(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
化合物Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド
【化１】
0006464395.tif 000009
またはその薬学的に使用可能な塩、もしくは互変異性体、またはすべての比率でのそれらの混合物。
【請求項２】
Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドならびにその薬学的に使用可能な塩、および互変異性体の製造方法であって、
【化２】
0006464395.tif 000010
を
【化３】
0006464395.tif 000011
と反応させ、
かつ／または
Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドをその塩の１種に変換する
ことを特徴とする、前記方法。
【請求項３】
少なくともＮ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドならびに／またはその薬学的に使用可能な塩、および／もしくは互変異性体、ならびに／またはすべての比率でのそれらの混合物、ならびに任意に賦形剤および／またはアジュバントを含む、医薬。
【請求項４】
癌、敗血症性ショック、原発性開放隅角緑内障（ＰＯＡＧ）、過形成、関節リウマチ、乾癬、アテローム性動脈硬化症、網膜症、骨関節炎、子宮内膜症、慢性炎症および／または神経変性疾患の処置のための使用のための、Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、またはその薬学的に使用可能な塩、もしくは互変異性体、またはすべての比率でのそれらの混合物。
【請求項５】
１）エストロゲン受容体モジュレーター、２）アンドロゲン受容体モジュレーター、３）レチノイド受容体モジュレーター、４）細胞毒性薬、５）抗増殖剤、６）プレニル−タンパク質転移酵素阻害剤、７）ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、８）ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、９）逆転写酵素阻害剤および１０）さらなる血管新生阻害剤の群からの化合物と組み合わせて治療有効量で投与する、腫瘍の処置のための使用のための、化合物Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドならびに／またはその生理学的に許容し得る塩、もしくは互変異性体。
【請求項６】
放射線療法ならびに１）エストロゲン受容体モジュレーター、２）アンドロゲン受容体モジュレーター、３）レチノイド受容体モジュレーター、４）細胞毒性薬、５）抗増殖剤、６）プレニル−タンパク質転移酵素阻害剤、７）ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、８）ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、９）逆転写酵素阻害剤および１０）さらなる血管新生阻害剤の群からの化合物と組み合わせて治療有効量で投与する、腫瘍の処置のための使用のための、化合物Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドならびに／またはその生理学的に許容し得る塩、もしくは互変異性体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の背景
本発明は、有用な特性を有する新規な化合物、特に医薬の調製に使用することができるものを見出す目的を有していた。
【０００２】
本発明は、１種または２種以上のキナーゼを阻害することができる化合物Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドに関する。当該化合物は、癌、敗血症性ショック、原発性開放隅角緑内障（ＰＯＡＧ）、過形成、関節リウマチ、乾癬、アテローム性動脈硬化症、網膜症、骨関節炎、子宮内膜症、慢性炎症および／または神経変性疾患、例えばアルツハイマー病を含む様々な障害の処置に適用を見出す。
【０００３】
本発明は、Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドならびに、キナーゼ、特に受容体チロシンキナーゼによるシグナル伝達の阻害、制御および／または調節が役割を果たすＮ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドの使用、さらに当該化合物を含む医薬組成物、ならびにキナーゼ誘発疾患の処置のための当該化合物の使用に関する。
【０００４】
プロテインキナーゼが代謝、細胞増殖、細胞分化および細胞生存を含むほぼすべての細胞プロセスを制御するので、それらは様々な疾患状態のための治療介入の魅力的な標的である。例えば、プロテインキナーゼが極めて重要な役割を果たす細胞周期調節および血管形成は、多数の疾患状態、例えば、しかし限定されずに癌、炎症性疾患、異常な血管新生およびそれに関連する疾患、アテローム性動脈硬化症、黄斑変性、糖尿病、肥満および疼痛と関連する細胞プロセスである。
【０００５】
特に、本発明は、Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドならびに、ＲＯＮ(recepteur d'origine nantais)によるシグナル伝達の阻害、制御および／または調節が役割を果たすＮ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドの使用に関する。
【背景技術】
【０００６】
細胞の制御が達成される主要な機構の１つは、細胞外シグナルの膜を横断しての伝達を介することによりもたらされ、それは次に細胞内の生化学的経路を調節する。タンパク質リン酸化は、細胞内シグナルが分子から分子まで伝播し、最終的に細胞応答をもたらす１つの経過を表す。これらのシグナル伝達カスケードは、多くのプロテインキナーゼおよびホスファターゼの存在から明らかなように高度に制御され、しばしば重複する。タンパク質のリン酸化は、主にセリン、トレオニンまたはチロシン残基で生じ、プロテインキナーゼは、したがってリン酸化部位のそれらの特異性によって分類されており、つまりセリン／トレオニンキナーゼおよびチロシンキナーゼである。
【０００７】
リン酸化が細胞内のかかる遍在的なプロセスであるので、および細胞表現型がこれらの経路の活性によって大いに影響されるので、現在、多くの疾患状態および／または疾患は、キナーゼカスケードの分子成分における異常な活性化または機能的変異のいずれかに起因すると信じられている。したがって、それらの活性を調節することができるこれらのタンパク質および化合物の特徴づけに、相当注目されている（調査について、以下を参照：Weinstein-Oppenheimer et al. Pharma. &. Therap., 2000, 88, 229-279）。
【０００８】
プロテインキナーゼによって引き起こされた疾患は、かかるプロテインキナーゼの異常な活性または活動亢進によって特徴づけられる。異常な活性は、以下のいずれかに関する：（１）通常はこれらのプロテインキナーゼを発現しない細胞における発現；（２）所望されない細胞増殖、例えば癌をもたらす増加したキナーゼ発現；（３）所望されない細胞増殖、例えば癌、および／または対応するプロテインキナーゼの活動亢進をもたらす増加したキナーゼ発現。
【０００９】
活動亢進は、あるプロテインキナーゼをコード化する遺伝子の増幅、または細胞増殖疾患と相関し得る活性レベルの発生のいずれかに関する（つまり細胞増殖疾患の１種または２種以上の徴候の重症度は、増加するキナーゼレベルに伴って増加する）。プロテインキナーゼの生物学的利用能はまた、このキナーゼの１組の結合タンパク質の存在または不存在によって影響され得る。
【００１０】
S.Raeppel et al.は、密接に関連するｃ−Ｍｅｔに対する残効性またはＲＯＮおよびｃ−Ｍｅｔに対する強力な二重の阻害活性を有する強力なＲＯＮ受容体チロシンキナーゼ阻害剤、例えばＮ−（３−フルオロ−４−（２−置換−チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−７−オキシ）フェニル）−１−フェニル−５−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドを、Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 20 (2010) 2745-2749に、可能な抗癌治療法として記載している。
【００１１】
ImClone Systems（現在Eli Lilly & Co.の１つの部）は、ＩＭＣ−４１Ａ１０、高い親和性でヒトＲＯＮ  ＲＴＫ（受容体チロシンキナーゼ）に結合し、ＭＳＰ（マクロファージ刺激タンパク質）リガンド結合を遮断するヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体を開発した(J.M. O'Toole et al., Cancer Res. 2006, 66, 9162)。ＩＭＣ−４１Ａ１０は、腫瘍成長を、５０〜６０％によって、結腸、肺および膵臓癌腫モデルを含む数種のヒト異種移植腫瘍モデルにおいて阻害した。
【００１２】
ＲＯＮの小分子阻害剤は、同様に記載されている。これらの化学物質は、ＲＯＮおよび密接に関連するｃ−Ｍｅｔキナーゼの両方を阻害する。ｃ−Ｍｅｔは、多数の種々の癌において活性化されると見出され、Ｍｅｔ／ＲＯＮを標的とする小分子阻害剤は、現在固形腫瘍を有する患者における臨床評価の下にある：
【００１３】
(a)最近の調査について、以下を参照：P.C. Ma, G. Maulik, J. ChristensenおよびR. Salgia, Cancer Metastasis Rev. 22 (2003), p. 309.
(b)C.W. Birchmeier, W. Birchmeier, E. GherardiおよびG.F. Vande Woude, Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 4 (2003), p. 915.
(c)J.G. Christensen, J. BurrowsおよびR. Salgia, Cancer Lett. 225 (2005), p. 1.
(d)S. Corso, P.M. ComoglioおよびS. Giordano, Trends Mol. Med. 11 (2005), p. 284.
(e)C. BoccaccioおよびP.M. Comoglio, Nat. Rev. Cancer 6 (2006), p. 637.
(f)B. PeruzziおよびD.P. Bottaro, Clin. Cancer Res. 12 (2006), p. 3657.
(g)B.S. KnudsenおよびG. Vande Woude, Cur. Opin. Gen. Dev. 18 (2008), p. 87.
(h)L. ToschiおよびP.A. Jaenne, Clin. Cancer Res. 14 (2008), p. 5941.
(i)I. DussaultおよびS.F. Bellon, Anti-Cancer Agents Med. Chem. 9 (2009), p. 221.
(j)N.A. Cipriani, O.O. Abidoye, E. VokesおよびR. Salgia, Lung Cancer 63 (2009), p. 169.
(k)J. Porter, Expert Opin. Ther. Patents 20 (2010), p. 159.
(l)T.L. Underiner, T. HerbertzおよびS.J. Miknyoczki, Anti-Cancer Agents Med. Chem. 10 (2010), p. 7.
【００１４】
例えば、ｃ−Ｍｅｔ／ＲＯＮの強力な小分子二重阻害剤は、Amgen：
J.Zhang et al., Cancer Res. 2008, 68, 6680；
L.Liu et al., J. Med. Chem. 2008,51, 3688
によって開示された。
【００１５】
１−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピル）−５−メチル−３−オキソ−２−フェニル−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド頭部
【化１】
0006464395.tif 000002
を有するこのキノリンに基づいた化合物は、ＭｅｔおよびＲＯＮ酵素の両方を阻害し、マウスにおける結腸直腸異種移植モデルにおける抗腫瘍活性を例証する。
【００１６】
Bristol-Myers Squibは、第Ｉ相臨床試験に進行したＭｅｔ／ＲＯＮキナーゼスーパーファミリーの新たなピリジンに基づいた選択的であり、経口的に有効な阻害剤としてのＢＭＳ−７７７６０７
【化２】
0006464395.tif 000003
を記載している(G.M. Schroeder et al., J. Med. Chem. 2009, 52, 1251)。
【００１７】
したがって、本発明の化合物またはそれらの薬学的に許容し得る塩を、固形癌を含む癌、例えば癌腫（例えば肺、膵臓、甲状腺、膀胱もしくは結腸の）、骨髄疾患（例えば骨髄性白血病）または腺腫（例えば絨毛結腸腺腫）の処置のために投与する。
腫瘍はさらに、単球性白血病、脳、泌尿生殖器、リンパ系、胃、喉頭ならびに肺腺癌および小細胞肺癌を含む肺癌、膵臓および／または乳癌を含む。
【００１８】
本発明の化合物は、さらにＨＩＶ−１（ヒト免疫不全ウイルス１型）によって誘発された免疫不全の処置のために好適である。
【００１９】
癌様の(cancer-like)過剰増殖疾患は、脳癌、肺癌、扁平上皮癌、膀胱癌、胃癌、膵臓癌、肝臓癌、腎臓癌、結腸直腸癌、乳癌、頭部癌、頸部癌、食道癌、婦人科癌、甲状腺癌、リンパ腫、慢性白血病および急性白血病と見なされるべきである。特に、癌様の細胞成長は、本発明の標的を表す疾患である。
【００２０】
本発明は、したがって、前記疾患の処置および／または予防における医薬および／または医薬活性成分として本発明の化合物、ならびに前記疾患の処置および／または予防のための医薬の調製のための本発明の化合物の使用、ならびに本発明の化合物のかかる投与を必要とする患者への投与を含む前記疾患の処置の方法に関する。
【００２１】
本発明の化合物が抗増殖作用を有することを、示すことができる。本発明の化合物は、過剰増殖性疾患を有する患者に投与されて、例えば腫瘍成長を阻害し、リンパ増殖性疾患と関連する炎症を低減し、組織修復による移植拒絶または神経学的損傷を阻害するなどする。本化合物は、予防目的または治療目的に適している。
【００２２】
本明細書中で使用する「処置」の用語を、疾患の防止および既往歴の処置の両方を指すために使用する。増殖／活力の防止は、例えば腫瘍成長を防止するための顕性の疾患の発生の前の本発明の化合物の投与によって達成される。あるいはまた、当該化合物を、患者の臨床症状を安定化するかまたは改善することにより、進行中の疾患の処置のために用いる。
【００２３】
宿主または患者は、任意の哺乳動物種、例えば霊長類種、特にヒト；マウス、ラットおよびハムスターを含むげっ歯動物；ウサギ；ウマ、ウシ、イヌ、ネコなどに属し得る。動物モデルは、実験的調査のために興味深く、ヒト疾患の処置のためのモデルを供給する。
【００２４】
特定の細胞の本発明の化合物での処理に対する感受性を、in vitro試験によって決定することができる。典型的には、細胞の培養物を、様々な濃度で、活性剤が細胞死を誘発するかまたは細胞増殖、細胞成長力もしくは遊走を阻害することを可能にするのに十分である期間にわたって、通常約１時間〜１週間、本発明の化合物と共にインキュベートする。in vitro試験を、生検試料からの培養した細胞を用いて行うことができる。処理の後に残留する細胞の量を、次に決定する。
【００２５】
用量は、用いる特定の化合物、特定の疾患、患者の状態などに依存して変化する。治療的用量は、典型的には、標的組織中の所望されない細胞集団をかなり低減し、一方患者の生存能を維持するのに十分である。処理を、一般的には、かなりの低減、例えば細胞負荷の少なくとも約５０％の低減が生じるまで継続し、所望されない細胞がもはや身体中で本質的に検出されなくなるまで継続してもよい。
【００２６】
細胞増殖および細胞死（アポトーシス）の調節解除に関連した多くの疾患がある。関連する状態は以下のものを含むが、それらには限定されない。本発明の化合物は、平滑筋細胞および／または炎症細胞の血管の内膜層中への増殖および／または遊走があり、例えば新生内膜の閉塞性病変の場合における、当該血管を通っての制限された血流がもたらされる様々な状態の処置に適している。関連する閉塞性血管疾患は、アテローム性動脈硬化症、移植術後の冠血管疾患、静脈移植血管狭窄、吻合周囲補綴の再狭窄（peri-anastomatic prosthetic restenosis）、血管形成術またはステント留置後の再狭窄などを含む。
【００２７】
さらに、本発明の化合物を使用して、ある既存の癌化学療法および放射線療法において付加もしくは相乗効果を達成し、かつ／またはある既存の癌化学療法および放射線療法の効能を回復することができる。
【００２８】
用語「方法」は、化学的、薬理学的、生物学的、生化学的および医学的技術の熟練家に知られているか、または既知の方式、手段、手法および手順から当該熟練家によって容易に開発された当該方式、手段、手法および手順を含むがそれらに限定されない、所与の課題を達成するための方式、手段、手法および手順を指す。
【００２９】
本明細書中で使用する用語「投与」は、本発明の化合物および標的キナーゼを、当該化合物がキナーゼの酵素活性に、直接；つまりキナーゼ自体と相互作用することによって、または間接的に；つまりキナーゼの触媒的活性が依存する別の分子と相互作用することによって影響し得るように一緒にする方法を指す。本明細書中で使用する投与を、in vitroで、つまり試験管中で、またはin vivoで、つまり生体の細胞もしくは組織中で達成することができる。
【００３０】
本明細書中で、用語「処置」は、疾患もしくは障害の進行を抑止、実質的に阻害、遅延もしくは逆転するか、疾患もしくは障害の臨床症状を実質的に寛解させるか、または疾患もしくは障害の臨床症状の出現を実質的に防止することを含む。
本明細書中で、用語「防止」は、有機体が最初の段階で障害または疾患を得るのを防ぐ方法を指す。
【００３１】
本発明において使用する化合物について、また本明細書中で治療的に有効な用量と称する治療有効量を、細胞培養アッセイから最初に評価することができる。例えば、用量を、動物モデルにおいて処方して、細胞培養において決定するＩＣ５０またはＩＣ１００を含む血中濃度範囲を達成することができる。かかる情報を使用して、ヒトにおける有用な用量をより正確に決定することができる。初期投薬量をまた、in vivoデータから評価することができる。これらの初期のガイドラインを使用して、通常の当業者は、ヒトにおける有効薬量を決定することができた。
【００３２】
さらに、本明細書中に記載した化合物の毒性および治療効果を、細胞培養物または実験動物における標準的な薬学的手順によって、例えばＬＤ５０およびＥＤ５０を決定することによって決定することができる。毒性と治療効果との間の用量比は治療指数であり、ＬＤ５０とＥＤ５０との間の比として表現することができる。これらの細胞培養アッセイおよび動物研究から得られたデータを、ヒトにおいて使用するには有毒でない投薬量範囲を処方するにあたって使用することができる。投薬量は、好ましくは、毒性がほとんど、または全くないＥＤ５０を含むある範囲の血中濃度内にある。投薬量は、使用する投薬形態および利用する投与の経路に依存して、この範囲内で変化し得る。正確な処方、投与の経路および投薬量は、個々の医師によって、患者の状態の観点において選択され得る（例えばFingl et al., 1975, The Pharmacological Basis of Therapeutics、１章、１頁中を参照）。
【００３３】
投薬量および間隔を個々に調整して、治療効果を維持するのに十分である活性化合物の血漿レベルを提供してもよい。経口投与のための通常の患者の投薬量は、約５０〜２０００ｍｇ／ｋｇ／日から、一般に約１００〜１０００ｍｇ／ｋｇ／日から、好ましくは約１５０〜７００ｍｇ／ｋｇ／日から、および最も好ましくは約２５０〜５００ｍｇ／ｋｇ／日からの範囲内である。
【００３４】
好ましくは、治療的に有効な血清レベルは、毎日複数回投与を投与することにより達成されるだろう。局所的な投与または選択的な取り込みの場合において、薬物の有効な局所的濃度は、血漿濃度と関連しない場合がある。当業者は、治療的に有効な局所的投薬量を、過度の実験を伴わずに最適化することができるだろう。
【００３５】
本明細書中に記載した化合物が防止し、処置し、かつ／または研究するにあたって有用であり得る好ましい疾患または障害は、細胞増殖性障害、特に癌、例えば、しかし限定されずに乳頭腫、ブラストグリオーマ(blastoglioma)、カポジ肉腫、黒色腫、肺癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮癌、星状細胞腫、頭部癌、頸部癌、皮膚癌、肝臓癌、膀胱癌、乳癌、肺癌、子宮癌、前立腺癌、精巣癌、結腸直腸癌、甲状腺癌、膵臓癌、胃癌、肝細胞癌、白血病、リンパ腫、ホジキン病およびバーキットの疾患である。
【００３６】
従来技術
他の複素環式誘導体および抗腫瘍剤としてのそれらの使用は、WO 2006/116713 A1に記載されている。
S.Raeppel et al.は、強力なＲＯＮ受容体チロシンキナーゼ阻害剤を、Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 20 (2010) 2745-2749において、可能な抗癌治療法として記載している。
【発明の概要】
【００３７】
発明の概要
本発明は、化合物Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド
【化３】
0006464395.tif 000004
ならびにその薬学的に使用可能な塩、互変異性体および立体異性体、ならびにすべての比率でのそれらの混合物に関する。
【００３８】
本発明はまた、当該化合物の光学的に活性な形態（立体異性体）、塩、鏡像異性体、ラセミ体、ジアステレオマーならびに水和物および溶媒和物に関する。化合物の溶媒和物の用語は、それらの相互の引力のために生成する、不活性溶媒分子の化合物上へのアダクションを意味するものと解釈される。溶媒和物は、例えば一水和物もしくは二水和物またはアルコキシドである。
当然、本発明はまた、塩の溶媒和物に関する。
【００３９】
薬学的に使用可能な誘導体の用語は、例えば、本発明の化合物の塩、およびまたいわゆるプロドラッグ化合物を意味するものと解釈される。
プロドラッグ誘導体の用語は、例えばアルキルもしくはアシル基、糖またはオリゴペプチドにより修飾されており、生物体中で迅速に切断されて本発明の有効な化合物を形成する本発明の化合物を意味するものと解釈される。
これらはまた、例えばInt. J. Pharm.115, 61-67 (1995)に記載されているように、本発明の化合物の生分解性ポリマー誘導体を含む。
【００４０】
「有効量」の表現は、組織、系、動物またはヒトにおいて、例えば研究者または医師によって求められているかまたは所望されている生物学的または薬学的応答を引き起こさせる、医薬の、または薬学的に活性な成分の量を示す。
さらに、「治療的有効量」の表現は、この量を施与されていない対応する対象と比較して、以下の結果：
疾患、症候群、状態、愁訴、障害もしくは副作用の改善された処置、治癒、防止もしくは解消、あるいはまた疾患、状態もしくは障害の進行の低減
を有する量を示す。
表現「治療的有効量」はまた、正常な生理学的機能を増大させるのに有効である量を包含する。
【００４１】
本発明は、Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドおよびその塩、ならびにＮ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドならびにその薬学的に使用可能な塩、互変異性体および立体異性体の製造方法であって、
【００４２】
【化４】
0006464395.tif 000005
を、
【化５】
0006464395.tif 000006
と反応させ、
かつ／または
Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドをその塩の１種に変換する
ことを特徴とする、前記方法に関する。
【００４３】
Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドおよびまたその調製のための出発物質は、さらに、文献（例えば標準的な学術書、例えばHouben-Weyl, Methoden der organischen Chemie [Methods of Organic Chemistry], Georg-Thieme-Verlag, Stuttgart）に記載されているように、正確には知られており、前記反応に適している反応条件の下で、自体公知の方法によって調製される。また、ここでより詳細に述べない自体公知の変形を、ここで使用することができる。
【００４４】
Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドを、好ましくは、５−エチル−１−ピリミジン−５−イル−ピラゾール−４−カルボニルクロリドを４−［（６，７−ジメトキシ−４−キノリル）オキシ］−３−フルオロ−アニリンと反応させることにより得ることができる。
【００４５】
５−エチル−１−ピリミジン−５−イル−ピラゾール−４−カルボニルクロリドにおいて、Ｃｌは、Ｂｒ、Ｉあるいは遊離の、または反応的に修飾されたＯＨ基、例えば１〜６個のＣ原子を有する活性化されたエステル、イミダゾリドもしくはアルキルスルホニルオキシ（好ましくはメチルスルホニルオキシもしくはトリフルオロメチルスルホニルオキシ）または６〜１０個のＣ原子を有するアリールスルホニルオキシ（好ましくはフェニルもしくはｐ−トリルスルホニルオキシ）によって置き換えられていてもよい。
【００４６】
当該反応を、一般に酸結合剤、好ましくは有機塩基、例えばＤＩＰＥＡ、トリエチルアミン、ジメチルアニリン、ピリジンまたはキノリンの存在下で行う。
アルカリもしくはアルカリ土類金属水酸化物、炭酸塩もしくは重炭酸塩またはアルカリもしくはアルカリ土類金属の、好ましくはカリウム、ナトリウム、カルシウムもしくはセシウムの弱酸の別の塩の添加はまた、好ましい場合がある。
【００４７】
使用する条件に依存して、反応時間は数分〜１４日であり、反応温度は約−３０°〜１４０°、通常−１０°〜９０°、特に約０°〜約７０°である。好適な不活性溶媒の例は、炭化水素、例えばヘキサン、石油エーテル、ベンゼン、トルエンもしくはキシレン；塩素化炭化水素、例えばトリクロロエチレン、１，２−ジクロロエタン、四塩化炭素、クロロホルムもしくはジクロロメタン；アルコール、例えばメタノール、エタノール、イソプロパノール、ｎ−プロパノール、ｎ−ブタノールもしくはｔｅｒｔ−ブタノール；エーテル、例えばジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）もしくはジオキサン；グリコールエーテル、例えばエチレングリコールモノメチルもしくはモノエチルエーテル、エチレングリコールジメチルエーテル（ジグライム）；ケトン、例えばアセトンもしくはブタノン；アミド、例えばアセトアミド、ジメチルアセトアミドもしくはジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）；ニトリル、例えばアセトニトリル；スルホキシド、例えばジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）；二硫化炭素；カルボン酸、例えばギ酸もしくは酢酸；ニトロ化合物、例えばニトロメタンもしくはニトロベンゼン；エステル、例えば酢酸エチルまたは前記溶媒の混合物である。
特に好ましいのは、ピリジン、アセトニトリル、ジクロロメタンおよび／またはＤＭＦである。
【００４８】
薬学的塩および他の形態
本発明の前述の化合物を、その最終的な非塩形態で使用することができる。他方、本発明はまた、種々の有機および無機酸類および塩基類から当該分野で公知の手順によって誘導することができるその薬学的に許容し得る塩の形態での化合物の使用を包含する。
【００４９】
本発明の化合物の薬学的に許容し得る塩形態は、大部分は、慣用の方法によって調製される。Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドの場合において、酸付加塩を、当該化合物を薬学的に許容し得る有機および無機酸類、例えばハロゲン化水素、例えば塩化水素、臭化水素またはヨウ化水素、他の鉱酸およびそれらの対応する塩、例えば硫酸塩、硝酸塩またはリン酸塩など、ならびにアルキルおよびモノアリールスルホン酸塩類、例えばエタンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩およびベンゼンスルホン酸塩、ならびに他の有機酸およびそれらの対応する塩、例えば酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、安息香酸塩、サリチル酸塩、アスコルビン酸塩などで処理することによって生成することができる。
【００５０】
したがって、当該化合物の薬学的に許容し得る酸付加塩は、以下のものを含む：酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アルギニン酸塩(arginate)、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩（ベシル酸塩）、重硫酸塩、重亜硫酸塩、臭化物、酪酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、カプリル酸塩、塩化物、クロロ安息香酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、リン酸二水素塩、ジニトロ安息香酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、ガラクタル酸塩（ムチン酸から）、ガラクツロン酸塩、グルコヘプタン酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミコハク酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、馬尿酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ヨウ化物、イセチオン酸塩、イソ酪酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メタリン酸塩、メタンスルホン酸塩、メチル安息香酸塩、リン酸一水素塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、オレイン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、フェニル酢酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ホスホン酸塩、フタル酸塩、しかしこれは、限定を表すものではない。
【００５１】
好ましい前述の薬学的塩は、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、ベシル酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、ヘミコハク酸塩、馬尿酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、イセチオン酸塩、マンデル酸塩、メグルミン、硝酸塩、オレイン酸塩、ホスホン酸塩、ピバル酸塩、リン酸ナトリウム、ステアリン酸塩、硫酸塩、スルホサリチル酸塩、酒石酸塩、チオリンゴ酸塩、トシル酸塩およびトロメタミンを含むが、これは、限定を表すことを意図しない。
【００５２】
Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドの酸付加塩を、遊離の塩基形態を十分な量の所望の酸と接触させ、慣用の方法で塩の生成を生じることにより調製する。遊離の塩基を、塩形態を塩基と接触させ、遊離の塩基を慣用の方法で単離することにより再生することができる。遊離の塩基形態は、ある点において、その対応する塩形態と、ある物理的特性、例えば極性溶媒への可溶性に関して異なる；本発明の目的のために、しかしながら、塩は、他の点ではそれらのそれぞれの遊離の塩基形態に相当する。
【００５３】
上に述べたものに関して、表現「薬学的に許容し得る塩」は、本文脈において、特にこの塩形態が活性成分の遊離形態または以前に使用されている活性成分の任意の他の塩形態と比較して改善された薬物動態学的特性を活性成分に付与する場合には、その塩の１種の形態にあるＮ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドを含む活性成分を意味するものと解釈されることが、明らかである。活性成分の薬学的に許容し得る塩形態はまた、この活性成分に、それが以前は有していなかった所望の薬物動態学的特性を初めて提供することができ、さらに身体におけるその治療効果に関してこの活性成分の薬力学に対して正の影響を及ぼすことができる。
【００５４】
本発明はさらに、少なくともＮ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドならびに／またはその薬学的に使用可能な塩、互変異性体および立体異性体、ならびにすべての比率でのそれらの混合物、ならびに任意に賦形剤および／またはアジュバントを含む医薬に関する。
【００５５】
医薬処方物は、予め決定した量の投薬単位毎に活性成分を含む投与単位の形態で投与され得る。かかる単位は、例えば、０．５ｍｇ〜１ｇ、好ましくは１ｍｇ〜７００ｍｇ、特に好ましくは５ｍｇ〜１００ｍｇの本発明による化合物を含み得、処置される疾患、投与方法および年齢、体重および患者の状態に応じるか、または、医薬処方物は、予め決定した量の投薬単位毎に活性成分を含む投薬単位の形態で投与され得る。好ましい投薬単位処方物は、先に示されるように、活性成分の１日用量または部分用量、あるいはその対応する画分を含むものである。さらに、このタイプの医薬処方物は、薬学の分野において一般的に知られている方法を使用して製造され得る。
【００５６】
医薬処方物は、任意の所望する好適な方法を介する投与に適合され得、例えば、経口（口腔または舌下を含む）、経直腸、経鼻、局所（頬、舌下または経皮を含む）、経膣または非経口（皮下、筋肉内、静脈内または皮内を含む）の方法による。かかる製剤は、薬学の分野で知られているあらゆる方法を使用して、例えば、活性成分に賦形剤（単数または複数）またはアジュバント（単数または複数）を組み合わせることにより調製され得る。
【００５７】
経口投与に適合させた医薬処方物を、例えば、カプセルまたは錠剤；粉末または顆粒；水性または非水性液体中の溶液または懸濁液；食用泡(edible foam)または泡食品(foam food)；あるいは、水中油滴型液体エマルションまたは油中水滴型液体エマルション、などの別個の単位として投与することができる。
【００５８】
よって、例えば、錠剤またはカプセルの形態での経口投与の場合には、活性成分の成分を、例えば、エタノール、グリセリン、水などの経口用の、無毒性である、薬学的に許容し得る不活性賦形剤と組み合わせることができる。粉末を、化合物を好適な微細サイズの粉末状にし、それを類似の方法で粉末状にした、例えばデンプンまたはマンニトールなどの、例えば食用炭水化物などの薬学的賦形剤と混合することにより調製する。フレーバー剤、保存料、分散剤および色素が、同様に存在してもよい。
【００５９】
カプセルは、前記のように粉末混合物を調製し、これでゼラチンの殻を充填することにより製造される。例えば固体形態の、高分散ケイ酸、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムまたはポリエチレングリコールなどの流動促進剤および潤滑剤を、充填操作の前に粉末混合物に加えてもよい。例えば寒天、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウムなどの崩壊剤または可溶化剤もまた、カプセルが摂取された後の医薬の利用率を高めるために、同様に加えることができる。
【００６０】
加えて、所望の場合または必要な場合、好適な結合剤、潤滑剤および崩壊剤ならびに色素も、同様に混合物中に組み入れてもよい。好適な結合剤は、デンプン、ゼラチン、天然糖、例えばグルコースまたはベータ−ラクトースなど、トウモロコシから作られる甘味料、天然および合成ゴム、例えばアカシア、トラガカントまたはアルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックスなどを含む。これらの剤形に使用される潤滑剤は、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどを含む。崩壊剤は、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガムなどを含むが、これらに限定されない。
【００６１】
錠剤は、例えば、粉末混合物を調製し、混合物を顆粒化するか、または乾式プレスし、潤滑剤および崩壊剤を添加し、混合物全体を圧縮して錠剤が得ることにより処方される。粉末混合物は、前記のように、好適な方法で粉末化された化合物を、希釈剤または基剤と、および任意に結合剤、例えばカルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチンまたはポリビニルピロリドンなど、溶解遅延剤、例えばパラフィンなど、吸収促進剤、例えば第四級アンモニウム塩などおよび／または吸収剤、例えばベントナイト、カオリンまたはリン酸二カルシウムなどと混合することにより調製される。粉末混合物は、それを結合剤、例えばシロップ、デンプンペースト、アカシア粘液またはセルロースまたはポリマー材料の溶液などにより湿潤させ、ふるいを通してそれを圧縮することにより顆粒化することができる。顆粒化の代替として、粉末混合物は、打錠機に通され、砕かれて顆粒を形成する不均一な形状の塊が得られ得る。
【００６２】
顆粒は、錠剤の型に付着することを防ぐために、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルクまたは鉱油の添加により潤滑化され得る。潤滑化された混合物は、次に圧縮され、錠剤が得られる。本発明による化合物はまた、自由に流動する(free-flowing)不活性賦形剤と組み合わされて、次に直接圧縮され、顆粒化または乾式プレスを行わずに錠剤が得られ得る。セラックシーリング層、糖またはポリマー材料の層およびワックスの光沢層からなる、透明なまたは不透明な保護層が存在してもよい。色素は、異なる投薬単位を差別化することを可能にするために、これらの被膜に添加され得る。
【００６３】
例えば、溶液、シロップおよびエリキシルなどの経口液体は、所定の量が予め特定された量の化合物を含むような、投与単位の形態で調製され得る。シロップは、水溶液中で好適なフレーバー剤とともに化合物を溶解させることにより調製することができ、一方、エリキシルは、無毒性アルコールビヒクルを使用して調製される。懸濁液は、無毒性ビヒクル中の化合物の分散により処方され得る。例えばエトキシ化されたイソステアリルアルコールおよびポリオキシエチレンソルビトールエーテルなどの可溶化剤および乳化剤、保存料、例えばペパーミント油または天然甘味料またはサッカリンなどのフレーバー添加剤あるいは他の人工甘味料なども、同様に添加され得る。
【００６４】
経口投与のための用量単位製剤を、所望の場合には、マイクロカプセルにカプセル化することができる。製剤をまた、放出が延長または遅延されるように、例えば、ポリマー、ワックスなどの中に粒子状材料を被覆することまたは包埋することなどにより調製することができる。
【００６５】
Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドならびにその薬学的に使用可能な塩、互変異性体および立体異性体をまた、例えば小型単層ベシクル、大型単層ベシクルおよび多層ベシクルなどのリポソーム送達系の形態で投与することができる。リポソームは、例えばコレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリンなどのさまざまなリン脂質から形成され得る。
【００６６】
Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドならびにその薬学的に使用可能な塩、互変異性体および立体異性体はまた、化合物分子が結合している個々の担体としてのモノクローナル抗体を使用して送達され得る。当該化合物はまた、標的医薬担体として可溶性ポリマーに結合され得る。かかるポリマーは、パルミトイルラジカルによって置換された、ポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミドフェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルトアミドフェノールまたはポリエチレンオキシドポリリジンを包含してもよい。当該化合物はさらに、医薬の制御放出を達成するのに好適な生分解性ポリマーのクラス、例えばポリ乳酸、ポリ−イプシロン−カプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロキシピラン、ポリシアノアクリレートおよび架橋または両親媒性の、ヒドロゲルのブロックコポリマーと結合されていてもよい。
【００６７】
経皮投与に適合された医薬処方物を、独立した膏薬として、レシピエントの表皮との広範かつ密接な接触のために、投与することができる。よって、例えば、活性成分を、一般論としてPharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986)に記載されるように、膏薬からイオン泳動により、送達することができる。
局所投与に適合された薬学的化合物を、軟膏、クリーム、懸濁液、ローション、粉末、溶液、ペースト、ジェル、スプレー、エアロゾルまたはオイルとして処方することができる。
【００６８】
眼または他の外部組織、例えば口および皮膚の処置のために、製剤を、好ましくは、局所的軟膏またはクリームとして適用する。軟膏を得るための製剤の場合において、活性成分を、パラフィン性または水混和性のクリーム基剤のいずれかとともに用いることができる。代替的に、活性成分を処方し、水中油滴型クリーム基剤または油中水滴型基剤を有するクリームとして得ることができる。
【００６９】
眼への局所適用に適合された医薬処方物には、活性成分が、好適な担体に、特に水性溶媒に溶解されるか、または懸濁された点眼剤が含まれる。
口腔中の局所適用に適合された医薬処方物には、薬用キャンディー、トローチおよびマウスウォッシュが包含される。
直腸投与に適合された医薬処方物を、坐薬または浣腸の形態で投与することができる。
【００７０】
担体物質が固体である、経鼻投与に適合された医薬処方物には、例えば２０〜５００ミクロンの範囲の粒径を有し、鼻から吸い込んで摂取される方法で、すなわち鼻の近傍に保持され、粉末を含有する容器から鼻腔を経由した急速な吸入により投与される粗粉末を含む。担体物質として液体を伴う鼻腔用スプレーまたは点鼻剤に好適な処方物には、水または油中の活性成分溶液が包含される。
【００７１】
吸入による投与に適合された医薬処方物には、エアロゾル、噴霧器または吸入器を備えた種々の加圧ディスペンサーにより発生させることができる、微粒子ダストまたはミストが包含される。
膣内投与に適合された医薬処方物を、ペッサリー、タンポン、クリーム、ジェル、ペースト、泡またはスプレー処方物として投与することができる。
【００７２】
非経口投与に適合された医薬処方物は、抗酸化剤、緩衝液、静菌物質(bacteriostatics)および溶質を含み、それにより処方物は処置されるべきレシピエントの血液と等張とされる水性および非水性の滅菌注射溶液；ならびに、懸濁媒体および増粘剤を含んでもよい水性および非水性の滅菌懸濁液を含む。処方物は、例えば密封アンプルおよびバイアルなどの単回用量または複数回投与容器で投与されることができ、フリーズドライ（凍結乾燥）状態で貯蔵されることができ、使用直前の、例えば注射用の水などの滅菌担体溶液の添加のみが必要とされるようにできる。レシピに従って調製された注射溶液および懸濁液は、滅菌粉末、顆粒および錠剤から調製され得る。
【００７３】
特に前述した構成成分に加え、特定のタイプの製剤に関し、該製剤にはまた、当該技術分野において通常の他の剤も含まれていてもよいことは言うまでもなく；よって、例えば、経口投与に好適な製剤には、フレーバー剤が含まれていてもよい。
【００７４】
Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドの治療有効量は、例えば、動物の年齢および体重、処置が求められる正確な疾患、およびその重症度、処方物の性質および投与の方法を含む多数の因子に依存し、最終的には処置する医師または獣医により決定される。しかしながら、腫瘍性成長、例えば結腸癌または乳癌の処置のための本発明による化合物の有効量は、一般に、１日当たりレシピエント（哺乳動物）の体重の０．１〜１００ｍｇ／ｋｇの範囲であり、特に典型的には、１日当たり体重の１〜１０ｍｇ／ｋｇの範囲である。よって、７０ｋｇの体重である成体の哺乳動物について、１日当たりの実際の量は、通常７０〜７００ｍｇであり、ここでこの量を、１日当たり単回用量として、または通常１日あたり一連の部分用量（例えば２、３、４、５もしくは６）で投与することができ、これにより全体の１日の用量は同一である。それらの塩もしくは溶媒和物の、または生理学的に機能的な誘導体の有効量は、本発明による化合物自体の有効量の割合として決定され得る。類似の用量が前述の他の状態の処置に好適であると想定され得る。
【００７５】
本発明はさらに、少なくともＮ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドならびに／またはその薬学的に使用可能な塩、互変異性体および立体異性体、ならびにすべての比率でのそれらの混合物、ならびに少なくとも１種のさらなる医薬活性成分を含む医薬に関する。
【００７６】
本発明はまた、
（ａ）有効量のＮ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、ならびに／またはその薬学的に使用可能な塩、互変異性体および立体異性体、ならびにすべての比率でのそれらの混合物、
ならびに、
（ｂ）有効量のさらなる医薬活性成分
の個別のパックからなるセット（キット）に関する。
【００７７】
セットは、好適な容器、例えば箱、個別の瓶、袋またはアンプルを含む。セットは、例えば、それぞれが、有効量のＮ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、ならびに／またはその薬学的に使用可能な塩、互変異性体および立体異性体、ならびにすべての比率でのそれらの混合物、ならびに溶解されたか、または凍結乾燥された形態での有効量のさらなる医薬活性成分を含む別個のアンプルを含んでもよい。
【００７８】
使用
本発明は、癌、敗血症性ショック、原発性開放隅角緑内障（ＰＯＡＧ）、過形成、関節リウマチ、乾癬、アテローム性動脈硬化症、網膜症、骨関節炎、子宮内膜症、慢性炎症および／または神経変性疾患、例えばアルツハイマー病の処置のための使用のためのＮ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドに関する。
【００７９】
本発明は、Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドの、癌、敗血症性ショック、原発性開放隅角緑内障（ＰＯＡＧ）、過形成、関節リウマチ、乾癬、アテローム性動脈硬化症、網膜症、骨関節炎、子宮内膜症、慢性炎症および／または神経変性疾患、例えばアルツハイマー病の処置のための医薬の調製のための使用に関する。
【００８０】
本発明は、癌、敗血症性ショック、原発性開放隅角緑内障（ＰＯＡＧ）、過形成、関節リウマチ、乾癬、アテローム性動脈硬化症、網膜症、骨関節炎、子宮内膜症、慢性炎症および／または神経変性疾患、例えばアルツハイマー病から選択された疾患を有する哺乳動物を処置する方法に関し、ここで当該方法は、哺乳動物に治療有効量のＮ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドを投与することを含む。
【００８１】
Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドは、癌疾患および炎症性疾患の処置および抑制において哺乳動物のための、特にヒトのための医薬活性成分として好適である。
【００８２】
宿主または患者は、任意の哺乳動物種、例えば霊長類種、特にヒト；マウス、ラットおよびハムスターを含む齧歯類；ウサギ；ウマ、ウシ、イヌ、ネコなどに属し得る。動物モデルは、実験的調査のために興味深く、ヒト疾患の処置のためのモデルを提供する。
【００８３】
本発明の化合物での処置に対する特定の細胞の感受性を、in vitro試験によって決定することができる。典型的には、細胞の培養物を、本発明の化合物と、様々な濃度で、活性剤、例えば抗ＩｇＭが細胞応答、例えば表面マーカーの発現を誘発することを可能にするのに十分である期間、通常約１時間〜１週間にわたって合わせる。in vitro試験を、血液から、または生検試料からの培養された細胞を使用して行うことができる。発現された表面マーカーの量を、フローサイトメトリーによって、マーカーを認識する特定の抗体を使用して評価する。
【００８４】
用量は、使用する特定の化合物、特定の疾患、患者の状況などに依存して変化する。治療的用量は、典型的には、標的組織中の所望されない細胞集団を縮小し、同時に患者の生存能を維持するのに相当に十分である。処理を、一般的に相当な縮小、例えば細胞負荷の少なくとも約５０％の縮小が生じるまで継続し、実質的に所望されない細胞がもはや身体において検出されなくなるまで継続してもよい。
【００８５】
シグナル伝達経路の識別、および様々なシグナル伝達経路間の相互作用の検出のために、様々な科学者は、好適なモデルまたはモデル系、例えば細胞培養モデル（例えばKhwaja et al., EMBO, 1997, 16, 2783-93）および遺伝子導入動物のモデル（例えばWhite et al., Oncogene, 2001, 20, 7064-7072）を開発した。シグナル伝達カスケードにおけるある段階の決定のために、相互作用する化合物を、シグナルを変調させるために利用することができる（例えばStephens et al., Biochemical J., 2000, 351, 95-105）。本発明の化合物をまた、動物および／もしくは細胞培養モデルにおけるキナーゼ依存性シグナル伝達経路を試験するための、または本出願において述べた臨床的疾患における試薬として使用することができる。
【００８６】
キナーゼ活性の測定は、当業者に周知である手法である。基質、例えばヒストン（例えばAlessi et al., FEBS Lett. 1996, 399, 3、３３３〜３３８頁）または塩基性ミエリンタンパク質を使用するキナーゼ活性の決定のための包括的な試験系は、文献（例えばCampos-Gonzalez, R.およびGlenney, Jr., J.R. 1992, J. Biol. Chem. 267、14535頁）に記載されている。
【００８７】
キナーゼ阻害剤の識別のために、様々なアッセイ系が利用可能である。シンチレーション近接アッセイ(Sorg et al., J. of Biomolecular Screening, 2002, 7, 11-19)およびフラッシュプレート(flashplate)アッセイにおいて、基質としてのタンパク質またはペプチドのγＡＴＰでの放射性リン酸化を、測定する。阻害化合物の存在下で、低下した放射性シグナルが検出可能であるか、または完全に検出可能ではない。さらに、均質な時間分解蛍光共鳴エネルギー移動（ＨＴＲ−ＦＲＥＴ）および蛍光偏光（ＦＰ）技術は、アッセイ方法として好適である(Sills et al., J. of Biomolecular Screening, 2002, 191-214)。
【００８８】
他の非放射性ＥＬＩＳＡアッセイ方法は、特定のホスホ抗体（ホスホ−ＡＢ）を使用する。ホスホ−ＡＢは、リン酸化された基質のみに結合する。この結合を、化学発光によって、第２のペルオキシダーゼ結合抗ヒツジ抗体を使用して検出することができる(Ross et al., 2002, Biochem. J.)。
【００８９】
本発明は、Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドならびに／またはそれらの生理学的に許容し得る塩、互変異性体および溶媒和物の、癌の処置または防止のための医薬の調製のための使用を包含する。処置のための好ましい癌腫は、脳の癌腫、尿生殖路癌腫、リンパ系の癌腫、胃癌、喉頭癌および肺癌腸癌の群から起因する。癌の好ましい形態のさらなる群は、単球性白血病、肺腺癌、小細胞肺癌、膵臓癌、膠芽腫および乳癌である。
【００９０】
また包含されるのは、Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドならびに／またはそれらの生理学的に許容し得る塩、互変異性体および溶媒和物の、哺乳動物における腫瘍誘発疾患の処置および／または抑制のための医薬の調製のための使用であり、ここでこの方法に対して、本発明の治療的に有効な量の化合物を、かかる処置を必要とする罹患した哺乳動物に投与する。治療的量は、特別の疾患に従って変化し、当業者によって過度の努力を伴わずに決定することができる。
【００９１】
特に好ましいのは、疾患の処置のための使用であり、ここで当該癌は固形腫瘍である。
固形腫瘍は、好ましくは扁平上皮、膀胱、胃、腎臓、頭頸部、食道、子宮頸部、甲状腺、腸、肝臓、脳、前立腺、尿生殖路、リンパ系、胃、喉頭および／または肺の腫瘍の群から選択される。
【００９２】
固形腫瘍は、さらに好ましくは肺腺癌、小細胞肺癌、膵臓癌、神経膠芽腫、結腸癌および乳癌の群から選択される。
好ましいのは、さらに、血液および免疫系の腫瘍の処置のための、好ましくは急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病および／または慢性リンパ性白血病の群から選択された腫瘍の処置のための使用である。
【００９３】
本発明はさらに、骨病理の処置のための本発明の化合物の使用に関し、ここで骨病理は骨肉腫、骨関節炎およびくる病の群から始まる。
【００９４】
Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドをまた、処置されている状態に対するそれらの特別の有用性について選択される他の周知の治療薬と同時に投与してもよい。
【００９５】
本化合物はまた、既知の抗癌剤との組み合わせに適している。これらの既知の抗癌剤は、以下のものを含む：エストロゲン受容体モジュレーター、アンドロゲン受容体モジュレーター、レチノイド受容体モジュレーター、細胞毒性薬、抗増殖剤、プレニル−タンパク質転移酵素阻害剤、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、逆転写酵素阻害剤およびさらなる血管新生阻害剤。本化合物は、放射線療法と同時の投与に特に適している。
【００９６】
「エストロゲン受容体モジュレーター」は、機構とは無関係にエストロゲンの受容体への結合を妨げるかまたは阻害する化合物を指す。エストロゲン受容体モジュレーターの例は、タモキシフェン、ラロキシフェン、イドキシフェン、ＬＹ３５３３８１、ＬＹ  １１７０８１、トレミフェン、フルベストラント、４−［７−（２，２−ジメチル−１−オキソプロポキシ−４−メチル−２−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−２Ｈ−１−ベンゾピラン−３−イル］フェニル２，２−ジメチルプロパノエート、４，４’−ジヒドロキシベンゾフェノン−２，４−ジニトロフェニルヒドラゾンおよびＳＨ６４６を含むが、それらには限定されない。
【００９７】
「アンドロゲン受容体モジュレーター」は、機構とは無関係にアンドロゲンの受容体への結合を妨げるかまたは阻害する化合物を指す。アンドロゲン受容体モジュレーターの例は、フィナステリドおよび他の５α還元酵素阻害剤、ニルタミド、フルタミド、ビカルタミド、リアロゾール(liarozole)および酢酸アビラテロンを含む。
【００９８】
「レチノイド受容体モジュレーター」は、機構とは無関係にレチノイドの受容体への結合を妨げるかまたは阻害する化合物を指す。かかるレチノイド受容体モジュレーターの例は、ベキサロテン、トレチノイン、１３−シス−レチノイン酸、９−シス−レチノイン酸、α−ジフルオロメチルオルニチン、ＩＬＸ２３−７５５３、トランス−Ｎ−（４’−ヒドロキシフェニル）レチンアミドおよびＮ−４−カルボキシフェニルレチンアミドを含む。
【００９９】
「細胞毒性薬」は、主として細胞機能に対する直接的な作用によって細胞死をもたらすか、または細胞ミオシス(cell myosis)を阻害するかもしくは妨げる化合物を指し、アルキル化剤、腫瘍壊死因子、干渉物質、マイクロツブリン(microtubulin)阻害剤およびトポイソメラーゼ阻害剤を含む。
【０１００】
細胞毒性薬の例は、チラパザミン、セルテネフ(sertenef)、カケクチン、イホスファミド、タソネルミン、ロニダミン、カルボプラチン、アルトレタミン、プレドニムスチン、ジブロモダルシトール(dibromodulcitol)、ラニムスチン、ホテムスチン、ネダプラチン、オキサリプラチン、テモゾロミド、ヘプタプラチン(heptaplatin)、エストラムスチン、トシル酸インプロスルファン、トロホスファミド、ニムスチン、ジブロスピジウムクロリド(dibrospidium chloride)、パミテパ(pumitepa)、ロバプラチン(lobaplatin)、サトラプラチン、プロフィロマイシン(profiromycin)、シスプラチン、イロフルベン、デキシホスファミド(dexifosfamide)、シス−アミンジクロロ（２−メチルピリジン）白金、ベンジルグアニン、グルホスファミド(glufosfamide)、ＧＰＸ１００、（トランス、トランス、トランス）ビス−ミュー−（ヘキサン−１，６−ジアミン）−ミュー−［ジアミン白金（ＩＩ）］ビス［ジアミン（クロロ）白金（ＩＩ）］四塩化物、ジアリシジニルスペルミン(diarisidinylspermine)、三酸化ヒ素、１−（１１−ドデシルアミノ−１０−ヒドロキシウンデシル）−３，７−ジメチルキサンチン、ゾルビシン、イダルビシン、ダウノルビシン、ビサントレン(bisantrene)、ミトキサントロン、ピラルビシン、ピナフィド(pinafide)、バルルビシン、アムルビシン、抗新生物薬、３’−デアミノ−３’−モルホリノ−１３  デオキソ−１０−ヒドロキシカルミノマイシン、アナマイシン(annamycin)、ガラルビシン(galarubicin)、エリナフィド(elinafide)、ＭＥＮ１０７５５および４−デメトキシ−３−デアミノ−３−アジリジニル−４−メチルスルホニルダウノルビシン（WO 00/50032を参照）を含むが、それらには限定されない。
【０１０１】
マイクロツブリン阻害剤の例は、パクリタキセル、硫酸ビンデシン、３’，４’−ジデヒドロ−４’−デオキシ−８’−ノルビンカロイコブラスチン、ドセタキセル、リゾキシン(rhizoxin)、ドラスチン、イセチオン酸ミボブリン(mivobulin isethionate)、アウリスタチン(auristatin)、セマドチン、ＲＰＲ１０９８８１、ＢＭＳ１８４４７６、ビンフルニン、クリプトフィシン、２，３，４，５，６−ペンタフルオロ−Ｎ−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）ベンゼンスルホンアミド、アンヒドロビンブラスチン、Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｌ−バリル−Ｌ−バリル−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｌ−プロリル−Ｌ−プロリン−ｔ−ブチルアミド、ＴＤＸ２５８およびＢＭＳ１８８７９７を含む。
【０１０２】
トポイソメラーゼ阻害剤は、例えばトポテカン、ヒカプタミン(hycaptamine)、イリノテカン、ルビテカン(rubitecan)、６−エトキシプロピオニル−３’，４’−Ｏ−エクソベンジリデンカルトロイシン、９−メトキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−５−ニトロピラゾロ［３，４，５−ｋｌ］アクリジン−２−（６Ｈ）プロパンアミン、１−アミノ−９−エチル−５−フルオロ−２，３−ジヒドロ−９−ヒドロキシ−４−メチル−１Ｈ，１２Ｈ−ベンゾ［ｄｅ］ピラノ［３’，４’：ｂ，７］インドリジノ［１，２ｂ］キノリン−１０，１３（９Ｈ，１５Ｈ）−ジオン、ルトテカン(lurtotecan)、７−［２−（Ｎ−イソプロピルアミノ）エチル］−（２０Ｓ）カンプトテシン、ＢＮＰ１３５０、ＢＮＰＩ１１００、ＢＮ８０９１５、ＢＮ８０９４２、リン酸エトポシド、テニポシド、ソブゾキサン、２’−ジメチルアミノ−２’−デオキシエトポシド、ＧＬ３３１、Ｎ−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−９−ヒドロキシ−５，６−ジメチル−６Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］カルバゾール−１−カルボキサミド、アスラクリン(asulacrine)、（５ａ，５ａＢ，８ａａ，９ｂ）−９−［２−［Ｎ−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−Ｎ−メチルアミノ］エチル］−５−［４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル］−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキソヒドロフロ（３’，４’：６，７）ナフト（２，３−ｄ）−１，３−ジオキソール−６−オン、２，３−（メチレンジオキシ）−５−メチル−７−ヒドロキシ−８−メトキシベンゾ［ｃ］フェナントリジニウム、６，９−ビス［（２−アミノエチル）アミノ］ベンゾ［ｇ］イソキノリン−５，１０−ジオン、５−（３−アミノプロピルアミノ）−７，１０−ジヒドロキシ−２−（２−ヒドロキシエチルアミノメチル）−６Ｈ−ピラゾロ［４，５，１−ｄｅ］アクリジン−６−オン、Ｎ−［１−［２（ジエチルアミノ）エチルアミノ］−７−メトキシ−９−オキソ−９Ｈ−チオキサンテン−４−イルメチル］ホルムアミド、Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル）アクリジン−４−カルボキサミド、６−［［２−（ジメチルアミノ）エチル］アミノ］−３−ヒドロキシ−７Ｈ−インデノ［２，１−ｃ］キノリン−７−オンおよびジメスナである。
【０１０３】
「抗増殖剤」は、アンチセンスＲＮＡおよびＤＮＡオリゴヌクレオチド、例えばＧ３１３９、ＯＤＮ６９８、ＲＶＡＳＫＲＡＳ、ＧＥＭ２３１およびＩＮＸ３００１ならびに代謝拮抗薬、例えばエノシタビン、カルモフール、テガフール、ペントスタチン、ドキシフルリジン、トリメトレキセート、フルダラビン、カペシタビン、ガロシタビン(galocitabine)、シタラビンオクホスファート、ホステアビン(fosteabine)ナトリウム水和物、ラルチトレキセド、パルチトレキシド(paltitrexid)、エミテフル(emitefur)、チアゾフリン、デシタビン、ノラトレキセド(nolatrexed)、ペメトレキセド、ネルザラビン(nelzarabine)、２’−デオキシ−２’−メチリデンシチジン、２’−フルオロメチレン−２’−デオキシシチジン、Ｎ−［５−（２，３−ジヒドロベンゾフリル）スルホニル］−Ｎ’−（３，４−ジクロロフェニル）尿素、Ｎ６−［４−デオキシ−４−［Ｎ２−［２（Ｅ），４（Ｅ）−テトラデカジエノイル］グリシルアミノ］−Ｌ−グリセロ−Ｂ−Ｌ−マンノヘプトピラノシル］アデニン、アプリジン(aplidine)、エクチナサイジン、トロキサシタビン、４−［２−アミノ−４−オキソ−４，６，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピリミジノ［５，４−ｂ］−１，４−チアジン−６−イル−（Ｓ）−エチル］−２，５−チエノイル−Ｌ−グルタミン酸、アミノプテリン、５−フルオロウラシル、アラノシン、１１−アセチル−８−（カルバモイルオキシメチル）−４−ホルミル−６−メトキシ−１４−オキサ−１，１１−ジアザテトラシクロ（７．４．１．０．０）テトラデカ−２，４，６−トリエン−９−イル酢酸エステル、スウェインソニン、ロメトレキソール(lometrexol)、デクスラゾキサン、メチオニナーゼ(methioninase)、２’−シアノ−２’−デオキシ−Ｎ４−パルミトイル−１−Ｂ−Ｄ−アラビノフラノシルシトシンおよび３−アミノピリジン−２−カルボキサルデヒドチオセミカルバゾンを含む。
【０１０４】
「抗増殖剤」はまた、「血管新生阻害剤」の下で列挙したもの以外の成長因子に対するモノクローナル抗体、例えばトラスツズマブ、および腫瘍抑制遺伝子、例えばｐ５３を含み、それは、組換えウィルス媒介遺伝子導入によって送達され得る（例えば米国特許第6,069,134号を参照）。
【０１０５】
ＲＯＮの阻害についての試験
細胞アッセイにおけるＭＳＰ（マクロファージ刺激タンパク質）誘発ｐＲＯＮの阻害
リガンド誘発ＲＯＮリン酸化を阻害するにあたってのＲＯＮキナーゼ阻害剤の効力および効能を決定するために、Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドを、以下に記載する細胞に基づいたアッセイにおいて試験した。ＭＤＡ−ＭＢ４５３細胞におけるリガンド誘発ｐＲＯＮ（ホスホＲＯＮ）の阻害（細胞に基づいた電気化学発光アッセイ（ＥＣＬＡ））：ＭＤＡ−ＭＢ４５３細胞（ＤＳＭＺ  ＡＣＣ６５）を、血清飢餓にし、１００μＭオルトバナジウム酸ナトリウムで前処理し（１時間、３７℃、５％ＣＯ２）、化合物（連続希釈法、開始濃度３０μＭ）と共に無血清培地中で３７℃、５％ＣＯ２で４５分間プレインキュベートした。
【０１０６】
細胞を、２５０ｎｇ／ｍｌのＭＳＰ（R&D Systems、＃４３０６−ＭＳ）で２０分間刺激し、上清を廃棄し、細胞を、低温ＮＰ−４０可溶化緩衝液（１％ＮＰ−４０、２０ｍＭトリス、ｐＨ８．０、１３７ｍＭ  ＮａＣｌ、１０％グリセロール、２ｍＭ  ＥＤＴＡ、プロテアーゼ阻害剤カクテルセットＩＩＩ(Calbiochem)、ホスファターゼ阻害剤カクテルセットＩＩ(Calbiochem)）中で可溶化した。ＭＡ６０００  ９６ウェルプレート（ＭＳＤ、＃Ｌ１５ＸＢ）を、ＰＢＳ中の３％ブロックＡ（ＭＳＤ）、ｐＨ７．４、０．０５％のTween20で遮断し、ＲＯＮ特異性捕獲抗体（R&D Systems、＃ＭＡＢ６９１）で被覆した。細胞可溶化物を加え、室温（ＲＴ）で２時間インキュベートした。ビオチン化抗ホスホチロシン抗体（R&D Systems、＃ＢＡＭ１６７６）およびスルホタグストレプトアビジン試薬（ＭＳＤ、＃Ｒ３２ＡＤ）を、検出のために使用した。
【０１０７】
ＲＯＮのキナーゼ媒介効果の阻害剤の効能の決定のためのin vitro（酵素）アッセイ
キナーゼアッセイを、３８４ウェルFlashPlateアッセイとして行った。試験プレートとして、Perkin Elmer（米国）からの３８４ウェルストレプトアビジン被覆FlashPlateマイクロタイタープレートを、使用した。キナーゼ反応の構成成分を、アッセイプレート中にピペットで採取した。４．５ｎＭのＧＳＴタグヒト組換えＲＯＮキナーゼ(Life technologies)、５００ｎＭのビオチン化ペプチド基質ＲＤＩＬＤＲＥＹＹＳＶＱＱＨＲＨ−アミド（自己リン酸化部位誘導ペプチド基質、特別注文）および２μＭのＡＴＰ（０．５μＣｉの＜３３＞Ｐ−ＡＴＰ／ウェルを有する）を、５０μｌの全容積（５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、５ｍＭのＭｇＣｌ２、２ｍＭのＤＴＴ、０．１％のＢＳＡ、０．０１％のIgepal（登録商標）CA630、１％のＤＭＳＯ、ｐＨ７．５）において、試験物質（１０種の濃度）の存在下または不存在下で、２２［度］Ｃで３０分間インキュベートした。
【０１０８】
反応を、５０μｌの２００ｍＭ  ＥＤＴＡ溶液を使用して停止した。室温でのさらなる８０分間のインキュベーションの後、上清を吸引によって除去し、ウェルを各回１００μｌの０．９％ＮａＣｌ溶液で３回洗浄した。放射能を、Ｔｏｐｃｏｕｎｔシンチレーションカウンター（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、米国）を使用して測定した。ＩＣ５０値を、Ａｓｓａｙ  ｅｘｐｌｏｒｅｒを使用して計算した。
【０１０９】
Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドの調製を、以下のスキーム１と同様にして行う。
【０１１０】
５−ヒドラジニルピリミジンＡ２は、ピリミジン−５−ボロン酸のジ−ｔｅｒｔ−ブチルアゾジカルボキシラートとの銅で触媒された反応によって得られる。Ａ２のＡ１とのその後の反応によって、ピラゾールＡ３が得られる。最終的に、Ａ３の加水分解およびその後の酸塩化物生成によって、Ａ５が得られる。アニリン１および酸塩化物Ａ５の反応を、ピリジンのような塩基の存在下で、および任意にＤＣＭのような不活性溶媒中で行う。酸塩化物Ａ５を、カルボン酸から、塩化チオニルまたは塩化オキサリルを試薬として使用して、標準的な手順によって調製することができる。あるいはまた、カルボン酸Ａ４を、アニリン１と、標準的な手順の下で、例えばＨＢＴＵまたはＨＡＴＵを使用して直接カップリングさせて、Ａ６を得ることができる。
【０１１１】
【化６】
0006464395.tif 000007
Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドの調製：
【０１１２】
化学の記載および後続する例において使用する略号は、以下のとおりである：
ＡＣＮ（アセトニトリル）；ｂｒ（広い）；ＣＤＣｌ３（重水素化クロロホルム）；ＤＣＭ（ジクロロメタン）；ＤＭＦ（ジメチルホルムアミド）；ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）；ｅｑ（定量的）；ＥＳ（エレクトロスプレイ）；  ＥｔＯＡｃ（酢酸エチル）；ＥｔＯＨ（エタノール）；ＨＣｌ（塩酸）；ＨＯＡｃ（酢酸）；ＫＯＨ（水酸化カリウム）；ＭｅＯＨ（メタノール）；ＭＳ（質量分析）；ＮａＨＣＯ３（炭酸水素ナトリウム）；ＮＭＲ（核磁気共鳴；ＰＥ（石油エーテル）；ＲＴ（室温）；ｓａｔ．ａｑ．（飽和水性）；ＳｉＯ２（シリカゲル）；ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）。
【０１１３】
ステップ１：エチル２−（（ジメチルアミノ）メチレン）−３−オキソペンタノアート（Ａ１）
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（１９．９ｇ、１６６．５ｍｍｏｌ、１．２ｅｑ．）を、３−オキソペンタン酸エチルエステル（２０ｇ、１３９ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ．）に、ＲＴでゆっくり加えた。２４時間撹拌した後に、混合物を、減圧下で濃縮した。粗製物（２８．５ｇ）を、さらに精製せずに使用した；1H NMR (300 MHz, CDCl3, 300 K) δ [ppm] 7.57 (s, 1H), 4.15 (q, J = 7.1, 2H), 2.99 - 2.91 (m, 6H), 2.60 (m, 2H), 1.25 (t, J = 7.1, 3H), 1.02 (t, J = 7.4, 3H).
【０１１４】
ステップ２：５−ヒドラジニルピリミジン塩酸塩（Ａ２）
圧力容器中で、ピリミジン−５−ボロン酸（１０ｇ、８０．７ｍｍｏｌ、１ｅｑ．）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルアゾジカルボキシラート（１８．６ｇ、８０．７ｍｍｏｌ、１ｅｑ．）、乾燥メタノール（３２０ｍＬ）中の無水酢酸銅（ＩＩ）（０．５ｇ、２．７ｍｍｏｌ、０．０３３ｅｑ）を、６０℃で１時間加熱した。混合物を、真空において濃縮した。残留物をジエチルエーテルに溶解し、ｓａｔ．ａｑ．ＮａＨＣＯ３ゾルおよびブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮して、中間体ジ−ｔｅｒｔ−ブチル１−（ピリミジン−５−イル）ヒドラジン−１，２−ジカルボン酸を得た。
【０１１５】
中間体をジオキサン（１３０ｍＬ）に溶解し、ジオキサン中の４Ｍ  ＨＣｌ（１５０ｍＬ、５９２ｍｍｏｌ、１０．５ｅｑ．）をゆっくり加えた。ＲＴで３０時間後、固体を濾別し、ジエチルエーテルで２回洗浄した。固体を真空中で乾燥し、Ａ２（９．３ｇ、７９％）を得た。1H NMR (300 MHz, DMSO, 300 K) δ [ppm] 10.43 (br.s, 1H), 9.05 (br.s, 3H), 8.78 (s, 1H), 8.58 (s, 2H). ＭＳ（ＥＳ）Ｃ４Ｈ６Ｎ４  所要値：１１０、観測値：１１１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１１６】
ステップ３：エチル５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキシレート（Ａ３）
Ａ２（５．５ｇ、３７．５ｍｍｏｌ、１ｅｑ．）を乾燥ＥｔＯＨ（１５０ｍＬ）に溶解した溶液に、Ｃｓ２ＣＯ３（１２．３ｇ、３７．５ｍｍｏｌ、１ｅｑ．）を加えた。ＲＴで１０分後、Ａ１（７．１ｇ、３５．６ｍｍｏｌ、０．９５ｅｑ．）を加え、混合物を７時間還流させた。反応混合物を濾過し、濾液を真空において濃縮した。水を加え、ａｑ．相を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機相を、ＭｇＳＯ４で乾燥し、真空中で濃縮した。
【０１１７】
粗生成物を、シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（ＰＥ／Ｅｔ２Ｏ＝１００：０〜１：１）によって精製して、所望の生成物Ａ３（２．８６ｇ、３１％）を得た；1H NMR (300 MHz, CDCl3, 300 K) δ [ppm] 9.29 (s, 1H), 8.89 (s, 2H), 8.09 (s, 1H), 4.34 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.00 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 1.38 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.24 (t, J = 7.5 Hz, 3H). ＭＳ（ＥＳ）Ｃ１２Ｈ１４Ｎ４Ｏ２  所要値：２４６、観測値：２４７（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１１８】
ステップ４：５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（Ａ４）
Ａ３（２．３ｇ、９．３ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ．）をＴＨＦ（２５０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＫＯＨ（１．０５ｇ、１８．７９ｍｍｏｌ、２ｅｑ．）を水（２５０ｍＬ）に溶解した溶液を加えた。混合物を５５℃で１８時間撹拌し、次に真空中で蒸発させた。粗製物を、ＲＰ−フラッシュクロマトグラフィー（水、次に水／ＡＣＮ＝１００：０〜９５：５）によって精製し、Ａ４（１．７ｇ、８５％）を得た；1H NMR (300 MHz, deuterium oxide, 300 K) δ [ppm] 9.24 (s, 1H), 9.00 (s, 2H), 7.98 (s, 1H), 2.94 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 1.06 (t, J = 7.5 Hz, 3H). ＭＳ（ＥＳ）Ｃ１０Ｈ１０Ｎ４Ｏ２  所要値：２１８、観測値：２１９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１１９】
ステップ４：Ｎ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド（Ａ６）
Ａ４（１４００ｍｇ、６．４２ｍｍｏｌ、１．２ｅｑ．）をＳＯＣｌ２（７０ｍＬ）に溶解した溶液を、８０℃で３時間加熱した。溶媒を真空中で除去し、粗製の物質を乾燥トルエン中で分割し、減圧下で再び蒸発させて、酸塩化物Ａ５を得た。
【０１２０】
酸塩化物Ａ５を０℃で乾燥ピリジン（５０ｍＬ）に溶解し、５−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）ピリジン−２−アミン１（１６８０ｍｇ、５．３５ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ．）を加えた。ＲＴで１２時間撹拌した後に、水（２ｍＬ）を加え、混合物を減圧下で蒸発させた。粗生成物を、シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１００：０〜２０：１）、続いてＨ２ＯおよびＡＣＮを溶離剤として使用してＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｃ１８）によって精製し、所望の画分を凍結乾燥して、表題化合物Ａ６（１．１８ｇ、２．２９ｍｍｏｌ、４３％）を白色粉末として得た。
【０１２１】
ＨＣｌ塩を調製するために、Ａ６を、ＡＣＮ（４０ｍＬ）および水（２０ｍＬ）に溶解した。ａｑ．ＨＣｌ（ｃ＝１ｍｏｌ／Ｌ、２．２９ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）を加え、１時間撹拌した後、混合物を凍結乾燥し、Ａ６のＨＣｌ塩を得た；1H NMR (400 MHz, DMSO, 300 K) δ [ppm] 10.49 (s, 1H), 9.36 (s, 1H), 9.11 (s, 2H), 8.82 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.13 (dd, J = 13.2, 2.2 Hz, 1H), 7.76 (s, 2H), 7.67 (s, 1H), 7.58 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 4.04 (s, 6H), 3.02 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 1.10 (t, J = 7.5 Hz, 3H). MS (ES) C27H23FN6O4 requires: 514, found: 515 (M+H)+. ＭＳ（ＥＳ）Ｃ２７Ｈ２３ＦＮ６Ｏ４  所要値：５１４、観測値：５１５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１２２】
ＲＯＮを阻害する本発明のＮ−（４−（（６，７−ジメトキシキノリン−４−イル）オキシ）−３−フルオロフェニル）−５−エチル−１−（ピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド（「Ａ６」）のＩＣ５０値
【表１】
0006464395.tif 000008
【０１２３】
以下の例は医薬に関する：
例Ａ：注射バイアル
１００ｇの式Ｉで表される活性材料および５ｇのリン酸水素二ナトリウムを３ｌの２回蒸留水に溶解した溶液を、２Ｎの塩酸を使用してｐＨ６．５に調整し、滅菌ろ過し、注射バイアル中に移し、滅菌条件下で凍結乾燥し、滅菌条件下で封をする。各々の注射バイアルは、５ｍｇの活性材料を含む。
【０１２４】
例Ｂ：座剤
２０ｇの式Ｉで表される活性材料と１００ｇの大豆レシチンおよび１４００ｇのココアバターとの混合物を、溶融し、型中に注ぎ入れ、放冷する。各々の座剤は、２０ｍｇの活性材料を含む。
【０１２５】
例Ｃ：溶液
１ｇの式Ｉで表される活性材料、９．３８ｇのＮａＨ２ＰＯ４・２Ｈ２Ｏ、２８．４８ｇのＮａ２ＨＰＯ４・１２Ｈ２Ｏおよび０．１ｇの塩化ベンザルコニウムから、２回蒸留した９４０ｍｌの水中に、溶液を調製する。ｐＨを６．８に調整し、溶液を１ｌにし、放射線により滅菌する。この溶液は、点眼剤の形態で用いることができる。
【０１２６】
例Ｄ：軟膏
５００ｍｇの式Ｉで表される活性材料を、無菌条件下で、９９．５ｇのワセリンと混合する。
【０１２７】
例Ｅ：錠剤
式Ｉで表される１ｋｇの活性材料、４ｋｇのラクトース、１．２ｋｇのジャガイモデンプン、０．２ｋｇのタルクおよび０．１ｋｇのステアリン酸マグネシウムの混合物を、慣用の様式で圧縮して、錠剤を得、各錠剤が１０ｍｇの活性材料を含むようにする。
【０１２８】
例Ｆ：糖衣錠
錠剤を、例Ｅに類似させて圧縮し、続いて、慣用の様式で、スクロース、ジャガイモデンプン、タルク、トラガカントおよび染料の被膜で被覆する。
【０１２９】
例Ｇ：カプセル
式Ｉで表される２ｋｇの活性材料を、慣用の様式で、硬質ゼラチンカプセル中に導入し、各々のカプセルが２０ｍｇの活性材料を含むようにする。
【０１３０】
例Ｈ：アンプル
１ｋｇの式Ｉで表される活性材料を６０ｌの２回蒸留水に溶解した溶液を滅菌ろ過し、アンプル中に移し、滅菌条件下で凍結乾燥し、滅菌条件下で封をする。各アンプルは、１０ｍｇの活性材料を含む。