(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
P01931(国際寄託番号BP-1931)、又はMK-01A（国際寄託番号BP-02066）、又はMK-03A（国際寄託番号BP-02067）を含むことを特徴とする動物の腸内菌叢の多様性を増加させるための微生物製剤。
【請求項２】
請求項１に記載の微生物製剤を用いて、非ヒト動物の腸内菌叢の多様性を増加させる方法。
【請求項３】
請求項１に記載の微生物製剤を含む動物の腸内菌叢の多様性を増加させるための健康食品。
【請求項４】
請求項１に記載の微生物製剤を含む動物の腸内菌叢の多様性を増加させるための医薬品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、動物の体質別に異なる機能を発揮する好熱菌を活用した好熱菌、並びに好熱菌を含む混合溶液が、動物の遺伝的背景、並びに腸内細菌叢の体質に依存して異なる生理反応をもたらす機能がある点に着目し、その機能を活用した製剤とその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
動物の腸内機能を整える製剤として、プロバイオティクス、プレバイオティクスが知られている。これらの技術として、乳酸菌、酵母、枯草菌などの主に常温で生息する微生物を用いた技術が普及している（特許文献１、特許文献２）。例えば、特許文献１では、ビフィズス菌とラクトバチラス・アシドフィルスを用いた非発酵型の乳酸菌の製造方法があり、特許文献２では、アディポネクチン分泌を制御する目的として、乳酸菌の一つであるラクトバチラス・ガセリ（Lactobacillusgasseri）SBT2055(FERM BP-10953)の培養上清を活用する製剤がある。また、特許文献３では、ビフィズス菌属の細菌の成長を促進し、顆粒球コロニー刺激因子の放出を促進し、Ｔヘルパー細胞タイプＩの分化を促進し、及び／又はＴヘルパー細胞タイプＩＩの分化を抑制するためのキバナシュスラン種・多糖類抽出物及び医薬組成物、及びその調製方法が公開されており、ビフィズス菌属の細菌の成長を促進し、顆粒球コロニー刺激因子の放出を促進し、Ｔヘルパー細胞タイプＩの分化を促進し、及び／又はＴヘルパー細胞タイプＩＩの分化を抑制するためのキバナシュスラン種・多糖類抽出物及び医薬組成物に関する技術が紹介されている。
【０００３】
また、非特許文献としては、クロストリジウム属の菌種の中で、免疫系の細胞の制御に関わる菌種並びに菌群を同定した研究として世界的な研究が知られている（非特許文献１）。さらに、免疫系の制御をする特定のバクテリアであるセグメント・フィラメンタス・バクテリア（SFB）（非特許文献２）、あるいはO157に対する防御機能を有するビフィズス菌の有効遺伝子を探索した極めて重要な研究（非特許文献３）などが知られている。
【０００４】
しかし、これらの技術は、宿主の遺伝的背景を考慮したタイプ別の腸内細菌叢の制御については加味されていない。近年、食餌と性差の双方が、腸内微生物叢の構成に影響を及ぼすことを世界的に示した研究データが報告されており（非特許文献４）、また、腸内細菌叢の多様性がヒトのメタボローム対策に重要であることが指摘されている（非特許文献５）。将来的には、宿主の遺伝的背景に基づいて適切なプロバイオティクスの組み合わせを設計していくことが必要であると想定される。
【０００５】
一方、発明者等は、これまでに常温領域で増殖しにくい極限環境微生物の一つである好熱菌を活用して、動物の生体に影響するプロバイオティクスの技術に成功している（特許文献４、５、非特許文献５）
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特許第４８９８８５９号
【特許文献２】特許第５２２５６５２号
【特許文献３】特許第５３９５７３３号
【特許文献４】特許第５５７８３７５号
【特許文献５】特許第５０４１２２８号
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Atarashi K, Tanoue T, Oshima K, Suda W, Nagano Y, Nishikawa H, Fukuda S, Saito T, Narushima S, Hase K, Kim S, Fritz JV, Wilmes P, Ueha S, Matsushima K, Ohno H, Olle B, Sakaguchi S, Taniguchi T, Morita H, Hattori M, Honda K*.  "Treg induction by a rationally selected mixture of Clos tridia strains from the human microbiota."  Nature 500:232-236. (2013)
【非特許文献２】Ivanov II, Atarashi K, Manel N, Brodie EL, Shima T, Karaoz U, Wei D, Goldfarb KC, Santee CA, Lynch SV, Tanoue T, Imaoka A, Itoh K, Takeda K, Umesaki Y, Honda K*, Littman DR*.  "Induction of intestinal Th17 cells by segmented filamentous bacteria."  Cell. 139:485-98. (2009)
【非特許文献３】Fukuda S, Toh H, Hase K, Oshima K, Nakanishi Y, Yoshimura K, Tobe T, Clarke JM, Topping DL, Suzuki T, Taylor TD, Itoh K, Kikuchi J, Morita H, Hattori M, Ohno H.  Bifidobacteria can protect from enteropathogenic infection through production of acetate. Nature. 2011 Jan 27;469(7331):543-7.
【非特許文献４】Bolnick DI, Snowberg LK, Hirsch PE, Lauber CL, Org E, Parks B, Lusis AJ, Knight R, Caporaso JG, Svanb&auml;ck R Individual diet has sex-dependent effects on vertebrate gut microbiota. Nat Commun. 2014 Jul 29;5:4500 doi: 10.1038/ncomms5500.
【非特許文献５】Le Chatelier E, Nielsen T, Qin J, Prifti E, Hildebrand F, Falony G, Almeida M, Arumugam M, Batto JM, Kennedy S, Leonard P, Li J, Burgdorf K, Grarup N, Jorgensen T, Brandslund I, Nielsen HB, Juncker AS, Bertalan M, Levenez F, Pons N, Rasmussen S, Sunagawa S, Tap J, Tims S, Zoetendal EG, Brunak S, Clement K, Dore J, Kleerebezem M, Kristiansen K, Renault P, Sicheritz-Ponten T, de Vos WM, Zucker JD, Raes J, Hansen T; MetaHIT consortium, Bork P, Wang J, Ehrlich SD, Pedersen O. Richness of human gut microbiome correlates with metabolic markers. Nature 500:541-549. (2013)
【非特許文献６】Miyamoto H, Seta M, Horiuchi S, Iwasawa Y, Naito T, Nishida A, Miyamoto H, Matsushita T, Itoh K, Kodama H (2013) Potential probiotic the rmophiles isolated from mice after compost ingestion. Journal of Applied Microbiology,114(4): 1147-1157
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
これまでの技術では、動物の体質に応じて異なるプロバイオティクスを投与するという概念は確立していなかった。しかしながら、遺伝的背景のみならず、腸内を形成する菌叢についても、動物種によって大きく異なっていることが知られており、これらを加味した上で活用できるプロバイオティクス、あるいはプレバイオティクスが必要とされうる。
【０００９】
動物の遺伝的背景によって体質は異なり、体質に応じて宿主固有の腸内菌叢の微生物構造、並びに生体分子の濃度の挙動が異なる。また、腸内細菌叢のコントロールとして抗生物質が用いられる場合があるが、腸内細菌叢の多様性が失われてしまい、腸内環境における弊害の可能性が想定されている。このような場合に適切なプロバイオティクスを投与することが必要とされる。
本発明は、上記の課題を解決するプロバイオティクス、あるいはプレバイオティクスを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
太りやすい傾向の動物と太りにくい系統の動物における特性に応じて機能する好熱菌プロバイオティクスを活用する。これによって、宿主の腸内細菌叢のポピレーションを改変するとともに、肝臓における生理機能分子の挙動を適切に制御する。動物種の特性、あるいは腸内の老化現象が認められる場合にも機能する好熱菌プロバイオティクスを活用する。これによって、宿主の腸内細菌叢のポピレーションを改変し、その挙動を適切に制御する。そのために、好熱菌Bacillus属の一つであるBP-863を用いる。BP-863は、発明者によって、2010年2月8日付けで製品評価技術基盤機構に国際寄託されている（受託番号BP-863）。
【００１１】
また、本発明は、混合微生物を活用しても体質別のプロバイオティクス、あるいはプレバイオティクスとして機能を発揮しうる製剤の製造方法を含むものである。
【００１２】
請求項１の発明は、P01931(国際寄託番号BP-1931)、又はMK-01A（国際寄託番号BP-02066）、又はMK-03A（国際寄託番号BP-02067）を含むことを特徴とする動物の腸内菌叢の多様性を増加させるための微生物製剤としたところにある。
【００１５】
請求項２の発明は、請求項１に記載の微生物製剤を用いて、非ヒト動物の腸内菌叢の多様性を増加させる方法としたところにある。
【００１７】
請求項３の発明は、請求項１に記載の微生物製剤を含む動物の腸内菌叢の多様性を増加させるための健康食品としたところにある。
【００１８】
請求項４の発明は、請求項１に記載の微生物製剤を含む動物の腸内菌叢の多様性を増加させるための医薬品としたことにある。
【発明の効果】
【００１９】
本出願内容において、宿主動物の遺伝的背景を考慮した上で、オーダーメード型のプロバイオティクス、あるいはプレバイオティクスの運用が可能となるため、その波及効果は多大であると想定される。すなわち、ヒトであれば人種別、地域別、食生活別、疾患別の対応が想定される。動物においても、ペット、家畜、家禽類などにおいて異なる腸内細菌叢と体質であることがあきらかであり、これらを加味して目的に合わせたプロバイオティクス、あるいはプレバイオティクスの運用が可能となる。又、本発明によって、動物の遺伝的背景において、太りやすい体質、あるいは太りにくい体質の特性に応じて、宿主固有の常温の腸内菌叢の微生物構造、並びに生理機能に寄与する生体分子の濃度を制御することが可能となる。さらに、動物の体質別で効率的に作用するプロバイオティクスの開発と普及が可能となる。さらに、動物の遺伝的背景による体質や宿主固有の常温の腸内菌叢の微生物構造に応じて、腸内細菌叢の多様性の増加、あるいは減少を制御し、特に日和見感染菌の減少がもたらされるとともに、有用菌のポピューレーションを維持させることが可能となる。
【００２０】
我々は、鶏、豚、犬を対象として、BP-863を含む飼料を活用することによって、腸内細菌叢の多様性が有意に増し、特に日和見感染菌の減少がもたらされる。例えば、鶏では、Enteroccocus属、豚ではStreptococcus属、犬では老犬で増えるClostoridium属のポピュレーションが減少させるとともに、それぞれの動物種で減少傾向のある種特異的な有用菌を併用投与することによって従来の問題を解決する。尚、動物の遺伝的背景によって体質は異なり、体質に応じて宿主固有の腸内菌叢の微生物構造、並びに生体分子の濃度の挙動が異なる場合がある。このような場合に適切なプロバイオティクスを投与することが必要とされるが、そのような体質依存的な特性を調整する体質別プロバイオティクスに関する研究は今後の課題である。また、腸内細菌叢のコントロールとして抗生物質が用いられる場合があるが、腸内細菌叢の多様性が失われてしまい、腸内環境における弊害の可能性が想定されている。このような場合に適切なプロバイオティクスを投与することが必要とされる。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】体質別プロバイオティクスの概念
【図２】体質別プロバイオティクスに用いる好熱菌群とその標準菌株
【図３】体質別プロバイオティクスを用いた肝臓の解糖系の調節
【図４】体質別プロバイオティクスを用いた肝臓のβ酸化とTCA回路の調節
【図５】体質別プロバイオティクスを用いた肝臓の尿素回路の調節
【図６】抗生物質に頼らない腸内菌叢コントロールの概念図
【図７】BP-863を経口給与した仔豚の増大率
【図８】BP-863を経口給与した仔豚における糞中菌叢の多様性
【図９】仔豚の糞中の日和見感染菌の挙動
【図１０】鶏の糞中の菌叢の多様性を日和見感染菌の挙動
【発明を実施するための形態】
【００２２】
次に、本発明の実施形態について説明するが、本発明はこれらの実施形態に限定されるものではない。
【００２３】
本発明で用いられる微生物群は、複数の生物種の好熱性微生物が挙げられる。具体的な生物種として、Bacillus coagulans、あるいはBacillus thermoamylovorans、並びにそれらの近縁の種等が挙げられる。なかでも、本発明で用いられる微生物群は、受託番号：NITE P-01931である微生物及び／又は受託番号：NITE BP-1051及び／又は受託番号：NITE BP-863及び／又は製品評価技術基盤機構（NITE）に混合微生物であるために受託拒否された混合微生物MK-01（受託拒否通知No.２０１４−０３１９）及び／又は製品評価技術基盤機構（NITE）に混合微生物であるために受託拒否された混合微生物MK-03（受託拒否通知No.２０１４−０３２１）が好ましい。Bacillus thermoamylovoransの近縁の種、なかでも、本発明で用いられる微生物群は、受託番号：NITE BP-863である微生物が好ましい。
【００２４】
本発明で用いられる微生物資材に混合可能な微生物としては、Lactobacillus属、並びにBifidobacterium属とともに、好熱性の微生物のBacillus属、Lysinibacillus属、Virgibacillus属、 Anoxybacillus属、 Paenibacillus属が挙げられる。さらに、 Deinococcus-Thermus門のMeiothermus属、Vulcanithermus属、Thermus属、Oceanobacillus属などを含むThermophiles inoculum MIROKU H2Kと共存させても然るべき生理活性を発揮する。これらの微生物群Thermophiles inoculum MIROKU H2Kは、複合菌、並びに難培養性のため製品評価技術基盤機構において受託拒否されたため、株式会社三六九（大分県杵築市）において保存されている。尚、このような共存可能な微生物群としては、ATCCに受託している受託番号PTA-1773も活用することができる。また、製品評価技術基盤機構（NITE）に混合微生物として寄託されている受託番号：NITE BP-1051も活用することができる。
【００２５】
好熱性種菌PTA-1773は、発明者によって、２０００年５月１日付けでATCC(American Type Culture Collection, 10801 University Boulevard Manassas, Virginia 20110-2209 U.S.A.)に国際寄託されている(受託番号: PTA-1773)
【００２６】
尚、本発明の製剤は、上記菌株について、それぞれ約１０個／ｇ〜約１０9個／ｇの微生物群、あるいは当該微生物群由来の機能成分量を含むことが好ましい。
【００２７】
上記微生物群を活用し、我々は、系統学的に異なるマウスに対して同じ好熱菌でも異なる生理反応を示すことを見出している。太りやすい系統のマウスと太りにくい系統のマウスにそれぞれ菌体を投与すると、腸内細菌相のバクテロイデス門、クロストリジウム属、並びにラクトバチラス属のポピュレーションを制御し、肝臓における機能分子の濃度を制御する。但し、同じ菌株でも、太りやすい系統のマウスと太りにくい系統のマウスに対する効き方が同じ傾向を示す菌株と、真逆の効き方を示す菌株の存在している。このような性質を活用して、体質別のプロバイオティクスとして活用し、従来の問題を解決する。
【００２８】
又、上記微生物群を活用し、鶏、豚、犬を対象として、BP-863を含む飼料を活用することによって、腸内細菌叢の多様性が有意に増し、特に日和見感染菌の減少がもたらされる。例えば、鶏では、Enteroccocus属、豚ではStreptococcus属、老化とともにで増えるClostoridium属のcluster XIのポピュレーションを減少させる。このような性質を活用して、抗生物質に頼らない腸内菌叢コントロールが可能なプロバイオティクスとして活用し、従来の問題を解決する。
【００２９】
（実施例1）
高脂肪食下での飼育試験のために表１に示す組成で試験を実施した。
【００３０】
【表１】
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【００３１】
BALB/c、並びにC57BL/6（雄、3週齢）を導入し、５日間予備的に飼育した後、実験を開始した。（１）高脂肪食（ラード）飼育群（対照群）（BALB/cでは記号mA）（C57BL/6では記号mE）、（２）高脂肪食（ラード）＋好熱菌MK01A溶液の飲水添加群（BALB/cでは記号mB）（C57BL/6では記号mF）、（３）高脂肪食（ラード）＋好熱菌P01931溶液の飲水添加群（BALB/cでは記号mC）（C57BL/6では記号mG）、（４）高脂肪食（ラード）＋好熱菌MK03A溶液（BALB/cでは記号mD）（C57BL/6では記号mH）の飲水添加群のマウスの系統当たり４群について計８群を準備した。１群は５匹とした一つのケージで飼育した。通常飼料は配合飼料（オリエンタル酵母株式会社製MF）を用いて、高脂肪食は、株式会社ケービーティーオリエンタル（佐賀県鳥栖市）で作成し、脂質の割合は24％（うちラード20％）で調整した。飲水は水道水を自由摂取させ、対照群以外は各好熱菌の溶液を1.0％飲水に添加した。飼料は一日25グラムの摂取制限内で自由摂食させた。２ヶ月間飼育した後、体重を測定し、血液などを採取するとともに解剖した上で、肝臓と糞便を採取し、メタボローム解析、菌叢解析に供した。尚、これらの菌株については、図２に示している。遺伝的には16SrDNA配列上、標準菌株であるBacillus coagulans（ATCC）と100％一致するものの、形態学的には異なっていた。
【００３２】
菌叢解析の結果、BALB/cでは表２、３に示したように、４群で糞中の菌叢の変化が確認された。特に、体重増加傾向が低かったmD群においてクロストリジウム属とラクトバチラス属のポピュレーションが増加する傾向が確認された。
【００３３】
【表２】
0006557876.tif 000003
【００３４】
【表３】
0006557876.tif 000004
【００３５】
菌叢解析の結果、C57BL/6では表４、５に示したように、４群で糞中の菌叢の変化が確認された。特に、体重増加傾向が低かったmG群においてクロストリジウム属とラクトバチラス属のポピュレーションが増加する傾向が確認された。
【００３６】
【表４】
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【００３７】
【表５】
0006557876.tif 000006
【００３８】
このとき、菌叢の多様性解析を２種類の方法で確認したところ、表６、７に示したように、多様性は菌株投与群ではいずれも増加傾向があり、その点で差異はなかった。
【００３９】
【表６】
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【００４０】
【表７】
0006557876.tif 000008
【００４１】
次に肝臓のメタボローム解析をCE-MSで実施したところ、表８に示したように、生理機能分子の濃度が各群で異なった。また、系統によって同じとはかぎらなかった。
解糖系については、図３に示したように、F6P、並びにG6Pについてマウスの系統によらず抑制傾向が確認されたが、TCA回路については、MK03A株を投与したmD群のみ、増加傾向が確認されたが、他は変化がなかった。
【００４２】
【表８】
0006557876.tif 000009
【００４３】
次に、  BALB/c、並びにC57BL/6（雄、3週齢）並びに（雄、８週齢）を導入し、５日間、予備的に飼育した後、実験を開始した。（１）通常飼育群（対照群）、（２）BP-863添加群、（３）混合溶液の飲水添加群の３群を準備した。１群は５匹で一つのケージで飼育した。飲水は水道水を自由摂取させ、飼料は自由摂食させた。３ヶ月間飼育した後、体重を測定し、血液などを採取するとともに解剖した上で、肝臓を採取し、メタボローム解析に供した。
【００４４】
血液分析の結果、血清中のレプチン濃度は、BALB/cよりもC57BL/6で高かったが、後者の方が太りやすかった。
【００４５】
肝臓のメタボローム解析の結果、表９、１０に示すように、投与開始時期の週齢やマウスの系統によって必ずしも同じ傾向ではなかった。
【００４６】
【表９】
0006557876.tif 000010
【００４７】
【表１０】
0006557876.tif 000011
【００４８】
これらの結果をまとめると、当該菌種については、太りやすい体質のマウス（C57BL/6）ならびに太りにくい体質のマウス（BALB/c）において、高脂肪食条件下においてほぼ類似した生理反応を誘導することが判明した。表１に示したように、腸内細菌相のバクテロイデス門の増加とともに、肝臓の解糖系の抑制やTCA回路の活性化、尿素回路の活性化など、ほぼ類似した生理反応を誘導することが判明した。但し、太りにくい系統のマウスにおいてのみ遊離アミノ酸の増加が確認された。但し、その反応は、生後まもない3週齢のマウスでは顕著に反応を示し、生後8週齢のマウスではやや異なる反応を示していた。
本発明技術は従来技術に対して新規性を持っていると言えた。
【００４９】
（実施例２）  母豚が同一で、出産後の日齢が30日前後の仔豚に対して、飼料1kg当たり10の2乗のBP-863を飼料に混ぜ、3週間給与した。  
【００５０】
その結果、仔豚の増体率は、5%程増加する傾向が確認された（図７参照）。そして、この時、豚糞のトータルDNAを抽出し、バクテリア16SrDNAを対象として次世代シーケンサーによって網羅的解析した。すなわち、豚糞中の菌叢解析をバクテリア16SrDNAを対象として次世代シーケンサーにて3000リード解析をした結果、BP-863を含む飼料を給与した豚と非投与群との間では、菌叢の変化が確認されるとともに、日和見感染菌が顕著に減少した。一方で、3000リードのうち、検出された菌種数がBP-863給与区で有意に増加していた。尚、本解析はDNA Res. Jun;20(3):241-253,2013、並びにDNA Res. Feb;21(1):15-25, 2014に記載された方法を用いた。
【００５１】
具体的には、図８に示したように、UniFrac解析の結果、BP-863非投与群と投与群との菌叢は有意に異なっていた。また、検出される配列の異なるユニット（OTU）数は、BP-863の投与群が増加していることから、多様性が増していることが明らかになった。さらに、詳細に解析した結果、日和見感染菌と想定されるStreptococcus 属の近縁の菌種が顕著に減少した。また、Clostoridium属のうち、cluster XIに属する菌種が減少する傾向が確認された。Clostoridium属のcluster XI としては、Clostridium mayombei などが挙げられた。Clostoridium cluster XIは、マウスを用いた実験では、肥満時に増加することが想定されているバクテリアの一つであることが知られている（Nature Jul 4;499(7456):97-101,2013）。
【００５２】
さらに、他の実験系も含めて、豚において減少するStreptococcus 属としては、Streptococcus alactoriticus、Streptococcus galactotiticus、Streptococcus orisuis、Streptococcus hyointestinalisなどが想定された。
【００５３】
この時、乳酸菌のうち、Lactobacillus amylovorusやBifidobacterium属は増加傾向であった。
【００５４】
尚、通常、老化に伴って腸内のClostridium属の菌種の増加が認められるが、BP-863を投与した動物の腸内菌叢のうち、Clostridium XIの減少傾向は、老犬においても確認された。  
【００５５】
（実施例３）  採卵鶏の大雛に対して、BP-863を含む飼料と含まない飼料を18週間の給与し、糞中の細菌叢を［００５０］と同様の方法で解析した。  
【００５６】
鶏糞中の菌叢解析をバクテリア16SrDNAを対象として次世代シーケンサーにて1800リード解析をした結果、BP-863を含む飼料を給与した鶏と非投与群との間では、菌叢の変化が確認されるとともに、バンコマイシン耐性菌などとして知られているEnterococuus属菌が顕著に減少した。一方で、1800リードのうち、検出された菌種数がBP-863給与区で有意に増加していた。具体的には、図１０に示されたように、BP-863投与群、並びに非投与群との間で、菌叢の有意な差が確認された。また、配列の異なるユニット（OTU）数は、BP-863の投与群が増加していることから、多様性が増していることが明らかになった。その中でも、Enterococcus属のうち、Enterococcus gallinarumが顕著に減少していた。尚、この時、Lactobacillus amylovorusの増加傾向が確認された。
【００５７】
これらの結果をまとめると、BP-863は菌叢を制御し、特に菌叢の多様性を増加させる傾向が認められ、その一方で、特定の有用菌を増加させるとともに、特定の日和見感染菌の減少を促すことが明らかになった。このような傾向は抗生物質の投与では、多くの腸内細菌叢を死滅させることから菌叢の多様性を失わせるため、本発明技術は従来技術に対して新規性を持っていると言えた。前述のように、近年、腸内細菌叢の多様性は肥満制御や各種疾患予防にも不可欠であることが明らかになってきており、本発明の有効性が高いと考えられた。本発明によって、抗生物質に頼らない形で、特定の日和見感染菌を軽減させると同時に、動物種を問わずに、腸内細菌叢の多様性をもたらし、さまざまな疾病予防をもたらすことが可能となることが期待される。
【受託番号】
【００５８】
ＮＩＴＥ  ｐ−０１９３１
【００５９】
ＮＩＴＥ  ＢＰ−０２０６６  
【００６０】
ＮＩＴＥ  ＢＰ−２０６７
【００６１】
ＮＩＴＥ  ＢＰ−８６３
【００６２】
ＮＩＴＥ  ＢＰ−１０５１  
【００６３】
ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１７７３  
【００６４】
受託拒否通知No.２０１４−０３１９  
【００６５】
受託拒否通知No.２０１４−０３２１  
【００６６】
Thermophiles inoculum MIROKU M2K株
【図１】
0006557876.tif 000012
【図２】
0006557876.tif 000013
【図３】
0006557876.tif 000014
【図４】
0006557876.tif 000015
【図５】
0006557876.tif 000016
【図６】
0006557876.tif 000017
【図７】
0006557876.tif 000018
【図８】
0006557876.tif 000019
【図９】
0006557876.tif 000020
【図１０】
0006557876.tif 000021