(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
シトルリンまたはその塩を有効成分として含有する眼の疲れの予防または改善剤。
【請求項２】
眼の疲れが、眼疲労である請求項１記載の予防または改善剤。
【請求項３】
眼疲労が、運動後の眼の疲れ又は運動後の視野のかすみである、請求項２記載の予防または改善剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、シトルリンまたはその塩を有効成分として含有する眼の疲れの予防または改善剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
眼の疲れは「見る」という活動、すなわち視覚を通して情報を得る活動が過度であった場合に引き起こされる。特に近年では、多くの人がＶＤＴ（ｖｉｓｕａｌ  ｄｉｓｐｌａｙ  ｔｅｒｍｉｎａｌ）作業に携わるようになったことに加え、携帯情報端末やノート型パソコン等の普及により、いつでもどこでもインターネットやゲーム、メールを行うことができる生活環境の変化により労働時間を超えて眼を酷使する機会が増えてきている。【０００３】
疲労は肉体疲労と精神疲労の二つに分類され、肉体疲労は筋線維の疲労やインパルス発射の減少などによるものであり、精神疲労は大脳の興奮水準を高めた状態で行う精神・神経活動が長く続いた時に生じ、高頻度のインパルスによりシナプス前終末部の伝達物質が枯渇して起こるシナプス疲労が原因であると考えられる（非特許文献１）。このうち、眼の疲れは、視力を必要とする作業を続けるときに起こるシナプス疲労が原因であると言われ、肉体疲労の関与は否定的である（非特許文献２）。【０００４】
また、眼の疲れは、適当な休息で改善する生理的な疲労である「眼疲労」と、容易に回復せず不快な症状が持続する病的疲労である「眼精疲労」とに分類される。【０００５】
シトルリンは、生体内でタンパク質の合成原料としては使われず、遊離の状態で存在するアミノ酸の一種である。体内ではアルギニンの前駆体としてアルギニン合成や、一酸化窒素（ＮＯ）の供給に関わるＮＯサイクルの構成因子として重要な役割を果たしている。【０００６】
シトルリンまたはその塩には疲労改善効果があることが知られており、例えば、水泳時の疲労困憊までの時間の延長効果（非特許文献３）、運動後の疲労感の軽減効果（非特許文献４）、ベンチプレス後の筋痛の低減効果（非特許文献５）、脳疲労改善用経口剤（特許文献１）等の報告があり、欧州では、抗疲労用医薬品としてシトルリン−リンゴ酸塩が用いられている。しかし、眼の疲れの予防または改善効果に関する報告はない。【０００７】
ところで、体内においてシトルリンは、アルギニンおよびオルニチン等と共に尿素サイクルを構成し、相互に変換され得る物質である。そして、アルギニンを含有する眼科用組成物が疲労感等の軽減に優れた効果を発揮することが知られ（特許文献２）、さらに、オルニチンには眼精疲労を抑制する効果があることが知られている（非特許文献６）。【０００８】
しかし、シトルリンまたはその塩による眼の疲れ、特に眼疲労の予防または改善効果は知られていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】日本国特開２０１３−０６０４０６号公報
【特許文献２】国際公開第２０１０／１０７０６９号
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】井上正康（編集）、他２名、「疲労の科学‐眠らない現代社会への警鐘」、株式会社講談社、２００１年、ｐ．１７−２３
【非特許文献２】市川宏著、「新臨床眼科全書」、金原出版株式会社、１９９３年、第２巻Ｂ、ｐ．１８９−２０３
【非特許文献３】「ジャーナル  オブ  ニュートリショナル  サイエンス  アンド  ビタミノロジー（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｖｉｔａｍｉｎｏｌｏｇｙ）」２０１１年、第５７巻、第３号、ｐ．２４６‐２５０
【非特許文献４】「ブリティッシュ・ジャーナル・オブ・スポーツ・メディシン（Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｓｐｏｒｔｓ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）」、２００２年、第３６巻、第４号、ｐ．２８２−２８９
【非特許文献５】「ジャーナル・オブ・ストレングス・アンド・コンディショニング・リサーチ（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｓｔｒｅｎｇｔｈ  ａｎｄ  Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）」、２０１０年、第２４巻、第５号、ｐ．１２１５−１２２２
【非特許文献６】「日本眼科紀要」、１９６５年、第１６巻、第９号、ｐ．１１４−１１９
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明の目的は、シトルリンまたはその塩を有効成分として含有する眼の疲れの予防または改善剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明は、下記の（１）〜（７）に関する。
（１）シトルリンまたはその塩を有効成分として含有する眼の疲れの予防または改善剤。
（２）眼の疲れが、眼疲労である（１）記載の予防または改善剤。
（３）眼疲労が、運動後の眼の疲れ又は運動後の視野のかすみである、（２）記載の予防または改善剤。
（４）シトルリンまたはその塩の有効量を必要とする対象者に摂取させる工程を含む、眼の疲れの予防または改善方法。
（５）シトルリンまたはその塩の有効量を必要とする対象者に摂取させる工程を含む、眼の疲れの予防または改善方法（但し、ヒトに対する医療行為を除く）。
（６）眼の疲れが、眼疲労である（４）または（５）記載の方法。
（７）眼疲労が、運動後の眼の疲れ又は運動後の視野のかすみである、（６）記載の方法。
【発明の効果】
【００１３】
本発明により、シトルリンまたはその塩を有効成分として含有する、眼の疲れの予防または改善剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】図１は、被験者の眼の疲れを評価する線分スケール（ＶＡＳ）法で用いる、線分の両端に眼の疲れの基準となる表現を記した線分を表し、線分の端から端までの実際の長さは１０ｃｍである。
【図２】図２は、Ｌ−シトルリン摂取８週間後の眼の疲れの体感指数の変化を示したものである。横軸のＡ群はプラセボ群、Ｂ群はＬ−シトルリン４００ｍｇ摂取群およびＣ群はＬ−シトルリン１６００ｍｇ摂取群を表す。値は平均値±標準偏差を示し、縦軸は、体感指数の変化を示す。Ｎ＝１５〜１６。＊はＣ群が、Ａ群に対して有意差（ｐ＜０．０５）があることを示す。
【図３】図３は、Ｌ−シトルリン摂取８日間後の運動後の眼の疲れの体感指数を示したものである。Ａ群はプラセボ群、Ｂ群はＬ−シトルリン２４００ｍｇ摂取群を表す。値は平均値±標準偏差を示し、縦軸は、体感指数を示す。Ｎ＝２２。＊はＢ群が、Ａ群に対して有意差（ｐ＜０．０５）があることを示す。
【図４】図４は、Ｌ−シトルリン摂取８日間後の運動後の視野のかすみの体感指数を示したものである。Ａ群はプラセボ群、Ｂ群はＬ−シトルリン２４００ｍｇ摂取群を表す。値は平均値±標準偏差を示し、縦軸は、体感指数を示す。Ｎ＝２２。＊はＢ群が、Ａ群に対して有意差（ｐ＜０．０５）があることを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本発明で用いられるシトルリンとしては、Ｌ−シトルリンおよびＤ−シトルリンがあげられるが、Ｌ−シトルリンが好ましい。シトルリンは、化学的に合成する方法、発酵生産する方法等により取得することができる。また、シトルリンは、市販品を購入することにより取得することもできる。シトルリンを化学的に合成する方法としては、例えば、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１２２，４７７（１９３８）、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，６，４１０（１９４１）に記載の方法があげられる。
【００１６】
Ｌ−シトルリンを発酵生産する方法としては、例えば、日本国特開昭５３−０７５３８７号公報、日本国特開昭６３−０６８０９１号公報に記載の方法があげられる。また、Ｌ−シトルリンおよびＤ−シトルリンは、シグマ−アルドリッチ社等より購入することもできる。
【００１７】
シトルリンの塩としては、例えば酸付加塩、金属塩、アンモニウム塩、有機アミン付加塩、アミノ酸付加塩等があげられる。酸付加塩としては、例えば塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩等の無機酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、リンゴ酸塩、乳酸塩、α−ケトグルタル酸塩、グルコン酸塩、カプリル酸塩等の有機酸塩があげられる。
【００１８】
金属塩としては、例えばナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、マグネシウム塩、カルシウム塩等のアルカリ土類金属塩、アルミニウム塩、亜鉛塩等があげられる。
アンモニウム塩としては、例えばアンモニウム、テトラメチルアンモニウム等の塩があげられる。
有機アミン付加塩としては、例えばモルホリン、ピペリジン等の塩があげられる。
【００１９】
アミノ酸付加塩としては、例えばグリシン、フェニルアラニン、リジン、アスパラギン酸、グルタミン酸等の塩があげられる。上記のシトルリンの塩のうち、リンゴ酸塩が好ましく用いられるが、他の塩、または２以上の塩を適宜組み合わせて用いてもよい。
本発明の眼の疲れの予防または改善剤としては、シトルリンまたはその塩をそのまま投与することも可能であるが、通常各種の製剤として提供するのが好ましい。
【００２０】
製剤は、有効成分としてシトルリンまたはその塩を含有するが、更に任意の有効成分を含有していてもよい。また、それら製剤は、有効成分を薬理学的に許容される一種またはそれ以上の担体と一緒に混合し、製剤学の技術分野においてよく知られている任意の方法により製造される。
製剤の投与形態は、経口投与または、例えば静脈内、腹膜内もしくは皮下投与等の非経口投与をあげることができるが、経口投与が好ましい。
【００２１】
投与する剤形としては、例えば錠剤、散剤、顆粒剤、丸剤、懸濁剤、乳剤、浸剤・煎剤、カプセル剤、シロップ剤、液剤、エリキシル剤、エキス剤、チンキ剤、流エキス剤等の経口剤、注射剤、点滴剤、クリーム剤、坐剤等の非経口剤のいずれでもよいが、経口剤として好適に用いられる。
【００２２】
経口投与に適当な、例えばシロップ剤のような液体調製物は、水、蔗糖、ソルビトール、果糖等の糖類、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール等のグリコール類、ごま油、オリーブ油、大豆油等の油類、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エステル類等の防腐剤、パラオキシ安息香酸メチル等のパラオキシ安息香酸誘導体、安息香酸ナトリウム等の保存剤、ストロベリーフレーバー、ペパーミント等のフレーバー類などを添加して製剤化することができる。
【００２３】
また、経口投与に適当な、例えば錠剤、散剤および顆粒剤等は、乳糖、白糖、ブドウ糖、蔗糖、マンニトール、ソルビトール等の糖類、バレイショ、コムギ、トウモロコシ等の澱粉、炭酸カルシウム、硫酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、塩化ナトリウム等の無機物、結晶セルロース、カンゾウ末、ゲンチアナ末等の植物末等の賦形剤、澱粉、寒天、ゼラチン末、結晶セルロース、カルメロースナトリウム、カルメロースカルシウム、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、アルギン酸ナトリウム等の崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム、タルク、水素添加植物油、マクロゴール、シリコーン油等の滑沢剤、ポリビニールアルコール、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、カルメロース、ゼラチン、澱粉のり液等の結合剤、脂肪酸エステル等の界面活性剤、グリセリン等の可塑剤などを添加して製剤化することができる。
【００２４】
また、経口摂取または投与に適当な製剤には、一般に飲食品に用いられる添加剤、例えば甘味料、着色料、保存料、増粘安定剤、酸化防止剤、発色剤、漂白剤、防かび剤、ガムベース、苦味料、酵素、光沢剤、酸味料、調味料、乳化剤、強化剤、製造用剤、香料、香辛料抽出物等が添加されてもよい。
【００２５】
非経口投与に適当な、例えば注射剤は、好ましくは受容者の血液と等張であるシトルリンまたはその塩を含む滅菌水性剤からなる。例えば、注射剤の場合は、塩溶液、ブドウ糖溶液または塩溶液とブドウ糖溶液の混合物からなる担体等を用いて注射用の溶液を調製する。また、これら非経口剤においても、経口剤で例示した防腐剤、保存剤、賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、結合剤、界面活性剤、可塑剤などから選択される１種またはそれ以上の補助成分を添加することができる。
【００２６】
本発明の眼の疲れの予防または改善剤中のシトルリンまたはその塩の濃度は、製剤の種類、該製剤の投与により期待する効果等に応じて適宜選択される。本発明の眼の疲れの予防または改善剤中のシトルリンまたはその塩として、通常は０．１〜１００重量％、好ましくは０．５〜８０重量％、特に好ましくは１〜７０重量％である。
【００２７】
本発明の眼の疲れの予防または改善剤中の投与量および投与回数は、投与形態、患者の年齢、体重、治療すべき症状の性質もしくは重篤度により異なるが、通常、成人一日当り、シトルリンまたはその塩として、通常は５０ｍｇ〜３０ｇ、好ましくは１００ｍｇ〜１０ｇ、より好ましくは２００ｍｇ〜３ｇ、さらに好ましくは４００ｍｇ〜１．６ｇとなるように、一日一回ないし数回投与する。
【００２８】
また、本発明の眼の疲れの予防または改善剤は、１回あたりの摂取量が上記投与量に調整された剤であってもよい。
摂取または投与期間は、特に限定されないが、通常は１日間〜１年間、好ましくは１週間〜３ヶ月間であり、さらに好ましくは、４〜８週間である。
【００２９】
本発明の眼の疲れの予防または改善剤は、例えば、眼疲労等の予防または改善に使用することができる。
眼疲労とは、上述したように、適当な休息で改善する生理的な疲労であり、テレビやパソコンの長時間使用等により眼を酷使した際又は運動した際に、ピント調節に働く毛様体筋に筋肉疲労と緊張が生じ、一過性の近視状態（視界がぼやける）、眼がチカチカする、まぶしい、眼が重い等の症状が起きることをいい、一般に眼の疲れを感じる状態をいう。
【００３０】
また、眼疲労には、運動後の眼の疲れ又は運動後の視野のかすみ等も含まれる。運動後の眼の疲れ又は運動後の視野のかすみとは、具体的には、運動に起因して眼の疲れが生じることや視界がぼやけることをさす。運動とは、具体的には有酸素運動又は無酸素運動をいう。特に、本発明の眼の疲れの予防または改善剤は、有酸素運動に起因する眼の疲れ又は有酸素運動に起因する視野のかすみの予防または改善に使用することができる。
本発明の眼の疲れの予防または改善剤は、上記のような眼疲労を予防または改善することができる。
【００３１】
さらに本発明においては、眼の疲れの予防または改善剤を製造するために、シトルリンまたはその塩が使用され得る。
【００３２】
さらにまた本発明は、眼の疲れの予防または改善方法を包含する。本発明の方法は、眼の疲れの予防または改善させる必要のある対象者に、該対象者の眼の疲れの予防または改善に十分な量のシトルリンまたはその塩を摂取させる、または投与する工程を含む。
【実施例】
【００３３】
以下に、シトルリン摂取による眼の疲れの予防もしくは改善効果に関する試験例を示す。
試験例１
健常な２５歳から４９歳までの女性４７名を１６名、１５名および１６名の３群に分け、１日１回、下記記載の所要量のカプセルを水と共に噛まずに摂取させ、８週間摂取させた。
Ａ群：プラセボ食品８カプセル（プラセボ）
Ｂ群：Ｌ−シトルリン含有食品２カプセルおよびプラセボ食品６カプセル（８カプセル中Ｌ−シトルリンは合計４００ｍｇ）
Ｃ群：Ｌ−シトルリン含有食品８カプセル（８カプセル中Ｌ−シトルリンは合計１６００ｍｇ）
Ｌ−シトルリン含有食品１カプセル当たりの成分はシトルリン２００ｍｇおよびコーンスターチ２００ｍｇであり、プラセボ食品１カプセルの成分は、コーンスターチ３３０ｍｇである。摂取開始４週間後および摂取開始８週間後の測定当日は来院時に摂取し、それ以外は各被験者が朝食後に摂取した。朝食後に摂取出来なかった場合は、その日のうちに摂取した。有効性評価にあたり、試験開始４週間後に来院しなかったＡ群の１名を除外し、Ａ群１５名、Ｂ群１５名、Ｃ群１６名について解析を行った。【００３４】
試験開始時および試験開始８週間後の被験者の眼の疲れについて、線分スケール（ＶＡＳ）法を用いて評価した。すなわち１０ｃｍの線分の両端に眼の疲れの基準となる表現を記し、被験者に眼の疲れに関して図１に示す線分のどのあたりに相当するかを記入してもらった。線分の左端からチェックした部分までの距離（ｃｍ）を測定し、この数値を体感指数とした。試験開始時の体感指数と試験開始から８週間後の体感指数との差（試験８週間目の体感指数の変化）を測定して、各群ごとに平均値および標準偏差を求めた。体感指数の変化が大きいほど、眼の疲れ改善効果が大きいことを表す。【００３５】
また、試験は無作為割付とし、二重遮蔽並行群間比較を行った。統計学的有意差検定は、試験開始８週間時の体感指数の変化量について、プラセボ（コーンスターチ摂取）群を対照群として、ｓｔｅｅｌ検定によって実施した。結果を図２に示す。
その結果、シトルリン１６００ｍｇ摂取により、試験開始８週間後の眼の疲れ、具体的には眼疲労の自覚症状が顕著な改善を示した。以上の結果から、シトルリン摂取により、眼の疲れが改善することが示された。【００３６】
なお、本試験の対象者は健常者であるため、病的疲労である「眼精疲労」を有する人は、対象者から除かれている。【００３７】
試験例２
健常な２０〜３０代男性２２人にＬ−シトルリン含有食品９カプセル（Ｌ−シトルリン  ２４００ｍｇ）もしくはプラセボ食品９カプセルを１日１回、水とともに８日間摂取させた。
試験食の摂取は８日間の摂取期間後に３週間のウォッシュアウト期間を設けてクロスオーバーで実施した。
Ｌ−シトルリン含有食品１カプセル当たりの成分はシトルリン２６７ｍｇおよびコーンスターチ１３３ｍｇであり、プラセボ食品１カプセルの成分は、コーンスターチ３３０ｍｇである。測定当日（摂取８日目）は来院時に摂取し、それ以外は各被験者が就寝前に摂取した。【００３８】
測定当日は試験食品摂取１時間後にエルゴメーターによる４ｋｍのタイムトライアルを実施し、運動直後の被験者の眼の疲れ及び視野のかすみについて、線分スケール（ＶＡＳ）法を用いて評価した。すなわち１０ｃｍの線分の両端に眼の疲れの基準となる表現を記し、被験者に眼の疲れ及び視野のかすみに関して図１に示す線分のどのあたりに相当するかを記入してもらった。線分の左端からチェックした部分までの距離（ｃｍ）を測定し、この数値を体感指数とし、各群ごとに平均値および標準偏差を求めた。体感指数の値が小さいほど、眼の疲れ改善効果が大きいことを表す。【００３９】
また、試験は無作為割付とし、二重遮蔽クロスオーバー比較を行った。統計学的有意差検定は、プラセボ（コーンスターチ摂取）群を対照群として、Ｐａｉｒｅｄ−ｔ検定によって実施した。結果を図３及び図４に示す。図３は眼の疲れの体感指数の変化を示し、図４は視野のかすみの体感指数の変化を示す。
その結果、一日当り、シトルリン２４００ｍｇを８日間摂取することにより、運動後の眼の疲れ及び視野のかすみ、具体的には眼疲労の自覚症状が顕著な改善を示した。以上の結果から、シトルリン摂取により、眼の疲れが改善することが示された。【００４０】
なお、本試験の対象者は健常者であるため、病的疲労である「眼精疲労」を有する人は、対象者から除かれている。
以下に、本発明の実施例を示す。【００４１】
［実施例１］
シトルリンを含有する錠剤の製造
Ｌ−シトルリン（協和発酵バイオ社製）１２０ｋｇ、環状オリゴ糖１９ｋｇ、セルロース５７ｋｇおよびプルラン１ｋｇを流動層造粒乾燥機で造粒した。得られた造粒物およびステアリン酸カルシウム３ｋｇをコニカルブレンダーで混合した後、ロータリー圧縮成形機で圧縮成形して錠剤を製造した。【００４２】
［実施例２］
シトルリンを含有する腸溶錠剤の製造
実施例１で製造した錠剤の表面をシェラック溶液でコーティングして腸溶錠剤を製造した。【００４３】
［実施例３］
シトルリンを含有する腸溶カプセルの製造
Ｌ−シトルリン（協和発酵バイオ社製）１２０ｋｇ、環状オリゴ糖１９ｋｇ、セルロース５７ｋｇ、ステアリン酸カルシウム３ｋｇおよびプルラン１ｋｇを、コニカルブレンダーで混合した。得られる混合物２０ｋｇおよび０．２ｋｇの二酸化ケイ素を混合撹拌して得られた混合物をカプセル充填機に投入し、ハードカプセルに充填してハードカプセルを得た。得られるハードカプセルの表面をツェイン溶液でコーティングして腸溶カプセルを製造した。【００４４】
［実施例４］
シトルリンを含有する飲料の製造
Ｌ−シトルリン（協和発酵バイオ社製）１．２８ｋｇ、エリスリトール３ｋｇ、クエン酸０．０５ｋｇ、人工甘味料３ｇおよび香料０．０６ｋｇを液温７０℃で水５０Ｌに撹拌溶解し、クエン酸でｐＨを３．３に調整後、プレート殺菌を用いて滅菌して瓶に充填後、パストライザー殺菌し、飲料を製造した。【００４５】
本発明を特定の態様を用いて詳細に説明したが、本発明の意図と範囲を離れることなく様々な変更および変形が可能であることは、当業者にとって明らかである。なお本出願は、２０１４年６月２５日付で出願された日本特許出願（特願２０１４−１２９７７８）に基づいており、その全体が引用により援用される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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