(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターであって、
【化２】
0006596497.tif 000017
0006596497.tif 000018
0006596497.tif 000019
からなる群より選択される化合物、又はその薬学的に許容し得る塩である、二重部位ＢＡＣＥ１インヒビター。
【請求項２】
前記薬学的に許容し得る塩がトリフルオロアセテートである、請求項１記載の二重部位ＢＡＣＥ１インヒビター。
【請求項３】
治療上活性な物質として使用するための、請求項１又は２記載の二重部位ＢＡＣＥ１インヒビター。
【請求項４】
β−アミロイドレベル及び／若しくはβ−アミロイドオリゴマーの上昇並びに／又はβ−アミロイドプラーク及びさらなる沈着物によって特徴付けられる疾患及び障害の治療的及び／又は予防的処置用の治療上活性な物質として使用するための、請求項１〜３のいずれか一項記載の二重部位ＢＡＣＥ１インヒビター。
【請求項５】
アルツハイマー病の治療的及び／又は予防的処置用の治療上活性な物質として使用するための、請求項４記載の二重部位ＢＡＣＥ１インヒビター。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか一項記載の二重部位ＢＡＣＥ１インヒビター並びに薬学的に許容し得る担体及び／又は薬学的に許容し得る補助物質を含む医薬組成物。
【請求項７】
β−アミロイドレベル及び／若しくはβ−アミロイドオリゴマーの上昇並びに／又はβ−アミロイドプラーク及びさらなる沈着物によって特徴付けられる疾患及び障害の治療的及び／又は予防的処置用の医薬の製造のための、請求項１〜６のいずれか一項記載の二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターの使用。
【請求項８】
アルツハイマー病の治療的及び／又は予防的処置用の医薬の製造のための、請求項１〜６のいずれか一項記載の二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターの使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、二重のＢＡＣＥ１抑制性を有するペプチド、それらの製造、それらを含有する医薬組成物及び治療上活性な物質としてのそれらの使用に関する。
【０００２】
本発明の化合物は、Ａｓｐ２（β−セクレターゼ、ＢＡＣＥ１又はメマプシン−２）阻害活性を有し、したがってβ−アミロイドレベル及び／若しくはβ−アミロイドオリゴマーの上昇並びに／又はβ−アミロイドプラーク及びさらなる沈着物によって特徴付けられる疾患及び障害、特にアルツハイマー病の治療的及び／又は予防的処置において使用され得る。
【背景技術】
【０００３】
アルツハイマー病（ＡＤ）は、中枢神経系の神経変性障害であって、高齢者における進行性認知症の主因である。その臨床症状は、記憶、認知、時間的及び場所的見当識、判断及び論理的思考の機能障害であるが情動撹乱をもたらすこともある。現在のところ、その疾患若しくはその進行を防止することができる、又はその臨床症状を安定して逆転させることができる、利用可能な処置はない。ＡＤは、平均余命の高いすべての社会において主要な健康上の問題となっており、また健康システムに甚大な経済的負担を与えてもいる。
【０００４】
ＢＡＣＥ１酵素は、アルツハイマー病関連Ａβ−ペプチドの生成に寄与するＡＰＰタンパク質のタンパク質分解切断の一つを担う。ＢＡＣＥ１酵素の阻害によってＡβ−ペプチドの生成を遅延又は停止させることは、有望な治療概念である。
【０００５】
活性部位指向ＢＡＣＥ１インヒビターは、たとえば国際公開公報第２００６／００２９０７号に報告されており、エキソサイト指向（触媒ドメイン）ＢＡＣＥ１インヒビターは、たとえばKornacker et al., Biochemistry 2005, 44, 11567-73に報告されている。
【０００６】
Bodorらは、血液脳関門を貫通するのに好適な修飾ペプチドを報告している（Bodor et al., Science, Vol. 257, 1992）。
【０００７】
発明の詳細な説明
本発明の目的は、ＢＡＣＥ酵素の酵素活性部位及び触媒ドメインの両方に結合する二重部位ＢＡＣＥ１インヒビター、前記化合物の調製、それらを含有する医薬及びそれらの製造や、アルツハイマー病などの、ＢＡＣＥ１活性の阻害が関わる疾患及び障害の治療的及び／又は予防的処置における前記化合物の使用である。さらに、神経性組織（たとえば脳）内、当該組織上、又は当該組織周辺でのβ−アミロイドプラークの生成、又は生成及び沈着が、ＡＰＰ又はＡＰＰフラグメントからのＡβ生成を阻害することにより、本発明の化合物によって阻害される。
【０００８】
本願明細書で用いられる一般用語の以下の定義は、当該用語が単独で現れるか又は他の群との組み合わせで現れるかにかかわらず適用される。
【０００９】
【表１】
0006596497.tif 000002
【００１０】
「Sta」の用語は、スタチン、（３Ｓ，４Ｓ）−４−アミノ−３−ヒドロキシ−６−メチルヘプタン酸（ＣＡＳ ４９６４２−０７−１）を表す。
【００１１】
「MetSta」の用語は、（３Ｓ，４Ｓ）−４−アミノ−３−ヒドロキシ−６−メチルチオヘキサン酸（ＣＡＳ該当なし）、（Ｆｍｏｃ保護体のＣＡＳ：２６８５４２−１８−３）を表す。
【００１２】
「27-OH-Chol」の用語は、２７−ヒドロキシコレステロール（ＣＡＳ ２０３８０−１１−４）を表す。構造及び調製は、第１８頁、化合物４を参照のこと。
【００１３】
「Chol-27-TFA-エステル」の用語は、スクシンアミド酸（３Ｓ，８Ｓ，９Ｓ，１０Ｒ，１３Ｒ，１４Ｓ，１７Ｒ）−１７−［（１Ｒ，５Ｒ）−１，５−ジメチル−６−（２，２，２−トリフルオロ−アセトキシ）−ヘキシル］−１０，１３−ジメチル−２，３，４，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−テトラデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−イルエステルを表し、これは「２７−ＯＨ−Ｃｈｏｌ」−ペプチドのＴＦＡ切断の際の副生成物として生じた。
【００１４】
「Chol'エステル'」の用語は、コレステリルヘミコハク酸塩（ＣＡＳ：１５１０−２１−０）を表す。
【００１５】
「PEG(3)」の用語は、１２−アミノ−４，７，１０−トリオキサドデカン酸（ＣＡＳ：７８４１０５−３３−５）を表す。
【００１６】
「PEG(4)」の用語は、１５−アミノ−４，７，１０，１３，テトラオキサペンタデカン酸（ＣＡＳ：該当なし）、（Ｆｍｏｃ保護体のＣＡＳ：５５７７５６−８５−１）を表す。
【００１７】
「薬学的に許容し得る塩」の用語は、ヒト及び動物の組織との接触での使用に好適な塩を言う。無機酸及び有機酸との好適な塩の例として、酢酸、クエン酸、ギ酸、フマル酸、塩酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、メタン−スルホン酸、硝酸、リン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、コハク酸、硫酸（sulfuric acid）、硫酸（sulphuric acid）、酒石酸、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）などが挙げられるが、これらに限定されない。具体的な塩は、トリフルオロアセテートである。
「薬学的に許容し得る担体」及び「薬学的に許容し得る補助物質」の用語は、製剤の他の成分と適合性のある希釈剤又は賦形剤などの担体及び補助物質を言う。
【００１８】
「医薬組成物」の用語は、所定の量又は割合の特定の成分を含む製品や、特定の成分を特定の量で組み合わせることによって直接的又は間接的に生じる任意の製品を包含する。好ましくは、１つ以上の活性成分と、不活性成分を含む任意の担体とを含む生成物や、任意の２つ以上の成分の組み合わせ、複合若しくは凝集から、又は任意の１つ以上の成分の解離から、又は１つ以上の成分の他のタイプの反応若しくは相互作用から、直接的又は間接的に生じる任意の生成物を包含する。
【００１９】
「５０％阻害濃度」（ＩＣ５０）の用語は、in vitroでの生物学的プロセスの５０％阻害を得るために必要とされる特定化合物の濃度を意味する。ＩＣ５０値は、ｐＩＣ５０値（−ｌｏｇＩＣ５０）に対数的に変換されることができ、高い値は指数関数的に大きな効力を示す。ＩＣ５０値は絶対値ではなく、たとえば使用濃度などの実験条件に依存する。Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ方程式を用いて、ＩＣ５０値を絶対阻害定数（Ｋｉ）に変換することができる（Biochem. Pharmacol. (1973) 22:3099）。用語「阻害定数」（Ｋｉ）は、レセプターに対する特定のインヒビターの絶対結合親和性を示す。これは、競合結合アッセイを用いて測定され、競合リガンド（たとえば、放射性リガンド）が存在しない場合、特定のインヒビターがレセプターの５０％を占めるはずである濃度に等しい。Ｋｉ値は対数的にｐＫｉ値（−ｌｏｇＫｉ）に変換することができ、高い値は指数関数的に大きな効力を示す。
【００２０】
「治療上有効量」は、疾患状態を処置するために被験体に投与されたときに、その疾患状態に対してそのような処置を達成するのに十分な化合物の量を意味する。「治療上有効量」は、化合物、処置される疾患状態、処置される疾患の重篤度、被験体の年齢及び相対的な健康状態、投与の経路及び形態、担当する医療従事者又は獣医従事者の判断、及び他の要因に応じて変動するであろう。
【００２１】
変数を言う場合の「本明細書で定義される」及び「本明細書に記載のとおりの」という用語は、もしあるとすれば、変数の広範な定義、並びに好ましい、より好ましい及び最も好ましい定義が参照により組み入れられる。
【００２２】
化学反応に言及するときに「処理する」、「接触させる」及び「反応させる」という用語は、指示された及び／又は所望の生成物を生成するための適切な条件下で２つ以上の試薬を添加又は混合することを意味する。なお、指示された及び／又は所望の生成物を生成する反応は、必ずしも最初に添加された２つの試薬の組み合わせから直接得られるわけではないこと、すなわち、最終的には指示された及び／又は所望の生成物の形成をもたらす混合物中で生成される１つ以上の中間体があり得ることは理解されるであろう。
【００２３】
本発明は、医薬組成物、前記化合物の使用方法、及び調製方法も提供する。
【００２４】
すべての別個の実施形態は組み合わせられてもよい。
【００２５】
本発明は、ＢＡＣＥ１酵素の酵素活性部位及び触媒ドメインの両方に結合する、二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターに関する。
【００２６】
本発明の特定の実施形態は、請求項１に記載の二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターであって、該ＢＡＣＥ１インヒビターの活性部位阻害部（Ｂ’）にエキソサイト阻害部（Ａ’）がリンカー（Ｌ’）によって連結されている二重部位ＢＡＣＥ１インヒビター、又はその薬学的に許容し得る塩に関する。
【００２７】
本発明の特定の実施形態は、本願明細書に記載される二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターに関し、Ｌ’は、
i. -（Gly）x-（ｘは３、４、５又は６である）、
ii. -X-Gly-Gly-（XはAla、DAla、Nle、Ser、Pro、D-Pro、Lys及びDLysからなる群より選択される）、
iii. -Gly-X-Gly-（XはAla、DAla、Nle、Ser、Pro、D-Pro、Orn、Lys及びDLysからなる群より選択される）、
iv. -Gly-Gly-X-（XはAla、DAla、Nle、Ser、Pro、D-Pro、Lys及びDLysからなる群より選択される）、
v. -Gly-DAla-DLys-、
vi. PEG（3）、及び
vii. PEG（4）
からなる群より選択される。
【００２８】
本発明の特定の実施形態は、本願明細書に記載される化合物に関し、Ａ’は、
i. Tyr-Pro-Tyr-Phe-Ile-Pro-Leu-、
ii. Tyr-Pro-Lys-Phe-Ile-Pro-Leu-、及び
iii. Tyr-Pro-Tyr-Phe-Ile-Pro-DLys-
からなる群より選択される。
【００２９】
本発明の特定の実施形態は、本願明細書に記載される化合物に関し、Ｂ’は、
i. Glu-Val-Asn-Sta-Val-Ala-Glu-Phe-Lys（パルミチル）-NH2、
ii. Glu-Val-Asn-Sta-Val-Ala-Glu-DPro-Lys（Y）-NH2（Ｙはパルミチル、パルミトレイック、オレイック、エライジック、エルシック、バクセニック及びミリストレイックからなる群より選択される）、及び
iii. Glu-Val-Asn-MetSta-Val-Ala-Glu-DPhe-Lys（パーム）-NH2、
からなる群より選択される。
【００３０】
本発明の特定の実施形態は、本願明細書に記載され、
【化１】
0006596497.tif 000003
0006596497.tif 000004
0006596497.tif 000005
からなる群より選択される化合物、又はその薬学的に許容し得る塩に関する。
【００３１】
本発明の特定の実施形態は、本願明細書に記載される化合物に関し、前記薬学的に許容し得る塩はトリフルオロアセテートである。
【００３２】
本発明の特定の実施形態は、治療上活性な物質として使用するための、本願明細書に記載される二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターに関する。
【００３３】
本発明の特定の実施形態は、ＢＡＣＥ１活性のインヒビターとして使用するための、本願明細書に記載される二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターに関する。
【００３４】
本発明の特定の実施形態は、β−アミロイドレベル及び／若しくはβ−アミロイドオリゴマーの上昇並びに／又はβ−アミロイドプラーク及びさらなる沈着物によって特徴付けられる疾患及び障害、特にアルツハイマー病の治療的及び／又は予防的処置用の治療上活性な物質として使用するための、本願明細書に記載される二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターに関する。
【００３５】
本発明の特定の実施形態は、アルツハイマー病の治療的及び／又は予防的処置用の治療上活性な物質として使用するための、本願明細書に記載される二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターに関する。
【００３６】
本発明の特定の実施形態は、本願明細書に記載される二重部位ＢＡＣＥ１インヒビター並びに薬学的に許容し得る担体及び／又は薬学的に許容し得る補助物質を含む医薬組成物に関する。
【００３７】
本発明の特定の実施形態は、ＢＡＣＥ１活性の阻害に使用するための医薬の製造のための、本願明細書に記載される二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターの使用に関する。
【００３８】
本発明の特定の実施形態は、β−アミロイドレベル及び／若しくはβ−アミロイドオリゴマーの上昇並びに／又はβ−アミロイドプラーク及びさらなる沈着物によって特徴付けられる疾患及び障害、特にアルツハイマー病の治療的及び／又は予防的処置用の医薬の製造のための、本願明細書に記載される二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターの使用に関する。
【００３９】
本発明の特定の実施形態は、アルツハイマー病の治療的及び／又は予防的処置用の医薬の製造のための、本願明細書に記載される二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターの使用に関する。
【００４０】
本発明の特定の実施形態は、ＢＡＣＥ１活性の阻害に使用するための、本願明細書に記載される二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターに関する。
【００４１】
本発明の特定の実施形態は、β−アミロイドレベル及び／若しくはβ−アミロイドオリゴマーの上昇並びに／又はβ−アミロイドプラーク及びさらなる沈着物によって特徴付けられる疾患及び障害、特にアルツハイマー病の治療的及び／又は予防的処置に使用するための、本願明細書に記載される二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターに関する。
【００４２】
本発明の特定の実施形態は、アルツハイマー病の治療的及び／又は予防的処置に使用するための、本願明細書に記載される二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターに関する。
【００４３】
本発明の特定の実施形態は、ＢＡＣＥ１活性の阻害に使用するための方法、特にβ−アミロイドレベル及び／若しくはβ−アミロイドオリゴマーの上昇並びに／又はβ−アミロイドプラーク及びさらなる沈着物によって特徴付けられる疾患及び障害、アルツハイマー病の治療的及び／又は予防的処置のための方法に関し、当該方法は、本願明細書に記載される二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターをヒト又は動物に投与することを含む。
【００４４】
さらに、本発明は、あらゆる光学異性体、すなわち ジアステレオ異性体、ジアステレオマー混合物、ラセミ混合物、それらの対応する鏡像異性体及び／又は互変異性体すべて、さらにはそれらの溶媒和物を含む。
【００４５】
二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターは、本願明細書に記載されるように調製され得る。出発物質は、市販であるか、又は公知の方法に従って調製され得る。
【００４６】
対応する、酸との薬学的に許容し得る塩は、当業者に公知の標準方法によって、たとえば、二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターを、たとえばジオキサン又はＴＨＦなどの好適な溶媒に溶解させ、適切な量の対応する酸を添加することによって得られることができる。産物は、通常、濾過により、又はクロマトグラフィにより単離されることができる。二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターの、塩基との薬学的に許容し得る塩への変換は、このような化合物のこのような塩基での処理によって実施されることができる。たとえば、このような塩を形成する、一つの可能な方法は、たとえばＭ（ＯＨ）ｎ（式中、Ｍ＝金属又はアンモニウムカチオン、ｎ＝水酸化物アニオンの数）などの塩基性塩の１／ｎ当量を、化合物の好適な溶媒（たとえば、エタノール、エタノール−水混合液、テトラヒドロフラン−水混合液）の溶液に添加し、エバポレーション又は凍結乾燥によって溶媒を除去することによるものである。
【００４７】
二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターやすべての中間体産物は、それらの調製が実施例に記載されない限り、類似の方法に従って又は本明細書に示す方法に従って調製されることができる。出発物質は、市販のものであるか、当該技術分野で公知であるか、又は当該技術分野で公知の方法によって若しくはそれと同様に調製されることができる。
【００４８】
本発明における二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターは官能基で誘導体化され得、in vivoで親化合物に戻し変換することができる誘導体を提供し得るということは、分かるであろう。
【００４９】
薬理試験
二重部位ＢＡＣＥ１インヒビター及びそれらの薬学的に許容し得る塩は、有益な薬理学的特性を持っている。本発明の化合物はＢＡＣＥ１活性の阻害と関連していることが見出されている。以下に示す試験に従って化合物を調べた。
【００５０】
細胞のＡβ−低下アッセイ：
ヒトＡＰＰ ｗｔ 遺伝子（ＡＰＰ６９５）のｃＤＮＡを発現するベクターが安定にトランスフェクトされたヒトＨＥＫ２９３細胞を、細胞アッセイにおいて化合物の効力を評価するのに使用した。９６ウェルマイクロタイタープレートにおいて細胞培地（Ｉｓｃｏｖｅ、ｐｌｕｓ １０％（v/v）ウシ胎仔血清、グルタミン、ペニシリン／ストレプトマイシン）中、約８０％コンフルエンスに細胞を播種し、８％ＤＭＳＯ（ＤＭＳＯの最終濃度は０．８％v/vに維持）を含有するＦＣＳ不含の培地の１／１０用量中１０倍濃度で化合物を添加した。３７℃及び５％ＣＯ２で１８〜２０時間、加湿されたインキュベーター内でインキュベーションした後、Ａβ４０濃度を決定するために培養上清を回収した。９６ウェルＥＬＩＳＡプレート（たとえば、Ｎｕｎｃ ＭａｘｉＳｏｒｂ）にＡβ４０のＣ末端を特異的に認識するモノクローナル抗体（Brockhaus et al., NeuroReport 9, 1481-1486; 1998）を被覆した。たとえば１％ＢＳＡで非特異的結合部位をブロッキングして洗浄した後、セイヨウワサビペルオキシダーゼがカップリングされたＡβ検出抗体（たとえば、抗体４Ｇ８、Senetek, Maryland Heights, MO）と一緒に培養上清を好適な希釈率で添加し、５〜７時間インキュベーションした。その後、０．０５％Ｔｗｅｅｎ ２０を含むＴｒｉｓ緩衝性生理食塩水でそのマイクロタイタープレートのウェルを十分に洗浄し、クエン酸緩衝液中テトラメチルベンジジン／Ｈ２Ｏ２でアッセイを現像した。１容量の１N Ｈ２ＳＯ４で反応を停止した後、ＥＬＩＳＡリーダーにて波長４５０ｎｍでその反応を測定した。既知量の純粋なＡβペプチドを用いて得られた標準曲線から、培養上清中のＡβの濃度を計算した。
【００５１】
【表２】
0006596497.tif 000006
0006596497.tif 000007
0006596497.tif 000008
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【００５２】
医薬組成物
【００５３】
二重部位ＢＡＣＥ１インヒビター及び薬学的に許容し得る塩は、治療上活性な物質として、たとえば医薬調製物の形態で使用されることができる。医薬調製物の例は、経腸的な製剤、たとえば、錠剤、被覆錠剤、糖衣錠剤、硬ゼラチンカプセル剤及び軟ゼラチンカプセル剤、液剤、乳剤又は懸濁剤などの形態のものである。しかしながら投与は、たとえば坐剤の形態で直腸に、たとえば注射液剤の形態で非経口的に、又はたとえば鼻噴霧薬として鼻腔内デリバリーにて行うことも可能である。
【００５４】
二重部位ＢＡＣＥ１インヒビター及びその薬学的に許容し得る塩は、医薬調製物の生成のため、薬学的に不活性な無機担体又は有機担体を用いて加工されることができる。乳糖、コーンスターチ又はその誘導体、タルク、ステアリン酸又はその塩などを、たとえば、錠剤、被覆錠剤、糖衣錠剤及び硬ゼラチンカプセル剤用の担体として使用できる。軟ゼラチンカプセル剤のための好適な担体は、たとえば、植物油、ロウ、脂肪、半固体及び液体ポリオールなどである。しかしながら、軟ゼラチンカプセル剤の場合には、活性物質の性質に応じて、通常担体は必要ない。液剤及びシロップ剤の生成のために好適な担体は、たとえば、水、ポリオール、グリセロール、植物油などである。坐剤のための好適な担体は、たとえば、天然又は硬化油、ロウ、脂肪、半液体又は液体ポリオールなどである。二重部位ＢＡＣＥ１インヒビター及びその薬学的に許容し得る塩は、好適なポリマーに封入されることも、又はナノテクノロジーを用いて製剤化されることもできる。
【００５５】
さらに、医薬調製物は、保存剤、可溶化剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、甘味料、着色料、香料、浸透圧を変化させるための塩類、緩衝剤、マスキング剤又は抗酸化剤などの薬学的に許容し得る補助物質を含有し得る。それらは、さらに他の治療上価値ある物質を含有することもできる。
【００５６】
二重部位ＢＡＣＥ１インヒビター又はその薬学的に許容し得る塩、及び治療的に不活性な担体を含有する医薬もまた本発明の目的であり、二重部位ＢＡＣＥ１インヒビター及び／又はその薬学的に許容し得る塩並びに、所望により、１以上のその他の治療上価値ある物質を、１以上の治療上不活性な担体と共に、ガレヌス製剤投与型にすることを含む、それらの生成方法もまた同様である。
【００５７】
投薬量は広範囲に変えることができ、当然ながら、各々の個別症例における個々の要件に対して調節しなければならない。経口投与の場合、成人の投薬量は、二重部位ＢＡＣＥ１インヒビター又はその薬学的に許容し得る塩の対応量で、１日あたり、約０．０１mgから約１０００mgまで変えることができる。１日投薬量を、単回用量または分割用量で投与でき、さらにその上限は必要が認められればそれを上回ることもできる。
【００５８】
以下の実施例は、本発明を限定することなく例示するが、その代表例を示すに過ぎない。医薬調製物は、約１〜５００mg、好ましくは１〜１００mgの二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターを含有することが好都合である。本発明に係る組成物の実施例は以下のとおりである。
【００５９】
実施例Ａ
以下の組成の錠剤を、常法により製造する。
【００６０】
【表３】
0006596497.tif 000010
【００６１】
製造手順
１．  成分１、２、３及び４を混合し、精製水を用いて顆粒にする。
２．  顆粒を５０℃で乾燥する。
３．  顆粒を好適な製粉装置に通す。
４．  成分５を加え、３分間混合し、好適な圧縮機で圧縮する。
【００６２】
実施例Ｂ−１
以下の組成のカプセル剤を製造する。
【００６３】
【表４】
0006596497.tif 000011
【００６４】
製造手順
１．  成分１、２及び３を好適なミキサー内で３０分間混合する。
２．  成分４及び５を加え、３分間混合する。
３．  好適なカプセルに充填する。
【００６５】
二重部位ＢＡＣＥ１インヒビター、乳糖及びコーンスターチを先ずミキサー内、次いで粉砕機（comminuting machine）内で混合する。混合物をミキサーに戻し、それにタルクを加えて十分に混合する。機械によって混合物を好適なカプセル、たとえば硬ゼラチンカプセルに充填する。
【００６６】
実施例Ｂ−２
以下の組成の軟ゼラチンカプセルを製造する。
【００６７】
【表５】
0006596497.tif 000012
【００６８】
【表６】
0006596497.tif 000013
【００６９】
製造手順
二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターを他の成分の温溶融物に溶解させ、その混合物を適切なサイズの軟ゼラチンカプセルに充填する。充填された軟ゼラチンカプセルを、常法に従って処理する。
【００７０】
実施例Ｃ
以下の組成の坐剤を製造する。
【００７１】
【表７】
0006596497.tif 000014
【００７２】
製造手順
坐剤塊をガラス又はスチール容器内で溶融させ、十分に混合して、４５℃に冷却する。その際、微細粉末とした二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターを添加し、完全に分散するまで攪拌する。混合物を好適なサイズの坐剤型の中へ注ぎ込み、放冷する。次いで坐剤を型から取り出して、ロウ紙又は金属箔で個々に包装する。
【００７３】
実施例Ｄ
以下の組成の注射液剤を製造する。
【００７４】
【表８】
0006596497.tif 000015
【００７５】
製造手順
二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターをポリエチレングリコール４００及び注射剤用の水（一部）の混合物に溶解させる。ｐＨを酢酸によって５．０に調整する。残量の水を添加することにより容量を１．０mlに調整する。溶液を濾過し、適切な過剰量（overage）を用いてバイアルに満たして滅菌する。
【００７６】
実施例Ｅ
以下の組成のサシェ剤を製造する。
【００７７】
【表９】
0006596497.tif 000016
【００７８】
製造手順
二重部位ＢＡＣＥ１インヒビターを乳糖、微結晶性セルロース及びカルボキシメチルセルロースナトリウムと混合し、水のポリビニルピロリドンとの混合物を用いて顆粒にする。顆粒をステアリン酸マグネシウム及び香味物質添加剤と混合して、サシェ剤に満たす。
【００７９】
実験部
以下の実施例は、本発明の例示のために提供される。これらは本発明の範囲を限定するものと考えられるべきでなく、その代表例であるに過ぎない。 
【００８０】
CEM Liberty Microwave Peptide Synthesizerについての一般手順
０．１mMolスケール：
【００８１】
Ｆｍｏｃの脱保護：
洗浄及び予備膨潤された樹脂（４３５mg、０．１mMol、TentaGel S RAM（ロード：０．２３mMol/g）、（Rapp Polymere、Ｃａｔ：Ｓ３００２３）を、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中２０％ピペリジンの溶液（７．０mL）でマイクロ波条件下５０℃で３分間、初期脱保護のために処理した。樹脂をＤＭＦで洗浄し、ＤＭＦ中２０％ピペリジンの溶液（７．０mL）でマイクロ波条件下７５℃で５分間、脱保護のために処理した。
【００８２】
アミノ酸のカップリング
洗浄及び予備膨潤された樹脂に、ＤＭＦ中０．２Mアミノ酸の溶液（２．５mL、５．０当量）を、次いでＤＭＦ中０．５M ＣＯＭＵ（登録商標）の溶液（１．０mL、５．０当量）、（ＣＡＳ：１０７５１９８−３０−９、Iris Biotech、Ｃａｔ：ＲＬ−１１７５．１０００）、次いでＮ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）中２Mジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）の溶液（０．５mL、１０．０当量）を加えた。この反応混合物を、マイクロ波条件下７５℃で５分間、カップリングのために処理した。
【００８３】
０．２５mMolスケール：
【００８４】
Ｆｍｏｃの脱保護：
洗浄及び予備膨潤された樹脂（１．０９g、０．２５mMol、TentaGel S RAM（ロード：０．２３mMol/g）、（Rapp Polymere、Ｃａｔ：Ｓ３００２３）を、ＤＭＦ中２０％ピペリジンの溶液（１０．０mL）でマイクロ波条件下５０℃で３分間、初期脱保護のために処理した。樹脂をＤＭＦで洗浄し、ＤＭＦ中２０％ピペリジンの溶液（１０．０mL）でマイクロ波条件下７５℃で５分間、脱保護のために処理した。
【００８５】
アミノ酸のカップリング：
洗浄及び予備膨潤された樹脂に、ＤＭＦ中０．２Mアミノ酸の溶液（５．０mL、４．０当量）を、次いでＤＭＦ中０．５M ＣＯＭＵ（登録商標）の溶液（２．０mL、４．０当量）、（ＣＡＳ：１０７５１９８−３０−９、Iris Biotech、Ｃａｔ：ＲＬ−１１７５．１０００）、次いでＮＭＰ中２M ＤＩＰＥＡの溶液（１．０mL、８．０当量）を加えた。この反応混合物を、マイクロ波条件下７５℃で５分間、カップリングのために処理した。
【００８６】
“n-C8”のカップリングのための一般手順
０．１mMolスケール：
脱保護され、ＤＭＦで洗浄され予備膨潤された樹脂を、カプリル酸（７９．２μl、５．０当量）、（ＣＡＳ：１２４−０７−２、Fluka）及びＣＯＭＵ（登録商標）（２１４mg、５．０当量）、（ＣＡＳ：１０７５１９８−３０−９、Iris Biotech、Ｃａｔ：ＲＬ−１１７５．１０００）及びＤＩＰＥＡ（２０４μL、１２．０当量）のＤＭＦ ５．０mL中溶液で、振盪機上で室温にて１時間処理した。
【００８７】
“n-C12”のカップリングのための一般手順
０．１mMolスケール：
脱保護され、ＤＭＦで洗浄され予備膨潤された樹脂を、ドデカン酸（１００mg、５．０当量）、（ＣＡＳ：１４３−０７−７、Aldrich）及びＣＯＭＵ（登録商標）（２１４mg、５．０当量）、（ＣＡＳ：１０７５１９８−３０−９、Iris Biotech、Ｃａｔ：ＲＬ−１１７５．１０００）及びＤＩＰＥＡ（２０４μL、１２．０当量）のＤＭＦ ５．０mL中溶液で、振盪機上で室温にて１時間処理した。
【００８８】
“n-C14”のカップリングのための一般手順
０．１mMolスケール：
脱保護され、ＤＭＦで洗浄され予備膨潤された樹脂を、ミリスチン酸（１１４mg、５．０当量）、（ＣＡＳ：５４４−６３−８、Fluka）及びＣＯＭＵ（登録商標）（２１４mg、５．０当量）、（ＣＡＳ：１０７５１９８−３０−９、Iris Biotech、Ｃａｔ：ＲＬ−１１７５．１０００）及びＤＩＰＥＡ（２０４μL、１２．０当量）のＤＭＦ ５．０mL中溶液で、振盪機上で室温にて１時間処理した。
【００８９】
“パルミトレイック”のカップリングのための一般手順
０．１mMolスケール：
脱保護され、ＤＭＦで洗浄され予備膨潤された樹脂を、パルミトレイン酸（１０２mg、４．０当量）、（ＣＡＳ：３７３−４９−９）及びＣＯＭＵ（登録商標）（１７６mg、４．０当量）、（ＣＡＳ：１０７５１９８−３０−９、Iris Biotech、Ｃａｔ：ＲＬ−１１７５．１０００）及びＤＩＰＥＡ（１３６μL、８．０当量）のＤＭＦ ５．０mL中溶液で、振盪機上で室温にて１時間処理した。
【００９０】
“オレイック”のカップリングのための一般手順
０．１mMolスケール：
脱保護され、ＤＭＦで洗浄され予備膨潤された樹脂を、オレイン酸（１１３mg、４．０当量）、（ＣＡＳ：１１２−８０−１）及びＣＯＭＵ（登録商標）（１７６mg、４．０当量）、（ＣＡＳ：１０７５１９８−３０−９、Iris Biotech、Ｃａｔ：ＲＬ−１１７５．１０００）及びＤＩＰＥＡ（１３６μL、８．０当量）のＤＭＦ ５．０mL中溶液で、振盪機上で室温にて１時間処理した。
【００９１】
“エライジック”のカップリングのための一般手順
０．１mMolスケール：
脱保護され、ＤＭＦで洗浄され予備膨潤された樹脂を、エライジン酸（１１３mg、４．０当量）、（ＣＡＳ：１１２−７９−８）及びＣＯＭＵ（登録商標）（１７６mg、４．０当量）、（ＣＡＳ：１０７５１９８−３０−９、Iris Biotech、Ｃａｔ：ＲＬ−１１７５．１０００）及びＤＩＰＥＡ（１３６μL、８．０当量）のＤＭＦ ５．０mL中溶液で、振盪機上で室温にて１時間処理した。
【００９２】
“バクセニック”のカップリングのための一般手順
０．１mMolスケール：
脱保護され、ＤＭＦで洗浄され予備膨潤された樹脂を、バクセン酸（１１３mg、４．０当量）、（ＣＡＳ：６９３−７２−１）及びＣＯＭＵ（登録商標）（１７６mg、４．０当量）、（ＣＡＳ：１０７５１９８−３０−９、Iris Biotech、Ｃａｔ：ＲＬ−１１７５．１０００）及びＤＩＰＥＡ（１３６μL、８．０当量）のＤＭＦ ５．０mL中溶液で、振盪機上で室温にて１時間処理した。
【００９３】
“エルシック”のカップリングのための一般手順
０．１mMolスケール：
脱保護され、ＤＭＦで洗浄され予備膨潤された樹脂を、エルカ酸（１１３mg、４．０当量）、（ＣＡＳ：１１２−８６−７）及びＣＯＭＵ（登録商標）（１７６mg、４．０当量）、（ＣＡＳ：１０７５１９８−３０−９、Iris Biotech、Ｃａｔ：ＲＬ−１１７５．１０００）及びＤＩＰＥＡ（１３６μL、８．０当量）のＤＭＦ ５．０mL中溶液で、振盪機上で室温にて１時間処理した。
【００９４】
“ミリストレイック”のカップリングのための一般手順
０．１mMolスケール：
脱保護され、ＤＭＦで洗浄され予備膨潤された樹脂を、ミリストレイン酸（９０．５mg、４．０当量）、（ＣＡＳ：５４４−６４−９）及びＣＯＭＵ（登録商標）（１７６mg、４．０当量）、（ＣＡＳ：１０７５１９８−３０−９、Iris Biotech、Ｃａｔ：ＲＬ−１１７５．１０００）及びＤＩＰＥＡ（１３６μL、８．０当量）のＤＭＦ ５．０mL中溶液で、振盪機上で室温にて１時間処理した。
【００９５】
最終切断のための一般手順
【００９６】
０．１mMolスケール：
樹脂をジクロロメタン（ＣＨ２Ｃｌ２）で洗浄し、次いで室温で３０分間、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）：ＴＩＳ：水、９５：２．５：２．５（５mL）の溶液で振盪機上で処理した。樹脂を濾過した。粗製ペプチドをジエチルエーテル（Ｅｔ２Ｏ）（３５mL）で沈殿させた。懸濁液を遠心分離して、溶媒をデカンテーションした。固体をアセトニトリル及び水に溶解させて凍結乾燥し、粗製ペプチドを得た。
【００９７】
精製のための一般手順
粗生成物をアセトニトリル及び水（含０．１％ＴＦＡ）に溶解させ、次いで、カラムYMC-Actus Pro C8、５μm、７５ｘ３０mmの分取ＨＰＬＣにより、水（含０．１％ＴＦＡ）：アセトニトリル、７０：３０〜２：９８の濃度勾配を用い、３０mL/分の流速で精製した。
【００９８】
表１に示すすべての実施例を本願明細書に記載される一般手順と同じように調製することができる。
【配列表】
0006596497000001.app