつかの実施形態において、システム中の活性成分は6か月を超える保存安定性を有する。いくつかの実施形態において、活性化後のシステム中の活性成分は3か月を超える保存安定性を有する。
【００２０】
いくつかの実施形態において、本発明は、水溶液中で加水分解を受けやすい活性成分を保存する方法を提供する。本方法は(a)第1の区画に活性成分を準備する工程、(b)第2の区画に水溶液を準備する工程、及び(c)第1の区画と第2の区画をシールで分離する工程を含み、第1の区画内の活性成分はシールを破壊して使用する直前まで水溶液と接触しない。いくつかの実施形態において、第1の区画内の活性成分は凍結乾燥粉末であるか、非加水分解性溶媒と混合されている。いくつかの実施形態において、活性成分はリポ酸コリンエステル若しくはその誘導体、又はペプチドである。
【００２１】
いくつかの実施形態において、本発明はまた、それが必要な対象において老眼を治療し又は予防する方法であって、有効量の本明細書に記載した医薬組成物のいずれかを対象の水晶体又は眼に投与するステップを含む、方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】アクアポリン-0による調節の間の水晶体線維細胞液層の形成を示す図である。
【図２Ａ】ウサギの眼をそれぞれ3%リポ酸コリンエステル製剤1滴で45分間処置した後のウサギの眼におけるリポ酸コリンエステルの代謝物の分布を示す図である。
【図２Ｂ】リポ酸コリンエステルの代謝及び排泄の概略図である。
【図３】リポ酸製剤及びリポ酸コリンエステル製剤の投与後のリポ酸の送達の比較を示す図である。
【図４】リポ酸コリンエステル製剤の長期保存のために用いられ得るインサートを有する2パート点眼ボトルのデザインを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
定義
本明細書において用いる場合、特に述べるか、文脈から明らかでない限り、本明細書に開示する数値は当技術における通常の許容範囲内、たとえば記述した値の10%以内であると理解される。
【００２４】
本明細書において用いる「EV06」、「LACE」又は「リポ酸コリンエステル」という用語は、下記の化学構造、
【００２５】
【化１】
0006526066.tif 000002
【００２６】
光学異性体、又はそれらの混合物を有すると理解される。LACEの対イオン(即ちZ-)は、薬学的に許容される任意のアニオンであってよい。対イオンの非限定的な例としては、塩素イオン、臭素イオン、ヨウ素イオン、硫酸イオン、メタンスルホン酸イオン、硝酸イオン、マレイン酸イオン、酢酸イオン、クエン酸イオン、フマル酸イオン、フマル酸水素イオン、酒石酸イオン(たとえば(+)-酒石酸イオン、(-)-酒石酸イオン、又はそれらの混合物)、コハク酸イオン、安息香酸イオン、及びグルタミン酸等のアミノ酸のアニオンが挙げられる。いくつかの実施形態において、対イオンは塩素イオンである。いくつかの実施形態において、対イオンは酒石酸イオンである。
【００２７】
本明細書において用いる「Dioptin(商標)」製剤は、リポ酸コリンエステル製剤を意味する。たとえば、Dioptin(商標)3%製剤は、製剤の3質量%のリポ酸コリンエステルを含む製剤を意味する。
【００２８】
本明細書において用いるリポ酸コリンエステルの「誘導体」は、リポ酸コリンエステルと非水医薬賦形剤との反応により生成する、リポ酸及びコリンを除く任意の化合物又は化合物の混合物であると理解される。いくつかの実施形態において、誘導体はリポ酸コリンエステルとプロピレングリコールとの反応によって生成する生成物である。いくつかの実施形態において、誘導体はリポ酸コリンエステルとグリセロールとの反応によって生成する生成物である。
【００２９】
本明細書において用いる場合、特に述べるか、文脈から明らかでない限り、「賦形剤」という用語は、薬学的に許容される賦形剤を意味する。
【００３０】
「含む」(「include」、「including」、「contain」、「containing」等)のオープンタームは、「含む(comprising)」を意味する。
【００３１】
「治療する(処置する)」という用語は、疾患又は障害に伴う病状、症状、又はパラメーターを改善するために有効な量、方法、又はモードで治療を施すことを意味する。
【００３２】
「予防する」という用語は、統計的に有意な程度に、又は当業者には検知できる程度に、患者を障害から防ぐこと、長期にわたって患者が障害を有しないように維持すること、又は障害の進行を中断させることを意味する。
【００３３】
「治療有効量」という用語は、対象における眼科疾患又は障害(たとえば老眼)の予防若しくは発現の遅延若しくは症状の改善、又は調節幅若しくは疾患の状態を表わす他の適切なパラメーターの改善等の所望の生物学的結果の達成をもたらす活性成分(たとえばLACE又はその誘導体)の量を意味する。眼科に適用される治療有効量の決定方法は、たとえば米国特許第8410162号に記載されているように公知であり、この特許の内容は参照により全体として本明細書に組み込まれる。たとえば、老眼を治療し又は予防するための治療有効量は、これだけに限らないが、水晶体の弾性、靱性、粘度、密度、又は透明性等の臨床的結果を測定することによって決定することができる。
【００３４】
本明細書において用いる「保存安定性」又は「保存安定」という用語は、25℃、相対湿度(RH)40%である期間(たとえば3か月)保存した際に実質的に変化しない組成物又は活性成分(たとえばLACE又はその誘導体)の特徴、又は特徴付けるものとして理解される。そのような保存安定性を決定する方法は公知であり、たとえば保存安定性は製剤をある期間保存した後で製剤中に残存した、又は分解した組成物又は活性成分(たとえばリポ酸コリンエステル)の百分率をHPLCによって決定することによって測定することができる。たとえば、保存安定性のある医薬組成物は、25℃、40%RHで3か月保存した後、HPLCで測定した組成物中に存在する活性成分(たとえばリポ酸コリンエステル)の少なくとも90%(たとえば91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、又は99%超)を有する組成物を意味し得る。保存安定性のある医薬組成物は、25℃、40%RHで3か月保存した後の分解率が、HPLCで測定して活性成分(たとえばリポ酸コリンエステル)の5%以下(たとえば4%未満、3%未満、2%未満、1%未満、又は0.5%未満)である組成物をも意味し得る。
【００３５】
本明細書において用いる化合物の「相対保持時間」又は「RRT」という用語は、式「RRT=(t2-t0)/(t1-t0)」によって計算することができる。t0=ボイド時間、t1=リポ酸コリンエステルの保持時間、t2=化合物の保持時間である。
【００３６】
本明細書において用いる「対象」という用語は、一般に動物(たとえばペット)又は健常人若しくはある疾患若しくは障害(たとえば老眼)の患者を含むヒトを意味する。
【００３７】
LACE製剤
種々の実施形態において、本発明は治療有効量のリポ酸コリンエステル又はその誘導体を含む医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態において、医薬組成物は治療有効量のリポ酸コリンエステル又はその誘導体を含む凍結乾燥粉末を含む。いくつかの実施形態において、凍結乾燥粉末はまた、非水賦形剤を含む。いくつかの実施形態において、凍結乾燥粉末は本明細書に記載した任意の医薬組成物を凍結乾燥することによって得られる。
【００３８】
いくつかの実施形態において、医薬組成物は治療有効量のリポ酸コリンエステル又はその誘導体と非水賦形剤を含む。いくつかの実施形態において、治療有効量のリポ酸コリンエステル及び非水賦形剤は4〜8 (たとえば4.0、4.2、4.4、4.6、4.8、5.0、5.2、5.4、5.6、5.8、6.0、6.2、6.4、6.6、6.8、7.0、7.2、7.4、7.6、7.8、8.0、又はこれらの特定した数値に基づく任意の範囲)のpHを有する水溶液中で混合される。いくつかの実施形態において、水溶液は緩衝剤を含む。いくつかの実施形態において、医薬組成物は緩衝剤を含まない。いくつかの実施形態において、水溶液は実質的に酸素を含まない。
【００３９】
いくつかの実施形態において、医薬組成物は治療有効量のリポ酸コリンエステル及び非水賦形剤を連続的又は同時に水溶液と混合することによって調製される。いくつかの実施形態において、医薬組成物は最初に治療有効量のリポ酸コリンエステルと非水賦形剤を混合して非水組成物を形成し、次いで非水組成物を水溶液と混合することによって調製される。
【００４０】
いずれかの方法で調製された医薬組成物は少なくとも3か月(たとえば3か月、6か月、9か月、1年、又は1年超)の保存安定性を有し得る。いくつかの実施形態において、医薬組成物は25℃、40%RHで3か月保存した後、HPLCで測定した組成物中に存在するリポ酸コリンエステル又はその誘導体の少なくとも90%(たとえば少なくとも91%、少なくとも92%、少なくとも93%、少なくとも94%、少なくとも95%、少なくとも96%、少なくとも97%、少なくとも98%、少なくとも99%、又は99%超)を有する。いくつかの実施形態において、医薬組成物は25℃、40%RHで3か月保存した後の分解率が、HPLCで測定してリポ酸コリンエステル又はその誘導体の5%以下(たとえば4%未満、3%未満、2%未満、1%未満、又は0.5%未満)である。
【００４１】
医薬組成物はまた、25℃、40%RHである期間保存した後、薬物関連分解物(たとえば全薬物関連不純物、又はある量の特定薬物関連不純物)の好ましいプロファイルを有し得る。製剤中の薬物関連分解物の量を測定するための分析ツール(たとえばHPLC)は公知である。いくつかの実施形態において、医薬組成物は25℃、40%RHで3か月保存した後、HPLCで決定される曲線下面積に基づく全薬物関連不純物が12%以下(たとえば10%未満、8%未満、6%未満、4%未満、2%未満、又は1%未満)であることを特徴とする。いくつかの実施形態において、医薬組成物は25℃、40%RHで3か月保存した後、HPLCで決定される曲線下面積に基づく薬物関連不純物が7%以下(たとえば6%未満、5%未満、4%未満、3%未満、2%未満、又は1%未満)であることを特徴とし、薬物関連不純物は相対保持時間が1.12〜1.14であることを特徴とする。いくつかの実施形態において、医薬組成物は25℃、40%RHで3か月保存した後のHPLCで決定される曲線下面積に基づく薬物関連不純物が4%以下(たとえば3%未満、2%未満、又は1%未満)であることを特徴とし、薬物関連不純物は相対保持時間が0.65〜0.66であることを特徴とする。
【００４２】
医薬組成物中のリポ酸コリンエステル又はその誘導体の濃度は、組成物の1質量%〜10質量%(たとえば1質量%、2質量%、3質量%、4質量%、5質量%、6質量%、7質量%、8質量%、9質量%、10質量%、又はこれらの特定した数値に基づく任意の範囲)の任意の濃度であってよい。いくつかの実施形態において、医薬組成物中のリポ酸コリンエステルの濃度は1%である。いくつかの実施形態において、医薬組成物中のリポ酸コリンエステルの濃度は3%である。いくつかの実施形態において、医薬組成物中のリポ酸コリンエステルの濃度は4%である。
【００４３】
非水賦形剤は眼科的に許容される賦形剤であってよい。いくつかの実施形態において、非水賦形剤は非加水分解性である。いくつかの実施形態において、非水賦形剤は実質的に水と混和性である。いくつかの実施形態において、非水賦形剤は水と混合するとエマルジョンを形成する。いくつかの実施形態において、非水賦形剤はイオン液体(たとえばグリセロール-コリン)である。
【００４４】
いくつかの実施形態において、実質的に水と混和性である非水賦形剤はアルコール(たとえばエタノール、ソルビトール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、グリセロール、又はそれらの混合物)である。いくつかの実施形態において、アルコールはポリオール(たとえばプロピレングリコール、グリセロール、エチレングリコール、ジエチレングリコール、エリスリトール、ラクチトール、マルチトール、マンニトール、ソルビトール、キシリトール、ペンタエリスリトール、又はシュクロース)である。いくつかの実施形態において、ポリオールはグリセロールである。いくつかの実施形態において、ポリオールはプロピレングリコールである。
【００４５】
いくつかの実施形態において、非水賦形剤は半フッ素化アルカンである。半フッ素化アルカンは、たとえば米国特許出願公開第2013/0046014号に記載されているように公知であり、この特許の内容は参照により全体として組み込まれる。半フッ素化アルカンは、その水素原子のいくつかがフッ素によって置き換えられた直鎖状又は分枝状アルカンである。いくつかの実施形態において、半フッ素化アルカンは少なくとも1つの非フッ素化炭化水素セグメントと少なくとも1つの過フッ素化炭化水素セグメントとからなっている。いくつかの実施形態において、半フッ素化アルカンは、一般式F(CF2)n(CH2)mHの、1つの過フッ素化炭化水素セグメントに結合した1つの非フッ素化炭化水素セグメント、又は一般式F(CF2)n(CH2)m(CF2)oFの、1つの非フッ素化炭化水素セグメントで隔てられた2つの過フッ素化炭化水素セグメントを有し、n、m、及びoは3〜20の範囲から独立に選択される。
【００４６】
医薬組成物中の非水賦形剤(たとえばグリセロール)の濃度は、組成物の0.1質量%〜10質量%(たとえば0.1質量%、0.2質量%、0.5質量%、1質量%、2質量%、3質量%、4質量%、5質量%、6質量%、7質量%、8質量%、9質量%、10質量%、又はこれらの特定した数値に基づく任意の範囲)であってよい。いくつかの実施形態において、非水賦形剤はグリセロールであり、グリセロールの濃度は組成物の0.1質量%〜5質量%の範囲(たとえば0.1質量%、0.2質量%、0.5質量%、1質量%、1.5質量%、2質量%、2.5質量%、3質量%、3.5質量%、4質量%、4.5質量%、5質量%、又はこれらの特定した数値に基づく任意の範囲)である。いくつかの実施形態において、グリセロールの濃度は組成物の0.1質量%、0.4質量%、1.3質量%、又は2.7質量%である。
【００４７】
医薬組成物はまた、他の好適な成分を含んでもよい。そのような好適な成分の非限定的な例としては、生物化学的に許容されるエネルギー源、保存剤、緩衝剤、等張化剤、界面活性剤、粘度調節剤、及び酸化防止剤からなる群から選択される1つ又は複数の成分が挙げられる。
【００４８】
生物化学的に許容される好適なエネルギー源は当技術で既知の任意のものであってよい。たとえば、生物化学的に許容されるエネルギー源は、エネルギー代謝経路、特にグルコース代謝経路の中間体として関与することによって還元を促進することができる任意のものであってよい。生物化学的に許容される好適なエネルギー源の非限定的な例としては、アミノ酸又はその誘導体(たとえばアラニン、グリシン、バリン、ロイシン、イソロイシン、2-オキソグルタレート、グルタメート、及びグルタミン、その他)、糖又はその代謝物(たとえばグルコース、グルコース-6-ホスフェート(G6P))、ピルベート(たとえばエチルピルベート)、ラクトース、ラクテート、又はその誘導体)、脂質(たとえば脂肪酸又はそのモノ-、ジ-、及びトリ-グリセリド及びリン脂質等の誘導体)、及びその他(たとえばNADH)が挙げられる。生物化学的に許容されるエネルギー源の好適な量は、組成物の0.01質量%〜5質量%の範囲(たとえば0.05質量%、0.1質量%、0.2質量%、0.5質量%、1質量%、2質量%、3質量%、4質量%、5質量%、又はこれらの特定した数値に基づく任意の範囲)であってよい。いくつかの実施形態において、生物化学的エネルギー源はエチルピルベートである。いくつかの実施形態において、生物化学的エネルギー源はアラニンである。いくつかの実施形態において、エチルピルベート又はアラニンの量は、組成物の0.05質量%〜5質量%の範囲(たとえば0.05質量%、0.1質量%、0.2質量%、0.5質量%、1質量%、2質量%、3質量%、4質量%、5質量%、又はこれらの特定した数値に基づく任意の範囲)である。いくつかの実施形態において、アラニンの量は組成物の0.5質量%である。本明細書に記載した実施形態のいずれにおいても、生物化学的に許容されるエネルギー源は眼科的に許容される量である。
【００４９】
好適な保存剤は当技術で既知の任意のものであってよい。非限定的な例としては、塩化ベンザルコニウム(BAK)、セトリモニウム、クロロブタノール、エデト酸二ナトリウム(EDTA)、ポリクアテルニウム-1(Polyquad(登録商標))、ポリヘキサメチレンビグアニド(PHMB)、安定化オキシクロロ複合体(PURITE(登録商標))、過ホウ酸ナトリウム、及びSofZia(登録商標)が挙げられる。医薬組成物中の保存剤の好適な量は、組成物の0.005質量%〜0.1質量%の範囲(たとえば0.005、0.01、0.02質量%、0.05質量%、0.1質量%、又はこれらの特定した数値に基づく任意の範囲)であってよい。いくつかの実施形態において、保存剤は塩化ベンザルコニウムである。いくつかの実施形態において、塩化ベンジルアルコニウムの量は、組成物の0.005質量%〜0.1質量%(たとえば0.005、0.01、0.02質量%、0.05質量%、0.1質量%、又はこれらの特定した数値に基づく任意の範囲)である。いくつかの実施形態において、塩化ベンジルアルコニウムの量は組成物の0.01質量%である。本明細書に記載した実施形態のいずれにおいても、保存剤は眼科的に許容される量である。いくつかの実施形態において、医薬組成物は保存剤を含まない。リポ酸コリンエステル又はその誘導体が保存剤として機能し得るとしても、本明細書において用いる場合、これは保存剤の範疇に入らない。
【００５０】
好適な緩衝剤は、医薬組成物に(たとえば本明細書に記載した)所望のpHを付与することができる当技術で既知の任意のものであってよい。非限定的な例としては、リン酸塩緩衝剤(たとえばリン酸二水素ナトリウム一水和物、リン酸一水素ナトリウム無水物)、酢酸塩緩衝剤、クエン酸塩緩衝剤、ホウ酸塩緩衝剤、及びHBSS(Hank's Balanced Salt Solution)が挙げられる。緩衝剤の好適な量は所望のpHに基づいて容易に計算できる。本明細書に記載した実施形態のいずれにおいても、緩衝剤は眼科的に許容される量である。しかし、いくつかの実施形態において、医薬組成物は緩衝剤を含まない。いくつかの実施形態において、水溶液又は最終の医薬組成物のpHは酸(たとえば塩酸)又は塩基(たとえば水酸化ナトリウム)で調節して(たとえば本明細書に記載した)所望のpH範囲とされる。アラニンのように通常は日常的に緩衝剤として用いないいくつかの化合物が緩衝剤としての能力を有していても、本明細書において用いる場合、これらは緩衝剤の範疇に入らない。
【００５１】
好適な等張化剤は当技術で既知の任意のものであってよい。非限定的な例としては、塩化ナトリウム、塩化カリウム、マンニトール、デキストロース、グリセリン、プロピレングリコール、及びそれらの混合物が挙げられる。医薬組成物中の等張化剤の好適な量は、200〜460mOsm(たとえば260〜360mOsm、又は260〜320mOsm)の浸透圧を達成できる任意の量である。いくつかの実施形態において、医薬組成物は等張化組成物である。いくつかの実施形態において、等張化剤(たとえば塩化ナトリウム)の量は組成物の0.1質量%〜5質量%(たとえば0.1質量%、0.5質量%、1質量%、2質量%、3質量%、4質量%、5質量%、又はこれらの特定した数値に基づく任意の範囲)である。本明細書に記載した実施形態のいずれにおいても、等張化剤は眼科的に許容される量である。
【００５２】
好適な界面活性剤は当技術で既知の任意のものであってよく、イオン性界面活性剤及び非イオン性界面活性剤を含む。非限定的なイオン性界面活性剤としては、ラウリル硫酸アンモニウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウレス硫酸ナトリウム、ミレス硫酸ナトリウム、ジオクチルナトリウムスルホスクシネート、ペルフルオロオクタンスルホネート、ペルフルオロブタンスルホネート、直鎖状アルキルベンゼンスルホン酸塩、ラウロイルサルコシネートナトリウム、ペルフルオロノナノエート、ペルフルオロオクタノエート、オクテニジン二塩酸、臭化セチルトリメチルアンモニウム、塩化セチルトリメチルアンモニウム、塩化セチルピリジニウム(CPC)、塩化ベンザルコニウム(BAK)、塩化ベンゼトニウム(BZT)、塩化ジメチルジオクタデシルアンモニウム、臭化セトリモニウム、臭化ジオクタデシルジメチルアンモニウム、スルテイン類(たとえばコカミドプロピルヒドロキシスルテイン)、リン酸塩(たとえばレシチン)、及びベタイン類(たとえばコカミドプロピルベタイン)が挙げられる。
【００５３】
有用な非イオン性界面活性剤の非限定的な例としては、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル(たとえばポリソルベート80[ポリ(オキシエチレン)ソルビタンモノオレエート]、ポリソルベート60[ポリ(オキシエチレン)ソルビタンモノステアレート]、ポリソルベート40[ポリ(オキシエチレン)ソルビタンモノパルミテート]、ポリ(オキシエチレン)ソルビタンモノラウレート、ポリ(オキシエチレン)ソルビタントリオレエート、又はポリソルベート65[ポリ(オキシエチレン)ソルビタントリステアレート]、ポリオキシエチレン水素化カスターオイル(たとえばポリオキシエチレン水素化カスターオイル10、ポリオキシエチレン水素化カスターオイル40、ポリオキシエチレン水素化カスターオイル50、又はポリオキシエチレン水素化カスターオイル60)、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール(たとえばポリオキシエチレン(160)ポリオキシプロピレン(30)グリコール[Pluronic F681]、ポリオキシエチレン(42)ポリオキシプロピレン(67)グリコール[Pluronic P123]、ポリオキシエチレン(54)ポリオキシプロピレン(39)グリコール[Pluronic P85]、ポリオキシエチレン(196)ポリオキシプロピレン(67)グリコール[Pluronic F1271]、又はポリオキシエチレン(20)ポリオキシプロピレン(20)グリコール[Pluronic L-441]、ポリオキシル40ステアレート、シュクロース脂肪酸エステル、及びそれらの組み合わせが挙げられる。いくつかの実施形態において、界面活性剤はポリソルベート80である。医薬組成物中の界面活性剤の好適な量は、組成物の0.01質量%〜5質量%(たとえば0.05、0.1、0.2質量%、0.5質量%、1質量%、2質量%、3質量%、4質量%、5質量%、又はこれらの特定した数値に基づく任意の範囲)であってよい。いくつかの実施形態において、界面活性剤はポリソルベート80であり、ポリソルベート80の量は組成物の0.05質量%〜5質量%の範囲(たとえば0.05、0.1、0.2質量%、0.5質量%、1質量%、2質量%、3質量%、4質量%、5質量%、又はこれらの特定した数値に基づく任意の範囲)である。いくつかの実施形態において、ポリソルベート80の量は組成物の0.5質量%である。本明細書に記載した実施形態のいずれにおいても、界面活性剤は眼科的に許容される量である。しかしいくつかの実施形態において、医薬組成物は界面活性剤を含まない。リポ酸コリンエステル又はその誘導体が界面活性剤として機能するとしても、本明細書において用いる場合、これは界面活性剤の範疇に入らない。
【００５４】
好適な粘度調節剤は当技術で既知の任意のものであってよい。非限定的な例としては、カルボポールゲル、セルロース系剤(たとえばヒドロキシプロピルメチルセルロース)、ポリカルボフィル、ポリビニルアルコール、デキストラン、ゼラチン、グリセリン、ポリエチレングリコール、ポロキサマー407、ポリビニルアルコール及びポリビニルピロリドン並びにそれらの混合物が挙げられる。粘度調節剤の好適な量は、組成物の0.1質量%〜5質量%の範囲(たとえば0.1質量%、0.5質量%、1質量%、2質量%、3質量%、4質量%、5質量%、又はこれらの特定した数値に基づく任意の範囲)であってよい。本明細書に記載した実施形態のいずれにおいても、粘度調節剤は眼科的に許容される量である。いくつかの実施形態において、医薬組成物は粘度調節剤(たとえばヒドロキシプロピルメチルセルロース等のポリマー性粘度調節剤)を含まない。
【００５５】
好適な酸化防止剤は当技術で既知の任意のものであってよい。いくつかの実施形態において、酸化防止剤の酸化還元電位は0.5mv未満(たとえば0.4mv未満、0.3mv未満、0.2mv未満、又は0.1mv未満)である。いくつかの実施形態において、酸化防止剤の酸化還元電位はジヒドロリポ酸(DHLA)の酸化還元電位である0.28mv未満である。非限定的な例としては、アスコルビン酸、L-アスコルビン酸ステアレート、アルファチオグリセリン、エチレンジアミン四酢酸、エリソルビン酸、システイン塩酸塩、N-アセチルシステイン、L-カルニチン、クエン酸、酢酸トコフェロール、ジクロロイソシアヌレートカリウム、ジブチルヒドロキシトルエン、2,6-ジ-t-ブチル-4-メチルフェノール、大豆レシチン、チオグリコール酸ナトリウム、チオリンゴ酸ナトリウム、天然ビタミンE、トコフェロール、アスコルビルパスチミネート、ピロ亜硫酸ナトリウム、ブチルヒドロキシアニソール、1,3-ブチレングリコール、ペンタエリスチルテトラキス[3-(3,5-ジ-t-ブチル-4-ヒドロキシフェニル)]プロピオネート、プロピルガレート、2-メルカプトベンズイミダゾール及び硫酸オキシキノリンが挙げられる。酸化防止剤の好適な量は、組成物の0.1質量%〜5質量%の範囲(たとえば0.1質量%、0.5質量%、1質量%、2質量%、3質量%、4質量%、5質量%、又はこれらの特定した数値に基づく任意の範囲)であってよい。本明細書に記載した実施形態のいずれにおいても、酸化防止剤は眼科的に許容される量である。
【００５６】
いくつかの実施形態において、医薬組成物は以下:。
(a)組成物の1質量%〜10質量%(たとえば1質量%、1.5質量%、3質量%、4質量%、5質量%、又は特定した数値の間の任意の範囲)の濃度のリポ酸コリンエステルを有すること、
(b)組成物の0.005質量%〜0.1質量%(たとえば0.01質量%)の濃度の保存剤(たとえば塩化ベンザルコニウム)を有すること、
(c)組成物の0.1質量%〜5質量%(たとえば0.5質量%)の生物化学的エネルギー源(たとえばアラニン)を有すること、及び
(d)組成物の0.5質量%〜5質量%(たとえば2.7質量%)の濃度のグリセロールを有すること
の1つ又は複数を特徴とする。
【００５７】
いくつかの実施形態において、医薬組成物中のリポ酸コリンエステルは塩素イオン、臭素イオン、ヨウ素イオン、硫酸イオン、メタンスルホン酸イオン、硝酸イオン、マレイン酸イオン、酢酸イオン、クエン酸イオン、フマル酸イオン、フマル酸水素イオン、酒石酸イオン(たとえば(+)-酒石酸イオン、(-)-酒石酸イオン、又はそれらの混合物)、コハク酸イオン、安息香酸イオン、及びグルタミン酸等のアミノ酸のアニオンからなる群から選択される対イオンを有する。いくつかの実施形態において、対イオンは塩素イオンである。
【００５８】
いくつかの実施形態において、医薬組成物は組成物の2.7質量%の濃度でグリセロールである非水賦形剤を含む。いくつかの実施形態において、グリセロールの濃度は組成物の3質量%である。
【００５９】
いくつかの実施形態において、医薬組成物は0.025質量%のエデト酸二ナトリウム二水和物、1.3質量%のグリセリン、0.5質量%のアラニン、0.01質量%の塩化ベンザルコニウム、1質量%のリポ酸コリンエステル、及び水から本質的になり、医薬組成物のpHは4.3〜4.7である。
【００６０】
いくつかの実施形態において、医薬組成物は0.025質量%のエデト酸二ナトリウム二水和物、0.4質量%のグリセリン、0.5質量%のアラニン、0.01質量%の塩化ベンザルコニウム、3質量%のリポ酸コリンエステル、及び水から本質的になり、医薬組成物のpHは4.3〜4.7である。
【００６１】
いくつかの実施形態において、医薬組成物は0.025質量%のエデト酸二ナトリウム二水和物、0.1質量%のグリセリン、0.5質量%のアラニン、0.01質量%の塩化ベンザルコニウム、4質量%のリポ酸コリンエステル、及び水から本質的になり、医薬組成物のpHは4.4〜4.6である。
【００６２】
LACEと非水賦形剤の混合
上述のように、本明細書に記載した医薬組成物は、治療有効量のリポ酸コリンエステルを非水賦形剤と予備混合して非水組成物を形成することによって形成され得る。次いで非水組成物を水溶液とさらに混合して、たとえば眼科製剤を形成する。いくつかの態様において、本発明はまた、非水組成物を水溶液から分離して、たとえば(たとえば本明細書に記載した)2パートデバイス又はキットに保存することによる医薬組成物の長期保存のシステム又は方法を提供する。分離保存された非水組成物は次いで使用前に水溶液と混合して、「活性化」製剤を形成することができる。
【００６３】
非水組成物は、リポ酸コリンエステルを非水賦形剤と混合することによって形成される溶液、エマルジョン、又は懸濁液であってよい。混合は持続した時間、加熱下で行なうことができる。いくつかの実施形態において、混合は20℃〜100℃(たとえば20℃、30℃、40℃、50℃、60℃、70℃、80℃、90℃、100℃、又はこれらの特定した数値に基づく任意の範囲)の温度で、1時間〜24時間(たとえば1時間、2時間、4時間、6時間、8時間、10時間、12時間、14時間、16時間、18時間、20時間、22時間、24時間、又はこれらの特定した数値に基づく任意の範囲)の間、行なわれる。いくつかの実施形態において、混合は37℃〜80℃の温度で行なわれる。いくつかの実施形態において、混合は8時間行なわれる。
【００６４】
いくつかの実施形態において、非水組成物は溶液である。いくつかの実施形態において、溶液はリポ酸コリンエステルを含む。いくつかの実施形態において、溶液はリポ酸コリンエステルの誘導体(たとえばリポ酸コリンエステルと非水賦形剤(たとえばプロピレングリコール又はグリセロール)から生成した反応生成物)を含む。溶液中のリポ酸コリンエステル又はその誘導体の濃度は、非水賦形剤(たとえばプロピレングリコール又はグリセロール)中の溶解度限界までであってよい。いくつかの実施形態において、リポ酸コリンエステル又はその誘導体の濃度は溶液の0.1質量%〜40質量%の範囲(たとえば1質量%、5質量%、10質量%、15質量%、20質量%、25質量%、30質量%、35質量%、40質量%、又はこれらの特定した数値に基づく任意の範囲)である。
【００６５】
非水組成物と水溶液との混合
本明細書に記載した非水組成物は、4〜8(たとえば4.2、4.4、4.6、4.8、5.0、5.2、5.4、5.6、5.8、6.0、6.2、6.4、6.6、6.8、7.0、7.2、7.4、7.6、7.8、8.0、又はこれらの特定した数値に基づく任意の範囲)のpHを有する水溶液と混合して眼科製剤を形成することができる。いくつかの実施形態において、非水組成物の混合によって水溶液のpHは実質的に変化しない。即ち、眼科製剤も4〜8のpHを有する。いくつかの実施形態において、眼科製剤は4〜6(たとえば4.2、4.4、4.6、4.8、5.0、5.2、5.4、5.6、5.8、6.0、又はこれらの特定した数値に基づく任意の範囲)のpHを有する。いくつかの実施形態において、眼科製剤は4.2〜4.7(たとえば4.5)のpHを有する。
【００６６】
眼科製剤は滅菌することができる。いくつかの実施形態において、非水組成物は水溶液と混合する前に滅菌される。いくつかの実施形態において、水溶液も滅菌される。いくつかの実施形態において、非水組成物は水溶液(たとえば滅菌済み水溶液、又は未滅菌水溶液)と混合され、次いで滅菌される。
【００６７】
眼科製剤は生物化学的に許容されるエネルギー源、保存剤、緩衝剤、等張化剤、界面活性剤、粘度調節剤、及び酸化防止剤からなる群から選択される1つ又は複数の成分を含み得る。生物化学的に許容される好適なエネルギー源、保存剤、緩衝剤、等張化剤、界面活性剤、粘度調節剤、及び酸化防止剤は、本明細書に記載したものである。いくつかの実施形態において、1つ又は複数の成分は非水組成物と混合する前に水溶液と混合される。いくつかの実施形態において、1つ又は複数の成分は水溶液と混合する前に非水組成物と混合される。生物化学的に許容されるエネルギー源、保存剤、緩衝剤、等張化剤、界面活性剤、粘度調節剤、及び酸化防止剤の好適な量も、本明細書に記載されている。しかし、本明細書に記載した実施形態のいずれにおいても、眼科製剤は緩衝剤、界面活性剤、粘度調節剤、保存剤、又はそれらの組み合わせを含まなくてもよい。
【００６８】
いくつかの実施形態において、眼科製剤は以下:
(a)製剤の1質量%〜10質量%の濃度(たとえば1質量%、1.5質量%、3質量%、4質量%、5質量%、又はこれらの特定した数値に基づく任意の範囲)のリポ酸コリンエステル又はその誘導体を有すること、
(b)製剤の0.005質量%〜0.1質量%(たとえば0.01質量%)の濃度の保存剤を有すること、
(c)4〜6(たとえば4.2、4.4、4.6、4.8、5.0、5.2、5.4、5.6、5.8、6.0又はこれらの特定した数値に基づく任意の範囲)のpHを有すること、
(d)製剤の0.1質量%〜5質量%(たとえば0.5質量%)の生物化学的エネルギー源(たとえばアラニン)を有すること、
(e)製剤の0.5質量%〜5質量%(たとえば2.7質量%)の濃度のグリセロールを有すること、及び
(f)3か月(たとえば3か月、6か月、9か月、又は12か月)を超える保存安定性を有すること
の1つ又は複数を特徴とする。
【００６９】
いくつかの実施形態において、眼科製剤は組成物の2.7質量%の濃度でグリセロールである非水賦形剤を含む。いくつかの実施形態において、グリセロールの濃度は組成物の3質量%である。
【００７０】
いくつかの実施形態において、眼科製剤は0.025質量%のエデト酸二ナトリウム二水和物、1.3質量%のグリセリン、0.5質量%のアラニン、0.01質量%の塩化ベンザルコニウム、1質量%のリポ酸コリンエステル又はその誘導体、及び水から本質的になり、眼科製剤のpHは4.3〜4.7である。
【００７１】
いくつかの実施形態において、眼科製剤は0.025質量%のエデト酸二ナトリウム二水和物、0.4質量%のグリセリン、0.5質量%のアラニン、0.01質量%の塩化ベンザルコニウム、3質量%のリポ酸コリンエステル又はその誘導体、及び水から本質的になり、眼科製剤のpHは4.3〜4.7である。
【００７２】
いくつかの実施形態において、眼科製剤は0.025質量%のエデト酸二ナトリウム二水和物、0.1質量%のグリセリン、0.5質量%のアラニン、0.01質量%の塩化ベンザルコニウム、4質量%のリポ酸コリンエステル又はその誘導体、及び水から本質的になり、眼科製剤のpHは4.4〜4.6である。
【００７３】
LACE製剤の保存
リポ酸コリンエステルは加水分解及び光誘起酸化を受けやすいので、いくつかの実施形態において、本発明はリポ酸コリンエステルを非水環境、無酸素環境、及び/又は光への曝露の少ない状態に保存する方法を提供する。いくつかの実施形態において、リポ酸コリンエステルは非水環境に保存される。いくつかの実施形態において、リポ酸コリンエステルは凍結乾燥粉末として非水環境に保存される。いくつかの実施形態において、リポ酸コリンエステルは(たとえば本明細書に記載した)非水組成物として、非水環境に保存される。いくつかの実施形態において、リポ酸コリンエステルは不透明な容器の中で非水環境に保存される。いくつかの実施形態において、非水環境は実質的に酸素を含まない。
【００７４】
いくつかの実施形態において、リポ酸コリンエステルは(たとえば非水組成物を水溶液と混合した後で)水性環境に保存され、水性環境は酸素を含まない。いくつかの実施形態において、リポ酸コリンエステルは水性環境に光への曝露の少ない状態(たとえば不透明な容器の中)で保存される。
【００７５】
いくつかの実施形態において、本発明はまた、活性成分を含む医薬組成物を水溶液中に保存するシステムを提供し、活性成分(たとえばリポ酸コリンエステル又はその誘導体)は水溶液中で加水分解を受けやすい。
【００７６】
いくつかの実施形態において、システムは第1の区画、第2の区画、及び第1の区画と第2の区画を分離するシールを含み、第1の区画は活性成分(たとえばリポ酸コリンエステル又はその誘導体)を含む非水組成物を含み、第2の区画は水溶液を含む。いくつかの実施形態において、第1の区画内の活性成分は固体状態(たとえば粉末、たとえば凍結乾燥粉末)である。いくつかの実施形態において、第1の区画内の活性成分は(たとえば本明細書に記載した)非水賦形剤と混合される。いくつかの実施形態において、システムはシールを破壊して非水溶液を水溶液と混合することによって活性化される。
【００７７】
システムの1例は図4に示す改良された点眼ボトルである。点眼ボトルはパート1(図4にインサートとして示す第1の区画及びシールを含む)及びパート2(第2の区画を含む)の2つのパートを含み(図4参照)、2つの区画は患者による活性化及び使用のための最終製剤の形成の前には互いに分離されている。いくつかの実施形態において、点眼ボトルのパート1は本明細書に記載した非水組成物のいずれか(たとえばグリセロールと混合したリポ酸コリンエステル又はその誘導体)を含んでいる。いくつかの実施形態において、点眼ボトルのパート1は水溶液中で加水分解を受けやすい活性成分(たとえばペプチド)を含む非水組成物を含んでいる。
【００７８】
いくつかの実施形態において、点眼ボトルのパート1はグリセロール中のリポ酸コリンエステル又はその誘導体(たとえばLACE 150mg/グリセロール  1.03μL)を含んでいる。いくつかの実施形態において、点眼ボトルのパート2は以下の賦形剤:0.01質量%の塩化ベンザルコニウム、2.6質量%のグリセリン(USP)、及び0.5質量%のアラニン(USP)を有する水溶液(4.8mL)を含んでおり、溶液のpHは4.5±0.2である。
【００７９】
インサートは活性化まで非水組成物をパート2から分離しており、それにより短期の眼科治療が開始されるまでの長期保存が可能になっている。いくつかの実施形態において、インサートには主インサート静止ホルダー、内部チューブ、及び下部シールが含まれており、内部チューブは非水組成物を含むように構成され、下部シールは非水組成物と水溶液の接触を防止するように構成されている。いくつかの実施形態において、点眼ボトルはインサートをシールするドロッパーチップを含んでいる。いくつかの実施形態において、点眼ボトルはボトルを圧迫し又は絞ることによって下部シールが上方に移動し、それにより内部チューブの穴が露出して非水組成物が水溶液中に放出されるために十分であるように構成されている。
【００８０】
上述の実施形態のいずれにおいても、原薬(たとえばリポ酸コリンエステル又はその誘導体)を含む非水組成物は、水溶液中に放出されるまでは、少なくとも3か月(たとえば6か月、9か月、12か月、2年、又は2年超)の保存安定性を有する。いくつかの実施形態において、非水組成物は分解した原薬が2%以下(たとえば1.5%、1%、0.5%、又は0.2%)であることを特徴とする。いくつかの実施形態において、非水組成物は分解した原薬が10%以下(たとえば9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%、1%、0.5%、又は0.2%)であることを特徴とする。いくつかの実施形態において、非水組成物を水溶液中に放出することによって形成される医薬組成物は、少なくとも3か月(たとえば6か月、9か月、又は12か月)の保存安定性を有する。
【００８１】
いくつかの実施形態において、本発明はまた、水溶液中で加水分解を受けやすい活性成分を保存する方法を提供する。本方法は(a)第1の区画に活性成分を準備する工程、(b)第2の区画に水溶液を準備する工程、及び(c)第1の区画と第2の区画をたとえばシールで分離する工程を含み、第1の区画内の活性成分は、たとえばシールを破壊して使用する直前まで水溶液と接触しない。いくつかの実施形態において、第1の区画内の活性成分は(たとえば本明細書に記載した)非水賦形剤と混合される。いくつかの実施形態において、活性成分はリポ酸コリンエステル若しくはその誘導体、又はペプチドである。第1の区画と第2の区画を構成する好適な方法には、本明細書に記載したものが含まれる。
【００８２】
治療の方法
(たとえば本明細書に記載した)リポ酸コリンエステル又はその誘導体を含む医薬組成物は、酸化傷害に伴う疾患又は障害を治療し又は予防するための方法において採用することができる。酸化傷害に伴う疾患又は障害は公知である。
【００８３】
いくつかの実施形態において、本発明は、それを必要とする対象において眼科疾患を治療する方法であって、治療有効量の本明細書に記載した医薬組成物のいずれかを対象の水晶体又は眼に投与するステップを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態において、眼科疾患は老眼、白内障、黄斑変性(加齢性黄斑変性を含む)、網膜症(糖尿病性網膜症を含む)、緑内障、又は眼科炎症である。いくつかの実施形態において、眼科疾患は老眼である。
【００８４】
本明細書において眼科疾患を治療し又は予防する方法のための医薬組成物の好適な量は治療に有効な任意の量であってよい。いくつかの実施形態において、本方法は対象の水晶体又は眼に、水晶体の調節幅を少なくとも0.1ジオプター(D)(たとえば0.1、0.2、0.5、1、1.2、1.5、1.8、2、2.5、3、又は5ジオプター)増大させるために有効な量の医薬組成物を投与するステップを含む。いくつかの実施形態において、本方法は対象の水晶体又は眼に、1〜5滴(1滴あたり約40μL)の医薬組成物を投与するステップを含む。いくつかの実施形態において、対象の水晶体又は眼は、各回1〜5滴(1滴あたり約40μL)の医薬組成物で1日1、2、3、4、5回又は5回を超えて治療される。いくつかの実施形態において、対象の水晶体又は眼は、各回1、2、3、4、5滴又は5滴を超える医薬組成物で治療される。いくつかの実施形態において、対象の水晶体又は眼は、各回1又は2滴(1滴あたり約40μL)の本明細書の医薬組成物で1日2又は3回治療される。
【００８５】
本方法は、いずれの年齢の患者についても実施できる予防方法を含む。本方法はまた、いずれの年齢の患者、特に20、25、30、35、40、45、50、52、55、57、60、70、75、若しくは80歳又はそれを超える年齢の患者についても実施できる治療方法を含む。
【００８６】
以下の実施例は説明のためであり、特許を請求する実施形態の範囲を限定するものではない。
【実施例】
【００８７】
(実施例1)
LACE塩化物の合成
リポ酸コリンエステル塩化物の2段階合成を以下に記載する。
【００８８】
【化２】
0006526066.tif 000003
【００８９】
R-リポ酸(5g、24.3mmol)、ジメチルアミノエタノール(2.37g、26.7mmol)、及びDMAP(0.9g、7.3mmol)を、室温、窒素下でMTBE(40mL)に懸濁した。反応混合物を0℃に冷却し、MTBE(20mL)中のDIC(3.36g、26.7mmol)を加えた。添加後、混合物をゆっくりと室温にまで加温し、最低12時間撹拌した。反応はTLC(5%MeOH/CH2Cl2)によってモニターした。反応混合物を濾過し、MTBEで洗浄し、フラッシュクロマトグラフィーで精製して黄色油(3.3g、10.1mmol)を得た。
【００９０】
上で得たリポエート(0.5g、1.8mmol)をアセトン(1.8mL)に懸濁し、CH3Cl(1.8mL、MTBE中1.0)を加えた。反応物をシールしたチューブの中で窒素下、50℃で一夜加熱した。HPLCにより95%の転化率が示された。
【００９１】
(実施例2)
LACE製剤の安定性に関する研究
種々のリポ酸コリンエステル製剤の安定性について試験した。
【００９２】
装置
HPLC分析の実施において用いたHPLCシステムは、IQ、OQ及びPQを伴うCGMPによって適格とした。用いたそれぞれのシステムはWaters社  2695 Separations Module及びWaters社  2487 Dual  λ  Absorbance Detectorからなっていた。
【００９３】
実験には以下の追加的な装置を用いた。
Mettler社  AE163  天秤、E-000,902
Mettler社  AE200  天秤、E-000,903
Mettler社  PB3002  天秤、E-000,904
Fisher社  ARSO Accumet pH  メーター、E-000,726
Precision Systems社  5004 J.-LOsmette  オスモメーター、E-000,705, E-000,800
Millipore社  A-10 Advantage  純水システム、E-000,723
【００９４】
容器の閉止
3mL白色ボトル:
3cc LDPE  シリンダー  円形ボトル、レジン、Dupont社  20-6064、色:白色、  PCC PEC17030 (WX in Mix)、Alcan Packaging社、PN: 20319-137 (BPN-000,688)
3 cc LDPE  シリンダー  円形ボトル、レジン、Chevron社  PE 5104、色:白色  WX0200、Alcan Packaging社、PN:20319-007 (BPN-000,441)
【００９５】
3mL  ナチュラルボトル:
3cc シリンダー  円形ボトル、レジン: LDPE Chevron Phillips社  PE 5104、色:ナチュラル、添加剤:PCC Lube-ZnSt 110445 S068、Alcan Packaging社、PN: 20319-006 (BPN-000,653)
【００９６】
チップ:
8mm コントロールドドロッパーチップ  0.020  ニードル、ナチュラル、レジン: LLDPE Dow社  Dowlex 2517、Alcan Packaging社、PN: 12208-0AA (BPN-000,443)
8mm コントロールドドロッパーチップ  0.020  ニードル、ナチュラル、レジン: LDPE Dupont社  20-6064、Alcan Packaging社、PN: 12208-015 (BPN-000,492B)
【００９７】
キャップ:
08/425 ドロッパーチップキャップ、レジン: PP Sunoco社  FT-120-W2  色:  白色  PCC C10054C、Alcan Packaging社、PN: 15055-201 (BPN-000,442)
【００９８】
方法
pHはUSP/NF<791>及びSOP-00273に従って測定した。浸透圧はUSP/NF<785>及びSOP-00084に従って測定した。
【００９９】
LACE塩化物を分析するためのHPLC法には、粒径5μm、孔径100A、内径2.0mm、長さ50mmのPhenomenex社  Luna CN  カラム(PN: 00B-4255-B0)を用いた。移動相は50%の0.1M酢酸ナトリウム及び50%のアセトニトリルからなっていた。流量は1.0mL/分、検出波長は225nm、カラム温度は40℃、注入体積は20μL、運転時間は50分とした。LACE塩化物の操作濃度は0.1mg/mLとし、分析にはプラスチックのHPLCバイアルを用いた。
【０１００】
LACE塩化物製剤(BCL457-180、BCL471-189、BCL483-079、BCL483-165、BCL489-027)の最終的な安定性スクリーニングのため、移動相濃度を逸脱して0.01M酢酸ナトリウムに調製した。その結果、保持時間が長くなり、LACEのピーク幅が広くなったが、結果に影響を与えるとは考えられなかった。LACEの標準は試料中のLACEと一致した。
【０１０１】
製剤BCL442-110 B-H
pH5.5及び7.0におけるLACE塩化物眼科製剤(BCL442-110)の詳細な処方をTable 1(表1)に示す。
【０１０２】
【表１】
0006526066.tif 000004
【０１０３】
LACE塩化物を1.5%、3.0%、及び5.0%で含む溶液中で、またpH5.5又はpH7.0で、pH、浸透圧、外観、及びLACE塩化物濃度を測定した。LACE塩化物の分析は調製の4日後に行なった。溶液は、LACE塩化物が調製の時から分析を行なうまで4日間、pH7で非常に安定ではないことを示した。しかしpH5.5の溶液は86%〜109%の回収という結果となり、LACE塩化物製剤が低いpHではより安定であることが示された。
【０１０４】
製剤BCL448-053 C及びD
クエン酸緩衝液中のLACE塩化物眼科製剤(BCL448-053)の詳細をTable 2(表2)に示す。
【０１０５】
【表２】
0006526066.tif 000005
【０１０６】
溶液を調製した時及び5℃(周囲RH)、25℃(40%RH)、40℃(25%RH以下(NMT))及び57℃(周囲RH)で3か月保存した後に試験した。溶液のLACE塩化物濃度を評価してLACEの経時的安定性を決定した。5℃で保存したLACE塩化物の1.5%溶液が、3か月後のLACEの回収97.0%と、顕著な変化を示さない唯一の溶液であった。
【０１０７】
製剤BCL457-180 D及びE
緩衝剤なしでポリソルベート80を添加した場合と添加しない場合のLACE塩化物眼科製剤(BCL457-180)の詳細をTable 3(表3)に示す。
【０１０８】
【表３】
0006526066.tif 000006
【０１０９】
溶液を調製した時及び5℃(周囲RH)、25℃(40%RH)、40℃(25%RH以下)及び57℃(周囲RH)で3か月保存した後に試験した。
【０１１０】
結果は、5℃及び25℃/40%RHで3か月、製剤はLACE塩化物の有効性について安定であることを示している。溶液は40℃、25%RH以下では2か月後に初期の90%未満の有効性を示す。ポリソルベート80の有無では製剤間に有意の安定性の差は見られない。
【０１１１】
(実施例3)
プロピレングリコールを含むLACE製剤
プロピレングリコール中のLACE塩化物溶液を調製し、その安定性を決定した。プロピレングリコール中の1.0%LACE塩化物溶液を調製し、-20℃(周囲RH)、5℃(周囲RH)、及び25℃(40%RH)で保存した。3か月保存後、LACE塩化物の有効性について溶液を試験した。
【０１１２】
結果は、LACE塩化物はプロピレングリコール中、5℃及び25℃で3か月保存した後、安定でないことを示している。これらの試料において、(実施例2に記載した方法による)HPLC分析で、相対保持時間(RRT)約0.73のピークを示した。室温で保存した溶液については、LACE塩化物は完全にこのピークに変換されている。その他のピークは検出されない。クエン酸緩衝液中のLACE塩化物溶液では0.73RRTのピークは検出されない。
【０１１３】
(実施例4)
3か月の安定性の結果
製剤
LACE点眼液の3種の製剤、即ち10mg/mL(1%)、30mg/mL(3%)、及び40mg/mL(4%)を調製し、安定性を試験した。
【０１１４】
1%LACE溶液:
0.025質量%のエデト酸二ナトリウム二水和物、
1.3質量%のグリセリン、
0.5質量%のアラニン、
0.01質量%の塩化ベンザルコニウム、
1質量%のリポ酸コリンエステル、
水、及び
pHを4〜5に調節する、水酸化ナトリウム(1N)及び/又はHCl(1N)。
【０１１５】
3%LACE溶液:
0.025質量%のエデト酸二ナトリウム二水和物、
0.4質量%のグリセリン、
0.5質量%のアラニン、
0.01質量%の塩化ベンザルコニウム、
3質量%のリポ酸コリンエステル、
水、及び
pHを4〜5に調節する、水酸化ナトリウム(1N)及び/又はHCl(1N)。
【０１１６】
4%LACE溶液:
0.025質量%のエデト酸二ナトリウム二水和物、
0.1質量%のグリセリン、
0.5質量%のアラニン、
0.01質量%の塩化ベンザルコニウム、
4質量%のリポ酸コリンエステル、
水、及び
pHを4〜5に調節する、水酸化ナトリウム(1N)及び/又はHCl(1N)。
【０１１７】
HPLC法
装置:
勾配流量1.0mL/分を送達できるポンプ若しくは同等物を含むWaters社  2695分離モジュール又は同等物及びオートサンプラー。
Waters社  2987  多波長検出器若しくは225nmを検出できる単一波長検出器又は同等物。
カラム: YMC Pack ODS AQ、250×4.6 mm、PN: AQ125052546WT
【０１１８】
試薬:
アセトニトリル、HPLCグレード又は同等物
メタノール、HPLCグレード又は同等物
リン酸二水素ナトリウム一水和物、USPグレード又は同等物
1-ヘプタンスルホン酸ナトリウム塩、HPLCグレード又は同等物
トリエチルアミン、HPLCグレード又は同等物
リン酸、NFグレード又は同等物
精製水
分析用天秤
種々のクラスA容量フラスコ
種々のクラスAピペット
種々のメスシリンダー
HPLCバイアル
【０１１９】
HPLCシステムパラメーター:
カラム: YMC Pack ODS AQ、250×4.6mm、5μm、12 nm、PN:AQ125052546WT
移動相:
A:0.05Mリン酸ナトリウム、0.005M 1-ヘプタンスルホン酸ナトリウム塩、0.2%トリエチルアミン、pH4.5(±0.2)(リン酸で調整)
D:アセトニトリル
勾配:
【０１２０】
【表４】
0006526066.tif 000007
【０１２１】
流量:1.0mL/分
波長:225nm
カラム温度:60℃
注入体積:10μL(有効性)、50μL(RS)
概算運転時間*:50分
概算保持時間*:21分
*運転時間及び保持時間はカラムの使用期間及び用いた計測器の種類によって変動することがある。
針の洗浄  水:アセトニトリル(90:10)
希釈剤  0.05Mリン酸ナトリウム
【０１２２】
結果
製剤を5℃で周囲RH、25℃で40%RH、40℃で25%RH以下、及び-20℃で周囲RHの4つの異なった条件で保存した。試料を0時間、1か月、及び3か月で採取し、EDTA含量、BAK含量、pH、及びLACEの有効性について試験した。結果を下のTable 4〜Table 7(表5〜表8)に示す。外観試験も0時間、1か月、及び3か月で行なった(Table 8(表9)参照)。薬物関連不純物をHPLCによって分析した。Table 9A〜Table 9D(表10)に、0時間、1か月、及び3か月で生成した薬物関連不純物の量を示す(0.05%を超える量の不純物のみを表に記載している)。
【０１２３】
【表５】
0006526066.tif 000008
【０１２４】
【表６】
0006526066.tif 000009
【０１２５】
【表７】
0006526066.tif 000010
【０１２６】
【表８】
0006526066.tif 000011
【０１２７】
【表９】
0006526066.tif 000012
【０１２８】
【表１０Ａ】
0006526066.tif 000013
【０１２９】
【表１０Ｂ】
0006526066.tif 000014
【０１３０】
【表１０Ｃ】
0006526066.tif 000015
【０１３１】
(実施例5)
Dioptin(商標)点眼剤はマウス水晶体の弾性を低下させる
方法
インビトロ試験:選択したレベル(0〜500μM)のリポ酸(LA)を添加した培地中で8月齢のマウス(C57BL/6J)の水晶体を12時間インキュベートした。水晶体の弾性は既知のカバースリップ法で測定した。弾性測定の後、アルキル化剤1を含む解離培地(遊離SH改質)中で水晶体をホモジナイズした。ホモジネートを濾過し、洗浄して再懸濁した残留物を還元剤(TCEP)及びアルキル化剤2(S-S SH改質)で処理した。濾過及び洗浄の後、残留物2の中のアルキル化されたSH基のレベルを決定した。スルフヒドリルの分析についてはウシ血清アルブミンを陽性対照とした。
【０１３２】
インビボ試験:8月齢のC57BL/6Jマウスを5週間の間、右眼(OD)に8時間おきに1日3回、5% LACE(Dioptin(商標))製剤2.5μLで処置した。最後の処置の後、水晶体を取り出してHBSSを含むキュベットに入れた。弾性は、1μmごとにZステージを上方移動させるコンピューター制御された計測器を用い、Harvard Apparatus F10等尺力トランスデューサーによってこれに伴う力を測定して決定した。比較のため、8週齢のC57BL/6Jマウスの水晶体の弾性を決定した。
【０１３３】
結果
LA処置により、水晶体の弾性の増大に伴う水晶体のタンパク質のジスルフィドの濃度依存性の減少が生じた。ジスルフィドと弾性の変化には負の相関(R=0.87、p=0.006)があった。両方の効果についての[LA]50は50±10μM、最大効果はLA 100μMであった。Dioptin(商標)による局所眼科処置の後、老齢マウスの処置した眼の水晶体は未処置の眼の水晶体よりも弾性が高く、即ち同様のZ変位に必要な相対的な力は未処置の眼の水晶体で大きかった。殆どの場合に、処置した眼の水晶体は8週齢のマウスの水晶体よりも弾性が高かった。
【０１３４】
ヒトの水晶体の中心近傍の弾性が加齢により低下するとともに、ヒトは調節能力を失う。ここでの結果は、ジスルフィドの還元によって水晶体の弾性を増大させる局所的眼科治療により、付随して調節幅が回復することを示唆している。
【０１３５】
(実施例6)
点眼剤の眼科安全性のためのEV06ドレーズ試験
EV06の安全性をドレーズ試験によって評価し、5%と高い濃度での使用を評価した。ドレーズ試験は食品医薬品局(FDA)の毒性学者であったJohn H. DraizeとJacob M. Spinesによって1944年に考案された急性毒性試験である。最初は化粧品の試験のために用いられたが、その手順には拘束され意識のある動物の眼又は皮膚に0.5mL又は0.5gの試験物質を投与し、次いで一定時間放置した後、これを洗浄して除き、その効果を記録するというステップが含まれている。Draizeら、J. Pharmacol. & Exp. Therapeutics, 82:377-390 (1944)に記載されたスケールを用いて、角膜、虹彩、及び結膜の反応を評価した。視覚には角膜が重要であるので、ドレーズスコアの73%は角膜の損傷に基づいている。正常なスコアは0であり、損傷の程度が増大すればスコアは高くなり、可能な最大スコアは110である。試験した全てのウサギの全スコアを平均することによって、それぞれの観察期間においてドレーズスコアを計算した。処置の24時間、48時間、及び72時間後に観察し、記録した。
【０１３６】
この試験は、30〜50μLの製品を6匹のニュージーランド白色ウサギの片方の眼に滴下し、モニターして結膜の赤色化、腫脹、又は刺激を示し得る瞬きの増大等の何らかの異常な臨床的兆候を観察することからなっている。EV06の試験濃度(3%〜5%)では悪影響は観察されず(ウサギ眼のドレーズ試験スコア2.0±0.6)、したがって「腐食性又は刺激性でない」と考えられた。
【０１３７】
(実施例7)
老眼における調節の回復のためのDioptin(商標)
方法
ウサギの眼に局所投与した場合の最大耐容濃度を角膜の生体分析、房水、並びにEV06及びその代謝物の水晶体濃度と関連させて決定するためにスクリーニング研究を行なった。ウサギのGLP研究において、90日間連続で1日3回、動物を0、1、3、又は4%のDioptin局所用溶液で処置した。投与前のベースライン及び投与の1、30、及び90日後にスリットランプ検査及び眼底検査を行なった。毎日の臨床観察、飼料の摂取、体重、臨床病理、及び毒物動態学を行なった。全身剖検及び眼の病理組織検査も行なった。
【０１３８】
結果
Dioptin(商標)眼科製剤はウサギの眼においてよく耐容された。GLP研究のいずれの時点においても用量に関連する眼毒性の兆候は観察されなかった。眼科検査は正常で、投与の第1日目に3%又は4%のDioptin(商標)を投与された動物のうち数匹で穏和な(1+)結膜のうっ血及び(1+)分泌という例外があり、これは投与期間中継続したが、悪化はしなかった。全身的影響又は有害事象は報告されなかった。EV06の血漿レベルは検出限界以下で、代謝が急速であることを示していた。
【０１３９】
Dioptin(商標)は老眼の新規で有望な治療であり、調節能を数ジオプター回復させる可能性を有している。前臨床研究において、EV06は水晶体タンパク質のジスルフィドを還元することによって水晶体の弾性を増大させる効果があることが示された。眼科製剤は非刺激性であり、1日3回、4%までの局所投与による90日間のGLP眼科毒性学研究において全身的及び眼科における安全性が示された。
【０１４０】
(実施例8)
老眼を治療するためのDioptin(商標)点眼剤:角膜浸透及び眼科薬物動態学
方法
リポ酸のエステルのウサギ角膜浸透を評価した。ここでもウサギを用いて、HPLC-ESI/MS/MS(LOD>2ng/ml)によりLACE(LAプロドラッグ)の代謝、吸収、及び分布を検討した。
【０１４１】
結果
LACEはリポ酸に対して浸透を改善することが見出された。LACEのプロトタイプ点眼製剤をDioptin(商標)として試験した。これは内因性ブチリルコリンエステラーゼによって急速に分解され、LAの眼組織レベルを高める。水晶体のDHLA(LAとして測定される)及びLACEは、3%のDioptin(商標)で処置した場合、反対側の未処置の眼と比較して両方とも有意に増大し[P<0.05]、それぞれ22.6±9.1(5)、及び142.3±31.9(5)nM/Lであった。
【０１４２】
図2Aに示すように、Dioptin(商標)によって眼組織試料中、重要なことに水晶体中のLACE(プロドラッグ)及びLA(活性)が増大する(ESI/LC/MS/MS)。LAは6,8-ビスメチルチオ-オクタン酸(BMOA)の形で排泄することができる。
【０１４３】
LACE代謝の概略図を図2Bに示す。角膜に吸収されたLACE分子は角膜においてプソイドコリンエステラーゼ(PCHE)によって非界面活性剤である天然の生成物(リポ酸及びコリン)に変換され、それにより房水(aqueous)への移動の間の角膜の損傷が最小化される。重要なことに、次いで角膜におけるこの分裂プロセスによって、これらの中間体の房水への移動が可能になる。リポ酸へのこの急速な分解により、非分解性カチオン性界面活性剤(たとえば、BAKを眼科で使用する場合の安全限界は0.01%未満である)と比べてより高い濃度のLACEを眼に投与することが可能になる。
【０１４４】
比較のため、ヒトにおいて、リポ酸製剤を眼に投与した後の取り込み率(全部で4時間にわたる曲線下面積)は僅かに0.37%(Cagini)である。一方、EV06製剤を用いた別の動物実験(ウサギ及びマウス)において、投与した点眼剤の2.2%が房水に浸透し、LAとして測定された。図3を参照されたい。
【０１４５】
結論として、Dioptin(商標)は、ジチオール化合物の房水への送達を改善することによって、タンパク質のジスルフィドを還元して、水晶体を軟化させ調節幅を回復させるための使いやすい眼科送達プラットフォームを提供する。これは老眼の治療に有用である。
【０１４６】
(実施例9)
グリセロールを含むLACE製剤
リポ酸コリンエステルを純グリセロール(水を含まない)と短時間、80℃で8時間、加熱しながら混合した。最終の透明溶液中に高濃度のリポ酸コリンエステルが見られた。最終の透明溶液は安定である。
【０１４７】
(実施例10)
単一ボトル2パート送達システム
単一ボトル2パート送達システムを2パートの安定な長期製造製剤について述べる。この送達ボトルには市販のボトル、ドロッパーチップ、及びキャップを用いる。市販の標準的なボトルにインサートを挿入する(図4、左上)。このインサートは活性化まで2つのパートを分離している。
【０１４８】
容量:4mL、ネック仕上げ:15-415
・材料:白色キャップ付きナチュラル透明LDPEボトル
・信頼性と再現性をもって試薬を分注できる。可撓性のあるコンタクトクリアーなボトルであるので内容物の確認が容易。
・化学的耐久性が優れている。材料は多くのバイオテック診断用途及び医薬用途に好適。
・一度に40μlの液滴を送達(水を基準として。液滴サイズは粘度による)。
・メーカー: Thermo Fisher Nalgene(登録商標)社
・メーカーパーツNo.:2750-9125
【０１４９】
パート1及びパート2の組成を下のTable 10(表11)に示す。
【０１５０】
【表１１】
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【０１５１】
パート1の調製
150mgの固体状リポ酸コリンエステル塩化物を103μLの医療グレードグリセロールに加え、80℃で6時間加熱する。無定形のミセルが形成される。
【０１５２】
図4(左図)に示すインサートは以下のアセンブリー成分:主インサート固定ホルダー1、非加水分解性溶媒を含み、粒子を除去するためのフィルターをも含む内部チューブ2、内部チューブ内の液体を含む下部シール3、及び滅菌前にインサートをシールするためのドロッパーチップ5を有する。図4に示すように、パート1組成物中の活性薬物を内部チューブ2に加える。次いでドロッパーチップを取り付ける。γ線照射によってパート1を滅菌する。
【０１５３】
パート1及びパート2の組み立て
パート2は別に滅菌される水溶液を含んでいる。インサート及び水溶液を正しく滅菌すれば、無菌的に制御された製造環境下でこれらを(キャップを除いて)組み合わせる(図4、中図)。パート2の容器の中にパート1のインサートを挿入する。組み立てた後は、温度条件を注意深く制御する必要なく(45℃未満)、長期保存が可能である。
【０１５４】
活性化
図4(右図)に示すように、活性化のために患者はボトルを圧迫し又は「絞って」、パート1をパート2の水溶液の中に放出するだけでよい。このステップにより下部シール3(図4)が上方に移動し、内部チューブ2(図4)の孔を露出させる。次いでパート1の組成物がパート2の水溶液中に流れ込む。僅かな振盪によって溶液は容易に溶解する。活性化の間、蓋はまだその場所にある。最終製剤(約5mL)は
3%リポ酸コリンエステル、
0.01%塩化ベンザルコニウム、
2.7%グリセリン(USP)、及び
0.5%アラニン(USP)を含み、
pHは4.5±0.2である。
【０１５５】
これにより、BIDの60日間の治療のための十分な製剤が提供される(40μL/滴)。
【０１５６】
最終製剤は予測される結果を維持するため十分に安定である。最終製剤は冷蔵(5℃)すれば活性化合物の0.5%超が分解することなく30日間安定である。
【０１５７】
2パートボトルに保存されたパート1及びパート2は45℃未満で2年間の熱分解に耐える長期保存安定性を提供する。
【０１５８】
特定の実施形態に関する上の記述は本発明の一般的性質を完全に明らかにしているので、当技術の技能に含まれる知識を応用することによって、他者は過度の実験を必要とせず、本発明の一般的概念から逸脱することなしに、種々の応用のためにこれらの特定の実施形態を容易に改変し及び/又は適合させることができる。したがって、そのような適合化及び改変は、本明細書に提示した教示及び指導に基づく、開示された実施形態の等価物の手段及び範囲に含まれることを意図している。本明細書における術語又は用語は説明の目的のためであって限定のためではなく、したがって本明細書の用語又は術語は教示及び指導に鑑みて当業者によって解釈されるべきであることを理解されたい。
【０１５９】
本発明の幅及び範囲は上記の例示的な実施形態のいずれによっても限定されるべきではなく、以下の特許請求の範囲及びその等価物によってのみ定義されるべきである。
【０１６０】
本明細書に記載した種々の態様、実施形態、及び選択肢の全ては、全ての変形において組み合わせることができる。
【０１６１】
本明細書に記述した全ての刊行物、特許、及び特許出願は、それぞれの個別の刊行物、特許、及び特許出願が具体的かつ個別に参照により組み込まれると指定されるかのように、これと同程度に参照により本明細書に組み込まれる。
【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３】
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【図４】
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