(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）
Ｖ＊−［Ｕｘ＋３−Ｕｘ＋２−Ｕｘ＋１−Ｕｘ］ｎ−Ｖ−Ｏ−Ｌ−ＮＨ２
（Ｉ）
式中、
Ｘは、１、２、３、および４から選択される整数であり、
ｎは、１、２、および３から選択される整数であり、
Ｕ１＝Ｕ５＝
【化１】
0006622804.tif 000119
Ｕ２＝Ｕ６＝
【化２】
0006622804.tif 000120
Ｕ３＝Ｕ７＝
【化３】
0006622804.tif 000121
Ｕ４＝
【化４】
0006622804.tif 000122
−Ｖ−は、結合、−ＵＸ＋３−、−ＵＸ＋３−ＵＸ＋２−、または−ＵＸ＋３−ＵＸ＋２−ＵＸ＋１−を表し、
Ｖ＊−は、Ｈ−、Ｈ−ＵＸ−、Ｈ−ＵＸ＋１−ＵＸ−、またはＨ−ＵＸ＋２−ＵＸ＋１−ＵＸ−を表し、
−Ｌ−は、−Ｌａ−、−Ｌａ−Ｌｅ−、−Ｌａ−Ｌｂ−Ｌｅ−、および−Ｌａ−Ｌｄ−Ｌｅ−から選択され、
ここで、
−Ｌａ−は、−（ＣＨ２）ｏ−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−Ｃ２Ｈ４−、および−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−ＣＨ２−から選択され、
−Ｌｂ−は、−Ｏ−を表し、
−Ｌｄ−は、−（ＣＨ２）ｑ−、−（ＣＦ２）ｑ−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｑ−Ｃ２Ｈ４−、および−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｑ−ＣＨ２−から選択され、
−Ｌｅ−は、−（ＣＨ２）ｐ１−、−（ＣＦ２）ｐ１−、−Ｃ２Ｈ４−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｐ１−、−ＣＨ２−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｐ１−、および−（ＣＨ２）ｐ１−Ｏ−（ＣＨ２）ｐ２−から選択され、
並びに、ｏ、ｑ、ｐ１、およびｐ２は、互いに独立して、１、２、３、４、５、および６から選択される整数である、
サッカライド、または一般式（Ｉ）の薬学的に許容できる塩。
【請求項２】
一般式（ＩＩ）
Ｖ＊−［Ｕｘ＋３−Ｕｘ＋２−Ｕｘ＋１−Ｕｘ］ｎ−Ｏ−Ｌ−ＮＨ２      （ＩＩ）
式中、ｘ、ｎ、Ｌ、Ｕｘ、ＵＸ＋１、ＵＸ＋２、ＵＸ＋３、およびＶ＊は、請求項１に定義される意味を有する、
請求項１に記載のサッカライド。
【請求項３】
一般式（ＩＩＩ）
Ｖ＊−［Ｕｘ＋３−Ｕｘ＋２−Ｕｘ＋１−Ｕｘ］ｎ−Ｕｘ＋３−Ｏ−Ｌ−ＮＨ２      （ＩＩＩ）
式中、ｘ、ｎ、Ｌ、Ｕｘ、ＵＸ＋１、ＵＸ＋２、ＵＸ＋３、およびＶ＊は、請求項１に定義される意味を有する、
請求項１に記載のサッカライド。
【請求項４】
一般式（ＩＶ）
Ｖ＊−［Ｕｘ＋３−Ｕｘ＋２−Ｕｘ＋１−Ｕｘ］ｎ−Ｕｘ＋３−Ｕｘ＋２−Ｏ−Ｌ−ＮＨ２      （ＩＶ）
式中、ｘ、ｎ、Ｌ、Ｕｘ、ＵＸ＋１、ＵＸ＋２、ＵＸ＋３、およびＶ＊は、請求項１に定義される意味を有する、
請求項１に記載のサッカライド。
【請求項５】
一般式（Ｖ）
Ｖ＊−［Ｕｘ＋３−Ｕｘ＋２−Ｕｘ＋１−Ｕｘ］ｎ−Ｕｘ＋３−Ｕｘ＋２−Ｕｘ＋１−Ｏ−Ｌ−ＮＨ２      （Ｖ）
式中、ｘ、ｎ、Ｌ、Ｕｘ、ＵＸ＋１、ＵＸ＋２、ＵＸ＋３、およびＶ＊は、請求項１に定義される意味を有する、
請求項１に記載のサッカライド。
【請求項６】
ｘは、１を表し、およびＶ＊−は、Ｈ−を表す、請求項１〜請求項５のいずれか一項に記載のサッカライド。
【請求項７】
ヒトおよび／または動物宿主において保護免疫応答を上昇させるのに使用するための請求項１〜請求項６のいずれか一項に記載のサッカライド。
【請求項８】
細菌の莢膜ポリサッカライドにおいて、次のサッカライド断片：
−３）−β−Ｄ−ＭａｎＮＡｃ−（１，３）−α−Ｌ−ＦｕｃＮＡｃ−（１，３）−α−Ｄ−ＧａｌＮＡｃ−（１，４）−α−Ｄ−Ｇａｌ−２，３（Ｓ）Ｐｙｒ−（１−；
−４）−α−Ｄ−Ｇａｌ−２，３（Ｓ）Ｐｙｒ−（１，３）−β−Ｄ−ＭａｎＮＡｃ−（１，３）−α−Ｌ―ＦｕｃＮＡｃ−（１，３）−α−Ｄ−ＧａｌＮＡｃ−（１−；
−３）−α−Ｄ−ＧａｌＮＡｃ−（１，４）−α−Ｄ−Ｇａｌ−２，３（Ｓ）Ｐｙｒ−（１，３）−β−Ｄ−ＭａｎＮＡｃ−（１，３）−α−Ｌ−ＦｕｃＮＡｃ−（１−；
−３）−α−Ｌ−ＦｕｃＮＡｃ−（１，３）−α−Ｄ−ＧａｌＮＡｃ−（１，４）−α−Ｄ−Ｇａｌ−２，３（Ｓ）Ｐｙｒ−（１，３）−β−Ｄ−ＭａｎＮＡｃ−（１−
の一つを含む、前記細菌と関連する病気の予防および／または治療において使用するための請求項１〜請求項６のいずれか一項に記載のサッカライド。
【請求項９】
前記細菌は、ストレプトコッカス  ニューモニアエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）血清型４である、請求項８に記載の使用のためのサッカライド。
【請求項１０】
前記細菌と関連する病気は、肺炎、髄膜炎、中耳炎、菌血症、並びに慢性気管支炎、副鼻腔炎、関節炎、および結膜炎の急性悪化を含む、請求項８又は９に記載の使用のためのサッカライド。
【請求項１１】
−Ｏ−Ｌ−ＮＨ２基の窒素原子を介して免疫原性担体に共有結合される請求項１〜請求項１０のいずれか一項に記載のサッカライドを含む複合体。
【請求項１２】
少なくとも一つの薬学的に許容できるアジュバントおよび／または賦形剤と共に請求項１１に記載の複合体、および／または請求項１〜請求項１０のいずれか一項に記載のサッカライドを含む医薬組成物。
【請求項１３】
ヒトおよび／または動物宿主において保護免疫応答を上昇させるのに使用するための請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
細菌の莢膜ポリサッカライドにおいて、次のサッカライド断片：
−３）−β−Ｄ−ＭａｎＮＡｃ−（１，３）−α−Ｌ−ＦｕｃＮＡｃ−（１，３）−α−Ｄ−ＧａｌＮＡｃ−（１，４）−α−Ｄ−Ｇａｌ−２，３（Ｓ）Ｐｙｒ−（１−；
−４）−α−Ｄ−Ｇａｌ−２，３（Ｓ）Ｐｙｒ−（１，３）−β−Ｄ−ＭａｎＮＡｃ−（１，３）−α−Ｌ―ＦｕｃＮＡｃ−（１，３）−α−Ｄ−ＧａｌＮＡｃ−（１−；
−３）−α−Ｄ−ＧａｌＮＡｃ−（１，４）−α−Ｄ−Ｇａｌ−２，３（Ｓ）Ｐｙｒ−（１，３）−β−Ｄ−ＭａｎＮＡｃ−（１，３）−α−Ｌ−ＦｕｃＮＡｃ−（１−；
−３）−α−Ｌ−ＦｕｃＮＡｃ−（１，３）−α−Ｄ−ＧａｌＮＡｃ−（１，４）−α−Ｄ−Ｇａｌ−２，３（Ｓ）Ｐｙｒ−（１，３）−β−Ｄ−ＭａｎＮＡｃ−（１−
の一つを含む、前記細菌に対する抗体の検出のための免疫学的アッセイのマーカーとして使用するための請求項１〜請求項６のいずれか一項に記載のサッカライド。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
［発明の分野］
本発明は、ストレプトコッカス  ニューモニアエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）血清型４莢膜ポリサッカライドに関連する一般式（Ｉ）の合成サッカライド、およびその複合体に関する。前記複合体および前記複合体を含む医薬組成物は、ストレプトコッカス  ニューモニアエと関連する病気、より明確に、ストレプトコッカス
ニューモニアエ血清型４と関連する病気の予防および／または治療のための有用である。さらに、一般式（Ｉ）の合成サッカライドは、ストレプトコッカス  ニューモニアエ細菌に対する抗体の検出のための免疫学的アッセイのマーカーとして有用である。
［発明の背景］
ストレプトコッカス  ニューモニエアは、グラム陽性であり、気道の感染症の主な原因となる被包性細菌であり、重大な侵襲性肺炎球菌疾患（ＩＰＤ）を引き起こすことができる。９０個を超える異なる肺炎球菌血清型が、データに記述されている。これらは、莢膜ポリサッカライド（ＣＰＳ）の構造によって分類され、莢膜ポリサッカライド（ＣＰＳ）の構造は各血清型に特有である。結果として、ＣＰＳに対して生成された免疫応答は、異なる血清型間で異なる。ＣＰＳに対して生成された免疫応答は、各血清型の抗原に対するウサギの特異的抗体を生成するために使用される。異なる血清型におけるＣＰＳの構造的類似のために、これらの特異的抗体およびこれらの血清型よりも他の血清型の間での交差反応性の上昇がよく観察される。当該免疫学的性質により、ＣＰＳは、Ｓ．ニューモニアエワクチンの主な構成要素として使用される。
【０００２】
４つの異なる血清型のＣＰＳを含む最初の効果的なワクチンは、１９４５年に記述された。その後、１４血清型をカバーし簡単に２３価ワクチンとなるワクチンが導入されるまで３０年以上かかった。しかしながら、これらのポリサッカライドワクチンは、いくつかの欠点を有した。ポリサッカライドワクチンは、長期的な保護を引き起こすことができず、感染に対して最も弱い集団、すなわち２歳より下の子供、並びに免疫不全および高齢の患者に対して効果的でなかった。これらの欠点は、炭水化物の免疫の結果であり、炭水化物−タンパク質複合体ワクチンの導入によって克服された。最初の肺炎球菌複合体ワクチンは、７価（ＰＣＶ−７）ワクチン、および１０価（ＰＣＶ−１０）ワクチンであった。ＰＣＶ−７は、後に最も新しいワクチン（ＰＣＶ−１３）と置き換えられ、ＰＣＶ−１３は、１３個の異なる血清型のＣＰＳ−糖複合体を含む。
【０００３】
ストレプトコッカス  ニューモニアエ血清型４  ＣＰＳは、全ての肺炎球菌複合体ワクチンに含まれる。ＳＰ４  ＣＰＳは、ガラクトース部分において酸不安定なトランス−２，３−（Ｓ）−ピルベートを含む配列β−（１，３）−ＭａｎＮＡｃ−α−（１，３）−ＦｕｃＮＡｃ−α−（１，３）−ＧａｌＮＡｃ−α−（１,４）−Ｇａｌを有するテトラサッカライド繰り返しユニットからなる（図１参照）。トランス−ピルベートケタールは、加水分解に対して不安定であるので、ワクチン接種のために意図される細菌源からの単離されるサッカライドに微不均一性を誘発している。したがって、ピルベート部分の不安定な性質は、Ｓ．ニューモニアエ４型細菌源から単離されるサッカライドの構造において非常に大きな意味を有しているので、前記サッカライドを含む複合体の生産および安定性に影響を与える。構造不均一性は、明確に定義されたサブユニットワクチンの方向に進んでいるワクチン開発の動向を考慮する場合に有害である。
【０００４】
本発明の目的は、ストレプトコッカス  ニューモニアエ血清型４莢膜ポリサッカライドに関連する一般式（Ｉ）のよく定義された合成サッカライドを提供することである。前記
サッカライドは、複合体、および前記サッカライドの医薬組成物を提供するために免疫原性担体に接合されるのに適しており、そのことは、ストレプトコッカス  ニューモニアエと関連する病気、より明確に、ストレプトコッカス  ニューモニアエ血清型４と関連する病気の予防および／または治療のための有用である。さらに、一般式（Ｉ）の合成サッカライドは、ストレプトコッカス  ニューモニアエ細菌に対する抗体の検出のための免疫学的アッセイのマーカーとして有用である。
【０００５】
本発明の目的は、独立請求項の教示によって解決される。本発明のさらに有利な特徴、態様および詳細は、本出願における独立請求項、明細書、図面および実施例から明らかである。
【０００６】
［発明の説明］
定義
本願に使用される用語「リンカー」は、任意に少なくとも一つの相互接続分子によって、サッカライドの還元末端モノサッカライドを免疫原性担体または固体支持体と接続することが可能である分子断片を含む。したがって、リンカー自体の、または相互接続分子を伴うリンカーの機能は、還元末端モノサッカライドと、免疫原性担体または固体支持体との間の特別な距離を確立、維持、および／または架橋することである。より具体的には、リンカーの一方の末端は、還元末端モノサッカライドのアノマー中心で、環外酸素原子に接続され、他方の末端は、相互接続分子を有する窒素原子を介して、または免疫原性担体と、もしくは固体支持体と直接的に接続される。
【０００７】
本願に使用される用語「相互接続分子」は、官能基Ｘおよび官能基Ｙを含む二官能性分子に関し、ここで官能基Ｘは、リンカーＬの末端アミノ基と反応することが可能であり、官能基Ｙは、免疫原性担体または固体支持体に機能的に存在する官能基と反応することが可能である。図２は、市販の相互接続分子の例を示すが、本発明にしたがって使用されることができる相互接続分子を、本願に示される例に制限しない。
【０００８】
本願に使用される用語「アジュバント」は、免疫学的アジュバント、すなわち、アジュバントに関連する抗原性は有さずワクチンに含まれる与えられた抗原に対する免疫応答を高めることによって前記ワクチンの効果を修正し、または増大させるワクチン組成において使用される物質に関する。当業者にとって、アジュバントの古典的に認識される例は、次を含む：
−カルシウム塩、およびアルミニウム塩（またはそれらの混合物）を含む、鉱物−含有組成物。カルシウム塩は、リン酸カルシウムを含む。アルミニウム塩は、任意の適切な型（ゲル、結晶、アモルファス、など）を取る塩を伴う水酸化物、リン酸塩、硫酸塩、等を含む。これらの塩への吸着は好まれる。鉱物含有組成物は、金属塩の粒子として製剤化されてもよい。水酸化アルミニウム、およびリン酸アルミニウムのような公知のアジュバントを使用してもよい。本発明は、一般的にアジュバントとして使用されるいくつかの「水酸化」または「リン酸」アジュバントを使用することができる。「水酸化アルミニウム」のような公知のアジュバントは、典型的にオキシ水酸化アルミニウム塩であり、通常、少なくとも部分的に結晶体である。「リン酸アルミニウム」のような公知のアジュバントは、典型的にヒドロキシリン酸アルミニウムであり、しばしば、少量の硫酸塩（すなわち、ヒドロキシリン酸硫酸アルミニウム）も含む。それらは、沈殿によって得られてもよく、沈殿中の反応条件および濃度は、塩におけるヒドロキシルのリン酸置換の程度に影響を与える。水酸化アルミニウムおよびリン酸アルミニウムの両方の混合を、本発明に係る製剤化において使用することができる。
【０００９】
−サポニン、サポニンは、ステロールグリコシド、およびトリテルペノイドグリコシドの異種グループであり、広範囲の植物種の樹皮、葉、茎、根、さらに花においてさえも発
見される。キラヤ（Ｑｕｉｌｌａｉａ）  サポナリア（ｓａｐｏｎａｒｉａ）、モリナ（Ｍｏｌｉｎａ）の木の樹皮に由来のサポニンは、アジュバントとして広く研究されている。サポニンを、スミラックス  オルナタ（Ｓｍｉｌａｘ  ｏｒｎａｔａ）（サルサプリラ（ｓａｒｓａｐｒｉｌｌａ））、シュッコンカスミソウ（ブライデス  ベール（ｂｒｉｄｅｓ  ｖｅｉｌ））、およびサボンソウ（ソープルート）から商業的に得ることもできる。サポニンアジュバント製剤は、ＱＳ２１のような精製製剤、およびＩＳＣＯＭのような脂質製剤を含む。サポニン組成物は、ＨＰＬＣおよびＲＰ−ＨＰＬＣを使用して精製されている。これらの技術を用いて精製された特定の画分が同定されており、ＱＳ７、ＱＳ１７、ＱＳ１８、ＱＳ２１、ＱＨ−Ａ、ＱＨ−ＢおよびＱＨ−Ｃを含む。サポニン製剤は、コレステロールのようなステロールも含んでもよい。サポニンとコレステロールとの組み合わせを、免疫刺激複合体（ＩＳＣＯＭ）と呼ばれる独特な粒子を形成するために使用することができる。ＩＳＣＯＭは、一般的に、ホスファチジルエタノールアミンまたはホスファチジルコリンのようなリン脂質を含む。任意の公知のサポニンを、ＩＳＣＯＭにおいて使用することができる。好ましくは、ＩＳＣＯＭは、ＱｕｉｌＡ、ＱＨＡおよびＱＨＣの１つ以上を含む。
【００１０】
−微粒子（すなわち、直径１００ｎｍ〜１５０ｐｍの粒子、より好ましくは直径２００ｎｍ〜３０ｐｍの粒子、または直径５００ｎｍ〜１０ｐｍの粒子）は、生体分解性および非毒性である物質から形成された。当該非毒性および生体分解性物質は、ポリ（α−ヒドロキシ酸）、ポリヒドロキシブチル酸、ポリオルトエステル、ポリ無水物、ポリカプロラクトンを含むが制限されない。
【００１１】
−例えば、α−グルコシルセラミド、フィトスフィンゴシン含有α−グリコシルセラミド、ＯＣＨ、ＫＲＮ７０００  ［（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトピラノシル）−２−（Ｎ−ヘキサコサノイルアミノ）−１，３，４−オクタデカントリオール］、ＣＲＯＮＹ−１０１、３’’−スルホ−ガラクトシル−セラミドなど、のようなＣＤ１ｄリガンド、
−例えば、ＣｐＧを含むジヌクレオチド配列（グアノシン残基へのリン酸結合により連結される非メチル化シトシン残基を含むジヌクレオチド配列）、またはＣｐＩモチーフを含むジヌクレオチド配列（イノシンへ連結されるシトシンを含むジヌクレオチド配列）、または二本鎖ＲＮＡ、またはパリンドローム配列を含むオリゴヌクレオチド、またはポリ（ｄＧ）を含むオリゴヌクレオチドなどのような免疫刺激性オリゴヌクレオチド。免疫刺激性オリゴヌクレオチドは、ホスホロチオエート修飾体のようなヌクレオチド修飾体／類似体を含むことができ、二本鎖または（ＲＮＡを除いて）一本鎖であることができる。
【００１２】
−ＴＬＲ４アンタゴニストＥ５５６４のような、ホスフェート含有非環式骨格に連結される脂質を含む化合物。
−油エマルジョン（例えば、フロイント（Ｆｒｅｕｎｄ’ｓ）アジュバント、ＭＦ５９（登録商標））。
【００１３】
理論的に、免疫学的事象のカスケードにおいて特定の状態を支持、または増幅し、最終的により顕著な免疫学的応答につながることができる各分子、または物質は、アジュバントとして定義されることができる。
【００１４】
原理上は、ワクチン製剤においてアジュバントの使用を介して、アジュバントは、
−ワクチンに適切な、または望ましい免疫応答を指示、および最適化することができ、
−ワクチンの粘膜輸送、すなわち、口腔の、または胃の、または肺の上皮のような粘膜表面、および関連するリンパ組織との接触の結果起こる投与を可能にすることができ、
−細胞媒介免疫応答を促進することができ、
−例えば高度精製、または組換え体抗原などのような、より弱い抗原の免疫原性を高める
ことができ、
−防御免疫を提供するために必要な抗原量、または予防接種の頻度を減らすことができ、−例えば、新生児、高齢者、および免疫不全のワクチン接種者などの免疫応答の減少や弱体化を有する個人におけるワクチンの効果を改善することができる。
【００１５】
少しはアジュバントの作用モードについて知られているが、現在、アジュバントは次のメカニズムの一つによって免疫応答を増大させると信じられる：
−抗原の生物学的または免疫学的半減期を増加させる、
−ＡＰＣによって抗原−アジュバント複合体の摂取後に抗原がエンドソーム膜を横断し細胞質に入ることを可能にすることによって、抗原提示細胞（ＡＰＣ）への抗原輸送、並びに、ＡＰＣ等による抗原処理および抗原提示を改善する、
−ストレス細胞、または損傷細胞からの危険誘導シグナルを模倣し、そのことは免疫応答を開始するのに役立つ、
−免疫調節のサイトカインの生産を誘導する、
−免疫システムの特定のサブセットへの免疫応答にバイアスをかけ、および
−抗原チャレンジの急速な拡散を阻害する。
【００１６】
サッカライドは、ＴＩ−２（Ｔ細胞非依存性−２）抗原および弱い（ｐｏｏｒ）免疫原として当業者に知られている。したがって、サッカライドベースのワクチンを生産するために、前記サッカライドは、複合体を提供する免疫原性担体に接合されており、複合体は、サッカライドと比較して免疫原性の増加を示す。この文脈において、用語「免疫原性担体」は、構造体として定義され、免疫原性担体は、複合体を形成するためにサッカライドに接合され、サッカライド自体と比較して免疫の増加を示す。したがって、免疫原性担体へのサッカライドの接合は、前記免疫原性担体に対する免疫応答を誘導することなく、前記サッカライドに対する免疫応答を刺激する効果を有する。
【００１７】
したがって、本発明は、一般式（Ｉ）
Ｖ＊−［Ｕｘ＋３−Ｕｘ＋２−Ｕｘ＋１−Ｕｘ］ｎ−Ｖ−Ｏ−Ｌ−ＮＨ２
（Ｉ）
式中、
Ｘは、１、２、３、および４から選択される整数であり、
ｎは、１、２、および３から選択される整数であり、
Ｕ１＝Ｕ５＝
【００１８】
【化１】
0006622804.tif 000002
【００１９】
Ｕ２＝Ｕ６＝
【００２０】
【化２】
0006622804.tif 000003
【００２１】
Ｕ３＝Ｕ７＝
【００２２】
【化３】
0006622804.tif 000004
【００２３】
Ｕ４＝
【００２４】
【化４】
0006622804.tif 000005
【００２５】
−Ｖ−は、１つの結合、−ＵＸ＋３−、−ＵＸ＋３−ＵＸ＋２−、または−ＵＸ＋３−ＵＸ＋２−ＵＸ＋１−、を表し、
Ｖ＊−は、Ｈ−、Ｈ−ＵＸ−、Ｈ−ＵＸ＋１−ＵＸ−、Ｈ−ＵＸ＋２−ＵＸ＋１−ＵＸ−、を表し、
Ｌは、リンカーを表す、
サッカライド、並びに一般式（Ｉ）のジアステレオマー異性体、および一般式（Ｉ）の薬学的に許容できる塩に関する。
【００２６】
リンカーＬは、好ましくは、２個〜４０個の炭素原子（任意の側鎖における炭素原子を含む）、より好ましくは２個〜３０個、より好ましくは２個〜２０個、より好ましくは２個〜１４個、より好ましくは２個〜１２個、さらにより好ましくは２個〜１０個の炭素原子を含む。これは、置換基の任意の炭素原子を含むＬにおける炭素原子の全数である。
【００２７】
酸素原子（すなわち、−Ｏ−Ｌ−ＮＨ２の酸素）とＮＨ２−基との間の最も短い原子鎖は、好ましくは２個〜１４個の原子、より好ましくは２個〜１２個の原子、より好ましくは２個〜１０個の原子、より好ましくは２個〜８個の原子からなる。最も短い鎖（最も短い鎖は、アノマー中心の酸素とＮＨ２−基との間の最も短い可能な連結である）が２個〜６個の原子からなる場合、これらは、好ましくは、炭素原子である。最も短い鎖が４個〜８個の原子からなる場合、鎖は、Ｏ、Ｎ、およびＳから選択される、１個、２個、または３個のヘテロ原子を含んでもよい。最も短い鎖が９個〜１４個の原子からなる場合、主鎖は、Ｏ、Ｎ、およびＳから選択される、１個、２個、３個、４個、５個、または６個のヘテロ原子を含んでもよい。
【００２８】
リンカー−Ｌ−、または最も短い鎖は、完全に、または部分的にフッ素化されてもよい。リンカー−Ｌ−は、３員、または４員、または５員、または６員の飽和炭素環、または５員の部分的に不飽和の炭素環（芳香族ではない）、または４員、または５員、または６員の飽和酸素ヘテロ環、または４員、または５員、または６員の飽和窒素ヘテロ環、または６員の芳香族炭素環を含んでもよい。
【００２９】
リンカー−Ｌ−は、アミド（−ＮＨ−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＨ−）および／または尿素（−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−）残基、好ましくは、一つのアミド残基のみ、または一つのウレア残基のみを含んでもよい。リンカーは、置換基、好ましくはＲ１０およびＲ１１のような２個の置換基、またはＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１５、およびＲ１４のような４個の置換基を含んでもよく、置換基は、本願に定義される通りの意味を有し、好ましくは、−Ｆ、−Ｃｌ、−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ３Ｈ７、−Ｃ５Ｈ９、−Ｃ６Ｈ１３、−ＯＣＨ３、−ＯＣ２Ｈ５、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨＦ２、−ＣＦ３、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２、−ＳＣＨ３、−ＳＣ２Ｈ５、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２、および−Ｎ（Ｃ２Ｈ５）２、から選択される。
【００３０】
リンカー−Ｌ−がフッ素化されている場合、３個以上の置換基−Ｆが好ましい。
好ましくは、リンカー−Ｌ−は、−ＣＨ２−、−（ＣＨ２）２−、−（ＣＨ２）３−、−（ＣＨ２）４−、−（ＣＨ２）５−、−（ＣＨ２）６−、−（ＣＨ２）７−、−（ＣＨ２）８−、−（ＣＨ２）９−、−（ＣＨ２）１０−、−ＣＦ２−、−（ＣＦ２）２−、−（ＣＦ２）３−、−（ＣＦ２）４−、−（ＣＦ２）５−、−（ＣＦ２）６−、−（ＣＦ２）７−、−（ＣＦ２）８−、−（ＣＦ２）９−、−（ＣＦ２）１０−、−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２−、−ＣＨ２−Ｏ−（ＣＨ２）３−、−（ＣＨ２）３−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−（ＣＨ２）２−、−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２）３−Ｏ−（ＣＨ２）２−、−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）３−、−（ＣＨ２）４−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−（ＣＨ２）４−、−Ｌａ−、−Ｌａ−Ｌｅ−、−Ｌａ−Ｌｂ−Ｌｅ−、−Ｌａ−Ｌｂ−Ｌｄ−Ｌｃ−Ｌｅ−、−Ｌａ−Ｌｄ−Ｌｅ−、から選択され、
ここで、
−Ｌａ−は、−（ＣＨ２）ｏ−、−（ＣＦ２）ｏ−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−Ｃ２Ｈ４−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−ＣＨ２−、−（ＣＲ１０Ｒ１１）ｏ−、
【００３１】
【化５】
0006622804.tif 000006
【００３２】
から選択され、
−Ｌｂ−、および−Ｌｃ−は、互いに独立して、−Ｏ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、
−ＮＨ−Ｃ（Ｓ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＮＲ９−、−ＮＲ１８−、−ＳＯ２−、
【００３３】
【化６】
0006622804.tif 000007
【００３４】
から選択され、
−Ｌｄ−は、−（ＣＨ２）ｑ−、−（ＣＦ２）ｑ−、−（ＣＲ１２Ｒ１３）ｑ−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｑ−Ｃ２Ｈ４−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｑ−ＣＨ２−、
【００３５】
【化７】
0006622804.tif 000008
【００３６】
を表し、
−Ｌｅ−は、−（ＣＨ２）ｐ１−、−（ＣＦ２）ｐ１−、−Ｃ２Ｈ４−（Ｏ−ＣＨ２−
ＣＨ２）ｐ１−、−ＣＨ２−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｐ１−、−（ＣＨ２）ｐ１−Ｏ−（ＣＨ２）ｐ２−、−（ＣＲ１４Ｒ１５）ｐ１−、−（ＣＲ１４Ｒ１５）ｐ１−Ｏ−（ＣＲ２１Ｒ２２）ｐ２−、
【００３７】
【化８】
0006622804.tif 000009
【００３８】
から選択され、
Ｒ９およびＲ１８は、互いに独立して、−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ３Ｈ７、および−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、から選択され、
Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１、およびＲ２２は、互いに独立して、−Ｈ、−Ｆ、−Ｃｌ、−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ３Ｈ７、−Ｃ５Ｈ９、−Ｃ６Ｈ１３、−ＯＣＨ３、−ＯＣ２Ｈ５、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨＦ２、−ＣＦ３、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２、−ＳＣＨ３、−ＳＣ２Ｈ５、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２、および−Ｎ（Ｃ２Ｈ５）２、から選択され、
ｏ、ｑ、ｐ１、およびｐ２は、互いに独立して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から選択される整数である。
【００３９】
本発明のサッカライドは、塩基性および／または酸性置換基を有し、有機酸もしくは有機塩基、または無機酸もしくは無機塩基と共に塩を形成してもよい。
当該酸添加塩の形成に適した酸の例は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、酢酸、クエン酸、シュウ酸、マロン酸、サリチル酸、ｐ−アミノサリチル酸、リンゴ酸、フマル酸、コハク酸、アスコルビン酸、マレイン酸、スルホン酸、ホスホン酸、過塩素酸、硝酸、ぎ酸、プロピオン酸、グルコン酸、乳酸、酒石酸、ヒドロキシマレイン酸、ピルビン酸、フェニル酢酸、安息香酸、ｐ−アミノ安息香酸、ｐ−ヒドロキシ安息香酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、亜硝酸、ヒドロキシエタンスルホン酸、エチレンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ナフチルスルホン酸、スルファニル酸、カンファースルホン酸、キナ酸、マンデル酸、ｏ−メチルマンデル酸、水素−ベンゼンスルホン酸、ピクリン酸、アジピン酸、ｄ−ｏ−トリル酒石酸、タルトロン酸、（ｏ、ｍ、ｐ）−トルイル酸、ナフチルアミンスルホン酸、および当業者によく知られている他の鉱物またはカルボン酸である。塩は、従来の方法で塩を生成するために、遊離塩基型を十分な量の所望の酸と接触させることによって調製される。
【００４０】
適切な無機塩基または有機塩基の例は、例えば、ＮａＯＨ、ＫＯＨ、ＮＨ４ＯＨ、テトラアルキルアンモニウム水酸化物、リジンやアルギニンなどである。塩は、例えば、一般式（Ｉ）の化合物の溶液を、上述の群から選択される、塩基の溶液と処理することなどに
よって、当該技術分野でよく知られている方法を用いて従来の方法で調製されてもよい。
【００４１】
さらに、本発明の化合物は、同時に塩基性基および酸性基を有することも可能である。さらに、それらの塩基性基および酸性基は、互いにすぐ近くに近接しているように表され、酸性基から塩基性基へと分子内プロトン移動を可能にするということも起こってもよい。したがって、本発明の好ましい実施形態において、一般式（Ｉ）の化合物は、少なくとも、例えば、一つの−Ｏ−および一つの−ＮＨ３＋基などを有する、両性イオン性であってもよい。
【００４２】
一般式（Ｉ）のサッカライドは、サッカライドのアノマー炭素、またはＣ−１炭素を介して互いに連結される、または結合される−Ｏ−Ｏ−結合、およびまたは糖断片（Ｕｘ、Ｕｘ＋１、Ｕｘ＋２、Ｕｘ＋３）を含まないことは、炭水化物化学の当業者にとって明らかである。
【００４３】
一般式（Ｉ）のサッカライドは、ヒトおよび／または動物宿主においてストレプトコッカス  ニューモニアエ血清型４細菌に対する保護免疫応答を誘導することができる。ガラクトース部分の２位および３位で（Ｓ）−ピルベートケタールの存在は、天然のＳ．ニューモニアエ４型莢膜ポリサッカライドに対する交差反応性を達成するのに必須である。トランス−ピルベートケタールが、加水分解に対して不安定であるように、細菌源から単離されるＳ．ニューモニアエ血清型４関連サッカライド（天然の莢膜ポリサッカライドおよびその断片）は、さらに、サイズに関して同質性ではなく、構造に関しても非同質性である。しかしながら、この欠点は、本発明のよく定義された合成サッカライドを用いて克服され、本発明のよく定義された合成サッカライドは、ヒトおよび／または動物宿主において、天然のＳＰ−４ポリサッカライドと交差反応し、オプソニン貪食作用および殺菌活性を示すので、Ｓ．ニューモニアエ血清型４細菌に対する保護を付与する高い抗体価を誘引することができる。
【００４４】
好ましくは、一般式（ＩＩ）
Ｖ＊−［Ｕｘ＋３−Ｕｘ＋２−Ｕｘ＋１−Ｕｘ］ｎ−Ｏ−Ｌ−ＮＨ２              
（ＩＩ）
のサッカライドであり、
式中、ｘ、ｎ、Ｌ、Ｕｘ、ＵＸ＋１、ＵＸ＋２、ＵＸ＋３、およびＶ＊は、本願に定義される意味を有する。
【００４５】
したがって、一般式（ＩＩ−ａ）、（ＩＩ−ｂ）、（ＩＩ−ｃ）、または（ＩＩ−ｄ）のサッカライドが特に好ましく、式中、ｎ、Ｌ、およびＶ＊は、本願に定義される意味を有する。
【００４６】
【化９−１】
0006622804.tif 000010
【００４７】
【化９−２】
0006622804.tif 000011
【００４８】
また好ましくは、一般式（ＩＩＩ）
Ｖ＊−［Ｕｘ＋３−Ｕｘ＋２−Ｕｘ＋１−Ｕｘ］ｎ−Ｕｘ＋３−Ｏ−Ｌ−ＮＨ２
（ＩＩＩ）
のサッカライドであり、
式中、ｘ、ｎ、Ｌ、Ｕｘ、ＵＸ＋１、ＵＸ＋２、ＵＸ＋３、およびＶ＊は、本願に定義される意味を有する。
【００４９】
したがって、一般式（ＩＩＩ−ａ）、（ＩＩＩ−ｂ）、（ＩＩＩ−ｃ）、または（ＩＩＩ−ｄ）のサッカライドも好ましく、式中、ｎ、Ｌ、およびＶ＊は、本願に定義される意味を有する。
【００５０】
【化１０−１】
0006622804.tif 000012
【００５１】
【化１０−２】
0006622804.tif 000013
【００５２】
本発明に係る好ましい実施形態は、一般式（ＩＶ）のサッカライドに関し
Ｖ＊−［Ｕｘ＋３−Ｕｘ＋２−Ｕｘ＋１−Ｕｘ］ｎ−Ｕｘ＋３−Ｕｘ＋２−Ｏ−Ｌ−ＮＨ２                                （ＩＶ）
式中、ｘ、ｎ、Ｌ、Ｕｘ、ＵＸ＋１、ＵＸ＋２、ＵＸ＋３、およびＶ＊は、本願に定義される意味を有する。したがって、一般式（ＩＶ−ａ）、（ＩＶ−ｂ）、（ＩＶ−ｃ）、または（ＩＶ−ｄ）のサッカライドが特に好ましく、式中、Ｖ＊、ｎ、およびＬは、本願に定義される意味を有する。
【００５３】
【化１１−１】
0006622804.tif 000014
【００５４】
【化１１−２】
0006622804.tif 000015
【００５５】
また好ましくは、一般式（Ｖ）
Ｖ＊−［Ｕｘ＋３−Ｕｘ＋２−Ｕｘ＋１−Ｕｘ］ｎ−Ｕｘ＋３−Ｕｘ＋２−Ｕｘ＋１−Ｏ−Ｌ−ＮＨ２      （Ｖ）
のサッカライドであり、
式中、ｘ、ｎ、Ｌ、Ｕｘ、ＵＸ＋１、ＵＸ＋２、ＵＸ＋３、およびＶ＊は、本願に定義される意味を有する。
【００５６】
また好ましくは、一般式（Ｖ−ａ）、（Ｖ−ｂ）、（Ｖ−ｃ）、または（Ｖ−ｄ）のサッカライドであり、式中、Ｌ、およびＶ＊は、本願に定義される意味を有する。
【００５７】
【化１２−１】
0006622804.tif 000016
【００５８】
【化１２−２】
0006622804.tif 000017
【００５９】
【化１２−３】
0006622804.tif 000018
【００６０】
好ましくは、整数ｘは１を表す。したがって、一般式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、または（Ｖ）の化合物は、式中、ｘが１を表すのが特に好ましい。さらにより好ましくは、一般式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、または（Ｖ）の化合物は、式中、ｘが１を表し、Ｖ＊はＨ−を表す。一般式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、または（Ｖ）のサッカライドは、式中、Ｖ＊がＨ−を表すのも好ましい。
【００６１】
好ましくは、整数ｎは１を表す。したがって、一般式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩ−ａ）、（ＩＩ−ｂ）、（ＩＩ−ｃ）、（ＩＩ−ｄ）、（ＩＩＩ）、（ＩＩＩ−ａ）、（ＩＩＩ−ｂ）、（ＩＩＩ−ｃ）、（ＩＩＩ−ｄ）、（ＩＶ）、（ＩＶ−ａ）、（ＩＶ−ｂ）、（ＩＶ−ｃ）、（ＩＶ−ｄ）、（Ｖ）、（Ｖ−ａ）、（Ｖ−ｂ）、（Ｖ−ｃ）、または（Ｖ−ｄ）、のサッカライドは、式中、ｎが１を表すのが特に好ましい。
【００６２】
好ましくは、リンカー−Ｌ−は、−Ｌａ−、−Ｌａ−Ｌｅ−、−Ｌａ−Ｌｂ−Ｌｅ−、−Ｌａ−Ｌｄ−Ｌｅ−、から選択され、
ここで、
−Ｌａ−は、−（ＣＨ２）ｏ−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−Ｃ２Ｈ４−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−ＣＨ２−、から選択され、
−Ｌｂ−は、−Ｏ−を表し、
−Ｌｄ−は、−（ＣＨ２）ｑ−、−（ＣＦ２）ｑ−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｑ−Ｃ２Ｈ４−、および−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｑ−ＣＨ２−、から選択され、
−Ｌｅ−は、−（ＣＨ２）ｐ１−、−（ＣＦ２）ｐ１−、−Ｃ２Ｈ４−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｐ１−、−ＣＨ２−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｐ１−、および−（ＣＨ２）ｐ１−Ｏ−（ＣＨ２）ｐ２−、から選択され、
および、ｏ、ｑ、ｐ１、およびｐ２は、互いに独立して、１、２、３、４、５、および６から選択される整数である。
【００６３】
したがって、一般式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩ−ａ）、（ＩＩ−ｂ）、（ＩＩ−ｃ）、（ＩＩ−ｄ）、（ＩＩＩ）、（ＩＩＩ−ａ）、（ＩＩＩ−ｂ）、（ＩＩＩ−ｃ）、（ＩＩＩ−ｄ）、（ＩＶ）、（ＩＶ−ａ）、（ＩＶ−ｂ）、（ＩＶ−ｃ）、（ＩＶ−ｄ）、（Ｖ）、（Ｖ−ａ）、（Ｖ−ｂ）、（Ｖ−ｃ）、または（Ｖ−ｄ）、のサッカライドは、特に好ましく、式中、
−Ｌ−は、−Ｌａ−、−Ｌａ−Ｌｅ−、−Ｌａ−Ｌｂ−Ｌｅ−、および−Ｌａ−Ｌｄ−Ｌｅ−、から選択され、
−Ｌａ−は、−（ＣＨ２）ｏ−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−Ｃ２Ｈ４−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−ＣＨ２−、から選択され、
−Ｌｂ−は、−Ｏ−を表し、
−Ｌｄ−は、−（ＣＨ２）ｑ−、−（ＣＦ２）ｑ−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｑ−Ｃ２Ｈ４−、および−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｑ−ＣＨ２−、から選択され、
−Ｌｅ−は、−（ＣＨ２）ｐ１−、−（ＣＦ２）ｐ１−、−Ｃ２Ｈ４−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｐ１−、−ＣＨ２−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｐ１−、および−（ＣＨ２）ｐ１−Ｏ−（ＣＨ２）ｐ２−、から選択され、
および、ｏ、ｑ、ｐ１、およびｐ２は、互いに独立して、１、２、３、４、５、および６から選択される整数である。
【００６４】
一般式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩ−ａ）、（ＩＩ−ｂ）、（ＩＩ−ｃ）、（ＩＩ−ｄ）、（ＩＩＩ）、（ＩＩＩ−ａ）、（ＩＩＩ−ｂ）、（ＩＩＩ−ｃ）、（ＩＩＩ−ｄ）、（ＩＶ）、（ＩＶ−ａ）、（ＩＶ−ｂ）、（ＩＶ−ｃ）、（ＩＶ−ｄ）、（Ｖ）、（Ｖ−ａ）、（Ｖ−ｂ）、（Ｖ−ｃ）、または（Ｖ−ｄ）、のサッカライドも好ましく、式中、
−Ｌ−は、−Ｌａ−、−Ｌａ−Ｌｅ−、−Ｌａ−Ｌｂ−Ｌｅ−、および−Ｌａ−Ｌｄ−Ｌｅ−、から選択され、
−Ｌａ−は、−（ＣＨ２）ｏ−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−Ｃ２Ｈ４−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−ＣＨ２−、から選択され、
−Ｌｂ−は、−Ｏ−を表し、
−Ｌｄ−は、−（ＣＨ２）ｑ−、−（ＣＦ２）ｑ−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｑ−Ｃ２Ｈ４−、および−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｑ−ＣＨ２−、から選択され、
−Ｌｅ−は、−（ＣＨ２）ｐ１−、−（ＣＦ２）ｐ１−、−Ｃ２Ｈ４−（Ｏ−ＣＨ２−
ＣＨ２）ｐ１−、−ＣＨ２−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｐ１−、および−（ＣＨ２）ｐ１−Ｏ−（ＣＨ２）ｐ２−、から選択され、
ｏ、ｑ、ｐ１、およびｐ２は、互いに独立して、１、２、３、４、５、および６から選択される整数であり、ｎは１を表す。
【００６５】
さらにより好ましくは、一般式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩ−ａ）、（ＩＩ−ｂ）、（ＩＩ−ｃ）、（ＩＩ−ｄ）、（ＩＩＩ）、（ＩＩＩ−ａ）、（ＩＩＩ−ｂ）、（ＩＩＩ−ｃ）、（ＩＩＩ−ｄ）、（ＩＶ）、（ＩＶ−ａ）、（ＩＶ−ｂ）、（ＩＶ−ｃ）、（ＩＶ−ｄ）、（Ｖ）、（Ｖ−ａ）、（Ｖ−ｂ）、（Ｖ−ｃ）、または（Ｖ−ｄ）、のサッカライドであり、式中、−Ｌ−は、−（ＣＨ２）ｏ−を表し、ｏは、２、３、４、５、および６から選択される整数である。
【００６６】
また好ましくは、一般式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩ−ａ）、（ＩＩ−ｂ）、（ＩＩ−ｃ）、（ＩＩ−ｄ）、（ＩＩＩ）、（ＩＩＩ−ａ）、（ＩＩＩ−ｂ）、（ＩＩＩ−ｃ）、（ＩＩＩ−ｄ）、（ＩＶ）、（ＩＶ−ａ）、（ＩＶ−ｂ）、（ＩＶ−ｃ）、（ＩＶ−ｄ）、（Ｖ）、（Ｖ−ａ）、（Ｖ−ｂ）、（Ｖ−ｃ）、または（Ｖ−ｄ）、のサッカライドであり、式中、−Ｌ−は、−（ＣＨ２）ｏ−を表し、ｏは、２、３、４、５、および６から選択される整数であり、ｎは１を表す。
【００６７】
さらに他の好ましい実施形態において、本発明に係るサッカライドは、
【００６８】
【化１３−１】
0006622804.tif 000019
【００６９】
【化１３−２】
0006622804.tif 000020
【００７０】
【化１３−３】
0006622804.tif 000021
【００７１】
【化１３−４】
0006622804.tif 000022
【００７２】
【化１３−５】
0006622804.tif 000023
【００７３】
【化１３−６】
0006622804.tif 000024
【００７４】
【化１３−７】
0006622804.tif 000025
【００７５】
からなる群から選択される。
［化学合成］
本発明の他の態様は、一般式（Ｉ）
Ｖ＊−［Ｕｘ＋３−Ｕｘ＋２−Ｕｘ＋１−Ｕｘ］ｎ−Ｖ−Ｏ−Ｌ−ＮＨ２ 
（Ｉ）
のサッカライドの合成方法に関し、
式中、
Ｘは、１、２、３、および４から選択される整数であり、
ｎは、１、２、および３から選択される整数であり、
Ｕ１＝Ｕ５＝
【００７６】
【化１４】
0006622804.tif 000026
【００７７】
Ｕ２＝Ｕ６＝
【００７８】
【化１５】
0006622804.tif 000027
【００７９】
Ｕ３＝Ｕ７＝
【００８０】
【化１６】
0006622804.tif 000028
【００８１】
Ｕ４＝
【００８２】
【化１７】
0006622804.tif 000029
【００８３】
−Ｖ−は、結合を表し、
Ｖ＊−は、Ｈ−、を表し、
Ｌは、リンカーを表し、
次のステップ：
１．式：
【００８４】
【化１８】
0006622804.tif 000030
【００８５】
の化合物１を提供すること、
（式中、Ｐ１、Ｐ３〜Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１３〜Ｐ１６は、保護基を表し、ｍは、０、１、２から選択される整数である）
および、式：
【００８６】
【化１９】
0006622804.tif 000031
【００８７】
の化合物２を提供するために、（式中、Ｐ１、Ｐ３〜Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１３〜Ｐ１６は、保護基を表し、ｍは、０、１、２から選択される整数である）モジュールａ、モジュールｂ、モジュールｃ、およびモジュールｄ、を行うこと、
または、
２．式：
【００８８】
【化２０】
0006622804.tif 000032
【００８９】
の化合物３を提供すること、
（式中、Ｐ１、Ｐ３〜Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１３〜Ｐ１６は、保護基を表し、ｍは、０、１、２から選択される整数である）
および、式：
【００９０】
【化２１】
0006622804.tif 000033
【００９１】
の化合物４を提供するために、（式中、Ｐ１、Ｐ３〜Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１３〜Ｐ１６は、保護基を表し、ｍは、０、１、２から選択される整数である）モジュールｄ、モジュールａ、モジュールｂ、およびモジュールｃ、を行うこと、
または、
３．式：
【００９２】
【化２２】
0006622804.tif 000034
【００９３】
の化合物５を提供すること、
（式中、Ｐ１、Ｐ３〜Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１３〜Ｐ１６は、保護基を表し、ｍは、０、１、２から選択される整数である）
および、式：
【００９４】
【化２３】
0006622804.tif 000035
【００９５】
の化合物６を提供するために、（式中、Ｐ１、Ｐ３〜Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１３〜Ｐ１６は、保護基を表し、ｍは、０、１、２から選択される整数である）モジュールｃ、モジュールｄ、モジュールａ、およびモジュールｂ、を行うこと、
または、
４．式：
【００９６】
【化２４】
0006622804.tif 000036
【００９７】
の化合物７を提供すること、
（式中、Ｐ１、Ｐ３〜Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１３〜Ｐ１６は、保護基を表し、ｍは、０、１、２から選択される整数である）
および、式：
【００９８】
【化２５】
0006622804.tif 000037
【００９９】
の化合物８を提供するために、（式中、Ｐ１、Ｐ３〜Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１３〜Ｐ１６は、保護基を表し、ｍは、０、１、２から選択される整数である）モジュールｂ、モジュールｃ、モジュールｄ、およびモジュールａ、を行うこと、
および、
５．式：
【０１００】
【化２６−１】
0006622804.tif 000038
【０１０１】
【化２６−２】
0006622804.tif 000039
【０１０２】
の化合物９、１０、１１、および１２を得るために（式中、Ｐ１、Ｐ３〜Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１３〜Ｐ１７は、保護基を表し、ｍは、０、１、２から選択される整数である）、化合物２、４、６、および８のフリーのＯＨ基の保護を行うこと、および、
６．式：
【０１０３】
【化２７−１】
0006622804.tif 000040
【０１０４】
【化２７−２】
0006622804.tif 000041
【０１０５】
の化合物１３、１４、１５、および１６を得るために（式中、Ｐ１、Ｐ３〜Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１４〜Ｐ１７は、保護基を表し、ｍは、０、１、２から選択される整数である）、化合物９、１０、１１、および１２においてモジュールＥを行うこと、
および、
７．式：
【０１０６】
【化２８】
0006622804.tif 000042
0006622804.tif 000043
【０１０７】
の化合物１７、１８、１９、および２０を得るために（式中、Ｐ１、Ｐ３〜Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１４〜Ｐ１７は、保護基を表し、ｍは、０、１、２から選択される整数である）、化合物１３、１４、１５、および１６においてモジュールＦを行うこと、
および、
８．式：
【０１０８】
【化２９−１】
0006622804.tif 000044
0006622804.tif 000045
【０１０９】
【化２９−２】
0006622804.tif 000046
【０１１０】
の化合物２０、２１、２２、および２３を提供するために（式中、Ｐ１、Ｐ５、Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１４〜Ｐ１７は、保護基を表し、ｍは、０、１、２から選択される整数である）、化合物１７、１８、１９、および２０においてモジュールＧを行うこと、
および、
９．一般式（Ｉ）の化合物、
（式中
−Ｖ−は、結合を表し、
Ｖ＊−は、Ｈ−、を表し、
および、Ｌは、リンカーを表す）
を提供するために、化合物２０、２１、２２、および２３における保護基Ｐ１、Ｐ５、Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１４〜Ｐ１７を除去すること、
を含み、
ここで、
モジュールＡは：
Ａ１．活性化剤の存在下でグリコシル化剤ＧＡ１との処理、
（ここで、ＧＡ１は、一般式
【０１１１】
【化３０】
0006622804.tif 000047
【０１１２】
であり、式中、Ｐ１〜Ｐ４は保護基を表し、ＬＧ１は脱離基を表す。）
および
Ａ２．保護基Ｐ２の除去を行うこと、
からなり、
モジュールＢは：
Ｂ１．活性化剤の存在下でグリコシル化剤ＧＡ２との処理、
（ここで、ＧＡ２は、一般式
【０１１３】
【化３１】
0006622804.tif 000048
【０１１４】
であり、式中、Ｐ５〜Ｐ７は保護基を表し、ＬＧ２は脱離基を表す。）
および
Ｂ２．保護基Ｐ７の除去を行うこと、
からなり、
モジュールＣは：
Ｃ１．活性化剤の存在下でグリコシル化剤ＧＡ３との処理、
（ここで、ＧＡ３は、一般式
【０１１５】
【化３２】
0006622804.tif 000049
【０１１６】
であり、式中、Ｐ８、およびＰ９は保護基を表し、ＬＧ３は脱離基を表す。）
および
Ｃ２．保護基Ｐ８、およびＰ９の除去を行い、アキシャル位のＯＨにおいて保護基Ｐ１６を導入すること
からなり、
モジュールＤは：
Ｄ１．活性化剤の存在下でグリコシル化剤ＧＡ４との処理、
（ここで、ＧＡ４は、一般式
【０１１７】
【化３３】
0006622804.tif 000050
【０１１８】
であり、式中、Ｐ１０〜Ｐ１３は保護基を表し、ＬＧ４は脱離基を表す。）
および
Ｄ２．保護基Ｐ１２の除去を行うこと、
からなり、
モジュールＥは、
Ｅ１．中間体−ＯＨ基を提供するために、保護基Ｐ１３の除去、
および
Ｅ２．ステップＥ１で得られた中間体−ＯＨ基を、脱離基−ＬＧ５に変換、
および
Ｅ３．立体配置の反転を伴う、アジド基−Ｎ３による脱離基−ＬＧ５への求核置換、
からなり、
モジュールＦは、対応するアセトアミド基へアジド基の還元からなり、
モジュールＧは、
Ｇ１．中間体ジオールを提供するために、保護基Ｐ３およびＰ４の除去、
および
Ｇ２．ステップＧ１で得られた中間体ジオールにおいて（Ｓ）−ピルベート部分の導入、
からなる。
【０１１９】
Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２、Ｐ１３、Ｐ１４、Ｐ１５、Ｐ１６、およびＰ１７は、保護基を表す。本願に使用される用語「保護基」は、有機合成において一般的に使用される基、好ましくは、アミン、ヒドロキシル基、チオール、イミン、カルボニル、カルボキシル、または他の一般的な官能基の保護のために使用される基、特に好ましくは、アミンおよびヒドロキシル基の保護のために使用される基である。
【０１２０】
より具体的に、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５、Ｐ６、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１２、Ｐ１３、Ｐ１６、およびＰ１７は、ヒドロキシル基のための保護基、より好ましくは、適切な連続する脱保護反応によって、次々に続いて除去されることが可能なヒドロキシル基のための異なる適切な保護基を表す。ヒドロキシル基のための公知の保護基は、アセチル、ベンジル、ベンジリデン、ベンゾイル、ｐ−メトキシベンジル、ｐ−メトキシベンジリデン、ｐ−メトキシフェニル、パラ−ブロモベンジル、ｐ−ニトロフェニル、アリル、アセチル、イソプロピル、レブリニル、ジメトキシトリチル、トリチル、２−ナフチルメチル、ピバロイル、、トリイソプロピルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルメトキシフェニルシリル、トリエチルシリル、トリメチルシリル、２−トリメチルシリルエトキシメチルを含むが限定されない。
【０１２１】
Ｐ１４およびＰ１５は、アミンのための保護基を表し、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボ
ニル、９−フルオレニルメトキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、２，２，２−トリクロロエチルオキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル；トリフルオロアセチル、トリクロロアセチル、アセチル、またはベンゾイルのようなカルボニル；およびベンジル、ｐ−メトキシベンジル、ｐ−メトキシフェニル、パラ−ブロモベンジル、ｐ−ニトロフェニル、または２−ナフチルメチルのような芳香族アルキル、からなる、または含む群から選択されてもよい。
【０１２２】
保護基は、永続する保護基および一時的な保護基に区別されることができる。永続する保護基は、全合成の間安定であり、合成の後期の段階で効率的に除去されることができる保護基である、この場合において、永続する保護基は、Ｐ１、Ｐ５、Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１４、Ｐ１５、Ｐ１６およびＰ１７を含む。Ｐ１、Ｐ５、Ｐ６、Ｐ１０、Ｐ１１、Ｐ１６、およびＰ１７は、全合成の間にヒドロキシル基を覆っており、一方保護基Ｐ１４およびＰ１５は、リンカーＬに存在する末端アミノ基を隠している。好ましくは、保護基Ｐ１は、ベンジル基であり、保護基Ｐ５およびＰ６は、ベンジリデン保護基と共に形成するかベンジル基であり、保護基Ｐ１０およびＰ１１は、ベンジリデン基と共に形成するかベンジル基であり、保護基Ｐ１６は、ベンゾイル、ベンジル、またはアセチル基、好ましくは、ベンゾイル、またはベンジル基であり、保護基Ｐ１４は、ベンジル基であり、保護基Ｐ１５は、ベンジルオキシカルボニル基（Ｃｂｚ）である。
【０１２３】
一時的な保護基は、モノサッカライドを含む異なる置換基の続く導入のためにヒドロキシル基をフリーにするために合成の異なる段階で選択的に除去されることができる一般的にオルソゴナル保護基であり、他の保護基、または他の残基は分子上に存在する。この場合において、一時的な保護基は、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９、Ｐ１２、およびＰ１３を含む。
【０１２４】
保護基の独創的な選択は、続く免疫原性担体または固体支持体への接合のためにアミノ基を用いて官能基化された一般的Ｉのサッカライドのライブラリーへの好都合なアクセスを可能にする。
【０１２５】
好ましくは、一時的な保護基Ｐ２、Ｐ７、Ｐ８、およびＰ９は、αグリコシド結合の形成に有利な保護基を示している。示す保護基の例は、アセチル、ベンゾイル、およびレブリノイル基である。好ましくは、Ｐ２、Ｐ７、Ｐ８、およびＰ９はアセチル基である。
【０１２６】
一時的な保護基Ｐ３、Ｐ４、およびＰ１２は、エーテルおよびシリルエーテルなどのような非参加基である。適切なエーテルおよびシリルエーテルの例は、アリル、ｐ−メトキシベンジル、２−ナフチルメチル、トリ−イソプロピルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルメトキシフェニルシリル、、トリエチルシリル、トリメチルシリル、２−トリメチルシリルエトキシメチルを含むが限定されない。好ましくは、保護基Ｐ１２は、Ｐ３およびＰ４の存在で選択的に除去されることができる。好ましくは、Ｐ３およびＰ４は、アリル、ｐ−メトキシベンジル、２−ナフチルメチル、トリイソプロピルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル、トリエチルシリル、トリメチルシリルからなる群から選択され、より好ましくＰ３およびＰ４は、同じである。好ましい実施形態において、保護基Ｐ１２は、アリル、またはｐ−メトキシベンジルを表し、保護基Ｐ３およびＰ４は、２−ナフチルメチル、またはシリルエーテルを表す。他の好ましい実施形態において、保護基Ｐ１２は、シリルエーテルであり、Ｐ３およびＰ４は、アリル、ｐ−メトキシベンジル、および２−ナフチルメチルからなる群から選択される。
【０１２７】
一時的な保護基Ｐ１３は、β結合の形成に好都合である参加保護基である。好ましくは、保護基Ｐ１３は、保護基Ｐ３、Ｐ４、およびＰ１２の存在下で選択的に除去されるだろう。好ましくは、保護基Ｐ１３は、レブリノイルである。
【０１２８】
構成要素ＧＡ１、ＧＡ２、ＧＡ３、およびＧＡ４は、グリコシル化剤である。本願に使用されるように、用語グリコシル化剤は、脱離基を有するアノマー位で官能基化されたモノサッカライドに関し、当該モノサッカライドは、適切な活性化剤を用いる活性化において、例えば、ヒドロキシル基などのような求核剤を用いて反応することができるオキソカルベニウム中間体を提供する。したがって、グリコシル化剤ＧＡ１、ＧＡ２、ＧＡ３、およびＧＡ４は、脱離基ＬＧ１、ＬＧ２、ＬＧ３、およびＬＧ４を用いてアノマー位で官能基化される。本発明の合成に適切な脱離基の例は、炭水化物化学の当業者によく知られており、ハロゲン化物、チオエーテル、イミド、アセテート、およびホスフェートを含む。
【０１２９】
好ましくは、脱離基ＬＧ１、ＬＧ２、ＬＧ３、およびＬＧ４は、
【０１３０】
【化３４】
0006622804.tif 000051
【０１３１】
からなる脱離基の群から選択される。
述べられるように、オキソカルベニウム中間体の提供は、適当な、および適切な活性化剤を用いてグリコシル化剤のアノマー位に導入される脱離基の活性化に依存する。ホスフェートのための適切な活性化剤（すなわち、ホスフェート活性化剤）およびイミデートのための適切な活性化剤（すなわち、イミデート活性化剤）は、例えば、シリルトリフレート、または銀トリフレートなどのようなルイス酸であり、一方、チオエーテルのための適切な活性化剤（すなわち、チオエーテル活性化剤）は、ＮＩＳ／ＴｆＯＨ、ＮＩＳ／ＴＭＳＯＴｆ、ＮＩＳ／ＢＦ３・Ｅｔ２Ｏ、ＮＩＳ／ＡｇＯＴｆ、ＤＭＴＳＴ／ＴＦ２Ｏ、ＩＤＰＣ、ＢＳＰ／Ｔｆ２Ｏ、Ｐｈ２ＳＯ／Ｔｆ２Ｏを含むが制限されないことは、当業者の一般的な知識である。シリルトリフレートの例は、トリメチルシリル、トリフルオロメタンスルホネート、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルトリフルオロメタンスルホネート、トリイソプロピルトリフルオロメタンスルホネートを含むが制限されない。
【０１３２】
好ましくは、ＬＧ１およびＬＧ４は、チオエーテルであり、ＬＧ２およびＬＧ３は、イミデートであり、より好ましくは、ＬＧ１およびＬＧ４は、エチルチオエーテルであり、ＬＧ２およびＬＧ３は、トリクロロアセトイミデートである。
【０１３３】
ステップＥ２において導入される脱離基ＬＧ５は、塩化物、臭化物、ヨウ化物、トシレート、ベンゼンスルホネート、ｐ−ニトロ−ベンゼンスルホネート、メシレート、またはトリフレート基を含む群から選択されることができる。好ましくは、脱離基ＬＧ５は、スルホン酸のエステル（すなわち、スルホネート）、および、より好ましくは、ＬＧ５は、トリフレート基である。
【０１３４】
本発明に係る好ましい実施形態において、
モジュールＡは、
Ａ１．無極性溶媒と極性非プロトン性溶媒との混合物中のチオエーテル活性化剤存在下
でグリコシル化剤ＧＡ１＊との処理、
（ここで、ＧＡ１＊は、一般式
【０１３５】
【化３５】
0006622804.tif 000052
【０１３６】
であり、式中、Ｐ２〜Ｐ４は保護基を表し、ＬＧ１＊は、
【０１３７】
【化３６】
0006622804.tif 000053
【０１３８】
からなる群から選択される脱離基を表す。）
および
Ａ２．ＭｅＯＮａ／ＭｅＯＨを用いて保護基Ｐ２の除去を行うこと、
からなる。
【０１３９】
モジュールＢは：
Ｂ１．無極性溶媒と極性非プロトン性溶媒との混合物中のイミデート活性化剤存在下でグリコシル化剤ＧＡ２＊との処理、
（ここで、ＧＡ２＊は、一般式
【０１４０】
【化３７】
0006622804.tif 000054
【０１４１】
であり、式中、Ｐ５〜Ｐ７は保護基を表し、ＬＧ２＊は
【０１４２】
【化３８】
0006622804.tif 000055
【０１４３】
からなる群から選択される脱離基を表す。）
および
Ｂ２．ＭｅＯＮａ／ＭｅＯＨを用いて保護基Ｐ７の除去を行うこと、
からなる。
【０１４４】
モジュールＣは、
Ｃ１．非極性溶媒中のイミデート活性化剤存在下でグリコシル化剤ＧＡ３＊との処理、
（ここで、ＧＡ３＊は、一般式
【０１４５】
【化３９】
0006622804.tif 000056
【０１４６】
であり、式中、Ｐ８、およびＰ９は保護基を表し、ＬＧ３＊は
【０１４７】
【化４０】
0006622804.tif 000057
【０１４８】
からなる群から選択される脱離基を表す。）
および
Ｃ２．ＭｅＯＮａ／ＭｅＯＨを用いて保護基Ｐ８、およびＰ９の除去を行い、アキシャル位のＯＨにおいて保護基Ｐ１６を導入すること
からなる。
【０１４９】
モジュールＤは：
Ｄ１．非極性溶媒中のチオエーテル活性化剤存在下でグリコシル化剤ＧＡ４＊との処理、
（ここで、ＧＡ４＊は、一般式
【０１５０】
【化４１】
0006622804.tif 000058
【０１５１】
であり、式中、Ｐ１０〜Ｐ１３は保護基を表し、ＬＧ４＊は、
【０１５２】
【化４２】
0006622804.tif 000059
【０１５３】
からなる群から選択される脱離基を表す。）
および
Ｄ２．保護基Ｐ１２の除去を行うこと、
からなる。
【０１５４】
好ましい極性非プロトン性溶媒は、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、およびジオキサンである。好ましい非極性溶媒は、トルエン、例えばクロロホルムおよび塩化メチレンなどのようなハロゲン化溶媒である。非極性非プロトン性溶媒と極性非プロトン性溶媒の好ましい混合物は、塩化メチレン／テトラヒドロフラン、塩化メチレン／ジエチルエーテル、トルエン／ジエチルエーテル、トルエン／テトラヒドロフランである。
【０１５５】
好ましくは、モジュールＥは、
Ｅ１．中間体−ＯＨ基を提供するために、溶媒中、または溶媒の混合物中のヒドラジン、またはヒドラジニウムを用いて保護基Ｐ１３の除去、
および
Ｅ２．ステップＥ１で得られた中間体−ＯＨ基を、脱離基−ＬＧ５に変換、
および
Ｅ３．立体配置の反転を伴う、アジド基−Ｎ３による脱離基−ＬＧ５への求核置換、
からなる。
【０１５６】
ステップＥ１において、例えば酢酸ヒドラジン、またはプロピオン酸ヒドラジンなどの弱酸のヒドラジン塩が好ましい。この反応の適切な溶媒は、例えば、塩化メチレンおよびトルエンなどのような非極性溶媒、例えば、ピリジン、酢酸、およびメタノールなどのような極性溶媒、並びにそれらの混合物である。
【０１５７】
好ましくは、モジュールＦにおいて行われる対応するアセトアミド基へのアジド基の還元は、ピリジン中でチオ酢酸を用いて処理することによって行われる。代替方法は、２ステップ：最初にアジド基の化学選択的還元、その後アセチル化でアジド基のアセトアミド基への変換を行うことである。化学選択的還元は、シュタウディンガー（Ｓｔａｕｄｉｎｇｅｒ）反応（ＰＰｈ３、またはＰＭｅ３、ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ)を介して、またはアンモニア、酢酸アンモニウム、トリフェニルホスフィン、またはピリジンの存在下でＰｄ／Ｃにおける水素化分解によって行われることができる。アセチル化は、塩基の存在下において、塩化アセチル、または無水酢酸を用いて達成されることができる。
【０１５８】
好ましくは、モジュールＧは、
Ｇ１．中間体ジオールを提供するために、溶媒の混合物中のＤＤＱ（２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノ−１，４−ベンゾキノン）を用いて保護基Ｐ３およびＰ４の除去、
および
Ｇ２．ステップＧ１で得られた中間体ジオールにおいて（Ｓ）−ピルベート部分の導入、
からなる。
【０１５９】
好ましくは、ステップＧ２における（Ｓ）−ピルベート部分の導入は、非極性溶媒中の
２，２−ビス（エチルチオ）プロパノエート、ＴＴＢＭＰ（２，４，６−トリ−ｔｅｒｔ−ブチルピリジン）、およびＤＭＴＳＴ（ジメチル（メチルチオ）スルホニウムトリフルオロメタンスルホネート）を用いて行われる。
【０１６０】
本発明の他の態様は、一般式（ＩＩ−ａ）
【０１６１】
【化４３】
0006622804.tif 000060
【０１６２】
のサッカライドの合成方法に関し、
式中、
ｎは１を表し、Ｖ＊−は、Ｈ−を表し、Ｌは、リンカー、すなわち一般式ＶＩ
【０１６３】
【化４４】
0006622804.tif 000061
【０１６４】
び化合物を表し、
次のステップ：
１．１  式
【０１６５】
【化４５】
0006622804.tif 000062
【０１６６】
の化合物２４（式中、Ｐ１４＊＊およびＰ１５＊＊は保護基を表し、Ｌは本願に定義される意味を有する）を、式
【０１６７】
【化４６】
0006622804.tif 000063
【０１６８】
の化合物２５（式中、Ｐ１＊＊〜Ｐ４＊＊は保護基を表し、ＬＧ１＊＊は、
【０１６９】
【化４７】
0006622804.tif 000064
【０１７０】
からなる群から選択される脱離基を表す）と反応させて、式
【０１７１】
【化４８】
0006622804.tif 000065
【０１７２】
の化合物２６を得ること、
および
１．２  化合物２７
【０１７３】
【化４９】
0006622804.tif 000066
【０１７４】
（式中、Ｐ１＊＊、Ｐ３＊＊、Ｐ４＊＊、Ｐ１４＊＊、およびＰ１５＊＊は保護基を表し、Ｌは本願に定義される意味を有する。）を得るために、化合物２６の保護基Ｐ２＊＊の除去を行うこと、
および
２．１  化合物２７を式
【０１７５】
【化５０】
0006622804.tif 000067
【０１７６】
（式中、Ｐ５＊＊〜Ｐ７＊＊は保護基を表し、ＬＧ２＊＊は、
【０１７７】
【化５１】
0006622804.tif 000068
【０１７８】
からなる群から選択される脱離基を表す。）
の化合物２８と反応させて、式
【０１７９】
【化５２】
0006622804.tif 000069
【０１８０】
（式中、Ｐ１＊＊、Ｐ３＊＊〜Ｐ７＊＊、Ｐ１４＊＊、Ｐ１５＊＊は、保護基を表し、Ｌは、本願に定義される意味を有する）の化合物２９を得ること、
および
２．２  化合物２９における保護基Ｐ７＊＊の除去を行い化合物３０
【０１８１】
【化５３】
0006622804.tif 000070
【０１８２】
（式中、Ｐ１＊＊、Ｐ３＊＊〜Ｐ７＊＊、Ｐ１４＊＊、Ｐ１５＊＊は、保護基を表し、Ｌは、本願に定義される意味を有する。）
得ること、
および
３．１  化合物３０を式
【０１８３】
【化５４】
0006622804.tif 000071
【０１８４】
（式中、Ｐ８＊＊〜Ｐ９＊＊は保護基を表し、ＬＧ３＊＊は、
【０１８５】
【化５５】
0006622804.tif 000072
【０１８６】
からなる群から選択される脱離基を表す。）
の化合物３１と反応させて、化合物３２
【０１８７】
【化５６】
0006622804.tif 000073
【０１８８】
（式中、Ｐ１＊＊、Ｐ３＊＊〜Ｐ６＊＊、Ｐ８＊＊、Ｐ９＊＊、Ｐ１４＊＊、およびＰ１５＊＊は、保護基を表し、Ｌは、本願に定義される意味を有する）を得ること、
および
３．２  化合物３２における保護基Ｐ８＊＊およびＰ９＊＊の除去を行い化合物３３
【０１８９】
【化５７】
0006622804.tif 000074
【０１９０】
（式中、Ｐ１＊＊、Ｐ３＊＊〜Ｐ６＊＊、Ｐ１４＊＊、およびＰ１５＊＊は、保護基を表し、Ｌは、本願に定義される意味を有する。）
を得ること、
および
３．３  化合物３３における保護基Ｐ１６＊を導入し、化合物３４
【０１９１】
【化５８】
0006622804.tif 000075
【０１９２】
（式中、Ｐ１＊＊、Ｐ３＊＊〜Ｐ６＊＊、Ｐ１４＊＊〜Ｐ１６＊＊は、保護基を表し、Ｌは、本願に定義される意味を有する。）
を得ること、
および
４．１  化合物３４を式
【０１９３】
【化５９】
0006622804.tif 000076
【０１９４】
（式中、Ｐ１０＊＊〜Ｐ１３＊＊は保護基を表し、ＬＧ４＊＊は、
【０１９５】
【化６０】
0006622804.tif 000077
【０１９６】
からなる群から選択される脱離基を表す。）
の化合物３５と反応させて、化合物３６
【０１９７】
【化６１】
0006622804.tif 000078
【０１９８】
（式中、Ｐ１＊＊、Ｐ３＊＊〜Ｐ６＊＊、Ｐ１０＊＊〜Ｐ１６＊＊は、保護基を表し、Ｌは、本願に定義される意味を有する）を得ること、
および
４．２  化合物３６を式
【０１９９】
【化６２】
0006622804.tif 000079
【０２００】
（式中、Ｐ１＊＊、Ｐ３＊＊〜Ｐ６＊＊、Ｐ１０＊＊〜Ｐ１２＊＊、Ｐ１４＊＊〜Ｐ１６＊＊は、保護基を表し、Ｌは、本願に定義される意味を有する。）
の化合物３７に変換すること、
および
４．３  化合物３７におけるアジド基を対応するアセトアミド基に変換し、化合物３８
【０２０１】
【化６３】
0006622804.tif 000080
【０２０２】
（式中、Ｐ１＊＊、Ｐ３＊＊〜Ｐ６＊＊、Ｐ１０＊＊〜Ｐ１２＊＊、Ｐ１４＊＊〜Ｐ１６＊＊は、保護基を表し、Ｌは、本願に定義される意味を有する。）
を得ること、
および、
４．４  化合物３７におけるアジド基を対応するアセトアミド基に変換し、化合物３８
【０２０３】
【化６４】
0006622804.tif 000081
【０２０４】
（式中、Ｐ１＊＊、Ｐ３＊＊〜Ｐ６＊＊、Ｐ１０＊＊〜Ｐ１２＊＊、Ｐ１４＊＊〜Ｐ１６＊＊は、保護基を表し、Ｌは、本願に定義される意味を有する。）
を得ること、
および
４．５  化合物３８における保護基Ｐ３＊＊およびＰ４＊＊の選択的除去を行い、ジオール３９
【０２０５】
【化６５】
0006622804.tif 000082
【０２０６】
（式中、Ｐ１＊＊、Ｐ５＊＊、Ｐ６＊＊、Ｐ１０＊＊〜Ｐ１２＊＊、Ｐ１４＊＊〜Ｐ１６＊＊は、保護基を表し、Ｌは、本願に定義される意味を有する。）
を得ること、
および
４．７  ジオール３９において（Ｓ）−ピルベート部分を導入し化合物４０
【０２０７】
【化６６】
0006622804.tif 000083
【０２０８】
（式中、Ｐ１＊＊、Ｐ５＊＊、Ｐ６＊＊、Ｐ１０＊＊〜Ｐ１２＊＊、Ｐ１４＊＊〜Ｐ１６＊＊は、保護基を表し、Ｌは、本願に定義される意味を有する。）
を得ること、
および
４．８  化合物４０においてＰ１＊＊、Ｐ５＊＊、Ｐ６＊＊、Ｐ１０＊＊〜Ｐ１２＊＊、Ｐ１４＊＊〜Ｐ１６＊＊の保護基の除去を行い、化合物ＶＩを得ること、
を含む。
【０２０９】
Ｐ１＊＊、Ｐ２＊＊、Ｐ３＊＊、Ｐ４＊＊、Ｐ５＊＊、Ｐ６＊＊、Ｐ７＊＊、Ｐ８＊＊、Ｐ９＊＊、Ｐ１０＊＊、Ｐ１１＊＊、Ｐ１２＊＊、Ｐ１３＊＊、Ｐ１４＊＊、Ｐ１５＊＊、およびＰ１６＊＊、は保護基を表す。
【０２１０】
好ましくは、保護基Ｐ１＊＊およびＰ１２＊＊は、ベンジル基であり、保護基Ｐ５＊＊およびＰ６＊＊は、ベンジリデン保護基と共に形成し、またはベンジル基であり、保護基Ｐ１０＊＊およびＰ１１＊＊は、ベンジリデン基と共に形成し、またはベンジル基であり、保護基Ｐ１６＊＊は、アセチル基であり、保護基Ｐ１４＊＊は、ベンジル基であり、および保護基Ｐ１５＊＊は、ベンジルオキシカルボニル基（Ｃｂｚ）である。
【０２１１】
好ましくは、一時的な保護基Ｐ２＊＊、Ｐ７＊＊、Ｐ８＊＊、およびＰ９＊＊は、アセチル、ベンゾイル、およびレブリノイル基から選択される。さらにより好ましくは、Ｐ７＊＊、Ｐ８＊＊、およびＰ９＊＊は、アセチル基であり、Ｐ２＊＊はベンゾイル基である。
【０２１２】
好ましくは、Ｐ３＊＊、およびＰ４＊＊は、アリル、ｐ−メトキシベンジル、２−ナフチルメチル、トリイソプロピルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル、トリエチルシリル、トリメチルシリル、からなる群から選択され、より好ましくは、Ｐ３＊＊、およびＰ４＊＊は、同じである。
【０２１３】
好ましくは、保護基Ｐ１３＊＊は、レブリノイルである。
化合物２４および２５のカップリングは、好ましくは、−１０℃〜１０℃の温度で、より好ましくは、−５℃〜＋５℃の温度で、より好ましくは、約０℃の温度で、非極性溶媒と極性非プロトン性溶媒との混合物中で、ＮＩＳ／ＴｆＯＨを用いて処理することによって行われる。
【０２１４】
化合物２７および２８のカップリングは、好ましくは、−１０℃〜＋１０℃の温度で、より好ましくは、−５℃〜＋５℃の温度で、より好ましくは、約０℃の温度で、非極性溶媒と極性非プロトン性溶媒との混合物中で、ＴＭＳＯＴｆを用いて処理することによって行われる。
【０２１５】
化合物３０および３１のカップリングは、好ましくは、−４０℃〜０℃の温度で、好ましくは、−３０℃〜−１０℃の温度で、より好ましくは、約−２０℃の温度で、非極性溶媒中で、ＴＭＳＯＴｆを用いて処理することによって行われる。
【０２１６】
化合物３４および３５のカップリングは、好ましくは、−６０℃〜０℃の温度で、好ましくは、−４０℃〜−２０℃の温度で、より好ましくは、約−３０℃の温度で、非極性溶媒中で、ＮＩＳ／ＴｆＯＨを用いて処理することによって行われる。
【０２１７】
合成工程を促進するために、モジュール的接近法を代替的に使用することができる。したがって、一般式ＩＩ−ｅの化合物は、受容体ＩＩ−ｆを供与体ＩＩ−ｇとカップリングさせることによって容易に接続することができ（スキーム１参照）、ここで、Ｐ１＊＊、Ｐ３＊＊〜Ｐ６＊＊、Ｐ１１＊＊〜Ｐ１６＊＊は、本願に定義される意味を有し、ＬＧ６は、
【０２１８】
【化６７】
0006622804.tif 000084
【０２１９】
から選択される脱離基である。
【０２２０】
【化６８】
0006622804.tif 000085
【０２２１】
［糖複合体］
本発明の他の態様は、−Ｏ−Ｌ−ＮＨ２基の窒素原子を介して免疫原性担体に共有結合される（ｃｏｖａｌｅｎｔｌｙ  ｂｏｕｎｄ）、または共有連結される（ｃｏｖａｌｅｎｔｌｙ  ｌｉｎｋｅｄ）一般式（Ｉ）のサッカライドを含む複合体に関する。言い換えると、本発明の他の態様は、−Ｏ−Ｌ−ＮＨ２基の窒素原子を介して免疫原性担体と接合される一般式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩ−ａ）〜（ＩＩ−ｄ）、（ＩＩＩ）、（ＩＩＩ−ａ）〜（ＩＩＩ−ｄ）、（ＩＶ）、（ＩＶ−ａ）〜（ＩＶ−ｄ）、（Ｖ）、（Ｖ−ａ）〜（Ｖ−ｄ）、または（ＶＩ）のいずれかのサッカライドに関する。一般式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩ−ａ）〜（ＩＩ−ｄ）、（ＩＩＩ）、（ＩＩＩ−ａ）〜（ＩＩＩ−ｄ）、（ＩＶ）、（ＩＶ−ａ）〜（ＩＶ−ｄ）、（Ｖ）、（Ｖ−ａ）〜（Ｖ−ｄ）、または（ＶＩ）の合成サッカライドを含む複合体は、−Ｏ−Ｌ−ＮＨ２基の窒素原子を介して免疫原性担体に共有結合され（ｃｏｖａｌｅｎｔｌｙ  ｂｏｕｎｄ）、または共有結合され（ｃｏｖａｌｅｎｔｌｙ  ｌｉｎｋｅｄ）、一般式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩ−ａ）〜（ＩＩ−ｄ）、（ＩＩＩ）、（ＩＩＩ−ａ）〜（ＩＩＩ−ｄ）、（ＩＶ）、（ＩＶ−ａ）〜（ＩＶ−ｄ）、（Ｖ）、（Ｖ−ａ）〜（Ｖ−ｄ）、または（ＶＩ）のいずれかのサッカライドを免疫原性担体と反応させることによって得られる複合体としても定義される。前記複合体は、ストレプトコッカス  ニューモニアエ血清型４細菌と関連する病気に対する免疫のためのワクチンとして効果的であることが証明された。
【０２２２】
サッカライドは、一般的にＴＩ−２（Ｔ細胞非依存性−２）抗原および低い免疫原として当業者に知られている。ＴＩ−２抗原は、表面曝露された免疫グロブリン受容体へのクロスリンクを介して成熟Ｂ細胞によってのみ認識される抗原である。Ｔ細胞ヘルプなしで、免疫記憶は生じない、さらに、サッカライドは、ヒト糖脂質およびヒト糖タンパク質に対する構造的相同性のために、ヒトにおいて低い免疫原であると知られている。サッカライドの低い免疫原性特性のために、サッカライドは、強力なワクチン生産のために必須な特徴であるＢ細胞による抗体生産、および記憶細胞の形成の両方を生産する能力が低いことは明らかである。
【０２２３】
したがって、強力なサッカライドに基づくワクチンを生産するために、一般式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩ−ａ）〜（ＩＩ−ｄ）、（ＩＩＩ）、（ＩＩＩ−ａ）〜（ＩＩＩ−ｄ）、（ＩＶ）、（ＩＶ−ａ）〜（ＩＶ−ｄ）、（Ｖ）、（Ｖ−ａ）〜（Ｖ−ｄ）、（ＶＩ）、およびテトラサッカライド２４＊のサッカライドは、複合体を提供するために免疫原性担体に共有結合され、複合体は、サッカライドと比較して免疫原性の増加を示す。したがって、本出願の範囲下では、サッカライド断片１
Ｖ＊−［Ｕｘ＋３−Ｕｘ＋２−Ｕｘ＋１−Ｕｘ］ｎ−Ｖ−Ｏ−
（式中、Ｖ＊、Ｕｘ＋３、Ｕｘ＋２、Ｕｘ＋１、Ｕｘ、Ｖ、ｘ、およびｎは、本願に定義される意味を有し、免疫原性担体に対してＯ原子を介して共有結合される。）
からなる複合体も含まれる。
【０２２４】
前記複合体は、一般式（Ｉ）の少なくとも一つの合成サッカライドを含み、免疫原性担体は、少なくとも一つのサッカライド（Ｉ）に対して共有結合される。
驚くべきことに、免疫原性担体に共有結合される一般式（Ｉ）のサッカライドを含む複合体を用いての免疫化は、一般式（Ｉ）のサッカライドの炭水化物部分に対して特異的である高い抗体価の生産をもたらす。前記抗体は、天然のＳＰ−４ポリサッカライドと交差反応し、オプソニン貪食作用および殺菌活性を示すので、Ｓ．ニューモニアエ血清型４細菌に対する保護を付与する。
【０２２５】
この文脈において、用語「免疫原性担体」は、構造体として定義され、免疫原性担体は、複合体を形成するためにサッカライドに接合され、サッカライド自体と比較して免疫原
性の増加を示す。したがって、免疫原性担体への一般式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩ−ａ）〜（ＩＩ−ｄ）、（ＩＩＩ）、（ＩＩＩ−ａ）〜（ＩＩＩ−ｄ）、（ＩＶ）、（ＩＶ−ａ）〜（ＩＶ−ｄ）、（Ｖ）、（Ｖ−ａ）〜（Ｖ−ｄ）、（ＶＩ）、およびテトラサッカライド２４＊のサッカライドの接合は、前記免疫原性担体に対する免疫応答を誘導することなく、効果として一般式（Ｉ）のサッカライドに対する免疫応答を刺激する効果を有する。
【０２２６】
好ましい免疫原性担体は、免疫調節特性を有する担体タンパク質、または担体スフィンゴ糖脂質ある。当業者にとって、担体タンパク質は、ジフテリアトキソイド、変異ジフテリアトキソイド、修飾ジフテリアトキソイド、変異および修飾ジフテリアトキソイド、破傷風トキソイド、修飾破傷風トキソイド、変異破傷風トキソイド、分類不可能なヘモフィルス  インフルエンザ菌（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）の非脂質化細胞表面リポタンパク質（タンパク質Ｄ）、髄膜炎菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）の外膜タンパク質（ＯＭＰ）複合体、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、キーホール  リンペット  ヘモシアニン（ｋｅｙｈｏｌｅ  ｌｉｍｐｅｔ  ｈｅｍｏｃｙａｎｉｎｅ）（ＫＬＨ）、またはコレラトキソイド（ＣＴ）、を含む、またはからなる群から選択されるタンパク質である。本願に使用される用語「トキソイド」は、細菌毒素（通常、外毒素）に関し、細菌の毒性は、化学的(ホルマリン)または熱処理によって活性化されていない、または抑制されており、一方、他の特性、一般的に免疫原性は維持される。本願に使用される変異トキソイドは、組換え体細菌毒素であり、変異トキソイドは、野生型アミノ酸配列を修飾することによってより少ない毒性、または非毒性であるように修飾されている。当該変異は、一つ以上のアミノ酸の置換が可能である。当該変異トキソイドは、修飾されたトキソイドを提供するために、相互接続分子の官能基Ｙと反応することができる官能基を当該表面に示す。前記官能基は、当業者に公知であり、還元剤の存在下で、活性エステル、イソシアネート基、またはアルデヒドと反応することができるリジン残基の第一級アミノ官能基、カルボジイミドによって活性化されることができるグルタミン酸残基の、もしくはアスパラギン酸残基のカルボキシレート官能基、またはシステイン残基のチオール官能基、を含むが限定されない。
【０２２７】
活性化エステルは、Ｎ−（γ−マレイミドブチリルオキシ）スルホスクシンイミドエステル（スルホ−ＧＭＢＳ）、スクシンイミジル（４−ヨードアセチル）アミノベンゾエート（スルホ−ＳＩＡＢ）、スクシンイミジル−３−（ブロモアセトアミド）プロピオネート（ＳＢＡＰ）、ジスクシンイミジルグルタレート（ＤＳＧ）、ジスクシンイミジルアジペート（ＤＳＡ）、２−ピリジルジチオール−テトラオキサテトラデカン−Ｎ−ヒドロキシスクインイミド（ＰＥＧ−４−ＳＰＤＰ）を含む（図２参照）。
【０２２８】
担体タンパク質におけるシステイン残基を、対応するデヒドロアラニンに変換することができ、担体タンパク質の表面上に相互連結分子の官能基Ｘを有する修飾担体タンパク質を提供するために、適切な相互連結分子とさらに反応させることができる。
【０２２９】
一般式（Ｉ）のサッカライドは、リジン残基の第一級アミン官能基を官能基として提示する非毒性変異ジフテリア毒素ＣＲＭ１９７に接合されると特に好ましい。
野生型ジフテリア毒素のようなＣＲＭ１９７は、ジスルフィド結合によって連結される２つのサブユニットからなる５３５アミノ酸の単一ポリペプチド鎖（５８ｋＤ）であり、グリシンをグルタミン酸へと単一アミノ酸置換を有する。ＣＲＭ１９７は、プレベナー（Ｐｒｅｖｎａｒ）などのような数多くの承認された複合体ワクチンにおいて、担体タンパク質として利用される。
【０２３０】
したがって、本発明の好ましい実施形態において、担体タンパク質は、当該表面に相互連結分子の前記官能基Ｘを有する修飾担体タンパク質を提供するために、当該表面に相互
連結分子の官能基Ｙと反応することができるリジン残基の第一級アミノ官能基を提示し、担体タンパク質は、一般式（Ｉ）の化合物のリンカーの末端アミノ基と反応することもできる。
【０２３１】
相互連結分子の前記官能基Ｘは、マレイミド、α−ヨードアセチル、α−ブロモアセチル、およびＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＮＨＳ）、アルデヒド、イミドエステル、カルボン酸、アルキルスルホネート、塩化スルホニル、エポキシド、無水物、カルボネートを含む、またはからなる群から選択される（図３参照）。
【０２３２】
好ましくは、一般式（Ｉ）のサッカライドは、マレイミドによって修飾されている非毒性変異ジフテリア毒素ＣＲＭ１９７に接合される。さらに他の好ましい実施形態において、一般式Ｉのサッカライドは、α−ブロモアセトアミドによって修飾されている非毒性変異ジフテリア毒素ＣＲＭ１９７に接合される。最も好ましい実施形態において、一般式（Ｉ）のサッカライドは、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドアジペートによって修飾されている非毒性変異ジフテリア毒素ＣＲＭ１９７に接合される。
【０２３３】
好ましくは、一般式（ＶＩＩ）
［Ｖ＊−（Ｕｘ＋３−Ｕｘ＋２−Ｕｘ＋１−Ｕｘ）ｎ−Ｖ−Ｏ−Ｌ−ＮＨ−Ｗ］ｃ−ＮＨ−ＣＲＭ１９７
（ＶＩＩ）
の複合体であり、
式中、
ｃは２〜１８を含み、
−Ｗ−は、
【０２３４】
【化６９】
0006622804.tif 000086
【０２３５】
から選択され、
ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から選択される整数を表し、
ｂは、１、２、３、および４から選択される整数を表し、および
Ｖ＊、ＵＸ＋３、ＵＸ＋２、ＵＸ＋１、Ｕｘ、Ｖ、ｘ、およびｎは、本願に定義される意味を有する。
【０２３６】
好ましくは、一般式（ＶＩＩ）において、リンカー−Ｌ−は、−Ｌａ−、−Ｌａ−Ｌｅ−、−Ｌａ−Ｌｂ−Ｌｅ−、および−Ｌａ−Ｌｄ−Ｌｅ−、から選択され、
−Ｌａ−は、−（ＣＨ２）ｏ−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−Ｃ２Ｈ４−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−ＣＨ２−、から選択され、
−Ｌｂ−は、−Ｏ−を表し、
−Ｌｄ−は、−（ＣＨ２）ｑ−、−（ＣＦ２）ｑ−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｑ−Ｃ
２Ｈ４−、および−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｑ−ＣＨ２−、から選択され、
−Ｌｅ−は、−（ＣＨ２）ｐ１−、−（ＣＦ２）ｐ１−、−Ｃ２Ｈ４−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｐ１−、−ＣＨ２−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｐ１−、および−（ＣＨ２）ｐ１−Ｏ−（ＣＨ２）ｐ２−、から選択され、
および、ｏ、ｑ、ｐ１、およびｐ２は、互いに独立して、１、２、３、４、５、および６から選択される整数である。
【０２３７】
さらに、一般式（ＶＩＩ）の複合体が好ましく、式中、−Ｗ−は、
【０２３８】
【化７０】
0006622804.tif 000087
【０２３９】
を表し、ａは、２、３、４、５、および６から選択される整数である。
一般式（ＶＩＩ）の複合体が特に好ましく、式中、
リンカー−Ｌ−は、−Ｌａ−、−Ｌａ−Ｌｅ−、−Ｌａ−Ｌｂ−Ｌｅ−、および−Ｌａ−Ｌｄ−Ｌｅ−、から選択され、
−Ｌａ−は、−（ＣＨ２）ｏ−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−Ｃ２Ｈ４−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−ＣＨ２−、から選択され、
−Ｌｂ−は、−Ｏ−を表し、
−Ｌｄ−は、−（ＣＨ２）ｑ−、−（ＣＦ２）ｑ−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｑ−Ｃ２Ｈ４−、および−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｑ−ＣＨ２−、から選択され、
−Ｌｅ−は、−（ＣＨ２）ｐ１−、−（ＣＦ２）ｐ１−、−Ｃ２Ｈ４−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｐ１−、−ＣＨ２−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｐ１−、および−（ＣＨ２）ｐ１−Ｏ−（ＣＨ２）ｐ２−、から選択され、
ｏ、ｑ、ｐ１、およびｐ２は、互いに独立して、１、２、３、４、５、および６から選択される整数であり、
−Ｗ−は、
【０２４０】
【化７１】
0006622804.tif 000088
【０２４１】
を表し、ａは、２、３、４、５、および６から選択される整数である。
さらにより好ましくは、一般式（ＶＩＩ）の複合体であり、式中、
ｘは１を表し、
Ｖ＊−は、Ｈ−を表し、
リンカー−Ｌ−は、−Ｌａ−、−Ｌａ−Ｌｅ−、−Ｌａ−Ｌｂ−Ｌｅ−、および−Ｌａ−Ｌｄ−Ｌｅ−、から選択され、
−Ｌａ−は、−（ＣＨ２）ｏ−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−Ｃ２Ｈ４−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−ＣＨ２−、から選択され、
−Ｌｂ−は、−Ｏ−を表し、
−Ｌｄ−は、−（ＣＨ２）ｑ−、−（ＣＦ２）ｑ−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｑ−Ｃ２Ｈ４−、および−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｑ−ＣＨ２−、から選択され、
−Ｌｅ−は、−（ＣＨ２）ｐ１−、−（ＣＦ２）ｐ１−、−Ｃ２Ｈ４−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｐ１−、−ＣＨ２−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｐ１−、および−（ＣＨ２）ｐ１−
Ｏ−（ＣＨ２）ｐ２−、から選択され、
ｏ、ｑ、ｐ１、およびｐ２は、互いに独立して、１、２、３、４、５、および６から選択される整数であり、
−Ｗ−は、
【０２４２】
【化７２】
0006622804.tif 000089
【０２４３】
を表し、ａは、２、３、４、５、および６から選択される整数である。
特に好ましくは、一般式（ＶＩＩ）の複合体であり、式中、リンカー−Ｌ−は、−（ＣＨ２）ｏ−を表し、
ｏは、２、３、４、５、および６から選択される整数であり、
−Ｗ−は、
【０２４４】
【化７３】
0006622804.tif 000090
【０２４５】
を表し、ａは、２、３、４、５、および６から選択される整数である。
さらに好ましくは、一般式（ＶＩＩ）の複合体であり、式中、ｘは１を表し、
Ｖ＊−は、Ｈ−を表し、
リンカー−Ｌ−は、−（ＣＨ２）ｏ−を表し、
ｏは、２、３、４、５、および６から選択される整数であり、
−Ｗ−は、
【０２４６】
【化７４】
0006622804.tif 000091
【０２４７】
を表し、ａは、２、３、４、５、および６から選択される整数である。
好ましくは、ｃは２〜１８、より好ましくは、５〜１５、さらにより好ましくは、８〜１２を含む。ｎが１表しても好ましい。
【０２４８】
他の実施形態において、前記免疫原性担体は、免疫調節特性を有するスフィンゴ糖脂質であると好ましく、より好ましくは、（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−（α−Ｄ−ガラクトピラノシル）−２−ヘキサコサノイルアミノオクタデカン−３，４−ジオールである。本願に使用される用語、免疫調節特性を有するスフィンゴ糖脂質は、標的抗原に対して免疫システム応答を刺激することが可能な適切なスフィンゴ糖脂質に関するが、スフィンゴ糖脂質自体において上記に定義されるような免疫を付与しない。
【０２４９】
本願に使用されるスフィンゴ糖脂質は、スフィンゴ脂質にα−連結される炭水化物部分を含む化合物である。好ましくは、炭水化物部分は、ヘキソピラノースであり、最も好ましくは、α−Ｄ−ガラクトピラノースである。当業者にとって、スフィンゴ脂質は、脂肪
酸に対してアミド結合を介して連結されるＣ１８アミノアルコールを含む脂質のクラスである。Ｃ１８アミノアルコールは、ヒドロキシル基を用いて好ましくは、モノ−、ジ−、またはポリ置換される。特に好ましくは、Ｃ１８アミノアルコールは、フィトスフィンゴシンである。脂肪酸は、好ましくは、１６個〜２８個、より好ましくは、１８個〜２６個の炭素数の飽和アルキル鎖を有するモノカルボン酸である。免疫調節特性を有するスフィンゴ糖脂質は、（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−（α−Ｄ−ガラクトピラノシル）−２−ヘキサコサノイルアミノオクタデカン−３，４−ジオールを含むが制限されず、ナチュラルキラー（ＮＫ）活性、およびナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞によるサイトカイン産生を刺激することができ、インビボにおいて強力な抗腫瘍活性を示す（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９９８，９５，５６９０）。
【０２５０】
免疫調節特性を有し、スフィンゴ糖脂質を有する一般式Ｉのサッカライドの複合体は、熱安定性であるという利点を有する。適切な複合体であるために、免疫調節特性を有するスフィンゴ糖脂質において官能基が導入される。前記官能基は、一般式Ｉのサッカライドの複合体を提供するために、一般式Ｉのサッカライドのリンカーにおける末端アミノ基と、または免疫調節特性を有する修飾スフィンゴ糖脂質を提供するために、相互連結分子の官能基Ｙと、直接反応する傾向がある。
【０２５１】
好ましくは、前記官能基は、免疫調節特性を有するスフィンゴ糖脂質の炭水化物部分のＣ６に導入される。したがって、免疫調節特性を有するスフィンゴ糖脂質は、官能基を用いて官能基化され、サッカライドの末端アミノ基と、または相互連結分子の官能基Ｙと反応する傾向がある。アミノ基と反応する傾向がある官能基は、活性化エステル、イソシアネート基、アルデヒド、エポキシド、イミドエステル、カルボン酸、アルキルスルホネート、および塩化スルホニルを含むが制限されない。相互連結分子の官能基Ｙと反応する傾向がある官能基は、相互連結分子の官能基Ｘを提示する免疫調節特性を有する修飾スフィンゴ糖脂質を提供することになり、アミン、アルコール、チオール、活性化エステル、イソシアネート基、アルデヒド、エポキシド、ビニル、イミドエステル、カルボン酸、アルキルスルホネート、塩化スルホニル、ビニル基、アルキニル基、およびアジド基を含むが制限されない。
【０２５２】
好ましくは、免疫調節特性を有するスフィンゴ糖脂質における炭水化物部分のＣ６に導入される官能基は、アミン、チオール、アルコール、カルボン酸、ビニル、マレイミド、α−ヨードアセチル、α−ブロモアセチル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＮＨＳ）、２−ピリジルジチオールを含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）、または含む（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）群から選択される。
【０２５３】
相互連結分子の前記官能基Ｘは、マレイミド、α−ヨードアセチル、α−ブロモアセチル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＮＨＳ）、アルデヒド、カルボン酸、エポキシド、アルキルスルホネート、塩化スルホニル、無水物、カルボネートを含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）、またはからなる群から選択される。
【０２５４】
本願に使用される用語「相互連結分子」は、官能基Ｘおよび官能基Ｙを含む二官能性分子に関し、ここで、官能基Ｘは、リンカー−Ｌ−の末端アミノ基と反応することができ、官能基Ｙは、免疫原性担体に、または固体支持体に提示する官能基と反応することができる。
【０２５５】
一般式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩ−ａ）、（ＩＩ−ｂ）、（ＩＩ−ｃ）、（ＩＩ−ｄ）、（ＩＩＩ）、（ＩＩＩ−ａ）、（ＩＩＩ−ｂ）、（ＩＩＩ−ｃ）、（ＩＩＩ−ｄ）、（ＩＶ）、（ＩＶ−ａ）、（ＩＶ−ｂ）、（ＩＶ−ｃ）、（ＩＶ−ｄ）、（Ｖ）、（Ｖ−ａ）、（Ｖ−ｂ）、（Ｖ−ｃ）、（Ｖ−ｄ）、もしくは（ＶＩ）のサッカライド、またはテ
トラサッカライド２４＊を含む複合体は、−Ｏ−Ｌ−ＮＨ２基の窒素原子を介して免疫原性担体に共有結合され（ｃｏｖａｌｅｎｔｌｙ  ｂｏｕｎｄ）、または共有結合され（ｃｏｖａｌｅｎｔｌｙ  ｌｉｎｋｅｄ）、特に、一般式（ＶＩＩ）の複合体は、ヒトおよび／または動物宿主において保護免疫応答を誘引するので、細菌の莢膜ポリサッカライドにおいて、次のサッカライド断片の一つを含む細菌と関連する病気の予防および／または治療に有用である：
−３）−β−Ｄ−ＭａｎＮＡｃ−（１，３）−α−Ｌ−ＦｕｃＮＡｃ−（１，３）−α−Ｄ−ＧａｌＮＡｃ−（１，４）−α−Ｄ−Ｇａｌ−２，３（Ｓ）Ｐｙｒ−（１−；
−４）−α−Ｄ−Ｇａｌ−２，３（Ｓ）Ｐｙｒ−（１，３）−β−Ｄ−ＭａｎＮＡｃ−（１，３）−α−Ｌ―ＦｕｃＮＡｃ−（１，３）−α−Ｄ−ＧａｌＮＡｃ−（１−；
−３）−α−Ｄ−ＧａｌＮＡｃ−（１，４）−α−Ｄ−Ｇａｌ−２，３（Ｓ）Ｐｙｒ−（１，３）−β−Ｄ−ＭａｎＮＡｃ−（１，３）−α−Ｌ−ＦｕｃＮＡｃ−（１−；
−３）−α−Ｌ−ＦｕｃＮＡｃ−（１，３）−α−Ｄ−ＧａｌＮＡｃ−（１，４）−α−Ｄ−Ｇａｌ−２，３（Ｓ）Ｐｙｒ−（１，３）−β−Ｄ−ＭａｎＮＡｃ−（１−。
【０２５６】
好ましくは、上述の莢膜ポリサッカライドの一つを含む細菌は、ストレプトコッカス  ニューモニアエ血清型４である。
好ましい実施形態において、免疫原性担体に接合される一般式Ｉのサッカライドを含む複合体は、細菌と関連する病気、特に、細菌の莢膜ポリサッカライドにおいて次のサッカライド断片：−３）−β−Ｄ−ＭａｎＮＡｃ−（１，３）−α−Ｌ−ＦｕｃＮＡｃ−（１，３）−α−Ｄ−ＧａｌＮＡｃ−（１，４）−α−Ｄ−Ｇａｌ−２，３（Ｓ）Ｐｙｒ−（１−；−４）−α−Ｄ−Ｇａｌ−２，３（Ｓ）Ｐｙｒ−（１，３）−β−Ｄ−ＭａｎＮＡｃ−（１，３）−α−Ｌ―ＦｕｃＮＡｃ−（１，３）−α−Ｄ−ＧａｌＮＡｃ−（１−；−３）−α−Ｄ−ＧａｌＮＡｃ−（１，４）−α−Ｄ−Ｇａｌ−２，３（Ｓ）Ｐｙｒ−（１，３）−β−Ｄ−ＭａｎＮＡｃ−（１，３）−α−Ｌ−ＦｕｃＮＡｃ−（１−；−３）−α−Ｌ−ＦｕｃＮＡｃ−（１，３）−α−Ｄ−ＧａｌＮＡｃ−（１，４）−α−Ｄ−Ｇａｌ−２，３（Ｓ）Ｐｙｒ−（１，３）−β−Ｄ−ＭａｎＮＡｃ−（１−、の一つを含む細菌と関連する病気、好ましくは、ストレプトコッカス  ニューモニアエ血清型４と関連する病気、の予防および／または治療に有用であり、ここで前記疾患は、肺炎、髄膜炎、中耳炎、菌血症、並びに慢性気管支炎、副鼻腔炎、関節炎、および結膜炎の急性悪化を含む。
【０２５７】
［医薬組成物］
本発明の他の態様は、複合体を含む医薬組成物、またはワクチンに関し、複合体は、−Ｏ−Ｌ−ＮＨ２の窒素原子を介して免疫原性担体に共有結合される（ｃｏｖａｌｅｎｔｌｙ  ｂｏｕｎｄ）、または共有結合される（ｃｏｖａｌｅｎｔｌｙ  ｌｉｎｋｅｄ）本発明に係るサッカライドを含み、および／または、少なくとも一つの薬学的に許容できるアジュバントおよび／または賦形剤と共に本発明に係る一つのサッカライドを含む。前記医薬組成物は、ヒトおよび動物宿主において保護免疫応答を上昇させるために使用することができる。理想的には、医薬組成物はヒトにおいて使用するために適切である。
【０２５８】
本発明の他の態様において、前記医薬組成物、またはワクチンは、ストレプトコッカス
ニューモニアエ血清型６Ｂ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆ、および２３Ｆ、好ましくは、血清型１、３、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆ、および２３Ｆ、より好ましくは、血清型１、２、３、５、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ｆ、および３３Ｆを含む、またはからなる群から選択されるストレプトコッカス  ニューモニアエ細菌における、少なくとも一つの莢膜ポリサッカライド、および／または莢膜ポリサッカライド断片、および／またはそれらのタンパク質複合体をさらに含む。
【０２５９】
本願に使用される用語「アジュバント」は、免疫学的アジュバント、すなわち、ワクチン組成において使用される物質に関し、アジュバントに関連する抗原性ではなく、ワクチンに含まれる与えられた抗原に対する免疫応答を高めることによって前記ワクチンの効果を修飾、または増加させる。当業者にとって、免疫学的アジュバントの古典的に認識される例は、油性エマルジョン（例えば、フロイント（Ｆｒｅｕｎｄ’ｓ）アジュバント、ＭＦ５９（登録商標）など）；サポニン；アルミニウムまたはカルシウム塩（例えば、アルム（ａｒｍ）など）；非イオン性ブロックポリマー界面活性剤、および他多数を含むが制限されない。
【０２６０】
医薬組成物は、好ましくは、特に投与の時点では水性形であるが、非水性液体形で、または乾燥形（例えば、ゼラチンカプセルなどのような、または凍結乾燥物などのような）で存在することもできる。
【０２６１】
医薬組成物は、例えば、チオメルサール、または２−フェノキシエタノールなどのような一つ以上の防腐剤を含んでもよい。水銀を使わない組成物が好ましく、防腐剤を使わないワクチンを調製することができる。
【０２６２】
医薬組成物は、緊張性を制御するために、例えばナトリウム塩などのような生理学的塩を含んでもよい。塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）が典型的であり、１〜２０ｍｇ／ｍｌで存在してもよい。存在してもよい他の塩は、塩化カリウム、リン酸二水素カリウム、リン酸二ナトリウム無水物、塩化マグネシウム、塩化カルシウムなどを含む。
【０２６３】
医薬組成物は、２００ｍＯｓｍ／ｋｇ〜４００ｍＯｓｍ／ｋｇのオスモル濃度を有することができる。
医薬組成物は、ただの水（例えば、ｗ．ｆ．ｉ．など）中の化合物（不溶性の金属塩の有無にかかわらず）を含むが、通常１つ以上のバッファーを含むだろう。典型的なバッファーは、リン酸バッファー；トリスバッファー；ホウ酸バッファー；コハク酸バッファー；ヒスチジンバッファー（特に、水酸化アルミニウムアジュバントを用いる）；またはクエン酸バッファー、を含む。バッファー塩は、５〜２０ｍＭ範囲で典型的に含まれるだろう。
【０２６４】
医薬組成物は、典型的に、ｐＨ６．０〜ｐＨ８．０などのｐＨ５．０〜ｐＨ９．５を有する。
医薬組成物は、好ましくは、滅菌しており、グルテンを用いていない。
【０２６５】
医薬組成物は、動物（および、特に、ヒト）患者に対する投与に適しているので、人用および獣医用を含む。医薬組成物は、患者に組成物を投与するステップを含み、患者の免疫応答を上昇させる方法において使用されてもよい。
【０２６６】
本発明の医薬組成物は、被検体がＳ．ニューモニアエ血清型４にさらされる前、および／または被検体がＳ．ニューモニアエ血清型４にさらされる後に投与されてもよい。
医薬組成物は、ユニットドーズ形で調製されてもよい。いくつかの実施形態において、ユニットドーズは、例えば、約０．５ｍＬなどの０．１〜１．０ｍＬの容量を有してもよい。
【０２６７】
本発明は、本発明の医薬組成物を含む、例えば、ユニットドーズ含む輸送装置（例えば、シリンジ、ネブライザー、噴霧器、吸入器、皮膚パッチなど）も提供する。この装置を、脊椎動物被検体に組成物を投与するために使用することができる。
【０２６８】
本発明は、本発明の医薬組成物を含む、例えば、ユニットドーズ含む滅菌容器（例えば
、バイアルなど）も提供する。
本発明は、本発明の医薬組成物のユニットドーズも提供する。
【０２６９】
本発明は、本発明の医薬組成物を含む密封容器も提供する。適切な容器は、例えばバイアルなどを含む。
本発明の医薬組成物は、様々な形で調製されてもよい。例えば、組成物は、液体溶液として、または懸濁液として、注射可能なように調製されてもよい。注射前の液体ビヒクル（ｖｅｈｉｃｌｅ）の溶液に、または懸濁液に適している固体形も調製することができる（例えば、凍結乾燥組成物、またはスプレー凍結乾燥組成物など）。組成物は、例えば、軟膏、クリーム、または粉末などの局所投与のために調製されてもよい。組成物は、例えば、錠剤またはカプセルとして、スプレーとして、またはシロップとしてなど（任意に香りをつけて）経口投与用に調製されてもよい。組成物は、微粉末または噴霧を用いて、例えば吸入器によってなどで肺投与用に調製されてもよい。組成物は、坐剤として調製されてもよい。組成物は、例えば、噴霧として、または滴下としてなどで、鼻用、耳用または眼用に調製されてもよい。筋肉内投与の注射が一般的である。
【０２７０】
医薬組成物は、アジュバントの有効量、すなわち、個々に投与される場合、単回投与またはシリーズの一部として、共投与されるＳ．ニューモニアエ血清型４抗原に対する免疫応答を高めるのに効果的な量、を含んでもよい。この量は、治療される個々の健康状態および体調、年齢、治療される個々の分類群（例えば非ヒト霊長類、霊長類など）、合成抗体に対する個々の免疫システムの能力、所望とされる保護の程度、ワクチン製剤、医療状況における治療する医師の評価、および、他の関連因子、に依存して変更することができる。量は、慣例の試験によって決定されることができる比較的広い範囲内に収まるだろう。
【０２７１】
本発明のワクチン製剤およびワクチンの投与のための技術は、「レミントンの薬科学（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）  マック出版社（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．）、ペンシルベニア州イーストンにおいて明らかにされてもよい。
【０２７２】
本発明に係る一つの複合体の、または一般式（Ｉ）の一つのサッカライドの治療有効量は、病気に対して少なくとも部分的な免疫化をもたらす化合物の量に関する。当該化合物の毒性および治療効果は、細胞培養物、または実験動物における標準的な薬学的、薬理学的、および毒物学的手順によって決定されることができる。毒性効果と治療効果との用量比は、治療指標になる。投与される組成物の実際量は、治療される患者、患者の体重、苦痛の重症度、投与方法、処方する医師の判断に依存するだろう。
【０２７３】
本発明の他の態様は、ヒトおよび／動物宿主においてＳ．ニューモニアエ血清型４に対する免疫応答を誘発する方法に関し、前記方法は、前記ヒトおよび／動物宿主に対して、一般式（Ｉ）のサッカライド、および／または一般式（Ｉ）のサッカライドの塩、および／またはそれらの複合体、またはそれらの医薬組成物を投与することを含む。ヒトおよび／動物宿主においてＳ．ニューモニアエ血清型４によって引き起こされる病気を治療する、または予防する本発明に係る方法は、前記ヒトおよび／動物宿主に対して、一般式（Ｉ）のサッカライド、および／または一般式（Ｉ）のサッカライドの塩、および／またはそれらの複合体、またはそれらの医薬組成物の少なくとも一つを投与することを含む。
【０２７４】
［免疫学的アッセイ］
本発明のさらに他の態様は、細菌の莢膜ポリサッカライドにおいて、次のサッカライド断片：
−３）−β−Ｄ−ＭａｎＮＡｃ−（１，３）−α−Ｌ−ＦｕｃＮＡｃ−（１，３）−α−
Ｄ−ＧａｌＮＡｃ−（１，４）−α−Ｄ−Ｇａｌ−２，３（Ｓ）Ｐｙｒ−（１−；
−４）−α−Ｄ−Ｇａｌ−２，３（Ｓ）Ｐｙｒ−（１，３）−β−Ｄ−ＭａｎＮＡｃ−（１，３）−α−Ｌ―ＦｕｃＮＡｃ−（１，３）−α−Ｄ−ＧａｌＮＡｃ−（１−；
−３）−α−Ｄ−ＧａｌＮＡｃ−（１，４）−α−Ｄ−Ｇａｌ−２，３（Ｓ）Ｐｙｒ−（１，３）−β−Ｄ−ＭａｎＮＡｃ−（１，３）−α−Ｌ−ＦｕｃＮＡｃ−（１−；
−３）−α−Ｌ−ＦｕｃＮＡｃ−（１，３）−α−Ｄ−ＧａｌＮＡｃ−（１，４）−α−Ｄ−Ｇａｌ−２，３（Ｓ）Ｐｙｒ−（１，３）−β−Ｄ−ＭａｎＮＡｃ−（１−
の一つを含む、細菌に対する抗体の検出のための免疫学的アッセイにおけるマーカーとして使用するための一般式（Ｉ）のサッカライドに関する。
【０２７５】
当該アッセイは、例えば、ストレプトコッカス  ニューモニアエ血清型４などのような細菌に対する抗体の検出のために有用なマイクロアレイおよびＥＬＩＳＡを含む。当該細菌は、細菌の莢膜ポリサッカライドにおいて、上述のサッカライド断片の一つを含む。
【０２７６】
本発明のサッカライドは、細菌の莢膜ポリサッカライドにおいて、上述のサッカライド断片の一つを含む、細菌に対する抗体の検出のために有用な免疫学的アッセイを提供するために、固体支持体に容易に接合されることができる。前記固体支持体は、固体支持体の表面に官能基が存在し、官能基は、修飾固体支持体を提供するために、一般式（Ｉ）のサッカライドのアミド基と、または相互連結分子の官能基Ｙと、反応する傾向があり、固体支持体の表面に、相互連結分子の官能基Ｘが存在し、一般式（Ｉ）のサッカイライドのアミノ基とさらに反応することができる。本発明に係る実施形態において、固体支持体は、マイクロアレイスライドであり、修飾マイクロアレイスライドを提供するために、マイクロアレイスライドの表面に、相互連結分子の官能基Ｙと反応する傾向がある官能基が存在し、マイクロアレイスライドの表面に、相互連結分子の官能基Ｘが存在する。当該マイクロアレイスライドの例は、コーニング（Ｃｏｒｎｉｎｇ）（登録商標）エポキシド被覆スライド、またはコーニング（Ｃｏｒｎｉｎｇ）（登録商標）ＧＡＰＳ（商標）ＩＩ被覆スライドを含むが制限されない。
【０２７７】
好ましい実施形態において、固体支持体は、固体支持体の表面に官能基が存在するマイクロアレイスライドであり、一般式（Ｉ）のサッカライドのアミノ基と、より好ましくは、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）活性化エステルと反応する傾向がある。当該マイクロアレイスライドは、例えばコードリンク（Ｃｏｄｅ  Ｌｉｎｋ）（登録商標）ＮＨＳスライドである。
【図面の簡単な説明】
【０２７８】
【図１】図１は、Ｓ．ニューモニアエ血清型４莢膜ポリサッカライド繰り返しユニットの化学構造を示す。
【図２】図２は、本発明に係る市販の相互連結分子の例を提供する。
【図３】図３は、本発明に係る相互連結分子の官能基Ｘの例を提供する。
【図４】ピルベート化テトラサッカライド２４＊（スポットＢ）、脱ピルベート化テトラサッカライド１６＊（スポットＧ）、トリサッカライド２０＊（スポットＩ）を、それらの多くの切除配列と共に含むスライドの、およびそれらの非天然の立体化学を有するサッカライドを含むスライドのプリントパターン。タンパク質ＣＲＭ１９７、およびＢＳＡ−ＧｌｃＮＡｃ複合体は、担体タンパク質に対する抗体応答を、および複合体化中に使用される部分「リンカー相互連結分子」を、それぞれ決定するためにプリントされた。コントロールとして、天然のＳ．ニューモニアエポリサッカライドをプリントした。スポットＡ：（２Ｓ，３ａＲ，４Ｓ，６Ｒ，７Ｓ，７ａＳ）−４−（（５−アミノペンチル）オキシ）−７−ヒドロキシ−６−（ヒドロキシル−メチル）−２−メチルテトラヒドロ−３ａＨ−［１，３］ジオキソロ［４，５−ｃ］ピラン−２−カルボン酸；スポットＢ：ピルベート化テトラサッカライド２４＊；スポットＣ：ジサッカライド１８＊；スポットＤ：Ｎ−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−２−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（５−アミノペンチル）オキシ）−４，５−ジヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−４，５−ジヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）アセトアミド；スポットＥ：Ｎ−（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−３−アセトアミド−２−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（５−アミノペンチル）オキシ）−４，５−ジヒドロキシ−２−（ヒドロキシ−メチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−５−ヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）オキシ）−４，５−ジヒドロキシ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）アセトアミド；スポットＦ：Ｓ．ニューモニアエ細胞壁ポリサッカライド（ＳＳＩ  ダイアグノスティカ（Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａ））；スポットＧ：テトラサッカライド１６＊；スポットＨ：組換え型ＣＲＭ１９７(Ｐｆｅｎｅｘ  Ｉｎｃ.)；スポットＩ：トリサッカライド２０＊；スポットＪ：（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）−２−（（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）−２−（（５−アミノペンチル）オキシ）−４，５−ジヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリオール；スポットＬ：モノサッカライド２１＊；スポットＫ：抗−「リンカー相互連結分子」抗体応答のためのＢＳＡ−ＧｌｃＮＡｃコントロール複合体；スポットＭ：Ｓ．ニューモニアエ血清型４ＣＰＳ（ＳＳＩ  ダイアグノスティカ）；スポットＮ：Ｓ．ニューモニアエ血清型２ＣＰＳ（ＳＳＩ  ダイアグノスティカ）；スポットＯ：Ｓ．ニューモニアエ血清型３ＣＰＳ（ＳＳＩ  ダイアグノスティカ）；
【図５】図５は、グリカンアレイを用いて、ウサギＳＰ４型血清（ＳＳＩ  ダイアグノスティカ）およびヒト参照血清００７ｓｐにおける合成ＳＰ４ベースのグリカンに対する抗体の検出を示す。細胞壁ポリサッカライド（ＣＷＰＳ）およびＳＰ４莢膜ポリサッカライド（ＣＰＳ）を用いた競合アッセイは、ＳＰ４ＣＰＳに対する抗体の同一性を確認するために行った（図４に係るプリンティングパターン）。非ピルベート化テトラサッカライド１６＊と比較して、ピルベート化サッカライド２４＊のシグナルは、天然のＳ．ニューモニアエ血清型４ＣＰＳによって、はるかにより効果的に阻害されることができ、このことは相互反応性抗体の増加を示す。Ｓ．ニューモニアエ細胞壁ポリサッカライドとの競合は、シグナル強度に影響を与えない（さらに図６参照）。
【図６】図６は、図５に示されるように、血清００７ｓｐを用いての競合実験の蛍光強度の定量を示す。血清００７ｓｐを用いての競合実験におけるシグナル減少は、非ピルベート化テトラサッカライド１６＊（スポットＧ）と比較してピルベート化テトラサッカライド２４＊（スポットＢ）でより強くなり、このことは、より高い抗体交差反応性を示す。
【０２７９】
次の実施例は、本発明の好ましい実施形態を示すために含まれる。実施例において開示される技術は、本発明の実施においてよく機能するために発明者によって発見された表現技術に従うので、当該実施において好ましい形態を構成するために考慮されることができることを当業者によって認識されるべきである。しかしながら、当業者は、本発明の開示の下で、いくつかの変更が特定の実施形態において行われることができ、開示され、本発明の精神および範囲から逸脱することなく同様の、または類似の結果をさらに得られることを認識するべきである。
【０２８０】
本発明の様々な態様におけるさらなる修正および代替的な実施形態は、この明細書を考
慮して当業者に明らかになるだろう。加えて、この明細書は、実例としてのみ解釈されるべきであり、本発明を実行する一般的な方法を当業者に教示する目的のためである。本願に示される、および記述される本発明の形態は、実施形態の実施例としてとらえられるべきであることを、理解されるべきである。要素および材料は、本願に説明される、および記述されるものに置換されてもよく、部分および工程は、転換されてもよく、本発明のある特徴は、独立して利用されてもよく、全ては、本発明のこの明細書における利点を有すると当業者に明らかになるだろう。変更は、次のクレームに記述されるような本発明の精神および範囲から逸脱することなく、本願に記述される要素において行われてもよい。
【発明を実施するための形態】
【０２８１】
［実施例］
Ａ．化学合成
一般的な情報：
特に明記されない限り、商業用グレード溶媒を使用した。乾燥溶媒を、水乾燥溶媒システム（Ｗａｔｅｒｓ  Ｄｒｙ  Ｓｏｌｖｅｎｔ  ｓｉｓｔｅｍ）から得た。クロマトグラフィーのための溶媒は、使用前に蒸留した。鋭敏反応を、熱乾燥ガラス容器で、アルゴン雰囲気下で行った。分析的薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を、０．２５ｍｍのシリカゲルの厚さでプレコートされたキエセルゲル（Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ）６０  Ｆ２５４ガラスプレートで行った。スポットをバニリン溶液（９５％ＥｔＯＨ中に６％（ｗ／ｖ）バニリンおよび１０％（ｖ／ｖ）硫酸を有する溶液）、またはハネシアン染色液（水中に、５％（ｗ／ｖ）モリブデン酸アンモニウム、１％（ｗ／ｖ）硫酸セリウム（ＩＩ）、および１０％（ｖ／ｖ）硫酸を有する溶液）を用いて染色することによって可視化した。シリカカラムクロマトグラフィーを、フルカ（Ｆｌｕｋａ）  キエセルゲル６０（２３０〜４００メッシュ）で行った。
【０２８２】
１Ｈ、１３Ｃ、および二次元ＮＭＲスペクトルを、２９６Ｋでバリアン（Ｖａｒｉａｎ）４００−ＭＲを用いて測定した。化学シフト（ｄ）を、それぞれの残留溶媒ピークに対して１００万分の１で報告した（ＣＤＣｌ３：１Ｈ  ＮＭＲにおいてｄ７．２７、および１３Ｃ  ＮＭＲにおいて７７．２３、ＣＤ３ＯＤ：１Ｈ  ＮＭＲにおいてｄ３．３１、および１３Ｃ  ＮＭＲにおいて４９．１５）。次の略語を、ピーク多重度を示すために使用する：ｓ  シングレット、ｄ  ダブレット、ｄｄ  ダブレットのダブレット、ｔ  トリプレット、ｄｔ  トリプレットのダブレット、ｑ  カルテット、ｍ  マルチプレット。カップリング定数（Ｊ）を、ヘルツ（Ｈｚ）で報告する。光学回転（ＯＲ）測定を、シュミット（Ｓｃｈｍｉｄｔ）＆ハンシュ（Ｈａｅｎｓｈ）  ユニポル（ＵｎｉＰｏｌ）  Ｌ１０００ポラリメーターを用いて、括弧に記述される溶媒で、λ＝５８９ｎｍ、およびｇ／１００ｍＬで表示される濃度（ｃ）で行った。高分解能質量分析法（ＨＲＭＳ）を、ベルリン自由大学、質量分析の中核施設で、アジレント（Ａｇｉｌｅｎｔ）６２１０  ＥＳＩ−ＴＯＦ質量分析計を用いて行った。赤外線（ＩＲ）スペクトルを、パーキン  エルマー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）１００  ＦＴＩＲ分光計を用いて測定した。
【０２８３】
実施例１Ａ：（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（（ベンジルオキシ）メチル）−６−（エチルチオ）−４，５−ビス（ナフタレン−２−イルメトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−オル（１＊）の合成
【０２８４】
【化７５】
0006622804.tif 000092
【０２８５】
（２Ｓ，４ａＲ，６Ｓ，７Ｒ，８Ｓ，８ａＳ）−６−（エチルチオ）−７，８−ビス（ナフタレン−２−イルメトキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン（Ｓ．Ｄ.Ｋｈａｊａ，Ｖ．Ｋｕｍａｒ，Ｍ．Ａｈｍａｄ，Ｊ．Ｘｕｅ，Ｋ．Ｌ．Ｍａｔｔａ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．２０１０，５１，４４１１−４４１４.）（５．５ｇ、９．２ｍｍｏｌ）を、活性化４ÅＭＳ（５．０ｇ）と共に１０分間ＤＣＭ（９０ｍＬ）中で撹拌し、０℃に冷却した。トリエチルシラン（１１．８６ｍＬ、７４．２ｍｍｏｌ）、続いてＴＦＡ（４．２９ｍＬ、５５．７ｍｍｏｌ）を滴下で加え、室温で４時間反応混合物を撹拌し、水を用いてクエンチした。ＣＨ２Ｃｌ２を用いて水層を抽出し、有機層を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、塩水を用いて洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮し、オイルを得た。溶出剤としてトルエンおよびアセトン（０〜７．５％）を用いてフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製し、無色オイルとして化合物１＊を得た（４．４ｇ、８０％）。［α］Ｄ２０＝＋２９．７°（ｃ＝１．１０，ＣＨＣｌ３）；ＩＲvｍａｘ（フィルム（ｆｉｌｍ））３５７０，２８５８，１３６２，１０８１，８１８，７３５ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ７．９３−７．７４（ｍ，８Ｈ），７．７１（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．５２−７．４１（ｍ，５Ｈ），７．４０−７．２９（ｍ，４Ｈ），５．０９（ｄ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，１Ｈ），５．０１−４．７７（ｍ，３Ｈ），４．６０（ｄ，Ｊ＝１．３Ｈｚ，２Ｈ），４．４９（ｄｄ，Ｊ＝９．７，１．６Ｈｚ，１Ｈ），４．１７（ｓ，１Ｈ），３．８８−３．７０（ｍ，３Ｈ），３．６９−３．５５（ｍ，２Ｈ），２．９１−２.６６（ｍ，２Ｈ），１．３５（ｔｄ，Ｊ＝７．４，１．７Ｈｚ，３Ｈ）.１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１３８．１，１３５．９，１３５．３，１３３．４，１３３．３，１３３．２（２Ｃ），１２８．６，１２８．５，１２８．２，１２８．１（２Ｃ），１２７．９（２Ｃ），１２７．８（２Ｃ），１２７．１，１２６．８，１２６．５，１２６.３，１２６．２，１２６．１，１２６．０，１２５．９，８５．３，８２．４，７８．２，７７．１，７６．０，７３．９，７２．３，６９．５，６７．１，２５．０，１５．３；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：計算値Ｃ３７Ｈ３８Ｏ５Ｓ［Ｍ＋Ｎａ］＋６１７．２３３８，測定値：６１７．２３４２.
実施例２Ａ：（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（（ベンジルオキシ）メチル）−６−（エチルチオ）−４，５−ビス（ナフタレン−２−イルメトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イルベンゾエート（２＊）の合成
【０２８６】
【化７６】
0006622804.tif 000093
【０２８７】
０℃に冷却したピリジン（３０ｍＬ）中に１＊（４．３ｇ、７．２３ｍｍｏｌ）を有する溶液に、塩化ペンゾイル（２．５２ｍＬ、２１．７ｍｍｏｌ）を加え、室温で１３時間
撹拌した。反応混合物を、水を用いて希釈し、エーテルを用いて水層を抽出した。有機層を、水、１．０Ｍ  ＨＣｌ、ブラインを用いて洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮し、オイルを得た。溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（０〜１０％）を用いてフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製し、オイルとして化合物２＊を得た（３．８ｇ、７５％）。［α］Ｄ２０＝＋７９．９°（ｃ＝１．６０，ＣＨＣｌ３）；ＩＲｖｍａｘ（フィルム）２８６２，１７２１，１２７２，１０９５，８１５，７０１ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．１８−８．０７（ｍ，２Ｈ），７．８４−７．７１（ｍ，６Ｈ），７．６９（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），７．６５−７．５５（ｍ，２Ｈ），７．５４−７．３４（ｍ，９Ｈ），７．３２−７．２８（ｍ，２Ｈ），７．２７−７．２０（ｍ，２Ｈ），５．９７（ｄｄ，Ｊ＝３．０，０．９Ｈｚ，１Ｈ），５．０４（ｔ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，２Ｈ），４．９６（ｄ，Ｊ＝１０．６Ｈｚ，１Ｈ），４．７６（ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，１Ｈ），４．５９（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），４．５３（ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，１Ｈ），４．４６（ｄ，Ｊ＝１１.８Ｈｚ，１Ｈ），３．９１−３．８６（ｍ，１Ｈ），３．８５−３．７３（ｍ，２Ｈ），３．６７（ｄｄ，Ｊ＝９．５，５．９Ｈｚ，１Ｈ），３．６０（ｄｄ，Ｊ＝９.５，７．０Ｈｚ，１Ｈ），２．８３（ｑｑ，Ｊ＝１２．６，７．４Ｈｚ，２Ｈ），１．３７（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  １６６．０，１３７．７，１３５．８，１３５．４，１３３．８，１３３．４（２Ｃ），１３３．３，１３３．２，１３３．１，１３０．３，１３０．２，１３０．０，１２８．６（２Ｃ），１２８．５，１２８．２，１２８．１（２Ｃ），１２７．９，１２７．８（２Ｃ），１２７．８，１２７．２，１２７．０，１２６．６，１２６．３，１２６．１，１２５．９，８５．６，８１．３，７８．０，７６．３，７６．１，７３．９，７１．９，６８．５，６７．８，２５．２，１５．３；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：計算値Ｃ４４Ｈ４２Ｏ６Ｓ［Ｍ＋Ｎａ］＋７２１．２６００、測定値：７２１．２６００.
実施例３Ａ：（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（５−（ベンジル（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）ペンチル）オキシ）−２−（（ベンジルオキシ）メチル）−４，５−ビス（ナフタレン−２−イルメトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イルベンゾエート（３＊）の合成
【０２８８】
【化７７】
0006622804.tif 000094
【０２８９】
エーテルおよびＤＣＭ（３：１、３６ｍＬ：１２ｍＬ）の混合物中に、マイクロウェーブ活性化４Å酸洗浄モレキュラーシーブス（ＡＷＭＳ）（３．２ｇ）、化合物２＊（２ｇ、２．８６ｍｍｏｌ）、およびＣ５アミノペンチルリンカー（１．２１ｇ、３．７２ｍｍｏｌ）を有する溶液を室温で１５分間撹拌した。反応混合物を、０℃に冷却し、ＮＩＳ（０．７８ｇ、３．１５ｍｍｏｌ）、続いてＴｆＯＨ（０．２５ｍＬ、０．２８ｍｍｏｌ）を加え、３０分間撹拌した。反応混合物を飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液を用いて希釈した。エーテルを用いて水層を抽出し、有機層を、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮し、オイルを得た。溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（０〜２５％）を用いてフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製し、オイルとして３：１（α：β）の中程度の選択性を示すα−アノマー３＊（１．７５ｇ、６３％）、およびβ−アノマー（０．６３ｇ、２３％）を得た。
【０２９０】
ＮＭＲ分析：Ｃ５アミノペンチルリンカーのために、アノマープロトンの１Ｈ  ｎｍｒは未知であり、またはピークは、ブロードしたので、結合の確認を、容易に立証することはできなかった。α−アノマーの１３Ｃから、アノマー炭素は、９８．４ｐｐｍであることによって、α−結合を示し（文献９７〜１０１）、ＪＣ１Ｈ１は、１６７．７Ｈｚであった。β−アノマーは、１３Ｃ値がβ−アノマーを示すアノマーであるために１０４．１ｐｐｍであり、文献（１０３〜１０５ｐｐｍ）との一致をもたらす。また、β−アノマーのＪＣ１Ｈ１カップリングは、β−アノマーを示す１５８．８Ｈｚであった。α−アノマー：［α］Ｄ２０＝＋９５．８°（ｃ＝０．７４，ＣＨＣｌ３）；ＩＲｖｍａｘ（フィルム）２９２８，１７２０，１６９８，１２７０，１１０３，１０５７，７４０ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．００（ｄｄ，Ｊ＝８．３，１．２Ｈｚ，２Ｈ），７．８４−７．７０（ｍ，６Ｈ），７．６４（ｄｄ，Ｊ＝１２．７，５．０Ｈｚ，２Ｈ），７．５６（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．５１−７．１２（ｍ，２３Ｈ），５．９２（ｓ，１Ｈ），５．１８（ｂｓ，２Ｈ），５．０３（ｄ，Ｊ＝１１．４Ｈｚ，１Ｈ），４．９８（ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，１Ｈ），４．９０（ｂｓ，１Ｈ），４．８４（ｄ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ，１Ｈ），４．７７（ｄ，Ｊ＝１１．４Ｈｚ，１Ｈ），４．４５（ｍ，４Ｈ），４．１７（ｂｓ，２Ｈ），３．９９（ｄｄ，Ｊ＝１０．０，３．６Ｈｚ，１Ｈ），３．６５（ｂｓ，１Ｈ），３．５４（ｄ，Ｊ＝６.３Ｈｚ，２Ｈ），３．４４（ｂｍ，１Ｈ），３．２２（ｂｍ，２Ｈ），１．５８（ｂｍ，４Ｈ），１．３１（ｂｍ，２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７１．３，１６６．０，１３８．１，１３７．９，１３６．１，１３５．９，１３３．４，１３３．３，１３３．１，１３３．０，１３０．２，１３０．０，１２８．７，１２８．６，１２８.５，１２８．５，１２８．２，１２８．１，１２８．０（３Ｃ），１２７．８（３Ｃ），１２７．７，１２７．４，１２７．０，１２６．７，１２６．２，１２６．１，１２６．０，１２５．９，１２５．８，９８．０，７６．７，７５．２，７３．７，７３．５，７２．１，６９.０，６８．９，６８．４，６８．２，６７．３，６０．５，５０．６，５０．４，４７．３（２Ｃ），２９．３，２８．１，２７．７，２３．６，２１．２，１４．４；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：計算値Ｃ６２Ｈ６１ＮＯ９［Ｍ＋Ｎａ］＋９８６．４２４４，測定値：９８６．４１４４.
実施例４Ａ：ベンジルベンジル（５−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）−６−（（ベンジルオキシ）メチル）−５−ヒドロキシ−３，４−ビス（ナフタレン−２−イルメトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ペンチル）カルバメート（４＊）の合成
【０２９１】
【化７８】
0006622804.tif 000095
【０２９２】
ＭｅＯＨおよびＴＨＦ（２：１、１０ｍＬ：５ｍＬ）の混合物中に化合物３＊（１．５ｇ、１．５５ｍｍｏｌ）を有する溶液に対して、室温で、メタノール中にＮａＯＭｅを有する０．５Ｍ溶液（０．７８ｍＬ、０．３９ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を５０℃で３０時間熱した。反応を、アンバーライト（Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ）１２０Ｈ＋樹脂を用いて中和し、濾過し、濃縮した。溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（０〜４０％）を用いてフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製し、オイルとして化合物４＊（１
．２ｇ、９０％）を得た。［α］Ｄ２０＝＋６１．８°（ｃ＝２．９０，ＣＨＣｌ３）；ＩＲｖｍａｘ（フィルム）３４６２，２９２０，１６９３，１２２６，１０８８，１０４３，７３１ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９３−７．６７（ｍ，８Ｈ），７．５７−７．４１（ｍ，６Ｈ），７．３９−７．０６（ｍ，１５Ｈ），５．１９（ｓ，２Ｈ），４．９９（ｄ，Ｊ＝１１．８Ｈｚ，２Ｈ），４．９１（ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，１Ｈ），４．８４（ｂｄ，Ｊ＝１１．４Ｈｚ，２Ｈ），４．５９（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．５５（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．４９（ｂｄ，Ｊ＝１２．７Ｈｚ，２Ｈ），４．１５（ｓ，１Ｈ），３．９６（ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，２Ｈ），３．７５（ｄｄ，Ｊ＝１０．０，５．４Ｈｚ，１Ｈ），３．６８（ｄｄ，Ｊ＝９．９，６．３Ｈｚ，１Ｈ），３．６３（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），３．３９（ｂｓ，１Ｈ），３．２３（ｂｍ，２Ｈ），２．６９（ｓ，１Ｈ），１．７５−１.４４（ｂｍ，４Ｈ），１．３２（ｂｍ，２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１３８．２，１３６．１，１３５．９，１３３．４（２Ｃ），１３３．２，１２８．７，１２８．６，１２８．５，１２８．４，１２８．３，１２８．１，１２８．０（２Ｃ），１２７．８（３Ｃ），１２７．４，１２６．８，１２６．６，１２６．３，１２６．２，１２６.１（２Ｃ），１２５．９，９７．５，７７．８，７６．２，７３．７，７３．５，７３．０，６９．８，６８．６，６８．３，６８．２，６７．３，２９．３，２３．６；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：計算値Ｃ５５Ｈ５７ＮＯ８［Ｍ＋Ｎａ］＋８８２．３９８２，測定値：８８２．３９１８.
実施例５Ａ：（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−５−アジド−２−メチル−６−（フェニルセラニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４−ジイルジアセテート（５＊）の合成
【０２９３】
【化７９】
0006622804.tif 000096
【０２９４】
ＣＨ２Ｃｌ２（２２０ｍＬ）中に（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）−２−メチル−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４−ジイルジアセテート（１４．５ｇ、６７．７ｍｍｏｌ）を有する溶液に対して、−５０℃で、ビスアセテートヨードベンゼン（２１．８ｇ、６７．７ｍｍｏｌ）、続いてトリメチルシリルアジド（１７．９ｍＬ、１３５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、１．５時間の期間にわたって−１０℃に温め、その時間までには、出発物質は、ＴＬＣによって観察されなかった。溶媒を真空下で除去し、赤茶色オイルとして粗生成物を得た。溶出剤としてシクロヘキサンおよび酢酸エチル（０〜３０％）を用いてフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製し、オイルとして化合物５＊（１４．５ｇ、５２％）を得た。［同一性がｍａｓｓおよびＮＭＲ分光学を用いて確認できなかった約７．６ｇの他の化合物も得る。］ＩＲｖｍａｘ（フィルム）２９３９，２１０９，１７４２，１３６８，１２１９，１０８３，１０１８，７４０ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．６３−７．５３（ｍ，２Ｈ），７．３５−７．２３（ｍ，３Ｈ），５．９６（ｄ，Ｊ＝５.４Ｈｚ，１Ｈ），５．３３（ｄｄ，Ｊ＝３．３，１．３Ｈｚ，１Ｈ），５．１４（ｄｄ，Ｊ＝１０．９，３．２Ｈｚ，１Ｈ），４．５１（ｑ，Ｊ＝６．５，０．７Ｈｚ，１Ｈ），４．２４（ｄｄ，Ｊ＝１０．９，５．４Ｈｚ，１Ｈ），２．１８（ｓ，３Ｈ），２．０７（ｓ，３Ｈ），１．１０（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７０．４，１６９．８，１３４．８，１２９．３，１２９．１，１２８．３，１２８．２，１２８．１，８４．５，７１．７，７０．２，６７．６，５８．９，２０．８，２０．７，１５．９；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ
）：計算値Ｃ１６Ｈ１９Ｎ３Ｏ５Ｓｅ［Ｍ＋Ｎａ］＋４３６．０３８８，測定値：４３６．０４００.
実施例６Ａ：（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−５−アジド−２−メチル−６−（２，２，２−トリクロロ−１−イミノエトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４−ジイルジアセテート（６＊）の合成
【０２９５】
【化８０】
0006622804.tif 000097
【０２９６】
ＴＨＦ、水、およびアセトンの混合物中（１：１：０．５、２８ｍＬ：２８ｍＬ：１４ｍＬ）中にアジドセレニド５＊（５．０ｇ、１２．１ｍｍｏｌ）を有する溶液を、０℃に冷却した。Ｎ−ヨードスクシンイミド（５．４ｇ、２４．２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を、３０分間室温で撹拌した。反応混合物を酢酸エチルを用いて希釈し、有機層を、飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液およびブラインをそれぞれ用いて洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮し、オイルを得た。溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（０〜６０％）を用いてフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製し、アノマーの１：１混合物として化合物（３．０ｇ、９１％）を得た。ジクロロエタン中にラクトール（０．７５ｇ、２．７ｍｍｏｌ）を有する溶液に溶解し、室温でトリクロロアセトニトリル（１．３７ｍＬ、１３．７ｍｍｏｌ）、続いてＫ２ＣＯ３（１．０２ｇ、７．２ｍｍｏｌ）を加え、４時間撹拌した。反応物をセライトでろ過し、ジクロロメタンを用いてセライトを洗浄し、真空下で溶媒を除去し、アノマーの混合物として化合物６＊（１．１２ｇ、９８％、α：β＝１：５．５）を得た。ＮＭＲがきれいであったので、さらなる精製なしに次のステップに使われた。［α］Ｄ２０＝−１９．２°（ｃ＝１．６４,ＣＨＣｌ３）；ＩＲｖｍａｘ（フィルム）２９９３，２１１４，１７５１，１７２９，１６７９，１２３５，１２１６，１０７０，１０３１，８４０，７９３ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）β−アノマーのみ報告された：δ８．７７（ｓ，１Ｈ），５．６８（ｄ，Ｊ＝８.５Ｈｚ，１Ｈ），５．２５（ｄｄ，Ｊ＝３．４，０．９Ｈｚ，１Ｈ），４．９１（ｄｄ，Ｊ＝１０．８，３．４Ｈｚ，１Ｈ），３．９７−３．８３（ｍ，２Ｈ），２．２１（ｓ，３Ｈ），２．０８（ｓ，３Ｈ），１．２４（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７０．６，１６９．９，１６１．１，９７．０，７１．８，７０．５，６９．４，６０．５，２０．８（２Ｃ），１６．２；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：計算値Ｃ１２Ｈ１５Ｃｌ３Ｎ４Ｏ６［Ｍ＋Ｎａ］＋４３８．９９５５，測定値：４３８．９９４０.
実施例７Ａ：（２Ｒ，４ａＲ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｒ，８ａＲ）−７−アジド−６−（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（５−（ベンジル（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）ペンチル）オキシ）−２−（（ベンジルオキシ）メチル）−４，５−ビス（ナフタレン−２−イルメトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−８−イルアセテート（７＊）の合成
【０２９７】
【化８１】
0006622804.tif 000098
【０２９８】
エーテルおよびＣＨ２Ｃｌ２（１：１、１１．６ｍＬ：１１．６ｍＬ）の混合物中に（２Ｒ，４ａＲ，７Ｒ，８Ｒ，８ａＲ）−７−アジド−２−フェニル−６−（２，２，２−トリクロロ−１−イミノエトキシ）ヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−８−イルアセテート（１．７５ｇ、２．０３ｍｍｏｌ）、およびアクセプター４＊（１．２６ｇ、２．６５ｍｍｏｌ）を有する溶液に、０℃でＴＭＳＯＴｆ（０．０３７ｍＬ、０．２０ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を０℃で１５分間撹拌した。反応をＥｔ３Ｎの滴下によってクエンチし、真空下で溶媒を除去した。溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（０〜２０％）を用いてフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製し、オイルとしてα−アノマー７＊（１．８９ｇ、７９％）、オイルとしてβ−アノマー（０．２６ｇ、１１％）を得た。グリコシル化の選択性は、１０：１〜７：１（α：β）の範囲であった。
【０２９９】
ＮＭＲ分析：α−アノマーの１Ｈ  ＮＭＲは、一つのアノマープロトンのみを示し、Ｊ＝３．５Ｈｚと区別された。他のアノマープロトンは、ナフチルメチレンプロトン内に組み込まれた。βアノマーのカップリング定数はＪ＝８．１Ｈｚであった。α−アノマーのために示された１３Ｃの値は、９９．５ｐｐｍ、および９７．１ｐｐｍであり、β−アノマーのために示された１３Ｃの値は、１０１．８ｐｐｍ、および９７．７ｐｐｍであった。フラクション−１のＪＣ１Ｈ１カップリングは、１７０．４Ｈｚおよび１６６．２Ｈｚであり、２つのα−アノマー結合を示し、β−アノマーのＪＣ１Ｈ１カップリングは、１６８．６Ｈｚおよび１６４．３Ｈｚであり、一つのα−アノマー結合および一つのβ−アノマー結合を示した。
【０３００】
α−アノマー：[α]Ｄ２０＝＋１２９．０°（ｃ＝１．２５，ＣＨＣｌ３）；ＩＲｖｍａｘ（フィルム）２９２５，２１０９，１７４４，１６９４，１２２５，１０８９，１０４２，７４８ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９０（ｓ，１Ｈ），７．８７−７．７０（ｍ，７Ｈ），７．５８（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．５３−７．０４（ｍ，２５Ｈ），５．２４（ｄｄ，Ｊ＝１１．１，３．３Ｈｚ，１Ｈ），５．１９（ｓ，１Ｈ），５．１７（ｓ，２Ｈ），５．０８（ｄ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，１Ｈ），４．９７（ｄ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ，１Ｈ），４．９４−４．８１（ｍ，４Ｈ），４．５４（ｓ，２Ｈ），４．４７（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，２Ｈ），４．３０（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），４．１４（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ），４．０７（ｓ，１Ｈ），４.０２（ｄｄ，Ｊ＝１０．３，３．６Ｈｚ，１Ｈ），３．９８−３．８６（ｍ，４Ｈ），３．６４−３．４６（ｍ，３Ｈ），３．３５（ｂｓ，１Ｈ），３．２０（ｂｍ，２Ｈ），３．０２（ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，１Ｈ），２．１６（ｓ，３Ｈ），１．５６（ｂｍ，４Ｈ），１．３８−１．０６（ｂｍ，２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７０．５，１３８．１，１３７．８，１３７．７，１３６．１，１３３．４（２Ｃ），１３３．２，１３３．０，１２９．１，１２８．７，１２８．６（２Ｃ），１２８.３（
２Ｃ），１２８．２（２Ｃ），１２８．１，１２８．０（２Ｃ），１２７．９，１２７.８，１２７．４，１２７．２，１２６．６，１２６．３（２Ｃ），１２６．２，１２６．０（２Ｃ），１２５．９，１２５．５，１００．５，９９．０，９７．３，７７．２，７６．５，７４．６，７３．７，７３．４，７３．３，７３．１，７０．４，６９．０，６８．８，６８.３，６７．２，６２．３，５８．０，２９．３，２３．６，２１．２；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：計算値Ｃ７０Ｈ７２Ｎ４Ｏ１３［Ｍ＋Ｎａ］＋１１９９．４９９４，測定値：１１９９．４９０２．
実施例８Ａ：ベンジル（５−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）−５−（（（２Ｓ，４ａＲ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｒ，８ａＲ）−７−アジド−８−ヒドロキシ−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−６−イル）オキシ）６−（（ベンジルオキシ）メチル−３，４−ビス（ナフタレン−２−イルメトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ペンチル）（ベンジル）カルバメート（８＊）の合成
【０３０１】
【化８２】
0006622804.tif 000099
【０３０２】
メタノールおよびＴＨＦ（２：１；１６ｍＬ：８ｍＬ）の混合物中に化合物７＊（１．８５ｇ、１．５７ｍｍｏｌ）を有する溶液に、ＭｅＯＨ中にＮａＯＭｅを有する０．５Ｍ溶液（０．３１ｍＬ、０．１５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１２時間撹拌した。反応物をアンバーライト１２０Ｈ＋樹脂を用いて中和し、濾過し、濃縮した。溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（０〜２０％）を用いてフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製し、白色泡として化合物８＊（１．７４ｇ、９８％）を得た。［α］Ｄ２０＝＋８８．９°（ｃ＝１．１５，ＣＨＣｌ３）；ＩＲｖｍａｘ（ｆｉｌｍ）３４７４，２９２５，２１１１，１７４０，１６９４，１２３４，１０８８，１０４１，７４８ｃｍ−１；１Ｈ
ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９２−７．６８（ｍ，８Ｈ），７．５８（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），７．５５−７．４３（ｍ，５Ｈ），７．４２−７．０７（ｍ，２０Ｈ），５．１８（ｂｓ，３Ｈ），５．０１（ｄ，Ｊ＝３．４Ｈｚ，１Ｈ），４．９８（ｓ，１Ｈ），４．９４（ｓ，１Ｈ），４．９２−４．７８（ｍ，３Ｈ），４．５４（ｓ，２Ｈ），４．４８（ｂｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），４．２８（ｓ，１Ｈ），４．０３−３．８３（ｍ，６Ｈ），３．６６−３.５２（ｍ，４Ｈ），３．５０（ｄｄ，Ｊ＝１０．５，３．４Ｈｚ，１Ｈ），３．４７−３．３２（ｂｍ，１Ｈ），３．３０−３．１３（ｍ，２Ｈ），３．０７（ｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，１Ｈ），１．７９−１．４３（ｂｍ，４Ｈ），１．４１−１．１０（ｂｍ，２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１３８．１，１３７．７，１３７．６，１３６．１，１３５．９，１３３．４，１３３．３，１３３．２，１３３．０，１２９．４，１２８．７，１２８．６（２Ｃ），１２８．４，１２８．３，１２８．２（２Ｃ），１２８．１（２Ｃ），１２８．０，１２７．９（２Ｃ），１２７．３，１２６．７，１２６.４（２Ｃ），１２６．３，１２６．２，１２６．１，１２５．９，１２５．６，１０１．０，９９．２，９７．０，７７．２
，７５．５，７５．４，７４．５，７３．７，７３．０，７２.８，６９．１，６９．０，６８．３，６７．７，６７．３，６２．６，６１．４，２９．３，２３．６；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：計算値Ｃ６８Ｈ７０Ｎ４Ｏ１２［Ｍ＋Ｎａ］＋１１５７．４８８８，測定値：１１５７．４９２３.
実施例９Ａ：ベンジル（５−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）−５−（（（２Ｓ，４ａＲ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｒ，８ａＲ）−７−アジド−８−（（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−３−アジド−４，５−ジヒドロキシ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−６−イル）オキシ）−６−（（ベンジルオキシ）メチル−３，４−ビス（ナフタレン−２−イルメトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ペンチル）（ベンジル）カルバメート（９＊）の合成
【０３０３】
【化８３】
0006622804.tif 000100
【０３０４】
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中にドナー化合物（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−５−アジド−２−メチル−６−（２，２，２−トリクロロ−１−イミノエトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４−ジイルジアセテート６＊（０．５ｇ、１．２ｍｍｏｌ）、およびアクセプター８＊（１．０５ｇ、０．９２ｍｍｏｌ）を有する溶液に、−２０℃でＴＭＳＯＴｆ（０．０１７ｍＬ、０．０９２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を０℃で３０分にわたって撹拌した。反応はＥｔ３Ｎを２滴加えることによってクエンチされ、蒸発させた。溶出剤としてトルエンおよびアセトン（０〜２５％）を用いてフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製し、アノマー混合物として中間体トリサッカライドを得て、アノマー混合物は、このステップで容易に分離することはできなかった。メタノールおよびＴＨＦの混合物（２：１；７ｍＬ：３．５ｍＬ）中に中間体トリサッカライドを有する溶液に対して、ＭｅＯＨ中にＮａＯＭｅを有する０．５Ｍ溶液（０．１８５ｍＬ、０．０９２ｍｍｏｌ）を加え、室温で１２時間撹拌した。反応物をアンバーライト１２０Ｈ＋樹脂を用いて中和し、濾過し、濃縮した。溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（０〜２５％）を用いてフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製し、白色泡としてα−アノマー９＊（０．７０ｇ、５８％）、およびβ−アノマー（０．１２ｇ、１４％）を得た。
【０３０５】
ＮＭＲ分析：α−アノマーの１Ｈ  ＮＭＲは、３つのα−アノマープロトンの化学シフト、および５．０９ｐｐｍ（Ｊ＝３．５Ｈｚ）、４．９９ｐｐｍ、および４．８３ｐｐｍ（Ｊ＝３．６Ｈｚ）のカップリング定数を含んだ。１３Ｃ値は、１００．５ｐｐｍ、９９．２ｐｐｍ、および９７．０ｐｐｍであった。ＪＣ１Ｈ１カップリングは、３つのα−アノマー結合を示す１７４．５Ｈｚ、１６８．４Ｈｚ、および１６７．０Ｈｚであった。β−アノマーの１Ｈ  ｎｍｒは、化学シフト並びに５．００ｐｐｍ（Ｊ＝３．５Ｈｚ）、および４．９１ｐｐｍのカップリング定数に基づく２つのα−アノマープロトン、並びに４．０６ｐｐｍ（Ｊ＝７．１Ｈｚ）のβ−アノマープロトンを含んだ。１３Ｃ値は、９９．１（２Ｃ）ｐｐｍ、および９７．０ｐｐｍであった。ＪＣ１Ｈ１カップリングは、２つのα−アノマー結合を示す１６８．６Ｈｚ、および１６７．１Ｈｚであり、α−アノマー結
合の一つと重複するβ結合は、それ故に計算されなかった。［α］Ｄ２０＝＋７１．６°（ｃ＝１．０６，ＣＨＣｌ３）；ＩＲｖｍａｘ（フィルム）３４８８，２９２３，２１１１，１７４０，１６９４，１２３４，１０８８，１０４０，７４７ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．８９（ｓ，１Ｈ），７.８７−７．７８（ｍ，５Ｈ），７．７８−７．７１（ｍ，２Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），７．５２−７．４２（ｍ，５Ｈ），７．４１−７．０８（ｍ，２０Ｈ），５．２１（ｓ，１Ｈ），５．１８（ｂｓ，２Ｈ），５．０９（ｄ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，１Ｈ），５．００（ｂｓ，１Ｈ），４．９５（ｂｓ，２Ｈ），４．９１（ｂｓ，２Ｈ），４．８３（ｄ，Ｊ＝３．７Ｈｚ，１Ｈ），４．６０−４．５０（ｍ，２Ｈ），４．４７（ｂｓ，２Ｈ），４．３４（ｓ，１Ｈ），４．１７（ｑ，Ｊ＝７.４Ｈｚ，１Ｈ），４．２２−４．１１（ｍ，１Ｈ），４．１０−３．８５（ｍ，６Ｈ），３．８３（ｄｄ，Ｊ＝１０．８，３．２Ｈｚ，１Ｈ），３．７２（ｄｄ，Ｊ＝１０．８，３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．７０−３．５０（ｍ，５Ｈ），３．４１（ｂｓ，１Ｈ），３．２１（ｂｍ，２Ｈ），３．０９（ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，１Ｈ），２.４７（ｓ，１Ｈ，ＯＨ），２．２３（ｓ，１Ｈ，ＯＨ），１．５９（ｂｍ，４Ｈ），１.２８（ｂｍ，２Ｈ），１．１４（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１３８．１，１３７．８，１３７．７，１３６．１，１３６.０，１３３．４（２Ｃ），１３３．２，１３３．１，１２９．２，１２８．７（２Ｃ），１２８．７，１２８．６，１２８．４，１２８．２，１２８．１，１２８．０（２Ｃ），１２７．９，１２７．１，１２６．４（２Ｃ），１２６．３，１２６．１（２Ｃ），１２５．９，１２５.６，１００．９，１００．５，９９．３，９７．０，７７．５，７７．４（２Ｃ），７７.２，７７．０，７６．９，７５．７，７５．５，７４．１，７３．７，７３．１，７２．６，７１．７，６９．２，６９．０，６８．８，６８．３，６７．４，６７．３，６６．７，６２．４，６１．１，５９．０，２９．３，２３．６，１６．５；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：計算値Ｃ７４Ｈ７９Ｎ７Ｏ１５［Ｍ＋Ｎａ］＋１３２８．５５３２，測定値：１３２８.５５５１．
実施例１０Ａ：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−５−アジド−６−（（（２Ｓ，４ａＲ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｒ，８ａＲ）−７−アジド−６−（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（５−ベンジル（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）ペンチル）オキシ）−２−（（ベンジルオキシ）メチル）−４，５−ビス（ナフタレン−２−イルメトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−８−イル）オキシ）４−ヒドロキシ−２−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イルアセテート（１０＊）の合成
【０３０６】
【化８４】
0006622804.tif 000101
【０３０７】
ＤＭＦ（２．４ｍＬ）中にトリサッカライド化合物９＊（０．６５ｇ、０．４０ｍｍｏｌ）を有する溶液に、室温でトリメチルオルトアセテート（０．３８ｍＬ、２．９９ｍｍ
ｏｌ）およびｐ−ＴＳＡ（０．０１４ｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を３０分間撹拌した。トリエチルアミン（４滴）を加え、共沸化合物としてトルエンを用いて真空下で溶媒を除去した。粗生成物に対して８０％酢酸（４．６６ｍＬ）を加え、反応混合物を室温で１時間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、トルエンを用いて共沸し、オイルを得た。溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（１０〜５０％）を用いてフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製し、白色泡として化合物１０＊（０．６２ｇ、９２％）を得た。［α］Ｄ２０＝＋６６．５°（ｃ＝１．１０，ＣＨＣｌ３）；ＩＲｖｍａｘ（フィルム）２９２５，２１１２，１７４６，１６９７，１２３３，１０８９，１０４２，７４６ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９０（ｓ，１Ｈ），７．８９−７．７９（ｍ，５Ｈ），７．７６（ｄｄ，Ｊ＝６．７，２．６Ｈｚ，２Ｈ），７．５８（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），７．５４−７．４３（ｍ，５Ｈ），７．４２−７．２１（ｍ，１９Ｈ），７．１７（ｓ，１Ｈ），５．２０（ｂｓ，３Ｈ），５．１０（ｄ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，１Ｈ），５．０８（ｄｄ，Ｊ＝３．４，１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．０１（ｂｓ，１Ｈ），４．９８−４．８９（ｍ，４Ｈ），４．８３（ｄ，Ｊ＝３．７Ｈｚ，１Ｈ），４．６１−４．５１（ｍ，２Ｈ），４．４８（ｄ，Ｊ＝６.７Ｈｚ，２Ｈ），４．３５（ｓ，１Ｈ），４．２６（ｑ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），４．１９（ｄｄ，Ｊ＝１０．７，３．５Ｈｚ，１Ｈ），４．０５（ｄ，Ｊ＝３.０Ｈｚ，１Ｈ），４．０４−３．９３（ｍ，４Ｈ），３．８９（ｔ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），３．８３（ｄｄ，Ｊ＝１０．８，３．２Ｈｚ，１Ｈ），３．７２（ｄｄ，Ｊ＝１０．８，３．４Ｈｚ，１Ｈ），３．６７（ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，１Ｈ），３．６４−３．５０（ｍ，３Ｈ），３．４２（ｂｓ，１Ｈ），３．２２（ｂｍ，２Ｈ），３．１０（ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，１Ｈ），２．２２（ｓ，３Ｈ），１．５７（ｂｍ，４Ｈ），１．４０−１．１６（ｂｍ，２Ｈ），１．００（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）．；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７１．５，１３８．１，１３７．７，１３６．０（２Ｃ），１３３．４（２Ｃ），１３３．２，１３３．１，１２９．３，１２８．７，１２８．６（２Ｃ），１２８．４（２Ｃ），１２８．２，１２８．１，１２８．０（３Ｃ），１２７．９，１２７．４，１２７．１，１２６．４，１２６．３，１２６．１（２Ｃ），１２５．９，１２５．６，１０１．０，１００．５，９９．２，９７．０，７７．４，７７．１，７５．７，７５．５，７４．０，７３．７，７３．１，７２．５，６９．２，６８.９，６８．３，６７．６，６７．３（２Ｃ），６５．８，６２．３，６１．０，５９．０，２９．３，２３．６，２１．０，１６．５．；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：計算値Ｃ７６Ｈ８１Ｎ７Ｏ１６［Ｍ＋Ｎａ］＋１３７０．５６３７，測定値：１３７０．５４７９.
実施例１１Ａ：（２Ｒ，４ａＲ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ，８ａＲ）−６−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−３−アセトキシ−５−アジド−６−（（（２Ｓ，４ａＲ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｒ，８ａＲ）−７−アジド−６−（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（５−ベンジル（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）ペンチル）オキシ）−２−（（ベンジルオキシ）メチル）−４，５−ビス（ナフタレン−２−イルメトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−８−イル）オキシ）−２−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）オキシ）−８−（ベンジルオキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−７−イル４−オキソペンタのエート（１１＊）の合成
【０３０８】
【化８５】
0006622804.tif 000102
【０３０９】
ＤＣＭ（２ｍＬ）中に、アクセプター１０＊（０．２５ｇ、０．１８ｍｍｏｌ）、（２Ｒ，４ａＲ，６Ｓ，７Ｒ，８Ｓ，８ａＲ）−８−（ベンジルオキシ）−６−（エチルチオ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−７−イル４−オキソペンタノエート（０．１４ｇ、０．２７ｍｍｏｌ）（一晩真空下で乾燥させた）、および活性化４ÅＭＳ（０．３９ｇ）を有する溶液を室温で１時間撹拌した。−３０℃に冷却後、ＮＩＳ（０．０６３ｇ、０．２７ｍｍｏｌ）、続いてＴｆＯＨ（８．２μＬ、０．０９３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１時間撹拌した。０．０５ｍＬのＥｔ３Ｎを用いて反応をクエンチした。ＤＣＭを用いてＲＭを希釈し、有機層を、飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液、水、ブラインを用いて洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮し、黄色のオイルを得た。溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（１０〜５０％）を用いてフラッシュクロマトグラフィーによって組成物を精製し、白色泡として化合物１１＊（０．２２、６６％）を得た。
【０３１０】
ＮＭＲ分析：１Ｈ  ＮＭＲは、化学シフト、およびカップリング定数（α−アノマープロトンは５．０２ｐｐｍ（Ｊ＝３．５Ｈｚ）、４．９８ｐｐｍ、および４．７０ｐｐｍ（Ｊ＝３．６Ｈｚ）、並びにβ−アノマープロトンは４．５７ｐｐｍ（Ｊ＝７．６Ｈｚ））に基づいて３つのα−アノマープロトン、および１つのβ−アノマープロトンを示した。１３Ｃ値は、αが１００．８ｐｐｍ、９９．１ｐｐｍ、および９７．０ｐｐｍ、βが１００．０ｐｐｍを示した。ＪＣ１Ｈ１カップリングは、３つのα−アノマー結合を示す１７３．９Ｈｚ、１７２．０Ｈｚ、および１７０．６Ｈｚあり、β−アノマー結合を示す１６４．９Ｈｚであった。
【０３１１】
［α］Ｄ２０＝＋３６．６°（ｃ＝０．９０，ＣＨＣｌ３）；ＩＲｖｍａｘ（フィルム）２９２５，２１１１，１７４６，１６９６，１２３３，１０８９，１０４２，７４８ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）δ８．０２−７．７３（ｍ，８Ｈ），７．６４（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１．６Ｈｚ，１Ｈ），７．５５−７．２０（ｍ，３４Ｈ），５．７１（ｓ，１Ｈ），５.３６（ｓ，１Ｈ），５．２５（ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），５．１５（ｍ，３Ｈ），５．０６（ｓ，１Ｈ），５．０２−４．８６（ｍ，６Ｈ），４．８３（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，１Ｈ），４．８０（ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），４．７２（ｄ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ，１Ｈ），４．６０（ｓ，２Ｈ），４．５１（ｓ，２Ｈ），４．３９（ｓ，１Ｈ），４．３４（ｄｄ，Ｊ＝１０．９，３．３Ｈｚ，１Ｈ），４．３０−４.２０（ｍ，３Ｈ），４．１７（ｓ，１Ｈ），４．０９−３．９１（ｍ，５Ｈ），３.８６−３．７０（ｍ，４Ｈ），３．７１−３．５９（ｍ，３Ｈ），３．５７（ｄｄ，Ｊ＝１０．９，３．７Ｈｚ，１Ｈ），３．
５４−３．３８（ｍ，２Ｈ），３．３３（ｄｄ，Ｊ＝１２．４，１．４Ｈｚ，１Ｈ），３．２４（ｂｓ，２Ｈ），２．７８−２.６４（ｍ，２Ｈ），２．６４−２．４８（ｍ，２Ｈ），２．１３（ｓ，３Ｈ），２.１２（ｓ，３Ｈ），１．５７（ｂｓ，４Ｈ），１．３７（ｂｓ，２Ｈ），０．９８（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）δ１７２．０，１７０．９，１３９．７（２Ｃ），１３９．６，１３９．４，１３９．０，１３７.７，１３４．４，１３４．３，１３４．０，１３３．９，１２９．８，１２９．７，１２９.６，１２９．３（２Ｃ），１２９．２，１２９．１，１２９．０，１２８．９（２Ｃ），１２８．８（２Ｃ），１２８．７（２Ｃ），１２８．６（２Ｃ），１２８．５，１２８．３，１２８．０，１２７．５，１２７．３，１２７．２（２Ｃ），１２７．１，１２７．０，１２６．８，１２６．７，１２６．５，１２６．２，１０１．８，１０１．６，１０１．４，１００．１，９８．０，８２．１，８０．２，７８．３，７８．３，７６．４，７６．３，７５．２，７４．６，７４．２，７４．１，７３．９，７３．１，７２．６，７１．１，７０．０，６９.６，６９．３，６８．６，６７．５，６６．８，６６．７，６３．４，６０．３，５９．７，３８．２，３０．０，２９．９，２８．７，２４．２，２０．８，１６．８；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：計算値Ｃ１０１Ｈ１０７Ｎ７Ｏ２３［Ｍ＋Ｎａ］＋１８０８．７３１６，測定値：１８０８．７１９６.
実施例１２Ａ：（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−５−アジド−６−（（（２Ｓ，４ａＲ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｒ，８ａＲ）−７−アジド−６−（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（５−（ベンジル（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）ペンチル）オキシ）−２−（（ベンジルオキシ）メチル）−４，５−ビス（ナフタレン−２−イルメトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−８−イル）オキシ）−４−（（（２Ｒ，４ａＲ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｒ，８ａＲ）−８−（ベンジルオキシ）−７−ヒドロキシ−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−６−イル）オキシ）−２−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イルアセテート（１２＊）の合成
【０３１２】
【化８６】
0006622804.tif 000103
【０３１３】
化合物１１＊（０．１８ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を、トルエン、エタノール、およびＤＣＭ（２：１：０．５、３．６ｍＬ：１．８ｍＬ：０．９ｍＬ）の混合物中に溶解した。その後、ヒドラジンアセテート（０．０４６ｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を加えた。３０分後、室温で水を用いて反応物を希釈し、水層を、エーテルを用いて抽出した。有機層を、ブラインを用いて洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮し、オイルを得た。溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（０〜３０％）を用いてフラッシュクロマトグラフィーによって粗生成物を精製し、オイルとして化合物１２＊（０．１２ｇ、７０％）を得た。［α］Ｄ２０＝＋４２．０°（ｃ＝１．００，ＣＨＣｌ３）；ＩＲｖｍａｘ（フィルム）３４９４，２８６９，２１１１，１７３０，１６９５，１２３４，１０８８，１０４１，７４６ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）δ８．０４−７．７３（ｍ，８Ｈ），７．６４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１．６Ｈｚ，１Ｈ），７．５６−７．０７（ｍ，３４Ｈ），５．６６（ｓ，１Ｈ），５．
３８（ｓ，１Ｈ），５．３４（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ），５．１６（ｄ，Ｊ＝３．１Ｈｚ，３Ｈ），５．０６（ｓ，１Ｈ），５．０２−４．８８（ｍ，５Ｈ），４．８６（ｑ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，２Ｈ），４．６２（ｓ，１Ｈ），４．６１（ｓ，２Ｈ），４．５１（ｓ，２Ｈ），４．４１（ｓ，１Ｈ），４．３８（ｄｄ，Ｊ＝１０．９，３．３Ｈｚ，１Ｈ），４．３３（ｑ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ），４.２８（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），４．２４−４．１７（ｍ，２Ｈ），４．１４（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ），４．１０−３．９３（ｍ，５Ｈ），３．８３−３.７１（ｍ，２Ｈ），３．７０−３．５５（ｍ，６Ｈ），３．４９−３．３８（ｍ，３Ｈ），３．３４（ｄｄ，Ｊ＝１２．４，１．５Ｈｚ，１Ｈ），３．２４（ｂｓ，２Ｈ），２．１７（ｓ，３Ｈ），１．５７（ｂｓ，４Ｈ），１．４２−１．２４（ｂｓ，２Ｈ），１．０３（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）δ１７１．１，１３９．５，１３８．８，１３８．７，１３８．５，１３８.３，１３６．８（２Ｃ），１３３．５，１３３．４，１３３．１，１３３．０，１２８．７，１２８．６，１２８．４（２Ｃ），１２８．３，１２８．０（２Ｃ），１２７．９（３Ｃ），１２７．８，１２７．７（２Ｃ），１２７．６，１２７．５，１２７．１，１２６．６，１２６．４，１２６．３，１２６．２（２Ｃ），１２６．１，１２５．９，１２５．８，１２５．６，１０１．５，１０１．０，１００．７，１００．５，９９．２，９７．１，８１．３，８１.１，７７．４，７７．２，７５．６，７５．４，７４．７，７４．６，７４．２，７４．０，７３．５，７３．０，７２．３，７１．７，７０．２，６９．１，６８．７，６８．５，６７．７，６６．６，６６．２，６５．７，６２．６，５９．２，５９．０２，２９．１，２３．３，２０．１，１５．９；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：計算値Ｃ９６Ｈ１０１Ｎ７Ｏ２１［Ｍ＋Ｎａ］＋１７１０．６９４８，測定値：１７１０．６８０９．
実施例１３Ａ：（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−５−アジド−６−（（（２Ｓ，４ａＲ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｒ，８ａＲ）−７−アジド−６−（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（５−（ベンジル（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）ペンチル）オキシ）−２−（（ベンジルオキシ）メチル）−４，５−ビス（ナフタレン−２−イルメトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−８−イル）オキシ）−４−（（（２Ｒ，４ａＲ，６Ｒ，７Ｓ，８Ｒ，８ａＳ）−７−アジド−８−（ベンジルオキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−６−イル）オキシ）−２−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イルアセテート（１３＊）の合成
【０３１４】
【化８７】
0006622804.tif 000104
【０３１５】
ＤＣＭ（０．６ｍＬ）中に化合物１２＊（０．０５ｇ、０．０３ｍｍｏｌ）を有する溶液に、ピリジン（０．０６ｍＬ、０．７４ｍｍｏｌ）、続いてＤＣＭ中にトリフリック無水物を有する１．０Ｍ溶液（０．０８９ｍＬ、０．０８９ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で３０分間撹拌した。反応物を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を用いてクエンチし、水層を、ＤＣＭを用いて抽出し、ブラインを用いて洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮し、オイルを得て、オイルを２時間高真空下で乾燥した。粗生成物を、その後、ＤＭＦ（０．６ｍＬ）中にとり、ＮａＮ３（０．００５７ｇ、０．０８９ｍｍｏｌ）を加え、反応物を８０℃に１．５時間熱した。室温に冷却後、反応物を、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液
を用いて希釈し、水層を、酢酸エチルを用いて抽出した。有機層を、ブラインを用いて洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮し、オイルを得た。粗生成物を、溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（０〜４０％）を用いてフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、白色泡として化合物１３＊（０．０３１ｇ、６１％）を得た。
【０３１６】
ＮＭＲ分析：１Ｈ  ＮＭＲは、β−マンノシド結合がＪ＝１．１Ｈｚのカップリング定数を示し、β−マンノシド結合は、反転前は７．２Ｈｚであった。
［α］Ｄ２０＝＋２１．０°（ｃ＝１．５０,ＣＨＣｌ３）；ＩＲｖｍａｘ（フィルム）２９１６，２８６０，２１１２，１７３７，１６９７，１２３４，１０８８，１０４５，７４６ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）δ８．０１−７．７６（ｍ，８Ｈ），７．６４（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１．５Ｈｚ，１Ｈ），７．５５−７．１７（ｍ，３４Ｈ），５．６８（ｓ，１Ｈ），５．３６（ｓ，１Ｈ），５．３０（ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ，１Ｈ），５．１５（ｄ，Ｊ＝３．４Ｈｚ，３Ｈ），５．０７（ｓ，１Ｈ），５．０２（ｄ，Ｊ＝１.３Ｈｚ，１Ｈ），５．０１−４．９０（ｍ，５Ｈ），４．８２（ｄ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ，１Ｈ），４．７４（ｄ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ，１Ｈ），４．６０（ｓ，２Ｈ），４．５１（ｓ，２Ｈ），４．４０（ｓ，１Ｈ），４．３７（ｄｄ，Ｊ＝１０．９，３.３Ｈｚ，１Ｈ），４．３５−４．２３（ｍ，２Ｈ），４．１７（ｓ，１Ｈ），４．１４（ｄｄ，Ｊ＝１０．４，４．９Ｈｚ，１Ｈ），４．０９−３．９４（ｍ，６Ｈ），３．９３−３．８３（ｍ，２Ｈ），３．７９（ｔ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，１Ｈ），３.７４（ｄｄ，Ｊ＝１０．９，３．４Ｈｚ，１Ｈ），３．６３（ｍ，３Ｈ），３．５５（ｄｄ，Ｊ＝１０．９，３．７Ｈｚ，１Ｈ），３．５１−３．３６（ｍ，２Ｈ），３.３３（ｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，１Ｈ），３．２４（ｂｓ，２Ｈ），２．１６（ｓ，３Ｈ），１．５７（ｂｓ，４Ｈ），１．３６（ｂｓ，２Ｈ），１．０４（ｄ，Ｊ＝６.５Ｈｚ，３Ｈ）．；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）δ１７１．５，１３９．７，１３９．６（２Ｃ），１３９．４，１３９．１，１３７．７（２Ｃ），３４.４，１３４．３，１３４．０，１３３．９，１２９．７，１２９．６，１２９．３（２Ｃ），１２９．２，１２９．１，１２８．９（３Ｃ），１２８．８，１２８．７，１２８．６（２Ｃ），１２８．５，１２８．４，１２８．０，１２７．５，１２７．３，１２７．２，１２７．１，１２７．０，１２６．８，１２６．７，１２６．５，１０２．２，１０１．５（２Ｃ），１００．２，９８．７，９８．０，７９．２，７８．３，７８．２，７７．７，７６．５，７６.３，７５．１，７４．３，７３．９，７３．２，７３．１，７２．６，７０．８，６９．９，６９．６，６９．１，６８．６，６８．０，６７．５，６６．２，６４．７，６３．４，６０．１，５９．７，３０．０，２４．２，２０．９，１６．７；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：計算値Ｃ９６Ｈ１００Ｎ１０Ｏ２０［Ｍ＋Ｎａ］＋１７３５．７０１３，測定値：１７３５．６９９５．
実施例１４Ａ：（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−５−アセトアミド−６−（（（２Ｓ，４ａＲ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｒ，８ａＲ）−７−アセトアミド−６−（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（５−（ベンジル（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）ペンチル）オキシ）−２−（（ベンジルオキシ）メチル）−４，５−ビス（ナフタレン−２−イルメトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−８−イル）オキシ）−４−（（（２Ｒ，４ａＲ，６Ｒ，７Ｓ，８Ｒ，８ａＳ）−７−アセトアミド−８−（ベンジルオキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−６−イル）オキシ）−２−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イルアセテート（１４＊）の合成
【０３１７】
【化８８】
0006622804.tif 000105
【０３１８】
ピリジン（０．５ｍＬ）中に化合物１３＊（０．０３ｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）を有する溶液に、チオ酢酸（０．１５ｍＬ、２．１８ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温で９６時間撹拌した。（反応は、ＴＬＣによって観察されることができなかったので、ＬＣ−ＭＳを４８時間後に行い、ジアセトアミドの存在を示した。さらに０．０７ｍＬのチオ酢酸を加え、さらに４８時間撹拌を続けた。（ＬＣ−ＭＳは、出発物質、またはモノ−、もしくはジアセトアミドを示さなかった。））。溶媒を真空下で除去し、粗生成物を、トルエンを用いて２回共沸させた。粗生成物を、溶出剤としてＤＣＭ、アセトン、およびＭｅＯＨ（ＭｅＯＨおよびアセトンのそれぞれを５％〜５０％まで）を用いてフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、白色泡として化合物１４＊（０．０２５ｇ、８１％）を得た。［α］Ｄ２０＝＋２８．０°（ｃ＝１．３８，ＣＨＣｌ３）；ＩＲｖｍａｘ（フィルム）３４３４，２９３４，２８６０，１７３８，１６７４，１２３４，１０９３，１０４５，７４９ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）δ７．８９（ｍ，８Ｈ），７．７４（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．６５−７．５４（ｍ，２Ｈ），７．５５−７．１４（ｍ，３４Ｈ），６．４７（ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ），６.２４（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ），５．５５（ｓ，１Ｈ），５．４４（ｓ，１Ｈ），５．２４（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ），５．１４（ｓ，２Ｈ），５．１０（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１Ｈ），５．０６−４．９４（ｍ，５Ｈ），４．９０（ｄ，Ｊ＝１２．７Ｈｚ，１Ｈ），４．８１（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ），４．７７（ｄ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ，１Ｈ），４．７４−４．６６（ｍ，１Ｈ），４．５７（ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，１Ｈ），４．５３−４．４５（ｍ，５Ｈ），４．４１（ｓ，１Ｈ），４．３９−４．２８（ｍ，３Ｈ），４．２８−４．２２（ｍ，１Ｈ），４．２０（ｄｄ，Ｊ＝１０．０，４．７Ｈｚ，１Ｈ），４．１１（ｄｄ，Ｊ＝１０．３，３.４Ｈｚ，１Ｈ），４．０８−３．９７（ｍ，４Ｈ），３．８４（ｔ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ），３．７９−３．５２（ｍ，６Ｈ），３．４０（ｍ，３Ｈ），３．２２（ｓ，２Ｈ），２．１３（ｓ，３Ｈ），１．９６（ｓ，３Ｈ），１．９４（ｓ，３Ｈ），１.９４（ｓ，３Ｈ），１．５６（ｂｓ，４Ｈ），１．４１−１．３０（ｍ，２Ｈ），１.１４（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ）．；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）δ１７１．６，１７１．０，１７０．４（２Ｃ），１３９．８（２Ｃ），１３９.５，１３９．３，１３９．２，１３７．８，１３７．６，１３４．３（２Ｃ），１３４．０，１３３．９，１２９．５，１２９．３，１２９．２，１２９．２，１２８．９，１２８．８（４Ｃ），１２８．７，１２８．６（４Ｃ），１２８．５（２Ｃ），１２８．０（２Ｃ），１２７．２，１２７．１，１２７．０，１２６．９，１２６．８，１２６．６，１２６．４（２Ｃ），１０２．２，１０１．９，１０１．４，１００．０，９８．４，９８．２，７９．１，７８．６，７７．３，７６．９，７６．７（２Ｃ），７３．８，７３．７，７３．０（２Ｃ），７１．３，７０．５，７０．２，６９．８，６９．２，６８．７（���Ｃ），６８．０，６７．４，６５．８，６３．３，５０．８，４９．６，４９．４，３０．０，２４．２，２３.８，２３．７，２３．２，２０．８，１６．９；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：計算値Ｃ１０２Ｈ１１２Ｎ４Ｏ２３［Ｍ＋Ｎａ］＋１７８３．７６１５，測定値：１７８３．７６０９．
実施例１５Ａ：ベンジル（５−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）−５−（（（２
Ｓ，４ａＲ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｒ，８ａＲ）−７−アセトアミド−８−（（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−３−アセトアミド−４−（（（２Ｒ，４ａＲ，６Ｒ，７Ｓ，８Ｒ，８ａＳ）−７−アセトアミド−８−（ベンジルオキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−６−イル）オキシ）−５−ヒドロキシ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−６−イル）オキシ）−６−（（ベンジルオキシ）メチル）−３，４−ビス（ナフタレン−２−イルメトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ペンチル）（ベンジル）カルバメート（１５＊）の合成
【０３１９】
【化８９】
0006622804.tif 000106
【０３２０】
ＭｅＯＨ（０．４５ｍＬ）中に化合物１４＊（０．０２１ｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）を有する溶液に対して、ＭｅＯＨ中０．５Ｍ  ＮａＯＭｅを有する溶液（５．９６μＬ、２．９８ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温で２．５時間撹拌した。反応物をＭｅＯＨを用いて希釈し、アンバーライト１２０Ｈ＋樹脂を用いて中和し、濾過し、濃縮し、泡として化合物１５＊（０．０１９３ｇ、９４％）を得た。［α］Ｄ２０＝＋４９．１°（ｃ＝１．９０，ＣＨＣｌ３）；ＩＲｖｍａｘ（フィルム）３３５４，２９２９，２８６０，１６６７，１３７２，１０９６，１０４５，７５１ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）δ８．０２−７．７８（ｍ，８Ｈ），７．７３（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．６３−７．５３（ｍ，２Ｈ），７．５３−７．１７（ｍ，３４Ｈ），７．１０（ｄ，Ｊ＝９．５Ｈｚ，１Ｈ），６．４６（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ），５．５６（ｓ，１Ｈ），５．４２（ｓ，１Ｈ），５．１４（ｓ，２Ｈ），５．１０（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１Ｈ），５．０５−４．８１（ｍ，９Ｈ），４．７８−４．６８（ｍ，１Ｈ），４．６１−４．４５（ｍ，６Ｈ），４．４５−４．２５（ｍ，４Ｈ），４．２０（ｄｄ，Ｊ＝１０．１，４.８Ｈｚ，１Ｈ），４．１７（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ），４．１３（ｄｄ，Ｊ＝１０．３，３．６Ｈｚ，１Ｈ），４．０９−３．９７（ｍ，３Ｈ），３．９４（ｄ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，１Ｈ），３．９１−３．８２（ｍ，２Ｈ），３．７５（ｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，１Ｈ），３．７３−３．５２（ｍ，５Ｈ），３．５０−３．２９（ｍ，４Ｈ），３．２１（ｓ，３Ｈ），１．９８（ｓ，３Ｈ），１．９６（ｓ，３Ｈ），１.９４（ｓ，３Ｈ），１．５５（ｂｓ，４Ｈ），１．３９−１．３０（ｍ，２Ｈ），１.２６（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）；１３ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）δ１７２．４，１７０．５，１７０．４，１３９．９，１３９．８，１３９．５，１３９．３，１３９．１，１３７．８，１３７．６，１３４．３（２Ｃ），１３４．０，１３３.８，１３０．３，１３０．０，１２９．６，１２９．５，１２９．３，１２９．２（３Ｃ），１２９．０，１２８．９，１２８．８（２Ｃ），１２８．７（２Ｃ），１２８．６（３Ｃ），１２８．５，１２８．４（２Ｃ），１２８．１，１２８．０，１２７．１（３Ｃ），１２７．０，１２６．９，１２６．８，１２６．６，１２６．４，１０２．２，１０２．０，１０１．３，１００．０，９９．４（２Ｃ），７９．０，７８．６，７８．１，７７．０，７６．８，７６．７，７４．６，７３．７，７３．１，７３．０，７１．４，７０．２，６９．９，６９.６，６９．２，６８．７，６８．６，６８．０，６７．４，６７．３，６３．３，５１．８，４９．５，４８．７，２４．２，２３．６（２Ｃ），２３．２，
１７．２；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：計算値Ｃ１００Ｈ１１０Ｎ４Ｏ２２［Ｍ＋Ｎａ］＋１７４１．７５０９，測定値：１７４１．７５０３．
実施例１６Ａ：Ｎ−（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）−２−（（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−３−アセトアミド−２−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−３−アセトアミド−２−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（５−アミノペンチル）オキシ）−４，５−ジヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−５−ヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）オキシ）−５−ヒドロキシ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）オキシ）−４，５−ジヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）アセトアミド（１６＊）の合成
【０３２１】
【化９０】
0006622804.tif 000107
【０３２２】
化合物１５＊（０．０１９ｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）に対して、ＭｅＯＨ、水、酢酸エチル、および酢酸（３：１：１：０．１  ０．３ｍＬ：０．１ｍＬ：０．１ｍＬ：１０μＬ）を加えた。Ｐｄ（ＯＨ）２（２０％）（０．０３６ｇ、０．０５２ｍｍｏｌ）の添加前、および添加後にアルゴンを用いて反応混合物を２〜３分パージした。反応混合物を、水素を用いてパージし、水素雰囲気下２４時間撹拌した。パラジウムをセライトでろ過し、メタノール、並びにＭｅＯＨおよび水の１：１混合物を用いて洗浄し、ろ液を濃縮しオイルを得た。（この時点でＬＣＭＳは出発物質を示さなかったが、部分的に脱ベンジル化された化合物のみ示した）。粗生成物を同じ溶媒組成、Ｐｄ／Ｃ（０．０３６ｇ、１０％Ｐｄ、５０％水）を用いて２０時間撹拌して、２度目のサイクルを再び受けた。上記にようなろ過、続く、ＬＣＭＳは、化合物のみを示した。粗生成物を、ヘキサンを用いて洗浄し、続くアセトンによるデカンテーションし、泡として化合物１６＊（０．００７５ｇ、７９％）を得た。［α］Ｄ２０＝＋３３．３°（ｃ＝０．５６，Ｈ２Ｏ）；ＩＲｖｍａｘ（フィルム）３３５４，２９２９，２８６０，１６６７，１３７２，１０９６，１０４５，７５１ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ２ｏ）δ５．１０（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），５．０５（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ），４．９４（ｓ，１Ｈ），４．９０（ｄ，Ｊ＝３．８Ｈｚ，１Ｈ），４．５３−４．４８（ｍ，２Ｈ），４．４５（ｄｄ，Ｊ＝１１．２，３．７Ｈｚ，１Ｈ），４．２４（ｓ，２Ｈ），４．１８−４．０７（ｍ，４Ｈ），４．０７−３．９２（ｍ，５Ｈ），３．９３−３．８２（ｍ，２Ｈ），３．８２−３．６８（ｍ，５Ｈ），３．６７−３．５２（ｍ，２Ｈ），３．４６−３．３９（ｍ，１Ｈ），３．０６（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ）２．１０（ｓ，３Ｈ），２．０９（ｓ，３Ｈ），２．０８（ｓ，３Ｈ），１．７９−１．６６（ｍ，４Ｈ），１．５６−１．４６（ｍ，２Ｈ），１．３０（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ）．；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ｄ２ｏ）δ１７５．４，１７３．６（２Ｃ），９８．７，９８．３，９８．２，９５．２，７７.２，７６．３，７３．２，７２．６，７１．７，７１．５，７０．３，６９．０，６８．１（２Ｃ），６７．９，６７．６，６６．８（２Ｃ），６０．４，６０．３，６０．２，５３.３，４９．０，４７．６，３９．３，２７．９，２６．４，２２．３，２２．１，２１．９，２１．８，１５．４；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：計算値Ｃ３５Ｈ６２Ｎ４Ｏ２０［Ｍ＋Ｎａ］＋８８１．３８５５，測定値：８８１．３７９０．
削除配列の調製のための一般的手順：
手順Ａ．脱アシル化：ＭｅＯＨ（０．０６ｍＬ）中に化合物を有する溶液に、０．５Ｍ
ＮａＯＭｅ（０．０１３ｍＬ、６．３７μｍｏｌ）の溶液を加え、反応混合物を、室温で２時間撹拌した。反応混合物をＭｅＯＨを用いて希釈し、アンバーライト１２０Ｈ＋樹脂を用いて中和し、濾過し、濃縮した。
【０３２３】
手順Ｂ．Ｎ−アセトアミドへのアジドの変換：ピリジン（０．６ｍＬ）中に化合物を有する溶液に、チオ酢酸（０．０９１ｍＬ、１．２７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で１８時間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、反応混合物を、トルエンを用いて２度共沸させ、粗生成物を黄色オイルとして得た。粗生成物を、溶出剤としてＤＣＭおよびＥｔＯＡｃ（０〜２０％）を用いてフラッシュカラムクロトマトグラフィーによって精製した。
【０３２４】
手順Ｃ．全体的な脱保護：化合物を、ＭｅＯＨ、水、酢酸エチル、および酢酸（３：１：１：０．１  ０．３ｍＬ：０．１ｍＬ：０．１ｍＬ：１０μＬ）の混合物中に溶解した。反応混合物を、Ｐｄ（ＯＨ）２（２０％）の添加前、および後にアルゴンを用いて２〜３分パージした。反応混合物を、その後、水素を用いてパージし、２４時間、水素雰囲気下で撹拌した。パラジウムをセライトでろ過して除き、メタノール、並びにＭｅＯＨおよび水の１：１混合物を用いて洗浄し、ろ液を濃縮した。粗生成物を同じ溶媒組成、Ｐｄ／Ｃ（１０％Ｐｄ、５０％水）を用いて２０時間撹拌して、２度目のサイクルを再び受けた。上述のようにろ過し、粗生成物を、ヘキサンを用いて洗浄し、デカンテーションした。粗生成物を、アセトンを用いて洗浄し、デカンテーションし、乾燥後、泡として化合物を得た。
【０３２５】
実施例１７Ａ：Ｎ−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−２−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（５−アミノペンチル）オキシ）−４，５−ジヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−４，５−ジヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）アセトアミド（１７＊）の合成
【０３２６】
【化９１】
0006622804.tif 000108
【０３２７】
一般手順Ｂ、Ａ、およびＣにしたがって、β−ジサッカライド削除配列１７＊を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ２ｏ）δ４．９４（ｄ，Ｊ＝３．８Ｈｚ，１Ｈ），４．６４（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），４．１５（ｓ，１Ｈ），３．９８−３．８９（ｍ，４Ｈ），３．８７−３．６５（ｍ，８Ｈ），３．６２−３．４７（ｍ，１Ｈ），３．０３（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ），２．０８（ｓ，３Ｈ），１．７８−１．６３（ｍ，４Ｈ），１．５３−１．４２（ｍ，２Ｈ）．；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ｄ２ｏ）δ１７４．９，１０２．６，９８．２，７６．９，７４．７，７０．８，７０．１，６９．３，６８．４，６７．８，６７．７，６１．０，６０．６，５２．５，３９．２，２７.９，２６．３（２Ｃ），２２．２；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：計算値Ｃ１９Ｈ３６Ｎ２Ｏ１１［
Ｍ＋Ｈ］＋４６９．２３９７，測定値：４６９．２３８３．
実施例１８Ａ：Ｎ−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−２−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（５−アミノペンチル）オキシ）−４，５−ジヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−４，５−ジヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）アセトアミド（１８＊）の合成
【０３２８】
【化９２】
0006622804.tif 000109
【０３２９】
一般手順Ｂ、およびＣにしたがって、β−ジサッカライド削除配列１８＊を得た。１Ｈ
ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ２ｏ）δ４．８３（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ），４．７６（ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ，１Ｈ），４．２２（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，１Ｈ），４．０３（ｄｄ，Ｊ＝１１．２，３．７Ｈｚ，１Ｈ），３．９４−３．６６（ｍ，５Ｈ），３．６６−３．４８（ｍ，５Ｈ），３．５１−３．３２（ｍ，２Ｈ），２.８５（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），１．９２（ｓ，３Ｈ），１．６３−１．４６（ｍ，４Ｈ），１．３８−１．２０（ｍ，２Ｈ）．；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ｄ２ｏ）δ１７４．３，９８．２，９８．１，７７．８，７１．６，７０．７，６９．０，６８．２，６８．１，６７．８，６７．０，６０．５，６０．４，５０．１，３９．３，２７.９，２６．４，２２．３，２１．８；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：計算値Ｃ１９Ｈ３６Ｎ２Ｏ１１［Ｍ＋Ｈ］＋４６９．２３９７，測定値：４６９．２３８３．
実施例１９Ａ：Ｎ−（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−３−アセトアミド−２−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（５−アミノペンチル）オキシ）−４，５−ジヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−５−ヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）オキシ）−４，５−ジヒドロキシ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）アセトアミド（１９＊）の合成
【０３３０】
【化９３】
0006622804.tif 000110
【０３３１】
一般手順Ｂ、およびＣにしたがって、β−トリサッカライド削除配列１９＊を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ２ｏ）δ４．９０（ｄ，Ｊ＝３．８Ｈｚ，１Ｈ），４．８８（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ），４．４８（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），４．２３（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），４．１３（ｄｄ，Ｊ＝１１．２，３.７Ｈｚ，１Ｈ），４．０６−３．８７（ｍ，４Ｈ），３．８０（ｄｄｄ，Ｊ＝１４.２，１０．６，３．１Ｈｚ，２Ｈ），３．７３−３．５５（ｍ，９Ｈ），３．５３−３．３８（ｍ，１Ｈ），２．９３−２．８９（ｍ，２Ｈ），１．９８（ｓ，３Ｈ），１.９５（ｓ，３Ｈ），１．６８−１．４９（ｍ，４Ｈ），１．４８−１．２８（ｍ，２Ｈ），１．２１（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）．；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ｄ２ｏ）δ１７４．９，１７４．３，１００．６，９８．４，９８．２，７８．２，７５．７，７１．６，７１．０，７０．８，７０．６，７０．４，６９．０，６８．３，６７．９，６６．３，６０．５，６０．２，５２．５，４８．９，３９．３，２８．０，２６．４，２２.３，２２．２，２２．１，１５．６；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：計算値Ｃ２７Ｈ４９Ｎ３Ｏ１５［Ｍ＋Ｎａ］＋６７８．３０６１，測定値：６７８．３００３．
実施例２０Ａ：Ｎ−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−３−アセトアミド−２−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（５−アミノペンチル）オキシ）−４，５−ジヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−５−ヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）オキシ）−４，５−ジヒドロキシ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）アセトアミド（２０＊）の合成
【０３３２】
【化９４】
0006622804.tif 000111
【０３３３】
一般手順Ｂ、およびＣにしたがって、α−ジサッカライド削除配列２０＊を得た。１Ｈ
ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ２ｏ）δ４．９４（ｄ，Ｊ＝３．８Ｈｚ，１Ｈ），４．９０（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ），４．７５（ｄ，Ｊ＝３．８Ｈｚ，１Ｈ），４．３６（ｔ
，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ），４．３０（ｄｄ，Ｊ＝１１．１，３.７Ｈｚ，１Ｈ），４．０６−４．００（ｍ，２Ｈ），３．９６（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），３．９３−３．７８（ｍ，５Ｈ），３．７４（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ），３．７１−３．５２（ｍ，５Ｈ），３．５１−３．３８（ｍ，１Ｈ），２．９１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），１．９４（ｓ，６Ｈ），１．６９−１．４９（ｍ，４Ｈ），１．４６−１．２５（ｍ，２Ｈ），１．１４（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ）．；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ｄ２ｏ）δ１７４．１，１７３．６，９８．５，９８．２（２Ｃ），７７．２，７２．９，７１．５，７０．９，７０．４，６９．０，６８.２，６８．１，６７．９，６７．５，６７．１，６０．４，６０．２，４９．４，４９．１，３９．３，２７．９，２６．４，２２．３，２２．１，２１．９，１５．３；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：計算値Ｃ２７Ｈ４９Ｎ３Ｏ１５［Ｍ＋Ｎａ］＋６７８．３０６１，測定値：６７８．３０６８．
実施例２１Ａ：Ｎ−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（（５−アミノペンチル）オキシ）−４，５−ジヒドロキシ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）アセトアミド（２１＊）の合成
【０３３４】
【化９５】
0006622804.tif 000112
【０３３５】
一般手順Ｂ、ＡおよびＣにしたがって、ＦｕｃＮＡｃ削除配列２１＊を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ４．２０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），３．８５−３．６７（ｍ，２Ｈ），３．５６−３．４２（ｍ，３Ｈ），３．４３−３．３１（ｍ，１Ｈ），３．２１（ｄｔ，Ｊ＝３．１，１．４Ｈｚ，１Ｈ），２．８０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），１．８８（ｓ，３Ｈ），１．６５−１．４４（ｍ，４Ｈ），１．４４−１．２６（ｍ，２Ｈ），１．１７（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ１７４．２，１０３．２，７３．４（２Ｃ），７２．０，７０．２，５４．０，５０．０，４０．７，２９．９，２８．３，２３．２，１７．０；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：計算値Ｃ１３Ｈ２６Ｎ２Ｏ５［Ｍ＋Ｎａ］＋３１３．１７３９，測定値：３１３．１７２８．
実施例２２Ａ：（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−５−アセトアミド−６−（（（２Ｓ，４ａＲ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｒ，８ａＲ）−７−アセトアミド−６−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（５−（ベンジル（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）ペンチル）オキシ）−２−（（ベンジルオキシ）メチル）−４，５−ジヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−８−イル）オキシ）−４−（（（２Ｒ，４ａＲ，６Ｒ，７Ｓ，８Ｒ，８ａＳ）−７−アセトアミド−８−（ベンジルオキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−６−イル）オキシ）−２−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イルアセテート（２２＊）の合成
【０３３６】
【化９６】
0006622804.tif 000113
【０３３７】
ＤＣＭ（１．０８ｍＬ）および水（０．０６ｍＬ）の混合物中に化合物１５＊（０．０３５ｇ、０．０２ｍｍｏｌ）を有する溶液に、ＤＤＱ（０．０１４ｇ、０．０６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、室温で３時間撹拌した。反応混合物を、水およびＤＣＭを用いて希釈した。有機層を、飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液、および飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を用いて洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮し、粗生成物をオイルとして得て、さらに、フラッシュクロマトグラフィー［（シリカゲル６０、溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（０〜５０％）］によって精製し、泡として化合物２２＊（０．０２１ｇ、７１％）を得た。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：計算値Ｃ８０Ｈ９６Ｎ４Ｏ２３［Ｍ＋Ｎａ］＋１５０３．６３６３，測定値：１５０３．６４３４．
実施例２３Ａ：（２Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，６Ｒ，７Ｓ，７ａＳ）−メチル７−（（（２Ｓ，４ａＲ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｒ，８ａＲ）−７−アセトアミド−８−（（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−３−アセトアミド−４−（（（２Ｒ，４ａＲ，６Ｒ，７Ｓ，８Ｒ，８ａＳ）−７−アセトアミド−８−（ベンジルオキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−６−イル）オキシ）−５−アセトキシ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−６−イル）オキシ）−４−（（５−（ベンジル（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）ペンチル）オキシ）−６−（（ベンジルオキシ）メチル）−２−メチルテトラヒドロ−３ａＨ−［１，３］ジオキソロ［４，５−ｃ］ピラン−２−カルボキシレート（２３＊）の合成
【０３３８】
【化９７】
0006622804.tif 000114
【０３３９】
ＤＣＭ（０．５ｍＬ）中に化合物２２＊（０．０１０ｇ、６．７５μｍｏｌ）を有する溶液に、メチル２，２−ビス（エチルチオ）プロパノエート（０．００８４ｇ、０．０４ｍｍｏｌ）、および２，４，６−トリ−ｔｅｒｔ−ブチルピリジン（０．０２３ｇ、０．０９４ｍｍｏｌ）、続いて４Ａ  ＭＳを加え、反応混合物を、室温で１０分間撹拌し、その後０℃に冷却し、ＤＣＭ（０．２ｍＬ）中にＤＭＴＳＴ（０．００９２ｇ、０．０９４ｍｍｏｌ）を有する溶液を用いて、２時間の期間にわたって０℃で処理した。反応混合物を、０．１ｍＬのＥｔ３Ｎを用いてクエンチし、濾過し、真空下で溶媒を除去した。粗生
成物をフラッシュクロマトグラフィー（溶出剤としてＤＣＭ、アセトン、およびＭｅＯＨ、５０％）によって精製し、混合物（ＲおよびＳ）として５ｍｇの化合物２３＊（０．００５ｇ、４７％）を得た。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：計算値Ｃ８４Ｈ１０１Ｎ４Ｏ２５［Ｍ＋Ｈ］＋１５６５．６７５５，測定値：１５６５．６７３３．
実施例２４Ａ：（２Ｓ，３ａＲ，４Ｓ，６Ｒ，７Ｓ，７ａＳ）−７−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−３−アセトアミド−４−（（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−３−アセトアミド−４−（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）−３−アセトアミド−４，５−ジヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−５−ヒドロキシ−６−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−５−ヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（（５−アミノペンチル）オキシ）−６−（ヒドロキシメチル）−２−メチルテトラヒドロ−３ａＨ−［１，３］ジオキソロ［４，５−ｃ］ピラン−２−カルボン酸（２４＊）の合成
【０３４０】
【化９８】
0006622804.tif 000115
【０３４１】
ＭｅＯＨ（０．５ｍＬ）中に化合物２３＊（０．００５ｇ、３．１９μｍｏｌ）を有する溶液に、ＮａＯＨ水溶液（０．０８５μＬ、３．７５Ｍ）を加え、反応混合物を一晩撹拌した。溶媒を真空下で除去し、水を用いて希釈し、０℃に冷却した。反応混合物を、酢酸３滴を用いて０℃で中和した。水層を、ＥｔＯＡｃを用いて抽出し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮し、粗化合物を得て、粗化合物の１Ｈ  ＮＭＲは、もはや酢酸塩ピーク、およびメチルエステルピークは示さなかった。粗生成物は、更なる精製なしで次のステップに使用された。
【０３４２】
ＭｅＯＨ、ＥｔＯＡｃ、および水（３：２：１；０．３ｍＬ：０．２ｍＬ：０．１ｍＬ）の混合物中に粗化合物を有する溶液を、３分間アルゴンを用いてパージし、続いてＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（１０％）を添加した。反応混合物を、Ｈ２を用いてさらにパージし、Ｈ２雰囲気下で４８時間撹拌した。反応混合物を、ＰＴＦＥフィルターに通してろ過し、ろ液を、１：１  ＭｅＯＨ：水の混合物を用いて洗浄した。溶媒を真空下で除去し、粗化合物を得て、粗化合物をＨＰＬＣによって精製し、標的化合物２４＊（１ｍｇ、３３％）および副生成物としてＲジアステレオ異性体を得た。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：計算値Ｃ３８Ｈ６４Ｎ４Ｏ２２［Ｍ＋Ｎａ］＋９５１．３９１０，測定値：９５１．３９２８．
化合物２４＊ａ〜２４＊ｆは、本発明に係る更なる実施例を構成し、化合物２４＊において記述された手順にしたがって得ることができる：
【０３４３】
【化９９−１】
0006622804.tif 000116
【０３４４】
【化９９−２】
0006622804.tif 000117
【０３４５】
【化９９−３】
0006622804.tif 000118
【０３４６】
Ｂ．生物学的評価
実施例１．Ｂ：ウサギＳＰ−４型血清およびヒト参照血清００７ｓｐからの抗体結合の決定のためのグリカンアレイ
マイクロアレイプリンティング
ピルベート化ＳＰ４テトラサッカライド２４＊を１０ｍＭ水中に溶解し、１００μＭおよび５０μＭのカップリングバッファー（５０ｍＭリン酸ナトリウム、ｐＨ８．５）で希釈した。各濃度を、サイエニオン（Ｓｃｉｅｎｉｏｎ）Ｓ３マイクロアレイプリンターを用いて、６５％相対湿度で、多くの関連する構造物および天然のポリサッカライドと一緒にコードリンク（ＣｏｄｅＬｉｎｋ）活性化ガラススライド（サーモディクス（Ｓｕｒｍ
ｏｄｉｃｓ））に重複してスポットした（プリンティングパターンは図４参照）。スライドを、湿度飽和容器内で一晩インキュベートした。スライドを、水を用いて２度洗浄し、１００ｍＭエタノールアミン、５０ｍＭリン酸ナトリウムｐＨ９と共に１時間、室温で、インキュベーションすることによってクエンチした。スライドを再び２回洗浄し、遠心分離によって乾燥し、使用まで４℃に保存した。
【０３４７】
マイクロアレイインキュベーション：
スライドを、１％ＢＳＡ−ＰＢＳを用いて室温でインキュベーションすることによってブロックし、ＰＢＳを用いて２度洗浄し、遠心分離によって乾燥した。Ａ６４ウェルインキュベーションガスケットを、ガラススライドに取り付けた。
【０３４８】
血清（ウサギＳＰ２型血清（ＳＳＩ  ダイアグノスティカ、デンマーク）、またはヒト参照血清００７ｓｐ（Ｃｌｉｎ．Ｖａｃｃｉｎｅ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０１１  １８（１０），１７２８））を、競合剤を含まない、または競合剤として天然のＳＰ４  ＣＰＳ（莢膜ポリサッカライド）、もしくはＣＷＰＳ（Ｓ．ニューモニアエ細胞壁ポリサッカライド）を含む１％ＢＳＡ−ＰＢＳで希釈した。  希釈物を、４５分間、室温でインキュベートし、その後、付属のインキュベーションパターンにしたがって、マイクロアレイにアプライした。１時間室温でインキュベーション後、ウェルを、０．０５％トゥイーン（Ｔｗｅｅｎ）−２０（ＰＢＳ−Ｔ）を含むＰＢＳを用いて５分間３回洗浄した。１％ＢＳＡ−ＰＢＳの二次抗体希釈液（００７ｓｐウェルのために：ヤギ抗−ヒトＩｇＧ  Ｆｃ  アレキサフルオロ（ＡｌｅｘａＦｌｉｏｒ）４８８（ジアノバ（Ｄｉａｎｏｖａ））１：４００、およびヤギ抗−ヒトＩｇＭアレキサフルオロ（ＡｌｅｘａＦｌｉｏｒ）５９４（インビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ））１：４００；ウサギフェルのために：ヤギ抗−ウサギＩｇＧ  ＦＩＴＣ（アブカム（Ａｂｃｕｍ）１；２００）を、３０分間、室温で、暗室内で、インキュベーションした。ウェルをＰＢＳ−Ｔを用いて二回洗浄し、ガスケットを除去し、スライドを、最初にＰＢＳ、その後、水を用いてリンスした。リンス後の物質を遠心分離によって乾燥し、蛍光をジーンピックス（ＧｅｎｅＰｉｘ）４３００ａ蛍光リーダーを用いて読み出した。
【０３４９】
結果：
アレイにプリントされた合成構造体のうち、ウサギ型血清において特異的ＩｇＧシグナルが、ピルベートＳＰ４テトラサッカライド２４＊でのみ観察された（図５参照）。このシグナルは、競合剤として天然のＳＰ４  ＣＰＳを用いて場合にはもはや観察されることは可能ではないだろうが、ＣＷＰＳ競合を行う場合は維持されるることが可能であるだろう。非ピルベートテトラサッカライド１６＊と比較して、ピルベートテトラサッカライド２４＊はシグナルを、天然のＳＰ４  ＣＰＳよりはるかにより効果的に阻害することができ、多数の交差反応性を示す。ＣＷＰＳ競合は、シグナル強度に影響を有さない。
【図１】
0006622804.tif 000123
【図２】
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【図３】
0006622804.tif 000125
【図４】
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【図５】
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【図６】
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