(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
遊離形態または塩形態の、式Ｉ：
【化１】
0006608933.tif 000031
［式中、
（ｉ）Ｒ1は、Ｃ1-4アルキルであり；
（ｉｉ）Ｒ2は、
Ｈ、
−ＯＨ、
ハロ、
Ｃ1-4アルキル、
Ｃ1-4アルコキシ、
−Ｎ(Ｒf)(Ｒg）、
−Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒh)(Ｒi）、
−Ｃ(Ｏ)ＯＲj、
−ＣＮ、
Ｃ1-4アルキルチオ、
ヘテロアリール、
ヘテロＣ3-7シクロアルキル、および
アリールオキシ（ここで、該アリールは、１個以上のハロ（例えば、フルオロ）で置換されていてもよい）
からなる群から選択され；
（ｉｉｉ）Ｒ3は、ＨまたはＣ1-4アルキルであり；
（ｉｖ）Ｒa、Ｒb、Ｒc、ＲdおよびＲeは、独立して、Ｈ、ハロ、−Ｏ−Ｃ1-6アルキルであり；
（ｖ）ＲfおよびＲgは、独立して、Ｈ、Ｃ1-4アルキルまたはヘテロアリールであり；
（ｖｉ）ＲhおよびＲiは、独立して、ＨまたはＣ1-4アルキルであり；
（ｖｉｉ）Ｒjは、ＨまたはＣ1-4アルキルである］
の化合物。
【請求項２】
化合物が、式Ｉ（ｉ）：
【化２】
0006608933.tif 000032
である、遊離形態または塩形態の請求項１記載の化合物。
【請求項３】
（ｉ）Ｒ1がＣ1-4アルキルであり；
（ｉｉ）Ｒ2がＣ1-4アルコキシであり；
（ｉｉｉ）Ｒ3がＨであり；
（ｉｖ）Ｒb、ＲcおよびＲeがＨであり；Ｒaがハロであり、Ｒdが−Ｏ−Ｃ1-6アルキルである、
遊離形態または塩形態の請求項１または２記載の化合物。
【請求項４】
化合物が、
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−８−(４−フルオロフェノキシ)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−８−(ジメチルアミノ)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−８−(ピロリジン−１−イル)−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−８−(１Ｈ−ピラゾール−１−イル)−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−８−(ピリジン−２−イルアミノ)−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−８−(エチルチオ)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−４−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボニトリル；
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−４−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボン酸；
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−４−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボン酸エチル；
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−Ｎ−エチル−３−メチル−４−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボキサミド；
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−４−オキソ−３ａ,４−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボキサミド；
８−クロロ−１−(２−クロロ−５−(シクロプロピルメトキシ)フェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(２,５−ジクロロフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(２−クロロフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(２−クロロフェニル)−３,５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(２,５−ジクロロフェニル)−３,５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(５−ブトキシ−２−クロロフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
８−クロロ−１−(２,５−ジクロロフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(５−ブトキシ−２−クロロフェニル)−８−クロロ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(５−ブトキシ−２−クロロフェニル)−８−メトキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；および
１−(２−クロロ−５−(シクロブチルメトキシ)フェニル)−８−メトキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン
からなる群から選択される、遊離形態または塩形態の請求項１または２記載の化合物。
【請求項５】
遊離形態または塩形態の請求項１〜４いずれか１項記載の化合物を薬剤的に許容される希釈剤もしくは担体と組み合わせてまたは薬剤的に許容される希釈剤もしくは担体と一緒に含む医薬組成物。
【請求項６】
遊離形態または塩形態の請求項１〜４いずれか１項記載の化合物を含む医薬。
【請求項７】
ＰＤＥ２媒介障害の処置のための、請求項５記載の医薬組成物または請求項６記載の医薬。
【請求項８】
該障害が、神経障害；認知障害；パーキンソン病およびうつ病に付随した認知機能障害；精神遅滞；睡眠障害（；精神障害；作為症；衝動制御障害；気分障害；精神運動障害；精神病性障害；薬物依存；摂食障害；小児精神障害；向精神物質の使用に起因する精神的および行動的障害；心血管障害；および疼痛からなる群から選択される、請求項７記載の医薬組成物または医薬。
【請求項９】
該障害が、不安、うつ病、自閉症スペクトラム症、統合失調症、自閉症および／または統合失調症患者における不安および／またはうつ病、および統合失調症または認知症に関連する認知障害から選択される、請求項７記載の医薬組成物または医薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、下記式ＩのＰＤＥ２阻害化合物、それらの医薬としての使用およびそれらを含む医薬組成物に関する。これらの化合物は、例えば不安、うつ病、自閉症スペクトラム症（ＡＳＤ）、統合失調症および認知障害のようなＰＤＥ２媒介障害の処置において、有用である。
【背景技術】
【０００２】
ＰＤＥ２は、脳（海馬、線条体および前頭前野を包含する）、心臓、血小板、内皮細胞、副腎球状層細胞およびマクロファージを包含する多種多様な組織および細胞型において発現する１０５−ＫＤａのホモ二量体である。ｃＧＭＰは、この酵素に対する好ましい基質およびエフェクター分子であるが、ＰＤＥ２は、環状アデノシン一リン酸（ｃＡＭＰ）および環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）のどちらをも加水分解し、多くの生理的プロセスに関与すると考えられている。特に、ｃＧＭＰシグナル伝達を減少させる一酸化窒素合成酵素（ＮＯＳ）の阻害が抗不安化合物であるベンゾジアゼピンクロルジアゼポキシドの行動的影響を弱めることを示している。また、Ｂａｙ６０−７５５０のような市販のＰＤＥ２ツール阻害剤は、脳内の環状ヌクレオチド濃度を増加させ、正常な齧歯類およびストレス状態にある齧歯類において重要な抗不安効果および抗うつ効果を発揮することが示されている（非特許文献１；非特許文献２；非特許文献３；非特許文献４）。Ｂａｙ６０−７５５０によるＰＤＥ２の阻害は、また、刺激を受けた１次ニューロン培養物中にて用量反応的にｃＧＭＰおよびｃＡＭＰ濃度を上昇させること；海馬のスライス標本中にて電気刺激に応答してＬＴＰを亢進すること；新規対象認識動物モデル（novel object recognition animal model）における学習およびラットにおける社会的認識課題（social recognition task）を増強すること；加齢老化（age impaired）ラットにおける新規対象記憶（novel object memory）の獲得期および固定期を改善すること；訓練後に投与された場合の対象位置および認識課題の遂行を改善することが示されている。非特許文献５。Ｂａｙ６０−７５５０は、また、ラットにおいて脳におけるｎＮＯＳ活性を増強することによって認知および記憶機能を改善することが示されている。(非特許文献６）。したがって、ＰＤＥ２は、有効な行動および認知機能において重要な役割を果たす。
【０００３】
有効な行動および認知機能に加えて、内皮細胞内でのＰＤＥ２Ａ  ｍＲＮＡおよび活性がインビトロでの腫瘍壊死因子−α刺激に応答して非常に誘発されることが観察されている。９−(６−フェニル−２−オキソヘキサ−３−イル)−２−(３,４−ジメトキシベンジル)−プリン−６−オン（ＰＤＰ）によるＰＤＥ２活性の選択的阻害は、内皮細胞のバリア機能を非常に変化させ、これは、ＰＤＥ２が病的状況下の循環器系の体液およびタンパク質完全性の調節において重要な役割を果たす可能性があることを示唆している。したがって、ＰＤＥ２は、敗血症に関し、またはより局在化した炎症応答において、優れた薬理学的ターゲットであり得る。
【０００４】
最近の研究では、ＰＤＥ２阻害は、また、肺拡張を誘発すること、肺血管リモデリングを予防すること、および肺高血圧の右心室肥大特徴を軽減することを示しており、これは、肺高血圧におけるＰＤＥ２阻害の治療可能性を示唆している。非特許文献７。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Xu et al., Eur. J. Pharmacol. (2005) 518:40-46
【非特許文献２】Masood et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. (2008) 326:369-379
【非特許文献３】Masood et al., JPET (2009) 331:690-699
【非特許文献４】Xu et al., Intl. J. Neuropsychopharmacol. (2013) 16:835-847
【非特許文献５】Gomez et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. (2013) 23:6522-6527
【非特許文献６】Domek-Lopacinska et al. (2008) Brain Res. 1216:68-77
【非特許文献７】Bubb et al., “Inhibition of Phosphodiesterase 2 Augments cGMP and cAMP Signaling to Ameliorate Pulmonary Hypertension”, Circulation, August 5, 2014, p. 496-507, DOI:10.1161/CIRCULATIONAHA.114.009751
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
有望な前臨床データおよびＰＤＥ２の有望な創薬ターゲットとしての確認試験にもかかわらず、現存するＰＤＥ２化合物の代謝安定性および脳浸透性の低さを一因として、現在臨床的検討下にあることが知られているＰＤＥ２阻害剤はない。かくして、ＰＤＥ２活性を選択的に阻害し、一方で優れた生物物理学的特性を示す、化合物が必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、経口利用能および脳アクセスが向上した、強力な選択的ＰＤＥ２阻害特性を有する新規化合物を提供する。したがって、第１の態様において、本発明は、遊離形態または塩形態の、式Ｉ：
【化１】
0006608933.tif 000002
［式中、
（ｉ）Ｒ1は、Ｃ1-4アルキル（例えば、メチル）であり；
（ｉｉ）Ｒ2は、
Ｈ、
−ＯＨ、
ハロ（例えば、クロロ）、
Ｃ1-4アルキル（例えば、メチル）、
Ｃ1-4アルコキシ（例えば、メトキシまたはエトキシ）、
−Ｎ(Ｒf)(Ｒg）、
−Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒh)(Ｒi）、
−Ｃ(Ｏ)ＯＲj、
−ＣＮ、
Ｃ1-4アルキルチオ（例えば、エチルチオ）、
ヘテロアリール（例えば、ピラゾリル、例えば、ピラゾール−１−イル）、
ヘテロＣ3-7シクロアルキル（例えば、モルホリニル（例えば、モルホリン−１−イル）またはピロリジニル（例えば、ピロリジン−１−イル））、および
アリールオキシ（例えば、フェノキシ）（ここで、該アリールは、１個以上のハロ（例えば、フルオロ）で置換されていてもよい）（例えば、４−フルオロフェノキシ）
からなる群から選択され；
（ｉｉｉ）Ｒ3は、ＨまたはＣ1-4アルキル（例えば、メチル）であり；
（ｉｖ）Ｒa、Ｒb、Ｒc、ＲdおよびＲeは、独立して、Ｈ、ハロ（例えば、クロロまたはフルオロ）、−Ｏ−Ｃ1-6アルキル（例えば、プロポキシ、ブトキシ（例えば、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ）、−ＯＣＨ2−シクロプロピル、−ＯＣＨ2−シクロブチルまたは−ＯＣＨ2−シクロペンチル）であり；
（ｖ）ＲfおよびＲgは、独立して、Ｈ、Ｃ1-4アルキル（例えば、メチル）またはヘテロアリール（例えば、ピリジル（例えば、ピリダ−２−イル））であり；
（ｖｉ）ＲhおよびＲiは、独立して、ＨまたはＣ1-4アルキル（例えば、エチル）であり；
（ｖｉｉ）Ｒjは、ＨまたはＣ1-4アルキル（例えば、エチル）である］
の化合物を提供する。
【０００８】
本発明は、また、遊離形態または塩形態の、以下のとおりの式Ｉの化合物を提供する：
１.１  Ｒ1がＣ1-4アルキル（例えば、メチル）である、式Ｉ；
１.２  Ｒ1がメチルである、式１.１；
１.３  Ｒ2が、Ｈ；−ＯＨ；ハロ（例えば、クロロ）；Ｃ1-4アルキル（例えば、メチル）；Ｃ1-4アルコキシ（例えば、メトキシまたはエトキシ）；−Ｎ(Ｒf)(Ｒg)；−Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒh)(Ｒi)；−Ｃ(Ｏ)ＯＲj；−ＣＮ；Ｃ1-4アルキルチオ（例えば、エチルチオ）；ヘテロアリール（例えば、ピラゾリル、例えば、ピラゾール−１−イル）；ヘテロＣ3-7シクロアルキル（例えば、モルホリニル（例えば、モルホリン−１−イル）またはピロリジニル（例えば、ピロリジン−１−イル））；およびアリールオキシ（例えば、フェノキシ）（ここで、該アリールは、１個以上のハロ（例えば、フルオロ）で置換されていてもよい）（例えば、４−フルオロフェノキシ）からなる群から選択される、式Ｉ、または１.１〜１.２のいずれか；
１.４  Ｒ2がＨである、式Ｉまたは１.１〜１.２のいずれか；
１.５  Ｒ2が−ＯＨである、式Ｉまたは１.１〜１.２のいずれか；
１.６  Ｒ2がハロ（例えば、クロロ）である、式Ｉまたは１.１〜１.２のいずれか；
１.７  Ｒ2がクロロである、式Ｉまたは１.１〜１.２のいずれか；
１.８  Ｒ2がＣ1-4アルキル（例えば、メチル）である、式Ｉまたは１.１〜１.２のいずれか；
１.９  Ｒ2がメチルである、式Ｉまたは１.１〜１.２のいずれか；
１.１０  Ｒ2がＣ1-4アルコキシ（例えば、メトキシまたはエトキシ）である式Ｉまたは１.１〜１.２のいずれか；
【０００９】
１.１１  Ｒ2がメトキシである、式Ｉまたは１.１〜１.２のいずれか；
１.１２  Ｒ2がエトキシである、式Ｉまたは１.１〜１.２のいずれか；
１.１３  Ｒ2がＮ(Ｒf)(Ｒg)である、式Ｉまたは１.１〜１.２のいずれか；
１.１４  ＲfおよびＲgが、独立して、Ｈ、Ｃ1-4アルキル（例えば、メチル）またはヘテロアリール（例えば、ピリジル（例えば、ピリダ−２−イル））である、式Ｉまたは１.１３；
１.１５  ＲfがＨであり、ＲgがＨ、Ｃ1-4アルキル（例えば、メチル）またはヘテロアリール（例えば、ピリジル（例えば、ピリダ−２−イル））から選択される、式Ｉまたは１.１３；
１.１６  ＲfがＨであり、Ｒgがピリジル（例えば、ピリダ−２−イル）である、式Ｉまたは１.１３；
１.１７  ＲfがＨであり、ＲgがＣ1-4アルキル（例えば、メチル）である、式Ｉまたは１.１３；
１.１８  ＲfがＨであり、Ｒgがメチルである、式Ｉまたは１.１３；
１.１９  ＲfおよびＲgがともにＨである、式Ｉまたは１.１３；
１.２０  ＲfおよびＲgがともにＣ1-4アルキル（例えば、メチル）である、式Ｉまたは１.１３；
【００１０】
１.２１  ＲfおよびＲgがともにメチルである、式Ｉまたは１.１３；
１.２２  ＲfがＨであり、Ｒgがヘテロアリール（例えば、ピリジル（例えば、ピリダ−２−イル））である、式Ｉまたは１.１３；
１.２３  Ｒ2が−Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒh)(Ｒi)である、式Ｉまたは１.１３；
１.２４  ＲhおよびＲiが、独立して、ＨまたはＣ1-4アルキル（例えば、エチル）である、式Ｉまたは１.２３；
１.２５  ＲhがＨであり、ＲiがＨまたはＣ1-4アルキル（例えば、エチル）である、式Ｉまたは１.２３；
１.２６  ＲhがＨであり、ＲiがＣ1-4アルキル（例えば、エチル）である、式Ｉまたは１.２３；
１.２７  ＲhがＨであり、Ｒiがエチルである、式Ｉまたは１.２３；
１.２８  ＲhおよびＲiがともにＨである、式Ｉまたは１.２３；
１.２９  Ｒ2が−Ｃ(Ｏ)ＯＲjである、式Ｉまたは１.１〜１.２のいずれか；
１.３０  ＲjがＨまたはＣ1-4アルキル（例えば、エチル）である、式Ｉまたは１.２９；
【００１１】
１.３１  ＲjがＨである、式Ｉまたは１.２９；
１.３２  ＲjがＣ1-4アルキル（例えば、エチル）である、式Ｉまたは１.２９；
１.３３  Ｒjがエチルである、式Ｉまたは１.２９；
１.３４  Ｒ2が−ＣＮである、式Ｉまたは１.１〜１.２のいずれか；
１.３５  Ｒ2がＣ1-4アルキルチオ（例えば、エチルチオ）である、式Ｉまたは１.１〜１.２のいずれか；
１.３６  Ｒ2がエチルチオである、式Ｉまたは１.１〜１.２のいずれか；
１.３７  Ｒ2がヘテロアリール（例えば、ピラゾリル、例えば、ピラゾール−１−イル）である、式Ｉまたは１.１〜１.２のいずれか；
１.３８  Ｒ2がピラゾリル、例えば、ピラゾール−１−イルである、式Ｉまたは１.１〜１.２のいずれか；
１.３９  Ｒ2がヘテロＣ3-7シクロアルキル（例えば、モルホリニル（例えば、モルホリン−１−イル）またはピロリジニル（例えば、ピロリジン−１−イル））である、式Ｉまたは１.１〜１.２のいずれか；
１.４０  Ｒ2がヘテロＣ5-6シクロアルキルである、式Ｉまたは１.１〜１.２のいずれか；
【００１２】
１.４１  Ｒ2がモルホリニル（例えば、モルホリン−１−イル）である、式Ｉまたは１.１〜１.２のいずれか；
１.４２  Ｒ2がピロリジニル（例えば、ピロリジン−１−イル）である、式Ｉまたは１.１〜１.２のいずれか；
１.４３  Ｒ2がアリールオキシ（例えば、フェノキシ）（ここで、該アリールは、１個以上のハロ（例えば、フルオロ）で置換されていてもよい）（例えば、４−フルオロフェノキシ）である、式Ｉまたは１.１〜１.２のいずれか；
１.４４  Ｒ2がフェノキシ（ここで、該フェニルは、１個以上のハロ（例えば、フルオロ）で置換されていてもよい（例えば、４−フルオロフェノキシ）である、式Ｉまたは１.１〜１.２のいずれか；
１.４５  Ｒ2が４−フルオロフェノキシである、式Ｉまたは１.１〜１.２のいずれか；
１.４６  Ｒ3がＨまたはＣ1-4アルキル（例えば、メチル）である、式Ｉまたは１.１〜１.４５のいずれか；
１.４７  Ｒ3がＨである、式Ｉまたは１.１〜１.４５のいずれか；
１.４８  Ｒ3がＣ1-4アルキル（例えば、メチル）である、式Ｉまたは１.１〜１.４５のいずれか；
１.４９  Ｒ3がメチルである、式Ｉまたは１.１〜１.４５のいずれか；
１.５０  Ｒa、Ｒb、Ｒc、ＲdおよびＲeが、独立して、Ｈ、ハロ（例えば、クロロまたはフルオロ）、−Ｏ−Ｃ1-6アルキル（例えば、プロポキシ、ブトキシ（例えば、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ）、−ＯＣＨ2−シクロプロピル、−ＯＣＨ2−シクロブチルまたは−ＯＣＨ2−シクロペンチル）である、式Ｉまたは１.１〜１.４９のいずれか；
【００１３】
１.５１  Ｒa、Ｒb、Ｒc、ＲdおよびＲeが、独立して、Ｈである、式Ｉまたは１.１〜１.５０のいずれか；
１.５２  Ｒa、Ｒb、Ｒc、ＲdおよびＲeが、独立して、ハロ（例えば、クロロまたはフルオロ）である、式Ｉまたは１.１〜１.５１のいずれか；
１.５３  Ｒa、Ｒb、Ｒc、ＲdおよびＲeが、独立して、クロロまたはフルオロである、式Ｉまたは１.１〜１.５１のいずれか；
１.５４  Ｒa、Ｒb、Ｒc、ＲdおよびＲeが、独立して、−Ｏ−Ｃ1-6アルキル（例えば、プロポキシ、ブトキシ（例えば、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ）、−ＯＣＨ2−シクロプロピル、−ＯＣＨ2−シクロブチルまたは−ＯＣＨ2−シクロペンチル）である、式Ｉまたは１.１〜１.５３のいずれか；
１.５５  Ｒa、Ｒb、Ｒc、ＲdおよびＲeが、独立して、−Ｏ−Ｃ3-6アルキルである、式Ｉまたは１.１〜１.５３のいずれか；
１.５６  Ｒb、ＲcおよびＲeがすべてＨである、式Ｉまたは１.１〜１.５５のいずれか；
１.５７  Ｒb、ＲcおよびＲeがすべてＨであり；ＲaおよびＲdが、独立して、Ｈ、ハロ（例えば、クロロまたはフルオロ）、−Ｏ−Ｃ1-6アルキル（例えば、プロポキシ、ブトキシ（例えば、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ）、−ＯＣＨ2−シクロプロピル、−ＯＣＨ2−シクロブチルまたは−ＯＣＨ2−シクロペンチル）から選択される、式Ｉまたは１.１〜１.５６のいずれか；
１.５８  Ｒb、ＲcおよびＲeがすべてＨであり；Ｒaがハロ（例えば、クロロまたはフルオロ）であり；ＲdがＨ、ハロ（例えば、クロロまたはフルオロ）または−Ｏ−Ｃ1-6アルキル（例えば、プロポキシ、ブトキシ（例えば、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ）、−ＯＣＨ2−シクロプロピル、−ＯＣＨ2−シクロブチルまたは−ＯＣＨ2−シクロペンチル）である、式Ｉまたは１.１〜１.５６のいずれか；
１.５９  Ｒb、ＲcおよびＲeがすべてＨであり；Ｒaがハロ（例えば、クロロまたはフルオロ）であり；ＲdがＨである、式Ｉまたは１.１〜１.５６のいずれか；
１.６０  Ｒb、ＲcおよびＲeがすべてＨであり；ＲaおよびＲdがともにハロ（例えば、クロロまたはフルオロ）である、式Ｉまたは１.１〜１.５６のいずれか；
【００１４】
１.６１  Ｒb、ＲcおよびＲeがすべてＨであり；ＲaおよびＲdがともにクロロである、式Ｉまたは１.１〜１.５６のいずれか；
１.６２  Ｒb、ＲcおよびＲeがすべてＨであり；Ｒaがハロ（例えば、クロロまたはフルオロ）であり；Ｒdが−Ｏ−Ｃ1-6アルキル（例えば、プロポキシ、ブトキシ（例えば、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ）、−ＯＣＨ2−シクロプロピル、−ＯＣＨ2−シクロブチルまたは−ＯＣＨ2−シクロペンチル）である、式Ｉまたは１.１〜１.５６のいずれか；
１.６３  Ｒb、ＲcおよびＲeがすべてＨであり；Ｒaがハロ（例えば、クロロまたはフルオロ）であり；Ｒdが−Ｏ−Ｃ3-6アルキル（例えば、プロポキシ、ブトキシ（例えば、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ）、−ＯＣＨ2−シクロプロピル、−ＯＣＨ2−シクロブチルまたは−ＯＣＨ2−シクロペンチル）である、式Ｉまたは１.１〜１.５６のいずれか；
１.６４  Ｒb、ＲcおよびＲeがすべてＨであり；Ｒaがクロロであり；Ｒdがブトキシ（例えば、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ）である、式Ｉまたは１.１〜１.５６のいずれか；
１.６５  Ｒb、ＲcおよびＲeがすべてＨであり；Ｒaがクロロであり；Ｒdがｎ−ブトキシである、式Ｉまたは１.１〜１.５６のいずれか；
１.６６  Ｒb、ＲcおよびＲeがすべてＨであり；Ｒaがハロ（例えば、クロロまたはフルオロ）であり；Ｒdが−Ｏ−Ｃ1-6アルキル（例えば、プロポキシ、ブトキシ（例えば、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ）、−ＯＣＨ2−シクロプロピル、−ＯＣＨ2−シクロブチルまたは−ＯＣＨ2−シクロペンチル）である、式Ｉまたは１.１〜１.５６のいずれか；
１.６７  Ｒa、Ｒb、ＲcおよびＲeがすべてＨであり、Ｒdが−Ｏ−Ｃ1-6アルキルである、式Ｉまたは１.１〜１.５６のいずれか；
１.６８  化合物が式Ｉ（ｉ）：
【化２】
0006608933.tif 000003
である、上記式のいずれか；
１.６９  化合物が式Ｉ（ｉｉ）：
【化３】
0006608933.tif 000004
である、上記式のいずれか；
１.７０  化合物が式Ｉ（ｉｉｉ）：
【化４】
0006608933.tif 000005
である、上記式のいずれか；
【００１５】
１.７１  化合物が、
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−８−(４−フルオロフェノキシ)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−８−(ジメチルアミノ)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−８−(ピロリジン−１−イル)−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−８−(１Ｈ−ピラゾール−１−イル)−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−８−(ピリジン−２−イルアミノ)−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−８−(エチルチオ)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−４−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボニトリル；
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−４−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボン酸；
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−４−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボン酸エチル；
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−Ｎ−エチル−３−メチル−４−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボキサミド；
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−４−オキソ−３ａ,４−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボキサミド；
８−クロロ−１−(２−クロロ−５−(シクロプロピルメトキシ)フェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(２,５−ジクロロフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(２−クロロフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(２−クロロフェニル)−３,５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(２,５−ジクロロフェニル)−３,５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(５−ブトキシ−２−クロロフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
８−クロロ−１−(２,５−ジクロロフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(５−ブトキシ−２−クロロフェニル)−８−クロロ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；
１−(５−ブトキシ−２−クロロフェニル)−８−メトキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン；および
１−(２−クロロ−５−(シクロブチルメトキシ)フェニル)−８−メトキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン
からなる群から選択される、上記式のいずれか；
１.７２  化合物が、例えば、実施例２３に記載されるようなＰＤＥアッセイにおいて、２μＭ未満、より好ましくは２５０ｎＭ以下、より好ましくは１０ｎＭ以下のＩＣ50をもって、ｃＧＭＰのホスホジエステラーゼ媒介（例えば、ＰＤＥ２媒介）加水分解を阻害する、上記式のいずれか。
【００１６】
特定の実施態様において、本発明は、遊離形態または塩形態の、式Ｉ（ｉ）：
【化５】
0006608933.tif 000006
［式中、
（ｉ）Ｒ1は、Ｃ1-4アルキル（例えば、メチル）であり；
（ｉｉ）Ｒ2は、Ｃ1-4アルコキシ（例えば、メトキシまたはエトキシ）であり；
（ｉｉｉ）Ｒ3は、Ｈであり；
（ｉｖ）Ｒb、ＲcおよびＲeは、Ｈであり；Ｒaは、ハロであり、Ｒdは、−Ｏ−Ｃ1-6アルキル（例えば、プロポキシ、ブトキシ（例えば、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ）、−ＯＣＨ2−シクロプロピル、−ＯＣＨ2−シクロブチルまたは−ＯＣＨ2−シクロペンチル）である］
の化合物を提供する。
【００１７】
特定の実施態様において、本発明は、遊離形態または塩形態の、
（ｉ）Ｒ1がＣ1-4アルキル（例えば、メチル）であり；
（ｉｉ）Ｒ2がＣ1-4アルコキシ（例えば、メトキシまたはエトキシ）であり；
（ｉｉｉ）Ｒ3がＨであり；
（ｉｖ）Ｒb、ＲcおよびＲeがＨであり；Ｒaがハロであり、Ｒdが−ＯＣＨ2−シクロブチルである、
式Ｉ（ｉ）の化合物を提供する
【００１８】
第２の態様において、本発明は、本発明の化合物、すなわち、遊離形態または薬剤的に許容される塩形態の、式Ｉ、Ｉ（ｉ）、Ｉ（ｉｉ）もしくはＩ（ｉｉｉ）、または式１.１〜１.７２のいずれかの化合物を薬剤的に許容される希釈剤もしくは担体と組み合わせてまたは薬剤的に許容される希釈剤もしくは担体と一緒に含む、医薬組成物を提供する。
【００１９】
本発明は、また、ＰＤＥ２媒介障害、例えば下記のような障害の処置（特に、不安、うつ病、自閉症スペクトラム症（ＡＳＤ）、統合失調症、認知障害の処置）のための本発明の化合物を使用する方法。このリストは、完全に網羅しているわけではなく、下記のような他の疾患および障害を包含し得る。
【００２０】
したがって、第３の態様において、本発明は、ＰＤＥ２媒介障害の処置方法であって、該処置を必要とする対象体に、治療上有効量の、本明細書に記載の本発明の化合物、すなわち、遊離形態または薬剤的に許容される塩形態の、式Ｉ、Ｉ（ｉ）、Ｉ（ｉｉ）もしくはＩ（ｉｉｉ）、または式１.１〜１.７２のいずれかの化合物、または本明細書に記載の医薬組成物を投与することを含む、方法を提供する。
【００２１】
第３の態様のさらなる実施態様において、本発明は、対象体、好ましくは哺乳動物、好ましくはヒトにおける以下の障害の処置方法であって、該対象体に、治療上有効量の、本明細書に記載の本発明の化合物、すなわち、遊離形態または薬剤的に許容される塩形態の、式Ｉ、Ｉ（ｉ）、Ｉ（ｉｉ）もしくはＩ（ｉｉｉ）、または式１.１〜１.７２のいずれかの化合物、または本明細書に記載の医薬組成物を投与することを含む、方法を提供する：
神経障害（たとえば、片頭痛；てんかん；アルツハイマー病；パーキンソン病；脳損傷；脳卒中；脳血管疾患（脳動脈硬化症、脳アミロイド血管症、遺伝性脳出血および低酸素性虚血性脳症を包含する）；脊髄性筋萎縮症；側索硬化症；多発性硬化症；
認知障害（健忘症、老年認知症、ＨＩＶ関連認知症、アルツハイマー関連認知症、ハンチントン関連認知症、レビー小体型認知症、血管性認知症、薬物関連認知症、せん妄および軽度認知障害を包含する）；およびパーキンソン病およびうつ病に付随した認知機能障害；
精神遅滞（ダウン症候群および脆弱Ｘ症候群を包含する）；
睡眠障害（過眠、睡眠リズム障害、不眠症、睡眠時随伴症および睡眠遮断を包含する）；
精神障害（例えば、不安（急性ストレス反応、全般不安症、社交不安障害、パニック障害、心的外傷後ストレス障害（ＰＴＳＤ）、強迫性障害、特定恐怖症、社会恐怖症、慢性不安症および強迫性障害を包含する）；
作為症（急性幻覚性躁病を包含する）；
衝動制御障害（病的賭博、病的放火、病的窃盗および間欠性爆発性障害を包含する）；
気分障害（双極性Ｉ型障害、双極性ＩＩ型障害、躁病、混合型情動状態、大うつ病、慢性うつ病、季節性うつ病、精神病性うつ病および産後うつ病を包含する）；
精神運動障害（錐体外路性運動障害、例えば、パーキンソニズム、レビー小体病、振戦、薬物誘発性振戦、薬物誘発性遅発性ジスキネジア、Ｌドパ誘発性ジスキネジアおよび下肢静止不能症候群）；
精神病性障害（統合失調症（例えば、連続性または突発性、妄想性、破瓜型、緊張型、未分化型および残遺型の統合失調症を包含する）、統合失調感情障害、統合失調症様および妄想性障害）；
薬物依存（麻薬依存、アルコール依存症、アンフェタミン依存症、コカイン中毒、ニコチン依存症および薬物禁断症候群を包含する）；
摂食障害（食欲不振、過食症（bulimia）、過食性障害、過食症（hyperphagia）および氷食症を包含する）；
小児精神障害（注意欠陥障害、注意欠陥多動障害、素行障害（例えば、チック障害、例えば、一過性、慢性、運動性または音声性チック障害）、自閉症および自閉症スペクトラム症（ＡＳＤ）を包含する）；
向精神物質の使用に起因する精神的および行動的障害；
心血管障害（例えば、肺高血圧および肺動脈性肺高血圧症）；および
疼痛（例えば、骨関節痛（変形性関節症）、反復運動痛（repetitive motion pain）、歯痛、癌性疼痛、筋筋膜痛（筋肉損傷、線維筋痛症）、手術期疼痛（一般外科、婦人科）、慢性疼痛および神経障害性疼痛）。
【００２２】
一の実施態様において、該疾患または障害は、不安、うつ病、自閉症スペクトラム症および統合失調症からな群から選択され、例えば自閉症および／または統合失調症患者における不安および／またはうつ病である。別の実施態様において、該疾患または障害は、統合失調症または認知症に関連する認知障害である。
【００２３】
第４の態様において、本発明は、本明細書に記載されるＰＤＥ２媒介障害の処置のための（医薬の製造に使用するための）、本明細書に記載の本発明の化合物、すなわち、遊離形態または薬剤的に許容される塩形態の、式Ｉ、Ｉ（ｉ）、Ｉ（ｉｉ）もしくはＩ（ｉｉｉ）、または式１.１〜１.７２のいずれかの化合物を提供する。
【００２４】
第５の態様において、本発明は、本明細書に記載されるＰＤＥ２媒介障害の処置に使用するための、明細書に記載の本発明の化合物、すなわち、遊離形態または薬剤的に許容される塩形態の、式Ｉ、Ｉ（ｉ）、Ｉ（ｉｉ）もしくはＩ（ｉｉｉ）、または式１.１〜１.７２のいずれかの化合物を薬剤的に許容される希釈剤もしくは担体と組み合わせてまたは薬剤的に許容される希釈剤もしくは担体と一緒に含む医薬組成物を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
（本文に記載なし）
【発明を実施するための形態】
【００２６】
発明の詳細な説明
他に特記されないかまたは文脈から明かではない場合、本明細書における以下の用語は、以下の意味を有する：
（ａ）本明細書で用いられる「アルキル」は、例えばハロゲン（例えば、クロロまたはフルオロ）、ヒドロキシまたはカルボキシで、モノ置換、ジ置換またはトリ置換されていてもよい、好ましくは炭素原子を１〜６個有し、好ましくは炭素原子を１〜４個有し、直鎖であっても分枝鎖であってもよい、飽和または不飽和の、好ましくは飽和の炭化水素基である。
（ｂ）本明細書で用いられる「アリール」は、例えばアルキル（例えば、メチル）、ハロゲン（例えば、クロロまたはフルオロ）、ハロアルキル（例えば、トリフルオロメチル）またはヒドロキシで、置換されていてもよい、単環式または二環式芳香族炭化水素、好ましくはフェニルである。
（ｃ）本明細書で用いられる「ヘテロアリール」は、例えばアルキル、ハロゲン、ハロアルキルまたはヒドロキシで、置換されていてもよい、芳香環を構成する原子の１個以上が炭素ではなくて硫黄または窒素である芳香族の基、例えば、ピリジルまたはチアジアゾリルである。
【００２７】
本発明の化合物、例えば、式Ｉ、Ｉ（ｉ）、Ｉ（ｉｉ）もしくはＩ（ｉｉｉ）、例えば、式１.１〜１.７２のいずれかの化合物は、遊離形態または塩形態で、例えば酸付加塩として、存在してよい。他に特記しない限り、本明細書において、「本発明の化合物」のような語は、いずれもの形態、例えば遊離形態もしくは酸付加塩形態、または該化合物が酸性置換基を含有する場合には塩基付加塩の形態の該化合物を包含すると解すべきである。本発明の化合物は、医薬としての使用を目的とし、したがって、薬剤的に許容される塩が好ましい。薬剤的使用に適していない塩は、例えば、本発明の化合物またはそれらの薬剤的に許容される塩の単離または精製に有用であり得、したがって、包含される。
本発明の化合物は、プロドラッグの形態で存在する場合もある。プロドラッグの形態は、体内で本発明の化合物に変換される化合物である。例えば、、本発明の化合物がヒドロキシ置換基またはカルボキシ置換基を含有する場合、これらの置換基は、生理学的に加水分解性でかつ許容されるエステルを形成し得る。本明細書で使用する場合、「生理学的に加水分解性でかつ許容されるエステル」とは、生理学的条件下で加水分解できて、投与されるべき用量で自体が生理学的に許容できるものである酸（ヒドロキシ置換基を有する本発明の化合物の場合）またはアルコール（カルボキシ置換基を有する本発明の化合物の場合）を生じる本発明の化合物を意味する。したがって、本発明の化合物がヒドロキシ基を含有する場合、例えば、化合物−ＯＨである場合、該化合物のアシルエステルプロドラッグ、すなわち、化合物−Ｏ−Ｃ(Ｏ)−Ｃ1-4アルキルは、体内で加水分解して、一方では生理学的に加水分解性であるアルコール（化合物−ＯＨ）を形成することができ、他方では酸（例えば、ＨＯＣ(Ｏ)−Ｃ1-4アルキル）を形成することができる。別法として、本発明の化合物がカルボン酸を含有する場合、例えば、化合物−Ｃ(Ｏ)ＯＨである場合、該化合物の酸エステルプロドラッグである化合物−Ｃ(Ｏ)Ｏ−Ｃ1-4アルキルは、化合物−Ｃ(Ｏ)ＯＨおよびＨＯ−Ｃ1-4アルキルを形成することができる。当然のことであるが、かくして、該用語は、慣用の薬剤的プロドラッグ形態を包含する。
【００２８】
本明細書における本発明の化合物は、それらのエナンチオマー、ジアステレ異性体およびラセミ体、ならびにそれらの多形体、水和物、溶媒和物および複合体を包含する。本発明の範囲内の化合物には二重結合を含有するものがある。本発明における二重結合の表示は、二重結合のＥ異性体およびＺ異性体のどちらも含むことを意味する。加えて、本発明の範囲内の化合物には１個以上の不斉中心を含有するものがある。本発明は、光学的に純粋な立体異性体のいずれか、およびいずれもの立体異性体の組合せの使用を包含する。
【００２９】
本発明の化合物がそれらの安定な同位体および不安定な同位体を包含することも意図される。安定な同位体は、同一の種（すなわち、元素）の豊富な核種と比べて１個のさらなる中性子を含有する非放射活性同位体である。該同位体を含む化合物の活性は保持され、該化合物は非同位体アナログの薬物動態を測定するための有用性を有すると考えられる。例えば、本発明の化合物の特定位置の水素原子を重水素（非放射性である安定な同位体）と置換できる。公知の安定な同位体の例としては、重水素、13Ｃ、15Ｎ、18Ｏが挙げられるが、これらに限定されない。別法として、同一の種（すなわち、元素）の豊富な核種と比べてさらなるニュートロンを含有する放射活性同位体である不安定な同位体、例えば123Ｉ、131Ｉ、125Ｉ、11Ｃ、18Ｆは、Ｉ、ＣおよびＦの対応する豊富な核種と置換できる。本発明の化合物の有用な同位体の別の例は11Ｃ同位体である。これらの放射性同位体は、本発明の化合物の放射性イメージングおよび／または薬物動態学的研究に有用である。式Ｉの同位体標識化合物は、一般に、非放射性標識試薬の代わりに放射性標識試薬を用いることによって調製され得る。
【００３０】
「本発明の化合物」または「本発明のＰＤＥ２阻害剤」という語句は、本明細書に記載された化合物、例えば、上記の、遊離形態または塩形態の、式Ｉ、Ｉ（ｉ）、Ｉ（ｉｉ）、Ｉ（ｉｉｉ）、または１.１〜１.７２のいずれかの化合物のいずれかまたは全てを包含する。
【００３１】
「処置」および「処置すること」という語は、該疾患の症状の処置または寛解、および該疾患の原因の処置を包含すると解されるべきである。一の実施態様において、本発明は、本明細書に記載の疾患または障害の処置のための方法を提供する。別の実施態様において、本発明は、本明細書に記載の疾患または障害の予防のための方法を提供する。
【００３２】
処置のための方法について、「有効量」という語は、特定の疾患または障害を処置するための治療上有効量を包含するよう意図されている。
【００３３】
「肺高血圧」という用語は、肺動脈性肺高血圧症を包含するよう意図されている。
【００３４】
「対象体」という用語は、ヒトまたは非ヒト（すなわち、動物）を包含する。特定の実施態様において、本発明は、ヒトおよび非ヒトのどちらも包含する。別の実施態様において、本発明は、非ヒトを包含する。他の実施態様において、該用語は、ヒトを包含する。
【００３５】
本明細書で使用される場合、「を含む」という用語は、オープンエンドであるよう意図されており、未記載のさらなる要素または方法の工程を排除しない。
【００３６】
「認知障害（cognitive disorders）」という用語は、認知不全（cognitive deficiency）症状（すなわち、同年代の集団（the same general age population）内で、一個体の記憶、知力、学習、論理、注意力または実行機能（作業記憶）のような１つ以上の認知的局面における機能が他の個体と比べて亜正常または最適以下）を含む障害を表す。したがって、認知障害としては、健忘症、老年認知症、ＨＩＶ関連認知症、アルツハイマー関連認知症、ハンチントン関連認知症、レビー小体型認知症、血管性認知症、薬物関連認知症、せん妄および軽度認知障害が挙げられるが、これらに限定されない。認知障害は、また、精神病（統合失調症）、気分障害、双極性障害、脳卒中、前頭側頭葉型認知症、進行性核上性麻痺、脳外傷および薬物乱用、アスペルガー症候群および加齢による記憶障害と主に関連があるが独占的に関連があるわけではない障害でもあり得る。
【００３７】
本発明の化合物、例えば、本明細書に記載の、遊離形態または薬剤的に許容される塩形態の、式Ｉ、Ｉ（ｉ）、Ｉ（ｉｉ）またはＩ（ｉｉｉ）、例えば、式１.１〜１.７２のいずれかの化合物は、単独の治療剤として使用することができるが、他の活性薬剤と組み合わせてまたは他の活性薬剤との共投与のために使用することもできる。
【００３８】
本発明を実施する際に用いられる投与量は、もちろん、例えば、処置されるべき特定の疾患または状態、使用される特定の本発明の化合物、投与方法および所望の治療に依存して変化する。本発明の化合物は、経口、非経口、経皮または吸入を包含する好適な経路によって投与できるが、経口投与されるのが好ましい。一般に、満足できる結果は、例えば上記した疾患の処置については、約０.０１〜２.０ｍｇ／ｋｇ程度の投与量の経口投与により得られるよう意図されている。大型哺乳動物、例えばヒトにおいて、経口投与について指摘された日用量は、したがって、約０.７５〜１５０ｍｇの範囲で、好都合には１日１回、もしくは１日２〜４回の分割用量で投与されるか、または持続放出剤形で投与される。かくして、例えば、経口投与要の単位用量は、本発明の化合物約０.２〜７５または１５０ｍｇ、例えば、約０.２または２.０〜５０、７５または１００ｍｇを薬剤的に許容される希釈剤または担体と一緒に含み得る。
【００３９】
本発明の化合物を含む医薬組成物は、慣用の希釈剤または賦形剤、およびガレヌス分野（galenic art）において公知の技術を用いて調製され得る。該薬剤的に許容される担体は、慣用の医薬的担体または賦形剤を含み得る。好適な医薬担体としては、不活性希釈剤または充填剤、水および種々の有機溶媒（例えば水和物および溶媒和物）が挙げられる。該医薬組成物は、必要に応じて、矯味矯臭剤、結合剤、賦形剤などのようなさらなる成分を含有することができる。かくして、経口投与について、クエン酸のような種々の賦形剤を含有する錠剤は、デンプン、アルギン酸およびある種の複合ケイ酸塩のような種々の崩壊剤、ならびにシュークロース、ゼラチンおよびアカシアのような結合剤と一緒に用いることができる。加えて、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウムおよびタルクのような滑沢剤は、しばしば、打錠目的に有用である。同類のタイプの固体組成物は、軟および硬充填ゼラチンカプセル剤内で用いることもできる。したがって、材料の非限定的な例としては、ラクトースまたは乳糖および高分子量ポリエチレングリコールが挙げられる。水性懸濁剤またはエリキシル剤が経口投与のために望ましい場合、その中の該活性化合物は、希釈剤、例えば、水、エタノール、プロピレングリコール、グリセリンまたはそれらの組合せと一緒に、種々の甘味剤または矯味矯臭剤、着色物質または色素、および、所望により、乳化剤または懸濁化剤と合わせることができる。該医薬組成物は、例えば、錠剤、カプセル剤、丸剤、散剤、徐放性製剤、液剤もしくは懸濁剤として経口投与に適した剤形、滅菌溶液、懸濁液もしくはエマルションとして非経口注射に適した剤形、軟膏剤もしくはクリーム剤として局所投与に適した剤形、または坐剤として直腸投与に適した剤形であり得る。
【００４０】
本明細書における本発明の化合物およびそれらの薬剤的に許容される塩は、本明細書に記載された方法および例示された方法を用いて、また、それに類似の方法および化学の分野において公知の方法によって製造され得る。このような方法としては下記のものが挙げられるが、これらに限定されない。これらの方法の出発物質は、市販されていない場合には、公知化合物の合成と同様または類似の技術を用いて化学分野から選択される手順によって製造され得る。本明細書で引用される全ての文献は出典明示によりその全体として本明細書の一部を構成する。
【実施例】
【００４１】
実施例１
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−８−(４−フルオロフェノキシ)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン
【化６】
0006608933.tif 000007
（ａ）５−ブトキシ−２−フルオロベンゼンアミン
４−フルオロ−３−ニトロフェノール（１）（２.８１ｇ、１７.９ｍｍｏｌ）、１−ブロモブタン（３.４３ｇ、２５.０ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（１１.６ｇ、３５.７ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（１５ｍＬ）中混合物を室温で１８時間撹拌する。溶媒を減圧除去した後、残留物を水（４００ｍＬ）で処理し、メチレン（３×５０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機相を蒸発乾固させて、４−ブトキシ−１−フルオロ−２−ニトロベンゼンを橙色の油として得る。粗４−ブトキシ−１−フルオロ−２−ニトロベンゼンのＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中溶液に濃ＨＣｌ（１０ｍＬ）を少しずつ添加する。該混合物を室温で５分間撹拌し、次に、塩化スズ(ＩＩ)（８.４０ｇ、４４.３ｍｍｏｌ）を添加する。室温で１６時間撹拌した後、該反応混合物を水（５００ｍＬ）で処理し、メチレン（４×５０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機相をブライン（４０ｍＬ）で洗浄し、次に、減圧下にて蒸発乾固させる。得られた粗生成物を、溶離液としてヘキサン中０〜１００％酢酸エチル勾配液を用いて中性酸化アルミナカラムによりさらに精製して、５−ブトキシ−２−フルオロベンゼンアミンを油として得る（２.４２ｇ、収率７４％）。MS (ESI) m/z 184.1 [M+H]+。
【００４２】
（ｂ）(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)ヒドラジン
亜硝酸ナトリウム（１.０４ｇ、１５.１ｍｍｏｌ）の水（５ｍＬ）中溶液を０℃にて５−ブトキシ−２−フルオロベンゼンアミン（２.３０ｇ、１２.６ｍｍｏｌ）の濃塩酸（１２ｍＬ）中懸濁液に滴下する。添加完了後、該反応混合物を０℃で３０分間撹拌し、次に、塩化スズ(ＩＩ)・二水和物（６.８６ｇ、３０.４ｍｍｏｌ）の濃塩酸（３ｍＬ）中溶液を添加する。該反応混合物を室温で一夜撹拌し、次に、濾過する。該濾過ケーキを６Ｎ  ＨＣｌ（３×４ｍＬ）およびヘキサン（３×５ｍＬ）で連続して洗浄し、次に、真空乾燥させて、粗生成物３.１８ｇを得、さらなる精製を行わずに直接次工程で使用する。MS (ESI) m/z 199.1 [M+H]+。
【００４３】
（ｃ）８−ブロモ／クロロ−１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン
(４−ブトキシ−２−フルオロフェニル)ヒドラジン（８６０ｍｇ、４.３４ｍｍｏｌ）および３−アセチル−６−ブロモ−４−ヒドロキシ−１,５−ナフチリジン−２(１Ｈ)−オン（５００ｍｇ、１.７７ｍｍｏｌ）のジオキサン（４ｍＬ）中懸濁液に濃ＨＣｌ（０.１ｍＬ）を添加する。密閉管中の該反応混合物を室温で５分間撹拌し、次に、マイクロ波反応器中にて１６０℃で５時間加熱する。室温に冷却した後、該反応混合物を水（２００ｍＬ）で処理し、次に、ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（１０／１）（４×５０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機相を蒸発乾固させる。得られた残留物を、溶離液としてヘキサン中０〜１００％酢酸エチル勾配液を用いてシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、８−クロロ−１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン（MS (ESI) m/z 401.1 [M+H]+）２２％および８−ブロモ−１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン（MS (ESI) m/z 445.1 [M+H]+）６８％を含有する生成物５８０ｍｇを得る。カラム上に２種類の化合物が同時溶出し、さらなる分離を行わずに直接次工程で使用する。
【００４４】
（ｄ）１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−８−(４−フルオロフェノキシ)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン
密閉マイクロ波バイアル中の８−ブロモ／クロロ−１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン（４１.０ｍｇ）、４−フルオロフェノール（１１２ｍｇ、１.００ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（９７ｍｇ、０.３０ｍｍｏｌ）のジオキサン（０.６ｍＬ）中懸濁液をマイクロ波反応器中にて１６０℃で５時間加熱する。室温に冷却した後、該反応混合物を水（１００ｍＬ）で処理し、ＣＨ2Ｃｌ2（４×２５ｍＬ）で抽出する。合わせた有機相を蒸発乾固させる。得られた残留物を、１６分間にわたって０.１％ギ酸含有水中０〜７０％アセトニトリル勾配液を用いて半分取ＨＰＬＣシステムによって精製して、１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−８−(４−フルオロフェノキシ)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン１７ｍｇをオフホワイト色の固体として得る。1H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 11.24 (s, 1H), 7.81 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.88 (dd, J = 6.0, 3.1 Hz, 1H), 6.85-6.78 (m, 4H), 6.76-6.70 (m, 1H), 6.62 (dd, J = 9.2, 9.2 Hz, 1H), 4.03-3.78 (m, 2H), 2.79 (s, 3H), 1.81-1.74 (m, 2H), 1.58-1.45 (m, 2H), 1.00 (t, J = 7.4 Hz, 3H)。MS (ESI) m/z 477.2 [M+H]+。
【００４５】
実施例２
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−８−(ジメチルアミノ)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン
【化７】
0006608933.tif 000008
工程（ｄ）において４−フルオロフェノールの代わりに４０％ジメチルアミン溶液を添加する、実施例１の合成に記載の手順に従う類似の方法で標記化合物を製造する。1H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 10.82 (s, 1H), 7.56 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.15-7.08 (m, 2H), 6.99-6.92 (m, 1H), 6.80 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 3.97 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.81 (s, 3H), 2.77 (s, 6H), 1.81-1.71 (m, 2H), 1.53-1.42 (m, 2H), 0.96 (t, J = 7.4 Hz, 3H)。MS (ESI) m/z 410.2 [M+H]+。
【００４６】
実施例３
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−８−(ピロリジン−１−イル)−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン
【化８】
0006608933.tif 000009
工程（ｄ）において４−フルオロフェノールの代わりにピロリジンを添加する、実施例１の合成に記載の手順に従う類似の方法で標記化合物を製造する。1H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 10.28 (s, 1H), 7.47 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.15-7.08 (m, 2H), 7.00-6.92 (m, 1H), 6.55 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 3.97 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 3.16-3.01 (m, 4H), 2.80 (s, 3H), 1.95-1.84 (m, 4H), 1.80-1.71 (m, 2H), 1.53-1.43 (m, 2H), 0.96 (t, J = 7.4, 7.4 Hz, 3H)。MS (ESI) m/z 436.2 [M+H]+。
【００４７】
実施例４
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−８−(１Ｈ−ピラゾール−１−イル)−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン
【化９】
0006608933.tif 000010
工程（ｄ）において４−フルオロフェノールの代わりに１Ｈ−ピラゾールを添加する、実施例１の合成に記載の手順に従う類似の方法で標記化合物を製造する。1H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 10.83 (s, 1H), 8.15 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.67 (dd, J = 1.7, 0.8 Hz, 1H), 7.59 (dd, J = 2.6, 0.8 Hz, 1H), 7.25-7.16 (m, 2H), 7.14-7.08 (m, 1H), 6.33 (dd, J = 2.6, 1.6 Hz, 1H), 4.00 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.84 (s, 3H), 1.82-1.72 (m, 2H), 1.53-1.43 (m, 2H), 0.96 (t, J = 7.4 Hz, 3H)。MS (ESI) m/z 433.2 [M+H]+。
【００４８】
実施例５
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−８−(ピリジン−２−イルアミノ)−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン
【化１０】
0006608933.tif 000011
実施例１の工程ｃで合成した粗８−ブロモ／クロロ−１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン（４１.０ｍｇ）、ピリジン−２−アミン（１６０ｍｇ、１.７ｍｍｏｌ）、Ｐｄ2(ｄｂａ)3（８ｍｇ）、キサントホス（１０ｍｇ）および炭酸セシウム（１３０ｍｇ、０.４０ｍｍｏｌ）のジオキサン（０.６ｍＬ）中懸濁液を１００℃で６０時間加熱する。室温に冷却した後、該反応混合物をＤＭＦ（５ｍＬ）で処理し、次に、濾過する。濾液を、１６分間にわたって０.１％ギ酸含有水中０〜３０％アセトニトリルの勾配液を用いて半分取ＨＰＬＣシステムで単離して、１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−８−(ピリジン−２−イルアミノ)−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン１１ｍｇをオフホワイト色の固体として得る。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 11.43 (s, 1H), 9.67 (s, 1H), 8.16-8.09 (m, 1H), 7.68 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.38-7.32 (m, 1H), 7.32-7.27 (m, 2H), 7.19-7.10 (m, 2H), 6.98-6.91 (m, 1H), 6.83-6.76 (m, 1H), 3.99 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.60 (s, 3H), 1.71-1.60 (m, 2H), 1.45-1.31 (m, 2H), 0.87 (t, J = 7.4 Hz, 3H)。MS (ESI) m/z 459.2 [M+H]+。
【００４９】
実施例６
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−８−(エチルチオ)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン
【化１１】
0006608933.tif 000012
工程（ｄ）において４−フルオロフェノールの代わりにエタンチオールを添加する、実施例１の合成に記載の手順に従う類似の方法で標記化合物を製造する。1H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 11.00 (s, 1H), 7.56 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.18-7.09 (m, 2H), 7.03-6.98 (m, 1H), 3.97 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.81 (s, 3H), 2.51 (q, J = 7.4 Hz, 2H), 1.81-1.73 (m, 2H), 1.53-1.44 (m, 2H), 1.01 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 0.97 (t, J = 7.4 Hz, 3H)。MS (ESI) m/z 427.2 [M+H]+。
【００５０】
実施例７
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−４−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボニトリル
【化１２】
0006608933.tif 000013
密閉マイクロ波バイアル中の実施例１の工程ｃで製造した粗８−ブロモ／クロロ−１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン（１４０ｍｇ）およびシアン化銅(Ｉ)（５０ｍｇ、０.５６ｍｍｏｌ）のピリジン（１.５ｍＬ）中懸濁液をマイクロ波反応器中にて１８０℃で５時間加熱する。室温に冷却した後、溶媒を減圧除去する。残留物を酢酸エチル（１５ｍＬ）で処理し、次に、濾過する。該濾液を水で３回（３×５ｍＬ）洗浄し、次に、蒸発乾固させる。得られた粗生成物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−４−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボニトリル７１ｍｇをオフホワイト色の固体として得る。1H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 11.23 (s, 1H), 7.80 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.23-7.15 (m, 1H), 7.13-7.08 (m, 1H), 7.08-7.01 (m, 1H), 4.00 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.82 (s, 3H), 1.84-1.74 (m, 2H), 1.53-1.47 (m, 2H), 0.98 (t, J = 7.4 Hz, 3H)。MS (ESI) m/z 392.1 [M+H]+。
【００５１】
実施例８
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−４−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボン酸
【化１３】
0006608933.tif 000014
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−４−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボニトリル（５６ｍｇ、０.１４ｍｍｏｌ）のジオキサン（１.０ｍＬ）中懸濁液に濃塩酸（０.１５ｍＬ）を添加する。該反応混合物を１００℃で２４時間撹拌する。溶媒を減圧除去した後、該残留物を、さらに、真空乾燥させて、１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−４−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボン酸（４５ｍｇ、収率７７％）をオフホワイト色の固体として得る。1H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 10.87 (s, 1H), 9.49 (s, 1H), 8.30 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.30-7.23 (m, 1H), 7.19-7.15 (m, 1H), 7.14-7.08 (m, 1H), 4.12-3.92 (m, 2H), 2.84 (s, 3H), 1.86-1.74 (m, 2H), 1.53-1.45 (m, 2H), 0.98 (t, J = 7.4, 7.4 Hz, 3H)。MS (ESI) m/z 411.1 [M+H]+。
【００５２】
実施例９
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−４−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボン酸エチル
【化１４】
0006608933.tif 000015
密閉マイクロ波バイアル中の１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−４−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボン酸（２０ｍｇ、０.０４９ｍｍｏｌ）および濃硫酸（１０μＬ）のエタノール（０.６０ｍＬ）中混合物をマイクロ波反応器中にて１２０℃で１時間加熱する。室温に冷却した後、該反応混合物を減圧濃縮する。得られた残留物を半分取ＨＰＬＣで精製して、１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−４−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボン酸エチル（１７ｍｇ、収率７７％）をオフホワイト色の固体として得る。1H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 11.07 (s, 1H), 8.23 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.19-7.13 (m, 2H), 7.07-7.00 (m, 1H), 4.35-4.24 (m, 2H), 3.99 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.83 (s, 3H), 1.82-1.72 (m, 2H), 1.56-1.42 (m, 2H), 1.30 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 0.97 (t, J = 7.4 Hz, 3H)。MS (ESI) m/z 439.2 [M+H]+。
【００５３】
実施例１０
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−Ｎ−エチル−３−メチル−４−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボキサミド
【化１５】
0006608933.tif 000016
（ａ）１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−４−クロロ−Ｎ−エチル−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボキサミド
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−４−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボン酸（２５ｍｇ、０.０６１ｍｍｏｌ）のＣＨ2Ｃｌ2（０.７５ｍＬ）中溶液に塩化チオニル（４５μＬ、０.６２ｍｍｏｌ）を添加し、次に、ＤＭＦを２滴添加する。４６℃で一夜撹拌した後、該反応混合物を減圧下にて蒸発乾固させる。残留物をＣＨ2Ｃｌ2（０.８０ｍＬ）に溶解し、次に、室温で３０分間、該溶液中にエタンアミンを通気する。溶媒を減圧除去した後、残留物を水で２回（２×１ｍＬ）洗浄し、次に、減圧乾燥させて、粗１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−４−クロロ−Ｎ−エチル−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボキサミド２６ｍｇを得、さらなる精製を行わずに次工程で用いる。MS (ESI) m/z 456.2 [M+H]+。
【００５４】
（ｂ）１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−Ｎ−エチル−３−メチル−４−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボキサミド
密閉バイアル中の１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−４−クロロ−Ｎ−エチル−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボキサミド（２６ｍｇ、０.０５７ｍｍｏｌ）および濃塩酸（１０μＬ）のジオキサン（０.５０ｍＬ）中懸濁液をマイクロ波反応器中にて１３０℃で１時間加熱する。室温に冷却した後、該混合物を減圧下にて蒸発乾固させる。得られた粗生成物を半分取ＨＰＬＣで精製して、１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−Ｎ−エチル−３−メチル−４−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボキサミド（１１ｍｇ、収率４４％）を薄黄色の固体として得る。1H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 10.77 (s, 1H), 8.30 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.26-7.16 (m, 2H), 7.13-7.06 (m, 1H), 6.84-6.76 (m, 1H), 4.10-3.90 (m, 2H), 3.42-3.24 (m, 2H), 2.83 (s, 3H), 1.87-1.72 (m, 2H), 1.55-1.42 (m, 2H), 1.11 (t, J = 7.3 Hz, 3H), 0.97 (t, J = 7.4 Hz, 3H)。MS (ESI) m/z 438.2 [M+H]+。
【００５５】
実施例１１
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−４−オキソ−３ａ,４−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボキサミド
【化１６】
0006608933.tif 000017
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−４−オキソ−４,５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボニトリル（１０ｍｇ、０.０２６ｍｍｏｌ）のジオキサン（０.２ｍＬ）中懸濁液に６Ｎ  ＮａＯＨ水溶液（４０μＬ）を添加する。該反応混合物を１００℃で２時間加熱する。室温に冷却した後、該反応混合物を減圧下にて蒸発乾固させる。該残留物を半分取ＨＰＬＣシステムで精製して、１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−４−オキソ−３ａ,４−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−８−カルボキサミド（３.２ｍｇ、収率３０％）をオフホワイト色の固体として得る。1H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 10.13 (s, 1H), 8.29 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.25-7.14 (m, 2H), 7.10-7.02 (m, 1H), 6.59 (s, 1H), 5.32 (s, 1H), 3.99 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.81 (s, 3H), 1.82-1.74 (m, 2H), 1.52-1.46 (m, 2H), 0.97 (t, J = 7.4, 7.4 Hz, 3H)。MS (ESI) m/z 410.2 [M+H]+。
【００５６】
実施例１２
８−クロロ−１−(２−クロロ−５−(シクロプロピルメトキシ)フェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン
【化１７】
0006608933.tif 000018
（ａ）５−(ベンジルオキシ)−２−クロロベンゼンアミン
４−クロロ−５−ニトロフェノール（２.２５ｇ、１３.０ｍｍｏｌ）、(ブロモメチル)ベンゼン（２.３３ｇ、１３.６ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（８.５０ｇ、２５.９ｍｍｏｌ）の無水Ｎ,Ｎ−ジメチルアセタミド（１０ｍＬ）中混合物を室温で２時間撹拌する。溶媒を減圧除去した後、該残留物を水（３００ｍＬ）で処理し、次に、メチレンで３回（３×３０ｍＬ）抽出する。合わせた有機相を蒸発乾固させて、４−(ベンジルオキシ)−１−クロロ−２−ニトロベンゼンを油として得る。粗４−(ベンジルオキシ)−１−クロロ−２−ニトロベンゼンのＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中溶液に濃ＨＣｌ（８ｍＬ）を少しずつ添加する。該混合物を室温で５分間撹拌し、次に、塩化スズ(ＩＩ)（８.０ｇ、４２.０ｍｍｏｌ）を添加する。室温で０.５時間撹拌した後、該反応混合物を水（４００ｍＬ）で処理し、次に、メチレン（４×３０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機相を飽和ＮａＨＣＯ3（３０ｍＬ）およびブライン（３０ｍＬ）で連続して洗浄し、次に、蒸発乾固させて、５−(ベンジルオキシ)−２−クロロベンゼンアミン３.０ｇを淡い橙色の固体として得る。MS (ESI) m/z 234.1 [M+H]+。
【００５７】
（ｂ）（５−(ベンジルオキシ)−２−クロロフェニル)ヒドラジン
亜硝酸ナトリウム（２２６ｍｇ、３.２８ｍｍｏｌ）の水（３ｍＬ）中溶液を０℃で５−(ベンジルオキシ)−２−クロロベンゼンアミン（６４０ｍｇ、２.７４ｍｍｏｌ）の濃塩酸（５ｍＬ）中懸濁液に滴下する。添加完了後、該反応混合物を０℃で３０分間撹拌する。塩化スズ(ＩＩ)（２.０８ｇ、１１.０ｍｍｏｌ）の濃塩酸（３ｍＬ）中溶液を添加する。得られた懸濁液を室温で２時間撹拌し、次に、濾過する。濾過ケーキを回収する。濾液を１０Ｎ  ＮａＯＨでｐＨ１０に塩基性化し、次に、ＣＨ2Ｃｌ2（３×４０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機相を蒸発乾固させる。得られた残留物と回収した濾過ケーキを合わせ、酢酸エチル中０〜２０％メタノール勾配液を用いて中性酸化アルミニウムカラムで精製して、(５−(ベンジルオキシ)−２−クロロフェニル)ヒドラジン（３００ｍｇ、収率４４％）を得る。MS (ESI) m/z  249.1 [M+H]+。
【００５８】
（ｃ）８−クロロ−１−(２−クロロ−５−ヒドロキシフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン
(５−(ベンジルオキシ)−２−フルオロフェニル)ヒドラジン（６５０ｍｇ、２.６ｍｍｏｌ）および３−アセチル−６−ブロモ−４−ヒドロキシ−１,５−ナフチリジン−２(１Ｈ)−オン（２００ｍｇ、０.７１ｍｍｏｌ）のジオキサン（２ｍＬ）中懸濁液に濃ＨＣｌ（０.１ｍＬ）を添加する。密閉管中の該反応混合物を室温で５分間撹拌し、次に、１１０℃で２日間加熱する。室温に冷却した後、該反応混合物を水（２００ｍＬ）で処理し、次に、ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（１０／１）（４×５０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機相を蒸発乾固させて、粗８−クロロ−１−(２−クロロ−５−ヒドロキシフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン４０９ｍｇを得、さらなる精製を行わずに直接次工程で使用する。構造確認のために該粗生成物の少量を半分取ＨＰＬＣで精製する。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 11.70 (s, 1H), 10.13 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.47-7.41 (m, 1H), 7.02-6.95 (m, 2H), 2.60 (s, 3H)。MS (ESI) m/z 361.0 [M+H]+。
【００５９】
（ｄ）８−クロロ−１−(２−クロロ−５−(シクロプロピルメトキシ)フェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン
密閉反応バイアル中の８−クロロ−１−(２−クロロ−５−ヒドロキシフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン（６０ｍｇ、０.１７ｍｍｏｌ）、(ブロモメチル)シクロプロパン（３０μＬ、０.２７ｍｍｏｌ）および炭酸ナトリウム（３６ｍｇ、０.２３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１.２ｍＬ）中懸濁液を１００℃で２日間加熱する。室温に冷却した後、該反応混合物を濾過する。該濾液を、１６分間にわたって０.１％ギ酸含有水中０〜６３％アセトニトリル勾配液を用いて半分取ＨＰＬＣシステムで分取して、８−クロロ−１−(２−クロロ−５−(シクロプロピルメトキシ)フェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オンをオフホワイト色の固体として得る（７ｍｇ、収率１０％）。1H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 11.08 (s, 1H), 7.71 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.14-7.06 (m, 2H), 3.86 (dd, J = 7.0, 2.8 Hz, 2H), 2.83 (s, 3H), 1.37-1.24 (m, 1H), 0.73-0.62 (m, 2H), 0.44-0.29 (m, 2H)。MS (ESI) m/z 415.1 [M+H]+。
【００６０】
実施例１３
１−(２,５−ジクロロフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン
【化１８】
0006608933.tif 000019
２,５−ジクロロフェニルヒドラジン（８０ｍｇ、０.４５ｍｍｏｌ）および３−アセチル−４−ヒドロキシ−１,５−ナフチリジン−２(１Ｈ)−オン（６２ｍｇ、０.３０ｍｍｏｌ）のエタノール（２ｍＬ）中懸濁液に濃ＨＣｌ（０.１ｍＬ）を添加する。密閉管中の該反応混合物をマイクロ波反応器中にて１６０℃で５時間加熱する。室温に冷却した後、該反応混合物をＤＭＦ（１０ｍＬ）で希釈し、次に、濾過する。濾液を半分取ＨＰＬＣシステムで単離して、１−(２,５−ジクロロフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン（２０ｍｇ、収率５０％：）を得る。1H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 9.95 (s, 1H), 8.27 (dd, J = 4.5, 1.4 Hz, 1H), 7.66-7.56 (m, 2H), 7.52-7.43 (m, 2H), 7.37 (dd, J = 8.3, 4.5 Hz, 1H), 2.81 (s, 3H)。MS (ESI) m/z 345.0 [M+H]+。
【００６１】
実施例１４
１−(２−クロロフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン
【化１９】
0006608933.tif 000020
２,５−ジクロロフェニルヒドラジンの代わりに(２−クロロフェニル)ヒドラジンを添加する、実施例１３の合成に記載の手順に従う類似の方法で標記化合物を製造する。1H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 10.22 (s, 1H), 8.24 (dd, J = 4.5, 1.4 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 8.3, 1.4 Hz, 1H), 7.61-7.53 (m, 2H), 7.52-7.42 (m, 2H), 7.34 (dd, J = 8.3, 4.5 Hz, 1H), 2.82 (s, 3H)。MS (ESI) m/z 311.1 [M+H]+。
【００６２】
実施例１５
１−(２−クロロフェニル)−３,５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン
【化２０】
0006608933.tif 000021
水素化ナトリウム（２４ｍｇ、０.１０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（０.６０ｍＬ）中撹拌懸濁液に１−(２−クロロフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン（１２ｍｇ、０.０３９ｍｍｏｌ）を添加する。該懸濁液を室温で０.５時間撹拌した後、ヨウ化メチル（２７４ｍｇ、１.９３ｍｍｏｌ）を添加する。該混合物を室温で１時間撹拌し、次に、−７０℃に冷却する。水（１ｍＬ）を添加して該反応をクエンチし、次に、ＤＭＦ（５ｍＬ）を添加する。得られた混合物を濾過し、濾液を半分取ＨＰＬＣシステムで単離して、１−(２−クロロフェニル)−３,５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン（１２ｍｇ、収率７２％）を得る。1H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 8.22 (dd, J = 4.6, 1.2 Hz, 1H), 7.67 (dd, J = 8.6, 1.0 Hz, 1H), 7.59-7.53 (m, 2H), 7.51-7.41 (m, 2H), 7.38 (dd, J = 8.6, 4.2 Hz, 1H), 3.73 (s, 3H), 2.80 (s, 3H)。MS (ESI) m/z 325.1 [M+H]+。
【００６３】
実施例１６
１−(２,５−ジクロロフェニル)−３,５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン
【化２１】
0006608933.tif 000022
１−(２−クロロフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オンの代わりに１−(２,５−ジクロロフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オンを添加する、実施例１５の合成に記載の手順に従う類似の方法で標記化合物を製造する。1H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 8.27 (dd, J = 4.5, 1.4 Hz, 1H), 7.71 (dd, J = 8.7, 1.2 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.53-7.46 (m, 2H), 7.44 (dd, J = 8.6, 4.4 Hz, 1H), 3.76 (s, 3H), 2.81 (s, 3H)。MS (ESI) m/z 359.0 [M+H]+。
【００６４】
実施例１７
１−(５−ブトキシ−２−クロロフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン
【化２２】
0006608933.tif 000023
２,５−ジクロロフェニルヒドラジンの代わりに(５−ブトキシ−２−クロロフェニル)ヒドラジンを添加する、実施例１３の合成に記載の手順に従う類似の方法で標記化合物を製造する。MS (ESI) m/z 383.2 [M+H]+。
【００６５】
実施例１８
１−(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン
【化２３】
0006608933.tif 000024
２,５−ジクロロフェニルヒドラジンの代わりに(５−ブトキシ−２−フルオロフェニル)ヒドラジンを添加する、実施例１３の合成に記載の手順に従う類似の方法で標記化合物を製造する。1H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 10.69 (s, 1H), 8.32 (dd, J = 4.6, 1.4 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 1H), 7.37 (dd, J = 8.3, 4.5 Hz, 1H), 7.21-7.07 (m, 2H), 7.04-6.96 (m, 1H), 3.98 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.82 (s, 3H), 1.84-1.68 (m, 2H), 1.56-1.42 (m, 2H), 0.97 (t, J = 7.4 Hz, 3H)。MS (ESI) m/z 367.2 [M+H]+。
【００６６】
実施例１９
８−クロロ−１−(２,５−ジクロロフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン
【化２４】
0006608933.tif 000025
３−アセチル−４−ヒドロキシ−１,５−ナフチリジン−２(１Ｈ)−オンの代わりに３−アセチル−６−ブロモ−４−ヒドロキシ−１,５−ナフチリジン−２(１Ｈ)−オンを添加する、実施例１３の合成に記載の手順に従う類似の方法で標記化合物を製造する。1H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 10.94 (s, 1H), 7.67 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.55-7.46 (m, 2H), 7.38 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 2.81 (s, 3H)。MS (ESI) m/z 379.0 [M+H]+。
【００６７】
実施例２０
１−(５−ブトキシ−２−クロロフェニル)−８−クロロ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン
【化２５】
0006608933.tif 000026
２,５−ジクロロフェニルヒドラジンおよび３−アセチル−４−ヒドロキシ−１,５−ナフチリジン−２(１Ｈ)−オンの代わりに(５−ブトキシ−２−クロロフェニル)ヒドラジンおよび３−アセチル−６−ブロモ−４−ヒドロキシ−１,５−ナフチリジン−２(１Ｈ)−オンを添加する、実施例１３の合成に記載の手順に従う類似の方法で標記化合物を製造する。1H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 10.83 (s, 1H), 7.66 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.04 (dd, J = 8.9, 2.9 Hz, 1H), 3.99 (dt, J = 14.3, 7.0 Hz, 2H), 2.81 (s, 3H), 1.91-1.71 (m, 2H), 1.56-1.40 (m, 2H), 0.97 (t, J = 7.4 Hz, 3H)。MS (ESI) m/z 417.1 [M+H]+。
【００６８】
実施例２１
１−(５−ブトキシ−２−クロロフェニル)−８−メトキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン
【化２６】
0006608933.tif 000027
１−(５−ブトキシ−２−クロロフェニル)−８−クロロ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン（５０ｍｇ、０.１２ｍｍｏｌ）のジオキサン（２.０ｍＬ）中溶液にナトリウムメトキシド溶液（０.５Ｎ、ＭｅＯＨ中１ｍＬ）を添加し、次に、アルゴン下にてＮａＨ（６０ｍｇ、２.５ｍｍｏｌ）を数回に分けて添加する。該混合物を室温で１０分間撹拌し、次に、密閉管中にてマイクロ波反応器において１６０℃で６時間加熱する。該反応混合物を室温に冷却した後、さらなるナトリウムメトキシド溶液（０.５Ｎ、ＭｅＯＨ中０.８ｍＬ）およびＮａＨ（８０ｍｇ、３.３ｍｍｏｌ）を添加する。該反応バイアルを密閉し、マイクロ波反応器において１６０℃でさらに６時間加熱する。該混合物を室温に冷却し、水（１００ｍＬ）でクエンチし、次に、ＣＨ2Ｃｌ2（４×２５ｍＬ）で抽出する。合わせた有機相を減圧下にて蒸発乾固させる。得られた残留物を、１６分間にわたって０.１％ギ酸含有水中０〜７０％アセトニトリル勾配液を用いて半分取ＨＰＬＣシステムで精製して、１−(５−ブトキシ−２−クロロフェニル)−８−メトキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オンをオフホワイト色の固体として得る（３６ｍｇ、収率７２％）。1H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 10.82 (s, 1H), 7.65 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.98 (dd, J = 8.9, 2.8 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.08-3.88 (m, 2H), 3.36 (s, 3H), 2.82 (s, 3H), 1.83-1.69 (m, 2H), 1.55-1.39 (m, 2H), 0.96 (t, J = 7.4 Hz, 3H)。MS (ESI) m/z 413.1 [M+H]+。
【００６９】
実施例２２
１−(２−クロロ−５−(シクロブチルメトキシ)フェニル)−８−メトキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン
【化２７】
0006608933.tif 000028
（ａ）８−クロロ−１−(２−クロロ−５−(シクロブチルメトキシ)フェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン
２,５−ジクロロフェニルヒドラジンおよび３−アセチル−４−ヒドロキシ−１,５−ナフチリジン−２(１Ｈ)−オンの代わりに(２−クロロ−５−(シクロブチルメトキシ)フェニル)ヒドラジンおよび３−アセチル−６−ブロモ−４−ヒドロキシ−１,５−ナフチリジン−２(１Ｈ)−オンを添加する、実施例１３の合成に記載の手順に従う類似の方法で標記化合物を製造する。
【００７０】
（ｂ）１−(２−クロロ−５−(シクロブチルメトキシ)フェニル)−８−メトキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン
粗８−クロロ−１−(２−クロロ−５−(シクロブチルメトキシ)−フェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オン（５０ｍｇ、０.１１ｍｍｏｌ）のメタノール（１.５ｍＬ）中溶液にナトリウムメトキシド溶液（５Ｍ、ＭｅＯＨ中１ｍＬ）を添加し、次に、アルゴン下にてＣｕＩ（２２ｍｇ、０.１２ｍｍｏｌ）を添加する。該混合物を密閉管中にてマイクロ波反応器において１３０℃で１.５時間加熱する。該反応混合物を室温に冷却し、水（２０ｍＬ）でクエンチし、次に、酢酸エチル（２０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機相を減圧下にて蒸発乾固させる。得られた残留物を、１６分間にわたって０.１％ギ酸含有水中０〜４３％アセトニトリル勾配液を用いて半分取ＨＰＬＣシステムで精製して、１−(２−クロロ−５−(シクロブチルメトキシ)フェニル)−８−メトキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ[４,３−ｃ][１,５]ナフチリジン−４(５Ｈ)−オンを白色固体として得る（１４ｍｇ、収率３０％）。1H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 10.67 (s, 1H), 7.62 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 6.98 (dd, J = 8.9, 2.9 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 3.97-3.90 (m, 2H), 3.36 (s, 3H), 2.82 (s, 3H), 2.79-2.72 (m, 1H), 2.16-2.09 (m, 2H), 1.99-1.90 (m, 2H), 1.88-1.81 (m, 2H)。MS (ESI) m/z 425.1 [M+H]+。
【００７１】
実施例２３
インビトロでのＰＤＥ２阻害の測定
ｒ−ｈＰＤＥ２Ａ（Accession No. NM_002599, Homo sapiens phosphodiesterase 2A, cGMP-stimulated, transcript variant 1）：  該遺伝子の組換えｃＤＮＡコピーを有する哺乳動物発現クローニングベクターをOrigeneから購入する。ＨＥＫ２９３細胞の一過性形質転換によりタンパク質を発現させる。形質転換から４８時間後に細胞を収集し、ＴＢＳバッファー（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７.５、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ）で１回洗浄し、次に、冷ホモジナイゼーションバッファー（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７.５、５ｍＭ  ＭｇＣｌ2、１Ｘプロテアーゼインヒビターカクテル）中にて超音波処理によって溶解する。該ホモジネートを４℃にて１５,０００ｇで３０分間遠心分離して、可溶性細胞質画分を得る。標準としてウシ血清アルブミンを用い、ＢＣＡ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ａｓｓａｙ  Ｋｉｔ（Pierce）を用いて、該細胞質ゾルのタンパク質濃度を測定する。
【００７２】
アッセイ：  基質としてＦＬ−ｃＡＭＰを用いて、ＰＤＥ２Ａをアッセイする。まず、酵素滴定を行って、ＰＤＥの作業濃度を測定する。阻害剤の不在下で１００ΔｍＰの活性をもたらす酵素の濃度は、ＰＤＥの適切な作業濃度であると思われる。
【００７３】
滴定曲線に従って標準反応バッファー（１０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ  ｐＨ７.２、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ2、０.１％ＢＳＡ、０.０５％ＮａＮ3）でＰＤＥ酵素を希釈する。ＰＤＥ２アッセイについては、該反応バッファーに１μＭ  ｃＧＭＰを加えて、酵素を十分に活性化する。希釈した酵素溶液９９μｌを平底９６ウェルポリスチレンプレートの各ウェルに添加し、次に、１００％ＤＭＳＯに溶解した試験化合物約１μｌを添加する。該混合物を酵素と混合し、室温で１０分間、プレインキュベートする。
【００７４】
基質（最終４５ｎＭ）を添加することによりＦＬ−ｃＮＭＰ転換反応を開始する。３８４ウェルマイクロタイタープレート中で酵素と阻害剤との混合物（１６μl）および基質溶液（０.２２５μＭ、４μｌ）を合わせる。該反応を暗所にて室温で１５分間インキュベートする。３８４ウェルプレートの各ウェルに結合試薬（消泡剤の１：１８００希釈液を加えた結合バッファーによるＩＭＡＰビーズの１：４００希釈液）６０μｌを添加することにより、該反応を停止させる。該プレートを室温で１時間インキュベートして、ＩＭＡＰ結合を完了させ、次に、Ｅｎｖｉｓｉｏｎマルチモードマイクロプレートリーダー（PerkinElmer, Shelton, CT）内に置いて、蛍光偏光（Δｍｐ）を測定する。
【００７５】
Δｍｐの低下として測定されるｃＡＭＰ濃度の低下は、ＰＤＥ活性の阻害を意味している。０.０００３７ｎＭ〜８０,０００ｎＭの範囲の８〜１６種類の濃度の化合物の存在下にて酵素活性を測定し、次に、薬物濃度対ΔｍＰをプロットすることによってＩＣ50値を測定する。試験ウェル値を同一プレートで行われたコントロール反応に対して正規化する（コントロールの％に変換した値）。４パラメーター・ワンサイト用量反応モデル（ＸＬＦｉｔ；IDBS, Cambridge, MA）に適合した非線形回帰ソフトウェアを使用して、ＩＣ50値を推定する。曲線の底をコントロールの０％に定める。
【００７６】
品質管理：  阻害剤のＩＣ50を測定するために、１００〜２００ミリ偏光単位の最適なシグナル範囲を提供する酵素濃度を選ぶ。各サンプルウェルの総蛍光強度を測定して、平均および標準偏差を算出する。いずれかのサンプルウェルの総蛍光強度が平均値±３ＳＤの範囲内にない場合には、その特定のウェルのｍｐ値を廃棄する。
【００７７】
上記のＩＭＡＰ手順またはそれと同様の手順を使用して、本発明者らは、私有のＰＤＥに焦点を合わせた化合物ライブラリーをスクリーニングして、ナノモルＰＤＥ２阻害活性を有する新規化合物を同定した。例示された本発明の化合物（例えば、実施例１〜２２の化合物）が試験され、一般に２μＭ未満のＩＣ50値を有し、大半の化合物が２５０ｎＭ以下のＩＣ50値を有し、ほとんどの化合物が１００ｎＭ未満のＩＣ50値を有し、いくつかは１０ｎＭ未満のＩＣ50値を有することが示されている。特に、Ｂａｙ６０−７５５０ならびに実施例１７、１９、２０、２１および２２のＩＣ50値を以下に示す。
【表１】
0006608933.tif 000029
【００７８】
実施例２４
マウスにおける薬物動態試験
マウスに実施例２２の化合物を単回経口投与し（１０ｍｇ／ｋｇ、ＰＯ）、Zhao et al., J. Chromatogr. B. Analyt. Technol. Biomed. Life Sci. (2005) 819(1):73-80およびAppels, N.M., et al., Rapid Commun. Mass Spec. 2005. 19(15):p.2187-92に記載の方法と類似の方法を用い、ＨＰＬＣおよびＬＣ−ＭＳを用いて血漿および脳の利用能を測定する（０.２５〜４時間）。該実験は、１０ｍｇ／ｋｇ  ＰＯでのＣｍａｘが３ｎｇ／ｍｌであり、Ｔｍａｘが０.２５時間であり、血液対血漿比が０.０４である公表されている標準Ｂａｙ６０−７５５０と比べて、実施例２２の化合物が下記の表に示されるように優れた脳アクセスを有することを示している。
【表２】
0006608933.tif 000030
【００７９】
実施例２５
インビボにおけるマウスの脳内のｃＧＭＰ測定：
マウスに実施例２２の化合物（３ｍｇ／ｋｇ）またはＢＡＹ６０−７５５０（３ｍｇ／ｋｇ）を単回腹腔内（ｉ.ｐ.）投与し、次に、図１に示されるように、１５、３０または６０分後に頭部への集中マイクロ波照射により屠殺する。該マウスの脳から線条体を切除し、ｃＧＭＰ濃度をアッセイする。組織サンプルにトリクロロ酢酸（ＴＣＡ）を最終濃度５％ＴＣＡで添加し、すぐに該組織を溶液中にて超音波処理し、氷上で貯蔵する。超音波処理したサンプルを４℃にて１５,０００×ｇで２０分間遠心分離して、沈殿したタンパク質を除去する。ＴＣＡを抽出するために、該サンプルを水飽和エーテルで３回洗浄する。次に、該サンプルを室温で真空乾燥させ（Ｓｐｅｅｄｖａｃ，Ｓａｖａｎｔ  ＳＰＤ１１１Ｖ）、ＥＩＡバッファー１００μＬに再懸濁する。該サンプルおよびｃＧＭＰ段階希釈標準をともに０.６４Ｍ  ＫＯＨおよび４％無水酢酸を用いてアセチル化して、ｃＧＭＰ抗体の親和性を増強させる。８ポイントｃＧＭＰ標準希釈液と一緒にプレコートしたアッセイプレート中にて各サンプルをデュプリケートで試験する。加えて、ブランク、最大結合（Ｂ0）および非特異的結合ウェルが含まれる。サンプルまたは標準５０μＬを含有する全てのウェルに、等量のＡＣｈＥ結合ｃＧＭＰおよびｃＧＭＰ抗体を添加する。該プレートを４℃で１８時間インキュベートする。次に、該ウェルを洗浄バッファーで５回洗浄する。アセチルチオコリンおよび２−ニトロ安息香酸を含有する検出試薬を添加し、ＳｏｆｔＭａｘ  ４.８ソフトウェア（Molecular Devices, Sunnyvale, CA）によって記録されるＢ0ウェルのＯＤが少なくとも０.５となるまで該プレートを室温でインキュベートする。各データポイントをＢ／Ｂ0％（１００×[(サンプルまたは標準のＯＤ−平均非特異的結合)／(平均Ｂ0−平均非特異的結合)]）に変換する。標準をプロットし、４パラメーター・ロジスティック方程式に当てはめる（図１）。Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ  ＥｘｃｅｌおよびＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｚｍを用いてサンプルの濃度を標準曲線から補間する。
【００８０】
上記の手順またはそれと類似の手順を用いて、該実験は、全身投与後に、Ｂａｙ６０−７５５０と比べて、実施例２２の化合物がマウスの線条体内のｃＧＭＰ濃度を増加させることを示しており（図１を参照）、これは、Ｂａｙ６０−７５５０と比べた実施例２２の化合物の脳アクセスの改善を示している。
【図１】
0006608933.tif 000033