(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
梅肉エキスの中和処理物を含有することを特徴とする体重増加抑制剤（但し、梅肉エキスの中和処理物は、梅肉の溶媒抽出による抽出成分の中和処理物を含まない）。
【請求項２】
梅肉エキスの中和処理物が、梅搾汁液を濃縮した梅肉エキスの中和処理物である、請求項１に記載の体重増加抑制剤。
【請求項３】
カロリー過多な食事の摂取時における体重の増加を抑制するための、請求項１又は２に記載の体重増加抑制剤。
【請求項４】
過食状態における体重の増加を抑制するための、請求項１〜３のいずれか一項に記載の体重増加抑制剤。
【請求項５】
梅肉エキスの中和処理物を含有することを特徴とする血中のレプチンレベル減少剤（但し、梅肉エキスの中和処理物は、梅肉の溶媒抽出による抽出成分の中和処理物を含まない）。
【請求項６】
梅肉エキスの中和処理物が、梅搾汁液を濃縮した梅肉エキスの中和処理物である、請求項５に記載のレプチンレベル減少剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、体重増加を抑制するための剤に関する。より詳しくは、梅肉からのエキスを含有する、体重増加抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
日本では、肥満人口は年々高まり、現在のところＢＭＩ３０以上の肥満は約３％と報告されている。また、成人だけではなく小児の肥満も最近増加しており、１０〜１２歳では、男子の約１０％、女子の約８〜９％が肥満と診断されている。肥満の原因として、食生活の変化や運動不足などが挙げられている。日本における肥満の９割以上がエネルギーの摂取過剰や消費不足を原因とする単純性肥満である。
肥満は、数多くの疾患の危険因子と考えられている。例えば、糖尿病、動脈硬化、高血圧などの疾患は、肥満との強い相関が示唆されている。
【０００３】
梅肉には、古くから様々な効果があることが知られている。例えば、特許文献１（特開２００６−３４８００１）には、梅肉エキスを含有する冷え症改善剤及び冷え症改善剤を含有する食品が記載されている。
【０００４】
特許文献２（特開２００６−６９９２１）には、梅の抽出物を有効成分として含有するα−グルコシダーゼ阻害剤が記載されている。さらに、梅肉抽出物又は梅肉抽出物の中和処理物が、抗腫瘍効果を有することが確認されており（特許文献３（特開２００３−２６５１３８））、また、ウイルス性肝炎患者における肝機能改善作用を有することも確認されている（特許文献４（特開２０１１−２０１８４１））。
【０００５】
特許文献５（特表２０１１−５１９８７２）には、梅の花、枝及び／又は葉等の脂溶性有効画分に含まれるスクアレンを酸化防止、育毛、美白用組成物の製造に使用することが記載されている。
【０００６】
レプチンは、遺伝性肥満マウスの病因遺伝子の研究で発見された肥満遺伝子に由来するホルモンである。レプチンは、脂肪細胞から分泌され、強力な摂食抑制やエネルギー消費亢進をもたらすことより、その作用不足は肥満症の成因に重要な役割を有すると考えられている。肥満症患者の血中では、レプチン濃度が上昇していることが知られており、肥満による代謝異常等の病態形成要因がレプチンの生理的な作用を阻害し、高レプチン血症を誘引していると考えられている 。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２００６−３４８００１号公報
【特許文献２】特開２００６−６９９２１号公報
【特許文献３】特開２００３−２６５１３８号公報
【特許文献４】特開２０１１−２０１８４１号公報
【特許文献５】特表２０１１−５１９８７２号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、体重増加を有意に抑制することができる、安全な剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者は、梅肉エキス又は梅肉エキスの中和処理物を摂取することにより、体重増加が抑制されることを発見し、本発明に至った。また、本発明者は、梅肉エキス又は梅肉エキスの中和処理物を摂取することにより、梅肉エキス又は梅肉エキスの中和処理物を摂取しない対照と比べて、レプチンの血中濃度が有意に減少することされることを発見し、本発明に至った。
【００１０】
本発明によれば、梅肉エキス（抽出物）又は梅肉エキスの中和処理物を含有する体重増加抑制剤が提供される。
本発明のある実施態様では、本発明の体重増加抑制剤により、カロリー過多な食事の摂取時における体重の増加を抑制することができる。
本発明のある実施態様では、本発明の体重増加抑制剤により、過食状態における体重の増加を抑制することができる。
さらに、本発明によれば、梅肉エキス又は梅肉エキスの中和処理物を含有する、血中のレプチンレベル減少剤が提供される。
【発明の効果】
【００１１】
本発明によれば、体重の増加、特に、過食状態における体重の増加やカロリー過多の食事を摂取している状態における体重の増加を有意に抑制することができる。
また、炎症性疾患など、血中レプチン濃度の減少が望まれる場合等にレプチンのレベルを抑制する効果を期待することができる。
また、本発明の体重増加抑制剤及びレプチンレベル減少剤は、食品として古くから摂取されている梅肉エキスを原料とすることから、副作用等の懸念も少なく、安心して摂取可能である。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】実施例３におけるＨＦＤ給餌後の体重推移・群平均推移を示すグラフである。
【図２】実施例３におけるＨＦＤ給餌後１１３日目の平均体重を示すグラフである。
【図３】実施例３における被験物投与開始後の体重増加を示すグラフである。
【図４】実施例４における被験物投与を開始した後の各群の摂餌量推移を示すグラフである。
【図５】実施例４における投与期間中の平均摂餌量を示すグラフである。
【図６】実施例５における回収した糞便の乾燥重量と、糞便回収日を含む直近の摂餌量（湿重量）の関係を示すグラフである。
【図７】実施例５における排出率（摂取量／排泄量×１００％）を示すグラフである。
【図８】実施例５における糞便中の総脂質量を示すグラフである。
【図９】実施例５における糞便中のトリグリセライド量を示すグラフである。
【図１０】実施例５における糞便中のコレステロール量を示すグラフである。
【図１１】実施例６における血漿中レプチン濃度を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明の体重増加抑制剤及びレプチンレベル減少剤は、梅肉エキスもしくは梅肉エキスの中和処理物を含有する。本発明の体重増加抑制剤は、摂取しても体重の増加が抑制される以外、特段の健康状態を損なうことはない。例えば、本発明の体重増加抑制剤は、体重が増加する条件下、例えば、脂質の多い食事などカロリー過多の食事を摂食している条件下、食事の絶対量が多い過食条件下、運動不足などの条件下において、体重の増加を有意に抑えることができる。また、体重が増加しやすい条件下以外でも、健康に悪影響を与えることなく、体重の増加を抑制することができる。
本願の体重増加抑制剤及びレプチンレベル減少剤は、経口により投与・摂取される。
【００１４】
本発明のある実施形態では、梅肉エキス又は梅肉エキスの中和処理物を含有する体重増加抑制剤又はレプチンレベル減少剤を、食事前、食事中、食後、又は食間に摂取する。梅肉エキスは、食品である梅肉由来であり、梅肉自体に重篤な副作用が知られていないことから、異常に大量に摂取しない限り、摂取量に制限は特にない。例えば、梅肉エキスの場合には成人で０．５〜７ｇ／日、梅肉エキスの中和処理物の場合には５〜４０ｇ／日を摂取することにより、体重増加の抑制を図ることができる。本発明の体重増加抑制剤及びレプチンレベル減少剤を、単独で若しくは水とともに投与・摂取したり、又は、食品に混ぜて投与・摂取してもよい。例えば、スポーツドリンク、野菜ジュース等に溶いたり、ヨーグルトやドレッシング、調味料に混ぜて摂取可能である。
さらに、本発明の体重増加抑制剤及びレプチンレベル減少剤は、ヒトのみならず、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ等の動物に投与することも可能である。
【００１５】
本願発明の体重増加抑制剤及びレプチンレベル減少剤は、梅肉エキス又は梅肉エキスの中和処理物を含有する。ここで、梅肉エキスとは、例えば、梅搾汁液を加熱濃縮して高濃度化したものであるが、梅肉を細切りしてそのまま煮詰める等により得たものであってもよい。梅搾汁液を濃縮した梅肉エキス又は梅肉エキスの中和処理物の製造方法は、以下のとおりである。
原料となる梅の種類は、食用である限り、特に限定されない。例えば、豊後、白加賀、花香実、古城、甲州最小、竜峡小梅、藤五郎、南高、鶯宿、竜峡小梅、玉英、梅郷、長束及び小向等を例示することができ、特に、白加賀及び小梅を使用することができる。また、食用として品種改良された梅に限らず、野生種の梅（杏のＤＮＡを持たず、梅のＤＮＡのみからなるもの）をも原料として使用することが可能である。
【００１６】
採取した梅の実を、種と果肉（梅肉）とに分離したり、果肉を搾汁しやすい大きさに粉砕したりして、果肉を搾汁し、梅搾汁液を得る。搾汁方法は、例えば、遠心力や圧力を利用した絞り器等を用いて梅肉を絞り、分離されてくる絞り汁を回収して行うことができる。原料とする梅の品種にもよるが、通常は、２０ｋｇの梅の実から、約８ｋｇの梅搾汁液を採取することができる。
続いて、梅搾汁液を濃縮して、梅肉エキスとする。梅肉エキスは、梅搾汁液を約９０時間加熱沸騰させて濃縮液とし、さらに２４時間加熱処理することによりＢｒｉｘ値７０〜８０％の梅肉エキスを得ることができる。通常は、８ｋｇの梅搾汁液から約２ｋｇの濃縮液が得られ、最終的には約０．４ｋｇの梅肉エキスが得られる。梅肉エキスは、長期保存が可能であるため、必要な時に用時調製して使用することができる。
【００１７】
本発明の体重増加抑制剤及びレプチンレベル減少剤は、上記のように得られた梅肉エキスを含有するものであってもよいが、さらに、製造加工を容易にし、風味を高めるために、梅肉エキスをさらに中和処理した梅肉エキスの中和処理物を含有するものであってもよい。
梅肉エキスの中和処理物は、以下のように製造される。加熱濃縮後の梅肉エキスを、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、水酸化カリウム等の飲用又は経口摂取において薬学的に許容されるアルカリ剤を用いて、ｐＨが６〜８になるように中和することが好ましい。より具体的には、梅肉エキスを等量の水で希釈して懸濁液とし、該懸濁液に中和のための溶液を適量添加して、懸濁液のｐＨを６〜８に調整して中和する。中和後、必要に応じて、不溶物を遠心分離して取り除いてもよい。また、市販の滅菌フィルターを通して無菌化してもよい。さらに糖類を加え、より飲食に適した味に調整してもよい。中和処理は、製剤加工を容易にすること、梅の強い酸味を緩和し、摂取しやすくすること等を目的として行う。
【００１８】
上記のようにして得られた梅肉エキスまたは梅肉エキス中和処理物にさらに担体を加えて、体重増加抑制剤又はレプチンレベル減少剤を調製する。加える担体は、薬学的に許容可能なもの又は飲食可能なものであれば特に限定されない。例えば、担体として、賦形剤、滑沢剤、希釈剤、結合剤、崩壊剤、乳化剤、安定剤、矯味矯臭剤等を使用することができる。
本発明の体重増加抑制剤及びレプチンレベル減少剤は、その形状は特に限定されないが、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤、ペースト剤、ドリンク剤等の経口摂取に適した形状とするのが好ましい。また、本発明の体重増加抑制剤及びレプチンレベル減少剤には、保存料、着色料、甘味料、酸化防止剤、増粘安定剤、乳化剤、調味料、防腐剤等の食品添加物を適宜配合することができる。
【００１９】
本発明の梅肉エキスまたは梅肉エキス中和処理物を含有する剤は、摂取することにより、体重の増加を抑制することができる。例えば、脂質の多い食事などカロリー過多の食事により、通常では体重が増加する条件下でも、本発明の体重増加抑制剤を摂取することにより、本発明の体重増加抑制剤を摂取していないときと比較して、体重の増加を有意に抑えることができる。この体重増加抑制作用は、食欲の減少に起因するものでも、腸管における脂質吸収が抑制されることに起因するものでもないことが確認されている。
また、本発明の梅肉エキスまたは梅肉エキス中和処理物を含有する剤は、摂取することにより血中のレプチンレベルを抑制することができる。
以下に実施例に基づいて本発明を説明するが、下記の実施例は本発明を説明するためのものであり、本発明を限定するためのものではない。
【実施例１】
【００２０】
＜梅肉の濃縮液調製＞
採取直後の青梅２０ｋｇをミキサーで砕き、種と果肉（梅肉）とに分離すると共に、搾汁しやすい大きさに梅肉を砕いた。遠心力を利用した絞り器で、粉砕した梅肉を絞り、分離されてくる絞り汁を回収して梅搾汁液８ｋｇを得た。この梅搾汁液を加熱沸騰させて約９０時間濃縮して、梅肉の一次濃縮を行った。さらに２４時間加熱処理し、梅肉の二次濃縮液０．４ｋｇ（Ｂｒｉｘ値７５％）を得た。
【実施例２】
【００２１】
＜被験物の調製＞
（１）ＭＫ６１５（梅肉エキスの中和処理物）
実施例１と同様の方法で作成した二次濃縮液４００ｇに日本薬局方精製水８００ｍｌを加えて撹拌し、ＮａＯＨ（食品添加用）を少量ずつ氷冷しながら加えてｐＨを６．８に調整した。この中和溶液をＭｉｓａｔｏｌ（登録商標）ＧＬと二次濃縮液が同じ含量となるように水で希釈した。この希釈液を以下ＭＫ６１５液とする。
【００２２】
（２）微粉化梅果皮懸濁液（Ｐｅｅｌ液）
梅に由来するトリテルペン酸の影響を確認するために、トリテルペン酸が非常に多く局在している青梅果皮を実験動物に投与可能な形態に加工する目的で、微粉化梅果皮懸濁液を作成した。この微粉化梅果皮懸濁液は、実施例１と同様の方法で作成した梅肉エキスに含有されるトリテルペン酸に比べ、５０〜３００倍の濃度のトリテルペン酸を有する。
製品製造における果汁搾汁残渣（青梅の加圧搾汁残渣）から果皮を、種や果肉から丁寧に分取し、ミキサーで細切した。この青梅果皮に流動性を持たせるための押水（精製水）を加えて、石臼式微粉化装置：マスコロイダー（増幸産業）を用いて、クリアランス４０μｍで微粉化し、青梅果皮の微粉化素材（懸濁液）を調製した。得られた懸濁液の果皮重量％は、１４．６２％であった（この液をストック液として保管した）。このストック液中のトリテルペン酸（ウルソール酸とオレアノール酸）の総濃度は、０．３００８ｍｇ／ｇ（うち、ウルソール酸０．２６３２ｍｇ／ｇ、オレアノール酸０．０３７６ｍｇ／ｇ）であった。トリテルペン酸の濃度は、ストック液をメタノールにより２回抽出することにより得られた抽出物の濃度を、ＬＣ−ＭＳ法により測定した。
このストック液を用いて、下記の「ＭＫ６１５＋微粉化梅果皮懸濁液」や「二次濃縮液由来酸性沈降物＋微粉化梅果皮懸濁液」を作成した。
【００２３】
（３）ＭＫ６１５＋微粉化梅果皮懸濁液（ＭＫ６１５＋Ｐｅｅｌ液）
実施例１と同様の方法で作成した二次濃縮液４００ｇに、上記微粉化果皮液のストック液３５５ｍｌを加え、さらに日本薬局方精製水３００ｍｌを加えてよく撹拌し、ＮａＯＨ（食品添加用）を少量ずつ氷冷しながら加えてｐＨ６．８に調整した。さらに、日本薬局方精製水でメスアップし、この調製液のトリテルペン酸類の濃度が、０．１ｍｇ／ｍｌとなるように調整した。さらに、二次濃縮液の濃度がＭｉｓａｔｏｌ（登録商標）ＧＬ相当の濃度となるように、微粉化梅果皮懸濁液のストック液と日本薬局方精製水の１：３容量混合液を加えて希釈した。この溶液のトリテルペン酸の濃度は、希釈前同様に０．１ｍｇ／ｍｌである。以下、このＭＫ６１５と微粉化梅果皮懸濁液の混液をＭＫ６１５＋Ｐｅｅｌ液とする。
【００２４】
（４）二次濃縮液由来酸性沈降物＋微粉化梅果皮懸濁液（ＩＤ＋Ｐｅｅｌ液）
実施例１と同様の方法で作成した二次濃縮液４００ｇに日本薬局方精製水８００ｍｌを加えて撹拌し、二次濃縮液の希釈液を得た。この溶液は梅に含まれる有機酸により酸性を示す。この希釈液を酸性のまま遠心分離し（室温中３０００ｒｐｍにて１５分）、沈降物を分取した。この沈降物を日本薬局方精製水３００ｍｌに再懸濁し、ＮａＯＨ（食品添加用）を少量ずつ氷冷しながら加えて、ｐＨ６．８に調整した。再度、上記と同様に遠心分離（室温中３０００ｒｐｍにて１５分）して沈降物を取り除き、上清を得た。この上清には、中和により水に溶解する二次濃縮液の成分を含有する。この上清溶液に０．５Ｎの濃度となるように塩酸を加えて酸性化し、室温で２４時間放置して沈降反応を行った。その後、遠心分離により酸性沈降物を回収した。この酸性沈降物を乾燥固形化し、重量を測定した。その結果、４００ｇの二次濃縮液中に酸性沈降物を２５．８ｇ含有していた。
この酸性沈降物は中性では水に溶解し、酸性では水に不溶性となる成分である。中和によりその存在状態が変化する成分であることから、中和による影響を確認する目的でこの成分の評価を行うこととした。
上記の固形化した酸性沈降物に、上記の微粉化梅果皮液のストック液１００ｍｌと日本薬局方精製水１００ｍｌとを加えた後、ＮａＯＨ（食品添加用）を少量ずつ加え、ｐＨ６．８に調整した。最後に精製水でメスアップして３００ｍｌとした。この溶液を８０℃で３０分の加熱処理を行うことにより殺菌した。この溶液中のトリテルペン酸類の濃度は０．１ｍｇ／ｍｌであり、酸性沈降物の濃度は、Ｍｉｓａｔｏｌ（登録商標）ＧＬ中の二次濃縮液の濃度から換算される含量と同等になるように調製した。以下、この酸性沈降物と微粉化梅果皮懸濁液の混液をＩＤ＋Ｐｅｅｌ液とする。
【実施例３】
【００２５】
＜体重抑制効果の確認＞
ＨＦＤ（Ｈｉｇｈ  Ｆａｔ  Ｄｉｅｔ；高脂質飼料）を投与することにより、肥満マウスを作成した。ＨＦＤは、Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｄｉｅｔ社の固形飼料Ｄ０９１００３０１（脂肪４０ｋｃａｌ％、炭水化物４０ｋｃａｌ％（高フルクトース処方）、コレステロール２％を含有）を使用し、水分として、４２ｇ／Ｌ（５５％フルクトース、４５％スクロース）糖含飲水を与えた（糖組成は、コーンシロップ・転化糖の糖組成で高フルクトース）。
普通飼料対照群のマウスには、普通飼料としてＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ社の固形飼料ＣＲＦ−１（脂肪１７．５％、タンパク質２４．９％、炭水化物５７．６％）を与え、水分として、糖を含まない水道水を与えた。
【００２６】
ＨＦＤの給餌から２８日（４週）経過目以降、ＨＦＤを給餌したマウスを４群に分け、被験物を８４日間（ＨＦＤ飼料を与えてから１６週後まで）投与し、評価を行った。被験物の投与は、ゾンデを用いて１０ｍｌ／ｋｇ（体重）を強制胃内投与により行った。ＨＦＤを与えてから２８日目の体重に基づいてＨＦＤを給餌したマウスを４つの群に分け、Ｋｒｕｓｋａｌ−Ｗａｌｌｉｓ検定（ｐ＝０．９３７８）により、群間の体重に差がないことを確認した。普通飼料を与えたマウス群（普通飼料対照群）には、被験物の投与を行わなかった。ＨＦＤ給餌マウス群と普通飼料対照群に投与した飼料及び被検物は、下記のとおりである。
【００２７】
【表１】
0006518993.tif 000002
【００２８】
ＨＦＤ給餌後の体重推移・群平均推移を図１に、ＨＦＤ給餌後１１３日目の平均体重を図２に、被験物投与開始後の体重増加を図３にそれぞれ示す。
ＨＦＤの給餌から２８日目のマウスの平均体重は２７．１ｇとなり、普通飼料対照群の平均体重２３．１ｇよりも約４．１ｇの体重差がみられ、４週間のＨＦＤ給餌により、体重が増加し、肥満が進行しつつあることがわかる（図１）。その後もＨＦＤ給餌を続けると、ＨＦＤ対照群では、体重が増加し続け、被験物投与開始から１２週時点（ＨＦＤ給餌開始から１６週時点）までの体重増加は、平均１１．５ｇとなった。普通飼料対照群の体重増加は平均５．８ｇであるため、ＨＦＤ対照群は、普通飼料対照群の約２倍の体重増加を示す。普通飼料対照群の体重増加は、成長による体重の自然増加であると考えられる。そのため、ＨＦＤ対照群の体重増加のうち、約半分は、肥満度が上がることによる体重増であり、残り約半分は、成長による自然の体重増加であると推測される。したがって、ＨＦＤ給餌開始４週までは急激な体重増加により肥満度が上昇し、４週以降は、ゆっくりと肥満度が上昇していると考えられる。
【００２９】
ＨＦＤの給餌を継続しつつ、各被験物を１２週間投与すると、ＭＫ６１５投与群及びＭＫ６１５＋Ｐｅｅｌ投与群では、ＨＦＤ対照群と比べて投与開始後の体重増加が明らかに抑制された（Ｏｎｅ−ｗａｙ  ＡＮＯＶＡのＰｏｓｔ−ｈｏｃ  ｔｅｓｔとしてＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ／Ｄｕｎｎ  ｔｅｓｔ，Ｐ＜０．００５で有意である）（図１〜図３）。
よって、ＨＦＤ給餌後の、ＭＫ６１５投与群及びＭＫ６１５＋Ｐｅｅｌ投与群の体重増加が、ＨＦＤ対照群と比べて有意に抑制されたことが確認された。一方、梅エキス由来の酸性沈降物（中性では水溶性）成分や果皮に多く存在するトリテルペン酸が豊富なＩＤ＋Ｐｅｅｌ投与群には明らかな作用を確認できなかった。
【実施例４】
【００３０】
＜摂餌量の測定＞
被験物の経口強制投与等のストレスによる摂餌抑制によって、ＭＫ６１５投与群及びＭＫ６１５＋Ｐｅｅｌ投与群の摂餌量が減少し、体重増加が抑制された可能性が考えられる。そこで、実施例３で確認された体重抑制効果が、摂餌量の減少に因るかどうかを確認するために、被験物の投与開始後から投与群ごとの摂餌量をモニタリングした。モニタリング及び給餌は２日ごとに行い、各測定値は、２日間の平均摂餌量とした。給餌は、予測消費量の約１．５倍量を与えて、十分に自由摂取が可能となるように留意した。
【００３１】
摂餌量は、一定重量の飼料を飼育ケージに給餌し、一定期間（２日）経過後の飼料残量の重量を測定してケージ単位の摂餌量とした。さらに、ケージ内の個体数と日数（２日）で除して、群毎の１匹当たりの１日摂取量を求めた。
【００３２】
被験物投与を開始した後の各群の摂餌量推移を図４に示す。ＨＦＤを給餌した各被験物の投与群において、群間に大きな摂餌量の変化は見られなかった。投与期間中の平均摂餌量を見ても（図５）、ＨＦＤを与えた各群で明らかな摂餌量の違いはなかった。したがって、実施例３で確認された体重抑制効果は、摂餌量の減少によるものではないことが分かった。また、飲水ボトルの消費量は、群間で有意に異なることはなかった（データは示さず）。
【実施例５】
【００３３】
＜糞便中の脂質解析＞
実施例４で確認されたように、ＭＫ６１５投与群及びＭＫ６１５＋Ｐｅｅｌ投与群では、ＨＦＤ対照と比較して摂餌量の大きな変化はないことが確認された。そのため、実施例３で確認された体重抑制効果が、腸管における脂質吸収の抑制等に因るかどうかを確認するために、糞便を回収して、乾燥重量及び糞便に含まれる脂質分画の量を測定した。
【００３４】
最終投与４日前の、朝１０時から翌朝１０時までの２４時間に排泄された糞便を集め、−２０℃で凍結保存した。集めた糞便を、解凍後、ただちに油圧ポンプを用いて室温で６時間減圧乾燥し、乾燥重量を測定した。
【００３５】
さらに、乾燥した糞便の０．５０ｇを秤量採取し、クロロホルム−メタノール（２：１）により抽出し、Ｆｏｌｃｈ分配をしてクロロホルム層を回収し、溶媒を留去後、減圧乾燥して、抽出物重量を測定し、さらに１０ｍｌのイソプロパノールに再溶解した。このイソプロパノール溶液のトリグリセライド量及びコレステロール量をそれぞれ酵素法により測定し、糞便中の脂質含量を算出した。
【００３６】
回収した糞便の乾燥重量と、糞便回収日を含む直近の摂餌量（湿重量）の関係を図６に示す。ケージ単位の摂餌量、糞便排泄量を１匹当たりの値に変換して比較すると、群毎の糞便排泄量は直近の摂餌量と関連がみられた。図７に示す排出率（摂取量／排泄量×１００％）では、ＨＦＤ群間にほとんど違いがないことが明らかになった。すなわち、ＭＫ６１５投与群及びＭＫ６１５＋Ｐｅｅｌ投与群における体重増加抑制は、排泄率が高いことを理由とするためではないことが明らかになった。なお、普通飼料対照群における排出率の高さは、飼料中の繊維性の未消化物に起因するものと考えられる。
【００３７】
糞便中の脂質成分について解析した結果を図８〜１０に示す。糞便中の脂質含量は、ＨＦＤ摂餌により上昇するが、いずれの群でも糞便中に排出されるトリグリセライド量は少ない。一方、コレステロールは、ＨＦＤ摂餌により糞便中に大量に排泄されることがわかった。体重増加が抑制されたＭＫ６１５投与群及びＭＫ６１５＋Ｐｅｅｌ投与群においても、栄養脂質としてのトリグリセリドの腸管吸収が抑制されて糞便中に排泄される傾向は観察されなかった。糞便中の脂質の約半量はコレステロールであり、トリグリセライドの量はその１００分の１程度であった。
【００３８】
これらの結果から、ＭＫ６１５投与群及びＭＫ６１５＋Ｐｅｅｌ投与群において確認された体重増加抑制は、腸管における脂質吸収の抑制による糞便排出量の増加又は糞便中の脂質の増加に因るものではないことが確認された。以上の結果から、梅肉エキスには、体重増加を抑制する効果があり、その効果は、摂食・摂餌の量の減少や、腸管における脂質吸収抑制によるものではないことが示された。
【実施例６】
【００３９】
＜血漿中のレプチン濃度の測定＞
実施例３における各群（ＨＦＤ対照群、ＭＫ６１５投与群、ＩＤ＋Ｐｅｅｌ投与群、ＭＫ６１５＋Ｐｅｅｌ投与群、普通飼料対照群）の被検物投与開始から１２週時点での血漿中のレプチン濃度を測定した。株式会社森永生科学研究所のマウスレプチン  ＥＬＩＳＡキットを用いて、血漿中のレプチン濃度を測定した。普通飼料対照群は、血漿をそのまま試料とし、普通飼料対照群以外は血漿を４倍希釈して、キットの説明に従ってレプチン濃度を測定した。検定には、ｏｎｅ  ｗａｙ  ＡＮＯＶＡのＰｏｓｔ−ｈｏｃ  ｔｅｓｔとしてＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ／Ｄｕｎｎ  ｔｅｓｔを用いた。結果を下記に示す。
【００４０】
【表２】
0006518993.tif 000003
【００４１】
また、ＨＦＤ対照群、ＭＫ６１５投与群、ＩＤ＋Ｐｅｅｌ投与群、ＭＫ６１５＋Ｐｅｅｌ投与群、普通飼料対照群の結果について、Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉ／Ｄｕｎｎ  ｔｅｓｔによる検定結果を図１１に示す。なお、表２の結果は、図１１に対応する。
これらの結果から、ＭＬ６１５投与群、ＭＫ６１５＋Ｐｅｅｌ投与群に、血中のレプチンレベルが抑制されていることが確認された。
【図１】
0006518993.tif 000004
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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