(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）に示される構造を有する化合物：
【化１】
0006608442.tif 000049
式中、Ｒ１が−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ４であり、ここでｍ＝０または１であり、Ｒ４はＣ１−１０アルキル、
【化２】
0006608442.tif 000050
で構成されたグループから選択され、
式中、各Ｒ５は独立してＨ、ヒドロキシル、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ１−１０アルコキシル、Ｃ１−１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１−１０アルキルオキシアルキル、ＮＨ２、ＮＨＲ６、−Ｒ７−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ８、−Ｒ７−（Ｃ＝Ｏ）Ｘ−Ｒ８、−Ｒ７−ＯＰＯ３Ｍ１Ｍ２、
【化３】
0006608442.tif 000051
であり、
式中、Ｒ６はＣ１−１０アルキル、フェニル、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｃ１−６アルキルまたは−（Ｃ＝Ｏ）−フェニルであり、
各Ｒ７とＲ９は独立して存在せずまたはＣ１−１０アルキレンであり、
各Ｒ８は独立してＨ、ヒドロキシル、金属またはＣ１−１０アルキル、−Ｃ１−１０アルキレン、−ＮＲ１０Ｒ１１または−ＯＰＯ３Ｍ１Ｍ２であり、
各Ｒ１０とＲ１１は独立してＨ、Ｃ１−１０アルキル（例えばＣ１−６アルキル）または置換Ｃ１−１０アルキル（例えばＣ１−６アルキル）であり、
各Ｍ１とＭ２は独立してＨまたは金属であり、
Ｘは存在せずまたはＯであり、
Ｙは存在せずまたは−（Ｃ＝Ｏ）−であり、
Ｚは存在せずまたはＯであり、
および各Ｒ２とＲ３は独立してＣ１−１０アルキル、Ｃ１−１０アルケニル、Ｃ１−１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１−１０アルコキシアルキル、アリール、Ｃ１−１０アラルキル、ヘテロアリール、Ｃ１−１０ヘテロアラルキル、ヘテロシクリル、Ｃ１−１０ヘテロシクロアルキル、カルボシクリルおよびＣ１−１０カルボシクロアルキルであり、
式中、Ｒ１が
【化４】
0006608442.tif 000052
であり、Ｒ２がイソブチルである場合、Ｒ３は４−ピリジルメチルではない、化合物、または、そのエナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、医薬的に許容される塩、若しくは溶媒和物。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物であって、式（ＩＩ）に示される構造を有する、化合物。
【化５】
0006608442.tif 000053
【請求項３】
請求項１または２に記載の化合物であって、Ｒ４はメチル、
【化６】
0006608442.tif 000054
で構成されたグループから選択される、化合物。
【請求項４】
請求項１または２に記載の化合物であって、Ｒ２はＣ１−１０アルキル、Ｃ１−１０アルコキシアルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ１−１０アラルキルまたはＣ１−１０ヘテロアラルキルである、化合物。
【請求項５】
請求項４に記載の化合物であって、Ｒ２はメチル−オキシ−メチル、４−ピリジルメチル、イソブチル、ベンジルまたは４−チアゾリル−メチルである、化合物。
【請求項６】
請求項１または２に記載の化合物であって、Ｒ３はＣ１−１０アルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ１−１０アラルキルまたはＣ１−１０ヘテロアラルキルである、化合物。
【請求項７】
請求項６に記載の化合物であって、Ｒ３はイソブチル、４−ピリジルメチルまたはベンジルである、化合物。
【請求項８】
以下に示す構造を有する化合物：
【化７】
0006608442.tif 000055
0006608442.tif 000056
0006608442.tif 000057
または、その薬学的に許容される塩、若しくは溶媒和物。
【請求項９】
医薬組成物であって、請求項１−８のいずれか一項に記載の化合物および薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
【請求項１０】
２０Ｓプロテアソームの触媒活性を特異的に阻害することに用いるための医薬組成物であって、請求項１−８のいずれか一項に記載の化合物の治療有効量を含む、医薬組成物。
【請求項１１】
請求項１０に記載の医薬組成物であって、２０ＳプロテアソームのＣＴ−Ｌ活性とＴ−Ｌ活性が同時に阻害される、医薬組成物。
【請求項１２】
プロテアソーム関連疾患または状態を治療することに用いるための医薬組成物であって、請求項１−８のいずれか一項に記載の化合物の治療有効量を含む、医薬組成物。
【請求項１３】
請求項１２に記載の医薬組成物であって、化合物は非経口経路により投与される、医薬組成物。
【請求項１４】
請求項１３に記載の医薬組成物であって、化合物は皮下、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、嚢内、胸腔内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、表皮下、関節内、嚢下、くも膜下腔内、胸骨内、胸骨内または輸液によって投与される、医薬組成物。
【請求項１５】
請求項１２に記載の医薬組成物であって、化合物は非経口経路を介して投与される、医薬組成物。
【請求項１６】
請求項１５に記載の医薬組成物であって、化合物は経口、経腸、口腔、経鼻、鼻腔内、経粘膜、表皮、経皮、皮膚、眼科、肺、舌下、直腸、膣または局所に投与される、医薬組成物。
【請求項１７】
請求項１−８のいずれか一項に記載の化合物の使用であって、２０Ｓプロテアソーム関連疾患または状態を治療することに用いるための医薬の製造における、使用。
【請求項１８】
請求項１２に記載の医薬組成物であって、２０Ｓプロテアソーム関連疾患または状態は癌、神経毒性／変性疾患、アルツハイマー病、虚血性状態、炎症、免疫関連疾患、ＨＩＶ感染、臓器移植片拒絶、敗血症性ショック、抗原提示の阻害、ウイルス遺伝子発現の減少、寄生虫感染症、アシドーシスに関連する状態、黄斑変性症、肺疾患、筋肉消耗疾患、線維性疾患、骨および育毛疾患で構成されたグループから選択されることを特徴とする、医薬組成物。
【請求項１９】
請求項１７の使用であって、２０Ｓプロテアソーム関連疾患または状態は癌、神経毒性／変性疾患、アルツハイマー病、虚血性状態、炎症、免疫関連疾患、ＨＩＶ感染、臓器移植片拒絶、敗血症性ショック、抗原提示の阻害、ウイルス遺伝子発現の減少、寄生虫感染症、アシドーシスに関連する状態、黄斑変性症、肺疾患、筋肉消耗疾患、線維性疾患、骨および育毛疾患で構成されたグループから選択されることを特徴とする、使用。
【発明の詳細な説明】
【関連出願の相互参照】
【０００１】
本出願は、２０１４年７月１４日に出願された米国仮特許出願第６２／０２４，０２４号に対する優先権を主張し、その全体が本明細書に参考として組み込まれる。
【技術分野】
【０００２】
本開示は、ペプチドエポキシケトン構造の骨格を有する化合物に関する。これらの化合物は、例えば、プロテアソームを阻害するために用いられる。
【背景技術】
【０００３】
プロテアソームは、細胞内タンパク質の分解調節を媒介することに重要な役割を果たす多触媒性プロテアーゼ複合体である。インビボにおいて、プロテアソーム複合体は２６Ｓプロテアソームとして存在し、分子量は約２０００ｋＤａであり、かつ一つの２０Ｓコア粒子（２０Ｓプロテアソーム）と二つの１９Ｓ調節粒子で構成されると考えられる。コアは中空であり、かつタンパク質が分解される閉鎖空洞を提供する。コア粒子の各末端は複数のＡＴＰａｓｅ活性部位とユビキチン結合部位を含む１９Ｓ調節サブユニットと結合され、ポリユビキチン化タンパク質を認識し、かつそれらを触媒コアに転送される。１１Ｓ粒子と呼ばれる調節サブユニットの代替形態は１９Ｓ粒子と本質的に同じ方法でコアと結合され、１１Ｓは外来ペプチドの分解において役割を果たすことができる。コア粒子２０Ｓプロテアソームの分子量は約７００ｋＤａであり、かつ四つのリングに形成された２８個のサブユニットで構成される。酵母と他の真核生物において、７αサブユニットは二つの外側リングをそれぞれ形成し、７βサブユニットは二つの内側リングをそれぞれ形成する。αリングは１９Ｓまたは１１Ｓ調節複合体の結合部位とし、および二つの内側βリングの物理的障壁として機能する。二つの内側βリングは活性タンパク質分解部位を含む。タンパク質の分解は二つのβ環の結合によって形成される中央チャンバ内で起こる。インビボにおいて、２０Ｓプロテアソームの阻害は２６Ｓプロテアソームの阻害と直接関連することができる。プロテアソームは二つの形態があり、体内の大多数の細胞によって遍在的に発現される構成型プロテアソーム、および免疫細胞であり、主に造血細胞と炎症性サイトカインに曝露された細胞で発現される。プロテアソーム媒介タンパク質分解は様々な細胞内プロセスに必要な高度に調節されたプロセスである。異なるペプチド基質の使用により、真核生物プロテアソームに三つの主要なタンパク質分解活性が定義され、大きな疎水性残基の後で切断するキモトリプシン様活性（ＣＴ−Ｌ）と、塩基性残基の後で切断するトリプシン様活性（Ｔ−Ｌ）と、酸性残基の後で切断するカスパーゼ様活性（ＰＧＰＨ）である。プロテアソームは長い間で医薬品開発の魅力的なターゲットとして認識され、かつ腫瘍学の治療ターゲットとして最初に臨床的に立証される（ＯｒｌｏｗｓｋｉとＫｕｈｎ，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．（２００８），１４，１６４９−１６５７）。
【０００４】
いくつかの小分子がプロテアソーム活性を阻害するために用いられ、ペプチドボロン酸、β-ラクトンとペプチドエポキシケトンを含む（ＢｅｎｎｅｔｔとＫｉｒｋ，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ＆Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ（２００８），１１，６１６−６２５；ＢｏｒｉｓｓｅｎｋｏとＧｒｏｌｌ，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．（２００７）１０７，６８７−７１７）。しかしながら、これらの化合物は、一般的に、分子、細胞とインビボレベルでのプロテアソームの役割を十分に探索と利用する適切な特異性および/または効力必要性が不足である。例えば、ペプチドボロン酸とβ−ラクトンはプロテアソームに対して非特異的であり、他のプロテアーゼを阻害することが見出されるためである（ＢｏｒｉｓｓｅｎｋｏとＧｒｏｌｌ，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．（２００７）１０７，６８７−７１７；Ｍｙｕｎｇら，Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｒｅｖｉｅｗｓ（２００１），２１，２４５−２７３）。これは、これらの阻害剤が非プロテアソームターゲットの阻害に関連するインビボでのオフターゲット活性を示す可能性を高める。一方で、ＵＳ８０８８７４１Ｂ２、ＵＳ６８３１０９９Ｂ１、ＷＯ２００５／１０５８２７、ＣＮ１０１０４４１５７Ａ、ＵＳ７６８７４５２Ｂ２とＵＳ２００７／０１０５７８６Ａ１に開示されるペプチドエポキシケトンはプロテアソームの阻害剤として高選択的である。しかしながら、これらのペプチドエポキシケトンは低い水溶性および/またはより低いプロテアソーム阻害効力を有する。したがって、改善された薬学的特性および/または生物学的特性を有する新規なプロテアソーム阻害剤を開発する必要性が該技術分野において存在する。
【発明の概要】
【０００５】
本明細書においてトリペプチドケトンエポキシ骨格を有する化合物を提供する。増加した水溶性と改善されたプロテアソーム阻害特性を有する化合物も本明細書に開示される。
【０００６】
特定の実施例において、本開示は式（Ｉ）に示される構造を有する化合物、およびそのエナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、医薬的に許容される塩または溶媒和物またはプロドラッグを提供し、
【化１】
0006608442.tif 000002
式中、Ｒ１が−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ４であり、ここでｍ＝０または１であり、Ｒ４はＣ１−１０アルキル、
【化２】
0006608442.tif 000003
で構成されたグループから選択され、
式中、各Ｒ５は独立してＨ、ヒドロキシル、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ１−１０アルコキシル、Ｃ１−１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１−１０アルキルオキシアルキル、ＮＨ２、ＮＨＲ６、−Ｒ７−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ８、−Ｒ７−（Ｃ＝Ｏ）Ｘ−Ｒ８、−Ｒ７−ＯＰＯ３Ｍ１Ｍ２、
【化３】
0006608442.tif 000004
であり、
式中、Ｒ６はＣ１−１０アルキル、フェニル、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｃ１−６アルキルまたは−（Ｃ＝Ｏ）−フェニルであり、
各Ｒ７とＲ９は独立して存在せずまたはＣ１−１０アルキレンであり、
各Ｒ８は独立してＨ、ヒドロキシル、金属またはＣ１−１０アルキル、−Ｃ１−１０アルキレン、−ＮＲ１０Ｒ１１または−ＯＰＯ３Ｍ１Ｍ２であり、
各Ｒ１０とＲ１１は独立してＨ、Ｃ１−１０アルキル（例えばＣ１−６アルキル）または置換Ｃ１−１０アルキル（例えばＣ１−６アルキル）であり、
各Ｍ１とＭ２は独立してＨまたは金属であり、
Ｘは存在せずまたはＯであり、
Ｙは存在せずまたは−（Ｃ＝Ｏ）−であり、
Ｚは存在せずまたはＯであり、
および各Ｒ２とＲ３は独立してＣ１−１０アルキル、Ｃ１−１０アルケニル、Ｃ１−１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１−１０アルコキシアルキル、アリール、Ｃ１−１０アラルキル、ヘテロアリール、Ｃ１−１０ヘテロアラルキル、ヘテロシクリル、Ｃ１−１０ヘテロシクロアルキル、カルボシクリルおよびＣ１−１０カルボシクロアルキルであり、
式中、Ｒ１が
【化４】
0006608442.tif 000005
であり、Ｒ２がイソブチルである場合、Ｒ３は４−ピリジルメチルではない。
特定の実施形態において、本明細書で提供される式（Ｉ）の化合物は式（ＩＩ）に示される構造を有し、
【化５】
0006608442.tif 000006
式中、各Ｒ１、Ｒ２とＲ３は上で定義した通りである。
特定の実施形態において、Ｒ４はメチル、
【化６】
0006608442.tif 000007
で構成されたグループから選択される。
特定の実施形態において、Ｒ１はメチル、
【化７】
0006608442.tif 000008
で構成されたグループから選択される。
【０００７】
特定の実施例において、Ｒ２はＣ１−１０アルキル、Ｃ１−１０アルコキシアルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ１−１０アラルキルまたはＣ１−１０ヘテロアラルキルである。
【０００８】
特定の実施例において、Ｒ２はメチル−オキシ−メチル、４−ピリジルメチル、イソブチル、ベンジルまたは４−チアゾリル−メチルである。
【０００９】
特定の実施例において、Ｒ３はＣ１−１０アルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ１−１０アラルキルまたはＣ１−１０ヘテロアラルキルである。
【００１０】
一態様において、本開示は２０Ｓプロテアソームの触媒活性を阻害できるトリペプチドエポキシケトンを提供する。特定の実施例において、本明細書で提供されるトリペプチドエポキシケトンは約５００ｎＭ、２５０ｎＭ、１００ｎＭ、５０ｎＭ、１０ｎＭまたは５ｎＭ未満の濃度の２０ＳプロテアソームのＣＴ−Ｌ触媒活性の阻害ＩＣ５０を有する。
【００１１】
別の態様において、本明細書で開示される化合物は改善された水溶性を有する。特定の実施例において、本明細書で提供されるトリペプチドエポキシケトンは少なくとも約０．０２、０．０５、０．１、０．５または１ｍｇ／ｍＬの水溶性を有する。
【００１２】
さらなる態様において、本開示は薬学的に許容される担体と治療有効量の本明細書に開示される２０Ｓプロテアソーム阻害剤を含む医薬組成物を提供し、例えば、癌、炎症、神経変性疾患（アルツハイマー病など）、筋萎縮疾患、慢性感染症、発熱、筋肉消耗、脱神経、神経傷害、および免疫関連状態などを含むがこれらに限定されないヒト状態の治療に役立つ。
【００１３】
特定の実施例において、医薬組成物は約１０−９ｇ〜約１０ｇの本明細書で提供される化合物を含む。一日あたりの被験者あたりの適切な投与量は約０．０１ｍｇ〜約５ｇである。
【００１４】
特定の実施例において、本明細書で開示される化合物または医薬組成物は非経口経路（例えば、皮下、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、髄腔内、胸骨内および/または注入）と非経腸経路（例えば、経口、経腸、鼻腔、鼻腔内、経粘膜、表皮、経皮 真皮、眼科、肺、舌下、直腸、膣または局所）による必要がある対象への送達に適した投与量に調合される。
【００１５】
本開示の別の態様は２０Ｓプロテアソームに関連する状態を治療する方法に関し、ここで提供される化合物の治療有効量を投与することを含む。
【００１６】
さらなる態様において、本開示はペプチドエポキシケトンの調製方法を提供する。
【００１７】
本開示の他の特徴と利点は以下の詳細な説明と特許請求の範囲から明らかになる。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】図１は本明細書に記載される化合物を投与したＢａｌｂ／ｃマウスから採取した血液試料中のプロテアソーム活性の残存率を示す。ビヒクルを投与したマウスから採取した血液試料中のプロテアソーム活性を１００％（対照群）とする。残りの活性は本明細書に記載される化合物を投与したマウスから採取した血液試料中のプロテアソーム活性を１０ｍｇ／ｋｇの静脈内注射（ＩＶ）または３０ｍｇ／ｋｇの経口強制飼養（ＰＯ）により対照群と比較することによって計算される。
【図２Ａ】図２ＡはＨＴ−２９ヒト結腸直腸腺癌の異種移植片を有するマウスにおけるＣＸ１３−１０３の抗腫瘍効果を示す。統計解析は２−ｗａｙ  ＡＮＯＶＡを用いて行う。
【図２Ｂ】図２ＢはＲＬヒトリンパ腫の異種移植片を有するマウスにおけるＣＸ１３−１０３の抗腫瘍効果を示す。統計解析は２−ｗａｙ  ＡＮＯＶＡを用いて行う。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
化合物およびその薬学的塩
一態様において、本開示は式（Ｉ）に示される構造を有する化合物、およびそのエナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、医薬的に許容される塩または溶媒和物またはプロドラッグを提供し、
【化８】
0006608442.tif 000009
式中、Ｒ１が−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ４であり、ここでｍ＝０または１であり、Ｒ４はＣ１−１０アルキル、
【化９】
0006608442.tif 000010
で構成されたグループから選択され、
式中、各Ｒ５は独立してＨ、ヒドロキシル、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ１−１０アルコキシル、Ｃ１−１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１−１０アルキルオキシアルキル、ＮＨ２、ＮＨＲ６、−Ｒ７−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ８、−Ｒ７−（Ｃ＝Ｏ）Ｘ−Ｒ８、−Ｒ７−ＯＰＯ３Ｍ１Ｍ２、
【化１０】
0006608442.tif 000011
であり、
式中、Ｒ６はＣ１−１０アルキル、フェニル、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｃ１−６アルキルまたは−（Ｃ＝Ｏ）−フェニルであり、
各Ｒ７とＲ９は独立して存在せずまたはＣ１−１０アルキレンであり、
各Ｒ８は独立してＨ、ヒドロキシル、金属またはＣ１−１０アルキル、−Ｃ１−１０アルキレン、−ＮＲ１０Ｒ１１または−ＯＰＯ３Ｍ１Ｍ２であり、
各Ｒ１０とＲ１１は独立してＨ、Ｃ１−１０アルキル（例えばＣ１−６アルキル）または置換Ｃ１−１０アルキル（例えばＣ１−６アルキル）であり、
各Ｍ１とＭ２は独立してＨまたは金属であり、
Ｘは存在せずまたはＯであり、
Ｙは存在せずまたは−（Ｃ＝Ｏ）−であり、
Ｚは存在せずまたはＯであり、
および各Ｒ２とＲ３は独立してＣ１−１０アルキル、Ｃ１−１０アルケニル、Ｃ１−１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１−１０アルコキシアルキル、アリール、Ｃ１−１０アラルキル、ヘテロアリール、Ｃ１−１０ヘテロアラルキル、ヘテロシクリル、Ｃ１−１０ヘテロシクロアルキル、カルボシクリルおよびＣ１−１０カルボシクロアルキルであり、
式中、Ｒ１が
【化１１】
0006608442.tif 000012
であり、Ｒ２がイソブチルである場合、Ｒ３は４−ピリジルメチルではない。
【００２０】
特定の実施例において、Ｒ５は−Ｒ７−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ８であり、Ｒ７とＲ８は上で定義した通りである。特定の実施例において、Ｒ７は存在せず、Ｒ８はＨ、Ｃ１−１０アルキル（例えば、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−６アルキル）、−Ｃ１−１０アルキレン、−ＮＲ１０Ｒ１１から選択され、Ｒ１０とＲ１１は上で定義した通りである。特定の実施例において、Ｒ７はＣ１−１０アルキレン（例えば、−ＣＨ２−、−Ｃ２Ｈ４−、−Ｃ３Ｈ７−など）であり、Ｒ８はＨ、Ｃ１−１０アルキル（例えば、Ｃ１−６アルキル）、−Ｃ１−１０アルキレン、−ＮＲ１０Ｒ１１から選択され、ここでＲ１０とＲ１１は上で定義した通りである。
【００２１】
特定の実施例において、Ｒ５は−Ｒ７−（Ｃ＝Ｏ）Ｘ−Ｒ８であり、Ｒ７とＲ８は上で定義した通りである。特定の実施例において、Ｒ７は存在せず、ＸはＯであり、Ｒ８はＨ、金属（例えばＮａとＫ）、ＮＨ４、Ｃ１−１０アルキル（例えばＣ１−６アルキル）、−Ｃ１−１０アルキレン、および−ＮＲ１０Ｒ１１から選択され、Ｒ１０とＲ１１は上で定義した通りである。特定の実施例において、Ｒ７は存在せず、Ｘは存在せず、Ｒ８は−ＮＲ１０Ｒ１１から選択され、ここでＲ１２とＲ１３は上で定義した通りである。
【００２２】
特定の実施例において、Ｒ５はＮＨ２、ＮＨＣＯＭｅ、ＮＨＣＯＥｔ、ＮＨＣＯＣ３Ｈ７、またはＮＨＢｏｃである。
【００２３】
特定の実施例において、Ｒ５は
【化１２】
0006608442.tif 000013
であり、Ｒ７、Ｒ９、Ｘ、ＹとＺは上で定義した通りである。特定の実施例において、Ｒ７、Ｒ９、Ｘ、ＹとＺのうちの少なくとも一つは存在しない。特定の実施例において、Ｘ、Ｙ、ＺとＲ７はすべて存在せず、Ｒ９はＣ１−１０アルキレン（例えば、−ＣＨ２−、−Ｃ２Ｈ４−、−Ｃ３Ｈ７−など）である。特定の実施例において、Ｒ７、Ｒ９とＸはすべて存在せず、Ｙは−（Ｃ＝Ｏ）−であり、ＺはＯである。特定の実施例において、Ｒ７とＲ８の両方は存在せず、Ｒ９はＣ１−１０アルキレン（例えば、−ＣＨ２−、−Ｃ２Ｈ４−、−Ｃ３Ｈ７−など）であり、Ｙは−（Ｃ＝Ｏ）−であり、ＺはＯである。特定の実施例において、Ｒ９とＸの両方は存在せず、Ｒ７はＣ１−１０アルキレン（例えば、−ＣＨ２−、−Ｃ２Ｈ４−、−Ｃ３Ｈ７−など）であり、Ｙは−（Ｃ＝Ｏ）−であり、ＺはＯである。
【００２４】
特定の実施例において、Ｘは存在せず、Ｒ７とＲ９の両方は独立してＣ１−１０アルキレン（例えば、−ＣＨ２−、−Ｃ２Ｈ４−、−Ｃ３Ｈ７−など）であり、Ｙは−（Ｃ＝Ｏ）−であり、ＺはＯである。特定の実施例において、Ｒ７、Ｒ９、ＸとＺはすべて存在せず、Ｙは−（Ｃ＝Ｏ）−である。
【００２５】
特定の実施例において、各Ｒ５は独立してＨ、−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ３Ｈ７、
【化１３】
0006608442.tif 000014
である。
【００２６】
特定の実施例において、各Ｒ５は独立して−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＯＣ２Ｈ５、−ＯＣ３Ｈ７、−ＯＰＯ３Ｎａ２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ３、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｃ２Ｈ５、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｃ３Ｈ７、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｃ４Ｈ９、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨ２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（Ｃ２Ｈ５）２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ２Ｈ５）２、
【化１４】
0006608442.tif 000015
である。
【００２７】
特定の実施例において、各Ｒ５は独立して−ＣＨ２ＯＨ、−Ｃ２Ｈ５ＯＨ、−Ｃ３Ｈ７ＯＨ、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ３、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）Ｃ２Ｈ５、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）Ｃ３Ｈ７、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）Ｃ４Ｈ９、−ＣＨ２ＯＰＯ３Ｎａ２、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨ２、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（Ｃ２Ｈ５）２、
【化１５】
0006608442.tif 000016
−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ２Ｈ５）２、
【化１６】
0006608442.tif 000017
である。
【００２８】
特定の実施例において、各Ｒ５は独立して−（Ｃ＝Ｏ）ＯＨ、−（Ｃ＝Ｏ）ＯＮａ、−（Ｃ＝Ｏ）ＯＮＨ４、−（Ｃ＝Ｏ）ＯＣＨ３、−（Ｃ＝Ｏ）ＯＣ２Ｈ５、−（Ｃ＝Ｏ）ＯＣ３Ｈ７、または−（Ｃ＝Ｏ）ＯＣ４Ｈ９である。
【００２９】
特定の実施例において、各Ｒ５は独立して−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮ（ＣＨ３）２、−ＣＯＮ（Ｃ２Ｈ５）２、
【化１７】
0006608442.tif 000018
である。
【００３０】
特定の実施例において、Ｒ１はメチル、
【化１８】
0006608442.tif 000019
で構成されたグループから選択される。
【００３１】
特定の実施例において、Ｒ２とＲ３は独立してＣ１−１０アルキル、Ｃ１−１０アルコキシアルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ１−１０アラルキルまたはＣ１−１０ヘテロアラルキルである。
【００３２】
特定の実施例において、Ｒ２とＲ３は独立して−（ＣＨ２）ｎＲ１２であり、Ｒ１２はＣ１−６アルキル、フェニル、ピリジル、−Ｏ−Ｃ１−６アルキル、チアゾリルであり、ここでｎは０、１、２、３、４、５である。
【００３３】
特定の実施例において、Ｒ２はメチル−オキシ−メチル、４−ピリジルメチル、イソブチル、ベンジルまたは４−チアゾリル−メチルである。
【００３４】
特定の実施例において、Ｒ３はイソブチル、４−ピリジルメチルまたはベンジルである。
【００３５】
式（Ｉ）の構造を有する化合物の例に、化合物が以下に挙げられるが、これらに限定されず、
【化１９】
0006608442.tif 000020
0006608442.tif 000021
0006608442.tif 000022
0006608442.tif 000023
【００３６】
式（Ｉ）における各キラル炭素は独立してＲ配置またはＳ配置であることができる。
【００３７】
特定の実施例において、式（Ｉ）の化合物は式（ＩＩ）に示される構造を有し、式中、Ｒ１、Ｒ２とＲ３は上で定義した通り、
【化２０】
0006608442.tif 000024
【００３８】
特定の実施例において、本明細書で提供される化合物は以下に挙げられる化合物、およびそのエナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、医薬的に許容される塩または溶媒和物またはプロドラッグから選択される構造を含む。
【化２１】
0006608442.tif 000025
0006608442.tif 000026
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【００３９】
薬学的に許容される塩は生理的に許容されかつ意図されるレシピエントへの投与に適した任意の塩またはエステルであることができる。薬学的に許容される塩の例に、酸付加塩（例えば、塩酸塩、水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、パントテン酸塩、酒石酸水素塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチシン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、糖酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メシル酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、p-トルエンスルホン酸塩およびパモ酸塩）、および塩基性塩（例えば、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム、亜鉛とジエタノールアミン塩）を含む。
【００４０】
定義
用語“Ｃｘ−ｙアルキル”は鎖中にｘ〜ｙ個の炭素を含む直鎖アルキルと分枝鎖アルキル基を含む置換または非置換飽和炭化水素基を指す。
【００４１】
用語“Ｃ２−ｙアルケニル”と“Ｃ２−ｙアルキニル”は長さと可能な置換が上記のアルキルに類似するが、少なくとも一つの二重結合または三重結合をそれぞれ含む置換または非置換の不飽和脂肪族基を指す。
【００４２】
用語“アルコキシ”はそれに結合した酸素を有するアルキル基を指す。代表的なアルコキシ基はメトキシ、エトキシ、プロポキシ、tert-ブトキシなどを含む。“エーテル”は酸素によって共有結合した二つの炭化水素である。したがって、そのアルキルをエーテルにするアルキルの置換基はアルコキシまたは類似する。
【００４３】
用語“Ｃ１−１０アルコキシアルキル”はそれによってエーテルを形成してアルコキシ基で置換されたＣ１−１０アルキル基を指す。
【００４４】
本明細書で使用される用語“Ｃ１−１０アラルキル”はアリール基で置換されたＣ１−１０アルキル基を指す。
【００４５】
本明細書で使用される用語“Ｃ１−１０ヘテロアラルキル”はヘテロアリール基で置換されたＣ１−１０アルキル基を指す。
【００４６】
本明細書で使用される用語“アリール”はリングの各原子が炭素である５−、６−と７−員リングの置換または非置換の単環芳香族基を含む。
【００４７】
用語“ヘテロアリール”は置換または非置換の芳香族５−〜７−員リング構造、より好ましくは５−〜６−員リングを含み、そのリング構造は１〜４個のヘテロ原子を含む。
【００４８】
本明細書で使用される用語“炭素リング”と“カルボシクリル”はリングの各原子が炭素である非芳香族置換または非置換環を指す。
【００４９】
用語“ヘテロシクリル”または“複素環式基”は置換または非置換の非芳香族３−から１０−員リング構造、より好ましくは３−〜７−員リングを指し、そのリング構造は１〜４個のヘテロ原子を含む。
【００５０】
用語“Ｃ１−１０ヒドロキシアルキル”はヒドロキシ基で置換されたＣ１−１０アルキル基を指す。
【００５１】
用語“プロドラッグ”は生理学的条件下で、治療的に活性な薬剤に変換される化合物を含む。プロドラッグを作製する一般的な方法は生理学的条件下で加水分解されて所望の分子を明らかにする選択された部分を含むことである。他の実施例において、プロドラッグは宿主動物の酵素活性によって変換される。
【００５２】
生物活性、選択性および溶解性
本明細書で提供される化合物はプロテアソームを阻害することに生物活性を有する。２０Ｓプロテアソームの阻害は該分野で周知の方法とアッセイによって決定することができ、例えば、Ｓｔｅｉｎら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，（１９９６），３５，３８９９−３９０８；Ｌｉｇｈｔｃａｐら、Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０００，４６，６７３−６８３；Ｋｉｓｓｅｌｅｖら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，（２００６），２８１，８５８２−８５９０および米国特許出願第０９／５６９７４８号に開示されるようである。２０Ｓプロテアソームのキモトリプシン様（ＣＴ−Ｌ）、カスパーゼ様活性（ＰＧＰＨ）とトリプシン様（ＴＬ）活性はそれぞれアッセイ緩衝液中の基質としてスクシニル−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−ＡＭＣ、Ｚ−Ｌｕｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−ＡＭＣとＢｏｃ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−ＡＭＣを用いた蛍光発生基質アッセイ法で測定される。基質から切断後の遊離フルオロフォア７−アミノ−４−メチルクマリン（ＡＭＣ）を蛍光光度計で定量し、かつ２０ＳプロテアソームのＣＴ−Ｌ、ＰＧＰＨとＴ−Ｌの活性を測定する。
【００５３】
本明細書で提供される化合物はプロテアソームの触媒活性を阻害するため、部分的に有用である。
【００５４】
特定の実施例において、本明細書で提供される化合物は約５００ｎＭ、２５０ｎＭ、１００ｎＭ（例えば、ＣＸ１３−１３０）、５０ｎＭ（例えば、ＣＸ１３−１０４、ＣＸ１３−１３７、ＣＸ１３−６０１、ＣＸ１３−６０３）、１０ｎＭ（例えば、ＣＸ１３−１３５、ＣＸ１３−６０５、ＣＸ１３−６０６、ＣＸ１３−７０５）または５ｎＭ（例えば、ＣＸ１３−１０３、ＣＸ１３−１０５、ＣＸ１３−１０７、ＣＸ１３−１３３、ＣＸ１３−６００、ＣＸ１３−６０８）未満の濃度で存在する場合、２０ＳプロテアソームのＣＴ−Ｌ活性の阻害（例えば、少なくとも５０％阻害）を示す。特定の実施例において、本明細書で提供される化合物は約５００ｎＭ（例えば、ＣＸ１３−１３３、ＣＸ１３−６０６、ＣＸ１３−６０８）未満の場合、２０ＳプロテアソームのＴ−Ｌ活性の阻害を示す。
【００５５】
別の態様において、本明細書で開示される化合物は改善された水溶性を有する。特定の実施例において、本明細書で提供されるトリペプチドエポキシケトンは少なくとも約０．０２、０．０５、０．１、０．５または１ｍｇ／ｍＬの水溶性を有する。
【００５６】
別の態様において、本明細書で提供されるトリペプチドエポキシケトンは改善された水溶性とプロテアソーム阻害の両方を有する。特定の実施例において、本明細書で開示される化合物は少なくとも約０．１、０．５または１ｍｇ／  ｍＬの水溶性を有し、かつ約１００ｎＭ、５０ｎＭ、１０ｎＭまたは５ｎＭ未満の濃度で存在する場合、２０ＳプロテアソームのＣＴ−Ｌ活性の阻害を示す。
【００５７】
化合物の用途
本開示の別の態様はプロテアソームの活性を阻害する方法に関し、本明細書で提供される化合物の治療有効量を投与することを含む。本明細書で使用される“治療有効量”は化合物を投与される対象において意図された治療効果または活性を提供するのに十分な化合物の量を意味する。有効量は年齢、性別、被験体の健康状態、化合物の剤形、被験体における疾患の重篤度等のような様々な因子に依存して変化することができる。治療有効量は上記要因を考慮して医師または化合物を処方する医師で決定することができる。
【００５８】
本開示の別の態様はプロテアソームに関連する状態を治療する方法に関する。本方法は本明細書で提供される有効量の化合物を投与することを含む。本明細書で提供される化合物は以下に挙げられるがこれらに限定されないプロテアソームに関連する状態または疾患のいずれかを治療するために用いられる。
【００５９】
種々の状態または疾患はプロテアソームの触媒機能によって媒介されることが知られまたは信じられる。プロテアソーム阻害は多数の疾患の予防および/または治療として示唆され、癌、神経毒性/変性疾患、アルツハイマー病、虚血状態、炎症、免疫関連疾患、ＨＩＶ感染、臓器移植片拒絶反応、敗血症性ショック、抗原提示抑制、寄生虫感染、アシドーシスに関連する状態、黄斑変性症、肺疾患、筋肉消耗疾患、線維性疾患、骨と育毛疾患を含むが、これらに限定されない。したがって、本明細書に開示されるペプチドエポキシケトンのようなプロテアソーム阻害剤組成物はこれらの状態の患者を治療する手段を提供する。
【００６０】
プロテアソーム阻害は抗腫瘍治療戦略として臨床的に証明される。したがって、本明細書に開示される化合物は癌の治療に役立つ。治療され得る例示的な癌としては、白血病、リンパ腫、骨髄腫、および肝細胞癌などの癌腫が挙げられる。本明細書中に開示される化合物で治療され得る他の癌は、副腎皮質癌、ＡＩＤＳ関連癌、星細胞腫、骨癌、骨肉腫、ＧＢＭ、悪性線維性組織球腫、メラノーマ、悪性中皮腫、褐色細胞腫、松果体芽腫と原発性原始神経外胚葉腫瘍、神経芽腫、子宮肉腫、胆管癌、膀胱癌、乳癌、胃腸癌、子宮頸癌、結腸癌、直腸癌、食道癌、眼癌、卵巣癌、頭頸部癌、腎臓癌、口腔と口腔癌、肺癌、鼻腔と副鼻腔癌、陰茎癌、前立腺癌、転移性細胞癌、唾液腺癌、軟部組織癌、皮膚癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、および膣癌を含む。
【００６１】
プロテアソーム阻害剤はＮＦ−κＢ阻害に関連する。ＮＦ−κＢはＴＮＦ、ＩＬ−１、シクロオキシゲナーゼ、ＩＣＡＭなどの炎症分子を含む遺伝子の転写を媒介する強力な転写因子である。したがって、本明細書で提供される化合物は免疫抑制剤として炎症性疾患または状態に役立つかもしれなく、アレルギー、喘息、移植臓器／組織の拒絶反応、自己免疫疾患狼瘡、慢性関節リウマチ、乾癬、多発性硬化症、および炎症性腸疾患が挙げられるが、これらに限定されない。本明細書で提供される化合物は必要に応じて医薬組成物中の有効量で、それらを必要とする対象に投与してこれらの状態を治療することができる。
プロテアソーム阻害剤は筋肉タンパク質の分解を低下させることが見出され、したがって、筋肉損失と繊維萎縮を阻害するのに役立つ。したがって、本明細書で提供される化合物は、慢性感染症、発熱、筋肉の消失と神経変性、神経損傷、アシドーシスに伴う腎不全と肝不全などの悪液質と筋肉消耗性疾患を治療するために使用することができる。特定の実施例において、本明細書で提供される化合物は必要に応じて医薬組成物中に有効量で投与し、筋肉タンパク質分解、細胞内タンパク質分解または細胞内ｐ５３タンパク質分解を減速または低下することができる。
【００６２】
本明細書で提供される化合物はまた神経変性疾患と状態の治療に使用することができ、以下を含むが、これらに限定されず、脳卒中、神経系への虚血性損傷、神経外傷（例えば、脳卒中の脳損傷、脊髄損傷と外傷性損傷）、多発性硬化症と他の免疫媒介性ニューロパチー（例えば、ギラン・バレー症候群およびその変異型、急性運動性軸索ニューロパシー、急性炎症性脱髄性多発神経障害およびフィッシャー症候群）、ＨＩＶ／ＡＩＤＳ認知症複合体、軸索切除症、糖尿病性神経障害、パーキンソン病、ハンチントン病、多発性硬化症、細菌性、寄生虫性、真菌性、およびウイルス性髄膜炎、脳炎、血管性認知症、多発性梗塞性認知症、レヴィー小体認知症、ピック病などの前頭葉痴呆、皮質下痴呆（例えば、ハンチントン病または進行性核上麻痺）、局所性皮質萎縮症候群（例えば、原発性失語症）、代謝毒性痴呆、および感染症による痴呆（例えば、梅毒または慢性髄膜炎）。
【００６３】
本明細書で提供される化合物は、さらにアルツハイマー病の主要な原因であるβ−アミロイドタンパク質（β−ＡＰ）の細胞外沈着に関連するタンパク質プロセシングの調節に役立つ。したがって、本明細書で提供される化合物は、例えば、β−ＡＰプロセシングの速度を低下させ、β−ＡＰプラーク形成速度を低下させ、β−ＡＰの生成速度を低下させ、およびアルツハイマー病の臨床症状を軽減させることによってアルツハイマー病を治療することに役立つ。
【００６４】
プロテアソーム阻害はまた線維症の軽減にさらに関連する。したがって、本明細書で提供される化合物は、糖尿病性腎症、糸球体硬化症、ＩｇＡ腎症、肝硬変、胆道閉鎖、うっ血性心不全、強皮症、放射線誘発性線維症、肺線維症および心筋線維症などの線維症関連状態の治療に用いることができる。
医薬組成物および投与
【００６５】
別の態様において、本開示は本明細書で提供される化合物と薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。
【００６６】
本明細書で使用される用語“薬学的に許容される担体”は本明細書で提供される化合物の運搬または輸送に関与する液体または固体の充填剤、希釈剤、賦形剤、溶媒または封入材料などの薬学的に許容される材料、組織、器官（内部または外部）、または身体の一部から別の場所、体液、組織、器官、または身体の一部分へ移動することができる。薬学的に許容される担体は過度の毒性または有害作用を伴わずに動物の組織に接触するために使用される媒体、希釈剤、賦形剤、または他の物質であることができる。典型的な薬学的に許容される担体は、糖、デンプン、セルロース、麦芽、トラガカント、ゼラチン、リンゲル液、アルギン酸、等張生理食塩水、緩衝剤などを含む。
【００６７】
各担体は他の成分と適合性があるという意味において“薬学的に許容される”ものであり、例えば本明細書で提供される製剤の化合物であり、かつ毒性、刺激、アレルギー反応、免疫原性、または合理的な利益/危険比に見合った他の問題または合併症なしに、生物学的対象の組織または器官と接触させて使用するのに適する。
【００６８】
薬学的に許容される担体として役立ち得る材料のいくつかの例には、以下を含み、（１）グルコースとスクロースなどの糖、（２）トウモロコシデンプンとジャガイモデンプンなどのデンプン、（３）カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースと酢酸セルロースなどのセルロースおよびその誘導体、（４）粉末のトラガカント、（５）麦芽、（６）ゼラチン、（７）タルク、（８）カカオバターと座薬ワックスなどの賦形剤（９）ピーナッツ油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油と大豆油などの油、（１０）プロピレングリコールなどのグリコール、（１１）グリセリン、ソルビトール、マンニトールとポリエチレングリコールなどのポリオール、（１２）オレイン酸エチル、ラウリン酸エチルなどのエステル類、（１３）寒天、（１４）水酸化マグネシウムと水酸化アルミニウムなどの緩衝剤、（１５）アルギン酸、（１６）発熱物質を含まない水、（１７）等張性生理食塩水、（１８）リンゲル液、（１９）エチルアルコールとプロパンアルコールなどのアルコール、（２０）リン酸緩衝液、（２１）アセトンなどの医薬製剤に使用される他の非毒性適合物質。
【００６９】
医薬組成物は、ｐＨ調整剤と緩衝剤、毒性調整剤などの生理学的条件に近似するのに必要な薬学的に許容される補助物質を含むことができ、例えば酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、乳酸ナトリウムなどである。
【００７０】
医薬組成物はいずれか適切な剤形に製造することができ、例えば、固体剤形（例えば、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤など）と液体剤形（例えば、水溶液、エマルジョン、エリキシル剤、シロップなど）である。薬学的組成物の調製方法は該分野で周知であり、かつ例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ｇｅｎｎａｒｏ  ｅｄ．２０ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ  ＰＡ，ＵＳＡ）（２０００）に記載されるような日常的な手順に従って実施することができる。  
【００７１】
特定の実施例において、医薬組成物は、本明細書で提供される約１０−９ｇ〜約１０ｇの化合物（例えば、約０．０１ｍｇ〜約１０ｇ、約０．１ｍｇ〜約１０ｇ、約１ｍｇ〜約１０ｇ、約５ｍｇ〜約１０ｇ、約１０ｍｇ〜約１０ｇ、約２０ｍｇ〜約１０ｇ、約３０ｍｇ〜約１０ｇ、約４０ｍｇ〜約１０ｇ、約５０ｍｇ〜約１０ｇ、約８０ｍｇ〜約１０ｇ、約１００ｍｇ〜約１０ｇ、約１５０ｍｇ〜約１０ｇ、約２００ｍｇ〜約１０ｇ、約３００ｍｇ〜約１０ｇ、約４００ｍｇ〜約１０ｇ、約５００ｍｇ〜約１０、約６００ｍｇ〜約１０ｇ、約７００ｍｇ〜約１０ｇ、約８００ｍｇ〜約１０ｇ、約９００ｍｇ〜約１０ｇ、約１ｇ〜約１０ｇ、約１０ｍｇ〜約５ｇ、約１０ｍｇ〜約３ｇ、約１０ｍｇ〜約１ｇ、約１０ｍｇ〜約９００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約７００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約５００ｍｇ、または約１０ｍｇ〜約３００ｍｇ）を含む。１日あたりの被験者あたりの適切な投薬量は約０．０１ｍｇ〜約５ｇであることができる。
【００７２】
特定の実施例において、本明細書中に開示される化合物または医薬組成物は、非経口経路（例えば、皮下、静脈内、筋肉内、動脈内、くも膜下腔内、嚢内、眼窩内、くも膜下腔内、胸骨内、および/または注入）と非経腸経路（例えば、経口、経腸、鼻腔、鼻腔内、経粘膜、表皮、経皮、真皮、眼科、肺、舌下、直腸、膣または局所）で投与することができる。特定の例において、本明細書に開示される化合物または医薬組成物は、経口または経腸的に必要な被験体への送達に適した剤形に処方される。
【００７３】
適切な剤形は以下を含むが、これらに限定されず、注射可能なエマルジョン、溶液および懸濁液のような非経口用の製剤、錠剤、カプセル、ピル、糖衣錠、散剤および顆粒のような経口用の製剤、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ゲル、溶液、パッチおよび吸入剤のような局所用または経皮用の製剤、および坐剤などの膣内または直腸内用の製剤である。これらの製剤は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ｇｅｎｎａｒｏ  ｅｄ．２０ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ  ＰＡ，ＵＳＡ）（２０００）に記載されるような該分野で周知の方法に従って、化合物を適切な条件で適切な賦形剤と会合させることによって調製することができる。
【００７４】
医薬組成物は、経口、静脈内、鼻腔内、局所、筋肉内、皮内、経皮、または皮下経路などを介していずれかの適切な投与経路で被験体に投与することができる。
【００７５】
特定の実施例において、本明細書で提供される化合物または医薬組成物は、第二活性薬剤と同時に投与することができ、コンビナトリアルまたは相乗的な薬学的効果を必要とする対象において達成することができる。例えば、本明細書で提供される化合物と第二活性薬剤は単一の医薬組成物中に、または別々の組成物中に、または別々の組成物中に順次投与することができる。癌治療用の本開示の化合物と同時に投与できる第二活性薬剤は以下を含むが、これらに限定されず、５−フルオロウラシル、ドキソルビシン、ダウノルビシン、タモキシフェン、ロイプロリド、ゴセレリン、フルタミド、ニルイミド、フィナステリド、デキサメタゾン、レナリドマイドアミノグルテチミド、アムサクリン、アナストロゾール、アスパラギナーゼ、ｂｃｇ、ビカルタミド、ブレオマイシン、ブセレリン、ブスルファン、カンプトテシン、カペシタビン、カルボプラチン、カルムスチン、クロラムブシル、シスプラチン、クラドリビン、クロドロネート、コルヒチン、シクロホスファミド、テモゾロミド、シプロテロン、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ジエネストロール、ジエチルスチルベストロール、ドセタキセル、ドキソルビシンアドリアマイシン、エピルビシン、エストラジオール、エストラムスチン、エトポシド、エキセメスタン、フィルグラスチム、フルタラビン、フルドロコルチゾン、フルオロウラシル、フルオキシメステロン、フルタミド、ゲムシタビン、ゲニステイン、ゴセレリン、タモキシフェン、テニポシド、テストステロン、チタノセンジクロライド、トポテカン、トラスツズマブ、トレチノイン、ビンブラスチン、ヒドロキシ尿素、イダルビシン、イフォスファミド、イマチニブ、インターフェロン、イリノテカン、アイソトカン、レトロゾール、ロイコボリン、ペントスタチン、プリカマイシン、プロカルバジン、ラルチトレキセド、リツキシマブ、ストレプトゾシン、スラミン、ロイプロリド、レバミゾール、ロムスチン、メクロレタミン、メドロキシプロゲステロン、メゲストロール、メルファラン、メルカプトプリン、メスナ、メトトレキセート、マイトマイシン、ミトタン、ミトキサントロン、ニルタミド、ノコダゾール、オクトレオチド、オキサリプラチン、パクリタキセル、パミドロネート、チオグアニン、チオテパ、チタノセンジクロライド、トポテカン、トラスツズマブ、トレチノイン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、およびビノレルビンである。
【００７６】
特定の実施例において、本開示の化合物は癌治療の非化学的方法と同時に投与することができる。特定の実施例において、本開示の化合物は放射線療法と同時に投与することができる。特定の実施例において、本開示の化合物は手術、熱切除、集束超音波療法、凍結療法、またはこれらのいずれかの組合せと同時に投与することができる。
【００７７】
特定の実施例において、本開示の化合物はステロイドと同時に投与することができ、以下を含むが、これらに限定されず、アムシノニド、ベクロメタゾン、ベタメタゾン、ブデソニド、クロロプレドニゾン、クロベタゾール、クロコルトロン、ロテプレドノール、コルチコステロン、コルチゾン、コルチゾール、デソニド、デソキシメタゾン、デキサメタゾン、ジフルラゾン、ジフルコルトロン、ジフプレートネート、エノキソロン、フルアザコート、フルメタゾン、フルニソリド、フルクロロン酸塩、フルオシノロンアセトニド、フルオシノニド、フルオコリンブチル、フルコトーロン、フルオロメトロン、酢酸フルペロロン、酢酸フルプレディニン、フルプレドニゾロン、フルランドレノライド、プロピオン酸フルチカゾン、腸内細菌、プロピオン酸ハロベタゾール、ハロシノニド、ハロメタゾン、ヒドロコルチゾン、ロテプレドノールエタボネート、マジペドン、メドリゾン、メプレドニゾン、モメタゾンフロエート、パラメタゾン、プレドニゾロン、デキサメタゾン、および２５−ジエチルアミノアセテートである。
特定の実施例において、本開示の化合物は、ベラパミル、ラパマイシン、ミコフェニレートモフェチル、サリドマイド、シクロホスファミド、シクロスポリン、およびモノクローナル抗体などのＭＤＲモジュレータを含む免疫療法剤と同時に投与される。
【００７８】
実施例
以下は本明細書に開示されるトリペプチドエポキシケトン、その合成、プロテアソーム活性阻害特性、抗腫瘍活性特性およびそれらの水溶性の例である。
【００７９】
本明細書で提供される化合物の合成は以下の例における合成スキームで示される。これらのスキームは本明細書で提供される化合物の調製のみを示し、他の可能な方法を限定することではない。さらに、スキームのステップはよりよく説明するためであり、必要に応じて変更することができる。例における化合物の実施例は研究の目的で海外で合成されかつ規制当局に提出する可能性がある。
一般的な実験方法については、１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは化合物の構造に関する情報を得るために用いられる。液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣ−ＭＳ）は陽性エレクトロスプレーイオン化モード（ＥＳＩ）で動作する四重極質量分析計システムを使用して実施する。純度はＵＶ検出を用いた高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によってチェックされる。分取高速液体クロマトグラフィー（分取ＨＰＬＣ）分離は必要に応じて精製するために用いられる。
【００８０】
実施例１
化合物ＣＸ１３−１０３の合成
【化２２】
0006608442.tif 000028
【００８１】
Ｃ１０３−２の合成
０℃でＳＯＣｌ２（５ｍＬ）をＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）に滴下する。続いて、Ｃ１０３−１（１０ｇ、４２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を還流下で一晩加熱する。室温に冷却した後、混合物を濃縮し、かつ真空で乾燥し、純粋な生成物Ｃ１０３−２（１１ｇ、定量）を得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１８１［Ｍ  ＋  Ｈ］＋。
【００８２】
Ｃ１０３−６の合成
ＣＣｌ４（２５０ｍＬ）中のＣ１０３−５（７．０５ｇ、５０ｍｍｏｌ）溶液に、ＮＢＳ（１１．５ｇ、６５ｍｍｏｌ）とＡＩＢＮ（８２０ｍｇ、５ｍｍｏｌ）を加える。反応混合物を還流下で一晩加熱する。室温に冷却した後、反応混合物を水に注ぎ、水層をＤＣＭで二回抽出する。組み合わせた層を飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、かつ真空中で濃縮する。残留油状物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーにより精製してＣ１０３−６（５．５６ｇ、収率５１％）を得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２２１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８３】
Ｃ１０３−７の合成
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のモルヒネ（４．８ｇ、５５ｍｍｏｌ）の冷却（０℃）溶液に、ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のＣ１０３−６（５．５６ｇ、２５．５ｍｍｏｌ）の溶液を滴下する。反応混合物を０℃で３０分間撹拌する。反応混合物を水に注ぎ、水層をＥｔＯＡｃで二回抽出する。組み合わせた層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、かつ真空中で濃縮する。残留油状物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーにより精製してＣ１０３−７（４．０３ｇ、収率７０％）を得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２２７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８４】
Ｃ１０３−８の合成
ＴＨＦ（３０ｍＬ）とＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中のＣ１０３−７（４ｇ、１７．７ｍｍｏｌ）の冷却（０℃）溶液に、２Ｎ  ＬｉＯＨ（１３ｍＬ、２６ｍｍｏｌ）を加える。得られた混合物を室温で１時間撹拌する。塩酸塩を加えてｐＨを５に調整し、かつ混合物を真空で濃縮する。残渣をクロマトグラフィーにより精製してＣ１０３−８（２．６５ｇ、収率７１％）を得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２１３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８５】
Ｃ１０３−１０の合成
ＤＭＦ（８０ｍＬ）中のＣ１０３−９（５．８１ｇ、２０．８ｍｍｏｌ）の冷却（０℃）溶液に、ＨＡＴＵ（８．３ｇ、２１．８ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（１４．３ｍＬ、８５ｍｍｏｌ）を加える。混合物を０℃で３０分間撹拌する。続いて、Ｃ１０３−２（５．２２ｇ、２０．８ｍｍｏｌ）を加える。得られた溶液を窒素下で室温で１時間撹拌する。反応混合物を水に注ぎ、かつＥｔＯＡｃで二回抽出する。組み合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、かつ真空で濃縮する。残留油状物を分取ＨＰＬＣにより精製してＣ１０３−１０（７．９ｇ、収率８６％）を得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４４２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８６】
Ｃ１０３−１１の合成
ＤＣＭ（４０ｍＬ）中のＣ１０３−１０（７．９ｇ、１７．９ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（１０ｍＬ）を０℃で徐々に添加する。続いて、反応混合物を室温で１時間撹拌する。真空で濃縮して粗生成物を得、これをさらに精製することなく次の工程に使用する。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３４２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８７】
Ｃ１０３−１２の合成
ＤＭＦ（５０ｍＬ）中のＣ１０３−８（２．６５ｇ、１２．５ｍｍｏｌ）の冷却（０℃）溶液に、ＨＡＴＵ（６．１８ｇ、１６．２５ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（１０ｍＬ、６０ｍｍｏｌ）を加える。混合物を０℃で３０分間撹拌する。Ｃ１０３−１１を加える。得られた溶液を窒素下で室温で１時間撹拌する。反応混合物を水に注ぎ、ＥｔＯＡｃで二回抽出する。組み合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、かつ真空で濃縮する。残留油状物をクロマトグラフィーで精製し、Ｃ１０３−１２（５．３ｇ、収率７９％）を得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５３６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８８】
Ｃ１０３−１３の合成
ＴＨＦ（３０ｍＬ）とＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中のＣ１０３−１２（５．３ｇ、９．８８ｍｍｏｌ）の冷却（０℃）溶液に、２Ｎ  ＬｉＯＨ（７．５ｍＬ、１６ｍｍｏｌ）を加える。得られた混合物を室温で１時間撹拌する。塩酸塩を加えてｐＨを５に調整し、かつ真空で濃縮する。残渣をクロマトグラフィーで精製し、Ｃ１０３−１３（３．４ｇ、収率６６％）を得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５２２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８９】
ＣＸ１３−１０３の合成
ＤＭＦ（２０ｍＬ）中のＣ１０３−１３（３．４ｇ、６．５３ｍｍｏｌ）の冷却（０℃）溶液に、ＨＡＴＵ（３．２３ｇ、８．５ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（５ｍＬ、３０ｍｍｏｌ）を加える。混合物を０℃で３０分間撹拌する。続いて、Ｃ１０３−４（Ｃ１０３−４の合成についてはＰＣＴ特許出願ＰＣＴ／ＵＳ２０１３／０５２１４３を参照する）を加える。得られた溶液を窒素下で室温で１時間撹拌する。反応混合物を水に注ぎ、ＥｔＯＡｃで二回抽出する。組み合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、かつ真空で濃縮する。残留油状物を分取ＨＰＬＣにより精製し、ＣＸ１３−１０３（１．１２ｇ、収率２５％）を得る。
【００９０】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、メタノール−ｄ４）δ８．３７（ｄ、２Ｈ）、７．３２（ｄ、２Ｈ）、７．２９−７．２５（ｍ、２Ｈ）、７．２０−７．１８（ｍ、３Ｈ）、６．７１（ｓ、１Ｈ）、４．７７（ｄｄ、１Ｈ）、４．５６−４．５１（ｍ、２Ｈ）、３．８２（ｓ、２Ｈ）、３．７４−３．７２（ｍ、４Ｈ）、３．２５（ｄ、１Ｈ）、３．２３（ｄｄ、１Ｈ）、３．０１（ｄｄ、１Ｈ）、２．９５（ｄ、１Ｈ）、２．７０−２．５０（ｍ、６Ｈ）、２．２０−１．９５（ｍ、２Ｈ）、１．８０−１．６０（ｍ、１Ｈ）、１．５２−１．２０（ｍ、５Ｈ）、０．９１（ｄ、３Ｈ）、０．８９（ｄ、３Ｈ）、ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６７５［Ｍ＋Ｈ］＋、純度＞９５％である。
例２
【００９１】
化合物ＣＸ１３−１０４の合成
中間体Ｃ１０４−７の合成
【化２３】
0006608442.tif 000029
【００９２】
Ｃ１０４−１の合成
９．６ｇ（４０ｍｍｏｌ）のＬ−３−（４−ピリジル）アラニン−２ＨＣｌに２００ｍｌの１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液と２００ｍｌのＴＨＦを加える。撹拌しながら、２０ｍｌのジ−ｔ−ブチルジカーボネートを滴加し、かつ混合物を２時間撹拌する。得られた反応混合物に３００ｍｌの水を加え、得られた混合物を酢酸エチル（２×２００ｍｌ）で洗浄する。水層に５％硫酸水素カリウム水溶液を加えてｐＨを約４に調整した後、混合物をｎ−ブタノール（４×２００ｍｌ）で抽出する。有機層を減圧下で濃縮する。固体を濾過により回収し、乾燥させて８．０ｇのＣ１０４−１を白色固体として得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２６７．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９３】
Ｃ１０４−０２の合成
８．０ｇ（３０ｍｍｏｌ）のＣ１０４−１をＤＭＦ（１００ｍｌ）に室温で溶解し、かつ４℃に冷却する。Ｎ、Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（４．４ｇ、４５ｍｍｏｌ）を加え、続いてＨＢＴＵ（１７ｇ、４５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（６．１ｇ、４５ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（１２ｍｌ、９０ｍｍｏｌ）を加える。反応物を徐々に室温まで温め、かつ一晩撹拌した後、ＥｔＯＡｃ（３００ｍｌ）で希釈し、かつ飽和塩化ナトリウム（２×１００ｍｌ）で洗浄し続ける。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、かつ減圧下で濃縮する。カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ（１％ＴＥＡ））により精製し、化合物Ｃ１０４−２を黄色油状物（６．２ｇ、６６％）として得る。ＭＳ  ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３１０．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９４】
Ｃ１０４−３の合成
化合物Ｃ１０４−２（６．２ｇ、２０ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２００ｍｌ）に溶解し、かつ０℃（氷＋ブライン）に冷却する。イソプロペニルマグネシウムブロミド（ＴＨＦ０．５Ｍ、２００ｍｌ、１００ｍｍｏｌ）を２０分かけて徐々に加える。反応物を０℃で４時間撹拌した後、０℃で飽和塩化アンモニウム水溶液に徐々に注ぐ。ＴＨＦを減圧下で除去し、かつ混合物をＥｔＯＡｃ（３×１００ｍｌ）で抽出する。続いて、組み合わせた有機層を飽和重炭酸ナトリウム、水と飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、かつ減圧下で濃縮する。カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ（１％ＴＥＡ））により精製し、化合物３を黄色油状物（５．０ｇ、８６％）として得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２９１．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９５】
Ｃ１０４−４の合成
化合物Ｃ１０４−３（５．０ｇ、１７ｍｍｏｌ）をメタノール（１００ｍｌ）に溶解し、かつ０℃に冷却する。塩化セリウム（ＩＩＩ）七水和物（８．２ｇ、２２ｍｍｏｌ）を加え、続いて水素化ホウ素ナトリウム（０．８５ｇ、２２ｍｍｏｌ）を加える。反応混合物を０℃で３時間撹拌する。混合物を０℃で飽和塩化アンモニウム水溶液（２００ｍｌ）に徐々に注ぎ、かつＥｔＯＡｃ（４×１００ｍｌ）で抽出する。続いて、組み合わせた有機層を飽和重炭酸ナトリウム、水とマリンで洗浄する。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、かつ減圧下で濃縮する。カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ（１％ＴＥＡ））により精製し、Ｃ１０４−４を黄色固体（４．５ｇ、９０％）として得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２９３．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９６】
Ｃ１０４−５の合成
化合物Ｃ１０４−４（４．５ｇ、１５ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１００ｍｌ）に溶解し、かつ０℃に冷却する。バナジルアセチルアセトネート（０．１２ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）を加え、続いてｔｅｒｔ−ブチルヒドロペルオキシド（デカン５．０−６．０Ｍ、１２ｍｌ、６０ｍｍｏｌ）を加える。反応物を室温まで徐々に一晩温める。続いて、混合物を飽和重炭酸ナトリウム、水とマリンで洗浄する。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、かつ減圧下で濃縮してＣ１０４−５を得、これを精製することなく次の工程で使用する。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３０９．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９７】
Ｃ１０４−６の合成
化合物Ｃ１０４−５（４．５ｇ、１５ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１００ｍｌ）に溶解し、かつ０℃に冷却する。デス−マーチンペルヨージナン（１３ｇ、３０ｍｍｏｌ）を加える。反応物を室温まで徐々に温め、２４時間放置する。続いて、混合物を４℃に冷却し、さらにデス−マーチンペルヨージナン（６．４ｇ、１５ｍｍｏｌ）を加える。溶液を徐々に室温まで温める。３時間後、混合物をセライトで濾過し、濾液を飽和亜硫酸水素ナトリウム、飽和重炭酸ナトリウム、水とマリンで洗浄する。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、かつ減圧下で濃縮する。カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ（２％ＭｅＯＨ））により精製し、化合物Ｃ１０４−６（０．３５ｇ、７．５％）を褐色油状物として得る。１Ｈ−ＮＭＲ（クロロホルム−ｄ）δ（ｐｐｍ）：８．３７−８．６１（ｍ、２Ｈ）、７．１３（ｄ、Ｊ＝５．２Ｈｚ、２Ｈ）、５．１３（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．６１（ｄ、１Ｈ）、３．１９（ｄ、１Ｈ）、２．６８−２．９０（ｍ、３Ｈ）、１．５４（ｓ、３Ｈ）、１．３９（ｓ、９Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３０７．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９８】
Ｃ１０４−７の合成
化合物Ｃ１０４−６（１．３ｇ、４．２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５０ｍｌ）に溶解し、かつ０℃に冷却する。ＴＦＡ（５０ｍｌ）を加える。反応物を徐々に室温まで温める。混合物を減圧下で濃縮してＣ１０４−７をＴＦＡ塩として得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２０７．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９９】
【化２４】
0006608442.tif 000030
【０１００】
Ｃ１０４−８の合成
（Ｓ）−２−アミノ−４−フェニルブタン酸（５．０ｇ、２８ｍｍｏｌ）、ベンジルアルコール（６．０ｇ、５５ｍｍｏｌ）、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（９．５ｇ、５５ｍｍｏｌ）およびトルエン（２００ｍＬ）の混合物をディーンスタークトラップでディーンスターク装置より１６時間加熱する。ベンゼン溶液を５％ＮａＨＣＯ３水溶液、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、かつ減圧下で蒸発かつ乾固する。残渣をヘキサン中で結晶化させてＣ１０４−８（９．０ｇ、８０％）を無色針状晶として得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２７０．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１０１】
Ｃ１０４−９の合成
ＤＭＦ（２０ｍＬ）中のＣ１０３−８（１．８ｇ、８．５ｍｍｏｌ）、Ｃ１０４−８（３．７ｇ、８．５ｍｍｏｌ）のＨＢＴＵ（４．８ｇ、１３ｍｍｏｌ）の混合物に添加漏斗を介してＤＩＥＡ（３ｍＬ）を徐々に加える。反応物を同じ温度で１６時間維持し、続いてＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）とブライン（２０ｍＬ）で希釈する。層を分離し、かつ水層をＥｔＯＡｃ（２×３０ｍＬ）で抽出する。有機層を組み合わせ、かつＮａ２ＳＯ４で乾燥させる。固体を濾過により除去し、揮発性物質を減圧下で除去し、かつシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝５：１）により精製してＣ１０４−９（２．４ｇ、収率６１％）を白色固体として得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４６３．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１０２】
Ｃ１０４−１０の合成
ＴＨＦ中のＣ１０４−９（２．４ｇ）にＰｄ／Ｃ（０．２４ｇ）を加え、Ｈ２雰囲気下で２時間撹拌する。混合物を濾過かつ濃縮して生成物１０４−５を得、これを精製することなく次の工程に使用する。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３７４．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１０３】
Ｃ１０４−１１の合成
ＤＭＦ（２０ｍＬ）中のＣ１０４−１０（１．８ｇ、８．５ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−ベンジル２−アミノ−４−メチルペンタン酸エチル（１．９ｇ、８．５ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（４．８ｇ、１３ｍｍｏｌ）に添加漏斗を介してＤＩＥＡ（３ｍＬ）を徐々に加える。反応物を室温で１６時間維持し、続いてＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）とブライン（２０ｍＬ）で希釈する。水層をＥｔＯＡｃ（２×３０ｍＬ）で抽出する。有機層を組み合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。固体を濾過により除去し、揮発性物質を減圧下で除去し、かつシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝５：１）により精製し、１０４−１１（２．４ｇ、収率６１％）を白色固体として得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５７７．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１０４】
Ｃ１０４−１２の合成
ＴＨＦ中のＣ１０４−１１（２．４グラム）にＰｄ／Ｃ（０２４ｇ）を加える。混合物をＨ２雰囲気下で２時間撹拌し、濾過かつ濃縮して生成物Ｃ１０４−１２を得、これを精製することなく次の工程に使用する。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４８７．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１０５】
ＣＸ１３−１０４の合成
ＴＨＦ（５ｍＬ）中のＣ１０４−１２（０．４０ｇ、０．８２ｍｍｏｌ）、Ｃ１０４−７（０．１７ｇ、０．８２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０．２０ｇ  １．５ｍｍｏｌ）とＨＢＴＵ（０．５６ｇ、１．５ｍｍｏｌ）の混合物を−５℃に維持し、かつＤＩＥＡ（１ｍＬ）を加える。反応物を−５℃で０．５時間維持し、続いてＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）とブライン（１０ｍＬ）で希釈する。層を分離し、かつ水層をＥｔＯＡｃ（２×５ｍＬ）で抽出する。有機層を組み合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。固体を濾過により除去し、揮発性物質を減圧下で除去する。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝５０：１）と分取ＨＰＬＣにより精製し、かつ化合物ＣＸ１３−１０４（５０ｍｇ、６．２％）を得る。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、メタノール−ｄ４）δ（ｐｐｍ）：０．８８−０．９９（ｍ、７Ｈ）  １．２６−１．３５（ｍ、２Ｈ）  １．４０−１．４７（ｍ、１Ｈ）  １．４９−１．５５（ｍ、４Ｈ）  １．６４（ｄ、Ｊ＝６．４５Ｈｚ、１Ｈ）  １．９８−２．１８（ｍ、２Ｈ）  ２．５３−２．６７（ｍ、６Ｈ）  ２．７９（ｄｄ、Ｊ＝１３．９７，９．９４Ｈｚ、１Ｈ）  ２．９９（ｄ、Ｊ＝４．８４Ｈｚ、１Ｈ）  ３．１８（ｄｄ、Ｊ＝１４．１０，３．６３Ｈｚ、１Ｈ）  ３．３０（ｓ、１Ｈ）  ３．６７−３．７７（ｍ、４Ｈ）  ３．７９−３．８７（ｍ、２Ｈ）  ４．４２（ｄｄ、Ｊ＝８．７３，６．３１Ｈｚ、１Ｈ）  ４．５３（ｄｄ、Ｊ＝８．３３，５．６４Ｈｚ、１Ｈ）  ４．７９（ｄｄ、Ｊ＝９．８１，３．６３Ｈｚ、１Ｈ）  ６．７３（ｓ、１Ｈ）  ７．１６−７．２２（ｍ、３Ｈ）  ７．２２−７．３２（ｍ、３Ｈ）  ７．３７（ｄ、Ｊ＝５．９１Ｈｚ、２Ｈ）  ８．４０（ｄ、Ｊ＝５．３７Ｈｚ、２Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６７５．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１０６】
実施例３
化合物ＣＸ１３−１０５の合成
【化２５】
0006608442.tif 000031
【０１０７】
Ｃ１０５−２の合成
ＤＭＦ（４０ｍＬ）中のＣ１０５−１（１０ｇ、３３．２ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（８．３ｇ、４３．２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（７ｇ、５１．１ｍｍｏｌ）の冷却（０℃）溶液にＤＩＥＡ（１４．３ｍＬ、８５．２ミリモル）を加える。混合物を０℃で３０分間撹拌し、続いてＮ、Ｏ−ジメチル−ヒドロキシルアミン塩酸塩（３．２ｇ、３３．２ｍｍｏｌ）を加える。得られた溶液を窒素下で室温で１時間撹拌する。反応混合物を水に注ぎ、ＥｔＯＡｃで二回抽出する。組み合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、かつ真空で濃縮する。残留油状物をシリカゲルカラムで精製し、標記化合物Ｃ１０５−２（８．０ｇ、収率７２．７％）を得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３４３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１０８】
Ｃ１０５−３の合成
ＴＨＦ（５０ｍＬ）中のＣ１０５−２（８ｇ、２３．２ｍｍｏｌ）の冷却（０℃）溶液に０℃でイソプロペニルマグネシウムブロミド（ＴＨＦにおける０．５Ｍ、２００ｍＬ、１００ｍｍｏｌ）を加える。得られた混合物を０℃で３時間撹拌する。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液に徐々に注ぐ。濃ＨＣｌを用いて溶液のｐＨを１．５に調整する。混合物をＥｔＯＡｃで抽出する。組み合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、かつ真空で濃縮する。残留油状物をシリカゲルカラムで精製し、標記化合物Ｃ１０５−３（５．８ｇ、収率７７％）を得る。
【０１０９】
Ｃ１０５−４の合成
ＭｅＯＨ（ｍＬ）とＴＨＦ（２０ｍＬ）中のＣ１０５−３（５．８ｇ、１８ｍｍｏｌ）の冷却（０℃）溶液にＮａＢＨ４（１．２１ｇ、３１．８ｍｍｏｌ）とＣｅＣｌ３・７Ｈ２Ｏ（１１．８ｇ、３１．８ｍｍｏｌ）を０℃で加える。得られた溶液を０℃で窒素下で３時間撹拌する。水（５ｍＬ）を加えて反応をクエンチする。真空で全ての揮発性物質を除去した後、残留物をＥｔＯＡｃで抽出する。組み合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、かつ真空で濃縮する。残留油状物をシリカゲルカラムで精製して標記化合物Ｃ１０５−４（４．３７ｇ、収率７２％）を得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３２６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１０】
Ｃ１０５−５の合成
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中のＣ１０５−４（４．３７ｇ、１３．４ｍｍｏｌ）の冷却（０℃）溶液にＶｏ（ａｃａｃ）２（３４４ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）とｔ−ＢｕＯ２Ｈ（デカン５．５Ｍ、２．６ｍＬ、１４．３ｍｍｏｌ）を加える。得られた混合物を室温で２時間撹拌する。水（５ｍＬ）を加えて反応をクエンチする。得られた混合物をセライトで濾過する。水層をＤＣＭで抽出する。組み合わせた有機層を亜硫酸水素ナトリウム水溶液とブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、かつ真空で濃縮する。残留油状物をさらに精製することなく次の工程に使用する。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３４２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１１】
Ｃ１０５−６の合成
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中のＣ１０５−５の冷却（０℃）溶液にデス−マーチンペルヨージナン（１３ｇ、３２．５ｍｍｏｌ）を加える。得られた混合物を室温で１時間撹拌する。得られた混合物をセライトで濾過し、濾過したケーキをＤＣＭで二回洗浄する。組み合わせた有機層を亜硫酸水素ナトリウム水溶液、飽和重炭酸ナトリウム塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、かつ真空で濃縮する。残留油状物をシリカゲルカラムで精製し、標記化合物Ｃ１０５−６（２ｇ、収率２９％）を得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３４０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１２】
Ｃ１０５−７の合成
ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）とＴＦＡ（１ｍＬ）中のＣ１０５−６（２ｇ、５．８８ｍｍｏｌ）の冷却（０℃）溶液にパラジウム炭素（４００ｍｇ、４０％ｗｔ）を加える。懸濁液を水素雰囲気（３．５ａｔｍ）で０℃で６時間撹拌し、続いて反応混合物をセライトで濾過する。濾液を真空で濃縮して所望の粗生成物を得、これをさらに精製することなく次の工程に使用する。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２０６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１３】
ＣＸ１３−１０５の合成
ＤＭＦ（５ｍＬ）中のＣ１０４−７（３１１ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（４２２ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）の冷却（０℃）溶液にＤＩＥＡ（０．６２ｍＬ、３．７ｍｍｏｌ）を加える。混合物を０℃で３０分間撹拌する。ＤＣＭ（２ｍＬ）中のＣ１０５−７の溶液を加える。得られた溶液を窒素下で室温で１時間撹拌する。反応混合物を水に注ぎ、かつＥｔＯＡｃで二回抽出する。組み合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、かつ真空で濃縮する。残留油状物を分取ＨＰＬＣで精製してＣＸ１３−１０５（７０ｍｇ、収率１６％）を得る。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、メタノール−ｄ４）δ７．３２−７．０９（ｍ、１０Ｈ）、６．７２（ｓ、１Ｈ）、４．７６（ｄｄ、１Ｈ）、４．５５（ｄｄ、１Ｈ）、４．４６（ｄｄ、１Ｈ）、３．８３（ｓ、２Ｈ）、３．７３−３．７１（ｍ、４Ｈ）、３．２８（ｄ、１Ｈ）、３．１１（ｄｄ、１Ｈ）、２．９４（ｄ、１Ｈ）、２．７６−２．６０（ｍ、３Ｈ）、２．５９−２．５５（ｍ、４Ｈ）、２．１１−２．０２（ｍ、２Ｈ）、１．６５−１．６１（ｍ、１Ｈ）、１．５４−１．５１（ｍ、２Ｈ）、１．４５（ｓ、３Ｈ）、０．９４（ｄ、３Ｈ）、０．９０（ｄ、３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６７４［Ｍ＋Ｈ］＋。純度＞９５％である。
【０１１４】
実施例４
化合物ＣＸ１３−１０７の合成
【化２６】
0006608442.tif 000032
【０１１５】
Ｃ１０７−３の合成
ＤＭＦ（４０ｍＬ）中のＣ１０７−１（１０ｇ、３５．８ｍｍｏｌ）の冷却（０℃）溶液にＥＤＣＩ（８．５ｇ、４４．３ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（７ｇ、５１．１ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（１４．３ｍＬ、８５．２ｍｍｏｌ）を加える。混合物を０℃で３０分間撹拌し、続いてＣ１０７−２（６．２ｇ、３４．１ｍｍｏｌ）を加える。得られた溶液を窒素下で室温で１時間撹拌する。反応混合物を水に注ぎ、ＥｔＯＡｃで二回抽出する。組み合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、かつ真空で濃縮する。残留油状物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーで精製してＣ１０７−３（１３．５ｇ、収率９７．８％）を得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３５１［Ｍ＋Ｈ−５５］＋。
【０１１６】
Ｃ１０７−４の合成
ＤＣＭ（５０ｍＬ）中のＣ１０７−３（１３．５ｇ、３３．３ｍｍｏｌ）の冷却（０℃）溶液にＴＦＡ（２０ｍＬ）を加える。反応混合物を室温で１時間撹拌する。真空で濃縮して粗生成物を得、これをさらに精製することなく次の工程に使用する。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３０７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１７】
Ｃ１０７−６の合成
ＤＭＦ（２０ｍＬ）中のＣ１０７−５（１．８ｇ、１２．４ｍｍｏｌ）の冷却（０℃）溶液にＨＡＴＵ（５．８ｇ、１５．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（１０ｍＬ、６０ｍｍｏｌ）を加える。混合物を０℃で３０分間撹拌する。続いて、Ｃ１０７−４を加える。得られた溶液を窒素下で室温で１時間撹拌する。反応混合物を水に注ぎ、ＥｔＯＡｃで二回抽出する。組み合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、かつ真空で濃縮する。残留油状物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーで精製してＣ１０７−６（４．５ｇ、収率８８％）を得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４３４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１８】
Ｃ１０７−７の合成
ＴＨＦ（１０ｍＬ）とＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中のＣ１０７−６（４．５ｇ、１０．１ｍｍｏｌ）の冷却（０℃）溶液に２Ｎ  ＬｉＯＨ（１０ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）を加える。得られた混合物を室温で１時間撹拌する。塩酸塩の添加によりｐＨを５に調整する。得られた固体を集め、水で洗浄し、かつ真空下で乾燥させ、標記化合物（３．８ｇ、収率９０％）を得る。
【０１１９】
ＣＸ１３−１０７の合成
ＤＭＦ（５ｍＬ）中のＣ１０７−７（３１１ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（４４５ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（０．５ｍＬ、２．２ｍｍｏｌ）の溶液に０℃で３０分間撹拌したＣ１０５−７を加える。得られた溶液を窒素下で室温で１時間撹拌する。反応混合物を水に注ぎ、ＥｔＯＡｃで二回抽出する。組み合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、かつ真空で濃縮する。残留油状物を分取ＨＰＬＣにより精製して（７０ｍｇ、収率１６％）を得る。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、メタノール−ｄ４）、δ７．２０−６．９８（ｍ、１０Ｈ）、４．６７（ｄｄ、１Ｈ）、４．３６−４．３１（ｍ、２Ｈ）、３．６８−３．６２（ｍ、４Ｈ）、３．２１（ｄ、１Ｈ）、３．０２（ｄｄ、１Ｈ）、２．９６（ｄｄ、２Ｈ）、２．８５（ｄ、１Ｈ）、２．６３（ｄｄ、１Ｈ）、２．５０−２．４０（ｍ、６Ｈ）、１．９６−１．７８（ｍ、２Ｈ）、１．５５−１．４３（ｍ、１Ｈ）、１．４３−１．３６（ｍ、２Ｈ）、１．２２（ｓ、３Ｈ）、０．８５（ｄ、３Ｈ）、０．８１（ｄ、３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６０７［Ｍ＋Ｈ］＋。純度＞９５％である。
【０１２０】
実施例５
化合物ＣＸ１３−１３０の合成
【化２７】
0006608442.tif 000033
【０１２１】
Ｃ１３０−２の合成
ＤＭＦ（３０ｍＬ）中の化合物Ｃ１３０−１（１．５ｇ、５．４ｍｍｏｌ）の混合物に（Ｓ）−ベンジル２−アミノ−３−（ピリジン−４−イル）プロパン酸エチル（１．３８ｇ、５．４ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（３．１ｇ、８．１ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（４ｍＬ）を室温で加える。反応物を同じ温度で１６時間維持し、続いてＥｔＯＡｃ（８０ｍＬ）とブライン（４０ｍＬ）で希釈する。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×４０ｍＬ）で抽出する。有機層を組み合わせ、かつＮａ２ＳＯ４で乾燥させる。固体を濾過により除去し、揮発性物質を減圧下で除去し、かつシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝１０：１）により精製して化合物１３０−２（２．０ｇ、収率７２％）を白色固体として得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５１８．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１２２】
Ｃ１３０−３の合成
ＴＨＦ（２５ｍＬ）中の化合物Ｃ１３０−２（１．５ｇ、２．９ｍｍｏｌ）にＰｄ／Ｃ（０．１５ｇ、炭素中１０％）を加え、かつ混合物をＨ２雰囲気下で５０℃で１６時間撹拌する。混合物を濾過し、かつ濃縮して化合物Ｃ１３０−３（１１００ｍｇ、収率９０％）を得、これを精製することなく次の工程に使用する。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４２８．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１２３】
Ｃ１３０−４の合成
ＤＭＦ（１５ｍＬ）中の化合物Ｃ１３０−３（１．１ｇ、２．６ｍｍｏｌ）の混合物に（Ｓ）−２−アミノ−４−メチル−１−（（Ｒ）−２−メチルオキシラン−２−イル−（０．６９ｇ、２．６ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１．５ｇ、３．９ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０．５３ｇ、３．９ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（２ｍＬ）を加える。反応物を室温で１６時間撹拌し、続いてＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ）とブライン（２０ｍＬ）で希釈する。層を分離し、かつ水層をＥｔＯＡｃ（２×３０ｍＬ）で抽出する。有機層を組み合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。固体を濾過により除去し、揮発性物質を減圧下で除去し、かつシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝１：１）により精製して化合物Ｃ１３０−４（５１０ｍｇ、収率３４％）を白色固体として得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５８１．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１２４】
Ｃ１３０−５の合成
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の化合物Ｃ１３０−４（５１０ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）の混合物に０℃でＴＦＡ（４ｍＬ）を加える。反応物を０℃で２時間維持し、かつ揮発性物質を減圧下で除去して化合物１３０−５（５００ｍｇ、１００％収率）を白色固体として得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４８１．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１２５】
ＣＸ１３−１３０の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の化合物Ｃ１３０−５（１１０ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）の混合物に酢酸（１４ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１０８ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（３９ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．２ｍＬ）を室温で加える。反応物を室温で１６時間維持し、続いてＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）とブライン（１０ｍＬ）で希釈する。層を分離し、かつ水層をＥｔＯＡｃ（２×２０ｍＬ）で抽出する。有機層を組み合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。固体を濾過により除去し、揮発性物質を減圧下で除去し、かつシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝４０：１）と分取ＨＰＬＣにより精製してＣＸ１３−１３０（２５ｍｇ、２１％）を白色固体として得る。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．５０（ｓ、２Ｈ）、７．３８−７．２５（ｍ、４Ｈ）、７．２１（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．１７（ｔ、Ｊ＝１０．３Ｈｚ、３Ｈ）、６．８３（ｄ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．１９（ｄ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．８１（ｄｄ、Ｊ＝１３．９、７．７Ｈｚ、１Ｈ）、４．５７（ｔ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．３８（ｄｄ、Ｊ＝１４．０、７．３Ｈｚ、１Ｈ）、３．２５（ｄｄ、Ｊ＝１６．９、５．１Ｈｚ、２Ｈ）、３．０５（ｄｄ、Ｊ＝１４．２、８．２Ｈｚ、１Ｈ）、２．９２（ｄ、Ｊ＝４．９Ｈｚ、１Ｈ）、２．６５（ｄｄ、Ｊ＝１４．７、６．３Ｈｚ、２Ｈ）、２．１３（ｄｄ、Ｊ＝１４．１、７．５Ｈｚ、２Ｈ）、１．９３（ｓ、４Ｈ）、１．６７−１．４７（ｍ、５Ｈ）、１．３０（ｄｄ、Ｊ＝１６．６、６．８Ｈｚ、２Ｈ）、０．９２（ｄｄ、Ｊ＝８．９、６．５Ｈｚ、６Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５２３．７（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１２６】
実施例６
化合物ＣＸ１３−１３３の合成
【化２８】
0006608442.tif 000034
【０１２７】
Ｃ１３３−２の合成
ＭｅＣＮ（２０ｍＬ）中のモルホリン（４５６ｍｇ、５．６ｍｍｏｌ）の溶液に室温でＫ２ＣＯ３（８４１ｍｇ、６．１ｍｍｏｌ）とＣ１３３−１（１ｇ、４．７ｍｍｏｌ）を加える。混合物を５０℃で４時間撹拌する。固体を濾過により除去し、揮発性物質を減圧下で除去し、かつシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝４：１）により精製して化合物Ｃ１３３−２（１．０ｇ、８１％収率）を無色油状物として得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２６４．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１２８】
Ｃ１３３−３の合成
ＴＨＦ（１６ｍＬ）と水（８ｍＬ）中の化合物Ｃ１３３−２（１０００ｍｇ、３．８ｍｍｏｌ）の溶液に室温でＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（４７７ｍｇ、１１．４ｍｍｏｌ）を加える。混合物を室温で１６時間撹拌する。続いて、混合物をＰＨ＝５に酸性化し、濃縮し、かつクロマトグラフィーにより精製してＣ１３３−３（７５０ｍｇ、８４％収率）を白色固体として得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２３６．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１２９】
ＣＸ１３−１３３の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中のＣ１３０−５（１１０ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）の混合物に１３３−３（５４ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１０８ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（３９ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．２ｍＬ）を室温で加える。反応物を室温で１６時間維持し、続いてＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）とブライン（１０ｍＬ）で希釈する。層を分離し、かつ水層をＥｔＯＡｃ（２×２０ｍＬ）で抽出する。有機層を組み合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。固体を濾過により除去し、揮発性物質を減圧下で除去し、かつシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝４０：１）と分取ＨＰＬＣにより精製してＣＸ１３−１３３（５５ｍｇ、４１％）を白色固体として得る。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、メタノール−ｄ４）δｐｐｍ  ０．８６−１．０１（ｄｄ、６Ｈ）  １．４３（ｔ、Ｊ＝６．９８Ｈｚ、４Ｈ）  １．４７−１．６４（ｍ、１Ｈ）  １．８８−１．９６（ｍ、２Ｈ）  ２．５６（ｍ、６Ｈ）  ２．９６（ｍ、９．９４Ｈｚ、２Ｈ）  ３．１８（ｄｄ、Ｊ＝９．９４Ｈｚ、１Ｈ）  ３．２２（ｄ、Ｊ＝５．２Ｈｚ、１Ｈ）  ３．４−３．６（ｍ、４Ｈ）  ３．６−３．６６（ｍ、４Ｈ）  ４．２６−４．２８（ｍ、１Ｈ）  ４．４６（ｄ、Ｊ＝４．８４  １Ｈ）  ４．７１−４．７５（ｍ、１Ｈ）  ７．０６（ｄ、Ｊ＝５．２Ｈｚ、１Ｈ）  ７．１６−７．２０（ｍ、１Ｈ）  ７．２０−７．２４（ｍ、２Ｈ）  ７．２６−７．３２（ｍ、２Ｈ）  ７．３４（ｓ、４Ｈ）  ８．３６−８．３８（ｍ、２Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６９８．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１３０】
実施例７
化合物ＣＸ１３−１３５の合成
【化２９】
0006608442.tif 000035
【０１３１】
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の化合物Ｃ１３０−５（１１０ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）の混合物に５−メチルイソオキサゾール−３−カルボン酸（４０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１０８ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（３９ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．２ｍＬ）を室温で加える。反応物を室温で１６時間維持し、続いてＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）とブライン（１０ｍＬ）で希釈する。層を分離し、かつ水層をＥｔＯＡｃ（２×２０ｍＬ）で抽出する。有機層を組み合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。固体を濾過により除去し、揮発性物質を減圧下で除去し、かつシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝４０：１）と分取ＨＰＬＣにより精製してＣＸ１３−１３５（１８ｍｇ、１６％）を白色固体として得る。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．３８（ｓ、２Ｈ）、７．３５（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．３３−７．２３（ｍ、３Ｈ）、７．２０（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、１Ｈ  ）、７．１６−７．０８（ｍ、４Ｈ）、６．９６（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．６８（ｄ、Ｊ＝７．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．４３（ｄ、Ｊ＝０．７Ｈｚ、１Ｈ）、４．７５（ｄｄ、Ｊ＝１４．２、７．５Ｈｚ、１Ｈ）、４．６２−４．４３（ｍ、２Ｈ）、３．２６（ｄ、Ｊ＝４．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．１２（ｄｄ、Ｊ＝１４．１、６．２Ｈｚ、１Ｈ）、２．９８（ｄｄ、Ｊ＝１４．１、７．５Ｈｚ、１Ｈ）、２．９１（ｄ、Ｊ＝５．０Ｈｚ、１Ｈ）、２．６７（ｔ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、２Ｈ）、２．５８−２．４５（ｍ、３Ｈ）、２．２１（ｄｔ、Ｊ＝１４．０  、７．７Ｈｚ、２Ｈ）、２．０４（ｔｄ、Ｊ＝１５．６、７．９Ｈｚ、１Ｈ）、１．６４−１．４２（ｍ、５Ｈ）、１．３７−１．１６（ｍ、２Ｈ）、０．８９（ｄｄ、Ｊ＝１３．１、６．３Ｈｚ、６Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５９０．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１３２】
実施例８
化合物ＣＸ１３−１３７の合成
【化３０】
0006608442.tif 000036
【０１３３】
ＤＭＦ（２ｍＬ）中のＣ１３０−５（１１０ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）の混合物に５−メチルチアゾール−２−カルボン酸（４１ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１０８ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（３９ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．２ｍＬ）を室温で加える。反応物を室温で１６時間維持し、続いてＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）とブライン（１０ｍＬ）で希釈する。層を分離し、かつ水層をＥｔＯＡｃ（２×２０ｍＬ）で抽出する。有機層を組み合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。固体を濾過により除去し、揮発性物質を減圧下で除去し、かつクロマトグラフィーにより精製してＣＸ１３−１３７（３６ｍｇ、３１％）を白色固体として得る。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．３２（ｄ、Ｊ＝５．６Ｈｚ、２Ｈ）、８．０５（ｓ、１Ｈ）、７．４１（ｄｄ、Ｊ＝２９．１、１７．６Ｈｚ、３Ｈ）、７．２０（ｄｔ、Ｊ＝２４．４、７．１Ｈｚ、３Ｈ）、７．１３−７．０２（ｍ、３Ｈ）、４．７９（ｄｄ、Ｊ＝１３．９、８．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．７１−４．４９（ｍ、２Ｈ）、３．２５（ｄ、Ｊ＝４．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．１１（ｄｄ、Ｊ＝１３．７、５．３Ｈｚ、１Ｈ）、２．９８−２．８１（ｍ、２Ｈ）、２．７６（ｓ、３Ｈ）、２．６３（ｔ、Ｊ＝７．７Ｈｚ、２Ｈ）、２．２３−１．９３（ｍ、２Ｈ）、１．７６−１．４１（ｍ、５Ｈ）、１．３０（ｄｄｄ、Ｊ＝１４．３、８．６、４．５Ｈｚ、２Ｈ）、０．８７（ｄｄ、Ｊ＝１７．５、６．４Ｈｚ、６Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６０６．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１３４】
実施例９
化合物ＣＸ１３−６００の合成
【化３１】
0006608442.tif 000037
【０１３５】
Ｃ６００−２の合成
ＤＭＦ（３０ｍＬ）中のＣ１０４−１０（２．０ｇ、５．４ｍｍｏｌ）の混合物にＣ６００−１（１．３８ｇ、５．４ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（３．１ｇ、８．１ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（４ｍＬ）を室温で加える。反応物を室温で１６時間維持し、続いてＥｔＯＡｃ（８０ｍＬ）とブライン（４０ｍＬ）で希釈する。層を分離し、かつ水層をＥｔＯＡｃ（２×４０ｍＬ）で抽出する。有機層を組み合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。固体を濾過により除去し、揮発性物質を減圧下で除去し、かつシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝１０：１）により精製して化合物Ｃ６００−２（１．８ｇ、収率６９％）を白色固体として得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６１１．７（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１３６】
Ｃ６００−３の合成
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の化合物Ｃ６００−２（１．７７ｇ、２．９ｍｍｏｌ）にＰｄ／Ｃ（０．１５ｇ、炭素１０％）を加え、かつ混合物をＨ２雰囲気下で５０℃で１６時間撹拌する。混合物を濾過し、かつ濃縮して化合物Ｃ６００−３（１．３５ｇ、収率９０％）を得、これを精製することなく次の工程に使用する。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５２１．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１３７】
ＣＸ１３−６００の合成
ＤＭＦ（４ｍＬ）中のＣ６００−３（１５０ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）、Ｃ１０３−４（７８ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（６０ｇ、０．５１ｍｍｏｌ）とＨＢＴＵ（１６５ｇ、０．５１ｍｍｏｌ）の冷却（−５℃）溶液にＤＩＥＡ（０．２ｍＬ）を加える。反応物を−５℃で１時間維持し、続いてＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）とブライン（１０ｍＬ）で希釈する。層を分離し、かつ水層をＥｔＯＡｃ（２×１０ｍＬ）で抽出する。有機層を組み合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。固体を濾過により除去し、かつ揮発性物質を減圧下で除去する。粗製物をクロマトグラフィーにより精製して化合物ＣＸ１３−６００（９８ｍｇ、５１．０％）を得る。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．３０（ｂｒ．ｓ、１Ｈ）、７．１３−７．２８（ｍ、１０Ｈ）、６．５７−６．７３（ｍ、２Ｈ）、６．１６（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、４．６６（ｄ、Ｊ＝７．２５Ｈｚ、１Ｈ）、４．４７−４．５９（ｍ、２Ｈ）、３．５９−３．８９（ｂｒ、６Ｈ）、３．２５（ｄ、Ｊ＝５．１０Ｈｚ、１Ｈ）、３．０５（ｄｄ、Ｊ＝６．７２、３．４９Ｈｚ、２Ｈ）、２．９０（ｄ、Ｊ＝４．８４Ｈｚ、１Ｈ）、２．４８−２．７４（ｍ、６Ｈ）、２．１８−２．２９（ｍ、１Ｈ）、１．９６−２．１１（ｍ、１Ｈ）、１．５５（ｓ、３Ｈ）、１．４１−１．５４（ｍ、２Ｈ）、１．２０（ｔ、Ｊ＝９．９４Ｈｚ、１Ｈ）、０．８８（ｄｄ、Ｊ＝１３．３０，５．７８Ｈｚ、６Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６７４．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１３８】
実施例１０
ＣＸ１３−６０１の合成
【化３２】
0006608442.tif 000038
【０１３９】
Ｃ６０１−１の合成
ＤＭＦ（５０ｍＬ）中のＣ１０４−１０（５００ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−ベンジル２−アミノ−４−メチルペンタン酸（３３５ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）、ＴＢＴＵ（５１６ｍｇ、１３ｍｍｏｌ）の混合物にＤＩＥＡ（０．３ｍＬ）を漏斗により室温で徐々に加える。反応物を室温で１６時間維持し、続いてＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）とブライン（１０ｍＬ）で希釈する。層を分離し、かつ水層をＥｔＯＡｃ（２×１０ｍＬ）で抽出する。有機層を組み合わせ、かつＮａ２ＳＯ４で乾燥させる。固体を濾過により除去し、揮発性物質を減圧下で除去し、かつシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝５：１）により精製して６０１−１（６６０ｇ、収率８７％）を白色固体として得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５６５．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１４０】
Ｃ６０１−２の合成
ＴＨＦ中のＣ６０１−１（６６０ｍｇ）にＰｄ／Ｃ（６６ｍｇ）を加え、かつ混合物をＨ２雰囲気下で１２時間撹拌する。混合物を濾過し、かつ濃縮して生成物Ｃ６０１−２を得、これを精製することなく次の工程に使用する。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４７５．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１４１】
ＣＸ１３−６０１の合成
ＤＭＦ（５ｍＬ）中のＣ６０１−２（１５０ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）、Ｃ１０３−４（１０２ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（５１ｇ、０．５１ｍｍｏｌ）とＨＢＴＵ（１４４ｇ、０．５１ｍｍｏｌ）の冷却（−５℃）溶液にＤＩＥＡ（０．２ｍＬ）を加える。反応物を−５℃で１時間維持し、続いてＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ）とブライン（１５ｍＬ）で希釈する。層を分離し、かつ水層をＥｔＯＡｃ（２×１０ｍＬ）で抽出する。有機層を組み合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。固体を濾過により除去し、かつ揮発性物質を減圧下で除去する。粗製物をクロマトグラフィーにより精製して化合物ＣＸ１３−６０１（７０ｍｇ、３５．３％）を得る。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．３３（ｄ、Ｊ＝９．９４Ｈｚ、２Ｈ）、７．１７−７．２６（ｍ、３Ｈ）、６．８９（ｄ、Ｊ＝８．３３Ｈｚ、１Ｈ）、６．７４（ｄ、Ｊ＝６．７２Ｈｚ、１Ｈ）、６．６６（ｓ、１Ｈ）、４．５８−４．６７（ｍ、２Ｈ）、４．５０（ｍ、１Ｈ）、３．６９−３．８３（ｍ、７Ｈ）、３．３５−３．４７（ｍ、４Ｈ）、３．３０（ｄ、Ｊ＝４．８４Ｈｚ、１Ｈ）、２．９２（ｄ、Ｊ＝４．８４Ｈｚ、１Ｈ）、２．７６（ｔ、Ｊ＝７．９２Ｈｚ、２Ｈ）、２．４９−２．６０（ｍ、４Ｈ）、２．２４−２．３７（ｍ、１Ｈ）、２．１２（ｍ、１Ｈ）、１．５３−１．６７（ｍ、２Ｈ）、１．４９−１．５８（ｍ、４Ｈ）  ０．８９−０．９８（ｍ、６Ｈ）  ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６２８．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１４２】
実施例１１
化合物ＣＸ１３−６０３の合成
【化３３】
0006608442.tif 000039
【０１４３】
ＤＭＦ（５ｍＬ）中のＣ６０１−２（２００ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）、Ｃ１０５−７（０．１７ｇ、０．８２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（６９ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）とＨＢＴＵ（１９１ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）の冷却（−５℃）溶液にＤＩＥＡ（０．５ｍＬ）を加える。反応物を−５℃で１時間維持し、続いてＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）とブライン（１０ｍＬ）で希釈する。層を分離し、かつ水層をＥｔＯＡｃ（２×１０ｍＬ）で抽出する。有機層を組み合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。固体を濾過により除去し、揮発性物質を減圧下で除去する。粗製物をクロマトグラフィーにより精製して化合物ＣＸ１３−６０３（６０ｍｇ、２１．６％）を得る。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．３５−７．２３（ｍ、７Ｈ）、７．２２−７．１３（ｍ、４Ｈ）、７．０２（ｄ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｂ、１Ｈ）、６．６．４（ｄ、Ｊ＝６．５Ｈｚ、１Ｈ）、４．８１（ｔｄ、Ｊ＝７．６、４．９Ｈｚ、１Ｈ）、４．５８（ｄｄ、Ｊ＝１３．６、７．９Ｈｚ、１Ｈ）、４．４２（ｔｄ、Ｊ＝７．３、３．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．８５（ｂ、５Ｈ）、３．７４（ｄｄ、Ｊ＝９．１、３．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．３５（ｓ、３Ｈ）、３．３２（ｄ、Ｊ＝５．１Ｈｚ、１Ｈ）、３．１７（ｄｄ、Ｊ  ＝１４．０、４．９Ｈｚ、１Ｈ）、２．９５（ｄ、Ｊ＝４．９Ｈｚ、１Ｈ）、２．８６（ｄｄ、Ｊ＝１４．０、７．７Ｈｚ、１Ｈ）、２．７１（ｔ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、２Ｈ）、２．６３（ｂ、４Ｈ）、２．２３（ｍ、１Ｈ）、２．０７（ｍ、１Ｈ）、１．５４（ｓ、３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６６２．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１４４】
実施例１２
化合物ＣＸ１３−６０５の合成
【化３４】
0006608442.tif 000040
【０１４５】
Ｃ６０５−２の合成
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のＣ１０４−１０（２４０ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）、Ｃ６０５−１（１４３ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（２４５ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）の混合物にＤＩＥＡ（０．５ｍＬ）を添加漏斗により滴下する。反応物を室温で１６時間維持し、続いてＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）とブライン（１０ｍＬ）で希釈する。層を分離し、かつ水層をＥｔＯＡｃ（２×１０ｍＬ）で抽出する。有機層を組み合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。固体を濾過により除去し、揮発性物質を減圧下で除去し、かつクロマトグラフィーにより精製してＣ６０５−２（３１０ｇ、収率８９％）を白色固体として得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５４２．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１４６】
Ｃ６０５−３の合成
ＴＨＦ中のＣ６０５−２（２７０ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）の溶液にＬｉＯＨ（９７．４ｍｇ、３．５ｍｍｏｌ）を加える。溶液を室温で２時間撹拌する。混合物を濃縮し、ｐＨ＝５に酸性化し、濃縮し、かつクロマトグラフィーにより精製してＣ６０５−３を白色固体（１５０ｍｇ、６１％）として得る。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ５２８．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１４７】
ＣＸ１３−６０５の合成
ＤＭＦ（５ｍＬ）中のＣ６０５−３（１５０ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）、Ｃ１０５−７（８７ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（５８ｇ、０．４２ｍｍｏｌ）とＨＢＴＵ（１６０ｇ、０．４２ｍｍｏｌ）の冷却（−５℃）溶液にＤＩＥＡ（０．３  ｍＬ）を加える。反応物を−５℃で１時間維持し、かつＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）とブライン（１０ｍＬ）で希釈する。層を分離し、かつ水層をＥｔＯＡｃ（２×１０ｍＬ）で抽出する。有機層を組み合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。固体を濾過により除去し、かつ揮発性物質を減圧下で除去する。粗製物をクロマトグラフィーにより精製して化合物ＣＸ１３−６０５（５０ｍｇ、２５．１％）を得る。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ  ３）δ８．８２（ｓ、１Ｈ）、７．１５−７．４１（ｍ、１０Ｈ）、７．１１（ｄ、Ｊ＝４．３０Ｈｚ、１Ｈ）、６．７５（ｓ、１Ｈ）、４．６７−４．７８（ｍ、２Ｈ）、４．４９（ｄ、Ｊ＝３．４９Ｈｚ、１Ｈ）、３．９１（ｓ、２Ｈ）、３．６７−３．７９（ｍ、４Ｈ）、３．２１−３．２９（ｄ、Ｊ＝５．１０Ｈｚ、２Ｈ）、３．０３−３．１６（ｍ、２Ｈ）、２．９４（ｄ、Ｊ＝５．１０Ｈｚ、１Ｈ）、２．５１−２．８０（ｍ、７Ｈ）、１．９１−２．０９（ｍ、２Ｈ）、１．４４（ｓ、３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：７１５．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１４８】
実施例１３
化合物ＣＸ１３−６０６の合成
【化３５】
0006608442.tif 000041
【０１４９】
Ｃ６０６−２の合成
２．０ｇ（１７ｍｍｏｌ）のＣ６０６−１に１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液３５ｍｌと３５ｍｌのＴＨＦを加える。続いてＴＨＦ（１５ｍＬ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（４．０３ｇ、１８．５ｍｍｏｌ）溶液を０℃で撹拌しながら加える。反応混合物を室温で一晩撹拌し、かつ減圧下で蒸発させて濃縮する。水相を１０％クエン酸水溶液でｐＨ４−５に酸性化し、かつ酢酸エチルで抽出する。抽出物をブラインで洗浄し、（ＭｇＳＯ４）乾燥し、かつ蒸発させて３．６ｇの化合物６０６−２（収率９８％）を得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２２０．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１５０】
Ｃ６０６−３の合成
ＤＣＭ（４０ｍＬ）中のＣ６０６−２（３．６ｇ、１６ｍｍｏｌ）溶液にＭｅＯＨ（２ｍＬ）、ＤＩＥＡ（８ｍＬ）とＥＤＣＩ（４．８ｇ、２５ｍｍｏｌ）を室温で加える。混合物を室温で一晩撹拌し、続いてＤＣＭ（２００ｍＬ）とブライン（５０ｍＬ）で希釈する。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させる。固体を濾過により除去し、かつクロマトグラフィーにより精製してＣ６０６−３（０．８ｇ、２０％）を白色固体として得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２３４．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１５１】
Ｃ６０６−４の合成
ＤＣＭ（８ｍＬ）中のＣ６０６−３（８００ｍｇ、３．４ｍｍｏｌ）混合物に０℃でＴＦＡ（２ｍＬ）を加える。反応物を０℃の温度で２時間維持し、かつ揮発性物質を減圧下で除去して化合物Ｃ６０６−４（７９０ｍｇ、収率１００％）を白色固体として得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１３４．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１５２】
Ｃ６０６−５の合成
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の化合物Ｃ６０６−４（７９０ｍｇ、３．４ｍｍｏｌ）混合物に（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−フェニルブタン酸（９５０ｍｇ、３．４ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１９５０ｍｇ、５．１５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（６９５ｍｇ、５．１５ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（２ｍＬ）を室温で加える。反応物を室温で１６時間維持し、続いてＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）とブライン（１０ｍＬ）で希釈する。層を分離し、かつ水層をＥｔＯＡｃで抽出する。有機層を組み合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。固体を濾過により除去し、揮発性物質を減圧下で除去し、かつクロマトグラフィーにより精製してＣ６０６−５（１．２ｇ、８９％）を白色固体として得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３９５．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１５３】
Ｃ６０６−６の合成
ＤＣＭ（６ｍＬ）中の化合物Ｃ６０６−５（６００ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）の混合物に０℃でＴＦＡ（２ｍＬ）を加える。反応物を０℃で２時間維持し、かつ揮発性物質を減圧下で除去して６０６−６（５９５ｍｇ、１００％収率）を白色固体として得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２９５．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１５４】
Ｃ６０６−７の合成
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の化合物Ｃ６０６−６（５９５ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）の混合物にＣ１３３−３（３６０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（８７０ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（３１１ｍｇ、  ２．３  ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（１ｍＬ）を加える。反応物を室温で１６時間維持し、続いてＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）とブライン（１０ｍＬ）で希釈する。層を分離し、かつ水層をＥｔＯＡｃ（２×２０ｍＬ）で抽出する。有機層を組み合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。固体を濾過により除去し、揮発性物質を減圧下で除去し、かつクロマトグラフィーにより精製して６０８−７（４９０ｍｇ、６３％）を白色固体として得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５１２．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１５５】
Ｃ６０６−８の合成
ＴＨＦ（６ｍＬ）と水（２ｍＬ）中の化合物Ｃ６０６−７（４９０ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）の溶液に室温でＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（１０１ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）を加える。混合物を室温で１６時間撹拌する。続いてＰＨ＝５に酸性化し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。固体を濾過により除去し、揮発性物質を除去して６０６−８（４４０ｍｇ、収率９２％）を白色固体として得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４９８．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１５６】
ＣＸ１３−６０６の合成
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の化合物Ｃ６０６−８（２００ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）の混合物にＣ１０３−４（１０７ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（２２７ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（８２ｍｇ、０．６  ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．２  ｍＬ）を室温で加える。反応物を室温で１６時間維持し、続いてＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）とブライン（１０ｍＬ）で希釈する。層を分離し、かつ水層をＥｔＯＡｃ（２×２０ｍＬ）で抽出する。有機層を組み合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。固体を濾過により除去し、揮発性物質を減圧下で除去し、かつクロマトグラフィーにより精製してＣＸ１３−６０６（１００ｍｇ、３８％）を白色固体として得る。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＭｅＯＤ）δ７．３３（ｓ、４Ｈ）、７．２４（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、２Ｈ）、７．１５（ｄｄ、Ｊ＝２０．９、７．１Ｈｚ、３Ｈ）、４．６３−４．４８（ｄｄ、Ｊ＝８．３、４．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．６５（ｄｄ、Ｊ＝８．８、４．１Ｈｚ、４Ｈ）、３．６０（ｄｄ、Ｊ＝６．１、３．７Ｈｚ、３Ｈ）、３．５４（ｄ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．２４（ｄ、Ｊ＝５．１Ｈｚ、１Ｈ）、２．９３（ｄ、Ｊ＝５．１Ｈｚ、１Ｈ）、２．６９−２．５２（ｍ、２Ｈ）、２．４６（ｓ、４Ｈ）、２．１８−２．０４（ｍ、１Ｈ）、２．０１−１．８５（ｍ、１Ｈ）、１．７６−１．６３（ｍ、１Ｈ）、１．５４−１．４２（ｍ、４Ｈ）、１．３５（ｄｄｄ、Ｊ＝１３．９、９．０、３．７Ｈｚ、１Ｈ）、０．９１（ｄｄ、Ｊ＝９．７、６．６Ｈｚ、６Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６５２．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１５７】
実施例１４
化合物ＣＸ１３−６０８の合成
【化３６】
0006608442.tif 000042
【０１５８】
ＤＭＦ（３ｍＬ）中のＣ６０６−８（２００ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）にＣ１０５−７（１０７ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（２２７ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（８２ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．２ｍＬ）を室温で加える。反応物を室温で１６時間維持する。続いてＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）とブライン（１０ｍＬ）で希釈する。層を分離し、かつ水層をＥｔＯＡｃ（２×２０ｍＬ）で抽出する。有機層を組み合わせ、かつＮａ２ＳＯ４で乾燥させる。固体を濾過により除去し、揮発性物質を減圧下で除去し、かつクロマトグラフィーにより精製してＣＸ１３−６０８（１００ｍｇ、３６％）を白色固体として得る。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＭｅＯＤ）δ７．３２（ｓ、４Ｈ）、７．２７−７．１２（ｍ、８Ｈ）、７．１１−７．０８（ｍ、２Ｈ）、４．７９（ｄｄ、Ｊ＝８．６、４．６Ｈｚ、１Ｈ  ）、４．４７（ｔ、Ｊ＝５．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．３３（ｄｄ、Ｊ＝９．２、５．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．６４（ｔ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、４Ｈ）、３．５１−３．５９（ｍ、４Ｈ）、３．５０（ｓ、２Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、３．２５（ｄ、Ｊ＝５．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．０７（ｄｄ、Ｊ＝１３．９、４．６Ｈｚ、１Ｈ）、２．９３（ｄ、Ｊ＝５．０Ｈｚ、１Ｈ）、２．７６（ｄｄ、Ｊ＝１３．９、８．７Ｈｚ、１Ｈ）、２．６４−２．４９（ｍ、２Ｈ）、２．４３（ｔ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、４Ｈ）、２．０５（ｍ、１Ｈ）、１．９１（ｍ、１Ｈ）、１．４３（ｓ、３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６８５．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１５９】
実施例１５
化合物ＣＸ１３−７０５の合成
【化３７】
0006608442.tif 000043
【０１６０】
Ｃ７０５−２の合成
ＤＭＦ（５ｍＬ）中のＣ７０５−１（２３９ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）の混合物に５−メチルチアゾール−２−カルボン酸（１１６ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（３７０ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１３１ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．７３ｍＬ）を室温で加える。反応を室温で１２時間維持する。続いてＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）とブライン（１０ｍＬ）で希釈する。層を分離し、かつ水層をＥｔＯＡｃ（２×１５０ｍＬ）で抽出する。有機層を組み合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。固体を濾過により除去し、揮発性物質を減圧下で除去し、かつクロマトグラフィーにより精製して７０５−２（３００ｍｇ、８８％）を白色固体として得る。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ４２０．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１６１】
Ｃ７０５−３の合成
ＴＨＦ（６ｍＬ）と水（２ｍＬ）中のＣ７０５−２（３４０ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）の溶液に室温でＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（６８ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）を加える。混合物を室温で２時間撹拌する。続いて混合物をＰＨ＝５に酸性化し、かつＥＡ（２０ｍＬ）で抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。固体を濾過により除去し、かつ揮発性物質を減圧下で除去して７０５−３（２６５ｍｇ、収率７８％）を白色固体として得る。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４０６．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１６２】
ＣＸ１３−７０５の調製
ＤＭＦ（３ｍＬ）中のＣ７０５−３（２６５ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）の混合物にＣ１０５−７（１３０ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（３００ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１０６ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．６ｍＬ）を室温で加える。反応物を室温で４時間維持する。続いてＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）とブライン（１０ｍＬ）で希釈する。層を分離し、かつ水層をＥｔＯＡｃ（２×２０ｍＬ）で抽出する。有機層を組み合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。固体を濾過により除去し、揮発性物質を減圧下で除去し、かつクロマトグラフィーにより精製してＣＸ１３−７０５（９０ｍｇ、２３％）を白色固体として得る。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＭｅＯＤ）δ８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．３１−７．１３（ｍ、１０Ｈ）、４．８０（ｄｄ、Ｊ＝８．８、４．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．５７−４．４８（ｍ、２Ｈ）、３．６６−３．５２（ｍ、２Ｈ）、３．２５（ｄ、Ｊ＝４．８４Ｈｚ、１Ｈ）、３．１０（ｄｄ、Ｊ＝１３．９７、４．５７Ｈｚ、１Ｈ）、２．９４（ｄ、Ｊ＝５．１０Ｈｚ、１Ｈ  ）、２．６６−２．８２（ｍ、６Ｈ）、２．０２−２．１６（ｍ、２Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５９３．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１６３】
実施例１６
化合物のプロテアソーム活性阻害特性
酵素アッセイにおける２０Ｓプロテアソームのキモトリプシン様（ＣＴ−Ｌ）、カスパーゼ様活性（ＰＧＰＨ）、およびトリプシン様（ＴＬ）活性の阻害は、スクシニル−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−ＡＭＣ（１０μｍｏｌ／Ｌ）、Ｚ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−ＡＭＣ（１０μｍｏｌ／Ｌ）とＢｏｃ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−ＡＭＣ（５０μｍｏｌ／Ｌ）を用いてそれぞれ２、４と８ｎｍｏｌ／Ｌで精製ヒト２０Ｓプロテアソームを基質とし、それぞれ２５ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）、０．５ｍＭのＥＤＴＡ、０．００２％のドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）と０．０５％のＮＰ−４０を含有するアッセイ緩衝液中で決定する。本明細書に開示される２０Ｓプロテアソーム阻害剤のストック溶液はジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）で調製し、かつアッセイ混合物中の最終ＤＭＳＯ濃度は１％である。反応は室温で１時間行う。プロテアソーム活性はプレートベースの分光蛍光計を用いて基質から切断した後のフルオロフォア７−アミノ−４−メチルクマリン（ＡＭＣ）の検出に基づいて測定する。ＩＣ５０は２０Ｓプロテアソームの触媒活性が５０％阻害されるインヒビターの濃度を示す定量的尺度である。特定の実施例において、化合物のプロテアソーム阻害効力は本明細書の表１に記載される。
【０１６４】
実施例１７
化合物の水溶性
化合物の溶解度を決定するために、バイアルに１−５ｍｇの化合物を秤量する。１ｍＬの水性緩衝液（ｐＨ４．０の５０ｍＭクエン酸塩）を加える。バイアルを２５℃で２４時間振盪し、続いて１００００ｒｐｍで１０分間遠心分離する。上清を０．４５μｍ膜フィルターで濾過し、かつ化合物の濃度を分析する。特定の実施例において、化合物の水溶性は本明細書の表１に記載される。
【表１】
0006608442.tif 000044
0006608442.tif 000045
0006608442.tif 000046
0006608442.tif 000047
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【０１６５】
実施例１８
耐性用量での本明細書に記載される化合物を投与したマウスから採取した血液試料中のプロテアソーム活性の阻害。
Ｂａｌｂ／ｃマウスにビヒクル（ｐＨ３．５で１０ｍＭクエン酸ナトリウム中の（２０％（ｗ／ｖ）ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン）、または耐容用量で静脈内注射１０ｍｇ／ｋｇまたは経口強制飼養３０ｍｇ／ｋｇの本明細書に記載される化合物のいずれかを投与する。投与の1時間後、全ての血液試料をチューブに集め、心臓穿刺によるヘパリンナトリウムを含み、かつ４℃で１５０ｘｇで５分間遠心分離する。得られたペレットを氷冷リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を用いて三回洗浄する。毎回、ペレットを１ｍＬの冷却ＰＢＳに再懸濁し、４℃で６０００ｘｇで１０分間遠心分離する。最後の洗浄の後、１００μＬの溶解緩衝液（５ｍＭのＥＤＴＡを含み、ｐＨ７．４）を１時間添加することによってペレット細胞を溶解し、続いて４℃で６０００ｘｇで１０分間遠心分離する。上清を新しいチューブに移し、かつ細胞ペレットを捨てる。血液溶解液の濃度はＢＣＡ法で測定する。１０μｇのタンパク質はＣＴ−Ｌの測定に用いられ、３０μｇのタンパク質はＰＧＰＨとＴ−Ｌ活性の測定に用いられる。続いてＣＴ−Ｌ、ＰＧＰＨまたはＴ−Ｌにサクシニル−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−ＡＭＣ（２５μｍｏｌ／Ｌ）、Ｚ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−ＡＭＣ（１０μｍｏｌ／Ｌ）またはＢｏｃ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−ＡＭＣ（１０μｍｏｌ／Ｌ）を基質としてそれぞれ添加する。混合物を３７℃で６０分間インキュベートする。遊離ＡＭＣ蛍光を蛍光測定器にセットした３６０／４６０ｎｍフィルターを用いて定量し、２０ＳプロテアソームのＣＴ−Ｌ、ＰＧＰＨまたはＴ−Ｌ活性を測定する。プロテアソーム活性の阻害率は、本明細書に記載される化合物を投与したマウスから採取した試料とビヒクルを投与したマウスから採取した試料との比較により算出される。プロテアソーム活性の阻害率は本明細書における図１に記載される。図１に示すように、試験した化合物は血液試料中のＣＴ−Ｌ活性を阻害する。特に、経口強制飼養によって投与されたＣＸ１３−６０３は血液試料中のＣＴ−Ｌ活性を阻害する。ＣＸ１３−６０８は血液試料中のプロテアソームのＣＴ−ＬとＴ−Ｌ活性の両方を同時に阻害する。
【０１６６】
実施例１９
ヒト腫瘍異種移植片を有するマウスにおける本明細書に記載される化合物の抗腫瘍効果。
実験期間において、雌マウス（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから購入したＮＩＨ  ＩＩＩ  ＨＯヌードマウス（約２０ｇ、５〜６週齢）をケージに維持する。ＡＴＣＣO（ＨＴＢ−３８ＴＭ）からの３´１０６ヒト結腸癌細胞（ＨＴ−２９）またはＡＴＣＣ（ＣＲＬ３８ＴＭ）からの１´１０７ヒトＢ細胞リンパ腫細胞（ＲＬ）を１００μＬリン酸緩衝生理食塩水でマウスの右脇腹に注射する。平均腫瘍サイズがＨＴ２９に対する約２０〜３０ｍｍ３またはＲＬに対する約６０〜９０ｍｍ３に達したとき、腫瘍を有する動物を異なるグループ（各グループ７〜１０匹）に配分し、全てのグループが腫瘍サイズの等しい分布を備えさせる。ビヒクル（１０％（ｗ／ｖ）ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、１０ｍＭクエン酸塩、ｐＨ４．０）またはビヒクル中で調製したＣＸ１３−１０３を含む溶液を静脈内注射により動物に投与する。１、２と５日目に動物に投与し、１週間に３回で、４〜５週間続ける。腫瘍の大きさはキャリパーで測定し、１週間に２または３回である。腫瘍体積は、式：長さ×幅２／２によって算出される。統計解析は２−ｗａｙ  ＡＮＯＶＡで行う。図２Ａと図２Ｂに示すように、ＣＸ１３−１０３の投与は腫瘍増殖を顕著に抑制される。
【図１】
0006608442.tif 000058
【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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