(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉによる化合物、またはその薬学的に許容可能な塩であって、
【化１】
0006448651.tif 000008
式中、Ｒが、−Ｓ−ＣＨ３または−Ｃｌである、化合物。
【請求項２】
６−エトキシ−７−メトキシ−２−（２−メチルスルファニルフェニル）−３，１−ベンゾキサジン−４−オンである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
２−（２−クロロフェニル）−６−エトキシ−７−メトキシ−３，１−ベンゾキサジン−４−オンである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
医療における使用のための、請求項１乃至３のいずれかに記載の化合物。
【請求項５】
皮膚病の予防法、予防及び／又は処置に使用するための、請求項１乃至３のいずれかに記載の化合物。
【請求項６】
薬学的に許容可能なアジュバント、希釈剤及び／又は担体と組み合わせた請求項１乃至３のいずれかに記載の化合物を含む、医薬組成物。
【請求項７】
皮膚病の予防法、予防及び／又は処置に使用するための、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
皮膚病が炎症性皮膚疾患である、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
皮膚病が、ネザートン症候群、アトピー性皮膚炎、接触皮膚炎、湿疹、乾癬、ざ瘡、表皮過角化症、表皮肥厚症、表皮炎症、皮膚炎症およびそう痒症から選択される、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
皮膚病がネザートン症候群である、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
皮膚病の処置のための薬剤の製造のための請求項１乃至３のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項１２】
皮膚病が炎症性皮膚疾患である、請求項１１に記載の使用。
【請求項１３】
皮膚病が、ネザートン症候群、アトピー性皮膚炎、接触皮膚炎、湿疹、乾癬、ざ瘡、表皮過角化症、表皮肥厚症、表皮炎症、皮膚炎症およびそう痒症から選択される、請求項１１に記載の使用。
【請求項１４】
皮膚病がネザートン症候群である、請求項１１に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、皮膚プロテアーゼ、特にヒトのカリクレイン７（ＫＬＫ７）、ヒトのカリクレイン５（ＫＬＫ５）、およびヒトのカリクレイン１４（ＫＬＫ１４）の活性を阻害するための方法および組成物に関する。より具体的には、本発明は、皮膚病の処置のための、より具体的には、炎症性皮膚疾患、特にネザートン症候群の処置のための、ヒトの皮膚カリクレインの選択的阻害剤である、置換された３，１−ベンゾキサジン−４−オンの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＫＬＫ７（ｈＫ７、または角質層キモトリプシン酵素（ＳＣＣＥ）、Ｓｗｉｓｓｐｒｏｔ Ｐ４９８６２）は、キモトリプシンのような活性を示すカリクレイン遺伝子ファミリーのＳＩセリンプロテアーゼである。ＫＬＫ７は、主に皮膚において発現され、皮膚生理学において重要な役割を果たすように見える（Ｅｇｅｌｒｕｄ． １９９３． Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｔｒａｔｕｍ ｃｏｒｎｅｕｍ ｃｈｙｍｏｎ−ｙｐｔｉｃ ｅｎｚｙｍｅ： ａ ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ ｔｈａｔ ｍａｙ ｂｅ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｄｅｓｑｕａｍａｔｉｏｎ． Ｊ． Ｉｎｖｅｓｔ． Ｄｅｒｍａｔｏｌ． １０１， ２００−２０４； Ｓｋｙｔｔ ｅｔ ａｌ． １９９５． Ｐｒｉｍａｒｙ ｓｕｂｓｔｒａｔｅ ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ｏｆ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｈｕｍａｎ ｓｔｒａｔｕｍ ｃｏｒｎｅｕｍ ｃｈｙｍｏｔｒｙｐｔｉｃ ｅｎｚｙｍｅ． Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ ２１ １ ， ５８６−５８９； Ｙｏｕｓｅｆ ｅｔ ａｌ． ２０００． Ｔｈｅ ＫＬＫ７ （ＰＲＳＳ６） ｇｅｎｅ， ｅｎｃｏｄｉｎｇ ｆｏｒ ｔｈｅ ｓｔｒａｔｕｍ ｃｏｒｎｅｕｍ ｃｈｙｍｏｔｒｙｐｔｉｃ ｅｎｚｙｍｅ ｉｓ ａ ｎｅｗ ｍｅｍｂｅｒ ｏｆ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ ｇｅｎｅ ｆａｍｉｌｙ − ｇｅｎｏｍｉｃ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ， ｍａｐｐｉｎｇ， ｔｉｓｓｕｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｈｏｒｍｏｎａｌ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ． Ｇｅｎｅ ２５４， １ １９−１２８１）。
【０００３】
ＫＬＫ７は、落屑（ｄｅｓｑｕａｍａｔｉｏｎ）のプロセスにおける角質化した扁平上皮中の細胞間の凝集構造の分解に関係する。落屑プロセスは、十分に調節され、角質層の一定の厚さを維持するために角質細胞のデノボ生成と微妙に均衡を保っている。この点で、ＫＬＫ７は、コルネオデスモソームの（ｃｏｒｎｅｏｄｅｓｍｏｓｏｍａｌ）タンパク質、コルネオデスモシン（ｃｏｒｎｅｏｄｅｓｍｏｓｉｎ）およびデスモコリン１を開裂することができると報告されている（Ｓｉｍｏｎ ｅｔ ａｌ． ２００１． Ｒｅｆｉｎｅｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｒｎｅｏｄｅｓｍｏｓｉｎ ｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓ ｄｕｒｉｎｇ ｔｅｒｍｉｎａｌ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｅｐｉｄｅｒｍｉｓ ａｎｄ ｉｔｓ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｔｏ ｄｅｓｑｕａｍａｔｉｏｎ． Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２７６， ２０２９２−２０２９９； Ｃａｕｂｅｔ ｅｔ ａｌ． ２００４． Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｒｎｅｏｄｅｓｍｏｓｏｍｅ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｂｙ ｔｗｏ ｓｅｒｉｎｅ ｐｒｏｔｅａｓｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ ｆａｍｉｌｙ， ＳＣ ＴＥ／ＫＬＫ５／ｈＫ５ ａｎｄ ＳＣＣＥ／ＫＬＫ７／ｈＫ７． Ｊ． Ｉｎｖｅｓｔ． Ｄｅｒｍａｔｏｌ． １２２， １２３５−１２４４； Ｂｒａｔｔｓａｎｄ ｅｔ ａｌ． ２００５． Ａ ｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃ ｃａｓｃａｄｅ ｏｆ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓｔｒａｔｕｍ ｃｏｒｎｅｕｍ． Ｊ． Ｉｎｖｅｓｔ． Ｄｅｒｍａｔｏｌ． １２４， １９８−２０３）。さらに、２つの脂質プロセシング酵素、β−グルコセレブロシダーゼおよび酸性スフィンゴミエリナーゼは、ＫＬＫ７によって分解され得ることが示された（Ｈａｃｈｅｍ ｅｔ ａｌ． ２００５． Ｓｕｓｔａｉｎｅｄ ｓｅｒｉｎｅ ｐｒｏｔｅａｓｅｓ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｂｙ ｐｒｏｌｏｎｇｅｄ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｉｎ ｐＨ ｌｅａｄｓ ｔｏ ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｐｉｄ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅｓ ａｎｄ ｐｒｏｆｏｕｎｄ ａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｂａｒｒｉｅｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｔｒａｔｕｍ ｃｏｒｎｅｕｍ ｉｎｔｅｇｒｉｔｙ． Ｊ． Ｉｎｖｅｓｔ． Ｄｅｒｍａｔｏｌ． １２５， ５１０−５２０）。両方の脂質プロセシング酵素は、それらの基質、グルコシルセラミドおよびスフィンゴミエリンで同時分泌され（ｃｏ−ｓｅｃｒｅｔｅｄ）、これらの極性脂質前駆体を、それらのより非極性の生成物、例えばセラミドへと処理し、続いて細胞外のラメラ膜へと組み込まれる。ラメラ膜構造は、機能的な皮膚バリアにとって重要である。最終的に、ＫＬＫ７は、炎症促進性サイトカインのＰｒｏ−インターロイキン−１β（ＩＬ−１β）を活性化することが示された（Ｎｙｌａｎｄｅｒ−Ｌｕｎｄｑｖｉｓｔ ＆ Ｅｇｅｌｒｕｄ． １９９７． Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ａｃｔｉｖｅ ＩＬ−１β ｆｒｏｍ ｐｒｏ−ＩＬ−１ β ｃａｔａｌｙｚｅｄ ｂｙ ｓｔｒａｔｕｍ ｃｏｒｎｅｕｍ ｃｈｙｍｏｔｒｙｐｔｉｃ ｅｎｚｙｍｅ ｉｎ ｖｉｔｒｏ． Ａｃｔａ Ｄｅｒｍ． Ｖｅｎｅｒｅｏｌ． ７７， ２０３−２０６）。
【０００４】
幾つかの研究は、ＫＬＫ７の活性の増加を、アトピー性皮膚炎、乾癬またはネザートン症候群などの、炎症性皮膚疾患に関連付けている。ＫＬＫ７活性の増加は、結果として落屑の誤調節（ｍｉｓｓ−ｒｅｇｕｌａｔｅｄ）をもたらすコルネオデスモソームの制御されていない分解、結果としてラメラ膜構造の妨害（ｄｉｓｔｕｒｂｅｄ）をもたらす脂質プロセシング酵素の増強された分解、または炎症促進性サイトカインＩＬ−１βの制御されていない（不）活性化につながる恐れがある。これが皮膚バリア機能および炎症の低下（ｉｍｐａｉｒｅｄ）につながり得ることが以前に実証された（ＷＯ ２００４／１０８１３９）。
【０００５】
ＫＬＫ７活性は、幾つかのレベルで制御される。様々な因子が炎症性皮膚疾患におけるＫＬＫ７活性の増加の原因であるかもしれない。第１に、発現されているプロテアーゼの量は、遺伝因子による影響を受けるかもしれない。このような遺伝的つながり（ＫＬＫ７遺伝子における３’−ＵＴＲ中の多型性）が最近記載された（Ｖａｓｉｌｏｐｏｕｌｏｓ ｅｔ ａｌ． ２００４． Ｇｅｎｅｔｉｃ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ａｎ ＡＡＣＣ ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ３'ＵＴＲ ｏｆ ｔｈｅ ｓｔｒａｔｕｍ ｃｏｒｎｅｕｍ ｃｈｙｍｏｔｒｙｐｔｉｃ ｅｎｚｙｍｅ ｇｅｎｅ ａｎｄ ａｔｏｐｉｃ ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ． Ｊ． Ｉｎｖｅｓｔ． Ｄｅｒｍａｔｏｌ． １２３， ６２−６６．）。著者は、カリクレイン７遺伝子の３’−ＵＴＲ中の記載された４回の塩基対の挿入が、ＫＬＫ７ ｍＲＮＡを安定させ、結果としてＫＬＫ７の過剰発現をもたらすと仮説した。第２に、ＫＬＫ７は、ラメラ体を介して酵素前駆体として角質層細胞外空間へと分泌されて、自己活性化することができないため、別のプロテアーゼ、例えばＫＬＫ５によって活性化される必要がある（上記のＣａｕｂｅｔ ｅｔ ａｌ． ）。そのような活性化酵素の制御されない活性は、結果としてＫＬＫ７の過剰活性化をもたらすかもしれない。第３に、活性化したＫＬＫ７は、ＬＥＫＴＩ、ＡＬＰまたはエラフィンのような天然阻害剤によって阻害され得る（Ｓｃｈｅｃｈｔｅｒ ｅｔ ａｌ． ２００５． Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎｓ ５ ａｎｄ ７ ｂｙ ｔｈｅ ｓｅｒｉｎｅ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｌｙｍｐｈｏ−ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ Ｋａｚａｌ−ｔｙｐｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ （ＬＥＫＴＩ）． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ３８６， １ １７３−１ １８４； Ｆｒａｎｚｋｅ ｅｔ ａｌ． １９９６． Ａｎｔｉｌｅｉｉｋｏｐｒｏｔｅａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｓｔｒａｔｕｍ ｃｏｒｎｅｉｉｍ ｃｈｙｍｏｔｒｙｐｔｉｃ ｅｎｚｙｍｅ − Ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｆｏｒ ａ ｒｅｇｕｌａｔｉｖｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｉｎ ｄｅｓｑｕａｍａｔｉｏｎ． Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２７１ ， ２１８８６−２１８９０）。発現の減少またはそのような阻害剤の欠如は、結果としてＫＬＫ７活性の増強をもたらすかもしれない。
【０００６】
ＬＥＫＴＩをコード化するスピンクの遺伝子中の突然変異がネザートン症候群の原因であること （Ｄｅｓｃａｒｇｕｅｓ ｅｔ ａｌ． ２００５． Ｓｐｉｎｋ５− ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ ｍｉｃｅ ｍｉｍｉｃ Ｎｅｔｈｅｒｔｏｎ ｓｙｎｄｒｏｍｅ ｔｈｒｏｕｇｈ ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｄｅｓｍｏｇｌｅｉｎ １ ｂｙ ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｈｙｐｅｒａｃｔｉｖｉｔｙ． Ｎａｔ− Ｇｅｎｅｔ． ３７， ５６−６５）および遺伝子中の単一点突然変異がアトピー性皮膚炎に関連していること（Ｗａｌｌｅｙ ｅｔ ａｌ． ２００１． Ｇｅｎｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｉｎ Ｎｅｔｈｅｒｔｏｎ ａｎｄ ｃｏｍｍｏｎ ａｔｏｐｉｃ ｄｉｓｅａｓｅ． Ｎａｔ． Ｇｅｎｅｔ． ２９， １７５−１７８； Ｎｉｓｈｉｏ ｅｔ ａｌ． ２００３． Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｉｎ ｔｈｅ ＳＰＩＮＫ５ ｇｅｎｅ ａｎｄ ａｔｏｐｉｃ ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｊａｐａｎｅｓｅ． Ｇｅｎｅｓ Ｉｍｍｕｎ． ４， ５１５−５１７）が分かった。最後に、ＫＬＫ７の活性を制御する別のレベルは、ｐＨである。ＫＬＫ７は、中性からわずかにアルカリ性の至適ｐＨを有し、皮膚の最内側層から最外層まで中性から酸性のｐＨ勾配がある。石鹸のような環境要因は、ＫＬＫ７の至適ｐＨへの角質層の最外層におけるｐＨ増加を結果としてもたらすかもしれず、それによってＫＬＫ７活性を増加させる。
【０００７】
ＫＬＫ７の活性の増加が炎症性皮膚疾患に関連するという仮説は、以下の研究によって支持されている：第１に、ネザートン症候群の患者は、セリンプロテアーゼ活性の表現型依存性の増加、コルネオデスモソームの減少、脂質プロセシング酵素、β−グルコセレブロシダーゼおよび酸性スフィンゴミエリナーゼの減少、およびバリア機能の低下を示す（Ｄｅｓｃａｒｇｕｅｓ ｅｔ ａｌ． ２００６． Ｃｏｒｎｅｏｄｅｓｍｏｓｏｍａｌ ｃａｄｈｅｒｉｎｓ ａｒｅ ｐｒｅｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｔａｒｇｅｔｓ ｏｆ ｓｔｒａｔｕｍ ｃｏｒｎｅｕｍ ｔｒｙｐｓｉｎ− ａｎｄ ｃｈｙｍｏｔｒｙｐｓｉｎ−ｌｉｋｅ ｈｙｐｅｒａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ Ｎｅｔｈｅｒｔｏｎ ｓｙｎｄｒｏｍｅ． Ｊ． Ｉｎｖｅｓｔ． Ｄｅｒｍａｔｏｌ． １２６， １６２２−１６３２； Ｈａｃｈｅｍ ｅｔ ａｌ． ２００６． Ｓｅｒｉｎｅ ｐｒｏｔｅａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｒｅｓｉｄｕａｌ ＬＥＫＴＩ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｉｎ Ｎｅｔｈｅｒｔｏｎ ｓｙｎｄｒｏｍｅ． Ｊ． Ｉｎｖｅｓｔ． Ｄｅｒｍａｔｏｌ． １２６， １６０９−１６２１．）。第２に、ＫＬＫ７を過剰発現する遺伝子組み換えマウスは、アトピー性皮膚炎の患者に見られる皮膚表現型に類似した皮膚表現型を示す（Ｈａｎｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ． ２００２． Ｅｐｉｄｅｒｍａｌ Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｓｔｒａｔｕｍ Ｃｏｒｎｅｕｍ Ｃｈｙｍｏｔｒｙｐｔｉｃ Ｅｎｚｙｍｅ ｉｎ Ｍｉｃｅ： Ａ Ｍｏｄｅｌ ｆｏｒ Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｉｔｃｈｙ Ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ． Ｊ． Ｉｎｖｅｓｔ． Ｄｅｒｍａｔｏｌ． １ １８， ４４４−４４９； Ｎｙ ＆ Ｅｇｅｌｒｕｄ． ２００３． Ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｍｉｃｅ ｏｖｅｒ−ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ａ ｓｅｒｉｎｅ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｉｎ ｔｈｅ ｓｋｉｎ： ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｏｆ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ｇａｍｍａ−ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ＭＨＣ ＩＩ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｂｙ ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅｓ． Ａｃｔａ Ｄｅｒｍ． Ｖｅｎｅｒｅｏｌ． ８３， ３２２−３２７； Ｎｙ ＆ Ｅｇｅｌｒｕｄ． ２００４． Ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｈｙｐｅｒｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｓｋｉｎ ｂａｒｒｉｅｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｉｎ ｍｉｃｅ ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ｓｔｒａｔｕｍ ｃｏｒｎｅｕｍ ｃｈｙｍｏｔｉｙｐｔｉｃ ｅｎｚｙｍｅ． Ａｃｔａ Ｄｅｒｍ． Ｖｅｎｅｒｅｏｌ． ８４， １８− ２２）。第３に、アトピー性皮膚炎および乾癬の患者の皮膚におけるＫＬＫ７のレベルの上昇が記載された（Ｅｋｈｏｌｍ ＆ Ｅｇｅｌｒｕｄ． １９９９． Ｓｔｒａｔｕｍ ｃｏｒｎｅｉｉｍ ｃｈｙｍｏｔｒｙｐｔｉｃ ｅｎｚｙｍｅ ｉｎ ｐｓｏｒｉａｓｉｓ． Ａｒｃｈ． Ｄｅｒｍａｔｏｌ． Ｒｅｓ． ２９１ ， １９５−２００）。それ故、ＫＬＫ７は、アトピー性皮膚炎、乾癬またはネザートン症候群のような炎症性皮膚疾患の処置の標的であると考えられ、その特異的阻害剤が必要とされている。
【０００８】
ネザートン症候群を患う患者が重度に損傷した皮膚バリアを有しているため、治療上活性な化合物の局所投与もまた、結果として、患者への化合物の全身曝露をもたらすだろう。したがって、プロテアーゼの望まれない全身阻害による全身作用のリスクなしに、ネザートン症候群の処置に使用することができる皮膚プロテアーゼに選択的な阻害剤を特定する必要がある。
【０００９】
ＫＬＫ７、ＫＬＫ５、およびＫＬＫ１４は、ヒトの皮膚の角質層中のタンパク質分解カスケードの一部であると考えられる（Ｂｒａｔｔｓａｎｄ ｅｔ ａｌ． ２００５． Ａ ｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃ ｃａｓｃａｄｅ ｏｆｋａｌｌｉｋｒｅｉ ｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓｔｒａｔｕｍ ｃｏｒｎｅｕｍ． Ｊ Ｉｎｖｅｓｔ Ｄｅｒｍａｔｏｌ １２４， １９８−２０３）。
【００１０】
したがって、ＫＬＫ７だけでなくＫＬＫ５およびＫＬＫ１４に対しても活性である阻害剤を特定することが有用であろう。
【００１１】
ＷＯ ２００４／１０８１３９は、特定の置換されたベンゾオキサジノンおよびチエノオキサジノンの化合物をＫＬＫ７の阻害剤として記載しているが、記載された化合物に対する選択性のデータについては報告していない。
【発明の概要】
【００１２】
本発明者は、皮膚プロテアーゼに選択的な阻害剤を特定することができ、ＫＬＫ７、ＫＬＫ５、およびＫＬＫ１４の活性が、以下の式Ｉによる化合物によって選択的に阻害され得ることを発見した：
【００１３】
【化１】
0006448651.tif 000002
式中、Ｒは、−Ｓ−ＣＨ３または−Ｃｌである。
【００１４】
前記化合物は、ネザートン症候群などの炎症性皮膚疾患の病態生理に関係する、皮膚プロテアーゼＫＬＫ７、ＫＬＫ５、およびＫＬＫ１４に対する選択性などの、幾つかの好適な特性を示し、他のプロテアーゼに対する阻害活性を有していないか、または低い阻害活性しか有していない。
【００１５】
したがって、本発明は、以下の式１による化合物を提供し；
【００１６】
【化２】
0006448651.tif 000003
式中、Ｒは、−Ｓ−ＣＨ３または−Ｃｌ、あるいはその薬学的に許容可能な塩である。
【００１７】
本発明はさらに、医療における使用のための、式Ｉによる化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【００１８】
化合物は、
６−エトキシ−７−メトキシ−２−（２−メチルスルファニルフェニル）−３，１−ベンゾキサジン−４−オン、または
２−（２−クロロフェニル）−６−エトキシ−７−メトキシ−３，１−ベンゾキサジン−４−オンであり得る。
【００１９】
本発明はさらに、皮膚病の予防法、予防及び／又は処置に使用するための、式Ｉによる化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【００２０】
本発明はさらに、薬学的に許容可能なアジュバント、希釈剤及び／又は担体と組み合わせた式Ｉによる化合物を含む医薬組成物を提供する。
【００２１】
本発明はさらに、皮膚病の予防法、予防及び／又は処置に使用するための、本発明による医薬組成物を提供する。
【００２２】
本発明はさらに、皮膚病の処置のための薬剤の製造のための、式Ｉによる化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用に関する。
【００２３】
本発明はさらに、必要としている被験体に対する式Ｉによる治療上活性な量の化合物の投与を含む、皮膚病の予防法、予防及び／又は処置のための方法を提供する。
【００２４】
皮膚病は、炎症性皮膚疾患であり得る。皮膚病は、ネザートン症候群、アトピー性皮膚炎、接触皮膚炎、湿疹、乾癬、ざ瘡、表皮過角化症、表皮肥厚症、表皮炎症、皮膚炎症およびそう痒症から選択され得る。処置される被験体は、ヒト、イヌ、ネコまたはウマなどの哺乳動物であり得る。
【００２５】
定義
本明細書で使用されるように、用語「薬学的に許容可能な塩」は、酸付加塩および塩基付加塩を含む。そのような塩は、例えば、随意に溶媒中で、または塩が不溶性である培地中で、本発明の化合物の遊離酸または遊離塩基の形態を適切な酸または塩基の１つ以上の同等物と反応させ、その後、標準技術を使用して（例えば真空内で又は凍結乾燥によって）、前記溶媒、または前記培地を除去することによって、従来の手段によって形成され得る。塩はまた、適切なイオン交換樹脂を使用して、塩形態の本発明の化合物の対イオンを別の対イオンと交換することによって調製されてもよい。
【００２６】
本明細書の文脈において、用語「処置する（ｔｒｅａｔ）」はまた、他に特定の指示がない限り、さらに「予防（ｐｒｏｐｈｙｌａｘｉｓ）」を含む。本発明の文脈内の用語「処置する」はさらに、包含する、急性または慢性の先行する疾患状態、あるいは再発性の疾病のいずれかを緩和するために、本発明の有効な量の化合物を投与することを包含する。この定義はまた、再発性の疾病の予防のための予防的治療および慢性障害のための継続的治療を包含する。
【００２７】
本発明の化合物は、経口、筋肉内、皮下、局所、鼻腔内、腹腔内、胸腔内、静脈内、硬膜外、鞘内、脳室内を含む任意の経路によって、および関節への注入によって、従来の医薬組成物の形態で投与されてもよい。
【００２８】
本発明の一実施形態では、投与経路は局所であってもよい。
【００２９】
投与量は、投与経路、疾患の重症度、患者の年齢および体重、および特別の患者のための最も適切な個々のレジメンおよび投与量レベルを決定するときに主治医によって通常考慮される、他の因子に依存するだろう。
【００３０】
本発明の化合物から医薬組成物を調製するために、不活性の、薬学的に許容可能な担体は、固体または液体のいずれかであり得る。固形製剤（Ｓｏｌｉｄ ｆｏｒｍ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ）は、粉末剤、錠剤、分散可能な果粒剤、カプセル剤、カシェ剤、および坐剤を含む。
【００３１】
固体担体は、１つ以上の物質であり得、希釈剤、香味剤、可溶化剤、滑沢剤、懸濁化剤、結合剤、または錠剤崩壊剤としても作用し得、また封入材料（ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｎｇ  ｍａｔｅｒｉａｌ）でもあり得る。
【００３２】
粉末剤では、担体は、微粉固体であり、これは、本発明の微粉化合物、または有効成分と混合している。錠剤では、有効成分は、適切な比率で必要な結着性を有している担体と混合され、所望の形状およびサイズに圧縮される。
【００３３】
坐剤組成物の調製のために、脂肪酸グリセリドとココアバターの混合物などの低融点ワックスは、最初に溶かされ、有効成分が例えば撹拌によってそこに分散される。その後、溶かされた均質の混合物は、好適にサイズが合わされた鋳型へと注がれ、冷却されて、凝固される。
【００３４】
適切な担体は、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ラクトース、糖、ペクチン、デキストリン、デンプン、メチルセルロース、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、低融点ワックス、ココアバターなどである。
【００３５】
用語「組成」は、有効成分が（他の担体の有無に関わらず）担体に包まれ、それ故それと関連性を持つカプセルを提供する担体として、封入材料を用いる有効成分の製剤も含むように意図される。同様に、カシェ剤も含まれる。
【００３６】
錠剤、粉末剤、カシェ剤、およびカプセル剤は、経口投与に適した固体剤形として使用され得る。
【００３７】
液状組成物は、溶液、懸濁液、およびエマルジョンを含む。例えば、活性化合物の滅菌水またはプロピレングリコール溶液は、非経口投与に適した液状製剤であり得る。液状組成物はまた、水性のポリエチレングリコール溶液中で製剤され得る。
【００３８】
経口投与のための水溶液は、有効成分を水中に溶解し、必要に応じて適切な着色剤、香味剤、安定剤、および増粘剤を加えることによって調製され得る。経口用途のための水溶液は、 天然合成ゴム、樹脂、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および医薬製剤の技術分野に既知の他の懸濁化剤などの粘着性物質とともに、微粉有効成分を水中に分散することによって作られ得る。
【００３９】
投与の様式によって、医薬組成物は、本発明の一実施形態に従う本発明の化合物の０．０５重量％乃至９９重量％（重量パーセント）、他の実施形態に従う０．１０重量％乃至５０重量％を含み、すべての重量パーセントは、全組成に基づいている。
【００４０】
本発明の実施のための治療上有効な量は、個々の患者の年齢、体重および反応を含む既知の基準の使用によって決定され得、当業者によって、処置されている又は予防されている疾患の文脈内で解釈され得る。
【００４１】
本発明による化合物を含む医薬組成物のための前述の主題は、本発明による組み合わせを含む医薬組成物についても同様に適用される。
【００４２】
本明細書に記載されるあらゆる方法または組成が、本明細書に記載される他の方法または組成に関して実施され得ることが熟慮される。
【００４３】
請求項及び／又は明細書における用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」とともに使用されるときの単語「ａ」または「ａｎ」の使用は、「１つ（ｏｎｅ）」を意味し得るが、「１つ以上」、「少なくとも１つ」、および「１つ又は１つを超える」の意味とも一致している。
【００４４】
本発明のこれらの及び他の実施形態は、以下の記載および添付の図面とともに考慮されたときに一層よく認識される且つ理解されるだろう。しかしながら、以下の記載が、本発明の様々な実施形態およびそれらの多数の具体的な詳細を示しながら、制限することなく実例によって与えられていることを理解されたい。多くの置換、変更、追加分及び／又は改変が、本発明の精神から逸脱することなく、本発明の範囲内でなされてもよく、本発明はそのような置換、変更、追加分及び／又は改変をすべて含んでいる。
【実施例】
【００４５】
＜実施例１＞
ヒトのプロテアーゼの阻害剤としての置換された３，１−ベンゾキサジン−４−オンの選択性
ヒトのプロテアーゼのパネル上の多くの置換された３，１−ベンゾキサジン−４−オンに対するＩＣ５０値を測定した。
【００４６】
ＫＬＫ７のアッセイ
材料：組換えのヒトのＫＬＫ７、Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ Ｓ−２５８６（Ｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃｓ， ｃａｔ． ｎｏ． ８２０８９４）のＫＬＫ７活性を、プレートリーダー（Ｓｐｅｃｔｒａｍａｘ）において４０５ｎｍで吸光度を測定することによって、９６ウェルのプレートにおいて、０μΜ、０．１μΜ、０．５μΜ、１．０μΜおよび５μΜの阻害剤の存在下で、終末濃度の２．５μｇ／ｍｌ（１００ｎＭ）のＫＬＫ７、１．０ｍＭの基質、５％のＤＭＳＯを用いて、１０ｍＭのＮａリン酸塩、ｐＨ７．２、０．５ＭのＮａＣｌにおいて３７℃で測定した。
【００４７】
ＫＬＫ５のアッセイ
材料：組換えのヒトのＫＬＫ５、Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ Ｓ−２２８８（Ｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃｓ， ｃａｔ． ｎｏ． ８２０８５２）のＫＬＫ５活性を、プレートリーダー（Ｓｐｅｃｔｒａｍａｘ）において４０５ｎｍで吸光度を測定することによって、９６ウェルのプレートにおいて、０μΜ、０．１μΜ、１．０μΜおよび１０μΜの阻害剤の存在下で、終末濃度の２．５μｇ／ｍｌのＫＬＫ５、１ｍＭの基質、５％のＤＭＳＯを用いて、０．１ＭのＴｒｉｓ、ｐＨ８．０、０．１５ＭのＮａＣｌにおいて３７℃で測定した。
【００４８】
ＫＬＫ１４のアッセイ
材料：組換えのヒトのＫＬＫ１４、Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ Ｓ−２３０２（Ｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃｓ， ｃａｔ． ｎｏ．８２０３４０）のＫＬＫ１４活性を、プレートリーダー（Ｓｐｅｃｔｒａｍａｘ）において４０５ｎｍで吸光度を測定することによって、９６ウェルのプレートにおいて、０μΜ、０．１μΜ、１．０μΜおよび１０μΜの阻害剤の存在下で、終末濃度の０．２６μｇ／ｍｌ（９４ｎＭ）のＫＬＫ１４、０．７５ｍＭの基質、５％のＤＭＳＯを用いて、０．１ｍＭのＴｒｉｓ、ｐＨ８．０、０．１５ＭのＮａＣｌにおいて３７℃で測定した。
【００４９】
カテプシンＧのアッセイ
材料：カテプシンＧ、１００ｍＵ（ＶＷＲ， Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ， ｃａｔ． ｎｏ． ２１９３７３）、Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ カテプシンＧ基質（ＶＷＲ， Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ， ｃａｔ． ｎｏ． ２１９４０７）のカテプシン活性を、プレートリーダー（Ｓｐｅｃｔｒａｍａｘ）において４０５ｎｍで吸光度を測定することによって、９６ウェルのプレートにおいて、０μΜ、０．１μΜ、１．０μΜおよび１０μΜの阻害剤の存在下で、終末濃度の１．５ｍＵ／ｍｌ（０．７５μｇ／ｍｌ、３２ｎＭ）のカテプシンＧ、０．７５ｍＭの基質、５％のＤＭＳＯを用いて、１０ｍＭのＮａリン酸塩、ｐＨ７．２、０．５ＭのＮａＣｌにおいて３７℃で測定した。
【００５０】
キモトリプシンのアッセイ
材料：キモトリプシン、ウシ、２５μｇ（Ｒｏｃｈｅ、シークエンスグレード）、Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ Ｓ−２５８６（Ｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃｓ， ｃａｔ． ｎｏ．８２ ０８ ９４）のキモトリプシン活性を、プレートリーダー（Ｓｐｅｃｔｒａｍａｘ）において４０５ｎｍで吸光度を測定することによって、９６ウェルのプレートにおいて、０μΜ、０．１μΜ、１．０μΜおよび１０μΜの阻害剤の存在下で、終末濃度の０．２μｇ／ｍｌ（６．８ｎＭ）のキモトリプシン、１ｍＭの基質、５％のＤＭＳＯを用いて、１０ｍＭのＮａリン酸塩、ｐＨ７．２、０．５ＭのＮａＣｌにおいて３７℃で測定した。
【００５１】
トリプシンのアッセイ
材料：トリプシン、１００μｇ（Ｒｏｃｈｅ、シークエンスグレード、Ｍｗ ２３５００）、Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ Ｓ−２２８８（Ｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃｓ， ｃａｔ． ｎｏ．８２０８５２）のトリプシン活性を、プレートリーダー（Ｓｐｅｃｔｒａｍａｘ）において４０５ｎｍで吸光度を測定することによって、９６ウェルのプレートにおいて、０μΜ、０．１μΜ、１．０μΜおよび１０μΜの阻害剤の存在下で、終末濃度の０．８μｇ／ｍｌ（３４ｎＭ）のトリプシン、１ｍＭの基質、５％のＤＭＳＯを用いて、１０ｍＭのＮａリン酸塩、ｐＨ７．２、０．５ＭのＮａＣｌにおいて３７℃で測定した。
【００５２】
トロンビンのアッセイ
材料：トロンビン（Ｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃｓ， ｃａｔ． ｎｏ．８２０７１２）、Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ Ｓ−２２８８（Ｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃｓ， ｃａｔ． ｎｏ．８２ ０８ ５２）のトロンビン活性を、プレートリーダー（Ｓｐｅｃｔｒａｍａｘ）において４０５ｎｍで吸光度を測定することによって、９６ウェルのプレートにおいて、０μΜ、０．１μΜ、１．０μΜおよび１０μΜの阻害剤の存在下で、終末濃度の１ｐｋａｔ／ｍｌ（０．０３μｇ／ｍｌ、８８ｐＭ）のトロンビン、０．５ｍＭの基質、５％のＤＭＳＯを用いて、５０ｍＭのＴｒｉｓ、ｐＨ８．３、１３０ｍＭのＮａＣｌにおいて３７℃で測定した。
【００５３】
【表１−１】
0006448651.tif 000004
【００５４】
【表１−２】
0006448651.tif 000005
【００５５】
表１で見られるように、化合物１（６−エトキシ−７−メトキシ−２−（２−メチルスルファニルフェニル）−３，１−ベンゾキサジン−４−オン）および化合物２（２−（２−クロロフェニル）−６−エトキシ−７−メトキシ−３，１−ベンゾキサジン−４−オン）のみが、望ましい選択性、即ち、ＫＬＫ７に対して０．１μΜより下のＩＣ５０、ＫＬＫ５およびＫＬＫ１４に対して１μΜより下のＩＣ５０、および試験される他のプロテアーゼに対して１０μΜを超えるＩＣ５０を有していることが分かった。
【００５６】
幾つかの化合物は、ＫＬＫ５およびＫＬＫ１４と同様にＫＬＫ７に対して強い阻害効果を有していることが分かったが、化合物１および２、即ち、本発明による化合物のみが、他のプロテアーゼに対して十分に低い阻害活性を有していることが実証可能であることに留意されるべきである。
【００５７】
化合物の置換（ｓｕｂｓｔａｔｉｏｎ）パターンの小さな変化でさえ、化合物の選択性に劇的に影響する。例えば、位置６でメトキシ置換されている化合物１２は、位置６でエトキシ置換されている化合物１と比較して、カテプシンＧおよびキモトリプシンに対して１０倍以上高い阻害活性（１０倍低いＩＣ５０として見られる）を示し、そのため化合物１２は、皮膚病の処置における使用に適していない。
【００５８】
要約すると、表１に示されたデータは、化合物１および２、即ち、本発明による化合物のみが、皮膚プロテアーゼＫＬＫ７、ＫＬＫ５、およびＫＬＫ１４に対して高い阻害活性を有して十分に選択的であり、一方で他のプロテアーゼに対して十分に低い阻害活性を有しており、そのため、これらは皮膚病の処置における使用に適していることを実証している。
【００５９】
＜実施例２＞
６−エトキシ−７−メトキシ−２−（２−メチルスルファニルフェニル）−３，１−ベンゾキサジン−４−オンの合成
【００６０】
【化３】
0006448651.tif 000006
【００６１】
＜実施例３＞
２−（２−クロロフェニル）−６−エトキシ−７−メトキシ−３，１−ベンゾキサジン−４−オンの合成。
実施例２と同じであるが、工程３において以下を用いている：
【００６２】
【化４】
0006448651.tif 000007