(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化４６】
0006507234.tif 000060
［式中、
Ｘは、ＣＨ又はＮであり；
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ６-Ｃ２０アリール、Ｃ３-Ｃ１２カルボシクリル、Ｃ２-Ｃ２０ヘテロシクリル、Ｃ１-Ｃ２０ヘテロアリール、-ＮＨ２、-ＮＨ-（Ｃ６-Ｃ２０アリール）、-ＮＨ-（Ｃ１-Ｃ２０ヘテロアリール）、-Ｃ（Ｏ）-（Ｃ１-Ｃ１２アルキル）、-Ｃ（Ｏ）-（Ｃ３-Ｃ１２カルボシクリル）、-ＮＨ-（Ｃ１-Ｃ１２アルキレン）-（Ｃ２-Ｃ２０ヘテロシクリル）、-ＮＨ-（Ｃ１-Ｃ２０ヘテロアリール）-（Ｃ２-Ｃ２０ヘテロシクリル）、-ＮＨＣ（Ｏ）-（Ｃ３-Ｃ１２カルボシクリル）、-ＮＨＣ（Ｏ）-（Ｃ１-Ｃ１２アルキル）、-（Ｃ６-Ｃ２０アリール）-Ｃ（Ｏ）-（Ｃ２-Ｃ２０ヘテロシクリル）、及び-（Ｃ１-Ｃ２０ヘテロアリール）-（Ｃ２-Ｃ２０ヘテロシクリル）より選択され、
Ｒ２及びＲ３は、Ｈ、-Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、Ｃ６-Ｃ２０アリール、Ｃ３-Ｃ１２カルボシクリル、Ｃ２-Ｃ２０ヘテロシクリル、Ｃ１-Ｃ２０ヘテロアリール、-ＮＨ２、-ＮＨ-（Ｃ６-Ｃ２０アリール）、-ＮＨ-（Ｃ１-Ｃ２０ヘテロアリール）、-Ｃ（Ｏ）-（Ｃ１-Ｃ１２アルキル）、-Ｃ（Ｏ）-（Ｃ３-Ｃ１２カルボシクリル）、-ＮＨ-（Ｃ１-Ｃ１２アルキレン）-（Ｃ２-Ｃ２０ヘテロシクリル）、-ＮＨ-（Ｃ１-Ｃ２０ヘテロアリール）-（Ｃ２-Ｃ２０ヘテロシクリル）、-ＮＨＣ（Ｏ）-（Ｃ３-Ｃ１２カルボシクリル）、-ＮＨＣ（Ｏ）-（Ｃ１-Ｃ１２アルキル）、-（Ｃ６-Ｃ２０アリール）-Ｃ（Ｏ）-（Ｃ２-Ｃ２０ヘテロシクリル）、及び-（Ｃ１-Ｃ２０ヘテロアリール）-（Ｃ２-Ｃ２０ヘテロシクリル）より独立に選択されるか；あるいは
Ｒ１及びＲ２は、縮合６員アリール、カルボシクリル、ヘテロシクリル、又はヘテロアリール環を場合により形成し；
ただし、Ｒ２及びＲ３のうちの少なくとも１個は、-Ｃ（Ｏ）ＮＨ２であり；
Ｒ４は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ、-ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ、-Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨ、-ＣＨ（ＣＦ３）ＯＨ、-ＣＨ２Ｆ、-ＣＨＦ２、-ＣＨ２ＣＨＦ２、-ＣＦ３、-Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、-Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ３、-Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、-ＮＨ２、-ＮＨＣＨ３、-Ｎ（ＣＨ３）２、-ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ３、-ＯＨ、-ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、１−ヒドロキシシクロプロピル、イミダゾリル、ピラゾリル、３−ヒドロキシ−オキセタン−３−イル、オキセタン−３−イル、及びアゼチジン−１−イルより選択され；
Ｒ５は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、又はＣＮであり；
Ｒ６は、構造：
【化４７】
0006507234.tif 000061
（式中、波線は結合部位を示す）
より選択され；そして
アルキル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、及びヘテロアリールは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、-ＣＮ、-ＣＨ３、-ＣＨ２ＣＨ３、-ＣＨ（ＣＨ３）２、-ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、-ＣＨ２ＮＨ２、-ＣＨ２ＮＨＣＨ３、-ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２、-ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ２ＯＣＨ３、-ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、-Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨ、-ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ（ＣＨ３）２、-Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ２ＣＨ３、-ＣＨ２ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、-ＣＨ２Ｆ、-ＣＨＦ２、-ＣＦ３、-ＣＨ２ＣＦ３、-ＣＨ２ＣＨＦ２、-ＣＨ（ＣＨ３）ＣＮ、-Ｃ（ＣＨ３）２ＣＮ、-ＣＨ２ＣＮ、-ＣＯ２Ｈ、-ＣＯＣＨ３、-ＣＯ２ＣＨ３、-ＣＯ２Ｃ（ＣＨ３）３、-ＣＯＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、-ＣＯＮＨ２、-ＣＯＮＨＣＨ３、-ＣＯＮ（ＣＨ３）２、-ＣＯＮＨ（ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２）、-Ｃ（ＣＨ３）２ＣＯＮＨ２、-ＮＨ２、-ＮＨＣＨ３、-Ｎ（ＣＨ３）２、-ＮＨＣＯＣＨ３、-Ｎ（ＣＨ３）ＣＯＣＨ３、-ＮＨＳ（Ｏ）２ＣＨ３、-Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（ＣＨ３）２ＣＯＮＨ２、-Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｓ（Ｏ）２ＣＨ３、-ＮＯ２、＝Ｏ、-ＯＨ、-ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、-ＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２、-ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、-Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＣＨ３）２、-ＳＣＨ３、-Ｓ（Ｏ）２ＣＨ３、-Ｓ（Ｏ）３Ｈ、シクロプロピル、オキセタニル、アゼチジニル、（１−メチルアゼチジン−３−イル）オキシ、Ｎ−メチル−Ｎ−オキセタン−３−イルアミノ、アゼチジン−１−イルメチル、ピロリジン−１−イル、及びモルホリノより独立に選択される１個以上の基で場合により置換されている］より選択される化合物又はその立体異性体、互変異性体若しくは薬学的に許容され得る塩。
【請求項２】
ＸがＮである、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
ＸがＣＨである、請求項１記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ２が-Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である、請求項１〜３のいずれか一項記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ３が-Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である、請求項１〜４のいずれか一項記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３のうちの１個が、-ＮＨ-（Ｃ６-Ｃ２０アリール）又は-ＮＨ-（Ｃ１-Ｃ２０ヘテロアリール）であり、ここで、アリール及びヘテロアリールが、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、-ＣＮ、-ＣＨ３、-ＣＨ２ＣＨ３、-ＣＨ（ＣＨ３）２、-ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、-ＣＨ２ＮＨ２、-ＣＨ２ＮＨＣＨ３、-ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２、-ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ２ＯＣＨ３、-ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、-Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨ、-ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ（ＣＨ３）２、-Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ２ＣＨ３、-ＣＨ２ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、-ＣＨ２Ｆ、-ＣＨＦ２、-ＣＦ３、-ＣＨ２ＣＦ３、-ＣＨ２ＣＨＦ２、-ＣＨ（ＣＨ３）ＣＮ、-Ｃ（ＣＨ３）２ＣＮ、-ＣＨ２ＣＮ、-ＣＯ２Ｈ、-ＣＯＣＨ３、-ＣＯ２ＣＨ３、-ＣＯ２Ｃ（ＣＨ３）３、-ＣＯＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、-ＣＯＮＨ２、-ＣＯＮＨＣＨ３、-ＣＯＮ（ＣＨ３）２、-ＣＯＮＨ（ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２）、-Ｃ（ＣＨ３）２ＣＯＮＨ２、-ＮＨ２、-ＮＨＣＨ３、-Ｎ（ＣＨ３）２、-ＮＨＣＯＣＨ３、-Ｎ（ＣＨ３）ＣＯＣＨ３、-ＮＨＳ（Ｏ）２ＣＨ３、-Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（ＣＨ３）２ＣＯＮＨ２、-Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｓ（Ｏ）２ＣＨ３、-ＮＯ２、＝Ｏ、-ＯＨ、-ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、-ＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２、-ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、-Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＣＨ３）２、-ＳＣＨ３、-Ｓ（Ｏ）２ＣＨ３、-Ｓ（Ｏ）３Ｈ、シクロプロピル、オキセタニル、アゼチジニル、（１−メチルアゼチジン−３−イル）オキシ、Ｎ−メチル−Ｎ−オキセタン−３−イルアミノ、アゼチジン−１−イルメチル、ピロリジン−１−イル、及びモルホリノより独立に選択される１個以上の基で場合により置換されている、請求項１〜５のいずれか一項記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ４が-ＣＨ２ＯＨである、請求項１〜６のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ５がＨである、請求項１〜７のいずれか一項記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ６が：
【化４８】
0006507234.tif 000062
である、請求項１〜８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１０】
以下より選択される化合物。
【表２】
0006507234.tif 000063
0006507234.tif 000064
0006507234.tif 000065
0006507234.tif 000066
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか一項記載の化合物及び薬学的に許容し得る担体、流動促進剤、希釈剤、又は賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項１２】
治療剤をさらに含む、請求項１１記載の医薬組成物。
【請求項１３】
請求項１〜１０のいずれか一項記載の化合物を薬学的に許容し得る担体、流動促進剤、希釈剤、又は賦形剤と組み合わせることを含む、医薬組成物を作製するための方法。
【請求項１４】
炎症性障害、免疫障害、癌、心血管疾患、ウイルス感染症、炎症、代謝／内分泌機能障害及び神経学的障害より選択され、かつブルトンチロシンキナーゼによって介入される、疾患又は障害を処置するための、請求項１１又は１２記載の医薬組成物。
【請求項１５】
疾患又は障害が、全身性及び局所的炎症、関節炎、免疫抑制に関連する炎症、臓器移植拒絶反応、アレルギー、潰瘍性大腸炎、クローン病、皮膚炎、喘息、全身性エリテマトーデス、シェーグレン症候群、多発性硬化症、強皮症／全身性硬化症、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、抗好中球細胞質抗体（ＡＮＣＡ）脈管炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、乾癬より選択される、請求項１４記載の医薬組成物。
【請求項１６】
免疫障害が関節リウマチである、請求項１４記載の医薬組成物。
【請求項１７】
疾患又は障害が、乳癌、卵巣癌、子宮頸癌、前立腺癌、精巣癌、尿生殖路癌、食道癌、喉頭癌、神経膠芽腫、神経芽細胞腫、胃癌、皮膚癌、ケラトアカントーマ、肺癌、類表皮癌、大細胞癌、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、小細胞癌、肺腺癌、骨癌、結腸癌、腺腫、膵癌、腺癌、甲状腺癌、濾胞腺癌、未分化癌、乳頭癌、セミノーマ、メラノーマ、肉腫、膀胱癌、肝癌及び胆汁道癌、腎癌、膵癌、骨髄障害、リンパ腫、ヘアリー細胞、頬側口腔癌、上咽頭癌、咽頭癌、口唇癌、舌癌、口腔癌、小腸癌、結腸直腸癌、大腸癌、直腸癌、脳癌及び中枢神経系癌、ホジキン、白血病、気管支癌、甲状腺癌、肝臓及び肝内胆管癌、肝細胞癌、胃癌、神経膠腫／神経膠芽腫、子宮内膜癌、メラノーマ、腎癌及び腎盂腎癌、膀胱癌、子宮体癌、子宮頸癌、多発性骨髄腫、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、骨髄性白血病、口腔癌及び咽頭癌、非ホジキンリンパ腫、メラノーマ、及び絨毛結腸腺腫より選択される癌である、請求項１４記載の医薬組成物。
【請求項１８】
疾患又は障害が血液悪性腫瘍である、請求項１４記載の医薬組成物。
【請求項１９】
血液悪性腫瘍が白血病又はリンパ腫である、請求項１８記載の医薬組成物。
【請求項２０】
抗炎症剤、免疫調節剤、化学療法剤、アポトーシス向上剤、向神経因子、心血管疾患を処置するための薬剤、肝疾患を処置するための薬剤、抗ウイルス剤、血液障害を処置するための薬剤、糖尿病を処置するための薬剤、及び免疫不全障害を処置するための薬剤より選択される追加の治療剤と組み合わせて使用するための、請求項１４記載の医薬組成物。
【請求項２１】
追加の治療剤がＢｃｌ−２阻害剤又はＪＡＫ阻害剤である、請求項２０記載の医薬組成物。
【請求項２２】
追加の治療剤がイブルチニブである、請求項２０記載の医薬組成物。
【請求項２３】
ａ）請求項１１又は１２記載の医薬組成物；及び
ｂ）使用説明書
を含む、ブルトンチロシンキナーゼによって介入される病状を処置するためのキット。
【請求項２４】
医薬としての使用のための、請求項１〜１０のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２５】
免疫障害、癌、心血管疾患、ウイルス感染症、炎症、代謝／内分泌機能障害及び神経学的障害より選択され、かつブルトンチロシンキナーゼによって介入される疾患又は障害を処置する際の使用のための、請求項１〜１０のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２６】
疾患又は障害を処置する際に追加の治療剤と組み合わせた使用のための、請求項１〜１０のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２７】
免疫障害、癌、心血管疾患、ウイルス感染症、炎症、代謝／内分泌機能障害及び神経学的障害の処置のための医薬であって、ブルトンチロシンキナーゼに介入する医薬の製造における、請求項１〜１０のいずれか一項記載の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は概して、炎症、免疫学的（immunological）及び癌を含むブルトンチロシンキナーゼ（Ｂｔｋ、ＢＴＫ）によって介入される障害を処置するための化合物に関し、そしてさらに具体的にはＢｔｋ活性を阻害する化合物に関する。本発明はまた、哺乳動物細胞又は関連病態のインビトロ、インサイチュー、及びインビボ診断又は処置のために本化合物を使用する方法に関する。
【０００２】
発明の背景
ヒト酵素の最大のファミリーであるプロテインキナーゼは、５００をはるかに超えるタンパク質を包含する。ブルトンチロシンキナーゼ（Ｂｔｋ）は、チロシンキナーゼのＴｅｃファミリーのメンバーであり、かつ初期Ｂ細胞発生並びに成熟Ｂ細胞活性化、シグナル伝達、及び生存の調節因子である（T. Hunter, Cell 1987 50:823-829）。
【０００３】
Ｂ細胞レセプター（ＢＣＲ）を介するＢ細胞シグナル伝達は、広範な生物学的アウトプットをもたらすことができ、それはまたＢ細胞の発生段階にも依存する。ＢＣＲシグナルの大きさ及び継続期間は正確に調節されなければならない。異常なＢＣＲ介入性シグナル伝達は、調節不全のＢ細胞活性化及び／又は病原性自己抗体の形成を引き起こし、多様な自己免疫性及び／又は炎症性疾患をもたらす可能性がある。ヒトにおけるＢｔｋの突然変異は、Ｘ連鎖無ガンマグロブリン血症（ＸＬＡ）をもたらす。この疾患は、Ｂ細胞の成熟障害、免疫グロブリン産生減少、Ｔ細胞非依存性免疫応答不全、及びＢＣＲ刺激時の持続性カルシウムサインの顕著な減弱に関連する。アレルギー性障害及び／又は自己免疫疾患及び／又は炎症性疾患におけるＢｔｋの役割についての証拠は、Ｂｔｋ欠損マウスモデルにおいて確立されている。例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）の標準マウス前臨床モデルにおいて、Ｂｔｋ欠損は、疾患進行の顕著な寛解をもたらすことが示されている。さらに、Ｂｔｋ欠損マウスはまた、コラーゲン誘発関節炎の発生に対して抵抗性があり得、そしてブドウ球菌誘発関節炎によりなりにくいこともあり得る。一連の証拠の多くは、自己免疫及び／又は炎症性疾患の病理発生におけるＢ細胞及び体液性免疫系の役割を支持する。Ｂ細胞を枯渇させるために開発された、タンパク質に基づく療法（例えばRituxan（登録商標）、Genentech/Biogen Idec）は、多数の自己免疫及び／又は炎症性疾患の処置への取り組みを表す。Ｂ細胞活性化におけるＢｔｋの役割ために、Ｂｔｋの阻害剤は、Ｂ細胞障害及びＢ細胞介入病原性活性（例えば自己抗体産生）の阻害剤として有用であり得る。Ｂｔｋはまた、破骨細胞、マスト細胞及び単球において発現され、そしてこれらの細胞の機能にとって重要であることが示されている。例えば、マウスにおけるＢｔｋ欠損は、ＩｇＥ介入性マスト細胞活性化障害（ＴＮＦα及び他の炎症性サイトカイン放出の顕著な減少）に関連し、そしてヒトにおけるＢｔｋ欠損は、活性化された単球によるＴＮＦα産生の大幅な減少に関連する。
【０００４】
したがって、Ｂｔｋ活性の阻害は、ＳＬＥ、関節リウマチ（Whang et al (2014) Drug Discovery Today in press; Kim et al (2011) Bioorganic & Med. Chem. Letters 21:6258-6263）、多様な脈管炎、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、重症筋無力症、アレルギー性鼻炎、及び喘息（Di Paolo et al (2011) Nature Chem. Biol. 7(1):41-50; Liu (2011) Drug Metab. and Disposition 39(10):1840-1849; Liu et al (2011) Jour. of Pharm. and Exper. Ther. 338(1):154-163; Lou et al (2012) J. Med. Chem. 55(10):4539-4550; Xu D. et al (2012) Jour. Pharm. and Exp. Ther. 341(1):90-103）などのアレルギー性障害及び／又は自己免疫及び／又は炎症性疾患の処置のために有用であり得る。加えて、Ｂｔｋは、アポトーシスにおいて役割を担い（Islam and Smith Immunol. Rev. 2000 178:49）；したがって、Ｂｔｋ活性の阻害は、癌に、並びにＢ細胞リンパ腫、白血病、及び他の血液悪性腫瘍の処置に、有用であり得る（US 7514444; Feldhahn et al. J. Exp. Med. 2005 201:1837）ということが報告されている。さらに、破骨細胞機能におけるＢｔｋの役割を考慮すれば、Ｂｔｋ活性の阻害は、骨粗鬆症などの骨障害の処置のために有用であり得る。
【発明の概要】
【０００５】
本発明は概して、ブルトンチロシンキナーゼ（Ｂｔｋ）調整活性を有し、式Ｉ構造：
【化１】
0006507234.tif 000002
を有するピラゾールカルボキサミド化合物に関し、その立体異性体、互変異性体又は薬学的に許容され得る塩を含む。種々の置換基は、本明細書において定義される。
【０００６】
本発明の一つの態様は、式Ｉ化合物及び薬学的に許容し得る担体、流動促進剤、希釈剤、又は賦形剤から構成される医薬組成物である。該医薬組成物はさらに、第二の治療剤を含んでもよい。
【０００７】
本発明の別の態様は、式Ｉ化合物と薬学的に許容し得る担体を組み合わせることを含む、医薬組成物を作製するための方法である。
【０００８】
本発明は、疾患又は障害を処置する方法を含み、この方法は、治療有効量の式Ｉ化合物を、免疫障害、癌、心血管疾患、ウイルス感染症、炎症、代謝／内分泌機能障害及び神経学的障害より選択され、かつブルトンチロシンキナーゼによって介入される疾患又は障害を有する患者に投与することを含む。
【０００９】
本発明は、ａ）式Ｉ化合物を含む第一の医薬組成物；及びｂ）使用説明書を含む、ブルトンチロシンキナーゼによって介入される病状を処置するためのキットを含む。
【００１０】
本発明は、医薬としての使用のための式Ｉ化合物を含む。
【００１１】
本発明は、免疫障害、癌、心血管疾患、ウイルス感染症、炎症、代謝／内分泌機能障害及び神経学的障害より選択され、かつブルトンチロシンキナーゼによって介入される疾患又は障害を処置する際の使用のための式Ｉ化合物を含む。
【００１２】
本発明は、疾患又は障害を処置する際に追加の治療剤と組み合わせた使用のための式Ｉ化合物を含む。
【００１３】
本発明は、免疫障害、癌、心血管疾患、ウイルス感染症、炎症、代謝／内分泌機能障害及び神経学的障害の処置のための医薬であって、ブルトンチロシンキナーゼに介入する医薬の製造における式Ｉ化合物の使用を含む。
【００１４】
本発明は、免疫障害、癌、心血管疾患、ウイルス感染症、炎症、代謝／内分泌機能障害及び神経学的障害の処置のための式Ｉ化合物の使用を含み、そしてここで、該医薬は、ブルトンチロシンキナーゼに介入する。
【００１５】
本発明は、式Ｉ化合物を作製する方法を含む。
【００１６】
本発明は、本明細書において記載されるとおりの発明を含む。
【００１７】
例示的実施態様の詳細な説明
ここで、本発明の特定の実施態様について詳細に言及するが、その例は、付随する構造及び式で例示される。本発明は列挙された実施態様と併せて記載されるが、それらは本発明をそれらの実施態様に限定することが意図されないということが理解されるであろう。それどころか、本発明は、特許請求の範囲によって定義されるとおりの本発明の範囲内に含まれ得る全ての代替、改変及び等価物を包含することが意図される。当業者は、本発明の実施で使用されることもできる本明細書に記載されるものと類似及び等価な多くの方法及び材料を認識するであろう。本発明は、記載される方法及び材料に決して限定されない。一つ以上の組み入れられた文献、特許及び同様の資料が、定義された用語、用語の用法、記載された技術等を非限定的に含み、本願と異なる又は矛盾する場合には、本願が支配する。特に断りない限り、本明細書で使用される全ての技術及び科学用語は、本発明が属する技術分野における通常の技術者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書に記載されるものと類似又は等価の方法及び材料が、本発明の実施又は試験において使用され得るが、適切な方法及び材料が以下に記載される。本明細書において言及される全ての刊行物、特許出願、特許及び他の参考文献は、参照によりその全体が組み入れられる。本願において使用される命名法は、特に断りない限り、ＩＵＰＡＣ系統的命名法に基づく。
【００１８】
定義
置換基の数を示すとき、用語「１個以上」は、１個の置換基から置換の最大可能数までの範囲、すなわち、置換基による１個の水素の置き換えから全ての水素の置き換えまでを指す。用語「置換基」は、親分子上の水素原子を置き換える原子又は一群の原子を示す。用語「置換されている」は、特定された基が１個以上の置換基を有することを示す。任意の基が、複数の置換基を保持してよく、かつ種々の可能な置換基が提供されている場合、その置換基は、独立に選択され、かつ同じである必要はない。用語「非置換の」は、特定された基が置換基を有しないということを意味する。用語「場合により置換されている」は、特定された基が非置換であるか又は可能な置換基の群から独立に選択される１個以上の置換基によって置換されていることを意味する。
置換基の数を示すとき、用語「１個以上」は、１個の置換基から置換の最大可能数まで、すなわち、置換基による１個の水素の置き換えから全ての水素の置き換えまでを意味する。
【００１９】
本明細書で使用されるとおりの用語「アルキル」は、１〜１２個の炭素原子（Ｃ１-Ｃ１２）の飽和の直鎖又は分岐鎖一価炭化水素基を指し、ここで、アルキル基は、以下に記載される１個以上の置換基で独立に場合により置換されていてもよい。別の実施態様では、アルキル基は、１〜８個の炭素原子（Ｃ１-Ｃ８）、又は１〜６個の炭素原子（Ｃ１-Ｃ６）である。アルキル基の例は、メチル（Ｍｅ、−ＣＨ３）、エチル（Ｅｔ、−ＣＨ２ＣＨ３）、１−プロピル（ｎ−Ｐｒ、ｎ−プロピル、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２−プロピル（ｉ−Ｐｒ、ｉ−プロピル、−ＣＨ（ＣＨ３）２）、１−ブチル（ｎ−Ｂｕ、ｎ−ブチル、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２−メチル−１−プロピル（ｉ−Ｂｕ、ｉ−ブチル、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２）、２−ブチル（ｓ−Ｂｕ、ｓ−ブチル、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３）、２−メチル−２−プロピル（ｔ−Ｂｕ、ｔ−ブチル、−Ｃ（ＣＨ３）３）、１−ペンチル（ｎ−ペンチル、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２−ペンチル（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、３−ペンチル（−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、２−メチル−２−ブチル（−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ３）、３−メチル−２−ブチル（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）２）、３−メチル−１−ブチル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２）、２−メチル−１−ブチル（−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３）、１−ヘキシル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２−ヘキシル（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、３−ヘキシル（−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３））、２−メチル−２−ペンチル（−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、３−メチル−２−ペンチル（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３）、４−メチル−２−ペンチル（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２）、３−メチル−３−ペンチル（−Ｃ（ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ３）２）、２−メチル−３−ペンチル（−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）２）、２，３−ジメチル−２−ブチル（−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ（ＣＨ３）２）、３，３−ジメチル−２−ブチル（−ＣＨ（ＣＨ３）Ｃ（ＣＨ３）３、１−ヘプチル、１−オクチル等を非限定的に含む。
【００２０】
本明細書で使用されるとおりの用語「アルキレン」は、１〜１２個の炭素原子（Ｃ１-Ｃ１２）の飽和の直鎖又は分岐鎖二価炭化水素基を指し、ここで、アルキレン基は、以下に記載される１個以上の置換基で独立に場合により置換されていてもよい。別の実施態様では、アルキレン基は、１〜８個の炭素原子（Ｃ１-Ｃ８）又は１〜６個の炭素原子（Ｃ１-Ｃ６）である。アルキレン基の例は、メチレン（−ＣＨ２−）、エチレン（−ＣＨ２ＣＨ２−）、プロピレン（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）等を非限定的に含む。
【００２１】
用語「アルケニル」は、少なくとも１つの不飽和の部位、すなわち、炭素−炭素ｓｐ２二重結合を有する２〜８個の炭素原子（Ｃ２-Ｃ８）の直鎖又は分岐鎖一価炭化水素基を指し、ここで、アルケニル基は、独立して、本明細書に記載される１個以上の置換基で独立に場合により置換されていてもよく、そして、「cis」及び「trans」配向、又は代替的に、「Ｅ」及び「Ｚ」配向を有する基を含む。例は、エチレニル又はビニル（−ＣＨ=ＣＨ２）、アリル（−ＣＨ２ＣＨ=ＣＨ２）等を非限定的に含む。
【００２２】
用語「アルケニレン」は、少なくとも１つの不飽和の部位、すなわち炭素−炭素ｓｐ２二重結合を有する２〜８個の炭素原子（Ｃ２-Ｃ８）の直鎖又は分岐鎖二価炭化水素基を指し、ここで、アルケニレン基は、本明細書に記載される１個以上の置換基で独立に場合により置換されていてもよく、そして「cis」及び「trans」配向、又は代替的に、「Ｅ」及び「Ｚ」配向を有する基を含む。例は、エチレニレン又はビニレン（−ＣＨ=ＣＨ−）、アリル（−ＣＨ２ＣＨ=ＣＨ−）等を非限定的に含む。
【００２３】
用語「アルキニル」は、少なくとも１つの不飽和の部位、すなわち炭素−炭素ｓｐ三重結合を有する２〜８個の炭素原子（Ｃ２-Ｃ８）の直鎖又は分岐鎖一価炭化水素基を指し、ここで、アルキニル基は、本明細書に記載される１個以上の置換基で独立に場合により置換されていてもよい。例は、エチニル（−Ｃ≡ＣＨ）、プロピニル（プロパルギル、−ＣＨ２Ｃ≡ＣＨ）等を非限定的に含む。
【００２４】
用語「アルキニレン」は、少なくとも１つの不飽和の部位、すなわち炭素−炭素ｓｐ三重結合を有する２〜８個の炭素原子（Ｃ２-Ｃ８）の直鎖又は分岐鎖二価炭化水素基を指し、ここで、アルキニレン基は、本明細書に記載される１個以上の置換基で独立に場合により置換されていてもよい。例は、エチニレン（−Ｃ≡Ｃ−）、プロピニレン（プロパルギレン、−ＣＨ２Ｃ≡Ｃ−）等を非限定的に含む。
【００２５】
用語「炭素環」、「カルボシクリル（carbocyclyl）」、「炭素環」及び「シクロアルキル」は、単環式環として３〜１２個の炭素原子（Ｃ３-Ｃ１２）を、又は二環式環として７〜１２個の炭素原子を有する、一価の非芳香族、飽和又は部分不飽和環を指す。７〜１２個の原子を有する二環式炭素環は、例えば、ビシクロ［４，５］、［５，５］、［５，６］又は［６，６］系として配置され得、そして９又は１０個の環原子を有する二環式炭素環は、ビシクロ［５，６］又は［６，６］系として、又はビシクロ［２．２．１］ヘプタン、ビシクロ［２．２．２］オクタン及びビシクロ［３．２．２］ノナンなどの架橋系として配置され得る。スピロカルボシクリル部分はまた、この定義の範囲内に含まれる。スピロカルボシクリル部分の例は、［２．２］ペンタニル、［２．３］ヘキサニル、及び［２．４］ヘプタニルを含む。単環式炭素環の例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、１−シクロペンタ−１−エニル、１−シクロペンタ−２−エニル、１−シクロペンタ−３−エニル、シクロヘキシル、１−シクロヘキサ−１−エニル、１−シクロヘキサ−２−エニル、１−シクロヘキサ−３−エニル、シクロヘキサジエニル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロノニル、シクロデシル、シクロウンデシル、シクロドデシル等を非限定的に含む。カルボシクリル基は、本明細書に記載される１個以上の置換基で独立に場合により置換されている。
【００２６】
「アリール」は、親芳香族環系の単一の炭素原子から１個の水素原子を除去することによって誘導される６〜２０個の炭素原子（Ｃ６-Ｃ２０）の一価の芳香族炭化水素基を意味する。いくつかのアリール基は、例示的構造中、「Ａｒ」として表される。アリールは、飽和、部分不飽和環、又は芳香族炭素環に縮合した芳香族環を含む二環式基を含む。典型的なアリール基は、ベンゼンから誘導された基（フェニル）、置換ベンゼン、ナフタレン、アントラセン、ビフェニル、インデニル、インダニル、１，２−ジヒドロナフタレン、１，２，３，４−テトラヒドロナフチル等を非限定的に含む。アリール基は、本明細書に記載される１個以上の置換基で独立に場合により置換されている。
【００２７】
「アリーレン」は、親芳香族環系の２個の炭素原子から２個の水素原子を除去することによって誘導される６〜２０個の炭素原子（Ｃ６-Ｃ２０）の二価芳香族炭化水素基を意味する。いくつかのアリーレン基は、例示的構造中、「Ａｒ」として表される。アリーレンは、飽和、部分不飽和環、又は芳香族炭素環に縮合した芳香族環を含む二環式基を含む。典型的なアリーレン基は、ベンゼンから誘導された基（フェニレン）、置換ベンゼン、ナフタレン、アントラセン、ビフェニレン、インデニレン、インダニレン、１，２−ジヒドロナフタレン、１，２，３，４−テトラヒドロナフチル等を非限定的に含む。アリーレン基は、本明細書に記載される１個以上の置換基で場合により置換されている。
【００２８】
用語「ヘテロ環」、「ヘテロシクリル」及び「複素環」は、本明細書において互換可能に使用され、そして３個〜約２０個の環原子の飽和又は部分不飽和（すなわち、環内に１個以上の二重及び／又は三重結合を有する）炭素環式基を指し、ここで、少なくとも１個の環原子は、窒素、酸素、リン及び硫黄より選択されるヘテロ原子であり、残りの環原子はＣであり、１個以上の環原子は、以下に記載される１個以上の置換基で独立に場合により置換されている。ヘテロ環は、３〜７個の環構成員（２〜６個の炭素原子、及びＮ、Ｏ、Ｐ、及びＳより選択される１〜４個のヘテロ原子）を有する単環又は７〜１０個の環構成員（４〜９個の炭素原子、及びＮ、Ｏ、Ｐ、及びＳより選択される１〜６個のヘテロ原子）を有する二環、例えば：ビシクロ［４，５］、［５，５］、［５，６］、又は［６，６］系であってよい。ヘテロ環は、Paquette, Leo A.; “Principles of Modern Heterocyclic Chemistry” (W.A. Benjamin, New York, 1968）、特に１、３、４、６、７、及び９章; “The Chemistry of Heterocyclic Compounds, A series of Monographs” (John Wiley & Sons, New York, 1950〜現在）、特に１３、１４、１６、１９、及び２８巻；及び、J. Am. Chem. Soc. (1960) 82:5566に記載されている。「ヘテロシクリル」はまた、ヘテロ環基が飽和、部分不飽和環、又は芳香族炭素環若しくは複素環と縮合した基を含む。複素環の例は、モルホリン−４−イル、ピペリジン−１−イル、ピペラジニル、ピペラジン−４−イル−２−オン、ピペラジン−４−イル−３−オン、ピロリジン−１−イル、チオモルホリン−４−イル、Ｓ−ジオキソチオモルホリン−４−イル、アゾカン−１−イル、アゼチジン−１−イル、オクタヒドロピリド［１，２−ａ］ピラジン−２−イル、［１，４］ジアゼパン−１−イル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、ジヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、テトラヒドロピラニル、ジヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、ピペリジノ、モルホリノ、チオモルホリノ、チオキサニル、ピペラジニル、ホモピペラジニル、アゼチジニル、オキセタニル、チエタニル、ホモピペリジニル、オキセパニル、チエパニル、オキサゼピニル、ジアゼピニル、チアゼピニル、２−ピロリニル、３−ピロリニル、インドリニル、２Ｈ−ピラニル、４Ｈ−ピラニル、ジオキサニル、１，３−ジオキソラニル、ピラゾリニル、ジチアニル、ジチオラニル、ジヒドロピラニル、ジヒドロチエニル、ジヒドロフラニル、ピラゾリジニルイミダゾリニル、イミダゾリジニル、３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサニル（3-azabicyco[3.1.0]hexanyl）、３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタニル、アザビシクロ［２．２．２］ヘキサニル、３Ｈ−インドリルキノリジニル及びＮ−ピリジル尿素を非限定的に含む。スピロヘテロシクリル部分はまた、この定義の範囲内に含まれる。スピロヘテロシクリル部分の例は、アザスピロ［２．５］オクタニル及びアザスピロ［２．４］ヘプタニルを含む。２個の環原子がオキソ（＝Ｏ）部分で置換されている複素環式基の例は、ピリミジノニル及び１，１−ジオキソ−チオモルホリニルである。本明細書におけるヘテロ環基は、本明細書に記載される１個以上の置換基で独立に場合により置換されている。
【００２９】
用語「ヘテロアリール」は、５、６又は７員環の一価芳香族基を指し、そして窒素、酸素、及び硫黄より独立に選択される１個以上のヘテロ原子を含有する５〜２０個の原子の縮合環系（その少なくとも１個が芳香族である）を含む。ヘテロアリール基の例は、ピリジニル（例えば、２−ヒドロキシピリジニルを含む）、イミダゾリル、イミダゾピリジニル、ピリミジニル（例えば、４−ヒドロキシピリミジニルを含む）、ピラゾリル、トリアゾリル、ピラジニル、テトラゾリル、フリル、チエニル、イソオキサゾリル、チアゾリル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、イソチアゾリル、ピロリル、キノリニル、イソキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、インドリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、シンノリニル、インダゾリル、インドリジニル、フタラジニル、ピリダジニル、トリアジニル、イソインドリル、プテリジニル、プリニル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、チアジアゾリル、フラザニル、ベンゾフラザニル、ベンゾチオフェニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、キナゾリニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、及びフロピリジニルである。ヘテロアリール基は、本明細書に記載される１個以上の置換基で独立に場合により置換されている。
【００３０】
ヘテロ環基又はヘテロアリール基は、そのようなことが可能である場合、炭素（炭素連結）、又は窒素（窒素連結）結合されてもよい。非限定的な例として、炭素結合したヘテロ環又はヘテロアリールは、ピリジンの位置２、３、４、５又は６、ピリダジンの位置３、４、５又は６、ピリミジンの位置２、４、５又は６、ピラジンの位置２、３、５又は６、フラン、テトラヒドロフラン、チオフラン、チオフェン、ピロール又はテトラヒドロピロールの位置２、３、４又は５、オキサゾール、イミダゾール又はチアゾールの位置２、４又は５、イソオキサゾール、ピラゾール又はイソチアゾールの位置３、４又は５、アジリジンの位置２又は３、アゼチジンの位置２、３又は４、キノリンの位置２、３、４、５、６、７又は８、或いはイソキノリンの位置１、３、４、５、６、７又は８で結合される。
【００３１】
非限定的な例として、窒素結合したヘテロ環又はヘテロアリールは、アジリジン、アゼチジン、ピロール、ピロリジン、２−ピロリン、３−ピロリン、イミダゾール、イミダゾリジン、２−イミダゾリン、３−イミダゾリン、ピラゾール、ピラゾリン、２−ピラゾリン、３−ピラゾリン、ピペリジン、ピペラジン、インドール、インドリン、１Ｈ−インダゾールの位置１、イソインドール又はイソインドリンの位置２、モルホリンの位置４、及びカルバゾール又はβ−カルボリンの位置９で結合される。
【００３２】
用語「処置する」及び「処置」は、目的が、望ましくない生理学的変化又は障害、例えば関節炎又は癌の発生又は広がりを減速する（和らげる）ことである、治療的処置を指す。本発明の目的に関して、有益な又は所望の臨床結果は、検出可能又は検出不可能に関わらず、症状の緩和、疾患の程度の縮小、疾患の安定化（即ち、悪化しない）状態、疾患進行の遅延又は緩徐化、病態の寛解又は一時的緩和、及び鎮静（部分的又は完全に関わらず）を非限定的に含む。「処置」はまた、処置を受けない場合に予測される生存期間と比較して生存期間を延長することを意味することができる。処置を必要とするものは、病状又は障害を有するものを含む。
【００３３】
語句「治療有効量」は、（ｉ）本明細書に記載される特定の疾患、病状又は障害を処置するか、（ｉｉ）本明細書に記載される特定の疾患、病状又は障害の１つ以上の症状を減弱、寛解又は除去するか、あるいは（ｉｉｉ）本明細書に記載される特定の疾患、病状又は障害の１つ以上の症状の発症を予防又は遅延させる、本発明の化合物の量を意味する。癌の場合、薬物の治療有効量は、癌細胞の数を減らし；腫瘍サイズを減じ；周辺器官への癌細胞浸潤を阻害し（すなわち、ある程度速度を落とす、そして好ましくは停止させる）；腫瘍の転移を阻害し（すなわち、ある程度速度を落とす、そして好ましくは停止させる）；腫瘍の成長をある程度阻害し；及び／又は癌に関連する症状のうちの１つ以上をある程度軽減することができる。薬物が現存する癌細胞の成長を防止する及び／又は死滅させることができる限りにおいて、それは細胞増殖抑制性及び／又は細胞毒性であることができる。癌治療について、例えば、有効性は、疾患の進行時間（ＴＴＰ）を評価する、及び／又は応答速度（ＲＲ）を決定することにより、測定され得る。
【００３４】
本明細書で使用されるとおりの「炎症性障害」は、過剰な又は制御されていない炎症反応が過剰な炎症症状、宿主組織の損傷又は組織機能の喪失をもたらす、任意の疾患、障害又は症状を指し得る。「炎症性障害」はまた、白血球の流入及び／又は好中球走化性によって介入される病理学的状態を指す。
【００３５】
本明細書で使用されるとおりの「炎症」は、傷害性物質と傷害された組織の両方を破壊するか、弱めるか又は取り囲む（隔離する）のに役立つ、組織の傷害又は破壊によって引き起こされる局所的な防御反応を指す。炎症は、とりわけ、白血球の流入及び／又は好中球走化性と関連している。炎症は、病原体及びウイルスによる感染から、並びに外傷又は心筋梗塞若しくは卒中後の再灌流、外来抗原に対する免疫反応及び自己免疫反応などの非感染手段から生じ得る。したがって、式Ｉ化合物による処置を受け入れることができる炎症性障害は、特異的防御系の反応及び非特異的防御系の反応に関連する障害を包含する。
【００３６】
「特異的防御系」は、特異的抗原の存在に反応する免疫系の構成成分を指す。特異的防御系の応答に起因する炎症の例は、外来抗原に対する古典的な反応、自己免疫疾患、及びＴ細胞によって介入される遅延型過敏反応を含む。慢性炎症性疾患、固体移植組織及び器官、例えば、腎臓及び骨髄の移植の拒絶反応、並びに移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）は、特異的防御系の炎症反応の更なる例である。
【００３７】
本明細書で使用されるとおりの用語「非特異的防御系」は、免疫記憶ができない白血球（例えば、顆粒球及びマクロファージ）によって介入される炎症性障害を指す。少なくとも部分的に非特異的防御系の反応に起因する炎症の例は、成人（急性）呼吸促迫症候群（ＡＲＤＳ）又は多臓器損傷症候群；再灌流傷害；急性糸球体腎炎；反応性関節炎；急性炎症成分を伴う皮膚疾患；急性化膿性髄膜炎又は他の中枢神経系炎症性障害（例えば、卒中）；熱傷；炎症性腸疾患；顆粒球輸血関連症候群；及びサイトカイン誘導毒性などの病状に関連する炎症を含む。
【００３８】
本明細書で使用されるとおりの「自己免疫疾患」は、組織傷害が体自体の構成要素に対する体液性又は細胞介在性応答に関連する任意の群の障害を指す。
【００３９】
本明細書で使用されるとおりの「アレルギー疾患」は、アレルギーに起因する任意の症状、組織の損傷、又は組織機能の喪失を指す。本明細書で使用されるとおりの「関節疾患」は、様々な病因に起因し得る関節の炎症性病変を特徴とする任意の疾患を指す。本明細書で使用されるとおりの「皮膚炎」は、様々な病因に起因し得る皮膚の炎症を特徴とする皮膚の疾患の大きなファミリーのいずれかを指す。本明細書で使用されるとおりの「移植拒絶反応」は、移植された組織及び周囲の組織の機能喪失、疼痛、腫脹、白血球増加症、及び血小板減少症を特徴とする、器官又は細胞（例えば、骨髄）などの移植された組織に対する任意の免疫反応を指す。本発明の治療方法は、炎症細胞の活性化に関連する障害の処置のための方法を含む。
【００４０】
「炎症細胞の活性化」は、炎症細胞（単球、マクロファージ、Ｔリンパ球、Ｂリンパ球、顆粒球（すなわち、好中球、好塩基球、及び好酸球等の多形核白血球）、マスト細胞、樹状細胞、ランゲルハンス細胞、及び内皮細胞を非限定的に含む）における、増殖性細胞応答の刺激（サイトカイン、抗原、又は自己抗体を非限定的に含む）、可溶性メディエーター（サイトカイン、酸素ラジカル、酵素、プロスタノイド、又は血管作用性アミンを非限定的に含む）の産生、又は新規若しくはより多数のメディエーター（主要組識適合性抗原又は細胞接着分子を非限定的に含む）の細胞表面発現による誘導を指す。これら細胞におけるこれら表現型のうちの１つ又は組み合わせの活性化は、炎症性障害の発症、永続化、又は増悪の一因となり得ることを当業者であれば理解するであろう。
【００４１】
用語「ＮＳＡＩＤ」は、「非ステロイド系抗炎症薬」の頭字語であり、そして、鎮痛性、解熱性（上昇した体温を低下させ、そして、意識障害を伴うことなく疼痛を軽減する）を有し、かつより高い用量では抗炎症性効果（炎症を軽減する）を有する、治療剤である。用語「非ステロイド系」は、これらの薬物を、（広範な他の効果の中でも）類似のエイコサノイド抑制性、抗炎症性作用を有するステロイドと区別するために使用される。鎮痛剤として、ＮＳＡＩＤは、これらが非麻薬性であるという点で珍しい。ＮＳＡＩＤは、アスピリン、イブプロフェン及びナプロキセンを含む。ＮＳＡＩＤは通常、疼痛及び炎症が存在する急性又は慢性病状の処置のために指示される。ＮＳＡＩＤは一般に、下記の病状の症状軽減のために指示される：関節リウマチ、変形性関節炎、炎症性関節症（例えば、強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、ライター症候群、急性痛風、月経困難症、転移部骨痛、頭痛及び偏頭痛、術後疼痛、炎症及び組織傷害に起因する軽度〜中程度の疼痛、発熱、腸閉塞並びに腎疝痛。大抵のＮＳＡＩＤは、酵素シクロオキシゲナーゼの非選択的阻害剤として作用し、シクロオキシゲナーゼ−１（ＣＯＸ−１）及びシクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）アイソザイムの両方を阻害する。シクロオキシゲナーゼは、アラキドン酸（それ自体は、ホスホリパーゼＡ２により細胞のリン脂質二重層から誘導される）からのプロスタグランジン及びトロンボキサンの形成を触媒する。プロスタグランジンは（中でも）、炎症の過程においてメッセンジャー分子として作用する。ＣＯＸ−２阻害剤は、セレコキシブ、エトリコキシブ、ルミラコキシブ、パレコキシブ、ロフェコキシブ、ロフェコキシブ及びバルデコキシブを含む。
【００４２】
用語「癌」は、制御されていない細胞成長によって典型的に特徴付けられる哺乳動物の生理学的状態を指すか又は記載するものである。「腫瘍」は、１つ以上の癌性細胞を含む。癌の例は、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫及び白血病又はリンパ性腫瘍を非限定的に含む。そのような癌の更なる具体例は、扁平細胞癌（例えば、扁平上皮細胞癌）、小細胞肺癌、非小細胞肺癌（「ＮＳＣＬＣ」）、肺腺癌及び肺の扁平上皮癌を含む肺癌、腹膜癌、肝細胞癌、消化管癌などの胃部又は胃癌、膵臓癌、グリア芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝細胞癌（hepatoma）、乳癌、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜又は子宮癌、唾液腺癌、腎臓又は腎癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝癌、肛門癌、陰茎癌並びに頭頸部癌を含む。
【００４３】
「血液悪性腫瘍（Hematological malignancies）」（イギリス英語スペリング”Haematological” malignancies）は、血液、骨髄、及びリンパ節に影響を及ぼす癌のタイプである。この３つは免疫系を介して密接に関連付けられるので、この３つのうちの１つに影響を及ぼす疾患はしばしば、その他のものにも影響を及ぼすであろう：リンパ腫はリンパ節の疾患であるが、それはしばしば骨髄にまで広がり、血液に影響を及ぼす。血液悪性腫瘍は、悪性腫瘍（「癌」）であり、そしてそれらは一般的に、血液学及び／又は腫瘍学における専門医によって処置される。いくつかのセンターでは、「血液学／腫瘍学」は、内科の一つの下位専門分野であるが、他のセンターでは、それらは、別個の部門とみなされている（外科的及び放射線腫瘍専門医も存在する）。全ての血液障害が悪性（「癌性」）とは限らないが；これら他の血液状態もまた、血液学者によって管理されてもよい。血液悪性腫瘍は、２つの主要な血液細胞系譜：骨髄系及びリンパ球系細胞株のいずれかから由来し得る。骨髄細胞株は通常、顆粒球、赤血球、血小板、マクロファージ及びマスト細胞を産生し；リンパ球系細胞株は、Ｂ、Ｔ、ＮＫ及び形質細胞を産生する。リンパ腫、リンパ性白血病、及び骨髄腫は、リンパ球系由来であるが、急性及び慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群及び骨髄増殖性疾患は、骨髄起源である。白血病は、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性単球性白血病（ＡＭＯＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含む。リンパ腫は、ホジキンリンパ腫（４つ全てのサブタイプ）及び非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ、全てのサブタイプ）を含む。
【００４４】
「化学療法剤」は、作用機序に関わらず、癌の処置において有用な化学物質である。化学療法剤のクラスは、以下を非限定的に含む：アルキル化剤、代謝拮抗物質、紡錘体毒植物性アルカロイド、細胞毒性／抗腫瘍性抗生物質、トポイソメラーゼ阻害剤、抗体、光増感剤、及びキナーゼ阻害剤。化学療法剤は、「標的療法」及び従来の化学療法において使用される化合物を含む。化学療法剤の例は、以下を含む：イブルチニブ（IMBRUVICA（商標）, APCI-32765, Pharmacyclics Inc./Janssen Biotech Inc.; CAS Reg. No. 936563-96-1,US 7514444）、イデラリシブ（以前のCAL-101, GS 1101, GS-1101, Gilead Sciences Inc.; CAS Reg. No. 1146702-54-6）、エルロチニブ（TARCEVA（登録商標）, Genentech/OSI Pharm.）、ドセタキセル（TAXOTERE（登録商標）、Sanofi-Aventis）、５−ＦＵ（フルオロウラシル、５−フルオロウラシル、CAS Reg. No. 51-21-8）、ゲムシタビン（GEMZAR（登録商標）, Lilly）、ＰＤ−０３２５９０１（CAS No. 391210-10-9, Pfizer）、シスプラチン（ｃｉｓ−ジアミン、ジクロロ白金（ＩＩ）、CAS No. 15663-27-1）、カルボプラチン（CAS No. 41575-94-4）、パクリタキセル（TAXOL（登録商標）, Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, N.J.）、トラスツズマブ（HERCEPTIN（登録商標), Genentech）、テモゾロミド（４−メチル−５−オキソ−２，３，４，６，８−ペンタアザビシクロ［４．３．０］ノナ−２，７，９−トリエン−９−カルボキサミド, CAS No. 85622-93-1, TEMODAR（登録商標）, TEMODAL（登録商標), Schering Plough）、タモキシフェン（（Ｚ）−２−［４−（１，２−ジフェニルブタ−１−エニル）フェノキシ］−Ｎ，Ｎ−ジメチルエタンアミン、NOLVADEX（登録商標）、ISTUBAL（登録商標）、VALODEX（登録商標））、及びドキソルビシン（ADRIAMYCIN（登録商標））、Ａｋｔｉ−１／２、ＨＰＰＤ、及びラパマイシン。
【００４５】
化学療法剤は、Ｂｃｌ−２阻害剤及びＪＡＫ阻害剤を含む。
【００４６】
化学療法剤の更なる例は、以下を含む：オキサリプラチン（ELOXATIN（登録商標）, Sanofi）、ボルテゾミブ（VELCADE（登録商標）, Millennium Pharm.）、スーテント（SUNITINIB（登録商標）, SU11248, Pfizer）、レトロゾール（FEMARA（登録商標）, Novartis）、メシル酸イマチニブ（GLEEVEC（登録商標）, Novartis）、ＸＬ−５１８（コビメチニブ、ＭＥＫ阻害剤, Exelixis, WO 2007/044515）、ＡＲＲＹ−８８６（Ｍｅｋ阻害剤, AZD6244, Array BioPharma, Astra Zeneca）、ＳＦ−１１２６（ＰＩ３Ｋ阻害剤, Semafore Pharmaceuticals）、ＢＥＺ−２３５（ＰＩ３Ｋ阻害剤, Novartis）、ＸＬ−１４７（ＰＩ３Ｋ阻害剤, Exelixis）、ＰＴＫ７８７／ＺＫ  ２２２５８４（Novartis）、フルベストラント（FASLODEX（登録商標）, AstraZeneca）、ロイコボリン（フォリン酸）、ラパマイシン（シロリムス, RAPAMUNE（登録商標）, Wyeth）、ラパチニブ（TYKERB（登録商標）, GSK572016, Glaxo Smith Kline）、ロナファーニブ（SARASAR（商標）, SCH 66336, Schering Plough）、ソラフェニブ（NEXAVAR（登録商標）, BAY43-9006, Bayer Labs）、ゲフィチニブ（IRESSA（登録商標）, AstraZeneca）、イリノテカン（CAMPTOSAR（登録商標）, CPT-11, Pfizer）、ティピファニブ（ZARNESTRA（商標）, Johnson & Johnson）、ABRAXANE（商標）（クレモフォール不含）、パクリタキセルのアルブミン操作したナノ粒子製剤（American Pharmaceutical Partners, Schaumberg, Il）、バンデタニブ（rINN, ZD6474, ZACTIMA（登録商標）, AstraZeneca）、クロラムブシル、ＡＧ１４７８、ＡＧ１５７１（SU 5271; Sugen）、テムシロリムス（TORISEL（登録商標）, Wyeth）、パゾパニブ（Glaxo Smith Kline）、カンホスファミド（TELCYTA（登録商標）, Telik）、チオテパ及びシクロホスファミド（cyclosphosphamide）（CYTOXAN（登録商標）、NEOSAR（登録商標））；ブスルファン、インプロスルファン及びピポスルファンなどのスルホン酸アルキル；ベンゾドーパ（benzodopa）、カルボコン、メツレドーパ（meturedopa）、及びウレドーパ（uredopa）などのアジリジン；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホルアミド及びトリメチロメラミンを含むエチレンイミン及びメチラメラミン（methylamelamines）；アセトゲニン（特に、ブラタシン及びブラタシノン）；カンプトテシン（合成類似体トポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン、カルゼルシン及びビセレシン合成類似体を含む）；クリプトフィシン（特にクリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体、ＫＷ−２１８９及びＣＢ１−ＴＭ１を含む）；エリュテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチイン；スポンギスタチン；クロラムブシル、クロルナファジン、クロロホスファミド（chlorophosphamide）、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノベンビキン（novembichin）、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタードなどのナイトロジェンマスタード；カルムスチン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、及びラニムスチン（ranimnustine）などのニトロソ尿素；エンジイン抗生物質などの抗生物質（例えば、カリチアマイシン、カリチアマイシンγ１Ｉ、カリチアマイシンωＩ１（Angew Chem. Intl. Ed. Engl. (1994) 33:183-186）��ジネマイシン、ジネマイシンＡ；クロドロネートなどのビスホスホネート；エスペラミシン；並びに、ネオカルジノスタチンクロモフォア及び関連色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団）、アクラシノマイシン（aclacinomysins）、アクチノマイシン、オースラマイシン（authramycin）、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン（carabicin）、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシニス（chromomycinis）、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン（detorubicin）、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン及びデオキシドキソルビシン）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、ネモルビシン（nemorubicin）、マルセロマイシン、マイトマイシンＣなどのマイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン、ピューロマイシン、クエラマイシン（quelamycin）、ロドルビシン（rodorubicin）、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン；メトトレキサート及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）などの代謝拮抗剤；デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサートなどの葉酸類似体；フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニンなどのプリン類似体；アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジンなどのピリミジン類似体；カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンなどのアンドロゲン；アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタンなどの抗副腎剤（anti-adrenals）；フォリン酸（frolinic acid）などの葉酸補液；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビスアントレン；エダトレキサート（edatraxate）；デフォファミン（defofamine）；デメコルチン；ジアジクオン；エフロルニチン（elfornithine）；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダミン（lonidainine）；マイタンシン及びアンサマイトシンなどのマイタンシノイド；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダンモール（mopidanmol）；ニトラエリン（nitraerine）；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸（podophyllinic acid）；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖類複合体（JHS Natural Products, Eugene, OR）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジコン；２，２’，２”−トリクロロトリエチルアミン；トリコテシン（特に、Ｔ−２トキシン、ベラクリンＡ（verracurin A）、ロリジンＡ及びアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン（gacytosine）；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；シスプラチン及びカルボプラチンなどの白金類似体；ビンブラスチン；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン（NAVELBINE（登録商標））；ノバントロン；テニポシド；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；カペシタビン（XELODA（登録商標）, Roche）；イバンドロネート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸などのレチノイド；並びに、上記のうちの任意の薬学的に許容し得る塩、酸及び誘導体。
【００４７】
また、「化学療法剤」の定義に含まれるのは以下である：（ｉ）例えば、タモキシフェン（NOLVADEX（登録商標）；クエン酸タモキシフェンを含む）、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、及びFARESTON（登録商標）（クエン酸トレミフェン（toremifine citrate））を含む抗エストロゲン薬及び選択的エストロゲン受容体調節薬（ＳＥＲＭ）などの腫瘍に対するホルモン作用を調節する又は阻害するように働く抗ホルモン剤；（ｉｉ）例えば、４（５）−イミダゾール、アミノグルテチミド、MEGASE（登録商標）（酢酸メゲストロール）、AROMASIN（登録商標）（エキセメスタン；Pfizer）、ホルメスタン（formestanie）、ファドロゾール、RIVISOR（登録商標）（ボロゾール）、FEMARA（登録商標）（レトロゾール；Novartis）、及びARIMIDEX（登録商標）（アナストロゾール；AstraZeneca）などの、副腎におけるエストロゲン産生を調節する酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤；（ｉｉｉ）フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、リュープロリド、及びゴセレリンなどの抗アンドロゲン；並びにトロキサシタビン（１，３−ジオキソランヌクレオシドシトシン類似体）；（ｉｖ）ＭＥＫ阻害剤などのプロテインキナーゼ阻害剤（WO 2007/044515）；（ｖ）脂質キナーゼ阻害剤；（ｖｉ）アンチセンスオリゴヌクレオチド、特に、異常な細胞増殖に関係付けられるシグナル伝達経路における遺伝子の発現を阻害するもの、例えば、ＰＫＣα、Ｒａｆ及びＨ−Ｒａｓ、例えば、オブリメルセン（GENASENSE（登録商標）、Genta Inc.）；（ｖｉｉ）ＶＥＧＦ発現阻害剤（例えば、ANGIOZYME（登録商標））及びＨＥＲ２発現阻害剤などのリボザイム；（ｖｉｉｉ）遺伝子治療ワクチンなどのワクチン、例えば、ALLOVECTIN（登録商標）、LEUVECTIN（登録商標）、及びVAXID（登録商標）；PROLEUKIN（登録商標）ｒＩＬ−２；LURTOTECAN（登録商標）などのトポイソメラーゼ１阻害剤；ABARELIX（登録商標）ｒｍＲＨ；（ｉｘ）ベバシズマブ（AVASTIN（登録商標）、Genentech）などの抗血管新生薬；並びに上記のうちの任意の薬学的に許容し得る塩、酸及び誘導体。
【００４８】
また、「化学療法剤」の定義に含まれるのは、アレムツズマブ（Campath）、ベバシズマブ（AVASTIN（登録商標）, Genentech）；セツキシマブ（ERBITUX（登録商標）、Imclone）；パニツムマブ（VECTIBIX（登録商標）, Amgen）、リツキシマブ（RITUXAN（登録商標）, Genentech/Biogen Idec）、ペルツズマブ（OMNITARG（商標）, 2C4, Genentech）、トラスツズマブ（HERCEPTIN（登録商標）, Genentech）、トシツモマブ（Bexxar, Corixia）、及び抗体薬物複合体、ゲムツズマブオゾガマイシン（MYLOTARG（登録商標）, Wyeth）などの治療抗体である。
【００４９】
本発明のＢｔｋ阻害剤と組み合わせて、化学療法剤として治療可能性を有するヒト化モノクローン抗体は、アレムツズマブ、アポリズマブ、アセリズマブ（aselizumab）、アトリズマブ（atlizumab）、バピネオズマブ、ベバシズマブ、ビバツズマブメルタンシン（bivatuzumab mertansine）、カンツズマブメルタンシン、セデリズマブ（cedelizumab）、セルトリズマブペゴル、シドフシツズマブ（cidfusituzumab）、シドツズマブ（cidtuzumab）、ダクリズマブ、エクリズマブ、エファリズマブ、エプラツズマブ、エルリズマブ（erlizumab）、フェルビズマブ（felvizumab）、フォントリズマブ、ゲムツズマブオゾガマイシン、イノツズマブオゾガマイシン、イピリムマブ、ラベツズマブ、リンツズマブ、マツズマブ、メポリズマブ、モタビズマブ、モトビズマブ（motovizumab）、ナタリズマブ、ニモツズマブ、ノロビズマブ（nolovizumab）、ヌマビズマブ（numavizumab）、オクレリズマブ、オマリズマブ、パリビズマブ、パスコリズマブ（pascolizumab）、ペクフシツズマブ（pecfusituzumab）、ペクツズマブ（pectuzumab）、ペルツズマブ、パキセリズマブ、ラリビズマブ（ralivizumab）、ラニビズマブ、レスリビズマブ（reslivizumab）、レスリズマブ、レシビズマブ（resyvizumab）、ロベリズマブ（rovelizumab）、ルプリズマブ（ruplizumab）、シブロツズマブ（sibrotuzumab）、シプリズマブ、ソンツズマブ（sontuzumab）、タカツズマブテトラキセタン（tacatuzumab tetraxetan）、タドシズマブ（tadocizumab）、タリズマブ（talizumab）、テフィバズマブ（tefibazumab）、トシリズマブ、トラリズマブ（toralizumab）、トラスツズマブ、ツコツズマブセルモロイキン（tucotuzumab celmoleukin）、ツクシツズマブ（tucusituzumab）、ウマビズマブ（umavizumab）、ウルトキサズマブ、及びビジリズマブを含む。
【００５０】
「代謝物」は、特定された化合物又はその塩の体内における代謝を通して産生された生成物である。化合物の代謝物は、当技術分野において公知の通例技術を使用して同定されてもよく、そしてそれらの活性は、本明細書に記載される試験などの試験を使用して決定される。このような生成物は、例えば、投与された化合物の酸化、還元、加水分解、アミド化、脱アミド化、エステル化、脱エステル化、酵素的切断等から得られてもよい。したがって、本発明は、本発明の式Ｉ化合物をその代謝生成物を生成するために十分な期間、哺乳動物と接触させることを含む方法によって産生された化合物を含む、本発明の化合物の代謝物を含む。
【００５１】
用語「添付文書」は、治療薬品の適応症、使用法、投与量、投与、禁忌及び／又は使用に関する警告についての情報を含む、このような治療薬品の商業用パッケージ内に慣例的に含まれる説明書を指すために使用される。
【００５２】
用語「キラル」は、その鏡像パートナーに重ね合わせることができない特性を有する分子を指し、一方、用語「アキラル」は、その鏡像パートナーに重ね合わせることができる分子を指す。
【００５３】
用語「立体異性体」は、同一の化学組成を有するが、その原子又は基の空間配置に関しては異なる、化合物を指す。
【００５４】
「ジアステレオマー」は、２個以上の不斉中心を有し、そしてその分子が互いの鏡像ではない立体異性体を指す。ジアステレオマーは、異なる物性、例えば、融点、沸点、スペクトル特性及び反応性を有する。ジアステレオマーの混合物は、電気泳動及びクロマトグラフィーなどの高分解能分析手順の下で分離することができる。
【００５５】
「エナンチオマー」は、互いの重ね合わせることのできない鏡像である、化合物の２つの立体異性体を指す。
【００５６】
本明細書において使用される立体化学の定義及び規則は、一般に、S. P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, New York; and Eliel, E. and Wilen, S., “Stereochemistry of Organic Compounds”, John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994に従う。本発明の化合物は、不斉又はキラル中心を含有し、そしてそれゆえ異なる立体異性体形態で存在してもよい。ジアステレオマー、エナンチオマー及びアトロプ異性体を非限定的に含む、本発明の化合物の全ての立体異性体形態、並びにラセミ混合物などのそれらの混合物は、本発明の一部を形成することが意図される。多くの有機化合物は、光学的活性型で存在する、すなわち、それらは平面偏光の面を回転させる能力を有する。光学活性化合物を記載する際、接頭辞Ｄ及びＬ、又はＲ及びＳは、そのキラル中心を中心とする分子の絶対配置を示すために使用される。接頭辞ｄ及びｌ又は（＋）及び（−）は、化合物による平面偏光の回転の符号を示すために用いられ、（−）又はｌは、その化合物が左旋性であることを意味する。接頭辞（＋）又はｄを付された化合物は、右旋性である。所与の化学構造について、これら立体異性体は、互いの鏡像であることを除いて同一である。特定の立体異性体は、エナンチオマーと称されてもよく、そしてこのような異性体の混合物は、エナンチオマー混合物と呼ばれることが多い。エナンチオマーの５０：５０混合物は、ラセミ混合物又はラセミ体と称され、これは化学的な反応又はプロセスにおいて立体選択又は立体特異性が存在しなかった場合に生じることもできる。用語「ラセミ混合物」及び「ラセミ体」は、光学活性を欠く、２つのエナンチオマー種の等モル混合物を指す。エナンチオマーは、超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）などのキラル分離方法によってラセミ混合物から分離されてもよい。分離されたエナンチオマー中のキラル中心での立体配置の決定は仮であり、かつ例示目的で表１構造中に示されることもできるが一方、立体化学は、例えばｘ線結晶学的データから決定的に確立される。
【００５７】
用語「互変異性体」又は「互変異性型」は、低エネルギー障壁を介して相互変換可能である、異なるエネルギーの構造異性体を指す。例えば、プロトン互変異性体（プロトトロピー互変異性体としても知られている）は、ケト−エノール及びイミン−エナミン異性化等のプロトンの移動を介する相互変換を含む。原子価互変異性体は、結合電子のいくつかの再構成による相互変換を含む。
【００５８】
用語「薬学的に許容し得る塩」は、生物学的に又は他の面でも、望ましくないわけではない塩を示す。薬学的に許容し得る塩は、酸及び塩基付加塩の両方を含む。語句「薬学的に許容し得る」は、物質又は組成物が、製剤を含む他の成分及び／又はそれにより処置される哺乳動物と、化学的及び／又は毒性学的に適合する必要があることを示す。
【００５９】
用語「薬学的に許容し得る酸付加塩」は、無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、炭酸、リン酸）、及び有機酸の脂肪族、脂環式、芳香族、アリール−脂肪族、複素環式、カルボキシル及びスルホン類より選択される有機酸（例えば、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、グルコン酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、アスパラギン酸、アスコルビン酸、グルタミン酸、アントラニル酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、エンボン酸、フェニル酢酸、メタンスルホン酸「メシラート」、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸及びサリチル酸（salicyclic acid））を用いて形成される薬学的に許容し得る塩を示す。
【００６０】
用語「薬学的に許容し得る塩基付加塩」は、有機又は無機塩基を用いて形成された薬学的に許容し得る塩を示す。許容し得る無機塩基の例は、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン及びアルミニウム塩を含む。薬学的に許容し得る有機無毒塩基から誘導された塩は、第一級、第二級及び第三級アミン、天然置換アミンを含む置換アミン、環状アミン及び塩基性イオン交換樹脂、例えば、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、２−ジエチルアミノエタノール、トリメタミン（trimethamine）、ジシクロヘキシルアミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、プリン、ピペラジン、ピペリジン、Ｎ−エチルピペリジン及びポリアミン樹脂の塩を含む。
【００６１】
「溶媒和物」は、１個以上の溶媒分子と本発明の化合物との会合又は複合体を指す。溶媒和物を形成する溶媒の例は、水、イソプロパノール、エタノール、メタノール、ＤＭＳＯ、酢酸エチル、酢酸及びエタノールアミンを非限定的に含む。
【００６２】
用語「ＥＣ５０」は、半最大有効濃度であり、そしてインビボで特定効果の最大の５０％を得るために必要とされる特定の化合物の血漿中濃度を示す。
【００６３】
用語「Ｋｉ」は、阻害定数であり、そして特定阻害剤の受容体に対する絶対結合親和性を示す。それは、競合結合アッセイを使用して測定され、そして競合リガンド（例えば、放射性リガンド）が存在しない場合に特定阻害剤が受容体の５０％を占める場合の濃度に等しい。Ｋｉ値は、ｐＫｉ値に対数的に変換され得（−ｌｏｇ Ｋｉ）、そのより高い値は、指数関数的により高い効力を示す。
【００６４】
用語「ＩＣ５０」は、半最大阻害濃度であり、そしてインビトロで生物学的プロセスの５０％阻害を得るために必要とされる特定化合物の濃度を示す。ＩＣ５０値は、ｐＩＣ５０値に対数変換され得（−ｌｏｇ ＩＣ５０）、より高い値は、指数関数的により大きい効力を指す。ＩＣ５０値は、絶対値ではなく、実験条件、例えば用いられた濃度に依存し、そしてCheng-Prusoff式を使用して絶対阻害定数（Ｋｉ）に変換され得る（Biochem. Pharmacol. (1973) 22:3099）。他のパーセント阻害パラメータ、例えばＩＣ７０、ＩＣ９０等が、計算されてもよい。
【００６５】
用語「この発明の化合物」及び「本発明の化合物」及び「式Ｉの化合物」は、式Ｉの化合物並びにその立体異性体、幾何異性体、互変異性体、溶媒和物、代謝物、及び薬学的に許容し得る塩及びプロドラッグを含む。
【００６６】
式Ｉ化合物を含む、本明細書において与えられる任意の式又は構造は、このような化合物の水和物、溶媒和物及び多形並びにそれらの混合物を表すことが意図される。
【００６７】
式Ｉ化合物を含む、本明細書において与えられる任意の式又は構造はまた、化合物の非標識の形態のみならず同位体で標識された形態をも表すことが意図される。同位体で標識された化合物は、１個以上の原子が、選択された原子質量又は質量数を有する原子によって置き換えられていることを除いて、本明細書において与えらえる式によって示された構造を有する。本発明の化合物に組み入れられ得る同位体の例は、非限定的に、２Ｈ（重水素、Ｄ）、３Ｈ（三重水素）、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｆ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、３６Ｃｌ、及び１２５Ｉなどの、水素、炭素、窒素、酸素、リン（phosphorous）、フッ素、及び塩素の同位体を含む。種々の同位体で標識された本発明の化合物、例えば、３Ｈ、１３Ｃ、及び１４Ｃなどの放射性同位体が組み入れられる化合物。このような同位体で標識された化合物は、代謝研究、反応速度論研究、薬物又は基質組織分布アッセイを含む陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）又は単一光子放射断層撮影（ＳＰＥＣＴ）などの検出又は撮像技術、あるいは患者の放射性処置において有用である場合がある。重水素で標識されている又は置換されている本発明の治療化合物は、分布、代謝、及び排泄（ＡＤＭＥ）に関する、改善されたＤＭＰＫ（薬物代謝及び薬物動態）特性を有してもよい。重水素などのより重い同位体での置換は、より優れた代謝安定性に起因する特定の治療上の利点、例えば増加されたインビボ半減期又は減少された必要投与量を与える場合がある。１８Ｆで標識された化合物は、ＰＥＴ又はＳＰＥＣＴ研究のために有用である場合がある。同位体で標識された本発明の化合物及びそのプロドラッグは概して、スキームにおいて又は以下に記載される実施例及び調製例において開示された手順を実施し、非同位体で標識された試薬の代わりに容易に入手可能な同位体で標識された試薬を使用することによって、調製され得る。さらに、より重い同位体、特に重水素（すなわち、２Ｈ又はＤ）での置換は、より優れた代謝安定性に起因する特定の治療上の利点、例えば増加されたインビボ半減期又は減少された必要投与量又は治療指数における改善を与える場合がある。この文脈における重水素は、式（Ｉ）の化合物における置換基としてみなされることが理解される。このようなより重い同位体、具体的には重水素の濃度は、同位体濃縮係数によって定義されてもよい。本発明の化合物において、特定の同位体として特に指定されない任意の原子は、その原子の任意の安定同位体を表すことが意味される。特に断りない限り、ある位置が、「Ｈ」又は「水素」として指定される場合、その位置は、その天然存在比の同位体組成での、水素を有することが理解される。したがって、本発明の化合物において、重水素（Ｄ）として特に指定された任意の原子は、重水素を表すことが意味される。
【００６８】
ピラゾールカルボキサミド化合物
本発明は、Ｂｔｋによって介入される疾患、病状及び／又は障害の処置において潜在的に有用である、式Ｉのピラゾールカルボキサミド化合物及びその医薬製剤を提供する。
【００６９】
式Ｉ化合物は、構造：
【化２】
0006507234.tif 000003
［式中、
Ｘは、ＣＨ又はＮであり；
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、Ｈ、-Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、Ｃ６-Ｃ２０アリール、Ｃ３-Ｃ１２カルボシクリル、Ｃ２-Ｃ２０ヘテロシクリル、Ｃ１-Ｃ２０ヘテロアリール、-ＮＨ２、-ＮＨ-（Ｃ６-Ｃ２０アリール）、-ＮＨ-（Ｃ１-Ｃ２０ヘテロアリール）、-Ｃ（Ｏ）-（Ｃ１-Ｃ１２アルキル）、-Ｃ（Ｏ）-（Ｃ３-Ｃ１２カルボシクリル）、-ＮＨ-（Ｃ１-Ｃ１２アルキレン）-（Ｃ２-Ｃ２０ヘテロシクリル）、-ＮＨ-（Ｃ１-Ｃ２０ヘテロアリール）-（Ｃ２-Ｃ２０ヘテロシクリル）、-ＮＨＣ（Ｏ）-（Ｃ３-Ｃ１２カルボシクリル）、-ＮＨＣ（Ｏ）-（Ｃ１-Ｃ１２アルキル）、-（Ｃ６-Ｃ２０アリール）-Ｃ（Ｏ）-（Ｃ２-Ｃ２０ヘテロシクリル）、及び-（Ｃ１-Ｃ２０ヘテロアリール）-（Ｃ２-Ｃ２０ヘテロシクリル）より独立に選択されるか；あるいは
Ｒ１及びＲ２は、縮合６員アリール、カルボシクリル、ヘテロシクリル、又はヘテロアリール環を場合により形成し；
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３のうちの少なくとも１個は、-Ｃ（Ｏ）ＮＨ２であり；
Ｒ４は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ、-ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ、-Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨ、-ＣＨ（ＣＦ３）ＯＨ、-ＣＨ２Ｆ、-ＣＨＦ２、-ＣＨ２ＣＨＦ２、-ＣＦ３、-Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、-Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ３、-Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、-ＮＨ２、-ＮＨＣＨ３、-Ｎ（ＣＨ３）２、-ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ３、-ＯＨ、-ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、１−ヒドロキシシクロプロピル、イミダゾリル、ピラゾリル、３−ヒドロキシ−オキセタン−３−イル、オキセタン−３−イル、及びアゼチジン−１−イルより選択され；
Ｒ５は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、又はＣＮであり；
Ｒ６は、構造：
【化３】
0006507234.tif 000004
0006507234.tif 000005
（式中、波線は結合部位を示す）
より選択され；そして
アルキル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、及びヘテロアリールは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、-ＣＮ、-ＣＨ３、-ＣＨ２ＣＨ３、-ＣＨ（ＣＨ３）２、-ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、-ＣＨ２ＮＨ２、-ＣＨ２ＮＨＣＨ３、-ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２、-ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ２ＯＣＨ３、-ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、-Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨ、-ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ（ＣＨ３）２、-Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ２ＣＨ３、-ＣＨ２ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、-ＣＨ２Ｆ、-ＣＨＦ２、-ＣＦ３、-ＣＨ２ＣＦ３、-ＣＨ２ＣＨＦ２、-ＣＨ（ＣＨ３）ＣＮ、-Ｃ（ＣＨ３）２ＣＮ、-ＣＨ２ＣＮ、-ＣＯ２Ｈ、-ＣＯＣＨ３、-ＣＯ２ＣＨ３、-ＣＯ２Ｃ（ＣＨ３）３、-ＣＯＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、-ＣＯＮＨ２、-ＣＯＮＨＣＨ３、-ＣＯＮ（ＣＨ３）２、-ＣＯＮＨ（ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２）、-Ｃ（ＣＨ３）２ＣＯＮＨ２、-ＮＨ２、-ＮＨＣＨ３、-Ｎ（ＣＨ３）２、-ＮＨＣＯＣＨ３、-Ｎ（ＣＨ３）ＣＯＣＨ３、-ＮＨＳ（Ｏ）２ＣＨ３、-Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（ＣＨ３）２ＣＯＮＨ２、-Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｓ（Ｏ）２ＣＨ３、-ＮＯ２、＝Ｏ、-ＯＨ、-ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、-ＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２、-ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、-Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＣＨ３）２、-ＳＣＨ３、-Ｓ（Ｏ）２ＣＨ３、-Ｓ（Ｏ）３Ｈ、シクロプロピル、オキセタニル、アゼチジニル、（１−メチルアゼチジン−３−イル）オキシ、Ｎ−メチル−Ｎ−オキセタン−３−イルアミノ、アゼチジン−１−イルメチル、ピロリジン−１−イル、及びモルホリノより独立に選択される１個以上の基で場合により置換されている］
を有し、又はその立体異性体、互変異性体若しくは薬学的に許容され得る塩。
【００７０】
式Ｉ化合物の例示的実施態様は、ＸがＮであるものを含む。
【００７１】
式Ｉ化合物の例示的実施態様は、ＸがＣＨであるものを含む。
【００７２】
式Ｉ化合物の例示的実施態様は、Ｒ１が-Ｃ（Ｏ）ＮＨ２であるものを含む。
【００７３】
式Ｉ化合物の例示的実施態様は、Ｒ２が-Ｃ（Ｏ）ＮＨ２であるものを含む。
【００７４】
式Ｉ化合物の例示的実施態様は、Ｒ３が-Ｃ（Ｏ）ＮＨ２であるものを含む。
【００７５】
式Ｉ化合物の例示的実施態様は、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３のうちの１つが-ＮＨ-（Ｃ６-Ｃ２０アリール）又は-ＮＨ-（Ｃ１-Ｃ２０ヘテロアリール）であるものを含み、ここでアリール及びヘテロアリールがＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、-ＣＮ、-ＣＨ３、-ＣＨ２ＣＨ３、-ＣＨ（ＣＨ３）２、-ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、-ＣＨ２ＮＨ２、-ＣＨ２ＮＨＣＨ３、-ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２、-ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ２ＯＣＨ３、-ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、-Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨ、-ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ（ＣＨ３）２、-Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ２ＣＨ３、-ＣＨ２ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、-ＣＨ２Ｆ、-ＣＨＦ２、-ＣＦ３、-ＣＨ２ＣＦ３、-ＣＨ２ＣＨＦ２、-ＣＨ（ＣＨ３）ＣＮ、-Ｃ（ＣＨ３）２ＣＮ、-ＣＨ２ＣＮ、-ＣＯ２Ｈ、-ＣＯＣＨ３、-ＣＯ２ＣＨ３、-ＣＯ２Ｃ（ＣＨ３）３、-ＣＯＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、-ＣＯＮＨ２、-ＣＯＮＨＣＨ３、-ＣＯＮ（ＣＨ３）２、-ＣＯＮＨ（ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２）、-Ｃ（ＣＨ３）２ＣＯＮＨ２、-ＮＨ２、-ＮＨＣＨ３、-Ｎ（ＣＨ３）２、-ＮＨＣＯＣＨ３、-Ｎ（ＣＨ３）ＣＯＣＨ３、-ＮＨＳ（Ｏ）２ＣＨ３、-Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（ＣＨ３）２ＣＯＮＨ２、-Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｓ（Ｏ）２ＣＨ３、-ＮＯ２、＝Ｏ、-ＯＨ、-ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、-ＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２、-ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、-Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＣＨ３）２、-ＳＣＨ３、-Ｓ（Ｏ）２ＣＨ３、-Ｓ（Ｏ）３Ｈ、シクロプロピル、オキセタニル、アゼチジニル、（１−メチルアゼチジン−３−イル）オキシ、Ｎ−メチル−Ｎ−オキセタン−３−イルアミノ、アゼチジン−１−イルメチル、ピロリジン−１−イル、及びモルホリノより独立に選択される１個以上の基で場合により置換されている。
【００７６】
式Ｉ化合物の例示的実施態様は、Ｒ４が-ＣＨ２ＯＨであるものを含む。
【００７７】
式Ｉ化合物の例示的実施態様は、Ｒ５がＨであるものを含む。
【００７８】
式Ｉ化合物の例示的実施態様は、Ｒ６が：
【化４】
0006507234.tif 000006
であるものを含む。
【００７９】
式Ｉ化合物の例示的実施態様は、Ｒ６が：
【化５】
0006507234.tif 000007
であるものを含む。
【００８０】
式Ｉ化合物の例示的実施態様は、本化合物が表１より選択されるものを含む。
【００８１】
本発明の式Ｉ化合物は、不斉又はキラル中心を含有し、そしてそれゆえ異なる立体異性体形態で存在してもよい。ジアステレオマー、エナンチオマー及びアトロプ異性体を非限定的に含む、本発明の化合物の全ての立体異性体形態、並びにラセミ混合物などのそれらの混合物は、本発明の一部を形成することが意図される。幾つかの場合において、立体化学は、決定されていないか、あるいは暫定的に指定されている。
【００８２】
加えて、本発明は、cis-trans（幾何）及び立体配座異性体を含む、全てのジアステレオマーを包含する。例えば、式Ｉ化合物が、二重結合又は縮合環を組み込む場合、cis及びtrans形態、並びにそれらの混合物は、本発明の範囲内に包含される。
【００８３】
本明細書で示される構造において、任意の特定のキラル原子の立体化学が特定されない場合は、全ての立体異性体が考えられ、そして本発明の化合物として含まれる。立体化学が実線の楔又は破線により特定されて、特定の立体配置を表す場合は、その立体異性体はそのように特定され、そして定義される。
【００８４】
本発明の化合物は、水、エタノール等などの薬学的に許容し得る溶媒との非溶媒和物形態のみならず溶媒和物形態で存在してもよく、そして、本発明が、溶媒和物形態及び非溶媒和物形態の両方を包含することが意図される。
【００８５】
本発明の化合物はまた、異なる互変異性体形態で存在してもよく、そして全てのそのような形態は、本発明の範囲内に包含される。用語「互変異性体」又は「互変異性形態」は、低エネルギー障壁を介して相互変換可能である、異なるエネルギーの構造異性体を指す。例えば、プロトン互変異性体（プロトトロピー互変異性体としても知られている）は、ケト−エノール及びイミン−エナミン異性化などのプロトンの移動を介する相互変換を含む。原子価互変異性体は、結合電子の一部の再構成による相互変換を含む。
【００８６】
生物学的評価
酵素活性（又は他の生物学的活性）の阻害剤としての式Ｉ化合物の相対的有効性は、各化合物が活性を予め定義された程度まで阻害する濃度を決定し、そして次にその結果を比較することによって確立され得る。典型的には、好ましい決定は、生化学的アッセイにおいて活性の５０％を阻害する濃度、すなわち５０％阻害剤濃度又は「ＩＣ５０」である。ＩＣ５０値の決定は、当技術分野において公知の従来技術を使用して達成され得る。一般に、ＩＣ５０は、種々の濃度の研究中の阻害剤の存在下で、所与の酵素の活性を測定することによって決定され得る。酵素活性の実験的に得られた値は、次に、使用された阻害剤濃度に対してプロットされる。５０％酵素活性（任意の阻害剤の非存在下での活性と比較して）を示す阻害剤の濃度を、ＩＣ５０値とする。類似的に、他の阻害剤濃度が、活性の適切な決定を通して定義され得る。例えば、幾つかの設定において、９０％阻害濃度、すなわちＩＣ９０等を確立することが望ましいこともあり得る。
【００８７】
式Ｉ化合物を、標準生化学的Ｂｔｋキナーゼアッセイによって試験した（実施例９０１）。
【００８８】
式Ｉ化合物を試験するために使用され得る標準細胞Ｂｔｋキナーゼアッセイのための一般手順は、Ｒａｍｏｓ細胞Ｂｔｋアッセイである（実施例９０２）。
【００８９】
標準細胞Ｂ細胞増殖アッセイが、Ｂａｌｂ／ｃマウスの脾臓から精製されたＢ細胞を用いて式Ｉ化合物を試験するために使用され得る（実施例９０３）。
【００９０】
標準Ｔ細胞増殖アッセイが、Ｂａｌｂ／ｃマウスの脾臓から精製されたＴ細胞を用いて式Ｉ化合物を試験するために使用され得る（実施例９０４）。
【００９１】
ＣＤ８６阻害アッセイが、８〜１６週齢Ｂａｌｂ／ｃマウスの脾臓から精製された全マウス脾細胞を使用して、Ｂ細胞活性の阻害について式Ｉ化合物に対して行われ得る（実施例９０５）。
【００９２】
Ｂ−ＡＬＬ細胞生存アッセイが、培養下の生存Ｂ−ＡＬＬ細胞の数を測定するために、式Ｉ化合物に対して行われ得る（実施例９０６）。
【００９３】
ＣＤ６９全血アッセイが、表面ＩｇＭをヤギＦ（ａｂ’）２抗ヒトＩｇＭと架橋することによって活性化されたヒト全血中のＢリンパ球によってＣＤ６９の産生を阻害するための化合物の能力を決定するために、式Ｉ化合物に対して行われ得る（実施例９０７）。ＣＤ６９は、リンパ球遊走及びサイトカイン分泌に関与するＩＩ型のＣ型レクチンである。ＣＤ６９発現は、白血球活性化の最も初期に利用可能な指標のうちの１つにあたり、そしてその急速誘導は、転写活性化を通して生じる（Vazquez et al (2009) Jour. of Immunology Published October 19, 2009, doi:10.4049/jimmunol.0900839）。選択的Ｂｔｋ阻害剤による抗原レセプター刺激の濃度依存的阻害は、リンパ球活性化マーカーＣＤ６９の細胞表面発現を誘導する（Honigberg et al (2010) Proc. Natl. Acad. Sci. 107(29):13075-13080）。したがって、選択的Ｂｔｋ阻害剤によるＣＤ６９阻害は、特定のＢ細胞障害の治療効果と相関される場合がある。ＣＤ６９ Ｈｕ血液ＦＡＣＳ ＩＣ７０値は、表１中、例示的式Ｉ化合物について示されている。
【００９４】
式Ｉ化合物の抗炎症効果はまた、マウス又はラットにおけるコラーゲン誘発関節炎（ＣＩＡ）アッセイによって試験され得る（William RO (2004) Methods of Mol. Med. 98:207-216）。コラーゲン誘発関節炎は、疾患病理発生の疑問に取り組むため、及び治療標的を確認するために広く使用される、関節リウマチ（ＲＡ）の動物モデルである。関節炎は通常、アジュバント中の自己又は異種のＩＩ型コラーゲンでの免疫化によってマウス又はラットにおいて誘導される。コラーゲン誘発関節炎に対する感受性は、主要組織適合性複合体クラスＩＩ遺伝子と強く関連しており、そして関節炎の発生は、ＩＩ型コラーゲンに対する健康なＴ及びＢ細胞反応によって達成される。ＣＩＡの主要な病理学的特徴は、多形核及び単核細胞の浸潤、パンヌス形成、軟骨退化、骨の侵食、及び線維症を伴う増殖性滑膜炎を含む。ＲＡと同様に、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）及びインターロイキン（ＩＬ）−１βなどの炎症性サイトカインは、ＣＩＡを有するマウスの関節炎関節において大量に発現され、そしてこれらの分子の遮断は、疾患重症度の低下をもたらす。試験対象は、尾の根元に式Ｉ化合物の製剤を注射され、そして関節炎の発症が、フロイント不完全アジュバント中のコラーゲンの全身投与によって同期化される（増強される）。足及び肢関節の炎症は、足の評価を含むスコアリングシステムを使用して数量化される。
【００９５】
式Ｉ例示的化合物の細胞毒性又は細胞分裂停止活性は、細胞培地中で増殖性哺乳動物腫瘍細胞を樹立させ、式Ｉ化合物を加え、細胞を約６時間〜約５日の期間培養し、そして細胞生存率を測定することによって測定され得る（実施例９０８）。細胞ベースのインビトロアッセイは、生存率、すなわち増殖（ＩＣ５０）、細胞毒性（ＥＣ５０）、及びアポトーシスの誘導（カスパーゼ活性化）を測定するために使用され、そして血液悪性腫瘍及び固形腫瘍に対する臨床的有効性を予測する際に有用である場合がある。
【００９６】
式Ｉ化合物の化学療法剤との組み合わせのインビトロ効力は、実施例９０８の細胞増殖アッセイ；Promega Corp., Madison, WIから市販されているCellTiter-Glo（登録商標）発光細胞生存率アッセイによって、測定され得る。このホモジニアスアッセイ方法は、鞘翅目のルシフェラーゼの組み換え発現に基づき（US 5583024; US 5674713; US 5700670）、そして代謝的に活性な細胞の指標である、存在するＡＴＰの定量化に基づいて、培養下の生存細胞の数を決定する（Crouch et al (1993) J. Immunol. Meth. 160:81-88; US 6602677）。CellTiter-Glo（登録商標）アッセイは、９６又は３８４ウェルフォーマットにおいて行われ、それを自動ハイスループット・スクリーニング（ＨＴＳ）を受けることを可能にする（Cree et al (1995) AntiCancer Drugs 6:398-404）。ホモジニアスアッセイ手順は、血清添加培地中で培養された細胞に単一試薬（CellTiter-Glo（登録商標）試薬）を直接加えることを含む。細胞洗浄、培地の除去及び複数のピペット操作工程は必要とされない。当該システムは、試薬を加え、そして混合した１０分後に、３８４ウェルフォーマット中、わずか１５個細胞／ウェルほどを検出する。
【００９７】
ホモジニアス「添加―混合―測定」フォーマットは、細胞溶解、及び存在しているＡＴＰの量に比例する発光シグナルの発生をもたらす。ＡＴＰの量は、培養下、存在する細胞の数に正比例する。CellTiter-Glo（登録商標）アッセイは、細胞型及び使用される培地に依存して、一般的には５時間を超える半減期を有する、ルシフェラーゼ反応によって生成される、「グロー型」発光シグナルを発生する。生存細胞は、相対発光単位（ＲＬＵ）に反映される。基質、カブトムシルシフェリン（Beetle Luciferin）は、ＡＴＰのＡＭＰへの同時変換及びフォトンの発生と共に、組み換えホタルルシフェラーゼによって酸化的に脱炭酸される。延長された半減期は、試薬注入器を使用する必要性を排除し、そして複数のプレートの連続又はバッチ方式処理に対して柔軟性を提供する。この細胞増殖アッセイは、種々の複数ウェルフォーマット、例えば９６又は３８４ウェルフォーマットを用いて使用され得る。データは、ルミノメーター又はＣＣＤカメラ撮像装置によって記録され得る。発光出力は、経時的に測定される相対光単位（ＲＬＵ）として提供される。
【００９８】
式Ｉ例示的化合物及び化学療法剤との組み合わせの抗増殖有効性は、特定の血液腫瘍細胞株に対して、CellTiter-Glo（登録商標）アッセイ（実施例９０８）によって測定される。ＥＣ５０値は、試験された化合物及び組み合わせについて確立される。
【００９９】
表１中の例示的式Ｉ化合物は、本発明の方法に従って、作製され、特徴付けられ、かつＢｔｋの阻害について試験され、そして以下の構造及び対応する名称を有する（ChemDraw Ultra, Version 11.0.1及びChemBioDraw, Version 11.0, CambridgeSoft Corp., Cambridge MA)。1個を超える名称が式I化合物又は中間体に関連する場合、化学構造が、化合物を定義するものとする。
【０１００】
表１中の例示的式Ｉ化合物は、特定のＢ細胞障害に対する治療効果と相関され得る、ＢＴＫへの結合において、及びＣＤ６９全血アッセイにおいて、驚くべきかつ予想外の特性を示す。
【０１０１】
【表１】
0006507234.tif 000008
0006507234.tif 000009
0006507234.tif 000010
0006507234.tif 000011
0006507234.tif 000012
0006507234.tif 000013
0006507234.tif 000014
0006507234.tif 000015
0006507234.tif 000016
0006507234.tif 000017
0006507234.tif 000018
0006507234.tif 000019
【０１０２】
式Ｉ化合物の投与
本発明の化合物は、処置されるべき病状に適切な任意の経路によって投与されてよい。適切な経路は、経口、非経口（皮下、筋肉内、静脈内、動脈内、皮内、髄腔内及び硬膜外を含む）、経皮、直腸、経鼻、局所（頬側及び舌下を含む）、膣内、腹腔内、肺内及び鼻腔内を含む。局所的免疫抑制処置のためには、本化合物は、灌流又は別様に移植術の前に移植片を阻害剤に接触させることを含む、病巣内投与によって投与されてもよい。好ましい経路が、例えばレシピエントの病状によって変更してもよいことは認識されるであろう。本化合物が経口投与される場合、それは薬学的に許容し得る担体又は賦形剤と共に丸剤、カプセル剤、錠剤等として製剤化されてもよい。本化合物が非経口投与される場合、それは後述するように、薬学的に許容し得る非経口ビヒクルと共に、かつ単位投与量の注射剤形態で、製剤化されてもよい。
【０１０３】
ヒト患者を処置するための用量は、式Ｉ化合物 約１０mg〜約１０００mgの範囲であってよい。典型的な用量は、本化合物 約１００mg〜約３００mgであってよい。用量は、特定の化合物の吸収、分布、代謝及び排出を含む、薬物動態及び薬力学的特性に依存して、１日１回（ＱＩＤ）、１日２回（ＢＩＤ）又はより高頻度に投与されてもよい。加えて、毒性因子が、投与量及び投与計画に影響を及ぼす場合もある。経口投与の場合、丸剤、カプセル剤又は錠剤は、特定された期間にわたって毎日又はより少ない頻度で摂取されてもよい。その投与計画は、多くの治療サイクルで繰り返されてもよい。
【０１０４】
式Ｉ化合物での処置の方法
本発明の式Ｉ化合物は、免疫障害、心血管疾患、ウイルス感染症、炎症、代謝／内分泌障害又は神経学的障害などの、Ｂｔｋに関連する異常な細胞増殖、機能又は挙動から生じる疾患又は障害を病む、ヒト又は動物患者を処置するために有用であり、したがって先に定義されたとおりの本発明の化合物のそれらへの投与を含む方法によって処置されてもよい。癌を病むヒト又は動物患者はまた、先に定義されたとおりの本発明の化合物のそれらへの投与を含む方法によって処置されてもよい。それによって、患者の病状は、改善されるか又は寛解される場合がある。
【０１０５】
式Ｉ化合物は、哺乳動物細胞、生物体、又は関連する病態、例えば全身性及び局所的炎症、免疫炎症性疾患、例えば関節リウマチ、免疫抑制、臓器移植拒絶反応、アレルギー、潰瘍性大腸炎、クローン病、皮膚炎、喘息、全身性エリテマトーデス、シェーグレン症候群、多発性硬化症、強皮症／全身性硬化症、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、抗好中球細胞質抗体（ＡＮＣＡ）脈管炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、乾癬の、インビトロ、インサイチュー、及びインビボ診断又は処置のため、及び全身関節の保護作用のために有用である場合がある。
【０１０６】
本発明の方法はまた、関節炎疾患などの疾患、例えば、関節リウマチ、単関節関節炎、変形性関節症、痛風関節炎、脊椎炎；ベーチェット疾患；敗血症、敗血症性ショック、エンドトキシンショック、グラム陰性敗血症、グラム陽性敗血症、及び毒素性ショック症候群；敗血症、外傷、又は出血に続発する多臓器傷害症候群；アレルギー性結膜炎、春季結膜炎、ブドウ膜炎、及び甲状腺眼症などの眼科障害；好酸球性肉芽腫；喘息、慢性気管支炎、アレルギー性鼻炎、ＡＲＤＳ、慢性肺炎症性疾患（例えば、慢性閉塞性肺疾患）、珪肺症、肺サルコイドーシス、胸膜炎、肺胞炎、脈管炎、肺気腫、肺炎、気管支拡張症、及び肺酸素毒性などの肺又は呼吸器障害；心筋、脳、又は四肢の再灌流傷害；嚢胞性線維症などの線維症；ケロイド形成又は瘢痕組織形成；アテローム性動脈硬化；全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、自己免疫性甲状腺炎、多発性硬化症、いくつかの型の糖尿病、及びレイノー症候群（Reynaud’s syndrome）などの自己免疫疾患；並びに、ＧＶＨＤ及び同種移植片拒絶などの移植片拒絶障害；慢性糸球体腎炎；慢性炎症性腸疾患（ＣＩＢＤ）、クローン病、潰瘍性大腸炎、及び壊死性腸炎などの炎症性腸疾患；接触性皮膚炎、アトピー性皮膚炎、乾癬、又は蕁麻疹などの炎症性皮膚病；感染に起因する発熱及び筋肉痛；髄膜炎、脳炎、及び軽症の外傷に起因する脳又は脊髄損傷などの中枢又は末梢神経系炎症性障害；シェーグレン症候群；白血球血管外漏出を含む疾患；アルコール性肝炎；細菌性肺炎；抗原抗体複合体介在性疾患；血液量減少性ショック；Ｉ型糖尿病；急性及び遅延型過敏症；白血球疾患及び転移に起因する疾患状態；熱傷；顆粒球輸血関連症候群；及びサイトカイン誘導毒性を処置することを含む。
【０１０７】
本発明の方法はまた、乳癌、卵巣癌、子宮頸癌、前立腺癌、精巣癌、尿生殖路癌、食道癌、喉頭癌、神経膠芽腫、神経芽細胞腫、胃癌、皮膚癌、ケラトアカントーマ、肺癌、類表皮癌、大細胞癌、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、小細胞癌、肺腺癌、骨癌、結腸癌、腺腫、膵癌、腺癌、甲状腺癌、濾胞腺癌、未分化癌、乳頭癌、セミノーマ、メラノーマ、肉腫、膀胱癌、肝癌及び胆汁道癌、腎癌、膵癌、骨髄障害、リンパ腫、ヘアリー細胞、頬側口腔癌、上咽頭癌、咽頭癌、口唇癌、舌癌、口腔癌、小腸癌、結腸直腸癌、大腸癌、直腸癌、脳癌及び中枢神経系癌、ホジキン、白血病、気管支癌、甲状腺癌、肝臓及び肝内胆管癌、肝細胞癌、胃癌、神経膠腫／神経膠芽腫、子宮内膜癌、メラノーマ、腎癌及び腎盂腎癌、膀胱癌、子宮体癌、子宮頸癌、多発性骨髄腫、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、骨髄性白血病、口腔癌及び咽頭癌、非ホジキンリンパ腫、メラノーマ、及び絨毛結腸腺腫より選択される癌を処置することを含む。
【０１０８】
本発明の方法は、再灌流傷害、すなわち組織又は器官が虚血の期間に続いて再灌流を経験する状況に起因する傷害を受けるか、又は受け得る対象を処置することにおいて有用性を有し得る。用語「虚血」は、動脈血の流入の閉塞に起因する局所性組織貧血を指す。特徴的に後に再灌流が続く一過性虚血は、好中球の活性化、及び患部における血管の内皮を通る遊出をもたらす。次に、活性化された好中球の蓄積は、反応性酸素代謝物の発生をもたらし、それは、関与する組織又は器官の構成要素を損傷する。「再灌流傷害」のこの現象は、血管発作（全虚血及び局所虚血を含む）、出血性ショック、心筋虚血又は梗塞、臓器移植、及び脳血管痙攣などの病状に一般に関連する。例示するため、再灌流傷害は、心臓バイパス手技の終結時、又はひとたび血液を受け入れることを妨害された心臓が再灌流し始めるときの心停止の間に生じる。Ｂｔｋ活性の阻害は、このような状況において再灌流傷害の量の減少をもたらし得ることが期待される。
【０１０９】
医薬製剤
ヒトを含む哺乳動物の治療的処置のために本発明の化合物を使用するために、それは通常、標準的な薬務に従って医薬組成物として製剤化される。本発明のこの態様によれば、薬学的に許容し得る希釈剤又は担体と共に本発明の化合物を含む医薬組成物が提供される。
【０１１０】
典型的な製剤は、本発明の化合物及び担体、希釈剤又は賦形剤を混合することによって調製される。適切な担体、希釈剤及び賦形剤は、当業者に周知であり、そして炭水化物、ロウ、水溶性及び／又は水膨潤性ポリマー、親水性又は疎水性材料、ゼラチン、油、溶媒、水等などの材料を含む。使用される特定の担体、希釈剤又は賦形剤は、本発明の化合物が適用される手段及び目的に依存するだろう。溶媒は一般に、当業者によって哺乳動物に安全に投与されると認識されている（ＧＲＡＳ）溶媒に基づいて選択される。一般に、安全な溶媒は、水などの無毒の水性溶媒及び水に可溶性又は混和性である他の無毒の溶媒である。適切な水性溶媒は、水、エタノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ３００）等及びそれらの混合物を含む。製剤はまた、薬物（すなわち、本発明の化合物又はその医薬組成物）の洗練された体裁を提供するために、又は医薬品（すなわち、医薬）の製造を補助するために、１つ以上の緩衝剤、安定化剤、界面活性剤、湿潤剤、滑沢剤、乳化剤、懸濁化剤、防腐剤、抗酸化剤、混濁剤（opaquing agent）、流動促進剤、加工助剤、着色剤、甘味料、芳香剤、香味剤及び他の公知の添加物を含んでもよい。
【０１１１】
製剤は、従来の溶解及び混合手順を使用して調製されてもよい。例えば、バルク原薬（すなわち、本発明の化合物又はその化合物の安定化形態（例えば、シクロデキストリン誘導体又は他の公知の複合体形成剤との複合体）を、先に記載した賦形剤の１つ以上の存在下で好適な溶媒に溶解させる。本発明の化合物は典型的には、薬物の容易に制御可能な投与量を提供するために、そして、患者が処方された処方計画を順守できるようにするために、医薬投与形態に製剤化される。
【０１１２】
適用のための医薬組成物（又は製剤）は、薬物を投与するために使用される方法に依存して、様々な方法で包装されてもよい。一般に、販売商品は、適切な形態の医薬製剤が中に入れられた容器を含む。適切な容器は、当業者に周知であり、そしてボトル（プラスチック及びガラス製）、サッシェ、アンプル、プラスチック袋、金属シリンダー等などの材料を含む。容器はまた、包装の内容物への軽率な接触を防止するための不正開封防止構成部を含んでもよい。加えて、容器は、容器の内容物を記載しているラベルが貼られている。そのラベルはまた、適切な注意事項を含んでもよい。
【０１１３】
本発明の化合物の医薬製剤は、種々の投与経路及びタイプ用に調製されてもよい。例えば、所望の程度の純度を有する式Ｉの化合物は場合により、凍結乾燥製剤、破砕された粉末、又は水溶液の形態で、薬学的に許容し得る希釈剤、担体、賦形剤又は安定剤と共に混合されてもよい（Remington’s Pharmaceutical Sciences (1980) 16th edition, Osol, A. Ed.）。製剤化は、周囲温度、適切なｐＨ及び所望の程度の純度で、生理学的に許容し得る担体、すなわち、用いられる投与量及び濃度でレシピエントに非毒性である担体と混合することにより行われてもよい。製剤のｐＨは、主に、化合物の具体的な用途及び濃度に依存するが、約３〜約８の範囲であってよい。ｐＨ５の酢酸緩衝液中での製剤化は、適切な実施態様である。
【０１１４】
本化合物は通常、固体組成物、凍結乾燥製剤として、又は水溶液として保存され得る。
【０１１５】
本発明の医薬組成物は、ある方法で、すなわち、好適な医療行為に合致する、投与の量、濃度、スケジュール、経過、ビヒクル及び経路で、製剤化され、調薬され、そして投与されるであろう。この文脈において考慮される要素は、処置される特定の障害、処置される特定の哺乳動物、個々の患者の臨床状態、障害の原因、薬剤の送達部位、投与の方法、投与のスケジューリング、及び医師に公知の他の要素を含む。投与されるべき化合物の「治療有効量」は、そのような考慮事項によって決定されるであろうし、過剰増殖障害を寛解させるか、又は処置するために必要な最少量である。
【０１１６】
一般命題として、非経口で投与される阻害剤の用量あたりの初期薬学的有効量は、１日あたり約０．０１〜１００mg／患者体重kg、すなわち約０．１〜２０mg／患者体重kgの範囲であり、使用される化合物の典型的な初期範囲は、０．３〜１５mg／kg／日であろう。
【０１１７】
許容し得る希釈剤、担体、賦形剤及び安定剤は、用いられる投与量及び濃度でレシピエントに無毒であり、そしてリン酸、クエン酸及び他の有機酸などの緩衝液；アスコルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤；防腐剤（例えば、塩化オクタデシルジメチルベンジルアンモニウム；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム；フェノール、ブチル又はベンジルアルコール；メチル又はプロピルパラベンなどのアルキルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３−ペンタノール；及びｍ−クレゾール）；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、又は免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、又はリジンなどのアミノ酸；グルコース、マンノース又はデキストリンを含む単糖類、二糖類又は他の炭水化物；ＥＤＴＡなどのキレート化剤；ショ糖、マンニトール、トレハロース又はソルビトールなどの糖；ナトリウムなどの塩形成対イオン；金属錯体（例えば、Ｚｎ−タンパク質錯体）；及び／又はTWEEN（商標）、PLURONICS（商標）又はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの非イオン性界面活性剤を含む。活性医薬成分はまた、例えば、コロイド薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフェア、マイクロエマルション、ナノ粒子及びナノカプセル）で、又はマクロエマルション中、コアセルベーション技術によって又は界面重合によって調製されたマイクロカプセル、例えば、それぞれヒドロキシメチルセルロース又はゼラチンマイクロカプセル及びポリ−（メチルメタシラート）マイクロカプセル（poly-(methylmethacylate)microcapsules）内に、封入されてもよい。このような技術は、Remington’ s Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980)に開示されている。
【０１１８】
式Ｉの化合物の徐放性製剤が調製されてもよい。徐放性製剤の適切な例は、式Ｉの化合物を含有する固体疎水性ポリマーの半透性マトリクスを含むが、そのマトリクスは、成形品、例えば、フィルム又はマイクロカプセルの形態である。徐放性マトリクスの例は、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリラート）、又はポリ（ビニルアルコール））、ポリ乳酸（US 3773919）、Ｌ−グルタミン酸とγ−エチル−Ｌ−グルタミン酸のコポリマー、非分解性エチレン−酢酸ビニル、分解性乳酸−グリコール酸コポリマー、例えば、LUPRON DEPOT（商標）（乳酸−グリコール酸コポリマーと酢酸ロイプロリドからなる注射用ミクロスフェア）及びポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸を含む。
【０１１９】
製剤は、本明細書に詳述される投与経路に適するものを含む。製剤は、好都合に単位投与形態で提示されてもよく、そして薬学の分野において周知の方法のいずれかによって調製されてもよい。技術及び製剤は概して、Remington’s Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Co., Easton, PA）に見いだされる。このような方法は、活性成分を１つ以上の補助成分を構成する担体と混ぜ合わせる工程を含む。一般に、製剤は、活性成分を液体担体又は微粉末固体担体又はその両方と均一かつ密接に混ぜ合わせ、そして次に必要であれば、生成物を成形することによって調製される。
【０１２０】
経口投与に適する式Ｉの化合物の製剤は、所定量の式Ｉの化合物をそれぞれ含有する、丸剤、カプセル剤、カシェ剤又は錠剤などの分割単位として調製されてもよい。圧縮錠剤は、場合により結合剤、滑沢剤、不活性希釈剤、防腐剤、表面活性剤又は分散剤と混合された、粉末又は顆粒などの自由流動性形態の活性成分を適切な機械で圧縮することによって調製されてもよい。成型錠剤は、不活性の液体希釈剤で湿らせた粉末活性成分の混合物を適切な機械で成型することによって作製されてもよい。錠剤は、場合により、コーティングされるか、又は切り込みを入れられてもよく、そして場合により、そこから活性成分の持続放出又は徐放を提供するように製剤化される。錠剤、トローチ剤、ロゼンジ剤、水性若しくは油性懸濁剤、分散性粉剤若しくは顆粒剤、乳剤、硬質若しくは軟質カプセル剤、例えばゼラチンカプセル剤、シロップ剤又はエリキシル剤が、経口使用のために調製されてもよい。経口使用に意図される式Ｉの化合物の製剤は、医薬組成物の製造のための当技術分野で公知の任意の方法に従って調製されてもよく、そしてそのような組成物は、口当たりのいい製剤を提供するために、甘味剤、香味料、着色剤及び保存剤を含む１つ以上の薬剤を含有してもよい。活性成分を錠剤の製造に適する無毒の薬学的に許容し得る賦形剤との混合物で含有する錠剤が許容され得る。これらの賦形剤は、例えば、炭酸カルシウム若しくはナトリウム、乳糖、リン酸カルシウム若しくはナトリウムなどの不活性希釈剤；トウモロコシデンプン又はアルギン酸などの造粒剤及び崩壊剤；デンプン、ゼラチン又はアラビアゴムなどの結合剤；並びにステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸又はタルクなどの滑沢剤であってよい。錠剤は、コーティングされていなくてもよく、あるいは胃腸管内での崩壊及び吸着を遅延させるためにマイクロカプセル化を含む公知の技術でコーティングされ、それによって長期にわたり持続作用を提供してもよい。例えば、モノステアリン酸グリセリル又はジステアリン酸グリセリルなどの時間遅延材料が、単独で又はロウと共に、用いられてもよい。
【０１２１】
眼又は他の外部組織、例えば、口腔及び皮膚の処置のために、製剤は、好ましくは、活性成分を、例えば０．０７５〜２０％w/wの量で含有する局所軟膏剤又はクリーム剤として適用される。軟膏剤に製剤化される場合、活性成分は、パラフィン系又は水混和性の軟膏基剤のいずれかと共に用いられてよい。代替的に、活性成分は、水中油型クリーム基剤を用いてクリーム剤に製剤化されてもよい。所望であれば、クリーム基剤の水相は、多価アルコール、すなわち、２個以上のヒドロキシル基を有するアルコール、例えば、プロピレングリコール、ブタン １，３−ジオール、マンニトール、ソルビトール、グリセリン及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ４００を含む）並びにそれらの混合物を含んでもよい。局所製剤は、望ましくは、皮膚又は他の患部を通る活性成分の吸収又は浸透を増強する化合物を含んでもよい。このような皮膚浸透増強剤の例は、ジメチルスルホキシド及び関連類似体を含む。本発明の乳剤の油相は、公知の成分から公知の方法で構成されてもよい。この相が、単に乳化剤だけを含む場合もあるが、それは望ましくは、少なくとも１つの乳化剤と、脂肪若しくは油、又は脂肪及び油の両方との混合物を含む。好ましくは、親水性乳化剤が、安定剤として作用する脂溶性乳化剤と一緒に含まれる。また、油及び脂肪の両方を含むことが好ましい。併せて、乳化剤は、安定剤と共に又は安定剤を含まず、いわゆる乳化ロウを構成し、そしてこのロウは、油及び脂肪と一緒に、クリーム製剤の油性分散相を形成するいわゆる乳化軟膏基剤を構成する。本発明の製剤における使用に適する乳化剤及びエマルション安定剤は、Tween（登録商標）60、Span（登録商標）80、セトステアリルアルコール、ベンジルアルコール、ミリスチルアルコール、モノステアリン酸グリセリル及び硫酸ラウリルナトリウムを含む。
【０１２２】
式Ｉ化合物の水性懸濁剤は、活性物質を水性懸濁剤の製造に適する賦形剤との混合物で含有する。そのような賦形剤は、懸濁化剤、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、クロスカルメロース、ポビドン、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカンタゴム及びアカシアゴム、並びに分散剤又は湿潤剤、例えば、天然に存在するリン脂質（例えば、レシチン）、アルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物（例えば、ステアリン酸ポリオキシエチレン）、エチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物（例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール）、エチレンオキシドと脂肪酸及び無水ヘキシトール由来の部分エステルとの縮合生成物（例えば、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン）を含む。水性懸濁剤はまた、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル若しくはｎ−プロピルなどの１つ以上の防腐剤、１つ以上の着色剤、１つ以上の香味料及び１つ以上の甘味剤、例えば、ショ糖又はサッカリンを含有してもよい。
【０１２３】
式Ｉの化合物の医薬組成物は、無菌の注射用水性又は油性懸濁剤などの無菌の注射用製剤の形態であってもよい。この懸濁剤は、先に述べた適切な分散剤又は湿潤剤及び懸濁化剤を使用して、公知の技術に従って製剤化されてもよい。無菌の注射用製剤はまた、無毒の非経口的に許容し得る希釈剤又は溶媒中の無菌の注射液剤又は懸濁剤、例えば、１，３−ブタンジオール中の液剤であるか、又は凍結乾燥粉末として調製されてもよい。中でも、用いられてよい許容し得るビヒクル及び溶媒は、水、リンガー溶液及び等張塩化ナトリウム溶液である。加えて、無菌の不揮発性油は、溶媒又は懸濁媒体として従来的に用いられてよい。この目的のために、合成モノグリセリド又はジグリセリドを含む任意の低刺激性不揮発性油が、用いられてもよい。加えて、オレイン酸などの脂肪酸も同様に、注射剤の調製に使用されてもよい。
【０１２４】
単回投与形態を作製するために担体材料と合わせてもよい活性成分の量は、処置される宿主及び特定の投与方法に依存して変化するだろう。例えば、ヒトへの経口投与に意図された持続放出製剤は、全組成物の約５〜約９５％（重量：重量）で変化してもよい適切かつ好都合な量の担体材料と共に調合される、約１〜１０００mgの活性物質を含有してもよい。医薬組成物は、投与のために容易に測定可能な量を提供するように調製され得る。例えば、静脈点滴用に意図された水性液剤は、約３０mL／時の速度で適切な容量の点滴が起こり得るように、液剤１ミリリットル当たり約３〜５００μgの活性成分を含有してよい。
【０１２５】
非経口投与に適する製剤は、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤及び意図されるレシピエントの血液と製剤を等張にする溶質を含有してもよい水性及び非水性の無菌注射液剤；並びに懸濁化剤及び増粘剤を含んでもよい水性及び非水性の無菌懸濁剤を含む。
【０１２６】
眼への局所投与に適する製剤はまた、活性成分が適切な担体、特に活性成分用の水性溶媒に溶解されるか又は懸濁される、点眼薬を含む。活性成分は、好ましくは、そのような製剤中に、約０．５〜２０％w/w、例えば、約０．５〜１０％w/w、例えば、約１．５％w/wの濃度で存在する。
【０１２７】
口腔内の局所投与に適する製剤は、活性成分を香味基剤、通常ショ糖及びアラビアゴム又はトラガカンタに含むロゼンジ剤；活性成分をゼラチン及びグリセリン又はショ糖及びアラビアゴムなどの不活性基剤中に含むドロップ剤（pastilles）；並びに活性成分を適切な液体担体中に含む洗口剤を含む。
【０１２８】
直腸投与用の製剤は、例えば、ココアバター又はサリチラートを含む適切な基剤を用いた坐剤として提示されてもよい。
【０１２９】
肺内又は経鼻投与に適する製剤は、例えば、０．１〜５００ミクロンの範囲の粒径（０．５、１、３０ミクロン、３５ミクロン等などの増大するミクロン単位で０．１〜５００ミクロンの範囲の粒径を含む）を有し、これは、肺胞嚢に達するように鼻腔を通る急速吸入によって、又は口腔を通る吸入によって投与される。適切な製剤は、活性成分の水性又は油性液剤を含む。エアロゾル又は乾燥粉剤の投与に適する製剤は、従来の方法に従って調製されてもよく、そして他の治療剤、例えば後述するような障害の治療又は予防においてこれまで使用されてきた化合物と共に送達されてもよい。
【０１３０】
膣内投与に適する製剤は、活性成分に加えて、当技術分野において適切であることが公知の担体を含有するペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォーム又はスプレー製剤として提示されてもよい。
【０１３１】
製剤は、単位用量又は多用量容器、例えば、密封アンプル及びバイアル内に包装されてもよく、そして使用直前に注射用の無菌の液体担体、例えば水の添加のみを必要とするフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保存されてもよい。即時注射液剤及び懸濁剤は、先に記載した種類の無菌の粉剤、顆粒剤及び錠剤から調製される。好ましい単位投与製剤は、本明細書において上述したような活性成分の１日用量又は単位１日分割用量、又はその適切な画分を含有するものである。
【０１３２】
本発明はさらに、先に定義したとおりの少なくとも１種の活性成分をそのための獣医用担体と一緒に含む獣医用組成物を提供する。獣医用担体は、組成物を投与する目的のために有用な物質であり、そして別の面では獣医学分野において不活性又は許容し得、かつ活性成分と融和性の、固体、液体又は気体材料であってよい。これらの獣医用組成物は、非経口的、経口的又は任意の他の所望の経路によって投与されてもよい。
【０１３３】
併用療法
式Ｉの化合物は、炎症又は過剰増殖障害（例えば、癌）などの本明細書に記載される疾患又は障害の処置のために、単独で、又は追加の治療剤と組み合わせて用いられてもよい。特定の実施態様で、式Ｉの化合物は、医薬組み合わせ製剤又は併用療法としての投与計画において、抗炎症性若しくは抗過剰増殖特性を有するか、又は炎症、免疫応答障害若しくは過剰増殖障害（例えば、癌）を処置するために有用な、追加の第二の治療化合物と組み合わされる。追加の治療用物質は、Ｂｃｌ−２阻害剤、ＪＡＫ阻害剤、抗炎症剤、免疫調節剤、化学療法剤、アポトーシス向上剤、向神経因子、心血管疾患を処置するための薬剤、肝疾患を処置するための薬剤、抗ウイルス剤、血液障害を処置するための薬剤、糖尿病を処置するための薬剤、及び免疫不全障害を処置するための薬剤であってよい。第二の治療剤は、ＮＳＡＩＤ抗炎症剤であってもよい。第二の治療剤は、化学療法剤であってもよい。医薬組み合わせ製剤又は投与計画の第二の化合物は、好ましくは、これらが互いに有害な影響を及ぼさないように式Ｉの化合物に相補的な活性を有する。このような化合物は、好適には、意図される目的のために有効な量で組み合わされて存在する。一つの実施態様では、本発明の組成物は、式Ｉの化合物、又はその立体異性体、互変異性体、溶媒和物、代謝物、又は薬学的に許容し得る塩若しくはプロドラッグを、ＮＳＡＩＤなどの治療剤と組み合わせて含む。
【０１３４】
併用療法は、同時又は連続投与計画として投与されてもよい。順次投与される場合、その組み合わせは２回以上の投与で投与されてもよい。併用投与は、分割製剤又は単一の医薬製剤を使用する同時投与、及びどちらかの順序での連続投与を含み、ここで好ましくは、両方（又は全て）の活性剤がその生物学的活性を同時に発揮する期間が存在する。
【０１３５】
上記のいずれの同時投与される薬剤の適切な投与量は、現在使用されているものであり、そして新たに同定された薬剤及び他の治療剤又は処置の組み合わせ作用（相乗作用）に起因して減少されてもよい。
【０１３６】
併用療法は、「相乗作用」を提供することができ、そして「相乗的」、すなわち、活性成分を一緒に使用するときに達成される効果が、化合物を別々に使用することによって生じる効果の合計を超えることを証明することもできる。相乗効果は、活性成分が：（１）合わせた単位投与量製剤で同時処方され、そして同時に投与されるか又は送達されるか；（２）別個の製剤として交互に又は並行して送達されるか；あるいは（３）いくつかの他の投与計画によるときに、実現されることもできる。交互療法で送達されるとき、相乗効果は、化合物が、例えば、別個の注射器中の異なる注射剤、別個の丸剤若しくはカプセル剤、又は別個の輸液剤によって、順次投与されるか又は送達されるときに実現されてもよい。一般に、交互療法の間、各活性成分の有効投与量は、順次、すなわち逐次投与されるが、それに反して併用療法では、有効投与量の２つ以上の活性成分が、一緒に投与される。
【０１３７】
治療の特定の実施態様においては、式Ｉの化合物、又はその立体異性体、互変異性体、溶媒和物、代謝物、又は薬学的に許容し得る塩もしくはプロドラッグは、本明細書に記載されるものなどの他の治療薬、ホルモン剤又は抗体薬と組み合わされてもよく、さらには、外科治療及び放射線治療と組み合わされてもよい。したがって、本発明に従う併用療法は、少なくとも１つの式Ｉの化合物、又はその立体異性体、互変異性体、溶媒和物、代謝物、又は薬学的に許容し得る塩若しくはプロドラッグの投与、及び、少なくとも１つの他の癌処置法の使用を含む。式Ｉの化合物及び他の薬学的に活性な治療剤の量、並びに投与の相対的タイミングは、所望の併用療法効果を達成するために選択されるであろう。
【０１３８】
式Ｉの化合物の代謝物
また、本明細書に記載される式Ｉのインビボ代謝生成物は、本発明の範囲内に包含される。そのような生成物は、例えば、投与された化合物の酸化、還元、加水分解、アミド化、脱アミド化、エステル化、脱エステル化、酵素的開裂等から生じることもできる。したがって、本発明は、本発明の化合物をその代謝生成物を生成するために十分な期間、哺乳動物と接触させることを含む方法によって生成される化合物を含む、式Ｉの化合物の代謝物を含む。
【０１３９】
代謝生成物は典型的には、本発明の化合物の放射標識（例えば、１４Ｃ又は３Ｈ）同位体を調製し、それをラット、マウス、モルモット、サルなどの動物に、又はヒトに、検出可能な用量（例えば、約０．５mg／kg超）で非経口的に投与し、十分な時間（典型的には、約３０秒〜３０時間）代謝させ、そしてその変換生成物を尿、血液又は他の生物試料から単離することによって同定される。これらの生成物は、それらが標識されているので容易に単離される（他のものは、代謝物中に残存するエピトープに結合可能な抗体の使用によって単離される）。代謝物の構造は、従来法、例えば、ＭＳ、ＬＣ／ＭＳ又はＮＭＲ分析によって決定される。一般に、代謝物の分析は、当業者に周知の従来の薬物代謝研究と同様にして行われる。代謝生成物は、それらが別様にインビボで見いだされない限り、本発明の化合物の治療投薬のための診断アッセイにおいて有用である。
【０１４０】
製造品
本発明の別の実施態様では、先に記載した疾患及び障害の処置のために有用な材料を含む製造品又は「キット」が提供される。一つの実施態様では、キットは、式Ｉの化合物、又はその立体異性体、互変異性体、溶媒和物、代謝物、又は薬学的に許容し得る塩若しくはプロドラッグを含む容器を含む。キットはさらに、容器上に、又は容器に関連してラベル又は添付文書を含んでもよい。用語「添付文書」は、治療薬品の適応症、使用法、投与量、投与、禁忌、及び／又は使用に関する警告についての情報を含む、このような治療薬品の商業用パッケージ内に慣例上含まれる説明書を指すために使用される。適切な容器は、例えば、ボトル、バイアル、シリンジ、ブリスター包装等を含む。容器は、種々の材料、例えば、ガラス又はプラスチックから形成されてもよい。容器は、病状を処置するために有効な式Ｉの化合物又はその製剤を保持することもでき、そして無菌アクセスポートを有してもよい（例えば、容器は、皮下注射針による穿孔可能なストッパーを有する静脈注射液剤バッグ又はバイアルであってもよい）。組成物中の少なくとも１つの活性剤は、式Ｉの化合物である。ラベル又は添付文書は、本組成物が癌などの選択病状を処置するために使用されることを表示する。加えて、ラベル又は添付文書は、処置されるべき患者は、過剰増殖障害、神経変性、心肥大、疼痛、偏頭痛又は神経外傷疾患若しくはイベントなどの障害を有する者であることを表示してもよい。一つの実施態様では、ラベル又は添付文書は、式Ｉの化合物を含む組成物が、異常な細胞成長に起因する障害を処置するために使用され得ることを表示する。ラベル又は添付文書はまた、本組成物が他の障害を処置するために使用され得ることを表示してもよい。代替的又は追加的に、製造品は、薬学的に許容し得る緩衝液、例えば、注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝食塩水、リンガー溶液及びデキストロース溶液を含む、第二の容器をさらに含んでもよい。それは、他の緩衝液、希釈剤、フィルター、針及びシリンジを含む、商業上及び使用者の見地から望ましい他の材料をさらに含んでもよい。
【０１４１】
キットはさらに、式Ｉの化合物及び存在する場合は第二の医薬製剤の投与のための指示を含んでもよい。例えば、キットが、式Ｉの化合物を含む第一の組成物及び第二の医薬製剤を含む場合、キットはさらに、第一及び第二の医薬組成物のそれを必要としている患者への同時、逐次又は別個の投与のための指示を含んでもよい。
【０１４２】
別の実施態様では、キットは、式Ｉの化合物の固体経口形態、例えば錠剤又はカプセル剤の送達に適する。そのようなキットは好ましくは、多数の単位投与量を含む。そのようなキットは、その意図される使用の順番に向けられた投与量を有するカードを含むことができる。そのようなキットの例は、「ブリスター包装」である。ブリスター包装は、包装産業において周知であり、そして医薬単位投与形態を包装するために広く使用される。所望ならば、記憶補助が、例えば、処置スケジュールにおいて投与量が投与され得る日を指定する、数、文字若しくは他の印の形態で、又はカレンダーインサートを用いて提供され得る。
【０１４３】
一つの実施態様によれば、キットは、（ａ）中に含まれている式Ｉの化合物を有する第一の容器；及び場合により（ｂ）中に含まれている第二の医薬製剤を有する第二の容器（ここで、第二の医薬製剤は、抗過剰増殖活性を有する第二の化合物を含む）を含んでもよい。代替的又は追加的に、キットは、薬学的に許容し得る緩衝液、例えば、注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝食塩水、リンガー溶液及びデキストロース溶液を含む、第三の容器をさらに含んでもよい。それは、他の緩衝液、希釈剤、フィルター、針及びシリンジを含む、商業上及び使用者の見地から望ましい他の材料をさらに含んでもよい。
【０１４４】
キットが式Ｉの組成物及び第二の治療剤を含む特定の他の実施態様において、キットは、分割ボトル又は分割ホイル小包などの別個の組成物を含むための容器を含んでもよいが、しかしながら別個の組成物は、単一の分割されていない容器の中に含まれていてもよい。典型的には、キットは、別個の成分の投与のための指示を含む。このキット形態は、別個の成分が好ましくは異なる投与形態で投与される（例えば、経口及び非経口）か、又は異なる投与間隔で投与されるときに、あるいは組合せの個々の成分のタイトレーションが、処方医師によって望まれるときに、特に有利である。
【０１４５】
式Ｉ化合物の調製
式Ｉの化合物は、特に本明細書に含まれる記載に照らして化学技術において周知の方法、及びComprehensive Heterocyclic Chemistry II, Editors Katritzky and Rees, Elsevier, 1997, e.g. Volume 3; Liebigs Annalen der Chemie, (9):1910-16, (1985); Helvetica Chimica Acta, 41:1052-60, (1958); Arzneimittel-Forschung, 40(12):1328-31, (1990)（これらの各々は参照により明白に組み入れられる）において記載されている他のヘテロ環についての方法に類似する方法を含む合成経路によって合成されてもよい。出発物質は、一般に、Aldrich Chemicals（Milwaukee, WI）などの販売業者から入手可能であるか、又は当業者に周知の方法を使用して容易に調製される（例えば、Louis F. Fieser and Mary Fieser, Reagents for Organic Synthesis, v. 1-23, Wiley, N.Y. (1967-2006 ed.)、又はBeilsteins Handbuch der organischen Chemie, 4, Aufl. ed. Springer-Verlag, Berlin（補遺を含む）（Beilsteinオンラインデータベースからも入手可能）に概して記載されている方法によって調製される）。
【０１４６】
式Ｉ化合物を合成する際に有用な合成化学変換及び保護基方法論（保護及び脱保護）並びに必要な試薬及び中間体は、当技術分野において公知であり、そして例えば、R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); T. W. Greene and P. G .M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed., John Wiley and Sons (1999);及びL. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995)及びその後の版において記載されているものを含む。
【０１４７】
式Ｉの化合物は、１種ずつ又は少なくとも２種、例えば、５〜１，０００種の化合物、又は１０〜１００種の化合物を含む、化合物ライブラリーとして調製されてもよい。式Ｉの化合物のライブラリーは、コンビナトリアル「分割及び混合（split and mix）」アプローチによって、又は液相若しくは固相化学のいずれかを使用した多段階並行合成によって、当業者に公知の手順により調製されてもよい。したがって、本発明のさらなる態様によれば、少なくとも２種の化合物、又はその薬学的に許容され得る塩を含む化合物ライブラリーが提供される。
【０１４８】
実施例は、式Ｉ化合物を調製するための例示的方法を提供する。当業者は、他の合成経路が式Ｉ化合物を合成するために使用されてもよいことを理解するであろう。特定の出発物質及び試薬が図面及び実施例において示され、そして考察されているが、他の出発物質及び試薬が、種々の誘導体及び／又は反応条件を提供するために容易に置き換えられ得る。加えて、記載される方法によって調製される例示的化合物の多くが、当業者に周知の従来化学を使用し、本開示に照らしてさらに改変され得る。
【０１４９】
式Ｉの化合物を調製する際に、中間体の遠隔官能基（例えば、第一級又は第二級アミン）の保護が必要な場合がある。そのような保護の必要性は、遠隔官能基の性質及び調製方法の条件に依存して変わるであろう。適切なアミノ保護基は、アセチル、トリフルオロアセチル、ｔ−ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）、ベンジルオキシカルボニル（ＣＢｚ）及び９−フルオレニルメチレンオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）を含む。そのような保護の必要性は、当業者により容易に決定される。保護基及びそれらの使用の一般的な説明については、T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York, 1991を参照のこと。
【０１５０】
式Ｉ化合物の調製のために有用な実験手順、中間体及び試薬は、参照によりその全体が組み入れられるWO2011/140488; US 2012/0010191; WO2013/067274; US 2013/0116235; WO2013/067277; US 2013/0116245; WO2013/067260; US 2013/0116262; WO2013/067264; US 2013/0116246において見いだされ得る。
【０１５１】
式Ｉ化合物１０１〜１４６の例示的実施態様は、以下の実施例においてより完全に記載されており、そして他の式Ｉ化合物の調製のために有用である場合がある。
【０１５２】
種々の低原子価の、Ｐｄ（ＩＩ）及びＰｄ（０）パラジウム触媒、プレ触媒並びにリガンドが、鈴木又は鈴木／宮浦カップリング工程（Miyaura, N. (2002) Top. Curr. Chem., 219:11-59; Kotha, S. et al (2002) Tetrahedron, 58:9633-9695; Bellina, F. et al (2004) Synthesis, 15:2419-2440; Hassan, J. et al (2002) Chem. Rev. 102:1359-1470; Littke, A. F. et al (2002) Angew. Chem., Int. Ed. 41:4176-4211; Barder, T. E. et al (2005) J. Am. Chem. Soc., 127:4685-4696; Walker, S. D. et al (2004) Angew. Chem., Int. Ed., 43:1871-1876; Yin, J. et al (2002) J. Am. Chem. Soc., 124:1162-1163）の間に使用され得、それはＰｄＣｌ２｛ＰｔＢｕ２（ｐ−Ｒ−Ｐｈ）｝２（Guram et al (2006) Organic Letters 8(9):1787-1789）、ＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２、Ｐｄ（ｔ−Ｂｕ）３、ＰｄＣｌ２  ｄｐｐｆ  ＣＨ２Ｃｌ２、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４、Ｐｄ（ＯＡｃ）２／ＰＰｈ３、Ｃｌ２Ｐｄ［（Ｐｅｔ３）］２、Ｐｄ（ＤＩＰＨＯＳ）２、Ｃｌ２Ｐｄ（Ｂｉｐｙ）、［ＰｄＣｌ（Ｐｈ２ＰＣＨ２ＰＰｈ２）］２、Ｃｌ２Ｐｄ［Ｐ（ｏ−ｔｏｌ）３］２、Ｐｄ２（ｄｂａ）３／Ｐ（ｏ−ｔｏｌ）３、Ｐｄ２（ｄｂａ）／Ｐ（フリル）３、Ｃｌ２Ｐｄ［Ｐ（フリル）３］２、Ｃｌ２Ｐｄ（ＰＭｅＰｈ２）２、Ｃｌ２Ｐｄ［Ｐ（４−Ｆ−Ｐｈ）３］２、Ｃｌ２Ｐｄ［Ｐ（Ｃ６Ｆ６）３］２、Ｃｌ２Ｐｄ［Ｐ（２−ＣＯＯＨ−Ｐｈ）（Ｐｈ）２］２、Ｃｌ２Ｐｄ［Ｐ（４−ＣＯＯＨ−Ｐｈ）（Ｐｈ）２］２、並びにカプセル化触媒Pd EnCat（商標）30、Pd EnCat（商標）TPP30、及びPd(II)EnCat（商標）BINAP30（US2004/0254066）を含む。
【０１５３】
低原子価の、Ｐｄ（ＩＩ）及びＰｄ（０）パラジウム触媒、プレ触媒、並びにリガンドの例示的実施態様は、市販されている（Johnson Matthey, West Deptford, NJ; Sigma-Aldrich Fine Chemicals、及び他の供給業者）、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２，４，６−トリイソプロピルビフェニル（X-Phos, CAS Reg. No. 564483-18-7）及びクロロ（２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，４’，６’−トリイソプロピル−１，１’−ビフェニル）［２−（２’−アミノ−１，１’−ビフェニル）］パラジウム（ＩＩ）（X-Phosアミノビフェニルパラジウムクロリドプレ触媒, CAS Reg. No. 1310584-14-5）を含む、「Ｂｕｃｈｗａｌｄ」触媒、パラダサイクル（palladacycles）、及びリガンドである。US 7223879, US 6395916, US 6307087を参照のこと。
【０１５４】
分離の方法
式Ｉ化合物を調製する方法において、反応生成物を互いに及び／又は出発物質から分離することが有利であり得る。各工程又は一連の工程の所望の生成物は、当技術分野において一般的な技術によって所望の均一度に分離される及び／又は精製される。典型的に、このような分離は、多相抽出、溶媒若しくは溶媒混合物からの結晶化、蒸留、昇華、又はクロマトグラフィーを含む。クロマトグラフィーは、例えば、逆相及び順相；サイズ排除；イオン交換；高、中、及び低圧液体クロマトグラフィーの方法及び装置；小規模分析；疑似移動床式（ＳＭＢ）及び分取薄層又は厚層クロマトグラフィー、並びに小規模薄層及びフラッシュクロマトグラフィーの技術を含む、任意の数の方法を含み得る。
【０１５５】
分離方法の別の分類は、混合物を、所望の生成物、未反応の出発物質、反応副生成物等に結合するか、又は別の方法でこれらを分離可能にするように選択された試薬で処理することを含む。このような試薬は、例えば、活性炭、分子ふるい、イオン交換媒体等の吸着剤又は吸収剤を含む。代替的に、該試薬は、塩基性物質の場合は酸、酸性物質の場合は塩基、抗体などの結合試薬、結合タンパク質、クラウンエーテルなどの選択的キレート剤、液体／液体イオン抽出試薬（ＬＩＸ）等であり得る。分離の適切な方法の選択は、関与する材料の性質、例えば、蒸留及び昇華においては沸点及び分子量、クロマトグラフィーにおいて極性官能基の存在又は非存在、多相抽出においては酸性及び塩基性媒体中の材料の安定性等に依存する。
【０１５６】
ジアステレオマー混合物は、当業者に周知の方法によって、例えば、クロマトグラフィー及び／又は分別結晶により、それらの物理化学的相違に基づいて、それらの個々のジアステレオマーに分離され得る。エナンチオマーは、適切な光学活性化合物（例えば、キラルアルコール又はMosher酸塩化物などの不斉補助剤）との反応によってエナンチオマー混合物をジアステレオマー混合物に変換し、ジアステレオマーを分離し、そして、個々のジアステレオ異性体を対応する純粋なエナンチオマーに変換する（例えば、加水分解する）ことによって分離され得る。また、本発明の化合物のいくつかは、アトロプ異性体（例えば、置換ビアリール）であってもよく、そして、本発明の一部としてみなされる。エナンチオマーはまた、キラルＨＰＬＣカラムの使用によって分離され得る。
【０１５７】
実質的にその立体異性体を含まない単一の立体異性体、例えばエナンチオマーは、光学活性分割剤を使用するジアステレオマーの形成などの方法を使用するラセミ混合物の分割によって得られてもよい（Eliel, E. and Wilen, S. “Stereochemistry of Organic Compounds,” John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994; Lochmuller, C. H., (1975) J. Chromatogr., 113(3):283-302）。本発明のキラル化合物のラセミ混合物は、以下を含む任意の適切な方法によって分離し、そして単離され得る：（１）キラル化合物を用いるイオン性ジアステレオマー塩の形成、及び分別結晶化又は他の方法による分離、（２）キラル誘導体化試薬を用いるジアステレオマー化合物の形成、ジアステレオマーの分離、及び純立体異性体への変換、並びに（３）キラル条件下での実質的に純粋な又は濃縮された立体異性体の直接分離。Drug Stereochemistry, Analytical Methods and Pharmacology,” Irving W. Wainer, Ed., Marcel Dekker, Inc., New York (1993)を参照のこと。
【０１５８】
方法（１）のもとで、ジアステレオマー塩は、ブルシン、キニーネ、エフェドリン、ストリキニーネ、α−メチル−β−フェニルエチルアミン（アンフェタミン）等などのエナンチオマー的に純粋なキラル塩基と、カルボン酸及びスルホン酸などの酸性官能基を有する不斉化合物との反応によって形成され得る。ジアステレオマー塩は、分別結晶化又はイオンクロマトグラフィーによって分離するために誘導されてもよい。アミノ化合物の光学異性体の分離のために、カンファースルホン酸、酒石酸、マンデル酸、又は乳酸などのキラルカルボン酸又はスルホン酸の添加により、ジアステレオマー塩の形成をもたらし得る。
【０１５９】
代替的に、方法（２）によって、分割されるべき基質は、キラル化合物の一方のエナンチオマーと反応されて、ジアステレオマー対を形成する（E. and Wilen, S. “Stereochemistry of Organic Compounds”, John Wiley & Sons, Inc., 1994, p. 322）。ジアステレオマー化合物は、不斉化合物をメンチル誘導体などの鏡像異性的に純粋なキラル誘導体化試薬と反応させ、次いでジアステレオマーを分離し、そして加水分解して、純粋な又は濃縮されたエナンチオマーを生成することによって形成され得る。光学純度を決定する方法は、メンチルエステル、例えば、塩基の存在下での（−）クロロギ酸メンチル、又はMosherエステルである、α−メトキシ−α−（トリフルオロメチル）フェニルアセタート（Jacob III. J. Org. Chem. (1982) 47:4165）などのラセミ混合物のキラルエステルを作製すること、及び２つのアトロプ異性エナンチオマー又はジアステレオマーの存在について１Ｈ ＮＭＲスペクトルを分析することを含む。アトロプ異性化合物の安定なジアステレオマーは、アトロプ異性ナフチル−イソキノリンの分離のための方法（WO96/15111）に従って、順相及び逆相クロマトグラフィーにより分離し、そして単離され得る。方法（３）によって、２つのエナンチオマーのラセミ混合物は、キラル固定相を使用するクロマトグラフィーにより分離され得る（“Chiral Liquid Chromatography” (1989) W. J. Lough, Ed., Chapman and Hall, New York; Okamoto, J. Chromatogr., (1990) 513:375-378）。濃縮又は精製されたエナンチオマーは、旋光性及び円偏光二色性などの、不斉炭素原子を含む他のキラル分子を区別するために使用される方法によって区別され得る。
【０１６０】
実施例
実施例１  三環式アミド、４，４−ジメチル−１，１０−ジアザトリシクロ［６．４．０．０２，６］ドデカ−２（６），７−ジエン−９−オン １ｅの調製
【化６】
0006507234.tif 000020
下記２つの手順は、Organic Preparations and Procedures Int., 29(4):471--498から適用された。ＵＳ８７１６２７４の実施例１０７の下記手順にも従い、磁気撹拌器及び窒素導入口を備えた５００mLの一口丸底フラスコに、ベンゼン（２４０mL）中の２−クロロ−４，４−ジメチルシクロペント−１−エンカルバルデヒド（３８ｇ、２４０mmol）を入れた。溶液に、エトキシカルボニルメチレントリフェニルホスホラン（８４ｇ、２４０mmol）を加えた。混合物を１４時間撹拌した。その後、溶媒を蒸発させ、残留物をヘキサン（２Ｌ）でトリチュレートして生成物を抽出し、ＰＰｈ３副生成物を取り去った。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させて、真空下で濃縮した。残留物を、１００％ヘキサン−１：１ヘキサン／酢酸エチルの勾配を用いたカラムクロマトグラフィーにより精製して、（Ｅ）−エチル ３−（２−クロロ−４，４−ジメチルシクロペント−１−エニル）アクリラート １ａの収率３７％（２０ｇ）を与えた。
【０１６１】
磁気撹拌器及び窒素導入口を備えた２５０mLの一口丸底フラスコに、ＤＭＳＯ（１００mL）中の１ａ（１７ｇ、７４mmol）を入れた。溶液に、アジ化ナトリウム（９．６ｇ、１５０mmol）を加えた。次に、混合物を７５℃に加熱し、８時間撹拌した。ｒｔ（室温）に冷やした後、Ｈ２Ｏ（１００mL）及びＣＨ２Ｃｌ２（２００mL）を加え、有機層を分離した。水層をＣＨ２Ｃｌ２（５０mL）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、真空下で濃縮した。残留物を、１００％ヘキサン−１：１ヘキサン／酢酸エチルの勾配を用いたカラムクロマトグラフィーにより精製して、エチル ５，５−ジメチル−１，４，５，６−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］ピロール−２−カルボキシラート １ｂの収率３７％（５．７ｇ）を与えた。
【０１６２】
磁気撹拌器及び窒素導入口を備えた２５０mLの一口丸底フラスコに、ＤＭＦ（５７mL）中の１ｂ（６．２ｇ、３０mmol）を入れた。溶液に、ＮａＨ（鉱油中の８０％分散液、１．２６ｇ、４２．１mmol）を加えた。得られた混合物を室温で９０分間撹拌した。その後、ブロモアセトニトリル（２．９４mL、４２mmol）を加えた。混合物を１４時間撹拌した。その後、水（１００mL）及び酢酸エチル（２００mL）を加え、有機層を分離した。水層を酢酸エチル（２×５０mL）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、エチル １−（シアノメチル）−５，５−ジメチル−１，４，５，６−テトラヒドロシクロ−ペンタ［ｂ］ピロール−２−カルボキシラート １ｃの収率９５％（７ｇ）を与えた。
【０１６３】
５００mLのＰａｒｒリアクターボトルを、窒素でパージし、１０％パラジウム炭素（５０％湿潤、２．０ｇ乾燥重量）、１ｃ（４．５ｇ、１８mmol）、１２％塩酸（９．２mL、３７mmol）、酢酸エチル（８０mL）及びエタノール（５２mL）を入れた。ボトルをＰａｒｒ水素化装置に取り付け、脱気し、５０psiの圧力まで水素ガスを入れて、６時間振とうした。その後、水素を脱気し、窒素をボトルに入れた。セライト（登録商標）５２１（１０．０ｇ）を加え、混合物をセライト（登録商標）５２１のパッドで濾過した。フィルターケーキをエタノール（２×５０mL）で洗浄し、合わせた濾液を減圧下で蒸発乾固した。粗残留物、エチル １−（２−アミノエチル）−５，５−ジメチル−１，４，５，６−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］ピロール−２−カルボキシラート塩酸塩 １ｄを、さらに精製することなく次の工程に供した。
【０１６４】
磁気撹拌器及び窒素導入口を備えた１００mLの一口丸底フラスコを、窒素でパージし、粗１−（２−アミノエチル）−５，５−ジメチル−１，４，５，６−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］ピロール−２−カルボキシラート塩酸塩 １ｄ（〜１８mmol）、ナトリウムエトキシド（６．２ｇ、９２mmol）及びエタノール（１２０mL）を入れた。混合物を５５℃で一晩撹拌した。その後、反応混合物を減圧下で濃縮し、残留物を酢酸エチル（２００mL）と水（１００mL）に分配した。溶液を濾過した。固体を酢酸エチル（１５mL）で洗浄し、所望の生成物１０７ｅ（８５０mg）を与えた。有機層を分離し、水層を酢酸エチル（２×１００mL）で抽出した。合わせた有機層を、硫酸ナトリウムで乾燥させ、ほぼ乾燥するまで減圧下で濃縮した。溶液を濾過し、固体（１．４４ｇ）を酢酸エチル（１５mL）で洗浄した。合わせた固体を真空下で乾燥させて、４，４−ジメチル−１，１０−ジアザトリシクロ［６．４．０．０２，６］ドデカ−２（６），７−ジエン−９−オン １ｅ（CAS Reg. No. 1346674-23-4）の収率６１％（２．３ｇ）を与えた：1H-NMR (400MHz, CDCl3) δ 1.23 (6H, s), 2.47 (2H, s), 2.5 (2H, s), 3.65 (2H, s), 3.93-3.96 (2H, m), 5.82 (1H, s), 6.703 (1H, s)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝２０５．０。
【０１６５】
実施例２  ３−（フェニルアミノ）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル ２の調製
【化７】
0006507234.tif 000021
【０１６６】
工程１：  ３−アミノ−１−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル ２ａ及び５−アミノ−１−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル ２ｂ
【化８】
0006507234.tif 000022
ＤＭＦ（１００mL）中の化合物 ３−アミノ−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリルのの溶液に、ＮａＨ（６０％、７．４ｇ、１８５mmol）を０℃で一度に加えた。反応混合物を０℃で３０分間撹拌し、ＳＥＭＣｌ（２−（トリメチルシリル）エトキシメチルクロリド、Sigma-Aldrich Catalog #238902、CAS Reg. No. 76513-69-4、１７．１ｇ、９２．５mmol）を滴下した。反応混合物を室温で１８時間撹拌し、ＤＣＭで希釈して、有機層を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（Biotage、順相シリカゲル８０ｇ、ＵＶ ２５４、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝２０／１〜３／２）により精製して、２ａと２ｂの１：１混合物（４．８ｇ、２２％）を白色の固体として与えた。
【０１６７】
工程２：  ３−（フェニルアミノ）−１−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル ２ｃ及び５−（フェニルアミノ）−１−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル ２ｄ
【化９】
0006507234.tif 000023
ジオキサン（５mL）中の上記からの２ａ及び２ｂ（１ｇ、４．２mmol）、ブロモベンゼン（６５５mg、４．２mmol）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１９３mg、０．２１mmol）、Ｘ−ｐｈｏｓ（２００mg、０．４２mmol）及びＣｓ２ＣＯ３（４．１ｇ、１２．６mmol）の混合物を、グローブボックス中で１００℃に１８時間加熱した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（Biotage、順相シリカゲル４０ｇ、検出及び回収したＵＶ ２５４、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１０／１）により精製して、２ｃ及び２ｄを異性体の混合物として与えた（１ｇ、７５％）。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝３１５．０。
【０１６８】
工程３：  ＥｔＯＨ（１０mL）中の２ｃと２ｄの混合物（１ｇ、３．１８mmol）に、ＨＣｌ水溶液（２N、１０mL）を加えた。反応混合物を８０℃で１８時間撹拌し、０℃に冷却し、ＮａＯＨ水溶液（１N）で中和して、次にＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（Biotage、順相シリカゲル４０ｇ、ＵＶ ２５４、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝３０／１）により精製して、３−（フェニルアミノ）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル ２（０．３ｇ、５０％）を黄色の固体として与えた。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１８５．０。
【０１６９】
実施例３  ２−（１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロ−［１，２］オキサボロロ［４，３−ｃ］ピリジン−４−イル）−７，７−ジメチル−２，３，４，６，７，８−ヘキサヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−１−オン ３の調製
【化１０】
0006507234.tif 000024
【０１７０】
工程１：  ３ｂの調製
【化１１】
0006507234.tif 000025
ＭｅＯＨ（８mL）及びＤＣＭ（２０mL）中のアルデヒド ３ａ（５００mg、１．４６mmol）の混合物に、ＮａＢＨ４（１１０mg、３mmol）を一度に加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌し、次に水でクエンチし、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（Biotage、順相シリカゲル４０ｇ、ＵＶ ２５４、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２０／１）により精製して、アルコール ３ｂ（５００mg、９９％）を白色の固体として与えた。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝３４６．０。
【０１７１】
工程２：  ＥｔＯＨ（２０mL）中の３ｂ（５００mg、１．４５mmol）、テトラヒドロキシジボラン（３８７mg、４．３５mmol）、Ｘｐｈｏｓ−Ｐｄ−Ｇ２（１２mg、０．０１５mmol）、Ｘ−ｐｈｏｓ（１４mg、０．０３mmol）及びＫＯＡｃ（４２６mg、４．３５mmol）の混合物を、グローブボックス中で８０℃に２時間加熱した。反応混合物を室温（ＲＴ）に冷やし、濃縮した。残留物をＤＣＭと水に分配した。有機層を分離し、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して、濃縮した。残留物をトルエンに溶解し、室温で２時間放置した。得られた沈殿物を回収し、乾燥させて、２−（１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロ−［１，２］オキサボロロ［４，３−ｃ］ピリジン−４−イル）−７，７−ジメチル−２，３，４，６，７，８−ヘキサヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−１−オン ３（３２０mg、６５％）を、白色の固体として与えた。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝３３８．１。
【０１７２】
実施例４  （Ｓ）−５−（２−メチル−４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミン ４の調製
【化１２】
0006507234.tif 000026
【０１７３】
工程１：  （Ｓ）−tert−ブチル ３−メチル−４−（６−ニトロピリジン−３−イル）ピペラジン−１−カルボキシラート ４ａの調製
【化１３】
0006507234.tif 000027
１，４−ジオキサン（５０mL）中の５−ブロモ−２−ニトロピリジン（５．０ｇ、２４．６３mmol）、（Ｓ）−tert−ブチル ３−メチルピペラジン−１−カルボキシラート（４．９ｇ、２４．６３mmol）、炭酸セシウム（２４．１ｇ、７３．８９mmol）及びＢＩＮＡＰ（１．５ｇ、２．４６mmol）の溶液に、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（１．１ｇ、１．２３mmol）を加えた。混合物を、窒素下で１００℃で１６時間撹拌した。混合物を１８℃に冷却し、水（５０mL）で希釈して、酢酸エチル（１００mL×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（８０mL）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、濃縮した。残留物を石油エーテル：酢酸エチル＝１：１で溶離したシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、４ａ（３．０ｇ、３８％）を褐色の固体として与えた。
【０１７４】
工程２：  （Ｓ）−２−メチル−１−（６−ニトロピリジン−３−イル）ピペラジン ４ｂの調製
【化１４】
0006507234.tif 000028
ジクロロメタン（６０mL）中の４ａ（２．５ｇ、７．７６mmol）の混合物に、トリフルオロ酢酸（３０mL）を加えた。混合物を１８℃で２時間撹拌した。混合物を濃縮し、残留物を与え、これを酢酸エチル（１５mL）でトリチュレートし、濾過し、真空下で乾燥させて、８ｂ（２．２ｇ、粗）を褐色の固体として与えた。
【０１７５】
工程３：  （Ｓ）−２−メチル−１−（６−ニトロピリジン−３−イル）−４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン ４ｃの調製
【化１５】
0006507234.tif 000029
メタノール（３０mL）中の４ｂ（２．２ｇ、９．９０mmol）及びオキセタン−３−オン（４９．５０mmol、２．９mL）の混合物に、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（３．１ｇ、４９．５０mmol）を加えた。反応混合物を、窒素下で５０℃で１８時間撹拌した。得られた混合物を、飽和塩化アンモニウム水溶液（１００mL）で希釈し、酢酸エチル（１００mL×３）で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過して、濃縮した。残留物を酢酸エチルで溶離したシリカゲル上のクロマトグラフィーにより精製して、４ｃ（１．２ｇ、４０％）を黄色の固体として与えた。
【０１７６】
工程４：  メタノール（５０mL）中の４ｃ（１．２ｇ、４．３１mmol）及びパラジウム（１０重量％ 活性炭、５００mg）の混合物に、水素を入れ、１８℃で３時間撹拌した。混合物をセライト（登録商標）のパッド（Imerys Minerals California, Inc., Sigma-Aldrich Co.）で濾過し、濾液を濃縮して、（Ｓ）−５−（２−メチル−４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミン ４（７００mg、６５％）を固体として与えた。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝２４９．１。
【０１７７】
実施例５  １−［２−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロロ［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル ５の調製
【化１６】
0006507234.tif 000030
【０１７８】
工程１：  ３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル ５ａの調製
【化１７】
0006507234.tif 000031
ＣＨ２Ｉ２（９０mL）中の３−アミノ−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル（６．６ｇ、６１．１mmol）の溶液に、亜硝酸イソアミル（５５．５mL）を−１０℃で３０分間かけて滴下した。反応混合物を１００℃に２時間加熱し、濃縮した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝４／１）により精製して、３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル ５ａ（６．７ｇ、５０％）を黄色の固体として与えた。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝２２０．０。
【０１７９】
工程２：  乾燥ＤＣＭ（２０mL）中の２−（１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロ−［１，２］オキサボロロ［４，３−ｃ］ピリジン−４−イル）−７，７−ジメチル−２，３，４，６，７，８−ヘキサヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−１−オン ３（１００mg、０．３mmol）、５ａ（６５mg、０．３mmol）、Ｃｕ（ＯＡｃ）２（６５mg、０．３６mmol）、ピリジン（２８mg、０．３６mmol）、Ｅｔ３Ｎ（３６mg、０．３６mmol）及び４Åモレキュラーシーブの混合物を、２５℃で１８時間撹拌した。反応混合物をＤＣＭで希釈し、濾過した。濾液を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して、減圧下で濃縮した。残留物を分取ＴＬＣ（順相シリカゲル、ＵＶ ２５４、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２０／１）により精製して、１−［２−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロロ［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル ５（６２mg、３９％）を白色の固体として与えた。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５２９．０。
【０１８０】
実施例１０１  ３−アニリノ−１−［２−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロロ［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］ピラゾール−４−カルボキサミド １０１
【０１８１】
工程１：  １０１ａの調製
【化１８】
0006507234.tif 000032
乾燥ＤＣＭ（２０mL）中の実施例２からの３−（フェニルアミノ）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル ２（６０mg、０．３３mmol）、実施例３からの２−（１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロ−［１，２］オキサボロロ［４，３−ｃ］ピリジン−４−イル）−７，７−ジメチル−２，３，４，６，７，８−ヘキサヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−１−オン ３（１２２mg、０．３６mmol）、Ｃｕ（ＯＡｃ）２（１１９mg、０．６６mmol）、ピリジン（５２mg、０．６６mmol）、Ｅｔ３Ｎ（６７mg、０．６６mmol）及び４Åモレキュラーシーブの混合物を、３０℃で１８時間撹拌した。反応混合物をＤＣＭで希釈し、濾過した。濾液を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して、減圧下で濃縮した。残留物を分取ＴＬＣ（順相シリカゲル、ＵＶ ２５４、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝３０／１）により精製して、１０１ａ（３０mg、１８％）を黄色の固体として与えた。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝４９４．１。
【０１８２】
工程２：  ＭｅＯＨ（１５mL）中の１０１ａ（１００mg、０．２mmol）、濃水酸化アンモニウム（１８M ＮＨ４ＯＨ、２１mL）、３０％過酸化水素（Ｈ２Ｏ２、１．２mL）及びＨ２Ｏ（６mL）の混合物を、室温で２日間撹拌した。反応混合物を濃縮した。残留物を分取ＴＬＣ（順相シリカゲル、ＵＶ ２５４、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２０／１）により精製して、１０１（４３mg、４２％）を白色の固体として与えた。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.25 (s, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.55 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.64 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.37 (bs, 1H), 7.30 (t, J = 8 Hz, 2H), 6.88 (t, J = 3.2 Hz, 1H), 6.59 (s, 1H), 4.94 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 4.74 (m, 1H), 4.46 (m, 1H), 4.22 (m, 3H), 3.94 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 2.58 (d, J = 7.2 Hz, 2H), ), 2.43 (s, 2H), 1.22 (s, 6H); ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５１２．１。
【０１８３】
実施例１０２  １−［３−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロロ［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−２−（ヒドロキシメチル）フェニル］−３−（２−ピリジルアミノ）ピラゾール−４−カルボキサミド １０２
【０１８４】
工程１：  １０２ａ及び１０２ｂの調製
【化１９】
0006507234.tif 000033
ジオキサン（２０mL）中の４，４−ジメチル−１，１０−ジアザトリシクロ［６．４．０．０２，６］ドデカ−２（６），７−ジエン−９−オン １ｅ（１ｇ、４．９mmol）、２−ブロモ−６−ヨードベンジル アセタート（４．３ｇ、１２．３mmol）、ＣｕＩ（４６８mg、２．４５mmol）、Ｃｓ２ＣＯ３（３．２ｇ、９．８mmol）の混合物を、１０５℃に加熱し、１６時間撹拌した。反応混合物を水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた抽出物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（Biotage、４０ｇカラム、シリカゲル、ＵＶ ２５４、ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ＝１０：１）により精製し、１０２ａと１０２ｂの混合物（１．４ｇ、６０％）を与えて、次の工程で分離することなく用いた。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝４３１．０及び４７９．０。
【０１８５】
工程２：  １０２ｃ及び１０２ｄの調製
【化２０】
0006507234.tif 000034
ジオキサン（２０mL）及び水（２０mL）中で溶解した１０２ａ及び１０２ｂ（１．４ｇ、３．２５mmol）及び水酸化ナトリウム（５２０mg、１２．９９mmol）の混合物を、２５℃で１６時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた抽出物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（Biotage、４０ｇカラム、シリカゲル、ＵＶ ２５４、ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ＝１０：１）により精製して、１０２ｃと１０２ｄの混合物（１．２ｇ、９５％）を黄色の固体として与えた。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝３８９．９／３９０．９及び４３６．９。
【０１８６】
工程３：  １０２ｅの調製
【化２１】
0006507234.tif 000035
ＥｔＯＨ（２０mL）中の化合物１０２ｃ及び１０２ｄ（１．２ｇ、３．１mmol）、テトラヒドロキシジボラン（８２４mg、９．２５mmol）、ＸＰｈｏｓ−Ｐｄ−Ｇ２（２５mg、０．０３１mmol）、Ｘ−Ｐｈｏｓ（３０mg、０．０６２mmol）、ＫＯＡｃ（９１０mg、９．２５mmol）の混合物を、窒素下で８０℃に２時間加熱した。反応混合物を水（２０mL）で処理し、ＤＣＭで抽出した。合わせた抽出物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（Biotage、４０ｇカラム、シリカゲル、ＵＶ ２５４、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２０／１）により精製して、１０２ｅ（１ｇ、９０％）を黄色の固体として与えた。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝３３７．１。
【０１８７】
工程４：  １０２ｆの調製
【化２２】
0006507234.tif 000036
ＤＣＭ（１０mL）中の１０２ｅ（６００mg、１．７９mmol）、３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル（３９０mg、１．７９mmol）、Ｅｔ３Ｎ（３６１mg、３．５７mmol）、ピリジン（２８３mg、３．５７mmol）、Ｃｕ（ＯＡｃ）２（３８９mg、２．１５mmol）の混合物を、Ｏ２（２Ｘ）でパージし、室温で１６時間撹拌した。混合物を濾過し、フィルターケーキをＤＣＭ（１０mL）で洗浄した。合わせた濾液を濃縮し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（Biotage、４０ｇカラム、シリカゲル、ＵＶ ２５４、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２５／１）により精製して、１−［３−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロロ［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−２−（ヒドロキシメチル）フェニル］−３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １０２ｆ（４００mg、２３％）を黄色の固体として与えた。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５２８．０。
【０１８８】
工程５：  １０２ｇの調製
【化２３】
0006507234.tif 000037
ジオキサン（１０mL）中の１０２ｆ（１５０mg、０．２８mmol）、ピリジン−２−アミン（４０mg、０．４３mmol）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（２６mg、０．０２８mmol）、Ｘａｎｔｐｈｏｓ（２９mg、０．０５６mmol）、Ｃｓ２ＣＯ３（２２８mg、０．７mmol）の混合物を、１００℃に加熱し、１６時間撹拌した。反応混合物を濾過し、フィルターケーキをＭｅＯＨで洗浄した。合わせた濾液を濃縮し、残留物を分取ＴＬＣ（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝２５：１）により精製して、１０２ｇ（３０mg、２０％）を黄色の固体として与えた。
【０１８９】
工程６：  実施例１０１（工程２）の手順に従って、１０２を調製した。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.71 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.90 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.48-7.61 (m, 3H), 6.88 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 6.52 (s, 1H), 4.98 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.38 (m, 3H), 4.02-4.01 (m, 3H), 3.88 (m, 1H), 3.29 (s, 1H), 2.56 (s, 2H), 2.42 (s, 2H), 1.21 (s, 6H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５１２．２。
【０１９０】
実施例１０３  １−［２−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロール［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−（２−ピリジルアミノ）ピラゾール−４−カルボキサミド １０３
【０１９１】
工程１：  １０３ａの調製
【化２４】
0006507234.tif 000038
乾燥ジオキサン（１０mL）中の１−［２−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロロ［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル ５（２３０mg、０．４３mmol）、ピリジン−２−アミン（６０mg、０．６４mmol）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（３９mg、０．０４３mmol）、Ｘａｎｔｐｈｏｓ（４９mg、０．０８６mmol）及びＣｓ２ＣＯ３（２５９mg、１．１mmol）の混合物を、グローブボックス中で９０℃に１８時間加熱した。反応混合物を室温に冷やし、濾過した。濾液を濃縮し、残留物を分取ＴＬＣ（順相シリカゲル、ＵＶ ２５４、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２５／１）により精製して、１０３ａ（１３０mg、６１％）を黄色の固体として与えた；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝４９５．１。
【０１９２】
工程２：  実施例１０１、工程２の手順に従って、１０３ａのニトリル基を加水分解して、１０３を与えた：1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.76 (s, 1H), 8.85 (s, 1H), 8.57 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.77 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.61 (m, 1H), 7.43 (s, 1H), 6.92 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 6.59 (s, 1H), 4.98 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.73 (m, 1H), 4.46 (m, 1H), 4.27 (m, 1H), 3.95 (m, 1H), 2.59 (d, J = 14.4 Hz, 1H), 2.43 (s, 2H), 1.21 (s, 6H); ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５１３．１。
【０１９３】
実施例１０４  １−［３−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロール［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−２−（ヒドロキシメチル）フェニル］−３−（ピリミジン−４−イルアミノ）ピラゾール−４−カルボキサミド １０４
実施例１０２の手順に従って、ピリミジン−４−アミンを１０２ｆと反応させて、１０４を与えた：1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.5 (s, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.51 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 7.94 (m, 2H),7.49-7.59 (m, 4H), 6.52 (s, 1H), 4.97 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 4.36 (d, J = 4.4 Hz, 2H), 4.21 - 4.16 (m, 3H), 3.88 (t, J = 0.8 Hz, 1H), 2.57 (s, 2H), 2.42 (s, 2H), 1.22 (s, 6H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５１３．２。
【０１９４】
実施例１０５  １−［３−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロール［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−２−（ヒドロキシメチル）フェニル］−３−［（１−メチルトリアゾール−４−イル）アミノ］ピラゾール−４−カルボキサミド １０５
実施例１０２の手順に従って、出発物質として１−メチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−アミンを用いて、１０５を調製した。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.10 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.76 (br s, 1H), 7.54 (m, 3H), 7.31 (s, 1H), 6.51 (s, 1H), 4.97 (t, J = 4.8 Hz 1H), 4.35 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 4.20 (m, 3H), 3.99 (s, 3H), 3.87 (m, 1H), 2.57 (s, 2H), 2.42 (s, 2H), 1.22 (s, 6H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５１６．２
【０１９５】
実施例１０６  １−［２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−（２−ピリジルアミノ）ピラゾール−４−カルボキサミド １０６
【化２５】
0006507234.tif 000039
実施例１０３の手順に従って、出発物質として１−（２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １０６ａを用いて、１０６を調製した。1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.84 (s, 1H), 8.70 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.54 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.90 (m, 3H), 7.75 (m, 2H), 6.95 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 4.74 (s, 2H), 1.49 (s, 9H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５２９．２
【０１９６】
実施例１０７  ３−（シクロプロパンカルボニルアミノ）−１−［２−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロロ［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］ピラゾール−４−カルボキサミド １０７
【０１９７】
工程１：  Ｎ−（４−シアノール−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）シクロプロパンカルボキサミド １０７ａの調製
【化２６】
0006507234.tif 000040
３−アミノ−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル（１００mg、０．９３mmol）、ＣＰＣＡ（８．５μL、１．０２mmol）、ＨＢＴＵ（４２１．０mg、１．１１mmol）、ＤＩＥＡ（２．１mL、０．４４M）及びＤＭＦ（１０mL）を合わせ、室温で撹拌した。７２時間後、反応物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、そのまま使用した。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１７７．０。
【０１９８】
工程２：  実施例１０９、工程２及び３の手順に従って、１０７ａを２−（１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロ−［１，２］オキサボロロ［４，３−ｃ］ピリジン−４−イル）−７，７−ジメチル−２，３，４，６，７，８−ヘキサヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−１−オン ３と反応させて、１０７をオフホワイトの固体として与えた。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.34 (s, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.57 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.54 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 6.57 (s, 1H), 5.11 (s, 1H), 4.58 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 4.40 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 4.21 (m, 3H), 3.93 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 2.65 - 2.51 (m, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.23 (d, J = 5.2 Hz, 6H), 0.88 - 0.81 (m, 4H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５０４．４。
【０１９９】
実施例１０８  １−［２−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロロ［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］インダゾール−３−カルボキサミド １０８
【０２００】
工程１：  メチル １−（２−（７，７−ジメチル−１−オキソ−３，４，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２（６Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−３−カルボキシラート １０８ａの調製
【化２７】
0006507234.tif 000041
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０mL）中の２−（１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロ−［１，２］オキサボロロ［４，３−ｃ］ピリジン−４−イル）−７，７−ジメチル−２，３，４，６，７，８−ヘキサヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−１−オン ３（２００mg、０．６mmol）、メチル １Ｈ−インダゾール−３−カルボキシラート（１５８mg、０．９mmol）、酢酸銅（ＩＩ）（１６３mg、０．９mmol）及びピリジン（９５mg、１．２mmol）の混合物を、開放系で２０℃で１６時間撹拌した。得られた混合物を水（１００mL）に注ぎ、酢酸エチル（５０mL×３）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過して、濃縮した。残留物を分取ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝２０：１）により精製して、１０８ａ（５０mg、１７％）を白色の固体として与えた。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝４８６．１。
【０２０１】
工程２：  ＮＨ３−ＭｅＯＨ（２０mL）中の１０８ａ（５０mg、０．１０３mmol）の混合物を、密閉したチューブ内で１００℃で１６時間撹拌した。反応物を冷却し、揮発性溶媒を濃縮した。残留物を分取ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝２０：１）により精製して、１０８（２７．３mg、５７％）を白色の固体として与えた。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.63 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.45 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.51 - 7.49 (m, 2H), 7.40 - 7.39 (m, 2H), 6.91 (s, 1H), 6.82 (s, 1H), 5.50 (s, 1H), 4.58 - 4.57 (m, 2H), 4.18 (m, 4H), 3.55 (m, 1H), 2.56 (s, 2H), 2.50 (s, 2H), 1.26 (s, 6H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝４７１．２。
【０２０２】
実施例１０９  ４−（シクロプロパンカルボニルアミノ）−１−［２−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロロ［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］ピラゾール−３−カルボキサミド １０９
【０２０３】
工程１：  Ｎ−（３−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）シクロプロパンカルボキサミド １０９ａの調製
【化２８】
0006507234.tif 000042
ＤＭＦ中の４−アミノ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボニトリル（２７０mg、２．４９７７mmol）の溶液に、シクロプロパンカルボン酸（１．１当量、２．７４７５mmol）、ＨＢＴＵ（１．２当量、２．９９７２mmol）及びＤＩＥＡ（１０当量、２４．９７７mmol）を加えた。反応完了後、反応物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機層を真空下で濃縮し、シリカフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、１０９ａを与えた。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１７７．１。
【０２０４】
工程２：  Ｎ−（３−シアノ−１−（２−（７，７−ジメチル−１−オキソ−３，４，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２（６Ｈ）−イル）−３−ホルミルピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）シクロプロパンカルボキサミド １０９ｂの調製
【化２９】
0006507234.tif 000043
ＤＭＳＯ（４mL、５６mmol）中の１０９ａ（１９０mg、１．０７８４mmol）の溶液を、２−（１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロ−［１，２］オキサボロロ［４，３−ｃ］ピリジン−４−イル）−７，７−ジメチル−２，３，４，６，７，８−ヘキサヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−１−オン ３及びカリウムtert−ブトキシド（１８３．４mg、１．６１７７mmol）と反応させ、マイクロ波中で１３０℃で９０分間加熱した。反応物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機相を濃縮し、カラムクロマトグラフィー（溶離剤：ヘプタン中０〜７０％酢酸エチル；ＤＣＭ中０〜４％メタノール）により精製して、１０９ｂを与えた。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝４８４．５。
【０２０５】
工程３：  ０℃で、メタノール（２．０mL、４９mmol）中の１０９ｂ（７８．６mg、０．１６３mmol）の溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（６．２mg、０．１６３mmol）を加え、次いで２．５時間後に水素化ホウ素ナトリウム（６．２mg、０．１６３mmol）の２回目の添加をした。１時間後、反応物を２時間かけて室温に放温し、ＤＣＭで希釈し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で抽出した。有機相をブラインで洗浄し、濃縮し、カラムクロマトグラフィー（溶離剤：ＤＣＭ中０〜５％メタノール）により精製して、直接使用した。粗生成物をエタノールと水の混合物（２：１；３mL）に溶解し、ビス（ジメチルホスファニルオキシ）白金ジメチル亜ホスフィン酸（３．４mg、０．００８mmol）を加えた。得られた混合物を９０℃で２．５時間加熱し、１６時間かけて室温まで放冷した。反応物を真空下で濃縮し、ＨＰＬＣにより精製して、１０９を与えた：ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５０３．６。
【０２０６】
実施例１１０  １−［２−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロロ［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルボキサミド １１０
実施例１０８の手順に従って、出発物質としてメチル １Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−カルボキシラートを用いて、１１０を調製した：1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.80 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.64 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.61 - 8.60 (m, 1H), 7.56 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.40 (dd, J = 8.0, 4.4 Hz, 1H), 7.10 (s, 1H), 6.80 (s, 1H), 5.60 (s, 1H), 4.59 (s, 2H), 4.36 - 4.18 (m, 4H), 3.48 (s, 1H), 2.56 (s, 2H), 2.49 (s, 2H), 1.26 (s, 6H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝４７２．３。
【０２０７】
実施例１１１  １−［２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−［（１−メチルトリアゾール−４−イル）アミノ］ピラゾール−４−カルボキサミド １１１
【０２０８】
工程１：  １−（２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １１１ａの調製
【化３０】
0006507234.tif 000044
実施例３及び５の手順に従って、出発物質として２−（７−tert−ブチル−５−フルオロ−４−オキソピリド［４，３−ｄ］ピリダジン−３（４Ｈ）−イル）−４−クロロニコチンアルデヒドを用いて、１１１ａを調製した。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５４５．８。
【０２０９】
工程２：  実施例１０５の手順に従って、１１１ａ及び１−メチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−アミンを反応させて、１１１を与えた：1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.16 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.68 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 8.58 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.92-7.87 (m, overlap, 3H), 7.80 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 5.12 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 4.60-4.56 (m, 2H), 4.03 (s, 3H), 1.39 (s, 9H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５３３．０。
【０２１０】
実施例１１２  １−［２−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロロ［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−［（２−フルオロシクロプロパンカルボニル）アミノ］ピラゾール−４−カルボキサミド １１２
実施例１０９の手順に従って、出発物質としてＮ−（４−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−２−フルオロ−シクロプロパンカルボキサミドを用いて、１１２を調製した。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.40 (s, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.57 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.56 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 6.58 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 5.08 - 4.88 (m, 2H), 4.58 (m, 1H), 4.41 (m, 1H), 4.32 - 4.12 (m, 3H), 3.93 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 2.58 (d, J = 4.6 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.62 (d, J = 23.3 Hz, 1H), 1.22 (s, 6H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５２２．２。
【０２１１】
実施例１１３  １−［２−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロロ［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］ピラゾール−４−カルボキサミド １１３
実施例１０９、工程２及び３の手順に従って、出発物質として１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル（２．０当量、１．７４５mmol）を用いて、１１３を調製した：1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.79 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 8.58 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 0.6 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.59 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.59 (s, 1H), 5.03 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 4.52 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.41 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 4.27 (d, J = 11.3 Hz, 1H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝４２１．２。
【０２１２】
実施例１１４  １−［２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−フェニル−ピラゾール−４−カルボキサミド １１４
【０２１３】
工程１：  １−（２−（６−（tert−ブチル）−８−フルオロ−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−３−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １１４ａの調製
【化３１】
0006507234.tif 000045
１，４−ジオキサン（０．９mL）及び水（０．１mL）中の炭酸セシウム（３当量、０．２７５６mmol）、５（５０mg、０．０９mmol）、４，４，５，５−テトラメチル−２−フェニル−１，３，２−ジオキサボロラン（２８．１mg、０．１４mmol）及びビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（７．１mg、０．０１mmol）の混合物を、マイクロ波中で１１０℃に１５分間加熱した。４，４，５，５−テトラメチル−２−フェニル−１，３，２−ジオキサボロラン（２８．１mg、０．１４mmol）を加え、反応物をマイクロ波中で１１０℃に２０分間加熱し、次いで４，４，５，５−テトラメチル−２−フェニル−１，３，２−ジオキサボロラン（５６．２mg、０．２８mmol）を添加し、マイクロ波中で１１０℃で２０分間加熱した。反応物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機相をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（溶離剤：ヘプタン中０〜８０％酢酸エチル；ＤＣＭ中０〜３％メタノール）により精製して、所望の物質を与えた。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝４９５．４。
【０２１４】
工程２：  １１４ａ（２５．７mg、０．０５mmol）を、エタノール（１．０mL、１７mmol）及び水（０．５mL、３０mmol）に入れ、窒素雰囲気下でビス（ジメチルホスファニルオキシ）白金ジメチル亜ホスフィン酸（１．１mg、０．００３mmol）を用いて処理した。反応物を９０℃に２１時間加熱し、濃縮し、ＨＰＬＣにより精製して、１１４を与えた：1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.82 (s, 1H), 8.72 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.57 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.89 - 7.82 (m, 4H), 7.79 (dd, J = 13.1, 1.7 Hz, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.47 - 7.40 (m, 3H), 7.32 (s, 1H), 5.15 (s, 1H), 4.56 (d, J = 18.7 Hz, 2H), 1.40 (s, 9H), 1.16 (s, 2H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５１３．２。
【０２１５】
実施例１１５  １−［２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−（１−メチルピラゾール−４−イル）ピラゾール−４−カルボキサミド １１５
【０２１６】
工程１：  １−（２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−１’−メチル−１Ｈ，１’Ｈ−３，４’−ビピラゾール−４−カルボニトリル １１５ａの調製
【化３２】
0006507234.tif 000046
バイアル中に、１−（２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １１１ａ（１００mg、０．１８４mmol）、１−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピラゾール（７６．５mg、０．３６７mmol）、炭酸セシウム（１７９．６mg、０．５５mmol）、及びＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（１４．２mg、０．０１８mmol）を入れた。脱気した１，４−ジオキサン（３．７mL）及び水（１mL）を加えた。反応混合物を、Ｎ２（３Ｘ）で真空パージ／逆充填した。バイアルに蓋をし、反応混合物を９０℃で２時間撹拌した。粗反応物をセライトパッドで濾過し、パッドをＥｔＯＡｃ（３×２０mL）でよくすすいだ。濾液を水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過して、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨの勾配）により精製して、１１５ａの７５．７mg（８２．７％）を与えた。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.21 (s, 1H), 8.77 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 8.36 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.09 (s, 2H), 7.92 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 11.4 Hz, 2H), 4.58 - 4.41 (m, 3H), 4.00 (s, 3H), 1.44 (s, 9H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝４９９．３。
【０２１７】
工程２：  ＥｔＯＨ（７．６mL）及びＨ２Ｏ（２．２mL）に溶解した１１５ａ（７５．７mg、０．１５mmol）の撹拌した溶液に、ビス（ジメチルホスファニルオキシ）白金ジメチル亜ホスフィン酸（５．２mg、０．０１２mmol）を加え、反応混合物を大気下で９０℃で４時間撹拌した。反応物をＤＣＭ中で希釈した。有機層を水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過して、減圧下で濃縮した。粗混合物を分取ＨＰＬＣにより精製して、１１５を固体として与えた（５０．３mg、６４．１％）。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.80 (s, 1H), 8.71 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 8.57 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.98 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.79 (dd, J = 13.1, 1.7 Hz, 1H), 7.68 (br s, 1H), 7.23 (br s, 1H), 5.08 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.65 - 4.44 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 1.39 (s, 9H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５１７．２。
【０２１８】
実施例１１６  １−［２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−［（５−クロロ−２−ピリジル）アミノ］ピラゾール−４−カルボキサミド １１６
【０２１９】
工程１：  １−（２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−３−（５−クロロピリジン−２−イルアミノ）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １１６ａの調製
【化３３】
0006507234.tif 000047
バイアル中に、１−（２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １１１ａ（４０．０mg、０．０７３mmol）、５−クロロピリジン−２−アミン（１２．３mg、０．０９５mmol）、ＸａｎｔＰｈｏｓ（１０．６mg、０．０１８mmol）、炭酸セシウム（７１．８mg、０．２２mmol）、及びトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（９．０mg、０．００９mmol）を入れた。脱気した１，４−ジオキサン（１．４mL）を加え、反応混合物をＮ２ ３Ｘで真空パージ／逆充填した。バイアルに蓋をし、反応混合物を９５℃で２．５時間撹拌した。粗反応物をセライトパッドで濾過し、パッドをＥｔＯＡｃ（３×２０mL）でよくすすいだ。濾液を水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過して、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨの勾配）により精製して、１１６ａの１５．９mg（３９．７％）を与えた。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.19 (s, 1H), 8.77 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.37 (t, J = 2.3 Hz, 1H), 8.25 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.68 (dd, J = 8.9, 2.6 Hz, 1H), 7.59 (s, 2H), 7.33 (s, 1H), 4.60 - 4.44 (m, 3H), 1.44 (s, 9H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５４５．３。
【０２２０】
工程２：  実施例１１５、工程２の手順に従って、出発物質として１１６ａを用いて、１１６を調製した。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.87 (s, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.70 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.57 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 8.26 (dd, J = 2.6, 0.8 Hz, 1H), 8.04 (dd, J = 8.8, 0.7 Hz, 1H), 7.93 (br s, 1H), 7.92 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.89 (dd, J = 9.0, 2.7 Hz, 1H), 7.84 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.79 (dd, J = 13.1, 1.7 Hz, 1H), 7.52 (br s, 1H), 5.12 (t, J = 5.1 Hz, 1H), 4.58 (d, J = 23.5 Hz, 2H), 1.40 (s, 9H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５６３．２。
【０２２１】
実施例１１７  ３−アミノ−１−［２−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロロ［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］ピラゾール−４−カルボキサミド １１７
【化３４】
0006507234.tif 000048
実施例１１４、工程２の手順に従って、３−アミノ−１−［２−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロロ［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］ピラゾール−４−カルボニトリル １１７ａを、１１７に変換した：1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.61 (s, 1H), 8.48 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.61 - 7.53 (m, 1H), 7.49 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.57 (d, J = 0.6 Hz, 1H), 5.81 (s, 2H), 5.01 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 4.64 (dd, J = 13.0, 4.9 Hz, 1H), 4.42 (dd, J = 13.0, 6.6 Hz, 1H), 4.28 - 4.15 (m, 2H), 3.91 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 2.58 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.22 (s, 6H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝４３６．２
【０２２２】
実施例１１８  １−［２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−［（５−ピペラジン−１−イル−２−ピリジル）アミノ］ピラゾール−４−カルボキサミド １１８
【０２２３】
工程１：  tert−ブチル ４−（６−（１−（２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシ−メチル）ピリジン−４−イル）−４−カルバモイル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−カルボキシラート １１８ａの調製
【化３５】
0006507234.tif 000049
実施例１１６の手順に従って、出発物質としてtert−ブチル ４−（６−アミノ−３−ピリジル）ピペラジン−１−カルボキシラート及び１−（２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １１１ａを反応させて、１１８ａを与えた：ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝７１３．４。
【０２２４】
工程２：  ＭｅＯＨ（１mL）及びＤＣＭ（１mL）中の１１８ａ（３６mg、０．０５mmol）の溶液に、１，４−ジオキサン中のＨＣｌ（４M）（０．６mL）を加え、反応混合物を４０℃で１．５時間撹拌し、次に減圧下で濃縮した。粗混合物を分取ＨＰＬＣにより精製して、１１８を固体として与えた（５．６mg、１７．０％）。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.45 (s, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.68 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 8.57 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 1.9 Hz, 2H), 7.87 (t, J = 7.9 Hz, 2H), 7.84 - 7.76 (m, 2H), 7.44 (dd, J = 9.2, 3.0 Hz, 2H), 5.14 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.63 (br s, 1H), 4.55 (br s, 1H), 2.99 (br s, 4H), 2.87 (br s, 4H), 1.40 (s, 9H), 1H 観察されず；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝６１３．３。
【０２２５】
実施例１１９  １−［２−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロロ［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−［（１−メチルトリアゾール−４−イル）アミノ］ピラゾール−４−カルボキサミド １１９
実施例１１５の手順に従って、出発物質として１−メチルトリアゾール−４−アミンを用いて、１１９を調製した。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５１７．２。
【０２２６】
実施例１２０  １−［２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−［［５−［（２Ｓ）−２−メチル−４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル］−２−ピリジル］アミノ］ピラゾール−４−カルボキサミド １２０
【０２２７】
実施例１１６の手順に従って、出発物質として５−［（２Ｓ）−２−メチル−４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル］ピリジン−２−アミンを用いて、１２０を調製した。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.49 (s, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.68 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.57 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.95 - 7.88 (m, 3H), 7.87 (br s, 1H), 7.82 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.79 (dd, J = 13.1, 1.7 Hz, 1H), 7.48 (dd, J = 9.0, 2.9 Hz, 1H), 7.43 (br s, 1H), 5.16 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 4.63 (br s, 1H), 4.56 (td, J = 6.4, 3.2 Hz, 3H), 4.48 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.43 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 3.76 - 3.67 (m, 1H), 3.41 (p, J = 6.3 Hz, 1H), 3.17 - 3.09 (m, 1H), 3.03 - 2.94 (m, 1H), 2.60 - 2.54 (m, 1H), 2.39 - 2.30 (m, 2H), 2.25 - 2.17 (m, 1H), 1.40 (s, 9H), 0.96 (d, J = 6.4 Hz, 3H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝６８３．３。
【０２２８】
実施例１２１  １−［２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−［１−（ジフルオロメチル）ピラゾール−４−イル］ピラゾール−４−カルボキサミド １２１
実施例１１５の手順に従って、出発物質として１−（ジフルオロメチル）−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピラゾールを用いて、１２１を調製した。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.95 (d, J = 0.6 Hz, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.73 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 8.57 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.99 - 7.89 (m, 2H), 7.84 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.82 - 7.75 (m, 2H), 7.33 (br s, 1H), 5.10 - 5.02 (m, 1H), 4.58 (br s, 1H), 4.52 (br s, 1H), 1.39 (s, 9H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５５３．２。
【０２２９】
実施例１２２  １−［２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−（１，３−ジメチルピラゾール−４−イル）ピラゾール−４−カルボキサミド １２２
実施例１１５の手順に従って、出発物質として１，３−ジメチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピラゾールを用いて、１２２を調製した。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.80 (s, 1H), 8.70 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.56 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.91 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.79 (dd, J = 13.1, 1.7 Hz, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 5.09 (s, 1H), 4.57 (d, J = 17.1 Hz, 2H), 3.80 (s, 3H), 2.36 (s, 3H), 1.39 (s, 9H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５３１．２
【０２３０】
実施例１２３  １−［２−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロロ［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−（プロパノイルアミノ）ピラゾール−４−カルボキサミド １２３
【０２３１】
工程１：  １−（２−（７，７−ジメチル−１−オキソ−３，４，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２（６Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−４−（トリチルアミノ）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボニトリル １２３ａの調製
【化３６】
0006507234.tif 000050
実施例５の手順に従って、出発物質として３−（トリチルアミノ）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリルを用いて、１２３ａを調製した。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝６６０．６。
【０２３２】
工程２：  ４−アミノ−１−（２−（７，７−ジメチル−１−オキソ−３，４，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２（６Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボニトリル １２３ｂの調製
【化３７】
0006507234.tif 000051
０℃で、ジエチルエーテル（３０mL、２８７mmol）中の１２３ａ（４００mg、０．６ａmmol）の撹拌した混合物を、１，４−ジオキサン中のＨＣｌ（４M）（３．０mL、１２mmol）、次いでＤＣＭ（１２mL）で処理し、反応物を徐々に室温に放温した。１．５時間後、反応物をＤＣＭで希釈し、ＭＰ炭酸樹脂で３０分間処理し、濾過して、真空下で濃縮した。粗生成物をシリカフラッシュクロマトグラフィー（溶離剤：ＤＣＭ中０〜２０％メタノール）により精製して、１２３ｂを白色の固体として与えた。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝４１８．４。
【０２３３】
工程３：  ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ、２５μL、０．１４mmol）及びプロピオン酸（５μL、０．０７mmol）を、ＤＭＦ（１mL、１２．９mmol）中の１２３ｂ（２０mg、０．０４７９０mmol）の溶液に加えた。反応物を０℃に冷却し、１０分間撹拌した。ＨＡＴＵ（２７．９mg、０．０７mmol）を加え、反応物を７０℃に温めながら８時間撹拌した。更なるプロピオン酸（７．５μL、０．１１mmol）、ＤＩＥＡ（２５μL、０．１４mmol）及びＨＡＴＵ（２７．９mg、０．０７mmol）を導入し、反応物を９０℃で４時間、次いで６０℃で７２時間撹拌した。水を加え、反応物を酢酸エチルで抽出した。有機相をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮して、カラムクロマトグラフィー（溶離剤：ＤＣＭ中０〜３％メタノール）により精製した。次に、生成物をエタノール（２mL、３４．３mmol）及び水（１．０mL、５６mmol）に入れ、ビス（ジメチルホスファニルオキシ）白金ジメチル亜ホスフィン酸（０．０５当量、０．００２３９５mmol）を加えた。反応物を、密閉したバイアル中で９０℃で１６時間撹拌し、濃縮し、ＨＰＬＣにより精製して、１２３を与えた。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.56 - 8.49 (m, 2H), 7.43 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 6.59 (s, 1H), 5.73 (s, 2H), 3.33 (s, 5H), 2.61 - 2.50 (m, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.01 - 1.91 (m, 2H), 1.22 (s, 6H), 0.79 (t, J = 7.5 Hz, 3H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝４９２．２。
【０２３４】
実施例１２４  ３−アセトアミド−１−［２−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロロ［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］ピラゾール−４−カルボキサミド １２４
実施例１２３の手順に従って、出発物質として酢酸を用いて、１２４を調製した。1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.47 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.38 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 6.79 (s, 1H), 5.63 - 5.04 (m, 1H), 4.99 (s, 2H), 4.52 - 4.47 (m, 1H), 4.31 - 4.00 (m, 3H), 2.56 (d, J = 4.4 Hz, 2H), 2.51 (s, 1H), 2.49 (s, 2H), 1.79 (s, 3H), 1.27 (s, 1H), 1.26 (s, 6H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝４７８．２
【０２３５】
実施例１２５  １−［２−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロロ［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−［［５−［（２Ｓ）−２−メチル−４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル］−２−ピリジル］アミノ］ピラゾール−４−カルボキサミド １２５
【０２３６】
工程１：  （Ｓ）−１−（２−（７，７−ジメチル−１−オキソ−３，４，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２（６Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−３−（（５−（２−メチル−４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）アミノ）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １２５ａの調製
【化３８】
0006507234.tif 000052
１，４−ジオキサン（１０mL）中の実施例５からの１−［２−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロロ［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル ５（４０mg、０．０８mmol）、実施例４からの（Ｓ）−５−（２−メチル−４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミン ４（３０mg、０．１２mmol）、及び炭酸セシウム（５２mg、０．１６mmol）の混合物に、Ｂｒｅｔｔｐｈｏｓ（４．３mg、０．００８mmol）及びＲｕｐｈｏｓプレ触媒（３mg、０．００４mmol）を加えた。混合物を、窒素下で１００℃で３時間撹拌した。得られた混合物を水（１００mL）に注ぎ、酢酸エチル（５０mL×３）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過して、濃縮した。残留物を分取ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝２０：１）により精製して、１２５ａ（１０mg、２０％）を白色の固体として与えた。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝６４９．３。
【０２３７】
工程２：  実施例１１５、工程２の手順に従って、出発物質として１２５ａを用いて、１２５を調製した。1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.82 (s, 1H), 8.57 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.93 - 7.90 (m, 2H), 7.70 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.74 (s, 1H), 4.72 - 4.60 (m, 6H), 4.40 - 4.35 (m, 1H), 4.26 - 4.25 (m, 2H), 4.01 - 3.98 (m, 1H), 3.58 (m, 2H), 3.12 (m, 2H), 2.61 - 2.48 (m, 7H), 2.32 (m, 1H), 1.25 (s, 6H), 1.00 (d, J = 6.4 Hz, 1H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝６６７．３
【０２３８】
実施例１２６  １−［２−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロロ［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−４−［［５−［（２Ｓ）−２−メチル−４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル］−２−ピリジル］アミノ］ピラゾール−３−カルボキサミド １２６
【０２３９】
工程１：  メチル ４−ブロモ−１−（２−（７，７−ジメチル−１−オキソ−３，４，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２（６Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート １２６ａの調製
【化３９】
0006507234.tif 000053
ジクロロメタン（５mL）中の実施例３からの２−（１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロ−［１，２］オキサボロロ［４，３−ｃ］ピリジン−４−イル）−７，７−ジメチル−２，３，４，６，７，８−ヘキサヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−１−オン ３（３００mg、０．８９mmol）、メチル ４−ブロモ−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート（１８２mg、０．８９mmol）、酢酸銅（ＩＩ）（１９４mg、１．０７mmol）及びジトリエチルアミン（１０８mg、１．０７mmol）の混合物に、ピリジン（８５mg、１．０２mmol）を加えた。混合物を、酸素下で６０℃で１時間撹拌した。水を加え、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残留物を分取ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝３０：１）により精製して、１２６ａ（１００mg、２２％）を黄色の固体として与えた。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｎａ］＋＝５３６．１／５３８．１。
【０２４０】
工程２：  （Ｓ）−メチル １−（２−（７，７−ジメチル−１−オキソ−３，４，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２（６Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−４−（（５−（２−メチル−４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）アミノ）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート １２６ｂの調製
【化４０】
0006507234.tif 000054
１，４−ジオキサン（２mL）中の１２６ａ（７０mg、０．１４mmol）、８（３４mg、０．１４mmol）、Ｂｒｅｔｔｐｈｏｓ（７．３mg、０．０１４mmol）、炭酸セシウム（８９mg、０．２７mmol）、及びＢｒｅｔｔｐｈｏｓプレ触媒Ｇ３（６．２mg、０．００７mmol）の混合物を、窒素下で１００℃で１時間撹拌した。得られた混合物を水（５mL）で希釈し、酢酸エチル（２０mL×３）で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残留物を分取ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝３０：１）により精製して、１２６ｂ（２０mg、２２％）を黄色の固体として与えた。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝６８２．２。
【０２４１】
工程３：  アンモニア−テトラヒドロフラン（５０mL）中の１２６ｂ（２０mg、０．０３mmol）の混合物を、密閉したチューブ内で、１００℃で１６時間撹拌した。得られた混合物を濃縮し、残留物を分取ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝３０：１）により精製して、１２６（４．４mg、２３％）を固体として与えた：1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.52 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.54 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.58 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.32 - 7.30 (m, 2H), 6.86 (s, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.75 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.43 (s, 1H), 4.81 - 4.78 (m, 1H), 4.71 - 4.65 (m, 6H), 4.23 - 4.14 (m, 2H), 3.61 - 3.49 (m, 2H), 3.40 - 3.38 (m, 1H), 3.07 (m, 2H), 2.58 - 2.40 (m, 7H), 2.20 - 2.10 (m, 1H), 1.28 (s, 6H), 0.96 (d, J = 6.4 Hz, 3H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝６６７．２
【０２４２】
実施例１２７  １−［３−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−５−フルオロ−２−（ヒドロキシメチル）フェニル］−３−（１−メチルピラゾール−４−イル）ピラゾール−４−カルボキサミド １２７
【０２４３】
工程１：  １−（３−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−５−フルオロ−２−（ヒドロキシメチル）フェニル）−３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １２７ａ
【化４１】
0006507234.tif 000055
実施例１１５の手順に従って、２−ブロモ−６−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−４−フルオロベンズアルデヒド及び１−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピラゾールを、パラジウム触媒下で反応させて、１２７ａを形成した：ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５６１．９
【０２４４】
工程２：  実施例１１５の手順に従って、１２７ａを１２７に変換した：1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.72 (s, 1H), 8.32 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.59 - 7.57 (m, 2H), 7.50 (dd, J = 8.8, 2.4 Hz, 1H), 7.23-7.20 (m, 1H), 4.48 (s, 1H), 4.32 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 1.44 (s, 9H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５３４．１
【０２４５】
実施例１２８  ３−（ブタノイルアミノ）−１−［２−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロロ［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］ピラゾール−４−カルボキサミド １２８
実施例１２３の手順に従って、４−アミノ−１−（２−（７，７−ジメチル−１−オキソ−３，４，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２（６Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボニトリル １２３ｂ及び酪酸をカップリングさせて、１２８を形成した：1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.46 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.39 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 5.51 (d, J = 13.8 Hz, 3H), 5.05 (d, J = 47.8 Hz, 3H), 4.57 - 4.43 (m, 1H), 4.18 (d, J = 46.8 Hz, 3H), 2.55 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 2.49 (s, 2H), 2.00 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 1.41 (h, J = 7.4 Hz, 2H), 1.26 (s, 6H), 0.79 (t, J = 7.4 Hz, 3H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５０６．４
【０２４６】
実施例１２９  ３−（５−アミノピラジン−２−イル）−１−［２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］ピラゾール−４−カルボキサミド １２９
実施例１３０の手順に従って、１−（２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １１１ａを、１２９に変換した：ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５３０．２
【０２４７】
実施例１３０  １−［２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−［３−［２−（ジメチルアミノ）エチルカルバモイル］フェニル］ピラゾール−４−カルボキサミド １３０
【０２４８】
工程１：  ３−（１−（２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−４−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル）ベンズアミド １３０ａの調製
【化４２】
0006507234.tif 000056
無水ＡＣＮ（１mL）中の１−（２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １１１ａ（４０mg、０．０７３mmol）の溶液に、水（１mL）中の［３−（２−ジメチルアミノエチルカルバモイル）フェニル］ボロン酸（２６．４mg、０．１１２mmol）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２のＤＣＭ錯体（９mg、０．０１１２mmol）、及び１M 炭酸カリウムを加えた。反応混合物をＮ２（３Ｘ）で真空パージ／逆充填した。反応混合物を１１０℃で１時間撹拌した。粗反応物を、ＥｔＯＡｃ（２mL）及び飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（２mL）で希釈した。層を分離した。有機層をセライトパッドに通し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して、粗１３０ａを与えて、これを精製することなく工程２において用いた。
【０２４９】
工程２：  ＴＨＦ（０．５mL）に溶解した粗１３０ａ（０．０７mmol）に、ＥｔＯＨ（０．５mL）、ビス（ジメチルホスファニルオキシ）白金ジメチル亜ホスフィン酸（３．０mg、０．００７mmol）、及びＨ２Ｏ（１mL）を加え、反応混合物を大気下で９０℃で２時間撹拌した。反応物をＤＣＭ中で希釈した。有機層を水及びブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過して、減圧下で濃縮した。粗混合物を分取ＨＰＬＣにより精製して、１３０を固体として与えた（５．１mg、１１．１％）。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.85 (s, 1H), 8.74 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 8.57 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.47 (t, J = 5.6 Hz,1H), 8.26 (t, J = 1.7 Hz, 1H), 8.01 - 7.71 (m, 6H), 7.52 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.32 (s, 1H), 5.13 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 4.56 (d, J = 18.2 Hz, 2H), 3.44 - 3.34 (m, 2H), 2.61 - 2.52 (m, 1H), 2.47 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 2.25 (s, 6H), 1.40 (s, 9H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝６２７．３
【０２５０】
実施例１３１  １−［２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−４−カルボキサミド １３１
実施例１３０の手順に従って、（４−メチルピペラジン−１−イル）−［４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル］メタノン及び１１１ａを反応させて、１３１を形成した：1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.84 (s, 1H), 8.73 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 8.57 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.97 - 7.84 (m, 4H),7.84 - 7.74 (m, 2H), 7.52 - 7.41 (m, 2H), 7.35 (s, 1H), 5.12 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 4.56 (d, J = 21.4 Hz, 2H), 3.62 (s, 2H), 2.38 - 2.28 (m, 5H), 2.20 (s, 3H), 1.39 (d, J = 3.6 Hz, 9H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝６３９．３
【０２５１】
実施例１３２  １−［２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イル）ピラゾール−４−カルボキサミド １３２
実施例１３０の手順に従って、５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン及び１１１ａを反応させて、１３２を形成した：1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.75 (s, 1H), 8.86 (s, 1H), 8.73 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 8.65 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.57 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.41 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.98 - 7.87 (m, 2H), 7.79 (dd, J = 13.1, 1.8 Hz, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.51 (dd, J = 3.4, 2.4 Hz, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.56 - 6.48 (m, 1H), 5.14 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 4.59 (d, J = 21.7 Hz, 2H), 1.40 (s, 9H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５５３．２
【０２５２】
実施例１３３  ３−［４−（アミノメチル）フェニル］−１−［２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］ピラゾール−４−カルボキサミド １３３
実施例１３０の手順に従って、１−（２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １１１ａを、１３３に変換した：ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５４２．２
【０２５３】
実施例１３４  １−［２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−（１−イソブチルピラゾール−４−イル）ピラゾール−４−カルボキサミド １３４
実施例１３０の手順に従って、１−（２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １１１ａを、１３４に変換した：ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５５９．３
【０２５４】
実施例１３５  １−［２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−［６−（４−メチルピペラジン−１−イル）−３−ピリジル］ピラゾール−４−カルボキサミド １３５
実施例１３０の手順に従って、１−メチル−４−（５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イル）ピペラジン及び１１１ａを反応させて、１３５を形成した：1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.82 (s, 1H), 8.71 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 8.58 (dd, J = 11.8, 2.5 Hz, 2H), 8.00 (dd, J = 8.9, 2.4 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.90 - 7.75 (m, 2H), 7.70 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 6.89 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 5.11 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 4.55 (d, J = 20.5 Hz, 2H), 3.60 - 3.52 (m, 4H), 2.43 (q, J = 5.5, 4.9 Hz, 4H), 2.24 (s, 3H), 1.39 (s, 9H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝６１２．３
【０２５５】
実施例１３６  １−［２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−［２−（４−メチルピペラジン−１−イル）−４−ピリジル］ピラゾール−４−カルボキサミド １３６
実施例１３０の手順に従って、５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン及び１１１ａを反応させて、１３６を形成した： 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.83 (s, 1H), 8.74 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 8.57 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.16 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.96 - 7.84 (m, 2H), 7.83 - 7.72 (m, 2H), 7.41 (s, 2H), 7.09 (dd, J = 5.1, 1.2 Hz, 1H), 6.52 (s, 0H), 5.13 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 4.53 (d, J = 17.6 Hz, 2H), 3.50 (t, J = 4.9 Hz, 4H), 2.41 (t, J = 5.0 Hz, 4H), 2.22 (s, 3H), 1.39 (s, 9H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝６１２．３
【０２５６】
実施例１３７  ３−（６−アセトアミド−３−ピリジル）−１−［２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］ピラゾール−４−カルボキサミド １３７
実施例１３０の手順に従って、１−（２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １１１ａを、１３７に変換した：ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５７１．２
【０２５７】
実施例１３８  １−［２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−（６−ヒドロキシ−３−ピリジル）ピラゾール−４−カルボキサミド １３８
実施例１３０の手順に従って、１−（２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １１１ａを、１３８に変換した：ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５３０．２
【０２５８】
実施例１３９  １−［２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−（５−メチルスルホニル−３−ピリジル）ピラゾール−４−カルボキサミド １３９
実施例１３０の手順に従って、１−（２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １１１ａを、１３９に変換した：ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５９２．２
【０２５９】
実施例１４０  １−［２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−（３−キノリル）ピラゾール−４−カルボキサミド １４０
実施例１３０の手順に従って、１−（２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １１１ａを、１４０に変換した：ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５６４．２
【０２６０】
実施例１４１  １−［２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−［４−（ヒドロキシメチル）フェニル］ピラゾール−４−カルボキサミド １４１
実施例１３０の手順に従って、［４−（ヒドロキシメチル）フェニル］ボロン酸及び１１１ａを反応させて、１４１を形成した：1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.80 (s, 1H), 8.72 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 8.57 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.98 - 7.75 (m, 5H), 7.68 (s, 1H), 7.41 - 7.34 (m, 2H), 7.31 (s, 1H), 5.23 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 5.13 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 4.55 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 2.59 - 2.52 (m, 2H), 1.40 (s, 9H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５４３．２
【０２６１】
実施例１４２  １−［２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−ピリミジン−５−イル−ピラゾール−４−カルボキサミド １４２
実施例１３０の手順に従って、１−（２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １１１ａを、１４２に変換した：ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５１５．２
【０２６２】
実施例１４３  １−［２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−（４−ピリジル）ピラゾール−４−カルボキサミド １４３
実施例１３０の手順に従って、１−（２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １１１ａを、１４３に変換した：ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５１４．２
【０２６３】
実施例１４４  １−［２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソ−フタラジン−２−イル）−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジル］−３−（３−ピリジル）ピラゾール−４−カルボキサミド １４４
実施例１３０の手順に従って、１−（２−（６−tert−ブチル−８−フルオロ−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−４−イル）−３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １１１ａを、１４４に変換した：ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５１４．２
【０２６４】
実施例１４５  １−［３−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロロ［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−５−フルオロ−２−（ヒドロキシメチル）フェニル］−３−［［５−［（２Ｓ）−２−メチル−４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル］−２−ピリジル］アミノ］ピラゾール−４−カルボキサミド １４５
【０２６５】
工程１：  １−（３−（７，７−ジメチル−１−オキソ−３，４，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２（６Ｈ）−イル）−５−フルオロ−２−（ヒドロキシメチル）フェニル）−３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １４５ａの調製
【化４３】
0006507234.tif 000057
実施例１１１の手順に従って、出発物質として２−ブロモ−６−（７，７−ジメチル−４−オキソ−１，２，６，８−テトラヒドロシクロペンタ［３，４］ピロロ［３，５−ｂ］ピラジン−３−イル）−４−フルオロ−ベンズアルデヒドを用いて、１４５ａを調製した。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５４５．８
【０２６６】
工程２：  実施例１２５の手順に従って、１４５ａを１４５に変換した：1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.39 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.34 - 7.27 (m, 1H), 7.22 - 7.20 (m, 1H), 6.97 - 6.93 (m, 2H), 6.75 (s, 1H), 6.25 (br s, 2H), 4.70 - 4.63 (m, 6H), 4.57 - 4.46 (m, 4H), 3.53 - 3.49 (m, 3H), 3.08 (s, 2H), 2.59-2.53 (m, 5H), 2.46 (s, 2H), 2.21 - 2.16 (m, 1H), 1.29 (s, 6H), 0.98 - 0.94 (m, 3H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝６８４．３
【０２６７】
実施例１４６  （Ｓ）−１−（５−フルオロ−２−（ヒドロキシメチル）−３−（１−オキソ−３，４，６，７，８，９−ヘキサヒドロピリド［３，４−ｂ］インドリジン−２（１Ｈ）−イル）フェニル）−３−（（５−（２−メチル−４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）アミノ）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド １４６
【０２６８】
工程１：  １−（５−フルオロ−２−（ヒドロキシメチル）−３−（１−オキソ−３，４，６，７，８，９−ヘキサヒドロピリド［３，４−ｂ］インドリジン−２（１Ｈ）−イル）フェニル）−３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １４６ａの調製
【化４４】
0006507234.tif 000058
ジクロロメタン（２mL）中の２−（６−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−４−イル）−３，４，６，７，８，９−ヘキサヒドロピリド［３，４−ｂ］インドリジン−１（２Ｈ）−オン（８０mg、０．２３mmol）及び３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル（５１．５mg、０．２３mmol）の混合物に、４Å ＭＳ（８０mg）、酢酸銅（５１．４mg、０．２８mmol）及びトリエチルアミン（２８．３mg、０．２８mmol）を加えた。酸素下、５０℃で１時間撹拌後、反応物を水（１０mL）でクエンチし、酢酸エチル（１５mL×３）で抽出した。合わせた有機抽出物をブライン（１０mL×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させて、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１〜１：１）により精製して、１４６ａ（４５mg、３６％）を淡黄色の固体として与えた。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５３２．１。
【０２６９】
工程２：  （Ｓ）−１−（５−フルオロ−２−（ヒドロキシメチル）−３−（１−オキソ−３，４，６，７，８，９−ヘキサヒドロピリド［３，４−ｂ］インドリジン−２（１Ｈ）−イル）フェニル）−３−（（５−（２−メチル−４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）アミノ）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １４６ｂ
【化４５】
0006507234.tif 000059
１，４−ジオキサン（３ml）中の１−（５−フルオロ−２−（ヒドロキシメチル）−３−（１−オキソ−３，４，６，７，８，９−ヘキサヒドロピリド［３，４−ｂ］インドリジン−２（１Ｈ）−イル）フェニル）−３−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １４６ａ（４５mg、０．０８５mmol）及び（Ｓ）−５−（２−メチル−４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミン ４（３２mg、０．１３mmol）の混合物に、ＢｒｅｔｔＰｈｏｓ−Ｐｄ−Ｇ３（８mg、０．００８５mmol）、炭酸セシウム（５６mg、０．１７mmol）、次いでＢｒｅｔｔｐｈｏｓ（９mg、０．０１７mmol）を加えた。窒素下、１１０℃で６時間撹拌した後、反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル（２０mL×３）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝２０：１）により精製して、１４６ｂ（９mg、１６％）を黄色の固体として与えた。ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝６５２．３。
【０２７０】
工程３：  エタノール（１mL）及び水（０．５mL）中の（Ｓ）−１−（５−フルオロ−２−（ヒドロキシメチル）−３−（１−オキソ−３，４，６，７，８，９−ヘキサヒドロピリド［３，４−ｂ］インドリジン−２（１Ｈ）−イル）フェニル）−３−（（５−（２−メチル−４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）アミノ）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル １４６ｂ（９mg、０．０１３８mmol）及びヒドリド（ジメチル亜ホスフィン酸−ｋｐ）［水素ビス（ジメチルホスフィニト−ｋｐ］］白金（ＩＩ）（１mg、０．００１３８mmol）の混合物を、窒素下、９０℃で２時間撹拌した。それをジクロロメタン（２０mL）で希釈し、水（１０mL）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝２０：１）により精製して、１４６（２．７mg、２９％）を黄色の固体として与えた。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.39 (s, 1H), 8.71 (s, 1H), 8.02 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.47-7.43 (m, 1H), 7.37-7.34 (m, 1H), 7.11-7.09 (m, 1H), 6.98 (dd, J = 8.6, 2.6 Hz, 1H), 6.25 (s, 1H), 4.72-4.62 (m, 4H), 4.53 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.38 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.06-4.05 (m, 2H), 3.94-3.83 (m, 2H), 3.54-3.42 (m, 1H), 3.40 (br s, 1H), 3.17-3.08 (m, 3H), 2.97-2.90 (m, 1H), 2.85-2.82 (m, 2H), 2.58-2.55 (m, 1H), 2.42-2.46 (m, 2H), 2.23-2.14 (m, 1H), 2.06-2.03 (m, 3H), 1.89-1.86 (m, 3H), 1.70 (br s, 1H), 0.96 (m, 3H)；ＭＳ−ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］＋＝６７０．３。
【０２７１】
実施例９０１  生化学的Ｂｔｋアッセイ
式Ｉ化合物を試験するために使用され得る標準生化学的Ｂｔｋキナーゼアッセイについての一般手順は以下の通りである。１Ｘ細胞シグナル伝達キナーゼ緩衝液（２５mM トリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．５、５mM β−グリセロリン酸、２mM ジチオスレイトール、０．１mM Ｎａ３ＶＯ４、１０mM ＭｇＣｌ２）、０．５μM Ｐｒｏｍｅｇａ  ＰＴＫビオチン化ペプチド基質２、及び０．０１％ＢＳＡを含有するマスターミックスマイナスＢｔｋ酵素を調製する。１Ｘ細胞シグナル伝達キナーゼ緩衝液、０．５μM（マイクロモル）ＰＴＫビオチン化ペプチド基質２、０．０１％ＢＳＡ、及び１００ng／ウェル（０．０６mU／ウェル）Ｂｔｋ酵素を含有するマスターミックスプラスＢｔｋ酵素を調製する。Ｂｔｋ酵素を以下のようにして調製する：Ｃ末端Ｖ５及び６ｘＨｉｓタグを有する全長ヒト野生型Ｂｔｋ（受入番号NM-000061）を、このエピトープをタグされたＢｔｋを保有するバキュロウイルスを作製するために、pFastBac（登録商標）ベクター（Invitrogen/Life Technologies）にサブクローン化した。バキュロウイルスの生成を、その公開されているプロトコル「Bac-to-Bac Baculovirus Expression System」（Invitrogen/Life Technologies, カタログ番号10359-016及び10608-016）において詳述されているInvitrogenの指示に基づいて行う。継代３ウイルスを使用してＳｆ９細胞を感染させて、組換えＢｔｋタンパク質を過剰発現させる。次に、Ｂｔｋタンパク質を、Ｎｉ−ＮＴＡカラムを使用して均質に精製する。最終タンパク質調製物の純度は、高感度なSypro-Ruby染色に基づいて、９５％を超える。２００μM ＡＴＰの溶液を、水で調製し、そして１N ＮａＯＨでｐＨ７．４に調整する。５％ＤＭＳＯ中の化合物の１．２５μL（マイクロリットル）量を、９６ウェル1/2領域Ｃｏｓｔａｒポリスチレンプレートに移す。化合物を、一つずつ、かつ１１点用量反応曲線（出発濃度は１０μMである；１：２希釈）を用いて試験する。１８．７５μLの量のマスターミックスマイナス酵素（陰性対照として）及びマスターミックスプラス酵素を、９６ウェル1/2領域costarポリスチレンプレート内の適切なウェルに移す。４０μMの最終ＡＴＰ濃度になるように、２００μM ＡＴＰ ５μLを、９６ウェル1/2領域Costarポリスチレンプレート内のその混合物に加える。その反応物を室温で１時間インキュベートさせる。反応を、３０mM ＥＤＴＡ、２０nM ＳＡ−ＡＰＣ、及び１nM ＰＴ６６ Ａｂを含有するPerkin Elmer １Ｘ検出緩衝液で停止させる。そのプレートを、励起フィルター３３０nm、発光フィルター６６５nm、及び第二の発光フィルター６１５nmを使用してPerkin Elmer Envisionを用い、時間分解蛍光を使用して読み取る。ＩＣ５０値をその後、計算する。代替的に、Lanthascreenアッセイを使用して、そのリン酸化ペプチド生成物の定量を通してＢｔｋ活性を評価することができる。ペプチド生成物上のフルオレセインと検出抗体上のテルビウムとの間に生じるＦＲＥＴ（蛍光共鳴エネルギー移動）は、ペプチドのリン酸化を減少するＢｔｋの阻害剤の添加とともに減少する。２５μL（マイクロリットル）の最終反応容量において、Ｂｔｋ（ｈ）（０．１ng／２５μL反応）を、５０mM Ｈｅｐｅｓ  ｐＨ７．５、１０mM ＭｇＣｌ２、２mM ＭｎＣｌ２、２mM ＤＴＴ、０．２mM ＮａＶＯ４、０．０１％  ＢＳＡ、及び０．４ｕＭ  フルオレセインポリ−ＧＡＴと共にインキュベートする。反応は、ＡＴＰを２５μM（マイクロモル）のＡＴＰのＫｍに加えることによって惹起される。室温で６０分間のインキュベーション後、反応を、室温で３０分間、６０mM ＥＤＴＡ中の最終濃度２nM Ｔｂ−ＰＹ２０検出抗体を加えることによって、停止する。検出を、３４０nM励起及び４９５nm及び５２０nmでの発光で、Perkin Elmer Envision上で決定する。例示的Ｂｔｋ阻害ＩＣ７０値は、表１中にある。
【０２７２】
実施例９０２  Ｒａｍｏｓ細胞Ｂｔｋアッセイ
式Ｉ化合物を試験するために使用され得る標準細胞的Ｂｔｋキナーゼアッセイについての別の一般手順は以下の通りである。Ｒａｍｏｓ細胞を、０．５ｘ１０７細胞／mLの密度で試験化合物の存在下、３７℃で１時間インキュベートする。次に、細胞を、３７℃で５分間、１０μg／mL（マイクログラム／ミリリットル）の抗ヒトＩｇＭＦ（ａｂ）２と共にインキュベートすることによって刺激する。細胞を、ペレット状にし、溶解し、そしてタンパク質アッセイを、透明になった溶解物に実施する。等しいタンパク質量の各サンプルを、抗ホスホＢｔｋ（Ｔｙｒ２２３）抗体（Cell Signaling Technology #3531; Epitomics, cat. #2207-1）又はホスホＢｔｋ（Ｔｙｒ５５１）抗体（BD Transduction Labs #558034）のいずれかを用いてＳＤＳ−ＰＡＧＥ及びウエスタンブロット法に付して、Ｂｔｋ自己リン酸化、又は各溶解物中のＢｔｋの総量に対する制御に対する抗Ｂｔｋ抗体（ＢＤ  Ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ  Ｌａｂｓ  ＃６１１１１６）を評価する。
【０２７３】
実施例９０３  Ｂ細胞増殖アッセイ
式Ｉ化合物を試験するために使用され得る標準細胞的Ｂ細胞増殖アッセイのための一般手順は以下の通りである。Ｂ細胞を、Ｂ細胞単離キット（Miltenyi Biotech, Cat # 130-090-862）を使用して、８〜１６週齢のＢａｌｂ／ｃマウスの脾臓から精製する。試験用化合物を、０．２５％ＤＭＳＯに希釈し、そして１００μLの最終容量中の１０μg／mLの抗マウスＩｇＭ抗体（Southern Biotechnology Associates Cat # 1022-01）の添加前に３０分間、２．５ｘ１０５個の精製されたマウス脾臓Ｂ細胞と共にインキュベートする。２４時間インキュベーションの後に、１μＣｉ ３Ｈ−チミジン（１マイクロキュリーのトリチウム化チミジン）を加え、そしてプレートを、ＳＰＡ［３Ｈ］チミジン取込アッセイシステム（Amersham Biosciences # RPNQ 0130）についての製造業者のプロトコルを使用する収集前にさらに３６時間インキュベートする。ＳＰＡビーズベースの蛍光を、microbeta counter（Wallace Triplex 1450, Perkin Elmer）内で計数する。
【０２７４】
実施例９０４  Ｔ細胞増殖アッセイ
式Ｉ化合物を試験するために使用され得る標準Ｔ細胞増殖アッセイについての一般手順は以下の通りである。Ｔ細胞を、Pan T cell isolation kit（Miltenyi Biotech, Cat # 130-090-861）を使用して、８〜１６週齢のＢａｌｂ／ｃマウスの脾臓から精製する。試験用化合物を、０．２５％ＤＭＳＯに希釈し、そして各々１０μg／mLの抗ＣＤ３（BD#553057）及び抗ＣＤ２８（BD # 553294）抗体を用いて３７℃で９０分間プレコーティングした透明平底プレート中の最終容量１００μL中の２．５×１０５個の精製されたマウス脾臓Ｔ細胞と共にインキュベートする。２４時間インキュベーションの後に、１μＣｉ ３Ｈ−チミジンを加え、そしてプレートを、ＳＰＡ［３Ｈ］チミジン取込アッセイシステム（Amersham Biosciences # RPNQ 0130）についての製造業者のプロトコルを使用して収集前にさらに３６時間インキュベートする。ＳＰＡビーズベースの蛍光を、microbeta counter（Wallace Triplex 1450, Perkin Elmer）内で計数した。
【０２７５】
実施例９０５  ＣＤ８６阻害アッセイ
式Ｉ化合物を試験するために使用され得るＢ細胞活性の阻害のための標準アッセイについての一般手順は以下の通りである。全マウス脾細胞は、赤血球溶解（BD Pharmingen #555899）によって８〜１６週齢Ｂａｌｂ／ｃマウスの脾臓から精製する。試験用化合物を０．５％ＤＭＳＯに希釈し、そして透明な平底プレート（Falcon 353072）中の最終容量 ２００μL中の１．２５ｘ１０６個の脾細胞と共に３７ｏＣで６０分間インキュベートする。次に、細胞を１５μg／mL ＩｇＭ（Jackson ImmunoResearch 115-006-020）の添加により刺激し、そして５％ＣＯ２、３７ｏＣで２４時間インキュベートする。２４時間のインキュベーションの後に、細胞を透明円錐底の９６ウェルプレートに移し、そして１２００ｘｇｘ５分間での遠心分離によってペレット状にする。細胞を、ＣＤ１６／ＣＤ３２（BD Pharmingen #553142）によってプレブロックし、その後にＣＤ１９−ＦＩＴＣ（BD Pharmingen #553785）、ＣＤ８６−ＰＥ（BD Pharmingen #553692）、及び７ＡＡＤ（BD Pharmingen #51-68981E）で三重染色する。細胞を、BD FACSCalibur（登録商標）フローサイトメーター（BD Biosciences, San Jose, CA）で選別し、そしてＣＤ１９＋／７ＡＡＤ−集団でゲートする。ゲートした集団でのＣＤ８６表面発現のレベルを、試験化合物濃度に対して測定する。
【０２７６】
実施例９０６  Ｂ−ＡＬＬ細胞生存アッセイ
以下は、生存細胞の数を測定するためのＸＴＴ読み取りを使用する標準Ｂ−ＡＬＬ（急性リンパ芽球性白血病）細胞生存研究についての手順である。このアッセイを、培養下のＢ−ＡＬＬ細胞の生存を阻害する能力について、式Ｉ化合物を試験するために使用することができる。使用され得る１つのヒトＢ細胞急性リンパ芽球性白血病株は、ＡＴＣＣから入手可能であるヒトプレＢ細胞ＡＬＬ株、ＳＵＰ−Ｂ１５である。
【０２７７】
ＳＵＰ−Ｂ１５プレＢ−ＡＬＬ細胞を、複数の９６ウェルマイクロタイタープレートにおいて、Ｉｓｃｏｖｅ培地＋２０％ＦＢＳ １００μL中に５×１０５細胞／mLの濃度で蒔く。次に試験化合物を、０．４％ＤＭＳＯの最終濃度で加える。細胞を、５％  ＣＯ２を用い３７℃で最長３日間までインキュベートする。３日後、細胞を、試験化合物を含有する新鮮な９６ウェルプレートに１：３分割し、そしてさらに３日まで成長させる。各２４時間後、ＸＴＴ溶液 ５０μLを、複製された９６ウェルプレートの１つに加え、そして吸光度の読みを、製造業者の指示に従って２、４及び２０時間にとる。次に、アッセイの線形範囲内（０．５−１．５）のＤＭＳＯのみで処理された細胞についてのＯＤでとった読みをとり、そして化合物を処理したウェル内の生存細胞の割合を、ＤＭＳＯのみを処理した細胞に対して測定する。
【０２７８】
実施例９０７  ＣＤ６９全血アッセイ
ヒト血液を、以下の制限で健常なボランティアから得た：１週間薬物を使っていない非喫煙者。血液（８種の化合物を試験するために約２０mL）を、静脈穿刺によって、ナトリウムヘパリンを有するVacutainer（登録商標）（Becton, Dickinson and Co.）管へ回収する。
【０２７９】
ＤＭＳＯ中、１０mMの式Ｉ化合物の溶液を、１００％ＤＭＳＯに１：１０希釈し、次に、１０点用量反応曲線のために１００％ＤＭＳＯへの３倍段階希釈によって希釈する。化合物をさらに、ＰＢＳに１：１０希釈し、そして次に各化合物 ５．５μLのアリコートを二度繰り返し、２mL ９６ウェルプレートに加え；ＰＢＳ中の１０％ＤＭＳＯ ５．５μLを、対照及び非刺激ウェルとして加える。ヒト全血−ＨＷＢ（１００μL）を各ウェルに加える。混合した後、プレートを、３７℃、５％ＣＯ２、１００％湿度で３０分間インキュベートする。ヤギＦ（ａｂ’）２抗ヒトＩｇＭ（５００μg／mL溶液 １０μL、最終５０μg／mL）を、混合しながら各ウェルに加え（非刺激ウェルを除く）、そしてプレートをさらに２０時間インキュベートする。２０時間のインキュベーションの最後に、サンプルを、３７℃、５％ＣＯ２、１００％湿度で３０分間、蛍光標識抗体と共にインキュベートする。補償調節及び初期電圧設定のために誘導された対照、非染色、及び単一染色を含む。次に、サンプルを、製造業者の説明書に従って、PharM Lyse（商標）（BD Biosciences Pharmingen）と共に溶解する。次に、サンプルを、LSRII machine上のBD Biosciences HTS ９６ウェルシステムで実行されるのに適する９６ウェルプレートに移す。獲得されたデータ及び平均蛍光強度値を、BD Biosciences DIVAソフトウェアを使用して得た。結果を、最初はＦＡＣＳ分析ソフトウェア（Flow Jo）によって分析する。試験化合物についての阻害濃度（ＩＣ５０、ＩＣ７０、ＩＣ９０等）を、抗ＩｇＭによって刺激されたＣＤ２０陽性でもあるＣＤ６９細胞の陽性パーセントを例えば５０％減少させる濃度として定義する（非刺激バックグラウンドについての８個のウェルの平均の減算後の、８個の対照ウェルの平均）。ＩＣ７０値を、非線形回帰曲線適合を使用してPrism version 5によって計算し、そして表１に示す。
【０２８０】
実施例９０８  インビトロ細胞増殖アッセイ
式Ｉ化合物の有効性を、以下のプロトコルを用いる細胞増殖アッセイによって測定する（Mendoza et al (2002) Cancer Res. 62:5485-5488）。試薬及びプロトコルを含むCellTiter-Glo（登録商標）発光細胞生存度アッセイが市販されている（Promega Corp., Madison, WI, Technical Bulletin TB288）。このアッセイは、細胞に侵入し、そして細胞増殖を阻害する化合物の能力を評価する。アッセイ原理は、Cell-Titer Glo試薬の添加が細胞溶解及びルシフェラーゼ反応を介する発光シグナルの発生をもたらすホモジニアスアッセイにおいて存在するＡＴＰを定量化することによる、存在する生存細胞の数の決定に基づく。発光シグナルは、存在するＡＴＰの量に比例する。
【０２８１】
一団のＢ細胞リンパ腫細胞株（ＢＪＡＢ、ＳＵＤＨＬ−４、ＴＭＤ８、ＯＣＩ−Ｌｙ１０、ＯＣＩ−Ｌｙ３、ＷＳＵ−ＤＬＣＬ２）を、通常成長培地の３８４ウェルプレートに蒔き、そして段階希釈したＢＴＫ阻害剤又はＤＭＳＯ単独を各ウェルに加える。細胞生存度を、CellTiter-Glo（登録商標）（Promega）によって、９６時間のインキュベーション後、評価する。データは、ＤＭＳＯ処置した対照細胞に対する、ＢＴＫ阻害剤処置した細胞における相対細胞生存度として提示される場合もある。データ点は、各用量レベルでの実験４回の平均である。エラーバーは、平均からのＳＤを表す。
【０２８２】
手順：第１日−細胞をプレート（３８４ウェル黒色透明底、microclear、Ｆａｌｃｏｎ製蓋付きＴＣプレート #353962）に播種し、細胞を収集し、３日間アッセイのために、細胞を、１ウェル当たり５４μL当たり１０００個細胞で、３８４ウェル細胞プレートに播種する。細胞培地：ＲＰＭＩ又はＤＭＥＭ高グルコース、１０％ウシ胎仔血清、２mM Ｌ−グルタミン、Ｐ／Ｓ。３７oＣ、５％ＣＯ２で一晩インキュベートする。
【０２８３】
第２日−薬物を細胞に加え、化合物希釈、ＤＭＳＯプレート（９点用に段階１：２）、９６ウェルプレートの第二カラムに１０mMで化合物 ２０μLを加える。Precisionを使用して合計９点のために、プレート全体にわたって段階１：２（１０μL＋２０μL  １００％ＤＭＳＯ）を実施する。培地プレート  Nunc製９６ウェル円錐底ポリプロピレンプレート（cat.# 249946）（１：５０希釈）。培地 １４７μLを全てのウェルに加える。Rapidplateを使用して、ＤＭＳＯプレート内の各ウェルからＤＭＳＯ＋化合物  ３μLを、培地プレート上の各対応するウェルに移す。
【０２８４】
細胞への薬物添加、細胞プレート（１：１０希釈）、培地＋化合物 ６μLを細胞（細胞上にはすでに５４μLの培地）に直接加える。インキュベーター内で、３７Ｃ、５％  ＣＯ２で３日間インキュベートし、それはあまり開放されない。
【０２８５】
第５日−プレートを発育させ、Cell Titer Glo緩衝液を室温で解凍する。細胞プレートを３７℃から取り外し、そして室温と平衡させる。約３０分間。Cell Titer Glo緩衝液をCell Titer Glo基質に加える（ボトルからボトルへ）。Cell Titer Glo試薬（Promega cat.# G7572） ３０μLを細胞の各ウェルに加える。プレート振盪機上に約３０分間置く。Analyst HTプレートリーダー上で発光を読み取る（１ウェル当たり半秒）。
【０２８６】
細胞生存度アッセイ及び組み合わせアッセイ：細胞を３８４ウェルプレートにおいて１０００〜２０００個細胞／ウェルで１６時間播種した。第２日目、９つの段階１：２化合物希釈物を、９６ウェルプレートにおいてＤＭＳＯで作製する。化合物をさらに、Rapidplate（登録商標）ロボット（Zymark Corp., Hopkinton, MA）を使用して成長培地中に希釈する。次に、希釈した化合物を、３８４ウェル細胞プレート内の四つ組ウェルに加え、そして３７oＣ及び５％ＣＯ２でインキュベートする。４日後、生存細胞の相対数を、製造業者の説明書に従ってCell-Titer Glo（Promega）を使用して、発光によって測定し、そしてWallac Multilabel Reader（登録商標）（PerkinElmer, Foster City）で読み取る。ＥＣ５０値を、Prism（登録商標）４．０ソフトウェア（GraphPad, San Diego）を使用して計算する。式Ｉ化合物及び化学療法剤を、全てのアッセイにおいて、同時に加えるか、又は４時間隔てて加える（一方を他方の前に）。
【０２８７】
追加の例示的インビトロ細胞増殖アッセイは以下の工程を含む：
１．  培地中約１０４個の細胞を含有する細胞培地 １００mLのアリコートを、３８４ウェルの不透明壁を有するプレートの各ウェルに入れる。
２．  培地を含有し、細胞を含まない対照ウェルを準備する。
３．  化合物を実験ウェルに加え、そして３〜５日間インキュベートする。
４．  プレートを約３０分間、室温と平衡にする。
５．  各ウェル内に存在する細胞培地の容量と等しいCellTiter-Glo試薬の容量を加える。
６．  内容物を、オービタルシェーカー上で２分間混合して、細胞溶解を誘起する。
７．  プレートを室温で１０分間インキュベートして、発光シグナルを安定化する。
８．  発光を記録し、そしてＲＬＵ＝相対発光単位としてグラフで報告する。
【０２８８】
上述の発明は、理解の明確さの目的のために例示及び例としていくらか詳細に記載されたが、その記載及び例は、本発明の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。したがって、全ての適切な改変及び等価物が、後に続く特許請求の範囲によって定義されるとおりの発明の範囲内にあるとみなされ得る。本明細書において引用されている全ての特許及び科学文献の開示内容は、参照によりその全体が明白に組み入れられる。