(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩及びＮ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩水和物からなる結晶多形２型であり、Ｘ線粉末回折において２θ＝６．８、１４．９、１７．８、２４．１、２４．６、及び２４．８°（±０．２°）のピークを有する結晶多形２型。
【請求項２】
請求項１に記載の結晶多形２型と１以上の医薬的に許容される希釈剤又は担体を含む医薬組成物。
【請求項３】
さらなる医薬活性剤と組合わせて投与するための請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
下記リストからなる群より選択されるカテプシンＫによって媒介される障害の治療における使用のための請求項２に記載の医薬組成物：
骨粗鬆症；
歯肉疾患、例えば、歯肉炎及び歯周炎；
ページェット病；
悪性の高カルシウム血症；
転移性骨疾患、例えば、新生物が含まれる骨癌；
過度の軟骨又はマトリックスの分解を特徴とする疾患、例えば、骨関節炎及び関節リウマチ；及び
疼痛。
【請求項５】
該障害が骨粗鬆症であることを特徴とする、請求項４に記載の使用のための医薬組成物。
【請求項６】
該障害が転移性骨疾患、例えば新生物が包含される骨癌であることを特徴とする、請求項４に記載の使用のための医薬組成物。
【請求項７】
該障害が骨関節炎であることを特徴とする、請求項４に記載の使用のための医薬組成物。
【請求項８】
該障害が関節リウマチであることを特徴とする、請求項４に記載の使用のための医薬組成物。
【請求項９】
請求項２に記載の医薬組成物が１以上のさらなる医薬活性剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、請求項４〜請求項８のいずれか１項に記載の使用のための医薬組成物。
【請求項１０】
１以上のさらなる医薬活性剤が、有機ビスホスホネート；エストロゲン受容体モジュレータ；アンドロゲン受容体モジュレータ；破骨細胞プロトンＡＴＰアーゼの阻害剤；ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼの阻害剤；インテグリン受容体アンタゴニスト；ビタミンＤ又はその類似体、骨芽細胞同化剤、例えばＰＴＨ；選択的シクロオキシゲナーゼ−２阻害剤（ＣＯＸ−２阻害剤）；インターロイキン−１−βの阻害剤；ＬＯＸ／ＣＯＸ阻害剤、ＲＡＮＫＬ阻害剤；抗スクレロスチン抗体、並びにこれらの医薬的に許容される塩及び混合物より選択される、請求項９に記載の使用のための医薬組成物。
【請求項１１】
請求項２に記載の医薬組成物と１以上のさらなる医薬活性剤が経口投与されることを特徴とする、請求項９又は請求項１０に記載の使用のための医薬組成物。
【請求項１２】
請求項２に記載の医薬組成物が経口投与されて、１以上のさらなる医薬活性剤が静脈内投与より投与されることを特徴とする、請求項９又は請求項１０に記載の使用のための医薬組成物。
【請求項１３】
Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド遊離塩基を、アセトン、ＩＰＡ、ＩＰＡｃ、ＥｔＯＡｃ、ＴＨＦ、及びＭＥＫより選択される溶媒の存在下に塩酸と反応させる工程と、前記溶媒より結晶多形２型を結晶させる工程を含んでなる、請求項１に記載の結晶多形２型の調製の方法。
【請求項１４】
該溶媒がアセトンである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
結晶させる工程を徐冷又は温度サイクリングの条件下で実施する、請求項１３又は請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
結晶させる工程を請求項１に記載の結晶多形２型の種結晶量（a seed amount）の存在下に実施する、請求項１３〜請求項１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
結晶させる工程を貧溶媒、例えばＴＢＭＥの使用によって促進する、請求項１３〜請求項１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
（ｉ）Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド遊離塩基をアセトン及びＴＢＭＥの存在下に塩酸と反応させる工程；
（ｉｉ）該溶液に結晶多形２型を播種する工程；及び
（ｉｉｉ）アセトン及びＴＢＭＥの添加によって結晶化を引き起こす工程を含んでなる、請求項１に記載の結晶多形２型の調製の方法。
【請求項１９】
請求項１に記載の結晶多形２型を１以上の医薬的に許容される希釈剤又は担体と会合させる工程を含んでなる、請求項２に記載の医薬組成物の調製の方法。
【請求項２０】
さらに、１２．４、１６．７、１７．０、２７．２、２８．２、及び３２．１（±０．２°，２θ値）より選択される１、２、３、４、５、又は６のピークを含有するＸＲＰＤパターンを有する請求項１に記載の結晶多形２型。
【請求項２１】
さらに、１２．４、及び１６．７（±０．２°，２θ値）より選択される１、又は２つのピークを含有するＸＲＰＤパターンを有する請求項１に記載の結晶多形２型。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、既知のシステインプロテアーゼ阻害剤、Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミドの新規な塩の特定の結晶形に関する。本発明はまた、その結晶形を含有する医薬製剤に、そして特にカテプシンＫによって媒介される障害の治療のための、その療法的使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
システインプロテアーゼのパパインスーパーファミリーは、哺乳動物、無脊椎動物、原生動物、植物、及び細菌が含まれる多様な種に広く分布している。カテプシンＢ、Ｆ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｏ、及びＳが含まれる、いくつかの哺乳動物のカテプシン酵素は、このスーパーファミリーに帰属されて、それらの活性の不適正な調節は、関節炎、筋ジストロフィー、炎症、糸球体腎炎、及び腫瘍浸潤が含まれる、いくつかの代謝障害との関連が示唆されてきた。病原性のカテプシン様酵素には、細菌のギンギパイン、マラリアのファルシパインＩ、ＩＩ、ＩＩＩ（以下続く）、並びにニューモシスチス・カリニ（Pneumocystis carinii）、トリパノソーマ・クルゼイ（Trypanosoma cruzei）及びブルセイ（brucei）、クリチジア・フシクラータ（Crithidia fusiculata）、住血吸虫属の種（Schistosoma spp）由来のシステインプロテアーゼが含まれる。
【０００３】
カテプシンＫの不適正な調節は、骨粗鬆症、歯肉炎及び歯周炎のような歯肉疾患、ページェット病、悪性の高カルシウム血症、及び転移性骨疾患が含まれるいくつかの障害との関連が示唆されてきた。骨関節炎の滑膜の軟骨吸収細胞においてそのレベルが上昇していることから、カテプシンＫは、骨関節炎及び関節リウマチのような、過度の軟骨又はマトリックスの分解を特徴とする疾患に関連していることが示唆される。転移性の新生物細胞は、典型的には、周囲のマトリックスを分解する高レベルのタンパク分解酵素を発現する。また、そのような疾患は、高レベルの骨代謝回転と関連している。従って、カテプシンＫの阻害は、癌細胞が骨再形成を弱めるとともに浸潤することによる続発性の転移を予防するのに役立つ可能性がある。
【０００４】
国際特許出願ＷＯ２０１０／０３４７８８は、その中で実施例２として開示されている、遊離塩基の形態であるＮ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミドが含まれるいくつかのシステインプロテアーゼ阻害剤を開示する。この化合物とその遊離塩基を本明細書において「化合物Ｉ」と「化合物Ｉ遊離塩基」とそれぞれ呼ぶ。
【０００５】
【化１】
0006530752.tif 000002
【０００６】
ＷＯ２０１０／０３４７８８の３頁には、その特定の系列のシステインプロテアーゼ阻害剤が水和物の形態でも存在し得ることが認められている。薬剤としてのその使用に関して言えば、化合物Ｉ遊離塩基は、その相対的に低い水溶解度と低い熱安定性に関連したいくつかの欠点を被っている。故に、以下の特質の１以上を有する化合物Ｉの形態へのニーズが存在する：
（ｉ）高い水溶解度
（ｉｉ）高度の結晶性
（ｉｉｉ）良好な水分安定性
（ｉｖ）良好な熱安定性。
【発明の概要】
【０００７】
本明細書は以下の発明の開示を包含する：
［１］Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩及びＮ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩水和物からなる結晶多形２型。
［２］［１］に記載の結晶多形２型と１以上の医薬的に許容される希釈剤又は担体を含んでなる医薬組成物。
［３］［１］に記載の結晶多形２型をさらなる医薬活性剤と一緒に含んでなる医薬組合せ。
［４］医薬品としての使用のための［１］に記載の結晶多形２型。
［５］カテプシンＫによって媒介される障害の治療における使用のための［１］に記載の結晶多形２型。
［６］該障害が：
骨粗鬆症；
歯肉炎及び歯周炎のような歯肉疾患；
ページェット病；
悪性の高カルシウム血症；
転移性骨疾患、例えば、新生物が含まれる骨癌；
骨関節炎及び関節リウマチのような、過度の軟骨又はマトリックスの分解を特徴とする疾患；及び
疼痛からなるリストより選択されることを特徴とする、［５］に記載の使用のための結晶多形２型。
［７］該障害が骨粗鬆症であることを特徴とする、［６］に記載の使用のための結晶多形２型。
［８］該障害が転移性骨疾患、例えば新生物が含まれる骨癌であることを特徴とする、［６］に記載の使用のための結晶多形２型。
［９］該障害が骨関節炎であることを特徴とする、［６］に記載の使用のための結晶多形２型。
［１０］該障害が関節リウマチであることを特徴とする、［６］に記載の使用のための結晶多形２型。
［１１］［１］に記載の結晶多形２型が１以上のさらなる医薬活性剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、［４］〜［１０］のいずれかに記載の使用のための結晶多形２型。
［１２］１以上のさらなる医薬活性剤が、有機ビスホスホネート；エストロゲン受容体モジュレータ；アンドロゲン受容体モジュレータ；破骨細胞プロトンＡＴＰアーゼの阻害剤；ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼの阻害剤；インテグリン受容体アンタゴニスト；ビタミンＤ又はその類似体、ＰＴＨのような骨芽細胞同化剤；選択的シクロオキシゲナーゼ−２阻害剤（ＣＯＸ−２阻害剤）；インターロイキン−１−βの阻害剤；ＬＯＸ／ＣＯＸ阻害剤、ＲＡＮＫＬ阻害剤；抗スクレロスチン抗体、並びにこれらの医薬的に許容される塩及び混合物より選択される、［１１］に記載の使用のための結晶多形２型。
［１３］［１］に記載の結晶多形２型と１以上のさらなる医薬活性剤が経口投与されることを特徴とする、［１１］又は［１２］に記載の使用のための結晶多形２型。
［１４］［１］に記載の結晶多形２型が経口投与されて、１以上のさらなる医薬活性剤が静脈内投与より投与されることを特徴とする、［１１］又は［１２］に記載の使用のための結晶多形２型。
［１５］［１］に記載の結晶多形２型の安全で有効な量を投与することを含んでなる、カテプシンＫによって媒介される障害の治療のための方法。
［１６］該障害が：
骨粗鬆症；
歯肉炎及び歯周炎のような歯肉疾患；
ページェット病；
悪性の高カルシウム血症；
転移性骨疾患、例えば、新生物が含まれる骨癌；
骨関節炎及び関節リウマチのような、過度の軟骨又はマトリックスの分解を特徴とする疾患；及び
疼痛からなるリストより選択されることを特徴とする、［１５］に記載の方法。
［１７］該障害が骨粗鬆症であることを特徴とする、［１６］に記載の方法。
［１８］該障害が転移性骨疾患、例えば新生物が含まれる骨癌であることを特徴とする、［１６］に記載の方法。
［１９］該障害が骨関節炎であることを特徴とする、［１６］に記載の方法。
［２０］該障害が関節リウマチであることを特徴とする、［１６］に記載の方法。
［２１］［１］に記載の結晶多形２型が１以上のさらなる医薬活性剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、［１６］〜［２０］のいずれかに記載の方法。
［２２］さらなる１以上の医薬活性剤が、有機ビスホスホネート；エストロゲン受容体モジュレータ；アンドロゲン受容体モジュレータ；破骨細胞プロトンＡＴＰアーゼの阻害剤；ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼの阻害剤；インテグリン受容体アンタゴニスト；ビタミンＤ又はその類似体、ＰＴＨのような骨芽細胞同化剤；選択的シクロオキシゲナーゼ−２阻害剤（ＣＯＸ−２阻害剤）；インターロイキン−１−βの阻害剤；ＬＯＸ／ＣＯＸ阻害剤、ＲＡＮＫＬ阻害剤；抗スクレロスチン抗体、並びにこれらの医薬的に許容される塩及び混合物より選択される、［２１］に記載の方法。
［２３］［１の結晶多形２型と１以上の医薬活性剤がすべて経口投与されることを特徴とする、［２１］又は［２２］に記載の方法。
［２４］［１の結晶多形２型が経口投与されて、１以上のさらなる医薬活性剤が静脈内投与より投与されることを特徴とする、［２１］又は［２２］に記載の方法。
［２５］Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド遊離塩基を、アセトン、ＩＰＡ、ＩＰＡｃ、ＥｔＯＡｃ、ＴＨＦ、及びＭＥＫより選択される溶媒の存在下に塩酸と反応させる工程と、前記溶媒より結晶多形２型を結晶させる工程を含んでなる、［１］に記載の結晶多形２型の調製の方法。
［２６］該溶媒がアセトンである、［２５］に記載の方法。
［２７］結晶させる工程を徐冷又は温度サイクリングの条件下で実施する、［２５］又は［２６］に記載の方法。
［２８］結晶させる工程を［１］に記載の結晶多形２型の種結晶量（a seed amount）の存在下に実施する、［２５］〜［２７］のいずれかに記載の方法。
［２９］結晶させる工程をＴＢＭＥのような貧溶媒の使用によって促進する、［２５］〜［２８］のいずれかに記載の方法。
［３０］（ｉ）Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド遊離塩基をアセトン及びＴＢＭＥの存在下に塩酸と反応させる工程；
（ｉｉ）該溶液に結晶多形２型を播種する工程；及び
（ｉｉｉ）アセトン及びＴＢＭＥの添加によって結晶化を引き起こす工程を含んでなる、［１］に記載の結晶多形２型の調製の方法。
［３１］［２５］〜［３０］のいずれかに記載の方法によって入手可能な結晶多形２型。
［３２］［１］に記載の結晶多形２型を１以上の医薬的に許容される希釈剤又は担体と会合させる工程を含んでなる、［２］に記載の医薬組成物の調製の方法。
［３３］図１に実質的に示されるようなＸＲＰＤパターンを有する結晶多形２型の形態の、Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩とＮ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩水和物からなる材料。
［３４］６．８、１２．４、１４．９、１６．７、１７．０、１７．８、２４．１、２４．６、２４．８、２７．２、２８．２、３２．１（±０．２°，２θ値）より選択される３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、又は全１２のピークを含有するＸＲＰＤパターンを有する結晶多形２型の形態の、Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩とＮ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩水和物からなる材料。
［３５］６．８、１２．４、１４．９、１６．７、１７．８、２４．１、２４．６、及び２４．８（±０．２°，２θ値）より選択される３、４、５、６、７、又は全８つのピークを含有するＸＲＰＤパターンを有する［３４］に記載の材料。
［３６］６．８、１４．９、１７．８、２４．１、２４．６、及び２４．８（±０．２°，２θ値）より選択される３、４、５、又は全６つのピークを含有するＸＲＰＤパターンを有する［３５］に記載の材料。
本発明により、Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩とＮ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩水和物からなる結晶多形２型を提供する。
【０００８】
結晶多形２型は、化合物Ｉ遊離塩基と、化合物Ｉの他の塩形態と、そしてＮ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩の他の結晶多形（結晶多形１型のような）と比較して改善された物理化学的プロフィールを有しており、特に、高い結晶性、良好な水分安定性、良好な熱安定性、及び高い水溶解度を特徴とする。従って、それは、医薬品の製造にとって非常に好ましい特質を有する。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
本発明について以下の図を参照して例解する：
【図１】図１は、結晶多形２型の試料のＸ線粉末回折パターンを示す。
【図２】図２は、結晶多形１型として知られる、Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩の結晶多形の試料のＸ線粉末回折パターンを示す。
【図３】図３は、化合物Ｉ遊離塩基の結晶形の試料のＸ線粉末回折パターンを示す。
【図４】図４は、ＤＭＳＯ溶液に溶けた結晶多形２型の試料の１Ｈ  ＮＭＲスペクトルを示す。
【図５】図５は、結晶多形２型の試料の固体１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルを示す。
【図６】図６は、２％未満のＲＨで１週間保存後の、結晶多形２型の試料の固体１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルを示す。
【図７】図７は、７５％  ＲＨで１週間保存後の、結晶多形２型の試料の固体１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルを示す。
【図８】図８は、８０％  ＲＨで１週間保存後の、結晶多形２型の試料の固体１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルを示す。
【図９】図９は、特徴的なケトン及び水和物の１３Ｃ  ＮＭＲシグナルの緩和挙動について検証する、結晶多形２型の試料に対して実施したＮＭＲ実験の結果を示す。
【図１０】図１０は、特徴的なケトンシグナルと水和物シグナルの間の差異を同定するために結晶多形２型の試料に対して実施した、さらなるＮＭＲ実験の結果を示す。
【図１１】図１１は、結晶多形２型の３種のバッチ由来の試料のキャピラリーＸ線粉末回折パターンを示す。
【図１２】図１２は、結晶多形２型の試料の熱分析を示す（上のグラフはＤＳＣで、下のグラフはＴＧＡである）。
【図１３】図１３は、結晶多形１型の試料の熱分析を示す（上のグラフはＤＳＣで、下のグラフはＴＧＡである）。
【図１４】図１４は、結晶性の化合物Ｉ遊離塩基の試料の熱分析を示す（上のグラフはＤＳＣで、下のグラフはＴＧＡである）。
【図１５】図１５は、結晶多形２型の試料の蒸気吸着量測定分析（質量プロットにおけるＤＶＳ変化）を示す。
【図１６】図１６は、結晶多形２型の試料の蒸気吸着量測定分析（ＤＶＳ等温プロット）を示す。
【図１７】図１７は、実施例１７の大規模手順を使用して得られた結晶多形２型の試料のＸ線粉末回折パターンを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
水溶解度（即ち、親水性）は、薬剤の薬物動態に影響を及ぼす、その重要な物理特性である。多くの状況では、増加した水溶解度が望ましい。
結晶性は、別の重要な物理特性である。一般に、高結晶性の固形物は、非晶性又は一部結晶性の固形物と比較して、取扱うことがより容易である（例えば、より一貫した物理特性を有すること）。さらに、正確な結晶形は、例えば、溶解速度や安定性（水分安定性のような）に影響を及ぼす可能性がある。固形物の結晶形は、例えば非晶形と比較して、低い水溶解度を有することが多い。
【００１１】
医薬品の初期製造の文脈でも、投与に先立つ後続期間の間でも、医薬応用において、一貫性と信頼性は、最も重要なことである。従って、熱安定性と水分安定性は、薬剤がどのように保存されて取り扱われるかということに影響を及ぼすので、該薬剤の重要な物理特性である。製造工程（例、化学合成、製剤化、（必要ならば、サイズ縮小））の間、又は保存の間の化学的分解又は物理形態の変化を回避するには、高い熱安定性及び水分安定性が所望される。
【００１２】
結晶多形２型は、下記に図解されるように、２つの成分（Ａ及びＢ）からなる単結晶相として存在する。
【００１３】
【化２】
0006530752.tif 000003
【００１４】
結晶多形２型は、図１に示されるようなＸ線粉末回折パターンを実質的に有することを特徴とする。
従って、本発明は、図１に示されるようなＸ線粉末回折パターンを実質的に有する、Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩とＮ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩水和物からなる結晶多形２型を提供する。
【００１５】
例えば、このパターンは、主要ピークを６．８、１２．４、１４．９、１６．７、１７．０、１７．８、２４．１、２４．６、２４．８、２７．２、２８．２、３２．１（±０．２°，２θ値）の位置に有し、これらシグナルのいくつかは、結晶多形２型に特徴的である。
【００１６】
従って、本発明は、少なくとも３つ（例えば、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、又は全１２）のシグナルが６．８、１２．４、１４．９、１６．７、１７．０、１７．８、２４．１、２４．６、２４．８、２７．２、２８．２、３２．１（±０．２°，２θ値）にあるＸ線粉末回折パターンを有する、Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩とＮ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩水和物からなる結晶多形２型を提供する。
【００１７】
６．８、１２．４、１４．９、１６．７、１７．８、２４．１、２４．６、及び２４．８にあるシグナルは、比較的高い相対強度（３０％より大きい−図１参照）を有するので、これらピークのうち少なくとも３つ（例えば、３、４、５、６、７、又は全８つ）を認めることが好ましい。６．８、１４．９、１７．８、２４．１、２４．６、及び２４．８にあるシグナルは、特に高い相対強度（４０％より大きい−図１参照）を有するので、これらピークのうち少なくとも３つ（例えば、３、４、５、又は全６つ）を認めることが好ましい。
【００１８】
１３．５、１９．０、及び２３．９（±０．２°，２θ値）でのシグナルはまた、特に高い相対強度（４０％より大きい−図１参照）を有するので、これらピークの３つすべてを認めることが好ましい。
【００１９】
実施例１７に従って大規模で調製した結晶多形２型は、図１７に示されるようなＸ線粉末回折パターンを実質的に有しており、これは、図１に示されるパターンとよく一致している。
【００２０】
好適にも、結晶多形２型は、結晶多形１型のスペクトル（図２参照）において出現する、３．９、７．５，及び９．２（±０．２°，２θ値）で１０％以上の相対強度を有するシグナルを有さないＸ線粉末回折パターンを有する。
【００２１】
結晶多形２型は、斜方晶系で結晶して、約２９４Ｋの温度でＰ２１２１２１空間群を有すること、及び／又は約２９４Ｋの温度でａ＝７．５Å、ｂ＝１５．３Å、ｃ＝２６．３Åの単位格子寸法を有することを特徴とする。
【００２２】
このように、本発明は、Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩とＮ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩水和物からなる結晶多形２型を提供し、ここで結晶多形２型は、約２９４Ｋの温度でＰ２１２１２１空間群を有すること、及び／又は約２９４Ｋの温度でａ＝７．５Å、ｂ＝１５．３Å、ｃ＝２６．３Åの単位格子寸法を有することを特徴とする。
【００２３】
結晶多形２型が２種の異なる化学成分（化合物Ｉ一塩酸塩のケトン形と水和形）からなるという事実にもかかわらず、この多形２型は、単結晶相として存在する。この単結晶相の内部で、その結晶中のケトン形（Ａ）の比率は、水和形（Ｂ）の比率より高い場合がある。１つの態様において、ケトン形の水和形に対するモル比は、約１：１〜約４：１、例えば、約１．２：１〜約３：１（約５０：５０、５１：４９、：５２：４８、５３：４７、５４：４６、５５：４５、５６：４４、５７：４３、５８：４２、５９：４１、６０：４０、６１：３９、６２：３８、６３：３７、６４：３６、６５：３５、６６：３４、６７：３３、６８：３２、６９：３１、７０：３０、７１：２９、７２：２８、７３：２７、７４：２６、７５：２５、７６：２４、７７：２３、７８：２２、７９：２１、又は８０：２０のように）である。別の態様において、ケトン形の水和形に対するモル比は、約４：１〜約５：１、例えば、８０：２０、８１：１９、８２：１８、８３：１７、又は８４：１６である。
【００２４】
このように、１つの側面において、本発明は、Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩とＮ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩水和物からなる結晶多形２型を提供し、ここでＮ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩のＮ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩水和物に対するモル比は、約１：１〜約４：１、例えば、約１．２：１〜約３：１（約５０：５０、５１：４９、：５２：４８、５３：４７、５４：４６、５５：４５、５６：４４、５７：４３、５８：４２、５９：４１、６０：４０、６１：３９、６２：３８、６３：３７、６４：３６、６５：３５、６６：３４、６７：３３、６８：３２、６９：３１、７０：３０、７１：２９、７２：２８、７３：２７、７４：２６、７５：２５、７６：２４、７７：２３、７８：２２、７９：２１、又は８０：２０のように）である。別の側面において、本発明は、Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩とＮ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩水和物からなる結晶多形２型を提供し、ここでＮ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩のＮ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩水和物に対するモル比は、約４：１〜約５：１（８０：２０、８１：１９、８２：１８、８３：１７、又は８４：１６のように）である。
【００２５】
ケトン形の水和形に対する比率は、１３Ｃ  ＮＭＲ又は１Ｈ  ＮＭＲ分析によって、好ましくは固体１３Ｃ  ＮＭＲ分析によって決定することができる。実施例５に従って調製された結晶多形２型は、６７：３３のケトン：水和物比を有すると決定された（固体１３Ｃ  ＮＭＲ分析によって決定した、実施例１１参照）。実施例１７に従って調製された結晶多形２型は、８２：１８のケトン：水和物比を有すると決定された（１Ｈ  ＮＭＲ分析によって決定した）。しかしながら、異なる方法により調製した結晶多形２型が異なるケトン：水和物比を有すると決定された場合でも、この材料の試料で得られたＸ線回折パターンは実質的に同じであって、多形２型におけるケトン：水和物の正確な比は、この材料の特質を決定する重要な特徴ではないことを示した。
【００２６】
実施例においてより詳しく考察するように、本発明者は、実施例８に記載の方法の１つに従って調製し得る、Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩の別の結晶多形を同定した。本明細書において「結晶多形１型」と呼ばれるこの型は、図２に示されるようなＸ線粉末回折パターンを実質的に有する。結晶多形１型におけるケトンの水和物に対する比は、決定しなかった。結晶多形１型は、熱安定性がより低くて水溶解度がより低いので、結晶多形２型よりずっと魅力に乏しい特性を有して、本発明の側面を形成しない。
【００２７】
本明細書に記載される化合物の命名法が多様であってよいことに注目されたい。本明細書において、化合物Ｉ遊離塩基は、Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミドと記載されるが、Ｎ−（（Ｓ）−１−（（３ａＳ，６Ｒ，６ａＲ）−６−エチニル−３−オキソテトラヒドロ−２Ｈ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４（５Ｈ）−イル）−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イル）−４−（５−フルオロ−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル）ベンズアミドと呼んでもよい。疑念の回避のために言えば、いずれの化合物名も：
【００２８】
【化３】
0006530752.tif 000004
【００２９】
の同じ化学構造を意味する。
化合物の命名におけるこの多様性が生じるのは、以下の二環式単位を命名するのに２つの異なる慣例があるためである：
【００３０】
【化４】
0006530752.tif 000005
【００３１】
この単位は、「３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール」とも「３−オキソテトラヒドロ−２Ｈ−フロ［３，２−ｂ］ピロール」とも呼んでよい。疑念の回避のために言えば、いずれの名称も同じ構造を意味する。
【００３２】
好適にも、結晶多形２型は、結晶性遊離塩基の形態のスペクトル（図３参照）において出現する、４．０、８．０、２０．８、及び２２．７（±０．２°，２θ値）で１０％以上の相対強度を有するシグナルを有さないＸ線粉末回折パターンを有する。化合物Ｉ遊離塩基の欠点についてはすでに言及したが、低い水溶解度と低い熱安定性が含まれる。
【００３３】
「相対強度」という用語は、図１〜図３によって図解されるような、スペクトル中の最高強度のシグナルの強度に対する百分率として付与される強度を意味すると理解されたい。
【００３４】
結晶多形２型は、それが同じ結晶相の内部にある約１：１〜約４：１又は約５：１の比（例えば、２：１又は８２：１８の比）の２種の化学成分（ケトンと水和物）からなるという構造において独特である。実施例１１に記載されて図５〜図８に図解されるように、驚くべきことに、ケトンの水和物に対する比は、結晶多形２型の試料を異なる相対湿度で保存したときに、変化しなかった。さらに、このスペクトルの緩和依存性を判定するための追加の固相ＮＭＲ実験は、このケトン形と水和形が異なる相にあるとする証拠を提供しなかった（実施例１１と図９及び図１０）。蒸気吸着量測定を使用する吸湿性分析（実施例１５）では、この結晶形が湿度媒介性変化の危険にさらされないという、この固体ＮＭＲ実験（実施例１１）の驚くべき知見が確認された。結晶多形２型は、結晶性遊離塩基や結晶多形１型と比較して、非常に高い溶解度だけでなく、著しく高い熱安定性を有することも見出された。
【００３５】
化合物Ｉ遊離塩基は、ＷＯ２０１０／０３４７８８（その内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に教示される方法によって調製することができる。実施例１を参照のこと。
【００３６】
実施例１６では、化合物Ｉ遊離塩基を大規模で調製するのに特に適している方法について記載する。
Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩（化合物Ｉ遊離塩基の一塩酸塩）は、化合物Ｉ遊離塩基の塩酸との反応によって調製することができる。
【００３７】
結晶多形２型を調製するための様々な方法がすでに決定されていて、以下が含まれる：
（ａ）特に徐冷（例、０．１°／分で５０℃から２０℃へ）を伴った、アセトン中の溶液からの結晶化；
（ｂ）特に温度サイクリングを伴った、ＩＰＡ中の溶液からの結晶化。好適な温度サイクルは、１時間ランプで５０℃と０℃の間のサイクリングを伴う；
（ｃ）特に温度サイクリングを伴った、アセトン、ＩＰＡｃ、ＥｔＯＡｃ、又はＭＥＫ中の溶液からの結晶化。好適な温度サイクルは、１時間ランプで５０℃と２０℃の間のサイクリングを伴う。
【００３８】
このように、結晶多形２型の調製の方法は、Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド遊離塩基を、アセトン、ＩＰＡ、ＩＰＡｃ、ＥｔＯＡｃ、ＴＨＦ、及びＭＥＫ（特にアセトン）より選択される溶媒の存在下に塩酸と反応させる工程と、該結晶形を前記溶媒より結晶させる工程を含む。結晶させる工程は、徐冷又は温度サイクリングの条件下に実施してよい。
【００３９】
いくつかの態様では、Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩の溶媒（例、上記に言及した１つ）中の溶液より、種結晶量の結晶多形２型の存在下に、結晶多形２型を結晶させる工程を含んでなる方法によって結晶多形２型を調製することが好ましい場合がある。
【００４０】
代わりの例示法は、化合物Ｉ遊離塩基のアセトン溶液に少量の結晶多形２型を播種する工程と、塩酸のアセトン溶液を添加する工程を含む。化合物Ｉ遊離塩基のＨＣｌとの反応に適した温度は５０℃付近であって、続いて０．１℃／分で５℃まで冷却して、結晶化を促進する。
【００４１】
貧溶媒（例、ＴＢＭＥ）の使用によって結晶化を促進してよい。
このように、結晶多形２型の調製用の別の例示法は、ＴＢＭＥを貧溶媒として使用する、ＩＰＡ、ＴＨＦ、又はアセトンの溶液からの結晶化を含む。
【００４２】
特に、このような方法は、化合物Ｉ遊離塩基のアセトン溶液をアセトン中のＨＣｌで処理することによってＮ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩を最初に生成する工程、少量の結晶多形２型を播種する工程、及びＴＢＭＥを貧溶媒として添加する工程を含む場合がある。上記の工程は、典型的には、５０℃付近で実施して、冷却（例えば、１２℃まで）を続ける。
【００４３】
このように、１つの態様では、徐冷（例えば、５０℃から２０℃へ０．１℃／分で冷却すること）でアセトンより再結晶させるときに得られる結晶多形２型を提供する。
結晶多形２型を大規模で調製するのに特に適している方法（実施例１７において詳しく記載するような）は、化合物Ｉ遊離塩基のアセトン、ＴＢＭＥ、及びＨＣｌ溶液を５０℃へ迅速に加熱する工程を含む。次いで、この溶液に少量の結晶多形２型を播種すると結晶多形２型の沈殿を引き起こし、これは、貧溶媒としてのＴＢＭＥとアセトンの添加によってさらに引き起こされる。次いで、生じる懸濁液を１０℃へ迅速に冷却する。
【００４４】
このように、１つの態様において、本発明は、
（ｉ）Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド遊離塩基をアセトン及びＴＢＭＥの存在下に塩酸と反応させる工程；
（ｉｉ）該溶液に結晶多形２型を播種する工程；及び
（ｉｉｉ）アセトン及びＴＢＭＥの添加によって結晶化を引き起こす工程を含んでなる、結晶多形２型の調製の方法を提供する。
【００４５】
上記に言及した方法は、結晶多形２型を産出する。このように、１つの態様では、上記に記載の方法によって得ることができる結晶多形２型を提供する。
上記に注目したように、Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩は、以下の方法によって調製され得る、いくつかのさほど好ましくない多形でも存在する：
化合物Ｉ遊離塩基のＩＰＡｃ溶液を塩酸のジオキサン溶液で、室温で処理することによって、Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩が非晶形で調製され得る。
【００４６】
冷却水（１％，ｖ／ｖ）の存在下での温ＴＨＦ（例、５０℃）（例、４容量）からの冷却による結晶化によって、Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩が結晶多形１型で調製され得る。
【００４７】
従って、結晶多形２型の調製においては、上記の他の所望されない形態を産出する条件を避けるべきである。
結晶多形２型は、カテプシンＫによって媒介される障害の治療に有用であることが期待され得る。
【００４８】
本発明の別の側面では、結晶多形２型の医薬品としての使用を提供する。また、カテプシンＫによって媒介される障害の治療用医薬品の製造における、結晶多形２型の使用を提供する。追加的に提供するのは、結晶多形２型の安全で有効な量を投与することを含んでなる、カテプシンＫによって媒介される障害の治療のための方法である。
【００４９】
１つの態様では、結晶多形２型の適正な投与量レベルが０．０１〜１００μＭの程度（０．０１〜１０μＭ又は０．１〜２５μＭのような）にある。
カテプシンＫによって媒介され得る特定の障害には：
骨粗鬆症；
歯肉炎及び歯周炎のような歯肉疾患；
ページェット病；
悪性の高カルシウム血症；
転移性骨疾患、例えば、新生物が含まれる骨癌；
骨関節炎及び関節リウマチのような、過度の軟骨又はマトリックスの分解を特徴とする疾患；及び
疼痛が含まれる。
【００５０】
特に興味深いのは、骨粗鬆症、骨癌のような転移性骨疾患、骨関節炎、及び関節リウマチの障害、特に骨粗鬆症又は骨関節炎である。
このように、１つの態様において、カテプシンＫによって媒介される障害は、骨粗鬆症である。別の態様において、カテプシンＫによって媒介される障害は、転移性骨疾患（例えば、新生物が含まれる骨癌）である。別の態様において、カテプシンＫによって媒介される障害は、骨関節炎である。別の態様において、カテプシンＫによって媒介される障害は、関節リウマチである。
【００５１】
結晶多形２型を単独で投与することは可能であるが、それは、典型的には、医薬組成物の一部として提示されるものである。そのような組成物は、結晶多形２型を１以上の医薬的に許容される賦形剤と一緒に含むものである。前記医薬的に許容される賦形剤は、投与に適していて、該組成物の他の成分と適合可能なものである。
【００５２】
故に、本発明の追加の側面は、結晶多形２型と１以上の医薬的に許容される希釈剤又は担体を含んでなる医薬組成物である。
該組成物には、経口、直腸、経鼻、局所（頬内と舌下が含まれる）、膣内、又は非経口（皮下、筋肉内、静脈内、及び皮内が含まれる）投与に適したものが含まれる。好適にも、この医薬組成物は、経口投与製剤である。該組成物は、簡便にも、単位剤形（例、錠剤と持続放出カプセル剤）で提示してよくて、製剤の技術分野で知られたどの方法によっても調製してよい。
【００５３】
このような方法には、結晶多形２型を１以上の医薬的に許容される希釈剤又は担体と会合させる工程が含まれる。一般に、該組成物は、結晶多形２型を液状担体又は微細化固形担体、又はその両方と均質かつ緊密に会合させる工程、そして次いで必要ならば該産物を成型する工程によって調製される。
【００５４】
さらなる側面では、結晶多形２型を１以上の医薬的に許容される希釈剤又は担体と会合させる工程を含んでなる、医薬組成物の調製の方法を提供する。
好適にも、（結晶多形２型を含んでなる医薬組成物の）単用量は、企図される適応症と投薬方式に依存して、約２５〜２００ｍｇ（約５０〜１００ｍｇ又は７５〜１２５ｍｇのように）の結晶多形２型を含むものである。骨粗鬆症の適応症では、１００ｍｇ付近の投与量単位がＱＤ（１日１回）投薬方式のために概して便利である。１つの態様において、該医薬組成物は、結晶多形２型と１以上の医薬的に許容される希釈剤又は担体を約１：２と１：１００の間（約１：２と１：５０の間、約１：２と１：２０の間、又は約１：３と１：１０の間のような）の（重量／重量）比（結晶多形２型：１以上の医薬的に許容される希釈剤又は担体）で含む。
【００５５】
結晶多形２型を含んでなる製品の投薬方式は、一般に、患者の状態や企図される適応症という慣用の要因を医師が考慮することによって選択されるものである。慣用のＢＩＤ（１日２回）及びＴＩＤ（１日３回）が想定される。しかしながら、結晶多形２型と化合物ＩのＤＭＰＫ（薬物代謝と薬物動態）は、ＱＤ投与方式にも適用可能であって、これは、患者コンプライアンスの視点からだけでなく、１日１回の投薬により昼間のＰＴＨスパイクが生じることを可能にすることによって同化性の骨成長を促進するという理由からも有利である。従って、本発明の側面は、ＱＤ投与に適応されて、骨粗鬆症のような適応症に適した投与量単位（１００ｍｇ付近の結晶多形２型と１以上の医薬的に許容される担体又は賦形剤を含有する投与量単位のような）を提供する。
【００５６】
本発明における経口投与用の製剤は、所定量の活性薬剤をそれぞれ含有するカプセル剤、カシェ剤、又は錠剤のような離散単位として；散剤又は顆粒剤として；水性液剤又は非水性液剤中の活性薬剤の溶液剤又は懸濁液剤として；又は水中油型の液体乳剤又は油中水型の液体乳剤として、及びボーラス剤、等として提示してよい。
【００５７】
経口投与用の組成物（例、錠剤及びカプセル剤）に関連して、賦形剤という用語には、結合剤、例えば、シロップ、アカシア、ゼラチン、ソルビトール、トラガカント、ポリビニルピロリドン（ポビドン）、メチルセルロース、エチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ショ糖、及びデンプン；充填剤及び担体、例えば、トウモロコシデンプン、ゼラチン、乳糖、ショ糖、微結晶性セルロース、カオリン、マンニトール、リン酸二カルシウム、塩化ナトリウム、及びアルギン酸；並びに、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウム、及び他のステアリン酸金属塩、ステアリン酸グリセロール、ステアリン酸、シリコーン油、タルク、ワックス剤、油剤、及びコロイド状シリカのような滑沢剤が含まれる。ペパーミント、ウィンターグリーン油、チェリーフレーバー、又は同等物のような香味剤も使用することができる。着色剤を添加して剤形を容易に識別可能にすることが望ましい場合もある。錠剤は、当該技術分野でよく知られた方法によって被覆してもよい。
【００５８】
錠剤は、圧縮又は成型によって作製してよく、１以上の副成分を伴ってもよい。圧縮錠剤は、粉末又は顆粒のような自由浮遊形態の結晶多形２型を好適な機械において圧縮することによって製造してよく、結合剤、滑沢剤、不活性希釈剤、保存剤、界面活性剤、又は分散剤と混合してもよい。成型錠剤は、不活性の液状希釈剤で湿らせた粉末化合物の混合物を好適な機械において成型することによって作製してよい。錠剤は、被覆しても割線を入れてもよくて、活性薬剤の遅延又は制御放出を提供するように製剤化してよい。
【００５９】
経口投与に適した他の製剤には、結晶多形２型を香味基剤（通常は、ショ糖とアカシア又はトラガカント）に含んでなる口内錠（lozenges）；結晶多形２型をゼラチン及びグリセリン、又はショ糖及びアカシアのような不活性基剤に含んでなる香錠；及び、結晶多形２型を好適な液状担体に含んでなる洗口剤が含まれる。
【００６０】
結晶多形２型に適正な投与量レベルは、適応症と治療を受ける個々の患者に依存するものである。好適な投与量は、慣用の動物実験によって決定することができる。典型的には、０．０１〜１００μＭの程度（０．０１〜１０μＭ又は０．１〜２５μＭのような）の（パパインスーパーファミリーの生理学的プロテアーゼを阻害するための）細胞内濃度を提供する投与量が望ましくて達成可能である。
【００６１】
医薬品として使用される場合、結晶多形２型を１以上のさらなる医薬活性剤と組み合わせて投与することが有利であり得る。そのようなさらなる医薬活性剤は、治療される障害に依拠して適正に選択されるものである。結晶多形２型とさらなる医薬活性剤は、同じか又は異なる経路を介して、同時的に、連続的に、又は異なる時間で投与してよい。
【００６２】
適正な投与方式が可能である場合、結晶多形２型とさらなる医薬活性剤は、医薬組合せにおいて一緒に製剤化してよい。
結晶多形２型は、例えば、骨粗鬆症、グルココルチコイド起因性の骨粗鬆症、ページェット病、異常増加性の骨代謝回転、歯周病、歯牙喪失、骨折、アテローム性動脈硬化症、肥満、寄生虫感染症、関節リウマチ、骨関節炎、人工関節周囲骨溶解、骨形成不全症、転移性骨疾患、悪性の高カルシウム血症、及び多発性骨髄腫を治療するか又は予防するのに有用な既知の薬剤と組み合わせて有用である。故に、骨粗鬆症又は他の骨障害を治療するか又は予防するのに有用な他の薬剤と結晶多形２型の組合せは、本発明の範囲に該当するとみなされる。
【００６３】
当該技術分野の当業者であれば、関与する薬物及び疾患の特定の特徴に基づいて、どの薬剤の組合せが有用であるかを判別することができよう。このような薬剤には、以下が含まれる：有機ビスホスホネート；エストロゲン受容体モジュレータ；アンドロゲン受容体モジュレータ；破骨細胞プロトンＡＴＰアーゼの阻害剤；ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼの阻害剤；インテグリン受容体アンタゴニスト；ビタミンＤ又はその類似体、ＰＴＨのような骨芽細胞同化剤；選択的シクロオキシゲナーゼ−２阻害剤（ＣＯＸ−２阻害剤）；インターロイキン−１−βの阻害剤；ＬＯＸ／ＣＯＸ阻害剤、ＲＡＮＫＬ阻害剤；抗スクレロスチン抗体、並びにこれらの医薬的に許容される塩及び混合物。
【００６４】
「アンドロゲン受容体モジュレータ」は、機序にかかわりなく、アンドロゲンのその受容体への結合に干渉するか又はそれを又は阻害する化合物を意味する。アンドロゲン受容体モジュレータの例には、フィナステリドと他の５ｃｃ−レダクターゼ阻害剤、ニルタミド、フルタミド、ビカルタミド、リアロゾール、及び酢酸アビラテロンが含まれる。
【００６５】
「破骨細胞プロトンＡＴＰアーゼの阻害剤」は、破骨細胞の頂端膜上に見出されて、骨吸収プロセスにおいて意義深い役割を担うことが報告されてきた、プロトンＡＴＰアーゼの阻害剤を意味する。このプロトンポンプは、骨粗鬆症と関連の代謝性疾患の治療及び予防に潜在的に有用である、骨吸収の阻害剤の設計に魅力的な標的を代表する。その全体が参照により本明細書に組み込まれる、C. Farina et al.,「Selective inhibitors of the osteoclast vacuolar proton ATPase as novel bone antiresorptive agents（新規抗骨吸収剤としての破骨細胞液胞型プロトンＡＴＰアーゼの選択的阻害剤）」 DDT, 4: 163-172 (1999) を参照のこと。
【００６６】
「ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤」は、３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリルＣｏＡレダクターゼの阻害剤を意味する。ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼへの阻害活性を有する化合物は、当該技術分野でよく知られたアッセイを使用することによって、容易に同定することができる。例えば、米国特許第４，２３１，９３８号の第６段とＷＯ８４／０２１３１の３０頁〜３３頁に記載又は引用されたアッセイを参照のこと。「ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤」という用語と「ＩＧ−ＣｏＡレダクターゼの阻害剤」という用語は、本明細書に使用されるとき、同じ意味を有する。
【００６７】
使用し得るＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤の例には、限定されないが、ロバスタチン（ＭＥＶＡＣＯＲ［メバコール］；米国特許第４，２３１，９３８号、４，２９４，９２６号、及び４，３１９，０３９号を参照のこと）、シンバスタチン−１９（ＺＯＣＯＲ［ゾコール］；米国特許第４，４４４，７８４号、４，８２０，８５０号、及び４，９１６，２３９号を参照のこと）、プラバスタチン（ＰＲＡＶＡＣＨＯＬ［プラバコール］；米国特許第４，３４６，２２７号、４，５３７，８５９号、４，４１０，６２９号、５，０３０，４４７号、及び５，１８０，５８９号を参照のこと）、フルバスタチン（ＬＥＳＣＯＬ［レスコール］）；米国特許第５，３５４，７７２号、４，９１１，１６５号、４，９２９，４３７号、５，１８９，１６４号、５，１１８，８５３号、５，２９０，９４６号、及び５，３５６，８９６号を参照のこと）、アトルバスタチン（ＬＩＰＩＴＯＲ［リピトール］；米国特許第５，２７３，９９５号、４，６８１，８９３号、５，４８９，６９１号、及び５，３４２，９５２号を参照のこと）、及びセリバスタチン（リバスタチン及びＢＡＹＣＨＯＬ［ベイコール］としても知られる；米国特許第５，１７７，０８０号を参照のこと）が含まれる。本方法に使用し得る上記及び追加のＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤の構造式については、M. Yalpani, 「Cholesterol Lowering Drugs（コレステロール低下薬）」, Chemistry & Industry, pp. 85-89 (1996年2月5日) の８７頁と、米国特許第４，７８２，０８４号と第４，８８５，３１４号に記載されている。本明細書に使用される「ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤」という用語には、すべての医薬的に許容されるラクトンと開環酸型（即ち、ラクトン環が開いて遊離酸を生成する場合）、並びにＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害活性を有する化合物の塩形態及びエステル形態が含まれて、それ故に、そのような塩、エステル、開環酸、及びラクトンの形態の使用は、本発明の範囲内に含まれる。
【００６８】
開環酸型が存在し得るＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤では、好ましくは、その開環酸より塩形態及びエステル形態を生成し得て、すべてのそのような形態が本明細書に使用される「ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤」という用語の意味内に含まれる。好ましくは、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤は、ロバスタチンとシンバスタチンより選択されて、最も好ましくは、シンバスタチンである。本明細書において、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤に関連した「医薬的に許容される塩」という用語は、その遊離酸を好適な有機又は無機塩基と反応させることによって概して製造される、本発明において利用される化合物の無害な塩、特に、ナトリウム、カリウム、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、亜鉛、及びテトラメチルアンモニウムのようなカチオンより生成されるもの、並びに、アンモニア、エチレンジアミン、Ｎ−メチルグルカミン、リジン、アルギニン、オルニチン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、ジエタノールアミン、プロカイン、Ｎ−ベンジルフェネチルアミン、１−ｐ−クロロベンジル−２−ピロリジン−１’−イル−メチルベンズ−イミダゾール、ジエチルアミン、ピペラジン、及びトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンのようなアミンより生成される塩を意味する。ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤の塩形態のさらなる例には、限定されないが、酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、重硫酸塩、重酒石酸塩、ホウ酸塩、臭化物、エデト酸カルシウム塩、カムシラート、炭酸塩、塩化物、クラブラン酸塩、クエン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシラート、エストラート、エシラート、フマル酸塩、グルセプタート、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘキシルレゾルシン酸塩、ヒドラバミン、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフト酸塩、ヨウ化物、イソチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリル酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシレート、メチル硫酸塩、ムコ酸塩、ナプシラート、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシラート、トリエトヨウ化物、及び吉草酸塩を含めてよい。
【００６９】
記載のＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害化合物のエステル誘導体は、プロドラッグとして作用する場合があり、これは、温血動物の血流中へ吸収されるときに、該剤形を放出するようなやり方で切断されて、該薬物が改善された治療効果をもたらすことを可能にする場合がある。
【００７０】
上記に使用されるように、「インテグリン受容体アンタゴニスト」は、α−ｖ−β−３インテグリンへの生理学的リガンドの結合に選択的に拮抗する、それを阻害する、又は中和する化合物、α−ｖ−β−５インテグリンへの生理学的リガンドの結合に選択的に拮抗する、それを阻害する、又は中和する化合物、α−ｖ−β−３インテグリンとα−ｖ−β−５インテグリンの両方への生理学的リガンドの結合に拮抗する、それを阻害する、又は中和する化合物、及び毛細管内皮細胞上で発現される特定のインテグリン（複数）の活性に拮抗する、それを阻害する、又は中和する化合物を意味する。この用語はまた、α−ｖ−β−６、α−ｖ−β−８、α−１−β−１、α−２−β−１、α−６−β−１、及びα−６−β−４のインテグリン類のアンタゴニストを意味する。この用語はまた、α−ｖ−β−３、α−ｖ−β−５、α−ｖ−β−６、α−ｖ−β−８、α−１−β−１、α−２−β−１、α−５−β−１、α−６−β−１、及びα−６−β−４のインテグリン類のあらゆる組合せのアンタゴニストも意味する。H. N. Lode と共同研究者は、PNAS USA 96:1591-1596 (1999) において、抗血管新生性のα−ｖインテグリンアンタゴニストと腫瘍特異抗体−サイトカイン（インターロイキン−２）融合タンパク質の間の、自発的腫瘍転移の阻止における相乗効果を観測している。それらの結果から、この組合せは、癌と転移性腫瘍増殖の治療法への可能性を有するものと示唆された。α−ｖ−β−３インテグリン受容体アンタゴニストは、現在利用可能なすべての薬物の機序とは異なる新たな機序を介して、骨吸収を阻害する。インテグリンは、細胞−細胞相互作用と細胞マトリックス相互作用を媒介するヘテロ二量体の膜貫通接着受容体である。α−ｖ−β−３インテグリンサブユニットは、非共有結合的に相互作用して、二価カチオン依存性のやり方で細胞外マトリックスリガンドへ結合する。破骨細胞上の最も豊富なインテグリンは、α−ｖ−β−３（＞１０７／破骨細胞）であって、これは、細胞の遊走及び極性形成に重要な細胞骨格組織化において律速的な役割を担うようである。α−ｖ−β−３拮抗効果は、骨吸収の阻害、再狭窄の阻害、黄斑変性の阻害、関節炎の阻害、並びに癌及び転移性増殖の阻害より選択される。
【００７１】
「骨芽細胞同化剤」は、ＰＴＨのように、骨を構築する薬剤を意味する。副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）又はそのアミノ末端断片と類似体の間欠投与は、動物とヒトにおいて、骨芽喪失を予防する、停止させる、一部逆転させて、骨形成を刺激することが示されている。ある考察については、D. W. Dempster et al., 「Anabolic actions of parathyroid hormone on bone（副甲状腺ホルモンの骨に対する同化作用）」 Endocr Rev 14: 690-709 (1993) を参照のこと。骨形成を刺激してそれによって骨の量及び強度を高めることにおける副甲状腺の臨床利益が諸研究によって実証されてきた。New Eng J Med 344 1434-1441 (2001) において、RM Neer et al．によって諸結果が報告された。
【００７２】
「選択的シクロオキシゲナーゼ−２阻害剤」又はＣＯＸ−２阻害剤は、身体中の疼痛及び炎症の原因となるＣＯＸ−２酵素を阻害する、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）の一種を意味する。ＣＯＸ−２阻害剤の非限定的な例には、セレコキシブ、エトリコキシブ、パレコキシブ、ロフェコキシブ、ルマリコキシブ、及びバルデコキシブが含まれる。
【００７３】
加えて、ＰＴＨｒＰ（１−３６）のような、副甲状腺ホルモン関連のタンパク質断片又は類似体では、強力な抗カルシウム尿効果が実証されていて［M. A. Syed et al., 「Parathyroid hormone-related protein-(1-36) stimulates renal tubular calcium reabsorption in normal human volunteers: implications for the pathogenesis of humoral hypercalcemia of malignancy（副甲状腺ホルモン関連タンパク質（１−３６）は、正常ヒトボランティアにおいて、腎尿細管カルシウム再吸収を刺激する：悪性の体液性高カルシウム血症の発病への意義）」 JCEM 86: 1525-1531 (2001) を参照のこと］、骨粗鬆症を治療するための同化剤としての可能性もあり得る。
【００７４】
本発明に従った好ましい組合せは、結晶多形２型を副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）又はその断片（ＰＴＨｒＰ（１−３６）のような）と同時的又は連続的に同時投薬することを含む。
【００７５】
１つの態様では、結晶多形２型と１以上の医薬活性剤が共に経口投与される。別の態様では、結晶多形２型が経口投与されて、１以上の医薬活性剤が静脈内投与により投与される。
【００７６】
当業者は、「治療」という用語が「予防」も含むように拡張され得ることを認めるであろう。
略語：
ＩＰＡ      イソプロピルアルコール
ＩＰＡｃ    酢酸イソプロピル
ＤＣＭ      ジクロロメタン
ＴＢＭＥ    ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル
ＭＥＫ      メチル−エチル−ケトン（２−ブタノン）
ＭＩＢＫ    メチル−イソブチル−ケトン
ＴＨＦ      テトラヒドロフラン
ＴＦＡ      トリフルオロ酢酸
ＲＨ        相対湿度
ＲＴ        室温（典型的には、２０℃）
ｈ          時間
ｍｉｎ      分
【実施例】
【００７７】
一般的な方法
Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）
Bruker AXS C2 GADDS 又は Bruker AXS D8 Advance 回折計のいずれかでＸＲＰＤ回折図（diffractograms）を収集した。
【００７８】
Bruker AXS C2 GADDS 回折計でのＸ線粉末回折パターンは、Ｃｕ Ｋα放射線（４０ｋＶ，４０ｍＡ）、自動ＸＹＺステージ、自動サンプルポジショニング用のレーザービデオ顕微鏡、及び HiStar ２次元エリア検出計を使用して獲得した。Ｘ線光学レンズ（optics）は、０．３ｍｍのピンホールコリメータと一体化した単一 Gobel 多層膜鏡からなる。
【００７９】
ビーム広がり（即ち、試料上のＸ線ビームの有効サイズ）は、概ね４ｍｍであった。３．２〜２９．７°の有効２θ範囲をもたらす、２０ｃｍの試料−検出器距離でθ−θ連続スキャンモードを利用した。典型的には、試料をＸ線ビームへ１２０秒間曝露した。
【００８０】
受容したままの粉末を粉砕することなく使用する平面標本として、周囲条件下で操作する試料を調製した。概ね１〜２ｍｇの試料にスライドガラス上で軽く加圧して、平面を得た。
【００８１】
Bruker AXS D8 Advance 回折計で獲得する、試料に関するＸ線粉末回折パターンは、Ｃｕ Ｋα放射線（４０ｋＶ，４０ｍＡ）、θ−２θゴニオメータ、Ｖ４散乱光と受光スリット、Ｇｅモノクロメータ、及び Lynxeye 検出器を使用して獲得した。データは、０．０５°（２θ）のステップ幅と０．５秒／ステップの収集時間を使用して、２°〜４２°（２θ）の角度範囲にわたって収集した。
【００８２】
受容したままの粉末を使用する平面標本として、周囲条件下で操作する試料を調製した。この試料を、研磨したゼロバックグラウンド（５１０）シリコンウエハーへカットしたキャビティの中へそっと充填した。
【００８３】
受容したままの粉末を粉砕することなく使用する平面標本として、周囲条件下で操作する試料を調製した。概ね２５〜５０ｍｇの試料を、研磨したゼロバックグラウンド（５１０）シリコンウエハーへカットした、直径１２ｍｍ、深さ０．５ｍｍのキャビティの中へそっと充填した（The Gem Dugout, 1652 Princeton Drive，ペンシルヴェニア州立大学、PA 16803，アメリカ）。
【００８４】
上記のパラメータを使用して、高分解能 Bruker D8 回折計を使用してＸＲＰＤキャピラリー試験を行った。Diffrac Plus XRD Commander v2.6.1 ソフトウェアを使用してデータを処理して、Diffrac Plus EVA v 13.0.0.2 又は v15.0.0.0 ソフトウェアを使用して可視化した。すべての試料（キャピラリー）を密封して室温で操作した。
【００８５】
１Ｈ  ＮＭＲ（液相）
オートサンプラーを装備してDRX400 コンソールによって制御される Bruker 400MHz 機器で液相ＮＭＲスペクトルを収集した。標準的な Bruker 負荷実験を使用して、Topspin v1.3 で実行する ICON-NMR v4.0.7 を使用して、自動化実験を獲得した。非定型の分光法では、Topspin 単独の使用によってデータを獲得した。
【００８６】
試料は、特に明記しない限り、ＤＭＳＯ−ｄ６中で調製した。Topspin v1.3 又は ACD SpecManager v12.5 を使用して、オフライン分析を行った。
１３Ｃ  ＮＭＲ（固体）
この分析は、１３Ｃについては１００．５６ＭＨｚ（１Ｈについては３９９．８８ＭＨｚ）で、そして１９Ｆについては３７６．２４ＭＨｚで操作する Varian VNMRS 機器を４ｍｍ（ローター外径）マジック角回転プローブで使用して行った。試料より、交差偏光マジック角回転（ＣＰＭＡＳ）技術を双極子デフェージング（中断デカップリング）の有無で使用して、炭素−１３スペクトルを記録した。１組のショートトライアル測定（リサイクル５秒、接触時間５ミリ秒）を使用して、適正な獲得条件を確立した。２相パルス幅変調（ＴＰＰＭ）１Ｈデカップリングと一緒に（７５ｋＨｚにほぼ等しいラジオ周波数場で）１０．０ｋＨｚの試料回転速度を使用した。試料は、受容したままに周囲プローブ温度（この回転速度では約３０℃）で操作した。スペクトルは、純正テトラメチルシランに関して（アダマンタン由来の高周波数ラインを３８．５ｐｐｍへ設定することによって）参照される。１９Ｆスペクトルは、直接励起に続く３．６μｓの９０°パルス、６０秒の緩和遅延、１４ｋＨｚの回転速度、そして１Ｈデカップリング無しによって得られた。このスペクトルは、ＣＦＣｌ３に対して参照される。
【００８７】
この分析は、１３Ｃについては１００．５６ＭＨｚ（１Ｈについては３９９．８８ＭＨｚ）で操作する Varian VNMRS 機器と６ｍｍ（ローター外径）マジック角回転プローブを使用して行った。試料より、交差偏光マジック角回転（ＣＰＭＡＳ）技術を使用して、炭素−１３スペクトルを記録した。１組のショートトライアル測定（リサイクル４秒、接触時間３ミリ秒）を使用して、適正な獲得条件を確立した。２相パルス幅変調（ＴＰＰＭ）１Ｈデカップリングと一緒に（５４ｋＨｚにほぼ等しいラジオ周波数場で）６．８ｋＨｚの試料回転速度を使用した。ここで使用する回転速度が先の測定に比べて低いことは、このスペクトル中に複数のスピニング・サイドバンドがあっても、これらが重要な中心バンドシグナルに著しく干渉しないことを意味する。スペクトルは、純正テトラメチルシランに関して（アダマンタン由来の高周波数ラインを３８．５ｐｐｍへ設定することによって）参照される。
【００８８】
熱力学的な水溶解度
十分量の化合物を水に懸濁させて、その親化合物の遊離型の最大最終濃度を１０ｍｇ／ｍｌ以上とすることによって、水溶解度を決定した。この懸濁液を２５℃で２４時間平衡させてから、ｐＨを測定した。次いで、この懸濁液をガラス繊維Ｃフィルターに通して９６ウェルプレートへ濾過した。次いで、この濾液を１０１倍希釈した。ＤＭＳＯ中ほぼ０．２５ｍｇ／ｍｌの標準溶液を参照してＨＰＬＣによって定量した。異なる容量の標準溶液と希釈及び非希釈の試料溶液を注入した。溶解度は、標準注入液中の主要ピークと同じ保持時間に見出されるピークの積分によって決定されるピーク面積を使用して算出した。
【００８９】
表１−溶解度測定用のＨＰＬＣ法のパラメータ
【００９０】
【表１】
0006530752.tif 000006
【００９１】
ダイオードアレイ検出器を装備する Agilent HP1100 シリーズシステムで、Chem Station ソフトウェア vB.02.01-SR1 を使用して分析を実施した。
示差走査熱量測定（ＤＳＣ）
３４ポジション・オートサンプラーを装備したMettler DSC 823e でＤＳＣデータを収集した。インジウム標準品（certified indium）を使用して、この機器をエネルギーと温度に関して較正した。典型的には、ピンホール付きアルミニウムパンにおいて、各試料の０．５〜３ｍｇを１０℃／分で２５℃から３００℃へ加熱した。試料の上に、５０ｍｌ／分の窒素パージを維持した。
【００９２】
この機器の制御及びデータ解析ソフトウェアは、STARe v9.20 であった。
熱重量分析（ＴＧＡ）
３４ポジション・オートサンプラーを装備したMettler TGA/SDTA 851e でＴＧＡデータを収集した。インジウム標準品を使用して、この機器を温度較正した。典型的には、各試料の５〜３０ｍｇを秤量済みのアルミニウム坩堝上へ載せて、１０℃／分で周囲温度から４００℃へ加熱した。試料の上に、５０ｍｌ／分の窒素パージを維持した。
【００９３】
この機器の制御及びデータ解析ソフトウェアは、STARe v9.20 であった。
蒸気吸着量測定（ＧＶＳ）
DVS Intrinsic Control ソフトウェア v1.0.0.30 によって制御される SMS DVS Intrinsic 水分吸着アナライザーを使用して、吸着等温線を得た。試料温度は、機器制御によって２５℃に維持した。湿度は、乾燥窒素と湿潤窒素の流れを２００ｍｌ／分の総流速で混合することによって制御した。相対湿度は、試料付近に配置した、較正済みの Rotronic プローブ（１．０〜１００％ＲＨの動的範囲）によって測定した。試料の重量変化（質量緩和）は、％ＲＨの関数として微量天秤（精度±０．００５ｍｇ）によって絶えずモニタリングした。
【００９４】
典型的には、５〜２０ｍｇの試料を周囲条件の下で補正（tared）メッシュステンレス鋼バスケットに入れた。試料は、４０％ＲＨと２５℃（典型的な室内条件）で載せて降ろした。下記に概略するようにして、水分吸着等温線を作成した（２回のスキャンで１回の完全なサイクルを得た）。標準等温線は、２５℃で、０〜９０％ＲＨの範囲にわたり１０％ＲＨ間隔で作成した。DVS Analysis Suite v6.0.0.7 を使用して、マイクロソフト・エクセルにおいてデータ解析を行った。
【００９５】
表２  SMS DVS 内在（Intrinsic）実験用の方法パラメータ
【００９６】
【表２】
0006530752.tif 000007
【００９７】
等温線作成の完了後に試料を回収して、ＸＲＰＤによって再解析した。
実施例１．Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド遊離塩基（化合物Ｉ遊離塩基）の合成
【００９８】
【化５】
0006530752.tif 000008
【００９９】
ＷＯ２０１０／０３４７８８の実施例２に記載のように、化合物Ｘを調製した。
化合物Ｘ（８９．６ｇ，１４６ミリモル）の溶液を５０℃で真空濃縮して、１００ｇのオイルを得た。このオイルをトルエン（２５０ｍＬ）に溶かして、５０〜５５℃での真空蒸留によって溶媒を除去した。これをもう一度繰り返した。残渣を塩化メチレン（７０ｍＬ）に溶かした。
【０１００】
３Ｌの３つ首丸底反応器にトリフルオロ酢酸（８００ｍＬ）を入れて、−５±２℃へ冷やした。この反応器を１００ｍＢａｒ未満へ排気してから、その真空を窒素で解除した。化合物Ｘの塩化メチレン溶液を、温度を−５±２℃に保ちながら、冷却トリフルオロ酢酸へ１０分にわたって添加した。この滴下漏斗を塩化メチレン（２０ｍＬ）で濯いだ。冷却を外して、反応温度をそのまま周囲温度へ達せしめた。この反応物を周囲温度で１６時間撹拌すると、この時点でのＨＰＬＣによるインプロセス制御は、９９．０％以上の変換を示した。
【０１０１】
トルエン（９００ｍＬ）とヘプタン（９００ｍＬ）を加えて、１〜３分間撹拌した。相をそのまま分離させた。化合物Ｉのトリフルオロ酢酸塩を含有する下相を保持する一方で、上相を捨てた。この下相をトルエン（９００ｍＬ）及びヘプタン（９００ｍＬ）とともに５分間撹拌した。相をそのまま分離させた。上相を捨てた。下相を塩化メチレン（７００ｍＬ）で希釈した。６Ｌの３つ首丸底反応器に２０％  Ｋ２ＨＰＯ４（二塩基性リン酸カリウムの水溶液）（４Ｌ）と塩化メチレン（７００ｍＬ）を入れた。この混合物を０℃へ冷やして、温度を２〜１０℃に保ちながら、このクエンチ混合物へ化合物Ｉのトリフルオロ酢酸塩の塩化メチレン溶液を加えた。相をそのまま分離させて、有機相を保持した。水相は塩化メチレン（２ｘ７００ｍＬ）で抽出した。
【０１０２】
合わせた有機相を１０％  Ｋ２ＨＰＯ４（二塩基性リン酸カリウムの水溶液）（２ｘ５００ｍＬ）で連続的に洗浄した。合わせた有機相を３５℃まで加熱して、硫酸マグネシウム（５０ｇ）で、３５℃で２０分間乾燥させた。この懸濁液を濾過して、濾過ケークを塩化メチレン（３５℃，５００ｍＬ）で洗浄した。濾液を３５〜４５℃で真空濃縮して乾固させた。この蒸発残渣を塩化メチレン（１００ｍＬ）に溶かした。ＴＢＭＥ（３００ｍＬ）を滴下した。静置させると、生成物が結晶し始めた。この混合物を、１５０ｍＬの蒸留物が採取されるまで、３５℃で真空濃縮させた。この時点で、薄い懸濁液を得た。追加のＴＢＭＥ（４５０ｍＬ）を滴下すると、黄色の懸濁液を生じた。この懸濁液を５℃へ冷やして、この温度で１６時間撹拌した。この懸濁液を濾過して、濾過ケークをＴＢＭＥ（２００ｍＬ）で洗浄した。この濾過ケークを３０℃で６時間真空乾燥させて、５５．３ｇ（６５％）の化合物Ｉ遊離塩基を得た。ＨＰＬＣ純度は、９６．８％である。
【０１０３】
上記に考察したように、化合物Ｉ遊離塩基は、水和形でも存在し得る。
この遊離塩基の非晶形を３容量の（９８：２）ＩＰＡ：水において５０℃で１時間スラリー化させることを伴う方法によって、それを遊離塩基の結晶形へ変換させることができる。
【０１０４】
結晶性の化合物Ｉ遊離塩基の試料のＸＲＰＤ回折図を図３に示す。
実施例２．化合物Ｉ遊離塩基の様々な塩形態の調製
化合物Ｉ遊離塩基の様々な塩形態を調製する試みを行った。それをするために、２種の溶媒系（名目上の乾燥溶媒を含む系と、過剰の水を加えた系）を利用することを決定した。化合物Ｉの特性の考慮に従って、基になる乾燥溶媒としてＩＰＡｃを選択して、第二溶媒としてＭＩＢＫを選択した。
【０１０５】
実験手順
３６個の４ｍＬガラスバイアルのそれぞれに、正確に秤量したおよそ３０ｍｇの化合物Ｉ遊離塩基を入れた。これらバイアルの半数へ３．０ｍＬのＩＰＡｃを加えて、他の半数に３ｍＬのＭＩＢＫと３０μＬの脱イオン水を加えた。次いで、このバイアルのそれぞれへ表３に示す酸を加えた：
表３−塩生成実験で使用した酸
【０１０６】
【表３】
0006530752.tif 000009
【０１０７】
次いで、ＩＰＡｃ実験物は、周囲温度と５０℃の間で（４時間ごとに各温度間で変換する）インキュベートして、一方ＭＩＢＫ実験物は、室温でインキュベートした。２４時間後、このバイアルを視察して、外観に注目した。ＭＩＢＫ実験物の多くですでにゴムが生成していたので、これらのバイアルを周囲温度／５０℃インキュベータへ移した。
【０１０８】
さらに２４時間後にバイアルを再び視察して、外観に注目した。得られた固形物を濾過して取って、ＸＲＰＤによって解析した。この時点で固形物を含有しないバイアルは、蓋を外してそのまま蒸発させて、生じるどの固形物もＸＲＰＤによって解析した。
【０１０９】
結果
下記の表４と表５に結果を要約する。ＩＰＡｃ実験物は、全部で１２の単離固形物を生成したが、このうち３つは投入した酸と同定され、１つは一部結晶性のＨＣｌ塩であって、８つは非晶性の固形物であった。
【０１１０】
ＭＩＢＫ実験物からは４つの固形物だけが単離されたが、２つは投入した酸であって、２つは茶褐色で非晶性の固形物であった。
表４−ＩＰＡｃにおいて実施した塩スクリーニング実験
【０１１１】
【表４】
0006530752.tif 000010
【０１１２】
表５−ＭＩＢＫ＋１％水において実施した塩スクリーニング実験
【０１１３】
【表５】
0006530752.tif 000011
【０１１４】
蒸発しても固形物をもたらさなかったすべての試料を５００μＬのＭＥＫ中に取って、５μＬの水を加えた。次いで、このバイアルを周囲温度と５０℃の間で２日間インキュベートすると、その時間の後で、どの試料にも依然として固形物が存在しなかった。バイアルの蓋を外してそのまま蒸発させると、いずれも茶褐色のゴムを得た。
【０１１５】
実施例３．化合物Ｉ遊離塩基の硫酸塩型及びメシレート塩型についてのさらなる検討
２個の１０ｍＬガラスバイアルのそれぞれへ約１００ｍｇの化合物Ｉ遊離塩基を秤量して入れた。次いで、それぞれへ１０．０ｍＬのＩＰＡｃに続いて１当量の硫酸（ＴＨＦ中１Ｍ溶液として）又はメタンスルホン酸（ＴＨＦ中１Ｍ溶液として）のいずれかを加えた。いずれの場合も、その酸の添加時に、ふわふわした白色の沈殿が発生した。周囲温度と５０℃の間で７２時間、４時間ごとにサイクルしながらバイアルをインキュベートした。次いで、固形物を濾過して取って、空気乾燥させた。
【０１１６】
６個のバイアルのそれぞれへ非晶性硫酸塩のほぼ１０ｍｇを秤量して入れて、メシレート塩でも同じことを行った。各バイアルへ表６に示す関連溶媒の１００μＬを加えた。次いで、このバイアルを周囲温度と５０℃の間で一晩インキュベートしてから、どの固形物も濾過して取って、ＸＲＰＤによって解析した。
【０１１７】
表６−非晶性の硫酸塩及びメシレート塩の成熟化条件
【０１１８】
【表６】
0006530752.tif 000012
【０１１９】
ＴＢＭＥから単離した固形物がいずれも非晶性であったのに対して、１，４−ジオキサンにおいて成熟させた硫酸塩は、新しい結晶回折パターンを示した。この方法によって生成した結晶性材料のＴＧＡ分析は、それが結晶性のジオキサン溶媒和物であって、それ故に有用性が限られていることを明らかにした。
【０１２０】
実施例２と実施例３の結果に基づいて、さらなる検討のために塩酸塩を選択した。
実施例４．化合物Ｉ遊離塩基からの結晶多形２型の合成
【０１２１】
【化６】
0006530752.tif 000013
【０１２２】
反応管の中へ化合物Ｉ遊離塩基（９９．２ｍｇ）を秤量して入れてアセトン（２．０ｍＬ）を加えると、短時間の撹拌後に澄明な溶液を得た。次いで、３７％  ＨＣｌ（１４μＬ，１．０ｍＬアセトン中の溶液として）を加えて、生じる澄明溶液を５０℃で１時間撹拌すると、その時間の後で、白色の沈殿が生成していた。この反応管を０．１℃／分で２０℃まで冷やしてから、２０℃でさらに８時間撹拌した。存在する固形物を濾過によって単離して、６０℃で真空下に一晩乾燥させて、６５ｍｇ（６１％）の灰白色の固形物を得た。この生成物は、結晶多形２型であることが決定された。
【０１２３】
実施例５．化合物Ｉ遊離塩基からの結晶多形２型の合成（貧溶媒と播種を伴う代替法）
１Ｌの３つ首丸底反応器を１００ｍＢａｒ未満へ排気して、その真空を窒素で解除した。次いで、この反応器にアセトン（１６４ｍＬ，１２８．９ｇ）と化合物Ｉ遊離塩基（７０ミリモル；４１ｇ）を入れた。この懸濁液を水浴で５０℃まで加熱して、化合物Ｉ遊離塩基の澄明溶液が得られるまで、この温度で撹拌した。濃塩酸（３７％）（６．９０ｇ，７０ミリモル，１．０当量）を３分にわたって加えた。この澄明溶液を１分間撹拌して、結晶多形２型（約２０ｍｇ）の播種を続けた。すぐに沈殿が始まったが、この懸濁液を５０℃で３０分間撹拌することによってそのまま「成熟」させた。ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（４１０ｍＬ，３０３．８ｇ）を４８±２℃で１９分にわたって加えた。次いで、この懸濁液を２時間にわたって２２℃へ冷やして、この温度で２時間撹拌した後で１２℃へ冷やして、１２℃で２０分間撹拌した。この懸濁液を濾過して、濾過ケークをアセトン／ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（１：２）（１２０ｍＬ）に続いてｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（１２０ｍＬ）で洗浄した。この濾過ケークを５０℃で６４時間真空乾燥させて、４２．０９ｇ（９６％）の結晶多形２型を得た。ＨＰＬＣ純度は、９７．４％であった。
【０１２４】
この方法を使用して生成した材料を実施例１１と実施例１２に記載の試験に使用した。
ＩＰＡとＴＨＦを溶媒として使用して同様の実験を実施しており、この結果を表７に示す。
【０１２５】
表７
【０１２６】
【表７】
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【０１２７】
実施例６．化合物Ｉ遊離塩基からの結晶多形２型の合成（播種を伴うさらなる代替法）
化合物Ｉ遊離塩基（１．６９６ｇ）を反応管の中へ秤量して入れて、アセトン（１０．０ｍＬ）を加えた。この反応管を磁気撹拌しながら５０℃まで加熱すると、澄明な溶液を生じた。次いで、この溶液に結晶多形２型（１０ｍｇ）を播種した。次いで、３７％  ＨＣｌ（２３７μＬ）のアセトン（１０．０ｍＬ）溶液を作製した。次いで、この酸性溶液を２．５ｍＬ分量で先の反応管へ加えた。５０℃で１時間撹拌後、生じる微細懸濁液を０．１℃／分で５℃へ冷やして、この温度で４８時間撹拌した。次いで、存在する固形物を濾過によって単離して、０℃へ冷やしておいたアセトン（２ｘ１０ｍＬ）で洗浄した。次いで、この固形物を特性決定に先立って６０℃で２４時間真空下に乾燥させて、表題生成物（１．５１ｇ，８３％）を灰白色の粉末として得た。この材料の試料のＸＲＰＤ回折図は、実施例９に記載のように得られており、図１に示す。
【０１２８】
この方法からの材料を実施例１３、１４、及び１５に記載の試験に使用した。
参考実施例７．Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩（非晶形）の合成
Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩の非晶形を下記の実験において調製した：
化合物Ｉ遊離塩基（５０２ｍｇ）を酢酸イソプロピル（１０ｍＬ）に溶かして、澄明な金色の溶液を得た。この溶液をジオキサン中４Ｍ  ＨＣｌ（２１４μｌ，１．０当量）で処理すると、微細な白色固形物の即座の沈殿を引き起こした。この固形物を真空で濃縮して微細な灰白色の粉末を得て、これを乾燥させた。ＸＲＰＤ解析は、この材料が非晶性であることを示した（データ示さず）。この遊離塩基では、一塩酸塩が水和形で存在する場合もある。しかしながら、この非晶形におけるケトン：水和物の比は、決定しなかった。
【０１２９】
参考実施例８．Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩（結晶多形１型）の合成
結晶多形２型とはＸＲＰＤ回折図が異なるＮ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩の結晶形（結晶多形１型と命名される）を以下の実験において調製した：
２００ｍｇの化合物Ｉ遊離塩基をＴＨＦに溶かして、３当量のＨＣｌ（１容量のＴＨＦにおいて作製した３７％  ＨＣｌ）を５０℃で加えた。５０℃で１時間静置後、７０μＬの水を加えて、この溶液を周囲温度へ冷やした。結晶性の固形物が生じて、これを濾過によって単離して、５０℃で真空下に乾燥させた。この２型多形におけるケトン：水和物の比は、決定しなかった。この材料の試料のＸＲＰＤ回折図を図２に示す。
【０１３０】
Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩の結晶多形１型を調製するための代替法は、１％（ｖ／ｖ）の水を含む４容量のＴＨＦ中の５０℃溶液を０．１℃／分で２０℃まで冷やす工程を伴う。
【０１３１】
実施例９．化合物Ｉ遊離塩基、結晶多形２型、及び結晶多形１型のＸＲＰＤ分析
「一般的な方法」に記載の方法を使用して、結晶性化合物Ｉ遊離塩基と結晶多形１型及び結晶多形２型のＸＲＰＤ分析を実施した。この結果を図１、図２、及び図３と下記の表８〜表１０に示す。いずれの材料も、ＸＲＰＤ回折図によって示されるように、結晶性である。
【０１３２】
表８−図１に対応するピークリスト（結晶多形２型の試料）
【０１３３】
【表８】
0006530752.tif 000015
【０１３４】
表９−図２に対応するピークリスト（結晶多形１型の試料）
【０１３５】
【表９】
0006530752.tif 000016
【０１３６】
表１０−図３に対応するピークリスト（結晶性化合物Ｉ遊離塩基の試料）
【０１３７】
【表１０】
0006530752.tif 000017
【０１３８】
実施例１０．結晶多形２型の試料の液相１Ｈ  ＮＭＲ分析
「一般的な方法」に記載の方法を使用して、結晶多形２型の１Ｈ  ＮＭＲ分析を行った。生じるスペクトルを図４に示すが、これからは、結晶多形２型の試料がケトン−水和物の平衡状態で存在することが明らかである。
【０１３９】
実施例１１．結晶多形２型の固体１３Ｃ  ＮＭＲ構造解析
実施例５の方法を使用して生成した結晶多形２型の試料の１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルを図５に例示する。２０８ｐｐｍ（ケトン）シグナルと１０２ｐｐｍ（水和物）シグナルの積分に基づいて、ケトン：水和物の比は、６７：３３であると決定された。
【０１４０】
スペクトルの環境依存性
試料を２％未満の相対湿度で１週間保存した後で、図６に例示する１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルを記録した。ケトン／水和物シグナルの全強度の中で、ケトンは、この６７％を占める（即ち、６７：３３のケトン：水和物の比）。試料を７５％  ＲＨで１週間保存した後で、図７に示す１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルを記録した。このシグナルの中で、ケトンは６７％を占める。図８に示す１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルは、８０℃で記録されて、６８％のケトン含量を示す。このように、ケトンの水和物に対する比は、異なる環境条件下で変化しなかったと見ることができる。
【０１４１】
スペクトルの緩和依存性
一般に、ある試料が諸成分の混合物であれば、その成分のどれかが有利になるようにＮＭＲ獲得条件を変化させることが可能であるはずである。このことは、各成分について緩和挙動が異なりさえすれば、奏効するものである。そのような１つの「フィルター」の基礎として１Ｈスピン−格子緩和時間（Ｔ１（Ｈ））を、そしてもう１つの「フィルター」の基礎として回転フレーム時間（rotating frame time）中の１Ｈスピン−格子緩和（Ｔ１Ｑ（Ｈ））を使用することができる。成分間の差異については、後者がより鋭敏である傾向がある。
【０１４２】
遅延コンタクトＣＰ実験を使用して、特徴的なケトン（２０８ｐｐｍ）シグナルと水和物（１０３ｐｐｍ）シグナルに関連した差異を探した。この結果を図９に示す。実験誤差の範囲内で、両シグナルの挙動は、同じであった。故に、ケトン成分と水和物成分が異なる相にあるとする証拠はなかった（但し、２つの形態中の分子の残余部分の類似性を考慮すれば、この緩和挙動が偶々同じであったとする可能性は、排除し得ない）。
【０１４３】
Ｔ１Ｑ挙動が識別不能であれば、Ｔ１が何らかの差異を示す可能性は低いであろう。それでも、このことを確認するために、一連の短期測定を行った。図１０は、全シグナルが上にあることを示す反転回復ＣＰ測定からの結果と、その下にあるシグナルを無効にする試みからの結果を示す。ここでも、ケトンシグナルと水和物シグナルの挙動において何らかの差異を示す証拠はない。
【０１４４】
従って、ケトン形と水和形は、結晶中で同じ相にあると結論付けてよい。
実施例１２．結晶多形２型のキャピラリーＸＲＰＤ構造解析
「一般的な方法」において上記で説明した方法に従って、結晶多形２型の３種のバッチについてキャピラリーＸＲＰＤデータを得た。図１１に重ね合わせた回折図を例示するが、ここでは３セットのデータが同一であることを見ることができて、バッチ間の一貫性と再現性を示している。
【０１４５】
この３種のバッチからのデータに索引付けをして、結晶性材料についての単位格子パラメータを決定した。ポーリー（Pawley）適合法の結果を表１１に要約する。
表１１
【０１４６】
【表１１】
0006530752.tif 000018
【０１４７】
この結果から、この３種の粉末データが同じパターンを示すので、それらが同じ結晶構造に関連していることが確証される。全体的に、ポーリー適合値は、計算プロフィールと観測プロフィールの間で良好に一致していることが観測され、バッチ番号３が最良の結果を示した。主にバッチ番号１において観測された些細な差異は、構造上の欠損、化学成分の１つの配置の乱れ、結晶度における転移に帰すことが可能である一連の人為的影響に関連付けることができる。
【０１４８】
結晶多形２型の結晶系は、斜方晶系（多重度Ｘ４）であることが見出されて、不斉単位格子（７４０Å３）において１つの分子と１つの塩素イオンを収容することが可能であると決定された。
【０１４９】
ケトンの水和物に対する比が約１：１〜約４：１（例えば２：１）であることを示す固体ＮＭＲに基づけば：
−両方の化学成分が約１：１〜約４：１（例えば２：１）の比で同じ相において交換可能的に結晶化する；又は
−同じ相において規則的な反復パターンで結晶化する両方の化学成分を含む共結晶が存在する；又は
−ケトン結晶の水和物結晶に対する比が約１：１〜約４：１（例えば２：１）であるコングロメレート（conglomerate）結晶が存在する、のいずれかである。
【０１５０】
最後の選択肢は、ケトン形と水和形が同じ相にあると結論付けた実施例１１と実施例１２の結果と一致せず、一方、第二の選択肢は、この不斉単位にあるのは１つの分子だけであることが知られているので、あり得ない。故に、両方の化学成分が約１：１〜約４：１（例えば２：１）の比で同じ相において交換可能的に結晶化すると結論付けてよい。
【０１５１】
実施例１３．化合物Ｉ遊離塩基と結晶多形２型の熱力学的な水溶解度
「一般的な方法」に記載の方法を使用して、化合物Ｉ遊離塩基と結晶多形２型の熱力学的な水溶解度を決定した。この結果を下記の表１２に示す：
表１２
【０１５２】
【表１２】
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【０１５３】
これらの結果は、化合物Ｉ遊離塩基の非晶形であっても低い（poor）溶解度と結晶多形１型の比較的低い溶解度に比べて、結晶多形２型がきわめて高い水溶解度を有したことを示す。
【０１５４】
実施例１４．化合物Ｉ遊離塩基、結晶多形２型、及び結晶多形１型の熱分析
「一般的な方法」に記載の方法を使用して、結晶多形２型（実施例６の方法を使用して得られた試料）のＤＳＣとＴＧＡによる熱分析を実施した。図１２の上グラフからは、この物質が良好な熱安定性を有して、１６０℃で分解が始まるまでは質量損失がわずかであることが見てとれる。これは、１６０℃未満で２回の顕著な質量損失を示す結晶多形１型（図１３）に対して明らかに優れていて、１１０℃未満の温度で質量損失（おそらくは、水分）を示す結晶性化合物Ｉ遊離塩基（図１４）にも優れている（これら２つの形態では、取扱いがずっとより困難であろうことが示唆される）。
【０１５５】
実施例１５．結晶多形２型の蒸気吸着量測定
「一般的な方法」に記載の方法を使用して、結晶多形２型（実施例６の方法を使用して得られた試料）の蒸気吸着量測定分析を実施した。結果を図１５と図１６に示す。これらの図は、この物質が０〜９０％  ＲＨの範囲にわたって約２．２％の水分を取り込んで、この水の取込みが可逆的であることを示す。このように、本物質には、湿気媒介性の形態変化のリスクがあるように見えないので、広いＲＨ範囲にわたって取り扱うことが可能であるように思われる。
【０１５６】
実施例１６．Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド遊離塩基（化合物Ｉ遊離塩基）の大規模合成
【０１５７】
【化７】
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【０１５８】
ＷＯ２０１０／０３４７８８、実施例２に記載のように化合物Ｘを調製した。
化合物Ｘ（９．５００ｋｇ，１５．５モル）の溶液を反応器へ移して、溶媒を減圧での蒸留によって除去した。トルエン（２×２３．０ｋｇ）を加えて、減圧で真空において除去した。この蒸発残渣をジクロロメタン（１７ｋｇ）に溶かして、生じる溶液をトリフルオロ酢酸（７０．８ｋｇ）及び精製水（０．５００ｋｇ）の混合物へ１０℃で加えた。生じる混合物を２２℃まで加熱して、この温度で化合物Ｘの化合物Ｉ遊離塩基への９９．５％以上の変換（ＨＰＬＣ）が得られるまで撹拌した。次いで、この反応混合物をｎ−ヘプタン（９７．０ｋｇ）及びｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（１０５．６ｋｇ）の混合物へ０℃で加えた。０℃で撹拌後、この材料を濾過によって単離して、ｎ−ヘプタン（３８．６ｋｇ）とｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（３８．６ｋｇ）の混合物で洗浄した。
【０１５９】
この湿った材料をジクロロメタン（２０４．０ｋｇ）に溶かして、２０％  Ｋ２ＨＰＯ４水溶液（ｐＨ７．５）で洗浄した。有機相を１５℃へ冷やして、シリカゲル６０（４０〜６３μＭ）（５５．５ｋｇ）、塩化メチレン（２０２．７ｋｇ）、及びアセトン（１３．４ｋｇ）より調製したカラムへ適用した。このカラムを、１）ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（１３２．０ｋｇ）中２０％（ｖ／ｖ）のアセトン（３５．０ｋｇ）、２）ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（１２４．０ｋｇ）中５０％（ｖ／ｖ）のアセトン（１３１．５ｋｇ）、及び３）アセトン（８７５．０ｋｇ）で溶出させた。所望の生成物（ＴＬＣとＨＰＬＣを使用して決定する）を含有する溶出液画分を約９０Ｌの容量まで蒸発させた。次いで、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（６４．５ｋｇ）と精製水（１．５８５ｋｇ）を加えて、蒸留を続けた。ほぼ５０Ｌの容量に達したとき、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（３２．０ｋｇ）と精製水（１．６３５ｋｇ）を加えた。この懸濁液を２℃へ冷やして、この温度で撹拌した。生成物を濾過によって単離し、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（２７．０ｋｇ）で洗浄して、真空下に３０℃で少なくとも１０時間乾燥させて、６．５ｋｇ（７２％）の化合物Ｉ遊離塩基を得た。
【０１６０】
実施例１７−化合物Ｉ遊離塩基から結晶多形２型の大規模合成
【０１６１】
【化８】
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【０１６２】
アセトン（２５．５０ｋｇ）及びＴＢＭＥ（２．４０ｋｇ）の混合物へ化合物Ｉ遊離塩基（６．３２５ｋｇ，１０．８モル）を加えた。３７％塩酸（０．９６０ｋｇ，９．７４モル）を加えて、この懸濁液を可能な限り速やかに５０℃まで加熱して、澄明な溶液を得た。この溶液に結晶多形２型（１２ｇ）を播種して、５０℃で撹拌した。結晶多形２型の沈殿が観察された。１）ＴＢＭＥ（９．７５ｋｇ）中５０％（ｖ／ｖ）のアセトン（１０．２５ｋｇ）に次いで２）ＴＢＭＥ（６５．０ｋｇ）を５０℃で加えることによって、さらなる沈殿を引き起こした。生じる懸濁液を可能な限り速やかに１０℃まで冷やして、この温度で２０分間撹拌後、生成物を濾過して取って、初めにＴＢＭＥ（１０．２５ｋｇ）中２９％（ｖ／ｖ）のアセトン（４．５０ｋｇ）で、次いでＴＢＭＥ（１４．５０ｋｇ）で洗浄した。生成物を真空下に５０℃で少なくとも２０時間乾燥させて、６．０ｋｇ（８９％）の結晶多形２型を得た。
【０１６３】
この材料の試料のＸＲＰＤ回折図を図１７に示す。１Ｈ  ＮＭＲ分析（示さず；500 MHz Bruker 機器、DMSO d6，温度：２９８℃，NOESY，１d/zg30 シグナルパルス）は、ケトンの水和物に対する比が８２：１８であることを示した。
【０１６４】
実施例に開示した結果の要約
結晶多形２型は、Ｎ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩とＮ−［１−６−（エチニル−３−オキソ−ヘキサヒドロ−フロ［３，２−ｂ］ピロール−４−カルボニル）−３−メチル−ブチル］−４−［５−フルオロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）チアゾール−４−イル］−ベンズアミド一塩酸塩水和物の両方からなる単結晶相として存在する。
【０１６５】
驚くべきことに、このケトン形と水和形は、様々な相対湿度の条件への曝露時に相互転換することが観測されず、ケトン形の水和形に対するこの比が安定していることを示した。
【０１６６】
結晶多形２型は、良好な水溶解度と良好な水分及び熱安定性を有する。
結晶多形２型は、水溶解度と熱安定性に関して、結晶多形１型と比較して、そして化合物Ｉの遊離塩基型（結晶形であるときでも）と比較して、明らかに有利である。
【０１６７】
化合物Ｉ遊離塩基の他の塩の結晶形を作製する試みは、概して奏効しなかった。
大規模製法（実施例１６と実施例１７）により化合物Ｉ遊離塩基と結晶多形２型が良好な収率及び純度で生成され、それによって本化合物を生成するための方法論が確かなものであることが確認された。
【０１６８】
特許及び特許出願が含まれる、本出願において参照されるすべての参考文献は、可能な限り完全な程度まで、参照により本明細書に組み込まれる。
本明細書とそれに続く特許請求項を通して、文脈上他の意味に解する場合が無ければ、「〜を含む（comprise）」という用語と「〜を含む（comprises）」及び「〜を含んでなる（comprising）」といった代替表記（variatons）は、陳述される整数、工程、整数の群、又は工程の群の包含を含意するが、他のあらゆる整数、工程、整数の群、又は工程の群の排除まで含意するものではないと理解されたい。
【０１６９】
本記載と特許請求項によりその一部が構成される本出願は、あらゆる後続の出願に関して優先度の基礎として使用されてよい。そのような後続の出願の特許請求項は、本明細書に記載のあらゆる特徴又は特徴の組合せへ指向される可能性がある。それらは、生成物、組成物、製法、又は使用の特許請求項の形式を取り得て、例として、そして制限無く、以下の特許請求項を含めることができる：
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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