(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
黒ニンジン（Daucuscarota subsp sativus cv.）の搾汁液または粉末を含有しており、前記搾汁液または粉末がアントシアニジン類を含有するものである添加剤を含有する皮膚化粧料であって、
皮膚化粧料中のアントシアニジン類の含有割合が０．０００１〜１質量％の範囲である、皮膚化粧料。
【請求項２】
前記搾汁液または粉末が、アントシアニジン類、カロテン類を含有しており、前記搾汁液または粉末中のアントシアニジン類の含有量が０．１〜０．５質量％である、請求項１記載の皮膚化粧料。
【請求項３】
前記化粧料が、保湿クリーム、美容液、化粧水、美白化粧料、美白ローション、乳液、日焼け止め乳液、ファンデーションから選ばれるものである、請求項１記載の皮膚化粧料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、栄養補助食品と、飲食品、化粧品および皮膚外用剤などに配合する添加剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
黒ニンジン（Daucus carota subsp sativus cv.）は、セリ科ニンジン属ニンジンの一品種であり、通常のニンジンにはあまり含まれていないアントシアニジンを含んでいる。
【０００３】
特許文献１には、水溶解性アントシアニジンからなる血糖代謝改善剤の発明が記載されている（特許請求の範囲）。
特許文献２には、歯周病用歯磨組成物の発明が記載されており（特許請求の範囲）、ポリフェノールとしてアントシアニジン類が配合できることが記載されている（段落番号００２１）。
特許文献３には、パープルキャロット色素を用いて紫色に着色する食品の製造方法の発明が記載されている（特許請求の範囲）。パープルキャロット色素は、紫ニンジン（黒ニンジン）の根から抽出される水溶性色素であることが記載されている（段落番号０００７）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２０１４−１９８６８４号公報
【特許文献２】特開２０１４−９４９５９号公報
【特許文献３】特開２００８−１４２０６１号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、栄養補助食品と、飲食品、化粧品および皮膚外用剤などに配合する添加剤を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、黒ニンジン（Daucus carota subsp sativus cv.）の搾汁液または粉末を含有しており、前記搾汁液または粉末がアントシアニジン類を含有するものである、栄養補助食品と、飲食品などの添加剤を提供する。
【発明の効果】
【０００７】
本発明の栄養補助食品は、アントシアニジン類などを含有する搾汁液または粉末を含んでおり、栄養補給効果が得られることが期待される。
本発明の添加剤は、アントシアニジン類などを含有する搾汁液または粉末を含んでおり、飲食品、化粧料、皮膚外用剤などに配合することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】試験例１のチロシナーゼ活性阻害評価の結果を示す。
【図２】試験例２のチロシナーゼ生合成阻害評価の結果を示す。
【図３】試験例３のＭＴＴアッセイ評価の結果を示す。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明の栄養補助食品および添加剤は、黒ニンジン（Daucus carota subsp sativus cv.）の根から搾汁した搾汁液、または根の粉末を含んでいるものであり、黒ニンジンの葉、茎などからの搾汁液または粉末は含まない。
搾汁液は、搾汁後の絞り滓は実質的に含まないが、製造工程に起因して、僅かな量の前記絞り滓が混入していてもよい。
搾汁液には、水やアルコールなどの溶媒を使用した抽出液は含まれない。
【００１０】
本発明の栄養補助食品および添加剤に含まれる搾汁液または粉末は、アントシアニジン類、カロテン類（α−カロテン、β−カロテン）などを含有している。
アントシアニジン類は、Ｃ６-Ｃ３-Ｃ６のフラボノイドの基本骨格を有するアグリコン（非糖部）で、糖や有機酸が結合するとアントシアニン（配糖体）になる。
アントシアニジン類は、置換基（ヒドロキシル基、メトキシル基）の数の違いから、シアニジン、デルフィニジン、ペラルゴニジン、ペオニジン、ペチュニジン、マルビジンなどに分けられる。
本発明の栄養補助食品または添加剤に含まれる搾汁液または粉末は、０．１〜０．５質量％のアントシアニジンを含有していることが好ましい。
【００１１】
本発明の栄養補助食品および添加剤は、液体および固体のいずれの形態でもよい。
本発明の栄養補助食品および添加剤が液体であるときは、搾汁液を濃縮したもの、水、水とエタノールの混合液などで希釈したもの、他の植物搾汁液と混合したものなどでもよい。
本発明の栄養補助食品および添加剤が固体であるときは、粉末を成形した顆粒、錠剤、搾汁液を乾燥した粉末、賦形剤を使用して成形した粉末、顆粒、錠剤などでもよい。
【００１２】
本発明の栄養補助食品および添加剤は、例えば、次の各工程による処理を経て、製造することができる。
（第１工程）
生の黒ニンジンを洗浄する工程。
洗浄は、水洗、水洗後にオゾン水などを使用する殺菌洗浄などを実施することができる。
【００１３】
（第２工程）
水蒸気処理工程。
洗浄後の黒ニンジンを水蒸気で蒸す。
【００１４】
（第３工程）
水蒸気処理した黒ニンジンから搾汁手段により搾汁する工程。
なお、第１工程と第２工程の間において、必要に応じて黒ニンジンを適当な大きさに切断する工程を付加することができる。
搾汁手段は、公知の搾汁機（ジューサーも含む）、ミキサーなどを使用することができる。
【００１５】
（第４工程）
第３工程で得た搾汁液から絞り滓を分離する工程。
第４工程では、第３工程で得た搾汁液の状態に応じて、網で液と滓を分離する方法、搾汁的を脱水機で処理する方法、濾過用の布材に入れて絞る方法などを適用することができる。
【００１６】
（第５工程）
栄養補助食品および添加剤を液体にするときは、第４工程終了時のものをそのまま使用することができるほか、濃縮、希釈、他の液体と混合などをする。
栄養補助食品および添加剤を固体にするときは、乾燥、成形などをする。乾燥は、第５工程終了後に凍結乾燥、スプレードライ法などの公知の乾燥方法を適用することができる。
また黒ニンジンの搾汁液に代えて粉末を使用するときは、第２工程の終了後に乾燥した後、粉砕する方法も適用することができる。前記乾燥法としては、フラッシュドライヤー（気流乾燥機）を使用して、ごく短時間で乾燥する方法を適用することができる。
【００１７】
本発明の栄養補助食品は、食後、食間、就寝前などに経口摂取することができる。
本発明の添加剤は、飲食品、化粧品、皮膚外用剤、医薬部外品、医薬品、医薬品材料、医薬部外品材料などの添加剤として使用することができる。
また、本発明の添加剤は、前記用途に応じて、予め安定剤、ｐＨ調整剤、殺菌剤などを配合しておくこともできる。
一例として、第３工程で得た搾汁液に対して、ｐＨ調整剤として５％クエン酸水溶液１１〜１２質量％、殺菌剤として０．１〜０．５質量％を配合した添加剤にすることができる。
【００１８】
本発明の添加剤を飲食品用の添加剤として使用するときは、以下に示す飲食品に添加することができる。
茶系飲料、スポーツ飲料、美容飲料、果汁飲料、炭酸飲料、アルコール飲料、清涼飲料、ゼリー飲料、ヨーグルト飲料、水や湯、炭酸水などで希釈する濃縮タイプの飲料などの飲料品、その他飲料（スープ、コーヒー、茶類、ジュース、ココアなど）、
水や湯などに溶解または懸濁させて飲用する粉末や顆粒、タブレットなどの乾燥固形物、
タブレット菓子、ゼリー類、スナック類、揚げ菓子、ケーキ類、羊羹、まんじゅうなどの和菓子類、ドーナツ、クッキーなどの洋菓子類、チョコレート、ガム、飴、グミなどの菓子類、スープ類、めん類、米飯類、シリアル、乳製品（牛乳、ヨーグルト、乳清飲料、乳酸菌飲料、バター、クリーム、チーズなど）、氷菓（アイスキャンディー、アイスクリーム、シャーベットなど）、冷菓（ゼリー、プリン、水ようかんなど）、油脂食品（マーガリン、ショートニング、ファットスプレッドなど）などに添加することができる。
調味料（味噌、醤油など）、健康食品（錠剤、カプセルなど）、栄養補助食品（栄養ドリンクなど）、水産加工品類、味噌汁やお吸い物などの汁物類、ハム・ソーセージなどの畜肉製品類、魚肉ハム、かまぼこなどの魚肉製品類、惣菜類、煮物類、乳製品、ホットケーキミックス、お好み焼きなどのミックス類、即席麺や即席スープの素など即席飲食品、離乳食、野菜ペースト、フルーツペーストなどのペースト類、などに添加することができる。
【００１９】
本発明の添加剤を飲食品用の添加剤として使用するときは、必要に応じて、本発明の目的を損なわない範囲で下記の成分を適宜選択して配合することができる。
また、本発明の栄養補助食品にも、下記の成分を適宜選択して配合することができる。
例えば、例えば、糖質甘味料（果糖、ブドウ糖、タガトース、アラビノースなどの単糖類、乳糖、オリゴ糖、麦芽糖、トレハロースなどの少糖類、粉末水あめ、デキストリン、糖アルコールなど）、高甘味度甘味料（スクラロース、アセスルファムＫ、ステビアなど）、でん粉などの多糖類、油脂類、乳製品、安定剤、乳化剤、香料（バニリン、リナロール、天然香料など）、色素、着色料、酸味料、風味原料（卵、コーヒー、茶類、ココア、果汁果肉、ヨーグルト、酒類など）、香味料（ラズベリーフレーバー、アップルフレーバー、コーヒーフレーバーなど）、湿化防止剤、電解質、保存料、湿潤剤、蛋白質、アミノ酸、ペプチド、食物繊維、有機酸（クエン酸、リンゴ酸、フマル酸、マロン酸、コハク酸、酒石酸、乳酸など）、ビタミン類（Ｌ−アスコルビン酸、ｄｌ−α−トコフェロール、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ナイアシン、パントテン酸、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、葉酸、ビオチン、イノシトールなど）、白金、ミネラル（亜鉛、鉄、カルシウム、マグネシウム、クロム、セレン、カリウム、ナトリウムなど）、海洋性コラーゲン、加水分解コラーゲン、ヒアルロン酸、発酵酵母エキス、グルコサミン、酵母、卵殻膜、リコピン、アスタキサンチン、その他カロテノイド、シルク、コンドロイチン、セラミド、プラセンタエキス、フカヒレエキス、深海鮫エキス、スクワレン、γ−アミノ酪酸、カゼインドデカペプチド、生栗皮抽出物、栗の葉抽出物、栗のいが抽出物、栗果肉抽出物、栗樹皮抽出物、キャベツ発酵エキス、バラの花びら抽出物、ブドウ葉抽出物、ブドウ種子抽出物、りんごポリフェノール、カミツレエキス、ライチ種子エキス、ゴツコラエキス、月桃葉エキス、ハス胚芽エキス、スターフルーツ葉エキス、桑葉抽出物、グァバ茶抽出物、赤ワイン、緑茶、紅茶、ウーロン茶、コーヒー、ココア、チョコレート、黒ゴマ、豆類、豆乳、ナッツ類、きのこ類、緑黄食野菜類、ヨード卵などの卵由来原料、カテキン類、その他アントシアニジン以外のポリフェノール類、ラズベリーケトン、低分子アルギン酸、サイリウム種皮、イチョウ葉抽出物、松樹皮抽出物、ナットウキナーゼ、植物ステロール、ジアシルグリセロール、キトサン、ヒアルロン酸、メチルスルフォニルメタン、コウジ酸、エラグ酸、アルブチン、ルシノール、マグノリグナン、リン酸Ｌ−アスコルビン酸マグネシウム、ＣｏＱ１０、α−リポ酸などが挙げられる。
【００２０】
また本発明の添加剤に含まれる黒ニンジンの搾汁液は、アントシアニジン類、カロテン類などを含有していることから、通常のニンジン（黒ニンジン以外のニンジン）の代替品や一部置換品として使用することもできる。
通常のニンジン（黒ニンジン以外のニンジン）の代替品や一部置換品として使用する場合には、通常のニンジンが含むカロテン類を減少させることなく、さらにアントシアニジンを含有させることができるため好ましい。
【００２１】
本発明の添加剤を化粧品用の添加剤として使用するときは、保湿クリーム、美容液、化粧水、美白化粧料、美白ローションなどの皮膚化粧料、育毛剤などの頭皮化粧料、シャンプー、コンディショナー、ヘアエッセンスなどの毛髪（頭皮も含む）化粧料、パック、オイル、軟膏、スプレー、貼付剤などに配合することができる。
【００２２】
本発明の添加剤を皮膚外用剤の添加剤として使用するときは、液剤、湿布剤、塗布剤、ゲル剤、クリーム剤、ジェル、スティック、シート、パップ、エアゾール剤、ローション剤、粉剤、泡剤、ボディーソープ、石鹸などに配合することができるほか、不織布などの基材上に本発明の添加剤を含む有効成分を積層したものとして使用することもできる。
【００２３】
本発明の添加剤を飲食品、化粧品、皮膚外用剤などに添加するときは、アントシアニジンの含有量を基準として配合することができる。
本発明の添加剤を飲食品に添加するときは、飲食品の種類により異なるが、アントシアニジンが０．００１〜５質量％の範囲で含有されるように添加することができる。
本発明の添加剤を化粧品に添加するときは、化粧品の種類により異なるが、アントシアニジンが０．０００１〜１質量％の範囲で含有されるように添加することができる。
本発明の添加剤を皮膚外用剤に添加するときは、皮膚外用剤の種類により異なるが、アントシアニジンが０．０００１〜１質量％の範囲で含有されるように添加することができる。
【実施例】
【００２４】
実施例１
密閉可能なオゾン水を満たした容器内に、予め水洗した生の黒ニンジンを浸漬して180分間そのままで保持した。容器から黒ニンジンを取り出したあとオゾン水洗した。
その後、水洗した黒ニンジンを通気性のある容器に入れ、水蒸気で60分間蒸した。
水蒸気処理した黒ニンジンを細かく切ったもの500ｇをミキサー（ジュースミキサー）内に入れ、破砕した。
破砕物を取り出した後、網（目開き200メッシュ）で漉して、濃い紫色の搾汁液350ｍｌ（固形分12〜15質量％）と滓に分離した。
この搾汁液（固形分12〜15質量％）を本発明の添加剤および栄養補助食品とした。
【００２５】
前記搾汁液中のアントシアニジンの量を測定した。測定は、分光光度計（日立製  U-310）を使用した比色法により行い、デルフィニジンの量として求めた。
その結果、搾汁液１００ｍｌ中に０．２２ｇ（水分を除去した場合は、１００ｇ中に０．３７ｇ）のアントシアニジン（デルフィニジン）が含まれていた。
【００２６】
実施例２
密閉可能なオゾン水を満たした容器内に、予め水洗した生の黒ニンジンを浸漬して180分間そのままで保持した。容器から黒ニンジンを取り出したあとオゾン水洗した。
その後、水洗した黒ニンジンを通気性のある容器に入れ、水蒸気で60分間蒸した。
水蒸気処理した黒ニンジンを細かく切ったもの100ｋｇをドライヤー（スプレードライヤー）により乾燥した。
その後、ディスク・ミルにより粉砕した粉末を打錠した錠剤を本発明の添加剤および栄養補助食品とした。
【００２７】
試験例１（チロシナーゼ活性阻害効果の評価）
チロシナーゼ活性阻害効果を、ヒト正常表皮色素細胞を用いて評価した。
まず、次の（１）、（２）、（３）、（４）および（５）を調製した。
【００２８】
（１）牛脳下垂体抽出液（ＢＰＥ）、牛胎児血清（ＦＢＳ）、ヒト組換え型塩基性線維芽細胞増殖因子（ｈＦＧＦ−Ｂ）、ハイドロコルチーゾン、インスリン、トランスフェリン、ヘパリン（全て混合でＨＭＧＳ）含有Ｍｅｄｉｕｍ２５４：Ｍｅｄｉｕｍ２５４（クラボウ社製）に、混合されたＨＭＧＳ（クラボウ社製）を添加し調製した。
【００２９】
（２）ＦＢＳ、ｈＦＧＦ−Ｂ、インスリン含有Ｍｅｄｉｕｍ２５４：Ｍｅｄｉｕｍ２５４にＦＢＳ２．５ｍｌ、ｈＦＧＦ−Ｂ０．５ｍｌ、インスリン０．５ｍｌ（クラボウ社製）を添加し調製した。
【００３０】
（３）１容量％ＦＢＳ含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）：ＰＢＳに、終濃度１容量％となるようにＦＢＳを添加し調製した。
【００３１】
（４）０．１容量％Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ／１００ｍＭリン酸緩衝液ｐＨ６．８：１００ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６．８）に終濃度０．１容量％となるようにＴｒｉｔｏｎ−Ｘを添加し調製した。
【００３２】
（５）０．２５ｍｇ  Ｌ−ＤＯＰＡ／ｍｌ１００ｍＭリン酸緩衝液：１００ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６．８）１ｍｌに０．２５ｍｇのＬ−ＤＯＰＡを添加、溶解して調製した。
【００３３】
次いで、正常ヒト新生児表皮色素細胞株（ＮＨＥＭ）をＨＭＧＳ含有Ｍｅｄｉｕｍ２５４にて、１０ｍｍ  ｄｉｓｈに５％炭酸ガス、飽和水蒸気下、３７℃で培養した。
サブコンフルエントまで、増殖したＮＨＥＭ細胞をＴｒｉｐｓｉｎではがし、回収した。
遠心し、回収したＮＨＥＭ細胞を６０万ｃｅｌｌｓ／ｍｌに０．１容量％Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ／１００ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６．８）で調整した。室温で３０分置き、細胞溶解液とした。この細胞溶解液のタンパク量も測定した。
細胞溶解液  ５０μｌ、黒ニンジン搾汁液  ５０μｌ、０．２５ｍｇ  Ｌ−ＤＯＰＡ／ｍｌ１００ｍＭリン酸緩衝液  ５０μｌを９６穴プレートに調整し、スタート時の吸光度をマイクロプレートリーダーにて４０５ｎｍで測定し、３７℃で２時間反応させ、その後また吸光度をマイクロプレートリーダーにて４０５ｎｍで測定した。
メラニンの検量線を作成し、出来たメラニン量を算定し、タンパク量あたりの換算を行い、未処理群と比較し、活性阻害を評価した。
【００３４】
図１に試験例１の結果を示す。
未処理（対照）と、実施例１の搾汁液濃度を０．３１３容量％〜５容量％の範囲で変えたものをサンプルとして試験した。
＊：有意水準5％で有意である。
＊＊：有意水準１％で有意である。
【００３５】
試験例２（チロシナーゼ生合成効果の評価）
チロシナーゼ生合成効果を、ヒト正常表皮色素細胞を用いて評価した。
まず、次の（１）、（２）、（３）、（４）および（５）を調製した。
【００３６】
（１）牛脳下垂体抽出液（ＢＰＥ）、牛胎児血清（ＦＢＳ）、ヒト組換え型塩基性線維芽細胞増殖因子（ｈＦＧＦ−Ｂ）、ハイドロコルチーゾン、インスリン、トランスフェリン、ヘパリン（全て混合でＨＭＧＳ）含有Ｍｅｄｉｕｍ２５４：Ｍｅｄｉｕｍ２５４（クラボウ社製）に、混合されたＨＭＧＳ（クラボウ社製）を添加し調製した。
【００３７】
（２）ＦＢＳ、ｈＦＧＦ−Ｂ、インスリン含有Ｍｅｄｉｕｍ２５４：Ｍｅｄｉｕｍ２５４にＦＢＳ２．５ｍｌ、ｈＦＧＦ−Ｂ０．５ｍｌ、インスリン０．５ｍｌ（クラボウ社製）を添加し調製した。
【００３８】
（３）１容量％ＦＢＳ含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）：ＰＢＳに、終濃度１容量％となるようにＦＢＳを添加し調製した。
【００３９】
（４）１容量％Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ／１００ｍＭリン酸緩衝液ｐＨ６．８：１００ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６．８）に終濃度１容量％となるようにＴｒｉｔｏｎ−Ｘを添加し調製した。
【００４０】
（５）０．２５ｍｇ  Ｌ−ＤＯＰＡ／ｍｌ１００ｍＭリン酸緩衝液：１００ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６．８）１ｍｌに０．２５ｍｇのＬ−ＤＯＰＡを添加、溶解して調製した。
【００４１】
次いで、ＮＨＥＭ細胞株をＦＢＳ、ｈＦＧＦ−Ｂ、インスリン含有Ｍｅｄｉｕｍ２５４にて３×１０5個／ｍＬに調製し、９６穴プレートに１００μＬずつ播種して、５％炭酸ガス、飽和水蒸気下、３７℃で培養した。
２４時間培養後、培養液を吸引除去し、黒ニンジン搾汁液については、終濃度が最高１０容量％となるようにＦＢＳ、ｈＦＧＦ−Ｂ、インスリン含有Ｍｅｄｉｕｍ２５４に添加して、５％炭酸ガス、飽和水蒸気下、３７℃で培養した。
２４時間経過後、培養上清を捨て、１容量％Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ／１００ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６．８）  １００μｌ添加し、室温で３０分おき、０．２５ｍｇ  Ｌ−ＤＯＰＡ／ｍｌ１００ｍＭリン酸緩衝液  ５０μｌを添加した。
スタート時の吸光度をマイクロプレートリーダーにて４０５ｎｍで測定し、３７℃で２時間反応させ、その後また吸光度をマイクロプレートリーダーにて４０５ｎｍで測定した。
メラニンの検量線を作成し、出来たメラニン量を算定し、タンパク量あたりの換算を行い、未処理群と比較し、活性阻害を評価した。
【００４２】
図２に試験例２の結果を示す。
未処理（対照）、Pos.con．（乳酸ナトリウム）、実施例１の搾汁液濃度を０．６２５容量％〜１０容量％の範囲で変えたものをサンプルとして試験した。
＊：有意水準5％で有意である。
＊＊：有意水準１％で有意である。
【００４３】
試験例３（ＭＴＴアッセイ）
線維芽細胞活性化効果を、以下の通り、ヒト正常新生児皮膚線維芽細胞を用いて評価した。
まず、次の（１）および（２）を調製した。
【００４４】
（１）０．５容量％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭ：ＤＭＥＭ（Ｓｉｇｍａ社製）に、終濃度０．５容量％となるようにＦＢＳを添加、溶解して調製した。
（２）ＭＴＴ試薬：ＭＴＴ（３−（４，５−ジメチル−２−チアゾリル）−２，５−ジフェニル−３Ｈ−テトラゾール−２−イウム・ブロミド）１０ｍｇ をリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）１ｍＬに溶解して調製した。
【００４５】
次いで、正常ヒト新生児皮膚線維芽細胞株（ＮＨＤＦ）を０．５容量％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭにて２×１０4個／ｍＬに調製し、９６穴プレートに１００μＬずつ播種して、５％炭酸ガス、飽和水蒸気下、３７℃で培養した。
２４時間培養後、培養液を吸引除去し、黒ニンジン搾汁液については、終濃度が最高１０容量％となるようにＦＢＳ非含有ＤＭＥＭに添加して、５％炭酸ガス、飽和水蒸気下、３７℃で培養した。
４８時間経過後、培養上清を捨て、ＦＢＳ非含有ＤＭＥＭ：ＭＴＴ試薬＝１０：１になるよう調製したＭＴＴ試薬含有ＤＭＥＭを１００μＬ添加し、５％炭酸ガス、飽和水蒸気下、３７℃で２時間反応させた。その後、上清を捨て、イソプロパノール１５０μＬを添加してミキシングし、生成されたホルマザン色素を抽出して、マイクロプレートリーダーにて５５０ｎｍで測定した。
線維芽細胞活性化効果は、生成されたホルマザン色素量により、黒ニンジンの試料を含有しないＦＢＳ非含有ＤＭＥＭ培地を添加した場合の線維芽細胞の活性を１００％として算出した。なお、５（ｗ／ｖ）％ＦＢＳをＤＭＥＭに添加した場合を陽性対照として、同時に評価を行った。
図３に試験例３の結果を示す。ＢＣは、実施例１の搾汁液を示し、数値は実施例１の搾汁液濃度（容量％）を示す。
【００４６】
処方例１（ニンジンケーキ）
下記の成分（１）〜（４）、（７）、（８）を混合溶解した。次いで、下記の成分（５）、（６）を均一に混合して、オーブンで焼き（１８０℃×３０分間）、ニンジンケーキを得た。
なお、ニンジンケーキの色は、通常のニンジンケーキの色と殆ど同じであった。
（組成）（質量％）
（１）砂糖  １６
（２）ソルビトール  ３．７
（３）乳化油脂  ９．２
（４）全卵  ４０
（５）薄力粉  １８
（６）ベーキングパウダー  ０．３
（７）水  ２．８
（８）摺り下ろしたニンジン（半量を実施例１の添加剤で置換した。アントシアニジン約０．０１８５質量％）１０
【００４７】
処方例２（チューインガム）
下記成分（１）〜（７）から製造した。
（組成）（質量％）
（１）砂糖  ４８．０
（２）ガムベース  ２０．０
（３）グルコース  １０．０
（４）水飴  １６．０
（５）香料  ０．５
（６）実施例１の添加剤  ５．０（アントシアニジン約０．０１８５質量％）
【００４８】
処方例３（グミ）
下記成分（１）〜（７）から製造した。
（組成）（質量％）
（１）還元水飴  ３８．０
（２）グラニュー糖  １９．０
（３）ブトウ糖  １９．０
（４）ゼラチン  ４．７
（５）水  ９．６８
（６）ユズ果汁  ３．０
（７）ユズフレーバー  ０．６
（８）色素  ０．０２
（９）実施例１の添加剤  ５．０（アントシアニジン約０．０１８５質量％）
【００４９】
処方例４（キャンディー）
下記成分（１）〜（６）から製造した。
（組成）（質量％）
（１）砂糖  ４７．４
（２）水飴  ３１．０
（３）水  １４．４
（４）有機酸  ２．０
（５）香料  ０．２
（６）実施例１の添加剤  ５．０（アントシアニジン約０．０１８５質量％）
【００５０】
処方例５（ヨーグルト（ハード・ソフト））
下記成分（１）〜（７）から製造した。
（組成）（質量％）
（１）牛乳  ４１．５
（２）脱脂粉乳  ５．８
（３）砂糖  ８．０
（４）寒天  ０．１５
（５）ゼラチン  ０．１
（６）乳酸菌  ０．００５
（７）実施例１の添加剤  ２．５（アントシアニジン約０．００９２５質量％）
（８）香料  微量
（９）水  残量
【００５１】
処方例６（清涼飲料）
下記成分（１）〜（５）から製造した。
（組成）（質量％）
（１）果糖ブドウ糖液糖  ３０．０
（２）乳化剤  ０．５
（３）実施例１の添加剤  ２．５（アントシアニジン約０．００９２５質量％）
（４）香料  適量
（５）精製水  残量
【００５２】
処方例７（錠菓）
下記成分（１）〜（５）から製造した。
（組成）（質量％）
（１）砂糖  ７１．４
（２）グルコース  １９．０
（３）ショ糖脂肪酸エステル  ０．２
（４）実施例１の添加剤  １０．０（アントシアニジン約０．０３７質量％）
（５）精製水  ３．９
【００５３】
処方例８（アイスクリーム）
下記成分（１）〜（８）から製造した。
（組成）（質量％）
（１）実施例１の添加剤  １０．０（アントシアニジン約０．０３７質量％）
（２）加糖練乳  １０．０
（３）無塩バター  １０．０
（４）グラニュー糖  １０．０
（５）水飴  １５．０
（６）酒石酸  ０．１ 
（７）香料  ０．５
（８）精製水  残量
【００５４】
処方例９（アイスキャンデー）
下記成分（１）〜（９）から製造した。
（組成）（質量％）
（１）実施例１の添加剤  １０．０（アントシアニジン約０．０３７質量％）
（２）砂糖  １５．２
（３）粉末水飴  ６．０
（４）脱脂粉乳  １．０
（５）精製ヤシ油  １．０
（６）アップルナップル透明果汁  １．０
（７）クエン酸  ０．２
（８）グリセリン脂肪酸エステル  ０．１
（９）精製水  残量
【００５５】
処方例１０（化粧水）
下記の成分（３）、（４）及び（８）〜（１１）を混合溶解した（混合物Ａ）。次いで、下記の成分（１）、（２）、（５）〜（７）及び（１２）を混合溶解した（混合物Ｂ）。得られた混合物Ａと混合物Ｂを均一に混合し、化粧水を得た。
（組成）（質量％）
（１）グリセリン  ７．０
（２）１，３−ブチレングリコール  ６．５
（３）ポリオキシエチレンソルビタンモノラウリン酸エステル（EO20）  １．２
（４）エタノール  ５．０
（５）乳酸  ０．０５
（６）乳酸ナトリウム  ０．１
（７）コラーゲン  １．０
（８）実施例１の添加剤  ０．５（アントシアニジン約０．００１８５質量％）
（９）アスコルビン酸２−グルコシド  ０．５
（１０）防腐剤  ０．１
（１１）香料  ０．１
（１２）精製水  残量
【００５６】
処方例１１（乳液）
下記の成分（１０）を加熱し、７０℃で保持した（溶液Ａ）。次いで、下記の成分（１）〜（９）及び（１１）を加熱混合し、７０℃で保持した（混合物Ｂ）。得られた混合物Ｂに溶液Ａを加えて混合し、均一に乳化した（混合物Ｃ）。得られた混合物Ｃを冷却した後、下記の成分（１２）〜（１５）を加え、均一に混合して乳液を得た。
（組成）（質量％）
（１）ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート（EO10） １．０
（２）ポリオキシエチレンソルビットテトラオレエート（EO60） ０．５
（３）グリセリルモノステアレート １．０
（４）ステアリン酸 ０．５
（５）ベヘニルアルコール ０．５
（６）スクワラン ８．０
（７）エタノール ５．０
（８）実施例１の添加剤 ０．５（アントシアニジン約０．００１８５質量％）
（９）アルブチン １．０
（１０）精製水 残量
（１１）防腐剤 ０．１
（１２）カルボキシビニルポリマー ０．２
（１３）水酸化ナトリウム ０．１
（１４）ヒアルロン酸 ０．１
（１５）香料 ０．１
【００５７】
処方例１２（クリーム）
下記の成分（１１）を加熱し、７０℃で保持した（溶液Ａ）。次いで、下記の成分（１）〜（８）を加熱混合し、７０℃で保持した（混合物Ｂ）。得られた混合物Ｂに溶液Ａを加えて混合し、均一に乳化した（混合物Ｃ）。得られた混合物Ｃを冷却した後、下記の成分（９）〜（１０）を加え、均一に混合してクリームを得た。
（組成）（質量％）
（１）流動パラフィン ２３.０
（２）ワセリン ７.０
（３）ベヘニルアルコール １.０
（４）ステアリン酸 ２.０
（５）ミツロウ ２.０
（６）ソルビタンモノステアレート １.５
（７）ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート ２.５（EO20）
（８）防腐剤 ０.１
（９）香 料 ０.１５
（１０）実施例１の添加剤 １．０（アントシアニジン約０．００３７質量％）
（１１）精製水 残量
【００５８】
処方例１３（日やけ止め乳液）
下記の成分（１）〜（１１）を混合分散した（分散液Ａ）。次いで、下記の成分（１２）〜（１５）を混合分散した（分散液Ｂ）。得られた分散液Ａに分散液Ｂを添加して、均一に乳化した（混合物Ｃ）。得られた混合物Ｃに下記の成分（１６）及び（１７）を添加して日やけ止め乳液を得た。
（組成）（質量％）
（１）ポリオキシアルキレン変性オルガノポリシロキサン １．０
（２）ジメチルポリシロキサン ５．０
（３）オクタメチルシクロテトラシロキサン ２０．０
（４）イソノナン酸イソトリデシル ５．０
（５）パラメトキシケイ皮酸 −２−エチルヘキシル １０．０
（６）防腐剤 ０．１
（７）香料 ０．１
（８）シリコーン処理微粒子酸化チタン ８．０
（９）シリコーン処理微粒子酸化亜鉛 ７．０
（１０）ポリスチレン末 ３．０
（１１）トリメチルシロキシケイ酸 ０．５
（１２）ジプロピレングリコール ３．０
（１３）エタノール １０．０
（１４）精製水 残量
（１５）食塩 ０．２
（１６）実施例１の添加剤 １．０（アントシアニジン約０．００３７質量％）
（１７）リン酸−Ｌ−アスコルビルマグネシウム ３．０
【００５９】
処方例１４（リキッドファンデーション）
下記の成分（１）〜（７）を混合溶解した（溶液Ａ）。この溶液Ａに下記の成分（１３）〜（１８）を加え、均一に混合し、７０℃で保持した（混合物Ｂ）。次いで、下記の成分（８）〜（１２）を均一に溶解し、７０℃で保持した（混合物Ｃ）。得られた混合物Ｃに混合物Ｂを添加して、均一に乳化した（混合物Ｄ）。得られた混合物Ｄを冷却した後、下記の成分（１９）及び（２０）を添加してリキッドファンデーションを得た。
（組成）（質量％）
（１）液状ラノリン ２．０
（２）流動パラフィン ５．０
（３）ステアリン酸 ２．０
（４）セタノール １．０
（５）自己乳化型モノステアリン酸グリセリン １．０
（６）パラメトキシケイ皮酸 −２−エチルヘキシル ８．０
（７）防腐剤 ０．１
（８）グリセリン ５．０
（９）トリエタノールアミン １．０
（１０）カルボキシメチルセルロース ０．２
（１１）ベントナイト ０．５
（１２）精製水 残量
（１３）酸化チタン ６．０
（１４）微粒子酸化チタン ２．０
（１５）微粒子酸化亜鉛 ５．０
（１６）マイカ ２．０
（１７）タルク ４．０
（１８）着色顔料 ４．０
（１９）実施例１の添加剤 １．０（アントシアニジン約０．００３７質量％）
（２０）香料 ０．１
【００６０】
処方例１５（ボディージェル）
下記成分（１）〜（１５）から製造した。
（組成）（質量％）
（１）マカデミアナッツ油 ２．０
（２）ミリスチン酸オクチルドデシル １０．０
（３）メチルフェニルポリシロキサン ５．０
（４）ベヘニルアルコール ３．０
（５）ステアリン酸 ３．０
（６）バチルアルコール １．０
（７）モノステアリン酸グリセリル １．０
（８）テトラオレイン酸ポリオキシエチレンソルビット ２．０
（９）水素添加大豆リン脂質 １．０
（１０）セラミド ０．１
（１１）パルミチン酸レチノール ０．１
（１２）防腐剤 適量
（１３）実施例１の添加剤  ２．０（アントシアニジン約０．００７４質量％）
（１４）１、３−ブチレングリコール ５．０
（１５）精製水 残量 
【図１】
0006566658.tif 000002
【図２】
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【図３】
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