(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
１又は複数の分析対象物質及び夾雑物を含有する検体を注入する注入部と、
前記注入部に連通し、前記注入部から供給された前記検体を通液することにより、分析対象物質を主に含有する第１抽出液を排出する第１固相部と、
細孔を有する充填剤からなり、前記第１抽出液をサイズ排除分画する分画部と、
前記検体若しくは溶剤を前記注入部から前記第１固相部に供給し又は前記第１抽出液を前記分画部に供給する送給部と、
前記分画部から溶出する溶出液を分画毎に採取するトレイ部と、
前記トレイ部を移動するトレイ移動部と、を備え、
前記第１固相部が、前記注入部に連通し、前記検体中の夾雑物の一部を吸着して分析対象物質及び夾雑物の残部を含む予備抽出液を排出する第３固相部と、
前記第３固相部に連通し、前記予備抽出液中の分析対象物質及び夾雑物の残部を吸着する第４固相部と、を備え、
前記送給部が、夾雑物の残部を選択的に溶離可能な第１溶剤及び分析対象物質を溶離可能な第２溶剤を前記第４固相部に個別に供給し、分析対象物質と前記第２溶剤とを含有する前記第１抽出液を得ることを特徴とする分析試料作製装置。
【請求項２】
前記分画部から溶出する前記溶出液の所定の分画を通液することにより、分析試料として第２抽出液を得る第２固相部をさらに備える、請求項１に記載の分析試料作製装置。
【請求項３】
前記第３固相部及び前記第４固相部が、前記分析対象物質と同じ極性を有する化学物質を吸着しない固相担体を備え、前記送給部がさらに前記予備抽出液にその極性を変更する極性変更溶剤を供給し、極性が変更された前記予備抽出液を前記第４固相部に供給する、請求項１又は２に記載の分析試料作製装置。
【請求項４】
前記第３固相部が前記分析対象物質と同じ極性を有する化学物質を吸着しない固相担体を備え、かつ、前記第４固相部が前記分析対象物質と同じ極性を有する化学物質を吸着する固相担体を備える、請求項１又は２に記載の分析試料作製装置。
【請求項５】
前記第４固相部に気体を通気して前記第４固相部内を乾燥する通気部をさらに備え、
前記送給部が、前記第４固相部に前記第１溶剤を供給した後に前記第２溶剤を供給し、前記送給部による前記第４固相部への前記第１溶剤の供給と前記第２溶剤の供給との間に、前記通気部が前記第４固相部を乾燥する、請求項１〜４のいずれか１項に記載の分析試料作製装置。
【請求項６】
制御部をさらに備え、前記制御部が、前記送給部による前記検体、前記溶剤、前記第１〜第２溶剤、前記極性変更溶剤又は前記溶出液の前記所定分画の供給、前記通気部による通気、並びに前記移動部による前記トレイ部の移動よりなる群から選ばれる少なくとも１種の動作を制御し、前記検体から自動的に前記分析試料を作製する、請求項１〜５のいずれか１項に記載の分析試料作製装置。
【請求項７】
１又は複数の分析対象物質及び夾雑物を含む検体を固相担体に通液し、分析対象物質を主に含有する第１抽出液を得る工程Ａと、
前記第１抽出液をサイズ排除分画し、溶出した溶出液を分画毎に分析試料として採取する工程Ｂと、を含み、
前記工程Ａが、前記検体中の夾雑物の一部を吸着する第１固相担体と、前記検体中の分析対象物質及び夾雑物の残部を吸着する第２固相担体と、からなる固相担体を用いて行なわれ、
前記検体の通液により、前記夾雑物の一部を前記第１固相担体に吸着させ、前記分析対象物質及び前記夾雑物の残部を含む予備抽出液を得る工程Ａ１と、
前記予備抽出液の通液により、前記分析対象物質及び前記夾雑物の残部を前記第２固相担体に吸着させる工程Ａ２と、
前記第２固相担体に前記夾雑物の残部を選択的に溶離可能な第１溶剤及び前記分析対象物質を溶離可能な第２溶剤を個別に通液し、前記分析対象物質と前記第２溶剤とを含有する第１抽出液を得る工程Ａ３と、を含むことを特徴とする分析試料作製方法。
【請求項８】
前記工程Ｂで得られた前記溶出液の所定の分画を固相抽出し、第２抽出液を分析試料として得る工程Ｃをさらに含む、請求項７に記載の分析試料作製方法。
【請求項９】
前記工程Ａ２が、前記分析対象物質と同じ極性を有する化学物質を吸着しない前記第１固相担体及び前記第２固相担体を用い、前記予備抽出液の極性を変更する極性変更溶剤との混合により極性が変更された前記予備抽出液を前記第２固相担体に通液することにより行なわれる、請求項７又は８に記載の分析試料作製方法。
【請求項１０】
前記工程Ａ２が、前記分析対象物質と同じ極性を有する化学物質を吸着しない前記第１固相担体、及び、前記分析対象物質と同じ極性を有する化学物質を吸着する前記第２固相担体を用いて行なわれる、請求項７〜９のいずれか１項に記載の分析試料作製方法。
【請求項１１】
前記工程Ａ３が、前記第２固相担体に前記第１溶剤を通液する工程と、前記第１溶剤通液後の前記第２固相担体に気体を通気して該第２固相担体を乾燥する工程と、前記乾燥後の前記第２固相担体に前記第２溶剤を通液する工程と、を含む、請求項７〜１０のいずれか１項に記載の分析試料作製方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、農薬その他の化学物質を分析するための試料を各種検体から短時間でかつ容易に得るための分析試料作製装置及び分析試料作製方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
化学工業の著しい発展に伴って多くの有機化学物質（以下、「化学物質」と称す。）が製造され、その中には人体や動植物、環境等に影響を及ぼす化学物質も含まれる。例えば、農薬はその使用を制限する傾向にあるものの、農作物に付着したり、牛乳等の乳製品中に混入したり、ゴルフ場の排水や水田等から環境に流出したりして、食の安全や環境保全に影響することがある。また、化学工場では排水を厳格に処理しているが、化学物質を含む排水が誤って河川や湖沼、海等に流出し、魚介類の汚染や大量死、生態系の破壊等を引き起こすこともある。
【０００３】
農作物、魚介類や、乳製品等の畜水産物といった生鮮食料品や生鮮食料品を含む加工食品中に残留する有害化学物質の分析は、これらを食することによる健康被害を防止する上で極めて重要である。しかしながら、特に生鮮食料品は賞味期限が短いこと、有害化学物質の分析に比較的長時間を要すること等の理由から、現状ではサンプリングする検体の数が限定され、必要かつ十分な分析が行なわれているとは言い難い。このため、健康被害を起こす濃度で農薬を含む食品が市場に出回ることもある。
【０００４】
従来から、化学物質の分析には、ガスクロマトグラフィ（ＧＣ）、液体クロマトグラフィ（ＬＣ）、高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）、質量分析（ＭＳ）、固相抽出（ＳＰＥ）、ゲル浸透クロマトグラフィ（ＧＰＣ）等の分析方法が一般に利用される。これらの分析方法によれば化学物質の種類や濃度を比較的短時間で分析できるものの、分析に先立って農作物や畜水産物等を含む検体を抽出、遠心分離、濃縮等の様々な精製操作で処理して分析試料を作製する必要があり、この処理に長時間を要するという問題がある。
【０００５】
上記分析方法を２つ以上組み合わせた方法も提案されている。特許文献１は、液体クロマトグラフィと固相抽出とガスクロマトグラフィとを組み合わせた化学物質の分析装置を開示する。特許文献２は、固相抽出とガスクロマトグラフィとを組み合わせた化学物質の自動分析装置を開示する。特許文献３は、固相抽出を利用して検体から分析試料を得る化学物質の前処理装置及び前処理方法を開示する。非特許文献１は、検体を固相抽出により前処理し、得られた分析試料をＧＣ／ＭＳ装置で分析する農薬の分析方法を開示する。非特許文献２は、検体を脱水抽出及びＧＰＣにより前処理し、得られた分析試料をＧＣ／ＭＳ装置で分析する農産物中残留農薬の迅速一斉分析方法を開示する。
【０００６】
特許文献１、２及び非特許文献１の分析装置は、分析対象物質を精度良くかつ容易に分析できるが、特許文献１の分析装置は固相抽出に比較的時間を要する液体クロマトグラフィを組み合わせて分析試料を作製しているので、分析試料作製時間の点で更なる改良の余地があり、また、特許文献２及び非特許文献１の分析装置は、固相抽出のみにより分析試料を作製しているので、分子量又は分子の大きさが近い複数種の分析対象物質を十分に区別できない可能性があり、分析精度の点で更なる改良の余地がある。
【０００７】
特許文献３によれば検体から分析試料を短時間でかつ容易に作製できるが、特許文献３から固相抽出とそれに続くサイズ排除分画とを組み合わせて分析試料を作製すること、及び前記組み合わせにより得られる効果は特許文献３からは明らかではない。
【０００８】
非特許文献２は、脱水抽出とＧＰＣとを組み合わせた分析試料作製方法を開示する。しかしながら、ＧＰＣにより例えば数種類以上の農薬を含む検体を処理した場合、農薬はいずれも分子量が比較的小さく、分子サイズの変動もあまり大きくないことから、１種類の農薬を主に含む分画を得ることが難しく、複数の分画を一括して農薬分画として分析に供することが一般的である。農薬分画には２〜３種類を超える農薬が混在するため、農薬分画を分析しても精度の高い分析結果を得ることは困難である。また、ＧＰＣ自体が比較的長い時間を要するため、分析試料の作製時間を短縮できない。ＧＰＣに脱水抽出を組み合わせても、このようなＧＰＣの問題を十分に解決できない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】国際公開第２００５／０７１３９８号公報
【特許文献２】国際公開第２００６／０２５１４３号公報
【特許文献３】国際公開第２００７／０２６６９３号公報
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】谷澤春奈、佐々野僚一、「自動前処理装置およびＧＣ大量注入法を用いた水中農薬分析の検討」、第１９回環境化学討論会、谷澤春奈口頭発表（名古屋；２０１０年）
【非特許文献２】小川正彦、冨森聡子、林克弘、橋爪清、「ＧＰＣ及びＧＣ／ＭＳ−ＳＩＭを用いた農産物中残留農薬の迅速一斉分析（第３報）」、三重保環研年報、第４号（通巻第４７号）、５３〜６７頁（２００２）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明の目的は、高精度の分析結果をもたらす分析試料を短時間でかつ容易に作製できる分析試料作製装置及び分析試料作製方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、検体に固相抽出を施して分析対象物質を高濃度で含む第１抽出液を得、この第１抽出液をサイズ排除分画することにより、１）検体が例えば分析対象物質として数種類以上の農薬を含む場合でも、１種類の農薬を主に含む分画を得ることが可能になり、該分画が精度の高い分析結果をもたらす分析試料となること、２）複数の農薬を含む分画でも、数種類以上の農薬を含むものではなく、２、３種類の農薬のみを含むものであるので、該分画をさらに固相抽出することにより、高い分析結果をもたらす分析試料が容易に得られること、及び、３）第１抽出液の少量化及びそれに伴ってサイズ排除分画層の寸法の低減化が可能になるので、サイズ排除分画に要する時間を短縮し、分析試料が極めて短時間で容易に得られることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１３】
すなわち、本発明は、下記（１）〜（９）の分析試料作製装置及び下記（１０）〜（１７）の分析試料作製方法を提供する。
【００１４】
（１）１又は複数の分析対象物質及び夾雑物を含有する検体を注入する注入部と、注入部に連通し、注入部から供給された検体を通液することにより、分析対象物質を主に含有する第１抽出液を排出する第１固相部と、細孔を有する充填剤からなり、第１抽出液をサイズ排除分画する分画部と、検体若しくは溶剤を注入部から第１固相部に供給し又は第１抽出液を分画部に供給する送給部と、分画部から溶出する溶出液を分画毎に採取するトレイ部と、トレイ部を移動するトレイ移動部と、を備えることを特徴とする分析試料作製装置。
【００１５】
分析試料作製装置（１）は、分析試料の作製手段として、固相抽出と、それに続くサイズ排除分画とを組み合わせて利用することを特徴とする。該装置によれば、例えば数種類以上の農薬を含む検体を用いた場合でも、サイズ排除分画からの溶出液として１種類の農薬を主に含む分画と２〜３種類程度の農薬を含む分画とが得られ、前者の分画はそのまま精度の高い分析結果をもたらす分析試料となり、後者の分画も従来のＧＰＣ処理で得られる農薬分画よりも精度が向上した分析結果をもたらす分析試料となる。また、検体の最初の処理に固相抽出を利用することにより、検体よりも少量の第１抽出液が得られることから、分画層の寸法の低減化が可能になるので、サイズ排除分画に要する時間を短縮し、検体からの分析試料を作製までの時間を非常に短時間にすることができる。したがって、分析試料作製装置（１）を用いれば、生鮮食料品等から比較的多くのサンプリングを行なう場合にも容易に対応でき、より正確な分析結果を短時間で迅速に得ることができる。
【００１６】
（２）分画部から溶出する溶出液の所定の分画を通液することにより、分析試料として第２抽出液を得る第２固相部をさらに備える、上記（１）の分析試料作製装置。
分析試料作製装置（２）によれば、サイズ排除分画により得られる溶出液の各分画のうち、２〜３種程度の分析対象物質を含む所定の分画をさらに第２固相部に通液することにより、時間をほとんど要することなく、精度の高い分析結果をもたらす分析試料となる第２抽出液を得ることができ、より一層正確な分析結果を短時間で得ることができる。
【００１７】
（３）第１固相部が検体中の夾雑物を選択的に吸着する固相担体を備え、送給部が夾雑物の第１固相部への吸着を妨げない溶剤を検体と共に又は検体の通液後に第１固相部に供給することにより、分析対象物質と溶剤とを含有する第１抽出液を得る、上記（１）又は（２）の分析試料作製装置。
分析試料作製装置（３）は、分析試料作製装置（１）の好ましい一実施形態であり、検体中の夾雑物を選択的に吸着する固相担体を備える第１固相部を用いることにより、前述の効果を達成する。
【００１８】
（４）第１固相部が検体中の分析対象物質を選択的に吸着する固相担体を備え、分析対象物質の第１固相部への吸着後に、送給部が分析対象物質を溶離可能な溶剤を第１固相部に供給することにより、分析対象物質と溶剤とを含有する第１抽出液を得る、上記（１）又は（２）の分析試料作製装置。
分析試料作製装置（４）は、分析試料作製装置（１）の別の好ましい実施形態であり、検体中の分析対象物質を選択的に吸着する固相担体を備える第１固相部を用いることにより、前述の効果を達成する。
【００１９】
（５）第１固相部が、注入部に連通し、検体中の夾雑物の一部を吸着して分析対象物質及び夾雑物の残部を含む予備抽出液を排出する第３固相部と、第３固相部に連通し、予備抽出液中の分析対象物質及び夾雑物の残部を吸着する第４固相部と、を備え、送給部が、夾雑物の残部を選択的に溶離可能な第１溶剤及び分析対象物質を溶離可能な第２溶剤を第４固相部に個別に供給し、分析対象物質と第２溶剤とを含有する第１抽出液を得る、上記（１）又は（２）の分析試料作製装置。
【００２０】
分析試料作製装置（５）は、分析試料作製装置（１）のより好ましい一実施形態であり、検体中の夾雑物の一部を吸着する第３固相部と、分析対象物質及び夾雑物の残部を吸着する第４固相部と、からなる第１固相部を用いることにより、前述の効果を達成する。特に、所定の２段階の固相抽出により、第１抽出液中の夾雑物濃度を一層低減化し、サイズ排除分画において１種の分析対象物質を主に含む分画の数を増加させ得ると共に、第１抽出液のより一層の少量化及びサイズ排除分画する分画層の寸法のより一層の低減化が可能になるので、サイズ排除分画に要する時間を更に短縮し、検体からの分析試料の作製に要する時間を、例えば１０分〜１５分程度に短縮できる。
【００２１】
（６）第３固相部及び第４固相部が、分析対象物質と同じ極性を有する化学物質を吸着しない固相担体を備え、送給部がさらに予備抽出液にその極性を変更する極性変更溶剤を供給し、極性が変更された予備抽出液を第４固相部に供給する、上記（５）の分析試料作製装置。
分析試料作製装置（６）は、分析試料作製装置（５）の好ましい一実施形態であり、分析対象物質と同じ極性を有する化学物質を吸着しない第３固相部及び第４固相部を用いることにより、分析試料作製装置（５）の効果を達成する。
【００２２】
（７）第３固相部が分析対象物質と同じ極性を有する化学物質を吸着しない固相担体を備え、かつ、第４固相部が分析対象物質と同じ極性を有する化学物質を吸着する固相担体を備える、上記（５）の分析試料作製装置。
分析試料作製装置（７）は、分析試料作製装置（５）の別の好ましい実施形態であり、が分析対象物質と同じ極性を有する化学物質を吸着しない第３固相部、及び分析対象物質と同じ極性を有する化学物質を吸着する第４固相部を用いることにより、分析試料作製装置（５）の効果を達成する。
【００２３】
（８）第４固相部に気体を通気して第４固相部内を乾燥する通気部をさらに備え、送給部が、第４固相部に第１溶剤を供給した後に第２溶剤を供給し、送給部による第４固相部への第１溶剤の供給と第２溶剤の供給との間に、通気部が第４固相部を乾燥する上記（５）〜（７）のいずれかの分析試料作製装置。
【００２４】
分析試料作製装置（８）は、分析試料作製装置（５）〜（７）の更に好ましい一実施形態であり、第４固相部から夾雑物の残部を除去した後に、分析対象物質を第２溶剤により溶出するので、得られる第１抽出液の夾雑物濃度をより一層低下させる。また、第４固相部への第１溶剤の供給と第２溶剤の供給との間に第４固相部を乾燥させることにより、第２溶剤による分析対象物質の溶出量の変動を防止できる。したがって、高精度及びぶれの非常に少ない分析結果をもたらす分析試料を得ることができる。
【００２５】
（９）制御部をさらに備え、制御部が、送給部による検体、溶剤、第１〜第２溶剤又は溶出液の所定分画の供給、通気部による通気、並びに移動部によるトレイ部の移動よりなる群から選ばれる少なくとも１種の動作を制御し、検体から自動的に分析試料を作製する上記（１）〜（８）のいずれかの分析試料作製装置。
分析試料作製装置（９）によれば、検体から分析試料を作製する工程が自動化されかつ分析試料の作製に要する時間も顕著に短縮されるので、大量の検体を分析する際に有利であり、サンプリング数を増やし、より正確な分析を実施できる。
【００２６】
（１０）１又は複数の分析対象物質及び夾雑物を含む検体を固相担体に通液し、分析対象物質を主に含有する第１抽出液を得る工程Ａと、第１抽出液をサイズ排除分画し、溶出した溶出液を分画毎に分析試料として採取する工程Ｂと、を含むことを特徴とする分析試料作製方法。
【００２７】
（１１）工程Ｂで得られた溶出液の所定の分画を固相抽出し、第２抽出液を分析試料として得る工程Ｃをさらに含む、上記（１０）の分析試料作製方法。
【００２８】
（１２）工程Ａが、検体中の夾雑物を選択的に吸着する固相担体を用いて行なわれ、夾雑物の固相担体への吸着を妨げない溶剤を検体と共に又は検体の通液後に固相担体に通液することにより、分析対象物質と溶剤とを含有する第１抽出液を得る、上記（１０）又は（１１）の分析試料作製方法。
【００２９】
（１３）工程Ａが、検体中の分析対象物質を選択的に吸着する固相担体を用いて行なわれ、検体の通液により分析対象物質を固相担体に吸着させた後に、分析対象物質を溶離可能な溶剤を固相担体に通液することにより、分析対象物質と溶剤とを含有する第１抽出液を得る、上記（１０）又は（１１）の分析試料作製方法。
【００３０】
（１４）工程Ａが、検体中の夾雑物の一部を吸着する第１固相担体と、検体中の分析対象物質及び夾雑物の残部を吸着する第２固相担体と、からなる固相担体を用いて行なわれ、検体の通液により、夾雑物の一部を第１固相担体に吸着させ、分析対象物質及び夾雑物の残部を含む予備抽出液を得る工程Ａ１と、予備抽出液の通液により、分析対象物質及び夾雑物の残部を第２固相担体に吸着させる工程Ａ２と、第２固相担体に夾雑物の残部を選択的に溶離可能な第１溶剤及び分析対象物質を溶離可能な第２溶剤を個別に通液し、分析対象物質と第２溶剤とを含有する第１抽出液を得る工程Ａ３と、を含む、上記（１０）又は（１１）の分析試料作製方法。
【００３１】
（１５）工程Ａ２が、分析対象物質と同じ極性を有する化学物質を吸着しない第１固相担体及び第２固相担体を用い、予備抽出液の極性を変更する極性変更溶剤との混合により極性が変更された予備抽出液を第２固相担体に通液することにより行なわれる、上記（１４）の分析試料作製方法。
【００３２】
（１６）工程Ａ２が、分析対象物質と同じ極性を有する化学物質を吸着しない第１固相担体、及び、分析対象物質と同じ極性を有する化学物質を吸着する第２固相担体を用いて行なわれる、上記（１４）の分析試料作製方法。
【００３３】
（１７）工程Ａ３が、第２固相担体に第１溶剤を通液する工程と、第１溶剤通液後の第２固相担体に気体を通気して該第２固相担体を乾燥する工程と、乾燥後の第２固相担体に第２溶剤を通液する工程と、を含む、上記（１４）〜（１６）のいずれかの分析試料作製方法。
分析試料作製方法（１０）〜（１７）によれば、それぞれ、分析試料作製装置（１）〜（８）と同様の効果が得られる。
【発明の効果】
【００３４】
本発明の分析試料作製装置及び分析試料作製方法によれば、種々の検体から、精度の高い分析結果をもたらす分析試料を非常に短時間でかつ極めて容易に得ることができ、検査対象物のサンプリング数を増やし、検査対象物の実体に即した分析結果を得ることが容易になる。
【図面の簡単な説明】
【００３５】
【図１】第１実施形態の分析試料作製装置の外観構成を模式的に示す斜視図である。
【図２】図１に示す分析試料作製装置の構成を模式的に示すブロック図である。
【図３】第１固相部を構成する、第３固相カートリッジと第４固相カートリッジとの組み合わせの一実施形態を示す模式図である。
【図４】第１固相部を構成する、第３固相カートリッジと第４固相カートリッジとの組み合わせの別の実施形態を示す模式図である。
【図５】本発明の分析試料作製装置により得られるサイズ排除分画の分画パターンを示す模式図である。
【図６】従来のサイズ排除分画の分画パターンを示す模式図である。
【図７】第２実施形態の分析試料作製装置の構成を模式的に示すブロック図である。
【図８】第３実施形態の分析試料作製装置の構成を模式的に示すブロック図である。
【図９】第４実施形態の分析試料作製装置の要部の構成を模式的に示すブロック図である。
【図１０】第５実施形態の分析試料作製装置の要部の構成を模式的に示すブロック図である。
【発明を実施するための形態】
【００３６】
図１は、本発明の第１実施形態である分析試料作製装置１（以下、「作製装置１」と称すことがある。）の外観構成を模式的に示す斜視図である。図２は、図１に示す作製装置１の構成を模式的に示すブロック図である。図１では、作製装置１の外装体１Ａ内に収納された各部（シリンジポンプユニット２０を除く）を実線で示す。図２では、トレイ移動部１６及び制御パネル１７の図示を省略する。
【００３７】
図１及び図２に示す分析試料作製装置１は、第１固相部として第３、第４固相カートリッジ１１、１２を有することを特徴とし、検体又は溶剤を注入する注入口１０と、検体の通液により予備抽出液を排出する第３固相カートリッジ１１と、予備抽出液の通液により第１抽出液を排出する第４固相カートリッジ１２と、第１抽出液をサイズ排除分画する分画部１３と、検体、溶剤、第１抽出液を所定の各部に供給する送給部１４と、分画部１３からの溶出液を分画毎に採取するトレイ部１５と、トレイ部１５を移動させるトレイ移動部１６と、制御パネル１７と、廃液貯留部（不図示）と、を備える。
【００３８】
以下、まず送給部１４について説明した後に、他の各部について順を追って説明する。送給部１４は、シリンジポンプユニット２０と、バルブユニット２１と、抽出液送給部２２と、流路Ｌ１〜Ｌ７と、を備える。
【００３９】
シリンジポンプユニット２０は、貯留部３０と、第１、第２バルブ３１ａ、３１ｂと、シリンジポンプ３２、３３、３４と、を備える。
【００４０】
貯留部３０は、第１〜第６貯留部３０ａ〜３０ｆを備える。第１貯留部３０ａは検体を、第２貯留部３０ｂは検体を押し流す溶剤又はコンディショニング用溶剤を、第３貯留部３０ｃは極性変更溶剤を、第４貯留部３０ｄは第４固相カートリッジ１２に吸着された夾雑物の残部を選択的に溶離する第１溶剤を、第５貯留部３０ｅは第４固相カートリッジ１２に吸着された分析対象物質を選択的に溶離する第２溶剤を、第６貯留部３０ｆは、サイズ排除分画用の展開液を、それぞれ貯留する。
【００４１】
第１〜６貯留部３０ａ〜３０ｆは、これらに対応する数の、注入口を有するタンク又は容器をシリンジポンプユニット２０内に設け、検体又は溶剤を補充するようにしてもよく、また、シリンジポンプユニット２０にカートリッジ式容器を着脱可能にする機構を設け、該カートリッジ式容器を交換するようにしてもよい。
【００４２】
第１、第２貯留部３０ａ、３０ｂは、流路Ｌ６の途中部に設けられた第１バルブ３１ａから２つに分岐した各枝管の一端（流路Ｌ６の一端）に連結され、シリンジポンプ３２は第１バルブ３１ａよりも下流側の流路Ｌ６の途中部に設けられ、シリンジポンプ３２よりも下流側の流路Ｌ６の他端は、注入口１０に繋がる流路Ｌ１に連結される。
【００４３】
第１バルブ３１ａは、第１、第２貯留部３０ａ、３０ｂの一方とシリンジポンプ３２とを連通させる。第１バルブ３１ａには４方電磁弁等を用いる。シリンジポンプ３２は、ポンプ本体３２ａと、ポンプ本体３２ａ及び流路Ｌ６に連結された３方電磁弁であるバルブ３２ｂと、からなる。この構成により、第１、第２貯留部３０ａ、３０ｂ中の検体又は溶剤の所定量を第３固相カートリッジ１１に供給する。
【００４４】
第４、第５、第６貯留部３０ｃ、３０ｄ、３０ｅは、流路Ｌ３の途中部に設けられた第２バルブ３１ｂから３つに分岐した各枝管の一端（流路Ｌ３の一端）に連結され、シリンジポンプ３３は第２バルブ３１ｂよりも下流側の流路Ｌ３の途中部に設けられ、シリンジポンプ３３よりも下流側の流路Ｌ３の他端は、第３、第４固相カートリッジ１１、１２を連結する流路Ｌ４の途中部に設けられた第３バルブ３５に連結される。
【００４５】
第２バルブ３１ｂは、第４〜第６貯留部３０ｃ〜３０ｅのいずれか一つとシリンジポンプ３３とを連通させる。第２バルブ３１ｂには５方電磁弁等を用いる。シリンジポンプ３３は、ポンプ本体３３ａと、ポンプ本体３３ａ及び流路Ｌ３に連結された３方電磁弁であるバルブ３３ｂと、からなる。この構成により、第３貯留部３０ｃ中の極性変更溶剤の所定量を流路Ｌ４中で予備抽出液と混合するか、又は第４、第５貯留部３０ｄ、３０ｅ中の第１、第２溶剤の所定量を第４固相カートリッジ１２に供給する。
【００４６】
第６貯留部３０ｆは流路Ｌ７の一端に連結され、シリンジポンプ３４は流路Ｌ７の途中部に配置され、流路Ｌ７の他端は、第４固相カートリッジ１２と分画部１３とを連結する流路Ｌ５の途中部に設けられた第４バルブ３６に連結される。シリンジポンプ３４は、ポンプ本体３４ａと、ポンプ本体３４ａ及び流路Ｌ７に連結された３方電磁弁であるバルブ３４ｂと、からなる。この構成により、第１抽出液の分画部１３への供給と同時又は供給後に、展開液を分画部１３に供給する。
【００４７】
バルブユニット２１は、４方電磁弁等である第３、第４バルブ３５、３６を備える。
【００４８】
第３バルブ３５は、流路Ｌ４の途中部に設けられ、流路Ｌ３の他端及び第３固相カートリッジ１１からの廃液を排出する排出口３５ａが連結される。第３バルブ３５は、少なくとも第１〜第４の切り替えモードを有する。第１モードでは流路Ｌ３及び排出口３５ａを閉じ、予備抽出液を第４固相カートリッジ１２に供給する。第２モードでは排出口３５ａを閉じ、流路Ｌ３、Ｌ４を連通させ、第１溶剤又は第２溶剤を第４固相カートリッジ１２に供給する。第３モードでは流路Ｌ４を閉じ、予備抽出液に極性変更溶剤を供給する。第４モードでは、流路Ｌ３、Ｌ４を閉じ、第３固相カートリッジ１２の廃液を排出口３５ａから系外に排出する。廃液は廃液貯留槽（不図示）に収容される。
【００４９】
第４バルブ３６は、流路Ｌ５の途中部に設けられ、流路Ｌ７の他端及び第４固相カートリッジ１２の廃液を排出する排出口３６ａが連結される。第４バルブ３６は、少なくとも第５〜７の切り替えモードを有する。第５モードでは、流路Ｌ７及び排出口３６ａを閉じ、第１抽出液を分画部１３に供給する。第６モードでは、排出口３６ａを閉じ、流路Ｌ７、Ｌ５を連通させ、第１抽出液と同時又は第１抽出液の供給後に、展開液を分画部１３に供給する。第７モードでは、流路Ｌ７及び分画部１３への流路Ｌ５を閉じ、第４固相カートリッジ１２の廃液を排出口３６ａから系外に排出する。廃液は廃液貯留槽（不図示）に収容される。
【００５０】
第２溶剤と展開液とが同じ溶剤である場合は、第６貯留部３０ｆ、シリンジポンプ３４及び流路Ｌ７を省略し、第４バルブ３６を３方バルブに変更してもよい。
【００５１】
抽出液送給部２２は、第４バルブ３６よりも下流側の流路Ｌ５途中部に設けられるシリンジポンプであり、ポンプ本体２２ａと、ポンプ本体２２ａ及び流路Ｌ５に連結された３方電磁弁であるバルブ２２ｂと、からなる。抽出液送給部２２は、第１抽出液及び／又は展開液のそれぞれ所定量を分画部１３に供給する。
【００５２】
本実施形態では、第１、第２、第３、第４バルブ３１ａ、３１ｂ、３５、３６、シリンジポンプ３３、３４、３５、及び抽出液送給部２２は、図示しないが、いずれも電源（不図示）及び制御パネル１７内に収納された制御部（不図示）に接続され、制御部により制御される。
【００５３】
次に、送給部１４以外の各部について説明する。
【００５４】
注入口１０は、送給部１４から流路Ｌ１を通じて検体や検体を押し流す溶剤、コンディショニング用溶剤等を受給し、流路Ｌ２を通じてこれらを第３固相カートリッジ１１に供給する。検体は１種又は複数種、分析の迅速性等の観点から好ましくは１〜２０種程度の分析対象物質及び夾雑物を含む。本発明における分析とは、検体中の分析対象物の種類や濃度を調べることであるから、検体が分析対象物質を含まない場合もある。本発明の分析対象物質は、合成された化学物質、自然界や動植物又はそれらの代謝産物中に存在する化学物質等を含む。検体中の分析対象物質以外の物質が夾雑物である。検体を押し流す溶剤やコンディショニング用溶剤としては特に限定されないが、例えば、アセトン、アクリロニトリル、水（好ましくはイオン交換水、蒸留水等の精製水）、これらの２種以上の混合溶剤等が挙げられる。
【００５５】
化学物質の具体例として、農薬、環境ホルモン、香料、毒物等が挙げられる。農薬としては特に限定はないが、例えば、化学農薬、細胞内呼吸阻害農薬、昆虫成長制御系農薬、代謝系阻害農薬、メラニン生合成阻害農薬、その他の農薬等が挙げられる。化学農薬としては、アセフェート、ジメトエート、ダイアジノン、マラソン、ジクロルボス（ＤＤＶＰ）、メチダチオン（ＤＭＴＰ）、フェニトロチオン（ＭＥＰ）、フェンチオン（ＭＰＰ）等の有機リン系、アラニカルブ、オキサミル、カルボスルファン、チオジカルブ、ベンフラカルブ、メソミル、フェノブカルブ（ＢＰＭＣ）、カルバリル（ＮＡＣ）等のカーバメート系、アクリナトリン、エトフェンプロックス、シハロトリン、シフルトリン、シペルメトリン、シラフルオフェン、ビフェントリン、ピレトリン、フェンバレレート、フェンプロパトリン、フルシトリネート、フルバリネート、ペルメトリン等のピレスロイド系、カルタップ、チオシクラム、ベンスルタップ等のネライストキシン系、アセタミプリド、イミダクロプリド、クロチアニジン、ジノテフラン、チアクロプリド、チアメトキサム、ニテンピラム等のネオニコチノイド系、エマメクチン安息香酸塩、ミルベメクチン、スピノサド等のマクロライド系、フィプロニル、エチプロール等のフェニルピラゾール系、インドキサカルブ、メタフルミゾン等のＮａチャンネル阻害剤、ピメトロジン、フロニカミド等が挙げられる。細胞内呼吸阻害農薬としては、テブフェンピラド、ピリダベン、フェンピロキシメート、トルフェンピラド、シフルメトフェン、アセキノシル、フルアクリピリム、クロルフェナピル等が挙げられる。昆虫成長制御系農薬としては、クロルフルアズロン、ジフルベンズロン、テフルベンズロン、フルフェノクスロン、ルフェニュロン、ヘキシチアゾクス、エトキサゾール、ブプロフェジン、ピリプロキシフェン、クロマフェノジド、テブフェノジド、メトキシフェノジド、シロマジン等が挙げられる。代謝系阻害農薬としては、スピロジクロフェン、スピロメシフェン、ピリダリル等が挙げられる。メラニン生合成阻害農薬としては、トリシクラゾール、ピロキロン等が挙げられる。その他の農薬としては、フルベンジアミド、クロラントラニリプロール等が挙げられる。環境ホルモンとしては特に限定されないが、例えば、ノニルフェノール、ビスフェノールＡ等のフェノール類、ダイオキシン類、フタル酸エステル等のエステル類、トリブチルスズ、トリフェニル錫等の有機錫化合物、エチルエストラジオール、エストリオール等のエストロゲン化合物、ポリ塩化ビフェニル（ＰＣＢ）、ポリ臭化ビフェニル（ＰＢＢ）、ジクロロジフェニルトリクロロエタン（ＤＤＴ）、ジエチルスチルベストロール（ＤＥＳ）、スチレン等が挙げられる。香料としては特に限定されないが、例えば、リモネン、ジペンテン、テルピノーレン、アロオシメン、オシメン、リナロール、ゲラニオール、ネロール、シトロネロール、ムゴール等が挙げられる。分析試料作製装置１は、特に農薬を含む検体からの分析試料の作製に適している。
【００５６】
検体は、従来法と同様に作製できる。例えば、野菜、果実、穀類、豆類等の農産物、畜産物、加工食品等の固形物を裁断又は粉砕等により細片化又はペースト化し、これに溶剤を加えて均質化及び遠心分離し、得られた上清を検体として使用できる。前記溶剤としては特に限定されないが、例えば、アセトニトリル、アセトン、メタノール、エタノール、酢酸エチル、水等が挙げられる。気体や、飲料水、排水、河川や湖沼、海の水、各種飲料その他の液状物は、そのまま検体として使用してもよい。また、液状物を例えば溶剤抽出し、分析対象物質を含む油相又は水相のいずれかを検体としても良い。
【００５７】
第３固相カートリッジ１１は、流路Ｌ２に繋がる受液口を一端に有し及び流路Ｌ４に繋がる排液口を他端に有する容器（カラム等）内に、検体中の夾雑物の一部を吸着しかつ分析対象物質及び夾雑物の残部を吸着しない固相担体を充填したものである。第３固相カートリッジ１１は、所定の容器内に前記特性の固相担体を充填したものでもよく、市販品でもよい。検体を第３固相カートリッジ１１に通液すると、夾雑物の一部が除去され、分析対象物質及び夾雑物の残部を含む予備抽出液が排出され、流路Ｌ４を通じて第４固相カートリッジ１２に供給される。この工程は本発明の分析試料作製方法の工程Ａ１である。
【００５８】
第４固相カートリッジ１２は、流路Ｌ４に繋がる受液口を一端に有し及び流路Ｌ５に繋がる排液口を他端に有する容器（カラム等）内に、予備抽出液中の分析対象物質及び夾雑物の残部を吸着する固相担体を充填したものである。第４固相カートリッジ１２は、所定の容器内に前記特性の固相担体を充填したものでもよく、市販品でもよい。予備抽出液を第４固相カートリッジ１２に通液すると、予備抽出液中の分析対象物質及び夾雑物の残部が固相担体に吸着する。この工程は、本発明の分析試料作製方法の工程Ａ２である。
【００５９】
分析対象物質及び夾雑物の残部が吸着した第４固相カートリッジ１２には、送給部１４から夾雑物の残部を選択的に溶離可能な第１溶剤及び分析対象物を溶離可能な第２溶剤を通液する。この工程は、本発明の分析試料作製方法の工程Ａ３である。第１抽出液中の夾雑物濃度の低減化等の観点から、第１溶剤の通液の後に第２溶剤を通液することが好ましい。第１溶剤の通液により、夾雑物の残部と第１溶剤とを含む廃液が得られ、第２排出口３６ａから排出される。第２溶剤の通液により、分析対象物質と第２溶剤とを含む第１抽出液が得られ、流路Ｌ５を通じて分画部１３に供給される。
【００６０】
図３は、第３、第４固相カートリッジ１１、１２の組み合わせの一実施形態を示す模式概念図である。本実施形態では、検体は植物由来、分析対象物質は極性の高い化学物質、検体量は０．５〜１ｍＬ程度であり、第３、第４固相カートリッジ１１、１２は径４ｍｍ、長さ１０ｍｍの円形カラムに固相担体としてオクタデシルシランシリカゲル（Ｃ１８）３０ｍｇ、５０ｍｇをそれぞれ充填したものである。Ｃ１８は、本実施形態では分析対象物質及び該物質と同じ極性を有する化学物質を吸着しない。検体をアセトニトリル水で押し流しながら第３固相カートリッジ１１に通液すると、分析対象物質とは異なる極性を有する夾雑物（夾雑物の一部）が吸着され、検体から除去される。該夾雑物は、極性の低い植物成分、高級脂肪酸エステル類、クロロフィル等である。
【００６１】
本実施形態では、送給部１４により予備抽出液に水、食塩水等の極性変更溶剤を供給する。また、本実施形態では流路Ｌ４を第３バルブ３５で閉じることにより予備抽出液と極性変更溶剤とを混合するが、これに限定されず、流路Ｌ４の途中部に予備抽出液と極性変更溶剤とを混合する混合室を設けても良い。
【００６２】
第４固相カートリッジ１２には第３固相カートリッジ１１と同じ固相担体が充填されているが、極性が変更された予備抽出液を第４固相カートリッジ１２に通液すると、分析対象物質及び夾雑物の残部が吸着される。
【００６３】
本実施形態では、固相担体としてオクタデシルシランシリカゲル（Ｃ１８）を用いるが、これに限定されず、分析対象物質の種類等に応じて公知の固相抽出用充填剤から適宜選択できる。該充填剤の具体例としては、例えば、ジビニルベンゼン重合体、スチレンジビニルベンゼン共重合体、アミノプロピルシリル化シリカゲル、エチレンジアミン−Ｎ−プロピルシリル化シリカゲル（ＰＳＡ）、シリカ系陽イオン交換体（ＳＣＸ）、シリカ系陰イオン交換体（ＳＡＸ）、グラファイトカーボン、シリカゾル等が挙げられる。
【００６４】
第１溶剤及び第２溶剤は固相担体の種類、分析対象物質及び夾雑物の種類等に応じて適宜選択されるが、本実施形態では、第１溶剤として水、第２溶剤としてアセトンとヘキサンとの混合溶剤（アセトン：ヘキサン＝１：１〜１：９、体積比）を用いる。予備抽出液を通液した後の第４固相カートリッジ１２に、先ず第１溶剤を通液し、次に第２溶剤を通液する。第１溶剤の通液により、夾雑物の残部が溶離し、第１溶剤と共に排出口３６ａから排出される。夾雑物の残部は、水溶性の高い植物成分、糖類、水等である。
【００６５】
第２溶剤の通液により、分析対象物と第２溶剤とを含む第１抽出液が得られる。第１抽出液の液量は２０μＬ〜２００μＬの範囲に調整可能であり、これにさらに第２溶剤又は展開液を加えて例えば０．５ｍＬに定容してもよい。第１抽出液中の分析対象物質の濃度は検体中よりも高くなり、かつ第１抽出液としては液量が少ないので、サイズ排除分画に要する時間を短縮化し、全体としての分析試料作製時間が短くなる。本実施形態の第２溶剤はアセトンとヘキサンとの混合溶剤であるが、この他にもアセトンとシクロヘキサンとの混合溶剤等も好適に使用できる。
【００６６】
また、図３に示すように、第１溶剤の通液と第２溶剤の通液との間に、ほぼ分析対象物のみが吸着した状態の第４固相カートリッジ１２を乾燥するし、余分な水分等を除去することが好ましい。乾燥は、例えば、液体窒素等を充填したボンベと、一端が該ボンベに連結され、他端に気体噴射ノズル（不図示）と、を備える通気部を用い、気体噴射ノズルから第４固相カートリッジ１２に窒素等の気体を通気することにより実施される。乾燥により、分析対象物質の第４固相カートリッジ１２からの溶出率を安定させ、複数の検体における分析結果のぶれを減少させ得る。
【００６７】
図４は、第３、第４固相カートリッジ１１、１２の組み合わせの別の実施形態を示す模式概念図である。本実施形態では、検体は植物由来、分析対象物質は極性の高い化学物質、検体量は０．５〜１ｍＬ程度であり、第３固相カートリッジ１１は、径４ｍｍ、長さ１０ｍｍのカラムに固相担体としてシリカゲル（Ｃ１８）を３０ｍｇ充填したものであり、第４固相カートリッジ１２は、径４ｍｍ、長さ１０ｍｍのカラムに固相担体としてシリカゲル（商品名：カタロイドＳＩ−３０、日揮触媒化成(株)製、以下「ＳＩ−３０｝と称す。）３０ｍｇを充填したものである。ＳＩ−３０は、Ｃ１８が吸着する化学物質とは極性の異なる化学物質を吸着する。第３、第４固相カートリッジ１１、１２に使用する固相担体は、上記のＣ１８及びＳＩ−３０に限定されず、使用目的に叶う異種の固相担体を公知の吸着剤の中から適宜選択して使用できる。
【００６８】
検体をアセトンで押し流しながら第３固相カートリッジ１１に通液させることにより、植物成分、糖類等の極性の夾雑物が除去され、予備抽出液が得られる。この予備抽出液をそのまま第４固相カートリッジ１２に通液することにより、分析対象物質及び夾雑物の残部を第４固相カートリッジ１２に吸着させる。高級脂肪酸エステル類等の極性の低い夾雑物は排出口３６ａから廃液として系外に排出される。
【００６９】
本実施形態では、第１溶剤としてヘキサンを用いることにより、無極性夾雑物と第１溶剤との混合物が得られ、これを排出口３６ａから排出した後、第２溶剤としてアセトニトリルと水との混合溶剤（混合割合は体積基準で４：１〜１：１の範囲）を用いることにより、分析対象物と第２溶剤とを含む第１抽出液が得られる。第１抽出液は、流路Ｌ５を通じて分画部１３に供給される。第１抽出液の液量を例えば２０μＬ〜２００μＬに調整し、第２溶剤をさらに加えて例えば０．５ｍＬに定容してもよい。
図３及び図４に示す実施形態におけるサイズ排除分画の具体的な条件は後述する。
【００７０】
分画部１３は、所定の容器（カラム）内に細孔を有する充填剤を充填したものである。該充填剤としては、分析対象物質の種類等に応じて、公知のサイズ排除分画用充填剤から適宜選択して使用できる。分画部１３に第１抽出液を通液してサイズ排除分画を行なうことにより、複数の分画が得られる。この時、必要に応じて送給部１４により展開液を更に供給してもよい。この工程が本発明の分析試料作製方法の工程Ｂである。
【００７１】
図５は、本発明の分析試料作製装置１により得られるサイズ排除分画の分画パターンを示す模式図である。図６は、従来のサイズ排除分画の分画パターンを示す模式図である。
【００７２】
従来技術では、検体を分析する前に、固相抽出又はサイズ排除分画で処理することは行なわれているが、これらを組み合わせた例は見られない。固相抽出は主に検体中に含まれる夾雑物を除去するために実施され、検体が複数の分析対象物質を含む場合、固相抽出液をそのまま分析に供しても、精度の高い分析結果が得られない場合がある。一方、サイズ排除分画は、固相抽出よりも精製が進むものの、例えば、検体が分子量や分子サイズの近似した多種の分析対象物質を含む場合、分析試料を得るための処理としては十分満足できるものではない。
【００７３】
例えば、分析対象物質が農薬である場合、農薬の分子量範囲は１８９．２４（トリシクラゾール）〜５４１．４４（アクリナトリン）程度と比較的狭いこと、農薬全般が数百程度の低分子量化学物質であること等から、図６に示すように、サイズ排除分画のみで得られる複数の分画は数種以上の農薬が混在した状態であることが多く、１種又は２〜３種の農薬を主に含む分画を得ることは難しい。したがって、複数の分画を合わせ、一括して多種類の農薬を含む農薬分画として分析に供されることが一般的である。この農薬分画を分析しても、精度の高い分析結果が得られない場合がある。
【００７４】
これに対し、本発明の作製装置１では、固相抽出（特に２段階の固相抽出）とそれに続くサイズ排除分画とを組み合わせることにより、第１抽出液が多種の農薬を含む場合でも、該抽出液をサイズ排除分画すると、図５に示すように、多種の農薬が混在した状態の農薬分画が得られるのではなく、ピレスロイド系農薬や、有機リン系、含窒素系農薬等の１種の農薬を主に含む分画Ｃ、Ｅと、２〜３種程度の比較的少ない種類の農薬を含む分画Ｂ、Ｄと、分析やさらなる処理の対象にならず、廃棄される分画Ａと、が得られる。分画Ｃ、Ｅはそのまま精度の高い分析結果をもたらす分析試料となる。分画Ｂ、Ｄは再度固相抽出等の簡易な処理を施すことにより、精度の高い分析結果をもたらす分析試料となる。したがって、固相抽出後の第１抽出液をサイズ排除分画することにより、所望の分析試料を得ることができる。
【００７５】
また、図３及び図４の実施形態に示す固相抽出を実施すれば、サイズ排除分画に用いるカラムを、径２．０〜４．６ｍｍ程度、長さ５０〜１５０ｍｍ程度に小型化できるので、サイズ排除分画に要する時間を短縮できる。また、図３及び図４に示す実施形態において、第１抽出液の液量を５０μＬ、サイズ排除分画で得られる分画の合計液量を０．５ｍＬ、展開液の分画部１３における流速を０．１ｍＬ／分、サイズ排除分画に要する時間を５分、得られる分析試料の合計量を０．５ｍＬに調整することにより、分析試料作製を１０分間で実施できる。
【００７６】
なお、分画部１３は、サイズ排除分画用充填剤の種類にもよるが、４０℃程度の温度に保持されることが好ましい。温度保持は、例えば、分画部１３を恒温槽（不図示）内に配置することにより実施できる。
【００７７】
トレイ部１５は、分画部１３から溶出する溶出液を溶出時間に応じて分画毎に収容するために、上部が開口した試料収容容器３８と、複数の試料収容容器３８を収載するトレイ３９と、を備える。試料収容容器３８には、例えば、ミクロ試験管、ミクロビーカ、分析試料収容セル等を使用できる。また、トレイ部１５として、複数のウェルが配列されたマイクロプレートを用いても良い。こうして得られる分析試料は、種々の分析法の試料として用いることができる。該分析法としては特に限定されないが、例えば、ガスクロマトグラフィ、高速液体クロマトグラフィ、質量分析（ＭＳ）等が挙げられる。
【００７８】
トレイ移動部１６は、トレイ部１５を上下左右に移動可能に支持する。本実施形態では、トレイ移動部１６として直交３軸ロボットを用いるが、トレイ部１５を上下左右に移動できるものであれば特に限定されず、アーム型ロボット等も使用できる。
【００７９】
制御部は、各種の制御を実行する中央演算部（ＣＰＵ、不図示）と、各種制御を実行するためのプログラムやデータが格納された記憶部（不図示）と、分析試料作製装置の動作状況等を表示する表示部と、タイマーと、を備え、各部が電気的に接続された電気回路である。本実施形態では、制御パネル１７が表示部である。
【００８０】
中央演算部は、記憶部に格納されたプログラムやデータに基づいて、例えば、送給部１４による検体、溶剤、展開液や第１抽出液の送給、通気部による第４固相カートリッジ１２への通気、トレイ移動部１６によるトレイ部１５の移動等の、分析試料作製装置１における全動作を制御する。
【００８１】
記憶部は、ハードディスクやＣＤ−ＲＯＭ（Ｃｏｍｐａｃｔ  Ｄｉｓｃ  Ｒｅａｄ  Ｏｎｌｙ  Ｍｅｍｏｒｙ）、ＤＶＤ（Ｄｉｇｉｔａｌ  Ｖｅｒｓａｔｉｌｅ  Ｄｉｓｃ  Ｒｅａｄ  Ｏｎｌｙ  Ｍｅｍｏｒｙ）等の記録媒体である。
【００８２】
制御パネル１７は、本実施形態では液晶パネルである。液晶パネルは、制御部に電気的に接続され、中央演算部により各動作を実行又は停止させる複数のアイコン、自動／手動切替アイコン、処理の状況、検体や溶剤の供給速度や供給量、検体や溶剤の残量、廃液貯留部の残容量等を表示する。液晶パネルに代えて、各動作を実行及び停止するボタン、チャンネル、コントローラ、スイッチ、つまみ（又はノブ）や各種メータ、表示ランプ等を有する表示部を設けてもよい。
【００８３】
本実施形態では、分析試料作製装置１の内部に制御部を設けているが、これに限定されず、例えば、各種データが入力され、かつ各種動作を実行するためのプログラムがインストールされたコンピュータを分析試料作製装置１に接続し、該コンピュータを制御部として用いてもよい。
【００８４】
図７は、第２実施形態の分析試料作製装置２の構成を模式的に示すブロック図である。分析試料作製装置２は、シリンジポンプユニット２０に代えてシリンジポンプユニット４０を備える以外は、分析試料作製装置１と同じ構成である。
【００８５】
シリンジポンプユニット４０は、シリンジポンプユニット２０において第１、第２バルブ３１ａ、３１ｂの下流側に設けられたシリンジポンプ３２、３３を有さず、第１バルブ３１ａと第１、第２貯留部３０ａ、３０ｂとを個別に連結する各枝管の途中部にシリンジポンプ５０ａ、５０ｂがそれぞれ設けられ、かつ第２バルブ３１ｂと第３、第４、第５貯留部３０ｃ、３０ｄ、３０ｅとを個別に連結する各枝管の途中部にシリンジポンプ５０ｃ、５０ｄ、５０ｅがそれぞれ設けられることを特徴とする。シリンジポンプ５０ａ〜５０ｅは、図示しないが、電源及び制御パネル内の制御部に接続され、制御部により制御される。
【００８６】
分析試料作製装置２では、例えば、第１バルブ３１ａを変位させて第１貯留部３０ａ又は第２貯留部３０ｂと流路Ｌ６とを連通させ、シリンジポンプ５０ａ、５０ｂにより、検体又は溶剤（検体を押し流す溶剤、コンディショニング用溶剤）の所定量を流路Ｌ６、Ｌ１、Ｌ２を介して第３固相カートリッジ１１に供給する。また、第２バルブ３１ｂを変位させ、第３貯留部３０ｃと流路Ｌ３とを連通させ、シリンジポンプ５０ｃにより極性変更溶剤を流路Ｌ４内にて予備抽出液に供給し、或いは、第４、第５貯留部３０ｄ、３０ｅのいずれか一方と流路Ｌ３とを連通させ、シリンジポンプ５０ｄ、５０ｅにより第１溶剤又は第２溶剤を流路Ｌ３、第４バルブ３６及び流路Ｌ５を介して第４固相カートリッジ１２に供給する。
分析試料作製装置２のように構成しても、分析試料作製装置１と同様の効果を得ることができる。
【００８７】
図８は、第３実施形態の分析試料作製装置３の構成を模式的に示すブロック図である。分析試料作製装置３は、シリンジポンプユニット２０に代えてシリンジポンプユニット４１を備え、かつ、第４固相カートリッジ１２、第４バルブ３６及び流路Ｌ５を有さず、第１固相部として第３固相カートリッジ１１のみを有し、第３固相カートリッジ１１と分画部１３とが流路Ｌ４により連結されるる以外は、分析試料作製装置１と同じ構成である。
【００８８】
シリンジポンプユニット４１は、６方電磁弁等である第１バルブ５１から５つに分岐した枝管のそれぞれ末端に第１、第２、第４、第５貯留部３０ａ、３０ｂ、３０ｄ、３０ｅが連結されることを特徴とする。第１バルブ５１を変位させ、第１、第２、第４、第５貯留部３０ａ、３０ｂ、３０ｄ、３０ｅのいずれか一つとシリンジポンプ３２とを連通させることにより、検体、検体を押し流す溶剤又はコンディショニング用溶剤、第１溶剤、第２溶剤のいずれかを、流路Ｌ６、Ｌ１、注入口１０及び流路Ｌ２を介して第３固相カートリッジ１１に供給する。第３固相カートリッジ１１から排出された第１抽出液は、分画部１３に直接供給される。
【００８９】
第３固相カートリッジ１１には、例えば、検体中の夾雑物を選択的に吸着する固相担体を充填する。この場合、送給部１４が供給する検体を第３固相カートリッジ１１に通液することにより、夾雑物が除去され、ほぼ分析対象物質のみを含む第１抽出液が第３固相カートリッジ１１から排出される。このとき、送給部１４が、検体と同時に又は検体の通液後に、検体を押し流しかつ夾雑物の第３固相カートリッジ１１への吸着を妨げない溶剤を第３固相カートリッジ１１に供給することが好ましい。
【００９０】
また、第３固相カートリッジ１１に、検体中の分析対象物質を選択的に吸着する固相担体を充填してもよい。検体を第３固相カートリッジ１１に通液して分析対象物質を吸着させた後に、送給部１４が第１溶剤及び第２溶剤を第３固相カートリッジ１１に順次供給することにより、分析対象物質と第２溶剤とを含有する第１抽出液が第３固相カートリッジ１１から排出される。
【００９１】
分析試料作製装置３は、第３固相カートリッジ１１のみを用いた１段の固相抽出を実施するものであるが、固相抽出とそれに続くサイズ排除分画とを組み合わせることにより、１種の分析対象物質を主に含む分画の数は分析試料作製装置１、２よりも多少少なくはなるが、良好な分析結果をもたらす分画を得ることができる。
【００９２】
図９は、第４実施形態の分析試料作製装置４の要部の構成を示す模式図である。分析試料作製装置４は、分析試料作製装置１において分画部１３とトレイ部１５との間に第２固相部１８を備え、それ以外の構成は分析試料作製装置１と同じである。
【００９３】
以下、図１〜２及び図９に基づいて、分析試料作製装置４の構成を説明する。分析試料作製装置４は、図示は省略したが、注入口１０、第３固相カートリッジ１１、第４固相カートリッジ１２、分画部１３、送給部１４、トレイ部１５、トレイ移動部１６、制御パネル１７、第２固相部１８及び廃液貯留部を有し、分画部１３は恒温槽（不図示）内に配置され、例えば４０℃に保持される。第２固相部１８による処理は、本発明の分析試料作製方法の工程Ｃであり、下記に示すように、簡易な構成かつ短時間で実施できるので、検体から分析試料を非常に短時間で作製できるという本発明の効果を損なうことはない。
【００９４】
第２固相部１８は、第１、第２、第３カートリッジ４３ａ、４３ｂ、４３ｃからなる固相カートリッジ部４３、シリンジポンプ４４、第５バルブ４５、シリンジポンプ４４を介して分画部１３と第５バルブ４５とを連結する流路Ｌ８、流路Ｌ８の途中部に設けられたシリンジポンプ４４のバルブ４４ｂにより流路Ｌ８から分岐する流路Ｌ９、第５バルブ４５から個別に３つに分岐してそれぞれ第１、第２、第３カートリッジ４３ａ、４３ｂ、４３ｃに連結される流路Ｌ１０、Ｌ１１、Ｌ１２と、を備える。
【００９５】
図９に示すように、固相カートリッジ部４３は、１種の固相担体が充填された固相カートリッジ（ＳＰＥ−Ａ）からなる第１カートリッジ４３ａと、吸着特性の異なる２種の固相担体がそれぞれ充填された複数の固相カートリッジ（ＳＰＥ−ＡとＳＰＥ−Ｃ）が直列に配列された第２カートリッジ４３ｂと、吸着特性の異なる２種の固相担体がそれぞれ充填された複数の固相カートリッジ（ＳＰＥ−ＢとＳＰＥ−Ｃ）が直列に配列された第３カートリッジ４３ｃとが並列に配列されたものである。本実施形態の固相カートリッジ部４３は、第１、第２、第３カートリッジ４３ａ、４３ｂ、４３ｃからなるが、第１、第２、第３カートリッジ４３ａ、４３ｂ、４３ｃの少なくとも１種からなるものであればよく、さらに別のカートリッジを含んでいてもよい。
【００９６】
シリンジポンプ４４は、ポンプ本体４４ａと、ポンプ本体４４ａ及び流路Ｌ８、Ｌ９に連結された４方電磁弁等であるバルブ４４ｂと、からなる。シリンジポンプ４４は、分画部１３から溶出した複数の分画を流路Ｌ８、Ｌ９に振り分けて押し流す。すなわち、シリンジポンプ４４は、さらなる固相抽出を必要とする要処理分画を流路Ｌ８から第５バルブ４５に導き、そのまま分析試料となる処理不要分画を流路Ｌ９に導き、トレイ部１５の試料収容容器３８に収容する。
【００９７】
第５バルブ４５は、シリンジポンプ４４を介して供給された複数の要処理分画を、該分画の分画部１３からの溶出時間等に応じて流路Ｌ１０、Ｌ１１、Ｌ１２の中の適切な流路に振り分け、第１、第２、第３カートリッジ４３ａ、４３ｂ、４３ｃのいずれかに供給する。第１、第２、第３カートリッジ４３ａ、４３ｂ、４３ｃのいずれか一つに通液することにより、高精度の分析結果をもたらす分析試料として第２抽出液を得、トレイ部１５の試料収容容器３８に収容する。なお、シリンジポンプ４４及び第５バルブ４５は、電源及び制御部（いずれも不図示）に接続され、制御部による制御を受ける。
【００９８】
シリンジポンプ４４のバルブ４４ｂによる流路Ｌ８、Ｌ９のいずれかへの切替及び第５バルブ４５による流路Ｌ１０、１１、１２のいずれかへの切替は、制御部により判定される。例えば、各種分析対象物について、分画部１３を構成するカラムの寸法、サイズ排除分画用充填剤の種類、展開液の種類、展開液を合せた第１抽出液の分画部１３への供給量や流速等の各条件を変更して、各分析対象物の分画部１３からの溶出時間を測定したデータテーブルを制御部内の記憶部に予め格納しておき、中央演算部が該データテーブルと分画部１３からの実際の溶出時間とを照らし合わせることにより、当該溶出時間に得られた分画が処理不要分画又は要処理分画であることを判定でき、また、同様にして、要処理分画を第１、第２、第３カートリッジ４３ａ、４３ｂ、４３ｃのいずれに通液させたらよいかを判定できる。
【００９９】
図１０は、第５実施形態の分析試料作製装置５の要部の構成を示す模式図である。分析試料作製装置５は、分析試料作製装置４において、流路Ｌ１０、Ｌ１１、Ｌ１２における第１、第２、第３カートリッジ４３ａ、４３ｂ、４３ｃの上流側途中部に、それぞれ、分画を押し流す溶剤を第１、第２、第３カートリッジ４３ａ、４３ｂ、４３ｃに供給するためのシリンジポンプユニット４６、４７、４８が設けられた第２固相部１８Ａを第２固相部１８に代えて用いる以外は、分析試料作製装置４と同じ構成を有する。
【０１００】
シリンジポンプユニット４６、４７、４８は、それぞれシリンジポンプ４６ａ、４７ａ、４８ａと、溶剤貯留部４６ｂ、４７ｂ、４８ｂと、からなる。溶剤貯留部４６ｂ、４７ｂ、４８ｂに貯留される溶剤を、要処理分画の供給と同時に又は供給後に、シリンジポンプ４６ａ、４７ａ、４８ａにより流路Ｌ１０、Ｌ１１、Ｌ１２を介して第１、第２、第３カートリッジ４３ａ、４３ｂ、４３ｃに供給することにより、得られる第２抽出液中の分析対象物質の精製度合いが一層高まり、より一層正確な分析結果をもたらす分析試料となる。
【０１０１】
（試験例１）
分析対象物質は農薬とした。下記表１に記載の野菜又は果物を乱切りした細片５００ｇをジューサーで摩砕した。得られたペースト１０ｇをアセトニトリル１０ｍｌと十分に混和し、遠心分離した。得られた上清０．５ｍｌを検体として用いた。この検体を図３に示す実施形態の分析試料作製装置で処理し、サイズ排除分画後にＦｒ１、Ｆｒ２−１〜３、Ｆｒ３〜Ｆｒ６という８つの分画を得た。検体から分析試料である分画を得るまでの時間は１０分であった。なお、イチゴについては２度の分析試料の作製を行ない、再現性を確認した。
【０１０２】
表１において、◎はそのまま分析可能な分画であることを示し、○は簡易な固相抽出（分画Ｆｒ２−１：グラファイトカーボンを用いた固相抽出、Ｆｒ２−２：ＰＳＡを用いた固相抽出、Ｆｒ２−３：シリカゲルを用いた固相抽出）を施すことにより、分析可能な分画であることを示している。
【０１０３】
【表１】
0006519852.tif 000002
【０１０４】
表１から、夾雑物を比較的多く含み、捨てられる分画（discard）を除き、大部分の分画がそのまま分析可能であり、残りの分画も簡易な固相抽出を施すことにより、分析可能となることが判る。
【符号の説明】
【０１０５】
１、２、３、４、５  分析試料作製装置
１Ａ  外装体
１０  注入口（注入部）
１１  第３固相カートリッジ
１２  第４固相カートリッジ
１３  分画部
１４  送給部
１５  トレイ部
１６  トレイ移動部
１７  制御パネル
１８、１８Ａ  第２固相部
２０、４０、４１、４６、４７、４８  シリンジポンプユニット
２１  バルブユニット
２２  抽出液送給部
２２ａ、３２ａ、３３ａ、３４ａ、４４ａ  ポンプ本体
２２ｂ、３１ａ、３１ｂ、３２ｂ、３３ｂ、３４ｂ、４４ｂ  バルブ
３０、３０ａ、３０ｂ、３０ｃ、３０ｄ、３０ｅ、３０ｆ  貯留部
３２、３３、３４、４４、４６ａ、４７ａ、４８ａ、５０ａ、５０ｂ、５０ｃ、５０ｄ、５０ｅ  シリンジポンプ
３５、３６  バルブ
３５ａ、３６ａ  排出口
３８  試料収容容器
３９  トレイ
４３  固相カートリッジ部
４３ａ、４３ｂ、４３ｃ  カートリッジ
４６ｂ、４７ｂ、４８ｂ  溶剤貯留部
Ｌ１〜Ｌ１２  流路
【図１】
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【図２】
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【図３】
0006519852.tif 000005
【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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