(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物：
【化１】
0006529983.tif 000076
（式中、ＨＡＲは、
【化２】
0006529983.tif 000077
から選択される５員のヘテロアリール環であり、
Ｒ1は、独立してＨ、Ｃ1-6アルキル、ＣＦ3及びＣ3−Ｃ5シクロアルキルから選択され；
Ｒ2は、独立してハロ、−ＣＮ及びＣ1-6アルキルから選択され；
Ｒ3は、Ｈ、Ｃ1-6アルキル、Ｃ3−Ｃ5シクロアルキル及びＣＦ3から選択され；
Ｒ4は、独立してＨ及びＣ1-6アルキルから選択され；
Ｒ5は、独立してＨ及びＣ1-6アルキルから選択され；
Ｒ6は、独立してＨ及びＣ1-6アルキルから選択される）、又はその水和物、溶媒和物、多形体、互変異性体、幾何異性体、光学活性体、又は薬学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｒ1〜Ｒ6中のＣ1-6アルキルがメチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ2がハロゲンである、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ3が、シクロブチル又はシクロプロピル等のＣ3−Ｃ5シクロアルキルである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ3が、エチル等のＣ1-6アルキルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ4が、メチル等のＣ1-6アルキルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ5が水素である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ6がＨである、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ6が、メチル等のＣ1-6アルキルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
ＨＡＲが、以下の基
【化３】
0006529983.tif 000078
から選択される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ1がメチルであり；Ｒ2が、フッ素、塩素及びＣＮから選択され；Ｒ3が、シクロブチル、エチル及びシクロプロピルから選択され；Ｒ4が、水素及びメチルから選択され；Ｒ5が水素であり；Ｒ6が、水素及びメチルから選択され；ＨＡＲが
【化４】
0006529983.tif 000079
から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
前記化合物が、以下の群から選択される、請求項１及び１１のいずれか１項に記載の化合物、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、互変異性体、多形体、ラセミ混合物、又は光学活性体。
Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−５−（４−メチルピペラジン−１−イル）−Ｎ４−（１−メチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン；
Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−Ｎ４−（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミン；
Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−Ｎ４−（１−エチル−５−メチル−ピラゾール−３−イル）−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミン；
Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］−Ｎ４−（１−メチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン；
Ｎ２−（５−クロロ−４−シクロプロピル−６−メチル−２−ピリジル）−Ｎ４−（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミン；
４−シクロプロピル−６−［［４−［（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）アミノ］−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］ピリミジン−２−イル］アミノ］−２−メチル−ピリジン−３−カルボニトリル；
Ｎ４−（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）−Ｎ２−（４−エチル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミン；
Ｎ２−（４−シクロブチル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−Ｎ４−（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミン；
Ｎ２−（５−クロロ−４−シクロプロピル−６−メチル−２−ピリジル）−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］−Ｎ４−（２−メチル−２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン；
Ｎ２−（５−クロロ−４−シクロプロピル−６−メチル−２−ピリジル）−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］−Ｎ４−（１−メチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン；
Ｎ２−（５−フルオロ−４−シクロプロピル−６−メチル−２−ピリジル）−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］−Ｎ４−（２−メチル−２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン；
Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−５−［３，４−ジメチルピペラジン−１−イル］−Ｎ４−（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン；
Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−５−［３，４−ジメチルピペラジン−１−イル］−Ｎ４−（１−メチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン；及び
Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−５−［３，４−ジメチルピペラジン−１−イル］−Ｎ４−（２−メチル−２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン。
【請求項１３】
前記化合物が、Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−５−［３，４−ジメチルピペラジン−１−イル］−Ｎ４−（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン、及びその活性代謝物であるＮ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−Ｎ４−（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミンから選択される、請求項１，１１及び１２のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１４】
前記化合物が、Ｎ４−（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）−Ｎ２−（４−エチル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミンである、請求項１，１１及び１２のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１５】
前記化合物がＮ２−（５−クロロ−４−シクロプロピル−６−メチル−２−ピリジル）−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］−Ｎ４−（２−メチル−２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミンである、請求項１，１１及び１２のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１６】
請求項１〜１５のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される希釈剤、賦形剤又は担体とを含有する医薬組成物。
【請求項１７】
少なくとも１種の更なる抗マラリア剤を更に含有する、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
前記更なる抗マラリア剤が、アルテミシニン、アルテメテル、ジヒドロアルテミシニン、クロロキン、メフロキン、キニン、アトバコン／プログアニル、ドキシサイクリン、ヒドロキシクロロキン、ハロファントリン、ピロナリジン、ルメファントリン、ピリメタミン−スルファドキシン、ピペラキン、アモジアキン、アトバコン、プログアニル塩酸塩、
（１Ｒ，３Ｓ）−５’，７−ジクロロ−６−フルオロ−３−メチル−スピロ［２，３，４，９−テトラヒドロピリド［３，４−ｂ］インドール−１，３’−インドリン］−２’−オン、
２−（１，１−ジフルオロエチル）−５−メチル−Ｎ−［４−（ペンタフルオロ−ラムダ６−スルファニル）フェニル］−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−アミン］、
シス−４−［２−［４−（ジスピロ［シクロヘキサン−１，３’−［１，２，４］トリオキソラン−５’，２’’−トリシクロ［３．３．１．１3,7］デカン］−４−イル）フェノキシ］エチル］モルホリン、
キナクリン、プリマキン、タフェノキン、フェロキン、及びアルテロランから選択される、請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
マラリア原虫に起因するマラリア若しくは寄生虫感染症の治療若しくは予防のための、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２０】
マラリア原虫に起因するマラリア若しくは寄生虫感染症の治療若しくは予防のための、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項２１】
パラジウム触媒アミノ化条件下、以下のように式（ＩＶ）の誘導体を式（Ｖ）の誘導体と反応させ、式（Ｘ）の中間体へと導く工程を含む、式（Ｉ）の化合物の製造方法：
【化７】
0006529983.tif 000080
（式中のＲ1，Ｒ2，Ｒ3，Ｒ4，Ｒ5及びＨＡＲは請求項１で定義された通りであり、式（ＩＶ）中のＲはＲ6であり、Ｒ6はアルキルであり、式（Ｘ）中のＲは保護基である）。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、トリアミノピリミジン化合物、その医薬組成物及びその使用法に関する。更に、本発明は、マラリア原虫（ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｓｐｅｃｉｅｓ）に起因する寄生虫感染症の治療法に関する。
【背景技術】
【０００２】
マラリアは、赤血球に感染し、赤血球を破壊するプラスモディウム属の寄生原虫に起因し、熱、重篤な貧血、脳マラリアの原因となり、治療しなければ死に至る。熱帯熱マラリア原虫は、サハラ砂漠以南のアフリカでは主な種であり、年間、約６０万人の死に関与している。アフリカでは、５歳未満の子供や妊婦にとってこの疾患は最も脅威である。三日熱マラリア原虫は、世界に蔓延するマラリアの原因の２５〜４０％となっており、特に、南アジア及び東南アジア、中央アメリカ及び南アメリカにおいてマラリアの原因となっている。ヒトに感染することが知られている他の主な３種は、卵形マラリア原虫、二日熱マラリア原虫、及び四日熱マラリア原虫である。
【０００３】
いったん感染すると、治療するのが困難であり、かつ病院及び地域環境から根絶するのが困難な耐性菌株が発生するので、マラリアの原因となることが知られているマラリア原虫、例えば、熱帯熱マラリア原虫及び三日熱マラリア原虫は特に重要である。このような菌株の例は、熱帯熱マラリア原虫のクロロキン耐性、ピリメタミン耐性、アルテミシニン耐性菌株である。
【０００４】
マラリアは、多くの開発途上国で蔓延している疾患である。世界の人口の約４０％が、マラリアが流行している国に住んでおり、毎年約２億４７００万人がこの疾患に苦しんでいる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
従って、蔓延した多剤耐性寄生虫の脅威を克服するために、特に新規作用機序のいずれかを有し、及び／又は新規な薬理作用基を含有する抗マラリア剤の開発が急務である。本発明は、マラリアの管理及び治療と関連する、当該技術分野における、このような欠点に対処することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明によれば、出願人は、ここに抗マラリア剤として作用する能力を有する化合物を発見した。本発明は、式（Ｉ）：
【０００７】
【化１】
0006529983.tif 000002
【０００８】
（式中、ＨＡＲ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は以下に定義する通りである）の化合物及びその薬学的に許容される塩を提供する。
【０００９】
また、本発明は、式（Ｉ）の化合物の製造方法、それを活性成分として含有する医薬組成物、医薬としてのその使用、そのような化合物の使用法、ヒトのような温血動物におけるマラリアの予防及び治療のための医薬の製造におけるそれらの使用を提供する。
【００１０】
典型的な式（Ｉ）の化合物は、有益な特性、代謝特性、毒物学的特性、及び／又は薬理学的特性を有すると期待される。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明は、式（Ｉ）の化合物：
【００１２】
【化２】
0006529983.tif 000003
【００１３】
（式中、ＨＡＲは、以下の基
【００１４】
【化３】
0006529983.tif 000004
【００１５】
から選択される５員のヘテロアリール環であり、
Ｒ１は、各出現ごとに独立してＨ、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３及びＣ３−Ｃ５シクロアルキルから選択され；
Ｒ２は、各出現ごとに独立してハロ、−ＣＮ及びＣ１−６アルキルから選択され；
Ｒ３は、各出現ごとにＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−Ｃ５シクロアルキル及びＣＦ３から選択され；
Ｒ４は、各出現ごとに独立してＨ及びＣ１−６アルキルから選択され；
Ｒ５は、各出現ごとに独立してＨ及びＣ１−６アルキルから選択され；
Ｒ６は、各出現ごとに独立してＨ及びＣ１−６アルキルから選択される）、並びにその錯体、水和物、溶媒和物、多形体、互変異性体、幾何異性体、光学活性体、又は薬学的に許容される塩を提供する。
【００１６】
ある実施態様では、Ｒ１はメチルである。
他の実施態様によれば、Ｒ２はハロゲンである。
ある実施態様では、Ｒ２は、フッ素、塩素及びＣＮから選択される。
更なる実施態様によれば、Ｒ２はＦ又はＣｌである。
他の実施態様によれば、Ｒ３は、シクロブチル又はシクロプロピル等のＣ３−Ｃ５シクロアルキルである。
他の実施態様によれば、Ｒ３は、シクロプロピルである。
他の実施態様によれば、Ｒ３は、エチル等のＣ１−６アルキルである。
ある実施態様では、Ｒ３は、シクロブチル、エチル及びシクロプロピルから選択される。
他の実施態様によれば、Ｒ４はＨである。
他の実施態様によれば、Ｒ４は、メチル等のＣ１−６アルキルである。
ある実施態様では、Ｒ４は、水素及びメチルから選択される。
ある実施態様では、Ｒ５は水素である。
他の実施態様によれば、Ｒ６はＨである。
他の実施態様によれば、Ｒ６は、メチル等のＣ１−６アルキルである。
ある実施態様では、Ｒ６は、水素及びメチルから選択される。
ある実施態様では、ＨＡＲは以下の基から選択される。
【００１７】
【化４】
0006529983.tif 000005
【００１８】
他の実施態様によれば、ＨＡＲは
【００１９】
【化５】
0006529983.tif 000006
【００２０】
から選択される。
【００２１】
他の特定の実施態様によれば、式（Ｉ）の化合物が提供され、式において、Ｒ１はメチルであり；Ｒ２は、フッ素、塩素及びＣＮから選択され；Ｒ３は、シクロブチル、エチル及びシクロプロピルから選択され；Ｒ４は、水素及びメチルから選択され；Ｒ５は水素であり；Ｒ６は、水素及びメチルから選択され；ＨＡＲは以下の基から選択される。
【００２２】
【化６】
0006529983.tif 000007
【００２３】
本明細書において、Ｃｘ−ｙアルキル等のように用語において使用される接頭辞Ｃｘ−ｙ（ここで、ｘ及びｙは整数である）は、基内に存在する炭素原子の数値範囲を示し；例えば、Ｃ１−６アルキルは、Ｃ１アルキル（メチル）、Ｃ２アルキル（エチル）、Ｃ３アルキル（プロピル及びイソプロピル）、及びＣ４アルキル（ブチル、１−メチルプロピル、２−メチルプロピル、及びｔ−ブチル）を含む。
【００２４】
特に示さない限り、基の結合原子は基の任意の適切な原子であってもよく；例えば、プロピルはプロパ−１−イル及びプロパ−２−イルを含む。
アルキル−本明細書で用いられる場合、「アルキル」という用語は、特定数の炭素原子を有する直鎖及び分岐鎖の飽和炭化水素基を意味する。「プロピル」等の個々のアルキル基への言及は直鎖バージョンのみに特異的であり、「イソプロピル」等の個々の分岐鎖アルキル基への言及は分岐鎖バージョンのみに特異的である。一態様では、「Ｃ１−６アルキル」はメチルであってもよい。
【００２５】
シクロアルキル−本明細書で用いられる場合、「シクロアルキル」という用語は、３〜１２個の環原子を含む、１個以上の−ＣＨ２−基が相当数の−Ｃ（Ｏ）−基で置換されていてもよい飽和、部分的飽和、又は不飽和の、単環式又は二環式炭素環を意味する。「シクロアルキル」の具体例としては、アダマンチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、インダニル、ナフチル、オキソシクロペンチル、１−オキソインダニル、フェニル、及びテトラリニルが挙げられるが、これらに限定されない。
３〜６−員のシクロアルキル
一態様では、「シクロアルキル」は「３〜６員のシクロアルキル」であってもよい。本明細書で用いられる場合、「３〜６員のシクロアルキル」という用語は、３〜６個の環原子を含む、−ＣＨ２−基が相当数の−Ｃ（Ｏ）−基で置換されていてもよい飽和、部分的飽和、又は不飽和の単環式炭素環を意味する。「３〜６員のシクロアルキル」の具体例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、オキソシクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、及びフェニルが挙げられる。
【００２６】
ハロ−本明細書で用いられる場合、「ハロ」という用語は、フルオロ、クロロ、ブロモ及びヨードを含む、一態様では、「ハロ」という用語は、フルオロ、クロロ及びブロモを意味する場合がある。他の態様では、「ハロ」という用語は、フルオロ及びクロロを意味する場合がある。他の態様では、「ハロ」という用語はフルオロを意味する場合がある。
【００２７】
有効量−本明細書で用いられる場合、「有効量」という表現は、症状、及び／又は治療すべき病状を有意かつポジティブに緩和する（例えば、ポジティブな臨床反応）のに十分な化合物又は組成物の量を意味する。医薬組成物に使用するための活性成分の有効量は、治療される特定の病状、病状の重症度、治療期間、併用療法の性質、使用される特定の活性成分、利用される特定の薬学的に許容される賦形剤／担体、投与経路、及び／又は  主治医の知識及び専門的意見の範囲内の因子によって変化するであろう。
【００２８】
薬学的に許容される−本明細書で用いられる場合、「薬学的に許容される」という用語は、妥当なベネフィット／リスク比に見合った、過剰毒性、刺激、アレルギー反応、又は他の問題若しくは合併症を有しない、ヒト及び動物の組織と接触して使用するのに好適な、適切な医療判断の範囲内の化合物、材料、組成物、及び／又は剤形を意味する。
【００２９】
本発明は、本発明の化合物の、薬学的に許容される塩、錯体、水和物、溶媒和物、又は多形体、互変異性体、幾何異性体、光学活性体、及び薬剤的に活性のある誘導体も包含する。そうでないと明確に記載されていない限り、本発明は、このような可能性のある全てのジアステレオマー、並びにそれらのラセミ混合物、実質的に純粋な分割されたエナンチオマー、すべての可能性のある幾何異性体、及び、これらの薬学的に許容可能な塩を含む。立体異性体の混合物、並びに単離された特定の立体異性体もまた含まれる。このような化合物の調製に用いられる合成手法の過程において、又は当業者に公知であるラセミ化又はエピマー化手法の使用において、このような手法の生成物は立体異性体の混合物である可能性がある。
【００３０】
「マラリア」という用語は、マラリア原虫による感染と関連する疾患及び病状を含む。
【００３１】
本明細書で用いられる場合、「治療」及び「治療すること」等の用語は、一般的に、望ましい薬理学的効果及び生理学的効果を得ることを意味する。この効果は、疾患、その症状又は病状を予防又は部分的に予防するという観点で予防的なものであってもよく、及び／又は疾患、病状、症状若しくはその疾患に伴う有害な影響を部分的又は完全に治癒するという観点で治療的なものであってもよい。本明細書で用いられる場合、「治療」という用語は、哺乳動物（特にヒト）の疾患の任意の治療を包含し、（ａ）その疾患にかかりやすいと診断される可能性があるが、まだかかっていると診断されていない被検体がその疾患を発症することを予防すること、（ｂ）その疾患を抑制すること（即ち、進行を止めること）、又はその疾患を緩和すること（即ち、その疾患及び／又はその症状若しくは病状を退行させること）を含む。  
【００３２】
「有効量」という用語は、「予防に有効な量」及び「治療に有効な量」を含む。
【００３３】
「予防に有効な量」という用語は、感染前（即ちマラリア寄生虫への暴露期間の前、最中、及び／又は直後）に投与するとき、マラリア寄生虫による疾患の可能性を抑制、減少させ、又はマラリア感染を予防し、又はマラリア寄生虫による疾患が遅れて発症するのを予防するのに有効な本発明の化合物の濃度を意味する。
【００３４】
「予防」という用語は、原因的予防（即ち、寄生虫の前赤内期の成長を予防することを含む抗マラリア活性）、抑制的予防（即ち、赤血球期での感染の進行を抑制することを含む抗マラリア活性）、最終的予防（即ち、肝臓内期での感染の進行を抑制することを含む抗マラリア活性）を含む。この用語は、マラリア寄生虫への暴露期間の前、最中及び／又は後に抗マラリア化合物を投与する一次予防（即ち、初期感染を予防すること）、マラリア寄生虫への暴露期間の終期及び／又は直後であるが、臨床的な症状が出る前に、抗マラリア化合物を投与する最終的予防（即ち、マラリアの臨床的症状の再発又は遅い発症を予防すること）を含む。通常、熱帯熱マラリア原虫感染には抑制的予防が用いられるが、三日熱マラリア原虫、又は熱帯熱マラリア原虫と三日熱マラリア原虫との組み合わせには、最終的予防が用いられる。  
【００３５】
同様に、「治療に有効な量」という用語は、マラリア感染を治療するのに有効な（例えば、感染が起こった後に投与した場合には、顕微鏡試験によって血中の寄生虫数を減少させる）化合物の濃度を意味する。
【００３６】
本明細書で用いられる場合、「被検体」という用語は哺乳動物を意味する。例えば、本発明で想定している哺乳動物としては、ヒト等が挙げられる。本明細書で考察する化合物は命名され、及び／又はＡＣＤ／Ｌａｂｓ（登録商標）によるＡＣＤ／Ｎａｍｅ、及び／又はＣａｍｂｒｉｄｇｅＳｏｆｔ（登録商標）によるＥｌｅｃｔｒｏｎｉｃ  Ｌａｂ  Ｎｏｔｅｂｏｏｋを用いて確認した。
【００３７】
式（Ｉ）の化合物は、適切に薬学的に許容される酸性塩又は塩基塩を形成することができ、このような場合、塩としての化合物の投与が適切である。酸付加塩の例としては、酢酸塩、アジピン酸塩、アスコルビン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重炭酸塩、硫酸水素塩、酪酸塩、ショウノウ酸塩、カンファースルホン酸塩、コリン、クエン酸塩、シクロヘキシルスルファミン酸塩、ジエチレンジアミン、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルタミン酸塩、グリコール酸塩、半硫酸塩、２−ヒドロキシエチルスルホン酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、ヒドロキシマレイン酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、メグルミン、２−ナフタレンスルホン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、過硫酸塩、フェニル酢酸塩、リン酸塩、二リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、キナ酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、スルファミン酸塩、スルファニル酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、トシレート（ｐ−トルエンスルホン酸塩）、トリフルオロ酢酸塩、及びウンデカン酸塩が挙げられる。塩基塩の例としては、アンモニウム塩；アルカリ金属塩、例えばナトリウム、リチウム及びカリウム塩；アルカリ土類金属塩、例えばアルミニウム、カルシウム及びマグネシウム塩；有機塩基との塩、例えばジシクロヘキシルアミン塩、及びＮ−メチル−Ｄ−グルカミン；及びアミノ酸、例えばアルギニン、リジン、オルニチン等との塩等が挙げられる。また、塩基性窒素含有基は、メチル、エチル、プロピル及びブチルハロゲン化物等の低級アルキルハロゲン化物；ジメチル、ジエチル、ジブチル等のジアルキル硫酸塩；ジアミル硫酸塩；デシル、ラウリル、ミリスチル及びステアリルハロゲン化物等の長鎖ハロゲン化物；ベンジル臭化物等のアリールアルキルハロゲン化物によって第四級化されていてもよい。例えば、生成物の単離又は生成には、無毒性の生理学的に許容される塩が好ましいが、他の塩も有用である。
【００３８】
塩は、遊離塩基形態の生成物を、塩が不溶性である溶媒若しくは媒体中で、又は真空下で、若しくは凍結乾燥によって除去される水のような溶媒中で、１当量以上の適切な酸と反応させるか、あるいは既存の塩のアニオンを、好適なイオン交換樹脂における別のアニオンと交換すること等による従来の手段によって形成され得る。
【００３９】
式（Ｉ）の化合物は、１個以上のキラル中心及び／又は幾何異性中心を有しており、本発明は、このような全ての光学異性体、ジアステレオマー及び幾何異性体を包含すると理解される。本発明は、更に式（Ｉ）の化合物のあらゆる互変異性型に関する。
【００４０】
式（Ｉ）の特定の化合物は、溶媒和されていない形態ばかりでなく、溶媒和された形態、例えば水和形態で存在し得ることも理解される。本発明は、このような全ての溶媒和形態を包含することが理解される。
本発明の追加の実施態様は以下の通りである。これらの追加の実施態様は、式（Ｉ）の化合物及びその薬学的に許容される塩に関する。このような特定の置換基は、本明細書の上記又は下記で明確化される定義、請求項又は実施態様のいずれでも適宜、使用することができる。
【００４１】
特定の態様によれば、以下の群から選択される本発明の化合物が提供される。
他の態様では、本発明は、以下から選択される化合物、並びにその薬学的に許容される塩、錯体、水和物、溶媒和物、互変異性体、多形体、ラセミ混合物、光学活性体及び薬学的に活性な誘導体を提供する：
Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−５−（４−メチルピペラジン−１−イル）−Ｎ４−（１−メチルトリアゾール−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン；
Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−Ｎ４−（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミン；
Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−Ｎ４−（１−エチル−５−メチル−ピラゾール−３−イル）−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミン；
Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］−Ｎ４−（１−メチルトリアゾール−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン；
Ｎ２−（５−クロロ−４−シクロプロピル−６−メチル−２−ピリジル）−Ｎ４−（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミン；
４−シクロプロピル−６−［［４−［（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）アミノ］−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］ピリミジン−２−イル］アミノ］−２−メチル−ピリジン−３−カルボニトリル；
Ｎ４−（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）−Ｎ２−（４−エチル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミン；
Ｎ４−（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）−Ｎ２−（４−エチル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−５−［（３Ｓ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミン；
Ｎ２−（４−シクロブチル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−Ｎ４−（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミン；
Ｎ２−（５−クロロ−４−シクロプロピル−６−メチル−２−ピリジル）−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］−Ｎ４−（２−メチルトリアゾール−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン；
Ｎ２−（５−クロロ−４−シクロプロピル−６−メチル−２−ピリジル）−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］−Ｎ４−（１−メチルトリアゾール−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン；
Ｎ２−（５−クロロ−４−シクロプロピル−６−メチル−２−ピリジル）−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］−Ｎ４−（２−メチルトリアゾール−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン；
Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−５−［３，４−ジメチルピペラジン−１−イル］−Ｎ４−（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン；
Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−５−［３，４−ジメチルピペラジン−１−イル］−Ｎ４−（１−メチルトリアゾール−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン；及び
Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−５−［３，４−ジメチルピペラジン−１−イル］−Ｎ４−（２−メチルトリアゾール−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン。
【００４２】
特定の態様によれば、本発明の化合物はＲエナンチオマーとして提供される。
【００４３】
特定の態様によれば、本発明の化合物は、Ｓエナンチオマーとして、又はラセミ混合物として提供される。
【００４４】
他の態様では、本発明は、以下から選択される化合物、並びにその薬学的に許容される塩、錯体、水和物、溶媒和物、互変異性体、多形体、ラセミ混合物、光学活性体及び薬学的に活性な誘導体を提供する。
例１：Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−５−（４−メチルピペラジン−１−イル）−Ｎ４−（１−メチルトリアゾール−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン；
例２：Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−Ｎ４−（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）−５−［（３Ｒ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミン；
例３：Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−Ｎ４−（１−エチル−５−メチル−ピラゾール−３−イル）−５−［（３Ｒ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミン；
例４：Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−５−［（３Ｒ）−３−メチルピペラジン−１−イル］−Ｎ４−（１−メチルトリアゾール−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン；
例５：Ｎ２−（５−クロロ−４−シクロプロピル−６−メチル−２−ピリジル）−Ｎ４−（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）−５−［（３Ｒ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミン；
例６：４−シクロプロピル−６−［［４−［（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）アミノ］−５−［（３Ｒ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリミジン−２−イル］アミノ］−２−メチル−ピリジン−３−カルボニトリル；
例７：Ｎ４−（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）−Ｎ２−（４−エチル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−５−［（３Ｒ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミン；
例８：Ｎ４−（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）−Ｎ２−（４−エチル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−５−［（３Ｓ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミン；
例９：Ｎ２−（４−シクロブチル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−Ｎ４−（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）−５−［（３Ｒ）−３−メチルピペラジン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミン；
例１０：Ｎ２−（５−クロロ−４−シクロプロピル−６−メチル−２−ピリジル）−５−［（３Ｒ）−３−メチルピペラジン−１−イル］−Ｎ４−（２−メチルトリアゾール−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン；
例１１：Ｎ２−（５−クロロ−４−シクロプロピル−６−メチル−２−ピリジル）−５−［（３Ｒ）−３−メチルピペラジン−１−イル］−Ｎ４−（１−メチルトリアゾール−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン；
例１２：Ｎ２−（５−クロロ−４−シクロプロピル−６−メチル−２−ピリジル）−５−［（３Ｒ）−３−メチルピペラジン−１−イル］−Ｎ４−（２−メチルトリアゾール−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン；
例１３：Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−５−［（３Ｒ）−３，４−ジメチルピペラジン−１−イル］−Ｎ４−（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン；
例１４：Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−５−［（３Ｒ）−３，４−ジメチルピペラジン−１−イル］−Ｎ４−（１−メチルトリアゾール−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン；及び
例１５：Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−５−［（３Ｒ）−３，４−ジメチルピペラジン−１−イル］−Ｎ４−（２−メチルトリアゾール−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン。
【００４５】
更なる特定の実施態様によれば、本発明は、Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−５−［３，４−ジメチルピペラジン−１−イル］−Ｎ４−（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン、及びその活性代謝物、Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−Ｎ４−（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミンから選択される化合物を提供する。
【００４６】
他の更なる特定の実施態様によれば、本発明は、化合物Ｎ４−（１，５−ジメチルピラゾール−３−イル）−Ｎ２−（４−エチル−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジル）−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミンを提供する。
【００４７】
他の更なる特定の実施態様によれば、本発明は、化合物Ｎ２−（５−クロロ−４−シクロプロピル−６−メチル−２−ピリジル）−５−［３−メチルピペラジン−１−イル］−Ｎ４−（２−メチルトリアゾール−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミンを提供する。
【００４８】
従って、一態様では、式（Ｉ）の化合物、又は医薬として使用するためのその薬学的に許容される塩が提供される。
従って、本発明の化合物は、医薬の製造、特に寄生虫の増殖を阻害するための医薬の製造に使用することができる。
従って、他の態様によれば、本発明の主題は、薬学的に許容される酸又は塩基とともに、式（Ｉ）の化合物、又は式（Ｉ）の化合物の付加塩を含有する医薬である。
【００４９】
上記医薬は、治療、特に全てのマラリア原虫、例えば熱帯熱マラリア原虫、三日熱マラリア原虫、四日熱マラリア原虫、卵形マラリア原虫及び二日熱マラリア原虫に起因するマラリアの治療における用途を見出した。
【００５０】
従って、一態様では、温血動物、例えばヒトにおけるマラリア原虫に起因する寄生虫感染症の治療のための医薬の製造における、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩の使用が提供される。
【００５１】
他の態様では、温血動物、例えばヒトにおいて抗マラリア作用を示すための医薬の製造における、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩の使用が提供される。
【００５２】
他の態様では、温血動物、例えばヒトにおけるマラリア原虫に起因する寄生虫感染症の治療法であって、式（Ｉ）の化合物、又はその薬学的に許容される塩の有効量を前記動物に投与することを含む方法が提供される。
【００５３】
他の態様では、温血動物、例えばヒトにおいて抗マラリア作用を示す方法であって、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩の有効量を、前記動物に投与することを含む方法が提供される。
【００５４】
他の態様では、温血動物、例えばヒトにおいて、マラリアの治療及び／又は予防に使用するための式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩が提供される。
【００５５】
ヒトを含むほ乳動物の治療的及び予防的処置、特にマラリア原虫に起因するマラリアの治療のための式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩は、通常、医薬組成物として、標準的な薬務に従って製剤化される。
【００５６】
従って、一態様では、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩と、少なくとも１種の薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤とを含有する医薬組成物が提供される。
【００５７】
他の態様では、温血動物、例えばヒトにおけるマラリア原虫に起因する寄生虫感染症の治療のための医薬の製造における式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩を含有する医薬組成物の使用が提供される。
【００５８】
他の態様では、温血動物、例えばヒトにおいて抗マラリア作用を示す医薬の製造における、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩を含有する医薬組成物の使用が提供される。
【００５９】
他の態様では、温血動物、例えばヒトにおいてマラリア原虫に起因するマラリアを治療する方法であって、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩を含有する医薬組成物の有効量を前記動物に投与することを含む方法が提供される。
【００６０】
他の態様では、温血動物、例えばヒトにおいて抗マラリア作用を示す方法であって、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩を含有する医薬組成物の有効量を前記動物に投与することを含む方法が提供される。
【００６１】
他の態様では、温血動物、例えばヒトにおいてマラリア原虫に起因するマラリアを治療するのに使用する、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩を含有する医薬組成物が提供される。
【００６２】
他の態様では、温血動物、例えばヒトにおいて抗マラリア作用を示すのに使用する、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩を含有する医薬組成物が提供される。
【００６３】
医薬組成物
ある態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される希釈剤又は担体とを含有する医薬組成物を提供する。
【００６４】
「薬学的に許容される」という用語は、妥当なベネフィット／リスク比に見合った、過剰毒性、刺激、アレルギー反応、又は他の問題若しくは合併症を有しない、ヒト及び動物の組織と接触して使用するのに好適な、適切な医療判断の範囲内の化合物、材料、組成物、及び／又は剤形を含む。
【００６５】
式（Ｉ）の化合物は、安定な薬学的に許容される酸性塩又は塩基塩を形成することができ、このような場合、塩としての化合物の投与が適切である。
【００６６】
酸付加塩の例としては、酢酸塩、アジピン酸塩、アスコルビン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重炭酸塩、硫酸水素塩、酪酸塩、ショウノウ酸塩、カンファースルホン酸塩、コリン、クエン酸塩、シクロヘキシルスルファミン酸塩、ジエチレンジアミン、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルタミン酸塩、グリコール酸塩、半硫酸塩、２−ヒドロキシエチルスルホン酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、ヒドロキシマレイン酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、メグルミン、２−ナフタレンスルホン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、過硫酸塩、フェニル酢酸塩、リン酸塩、二リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、キナ酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、スルファミン酸塩、スルファニル酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、トシレート（ｐ−トルエンスルホン酸塩）、トリフルオロ酢酸塩、ウンデカン酸塩が挙げられる。塩基塩の例としては、アンモニウム塩；アルカリ金属塩、例えばナトリウム、リチウム及びカリウム塩；アルカリ土類金属塩、例えばアルミニウム、カルシウム及びマグネシウム塩；有機塩基との塩、例えばジシクロヘキシルアミン塩、及びＮ−メチル−Ｄ−グルカミン；及びアミノ酸、例えばアルギニン、リジン、オルニチン等との塩等が挙げられる。また、塩基性窒素含有基は、メチル、エチル、プロピル及びブチルハロゲン化物等の低級アルキルハロゲン化物；ジメチル、ジエチル、ジブチル等のジアルキル硫酸塩；ジアミル硫酸塩；デシル、ラウリル、ミリスチル及びステアリルハロゲン化物等の長鎖ハロゲン化物；ベンジル臭化物等のアリールアルキルハロゲン化物によって第四級化されていてもよい。例えば、生成物の単離又は生成には、無毒性の生理学的に許容される塩が好ましいが、他の塩も有用である。
【００６７】
塩は、遊離塩基形態の生成物を、塩が不溶性である溶媒若しくは媒体中で、又は真空下で、若しくは凍結乾燥によって除去される水のような溶媒中で、１当量以上の適切な酸と反応させるか、あるいは既存の塩のアニオンを、好適なイオン交換樹脂における別のアニオンと交換すること等による従来の手段によって形成され得る。
【００６８】
本発明の組成物は、経口使用に（例えば錠剤、ロゼンジ剤、硬カプセル剤若しくは軟カプセル剤、水性若しくは油性懸濁剤、乳剤、分散性の散剤若しくは顆粒剤、シロップ剤又はエリキシル剤として）、局所使用に（例えばクリーム剤、軟膏剤、ゲル剤、又は水性若しくは油性液剤若しくは懸濁剤として）、吸入による投与に（例えば微粉化散剤又は液体エアゾール剤として）、注入による投与に（例えば微粉化散剤として）、又は非経口投与に（例えば静脈内、皮下、若しくは筋肉内投薬用の滅菌水性若しくは油性液剤として、又は経直腸投薬用の坐剤として）適切な形態であってよい。
【００６９】
本発明の組成物は、当該当技術分野において周知の、従来の医薬添加剤を使用する従来の手順によって取得することができる。従って、経口使用が意図されている組成物は、例えば、１つ又は複数の着色剤、甘味剤、香味剤及び／又は保存剤を含有し得る。
【００７０】
錠剤製剤のための適切な薬学的に許容される賦形剤としては、例えば、不活性希釈剤（例えば、ラクトース、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム又は炭酸カルシウム）、顆粒化剤及び崩壊剤（例えば、コーンスターチ又はアルギン酸、ジャガイモでん粉又はデンプングリコール酸ナトリウム）；結合剤（例えば、デンプン）；滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸又はタルク、ポリエチレングリコール、及びシリカ）；保存剤（例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル又はｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル）、及び抗酸化剤（例えば、アスコルビン酸）が挙げられる。錠剤製剤は、それらの崩壊及び胃腸内での活性成分のその後の吸収を改変するために、又は万一に備えて、従来のコーティング剤及び当該技術分野で周知の手順を使用し、それらの安定性及び／又は外見を改善するために、コーティングされていなくてもコーティングされていてもいずれでもよい。
【００７１】
例えば、経口投与用の錠剤及びカプセルは、限定されないが、フィラー、崩壊剤及び湿潤剤のような従来の賦形剤を更に含有していてもよい。フィラーとしては、ラクトース、糖、微結晶性セルロース、トウモロコシデンプン、リン酸カルシウム、及びソルビトールが挙げられるが、これらに限定されない。
【００７２】
結合剤としては、シロップ、アカシア、ゼラチン、ソルビトール、トラガカント、デンプン粘液及びポリビニルピロリドンが挙げられるが、これらに限定されない。
【００７３】
錠剤は、当該技術分野で周知の方法によりコーティングすることができる。例えば、経口投与用の錠剤及びカプセルは、限定されないが、結合剤、フィラー、滑沢剤、崩壊剤及び湿潤剤を含む従来の賦形剤を含有していてもよい。
【００７４】
経口使用のための組成物は、上記活性成分が、不活性固体希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム又はカオリンと混合される硬質ゼラチンカプセル剤の形態であってもよく、又は上記活性成分が水又は油、例えば、ラッカセイ油、流動パラフィン若しくはオリーブ油と混合される軟質ゼラチンカプセルであってもよい。
【００７５】
水性懸濁物は、一般に、１種以上の懸濁剤（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニル−ピロリドン、トラガカントガム及びアカシアガム）；分散剤若しくは湿潤剤（例えば、レシチン若しくはアルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンステアレート））、又はエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物（例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール）、又はエチレンオキシドと脂肪族アルコールとの縮合物、例えばヘプタデカエチルオキシセタノール、又はエチレンオキシドと、脂肪酸及びヘキシトールとの部分エステルとの縮合生成物（例えばポリオキシエチレンソルビトールモノオレエート）、又はエチレンオキシドと脂肪酸及びヘキシトール無水物から得られる部分エステルとの縮合生成物（例えば、ポリエチレンソルビタンモノオレエート）と一緒に、微細に粉末化された形態、又はナノ若しくは微粉化粒子の形態で上記活性成分を含む。上記水性懸濁物はまた、１種以上の保存剤（例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル若しくはｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル）、抗酸化剤（例えば、アスコルビン酸）、着色剤、矯味矯臭剤、及び／又は甘味剤（例えば、スクロース、サッカリン若しくはアスパルテーム）を含んでいてもよい。
【００７６】
油性懸濁物は、上記活性成分を、植物性油、例えば、ラッカセイ油、オリーブ油、胡麻油若しくは椰子油、又は鉱油、例えば、流動パラフィン中に懸濁することによって製剤化することができる。上記油性懸濁物はまた、濃化剤、例えば、蜜蝋、固形パラフィン若しくはセチルアルコールを含んでいてもよい。甘味剤、例えば、上記に示されるもの、及び矯味矯臭剤は、口に合う経口調製物を提供するために添加することができる。上記組成物は、アスコルビン酸のような抗酸化剤の添加によって、保護され得る。
【００７７】
水の添加による水性懸濁物の調製に適している分散性の散剤及び顆粒剤は、一般に、分散剤又は湿潤剤、懸濁剤、及び１種以上の保存剤と一緒に、活性成分を含む。適切な分散剤又は湿潤剤及び懸濁剤は、前記で言及されたものによって例示される。更なる賦形剤、例えば、甘味剤、矯味矯臭剤及び着色剤もまた、存在し得る。
【００７８】
本発明の医薬組成物はまた、水中油型エマルジョンの形態であってもよい。その油相は、植物性油（例えば、オリーブ油又はラッカセイ油）、又は鉱油（例えば、流動パラフィン）、又はこれらのうちのいずれかの混合物であってもよい。適切な乳化剤は、例えば、天然に存在するガム（例えば、アカシアガム又はトラガカントガム）、天然に存在するホスファチド（例えば、ダイズ、レシチン、脂肪酸とヘキシトール無水物とから得られるエステル又は部分エステル（例えば、ソルビタンモノオレエート）及び上記部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート）であってもよい。上記エマルジョンはまた、甘味剤、矯味矯臭剤及び保存剤を含んでいてもよい。
【００７９】
シロップ剤及びエリキシル剤は、甘味剤、例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ソルビトール、アスパルテーム又はスクロースとともに処方される場合があり、粘滑剤、保存剤、矯味矯臭剤及び／又は着色剤を含んでいてもよい。
【００８０】
上記薬学的組成物はまた、無菌の注射用水性懸濁物又は油性懸濁物の形態であってもよく、これらは、適切な分散剤又は湿潤剤及び懸濁剤（これらは、上記で言及されている）のうちの１種以上を用いて、公知の手順に従って処方することができる。無菌の注射用調製物はまた、非毒性の非経口的に受容可能な希釈剤又は溶媒中の、無菌の注射用溶液又は懸濁物（例えば、１，３−ブタンジオール中の溶液）であってもよい。
【００８１】
吸入による投与のための組成物は、上記活性成分を、微細に分割した固体を含むエアロゾル又は液滴のいずれかとして分散させるように配置された従来の加圧エアロゾルの形態であってもよい。従来のエアロゾルプロペラント（例えば、揮発性フッ素化炭化水素又は炭化水素）を使用することができ、上記エアロゾルデバイスは、活性成分の計量された量を分与するように都合良く配置されている。
【００８２】
投与のための組成物はリポソーム製剤として製剤化してもよい。リポソーム製剤は、興味のある細胞又は角質層に浸透し、細胞膜と融合し、リポソームの内容物を細胞に送達するリポソームを含み得る。他の適切な製剤はニオソームを使用し得る。ニオソームは、大部分が非イオン製脂質からなり、その一部の形態が角質層を通して化合物を輸送するのに有効なリポシームに類似する脂質小胞である。
【００８３】
投与のための組成物は、移植又は筋肉内注射として投与することのできるデポ製剤として製剤化してもよい。組成物は、適切な高分子材料又は疎水性材料（許容される油中のエマルションとして）、イオン交換樹脂、又は難溶性誘導体とともに製剤化することができる。
本発明の化合物は、徐放性製剤中で、又は徐放性薬物送達システムから投与することもできる。
【００８４】
製剤に関する更なる情報、薬物送達、並びに加工技術については、読者は、本明細書に参照として組み入れられる、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  （第２１版，２００５，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ  ｏｒ  ｉｎ  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  （Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ＆  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ），第２２版，２０１２，Ｌｌｏｙｄ，Ｅｄ．Ａｌｌｅｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓを参照すべきである。
【００８５】
単一剤形を製造するために１種又は複数の賦形剤と組み合わされる活性成分の量は、被治療者及び具体的な投与経路によって必然的に異なる。例えば、ヒトに経口投与するための製剤は、例えば、組成物全体の約５〜約９８重量％の間で異なり得る適切かつ使いやすい量の賦形剤と組み合された、０．５ｍｇ〜４ｇの活性成分を通常含有する。投与単位剤形は、約１ｍｇ〜約５００ｍｇの活性成分を通常含有する。投与経路及び投与法に関する更なる情報については、Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  （Ｃｏｒｗｉｎ  Ｈａｎｓｃｈ；Ｃｈａｉｒｍａｎ  ｏｆ  Ｅｄｉｔｏｒｉａｌ  Ｂｏａｒｄ），Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ  １９９０の第５巻、２５．３章、及びＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（上述）を参照されたい。
【００８６】
上述したように、特定の疾病状態の治療的又は予防的治療のために必要な投与量の大きさは、治療される宿主、投与の経路及び治療される病気の重篤度によって必然的に変化する。好ましくは１〜２５ｍｇ／ｋｇの範囲の日量を使用する。従って、最適投与量は、いずれもの特定の患者を治療する医師によって決定され得る。
【００８７】
医薬組成物、工程、方法、使用、医薬及び製造のいずれにおいても、本明細書において特徴付けられ、本発明の化合物の他のあらゆる態様も本明細書に記載される。
【００８８】
投与経路
本発明の組成物は、限定されないが、経口、非経口、舌下、経皮、経膣、経直腸、経粘膜、局所的、吸入によって、口腔もしくは経鼻投与によって、又はこれらの組み合わせを含む任意の方法で投与することができる。本発明の組成物は、インプラントの形態で投与してもよく、これにより、組成物をゆっくりと放出させることができ、さらに、ゆっくりと制御された静脈輸液を行うことができる。好ましい実施態様では、本発明のトリアミノピリミジン誘導体は、経口投与される。
【００８９】
特定の実施態様では、本発明の化合物は、約１ｍｇ〜１，５００ｍｇ、例えば約２００〜７００ｍｇの投与量でヒトに投与される。更に特定の実施態様では、本発明の化合物は、６００ｍｇ未満（例えば約２６０ｍｇ〜約５２０ｍｇ）の投与量で投与される。
【００９０】
本発明を以下の実施例によってさらに説明するが、決して本発明の範囲を限定することを意図したものではない。
【００９１】
単回投薬又は複数回投薬として個人に投与される投薬量は、薬物動態特性、患者の病状及び特徴（性別、年齢、体重、健康状態、身長）、症状の程度、現在行っている治療、治療頻度、及び望ましい効果等の因子に基づいて変化するであろう。
【００９２】
併用
本明細書に記載の本発明の化合物は、単独療法として適用してもよく、本発明の化合物に加え、１種以上の他の薬剤及び／又は治療法を含んでもよい。このような共療法は、個々の治療成分の同時、連続的又は別個の投与によって達成することができる。投与が連続的又は別個である場合、併用の有益な効果を失うような第２成分の投与の遅れがあってはならない。
【００９３】
本発明の特定の実施態様によれば、本発明の化合物及びその医薬製剤は、マラリアの治療に有用な補助剤と併用して投与することができる。適切なクラス及び薬剤としては、マラリアの治療及び予防に有用な１種以上の抗マラリア剤、例えば、アルテミシニン又はアルテミシニン誘導体（例えばアルテメテル又はジヒドロアルテミシニン）、クロロキン、メフロキン、キニン、アトバコン／プログアニル、ドキシサイクリン、ヒドロキシクロロキン、ハロファントリン、ピロナリジン、ルメファントリン、ピリメタミン−スルファドキシン及びピペラキンが挙げられる。
【００９４】
また、アモジアキン、アトバコン、プログアニル塩酸塩、スピロ［３Ｈ−インドール−３，１’−［１Ｈ］ピリド［３，４−ｂ］インドール］−２（１Ｈ）−オン（ＣＡＳ登録番号：１１９３３１４−２３−６），５，７’−ジクロロ−６’−フルオロ−２’，３’，４’，９’−テトラヒドロ−３’−メチル−，（１’Ｒ，３’Ｓ）−］、イオウ、［４−［［２−（１，１−ジフルオロエチル）−５−メチル［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イル］アミノ］フェニル］ペンタフルオロ−］（ＣＡＳ登録番号：１２８２０４１−９４−４）、モルホリン、及び４−［２−（４−シス−ジスピロ［シクロヘキサン−１，３’−［１，２，４］トリオキソラン−５’，２’’−トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン］−４−イルフェノキシ）エチル］−］  （ＣＡＳ登録番号：１０２９９３９−８６−３）が挙げられる。
【００９５】
本発明との関連で有用な、更なる補助剤は、キナクリン、プリマキン、タフェナキン、ドキシサイクリン、フェロキン、及びアルテロランから選択される。
本発明は、本発明の化合物又はその医薬製剤が、マラリアの治療に有用な他の治療計画又は補助剤の前、同時又は連続的に有効量で個体に投与される、本発明による、本発明の少なくとも１種の化合物、又は医薬製剤の投与を包含する。前記補助剤と同時に投与される、本発明の化合物又はその医薬製剤は、同一か異なる組成物において、同一か異なる投与経路により、投与することができる。
【００９６】
患者
一実施態様では、本発明における患者はマラリアを患っている患者である。他の実施態様では、本発明における患者は、マラリア原虫に感染するリスクが高い患者である。他の実施態様では、本発明における患者は熱帯熱マラリアに感染するリスクが高い患者である。他の実施態様では、本発明における患者は三日熱マラリアに感染するリスクが高い患者である。
【００９７】
本発明における使用
一実施態様では、本発明は、マラリアの治療又は予防のための医薬組成物の製造のための、本明細書に記載の式（Ｉ）の化合物、並びにその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、多形体、互変異性体、幾何異性体、光学活性体、又は薬学的に許容される塩の使用を提供する。
【００９８】
他の実施態様では、本発明は、患者におけるマラリアの予防又は治療方法を提供する。該方法は、予防又は治療を必要とする患者に、本発明の化合物、その薬学的に許容される塩若しくは薬学的に活性な誘導体、又はその医薬製剤の有効量を投与することを含む。
【００９９】
他の実施態様では、本発明は、マラリアの治療又は予防に使用するための、本発明の化合物、並びにその薬学的に許容される塩若しくは薬学的に活性な誘導体、又は医薬製剤を提供する。
【０１００】
他の実施態様では、本発明は、本発明の化合物の使用、又は本発明の化合物がマラリアの治療に有用な補助剤を併用して投与される本発明の方法を提供する。
【０１０１】
他の実施態様では、本発明は、マラリアの治療に有用な補助剤を併用して本発明の化合物を含有する医薬組成物を提供する。
本発明の化合物及び組成物は、細胞を、少なくとも１種の本発明の化合物と接触させることを含む、細胞内で寄生虫感染症を不活性化するための方法において使用することができる。特定の実施様態によれば、例えばヒト細胞の赤血球のような霊長類細胞である。
【０１０２】
方法
他の実施態様では、本発明は、パラジウム触媒アミノ化条件下（例えば、触媒として９，９−ジメチル−４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）キサンテン及びトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウムを使用し）、以下のように式（ＩＶ）の誘導体を式（Ｖ）の誘導体と反応させ、式（Ｘ）の中間体へと導く工程を含む、式（Ｉ）の化合物の製造方法を提供する。
【０１０３】
【化７】
0006529983.tif 000008
【０１０４】
（式中、Ｒは保護基（例えば、Ｂｏｃ）である）。
【０１０５】
他の実施態様では、本発明は、酸性条件下（例えば、４Ｎ塩酸又はトリフルオロ酢酸を使用し）、式（Ｘ）の誘導体を反応させ、式（Ｉ）の化合物へと導く工程を含む、式（Ｉ）の化合物の製造方法を提供する。
【０１０６】
【化８】
0006529983.tif 000009
【０１０７】
（式中、Ｒは保護基（例えば、Ｂｏｃ）である）。
【０１０８】
更なる任意の工程において、式（Ｉ）の化合物（式中、Ｒ６＝Ｈ）は、還元的アミノ化条件下、更に式（Ｉ）の化合物（式中、Ｒ６＝アルキル）に変換される。
【０１０９】
他の実施態様では、本発明は、パラジウム触媒アミノ下条件下（例えば、触媒として、９，９−ジメチル−４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）キサンテン及びトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウムを使用し）、以下のように式（ＩＶ）の誘導体を式（Ｖ）の誘導体と反応させ、式（Ｘ）の中間体へと導く工程を含む、式（Ｉ）の化合物の製造方法を提供する：
【０１１０】
【化９】
0006529983.tif 000010
【０１１１】
（式中、ＲはＲ６であり、Ｒ６はアルキルである）。
【０１１２】
他の実施態様では、本発明は、式（ＩＶ）の中間体を提供する。
【０１１３】
【化１０】
0006529983.tif 000011
【０１１４】
（式中、Ｒ４、Ｒ５及びＨＡＲは明細書に定義された通りであり、Ｒは、保護基（例えば、Ｂｏｃである）及びＲ６から選択される。）
【０１１５】
他の実施態様では、前記本発明は、以下から選択される式（ＩＶ）の中間体を提供する。
ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−クロロ−４−（（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−クロロ−４−（（１−エチル−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−クロロ−４−（（２−メチル−２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−クロロ−４−（（１−メチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート；及び
２−クロロ−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）−５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−４−アミン。
【０１１６】
他の実施態様では、本発明は、式（Ｘ）の中間体を提供する。
【０１１７】
【化１１】
0006529983.tif 000012
【０１１８】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＨＡＲは明細書に定義された通りであり、Ｒは、保護基（例えば、Ｂｏｃ）である。）
【０１１９】
他の実施態様では、本発明は、以下の群から選択される式（Ｘ）の中間体を提供する。
ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）アミノ）−４−（（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）アミノ）−４−（（１−エチル−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−ｙｌ）アミノ）−４−（（１−メチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（（５−クロロ−４−シクロプロピル−６−メチルピリジン−２−イル）アミノ）−４−（（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（（５−シアノ−４−シクロプロピル−６−メチルピリジン−２−イル）アミノ）−４−（（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）−２−（（４−エチル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）−２−（（４−エチル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（（４−シクロブチル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）アミノ）−４−（（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（（５−クロロ−４−シクロプロピル−６−メチルピリジン−２−イル）アミノ）−４−（（２−メチル−２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（（５−クロロ−４−シクロプロピル−６−メチルピリジン−２−イル）アミノ）−４−（（１−メチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート；及び
ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（（３−シクロプロピル−４−フルオロ−５−メチルフェニル）アミノ）−４−（（２−メチル−２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート。
【０１２０】
商業的に入手可能でない場合、上述したもののような方法のために必要な出発物質は、標準的な有機化学の技術、既知の構造的に同様な化合物の合成と類似である技術、上記に与えた参考文献中に記載又は例示されている技術から選択される方法によって製造することができる。
【０１２１】
本明細書に記載されたような合成方法のための出発物質の多くは商業的に入手可能であり、及び／又は科学文献に広く報告されており、又は前記科学文献に報告されている方法を適応し、商業的に入手可能な化合物から製造することができる。読者は、反応条件及び試薬の一般的指導に関して、Ａｄｖａｎｃｅｄ    Ｏｒｇａｎｉｃ    Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，第５版，ｂｙ    Ｊｅｒｒｙ    Ｍａｒｃｈ    ａｎｄ    Ｍｉｃｈａｅｌ    Ｓｍｉｔｈ，ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ    ｂｙ    Ｊｏｈｎ    Ｗｉｌｅｙ    ＆    Ｓｏｎｓ    ２００１を更に参照されたい。
【０１２２】
本明細書中で記述した反応のいくつかにおいて、化合物中のいずれもの感受性の基を保護することが必要／好ましいことがあることも更に認識される。保護が必要であり、又は所望される場合は、このような保護のために適した方法のように、当業者にとって既知である。慣用的な保護基は、標準的な慣例（例示として、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ    Ｇｒｏｕｐｓ    ｉｎ    Ｏｒｇａｎｉｃ    Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ    Ｗｉｌｅｙ    ａｎｄ    Ｓｏｎｓ，１９９１を参照されたい）又は本明細書で上述したように使用することができる。
【０１２３】
実施例
本発明は、制約されるものではないが、以下の実施例によってここに例示され、これらにおいて、他に記述されない限り：
（ｉ）蒸発は、真空中で回転蒸発によって行われ、仕上げ処置は、残留固体のろ過による除去の後に行った；
（ｉｉ）温度は、℃として引用される；操作は、室温、即ち通常は１８〜２６℃の範囲で、また他に記述しない限り、又は当業者が不活性雰囲気下で行うものでない限り、空気を除去せずに行った；
（ｉｉｉ）化合物を精製するためにカラムクロマトグラフィー（フラッシュ法による）を使用し、他に記述しない限り、Ｍｅｒｃｋ  Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌシリカ（品番９３８５）を用いて行った；
（ｉｖ）一般的に、反応の経過は、ＴＬＣ、ＨＰＬＣ、又はＬＣ／ＭＳによって追跡され、反応時間は例示のためにのみ与えられる；収率は、例示のためにのみ与えられ、必ずしも得られる最大ではない；
（ｖ）本発明の最終生成物の構造は、一般的にＮＭＲ及び質量スペクトル技術によって確認した。プロトン磁気共鳴スペクトルは、一般的に他に記述されない限り、Ｂｒｕｋｅｒ  ＤＲＸ−３００分光計又はＢｒｕｋｅｒ  ＤＲＸ−４００分光計を使用し、それぞれ３００ＭＨｚ、又は４００ＭＨｚの磁場強度で操作して、ＤＭＳＯ−ｄ６によって測定した。ＮＭＲスペクトルが複雑である場合、診断的シグナルのみが報告されている。化学シフトは、外部標準としてのテトラメチルシランからのパーツパーミリオン低磁場で報告され（δスケール）、ピークの多重度は：ｓ、単一線；ｄ、二重線；ｄｄ、二重線の二重線；ｄｔ、三重線の二重線；ｄｍ、多重線の二重線；ｔ、三重線；ｍ、多重線；ｂｒ、幅広線のように示されている。高速原子衝撃（ＦＡＢ）質量スペクトルデータは、一般的にエレクトロスプレーで操作されるＰｌａｔｆｏｒｍ分光計（Ｍｉｃｒｏｍａｓｓによって供給）を用いて得、適宜に、陽イオンデータ又は陰イオンデータのいずれかを収集するか、又はＳｅｄｅｘ  ７５ＥＬＳＤを備えたＡｇｉｌｅｎｔ  １１００系のＬＣ／ＭＳを使用し、適宜に陽イオンデータ又は陰イオンデータのいずれかを収集した。同位体の分離が、多重の質量スペクトルピークをもたらす分子の場合、最低質量の主要イオンが報告されている（例えば塩素が存在する場合）。逆相ＨＰＬＣは、Ａｇｉｌｅｎｔ装置で、ＹＭＣ  Ｐａｃｋ  ＯＤＳ−ＡＱ（１００×２０ｍｍの内径、Ｓ−５μの粒子の大きさ、１２ｎｍの細孔の大きさ）を用いて行った；
（ｖｉ）それぞれの中間体は、その後の段階で要求される標準まで精製され、与えられた構造が正しいことを確認するために十分な詳細さで特徴付けされた；純度はＨＰＬＣ、ＴＬＣ、又はＮＭＲによって評価し、同一性は赤外分光法（ＩＲ）、質量分光法又はＮＭＲ分光法によって、適宜に決定し；
（ｖｉｉ）以下の略語を使用することができる：
ＡＣＮ-アセトニトリル；ＴＬＣ−薄層クロマトグラフィー；ＨＰＬＣ−高圧液体クロマトグラフィー；ＭＰＬＣ−中圧クロマトグラフィー；ＮＭＲ−核磁気共鳴分光法；ＤＭＡ  ジメチルアセトアミド−ＤＭＳＯ−ジメチルスルホキシド；ＣＤＣｌ３−重水素化クロロホルム；ＭｅＯＤ−重水素化メタノール、即ちＤ３ＣＯＤ；ＭＳ−質量分析法；ＥＳＰ（又はＥＳ）−エレクトロスプレー；ＨＢＳＳ-ハンクス液；ＥＩ−電子衝撃；ＡＰＣＩ−大気圧化学イオン化；ＴＨＦ−テトラヒドロフラン；ＤＣＭ−ジクロロメタン；ＨＰＭＣ−ヒドロキシプロピルメチルセルロース；ＭｅＯＨ−メタノール；ＤＭＦ−ジメチルホルムアミド；ＥｔＯＡｃ−酢酸エチル；ＬＣ／ＭＳ−液体クロマトグラフィー／質量分析法；ｈ−時間；ｍｉｎは分である；ｄ−日；ＭＴＢＤ−Ｎ−メチル−１，５，７−トリアザビシクロ［４．４．０］デカ−５−エン；ＮＡＤＰＨ-ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸−還元型；ＰＥＧ−ポリエチレングリコール；ＲＴ−室温；ＴＥＥＲ-経上皮電気抵抗；ＴＦＡ−トリフルオロ酢酸；ｖ／ｖ−容量／容量の比；Ｂｏｃはｔ−ブトキシカルボニルを表わす；Ｃｂｚはベンジルオキシカルボニルを表す；Ｂｚはベンゾイルを表す；ａｔｍは大気圧を表す；ｒｔは室温を表す；ｍｇはミリグラムを表す；μＬはマイクロリットルを表す；ｍＬはミリリットルを表す；Ｌはリットルを表す；μＭはマイクロモルを表す；ｍＭはミリモルを表す；Ｍはモルを表す；Ｎは規定濃度を表す；ｎｍはナノメートルを表す。
【０１２４】
本発明によれば、一般式（Ｉ）の化合物は以下の方法により製造することができる。中間体（ＩＩ−ｘｋ）及び一般式（Ｉ）の合成をスキーム１、２及び３に示す。
【０１２５】
合成スキーム１
【０１２６】
【化１２】
0006529983.tif 000013
【０１２７】
合成スキーム２
【０１２８】
【化１３】
0006529983.tif 000014
【０１２９】
合成スキーム３
【０１３０】
【化１４】
0006529983.tif 000015
【０１３１】
中間体ＩＩ
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（２，４−ジオキソ−１，２，３，４−テトラヒドロピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート
【０１３２】
【化１５】
0006529983.tif 000016
【０１３３】
Ｂｉｏｔａｇｅマイクロ波用バイアル中、５−ブロモピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（Ｉａ）（２４ｇ、１２５．６７ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ）及び（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート（３７．８ｇ、１８８．５０ｍｍｏｌ、Ａｃｔｉｖａｔｅ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）をピリジン（１２ｍＬ）中に調製し、１５０℃で９０分間マイクロ波照射した。減圧下、ピリジンを除去し、水中に注ぎ入れて懸濁液を得、これをろ過し、減圧乾燥し、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（２，４−ジオキソ−１，２，３，４−テトラヒドロピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレートの固体を得た（２２．００ｇ、５６．４％）。注：反応は、各２ｇの１２バッチで行った。全てを混合し、後処理を行った。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.19 (d, J=6.78 Hz, 3 H) 1.40 (s, 9 H) 2.30 (d, J=2.83 Hz, 1 H) 2.42 (dd, J=11.30, 3.58 Hz, 1 H) 2.93 - 3.22 (m, 3 H) 3.72 (d, J=13.19 Hz, 1 H) 4.12 (br. s., 1 H) 6.73 (d, J=4.71 Hz, 1 H) 10.51 (br. s., 1 H) 11.10 (s, 1 H) MS (ES+), C14H22N4O4について(M+H)+ = 310.09．
【０１３４】
中間体ＩＩａ
（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（２，４−ジオキソ−１，２，３，４−テトラヒドロピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート
【０１３５】
【化１６】
0006529983.tif 000017
【０１３６】
中間体ＩＩａは、中間体ＩＩに類似する方法を用い、５−ブロモピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（Ａｌｄｒｉｃｈ）及び（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート（Ａｃｔｉｖａｔｅ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）から製造した。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.19 (d, J=6.78 Hz, 3 H) 1.40 (s, 9 H) 2.30 (d, J=2.83 Hz, 1 H) 2.42 (dd, J=11.30, 3.58 Hz, 1 H) 2.93 - 3.22 (m, 3 H) 3.72 (d, J=13.19 Hz, 1 H) 4.12 (br. s., 1 H) 6.73 (d, J=4.71 Hz, 1 H) 10.51 (br. s., 1 H) 11.10 (s, 1 H) MS (ES+), C14H22N4O4について(M+H)+ = 310.09.
【０１３７】
中間体ＩＩＩ
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２，４−ジクロロピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート
【０１３８】
【化１７】
0006529983.tif 000018
【０１３９】
２Ｌの丸底フラスコ中、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２，４−ジオキソ−１，２，３，４−テトラヒドロピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート（２２ｇ、７０．８９ｍｍｏｌ、中間体ＩＩ）を、オキシ塩化リン（７９３ｍｌ、８５０６．５６ｍｍｏｌ）中に調製し、褐色の懸濁液を得た。反応混合物を５〜６時間還流し、ＬＣＭＳにより反応を監視し、必要な質量を確認した。減圧下、オキシ塩化リンを留去し、残留した油をＴＨＦ（２５０ｍＬ）及び砕いた氷（４００ｇ）で希釈し、反応混合物をｐＨ８まで塩基性化した。反応混合物に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（２２．１７ｍＬ、９６．４１ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ）を加え、室温で１６時間撹拌した。反応混合物をメタノールで希釈し、ろ過して過剰の塩を除去した。減圧下、溶媒を除去し、残渣を水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下、溶媒を除去した。残渣をシリカゲルに供して精製し、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２，４−ジクロロピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート（２３．００ｇ、９３％）を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ ppm 1.31 (d, J=6.78 Hz, 3 H) 1.37 - 1.47 (m, 9 H) 2.70 - 2.93 (m, 2 H) 3.15 - 3.29 (m, 3 H) 3.94 (d,J=13.94 Hz, 1 H) 4.33 (br. s., 1 H) 8.11 (s, 1 H) MS (ES+), C14H20Cl2N4O2について(M+H)+ = 349.
【０１４０】
中間体ＩＩＩａ
（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２，４−ジクロロピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート
【０１４１】
【化１８】
0006529983.tif 000019
【０１４２】
中間体ＩＩＩａは、中間体ＩＩＩに類似する方法を用いてＩＩａから製造した。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ ppm 1.31 (d, J=6.78 Hz, 3 H) 1.37 - 1.47 (m, 9 H) 2.70 - 2.93 (m, 2 H) 3.15 - 3.29 (m, 3 H) 3.94 (d,J=13.94 Hz, 1 H) 4.33 (br. s., 1 H) 8.11 (s, 1 H) MS (ES+), C14H20Cl2N4O2について(M+H)+ = 349.                                                            
【０１４３】
中間体ＩＶａ
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−クロロ−４−（（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート
【０１４４】
【化１９】
0006529983.tif 000020
【０１４５】
２５ｍＬのＢｉｏｔａｇｅマイクロ波バイアル中、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２，４−ジクロロピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート（５００ｍｇ、１．４４ｍｍｏｌ、中間体ＩＩＩ）及び１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−アミン（１６０ｍｇ、１．４４ｍｍｏｌ、Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ  Ｂｉｏ．）をエタノール（１０ｍＬ）中に調製し、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．７５４ｍＬ、４．３２ｍｍｏｌ）を加え、反応物の塊を１２０℃で４時間、マイクロ波照射に供した。ＬＣＭＳにより反応を監視し、必要な質量を確認した。反応物を冷却し、蒸発下に乾燥した後、残渣をシリカゲルによるＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いたクロマトグラフィーに供し、純粋固体の（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−クロロ−４−（（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレートを得た（３００ｍｇ、４９．４  ％）。MS (ES+), C19H28ClN7O2について(M+H)+= 422.20  
【０１４６】
中間体ＩＶｂ
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−クロロ−４−（（１−エチル−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート
【０１４７】
【化２０】
0006529983.tif 000021
【０１４８】
中間体ＩＶｂは、中間体ＩＶａと類似する方法を用い、１−エチル，５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−アミン（ＣｈｅｍＣｏｌｌｅｃｔ）及び中間体ＩＩＩから製造した。収率：63.7 %, MS (ES+), C20H30ClN7O2について(M+H)+= 436.38.
【０１４９】
中間体ＩＶｃ
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−クロロ−４−（（２−メチル−２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート
【０１５０】
【化２１】
0006529983.tif 000022
【０１５１】
５０ｍＬの丸底フラスコ中、２−メチル−２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−アミン塩酸塩（３８８ｍｇ、２．８８ｍｍｏｌ，ＣｈｅｍＢｒｉｄｇｅ）をＤＣＭ（２ｍＬ）中に調製し、氷冷しながらトリエチルアミン（２００ｍＬ、１．４４ｍｏｌ）を加え、５分間撹拌した。これを完全に蒸発させ、乾燥させた。残渣をＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解し、氷浴を用いて冷却した。水素化ナトリウム（１７３ｍｇ、４．３２ｍｍｏｌ）を加え、冷却して１５分間撹拌し、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２，４−ジクロロピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート（５００ｍｇ、１．４４ｍｍｏｌ、中間体ＩＩＩ）を加えた。得られた反応混合物を室温で一晩撹拌した。ＬＣＭＳにより反応を追跡し、必要な質量を確認した。ＤＭＦを蒸発させた後、懸濁液を水及び酢酸エチルで分配した。有機層を一緒にし、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮して乾燥し、Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ（登録商標）により精製し、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−クロロ−４−（（２−メチル−２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート（１８０ｍｇ、３０．６％）を得た。MS (ES+), C17H25ClN8O2について(M+H)+= 409.36。
【０１５２】
中間体ＩＶｄ
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−クロロ−４−（（１−メチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート
【０１５３】
【化２２】
0006529983.tif 000023
【０１５４】
中間体ＩＶｄは、中間体ＩＶｃに類似する方法を用い、１−メチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−アミン塩酸塩（ＣｈｅｍＢｒｉｄｇｅ）及び中間体ＩＩＩから製造した。
収率：51 %. MS (ES+), C17H25ClN8O2について(M+H)+= 409.32。
【０１５５】
中間体ＩＶｅ
（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−クロロ−４−（（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート
【０１５６】
【化２３】
0006529983.tif 000024
【０１５７】
中間体ＩＶｅは、中間体ＩＶａに類似する方法を用い、１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−アミン（１６０ｍｇ、１．４４ｍｍｏｌ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ  Ｂｉｏ．）及び中間体ＩＩＩａから製造した。収率：49 %, MS (ES+), C19H28ClN7O2について(M+H)+= 422.20.
【０１５８】
中間体ＩＩｂ
５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン
【０１５９】
【化２４】
0006529983.tif 000025
【０１６０】
２０ｍＬのＢｉｏｔａｇｅマイクロ波用バイアル中、５−ブロモウラシル（３ｇ、１５．７１ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ）及びＮ−メチルピペラジン（２．６１ｍＬ、２３．５６ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ）をピリジン（１５ｍＬ）中に調製し、白色の懸濁液を得た。次いで、バイアルに蓋をし、１５０℃で４５分間のマイクロ波照射に供した。ＬＣＭＳにより反応を監視し、必要な質量を確認した。減圧下、ピリジンを除去した後、残渣を酢酸エチルで粉砕し、懸濁液をろ過し、減圧乾燥し、５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオンを暗灰色の固体として得た（３．３０ｇ，１００  ％）。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.07 (s, 3 H) 2.43 - 2.49 (m, 4 H) 2.98 - 3.09 (m, 4 H) 7.21 (s, 1H) 10.84 (br. s., 1 H) MS (ES+), C9H14N4O2について(M+H)+ =211.09．
【０１６１】
中間体ＩＩＩｂ
２，４−ジクロロ−５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン
【０１６２】
【化２５】
0006529983.tif 000026
【０１６３】
２５０ｍＬの丸底フラスコ中、５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（３．３０ｇ、１５．７０ｍｍｏｌ、中間体ＩＩｂ）を、オキシ塩化リン（２００ｍＬ、２１４５．６７ｍｍｏｌ）中に調製し、褐色の懸濁液を得た。次いで、反応物を１２０℃で４時間加熱した。ＬＣＭＳにより反応を監視し、必要な質量を確認した。減圧下、オキシ塩化リンを除去し、濃く黒い残渣を得た。これに氷を加え、冷却下、重炭酸ナトリウムを用いてｐＨ８まで中和した。次いで、懸濁液を、ジクロロメタン中１０％のメタノールで抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下、溶媒を除去して残渣を得、メタノール及びジクロロメタンを用いたＣｏｍｂｉｆｌａｓｈ（登録商標）で精製し、２，４−ジクロロ−５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン（１．１００ｇ、２８．４％）を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ ppm 2.34 - 2.38 (s, 3 H) 2.52 - 2.63 (m, 4 H) 3.13 (br. s., 4 H) 8.64 (s, 1H) MS (ES+), C9H12Cl2N4について(M+H)+= 247.
【０１６４】
中間体ＩＶｆ
２−クロロ−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）−５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−４−アミン
【０１６５】
【化２６】
0006529983.tif 000027
【０１６６】
中間体ＩＶｆは、中間体ＩＶｃに類似する方法を用い、１−メチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−アミン塩酸塩（ＣｈｅｍＢｒｉｄｇｅ）及び中間体ＩＩＩｂから製造した。収率：29.5 %. MS (ES+), C12H15ClN8について(M+H)+= 309.32.
【０１６７】
中間体Ｖａ
６−クロロ−４−シクロプロピル−３−フルオロ−２−メチルピリジン
【０１６８】
【化２７】
0006529983.tif 000028
【０１６９】
冷却管及び温度計を備えた１００ｍＬの三ツ口丸底フラスコ中、硫酸（１．３１８ｍＬ、２４．７３ｍｍｏｌ）の水溶液（４５ｍＬ）を調製し、シクロプロパンカルボン酸（２．１２９ｇ、２４．７３ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ）、硝酸銀（１．２６０ｇ、７．４２ｍｍｏｌ）を加えた。得られた懸濁液に６−クロロ−３−フルオロ−２−メチルピリジン（１．８ｇ、１２．３７ｍｍｏｌ、Ｍａｔｒｉｘ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を加え、白色の懸濁液を得た。混合物を７０℃に加熱し、新しく調製した過硫酸アンモニウム（８．４７ｇ、３７．１０ｍｍｏｌ）の水溶液（３５ｍＬ）を、２０分間かけて滴下して加えた。添加完了後、熱源を取り除き、二酸化炭素の発生を維持させた。ＴＬＣにより反応を監視した。次いで、混合物を冷却し、重炭酸ナトリウムを用いて中性のｐＨまで後処理し、化合物をジエチルエーテル（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機層を蒸発させ、粗試料２．１ｇを得た。粗資料を、ＤＣＭ−ヘキサンを用いたシリカゲルにより精製し、６−クロロ−４−シクロプロピル−３−フルオロ−２−メチルピリジン（０．５４０ｇ、２３．５３％）を得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.87 - 0.95 (m, 2 H) 1.05 - 1.15 (m, 2 H) 2.00 - 2.12 (m, 1 H) 2.38 (d, J=3.20 Hz, 3 H) 6.96 (d, J=4.71 Hz, 1 H) MS (ES+), C9H9ClFNについて(M+H)+ = 186.05.
【０１７０】
中間体Ｖｂ
４−シクロプロピル−Ｎ−（ジフェニルメチレン）−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−アミン
【０１７１】
【化２８】
0006529983.tif 000029
【０１７２】
６−クロロ−４−シクロプロピル−３−フルオロ−２−メチルピリジン（中間体Ｖａ、５３２ｍｇ、２．８７ｍｍｏｌ）を２５ｍＬの熱反応器（ｔｈｅｒｍａｌ  ｒｅａｃｔｏｒ）中に調製し、トルエン（１０ｍＬ）に溶解した。ベンゼンメタンイミン，アルファ−フェニル−（０．７２１ｍＬ、４．３０ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ），ラセミ体の２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフチル（７１．４ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（２５．７ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ）及び炭酸セシウム（１４０１ｍｇ、４．３０ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を、窒素雰囲気下、１２０℃で一晩還流した。ＬＣＭＳにより反応を監視し、生成物の生成を確認した。得られた塊を濃縮し、Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ（登録商標）、それに続きギルソンＨＰＬＣにより精製し、４−シクロプロピル−Ｎ−（ジフェニルメチレン）−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−アミンの純粋な黄色のガム状物質（３５０ｍｇ、３７．０  ％）を得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.44 - 0.55 (m, 2 H) 0.82 - 1.02 (m, 2 H) 1.81 - 1.96 (m, 1 H) 2.25 (d, J=3.20 Hz, 3 H) 5.98 (d, J=4.90 Hz, 1 H) 7.10 (dd, J=6.59, 2.83 Hz, 2 H) 7.28 - 7.37 (m, 3 H) 7.44 - 7.60 (m, 3 H) 7.62 - 7.71 (m, 2 H) MS (ES+), C22H19FN2について(M+H)+ = 331.40.
【０１７３】
中間体Ｖ
４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−アミン塩酸塩
【０１７４】
【化２９】
0006529983.tif 000030
【０１７５】
５０ｍＬの丸底フラスコ中、４−シクロプロピル−Ｎ−（ジフェニルメチレン）−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−アミン（３５０ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）を、１，４−ジオキサンの無色の溶液（１０ｍＬ）中に調製した。室温で、ジオキサン中のＨＣｌ（４ｍＬ、１６．００ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。反応塊を室温で２時間撹拌し、反応の完了をＬＣＭＳにより確認した。反応液を濃縮し、アセトニトリルで粉砕し、４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−アミンの白色固体を塩酸塩として得た（２００ｍｇ、９３％）。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.77 - 0.92 (m, 2 H) 1.14 - 1.27 (m, 2 H) 1.97 - 2.18 (m, 1 H) 2.37 (d, J=3.01 Hz, 3 H) 6.33 (d, J=5.84 Hz, 1 H) 7.49 (br. s., 2 H) 14.19 (br. s., 1H) MS (ES+), C9H11FN2について(M+H)+ = 167.12.
【０１７６】
中間体ＶＩａ
６−クロロ−４−エチル−３−フルオロ−２−メチルピリジン
【０１７７】
【化３０】
0006529983.tif 000031
【０１７８】
中間体ＶＩａは、中間体Ｖａに類似する方法を用い、６−クロロ−３−フルオロ−２−メチルピリジン（Ｍａｔｒｉｘ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）及びプロピオン酸から製造した。収率： 50.5% 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.18 (t, J=7.54 Hz, 3 H) 2.26 (d, J=1.13 Hz, 3 H) 2.63 - 2.81 (m, 2 H) 7.36 (d, J=4.71 Hz, 1 H). MS (ES+), C8H9ClFNについて(M+H)+ = 174.12.
【０１７９】
中間体ＶＩｂ
Ｎ−（ジフェニルメチレン）−４−エチル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−アミン
【０１８０】
【化３１】
0006529983.tif 000032
【０１８１】
中間体ＶＩｂは、中間体Ｖｂに類似する方法を用い、中間体ＶＩａから製造した。収率：  28% 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.18 (t, J=7.54 Hz, 3 H) 2.26 (d, J=1.13 Hz, 3 H) 2.63 - 2.81 (m, 2 H) 5.98 (d, J=4.90 Hz, 1 H) 7.10 (dd, J=6.59, 2.83 Hz, 2 H) 7.28 - 7.37 (m, 3 H) 7.44 - 7.60 (m, 3 H) 7.62 - 7.71 (m, 2 H) MS (ES+), C21H19FN2について(M+H)+ = 319.12.
【０１８２】
中間体ＶＩ
４−エチル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−アミン塩酸塩
【０１８３】
【化３２】
0006529983.tif 000033
【０１８４】
中間体ＶＩは、中間体Ｖに類似する方法を用い、中間体ＶＩｂから製造した。収率： 94 %,1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.18 (t, J=7.54 Hz, 3 H) 2.26 (d, J=1.13 Hz, 3 H) 2.63 - 2.81 (m, 2 H) 7.36 (d, J=4.71 Hz, 1 H). MS (ES+), C8H11FN2について(M+H)+ = 155.06.
【０１８５】
中間体ＶＩＩａ
６−クロロ−４−シクロプロピル−２−メチルニコチノニトリル
【０１８６】
【化３３】
0006529983.tif 000034
【０１８７】
中間体ＶＩＩａは、中間体Ｖａに類似する方法を用い、６−クロロ−２−メチルニコチノニトリル（Ｍａｎｃｈｅｓｔｅｒ  ｏｒｇａｎｉｃｓ）及びプロピオン酸から製造した。収率： 14 % MS (ES+), C10H9ClN2について(M+H)+ = 193.10.
【０１８８】
中間体ＶＩＩｂ
４−シクロプロピル−６−（（ジフェニルメチレン）アミノ）−２−メチルニコチノニトリル
【０１８９】
【化３４】
0006529983.tif 000035
【０１９０】
中間体ＶＩＩｂは、中間体Ｖｂに類似する方法を用い、中間体ＶＩＩａから製造した。収率： 81% MS (ES+), C23H19N3について(M+H)+ = 338.40.
【０１９１】
中間体ＶＩＩ
６−アミノ−４−シクロプロピル−２−メチルニコチノニトリル塩酸塩
【０１９２】
【化３５】
0006529983.tif 000036
【０１９３】
中間体ＶＩＩは、中間体Ｖに類似する方法を用い、中間体ＶＩＩｂから製造した。収率： 38.6 % MS (ES+), C10H11N3について(M+H)+ = 174.14.
【０１９４】
中間体ＶＩＩＩａ
６−クロロ−４−シクロブチル−３−フルオロ−２−メチルピリジン
【０１９５】
【化３６】
0006529983.tif 000037
【０１９６】
中間体ＶＩＩＩａは、中間体Ｖａに類似する方法を用い、６−クロロ−３−フルオロ−２−メチルピリジン（Ｍａｔｒｉｘ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）及びシクロブタンカルボン酸から製造した。収率： 21 % MS (ES+), C10H11ClFNについて(M+H)+ = 200.
【０１９７】
中間体ＶＩＩＩｂ
４−シクロブチル−Ｎ−（ジフェニルメチレン）−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−アミン
【０１９８】
【化３７】
0006529983.tif 000038
【０１９９】
中間体ＶＩＩＩｂは、中間体Ｖｂに類似する方法を用い、中間体ＶＩＩＩａから製造した。収率：40 % MS (ES+), C23H21FN2について(M+H)+ = 346.
【０２００】
中間体ＶＩＩＩ
４−シクロブチル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−アミン塩酸塩
【０２０１】
【化３８】
0006529983.tif 000039
【０２０２】
中間体ＶＩＩＩは、中間体Ｖに類似する方法を用い、中間体ＶＩＩＩｂから製造した。収率： 88 % 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.73 - 1.92 (m, 1H) 1.98 - 2.17 (m, 3 H) 2.21 - 2.33 (m, 2 H) 2.33 - 2.38 (m, 3 H) 3.58 - 3.75 (m, 1 H) 6.72 (d, J=5.65 Hz, 1 H) 7.74 (br. s., 1 H) MS (ES+), C10H13FN2について(M+H)+ = 167.12.
【０２０３】
中間体ＩＸｃ
３，６−ジクロロ−２−メチルピリジン
【０２０４】
【化３９】
0006529983.tif 000040
【０２０５】
５−クロロ−６−メチルピリジン−２−アミン（７．５ｇ、５２．６０ｍｍｏｌ、Ｃｏｍｂｉ−Ｂｌｏｃｋｓ）のＤＣＭ（２００ｍＬ）中の懸濁液に、塩化銅（ＩＩ）（９．１９ｇ、６８．３８ｍｍｏｌ）を加え、１０分間撹拌した。ｔｅｒｔ−ブチルニトリル（１２．５０ｍＬ、１０５．２０ｍｍｏｌ）を加え、撹拌を、室温にて更に３０分間続けた。色が濃青色に変化した。ＬＣＭＳにより反応を監視した。ＬＣＭＳにより、反応が完了したことが示された。反応混合物を、水、食塩水で洗浄し、有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下に濃縮して粗生成物を得た。生成物を、５％酢酸エチル：ヘキサン混合物を用いるカラムクロマトグラフィーにより精製し、３，６−ジクロロ−２−メチルピリジン（３．８０ｇ，４４．６％）を黄色の液体として得た。MS (ES+), C6H5Cl2Nについて(M+H)+ = 162.15.
【０２０６】
中間体ＩＸａ
３，６−ジクロロ−４−シクロプロピル−２−メチルピリジン
【０２０７】
【化４０】
0006529983.tif 000041
【０２０８】
中間体ＩＸａは、中間体Ｖａに類似する方法を用い、中間体ＩＸｃから製造した。収率： 23 % MS (ES+), C9H9Cl2Nについて(M+H)+ = 202.24.
【０２０９】
中間体ＩＸｂ
５−クロロ−４−シクロプロピル−Ｎ−（ジフェニルメチレン）−６−メチルピリジン−２−アミン
【０２１０】
【化４１】
0006529983.tif 000042
【０２１１】
１００ｍＬの丸底フラスコ（ＲＢＦ）中、３，６−ジクロロ−４−シクロプロピル−２−メチルピリジン（２５０ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）、ベンゼンメタンイミン，アルファ−フェニル−（０．２２８ｍＬ、１．３６ｍｍｏｌ）及び９，９−ジメチル−４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）キサンテン（５７．３ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）をトルエン（６ｍＬ）中に調製し、反応混合物を５分間、脱気した。次いで、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（４５．３ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）及びナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（３５７ｍｇ、３．７１ｍｍｏｌ）を加えた。次いで、反応混合物を、窒素雰囲気下、１１０℃に３時間加熱した。ＬＣＭＳにより反応を監視し、必要な質量を確認した。反応混合物をセライトベッドでろ過した。酢酸（４０μＬ、２当量）をろ液に加えた。次いで、ろ液をシリカに吸着させ、酢酸エチル／ヘキサンを用いてクロマトグラフ分析し、５−クロロ−４−シクロプロピル−Ｎ−（ジフェニルメチレン）−６−メチルピリジン−２−アミン（３００ｍｇ、６９．９％）を固体として得た。MS (ES+), C22H9ClN2について(M+H)+ = 347.59.
【０２１２】
中間体ＩＸ
５−クロロ−４−シクロプロピル−６−メチルピリジン−２−アミン塩酸塩
【０２１３】
【化４２】
0006529983.tif 000043
【０２１４】
中間体ＩＸは、中間体Ｖに類似する方法を用い、中間体ＩＸｂから製造した。収率：48 % MS (ES+), C9H11ClN2について(M+H)+ = 183.45.
【０２１５】
中間体Ｘａ
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）アミノ）−４−（（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート
【０２１６】
【化４３】
0006529983.tif 000044
【０２１７】
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−クロロ−４−（（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート（１８５ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ、中間体ＩＶａ）を５０ｍＬの反応器中に調製し、トルエン（１０ｍＬ）に溶解した。これに、４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−アミン塩酸塩（８９ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ、中間体Ｖ）、９，９−ジメチル−４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）キサンテン（２５．４ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（２０．０８ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）及びナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（８４ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を、窒素雰囲気下、１２０℃で一晩還流した。ＬＣＭＳにより反応を監視し、必要な質量を確認した。反応混合物を冷却し、メタノールで希釈し、セライトベッドでろ過し、得られたろ液を濃縮し、Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ（登録商標）、次いでギルソン調製用ＨＰＬＣで精製し、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）アミノ）−４−（（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート（６０．０ｍｇ、２４．８１％）の純粋な白色固体を得た。MS (ES+), C28H38FN9O2について(M+H)+ = 552.37.
【０２１８】
中間体Ｘｂ
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）アミノ）−４−（（１−エチル−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート
【０２１９】
【化４４】
0006529983.tif 000045
【０２２０】
これは、中間体Ｘａについて上述したように、中間体ＩＶｂ及び中間体Ｖから製造した。収率：23.12 % MS (ES+), (M+H)+ = C29H40FN9O2について567.60.
【０２２１】
中間体Ｘｃ
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）アミノ）−４−（（１−メチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート
【０２２２】
【化４５】
0006529983.tif 000046
【０２２３】
これは、中間体Ｘａについて上述したように、中間体ＩＶｄ及び中間体Ｖから製造した。収率：45.5 % MS (ES+), (M+H)+ = C26H35FN10O2について539.44.
【０２２４】
中間体Ｘｄ
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（（５−クロロ−４−シクロプロピル−６−メチルピリジン−２−イル）アミノ）−４−（（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート
【０２２５】
【化４６】
0006529983.tif 000047
【０２２６】
これは、中間体Ｘａについて上述したように、中間体ＩＶａ及び中間体ＩＸから製造した。収率：44.6 % MS (ES+), C28H38ClN9O2について(M+H)+ = 569.39.
【０２２７】
中間体Ｘｅ
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（（５−シアノ−４−シクロプロピル−６−メチルピリジン−２−イル）アミノ）−４−（（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート
【０２２８】
【化４７】
0006529983.tif 000048
【０２２９】
これは、中間体Ｘａについて上述したように、中間体ＩＶａ及び中間体ＶＩＩから製造した。収率：35.5 % MS (ES+), C29H38N10O2について(M+H)+ = 559.35.
【０２３０】
中間体Ｘｆ
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）−２−（（４−エチル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート
【０２３１】
【化４８】
0006529983.tif 000049
【０２３２】
これは、中間体Ｘａについて上述したように、中間体ＩＶａ及び中間体ＶＩから製造した。収率：57.9 % MS (ES+), C27H38FN9O2について(M+H)+ = 540.21.
【０２３３】
中間体Ｘｇ
（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）−２−（（４−エチル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート
【０２３４】
【化４９】
0006529983.tif 000050
【０２３５】
これは、中間体Ｘａについて上述したように、中間体ＩＶｅ及び中間体ＶＩから製造した。収率：57.9 % MS (ES+), C27H38FN9O2について(M+H)+ = 540.21.
【０２３６】
中間体Ｘｈ
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（（４−シクロブチル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）アミノ）−４−（（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート（７２．０ｍｇ，２５．６％）．
【０２３７】
【化５０】
0006529983.tif 000051
【０２３８】
これは、中間体Ｘａについて上述したように、中間体ＩＶａ及び中間体ＶＩＩＩから製造した。収率：25.6 % MS (ES+), (M+H)+ = 566.33 for C29H40FN9O2.
【０２３９】
中間体Ｘｉ
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（（５−クロロ−４−シクロプロピル−６−メチルピリジン−２−イル）アミノ）−４−（（２−メチル−２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート
【０２４０】
【化５１】
0006529983.tif 000052
【０２４１】
これは、中間体Ｘａについて上述したように、中間体ＩＶｃ及び中間体ＩＸから製造した。収率：46.0 % MS (ES+), C26H35ClN10O2について(M+H)+ = 555.26.
【０２４２】
中間体Ｘｊ
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（（５−クロロ−４−シクロプロピル−６−メチルピリジン−２−イル）アミノ）−４−（（１−メチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート
【０２４３】
【化５２】
0006529983.tif 000053
【０２４４】
これは、中間体Ｘａについて上述したように、中間体ＩＶｄ及び中間体ＩＸから製造した。収率：14.75 % MS (ES+), C26H35ClN10O2について(M+H)+ = 555.26.
【０２４５】
中間体Ｘｋ
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（（３−シクロプロピル−４−フルオロ−５−メチルフェニル）アミノ）−４−（（２−メチル−２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート
【０２４６】
【化５３】
0006529983.tif 000054
【０２４７】
これは、中間体Ｘａについて上述したように、中間体ＩＶｃ及び中間体Ｖから製造した。収率：58.3 % MS (ES+), C26H35FN10O2について(M+H)+ = 539.29.
【０２４８】
実施例１
Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）−Ｎ４−（１−メチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）−５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン
【０２４９】
【化５４】
0006529983.tif 000055
【０２５０】
これは、中間体Ｘａについて上述したように、中間体ＩＶｆ及び中間体Ｖから製造した。収率：21.28%, 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.70 - 0.82 (m, 2H) 1.04 - 1.15 (m, 2 H) 1.99 - 2.14 (m, 1H) 2.26 (s, 3H) 2.36 (d, J=3.01 Hz, 3 H) 2.87 (t, J=4.43 Hz, 4 H) 4.05 (s, 3 H) 6.55 (s, 1 H) 7.85 (d, J=5.09 Hz, 1 H) 8.07 (s, 1H) 8.51 (s, 1 H) 8.94 (s, 1 H) 9.62 (s, 1 H). MS (ES+), C21H27FN10について(M+H)+ = 439.
【０２５１】
実施例２
（Ｒ）−Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）−Ｎ４−（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−５−（３−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン二塩酸塩
【０２５２】
【化５５】
0006529983.tif 000056
【０２５３】
５０ｍＬの丸底フラスコ中、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）アミノ）−４−（（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート（５５ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ、中間体Ｘａ）を、１，４−ジオキサンの無色の溶液（１０ｍＬ）中に調製した。室温で、ジオキサン中４Ｎ  ＨＣｌ（４ｍＬ、１６．００ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。反応塊を室温で２時間撹拌し、反応が完了したことが示され、ＬＣＭＳで確認した。反応塊を濃縮し、アセトニトリルで粉砕し、（Ｒ）−Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）−Ｎ４−（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−５−（３−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−２，４−ジアミンの白色固体（４０．０ｍｇ、７６％）を得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.73 - 0.82 (m, 2 H) 1.15 - 1.22 (m, 2 H) 1.29 (d, J=6.22 Hz, 3 H) 2.13 (t, J=4.71 Hz, 1 H) 2.31 (s, 3 H) 2.54 (d, J=3.20 Hz, 3 H) 2.76 - 2.89 (m, 1 H) 2.95 - 3.18 (m, 3 H) 3.25 - 3.38 (m, 1 H) 3.42 (br. s., 1 H) 3.56 - 3.80 (m, 4 H) 6.64 - 6.89 (m, 2 H) 8.12 (s, 1 H) 9.38 (br. s., 1 H) 9.81 (br. s., 1 H) 10.29 (s, 1 H) 11.39 (br. s., 1 H) 13.93 (br. s., 1 H) MS (ES+), (M+H)+ = C23H30FN9について452.27.
【０２５４】
実施例３
（Ｒ）−Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）−Ｎ４−（１−エチル−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−５−（３−メチルメチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン二塩酸塩
【０２５５】
【化５６】
0006529983.tif 000057
【０２５６】
これは、実施例２について上述したように、中間体Ｘｂから製造した。収率：96 %, 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.67 - 0.84 (m, 2 H) 1.12 - 1.21 (m, 2 H) 1.22 - 1.36 (m, 6 H) 2.09 - 2.18 (m, 1 H) 2.32 (s, 3 H) 2.53 (d, J=3.20 Hz, 3 H) 2.76 - 2.86 (m, 1 H) 3.00 (d, J=5.09 Hz, 1 H) 3.05 - 3.19 (m, 2 H) 3.24 - 3.52 (m, 2 H) 3.66 (br. s., 1 H) 4.05 (q, J=7.03 Hz, 2 H) 6.68 (br. s., 1 H) 6.76 (br. s., 1 H) 8.09 (s, 1 H) 9.16 (br. s., 1 H) 9.58 (br. s., 1 H) 10.31 (br. s., 1 H) 11.31 (br. s., 1 H) 13.90 (br. s., 1 H).MS (ES+), C24H32FN9について(M+H)+ = 466.2９.
【０２５７】
実施例４
（Ｒ）−Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）−Ｎ４−（１−メチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）−５−（３−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン二塩酸塩
【０２５８】
【化５７】
0006529983.tif 000058
【０２５９】
これは、実施例２について上述したように、中間体Ｘｃから製造した。収率：92 %, 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13.61-14.09 (m, 1H), 12.20 (br. s., 1H), 10.97 (s, 1H), 9.65 (br. s., 1H), 8.91-9.29 (m, 2H), 8.13 (s, 1H), 6.97 (d, J=4.90 Hz, 1H), 3.67 (br. s., 1H), 3.27-3.56 (m, 3H), 2.98-3.27 (m, 3H), 2.68-2.94 (m, 1H), 2.03-2.28 (m, 2H), 1.07-1.38 (m, 6H), 0.69-0.84 (m, 2H). MS (ES+), C21H27FN10について(M+H)+ = 439.37.
【０２６０】
実施例５
（Ｒ）−Ｎ２−（５−クロロ−４−シクロプロピル−６−メチルピリジン−２−イル）−Ｎ４−（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−５−（３−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン二塩酸塩
【０２６１】
【化５８】
0006529983.tif 000059
【０２６２】
これは、実施例２について上述したように、中間体Ｘｄから製造した。収率：92 %, 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9.39 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.92-8.01 (m, 1H), 7.77 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.36-3.42 (m, 1H), 2.63-3.00 (m, 7H), 2.04-2.40 (m, 7H), 0.91-1.18 (m, 8H), 0.56-0.78 (m, 2H).MS (ES+), C23H30ClN9について(M+H)+ = 468.40.
【０２６３】
実施例６
（Ｒ）−４−シクロプロピル−６−（（４−（（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）−５−（３−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−２−メチルニコチノニトリル二塩酸塩
【０２６４】
【化５９】
0006529983.tif 000060
【０２６５】
これは、実施例２について上述したように、中間体Ｘｅから製造した。収率：91 %, 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.19 (t, J=7.54 Hz, 3 H) 1.28 (d, J=6.22 Hz, 3 H) 2.31 (s, 3 H) 2.54 (d, J=3.01 Hz, 3 H) 2.68 (d, J=7.54 Hz, 2 H) 2.77 - 2.87 (m, 1 H) 3.12 (br. s., 2 H) 3.27 - 3.39 (m, 1 H) 3.44 (br. s., 1 H) 3.64 (br. s., 1 H) 3.73 (s, 3 H) 6.72 (s, 1 H) 7.17 (d, J=4.52 Hz, 1 H) 8.12 (s, 1 H) 9.28 (br. s., 1 H) 9.71 (br. s., 1H) 10.27 (s, 1 H) 11.48 (s, 1 H) MS (ES+), C24H30N10について(M+H)+ = 459.26.
【０２６６】
実施例７
（Ｒ）−Ｎ４−（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−Ｎ２−（４−エチル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）−５−（３−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン二塩酸塩
【０２６７】
【化６０】
0006529983.tif 000061
【０２６８】
これは、実施例２について上述したように、中間体Ｘｆから製造した。収率：75 %, 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.15 - 1.24 (m, 3 H) 1.29 (d, J=6.03 Hz, 3 H) 2.31 (s, 3 H) 2.54 (d, J=3.01 Hz, 3 H) 2.67 (q, J=7.66 Hz, 2 H) 2.85 (d, J=11.49 Hz, 1 H) 2.96 - 3.22 (m, 3 H) 3.24 - 3.54 (m, 4 H) 3.60 - 3.76 (m, 4 H) 6.74 (s, 1 H) 7.18 (d, J=4.33 Hz, 1 H) 8.13 (s, 1 H) 9.40 (br. s., 1 H) 9.82 (br. s., 1 H) 10.28 (s, 1 H) 11.52 (br. s., 1 H) MS (ES+), C22H30FN9について(M+H)+ = 440.28.
【０２６９】
実施例８
（Ｓ）−Ｎ４−（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−Ｎ２−（４−エチル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）−５−（３−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン二塩酸塩
【０２７０】
【化６１】
0006529983.tif 000062
【０２７１】
これは、実施例２について上述したように、中間体Ｘｇから製造した。収率：75 %, 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.15 - 1.24 (m, 3 H) 1.29 (d, J=6.03 Hz, 3 H) 2.31 (s, 3 H) 2.54 (d, J=3.01 Hz, 3 H) 2.67 (q, J=7.66 Hz, 2 H) 2.85 (d, J=11.49 Hz, 1 H) 2.96 - 3.22 (m, 3 H) 3.24 - 3.54 (m, 4 H) 3.60 - 3.76 (m, 4 H) 6.74 (s, 1 H) 7.18 (d, J=4.33 Hz, 1 H) 8.13 (s, 1 H) 9.40 (br. s., 1 H) 9.82 (br. s., 1 H) 10.28 (s, 1 H) 11.52 (br. s., 1 H) MS (ES+), C22H30FN9について(M+H)+ = 440.28.
【０２７２】
実施例９
（Ｒ）−Ｎ２−（４−シクロブチル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）−Ｎ４−（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−５−（３−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン二塩酸塩
【０２７３】
【化６２】
0006529983.tif 000063
【０２７４】
これは、実施例２について上述したように、中間体Ｘｈから製造した。収率：99%, 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.29 (d, J=6.40 Hz, 3 H) 1.77 - 1.95 (m, 1 H) 2.08 - 2.19 (m, 3 H) 2.24 - 2.44 (m, 5 H) 2.51 - 2.55 (m, 3 H) 2.78 - 2.93 (m,1 H) 2.98 - 3.19 (m, 3 H) 3.31 (br. s., 1 H) 3.40 (d, J=10.74 Hz, 1 H) 3.57 - 3.80 (m, 5 H) 6.78 (s, 1H) 7.22 (d, J=4.71 Hz,1 H) 8.14 (s, 1 H) 9.47 (d, J=9.23 Hz, 1 H) 9.92 (d, J=8.85 Hz, 1 H) 10.31 (s, 1 H) 11.57 (s, 1 H) 13.96 (br. s., 1 H). MS (ES+), C24H32FN9について(M+H)+ = 466.
【０２７５】
実施例１０
（Ｒ）−Ｎ２−（５−クロロ−４−シクロプロピル−６−メチルピリジン−２−イル）−Ｎ４−（２−メチル−２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）−５−（３−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン二塩酸塩
【０２７６】
【化６３】
0006529983.tif 000064
【０２７７】
これは、実施例２について上述したように、中間体Ｘｉから製造した。収率：99%, 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.63-0.88 (m, 2H) 1.14-1.37 (m, 6H), 2.19-2.34 (m, 1H), 2.68 (s, 4H), 2.83 (t, J=11.30 Hz, 1H), 2.95-3.25 (m, 4H), 3.29-3.59 (m, 3H), 4.17 (s, 4H), 6.82 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.46-8.63 (m, 1H), 9.33 (br. s., 1H), 9.81 (br. s., 1H), 10.90 (br. s., 1H), 11.73 (br. s., 1H), MS (ES+), C21H27ClN10について(M+H)+ = 455.
【０２７８】
実施例１１
（Ｒ）−Ｎ２−（５−クロロ−４−シクロプロピル−６−メチルピリジン−２−イル）−Ｎ４−（１−メチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）−５−（３−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン二塩酸塩
【０２７９】
【化６４】
0006529983.tif 000065
【０２８０】
これは、実施例２について上述したように、中間体Ｘｊから製造した。収率：79%, 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.25 (br. s., 1H), 10.98 (br. s., 1H), 9.62 (br. s., 1H), 9.14 (br. s., 2H), 8.16 (s, 1H), 7.02 (br. s., 1H), 4.13 (s, 4H), 3.38 (s, 5H), 2.97-3.29 (m, 4H), 2.61-2.93 (m, 6H), 2.27 (br. s., 2H), 1.06-1.40 (m, 7H), 0.77 (br. s., 3H) MS (ES+), (M+H)+ = C21H27ClN10について455.
【０２８１】
実施例１２
（Ｒ）−Ｎ２−（５−フルオロ−４−シクロプロピル−６−メチルピリジン２−イル）−Ｎ４−（２−メチル−２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）−５−（３−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン二塩酸塩
【０２８２】
【化６５】
0006529983.tif 000066
【０２８３】
これは、実施例２について上述したように、中間体Ｘｋから製造した。収率：92 % MS (ES+), C22H28FN9について(M+H)+ = 438.36.
【０２８４】
実施例１３
（Ｒ）−Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）−Ｎ４−（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−５−（３，４−ジメチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン
【０２８５】
【化６６】
0006529983.tif 000067
【０２８６】
５０ｍＬの丸底フラスコ中、（Ｒ）−Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）−Ｎ４−（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−５−（３−メチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン二塩酸塩（１９０ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ、実施例２）をＤＣＭ（２ｍＬ）中に調製し、黄色の懸濁液を得た。これにヒューニッヒ塩基（０．１８４ｍＬ、１．０５ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液は透明に変化した。１０分後、白色の懸濁液に変化した。更に１０分後、混合液を濃縮して乾燥させた。得られた残渣をエタノール（無水、９９．５％）（３ｍＬ）に溶解し、ホルムアルデヒド（０．０４２ｍＬ、０．６３ｍｍｏｌ）を加え、１０分間撹拌した。白色の懸濁液は徐々に清澄になり、黄色の溶液になった。この清澄な溶液にシアノ水素化ホウ素ナトリウム（２６．４ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）を一度に加え、白色の懸濁液を得た。３０分後、ＬＣＭＳにより反応が完了したことが示された。反応混合物を濃縮し、粗生成物を、逆相ＨＰＬＣ  ＧＩＬＳＯＮ装置を通して精製し、（Ｒ）−Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）−Ｎ４−（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−５−（３，４−ジメチルピペラジン−１−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン（８０ｍｇ、４０．８％）を得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.67 - 0.78 (m, 2 H) 1.00 (d, J=6.22 Hz, 3 H) 1.02 - 1.08 (m, 2 H) 1.96 - 2.10 (m, 1 H) 2.23 (s, 7 H) 2.30 - 2.38 (m, 4 H) 2.73 - 2.96 (m, 4 H) 3.33 (s, 3 H) 6.83 (s, 1 H) 7.67 (d, J=5.09 Hz, 1 H) 8.00 (s, 1 H) 8.03 (s, 1 H) 9.26 (s,1 H) MS (ES+), C21H32FN9について(M+H)+ = 466.45.
【０２８７】
実施例１４
（Ｒ）−Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）−５−（３，４−ジメチルピペラジン−１−イル）−Ｎ４−（１−メチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン
【０２８８】
【化６７】
0006529983.tif 000068
【０２８９】
これは、実施例１３について上述したように、実施例４から製造した。収率：12%,1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.71 - 0.81 (m, 2 H) 0.81 - 0.90 (m, 1 H) 1.01 (d, J=6.03 Hz, 3 H) 1.05 - 1.16 (m, 2 H) 1.20 - 1.32 (m, 2 H) 1.99 - 2.13 (m, 1 H) 2.24 (s, 3 H) 2.36 (d, J=3.01 Hz, 4 H) 2.69 - 2.98 (m, 5 H) 2.69 - 2.98 (m, 5 H) 4.05 (s, 3 H) 7.76 - 7.94 (m, 1 H) 8.05 (s, 1 H) 8.40 - 8.60 (m, 1 H) 8.92 (s, 1 H) 9.47 - 9.71 (m, 1 H). MS (ES+), C22H29FN10について(M+H)+ = 453.25.
【０２９０】
実施例１５
（Ｒ）−Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−フルオロ−６−メチルピリジン−２−イル）−５−（３，４−ジメチルピペラジン−１−イル）−Ｎ４−（２−メチル−２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン
【０２９１】
【化６８】
0006529983.tif 000069
【０２９２】
これは、実施例１３について上述したように、実施例１１から製造した。収率： 28%, 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.28 (s, 3 H) 3.78 - 4.09 (m, 5 H) 5.76 (s, 2 H) 5.97 - 6.51 (m, 1 H) 7.36 (t, J=7.82 Hz, 1 H) 7.71 (d, J=7.91 Hz, 1 H) 7.91 (d, J=7.54 Hz, 1 H) 8.41 (s, 1 H) 8.57 (s, 1 H) 10.05 (t, J=6.12 Hz, 1 H). MS (ES+), C22H29FN10について(M+H)+ = 453.34.
【０２９３】
実施例１６  生物活性
式（Ｉ）の化合物は、その強力な抗マラリア作用のために興味深いものである。抗マラリア作用を達成するための、本明細書に開示された本発明の化合物の能力は、以下のプロトコルに基づくアッセイを用いた、熱帯熱マラリア原虫のようなマラリア原虫の増殖を阻害する能力について評価することができる。
【０２９４】
以下のプロトコルに記載されたような３種の対照となる抗マラリア剤に加え、更に、本発明の化合物（実施例２及び１３）についても、熱帯熱マラリア原虫及び三日熱マラリア原虫の野生分離株に対して試験を行った。活性データを表１に示す。
【０２９５】
【表１】
0006529983.tif 000070
【０２９６】
上記データは、本発明の化合物が、熱帯熱マラリア及び三日熱マラリアに対し、同等の活性を有するという事実を支持している。
【０２９７】
インビトロにおける抗マラリア原虫活性の測定
試験試料は、熱帯熱マラリア原虫のクロロキン感受性ＮＦ５４（ＭＲＡ−１０００，ＭＲ４，ＡＴＣＣ，Ｍａｎａｓｓａｓ，Ｖｉｒｇｉｎｉａ）及びクロロキン耐性Ｋ１株に対し、二連で２つの別々の機会で試験を行った。Ｔｒａｇｅｒ及びＪｅｎｓｅｎの修飾法を熱帯熱マラリア原虫の無性血中期のインビトロ連続培養を維持するために使用した（Ｔｒａｇｅｒｔら，１９７６，Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９３，６７３−６７５）。インビトロにおける抗マラリア原虫活性の定量的評価は、前述のように、ＳＹＢＲ１法（Ｊｏｈｎｓｏｎ等，２００７，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．，５１，１９２６?１９３３）を用いて測定した。
【０２９８】
薬剤を含まない対照についての阻害割合を薬物濃度の対数に対してプロットした。増殖阻害曲線を、Ｓ字−投与量反応（可変傾き）式を用いて非線回帰により適合させ、濃度−反応曲線を得た。化合物のＥＣ５０は、５０％阻害が観察される最低濃度として定義された。クロロキン二リン酸（ＣＱ）（Ｓｉｇｍａ），アルテスナート（Ｓｉｇｍａ）、及びピリメタミンを、全ての実験において参考として用いた。
【０２９９】
本発明の式（Ｉ）の化合物を、抗マラリア原虫活性試験で評価し、熱帯熱マラリア原虫（ＮＦ５４及びＫ１の両株）に対する阻害活性を測定し、結果を以下の表２に報告する。
【０３００】
【表２】
0006529983.tif 000071
【０３０１】
マウスのマラリアモデルにおけるインビボにおける有効性
血液期に対するインビボにおける有効性を、経口投与により投与した４日後（１日１回）のネズミマラリア原虫で感染させたマウス中で測定した。この４日の抑制試験の詳細なプロトコルは、Ｆｉｄｏｃｋ等，２００４，Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ（３），ｐ  ５０９に開示されている。マウスの血液中の寄生虫の増殖阻害の割合を以下の表３に示す。
【０３０２】
【表３】
0006529983.tif 000072
【０３０３】
薬剤耐性熱帯熱マラリア原虫及び三日熱マラリア原虫野生分離株に対する、実施例２及び１３の生体外における活性
標準的な抗マラリア剤、クロロキン（ＣＱ）、アモジアキン（ＡＱ）、ピペラキン（ＰＩＰ）、メフロキン（ＭＦＱ）、及びアルテスナート（ＡＳ）、並びに本発明の化合物を、製造業者の説明書に従って、Ｈ２Ｏ又はジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中の１ｍｇ／ｍＬの貯蔵液として調製した。５０％メタノールで化合物を希釈することにより薬物プレートをプレ投与し、凍結乾燥し、４℃に保存した。
【０３０４】
マラリア原虫分離株を、三日熱マラリア及び熱帯熱マラリアの多剤耐性株が風土病であるＴｉｍｉｋａ（インドネシア  パプア州）で、マラリアの診療所に通う患者から採集した。２，０００μＬ−１〜８０，０００μＬ−１の寄生虫が存在する状態で、熱帯熱マラリア原虫又は三日熱マラリア原虫のいずれかに感染しており、大部分（８０％超）の寄生虫が発生の環状期であるなら、外来施設に通う症候性マラリア患者が試験に採用された。静脈穿刺により静脈血（５ｍＬ）を採集し、セルロース（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，  Ａｕｓｔｒａｌｉａ）ろ過を用いて宿主の白血球を除去した後、充填した感染赤血球（ｉＲＢＣ）を、生体外薬剤感受性アッセイに使用した。
【０３０５】
三日熱マラリア及び熱帯熱マラリアの分離株の薬剤感受性は、既に開示されている（Ｍａｒｆｕｒｔ等，２０１１，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．，５５（９）：４４６１）ような、ＷＨＯマイクロテストから改変されたプロトコルにより測定した。ＲＰＭＩ  １６４０培地と、１０％  ＡＢ及びヒト血清（熱帯熱マラリア原虫）、又はＭｃＣｏｙ’ｓ  ５Ａ培地と２０％  ＡＢ及びヒト血清（三日熱マラリア原虫）からなる  ２％ヘマトクリット血液培地混合物（ＢＭＭ）  ２００μＬを、抗マラリア剤、ＣＱ（２，９９２ｎＭ）、ＡＱ（１５８ｎＭ）、ＰＩＰ（１，０２９ｎＭ）、ＭＦＱ（３３８ｎＭ）、ＡＳ（４９ｎＭ）、本発明の化合物（２，１４６ｎＭ）の１１個の連続希釈濃度（２倍希釈）を含むプレ投与薬剤プレートの各ウェルに加えた（かっこ内に示すのは最大濃度）。３７．０℃、３５〜３６時間で寄生虫を成熟させるためにろうそく瓶を使用した。薬剤を含まない対照のウェルで、環状期の４０％超が成熟シゾント期（ｍａｔｕｒｅ  ｓｃｈｉｚｏｎｔ  ｓｔａｇｅ）に達した時にインキュベーションを停止した。
【０３０６】
各ウェルで形成された厚層血液塗抹標本を５％ギムザ溶液で３０分間染色し、顕微鏡で検査した。２００個の無性期寄生虫あたりのシゾントの数を、各薬剤濃度について測定し、対照ウェルに対して標準化した。投与量−反応データを非線形回帰分析（ＷｉｎＮｏｎＬｎ  ４．１，Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、及びＳ字状阻害Ｅｍａｘモデルを用いて得られたＩＣ５０値を用いて分析した。Ｅｍａｘ及びＥ０が、それぞれ１００及び１の１５％以内である、予測曲線からの生体外  ＩＣ５０データのみを使用した。薬剤プレートの品質は、クロロキン耐性株Ｋ１及びクロロキン感受性株ＦＣ２７を用いたシゾント成熟アッセイ（２つの独立した実験）を実施することにより確認した。
【０３０７】
顕微鏡スライド読取りの品質管理（ＱＣ）については、分離株あたり２つの無作為に選択した薬剤を第２の顕微鏡使用者により読み取ることであった。２名の顕微鏡使用者により得られた生データが選択した薬剤のＩＣ５０評価値において著しい変化をもたらす場合、全てのアッセイ（即ち、全ての標準薬剤及び実験用化合物）について、第２のリーダーにより再読取りを行った。必要であれば、熟練した顕微鏡使用者による第３の読取りにより、矛盾した結果を解明した。
【０３０８】
代謝安定性のアッセイ（ラット／ヒトの肝細胞Ｃｌｉｎｔ）
凍結保存した肝細胞の生存性を、トリパンブルーを用いて測定し、該細胞濃度を１０６細胞／ｍＬにＬｅｉｂｏｖｉｔｚ  Ｌ−１５緩衝液で調製した。１μＭ化合物（アセトニトリル中；０．０１％ＤＭＳＯ）を、５００μＬの肝細胞（１００万細胞／ｍＬ）でＮＵＮＣプレート中でインキュベートした。反応を、異なる時間ポイント（０、５、１５、３０、６０、９０及び１２０分）において３倍量の冷却したアセトニトリルの１００μＬを反応混合物に添加することにより停止させ、４℃で１５分間遠心分離した。上清を、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳを用いて基質の枯渇について分析した。
【０３０９】
血液：血漿（ＢＰ）比の判定
インキュベーションプレート、及びイヌの血液／血漿を３７℃で１０分間予熱した。各化合物の希釈標準溶液２μＬを３９８μＬのイヌの参考血漿又は血液に加え、最終濃度を１０μＭとした。プレートを振盪しながら３７℃で３０分間インキュベートした。インキュベーション後、血液試料を、４，０００ｒｐｍで１０分間（３７℃）回転させ、血漿試料を３７℃に保存した。遠心した全血液試料から分離した一定量（１００μＬ）の血漿、及び参考の血漿試料を９６ウェルプレートに移した。冷却したアセトニトリル４００μＬを加え、タンパク質を沈殿させ、化合物を遊離させた。１０分間撹拌した後、プレートを４，０００ｒｐｍで３０分間遠心した。上清２５０μＬを新しい９６ウェルプレートに移し、再度４，０００ｒｐＭで３０分間遠心した。上清１００μＬを、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳによる分析に使用した。
【０３１０】
血漿タンパク質結合アッセイ
血漿タンパク質結合は、平衡透析技術を使用して測定し、これによって化合物が２０μＭの濃度を与えるように１０％の血漿に加えられ、等張緩衝液により３７℃で１８時間透析される。血漿及び緩衝溶液をＬＣＵＶＭＳを使用して分析し、一次見掛け結合定数を化合物に対して誘導する。次いで結合定数は、１００％血漿中の遊離％を決定するために使用される。
【０３１１】
ヒト薬物動態（ＰＫ）パラメータの予測
ヒト血漿中のヒト肝細胞Ｃｌｉｎｔ及び遊離画分（Ｆｕ）を使用し、ヒトＣＬを予測するために十分に撹拌したモデルを使用した。通常に使用される、肝血流量、肝重量、肝臓の細胞充実度、及びインビトロインビボ相関性／外挿法（ＩＶＩＶＣ／Ｅ）テンプレート（Ｓｍｉｔｈ等，Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｉｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｖｏｌｕｍｅ  １３，２００４，Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，Ｗｅｉｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を、予測のために用いた。
【０３１２】
薬物動態試験
全てのインビボ試験は、組織化された動物倫理委員会に承認されていた。
化合物の静脈注射による薬物動態（ＩＶＰＫ）又は経口投与による薬物動態（ＰＯＰＫ）は、オスのラット又はオスのビーグル犬で測定した。ラットでのＩＶＰＫについては、実施例７及び実施例１０を、２０％  ＤＭＡ、８０％リン酸緩衝食塩水溶液として投与し、実施例１３は、生理食塩水中、１０％  ｖ／ｖ  ＮＭＰ、２０％  ＤＭＡの溶液として投与した。ＰＯＰＫについては、実施例７、実施例１０を、２０％  ＤＭＡ溶液、８０％リン酸緩衝食塩水溶液として投与し、実施例１３は、強制経口投与により、０．５％  ＨＰＭＣ、及び０．１％  Ｔｗｅｅｎ８０の懸濁液として投与した。実施例１３は、ＩＶＰＫについては１０％エタノール、３０％  ＰＥＧ４００、６０％食塩水溶液として、ＰＯＰＫについては０．５％  ＨＰＭＣ及び０．１％  Ｔｗｅｅｎ８０懸濁液としてイヌに投与した。ラット及びイヌのＰＫに用いる投与量は、実施例７及び１０について０．５ｍｇ／ｋｇであり、又は実施例１３については２ｍｇ／ｋｇであった（ＩＶＰＫ）。実施例７及び１０について、５ｍｇ／ｋｇの投与量が、ＰＯＰＫの際に使用された。実施例１３について、１０ｍｇ／ｋｇの投与量が、ＰＯＰＫ試験の際に使用された。投与後、１３の時間ポイント（イヌのＩＶＰＫについて、０、０．０８３３、０．２５、０．２８３、０．３３３、０．４１７、０．７５、１．２５、３．２５、６．２５、１２．２５、２４．２５時間；イヌのＰＯＰＫについて、０、０．２５、０．５、１、１．５、２、３、４、８、１２、２４、３２、４８時間；ラットのＩＶＰＫについて、０．０８３、０．２５、０．５、１、２、４、７、２４時間；ラットのＰＯＰＫについて、０．２５、１、３、６、１２、２４、３６、４８時間）において血液試料を採集した。血液（ラット）又は血漿（イヌ）試料を、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳにより分析した。ＰＫパラメータは、Ｐｈｏｅｎｉｘ（登録商標）において、ノンコンパートメント分析により評価した。
【０３１３】
感染したＰｆ／ＳＣＩＤマウスの血液中の薬物動態：種々の時間（０．２５、０．５、１、２、４、６、８及び２３時間）に血液試料（２５μＬ）を採集し、２５μＬのミリＱ水と混合し、ドライアイス上で直ちに凍結させた。凍結した試料は、分析まで−８０℃に保存した。媒体で処理したマウスに、同じ血液試料採集を行った。血液試料は、１０μＬの希釈血液を１８０μＬのＡｃＮ：ＭｅＯＨ（８０：２０；ｖ：ｖ）混合物と混合することにより液−液抽出により処理した。ＬＣ／ＭＳＭＳによる定量分析は、ＵＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ）及びＳｃｉｅｘ  ＡＰＩ４０００を用いて実施した。このアッセイによる定量下限値（ＬＬＯＱ）は０．００５μｇ／ｍＬであった。
【０３１４】
ＣＹＰ阻害アッセイ
本試験は、５種の主要なヒトＣＹＰアイソザイムの特異的基質を用いて実施した。これらの基質は、それぞれのＫｍ値に相当する濃度で混合物（それぞれ主としてＣＹＰ  １Ａ２、２Ｃ９、２Ｃ１９、２Ｄ６及び３Ａ４／５で代謝される、フェナセチン、ジクロフェナク、ジクロフェナク、Ｓ‐メフェニトイン、ブフラロール及びミダゾラム）として使用した。ＣＹＰ特異的代謝産物の生成を追跡するために、ＬＣ‐ＭＳ‐ＭＳ（ＭＲＭ  ｍｏｄｅ）を用いた。媒体による対照のピーク面積における代謝産物の生成の減少を用い、ＩＣ５０値を計算した。更に、陽性コントロールとして、個々のＣＹＰ（それぞれＣＹＰ  １Ａ２、２Ｃ９、２Ｃ１９、２Ｄ６及び３Ａ４／５で特異的に阻害されるα‐ナフトフラボン、スルファフェナゾール、Ｎ‐３‐ベンジルニルバノール、キニジン及びケトコナゾール）に特異的な５種の標準的阻害剤の混合物をインキュベートした。試験化合物は、６種の異なる濃度（３０、１０、３、１、０．３、０．１μＭ）で用い、ＩＣ５０を評価した。
【０３１５】
インキュベーションは９６ディープウェルプレート中で実施した。２０ｍｇ／ｍＬのＨＬＭ及び９０μＬの基質混合物溶液を１５８４０μＬのリン酸緩衝液に加え、この混合物１７９μＬを、各ウェル中、１μＬの試験化合物、阻害剤混合鬱溶液又は媒体と混合した。アッセイ混合物中のＤＭＳＯ：ＡＣＮの採集濃度は０．３：０．７％  ｖ／ｖであった。インキュベーションプレートを水浴中に置き、３７℃で５分間予熱し、リン酸緩衝液中の１０ｍｍｏｌ／Ｌ  ＮＡＤＰＨを２０μＬ加えることにより、反応を開始させた。ＮＡＤＰＨを加えた後、インキュベーションプレートを３７℃で５分間インキュベートした。１容量（２００μＬ）の、３％ギ酸及び４０ｎｍｏｌ／Ｌのベラパミルを含む冷却したＡＣＮを加えることにより反応を停止した。プレートを氷上に２０分間静置した後、４０００ｒｐｍで３０分間遠心してタンパク質を沈殿させた。上清１８０μＬをＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析の分析プレートに移した。
【０３１６】
Ｃａｃｏ２透過アッセイ
Ｃａｃｏ２単分子層中の透過性は１０μＭで測定した。Ｃａｃｏ−２細胞単分子層をＨＢＳＳで１回洗浄した。全ての輸送実験を実施する前後のいずれにおいてもＴＥＥＲを測定した。Ｐａｐｐは、頂端部Ａから基底面Ｂ方向で測定した。輸送緩衝液（ＨＢＳＳ、ｐＨ７．４）８００μＬを、最初に単分子層の基底側に供給した。次いで、２００μＬの化合物溶液（全ての試験化合物は、共溶媒として１％  ＤＭＳＯを含むＨＢＳＳ、ｐＨ６．５で希釈した。）を頂端部側に加えることによりアッセイを開始した。試験化合物の添加前、添加の４５分及び１２０分後に、頂端部供給区画及び受領区画から、それぞれ２μＬ及び２００μＬの試料を取り除いた。インキュベータ内部で、トランスウェルプレートを３７℃で、４８０ｒｐｍで振盪した。全ての試料は、ただちにＬＣ−ＭＳ／ＭＳにより分析した。化学阻害剤の混合物：（キニジン（Ｐ−ｇｐ）、スルファサラジン（ＢＣＲＰ）及びベンズブロマロン（ＭＲＰ２））を用い、Ｃａｃｏ−２細胞中の３種の主な流出トランスポータＡＢＣＢ１（Ｐ−ｇｐ）、ＡＢＣＧ２（ＢＣＲＰ）及びＡＢＣＣ２（ＭＲＰ２）の完全な化学的阻害により、受動的透過性を測定した。
【０３１７】
見かけの透過係数（Ｐａｐｐ）は、以下の式に従って計算した：
Ｐａｐｐ＝（ΔＱ／Δｔ）／（Ａ×ＣＤ）［ｃｍ／ｓ］  （１）
式中、（ΔＱ／Δｔ）［ｃｍ／ｓ］は、時間とともに基底側（受領区画）に輸送される試験化合物の累計量であり、Ａは単分子層膜の表面積（ｃｍ２）であり、ＣＤは、（ΔＱ／Δｔ）を測定した機関の供給チャンバー内の平均薬物濃度である。Ｈｅｐ  Ｃｌｉｎｔ、ＰＰＢ、ＢＰ比、及び薬物動態特性の予測値／観察値を以下の表４に示す。
【０３１８】
【表４】
0006529983.tif 000073
【０３１９】
寄生虫の負担の迅速な減少は、臨床症状の迅速な軽減をもたらし、薬剤耐性の発現のリスクを最小限にするために不可欠であるので、本発明の化合物は、インビトロにおけるＰＫ／薬理学的特性を更に評価した：インビトロにおける寄生虫減少比（ＰＲＲ）アッセイ（Ｌｅ  Ｍａｎａｃｈら，２０１３，Ｍａｌａｒ  Ｊ．，１６，４２４−４３０）で試験を行った場合、実施例１３は、暴露４８時間後に、同じアッセイにおけるクロロキンと同等の作用である、４対数を超える殺傷力を示した。
【０３２０】
上述した、Ｐｆ／ＳＣＩＤ  モデル１では、実施例１３は、経口経路により２０ｍｇ／ｋｇ容量で毎日治療し、４日後に、検出限界未満までｐｆ寄生虫を除去した。最大の殺傷率は４０ｍｇ／ｋｇで観察された。この投与量で観察される血液Ｃｍｉｎ（０．０４  μＭ）は、ヒト投与量予測のための最小殺寄生虫濃度（ＭＰＣ）と考えられた。
【０３２１】
ＣＹＰ阻害
実施例７、１０及び１３は、ヒトＣＹＰ  ３Ａ４、２Ｄ６、２Ｃ９、２Ｃ１９及び１Ａ２を阻害しなかった。ＩＣ５０は３０μＭ超であった。経時的な阻害アッセイにおけるＩＣ５０は５６μＭであった。
【０３２２】
Ｃａｃｏ２透過性（ｐＨ６．５／７．４）
データを以下の表５に示す。
【０３２３】
【表５】
0006529983.tif 000074
【０３２４】
インビボにおける代謝産物の同定
実施例１３の代謝産物を、以下のモデルを用いてインビトロ及びインビボの両方で同定した。
−インビトロ：実施例１３の化合物を、２ｍＭ  ＮａＤＰＨの存在下、最終濃度１０μＭで、ヒト肝臓ミクロソーム（ＨＬＭ）又はラット肝臓ミクロソーム（ＲＬＭ）とインキュベートした。反応混合物中に２ｍＭグルタチオン（ＧＳＨ）又はＮ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）を含ませることにより、反応中間体を捕捉した。
−胆管カニューレ装着ラットでのインビボ：実施例１３を、対照（ｎ＝３）又はＢＤＣラット（ｎ＝２）について、それぞれ２ｍｇ／体重１ｋｇ又は４ｍｇ／体重１ｋｇの投与量で、頸静脈を通して急速投与として静脈投与（ＩＶ）した。０．０８３、０．２５、０．５、１、２、４、６、８及び２４時間に、頸動脈を通して血液試料を採集し、胆汁試料を、０〜２時間、２〜４時間、４〜６時間、６〜８時間及び８〜２４時間間隔で採集し、尿試料を、０〜８時間及び８〜２４時間間隔で採集した。親化合物及び代謝産物の存在について、胆汁及び尿試料を分析し、親化合物の存在について血液試料を分析した。データを、以下の表６に示す。
【０３２５】
【表６】
0006529983.tif 000075
【０３２６】
上記研究は、実施例２の化合物が実施例１３の化合物の活性代謝産物であり、インビトロ及びインビボの両方で生成することを示唆した。活性代謝産物への変換割合はマウスで最も高く、次にラットが高く、次いでヒトの肝臓ミクロソームであった。
【０３２７】
重要なことに、ＨＬＭ又はＨｕ肝細胞の存在下で同定された特有の代謝産物はなかった。ＧＳＨ又はＮＡＣ付加物の生成はなかった。従って、インビトロで生成される反応性代謝産物はなかった。