(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
被験対象の心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の発症リスクを評価するための方法であって、
ａ）被験対象の試料における、ｓＣＤ１４−ＳＴの量を測定する工程、
ｂ）被験対象の個々の、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の発症リスクを評価するために、前記工程ａ）で測定した量を、少なくとも１つの基準量と比較する工程
を含む、前記方法。
【請求項２】
被験対象において心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症を診断するための方法であって、
ａ）被験対象の試料における、ｓＣＤ１４−ＳＴの量を測定する工程、
ｂ）心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の有無を判定するために、前記工程ａ）で測定した量を、少なくとも１つの基準量と比較する工程
を含む、前記方法。
【請求項３】
心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の被験対象における死亡リスクを評価するための方法であって、
ａ）被験対象の試料における、ｓＣＤ１４−ＳＴの量を測定する工程、
ｂ）被験対象の死亡リスクを判定するために、前記工程ａ）で測定した量を、少なくとも１つの基準量と比較する工程
を含む、前記方法。
【請求項４】
心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の被験対象が、抗生物質、プロバイオティクス、及びラクツロースからなる群から選んだ物質による治療の恩恵を受けるかを評価するための方法であって、
ａ）被験対象の試料における、ｓＣＤ１４−ＳＴの量を測定する工程、
ｂ）その可能性を評価するために、前記工程ａ）で測定した量を、少なくとも１つの基準量と比較する工程
を含む、前記方法。
【請求項５】
被験対象が、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症のために入院する必要があるかを判定するための方法であって、
ａ）被験対象の試料における、ｓＣＤ１４−ＳＴの量を測定する工程、
ｂ）被験対象が入院する必要があるかを判定するために、前記工程ａ）で測定した量を、少なくとも１つの基準量と比較する工程を含む、前記方法。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法であって、
ａ’）同じ個体の同一又は異なる試料において、少なくとも１つの追加マーカーを測定する工程、
ｂ’）前記工程ａ’）で測定した少なくとも１つの追加マーカーの量を、前記追加マーカーの少なくとも１つの基準量と比較する工程、及び
ｃ’）前記ｓＣＤ１４−ＳＴに関して工程ｂ）で得られた結果と、前記の少なくとも１つの追加マーカーに関して工程ｂ’）で得られた結果とを組み合わせることにより、それぞれの工程ｃ）を実施する工程
を更に含む、前記方法。
【請求項７】
前記の少なくとも１つの追加マーカーが、ＳＴ２、ＣＲＰ、ｈｓｃＴｎＴ、及びＮＴ−ｐｒｏＢＮＰからなる群から選んだ、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
被験対象が、急性冠症候群、急性心不全、慢性心不全、冠動脈疾患、狭心症、心筋梗塞、虚血性脳卒中、出血性脳卒中、一過性脳虚血発作からなる群から選んだ１又はそれ以上の心血管疾患若しくは状態の症状を示す、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
心血管疾患若しくは状態が、
（ｉ）慢性心不全（前記ｓＣＤ１４−ＳＴの量が１１５ｐｇ／ｍＬ以上である）、
（ii）狭心症（前記ｓＣＤ１４−ＳＴの量が２１４ｐｇ／ｍＬ以上である）、
（iii）急性心不全（前記ｓＣＤ１４−ＳＴの量が２９５ｐｇ／ｍＬ以上である）、
（iv）心筋梗塞（前記ｓＣＤ１４−ＳＴの量が２６０ｐｇ／ｍＬ以上である）
のいずれか１つである、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記方法が、高い死亡リスクを示す心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の被験対象を同定するための方法である（前記ｓＣＤ１４−ＳＴの量が５００ｐｇ／ｍＬ以上である）、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記方法が、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の臨床徴候のない被験対象の、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の発症リスクを評価するための方法である、請求項１、６〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
ｓＣＤ１４−ＳＴの、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症のマーカーとしての使用。
【請求項１３】
心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症を診断するための、
被験対象の心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の発症リスクを評価するための、
心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の被験対象における死亡リスクを評価するための、
心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の被験対象が、抗生物質、プロバイオティクス、及びラクツロースからなる群から選んだ物質による治療の恩恵を受ける可能性を評価するための、及び／又は、
被験対象が、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症のために入院する必要があるかを評価するための、
キットであって、前記キットが、
ａ）被験対象からの試料における、ｓＣＤ１４−ＳＴの量を測定する手段；
ｂ）前記ａ）により測定された量に基づく、診断及び／又はリスク評価のための説明書；並びに、必要に応じて、
ｃ）少なくとも１つの追加マーカーの量を測定する手段、及び、前記の少なくとも１つの追加マーカーの測定された量に基づく診断及び／又はリスク評価のための説明書
を含む、前記キット。
【請求項１４】
前記死亡リスクが心臓手術後の死亡リスクであるか、あるいは、前記被験対象が心臓手術を体験した被験対象である、請求項３に記載の方法。
【請求項１５】
ｓＣＤ１４−ＳＴの、心臓手術後の被験対象における死亡リスクを評価するためのマーカーとしての使用。
【請求項１６】
胸痛を呈する被験対象において心臓性および非心臓性胸痛を識別するための方法であって、
ａ）被験対象の試料における、ｓＣＤ１４−ＳＴの量を測定する工程、
ｂ）心臓性胸痛の有無を判定するために、前記工程ａ）で測定した量を、少なくとも１つの基準量と比較する工程を含む、前記方法。
【請求項１７】
ｓＣＤ１４−ＳＴの、心臓性および非心臓性胸痛を識別するためのマーカーとしての使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症に対する診断又は予後を評価するための手段の分野、及び被験対象の心血管又はアテローム性動脈硬化症のリスクを評価するための方法に関する。
特には、本発明は、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症を診断するための新規方法に関する。ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体が、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の診断のための新規マーカーとして、提供される。また、本発明は、将来の心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の被験対象の発症リスクの評価のための方法を含む。更に、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の徴候を示す被験対象における急性心臓イベントの診断のための方法が提供される。好ましくは、本発明の方法は、被験対象が病院または集中治療室に入院すべきか、あるいは、被験対象が退院できるかを同定することができる。また、本発明の方法は、種々の心血管疾患若しくは状態間の識別に用いることができる。更に、本発明は、前記の各方法を実施するための装置およびキットを含む。
【背景技術】
【０００２】
被験対象が何らかの痛みを伴って救急部門に現れた場合、痛みの根本的な原因を同定し、被験対象の健康への影響を回避するために、被験対象の病理学的状態の迅速な診断が必須である。関連性の高いトピックは、患者を病院に入院させるか（更には、時間のかかる分析、及び／又は、集中治療処置のため）、あるいは、患者を自宅に退院させることができるかの判定である。
【０００３】
例えば、急性心血管イベントの場合、一定の治療計画の決定が、通常、短い時間の間に行われなければならない。心血管疾患（特には心疾患）は、西半球における罹患率および死亡率の主要な原因である。心血管疾患は、長い期間に亘って、無症候性のままであることができる。しかしながら、一度、急性心血管イベント、例えば、心筋梗塞（ＭＩ）または急性非代償性心不全（ＡＤＨＦ）が起こると、深刻な結果を有するかもしれない。従って、通常、緊急治療室において、医師の前に現れ、且つ、急性冠症候群（ＡＣＳ）（すなわち、不安定狭心症（ＵＡＰ）または心筋梗塞（ＭＩ））または急性非代償性心不全（ＡＤＨＦ；J. Am. Coll. Cardiol. 2000; 36, p. 959-969を参照）が疑われる患者に関して、迅速な診断のためのガイドラインが存在する。急性ＭＩが疑われる被験対象では、心電図が記録され、トロポニンＴ又はトロポニンＩ（ｃＴｎ）のレベルが測定される。更に、疑いのある被験対象が、胸痛、呼吸困難、動悸、吐き気、嘔吐、および当業者に公知の更なる症候群のような、明らかな症候群を示すかを分析する。被験対象が３つの基準の２つに陽性である場合、更なる検査のために入院させる。ＡＤＨＦが疑われる被験対象では、血漿ＢＮＰ又はＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度の測定が、心不全と互換性の徴候または症状を示す呼吸困難に関して評価された患者において、推奨される（J Card Fail 2010;16(6): p. e134-155参照）。
【０００４】
しかしながら、緊急治療室に現れる被験対象の構成は不均一であり、約５０％の心血管疾患若しくは状態（急性、すなわち、虚血状態と非虚血状態の両方を含む）の患者、１０％の肺合併症の患者、及び４０％の他の合併症（例えば、腫瘍）の患者（更に、心血管疾患若しくは状態かもしれない）を含む。従来の診断技術（特には、緊急事態用）は、通常、これらの様々な病理学的状態をカバーする信頼性の高い診断、及び／又は、リスク評価用として認められていない。また、欠点は、洗練された診断技術及びアッセイを実施するための充分な人員の不足並びに緊急治療室で変化する占有率にある。
【０００５】
現在のところ、医師が救急部門で直面する可能性のある種々の心血管疾患及び状態をカバーする標準化された診断手順は存在しない。従って、被験対象を退院させることができる（ルール・アウト）、あるいは、更なる検査又は（救命可能な）集中治療処置のために入院する必要がある（ルール・イン）かの判定を可能にする、心血管疾患若しくは状態の迅速かつ正確な診断は、救急部門においては充分な精度で実施できない。その結果として、多くの患者は、誤って入院するか、誤って退院するかのいずれかであろう。
【０００６】
いくつかのケースでは、いわゆる分子マーカーは、被験対象の病理学的状態の迅速かつ充分に正確な診断を確立することを可能にする。顕著な例は、前述のとおり、急性ＭＩの診断のためのｃＴｎであり、あるいは、種々の非虚血性心疾患（例えば、心不全）のためのナトリウム利尿ペプチド（特に、ＢＮＰ及びＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）である。ｃＴｎの血中濃度は、急性ＭＩの診断のために日常的に使用される、心筋壊死の高感度かつ特異的マーカーである。虚血マーカーの一例としてのｃＴｎの測定に関して、Katus et al. (Mol Cell Cardiol 1989; 21:1349-53)、Hamm et al. (NEJM 1992; 327: 146-50)、Ohmann et al. (NEJM 1996; 335: 1333-34)、Christenson et al. (Clin Chem 1998; 44: 494-501)、及びEP-A-0 394 819を参照されたい。新世代の高感度ｃＴｎテストが導入されているが、心筋梗塞診断における診断感度及び特異度の欠如が、特に緊急治療室に現れる症状持ちの患者において、未だに残っている（Apple and Christenson (Clin Chem 2012; 58: 54-61)、Thygesen et al. (JACC 2012, 60(16):1581-98)を参照）。
【０００７】
或る研究は、高齢者におけるｓＣＤ１４レベルと心血管リスクとの間に相関があることを示した（Reiner AP et al.: Soluble CD14: Genomewide Association Analysis and Relationship to Cardiovascular Risk and Mortality in Older Adults. Arterioscler Thromb Vasc Biol; published online November 15, 2012）。しかしながら、中年男性における別の研究は、ｓＣＤ１４と、冠状動脈性心疾患の患者との間に相関がないことを示す（Morange PE et al.: TLR4/Asp299Gly, CD14/C-260T, plasma levels of the soluble receptor CD14 and the risk of coronary heart disease: The PRIME Study. Eur J Hum Genet. 2004; 12:1041-1049）。
【０００８】
従って、特に、症状の発症後早期に救急部門に現れる被験対象のための、評価および／または個々のリスク層別化を可能にする、診断または予後の測定に関するニーズがある。前記測定は、過去に心血管疾患若しくは状態（特に急性心血管疾患）と診断されていない患者においても、前記評価／リスク層別化を可能とすべきである。
【０００９】
本発明の技術的課題は、前記ニーズを満足するための手段および方法の提供とみなすことができる。
【００１０】
前記の技術的課題は、クレーム及び以下の記載により特徴付けられる実施態様により解決される。
【発明の概要】
【００１１】
本発明は、それぞれ単独で又は組み合わせて、本発明の課題の解決に貢献する、以下の観点、主題、好適態様を提供する：
［１］被験対象の心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の発症リスクを評価する方法であって、
ａ）被験対象の試料における、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の量を測定する工程、
ｂ）前記工程ａ）で測定した量を、少なくとも１つの基準量と比較する工程、及び
ｃ）前記工程ｂ）で得られた結果に基づいて、被験対象の個々の、心血管疾患若しくは状態の発症リスクを評価する工程
を含む、前記方法。
［２］被験対象において心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症を診断する方法であって、
ａ）被験対象の試料における、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の量を測定する工程、
ｂ）前記工程ａ）で測定した量を、少なくとも１つの基準量と比較する工程、及び
ｃ）前記工程ｂ）で得られた結果に基づいて、心血管疾患若しくは状態の有無を判定する工程
を含む、前記方法。
［３］心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の被験対象における死亡リスクを評価する方法であって、
ａ）被験対象の試料における、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の量を測定する工程、
ｂ）前記工程ａ）で測定した量を、少なくとも１つの基準量と比較する工程、及び
ｃ）前記工程ｂ）で得られた結果に基づいて、被験対象の死亡リスクを判定する工程
を含む、前記方法。
［４］心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の被験対象が、抗生物質、プロバイオティクス、及びラクツロースからなる群から選んだ物質による治療の恩恵を受けるかを評価する方法であって、
ａ）被験対象の試料における、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の量を測定する工程、
ｂ）前記工程ａ）で測定した量を、少なくとも１つの基準量と比較する工程、及び
ｃ）前記工程ｂ）で得られた結果に基づいて、その可能性を評価する工程
を含む、前記方法。
［５］被験対象が、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症のために入院する必要があるかを判定する方法であって、
ａ）被験対象の試料における、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の量を測定する工程、
ｂ）前記工程ａ）で測定した量を、少なくとも１つの基準量と比較する工程、及び
ｃ）前記工程ｂ）で得られた結果に基づいて、被験対象が入院する必要があるかを判定する工程
を含む、前記方法。
［６］前記［１］〜［５］のいずれかに記載の方法であって、
ａ’）同じ個体の同一又は異なる試料において、少なくとも１つの追加マーカーを測定する工程、
ｂ’）前記工程ａ’）で測定した少なくとも１つの追加マーカーの量を、前記追加マーカーの少なくとも１つの基準量と比較する工程、及び
ｃ’）前記化合物に関して工程ｂ）で得られた結果と、前記の少なくとも１つの追加マーカーに関して工程ｂ’）で得られた結果とを組み合わせることにより、それぞれの工程ｃ）を実施する工程
を更に含む、前記方法。
［７］前記工程ｃ’）が、前記化合物に関して工程ｂ）で得られた結果と、前記の少なくとも１つの追加マーカーに関する結果とを、それぞれ組み合わせることにより、被験対象の個々の、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の発症リスクを評価する工程を含む、前記［６］に記載の方法。
［８］前記工程ｃ’）が、前記化合物に関して工程ｂ）で得られた結果と、前記の少なくとも１つの追加マーカーに関する結果とを、それぞれ組み合わせることにより、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の有無を判定する工程を含む、前記［６］に記載の方法。
［９］前記工程ｃ’）が、前記化合物に関して工程ｂ）で得られた結果と、前記の少なくとも１つの追加マーカーに関する結果とを、それぞれ組み合わせることにより、被験対象の死亡リスクを判定する工程を含む、前記［６］に記載の方法。
［１０］前記工程ｃ’）が、前記化合物に関して工程ｂ）で得られた結果と、前記の少なくとも１つの追加マーカーに関する結果とを、それぞれ組み合わせることにより、被験対象が、抗生物質、プロバイオティクス、及びラクツロースからなる群から選んだ物質による治療の恩恵を受けるかを判定する工程を含む、前記［６］に記載の方法。
［１１］前記工程ｃ’）が、前記化合物に関して工程ｂ）で得られた結果と、前記の少なくとも１つの追加マーカーに関する結果とを、それぞれ組み合わせることにより、被験対象が入院する必要があるかを判定する工程を含む、前記［６］に記載の方法。
［１２］前記抗生物質が腸に吸収されない、前記［４］又は［６］に記載の方法。
［１３］前記抗生物質がアミノグリコシドである、前記［４］、［６］、［１２］のいずれかに記載の方法。
［１４］前記抗生物質がネオマイシンまたはパロマイシンである、前記［４］、［６］、［１２］、［１３］のいずれかに記載の方法。
［１５］前記被験対象が心血管疾患若しくは状態（好ましくは急性心不全）である、前記［４］、［６］、又は［１２］〜［１４］のいずれかに記載の方法。
［１６］前記工程ｃ’）が、前記化合物に関して工程ｂ）で得られた結果と、前記の少なくとも１つの追加マーカーに関する結果とを、それぞれ組み合わせることにより、被験対象が入院する必要があるかを判定する工程を含む、前記［６］に記載の方法。
［１７］前記の少なくとも１つの追加マーカーが、神経ホルモンマーカー、水分バランスの調節因子、虚血性心臓マーカー、サイトカイン、炎症マーカー、及び細胞接着分子からなる群から選んだ、前記［６］〜［１６］のいずれかに記載の方法。
［１８］好ましくは、前記の少なくとも１つの追加マーカーが、プロカルシトニン、Ｃ反応性タンパク質、コペプチン、及びトランスフォーミング増殖因子−βサイトカインスーパーファミリーマーカーからなる群、及び／又は、神経ホルモンマーカー、虚血性心臓マーカー、炎症マーカー、及び、必要に応じてインターロイキン−１受容体ファミリーマーカーからなる群から選んだ、前記［６］〜［１７］のいずれかに記載の方法。
［１９］被験対象が、急性冠症候群、急性心不全、慢性心不全、冠動脈疾患、狭心症、心筋梗塞、虚血性脳卒中、出血性脳卒中、一過性脳虚血発作からなる群から選んだ１又はそれ以上の心血管疾患若しくは状態の症状を示す、前記［１］〜［１８］のいずれかに記載の方法。
［２０］前記方法が、慢性心不全の診断方法である（前記化合物（好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の量が、好ましくは１１５ｐｇ／ｍＬ以上、より好ましくは１５０ｐｇ／ｍＬ以上、更に好ましくは２６０ｐｇ／ｍＬ以上である）、前記［１］〜［１９］のいずれかに記載の方法。
［２１］前記方法が、慢性心不全の診断方法である（前記化合物（好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の量が、好ましくは１１５ｐｇ／ｍＬ〜４０００ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは１５０ｐｇ／ｍＬ〜３０００ｐｇ／ｍＬ、更に好ましくは２６０ｐｇ／ｍＬ〜２０００ｐｇ／ｍＬである）、前記［１］〜［１９］のいずれかに記載の方法。
［２２］前記方法が、不安定狭心症の診断方法である（前記化合物（好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の量が、好ましくは２１４ｐｇ／ｍＬ以上、より好ましくは２１６ｐｇ／ｍＬ以上、更に好ましくは２２２ｐｇ／ｍＬ以上である）、前記［１］〜［１９］のいずれかに記載の方法。
［２３］前記方法が、不安定狭心症の診断方法である（前記化合物（好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の量が、好ましくは２１４ｐｇ／ｍＬ〜４０００ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは２１６ｐｇ／ｍＬ〜３０００ｐｇ／ｍＬ、更に好ましくは２２２ｐｇ／ｍＬ〜２０００ｐｇ／ｍＬである）、前記［１］〜［１９］のいずれかに記載の方法。
［２４］前記方法が、急性心不全の診断方法である（前記化合物（好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の量が、好ましくは２９５ｐｇ／ｍＬ以上、より好ましくは３５４ｐｇ／ｍＬ以上、更に好ましくは４５５ｐｇ／ｍＬ以上である）、前記［１］〜［１９］のいずれかに記載の方法。
［２５］前記方法が、急性心不全の診断方法である（前記化合物（好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の量が、好ましくは２９５ｐｇ／ｍＬ〜４０００ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは３５４ｐｇ／ｍＬ〜３０００ｐｇ／ｍＬ、更に好ましくは４５５ｐｇ／ｍＬ〜２０００ｐｇ／ｍＬである）、前記［１］〜［１９］のいずれかに記載の方法。
［２６］前記方法が、急性非代償性心不全（ＡＤＨＦ）の診断方法である、前記［１］〜［１９］、２４、又は２５のいずれかに記載の方法。
［２７］前記方法が、心筋梗塞の診断方法である（ｓＣＤ１４−ＳＴの量が、好ましくは２６０ｐｇ／ｍＬ以上、より好ましくは２７６ｐｇ／ｍＬ以上、更に好ましくは２９５ｐｇ／ｍＬ以上である）、前記［１］〜［１９］のいずれかに記載の方法。
［２８］前記方法が、心筋梗塞の診断方法である（ｓＣＤ１４−ＳＴの量が、好ましくは２６０ｐｇ／ｍＬ〜４０００ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは２７６ｐｇ／ｍＬ〜３０００ｐｇ／ｍＬ、更に好ましくは２９５ｐｇ／ｍＬ〜２０００ｐｇ／ｍＬである）、前記［１］〜［１９］のいずれかに記載の方法。
［２９］前記方法が、非ＳＴ上昇型心筋梗塞の診断方法である、前記［１］〜［１９］、［２７］、［２８］のいずれかに記載の方法。
［３０］前記方法が、慢性心不全と急性心不全とを識別する方法であり、急性心不全の被験対象からの試料における前記化合物（好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の量が、好ましくは３４０ｐｇ／ｍＬ以上、より好ましくは３５４ｐｇ／ｍＬ以上、更に好ましくは４５５ｐｇ／ｍＬ以上である）、前記［１］〜［１９］のいずれかに記載の方法。
［３１］前記方法が、高い死亡リスクを示す心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の被験対象を同定する方法である（前記化合物（好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の量が、好ましくは５００ｐｇ／ｍＬ以上、より好ましくは８００ｐｇ／ｍＬ以上、更に好ましくは１３００ｐｇ／ｍＬ以上である）、前記［１］〜［１９］のいずれかに記載の方法。
［３２］前記方法が、高い死亡リスクを示す心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の被験対象を同定する方法である（前記化合物（好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の量が、好ましくは５００ｐｇ／ｍＬ〜４０００ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは８００ｐｇ／ｍＬ〜３０００ｐｇ／ｍＬ、更に好ましくは１３００ｐｇ／ｍＬ〜２０００ｐｇ／ｍＬである）、前記［１］〜［１９］のいずれかに記載の方法。
［３３］前記方法が、高い死亡リスクを示す急性心不全の被験対象のサブグループを同定する方法である、前記［１］〜［１９］、［３１］、［３２］のいずれかに記載の方法。
［３４］前記方法が、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の被験対象の予後を評価する方法である、前記［１］〜［３３］のいずれかに記載の方法。
［３５］前記方法が、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の臨床徴候のない被験対象の、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の発症リスクを評価する方法である、前記［１］〜［１９］のいずれかに記載の方法。
［３６］被験対象からの試料において測定された前記化合物（好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の量が、好ましくは２２５ｐｇ／ｍＬ以上、より好ましくは２４０ｐｇ／ｍＬ以上、更に好ましくは２６０ｐｇ／ｍＬ以上である場合に、前記被験対象は、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の高い発症リスクを有する、前記［３５］に記載の方法。
［３７］健常者における前記化合物（好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の基準量が、好ましくは２２３ｐｇ／ｍＬ〜２６２ｐｇ／ｍＬである、前記［１］〜［３６］のいずれかに記載の方法。
［３８］前記試料が血液試料である、前記［１］〜［３７］のいずれかに記載の方法。
［３９］前記試料が、被験対象から単離した試料である、前記［３８］に記載の方法。
［４０］インビトロで実施する、前記［１］〜［３９］のいずれかに記載の方法。
［４１］前記化合物の量、及び／又は、少なくとも１つの追加マーカーの量の測定が、
（ｉ）ペプチドを特定リガンドと接触させる工程、
（ii）（場合により）非結合リガンドを除去する工程、
（iii）結合リガンドの量を測定する工程
を含む、前記［１］〜［４０］のいずれかに記載の方法。
［４２］前記化合物の量、及び／又は、少なくとも１つの追加マーカーの量を、イムノアッセイにより測定する、前記［１］〜［４１］のいずれかに記載の方法。
［４３］前記化合物がｓＣＤ１４−ＳＴであり、ｓＣＤ１４−ＳＴの量を、ｓＣＤ１４−ＳＴに特異的な抗体を用いて測定する、前記［１］〜［４２］のいずれかに記載の方法。
［４４］ｓＣＤ１４−ＳＴに特異的な前記抗体が、ｓＣＤ１４に結合しない、前記［４３］に記載の方法。
［４５］工程ｂ）又はｂ’）における比較を、それぞれ、コンピュータを使用して実施する、前記［１］〜［４４］のいずれかに記載の方法。
［４６］前記化合物、ｓＣＤ１４−ＳＴ、及び／又は、少なくとも１つの追加マーカーの測定された量の値を、コンピュータプラグラムにより、それぞれの基準量に対応する値と比較する、前記［４５］に記載の方法。
［４７］前記コンピュータプラグラムが、前記比較結果を評価し、適当な出力フォーマットで評価結果を提供する、前記［４６］に記載の方法。
［４８］ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症のマーカーとしての使用。
［４９］心血管疾患若しくは状態が、急性冠症候群、急性心不全、慢性心不全、冠動脈疾患、狭心症、心筋梗塞、虚血性脳卒中、出血性脳卒中、一過性脳虚血発作、肺塞栓症からなる群から選んだ、前記［４８］に記載の使用。
［５０］前記マーカーをインビトロアッセイで使用する、前記［４８］又は［４９］に記載の方法。
［５１］心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症であり、且つ、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の血漿レベルが増加している被験対象の治療における使用のための、抗生物質、プロバイオティクス、及びラクツロースからなる群から選んだ物質、
［５２］前記抗生物質が腸に吸収されない、前記［５１］に記載の使用のための物質。
［５３］前記抗生物質がアミノグリコシドである、前記［５１］又は［５２］に記載の使用のための物質。
［５４］前記抗生物質がネオマイシン又はパロマイシンである、前記［５１］〜［５３］のいずれかに記載の使用のための物質。
［５５］食細胞の機能不全に関連する疾患、例えば、尿毒症、血清オプソニンの活性の低下、補体欠損症、先天性食作用の機能障害、慢性肉芽腫症、ミエロペルオキシダーゼ欠損、白血病、悪性リンパ腫、細菌性心内膜炎、糖尿病、及び肝硬変、あるいは、敗血症の治療における使用のためでない、前記［５１］〜［５４］のいずれかに記載の使用のための物質。
［５６］増加した血漿レベルが、３４５ｐｇ／ｍＬ以上、好ましくは８００ｐｇ／ｍＬ以上、より好ましくは１３００ｐｇ／ｍＬ以上である、前記［５１］〜［５５］のいずれかに記載の使用のための物質。
［５７］心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症を診断するための、
被験対象の心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の発症リスクを評価するための、
心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の被験対象における死亡リスクを評価するための、
心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の被験対象が、抗生物質、プロバイオティクス、及びラクツロースからなる群から選んだ物質による治療の恩恵を受ける可能性を評価するための、及び／又は、
被験対象が、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症のために入院する必要があるかを評価するための、
キットであって、前記キットが、
ａ）被験対象からの試料におけるｓＣＤ１４−ＳＴの量を測定する手段；
ｂ）前記ａ）により測定されたｓＣＤ１４−ＳＴの量に基づく、診断及び／又はリスク評価のための説明書；並びに、必要に応じて、
ｃ）少なくとも１つの追加マーカーの量を測定する手段、及び、前記の少なくとも１つの追加マーカーの測定された量に基づく診断及び／又はリスク評価のための説明書
を含む、前記キット。
［５８］前記死亡リスクが心臓手術後の死亡リスクであるか、あるいは、前記被験対象が心臓手術を体験した被験対象である、前記［１］〜［４７］のいずれかに記載の方法。
［５９］前記死亡リスクが心臓手術後の死亡リスクであるか、あるいは、前記被験対象が心臓手術を体験した被験対象である、前記［３］に記載の方法。
［６０］ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の、心臓手術後の被験対象における死亡リスクを評価するためのマーカーとしての使用。
［６１］胸痛を呈する被験対象において心臓性および非心臓性胸痛を識別する方法であって、
ａ）被験対象の試料における、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の量を測定する工程、
ｂ）前記工程ａ）で測定した量を、少なくとも１つの基準量と比較する工程、及び
ｃ）前記工程ｂ）で得られた結果に基づいて、心臓性胸痛の有無を判定する工程
を含む、前記方法。
［６２］ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の、心臓性および非心臓性胸痛を識別するためのマーカーとしての使用。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】健常対照群と異なる被験対象群におけるｓＣＤ１４−ＳＴ血漿濃度。
【図２】健常対照群とＣＨＦ被験対象間の識別のためのＲＯＣ分析。
【図３】健常対照群と緊急治療室への入院時の不安定狭心症（ＵＡＰ）被験対象のｓＣＤ１４−ＳＴ血漿濃度（心筋トロポニンＩ（ｃＴｎＩ）との比較）。
【図４】不安定狭心症（ＵＡＰ）被験対象と健常対照群の識別に関するｓＣＤ１４−ＳＴ（上図）と心筋トロポニンＩ（ｃＴｎＩ、下図）のＲＯＣ曲線の比較。
【図５】健常対照群と緊急治療室への入院時の非ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＮＳＴＥＭＩ）のｓＣＤ１４−ＳＴ及び心筋トロポニンＩ（ｃＴｎＩ）値。
【図６】緊急治療室への入院時の非ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＮＳＴＥＭＩ）の検出に関するｓＣＤ１４−ＳＴの診断妥当性に関するＲＯＣ分析：健常対照群と緊急治療室でＮＳＴＥＭＩを呈する患者間のＡＵＣ曲線の比較：閾値、ｓＣＤ１４−ＳＴ＝２７６ｐｇ／ｍＬ、ｃＴｎＩ＝０．０１２ｎｇ／ｍＬ。
【図７】非ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＮＳＴＥＭＩ）の診断のためのｓＣＤ１４−ＳＴ（下図）とＰＡＴＨＦＡＳＴ  ｃＴｎＩ（上図）のインタラクティブドットダイアグラムの比較。
【図８】緊急治療室にて急性呼吸困難を呈している被験対象における急性非代償性心不全（ＡＤＨＦ）の検出に関するｓＣＤ１４−ＳＴの診断妥当性に関するＲＯＣ分析：ＡＵＣ＝１．０００（９５％信頼区間：０．９７６−１．０００）、ＳＥＮＳ＝１００％、ＳＰＥＣ＝１００％、閾値＝３１１ｐｇ／ｍＬ。
【図９】急性非代償性心不全（ＡＤＨＦ）と慢性心不全（ＣＨＦ）との識別のためのｓＣＤ１４−ＳＴのＲＯＣ曲線：ＡＵＣ＝０．９９３（９５％信頼区間：０．９５１−１．０００）、感度＝９８．３％、特異度＝９５％、閾値＝３５４ｐｇ／ｍＬ。
【図１０】健常対照群対急性非代償性心不全（ＡＤＨＦ、閾値３１１ｐｇ／ｍＬ）と慢性心不全（ＣＨＦ）対ＡＤＨＦ（閾値、３５４ｐｇ／ｍＬ）との間の識別のためのｓＣＤ１４−ＳＴの比較。
【図１１】生存者と非生存者におけるｓＣＤ１４−ＳＴ値（ＮＴ−プロＢＮＰとの比較）。
【図１２】死亡リスク予測のためのｓＣＤ１４−ＳＴのＲＯＣ曲線。
【図１３】死亡リスク予測のためのＲＯＣ曲線の比較。
【図１４】生存者と非生存者におけるｓＣＤ１４−ＳＴ値（ＮＴ−プロＢＮＰとの比較）。
【図１５】待機的心臓出術後の死亡リスク予測のためのｓＣＤ１４−ＳＴのＲＯＣ曲線。
【図１６】待機的心臓出術後の死亡リスク予測のためのＲＯＣ曲線の比較。
【図１７】不安定狭心症（ＵＡＰ）と非心臓性胸痛の患者におけるｓＣＤ１４−ＳＴ。
【図１８】心臓性および非心臓性胸痛間の識別のためのｓＣＤ１４−ＳＴのＲＯＣ曲線。
【図１９】（Ａ）全研究群及び（Ｂ）急性心不全（ＡＨＦ）患者におけるｓＣＤ１４−ＳＴ及びｓＣＤ１４レベルによる死亡率予測のためのＲＯＣ曲線の比較。
【図２０】心臓疾患におけるｓＣＤ１４−ＳＴ及びｓＣＤ１４の方法比較：バブロック−パッシング回帰分析は、ｓＣＤ１４とｓＣＤ１４−ＳＴとの間で充分な相関を示す（急性心不全（ＡＨＦ）患者における死亡率予測）。
【図２１】ｓＣＤ１４−ＳＴと追加マーカーとの組合せ：生存者及び非生存者間の識別のためのＲＯＣ曲線。
【発明の詳細な説明】
【００１３】
以下、本発明を好適態様及び実施例に基づいて詳細に説明するが、これらは単に例示目的のために提示するものであり、いかなる場合も本発明の範囲を限定するものと解してはならない。
【００１４】
本発明は、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の患者だけでなく、心血管疾患又はアテローム性動脈硬化症の臨床徴候はないが、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の発症リスクが高い患者においても、ｓＣＤ１４−ＳＴが上昇するとの予想外の知見に基づく。
【００１５】
ｓＣＤ１４−ＳＴは、従来、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の分野と全く関係のない用途のためのマーカーとして使用されてきた。標準的な検査だけでなく、いわゆるポイントオブケアの状況の両方に適用可能である診断技術は、敗血症のために利用可能になり、ｓＣＤ１４−ＳＴの測定に基づくシステムを用いることにより、敗血症を容易に評価できる（ＥＰ１７４６１０４Ａ１）。ｓＣＤ１４−ＳＴは、食細胞の機能を評価するために提案されている（ＥＰ２２８０２７９Ａ１）。
【００１６】
驚くべきことに、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物を測定し、それを前記化合物のそれぞれの基準量と比較することが、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症に関して優れた診断力を有していることが見出された。更に、このような化合物が、過去に心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症と診断された被験対象、あるいは、心血管疾患又はアテローム性動脈硬化症の臨床徴候がない被験対象において、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症を予測するために使用できることが見出された。更に、被験対象におけるこのような化合物のレベルを測定することは、特定の心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症を区別することが可能である。
【００１７】
特に、本発明方法は、被験対象における、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の量の測定に基づく、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の診断方法を提供する。更に、本発明方法は、被験対象の心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の発症リスクを評価することが可能であるだけでなく、被験対象の全体的な死亡リスクを評価することが可能である。好適態様では、本発明方法は、被験対象における、特定の心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症を区別する方法も提供する。あるいは、本発明方法は、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の被験対象が、抗生物質、プロバイオティクス、及びラクツロースからなる群から選んだ１又はそれ以上の物質による治療の恩恵を受けるかを評価することが可能である。本発明は、被験対象からの試料に存在する、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の量に基づいて、前記被験対象が入院する必要があるかを判定するためにも使用することができる。
【００１８】
好適態様では、本発明方法は、
ａ）被験対象の試料における、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の量を測定する工程、
ｂ）前記工程ａ）で測定した前記化合物の量を、少なくとも１つの基準量と比較する工程、及び
ｃ）前記工程ｂ）で得られた結果に基づいて、診断又はリスク／ベネフィットの評価を実施する工程
を含む。
【００１９】
具体的には、前記の診断又は評価は、任意の他の臨床的徴候又は症状とは無関係である。
【００２０】
被験対象におけるｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の量を測定することは、充分であり、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の診断に関して、及び／又は、被験対象の心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の発症リスクの評価に関して、大きな利益をもたらすことが有利に見いだされた。従来法（特に心筋トロポニンｃＴｎの測定）に対して、本発明方法は、二回以上の測定（例えば、マーカーの上昇及び低下、又は他の動態を判定するための）を必要とせず、従って、より効率的な診断及び／又は評価が可能であるという利点がある。
【００２１】
更に、本発明方法の診断及び予後予測力は、技術水準と比較して、優れている。驚くべきことに、本発明方法は、優れた感度及び／又は特異度を特徴とする結果を提供することを見出した。
【００２２】
好適態様では、本発明方法は、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物との組合せで、神経ホルモンマーカー、水分バランスの調節因子であるマーカー、虚血性心臓マーカー、トランスフォーミング増殖因子−βサイトカインスーパーファミリーマーカー、及び／又は炎症マーカーから選んだ追加マーカーの同時測定を含み、その後、測定された量を、それぞれ、測定されたマーカーの基準量と比較する。本発明によれば、更に驚くべきことに、神経ホルモンマーカー、水分バランスの調節因子であるマーカー、虚血性心臓マーカー、トランスフォーミング増殖因子−βサイトカインスーパーファミリーマーカー、インターロイキン受容体ファミリー（例えば、ＩＬ１ＲＬ１及びＳＴ２としても知られているインターロイキン−１受容体様１）、又は好中球ゼラチナーゼ関連リポカリン（ＮＧＡＬ）、及び／又は炎症マーカーから選択した追加マーカーを、被験対象の同一又は異なる試料において、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物との組合せで測定した場合、被験対象における心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の診断に関して、被験対象が心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症を発症する高いリスクを有するかどうかの同定に関して、被験対象が病院に入院すべきどうかの同定に関して、あるいは、被験対象に関する死亡リスクの予測に関して、更に高い正確性が達成されることを見出した。また、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の明らかな症状、あるいは、臨床徴候を有していない被験対象であっても、被験対象の公知の疾患状態又は他の診断とは独立して、あるいは、関係なく、このような非常に高い予測値が達成される。
【００２３】
或る態様では、前記の少なくとも１つの追加マーカーを、好ましくは、神経ホルモンマーカー（例えば、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）、虚血性心臓マーカー（例えば、ｈｓＴｎＴ）、炎症マーカー（例えば、Ｃ反応性タンパク質、ＣＲＰ）、及びインターロイキン１受容体ファミリーマーカー（例えば、ＩＬ１ＲＬ１／ＳＴ２）から選択することができる。このような態様では、疾患若しくは状態は、本発明の意味の範囲内の疾患若しくは状態、すなわち、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症である。あるいは、例えば急性心不全を含むことができる。例えば、前記疾患若しくは状態は、急性冠症候群、急性心不全、慢性心不全、冠動脈疾患、狭心症、心筋梗塞、虚血性脳卒中、出血性脳卒中、及び／又は、一過性脳虚血発作からなる群からも選択することができる。
【００２４】
本明細書で用いる用語「水分バランスの調節因子」とは、流体の取り込みと出力との間のバランスを調節及び維持するために、被験対象における恒常的制御機構に作用する物質を意味する。
【００２５】
本明細書で用いる用語「被験対象」とは、動物、好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒトを意味する。
【００２６】
本発明の好適態様では、被験対象は、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の症状があるべきではない。特に、被験対象は、米国心臓病学会によって定義されるような急性心血管イベント、例えば、上述のような胸部不快感、呼吸困難、心電図変化、及びその他を呈するべきではない。より好ましくは、被験対象は、直前の２４時間以内に少なくとも５分間持続する狭心症の一回以上のエピソードがあるべきではなく、予め存在することが知られておらず、共存する障害に起因しない、少なくとも０〜５ｍｍの一時的または永続的なＳＴ低下、あるいは、従来アッセイ法による陽性ｃＴｎ値のいずれも示すべきではない。あるいは、被験対象は、安静時に増加または発生していた、あるいは、直前の４８時間以内の最後のエピソードで急性心筋梗塞の疑いを是認する虚血の症状を呈するべきではない。心筋虚血は、心電図により（ＳＴ低下＝０．１ｍＶ、又はＴ波反転＝０．１ｍＶ）、あるいは、上昇する生化学マーカーにより（クレアチンキナーゼ［ＣＫ］−ＭＢ  ＞６μｇ／Ｌ、高感度トロポニンＴ  ＞１３ｐｇ／ｍＬ、定性的なｃＴｎテスト  陽性、あるいは、心筋梗塞のためのローカル診断限界よりも高値のＣＫ、ＣＫ−Ｂ、又はＣＫ  ＭＢの触媒活性）、確認する必要がある。
【００２７】
本発明の意味において「心血管疾患若しくは状態」とは、被験対象の異常状態として当業者に認識され、そして、心血管系の変化を含む現象によって特徴付けられるか、あるいは、前記現象にリンクされた、被験対象における生理学的状況であることができる。心血管疾患若しくは状態は、例えば、急性冠症候群（ＡＣＳ）、急性心不全、急性非代償性心不全（ＡＤＨＦ）、慢性心不全、冠動脈疾患、狭心症、心筋梗塞、虚血性脳卒中、出血性脳卒中、及び一過性脳虚血発作である。ＡＣＳ患者は、不安定狭心症（ＵＡＰ）又は心筋梗塞（ＭＩ）を呈することができる。ＭＩは、ＳＴ上昇型ＭＩ（ＳＴＥＭＩ）又は非ＳＴ上昇型ＭＩ（ＮＳＴＥＭＩ）であることができる。ＡＣＳの発生の後、左心室機能不全（ＬＶＤ）、又は心不全の発症が起こり得る。更に、好ましい心血管疾患若しくは状態には、心臓突然死及び脳卒中（脳血管イベント又は事故）を含む心臓除脈性不整脈又は頻拍性不整脈が包含される。特に好ましくは、心血管合併症はＡＣＳ及びＡＤＨＦである。
【００２８】
好適態様では、本方法は、それぞれ、「ルール・イン」又は「ルール・アウト」診断を提供するために使用される。本発明の意味において、「ルール・イン」とは、被験対象における或る疾患若しくは状態の存在を積極的に判定することが可能な診断を意味する。一方、用語「ルール・アウト」とは、或る疾患若しくは状態を排除することが可能な診断を意味する。また、本明細書において、「ルール・イン」は、病院に入院を必要とする状況を意味することができ、一方、「ルール・アウト」は、被験者の退院を可能にする状況を意味することができる。
【００２９】
また、本発明は、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の、心臓性および非心臓性胸痛を識別するためのマーカーとしての使用を提供する。従って、いくつかの態様において、本発明は、胸痛を呈する被験対象における心臓性および非心臓性胸痛を識別する方法も提供する。
【００３０】
胸痛は、例えば、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の量（好ましくは、ｓＣＤ１４−ＳＴの量）が、例えば、２００ｐｇ／ｍＬ以上、２１０ｐｇ／ｍＬ以上、２２０ｐｇ／ｍＬ以上、２３０ｐｇ／ｍＬ以上、２４０ｐｇ／ｍＬ以上、２５０ｐｇ／ｍＬ以上、２５５ｐｇ／ｍＬ以上、３００ｐｇ／ｍＬ以上、又は３８０ｐｇ／ｍＬ以上である場合、心臓性胸痛と同定することができる。好ましくは、前記化合物の量が２２０ｐｇ／ｍＬ以上、又は２５５ｐｇ／ｍＬ以上である。
【００３１】
胸痛は、例えば、ｓＣＤ１４−ＳＴの量が、例えば、２００ｐｇ／ｍＬ、２１０ｐｇ／ｍＬ、２２０ｐｇ／ｍＬ、２３０ｐｇ／ｍＬ、２４０ｐｇ／ｍＬ、２５０ｐｇ／ｍＬ、２５５ｐｇ／ｍＬ、３００ｐｇ／ｍＬ、又は３８０ｐｇ／ｍＬを超えない場合、非心臓性胸痛と同定することができる。好ましくは、ｓＣＤ１４−ＳＴの量が２２０ｐｇ／ｍＬ又は２５５ｐｇ／ｍＬを超えない。
【００３２】
有利なことに、心臓及び非心臓性胸痛の間の識別は、被験対象が最初の胸痛を呈するとき、例えば、入院の段階（例えば、緊急治療室への入室）で実施される。好ましくは、トロポニンは、最初は陰性である。
【００３３】
いくつかの態様において、被験対象は、心臓手術、例えば、待機的心臓手術又は緊急心臓手術を受ける。本発明は、例えば、心臓手術（例えば、待機的心臓手術又は緊急心臓手術）を受けた後の被験対象における死亡リスクを評価又は予測する方法を提供する。本発明は、例えば、心臓手術（例えば、待機的心臓手術又は緊急心臓手術）後に高い死亡リスクを有する被験対象を同定する方法を提供する。従って、本発明は、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の、心臓手術（例えば、待機的心臓手術又は緊急心臓手術）後の被験対象における死亡リスクの評価又は予測のためのマーカーとしての使用を提供する。
【００３４】
被験対象が心臓手術を受ける場合、本方法は、例えば、手術前、手術時、又は手術後に実施することができる。本方法は、手術の１、２、３、４、又は５日以内、例えば、術後一日目に実施することができる。
【００３５】
被験対象が心臓手術を受ける場合、例えば、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の量（好ましくは、ｓＣＤ１４−ＳＴの量）が、例えば、３００ｐｇ／ｍＬ以上、例えば、３２５ｐｇ／ｍＬ以上、例えば、３５０ｐｇ／ｍＬ以上、３７１ｐｇ／ｍＬ以上、３７５ｐｇ／ｍＬ以上、４００ｐｇ／ｍＬ以上、５００ｐｇ／ｍＬ以上、６００ｐｇ／ｍＬ以上、８００ｐｇ／ｍＬ以上、１０００ｐｇ／ｍＬ以上、１３００ｐｇ／ｍＬ以上、１６００ｐｇ／ｍＬ以上、１９００ｐｇ／ｍＬ以上である場合、高い死亡リスクが存在すると判定することができる。
【００３６】
用語「試料」とは、体液の試料、分離した細胞の試料、又は組織若しくは器官からの試料を意味する。体液の試料は、周知技術により得ることができ、好ましくは、血液、血漿、血清、又は尿の各試料、より好ましくは、血液、血漿、又は血清の各試料を含む。組織又は器官試料は、任意の組織又は器官から、例えば、生検により得ることができる。分離した細胞は、体液、又は組織若しくは器官から、遠心分離又はセルソーティングのような分離技術により得ることができる。好ましくは、細胞、組織、又は器官の各試料は、本明細書においてマーカーと称するペプチドを発現又は産生する、これらの細胞、組織、又は器官から得られる。
【００３７】
特に好ましくは、本発明の方法及び使用における前記化合物は、ｓＣＤ１４−ＳＴである。
【００３８】
本明細書において、断片若しくは誘導体とは、例えば、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体であることができる。
【００３９】
本明細書において、ｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体（例えば、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外の断片若しくは誘導体）は、
−  本明細書で規定する断片、誘導体、又は配列の内部に位置するエピトープ、
−  そのアミノ酸配列が、本明細書で規定する断片、誘導体、又は配列を含む、又はからなるペプチド、
に特異的に結合する１又はそれ以上の抗体、あるいは、そのアミノ酸配列が本明細書で規定する断片、誘導体、又は配列を含む、又はからなるペプチドを用いて調製した１又はそれ以上の抗体、への特異的結合により、規定することができる。
【００４０】
ｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体（例えば、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外の断片若しくは誘導体）は、
−  配列番号１のアミノ酸１７−２６内に位置するエピトープに特異的に結合する抗体、及び／又は、
−  配列番号１のアミノ酸５３−６８内に位置するエピトープに特異的に結合する抗体、及び／又は、
−  そのアミノ酸配列が配列番号１のアミノ酸１７−２６を含む、又はからなるペプチドに特異的に結合する抗体、及び／又は、
−  そのアミノ酸配列が配列番号１のアミノ酸５３−６８を含む、又はからなるペプチドに特異的に結合する抗体、及び／又は、
−  配列番号１のアミノ酸１７−２６を含む、又はからなるペプチドを用いて調製した抗体、及び／又は、
−  配列番号１のアミノ酸５３−６８を含む、又はからなるペプチドを用いて調製した抗体、
に特異的に結合することができる。
【００４１】
本明細書において、ｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体（例えば、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外の断片若しくは誘導体）は、例えば、配列番号１の少なくとも１０、１５、１６、２０、３０、４０、５０、５１、５２、６０、６８、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１５０、又は２００個の連続アミノ酸を含むことができる。好ましくは、ｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体（例えば、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外の断片若しくは誘導体）は、配列番号１の少なくとも１０個の連続アミノ酸を含む。或る好適態様では、断片若しくは誘導体は、配列番号１の少なくとも２０又は３０個の連続アミノ酸を含むことができる。断片若しくは誘導体は、配列番号１の少なくとも５２、６８、又は、例えば、７５個の連続アミノ酸を含むこともできる。断片若しくは誘導体は、配列番号１の少なくとも９０又は１００個の連続アミノ酸を含むこともできる。
【００４２】
或る態様では、断片若しくは誘導体は、配列番号１のＮ末端アミノ酸、又は、Ｎ末端の５、６、７、８、９、１０、１１、又は１２（好ましくは、例えば、１１）個のアミノ酸を含む。断片若しくは誘導体は、あるいは、配列番号１のＣ末端アミノ酸、又は、Ｃ末端の５、６、７、８、９、１０、１１、又は１２（好ましくは、例えば、１１）個のアミノ酸を含む。或る態様では、断片若しくは誘導体は、配列番号１のＮ末端又はＣ末端のいずれも含まない。或る態様では、断片若しくは誘導体のＮ末端は、配列番号１のＮ末端の１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１５０、又は２００個のアミノ酸内に位置する。或る態様では、断片若しくは誘導体のＮ末端は、配列番号１のＮ末端から、少なくとも５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１５０、又は２００個のアミノ酸に位置する。或る態様では、断片若しくは誘導体のＣ末端は、配列番号１のＣ末端の１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１５０、又は２００個のアミノ酸内に位置する。或る態様では、断片若しくは誘導体のＣ末端は、配列番号１のＣ末端から、少なくとも５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１５０、又は２００個のアミノ酸に位置する。
【００４３】
或る態様では、断片若しくは誘導体は、例えば、配列番号１の少なくとも１０個の連続アミノ酸を含み、そのＮ末端は、配列番号１のＮ末端の１０、２０、又は３０個のアミノ酸内に位置する。
【００４４】
或る態様では、断片若しくは誘導体は、例えば、配列番号１の少なくとも２０個の連続アミノ酸を含み、そのＮ末端は、配列番号１のＮ末端の１０、２０、又は３０個のアミノ酸内に位置する。
【００４５】
或る態様では、断片若しくは誘導体は、例えば、配列番号１の少なくとも４０個の連続アミノ酸を含み、そのＮ末端は、配列番号１のＮ末端の１０、２０、又は３０個のアミノ酸内に位置する。
【００４６】
或る態様では、断片若しくは誘導体は、例えば、配列番号１の少なくとも６０個の連続アミノ酸を含み、そのＮ末端は、配列番号１のＮ末端の１０、２０、又は３０個のアミノ酸内に位置する。
【００４７】
或る態様では、断片若しくは誘導体は、例えば、配列番号１の少なくとも１００個の連続アミノ酸を含み、そのＮ末端は、配列番号１のＮ末端の１０、２０、又は３０個のアミノ酸内に位置する。
【００４８】
他の態様では、断片若しくは誘導体は、例えば、配列番号１の少なくとも１０個の連続アミノ酸を含み、そのＣ末端は、配列番号１のＣ末端の１０、２０、又は３０個のアミノ酸内に位置する。
【００４９】
他の態様では、断片若しくは誘導体は、例えば、配列番号１の少なくとも２０個の連続アミノ酸を含み、そのＣ末端は、配列番号１のＣ末端の１０、２０、又は３０個のアミノ酸内に位置する。
【００５０】
他の態様では、断片若しくは誘導体は、例えば、配列番号１の少なくとも４０個の連続アミノ酸を含み、そのＣ末端は、配列番号１のＣ末端の１０、２０、又は３０個のアミノ酸内に位置する。
【００５１】
他の態様では、断片若しくは誘導体は、例えば、配列番号１の少なくとも６０個の連続アミノ酸を含み、そのＣ末端は、配列番号１のＣ末端の１０、２０、又は３０個のアミノ酸内に位置する。
【００５２】
他の態様では、断片若しくは誘導体は、例えば、配列番号１の少なくとも１００個の連続アミノ酸を含み、そのＣ末端は、配列番号１のＣ末端の１０、２０、又は３０個のアミノ酸内に位置する。
【００５３】
他の態様では、例えば、断片若しくは誘導体のＮ末端は、配列番号１のＮ末端から１０個のアミノ酸内に位置し、前記断片若しくは誘導体のＣ末端は、配列番号１のＣ末端から少なくとも３０、５０、又は１００個のアミノ酸に位置する。
【００５４】
他の態様では、例えば、断片若しくは誘導体のＮ末端は、配列番号１のＮ末端から３０個のアミノ酸内に位置し、前記断片若しくは誘導体のＣ末端は、配列番号１のＣ末端から少なくとも３０、５０、又は１００個のアミノ酸に位置する。
【００５５】
他の態様では、例えば、断片若しくは誘導体のＮ末端は、配列番号１のＮ末端から少なくとも３０個のアミノ酸に位置し、前記断片若しくは誘導体のＣ末端は、配列番号１のＣ末端から少なくとも３０、５０、又は１００個のアミノ酸に位置する。
【００５６】
或る態様では、断片若しくは誘導体は、配列番号１のアミノ酸１−３５０、５−３５６、１−１０、１−１１、１−１５、１−１６、１−１７、１−２０、１−２６、１−３０、１−４０、１−５０、１−５２、１−５３、１−６０、１−６８、１−８０、１−１００、１−１２０、１−１４０、１−１６０、１−１８０、１−２００、１−２２０、１−２４０、１−２６０、１−２８０、１−３００、１−３２０、１−３４０、及び／又は１−３５６を含むことができる。
【００５７】
或る態様では、断片若しくは誘導体は、配列番号１のアミノ酸１７−２６及び／又は５３−６８、あるいは、配列番号１のアミノ酸１７−６８を含むことができる。
【００５８】
本明細書における或る態様では、断片若しくは誘導体は、例えば、
−  非還元条件下での電気泳動（例えば、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）による測定として、１３±２ｋＤａの分子量を示す；
−  配列番号１の１−１１位のアミノ酸配列を含む；及び／又は
−  配列番号１の５３−６８位のアミノ酸配列からなるペプチドを用いて調製した抗体に（及び／又は、配列番号１のアミノ酸５３−６８内に位置するエピトープに特異的に結合する抗体に；及び／又は、そのアミノ酸配列が、配列番号１のアミノ酸５３−６８を含む、又はからなるペプチドに特異的に結合する抗体に）特異的に結合する；
から選んだ２又はそれ以上の特性を組み合わせることができる。
【００５９】
他の態様では、断片若しくは誘導体は、
−  非還元条件下での電気泳動（例えば、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）による測定として、１３±２ｋＤａの分子量を示す；
−  配列番号１の１−１１位のアミノ酸配列を含む；及び／又は
−  配列番号１の５３−６８位のアミノ酸配列からなるペプチドを用いて調製した抗体に（及び／又は、配列番号１のアミノ酸５３−６８内に位置するエピトープに特異的に結合する抗体に；及び／又は、そのアミノ酸配列が、配列番号１のアミノ酸５３−６８を含む、又はからなるペプチドに特異的に結合する抗体に）特異的に結合する；
から選んだ１又はそれ以上の特性を有しない。
【００６０】
配列番号１の３５６−アミノ酸配列は、例えば、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＡＨ１０５０７．１に係るヒトＣＤ１４分子の公知配列の２０−３７５位に相当する。
【００６１】
配列番号１：
【化１】
0006474730.tif 000002
【００６２】
本明細書における用語「ｓＣＤ１４−ＳＴ」は、「可溶性ＣＤ１４サブタイプ」又は「プレセプシン」としても知られているペプチドを意味する。ｓＣＤ１４−ＳＴは、ｓＣＤ１４（可溶性ＣＤ１４）に由来し、前記ｓＣＤ１４は、少なくとも二種類の高分子型（４９ｋＤａ及び５５ｋＤａ）が存在し、ｓＣＤ１４−ＳＴは、前記ｓＣＤ１４の断片である。ｓＣＤ１４のタンパク質分解は、ｓＣＤ１４−ＳＴの生成をもたらす。ｓＣＤ１４−ＳＴは、非還元条件下での電気泳動において、１３±２ｋＤａの見掛け分子量を示す。ｓＣＤ１４に結合することなくｓＣＤ１４−ＳＴに特異的に結合する抗体が利用できるため、ｓＣＤ１４−ＳＴとｓＣＤ１４との識別を可能にする。一方、ｓＣＤ１４に結合できるが、ｓＣＤ１４−ＳＴを認識しない抗体は、有益に排除することができる。
【００６３】
本明細書における用語「ペプチド又はポリペプチド」又は「マーカー」は、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物、あるいは、本明細書に記載の他の適切な予測マーカー（特に好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴであるが）を意味する。ここで、特定の態様によれば、以下に限定されるものではないが、それぞれ上述したような、神経ホルモンマーカー、虚血性心臓マーカー、トランスフォーミング増殖因子−βサイトカインスーパーファミリーマーカー、インターロイキン受容体ファミリー（例えば、ＩＬ１ＲＬ１及びＳＴ２としても知られているインターロイキン−１受容体様１）、又は好中球ゼラチナーゼ関連リポカリン（ＮＧＡＬ）、及び／又は炎症マーカーを含む、マーカーの組合せが測定される。用語「ペプチド又はポリペプチド」又は「マーカー」は、更に、リスクマーカーとして本技術分野で公知の別のペプチドを意味することができる。
【００６４】
神経ホルモンマーカー、水分バランスの調節因子であるマーカー、虚血性心臓マーカー、トランスフォーミング増殖因子−βサイトカインスーパーファミリーマーカー、インターロイキン受容体ファミリー（例えば、ＩＬ１ＲＬ１及びＳＴ２としても知られているインターロイキン−１受容体様１）、又は好中球ゼラチナーゼ関連リポカリン（ＮＧＡＬ）、及び炎症マーカーは、独立したリスク指標のグループを表すことが見出された。従って、新規の心血管マーカーとしての、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物と、本発明により提供される、前記マーカー群のマーカーとの組合せが、感度および特異度の更なる向上をもたらし、その結果、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の診断における、あるいは、被験対象の心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の発症リスクの評価における、あるいは、被験対象の死亡リスクの評価における、より高い精度をもたらした。更に、或る治療の恩恵を受けるであろう被験対象を、高い精度で同定することが可能である。前記の高い精度は、各種の心血管疾患若しくは状態の識別、例えば、慢性心不全と急性心不全との識別も可能とする。加えて、本発明方法の精度は、入院の必要な被験対象と、退院可能な被験対象とを区別する方法を提供する。本発明の好適態様では、前記の高い精度が、心筋梗塞の被験対象（ルール・イン）と、心筋梗塞を罹患していない被験対象（ルール・アウト）との同定を可能とする。
【００６５】
この好適態様によれば、本発明方法は、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の測定を含み、同じ被験対象からの同一又は異なる試料において、前記化合物の量だけでなく、神経ホルモンマーカー、水分バランスの調節因子、虚血性心臓マーカー、トランスフォーミング増殖因子−βサイトカインスーパーファミリーマーカー、インターロイキン受容体ファミリー（例えば、ＩＬ１ＲＬ１及びＳＴ２としても知られているインターロイキン−１受容体様１）、又は好中球ゼラチナーゼ関連リポカリン（ＮＧＡＬ）、及び／又は、１つの炎症マーカーの量を測定する。
【００６６】
神経ホルモンマーカーは、例えば、心房性ナトリウム利尿ペプチド（ＡＮＰ）、脳（Ｂ型）ナトリウム利尿ペプチド（ＢＮＰ）、又は各プロペプチドのＮ末端断片であるＮＴ−プロＡＮＰ、プロＡＮＰ、及びＮＴ−プロＢＮＰから選択でき、ＮＴ−プロＢＮＰが神経ホルモンマーカーとして好ましい。水分バランスのマーカーは、例えば、プレプロバソプレシンに由来するペプチド、好ましくはコペプチンから選択できる。コペプチンは、プレプロバソプレシンのＣ末端部分である。
【００６７】
ｃＴｎは、例えば、虚血性心臓マーカーとして、好ましくは心筋梗塞のマーカーとして、測定することができる。マルチマーカーアプローチでは、前記虚血性心臓マーカーは、好ましくはｃＴｎＴ又はｃＴｎＩであり、より好ましくは高感度ｃＴｎＴ（ｈｓＴｎＴ）又は高感度ｃＴｎＩであり、虚血性心臓マーカーの基準量は、好ましくは約８ｐｇ／ｍＬである。
【００６８】
炎症マーカーは、例えば、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、インターロイキン、特にＩＬ−６、及びＶＣＡＭ及びＩＣＡＭのような接着分子から選択できる。炎症マーカーとしてＣＲＰ又はＩＬ−６を好適に測定できる。
【００６９】
特定の態様によれば、炎症マーカーの使用に関して、被験対象の同一又は異なる試料において、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の量の測定に加えて、Ｃ反応性タンパク質（特に高感度Ｃ反応性タンパク質（ｈｓ−ＣＲＰ））の量を測定する。好適態様では、病院へ入院して最終的に介入（インターベンション）を受けるべき被験対象または死亡リスクのある被験対象と、更なる臨床的または医学的治療に関して検討しない患者との識別に関して、極めて高感度の判定結果と特異度が提供される。Ｃ反応性タンパク質は、公知方法（Roberts et al., Clin Chem 2001, 47: 418-425 [Erratum, Clin Chem 2001;47:980.]）、例えば、ＣＲＰ免疫アッセイのための世界保健機関の国際基準標準（85/506）(WHO Expert Committee on Biological Standardization. Thirty-seventh report. World Health Organ Tech Rep Ser 1987; 760:21-22.)で較正された、レート比濁法により、あるいは、モノクローナル抗体、固相、サンドイッチ型酵素免疫測定法（例えば、IMX, Abbott Laboratories, North Chicago）により、アッセイできる。前記アッセイで検出される値の範囲は、典型的には０．０５〜３０μｇ／ｍＬである。Ｃ反応性タンパク質の正常値の中央値は、典型的には０．８μｇ／ｍＬであり、９０％正常値は＜３μｇ／ｍＬ、９９％正常値は＜１０．０μｇ／ｍＬである。基準量、すなわち、≧４μｇ／ｍＬのＣ反応性タンパク質のレベル、及び特には＞１０μｇ／ｍＬのＣ反応性タンパク質のレベルは、好ましくは、病院への入院のための閾値であるべきである。マルチマーカーアプローチにおいては、炎症マーカーは、好ましくはプロカルシトニン（ＰＣＴ）であり、ＰＣＴの基準量は、好ましくは約０．５ｎｇ／ｍＬ、２．０ｎｇ／ｍＬ、及び１０ｎｇ／ｍＬである。
【００７０】
トランスフォーミング増殖因子−βサイトカインスーパーファミリーマーカーは、例えば、ＴＧＦ−βアイソフォームから選択でき、好ましくはＭＩＣ−１又はＧＤＦ−１５を測定することができる；前記トランスフォーミング増殖因子−βサイトカインスーパーファミリーマーカーの基準量は、好ましくは約１．０ｎｇ／ｍＬである。
【００７１】
インターロイキン受容体ファミリーマーカーとして、好ましくはＩＬ１ＲＬ１及びＳＴ２を選択できる。
【００７２】
水分バランスのマーカーは、例えば、プレプロバソプレシン由来ペプチド、好ましくはコペプチンから選択できる。コペプチンの基準量は、好ましくは１１．２５ｐｍｏｌ／Ｌである。
【００７３】
腎臓損傷マーカーとして、好ましくは好中球ゼラチナーゼ関連リポカリン（ＮＧＡＬ）を選択できる。
【００７４】
或る態様では、神経ホルモンマーカー（例えば、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）、虚血性心臓マーカー（例えば、ｈｓＴｎＴ）、炎症マーカー（例えば、Ｃ反応性タンパク質、ＣＲＰ）、及びインターロイキン−１受容体ファミリーマーカー（例えば、ＩＬ１ＲＬ１／ＳＴ２）から選んだ少なくとも１つの追加マーカーの量に加えて、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体の量を測定する。このような態様では、疾患若しくは状態は、本発明の意味内における疾患若しくは状態、すなわち、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症である。あるいは、例えば、急性心不全を含むことができる。例えば、前記疾患若しくは状態は、急性冠症候群、急性心不全、慢性心不全、冠動脈疾患、狭心症、心筋梗塞、虚血性脳卒中、出血性脳卒中、及び／又は一過性脳虚血発作からなる群から選ぶこともできる。
【００７５】
好ましくは、本発明における被験対象は救急部門、好ましくは病院、より好ましくは医療救急部門へ提示する。
【００７６】
本発明の明細書において、用語「救急部門」とは、体調不良を感じる被験対象、又は、或る疾患を発症する個々のリスクの評価を求める被験対象が、生理学的状態の分析、及び／又は、その不快感の根底にある原因を得るために、医学的背景を有する人（好ましくは医師）に相談するために、提示する任意の場所を意味する。典型例は、病院の救急部門若しくは緊急治療室、救急車、医師の診療所若しくはオフィス、及び被験者の診断及び／又は治療に適した他の機関である。
【００７７】
本発明の方法は、好ましくは、インビトロ法である。更に、それは、先に明示的に述べたものに加えて、いくつかの工程を含むことができる。例えば、更なる工程は、試料の前処理、又は、前記方法により得られた結果の評価に関するものであることができる。前記方法は、手動で実施するか、あるいは、自動化により支援することができる。好ましくは、工程（ａ）及び／又は（ｂ）は、その全体又は一部を、自動化により（例えば、工程（ａ）における測定、あるいは、工程（ｂ）におけるコンピュータで行う比較のための適切なロボット及び感覚機器により）支援することができる。
【００７８】
本明細書における用語「評価」とは、被験対象が心血管疾患若しくは状態の高い発症リスクを有するか、被験対象が入院を必要としているか、あるいは、被験対象が特定の治療の恩恵を受けるか、を評価することを意味する。当業者により理解されるように、このような評価は、通常、同定される被験対象の全て（すなわち、１００％）に対して正確であることを意図しない。しかしながら、前記用語は、被験対象の統計学的に有意な一部を同定することを要求する（例えば、コホート研究におけるコホート）。一部が統計学的に有意であるかどうかは、更なる手間なしに、当業者により、各種の周知の統計的評価ツール（例えば、信頼区間の決定、ｐ値の決定、スチューデントのｔ検定、マン・ホイットニー検定等）を用いて判定することができる。詳細は、Dowdy and Wearden, Statistics for Research, John Wiley & Sons, New York 1983に記載されている。好ましい信頼区間は、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％である。ｐ値は、好ましくは、０．１、０．０５、０．０１、０．００５、又は０．０００１である。より好ましくは、集団の被験対象の少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％が、本発明方法により正しく同定できる。
【００７９】
本明細書における用語「予測」とは、被験対象が、将来、規定された時間ウィンドウ（予測ウインドウ）内で死亡する確率を評価することを意味する。前記予測ウィンドウは、被験対象が予測確率に従って死亡する間隔である。予測ウィンドウは、本発明方法による分析時の被験対象の残りの全寿命であることができる。しかしながら、好ましくは、予測ウィンドウは、心血管合併症の出現後（より好ましく、且つ、正確には、本発明方法により分析される試料を得た後）、１か月、６か月、又は、１年、２年、３年、４年、５年、若しくは１０年の間隔である。当業者により理解されるように、このような評価は、通常、分析される被験対象の１００％に対して、正確であることを意図しない。しかしながら、前記用語は、分析される被験対象の統計学的に有意な一部に関して、評価が有効であることを要求する。一部が統計学的に有意であるかどうかは、更なる手間なしに、当業者により、各種の周知の統計的評価ツール（例えば、信頼区間の決定、ｐ値の決定、スチューデントのｔ検定、マン・ホイットニー検定など）を用いて判定することができる。詳細は、Dowdy and Wearden, Statistics for Research, John Wiley & Sons, New York 1983に記載されている。好ましい信頼区間は、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％である。ｐ値は、好ましくは、０．１、０．０５、０．０１、０．００５、又は０．０００１である。好ましくは、本発明によって想定される確率は、与えられたコホートの被験対象の少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、又は少なくとも９０％に関して、予測が正確になることを可能にする。
【００８０】
本明細書における用語「死亡率」とは、心血管合併症、肺疾患、肺塞栓症、血栓症、血栓塞栓性合併症、脳卒中、腫瘍および悪性疾患、敗血症、敗血症性ショック、出血性疾患、臓器不全、急性腎疾患、感染症、消化管合併症、膵炎、リウマチ性疾患、並びにその他によって引き起こされる死亡率を意味する。
【００８１】
本明細書における表現「死亡リスクの評価」とは、本発明方法により分析される被験対象を、正常な（すなわち、高くない）死亡リスクを有する集団の被験対象群か、あるいは、有意に高いリスクを有する被験対象群のいずれかに割り当てられることを意味する。本発明に従って言及される高いリスクとは、所定の予測ウィンドウ内の死亡リスクが、被験対象の集団における平均的な死亡リスクに対して、或る被験対象に関して有意に上昇していることを意味する。好ましくは、１年の予測ウィンドウに関して、平均リスクは０．５〜３．０％（好ましくは１．５％）の範囲内である。好ましくは、本明細書における高いリスクは、１年の予測ウィンドウに関して、３．０％を超える、好ましくは５．０％を超える、より好ましくは３．０％〜８．０％の範囲内の、リスクに関する。このようなリスク層別化を適用できる時間軸（すなわち、予後リスクを予測することができる期間）は、１日〜５年、より好ましくは１週〜２年、及び１か月から１年であることができる。
【００８２】
一般的に、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体、あるいは、少なくとも１つの追加マーカーから選んだ化合物の量を、各マーカーの基準値及び或る生理学的状態に関連する各マーカーの閾値をそれぞれ測定するために、健康な基準集団及び心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の被験対象において、測定する。測定結果は、当業者に公知の統計的方法（例えば、ＲＯＣ（receiver operating characteristic）分析）により分析される。閾値は、特定の心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症に関して、あるいは、被験対象の或るリスク状態に関して、測定され、特定の使用に適しているアッセイ特異度及び／又は感度が得られるように選択される。好適態様では、閾値は、集団における各値の分布の観点から選択される。基準値と閾値をそれぞれ確立するために、健常者及び／又は非健常者群の、例えば、中央値、６０パーセンタイル、７０パーセンタイル、８０パーセンタイル、９０パーセンタイル、９５パーセンタイル、９８パーセンタイル、又は９９パーセンタイルを選択することが有用かもしれない。
【００８３】
被験対象の試料中で測定された、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の量は、次に、健常な基準集団における前記化合物の量と比較する。診断／評価は、定められた生理学的状態で設定された閾値に基づいて行われる。
【００８４】
本発明による組合せ測定は、好ましくは、マーカーの並行測定が、調査される被験対象の１又はそれ以上の試料において行えるように、行われる。好ましくは、被験対象から採取した１又はそれ以上の試料（例えば、全血試料、又は血漿試料、又は血清試料）が、１又はそれ以上のテストにおいて、同時に、あるいは、迅速かつ順次に、調査される。前記測定は、特に好ましくは、単一の被験対象試料において行われる。
【００８５】
マーカーの組合せ測定は、原則として、一般的な市販のアッセイを用いる任意の公知方法に基づいて、実施することができる。例えば、自動分析装置を前記測定に用いることができる。あるいは、緊急治療室で、病棟若しくは集中治療ステーションで、救急車若しくは診療所で使用するための迅速アッセイ若しくはＰＯＣ（Ｐｏｉｎｔ  ｏｆ  Ｃａｒｅ）アッセイ、又は患者の自己テストを使用することもできる。
【００８６】
ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物、あるいは、本明細書で言及する他のペプチド又はポリペプチド（本明細書におけるマーカー）の量の測定は、量または濃度の、好ましくは半定量的又は定量的な測定のことを言及する。測定は、直接的または間接的に実施できる。直接的測定は、ペプチド又はポリペプチドそれ自体から得られるシグナル、及び、試料中に存在するペプチドの分子数に直接的に相関する強度に基づいて、ペプチド又はポリペプチドの量または濃度を測定することに関する。このようなシグナル（本明細書において強度シグナルと称することがある）は、例えば、ペプチド又はポリペプチドの特定の物理的または化学的特性の強度値を測定することにより得ることができる。間接的測定は、二次成分（すなわち、ペプチド又はポリペプチドそれ自体でない成分）又は生物学的読み取りシステム（例えば、測定可能な細胞応答、リガンド、標識、または酵素反応産物）から得られるシグナルの測定を含む。
【００８７】
好ましくは、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の量の測定は、前記化合物に特異的なポリクローナル抗体、及び、好ましくはモノクローナル抗体のような抗体を用いて実施する。好適態様では、前記抗体は、ｓＣＤ１４又はＣＤ１４に結合することなく、ｓＣＤ１４−ＳＴに特異的に結合する。このような特異性は、例えば、ＣＤ１４の二次構造におけるｂ３及びｂ４間の領域（すなわち、ヒトＣＤ１４におけるアミノ酸３６−７９）に対して抗体が惹起されると得られる。
【００８８】
本発明によれば、ペプチド又はポリペプチド（本明細書におけるマーカー）の量の測定は、試料中のペプチドの量を測定するための全ての公知方法により達成することができる。前記方法には、様々なサンドイッチ、競合、又はその他のアッセイ形式において標識分子を利用することができる、免疫アッセイ装置および方法が含まれる。前記アッセイは、ペプチド又はポリペプチドの存在又は不在の指標となるシグナルを引き出す。また、シグナル強度は、好ましくは、試料中に存在するポリペプチドの量に、直接的あるいは間接的に（例えば、反比例）相関できる。更に適切な方法には、ペプチド又はポリペプチドに特異的な物理的又は化学的特性（例えば、その正確な分子量またはＮＭＲスペクトル）の測定が含まれる。前記方法には、好ましくは、バイオセンサー、イムノアッセイに連結された光学デバイス、バイオチップ、分析デバイス（質量分析器、ＮＭＲ分析器、又はクロマトグラフィーデバイス）が含まれる。更に、前記方法には、マイクロプレートＥＬＩＳＡに基づく方法、完全自動化又はロボットイムノアッセイ（AccuTnI, Beckmann-Coulter Diagnostics; Architect cTnI and AxSYM cTnI, Abbott Diagnostics; ADVIA Centaur XP cTNI, Bayer Healthcare; Immulite 2500 cTnI, Diagnostics Product Corporation; Elecsys cTnT, Roche Diagnostics）、ＣＢＡ（例えば、Roche-Hitachi分析器で利用できる、enzymatic Cobalt Binding Assay）、LIAISON（登録商標） BRAHMS PCT（登録商標） 、KRYPTORランダムアクセス分析器、BRAHMS PCT LIA、BRAHMS PCT-Q、及びラテックス凝集アッセイ（例えば、Roche-HitachiＴＭ分析器、PATHFAST chemiluminescent enzyme immunoassay system (CLEIA), Mitsubishi Chemical Medience Corporation, Tokyo, Japanで利用できる）が含まれる。
【００８９】
好ましくは、ペプチド又はポリペプチド（本明細書におけるマーカー）の量の測定は、（ａ）その強度がペプチド又はポリペプチドの量の指標となる細胞応答を誘発できる細胞と、前記ペプチド又はポリペプチドとペプチドとを、適切な時間、接触させる工程、（ｂ）前記細胞応答を測定する工程を含む。細胞応答の測定のためには、好ましくは、試料または処理した試料を細胞培養物に添加し、内部または外部の細胞応答を測定する。前記細胞応答には、レポーター遺伝子の測定可能な発現、あるいは、物質（例えば、ペプチド、ポリペプチド、又は小分子）の分泌が含まれる。前記発現又は物質は、ペプチド又はポリペプチドの量に相関する強度シグナルを発生する。
【００９０】
また、好ましくは、ペプチド又はポリペプチド（本明細書におけるマーカー）の量の測定は、試料中のペプチド又はポリペプチドから得られる特定の強度シグナルを測定する工程を含む。先述したとおり、このようなシグナルは、前記ペプチドまたはポリペプチドに特異的なＮＭＲスペクトル、又は、質量スペクトルで観察されたペプチドまたはポリペプチドに特異的なｍ／ｚ変数で観察された信号強度であることができる。
【００９１】
ペプチド又はポリペプチド（本明細書におけるマーカー）の量の測定は、好ましくは、（ａ）ペプチドと特定リガンドとを接触させる工程、（ｂ）（所望により）非結合リガンドを除去する工程、（ｃ）結合したリガンド量を測定する工程を含む。結合したリガンドは、強度シグナルを発生する。本発明における結合には、共有および非共有結合の両方が含まれる。本発明におけるリガンドは、本明細書におけるペプチド又はポリペプチドに結合する任意の化合物、例えば、ペプチド、ポリペプチド、核酸、又は小分子であることができる。好ましいリガンドには、抗体、核酸、ペプチド又はポリペプチド（例えば、ペプチド又はポリペプチド及びペプチドに対する結合ドメインを含むそれらの断片に対する受容体または結合パートナー）、及びアプタマー（例えば、核酸又はペプチドアプタマー）が含まれる。このようなリガンドの調製方法は、本技術分野において周知である。例えば、適切な抗体またはアプタマーの同定および製造は、商業的供給業者によっても提供される。当業者は、より高い親和性または特異性を有するこのようなリガンドの誘導体を開発する方法に精通している。例えば、ランダム変異を、核酸、ペプチド、又はポリペプチドに導入することが可能である。これらの誘導体は、次に、本技術分野で公知のスクリーニング手順（例えば、ファージディスプレイ）に従って、結合に関して試験することができる。本明細書における抗体には、ポリクローナル及びモノクローナル抗体の両方が含まれ、それらの断片（例えば、抗原又はハプテンと結合可能なＦｖ、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ）２断片）が含まれる。本発明はまた、所望の抗原特異性を呈する非ヒトドナー抗体のアミノ酸配列がヒトアクセプター抗体の配列と組み合わされたヒト化ハイブリッド抗体、及び単鎖抗体を含む。前記ドナー配列は、通常、ドナーの少なくとも抗原結合性アミノ酸残基を含むが、ドナー抗体の構造的及び／又は機能的に関連する他のアミノ酸残基を含むこともできる。このようなハイブリッドは、本技術分野で周知のいくつかの方法により調製することができる。好ましくは、リガンド又は薬剤は、ペプチド又はポリペプチドに特異的に結合する。本発明における特異的結合とは、リガンド又は薬剤が、分析される試料中に存在する別のペプチド、ポリペプチド、又は物質に実質的に結合（「交差反応」）しないことを意味する。好ましくは、特異的結合ペプチド又はポリペプチドは、任意の他の関連ペプチド又はポリペプチドより、少なくとも３倍以上、より好ましくは少なくとも１０倍以上、更に好ましくは少なくとも５０倍以上の高い親和性で結合する。非特異的結合は、例えば、ウェスタンブロット上のサイズにより、あるいは、試料中の相対的に高い存在量により、明確に区別及び測定できる場合には、許容可能である。リガンドの結合は、本技術分野で公知の任意の方法により、測定することができる。好ましくは、前記方法は、半定量的または定量的である。適切な方法は、以下に記載されている。
【００９２】
第一に、リガンドの結合は、直接（例えば、ＮＭＲ又は表面プラズモン共鳴により）、測定することができる。
【００９３】
第二に、リガンドはまた、目的のペプチド又はポリペプチドの酵素活性の基質として機能する場合に、酵素反応産物を測定することができる（例えば、プロテアーゼの量は、切断された基質の量を測定することにより測定できる（例えば、ウェスタンブロット））。あるいは、リガンドが酵素特性自体を示すことができ、「リガンド／ペプチド又はポリペプチド」複合体、あるいは、ペプチド又はポリペプチドが結合したリガンドを、それぞれ、強度シグナルの発生により検出を可能にする適切な基質と接触させることができる。酵素反応産物の測定のために、好ましくは、基質の量は飽和している。基質はまた、反応前に、検出可能な標識で標識化することができる。好ましくは、試料と基質とを、適切な時間、接触させる。適切な時間とは、検出可能な（好ましくは測定可能な）量の産物が産生されるのに必要な時間を意味する。産物量の測定に代えて、一定の（例えば、検出な可能な）量の産物の出現に必要な時間を測定することができる。
【００９４】
第三に、リガンドは、リガンドの検出および測定を可能にする標識に共有結合または非共有結合することができる。標識化は、直接的または間接的方法によって行うことができる。直接標識には、リガンドへの直接的な（共有結合または非共有結合）標識のカップリングが含まれる。間接標識には、第一リガンドへの第二リガンドの結合（共有結合または非共有結合）が含まれる。第二リガンドは、第一リガンドに特異的に結合する必要がある。第二リガンドは、適切な標識と結合することができ、及び／又は、第二リガンドに結合する第三リガンドの標的（受容体）であることができる。第二、第三、更に高次のリガンドの使用は、しばしば、シグナルを増加させるために使用される。適切な第二及びより高次のリガンドは、抗体、二次抗体、及び周知のストレプトアビジン−ビオチン系（Vector Laboratories、Inc.）を含むことができる。リガンド又は基質はまた、本技術分野で知られているように、１又はそれ以上のタグで「タグ付け」することができる。このようなタグは、次に、より高次のリガンドのための標的であることができる。適当なタグには、ビオチン、ジゴキシゲニン、Ｈｉｓタグ、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ、ＦＬＡＧ、ＧＦＰ、ｍｙｃ−ｔａｇ、Ａ型インフルエンザウイルスの赤血球凝集素（ＨＡ）、マルトース結合タンパク質などが含まれる。ペプチド又はポリペプチドの場合、好ましくは、タグはＮ末端及び／又はＣ末端に存在する。適切な標識は、適当な検出方法により検出可能な任意の標識である。典型的な標識には、金粒子、ラテックスビーズ、アクリジニウムエステル、ルミノール、ルテニウム、酵素的活性標識、放射性標識、磁気標識（例えば、常磁性および超常磁性標識を含む、「磁性ビーズ」）、および蛍光標識が含まれる。酵素的活性標識には、例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、β−ガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼ、及びそれらの誘導体が含まれる。検出に適切な基質には、ジアミノベンジジン（ＤＡＢ）、３，３’−５，５’−テトラメチルベンジジン、ＮＢＴ−ＢＣＩＰ（４−ニトロブルーテトラゾリウムクロリド及び５−ブロモ−４−クロロ−３−インドリル−ホスフェート；Roche Diagnosticsから既製のストック溶液として入手可能）ＣＤＰ−ＳｔａｒＴＭ（Amersham Biosciences）、ＥＣＦＴＭ（Amersham Biosciences）が含まれる。適切な酵素−基質の組み合わせは、本技術分野で公知の方法に従って測定できる発色反応産物、蛍光、または化学発光を生じさせることができる（例えば、感光フィルムまたは適切なカメラシステムを用いて）。酵素反応の測定に関しては、上記基準が同様に適用される。典型的な蛍光標識には、蛍光タンパク質（例えば、ＧＦＰ及びその誘導体）、Ｃｙ３、Ｃｙ５、テキサスレッド、フルオレセイン、及びＡｌｅｘａ色素（例えば、Ａｌｅｘａ５６８）が含まれる。更なる蛍光標識が、例えば、Molecular Probes（Oregon）から入手可能である。また、蛍光標識として量子ドットの使用が想定される。典型的な放射性標識には、３５Ｓ、１２５Ｉ、３２Ｐ、３３Ｐなどが含まれる。放射性標識は、公知および適当な任意の方法、例えば、感光性フィルムまたはホスフォイメージャーによって検出することができる。本発明に���る適切な測定方法はまた、沈降（特に免疫沈降）、電気化学発光（電気生成化学発光）、ＲＩＡ（radioimmunoassay）、ＥＬＩＳＡ（enzyme-linked immunosorbent assay）、サンドイッチ酵素免疫試験、ＥＣＬＩＡ（electrochemiluminescence sandwich immunoassays）、ＤＥＬＦＩＡ（dissociation-enhanced lanthanide fluoro immuno assay）、ＳＰＡ（scintillation proximity assay）、比濁法（turbidimetry）、比濁法（nephelometry）、ラテックス増強比濁法（turbidimetry）若しくは比濁法（nephelometry）、又は固相免疫試験を含む。本技術分野で公知の更なる方法（例えば、ゲル電気泳動、二次元ゲル電気泳動、ＳＤＳポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）、ウェスタンブロッティング、及び質量分析）は、単独で、あるいは、先述の標識化または他の検出方法と組み合わせて、使用することができる。
【００９５】
ペプチド又はポリペプチド（本明細書におけるマーカー）の量はまた、好ましくは、以下のようにして測定することができる：（ａ）前記で特定したペプチド又はポリペプチドに対するリガンドを含む固体支持体を、前記ペプチド又はポリペプチドを含む試料と接触させること、及び（ｂ）前記支持体に結合するペプチド又はポリペプチド量を測定すること。リガンド（好ましくは、核酸、ペプチド、ポリペプチド、抗体、及びアプタマーからなる群から選択される）は、好ましくは、固定された形態で固体支持体上に存在する。固体支持体を製造するための材料は、本技術分野で周知であり、とりわけ、市販のカラム材料、ポリスチレンビーズ、ラテックスビーズ、磁気ビーズ、コロイド金属粒子、ガラス及び／又はシリコンチップ及び表面、ニトロセルロースストリップ、膜、シート、デュラサイト、反応トレイのウェル及びウォール、プラスチックチューブ等である。リガンド又は薬剤は、多くの異なる担体に結合させることができる。周知の担体の例には、ガラス、ポリスチレン、ポリ塩化ビニル、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリカーボネート、デキストラン、ナイロン、アミロース、天然および修飾セルロース、ポリアクリルアミド、アガロース、及びマグネタイトが含まれる。担体の性質は、本発明の目的のために、可溶性または不溶性のいずれかであることができる。リガンドを固定（fixing/immobilizing）するための適切な方法は周知であり、以下に限定されるものではないが、イオン性、疎水性、共有結合性の相互作用などが含まれる。また、本発明におけるアレイとして「懸濁アレイ」を使用するようにも意図されている（Nolan 2002, Trends Biotechnol. 20(1):9-12）。このような懸濁アレイでは、担体（例えば、マイクロビーズ又はマイクロスフェア）が懸濁液中に存在する。アレイは、異なるマイクロビーズ又はマイクロスフェアからなり、おそらく標識され、異なるリガンドを担持する。このようなアレイを製造する方法（例えば、固相化学および光不安定性保護基に基づく）は、一般的に公知である（US 5,744,305）。
【００９６】
本明細書における用語「量」は、ポリペプチド又はペプチド（本明細書におけるマーカー）の絶対量、前記ポリペプチド又はペプチドの相対量又は濃度、及び、それに相関する、あるいは、由来することができる任意の値又はパラメーターを包含する。このような値又はパラメータは、直接的測定により前記ペプチドから得られる全ての特有な物理的又は化学的特性からの強度シグナル値を含む（例えば、質量スペクトル又はＮＭＲスペクトルにおける強度値）。更に、本明細書の他の箇所で特定された間接的測定により得られる全ての値又はパラメータが含まれる（例えば、前記ペプチドへの応答における生物学的読み取りシステムから測定される応答レベル、又は特異的に結合したリガンドから得られる強度シグナル）。先述の量又はパラメータに相関する値はまた、全ての標準的な数学的操作により得られることを理解すべきである。
【００９７】
本明細書における用語「比較」は、分析される試料に含まれるポリペプチド又はペプチド（本明細書におけるマーカー）の量と、本明細書の他の箇所で特定される適切な基準源の量とを比較することを包含する。本明細書における比較は、対応するパラメーター又は値の比較を意味することを理解すべきである。例えば、絶対量を絶対基準量と比較する一方、濃度を基準濃度と比較する、あるいは、テスト試料から得られた強度シグナルを、同じタイプの基準試料の強度シグナルと比較する。本発明方法の工程（ｂ）で言及する比較は、手動で行うこともできるし、コンピュータが支援する比較でもよい。コンピュータ支援比較については、測定した量の値は、コンピュータプログラムによってデータベースに保存されている適切な基準に対応する値と比較することができる。コンピュータプログラムは、更に、比較の結果を評価することができ、例えば、適切な出力フォーマットで所望の評価を自動的に提供することができる。ステップ（ａ）で測定された量と基準量との比較に基づいて、被験対象が心臓インターベンションに感受性であるかどうか、すなわち、心臓インターベンションによりうまく治療できる被験対象群に属するかどうかを評価することが可能である。従って、基準量は、比較量の差または類似性のいずれかが、心臓インターベンションに感受性である被験対象群に属するそれらのテスト被験対象を同定することが、あるいは、心臓インターベンションに感受性でないそれらのテスト被験対象を同定することが可能となるように選択されるべきである。
【００９８】
従って、本明細書における用語「基準量」は、被験対象が病院または集中治療室に入院すべきかどうか、あるいは、自宅に退院することができるかどうかを評価することを可能にする、本明細書における各マーカーの量を意味する。従って、基準は、例えば、（ｉ）病院にうまく入院したことが知られている被験対象、すなわち、死亡等の悪影響または非適合治療レジメンにより引き起こされる副作用が発生することなく、更なる調査の結果に基づいて、更なる検査及びその後の処置または集中治療処置を受けた被験対象、又は（ii）病院に入院しなかったことが知られており、且つ、死亡か、あるいは、非適合治療レジメンにより引き起こされる副作用のあった被験対象、に由来することができる。更に、基準量は、以下のような閾値と定義することができる。すなわち、前記閾値より高い値が、更なる検査および／または集中治療のために入院すべき被験対象の指標となり、一方、前記閾値より低い値が、自宅に退院することができない被験対象の指標となる。個々の被験対象に適用可能な基準量は、年齢、性別、または亜集団のような様々な生理学的パラメーターに応じて、また、本明細書で言及するようなポリペプチド又はペプチド（本明細書におけるマーカー）の測定のために使用される手段に応じて、変えることができる。適切な基準量は、本発明方法により、テスト試料と一緒に（すなわち、同時に、あるいは、続いて）、分析すべき基準試料から測定することができる。閾値となる好ましい基準量は、正常の上限基準限界（ＵＲＬ；upper reference limit）、すなわち、見かけ上健康な被験対象の集団において見出される生理学的量の上限に由来することができる。被験対象の所定の集団に関するＵＲＬは、種々の周知方法により測定することができる。適切な技術は、本発明方法で測定されるべきペプチド又はポリペプチドの量に関して、集団の中央値を測定することができる。ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物に関する好ましい閾値（すなわち、基準量）は、下限検出限界の少なくとも１〜２倍である。例えば、本明細書で言及するＰＡＴＨＦＡＳＴ  ｓＣＤ１４−ＳＴの下限検出限界は、好ましくは２０ｐｇ／ｍＬである。
【００９９】
従って、本発明の好適態様では、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物（好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）に関する閾値を規定する基準量は、２０ｐｇ／ｍＬ、及び、見かけ上健康な集団の９９パーセンタイル未満、９７．５パーセンタイル未満、又は９５パーセンタイル未満、又は９０パーセンタイル未満である。
【０１００】
基準量より高い、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の量は、より好ましくは、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の被験対象の、あるいは、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の発症リスクが高い被験対象の指標である。更なる好適態様では、基準量より高い化合物量は、その生理学的状態が、適切な治療手段および／または入院の開始を必要とする被験対象に特徴的です。基準量より高い化合物量は、好ましくは、抗生物質、プロバイオティクス、及びラクツロースからなる群から選択される物質を用いた治療の恩恵を受ける被験対象を示す。別の好適態様では、基準量より高い化合物量は、死亡リスクの高い被験対象の指標である。
【０１０１】
有利なことに、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物は、心臓インターベンションを必要とする被験対象（すなわち、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の被験対象、及び、特には、急性心血管イベントまたは心不全（例えば、急性心不全）の影響を受ける被験対象）に対する心臓インターベンションの成功を評価するための信頼できる予後バイオマーカーであることが、本発明の基礎をなす研究において見出された。本発明によれば、リスク／成功の層別化を、心臓インターベンションを患者に施す前に、容易に実施することができる。患者が心臓インターベンションの影響を受けにくいことが判明した場合、危険で時間及び／又はコストのかかる集中治療を回避することができる。従って、心臓インターベンションに伴う有害かつ重篤な副作用から被験対象を予防する以外に、本発明方法は、資源が保持される点で、保健システムに対して有益であろう。本明細書に記載した本発明方法によれば、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の量、あるいは、それを測定するための手段は、心臓インターベンションに影響を受けやすい被験対象を同定するための診断組成物の製造に使用できることを理解すべきである。
【０１０２】
好適態様では、本発明方法は、多臓器不全症候群（ＭＯＤＳ）の被験対象におけるリスク評価のために使用される。
【０１０３】
加えて、又は代替的に、本発明の前記方法は、集中治療室での集中治療処置に影響を受けやすい被験対象を同定するために使用することができる。集中治療処置は、追加の診断手順、例えば、ＴＴＥ（transthoratic echocardiography）、ＴＥＥ（transesophageal echocardiography）、腹部超音波検査、胸部のＣＴスキャン、胸部Ｘ線撮影、高解像度ＣＴスキャン、心臓カテーテル法（left 6 right heart）、灌流／吸入シンチグラフィー、圧縮超音波検査、トレッドミル運動負荷心電図、気管支鏡検査、静脈造影、血管造影、及びＣＴＡ（CT arteriogram）または脳のＭＲＡ（magnetic resonance arteriogram）を含むことができる。心疾患、血栓塞栓性合併症、脳卒中又は肺塞栓症、癌および他の心外疾患の場合、治療には、ＰＣＩ、別の外科的処置、例えば、塞栓摘出、および特定の薬物治療、例えば、酸素、ビタミンＫアンタゴニストを含む経口抗凝固薬、未分画ヘパリンを含む抗凝固薬、ＬＭＷヘパリン、他の抗血栓薬、血栓溶解薬、アセチルサリチル酸、クロピドグレル、ループ利尿薬および他の利尿薬、β遮断薬、ＡＣＥ阻害薬、ジギタリス、カルシウムアンタゴニスト、硝酸塩、ステロイド、テオフィリン、β−２模倣物、他の気管支拡張薬、ＮＳＡＩＤ、アヘン剤、抗生物質などを含む。治療的インターベンションには、全ての手術及び薬物治療が含まれる。
【０１０４】
被験対象に対して本発明方法により選択すべき治療は、好ましくは、薬物に基づく治療である。より好ましくは、前記薬物は、ＡＣＥ阻害剤、好ましくはカプトプリル、エナラプリル、フォシノプリル、リシノプリル、ペリンドプリル、キナプリル、ラミプリル、若しくはトランドラプリル、ＡＴ−１受容体遮断薬、好ましくはカンデサルタン、ロサルタン、若しくはバルサルタン、β受容体遮断薬、好ましくはビソプロロール、カルベジロール、メトプロロール、若しくはコハク酸、又はアルドステロンアンタゴニスト、好ましくはスピロノラクトン若しくはエプレレノン、好ましくは、ラクツロース、プロバイオティクス、及び抗生物質による治療である。
【０１０５】
本発明の好適態様では、消化管によって吸収されない抗生物質が治療のために使用される。更なる好適態様では、アミノグリコシド系抗生物質が使用される。好ましくは、ネオマイシン及びパロマイシンが使用される。
【０１０６】
被験対象に対して本発明に従って選択すべき別の好適治療は、介入治療である。本明細書における介入治療は、被験対象への物理的な介入（例えば、ＰＣＩ、手術、および／または電気生理学的介入）に基づく治療である。より好ましくは、前記介入治療は、心臓再同期療法（ＣＲＴ；cardiac resynchronisation therapy）であるか、あるいは、除細動器の注入（ＩＣＤ；implantation of a cardioverter defibrillator）に基づく。
【０１０７】
更に、本発明には、本発明方法を実施するのに適合させた、入院させるべき被験体を同定するための装置が含まれる。前記装置は、被験対象の試料中のｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の量を測定するための手段、及び、前記量を基準量と比較するための手段を含み、それにより、適切な治療手段の開始を必要とする高リスクの被験対象、又は、入院すべき被験対象に関する指標を同定する。
【０１０８】
本明細書における用語「装置」とは、予測を可能にするように、互いに作動可能に連結された前記手段を少なくとも含むシステムを意味する。ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の量を測定するための好適な手段、及び、比較を実施するための手段は、本発明方法に関連して、先述されている。操作方法における手段を連結する方法は、装置に含まれる手段のタイプに依存する。例えば、ペプチド量を自動的に測定する手段が適用される場合には、前記自動作動手段により得られるデータは、所望の結果を得るために、例えば、コンピュータプログラムにより処理することができる。好ましくは、このような場合、単一装置に前記手段を含むことができる。従って、前記装置は、適用された試料中のペプチド又はポリペプチドの量の測定のための分析ユニット、及び、評価のために得られたデータを処理するためのコンピューターユニットを含むことができる。一方、ペプチド又はポリペプチドの量を測定するために、テストストリップのような手段を使用する場合には、比較のための手段は、測定量を基準量に割り当てる対照ストリップ又はテーブルを含むことができる。テストストリップは、好ましくは、本明細書で言及するペプチド又はポリペプチドに特異的に結合するリガンドに結合されている。前記ストリップ又は装置は、好ましくは、前記リガンドへの前記ペプチド又はポリペプチドの結合を検出するための手段を含む。好適な検出用手段は、前記の本発明方法に関する態様に関連して開示される。このような場合、前記各手段は、システムのユーザーが、マニュアル中で与えられた指示および解釈に基づいて、その量および診断又は予後値の判定の結果をまとめるように、作動可能に連結されている。前記手段は、そのような実施態様において別個のデバイスとして現れることができ、好ましくは、キットとして一緒に包装される。当業者は、更なる手間なしに、手段を連結する方法を理解するであろう。好ましい装置は、専門の臨床医の特定な知識がなくても適用できるもの、例えば、単にサンプルを充填する必要があるテストストリップ又は電子デバイスである。結果は、臨床医により解釈が必要な生データの出力として与えることができる。しかしながら、好ましくは、装置の出力は、処理され（すなわち、評価され）、その解釈が臨床医を必要としない生データである。更に好ましい装置は、本発明方法に従って先に言及した、分析ユニット／装置（例えば、バイオセンサー、アレイ、ナトリウム利尿ペプチドを特異的に認識するリガンドに結合された固体支持体、プラズモン表面共鳴デバイス、ＮＭＲ分光計、質量分析計など）又は評価ユニット／装置を含む。
【０１０９】
更に、本発明はまた、被験対象の同一又は異なる試料中のペプチド又はポリペプチド（本明細書で用いるようなマーカー）の量を測定するための手段、及び、前記量と基準量とを比較するための手段を含み、それにより、被験対象が死亡リスク又は急性心血管イベントにあるかどうかを予測する、本発明方法を実施するのに適合された、被験対象の死亡リスク又は更なる急性心血管イベントを評価するための装置に関する。
【０１１０】
また、被験対象の試料中のｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体、又はそれらの変異体から選んだ化合物の量を測定するための手段、及び、前記量と基準量とを比較するための手段を含み、それにより、被験対象を病院に入院させるべきかどうかを判定する、本発明方法を実施するのに適合された、被験対象を病院に入院させるかどうかについて判定するための装置を想定する。
【０１１１】
本発明はまた、被験対象の試料中のｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の量を測定するための手段、及び、前記量と基準量とを比較するための手段を含み、それにより、被験対象が心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の発症に関するリスクがあるかどうかを予測する、適切な治療手段の開始を必要とする心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の発症に関する高いリスクを評価するための装置に関する。
【０１１２】
本発明はまた、被験対象の試料中のｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の量を測定するための手段、及び、前記量と基準量とを比較するための手段を含み、それにより、被験対象が死亡リスクを有するかどうかを予測する、本発明方法を実施するのに適合された、被験対象における死亡リスクを評価するための装置に関する。
【０１１３】
更に、本発明は、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の発症に関する高いリスクを有する被験対象、あるいは、病院に入院すべき被験対象を同定するための、被験対象を病院に入院させるべきかどうかを判定するための、あるいは、被験対象における死亡リスクを予想するための、本発明方法を実施するためのキットを想定する。前記キットは、被験対象の試料中のｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体、又はそれらの変異体から選んだ化合物の量を測定するための手段、及び、前記量と基準量とを比較するための手段を含み、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の発症に関する高いリスクを有する被験対象、あるいは、病院に入院すべき被験対象が同定され、適切な治療手段の開始についての、あるいは、被検試料の病院または集中治療室への入院についての判定がなされ、あるいは、被験対象における死亡リスクが予測される。
【０１１４】
本明細書における用語「キット」は、前記手段のコレクションを意味し、好ましくは、別々に、あるいは、単一の容器内で提供される。前記容器は、好ましくは、本発明方法を実施するための説明書も含む。
【０１１５】
これまで述べた、あるいは、以下に述べる用語の定義及び説明は、本明細書及び付随の特許請求の範囲に記載の全ての態様に、それに応じて適用されると理解すべきである。
【０１１６】
１．被験対象の心血管疾患の発症リスクの評価
ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の測定、及び、それと各基準量との比較が、適切な治療手段を必要とする心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の高い発症リスクを被験対象が有するかを同定するための高い予測値を提供する。特に、前記方法は、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症を示す臨床徴候又は症状がない被験対象においても、前記疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の発症リスクの判定を可能にする。
【０１１７】
好ましくは、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の高い発症リスクを有する被験対象は、前記被験対象からの試料において測定される、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物（特に好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の量が、好ましくは２２５ｐｇ／ｍＬ以上、より好ましくは２４０ｐｇ／ｍＬ以上、更に好ましくは２６０ｐｇ／ｍＬ以上であることにより特徴付けられる。
【０１１８】
典型的には、健常な基準集団との比較が、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の高いレベルに関する閾値を同定するために適用される。健常被験対象における前記化合物（特に好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の基準量は、好ましくは、２２３ｐｇ／ｍＬ〜２６２ｐｇ／ｍＬである。
【０１１９】
２．被験対象における心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の診断
本発明の好適態様によれば、被験対象における心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症を診断する方法を提供する。好ましくは、急性冠症候群、急性心不全、慢性心不全、冠動脈疾患、狭心症、心筋梗塞、虚血性脳卒中、出血性脳卒中、及び一過性脳虚血発作からなる群から選んだ１又はそれ以上の心血管疾患若しくは状態の診断を提供する。前記方法は、更に、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の被験対象の予後を評価するためにも有用である。好適態様では、前記方法は、様々な心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の識別のために使用される。
【０１２０】
ａ）慢性心不全の診断
本発明によれば、慢性心不全の診断のための方法を提供し、好ましくは、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物（特に好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の量が、１１５ｐｇ／ｍＬ以上、より好ましくは１５０ｐｇ／ｍＬ以上、更に好ましくは２６０ｐｇ／ｍＬ以上である。別の態様では、前記化合物（好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の量が、１１５ｐｇ／ｍＬ〜４０００ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは１５０ｐｇ／ｍＬ〜３０００ｐｇ／ｍＬ、更に好ましくは２６０ｐｇ／ｍＬ〜２０００ｐｇ／ｍＬである。
【０１２１】
ｂ）狭心症の診断
本発明の更なる態様として、狭心症の診断のための方法を提供し、好ましくは、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物（特に好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の量が、２１４ｐｇ／ｍＬ以上、より好ましくは２１６ｐｇ／ｍＬ以上、更に好ましくは２２２ｐｇ／ｍＬ以上である。別の態様では、狭心症の被験対象における前記化合物（好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の量が、２１４ｐｇ／ｍＬ〜４０００ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは２１６ｐｇ／ｍＬ〜３０００ｐｇ／ｍＬ、更に好ましくは２２２ｐｇ／ｍＬ〜２０００ｐｇ／ｍＬである。
【０１２２】
ｃ）急性心不全の診断
急性心不全は、本発明方法により診断することができる。そこでは、急性心不全の被験対象における、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物（特に好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の量が、２９５ｐｇ／ｍＬ以上、より好ましくは３５４ｐｇ／ｍＬ以上、更に好ましくは４５５ｐｇ／ｍＬ以上である。あるいは、前記化合物（好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の量が、２９５ｐｇ／ｍＬ〜４０００ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは３５４ｐｇ／ｍＬ〜３０００ｐｇ／ｍＬ、更に好ましくは４５５ｐｇ／ｍＬ〜２０００ｐｇ／ｍＬである。
更なる好適態様では、前記方法は、被験対象における急性非代償性心不全（ＡＤＨＦ）の診断のために適用される。
更に、本発明方法は、慢性心不全と急性心不全との識別を可能にする。そこでは、急性心不全の被験対象からの試料における、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物（特に好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の量が、好ましくは３４０ｐｇ／ｍＬ以上、より好ましくは３５４ｐｇ／ｍＬ以上、更に好ましくは４５５ｐｇ／ｍＬ以上である。
【０１２３】
ｄ）心筋梗塞の診断
本発明の好適態様では、当該方法は、心筋梗塞を診断するためのものである。心筋梗塞は、被験対象からの試料において、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物（特に好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の量の存在により特徴付けられることを見出した。好ましくは２６０ｐｇ／ｍＬ以上、より好ましくは２７６ｐｇ／ｍＬ以上、更に好ましくは２９５ｐｇ／ｍＬ以上である。あるいは、心筋梗塞の指標である前記化合物（好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の量は、２６０ｐｇ／ｍＬ〜４０００ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは２７６ｐｇ／ｍＬ〜３０００ｐｇ／ｍＬ、更に好ましくは２９５ｐｇ／ｍＬ〜２０００ｐｇ／ｍＬである。
本発明方法を用いて、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物を用いる心筋梗塞のルール・アウトが、救急部門への入院時に既に可能かもしれない。有利なことに、本発明によれば、前記化合物に基づく診断が迅速に提供でき、単一試料で充分である。これが、従来のｃＴｎ測定に対して特に有利な点である。従来法は、ｃＴｎの上昇及び／又は低下の検出に依存しており、従って、少なくとも二回のｃＴｎ測定を必要とする。更に、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の診断力および予後力は、ｃＴｎのような従来マーカーと比べて、優れている。
あるいは、ｃＴｎレベルは、更に精度を高めるために、ｓＣＤ４−ＳＴの量と組み合わせて測定することができる。
【０１２４】
３．被験対象の死亡リスクの評価
本発明によれば、死亡リスクの高い心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症の被験対象を同定するための方法を提供する。そこでは、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物（特に好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の量は、好ましくは５００ｐｇ／ｍＬ以上、より好ましくは８００ｐｇ／ｍＬ以上、更に好ましくは１３００ｐｇ／ｍＬ以上である。
あるいは、死亡リスクの高い被験対象における前記化合物（好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の量は、５００ｐｇ／ｍＬ〜４０００ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは８００ｐｇ／ｍＬ〜３０００ｐｇ／ｍＬ、更に好ましくは１３００ｐｇ／ｍＬ〜２０００ｐｇ／ｍＬである。
特に、急性心不全の患者における死亡リスクは、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の測定を使用することにより、評価することができる。心不全（特に急性心不全）の患者は、通常、高い死亡率を示す。ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の濃度は、高い死亡リスクを有する心不全患者を同定することができる。ｓＣＤ１４−ＳＴ濃度により評価されるような、高い死亡リスクを有する患者は、通常、生存した患者よりも、より高度な心不全であった。
【０１２５】
４．心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症を有する被検対象が特定の治療の恩恵を受けるかどうかの評価
アクティブキャリア媒介性の腸輸送は、炎症に関連する浮腫性心不全におけるより高いリポ多糖（ＬＰＳ）濃度と腸管虚血の結果としての上皮機能不全を示す急性慢性心不全において減少する。この知見は、肝硬変および門脈圧亢進症の患者における特発性細菌性腹膜炎においても見出されたように、上皮のバリア機能の破壊や細菌侵入をもたらす低酸素および／または浮腫腸管の観察と一致する。
ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の高いレベルは、被験対象（特には心不全の被験対象）が抗生物質の使用の恩恵を受けることの指標である。従って、本発明方法は、被験対象が、抗生物質、プロバイオティクス、及びラクツロースからなる群から選んだ物質を用いる治療の恩恵を受けるかどうかを評価するためのものである。
好ましくは、ネオマイシン又はパロマイシンのような消化管によって吸収されない抗生物質が使用される。通常、アミノグリコシド系抗生物質が好ましい。被験対象に適用した場合に腸の細菌叢を変更できるラクツロース及びプロバイオティクスを用いる追加治療も、特に有益である。
この知見に基づいて、本発明は、抗生物質、プロバイオティクス、及びラクツロースからなる群から選んだ物質が、ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の血漿レベルが高い被験対象の治療に使用するために提供される、との新規治療概念を提供する。好ましくは、前記化合物（好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の血漿レベルが３４５ｐｇ／ｍＬ以上、好ましくは８００ｐｇ／ｍＬ以上、より好ましくは１３００ｐｇ／ｍＬ以上である。
本発明によれば、或る物質が、食細胞の機能不全に関連する疾患、例えば、尿毒症、血清オプソニンの活性の低下、補体欠損症、先天性食作用の機能障害、慢性肉芽腫症、ミエロペルオキシダーゼ欠損、白血病、悪性リンパ腫、細菌性心内膜炎、糖尿病、及び肝硬変、あるいは、敗血症の治療ではない、治療における使用のために提供される。
【０１２６】
５．個々の被験対象が入院を必要とするかどうかの判定
好ましくは、本発明方法は、被験対象が病院または集中治療室に入院すべきかどうか（「ルール・イン」）、あるいは、退院することができるかどうか（「ルール・アウト」）の同定を可能にする。ほとんどの場合、被験対象は救急部門に現れる。本方法は、被験対象の試料中のｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、又は、ｓＣＤ１４−ＳＴ以外のｓＣＤ１４の断片若しくは誘導体から選んだ化合物の測定に基づく。従って、被験対象が、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症のために入院する必要があるかどうかを判定するための方法が提供される。
前記化合物（好ましくはｓＣＤ１４−ＳＴ）の量が、２６０ｐｇ／ｍＬ〜４０００ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは２７６ｐｇ／ｍＬ〜３０００ｐｇ／ｍＬ、更に好ましくは２９５ｐｇ／ｍＬ〜２０００ｐｇ／ｍＬ、更に好ましくは３４０ｐｇ／ｍＬ〜４０００ｐｇ／ｍＬ、更に好ましくは３５４ｐｇ／ｍＬ〜３０００ｐｇ／ｍＬ、更に好ましくは４５５ｐｇ／ｍＬ〜２０００ｐｇ／ｍＬである場合、通常、被験対象の入院が必要である。
【０１２７】
《実施例１》
以下、ｓＣＤ１４−ＳＴの使用が、心血管疾患若しくは状態の発症リスクが高い被験対象の検出、急性冠症候群（ＡＣＳ）、急性心筋梗塞（ＭＩ）、及び急性心不全（ＡＨＦ）の診断、並びに、緊急治療室における意思決定および緊急部門に現れる患者の全体的管理を向上させることを、ｓＣＤ１４−ＳＴの診断および予後力を評価することにより、そして、ｓＣＤ１４−ＳＴ濃度（心血管疾患若しくは状態において、病院への退院および入院、集中治療処置、予防、並びに治療手段に関する意思決定を導く）の臨床的影響をプロスペクティブに検討することにより、示す。
異なる心疾患患者と、健常者の対照群とから得た試料中のｓＣＤ１４−ＳＴを測定した：
・慢性心不全（ＨＦ）、ｎ＝４０
・狭心症（ＡＰ）及び不安定狭心症（ＵＡＰ）、ｎ＝１７
・非ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＮＳＴＥＭＩ）、ｎ＝２９
・急性非代償性心不全（ＡＤＨＦ）、ｎ＝６０
・対照群、ｎ＝１１９
【０１２８】
測定したｓＣＤ１４−ＳＴレベルは、健常対照と心血管疾患患者との間だけでなく、異なる患者群との間でも、非常に有意に異なっていた（図１）。
ｓＣＤ１４−ＳＴは、ＰＡＴＨＦＡＳＴプレセプシンアッセイ（三菱化学メディエンス）を用いて測定した。
【０１２９】
《実施例２》
基準範囲
以下の基準を満たす男性６０人及び女性５９人（年齢範囲２１〜６９歳、年齢中央値４２歳）を健常対照群（基準集団）として用いた：
アンケートにより慢性疾患及び医薬摂取者は除いた。身体検査、血圧評価、ＥＣＧ登録、及び経口グルコース耐性試験に病理学的所見が認められなかった。Ｎ末端プロＢ型ナトリウム利尿ペプチドの血漿濃度が１２５ｐｇ／ｍＬ以下であった。ＴＳＨ、クレアチニン、及びＨｂＡ１ｃの各濃度が正常であった。心血管疾患患者は、ドブタミン負荷試験を含む心臓磁気共鳴画像により除いた。
【０１３０】
対照群のＥＤＴＡ血漿試料中のｓＣＤ１４−ＳＴ濃度は、ＰＡＴＨＦＡＳＴアッセイを用いて測定した。臨床検査標準協会（ＣＬＳＩ）ガイドラインＣ２８−Ａ３に基づく９９パーセンタイル参照上限（ＵＲＬ）は、２５８（９０％ＣＩ：２３７−２７６）ｐｇ／ｍＬであった。結果を表１に示す。
【０１３１】
【表１】
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【０１３２】
《実施例３》
慢性心不全（ＣＨＦ）患者におけるｓＣＤ１４−ＳＴレベル
慢性心不全（ニューヨーク健康協会（ＮＹＨＡ）分類Ｉ−III）患者４０人から得たＥＤＴＡ血漿試料中のｓＣＤ１４−ＳＴ濃度を測定した。
【０１３３】
【表２】
0006474730.tif 000004
【０１３４】
ｓＣＤ１４−ＳＴ値は、対照群と比較して、ＣＨＦ患者で有意に（ｐ＝０．０００４）上昇していた（表２）。ＲＯＣ分析（表３参照）の結果は、健常対照とＣＨＦ患者との間でｓＣＤ１４−ＳＴの識別力を示す、ＡＵＣ０．６８９（感度＝７０％、ＮＰＶ＝８６％；特異度＝６４％、ＰＰＶ＝４１．２％）であった（図２参照）。この効果は、心疾患の病因に関与する基礎となる炎症過程に起因している可能性がある。
【０１３５】
【表３】
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【０１３６】
《実施例４》
不安定狭心症（ＵＡＰ）患者におけるｓＣＤ１４−ＳＴレベル
緊急治療室で不安定狭心症を呈する患者におけるｓＣＤ１４−ＳＴ値を測定した（表４）。健常対照群の対応値に対する差異は、高い有意差（ｐ＜０．０００１）を示し、心筋トロポニンＩ（ｃＴｎＩ；図３参照）よりも優れていた。
【０１３７】
【表４】
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【０１３８】
並行して、ＰＡＴＨＦＡＳＴ  ｃＴｎＩアッセイを用いてｃＴｎＩ濃度を測定した。驚くべきことに、ｓＣＤ１４−ＳＴは、ｃＴｎＩと比較して、健常対照群とＵＡＰ患者との間で高い識別力を示した。この知見は、ｓＣＤ１４−ＳＴに関して優位に高いＡＵＣを示すＲＯＣ分析（図４）により確認することができた。（0.996 vs 0.681，p=0.0001）
【０１３９】
この結果は、上昇したｓＣＤ１４−ＳＴ濃度がアテローム性動脈硬化および心血管疾患の病因における炎症過程を反映するとの知見（急性心血管疾患でない患者におけるｓＣＤ１４−ＳＴの増加により示すことができる）を説明する。この知見は、ｓＣＤ１４−ＳＴと比較して、対照とＵＡＰ患者との間でｃＴｎＩ値は、それほど有意な差異が見られなかったとの観察により強調することができる。要約すると、急性心血管疾患または状態にない患者（例えば、ＣＨＦまたは狭心症）におけるｓＣＤ１４−ＳＴ濃度の増加は、アテローム性動脈硬化症および心血管疾患の病因における炎症効果を反映する。
【０１４０】
《実施例５》
非ＳＴ上昇型心筋梗塞患者におけるｓＣＤ１４−ＳＴレベル
緊急治療室に入院した治療継続患者の血漿試料中のｓＣＤ１４−ＳＴ濃度を、ＰＡＴＨＦＡＳＴアッセイを用いて測定した。血液採取は、入院直後に実施した。非ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＮＳＴＥＭＩ）患者２８人が含まれる。
【０１４１】
ｓＣＤ１４−ＳＴ測定の結果は、患者の臨床経過中に独立して確立された、被験対象の退院時の退院診断に対して解釈された。
【０１４２】
【表５】
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【０１４３】
緊急治療室でＮＳＴＥＭＩ患者から入院時に得られた血漿試料において測定したｓＣＤ１４−ＳＴ値を、表５に示す。
健常対照とＮＳＴＥＭＩ患者との間の差異は、高い有意差（ｐ＜０．０００１）を示した（表６）。並行して、ｃＴｎＩを測定した。両マーカーとも、図５に示すように、健常対照群とＮＳＴＥＭＩ患者との間で高い有意差で異なっていたが、ＲＯＣ分析で得られたＡＵＣ曲線の比較は、ｓＣＤ１４−ＳＴがより高い識別力を有することを示した（図６）。
【０１４４】
緊急治療室で胸痛を呈する患者におけるＮＳＴＥＭＩの診断に関する優れた診断精度は、ｓＣＤ１４−ＳＴのＲＯＣ由来の閾値と、ＰＡＴＨＦＡＳＴ  ｃＴｎＩの９９パーセンタイルカットオフ値（０．０２ｎｇ／ｍＬ）を含むことにより、確認することができた。結果を図７に示す。カットオフ値２９０ｐｇ／ｍＬでｓＣＤ１４−ＳＴの１００％の感度を示す一方で、国際的ガイドラインに従った健常な基準集団の９９パーセンタイル濃度のメーカー推奨カットオフ値を用いることにより、ＰＡＴＨＦＡＳＴ  ｃＴｎＩは７４．１％の感度を示した。最初に測定されたｃＴｎ値がカットオフ値より低い場合、ガイドラインは、入院後３〜６時間のｃＴｎ測定、及び、９９パーセンタイルカットオフ値よりも少なくとも１バリューの上昇及び／又は低下を検出することを勧める。
【０１４５】
【表６】
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【０１４６】
《実施例６》
急性心不全の診断
急性呼吸困難で緊急治療室に入院し、３００ｐｇ／ｍＬの閾値濃度を超える高いＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ値により急性心不全と評価した患者６０人から得た血漿試料中のｓＣＤ１４−ＳＴ濃度を、ＰＡＴＨＦＡＳＴアッセイを用いて測定した。急性心不全の診断を確認した全ての患者で、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ血漿レベルが３６１ｐｇ／ｍＬ以上であることが明らかになった（表７）。
【０１４７】
【表７】
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【０１４８】
ＲＯＣ分析の結果は、急性心不全の「ルール・イン」及び「ルール・アウト」が、健常対照群とＡＤＨＦ患者との識別のためのｓＣＤ１４−ＳＴ閾値３１１ｐｇ／ｍＬにおいて、それぞれ１００％の感度および特異度で可能であることを示した（図８）。
ＣＨＦ患者と急性心不全患者との識別に関して、ＲＯＣ分析は、ｓＣＤ１４−ＳＴ閾値３５４ｐｇ／ｍＬにおいて、感度９８．３％、特異度９５．０％であり、ＡＵＣは０．９９３であることを明らかにした（図９）。
これらの結果は、緊急治療室で急性呼吸困難を示す患者における急性心不全の「ルール・イン」及び「ルール・アウト」が、ｓＣＤ１４−ＳＴ血漿濃度を用いることにより、明らかに可能であることを示した（図１０）。
【０１４９】
《実施例７》
急性心不全患者における死亡リスクの予測
急性呼吸困難で緊急治療室に入院し、３００ｐｇ／ｍＬの閾値濃度を超える高いＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ値により急性心不全と評価した患者６０人（Chen AA, et al. NT-proBNP levels, echocardiographic findings, and outcomes in breathless were patients: results from the ProBNP Investigating of Dyspnea in the Emergency Room (PRIDE) echocardiographic substudy. Euer Heart J 2006;27:839-845）が、本研究に含まれていた。２年間のフォローアップの間、２５人の患者が死亡した。
【０１５０】
【表８】
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【０１５１】
ｓＣＤ１４−ＳＴが、生存者と非生存者との間で高い有意性をもって異なっていたのに対して、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ値は、両群間で有意な違いを示さなかった。
ｓＣＤ１４−ＳＴの結果予測と、９種の炎症および心血管マーカー（ルーチン診断または臨床研究で既に確立されている）との比較のためのＲＯＣ分析の結果は、急性心不全患者でのｓＣＤ１４−ＳＴの優れた予後妥当性を明らかにした（図１３）。
【０１５２】
《実施例８》
待機的心臓手術後の患者における死亡リスクの予測
待機的心臓手術を受けた４９人の患者から術後１日目に得られたＥＤＴＡ血漿試料中のｓＣＤ１４−ＳＴ及びＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度を測定した。２年間のフォローアップの間、２４人の患者が死亡した。
【０１５３】
【表９−１】
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【０１５４】
ｓＣＤ１４−ＳＴ及びＮＴ−ｐｒｏＢＮＰは、生存者と非生存者との間で高い有意性をもって異なっていたが、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰは、両群間でわずかな違いを示したにすぎなかった（図１４）。
【０１５５】
結果予測に関するｓＣＤ１４−ＳＴ（ＡＵＣ＝０．９５７、カットオフ値＝３７１ｐｇ／ｍＬ、感度＝１００％、特異度＝９２．０％）とＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ（ＡＵＣ＝０．８９５、カットオフ値＝４２４９ｐｇ／ｍＬ、感度＝８７．５％、特異度＝８４．０％）との比較のためのＲＯＣ分析の結果は、待機的心臓手術を受けた患者でのｓＣＤ１４−ＳＴの優れた予後妥当性を明らかにした（図１５及び図１６）。
【０１５６】
《実施例９》
入院時の心臓性および非心臓性胸痛間の識別
目的および方法
緊急治療室に入院した急性心筋梗塞（ＡＭＩ）の疑いのある胸痛患者３０人が、本研究に含まれていた。トロポニンは、最初陰性であった。ＡＭＩ、急性冠症候群（ＡＣＳ）、または不安定狭心症（ＵＡＰ）は、連続トロポニン測定、心電図（ＥＣＧ）、及び初期の胸痛症状の非心臓起源を確認するための更なるケアを含む現在のガイドラインに従って、標準的診断手順によって除外された。ｓＣＤ１４−ＳＴを入院時に測定し、心臓性胸痛を有するがＡＭＩではない１７人の患者群（最終診断ＵＡＰが確立された）の入院時に測定したｓＣＤ１４−ＳＴ値と比較した。
【０１５７】
結果
ＵＡＰ及び最初の心臓性胸痛を有する患者群は、非心臓性胸痛の患者群と比較して、有意に高いｓＣＤ１４−ＳＴ値を示した（ｐ＜０．０００１；表９、図１７）。
【０１５８】
【表９−２】
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【０１５９】
心臓性および非心臓性胸痛間の識別に関するＲＯＣ（receiver operating characteristic）分析は、ＡＵＣ値０．９８１と、対応する感度９４．１％、特異度９６．０％を明らかにした（図１８参照）。
【０１６０】
結論
ＲＯＣ分析の結果は、心臓性および非心臓性胸痛間の識別に関して、ｓＣＤ１４−ＳＴの高い識別力を示した。ＲＯＣから求めたカットオフ値は２５５ｐｇ／ｍＬであり、心臓疾患の診断で確立されたｓＣＤ１４−ＳＴの他の閾値に準じた。
【０１６１】
この結果は、２５５ｐｇ／ｍＬのカットオフ値より低いｓＣＤ１４−ＳＴ値を示す胸痛患者は、非心臓性胸痛の患者に割り当てられ、更なる診断手順（例えば、連続トロポニン測定、ＥＣＧ、又は更なるケア）を行うことなく緊急治療室から退室することができることを示す。
【０１６２】
《実施例１０》
急性心不全（ＡＨＦ）患者における死亡リスク予測のための心臓マーカーとしてのｓＣＤ１４及びｓＣＤ１４−ＳＴ
方法
救急部門で処置される患者３５人（３２〜８９歳、中央値６７歳、女性１３人、男性２２人）から得られたベースライン血漿試料中のｓＣＤ１４及びｓＣＤ１４−ＳＴ濃度を測定した。急性心不全（ＡＨＦ）の診断は、ＰＲＩＤＥスタディー（Januzzi J et al.: The N-terminal Pro-BNP investigation of dyspnea in the emergency department (PRIDE) study. Am J Cardiol 2005;95:948-54）に従って、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰカットオフ値３００ｎｇ／Ｌを使用するＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ測定により確認した。結果の指標は、２８日以内の死亡とした。ｓＣＤ１４は、Quantikine Human sCD14 Immunoassay (R&D Systems Inc. Minneapolis, MN, USA)を用いて測定した。ｓＣＤ１４−ＳＴは、PATHFAST Presepsin assay (Mitsubishi Chemical Medience)を用いて測定した。ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰは、ELECSYS proBNP assay (Roche Diagnostics)を用いて測定した。
【０１６３】
結果
本研究群のベースライン濃度は、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ、ｓＣＤ１４、及びｓＣＤ１４−ＳＴの各々において、範囲１７〜２２６４ｎｇ／Ｌ、中央値２０８ｎｇ／Ｌ；範囲６６７７〜２６０００ｎｇ／Ｌ、中央値１２８００ｎｇ／Ｌ；及び範囲３００〜８８９３ｎｇ／Ｌ、中央値９５２ｎｇ／Ｌであった。ＡＨＦの診断を確認した患者１５人から、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ値がカット値３００ｎｇ／Ｌを超えることが明らかになった。２８日間のフォローアップの間、全研究群の患者５人（１４．３％）、ＡＨＦ群の患者３人（２０．０％）が死亡した。全研究群およびＡＨＦ群の生存者および非生存者間の識別のためのＲＯＣ分析から得られたＡＵＣ（area under the curves）を表１０に、ＲＯＣ曲線を図１９（パネル（Ａ）：全研究群、パネル（Ｂ）：ＡＨＦ群）に示す。ｓＣＤ１４の濃度は、ｓＣＤ１４−ＳＴと比較して約１０倍高いことが判明したが、両マーカーは、Bablok-Passing回帰により示されるように、充分な相関を示した（図２０）。ｓＣＤ１４、ｓＣＤ１４−ＳＴ、及びＮＴ−ｐｒｏＢＮＰのＲＯＣ−ＡＵＣは、全研究群よりも、ＡＨＦ群の生存者および非生存者間の有意に高い識別力を示した（表１０、図１９）。
【０１６４】
【表１０】
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【０１６５】
結論
ｓＣＤ１４及びｓＣＤ１４−ＳＴは、既に確立された心臓マーカーＮＴ−ｐｒｏＢＮＰとの比較において、急性心不全患者における死亡リスク予測のためのＲＯＣ分析から得られた優れた結果を明らかにし、前記結果は、ｓＣＤ１４及びｓＣＤ１４−ＳＴが心臓マーカーとして使用可能であることを示す。
【０１６６】
《実施例１１》
急性心不全（ＡＨＦ）患者のリスク層別化のためのマルチマーカーアプローチ
本研究では、追加マーカーを組み合わせて、ｓＣＤ１４−ＳＴとの同時評価の付加的な診断および予後価値を示す。急性心不全患者において、以下の各マーカーとのペアワイズコンビネーションによりｓＣＤ１４−ＳＴを評価した：
−インターロイキン−１受容体ファミリーマーカー（ＳＴ２：可溶性ＳＴ２の血漿濃度は炎症疾患および心疾患（特に急性心不全）において増加する）、
−神経ホルモンマーカー（ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）、
−虚血性心臓マーカー（高感度ｃＴｎＴ、すなわち、ｈｓＴｎＴ）、又は
−炎症マーカー（ＣＲＰ）。
【０１６７】
方法
救急部門で処置される急性心不全患者６０人（５０〜９０歳、中央値７７歳、女性２６人、男性３４人）から得られたベースライン血漿試料中のマーカー濃度を測定した。心筋梗塞または敗血症患者は除外した。結果の指標は、２年での死亡とした。ＳＴ２は、Presage ST2 assay（Critical Diagnostics, San Diego, CA, USA）を用いて測定した。ｓＣＤ１４−ＳＴは、PATHFAST Presepsin assay（Mitsubishi Chemical Medience）を用いて測定した。アミノ末端プロＢ型ナトリウム利尿ペプチド（ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）、高感度心臓トロポニンＴ（ｈｓｃＴｎＴ）、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）は、ELECSYS tests（Roche Diagnostics）を用いて測定した。
【０１６８】
結果
急性心不全の診断を確認する本研究群のベースラインＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度は、範囲３６１〜２７２８７ｎｇ／Ｌ、中央値（ＩＱＲ）５７７３（２２０７〜８４８８）ｎｇ／Ｌであった。２年間のフォローアップ期間の間、患者２５人（４１．７％）が死亡した。生存者および非生存者間の識別に関するマン・ホイットニー独立サンプル検定およびＲＯＣ分析の結果が表１１にまとめられている。
【０１６９】
表１２は、各マーカーＳＴ２、ＣＲＰ、ｈｓＴｎＴ、及びＮＴ−ｐｒｏＢＮＰとｓＣＤ１４−ＳＴとの組合せに関するＲＯＣ分析および総再分類（Net Reclassification）の結果を含む。マーカー組合せの同時評価は、ＡＵＣ値および総再分類指標（Net Reclassification Index）の増加によって示されるように、予後妥当性を増強した。
【０１７０】
【表１１】
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【０１７１】
【表１２】
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【０１７２】
結論
急性心不全患者におけるｓＣＤ１４−ＳＴとＳＴ２、ｓＣＤ１４−ＳＴとＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ、ｓＣＤ１４−ＳＴとｈｓＴｎＴ、又はｓＣＤ１４−ＳＴとＣＲＰの同時評価は、単独マーカーの測定と比較して、死亡リスク予測を向上させる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【配列表】
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