(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ツルマメオイルを有効成分として含む抗酸化用組成物。
【請求項２】
ツルマメオイルを有効成分として含む抗老化用組成物。
【請求項３】
前記組成物は老化を遅延または老化を改善する、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記組成物はコラゲナーゼの生成を抑制または阻害し、またはコラゲナーゼの発現を抑制する、請求項２または３に記載の組成物。
【請求項５】
前記組成物はシワを改善またはシワを緩和させる、請求項２または３に記載の組成物。
【請求項６】
ツルマメオイルを有効成分として含む美白用組成物。
【請求項７】
前記組成物はメラニンの生成を抑制または阻害し、またはメラニンの発現を抑制する、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
ツルマメオイルを有効成分として含む抗炎症用組成物。
【請求項９】
前記炎症はニキビである、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
前記組成物はＭＣＰ(Ｍｏｎｏｃｙｔｅ  Ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔ  Ｐｒｏｔｅｉｎ)の生成、またはその発現を抑制しまたは阻害する、請求項８または９に記載の組成物。
【請求項１１】
ツルマメオイルを有効成分として含む保湿用組成物。
【請求項１２】
前記組成物はアトピーまたは乾癬を治療、予防、または改善する、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
前記組成物は皮膚バリア機能を強化する、請求項１１または１２に記載の組成物。
【請求項１４】
前記組成物はツルマメオイルを０．００１〜１０重量％の範囲で含む、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１５】
前記組成物は化粧料組成物である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１６】
前記組成物は皮膚外用剤組成物である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１７】
前記組成物は薬学的組成物である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１８】
前記組成物は健康食品組成物である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本明細書は、ツルマメオイルを有効成分として含む組成物に係り、具体的に抗酸化、抗老化、抗シワ、美白、抗炎、抗ニキビ、保湿、アトピーの改善、皮膚バリア機能の改善などの用途を有する組成物に関して開示する。
【背景技術】
【０００２】
ヒトの皮膚は歳をとるにつれ色々な内的、外的要因によって変化していく。内的には新陳代謝を調節する各種のホルモンの分泌が減少し、免疫細胞の機能と細胞の活性が低下して生体に必要な免疫蛋白質及び生体構成蛋白質の生合成が減少するようになる。一方、外的にはオゾン層の破壊による紫外線含有量の増加などによる環境汚染が深刻化し、フリーラジカルや活性有害酸素などが増加し、これにより、皮膚の厚さの減少、シワの増加、または皮膚弾力の減少などの皮膚トラブルをはじめとした色々な変化を起こすようになる。
【０００３】
老化が進行するにつれ、皮膚を構成する物質であるコラーゲン、エラスチン、ヒアルロン酸、及び糖蛋白質の含有量及び配列が変化したり減少したりする症状が現れ、フリーラジカルや活性有害酸素によって皮膚が酸化ストレスを受けるようになる。また、老化の進行や紫外線によって、皮膚を構成する多くの細胞で前炎症性サイトカイン(ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｃｙｔｏｋｉｎｅ)を生成する酵素であるシクロオキシゲナーゼ-２(Ｃｏｘ-２，ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ)の生合成が増加し、これらの炎症性因子によって皮膚組織を分解する酵素であるマトリックスメタロプロテアーゼ(ＭＭＰ、Ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ)の生合成が増加し、ｉＮＯＳ(ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ  ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ  ｓｙｎｔｈａｓｅ)によるＮＯ(ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ)の生成が増加すると知られている。すなわち、自然的に進行する内因性老化による細胞活性の減少及び微細炎症によって基質物質の生合成が減少し、色々な有害環境によるストレスの増加及び太陽光線による活性酸素種の増加といった外的要因によって分解及び変性が加速化し、皮膚基質が破壊し且つ薄くなりながら皮膚老化の諸症状が現れるようになる。
【０００４】
一方、体内酵素系、還元代謝、化学薬品、公害物質、及び光化学反応などの各種の物理的、化学的、及び環境的要因などによって生成される活性酸素は、細胞構成成分である脂質、蛋白質、糖、及びＤＮＡなどに対して非選択的、不可逆的な破壊作用をすることで細胞を老化させたり癌をはじめとする各種の病気を引き起こしたりすると知られている。また、これらの活性酸素による脂質過酸化の結果で生成される脂質過酸化物をはじめとする色々な体内過酸化物も、細胞に対する酸化的破壊を引き起こして各種の機能障害を生じさせることによって色々な病気の原因になったりもする。したがって、このようなフリーラジカルを消去できる化合物(ｆｒｅｅ  ｒａｄｉｃａｌ  ｓｃａｖｅｎｇｅｒｓ)または過酸化物生成抑制物質のような抗酸化剤が、これらの酸化物に起因する老化及び各種の疾患の抑制または治療剤として期待されている実情である。
【０００５】
先行技術は、特許文献１等に記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】韓国公開特許第１０-２００１-００５４２９０号公報
【特許文献２】韓国公開特許第１０-２０１３-０１０７１２３号公報
【特許文献３】韓国公開特許第１０-２０１３-０１２０５９７号公報
【特許文献４】欧州特許出願公開第２１７２２０６号明細書
【特許文献５】韓国公開特許第１０-１９８９-００１５７３０号公報
【特許文献６】韓国公開特許第１０-２０１２-００４２８０６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
一例において、本発明の目的は、ツルマメオイルを含む、多様な用途を有する組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
前記目的を達成するために、本発明の一観点はツルマメオイルを有効成分として含有する組成物を提供する。
【０００９】
具体例１．ツルマメオイルを有効成分として含む抗酸化用組成物。
具体例２．ツルマメオイルを有効成分として含む抗老化用組成物。
具体例３．前記具体例１〜３のいずれかにおいて、前記組成物は老化を遅延または老化を改善する、組成物。
具体例４．前記具体例１〜３のいずれかにおいて、前記組成物はコラゲナーゼの生成を抑制または阻害し、またはコラゲナーゼの発現を抑制する、組成物。
具体例５．前記具体例１〜３のいずれかにおいて、前記組成物はシワを改善またはシワを緩和させる、組成物。
具体例６．ツルマメオイルを有効成分として含む美白用組成物。
具体例７．前記具体例６において、前記組成物はメラニンの生成を抑制または阻害し、またはメラニンの発現を抑制する、組成物。
具体例８．ツルマメオイルを有効成分として含む抗炎症用組成物。
具体例９．前記具体例８において、前記炎症はニキビである、組成物。
具体例１０．前記具体例８または９において、前記組成物はＭＣＰ(Ｍｏｎｏｃｙｔｅ  Ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔ  Ｐｒｏｔｅｉｎ)の生成、またはその発現を抑制しまたは阻害する、組成物。
具体例１１．ツルマメオイルを有効成分として含む保湿用組成物。
具体例１２．前記具体例１１において、前記組成物はアトピーまたは乾癬を治療、予防、または改善する、組成物。
具体例１３．前記具体例１１または１２において、前記組成物は皮膚バリア機能を強化する、組成物。
具体例１４． 前記具体例１〜１３のいずれかにおいて、前記組成物はツルマメオイルを０．００１〜１０質量％の範囲で含む、組成物。
具体例１５．前記具体例１〜１４のいずれかにおいて、前記組成物は化粧料組成物である、組成物。
具体例１６．前記具体例１〜１５のいずれかにおいて、前記組成物は皮膚外用剤組成物である、組成物。
具体例１７．前記具体例１〜１６のいずれかにおいて、前記組成物は薬学的組成物である、組成物。
具体例１８．前記具体例１〜１７のいずれかにおいて、前記組成物は健康食品組成物である、組成物。
【発明の効果】
【００１０】
本発明の一実施例に係る組成物は、ツルマメオイルを有効成分として含み、抗老化、抗シワ、美白、抗炎、抗ニキビ、保湿、アトピーの改善、皮膚バリア機能の改善などの効果を奏する。このような効果は、それぞれの効果を奏すると認められて市中で販売される物質よりも優れた水準で、且つ、ツルマメではない他種の豆オイルよりも優れたものであった。さらに、本発明の一実施例に係る組成物は、天然の植物から得られたオイルを有効成分として含み、副作用が殆どなく、長期間使用した場合でも耐性ができる可能性が極めて低いことから、化粧品または医薬の分野において多様に活用可能であるという長所がある。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】ツルマメオイルのＨＰＬＣ測定結果を示す図である。
【図２】大豆オイルのＨＰＬＣ測定結果を示す図である。
【図３】ツルマメ抽出物に対してＨＰＬＣを測定した結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本明細書において「ツルマメ（ナプテギマメ）(Ｇｌｙｃｉｎｅ  ｇｒａｃｉｌｉｓ)」は、形が平たいという語源から付けられた名称であって、ナプチョレギマメ(青松)、ナプトゥレマメ(迎日)、ナプチャクマメ(京畿道)などと多様に呼ばれる。本明細書のツルマメは、最もよく見られる豆である大豆とは異なり、楕円形であり平たくて細長い形を有する。ツルマメを初伏前に植えるとツルがたくさん伸びるが、初伏が過ぎて植えると背が低くて株の下に一度に足が入る隙もなく豆がたくさん生る。ツルマメの葉は多少狭くて小さい方であり、青色の花を咲かせる。ツルマメをもやしに育てる場合、成長がはやくて頭の部分が細長くて小さく、軟らかくて美味しいという特徴がある。
【００１３】
本明細書において「ツルマメオイル」は、当業界において天然物のオイルを得ると知られた方法にて得られたものであれば制限なく用いることができる。具体的に、ツルマメを油圧式搾油機に入れて搾油して得られたオイル、または該オイルをろ過紙に通過させて得られるオイルの双方を意味するものであってよいが、これに制限されるものではない。
【００１４】
本発明は、一観点において、ツルマメオイルを有効成分として含む抗酸化用組成物に関する。本明細書において「抗酸化」とは、当業界において知られた酸化過程を遅延または防止、または予防できる効能をいうものであって、制限がない。
【００１５】
本発明は、他の観点において、ツルマメオイルを有効成分として含む抗老化用組成物に関する。本明細書において「抗老化」とは、当業界において知られた老化過程を遅延または防止、または予防できる効能をいうものであり、具体的に、皮膚内コラゲナーゼの発現を効果的に抑制することによって皮膚内のコラーゲン分解を減少させ、皮膚弾力を増進させるとともにシワを改善させる効能を意味するものであってよいが、これに制限されるものではない。
【００１６】
本発明の一観点である組成物において、前記組成物は老化を遅延または老化を改善することができる。
【００１７】
本発明の一観点である組成物は、さらに、コラゲナーゼの生成を抑制または阻害し、またはコラゲナーゼの発現を抑制することができる。
【００１８】
本発明の一観点である組成物は、さらに、シワを改善またはシワを緩和させることができる。
【００１９】
本発明は、また他の観点において、ツルマメオイルを有効成分として含む美白用組成物に関する。前記組成物は、メラニンの生成を抑制しまたはメラニン生成関連遺伝子の発現自体を抑制することによって優れた美白効果を提供することができる。
【００２０】
本発明は、さらなる観点において、ツルマメオイルを有効成分として含む抗炎症用組成物に関する。本明細書において「抗炎症」とは、炎症を抑制しまたは阻止するあらゆる種類の活性を意味するものである。本発明の一観点である前記組成物において、前記炎症は、皮膚炎症だけでなく体内のあらゆる種類の炎症を含むものであり、具体的にニキビであってよいが、これに制限されるものではない。
【００２１】
本発明の一観点である組成物において、前記組成物は、ＭＣＰ(Ｍｏｎｏｃｙｔｅ  Ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔ  Ｐｒｏｔｅｉｎ)の生成を抑制し、またはその生成関連遺伝子の発現自体を抑制しまたは阻害することができる。
【００２２】
本発明は、さらに他の観点において、ツルマメオイルを有効成分として含む保湿用組成物に関する。本発明の組成物は、皮膚バリア機能を強化させ且つ皮膚角質形成細胞の分化を誘導させることができる。したがって、表皮分化の不完全により生じる皮膚乾燥症または乾癬などを予防または改善する上で有効に用いることができる。
【００２３】
このような観点において、前記組成物は、アトピーまたは乾癬を治療、予防、または改善することができる。本発明の一観点である組成物において、前記組成物は、さらに、皮膚バリア機能を強化させることができる。
【００２４】
本発明の一観点である組成物において、前記組成物は、ツルマメオイルを０．００１質量％以上、０．００２質量％以上、０．００３質量％以上、０．００４質量％以上、０．００５質量％以上、０．００６質量％以上、０．００７質量％以上、０．００８質量％以上、０．００９質量％以上、０．０１質量％以上、０．０２質量％以上、０．０３質量％以上、０．０４質量％以上、０．０５質量％以上、０．０６質量％以上、０．０７質量％以上、０．０８質量％以上、０．０９質量％以上、または０．１質量％以上、６質量％以下、７質量％以下、８質量％以下、９質量％以下、１０質量％以下、例えば０．００１〜１０質量％、０．００１〜１０質量％、０．００５〜９質量％、０．０１〜８質量％、０．０５〜７質量％、または０．１〜６質量％の範囲で含んでいてよい。前記ツルマメオイルが前記範囲未満で含まれると、前記言及した各種の効果が微小に現れ、前記範囲を超過して含まれると、含有量の増加に伴う明らかな効果の増加が現れず、他の成分の含量比に影響を及ぼし得る。
【００２５】
本発明の一観点である組成物において、前記組成物は化粧料組成物であってよい。
【００２６】
本発明に係る皮膚外用剤組成物を化粧料の形態で剤形化する場合、柔軟化粧水、収れん化粧水、栄養化粧水、アイクリーム、栄養クリーム、マッサージクリーム、クレンジングクリーム、クレンジングフォーム、クレンジングウォータ、パウダー、エッセンス、またはパックなどの形態で剤形化されてよく、その剤形が特に限定されるものではない。また、本発明に係る組成物は、脂肪物質、有機溶媒、溶解剤、濃縮剤、ゲル化剤、軟化剤、抗酸化剤、懸濁化剤、安定化剤、発泡剤(ｆｏａｍｉｎｇ  ａｇｅｎｔ)、芳香剤、界面活性剤、水、イオン型または非イオン型乳化剤、充填剤、金属イオン封鎖剤、キレート化剤、保存剤、ビタミン、遮断剤、湿潤化剤、必須オイル、染料、顔料、親水性もしくは親油性活性剤、脂質小嚢または化粧品に通常用いられる任意の他の成分などの化粧品学もしくは皮膚科学分野において通常用いられる補助剤を含有してもよい。前記補助剤は、化粧品学または皮膚科学分野において一般に用いられる量で取り込まれる。また、本発明の組成物は、皮膚改善効果を増加させるために皮膚吸収促進物質を含有していてよい。
【００２７】
本発明の一観点である組成物において、前記組成物は皮膚外用剤組成物であってよい。
【００２８】
本発明の組成物は、皮膚外用剤組成物であってよく、より具体的には、抗酸化用皮膚外用剤組成物として用いられていてよく、これは有機ラジカルであるＤＰＰＨの酸化を抑制させることで優れた抗酸化効果を提供することができる。また、本発明の組成物は、抗老化用皮膚外用剤組成物として用いられていてよく、これは皮膚内コラゲナーゼの発現を効果的に抑制することによって皮膚内のコラーゲン分解を減少させて皮膚弾力を増進させ且つシワを改善させる抗老化効果に優れる。また、本発明の組成物は、美白用皮膚外用剤組成物として用いられていてよく、これはメラニンの生成を抑制することによって優れた美白効果を提供することができる。さらには、本発明の組成物は、保湿用皮膚外用剤組成物として用いられていてよく、これは皮膚バリア機能を強化させ且つ皮膚角質形成細胞の分化を誘導させることができる。したがって、表皮分化の不完全で生じる皮膚乾燥症または乾癬などを予防または改善する皮膚外用剤組成物として有効に用いることができる。
【００２９】
本発明に係る皮膚外用剤組成物を化粧料の形態で剤形化する場合、柔軟化粧水、収れん化粧水、栄養化粧水、アイクリーム、栄養クリーム、マッサージクリーム、クレンジングクリーム、クレンジングフォーム、クレンジングウォータ、パウダー、エッセンス、またはパックなどの形態で剤形化されてよく、その剤形が特に限定されるものではない。また、本発明に係る組成物は、脂肪物質、有機溶媒、溶解剤、濃縮剤、ゲル化剤、軟化剤、抗酸化剤、懸濁化剤、安定化剤、発泡剤(ｆｏａｍｉｎｇ  ａｇｅｎｔ)、芳香剤、界面活性剤、水、イオン型または非イオン型乳化剤、充填剤、金属イオン封鎖剤、キレート化剤、保存剤、ビタミン、遮断剤、湿潤化剤、必須オイル、染料、顔料、親水性もしくは親油性活性剤、脂質小嚢または化粧品に通常用いられる任意の他の成分などの化粧品学もしくは皮膚科学分野において通常用いられる補助剤を含有してもよい。前記補助剤は、化粧品学または皮膚科学分野において一般に用いられる量で取り込まれる。また、本発明の組成物は、皮膚改善効果を増加させるために皮膚吸収促進物質を含有していてよい。
【００３０】
本発明の一観点である組成物において、前記組成物は薬学的組成物であってよい。
【００３１】
本発明に係る組成物を医薬品に適用する場合には、前記組成物を有効成分として商用される無機または有機の担体を加えて固体、半固体、または液状の形態で経口投与剤あるいは非経口投与剤として製剤化することができる。
【００３２】
前記経口投与のための製剤としては、錠剤、丸剤、顆粒剤、軟・硬カプセル剤、散剤、細粒剤、粉剤、乳濁剤、シロップ剤、ペレット剤などが挙げられる。また、前記非経口投与のための製剤としては、注射剤、点滴剤、軟膏、ローション、スプレー、懸濁剤、乳剤、坐剤などが挙げられる。本発明の有効成分を製剤化するためには、常法によって実施すれば容易に製剤化することができ、界面活性剤、賦形剤、着色料、香辛料、保存料、安定剤、緩衝剤、懸濁剤、その他、商用する補助剤を好適に用いていてよい。
【００３３】
本発明に係る前記薬学組成物は、経口、非経口、直腸、局所、経皮、静脈内、筋肉内、腹腔内、皮下などに投与されていてよい。
【００３４】
また、前記活性成分の投与量は、治療を受ける対象の年齢、性別、体重と、治療する特定の疾患または病理状態、疾患または病理状態の深刻度、投与経路及び処方者の判断によって変わり得る。このような因子に基づく投与量の決定は、当業者の水準内にある。一般的な投与量は、０．００１ｍｇ／ｋｇ／日〜２０００ｍｇ／ｋｇ／日、より具体的には、０．５ｍｇ／ｋｇ／日〜１５００ｍｇ／ｋｇ／日である。
【００３５】
本発明の一観点である組成物において、前記組成物は健康食品組成物であってよい。本発明に係る組成物は含む多様な形態の食品添加剤または機能性食品を提供する。前記組成物を含む発酵乳、チーズ、ヨーグルト、ジュース、生菌製剤、及び健康補助食品などに加工されてよく、その他、各種の食品添加剤の形態で使用されてよい。
【００３６】
一実施例において前記組成物は、本発明の目的とする主な効果を損なわない範囲内で主な効果に相乗効果を与え得る他の成分などを含有していてよい。例えば、物性改善のために香料、色素、殺菌剤、酸化防止剤、防腐剤、保湿剤、粘増剤、無機塩類、乳化剤、及び合成高分子物質などの添加剤をさらに含んでいてよい。その他にも、水溶性ビタミン、油溶性ビタミン、高分子ペプチド、高分子多糖、及び海草エキスなどの補助成分をさらに含んでいてよい。前記成分は、剤形または使用目的に応じて当業者が困難なく適宜選定して配合することができ、その添加量は、本発明の目的及び効果を損なわない範囲内で選択されてよい。例えば、前記成分の添加量は、組成物の全重量を基準にし、０．０１質量％〜５質量％、より具体的には、０．０１質量％〜３質量％の範囲であってよい。
【００３７】
本発明に係る組成物の剤形は、溶液、乳化物、粘性混合物、タブレット、粉末などの各種の形態であってもよく、これは、単純飲用、注射投与、スプレー方式またはスクイズ方式などの様々な方法で投与すればよい。
【００３８】
本発明の一観点において、対象に有効量の前記ツルマメオイルを含む組成物を適用することを含む抗酸化方法を提供することができる。例えば、前記方法は、前記組成物を対象の皮膚に適用することを含んでいてよい。
【００３９】
本発明の他の観点において、対象に有効量の前記ツルマメオイルを含む組成物を適用することを含む抗老化方法を提供することができる。例えば、前記方法は、前記組成物を対象の皮膚に適用することを含んでいてよい。
【００４０】
前記抗老化方法は、老化を遅延または改善することができ、例えば、皮膚の老化を遅延または改善することができる。前記方法は、コラゲナーゼの生成を抑制または阻害し、またはコラゲナーゼの発現を抑制することができる。前記方法は、シワの改善またはシワを緩和することができる。
【００４１】
本発明の他の観点において、対象に有効量の前記ツルマメオイルを含む組成物を適用することを含む美白方法を提供することができる。例えば、前記方法は、前記組成物を対象の皮膚に適用することを含んでいてよい。
【００４２】
前記美白方法は、皮膚美白効果を奏し、メラニンの生成を抑制または阻害し、またはメラニンの発現を抑制することができる。
【００４３】
本発明の他の観点において、対象に有効量の前記ツルマメオイルを含む組成物を適用することを含む抗炎症方法を提供することができる。例えば、前記方法は、前記組成物を対象の皮膚に適用することを含んでいてよい。
【００４４】
前記抗炎症方法は、ＭＣＰ(Ｍｏｎｏｃｙｔｅ  Ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔ  Ｐｒｏｔｅｉｎ)の生成または発現を抑制し、または阻害することができる。前記炎症はニキビを含んでいてよい。
【００４５】
本発明の他の観点において、対象に有効量の前記ツルマメオイルを含む組成物を適用することを含む皮膚保湿方法を提供することができる。例えば、前記方法は、前記組成物を対象の皮膚に適用することを含んでいてよい。前記方法は、皮膚バリアを強化することができ、アトピーまたは乾癬を治療、予防、または改善することができる。
【００４６】
本発明の一観点において、対象の抗酸化のためのツルマメオイルを提供することができる。例えば、前記ツルマメオイルは対象の皮膚に適用することができる。
【００４７】
本発明の他の観点において、対象の皮膚抗老化のためのツルマメオイルを提供することができる。例えば、前記ツルマメオイルは対象の皮膚に適用することができる。
【００４８】
前記ツルマメオイルは、老化を遅延または改善することができ、例えば、皮膚の老化を遅延または改善することができる。前記ツルマメオイルは、コラゲナーゼの生成を抑制または阻害し、またはコラゲナーゼの発現を抑制することができる。前記方法は、シワの改善またはシワを緩和することができる。
【００４９】
本発明の他の観点において、対象の皮膚美白のためのツルマメオイルを提供することができる。例えば、前記ツルマメオイルは対象の皮膚に適用することができる。
【００５０】
前記ツルマメオイルは、皮膚美白効果を奏し、メラニンの生成を抑制または阻害し、またはメラニンの発現を抑制することができる。
【００５１】
本発明の他の観点において、対象の炎症を防止、抑制または改善のためのツルマメオイルを提供することができる。例えば、前記ツルマメオイルは対象の皮膚に適用することができる。
【００５２】
前記ツルマメオイルは、ＭＣＰ(Ｍｏｎｏｃｙｔｅ  Ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔ  Ｐｒｏｔｅｉｎ)の生成または発現を抑制し、または阻害することができる。前記炎症はニキビを含んでいてよい。
【００５３】
本発明の他の観点において、対象の皮膚保湿のためのツルマメオイルを提供することができる。例えば、前記ツルマメオイルは対象の皮膚に適用することができる。
【００５４】
前記ツルマメオイルは、皮膚バリア機能を強化することができ、アトピーまたは乾癬を治療、予防、または改善することができる。
【００５５】
以下、実施例を挙げて本発明をより詳細に説明する。これらの実施例は単に本発明を例示するためのものであって、本発明の範囲がこれらの実施例によって制限されるものではないと解釈されるのは当業界において通常の知識を有する者にとって自明であろう。
【００５６】
［実施例］ツルマメオイルの製造
ツルマメ(Ｇｌｙｃｉｎｅ  ｇｒａｃｉｌｉｓ)を精製水で洗浄し乾燥してから細末化して得られたツルマメ粉１ｋｇを油圧式搾油機に入れて搾油した後、ろ過紙でろ過して、ツルマメオイル１５５ｇを収得した。
【００５７】
［比較例１］大豆オイルの製造
大豆(Ｇｌｙｃｉｎｅ  ｍａｘ)を精製水で洗浄し乾燥してから細末化して得られた大豆粉１ｋｇを油圧式搾油機に入れて搾油した後、ろ過紙でろ過して、大豆オイル１８５ｇを収得した。
【００５８】
［比較例２］ツルマメ抽出物の製造
ツルマメ(Ｇｌｙｃｉｎｅ  ｇｒａｃｉｌｉｓ)を精製水で洗浄し乾燥してから細末化して得られたツルマメ粉１００ｇを７０％エタノール水溶液１リットルに入れ、冷却コンデンサ付き抽出機で１２時間沸かして抽出した後、３００メッシュのろ過布でろ過した。前記ろ過液を４〜１５℃で７日間放置して熟成させた後、ワットマンろ過紙第２番でろ過した。最終ろ過液を冷却コンデンサ付き蒸留装置を利用して５０℃で減圧濃縮し乾燥して、ツルマメ抽出物(乾燥重量１５．１８ｇ)を得た。
【００５９】
［試験例１］成分の比較分析
前記実施例１で製造したツルマメオイル、比較例１で製造した大豆オイル、及び比較例２で製造したツルマメ抽出物のそれぞれの成分を分析した。前記オイル及び抽出物のそれぞれを２０％メチルクロリド、７０％エタノールに溶かして１０，０００ｐｐｍ溶液にした後、ＨＰＬＣ(Ｗａｔｅｒｓ社製、２６９５モデル)を利用して成分分析(Ｗａｔｅｒｓ社製、２９９６ＰＤＡ検出器)を行った。固定相は関東化学株式会社製のＭｉｇｈｔｙｓｉｌ  ＲＰ−１８  ＧＰ  ２５０−４．６（５μｍ）コラムを利用し、また、実施例１で製造したツルマメオイル、比較例１で製造した大豆オイルに対しては次の表１に表すような組成の移動相を、比較例２で製造したツルマメ抽出物に対しては次の表２に表すような組成の移動相を用いた。
【００６０】
【表１】
0006482644.tif 000002
【００６１】
【表２】
0006482644.tif 000003
【００６２】
その結果、図１〜図３(図１：実施例１で製造したツルマメオイル、図２：比較例１で製造した大豆オイル；図３：比較例２で製造したツルマメ抽出物)から確認できるように、本願発明の有効成分であるツルマメオイルは、他種の豆オイルである大豆オイルとはそのピークの形態や強さが全く異なり、特にツルマメ抽出物とは全く異なるピークを示すことを観察することができた。
【００６３】
［試験例２］抗酸化能の評価
前記実施例１で製造したツルマメオイルの抗酸化効果を調べてみるために、ＤＰＰＨ(１,１-ジフェニル-２-ピクリルヒドラジル；１,１-ｄｉｐｈｅｎｙｌ-２-ｐｉｃｒｙｌ  ｈｙｄｒａｚｙｌ)法を用いた。ＤＰＰＨ法は、ＤＰＰＨの還元によって発生する吸光度の変化によってＤＰＰＨ酸化抑制効能を比較測定することによって抗酸化能を評価する方法である。すなわち、前記実施例１で収得したツルマメオイルによってＤＰＰＨの酸化が抑制されて対照群に比べて吸光度が減少する程度を測定し、その結果、対照群の吸光度に比べて５０％以下の吸光度を示す濃度を有効抗酸化濃度と評価した。
【００６４】
陽性対照群としては、合成抗酸化剤であるトロロックス(Ｔｒｏｌｏｘ)と比較例１で製造した大豆オイル、及び比較例２で製造したツルマメ抽出物のそれぞれを用いた。１００μＭ(ｉｎエタノール)ＤＰＰＨ溶液１９０μｌと前記で収得した実施例１のツルマメオイル、及び陽性対照群のそれぞれを１０μｌずつ入れて反応液を調製し、３７℃で３０分間反応させた後、５４０ｎｍで吸光度を測定した。
【００６５】
各物質のＤＰＰＨ分析結果は下記の表３に表したとおりであり、ＩＣ５０は、添加した試料によって吸光度が５０％減少したときの試料濃度を意味する。
【００６６】
【表３】
0006482644.tif 000004
【００６７】
前記表３から確認できるように、本発明のツルマメオイルは、市中で販売中の抗酸化剤のトロロックスと類似した抗酸化能を示した。また、このような効果から、大豆オイルよりも遥かに優れた活性を示すことを確認することができた。
【００６８】
［試験例３］コラゲナーゼ発現抑制効能の比較
陽性対照群としてトコフェロール、ＥＧＣＧ、比較例１で製造した大豆オイル、及び比較例２で製造したツルマメ抽出物のそれぞれを用いて、前記実施例１で得られたツルマメオイルとのコラゲナーゼ生成抑制能を比較してみた。トコフェロール及びＥＧＣＧは皮膚の表皮細胞を再生させて皮膚の老化を防止すると知られている。
【００６９】
２．５％のウシ胎児血清が含有されたＤＭＥＭ(Ｄｕｌｂｅｃｃｏ'ｓ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ'ｓ  Ｍｅｄｉａ)培地が入っている９６ウェルマイクロタイタープレート(９６−ｗｅｌｌ  ｍｉｃｒｏｔｉｔｅｒ  ｐｌａｔｅ)にヒトの線維芽細胞を５，０００細胞／ウェル(ｗｅｌｌ)となるように入れ、９０％程度育つまで培養した後、無血清ＤＭＥＭ培地で２４時間培養した。しかる後、前記無血清ＤＭＥＭ培地に、ツルマメオイル１００μｌ／ｍｌ濃度、トコフェロール１０−４モル濃度、ＥＧＣＧを１０−４モル濃度、及び大豆オイル１００μｌ／ｍｌ濃度とツルマメ抽出物１００μｌ／ｍｌ濃度でそれぞれ２４時間処理した後に得られた細胞培養液を採取した。
【００７０】
コラゲナーゼ測定器具(米国のアマシャムパマシャ社製)を利用して、採取した細胞培養液におけるコラゲナーゼ生成程度を測定した。先ず、１次コラゲナーゼ抗体が均一に塗布された９６ウェルプレート(９６−ｗｅｌｌ  ｐｌａｔｅ)に採取された細胞培養液を入れ、３時間にかけて恒温槽で抗原−抗体反応を実施した。３時間後、発色団が結合された２次コラーゲン抗体を９６−ウェルプレート(９６−ｗｅｌｌ  ｐｌａｔｅ)に入れ、再び１５分間反応させた。１５分後、発色誘発物質を入れ、室温で１５分間発色を誘発させ、再び１Ｍ硫酸を入れ、反応(発色)を中止させると、反応液の色は黄色を帯びるようになり、反応の進行程度によって黄色の程度が異なって見えることを観察することができた。
【００７１】
黄色を帯びる９６−ウェルプレート(９６−ｗｅｌｌ  ｐｌａｔｅ)の吸光度を吸光計を利用して４０５ｎｍで測定した後、下記の式１によってコラゲナーゼの合成程度を求めた。このとき、組成物を処理しなかった群の採取された細胞培養液の反応吸光度を対照群とした。すなわち、非処理群におけるコラゲナーゼの発現程度を１００とし、これに対して、試験物質を処理した群におけるコラゲナーゼの発現程度を求め、その結果を下記の表４に表した。
【００７２】
【数１】
0006482644.tif 000005
【００７３】
【表４】
0006482644.tif 000006
【００７４】
コラゲナーゼの発現程度が低いほどコラゲナーゼの発現抑制能が高く、皮膚内のコラーゲンの分解が少なく起きるため、生成されるシワの量が少なくなる。
【００７５】
前記表４を見ると、本発明の有効成分であるツルマメオイルは、試験管内(ｉｎ  ｖｉｔｒｏ)でコラゲナーゼの発現を効果的に抑制し、抗酸化物質と知られているトコフェロールよりもコラゲナーゼの発現抑制能に優れていることを確認することができた。特に本発明の有効成分であるツルマメオイルは、大豆オイルと比較したとき、高いコラゲナーゼ発現抑制能を示した。したがって、本発明に係るツルマメオイルは、コラゲナーゼの発現を効果的に抑制することによって皮膚内のコラーゲン分解を減少させることができ、これにより、優れた抗老化、抗シワ効果を有することを確認することができた。
【００７６】
［試験例４］美白能の評価
陽性対照群としてハイドロキノン、比較例１で製造した大豆オイル、及び比較例２で製造したツルマメ抽出物のそれぞれを用いて、前記実施例１で得られたツルマメオイルとのメラニン生成抑制能を調べてみた。
【００７７】
Ｃ５７ＢＬ／６マウス由来のネズミの色素細胞(Ｍｅｌ−Ａｂ  ｃｅｌｌ)(Ｄｏｏｌｅｙ,Ｔ.Ｐ. ｅｔ ａｌ,Ｓｋｉｎ ｐｈａｒｍａｃｏｌ、７,ｐｐ １８８−２００)をＤＭＥＭに１０％ウシ胎盤血清、１００ｎＭ  １２−Ｏ−テトラデカノイルホルボール（ｔｅｔｒａｄｅｃａｎｏｙｌｐｈｏｒｂｏｌ)−１３−アセテート、１ｎＭコレラトキシン(ｃｈｏｌｅｒａ  ｔｏｘｉｎ)を添加した培地で３７℃、５％ＣＯ２の条件で培養した。培養されたＭｅｌ−Ａｂ細胞を０．２５％トリプシン−ＥＤＴＡで剥がし取り、２４−ウェルプレートに１０５細胞／ウェル(ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ)の濃度に細胞を培養した後、二日目から３日連続で各試験物質を加えて培養した。ハイドロキノンと前記で得られた大豆オイル、ツルマメ抽出物、及び前記実施例１のツルマメオイルのそれぞれを１０ｐｐｍの濃度にして用いた。次いで、培養液を除去し、ＰＢＳ(ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  ｂｕｆｆｅｒｅｄ  ｓａｌｉｎｅ)で洗浄した後、１Ｎ水酸化ナトリウムで細胞を溶かし、４００ｎｍで吸光度を測定してから、下記の式２によりメラニン生成抑制率を求め、その結果を下記の表５に表した(Ｄｏｏｌｅｙの方法)。
【００７８】
【数２】
0006482644.tif 000007
【００７９】
【表５】
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【００８０】
前記表５に表したように、本発明の有効成分であるツルマメオイルは、公知の美白物質であるハイドロキノンよりも優れたメラニン生成抑制率を示すことが確認でき、特に、大豆オイル及びツルマメ抽出物よりも優れたメラニン生成抑制率を示した。これにより、本発明に係るツルマメオイルは、皮膚内メラニン生成を効果的に抑制することによって美白効果に優れていることが分かった。
【００８１】
［試験例５］抗炎効果の評価
実験一日前の皮膚角化上皮細胞(Ｎｏｒｍａｌ  ｈｕｍａｎ  ｓｋｉｎ  ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅ、ＮＨＥＫ、入手先：Ｌｏｎｚａ)を９６ウェル(ｗｅｌｌ)プレートに５×１０４細胞／ウェルになるように分注した後、３７℃、５％ＣＯ２インキュベーター(ｉｎｃｕｂａｔｏｒ)で２４時間培養した。２４時間後、ＰＢＳで細胞を２回洗浄し、無血清ＫＢＭ(ｓｅｒｕｍ  ｆｒｅｅ  ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅ  ｂａｓｅｍｅｎｔ  ｍｅｄｉａ)に取り替えた。
【００８２】
その後、陽性対照群としてヒドロコルチゾン(ｈｙｄｒｏｃｏｒｔｉｓｏｎｅ)、比較例１で製造した大豆オイル、及び比較例２で製造したツルマメ抽出物と実施例１で得られたツルマメオイルのそれぞれを表４で提示した濃度で前記細胞に処理し、３０分間反応させた後、レチノイン酸(Ｒｅｔｉｎｏｉｃ  ａｃｉｄ)１０μＭをそれぞれのウェルに処理した。前記レチノイン酸は、皮膚刺激源で炎症性サイトカインであるＭＣＰ(Ｍｏｎｏｃｙｔｅ  Ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔ  Ｐｒｏｔｅｉｎ−１)の分泌を促進すると知られている。それぞれのウェルを３７℃、５％ＣＯ２インキュベーターで２４時間培養した後、培養液を取ってＭＣＰ−１  ＥＬＩＳＡを行い、その結果を下記の表６に表した。ＥＬＩＳＡは、製造会社であるＢＤ  ｓｃｉｅｎｃｅから提供された方法を用いて行った。
【００８３】
【表６】
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【００８４】
前記表６から分かるように、本発明の有効成分であるツルマメオイルは、レチノイン酸によって増加したＭＣＰ−１の分泌を顕著に減少させることを確認した。このような結果は、市中で抗炎症物質として販売中のヒドロコルチゾンと類似した水準でＭＣＰ−１の分泌を減少させるものであった。さらに、このような結果は、ツルマメ抽出物や大豆オイルに比べても顕著に高いＭＣＰ−１発現抑制率を示すものであるため、本発明の有効成分であるツルマメオイルは優れた抗炎症効果を有するものであることが分かった。
【００８５】
［試験例６］保湿能の評価
前記実施例１に従って得られたツルマメオイルの皮膚バリア機能及び皮膚保湿能を確認するために吸光度を利用した試験を行った。
【００８６】
一次培養したヒトの角質形成細胞を培養用フラスコに入れて底に付着させた後、比較例１で製造した大豆オイル５０ｍｇ／ｍｌ、１００ｍｇ／ｍｌ、及び比較例２で製造したツルマメ抽出物５０ｍｇ／ｍｌ、１００ｍｇ／ｍｌと実施例１で得られたツルマメオイル５０ｍｇ／ｍｌ、１００ｍｇ／ｍｌのそれぞれを培養液に添加し、細胞が底面積の８０〜９０％程度育つまで５日間培養した。この細胞を収穫(ｃｅｌｌ  ｈａｒｖｅｓｔ)してＰＢＳ(ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  ｂｕｆｆｅｒｅｄ  ｓａｌｉｎｅ)で洗浄した後、２％  ＳＤＳ(Ｓｏｄｉｕｍ  Ｄｏｄｅｃｙｌ  Ｓｕｌｆａｔｅ)と２０ｍＭ濃度のＤＴＴ(Ｄｉｔｈｉｏｔｈｒｅｉｔｏｌ)を含有した１０ｍＭ濃度のトリス−塩酸緩衝液(Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．４)１ｍｌを加えて３分間超音波処理(ｓｏｎｉｃａｔｉｏｎ)を行った後、１０分間沸かした。これを１２００ｒｐｍで３０分間遠心分離をし、分離した沈殿物を再びＰＢＳ  １ｍｌに懸濁させ、３４０ｎｍにおける吸光度を測定した。
【００８７】
一方、これとは別に、前記超音波処理後の溶液の一部を取って蛋白質含有量を測定し、細胞分化程度の評価時の基準とした。低カルシウム(０．０３ｍＭ)処理群と高カルシウム(１．２ｍＭ)処理群をそれぞれ陰性／陽性対照群とし、低カルシウム濃度に試験物質を添加して実施した試験結果を下記の表７に表した。
【００８８】
【表７】
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【００８９】
前記表７に表すように角質形成細胞の分化時に生成されるＣＥ(Ｃｏｒｎｉｆｉｅｄ  Ｅｎｖｅｌｏｐ)の量を測定して細胞分化促進効果を比較した結果、本発明に係るツルマメオイルは角質形成細胞で分化を促進することが分かり、ツルマメ抽出物または大豆オイルに比べて顕著に高い角質形成細胞分化促進効能を示すことと確認された。これにより、本発明に係るツルマメオイルは、皮膚のバリア機能を強化して皮膚保湿能を増進させることが分かった。
【００９０】
［試験例７］刺激感の評価
公知の美白物質であるコウジ酸と本発明において有効成分として用いられるツルマメオイルの使用性を比較するために、ヒリヒリ感、ひりつき感などの刺激感に敏感なパネル１５人を対象にヒリヒリ感、ひりつき感などの刺激感の程度を実験した。
【００９１】
被験者にコウジ酸(ｋｏｊｉｃ  ａｃｉｄ、ＹＭ  ｃｈｅｍｉｃａｌから購入)と前記実施例１で得たツルマメオイルをそれぞれ０．５ｍｌずつ左右を無作為に変えながら適用して擦り、０．１点単位にして０〜３．０の間の点数を付けるようにした。その結果を下記の表８に表した。
【００９２】
【表８】
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【００９３】
＜評価基準＞
０〜０．４：刺激なし
０．５〜１．０：若干刺激あり
１．１〜２．０：普通程度の刺激あり
２．１〜３．０：刺激が激しい
【００９４】
前記表８から分かるように、コウジ酸の場合は、ヒリヒリ感、ひりつき感が相当であるため刺激感があるのに対し、本発明の有効成分であるツルマメオイルは、各種の効能をそのまま含みながらも皮膚に対する刺激を急激に減少させることを確認することができた。
【００９５】
本発明において組成物は下記のように種々の剤形に応用可能であるが、これらに限定されるものではない。
【００９６】
［製剤例１］錠剤
ツルマメオイル１００ｍｇ、ブドウ糖１００ｍｇ、紅参抽出物５０ｍｇ、澱粉９６ｍｇ、及びステアリン酸マグネシウム４ｍｇを混合し、３０％エタノールを４０ｍｇ添加して顆粒を形成した後、６０℃で乾燥し、打錠機で錠剤として打錠した。
【００９７】
［製剤例２］顆粒剤
ツルマメオイル１００ｍｇ、ブドウ糖１００ｍｇ、紅参抽出物５０ｍｇ、及び澱粉６００ｍｇを混合し、３０％エタノールを１００ｍｇ添加して顆粒を形成した後、６０℃で乾燥して顆粒を形成した後、分包充填した。内容物の最終重量は１ｇとした
【００９８】
［製剤例４］ドリンク剤
ツルマメオイル１００ｍｇ、ブドウ糖１０ｇ、紅参抽出物５０ｍｇ、クエン酸２ｇ、及び精製水１８７．８gを混合し、ビンに充填した。内容物の最終容量は２００ｍｌとした。
【００９９】
［製剤例５］健康食品の製造
【０１００】
【表９】
0006482644.tif 000012
【０１０１】
前記ビタミン及び無機質混合物の組成比は、比較的に健康食品に適合した成分を混合組成したが、その配合比を任意に変形実施してもよく、通常の健康食品の製造方法により前記成分を混合した後、顆粒を製造し、通常の方法により健康食品組成物の製造に用いることができる。
【０１０２】
［製剤例６］健康飲料の製造
【０１０３】
【表１０】
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【０１０４】
前記表１０のように総体積９００ｍｌになるように残量の精製水を添加し、通常の健康飲料の製造方法により前記成分を混合した後、８５℃で約１時間攪拌加熱し、これにより調製された溶液をろ過し、滅菌された２リットル容器に取得して密封滅菌してから冷蔵保管し、後で本発明の健康飲料組成物の製造に用いることができる。
【０１０５】
［剤形例１］ローション
【０１０６】
【表１１】
0006482644.tif 000014
【０１０７】
［剤形例２］クリーム
【０１０８】
【表１２】
0006482644.tif 000015
【０１０９】
［剤形例３］パック
【０１１０】
【表１３】
0006482644.tif 000016
【０１１１】
［剤形例４］美容液
【０１１２】
【表１４】
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【０１１３】
［剤形例５］軟膏
【０１１４】
【表１５】
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【０１１５】
以上、本発明内容の特定の部分について詳細に記述したところ、当業界の通常の知識を有する者にとってこのような具体的記述は、単に好ましい実施態様であるに過ぎず、これにより本発明の範囲が制限されるものでない点は明白なことであろう。したがって、本発明の実質的な範囲は、添付された請求項とそれらの等価物によって定義されると言える。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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