(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記化学式２で表すペプチドホウ酸化合物と、下記化学式１で表す化合物とを含む安定化薬学組成物：
［化学式１］
0006454030.tif 000029
前記化学式１において、
Ｍ＝Ｍｇ＋２またはＣａ＋２であり、
ｍ＝２の整数であり、
ｘ＝０、１または２の整数であり、
［化学式２］
0006454030.tif 000030
前記化学式２において、前記Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立に、水素、炭素数Ｃ１〜１０のアルキル、炭素数Ｃ１〜１０のアルコキシ、炭素数Ｃ５〜１２のアリールオキシ、炭素数Ｃ５〜１２のアラルキル、炭素数Ｃ５〜１２のアラルコキシ、炭素数Ｃ６〜１２のアリール、Ｃ３〜１２の炭素数を有し、Ｎ、Ｏ、およびＳから構成された群より選択された１種以上のヘテロ原子を含むヘテロアリール、炭素数Ｃ３〜６のシクロアルキル、Ｃ３〜６の炭素数を有し、Ｎ、Ｏ、およびＳから構成された群より選択された１種以上のヘテロ原子を含む５〜７員のシクロヘテロアルキル、炭素数Ｃ３〜１０のジアルキルスルフィド、炭素数Ｃ３〜１０のアルキルチオール、炭素数Ｃ３〜１０のアルキルアミン、ジクロロフェニル、４−（（ｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル、３−（ニトロアミジノ）プロピル、および（１−シクロペンチル−９−シアノ）ノニルからなる群より選択された置換基であるか；
前記Ｒ１およびＲ３は、独立に、水素、炭素数Ｃ１〜１０のアルキル、炭素数Ｃ１〜１０のアルコキシ、炭素数Ｃ５〜１２のアリールオキシ、炭素数Ｃ５〜１２のアラルキル、炭素数Ｃ５〜１２のアラルコキシ、炭素数Ｃ６〜１２のアリール、Ｃ３〜１２の炭素数を有し、Ｎ、Ｏ、およびＳから構成された群より選択された１種以上のヘテロ原子を含むヘテロアリール、炭素数Ｃ３〜６のシクロアルキル、およびＣ３〜６の炭素数を有し、Ｎ、Ｏ、およびＳから構成された群より選択された１種以上のヘテロ原子を含む５〜７員のシクロヘテロアルキル、炭素数Ｃ３〜１０のジアルキルスルフィド、炭素数Ｃ３〜１０のアルキルチオール、炭素数Ｃ３〜１０のアルキルアミン、ジクロロフェニル、４−（（ｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル、３−（ニトロアミジノ）プロピル、および（１−シクロペンチル−９−シアノ）ノニルからなる群より選択された置換基であり、
前記Ｒ２は、水素、炭素数Ｃ１〜１０のアルキル、炭素数Ｃ１〜１０のアルコキシ、炭素数Ｃ５〜１２のアリールオキシ、炭素数Ｃ５〜１２のアラルキル、炭素数Ｃ５〜１２のアラルコキシ、炭素数Ｃ６〜１２のアリール、Ｃ３〜１２の炭素数を有し、Ｎ、Ｏ、およびＳから構成された群より選択された１種以上のヘテロ原子を含むヘテロアリール、炭素数Ｃ３〜６のシクロアルキル、およびＣ３〜６の炭素数を有し、Ｎ、Ｏ、およびＳから構成された群より選択された１種以上のヘテロ原子を含む５〜７員のシクロヘテロアルキル、炭素数Ｃ３〜１０のジアルキルスルフィド、炭素数Ｃ３〜１０のアルキルチオール、炭素数Ｃ３〜１０のアルキルアミン、ジクロロフェニル、４−（（ｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル、３−（ニトロアミジノ）プロピル、および（１−シクロペンチル−９−シアノ）ノニルからなる群より選択された置換基であるかまたは、前記化学式２の化合物に含まれているアミノ酸骨格
0006454030.tif 000031
内の隣接した窒素原子と共に、Ｃ３〜６の炭素数を有し、Ｎ、Ｏ、およびＳから構成された群より選択された１種以上のヘテロ原子を含む５〜７員のシクロヘテロアルキルを形成し；
前記ｎは、１〜８の整数である。
【請求項２】
前記化学式２のＲ１、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立に、水素、ｎ−ブチル、イソブチル、ネオペンチル、フェニル、ジクロロフェニル、ピラジル、４−（（ｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル、３−（ニトロアミジノ）プロピル、（１−シクロペンチル−９−シアノ）ノニル、ナフチルメチル、ベンジル、ベンジルオキシ、およびピロリジンから構成されたグループより選択され、前記ｎは、１または２の整数である、請求項１に記載の薬学組成物。
【請求項３】
前記ペプチドホウ酸化合物は、下記化学式３で表されるボルテゾミブ（Ｂｏｒｔｅｚｏｍｉｂ）、または下記化学式７で表されるイキサゾミブ（Ｉｘａｚｏｍｉｂ）である、請求項１に記載の薬学組成物：
［化学式３］
0006454030.tif 000032
、
［化学式７］
0006454030.tif 000033
。
【請求項４】
前記化学式１で表す化合物は、カルシウムジ−グルコネート一水和物およびマグネシウムジ−グルコネート二水和物からなる群より選択された１種以上である、請求項１に記載の薬学組成物。
【請求項５】
前記化学式１の化合物は、前記ペプチドホウ酸化合物１重量部対比３〜１２重量部で含まれるものである、請求項１に記載の薬学組成物。
【請求項６】
前記薬学組成物は、下記化学式８〜１１で表される化合物からなる群より選択される化合物の含有量の合計が、全体薬学組成物１００重量部を基準として３．５重量部以下である、請求項１に記載の薬学組成物：
［化学式８］
0006454030.tif 000034
、
［化学式９］
0006454030.tif 000035
、
［化学式１０］
0006454030.tif 000036
、
［化学式１１］
0006454030.tif 000037
。
【請求項７】
前記組成物のｐＨは、４〜８である、請求項１に記載の薬学組成物。
【請求項８】
前記薬学組成物は、注射剤である、請求項１に記載の薬学組成物。
【請求項９】
前記組成物は、凍結乾燥製剤である、請求項１に記載の薬学組成物。
【請求項１０】
前記薬学組成物は、多発性骨髄腫の治療のためのものである、請求項１に記載の薬学組成物。
【請求項１１】
下記化学式１で表す化合物を用いて下記化学式２で表すペプチドホウ酸化合物またはこれを含む薬学組成物の安定性を向上させる方法：
［化学式１］
0006454030.tif 000038
前記化学式１において、
Ｍ＝Ｍｇ＋２またはＣａ＋２であり、
ｍ＝２の整数であり、
ｘ＝０、１または２の整数であり、
［化学式２］
0006454030.tif 000039
前記化学式２において、前記Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立に、水素、炭素数Ｃ１〜１０のアルキル、炭素数Ｃ１〜１０のアルコキシ、炭素数Ｃ５〜１２のアリールオキシ、炭素数Ｃ５〜１２のアラルキル、炭素数Ｃ５〜１２のアラルコキシ、炭素数Ｃ６〜１２のアリール、Ｃ３〜１２の炭素数を有し、Ｎ、Ｏ、およびＳから構成された群より選択された１種以上のヘテロ原子を含むヘテロアリール、炭素数Ｃ３〜６のシクロアルキル、Ｃ３〜６の炭素数を有し、Ｎ、Ｏ、およびＳから構成された群より選択された１種以上のヘテロ原子を含む５〜７員のシクロヘテロアルキル、炭素数Ｃ３〜１０のジアルキルスルフィド、炭素数Ｃ３〜１０のアルキルチオール、炭素数Ｃ３〜１０のアルキルアミン、ジクロロフェニル、４−（（ｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル、３−（ニトロアミジノ）プロピル、および（１−シクロペンチル−９−シアノ）ノニルからなる群より選択された置換基であるか；
前記Ｒ１およびＲ３は、独立に、水素、炭素数Ｃ１〜１０のアルキル、炭素数Ｃ１〜１０のアルコキシ、炭素数Ｃ５〜１２のアリールオキシ、炭素数Ｃ５〜１２のアラルキル、炭素数Ｃ５〜１２のアラルコキシ、炭素数Ｃ６〜１２のアリール、Ｃ３〜１２の炭素数を有し、Ｎ、Ｏ、およびＳから構成された群より選択された１種以上のヘテロ原子を含むヘテロアリール、炭素数Ｃ３〜６のシクロアルキル、およびＣ３〜６の炭素数を有し、Ｎ、Ｏ、およびＳから構成された群より選択された１種以上のヘテロ原子を含む５〜７員のシクロヘテロアルキル、炭素数Ｃ３〜１０のジアルキルスルフィド、炭素数Ｃ３〜１０のアルキルチオール、炭素数Ｃ３〜１０のアルキルアミン、ジクロロフェニル、４−（（ｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル、３−（ニトロアミジノ）プロピル、および（１−シクロペンチル−９−シアノ）ノニルからなる群より選択された置換基であり、
前記Ｒ２は、水素、炭素数Ｃ１〜１０のアルキル、炭素数Ｃ１〜１０のアルコキシ、炭素数Ｃ５〜１２のアリールオキシ、炭素数Ｃ５〜１２のアラルキル、炭素数Ｃ５〜１２のアラルコキシ、炭素数Ｃ６〜１２のアリール、Ｃ３〜１２の炭素数を有し、Ｎ、Ｏ、およびＳから構成された群より選択された１種以上のヘテロ原子を含むヘテロアリール、炭素数Ｃ３〜６のシクロアルキル、およびＣ３〜６の炭素数を有し、Ｎ、Ｏ、およびＳから構成された群より選択された１種以上のヘテロ原子を含む５〜７員のシクロヘテロアルキル、炭素数Ｃ３〜１０のジアルキルスルフィド、炭素数Ｃ３〜１０のアルキルチオール、炭素数Ｃ３〜１０のアルキルアミン、ジクロロフェニル、４−（（ｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル、３−（ニトロアミジノ）プロピル、および（１−シクロペンチル−９−シアノ）ノニルからなる群より選択された置換基であるかまたは、前記化学式２の化合物に含まれているアミノ酸骨格
0006454030.tif 000040
内の隣接した窒素原子と共に、Ｃ３〜６の炭素数を有し、Ｎ、Ｏ、およびＳから構成された群より選択された１種以上のヘテロ原子を含む５〜７員のシクロヘテロアルキルを形成し；
前記ｎは、１〜８の整数である。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ペプチドホウ酸化合物を含有する安定化薬学製剤に関し、より詳細には、ペプチドホウ酸化合物と、安定化剤としてグルコン酸またはその薬学的に許容可能な塩とを含む安定化製剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
アルファ−アミノホウ酸をペプチド配列のＣ−末端に有するペプチドプロテアソーム阻害化合物のペプチドホウ酸化合物がある。このようなペプチドホウ酸化合物の一つとして、従来からＰＳ−３４１として知られたボルテゾミブ（ｂｏｒｔｅｚｏｍｉｂ）がある（ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標））。ボルテゾミブはジペプチドホウ酸誘導体であり、Ｋｉが０．６ｎｍｏｌ／Ｌの高度に選択的であり、強力な不可逆性のプロテアソーム阻害剤として合成されたものである。米国国立癌研究所のインビトロ（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）スクリーンを用いた結果、ボルテゾミブは、広範囲な腫瘍系に対して細胞毒性を示し、ヒト前立腺および肺癌異種移植モデルにおいても抗腫瘍活性があることが発見された。
【０００３】
ペプチドホウ酸化合物は、アミノ酸配列のＣ−末端にアミノホウ酸を有する、通常２〜４個のアミノ酸から構成される短鎖ペプチドの誘導体である（Ｚｅｍｂｏｗｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔ．Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｅｓ．４７（５）：４０５−４１３（１９９６））。ペプチドホウ酸化合物は、ホウ酸基と活性部位のセリンまたはヒスチジン残基との間で安定した四面体ホウ酸エステル複合体を形成する能力を備えることによって、強力なセリンプロテアーゼ阻害剤活性を示す。ペプチドホウ酸化合物のアミノ酸配列を変化させて非天然アミノ酸残基または他の置換基を導入することによって、活性が向上したり、特定のプロテアーゼに対して高い特異性を示すようにする。これらの誘導体は、他の短鎖ペプチドと同様の問題点を有するが、最も大きな問題点は、体内から非常に速やかに除去されて生体内の標的部位に到達できないことである。
【０００４】
したがって、ペプチドホウ酸化合物の安定性を増加させるために、リポソームなどのような伝達体に導入したり（ＪＰ２０１０−５３６８７５Ａ）、多様な安定化剤を追加的に含む製剤として提供されてきた。
【０００５】
具体的には、ＵＳ６，９５８，３１９の実施例５では、アスコルビン酸を安定化剤として用いた組成物を提示している。しかし、類縁物質の安定性が大きく改善されていないことが分かる。ＷＯ２００９／１５４７３７ではクエン酸、ＷＯ２０１０／０８９７６８ではトロメタミン（ｔｒｏｍｅｔｈａｍｉｎｅ）を、ＷＯ２０１０／１１４９８２ではシクロデキストリンを、ＵＳ２０１１／０２３４４１ではプロピレングリコールを、ＷＯ２０１４／０２３６７４では酒石酸（ｔａｒｔａｒｉｃ  ａｃｉｄ）を安定化剤として用いた。しかし、クエン酸と酒石酸の場合、製剤の安定性でない、単一活性物質に対する安定性データを示している。シクロデキストリンの場合、一般に注射剤として使用されておらず、プロピレングリコールは粘性の高い液体として扱いにくい。トロメタミンは、長期加速安定性試験条件（４０、７５％）で安定性に問題があることが明らかになった。
【０００６】
そこで、ペプチドホウ酸化合物自体だけでなく、ペプチドホウ酸化合物を含む薬学製剤の安定性を向上させる安定化剤、並びに前記安定化剤とペプチドホウ酸化合物とを含む薬学製剤の開発が必要であるのが現状である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、ペプチドホウ酸化合物自体だけでなく、ペプチドホウ酸化合物を含む製剤の安定性を向上させる安定化剤、並びに前記安定化剤とペプチドホウ酸化合物とを含む、安定性の向上した薬学製剤を提供する。
【０００８】
本発明は、プロテアソーム阻害剤であって主に多発性骨髄腫の標的抗癌剤として使用されるボルテゾミブ（Ｂｏｒｔｅｚｏｍｉｂ）ホウ酸化合物の安定化薬学組成物に関する。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、ペプチドホウ酸化合物を含有する安定化薬学製剤に関し、より詳細には、ペプチドホウ酸化合物と、安定化剤としてグルコン酸またはその薬学的に許容可能な塩とを含む安定化薬学製剤に関する。
【００１０】
本発明は、ペプチドホウ酸化合物と、グルコン酸またはその薬学的に許容可能な塩とを含み、前記グルコン酸またはその薬学的に許容可能な塩の具体例は、下記化学式１で表す化合物であってもよい。
［化学式１］
0006454030.tif 000002
前記化学式１において、
Ｍ＝Ｍｇ＋２またはＣａ＋２であり、
ｍ＝２の整数であり、
ｘ＝０、１または２の整数である。
【００１１】
本発明において、ペプチドホウ酸化合物は、ペプチド配列のＣ−末端にアルファ−アミノホウ酸を含有するペプチドである。一般に、ペプチドホウ酸化合物は、下記化学式２の構造を有するものであってもよい：
［化学式２］
0006454030.tif 000003
ここで、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、互いに同一または異なっていてもよい、独立に選択された部分であり、ｎは、１〜８、好ましくは１〜４、さらに好ましくは１または２の整数である。
【００１２】
好ましくは、前記化学式２において、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立に、水素、炭素数Ｃ１〜１０のアルキル、炭素数Ｃ１〜１０のアルコキシ、炭素数Ｃ５〜１２のアリールオキシ、炭素数Ｃ５〜１２のアラルキル、炭素数Ｃ５〜１２のアラルコキシ、炭素数Ｃ６〜１２のアリール、Ｃ３〜１２の炭素数を有し、Ｎ、Ｏ、およびＳから構成された群より選択された１種以上のヘテロ原子を含むヘテロアリール、炭素数Ｃ３〜６のシクロアルキル、Ｃ３〜６の炭素数を有し、Ｎ、Ｏ、およびＳから構成された群より選択された１種以上のヘテロ原子を含む５〜７員のシクロヘテロアルキル、炭素数Ｃ３〜１０のジアルキルスルフィド、炭素数Ｃ３〜１０のアルキルチオール、および炭素数Ｃ３〜１０のアルキルアミンからなる群より選択された置換基であるか；前記Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立に、水素、炭素数Ｃ１〜１０のアルキル、炭素数Ｃ１〜１０のアルコキシ、炭素数Ｃ５〜１２のアリールオキシ、炭素数Ｃ５〜１２のアラルキル、炭素数Ｃ５〜１２のアラルコキシ、炭素数Ｃ６〜１２のアリール、Ｃ３〜１２の炭素数を有し、Ｎ、Ｏ、およびＳから構成された群より選択された１種以上のヘテロ原子を含むヘテロアリール、炭素数Ｃ３〜６のシクロアルキル、およびＣ３〜６の炭素数を有し、Ｎ、Ｏ、およびＳから構成された群より選択された１種以上のヘテロ原子を含む５〜７員のシクロヘテロアルキル、炭素数Ｃ３〜１０のジアルキルスルフィド、炭素数Ｃ３〜１０のアルキルチオール、炭素数Ｃ３〜１０のアルキルアミンからなる群より選択された置換基が、前記化学式２の化合物に含まれているアミノ酸骨格
0006454030.tif 000004
内の隣接した窒素原子と共に、炭素数Ｃ３〜６であり、Ｎ、Ｏ、およびＳから構成された群より選択された１種以上のヘテロ原子を含む５〜７員のシクロヘテロアルキルを形成することができる。
【００１３】
前記アルコキシ、アラルキルおよびアラルコキシのアルキル成分を含むアルキルは、好ましくは、炭素数が１〜１０個、さらに好ましくは、炭素数が１〜６個であり、線状または分枝状であってもよい。前記アリールオキシ、アラルキルおよびアラルコキシのアリール成分を含むアリールは、好ましくは、炭素数が６〜１２個であり、好ましくは、単核または二核（つまり、２つの融合された環）、さらに好ましくは、単核、例えば、ベンジル、ベンジルオキシ、またはフェニルを含むことができる。前記ヘテロアリールは、好ましくは、炭素数が６〜１２個であり、好ましくは、単核または二核で、環内に１つ以上の窒素、酸素または硫黄原子を有する芳香族環であり、例えば、フリル、ピロール、ピリジン、ピラジン、またはインドールを含む。シクロアルキルは、好ましくは、炭素原子が３〜６個である。シクロヘテロアルキルは、環内に１つ以上の窒素、酸素または硫黄原子を有する非芳香族環、好ましくは、３〜６個の炭素数を有する５員〜７員環をいう。当該シクロヘテロアルキルには、例えば、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、およびモルホリンが含まれる。シクロアルキルまたはシクロヘテロアルキルのうちのいずれか１つはアルキルと組み合わされてもよいし、例えば、シクロヘキシルメチルであってもよい。
【００１４】
前記Ｒ１、Ｒ２およびＲ３からなる群の中から選択された１つ以上の置換基（水素の場合を除く）は、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、好ましくは、フルオロまたはクロロ；ヒドロキシ；Ｃ１−６の低級アルキル；Ｃ１−６の低級アルコキシ、例えば、メトキシまたはエトキシ；Ｃ６−１２のアリール、Ｃ３〜１２の炭素数を有し、Ｎ、Ｏ、およびＳから構成された群より選択された１種以上のヘテロ原子を含むヘテロアリール、ケト；アルデヒド；カルボン酸、エステル、アミド、カーボネート、またはカルバメート；スルホン酸またはスルホン酸エステル；シアノ；一級、二級、または三級アミノ；ニトロ；アミジノ；グアニジン、チオおよびＣ１−６のアルキルチオから選択される１つ以上の置換基で置換されていてもよい。
【００１５】
化学式２において、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の具体例は、水素；ｎ−ブチル、イソブチル、およびネオペンチル（アルキル）；フェニル、ジクロロフェニルまたはピラジル（アリール）；４−（（ｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル、３−（ニトロアミジノ）プロピル、および（１−シクロペンチル−９−シアノ）ノニル（置換されたアルキル）；ナフチルメチルおよびベンジル（アラルキル）；ベンジルオキシ（アラルコキシ）；およびピロリジン（Ｒ２は、隣接した窒素原子と共にシクロヘテロアルキル環を形成する）からなる群より選択された１以上であり、前記ｎは、１または２の整数であってもよい。
【００１６】
好ましくは、前記化学式２において、Ｒ１は、Ｃ６〜１２のアリール、Ｃ６〜１２の炭素数を有し、Ｎ、Ｏ、およびＳから構成された群より選択された１種以上のヘテロ原子を含むヘテロアリールまたはＣ１〜１０のアルキル基であってもよいし、さらに好ましくは、ジアジン（ｄｉａｚｉｎｅ）、ベンジルおよびジクロロフェニルからなる群より選択された１以上であってもよい。
【００１７】
好ましくは、前記化学式２の化合物に含まれているアミノ酸骨格
0006454030.tif 000005
において、Ｒ２は、下記表１のアミノ酸残基および
0006454030.tif 000006
からなる群より選択された１以上の置換基を含むことができ、Ｒ２は、プロピルであり、前記アミノ酸骨格内の窒素原子と共に５員環を形成することができる。
【表１】
0006454030.tif 000007
【００１８】
好ましくは、前記化学式２の化合物において、Ｒ２は、フェニルアラニン、ロイシン、グリシン、アスパラギン酸またはグルタミン酸の残基、または
0006454030.tif 000008
を有する化合物であってもよい。
【００１９】
好ましくは、前記化学式２のＲ３は、水素またはＣ１〜１０のアルキル基であってもよいし、好ましくは、ｉｓｏ−ブチル基である。
【００２０】
前記化学式２のペプチドホウ酸は、側鎖としてホウ酸を有するフェニルアラニン、ロイシン、グリシン、アスパラギン酸またはグルタミン酸を含むことができる。
【００２１】
前記化学式２のペプチドホウ酸化合物の具体的な一例は、化学式３〜７のうちの１つの構造を有する化合物であってもよい。
［化学式３］
0006454030.tif 000009
［化学式４］
0006454030.tif 000010
［化学式５］
0006454030.tif 000011
［化学式６］
0006454030.tif 000012
［化学式７］
0006454030.tif 000013
【００２２】
一般に、ペプチドホウ酸化合物の一例は化学式２に表しており、前記化学式２において、ｎは、１〜８の整数、好ましくは、１〜４の整数であってもよいし、例えば、１個のアミノ酸から構成されたモノ−ペプチド、２個のアミノ酸から構成されたジ−ペプチド、３個のアミノ酸から構成されたトリ−ペプチドなどを含む。さらに他の例示的なペプチドホウ酸化合物は、ＵＳ６，０８３，９０３、ＵＳ６，２９７，２１７号およびＵＳ６，６１７，３１７号に開示されている。
【００２３】
本発明の一例によるペプチドホウ酸化合物は、ジペプチジルホウ酸化合物であってもよいし、例えば、前記化学式３で表されるボルテゾミブ（Ｂｏｒｔｅｚｏｍｉｂ）、または前記化学式７で表されるイキサゾミブ（Ｉｘａｚｏｍｉｂ）であってもよい。
【００２４】
ボルテゾミブのようなペプチドホウ酸化合物は、アミノ酸配列のＣ−末端にアミノホウ酸を含有する、通常２〜４個の短いアミノ酸ペプチドの誘導体である（文献［Ｚｅｍｂｏｗｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔ．Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｅｓ．４７（５）：４０５−４１３（１９９６）］）。ホウ酸基と活性部位のセリンまたはヒスチジン部分との間に安定した四面体型ボレート複合体を形成する能力により、ペプチドホウ酸化合物は、強力なセリン−プロテアーゼ抑制剤である。
【００２５】
本発明による化学式１を有する化合物は、グルコン酸またはグルコン酸の薬学的に許容可能な塩であってもよい。具体例としては、前記グルコン酸塩は、カルシウムジ−グルコネート一水和物およびマグネシウムジ−グルコネート二水和物からなる群より選択された１種以上であってもよい。
【００２６】
本発明の一例において、下記化学式１で表す化合物を含むペプチドホウ酸化合物の安定化剤を提供する。前記安定化剤は、ペプチドホウ酸化合物の安定化のための薬学組成物に添加され、ペプチドホウ酸化合物は、前記薬学組成物で上述した通りである。
［化学式１］
0006454030.tif 000014
前記化学式１において、
Ｍ＝Ｍｇ＋２またはＣａ＋２であり、
ｍ＝２であり、
ｘ＝０、１または２である。
【００２７】
より具体的には、前記化学式１で表す化合物は、ペプチドホウ酸化合物１重量部対比３〜１２重量部、４〜１１重量部、４〜６重量部、または９〜１１重量部であってもよいが、これに制限されるわけではない。
【００２８】
また、本発明の一具体例において、前記薬学組成物のｐＨは、４〜８または４〜６であってもよいし、本発明の薬学組成物は、前記ｐＨ範囲のすべてにおいて安定した特性を示すことから、ペプチドホウ酸の安定化薬学組成物として有用に使用できる。
【００２９】
前記薬学組成物は、多様な方法で投与され、経口または非経口経路を含むが、好ましくは、注射により投与される組成物であってもよい。
【００３０】
前記薬学組成物は、多様な製剤形態に製剤化することができ、好ましくは、安定性の面を考慮して凍結乾燥製剤であってもよい。
【００３１】
本発明による薬学組成物は、ペプチドホウ酸化合物を活性成分として含み、前記活性成分の例としては、ボルテゾミブ（Ｂｏｒｔｅｚｏｍｉｂ）が挙げられる。これによって、本発明による薬学組成物は、多発性骨髄腫の治療のための、安定性の増加した薬学組成物に関する。
【００３２】
本発明による薬学組成物は、ペプチドホウ酸化合物を含む薬学組成物であって、薬学的に許容可能な多様な賦形剤、担体などを追加的に含んでもよいし、特に制限はない。
【００３３】
本発明による薬学組成物は、ペプチドホウ酸化合物自体の安定性だけでなく、前記ペプチドホウ酸化合物を含む製剤の安定性を向上させる。ペプチドホウ酸化合物を含む製剤の安定性は、保管期間中の類縁物質の含有量が特定数値範囲以下の低濃度を有しなければならない。例えば、市販製品のベルケイド注の基準および試験方法をみると、Ｉｍｐｕｒｉｔｙ  Ａ＋Ｂは１．５％以下、Ｉｍｐｕｒｉｔｙ  Ｃは１．３％以下、Ｉｍｐｕｒｉｔｙ  Ｄは０．５％以下で含有しなければならず、また、総類縁物質は３．５％以下に管理するようになっている。これによって、本発明の薬学組成物は、下記化学式８〜１１で表される化合物からなる群より選択される化合物の含有量が、全体薬学組成物１００重量部を基準として３．５重量部以下で含まれるものであってもよい。具体的には、化学式８はＩｍｐ  Ａ、化学式９はＩｍｐ  Ｂ、化学式１０はＩｍｐ  Ｃ、および化学式１１はＩｍｐ  Ｄを表す。
［化学式８］
0006454030.tif 000015
［化学式９］
0006454030.tif 000016
［化学式１０］
0006454030.tif 000017
［化学式１１］
0006454030.tif 000018
【００３４】
例えば、本発明の一例による安定化製剤は、Ｉｍｐｕｒｉｔｙ  Ａ＋Ｂは１．５％以下、Ｉｍｐｕｒｉｔｙ  Ｃは１．３％以下、Ｉｍｐｕｒｉｔｙ  Ｄは０．５％以下で含有しなければならず、また、総類縁物質は３．５％以下の濃度で保管期間中の安定性を確保することができる。
【発明の効果】
【００３５】
本発明は、プロテアソーム阻害剤であって主に多発性骨髄腫の標的抗癌剤として使用されるボルテゾミブ（Ｂｏｒｔｅｚｏｍｉｂ）ホウ酸化合物と、安定化剤とを含む組成物に関し、前記組成物は、改善された安定性を示し、医薬品として開発可能である。
【発明を実施するための形態】
【００３６】
以下、本発明を、実施例および実験例によって詳細に説明する。ただし、下記の実施例および実験例は本発明を例示するためのものに過ぎず、本発明の範囲が下記の実施例および実験例によって限定されるものではない。
【００３７】
＜実施例１〜５＞ボルテゾミブとマグネシウムジ−グルコネート二水和物の凍結乾燥製剤の調製
フラスコにボルテゾミブ１００ｍｇとｔｅｒｔ−ブタノール４０ｍｌを入れて、４５℃で１０分間すべて溶解するまで撹拌した。前記得られた溶液に、下記表２のような組成でマグネシウムジ−グルコネート二水和物と注射用水６０ｍｌを入れて、１０分間すべて溶解するまで撹拌した。下記表２のように、０．１Ｎ塩酸または０．５Ｎ  ＮａＯＨ溶液でｐＨを合わせてろ過した。バイアルに分注した後、凍結乾燥機で３日間凍結乾燥して凍結乾燥製剤を得た。
【表２】
0006454030.tif 000019
【００３８】
＜実施例６〜７＞ボルテゾミブとカルシウムジ−グルコネート一水和物の凍結乾燥製剤の調製
フラスコにボルテゾミブ１００ｍｇとｔｅｒｔ−ブタノール４０ｍｌを入れて、４５℃で１０分間すべて溶解するまで撹拌した。前記得られた溶液に、下記表３のように、カルシウムジ−グルコネート一水和物と注射用水６０ｍｌを入れて、１０分間すべて溶解するまで撹拌した。０．１Ｎ塩酸または０．５Ｎ  ＮａＯＨ溶液でｐＨを合わせてろ過した。バイアルに分注した後、凍結乾燥機で３日間凍結乾燥して凍結乾燥製剤を得た。
【表３】
0006454030.tif 000020
【００３９】
＜比較例１＞ボルテゾミブ単独の凍結乾燥製剤の製造
フラスコにボルテゾミブ１００ｍｇとｔｅｒｔ−ブタノール４０ｍｌを入れて、４５℃で１０分間すべて溶解するまで撹拌した。前記得られた溶液に注射用水６０ｍｌを入れて１０分間撹拌した。０．１Ｎ塩酸溶液でｐＨを４．９に合わせてろ過した。バイアルに分注した後、凍結乾燥機で３日間凍結乾燥して凍結乾燥製剤を得た。
【００４０】
＜比較例２＞ボルテゾミブとアスコルビン酸の凍結乾燥製剤の製造
フラスコにボルテゾミブ１００ｍｇとｔｅｒｔ−ブタノール４０ｍｌを入れて、４５℃で１０分間すべて溶解するまで撹拌した。前記得られた溶液にアスコルビン酸１．０ｇを入れて、注射用水６０ｍｌを入れて１０分間撹拌した。０．１Ｎ塩酸溶液でｐＨを４．９に合わせてろ過した。バイアルに分注した後、凍結乾燥機で３日間凍結乾燥して凍結乾燥製剤を得た。
【００４１】
＜比較例３〜４＞ボルテゾミブとグルコン酸ナトリウム塩の凍結乾燥製剤の製造
フラスコにボルテゾミブ１００ｍｇとｔｅｒｔ−ブタノール４０ｍｌを入れて、４５℃で１０分間すべて溶解するまで撹拌した。前記得られた溶液にグルコン酸ナトリウム塩１．０ｇを入れて、注射用水６０ｍｌを入れて１０分間撹拌した。下記表４のように、０．１Ｎ塩酸または０．５Ｎ  ＮａＯＨ溶液でｐＨを合わせてろ過した。バイアルに分注した後、凍結乾燥機で３日間凍結乾燥して凍結乾燥製剤を得た。
【表４】
0006454030.tif 000021
【００４２】
＜実験例１＞ボルテゾミブ凍結乾燥製剤の含有量の安定性
含有量は、安定性評価のうち製品の品質を評価する重要項目の一つであって、前記実施例と比較例の組成を６０℃の苛酷条件で保管後に含有量の変化を観察し、表５に結果を示した。
【表５】
0006454030.tif 000022
【００４３】
本発明の実施例は、６０℃の苛酷条件で４週間保管時に含有量の減少および変化が観察されなかった。しかし、安定化剤を使用しない比較例１の場合、６０℃２週に含有量が９５％以下に減少し、４週後には９０％以下に減少して、安定性が非常に低下することが分かる。比較例２の場合、６０℃２週に含有量が８０．１％と非常に安定性が減少し、２週目の含有量が含有量基準を顕著に外れて４週目の含有量は測定しなかった。
【００４４】
＜実験例２＞ボルテゾミブ凍結乾燥製剤の類縁物質の安定性
前記実施例および比較例の製剤に対して、６０℃の苛酷条件で保管後に類縁物質をＨＰＬＣで分析した。ＨＰＬＣ分析のための試料は、検体約３３ｍｇ（ボルテゾミブ３ｍｇ相当量）に移動相Ａ液３ｍｌを入れて、超音波処理して溶解させた。
【００４５】
ＨＰＬＣ分析条件は以下の通りである。
＜ＨＰＬＣ分析条件＞
カラム：Ｓｙｍｍｅｔｒｙ  Ｃ１８  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ  ｃｏｌｕｍｎ  ２５０ｍｍｘ４．６ｍｍ、５μｍ
カラム温度：２５℃
移動相Ａ：アセトニトリル：水：ギ酸＝３０：７０：０．１
移動相Ｂ：アセトニトリル：水：ギ酸＝８０：２０：０．１
流速：１．０ｍｌ／分
注入量：２０μｌ
検出器：ＵＶ２７０ｎｍ
検体ｔｒａｙ温度：５℃
検液：移動相Ａ：移動相Ｂ＝９：１
【表６】
0006454030.tif 000023
【００４６】
実施例１−７および比較例１−４の製剤に対して、苛酷条件で保管後に得られた類縁物質をＨＰＬＣで分析した結果を、下記表７にまとめた。
【００４７】
下記のＩｍｐｕｒｉｔｙ  Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄの構造式は次の通りである。化学式８はＩｍｐ  Ａ、化学式９はＩｍｐ  Ｂ、化学式１０はＩｍｐ  Ｃ、および化学式１１はＩｍｐ  Ｄを表す。
［化学式８］
0006454030.tif 000024
［化学式９］
0006454030.tif 000025
［化学式１０］
0006454030.tif 000026
［化学式１１］
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【表７】
0006454030.tif 000028
【００４８】
市販製品のベルケイド注の基準および試験方法をみると、Ｉｍｐｕｒｉｔｙ  Ａ＋Ｂは１．５％以下、Ｉｍｐｕｒｉｔｙ  Ｃは１．３％以下、Ｉｍｐｕｒｉｔｙ  Ｄは０．５％以下で含有しなければならず、また、総類縁物質は３．５％以下に管理するようになっている。
【００４９】
安定化剤を使用しない比較例１の場合、開始時にＩｍｐｕｒｉｔｙ  Ａ、ＢおよびＤは検出されておらず、６０℃の苛酷保管条件で２週間保管した場合に、類縁物質Ａ、Ｂ、Ｃが大きく増加し、総類縁物質が７．２８％と大きく増加して基準を超えた。
【００５０】
また、安定化剤としてグルコン酸ナトリウム塩を用いた比較例３と４の場合、６０℃の苛酷保管条件で４週間保管時、ｐＨが高い７．５の組成物では、類縁物質Ｃが１．６８％と大きく増加し、ｐＨが低い４．０の組成物では、類縁物質Ｄが０．８９％と大きく増加して基準を超えた。
【００５１】
反面、本発明の実施例１〜５の凍結乾燥製剤は、６０℃の苛酷保管条件で４週間保管時、類縁物質が基準に適合し、比較例との比較時、組成物のｐＨ変化および安定化剤の量に関係なく非常に安定していることが分かった。また、グルコン酸カルシウム塩を用いた本発明の実施例６〜７の凍結乾燥製剤も、６０℃の苛酷保管条件で４週間保管時、類縁物質が基準に適合し、比較例に比べて非常に安定していることを確認した。