(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＨＬＢが８以上１２以下である、多価アルコール脂肪酸エステル及びシリコーン系界面活性剤から選ばれる少なくとも１種以上と組成の異なる２種類以上の水相とを含有し、
前記多価アルコール脂肪酸エステルが、ポリエチレングリコール、（ポリ）ブチレングリコール、（ポリ）プロピレングリコール、（ポリ）グリセリン、及びソルビタンから選ばれる多価アルコールと脂肪酸とのエステルであり、
前記シリコーン系界面活性剤が、（ポリ）エーテル変性及び／又は（ポリ）グリセリン変性シリコーンであり、
前記組成の異なる２種類以上の水相のうち、少なくとも１種類の水相が、美白成分を含有する、油中水型皮膚外用組成物。
【請求項２】
前記脂肪酸の炭素数が１２以上３０以下である、請求項１に記載の皮膚外用組成物。
【請求項３】
前記脂肪酸が不飽和脂肪酸である、請求項１又は２に記載の皮膚外用組成物。
【請求項４】
前記脂肪酸は分岐鎖を有する、請求項１〜３の何れか１項に記載の皮膚外用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、水相中に含まれる有効成分を表皮ケラチノサイトへ効率的に送り込むことができる、油中水型皮膚外用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
油中水型乳化組成物は、連続相に油性成分が存在するため高い閉塞効果を有しており、保湿性が高いなどの利点を有する。このような油中水型乳化組成物にベシクルを含有させることで、油中水型乳化剤形でありながら、水溶性の有効成分の経皮吸収性を高める試みが提案されている（特許文献１）。
【０００３】
ところで、過酸化脂質が結合したメラニン（過脂化メラニン）は通常のメラニンよりも色調が濃く、表皮においてシミを生じさせたり肌の色を暗くしたりすることがわかっている。そこで、この過脂化メラニンをターゲットとする美白剤の探索もなされている（特許文献２）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００７−３０８３８０号公報
【特許文献２】特開２０１４−０４８２３５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
特許文献２に記載されるような新たな機序に基づく美白剤の開発に伴い、それらを効果的に肌に作用させるための技術が求められている。
そこで、本発明は、水溶性の有効成分を表皮へ効率的に送り込むことができる油中水型皮膚外用組成物を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、上記課題を解決すべく研究を進め、特定の界面活性剤には表皮ケラチノサイトに存在する過脂化メラニンキャップに吸着する性質があることを見出し、そのような界面活性剤を油中水型皮膚外用組成物に含有させることに想到し、本発明を完成させた。
【０００７】
本発明は、ＨＬＢ（Hydrophilic-Lypophilic Balance）が８以上１２以下である、多価アルコール脂肪酸エステル及びシリコーン系界面活性剤から選ばれる少なくとも１種以上を含有する、油中水型皮膚外用組成物である。特に、ポリエチレングリコール、（ポリ）ブチレングリコール、（ポリ）プロピレングリコール、（ポリ）グリセリン、及びソルビタンから選ばれる多価アルコールと脂肪酸とのエステルである多価アルコール脂肪酸エステルを含有することが好ましい。
また、前記多価アルコール脂肪酸エステルにおいては、脂肪酸の炭素数が１２以上３０以下であることが好ましい。また、前記脂肪酸は不飽和脂肪酸であることが好ましい。また、前記脂肪酸は分岐鎖を有することが好ましい。
また、本発明の皮膚外用組成物は、水相に表皮で作用する成分を含有することが好ましい。さらに、前記表皮で作用する成分は美白成分であることが好ましい。
なお、本明細書においてＨＬＢ（Hydrophilic-Lypophilic Balance）は、グリフィンの式より算出した値をいう。また、（ポリ）ブチレングリコール等というときは、ポリブチレングリコール又はブチレングリコールを指す。
【発明の効果】
【０００８】
本発明により、水相中に含まれる有効成分を表皮ケラチノサイトへ効率的に送り込むことができる油中水型皮膚外用組成物が提供される。有効成分としては美白成分が特に好ましく、このような皮膚外用組成物は美白用途に好適である。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】過脂化メラニンキャップを保持した分化ケラチノサイトのＬＳＭ観察写真。
【図２】ミセル液を塗布したヒト３次元培養表皮断面のＬＳＭ観察写真（Ａ：位相差観察、Ｂ：蛍光観察）。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
以下、本発明の皮膚外用組成物について説明するが、本発明の技術的範囲は、以下の具体的な実施形態にのみ限定されるものではない。
【００１１】
本発明の油中水型皮膚外用組成物は、ＨＬＢが８以上１２以下である、多価アルコール脂肪酸エステル及びシリコーン系界面活性剤から選ばれる少なくとも１種以上の界面活性剤を含有する。
本発明における多価アルコール脂肪酸エステル及びシリコーン系界面活性剤のＨＬＢの下限は８以上であり、９以上が好ましく、１０以上がより好ましい。また、上限は１２以下であり、１１以下が好ましい。ＨＬＢがこの範囲にある界面活性剤は、過脂化メラニンキャップに吸着することができる。上記界面活性剤のうち、多価アルコール脂肪酸エステルが好ましい。
【００１２】
多価アルコール脂肪酸エステルにおいて、親水基部分である多価アルコールとしては、例えばポリエチレングリコール、（ポリ）ブチレングリコール、（ポリ）プロピレングリコール、（ポリ）グリセリン、ソルビタン等が挙げられ、好ましくはポリエチレングリコールである。
多価アルコール脂肪酸エステルの疎水基部分である脂肪酸としては、炭素数が好ましくは１２以上、より好ましくは１６以上、さらに好ましくは１８以上であり、また好ましくは３０以下、より好ましくは２２以下であるものが好ましい。脂肪酸は飽和脂肪酸でも、不飽和脂肪酸でもよいが、不飽和脂肪酸であることが好ましい。また、脂肪酸は炭素鎖に分岐があってもなくてもよいが、分岐があることが好ましい。
このような多価アルコール脂肪酸エステルとしては、モノオレイン酸ポリエチレングリコール（例えば「エマレックスＯＥ−１０」（日本エマルション社製））、モノオレイン酸ポリエチレングリコールソルビタン（例えば「ニッコールＴＯ−１０６Ｖ」（日光ケミカルズ社製））、モノオレイン酸ジグリセリル（例えば「ニッコールＤＧＭＯ−９０Ｖ」（日光ケミカルズ社製））、イソステアリン酸ソルビタン（例えば「クリル６」（クローダジャパン社製））等が好ましく挙げられる。
【００１３】
シリコーン系界面活性剤において、シリコーン主鎖は、直鎖・分岐、架橋型でもよく、親水基部分である多価アルコールとしては、（ポリ）エーテル変性、（ポリ）グリセリン変性、（ポリ）アミノ変性等が挙あげられ、好ましくは、（ポリ）エーテル変性、（ポリ）グリセリン変性、さらに好ましくは、（ポリ）エーテル変性である。また、アルキル共変性、フッ素共変性されていてもよく、好ましくは、アルキル共変性である。
このようなシリコーン系界面活性剤としては、ＰＥＧ−９ジメチコン、ＰＥＧ−１２ジメチコン、ＰＥＧ−１０メチルエーテルジメチコン等が好ましく挙げられる。
【００１４】
本発明においてＨＬＢが８以上１２以下である、多価アルコール脂肪酸エステル又はシリコーン系界面活性剤は、１種又は２種以上を任意に組み合わせて用いることができ、そ
の総含有量は皮膚外用組成物全体の０．１〜１０重量％が好ましく、０．５〜６重量％がより好ましく、０．５〜５重量％がさらに好ましい。また、界面活性剤のうち多価アルコール脂肪酸エステルが、界面活性剤全体の３重量％以上を占めることが好ましく、より好ましくは５重量％以上、さらに好ましくは１０重量％以上である。
【００１５】
油中水型の乳化剤形としては、一般的なＷ／Ｏ型であってもよいが、その他に、組成の異なる２種類以上の水相を含む油中水型乳化剤形であってもよい。例えば、（Ｗ１＋Ｗ２）／Ｏ乳化型のように、組成が異なる２種類の水相（Ｗ１及びＷ２）を有する乳化組成物が挙げられる。もちろん、組成が異なる３種類の水相（Ｗ１、Ｗ２及びＷ３）を有する態様であってもよい。
組成が異なる２種類以上の水相を有することで、水相の環境条件をそれぞれ異なるものとすることができるため、水相に含める各有効成分の最適な環境を用意することができる。ここで、組成が異なる２種類以上の水相のうち、表皮ケラチノサイトに送り込みたい水性の有効成分を含む水相に、本発明で必須の含有成分とする上記特定の界面活性剤を含有させることが好ましい。
【００１６】
本発明の皮膚外用剤は、当該技術分野で通常行われている油中水型乳化製剤の調製方法に従って製造することができる。例えば、有機変性粘土鉱物を活用したゲル乳化法が挙げられる。
乳化系の経時安定性向上を目的として、ポリエチレングリコール、グリセリン、１，３−ブチレングリコール、エリスリトール、ソルビトール、キシリトール、マルチロール、ジグリセリン等の多価アルコールの任意の１種又は２種以上を、皮膚外用組成物全量の好ましくは１〜５０重量％、より好ましくは５〜４０重量％、さらに好ましくは１０〜３０重量％含有させてもよい。
また、乳化系の経時安定性向上のために、シリコーン系界面活性剤、非イオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤、両性界面活性剤、及びアニオン性界面活性剤等の界面活性剤であって、ＨＬＢが好ましくは３以上８以下、より好ましくは４以上６以下のものを１種又は２種以上、皮膚外用組成物全量の好ましくは１〜２０重量％、より好ましくは３〜１０重量％が、さらに好ましくは５〜８重量％含有させてもよい。
【００１７】
ＨＬＢが８以上１２以下である、多価アルコール脂肪酸エステル及びシリコーン系界面活性剤から選ばれる少なくとも１種以上の界面活性剤を油中水型皮膚外用組成物に含めれば、該界面活性剤は過脂化メラニンキャップに吸着するため、これで油水界面を形成された水相はその中に含む有効成分を効率的に表皮ケラチノサイトへ、特に過脂化メラニンキャップに送り込むことができる。
そのため、本発明の皮膚外用組成物は、表皮で作用する成分を水相に含有することが好ましい。表皮で作用する成分としては、通常皮膚外用組成物に配合する有効成分等、特に限定されない。
【００１８】
過脂化メラニンキャップが存在すると、シミを生じさせたり肌の色を暗くしたりする。そのため、本発明の皮膚外用剤組成物は、水相に美白成分を含有することが好ましい。特に、該美白成分が表皮で作用するものであれば、過脂化メラニンキャップへ効率的に送り込まれることによりその美白効果をより期待できる。
なお、本発明において「過脂化メラニン」とは、過酸化脂質とメラニンが結合した（脂質化）メラニンをいい、特開２０１４−０４８２３５号公報中の「脂化メラニン」と同義である。また、「メラニンキャップ」とは、細胞核が帽子をかぶったような状態に分布したメラノソームをいう。
【００１９】
美白成分としては、一般的に化粧料に用いられているものであれば特に限定はなく、例えば、４−ｎ−ブチルレゾルシノール、アスコルビン酸グルコシド、３−О−エチルアス
コルビン酸、トラネキサム酸、アルブチン、１−トリフェニルメチルピペリジン、１−トリフェニルメチルピロリジン、２−（トリフェニルメチルオキシ）エタノール、２−（トリフェニルメチルアミノ）エタノール、２−（トリフェニルメチルオキシ）エチルアミン、トリフェニルメチルアミン、トリフェニルメタノール、トリフェニルメタン及びアミノジフェニルメタン、Ｎ−（p−トルイル）システイン酸、Ｎ−（p−メトキシベンゾイル）システイン酸、Ｎ−ベンゾイル−セリン、Ｎ−（ｐ−メチルベンゾイル）セリン、Ｎ−（ｐ−エチルベンゾイル）セリン、Ｎ−（ｐ−メトキシベンゾイル）セリン、Ｎ−（ｐ−フルオロベンゾイル）セリン、Ｎ−（ｐ−トリフルオロメチルベンゾイル）セリン、Ｎ−（２−ナフトイル）セリン、Ｎ−（ｐ−メチルベンゾイル）−Ｏ−メチルセリン、Ｎ−（ｐ−メチルベンゾイル）−Ｏ−アセチルセリン、Ｎ−（２−ナフトイル）−Ｏ−メチルセリン、コウジ酸、４−メトキシサリチル酸カリウム塩、カモミラエキス、メリッサエキス、アーティチョークエキス、ユズエキス、マヨラナエキス、ビワ葉エキス、カッコンエキス，アロエエキス、クロレラエキス等が挙げられる。
化粧料における美白成分の含有量は、通常０．０１〜１０質量％であり、０．１〜１０質量％が好ましく、０．２〜５質量％がより好ましい。
【００２０】
本発明の水中油乳化型皮膚外用組成物は、化粧品、医薬部外品、医薬品に適用することが可能であり、本発明の効果を損なわない限りにおいて、それぞれの用途に応じて適宜必要な成分を含有させることができる。
このうち化粧料、特にスキンケア化粧料に適用させることが好ましい。
化粧料に適用される場合、通常化粧料に使用される成分を広く配合することが可能であり、また、その剤形や用途についても、何ら限定されない。以下、化粧料に適用される場合、化粧料中に含有させることができる成分について説明する。
通常化粧料に使用される成分としては、各種有効成分、油性成分、増粘剤、紛体類、紫外線吸収剤、有機変性粘土鉱物等が挙げられる。
有効成分としては、シワ改善成分、抗炎症成分、動植物由来の抽出物等が挙げられる。表皮で作用するものが好ましい。有効成分は、１種のみを含有させてもよく、２種以上含有されていてもよい。
【００２１】
シワ改善成分としては、一般的に化粧料に用いられているものであれば特に限定はない。例えば、ビタミンＡ又はその誘導体が、レチノール、レチナール、レチノイン酸、トレチノイン、イソトレチノイン、レチノイン酸トコフェロール、パルミチン酸レチノール、酢酸レチノールやウルソール酸ベンジルエステル、ウルソール酸リン酸エステル、ベツリン酸ベンジルエステル、ベンジル酸リン酸エステル、コンドロイチン硫酸ナトリウム、２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン、センブリエキス、ゲットウ葉エキス、加水分解ヒカゲノツルニンジン根エキス、ヤグルマギクエキス等が挙げられる。化粧料におけるシワ改善成分の含有量は、通常０．０１〜１０質量％であり、０．１〜１０質量％が好ましく、０．２〜５質量％がより好ましい。
【００２２】
動植物由来の抽出物としては、一般的に医薬品、化粧料、食品等に用いられているものであれば特に限定はない。例えば、アケビエキス、アスナロエキス、アスパラガスエキス、アボカドエキス、アマチャエキス、アーモンドエキス、アルニカエキス、アロエエキス、アロニアエキス、アンズエキス、イチョウエキス、インドキノエキス、ウイキョウエキス、ウドエキス、エイジツエキス、エゾウコギエキス、エンメイソウエキス、オウゴンエキス、オウバクエキス、オウレンエキス、オタネニンジンエキス、オトギリソウエキス、オドリコソウエキス、オレンジエキス、カキョクエキス、カッコンエキス、カモミラエキス、カロットエキス、カワラヨモギエキス、カンゾウエキス、キウイエキス、キューカンバーエキス、グアバエキス、クジンエキス、クチナシエキス、クマザサエキス、クララエキス、クルミエキス、グレープフルーツエキス、黒米エキス、クロレラエキス、クワエキス、ケイケットウエキス、ゲットウヨウエキス、ゲンチアナエキス、ゲンノショウコエキ
ス、紅茶エキス、ゴボウエキス、コメエキス、コメ発酵エキス、コメヌカ発酵エキス、コメ胚芽油、コケモモエキス、サルビアエキス、サボンソウエキス、ササエキス、サンザシエキス、サンシャエキス、サンショウエキス、シイタケエキス、ジオウエキス、シコンエキス、シソエキス、シナノキエキス、シモツケソウエキス、シャクヤクエキス、ショウキョウエキス、ショウブ根エキス、シラカバエキス、スギナエキス、ステビアエキス、ステビア発酵物、セイヨウキズタエキス、セイヨウサンザシエキス、セイヨウニワトコエキス、セイヨウノコギリソウエキス、セイヨウハッカエキス、セージエキス、ゼニアオイエキス、センキュウエキス、センブリエキス、ソウハクヒエキス、ダイオウエキス、ダイズエキス、タイソウエキス、タイムエキス、タンポポエキス、茶エキス、チョウジエキス、チンピエキス、甜茶エキス、トウガラシエキス、トウキエキス、トウキンセンカエキス、トウニンエキス、トウヒエキス、ドクダミエキス、トマトエキス、納豆エキス、ニンジンエキス、ニンニクエキス、ノバラエキス、ハイビスカスエキス、バクモンドウエキス、ハスエキス、パセリエキス、バーチエキス、ハマメリスエキス、ヒキオコシエキス、ヒノキエキス、ビワエキス、フキタンポポエキス、フキノトウエキス、ブクリョウエキス、ブッチャーブルームエキス、ブドウエキス、ブドウ種子エキス、ヘチマエキス、ベニバナエキス、ペパーミントエキス、ボダイジュエキス、ボタンエキス、ホップエキス、マツエキス、マヨナラエキス、マロニエエキス、ミズバショウエキス、ムクロジエキス、メリッサエキス、モズクエキス、モモエキス、ヤグルマギクエキス、ユーカリエキス、ユキノシタエキス、ユズエキス、ユリエキス、ヨクイニンエキス、ヨモギエキス、ラベンダーエキス、緑茶エキス、リンゴエキス、ルイボス茶エキス、レイシエキス、レタスエキス、レモンエキス、レンギョウエキス、レンゲソウエキス、ローズエキス、ローズマリーエキス、ローマカミツレエキス、ローヤルゼリーエキス、ワレモコウエキス等のエキスが好ましいものとして挙げられる。
化粧料中における動植物由来抽出物の含有量は、通常０．０１〜１０質量％であり、０．１〜１０質量％が好ましく、０．２〜５質量％がより好ましい。
【００２３】
抗炎症成分としては、クラリノン、グラブリジン、グリチルリチン酸、グリチルレチン酸等が挙げられ、好ましくは、グリチルリチン酸及びその塩、グリチルレチン酸アルキル及びその塩、並びに、グリチルレチン酸及びその塩である。
化粧料中における抗炎症成分の含有量は、通常０．０１〜１０質量％であり、０．１〜５質量％が好ましく、０．２〜３質量％がより好ましい。
【００２４】
油性成分としては、極性油、天然油、炭化水素油、シリコーン油等が挙げられる。
極性油としては、合成エステル油として、ミリスチン酸イソプロピル、オクタン酸セチル、ミリスチン酸オクチルドデシル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、ラウリン酸ヘキシル、ミリスチン酸ミリスチル、オレイン酸デシル、ジメチルオクタン酸ヘキシルデシル、乳酸セチル、乳酸ミリスチル、酢酸ラノリン、ステアリン酸イソセチル、イソステアリン酸イソセチル、１２−ヒドロキシステアリル酸コレステリル、ジ−２−エチルヘキシル酸エチレングリコール、ジペンタエリスリトール脂肪酸エステル、モノイソステアリン酸Ｎ−アルキルグリコール、ジカプリン酸ネオペンチルグリコール、リンゴ酸ジイソステアリル、ジ−２−ヘプチルウンデカン酸グリセリン、トリ−２−エチルヘキシル酸トリメチロールプロパン、トリイソステアリン酸トリメチロールプロパン、テトラ−２−エチルヘキシル酸ペンタンエリスリトール、トリ−２−エチルヘキシル酸グリセリン、トリイソステアリン酸トリメチロールプロパンを挙げることができる。
【００２５】
さらに、セチル２−エチルヘキサノエート、２−エチルヘキシルパルミテート、トリミリスチン酸グリセリン、トリ−２−ヘプチルウンデカン酸グリセライド、ヒマシ油脂肪酸メチルエステル、オレイン酸オイル、セトステアリルアルコール、アセトグリセライド、パルミチン酸２−ヘプチルウンデシル、アジピン酸ジイソブチル、Ｎ−ラウロイル−Ｌ−グルタミン酸−２−オクチルドデシルエステル、アジピン酸ジ−２−ヘプチルウンデシル
、エチルラウレート、セバチン酸ジ−２−エチルヘキシル、ミリスチン酸２−ヘキシルデシル、パルミチン酸２−ヘキシルデシル、アジピン酸２−ヘキシルデシル、セバチン酸ジイソプロピル、コハク酸２−エチルヘキシル、酢酸エチル、酢酸ブチル、酢酸アミル、クエン酸トリエチル、オクチルメトキシシンナメート等も挙げられる。
【００２６】
また、天然油として、アボカド油、ツバキ油、タートル油、マカデミアナッツ油、トウモロコシ油、ミンク油、オリーブ油、ナタネ油、卵黄油、ゴマ油、パーシック油、小麦胚芽油、サザンカ油、ヒマシ油、アマニ油、サフラワー油、綿実油、エノ油、大豆油、落花生油、茶実油、カヤ油、コメヌカ油、シナギリ油、日本キリ油、ホホバ油、胚芽油、トリグリセリン、トリオクタン酸グリセリン、トリイソパルミチン酸グリセリン等が挙げられる。
【００２７】
炭化水素油としては、イソドデカン、イソヘキサデカン、スクワラン、ワセリン、水添ポリ（Ｃ６−１２オレフィン）、水添ポリイソブテン等が挙げられ、中でもワセリンが好ましい。
シリコーン油としてはシクロペンタシロキサン、デカメチルシクロペンタシロキサン、カプリリルメチコン、ジメチコン、（ジメチコン／ビニルジメチコン）クロスポリマー、（ジメチコン/フェニルビニルジメチコン）クロスポリマー等が挙げられ、これらのうち粘度１０〜８００万ｍＰａｓの高重合ジメチコンが好ましい。
【００２８】
増粘剤としては、グアガム、クインスシード、カラギーナン、ガラクタン、アラビアガム、ペクチン、マンナン、デンプン、キサンタンガム、カードラン、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、メチルヒドロキシプロピルセルロース、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、グリコーゲン、ヘパラン硫酸、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸ナトリウム、トラガントガム、ケラタン硫酸、コンドロイチン、ムコイチン硫酸、ヒドロキシエチルグアガム、カルボキシメチルグアガム、デキストラン、ケラト硫酸、ローカストビーンガム、サクシノグルカン、カロニン酸，キチン、キトサン、カルボキシメチルキチン、寒天、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、アルキル変性カルボキシビニルポリマー、ポリアクリル酸ナトリウム、ポリエチレングリコール、ベントナイト等が挙げられる。
【００２９】
粉体類としては、表面を処理されていてもよい、マイカ、タルク、カオリン、合成雲母、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、無水ケイ酸（シリカ）、酸化アルミニウム、硫酸バリウム等の粉体類、表面を処理されていてもよい、ベンガラ、黄酸化鉄、黒酸化鉄、酸化コバルト、群青、紺青、酸化チタン、酸化亜鉛の無機顔料類、表面を処理されていてもよい、雲母チタン、魚燐箔、オキシ塩化ビスマス等のパール剤類、レーキ化されていてもよい赤色２０２号、赤色２２８号、赤色２２６号、黄色４号、青色４０４号、黄色５号、赤色５０５号、赤色２３０号、赤色２２３号、橙色２０１号、赤色２１３号、黄色２０４号、黄色２０３号、青色１号、緑色２０１号、紫色２０１号、赤色２０４号等の有機色素類、ポリエチレン末、ポリメタクリル酸メチル、ナイロン粉末、オルガノポリシロキサンエラストマー等の有機粉体類、が挙げられる。
【００３０】
紫外線吸収剤としては、パラアミノ安息香酸系紫外線吸収剤、アントラニル酸系紫外線吸収剤、サリチル酸系紫外線吸収剤、桂皮酸系紫外線吸収剤、ベンゾフェノン系紫外線吸収剤、糖系紫外線吸収剤、２−（２'−ヒドロキシ−５'−ｔ−オクチルフェニル)ベンゾトリアゾール、４−メトキシ−４'−ｔ−ブチルジベンゾイルメタン等の紫外線吸収剤類、等が挙げられる。
【００３１】
有機粘土鉱物としては、ジメチルジステアリルアンモニウム変性ヘクトライト、ベンジルジメチルステアリルアンモニウム変性ヘクトライト、トリオクチルメチルアンモニウム
ヘクトライト等が挙げられる。
【実施例】
【００３２】
以下、実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００３３】
＜１＞過脂化メラニンキャップへの吸着性の評価
チロシナーゼ、ドーパ、及び大豆リン脂質を１％ＰＢＳ溶液中で反応させ、過脂化メラニン溶液とした（反応収率１００％のとき、過脂化メラニン濃度約３０％）。前記過脂化メラニン溶液に、表１に記載の各界面活性剤水溶液（２０重量％）を、界面活性剤濃度が９重量％になるように添加し、軽く振り混ぜた後、２時間静置した。静置後に過脂化メラニンとの相互作用により沈降した界面活性剤を含めないように上澄み０．５ｇをメスフラスコにとり、水２．５ｍＬを加え、テトラヒドロフランを加えて正確に１０ｍＬとした。これをメンブランフィルター（孔径０．２μｍ）でろ過し、ろ液を試料溶液とした。上澄みに代えて、前記各界面活性剤水溶液を用いて同様に調製し、対照溶液とした。また、上澄みに代えて、１％ＰＢＳ溶液を用いて同様に調製し、ブランク溶液とした。
各試料溶液、対照溶液、ブランク溶液を用いてＨＰＬＣ解析を行い、蒸発光散乱で検出した界面活性剤のピーク面積を算出した。ＨＰＬＣ条件は以下の通り。
【００３４】
ＨＰＬＣ装置：島津製作所  ＬＣ１０シリーズ
カラム：Agilent Poroshell 120 SB-C18  （3.0mm×100、2.7μｍ）
カラム温度：４０℃
移動相：７０％テトロヒドロフラン
流速：０．５ｍＬ/ｍｉｎ  （１８ＭＰａ）
蒸発光散乱装置：Polymer Laboratories PL-ELS2100
Evap temp：９０℃
Neb temp：５０℃
Gas flow：１．２ＳＬ
【００３５】
表１に結果を示す。減量率は対照溶液のピーク面積に対する試料溶液のピーク面積の割合として算出した。減量率が大きいほど、界面活性剤が過脂化メラニンキャップに吸着して沈降した分が多いことを表す。
【００３６】
【表１】
0006492318.tif 000002
【００３７】
＜２＞過脂化メラニンキャップへの吸着の観察
正常ヒト皮膚表皮角化細胞（ケラチノサイト、クラボウ社製）を、４ウェルチャンバースライド（ＩＷＡＫＩ社製）に７×１０４cells/ウェルずつ播種し、インキュベーター内（ＣＯ２濃度５％、３７℃）で、２４時間培養した。Ｂ１６−Ｆ０細胞（マウスメラノソーマ細胞）から取り出した、メラノソームを上記培養したケラチノサイトに添加し、さらにインキュベーター内（ＣＯ２濃度５％、３７℃）で、２４時間培養した。親水性蛍光プローブ（FluoSpheres Fluorescent Microspheres、invitrogen社製）７．２×１０８particles/mLと、モノオレイン酸ポリエチレングリコール（エマレックスＯＥ−１０、日本エマルション社製）０．１重量％とを、上記培養した過脂化メラニンキャップを保持した分化ケラチノサイトに添加し、さらにインキュベーター内（ＣＯ２濃度５％、３７℃）で、４時間培養した。また、比較のため親水性蛍光プローブのみを添加した分化ケラチノサイトも同様に培養した。培養後の細胞を、ＰＢＳ溶液（５００μＬ/ウェル）で洗浄した後、核を染色（Dapi Fluormount-G、Southern Biotech社製）し、さらに４％パラホフムアルデヒド・リン酸緩衝液（ＷＡＫＯ社製）で１５分間かけて固定した。
固定化細胞を、共焦点レーザー走査顕微鏡（ＬＳＭ）で観察した。測定は、カールツァイスマイクロスコピー社製のＬＳＭ装置を用い、室温にて、倍率６３０倍、励起波長５８０ｎｍで行った。
図１にＬＳＭ観察像を示す。親水性蛍光プローブのみを添加した場合（Ａ）に比べ、親水性蛍光プローブとともにモノオレイン酸ポリエチレングリコールを添加したケラチノサイト（Ｂ）では、より強く蛍光染色されており、モノオレイン酸ポリエチレングリコールが過脂化メラニンキャップに吸着していることが分かる。
【００３８】
＜３＞（Ｗ１＋Ｗ２）／Ｏ型乳化組成物の作製
表２に示す処方で本発明の（Ｗ１＋Ｗ２）／Ｏ型皮膚外用組成物を作製した。すなわち、イを撹拌混合して溶解させた後、ロ、ハ及びニを添加して、本発明の（Ｗ１＋Ｗ２）／Ｏ型乳化組成物を得た。
【００３９】
【表２】
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【００４０】
＜４＞水相成分の表皮への浸透の観察 
モノオレイン酸ポリエチレングリコール（エマレックスＯＥ−１０、日本エマルション社製）１重量％水溶液、及びカルセイン ３０ｍＭ水溶液を用いてミセル液（サンプル）を作製した。
スクリュー管（容量３０ｍＬ）に、レシーバー溶液としてＰＢＳ（−）バッファー（ｐＨ７．０）を２９ｍＬ採取した。ここに、インキュベーター（３７℃、５％ＣＯ２）で１時間前培養したヒト３次元培養表皮（Labcyte EPI-MOODEL24）を培養カップごとセットした。３２℃で１０分間馴化した後、該表皮にサンプルを５０μＬ塗布した。３時間静置した後、メスを用いて培養カップから表皮を切り出した。これをＯＣＴコンパウンドに浸して液体窒素により凍結することで包埋した。クライオスタットを用いて１０μｍ厚の切片を作製した。該切片を、共焦点レーザー走査顕微鏡（ＬＳＭ）で観察した。測定は、カールツァイスマイクロスコピー社製のＬＳＭ装置を用い、倍率２００倍、励起波長４８８ｎｍ、蛍光波長５１５ｎｍで行った。
図２にＬＳＭ観察像を示す。表皮全体で蛍光マーカーが観察されたことから、ミセルの水相成分が角層を突破して表皮全体に浸透したことが分かる。
【産業上の利用可能性】
【００４１】
本発明により、水相中に含まれる有効成分を表皮ケラチノサイトへ効率的に送り込むことができる油中水型皮膚外用組成物が提供される。有効成分を表皮において、特に美白成分を表皮ケラチノサイトの過脂化メラニンキャップ近傍において、効率的に作用させることができるため、本発明は産業上非常に有用である。
【図１】
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【図２】
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