(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
200〜300℃の融点を有する熱可塑性材料である熱活性化結合剤により綿パルプを含む吸収層に恒久的に融着された、2〜15マイクロンの厚さを有する金属箔を含む皮膚浸透を高める不透過層を含む、0.2〜1.5mmの厚さを有する積層体形態のシートパックであって、前記吸収層が、(a)CLOCK遺伝子活性化因子、(b)PER遺伝子活性化因子、(c)BMAL遺伝子活性化因子、(d)CRY遺伝子活性化因子、又は(e)それらの組み合わせからなる群から選択される成分を含む、25℃における2〜1000センチポアズの粘度、及び1.00〜1.010の比重を有する水性ベースのトリートメント組成物を含浸させてあり；前記シートパックが、シートパック積層体の吸収層側を皮膚に18:00〜24:00時の範囲の選択時間に1〜60分間局所的に適用するための使用説明書と共にパッケージに収容されており、前記トリートメント組成物の皮膚浸透が、同じ吸収層を含むが、吸収層に恒久的に融着された不透過層を有さないシートパックに比べて改善している、前記シートパック。
【請求項２】
トリートメント組成物がCLOCK遺伝子活性化因子を含む、請求項１に記載のシートパック。
【請求項３】
結合剤が低密度ポリエチレンである、請求項１に記載のシートパック。
【請求項４】
吸収層が不織布の形態である、請求項３に記載のシートパック。
【請求項５】
吸収層が、以下の仕様：
(a) ラローズ法による測定から5秒後に1グラム当たり0.03〜2.5mL/グラムの水を吸収する、
(b) 厚さ0.1〜1.0mm、
(c) 屈曲抵抗性1.0〜2.0mm.m2/グラム、
(d) ドレープ係数1〜70％、
(e) KES屈曲剛性B値0.20gf/cm2/cm以下；又は
(f) 摩擦係数0.45MIU未満
の1つ以上を有する不織布である、請求項４に記載のシートパック。
【請求項６】
不織布が、綿、レーヨン及び合成繊維の混合物を含む、請求項５に記載のシートパック。
【請求項７】
不織布が、25〜75％のパルプ(綿)、10〜50％のレーヨン、及び2〜15％のポリエステルを含む、請求項６に記載のシートパック。
【請求項８】
不透過層が、以下の仕様：
(a) 98〜100％のアルミニウム、
(b) 融点650℃超、
(c) 比重2.5〜3.0、
(d) 厚さ2〜15マイクロン
を有する金属箔である、請求項５に記載のシートパック。
【請求項９】
吸収層が、融点221〜248℃及び比重915〜935kg/m3を有する合成ポリマーである熱活性化結合剤により不透過層に結合されている、請求項４に記載のシートパック。
【請求項１０】
不透過層が、同じ吸収層を含むが吸収層に結合された不透過層は含まないシートパックによるトリートメント組成物の皮膚浸透と比較した場合に、トリートメント組成物が皮膚へのトリートメント組成物の皮膚浸透において少なくとも10％の改善を示すようにさせる、請求項１に記載のシートパック。
【請求項１１】
吸収層が、915〜935kg/m3の比重を有する低密度ポリエチレンである熱活性化結合剤により不透過層に結合されている、請求項４に記載のシートパック。
【請求項１２】
スキントリートメント組成物が、PER遺伝子活性化因子を含む、請求項１に記載のシートパック。
【請求項１３】
スキントリートメント組成物が、BMAL又はCRY遺伝子活性化因子を含む、請求項１に記載のシートパック。
【請求項１４】
CLOCK、PER、CRY、又はBMALの活性化因子が、以下：
チコリ酸、
エキナセア抽出物、
トリペプチド-32、
テトラペプチド-26；又は
オートファジー活性化因子
の1つ以上である、請求項１に記載のシートパック。
【請求項１５】
DNA修復酵素、プロバイオティクス微生物、プロテアソーム活性化因子又はそれらの組み合わせからなる群から選択されるさらなるスキントリートメント活性物質を含む、請求項１に記載のシートパック。
【請求項１６】
顔又は身体の皮膚を処置するための、請求項１に記載のシートパック。
【請求項１７】
使用説明書が、シートパックを10分間皮膚に適用するためのものである、請求項１に記載のシートパック。
【請求項１８】
使用説明書が、シートパックを1〜30分間皮膚に適用するためのものである、請求項１５に記載のシートパック。
【請求項１９】
使用説明書が、シートパックを皮膚から外した後に過剰なトリートメント組成物を皮膚へマッサージするためのものである、請求項１５に記載のシートパック。
【請求項２０】
CLOCK、PER、CRY、又はBMALの活性化因子がペプチドである、請求項１に記載のシートパック。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、顔又は身体の表面を処置して処置利益を提供するトリートメント組成物を含浸させたシートパックの分野にある。
【背景技術】
【０００２】
「シートパック」という用語は、元々、水に浸したベッドシーツで人の身体を包み込む手法を指していた。身体が徐々にシーツを温めるにつれて、興奮していると思われる人が周囲の布の温もりと包み込みにより安心感を得ていた。
【０００３】
今日、この用語はさらに広い意味を有し、美容業界においては、皮膚に一時的に適用して直接利益を提供するスキントリートメント組成物を含浸させた様々な大きさ及び形の織布を指す。十分興味深いことに、今日の製品は、典型的には日中又は夜の静かで落ち着いた時間中に使用されるため、元来のシートパックの安心感の側面が残されている。大半の場合、今日のシートパックは顔のトリートメント用である。これらは顔に施用され、短時間(1分間〜30分間であり得る)後に除去される。その後は、顔を洗ってもよいし、適切であれば、皮膚上に残っている全てのトリートメント組成物が皮膚に擦り込まれる。これらのシートパックはアジアの消費者に特に人気があり、日々の美容ルーティンの一部として典型的に使用されるクリーム及びローションにおいて見られる濃度より高い濃度で活性成分を含有する場合もある。
【０００４】
しかしながら、今日の大部分のシートパックは、「キッチンシンク」アプローチで処方され、様々な利益を有するとうたわれている多くの異なる活性成分を含有する。処置利益と、有効性を最大化するためのその処置利益のタイミングとの間の相違についての理解不足が存在する。例えば、天然の皮膚細胞においては、異なる遺伝子の発現が24時間サイクルにわたり変化することが知られている。これは概日リズムとも呼ばれる。スキンケア製品は、特定の遺伝子の発現を刺激又は阻害し、究極的には望ましくない皮膚状態(例えば、エイジング、色素過剰症、湿潤等)の改善をもたらすと言われている活性成分を含む場合がある。しかしながら、任意のトリートメント組成物又はその中の活性成分の効果の最大化において重要なのは、タイミングである。特に、トリートメント組成物を、処置表面がそれを受容するために最適化された時間に処置表面に適用することは、処置自体を確実に最大限効果的にする。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
従って、本発明の目的は、シートパック成分、及び未処置の天然の皮膚細胞において通常は可変的に発現されている皮膚細胞中の特定の遺伝子の発現を刺激する少なくとも1種の活性物質、及び場合により、利益を提供する少なくとも1種の第2のスキントリートメント活性物質を含有するトリートメント組成物の存在により最適化された有効性を有するシートパックであって；上記成分の処置利益が最適化されるように、上記シートパックが、天然で未処置の皮膚細胞の大部分において特定の遺伝子の発現を刺激するトリートメント組成物中の成分が最大限に発現される時間に処置表面(例えば皮膚)に適用される、上記シートパックを提供することである。
【０００６】
定義
別段に指示されない限り、本明細書中に記載される全てのパーセントは重量パーセントである。
【０００７】
「BMAL」は、ARNTL遺伝子又はBMAL遺伝子によってコードされ、概日リズムに影響を及ぼすアリール炭化水素受容体核内輸送体様タンパク質(aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator-like protein)1を意味する。
【０００８】
「CLOCK」は、概日リズムに影響を与え一般的には明暗により影響を受けるタンパク質(CLK)をコードする、皮膚細胞中に存在する概日運動出力サイクル異常(Circadian Cycles Locomotor Output Cycles Kaput)遺伝子を意味する。
【０００９】
「CRY」は、概日リズムに影響を及ぼすタンパク質(1型及び2型の両方)をコードするクリプトクロム概日(cryptochrome circadian)遺伝子を意味する。
【００１０】
「PER」は、ヒトにおけるピリオド概日性タンパク質ホモログタンパク質をコードするピリオド(Period)遺伝子(1、2、又は3)を意味する。特にPer1は、概日リズムの維持のために重要であり、24時間サイクルにわたり低下及び流動する。細胞内のPer1遺伝子発現は、夜に最も活発であり、昼光時間中は低下し、暗時間中に再び増加する。
【００１１】
「シートパック」は、顔又は身体の表面にフィットする大きさ及び形にし得る物質の薄いシートを意味し、一時的に適用されてパックが適用された領域中のケラチン表面(例えば皮膚)にある程度の化粧的又は治療的改善を提供するように設計される。
【００１２】
「シートマスク」は、顔上に配置するための大きさ及び形にされたシートパックを意味し、目、鼻、又は口用の切り出し部分を含み得る。
【００１３】
「利益」は、製品が指示どおり使用された場合に、その製品が提供するように設計された利益を意味する。製品の製造者が宣伝する利益(又は主張)は、一般的に、消費者が製品を初めて購入することを促す利益である。利益は、典型的には、例えば、アンチエイジングトリートメント(線及びしわを処置する)、アンチエイジング光学(皮膚の外観の不完全さをぼかす)、保湿(乾燥皮膚を保湿する)、抗炎症(刺激を受けた又は炎症した皮膚を処置して発赤、痛み又は熱を低減する)、SPF(UVA光線及び/又はUVB光線を遮断する)、抗にきび(にきび病変、過剰皮膚油性(excessive skin oiliness)を処置する)、皮膚美白(皮膚を美白する、又は色素過剰斑を改善する)などのカテゴリーに分類される。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】図1は、シートパックが積層体形態であり、吸収層が結合剤で不透過層に結合されている本発明の実施形態を表す。
【図２】図2は、積層体を創出し、不透過層と吸収層を結合剤で結合するために使用し得る一種の装置を表す。
【図３】図3は、2ピースの顔トリートメントマスク(1つのピースは顔の上半分のトリートメント用に設計され、第2のピースは顔の下半分に適用するために設計される)の形態のシートパックの一種を表す。
【図４】図4は、シートパックが収容される様々な種類のパッケージ及びポーチ、並びにシートパックを皮膚に適用するための最適時間についての使用説明書を表す。
【図５】図5は、24時間にわたるPER1活性を決定するための、未処置細胞及びオゾンに曝露された細胞の試験の結果を表す。
【図６】図6は、時間同期させた、未処置細胞、トリペプチド-32(PER1遺伝子活性化因子)で処置した細胞、オゾンで処置した細胞、並びにオゾン及びトリペプチド-32で処置した細胞の試験の結果を表す。
【図７】図7は、トリートメント組成物を本発明の積層体シートマスクに含浸させた場合に、トリートメント組成物が、吸収層のみを含み不透過層は含まない同じシートマスクと比較すると有意に改善された(25％以下の)皮膚への透過性を示すことを示す透過研究の結果を表す。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
発明の要約
本発明は、皮膚に局所的に適用された場合に、天然で未処置の皮膚細胞において24時間にわたり可変的に発現される遺伝子を刺激する少なくとも1種の成分、及び場合により組み合わせて少なくとも1種の利益剤を含有するトリートメント組成物を含浸させた吸収層を含むシートパックであって；上記シートパックが、天然で未処置の皮膚細胞において上記成分により刺激される同遺伝子が最大に発現される24時間以内の選択時間にシートパックを皮膚に局所的に適用するための使用説明書と共にパッケージに収容されている、上記シートパックを対象とする。
【００１６】
また本発明は、シートパックを作製するための方法であって、以下のステップ：
(a) 天然で未処置の皮膚細胞において24時間にわたり可変的に発現される遺伝子を同定するステップ、
(b) 吸収層と、場合により吸収層に結合された不透過層を含むシートパックを形成するステップ、
(c) 吸収層に、皮膚に局所的に適用された場合に上記(a)の遺伝子を刺激する少なくとも1種の成分を含有するトリートメント組成物を含浸させるステップ；
(d) 天然で未処置の皮膚細胞の大部分において上記(a)の遺伝子が最大に発現される時間に上記シートパックを皮膚に適用するための使用説明書を含むパッケージに、上記シートパックをパッケージするステップ
を含む、上記方法も対象とする。
【００１７】
また本発明は、シートパックで皮膚を処置するための方法であって、以下のステップ：
(a) 吸収層と、場合によりそれに結合された不透過層を含むシートパックを形成するステップ；
(b) 吸収層に、天然の皮膚細胞に局所的に適用された場合に、上記天然の皮膚細胞において24時間にわたり可変的に発現される遺伝子を刺激する少なくとも1種の成分を含有するトリートメント組成物を含浸させるステップ、
(c) 天然で未処置の皮膚細胞において上記(b)の同遺伝子が最大に発現される時間に上記シートパックを皮膚に局所的に適用するステップ
を含む、上記方法も対象とする。
【００１８】
詳細な説明
本発明の様々な成分及び実施形態は、本明細書中に詳細に記載される。
【００１９】
シートパック
本発明は、吸収層と、場合により吸収層に結合された不透過層とを含むシートパックであって、吸収層に、天然の皮膚細胞において24時間にわたり可変的に発現される遺伝子を刺激する活性を有する少なくとも1種の成分を含有するトリートメント組成物が含浸されている、上記シートパックを対象とする。この成分はスキントリートメント活性物質であってもよく、又は少なくとも1種のさらなるスキントリートメント活性物質を組成物中に組み込むことが望ましい場合もある。シートパックは、天然で未処置の皮膚細胞において上記成分により刺激される同遺伝子が最大に発現される時間に上記シートパックを皮膚に局所的に適用するための使用説明書と共にパッケージに収容される。
【００２０】
A. 不透過層
本発明のシートパックは積層体形態であり、場合により少なくとも1つの不透過層を含む。「不透過」という用語は、上記層が通常は水分に対して不透過性であるため、シートマスク吸収層からの活性処方の蒸発を実質的に低減し得るか又は完全に阻害し得ることを意味する。積層体において使用される不透過層は、薄膜の形態で存在することが可能な金属箔製、合成ポリマー材料製又は天然ポリマー材料製であり得る。特に好ましいのは金属箔である。
【００２１】
金属箔
好適な金属箔は、アルミニウム、シリカ、鉄、銅、マンガン、マグネシウム又は亜鉛を含有する金属合金であり得る。好ましいのは、0.1〜1.0％のシリカと鉄の組み合わせ、0.01〜0.12％の銅、0.001〜0.06％のマンガン、0.001〜0.06％のマグネシウム、0.001〜0.06％の亜鉛、及び約98％超のアルミニウム(好ましくは約98〜100％のアルミニウム)を含有する金属合金から得られるアルミ箔である。好ましいアルミ箔は、固体形態で色は銀色であり、融点650℃超及び比重2.5〜3.0(好ましくは約2.7)を有する。最も好ましいのは、2〜15マイクロン、好ましくは約5〜10マイクロン、さらに特に約7マイクロンの厚さを有するアルミ箔である。最も好ましいのは、Toyo KK、大阪府、日本により作製されたアルミ箔合金である。
【００２２】
合成ポリマーシート
積層体の作製に適した不透過層の例として、2〜20マイクロンの厚さを有する薄いシートにフィルムを形成することができるポリビニリデンクロリド、ポリエチレン、又は他のエチレン性不飽和モノマーのホモポリマー又はコポリマーも挙げられる。積層体に適したこのような不透過層の例として、カナダ特許第385753号において示される、商標「サランラップ(Saran Wrap)」で呼ばれる場合が多い種類のポリビニリデンクロリド又はポリエチレンが挙げられる。好ましい合成ポリマー不透過層は、金属箔と類似の機能的特徴(例えば比重(密度)2.5〜3.0、好ましくは約2.7など)を有する。
【００２３】
不透過層は、活性成分の皮膚への浸透を補助し、マスクからの水及び流体の蒸発を低下させ、一般的には処置の効果を高めるバリアーを提供する。
【００２４】
B. 吸収層
シートマスクを創出するために使用される吸収層は、好ましくは不織布から作製される。不織布は、編布又は織布のいずれでもない布を指す。これらは、典型的には、繊維又はフィラメントを機械的に、熱的に又は化学的に絡ませることによって形成される。吸収層に適した不織布は、様々な好ましい機能的特性を有する。
【００２５】
第一に、最も好適な不織布は、優れた水又は液体吸収特性を有していなければならない。すなわち、この布は、液体を吸収及び保持できるべきである。好適な不織布は、ラローズ法により水吸収能を測定することによって同定することができる。この場合、好適な不織布の例は、5秒後に1グラム当たり約0.03〜2.5mL/グラムの水吸収読み取り値を有し得る。より好ましいのは、0.30〜2.5mL/グラムの水吸収能である。水吸収能が低すぎる場合(0.03mL/グラム未満)、不織布は、所望のケラチン表面領域を処置するのに十分なトリートメント組成物を吸収することができない場合がある。例えば、フェイスマスクへの適用において、吸収層が、約15〜50mL、より好ましくは20〜40mLを含有することが望ましい。最も好ましいのは、55〜80平方インチの表面積を有するフェイスマスクにおいて約24〜25mLの満杯量である。
【００２６】
1つの好ましい実施形態において、不織布は、厚さ0.1〜1.0mm、好ましくは0.2〜0.8mm、より好ましくは0.5〜0.7mmを有する。
【００２７】
好適な不織布は、布が処置表面上に容易にドレープし、わずかに動いたとしても処置皮膚表面上の位置にとどまることを可能とするのに十分な柔軟性も有していなければならない。この特性は、典型的には、屈曲抵抗性を測定することにより、好ましくはカンチレバー剛軟度法(IST 90.1〜86又はASTM D1388)によって定量化される。一実施形態において、不織布は、屈曲抵抗性1.0〜2.0mm.m2/グラムを有し得る。
【００２８】
本発明において使用し得る好適な不織布の別の特性は、ドレープ抵抗によって定量化される。好適な不織布としては、ドレープ係数1〜70％、好ましくは約25〜70％、又は50〜68％を有する不織布が挙げられる。ドレープ係数が高いほど、不織布のドレープ性は低い。身体表面を処置するためのシートパックの作製において、ドレープは重要な考慮事項である。シートパックは、処置表面上にドレープさせることができなければならない。
【００２９】
別の実施形態において、不織布のKES屈曲剛性B値は0.20gf/cm2/cm以下であり、柔らかく且つ容易に屈曲する布を提供する。
【００３０】
さらに、不織布の一つの好ましい実施形態は、その摩擦係数(一測定値であり、それにより滑らかな感触を定量化することができる)によって特徴付けることが可能である。摩擦係数を計算するための式は：
μ = F / N
(式中、Fは、水平面上で物体を動かすために必要とされる力であり、Nはその面に垂直な荷重)である。摩擦は、好ましくは摩擦テスターによって測定される。1つの好ましい実施形態において、不織布の摩擦係数は0.45MIU未満である。0.45MIU超の測定値を有する布は、硬い感触を与える傾向があり得る。
【００３１】
吸収材の不織布を作製するために使用し得る繊維の例として、セルロース、レーヨン、ウール、絹、セルロースアセテート、合成又は半合成繊維が挙げられる。繊維は、天然繊維と合成繊維との複合材であってもよい。
【００３２】
セルロース繊維は、天然繊維であっても合成繊維であってもよい。セルロース繊維が親水性である場合、不織布の水吸収性及び水保持特性が高められる。天然セルロース繊維の例として、木材パルプ、非木材供給源由来のパルプ、綿、綿リント等が挙げられる。パルプ繊維は、硬材パルプ又は軟材パルプ、さらに竹、藁、樹皮、麻、ジュートなどに由来し得る。軟木材パルプは、不織布を創出するために用いられる結合プロセス中に統合性を保持するその比較的長い繊維長により特に好適であるが、ここで硬木材パルプは比較的短い繊維長を有するため最適ではない。特に望ましいのは、パルプが不織布組成の5〜90％、好ましくは20〜80％、より好ましくは40〜70％を構成する不織布である。
【００３３】
レーヨン繊維を不織布組成に含めることが望ましい場合がある。再生セルロース繊維から作製されるレーヨンは、不織布における強度及び水吸収性を増加させる。レーヨン繊維の量は、全不織布組成の10〜90％、好ましくは20〜80％、より好ましくは25〜75％の範囲であり得る。レーヨンとセルロース繊維との組み合わせは、良好な感触、水吸収性、及び強度を有する不織布を提供する。
【００３４】
合成繊維を不織布に含めることが望ましい場合もある。このような合成繊維の例として、ポリアミド、ポリアクリロニトリル、ポリオレフィン、ポリエステル又はポリビニルアルコールのホモポリマー及びコポリマー(例えばポリエチレンテレフタレート(PET)、ポリテトラメチレンテレフタレート(PTT)、ポリプロピレン)などが挙げられる。所望の場合、不織布は、1〜75％、好ましくは5〜50％、より好ましくは約5〜30％のかかる合成繊維を含有し得る。合成繊維の量が多すぎる場合(例えば60〜70％超)、不織布の水吸収性が低下し、不織布を処置表面上に配置したときにトリートメント組成物が容易に処置表面に移動しない。吸収層に含浸されたトリートメント組成物の移動は、合成繊維がある程度親油性である場合に最大化することができる。これにより、保湿組成物がより容易に吸収層から皮膚へと浸出される。1つの好ましい実施形態において、合成繊維はPETである。
【００３５】
特に好ましいのは、吸収層が約25〜75％のパルプ(綿)、10〜50％のレーヨン、及び2〜15％のポリエステル(より好ましくは約55+/-5％のパルプ、35+/-5％のレーヨン、及び10％+/-5％のポリエステル)を含有する不織布である場合である。この不織布の例は、Sansho Shigyo Co. Ltd.から購入することができる。他の好ましい実施形態において、不織布は、1つ以上の上記の機能的パラメータ、具体的には水吸収性、ドレープ係数、KES屈曲剛性、及び摩擦係数、を有する。
【００３６】
C. 結合剤
吸収層と不透過層との積層化は、所望の場合、結合剤を用いて達成される。結合剤は、2つの層を恒久的様式で確実に一緒にするものでなければならず、不透過層及び吸収層並びにトリートメント組成物と適合するものでなければならず、圧力及び熱の適用により層を共に融着することができるものでなければならない。結合を実現するために用いられる熱は、2層を効果的に積層するためには十分に低いが、吸収層の燃焼、分解、融解、又は他の崩壊を引き起こすほどには高くないものでなければならない。一実施形態において、結合剤は200〜300℃の融点を有し、その融点から約1〜35％低い温度において吸収層と不透過層とを効果的に融着することができる。最も好ましいのは、エチレン性不飽和モノマー繰り返し単位(例えばアクリル酸、メタクリル酸又はそれらの単純C1〜20アルキル若しくは芳香族エステル)；あるいはエチレン、プロピレン、ブチレン繰り返し単位由来のポリマーである。特に好ましいのは、ポリエチレン、特に東ソー株式会社(Tosoh Corporation)により商品名「ペトロテン(Petrothene)」の下で販売されている低密度ポリエチレン(融点221〜248℃を有し、固体形態の乳白色のペレットであり、比重915〜935kg/m3を有する)である。最も好ましいのは、結合剤が200〜300℃の融点を有し、約300〜400℃の温度で不透過層を吸収層に結合させる場合である。
【００３７】
D. 吸収層と不透過層の結合
シートパックが積層体形態である場合、吸収層と不透過層は共に結合されて、吸収層が不透過層に接着されている積層体を形成しなければならない。結合は、結合材を含む押出機を、不織布のスプールと金属箔層のスプールの2つの別個のスプール間に配置し、上記の層が共に積層されるのに十分な量の圧力及び熱により2層間に結合材を押し出して、その後この積層体を別の回収ローラー上に巻き取ることによって最良に達成される。
【００３８】
吸収層2を結合剤4で不透過層3に結合することによって形成される積層体1は、図1に示される。
【００３９】
積層化を行うために適した装置は、図2に最良に示される。結合材17は、押出機6の入口部5に供給される。不織布7は1つのスプール8の上に、金属箔9の形態の不透過層は第2のスプール10の上に配置される。装置が関与すると、不織布7はガイドスプール11及び12の上に供給され、これらは回転して不織布フィルム層を2つの回転スプール11及び12の上を越えて大きな回転スプール13上に供給し、このスプール13は別の大きな回転スプール14に隣接しており、スプール13が時計回り方向に回転するとスプール14が反時計回り方向に回転して吸収層7と金属箔層9がスプール13と14の間に供給され、結合材17が圧力及び熱により2層間に供給されて箔層9と不織布7が共に結合されるようになっている。
【００４０】
第2のスプール10は、同様に回転して金属箔層9をスプール13及び14に供給する。金属箔層9は、第2のスプール10から大きなスプール14へと供給され、結合材17が2層間に供給されると共に圧力及び熱が適用され、これらの2層を共に結合して積層体1を形成する。結合された層がスプール13及び14から供出されたときに形成された積層体は、小さなスプール15に沿って供給されて受容スプール18上に保存され、後で所望の大きさ及び形に切断される。トリートメント組成物(以下により完全に記載される)は、積層体が処置表面に望ましい形に切断される前または後のいずれかに吸収層に含浸させることができる。
【００４１】
より具体的には、上記の層の結合が起こる温度が300〜400℃、好ましくは325〜360℃、最も好ましくは330〜335℃であることが好ましい。結合に最も最適な圧力は、2.5〜4.0パスカル、より好ましくは2.75〜3.25パスカル、最も好ましくは約2.8〜3.2パスカル、又は特に3.0パスカルである。
【００４２】
不織布層、結合剤層、及び不透過層から形成される積層体は、好ましくは厚さ0.2〜1.5mm、好ましくは約0.2〜1.0mm、最も好ましくは0.3〜0.8mmを有する。この厚さが、最適な強度および弾力性を有するシートパックを与える。
【００４３】
E. トリートメント組成物の吸収層への含浸
トリートメント組成物(本明細書中により具体的に記載される)は、好ましくは、積層化プロセスの後、積層ロールを処置表面に望ましい所望の形及び大きさに切断する前、又はカスタマイズされた形に切断した後のいずれかに吸収層に含浸される。トリートメント組成物の吸収層への含浸が、積層体が所望の大きさ及び形に切断された後に起こることが最も好ましい。本発明の一実施形態において、トリートメント組成物は別の容器に収容され、消費者によりマスクに適用されてもよい。この場合、シートマスクと、トリートメント組成物で満たされた容器は、消費者により購入されるキットの形態で販売される。使用直前に、消費者は、皮膚の処置のためにトリートメント組成物をマスクの吸収層に適用する。
【００４４】
F. シートマスクの形
その後積層体は、処置される表面に応じて所望の形に切断される。例えば、顔トリートメントシートパックは、顔への適用に適した様々な形状に切断することができる。これらの形は、顔の表面全体を被覆する1ピースマスク、又は所望の戦略的領域(例えば、目の下、口の周り、又は皮膚の乾燥領域上)に配置し得る多様な小さいピースを包含する。
【００４５】
最も好ましいのは、上部分は額と鼻の間の領域を被覆し、下部分は鼻の下の周囲及び頬又は首までを被覆する、図3に表されるような2つの部分のフェイスマスクである。図3の2ピースマスクは、マスクの上部分20は顔の上部分にフィットするが目は閉塞しないようにするために十分に大きな2つのアイスリット19を有する。鼻の両側のスリット21は、マスク部分が鼻橋領域を処置することを可能とする。顔の下半分の処置用のマスク部分22は、唇を囲むだけ十分に大きな開口部分23を有する。顎の周囲に容易にドレーピングすることを可能とするため、様々なスリット24、25、26、及び27が、下部フェイスマスク22に好ましく埋め込まれる。
【００４６】
シートパックパック容器及び使用説明書
所望のケラチン表面にフィットさせるために切断されるシートパックは、好ましくは図4に表されるような気密性ポーチ又はエンベロープ28であるパッケージに収容される。パッケージの一種が図4に表される。シートパックを保持するためのエンベロープは、シートマスクを確実に折り畳まれていない状態のままとし得る大きさ及び形であり得る。あるいは、シートパックを半分又は4分の1に折り畳んで、より小さなサイズのエンベロープ28に保存することがより望ましい場合がある。使用説明書は、エンベロープ29の上に直接配置されていてもよいし、あるいは1つ以上のエンベロープ28が入っている二次パッケージ30の上に配置されていてもよい。二次パッケージは、1つ以上の保存エンベロープ28に収容されている個々のシートパックを保持するための箱30であり得る。使用説明書は、天然の皮膚細胞においてトリートメント組成物中の成分により活性化される同遺伝子が最大に発現される時間にシートパックを適用することを使用者に指示する。
【００４７】
トリートメント組成物
本発明のシートパックにおいて使用されるトリートメント組成物は、好ましくは液体形態である。このトリートメント組成物は、エマルション(水中油エマルション若しくは油中水エマルションのいずれか)であってもよいし、溶液形態若しくは分散液形態であってもよい。特に好ましい形態はセラムと呼ばれ、これは一般的には水、保水剤及び他の成分の混合物であり、極めて少量の油相を含むか全く油相を含まない。シートパックに含浸させるのに適したトリートメント組成物は、25℃における粘度2〜1000cps、好ましくは約2〜200cps、より好ましくは約5〜50cps、及び比重1.000〜1.010、より好ましくは約1.000〜1.008、最も好ましくは約1.005を有し得る。トリートメント組成物を上記の粘度範囲内及び比重範囲内に維持することにより、トリートメント組成物が吸収層に適切に浸透し、層を透過するために十分に液状であるが層の透過において困難を生じるほど粘性ではなくなることを確実にする。
【００４８】
トリートメント組成物がエマルション形態である場合、組成物は、約1〜99％、好ましくは約5〜90％、より好ましくは約10〜85％の水、及び約1〜99％、好ましくは約5〜90％、より好ましくは約5〜75％の油を含み得る。水性懸濁液又は分散液の形態である場合、組成物は、一般的に、約1〜99.9％、好ましくは約5〜95％、より好ましくは約10〜90％の水を含んでいてよく、残りの成分は活性成分又は他の処方成分である。
【００４９】
特に好適なのは、天然の皮膚細胞において24時間にわたり可変的に発現される遺伝子を刺激する活性を有する少なくとも1種の活性成分、及び場合により利益を提供する少なくとも1種のスキントリートメント活性物質を含有するトリートメント組成物である。組成物は、安定且つ商業的に許容可能な処方の提供に寄与する他の成分を含有し得る。
【００５０】
特にシートパックが長時間にわたり一貫して適用される場合、24時間にわたり可変的に発現される遺伝子を刺激する活性成分は、処置された細胞を、それらの生物学的(概日)経路が全て同期的に機能するように同期させることによって作用し得る。あるいは、この活性成分は、枯渇状態(多くの場合一日の終わりに見られる状態)の天然の皮膚に、可変的に発現される遺伝子を刺激する生物学的タンパク質を補充することによっても作用し得る。その可変的に発現される遺伝子を刺激する活性を有する成分は、1種以上の利益活性物質の有効性を最大化し、これにより処置表面に対するこれらの効果が最適化される。
【００５１】
A. 可変的に発現される遺伝子を刺激する活性物質
【００５２】
皮膚細胞において可変的に発現される遺伝子の例としては、ピリオドホモログ遺伝子(PER1、2、及び3)、概日運動出力サイクル異常(CLOCK)、クリプトクロム概日クロック1又は1(CRY1、2)、並びに脳及び筋肉アリール炭化水素受容体核内輸送体(BMAL)等が挙げられる。これらの遺伝子は、皮膚細胞において24時間にわたり可変的に発現されるため一般的に概日遺伝子と呼ばれ、そのピーク発現は、通常は夕方から夜の時間に起こる。
【００５３】
皮膚細胞(例えばケラチン生成細胞、線維芽細胞、脂肪細胞等)においてこれらの遺伝子の発現を刺激する活性成分は、PER、CLOCK、CRY、又はBMAL遺伝子の1つ以上を刺激することが可能であり、例えば、限定するものではないが、本明細書中に示されるものが挙げられる。可変的に発現される遺伝子の発現を刺激する成分は、0.00001〜8％、好ましくは約0.0005〜5％、より好ましくは約0.001〜3％の量でトリートメント組成物中に存在し得る。
【００５４】
エキナセア-チコリ酸
エキナセア抽出物、又はそれに由来する活性成分であるチコリ酸は、特にPER及びPER1の好適な活性化因子であることが示されている。チコリ酸成分は、合成であってもよいし、天然由来であってもよい。合成チコリ酸は、Sigma Aldrichなどの多くの商業的製造者から購入することができる。チコリ酸は、チコリ酸を含有することが知られている植物供給源、例えばエキナセア(Echinacea)、キクニガナ(Cichorium)、タンポポ(Taraxacum)、メボウキ(Ocimum)、メリッサ(Melissa)から、又は藻類若しくは海藻類から抽出することもできる。より具体的には、植物抽出物、例えば、ムラサキバレンギク(Echinacea purpurea)、チコリー(Cichorium intybus)、セイヨウタンポポ(Taraxacum officinale)、スイートバジル(Ocimum basilicum)、又はセイヨウヤマハッカ(Melissa officinalis)は優れた供給源である。「チコリ酸」という用語は、本明細書中で用いられる場合、皮膚細胞においてPER1遺伝子発現を増加させることができるそれらの任意の異性体も包含する。
【００５５】
最も好ましいのは、全抽出組成物の約3重量％のチコリ酸を含有するよう抽出工程中に標準化されたムラサキバレンギクの抽出物である、Symriseにより商品名Symfinity(商標)1298の下で販売されているムラサキバレンギク由来の植物抽出物である。異なる供給源に由来するエキナセア抽出物はチコリ酸含有量が異なり、従ってPER1遺伝子発現の誘導において可変的な結果を生じる。例えば、本発明者らは、エキナセアの抽出物中に一般的に見られる別の成分(具体的にはカフタル酸)は、皮膚細胞においてPER1遺伝子発現を増加させないことを観察した。さらに、エキナセア属の各種は、フェノール酸及びチコリ酸の含有量が異なる。ムラサキバレンギクの根のエタノール性抽出物は、エキナセア・アングスティフォリア(Echinacea angustifolia)又はエキナセア・パリダ(Echinacea pallida)のエタノール性抽出物より多くのチコリ酸を提供する。任意の抽出物中の活性成分の含有量は、抽出法にも極めて依存する。例えば、多くの場合、抽出工程中の酵素的褐色化は、得られた抽出物のフェノール酸含有量を低下させることが知られている。最適なチコリ酸含有量を有するエキナセア抽出物は、好ましくはエタノール中に抽出される。別の抽出法は、水単独、水とアルコールの混合物、又はアルコール単独(このアルコールは、メタノール、エタノール及び類似の低炭素鎖長アルコール、例えばプロパノール、イソプロパノールなどから選択される)であり得る。
【００５６】
ペプチド
種々のペプチドが好適なCLOCK又はPER1遺伝子活性化因子である。このようなペプチドの一例は、米国特許出願第2014/0045766号に開示されており、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【００５７】
このようなペプチドは、一般式：
R1-(AA)n-X1-S-T-P-X2-(AA)p-R2
を有し、
式中、(AA)n-X1-S-T-P-X2-(AA)pは(配列番号1)であり：
X1は、スレオニン、セリンを表すか、又はゼロに等しく、
X2は、イソロイシン、ロイシン、プロリン、バリン、アラニン、グリシンを表すか、又はゼロに等しく、
AAは、任意のアミノ酸又はそれらの誘導体を表し、n及びpは0〜4の整数であり、
R1は、遊離の、又はアセチル基、ベンゾイル基、トシル基若しくはベンジルオキシカルボニル基のいずれかから選択され得る保護基で置換されているN末端アミノ酸の第一級アミン官能基を表し、
R2は、C1〜C20アルキル鎖又はNH2、NHY若しくはNYY基(YはC1〜C4アルキル鎖を表している)のいずれかから選択され得る保護基で置換されているC末端アミノ酸のカルボキシル官能基の水酸基を表し、
ここで一般式(I)の配列は、約3〜13個のアミノ酸残基を含み、
前記一般式(I)の配列は、アミノ酸X1及びX2の、他の化学的に等価のアミノ酸との置換を含む可能性があり；
ここでアミノ酸は、以下：
アラニン(A)
アルギニン(R)
アスパラギン(N)
アスパラギン酸(D)
システイン(C)
グルタミン酸(E)
グルタミン(Q)
グリシン(G)
ヒスチジン(H)
イソロイシン(I)
ロイシン(L)
リジン(K)
メチオニン(M)
フェニルアラニン(F)
プロリン(P)
セリン(S)
スレオニン(T)
トリプトファン(W)
チロシン(Y)
バリン(V)
である。
【００５８】
より好ましいのは、以下のような上記式のペプチドである：
(配列番号1) S-T-P-NH2
Ser-Thr-Pro-NH2
(配列番号2) Y-V-S-T-P-Y-N-NH2
Tyr-Val-Ser-Thr-Pro-Tyr-Asn-NH2
(配列番号3) NH2-V-S-T-P-E-NH2
NH2-Val-Ser-Thr-Pro-Glu-NH2
(配列番号4) NH2-L-H-S-T-P-P-NH2
NH2-Leu-His-Ser-Thr-Pro-Pro-NH2
(配列番号5)CH3NH-R-H-S-T-P-E-NH2
CH3-NH-Arg-His-Ser-Thr-Pro-Glu-NH2
(配列番号6)CH3NH-H-S-T-P-E-CH3NH
CH3-NH-His-Ser-Thr-Pro-Glu-CH3-NH
【００５９】
より好ましいのは、S-T-P-NH2ペプチド(配列番号1)、又はそれらの混合物である。
【００６０】
最も好ましいのは、INCI名「トリペプチド-32」を有する、ISP-VincienceによりChronolux(登録商標)の商標の下で製造されるペプチドである。
【００６１】
別の好適なペプチドは、米国特許出願第2011/0269694号(この文献はその全体が参照により本明細書に組み込まれる)に開示されるようなペプチドであり、以下の式：
R1-X1-X2-Ser-Pro-Leu-Gln-X3-X4-R2
(式中：
X1は、システイン、メチオニンであるか、又はゼロに等しく、
X2は、セリン、スレオニンであるか、又はゼロに等しく、
X3は、アラニン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、プロリン、バリンであるか、又はゼロに等しく、
X4は、アスパラギン、グルタミンであるか、又はゼロに等しく、
R1は、遊離の、又はアセチル基、ベンゾイル基、トシル基若しくはベンジルオキシカルボニル基から選択され得る保護基で置換されているN末端アミノ酸の第一級アミン官能基であり、
R2は、遊離の、あるいはC1〜20アルキル鎖又はNH2、NHY若しくはNYY基(ここで、YはC1〜4アルキル鎖である)から選択され得る保護基で置換されているC末端アミノ酸のカルボキシル官能基の水酸基である)
を有し、
前記一般式(I)の配列は、4〜8個のアミノ酸残基で形成されており、前記一般式(I)の配列は、アミノ酸X2〜X4の、他の化学的に等価のアミノ酸との置換を含む可能性がある。
【００６２】
より好ましいのは、上記置換が、以下：
Ser-Pro-Leu-Gln-NH2
を与えるように選択されるペプチドである。
【００６３】
このペプチドはINCI名「テトラペプチド-26」を有し、ISP-Vinscienceから商標Chronogen(登録商標)の下で購入することができる。
【００６４】
同様に、PER、CLOCK、BMAL、又はCRYの1つ以上の活性化因子として好適なのは、細胞のオートファジープロセスの活性化因子である成分である。一般的に、細胞のオートファジープロセスは、4つの一般的ステップを含む。ステップ1は液胞形成の開始であり；ステップ2は、初期の液胞又は分解対象の細胞質物質を捕捉するオートファゴソームの形成である。ステップ3は、オートファゴソームの分解液胞への成熟である。ステップ4は、捕捉された物質の実際の分解である。
【００６５】
オートファジー活性化活性を有する成分は、それらの様々な細胞代謝経路を刺激又は阻害する能力によって同定することができる。例えば、MAP-LC3、ATG5-12、タンパク質p53、AMPK、又はDRAM遺伝子の発現を刺激する成分は、好適なオートファジー活性化因子である。mTOR遺伝子の発現を阻害する成分も好適なオートファジー活性化因子である。
【００６６】
遺伝子MAP-LC3は、微小管関連タンパク質1軽鎖3(オートファゴソームの形成を開始するタンパク質)をコードする。ATG5-12は、オートファゴソームの形成も刺激する。哺乳類ラパマイシン標的としても知られるmTORは、ラパマイシン又はFK506結合タンパク質12-ラパマイシン関連タンパク質1(FRAP1)の機構的標的としても知られている。FRAP1は、FRAP遺伝子によってコードされる。オートファゴソーム産生に関与する、mTORの発現を阻害する任意の成分がオートファジー活性化特性を有する。同様にオートファジー活性化因子として好適なのは、ケラチン生成細胞においてタンパク質p53、AMPK、及び/又はDRAM(損傷修復オートファジー調節タンパク質)の発現を刺激する成分である。腫瘍抑制タンパク質としても知られるタンパク質p53は、p53遺伝子によってコードされる。AMPKはAMP活性化プロテインキナーゼを意味し、DRAMは損傷関連オートファジー調節因子を意味する。いずれも、ケラチン生成細胞におけるオートファジー活性化を刺激することが知られている。
【００６７】
従って、上述の遺伝子に対して上記の効果を有する任意の成分が、好適なオートファジー活性化因子、及びPER、BMAL、CLOCK、又はCRYの活性化因子であり得る。自家食プロセス中に、細胞デブリ(例えば酸化タンパク質及び過酸化脂質)が分解される。このような細胞デブリは、多くの場合、正常な代謝機能に影響を及ぼす。細胞(好ましくはケラチン生成細胞)の上記遺伝子及び/又はタンパク質を刺激又は阻害する能力により有効性を決定するための成分のスクリーニングは、米国特許公開第2011/0243983号(その全体が参照により組み込まれる)中に示される方法、又は当技術分野で公知の他の方法に従って行うことができる。
【００６８】
例えば、オートファジー活性化因子であり得る成分を同定するための1つの一般的な方法は、最初に培養細胞(例えばケラチン生成細胞)中で栄養ストレスを誘導することによる方法である。例えば細胞を、最初に成長因子を含む完全培地中で約24時間培養する。次いで、培養培地を除去し、非栄養培地(例えば成長因子を含まない培地)で置換する。細胞を、約30分間〜約25時間、栄養ストレス状態で培養する。次いで、非栄養培地を除去し、完全培養培地で置換して細胞の回復を促進する。その後、これらの細胞中のMAP-LC3；ATGS-12；リン酸化mTOR；リン酸化p53；DRAM；又はリン酸化AMPKの1つ以上の発現を測定することにより、自家食活性について細胞を評価する。このような発現の測定は、免疫蛍光測定によって行うことができる。さらに、発現は、発現された遺伝子に関連するリン酸化タンパク質のウエスタンブロット分析によって確認することができる。
【００６９】
上記の遺伝子に刺激作用又は阻害作用のいずれかを及ぼしてオートファジーを刺激し、PER、CLOCK、CRY、又はBMALの1つ以上を活性化させることが知られている成分の例は酵母抽出物であり、例えば、限定するものではないが、リソサムニウム属(Lithothamnium)、メリロット属(Melilot)、シトラス属(Citrus)、カンジダ属(Candida)、レンス属(Lens)、ウルティカ属(Urtica)、カラムボラ属(Carambola)、モモルジカ属(Momordica)、ヤロウィア属(Yarrowia)、プルムバゴ属(Plumbago)等に由来する酵母抽出物などが挙げられる。さらなる具体例としては、リソサムニウム・カルカレウム(Lithothamniumn calcareum)、メリロツス・オフィシナリス(Melilotus officinalis)、シトラス・リモヌム(Citrus limonum)(レモン)、カンジダ・サイトアナ(Candida saitoanna)、レンス・クリナリア(Lens culinaria)、ウルティカ・ジオイカ(Urtica dioica)、アベロア・カラムボラ(Averrhoa carambola)、モモルジカ・カランチア(Momordica charantia)(ツルレイシ)、ヤロウィア・リポリティカ(Yarrowia lipolytica)、プルムバゴ・ゼイラニカ(Plumbago zeylanica)等が挙げられる。
【００７０】
上記の遺伝子の1つ以上を刺激する別の成分は、褐色海藻(例えばラミナリア・ディジタータ(Laminaria digitata))由来の膜状多糖の酵素的脱重合の抑制によって得られる特定のオリゴ糖である。より具体的には、オリゴ糖は、ウロカニン酸、特にマニュロン酸及びグルロン酸から形成される。最も好ましいのは、INCI名「加水分解アルギン」を有し、CAS No. 73049-73-7を有する活性物質である。
【００７１】
可変的に発現される遺伝子を刺激する成分は、それ自体において及びそれ自体が、スキントリートメント活性物質でもあり得る。あるいは、可変的に発現される遺伝子を刺激する成分がその有効性のみを有する場合もあり、この場合は、1種以上のさらなるスキントリートメント活性物質を加えることが望ましい。これにより確実に、天然で未処置の皮膚細胞の大部分において可変的に発現される遺伝子が最大に発現される時間にその遺伝子を刺激すると、処置利益を与える。特に、処置利益は、皮膚細胞が同期的に作用する状況において最大化され得る。細胞同期の前は、細胞の生物学的経路は正確な同期性で作動していない場合がある。しかしながら、この場合であっても、正常な概日リズムは、大部分の細胞を、同じ一般的な時間枠で代謝的に作動するようにさせるといえる。
【００７２】
他の皮膚活性物質
トリートメント組成物は、好ましくは1種以上のさらなるスキントリートメント活性物質を含有する。スキントリートメント活性物質は、利益を提供するあらゆるもの、例えば皮膚美白剤(チロシナーゼ阻害又は他の経路を介する)、保湿剤、抗にきび剤、抗炎症剤、抗酒さ剤、細胞DNA修復活性物質、タンパク質修復活性物質、抗しわ剤、皮膚引き締め剤、光学的ぼかし剤(blurring agent)、油吸収活性物質、保水剤、コラーゲン若しくはエラスチン刺激活性物質、又は利益の提供に直接的又は間接的に寄与する特定の成分であり得る。このような活性物質は、約0.00001〜10％、好ましくは0.00005〜5％、より好ましくは約0.0001〜2％の量で存在し得る。好適な利益活性物質としては、例えば、限定するものではないが、本明細書中に示される利益活性物質が挙げられる。好ましいのは、可変的に発現される遺伝子を刺激する成分と組み合わせた場合に最適化された有効性を示す利益活性物質である。
【００７３】
DNA修復酵素
組成物は、1種以上のDNA修復酵素を含有し得る。推奨範囲は、1種以上のDNA修復酵素約0.00001〜約35％、好ましくは約0.00005〜約30％、より好ましくは約0.0001〜約25％である。
【００７４】
米国特許第5,077,211；5,190,762；5,272,079；及び5,296,231号に開示されるDNA修復酵素(これらの文献は全て参照によりその全体が本明細書に組み込まれる)は、本発明の組成物及び方法における使用に好適である。このようなDNA修復酵素の一例は、AGI/Dermaticsから商品名Roxisomes(登録商標)の下に購入することが可能であり、INCI名「アラビドプシス・サリアナ(Arabidopsis Thaliana)抽出物」を有する。このDNA修復酵素は、単独で又はレシチン及び水との混合物として存在し得る。このDNA修復酵素は、8-オキソ-グアニン塩基損傷の修復において有効であることが知られている。
【００７５】
使用し得る別の種類のDNA修復酵素は、06-メチルグアニン塩基損傷の修復において有効であることが知られているDNA修復酵素である。このDNA修復酵素は、AGI/Dermaticsにより、商品名「Adasomes(登録商標)」の下で販売されており、INCI名「ラクトバチルス発酵物」を有し、それ自体で又はレシチン及び水と混合して、本発明の組成物に添加することができる。
【００７６】
使用し得る別の種類のDNA修復酵素は、T-T二量体の修復において有効であることが知られているDNA修復酵素である。酵素は、生物学的物質又は植物学的物質の混合物として存在する。このような成分の例は、AGI/Dermaticsにより、商品名Ultrasomes(登録商標)又はPhotosomes(登録商標)の下に販売されている。Ultrasomes(登録商標)は、ミクロコッカス(Micrococcus)溶解物(ミクロコッカスの様々な種の制御溶解の最終生成物)、レシチン及び水の混合物を含む。Photosomes(登録商標)は、プランクトン抽出物(1種以上の下記の生物：海洋プランクトン、緑色微細藻類、珪藻類、青緑色窒素固定海藻を含む、海洋バイオマスの抽出物である)、水及びレシチンの混合物を含む。
【００７７】
他の好適なDNA修復酵素としてエンドヌクレアーゼVが挙げられるが、これはバクテリオファージT4のdenV遺伝子により産生され得る。同様に好適なのは、T4エンドヌクレアーゼ；O6-メチルグアニン-DNAメチルトランスフェラーゼ；フォトリアーゼ(例えばウラシル-及びヒポキサンチン-DNAグリコシラーゼ)；脱ピリミジン部位/脱プリン部位エンドヌクレアーゼ；DNAエクソヌクレアーゼ、損傷塩基グリコシラーゼ(例えば、3-メチルアデニン-DNAグリコシラーゼ)；単独の又は複合体(例えば、大腸菌uvrA/uvrB/uvrCエンドヌクレアーゼ複合体)としてのコレンドヌクレアーゼ；多機能DNA修復酵素であるAPEXヌクレアーゼ(多くの場合「APE」と呼ばれる)；ジヒドロ葉酸レダクターゼ；末端トランスフェラーゼ；トポイソメラーゼ；O6ベンジルグアニン；DNAグリコシラーゼである。
【００７８】
他の種類の好適なDNA修復酵素は、促進される修復の種類によって分類することが可能であり、BER(塩基除去修復)酵素又はBER因子酵素、例えばウラシル-DNAグリコシラーゼ(UNG)；一本鎖選択的単機能ウラシルDNAグリコシラーゼ(SMUG1)；3,N(4)-エテノシトシングリコシラーゼ(MBD4)；チミンDNA-グリコシラーゼ(TDG)；A/G特異的アデニンDNAグリコシラーゼ(MUTYH)；8-オキソグアニンDNAグリコシラーゼ(OGG1)；エンドヌクレアーゼIII様(NTHL1)；3-メチルアデニンDNAグリコシダーゼ(MPG)；DNAグリコシラーゼ/APリアーゼ(NEIL1又は2)；APエンドヌクレアーゼ(APEX1及び2)、DNAリガーゼ(LIG3)、リガーゼ付属因子(XRCC1)；DNA5'-キナーゼ/3'-ホスファターゼ(PNKP)；ADP-リボシルトランスフェラーゼ(PARP1又は2)などを包含する。別のカテゴリーのDNA修復酵素として、損傷を直接修復すると考えられるDNA修復酵素、例えばO6-MeGアルキルトランスフェラーゼ(MGMT)；1-meAジオキシゲナーゼ(ALKBH2又はALKBH3)が挙げられる。
【００７９】
DNA/タンパク質架橋を修復することができるさらに別のカテゴリーの酵素として、Tyr-DNAホスホジエステラーゼ(TDP1)が挙げられる。
【００８０】
同様に、MMR(ミスマッチ除去修復)DNA修復酵素、例えば、MutSタンパク質ホモログ(MSH2)；ミスマッチ修復タンパク質(MSH3)；mutSホモログ4(MSH4)；MutSホモログ5(MSH5)；又はG/Tミスマッチ-結合タンパク質(MSH6)；DNAミスマッチ修復タンパク質(PMS1、PMS2、MLH1、MLH3)；減数分裂後分離増加型2様タンパク質(PMS2L3)；又は減数分裂後分離増加型2様4偽遺伝子(PMS2L4)も好適である。
【００８１】
同様に、ヌクレオチド除去修復(NER)酵素として知られるDNA修復酵素も好適であり、例えば、色素性乾皮症C群相補性タンパク質(Xeroderma pigmentosum group C-complementing protein)(XPC)；RAD23(S. セレビシエ(S. cerevisiae))ホモログ(RAD23B)；カルトラクチンアイソフォーム(CETN2)；RFAタンパク質1、2又は3(RPA1、2又は3)；3’-5’DNAヘリカーゼ(ERCC3)；5’-3’DNAヘリカーゼ(ERCC2)；塩基性転写因子(GTF2H1、GTF2H2、GTF2H3、GTF2H4、GTF2H5)；CDK活性化キナーゼ(CDK7、CCNH)；サイクリンG1相互作用タンパク質(MNAT1)；DNA除去修復タンパク質ERCC-5l；除去修復交差相補1(ERCC1)；DNAリガーゼ1(LIG1)；ATP依存性ヘリカーゼ(ERCC6)；などのDNA修復酵素が挙げられる。
【００８２】
同様に、相同組換えを促進するカテゴリー中のDNA修復酵素も好適であり得、例えば、限定するものではないが、DNA修復タンパク質RAD51ホモログ(RAD51、RAD51L1、RAD51B等)；DNA修復タンパク質XRCC2；DNA修復タンパク質XRCC3；DNA修復タンパク質RAD52；ATPアーゼ(RAD50)；3’エクソヌクレアーゼ(MRE11A)；等が挙げられる。
【００８３】
DNAポリメラーゼであるDNA修復酵素も好適であり、例えば、DNAポリメラーゼベータサブユニット(POLB)；DNAポリメラーゼガンマ(POLG)；DNAポリメラーゼサブユニットデルタ(POLD1)；DNAポリメラーゼIIサブユニットA(POLE)；DNAポリメラーゼデルタ補助タンパク質(PCNA)；DNAポリメラーゼゼータ(POLZ)；MAD2ホモログ((REV7)；DNAポリメラーゼイータ(POLH)：DNAポリメラーゼカッパ(POLK)：などが挙げられる。
【００８４】
多くの場合は「エディティング及びプロセシングヌクレアーゼ」と呼ばれる様々な種類のDNA修復酵素として、3’-ヌクレアーゼ；3’-エクソヌクレアーゼ；5’-エクソヌクレアーゼ；エンドヌクレアーゼ；などが挙げられる。
【００８５】
DNA修復酵素の他の例はDNAヘリカーゼを包含し、例えば、ATP DNAヘリカーゼ等が挙げられる。
【００８６】
DNA修復酵素は、植物抽出物、細菌溶解物、生物学的材料などの成分として存在し得る。例えば、植物抽出物はDNA修復酵素を含有し得る。
【００８７】
本発明の組成物は、1種以上のDNA修復酵素を含み得る。
【００８８】
プロテアソーム活性化因子
トリートメント組成物は、約0.0001〜65％、好ましくは約0.0005〜50％、より好ましくは約0.001〜40％の量の1種以上のプロテアソーム活性化因子を含有し得る。好適なプロテアソーム活性化因子は、ケラチン表面の細胞においてプロテアソーム活性を刺激する任意の化合物、分子、又は活性成分である。プロテアソームは、損傷タンパク質を分解する細胞内のタンパク質複合体である。プロテアソーム活性化因子である成分は、年齢、細胞の損傷(例えばUV光に対する曝露によって引き起こされる細胞の損傷)によってプロテアソーム活性が低下する可能性がある細胞中のプロテアソーム活性を刺激する。
【００８９】
好適なプロテアソーム活性化因子の例としては、限定するものではないが、アルギン、アルギネート、加水分解アルギン、糖蜜抽出物、トラメテス属抽出物(トラメテス・ベシコロル(Trametes versicolor)(カワラタケ)からの抽出物を含む)、オレア・エウロパ(Olea Europa)(オリーブ)果実抽出物(単独又はアカシアセネガル抽出物との組み合わせ)、ポミフェリン/オサジン、プランクトン抽出物、アルギニンフェルレート、プランクトン抽出物/ブチレングリコール/アルギニンフェルレート/水を含む組成物、酵母抽出物、プランクトン抽出物、及びUB5(ペンタ-ユビキチン)と呼ばれるペプチドが挙げられる。
【００９０】
プロバイオティクス微生物
トリートメント組成物は、1種以上のプロバイオティクス微生物又はそれらの溶解物若しくは濾液を含有し得る。プロバイオティクス微生物抽出物は、任意のプロバイオティクス細菌又は酵母の発酵から得ることが可能であり、例えば、ラクトバチルス目(Lactobacillales)若しくはビフィドバクテリウム目(Bifidobacteriales)、又は酵母の属、サッカロマイセス(Saccharomyces)に由来するプロバイオティクス微生物抽出物が挙げられる。より好ましい細菌は、ビフィドバクテリウム及びラクトバチルスに由来する細菌である。ラクトバチルス目に由来する好適な細菌としては、アビオトロフィア属(Abiotrophia)、アエロコッカス属(Aerococcus)、カモバクテリウム属(Camobacterium)、エンテロコッカス属(Enterococcus)、ラクトバチルス属(Lactobacillus)、ラクトコッカス属(Lactococcus)、レウコノストック属(Leuconostoc)、オエノコッカス属(Oenococcus)、ペディオコッカス属(Pediococcus)、スポロラクトバチルス属(Sporolactobacillus)、テラゲノコッカス属(Teragenococcus)等が挙げられる。特に望ましいのは、相当多数の種が存在するラクトバチルス属に由来する細菌である。最も好ましいのは、ラクトバチルス・プランタルム(Lactobacillus Plantarum)又はラクトバチルス・カゼイ(Lactobacillus casei)若しくはラクトバチルス・ラムノサス(Lactobacillus rhamnosus)(P)である。
【００９１】
ビフィドバクテリウム目に由来する好適なプロバイオティクスとして、ビフィドバクテリウム属に由来するプロバイオティクスが挙げられる。特に好ましいのはビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)由来のプロバイオティクスであるが、他の種も好適であり得る。特に好ましいのは、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)由来の不活性化細菌溶解物であり、これは発酵産物の形態であり得る。このような成分は、INCI名「ビフィダ溶解物」、「ビフィダ発酵溶解物」、「ビフィダ発酵ろ液」を有する。ビフィドバクテリウム属は、他の植物抽出物若しくは成分との混合物の形態であってもよいし、発酵産物の形態であってもよい。
【００９２】
好適なプロバイオティクス酵母として、例えば、サッカロマイセス・セレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)、サッカロマイセス・ボウラルディ(Saccharomyces boulardii)、サッカロマイセス・ブルデリ(Saccharomyces bulderi)等の種を含むサッカロマイセス属由来のプロバイオティクス酵母が挙げられる。
【００９３】
本発明の一実施形態において、ビフィドバクテリウムは、米国特許第6,790,434号(その全体が参照により本明細書に組み込まれる)に示される。
【００９４】
本発明の別の実施形態において、着色化粧組成物中で使用されるプロバイオティクス微生物抽出物は、米国特許第7,510,734号(その全体が参照により本明細書に組み込まれる)に示されるとおりに得られ、CTFA名「ラクトバチルス発酵物」(ラクトバチルスの発酵から得られる抽出物として定義される)を有する。市販の供給源として、Active Concepts LLCにより商品名「AC Probiotic 1」の下に販売されているもの、又は韓国のNatural F&P Co., Ltdにより販売されている「Lactobacillus crispatus KLB 46」が挙げられる。同様に様々な誘導体も好適であり、例えばCTFA名「ラクトバチルス発酵ろ液」を有する誘導体(ラクトバチルス発酵物から得られた抽出物のろ液)が挙げられ、これはActive Concepts LLCから商品名「ACB Salicylic Acid Bioferment」の下に販売されている、サリチル酸と上記ろ液との混合物として購入することができる。同様に、CTFA名「ラクトバチルス発酵溶解物」を有する誘導体(ラクトバチルスの発酵から得られた抽出物の溶解物)、又はラクトバチルス発酵溶解ろ液(ラクトバチルスの発酵から得られた抽出物の溶解物がろ過されたもの)も好適である。
【００９５】
同様に、単独で又は様々な植物材料(例えば、リンゴ、朝鮮人参、ニンニク等)と組み合わせて発酵させた酵母(例えばサッカロマイセス)由来の抽出物も好適である。このような成分は、CTFA名「サッカロマイセス発酵物」、「サッカロマイセス発酵溶解物」、「サッカロマイセス発酵溶解ろ液」、「サッカロマイセス/ブドウ発酵物」、「サッカロマイセス/ラミナリア・サッカリナ(Lamanaria Saccharina)発酵物」等を有し；またサッカロマイセスの、金属(例えば、銅、カルシウム、マグネシウム、トルマリン等)と組み合わせた発酵から得られた抽出物も好適である。
【００９６】
プロバイオティクス微生物又はそれらの発酵物若しくは溶解物の好適な範囲は、約0.0001〜35％、好ましくは約0.001〜20％、より好ましくは約0.01〜10％であり得る。
【００９７】
他の成分
安定な、化粧上許容可能な組成物を提供するために、トリートメント組成物中に他の成分が存在していてもよい。このような成分としては、界面活性剤、増粘剤、保存剤、保水剤、植物抽出物、他のペプチド又はタンパク質などが挙げられる。
【００９８】
より具体的には、好適な界面活性剤は、特に非イオン性有機界面活性剤又はシリコンベースの界面活性剤(好ましくはHLB5〜13を有する)を含む。より具体的には、アルコキシ基が1〜26個の炭素原子のアルコキシ基であるアルコキシル化アルコール(好ましくはラウリルアルコール、ステアリルアルコール、ベヘンアルコール又はセテアリルアルコール由来の脂肪アルコキシル化アルコール)である。例として、ラウレス、オレス、グルセス又はそれらのメチル若しくはエチル誘導体などが挙げられる。より具体的な例として、PEG-75、メチルグルセス-20、ビス-PEG-18メチルエーテルジメチルシラン、グリセレス-26、PEG-8グリセリルイソステアレート、オレス-3ホスフェート、ラウレス-3及びそれらの混合物が挙げられる。存在する場合、界面活性剤は、0.01〜10％の範囲であり得る。
【００９９】
好適な増粘剤として、水性又は非水性増粘剤、例えばカルボマー、C10-30アルキルアクリレートクロスポリマー、ポリアクリル酸ナトリウム、ポリアクリレートクロスポリマー-6、ポリアクリレートクロスポリマー-7等などが挙げられる。存在する場合、このような増粘剤は、0.1〜10％の範囲であり得る。
【０１００】
好適な保水剤としては、アルキレングリコール(例えばブチレングリコール、ペンチレングリコール、プロピレングリコール)、エチルヘキシルグリセリン、グリセリン及びそれらの混合物が挙げられる。存在する場合、このような保水剤は、0.1〜5％の範囲であり得る。
【０１０１】
組成物は、1種以上の植物成分、例えばポリアココス・スクレロチウム(Poriacocos sclerotium)抽出物、シリブム・マリアヌム(Silybum marianum)(マリアアザミ)、アンテミス・ノビリス(Anthemis nobilis)(カモミール・ローマン)、マグノリア・オフィシナリス(Magnolia officianalis)樹皮抽出物、ガルシニア・マンゴスタナ(Garcinia mangostana)(マンゴスチン)抽出物、クラドシフォン・オカムラヌス(Cladosiphon okamuranus)(オキナワモズク)抽出物、ベチュラ・アルバ(Betula alba)(白樺)抽出物、アルテミア(Artemia)抽出物、及びそれらの混合物も含み得る。このような抽出物は、0.001〜5％、好ましくは約0.01〜3％、より好ましくは約0.01〜1％の範囲の量で存在し得る。
【０１０２】
好適なトリートメント組成物は、以下：
50〜95％の水
0.001〜5％の植物抽出物
0.01〜5％の可変遺伝子刺激活性物質、
0.01〜5％のスキントリートメント活性物質、
0.01〜5％の植物抽出物、
0.01〜5％の保水剤；及び
0.01〜5％の増粘剤
を含有し得る。
別の好適なトリートメント組成物は、以下：
50〜95％の水、
0.01〜5％の可変遺伝子刺激活性物質(スキントリートメント活性物質でもある)
0.01〜5％のDNA修復酵素；及び
0.01〜5％のビフィドバクテリウム属由来の不活性化細菌溶解物
を含有し得る。
【０１０３】
方法
本発明の方法において、シートパックは、所望のケラチン表面に1〜60分間の期間で適用される。しかしながら、シートパックの1つの特定の利益は、それが、10分以下で効果的なスキントリートメントを提供することである。最も標準的なシートパック製品は、20〜30分間を必要とする。20〜40平方インチを有する標準的な顔を処置するためには、満量24〜25mLが完璧である。マスクを外した後に顔上に残っているトリートメント組成物は、トリートメントローション又はクリームとして皮膚へマッサージすることが可能であり、皮膚にさらなる保湿剤を適用することを不必要にし得る。特に夜の休息時間中、皮膚バリアーは自然により透過性となり、これにより皮膚の最適化された処置を可能とする。1つの好ましい実施形態において、使用説明書は、消費者に、シートマスクを12:00〜24:00時、より好ましくは16:00〜24:00時、最も好ましくは18:00〜24:00時の期間適用することを指示する。
【０１０４】
本発明は、シートパックを作製するための方法であって、以下のステップ：
(a) 天然で未処置の皮膚細胞において24時間にわたり可変的に発現される遺伝子を同定するステップ、
(b) 吸収層と、場合により吸収層に結合された不透過層を含むシートパックを形成するステップ、
(c) 吸収層に、皮膚に局所的に適用された場合に上記(a)の遺伝子を刺激する少なくとも1種の成分を含有するトリートメント組成物を含浸させるステップ；
(d) 天然で未処置の皮膚細胞において上記(a)の遺伝子が最大に発現される時間にシートパックを皮膚に適用するための使用説明書を含むパッケージに、シートパックをパッケージするステップ
を含む、上記方法も包含する。
【０１０５】
ステップ(a)において、天然で未処置の皮膚細胞において24時間にわたり可変的に発現される遺伝子は、実施例1に示される方法又は類似の方法によって同定することができる。
【０１０６】
(a)において同定される遺伝子が一旦決定されると、成分をスクリーニングして、様々な種類の細胞(例えば皮膚細胞)における遺伝子発現に対するそれらの効果を決定することができる。上記(a)において同定される同遺伝子の刺激において活性を示す成分が選抜される。次いで、その成分はトリートメント組成物に形成され、本明細書中にさらに記載されるとおりに吸収層に含浸される。シートパックは、不織布を所望の形に切断し、天然で未処置の皮膚細胞において(a)において同定される遺伝子が最大に発現される時間にシートパックを皮膚に適用するための使用説明書を含むパッケージ中にパッケージすることによって作製される。
【０１０７】
また本発明は、シートパックで皮膚を処置するための方法であって、以下のステップ：
(a) 吸収層と、場合によりそれに結合された不透過層を含むシートパックを形成するステップ；
(b) 吸収層に、天然の皮膚細胞に局所的に適用された場合に、天然の皮膚細胞において24時間にわたり可変的に発現される遺伝子を刺激する少なくとも1種の成分を含有するトリートメント組成物を含浸させるステップ、
(c) 天然で未処置の皮膚細胞において上記(b)の同遺伝子が最大に発現される時間に、前記シートパックを皮膚に局所的に適用するステップ
を含む、上記方法も対象とする。
【０１０８】
本発明の方法は、本明細書に記載されるとおりである。本発明は、以下の実施例と組み合わせてさらに説明されるが、この実施例は例示の目的のためにのみに示される。
【実施例】
【０１０９】
実施例1
正常ヒト表皮ケラチン生成細胞(NHEK)ドナーにおけるPER1遺伝子発現を、対照細胞及びオゾンに曝露された細胞においてレポーターアッセイを用いて試験した。NHEKを、黒壁96ウェルマイクロタイタープレートにおいて、EpiLife培地中3x104の濃度で3時間プレーティングした。次いで、細胞を、per1プロモーターエレメントの上流にライゲーションされたレポーター遺伝子としてのルシフェラーゼを含むプラスミドと共に添加物非含有培地においてトランスフェクトした。さらに、Plus試薬及びLipfectamine試薬(Invitrogen、Carlsbad、CA)の添加によりトランスフェクションを促進した。添加物非含有培地におけるトランスフェクションをさらに4時間行った。これが細胞を「飢餓状態」とし、これらの細胞がそれらの概日リズムに同期するようにさせる。トランスフェクション後、純粋な完全培地及びオゾンを含有する完全培地を添加し、16時間インキュベートした。次いで、ルシフェラーゼ試薬、Glo-Bright(Promega Corporation、ウィスコンシン州マディソン)を添加し、Lmax luminometer(Molecular Devices、カリフォルニア州サニーベール)中で発光を測定する。結果は図5に示され、未処置細胞が24時間にわたって可変的なPer1活性を示す(最大活性は0時(夜)に生じ、12時間後(昼)にその最低レベルまでゆっくりと低下し、その後24時間で再び増加する)ことを示す。オゾン処置細胞は、0時間、6時間、及び12時間でper1活性の低下を示し、オゾンの毒作用に対する細胞安定化は、24時間までに安定する。この結果は、NHEKにおけるper1遺伝子発現の関数としての未処置細胞の正常な概日リズムを示す。
【０１１０】
再度試験を実施し、さらに、per1遺伝子活性を有するペプチドについて試験した。結果は図6に示される。0時に同期させた、未処置細胞、トリペプチド-32で処置した細胞、オゾンで処置した細胞、及びオゾンとトリペプチド-32で処置した細胞は、トリペプチド-32がper1遺伝子活性化因子であり、未処置細胞においてper1遺伝子発現を増加させること；さらにこの効果が、オゾンで処置した細胞中に見られる悪影響を改善することを明らかに示す。6時間及び12時間で、オゾン処置を伴うトリペプチド-32処置細胞及びオゾン処置を伴わないトリペプチド-32処置細胞は、未処置細胞及びオゾンのみで処置した細胞と比較した場合に、改善されたper1遺伝子発現を示す。24時間で、オゾン及びトリペプチド-32で処置した細胞は最高レベルのper1遺伝子発現を示し、未処置細胞、トリペプチド-32処置細胞、及びオゾン処置細胞は全て、より少ない、及びほぼ同等のPER1発現を示した。
【０１１１】
両試験において、NHEKが全てそれらの概日リズムに関して同期し、同時にper1を発現するように、試験の開始時点(0時間)にNHEKを処置した。24時間にわたるper1遺伝子発現のレベルは、12時間で(正午に相当)その最低点まで低下した。その後per1活性は24時間で増加した。しかしながら、0時に同期させた細胞は、全てがそれらの同期性を直列に維持していたわけではなく、それらの概日経路が分岐し始めたため、per1遺伝子発現の増加は、0時間目のper1遺伝子発現より少なかった。結果は、24時間にわたる細胞の自然な概日リズム、及びper1の発現が24時間サイクルに一致する時間(通常は夜)に増加することを示す。
【０１１２】
実施例2
トリートメント組成物を以下のとおりに調製した：
【０１１３】
【表１】
0006600073.tif 000002
【０１１４】
組成物は、上記の成分を組み合わせて十分に混合することによって調製した。
【０１１５】
実施例3
45〜65％(55％)パルプ、25〜45％(35％)レーヨン、及び5〜15％(10％)ポリエステル(不織布KP9650、三昭紙業株式会社(Sansho Shigyo Co. Ltd)、土佐市、高知県、日本)を含む不織布を、図3に示されるように、目、鼻及び口用の穴を有するフェイスマスク用のパターンに切断した。第2のフェイスマスクを、アルミニウム及びアルミニウム合金(約99.30％以上のアルミニウム、それぞれ0.7％以下のシリコン及び鉄、0.1％以下の銅、0.05％以下のマンガン、0.05％以下のマグネシウム及び0.05％以下の亜鉛)を含むアルミ箔(東洋アルミニウム株式会社(Toyo Aluminum KK)、大阪府、日本)と、同不織布との積層体を作製することによって作製した。1つのスプール上に不織布をロードした。2番目のスプール上にアルミ箔をロードした。低密度ポリエチレン(ペトロテン(Petrothene)、東ソー株式会社(Tosoh Corporation)、東京、日本)を含有する押出機が、2枚のフィルム間に上記の樹脂を押出し、これを図2に示されるとおり、圧力結合ローラーと冷却ローラーとの間で圧縮した。図2と同じ設計の第2のシートパックを積層化フィルムから切り出した。実施例2の組成物を、両シートマスクの不織層に含浸した。
【０１１６】
次いで、上記のマスクを、皮膚への浸透におけるそれらの有効性について皮膚モデル上で試験した。
【０１１７】
フルオレセイン皮膚モデル試験
EFT-400皮膚モデルを通した培地へのフルオレセインの移行を、特定の時点(t=0分、15分、30分、45分、60分、90分、120分、150分、180分)で蛍光プレートリーダーを用いて測定し、結果を比較した。マスクに起因するより多くの浸透効果は、培地へのより多くのフルオレセインの移動を示唆していた。
【０１１８】
材料：
・EFT-400生皮膚等価物：Mattek；EFT-400；ロットNo. 17586；キットE(「LSE」)。
・EFT-400培地：Mattek；EFT-400-asy；ロットNo. 092914GSA。
・フルオレセイン：ベンダー：SigmaカタログNo. F6377-100G ロットNo. 061M0048V
・DPBS(ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水)：ベンダー：Corning CellgroカタログNo. 21-0341-CV ロットNo. 21031456。
・提供されたマスク：
・55+/-5％パルプ、35+/-5％レーヨン、及び10％+/-5％ポリエステルを含む不織布に由来する吸収層のみを有するフェイスマスク。不織布は、三昭紙業株式会社から購入した。
【０１１９】
上記と同じ吸収層、さらに、約7マイクロンの厚さを有する金属アルミ箔(東洋アルミニウム株式会社、大阪府、日本から購入)の不透過層を有するフェイスマスク。上記の2層を、本明細書中に記載されるとおりに低密度ポリエチレンで共に結合した。
・皮膚生検パンチ8mm(マスクから8mmの丸円片を切り出してEFT-400の内ウェルに適合させるため)。
【０１２０】
試験したサンプル：n=2
・ブランク - LSE(生皮膚等価物)に何も適用しなかった。
・25μl DPBS単独を、LSEに局所的に適用した。
・25μlのフルオレセイン(＠DPBS中100ppm希釈)を、LSEに局所的に適用した。
・吸収層単独マスクを、25μlのフルオレセイン(@100ppm)を配置したLSE上に重ねた。
・吸収層と不透過層の積層体のマスクを、25μlのフルオレセイン(@100ppm)を配置したLSE上に重ねた。
【０１２１】
手順
2.5ml培地(EFT-400)を構築して供給し、標準的な条件(5％CO2/37℃/100％湿度)で一晩インキュベートした。MatTek’s EpiDerm Full Thickness 400(EFT-400)使用プロトコルのとおりにLSEを維持した。
【０１２２】
1. 既存の培地を吸出し、LSEを1ウェル当たり2.5mlの培地でリフレッシュした。
2. 8mm生検パンチを用いて、上記のとおりに提供されたサンプルから小円を適切に切り出した。
3. 25μlのDPBSを、指定ウェル上のLSE上にピペッティングした。
4. 25μlのDPBS中フルオレセイン単独(100ppm)をLSE上にピペッティングした。
5. ダイカットされた吸収層単独円をLSEウェル中に配置し、25μlのDPBS中100ppmフルオレセインをマスクの不織布上にピペッティングし、DPBS単独(対照)を含むウェルでもピペッティングした。
6. ダイカットされた吸収層と不透過層の積層体を取り出した。円片をウェルの上で保持しながら、吸収層を25μlのDPBS中100ppmフルオレセインで飽和させた。次いで、ダイカットマスク片の浸漬ディスクを、浸漬側を下にしてEFTウェルに急速に適用した。
7. 以下に示されるとおり、様々な時点で上清をLSEのウェル底から引き出し、最終読み取り(t=3時間)後に、プレートリーダーを介した蛍光分析を用いて読んだ。
i. 使用した設定は、底読み取り(Bottom Read Ex)：494、発光(em)：521、カットオフ(Cutoff)：515であった。
【０１２３】
3時間時点(0分、15分、30分、45分、60分、90分、120分、150分、及び180分)に従って、各時点の250μlの上清を回収し、蛍光プレート読み取り用に0.5μlのマイクロ遠心分離管に保存した(光から保護して4℃にて保存)。
【０１２４】
EFT-400-ASY培地中で希釈した100ppmフルオレセインの連続希釈を使用し、100μlの各希釈を以下のテンプレートのとおりに96ウェルプレートにピペッティングして用いて標準曲線を作成した。2つのプレートを作製した：1枚のプレートは標準曲線測定用で、1枚は試験サンプル用であった。
【０１２５】
標準曲線サンプルの調製 (n=2)：
【０１２６】
8本の1.5μlエッペンドルフチューブを利用して、連続希釈セットを作成した：
・1,000μlの培地EFT-400培地中100ppmフルオレセインをチューブNo. 1にピペットする
・チューブ2〜8には、500μlのEFT-400-ASY培地単独を加える。
・チューブNo. 1から開始して、500μlの100ppmフルオレセインをチューブ1からチューブ2に移し、ピペットアップ及びダウンして徹底的に混合し、チューブNo. 2において最終濃度50ppmを作出する。
・次いで、徹底的に混合した後、チューブNo. 2から500μlをピペットしてチューブNo. 3に送り、ピペットアップ及びダウンして徹底的に混合する。チューブNo. 3において最終濃度25ppmを作出する。
・この連続移動を残りのチューブについて継続し、各連続希釈は後続のチューブの濃度を半分に低下させる。
・各チューブから得られた1ウェル当たり100μlの溶液を、96ウェルプレートの対応するウェルにピペットする。
【０１２７】
各時点における各サンプルを有する第2のプレートを作成し、標準曲線の直後に読み取る。
100μl n=1。
【０１２８】
時間-サンプル
A = ウェルに何も入っていない
B = ウェルに何も入っていない
C = 25μl DPBS単独
D = 25μl DPBS単独のウェル
E = 25μlのDPBS中100ppmフルオレセインのウェル
F = 25μlのDPBS中100ppmフルオレセインのウェル
G = 25μlの吸収層単独上100ppmフルオレセインのウェル
H = 25μlの吸収層単独上100ppmフルオレセインのウェル
I = 25μlのフルマスク上100ppmフルオレセインのウェル
J = 25μlのフルマスク上100ppmフルオレセインのウェル
【０１２９】
結果が計算され、図7にグラフで示される。吸収層に結合された金属箔層の積層体を含むシートマスクは、不織層吸収層のみを含むマスクと比較した場合に一貫して高められた皮膚浸透を示した。「皮膚浸透」は、組成物中に存在する成分が皮膚へ実際に吸収されたことを意味する。不透過層は、使用期間中の皮膚からのトリートメント組成物の蒸発を低下させる場合もあれば、低下させない場合もあるが、これは必ずしも浸透と相関していない。例えば、トリートメント組成物は、皮膚表面上に単に表面的に残っていてもよい。
【０１３０】
本発明は好ましい実施形態に関して記載されているが、これは、本発明の範囲を示される特定の形態に限定することを意図するものではなく、反対に、添付の請求項によりに定義される本発明の精神及び範囲に包含されるような代替、改変、及び等価物を網羅することが意図される。本発明の様々な実施形態を以下に示す。
１．皮膚に局所的に適用された場合に、天然で未処置の皮膚細胞において24時間にわたり可変的に発現される遺伝子を刺激する少なくとも1種の成分を含有するトリートメント組成物を含浸させた吸収層を含むシートパックであって；前記シートパックが、天然で未処置の皮膚細胞において前記成分により刺激される同遺伝子が最大に発現される24時間以内の選択時間に前記シートパックを皮膚に局所的に適用するための使用説明書と共にパッケージに収容されている、前記シートパック。
２．天然で未処置の皮膚細胞において可変的に発現される遺伝子が、ピリオド遺伝子1、2、又は3(PER1、2、3)；概日運動出力サイクル異常(CLOCK)遺伝子；脳及び筋肉アリール炭化水素受容体核内輸送体(BMAL)遺伝子；又はクリプトクロム概日遺伝子(CRY)の1つ以上である、上記１に記載のシートパック。
３．シートパックが、吸収層に結合された不透過層を有する積層体形態である、上記２に記載のシートパック。
４．吸収層が不織布であり、不透過層が金属箔である、上記３に記載のシートパック。
５．吸収層が、以下の仕様：
(a) ラローズ法による測定から5秒後に1グラム当たり0.03〜2.5mL/グラムの水を吸収する、
(b) 厚さ0.1〜1.0mm、
(c) 屈曲抵抗性1.0〜2.0mm.m2/グラム、
(d) ドレープ係数1〜70％、
(e) KES屈曲剛性B値0.20gf/cm2/cm以下；又は
(f) 摩擦係数0.45MIU未満
の1つ以上を有する不織布である、上記４に記載のシートパック。
６．不織布が、綿、レーヨン及び合成繊維の混合物を含む、上記５に記載のシートパック。
７．不織布が、25〜75％のパルプ(綿)、10〜50％のレーヨン、及び2〜15％のポリエステルを含む、上記６に記載のシートパック。
８．不透過層が、以下の仕様：
(a) 約98〜100％のアルミニウム、
(b) 融点650℃超、
(c) 比重2.5〜3.0、
(d) 厚さ2〜15マイクロン
の1つ以上を有する金属箔である、上記５に記載のシートパック。
９．吸収層が、融点221〜248℃及び比重915〜935kg/m3を有する合成ポリマーである結合剤により不透過層に結合されている、上記４に記載のシートパック。
１０．不透過層が、同じ吸収層を含むが吸収層に結合された不透過層は含まないシートパックによる処置面へのトリートメント組成物の皮膚浸透と比較した場合に、トリートメント組成物が処置面へのトリートメント組成物の皮膚浸透において少なくとも10％の改善を示すようにさせる、上記４に記載のシートパック。
１１．吸収層が、低密度ポリエチレンである結合剤により不透過層に結合されている、上記４に記載のシートパック。
１２．可変的に発現される遺伝子を刺激する成分が、スキントリートメント活性物質でもある、上記１に記載のシートパック。
１３．トリートメント組成物が、さらなるスキントリートメント活性物質を含有する、上記１に記載のシートパック。
１４．CLOCK、PER、CRY、又はBMALの活性化因子が、以下：
チコリ酸、
エキナセア抽出物、
トリペプチド-32、
テトラペプチド-26；又は
オートファジー活性化因子
の1つ以上である、上記２に記載のシートパック。
１５．さらなるスキントリートメント活性物質が、DNA修復酵素、プロバイオティクス微生物、プロテアソーム活性化因子又はそれらの組み合わせである、上記１２に記載のシートパック。
１６．顔又は身体の皮膚を処置するための、上記１に記載のシートパック。
１７．使用説明書が、シートパックを18:00〜24:00時の範囲の時間に皮膚に適用するためのものである、上記１に記載のシートパック。
１８．使用説明書が、シートパックを20:00〜24:00時の範囲の時間に皮膚に適用するためのものである、上記１５に記載のシートパック。
１９．使用説明書が、シートパックを18:00〜24:00時の範囲の時間に1〜60分間皮膚に適用するためのものである、上記１５に記載のシートパック。
２０．シートパックを作製するための方法であって、以下のステップ：
(a) 天然で未処置の皮膚細胞において24時間にわたり可変的に発現される遺伝子を同定するステップ、
(b) 吸収層と、場合により吸収層に結合された不透過層を含むシートパックを形成するステップ、
(c) 吸収層に、皮膚に局所的に適用された場合に上記(a)の遺伝子を刺激する少なくとも1種の成分を含有するトリートメント組成物を含浸させるステップ；
(d) 天然で未処置の皮膚細胞において上記(a)の遺伝子が最大に発現される時間にシートパックを皮膚に適用するための使用説明書を含むパッケージに、前記シートパックをパッケージするステップ
を含む、前記方法。
２１．24時間にわたり可変的に発現される遺伝子が、18:00〜24:00時の範囲の時間に最大に発現され、PER、CLOCK、BMAL、又はCRYの1つ以上である、上記２０に記載の方法。
２２．シートパックで皮膚を処置するための方法であって、以下のステップ：
(a) 吸収層と、場合によりそれに結合された不透過層を含むシートパックを形成するステップ；
(b) 吸収層に、天然の皮膚細胞に局所的に適用された場合に前記天然の皮膚細胞において24時間にわたり可変的に発現される遺伝子を刺激する少なくとも1種の成分を含有するトリートメント組成物を含浸させるステップ、
(c) 天然で未処置の皮膚細胞において上記(b)の同遺伝子が最大に発現される時間に前記シートパックを皮膚に局所的に適用するステップ
を含む、前記方法。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【配列表】
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