(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（１）
【化１】
0006498695.tif 000018
（式中Ｒ１およびＲ２は、互いに独立して、メチルまたはエチルであり、
Ｒ３はハロゲンであり、および
ｎは１または２である）
によって表される化合物、又は、前記化合物の塩、溶媒和物、多形体。
【請求項２】
Ｒ１がＲ２と異なっているか、または
Ｒ３がＣｌ、ＢｒもしくはＦまたはその組み合わせである、
請求項１に記載の化合物、又は、前記化合物の塩、溶媒和物、多形体。
【請求項３】
Ｒ３はＣｌである、請求項２に記載の化合物、又は、前記化合物の塩、溶媒和物、多形体。
【請求項４】
前記化合物が、
【化２】
0006498695.tif 000019
0006498695.tif 000020
からなる群から選択される、
請求項１に記載の化合物、又は、前記化合物の塩、溶媒和物、多形体。
【請求項５】
前記化合物が式５の構造によって表される、請求項４に記載の化合物、又は、前記化合物の塩、溶媒和物、多形体。
【請求項６】
前記化合物が式６の構造によって表される、請求項４に記載の化合物、又は、前記化合物の塩、溶媒和物、多形体。
【請求項７】
薬学的に許容される担体と、有効成分として請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物、又は、前記化合物の塩、溶媒和物、多形体とを含み、
前記組成物が経口投与、非経口投与、経皮投与、局所投与もしくは直腸投与、吸入投与、坐剤による投与、または透析による投与に適した形態である、医薬組成物。
【請求項８】
脳障害および／またはその進行および／または症状の治療もしくは阻止用の医薬組成物であって、
前記脳障害が、外傷性脳障害（ＴＢＩ）およびＴＢＩの結果として起こる二次性脳障害からなる群より選択される急性事象から生じる脳損傷に起因する、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
脳障害および／またはその進行および／または症状の治療もしくは阻止用の医薬組成物であって、
前記脳障害がＴＢＩに起因する二次性脳障害、または二次性脳障害もしくは神経変性に関与する薬剤に起因する二次性脳障害であり、前記薬剤が、グルタミン酸塩、グルタミン酸塩以外のグルタミン酸受容体リガンド、低酸素模倣剤、一酸化窒素発生剤、アポトーシス誘発剤、ステロイド剤、塩化アンモニウム、毒性化合物およびＡＴＰ産生を妨害する作用薬から選択されるか、または
前記脳障害が感染症、毒物、およびレクリエーショナルドラッグ、一般用医薬品および／または処方薬の過剰摂取から選択される急性もしくは慢性の障害に起因する、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
移動、増殖、接着および／または分化を活性化し、それによって損傷に起因する脳障害を有する対象、または損傷に起因する脳障害を発症するリスクがある対象において喪失した脳細胞を補充することによって、中枢神経系障害を阻止する、減少させるまたは治療する用の、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
神経変性疾患またはその症状の治療もしくは阻止する用であるか、または
神経変性疾患を有する対象または神経変性疾患を発症するリスクがある対象においてプログラム細胞死を阻止する用の、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
移動、増殖、接着および／または分化を活性化し、それによって神経変性疾患を有する対象、または神経変性疾患を発症するリスクがある対象において喪失した脳細胞を補充することによって、中枢神経系障害を阻止する、減少させるまたは治療する用の、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記神経変性疾患がアルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、ルー・ゲーリッグ病、多発性硬化症、自己免疫障害、ピック病、びまん性レヴィー小体病、進行性核上性麻痺（スティール・リチャードソン症候群）、多系統神経変性（シャイ・ドレーガー症候群）、運動ニューロン疾患、筋萎縮性側索硬化症、変性運動失調症、皮質基底核変性症、グアム型筋委縮性側索硬化症−パーキンソン病−認知症複合、亜急性硬化性全脳炎、シヌクレイン病、原発性進行性失語症、線条体黒質変性症、マシャド・ジョセフ病／脊髄小脳失調症３型とオリーブ核橋小脳変性、ジルドラトゥレット病、球麻痺と仮性球麻痺、脊髄および球脊髄性筋委縮症（ケネディ病）、原発性側索硬化症、家族性痙性対麻痺、ウェルドニッヒ・ホフマン病、クーゲルベルク・ウェランダー病、テイ・サックス病、サンドホフ病、家族性痙性病、ヴォールファルト・クーゲルベルク・ウェランダ病、痙性対麻痺、進行性多巣性白質脳症、プリオン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー病、クールー病および致死性家族性不眠症からなる群から選択される、請求項１１または１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
損傷した脳領域への前駆細胞の移動、損傷した脳領域での神経分化、および損傷した神経回路の再建を含む中枢神経系における回復過程を刺激するまたは高める用であるか、または
脳浮腫の治療または阻止する用の医薬組成物であって、
前記脳浮腫が外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、神経変性疾患、または感染症、毒物、およびレクリエーショナルドラッグ、一般用医薬品および／または処方薬の過剰摂取から選択される急性もしくは慢性の障害に起因する、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
細胞、組織および／または器官のグラフティングもしくは移植を促進する用の医薬組成物であって、
前記細胞、組織および／または器官がそれを必要とする対象においてグラフトまたは移植される、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
細胞、組織および／または器官のグラフティングもしくは移植を促進する用の医薬組成物であって、
前記細胞、組織および／または器官がそれを必要とする対象の中枢神経系においてグラフトまたは移植されるか、または
前記細胞、組織および／または器官が脳に関連している、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
発達障害を有する対象、または発達障害を有するリスクがある対象において脳の発達を促進する用の医薬組成物であって、
前記発達障害がハンチントン病、２１トリソミー症候群、脆弱Ｘ症候群、レット症候群、ウィリアムズ症候群、連鎖球菌感染症に関連する小児自己免疫性神経精神障害、シデナム舞踏病、トキソプラズマ症、神経梅毒、亜急性硬化性全脳炎、統合失調症、視覚消失に起因する自閉症もしくは発達障害、聴覚消失、（感覚遮断）、代謝障害（例えば糖尿病、フェニルケトン尿症）、栄養不良（例えば二分脊椎、無脳症、胎児性アルコール症候群）、先天性損傷もしくは乳児期もしくは小児期に生じる損傷からなる群から選択される、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
損傷領域にわたり、および標的領域内に軸索成長を誘発することによって病変部を修復する、および／または脊髄の修復を刺激する用の、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
心血管疾患の治療または阻止する用の医薬組成物であって、
前記心血管疾患がハンチントン病に起因する、または関連しているか、または
前記心血管疾患が心不全、心停止および心筋梗塞からなる群から選択される、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前記化合物または組成物が脳障害および／または神経変性を発症するリスクがある対象に予防的に投与され、
前記対象が、脳損傷が持続するリスクがある、または神経変性疾患、脳浮腫もしくは心不全を伴う心血管疾患を発症するリスクがある、または前記対象が移植候補者であるか、または
前記対象がリスクの高い活動に関与している対象、脳障害および／または神経変性に関連した神経発達障害を発症するリスクがある乳児または小児、脳障害および／または神経変性に関連した遺伝性疾患を有するリスクがある対象、ならびに脳障害および／または神経変性に関連した加齢性神経疾患を発症するリスクがある対象からなる群から選択される、
請求項７〜１９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ミトコンドリアトランスロケータータンパク質（ＴＳＰＯ）に効果的に結合し、細胞死過程に対抗するキナゾリン骨格に基づく複素環化合物に関する。本発明は、そのような化合物を含む医薬組成物と、これらの化合物を用いる方法、特に、根底にある病理過程を含む、急性事象（例えば外傷性脳損傷（ＴＢＩ）もしくはその後遺症）、または慢性的な障害（例えば感染症、毒物もしくは薬物使用）に起因する神経変性疾患ならびに脳障害を治療する、および阻止する方法とをさらに提供する。
【背景技術】
【０００２】
神経変性脳疾患および損傷に起因する神経変性は、健康面でも経済的にも大きな問題である。現在のモデルによると、２０００年と２０５０年の間にアルツハイマー病罹患者総数は、少なくとも３倍以上の増加が予測される。神経変性の根本的原因で広く受け入られている考え方は、グルタミン酸塩による過興奮ならびにミトコンドリアの機能障害であり、脳内の神経細胞死が引き起こされる（Ｃａｍｉｎｓら，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｆｉｎｄ  Ｅｘｐ  Ｃｌｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２００８；３０：４３−６５；Ｎａｋａｍｕｒａら，Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ．２０１０；１５：１３５４−６３）。いくつかの可能性のある治療法がデザインされており、例えば、グルタミン酸受容体の抑制によって検証されている。しかし、おそらく神経変性の原因が十分に理解されていないために、そのような方法は、効果的な治療の完成までには至っていない（Ｂｙｒｎｅｓら，Ｎｅｕｒｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ．２００９；６：９４−１０７）。したがって、代替方法としては、例えば、ミトコンドリアベースの細胞死過程を阻止することによる方法が探究されている（Ｖｅｅｎｍａｎら，Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖ  Ｒｅｓ．２０００；５０：３５５−３７０；Ｖｅｅｎｍａｎら，Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．２００２；８０：９１７−２７；Ｍａｔｔｓｏｎら，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｍｏｌ  Ｍｅｄ．２００３；９：１９６−２０５）。さらに、グリアは脳細胞の大部分を構成しており、健常な神経細胞を維持し、および保護するのに役立っている。実際、いまのところ、グリアが神経変性の進行において重要な要因を示すことは十分に認識されている（Ｒｏｓｓら，Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ  Ｂｕｌｌ．２００９；８０：２２４−３２）。したがって、グリアは、神経変性の効果的な治療を開発するために含めて考える要因の一つであるはずである。
【０００３】
外傷性脳損傷（ＴＢＩ）は、脳への突然の物理的損傷によって特徴付けられる。ＴＢＩは、多くの要因、例えば、戦争、テロリズム、自動車事故と他の交通事故、業務上の事故、スポーツ傷害、暴力犯罪、家庭内事故、児童虐待と家庭内暴力によって、または頭蓋骨を通過する物体、例えば銃創によって引き起こされる。ＴＢＩに起因する可能性のある身体的、行動的および／または精神的な変化は、損傷を受ける脳の領域に依存する。損傷には、限局性およびびまん性脳障害がある。限局性損傷は、脳の小領域に限定される。限局性障害は、多くの場合、頭部が物体に当たる、または弾丸などの物体が脳に入り込む点で最も多く生じる。びまん性障害は、脳全体に広がる。損傷直後の頭部外傷の治療はこの数十年の間に着実に改善したが、能力障害などの長引く影響は中等度または重度のＴＢＩの後に、依然として起こり得る（Ｋｌｕｇｅｒら，Ｊ  Ａｍ  Ｃｏｌｌ  Ｓｕｒｇ．２００４；１９９：８７５−７９）。ＴＢＩの一次性損傷の数時間および数日後に二次性脳損傷の進行が続くことは現在では十分に理解されている（Ｇａｅｔｚら，Ｃｌｉｎ  Ｎｅｕｒｏｐｈｙｓｉｏｌ．２００４；１１５：４−１８；Ｓｕｌｌｉｖａｎら，Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｒｅｓ．２００５；７９：２３１−３９）。脳障害のこの第二波に関与する主な要因としては、興奮性アミノ酸、例えばグルタミン酸塩、Ｃａ＋＋ホメオスタシスおよび活性酸素種（ＲＯＳ）（Ｋｌｕｇｅｒら，２００４，Ｇａｅｔｚら，２００４）が挙げられる。ミトコンドリアは、二次性脳損傷によって影響を受ける細胞小器官の１つであり、特にミトコンドリア膜電位（ΔΨｍ）の崩壊は、二次性脳損傷および脳変性疾患に起因する神経細胞死を引き起こす諸要因の中でも中心的役割を果たすように見える。（Ｋｌｕｇｅｒら，２００４；Ｇａｅｔｚら，２００４）。これが示唆することは、脳損傷を被った直後、このΔΨｍの調節を標的にすることはＴＢＩのために著しい治療上の意味が含まれることである。ＴＳＰＯはこれらの機序の主成分であるので、二次性脳損傷、神経変性疾患および関連する病態を治療するためにＴＳＰＯを標的にすることは、新規の潜在的に極めて効果的な方法を意味する。
【０００４】
重要なことに、ＴＳＰＯは、ミトコンドリア外膜に位置している電位依存性アニオンチャネル（ＶＤＡＣ）と関連しており、このチャネルは、小分子およびイオンがミトコンドリア膜間スペースと細胞質の間を通過させる主要なチャネルとして機能する（ＭｃＥｎｅｒｙら，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ．１９９２；８９：３１７０−４；Ｖｅｅｎｍａｎら，Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．２０１４；１４：５５９−７７）。ＶＤＡＣの開通は、ΔΨｍの崩壊に関与することがあり得る。また、ＴＳＰＯは、ミトコンドリア内膜内に位置し、ΔΨｍの崩壊にも関与する致死的な孔を形成することもあり得るアデニンヌクレオチドトランスロケーター（ＡＮＴ）にも関連している。疾患および脳外傷に起因して起こり得る、神経変性に関連したプログラム細胞死の過程、例えばΔΨｍの崩壊、でのＴＳＰＯの重要な役割の発見により、神経変性疾患および脳外傷の治療のための創薬のターゲットとしてＴＳＰＯが例証された。これに関連して、ＴＳＰＯが、ミトコンドリアのアポトーシスカスケード、ならびに他の種類のプログラム細胞死の誘発に携わるＲＯＳの生成に関与することが判明した。これらのＲＯＳがミトコンドリア内膜に位置するカルジオリピンからシトクロムｃを離れさせることが知られている。加えて、ＲＯＳは、ミトコンドリア外膜での開孔に関与し、シトクロムｃをサイトゾルに放出させる。これにより、ミトコンドリアアポトーシシ経路の活性化の開始段階が形成される（Ｖｅｅｎｍａｎら，Ｊ  Ｂｉｏｅｎｅｒｇ  Ｂｉｏｍｅｍｂｒ．２００８；４０：１９９−２０５；Ｖｅｅｎｍａｎら，２０１４）。これらのデータにより、ＴＳＰＯがプログラム細胞死の割合を調節する機序に関して理解することができる。これは、疾患、例えば神経変性と脳外傷の結果、および特に脳における細胞死を引き起こす他の種類の脳障害を治療するためのドラッグデザインの意味が含まれる。
【０００５】
ＴＳＰＯは最初、末梢組織中でベンゾジアゼピンを結合するその能力によって検出され、その後、脳内のグリア細胞中でも検出され、したがってその以前の名称は末梢型ベンゾジアゼピン受容体（ＰＢＲ）という（Ｐａｐａｄｏｐｏｕｌｏｓら，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｓｃｉ．２００６；２７：４０２−９；ＶｅｅｎｍａｎおよびＧａｖｉｓｈ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｈｅｒ．２００６；１１０：５０３−２４；Ｖｅｅｎｍａｎら，Ｃｕｒｒ  Ｐｈａｒｍ  Ｄｅｓｉｇｎ．２００７；１３：２３８５−２４０５）。このミトコンドリアタンパク質が特定のリガンドによって薬理学的に調節され得ることは知られている（Ｖｅｅｎｍａｎら，Ｊ  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．  ２００２；８０：９１７−２７；ＶｅｅｎｍａｎおよびＧａｖｉｓｈ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｈｅｒ．  ２００６；１１０：５０３−２４；Ｖｅｅｎｍａｎら，２００７）。古典的なＴＳＰＯリガンドの一般的な例としては、ＰＫ１１１９５およびＲｏ５  ４８６４がある（ＰＫ１１１９５はイソキノリン誘導体であり、Ｒｏ５  ４８６４はベンゾジアゼピンである）。ＴＳＰＯ機能としては、細胞死過程の調節、細胞周期の調節、遺伝子発現の調節、ステロイド産生の調節、細胞移動への関与、細胞分化への関与、血管新生への関与、興奮毒性細胞死への関与、および炎症反応と免疫応答への関与が挙げられる。ＴＳＰＯの発現は、例えばアルツハイマー病、パーキンソン病およびハンチントン病において生じる神経変性、ならびに脳外傷にも起因する神経変性の間に、高まる（Ｇａｖｉｓｈら，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｒｅｖ．１９９９；５１：６２９−５０；ＶｅｅｎｍａｎおよびＧａｖｉｓｈ．  ２０００；５０：３５５−７０；ＶｅｅｎｍａｎおよびＧａｖｉｓｈ．２００６；ＶｅｅｎｍａｎおよびＧａｖｉｓｈ．  Ｃｕｒｒ  Ｍｏｌ  Ｍｅｄ．２０１２；１２：３９８−４１２；Ｖｅｅｎｍａｎら，Ｐｈａｒｍａｃｏｇｅｎｅｔ  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ．２０１２；２２：６０６−１９；Ｖｅｉｇａら，Ｇｌｉａ．２００７；５５：１４２６−３６；Ｐａｐａｄｏｐｏｕｌｏｓら，Ｅｘｐ  Ｎｅｕｒｏｌ．２００９；２１９：５３−７）。中枢神経系において、ＴＳＰＯの最初の細胞部位は、アストロサイトおよびミクログリアである。しかし、ＴＳＰＯは、細胞死経路上にある神経細胞内で発現することもあり得る。遺伝子操作（ｓｉＲＮＡおよびアンチセンスＲＮＡ）でＴＳＰＯを発現抑制することで、グルタミン酸塩によって誘発される細胞死を含む、プログラム細胞死を阻止する。興味深いことに、ＴＳＰＯレベルは、致死レベルのグルタミン酸塩に曝されたＵ１１８ＭＧ細胞内で上昇する。Ｕ１１８ＭＧ細胞は、アストロサイト由来である。少なくともこれらの理由で、ＴＳＰＯは、脳を神経病理学的過程から保護するための有望な標的である（Ｖｅｉｇａら，２００７；Ｐａｎｉｃｋａｒら，Ｇｌｉａ．２００７；５５：１７２０−７）。細胞死におけるその役割以外に、ＴＳＰＯの調節下での他の解明された機能、例えば遺伝子発現の調節、炎症反応と免疫応答への関与、細胞移動への関与、細胞分化への関与、血管新生への関与および興奮毒性細胞死へのその特異的関与は、修復および回復機構への寄与を含む、疾患および脳外傷に��因する脳内の細胞死の治療の標的としてのＴＳＰＯの重要性を際だたせている（Ｂｏｄｅら，Ｐｈａｒｍａｃｏｇｅｎｅｔ  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ．２０１２；２２：５３８−５０；Ｖｅｅｎｍａｎら，Ｐｈａｒｍａｃｏｇｅｎｅｔ  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ．２０１２）。古典的ＴＳＰＯリガンドＰＫ１１１９５とＲｏ５  ４８６５がｉｎ  ｖｉｖｏで中程度の神経保護効果を呈することはこれまでに明らかにされている（例えば、Ｖｅｅｎｍａｎら，２００２；Ｖｅｉｇａら，２００５；８０：２９−３７；Ｖｅｅｎｍａｎ  Ｇａｖｉｓｈ．２０１２を参照されたい）。古典的なＴＳＰＯリガンドのｉｎ  ｖｉｔｒｏでの結果は、遺伝子操作によるＴＳＰＯの発現抑制によって見出されたものに近い（Ｖｅｅｎｍａｎら，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２００４；６８：６８９−９８；Ｋｕｇｌｅｒら，Ｃｅｌｌ  Ｏｎｃｏｌ．２００８；３０：４３５−５０；Ｖｅｅｎｍａｎら，２００８；Ｌｅｖｉｎら，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．２００５；４４：９９２４−３５；Ｚｅｎｏら，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．２００９；４８：４６５２−６１）。
【０００６】
米国特許第８，５４１，４２８号はフタラジン、キナゾリンとキノキサリンの誘導体、これらの化合物を含有する医薬組成物、および外傷性脳損傷（ＴＢＩ）に起因する脳障害の治療と阻止、ならびに神経変性疾患の治療と阻止でのその治療用途を開示する。前記特許出願公開で開示されている化合物は、様々な親和性でＰＢＲ（ＴＳＰＯ）に結合することが示され、および細胞培養においてグルタミン酸塩によって誘発される細胞死を減少させることが示された。さらに、これらの化合物によって付与される細胞保護は、ニューロン型細胞（ＳＨ  ＳＹ  ５Ｙ）ならびにグリア細胞型（Ｕ１１８ＭＧ）によって生じた。
【０００７】
米国特許第６，７６５，００６号は、ＡＭＰＡ受容体のアンタゴニストまたは正のモジュレーターであるキナゾリンおよび他の複素環、ならびに神経細胞消失の処置、阻止もしくは回復、または神経変性疾患の治療、阻止もしくは回復のためのその使用を開示する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
ＴＳＰＯはＴＢＩおよび二次性脳障害および／または神経変性疾患に起因して生じるため、ＴＳＰＯに効果的に結合する改善された薬剤を、種々の種類のプログラム細胞死（アポトーシス、ネクローシス、オートファジー性細胞死）を含む脳細胞死を阻止する効果と組み合わせて開発する必要性が当分野では存在する。さらに、ＴＢＩ、二次性脳障害および神経変性疾患の治療を成功させるために、修復機序を活性化しおよび／または促進することがさらに望ましい。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、式（Ｉ）によって描写される化合物、ならびに本明細書に記載の個々の化合物に関し、該化合物は、アミド基で置換され、任意選択でハロゲン基によって置換された回転可能なフェニル基が結合したキナゾリン骨格に基づいている。本発明はさらに、該化合物を含有する医薬組成物と、急性もしくは慢性の事象およびその後遺症に起因する脳損傷の治療および阻止、ならびにニューロンおよび／またはグリア細胞の変性を含む脳疾患に関連する脳障害の治療での該医薬組成物の治療用途とに関する。また、本発明の化合物は、プログラム細胞死の機序を抑制し（すなわち、細胞死を阻止する）、および死滅した脳細胞の補充に関連する細胞活性を刺激することができる。本発明の化合物は、１８ｋＤａのミトコンドリアトランスローケータタンパク質（ＴＳＰＯ）に効果的に結合し、その細胞死の機能を阻害する。このように、これらの化合物には、細胞死を阻止する特異的性質があり、それによって、ニューロンそれ自体と、ニューロンを健全に維持するグリア細胞との両方のための神経保護特性がある。外傷性脳障害後に二次性脳障害を引き起こす重要な作用薬であり、神経変性における有害な作用薬の１つとしても知られているグルタミン酸塩によって誘発される細胞死過程を減弱させることによって、本発明の化合物は脳内の細胞死を阻止する。これらの化合物は、二次性脳障害および神経変性ならびに他の病態の一部である他の作用薬（これらに限定されないが、例えばグルタミン酸塩、グルタミン酸塩以外のグルタミン酸受容体リガンド、低酸素模倣剤、βアミロイド、一酸化窒素発生剤、アポトーシス誘発剤、ステロイド剤、塩化アンモニウム、毒性化合物およびＡＴＰ産生を妨害する作用薬）からも保護する。また、これらの化合物は、細胞分化を活性化し、病変および損傷した中枢神経系において回復過程を刺激するように活性化細胞を役立たせる。
したがって、本発明の化合物は、プログラム細胞死経路に関連した神経変性疾患および脳損傷を含む、疾患と病態の治療および阻止に役立つ。本発明の化合物はさらに、例えば、ハンチントン病に関連している心血管機能不全の治療または阻止に役立つ。
【００１０】
一般に、本発明の化合物は、１）予防的作用、２）進行する障害（例えば脳障害）および疾患（例えば神経変性）への抵抗、３）自己修復の刺激、および
４）病変部および損傷組織のグラフト／移植による置換の補助などの作用様式のうちの１つまたは複数で用いられてもよい。本明細書に提示する化合物の広範な用途は、疾患およびそれに関連する進行する障害に共通の過程（例えば細胞死）を調節する能力、ならびに特定の細胞型を成熟細胞の所望の形態に分化するそれらの化合物の能力による。
【００１１】
一実施形態において、本発明は、式（Ｉ）：
【００１２】
【化１】
0006498695.tif 000002
の構造によって表され、塩類、溶媒和化合物、多形体およびその混合物を含む化合物を提供する。
（式中、Ｒ１およびＲ２は、互いに独立して直鎖状または分枝状のＣ１−Ｃ１２アルキルであり、
Ｒ３はハロゲンであり、および
ｎは０、１、２、３、４および５であり、
ただし、ｎが０であるとき、Ｒ１はＲ２と異なる。）
【００１３】
一実施形態において、Ｒ１およびＲ２は、それぞれＣ１−Ｃ４アルキルであり、好ましくはＲ１およびＲ２は、互いに異なる。一部の実施形態において、Ｒ１およびＲ２はメチルであり、および他はエチルである。
【００１４】
別の実施形態において、化合物は、式（Ｉ）の構造によって表され、Ｒ１およびＲ２は同じであり（それによって対称アミドを形成する）、およびｎが０以外である（すなわち、化合物はフェニル環上に１または複数のハロゲン置換基を有する）。現在好ましい別の実施形態において、化合物は、式（Ｉ）の構造によって表され、Ｒ１およびＲ２は互いに異なっている（それによって不斉アミドを形成する）。本発明の原則によれば、ｎが０（すなわち、Ｒ３が存在しない）であるとき、Ｒ１およびＲ２は互いに異なっている。しかし、ｎが０以外であるハロゲン化誘導体の場合、Ｒ１とＲ２は同じ（対称アミド）か、または互いに異なっている（不斉アミド）。各可能性は、本発明の別の実施形態を表す。
【００１５】
特に好適な一実施形態において、化合物は式（Ｉ）の構造によって表され、ｎは０以外であり、およびＲ１とＲ２は互いにに異なっており、それによって不斉アミドを形成し、ハロゲン化フェニル置換基を有する。
【００１６】
一部の実施形態において、本発明は、治療的活性化合物の所望の特徴を系統的に改善する方法を教示し、これに限定されないが、例えば、細胞培養中のグルタミン酸塩によって誘発される細胞死から、本発明の化合物の構造中の特定の標的修飾（すなわち、アルキル側鎖の修飾とハロゲン化、例えば回転可能なフェニル環のＣｌ）による保護が含まれる。
【００１７】
本発明の代表的な化合物は、化合物１、２、３、５、６、７および８から選択され、化合物１、化合物５および化合物６が現在好ましい。化合物１〜８の構造は、以下の発明を実施するための形態に示す。
【００１８】
一実施形態において、本発明は、薬学的に許容される担体と、有効成分として式（Ｉ）によって表される化合物または式１、２、３、４、５、６、７もしくは８のいずれかの化合物とを含む医薬組成物を提供する。
【００１９】
いくつかの実施形態において、記載の医薬組成物は、経口投与、非経口投与、経皮投与、局所投与もしくは直腸投与、吸入投与、坐剤による投与、または透析による投与に適した形態である。各可能性は、本発明の別の実施形態を表す。
【００２０】
本発明の化合物は、予想外に、米国特許第８，５４１，４２８号に開示される化合物、ならびに古典的ＴＳＰＯリガンドよりも効力がある。該化合物は、効果的なＴＳＰＯ結合と、例えば、本明細書に示すように細胞培養中の細胞死からの良好な保護を組み合わせているからである。動物試験において、例えば、本明細書に示すように、本発明の化合物１は、ハンチントンの神経変性運動疾患の動物モデルのトランスジェニックＲ６−２マウスの寿命を高め、自発運動を向上させるが、一方、米国特許第８，５４１，４２８号に記載の最も効力のある化合物である化合物Ａならびに古典的ＴＳＰＯリガンド、ＰＫ１１１９５はこの動物モデルにおいてそのような効果はなかった。ハンチントン病のヒト神経変性疾患のＲ６−２トランスジェニックマウスモデルにおいて、化合物５および６が強力に寿命を高め、および振戦を減少させる効果を示したように、化合物のハロゲン化は極めて効果的であるように見える。
【００２１】
一実施形態において、式（Ｉ）の化合物のアミド部分の鎖長を増やすことで、ＴＳＰＯへの結合親和性が大幅に高まることが発見されたのは予想外であった。
例えば、本発明の化合物７（Ｒ１、Ｒ２＝エチル）は、化合物Ａ（Ｒ１、Ｒ２＝メチル、Ｋｉ≒６００ｎｍ）と比べると、大幅に高い親和性（Ｋｉ≒２．５ｎｍ）でＴＳＰＯに結合する。この発見は完全に予想外であり、本発明の一実施形態を表す。
【００２２】
別の実施形態において、不斉アミドを含む化合物が対称アミドを有するその対応物よりも効力が高いことが発見されたのは予想外であった。どのような特定の機序または理論にも束縛されることを望むものではないが、ＴＳＰＯへの親和性と細胞死を阻止する能力を組み合わせることと、動物とヒトのいずれにおいても神経変性過程に抵抗することとの両方において、不斉性が重要であると考えられる。米国特許第８，５４１，４２８号に記載の化合物のいずれも、不斉アミド部分がない。ＴＳＰＯへの化合物の親和性と、細胞死を阻止し、神経変性過程を回復させるその能力との両方に寄与する不斉アミドの複合効果の発見は、予想することができなかった。特に、本明細書に示すように、米国特許第８，５４１，４２８号の化合物間の比較と、古典的ＴＳＰＯリガンド、例えばＰＫ１１１９５とＲｏ５  ４８６４との比較に基づいて、向上したＴＳＰＯの親和性が時には保護能力の喪失に関連することが発見された。本明細書に考察するように、今や本出願者らは、式（Ｉ）の新規の化合物が、細胞培養において細胞保護特性と組み合わせたＴＳＰＯへの効果的な親和性と、動物モデルにおいてハンチントンの神経変性疾患についての保護効果との両方を有することを予想外に発見した。これらの発見は完全に予想外であり、本発明の一実施形態を構成する。
【００２３】
さらに、予想外に発見したことは、フェニル環上にハロゲン置換基を有するいくつかのキナゾリン誘導体が細胞死から効率的に保護するということである。
さらに、フェニル環上のハロゲン置換基の一部の立体配置がＴＳＰＯへの結合を調節し、ＴＳＰＯと結合する強力な化合物をもたらし、細胞死から保護することを発見した。このように、一部の実施形態において、フェニル環上のハロゲン置換基（複数可）は、単独でまたは、アミド側鎖上のアルキル置換基の性質との組み合わせにより、式（Ｉ）によって表される新規の化合物の結合特性と細胞保護機能との組み合わせに大幅に影響を及ぼす。米国特許第８，５４１，４２８号は、いずれのハロゲン化誘導体も、または不斉アミドも全く例証していない。したがって、フェニル環上に少なくとも１つのハロゲン部分を含み、および／または不斉アミドが存在する式（Ｉ）のキナゾリン誘導体は、本発明のさらなる実施形態を構成する。アミド基の不斉アルキル部分の効果の発見に基づいて、現在では、これらの部分との相互作用において回転可能なフェニル環上に位置するハロゲンがＴＳＰＯへの結合ならびにＴＳＰＯ機能制御、例えば細胞死の調節、に影響を及ぼし得ることが予想される。
【００２４】
本明細書に考察するように、回転可能なフェニル環上にハロゲン（複数可）を取り込むことによって必ずしもＴＳＰＯへの結合が大幅に影響を受けることはないが、しかしハロゲンが存在することで、細胞培養において、同じ構造だがハロゲン化が欠けている高濃度の化合物（１００μＭ）によって誘発される望ましくない致死効果を阻止する、または減少させることも発見した。さらに、グルタミン酸塩に誘発される細胞死からのハロゲン化化合物の保護効果は、対応する非ハロゲン化類似体の効果よりも良いか、または同等である。したがって、ハロゲン化化合物は、非ハロゲン化誘導体と比較すると、保護性は高いが毒性は低く、かつ副作用プロファイルの減少と関連することもあり得る点で、特別な利点を示す。
【００２５】
本発明の化合物、例えば化合物１の別の利点は、該化合物が数ヵ月の貯蔵の間、安定しており、特性においてバッチ間変動がほとんどないことである。
ＴＢＩおよび神経変性過程を阻止するＴＳＰＯの細胞死制御の機能を標的にする能力に加えて、さらに、マイクロアレイ研究によって、ＴＳＰＯノックダウンがヒトアストロサイト型細胞においてグルアミン酸塩受容体、トランスポーターおよび酵素の遺伝子発現に大きな変化をもたらすことが見出された（Ｖｅｅｎｍａｎら，２０１２ｂ）。このように、本発明の化合物を用いる短期間治療は、ミトコンドリア膜電位（ΔΨｍ）の崩壊をブロックすることによって細胞死を阻止することができ、一方、例えば、ＴＳＰＯ発現の安定なノックダウンによって、またはＴＳＰＯリガンドによる長期間の阻止によって達成される長期間治療は、遺伝子発現を調節して、神経変性過程に抵抗することができる。さらに、ＴＳＰＯは、遺伝子発現へのＴＳＰＯの影響によって細胞周期、細胞の発生、移動、分化および接着を調節できるので（Ｂｏｄｅら，２０１２；Ｖｅｅｎｍａｎら，２０１２）、ＴＳＰＯを標的にするにより、心室壁を裏打ちする幹細胞の分化を刺激して、それらの細胞を病変部の脳領域へ移動させ、そこで損傷したニューロンを置換することができる。このように、本発明は、ミトコンドリアの細胞過程の調節と、脳外傷の結果の脳障害に関しての遺伝子発現および神経変性疾患に関しての遺伝子発現とに影響を及ぼす、本明細書に記載の化合物の能力を含む（Ｂｏｄｅら，２０１２、Ｖｅｅｎｍａｎら，２０１２）。実際に、本明細書に記載の新規の化合物は、グルタミン酸塩との組み合わせで、培養においてＰＣ１２細胞を刺激して、ニューロン様細胞に分化させることができる。本明細書に記載の新規化合物によるＴＳＰＯの調節によって影響を受ける保護過程と修復過程を組み合わせることにより、本発明の新しい独自の特徴を示す。
【００２６】
上記の化合物または医薬組成物は、処置の種々のモデルに役立つ。一部の実施形態において、該化合物または医薬組成物は、リスクが高い群における対象、例えば、リスクの高い活動に関与している対象、脳障害および／または神経変性に関連した神経発達障害を発症するリスクがある乳児または小児、脳障害および／または神経変性に関連した遺伝性疾患を有するリスクがある対象、ならびに／または脳障害および／または神経変性に関連した加齢性神経疾患を発症するリスクがある対象に予防処置として与えられる。別の実施形態において、該化合物または医薬組成物は、損傷または疾患が進行する間、対抗処置として与えられる。いくつかの実施形態において、該化合物または医薬組成物は、脳において自己回復過程を刺激するために、対抗処置として、または対抗処置に加えて与えられる。
一部の別の実施形態において、該化合物または医薬組成物は、それを必要とする対象に細胞移植および組織修復を補助する処置として与えられる。各可能性は、本発明の別の実施形態を表す。
【００２７】
このように、一部の実施形態において、本発明は、上述の化合物または医薬組成物の有効量を、それを必要とする対象に投与することによって、脳障害および／またはその進行および／または症状を治療する、または阻止する方法を提供する。一実施形態において、脳障害は、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）などの急性事象から生じる脳損傷に起因する。別の実施形態において、脳障害は、ＴＢＩから生じる二次性脳障害に起因する。さらに別の実施形態において、脳障害は、二次性脳障害または神経変性に関与する薬剤、例えば、グルタミン酸塩、グルタミン酸塩以外のグルタミン酸受容体リガンド、低酸素模倣剤、一酸化窒素発生剤、アポトーシス誘発剤、ステロイド剤、塩化アンモニウム、毒性化合物およびＡＴＰ産生を妨害する作用薬に起因する二次性脳障害である。別の実施形態において、脳障害は、感染症、毒物への曝露、およびレクリエーショナルドラッグ、一般用医薬品および／または処方薬の過剰摂取から生じる急性もしくは慢性の障害に起因する。各可能性は、本発明の別の実施形態を表す。
【００２８】
別の態様において、本発明はさらに、損傷に起因する脳障害を有する対象、もしくは損傷に起因する脳障害を発症するリスクがある対象において、上述の化合物または医薬組成物の有効量を前記対象に投与することによって、移動、増殖、接着および／または分化を活性化し、それによって喪失した脳細胞を補充することによって、中枢神経系障害を阻止する、減少させるまたは治療する方法を提供する。
【００２９】
本発明はさらに、上述の化合物または医薬組成物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む、神経変性疾患もしくはその症状を治療するまたは阻止する方法を提供する。
【００３０】
特定の一態様において、本発明は、神経変性疾患を有する対象または神経変性疾患を発症するリスクがある対象においてプログラム細胞死を阻止することによって神経変性を阻止する方法を提供し、該方法は上述の化合物または医薬組成物の有効量を前記対象に投与することを含む。
【００３１】
別の実施形態において、本発明は、神経変性疾患を有する対象、もしくは神経変性疾患を発症するリスクがある対象において、移動、増殖、接着および／または分化を活性化し、それによって喪失した脳細胞を補充することによって、中枢神経系障害を阻止する、減少させるまたは治療する方法を提供し、該方法は上述の化合物または医薬組成物の有効量を前記対象に投与することを含む。
【００３２】
いくつかの実施形態において、神経変性疾患は、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、ルー・ゲーリッグ病、多発性硬化症、自己免疫障害、ピック病、びまん性レヴィー小体病、進行性核上性麻痺（スティール・リチャードソン症候群）、多系統神経変性（シャイ・ドレーガー症候群）、運動ニューロン疾患、筋萎縮性側索硬化症、変性運動失調症、皮質基底核変性症、グアム型筋委縮性側索硬化症−パーキンソン病−認知症複合、亜急性硬化性全脳炎、シヌクレイン病、原発性進行性失語症、線条体黒質変性症、マシャド・ジョセフ病／脊髄小脳失調症３型とオリーブ核橋小脳変性、ジルドラトゥレット病、球麻痺と仮性球麻痺、脊髄および球脊髄性筋委縮症（ケネディ病）、原発性側索硬化症、家族性痙性対麻痺、ウェルドニッヒ・ホフマン病、クーゲルベルク・ウェランダー病、テイ・サックス病、サンドホフ病、家族性痙性病、ヴォールファルト・クーゲルベルク・ウェランダ病、痙性対麻痺、進行性多巣性白質脳症、プリオン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー病、クールー病および致死性家族性不眠症からなる群から選択される。各可能性は、本発明の別の実施形態を表す。
【００３３】
別の態様において、本発明はさらに、損傷した脳領域への前駆細胞の移動、損傷した脳領域での神経分化、および損傷した神経回路の再建を含む中枢神経系における回復過程を刺激するまたは高める方法を提供し、該方法は上述の化合物または医薬組成物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む。
【００３４】
別の態様において、本発明は脳浮腫を阻止する、減少させる、または治療する方法を提供し、該方法は上述の化合物または医薬組成物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む。いくつかの実施形態において、治療される脳浮腫は、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、神経変性疾患、または感染症、毒物、およびレクリエーショナルドラッグ、一般用医薬品および／または処方薬の過剰摂取から選択される急性もしくは慢性の障害に起因する。各可能性は、本発明の別の実施形態を表す。
【００３５】
さらなる態様において、本発明は細胞、組織および／または器官のグラフティングもしくは移植を促進する方法を提供し、該方法は、上述の化合物または医薬組成物の有効量をそのような細胞、組織および／または器官に接触させることを含む。一実施形態において、細胞、組織および／または器官は、それを必要とする対象にグラフトまたは移植される。現在の好ましい一実施形態において、細胞、組織および／または器官は、それを必要とする対象の中枢神経系にグラフトまたは移植される。特定の一実施形態において、細胞、組織および／または器官は、脳に関連する。各可能性は、本発明の別の実施形態を表す。
【００３６】
さらなる一実施形態において、本発明はさらに、発達障害を有する対象、または発達障害を有するリスクがある対象において脳の発達を促進する方法を提供し、該方法は上述の化合物または医薬組成物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む。
【００３７】
いくつかの実施形態において、発達障害は、ハンチントン病、２１トリソミー症候群、脆弱Ｘ症候群、レット症候群、ウィリアムズ症候群、連鎖球菌感染症に関連する小児自己免疫性神経精神障害、シデナム舞踏病、トキソプラズマ症、神経梅毒、亜急性硬化性全脳炎、統合失調症、視覚消失に起因する自閉症もしくは発達障害、聴覚消失、（感覚遮断）、代謝障害（例えば糖尿病、フェニルケトン尿症）、栄養不良（例えば二分脊椎、無脳症、胎児性アルコール症候群）、先天性損傷もしくは乳児期もしくは小児期に生じる損傷からなる群から選択される。各可能性は、本発明の別の実施形態を表す。
【００３８】
別の実施形態において、本発明は、損傷領域にわたり、および標的領域内に軸索成長を誘発することによって病変部を修復する、および／または脊髄の修復を刺激する方法を提供し、該方法は上述の化合物または医薬組成物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む。
【００３９】
別の態様において、本発明は心血管疾患を阻止または治療する方法を提供し、該方法は上述の化合物または医薬組成物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む。好ましい一実施形態において、心臓血管疾患はハンチントン病に起因するまたは同疾患に関連している。別の実施形態において、心血管疾患は心不全、うっ血性心不全、心停止および心筋梗塞からなる群から選択される。各可能性は、本発明の別の実施形態を表す。
【００４０】
いくつかの実施形態において、本化合物または組成物は、脳障害および／または神経変性を発症するリスクがある対象に予防的に投与される。一部の実施形態において、前記対象は、脳損傷が持続するリスクがある、または神経変性疾患、脳浮腫もしくは心血管疾患を発症するリスクがある、または前記対象は移植候補者である。別の実施形態によれば、本化合物または組成物は、リスクの高い活動に関与している対象、脳障害および／または神経変性に関連した神経発達障害を発症するリスクがある乳児または小児、脳障害および／または神経変性に関連した遺伝性疾患を有するリスクがある対象、脳障害および／または神経変性に関連した加齢性神経疾患を発症するリスクがある対象からなる群から選択される対象に予防的に投与される。各可能性は、本発明の別の実施形態を表す。
【００４１】
本発明はさらに、脳障害および／またはその進行および／または症状の治療もしくは阻止のために上述の化合物または医薬組成物のいずれか１つを用いることに関する。
【００４２】
本発明はさらに、損傷に起因する脳障害を有する対象、または損傷に起因する脳障害を発症するリスクがある対象において、移動、増殖、接着および／または分化を活性化し、それによって喪失した脳細胞を補充することによって、中枢神経系障害を阻止する、減少させるまたは治療するために、上述の化合物または医薬組成物のいずれか１つを用いることに関する。
【００４３】
別の態様において、本発明は、神経変性疾患もしくはその症状を治療する、または阻止するために、上述の化合物または医薬組成物のいずれか１つを用いることに関する。
【００４４】
特定の態様において、本発明は、神経変性疾患を有する対象または神経変性疾患を発症するリスクがある対象においてプログラム細胞死を阻止するために、上述の化合物または医薬組成物のいずれか１つを用いることに関する。
【００４５】
さらなる態様において、本発明は、神経変性疾患を有する対象、または神経変性疾患を発症するリスクがある対象において、移動、増殖、接着および／または分化を活性化し、それによって喪失した脳細胞を補充することによって、中枢神経系障害を阻止する、減少させるまたは治療するために、上述の化合物または医薬組成物のいずれか１つを用いることに関する。
【００４６】
別の態様において、本発明は、損傷した脳領域への前駆細胞の移動、損傷した脳領域での神経分化、および損傷した神経回路の再建を含む中枢神経系における回復過程を刺激するまたは促進するために、上述の化合物または医薬組成物のいずれか１つを用いることに関する。
【００４７】
さらに別の態様において、本発明は、脳水腫を治療するまたは阻止するために、上述の化合物または医薬組成物のいずれか１つを用いることに関する。
【００４８】
さらなる態様において、本発明は、細胞、組織および／または器官のグラフティングまたは移植を促進するために、上述の化合物または医薬組成物のいずれか１つを用いることに関する。
【００４９】
別の態様において、本発明は、発達障害を有する対象、または発達障害を有するリスクがある対象において脳の発達を促進するために、上述の化合物または医薬組成物のいずれか１つを用いることに関する。
【００５０】
さらなる態様において、本発明は、損傷領域にわたり、および標的領域内に軸索成長を誘発することによって病変部を修復するおよび／または脊髄の修復を刺激するために、上述の化合物または医薬組成物のいずれか１つを用いることに関する。
【００５１】
さらに別の態様において、本発明は、心不全を伴う心血管疾患を治療する、または阻止するために、上述の化合物または医薬組成物のいずれか１つを用いることに関する。好ましい実施形態において、記載の心血管疾患は、ハンチントン病に起因する、または同疾患に関連している。
【００５２】
さらなる実施形態および本発明の適用性の完全な範囲は、以下に示す発明を実施するための形態から明らかになろう。しかし、本発明の趣旨および範囲内で種々の変更および修正が当業者にとって、この発明を実施するための形態から明らかになるので、本発明の好ましい実施形態を示しているが、発明を実施するための形態および特定の実施例は例証としてのみ示されていることが理解されよう。
【００５３】
図１は、化合物１（アルキル基としてメチルとエチルによって特徴付けられる）は、神経起源のＵ１１８ＭＧ細胞の培養においてグルタミン酸塩によって誘発される細胞死（脳損傷および神経変性の場合、グルタミン酸塩が細胞損傷効果を有する神経毒として作用し得る）を有意に減少させる。この保護はＴＳＰＯの制御下の細胞死過程を含む、すなわちミトコンドリア電位（ΔΨｍ）の崩壊およびカルジオリピン酸が阻止される。
【００５４】
図８は、Ｕ１１８ＭＧ細胞においてグルタミン酸塩によって誘発される細胞死からの保護を本発明の化合物１、５、６、７、８で示す。
【図面の簡単な説明】
【００５５】
【図１Ａ】グルタミン酸塩によって誘発される細胞死は、化合物１によって用量依存的に減少することを示す。重要なことには、化合物１は、それ自体は致死効果が極めて少ない。＃＃＃ｐ＜０．００１対溶媒対照群（対照）、＊ｐ＜０．０５対グルタミン酸塩曝露群（グルタミン酸塩）、＊＊＊ｐ＜０．００１対グルタミン酸塩曝露細胞群（グルタミン酸塩）。
【図１Ｂ】グルタミン酸塩によって誘発されたΔΨｍ崩壊は化合物１によって阻止されることを示す。＃＃ｐ＜０．０１対溶媒対照群（対照）、＊＊ｐ＜０．０１対グルタミン酸塩曝露群（グルタミン酸塩）。
【図１Ｃ】グルタミン酸塩によって誘発されたミトコンドリアレベルでのＲＯＳ生成は、化合物１によって減弱されることを示す。＃＃＃ｐ＜０．００１対溶媒対照群（対照）、＊＊＊ｐ＜０．００１対グルタミン酸塩曝露細胞群（グルタミン酸塩）。
【図２】ｉｎ  ｖｉｔｒｏで化合物２（ＣｌとＦによってハロゲン化された回転可能なフェニル環によって特徴付けられる）の保護特性を示す。ｎ＝４、結果は平均±ＳＥＭとして表す。一元配置分散分析は、ｐ＜０．０００１を示し、ボンフェローニ多重比較検定は、グルタミン酸塩対グルタミン酸塩＋化合物２（５〜５０μＭ）に対してｐ＜０．００１を示した。白いカラムは、化合物なし（０）でまたは化合物２（１、５、１０、２５、５０μＭ）と共にグルタミン酸塩への曝露を示す。黒いカラムは、化合物２のみでの処理を示す。
【図３】ｉｎ  ｖｉｔｒｏで化合物３（２つの位置でＣｌによってハロゲン化された回転可能なフェニル環による特徴付けられる）の保護特性を示す。ｎ＝４、結果は平均±ＳＥＭとして表す。＊＊＊：一元配置分散分析は、ｐ＜０．０００１を示し、ボンフェローニ多重比較検定は、グルタミン酸塩対グルタミン酸塩＋化合物３（５〜５０μＭ）に対してｐ＜０．００１を示した。白いカラムは、化合物なし（０）でまたは化合物３（１、５、１０、２５、５０μＭ）と共にグルタミン酸塩への曝露を示す。黒いカラムは、化合物３のみでの処理を示す。
【図４】化合物４（Ｂｒによってハロゲン化された回転可能なフェニル環による特徴付けられる）は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでグルタミン酸塩の致死効果に対して、ＳＨ  ＳＹ  ６Ｙ細胞系から神経細胞を保護することを示す。ｎ＝６、＊＊＝ｐ＜０．０１  ポストホックとしてマン・ホイットニー検定を行う一元配置分散分析。対照群：グルタミン酸塩曝露なし、および化合物４の処理なし。化合物４群：化合物４の処理のみ。グルタミン酸塩群：グルタミン酸塩曝露のみ。化合物４＋グルタミン酸塩群：グルタミン酸塩処理と共にグルタミン酸塩の曝露
【図５】Ａ−Ｂ。動物モデルにおける化合物１の効果を示す。Ａ）溶媒処置（ＤＭＳＯ）および偽処置（生理食塩水）を受けたハンチントン病のトランスジェニックＲ６−２マウスに比べて、化合物１は、Ｒ６−２マウスの平均寿命を上げている。Ｒ６−２マウスは、ハンチントンの神経変性疾患のトランスジェニックマウスモデルである。ＤＭＳＯ処置Ｒ６２−２マウスと生理食塩水処置Ｒ６−２マウスの間に相違は見られなかった。Ｂ）ＤＭＳＯ処置と生理食塩水処置のＲ６−２マウスに比べて、従来技術の比較化合物Ａはこのハンチントン病モデルにおいて効果がない。また、古典的ＴＳＰＯリガンドＰＫ１１１９５は、このハンチントン病モデルにおいてまったく効果がない（データ図示せず）。
【図６】溶媒処置（この図ではＤＭＳＯを示す）Ｒ６−２マウスおよび偽処置（生理食塩水処置は図示せず）Ｒ−２マウスに比べて、化合物１がＲ６−２マウスの自発運動を向上させことを示す。従来技術の比較化合物Ａはこのハンチントン病モデルにおいてまったく効果がない（データ図示せず）。また、古典的ＴＳＰＯリガンドＰＫ１１１９５は、このハンチントン病モデルにおいてまったく効果がない（データ図示せず）。＊＊ｐ＜０．００１  化合物１処置Ｒ６−２マウス対溶媒処置Ｒ６−２マウス（ＤＭＳＯ）。
【図７】化合物Ａと比較して、本発明の化合物１、５、６、７、８の機能特性を示す。アルキル修飾（Ｋｉ約６０ｎＭ）によってもたらされた「中等度」の親和性は、最適な保護をもたらす（化合物１および化合物６）。ハロゲンを回転可能なフェニルに付加することによって保護が向上し、および「高」濃度（１００μＭ）で致死効果を減少させる（化合物５、６、８）。アルキル側鎖をさらに伸長すると、ＴＳＰＯに対して比較的強い親和性をもたらす（化合物７、８）。アルキル修飾とハロゲン化を組み合わせて誘導化合物を生成すると、本スキームにおいて他のすべての化合物と比べて、グルタミン酸塩に対する保護効果がさらに向上する、例えば化合物６。詳細については、図８および９を参照されたい。
【図８Ａ】参照化合物Ａ（米国特許第８，５４１，４２８号）による、Ｕ１１８ＭＧ細胞においてグルタミン酸塩によって誘発される細胞死からの保護を示す。
【図８Ｂ】化合物５による、Ｕ１１８ＭＧ細胞においてグルタミン酸塩によって誘発される細胞死からの保護を示す。
【図８Ｃ】（＝図１Ａ）化合物１による、Ｕ１１８ＭＧ細胞においてグルタミン酸塩によって誘発される細胞死からの保護を示す。
【図８Ｄ】化合物６による、Ｕ１１８ＭＧ細胞においてグルタミン酸塩によって誘発される細胞死からの保護を示す。
【図８Ｅ】化合物７による、Ｕ１１８ＭＧ細胞においてグルタミン酸塩によって誘発される細胞死からの保護を示す。
【図８Ｆ】化合物８による、Ｕ１１８ＭＧ細胞においてグルタミン酸塩によって誘発される細胞死からの保護を示す。＃ｐ＜０．０５対溶媒対照群（対照）、＃＃＃ｐ＜０．００１対溶媒対照群（対照）、＊ｐ＜０．０５対グルタミン酸塩曝露群（グルタミン酸塩）、＊＊＊ｐ＜０．００１対グルタミン酸塩曝露細胞群（グルタミン酸塩）。
【図９】Ａ−Ｂ。培養において有害な、望ましくない細胞死効果の減少を示す。図７および８に示す化合物を１００μＭ（すなわち高濃度）適用することにより認められる効果の比較概要。本発明の化合物の望ましくない致死効果は、ハロゲン化によって最小源に抑えられる。この概要は、Ｃｌによるハロゲン化が１００μＭの濃度で致死効果を減少させる、すなわち保護特性だけが残る。Ａ）化合物Ａ、化合物１および化合物７のハロゲン化により、それぞれ化合物５、化合物６および化合物８を得、培養においてこの高濃度の細胞死作用を減少させる。Ｂ）ハロゲン化化合物５、化合物６および化合物８は、対応する非ハロゲン化化合物Ａ、化合物１および化合物７よりも、培養においてグルタミン酸塩の細胞死作用をさらにもっと減少させる。抑制されてない場合、グルタミン酸塩それ自体は、一般的に細胞の５０〜６０％を死滅させるが、化合物６を１００μＭの最適以下用量で用いても、細胞のわずか５％がグルタミン酸塩によって死滅される。この提示から、化合物５が最少の有害な副作用を示すと結論付けることもできる。
【図１０】細胞培養において、グルタミン酸塩と共に与えられた化合物１は、軸索に似ている神経突起の伸長によって特徴付けられる、ニューロン型細胞へのＰＣ１２細胞の分化を誘発することができる。本発明の他の化合物には、同じ効果がある（一方、報告によれば、古典的ＴＳＰＯリガンドはこの種の分化に関して効果的でない）。三角形は、化合物１の適用によって誘発された軸索に似ている神経突起を示す。矢印は、潜在的接触部位を示す。
【図１１】Ｘ線で決定した化合物１の球棒構造を示す。
【図１２】化合物６（化合物１のハロゲン化誘導体）は、溶媒処置（ＤＭＳＯ）Ｒ−２マウスと比べて、Ｒ６−２マウスの寿命を上げていることを示す。垂直線は、各処置群における寿命の中央値を表す。
【図１３】化合物５（化合物Ａのハロゲン化誘導体）は、溶媒処置（ＤＭＳＯ）Ｒ−２マウスと比べて、Ｒ６−２マウスの寿命を上げていることを示す。垂直線は、各処置群における寿命の中央値を表す。
【発明を実施するための形態】
【００５６】
本発明は、新規の複素環式化合物、例えば、好ましくは式（Ｉ）のアミド基に結合した一組の不斉アルキル鎖を有するキナゾリン骨格、および／または式（Ｉ）の回転可能なフェニル環に結合した種々のハロゲン、ならびに本明細書に記載の式１、２、３、４、５、６．７および８の構造によって表される個々の化合物に関する。本発明の化合物、特に化合物１は、ＴＳＰＯに効果的に結合してその細胞死機能を調節し、ならびに遺伝子発現、細胞周期、移動、増殖、分化および関連する組織の発育と修復も調節することができる。本発明は、該化合物を含有する医薬組成物と、急性事象（例えば、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）およびその後遺症）、慢性事象（例えば、感染症、毒物および／または薬物の使用）に起因する脳障害、および神経変性疾患と関連する障害の治療および阻止での治療用途とを含む。
【００５７】
化合物
一実施形態において、本発明は、式（Ｉ）の構造によって表され、塩、溶媒和化合物、多形体およびその混合物を含む化合物を提供する。
【００５８】
【化２】
0006498695.tif 000003
（式中Ｒ１およびＲ２は、互いに独立して直鎖状または分枝状のＣ１−Ｃ１２アルキルであり、
Ｒ３はハロゲンであり、および
ｎは０、１、２、３、４または５であり；
ただし、ｎが０のとき、Ｒ１はＲ２と異なる。）
【００５９】
一実施形態において、Ｒ１およびＲ２は、各々Ｃ１−Ｃ４アルキルである。現在の一部の好ましい実施形態において、該化合物は、式（Ｉ）の構造によって表され、Ｒ１およびＲ２が互いに独立して、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチルおよびｔｅｒｔ−ブチルからなる群から選択される。
【００６０】
現在の別の好ましい実施形態において、該化合物は、式（Ｉ）の構造によって表され、Ｒ１およびＲ２が同じであり（それによって対称アミドを形成する）、およびｎが０以外である。現在の別の好ましい実施形態において、該化合物は、式（Ｉ）の構造によって表され、Ｒ１およびＲ２が互いに異なっている（それによって不斉アミドを形成する）。本発明の原則によれば、ｎが０（すなわち、Ｒ３が存在しない）のとき、Ｒ１およびＲ２は互いに異なっている。しかし、ｎが０以外であるハロゲン化誘導体の場合、Ｒ１とＲ２は同じ（対称アミド）か、または互いに異なっている（不斉アミド）。
【００６１】
好ましい一実施形態において、式（Ｉ）の化合物中のｎは０である。好ましい別の実施形態において、式（Ｉ）の化合物中のｎは１である。好ましい別の実施形態において、式（Ｉ）の化合物中のｎは２である。他の可能性は、ｎが３、４または５を含む。現在の好ましいＲ３基は、Ｃｌ、ＢｒもしくはＦ、またはその組み合わせである。各可能性は、本発明の別の実施形態を表す。本発明の代表的な化合物は、化合物１、２，３、４、５、６、７および８から選択され、以下に示される。
【００６２】
【化３】
0006498695.tif 000004
0006498695.tif 000005
【００６３】
一実施形態において、式（Ｉ）の化合物のアミド部分の鎖長を増やすことで、ＴＳＰＯへの結合親和性が大幅に高まることが発見されたのは予想外であった。
このように、一実施形態において、Ｒ１およびＲ２が互いに独立してＣ２−Ｃ１２のアルキルである本発明の化合物が現在好ましい。
【００６４】
別の実施形態において、不斉アミドを含む化合物が対称アミドを有するその対応物よりも効力が高いことが発見されたのは予想外であった。このように、一実施形態において、Ｒ１がＲ２と異なっている式（Ｉ）の化合物が現在好ましい。
【００６５】
別の実施形態において、回転可能なフェニル環上にハロゲン（複数可）を取り込むことによって、細胞培養において、ハロゲン化がないが同じ構造の高濃度の化合物によって誘発される望ましくない致死効果を阻止する、または減少させることが発見されたのは予想外であった。このように、一実施形態において、フェニル環上に１または複数のハロゲンを含有する式（Ｉ）の化合物が現在好ましい。
【００６６】
上記の属性の組み合わせも、考察されており、本発明の別の実施形態を表す。
例えば、不斉アミドおよびハロゲン化フェニル環を含有する化合物（例えば、化合物６）は、本発明の好ましい実施形態を表す。
【００６７】
一実施形態において、本発明は、薬学的に許容される担体と、有効成分として式（Ｉ）によって表される化合物または式１、２、３、４、５、６、７もしくは８のいずれか１つから選択される化合物とを含む医薬組成物を提供する。
化学定義
【００６８】
本明細書に用いる「アルキル」という用語は、直鎖状基および分枝状基を含む、任意の飽和脂肪族炭化水素を指す。一実施形態において、アルキル基は、本明細書でＣ１−Ｃ１２アルキルと表す１〜１２の炭素を有する。別の実施形態において、アルキル基は、本明細書でＣ１−Ｃ６アルキルと表す１〜６の炭素を有する。別の実施形態において、アルキル基は、本明細書でＣ１−Ｃ４アルキルと表す１〜４の炭素を有する。アルキル基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、すべてのその異性体を含むペンチル、すべてのその異性体を含むヘキシル、すべてのその異性体を含むヘプチル、すべてのその異性体を含むオクチル、すべてのその異性体を含むノニル、すべてのその異性体を含むデシル、すべてのその異性体を含むウンデシル、およびすべてのその異性体を含むドデシルが挙げられるが、これらに限定されない。同様に、「アルキレン」という用語は、アルキル基が２つの位置で結合して、２つの別々の付加基（例えばＣＨ２）同士を結合している二価基を意味する。
【００６９】
アルキル基は、無置換であり得、またはハロゲン基、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキルアリールオキシ基、ヘテロアリールオキシ基、オキソ基、シクロアルキル基、フェニル基、ヘテロアリール基、ヘテロシクリル基、ナフチル基、アミノ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、ヘテロアリールアミノ基、ジアルキルアミノ基、ジアリールアミノ基、アルキルアリルアミノ基、アルキルヘテロアリールアミノ基、アリールヘテロアリールアミノ基、アシル基、アシロキシ基、ニトロ基、カルボキシ基、カルバモイル基、カルボキサミド基、シアン基、スルホニル基、スルホニルアミノ基、スルフィニル基、スルフィニルアミノ基、チオール基、Ｃ１−Ｃ１２アルキルチオアリールチオ基またはＣ１−Ｃ１２アルキルスルホニル基からなる群から選択される１または複数の置換基で置換され得る。いずれの置換基も無置換基であり得る、または上述の置換基のいずれか１つとさらに置換され得る。
【００７０】
本明細書に単独で、または別の基の一部として用いる場合、「ハロゲン」という用語は、塩素（Ｃｌ）、臭素（Ｂｒ）、フッ素（Ｆ）およびヨウ素（Ｉ）を指す。
【００７１】
本発明の化合物の１つまたは複数は、塩として存在することもある。「塩」という用語は、塩基性付加塩および酸付加塩の両方を包含し、例えば有機酸付加もしくは無機酸付加のアミン窒素の塩があるが、これに限定されない。
そのような酸としては、塩酸、フッ化水素酸、トリフルオロ酢酸、硫酸、リン酸、酢酸、コハク酸、クエン酸、乳酸、マレイン酸、フマル酸、パルミチン酸、コール酸、パモ酸、粘液酸、Ｄ−グルタミン酸、Ｄ−樟脳酸、グルタル酸、フタル酸、酒石酸、ラウリン酸、ステアリン酸、サルチル酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ソルビン酸、ピクリン酸、安息香酸、桂皮酸などが挙げられる。
【００７２】
本発明は、式（Ｉ）の化合物の溶媒和化合物およびその塩も含む。「溶媒和化合物」とは、１または複数の溶媒分子を有する本発明の化合物の物理的結合を意味する。この物理的結合は、様々な程度のイオン結合および共有結合、例えば水素結合を含む。いくつかの例において、溶媒和化合物は単離することができる。「溶媒和化合物」は、溶液相溶媒和化合物と単離可能な溶媒和化合物の両方を包含する。好適な溶媒和化合物の非限定例としては、エタノラート、メタノラートなどが挙げられる。「水和物」とは、溶媒分子が水の溶媒和化合物である。
【００７３】
本発明は、式（Ｉ）の化合物の多形体およびその塩も含む。「多形体」という用語は、Ｘ線回析、ＩＲスペクトル、融点などの特定の物性によって特徴付けることができる、物質の特定の結晶状態を指す。
治療用途
【００７４】
グリアは脳細胞の大部分を構成しており、健常な神経細胞を維持し、および保護するのに役立っている。現在では、グリアが神経変性の進行において重要な要因を示すことが認識されている。本発明は、第一に、アストログリア、ミクログリアおよびオリゴデンドロサイトを含むグリアを、損傷および疾患に起因する脳障害の治療のための主要な場として実際に考える。
【００７５】
さらに、ミトコンドリア膜電位（ΔΨｍ）の崩壊は、二次性脳損傷および脳変性疾患に起因する神経細胞死を引き起こす諸要因の中でも中心的役割を果たすように見える。これが示唆することは、脳損傷を被った直後、このΔΨｍの調節を標的にすることはＴＢＩのための著しい治療との関連を有することである。ＴＳＰＯはこれらの機序のための主成分であるので、本発明は、いずれの種類の脳損傷、神経変性疾患および関連病態に関連する脳障害を治療するためにＴＳＰＯを標的にする。
【００７６】
好ましい実施形態において、本発明の化合物は、現在、利用できる治療法よりも優れた方法で、細胞死の阻止、例えば、脳損傷および／または神経変性疾患に起因して起こるプログラム細胞死の阻止、との組み合わせでＴＳＰＯに効果的に結合する。
【００７７】
さらに、免疫応答、炎症、細胞増殖、細胞移動、細胞分化、神経突起伸長などに関して修復特性を活性化し、促進にする本発明の化合物の能力は、上述の脳障害、および薬物の過剰摂取、毒性障害に起因する種々の種類の脳障害の治療的処置に適用することができる。
【００７８】
上記のように、本発明の化合物は、神経細胞、すなわちグリアおよび／またはニューロンにおける根本的なプログラム細胞死レベルを阻止する／減少させる、例えば、神経変性および脳内の細胞死と細胞障害の根底にある過程において重要な作用薬であることが知られている、グルタミン酸塩によって誘発される細胞死を減弱させる。さらに、これらの化合物は、神経変性および脳障害の進行の一因となる他の薬剤による細胞死誘発を阻止する／減少させる。このように、本発明の化合物は、神経変性、進行性脳外傷および関連する障害の一因となっている要因の全てとまではいかないが、ほとんどに起因する細胞死を阻止する。加えて、本発明の化合物は、損傷した脳領域を補充し、損傷した神経回路を、ニューロンを含む新しい脳細胞によって再建し、ならびに脳細胞の分化を刺激することによって該損傷脳領域の修復に寄与することができる。したがって、本発明の化合物は、神経変性疾患および脳損傷後の進行性脳障害の阻止、治療に有用であり、症状改善に加えて、実際の治癒をもたらす可能性がある。
【００７９】
本発明の化合物は、プログラム細胞死から、古典的ＴＳＰＯリガンドよりも良好な保護を提供する。さらに、細胞培養において古典的ＴＳＰＯリガンドで見られる問題と対照的に、本発明の化合物は、高濃度で古典的ＴＳＰＯリガンドほど毒性でなく、あるいは全く毒性でない。さらに、本発明の化合物は、グルタミン酸塩などのアポトーシス誘発因子のアポトーシス性レベルを高めることはないが、古典的ＴＳＰＯリガンドは細胞培養において（特に、５０μＭ以上の高濃度で）高めることはあり得る。したがって、本発明の化合物は、古典的ＴＳＰＯリガンドと比較して、特に有利である。加えて、本発明の化合物は、米国特許第８，５４１，４２８号に開示されている化合物と比べて、予想外に、ＴＳＰＯへの効果的な親和性に細胞保護能力を組み合わせている。さらに、ハンチントン病の動物モデル（Ｒ６−２マウス）において、本発明の化合物（例えば化合物１）は、寿命の延長および自発運動の増加などの良好な特性を示すが、一方、古典的ＴＳＰＯリガンドおよび米国特許第８，５４１，４２８号に開示されている化合物にはＲ６−２モデルにおいてこれらのプラス効果が全く欠如している。別の実験において、化合物５および化合物６が振戦行動の出現を低下させることがさらに判明した。本発明の化合物が、病理的行動作用と、致死性などの他の症状とを含む実質的な神経保護特性を有し、したがって、脳損傷後の二次性脳障害、脳手術、神経変性疾患ならびに関連する障害、例えば、感染症、毒性障害、および薬物（レクリエーショナルドラッグ、一般用医薬品、処方薬を含む）の過剰摂取に起因する脳障害を治療および阻止するために用いることができることを、これらの特性は示している。
【００８０】
本発明の化合物は、予想外に、ＴＳＰＯへの効果的な親和性に、細胞において細胞死レベルを減少させる、特に、外傷性脳損傷後に二次性脳障害を引き起こす重要な作用薬であり、また神経変性疾患に関与することが知られている神経毒性物質による細胞死レベルを減少させる、極めて効果的な能力を組み合わせる。さらに、回転可能なフェニル環上のハロゲン（複数可）は、細胞培養において、ハロゲン化がないが同じ構造の高濃度（１００μＭ）の化合物によって誘発される望ましくない致死効果を阻止する、または減少させる。これらの態様において、本発明の化合物は、既知のＴＳＰＯリガンドより優れている。本化合物は、そのような障害を治療するために、現在利用できるいかなる化合物よりも優れている。したがって、本発明の化合物は、いかなる種類の脳障害、例えば外傷性脳損傷（ＴＢＩ）に起因する脳障害および／または、例えば戦争、テロリズム、交通事故（例えば自動車事故、非自動車両事故など）、スポーツ傷害、暴力犯罪、家庭内事故、児童虐待、家庭内暴力、業務関連事故、銃創に付随するＴＢＩに起因する二次脳損傷の治療および阻止に役立つ。他の種類の脳損傷は、毒性障害、いかなる種類の感染症およびレクリエーショナルドラッグ、一般用医薬品または処方薬の過剰摂取による場合もある。本化合物は、脳損傷に関連する高リスク状況で、予防的に適用されることもできる。本発明の化合物は、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、ルー・ゲーリッグ病、多発性硬化症、自己免疫障害その他などの神経変性疾患を治療する、および阻止する際にも役立つ。さらなる治療指標を以下に記載する。
【００８１】
神経変性および神経変性疾患
一態様において、本発明は、神経変性疾患またはその症状を治療する、または阻止する方法を提供し、該方法は、上述の本発明の化合物またはそのような化合物を含む医薬組成物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む。別の実施形態において、本発明は、神経変性疾患またはその症状を治療する、または阻止する際に、上述の化合物または医薬組成物のいずれか１つを用いることに関する。
【００８２】
別の態様において、本発明は、神経変性疾患の対象または神経変性疾患を発症するリスクがある対象において神経変性を阻止する（例えば細胞アポトーシスを阻止することによって）方法を提供し、該方法は上述の本発明の化合物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む。別の実施形態において、本発明は、神経変性疾患の対象または神経変性疾患を発症するリスクがある対象において神経変性を阻止する（例えば細胞アポトーシスを阻止することによって）際に、上述の化合物または医薬組成物のいずれか１つを用いることに関する。
【００８３】
別の態様において、本発明は、問題になっている中枢神経領域中におよび該領域において必要な細胞の移動、増殖、分化および／または接着、ならびに免疫応答および炎症の他の必要な調節の過程を介して喪失した脳細胞の補充を活性化または促進することによって、中枢神経障害を阻止する、減少させる、または治療する方法を提供する。該方法は、本明細書に記載の本発明の化合物、またはそのような化合物を含む医薬組成物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む。本発明はさらに、移動、増殖、接着および／または分化を活性化し、それによって、それを必要とする対象において喪失した脳細胞を補充することによって、中枢神経系障害を阻止する、減少させるまたは治療するために、上述の化合物または医薬組成物のいずれか１つを用いることに関する。一部の実施形態において、対象は神経変性疾患を有する、または神経変性疾患を発症するリスクがある。
【００８４】
一般に、中枢神経系の疾患は神経変性と呼ばれ、依然としてほとんど不明の理由で生じる神経細胞死が徐々に発展し、容赦なく進行することによって特徴付けられることを示す。したがって、中枢神経系の疾患は、感染症、代謝障害および中毒によって誘発される同等の状態とは異なる。神経変性として分類されている障害のかなりの部分は、優性遺伝または劣性遺伝のいずれかの遺伝的なものである。しかし、他の部分は、ある所定の家系における例外的な症例として、散発的にのみ生じ、その原因は一般的に不明である。変性疾患の分類は、原因または病理発生に関する正確な知識にも基づいて行うことができず、個々の症候群への変性疾患の細区画は、主に神経病理学的所見および臨床所見をベースにした記述的基準に基づく。この疾患群は、いくつかの異なった臨床症候を示し、それを認識することで臨床医が診断に達することを支援することができる。本発明の化合物は、それが、機械的損傷、疾患、感染症、毒性障害および薬物の過剰摂取、例えばレクリエーショナルドラッグ、一般用医薬品または処方薬もしくはその他であろうが、いかなる種類の脳障害を治療するようにデザインされている。
【００８５】
本発明と関連して神経変性疾患の例としては、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、ルー・ゲーリッグ病、多発性硬化症、自己免疫障害、ピック病、びまん性レヴィー小体病、進行性核上性麻痺（スティール・リチャードソン症候群）、多系統神経変性（シャイ・ドレーガー症候群）、運動ニューロン疾患、筋萎縮性側索硬化症、変性運動失調症、皮質基底核変性症、グアム型筋委縮性側索硬化症−パーキンソン病−認知症複合、亜急性硬化性全脳炎、シヌクレイン病、原発性進行性失語症、線条体黒質変性症、マシャド・ジョセフ病／脊髄小脳失調症３型とオリーブ核橋小脳変性、ジルドラトゥレット病、球麻痺と仮性球麻痺、脊髄および球脊髄性筋委縮症（ケネディ病）、原発性側索硬化症、家族性痙性対麻痺、ウェルドニッヒ・ホフマン病、クーゲルベルク・ウェランダー病、テイ・サックス病、サンドホフ病、家族性痙性病、ヴォールファルト・クーゲルベルク・ウェランダ病、痙性対麻痺、進行性多巣性白質脳症、クロイツフェルト・ヤコブ病を含むプリオン病、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー病、クールー病および致死性家族性不眠症が挙げられる。
【００８６】
脳損傷および脳障害
別の態様において、本発明は、脳障害および／またはその進行および／または症状を治療する、または阻止する方法を提供し、該方法は上述の本発明の化合物または医薬組成物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む。一部の実施形態において、脳障害は、外傷性脳障害（ＴＢＩ）およびＴＢＩの結果として生じ、その後進行する二次性脳損傷などの急性事象から生じる脳損傷に起因する。一部の態様において、本発明は、問題になっている中枢神経領域中に必要な細胞の移動、増殖、分化および接着、ならびに免疫応答および炎症の他の必要な調節の過程を介して喪失した脳細胞の補充を活性化または促進することによって、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）に起因する脳障害またはＴＢＩから生じる二次性脳障害の進行を阻止する、または治療する方法を提供する。
該方法は、上述の本発明の式の化合物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む。
【００８７】
本発明は、脳障害および／または症状および／または脳障害の進行を治療する、または阻止するための薬物の製造における、本発明の化合物の使用に関する。脳障害は、例えば、いかなる種類の脳損傷によって引き起こされ得る。
【００８８】
別の態様において、本発明はさらに、損傷に起因する脳障害を有する対象、もしくは損傷に起因する脳障害を発症するリスクがある対象において、上述の化合物または医薬組成物の有効量を前記対象に投与することによって、移動、増殖、接着および／または分化を活性化し、それによって喪失した脳細胞を補充することによって、中枢神経系障害を阻止する、減少させるまたは治療する方法を提供する。
【００８９】
一実施形態において、脳損傷は急性事象、例えば、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）に起因する。別の実施形態において、脳障害は、ＴＢＩから生じる二次性脳障害であり、それは継続する慢性過程を表する。別の実施形態において、これは、二次性脳障害または神経変性に関与する作用薬、例えば、グルタミン酸塩、グルタミン酸塩以外のグルタミン酸受容体リガンド、低酸素模倣剤、一酸化窒素発生剤、アポトーシス誘発剤、ステロイド剤、塩化アンモニウム、毒性化合物またはＡＴＰ産生を妨害する作用薬に関する。別の実施形態において、脳障害は、感染症、毒物および薬物の過剰摂取、例えばレクリエーショナルドラッグ、一般用医薬品および／または処方薬などの慢性障害に起因する。
【００９０】
一実施形態において、脳損傷は外傷性脳損傷（ＴＢＩ）である。本明細書に考察するように、本発明の化合物は、ＴＢＩから生じる二次性脳障害を阻止するおよび治療するのに特に役立つ。このように、本発明の化合物は、例えば、戦場で兵士、特にＴＢＩを被っている兵士を治療するのに役立つ。例えば、兵士がＴＢＩを受けた後、できるだけ早急に現場で本化合物が投与されることができるように、例えば、救急医療隊員におよび／または戦場において、もしくは危機にひんした、もしくはテロリスト攻撃現場で兵士に本発明の化合物を供給することによって、本発明の化合物を兵士に投与し、ＴＢＩに起因する二次性脳障害を阻止することができる。本発明の化合物は、暴力犯罪、例えば、これに限定されないが、テロリスト攻撃および脳障害を起こし得るいかなる他の災難の犠牲者である一般市民にとっても役立つ。これによって、テロリスト攻撃を含む敵対行為、ならびに他の犯罪および事故のために被ったＴＢＩの後遺症において現在生じている能力障害の出現を減少させることができる。
【００９１】
本発明の化合物の有用性は、戦争およびテロリスト攻撃などの暴力犯罪に限定されない。本発明の化合物は、例えば、交通事故（例えば自動車事故および非自動車両事故など）、スポーツ傷害、業務関連事故、家庭内事故、児童虐待、家庭内暴力、銃創など、能力障害およびてんかんなどの現象の結果を含み、家庭内出来事に起因する脳損傷を被る個人にとっても役立つ。別の実施形態において、特定の状況下では、本化合物は、中枢神経系障害の出現率が極めて高いスポーツに関して予防的に投与することができる。
【００９２】
関連した態様において、本発明は、損傷した脳領域への前駆細胞の移動、損傷した脳領域での神経分化、および損傷した神経回路の再建を含む、中枢神経系における回復過程を刺激するまたは促進する方法を提供する。該方法は、上述の本発明の化合物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む。本発明はさらに、中枢神経系における回復過程を刺激するまたは促進するために、上述の化合物または医薬組成物のいずれか１つを用いることに関する。
【００９３】
心血管疾患
心不全は、ハンチントン病のモデルマウスのＲ６−２マウスでの主な死因である。この現象は、遺伝的状態、ならびそれに伴うストレスに関連しているように見える。本発明の化合物がＲ６−２マウスにおいて心不全を阻止することが現在では発見されている。このように、別の態様において、本発明は、心血管疾患、特に心不全を阻止または治療する方法を提供し、該方法は上述の化合物または医薬組成物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む。好ましい一実施形態において、心血管疾患は、ハンチントン病に起因する、または関連している。本発明は、心血管疾患、特に心不全を阻止または治療するために上述の化合物または医薬組成物のいずれか１つを用いることに関する。
【００９４】
他の治療指標
一態様において、本発明は脳浮腫を阻止する、減少させる、または治療する方法を提供し、該方法は上述の化合物または医薬組成物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む。本発明はさらに、脳水腫を治療する、または阻止するために上述の化合物または医薬組成物のいずれか１つを用いることに関する。脳浮腫は、上述のように外傷性脳損傷、神経変性疾患および／または急性障害もしくは慢性障害から生じることもあり得る。
【００９５】
さらなる態様において、本発明の化合物は、グラフト／移植によって病変組織および損傷組織の置換を支持する。この実施形態に従って、本発明はさらに、細胞、組織および／または器官を上述の化合物または医薬組成物の有効量と接触させることによって、そのような細胞、組織および／または器官のグラフティングまたは移植を促進する方法を提供する。現在の好ましい一実施形態において、グラフトまたは移植される細胞の標的領域は、中枢神経系である。具体的な一実施形態において、細胞、組織および／または器官は、脳に関連する。本発明はさらに、細胞、組織および／または器官のグラフティングもしくは移植を促進するために、上述の化合物または医薬組成物のいずれか１つを用いることに関する。
【００９６】
さらなる実施形態において、本発明はさらに、発達障害を有する対象、または発達障害を有するリスクがある対象において脳の発達を促進する方法を提供し、該方法は上述の化合物または医薬組成物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む。本発明の化合物は、発達障害を治療するために用いることができ、本発明と関連して、そのような発達障害の例としては、ハンチントン病、２１トリソミー症候群、脆弱Ｘ症候群、レット症候群、ウィリアムズ症候群、連鎖球菌感染症に関連する小児自己免疫性神経精神障害、シデナム舞踏病、トキソプラズマ症、神経梅毒、亜急性硬化性全脳炎、統合失調症、視覚消失に起因する自閉症もしくは発達障害、聴覚消失、（感覚遮断）、代謝障害（例えば糖尿病、フェニルケトン尿症）、栄養不良（例えば二分脊椎、無脳症、胎児性アルコール症候群）、先天性損傷もしくは乳児期もしくは小児期に生じる損傷が挙げられるが、これに限定されるものではない。本発明はさらに、発達障害を有する対象、または発達障害を有するリスクがある対象において脳の発達を促進するために、上述の化合物または医薬組成物のいずれか１つを用いることに関する。
【００９７】
別の実施形態において、本発明は、損傷領域にわたり、および標的領域内に軸索成長を誘発することによって病変部を修復する、および／または脊髄の修復を刺激する方法を提供し、該方法は上述の化合物または医薬組成物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む。本発明はさらに、病変部を修復するためおよび／または脊髄の修復を刺激するために、上述の化合物または医薬組成物のいずれか１つを用いることに関する。
【００９８】
上記のように、本発明の化合物は、１）予防的作用、２）進行する障害（例えば脳障害）および疾患（例えば神経変性）への抵抗、３）自己修復の刺激、および４）病変および損傷組織のグラフト／移植による置換の補助などの作用様式のうちの１つまたは複数で用いられてもよい。このように、いくつかの実施形態において、上述の化合物または組成物は、脳障害および／または神経変性を発症するリスクがある対象に予防的に投与される。一部の実施形態において、前記対象は、脳損傷が持続するリスクがある、または神経変性疾患、脳浮腫もしくは心血管疾患を発症するリスクがある、または前記対象は移植候補者である。一部の実施形態によれば、予防的に投与される化合物または組成物は、リスクの高い活動に関与している対象、脳障害および／または神経変性に関連した神経発達障害を発症するリスクがある乳児または小児、脳障害および／または神経変性に関連した遺伝性疾患を有するリスクがある対象、ならびに脳障害および／または神経変性に関連した加齢性神経疾患を発症するリスクがある対象からなる群から選択される対象に予防的に投与される。
【００９９】
上述の方法のいずれかの好ましい一実施形態において、化合物は式（Ｉ）の構造によって表される。別の好ましい実施形態において、化合物は式１の構造によって表される。別の好ましい実施形態において、化合物は式２の構造によって表される。別の好ましい実施形態において、化合物は式３の構造によって表される。別の好ましい実施形態において、化合物は式４の構造によって表される。別の好ましい実施形態において、化合物は式５の構造によって表される。別の好ましい実施形態において、化合物は式６の構造によって表される。別の好ましい実施形態において、化合物は式７の構造によって表される。別の好ましい実施形態において、化合物は式８の構造によって表される。各可能性は、本発明の別の実施形態を表す。
【０１００】
本明細書に用いる場合、「投与する」という用語は、本発明の化合物と接触させることを指す。投与は、細胞または組織培養物に対して、または生物、例えばヒトに対してなされ得る。一実施形態において、本発明は、本発明の化合物をヒト対象に投与することを包含する。
【０１０１】
「治療」処置または「効果的」処置とは、病態の徴候を示す対象に、それらの徴候を減少させる、または取り除く目的で投与される処置である。本発明の化合物の「治療有効量」または「有効量」とは、その化合物が投与される対象に有益効果をもたらすのに十分な化合物の量である。本発明による効果的処置の例としては、本明細書に記載のＴＢＩまたはいずれかの神経変性疾患の症状の１または複数を減少させるもしくは改善すること、寿命を延長させること、運動活性を増加させること、認識能力と他の脳機能を増強すること、ならびにＴＢＩおよび／または神経変性疾患の進行を阻止することが挙げられるが、これに限定されない。同様に、本発明の化合物を用いて、感染症、毒性障害、薬物の過剰摂取、例えばレクリエーショナルドラッグ、一般用医薬品および／または処方薬などに起因する脳障害を治療することができる。
【０１０２】
本明細書に用いる場合、「脳浮腫」という用語は、脳の細胞内空間または細胞外空間内に過剰体液が蓄積された状態を指す。本発明と関連して脳水腫は、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、神経変性疾患、または感染症、毒物および薬物の過剰摂取、例えばレクリエーショナルドラッグ、一般用医薬品および／または処方薬から選択される急性障害もしくは慢性障害の結果であり得る。
【０１０３】
「グラフティング」および「移植」という用語は、その元々の本来の部位から摘出され、同じ人または別の人の新しい位置に移される、組織の切片または完全な器官を指す。
【０１０４】
「心血管疾患」という用語は、心臓と血管の疾患を指す。本発明に関連する心血管疾患としては、心不全、うっ血性心不全、心停止および心筋梗塞が挙げられるが、これに限定されるものではない。
【０１０５】
医薬組成物
本発明の化合物は単独で投与されることができるが、これらの化合物が、薬学的に許容される担体または賦形剤と共に本発明の化合物を含有する医薬組成物で投与されることが考えられる。
【０１０６】
本発明の医薬組成物は、経口、直腸、経皮、非経口（皮下、腹腔内、静脈内、動脈内、経皮および筋内）、局所、鼻腔内、坐剤による直腸経路または透析による経路を含む種々の経路による投与用に製剤化されることができる。そのような組成物は、製薬技術分野で周知の方法で調製され、および有効成分として上述の本発明の少なくとも１種の化合物と、薬学的に許容される賦形剤または担体とを含む。「薬学的に許容される」という用語は、動物において、より詳しくはヒトにおいての使用が連邦政府もしくは州政府の監督機関によって承認されている、または米国薬局方もしくは他の一般に認められた薬局方に収載されていることを意味する。
【０１０７】
本発明による医薬組成物を調製する間、有効成分は、通常、固形物、半固形物または液体物質であり得る、担体または賦形剤と混合される。該組成物は、好ましくは経口的投与に適しており、その場合には、該組成物は錠剤、丸薬、カプセル剤、ペレット剤、顆粒剤、粉末剤、トローチ剤、サシェ剤、カシェ剤、エリキシル剤、懸濁剤、分散剤、乳剤、液剤、シロップ剤、エアゾール剤（固体として、または液体媒質中で）、例えば活性化合物の１０重量％までを含有する軟膏剤、軟ゼラチンカプセル剤、硬ゼラチンカプセル剤、坐剤、滅菌注射用製剤および滅菌封入粉末剤の形状であり得る。
【０１０８】
担体は、従来法で使用されている任意のものであってよい。担体の選択は、医薬組成物を投与するのに用いられる特定の方法によって決定される。好適な担体の一部の例としては、ラクトース、グルコース、デキストロース、ショ糖、ソルビトール、マンニトール、デンプン、アラビアゴム、リン酸カルシウム、アルギン酸塩、トラガカント、ゼラチン、ケイ酸カルシウム、微結晶性セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、水およびメチルセルロースが挙げられる。他の医薬担体は、水、アルコール（例えばエタノール）などの滅菌液、および油（ピーナッツ油、ダイズ油、鉱油、ゴマ油などの石油、動物油、植物油または合成由来のものを含む）などの脂質担体、リン脂質（例えばレシチン）、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールもしくは他の合成溶媒であり得る。医薬組成物が静脈内投与される場合、水は好ましい担体である。食塩水およびデキストロース水溶液とグリセリン溶液も、液状担体として、特に注射剤として使用することができる。
【０１０９】
製剤は、さらに、滑石、ステアリン酸マグネシウムおよび鉱油などの潤滑剤；表面湿潤剤、抗酸化剤、界面活性剤、乳化剤と懸濁化剤；メチルヒドロキシベンゾエートおよびプロピルヒドロキシベンゾエートなどの保存料；甘味剤；香味料、着色剤、緩衝剤（例えば酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩）、崩壊剤、湿潤剤、抗菌薬、抗酸化剤（例えばアスコルビン酸または重亜硫酸ナトリウム）、キレート薬（例えばエチレンジアミン四酢酸）、ならびに塩化ナトリウムなどの張度調節剤を含むことができる。脂肪酸も、含むことができる。
【０１１０】
錠剤などの固形組成物を調製するために、主要な有効成分は、本発明の化合物の均一混合物を含有する固形の予備処方組成物を形成するために、医薬賦形剤と混合される。これらの予備処方組成物を均一と呼ぶ場合、活性成分が組成物全体にわたり均一に分散されており、その結果、錠剤、丸薬およびカプセル剤などの同等に効果的な単位剤形に容易に細分されることができることを意味する。次いで、この固形の予備処方組成物は、本発明の有効成分を例えば、０．１〜約５００ｍｇ含有する上記の単位剤形の種類に細分される。
【０１１１】
任意の方法を用いて、医薬組成物を調製することができる。固形剤形は、湿式造粒法、乾式造粒法、直接圧縮法などによって調製されることができる。
【０１１２】
本発明の固形剤形を被覆し、さもなければ配合して、持続作用の利点を提供する剤形をもたらしてもよい。例えば、錠剤または丸薬は、内部投与成分および外部投与成分を含むことができ、後者の成分は前者の成分を覆う形状である。
この２つの成分は腸溶性層によって分離されることができ、それによって胃内での崩壊を妨げるのに役立ち、かつ内部成分が損なわれないまま十二指腸に到達する、または徐放されるのを可能にする。種々の物質をこのような腸溶性層またはコーティングで用いることが可能であり、そのような物質としては、いくつかのポリマー酸と、シェラック、セチルアルコールおよび酢酸セルロースなどの物質とポリマー酸との混合物とが挙げられる。
【０１１３】
本発明の組成物を組み込むことができる、経口投与用または注射による液体剤形としては、水溶液、アルコール溶液、適切に風味付けされたシロップ、水性懸濁液または油懸濁液、および綿実油、ゴマ油、ヤシ油またはピーナッツ油などの食用油、ならびにエリキシルおよび同様の薬剤溶媒によって風味付けされた乳濁液が挙げられる。
【０１１４】
吸入用の組成物は、薬学的に許容される水性溶媒または有機溶媒もしくはその混合物および粉末剤に溶解した溶液剤および懸濁剤が挙げられる。液体または固形組成物は、上述の適切な薬学的に許容される賦形剤を含有してもよい。好ましくは、組成物は局所効果または全身効果のために経口または経鼻呼吸経路によって投与される。好ましくは薬学的に許容される溶媒に溶解した組成物は、不活性ガスを用いて霧状にすることができる。霧状の溶液剤は、噴霧装置から直接的に吸入してもよく、または噴霧装置をフェイスマスクテントもしくは間欠的陽圧呼吸器に装着してもよい。溶液、懸濁液または粉末の組成物は、適切な方法で製剤を送達する装置から経口でまたは経鼻で投与されるのが好ましい。
【０１１５】
本発明の方法で使用される別の製剤は、経皮送達デバイス（「パッチ」）を使用する。そのような経皮パッチを用いて、制御された量の本発明の化合物を持続的または断続的な注入で供給することができる。医薬品の送達のための経皮パッチの構造および使用は、当分野で周知である。
【０１１６】
さらに別の実施形態において、該組成物は、局所投与、例えば軟膏剤、ゲル剤、滴下剤またはクリーム剤として調製される。例えば、クリーム剤、ゲル剤、滴下剤、軟膏剤などを用いることによる体表面への局所投与の場合、本発明の化合物は、医薬担体を含むまたは含まないで、生理学的に許容される希釈剤で調製され、塗布されることができる。局所剤またはゲル剤の基剤のアジュバントは、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリラート、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリエチレングリコールおよびウッドワックスアルコールを含み得る。
【０１１７】
別の製剤としては、経鼻噴霧剤、リポソーム製剤、即時放出製剤、徐放製剤、制御放出製剤、遅延放出製剤などが挙げられ、当分野で既知である。
【０１１８】
組成物は、単位剤形で調製されるのが好ましい。適切な医薬賦形剤に関連して、「単位剤形」という用語は、ヒト対象および他の哺乳類のための単位投与量として適切な物理的に個別の単位を指し、各単位は所望の治療効果を生成するように算出された所定量の活性物質を含有する。
【０１１９】
製剤の調製において、他の成分と配合する前に適当な粒径をもたらすように活性成分をミリングすることが必要な場合もある。活性化合物が実質的に不溶性である場合、化合物は通常、約２００メッシュ未満の粒径にミリングされる。活性成分が実質的に水溶性である場合、製剤内で実質的に一様分布、例えば約４０メッシュ、をもたらすように、粒径は通常ミリングによって調節される。
【０１２０】
本発明の医薬組成物を、治療を必要とする領域に局所的に投与することが望ましい場合がある。これは、例えば、手術中の局所注入によって、例えば、術後の創傷被覆材と組み合わせた局所適用によって、注射によって、カテーテルによって、坐剤によって、またはインプラントによって、達成することができ、前記インプラントは、多孔性、非多孔性またはゲル状の物質である。
【０１２１】
本発明の化合物は、任意の使いやすい経路によって、例えば、注入もしくはボーラス注入によって、上皮内層（例えば、口腔粘膜、直腸および腸の粘膜など）からの吸収によって投与されてもよく、および他の治療上活性な薬剤と共に投与されてもよい。投与は局所化されてもよく、発症した領域、損傷した領域または病変領域の近くが好ましいが、全身投与であってもよい。加えて、適切な経路、例えば心室内注射および髄腔内注射によって、本発明の医薬組成物を中枢神経系に導入することが望ましいこともあり、心室内注射は、例えばリザーバーに取り付けた心室内カテーテルによって容易にすることも可能である。ナノテクノロジー技術を含む、標的化薬物送達システムを使用することもできる。肺内投与は、例えば、吸入器または噴霧器を用いて、およびエアゾール剤と共に製剤を使用することもできる。
【０１２２】
一実施形態において、薬物注入ポンプを用いて、本発明の化合物を投与してもよい。このように、本発明の化合物は、生分解性、生体適合性ポリマーインプラントと組み合わせて投与されることができ、それによって選択部位で、制御期間中、化合物を放出する。好ましいポリマー材料の例としては、ポリ無水物、ポリオルトエステル、ポリグリコール酸、ポリ乳酸、ポリエチレン酢酸ビニル、コポリマーおよびそれらの混合物が挙げられる（Ｍｅｄｉｃａｌ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ，  ＬａｎｇｅｒおよびＷｉｓｅ（編），１９７４，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓ．，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，ＦＬを参照されたい）。さらに別の実施形態において、放出制御系は治療標的の近くに配置されることができ、したがってわずかな全身投与量だけを必要とする。
【０１２３】
さらに、時には、本医薬組成物は、非経口投与（皮下、静脈内、動脈内、経皮、腹腔内または筋内の注射）用に製剤化することができ、ならびに抗酸化剤、緩衝液、静菌薬および意図されるレシピエントの血液と製剤を等張にする溶質を含むことができる水性および非水性等張滅菌注射溶液と、懸濁剤、可溶化剤、増粘剤、安定剤および保存剤を含む水性および非水溶滅菌懸濁液とを含んでもよい。石油、動物油、植物油もしくは合成油などの油、脂肪酸アルカリ金属、アンモニウムおよびトリエタノールアミン塩などのセッケン、ならびに適切な界面活性剤も非経口投与で用いてもよい。さらに、注射部位での刺激作用を最小限に抑える、または取り除くために、該組成物は１種または複数種の非イオン界面活性剤を含んでもよい。適切な界面活性剤としては、ソルビタンオレイン酸モノエステルなどのポリエチレンソルビタン脂肪酸エステル、およびプロピレングリコールとプロピレンオキシドの縮合により形成された疎水性塩基によるエチレンオキシドの高分子量付加物が挙げられる。
【０１２４】
非経口製剤は、単回投与量または複数回投与量をアンプルおよびバイアルなどの密封容器で提供することができ、およびフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保管することができ、使用する直前に、注射用の滅菌液体担体、例えば水の添加のみを必要とする。即時注射溶液および即時懸濁液は、前述の種類および当分野で既知の滅菌粉末剤、顆粒剤および錠剤から調製することができる。
【０１２５】
特定の障害または病態、例えば、ＴＢＩ、神経変性疾患および他の同等の障害と損傷の治療に効果的である本発明の化合物の量は、その障害または病態の性質に依存し、標準臨床技術によって決定することができる。加えて、ｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイを任意選択で用いて、最適な投与量範囲を特定することに役立つ。製剤で使用される正確な薬物用量も、投与経路および疾患または障害の重症度に依存し、医師の判断および各患者の状況によって決定されるべきである。好ましい投与量は、０．０１〜１０００ｍｇ／体重ｋｇの範囲内であり、より好ましくは約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇおよびさらに好ましくは約１ｍｇ／〜約１０ｍｇ／ｋｇの範囲内である。有効量は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたは動物モデル試験バイオアッセイまたは試験系から導き出される用量反応曲線から推定することができる。
【０１２６】
合成方法
式（Ｉ）のキナゾリン誘導体は、スキーム１に記載のように、さらに実施例９に詳しく述べるように調製することができる。
【０１２７】
【化４】
0006498695.tif 000006
スキーム１において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびｎは、上記で式（Ｉ）のために定義した通りである。
【０１２８】
市販のアントラニルアミドは、ベンズアルデヒドまたはそのハロゲン化誘導体と反応して、２−フェニルキナゾリン−４−オールまたはそのハロゲン化誘導体（中間体Ａ）を与える。この中間体は、対応するアルコール化合物を調製するために塩基（例えば、ナトリウムまたは水素化カリウムなどの水素化物）で処理し、続いてカルバモイル誘導体（Ｘは、例えばハロゲン、好ましくはＣｌである）を添加してＯ−アミド化生成物を得る。塩化カルバモイルの窒素原子上の異なるアルキル基は、所望通り調製することができる。
【０１２９】
塩基の性質は、特に限定しない。好ましい塩基としては、水素化物（例えば、水素化ナトリウムまたは水素化カリウム）が挙げられるが、これに限定されない。他の適切な塩基としては、非環状アミン（例えばトリメチルアミン、トリエチラミン、ジメチルフェニラミン、ジイソプロピルエチルアミンおよびトリブチルアミン）から選択される第三アミン、環状アミン（例えばＮ−メチルモルホリン）、ならびに芳香族アミン（例えばジメチルアニリン、ジメチルアミノピリジンおよびピリジン）などの有機塩基が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１３０】
反応は、溶媒の存在または非存在下で行われることができる。溶媒を用いる場合、溶媒の性質は特に限定されないが、例としては、エステル（例えば酢酸エチル）、エーテル（例えばジメトキシエタン、ＴＨＦ）、塩素系溶媒（例えばジクロロメタンまたはクロロホルム）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、アセトニトリルもしくはトルエン、またはこれらの溶媒の互いの混合物などの溶媒が挙げられる。
【０１３１】
一実施形態では、塩基は水素化カリウム（ＫＨ）であり、および溶媒はジメトキシエタン（ＤＭＥ）である。
【０１３２】
本出願に引用されているすべての文献は、あたかも本明細書に完全に記載されているかのように、その全体を参照によって明白に組み込まれている。
【０１３３】
本発明のいくつかの実施形態をより完全に例示するために、以下の実施例を示す。しかし、実施例は、本発明の広範な範囲を限定するものとして決して解釈されてはならない。当業者は、本発明の範囲から逸脱することなく、本明細書に開示される原則の多くの変更および修正を容易に考案することができる。
【０１３４】
実験の詳細
実施例１−生物学的アッセイのための材料および方法
ＴＳＰＯ結合およびウエスタンブロットタンパク質分析
ＴＳＰＯ結合アッセイを利用して、本発明の化合物が前述の方法（Ｖｅｅｎｍａｎら２００４；Ｌｅｖｉｎら２００５）に従って標準ＴＳＰＯリガンドと競合することができるかどうか、品質管理で利用するか否かを決定した。手短に言うと、このアッセイは、標準放射性リガンド［３Ｈ］ＰＫ１１１９５（１−（２−クロロフェニル）−Ｎ−メチル−Ｎ−（１−メチル−プロピル）−３イソキノリンカルボアミド）を利用し、ＴＳＰＯへの結合において本発明の化合物が標準リガンを置換できる能力を測定する。標準放射性物質とＴＳＰＯの反応で得られる、放射性リガンド−受容体複合体の放射活性を測定することによって全放射性結合を決定した。標準放射性リガンドと検討した化合物をＴＳＰＯに加え、しばらくインキュベーションした後、得られたリガンド−受容体複合体の放射活性をγカウンターの助けを借りて測定した。この放射活性は、標準放射性物質がＴＳＰＯに結合したことを示す。検討した化合物がＴＳＰＯにうまく結合すると、標準放射性物質がＴＳＰＯに結合するのが少なくなり、したがって測定される放射活性は低くなる。これは、５０％阻害濃度（ＩＣ５０）として表すことができる。これは生物的機能または生化学的機能を阻害する、この場合ＴＳＰＯに結合する標準放射性リガンドの結合を阻害する際の化合物の有効性の基準である。ＩＣ５０の導出値はＫｉであり、ＴＳＰＯへの新規化合物の算出された結合親和性である。
【０１３５】
種々のヒトグリア型細胞株（Ｔ９８Ｇ、Ｕ８７ＭＧ、ＡＩ７２、Ｕ１１８ＭＧ）ならびにヒトニューロン型の細胞株ＳＨ−ＳＹ  ５ＹとＢｅ（２）−Ｃの細胞培養物を用いて新化合物を試験した。加えて、ラットグリオーマ細胞株Ｃ６を用いた。ラット由来のＰＣ１２細胞を、神経細胞の特性を示す別の細胞株として用いた。本出願者らも、遺伝子操作によって、改変型ラットＣ６グリア細胞株および改変型ヒトＵ１１８ＭＧグリア型細胞株を生成した。両方ともＴＳＰＯの発現が少なく、本発明の化合物を含む、ＴＳＰＯの特異的効果を検討することを可能にし、これまでに記述された方法によって行われることができる（Ｗｅｉｓｉｎｇｅｒら，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．２００４；４３：１２３１５−２１；Ｌｅｖｉｎら，２００５；Ｚｅｎｏら，２００９）。
【０１３６】
本発明の化合物の保護能力およびＴＳＰＯの関与を細胞培養における試験で、培養したグリア型および神経細胞型の細胞株を用い、標準方法に従って試験を行った（Ｋｕｇｌｅｒら，２００８；Ｚｅｎｏら，２００９；Ｄａｄｏｎ−Ｎａｃｈｕｍら，Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｒｅｖ．２０１１；７：６６４−７１）。さらに、初代細胞培養物も使用する（Ｂａｎｋｅｒ，Ｇ．ら，Ｃｕｌｔｕｒｉｎｇ  Ｎｅｒｖｅ  Ｃｅｌｌｓ，第２版，Ｔｈｅ  ＭＩＴ  Ｐｒｅｓｓ  （１９９８）。処理は、（１）神経変性の特定の態様を模倣するために、グルタミン酸塩（３５ｍＭ）、アミロイドβペプチド（１−４２）、ＮＨ４Ｃｌ、ＣｏＣｌ２および一酸化窒素（ＮＯ）ドナーへの曝露、（２）比較処置として、新規化合物による処置、および従来のＴＳＰＯリガンドによる処置、ならびに（３）遺伝子操作によるＴＳＰＯノックダウンを含んでいた。
【０１３７】
アッセイを行った技法およびパラメータを以下にまとめる：全タンパク質レベル（Ｂｒａｄｆｏｒｄ．  Ａｎａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９７６；７２：２４８−５４）；ＴＳＰＯリガンド結合アッセイ（Ｋｕｇｌｅｒら，２００８；Ｌｅｖｉｎら，２００５；Ｄａｎｏｖｉｃｈら，Ｅｕｒ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌ，２００８；１８：２４−３３）、アポトーシスとネクローシスを含む細胞死および関連する分子生物学的過程（Ｓｏｕｓｔｉｅｌら，Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ  Ａｐｐｌ  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．２００８；３４：４１２−２３；Ｓｏｕｓｔｉｅｌら，Ｅｘｐ  Ｎｅｕｒｏｌ．２００８；２１４：２０１−８；Ｚｅｎｏら，２００９）；ミトコンドリア膜電位崩壊（Ｃｈｅｌｌｉら，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２００４；６８：１２５−３４；Ｋｕｇｌｅｒら２００８；Ｚｅｎｏら２００９；ＳｈａｒｇｏｒｏｄｓｋｙらＡｐｏｐｔｏｓｉｓ．２０１２；１７：６４７−６５）；酸化ストレスの基準として活性酸素種（ＲＯＳ）生成（Ｖｅｅｎｍａｎら，２００８；Ｚｅｎｏら，２００９）；ＴＳＰＯノックダウン（Ｌｅｖｉｎら，２００５；Ｚｅｎｏら，２００９）；ミトコンドリアＴＳＰＯおよび関連するタンパク質の発現レベル（Ｖｅｅｎｍａｎら，２００２；Ｌｅｖｉｎら２００５；Ｖｅｅｎｍａｎら，２００８）；ＲＴ−ＰＣＲおよびマイクロアレイ解析による遺伝子発現（Ｂｏｄｅら，２０１２；Ｖｅｅｎｍａｎら，２０１２）。炎症、免疫応答、移動および細胞周期のパラメータも、試験する。すべてのこれらの方法は、化合物の品質管理に適用されることもできる。
【０１３８】
データは、必要に応じて平均値±ＳＤまたはＳＥＭとして表される。必要に応じて、ポストホックテストを含む、一元配置分散分析または多変量分散分析を用いてデータを分析する。等分散性についてバートレット検定を用いて、適切なモデル、すなわちパラメトリックまたはノンパラメトリックを決定する。統計的有意性は、ｐ＜０．０５で定義する。
【０１３９】
動物試験
本明細書に記載のアッセイの場合、ラットでのカイニン酸の全身注射を適用し、および挫傷も処理した（Ｖｅｅｎｍａｎら２００２；Ｓｏｕｓｔｉｅｌら，Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ  Ａｐｐｌ  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．２００８；Ｓｏｕｓｔｉｅｌら，Ｅｘｐ  Ｎｅｕｒｏｌ．２００８）。これらのモデルは、脳内の定義された細胞死を極めて十分に示す。脳内の細胞死は、脳疾患に共通の進行する神経変性の主要な病理学的特徴である。本発明の化合物は、疾患および損傷後の進行する脳障害、例えば行動障害、の結果としての脳内の細胞死を阻止するようにデザインされているので、脳内の細胞死を示す動物モデルは、本発明の化合物の保護能力を示すために選ばれるモデルである。これらの理由から、ハンチントン病のためのＲ６−２モデルを選び、化合物１の有効性を試験し、および化合物１の有効性と、米国特許第８，５４１，４２８号（化合物Ａ）、古典的ＴＳＰＯリガンドＰＫ１１１９５、ならびに本明細書に開示した他の化合物の有効性とを比較した。化合物５および６も同じＲ６−２モデルで試験した。
【０１４０】
実施例２−ＴＳＰＯへのｉｎ  ｖｉｔｒｏ結合
上述のように、ＴＳＰＯへの結合を［３Ｈ］ＰＫ１１１９５ラジオアッセイを用いて評価した。本発明の化合物のＴＳＰＯへの結合および保護効果の結果を表１に示す。化合物１〜８は、細胞培養において試験し、および望ましい化合物（すなわち、化合物１）も動物モデルで試験した。これらの化合物の構造を上に示す。表１は、米国特許第８，５４１，４２８号によって包含される化合物（化合物Ａ）も含む。
【０１４１】
【表１】
0006498695.tif 000007
【０１４２】
【化５】
0006498695.tif 000008
【０１４３】
本発明の化合物１と、米国特許第８，５４１，４２８号に例示されている化合物Ａを比較すると、Ｎ−アミド部分のアルキル基の性質が化合物のＴＳＰＯへの親和性に強い影響を及ぼすこと、最も重要なことは、不斉アミドが保護効果とＴＳＰＯへの比較的高い親和性の組み合わせをもたらすことを示している。
したがって、どのような特定の機序または理論にも束縛されることを望むものではないが、不斉性がＴＳＰＯへの親和性と細胞死から細胞を保護する能力の組み合わせにとって有益であると考えられる。この発見は完全に予想外であり、本発明の別の実施形態を表す。
【０１４４】
さらに、キナゾリン骨格に結合した回転可能なフェニル環に結合したハロゲンは細胞保護効果を向上させる一方、ＴＳＰＯ結合親和性を保持するように見えることが発見された（図２〜４および７〜９）。したがって、ハロゲン置換基の式（Ｉ）の化合物への結合は、さらなる改善、特に細胞死から保護するそれらの能力に関して、改善を可能にすることが考えられる。図７〜９は、フェニル環でのハロゲン化がＴＳＰＯ親和性には必ずしも影響を及ぼすわけではないが、保護に関してプラス効果があることを示す。したがって、どのような特定の機序または理論にも束縛されることを望むものではないが、細胞死から細胞を保護する本発明の化合物の能力にとってハロゲン化が有益になり得ると考えられる。このさらなる発見は完全に予想外であり、本発明の別の実施形態を表す。
【０１４５】
さらに、不斉アミドと回転可能なハロゲン化フェニル基の組み合わせを有する化合物は、不斉アミドとハロゲンの両成分によって付与される利点を組み合わせ、特性を向上させることが可能である。
【０１４６】
実施例３：本発明の化合物の保護特性
本発明の化合物は、アストロサイト由来のＵ１１８ＭＧ細胞（図１、２、３および８）または神経細胞由来のＳＨ  ＳＹ  ６Ｙ細胞（図４）の細胞培養においてグルタミン酸塩によって誘発される細胞死から保護する。図１は、ＴＳＰＯに対して親和性が良く（表１）、細胞死およびグルタミン酸塩によって誘発される細胞死過程を阻害する化合物１を示す。図１Ａに示すように、本発明の化合物１は、細胞培養において３５ｍＭのグルタミン酸塩によって誘発されるグリア細胞死から保護する（結果はＡＶＧ±ＳＤで示す）。対照群において、３５ｍＭのグルタミン酸塩は、細胞の約６０％を死滅させた。化合物１は、１０〜１００μＭの濃度でグリア細胞培養においてグルタミン酸塩によって誘発される細胞死から有意に保護する。比較すると、従来の化合物Ａ（米国特許第８，５４１，４２８号）は、細胞死から保護することにおいて、予想外に効果がかなり低い（図８Ａ）。＊ｐ＜０．０５対グルタミン酸塩曝露群（グルタミン酸塩）、＊＊＊ｐ＜０．００１対グルタミン酸塩群  ＃＃＃ｐ＜０．００１対溶媒対照群（対照）、各群についてｎ＝１２。
【０１４７】
さらに、図１Ｂに示すように、化合物１は、ミトコンドリア膜電位（ΔΨｍ）の崩壊を阻止する。この崩壊は、一般的にグルタミン酸塩によって誘発され、通常、ＴＳＰＯの制御下にある（結果はＡＶＧ±ＳＤで示す）。化合物１は、このモデルにおいて２５μＭの濃度で非常に効果的である（古典的ＴＳＰＯリガンドＰＫ１１１９５で同じ効果を達成するには、５０μＭの濃度を適用する必要がある（データ不図示）。
【０１４８】
次に、蛍光染料１０−Ｎ−ノニル−アクリジンオレンジ（ＮＡＯ）を使用して、ミトコンドリアレベルで、活性酸素種（ＲＯＳ）の生成を測定した。このＲＯＳ生成は一般的にグルタミン酸塩によって誘発され、通常、ＴＳＰＯの制御下にある。図１Ｃは、化合物１がミトコンドリアレベルで、グルタミン酸塩によって誘発されるＲＯＳ生成を阻害することを示す（結果をＡＶＧ±ＳＤで示す）。図２は、ＴＳＰＯに対して中等度の親和性を有する（表１）化合物２がＵ１１８ＭＧ細胞において細胞死を誘発するグルタミン酸塩に対してｉｎ  ｖｉｔｒｏで強い保護特性を有することを示す。結果はＡＶＧ±ＳＥＭで示す。＊＊＊：一元配置分散分析は、ｐ＜０．０００１を示し、ボンフェローニ多重比較検定は、グルタミン酸塩対グルタミン酸塩＋化合物２（５〜５０μＭ）に対してｐ＜０．００１を示した。図２において、白いカラムは、化合物なし（０）でまたは化合物２（１、５、１０、２５、５０μＭ）と共にグルタミン酸塩への曝露を示す。黒いカラムは、化合物２のみでの処理を示す。
【０１４９】
図３は、ＴＳＰＯに対して親和性を有する（表１）化合物３がＵ１１８ＭＧ細胞において細胞死を誘発するグルタミン酸塩に対してｉｎ  ｖｉｔｒｏで良好な保護特性を有することを示す。結果はＡＶＧ±ＳＥＭで示す。＊＊＊：一元配置分散分析は、ｐ＜０．０００１を示し、ボンフェローニ多重比較検定は、グルタミン酸塩対グルタミン酸塩＋化合物３（５〜５０μＭ）に対してｐ＜０．００１を示した。図３において、白いカラムは、化合物なし（０）でまたは化合物３（１、５、１０、２５、５０μＭ）と共にグルタミン酸塩への曝露を示す。黒いカラムは、化合物３のみでの処理を示す。
【０１５０】
図４は、ＴＳＰＯに対して良好な親和性を有する（表１）化合物４がｉｎ  ｖｉｔｒｏでグルタミン酸塩の致死効果からＳＨ  ＳＹ  ６Ｙ細胞株由来の神経細胞を保護することを示す。結果はＡＶＧ±ＳＥＭで示す。ｎ＝６、＊＊ｐ＜０．０１  ポストホックとしてマン・ホイットニー検定と共に一元配置分散分析。対照群：グルタミン酸塩を含まない。対照群：グルタミン酸塩曝露なし、および化合物４処理なし。化合物４群：化合物４の処理のみ。グルタミン酸塩群：グルタミン酸塩曝露のみ。化合物４＋グルタミン酸塩群：グルタミン酸塩処理と共にグルタミン酸塩曝露。
【０１５１】
これらの結果（図１〜４）に基づいて、有益効果が好ましい成分を決定するために、化合物１への系統的改変を検討し、化合物１に適用した（図７〜９）。
【０１５２】
図７．化合物Ａが化合物１と異なることは、化合物１の１つのメチル側鎖と１つのエチル側鎖（すなわち不斉アミド）の代わりに、化合物Ａにはメチル側鎖が２つ（すなわち対称アミド）あることである。
【０１５３】
化合物５が化合物１と異なることは、化合物１の１つのメチル側鎖と１つのエチル側鎖の代わりに、化合物５にはメチル側鎖が２つ、および第３（回転可能）フェニルの２位に置換されたＣｌがあることである。
【０１５４】
化合物６が化合物１と異なることは、化合物６には第３［回転可能）フェニルの２位に置換されたＣｌがあることである。
【０１５５】
化合物７が化合物１と異なることは、化合物１の１つのメチル側鎖と１つのエチル側鎖の代わりに、化合物７にはエチル側鎖が２つあることである。
【０１５６】
化合物８が化合物１と異なることは、化合物１の１つのメチル側鎖と１つのエチル側鎖の代わりに、化合物８にはエチル側鎖が２つ、および第３（回転可能）フェニルの２位に置換されたＣｌがあることである。
【０１５７】
化合物Ａおよび化合物５（Ｒ１とＲ２がメチルである）は共に±６００ｎＭのＫｉを有することが判明した。
【０１５８】
さらに、化合物１および化合物６（Ｒ１がメチルであり、Ｒ２がエチルである）は共に±６０ｎＭのＫｉを有することが判明した。
【０１５９】
さらに、化合物７および化合物８（Ｒ１とＲ２がエチルである）は共に±２．５ｎＭのＫｉを有することが判明した。
【０１６０】
図８Ａ〜Ｆは、参照化合物Ａ（図８Ａ）ならびに本発明の化合物５、１、６、７および８（それぞれ図８Ｂ〜Ｆ）の活性を示す。
【０１６１】
実験の準備を、例として図８Ｂを使用して説明する：
１．対照群：細胞死レベルを０％とする。
２．グルタミン酸塩群：グルタミン酸塩によって誘発される細胞死レベルは５０％超である。
３．化合物５群：単独で、化合物５は５％超のレベルの細胞死を誘発しない。
４．グルタミン酸塩＋化合物５群：化合物５がグルタミン酸塩によって誘発される細胞死を防止する処置として与えられる場合、化合物５の濃度を上げることによって、細胞死のレベルが５０％超から５％未満に減少する。
【０１６２】
（ＡＶＧ±ＳＤ）として表わす結果は、ハロゲンを回転可能なフェニルに付加することによって保護が向上することを示す（図８Ａと８Ｂ、図８Ｃと８Ｄ、および図８Ｅと８Ｆを比較する）。ハロゲンを回転可能なフェニルに付加することによって、未処置細胞において高濃度で化合物の致死性も減少する（図８Ａと８Ｂ、図８Ｃと８Ｄを比較する）。さらに、アルキル側鎖に不斉性をもたせることによって、細胞死に対する保護が向上する（例えば、図８Ａと８Ｃおよび８Ｂと８Ｄを比較する）。アルキル修飾（Ｋｉ約６０ｎＭ）によってもたらされた「中等度」の親和性は、最適な保護をもたらす。＃ｐ＜０．０５対溶媒対照群（対照）、＃＃＃ｐ＜０．００１対溶媒対照群（対照）、＊ｐ＜０．０５対グルタミン酸塩曝露細胞群（グルタミン酸塩）。
【０１６３】
グルタミン酸塩が誘発する細胞死に対して１０、２５、５０および１００μＭの濃度で、十分かつ着実に保護する点において、化合物１、５および６は、化合物Ａ（米国特許第８，５４１，４２８号）、７および８よりも優れているように見える。加えて、グルタミン酸塩が誘発する細胞死に対して１０、２５、５０および１００μＭの濃度で、通常、十分に保護する点において、化合物６は化合物１よりも優れているように見える。化合物５は、現在の実験において他の化合物よりも優れているように見える。
【０１６４】
全体的に、化合物の望ましい効果は、以下の通りである：ｉ）化合物自体の致死効果が小さい、およびｉｉ）グルタミン酸塩によって誘発される細胞死レベルが着実に減少する。
【０１６５】
以上のことから、およびどのような特定の理論または作用の機序にも束縛されることを望むものではないが、アルキル鎖Ｒ１、Ｒ２を伸長すると、ＴＳＰＯ結合が改善するように見える。
【０１６６】
図９．１００μＭの化合物Ａ、１、５、６、７および８の潜在的悪影響の詳細をさらに検討した。本発明の化合物にわずかな致死効果がある場合、第３の回転可能なフェニルのハロゲン化（非限定的な例としてＣｌを用いることによる）によってさらに減少させることが可能である。
【０１６７】
実施例４：薬物動態特性
１）化合物１を腹腔内投与の部位から吸収する。マウスにおける半減期は３．５時間で良好。
２）かなり迅速に脳に送達される（濃度時間のプロファイルを各々経過観察する）。
３）脳への摂取率は０．２である。
４）皮下または腹腔内に注射した、使用する溶媒ＤＭＳＯ／ゴマ油（１：９）またはＤＭＳＯ単独は、マウスおよびラットにおいて何ら有害作用を示さない。慢性的に皮下注射すると、ゴマ油は、注射したマウスの耳回りに脱毛を誘発することがある。したがって、溶媒の選択肢は純粋なＤＭＳＯである。マウスでは１０〜２０μＬおよびラットでは約２００μＬの少量を、数週間から数ヵ月間にわたり一日１回注射する場合、そのような有害作用、または他の有害作用は生じることはないからである。
【０１６８】
実施例５−ハンチントン病モデルのトランスジェニックマウスであるＲ６−２マウスにおいて寿命を延ばす化合物１の優れた効果
Ｒ６−２は、ハンチントン病のトランスジェニックマウスモデルである。ヒトにおいてハンチントン病は、運動行為に影響を及ぼし、最終的にこの疾患を有する患者が死に至る、遺伝性の神経変性疾患である。Ｒ６−２マウス（約１２０のＣＡＧ反復、Ｂ６ＣＢＡ−Ｔｇ（ＨＤｅｘｏｎ１）６２Ｇｐｂ／３Ｊ）を後述の実験で使用した。この目的のために、Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（ＭＥ）から入手したマウスを飼育した。特に、遺伝子型：Ｔｇ（ＨＤｅｘｏｎ１）６２Ｇｐｂのヘテロ接合体の雄、および野生型背景の系統からのＢ６ＣＢＡＦ１／Ｊ雌をＪａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙのプロトコルに従って飼育した。ヘテロ接合体雄マウスの仔（Ｒ６−２マウス）を用いて、薬物処置の有無による、寿命および運動活性を測定した。薬物処置は、一日１回（週に５日連続して）、マウスに各２０μＬの生理食塩水（偽対照群）、溶媒ＤＭＳＯ（溶媒対照群）、古典的ＴＳＰＯリガンドＰＫ１１１９５（１５ｍｇ／ｋｇ）、従来の化合物Ａ（１５ｍｇ／ｋｇ）、化合物１（１５ｍｇ／ｋｇ）および化合物１（７．５ｍｇ／ｋｇ）の皮下注射からなっていた。薬物処置は、出生後５週目に開始した。量は、ＴＳＰＯリガンドに関する以前の研究に従って用いた。
【０１６９】
行動実験は別として、マウスを毎日観察し、死亡日を書き留めた。行動実験には、オープンフィールド装置での走行距離、および振戦測定が含まれた。
【０１７０】
オープンフィールド
オープンフィールドは、薄暗い部屋（５０ｌｘ）に置かれた黒い光沢がないパースペックスボックス（５０Ｌ×５０Ｗ×４０Ｈｃｍ）でできており、黒色マウスとのコントラストを視覚的にわかりやすくするためにその床は白色のパースペックスから作られている。マウスは、オープンフィールドの隅に（壁に面して）置かれ、次いで５分間自由に探索できる。行動は、ＬｅｍｏｉｎｅらＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｅｈａｖｉｏｒ．１９９０；３６：８５−８８に従って、ＣＣＴＶパナソニックカメラでビデオ録画し、Ｅｔｈｏｖｉｓｉｏｎ  ＸＴ７．０ソフトウェア（Ｎｏｌｄｕｓ、Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）で録画後分析する。
【０１７１】
振戦装置
本発明のためのＲ６−２マウスの実験において振戦の出現をアッセイするために、圧力を与える力をニュートン単位でアッセイし、示すための用の特定のソフトウェアを用い、Ｋｉｎｄｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  （Ｐｏｗａｙ，ＣＡ）のＳｔａｒｔｌｅＭｏｎｉｔｏｒを使用した。
【０１７２】
図５Ａは、化合物１がＲ６−２マウスにおいて平均寿命を上げることを示す。
生理食塩水偽処置および溶媒ＤＭＳＯ処置を受けたトランスジェニックＲ６−２マウスによって表される対照群と比較すると、化合物１は、ハンチントン病のトランスジェニックＲ６−２モデルの偽処置マウスと溶媒処置マウスに比べ、平均寿命を上げている。このパラダイムにおいて、生理食塩水およびＤＭＳＯの効果は、互いに区別できない。化合物１の有益効果に関して、化合物１で処置されたＲ６−２マウスの死亡事象の開始は遅くなり、平均寿命は長くなる。これは対照群のＲ６−２マウスと比べると、かなり著しく有利である。ｙ軸は、週当たりの生存動物のパーセンテージを示す。ｘ軸は、生後週数を示す。すべての実験群について、５０％生存カットオフを水平方向に延ばした黒い矢でマークをつける。各実験群について、この５０％生存カットオフ値が達成された週は、関連する寿命曲線と同じ記号（正方形、三角形およびひし形、図５Ａの図の説明を参照されたい）を示した縦方向矢印でマークをつける。９週目からの週当たりの平均生存に関して、化合物１群対生理食塩水群  ｐ＜０．０１；
化合物１群対ＤＭＳＯ群  ｐ＜０．０５；ＤＭＳＯ群対生理食塩水群のマウス数（ｎ＝８対９）。
【０１７３】
図５Ｂは、化合物１と比較すると、従来の化合物Ａは、Ｒ６−２マウスの寿命を伸ばすことにおいて予想外に著しく有効性が低い。実際に、化合物Ａで処置を受けたＲ６−２マウスは、溶媒処置マウスならびに生理食塩水処置マウスと区別がつかない。同様に、古典的ＴＳＰＯリガンドＰＫ１１１９５で処置を受けたＲ６−２マウスは、溶媒処置マウスならびに生理食塩水処置マウスと、寿命に関しても区別がつかない（データ図示せず）。
【０１７４】
実施例６−ハンチントン病のトランスジェニックマウスモデルであるＲ６−２において化合物１の歩行運動を向上させる優れた効果
図６．化合物１はＲ６−２マウスの運動力を上げる。ハンチントン病のトランスジェニックＲ６−２モデルの非処置マウスおよび溶媒処置マウスに比べ、オープンフィールドで測定したように、化合物１は、その溶媒対照に比べ、Ｒ２−マウスの自発運動を有意に向上させる。また、化合物１は、偽対照群（生理食塩水）に比べて、自発運動を向上させた。具体的には、第１のマウスの死亡が起こった９週目から、すべてのマウスが死亡した１６週目まで、セッション当たり、実験群当たり、週当たり、オープンフィールドでの平均走行距離をｃｍで測定した。化合物１の適用に起因する有害反応は、観察されない。化合物１群対ＤＭＳＯ群  ｐ＜０．０１；化合物１群対生理食塩水群の傾向（図示せず）。比較すると、従来の化合物ＡおよびＰＫ１１１９５は、何ら歩行運動を向上させる効果（データ図示せず）を示さなかった。
【０１７５】
実施例７：化合物１は、細胞培養中でＰＣ−１２細胞を、神経細胞分化を明らかにする伸長した神経突起を示す神経様細胞にトランスフォームすることができる（図１０）。手短に言うと、基本的に実施例１の細胞培養物に関して記載したように、グルタミン酸塩と組み合わせて、ＰＣ−１２細胞は化合物１に曝し、その状態で５日間そのままにしておいた。これにより、軸索様突出を有する神経様細胞がもたらされた（図１０）。
【０１７６】
実施例８：ハンチントン病のトランスジェニックマウスモデルであるＲ６−２において化合物５および６の寿命を延ばす優れた効果
実施例５に前述したように、Ｒ６−２マウスを用いた。一実験において、処置は、一日１回（週に５日連続して）、マウスに各２０μＬの溶媒ＤＭＳＯ（対照群、ｎ＝１０）および化合物６（７．５ｍｇ／ｋｇ、ｎ＝１２）の皮下注射からなっていた。別の実験において、ＤＭＳＯ対照群（ｎ＝５）と比べて、化合物５（７．５ｍｇ／ｋｇ、ｎ＝５）を試験した。
【０１７７】
図１２および１３は、化合物６および５（それぞれ）が、溶媒（ＤＭＳＯ）処置マウスと比べて、トランスジェニックＲ６−２マウスの平均寿命を上げることを示す。
【０１７８】
図１２に示すように、溶媒（ＤＭＳＯ）処置したマウスの５０％が１０週目になる前に死亡したが、化合物６で処置したＲ６−２トランスジェニックマウスの５０％は、１２週目まで、まだ生存していた。ｙ軸は、週当たりの生存動物のパーセンテージを示す。ｘ軸は、生後週数を示す。５０％生存カットオフを水平方向の矢印でマークをつける。各実験群について、５０％生存カットオフを達成する週に縦方向矢印でマークをつける。生存動物の数に関して、共分散分析とウィルコクソンのマッチドペア符号順位検定を適用すると、化合物６で処置したＲ６−２マウスと、ＤＭＳＯ（溶媒）注射したＲ６−２マウスの間の有意差を示す：ｐ＜０．０１。処置の各週でマン−ホィットニー検定を適用すると、化合物６で処置したＲ６−２マウス（１２週齢）の５０％生存の週およびその後の週では、処置したＲ６−２マウスと、溶媒注射したＲ６−２マウスの間の差は、これらの２週のそれぞれで、有意であったｐ＜０．０５。溶媒注射したＲ６−２マウスの死亡率勾配が化合物６で処置したＲ６−２マウスの死亡率勾配よりも急であるか否かを判定するために、線形回帰モデルを適用した。両群の全生存期間を調べ、および診断の週（８週目、その後最初の複数の動物が死亡）から溶媒処置Ｒ６−２マウスのすべてが死亡する（１３週目）までの限定期間も調べると、いずれの場合も、勾配間に有意差が認められる、ｐ＜０．０１（Ｆ＝それぞれ、１２．５と２０．８）。
【０１７９】
図１３に示すように、溶媒（ＤＭＳＯ）処置マウスの５０％未満は、１１週目になる前に死亡し、この時点で、化合物５で処置したマウスの１００％はまだ生存していた。さらに、１２週目に、溶媒（ＤＭＳＯ）処置マウスのすべてが死亡したが、化合物５で処置したマウスの５０％はまだ生存しており、同処置マウスの２０％は１８週目まで生存し続けた。ｙ軸は、週当たりの生存動物のパーセンテージを示す。ｘ軸は、生後週数を示す。５０％生存カットオフを水平方向の矢印でマークをつける。各実験群について、５０％生存カットオフを達成する週に縦方向矢印でマークをつける。
【０１８０】
実施例９：合成プロトコル
空気に敏感な化合物および湿気に敏感な化合物に関与するすべての反応は、アルゴン雰囲気下で、加熱型フラスコ、乾燥した、空気を含有しない溶媒を用いて、行った。１，２−ジメトキシエタンをアルゴン下でＣａＨ２から蒸留した。フラッシュクロマトグラフィ（ＦＣ）は、シリカゲル６０（２３０〜４００メッシュ）を使用して行った。薄層クロマトグラフィは、プレコート（シリカゲル６０、０．０２５ｍｍ）したプレートを使用して行った。すべてのＮＭＲスペクトルは、室温で、Ｂｒｕｋｅｒ−Ａｖａｎｃｅ−３００装置を用いて、それぞれ３００ＭＨｚ（１Ｈ）または７５ＭＨｚ（１３Ｃ）の動作周波数で記録した。化学シフトは重水素化溶媒の残存プロトンまたは炭素共鳴を参照する
（１Ｈ  ＮＭＲの場合、クロロホルムδ＝７．２４またはプロトン分離１３Ｃ  ＮＭＲの場合、δ＝７７．００、および（Ｊ）は（Ｈｚ）である）。
【０１８１】
基本手順（スキーム１）
本発明の化合物は、一般に、上述のスキーム１および以下のスキーム２に記載の方法によって調製することができる。手短に言うと、アルゴン下で１，２−ジメトキシエタン（ＤＭＥ）３０ｍＬ中の水素化カリウムの懸濁液（６．７５ｍｍｏｌ）に、アルコール（４．５ｍｍｏｌ）を一度に加える。この反応混合物を室温で３０分間撹拌し、これに塩化カルバモイル（７ｍｍｏｌ）を加える。反応混合物は、反応が完了するまで２〜５時間、還流させる（ＴＬＣでモニターする）。この反応を３０ｍＬの水で慎重にクエンチし、続いてジクロロメタン（または酢酸エチル）で抽出する。混合有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、次いで溶媒を減圧下で蒸発させる。結果として生じる粗生成物は、溶離液としてヘキサン／ＥｔＯＡｃ（化合物１、２、３および４の場合は２／１、化合物５、６、７および８の場合は、８５／１５）を用いてシリカゲルクロマトグラフィーによって精製する。精製後、純粋化合物をＤＣＭ／酢酸エチル／ｎ−ペンタンで結晶化させて、固形の化合物を得た。
【０１８２】
方法を化合物１用に以下に例示する。しかし、本発明の他の化合物は、スキーム１および２に全般的に説明した同様の方法によって調製することもできる。
【０１８３】
２−フェニルキナゾリン−４−イル  エチル（メチル）カルバマ−ト（化合物１）：
【０１８４】
【化６】
0006498695.tif 000009
表題の生成物は、６５％の収率で白色固形として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．３２（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，１．５Ｈ，回転異性体１），１．３３（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，１．５Ｈ，回転異性体２），３．１２（ｓ，１．５Ｈ，回転異性体１），３．１３（ｓ，１．５Ｈ，回転異性体２），３．５０−３．５９（ｍ，２Ｈ），７．４５−７．５０（ｍ，３Ｈ），７．５４−７．５９（ｍ，１Ｈ），７．８５−７．９０（ｍ，１Ｈ），８．０４−８．０９（ｍ，２Ｈ），８．５１−８，５５（ｍ，２Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１２，２３（回転異性体１），１３．４０（回転異性体２），３４．４０（回転異性体１），３４．４６（回転異性体２），４４．５５（回転異性体１），４４，８４（回転異性体２），１１５．８１（回転異性体１），１１６．１９（回転異性体２），１２３．２５（回転異性体１），１２３．２９（回転異性体２），１２７．１１（回転異性体１），１２７．１５（回転異性体２），１２８．２８（回転異性体１），１２．３２（回転異性体２），１２８．３６，１２８．５６（回転異性体１），１２８．５９（回転異性体２），１３０．６３，１３４．２１，１３７．２８，１５３．１２（回転異性体１），１５３．２０（回転異性体２），１６０．２６（回転異性体１），１６０．３４（回転異性体２），１６４．０５（回転異性体１），１６４．１４（回転異性体２），１７９．１０。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ１８Ｈ１８Ｎ３Ｏ２の算出総質量［Ｍ＋Ｈ］＋：３０８．１３９９；実測値：３０８．１３５０。化合物１は、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（１：３）から再結晶することができる。
【０１８５】
Ｘ線で決定した化合物１の構造を図１１に球棒表示で表す。
【０１８６】
２−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）キナゾリン−４−イル  ジエチルカルバマート［化合物２）：
【０１８７】
【化７】
0006498695.tif 000010
表題の生成物は、５７％の収率で白色固形として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．２４−１．４３（ｍ，６Ｈ），３．４１−３．６０（ｍ，４Ｈ），７．２２（ｔ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．５９（ｄｄ，Ｊ＝８．２＆７．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８９（ｄｄｄ，Ｊ＝８．６，６．９＆１．５Ｈｚ，１Ｈ），８．０５（ｄｄ，Ｊ＝９．９＆８．４Ｈｚ，２Ｈ），８．４３（ｄｄｄ，Ｊ＝８．７，４．９＆２．１Ｈｚ，１Ｈ）および８．６１（ｄｄ，Ｊ＝７．４＆２．２Ｈｚ，１Ｈ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ１９Ｈ１７ＣｌＦＮ３Ｏ２の算出総質量［Ｍ＋Ｈ］＋：３７３．０９９３；実測値：３７４．１０３１。
【０１８８】
２−（２，６−ジクロロフェニル）キナゾリン−４−イル  ジエチルカルバマート（化合物３）：
【０１８９】
【化８】
0006498695.tif 000011
表題の生成物は、６３％の収率で白色固形として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．２３（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），１．３０（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），３．３８−３．５４（ｍ，４Ｈ），７．２５−７．４２（ｍ，３Ｈ），７．７０（ｄｄ，Ｊ＝８．３＆７．０Ｈｚ，１Ｈ），７．９５（ｄｄｄ，Ｊ＝８．６，６．９＆１．５Ｈｚ，１Ｈ）および８．１３（ｄｄ，Ｊ＝９．４＆８．４Ｈｚ，２Ｈ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ１９Ｈ１７Ｃｌ２Ｎ３Ｏ２の算出総質量［Ｍ＋Ｈ］＋：３９０．０６９８；実測値：３９０．０７６９。
【０１９０】
２−（４−ブロモフェニル）キナゾリン−４−イル  ジエチルカルバマート［化合物４）：
【０１９１】
【化９】
0006498695.tif 000012
表題の生成物は、６０％の収率で白色固形として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：１．１３−１．２６（ｍ，６Ｈ），３．３４−３．４６（ｍ，４Ｈ），７．４６−７．５１（ｍ，２Ｈ），７．５３（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），７．７５（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），７．９２（ｔ，５．２Ｈｚ，１Ｈ）および８．３７（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：１２．７，１４．０，４２．２，４２．３，１１５．７，１２３．０，１２５．１，１２７．９，１２９．８，１３１．２，１３４．０，１３５．９，１５２．７，１５９．０および１６３．９。ＭＳ：Ｃ１９Ｈ１８Ｎ３Ｏ２Ｂｒの算出ｍ／ｚ値：［Ｍ＋Ｈ］＋３９９．０６；実測値：３９９．９。
【０１９２】
化合物５〜８の合成のための全般的な反応：
【０１９３】
【化１０】
0006498695.tif 000013
【０１９４】
２−（２−クロロフェニル）キナゾリン−４−イル  ジメチルカルバマート（化合物５）：
【０１９５】
【化１１】
0006498695.tif 000014
表題の生成物は、４７％の収率で白色固形として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ３．１０（ｓ，３Ｈ），３．１６（ｓ，３Ｈ），７．３１−７．４２（ｍ，２Ｈ），７．４４−７．５１（ｍ，２Ｈ），７．６５（ｄｄ，Ｊ＝８．６＆７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．８０−７．８７（ｍ，１Ｈ），７．９２（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），８．０５−８．２１（ｍ，２Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ３７．３４，１１６．２０，１２３．６１，１２７．００，１３０．６０，１３０．７７，１３２．２６，１３３．２６，１３４．７８，１３７．７３，１５２．１１，１５３．０４，１６１．１７および１６４．１１。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ１７Ｈ１４ＣｌＮ３Ｏ２の算出総質量［Ｍ＋Ｈ］＋：３２７．０７７５；実測値：３２７．００００。
【０１９６】
２−（２−クロロフェニル）キナゾリン−４−イル  エチル（メチル）カルバマート（化合物６）
【０１９７】
【化１２】
0006498695.tif 000015
表題の生成物は、６５％の収率で白色固形として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．１７−１．３２（ｍ，３Ｈ），３．０４および３．０８（２ｓ，３Ｈ），３．３８−３．５８（ｍ，２Ｈ），７．３３（ｄｄ，Ｊ＝７．０＆３．２Ｈｚ，２Ｈ），７．４０−７．５０（ｍ，１Ｈ），７．６１（ｄｄ，Ｊ＝８．６＆７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．７８−７．８４（ｍ，１Ｈ），７．８８（ｄｄ，Ｊ＝９．４＆７．２Ｈｚ，２Ｈ）および８．０８（ｄｄ，Ｊ＝９．５＆７．２Ｈｚ，２Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１２．４３＆１３．６５，３４．６４＆３４．７４，４４．８２＆４５．１２，１１６．０７＆１１６．３６，１２３．５２＆１２３．５７，１２６．９２，１２８．１３＆１２８．１９，１２８．６０，１３０．５２，１３０．７１，１３２．２３，１３３．２３，１３４．６８，１３７．７０＆１３７．７２，１５１．７１＆１５１．９２，１５２．９５＆１５２．９９，１６１．０９＆１６１．１５，１６４．１１＆１６４．１９。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ１８Ｈ１６ＣｌＮ３Ｏ２の算出総質量［Ｍ＋Ｈ］＋：３４１．０９３１；実測値：３４１．００００。
【０１９８】
２−フェニルキナゾリン−４−イル  ジエチルカルバマート（化合物７）
【０１９９】
【化１３】
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表題の生成物は、６０％の収率で白色固形として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．１９−１．４２（ｍ，６Ｈ），３．３２−３．６８（ｍ，４Ｈ），７．３６−７．６３（ｍ，４Ｈ），７．８５（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，１Ｈ），８．０５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）および８．５１（ｄｄ，Ｊ＝６．６＆３．０Ｈｚ，２Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１３．４１＆１４．６５，４２．９０＆４３．００，１１６．３７，１２３．６１，１２７．４２，１２８．６１，１２８．６７，１２８．９１，１３０．９４，１３４．４９，１３７．６３，１５１．８２，１５３．４６，１６０．６３および１６４．５７。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ１９Ｈ１９Ｎ３Ｏ２の算出総質量［Ｍ＋Ｈ］＋：３２１．１４７７；実測値：３２１．００００。
【０２００】
２−（２−クロロフェニル）キナゾリン−４−イル  ジエチルカルバマート（化合物８）：
【０２０１】
【化１４】
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表題の生成物は、６９％の収率で白色固形として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．０２−１．５５（ｍ，６Ｈ），３．２３−３．７６（ｍ，４Ｈ），７．２６−７．４０（ｍ，２Ｈ），７．４１−７．５３（ｍ，１Ｈ），７．５７−７．７２（ｍ，１Ｈ），７．７５−７．９７（ｍ，２Ｈ）および８．０１−８．２７（ｍ，２Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１３．２５＆１４．５５，４２．８５，１１６．２７，１２３．５０，１２６．８６，１２８．１０，１２８．５５，１３０．４７，１３０．６８，１３２．２３，  １３３．２１，  １３７．６６，  １５１．５５，  １５２．９２，１６１．０８および１６４．２０。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ１９Ｈ１８ＣｌＮ３Ｏ２の算出総質量［Ｍ＋Ｈ］＋：３５５．１０８８，実測値：３５５．００００。
【０２０２】
本発明のいくつかの実施形態を例示し、説明したが、本発明が本明細書に記載の実施形態に限定されないことは明白である。添付の特許請求の範囲に記載の本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく、多数の修正、変更、変化、置換および均等物は当業者にとって明らかであろう。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図８Ｃ】
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【図８Ｄ】
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【図８Ｅ】
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【図８Ｆ】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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