(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
アセチル総置換度が０．４〜１．１である酢酸セルロースを含有することを特徴とする、がんの予防及び／又は治療剤。
【請求項２】
家畜用である請求項１記載のがんの予防及び／又は治療剤。
【請求項３】
がんが結腸癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、前立腺癌、胃癌、及び膵癌から選ばれる、請求項１又は２記載のがんの予防及び／又は治療剤。
【請求項４】
前記酢酸セルロースが、下記で定義される組成分布指数（ＣＤＩ）が２．０以下である酢酸セルロースである請求項１〜３のいずれか１項に記載のがんの予防及び／又は治療剤。
ＣＤＩ＝（組成分布半値幅の実測値）／（組成分布半値幅の理論値）
組成分布半値幅の実測値：酢酸セルロース（試料）の残存水酸基をすべてプロピオニル化して得られるセルロースアセテートプロピオネートをＨＰＬＣ分析して求めた組成分布半値幅
【数１】
0006453851.tif 000021
ＤＳ：アセチル総置換度
ＤＰｗ：重量平均重合度（酢酸セルロース（試料）の残存水酸基をすべてプロピオニル化して得られるセルロースアセテートプロピオネートを用いてＧＰＣ−光散乱法により求めた値）
【請求項５】
アセチル総置換度が０．４〜１．１である酢酸セルロースを含有することを特徴とする、肝癌の予防及び／又は治療剤。
【請求項６】
家畜用である請求項５記載の肝癌の予防及び／又は治療剤。
【請求項７】
前記酢酸セルロースが、下記で定義される組成分布指数（ＣＤＩ）が２．０以下である酢酸セルロースである請求項５又は６に記載の肝癌の予防及び／又は治療剤。
ＣＤＩ＝（組成分布半値幅の実測値）／（組成分布半値幅の理論値）
組成分布半値幅の実測値：酢酸セルロース（試料）の残存水酸基をすべてプロピオニル化して得られるセルロースアセテートプロピオネートをＨＰＬＣ分析して求めた組成分布半値幅
【数２】
0006453851.tif 000022
ＤＳ：アセチル総置換度
ＤＰｗ：重量平均重合度（酢酸セルロース（試料）の残存水酸基をすべてプロピオニル化して得られるセルロースアセテートプロピオネートを用いてＧＰＣ−光散乱法により求めた値）
【請求項８】
アセチル総置換度が０．４〜１．１である酢酸セルロースを含有することを特徴とする、非アルコール性脂肪性肝炎の予防及び／又は治療剤。
【請求項９】
家畜用である請求項８記載の非アルコール性脂肪性肝炎の予防及び／又は治療剤。
【請求項１０】
前記酢酸セルロースが、下記で定義される組成分布指数（ＣＤＩ）が２．０以下である酢酸セルロースである請求項８又は９に記載の非アルコール性脂肪性肝炎の予防及び／又は治療剤。
ＣＤＩ＝（組成分布半値幅の実測値）／（組成分布半値幅の理論値）
組成分布半値幅の実測値：酢酸セルロース（試料）の残存水酸基をすべてプロピオニル化して得られるセルロースアセテートプロピオネートをＨＰＬＣ分析して求めた組成分布半値幅
【数３】
0006453851.tif 000023
ＤＳ：アセチル総置換度
ＤＰｗ：重量平均重合度（酢酸セルロース（試料）の残存水酸基をすべてプロピオニル化して得られるセルロースアセテートプロピオネートを用いてＧＰＣ−光散乱法により求めた値）
【請求項１１】
アセチル総置換度が０．４〜１．１である酢酸セルロースを含有することを特徴とする、肥満及び／又は糖尿病の予防及び／又は治療剤。
【請求項１２】
家畜用である請求項１１記載の肥満及び／又は糖尿病の予防及び／又は治療剤。
【請求項１３】
前記酢酸セルロースが、下記で定義される組成分布指数（ＣＤＩ）が２．０以下である酢酸セルロースである請求項１１又は１２に記載の肥満及び／又は糖尿病の予防及び／又は治療剤。
ＣＤＩ＝（組成分布半値幅の実測値）／（組成分布半値幅の理論値）
組成分布半値幅の実測値：酢酸セルロース（試料）の残存水酸基をすべてプロピオニル化して得られるセルロースアセテートプロピオネートをＨＰＬＣ分析して求めた組成分布半値幅
【数４】
0006453851.tif 000024
ＤＳ：アセチル総置換度
ＤＰｗ：重量平均重合度（酢酸セルロース（試料）の残存水酸基をすべてプロピオニル化して得られるセルロースアセテートプロピオネートを用いてＧＰＣ−光散乱法により求めた値）
【請求項１４】
アセチル総置換度が０．４〜１．１である酢酸セルロースを含有することを特徴とする、高コレステロール血症の予防及び／又は治療剤。
【請求項１５】
家畜用である請求項１４記載の高コレステロール血症の予防及び／又は治療剤。
【請求項１６】
前記酢酸セルロースが、下記で定義される組成分布指数（ＣＤＩ）が２．０以下である酢酸セルロースである請求項１４又は１５に記載の高コレステロール血症の予防及び／又は治療剤。
ＣＤＩ＝（組成分布半値幅の実測値）／（組成分布半値幅の理論値）
組成分布半値幅の実測値：酢酸セルロース（試料）の残存水酸基をすべてプロピオニル化して得られるセルロースアセテートプロピオネートをＨＰＬＣ分析して求めた組成分布半値幅
【数５】
0006453851.tif 000025
ＤＳ：アセチル総置換度
ＤＰｗ：重量平均重合度（酢酸セルロース（試料）の残存水酸基をすべてプロピオニル化して得られるセルロースアセテートプロピオネートを用いてＧＰＣ−光散乱法により求めた値）
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、脂質代謝改善作用を有する栄養組成物に関する。前記栄養組成物は、中性脂肪低減に優れた効果を発揮する。また、肥満、糖尿病、高脂血症などの予防、治療効果が期待できる。本発明は、また、脂質代謝改善剤、並びに、炎症性腸疾患及び／又は免疫異常（アレルギー疾患等）の予防及び／又は治療剤に関する。さらに、本願は、がんの予防及び／又は治療剤に関する。さらに、本願は、非アルコール性脂肪性肝炎の予防及び／又は治療剤に関する。さらに、本願は、高コレステロール血症の予防及び／又は治療剤に関する。本願は、２０１４年３月２４日に日本に出願した国際出願ＰＣＴ／ＪＰ２０１４／０５８０６９の優先権を主張し、その内容をここに援用する。
【背景技術】
【０００２】
近年、食生活の向上、洋風化に伴い、高カロリー、高脂肪食を摂取する機会が増えている。脂肪の過剰摂取は、肥満や血清脂質の上昇を引き起こし、それに伴う合併症を発症する危険性が高まる。【０００３】
従来、体内で分解できないため、血糖値の上昇を抑えることから糖尿病を予防でき、また脂肪の吸収を抑えることからダイエットに効果があるとされている物質として、難消化性デキストリンが知られている（非特許文献１参照）。特許文献１には、長期間摂取しても安全な食物繊維を含有する脂質代謝改善剤として、特定構造の分岐α−グルカンを含有する脂質代謝改善剤が提案されている。【０００４】
しかしながら、難消化性デキストリンは、ミネラルの吸収を邪魔しないことや、副作用がないという利点があるものの、中性脂肪の低減についてはさらに改善の余地がある。また、難消化性デキストリンは大量に摂取すると下痢を生じさせる場合がある。【０００５】
一方、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、難消化性デキストリン、ペクチン、ポリデキストロース等の可溶性食物繊維が食品添加物として使用されている。これらの可溶性食物繊維は、（ｉ）腸管内容物の粘度を高め、糖の吸収を遅らせることから、食後の急激な血糖値の上昇を抑制する、（ii）胆汁酸やコレステロールを吸着し、体外に排泄することから、血清コレステロールの上昇を抑制する、（iii）腸管内にて発酵・分解され、短鎖脂肪酸が増えることから、腸管上皮細胞の発達を促すという働きをすると言われている。しかしながら、短鎖脂肪酸産生菌を含む腸内菌群の増加については乳酸飲料などを除くと検討されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２０１０−１００５８３号公報
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】日本食物繊維研究会誌、第４巻、第２号、２０００年、第５９頁〜第６５頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の目的は、中性脂肪の低減効果に優れ、しかも腸に優しく安全性の高い栄養組成物及び家畜飼料を提供することにある。
本発明の他の目的は、腸に優しく安全性の高い脂質代謝改善剤を提供することにある。
本発明のさらに他の目的は、腸に優しく安全性の高い炎症性腸疾患及び／又は免疫異常の予防及び／又は治療剤を提供することにある。
本発明の別の目的は、新規ながんの予防及び／又は治療剤を提供することにある。
本発明のさらに別の目的は、非アルコール性脂肪性肝炎の予防及び／又は治療剤を提供することにある。
本発明のさらに別の目的は、肥満、糖尿病等の予防及び／又は治療剤を提供することにある。
本発明のさらに別の目的は、高コレステロール血症の予防及び／又は治療剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、上記目的を達成するため鋭意検討した結果、低置換度の酢酸セルロースが血中中性脂肪値の低減効果に優れることを見出すとともに、低置換度の酢酸セルロースが、腸内菌叢に関し、有益であるＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｓｕｂｃｌｕｓｔｅｒ  ＸＩＶａを含むＯＴＵ群（ＯＴＵ９４０）が増加するという働きを有することを見出した。前記Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｓｕｂｃｌｕｓｔｅｒ  ＸＩＶａは、難治性疾患である炎症性腸疾患（厚生労働省が指定するクローン病や潰瘍性大腸炎など）並びにアレルギーなどの免疫異常に対して、治療並びに予防効果を持つことが期待されていることから、低置換度の酢酸セルロースの摂取乃至投与により、腸内菌叢が改善され、炎症性腸疾患やアレルギーなどの免疫異常に対して治療並びに予防効果を持つことが高く期待できる。
本発明者らはまた、低置換度の酢酸セルロースが、腸内菌叢に関し、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｃｌｕｓｔｅｒ  ＸＩを含むＯＴＵ９１９およびＯＴＵ３３８を減少するという働きを有することを見出した。Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｃｌｕｓｔｅｒ  ＸＩは肝臓の発がんに関与すると疑われる二次胆汁酸を産生するので、この細菌群の減少は、低置換度の酢酸セルロースの摂取乃至投与により、腸内菌叢が改善され、肝癌の予防効果または治療効果を持つことが高く期待できる。【００１０】
さらに、本発明者らは、低置換度の酢酸セルロースが、腸内菌叢に関し、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｘｙｌａｎｉｓｏｌｖｅｎｓ及びＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｏｖａｔｕｓを顕著に増加させるという働きを有することを見出した。
トムゼン・フリーデンライヒ抗原α（Ｔｈｏｍｓｅｎ−Ｆｒｉｅｄｅｎｒｅｉｃｈ  Ａｎｔｉｇｅｎα：ＴＦα）は、がん細胞の表面に特異的に発現する糖鎖抗原であり、がん治療の有望な標的であるが、健康なヒトの血清中にもＴＦαに対する免疫（ＴＦα抗体）が見出されることがしばしばあり、がん免疫監視において重要な役割を果たしていると考えられている（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，７５，ｐ．５９４−６０２，１９９７；Ｋｕｒｔｅｎｋｏｖら，Ａｃｔａ  Ｏｎｃｏｌｏｇｉｃａ，４６，ｐ．３１６−３２３，２００７など）。ＴＦαが発現しているがん細胞を持っていない健康なヒトが、予めＴＦα抗体を持てている理由として、腸内細菌の一種であるＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｏｖａｔｕｓがＴＦα構造を発現しており、抗がんワクチンとして可能性が提案されている（Ｈｅｎｄｅｒｓｏｎら，Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ，２１（１０），ｐ．１２７７，２０１１）。また、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｘｙｌａｎｉｓｏｌｖｅｎｓが、より抗原性が高いＴＦαを発現しており、がん治療薬として有用であることが報告されている（ＵＳ２０１４／０３０２０９３Ａ１）。
従って、低置換度の酢酸セルロースの摂取乃至投与により、腸内のＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｘｙｌａｎｉｓｏｌｖｅｎｓ及びＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｏｖａｔｕｓが顕著に増加することは、ＴＦαに対する免疫の獲得を通じて、ＴＦαを発現するがんに対して治療並びに予防効果を持つことが期待される。【００１１】
さらに、本発明者らは、低置換度の酢酸セルロースの摂取乃至投与が、腸内菌叢に関し、Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ  ｍｕｃｉｎｉｐｈｉｌａも増加させることも併せて見出した。
Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ  ｍｕｃｉｎｉｐｈｉｌａは、動物実験で肥満抑制作用、２型糖尿病抑制作用を示すことが報告されており（Ｅｖｅｒａｒｄら，Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１１０（２２），ｐ．９０６６，２０１３；Ｌｕｋｏｖａｃら，ｍＢｉｏ，５（４）：ｅ０１４３８−１４．ｄｏｉ：１０．１１２８／ｍＢｉｏ．０１４３８−１４，２０１４；Ｅｖｅｒａｒｄら，Ｄｉａｂｅｔｅｓ，６０，ｐ．２７７５，２０１１）、低置換度の酢酸セルロースの摂取乃至投与により、肥満症、２型糖尿病等に治療並びに予防効果を持つことが期待される。【００１２】
さらに、本発明者らは、低置換度の酢酸セルロースを投与したラットの腸内において、短鎖脂肪酸（Ｓｈｏｒｔ−ｃｈａｉｎ  ｆａｔｔｙ  ａｃｉｄ：ＳＣＦＡ）、特に酢酸、プロピオン酸が著しく増加することを見出した。酢酸は、腸管から吸収された後、血管で輸送され、脂肪細胞や筋肉に作用して脂肪の蓄積を抑制、燃焼を促進し、肥満を抑制することが報告されている（Ｋｉｍｕｒａら、ＮＡＴＵＲＥ  ＣＯＭＭＵＮＩＣＡＴＩＯＮＳ，４：１８２９、２０１３年）。また、酢酸は血液脳関門を通過し視床下部に作用して、食欲が抑制されることが報告されている（Ｆｒｏｓｔら、ＮＡＴＵＲＥ  ＣＯＭＭＵＮＩＣＡＴＩＯＮＳ，５：３６１１、２０１４年）。また、短鎖脂肪酸は、ＧＰＲ４３受容体を介して腸内分泌細胞を刺激し、食欲抑制ホルモンであるペプチドＹＹを放出させることが報告されている（Ｋａｒａｋｉら，Ｃｅｌｌ  ａｎｄ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，３２４，ｐ．３５３，２００６）。さらに、短鎖脂肪酸、特にプロピオン酸が、脂肪酸やコレステロールの肝臓内での生合成を阻害し、コレステロールや中性脂肪の血中濃度を低下させることが報告されている（Ｎｉｓｈｉｎａら，Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，１２０，６６８，１９９０；Ｈａｒａら，Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，１２９，９４２，１９９９）。
従って、低置換度の酢酸セルロースの摂取乃至投与により、肥満、高コレステロール血症に治療並びに予防効果を持つことが期待される。【００１３】
さらに、本発明者らは、低置換度の酢酸セルロースを非アルコール性脂肪性肝炎モデル動物であるＳＴＡＭマウスに投与したところ、優れた治療、予防効果を示すことを見出した。
上記知見に基づき、本発明者らは、本発明の完成に至った。【００１４】
すなわち、本発明は、アセチル総置換度が０．４〜１．１である酢酸セルロースを含有することを特徴とする栄養組成物を提供する。【００１５】
前記酢酸セルロースは、下記で定義される組成分布指数（ＣＤＩ）が２．０以下であるものであってもよい。
ＣＤＩ＝（組成分布半値幅の実測値）／（組成分布半値幅の理論値）
組成分布半値幅の実測値：酢酸セルロース（試料）の残存水酸基をすべてプロピオニル化して得られるセルロースアセテートプロピオネートをＨＰＬＣ分析して求めた組成分布半値幅
【数１】
0006453851.tif 000002
ＤＳ：アセチル総置換度
ＤＰｗ：重量平均重合度（酢酸セルロース（試料）の残存水酸基をすべてプロピオニル化して得られるセルロースアセテートプロピオネートを用いてＧＰＣ−光散乱法により求めた値）【００１６】
本発明は、また、アセチル総置換度が０．４〜１．１である酢酸セルロースを含有することを特徴とする家畜飼料を提供する。【００１７】
本発明は、さらに、アセチル総置換度が０．４〜１．１である酢酸セルロースを含有することを特徴とする脂質代謝改善剤を提供する。この脂質代謝改善剤は家畜用であってもよい。【００１８】
本発明は、また、アセチル総置換度が０．４〜１．１である酢酸セルロースを含有することを特徴とする、炎症性腸疾患及び／又は免疫異常の予防及び／又は治療剤を提供する。この炎症性腸疾患及び／又は免疫異常の予防及び／又は治療剤は家畜用であってもよい。【００１９】
本発明は、さらに、アセチル総置換度が０．４〜１．１である酢酸セルロースを含有することを特徴とする、がんの予防及び／又は治療剤を提供する。このがんの予防及び／又は治療剤は家畜用であってもよい。
前記がんは、好ましくは、肝癌、結腸癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、前立腺癌、胃癌及び膵癌から選ばれる。【００２０】
本発明は、さらに、アセチル総置換度が０．４〜１．１である酢酸セルロースを含有することを特徴とする、非アルコール性脂肪性肝炎の予防及び／又は治療剤を提供する。この非アルコール性脂肪性肝炎の予防及び／又は治療剤は家畜用であってもよい。【００２１】
本発明は、さらに、アセチル総置換度が０．４〜１．１である酢酸セルロースを含有することを特徴とする、肥満及び／又は糖尿病の予防及び／又は治療剤を提供する。この肥満及び／又は糖尿病の予防及び／又は治療剤は家畜用であってもよい。【００２２】
本発明は、さらに、アセチル総置換度が０．４〜１．１である酢酸セルロースを含有することを特徴とする、高コレステロール血症の予防及び／又は治療剤を提供する。この高コレステロール血症の予防及び／又は治療剤は家畜用であってもよい。
【発明の効果】
【００２３】
本発明の栄養組成物及び家畜飼料は、水溶性或いは水親和性に優れたアセチル置換度の低い酢酸セルロースを含有するので、高カロリー成分や脂肪が腸壁から吸収されにくくなるためか、脂質代謝が大きく改善され、中性脂肪の低減効果に優れる。また、ＣＭＣ等の他の水溶性セルロース誘導体と比べて、腸に優しく下痢を起こしにくく、各種血清化学検査値にも影響は小さい等、安全性の点で優れている。
また、本発明の脂質代謝改善剤及び家畜用の脂質代謝改善剤は、脂質代謝改善作用に優れるとともに、安全性にも優れる。
さらに、本発明の炎症性腸疾患及び／又は免疫異常の予防及び／又は治療剤は、炎症性腸疾患や免疫異常に対して優れた予防及び／又は治療効果が期待できるとともに、安全性にも優れる。
さらにまた、本発明のがんの予防及び／又は治療剤は、がんの予防効果、治療効果に優れるとともに、安全性にも優れる。
さらにまた、本発明の非アルコール性脂肪性肝炎の予防及び／又は治療剤は、非アルコール性脂肪性肝炎の予防効果、治療効果に優れるとともに、安全性にも優れる。
さらにまた、本発明の肥満及び／又は糖尿病の予防及び／又は治療剤は、肥満及び／又は糖尿病の予防効果、治療効果に優れるとともに、安全性にも優れる。
さらにまた、本発明の高コレステロール血症の予防及び／又は治療剤は、高コレステロール血症の予防効果、治療効果に優れるとともに、安全性にも優れる。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】実施例の評価試験２において、各飼料で飼育したラットにおけるＯＴＵの種類とその存在量を示すグラフである。
【図２】実施例の評価試験２において、各群（ＣＥ、ＷＳ、ＣＭ、ＤＥ）におけるＯＴＵ９４０の存在比（％）を示すグラフである。
【図３】実施例の評価試験２において、各群（ＣＥ、ＷＳ、ＣＭ、ＤＥ）における、炎症性腸疾患並びに免疫異常に対して治療並びに予防効果を持つことが期待される細菌群に特異的なＯＴＵの存在比（％）を示すグラフである。
【図４】実施例の評価試験２において、各群（ＣＥ、ＷＳ、ＣＭ、ＤＥ）における、発がん性二次胆汁酸を与える細菌群に特異的なＯＴＵの存在比（％）を示すグラフである。
【図５】実施例の評価試験３において、ラット盲腸内容物におけるＣｏｎｔ群の測定値を１としたときの各群（１％ＷＳＣＡ群、２％ＷＳＣＡ群、４％ＷＳＣＡ群、４％ＦＯＳ群）の酢酸の濃度の相対値を表したグラフである。
【図６】実施例の評価試験３において、ラット盲腸内容物におけるＣｏｎｔ群の測定値を１としたときの各群（１％ＷＳＣＡ群、２％ＷＳＣＡ群、４％ＷＳＣＡ群、４％ＦＯＳ群）のプロピオン酸の濃度の相対値を表したグラフである。
【図７】実施例の評価試験３において、ラット盲腸内容物におけるＣｏｎｔ群の測定値を１としたときの各群（１％ＷＳＣＡ群、２％ＷＳＣＡ群、４％ＷＳＣＡ群、４％ＦＯＳ群）の酪酸の濃度の相対値を表したグラフである。
【図８】実施例の評価試験３において、各群（Ｃｏｎｔ群、１％ＷＳＣＡ群、２％ＷＳＣＡ群、４％ＷＳＣＡ群、４％ＦＯＳ群）の各個体の盲腸内容物のプロピオン酸濃度（μｍｏｌ／ｇ）を横軸に、血漿コレステロール濃度（ｍｇ／ｄｌ）を縦軸にプロットしたグラフである。
【図９】実施例の評価試験４において、各群（ＣＥ群、ＷＳ１％群、ＷＳ２％群、ＷＳ３％群）における、ラットの体重増加量の推移を示すグラフである。
【図１０】実施例の評価試験４において、各群（ＣＥ群、ＷＳ１％群、ＷＳ２％群、ＷＳ３％群）における、ラットの飼料摂取量（ｇ／日）を示すグラフである。
【図１１】実施例の評価試験４において、各群（ＣＥ群、ＷＳ１％群、ＷＳ２％群、ＷＳ３％群）における、肝機能として血清生化学検査値（ＡＳＴ、ＡＬＴ）を示すグラフである。
【図１２】実施例の評価試験４において、各群（ＣＥ群、ＷＳ１％群、ＷＳ２％群、ＷＳ３％群）における、腎機能として血清生化学検査値（ＢＵＮ、ＣＲＥ）を示すグラフである。
【図１３】実施例の評価試験４において、各群（ＣＥ群、ＷＳ１％群、ＷＳ２％群、ＷＳ３％群）における、脂質代謝として血清生化学検査値（ＴＣＨＯ、ＨＤＬＣ、ＴＧ）を示すグラフである。
【図１４】実施例の評価試験４において、各群（ＣＥ群、ＷＳ１％群、ＷＳ２％群、ＷＳ３％群）における、栄養状態として血清生化学検査値（ＡＬＢ、ＴＰ）を示すグラフである。異なるアルファベットは有意差（ｐ＜０．０５）を示す。
【図１５】実施例の評価試験４において、各群（ＣＥ群、ＷＳ１％群、ＷＳ２％群、ＷＳ３％群）における、血糖値として血清生化学検査値（ＧＬＵ）を示すグラフである。
【図１６】実施例の評価試験５において、各群（ＮＡ群、ＮＨＦ群、ＳＨＦ群、ＳＨＦＷ群）における、ラットの体重増加量の推移を示すグラフである。異なるアルファベットは有意差（ｐ＜０．０５）を示す。
【図１７】実施例の評価試験５において、各群（ＮＡ群、ＮＨＦ群、ＳＨＦ群、ＳＨＦＷ群）における、ラットの屠体重、各臓器重量の解剖時体重に対する比率（％）を示すグラフである。異なるアルファベットは有意差（ｐ＜０．０５）を示す。
【図１８】実施例の評価試験５において、各群（ＮＡ群、ＮＨＦ群、ＳＨＦ群、ＳＨＦＷ群）における、血漿生化学検査値（ＡＳＴ、ＡＬＴ、ＧＬＵ、ＴＣＨＯ、ＡＬＢ、ＴＰ）を示すグラフである。異なるアルファベットは有意差（ｐ＜０．０５）を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
本発明の栄養組成物若しくは家畜飼料、脂質代謝改善剤、炎症性腸疾患及び／又は免疫異常の予防及び／又は治療剤、並びに、がんの予防及び／又は治療剤、非アルコール性脂肪性肝炎の予防及び／又は治療剤、肥満、糖尿病等の予防及び／又は治療剤、高コレステロール血症の予防及び／又は治療剤は、アセチル総置換度が０．４〜１．１である酢酸セルロースを含有することを特徴とする。
【００２６】
［酢酸セルロース］
（アセチル総置換度）
本発明における酢酸セルロースは、アセチル総置換度（平均置換度）が０．４〜１．１である。アセチル総置換度がこの範囲であると水に対する溶解性に優れ、この範囲を外れると水に対する溶解性が低下する傾向となる。前記アセチル総置換度の好ましい範囲は０．５〜１．０であり、さらに好ましい範囲は０．６〜０．９５である。アセチル総置換度は、酢酸セルロースを水に溶解し、酢酸セルロースの置換度を求める公知の滴定法により測定できる。また、該アセチル総置換度は、酢酸セルロースの水酸基をプロピオニル化した上で(後述の方法参照)、重クロロホルムに溶解し、ＮＭＲにより測定することもできる。
【００２７】
アセチル総置換度は、ＡＳＴＭ：Ｄ−８１７−９１（セルロースアセテートなどの試験方法）における酢化度の測定法に準じて求めた酢化度を次式で換算することにより求められる。これは、最も一般的なセルロースアセテートの置換度の求め方である。
ＤＳ＝１６２．１４×ＡＶ×０．０１／（６０．０５２−４２．０３７×ＡＶ×０．０１）
ＤＳ：アセチル総置換度
ＡＶ：酢化度（％）
まず、乾燥した酢酸セルロース（試料）５００ｍｇを精秤し、超純水とアセトンとの混合溶媒（容量比４：１）５０ｍｌに溶解した後、０．２Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液５０ｍｌを添加し、２５℃で２時間ケン化する。次に、０．２Ｎ−塩酸５０ｍｌを添加し、フェノールフタレインを指示薬として、０．２Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液（０．２Ｎ−水酸化ナトリウム規定液）で、脱離した酢酸量を滴定する。また、同様の方法によりブランク試験（試料を用いない試験）を行う。そして、下記式にしたがってＡＶ（酢化度）（％）を算出する。
ＡＶ（％）＝（Ａ−Ｂ）×Ｆ×１．２０１／試料重量（ｇ）
Ａ：０．２Ｎ−水酸化ナトリウム規定液の滴定量（ｍｌ）
Ｂ：ブランクテストにおける０．２Ｎ−水酸化ナトリウム規定液の滴定量（ｍｌ）
Ｆ：０．２Ｎ−水酸化ナトリウム規定液のファクター
【００２８】
（組成分布指数（ＣＤＩ））
本発明において、前記酢酸セルロースの組成分布（分子間置換度分布）は特に限定されず、組成分布指数（ＣＤＩ）は、例えば１．０〜３．０である。組成分布指数（ＣＤＩ）は、好ましくは１．０〜２．０、より好ましくは１．０〜１．８、さらに好ましくは１．０〜１．６、特に好ましくは１．０〜１．５である。
【００２９】
組成分布指数（ＣＤＩ）の下限値は０であるが、これは例えば１００％の選択性でグルコース残基の６位のみをアセチル化し、他の位置はアセチル化しない等の特別な合成技術をもって実現されるものであり、そのような合成技術は知られていない。グルコース残基の水酸基の全てが同じ確率でアセチル化および脱アセチル化される状況において、ＣＤＩは１．０となるが、実際のセルロースの反応においてはこのような理想状態に近付けるためには相当の工夫を要する。前記組成分布指数（ＣＤＩ）が小さいほど、組成分布（分子間置換度分布）が均一となる。組成分布が均一であると、アセチル総置換度が通常よりも広い範囲で水溶性を確保でき、均一な溶解がなされ、構造粘性が発現しないので摂取させやすいなどの利点がある。
【００３０】
ここで、組成分布指数（Compositional Distribution Index, CDI）とは、組成分布半値幅の理論値に対する実測値の比率［（組成分布半値幅の実測値）／（組成分布半値幅の理論値）］で定義される。組成分布半値幅は「分子間置換度分布半値幅」又は単に「置換度分布半値幅」ともいう。
【００３１】
酢酸セルロースのアセチル総置換度の均一性を評価するのに、酢酸セルロースの分子間置換度分布曲線の最大ピークの半値幅（「半価幅」ともいう）の大きさを指標とすることができる。なお、半値幅は、アセチル置換度を横軸（ｘ軸）に、この置換度における存在量を縦軸（ｙ軸）としたとき、チャートのピークの高さの半分の高さにおけるチャートの幅であり、分布のバラツキの目安を表す指標である。置換度分布半値幅は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）分析により求めることができる。なお、ＨＰＬＣにおけるセルロースエステルの溶出曲線の横軸（溶出時間）を置換度（０〜３）に換算する方法については、特開２００３-２０１３０１号公報（段落００３７〜００４０）に説明されている。
【００３２】
（組成分布半値幅の理論値）
組成分布半値幅（置換度分布半値幅）は確率論的に理論値を算出できる。すなわち、組成分布半値幅の理論値は以下の式（１）で求められる。
【数２】
0006453851.tif 000003
ｍ：酢酸セルロース１分子中の水酸基とアセチル基の全数
ｐ：酢酸セルロース１分子中の水酸基がアセチル置換されている確率
ｑ＝１−ｐ
ＤＰｗ：重量平均重合度（ＧＰＣ−光散乱法による）
なお、重量平均重合度（ＤＰｗ）の測定法は後述する。
【００３３】
式（１）は、セルロースの全ての水酸基が同じ確率でアセチル化および脱アセチル化された際に必然的に生じる組成分布半値幅であり、所謂二項定理に従って導かれるものである。さらに、組成分布半値幅の理論値を置換度と重合度で表すと、以下のように表される。本発明では下記式（２）を組成分布半値幅の理論値を求める定義式とする。
【数３】
0006453851.tif 000004
ＤＳ：アセチル総置換度
ＤＰｗ：重量平均重合度（ＧＰＣ−光散乱法による）
なお、重量平均重合度（ＤＰｗ）の測定法は後述する。
【００３４】
ところで、式（１）および式（２）においては、より厳密には重合度分布を考慮に入れるべきであり、この場合には式（１）および式（２）の「ＤＰｗ」は、重合度分布関数に置き換え、式全体を重合度０から無限大までで積分すべきである。しかしながら、ＤＰｗを使う限り、式（１）および式（２）は近似的に十分な精度の理論値を与える。ＤＰｎ（数平均重合度）を使うと、重合度分布の影響が無視できなくなるので、ＤＰｗを使うべきである。
【００３５】
（組成分布半値幅の実測値）
本発明において、組成分布半値幅の実測値とは、酢酸セルロース（試料）の残存水酸基（未置換水酸基）をすべてプロピオニル化して得られるセルロースアセテートプロピオネートをＨＰＬＣ分析して求めた組成分布半値幅である。
【００３６】
一般的に、アセチル総置換度２〜３の酢酸セルロースに対しては、前処理なしに高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）分析を行うことができ、それによって組成分布半値幅を求めることができる。例えば、特開２０１１−１５８６６４号公報には、置換度２．２７〜２．５６の酢酸セルロースに対する組成分布分析法が記載されている。
【００３７】
一方、本発明においては、組成分布半値幅（置換度分布半値幅）の実測値は、ＨＰＬＣ分析前に前処理として酢酸セルロースの分子内残存水酸基の誘導体化を行い、しかる後にＨＰＬＣ分析を行って求める。この前処理の目的は、低置換度酢酸セルロースを有機溶剤に溶解しやすい誘導体に変換してＨＰＬＣ分析可能とすることである。すなわち、分子内の残存水酸基を完全にプロピオニル化し、その完全誘導体化セルロースアセテートプロピオネート（ＣＡＰ）をＨＰＬＣ分析して組成分布半値幅（実測値）を求める。ここで、誘導体化は完全に行われ、分子内に残存水酸基はなく、アセチル基とプロピオニル基のみ存在していなければいけない。すなわち、アセチル置換度（ＤＳａｃ）とプロピオニル置換度（ＤＳｐｒ）の和は３である。これは、ＣＡＰのＨＰＬＣ溶出曲線の横軸（溶出時間）をアセチル置換度（０〜３）に変換するための較正曲線を作成するために関係式：ＤＳａｃ＋ＤＳｐｒ＝３を使用するためである。
【００３８】
酢酸セルロースの完全誘導体化は、ピリジン／Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド混合溶媒中でＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンを触媒とし、無水プロピオン酸を作用させることにより行うことができる。より具体的には、溶媒として混合溶媒［ピリジン／Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド＝１／１（ｖ/ｖ）］を酢酸セルロース（試料）に対して２０重量部、プロピオニル化剤として無水プロピオン酸を該酢酸セルロースの水酸基に対して６．０〜７．５当量、触媒としてＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンを該酢酸セルロースの水酸基に対して６．５〜８．０ｍｏｌ％使用し、温度１００℃、反応時間１．５〜３．０時間の条件でプロピオニル化を行う。そして、反応後、沈殿溶媒としてメタノールを用い、沈殿させることにより、完全誘導体化セルロースアセテートプロピオネートを得る。より詳細には、例えば、室温で、反応混合物１重量部をメタノール１０重量部に投入して沈澱させ、得られた沈殿物をメタノールで５回洗浄し、６０℃で真空乾燥を３時間行うことにより、完全誘導体化セルロースアセテートプロピオネート（ＣＡＰ）を得ることができる。なお、後述の多分散性（Ｍｗ／Ｍｎ）及び重量平均重合度（ＤＰｗ）も、酢酸セルロース（試料）をこの方法により完全誘導体化セルロースアセテートプロピオネート（ＣＡＰ）とし、測定したものである。
【００３９】
上記ＨＰＬＣ分析では、異なるアセチル置換度を有する複数のセルロースアセテートプロピオネートを標準試料として用いて所定の測定装置および測定条件でＨＰＬＣ分析を行い、これらの標準試料の分析値を用いて作成した較正曲線［セルロースアセテートプロピオネートの溶出時間とアセチル置換度（０〜３）との関係を示す曲線、通常、三次曲線］から、酢酸セルロース（試料）の組成分布半値幅（実測値）を求めることができる。ＨＰＬＣ分析で求められるのは溶出時間とセルロースアセテートプロピオネートのアセチル置換度分布の関係である。これは、試料分子内の残存ヒドロキシ基のすべてがプロピオニルオキシ基に変換された物質の溶出時間とアセチル置換度分布の関係であるから、本発明の酢酸セルロースのアセチル置換度分布を求めていることと本質的には変わらない。
【００４０】
上記ＨＰＬＣ分析の条件は以下の通りである。
装置: Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ
カラム: Ｗａｔｅｒｓ  Ｎｏｖａ−Ｐａｋ  ｐｈｅｎｙｌ  ６０Å ４μｍ（１５０ｍｍ×３．９ｍｍΦ）＋ガードカラム
カラム温度：３０℃
検出: Ｖａｒｉａｎ  ３８０−ＬＣ
注入量: ５．０μＬ（試料濃度：０．１％（ｗｔ／ｖｏｌ））
溶離液:  Ａ液：ＭｅＯＨ／Ｈ2Ｏ＝８／１（ｖ／ｖ），Ｂ液：ＣＨＣｌ3／ＭｅＯＨ＝８／１（ｖ／ｖ）
グラジェント：Ａ／Ｂ＝８０／２０→０／１００（２８ｍｉｎ）；流量：０．７ｍＬ／ｍｉｎ
【００４１】
較正曲線から求めた置換度分布曲線［セルロースアセテートプロピオネートの存在量を縦軸とし、アセチル置換度を横軸とするセルロースアセテートプロピオネートの置換度分布曲線］（「分子間置換度分布曲線」ともいう）において、平均置換度に対応する最大ピーク（Ｅ）に関し、以下のようにして置換度分布半値幅を求める。ピーク（Ｅ）の低置換度側の基部（Ａ）と、高置換度側の基部（Ｂ）に接するベースライン（Ａ−Ｂ）を引き、このベースラインに対して、最大ピーク（Ｅ）から横軸に垂線をおろす。垂線とベースライン（Ａ−Ｂ）との交点（Ｃ）を決定し、最大ピーク（Ｅ）と交点（Ｃ）との中間点（Ｄ）を求める。中間点（Ｄ）を通って、ベースライン（Ａ−Ｂ）と平行な直線を引き、分子間置換度分布曲線との二つの交点（Ａ’、Ｂ’）を求める。二つの交点（Ａ’、Ｂ’）から横軸まで垂線をおろして、横軸上の二つの交点間の幅を、最大ピークの半値幅（すなわち、置換度分布半値幅）とする。
【００４２】
このような置換度分布半値幅は、試料中のセルロースアセテートプロピオネートの分子鎖について、その構成する高分子鎖一本一本のグルコース環の水酸基がどの程度アセチル化されているかにより、保持時間（リテンションタイム）が異なることを反映している。したがって、理想的には、保持時間の幅が、（置換度単位の）組成分布の幅を示すことになる。しかしながら、ＨＰＬＣには分配に寄与しない管部（カラムを保護するためのガイドカラムなど）が存在する。それゆえ、測定装置の構成により、組成分布の幅に起因しない保持時間の幅が誤差として内包されることが多い。この誤差は、上記の通り、カラムの長さ、内径、カラムから検出器までの長さや取り回しなどに影響され、装置構成により異なる。このため、セルロースアセテートプロピオネートの置換度分布半値幅は、通常、下式で表される補正式に基づいて、補正値Ｚとして求めることができる。このような補正式を用いると、測定装置（および測定条件）が異なっても、同じ（ほぼ同じ）値として、より正確な置換度分布半値幅（実測値）を求めることができる。
Ｚ＝（Ｘ2−Ｙ2）1/2
［式中、Ｘは所定の測定装置および測定条件で求めた置換度分布半値幅（未補正値）である。Ｙ＝（ａ−ｂ）ｘ／３＋ｂ（０≦ｘ≦３）である。ここで、ａは前記Ｘと同じ測定装置および測定条件で求めた総置換度３のセルロースアセテートの見掛けの置換度分布半値幅（実際は総置換度３なので、置換度分布は存在しない）、ｂは前記Ｘと同じ測定装置および測定条件で求めた総置換度３のセルロースプロピオネートの見掛けの置換度分布半値幅である。ｘは測定試料のアセチル総置換度（０≦ｘ≦３）である］
【００４３】
なお、上記総置換度３のセルロースアセテート（もしくはセルロースプロピオネート）とは、セルロースのヒドロキシル基の全てがエステル化されたセルロースエステルを示し、実際には（理想的には）置換度分布半値幅を有しない（すなわち、置換度分布半値幅０の）セルロースエステルである。
【００４４】
本発明において、前記酢酸セルロースの組成分布半値幅（置換度分布半値幅）の実測値としては、好ましくは０．１２〜０．３４であり、より好ましくは０．１３〜０．２５である。
【００４５】
先に説明した置換度分布理論式は、すべてのアセチル化と脱アセチル化が独立かつ均等に進行することを仮定した確率論的計算値である。すなわち、二項分布に従った計算値である。このような理想的な状況は現実的にはあり得ない。酢酸セルロースの加水分解反応が理想的なランダム反応に近づくような、および/または、反応後の後処理について組成について分画が生じるような特別な工夫をしない限り、セルロースエステルの置換度分布は確率論的に二項分布で定まるものよりも大幅に広くなる。
【００４６】
反応の特別な工夫の一つとしては、例えば、脱アセチル化とアセチル化が平衡する条件で系を維持することが考えられる。しかし、この場合には酸触媒によりセルロースの分解が進行するので好ましくない。他の反応の特別な工夫としては、脱アセチル化速度が低置換度物について遅くなる反応条件を採用することである。しかし、従来、そのような具体的な方法は知られていない。つまり、セルロースエステルの置換度分布を反応確率論通り二項分布にしたがうよう制御するような反応の特別な工夫は知られていない。さらに、酢化過程(セルロースのアセチル化工程）の不均一性や、熟成過程（酢酸セルロースの加水分解工程）で段階的に添加する水による部分的、一時的な沈殿の発生などの様々な事情は、置換度分布を二項分布よりも広くする方向に働き、これらを全て回避し、理想条件を実現することは、現実的には不可能である。これは、理想気体があくまで理想の産物であり、実在する気体の挙動はそれとは多かれ少なかれ異なることと似ている。
【００４７】
従来の低置換度酢酸セルロースの合成と後処理においては、このような置換度分布の問題について殆ど関心が払われておらず、置換度分布の測定や検証、考察が行われていなかった。例えば、文献（繊維学会誌、42、p25 (1986)）によれば、低置換度酢酸セルロースの溶解性は、グルコース残基２、３、６位へのアセチル基の分配で決まると論じられており、組成分布は全く考慮されていない。
【００４８】
本発明者らの検討によれば、後述するように、酢酸セルロースの置換度分布は、驚くべきことに酢酸セルロースの加水分解工程の後の後処理条件の工夫で制御することができる。文献（CiBment, L., and Rivibre, C., Bull. SOC. chim., (5) 1, 1075 (1934)、Sookne, A. M., Rutherford, H. A., Mark, H., and Harris, M. J. Research Natl. Bur. Standards, 29, 123 (1942)、A. J. Rosenthal, B. B. White Ind. Eng. Chem., 1952, 44 (11), pp 2693-2696.）によれば、置換度２．３の酢酸セルロースの沈澱分別では、分子量に依存した分画と置換度（化学組成）に伴う微々たる分画が起こるとされており、本発明者らが見出したような置換度（化学組成）で顕著な分画ができるとの報告はない。さらに、低置換度酢酸セルロースについて、溶解分別や沈澱分別で置換度分布（化学組成）を制御できることは検証されていなかった。
【００４９】
本発明者らが見出した置換度分布を狭くするもう１つの工夫は、酢酸セルロースの９０℃以上の（又は９０℃を超える）高温での加水分解反応（熟成反応）である。従来、高温反応で得られた生成物の重合度について詳細な分析や考察がなされて来なかったにもかかわらず、９０℃以上の高温反応ではセルロースの分解が優先するとされてきた。この考えは、粘度に関する考察のみに基づいた思い込み（ステレオタイプ）と言える。本発明者らは、酢酸セルロースを加水分解して低置換度酢酸セルロースを得るに際し、９０℃以上の（又は９０℃を超える）高温下、好ましくは硫酸等の強酸の存在下、多量の酢酸中で反応させると、重合度の低下は見られない一方で、ＣＤＩの減少に伴い粘度が低下することを見出した。すなわち、高温反応に伴う粘度低下は、重合度の低下に起因するものではなく、置換度分布が狭くなることによる構造粘性の減少に基づくものであることを解明した。上記の条件で酢酸セルロースの加水分解を行うと、正反応だけでなく逆反応も起こるため、生成物（低置換度酢酸セルロース）のＣＤＩが極めて小さい値となり、水に対する溶解性も著しく向上する。これに対し、逆反応が起こりにくい条件で酢酸セルロースの加水分解を行うと、置換度分布は様々な要因で広くなり、水に溶けにくいアセチル総置換度０．４未満の酢酸セルロース及びアセチル置換度１．１を超える酢酸セルロースの含有量が増大し、全体として水に対する溶解性が低下する。
【００５０】
（２，３，６位の置換度の標準偏差）
本発明において、前記酢酸セルロースのグルコース環の２，３，６位の各アセチル置換度は、手塚（Ｔｅｚｕｋａ，Ｃａｒｂｏｎｙｄｒ．Ｒｅｓ．２７３，８３（１９９５））の方法に従いＮＭＲ法で測定できる。すなわち、酢酸セルロース試料の遊離水酸基をピリジン中で無水プロピオン酸によりプロピオニル化する。得られた試料を重クロロホルムに溶解し、13Ｃ−ＮＭＲスペクトルを測定する。アセチル基の炭素シグナルは１６９ｐｐｍから１７１ｐｐｍの領域に高磁場から２位、３位、６位の順序で、そして、プロピオニル基のカルボニル炭素のシグナルは、１７２ｐｐｍから１７４ｐｐｍの領域に同じ順序で現れる。それぞれ対応する位置でのアセチル基とプロピオニル基の存在比から、元のセルロースジアセテートにおけるグルコース環の２，３，６位の各アセチル置換度を求めることができる。なお、このように求めた２，３，６位の各アセチル置換度の和はアセチル総置換度であり、この方法でアセチル総置換度を求めることもできる。なお、アセチル総置換度は、13Ｃ−ＮＭＲのほか、1Ｈ−ＮＭＲで分析することもできる。
【００５１】
２，３，６位の置換度の標準偏差σは、次の式で定義される。
【数４】
0006453851.tif 000005
【００５２】
本発明においては、酢酸セルロースのグルコース環の２，３及び６位のアセチル置換度の標準偏差が０．０８以下（０〜０．０８）であることが好ましい。該標準偏差が０．０８以下である酢酸セルロースは、グルコース環の２，３，６位が均等に置換されており、水に対する溶解性に優れる。
【００５３】
（多分散性（分散度、Ｍｗ／Ｍｎ））
本発明において、分子量分布（重合度分布）の多分散性（Ｍｗ／Ｍｎ）は、酢酸セルロース（試料）の残存水酸基をすべてプロピオニル化して得られるセルロースアセテートプロピオネートを用いてＧＰＣ−光散乱法により求めた値である。
【００５４】
本発明における前記酢酸セルロースの多分散性（分散度、Ｍｗ／Ｍｎ）は、１．２〜２．５の範囲であることが好ましい。多分散性Ｍｗ／Ｍｎが上記の範囲にある酢酸セルロースは、分子の大きさが揃っており、水に対する溶解性に優れる。
【００５５】
酢酸セルロースの数平均分子量（Ｍｎ）、重量平均分子量（Ｍｗ）及び多分散性（Ｍｗ／Ｍｎ）は、ＨＰＬＣを用いた公知の方法で求めることができる。本発明において、酢酸セルロースの多分散性（Ｍｗ／Ｍｎ）は、測定試料を有機溶剤に可溶とするため、前記組成分布半値幅の実測値を求める場合と同様の方法で、酢酸セルロース（試料）を完全誘導体化セルロースアセテートプロピオネート（ＣＡＰ）とした後、以下の条件でサイズ排除クロマトグラフィー分析を行うことにより決定される（ＧＰＣ−光散乱法）。
装置：Ｓｈｏｄｅｘ製  ＧＰＣ  「ＳＹＳＴＥＭ−２１Ｈ」
溶媒：アセトン
カラム：ＧＭＨｘｌ（東ソー）２本、ガードカラム（東ソー製ＴＳＫｇｅｌ  ｇｕａｒｄｃｏｌｕｍｎ  ＨＸＬ−Ｈ）
流速：０．８ｍｌ／ｍｉｎ
温度：２９℃
試料濃度：０．２５％（ｗｔ／ｖｏｌ）
注入量：１００μｌ
検出：ＭＡＬＬＳ（多角度光散乱検出器）（Ｗｙａｔｔ製、「ＤＡＷＮ−ＥＯＳ」）
ＭＡＬＬＳ補正用標準物質：ＰＭＭＡ（分子量２７６００）
【００５６】
（重量平均重合度（ＤＰｗ））
本発明において、重量平均重合度（ＤＰｗ）は、酢酸セルロース（試料）の残存水酸基をすべてプロピオニル化して得られるセルロースアセテートプロピオネートを用いてＧＰＣ−光散乱法により求めた値である。
【００５７】
本発明における前記酢酸セルロースの重量平均重合度（ＤＰｗ）は、５０〜８００の範囲であることが好ましい。重量平均重合度（ＤＰｗ）が高すぎると、濾過性が悪くなりやすい。前記重量平均重合度（ＤＰｗ）は、好ましくは５５〜７００、さらに好ましくは６０〜６００である。
【００５８】
上記重量平均重合度（ＤＰｗ）は、前記多分散性（Ｍｗ／Ｍｎ）と同じく、前記組成分布半値幅の実測値を求める場合と同様の方法で、酢酸セルロース（試料）を完全誘導体化セルロースアセテートプロピオネート（ＣＡＰ）とした後、サイズ排除クロマトグラフィー分析を行うことにより求められる（ＧＰＣ−光散乱法）。
【００５９】
上述のように、水溶性の酢酸セルロースの分子量（重合度）、多分散性（Ｍｗ／Ｍｎ）はＧＰＣ−光散乱法（ＧＰＣ−ＭＡＬＬＳ、ＧＰＣ−ＬＡＬＬＳなど）により測定される。なお、光散乱の検出は、一般に水系溶媒では困難である。これは水系溶媒は一般的に異物が多く、一旦精製しても二次汚染されやすいことによる。また、水系溶媒では、微量に存在するイオン性解離基の影響のため分子鎖の広がりが安定しない場合があり、それを抑えるために水溶性無機塩（例えば塩化ナトリウム）を添加したりすると、溶解状態が不安定になり、水溶液中で会合体を形成したりすることがある。この問題を回避するための有効な方法の一つは、水溶性酢酸セルロースを誘導体化し、異物が少なく、二次汚染されにくい有機溶媒に溶解するようにし、有機溶媒でＧＰＣ−光散乱測定を行うことである。この目的の水溶性酢酸セルロースの誘導体化としてはプロピオニル化が有効であり、具体的な反応条件及び後処理は前記組成分布半値幅の実測値の説明箇所で記載した通りである。
【００６０】
（６％粘度）
本発明における前記酢酸セルロースの６％粘度は、例えば５〜５００ｍＰａ・ｓ、好ましくは６〜３００ｍＰａ・ｓである。６％粘度が高すぎると濾過性が悪くなる場合がある。
【００６１】
酢酸セルロースの６％粘度は、下記の方法で測定できる。
５０ｍｌのメスフラスコに乾燥試料３．００ｇを入れ、蒸留水を加え溶解させる。得られた６ｗｔ／ｖｏｌ％の溶液を所定のオストワルド粘度計の標線まで移し、２５±１℃で約１５分間整温する。計時標線間の流下時間を測定し、次式により６％粘度を算出する。
６％粘度（ｍＰａ・ｓ）＝Ｃ×Ｐ×ｔ
Ｃ：試料溶液恒数
Ｐ：試料溶液密度（０．９９７ｇ／ｃｍ3）
ｔ：試料溶液の流下秒数
試料溶液恒数は、粘度計校正用標準液［昭和石油社製、商品名「ＪＳ−２００」（ＪＩＳ  Ｚ  ８８０９に準拠）］を用いて上記と同様の操作で流下時間を測定し、次式より求める。
試料溶液恒数＝｛標準液絶対粘度（ｍＰａ・ｓ）｝／｛標準液の密度（ｇ／ｃｍ3）×標準液の流下秒数｝
【００６２】
（低置換度酢酸セルロースの製造）
本発明における前記酢酸セルロース（低置換度酢酸セルロース）は、例えば、（Ａ）中乃至高置換度酢酸セルロースの加水分解工程（熟成工程）、（Ｂ）沈殿工程、及び、必要に応じて行う（Ｃ）洗浄、中和工程により製造できる。
【００６３】
［（Ａ）加水分解工程（熟成工程）］
この工程では、中乃至高置換度酢酸セルロース（以下、「原料酢酸セルロース」と称する場合がある）を加水分解する。原料として用いる中乃至高置換度酢酸セルロースのアセチル総置換度は、例えば、１．５〜３、好ましくは２〜３である。原料酢酸セルロースとしては、市販のセルロースジアセテート（アセチル総置換度２．２７〜２．５６）やセルローストリアセテート（アセチル総置換度２．５６超〜３）を用いることができる。
【００６４】
加水分解反応は、有機溶媒中、触媒（熟成触媒）の存在下、原料酢酸セルロースと水を反応させることにより行うことができる。有機溶媒としては、例えば、酢酸、アセトン、アルコール（メタノール等）、これらの混合溶媒などが挙げられる。これらの中でも、酢酸を少なくとも含む溶媒が好ましい。触媒としては、一般に脱アセチル化触媒として用いられる触媒を使用できる。触媒としては、特に硫酸が好ましい。
【００６５】
有機溶媒（例えば、酢酸）の使用量は、原料酢酸セルロース１重量部に対して、例えば、０．５〜５０重量部、好ましくは１〜２０重量部、さらに好ましくは３〜１０重量部である。
【００６６】
触媒（例えば、硫酸）の使用量は、原料酢酸セルロース１重量部に対して、例えば、０．００５〜１重量部、好ましくは０．０１〜０．５重量部、さらに好ましくは０．０２〜０．３重量部である。触媒の量が少なすぎると、加水分解の時間が長くなりすぎ、酢酸セルロースの分子量の低下を引き起こすことがある。一方、触媒の量が多すぎると、加水分解温度に対する解重合速度の変化の度合いが大きくなり、加水分解温度がある程度低くても解重合速度が大きくなり、分子量がある程度大きい酢酸セルロースが得られにくくなる。
【００６７】
加水分解工程における水の量は、原料酢酸セルロース１重量部に対して、例えば、０．５〜２０重量部、好ましくは１〜１０重量部、さらに好ましくは２〜７重量部である。また、該水の量は、有機溶媒（例えば、酢酸）１重量部に対して、例えば、０．１〜５重量部、好ましくは０．３〜２重量部、さらに好ましくは０．５〜１．５重量部である。水は、反応開始時において全ての量を系内に存在させてもよいが、酢酸セルロースの沈殿を防止するため、使用する水の一部を反応開始時に系内に存在させ、残りの水を１〜数回に分けて系内に添加してもよい。
【００６８】
加水分解工程における反応温度は、例えば、４０〜１３０℃、好ましくは５０〜１２０℃、さらに好ましくは６０〜１１０℃である。特に、反応温度を９０℃以上（或いは９０℃を超える温度）とする場合には、正反応（加水分解反応）に対する逆反応（アセチル化反応）の速度が増加する方向に反応の平衡が傾く傾向があり、その結果、置換度分布が狭くなり、後処理条件を特に工夫しなくとも、組成分布指数ＣＤＩの極めて小さい低置換度酢酸セルロースを得ることができる。この場合、触媒として硫酸等の強酸を用いるのが好ましく、また、反応溶媒として酢酸を過剰に用いるのが好ましい。また、反応温度を９０℃以下とする場合であっても、後述するように、沈殿工程において、沈殿溶媒として２種以上の溶媒を含む混合溶媒を用いて沈殿させたり、沈殿分別及び／又は溶解分別を行うことにより、組成分布指数ＣＤＩが非常に小さい低置換度酢酸セルロースを得ることができる。
【００６９】
［（Ｂ）沈殿工程］
この工程では、加水分解反応終了後、反応系の温度を室温まで冷却し、沈殿溶媒を加えて低置換度酢酸セルロースを沈殿させる。沈殿溶媒としては、水と混和する有機溶剤若しくは水に対する溶解度の大きい有機溶剤を使用できる。例えば、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン；メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール等のアルコール；酢酸エチル等のエステル；アセトニトリル等の含窒素化合物；テトラヒドロフラン等のエーテル；これらの混合溶媒などが挙げられる。
【００７０】
沈殿溶媒として２種以上の溶媒を含む混合溶媒を用いると、後述する沈殿分別と同様の効果が得られ、組成分布（分子間置換度分布）が狭く、組成分布指数（ＣＤＩ）が小さい低置換度酢酸セルロースを得ることができる。好ましい混合溶媒として、例えば、アセトンとメタノールの混合溶媒、イソプロピルアルコールとメタノールの混合溶媒などが挙げられる。
【００７１】
また、沈殿して得られた低置換度酢酸セルロースに対して、さらに沈殿分別（分別沈殿）及び／又は溶解分別（分別溶解）を行うことにより、組成分布（分子間置換度分布）が狭く、組成分布指数ＣＤＩが非常に小さい低置換度酢酸セルロースを得ることができる。
【００７２】
沈殿分別は、例えば、沈殿して得られた低置換度酢酸セルロース（固形物）を水に溶解し、適当な濃度（例えば、２〜１０重量％、好ましくは３〜８重量％）の水溶液とし、この水溶液に貧溶媒を加え（又は、貧溶媒に前記水溶液を加え）、適宜な温度（例えば、３０℃以下、好ましくは２０℃以下）に保持して、低置換度酢酸セルロースを沈殿させ、沈殿物を回収することにより行うことができる。貧溶媒としては、例えば、メタノール等のアルコール、アセトン等のケトンなどが挙げられる。貧溶媒の使用量は、前記水溶液１重量部に対して、例えば１〜１０重量部、好ましくは２〜７重量部である。
【００７３】
溶解分別は、例えば、前記沈殿して得られた低置換度酢酸セルロース（固形物）或いは前記沈殿分別で得られた低置換度酢酸セルロース（固形物）に、水と有機溶媒（例えば、アセトン等のケトン、エタノール等のアルコールなど）の混合溶媒を加え、適宜な温度（例えば、２０〜８０℃、好ましくは２５〜６０℃）で撹拌後、遠心分離により濃厚相と希薄相とに分離し、希薄相に沈殿溶剤（例えば、アセトン等のケトン、メタノール等のアルコールなど）を加え、沈殿物（固形物）を回収することにより行うことができる。前記水と有機溶媒の混合溶媒における有機溶媒の濃度は、例えば、５〜５０重量％、好ましくは１０〜４０重量％である。
【００７４】
［（Ｃ）洗浄、中和工程］
沈殿工程（Ｂ）で得られた沈殿物（固形物）は、メタノール等のアルコール、アセトン等のケトンなどの有機溶媒（貧溶媒）で洗浄するのが好ましい。また、塩基性物質を含む有機溶媒（例えば、メタノール等のアルコール、アセトン等のケトンなど）で洗浄、中和することも好ましい。なお、中和工程は加水分解工程の直後に設けても良く、その場合には塩基性物質またはその水溶液を加水分解反応浴に添加するのが好ましい。
【００７５】
前記塩基性物質としては、例えば、アルカリ金属化合物（例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等のアルカリ金属水酸化物；炭酸ナトリウム、炭酸カリウム等のアルカリ金属炭酸塩；炭酸水素ナトリウム等のアルカリ金属炭酸水素塩；酢酸ナトリウム、酢酸カリウム等のアルカリ金属カルボン酸塩；ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド等のナトリウムアルコキシドなど）、アルカリ土類金属化合物（例えば、水酸化マグネシウム、水酸化カルシウム等のアルカリ土類金属水酸化物、炭酸マグネシウム、炭酸カルシウム等のアルカリ土類金属炭酸塩；酢酸マグネシウム、酢酸カルシウム等のアルカリ土類金属カルボン酸塩；マグネシウムエトキシド等のアルカリ土類金属アルコキシドなど）などを使用できる。これらの中でも、特に、酢酸カリウム等のアルカリ金属化合物が好ましい。
【００７６】
洗浄、中和により、加水分解工程で用いた触媒（硫酸等）などの不純物を効率よく除去することができる。
【００７７】
このようにして得られた低置換度酢酸セルロースは、必要に応じて、粉砕、篩別又は造粒して、特定粒度の範囲に調整することができる。
【００７８】
［脂質代謝改善作用を有する栄養組成物及び家畜飼料］
本発明の脂質代謝改善作用を有する栄養組成物、家畜飼料は、前記低置換度酢酸セルロースを含有している。
このような脂質代謝改善作用を有する栄養組成物、家畜飼料を摂取すると、前記低置換度酢酸セルロースの細菌による分解が速やかであり、かかる生分解における分解生成物が酢酸その他の酸性成分を生じ、また、宿主の健康維持に貢献する腸内細菌に適した腸内環境において、宿主の健康に害を及ぼす腸内細菌が劣勢となるため、腸に優しく、摂取量が多くても下痢を起こしにくく、血清生化学検査の結果も含めて安全性に優れるという利点がある。一方では、腸内菌叢に関しては、有益であるＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｕｂｃｌｕｓｔｅｒ ＸＩＶａを含むＯＴＵ９４０群が増加するという働きを有する。
【００７９】
本発明の脂質代謝改善作用を有する栄養組成物は前記低置換度酢酸セルロースと必要に応じて一般的な食品とその他添加物等の食品として許容される各種の担体、賦形剤、希釈剤を含む形態で構成されていてもよい。その他の添加物としては、例えばコーンスターチ、αスターチ、カゼイン、スクロース、大豆油、セルロース、ミネラルミックス、ビタミンミックス、Ｌ−シスチン、重酒石酸コリン、t−ブチルヒドロキノンなどが挙げられる。また、卵殻カルシウム、パントテン酸カルシウム、ローヤルゼリー、プロポリス、蜂蜜、食物繊維、アガリクス、キチン、キトサン、フラボノイド類、カロテノイド類、ルテイン、漢方生薬、コンドロイチン、各種アミノ酸等の健康食品等の成分として使用されているものを添加してもよい。
【００８０】
脂質代謝改善作用を有する栄養組成物の形態は、特に限定されず用途に応じて適宜選択でき、例えば、粉末状、顆粒状、カプセル状、タブレット状、グミ状、ガム状、キャンディー状、丸剤状、錠剤状、散剤状、棒状、板状、液状、乳濁状、懸濁状、シロップ状、ゼリー状、クリーム状、軟膏状、シート状、トローチ状等のいずれの形態をとることもでき、それぞれ当該技術分野の公知の方法及び手段を用いて製造することができる。
【００８１】
本発明の脂質代謝改善作用を有する栄養組成物において、該脂質代謝改善作用を有する栄養組成物中の前記アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロース（低置換度酢酸セルロース）の含有量は、通常、０．１重量％以上、好ましくは０．５重量％以上、さらに好ましくは１重量％以上である。上記低置換度酢酸セルロースの含有量が０．１重量％未満では、脂質代謝改善効果が発揮されない場合がある。
【００８２】
本発明の脂質代謝改善作用を有する栄養組成物は、ヒトに限らず、家畜（ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジなど）、家禽（ニワトリ、アヒルなど）、ペット（イヌ、ネコ、サル、マウス、ラット、モルモットなど）などの飼育動物のための飼料、餌料などとして脂質代謝改善の目的で使用することができる。すなわち、前記低置換度酢酸セルロースを含有する家畜飼料は、家畜体内において、脂質代謝が大きく改善され、過剰な中性脂肪が顕著に低減する。
【００８３】
［食品、医薬品］
本発明の脂質代謝改善作用を有する栄養組成物は、一般食品に加えて、健康食品、特定保健食品、栄養補助食品、栄養機能食品、栄養保健食品等、健康の維持の目的で摂取する食品および／または飲料として使用できる。また、上記の食品および／または飲料に限定されることはなく、脂質代謝改善作用を有する医薬品栄養剤および／または濃厚流動食にも使用できる。
【００８４】
本発明の脂質代謝改善作用を有する栄養組成物を加工食品として使用するときの種類は特に限定されるものではないが、例えば、ちくわ、はんぺん、ソーセージ等の魚介加工品；ハム等の農産加工品；ゼリー、キャンディー、グミ、チューインガム、クッキー、ビスケット、チョコレート等の菓子類；チーズ、バター、ヨーグルト等の乳製品；パン、ケーキ等の小麦粉加工品；そば、うどん等の麺類；さとう、人工甘味料等の調味食品などの食品；お茶、清涼飲料水、ジュース、酒類、栄養ドリンク等の飲料などが挙げられる。
【００８５】
本発明の脂質代謝改善作用を有する栄養組成物は、医薬品としても使用できる。該医薬品としては、脂質代謝異常症等の患者の予防や治療目的で使用する医薬品栄養剤や濃厚流動食も挙げられる。さらに、前記低置換度酢酸セルロースを有効成分とする錠剤、カプセル剤、散剤、シロップ剤などの形態の医薬品も挙げられる。
なお、本明細書において「治療」とは、対象疾患の症状及び／又はその付随する症候を緩和し又は治癒することを意味するが、対象疾患の「治癒」まで至らずに症状を緩和する場合（対症療法など）も「治療」に含まれるものとする。
また、「予防」とは、対象疾患（疾患が治癒した場合は当該疾患の再発を含む）の症状又はその付随する症候の発症を遅延し、又は防止する方法、対象が、症状若しくは疾病を獲得しないようにする方法、又は、対象が症状若しくは疾病を獲得するリスクを低減することを意味するものとする。
【００８６】
本発明の医薬品は、前記アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロースをそのまま製剤として使用してもよいが、必要に応じて、製剤学的に許容される各種の担体、賦形剤、希釈剤、例えば、食品素材や、食品添加物、医薬品、医薬品添加物、医薬部外品添加物などの添加剤と組み合わせた製剤としてもよい。製剤は経口製剤であっても、非経口製剤であってもよい。製剤の形態は、特に限定されず用途に応じて適宜選択でき、例えば、粉末状、顆粒状等、前記栄養組成物の形態と同様の形態とすることができ、製薬分野で公知の方法により製造することができる。
【００８７】
前記添加剤としては、例えば、コーンスターチ、αスターチ、乳糖、白糖、マルトース、トレハロース、環状四糖、デキストリン、デンプン、結晶セルロース、重炭酸ナトリウム、炭酸カルシウム等の賦形剤（担体）；カルボキシメチルセルロース、寒天、ゼラチン末等の崩壊剤；ポリビニルアルコール、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース等の結合剤；シリカ、ステアリン酸マグネシウム、タルク等の滑沢剤；ヒドロキシプロピルメチルセルロース等のコーティング剤；界面活性剤；乳化剤；可塑剤；防腐剤（抗菌剤）；保湿剤；増粘剤；増粘安定剤；抗酸化剤；キレート剤；色素；香料；酸味料；調味料；ｐＨ調整剤；ビタミン剤；各種アミノ酸；ミネラル；油脂；栄養補助剤；水溶性高分子；電解質；希釈剤；水；生理食塩水；アルコール類；有機溶媒；動物や植物のエキスなどが挙げられる。
【００８８】
本発明の栄養組成物を医薬品として使用する場合の前記低置換度酢酸セルロースの摂取又は投与量は、対象疾患の種類、病態、年齢、投与形態によって異なるが、通常、成人１人あたり１日の前記低置換度酢酸セルロースの摂取又は投与量として、１ｇ〜１００ｇ、好ましくは１０ｇ〜６０ｇ程度を１回又は数回に分けて摂取又は投与することができる。家畜、家禽、ペットなどの飼育動物に摂取させる場合は、１日当たりの摂取量が前記の範囲になるように、飼料に前記低置換度酢酸セルロースを配合すればよく、一般的には、飼料固形分として０．１〜１０重量％、好ましくは１〜６重量％配合すればよい。
【００８９】
前記食品、医薬品において、該組成物中の前記アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロース（低置換度酢酸セルロース）の含有量は、通常、０．１重量％以上、好ましくは０．５重量％以上、さらに好ましくは１重量％以上である。上記低置換度酢酸セルロースの含有量が０．１重量％未満では、脂質代謝改善効果等の予防又は治療効果等が発揮されにくい。
【００９０】
［脂質代謝改善剤］
本発明の脂質代謝改善剤は前記アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロース（低置換度酢酸セルロース）を含有している。前記のように、アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロースは、ヒトや家畜に摂取させた場合、脂質代謝改善作用を発揮する。また、腸に優しく、摂取量が多くても下痢を起こしにくく安全性に優れる。
【００９１】
本発明の脂質代謝改善剤は、前記アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロースをそのまま製剤として使用してもよいが、必要に応じて、製剤学的に許容される各種の担体、賦形剤、希釈剤、例えば、食品素材や、食品添加物、医薬品、医薬品添加物、医薬部外品添加物などの添加剤と組み合わせた製剤としてもよい。製剤は経口製剤であっても、非経口製剤であってもよい。製剤の形態は、特に限定されず用途に応じて適宜選択でき、例えば、粉末状、顆粒状等、前記栄養組成物の形態と同様の形態とすることができ、製薬分野で公知の方法により製造することができる。
【００９２】
前記添加剤としては、例えば、コーンスターチ、αスターチ、乳糖、白糖、マルトース、トレハロース、環状四糖、デキストリン、デンプン、結晶セルロース、重炭酸ナトリウム、炭酸カルシウム等の賦形剤（担体）；カルボキシメチルセルロース、寒天、ゼラチン末等の崩壊剤；ポリビニルアルコール、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース等の結合剤；シリカ、ステアリン酸マグネシウム、タルク等の滑沢剤；ヒドロキシプロピルメチルセルロース等のコーティング剤；界面活性剤；乳化剤；可塑剤；防腐剤（抗菌剤）；保湿剤；増粘剤；増粘安定剤；抗酸化剤；キレート剤；色素；香料；酸味料；調味料；ｐＨ調整剤；ビタミン剤；各種アミノ酸；ミネラル；油脂；栄養補助剤；水溶性高分子；電解質；希釈剤；水；生理食塩水；アルコール類；有機溶媒；動物や植物のエキスなどが挙げられる。
【００９３】
本発明の脂質代謝改善剤において、前記アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロース（低置換度酢酸セルロース）の含有量は、通常、０．１重量％以上、好ましくは０．５重量％以上、さらに好ましくは１重量％以上である。上記低置換度酢酸セルロースの含有量が０．１重量％未満では、脂質代謝改善効果が発揮されにくい。
【００９４】
本発明の脂質代謝改善剤は、ヒトに限らず、家畜（ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジなど）、家禽（ニワトリ、アヒルなど）、ペット（イヌ、ネコ、サル、マウス、ラット、モルモットなど）などの飼育動物にも適用できる。
本発明の脂質代謝改善剤の摂取又は投与量は、病態、年齢、投与形態によって異なるが、通常、成人１人あたり１日の前記低置換度酢酸セルロースの摂取又は投与量として、１ｇ〜１００ｇ、好ましくは１０ｇ〜６０ｇ程度を１回又は数回に分けて摂取又は投与することができる。家畜、家禽、ペットなどの飼育動物に摂取させる場合は、１日当たりの摂取量が前記の範囲になるように、飼料に前記低置換度酢酸セルロースを配合すればよく、一般的には、飼料固形分として０．１〜１０重量％、好ましくは１〜６重量％配合すればよい。
【００９５】
［炎症性腸疾患及び／又は免疫異常の予防及び／又は治療剤］
本発明の炎症性腸疾患及び／又は免疫異常の予防及び／又は治療剤は、前記アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロース（低置換度酢酸セルロース）を含有している。
前記炎症性腸疾患及び／又は免疫異常の予防及び／又は治療剤において、該組成物中の前記アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロース（低置換度酢酸セルロース）の含有量は、通常、０．１重量％以上、好ましくは０．５重量％以上、さらに好ましくは１重量％以上である。
本発明の炎症性腸疾患及び／又は免疫異常の予防及び／又は治療剤は、ヒトに限らず、家畜（ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジなど）、家禽（ニワトリ、アヒルなど）、ペット（イヌ、ネコ、サル、マウス、ラット、モルモットなど）などの飼育動物にも適用できる。
本発明の炎症性腸疾患及び／又は免疫異常の予防及び／又は治療剤は、病態、年齢、投与形態によって異なるが、通常、成人１人あたり１日の前記低置換度酢酸セルロースの摂取又は投与量として、１ｇ〜１００ｇ、好ましくは１０ｇ〜６０ｇ程度を１回又は数回に分けて摂取又は投与することができる。家畜、家禽、ペットなどの飼育動物に摂取させる場合は、１日当たりの摂取量が前記の範囲になるように、飼料に前記低置換度酢酸セルロースを配合すればよく、一般的には、飼料固形分として０．１〜１０重量％、好ましくは１〜６重量％配合すればよい。
【００９６】
前述したように、アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロースは、腸内菌叢に関しては、有益であるＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｕｂｃｌｕｓｔｅｒ ＸＩＶａを含むＯＴＵ９４０群が増加するという働きを有する。
【００９７】
最近、上記Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｕｂｃｌｕｓｔｅｒ ＸＩＶａを含む細菌群（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｕｂｃｌｕｓｔｅｒ ＩＶ、同ＸＩＶａ、同ＸＶＩＩＩ）は、難治性疾患である炎症性腸疾患（厚生労働省が指定するクローン病や潰瘍性大腸炎等）並びにアレルギーなどの免疫異常に対して、治療並びに予防効果を持つことが期待されるとの研究成果が発表されている（Ｎａｔｕｒｅ，５００，２３２−２３６（２０１３）、２０１３年８月８日）。より具体的には、上記論文の著者らは、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｕｂｃｌｕｓｔｅｒ ＩＶ、同ＸＩＶａ、同ＸＶＩＩＩに属する１７のクロストリジウム属菌が、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）の増殖を促進する効果があることを実験的に証明した。そして、上記論文の著者らは、他の実験事実に基づき、クロストリジウム属菌による制御性Ｔ細胞増殖促進のメカニズムを次の通り説明している。（ｉ）同菌は、腸内での発酵において酪酸を産生する。（ii）酪酸は、ヒストン脱アセチル化酵素を阻害する。その結果、ヒストンのアセチル化が促される。なお、ヒストンとは細胞の核内でＤＮＡに巻き付くタンパク質であり、遺伝子の発現に関与する。これがアセチル化されるとＤＮＡとの結合が弱まり、遺伝子がオンとなりやすい。（iii）前項のメカニズムにより、未熟なＴ細胞のＤＮＡのうち、Ｔｒｅｇへの分化に重要なＦｏｘｐ３遺伝子領域のヒストンのアセチル化が促進され、遺伝子がオンとなり、Ｔｒｅｇへ分化する。Ｔｒｅｇは腸の恒常性に関与するので、上記論文の著者らは、難治性疾患である炎症性腸疾患（厚生労働省が指定するクローン病や潰瘍性大腸炎）並びにアレルギーなどの免疫異常に対して、治療や予防の観点から今回の知見が役立つとしている。また、上記論文の著者らは、酪酸化したデンプンを用いた実験で、Ｔｒｅｇが２培に増えたとの実験事実を公表している。
【００９８】
この論文「Ｎａｔｕｒｅ，５００，２３２−２３６（２０１３）、２０１３年８月８日」に発表された知見からすると、前記アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロース（低置換度酢酸セルロース）は、腸内菌叢に関しては、有益であるＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｕｂｃｌｕｓｔｅｒ ＸＩＶａを含むＯＴＵ９４０群が増加するという働きを有し、上記Ｔｒｅｇの増殖促進効果を通じて、炎症性腸疾患ならびにアレルギー等免疫性疾患の治療及び予防に効果があると強く期待される。
【００９９】
［がんの予防及び／又は治療剤］
本発明のがんの予防及び／又は治療剤は、前記アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロース（低置換度酢酸セルロース）を含有している。
予防及び／又は治療対象となるがんとしては、特に限定される物ではないが、例えば、白血病、精上皮腫、黒色腫、奇形腫、リンパ腫、神経芽細胞腫、神経膠腫、直腸癌、子宮体癌、腎癌、副腎癌、甲状腺癌、血液がん、皮膚癌、脳癌、子宮頸癌、腸癌、肝癌、結腸癌、胃癌、腸癌、頭頸部癌、消化器癌、リンパ節癌、食道癌、結腸直腸癌、膵癌、耳鼻咽喉癌、乳癌、前立腺癌、子宮癌、卵巣癌および肺癌ならびにその転移癌が挙げられ、肝癌、結腸癌およびその肝転移、乳癌、肺癌、卵巣癌、前立腺癌、消化器癌（例えば、胃癌および膵癌）などが好適な治療対象である。
前記がんの予防及び／又は治療剤において、該組成物中の前記アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロース（低置換度酢酸セルロース）の含有量は、通常、０．１重量％以上、好ましくは０．５重量％以上、さらに好ましくは１重量％以上である。
本発明のがんの予防及び／又は治療剤は、ヒトに限らず、家畜（ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジなど）、家禽（ニワトリ、アヒルなど）、ペット（イヌ、ネコ、サル、マウス、ラット、モルモットなど）などの飼育動物にも適用できる。
本発明のがんの予防及び／又は治療剤の摂取又は投与量は、がんの種類、病態、年齢、投与形態によって異なるが、通常、成人１人あたり１日の前記低置換度酢酸セルロースの摂取又は投与量として、１ｇ〜１００ｇ、好ましくは１０ｇ〜６０ｇ程度を１回又は数回に分けて摂取又は投与することができる。家畜、家禽、ペットなどの飼育動物に摂取させる場合は、１日当たりの摂取量が前記の範囲になるように、飼料に前記低置換度酢酸セルロースを配合すればよく、一般的には、飼料固形分として０．１〜１０重量％、好ましくは１〜６重量％配合すればよい。
【０１００】
最近、前記ＯＴＵ９４０は、ヒトの消化活動において、メタンを低減し、水素を増やすことを示唆する論文が発表されている（Ｈｉｒｏｓａｋｉ  Ｍｅｄ．Ｊ．６２：７−１７，２０１１）。前記のように、アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロース（を含む組成物）をヒトや家畜に投与すると、腸内菌叢において、ＯＴＵ９４０を持つ細菌が著しく増加する。従って、前記低置換度酢酸セルロースを含む組成物をヒトや家畜に投与することにより、メタンガスが低減され温室効果ガス低減に資すことが期待されるとともに、水素ガスが増え、肝臓の酸化ストレスを低減する効果が奏されると考えられる。水素ガスにより肝臓の酸化ストレスが低減することは、Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，２０１２，１０７，４８５−４９２に報告されている。
【０１０１】
さらに、最近、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｌｕｓｔｅｒ ＸＩは、発がん性二次胆汁酸を与える細菌であることが報告されている［Ｎａｔｕｒｅ，４９９，９７−１０１（２０１３）、２０１３年７月４日参照］。前記アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロース（を含む組成物）をヒトや家畜に投与すると、腸内菌叢において、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｌｕｓｔｅｒ ＸＩが著しく減少する。従って、前記低置換度酢酸セルロースを含む組成物をヒトや家畜に投与することにより、肝癌の発症抑制効果が得られると強く期待できる。
【０１０２】
一方、トムゼン・フリーデンライヒ抗原α（Ｔｈｏｍｓｅｎ−Ｆｒｉｅｄｅｎｒｅｉｃｈ  Ａｎｔｉｇｅｎα：ＴＦα）は、がん細胞の表面に特異的に発現する糖鎖抗原であり、がん治療の有望な標的であるが、健康なヒトの血清中にもＴＦαに対する免疫（ＴＦα抗体）が見出されることがしばしばあり、がん免疫監視において重要な役割を果たしていると考えられている（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，７５，ｐ５９４−６０２，１９９７；Ｋｕｒｔｅｎｋｏｖ，Ａｃｔａ  Ｏｎｃｏｌｏｇｉｃａ，４６，ｐ３１６−３２３，２００７など）。すなわち、ＴＦα（「コア−１」とも呼ばれる）は、広汎ながん細胞、例えば、結腸癌の６０％超および結腸癌からの肝転移の９０％超、ならびに、乳癌、肺癌、卵巣癌、前立腺癌、および他の消化器癌を含めた他の主要な大多数の癌、例えば、胃癌および膵癌などにおいて発現されることが知られており、がん免疫療法の第一の標的として期待されている。
ＴＦαが発現しているがん細胞を持っていない健康なヒトが、予めＴＦα抗体を持てている理由として、腸内細菌の一種であるＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｏｖａｔｕｓがＴＦα構造を発現しており、抗がんワクチンとして可能性が提案されている（Ｈｅｎｄｅｒｓｏｎ，Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．２１，ｎｏ．１０，ｐ．１２７７，２０１１）。また、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｘｙｌａｎｉｓｏｌｖｅｎｓが、より抗原性が高いＴＦαを発現しており、がん治療薬として有用であることが報告されている（ＵＳ２０１４／０３０２０９３Ａ１）。
前記のように、アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロース（を含む組成物）をヒトや家畜に投与すると、腸内菌叢において、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｘｙｌａｎｉｓｏｌｖｅｎｓ及びＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｏｖａｔｕｓが顕著に増加する。
従って、前記低置換度酢酸セルロースを含む組成物をヒトや家畜に投与することにより、上記がんに対する予防及び／又は治療効果が得られると強く期待できる。
【０１０３】
［非アルコール性脂肪性肝炎の予防及び／又は治療剤］
非アルコール性脂肪肝疾患（ｎｏｎ−ａｌｃｏｈｏｌｉｃ  ｆａｔｔｙ  ｌｉｖｅｒ  ｄｉｓｅａｓｅ：ＮＡＦＬＤ）は、常習飲酒歴がないにもかかわらず、アルコール性肝障害に類似した病理像を呈する疾患であり、肝臓に脂肪が沈着するのみの単純性脂肪肝と脂肪沈着とともに炎症や線維化が起こる脂肪性肝炎に大別され、成人の約８％程度が発症する。中でも、非アルコール性脂肪性肝炎（ｎｏｎ−ａｌｃｏｈｏｌｉｃ  ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ：ＮＡＳＨ）は、肝臓の脂肪化に伴い炎症を起こし線維化が進行する病態であり、やがて、肝硬変に至り、肝細胞癌を引き起こす可能性があり、成人の約１％程度が発症する。ＮＡＳＨに対する確立された予防法および治療法は現時点で存在せず、脂肪肝およびその背景の肥満改善のために運動療法、食事療法のみを行われているのが現状であり、有効な治療法の開発が望まれている。
ＮＡＳＨの発症機序としては、肝細胞への中性脂肪の沈着（１ｓｔ  ｈｉｔ）がおこり、さらに肝細胞障害要因（２ｎｄ  ｈｉｔ）が加わり、ＮＡＳＨを発症するとする説（ｔｗｏ−ｈｉｔ  ｔｈｅｏｒｙ）が従来提案されていたが、最近、腸管や脂肪組織に由来するサイトカインや細菌関連分枝などの炎症刺激物質を主な要因とし、種々の因子が段階的にではなく並行して肝臓に作用し、ＮＡＳＨの病態形成に関与するとする説（ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｐａｒａｌｌｅｌ  ｈｉｔｓ  ｈｙｐｏｔｈｅｓｉｓ）が提唱されている。しかしながら、原因が解明されたとはいえず、有効な治療法も未だ確立されていない。
本発明者らは、低置換度の酢酸セルロースの投与が腸内細菌叢を変化させ、肝臓のストレスを低減する効果を発揮することに着目して、ＮＡＳＨの動物モデルであるＳＴＡＭマウスに前記低置換度酢酸セルロースを投与したところ、ＮＡＳＨの特有の症状が改善されるという知見が得られ、ＮＡＳＨ対する予防及び／又は治療剤として有用であることを見出した。
【０１０４】
即ち、本発明の非アルコール性脂肪性肝炎の予防及び／又は治療剤は、前記アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロース（低置換度酢酸セルロース）を含有している。
前記非アルコール性脂肪性肝炎の予防及び／又は治療剤において、該組成物中の前記アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロース（低置換度酢酸セルロース）の含有量は、通常、０．１重量％以上、好ましくは０．５重量％以上、さらに好ましくは１重量％以上である。
本発明の非アルコール性脂肪性肝炎の予防及び／又は治療剤は、ヒトに限らず、家畜（ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジなど）、家禽（ニワトリ、アヒルなど）、ペット（イヌ、ネコ、サル、マウス、ラット、モルモットなど）などの飼育動物にも適用できる。
本発明の非アルコール性脂肪性肝炎の予防及び／又は治療剤の摂取又は投与量は、病態、年齢、投与形態によって異なるが、通常、成人１人あたり１日の前記低置換度酢酸セルロースの摂取又は投与量として、１ｇ〜１００ｇ、好ましくは１０ｇ〜６０ｇ程度を１回又は数回に分けて摂取又は投与することができる。家畜、家禽、ペットなどの飼育動物に摂取させる場合は、１日当たりの摂取量が前記の範囲になるように、飼料に前記低置換度酢酸セルロースを配合すればよく、一般的には、飼料固形分として０．１〜１０重量％、好ましくは１〜６重量％配合すればよい。
【０１０５】
［肥満、糖尿病の予防及び／又は治療剤］
本発明者らは、前記低置換度酢酸セルロースを投与したラットの腸内において、短鎖脂肪酸（Ｓｈｏｒｔ−ｃｈａｉｎ  ｆａｔｔｙ  ａｃｉｄ：ＳＣＦＡ）、特に酢酸、プロピオン酸が著しく増加することを見出した。酢酸は、腸管から吸収された後、血管で輸送され、脂肪細胞や筋肉に作用して脂肪の蓄積を抑制、燃焼を促進し、肥満を抑制することが報告されている（Ｋｉｍｕｒａら、ＮＡＴＵＲＥ  ＣＯＭＭＵＮＩＣＡＴＩＯＮＳ，４：１８２９、２０１３年）。また、酢酸は血液脳関門を通過し視床下部に作用して、食欲が抑制されることが報告されている（Ｆｒｏｓｔら、ＮＡＴＵＲＥ  ＣＯＭＭＵＮＩＣＡＴＩＯＮＳ，５：３６１１、２０１４年）。さらに、短鎖脂肪酸は、ＧＰＲ４３受容体を介して腸内分泌細胞を刺激し、食欲抑制ホルモンであるペプチドＹＹを放出させることが報告されている（Ｋａｒａｋｉら，Ｃｅｌｌ  ａｎｄ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，３２４，ｐ．３５３，２００６）。
従って、低置換度の酢酸セルロースの摂取乃至投与により、肥満に治療並びに予防効果を持つことが期待される。
さらに、本発明者らは、低置換度の酢酸セルロースの摂取乃至投与が、腸内菌叢に関し、Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ  ｍｕｃｉｎｉｐｈｉｌａも増加させることも併せて見出した。
Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ  ｍｕｃｉｎｉｐｈｉｌａは、動物実験で肥満抑制作用、２型糖尿病抑制作用を示すことが報告されており（Ｅｖｅｒａｒｄ，Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，ｖｏｌ．１１０，ｎｏ．２２，ｐ．９０６６，２０１３；Ｌｕｋｏｖａｃ，ｍＢｉｏ,５（４）：ｅ０１４３８−１４．ｄｏｉ：１０．１１２８／ｍＢｉｏ．０１４３８−１４，２０１４；Ｅｖｅｒａｒｄら，Ｄｉａｂｅｔｅｓ，６０，ｐ．２７７５，２０１１）、低置換度の酢酸セルロースの摂取乃至投与により、肥満症、２型糖尿病等に治療並びに予防効果を持つことが期待される。
【０１０６】
即ち、本発明の肥満及び／又は糖尿病（特に、２型糖尿病）の予防及び／又は治療剤は、前記アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロース（低置換度酢酸セルロース）を含有している。
前記肥満及び／又は糖尿病の予防及び／又は治療剤において、該組成物中の前記アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロース（低置換度酢酸セルロース）の含有量は、通常、０．１重量％以上、好ましくは０．５重量％以上、さらに好ましくは１重量％以上である。
本発明の肥満及び／又は糖尿病の予防及び／又は治療剤は、ヒトに限らず、家畜（ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジなど）、家禽（ニワトリ、アヒルなど）、ペット（イヌ、ネコ、サル、マウス、ラット、モルモットなど）などの飼育動物にも適用できる。
本発明の肥満及び／又は糖尿病の予防及び／又は治療剤の摂取又は投与量は、病態、年齢、投与形態によって異なるが、通常、成人１人あたり１日の前記低置換度酢酸セルロースの摂取又は投与量として、１ｇ〜１００ｇ、好ましくは１０ｇ〜６０ｇ程度を１回又は数回に分けて摂取又は投与することができる。家畜、家禽、ペットなどの飼育動物に摂取させる場合は、１日当たりの摂取量が前記の範囲になるように、飼料に前記低置換度酢酸セルロースを配合すればよく、一般的には、飼料固形分として０．１〜１０重量％、好ましくは１〜６重量％配合すればよい。
【０１０７】
［高コレステロール血症の予防及び／又は治療剤］
短鎖脂肪酸、特にプロピオン酸が、脂肪酸やコレステロールの肝臓内での生合成を阻害し、コレステロールや中性脂肪の血中濃度を低下させることが報告されている（Ｎｉｓｈｉｎａら，Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，１２０，６６８，１９９０；Ｈａｒａら，Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，１２９，９４２，１９９９）。上述のように、本発明の低置換度酢酸セルロースを投与すると腸管内の短鎖脂肪酸、特にプロピオン酸が顕著に増加する。従って、前記低置換度酢酸セルロースを摂取又は投与すると、腸管内のプロピオン酸の濃度が増加して肝臓内に運ばれ、脂肪酸やコレステロールの生合成が阻害される結果、コレステロールや中性脂肪の血中濃度を低下することが期待される。
【０１０８】
即ち、本発明の高コレステロール血症の予防及び／又は治療剤は、前記アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロース（低置換度酢酸セルロース）を含有している。
前記高コレステロール血症の予防及び／又は治療剤において、該組成物中の前記アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロース（低置換度酢酸セルロース）の含有量は、通常、０．１重量％以上、好ましくは０．５重量％以上、さらに好ましくは１重量％以上である。
本発明の高コレステロール血症の予防及び／又は治療剤は、ヒトに限らず、家畜（ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジなど）、家禽（ニワトリ、アヒルなど）、ペット（イヌ、ネコ、サル、マウス、ラット、モルモットなど）などの飼育動物にも適用できる。
本発明の高コレステロール血症の予防及び／又は治療剤の摂取又は投与量は、病態、年齢、投与形態によって異なるが、通常、成人１人あたり１日の前記低置換度酢酸セルロースの摂取又は投与量として、１ｇ〜１００ｇ、好ましくは１０ｇ〜６０ｇ程度を１回又は数回に分けて摂取又は投与することができる。家畜、家禽、ペットなどの飼育動物に摂取させる場合は、１日当たりの摂取量が前記の範囲になるように、飼料に前記低置換度酢酸セルロースを配合すればよく、一般的には、飼料固形分として０．１〜１０重量％、好ましくは１〜６重量％配合すればよい。
【実施例】
【０１０９】
以下に、実施例に基づいて本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例により限定されるものではない。【０１１０】
製造例１
酢酸セルロース（ダイセル社製、商品名「Ｌ−５０」、アセチル基総置換度２．４３、６％粘度：１１０ｍＰａ・ｓ）１重量部に対して、５．１重量部の酢酸および２．０重量部の水を加え、４０℃で５時間撹拌して外観均一な溶液を得た。この溶液に０．１３重量部の硫酸を加え、得られた溶液を７０℃に保持し、加水分解（部分脱アセチル化反応；熟成）を行った。なお、この熟成過程においては、途中で２回、水を系に添加した。すなわち、反応を開始して１時間後に０．６７重量部の水を加え、さらに２時間後、１．６７重量部の水を加え、さらに６時間反応させた。合計の加水分解時間は９時間である。なお、反応開始時から１回目の水の添加までを第１熟成、１回目の水の添加から２回目の水の添加までを第２熟成、２回目の水の添加から反応終了（熟成完了）までを第３熟成という。
加水分解を実施した後、系の温度を室温（約２５℃）まで冷却し、反応混合物に１５重量部のアセトン／メタノール＝１／２（重量比）混合溶媒（沈殿化剤）を加えて沈殿を生成させた。
固形分１５重量％のウェットケーキとして沈殿を回収し、８重量部のメタノールを加え、固形分１５重量％まで脱液することにより洗浄した。これを３回繰り返した。洗浄した沈殿物を、酢酸カリウムを０．００４重量％含有するメタノール８重量部でさらに２回洗浄して中和し、乾燥して、水溶性酢酸セルロースを得た。【０１１１】
（置換度（ＤＳ）の測定）
手塚の方法（Carbohydr. Res. 273, 83(1995)）に準じて水溶性酢酸セルロース試料の未置換水酸基をプロピオニル化した。プロピオニル化低置換度酢酸セルロースのアセチル基総置換度は、手塚の方法（同）に準じて13Ｃ−ＮＭＲにおける１６９〜１７１ｐｐｍのアセチルカルボニルのシグナルおよび１７２〜１７４ｐｐｍのプロピオニルカルボニルのシグナルから決定した。このように求めた水溶性酢酸セルロースのアセチル基総置換度は０．８７であった。【０１１２】
（組成分布指数（ＣＤＩ）の測定）
酢酸セルロースのＣＤＩは、プロピオニル化酢酸セルロースに導いた後に次の条件でＨＰＬＣ分析を行うことで決定した。
装置: Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ
カラム: Ｗａｔｅｒｓ  Ｎｏｖａ−Ｐａｋ  ｐｈｅｎｙｌ  ６０Å ４μｍ（１５０ｍｍ×３．９ｍｍΦ）＋ガードカラム
カラム温度: ３０℃
検出: Ｖａｒｉａｎ  ３８０−ＬＣ
注入量: ５．０μＬ（試料濃度：０．１％（ｗｔ／ｖｏｌ））
溶離液:  Ａ液：ＭｅＯＨ／Ｈ2Ｏ＝８／１（ｖ／ｖ），Ｂ液：ＣＨＣｌ3／ＭｅＯＨ＝８／１（ｖ／ｖ）
グラジェント：Ａ／Ｂ＝８０／２０→０／１００（２８ｍｉｎ）；流量：０．７ｍＬ／ｍｉｎ
まず、アセチルＤＳ（アセチル基総置換度）が０〜３の範囲でＤＳ既知の標品をＨＰＬＣ分析することで、溶出時間対ＤＳの較正曲線を作成した。較正曲線に基づき、未知試料の溶出曲線（時間対検出強度曲線）をＤＳ対検出強度曲線（組成分布曲線）に変換し、この組成分布曲線の未補正半値幅Ｘを決定し、次式により組成分布の補正半値幅Ｚを決定した。
Ｚ＝（Ｘ2−Ｙ2）1/2
なお、Ｙは次式で定義される装置定数である。
Ｙ＝（ａ−ｂ）ｘ／３＋ｂ
ａ：  アセチルＤＳ＝３の標品のＸ値
ｂ：  アセチルＤＳ＝０の標品のＸ値
ｘ：  未知試料のアセチルＤＳ
補正半値幅Ｚから、次式により組成分布指数（ＣＤＩ）を決定した。
ＣＤＩ＝Ｚ／Ｚ0
ここに、Ｚ0は全ての部分置換酢酸セルロースの調製におけるアセチル化および部分脱アセチル化が全ての分子の全ての水酸基（又はアセチル基）に対して等しい確率で生じた場合に生成する組成分布であり、次式で定義される。
【数５】
0006453851.tif 000006
ＤＰｗ：重量平均重合度
ｐ：（未知試料のアセチルＤＳ）／３
ｑ：１−ｐ
このように求めた水溶性酢酸セルロースのＣＤＩは１．４であった。【０１１３】
（重量平均重合度（ＤＰｗ）、分散度（ＤＰｗ／ＤＰｎ）の測定）
酢酸セルロースの重量平均重合度および分散度は、プロピオニル化酢酸セルロースに導いた後に次の条件でＧＰＣ−光散乱測定を行うことで決定した。
装置：Ｓｈｏｄｅｘ製  ＧＰＣ  「ＳＹＳＴＥＭ−２１Ｈ」
溶媒：アセトン
カラム：ＧＭＨｘｌ（東ソー）２本、ガードカラム（東ソー製ＴＳＫｇｅｌ  ｇｕａｒｄｃｏｌｕｍｎ  ＨＸＬ−Ｈ）
流速：０．８ｍｌ／ｍｉｎ
温度：２９℃
試料濃度：０．２５％（ｗｔ／ｖｏｌ）
注入量：１００μｌ
検出：ＭＡＬＬＳ（多角度光散乱検出器）（Ｗｙａｔｔ製、「ＤＡＷＮ−ＥＯＳ」）
ＭＡＬＬＳ補正用標準物質：ＰＭＭＡ（分子量２７６００）
このように求めた水溶性酢酸セルロースのＤＰｗは１８０、ＤＰｗ／ＤＰｎは１．９であった。【０１１４】
実施例１
製造例１で得られた水溶性酢酸セルロースを用い、表１に記載の組成となるように各成分を混合して、粉末状の脂質代謝改善作用を有する栄養組成物を調製した。【０１１５】
比較例１
株式会社林原生物化学研究所「ＡＩＮ−９３Ｇ」（ジャーナル・オブ・ニュートリッション（Journal of Nutrition）、第１２３巻、第１９３９−１９５１頁（１９９３年））の精製飼料（組成は表１参照）を比較例１とした。【０１１６】
参考例１
松谷化学工業株式会社製の難消化性デキストリン「パインファイバー」を用い、表１に記載の組成となるように各成分を混合して、粉末状の栄養組成物を調製した。【０１１７】
参考例２
ダイセルファインケム株式会社製のカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）「ＣＭＣ１２２０」を用い、表１に記載の組成となるように各成分を混合して、粉末状の栄養組成物を調製した。【０１１８】
評価試験１（ラットによる脂質代謝改善効果の検証）
７週齢のウィスター系雄性ラット（日本チャールスリバー株式会社販売）を、無作為に４群各１２匹に分けて、１週間、精製飼料で予備飼育した。その後、１群は引き続き精製飼料で、残り３群は、難消化性デキストリン、水溶性酢酸セルロース、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）から所定の構成で調製した飼料により、さらに４週間飼育した。その後、各々エーテル麻酔下で下大動脈より採血後屠殺し、解剖して、臓器重量、血清脂質などを調べた。なお、ラットの飼育は、試験期間中を通じて、２又は３日おきに体重と摂餌量を測定しながら、餌及び水は自由摂取とした。また、解剖前は一晩絶食とした。
中性脂肪、総コレステロール、ＨＤＬ−コレステロールの測定は、それぞれ市販の中性脂肪トリグリセライド測定用キット（和光純薬株式会社「トリグリセライド  Ｅ−テスト  ワコー」）、総コレステロール測定用キット（和光純薬株式会社「コレステロール  Ｅ−テスト  ワコー」）、ＨＤＬ−コレステロール測定用キット（和光純薬株式会社「ＨＤＬ−コレステロール  Ｅ−テスト  ワコー」）を使用した。
結果を表２に示す。表２より、実施例１の脂質代謝改善作用を有する栄養組成物によれば、血中中性脂肪値を有意に低減できることが分かる。【０１１９】
【表１】
0006453851.tif 000007
【０１２０】
【表２】
0006453851.tif 000008
【０１２１】
実施例２
株式会社林原生物化学研究所「ＡＩＮ−９３Ｇ」（ジャーナル・オブ・ニュートリッション（Journal of Nutrition）、第１２３巻、第１９３９−１９５１頁（１９９３年））の精製飼料（組成は表１参照）１００重量部に、製造例１で得られた水溶性酢酸セルロースを２重量部、セルロース（オリエンタル酵母工業株式会社製、商品名「セルロースパウダー」）を３重量部加えて混合し、飼料を調製した。【０１２２】
参考例３
株式会社林原生物化学研究所「ＡＩＮ−９３Ｇ」（ジャーナル・オブ・ニュートリッション（Journal of Nutrition）、第１２３巻、第１９３９−１９５１頁（１９９３年））の精製飼料（組成は表１参照）１００重量部に、セルロース（オリエンタル酵母工業株式会社製、商品名「セルロースパウダー」）を５重量部加えて混合し、飼料を調製した。【０１２３】
参考例４
株式会社林原生物化学研究所「ＡＩＮ−９３Ｇ」（ジャーナル・オブ・ニュートリッション（Journal of Nutrition）、第１２３巻、第１９３９−１９５１頁（１９９３年））の精製飼料（組成は表１参照）１００重量部に、ダイセルファインケム株式会社製のカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）「ＣＭＣ１２２０」を２重量部、セルロース（オリエンタル酵母工業株式会社製、商品名「セルロースパウダー」）を３重量部を加えて混合し、飼料を調製した。【０１２４】
参考例５
株式会社林原生物化学研究所「ＡＩＮ−９３Ｇ」（ジャーナル・オブ・ニュートリッション（Journal of Nutrition）、第１２３巻、第１９３９−１９５１頁（１９９３年））の精製飼料（組成は表１参照）１００重量部に、松谷化学工業株式会社製の難消化性デキストリン「パインファイバー」を２重量部、セルロース（オリエンタル酵母工業株式会社製、商品名「セルロースパウダー」）を３重量部を加えて混合し、飼料を調製した。【０１２５】
評価試験２（安全性試験および腸内細菌叢解析）
４週齢のウィスター系雄性ラット（日本チャールスリバー株式会社販売）を１週間馴化させ、セルロース（ＣＥ）群（「ＣＥ群」と称する場合がある）、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）群（「ＣＭ群」と称する場合がある）、難消化性デキストリン（ＤＥ）群（「ＤＥ群」と称する場合がある）、水溶性酢酸セルロース（ＷＳＣＡ）群（「ＷＳ群」と称する場合がある）の計４群各６匹に分け、４週間飼育した。飼料は、ＣＥ群については参考例３の飼料、ＣＭ群については参考例４の飼料、ＤＥ群については参考例５の飼料、ＷＳ群については実施例２の飼料を用いた。飼育は、飼育温度２３±２℃、湿度５０±１０％、明暗サイクル１２時間で行い、飼料および水は自由摂取とした。【０１２６】
＜安全性試験法＞
飼育期間中は、体重、飼料摂取量を記録した。飼育終了後、一晩絶食したのち、各種臓器重量および屠体重を測定した。摂取した血清は血清生化学検査値解析に用いた。盲腸は解剖直後に盲腸内容物の重量を測定し、１０倍量のＰＢＳにて希釈し、下記の腸内細菌叢解析に用いた。【０１２７】
体重変化、摂取量、臓器重量（盲腸、腎臓、肝臓）については、４群間に有意な差はなかった。また、血清生化学検査値より、肝機能（ＡＳＴ、ＡＬＴ）、腎機能（ＢＵＮ、ＣＲＥ）、膵機能（ＧＬＵ）、栄養状態（ＴＰ、ＡＬＢ）のすべてについては、４群間に有意な差はなかった。体重変化、摂取量、臓器重量、血清生化学検査の結果から、前記アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロース（低置換度酢酸セルロース）の投与は、安全性の点で優れていることが認められた。さらに、飼育期間中にラットの便性状を確認したところ、特にＣＭＣ等の水溶性セルロース誘導体を投与したＣＭＣ群では下痢もしくは軟便が発生していたのに対し、ＷＳＣＡ群では正常便であった。このことから、ＣＭＣ等の他の水溶性セルロース誘導体と比べて、腸に優しく下痢を起こしにくい点でも優れることが認められた。【０１２８】
＜腸内細菌叢解析法＞
腸内細菌叢解析は、Ｎａｇａｓｈｉｍａらの方法（Ａｐｐｌ．  Ｅｎｖｉｒｏｎ．  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，２００３．６９（２）．１２５１−１２６２）に一部変更を加え、Ｔ−ＲＦＬＰ解析により実施した。すなわち、ＰＢＳにて希釈した盲腸内容物１ｍｌから、ＤＮｅａｓｙ  Ｂｌｏｏｄ  ＆  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ社製）を用いてＤＮＡの抽出を行った。得られたＤＮＡ抽出物は純度を確認し、ＰＣＲを行った。ＰＣＲは、プライマーの蛍光標識をＦＡＭ標識にて実施した。次いで、電気泳動にて目的鎖長のＰＣＲ産物バンドを切り出し、ＱＩＡｑｕｉｃｋ  Ｇｅｌ  Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ社製）を用いてＰＣＲ産物の精製を行った。精製したサンプルはＢｓｌＩ制限酵素処理の後、Ｔ−ＲＦＬＰ解析に付した。【０１２９】
Ｔ−ＲＦＬＰ解析とは、１６Ｓ  ｒＲＮＡ遺伝子を制限酵素処理することにより各細菌種間における特異的なＤＮＡの断片（＝ＯＴＵ）をピークとして検出し、各ピークの存在比から菌叢を解析する方法である。ＯＴＵのピークの位置が菌種を、面積値がその菌の存在量を示す。解析結果を表３〜６、図１〜４に示す。【０１３０】
表３には、ＣＥ群、ＷＳ群、ＣＭ群、ＤＥ群の各ラットについて、細菌種間における特異的なＤＮＡ断片であるＯＴＵの種類とその存在比（％）、及び該ＯＴＵから推定される菌種を解析した結果を示す。表３の第２行の数字（５，７，１０・・・）は個体番号、第３行の符号（ＣＥ−１，ＣＥ−２，ＣＥ−３・・・）は、その個体が属する群名とその何番目であるか（ラット個体名）を示す。表中の数字は、各ＯＴＵの存在比（％）を示す。図１は、表３を棒グラフ化したもので、横軸はラット個体名、縦軸は存在比（％）である。【０１３１】
表４には、ＣＥ群、ＷＳ群、ＣＭ群、ＤＥ群の各ラットにおける、ＯＴＵ９４０存在比（％）を示す。図２は、表４を棒グラフ化したもので、横軸は群名、縦軸は各群におけるＯＴＵ９４０の存在比（％）の平均値である。ＯＴＵ９４０は、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｕｂｃｌｕｓｔｅｒ ＸＩＶａが有する特異的なＤＮＡ断片である。前述したように、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｕｂｃｌｕｓｔｅｒ ＸＩＶａは、難治性疾患である炎症性腸疾患並びにアレルギーなどの免疫異常に対して、治療並びに予防効果を持つという研究成果が発表されている。表４及び図２から、ＷＳＣＡ（水溶性酢酸セルロース）を投与したＷＳ群においては、ＯＴＵ９４０存在比（％）が、ＣＥ群、ＣＭ群、ＤＥ群と比較して著しく高いことから、腸内でＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｕｂｃｌｕｓｔｅｒ ＸＩＶａが著しく増殖していることが推察される。このことから、前記アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロース（低置換度酢酸セルロース）の投与には、難治性疾患である炎症性腸疾患並びにアレルギーなどの免疫異常に対する治療並びに予防効果が強く期待できる。【０１３２】
一方、前述したように、ＯＴＵ９４０は、ヒトの消化活動において、メタンを低減し、水素を増やすことを示唆する論文が発表されている。前記アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロース（低置換度酢酸セルロース）を含む組成物をヒトや家畜に投与すると、腸内菌叢において、ＯＴＵ９４０が著しく増加することから、前記アセチル総置換度０．４〜１．１の酢酸セルロース（低置換度酢酸セルロース）の投与には、メタンガスが低減され温室効果ガス低減に資すことが期待されるとともに、水素ガスが増え、内臓の酸化ストレスを低減する効果が強く期待できる。【０１３３】
表５には、ＣＥ群、ＣＭ群、ＤＥ群、ＷＳ群の各ラットについて、前述した炎症性腸疾患並びに免疫異常に対して治療並びに予防効果を持つことが期待される細菌群［Ｎａｔｕｒｅ，  ５００，  ２３２−２３６  （２０１３）、２０１３年８月８日参照］が有する特異的なＤＮＡ断片であるＯＴＵ（すなわち、ＯＴＵ９４０、ＯＴＵ１０６、ＯＴＵ７５４、ＯＴＵ９５５、ＯＴＵ９９０、ＯＴＵ４９４、ＯＴＵ５０５、ＯＴＵ５１７、ＯＴＵ３６９、ＯＴＵ７４９、ＯＴＵ６５０）の存在比（％）を解析した結果を示す。表５の第２行の数字（５，７，１０・・・）は個体番号、第３行の符号（ＣＥ−１，ＣＥ−２，ＣＥ−３・・・）は、その個体が属する群名とその何番目であるか（ラット個体名）を示す。表中の数字は、各ＯＴＵの存在比（％）を示す。図３は、表５を棒グラフ化したもので、横軸は群名、縦軸は各群における前記特定のＯＴＵの全存在比（％）の平均値である。表５及び図３から、ＷＳＣＡ（水溶性酢酸セルロース）を投与したＷＳ群においては、上記特定のＯＴＵの存在比（％）が、ＣＭ群、ＤＥ群と比較して高いことから、腸内で上記特定の細菌が著しく増殖していることが推察される。このことからも、ＷＳＣＡ（水溶性酢酸セルロース）の投与には、難治性疾患である炎症性腸疾患並びにアレルギーなどの免疫異常に対する治療並びに予防効果が強く期待できる。【０１３４】
表６には、ＣＥ群、ＣＭ群、ＤＥ群、ＷＳ群の各ラットについて、発がん性二次胆汁酸を与える細菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｌｕｓｔｅｒ ＸＩ）［Ｎａｔｕｒｅ，４９９，９７−１０１（２０１３）、２０１３年７月４日参照］が有する特異的なＤＮＡ断片であるＯＴＵ（ＯＴＵ９１９及びＯＴＵ３３８）の存在比（％）を解析した結果を示す。表６の第２行の数字（５，７，１０・・・）は個体番号、第３行の符号（ＣＥ−１，ＣＥ−２，ＣＥ−３・・・）は、その個体が属する群名とその何番目であるか（ラット個体名）を示す。表中の数字は、各ＯＴＵの存在比（％）を示す。図４は、表６を棒グラフ化したもので、横軸は群名、縦軸は各群における前記特定のＯＴＵの全存在比（％）の平均値である。表６及び図４から、ＷＳＣＡ（水溶性酢酸セルロース）を投与したＷＳ群においては、上記特定のＯＴＵの存在比（％）が、ＣＥ群、ＣＭ群、ＤＥ群と比較して著しく低いことから、腸内で上記特定の細菌が著しく減少していることが推察される。このことから、ＷＳＣＡ（水溶性酢酸セルロース）の投与には、肝癌の発症の抑制効果が期待できる。【０１３５】
【表３】
0006453851.tif 000009
【０１３６】
【表４】
0006453851.tif 000010
【０１３７】
【表５】
0006453851.tif 000011
【０１３８】
【表６】
0006453851.tif 000012
【０１３９】
実施例３
製造例１で得られた水溶性酢酸セルロースを用い、表７に記載の組成となるように各成分を混合して、飼料を調製した。【０１４０】
実施例４
製造例１で得られた水溶性酢酸セルロースを用い、表７に記載の組成となるように各成分を混合して、飼料を調製した。【０１４１】
実施例５
製造例１で得られた水溶性酢酸セルロースを用い、表７に記載の組成となるように各成分を混合して、飼料を調製した。【０１４２】
比較例２
表７に記載の組成となるように各成分を混合して、飼料を調製した。【０１４３】
参考例６
フラクトオリゴ糖（メイオリゴＰ，明治社製）を用い、表７に記載の組成となるように各成分を混合して、飼料を調製した。【０１４４】
【表７】
0006453851.tif 000013
【０１４５】
評価試験３（盲腸内容物の短鎖脂肪酸量および細菌叢解析）
動物実験には、７週齢（体重１５０〜１７０ｇ）のウィスター系雄性ラット（日本エスエルシー株式会社、春野支所）３０匹を用い、室温２４±１℃、相対湿度５５±５℃で１２時間の明暗周期（７：００〜１９：００点灯）の条件下、ステンレス製ゲージ内で個別に飼育した。ラットは搬入後、比較例２の飼料を水道水とともに３日間与え順化させた後、体重を基準に５群に分け、比較例２（「Ｃｏｎｔ群」と称する場合がある）、参考例６（「４％ＦＯＳ群」と称する場合がある）、実施例３（「１％ＷＳＣＡ群」と称する場合がある）、実施例４（「２％ＷＳＣＡ群」と称する場合がある）、実施例５（「４％ＷＳＣＡ群」と称する場合がある）で調製した各実験飼料を水道水とともに２１日間自由摂取させた。１群当たりのラット数は全て６匹で構成されている。最終日には糞便１日分の全回収を行い、測定に供した。
飼育期間中を通じて、体重と飼料摂取量を測定した。
飼育終了後、各群６匹ずつ非絶食下で１０：３０に解剖した。解剖はペントバルビタール麻酔下で行い、腹部大動脈から採血した後、盲腸の摘出および結腸内容物の回収を行った。摘出した盲腸は重量測定後、切り開き、内容物の回収を行った。回収した内容物はｐＨ（堀場コンパクトｐＨメーター）、および短鎖脂肪酸の測定に供した。
表８に、各群の飼料摂取量及び体重増加量（ｇ／２１日）、盲腸の組織重量及び内容物量（ｇ）、盲腸、結腸、及び糞便のｐＨを示す。【０１４６】
【表８】
0006453851.tif 000014
【０１４７】
２％ＷＳＣＡ群、４％ＷＳＣＡ群において飼料摂取量の減少、体重増加量の抑制傾向が見られた。これは、後述するように腸管内で増加した短鎖脂肪酸量により食欲が抑制されたことに起因するものと推察される。また、１％ＷＳＣＡ群、２％ＷＳＣＡ群、４％ＷＳＣＡ群及び４％ＦＯＳ群において、盲腸の組織重量及び内容物量の増加、盲腸、結腸、及び糞便のｐＨの低下が観察されたが、これは、後述するように腸管内の短鎖脂肪酸量の増加に起因するものと推察される。【０１４８】
＜盲腸内容物の短鎖脂肪酸量の測定＞
盲腸内容物（約１５０ｍｇ）に対して総重量が０．５ｇになるように蒸留水を加え、ｖｏｒｔｅｘで撹拌した。内部標準としてクロトン酸の５ｍＭ  ＮａＯＨ溶液（０．１５ｍｇ／ｍＬ）０．５ｍＬを加えた後、氷中で冷やしながら、ポリトロンホモジナイザーを用いてホモジネート（Ｌｅｖｅｌ３０，３０秒）した後に、遠心分離（１５，０００×ｇ，４℃，１５分間）した。上清０．５ｍＬを新しいエッペンチューブに移し、等量のクロロホルムを加え、ｖｏｒｔｅｘで１分間撹拌し、さらに遠心分離（１５，０００×ｇ，４℃，１５分間）した。水層１ｍＬをシリンジで回収し、シリンジフィルター（Ｄｉｓｍｉｃ−１３ＨＰ）及び注射針（２３−２５Ｇ）を取り付け、バイアルの底部に空気が入らないように気を付けながら、オートサンプラー用バイアルに移した。バイアルをＨＰＬＣのオートサンプラーにセットし、酢酸、プロピオン酸、酪酸の各短鎖脂肪酸の量を測定した。Ｃｏｎｔ群の測定値を１としたときの各短鎖脂肪酸の濃度の相対値を棒グラフで表した結果を図５〜７に示す。【０１４９】
図５〜７より、水溶性酢酸セルロース及びフラクトオリゴ糖の投与により、盲腸内の短鎖脂肪酸、特に酢酸、プロピオン酸が顕著かつ用量依存的に増加することが分かった。
酢酸は、腸管から吸収された後、血管で輸送され、脂肪細胞や筋肉に作用して脂肪の蓄積を抑制、燃焼を促進し、肥満を抑制することが報告されている（Ｋｉｍｕｒａら、ＮＡＴＵＲＥ  ＣＯＭＭＵＮＩＣＡＴＩＯＮＳ，４：１８２９、２０１３年）。また、酢酸は血液脳関門を通過し視床下部に作用、食欲が抑制されることが報告されている（Ｆｒｏｓｔら、ＮＡＴＵＲＥ  ＣＯＭＭＵＮＩＣＡＴＩＯＮＳ，５：３６１１、２０１４年）。
従って、低置換度の水溶性酢酸セルロースの摂取乃至投与により、肥満症に対して治療並びに予防効果を持つことが期待される。【０１５０】
＜血漿コレステロールの測定＞
短鎖脂肪酸、特にプロピオン酸が、脂肪酸やコレステロールの肝臓内での生合成を阻害し、コレステロールや中性脂肪の血中濃度を低下させることが報告されている（Ｎｉｓｈｉｎａら，Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，１２０，６６８，１９９０；Ｈａｒａら，Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，１２９，９４２，１９９９）。低置換度酢酸セルロースの投与により盲腸内で増加したプロピオン酸のコレステロールの肝臓内での生合成に対する影響を検証するため、血漿コレステロール値を測定した。具体的は、前記で採血したラット血液から常法に従い血漿を分離して、コレステロールＣ−テストワコー（ＷＡＫＯ純薬社）により、各群の血漿コレステロールを測定した。結果を下記表９に、各群の各個体の盲腸内容物のプロピオン酸濃度（μｍｏｌ／ｇ）を横軸に、血漿コレステロール濃度（ｍｇ／ｄｌ）を縦軸にプロットしたグラフを図８示す。【０１５１】
【表９】
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【０１５２】
血漿コレステロール濃度は、低置換度酢酸セルロースの投与により用量依存的に低下し、４％ＷＳＣＡ群では、フラクトオリゴ糖投与群より強いコレステロール低下作用を示した。また、盲腸内容物のプロピオン酸の濃度に応じて血漿コレステロール濃度が低下する傾向が観られ（相関係数：Ｒ2＝０．４６１７）、血漿コレステロール濃度の低下は、プロピオン酸による生合成の阻害によるものであることが示唆された。【０１５３】
＜盲腸内容物の細菌叢解析＞
Ｃｏｎｔ群、４％ＷＳＣＡ群及び４％ＦＯＳ群の盲腸内容物を１０倍量のＰＢＳにて希釈し、Ｔａｋａｈａｓｈｉらの方法（ＰＯＬＳ  ＯＮＥ，２０１４，９（８），ｅ１０５９９２に記載の方法）に従い、但し、細菌の検索をＲＤＰデータベースの代わりにアポロンデータベースで行って細菌叢を解析した。検出された細菌種の割合（％）を示した結果を表１０に示す。【０１５４】
【表１０】
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【０１５５】
表１０より、低置換度の水溶性酢酸セルロースの投与により、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｘｙｌａｎｉｓｏｌｖｅｎｓ及びＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｏｖａｔｕｓ及びＡｋｋｅｒｍａｎｓｉａ  ｍｕｃｉｎｉｐｈｉｌａが増加することが分かった。特に、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｘｙｌａｎｉｓｏｌｖｅｎｓ及びＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｏｖａｔｕｓは、下記表１１に示すように、Ｃｏｎｔ群の１５００倍、１２００倍と、腸内細菌叢を改善するとされるフラクトオリゴ糖投与群と比較しても顕著に増加した。【０１５６】
【表１１】
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【０１５７】
Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｘｙｌａｎｉｓｏｌｖｅｎｓ及びＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｏｖａｔｕｓは、がん治療の有望な標的とされるトムゼン・フリーデンライヒ抗原α（ＴＦα）を細胞表面に発現しており、がん治療薬として有用であるという報告がある（ＵＳ２０１４／０３０２０９３Ａ１、Ｈｅｎｄｅｒｓｏｎ，Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．２１，ｎｏ．１０，ｐ．１２７７，２０１１など）。
従って、低置換度の水溶性酢酸セルロースの摂取乃至投与により、腸内のＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｘｙｌａｎｉｓｏｌｖｅｎｓ及びＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｏｖａｔｕｓが顕著に増加することは、ＴＦαに対する免疫の獲得を通じて、ＴＦαを発現するがん、特に結腸癌、肝転移癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、前立腺癌、胃癌、膵癌などの消化器系癌に対して治療並びに予防効果を発揮することが期待される。【０１５８】
また、Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ  ｍｕｃｉｎｉｐｈｉｌａは、動物実験で肥満抑制作用、２型糖尿病抑制作用を示すことが報告されており（Ｅｖｅｒａｒｄ，Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，ｖｏｌ．１１０，ｎｏ．２２，ｐ．９０６６，２０１３；Ｌｕｋｏｖａｃら，ｍＢｉｏ，５（４）：ｅ０１４３８−１４．ｄｏｉ：１０．１１２８／ｍＢｉｏ．０１４３８−１４，２０１４；Ｅｖｅｒａｒｄら，Ｄｉａｂｅｔｅｓ，６０，ｐ．２７７５，２０１１）、肥満やその関連代謝疾患に対する治療、予防の有望な標的になり得ることが示唆されている。従って、低置換度の水溶性酢酸セルロースの摂取乃至投与することは、腸内のＡｋｋｅｒｍａｎｓｉａ  ｍｕｃｉｎｉｐｈｉｌａの構成比が増加することにより肥満症、２型糖尿病に治療並びに予防効果を持つことが期待される。【０１５９】
実施例６
オリエンタル酵母株式会社製「ＡＩＮ−９３Ｇ」の精製飼料（組成は表１参照）１００重量部に、製造例１で得られた水溶性酢酸セルロースを１重量部、セルロース（オリエンタル酵母工業株式会社製、商品名「セルロースパウダー」）を４重量部加えて混合し、飼料を調製した。【０１６０】
実施例７
オリエンタル酵母株式会社製「ＡＩＮ−９３Ｇ」の精製飼料（組成は表１参照）１００重量部に、製造例１で得られた水溶性酢酸セルロースを２重量部、セルロース（オリエンタル酵母工業株式会社製、商品名「セルロースパウダー」）を３重量部加えて混合し、飼料を調製した。【０１６１】
実施例８
オリエンタル酵母株式会社製「ＡＩＮ−９３Ｇ」の精製飼料（組成は表１参照）１００重量部に、製造例１で得られた水溶性酢酸セルロースを３重量部、セルロース（オリエンタル酵母工業株式会社製、商品名「セルロースパウダー」）を２重量部加えて混合し、飼料を調製した。【０１６２】
参考例７
オリエンタル酵母株式会社製「ＡＩＮ−９３Ｇ」の精製飼料（組成は表１参照）１００重量部に、セルロース（オリエンタル酵母工業株式会社製、商品名「セルロースパウダー」）を５重量部加えて混合し、飼料を調製した。【０１６３】
評価試験４（水溶性酢酸セルロース投与による体重及び血清生化学検査値に及ぼす影響）
４週齢のウィスター系雄性ラット（日本チャールスリバー株式会社販売）を、１週間、オリエンタル酵母株式会社製「ＡＩＮ−９３Ｇ」の精製飼料（組成は表１参照）で予備飼育した後に無作為に４群各６匹に分けて、それぞれ、参考例７（「ＣＥ群」と称する場合がある）、実施例６（「ＷＳ１％群」と称する場合がある）、実施例７（「ＷＳ２％群」と称する場合がある）、及び実施例８（「ＷＳ３％群」と称する場合がある）で調製した飼料により、さらに４週間本飼育した。飼育は、飼育温度２３±２℃、湿度５０±１０％、明暗サイクル１２時間で行い、飼料および水は自由摂取とした。【０１６４】
＜体重及び血清生化学検査値＞
飼育期間中は、体重、飼料摂取量を記録した。飼育終了後、一晩絶食したのち屠殺・解剖し、解剖時体重および屠体重を測定した。摂取した血清は、富士ドライケム（富士フィルム社製）を用いて、肝機能としてアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）、腎機能として尿素窒素（ＢＵＮ）、クレアチニン（ＣＲＥ）、脂質代謝として総コレステロール（ＴＣＨＯ）、ＨＤＬコレステロール（ＨＤＬＣ）、トリグリセリド（ＴＧ）、栄養状態としてアルブミン（ＡＬＢ）、総タンパク質（ＴＰ）、並びに血糖値（ＧＬＵ）の各血清生化学検査値を解析した。
図９に体重（ｇ）の推移を示すグラフ、図１０に飼料摂取量（ｇ／日）を示すグラフ、図１１に肝機能としてＡＳＴ（Ｕ／ｌ）、ＡＬＴ（Ｕ／ｌ）、図１２に腎機能としてＢＵＮ（ｍｇ／ｄｌ）、ＣＲＥ（ｍｇ／ｄｌ）、図１３に脂質代謝としてＴＣＨＯ（ｍｇ／ｄｌ）、ＨＤＬＣ（ｍｇ／ｄｌ）、ＴＧ（ｍｇ／ｄｌ）、図１４に栄養状態としてＡＬＢ（ｇ／ｄｌ）、ＴＰ（ｇ／ｄｌ）、図１５にＧＬＵ（ｍｇ／ｄｌ）をそれぞれ示す。【０１６５】
ＷＳ３％群では、体重増加量及び飼料摂取量の減少傾向が観られた。これは、上述するように水溶性酢酸セルロースの摂取により腸管内の短鎖脂肪酸、特に酢酸量が増加して、体重増加及び食欲が低下したためと考えられる。また、ＷＳ１％群、ＷＳ２％群程度の水溶性酢酸セルロースの摂取量であれば、肝機能、腎機能に大きな影響はないものと考えられた。
脂質代謝関連や血糖値では、水溶性酢酸セルロースの投与量の増加で低値を示す傾向にあった。従って、低置換度の水溶性酢酸セルロースは、脂質代謝改善剤、糖尿病の予防及び／又は治療薬としての有用性が示唆された。【０１６６】
実施例９
製造例１で得られた水溶性酢酸セルロースを用い、表１２に記載の組成となるように各成分を混合して、粉末状の高脂肪飼料を調製した。【０１６７】
参考例８
日本クレア株式会社「Ｈｉｇｈ  Ｆａｔ  Ｄｉｅｔ  ３２」（組成は表１２参照）を参考例８の高脂肪飼料とした。【０１６８】
【表１２】
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【０１６９】
評価試験５（非アルコール性脂肪性肝炎の治療効果）
ヒト非アルコール性脂肪性肝炎（Ｎｏｎ−ａｌｃｏｈｏｌｉｃ  ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ、以下、ＮＡＳＨと称する場合がある）と極めて類似した発症機序、病態、病態進展を示すＳＴＡＭマウスを用い、水溶性酢酸セルロースのＮＡＳＨの発症抑制・治療効果を検討した。
ＳＴＡＭマウスの作成は、株式会社ステリック再生医科学研究所の方法に従って作成した。具体的には、雌性妊娠Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス（経産）（日本チャールスリバー株式会社販売）をマウス飼育用ケージあたり１匹ずつ、ＡＩＮ−９３Ｇ標準飼料（組成は表１参照）を与え飼育した。出産後３週目まで親子同居飼育を行い、離乳期の４週齢から１ケージ２匹ずつの飼育を行った。後述のＳＨＦ群、ＳＨＦＷ群に相当する仔マウスには、出生２日後にストレプトゾトシン（ＳＴＺ）で処置した。
仔マウス（雄性）は、離乳期に入る４週齢より、下記表１３に示される群構成でＡＩＮ−９３Ｇ標準飼料又は参考例８の高脂肪飼料を与えて１週間飼育し、５週齢目に表１３に示される４群各７匹に群分けを行い、各群に表１３に示される各飼料を与え、さらに飼育を行った。【０１７０】
【表１３】
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【０１７１】
飼育環境は、温度及び湿度は通常飼育環境（飼育温度２３±２℃、湿度５０±１０％）とし、午前７時から午後７時までを明期とする明暗サイクルとし、各飼料および水（水道水）は自由摂取とした。
飼育期間中は、体重を記録し、８週齢目まで表１３に示される飼料で飼育を行った。飼育終了後、一晩絶食し、ネンブタノール麻酔下に開腹した後、後大動脈より、予めＥＤＴＡ１０μＬを入れたシリンジを用いて採血を行った。血漿分取後に濃度調整を行うために、採血量を記録した。その後、脱血し、速やかに肝臓を摘出し重量を測定した。その他、脾臓、脂肪組織、盲腸を取り出し、重量を測定した。盲腸は、予め重量を測定しておいた２ｍＬ容のチューブに盲腸内容物のみを採取し、盲腸内容物重量を求めた。
血漿生化学検査値として、富士ドライケム（富士フィルム社）を用いて、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）、総コレステロール（ＴＣＨＯ）、血糖値（ＧＬＵ）、総タンパク質（ＴＰ）、並びにアルブミン（ＡＬＢ）を測定した。【０１７２】
図１６に体重増加量の推移を示すグラフ、図１７に解剖時体重に対する屠体重及び各臓器の比率（％）を示すグラフ、表１４に各血漿生化学検査値、図１８に血漿生化学検査値をグラフ化したものを示す。【０１７３】
【表１４】
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【０１７４】
図１６より、ＳＴＡＭマウスであるＳＨＦ群、ＳＨＦＷ群は、出生２日後にＳＴＺ処置を施しているため、耐糖能異常を起こしており、離乳時の体重はＮＡ群、ＮＨＦ群と比較してそれぞれ有意に低下した。最終日の体重は、すべての群間で有意差がみられた。
図１７より、ＳＨＦ群及びＳＨＦＷ群間では、屠体重、脂肪組織、脾臓の重量比に差は認められなかったが、ＳＨＦＷ群はＳＨＦ群と比較して肝臓重量比が有意に減少し、盲腸重量比も有意に増加しており、これは水溶性酢酸セルロース投与による影響が示唆された。
また、ＮＨＦ群と比較して、ＳＨＦ群では肝臓割合が有意に増加したことから、ＳＴＡＭマウスは肝臓が肥大することが認められた。一方、ＳＨＦＷ群ではＳＨＦ群に比べて、肝臓割合が有意に減少していることから、水溶性酢酸セルロースの投与により、肝臓肥大が抑制され、またこのことからＳＴＡＭマウスの脂肪肝又はＮＡＳＨが改善、或いは脂肪肝又はＮＡＳＨの発症が抑制される可能性が示唆された。
表１４及び図１８より、ＳＨＦＷ群は、ＳＨＦ群と比較してＡＳＴ、ＡＬＴが低値を示し、またＮＡ群、ＮＨＦ群とは有意差がなかった。従って、水溶性酢酸セルロースの投与は肝機能の改善効果を有することが示唆された。
加えて、ＳＨＦ群のＴＣＨＯ、ＧＬＵはＮｏｒｎａｌ群（ＮＡ群及びＮＨＦ群）に比べ、有意な高値を示したが、ＳＨＦＷ群はＳＨＦ群と比較して有意な低値を示し、Ｎｏｒｎａｌ群（ＮＡ群及びＮＨＦ群）により近似した。この結果より、水溶性酢酸セルロースの投与はＳＴＡＭマウスのコレステロール代謝異常および耐糖能異常を改善する可能性が示唆された。
各群の栄養状態に関して、ＡＬＢ、ＴＰは、Ｎｏｒｍａｌ群（ＮＡ群及びＮＨＦ群）とＳＴＡＭ群（ＳＨＦ群及びＳＨＦＷ群）の間に有意差がみられた。また、体重変化とも考え併せると、ＳＴＡＭマウスは低栄養状態にあると判断される。ただし、ＳＴＡＭ群（ＳＨＦ群及びＳＨＦＷ群）間の比較では有意な差がないため、水溶性酢酸セルロースが栄養状態に及ぼす影響は少ないと考えられた。
【産業上の利用可能性】
【０１７５】
本発明の栄養組成物及び家畜飼料は、中性脂肪の低減効果に優れる。また、ＣＭＣ等の他の水溶性セルロース誘導体と比べて、腸に優しく下痢を起こしにくい等、安全性の点で優れている。また、本発明の脂質代謝改善剤及び家畜用の脂質代謝改善剤は、脂質代謝改善作用に優れる。さらに、本発明の炎症性腸疾患及び／又は免疫異常の予防及び／又は治療剤は、炎症性腸疾患や免疫異常に対して優れた予防及び／又は治療効果が期待できる。また、本発明のがんの予防及び／又は治療剤は、がんの予防効果、治療効果に優れる。さらに、本発明の肥満、糖尿病の予防及び／又は治療剤は、肥満、糖尿病の予防効果、治療効果に優れる。さらにまた、本発明の非アルコール性脂肪性肝炎の予防及び／又は治療剤は、非アルコール性脂肪性肝炎の予防効果、治療効果に優れる。さらにまた、本発明の高コレステロール血症の予防及び／又は治療剤は、高コレステロール血症の予防効果、治療効果に優れる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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