(57)【要約】  本発明は、Ｄ−ガンマ−グルタミル−［Ｄ／Ｌ］−トリプトファンのプロドラッグを提供し、該プロドラッグは、式Ｉの化合物又はその薬学的に許容される塩であり、【化１】2014510734.tif 000033式中、ＧはＣ１−Ｃ８アルキルまたはベンジルであり、ＴはＣ１−Ｃ８アルキルまたはベンジルであり、＊は（Ｒ）または（Ｓ）配置のキラル炭素であり、但し、＊が（Ｒ）配置の場合、ＧおよびＴの少なくとも１つは、Ｃ５−Ｃ８アルキルである。加えて、本発明は、医薬組成物中における式Ｉの化合物の使用を提供する。
2014510734.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物：
【化１】
2014510734.tif 000032
（式中、
Ｇは、Ｃ１−Ｃ８アルキルおよびベンジルからなる群から選択され；
Ｔは、Ｃ１−Ｃ８アルキルおよびベンジルからなる群から選択され；ならびに
＊は、（Ｒ）配置または（Ｓ）配置であるキラル炭素であり；
但し、＊が（Ｒ）配置の場合は、ＧおよびＴの少なくとも１つは、Ｃ５−Ｃ８アルキルである）
または、薬学的に許容されるその塩。
【請求項２】
前記Ｇが、Ｃ５−Ｃ８アルキルからなる群から選択される
ことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記Ｔが、Ｃ５−Ｃ８アルキルから選択される
ことを特徴とする、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
前記＊が（Ｒ）配置である
ことを特徴とする、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
前記＊が（Ｓ）配置である
ことを特徴とする、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
前記Ｇがイソアミルであり、前記Ｔがイソアミルであり、かつ、前記＊が（Ｒ）配置である
ことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
前記Ｇがイソアミルであり、前記Ｔがイソアミルであり、かつ、前記＊が（Ｓ）配置である
ことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
前記Ｇがヘプチルであり、前記Ｔがヘプチルであり、かつ、前記＊が（Ｓ）配置である
ことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
前記Ｇがペンチルであり、前記Ｔがペンチルであり、かつ、前記＊が（Ｓ）配置である
ことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
前記Ｇがヘキシルであり、前記Ｔがヘキシルであり、かつ、前記＊が（Ｓ）配置である
ことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
前記Ｇがイソアミルであり、前記Ｔがペンチルであり、かつ、前記＊が（Ｒ）配置である
ことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
前記Ｇがイソアミルであり、前記Ｔがヘプチルであり、かつ、前記＊が（Ｒ）配置である
ことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
前記Ｇがイソアミルであり、前記Ｔがエチルであり、かつ、前記＊が（Ｒ）配置である
ことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
前記Ｇがエチルであり、前記Ｔがエチルであり、かつ、前記＊が（Ｓ）配置である
ことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項１５】
前記Ｇがエチルであり、前記Ｔがイソアミルであり、かつ、前記＊が（Ｓ）配置である
ことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項１６】
前記Ｇがエチルであり、前記Ｔがイソアミルであり、かつ、前記＊が（Ｒ）配置である
ことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項１７】
前記Ｇがベンジルであり、前記Ｔがイソアミルであり、かつ、前記＊が（Ｒ）配置である
ことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項１８】
前記Ｇがベンジルであり、前記Ｔがイソアミルであり、かつ、前記＊が（Ｓ）配置である
ことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項１９】
請求項１〜１８のいずれか一項に記載の化合物および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ジペプチドのプロドラッグの分野に関し、より具体的には、Ｄ−ガンマ−グルタミル−Ｄ−トリプトファン（Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨ）およびＤ−ガンマ−グルタミル−Ｌ−トリプトファン（Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨ）のジペプチドのプロドラッグの分野に関する。
【背景技術】
【０００２】
プロドラッグは、投与した後に体内で変換され、活性薬を提供する化合物である。治療上の用途および投与の形態に依存して、プロドラッグは、経口、注射、鼻腔内、または肺組織に直接向けられる吸入剤形として使用することができる（Ｒａｕｔｉｏ  ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  ＲｅｖｉｅｓＤｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ７，２５５−２７０（２００８年2月）。肺組織に直接向けられる吸入剤形でのプロドラッグの使用は、概説されている（Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  Ｏｆ  Ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｈｏｒａｃｉｃ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  Ｖｏｌ１  ２００４，Ｈｏｗ  ｔｈｅ  Ｌｕｎｇ  Ｈａｎｄｌｅｓ  Ｄｒｕｇｓ，  Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃｓ  ｏｆ  Ｉｎｈａｌｅｄ  Ｃｏｒｔｉｃｏｓｔｅｒｏｉｄｓ，  Ｊｕｌｉａ  Ｗｉｎｋｌｅｒ，  Ｇｕｅｎｔｈｅｒ  Ｈｏｃｈｈａｕｓ，  ａｎｄ  Ｈａｒｔｍｕｔ  Ｄｅｒｅｎｄｏｒｆ  ３５６−３６３；  Ｈ．Ｄｅｒｅｎｄｏｆｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｊ  ２００６；２８：１０４２−１０５０）。
【０００３】
吸入ならびに鼻腔内の投与手段に関しては、吸収された活性薬の迅速な排除による、経口生物学的利用能および全身性副作用の最小化が、いくつかの薬物設計の検討事項である。経口投与のために設計されたプロドラッグは、動物に経口投与した時の経口生物学的利用能の向上、ならびに、ｐＨが１．２（偽胃液として知られている）およびｐＨが５．８または６．８（偽腸液として知られている）の偽消化液における適切な化学的安定性を選ぶ。注射に使用されるプロドラッグにおいては、化合物の水溶解度が重要な検討事項である。
【０００４】
プロドラッグの選別基準は、その投与の形態に依存する。しかしながら、ヒトの血液中において、すぐに加水分解されて活性薬になりうるプロドラッグは、投与において有益な特性である。ヒト血液は、エステル誘導体を活性薬に生体内変換することができる、いくつかのエステラーゼを有している（Ｄｅｒｅｋ  Ｒｉｃｈｔｅｒ  ａｎｄ  Ｐｈｙｌｌｉｓ  Ｇｏｄｂｙ  Ｃｒｏｆｔ，Ｂｌｏｏｄ  Ｅｓｔｅｒａｓｅｓ，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ．１９４２  Ｄｅｃｅｍｂｅｒ；３６（１０−１２）：７４６−７５７；  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＦＭ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ  ｏｆ  ｅｓｔｅｒａｓｅｓ  ｉｎ  ｍａｎ．  Ｃｌｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｉｎｅｔ．１９８５  Ｓｅｐ−Ｏｃｔ；１０（５）：３９２−４０３）。さらに、プロドラッグは、ヒト肝臓において、活性薬に生体内変換されてもよい（Ｂａｂａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｈｅ  ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ  ｏｆ  ｅｎａｌａｐｒｉｌ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｃｏｍｐｅｎｓａｔｅｄ  ｌｉｖｅｒ  ｃｉｒｒｈｏｓｉｓ  Ｂｒ  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９０  Ｊｕｎ；２９（６）：７６６−９）。したがって、投与の形態にかかわらず、ヒト肝細胞および血液の生体内変換の結果は、エステル型プロドラッグの評価に用いることができる。
【０００５】
Ｄ−イソグルタミル−Ｄ−トリプトファンまたはＤ−ガンマ−グルタミル−Ｄ−トリプトファン（Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨまたはＡｐｏ８０５としても知られている）は、乾癬を含む自己免疫疾患の治療のために開発された、血液制御性の合成ジペプチドである（Ｓａｐｕｎｔｓｏｖａ，Ｓ．Ｇ．，ｅｔ  ａｌ．（Ｍａｙ  ２００２），Ｂｕｌｌｅｔｉｎ  ｏｆ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１３３（５），４８８−４９０）。Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨ（サイモデプレッシン（ｔｈｙｍｏｄｅｐｒｅｓｓｉｎ））のナトリウム塩は、乾癬に対する効果的療法と考えられており（米国特許第５７３６５１９号）、ロシアにおいては、注射アンプルの形で入手できる。
【０００６】
Ｄ−イソグルタミル−Ｌ−トリプトファンまたはＤ−ガンマ−グルタミル−Ｌ−トリプトファン（Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨまたはＳＣＶ−０７としても知られている）は、患者の免疫系を調整するために有益であると報告されており（米国特許第５７４４４５２号）、肺がん（国際公開第２００９／０２５８３０Ａ１号）、結核（国際公開第２００３／０１３５７２Ａ１号）、性器ウイルス感染（国際公開第２００６／０７６１６９号）、メラノーマ（国際公開第２００７／１２３８４７号）、出血性ウイルス感染（国際公開第２００６／０４７７０２号）、呼吸器ウイルス感染（国際公開第２００５／１１２６３９号）、Ｃ型肝炎（国際公開第２０１０／０１７１７８号）、ならびに、疾患に起因する、粘膜の病変または損傷（国際公開第２００８／１００４５８号）の治療において有益である。ＳＣＶ−０７はまた、ワクチン・エンハンサーとしても報告されている（国際公開第２００６／１１６０５３号）。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
（概要）
本発明は、少なくとも一部は、Ｄ−ガンマ−グルタミル−Ｄ−トリプトファン（Ａｐｏ８０５）ならびにＤ−ガンマ−グルタミル−Ｌ−トリプトファン（ＳＣＶ−０７）のプロドラッグ、特には、Ａｐｏ８０５ならびにＳＣＶ−０７よりもより脂溶性であるプロドラッグ、の発見に基づいている。理論に縛られることなく、Ａｐｏ８０５ならびにＳＣＶ−０７よりもより脂溶性であるプロドラッグは、インビボにおいて、より迅速、かつ、より効率的に、それぞれ、Ａｐｏ８０５ならびにＳＣＶ−０７に変換されると信じられている。
【０００８】
本発明のプロドラッグ化合物の一例は、Ａｐｏ８０４である。Ａｐｏ８０４は、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＭｅ）−Ｏ−ＣＨ２Ｐｈのペプチド配列を有し、Ａｐｏ８０５のプロドラッグである。Ａｐｏ８０４は、安定な化学物質である。Ａｐｏ８０４は、Ａｐｏ８０５よりもより脂溶性であり、より高いｌｏｇＤ７．４を有する。ラットにおける薬物動態の研究において、Ａｐｏ８０５と比較した際、Ａｐｏ８０４は、向上された経口生物学的利用能を示す。凍結保存されたヒト肝細胞における、さらなる評価では、４時間の間、３１％のＡｐｏ８０５がＡｐｏ８０４から形成されることが示された。
【０００９】
本発明の実施形態は、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容できる塩を提供する。
【００１０】
【化１】
2014510734.tif 000003
【００１１】
式中、
ＧはＣ１−Ｃ８アルキルおよびベンジルからなる群から選択され；
Ｔは、Ｃ１−Ｃ８アルキルおよびベンジルからなる群から選択され；かつ
＊は、（Ｒ）配置または（Ｓ）配置のいずれかであるキラル炭素であり、但し、＊が（Ｒ）配置である際、ＧおよびＴの少なくとも１つはＣ５−Ｃ８アルキルである。
【００１２】
本発明の実施形態は、Ｇが、Ｃ５−Ｃ８アルキルからなる群から選択される、ここに記載の化合物を提供する。
【００１３】
本発明の実施形態は、Ｔが、Ｃ５−Ｃ８アルキルからなる群から選択される、ここに記載の化合物を提供する。
【００１４】
本発明の実施形態は、＊が、（Ｒ）配置である、ここに記載の化合物を提供する。
【００１５】
本発明の実施形態は、＊が、（Ｓ）配置である、ここに記載の化合物を提供する。
【００１６】
本発明の実施形態は、Ｇが、イソアミルであり；Ｔが、イソアミルであり；かつ、＊が、（Ｒ）配置である、ここに記載の化合物を提供する。
【００１７】
本発明の実施形態は、Ｇが、イソアミルであり；Ｔが、イソアミルであり；かつ、＊が、（Ｓ）配置である、ここに記載の化合物を提供する。
【００１８】
本発明の実施形態は、Ｇが、ヘプチルであり；Ｔが、ヘプチルであり；かつ、＊が、（Ｓ）配置である、ここに記載の化合物を提供する。
【００１９】
本発明の実施形態は、Ｇが、ペンチルであり；Ｔが、ペンチルであり；かつ、＊が、（Ｓ）配置である、ここに記載の化合物を提供する。
【００２０】
本発明の実施形態は、Ｇが、ヘキシルであり；Ｔが、ヘキシルであり；かつ、＊が、（Ｓ）配置である、ここに記載の化合物を提供する。
【００２１】
本発明の実施形態は、Ｇが、イソアミルであり；Ｔが、ペンチルであり；かつ、＊が、（Ｒ）配置である、ここに記載の化合物を提供する。
【００２２】
本発明の実施形態は、Ｇが、イソアミルであり；Ｔが、ヘプチルであり；かつ、＊が、（Ｒ）配置である、ここに記載の化合物を提供する。
【００２３】
本発明の実施形態は、Ｇが、イソアミルであり；Ｔが、エチルであり；かつ、＊が、（Ｒ）配置である、ここに記載の化合物を提供する。
【００２４】
本発明の実施形態は、Ｇが、エチルであり；Ｔが、エチルであり；かつ、＊が、（Ｓ）配置である、ここに記載の化合物を提供する。
【００２５】
本発明の実施形態は、Ｇが、エチルであり；Ｔが、イソアミルであり；かつ、＊が、（Ｓ）配置である、ここに記載の化合物を提供する。
【００２６】
本発明の実施形態は、Ｇが、エチルであり；Ｔが、イソアミルであり；かつ、＊が、（Ｒ）配置である、ここに記載の化合物を提供する。
【００２７】
本発明の実施形態は、Ｇが、ベンジルであり；Ｔが、イソアミルであり；かつ、＊が、（Ｒ）配置である、ここに記載の化合物を提供する。
【００２８】
本発明の実施形態は、Ｇが、ベンジルであり；Ｔが、イソアミルであり；かつ、＊が、（Ｓ）配置である、明細書に記載の化合物を提供する。
【００２９】
本発明の実施形態は、ここに記載の化合物ならびに薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物を提供する。
【００３０】
本発明の他の態様及び特徴は、添付される図と併せて、本発明の具体的な実施形態の下記の記述を概観することにより、当業者には明らかになるだろう。
【００３１】
（図面の簡単な説明）
【図面の簡単な説明】
【００３２】
【図１】図１は、酸およびアミン基の推定ｐＫａ値を用いた、ジペプチドＨ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨのＡＣＤ  ｐｈｙｓｃｈｅｍ  化学種同定計算を示す図である。Ｈ２ＬおよびＨ３Ｌの化学構造を図の中に示す。Ｈ２ＬはＨ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨの双性イオン（ｚｗｉｔｔｅｒｉｏｎ）種である。
【図２】図２は、酸およびアミン基の推定ｐＫａ値を用いた、ジペプチドＨ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＭｅ）−ＯＨのＡＣＤ  ｐｈｙｓｃｈｅｍ  化学種同定計算を示す図である。Ｈ３ＬおよびＨ３Ｌの化学構造を図の中に示す。Ｈ３ＬはＨ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＭｅ）−ＯＨの双性イオン種である。
【図３】図３は、酸およびアミン基の推定ｐＫａ値を用いた、ジペプチドＨ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−イソアミルのＡＣＤ  ｐｈｙｓｃｈｅｍ  化学種同定計算を示す図である。Ｈ２ＬおよびＨ３Ｌの化学構造を図の中に示す。Ｈ２Ｌは、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−イソアミルの中性種であり、Ｈ３Ｌは、アミノ基が正電荷を帯びているアミノ塩種である。
【図４】図４は、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−イソアミル（Ａｐｏ８４８）のおよびＡｐｏ８０５モノカリウム塩（Ａｐｏ８０５Ｋ１）をラットに経口投薬した後の、血漿中のＡｐｏ８０５（Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨ）の平均濃度（ｎ＝５）を示しており、プロドラッグの向上した生物学的利用能を実証している図である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３３】
（詳細な説明）
明細書中において使用する際、用語「アルキル」は、分岐または非分岐の飽和炭化水素鎖を意味する。非限定で、アルキル原子団の具体例は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−プロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｎ−ペンチル、ヘキシル、オクチルなどを含む。用語法「Ｃｘ−Ｃｙ」（式中、ｘおよびｙは整数である。）を、アルキル原子団に対して使用する際には、その「Ｃ」はアルキル原子団中の炭素原子の数に関している。例えば、メチルは、Ｃ１アルキルとして表記され、イソブチルは、Ｃ４アルキルとして表記される。各範囲に包含される、すべての具体的な整数ならびに整数の範囲は、その広い範囲によって、明解に開示されている。例えば、Ｃ１−Ｃ８は、具体的には、下記のものを包含している：Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ１−Ｃ２、Ｃ１−Ｃ３、Ｃ１−Ｃ４、Ｃ１−Ｃ５、Ｃ１−Ｃ６、Ｃ１−Ｃ７、Ｃ１−Ｃ８、Ｃ２−Ｃ３、Ｃ２−Ｃ４、Ｃ２−Ｃ５、Ｃ２−Ｃ６、Ｃ２−Ｃ７、Ｃ２−Ｃ８、Ｃ３−Ｃ４、Ｃ３−Ｃ５、Ｃ３−Ｃ６、Ｃ３−Ｃ７、Ｃ３−Ｃ８、Ｃ４−Ｃ５、Ｃ４−Ｃ６、Ｃ４−Ｃ７、Ｃ４−Ｃ８、Ｃ５−Ｃ６、Ｃ５−Ｃ７、Ｃ５−Ｃ８、Ｃ６−Ｃ７、Ｃ６−Ｃ８、およびＣ７−Ｃ８。他の例としては、Ｃ５−Ｃ８は、具体的には、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ５−Ｃ６、Ｃ５−Ｃ７、Ｃ５−Ｃ８、Ｃ６−Ｃ７、Ｃ６−Ｃ８、およびＣ７−Ｃ８を包含している。
【００３４】
下記の略語および／または省略表現も、明細書中で使用されている。
【００３５】
【表１−１】
2014510734.tif 000004
【００３６】
【表１−２】
2014510734.tif 000005
【００３７】
【表１−３】
2014510734.tif 000006
【００３８】
本発明の化合物は、式Ｉによって記載される。
【００３９】
【化２】
2014510734.tif 000007
【００４０】
式中、
Ｇは、Ｃ１−Ｃ８アルキルおよびベンジルからなる群から選択され；
Ｔは、Ｃ１−Ｃ８アルキルおよびベンジルからなる群から選択され；かつ
＊は、（Ｒ）配置または（Ｓ）配置のいずれかであるキラル炭素であり、但し、＊が（Ｒ）配置である際、ＧおよびＴの少なくとも１つはＣ５−Ｃ８アルキルである。
【００４１】
式Ｉの化合物は、式ＩＡと呼ばれる部分集合を含んでいる：
【００４２】
【化３】
2014510734.tif 000008
【００４３】
式中、
＊は、（Ｒ）配置であり；
Ｇは、Ｃ１−Ｃ８アルキルおよびベンジルからなる群から選択され；
ＴはＣ１−Ｃ８アルキルおよびベンジルからなる群から選択され；かつ、
ＧおよびＴの少なくとも１つはＣ５−Ｃ８アルキルである。
【００４４】
式ＩＡの具体例には、それらに限定されるものではないが、Ｇがエチルであり、かつ、Ｔがイソアミルである；Ｇがイソアミルであり、かつ、Ｔがイソアミルである；Ｇがイソアミルであり、かつ、Ｔがエチルである；Ｇがイソアミルであり、かつ、Ｔがイソアミルである；Ｇがベンジルであり、かつ、Ｔがイソアミルである；ならびに、Ｇがイソアミルであり、かつ、Ｔがベンジルであるものが含まれている。
【００４５】
更に、式ＩＡの化合物の非限定的な例には、下記のものが含まれる：
正式な名称は、（２Ｒ）−２−アミノ−５−（｛（２Ｒ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−［（４−メチルペンチル）オキシ］−１−オキソプロパン−２−イル｝アミノ）−５−オキソペンタン酸  エチル  エステル  塩酸塩である、Ｇがエチルであり、かつ、Ｔがイソアミルである塩酸塩。別名は、ペプチド  Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ−（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−ＯＥｔの塩酸塩である；
正式な名称は、（２Ｒ）−２−アミノ−５−｛［（２Ｓ）−１−エトキシ−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−オキソプロパン−２−イル］アミノ｝−５−オキソペンタン酸  ３−メチルブチル  エステル  塩酸塩である、Ｇがイソアミルであり、かつ、Ｔがエチルである塩酸塩。別名は、ペプチド  Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ−（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−Ｅｔ）−Ｏ−イソアミルの塩酸塩である；
正式な名称は、（２Ｒ）−２−アミノ−５−｛［（２Ｒ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−（３−メチルブトキシ）−１−オキソプロパン−２−イル］アミノ｝−５−オキソペンタン酸  ３−メチルブチル  エステルである、Ｇがイソアミルであり、かつ、Ｔがイソアミルであるエステル。別名は、Ｄ−ガンマ−グルタミル−Ｄ−トリプトファン  ジイソアミル  エステル、ならびに、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−イソアミル。この化合物の構造を以下に示す、
【００４６】
【化４】
2014510734.tif 000009
【００４７】
式Ｉの化合物は、式ＩＢと呼ばれる部分集合を含んでいる：
【００４８】
【化５】
2014510734.tif 000010
【００４９】
式中、
＊は、（Ｓ）配置であり；
Ｇは、Ｃ１−Ｃ８アルキルおよびベンジルからなる群から選択され；
Ｔは、Ｃ１−Ｃ８アルキルおよびベンジルからなる群から選択される。
【００５０】
式ＩＢの化合物の非限定的な例には、下記のものが含まれる：
正式な名称は、塩化  （２Ｒ）−５−｛［（２Ｓ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−（３−メチルブトキシ）−１−オキソプロパン−２−イル］アミノ｝−１−（３−メチルブトキシ）−１，５−ジオキソペンタン−２−アミニウムである、Ｇがイソアミルであり、かつ、Ｔがイソアミルである塩酸塩。この塩の別名には、Ｄ−ガンマ−グルタミル−Ｌ−トリプトファン  ジイソアミル  エステル  塩酸塩、ならびに、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ−（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−イソアミル・ＨＣｌが含まれる；
正式な名称は、（２Ｒ）−２−アミノ−５−｛［（２Ｓ）−１−（ヘプチルオキシ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−オキソプロパン−２−イル］アミノ｝−５−オキソペンタン酸  ヘプチル  エステル  塩酸塩である、Ｇがヘプチルであり、かつ、Ｔがヘプチルである塩酸塩。この塩の別名には、Ｄ−ガンマ−グルタミル−Ｌ−トリプトファン  ジ−ｎ−ヘプチル  エステル  塩酸塩、ならびに、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ−（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−ヘプチル）−Ｏ−ヘプチル・ＨＣｌが含まれる；
正式な名称は、（２Ｒ）−２−アミノ−５−｛［（２Ｓ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−オキソ−１−（ペンチルオキシ）プロパン−２−イル］アミノ｝−５−オキソペンタン酸  ペンチル  エステル  塩酸塩である、Ｇがペンチルであり、かつ、Ｔがペンチルである塩酸塩。この塩の別名には、Ｄ−ガンマ−グルタミル−Ｌ−トリプトファン  ジ−ｎ−ペンチル  エステル  塩酸塩、ならびに、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ−（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−ペンチル）−Ｏ−ペンチル・ＨＣｌが含まれる；
正式な名称は、（２Ｒ）−２−アミノ−５−（｛（２Ｓ）−１−（ヘキシルオキシ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−オキソプロパン−２−イル］アミノ｝−５−オキソペンタン酸  ヘキシル  エステル  塩酸塩である、Ｇがヘキシルであり、かつ、Ｔがヘキシルである塩酸塩。この塩の別名には、Ｄ−ガンマ−グルタミル−Ｌ−トリプトファン  ジ−ｎ−ヘキシル  エステル  塩酸塩、ならびに、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ−（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−ヘキシル）−Ｏ−ヘキシル・ＨＣｌが含まれる；
正式な名称は、（２Ｒ）−２−アミノ−５−（｛（２Ｓ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−［（４−メチルペンチル）オキシ］−１−オキソプロパン−２−イル｝アミノ）−５−オキソペンタン酸  エチル  エステル  塩酸塩である、Ｇがエチルであり、かつ、Ｔがイソアミルである塩酸塩。この塩の別名は、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ−（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−エチル）−Ｏ−イソアミル・ＨＣｌである。
【００５１】
式Ｉの化合物の一般的な調製方法
ＧおよびＴが同じアルキル基である式Ｉの化合物は、下記の製法（製法Ａおよび製法Ｂ）により調製することができる。
【００５２】
製法Ａは、Ｇ＝Ｔである式ＩＡの化合物の調製に使用することができる。
【００５３】
【化６−１】
2014510734.tif 000011
【００５４】
製法Ａ
製法Ａは、ＧおよびＴが同じアルキルである、式ＩＡの化合物の調製に使用される方法である。製法Ａでは、ジペプチド  Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ−（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨを、炭酸カリウムおよびＴ−Ｉで処理することで、ジエステル  Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ−（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−Ｇ）−Ｏ−Ｔ（式中、ＧとＴは同じアルキルである）が得られる。Ｔ−Ｉは、試薬  ヨウ化アルキルである。酢酸エチル、あるいは、ジオキサン等の不活性溶媒中における、ＨＣｌによるＢｏｃ基の脱保護によって、ＧとＴが同じである、式ＩＡの化合物が得られる。あるいは、ＨＣｌの存在下、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨのアルコールＴ−ＯＨとの反応によっても、ＧとＴが同じである、式ＩＡの化合物は調製される。Ｔ−ＯＨは、アルカノールである。製法Ａにおいて、式ＩＡの化合物は、＊が、（Ｒ）配置である、式Ｉの化合物である。
【００５５】
製法Ａの例は、Ｔ−Ｉが３−ヨード−３−メチルブタンである、後述の例１において、更に、具体的に説明されている。ＤＭＦ中における、炭酸カリウムの存在下、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ−（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨと、Ｔ−Ｉ（Ｔは３−メチルブチルである）との間の反応により、Ｇ＝Ｔ＝イソアミルである、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ−（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−Ｇ）−Ｏ−Ｔが得られる。ジクロロメタン中における、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ−（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−Ｔ）−Ｏ−Ｇ中のＢｏｃ基のＨＣｌ脱保護によって、Ｇ＝Ｔ＝イソアミルである、式ＩＡのＨＣｌ塩が得られる。例１中の式ＩＡの化合物は、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ−（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−イソアミルである。
【００５６】
製法Ｂは、Ｇ＝Ｔである、式ＩＢの化合物の調製に使用できる。
【００５７】
【化６−２】
2014510734.tif 000012
【００５８】
製法Ｂ
製法Ｂにおいては、式ＩＢの化合物の調製に際して、Ｄ，Ｌジペプチド誘導体  Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨ、あるいはＨ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨが使用されることを除いて、その反応条件は、製法Ａと同じである。製法Ｂにおいて、式ＩＢの化合物は、＊が、（Ｓ）配置である、式Ｉの化合物である。
【００５９】
製法Ｂの例は、後述の例２においてさらに具体的に説明される。Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨをＴ−ＯＨ（Ｔはｎ−ヘプチルである）を、ＨＣｌと反応させることで、Ｇ＝Ｔ＝ｎ−ヘプチルである、式ＩＢの化合物のＨＣｌ塩が得られる。例２中の式ＩＢの化合物は、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−ｎ−ヘプチル）−Ｏ−ｎ−ヘプチルである。
【００６０】
ＴおよびＧが独立にＣ１−Ｃ８アルキルまたはベンジルである、式Ｉの化合物は、製法Ｃおよび製法Ｄの少なくとも１の製法により調製することができる。
【００６１】
【化６−３】
2014510734.tif 000013
【００６２】
製法Ｃにおいては、ＥＤＣＩおよびＨＯＢｔの存在下、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ−Ｏ−Ｇを、Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−Ｔと連結することで、化合物Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ−（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−Ｔ）−Ｏ−Ｇが得られる。ＧとＴは、式Ｉの化合物中と同義である。製法Ａにおいて記述したように、ＨＣｌ脱保護により、式ＩＡの化合物が得られる。製法Ｃにおいて、式ＩＡの化合物は、＊が、（Ｒ）配置である、式Ｉの化合物である。
【００６３】
製法Ｃの例は、後述の例６  Ｅならびに６  Ｆ中に示されている。ＤＭＦ中において、ＥＤＣＩおよびＨＯＢｔＧによって、イソアミルである、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ−Ｏ−Ｇを、Ｔがｎ−ヘプチルである、Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−Ｔと連結することで、Ｇが、イソアミルであり、かつ、Ｔが、ｎ−ヘプチルである、化合物  Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ−（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−Ｔ）−Ｏ−Ｇが得られる。エーテル等の不活性有機溶媒中における、ＨＣｌ脱保護により、Ｇが、イソアミルであり、かつ、Ｔが、ｎ−ヘプチルである、式ＩＡの化合物が得られ、そして、例６中の式ＩＡの化合物は、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ−（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−ｎ−ヘプチル）−Ｏ−イソアミルである。
【００６４】
【化６−４】
2014510734.tif 000014
【００６５】
製法Ｄ
製法Ｃと同様の手法で、製法Ｄでは、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ−Ｏ−ＧをＬ−Ｔｒｐ−Ｏ−Ｔと連結して、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ−（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−Ｔ）−Ｏ−を得、そして、不活性溶媒中において、ＨＣｌで脱保護することで、式ＩＢの化合物が得られる。製法Ｄにおいて、式ＩＢの化合物は、＊が、（Ｓ）配置である、式Ｉの化合物である。
【００６６】
製法Ｄの例は、後述の例１２  Ｅならびに１２  Ｆ中に示されている。ＤＭＦ中において、ＥＤＣＩおよびＨＯＢｔによって、Ｇが、エチルである、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ−Ｏ−Ｇを、Ｔが、イソアミルである、Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−Ｔと連結することで、Ｇが、エチルであり、かつ、Ｔが、イソアミルである、化合物  Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ−（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−Ｔ）−Ｏ−Ｇが得られる。エーテル等の不活性有機溶媒中における、ＨＣｌ脱保護によって、Ｇが、エチルであり、かつ、Ｔが、イソアミルである、式ＩＢの化合物が得られ、そして、実施例１２中の式ＩＢの化合物は、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ−（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−エチルである。
【００６７】
本発明の化合物の薬学的に許容される塩は、本発明の化合物中に存在する、酸性基または塩基性基の塩を含んでいる。薬学的に許容される酸付加塩は、それらに限定されるものではないが、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、パントテン酸塩、重酒石酸塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチシン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩（glucuronate）、サッカラート、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、およびパモ酸塩（すなわち、１，１’−メチレン−ｂｉｓ−（２−ヒドロキシ−３−ナフトエ酸塩））を含んでいる。適する塩基性塩は、それらに限定されるものではないが、アルミニウム塩、カルシウム塩、リチウム塩、マグネシウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩、亜鉛塩およびジエタノールアミン塩を含んでいる。“Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ  ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ  ｓａｌｔｓ”についての総論として、Ｂｅｒｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，６６  Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１−１９（１９７７）を参照。
【００６８】
Ｄ−ガンマ−グルタミル−Ｄ−トリプトファンは、その化学構造中に、２つのカルボン酸と１つのアミノ基を有している。ｐＨの尺度に対する、荷電および／または中性の化学種を表す化学種同定プロットは、ＡＣＤ  ｐｈｙｓｃｈｅｍソフトウエアを用いて数値計算することができる（Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，Ｉｎｃ．，Ｔｏｒｏｎｔｏ，Ｏｎｔａｒｉｏ，Ｃａｎａｄａ）。図１に示すように、ｐＨ  ５．８〜７．４における、主要の化学種は、Ｈ３Ｌであり、従って、ジペプチド  Ｄ−ガンマ−グルタミル−Ｄ−トリプトファンは、負帯電したカルボン酸塩として存在している。
【００６９】
Ｄ−ガンマ−グルタミル−Ｄ−トリプトファン  Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＭｅ）−ＯＨのモノアルキルエステルの化学種同定プロットを、図２に示す。電気的に中性であるＨ３Ｌ双性イオン種の割合は、ｐＨ依存性を示し、ｐＨ７．４では、より多くの負に帯電しているＨ２Ｌ種（１負電荷）が存在している。例えば、重要なｐＨにおける、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＭｅ）−ＯＨについて、数値計算された化学種の分布を、以下の表に示す。
【００７０】
【表２】
2014510734.tif 000015
【００７１】
*化学種合計 = 1.0 (ACD physchem v11.03)。例として、 表中の0.09 と 0.91 は、ｐＨ６．０の溶液中に、 H2L と H3L 化学種が、   それぞれ、９％と９１％存在することを意味する。
【００７２】
モノアルキルエステル  Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＭｅ）−ＯＨの場合、腸内吸収に利用できる化学種は、ｐＨ  ６．０〜７．４の範囲における、負電荷のＨ２Ｌと電気的に中性な双性イオン種Ｈ３Ｌの混合物である。
【００７３】
プロドラッグが、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−イソアミルのような、Ｄ−ガンマ−グルタミル−Ｄ−トリプトファン  ジアルキルエステルである場合、中性な化学種は、Ｈ２Ｌである。重要なｐＨにおける、化学種の同定結果は、下記のとおりである、
【００７４】
【表３】
2014510734.tif 000016
【００７５】
* 化学種合計 = 1.0 (ACD physchem v11.03)。 例として、表中の 0.12 と 0.88 は、ｐＨ６．０の溶液中に、 H2L と H3L 化学種が、   それぞれ、１２％と８８％存在することを意味する。
【００７６】
ｐＨ  ６とｐＨ  ７．４の間においては、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−イソアミルは、Ｈ２ＬとＨ３Ｌの混合物であり、Ｈ２Ｌが、中性化学種である。
【００７７】
Ｄ−ガンマ−グルタミル−Ｄ−トリプトファン  ジアルキル  エステル、特に、少なくとも１つのＣ５−Ｃ８アルキル  エステルを有する、Ｄ−ガンマ−グルタミル−Ｄ−トリプトファンは、Ｄ−ガンマ−グルタミル−Ｄ−トリプトファン  Ｃ１−Ｃ４ジアルキル  エステルと比較すると、脂溶性の向上を示す。ｐＨ７．４における実験的なｌｏｇＤの比較を以下に示す。
【００７８】
【表４】
2014510734.tif 000017
【００７９】
ジイソアミルエステルの使用により、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨのｌｏｇＤ値が１０５倍を超える向上がなされる。プロドラッグは、体内の複数の部位において、親の薬剤へと生体内変換される。体内のそのような部位の例には、腸の一部、血液、および肝臓を含む。ジアルキル  エステル  プロドラッグについて、生体内変換の１つの可能性のある部位は肝臓である。より脂溶性の化合物は、腸内吸収の後、ヒト肝細胞に到達した該化合物の、親薬物であるＨ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨへの生体内変換を促進させる。上記の通り、化合物Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−イソアミルは、ジメチル  エステル  Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−Ｍｅ）−Ｏ−Ｍｅ、またはモノメチルエステル  Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−Ｍｅ）−ＯＨよりも、より脂溶性である。
【００８０】
Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨのジイソアミル  エステルおよびジメチル  エステルを、ヒト肝細胞において試験した際、ヒト肝細胞内で生成された、より高い割合のＨ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨが、４時間にわたって形成されることを、生物学的評価のデータが裏付けている。
【００８１】
【表５】
2014510734.tif 000018
【００８２】
ヒト肝細胞を用いる選別方法を同様に適用すると、２．９時間の間に、５０％のエナラプリルがエナラプリル塩（ｅｎａｌａｐｒｉｌａｔｅ）に生体内変換される。Ｂｒ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．（１９９０），２９，７６６−７６９に、ヒト患者の肝臓においてエナラプリルのエナラプリル塩への生体内変換が報告されている。従って、Ａｐｏ８４８は、エナラプリルからエナラプリル塩への過程と同様に、３時間以内に、ヒト肝細胞において、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨへと生体内変換するという、類似のプロファイルを有している。
【００８３】
ラットの薬物動態学研究において、Ａｐｏ８４８を試験したところ、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨと比較して、向上した経口被曝を示し、この研究の結果を、図４および後述の例１６に示す。
【００８４】
本発明の化合物またはその塩は、医薬製剤に処方される。本発明の多くの化合物は、一般に水溶性であり、塩として形成される。その際、本発明かかる医薬組成物は、かかる化合物の塩、好ましくは、当該分野で知られている、生理学的に許容される塩を含むことができる。通常、医薬調製物は、注射、吸入、外用投与、灌注、あるいは、選択される治療に適したその他の形態など、該調製物の投与の形態において許容される、１または複数の担体を含んでいる。適する担体は、かかる投与の形態における使用が、当該技術分野において公知のものである。
【００８５】
適する医薬組成物は、当該技術分野において公知の手段で製剤され、また、投与の形態および用量は、熟練の開業医によって決定される。非経口投与では、化合物は、滅菌水、生理食塩水、あるいは、ビタミンＫに用いられるような、非水溶性化合物の投与に使用される薬学的に許容される担体に溶解される。経腸投与では、化合物は、錠剤、カプセル剤により、あるいは、液体に溶解した上で、投与される。錠剤またはカプセル剤は、腸溶被覆、または徐放性製剤が可能である。放出される化合物を封入するポリマーまたはタンパク質微量粒子、外用又は局所的に化合物を投与するために用いることができる、軟膏、ペースト、ゲル、ヒドロゲルまたは溶液を初めとする、多くの適当な剤形が公知である。徐放パッチまたはインプラントは、長期にわたる放出を提供するために採用することができる。当業者に公知の多くの手法が、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ＆  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  ｂｙ  Ａｌｆｏｎｓｏ  Ｇｅｎｎａｒｏ，２０ｔｈ  ｅｄ．，Ｌｉｐｐｅｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，（２０００）に記載されている。非経口投与のための製剤は、例えば、賦形剤、ポリエチレングリコールなどのポリアルキレングリコール、植物由来の油、または水素添加ナフタレンを含む。生体適合性の、生分解性のラクチドポリマー、ラクチド／グリコリド・コポリマー、あるいは、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン・コポリマーは、化合物の放出を制御するために使用することができる。修飾された化合物に対する、他の潜在的に役立つ非経口送達システムには、エチレン−酢酸ビニル・コポリマー粒子、浸透圧ポンプ、埋め込み型注入システム、ならびに、リポソームが含まれる。吸入のための製剤は、ラクトース等の賦形剤、あるいは、例えば、ポリオキシエチレン−９−ラウリルエーテル、グリココール酸塩およびデオキシコール酸塩を含む水溶液とすることができ、また、点鼻剤の剤形もしくはゲルとしての投与に対する、油性溶液とすることもできる。
【００８６】
本発明にかかる、あるいは、本発明における用途の化合物または医薬組成物は、インプラント、移植、プロテーゼ、ステント等の医療装置または器具を利用して投与することができる。また、インプラントは、前記化合物または組成物を含み、放出することを意図して考案される。一例は、ある期間にわたる化合物の放出に適合する、ポリマー材料で作製されている、インプラントである。
【００８７】
本発明にかかる医薬組成物の「有効量」は、治療的有効量または予防的有効量を含む。「治療的有効量」は、必要とされる投薬ならびに期間において、ＰＡＳＩ値、あるいは当業者に公知の他の適当な臨床的指標の改善等の、所望の治療効果を達成するために有効な量を指す。患者の病状、年齢、性別、および体重、ならびに、患者において所望の応答を導き出す化合物の能力などの因子に依って、化合物の治療的有効量は変化する。投薬計画は、最適な治療反応を提供するために調節される。治療的有効量は、また、化合物の如何なる毒性または有毒な効果を、治療の有益な効果が上回っている量でもある。「予防的有効量」は、必要とされる投薬ならびに期間において、望ましいＰＡＳＩ値（乾癬の拡がりおよび重篤度の指数）、あるいは、当業者に公知の他の適当な臨床的指標等、望ましい予防結果を達成するために有効な量を指す。典型的には、予防的投与は、疾患の発症前または初期段階の対象者に使用されるので、予防的有効量は、治療的有効量よりも少なくすることができる。
【００８８】
投薬量は、緩和すべき病状の重篤度に依って変えることができることに留意すべきである。如何なる特定の患者に対して、特定の投薬計画は、個々の必要性、ならびに組成物の投与を管理する、あるいは、指揮する人の専門的な判断に従って、経時的に調節することができる。本明細書中に明記されている投与範囲は、単なる例示に過ぎず、内科の医師により選択される投与範囲を限定するものではない。組成物中の活性化合物の量は、例えば、患者の病状、年齢、性別および体重等の因子に従って、変えることができる。投薬計画は、最適な治療応答を提供するために調節することができる。例えば、大丸薬で単回投与することができ、数回に分割した薬量を、時間をかけて投与することもでき、さらには、治療状況の緊急性の要求に従って、投薬量を比例して減少または増加することができる。投与の容易性および投薬量の均質性のために、単位投薬量の形態に非経口組成物を製剤することが有利である。
【００８９】
一般的に、本発明の化合物は、実質的な毒性を引き起こさない範囲で使用すべきである。本発明の化合物の毒性は、標準的な方法、例えば、細胞培養または実験動物において試験し、治療指数、すなわち、ＬＤ５０（集団の５０％の致死量）とＬＤ１００（集団の１００％の致死量）の比の測定により決定することができる。しかしながら、ある状況下、例えば、重篤な病状においては、実質的に過剰の組成物を投与することが必要となる可能性がある。
【００９０】
本明細書中において使用される際、「患者」は、ヒト、非ヒト霊長類、ラット、マウス、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、イヌ、ネコ、等である。患者は、乾癬、および／またはアトピー性皮膚炎、および／または、免疫系を調整する際、薬剤を使用する、内科的症状を有すると疑われる、または有する危険性がある。乾癬、アトピー性皮膚炎、ならびに、免疫調節化合物が使用される、様々な疾患に対する診断方法、ならびに、これらの病状の臨床的な兆候の診断は、当業者には公知である。
【実施例】
【００９１】
以下の例は、明細書に記載の本発明の実施態様のいくつかを例証するものである。これらの例は、如何なる意味でも、本発明の技術思想または技術的範囲を限定するものではない。
【００９２】
（例１）
（２Ｒ）−２−アミノ−｛［（２Ｒ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−（３−メチルブトキシ）−１−オキソプロパン−２−イル］アミノ｝−５−オキソペンタン酸  ３−メチルブチル  エステル  塩酸塩（Ａｐｏ８４８・ＨＣｌ）、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−イソアミル）−Ｏ−イソアミル・ＨＣｌの調製
【００９３】
【化７−１】
2014510734.tif 000019
【００９４】
ステップ１：Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−イソアミルの調製
氷水浴で冷却されたＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−ガンマ−グルタミル−Ｄ−トリプトファン（Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨ、Ａｐｏ８０６、４．００ｇ、９．２３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３０ｍＬ）溶液に、無水炭酸カリウム（５．１０ｇ、３６．９ｍｍｏｌ）と、引き続き、１０分間をかけて、１−ヨード−３−メチルブタン（４．９０ｍＬ，３６．９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液を滴下した。混合物を放置して、室温に戻し、そして、１８時間撹拌した。反応混合物を脱イオン水（１５０ｍＬ）中に注ぎ、固体が析出するまで３０分間撹拌した。ヘキサン（１５０ｍＬ）を加え、混合物を１０分間撹拌した。デカンテーションにより、ヘキサンと水を除去し、そして、新たな脱イオン水（１００ｍＬ）とヘキサン（１５０ｍＬ）を加えた。混合物をさらに１５分間撹拌した。固体を吸引濾過により回収し、ヘキサン（２５ｍＬ、５回）で洗浄し、真空オーブンで乾燥して、（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−５−｛［（２Ｒ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−（３−メチルブトキシ）−１−オキソプロパン−２−イル］アミノ｝−５−オキソペンタン酸  ３−メチルブチル  エステル（Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−イソアミル）を茶色の個体として得た（４．５０ｇ）。収率８５．１％。
【００９５】
1H NMR (DMSO-D6, 90 MHz) d ppm : 10.84 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 6.94 - 7.54 (m, 6H), 3.73 - 4.64 (m, 6H), 3.10 (s, 2H), 1.97 - 2.38 (m, 2H), 1.23 - 1.45 (m, 17H), 0.65 - 0.97 (m, 12H); 
MS-ESI (m/z): 575 [M+1]+
ステップ２：Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−イソアミル・ＨＣｌの調製
（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−５−｛［（２Ｒ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−（３−メチルブトキシ）−１−オキソプロパン−２−イル］アミノ｝−５−オキソペンタン酸  ３−メチルブチル  エステル（Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−イソアミル）（１．１０ｇ、１．９２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１００ｍＬ）に溶解し、その溶液を氷水浴で冷却した。その冷却溶液の中に、ＨＣｌガスを２時間吹き込んだ。次いで、反応混合物を放置して、室温に戻し、そして、窒素ガスを３０分間吹き込んだ。減圧下、ロータリーエバポレーターを用いて、揮発性物質を除去した。次いで、残留固形分物を真空オーブン中で乾燥することで、題記化合物を得た（０．６７ｇ）。収率６９．５％。
【００９６】
1H NMR (DMSO-D6, 400 MHz) d ppm : 10.92 (br. s, 1H), 8.47 - 8.62 (m, 4H), 7.48 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.07 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 6.96 - 7.03 (m, 1H), 4.45 - 4.52 (m, 1H), 4.12 - 4.22 (m, 2H), 3.94 - 4.04 (m, 3H), 3.01 - 3.17 (m, 2H), 2.24 - 2.40 (m, 2H), 1.97 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 1.61 - 1.71 (m, 1H), 1.42 - 1.55 (m, 3H), 1.28 - 1.39 (m, 2H), 0.89 (d, J = 7.1 Hz, 6H), 0.77 - 0.85 (m, 6H); 
MS-ESI (m/z): 475 [M+1]+
（例２）
ガンマ−Ｄ−グルタミル−Ｌ−トリプトファン  ジヘプチル  エステル  塩酸塩、あるいは（２Ｒ）−２−アミノ−５−｛［（２Ｓ）−１−（ヘプチルオキシ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−オキソプロパン−２−イル］アミノ｝−５−オキソペンタン酸  ヘプチル  エステル  塩酸塩（Ａｐｏ８７４塩酸塩）Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−ヘプチル）−Ｏ−ヘプチル・ＨＣｌの調製
【００９７】
【化７−２】
2014510734.tif 000020
【００９８】
ＣＨ２Ｃｌ２（６０ｍＬ）中のＤ−ガンマ−グルタミル−Ｌ−トリプトファン（４．０ｇ、１２ｍｍｏｌ）とヘプタノール（７．０ｇ、６０ｍｍｏｌ）の氷冷懸濁液中に、ＨＣｌガスを吹き込んだ。ＨＰＬＣにより、反応の進行を監視した：ＨＰＬＣカラム：ＸＴｅｒｒａ  ＭＳ，Ｃ１８，５μｍ，４．６×２５０ｍｍ；  移動相：  Ａ＝水相：４ｍＭのＴｒｉｓ，２ｍＭのＥＤＴＡ，ｐＨ７．４；  Ｂ＝有機相：ＣＨ３ＣＮ；  方法  勾配：時間（分）−Ｂ％：０−５％、１５−９０％、２５−９０％；  流速＝１ｍＬ／分；  注入量＝５μＬ；  λ：２２２、２５４、２８０、４５０ｎｍ；  出発物質の保持時間（ＲＴ）＝５．６分；  Ａｐｏ８７４のＲＴ＝１８．６分。氷冷温度において２時間経過後、ＨＰＬＣによる反応混合物の分析（曲線下面積、ＡＵＣ）は、約３１％の出発物質の存在を示した。反応混合物を放置し、周囲温度に戻し、終夜撹拌した。反応混合物を、再び氷冷し、１−ヘプタノール（７．０ｇ、６０ｍｍｏｌ）を加えた。次いで、混合物中に、ＨＣｌガスを吹き込み、得られる混合物をさらに６時間撹拌した。その反応混合物中に、窒素ガスを吹き込み、そして、混合物を真空中において蒸発乾固させることで、題記化合物を得た。イソプロパノールとジクロロメタンとの混合物からなる溶媒勾配（７から１００％）を用いて、シリカゲル上のフラッシュ・カラム・クロマトグラフィーにより精製した後、Ａｐｏ８７４塩酸塩のサンプル（１．３ｇ）を単離した；２８０ｎｍで測定される、ＨＰＬＣ（ＡＵＣ）純度＝９８．４％。
【００９９】
1H NMR (DMSO-D6) d ppm: 10.92 (s, 1H), 8.55 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 8.20-8.50 (br., 3H), 7.47 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.06 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 6.98 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 4.46 - 4.47 (m, 1H), 4.11 - 4.14 (m, 2H), 3.92 - 3.99 (m, 3H), 3.01 - 3.15 (m, 2H), 2.30 - 2.40 (m, 1H), 2.20 - 2.30 (m, 1H), 1.90 - 2.10 (m, 2H), 1.50 - 1.70 (m, 2H), 1.40 - 1.50 (m, 2H), 1.10 - 1.40 (m, 16H), 0.80 - 0.90 (m, 6H); 
MS-ESI (m/z): 530 [M - HCl +1]+ (free base)
（例３）
（２Ｒ）−２−アミノ−５−｛［（２Ｓ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−（３−メチルブトキシ）−１−オキソプロパン−２−イル］アミノ｝−５−オキソペンタン酸  ３−メチルブチル  エステル  塩酸塩、Ａｐｏ８７１・ＨＣｌ、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−イソアミル・ＨＣｌの調製
【０１００】
【化７−３】
2014510734.tif 000021
【０１０１】
例２に記載と同様の方法により、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨのイソアミルアルコールの混合物中に、ＨＣｌガスを吹き込むことにより、（２Ｒ）−２−アミノ−５−｛［（２Ｓ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−（３−メチルブトキシ）−１−オキソプロパン−２−イル］アミノ｝−５−オキソペンタン酸  ３−メチルブチル  エステル  塩酸塩、Ａｐｏ８７１塩酸塩を調製した。サンプルを、イソプロパノールとジクロロメタンとの混合物からなる溶媒勾配（１０から１００％）を使用して、シリカゲル上のフラッシュ・カラム・クロマトグラフィーにより精製した。例２に記載のＨＰＬＣ方法を使用した。２８０ｎｍで測定される、ＨＰＬＣ（ＡＵＣ）純度＝９９．２％。
【０１０２】
1H NMR (DMSO-D6) d ppm: 10.91 (s, 1H), 8.50 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.2-8.2 (br., 3H), 7.47 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.07 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 6.98 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 4.45-4.47 (m, 1H), 4.13-4.17 (m, 2H), 3.96-3.99 (m, 2H), 3.83-3.86 (m, 1H), 3.01-3.15 (m, 2H), 2.33-2.35 (m, 1H), 2.23-2.25 (m, 1H), 1.87-1.94 (m, 2H), 1.64-1.67 (m, 1H), 1.46-1.52 (m, 3H), 1.29-1.34 (m, 2H), 0.87-0.89 (m, 6H), 0.79-0.82 (m, 6H); 
MS-ESI (m/z): 474 [M -HCl +1]+ (free base)
（例４）
ガンマ−Ｄ−グルタミル−Ｌ−トリプトファン  ジペンチル  エステル  塩酸塩、あるいは、（２Ｒ）−２−アミノ−５−｛［（２Ｓ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−オキソ−１−（ペンチルオキシ）プロパン−２−イル］アミノ｝−５−オキソペンタン酸  ペンチル  エステル  塩酸塩、Ａｐｏ８７６塩酸塩またはＨ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−ペンチル）−Ｏ−ペンチル・ＨＣｌの調製
【０１０３】
【化７−４】
2014510734.tif 000022
【０１０４】
例２に記載と同様な方法により、ｎ−ペンタノール中において、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨをＨＣｌと反応させ、（２Ｒ）−２−アミノ−５−｛［（２Ｓ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−オキソ−１−（ペンチルオキシ）プロパン−２−イル）］アミノ｝−５−オキソペンタン酸  ペンチル  エステル  塩酸塩、Ａｐｏ８７６塩酸塩を得る。２８０ｎｍで測定される、ＨＰＬＣ（ＡＵＣ）純度＝９９．２％。
【０１０５】
1H NMR (DMSO-D6) d ppm: 10.85 (s, 1H), 8.29 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.33 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.06 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.98 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 4.43-4.49 (m, 1H), 3.99-4.06 (m, 2H), 3.92-3.95 (m, 2H), 3.24-3.28 (m, 1H), 2.99-3.14 (m, 2H), 2.14-2.24 (m, 2H), 1.75-1.83 (m, 2H), 1.53-1.58 (m, 3H), 1.41-1.44 (m, 2H), 1.26-1.30 (m, 3H), 1.06-1.25 (m, 4H), 0.81-0.88 (m, 6H)；
MS-ESI (m/z): 474 [M -HCl +1] + (free base)
（例５）
ガンマ−Ｄ−グルタミル−Ｌ−トリプトファン  ジヘキシル  エステル  塩酸塩、あるいは、（２Ｒ）−２−アミノ−５−｛［（２Ｓ）−１−（ヘキシルオキシ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−オキソプロパン−２−イル］アミノ｝−５−オキソペンタン酸  ヘキシル  エステル  塩酸塩、またはＨ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−ヘキシル）−Ｏ−ヘキシル・ＨＣｌ（Ａｐｏ８８１塩酸塩）
【０１０６】
【化７−５】
2014510734.tif 000023
【０１０７】
例２に記載と同様の方法で、ヘキサノール中で、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨをＨＣｌと反応させことで、（２Ｒ）−２−アミノ−５−｛［（２Ｓ）−１−（ヘキシルオキシ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−オキソプロパン−２−イル］アミノ｝−５−オキソペンタン酸  ヘキシル  エステル  塩酸塩、Ａｐｏ８８１塩酸塩、あるいは、ガンマ−Ｄ−グルタミル−Ｌ−トリプトファン  ジヘキシル  エステル  塩酸塩が得られる。２８０ｎｍで測定される、ＨＰＬＣ（ＡＵＣ）純度＝９５．０％。
【０１０８】
1H NMR (DMSO-D6) d ppm: 10.91 (s, 1H), 8.46 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 6.80-7.80 (br., 3H), 7.48 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.06 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 6.98 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 4.43-4.49 (m, 1H), 4.07-4.11 (m, 2H), 3.93-3.96 (m, 2H), 3.72-3.73 (m, 1H),  3.03-3.14 (m, 2H), 2.30-2.40 (m, 1H), 2.20-2.30 (m, 1H), 1.90-2.00 (m, 1H), 1.80-1.90 (m, 1H), 1.50-1.60 (m, 2H), 1.40-1.50 (m, 2H), 1.10-1.40 (m, 12H), 0.70-0.90 (m, 6H); 
MS-ESI (m/z): 502 [M -HCl +1]+ (free base)
（例６）
Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−ヘプチル）−Ｏ−イソアミル  塩酸塩（Ａｐｏ９２２・ＨＣｌ）の調製
【０１０９】
【化７−６】
2014510734.tif 000024
【０１１０】
Ａ．Ｂｏｃ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−ヘプチルの調製
ジクロロメタン（１００ｍＬ）およびＤＭＦ（１００ｍＬ）の中に、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ（１０．０ｇ、３２．８ｍｍｏｌ）、ヘプタノール（３．８２ｇ、３２．８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（６．９３ｇ、３６．１ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ水和物（５．５３ｇ、３６．１ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（４．２４ｇ、３２．８ｍｍｏｌ）を混合した。反応混合物を、室温で終夜撹拌し、次いで、ジクロロメタンを除去するため、ロータリーエバポレーターを用いて留去することにより、濃縮した。酢酸エチル中に残渣を溶出し、次いで、順次、水、飽和重炭酸ナトリウム溶液、水、１Ｎ  ＨＣｌ溶液、水、および食塩水により洗浄し、その後、硫酸マグネシウム上で乾燥した。濾過後、有機溶液を濃縮乾固させ、ヘキサンにより残渣を研和することで、白色固形物として、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−ヘプチル（７．８９ｇ）が得られた。収率６０％。
【０１１１】
1H NMR (CDCl3, 400MHz) d (ppm): 8.05 (br. s, 1H), 7.57 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.19 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.07 - 7.15 (m, 1H), 7.02 (s, 1H), 5.07 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.56 - 4.69 (m, 1H), 3.95 - 4.12 (m, 2H), 3.29 (br. s, 2H), 1.48 - 1.63 (m, 5H), 1.15 - 1.46 (m, 14H), 0.88 (t, J = 7.1 Hz, 3H); 
MS-ESI (m/z): 403 [M+1]+
Ｂ．Ｈ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−ヘプチル  塩酸塩の調製
氷水浴による冷却下、撹拌しながら、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−ヘプチル（７．４０ｇ、１８．４ｍｍｏｌ）の酢酸エチル（７５ｍＬ）およびエーテル（７５ｍＬ）中の溶液に、ＴＬＣによって観察した際、残留した出発物質が見出されなくなるまで、２時間、ＨＣｌガスをゆっくりと吹き込んだ。真空下、反応混合物を濃縮し、その後、水（１０ｍＬ）およびアセトニトリルと混合させた。混合物を再度濃縮し、エーテルにより残渣を研和することで、オフホワイト色の固形物として  Ｈ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−ヘプチル  塩酸塩（５．４３ｇ）が得られた。収率８７％。
【０１１２】
1H NMR (DMSO-D6, 400MHz) d(ppm): 11.10 (br. s, 1H), 8.58 (br. s, 3H), 7.51 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.10 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.95 - 7.06 (m, 1H), 4.21 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 3.88 - 4.10 (m, 2H), 3.15 - 3.37 (m, 2H), 1.35 - 1.50 (m, 2H), 1.03 - 1.31 (m, 8H), 0.86 (m, 3H); 
MS-ESI (m/z): 303 [M+1]+ (free base)
Ｃ．Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ｏ−イソアミルの調製
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｏ−Ｂｚｌ）−ＯＨ（５．４８ｇ、１６．２ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（４．４８ｇ、３２．５ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（３０ｍＬ）の懸濁液中に、室温で、１−ヨード−３−メチルブタン（６．４３ｇ、３２．５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した後、固形物を濾別し、酢酸エチルで洗浄した。ロータリーエバポレーターを用いた留去により濾液を濃縮し、残渣を水と混合した。ヘキサン中に、得られた固形物を溶出させ、有機溶液を水（２×）で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥して、そして、濾過処理した。ロータリーエバポレーターを用いた留去により濾液を濃縮することで、白色固形物として、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｏ−Ｂｚｌ）−Ｏ−イソアミル（６．６４ｇ）が、定量的収率で得られた。
【０１１３】
1H NMR (CDCl3, 90 MHz) d ppm: 7.03 - 7.56 (m, 5H), 5.12 (s, 3H), 3.87 - 4.50 (m, 3H), 2.25 - 2.63 (m, 2H), 1.83 - 2.20 (m, 2H), 1.23 - 1.75 (m, 12H), 0.91 (d, J = 5.85 Hz, 6H)
Ｄ．Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（ＯＨ）−Ｏ−イソアミルの調製
酢酸エチル（８０ｍＬ）中で、上述のＢｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｏ−Ｂｚｌ）−Ｏ−イソアミル（６．２０ｇ、１５．２ｍｍｏｌ）および１０％のＰｄ／Ｃ（含水、０．６２ｇ）を混合した。Ｐａｒｒの装置を用い、水素圧４０ｐｓｉの水素ガス雰囲気下、４．５時間、反応混合物に水素化を行った。Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）を通して混合物を濾過し、また、濾塊を酢酸エチルで完全に洗浄した。ロータリーエバポレーターを用いた留去により濾液を濃縮することで、粘着性の透明な油状物として、題記化合物Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（ＯＨ）−Ｏ−イソアミルが定量的収率（５．５０ｇ）で得られた。
【０１１４】
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) d ppm: 5.18 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 4.35 (br. s, 1H), 4.18 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 2.38 - 2.54 (m, 2H), 2.12 - 2.27 (m, 1H), 1.84 - 2.04 (m, 1H), 1.63 - 1.81 (m, 1H), 1.50 - 1.63 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 0.93 (d, J = 6.1 Hz, 6H)
Ｅ．Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−ヘプチル）−Ｏ−イソアミルの調製
氷水浴による冷却下、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（ＯＨ）−Ｏ−イソアミル（９５２ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）、Ｈ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−ヘプチル  塩酸塩（１．０２ｇ、３．０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（９３３ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ水和物（５０５ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液中に、ＤＩＰＥＡ（４２６ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、室温で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、そして、有機相を、順次、水、１Ｎ  ＨＣｌ溶液、水、飽和重炭酸ナトリウム溶液、水、および食塩水で洗浄した。有機相を、シリカゲルとともに、ロータリーエバポレーターを用いた留去により濃縮し、ヘキサン中に酢酸エチル（２０から３０％）を混合した液によりシリカゲル上カラムクロマトグラフィーで残渣を精製することで、淡黄色の粘着性のオイルとして、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−ヘプチル）−Ｏ−イソアミル（１．６０ｇ）が得られた。収率８３％。
【０１１５】
1H NMR (CDCl3, 400MHz) d (ppm): 8.15 (br. s, 1H), 7.53 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 7.15 - 7.23 (m, 1H), 7.06 - 7.15 (m, 1H), 7.03 (br. s, 1H), 6.24 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 5.23 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 4.93 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 3.91 - 4.33 (m, 5H), 3.20 - 3.47 (m, 2H), 2.08 - 2.32 (m, 3H), 1.90 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 1.36 - 1.72 (m, 14H), 1.26 (br. s, 8H), ), 0.79 - 1.02 (m, 9H); 
MS-ESI (m/z): 602 [M+1]+
Ｆ．Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−ヘプチル）−Ｏ−イソアミル  塩酸塩の調製
室温で、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−ヘプチル）−Ｏ−イソアミル（１．５６ｇ、２．６ｍｍｏｌ）を、２Ｍ  ＨＣｌのエーテル溶液（１５ｍＬ）と混合し、終夜撹拌した。減圧下、ロータリーエバポレーターを用いた留去により、反応混合物を濃縮した。残渣を飽和重炭酸ナトリウム溶液と酢酸エチルの間で分液した。有機相を、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、濾過し、ロータリーエバポレーターを用いた留去により濃縮乾固し、粘着性のオイルを得た。エーテル中に得られたオイルを溶出し、２Ｍ  ＨＣｌエーテル溶液（１．５ｍＬ）によって酸性化した。再び、ロータリーエバポレーターを用いた留去により、得られる懸濁液を濃縮することで、オフホワイト色の泡状物質として、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−ヘプチル）−Ｏ−イソアミル  塩酸塩（７５０ｍｇ）が得られた。収率４６％。
【０１１６】
1H NMR (DMSO-D6, 400MHz) d (ppm): 11.01 (br. s, 1H), 8.75 (br. s, 3H), 8.56 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.20 (br. s, 1H), 7.05 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.90 - 7.00 (m, 1H), 4.38 - 4.56 (m, 1H), 4.13 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 3.79 - 4.03 (m, 3H), 2.94 - 3.25 (m, 2H), 2.18 - 2.46 (m, 2H), 1.88 - 2.12 (m, 2H), 1.64 (dt, J = 12.4, 6.4 Hz, 1H), 1.35 - 1.54 (m, 4H), 1.05 - 1.30 (m, 8H), 0.70 - 0.95 (m, 9H); 
MS-ESI (m/z): 502 [M+1]+ free base
（例７）
Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−ペンチル）−Ｏ−イソアミル塩酸塩（Ａｐｏ９２１．ＨＣｌ）の調製
【０１１７】
【化７−７】
2014510734.tif 000025
【０１１８】
Ａ．Ｂｏｃ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−ペンチルの調製
上記例６  Ａの記載と同様な手順で、ジクロロメタン（１００ｍＬ）およびＤＭＦ（１００ｍＬ）中における、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ（１０．０ｇ、３２．８ｍｍｏｌ）、ペンタノール（２．９０ｇ、３２．８ｍｍｏｌ）と、ＨＯＢｔ水和物（５．５３ｇ、３６．１ｍｍｏｌ）およびＥＤＣＩ（６．９３ｇ、３．６１ｍｍｏｌ）との、室温、終夜の反応によって、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−ペンチル（７．４９ｇ、収率６１％）を調製した。
【０１１９】
1H NMR (CDCl3, 400MHz) d (ppm): 8.07 (br. s, 1H), 7.57 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.19 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 7.08 - 7.15 (m, 1H), 7.01 (s, 1H), 5.08 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.57 - 4.70 (m, 1H), 3.95 - 4.14 (m, 2H), 3.20 - 3.38 (m, 2H), 1.50 - 1.61 (m, 2H), 1.15 - 1.47 (m, 13H), 0.87 (t, J = 7.1 Hz, 3H)
Ｂ．Ｈ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−ペンチル  塩酸塩の調製
上記例６  Ｂの記載と同様な手順で、氷水浴による冷却下、エーテル（７５ｍＬ）および酢酸エチルの溶媒混合物中における、ＨＣｌガスを用いた、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−ペンチル（５．６４ｇ、１３．６ｍｍｏｌ）の脱保護により、Ｈ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−２−ペンチル  塩酸塩（４．６８ｇ、収率７５％）を調製した。
【０１２０】
1H NMR (DMSO-D6, 400MHz) d(ppm): 11.12 (br. s, 1H), 8.64 (br. s, 3H), 7.52 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.06 - 7.17 (m, 1H), 6.93 - 7.06 (m, 1H), 4.19 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 3.86 - 4.10 (m, 2H), 3.15 - 3.38 (m, 2H), 1.32 - 1.52 (m, 2H), 1.14 - 1.28 (m, 2H), 1.01 - 1.13 (m, 2H), 0.82 (m, 3H); 
MS-ESI (m/z): 275 [M+1]+ (free base)
Ｃ．Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−ペンチル）−Ｏ−イソアミルの調製
上記例６  Ｅの記載と同様な手順で、室温、ＤＭＦ（１０ｍＬ）中における、Ｈ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−ペンチル  塩酸塩（９３２ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（９３３ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ水和物（５０５ｍｇ、７．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（４２６ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）、およびＢｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（ＯＨ）−Ｏ−イソアミル（９５２ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）の反応により、Ｂｏｃ―Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−ペンチル）−Ｏ−イソアミル（１．４４ｇ、収率８８％）を調製した。
【０１２１】
1H NMR (CDCl3, 400MHz) d (ppm): 8.15 (br. s, 1H), 7.53 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.18 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 7.06 - 7.15 (m, 1H), 7.02 (br. s, 1H), 6.24 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 5.23 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 4.85 - 4.98 (m, 1H), 3.93 - 4.28 (m, 5H), 3.21 - 3.42 (m, 2H), 2.10 - 2.32 (m, 3H), 1.82 - 1.98 (m, 1H), 1.62 - 1.74 (m, 1H), 1.47 - 1.62 (m, 4H), 1.43 (s, 9H), 1.15 - 1.37 (m, 4H), 0.82 - 0.97 (m, 9H); 
MS-ESI (m/z): 574 [M+1]+
Ｄ．Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−ペンチル）−Ｏ−イソアミル  塩酸塩の調製
上記例６  Ｆの記載と同様の手順で、２Ｍ  ＨＣｌのエーテル溶液（１５ｍＬ）による、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−ペンチル）−Ｏ−イソアミル（１．４１ｇ、２．４ｍｍｏｌ）の脱保護により、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−ペンチル）−Ｏ−イソアミル塩酸塩（９００ｍｇ、収率５８％）が得られた。
【０１２２】
1H NMR (DMSO-D6, 400MHz) d(ppm): 10.99 (br. s, 1H), 8.72 (br. s, 3H), 8.55 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.04 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 6.92 - 7.01 (m, 1H), 4.40 - 4.54 (m, 1H), 4.08 - 4.23 (m, 2H), 3.83 - 4.02 (m, 3H), 2.98 - 3.22 (m, 2H), 2.21 - 2.45 (m, 2H), 1.91 - 2.09 (m, 2H), 1.58 - 1.73 (m, 1H), 1.35 - 1.54 (m, 4H), 1.05 - 1.29 (m, 4H), 0.75 - 0.93 (m, 9H); 
MS-ESI (m/z): 474 [M+1]+ (free base)
（例８）Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−Ｅｔ）−Ｏ−イソアミル  塩酸塩（Ａｐｏ９１８・ＨＣｌ）の調製
【０１２３】
【化７−８】
2014510734.tif 000026
【０１２４】
Ａ．Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−Ｅｔ）−Ｏ−イソアミルの調製
上記例６  Ｅの記載と同様の手順で、室温、ＤＭＦ（１０ｍＬ）中における、Ｈ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−Ｅｔ  塩酸塩（８０６ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（９３３ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ水和物（５０５ｍｇ、７．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（４２６ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）、およびＢｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ−Ｏ−イソアミル（９５２ｇ、３．０ｍｍｏｌ）の反応により、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−Ｅｔ）−Ｏ−イソアミル（８７０ｍｇ、収率５４％）を調製した。
【０１２５】
1H NMR (CDCl3, 400MHz) d (ppm): 8.18 (br. s, 1H), 7.53 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.18 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.06 - 7.15 (m, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.24 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 5.24 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.81 - 5.00 (m, 1H), 4.00 - 4.29 (m, 5H), 3.22 - 3.43 (m, 2H), 2.06 - 2.34 (m, 3H), 1.81 - 1.97 (m, 1H), 1.57 - 1.76 (m, 1H), 1.48 - 1.56 (m, 2H), 1.43 (s, 9H),1.22 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 0.91 (d, J = 5.1 Hz, 6H); 
MS-ESI (m/z): 532 [M+1]+
Ｂ．Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−Ｅｔ）−Ｏ−イソアミル  塩酸塩の調製
例６  Ｆの記載と同様の手順で、１Ｍ  ＨＣｌエーテル溶液（１２ｍＬ）による、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−Ｅｔ）−Ｏ−イソアミル（５１５ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）の脱保護により、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＥｔ）−Ｏ−イソアミル  塩酸塩（Ａｐｏ９１８．ＨＣｌ、２４０ｍｇ、収率５５％）が得られた。
【０１２６】
1H NMR (DMSO-D6, 400MHz) d (ppm): 10.85 (br. s, 1H), 8.27 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.06 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.93 - 7.02 (m, 1H), 4.37 - 4.54 (m, 1H), 3.89 - 4.12 (m, 4H), 3.17 - 3.26 (m, 1H), 3.07 - 3.17 (m, 1H), 2.93 - 3.07 (m, 1H), 2.19 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 1.37 - 1.87 (m, 7H), 1.07 (t, J=7.1 Hz, 3H), 0.88 (d, J = 7.1 Hz, 6H); 
MS-ESI (m/z): 432 [M+1]+ (free base)
（例９）
Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−Ｅｔ  塩酸塩（Ａｐｏ９２３・ＨＣｌ）の調製
【０１２７】
【化７−９】
2014510734.tif 000027
【０１２８】
Ａ．Ｂｏｃ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミルの調製
例６  Ａの記載と同様の手順で、ＤＭＦ（２５０ｍＬ）中における、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ（２５．００ｇ、８２．２ｍｍｏｌ）、３−メチルブタン−１−オール（７．９７ｇ、９０．４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（１８．９０ｇ、９８．９ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ水和物（１２．５８ｇ、８２．２ｍｍｏｌ）、およびＥｔ３Ｎ（１８．２９ｇ、１８０．７ｍｍｏｌ）の反応により、白色固形物として、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル（１８．５８ｇ）を調製した。収率６０％。
【０１２９】
1H NMR (DMSO-D6, 400MHz) d (ppm): 10.86 (br. s, 1H), 7.48 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.03 - 7.11 (m, 1H), 6.94 - 7.03 (m, 1H), 4.13 - 4.24 (m, 1H), 3.92 - 4.08 (m, 2H), 2.90 - 3.16 (m, 2H), 1.44 - 1.62 (m, 1H), 1.34 (s, 10H), 1.24 (br. s, 1H), 0.82 (t, J = 6.6 Hz, 6H); 
MS-ESI (m/z): 375 [M+1]+
Ｂ．Ｈ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル  塩酸塩の調製
例６  Ｂの記載と同様の手順で、氷水浴下で冷却下、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル（１８．００ｇ、４８．１ｍｍｏｌ）の酢酸エチル（１００ｍＬ）溶液と、エーテル（１００ｍＬ）の混合物中に、２時間、ＨＣｌガスの吹き込みを行った後、オフホワイトの固形物として、Ｈ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル  塩酸塩（１２．０ｇ）が得られた。収率８０％。
【０１３０】
1H NMR (DMSO-D6, 400MHz) d (ppm): 11.09 (br. s, 1H), 8.47 (br. s, 3H), 7.50 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.10 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 6.96 - 7.06 (m, 1H), 4.23 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 3.95 - 4.13 (m, 2H), 3.18 - 3.31 (m, 2H), 1.36 - 1.52 (m, 1H), 1.24 - 1.36 (m, 2H), 0.79 (d, J = 5.1 Hz, 6H); 
MS-ESI (m/z): 275 [M+1]+(free base)
Ｃ．Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−Ｅｔの調製
例６  Ｅの記載と同様の手順で、ＤＭＦ（２５ｍｌ）中における、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（ＯＨ）−Ｏ−エチルジクロロヘキシルアミン（２．９４ｇ、６．４ｍｍｏｌ）、Ｈ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル塩酸塩（２．００ｇ、６．４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（１．４８ｇ、７．７ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ水和物（０．９９ｇ、６．４ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（２．２８ｇ、２２．５ｍｍｏｌ）の反応によって、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−Ｅｔを調製した。収率５８％。
【０１３１】
1H NMR (DMSO-D6, 400MHz) d (ppm): 10.86 (br. s, 1H), 8.29 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.08 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.99 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 4.44 - 4.54 (m, 1H), 4.02 - 4.15 (m, 3H), 3.98 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.98 - 3.19 (m, 2H), 2.20 (br. s, 2H), 1.90 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 1.64 - 1.81 (m, 1H), 1.43 - 1.52 (m, 1H), 1.39 (s, 8H), 1.33 (br. s, 3H), 1.18 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 0.81 (t, J = 6.6 Hz, 6H);
MS-ESI (m/z): 532 [M+1]+
Ｄ．Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−Ｅｔ  塩酸塩（Ａｐｏ９２３・ＨＣｌ）の調製
例６  Ｆの記載と同様の手順で、２Ｍ  ＨＣｌエーテル溶液（１０ｍＬ）による、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−Ｅｔ（０．６０ｇ、１．１ｍｍｏｌ）の脱保護によって、オフホワイトの泡状物質として、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−Ｅｔ  塩酸塩（Ａｐｏ９２３・ＨＣｌ）が得られた。収率４７％。
【０１３２】
1H NMR (DMSO-D6, 400MHz) d (ppm): 10.94 (br. s, 1H), 8.59 (br. s, 3H), 8.51 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.07 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.99 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 4.48 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 4.17 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 3.89 - 4.03 (m, 3H), 2.98 - 3.18 (m, 2H), 2.21 - 2.42 (m, 2H), 1.93 - 2.03 (m, 2H), 1.41 - 1.54 (m, 1H), 1.28 - 1.36 (m, 2H), 1.21 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 0.81 (t, J = 6.6 Hz, 6H); 
MS-ESI (m/z): 432 [M+1]+(free base)
（例１０）
Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−Ｂｚｌ  塩酸塩（Ａｐｏ９２４・ＨＣｌ）の調製
【０１３３】
【化７−１０】
2014510734.tif 000028
【０１３４】
Ａ．Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−Ｂｚｌの調製
上記例６  Ｅの記載と同様の手順で、室温、ＤＭＦ（２５ｍＬ）中における、Ｈ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル  塩酸塩（２．００ｇ、３．０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（１．４８ｇ、７．７ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ水和物（０．９９ｇ、６．４ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（２．２８ｇ、２２．５ｍｍｏｌ）およびＢｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（ＯＨ）−Ｏ−Ｂｚｌ（２．１７ｇ、６．４ｍｍｏｌ）の反応により、Ｂｏｃ―Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−Ｂｚｌ（３．２ｇ、収率８３％）を調製した。
【０１３５】
1H NMR (DMSO-D6, 400MHz) d (ppm): 10.86 (br. s, 1H), 8.29 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.29 - 7.39 (m, 7H), 7.13 (s, 1H), 7.06 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.98 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 5.05 - 5.19 (m, 2H), 4.41 - 4.51 (m, 1H), 4.03 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 2.96 - 3.15 (m, 2H), 2.11 - 2.29 (m, 2H), 1.84 - 1.97 (m, 1H), 1.74 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 1.40 - 1.50 (m, 1H), 1.38 (br. s, 8H), 1.22 - 1.34 (m, 4H), 0.78 (t, J = 6.6 Hz, 6H); 
MS-ESI (m/z): 594 [M+1]+
Ｂ．Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−Ｂｚｌ  塩酸塩（Ａｐｏ９２４・ＨＣｌ）の調製
上記例６  Ｆの記載と同様の手順で、２Ｍ  ＨＣｌエーテル溶液（１８ｍＬ）による、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−Ｂｚｌ（１．２ｇ、２．０ｍｍｏｌ）の脱保護により、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−Ｂｚｌ  塩酸塩（０．５９ｇ、収率５５％）が得られた。
【０１３６】
1H NMR (DMSO-D6, 400MHz) d (ppm): 10.92 (s, 1H), 8.57 (br. s, 3H), 8.49 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.32 - 7.42 (m, 6H), 7.16 (s, 1H), 7.07 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 6.98 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 5.12 - 5.31 (m, 2H), 4.48 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 4.07 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 3.91 - 4.01 (m, 2H), 2.99 - 3.19 (m, 2H), 2.24 - 2.43 (m, 2H), 1.89 - 2.08 (m, 2H), 1.38 - 1.52 (m, 1H), 1.24 - 1.36 (m, 2H), 0.74 - 0.84 (m, 6H); 
MS-ESI (m/z): 494 [M+1]+ (free base)
（例１１）
ガンマ−Ｄ−グルタミル−Ｌ−トリプトファン  ジエチル  エステル  塩酸塩、あるいは、（２Ｒ）−２−アミノ−５−｛［（２Ｓ）−１−（エトキシ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−オキソプロパン−２−イル］アミノ｝−５−オキソペンタン酸  エチル  エステル  塩酸塩、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−エチル）−Ｏ−エチル  塩酸塩、Ａｐｏ８７０塩酸塩の調製
【０１３７】
【化７−１１】
2014510734.tif 000029
【０１３８】
例２の記載と同様の手順で、エタノール中において、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨをＨＣｌと反応させ、ガンマ−Ｄ−グルタミル−Ｌ−トリプトファン  ジエチル  エステル  塩酸塩を得た。例２に記載のＨＰＬＣ法を用いた。ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝１１．３分；２８０ｎｍで測定される、ＨＰＬＣ（ＡＵＣ）純度＝９６．８％。
【０１３９】
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) d ppm: 10.91 (s, 1H), 8.51 (d, J= 7.3 Hz, 1H), 7.80 - 8.40 (br, m 3H), 7.49 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.34 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.07 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 6.99 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 4.44 - 4.47 (m, 1H), 4.16 - 4.21 (q, J = 7.0 Hz, 2H),  3.99 - 4.05 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 3.91 - 3.95 (m, 1H),  3.01-3.16 (m, 2H), 2.33 - 2.39 (m, 1H), 2.21 - 2.25 (m, 1H), 1.90 - 1.98 (m, 2H), 1.22 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.08 (t, J = 7.0 Hz, 3H); 
MS-ESI (m/z) 390 [M+1]+(free base)
（例１２）
（Ｒ）−５−（（Ｓ）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−（イソペンチルオキシ）−１−オキソプロパン−２−イルアミノ）−２−アミノ−５−オキソペンタン酸  エチル  エステル  塩酸塩、あるいは、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−エチル  塩酸塩（Ａｐｏ９１４・ＨＣｌ）の調製
【０１４０】
【化７−１２】
2014510734.tif 000030
【０１４１】
Ａ．Ｂｏｃ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミルの調製
ＤＭＦ（１００ｍＬ）中で、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ（１０．０ｇ、３２．８ｍｍｏｌ）、３−メチル−１−ブタノール（７．１ｍＬ、６５．７ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（８．２ｇ、４２．７ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（５．３ｇ、３９．４ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡ（７．４ｍＬ、４２．７ｍｍｏｌ）を混合した。得られる混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を、撹拌しながら、ビーカー中の冷水（１００ｍＬ）に注ぎ、そして、得られる懸濁液を５℃（氷浴）で２０分間撹拌した。吸引濾過により、白色固形物として、Ｂｏｃ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミルが得られ、終夜風乾した（１０．８ｇ）。収率８８％。
【０１４２】
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) d ppm: 10.86 (br. s., 1H), 7.48 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.07 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 6.99 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 4.12 - 4.24 (m, 1H), 3.93 - 4.09 (m, 2H), 3.05 - 3.15 (m, 1H), 2.95 - 3.05 (m, 1H), 1.48 - 1.59 (m, 1H), 1.31 - 1.41 (m, 11H), 0.82 (t, J= 6.6 Hz, 6H); 
MS-ESI (m/z) 375 [M+1]+
Ｂ．Ｈ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル  塩酸塩の調製
Ｂｏｃ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル（１０．５２ｇ、２８．１ｍｍｏｌ）の１５０ｍＬ  ＥｔＯＡｃ懸濁液中に、ＨＣｌガスを１．５時間吹き込んだ。懸濁液を５℃（氷浴）で２０分間撹拌した。吸引濾過により固形の生成物を回収し、ＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で洗浄することで、白色の固形物として、Ｈ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル塩酸塩（７．８３ｇ）が得られた。収率９０％。
【０１４３】
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz) d ppm: 11.13 (br. s., 1 H), 8.66 (br. s., 2 H), 7.52 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 7.38 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 7.25 (s, 1 H), 7.09 (t, J = 7.6 Hz,1 H), 7.01 (t, J = 7.6 Hz, 1 H), 4.19 (t, J = 6.6 Hz, 1 H), 3.94 - 4.08 (m, 2 H), 3.33 (d, J = 5.1 Hz, 1 H), 3.20 - 3.29 (m, 1 H), 1.36 - 1.48 (m, 1 H), 1.23 - 1.33 (m, 2 H), 0.78 (d, J = 5.1 Hz, 6 H); 
MS-ESI (m/z) 275 [M+1]+(free base)
Ｃ．Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−Ｂｚｌの調製
氷水浴による冷却下、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ−Ｏ−Ｂｚｌ（８．３ｇ、２４．６ｍｍｏｌ）、Ｈ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル  塩酸塩（７．６５ｇ、２４．６ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（５．６７ｇ、２９．５ｍｍｏｌ）、およびＨＯＢｔ（３．５ｇ、２５．８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１００ｍＬ）溶液中に、ＤＩＰＥＡ（８．６ｍＬ、４９．２ｍｍｏｌ）を添加した。得られる混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を、撹拌しながら、ビーカー中の冷水（２５０ｍＬ）に注いだ。混合物を酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を、順次、１０％のクエン酸溶液（３０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）、および食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、その後、ＭｇＳＯ４上で乾燥した。真空下、溶媒を除去した後、淡黄色を帯びたオイルとして、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−ｂｚｌが得られた（１３．５ｇ）。収率９３％。
【０１４４】
1H NMR (DMSO-d6,400MHz) d ppm: 10.87 (br. s., 1 H), 8.30 (d, J = 7.1 Hz, 1 H), 7.48 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 7.27 - 7.40 (m, 7 H), 7.15 (br. s., 1 H), 7.07 (t, J = 7.6 Hz, 1 H), 6.91 - 7.03 (m, 1 H), 5.04 - 5.19 (m, 2 H), 4.48 (d, J = 6.1 Hz, 1 H), 3.97 (t, J = 6.1 Hz, 3 H), 3.12 (dd, J = 14.1, 6.1 Hz, 1 H), 3.02 (dd, J = 14.1, 8.1 Hz, 1 H), 2.14 - 2.29 (m, 2 H), 1.93 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 1.67 - 1.83 (m, 1 H), 1.41 - 1.55 (m, 2 H), 1.28-1.38 (m, 10 H), 0.80 (t, J = 6.1 Hz, 6 H); 
MS-ESI (m/z) 594 [M+1]+
Ｄ．Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−ＯＨの調製
圧力４５ｐｓｉの水素雰囲気下、Ｐａｒｒの装置内で、エタノール（２５０ｍＬ）中のＢｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−ベンジル（１２．３５ｇ、２０．８ｍｍｏｌ）および１．５ｇの１０％Ｐｄ担持活性炭（湿）の混合物を、室温で２時間振盪した。Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）を用いて、Ｐｄ触媒を濾別し、そして、減圧下、濾液を蒸散させ、ピンク色のオイルを得、その後、真空下で乾燥させることで、ピンク色の泡状固形物として、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−ＯＨ（９．１ｇ）が得られた。収率８７％。
【０１４５】
1H NMR (DMSO-d6,400MHz) d ppm: 10.87 (s, 1 H), 8.30 (d, J = 7.1 Hz, 1 H), 7.48 (d, J = 7.1 Hz, 1 H), 7.34 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 7.15 (s, 1 H), 7.03 - 7.12 (m, 2 H), 6.93 - 7.03 (m, 1 H), 4.41 - 4.54 (m, 1 H), 3.98 (t, J = 6.6 Hz, 2 H), 3.82 - 3.92 (m, 1 H), 3.39 - 3.50 (m, 2 H), 3.07 - 3.18 (m, 1 H), 2.97 - 3.07 (m, 1 H), 2.18 (t, J = 7.6 Hz, 2 H), 1.90 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 1.70 (dd, J = 13.6, 7.6 Hz, 1 H), 1.47 (dq, J = 13.3, 6.7 Hz, 1 H), 1.26 - 1.41 (m, 9 H), 1.07 (t, J = 6.6 Hz, 1 H), 0.75 - 0.84 (m, 6 H); 
MS-ESI (m/z) 504 [M+1]+
Ｅ．Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−エチルの調製
室温で、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−ＯＨ（１．２５ｇ、２．４８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３５ｍＬ）溶液に、順次、ヨードエタン（０．６ｍＬ、７．４５ｍｍｏｌ）と炭酸カリウム（０．６９ｇ、４．９６ｍｍｏｌ）を添加した。得られる混合物を室温で終夜撹拌した。水（２５ｍＬ）で、反応混合物にクエンチ処理を施し、その後、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を、順次、１０％クエン酸溶液（２０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３溶液、および食塩水（２５ｍＬ）で洗浄し、そして、有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥した。真空下、溶媒を除去した後、ピンク色を帯びた褐色のオイルとして、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−エチル（１．１２ｇ）が得られた。収率８５％。
【０１４６】
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz) d ppm: 10.86 (s, 1 H), 8.29 (d, J = 7.1 Hz, 1 H), 7.96 (s, 1 H), 7.48 (d, J = 7.1 Hz, 1 H), 7.34 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 7.22 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 7.14 (s, 1 H), 7.07 (t, J = 7.6 Hz, 1 H), 6.99 (t, J = 7.6 Hz, 1 H), 4.47 (d, J = 7.1 Hz, 1 H), 4.03 - 4.16 (m, 2 H), 3.98 (t, J = 7.1 Hz, 2 H), 3.91 (d, J = 5.1 Hz, 1 H), 3.07 - 3.16 (m, 1 H), 3.04 (d, J = 9.1 Hz, 1 H), 2.18 (t, J = 7.6 Hz, 2 H), 1.79 - 1.97 (m, 1 H), 1.63 - 1.78 (m, 1 H), 1.43 - 1.54 (m, 1 H), 1.27-1.38 (m, 10 H), 1.18 (t, J = 7.1 Hz, 3 H), 0.81(t, J = 6.6 Hz, 6 H); 
MS-ESI (m/z) 532[M+1]+
Ｆ．Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−エチル  塩酸塩（Ａｐｏ９１４・ＨＣｌ）の調製
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−エチル（１．０５ｇ、１．９８ｍｍｏｌ）の３５ｍＬのジクロロメタン溶液中に、ＨＣｌガスを２時間吹き込んだ。反応混合物を蒸発乾固し、そして、粗生成物を、溶離液として、イソプロパノールとジクロロメタンの混合溶媒（１／１比、ｖ／ｖ）を使用して、シリカゲル上でフラッシュ・クロマトグラフィーにより精製した。得られる粘着性の泡状固形物を、２Ｍ  ＨＣｌ  Ｅｔ２Ｏ溶液中に溶解し、室温で３０分間撹拌した。減圧下、揮発性物質を留去した後、茶−ピンク色を帯びた泡状固形物として、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−エチル  塩酸塩（Ａｐｏ９１４・ＨＣｌ）が得られた（０．８１ｇ）。収率８８％。
【０１４７】
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz) d ppm: 10.90 (br. s., 1H), 8.43 (d, J = 7.07 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.08 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 8.08 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.03 - 7.11 (m, 1H), 6.94 - 7.02 (m, 1H), 4.47 (q, J = 7.07 Hz, 1H), 4.13 (d, J = 7.07 Hz, 2H), 4.08 - 4.20 (m, 2H), 3.94 - 4.03 (m, 2H), 3.57 - 3.68 (m, 1H), 3.13 (dd, J = 6.06, 14.15 Hz, 1H), 3.03 (dd, J= 8.59, 14.65 Hz, 1H), 2.12 - 2.37 (m, 2H), 1.82 - 1.95 (m, 1H), 1.68 - 1.82 (m, 1H), 1.48 (dt, J = 6.57, 13.14 Hz, 1H), 1.26 - 1.38 (m, 2H), 1.21 (t, J = 7.07 Hz, 3H), 0.75 - 0.86 (m, 6H); 
MS-ESI (m/z) 432[M+1]+(free base)
（例１３）
Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−Ｂｚｌ  塩酸塩（Ａｐｏ９２７・ＨＣｌ）の調製
【０１４８】
【化７−１３】
2014510734.tif 000031
【０１４９】
（例１２  Ｃの記載に沿って調製された）Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−Ｂｚｌ（０．９７ｇ、１．６３ｍｍｏｌ）を、４Ｍ  ＨＣｌ  ジオキサン溶液  １０ｍＬ中で、室温で３０分間撹拌した。反応混合物を蒸発乾固し、そして、残渣オイルをアセトニトリル中に溶出した。再度、混合物を蒸発乾固し、そして、残渣の泡状固形物を、真空下、４時間乾燥した。それにより、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−Ｂｚｌ  塩酸塩（０．８０ｇ）が、収率９２％で得られた。
【０１５０】
1H NMR (CDCl3, 400MHz) d ppm: 9.12 (br. s., 1H), 8.03 (s, 1H), 7.47 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.27 - 7.34 (m, 2H), 7.24 (br. s., 3H), 7.19 (br. s., 2H), 6.98 - 7.12 (m, 2H), 4.90 - 5.06 (m, 2H), 4.80 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 3.97 - 4.09 (m, 3H), 3.75 - 3.82 (m, 1H), 3.62 - 3.70 (m, 1H), 3.22 - 3.31 (m, 1H), 3.11 - 3.21 (m, 1H), 2.46 (br. s., 1H), 2.33 - 2.42 (m, 1H), 2.26 (br. s., 1H), 2.18 (br. s., 1H), 1.60 (dt, J = 13.1, 6.6 Hz, 1H), 1.40 - 1.50 (m, 2H), 0.87 (d, J = 6.1 Hz, 6H); 
MS-ESI (m/z) 494[M+1]+(free base)
（例１４）
分配係数の決定、Ｄ７．４
ＭＯＰＳバッファー（５０ｍＭ、ｐＨ  ７．４）および１−オクタノールを、それぞれ、水相および有機相として使用した。ＭＯＰＳバッファーと１−オクタノールを混合し、使用前に、互いに、事前飽和処理を施した。
【０１５１】
典型的な試験では、Ａｐｏ８４８塩酸塩（Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−イソアミル  ＨＣｌ）の水溶液は、化合物を２ｍｇ秤量して、５ｍＬのメスフラスコに入れ、次いで、ＭＯＰＳバッファー（５０ｍＭ、ｐＨ  ７．４）を定量まで加えることで、調製した。得られる混合物を、超音波処理し、そして、ボルテックスをすることで、完全な溶解を確保した。ＨＰＬＣ（カラム：ＸＴｅｒｒａ  ＭＳ  Ｃ１８，５μＭ，４．６×２５０ｎｍ；移動相：Ａ＝４ｍＭのＴｒｉｓ、２ｍＭのＥＤＴＡ、ｐＨ  ７．４水相、Ｂ＝アセトニトリル；勾配方法：時間（分）−Ｂ（％）（５）０−５、１５−５５、２５−５５、２５．０５−５、３０−５；流速：１ｍＬ／分；注入量＝２μＬ；検出器波長：２８２ｎｍ）により、得られる溶液を分析し、ピーク高さ（ＨａｑｕＩ）を求めた。
【０１５２】
この水溶液１ｍＬを別の１０ｍＬ試験管にピペットで取り、１ｍＬの１−オクタノールと混合した。この混合物を、１時間ボルテックスし、次いで、４０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。２相に分離した。水相および有機相の両方をＨＰＬＣで分析し、ピーク高さＨａｑｕＦとＨｏｒｇＦとを得た。分配係数「Ｄ７．４」を、下記の式の一方、または両方を用いて、算定した：Ｄ７．４＝（ＨａｑｕＩ−ＨａｑｕＦ）／ＨａｑｕＦ、またはＤ７．４＝ＨｏｒｇＦ／ＨａｑｕＦ。
【０１５３】
Ａｐｏ８４８のＤ７．４は、１２７であり、従って、ｌｏｇＤ７．４は、２．１と計算された。同様にして、下記の化合物のｌｏｇＤ７．４も決定した：Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−Ｍｅ）−Ｏ−Ｍｅ（０．５７）、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−Ｍｅ）−ＯＨ（−０．８９）、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨ（−３．２２）。
【０１５４】
（例１５）
ヒト肝細胞における式Ｉの化合物の生体内変換の研究
基本手順：
ＬｉｖｅｒＰｏｏｌ（商標）凍結保存ヒト肝細胞（１０人の男性ドナーから集められた）をＣｅｌｓｉｓ  Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓから入手した。肝細胞は、使用するまで液体窒素中で保存した。アッセイの直前に、肝細胞を３７℃で素早く解凍し、１００×ｇで１０分間遠心分離した。培地を除去し、細胞をＰＢＳ中に。４×１０６細胞数／ｍＬの密度で再懸濁した。式Ｉの化合物（１００μＭ）を、５０μＬ容中の０．１×１０６肝細胞とともにインキュベートした。インキュベーションの１０、２０、６０、１２０、および２４０分後に、等容量の５％（ｗ／ｖ）ＴＣＡを添加することにより、反応をクエンチした。「時間０」のサンプルは、試験化合物の添加前にＴＣＡを添加することにより作製した。短時間のボルテックスおよび氷上での１０分のインキュベーションの後、サンプルを遠心分離し（１６０００×ｇ、１０分）、そして、上清を、ＵＶ検出を用いて、ＨＰＬＣにより分析した。
【０１５５】
ＳＧＦ、ＳＩＦ、血漿、および肝細胞サンプル中のプロドラッグのＨＰＬＣ分析：アジレント(Agilent)  １１００シリーズＨＰＬＣシステムを用いて、ＨＰＬＣ分析を行った。該システムは、以下で構成される；プログラム可能のマルチチャネルポンプ、自動注入器、脱気装置、およびデータ収集および分析のためのアジレント(Agilent)  ＨＰＬＣ２１８Ｃｈｅｍ  Ｓｔａｔｉｏｎ  Ｒｅｖ．Ａ．０９．０３ソフトウエアによって制御されているＨＰ検出器。傾斜法は、すべてのプロドラッグおよびＡｐｏ８０５を含むそれらの加水分解生成物の特定のために、以下のクロマトグラフ条件、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  ＸＤＢ，Ｃ１８カラム（ｐａｒｔ＃９６３９６７−９０２、１５０×４．６ｍｍ、３．５μｍ）で行われた：
温度：周囲温度
移動相：Ａ＝水相：１０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ，２ｍＭのＥＤＴＡ，ｐＨ  ７．４
Ｂ＝有機相：アセトニトリル
傾斜法：  時間：０分  ５％Ｂ、２５分  ５０％Ｂ、３５分  ８０％Ｂ、４５分  ５％Ｂ、５０分  ５％Ｂ
移動相流速：１．０ｍＬ／分
注入量：５０μＬ
データ収集時間：３０分
検出波長：２８０ｎｍ、４ｎｍバンド幅、参照３６０ｎｍ，４ｎｍバンド幅。
【０１５６】
λ＝２８０ｎｍにおいて、クロマトグラムを分析した。ピーク面積（ｍＡＵ＊ｓ）を、プロドラッグ、中間体、およびＨ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨ（Ａｐｏ８０５）の定量に使用した。
【０１５７】
Ｇ＝Ｔ＝イソアミルである、式ＩＡの化合物：Ａｐｏ８４８の生物変換を、ヒト凍結保存肝細胞を用いたインキュベーションによって、インビトロで調査したところ、インキュベーション混合物のＨＰＬＣ分析により、３時間後に４５％のＡｐｏ８０５の形成が確認された。同じ肝細胞系において、３時間後、Ａｐｏ８０５へ３０％の変換を起こす、別の化合物  Ａｐｏ８０４（Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＭｅ）−Ｏ−ＣＨ２Ｐｈ）を上回る、顕著な向上を、Ａｐｏ８４８は示している。
【０１５８】
（例１６）
ラットにおける式Ｉの化合物の薬物動態研究
動物への投薬のための基本手順
１投薬群あたり、体重２５０から３００ｇの５匹の雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットを使用した。投薬の１日前に、静脈カテーテルと動脈カテーテル（長さ２０ｃｍのポリウレタン製のコイル管で作製されており、１００ユニット／ｍＬのヘパリンを含む生理食塩水で満たされている）を、各ラットの頸静脈および頸動脈にしっかりと挿入した。経口投薬前、ラットは、終夜絶食させ、そして、投薬の約２時間後に給餌した。すべての投薬と血液サンプリングは、完全に意識のあるラットで実施した。被験化合物は、水溶液として経口的に胃管投与、または、０．９％の塩化ナトリウム溶液、最終ｐＨは７．０であり、５ｍｇ／ｋｇ（Ａｐｏ８０５換算）に相当する用量で静脈注射（Ａｐｏ８０５Ｋ１のみ）を行った。投与後３０時間まで、血液（０．３ｍＬ）を各動物の頸動脈からサンプリングした。各サンプリングの後、等量の未処理の血液による置換を行った。血液サンプルは、すぐに遠心分離し（４３００×ｇ、５分、４℃）、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析をするまで、−８０℃で凍結した。
【０１５９】
血漿中薬物濃度のＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析のための基本手順
メタノール（２００μＬ）を、血漿サンプル（５０μＬ）に加えて、血漿タンパク質を沈殿させた。短いボルテックスと遠心分離の後、上清（２００μＬ）を除去し、窒素気流下、４０℃で乾燥させた。サンプルを、水（３００μＬ）により戻した上で、２０μＬを分析のために注入した。
【０１６０】
Ｉｏｎｉｃｓ  ＥＰ１０＋およびＨＳＩＤを備え付けた、Ｓｃｉｅｘ  ＡＰＩ  ３６５  ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分光光度計を使用した。キラルカラム（Ｓｕｐｅｌｃｏ−Ａｓｔｅｃ  ＣＨＩＲＯＢＩＯＴＥＣ（商標登録）ＴＡＧ）、１００×２．１ｍｍ、５μｍを、周囲温度で使用した。移動相は、（Ａ）０．１％  ギ酸水溶液および（Ｂ）０．１％  ギ酸アセトニトリル溶液、混合比率  ８８：１２（Ａ：Ｂ、ｖ／ｖ）からなり、流速は、０．６ｍＬ／分であった。分析には、ＭＲＭモードにおいて、陽イオンエレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ＋）を使用した。Ａｐｏ８０５の濃度について、サンプルを分析した。
【０１６１】
ラット中における、Ａｐｏ８４８およびＡｐｏ８０５（Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨ）の経口生物学的利用能
Ｇ＝Ｔ＝イソアミルである、式ＩＡの化合物である、プロドラッグＡｐｏ８４８の絶対的経口生物学的利用能を、Ａｐｏ８０５Ｋ１（Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨのカリウム塩）の値と、雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットにおいて比較した。各群当たり、５匹の成体動物に対して、５ｍｇ／ｋｇのＡｐｏ８０５Ｋ１、Ａｐｏ８４８、またはＡｐｏ８３８を経口投与し、また、５ｍｇ／ｋｇのＡｐｏ８０５Ｋ１を静脈内投与した。ラットの血液中において、Ａｐｏ８４８は、即時的にＡｐｏ８０５へと変換されるので、投与後、様々な時間間隔において、採取した血漿中の、Ａｐｏ８０５のレベルのみを測定した。
【０１６２】
ＰＫ分析
ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ５．２ソフトウエアを使用して、個々の動物のデータについて、非コンパートメント分析を実施した。生物学的利用能は、被験化合物の経口投与の後のＡＵＣＩＮＦ＿Ｄと、Ａｐｏ８０５Ｋ１のＩＶ投与の後のＡＵＣＩＮＦ＿Ｄとの比として、算出した。
【０１６３】
図４は、Ａｐｏ８４８またはＡｐｏ８０５Ｋ１の経口投与の後のＡｐｏ８０５の血漿中濃度を示す。経口投与後の時間−血漿中濃度曲線下の面積（ＡＵＣ）と、静脈内投与の後のＡＵＣの比として計算された、絶対的経口生物学的利用能は、Ａｐｏ８４８に対しては、４８％であった。Ａｐｏ８０５Ｋ１の絶対的生物学的利用能は、１２％でしかなかった。従って、プロドラッグの生物学的利用能は、Ａｐｏ８０５Ｋ１と比較して、大いに向上されている。
【０１６４】
（例１７）
式Ｉの化合物のＣａｃｏ−２細胞透過性評価
式Ｉの化合物のヒトの腸内吸収の可能性を、ｃａｃｏ−２細胞透過性アッセイにおいて推定した。
【０１６５】
細胞培養
本来、ＡＴＣＣから入手されたｃａｃｏ−２細胞を、９００００細胞／播種の密度で、０．９ｃｍ２のＰＥＴフィルター（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）上に播種した。培養条件は、２１から２８日間、非必須アミノ酸で強化したイーグルス最少必須培地を含有する２０％ウシ胎仔血清中に維持した。細胞単層の完成度は、Ｌｕｃｉｆｅｒ  Ｙｅｌｌｏｗ  傍細胞見かけ透過性係数（Ｐａｐｐ）の測定を介して評価した。
【０１６６】
輸送実験
被験化合物の添加の前に、成長培地を除去し、３７℃で、ハンクス平衡塩溶液（ＨＢＳＳ）を用いて、単層を２度リンスした。細胞単層を含むフィルター装入物を、下のチャンバーにＨＢＳＳ又は被験化合物の溶液を含有させている、独立した１２ウェルの細胞培養皿に移した。すべての薬物輸送試験は、３７℃で、ｐＨ  ７．４、５０μＭの被験化合物のＨＢＳＳ溶液を使用して行った。上のチャンバーの培地容量は１ｍＬであり、下のチャンバーの培地容量は２ｍＬであった。すべての実験において、被験化合物溶液は、上のチャンバー（頂端部から基底部への輸送、Ａ＞Ｂ）または下のチャンバー（基底部から頂端部への輸送、Ｂ＞Ａ）に加えられ、時間とともに、加えられたチャンバーと反対のチャンバー中における、該被験化合物の出現を監視した。１００μＬのサンプルを、被験化合物を添加した後すぐに供与チャンバーから取り出し、被験化合物の初期濃度を確認した（Ｃ０）。３０、６０、９０、および１２０分において、１００μＬの上清サンプルを、受容チャンバーから取り除き、１００μＬの予め温めたバッファーを補充添加した。１２０分では、１００μＬの上清サンプルを、供与チャンバーから取り出し、試験終了時に残っている化合物の濃度を特定した。サンプルは、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって分析した。実験の間に、部分的加水分解を受けるプロドラッグの場合は、プロドラッグおよびすべての加水分解生成物の濃度について、そのサンプルを分析した。
【０１６７】
透過性の算出
時間と共に受容チャンバー中に出現する被験化合物の蓄積した量、ｄＱ／ｄｔ、を使用して、下記の式を用いて、見かけ透過性を算出した。Ｐａｐｐ＝ｄＱ／ｄｔ×１（Ａ×Ｃ０）、式中、Ａは、フィルターの面積（０．９ｃｍ２）であり、Ｃ０は、供与チャンバー内の被験化合物の初期濃度である。実験中に部分的に加水分解が起こっている被験化合物には、輸送物質の総量（モル単位）を計算に用いた。各被験化合物において、Ａ＞ＢおよびＢ＞Ａの両方の方向のＰａｐｐ値をそれぞれの方向における定常状態速度定数ｄＱ／ｄｔの傾斜を用いて計算した。その値が１．０×１０６ｃｍ／ｓと同じかより高い場合は、高い吸収の可能性がＰａｐｐ（Ａ＞Ｂ）から見込まれる。比Ｐａｐｐ（Ｂ＞Ａ）／Ｐａｐｐ（Ａ＞Ｂ）が２．５と同じかそれより高い場合には、流出プロファイルが示唆される。
【０１６８】
結果
ＧおよびＴがイソアミルである、式ＩＡの化合物：Ａｐｏ８４８のヒトの腸内吸収の可能性は、ｃａｃｏ−２透過性アッセイにより推定された。見かけ透過性は、Ａｐｏ８４８において２．８７×１０−６ｃｍ／ｓであり、高い透過性の可能性を示している。
【０１６９】
本発明の様々な実施形態が明細書中に開示されているが、多くの修正や変更を、当業者の共通の一般知識にしたがって、本発明の技術的範囲内で行うことができる。そのような変更には、実質的に同じ方法で、同じ結果を得るために、本発明の如何なる面において公知の均等物の置換を含む。数値範囲は、その範囲を定義している数字を含む。さらに、数値範囲は、列挙された範囲において具体的にその範囲が欠落すると述べられた範囲内の個々の値に加えて列挙されるように提供される。表現「含有している（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、明細書において、外縁を定めない用語として用いられ、実質、「含むが、それに限定されない（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ，ｂｕｔ  ｎｏｔ  ｌｉｍｉｔｅｄ  ｔｏ）」と同じであり、用語「含有する（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」は、対応する意味を持つ。明細書に記載の通り、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈において明確に違うことが明示されない限り、複数形を含む。したがって、例えば、「もの（ａ  ｔｈｉｎｇ）」は、１より多くのものを含む。明細書中の参考文献の引用は、そのような参考文献が、本発明の先行技術であることを認めるものではない。さらに、明細書の背景の項中に登場する物質は、そのような物質が本発明の先行技術であることを認めるものではない。参照により、明細書中に組み込まれるべき、個々の優先権書類は、具体的かつ個々に表示されているように、かつ、明細書中に完全に明記されているように、如何なる優先権書類も、参照により明細書中に組み込まれる。本発明は、すべての実施形態、ならびに、例および図面を参照して、実質的に明細書内に記載されている、変形をも包含している。
【図１】
2014510734.tif 000034
【図２】
2014510734.tif 000035
【図３】
2014510734.tif 000036
【図４】
2014510734.tif 000037
【手続補正書】
【提出日】平成25年11月29日(2013.11.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３２】
【図１】図１は、酸およびアミン基の推定ｐＫａ値を用いた、ジペプチドＨ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨのＡＣＤ  ｐｈｙｓｃｈｅｍ  化学種同定計算を示す図である。Ｈ２ＬおよびＨ３Ｌの化学構造を図の中に示す。Ｈ２ＬはＨ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨの双性イオン（ｚｗｉｔｔｅｒｉｏｎ）種である。
【図２】図２は、酸およびアミン基の推定ｐＫａ値を用いた、ジペプチドＨ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＭｅのＡＣＤ  ｐｈｙｓｃｈｅｍ  化学種同定計算を示す図である。Ｈ３ＬおよびＨ３Ｌの化学構造を図の中に示す。Ｈ３ＬはＨ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＭｅの双性イオン種である。
【図３】図３は、酸およびアミン基の推定ｐＫａ値を用いた、ジペプチドＨ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−イソアミルのＡＣＤ  ｐｈｙｓｃｈｅｍ  化学種同定計算を示す図である。Ｈ２ＬおよびＨ３Ｌの化学構造を図の中に示す。Ｈ２Ｌは、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−イソアミルの中性種であり、Ｈ３Ｌは、アミノ基が正電荷を帯びているアミノ塩種である。
【図４】図４は、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｏ−イソアミル）−Ｏ−イソアミル（Ａｐｏ８４８）のおよびＡｐｏ８０５モノカリウム塩（Ａｐｏ８０５Ｋ１）をラットに経口投薬した後の、血漿中のＡｐｏ８０５（Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＨ）の平均濃度（ｎ＝５）を示しており、プロドラッグの向上した生物学的利用能を実証している図である。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３５】
【表１−１】
2014510734.tif 000038
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６９】
Ｄ−ガンマ−グルタミル−Ｄ−トリプトファン  Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＭｅのモノアルキルエステルの化学種同定プロットを、図２に示す。電気的に中性であるＨ３Ｌ双性イオン種の割合は、ｐＨ依存性を示し、ｐＨ７．４では、より多くの負に帯電しているＨ２Ｌ種（１負電荷）が存在している。例えば、重要なｐＨにおける、Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ）−ＯＭｅについて、数値計算された化学種の分布を、以下の表に示す。
【国際調査報告】
2014510734.tif 000039
2014510734.tif 000040