(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（１）スクロース及び／又はトレハロース、
（２）メチオニン、
（３）溶媒を添加して再構成したときに１００ｍＭ以下の製薬学的に受容可能な塩、及び、
（４）リン酸緩衝剤、
を含有してなるヒトＩｇＧ１のＦｃ領域にヒトｐ７５腫瘍壊死因子受容体の細胞外リガンド結合部分が融合したポリペプチドを含有する凍結乾燥組成物。
【請求項２】
ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域にヒトｐ７５腫瘍壊死因子受容体の細胞外リガンド結合部分が融合したポリペプチドの配合量が、バイアル当たり５〜１００ｍｇであるか、又は注射用水１ｍＬを添加して再構成したときに５〜１００ｍｇ／ｍＬである、請求項１に記載の凍結乾燥組成物。
【請求項３】
ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域にヒトｐ７５腫瘍壊死因子受容体の細胞外リガンド結合部分が融合したポリペプチドが、エタネルセプトである、請求項１又は２に記載の凍結乾燥組成物。
【請求項４】
製薬学的に受容可能な塩が、塩化ナトリウムである、請求項１から３のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
【請求項５】
スクロースの配合量がバイアル当たり５〜１００ｍｇであり、メチオニンの配合量がバイアル当たり０．２〜２０ｍｇであり、塩化ナトリウムの配合量がバイアル当たり０．５〜５．５ｍｇであって、リン酸緩衝剤の配合量が注射用水１ｍＬを添加して再構成したときに１〜５０ｍＭとなる量である、請求項１から４のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
【請求項６】
スクロースの配合量が注射用水１ｍＬを添加して再構成したときに５〜１００ｍｇ／ｍＬであり、メチオニンの配合量が注射用水１ｍＬを添加して再構成したときに０．２〜２０ｍｇ／ｍＬであり、塩化ナトリウムの配合量が注射用水１ｍＬを添加して再構成したときに１０〜１００ｍＭであって、リン酸緩衝剤の配合量が注射用水１ｍＬを添加して再構成したときに１〜５０ｍＭとなる量である、請求項１から４のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
【請求項７】
凍結乾燥組成物が、さらにヒスチジンを含有する、請求項１から６のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
【請求項８】
メチオニン、又はメチオニン及びヒスチジンの配合量が、溶媒１ｍＬを添加して再構成したときに遊離アミノ酸に換算して０．２〜２０ｍｇ／ｍＬとなる量である、請求項１から７のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
【請求項９】
凍結乾燥組成物が、さらにメチオニン及びヒスチジン以外のアミノ酸を含有する、請求項１から８のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
【請求項１０】
凍結乾燥組成物が、さらにヒスチジン緩衝剤を含有する、請求項１から９のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
【請求項１１】
スクロースが、精製白糖である、請求項１から１０のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
【請求項１２】
請求項１から１１のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物；及び当該凍結乾燥組成物を液状組成物に再構成するための溶媒；を含有してなるキット。
【請求項１３】
請求項１から１１のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物及び溶媒を含む液状組成物。
【請求項１４】
溶媒が、水である請求項１３に記載の液状組成物。
【請求項１５】
液状組成物が、注射剤である、請求項１３又は１４に記載の液状組成物。
【請求項１６】
請求項１から１１のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物を含有してなる疾患を治療するための医薬組成物。
【請求項１７】
疾患が、自己免疫疾患、強直性脊椎炎、若年性関節リウマチ、乾癬、乾癬性関節炎、慢性関節リウマチ、ウェゲナー疾患（ウェゲナー肉芽腫症）、クローン病又は炎症性腸疾患、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、Ｃ型肝炎、子宮内膜症、喘息、悪液質、アトピー性皮膚炎、アルツハイマー及びがんからなる疾患群から選択される疾患である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域にヒトｐ７５腫瘍壊死因子受容体の細胞外リガンド結合部分が融合したポリペプチドを含有する安定な凍結乾燥組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
可溶性腫瘍壊死因子受容体（可溶性ＴＮＦ−Ｒ）はＴＮＦ媒介性疾患に有効であり、ライム病、若年性（リウマチ様）関節炎、骨関節炎、乾癬性関節炎、リウマチ様関節炎、staphylococcal誘導（「敗血症性」）関節炎などのリウマチ性疾患の治療薬として有効であることが知られている（特許文献１参照）。可溶性ＴＮＦ−Ｒとしては、ＲＩ（ｐ５５）及びＲＩＩ（ｐ７５）が知られており、可溶性ＴＮＦ−ＲＩＩ製剤は、若年性関節リウマチの治療薬としても期待されている。可溶性ＴＮＦ−Ｒ製剤としては、エタネルセプト（etanercept）［一般名］が知られており、商品名エンブレル（登録商標）が既存治療で効果不十分な関節リウマチの治療薬として製造・販売されている。
【０００３】
エタネルセプト（etanercept）は、ヒトＩｇＧ１のＦｃ部分（アミノ酸数２３２個）に連結したヒト７５キロダルトン（ｐ７５）腫瘍壊死因子レセプター（ＴＮＦ−Ｒ）の細胞外ドメイン（アミノ酸数２３５個）から構成される融合タンパク質の二量体である。この分子の二量体の形態は、これらの２つの融合ポリペプチド（「単量体」）が、２つの単量体のそれぞれの免疫グロブリン部分で３つのジスルフィド結合で結合している。したがって、エタネルセプトは、９３４個のアミノ酸からなり、外見上約１５０キロダルトンの分子量を有する。エタネルセプトはＴＮＦに特異的に結合し、細胞表面ＴＮＦレセプターとの相互作用をブロックし、多発性硬化症、慢性関節リウマチ、並びにＩ型糖尿症など、炎症性及び免疫性疾患の治療に有用であることが知られている（特許文献２参照）。
【０００４】
しかし、一般に、ポリペプチドは保存中に凝集や変性などにより不活性化し、長期保存することが難しいことが知られている。エタネルセプトも例外ではなく、安定性に問題があり、特に溶液中では不安定であり、長期の保存を可能とするには、これを安定化させる必要がある。
また、一般に水性注射製剤は、そのまま注射することができ、凍結乾燥製剤に比べて便利であることから、エタネルセプトについても水性注射製剤の安定化についての報告が多数なされてきている。例えば、安定化剤としてＬ−アルギニンを添加した水性注射製剤（特許文献３参照）、アルギニンに代えてメチオニン、リシン、ヒスチジン及びこれらの薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される一つ以上の安定化剤を添加した水性注射製剤（特許文献４参照）、アミノ酸を用いずに凝集を防ぐのに十分な量であり、組成物を安定化させるための塩化ナトリウムなどの塩を約１４０ｍＭの濃度で存在させた組成物（特許文献５参照）などが報告されてきている。
【０００５】
一般に、蛋白質製剤の長期保存のためには水性注射製剤よりも凍結乾燥製剤の方が有利と考えられているが、一方、多くの水性注射製剤で使用されているリン酸緩衝液系は、凍結中におけるｐＨの変化が大きいことが知られている（非特許文献１）。このために、凍結乾燥製剤においてはリン酸緩衝液系の使用が躊躇される。
現在、製造・販売されているエタネルセプトを有効成分として含有しているエンブレル（登録商標）には、皮下注射用の凍結乾燥製剤（バイアル製剤）と水性注射製剤（プレフィルドシリンジ）がある。水性注射製剤は、Ｌ−アルギニン塩酸塩及び塩化ナトリウム（約１００ｍＭ）を含有するリン酸塩を緩衝剤とした製剤であり、凍結乾燥製剤はＤ−マンニトールを含有するトリスヒドロキシメチルアミノメタン（tris（hydroxymethyl）aminomethane、トロメタモール）を緩衝剤とした製剤である。
エンブレル（登録商標）の凍結乾燥製剤は、５℃の暗所では約３６ヵ月保存可能であるとされているが、２５℃の暗所では約６ヵ月で、また、４０℃の暗所では約２ヵ月で規格外となると報告されており、保存安定性の改善が求められている（非特許文献２参照）。
また、エタネルセプトの製剤に関する技術においても、リン酸緩衝液系に代えてクエン酸塩緩衝液系とした製剤が提案されている（特許文献６参照）。なお、特許文献６では、副作用の可能性があるアルギニンに代えてリジン又はプロリンの使用が提案されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特表２００２−５１４０４８号公報
【特許文献２】特表２００３−５１７０２２号公報
【特許文献３】特表２００５−５２７５０３号公報
【特許文献４】特表２０１４−５２２４０２号公報
【特許文献５】特表２０１４−５１８２７６号公報
【特許文献６】特表２０１４−５１９４８４号公報
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Parag et al., Biotechnol. Prog. 2010, 26(3)727-733
【非特許文献２】医薬品インタビューフォーム「エンブレル」2014年7月改訂（第23版）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域にヒトｐ７５腫瘍壊死因子受容体の細胞外リガンド結合部分が融合したポリペプチド（以下ＴＮＦＲ−Ｆｃと記すことがある）を含有する新規な医薬用の組成物を提供する。より詳細には、本発明は、ＴＮＦＲ−Ｆｃを含有する保存安定性に優れた医薬用の組成物を提供する。
さらに詳細には、本発明は、ＴＮＦＲ−Ｆｃを含有する保存安定性に優れた凍結乾燥製剤に適した医薬用の組成物を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、保存安定性に優れたＴＮＦＲ−Ｆｃを含有する製剤の開発を検討してきた。長期の保存安定性を確保するためには、液剤よりも凍結乾燥製剤の方が優れているが、凍結乾燥製剤とするためには特有の課題があり、例えば、緩衝剤の選択に制限があると考えられていた。
しかし、意外にも、特定の糖とアミノ酸の１種であるメチオニン及び／またはヒスチジンとを組み合わせて使用することにより、ＴＮＦＲ−Ｆｃに関し、緩衝剤の種類にかかわらず、とりわけリン酸緩衝液系を用いても安定な凍結乾燥製剤とすることができるだけでなく、塩濃度も比較的低くすることができることを見出した。以下に本発明を説明する。なお、特に断らない限り、濃度表示は溶媒を添加して再構成(再溶解)したときの値である。
【００１０】
即ち、本発明は、
（１）スクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択される少なくとも１つの糖、好ましくはスクロース及び／又はトレハロース、
（２）メチオニン及び／又はヒスチジン、及び、
（３）１００ｍＭ以下の製薬学的に受容可能な塩、
を含有してなるＴＮＦＲ−Ｆｃを含有する凍結乾燥組成物に関する。
【００１１】
また、本発明は、
（１）スクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択される少なくとも１つの糖、好ましくはスクロース及び／又はトレハロース、
（２）メチオニン及び／又はヒスチジン、
（３）１００ｍＭ以下の製薬学的に受容可能な塩、
（４）ＴＮＦＲ−Ｆｃ、及び、
（５）溶媒、
を含有してなる液状組成物を製造する工程；及び、
当該液状組成物を凍結乾燥する工程；
を含有してなるＴＮＦＲ−Ｆｃを含有する凍結乾燥組成物の製造方法に関する。
【００１２】
また、本発明は、
（１）スクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択される少なくとも１つの糖、好ましくはスクロース及び／又はトレハロース、
（２）メチオニン及び／又はヒスチジン、及び、
（３）１００ｍＭ以下の製薬学的に受容可能な塩、
を含有してなるＴＮＦＲ−Ｆｃを含有する凍結乾燥組成物；及び
当該凍結乾燥組成物を液状組成物に再構成するための溶媒；
を含有してなるキットに関する。
【００１３】
また、本発明は、
（１）スクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択される少なくとも１つの糖、好ましくはスクロース及び／又はトレハロース、
（２）メチオニン及び／又はヒスチジン、及び、
（３）１００ｍＭ以下の製薬学的に受容可能な塩、
を含有してなるＴＮＦＲ−Ｆｃを含有する凍結乾燥組成物を、溶媒で再構成してなる液状組成物に関する。
【００１４】
また、本発明は、
（１）スクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択される少なくとも１つの糖、好ましくはスクロース及び／又はトレハロース、
（２）メチオニン及び／又はヒスチジン、及び、
（３）１００ｍＭ以下の製薬学的に受容可能な塩、
を含有してなるＴＮＦＲ−Ｆｃを含有する凍結乾燥組成物；を含有してなる疾患を治療するための医薬組成物に関する。
【００１５】
さらに、本発明は、
（１）スクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択される少なくとも１つの糖、好ましくはスクロース及び／又はトレハロース、
（２）メチオニン及び／又はヒスチジン、及び、
（３）１００ｍＭ以下の製薬学的に受容可能な塩、
を含有してなるＴＮＦＲ−Ｆｃを含有する凍結乾燥組成物を、溶媒で再構成してなる液状組成物；を含有してなる疾患を治療するための医薬組成物に関する。
【００１６】
本発明を、より詳細に説明すれば次のとおりである。なお、特に断らない限り、濃度表示は溶媒を添加して再構成(再溶解)したときの値である。
［１］まず、本発明の凍結乾燥組成物について説明する。
［１−１］（１）スクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択される少なくとも１つの糖、好ましくはスクロース及び／又はトレハロース、
（２）メチオニン及び／又はヒスチジン、及び、
（３）１００ｍＭ以下の製薬学的に受容可能な塩、
を含有してなるＴＮＦＲ−Ｆｃを含有する凍結乾燥組成物。
［１−２］ＴＮＦＲ−Ｆｃが、エタネルセプト（etanercept）である、前記［１−１］に記載の凍結乾燥組成物。
［１−３］エタネルセプトの配合量が、１０〜５０ｍｇ／ｍＬとなる量である、前記［１−１］又は［１−２］に記載の凍結乾燥組成物。
［１−４］凍結乾燥組成物が、さらに緩衝剤を含有する、前記［１−１］から［１−３］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
［１−５］緩衝剤が、リン酸緩衝剤及び／又はヒスチジン緩衝剤である、［１−４］に記載の凍結乾燥組成物。
［１−６］リン酸緩衝剤が、リン酸ナトリウム緩衝剤である、［１−５］に記載の凍結乾燥組成物。
［１−７］リン酸緩衝剤の配合量が、約１〜３０ｍＭとなる量である、前記［１−６］に記載の凍結乾燥組成物。
［１−８］スクロースが、精製白糖である、前記［１−１］から［１−７］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
［１−９］スクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択される少なくとも１つの糖好ましくはスクロース及び／又はトレハロースの配合量が、５〜１００ｍｇ／ｍＬとなる量である、前記［１−１］から［１−８］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
【００１７】
［１−１０］メチオニン及び／又はヒスチジンの配合量が、遊離アミノ酸に換算して０．２〜２０ｍｇ／ｍＬとなる量である、前記［１−１］から［１−９］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
［１−１１］製薬学的に受容可能な塩が、溶媒を添加して再構成したときの濃度が、１００ｍＭ未満である、前記［１−１］から［１−１０］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
［１−１２］製薬学的に受容可能な塩が、溶媒を添加して再構成したときの濃度が、３０ｍＭ〜８０ｍＭの範囲である、前記［１−１］から［１−１１］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
［１−１３］製薬学的に受容可能な塩が、塩化ナトリウムである、前記［１−１］から［１−１２］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
［１−１４］凍結乾燥組成物が、さらにメチオニン及びヒスチジン以外のアミノ酸を含有する、前記［１−１］から［１−１３］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
［１−１５］メチオニン及びヒスチジン以外のアミノ酸の濃度が、１〜３０ｍＭとなる量である、前記［１−１４］に記載の凍結乾燥組成物。
［１−１６］メチオニン及びヒスチジン以外のアミノ酸が、グリシンである、前記［１−１４］又は［１−１５］に記載の凍結乾燥組成物。
［１−１７］凍結乾燥組成物に溶媒を添加して再構成したときのｐＨが、５．０〜８．０の範囲である、前記［１−１］から［１−１６］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
［１−１８］凍結乾燥組成物に溶媒を添加して再構成したときのｐＨが、５．５〜７．５の範囲である、前記［１−１］から［１−１６］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
［１−１９］凍結乾燥組成物に溶媒を添加して再構成したときの浸透圧の生理食塩水に対する比が、０．５〜１．５の範囲である、前記［１−１］から［１−１８］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
［１−２０］凍結乾燥組成物に溶媒を添加して再構成したときの浸透圧の生理食塩水に対する比が、０．８〜１．２の範囲である、前記［１−１］から［１−１８］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
【００１８】
［１−２１］凍結乾燥組成物が、５℃で保存可能である、前記［１−１］から［１−２０］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
［１−２２］凍結乾燥組成物が、５℃で少なくとも２年は保存可能である、前記［１−２１］に記載の凍結乾燥組成物。
［１−２３］凍結乾燥組成物が、５℃で少なくとも３年は保存可能である、前記［１−２１］に記載の凍結乾燥組成物。
［１−２４］凍結乾燥組成物が、２５℃の暗所での加速試験において、エンブレル（登録商標）の凍結乾燥製剤よりも安定である、前記［１−１］から［１−２３］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
［１−２５］凍結乾燥組成物が、４０℃の暗所での苛酷試験において、エンブレル（登録商標）の凍結乾燥製剤よりも安定である、前記［１−１］から［１−２３］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
［１−２６］凍結乾燥組成物が、さらに賦形剤を含有する、前記［１−１］から［１−２５］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
［１−２７］凍結乾燥組成物が、マンニトールを含有していない凍結乾燥組成物である、前記［１−１］から［１−２６］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
［１−２８］凍結乾燥組成物が、Ｌ−アルギニン又はその塩を含有していない凍結乾燥組成物である、前記［１−１］から［１−２７］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
［１−２９］凍結乾燥組成物が、Ｌ−リジンを含有していない凍結乾燥組成物である、前記［１−１］から［１−２８］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
［１−３０］凍結乾燥組成物が、凍結乾燥製剤である、前記［１−１］から［１−２９］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物。
【００１９】
［２］次に、本発明の凍結乾燥組成物の製造方法について説明する。
［２−１］（１）スクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択される少なくとも１つの糖、好ましくはスクロース及び／又はトレハロース、
（２）メチオニン及び／又はヒスチジン、
（３）１００ｍＭ以下の製薬学的に受容可能な塩、
（４）ＴＮＦＲ−Ｆｃ、及び、
（５）溶媒、
を含有してなる液状組成物を製造する工程；及び、
当該液状組成物を凍結乾燥する工程；
を含有してなるＴＮＦＲ−Ｆｃを含有する凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−２］ＴＮＦＲ−Ｆｃが、エタネルセプト（etanercept）である、前記［２−１］に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−３］エタネルセプトの配合量が、１０〜５０ｍｇ／ｍＬとなる量である、前記［２−１］又は［２−２］に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−４］凍結乾燥組成物が、さらに緩衝剤を含有する、前記［２−１］から［２−３］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−５］緩衝剤が、リン酸緩衝剤及び／又はヒスチジン緩衝剤である、［２−４］に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−６］リン酸緩衝剤が、リン酸ナトリウム緩衝剤である、［２−５］に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−７］リン酸緩衝剤の配合量が、約１〜３０ｍＭとなる量である、前記［２−６］に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−８］スクロースが、精製白糖である、前記［２−１］から［２−７］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−９］スクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択される少なくとも１つの糖、好ましくはスクロース及び／又はトレハロースの配合量が、５〜１００ｍｇ／ｍＬとなる量である、前記［２−１］から［２−８］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
【００２０】
［２−１０］メチオニン及び／又はヒスチジンの配合量が、遊離アミノ酸に換算して０．２〜２０ｍｇ／ｍＬとなる量である、前記［２−１］から［２−９］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−１１］製薬学的に受容可能な塩が、溶媒を添加して再構成したときの濃度が、１００ｍＭ未満である、前記［２−１］から［２−１０］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−１２］製薬学的に受容可能な塩が、溶媒を添加して再構成したときの濃度が、３０ｍＭ〜８０ｍＭの範囲である、前記［２−１］から［２−１１］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−１３］製薬学的に受容可能な塩が、塩化ナトリウムである、前記［２−１］から［２−１２］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−１４］凍結乾燥組成物が、さらにメチオニン及びヒスチジン以外のアミノ酸を含有する、前記［２−１］から［２−１３］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−１５］メチオニン及びヒスチジン以外のアミノ酸の濃度が、１〜３０ｍＭとなる量である、前記［２−１４］に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−１６］メチオニン及びヒスチジン以外のアミノ酸が、グリシンである、前記［２−１４］又は［２−１５］に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−１７］凍結乾燥組成物に溶媒を添加して再構成したときのｐＨが、５．０〜８．０の範囲である、前記［２−１］から［２−１６］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−１８］凍結乾燥組成物に溶媒を添加して再構成したときのｐＨが、５．５〜７．５の範囲である、前記［２−１］から［２−１６］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−１９］凍結乾燥組成物に溶媒を添加して再構成したときの浸透圧の生理食塩水に対する比が、０．５〜１．５の範囲である、前記［２−１］から［２−１８］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−２０］凍結乾燥組成物に溶媒を添加して再構成したときの浸透圧の生理食塩水に対する比が、０．８〜１．２の範囲である、前記［２−１］から［２−１８］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
【００２１】
［２−２１］凍結乾燥組成物が、５℃で保存可能である、前記［２−１］から［２−２０］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−２２］凍結乾燥組成物が、５℃で少なくとも２年は保存可能である、前記［２−２１］に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−２３］凍結乾燥組成物が、５℃で少なくとも３年は保存可能である、前記［２−２１］に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−２４］凍結乾燥組成物が、２５℃の暗所での加速試験において、エンブレル（登録商標）の凍結乾燥製剤よりも安定である、前記［２−１］から［２−２３］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−２５］凍結乾燥組成物が、４０℃の暗所での苛酷試験において、エンブレル（登録商標）の凍結乾燥製剤よりも安定である、前記［２−１］から［２−２３］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−２６］凍結乾燥組成物が、さらに賦形剤を含有する、前記［２−１］から［２−２５］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−２７］凍結乾燥組成物が、マンニトールを含有していない凍結乾燥組成物である、前記［２−１］から［２−２６］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−２８］凍結乾燥組成物が、Ｌ−アルギニン又はその塩を含有していない凍結乾燥組成物である、前記［２−１］から［２−２７］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−２９］凍結乾燥組成物が、Ｌ−リジンを含有していない凍結乾燥組成物である、前記［２−１］から［２−２８］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
［２−３０］凍結乾燥組成物が、凍結乾燥製剤である、前記［２−１］から［２−２９］のいずれか一項に記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
【００２２】
［３］次に、本発明のキットについて説明する。
［３−１］（１）スクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択される少なくとも１つの糖、好ましくはスクロース及び／又はトレハロース、
（２）メチオニン及び／又はヒスチジン、及び、
（３）１００ｍＭ以下の製薬学的に受容可能な塩、
を含有してなるＴＮＦＲ−Ｆｃを含有する凍結乾燥組成物；及び
当該凍結乾燥組成物を液状組成物に再構成するための溶媒；
を含有してなるキット。
［３−２］ＴＮＦＲ−Ｆｃが、エタネルセプト（etanercept）である、前記［３−１］に記載のキット。
［３−３］エタネルセプトの配合量が、１０〜５０ｍｇ／ｍＬとなる量である、前記［３−１］又は［３−２］に記載のキット。
［３−４］凍結乾燥組成物が、さらに緩衝剤を含有する、前記［３−１］から［３−３］のいずれか一項に記載のキット。
［３−５］緩衝剤が、リン酸緩衝剤及び／又はヒスチジン緩衝剤である、［３−４］に記載のキット。
［３−６］リン酸緩衝剤が、リン酸ナトリウム緩衝剤である、［３−５］に記載のキット。
［３−７］リン酸緩衝剤の配合量が、約１〜３０ｍＭとなる量である、前記［３−６］に記載のキット。
［３−８］スクロースが、精製白糖である、前記［３−１］から［３−７］のいずれか一項に記載のキット。
［３−９］スクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択される少なくとも１つの糖、好ましくはスクロース及び／又はトレハロースの配合量が、５〜１００ｍｇ／ｍＬとなる量である、前記［３−１］から［３−８］のいずれか一項に記載のキット。
【００２３】
［３−１０］メチオニン及び／又はヒスチジンの配合量が、遊離アミノ酸に換算して０．２〜２０ｍｇ／ｍＬとなる量である、前記［３−１］から［３−９］のいずれか一項に記載のキット。
［３−１１］製薬学的に受容可能な塩が、溶媒を添加して再構成したときの濃度が、１００ｍＭ未満である、前記［３−１］から［３−１０］のいずれか一項に記載のキット。
［３−１２］製薬学的に受容可能な塩が、溶媒を添加して再構成したときの濃度が、３０ｍＭ〜８０ｍＭの範囲である、前記［３−１］から［３−１１］のいずれか一項に記載のキット。
［３−１３］製薬学的に受容可能な塩が、塩化ナトリウムである、前記［３−１］から［３−１２］のいずれか一項に記載のキット。
［３−１４］凍結乾燥組成物が、さらにメチオニン及びヒスチジン以外のアミノ酸を含有する、前記［３−１］から［３−１３］のいずれか一項に記載のキット。
［３−１５］メチオニン及びヒスチジン以外のアミノ酸の濃度が、１〜３０ｍＭとなる量である、前記［３−１４］に記載のキット。
［３−１６］メチオニン及びヒスチジン以外のアミノ酸が、グリシンである、前記［３−１４］又は［３−１５］に記載のキット。
［３−１７］凍結乾燥組成物に溶媒を添加して再構成したときのｐＨが、５．０〜８．０の範囲である、前記［３−１］から［３−１６］のいずれか一項に記載のキット。
［３−１８］凍結乾燥組成物に溶媒を添加して再構成したときのｐＨが、５．５〜７．５の範囲である、前記［３−１］から［３−１６］のいずれか一項に記載のキット。
［３−１９］凍結乾燥組成物に溶媒を添加して再構成したときの浸透圧の生理食塩水に対する比が、０．５〜１．５の範囲である、前記［３−１］から［３−１８］のいずれか一項に記載のキット。
［３−２０］凍結乾燥組成物に溶媒を添加して再構成したときの浸透圧の生理食塩水に対する比が、０．８〜１．２の範囲である、前記［３−１］から［３−１８］のいずれか一項に記載のキット。
【００２４】
［３−２１］凍結乾燥組成物が、５℃で保存可能である、前記［３−１］から［３−２０］のいずれか一項に記載のキット。
［３−２２］凍結乾燥組成物が、５℃で少なくとも２年は保存可能である、前記［３−２１］に記載のキット。
［３−２３］凍結乾燥組成物が、５℃で少なくとも３年は保存可能である、前記［３−２１］に記載のキット。
［３−２４］凍結乾燥組成物が、２５℃の暗所での加速試験において、エンブレル（登録商標）の凍結乾燥製剤よりも安定である、前記［３−１］から［３−２３］のいずれか一項に記載のキット。
［３−２５］凍結乾燥組成物が、４０℃の暗所での苛酷試験において、エンブレル（登録商標）の凍結乾燥製剤よりも安定である、前記［３−１］から［３−２３］のいずれか一項に記載のキット。
［３−２６］凍結乾燥組成物が、さらに賦形剤を含有する、前記［３−１］から［３−２５］のいずれか一項に記載のキット。
［３−２７］凍結乾燥組成物が、マンニトールを含有していない凍結乾燥組成物である、前記［３−１］から［３−２６］のいずれか一項に記載のキット。
［３−２８］凍結乾燥組成物が、Ｌ−アルギニン又はその塩を含有していない凍結乾燥組成物である、前記［３−１］から［３−２７］のいずれか一項に記載のキット。
［３−２９］凍結乾燥組成物が、Ｌ−リジンを含有していない凍結乾燥組成物である、前記［３−１］から［３−２８］のいずれか一項に記載のキット。
［３−３０］凍結乾燥組成物が、凍結乾燥製剤である、前記［３−１］から［３−２９］のいずれか一項に記載のキット。
［３−３１］キットが、さらに取扱説明書を含有する、前記［３−１］から［３−３０］のいずれか一項に記載のキット。
［３−３２］凍結乾燥組成物を液状組成物に再構成するための溶媒が、精製水である、前記［３−１］から［３−３１］のいずれか一項に記載のキット。
【００２５】
［４］次に、本発明の液状組成物について説明する。
［４−１］（１）スクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択される少なくとも１つの糖、好ましくはスクロース及び／又はトレハロース、
（２）メチオニン及び／又はヒスチジン、及び、
（３）１００ｍＭ以下の製薬学的に受容可能な塩、
を含有してなるＴＮＦＲ−Ｆｃを含有する凍結乾燥組成物を、溶媒で再構成してなる液状組成物。
［４−２］ＴＮＦＲ−Ｆｃが、エタネルセプト（etanercept）である、前記［４−１］に記載の液状組成物。
［４−３］エタネルセプトの濃度が、１０〜５０ｍｇ／ｍＬである、前記［４−１］又は［４−２］に記載の液状組成物。
［４−４］凍結乾燥組成物が、さらに緩衝剤を含有する、前記［４−１］から［４−３］のいずれか一項に記載の液状組成物。
［４−５］緩衝剤が、リン酸緩衝剤及び／又はヒスチジン緩衝剤である、［４−４］に記載の液状組成物。
［４−６］リン酸緩衝剤が、リン酸ナトリウム緩衝剤である、［４−５］に記載の液状組成物。
［４−７］リン酸緩衝剤の濃度が、約１〜３０ｍＭである、前記［４−６］に記載の液状組成物。
［４−８］スクロースが、精製白糖である、前記［４−１］から［４−７］のいずれか一項に記載の液状組成物。
［４−９］スクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択される少なくとも１つの糖、好ましくはスクロース及び／又はトレハロースの濃度が、５〜１００ｍｇ／ｍＬである、前記［４−１］から［４−８］のいずれか一項に記載の液状組成物。
【００２６】
［４−１０］メチオニン及び／又はヒスチジンの濃度が、遊離アミノ酸に換算して０．２〜２０ｍｇ／ｍＬである、前記［４−１］から［４−９］のいずれか一項に記載の液状組成物。
［４−１１］製薬学的に受容可能な塩が、溶媒を添加して再構成したときの濃度が、１００ｍＭ未満である、前記［４−１］から［４−１０］のいずれか一項に記載の液状組成物。
［４−１２］製薬学的に受容可能な塩が、溶媒を添加して再構成したときの濃度が、３０ｍＭ〜８０ｍＭの範囲である、前記［４−１］から［４−１１］のいずれか一項に記載の液状組成物。
［４−１３］製薬学的に受容可能な塩が、塩化ナトリウムである、前記［４−１］から［４−１２］のいずれか一項に記載の液状組成物。
［４−１４］凍結乾燥組成物が、さらにメチオニン及びヒスチジン以外のアミノ酸を含有する、前記［４−１］から［４−１３］のいずれか一項に記載の液状組成物。
［４−１５］メチオニン及びヒスチジン以外のアミノ酸の濃度が、１〜３０ｍＭである、前記［４−１４］に記載の液状組成物。
［４−１６］メチオニン及びヒスチジン以外のアミノ酸が、グリシンである、前記［４−１４］又は［４−１５］に記載の液状組成物。
［４−１７］液状組成物のｐＨが、５．０〜８．０の範囲である、前記［４−１］から［４−１６］のいずれか一項に記載の液状組成物。
［４−１８］液状組成物のｐＨが、５．５〜７．５の範囲である、前記［４−１］から［４−１６］のいずれか一項に記載の液状組成物。
［４−１９］液状組成物の浸透圧の生理食塩水に対する比が、０．５〜１．５の範囲である、前記［４−１］から［４−１８］のいずれか一項に記載の液状組成物。
［４−２０］液状組成物の浸透圧の生理食塩水に対する比が、０．８〜１．２の範囲である、前記［４−１］から［４−１８］のいずれか一項に記載のキット。
【００２７】
［４−２１］凍結乾燥組成物が、５℃で保存可能である、前記［４−１］から［４−２０］のいずれか一項に記載の液状組成物。
［４−２２］凍結乾燥組成物が、５℃で少なくとも２年は保存可能である、前記［４−２１］に記載の液状組成物。
［４−２３］凍結乾燥組成物が、５℃で少なくとも３年は保存可能である、前記［４−２１］に記載の液状組成物。
［４−２４］凍結乾燥組成物が、２５℃の暗所での加速試験において、エンブレル（登録商標）の凍結乾燥製剤よりも安定である、前記［４−１］から［４−２３］のいずれか一項に記載の液状組成物。
［４−２５］凍結乾燥組成物が、４０℃の暗所での苛酷試験において、エンブレル（登録商標）の凍結乾燥製剤よりも安定である、前記［４−１］から［４−２３］のいずれか一項に記載の液状組成物。
［４−２６］凍結乾燥組成物が、さらに賦形剤を含有する、前記［４−１］から［４−２５］のいずれか一項に記載の液状組成物。
［４−２７］凍結乾燥組成物が、マンニトールを含有していない凍結乾燥組成物である、前記［４−１］から［４−２６］のいずれか一項に記載の液状組成物。
［４−２８］凍結乾燥組成物が、Ｌ−アルギニン又はその塩を含有していない凍結乾燥組成物である、前記［４−１］から［４−２７］のいずれか一項に記載の液状組成物。
［４−２９］凍結乾燥組成物が、Ｌ−リジンを含有していない凍結乾燥組成物である、前記［４−１］から［４−２８］のいずれか一項に記載の液状組成物。
［４−３０］凍結乾燥組成物が、凍結乾燥製剤である、前記［４−１］から［４−２９］のいずれか一項に記載の液状組成物。
［４−３１］液状組成物が、注射剤である、前記［４−１］から［４−３０］のいずれか一項に記載の液状組成物。
［４−３２］凍結乾燥組成物を液状組成物に再構成するための溶媒が、精製水である、前記［４−１］から［４−３１］のいずれか一項に記載の液状組成物。
【００２８】
［５］次に、本発明の医薬組成物について説明する。
［５−１］（１）スクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択される少なくとも１つの糖、好ましくはスクロース及び／又はトレハロース、
（２）メチオニン及び／又はヒスチジン、及び、
（３）１００ｍＭ以下の製薬学的に受容可能な塩、
を含有してなるＴＮＦＲ−Ｆｃを含有する凍結乾燥組成物；を含有してなる疾患を治療するための医薬組成物。
［５−２］ＴＮＦＲ−Ｆｃが、エタネルセプト（etanercept）である、前記［５−１］に記載の医薬組成物。
［５−３］エタネルセプトの配合量が、１０〜５０ｍｇ／ｍＬとなる量である、前記［５−１］又は［５−２］に記載の医薬組成物。
［５−４］凍結乾燥組成物が、さらに緩衝剤を含有する、前記［５−１］から［５−３］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［５−５］緩衝剤が、リン酸緩衝剤及び／又はヒスチジン緩衝剤である、［５−４］に記載の医薬組成物。
［５−６］リン酸緩衝剤が、リン酸ナトリウム緩衝剤である、［５−５］に記載の医薬組成物。
［５−７］リン酸緩衝剤の配合量が、約１〜３０ｍＭとなる量である、前記［５−６］に記載の医薬組成物。
［５−８］スクロースが、精製白糖である、前記［５−１］から［５−７］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［５−９］スクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択される少なくとも１つの糖、好ましくはスクロース及び／又はトレハロースの配合量が、５〜１００ｍｇ／ｍＬとなる量である、前記［５−１］から［５−８］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【００２９】
［５−１０］メチオニン及び／又はヒスチジンの配合量が、遊離アミノ酸に換算して０．２〜２０ｍｇ／ｍＬとなる量である、前記［５−１］から［５−９］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［５−１１］製薬学的に受容可能な塩が、溶媒を添加して再構成したときの濃度が、１００ｍＭ未満である、前記［５−１］から［５−１０］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［５−１２］製薬学的に受容可能な塩が、溶媒を添加して再構成したときの濃度が、３０ｍＭ〜８０ｍＭの範囲である、前記［５−１］から［５−１１］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［５−１３］製薬学的に受容可能な塩が、塩化ナトリウムである、前記［５−１］から［５−１２］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［５−１４］凍結乾燥組成物が、さらにメチオニン及びヒスチジン以外のアミノ酸を含有する、前記［５−１］から［５−１３］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［５−１５］メチオニン及びヒスチジン以外のアミノ酸の濃度が、１〜３０ｍＭとなる量である、前記［５−１４］に記載の医薬組成物。
［５−１６］メチオニン及びヒスチジン以外のアミノ酸が、グリシンである、前記［５−１４］又は［５−１５］に記載の医薬組成物。
［５−１７］凍結乾燥組成物に溶媒を添加して再構成したときのｐＨが、５．０〜８．０の範囲である、前記［５−１］から［５−１６］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［５−１８］凍結乾燥組成物に溶媒を添加して再構成したときのｐＨが、５．５〜７．５の範囲である、前記［５−１］から［５−１６］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［５−１９］凍結乾燥組成物に溶媒を添加して再構成したときの浸透圧の生理食塩水に対する比が、０．５〜１．５の範囲である、前記［５−１］から［５−１８］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［５−２０］凍結乾燥組成物に溶媒を添加して再構成したときの浸透圧の生理食塩水に対する比が、０．８〜１．２の範囲である、前記［５−１］から［５−１８］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【００３０】
［５−２１］凍結乾燥組成物が、５℃で保存可能である、前記［５−１］から［５−２０］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［５−２２］凍結乾燥組成物が、５℃で少なくとも２年は保存可能である、前記［５−２１］に記載の医薬組成物。
［５−２３］凍結乾燥組成物が、５℃で少なくとも３年は保存可能である、前記［５−２１］に記載の医薬組成物。
［５−２４］凍結乾燥組成物が、２５℃の暗所での加速試験において、エンブレル（登録商標）の凍結乾燥製剤よりも安定である、前記［５−１］から［５−２３］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［５−２５］凍結乾燥組成物が、４０℃の暗所での苛酷試験において、エンブレル（登録商標）の凍結乾燥製剤よりも安定である、前記［５−１］から［５−２３］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［５−２６］凍結乾燥組成物が、さらに賦形剤を含有する、前記［５−１］から［５−２５］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［５−２７］凍結乾燥組成物が、マンニトールを含有していない凍結乾燥組成物である、前記［５−１］から［５−２６］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［５−２８］凍結乾燥組成物が、Ｌ−アルギニン又はその塩を含有していない凍結乾燥組成物である、前記［５−１］から［５−２７］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［５−２９］凍結乾燥組成物が、Ｌ−リジンを含有していない凍結乾燥組成物である、前記［５−１］から［５−２８］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［５−３０］凍結乾燥組成物が、凍結乾燥製剤である、前記［５−１］から［５−２９］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［５−３１］疾患が、自己免疫疾患、強直性脊椎炎、若年性関節リウマチ、乾癬、乾癬性関節炎、慢性関節リウマチ、ウェゲナー疾患（肉芽腫症）、クローン病又は炎症性腸疾患、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、Ｃ型肝炎、子宮内膜症、喘息、悪液質、アトピー性皮膚炎、アルツハイマー及びがんからなる疾患群から選択される疾患である、前記［５−１］から［５−３０］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【００３１】
［６］次に、本発明の液状組成物を含有してなる疾患を治療するための医薬組成物について説明する。
［６−１］（１）スクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択される少なくとも１つの糖、好ましくはスクロース及び／又はトレハロース、
（２）メチオニン及び／又はヒスチジン、及び、
（３）１００ｍＭ以下の製薬学的に受容可能な塩、
を含有してなるＴＮＦＲ−Ｆｃを含有する凍結乾燥組成物を、溶媒で再構成してなる液状組成物；を含有してなる疾患を治療するための医薬組成物。
［６−２］ＴＮＦＲ−Ｆｃが、エタネルセプト（etanercept）である、前記［６−１］に記載の医薬組成物。
［６−３］エタネルセプトの配合量が、１０〜５０ｍｇ／ｍＬとなる量である、前記［６−１］又は［６−２］に記載の医薬組成物。
［６−４］凍結乾燥組成物が、さらに緩衝剤を含有する、前記［６−１］から［６−３］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［６−５］緩衝剤が、リン酸緩衝剤及び／又はヒスチジン緩衝剤である、［６−４］に記載の医薬組成物。
［６−６］リン酸緩衝剤が、リン酸ナトリウム緩衝剤である、［６−５］に記載の医薬組成物。
［６−７］リン酸緩衝剤の配合量が、約１〜３０ｍＭとなる量である、前記［６−６］に記載の医薬組成物。
［６−８］スクロースが、精製白糖である、前記［６−１］から［６−７］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［６−９］スクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択される少なくとも１つの糖、好ましくはスクロース及び／又はトレハロースの配合量が、５〜１００ｍｇ／ｍＬとなる量である、前記［６−１］から［６−８］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【００３２】
［６−１０］メチオニン及び／又はヒスチジンの配合量が、遊離アミノ酸に換算して０．２〜２０ｍｇ／ｍＬとなる量である、前記［６−１］から［６−９］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［６−１１］製薬学的に受容可能な塩が、溶媒を添加して再構成したときの濃度が、１００ｍＭ未満である、前記［６−１］から［６−１０］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［６−１２］製薬学的に受容可能な塩が、溶媒を添加して再構成したときの濃度が、３０ｍＭ〜８０ｍＭの範囲である、前記［６−１］から［６−１１］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［６−１３］製薬学的に受容可能な塩が、塩化ナトリウムである、前記［６−１］から［６−１２］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［６−１４］凍結乾燥組成物が、さらにメチオニン及びヒスチジン以外のアミノ酸を含有する、前記［６−１］から［６−１３］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［６−１５］メチオニン及びヒスチジン以外のアミノ酸の濃度が、１〜３０ｍＭとなる量である、前記［６−１４］に記載の医薬組成物。
［６−１６］メチオニン及びヒスチジン以外のアミノ酸が、グリシンである、前記［６−１４］又は［６−１５］に記載の医薬組成物。
［６−１７］凍結乾燥組成物に溶媒を添加して再構成したときのｐＨが、５．０〜８．０の範囲である、前記［６−１］から［６−１６］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［６−１８］凍結乾燥組成物に溶媒を添加して再構成したときのｐＨが、５．５〜７．５の範囲である、前記［６−１］から［６−１６］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［６−１９］凍結乾燥組成物に溶媒を添加して再構成したときの浸透圧の生理食塩水に対する比が、０．５〜１．５の範囲である、前記［６−１］から［６−１８］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［６−２０］凍結乾燥組成物に溶媒を添加して再構成したときの浸透圧の生理食塩水に対する比が、０．８〜１．２の範囲である、前記［６−１］から［６−１８］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【００３３】
［６−２１］凍結乾燥組成物が、５℃で保存可能である、前記［６−１］から［６−２０］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［６−２２］凍結乾燥組成物が、５℃で少なくとも２年は保存可能である、前記［６−２１］に記載の医薬組成物。
［６−２３］凍結乾燥組成物が、５℃で少なくとも３年は保存可能である、前記［６−２１］に記載の医薬組成物。
［６−２４］凍結乾燥組成物が、２５℃の暗所での加速試験において、エンブレル（登録商標）の凍結乾燥製剤よりも安定である、前記［６−１］から［６−２３］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［６−２５］凍結乾燥組成物が、４０℃の暗所での苛酷試験において、エンブレル（登録商標）の凍結乾燥製剤よりも安定である、前記［６−１］から［６−２３］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［６−２６］凍結乾燥組成物が、さらに賦形剤を含有する、前記［６−１］から［６−２５］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［６−２７］凍結乾燥組成物が、マンニトールを含有していない凍結乾燥組成物である、前記［６−１］から［６−２６］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［６−２８］凍結乾燥組成物が、Ｌ−アルギニン又はその塩を含有していない凍結乾燥組成物である、前記［６−１］から［６−２７］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［６−２９］凍結乾燥組成物が、Ｌ−リジンを含有していない凍結乾燥組成物である、前記［６−１］から［６−２８］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［６−３０］凍結乾燥組成物が、凍結乾燥製剤である、前記［６−１］から［６−２９］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［６−３１］疾患が、自己免疫疾患、強直性脊椎炎、若年性関節リウマチ、乾癬、乾癬性関節炎、慢性関節リウマチ、ウェゲナー疾患（肉芽腫症）、クローン病又は炎症性腸疾患、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、Ｃ型肝炎、子宮内膜症、喘息、悪液質、アトピー性皮膚炎、アルツハイマー及びがんからなる疾患群から選択される疾患である、前記［６−１］から［６−３０］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［６−３２］凍結乾燥組成物を液状組成物に再構成するための溶媒が、精製水である、前記［６−１］から［６−３１］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【００３４】
［７−１］また、１態様として、本発明は、エタネルセプト；
スクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択される少なくとも１つの糖；
Ｌ−メチオニン及び／またはヒスチジン；
塩化ナトリウム；
リン酸塩（リン酸緩衝剤としてのリン酸二水素ナトリウム・２水和物／リン酸水素二ナトリウム・１２水和物の混合物）を含む医薬用組成物である。
［７−２］好ましくは、
エタネルセプト  ５〜１００ｍｇ／ｍＬ；
スクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択される少なくとも１つの糖  ５〜１００ｍｇ／ｍＬ；
Ｌ−メチオニン及び／又はヒスチジン  ０．２〜２０ｍｇ／ｍＬ；
塩化ナトリウム  ０．５〜５．５ｍｇ／ｍＬ；
リン酸塩（同上）  １〜３０ｍＭ
を含み、
更に任意にグリシン１〜３０ｍＭを含んでいても良いが、
ｐＨが５．０〜８．０の範囲である凍結乾燥組成物である。
［７−３］より好ましくは、
エタネルセプト  １０〜５０ｍｇ／ｍＬ；
スクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択されるいずれか１つの糖を  ５〜１００ｍｇ／ｍＬ；
メチオニン又はヒスチジンの何れか一方を０．２〜２０ｍｇ／ｍＬ；
塩化ナトリウム  ３〜５ｍｇ／ｍＬ；
リン酸塩（同上）  １〜３０ｍＭ
を含み、
更に任意にグリシン３〜１０ｍＭを含んでいても良いが、
ｐＨが５．５〜７．５の範囲である凍結乾燥組成物である。
［７−４］更に好ましくは、
エタネルセプト２０〜５０ｍｇ／ｍＬ；
スクロース及び／またはトレハロース  ５〜１００ｍｇ／ｍL；
メチオニン又はヒスチジンの何れか一方を０．２〜２０ｍｇ／ｍＬ；
塩化ナトリウム  ３〜５ｍｇ／ｍＬ；
リン酸塩（同上）  １〜３０ｍＭ
を含み、
更に任意にグリシン３〜１０ｍＭを含んでいても良いが、
ｐＨが５．５〜７．５の範囲である凍結乾燥組成物である。
［７−５］とりわけ好ましくは、
エタネルセプト２０〜５０ｍｇ／ｍＬ；
スクロースを２０〜６０ｍｇ／ｍＬ；
Ｌ−メチオニンを１ｍｇ〜２ｍｇ／ｍＬ；
塩化ナトリウム  ３〜５ｍｇ／ｍＬ；
リン酸塩（同上）  ５〜１５ｍＭ
を含み、
更に任意にグリシン３〜１０ｍＭを含んでいても良いが、
ｐＨが５．５〜７．５の範囲である凍結乾燥製剤である。
［７−６］或いはまた、
エタネルセプト２０〜５０ｍｇ／ｍＬ；
トレハロースを２０〜４０ｍｇ／ｍＬ；
Ｌ−メチオニンを１ｍｇ〜２ｍｇ／ｍＬ；
塩化ナトリウム  ３〜５ｍｇ／ｍＬ；
リン酸塩（同上）  ５〜１５ｍＭ
を含み、
更に任意にグリシン３〜１０ｍＭを含んでいても良いが、
ｐＨが５．５〜７．５の範囲である凍結乾燥製剤である。
【発明の効果】
【００３５】
本発明の凍結乾燥組成物などの医薬用の組成物は、特定の糖とアミノ酸の１種であるメチオニン及び／又はヒスチジンとを組み合わせて使用することにより、緩衝剤の種類にかかわらず、とりわけポリペプチド製剤に汎用されているリン酸緩衝液系を用いても安定な凍結乾燥製剤とすることができるだけでなく、塩濃度も比較的低くすることができ、簡便で製造も容易であって、かつ安全性の高い医薬用の組成物である。
塩化ナトリウムなどの塩濃度は、１００ｍＭ以下、さらには８０ｍＭ以下としたとしても、十分な安定性を確保することができる。
【００３６】
例えば、２５℃で２か月の加速試験又は４０℃若しくは５０℃で２か月の苛酷試験において、既存のエンブレル（登録商標）の凍結乾燥製剤と比較して優れた保存安定性を示す。このことは、従来品に比べて使用時の室温での取り扱いが容易になること、及び、従来品と比較して有効期間の延長が期待される。
【００３７】
このように、本発明の凍結乾燥組成物は凍結乾燥工程、保存時及び／又は再溶解時に優れた安定性を有しており、本発明は、安全で取り扱いが容易な新規な製剤を提供するものである。さらに、本発明の凍結乾燥組成物は、従来から医薬品に使用されていたものから選択された添加剤を組合せて調整されており、その製造も簡便で容易であり、工業的な製造にも適したものである。
【発明を実施するための形態】
【００３８】
本発明は、可溶性腫瘍壊死因子受容体（可溶性ＴＮＦ−Ｒ）、特にＴＮＦＲ−Ｆｃを含有する安定な凍結乾燥組成物を提供する。当該融合ポリペプチドの１種である一般名でエタネルセプト（etanercept）と呼ばれているポリペプチドは、ヒトＩｇＧ１のＦｃ部分（アミノ酸数２３２個）に連結したヒト７５キロダルトン（ｐ７５）腫瘍壊死因子レセプター（ＴＮＦ−Ｒ）の細胞外リガンド結合部分（アミノ酸数２３５個）から構成される融合タンパク質の二量体である。
一般にポリペプチドは溶液中で不安定であり、長期保存が難しいと言われている。本発明は、長期保存しても有効成分の当該融合ポリペプチドを安定に維持することができる新規な凍結乾燥製剤を提供する。
【００３９】
本発明における「ヒトｐ７５腫瘍壊死因子受容体の細胞外リガンド結合部分」について説明する。
ヒトｐ７５腫瘍壊死因子受容体は、ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ（腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーのメンバー１Ｂ）、ＴＮＦＲ２、又はＣＤ１２０ｂとも呼ばれている。ＴＮＦＲ２の全長のアミノ酸配列は既に知られており、公知の文献を参照することができる。ＴＮＦＲ２は、ＬＴ−α（リンホトキシン−α）（ＴＮＦ−βとも言う。）の細胞への結合を介在する。ＬＴ−αは、炎症に関連しているサイトカインの１種である。本発明におけるＴＮＦＲ２は、ＬＴ−αに対する結合能を有するものであればよい。したがって、本発明におけるＴＮＦＲ２は、天然のアミノ酸配列を有するものに限定されるものではなく、その改変体も包含している。ここで、「結合能」、「結合する」、若しくは「結合性を有する」、又は「リガンド結合能」、「リガンド結合する」、若しくは「リガンド結合活性を有する」とは、単量体形態の場合には、少なくとも１×１０７Ｍ−１の、又は少なくとも１×１０８Ｍ−１の親和性で（阻害定数、Ｋｉで）、また、二量体又は三量体のような多量体の形態の場合には、少なくとも１×１０９Ｍ−１の、又は少なくとも８×１０９Ｍ−１の親和性で、ＬＴ−αなどのリガンドに結合することを意味する。ＴＮＦＲ２又はその改変体の親和性（阻害定数）は、公知の方法により行うことができる（例えば、Mohler et al., J. Immunol., 1993, 151:1548-1561又はPeppel et al., J. Exp. Med., 1991, 174:1483-1489を参照）。
【００４０】
本発明における「ヒトｐ７５腫瘍壊死因子受容体の細胞外リガンド結合部分」とは、前記したヒトｐ７５腫瘍壊死因子受容体の細胞外領域であって、リガンドとの結合能を有し、かつ可溶性となる部分であればよい。そして、ヒト免疫グロブリンのＦｃ部分に融合することができる。
「ヒトｐ７５腫瘍壊死因子受容体の細胞外リガンド結合部分」は、ＴＮＦＲ２の細胞外部分の２００〜２４０個、好ましくは２２５〜２３５個のアミノ酸を含むものであればよい。そして、そのアミノ酸配列の少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、若しくは９４％、好ましくは少なくとも９５％、９６％、若しくは９７％、又はより好ましくは少なくとも９８％、若しくは９９％以上の同一性を有するアミノ酸配列を有するポリペプチドが包含されている。ここで、同一性とは、例えばＮＣＢＩのホームページ（http://www.ncbi.nlm.nih.gov/blast/blast.cgi）で提供されている「ｂｌａｓｔｐ」などの「ブラスト（ＢＬＡＳＴ）」プログラムなどの、公的に利用可能なコンピュータ相同性プログラムを使用して算出することができる。
本発明における「ヒトｐ７５腫瘍壊死因子受容体の細胞外リガンド結合部分」は、グリコシル化されたものでもよいし、グリコシル化されていないものでもよい。
【００４１】
本発明における「ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域」としては、重鎖定常ドメインの一部若しくは全部、又はそれらの断片が挙げられる。また、１個又は２個以上のアミノ酸が、他のアミノ酸で置換された変異体を含むことができる。「ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域」としては、例えば、ヒトＩｇＧ１の重鎖定常ドメインのＣＨ１ドメイン、ヒンジ領域、ＣＨ２ドメイン、及びＣＨ３ドメイン（全部でアミノ酸数は３３０個）を含むポリペプチドの全部若しくは一部、又はそれらの断片が挙げられる。
本発明における「ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域にヒトｐ７５腫瘍壊死因子受容体の細胞外リガンド結合部分が融合したポリペプチド」（ＴＮＦＲ−Ｆｃ）とは、前記した「ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域」と、「ヒトｐ７５腫瘍壊死因子受容体の細胞外リガンド結合部分」が融合したポリペプチドである。
「融合した」とは、「ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域」と、「ヒトｐ７５腫瘍壊死因子受容体の細胞外リガンド結合部分」が、直接又は１個以上のアミノ酸を有する適当なリンカーポリペプチドを介して共有結合をしていることである。また、融合する部分には特に制限はないが、ＴＮＦＲポリペプチドが、重鎖定常ドメインのＣＨ１領域のＮ末端に共有結合することが好ましい。
本発明における「ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域にヒトｐ７５腫瘍壊死因子受容体の細胞外リガンド結合部分が融合したポリペプチド」は、二量体として存在することが好ましい。このような二量体としては、例えば、重鎖間のジスルフィド結合の形成により行われるのが好ましい。
【００４２】
本発明における「ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域にヒトｐ７５腫瘍壊死因子受容体の細胞外リガンド結合部分が融合したポリペプチド」の好ましい例としては、エタネルセプトが挙げられる。
「エタネルセプト（etanercept）」は、ヒトＩｇＧ１の２３２位のアミノ酸位置に、ＴＮＦＲ２ポリペプチドの細胞外部分に由来する２３５個のアミノ酸からなるポリペプチドが融合したポリペプチドの二量体である。エタネルセプトを有効成分として含有している医薬品は、商品名がエンブレル（登録商標）としてすでに製造・販売されている。エンブレル（登録商標）には、皮下注射用の凍結乾燥製剤と水性注射製剤がある。
【００４３】
凍結乾燥は、真空下で行われる乾燥法で真空凍結乾燥とも言われる。一般的には、−２０℃〜−１００℃、好ましくは−２０℃〜−５０℃で固体となる常温で液体、例えば水などの液体の溶液を、低温にして溶液を固化させて、真空下で液体成分を昇華させて乾燥する方法である。
本発明における「凍結乾燥組成物」とは、１又は２以上の成分を含有している組成物を凍結乾燥してできた組成物のことである。凍結乾燥組成物の成分は、基本的には凍結乾燥される前の溶液に溶解していた溶質の成分と、近似的に同じとなる。本発明では、凍結乾燥してできた１又は２以上の成分を含有している組成物を凍結乾燥組成物と言い、それを医薬として投与可能な形態としたものを凍結乾燥製剤と言う。凍結乾燥製剤は、用時溶解して用いる製剤である。また、凍結乾燥製剤は、通常はひとつの凍結乾燥組成物からなるものであるが、本発明の凍結乾燥製剤は、必ずしもこれに限定されるものではない。
凍結乾燥製剤は、投与に当たり適当な溶媒、例えば精製水を添加して用時溶解することにより、液剤、注射剤、又は点滴用製剤などの経口又は非経口製剤とすることができる。凍結乾燥組成物、好ましくは凍結乾燥製剤に、一定量の溶媒を添加して投与可能な製剤とすることを、再構成と言う。このような溶媒としては、精製水が好ましい。
【００４４】
本発明において「溶媒を添加して再構成した」とは、本発明の凍結乾燥組成物又は凍結乾燥製剤に、一定量の溶媒を添加して投与可能な製剤とすることを言う。したがって、ある成分において、凍結乾燥組成物又は凍結乾燥製剤における配合量が溶媒を添加して再構成したときの濃度で規定されている場合は、当該凍結乾燥組成物又は凍結乾燥製剤を一定量の溶媒で再構成したときの溶液の濃度（ｍＭ又はｍｇ／ｍＬ）であるということができる。なお、添加する溶媒の量は投与方法及び使用目的等に応じて適宜設定しうるが、通常、皮下注射用として、０．１〜１０ｍＬ、好ましくは０．２〜５ｍＬ、より好ましくは０．５〜２ｍＬ、さらに好ましくは０．８〜１．２ｍＬ、特に１．０ｍＬである。
また、凍結乾燥組成物又は凍結乾燥製剤は、適当な容器、通常はガラス製の瓶の中で製造され、保管される。当該ガラス製の瓶を「バイアル」と言う。したがって、本発明において、バイアル当たりの含量とは、バイアル中にある特定の成分の重量（質量）のことを言う。
【００４５】
本発明における「ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域にヒトｐ７５腫瘍壊死因子受容体の細胞外リガンド結合部分が融合したポリペプチド（ＴＮＦＲ−Ｆｃ）を含有する凍結乾燥組成物」とは、少なくとも１種以上のＴＮＦＲ−Ｆｃを含有する溶液、例えば水溶液を、凍結乾燥して製造される凍結乾燥組成物である。当該凍結乾燥組成物は、これをそのまま、又は他の医薬組成物と共に用いて、医薬として投与可能な形態となる凍結乾燥製剤とすることができる。なお、使用量は対象疾患及び患者の病態等により適宜設定しうるが、通常、１回あたり１バイアルを使用する。
本発明におけるＴＮＦＲ−Ｆｃの配合量としては、例えば、バイアル当たりで５ｍｇ〜１００ｍｇ、１０ｍｇ〜１００ｍｇ、５ｍｇ〜５０ｍｇ、又は１０ｍｇ〜５０ｍｇの範囲で選択することができる。より具体的には、１０ｍｇ、２５ｍｇが選択される。このバイアルに１ｍＬの注射用水を添加して再構成した場合の当該ポリペプチドの濃度は、５ｍｇ／ｍＬ〜１００ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬ〜１００ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ〜５０ｍｇ／ｍＬ、又は１０ｍｇ／ｍＬ〜５０ｍｇ／ｍＬの範囲であり、具体的には１０ｍｇ／ｍＬ又は２５ｍｇ／ｍＬということになる。
【００４６】
本発明の凍結乾燥組成物におけるスクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択される少なくとも１つの糖としては、これらの糖のなかの１種又は２種以上を組み合わせて使用することができる。好ましい糖として、スクロース及び／又はトレハロースが挙げられる
本発明における「スクロース」は、ショ糖又はサッカロースと言われ、化学名は１−α−Ｄ−グルコピラノシル−２−β−Ｄ−フルクトフラノシドである。本発明のスクロースは必ずしも純粋なものでなくてもよいが、純度の高いものが好ましい。好ましいスクロースとしては医薬品グレードの精製白糖、例えば精製白糖（日局）が挙げられる。
本発明における「トレハロース」は、２分子のＤ−グルコースが還元性基どうしで結合した非還元性二糖である。トレハロースには、α，β−体のネオトレハロース及びβ，β−体のイソトレハロースの異性体が存在する。本発明におけるトレハロースは、これらのいずれでも、又はこれらの混合物でもよいが、好ましくは天然に存在するα，α−体のトレハロースが挙げられる。
本発明における「ラフィノース」は、フルクトース、ガラクトース、グルコース分子が1分子ずつグリコシド結合によって連なったものであり、スクロースの6位にD−ガラクトースがグリコシド結合した構造をとっている。化学名は、β-D-フルクトフラノシル6-O-α-D-ガラクトピラノシル-α-D-グルコピラノシドである。医療用として例えば、ニッテンラフィノース（日本甜菜製糖株式会社）があげられる。
本発明における「マルトース」は、α−D−グルコピラノシル−（１→４）−β−D−グルコピラノースである。本発明に用いられるマルトースは、必ずしも純粋なものでなくともよいが、純度の高いものが好ましい。好ましいマルトースとしては医薬品グレードが好ましく、例えばマルトース水和物（日局）があげられる。
本発明における「マルトトリオース」は、３分子のグルコースがα１−４グリコシド結合した三糖であり、化学名は4-O-(4-O-α-D-グルコピラノシル-α-D-グルコピラノシル)-D-グルコースである。
以上の各糖は、無水物の他１〜複数個の結晶水を有する水和物としても存在する。本発明においては、それらの水和物も用い得る。
本発明における、「スクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択される少なくとも１つの糖」に関しては、上記の５つの糖について説示されるが、より好ましくはスクロース及び／又はトレハロースである。
因みに、糖の結晶化度と熱安定化作用との関連についての文献（「日本食品工学会誌」、Vol.11, No.3, pp.117-123,Sep.2010の「３．３  糖の結晶化度と残存酵素活性の関係」）を参照すると、ある種のタンパク質の凍結乾燥製剤の安定化において、スクロースとトレハロースとの効果の程度の範囲内に、ラフィノース、マルトース、マルトトリオースの効果が位置づけられている。
【００４７】
本発明の凍結乾燥組成物におけるスクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択される少なくとも１つの糖、より好ましくはスクロース及び／又はトレハロースの配合量としては、バイアル当たり５ｍｇ〜１００ｍｇ、５ｍｇ〜８０ｍｇ、５ｍｇ〜７０ｍｇ、１０ｍｇ〜１００ｍｇ、１０ｍｇ〜８０ｍｇ、１０ｍｇ〜７０ｍｇ、３０ｍｇ〜１００ｍｇ、３０ｍｇ〜８０ｍｇ、又は３０ｍｇ〜７０ｍｇの範囲から選択することができる。また、当該配合量の範囲内で、複数の糖を任意の比率で混合してもよい。このバイアルに１ｍＬの注射用水を添加して再構成した場合の当該スクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択される少なくとも１つの糖、より好ましくはスクロース及び／又はトレハロースの濃度は、５ｍｇ／ｍＬ〜１００ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ〜８０ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ〜７０ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬ〜１００ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬ〜８０ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬ〜７０ｍｇ／ｍＬ、３０ｍｇ／ｍＬ〜１００ｍｇ／ｍＬ、３０ｍｇ／ｍＬ〜８０ｍｇ／ｍＬ、又は３０ｍｇ／ｍＬ〜７０ｍｇ／ｍＬの範囲ということになる。
凍結乾燥製剤として優れる為には、有効成分が安定化されていることは必須であるが、他にも保管・運搬等の取り扱いの際に凍結乾燥した内容物（ケーキ）が容易に壊れないものであること、かつ、再構成されるときに溶媒に簡便に溶解することが望ましい。本発明においても、上述される糖類の種類と量とは、凍結乾燥した際にＴＮＦＲ−Ｆｃが安定化されているのみならず、好ましくは、医療用製品としてのかかる製剤学的な実用性に鑑みて設定されるべきものである。
【００４８】
本発明における「メチオニン又はヒスチジン」としては、Ｄ−体、Ｌ−体、又はこれらの混合物のいずれでもよいが、好ましくはＬ−体が挙げられる。また、その製薬学的に許容される塩でもよく、塩酸塩などの無機塩、クエン酸塩などの有機酸塩などが挙げられるが、溶解性に優れた塩が好ましい。
本発明の凍結乾燥組成物におけるメチオニン及び／又はヒスチジンの配合量としては、遊離のメチオニン及び／又はヒスチジンに換算してバイアル当たり０．２ｍｇ〜２０ｍｇ、０．２ｍｇ〜１５ｍｇ、０．２ｍｇ〜１０ｍｇ、０．２ｍｇ〜５ｍｇ、０．２ｍｇ〜３ｍｇ、０．５ｍｇ〜２０ｍｇ、０．５ｍｇ〜１５ｍｇ、０．５ｍｇ〜１０ｍｇ、０．５ｍｇ〜５ｍｇ、０．５ｍｇ〜３ｍｇ、１ｍｇ〜２０ｍｇ、１ｍｇ〜１５ｍｇ、１ｍｇ〜１０ｍｇ、１ｍｇ〜５ｍｇ、又は１ｍｇ〜３ｍｇの範囲から選択することができる。このバイアルに１ｍＬの注射用水を添加して再構成した場合の当該メチオニン及び／又はヒスチジンの濃度は、遊離のメチオニン及び／又はヒスチジンに換算して０．２ｍｇ／ｍＬ〜２０ｍｇ／ｍＬ、０．２ｍｇ／ｍＬ〜１５ｍｇ／ｍＬ、０．２ｍｇ／ｍＬ〜１０ｍｇ／ｍＬ、０．２ｍｇ／ｍＬ〜５ｍｇ／ｍＬ、０．２ｍｇ／ｍＬ〜３ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ〜２０ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ〜１５ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ〜１０ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ〜５ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ〜３ｍｇ／ｍＬ、１ｍｇ／ｍＬ〜２０ｍｇ／ｍＬ、１ｍｇ／ｍＬ〜１５ｍｇ／ｍＬ、１ｍｇ／ｍＬ〜１０ｍｇ／ｍＬ、１ｍｇ／ｍＬ〜５ｍｇ／ｍＬ、又は１ｍｇ／ｍＬ〜３ｍｇ／ｍＬの範囲ということになる。
【００４９】
本発明における「製薬学的に受容可能な塩」としては、医薬として用いられる塩であれば、特に制限はないが、本発明の好ましい態様においてはアミノ酸又は緩衝剤として配合された成分は含まれない。例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、臭化ナトリウムなどの無機塩が挙げられる。好ましい塩としては、塩化ナトリウムが挙げられる。
本発明の凍結乾燥組成物における製薬学的に受容可能な塩の配合量としては、凍結乾燥組成物のバイアルに１ｍＬの注射用水を添加して再構成したときの濃度が、１００ｍＭ以下又は１００ｍＭ未満であり、例えば、１０ｍＭ〜１００ｍＭ、１０ｍＭ〜９０ｍＭ、１０ｍＭ〜８０ｍＭ、１０ｍＭ〜７０ｍＭ、２０ｍＭ〜１００ｍＭ、２０ｍＭ〜９０ｍＭ、２０ｍＭ〜８０ｍＭ、２０ｍＭ〜７０ｍＭ、３０ｍＭ〜１００ｍＭ、３０ｍＭ〜９０ｍＭ、３０ｍＭ〜８０ｍＭ、３０ｍＭ〜７０ｍＭ、５０ｍＭ〜１００ｍＭ、５０ｍＭ〜９０ｍＭ、５０ｍＭ〜８０ｍＭ、又は５０ｍＭ〜７０ｍＭの範囲から選択することができる。製薬学的に受容可能な塩として塩化ナトリウムを用いた場合には、バイアル当たり０．５ｍｇ〜５．５ｍｇ、０．５ｍｇ〜５．０ｍｇ、０．５ｍｇ〜４．５ｍｇ、０．５ｍｇ〜４．０ｍｇ、１ｍｇ〜５．５ｍｇ、１ｍｇ〜５．０ｍｇ、１ｍｇ〜４．５ｍｇ、１ｍｇ〜４．０ｍｇ、１．５ｍｇ〜５．５ｍｇ、１．５ｍｇ〜５．０ｍｇ、１．５ｍｇ〜４．５ｍｇ、１．５ｍｇ〜４．０ｍｇ、２ｍｇ〜５．５ｍｇ、２ｍｇ〜５．０ｍｇ、２ｍｇ〜４．５ｍｇ、２ｍｇ〜４．０ｍｇ、２．５ｍｇ〜５．５ｍｇ、２．５ｍｇ〜５．０ｍｇ、２．５ｍｇ〜４．５ｍｇ、２．５ｍｇ〜４．０ｍｇ、３ｍｇ〜５．５ｍｇ、３ｍｇ〜５．０ｍｇ、３ｍｇ〜４．５ｍｇ、又は３ｍｇ〜４．０ｍｇの範囲から選択することができる。
【００５０】
本発明の凍結乾燥組成物は、さらに緩衝剤を含有することが好ましいが、必ずしも用いる必要が無い場合もある。本発明のポリペプチドは自己緩衝作用を有しており、適度に濃縮されたポリペプチド自体が緩衝剤としても機能することがあるからである。本発明の凍結乾燥組成物に添加される当該緩衝剤としては、水性であってｐＨを５．０〜８．０、好ましくは５．５〜７．５、より好ましくは５．８〜７．２に維持することができ、医薬添加剤として許容されるものであれば、特に制限はない。例えば、リン酸緩衝剤、ヒスチジン緩衝剤、クエン酸緩衝剤、トロメタモール緩衝剤、酢酸緩衝剤、エタノールアミン緩衝剤などが挙げられる。好ましい緩衝剤としては、リン酸緩衝剤、ヒスチジン緩衝剤などが挙げられる。
本発明の凍結乾燥組成物における緩衝剤の配合量としては、凍結乾燥組成物のバイアルに１ｍＬの注射用水を添加して再構成したときの濃度として、５０ｍＭ以下、好ましくは３０ｍＭ以下が挙げられる。例えば、緩衝剤としてリン酸ナトリウム緩衝剤を用いた場合のバイアルに１ｍＬの注射用水を添加して再構成したときの当該リン酸の濃度として、１ｍＭ〜５０ｍＭ、１ｍＭ〜３０ｍＭ、１ｍＭ〜２０ｍＭ、１ｍＭ〜１０ｍＭ、２ｍＭ〜５０ｍＭ、２ｍＭ〜３０ｍＭ、２ｍＭ〜２０ｍＭ、２ｍＭ〜１０ｍＭ、３ｍＭ〜５０ｍＭ、３ｍＭ〜３０ｍＭ、３ｍＭ〜２０ｍＭ、又は３ｍＭ〜１０ｍＭの範囲から選択することができる。
【００５１】
本発明の凍結乾燥組成物は、さらにメチオニン及び／又はヒスチジン以外のアミノ酸を含有させることもできるが、特に必須ではない。本発明の凍結乾燥組成物に含有させることができるアミノ酸としては、グリシン、システイン、プロリン、セリン、グルタミン酸、アラニン、及びこれらの塩などが挙げられる。好ましいアミノ酸としては、グリシンが挙げられる。アルギニン及び／又はリジンも本発明の凍結乾燥組成物の特性に影響を与えない範囲で配合することもできるが、本発明の好ましい組成物はアルギニン及び／又はリジンを含有しない。
本発明の凍結乾燥組成物におけるメチオニン及び／又はヒスチジン以外のアミノ酸の配合量としては、凍結乾燥組成物のバイアルに１ｍＬの注射用水を添加して再構成したときの濃度として、１ｍＭ〜３０ｍＭ、１ｍＭ〜２０ｍＭ、１ｍＭ〜１０ｍＭ、２ｍＭ〜３０ｍＭ、２ｍＭ〜２０ｍＭ、２ｍＭ〜１０ｍＭ、３ｍＭ〜３０ｍＭ、３ｍＭ〜２０ｍＭ、又は３ｍＭ〜１０ｍＭの範囲から選択することができる。
【００５２】
本発明の凍結乾燥組成物は、必要に応じてさらに他の添加成分を含有させることもできる。このような添加成分としては、通常の凍結乾燥製剤に使用される成分であり、かつ本発明の凍結乾燥組成物の特性に影響を与えない成分であれば、特に制限は無い。このような添加成分としては、例えば、ラクトース、キシリトール、ソルビトール、マルトース、イノシトール、グルコース、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、ヒトＳＡ又は組換え型ＨＡ、デキストラン、ＰＶＡ、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ポリエチレンイミン、ゼラチン、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）、サルコシン、ガンマ−アミノ酪酸などが挙げられる。マンニトールも本発明の凍結乾燥組成物の特性に影響を与えない範囲で配合することもできるが、本発明の好ましい組成物はマンニトールを含有しない。
本発明の凍結乾燥組成物における他の添加成分の配合量としては、凍結乾燥組成物のバイアルに１ｍＬの注射用水を添加して再構成したときの濃度として、例えば、０．１ｍＭ〜２ｍＭ、０．１ｍＭ〜１ｍＭ、０．１ｍＭ〜０．７ｍＭ、０．５ｍＭ〜２ｍＭ、０．５ｍＭ〜１ｍＭ、又は０．５ｍＭ〜０．７ｍＭの範囲から選択される。
【００５３】
本発明の凍結乾燥組成物の凍結乾燥前の水溶液（調製液）のｐＨは、５．０〜８．０、好ましくは５．５〜７．５、より好ましくは５．８〜７．２である。また、本発明の凍結乾燥組成物のバイアルに１ｍＬの注射用水を添加して再構成したときの溶液のｐＨも同様である。ｐＨは、当業者には公知の方法で調整することができる。
【００５４】
本発明の凍結乾燥組成物のバイアルに１ｍＬの注射用水を添加して再構成したときの溶液の浸透圧としては、一般的には、血清または血漿とほぼ等張になるのが好ましく、一般的な範囲、例えば、約１８０〜４８０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇＨ２Ｏ、好ましくは２００〜４００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇＨ２Ｏ、より好ましくは２５０〜３５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇＨ２Ｏ、さらに好ましくは２８０〜３２０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇＨ２Ｏの重量モル浸透圧濃度が挙げられる。
また、生理食塩水、例えば、０．９％ＮａＣｌ水溶液の浸透圧に対する比で言えば、本発明の凍結乾燥組成物のバイアルに１ｍＬの注射用水を添加して再構成したときの溶液の浸透圧が、０．５〜１．５、好ましくは０．８〜１．２、より好ましくは０．９〜１．１の範囲であればよい。浸透圧は、当業者には公知の方法で調整することができる。例えば、塩、糖類またはアミノ酸等の各成分の配合量または含有量は上記浸透圧の範囲を考慮して適宜調整される。
【００５５】
本発明の凍結乾燥組成物は、下記の具体例で実証されているように安定性に優れている。例えば、既に販売されている商品名がエンブレル（登録商標）の皮下注射用の凍結乾燥製剤はその添付文書において、２〜８℃で保存されると記載されているが、２５℃の暗所での加速試験、及び４０℃又は５０℃の暗所での苛酷試験のいずれにおいても本発明の凍結乾燥組成物の方が優れていることが明らかにされている。
本発明における「安定」とは、以下（１）から（５）のいずれか1つ以上の要件を満たすことである。なお、保存期間は、例えば、製造時または製品の購入時、好ましくは製造時からの期間を示す。
（１）４０℃（相対湿度７５％）の暗所で、少なくとも１箇月、好ましくは１．５箇月、より好ましくは２箇月間保存したときの、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥ−ＨＰＬＣ）における高分子量不純物（ＨＭＷ）の量（％）の経時変化（増加量；％（実施例参照））が、１．５％以下、好ましくは１．０％以下、より好ましくは０．７％以下、さらに好ましくは０．５％以下、特に好ましくは０．２％以下である場合。
（２）５０℃の暗所で、少なくとも２週間、好ましくは４週間、より好ましくは６週間保存したときの、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥ−ＨＰＬＣ）での高分子量不純物（ＨＭＷ）量（％）の経時変化（増加量；％）が、２．０％以下、好ましくは１．５％以下、より好ましくは１．０％以下、さらに好ましくは０．８％以下、特に好ましくは０．５％以下である場合。
（３）４０℃（相対湿度７５％）の暗所で、少なくとも１箇月、好ましくは１．５箇月、より好ましくは２箇月間保存したときの、疎水相互作用クロマトグラフィー（ＨＩ−ＨＰＬＣ）での相対的に疎水性の高い不純物量（％）の経時変化（増加量；％）が、２．０％以下、好ましくは１．５％以下、より好ましくは１．０％以下、さらに好ましくは０．８％以下、特に好ましくは０．５％以下である場合。
（４）５０℃の暗所で、少なくとも２週間、好ましくは４週間、より好ましくは６週間保存したときの、疎水相互作用クロマトグラフィー（ＨＩ−ＨＰＬＣ）での相対的に疎水性の高い不純物量（％）の経時変化（増加量；％）が、３．０％以下、好ましくは２．０％以下、より好ましくは１．５％以下、さらに好ましくは１．０％以下、特に好ましくは０．５％以下である場合。
（５）前記の（１）から（４）において、高分子量不純物（ＨＭＷ）の量若しくは相対的に疎水性の高い不純物の増加量（％）が、既に販売されている商品名エンブレル（登録商標）の凍結乾燥製剤のそれと比較して、同等以下、好ましくはエンブレル（登録商標）の０．８倍以下、より好ましくは０．６倍以下、さらに好ましくは０．４倍以下、特に好ましくは０．２倍以下である場合。
【００５６】
本発明の凍結乾燥組成物は安定性に優れ、本発明の凍結乾燥組成物はより高純度の有効成分を投与することが可能となるだけでなく、より長期の保存が可能となる。例えば、２〜８℃、具体的には５℃の暗所において３年以上の保存が可能となり、さらに高温、例えば、室温での保存も可能となると考えられる。
【００５７】
本発明の凍結乾燥組成物は、通常の凍結乾燥の製造方法に準じて製造することができる。例えば、本発明の凍結乾燥組成物は、
（Ａ）（１）スクロース、トレハロース、ラフィノース、マルトース及びマルトトリオースからなる糖類から選択される少なくとも１つの糖、より好ましくはスクロース及び／又はトレハロース、
（２）メチオニン及び／又はヒスチジン、
（３）１００ｍＭ以下の製薬学的に受容可能な塩、
（４）ＴＮＦＲ−Ｆｃ、及び、
（５）溶媒、
を含有してなる液状組成物を製造する工程；
（Ｂ）当該液状組成物を容器へ分注する工程；及び、
（Ｃ）当該液状組成物を凍結乾燥する工程；
を含有してなる方法により製造することができる。
また、必要に応じて、上記工程（Ａ）と（Ｂ）の間に当該液状組成物をろ過する工程を含めることができる。
ここにおける「液状組成物」は均一又は不均一の溶液であってよいが、均一な溶液であることが好ましい。また、当該液状組成物は、前記の各成分を精製水などの溶媒に混合することにより製造することができる。混合、溶解は、当業者には公知の各種の手段で行うことができる。また、混合する順序も特に制限は無い。
凍結乾燥は、当業者には公知の各種の装置を用いて行うことができる。
【００５８】
本発明は、新規な本発明の凍結乾燥組成物を提供するものである。さらに、本発明は、当該凍結乾燥組成物及び当該凍結乾燥組成物を液状組成物に再構成するための溶媒を含有してなるキットを提供する。凍結乾燥組成物を液状組成物に再構成するための溶媒としては水、特に注射用の精製水が好ましい。
当該キットは、用時溶解して患者に投与するために必要な成分を包含している。また、当該キットは、さらに投与に必要な成分又は物品を含有していてもよい。例えば、取扱説明書や当該キットを包装するための包装用物品などを含有していてもよい。
【００５９】
本発明は、さらに、前記してきた本発明の凍結乾燥組成物を、液状組成物に再構成するための溶媒で再構成してなる液状組成物を提供する。ここにおける本発明の液状組成物は、例えば、本発明の凍結乾燥組成物を溶媒に溶解して製造することができる。溶媒としては水、特に注射用の精製水が好ましい。
本発明の液状組成物は、注射用として使用することもできるが、点滴用として使用してもよい。なお、添加する溶媒の量は投与方法及び使用目的等に応じて適宜設定しうるが、好ましくは皮下注射用として、０．１〜１０ｍＬ、好ましくは０．２〜５ｍＬ、より好ましくは０．５〜２ｍＬ、さらに好ましくは０．８〜１．５ｍＬ、特に１．０ｍＬである。
【００６０】
本発明の凍結乾燥組成物又はそれを溶媒で再構成してなる液状組成物は、有効成分を含有しており、疾患を患う患者の治療用の医薬組成物とすることもできる。
本発明の医薬組成物における治療対象となる疾患としては、自己免疫疾患、強直性脊椎炎、若年性関節リウマチ、乾癬、乾癬性関節炎、慢性関節リウマチ、ウェゲナー疾患（肉芽腫症）、クローン病又は炎症性腸疾患、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、Ｃ型肝炎、子宮内膜症、喘息、悪液質、アトピー性皮膚炎、アルツハイマー及びがんからなる疾患群から選択される疾患が挙げられる。
本発明の医薬組成物は、疾患、症状の重症度、患者の病歴、及び／又は（前）治療に対する反応などにより、適宜用量を決めることができる。例えば、成人１人当たりの本発明の有効成分の量として、約２０〜１０００ｍｇ、約２０〜５００ｍｇ、約２０〜２００ｍｇ、又は約２０〜１００ｍｇの範囲で適宜投与することもできる。投与は、１用量２０〜１００ｍｇの範囲で１日１回から数回、又は週２回以上などの方法で医師が調整及び監視して投与することができる。また別の実施形態では、注射投与の容認用量は、８０〜１００ｍｇ／用量、例えば１用量当たり８０ｍｇを含む。用量は毎週、週２回又は数週間（例えば、３週間）に分けて投与することができる。本発明の前記した医薬組成物は、皮下、筋肉内、静脈内、脳脊髄内、関節内、関節滑液襄内などに投与してもよい。
【００６１】
少なくとも３週間の期間にわたって週１から３回１用量１００ｍｇまでの医薬組成物で患者の状態が改善するが、望ましい程度の改善を誘導するにはより長い期間の治療が必要となることもあるということがさらに考慮される。しかしながら、不治の慢性症状に対しては投与計画を無期限に続けてもよい。小児科の患者（年齢４〜１７歳）に適した投与計画には、１用量０．４ｍｇ／ｋｇから５ｍｇ／ｋｇの本発明の前記した医薬組成物を週１回以上投与することが含まれていてもよい。
【００６２】
より具体的には、慢性関節リウマチの場合には、２５ｍｇの本発明の前記した医薬組成物を週２回投与してもよい。あるいは、５０ｍｇ週１回の投与は安全で効果的であることが明らかとなっている。
【００６３】
乾癬性関節炎及び強直性脊椎炎の場合には、推奨用量は、本発明の前記した医薬組成物の有効成分の２５ｍｇ週２回投与又は５０ｍｇ週１回投与である。
【００６４】
プラーク乾癬になると、本発明の前記した医薬組成物の推奨用量は、２５ｍｇ週２回投与又は５０ｍｇ週１回投与である。あるいは、５０ｍｇ週２回投与を１２週間までの間使用し、その後必要に応じて１用量２５ｍｇを週２回又は５０ｍｇを週１回で使用してもよい。寛解を達成するまで、２４週間までの間ＴＮＦＲ：Ｆｃを用いた治療を継続すべきである。２４週間を越える継続的な治療は、一部の成人患者にとって適切である場合がある。１２週間後に応答を示さない患者の治療は中止するべきである。本発明の前記した医薬組成物を用いた再治療が示される場合、治療継続期間と同じガイダンスに従うべきである。用量は２５ｍｇ週２回又は５０ｍｇ週１回であるべきである。
【００６５】
若年性特発性関節炎（年齢４歳以上）に関して、溶媒１ｍｌ中に２５ｍｇの本発明の前記した医薬組成物を、０．４ｍｇ／ｋｇ（１用量当たり最大２５ｍｇまで）を、用量間隔３〜４日で皮下注射として週２回投与してもよい。
【００６６】
小児科のプラーク乾癬（年齢８歳以上）に関しては、０．８ｍｇ／ｋｇ週１回（１用量当たり最大５０ｍｇまで）を２４週間までの間投与してもよい。１２週間後に応答を示さない患者の治療は中止するべきである。本発明の前記した医薬組成物を用いた再治療の必要が示される場合、治療継続期間に関する上記ガイダンスに従うべきである。用量は０．８ｍｇ／ｋｇ（１用量当たり最大５０ｍｇまで）週１回とするべきである。
【００６７】
本発明の好ましい凍結乾燥組成物としては、有効成分として１０ｍｇ〜５０ｍｇの範囲のエタネルセプト（etanercept）を含有する凍結乾燥組成物が挙げられる。このような凍結乾燥組成物をより具体的に例示すれば、次のとおりとなる。なお、濃度表示は溶媒を添加して再構成(再溶解)したときの値である。
製剤例１：
（１）２０ｍｇ〜６０ｍｇの精製白糖；
（２）１ｍｇ〜２ｍｇのＬ−メチオニン；
（３）３ｍｇ〜５ｍｇの塩化ナトリウム；
（４）５ｍＭ〜１５ｍＭのリン酸塩；及び、
（５）１０ｍｇ〜５０ｍｇの範囲のエタネルセプト；
を含有してなる凍結乾燥組成物。当該凍結乾燥組成物は、約１ｍＬの注射用精製水に用時溶解して使用することができる。
【００６８】
製剤例２：
（１）２０ｍｇ〜６０ｍｇの精製白糖；
（２）１ｍｇ〜２ｍｇのＬ−メチオニン；
（３）３ｍｇ〜５ｍｇの塩化ナトリウム；
（４）５ｍＭ〜１５ｍＭのリン酸塩；
（５）５ｍｇ〜１５ｍｇのグリシン；及び、
（６）１０ｍｇ〜５０ｍｇの範囲のエタネルセプト；
を含有してなる凍結乾燥組成物。当該凍結乾燥組成物は、約１ｍＬの注射用精製水に用時溶解して使用することができる。
【００６９】
製剤例３：
（１）２０ｍｇ〜６０ｍｇの精製白糖；
（２）１ｍｇ〜２ｍｇのＬ−メチオニン；
（３）３ｍｇ〜５ｍｇの塩化ナトリウム；
（４）５ｍＭ〜１５ｍＭのリン酸塩；
（５）ヒスチジンとして５ｍＭ〜１０ｍＭのヒスチジン及び／またはヒスチジン塩酸塩；及び、
（６）１０ｍｇ〜５０ｍｇの範囲のエタネルセプト；
を含有してなる凍結乾燥組成物。当該凍結乾燥組成物は、約１ｍＬの注射用精製水に用時溶解して使用することができる。
【００７０】
製剤例４：
（１）２０ｍｇ〜６０ｍｇの精製白糖；
（２）１ｍｇ〜２ｍｇのＬ−メチオニン；
（３）３ｍｇ〜５ｍｇの塩化ナトリウム；
（４）５ｍＭ〜１５ｍＭのリン酸塩；
（５）ヒスチジンとして５ｍＭ〜１０ｍＭのヒスチジン及び／またはヒスチジン塩酸塩；
（６）５ｍｇ〜１５ｍｇのグリシン；及び、
（７）１０ｍｇ〜５０ｍｇの範囲のエタネルセプト；
を含有してなる凍結乾燥組成物。当該凍結乾燥組成物は、約１ｍＬの注射用精製水に用時溶解して使用することができる。
【００７１】
製剤例５：
（１）２０ｍｇ〜６０ｍｇのトレハロース；
（２）１ｍｇ〜２ｍｇのＬ−メチオニン；
（３）３ｍｇ〜５ｍｇの塩化ナトリウム；
（４）５ｍＭ〜１５ｍＭのリン酸塩；
（５）１０ｍｇ〜５０ｍｇの範囲のエタネルセプト；
を含有してなる凍結乾燥組成物。当該凍結乾燥組成物は、約１ｍＬの注射用精製水に用時溶解して使用することができる。
【００７２】
製剤例６：
（１）２０ｍｇ〜６０ｍｇのトレハロース；
（２）１ｍｇ〜２ｍｇのＬ−メチオニン；
（３）３ｍｇ〜５ｍｇの塩化ナトリウム；
（４）５ｍＭ〜１５ｍＭのリン酸塩；
（５）５ｍｇ〜１５ｍｇのグリシン；及び、
（６）１０ｍｇ〜５０ｍｇの範囲のエタネルセプト；
を含有してなる凍結乾燥組成物。当該凍結乾燥組成物は、約１ｍＬの注射用精製水に用時溶解して使用することができる。
【００７３】
製剤例７：
（１）２０ｍｇ〜６０ｍｇのトレハロース；
（２）１ｍｇ〜２ｍｇのＬ−メチオニン；
（３）３ｍｇ〜５ｍｇの塩化ナトリウム；
（４）５ｍＭ〜１５ｍＭのリン酸塩；
（５）ヒスチジンとして５ｍＭ〜１０ｍＭのヒスチジン及び／またはヒスチジン塩酸塩；及び、
（６）１０ｍｇ〜５０ｍｇの範囲のエタネルセプト；
を含有してなる凍結乾燥組成物。当該凍結乾燥組成物は、約１ｍＬの注射用精製水に用時溶解して使用することができる。
【００７４】
製剤例８：
（１）２０ｍｇ〜６０ｍｇのトレハロース；
（２）１ｍｇ〜２ｍｇのＬ−メチオニン；
（３）３ｍｇ〜５ｍｇの塩化ナトリウム；
（４）５ｍＭ〜１５ｍＭのリン酸塩；
（５）ヒスチジンとして５ｍＭ〜１０ｍＭのヒスチジン及び／またはヒスチジン塩酸塩；
（６）５ｍｇ〜１５ｍｇのグリシン；及び、
（７）１０ｍｇ〜５０ｍｇの範囲のエタネルセプト；
を含有してなる凍結乾燥組成物。当該凍結乾燥組成物は、約１ｍＬの注射用精製水に用時溶解して使用することができる。
【００７５】
製剤例９：
（１）２０ｍｇ〜６０ｍｇのラフィノース；
（２）１ｍｇ〜２ｍｇのＬ−メチオニン；
（３）３ｍｇ〜５ｍｇの塩化ナトリウム；
（４）５ｍＭ〜１５ｍＭのリン酸塩；
（５）ヒスチジンとして５ｍＭ〜１０ｍＭのヒスチジン及び／またはヒスチジン塩酸塩；及び、
（６）１０ｍｇ〜５０ｍｇの範囲のエタネルセプト；
を含有してなる凍結乾燥組成物。当該凍結乾燥組成物は、約１ｍＬの注射用精製水に用時溶解して使用することができる。
【００７６】
製剤例１０：
（１）２０ｍｇ〜６０ｍｇのマルトース；
（２）１ｍｇ〜２ｍｇのＬ−メチオニン；
（３）３ｍｇ〜５ｍｇの塩化ナトリウム；
（４）５ｍＭ〜１５ｍＭのリン酸塩；
（５）ヒスチジンとして５ｍＭ〜１０ｍＭのヒスチジン及び／またはヒスチジン塩酸塩；及び、
（６）１０ｍｇ〜５０ｍｇの範囲のエタネルセプト；
を含有してなる凍結乾燥組成物。当該凍結乾燥組成物は、約１ｍＬの注射用精製水に用時溶解して使用することができる。
【００７７】
製剤例１１：
（１）２０ｍｇ〜６０ｍｇのマルトトリオース；
（２）１ｍｇ〜２ｍｇのＬ−メチオニン；
（３）３ｍｇ〜５ｍｇの塩化ナトリウム；
（４）５ｍＭ〜１５ｍＭのリン酸塩；
（５）ヒスチジンとして５ｍＭ〜１０ｍＭのヒスチジン及び／またはヒスチジン塩酸塩；及び、
（６）１０ｍｇ〜５０ｍｇの範囲のエタネルセプト；
を含有してなる凍結乾燥組成物。当該凍結乾燥組成物は、約１ｍＬの注射用精製水に用時溶解して使用することができる。
なお、以上の製剤例１〜１１におけるリン酸塩としては、一般的なリン酸塩緩衝剤（例えば、リン酸ナトリウム緩衝剤が用いうるが、より具体的には、リン酸二水素ナトリウム・２水和物／リン酸水素二ナトリウム・１２水和物の混合物が挙げられる。
【００７８】
以下、実施例により本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれら実施例により何ら限定されるものではない。
以下に示す実施例等で使用した「エタネルセプト」は、公知の方法で調製可能または市販品を入手可能である。
以下に示す実施例で使用したサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥ−ＨＰＬＣ）で用いたカラムは、内径８ｍｍ，長さ３０ｃｍのステンレス管に粒径５μｍの液体クロマトグラフィー用ジオールシリカゲルを充てんしたもの（一例として、製品名ＹＭＣ Ｐａｃｋ Ｄｉｏｌ３００（株式会社ワイエムシィ製））であり、凝集体等の高分子量不純物（ＨＭＷ）の量は、有効成分のエタネルセプトよりも高分子量側に溶出する（溶出の早い）ピークの積分値を合計したものである。
以下に示す実施例で使用した疎水相互作用クロマトグラフィー（ＨＩ−ＨＰＬＣ）で用いたカラムは、内径４．６ｍｍ，長さ３．５ｃｍのステンレス管に粒径２．５μｍのブチル基を固定化した非多孔性親水性ポリマーゲルを充てんしたもの（一例として、製品名Ｂｕｔｙｌ−ＮＰＲ（東ソー株式会社製））であり、相対的に疎水性の高い不純物の量は、有効成分のエタネルセプトよりも溶出の遅い時間に出現するピークの積分値である。
【実施例１】
【００７９】
次に示す成分、
（１）精製白糖（日局）            ２５ｍｇ
（２）メチオニン                    １．９ｍｇ
（３）塩化ナトリウム                ３．７ｍｇ
（４）リン酸ナトリウム緩衝剤      １０ｍＭ
（５）グリシン                    １０ｍｇ
（６）エタネルセプト              ２５ｍｇ
が１．２ｍＬ中に含まれるように注射用精製水を用いて調整した水溶液（調製液）を調製した。当該溶液のｐＨは、６．３であった。得られた溶液を、０．２２μｍのフィルターを用いて濾過し、濾液を各バイアルに１．２ｍＬずつ充填した。このバイアルを凍結乾燥して、エタネルセプト含有の凍結乾燥組成物を得た。得られた凍結乾燥組成物は、そのまま凍結乾燥製剤として使用することができる。
【実施例２】
【００８０】
実施例１と同様にして、下記の表１に示す成分を含有する凍結乾燥組成物を得た。表１の下段に濾過前の調製液のｐＨを併せて示す。
【００８１】
［実施例３〜８］
実施例１と同様にして、下記の表１に示す成分を含有する実施例３〜８の凍結乾燥組成物を得た。表１の下段に濾過前の調製液のそれぞれｐＨを併せて示す。
【００８２】
【表１】
0006480154.tif 000002
【００８３】
［比較例１］
既に製造・販売されているエンブレル（登録商標）の凍結乾燥製剤を比較例として用いた。当該凍結乾燥製剤の成分は次のとおりである。
（１）精製白糖                １０ｍｇ
（２）Ｄ−マンニトール        ４０ｍｇ
（３）トロメタモール            ０．３２ｍｇ
（４）トロメタモール塩酸塩      １．１６ｍｇ
（５）エタネルセプト          ２５ｍｇ
なお、これらの成分に注射用精製水１．０ｍＬを添加して再構成した水溶液のｐＨは７．６であった。
【００８４】
［試験例１］
前記で得られた各製剤を、それぞれ（１−１）４０℃で７５％相対湿度（ＲＨ）の暗所に１か月間保存した後、（１−２）４０℃で７５％ＲＨの暗所に１．５か月間保存した後、（１−３）４０℃で７５％ＲＨの暗所に２か月間保存した後、（２−１）５０℃の暗所に２週間保存した後、（２−２）５０℃の暗所に４週間保存した後、及び（２−３）５０℃の暗所に６週間保存した後に、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥ−ＨＰＬＣ）又は疎水相互作用クロマトグラフィー（ＨＩ−ＨＰＬＣ）により不純物を測定した。なお、再構成後の製剤のｐＨを確認したところ、何れの製剤についても保存期間中のｐＨの変化はほとんど認められなかった。
サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥ−ＨＰＬＣ）により検出された高分子量不純物（ＨＭＷ）の量、及び疎水相互作用クロマトグラフィー（ＨＩ−ＨＰＬＣ）により検出された相対的に疎水性の高い不純物の量を、それぞれのピーク面積の、全ピーク面積に対する割合（％）としてを算出し、さらに各測定時における保存開始時からの差（％）を、経時変化（増加量；％）として表示した。
サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥ−ＨＰＬＣ）による結果を次の表２、また疎水相互作用クロマトグラフィー（ＨＩ−ＨＰＬＣ）による結果を次の表３に示す。
【００８５】
【表２】
0006480154.tif 000003
【００８６】
【表３】
0006480154.tif 000004
【００８７】
これらの結果からも明らかなように、本発明の凍結乾燥製剤は、従来のエタネルセプト製剤（比較例１参照）に比べて顕著に安定となっている。
サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥ−ＨＰＬＣ）の結果（表２参照）では、４０℃２か月間の試験では、比較例１の製剤は１．８４％の増加が見られるのに対して、実施例１〜８の本発明の製剤では約０．１２％（実施例４）〜０．２９％（実施例１）程度しか不純物は増加していない。すなわち、比較例１と比べて、顕著（約１／６．３〜１／１５の範囲）に不純物の増加が抑制されていることになる。そして、本発明の製剤では、４０℃で２か月間も保存しても、不純物はほとんど増加せず、長期間にわたり安定に保存可能であることがわかる。
さらに、５０℃２週間の苛酷試験においては、比較例１の製剤では約１．７７％も増加しているのに対して、本発明の製剤では約０．１０％（実施例４）程度しか増加していない。５０℃６週間では、比較例１では約３．７１％も増加しているのに対して、実施例１〜８の本発明の製剤では約０．２２％（実施例４）から０．６５％（実施例１）程度しか不純物は増加していない。すなわち、比較例１と比べて、顕著（約１／５．７〜約１／１７の範囲）に不純物の増加が抑制されていることになる。
これらのことから、本発明の製剤では、苛酷な条件下においても十分に耐えうる保存安定性を有していることがわかる。特に、実施例の製剤においては、実施例２、４、及び６の製剤が、高分子量不純物（HMW）生成の抑制において優れた安定性を有していた。なお、本発明の実施例の製剤では開始時及び各測定時の何れにおいても低分子量不純物（ＬＭＷ）は検出されなかった。
【００８８】
疎水相互作用クロマトグラフィー（ＨＩ−ＨＰＬＣ）の結果（表３参照）でも、４０℃２か月間の試験では、比較例１の製剤は約２．６０％の増加が見られるのに対して、実施例１〜８の本発明の製剤では約０．２０％（実施例４）から０．８４％（実施例５）程度しか不純物は増加していない。すなわち、比較例１と比べて、顕著（約１／３．１〜約１／１３の範囲）に不純物の増加が抑制されていることになる。そして、本発明の製剤では、４０℃で２か月間も保存しても、不純物はほとんど増加せず、長期間にわたり安定に保存可能であることがわかる。
さらに、５０℃２週間の苛酷試験においては、比較例１の製剤では約２．４４％も増加しているのに対して、本発明の製剤では約０．０５％（実施例４）程度しか増加していない。５０℃６週間では、比較例１では約５．０２％も増加しているのに対して、実施例１〜８の本発明の製剤では約０．２３％（実施例６）から０．８０％（実施例１）程度しか不純物は増加していない。すなわち、比較例１と比べて、顕著（約１／６．２倍〜約１／２１の範囲）に不純物の増加が抑制されていることになる。
これらのことから、本発明の製剤では、苛酷な条件下においても十分に耐えうる保存安定性を有していることがわかる。特に、実施例の製剤においては、実施例４、及び６の製剤が優れた安定性を有していた。
【産業上の利用可能性】
【００８９】
本発明の凍結乾燥組成物は、極めて安定性に優れており、高純度の有効成分を維持することができ、また長期の保存が可能となり、製薬産業において有用であることから、安定性に優れた凍結乾燥製剤に関する本発明は、産業上の利用可能性を有している。