(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
カズノコの凍結乾燥物に対して超臨界二酸化炭素流体を用いて圧力１２〜１５ＭＰａ、温度４０〜８０℃の条件で連続抽出を行い、残渣を回収する工程を有する、コレステロール量を低減し、リン脂質結合型ｎ−３ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）およびリン脂質結合型ｎ−３イコサペンタエン酸（ＥＰＡ）の含有率を高めたカズノコ由来組成物の製造方法。
【請求項２】
コレステロールを２０〜９０質量％低減する請求項１に記載のカズノコ由来組成物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ホスファチジルコリン結合型ｎ−３ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）およびイコサペンタエン酸ｎ−３（ＥＰＡ）を含有し、コレステロールの量を低減したカズノコ由来の組成物の製造方法と、その方法から得られた組成物を含む機能性食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＤＨＡおよびＥＰＡのｎ−３系脂肪酸は、平成２４年度消費者庁から公表された「食品の機能性評価モデル」で唯一Ａ評価（心血管疾患リスク低減、血中中性脂肪低下作用、関節リューマチ症状緩和）を受けた物質である。
【０００３】
これらの脂肪酸はマグロ、カツオ、イワシなどの魚肉、廃棄物の魚頭、魚内臓から抽出して得られる。抽出法としては、例えば、熱水抽出（特許文献１）、遠心分離抽出（特許文献２）、溶剤抽出（特許文献３，４）、亜臨界水抽出（特許文献５）が知られている。これらの脂肪酸は、いずれもトリグリセリド（ＴＡＧ）結合型である。ＴＡＧ−ＤＨＡおよびＴＡＧ−ＥＰＡは脂肪分解酵素によりモノグリセリドとなり、ミセル形成を介した胆汁酸塩による乳化を経て小腸から吸収される。
【０００４】
それに対してカズノコ（ニシンの魚卵）に含まれるＤＨＡおよびＥＰＡはリン脂質結合型であり、特に主成分のホスファチジルコリン結合型ＤＨＡおよびＥＰＡは、胆汁に依存せずにミセルを形成して、小腸でホスホリパーゼによりリゾホスファチジルコリンとして吸収され、ＴＡＧ結合型より格段に吸収効率がよい。ホスファチジルコリン結合型ＤＨＡおよびＥＰＡは、魚卵以外では、アザラシ、オキアミに含有している。
【０００５】
カズノコのリン脂質はホスファチジルコリン（ＰＣ）が主成分であるので、ＰＣ−ＤＨＡより誘導されたＤＨＡ結合型リゾホスファチジルコリン（ＬＰＣ−ＤＨＡ）は脳関門を通過し、神経伝達物質コリンの前駆体を供給することができる。
【０００６】
このようにカズノコのＰＣ−ＤＨＡ、ＰＣ−ＥＰＡは魚肉、魚頭、魚内臓由来のＴＡＧ−ＤＨＡ、ＴＡＧ−ＥＰＡより優れた機能性を有しているが、抗メタボリックシンドローム用の機能性食品素材として開発されていないのは、魚油の原料になる魚肉、廃棄物の魚頭、魚内臓などに比べて原料が高価である他、コレステロール含有量が多いことも原因に挙げられる（非特許文献１）。
【０００７】
カズノコからの魚卵油（脂質）の抽出法としては、有機溶剤ヘキサン：エタノール（１：１）による抽出（非特許文献２）や、８５〜１００％エタノールによる抽出（特許文献６）などが知られているが、これらの方法ではコレステロールは選択的に低減されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開平１１−１０３８３０号公報
【特許文献２】特開２００４−９１５１４号公報
【特許文献３】特許２９９３２５３号公報
【特許文献４】特開２００４−９１６１６号公報
【特許文献５】特許４７３９２９７号公報
【特許文献６】特開２０１０−５３０５４号公報
【特許文献７】特公昭４６−４２９４４号公報
【特許文献８】特開昭４７−１９０６２号公報
【特許文献９】特開昭５４−７０４６９号公報
【特許文献１０】特許１４４５１７４号公報
【特許文献１１】特開昭５９−１４０２９９号公報
【特許文献１２】特開平０３−９８５４１号公報
【特許文献１３】特許３０８１０３８号公報
【特許文献１４】米国特許第３７１７４７４号公報
【特許文献１５】米国特許第４３３３９５９号公報
【特許文献１６】英国特許第２２３８４５６号公報
【特許文献１７】特許１９２１８９２号公報
【特許文献１８】特開平０５−２６８９１１号公報
【特許文献１９】特許１９９１１０号公報
【特許文献２０】特許３５５８４２３号公報
【特許文献２１】特開２００４−２６６３号公報
【特許文献２２】特開２００４−２６７６７号公報
【特許文献２３】特開２０１２−１７０４４１号公報
【特許文献２４】特許２９６３１５２号公報
【特許文献２５】特許３０８１６９２号公報
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Food Chemistry, 2006, 94, 61-7
【非特許文献２】J. Agric. Food Chem., 2006,54,3750〜55（PMID19127755）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
機能性に優れたＰＣ−ＤＨＡおよびＰＣ−ＥＰＡを含有するカズノコを用い、そのコレステロール量を低減することの報告はない。油脂からのコレステロール低減方法としては、リポ蛋白質を含有する鶏卵の乾燥黄身からコレステロールを低減する方法が知られている。例えば、非極性溶媒による抽出（特許文献７）、アセトンによる抽出（特許文献８）、ジメチルエーテルによる抽出（特許文献９）、超臨界二酸化炭素による抽出（特許文献１０〜１３）等である。また、液状卵黄からの脂質除去として、食用油との混合法（特許文献１４〜１６）、超臨界二酸化炭素による抽出（特許文献１７，１８）が知られている。しかし、鶏卵黄身のＤＨＡおよびＥＰＡはリン脂質結合型が少なく、これらの方法はＰＣ−ＤＨＡおよびＰＣ−ＥＰＡを多く含むカズノコには適応できない。
【００１１】
また、魚加工残渣の頭部、イカ等から溶剤抽出することによりリン脂質、ＤＨＡ、スフィンゴミエリンを多く含む組成物を製造する方法が知られているが（特許文献１９〜２３）、コレステロール量の低減はなされず、また溶剤除去の問題がある。
【００１２】
オキアミ油を超臨界二酸化炭素により抽出する方法が知られているが（特許文献２４，２５）、アスタキサンチン等色素分離が主目的で、コレステロールを低減することについては記載がない。
【００１３】
本発明は、ＰＣ−ＤＨＡおよびＰＣ−ＥＰＡを含有するカズノコを原料とし、有機溶媒を用いずにしかも環境に負担をかけない方法で効率よくコレステロールの量を低減した組成物を製造する方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明者らは、前記目的を達成するために検討した結果、超臨界二酸化炭素による抽出法を用いることによりカズノコのコレステロールを低減し、ＰＣ−ＤＨＡおよびＰＣ−ＥＰＡの含有率を増大させたカズノコ由来の組成物が得られることを見出した。
すなわち、本発明は以下からなる。
【００１５】
［１］カズノコの凍結乾燥物を超臨界二酸化炭素流体による抽出を行い残渣部を回収する工程を有する、コレステロール量を低減し、ＰＣ−ＤＨＡおよびＰＣ−ＥＰＡの含有率を高めたカズノコ由来組成物の製造方法。
［２］コレステロールを２０〜９０質量％低減する前記１に記載のカズノコ由来組成物の製造方法。
［３］前記１または２に記載の方法で得られたカズノコ由来組成物を含有する機能性食品。
［４］カプセルまたは錠剤である前記３に記載の機能性食品。
【発明の効果】
【００１６】
本発明は、カズノコから有機溶媒を用いずに安全な方法でコレステロール量を低減し、カズノコに特有のＰＣ−ＤＨＡおよびＰＣ−ＥＰＡの含有率を高めることができる。得られたカズノコ由来組成物は安全性に優れ、コレステロールの量は低減され、機能性の高いＰＣ−ＤＨＡ、ＰＣ−ＥＰＡの含有率が高いため、それを含む機能性食品として好適に用いることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】本発明で用いることのできる超臨界二酸化炭素抽出装置の模式図である。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
以下に本発明を説明する。
本発明においてカズノコの凍結乾燥物とは、カズノコの魚卵膜を破りその内容物を凍結乾燥してなるものをいう。より好ましくは塩蔵カズノコを流水で戻し、ミートチョッパー等により粉砕した後、濾過し、濾液を凍結乾燥してなるものをいう。
凍結乾燥物の組成は、水分約１〜２０質量％、蛋白質７０〜９０質量％、脂質１０〜２０質量％、炭水化物０．２〜１質量％、灰分１〜５質量％である。脂質中の約５０〜６０質量％がホスファチジルコリンであることが知られている。凍結乾燥物中のコレステロールは約１〜２質量％で、脂質１ｇ当たり約５０〜１５０ｍｇ含まれている。
【００１９】
このカズノコ凍結乾燥物の脂質中のコレステロールを超臨界二酸化炭素により抽出処理する。本発明において超臨界二酸化炭素とは、臨界温度および臨界圧力を超過した状態の流体であって３１℃以上、１０ＭＰａ上の状態にあるものをいう。抽出剤として用いる二酸化炭素はたとえ抽出物、抽出残渣に残留していても危険性は全くなく、安全であり機能性食品やサプリメントとして使用可能である。さらに二酸化炭素は臨界温度および臨界圧力が比較的低いので、温度、圧力を変化させることで溶解性を変えることができる。
【００２０】
抽出処理は図１に示すような超臨界二酸化炭素抽出装置を用いて行う。
好ましい圧力は１０〜１７ＭＰａ、より好ましくは１２〜１５ＭＰａであり、好ましい温度は圧力によって一概に言えないが４０〜８０℃、より好ましくは５０〜７０℃である。抽出時間は抽出槽容量と超臨界二酸化炭素流体のコレステロール溶解性、および流量に依存し、抽出槽容量の１０００〜１５００倍流す時間となる（Ｖ／Ｖｏ値１０００〜１５００、Ｖ／Ｖｏ：Ｖは抽出目的物が抽出されるまでの超臨界二酸化炭素流体量、Ｖｏは抽出槽容量）。
例えば、１２ＭＰａ，７０℃，５時間、Ｖ／Ｖｏ値１０８０（抽出槽が５０ｍＬの場合は流速３ｍＬ／ｍｉｎ）の下で抽出を行うと、コレステロールだけを選択的に抽出でき、残渣にコレステロールが２０〜３０％低減したＰＣ−ＤＨＡ、ＰＣ−ＥＰＡ含有の組成物を得ることができる。
また１５ＭＰａ，５０℃，５時間、Ｖ／Ｖｏ値１４４０（抽出槽が５０ｍＬの場合は流速４ｍＬ／ｍｉｎ）の条件で抽出を行うと、トリグリセライド（ＴＡＧ）を含んだコレステロールが多量に抽出され、残渣にコレステロールが７０〜９０質量％とＴＡＧが９〜１２質量％低減したＰＣ−ＤＨＡ、ＰＣ−ＥＰＡ含有の組成物を得ることができる。
【００２１】
本発明のカズノコ由来組成物は機能性食品とすることができ、これを摂取することによりコレステロールの摂取を抑えつつＰＣ−ＤＨＡおよびＰＣ−ＥＰＡを効果的に摂取することができる。本発明のカズノコ由来組成物は、カプセルに封入するか、錠剤状にすることにより容易に摂取可能である。カプセル封入および錠剤化は常法によることができる。
【実施例】
【００２２】
以下に、実施例及び比較例を挙げて本発明を説明するが、本発明は以下の記載により限定されるものではない。なお、下記例中の組成成分量はＢｌｉｇｈ＆Ｄｙｅｒ法で抽出しＴＬＣ分析（デンシトメーターにて濃度を測定）にて測定した。
【００２３】
実施例１
塩蔵カズノコを流水で洗浄し、ミートチョッパーで粉砕後、濾布で濾過し、濾過液を凍結乾燥し、カズノコ凍結乾燥物を得た。このカズノコ凍結乾燥物１ｇ中にはコレステロールが２０．３ｍｇ含まれていた。
このカズノコ凍結乾燥物２ｇを、図１に概略を示す超臨界二酸化炭素抽出装置（日本分光株式会社  ＳＣ−ＣＯ2  ２０８０  ｐｌｕｓ：抽出槽の容量は５０ｍＬ）を用いて、１２ＭＰａ，７０℃の条件下で抽出を行った。超臨界二酸化炭素の流速が抽出選択性に与える影響を調べたところ、下記表１の結果を得た。
すなわち、流速を４ｍＬ／ｍｉｎ以上にするとトリグリセライド（ＴＡＧ）も一部一緒に抽出されてしまう。コレステロールを選択的に低減し得たのは、１２ＭＰａ，７０℃，１〜３ｍＬ／ｍｉｎ，５時間の条件であった。３ｍＬ／ｍｉｎ（Ｖ／Ｖｏ値１０８０）の場合、抽出槽の残渣には、蛋白質、ＴＡＧ、リン脂質、ＰＣ−ＤＨＡ、ＰＣ−ＥＰＡ、炭水化物、無機物等が含まれ、ＰＣ−ＤＨＡとＰＣ−ＥＰＡの含有率は約３質量％増加（残渣中）し、コレステロールは２４質量％低減した（抽出前のＰＣ−ＤＨＡは３６．４ｍｇ／ｇカズノコ凍結乾燥物、ＰＣ−ＥＰＡは２０．３ｍｇ／ｇカズノコ凍結乾燥物）。
【００２４】
【表１】
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【００２５】
実施例２
実施例１と同じ試料を用いに、超臨界二酸化炭素抽出装置を用い、温度及び圧力の抽出挙動に与える影響を調べた。結果を表２に示す。
１５ＭＰａ，５０℃，５時間ではＴＡＧも幾分抽出されてはくるものの、実施例１すなわち１２ＭＰａ，７０℃，５時間のときの抽出の条件と比較し、４ｍＬ／ｍｉｎ（Ｖ／Ｖｏ値１４４０）で約４倍のコレステロール抽出量を得ることができた。抽出残渣としてコレステロールとＴＡＧが低減され、蛋白質、リン脂質、ＰＣ−ＤＨＡ、ＰＣ−ＥＰＡ、炭水化物、無機物等を含有する組成物（ＤＨＡとＥＰＡの含有率は約７質量％増（残渣中））が得られた。コレステロールは９０質量％，ＴＡＧは１２質量％低減した（抽出前のコレステロール：２０．３ｍｇ／ｇカズノコ凍結乾燥物、ＴＡＧ：８０ｍｇ／ｇカズノコ凍結乾燥物）。
【００２６】
【表２】
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【００２７】
実施例３
下記の配合割合の水相原料と固相原料とを使用し、あらかじめ十分に混合しておいた水相原料中に撹拌しながら固相原料を添加し、定法に準じて乳化させてマヨネーズタイプの水中油型乳化食品を製造した。なおカズノコ由来組成物は、超臨界二酸化炭素抽出装置を用い、１５ＭＰａ，５０℃，５時間、Ｖ／Ｖｏ値１４４０の条件で抽出された残渣を用いた。
コレステロール含有量は、０．１７質量％、ＰＣ−ＤＨＡ含有量は３．３質量％、ＰＣ−ＥＰＡ含有量は１．８質量％であった。
【００２８】
【表３】
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【００２９】
このマヨネーズタイプの水中油型乳化食品を試食したところ、コクが強く感じられ食味良好であった。カズノコには抗酸化作用のあるＣｏＱ１０やルチンが含まれており酸化されにくく、魚臭はしなかった。
【００３０】
比較例１
実施例３において、カズノコ由来組成物に代えて魚油（ＤＨＡ，ＥＰＡ含有の市販品）を使用しマヨネーズタイプの水中油型乳化食品を製造した。コレステロール含有量は、１２質量％であった。製造時に生臭く、３日後には悪臭となり試食に耐えられなかった。
【００３１】
実施例４
表４の割合で混合し、分離液状ドレッシングタイプの水中油型乳化食品を得た。カズノコ由来組成物は、超臨界二酸化炭素抽出装置を用い、１２ＭＰａ，７０℃，５時間、Ｖ／Ｖｏ値１０８０の条件で抽出された残渣を用いた。ＰＣ−ＤＨＡの含有量は１質量％、ＰＣ−ＥＰＡの含有量は０．５質量％であった。
【表４】
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【００３２】
実施例５
軟カプセル皮膜形成溶液（ゼラチン：グリセロール：水（質量比）＝４５：２２．５：３２．５）を常法により調製し、超臨界二酸化炭素抽出装置を用いて１５ＭＰａ，５０℃，５時間、Ｖ／Ｖｏ値１４４０の条件で抽出された残渣（カズノコ由来組成物）をカプセルに封入し、ロータリー式軟カプセル製造装置により常法により軟カプセルを製造した。カズノコ由来組成物の量は、１カプセル当たりＰＣ−ＤＨＡ約２０ｍｇ，ＰＣ−ＥＰＡ約１０ｍｇ含むように調整した。
得られたカプセルの場合、１日１０〜１５カプセルを摂取すれば日本人の一日必要な
ＤＨＡ＋ＥＰＡ合計１ｇ（厚生労働省「日本人の食事摂取量基準」）の不足分３００〜
４５０ｍｇを補うことができる。
【図１】
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