(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
１０％（ｗ／ｗ）〜６０％（ｗ／ｗ）の１つ以上の糖アルコールを含む、止血および創傷治癒に用いるための乾燥組成物を調製する方法であって：
ａ．粉末型の架橋された生体適合性ポリマー、１つ以上の糖アルコール、アルブミンおよび水性媒体を提供する工程と、
ｂ．生体適合性ポリマー、１つ以上の糖アルコール、アルブミンおよび水性媒体を混合して、ペーストを得る工程と、
ｃ．前記ペーストを凍結乾燥する工程と、
いう連続工程を包含する、方法。
【請求項２】
アルブミンがヒト血清アルブミンである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
乾燥前の前記ペーストが、０．１％（ｗ／ｗ）〜１０％（ｗ／ｗ）の量でアルブミンを含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
乾燥前の前記ペーストが、０．５％（ｗ／ｗ）〜５．０％（ｗ／ｗ）の量でアルブミンを含む、請求項１から３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記乾燥組成物が、２０％（ｗ／ｗ）〜５０％（ｗ／ｗ）の１つ以上の糖アルコールを含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
乾燥前の前記ペーストが、３％（ｗ／ｗ）〜２０％（ｗ／ｗ）の１つ以上の糖アルコールを含む、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
前記生体適合性ポリマーが、架橋されたスポンジから得られる、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記生体適合性ポリマーがゼラチンである、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
乾燥前の前記ペーストが：
ａ．５％（ｗ／ｗ）〜２０％（ｗ／ｗ）の１つ以上の糖アルコールと、
ｂ．０．５％（ｗ／ｗ）〜５％（ｗ／ｗ）のアルブミンと、
ｃ．１５％（ｗ／ｗ）〜２５％（ｗ／ｗ）の生体適合性ポリマーと、
ｄ．６０％（ｗ／ｗ）〜８０％（ｗ／ｗ）の水と、
を含む、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記乾燥組成物が、５％（ｗ／ｗ）未満の水を含む、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記１つ以上の糖アルコール類が、グリコール、グリセロール、エリスリトール、トレイトール、アラビトール、キシリトール、リビトール、マンニトール、ソルビトール、ズルシトール、フシトール、イジトール、イノシトール、ボレミトール、イソマルト、マルチトール、ラクチトール、およびポリグリシトールからなる群より選択される、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記１つ以上の糖アルコールが、マンニトールおよび必要に応じて１つ以上のさらなるポリオール類である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記乾燥組成物がさらに、止血、または創傷、骨、腱および／または組織治癒を刺激する１つ以上の生理活性剤を含む、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記生理活性剤がトロンビンである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記水性媒体が、水、生理食塩水、塩化カルシウム溶液、および緩衝化水性媒体からなる群より選択される、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記方法が、外側包装材中へ乾燥組成物を入れるさらなる工程を包含する、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記方法が、乾燥組成物を滅菌するさらなる工程を包含する、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記ペーストが、ペースト型で組成物を分散させるために適切なアプリケーターへ充填され、アプリケーター内で乾燥される、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記乾燥組成物が、再構成して、３０秒未満で、機械的混合なしにペーストを形成する、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
乾燥組成物を再構成するための方法であって、
ａ．請求項１〜１９のいずれか一項に記載の方法で得られる乾燥組成物を提供する工程と、
ｂ．前記乾燥組成物に水性媒体を添加することでペーストを形成する工程と、
を包含する、方法。
【請求項２１】
前記乾燥組成物が、シリンジ内に存在する、請求項２０に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、止血および／または創傷治癒における使用に適切な乾燥組成物であって、この乾燥組成物が、１つ以上のポリオール類を含み、かつ水性媒体の添加の際に自発的にペーストを形成する乾燥組成物に関する。この組成物はさらに、アルブミンのような押し出し増強因子を含む。この開示はさらに、上記乾燥組成物を調製する方法、および上記組成物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
コラーゲンおよびゼラチンなどのタンパク質系止血材料は、外科処置用に、固形スポンジ状でおよび固めていないかまたは詰めていない粉末型として市販されている。この固めていないか、または詰めていない粉末を流体（生理食塩水またはトロンビンなど）と混合すれば、混合条件および材料の相対比に応じて、びまん性出血の場合、特に、でこぼこした表面または手の届きにくい領域で用いる止血性組成物として有用であるペーストまたはスラリーが形成され得る。
【０００３】
従来の止血性ペーストは、固めていない粉末と液体とを機械的に振盪混合して、均一な組成物とすることにより、使用時点で調製する。粉末と流体との混合は、ビーカーなどの容器中で行ってもよい。そのような混合では、粉末をそれが最初に入っていた容器からビーカーに移し、粉末の入ったビーカーに流体を加え、次いで混合物を混練してペーストを形成する必要がある。そのようにしてペーストを形成して初めて、ペーストを送達手段またはアプリケーター（例えばシリンジ）に入れて、創傷に塗布してもよい。
【０００４】
特許文献１は、粉末型の止血剤（ゼラチン粉末など）を一定量含有する容器に関する。適切な量の液体を添加する際に、蓋を閉じて容器を震盪することで、容器内での機械的混合を行う。次いで、得られるパテ様止血性ペーストを容器から取り出して患者に塗布することで、止血を促進してもよい。
【０００５】
あるいは、１本目のシリンジ（シリンジＩ）に固めていないゼラチン粉末を、２本目のシリンジ（シリンジＩＩ）に液体を、予め入れておく試みがなされている。ペーストを作る場合、ルアーロックを介してシリンジＩとＩＩを連結して、シリンジＩＩの溶液をシリンジＩに押し込む。シリンジＩとＩＩの間で溶液と粉末を繰り返して行き来させようと努めることで、均質なペーストが形成されるかもしれないが、形成されなくてもよい。手術状況では、シリンジに入った粉末および液体の混合が不十分なせいで、最適な粉末：液体の比になっている止血性ペーストが得られない場合が多い。たとえ、そのような混合方法でペーストを上手く形成できるとしても、ペーストを形成するのに必要な時間および機械的労力は、望ましくないばかりか、許容できないことさえあり得る。また、そのような混合法は、ペーストの最終密度に影響を及ぼす可能性があり（混合しすぎるとペーストの密度が落ちる場合がある）、そのため、その都度ペーストのコンシステンシーには一貫性がない。
【０００６】
Ｆｌｏｓｅａｌ  Ｈａｅｍｏｓｔａｔｉｃ  Ｍａｔｒｉｘ（Ｂａｘｔｅｒ）は、止血ゼラチンペーストを作成するキットである。このゼラチンペーストは、最初にトロンビン溶液を作り、次いでゼラチンマトリクス・トロンビン溶液の混合物を、つないだ２つのシリンジの間で、合計で少なくとも２０回行き来させることにより、生成される。次いで、このペーストをシリンジから直接患者に塗布して、止血を促進してもよい。
【０００７】
同様に、Ｓｕｒｇｉｆｌｏ（登録商標）Ｈａｅｍｏｓｔａｔｉｃ  Ｍａｔｒｉｘ（Ｅｔｈｉｃｏｎ）は、トロンビンを含む止血ゼラチンペーストを作成するキットであり、このペーストは、ゼラチンマトリクス・トロンビン溶液の混合物を、つないだ２つのシリンジの間で、合計で少なくとも６回行き来させることにより、調製される。
【０００８】
特許文献２は、流動性の止血性ペーストを形成させるために必要な機械力および時間が少なくなるように、水性液体をより吸収しやすくした止血性ペーストを調製する方法に関する。特許文献２のペーストは、圧縮した止血粉末粒子から調製されるものであり、そしてペーストを調製するためには、そのペーストを、つないだシリンジの間で、合計で少なくとも５回行き来させなければならない。
【０００９】
特許文献３は、凝固誘導剤（トロンビンなど）および生体適合性ポリマー（ゼラチンなど）を含む乾燥止血性組成物を作るプロセスに関する。凝固誘導剤と生体適合性ポリマーとを混合してペーストを形成し、このペーストを凍結乾燥させる。得られる乾燥組成物を、その組成物を移すことおよび先に述べたとおり、希釈剤を、つないだ２つのシリンジの間で、合計で少なくとも２０回行き来させることにより、再構成する。
【００１０】
混合手順および操作は、時間がかかり、かつ止血性ペーストの滅菌を損なう可能性がある。そのような望ましくない混合の要件の必要性を省いた止血性組成物を提供することができたら望ましいであろう。
【００１１】
特許文献４は、流動性ペーストを形成するために自然に、すなわち、水性媒体の添加の際になんら混合を必要とすることなく再構成する、創傷治癒および止血性の使用に適切な乾燥ペースト組成物を開示している。この乾燥組成物は、架橋された生体適合性ポリマー，１つ以上のポリオール類および水性媒体を混合して、ペーストを調製すること、次いで、そのペーストを凍結乾燥して、乾燥組成物を得ることによって調製される。
【００１２】
特許文献５は、上記組成物が押し出し増強因子を含む、ゼラチンペーストを開示している。アルブミンなどの押し出し増強因子を、適切な量で提供することで、より高いゼラチン濃度の使用が可能になり、これが次に、このような生成物の止血性特性を改善し得ることが示される。ＷＯ２０１３／０６０７７０は、その全体が参照によって援用される。
【００１３】
従来の流動性ペースト生成物よりもシリンジから押し出すのが容易である、自然に再構成する乾燥ペースト組成物を提供することが望ましいであろう。シリンジから容易に押し出すことの可能な能力を保持している、従来の流動性ペーストよりも高濃度のポリマー（例えば、ゼラチン）を有する自然に再構成する乾燥ペースト組成物を提供することも望ましいであろう。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１４】
【特許文献１】国際公開第０３／０５５５３１号パンフレット
【特許文献２】米国特許出願公開第２００５／０２８４８０９号明細書
【特許文献３】国際公開第２０１１／１５１４００号パンフレット
【特許文献４】国際公開第２０１３／１８５７７６号パンフレット
【特許文献５】国際公開第２０１３／０６０７７０号パンフレット
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明の開示は、適切な量の水性媒体の添加の際に、止血および創傷治癒の手当に使用するのに適した実質的に均質なペーストを形成する、改良された乾燥組成物に関する。このペーストは、液体が添加されると自然に形成され、すなわちこのペーストを形成するのに機械撹拌は不要である。
【００１６】
本開示はさらに、上記乾燥組成物の調製法であって、以下の工程：
ａ．粉末型の生体適合性ポリマー、１つ以上のポリオール類、押し出し増強因子および水性媒体を提供する工程と、
ｂ．上記生体適合性ポリマー、１つ以上のポリオール類、押し出し増強因子および水性媒体を混合して、ペーストを得る工程と、
ｃ．上記ペーストを乾燥する工程と、
を包含する、方法に関する。
【００１７】
上記生体適合性ポリマーは、好ましくは止血および／または創傷治癒における使用に適している。
【００１８】
好ましくは、上記押し出し増強因子は、アルブミン、より好ましくはヒト血清アルブミンである。
【００１９】
上記乾燥組成物から形成されたペーストの使用も同様に、本開示に包含される。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】水の相図である。この相図は、圧温度平面において、固体、液体、および気体の３つの相の間の平衡または相境界の線を示す。
【図２】実施例６の各種ポリオール類を含有する、凍結乾燥されたゼラチンペーストの平均の再構成の時間±標準偏差である。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
定義
「生物活性剤」とは、インビボまたはインビトロで実証可能な、ある程度の薬理作用（有益なものである場合が多い）を提供する任意の作用剤（因子）、薬物、化合物、組成物、または混合物である。したがって、ある作用剤（因子）がヒトまたは動物の身体で細胞組織と相互作用するか、または細胞組織に影響を及ぼすならば、それは生物活性であるとみなされる。本明細書において用いる場合、この用語はさらに、個体において局所的または全身的な作用をもたらす任意の生理学的または薬理学的活性物質を包含する。生物活性剤は、酵素などのタンパク質であってもよい。生物活性剤のさらなる例としては、限定するものではないが、オリゴ糖、多糖、必要に応じてグリコシル化されたペプチド、必要に応じてグリコシル化されたポリペプチド、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド、脂質、脂肪酸、脂肪酸エステル、および二次代謝産物を含むか、またはそれらからなる作用剤が挙げられる。生物活性剤は、ヒトまたは他の任意の動物などの個体の処置に関連して、予防、治療のいずれで用いてもよい。
【００２２】
「生体適合性」とは、ある材料が、宿主になんら望ましくない局所的作用も全身作用も及ぼすことなく、その材料の目的とする機能を発揮する能力を指す。
【００２３】
「生物学的に吸収可能な」とは、本文脈においては、そのような粉末を形成する材料が、血流中へ輸送することが可能な大きさのより小さな分子へと身体内で分解され得ることを記述するのに用いられる用語である。上記分解および吸収により、上記粉末材料は、徐々に、塗布部位から取り除かれていく。例えば、ゼラチンは、組織のタンパク質分解酵素により分解されて、吸収可能な小さい分子となることができ、これにより、ゼラチンは、組織に塗布された場合は、典型的には、約４〜６週間の内に吸収され、出血面および粘膜に塗布された場合は、典型的には３〜５日の内に吸収される。
【００２４】
「押し出し増強因子」とは本明細書の開示によれば、シリンジからのペーストの押し出しを容易にし得る任意の生体適合性化合物を包含する。
【００２５】
「ゲル」とは、固形の、ゼリー様材料であり、柔らかく弱いものから固く強いものまで幅広い特性を有し得る。ゲルは、実質的に希薄な架橋系であると定義され、定常状態では流動性を示さない。重量で見ると、ゲルはほとんど液体であるが、それでもゲルは液体内の三次元の架橋ネットワークのおかげで固体のように振る舞う。ゲルの構造（硬度）を持たせ、粘性（粘着すること）の一因となっているのは、流体内の架橋である。このように、ゲルとは、固体が連続相となり液体が不連続相となっている、固体内の液体の分子が分散したものである。ゲルは、ペーストでもスラリーでもない。
【００２６】
「止血」とは、出血の減少または停止を引き起こすプロセスである。止血は、血液が身体または血管の外側に存在すると生じるものであり、かつ出血および失血を止めるための身体に自然に備わった反応である。止血の間、３つの段階が短時間で立て続けに起こる。血管攣縮が第一の反応であり、血管が収縮することで、失われる血液を減らそうとする。第二段階では、血小板の栓が形成され、血小板は互いにくっついて、血管壁の破損を覆う一時的なシールを形成する。第三の最終段階は、凝固または凝血と呼ばれる。凝固は、血小板の栓を、「分子糊」として作用するフィブリン糸で補強する。
【００２７】
本発明による「止血剤」は、生物学的に吸収可能な材料である。適切な生物学的に吸収可能な材料の例としては限定するものではないが、ゼラチン、コラーゲン、キチン、キトサン、アルギン酸塩、セルロース、ポリグリコール酸、ポリ酢酸、およびそれらの混合物が挙げられる。
【００２８】
「国際単位（ＩＵ）」。薬理学において、国際単位とは、生物活性または作用に基づいて、物質の量を測定する単位である。国際単位は、ＩＵ、ＵＩ、またはＩＥと略記される。国際単位は、ビタミン、ホルモン、ある種の医薬、ワクチン、血液製剤、および同様な生物活性物質を定量するのに用いられる。
【００２９】
本開示による「ペースト」とは、練り歯磨きのように、展性のあるパテ様コンシステンシーを有する。ペーストは、微粉砕固体／粉末型固体と液体とを混合した粘りのある流体混合物である。ペーストとは、十分に大きな負荷または応力がかかる（このポイントでペーストは流体のように流れ、すなわちペーストは流動性である）までは固体のように振る舞う物質である。ペーストは、典型的には、母体をなす流体中の顆粒状材料の懸濁物からなる。個々の粒子は、浜辺の砂のように互いに密集しあって、無秩序なガラス状または非晶質性構造を形成し、これがペーストにそれらの固体状の特性を与えている。この「互いに密集している」ことによって、ペーストの最も珍しい特性のいくつかがもたらされている；これにより、ペーストは脆い物質の特性を示すようになる。ペーストは、ゲル／ゼリーではない。「スラリー」は、粉末／微粉砕固体と液体（通常は水）との流体混合物である。スラリーは、いろいろな点で、粘りのある流体のように振る舞い、重力に従って流れ、粘性がそれほど高くなければポンプでくみ上げることができる。スラリーは、薄いペーストと見なしてもよく、すなわち、スラリーは一般に、ペーストよりも多くの水を含有する。
【００３０】
「パーセンテージ」。特に記載が無いかぎり、パーセンテージはｗ／ｗである。
【００３１】
「自然な、自発性」。「自然な」という用語は、内在する力または原因により生じる現象を記述するのに用いられ、この現象は、外部の作用剤または刺激と無関係であり、短期間のうちに、すなわち好ましくは約３０秒未満、より好ましくは約２０秒未満、さらにより好ましくは約１０秒未満、または約５秒未満で起こるものである。
【００３２】
詳細な説明
本開示は、適切な量の水性媒体が添加される際に、止血手当に使用するのに適した実質的に均質なペーストを形成する、乾燥組成物に関する。このペーストは、液体成分の添加の際に自然に形成され、すなわちこのようなペーストを形成するのに機械的な撹拌は不要である。
【００３３】
乾燥組成物は、以下の連続的工程：
ａ．粉末型の生体適合性ポリマー、１つ以上のポリオール類、押し出し増強因子、および水性媒体を提供する工程と、
ｂ．生体適合性ポリマー、１つ以上のポリオール類、押し出し増強因子、および水性媒体を混合してペーストを得る工程と、
ｃ．上記ペーストを乾燥させる工程、を包含する方法により調製してもよい。
【００３４】
本開示はさらに、乾燥組成物に水性媒体を添加することで調製された、止血および／または創傷治癒手当に使用するのに適したペースト、ならびに止血および／または創傷治癒を促進するためのそのペーストの使用に関する。
【００３５】
止血および創傷治癒の手当における使用のためのペーストの調製における、本明細書に記載のような乾燥組成物の使用もまた開示される。
【００３６】
本明細書に開示される乾燥組成物の利点には多数あるが、以下が挙げられる：
・ペーストを調製するのにかかる時間が短くなり、例えば出血をより早く止めることができる。
・作業工程が少なくなるので、調製中にペーストの無菌性が損なわれる危険性が低下する。
・ペースト調製が単純になるので、調製中に間違いを起こす危険性が低下する。
・毎回、最適なコンシステンシーのペーストが得られる。
・ペーストの押し出しが容易になり（例えば、シリンジから止血性ペーストを絞り出すのに必要な力が減り）、これによって止血性ペーストの塗布の正確性が向上する。
・溶液中で不安定な生物活性剤を乾燥前のペーストに添加してもよく、これによって、そのような剤が本開示の乾燥組成物中に存在する。
例えば、トロンビンを乾燥前のペーストに添加してもよく、そうすることで、時間がかかり間違いを起こしやすいトロンビン希釈工程が回避される。
【００３７】
上記の要因は全て、患者の安全性の向上をもたらす。
【００３８】
生体適合性ポリマー
本発明の開示は、粉末状の生体適合性剤（この剤を用いてペーストを作る）に関連する。次いで、ペーストを乾燥させて、止血および創傷治癒手当に使用するのに適した乾燥組成物を得る。
【００３９】
本開示の生体適合性ポリマーは、生物学的ポリマーであっても、非生物学的ポリマーであってもよい。適切な生物学的ポリマーとしては、タンパク質、例えばゼラチン、溶解性コラーゲン、アルブミン、ヘモグロビン、カゼイン、フィブリノーゲン、フィブリン、フィブロネクチン、エラスチン、ケラチン、およびラミニン、またはそれらの誘導体もしくは組み合わせが挙げられる。特に好適であるのは、ゼラチンまたは溶解性の非繊維状コラーゲン、より好ましくはゼラチンの使用である。他にも適した生物学的ポリマーとして、多糖類、例えばグリコサミノグリカン、デンプン誘導体、キシラン、セルロース誘導体、ヘミセルロース誘導体、アガロース、アルギン酸塩、およびキトサン、またはそれらの誘導体もしくは組み合わせが挙げられる。適切な非生物学的ポリマーは、２つの機構、すなわち（１）ポリマー主鎖の破壊または（２）水溶性をもたらす、側鎖の分解のいずれかにより分解可能であるように選択されるであろう。非生物学的ポリマーの例としては、合成物、例えばポリアクリラート、ポリメタクリラート、ポリアクリルアミド、ポリビニル樹脂、ポリラクチド・グリコリド、ポリカプロラクトン、およびポリオキシエチレン、またはそれらの誘導体もしくは組み合わせが挙げられる。異なる種類のポリマーの組み合わせも可能である。
【００４０】
本開示のペーストは、単一の生体適合性ポリマーを含んでもよいし、２種以上の生体適合性ポリマーの混合物を含んでもよい。
【００４１】
１つの実施形態において、生体適合性ポリマーは、生物学的に吸収可能である。適切な生物学的に吸収可能な材料の例としては、ゼラチン、コラーゲン、キチン、キトサン、アルギン酸塩、セルロース、酸化セルロース、ポリグリコール酸、ポリ酢酸、およびそれらの組み合わせが挙げられる。それらの様々な形、例えば直鎖型または架橋型、塩、エステルなどの形態も、本発明では考慮に入れていることが理解されよう。
【００４２】
本開示の好適な実施形態において、生物学的に吸収可能な材料とはゼラチンである。ゼラチンの生物学的吸収性は高いので、ゼラチンが好適である。さらに、ゼラチンは、生体適合性が高く、これは、血流に入った場合、またはヒトの組織と長期間接触した場合に、ヒトなどの動物に対して無毒であることを意味する。
【００４３】
ゼラチンは、典型的には、ブタ原料に由来するが、ウシまたは魚原料など、他の動物原料に由来するものでもよい。ゼラチンは、合成されたもの、すなわち組換え手段により作られたものであってもよい。
【００４４】
好ましい実施形態において、ポリマーは架橋されている。
【００４５】
化学的架橋法および物理的架橋法の両方を含む、当業者に既知の任意の適切な架橋法を用いてもよい。
【００４６】
本開示の一実施形態において、ポリマーは、乾燥加熱などの物理的手段によって架橋されている。乾燥加熱処理は、通常、１００℃〜２５０℃、例えば、約１１０℃〜約２００℃の温度で行われる。詳細には、この温度は、１１０〜１６０℃の範囲、例えば、１１０〜１４０℃の範囲、または１２０〜１８０℃の範囲、または１３０〜１７０℃の範囲、または１３０〜１６０℃の範囲、または１２０〜１５０℃の範囲であってもよい。架橋を行う時間は、当業者により最適化されてもよく、通常は、約１０分間〜約１２時間、例えば約１時間〜約１０時間、例えば約２時間〜約１０時間、例えば約４時間〜約８時間、例えば約５時間〜約７時間、例えば約６時間の期間である。
【００４７】
適切な化学的架橋剤の例としては、限定するものではないが、アルデヒド類、具体的にはグルタルアルデヒドおよびホルムアルデヒド、アシルアジド、カルボジイミド類、ジイソシアン酸ヘキサメチレン、ポリエーテルオキシド、１，４−ブタンジオールジグリシジルエーテル、タンニン酸、アルドース糖、例えばＤ−フルクトース、ゲニピン、および色素を利用した光酸化が挙げられる。具体的な化合物としては、限定するものではないが、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）、ジチオビス（プロパン酸ジヒドラジド）（ＤＴＰ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノ−プロピル）−カルボジイミド（ＥＤＡＣ）が挙げられる。
【００４８】
一実施形態では、粉末型の生体適合性ポリマーは、架橋されたスポンジから得られる。生体適合性ポリマーは、例えば、ゼラチンまたはコラーゲンが架橋したスポンジ、詳細にはゼラチンが架橋したスポンジ（市販のスポンゴスタン（Ｓｐｏｎｇｏｓｔａｎ）（登録商標）スポンジおよびスルギフォーム（Ｓｕｒｇｉｆｏａｍ）（登録商標）スポンジなど）から得てもよい。架橋したスポンジを、当該分野で既知の方法（例えば、高性能ミキサーでの回転床、押出、顆粒化、および処理、または粉砕（例えば、ハンマーミルまたは遠心ミルの使用による）により微粒子化して、粉末型の架橋生体適合性ポリマーを得る。
【００４９】
Ｅｔｈｉｃｏｎ製のスポンゴスタン（Ｓｐｏｎｇｏｓｔａｎ）（登録商標）／スルギフォーム（Ｓｕｒｇｉｆｏａｍ）（登録商標）は、ゼラチン系の架橋した吸収性止血スポンジである。このスポンジは、１ｇあたり＞３５ｇの血液を吸収し、４〜６週間内に、ヒトの体内に完全に吸収される。
【００５０】
架橋した粉末粒子は、一実施形態において、大きさが約１０００ミクロン未満であり、すなわち１×１ｍｍのふるいを通過できる。
【００５１】
一実施形態において、乾燥前のペーストは、約１０％〜約６０％の生体適合性ポリマー、例えば約１０％〜約５０％の生体適合性ポリマー、例えば約１０％〜約４０％の生体適合性ポリマーなど、例えば約１０％〜約３０％の生体適合性ポリマー、例えば約１２％〜約２５％の生体適合性ポリマーなど、例えば約１４％〜約２５％の生体適合性ポリマー、例えば約１５％〜約２５％の生体適合性ポリマーなど、例えば約１６％〜約２０％の生体適合性ポリマー、例えば約１７％〜約２０％の生体適合性ポリマーなど、例えば約１８％〜約２０％の生体適合性ポリマーを含む。
【００５２】
一実施形態において、乾燥前のペーストは、１０％超の生体適合性ポリマー、例えば１５％超の生体適合性ポリマーなど、例えば１６％超の生体適合性ポリマー、例えば１７％超の生体適合性ポリマーなど、例えば１８％超の生体適合性ポリマー、例えば１９％超の生体適合性ポリマーなど、例えば２０％超の生体適合性ポリマーを含む。
【００５３】
一実施形態において、乾燥前のペーストは、４０％未満の生体適合性ポリマー、例えば３０％未満の生体適合性ポリマーなど、例えば２５％未満の生体適合性ポリマー、例えば２０％未満の生体適合性ポリマーなどを含む。
【００５４】
好適な実施形態において、乾燥前のペーストは、約１０％〜約３０％の生体適合性ポリマー、より好ましくは約１５％〜約２５％の生体適合性ポリマー、例えば約２０％の生体適合性ポリマーなどを含む。
【００５５】
一実施形態において、乾燥前のペーストは、約１５％〜約２０％の生体適合性ポリマー、例えば、約１６％〜約２０％の生体適合性ポリマーなど、例えば、約１７％〜約２０％の生体適合性ポリマー、例えば約１８％〜約２０％の生体適合性ポリマーなどを含む。
【００５６】
一実施形態において、乾燥前のペーストは、約２０％〜約２５％の生体適合性ポリマー、例えば、約２１％〜約２５％の生体適合性ポリマーなど、例えば、約２２％〜約２５％の生体適合性ポリマー、例えば約２３％〜約２５％の生体適合性ポリマーなどを含む。
【００５７】
乾燥後、上記組成物は、約４０％〜８０％の生体適合性ポリマー、例えば約４５％〜８０％の生体適合性ポリマーなど、例えば約５０％〜８０％の生体適合性ポリマー、例えば約５５％〜８０％の生体適合性ポリマーなどを含む。
【００５８】
一実施形態において、上記組成物は、乾燥後、約４０％〜８０％の生体適合性ポリマー、例えば約４５％〜７５％の生体適合性ポリマーなど、例えば約５０％〜７０％の生体適合性ポリマーを含む。
【００５９】
一実施形態において、本開示の乾燥組成物は、約３０％超の生体適合性ポリマー、例えば約４０％超の生体適合性ポリマーなど、例えば約４５％超の生体適合性ポリマー、例えば約５０％超の生体適合性ポリマーなど、例えば約５５％超の生体適合性ポリマー、例えば約６０％超の生体適合性ポリマーなど、例えば約６５％超の生体適合性ポリマー、例えば約７０％超の生体適合性ポリマーなど、例えば約７５％超の生体適合性ポリマー、例えば約８０％超の生体適合性ポリマーなどを含む。
【００６０】
一実施形態において、本開示の乾燥組成物は、約８０％未満の生体適合性ポリマー、例えば約７０％未満の生体適合性ポリマーなど、例えば約６５％未満の生体適合性ポリマー、例えば約６０％未満の生体適合性ポリマーなど、例えば約５５％未満の生体適合性ポリマー、例えば約５０％未満の生体適合性ポリマーなどを含む。
【００６１】
水性媒体
本開示の水性媒体は、当業者に公知の止血用途に適したペーストを調製するのに適する任意の水性媒体、例えば水、生理食塩水、塩化カルシウム溶液、または緩衝化水性媒体であってもよい。水は、ＷＦＩ（注射用水）であってもよい。再構成されたペースト生成物の等張性が、ヒトまたは動物の被験体に用いるのに適するように、水性媒体を選択する。
【００６２】
本発明の水性媒体は、一実施形態において、生理食塩水である。
【００６３】
本開示の水性媒体は、一実施形態において、塩化カルシウム溶液である。
【００６４】
他の実施形態において、上記水性媒体は水である。
【００６５】
上記水性媒体はまた、止血性ペーストに用いるのに適した緩衝化水性媒体であってもよい。当業者に既知の任意の適切な緩衝剤には、例えば以下からなる群より選択される１つ以上の緩衝剤を用いてもよい：クエン酸ナトリウム；クエン酸、クエン酸ナトリウム；酢酸、酢酸ナトリウム；Ｋ２ＨＰＯ４、ＫＨ２ＰＯ４；Ｎａ２ＨＰＯ４、ＮａＨ２ＰＯ４；ＣＨＥＳ；ホウ砂、水酸化ナトリウム；ＴＡＰＳ；ビシン；トリス；トリシン；ＴＡＰＳＯ；ＨＥＰＥＳ；ＴＥＳ；ＭＯＰＳ；ＰＩＰＥＳ；カコジル酸塩；ＳＳＣ；ＭＥＳ、など。緩衝化水性媒体のｐＨは、ヒト用の止血性ペーストを作るのに適していなければならず、当業者が決めてもよい。
【００６６】
水性媒体の量は、適切なコンシステンシーのペーストが形成されるように、生体適合性ポリマーの量に対して調整される。製造を最適化するために、最終の再構成されたペースト組成物で望ましい乾燥の前に、ペーストに加える水は、ペーストができるだけ小さいスペースをとり、乾燥工程で水を取り除くのに必要なエネルギーが少なくなるように、少ないことが望ましい場合がある。従って、乾燥前のペーストは、最終の再構成されたペーストよりも水分含量が少なくてもよい。「喪失」水を、再構成の間に添加して、所望の水：生体適合性ポリマー比を有する流動性ペーストを得てもよい。
【００６７】
本開示のペーストは、乾燥前に、約５０％〜約９０％の水、例えば約５５％〜約８５％の水など、例えば約６０％〜約８０％の水、例えば約７０％の水などを含む。
【００６８】
好ましくは、本開示のペーストは、乾燥前に、約６０％〜約８０％、より好ましくは約７０％〜約７５％の水を含む。
【００６９】
乾燥後、乾燥組成物は、約５％未満の水、例えば約３％未満の水など、好ましくは約２％未満の水、より好ましくは約１．５％未満の水、さらにより好ましくは約１％未満の水、さらにはそれ未満の水を含む。したがって、一実施形態において、乾燥組成物は、約０．１〜約５％の水、例えば約０．１％〜約２％の水などを含む。
【００７０】
一実施形態において、乾燥組成物の残留含水量は、約０．５％以下である。そのように低い残留含水量は、例えば工業用凍結乾燥装置を用いることで可能である。
【００７１】
乾燥後の組成物の残留含水量が低いことは、乾燥組成物で微生物が増殖する危険性を低下させるので望ましい。さらに、水性条件下で不安定な生物活性剤（例えばトロンビンなど）をこの組成物が含む場合には、残留含水量が低いことが、必須である。トロンビンが本開示の組成物中に存在する場合、乾燥組成物の残留含水量は、好ましくは水約３％未満、より好ましくは水約２％未満である。
【００７２】
ポリオール類
本開示に従って、組成物を乾燥する前の組成物に１つ以上のポリオール類が添加される。１つ以上のポリオール類は、水性媒体の形態で液体（水など）を添加すると、どのような種類の機械混合も撹拌も用いることなく、自然に再構成されて止血目的に最適なコンシステンシーのペーストを形成する、乾燥組成物を得る上で役割を果たす。
【００７３】
本明細書中で定義されるようなポリオールとは、複数のヒドロキシル官能基を有する化合物である。本明細書中で定義されるようなポリオール類としては、糖類（単糖類、二糖類、および多糖類）および糖アルコールならびにそれらの誘導体が挙げられる。
【００７４】
単糖類としては、限定するものではないが、グルコース、フルクトース、ガラクトース、キシロース、およびリボースが挙げられる。
【００７５】
二糖類としては、限定するものではないが、スクロース（ショ糖）、ラクツロース、ラクトース、マルトース、トレハロース、およびセロビオースが挙げられる。
【００７６】
多糖類としては、限定するものではないが、デンプン、グリコーゲン、セルロース、およびキチンが挙げられる。
【００７７】
糖アルコールは、ポリアルコールとしても公知であり、炭水化物が水素化された形態であり、炭水化物のカルボニル基（アルデヒドまたはケトン、還元糖）が還元されて第一級または第二級ヒドロキシル基になっている（すなわちアルコール）。糖アルコール類が一般式Ｈ（ＨＣＨＯ）ｎ＋１Ｈを有するのに対し、糖類は、Ｈ（ＨＣＨＯ）ｎＨＣＯを有する。本開示の方法に用いてもよいいくつかの一般的な糖アルコール類としては、限定するものではないが、グリコール（２炭素）、グリセロール（３炭素）、エリスリトール（４炭素）、トレイトール（４炭素）、アラビトール（５炭素）、キシリトール（５炭素）、リビトール（５炭素）、マンニトール（６炭素）、ソルビトール（６炭素）、ズルシトール（６炭素）、フシトール（６炭素）、イジトール（６炭素）、イノシトール（６炭素；環状糖アルコール）、ボレミトール（７炭素）、イソマルト（１２炭素）、マルチトール（１２炭素）、ラクチトール（１２炭素）、ポリグリシトールが挙げられる。
【００７８】
一実施形態において、上記組成物は単一種のポリオールを含む。
【００７９】
本開示の一実施形態において、上記組成物は、２種以上のポリオール、例えば２種、３種、４種、５種、６種、またはそれより多種の異なるポリオール類を含む。
【００８０】
本開示の一実施形態において、上記組成物は、２種のポリオール類、例えば、マンニトールとグリセロール、またはトレハロースとグリコールとを含む。
【００８１】
本開示の一実施形態において、上記組成物は、１つ以上の糖アルコール類、例えば以下からなる群より選択される１つ以上の糖アルコール類を含む：グリコール、グリセロール、エリスリトール、トレイトール、アラビトール、キシリトール、リビトール、マンニトール、ソルビトール、ズルシトール、フシトール、イジトール、イノシトール、ボレミトール、イソマルト、マルチトール、ラクチトール、およびポリグリシトール。
【００８２】
一実施形態において、上記組成物は、１つ以上の糖アルコール類および１つ以上の糖類、例えば１種の糖アルコールおよび１種の糖などを含む。
【００８３】
一実施形態において、上記組成物は、１種の糖アルコールおよび必要に応じて１つ以上の追加のポリオール類（糖アルコールでも糖でもいずれでもよい）を含む。
【００８４】
一実施形態において、上記組成物は糖を唯一のポリオールとして含むことはない。
【００８５】
本開示の一実施形態において、上記組成物はマンニトールを含む。
【００８６】
本開示の一実施形態において、上記組成物はソルビトールを含む。
【００８７】
本開示の一実施形態において、上記組成物はグリセロールを含む。
【００８８】
本開示の一実施形態において、上記組成物はトレハロースを含む。
【００８９】
本開示の一実施形態において、上記組成物はグリコール（プロピレングリコールなど）を含む。
【００９０】
本開示の一実施形態において、上記組成物はキシリトールを含む。
【００９１】
本開示の一実施形態において、上記組成物はマルチトールを含む。
【００９２】
本開示の一実施形態において、上記組成物はソルビトールを含む。
【００９３】
一実施形態において、乾燥前の上記ペーストは、約１％〜約４０％の１つ以上のポリオール類、例えば約１％〜約３０％の１つ以上のポリオール類、例えば約１％〜約２５％の１つ以上のポリオール類など、例えば約１％〜約２０％の１つ以上のポリオール類、例えば約１％〜約１５％の１つ以上のポリオール類など、例えば約１％〜約１４％の１つ以上のポリオール類など、例えば約１％〜約１３％の１つ以上のポリオール類、例えば約１％〜約１２％の１つ以上のポリオール類など、例えば約１％〜約１１％の１つ以上のポリオール類、例えば約１％〜約１０％の１つ以上のポリオール類などを含む。
【００９４】
一実施形態において、乾燥前のペーストは、約２％〜約４０％の１つ以上のポリオール類、例えば約２％〜約３０％の１つ以上のポリオール類、例えば約２％〜約２５％の１つ以上のポリオール類など、例えば約２％〜約２０％の１つ以上のポリオール類、例えば約２％〜約１８％の１つ以上のポリオール類など、例えば約２％〜約１７％の１つ以上のポリオール類、例えば約２％〜約１６％の１つ以上のポリオール類など、例えば約２％〜約１５％の１つ以上のポリオール類、例えば約２％〜約１４％の１つ以上のポリオール類など、例えば約２％〜約１３％の１つ以上のポリオール類、例えば約２％〜約１２％の１つ以上のポリオール類など、例えば約２％〜約１１％の１つ以上のポリオール類、例えば約２％〜約１０％の１つ以上のポリオール類などを含む。
【００９５】
一実施形態において、乾燥前のペーストは、約３％〜約４０％の１つ以上のポリオール類、例えば約３％〜約３０％の１つ以上のポリオール類、例えば約３％〜約２５％の１つ以上のポリオール類など、例えば約３％〜約２０％の１つ以上のポリオール類、例えば約３％〜約１８％の１つ以上のポリオール類など、例えば約３％〜約１７％の１つ以上のポリオール類、例えば約３％〜約１６％の１つ以上のポリオール類など、例えば約３％〜約１５％の１つ以上のポリオール類、例えば約３％〜約１４％の１つ以上のポリオール類など、例えば約３％〜約１３％の１つ以上のポリオール類、例えば約３％〜約１２％の１つ以上のポリオール類など、例えば約３％〜約１１％の１つ以上のポリオール類、例えば約３％〜約１０％の１つ以上のポリオール類などを含む。
【００９６】
一実施形態において、乾燥前のペーストは、約５％超の１つ以上のポリオール類を含み、したがって、一実施形態において、上記乾燥前のペーストは、約５％〜約４０％の１つ以上のポリオール類、例えば約５％〜約３０％の１つ以上のポリオール類、例えば約５％〜約２５％の１つ以上のポリオール類など、例えば約５％〜約２０％の１つ以上のポリオール類、例えば約５％〜約１８％の１つ以上のポリオール類など、例えば約５％〜約１７％の１つ以上のポリオール類、例えば約５％〜約１６％の１つ以上のポリオール類など、例えば約５％〜約１５％の１つ以上のポリオール類、例えば約５％〜約１４％の１つ以上のポリオール類など、例えば約５％〜約１３％の１つ以上のポリオール類、例えば約５％〜約１２％の１つ以上のポリオール類など、例えば約５％〜約１１％の１つ以上のポリオール類、例えば約５％〜約１０％の１つ以上のポリオール類などを含む。
【００９７】
一実施形態において、乾燥前のペーストは、約６％〜約４０％の１つ以上のポリオール類、例えば約６％〜約３０％の１つ以上のポリオール類、例えば約６％〜約２５％の１つ以上のポリオール類など、例えば約６％〜約２０％の１つ以上のポリオール類、例えば約６％〜約１８％の１つ以上のポリオール類など、例えば約６％〜約１７％の１つ以上のポリオール類、例えば約６％〜約１６％の１つ以上のポリオール類など、例えば約６％〜約１５％の１つ以上のポリオール類、例えば約６％〜約１４％の１つ以上のポリオール類など、例えば約６％〜約１３％の１つ以上のポリオール類、例えば約６％〜約１２％の１つ以上のポリオール類など、例えば約６％〜約１１％の１つ以上のポリオール類、例えば約６％〜約１０％の１つ以上のポリオール類などを含む。
【００９８】
一実施形態において、乾燥前のペーストは、約１０％〜約４０％の１つ以上のポリオール類、例えば約１０％〜約３０％の１つ以上のポリオール類、例えば約１０％〜約２５％の１つ以上のポリオール類など、例えば約１０％〜約２０％の１つ以上のポリオール類、例えば約１０％〜約１８％の１つ以上のポリオール類など、例えば約１０％〜約１７％の１つ以上のポリオール類、例えば約１０％〜約１６％の１つ以上のポリオール類など、例えば約１０％〜約１５％の１つ以上のポリオール類を含む。
【００９９】
一実施形態において、乾燥前のペーストは、約１％超の１つ以上のポリオール類、例えば約２％超の１つ以上のポリオール類など、例えば約３％超の１つ以上のポリオール類、例えば約４％超の１つ以上のポリオール類など、例えば約５％超の１つ以上のポリオール類、例えば約６％超の１つ以上のポリオール類など、例えば約７％超の１つ以上のポリオール類、例えば約８％超の１つ以上のポリオール類など、例えば約９％超の１つ以上のポリオール類、例えば約１０％超の１つ以上のポリオール類などを含む。
【０１００】
一実施形態において、乾燥前のペーストは、約２０％未満の１つ以上のポリオール類、例えば約１８％未満の１つ以上のポリオール類など、例えば約１７％未満の１つ以上のポリオール類、例えば約１６％未満の１つ以上のポリオール類など、例えば約１５％未満の１つ以上のポリオール類、例えば約１４％未満の１つ以上のポリオール類など、例えば約１３％未満の１つ以上のポリオール類、例えば約１２％未満の１つ以上のポリオール類など、例えば約１１％未満の１つ以上のポリオール類、例えば約１０％未満の１つ以上のポリオール類などを含む。
【０１０１】
乾燥後、上記乾燥組成物は、約１０％〜約６０％の１つ以上のポリオール類、例えば約２０％〜約５０％の１つ以上のポリオール類など、例えば約２０％〜約４５％の１つ以上のポリオール類など、例えば約２０％〜約４０％、例えば約２０％〜約３５％の１つ以上のポリオール類など、例えば約２０％〜約３０％の１つ以上のポリオール類を含む。
【０１０２】
一実施形態において、上記乾燥組成物は、約２０％〜約６０％の１つ以上のポリオール類、例えば約２０％〜約５０％の１つ以上のポリオール類など、例えば約２０％〜約５０％、例えば約２０％〜約４５％の１つ以上のポリオール類など、例えば約２０％〜約４０％、例えば約２０％〜約３０％の１つ以上のポリオール類などを含む。
【０１０３】
一実施形態において、上記乾燥組成物は、約２５％〜約６０％の１つ以上のポリオール類、例えば約２５％〜約５０％の１つ以上のポリオール類など、例えば約２５％〜約４５％の１つ以上のポリオール類、例えば約２５％〜約４０％の１つ以上のポリオール類など、例えば約２５％〜約３５％の１つ以上のポリオール類、例えば約２５％〜約３０％の１つ以上のポリオール類などを含む。
【０１０４】
一実施形態において、上記乾燥組成物は、約２７％〜約６０％の１つ以上のポリオール類、例えば約２７％〜約５０％の１つ以上のポリオール類など、例えば約２７％〜約４５％の１つ以上のポリオール類、例えば約２７％〜約４０％の１つ以上のポリオール類など、例えば約２７％〜約３５％の１つ以上のポリオール類、例えば約２７％〜約３０％の１つ以上のポリオール類などを含む。
【０１０５】
一実施形態において、上記乾燥組成物は、約３０％〜約６０％の１つ以上のポリオール類、例えば約３０％〜約５０％の１つ以上のポリオール類など、例えば約３０％〜約４５％の１つ以上のポリオール類、例えば約３０％〜約４０％の１つ以上のポリオール類など、例えば約３０％〜約３５％の１つ以上のポリオール類を含む。
【０１０６】
一実施形態において、上記乾燥組成物は、生体適合性ポリマーより少ないポリオールを含む、すなわち、ポリオール：生体適合性ポリマーの比は、１：１未満、例えば約０．９：１以下など、例えば約０．８：１以下、例えば約０．７：１以下など、例えば約０．６：１以下、例えば約０．５：１以下など、例えば約０．４：１以下など、例えば約０．３：１以下、例えば約０．２：１以下など、例えば約０．１：１以下である。ポリオール：生体適合性ポリマーの比は、乾燥前のペーストにおけるものと同一である。
【０１０７】
一実施形態において、ポリオール：生体適合性ポリマーの比は、約０．１：１〜１：１；例えば約０．２：１〜１：１など、例えば約０．３：１〜１：１、例えば約０．４：１〜１：１などである。
【０１０８】
好適な実施形態において、ポリオール：生体適合性ポリマーの比は、約０．２：１〜０．８：１；例えば約０．２：１〜０．７：１など、例えば約０．２：１〜０．６：１、例えば約０．２：１〜０．５：１などである。さらにより好ましくは、ポリオール：生体適合性ポリマーの比は、約０．３：１〜０．８：１；例えば約０．３：１〜０．７：１など、例えば約０．３：１〜０．６：１、例えば約０．３：１〜０．５：１など、例えば約０．３５：１〜０．５：１、例えば約０．３５：１〜０．４５：１などである。
【０１０９】
一実施形態において、上記ポリオールは、ポリエチレングリコールではない。
【０１１０】
押し出し増強因子
特定の押し出し増強因子、例えば、適切な量のアルブミンの提供によって、例えば、それによって、例えば、シリンジからゼラチンペースト組成物を押し出すために必要な力の量が減るので、より高濃度のゼラチン使用が可能になる。より高濃度のゼラチンの使用は、やがて、このような生成物の止血性特性を改善し得る。押し出し増強因子を適切な量で提供することが必要である。この量は、止血性ペースト組成物が、例えば、アプリケーター先端部を備えるシリンジを用いて外科医によって正確に塗布され得るように、押し出し効果を得るために、すなわち、比較的大量の生体適合性ポリマー、例えば、架橋ゼラチンについてさえ流動性のペーストを可能にするために、十分高くあるべきであり、もう一方では、その量は、止血性組成物の負の機能的な特性を妨げるほど低くあるべきである。
【０１１１】
好ましい実施形態において、押し出し増強因子はアルブミン、特にヒト血清アルブミンである。
【０１１２】
乾燥前の湿ったペースト組成物では、アルブミンなどの押し出し増強因子は好ましくは、約０．１％〜約１０％、例えば、約０．２％〜約８％など、例えば、約０．３％〜約７％、好ましくは約０．５％〜約５％、より好ましくは約１％〜約４％の量で存在する。
【０１１３】
乾燥組成物では、上記押し出し増強因子、例えば、アルブミンは、好ましくは約０．３％〜約３０％、例えば、約０．５％〜約２５％など、例えば約１％〜約２０％、好ましくは約２％〜約１５％の量で存在する。
【０１１４】
一実施形態においては、押し出し増強因子は、乾燥組成物中に存在せず、しかし、再構成の間にペースト組成物中に代わりに導入される。例えば、押し出し増強因子は、ペーストの再構成に用いられる水性媒体中に存在してもよく、それによって、押し出し増強因子を含む湿ったペースト組成物が得られる。
【０１１５】
一実施形態においては、シリンジのような、ペースト型で組成物を分散させるために適切なアプリケーター装置中に存在している再構成された湿ったペースト組成物は、４０Ｎ以下、好ましくは３５Ｎ、特に好ましくは３０Ｎ未満、さらに２０Ｎ未満の平均押し出し力を有する。押し出し力は、シリンジからペースト生成物を押し出すために必要な力を測定できる当該分野で公知の適切な方法によって試験され得る。
【０１１６】
一実施形態においては、再構成された湿ったペースト組成物は、４０Ｎ以下、好ましくは３５Ｎ未満、特に好ましくは３０Ｎ未満、またはさらに２０Ｎ未満という平均押し出し力（ＷＯ２０１３／０６０７７０の実施例１に記載の試験方法を使用する）を有する。
【０１１７】
本開示による押し出し増強因子の別の分類は、リン脂質、例えば、ホスファチジルコリンおよびセリン、またはレシチンもしくはダイズ油のような複合混合物である。
【０１１８】
生物活性剤
本開示の一実施形態において、乾燥組成物は、１つ以上の生物活性剤を含む。生物活性剤がその生物活性を保持すること、すなわち生物活性剤が乾燥組成物の再構成後のペーストにおいて生物活性であることが、必須である。多くの生物活性剤が溶液中で不安定であり、特に酵素および他のタンパク質は、水が存在すると、分解してしまうか、その二次構造を失ってしまう可能性がある。
【０１１９】
一実施形態において、生物活性剤は、トロンビンのように、創傷治癒および／または止血を刺激する。
【０１２０】
通例では、例えば市販されている止血キット（ＦｌｏｓｅａｌおよびＳｕｒｇｉｆｌｏ（登録商標）など）を用いることによって、止血性ペーストが必要な時に手術部位で直接トロンビン溶液をゼラチン粉末に加えて止血性ペーストを作る。溶液中のトロンビンは非常に不安定でありすぐに自己分解してしまうので、このトロンビン溶液は、ペーストを作る直前に作らなければならない。手術部位でトロンビン溶液を作ることは、時間がかかるとともに、トロンビンの正確な希釈に関して間違いを起こす危険性と関わる。
【０１２１】
本開示の方法は、乾燥前のペーストにトロンビンを添加することを可能にし、それによって、手術部位での時間がかかりかつ間違いを起こしやすいトロンビン希釈工程および添加を必要とすることなく、適切な水性媒体（水など）を用いて再構成されたときに、所望量のトロンビンを含むようになっている、トロンビンを含む乾燥組成物が得られる。このように、乾燥組成物にトロンビンを含んでもよいということは、止血性ペーストを作成する従来の方方に勝る明らかな利点となる。
【０１２２】
本発明者は、再構成されたペーストではトロンビン活性の損失が本質的に測定されないように、トロンビンをペーストに含ませて凍結乾燥により乾燥させてもよいことを以前に示した。
【０１２３】
トロンビンは、乾燥前のペースト中に、約１００ＩＵ／ｍｌペースト〜約５００ＩＵ／ｍｌペースト、例えば約１５０ＩＵ／ｍｌペースト〜約４５０ＩＵ／ｍｌペーストなど、例えば約２００ＩＵ／ｍｌペースト〜約４００ＩＵ／ｍｌペースト、例えば約２５０ＩＵ／ｍｌペースト〜約３５０ＩＵ／ｍｌペーストなどの範囲の濃度で加えてもよい。
【０１２４】
一実施形態では、１つ以上の生物活性剤とは、例えばトロンビン、またはトロンビンとフィブリノーゲンの組み合わせ、またはトロンビンおよびフィブリノーゲンと第ＸＩＩＩ因子の組み合わせ、またはトロンビンおよびフィブリノーゲンおよび第ＸＩＩＩ因子とトラネキサム酸の組み合わせであってもよい。
【０１２５】
トロンビンとは「トリプシン様」セリンプロテアーゼタンパク質であり、このタンパク質は、ヒトでは、Ｆ２遺伝子によりコードされる。凝固カスケードにおいて、プロトロンビン（凝固第ＩＩ因子）がタンパク質分解により切断されることで、トロンビンが形成され、最終的に失血が食い止められる。トロンビンは、次いで、セリンプロテアーゼとして働くが、セリンプロテアーゼは、溶解性フィブリノーゲンを不溶性のフィブリン鎖に変換し、さらには多くの他の凝固関連反応を触媒する。血液凝固経路において、トロンビンは、第ＸＩ因子をＸＩａに、第ＶＩＩＩ因子をＶＩＩＩａに、第Ｖ因子をＶａに、およびフィブリノーゲンをフィブリンに変換するように働く。
【０１２６】
好適な生物活性剤は、トロンビンである。一実施形態において、このトロンビンは、プロトロンビンとして添加される。
【０１２７】
一実施形態において、乾燥組成物は、骨および／または腱の治癒を刺激する１つ以上の生物活性剤、例えば、マトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）、インスリン様成長因子１（ＩＧＦ−Ｉ）、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）、およびトランスフォーミング成長因子β（ＴＧＦ−β）からなる群より選択される１つ以上の成長因子を含む。
【０１２８】
一実施形態において、乾燥組成物は、１つ以上の骨形成タンパク質（ＢＭＰ）を含む。骨形成タンパク質（ＢＭＰ）は、ＴＧＦ−βスーパーファミリーのうちのサブグループである。骨形成タンパク質（ＢＭＰ）は、サイトカインとしておよびメタボロゲンとしても公知の成長因子のグループである。ＢＭＰは、最初、それらが持つ骨形成および軟骨形成の誘導能力によって発見されたが、今では、形態形成シグナルの中心的グループを構成し、体中の組織構築を指揮すると見なされている。
【０１２９】
一実施形態において、乾燥組成物は、１つ以上のマトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）を含む。ＭＭＰは、亜鉛依存性エンドペプチダーゼである。ＭＭＰは、創傷後の治癒過程の間、細胞外基質（ＥＣＭ）の分解および再造形で非常に重要な役割を担っている。ＭＭＰ−１、ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−８、ＭＭＰ−１３、およびＭＭＰ−１４を含むある種のＭＭＰは、コラゲナーゼ活性を有しており、すなわち他の多くの酵素と異なり、それらはＩ型コラーゲン原繊維を分解することができる。
【０１３０】
これらの成長因子は全て、治癒過程の間、異なる役割を有する。ＩＧＦ−１は、炎症の第一段階の間、コラーゲンおよびプロテオグリカン産生を増大させ、ＰＤＧＦも、創傷後の初期段階の間存在して、ＤＮＡの合成および細胞増殖とともに他の成長因子の合成を促進する。ＴＧＦ−βの３種のアイソフォーム（ＴＧＦ−β１、ＴＧＦ−β２、ＴＧＦ−β３）は、創傷治癒および瘢痕形成に役割を果たすことが公知である。ＶＥＧＦは、血管新生を促進すること、ならびに内皮細胞の増殖および移動を誘発することが周知である。
【０１３１】
一実施形態において、乾燥組成物は、細胞外基質（ＥＣＭ）のフレークまたは粒子を含む。ＥＣＭは、動物組織の細胞外部分であり、通常、動物細胞を構造的に支持しており、さらに様々な他の重要な機能を行う。ＥＣＭは、組織の機能的再生を促進するので、治癒において非常に有益な効果を有することがわかっている。
【０１３２】
本開示のペーストと組み合わせて用いられ得る生物学的作用剤の種類は、莫大である。一般に、本明細書に開示の組成物を介して投与され得る生物学的作用剤としては、限定するものではないが、抗感染薬（抗生物質および抗ウイルス剤など）；鎮痛薬および鎮痛合剤の組み合わせ；駆虫剤；抗関節炎薬；抗痙攣薬；抗鬱薬；抗ヒスタミン薬；抗炎症剤；抗偏頭痛製剤；抗悪性腫瘍薬；抗パーキンソン症候群薬；抗精神病薬；解熱薬、鎮痙薬；抗コリン薬；交感神経模倣薬；キサンチン誘導体；ピンドロールなどのカルシウムチャンネル遮断薬およびβ遮断薬を含む心血管系製剤および抗不整脈薬；降圧薬；利尿薬；血管拡張薬（一般的な冠血管用、末梢用、および脳血管用を含む）；中枢神経系刺激薬；ホルモン類、例えば、エストラジオールおよび他のステロイド（コルチコステロイドを含む）；免疫抑制剤；筋肉弛緩薬；副交感神経遮断薬；覚醒剤；天然由来または遺伝子改変のタンパク質、多糖類、糖タンパク質、またはリポタンパク質；オリゴヌクレオチド、抗体、抗原、コリン作動薬、化学療法薬、放射性作用剤、骨誘導剤、細胞分裂阻害薬  ヘパリン中和剤、凝血促進剤および止血剤、例えば、プロトロンビン、トロンビン、フィブリノーゲン、フィブリン、フィブロネクチン、ヘパリナーゼ、第Ｘ／Ｘａ因子、第ＶＩＩ／ＶＩＩａ因子、第ＶＩＩＩ／ＶＩＩＩａ因子、第ＩＸ／ＩＸａ因子、第ＸＩ／ＸＩａ因子、第ＸＩＩ／ＸＩＩａ因子、第ＸＩＩＩ／ＸＩＩＩａ因子、組織因子、バトロキソビン、アンクロッド、エカリン、フォン・ビルブランド因子、コラーゲン、エラスチン、アルブミン、ゼラチン、血小板表面糖タンパク質、バソプレッシン、バソプレッシン類似体、エピネフリン、セレクチン、凝血促進剤毒液、プラスミノーゲン活性化因子阻害薬、血小板活性化剤、および止血活性を有する合成ペプチドが挙げられる。
【０１３３】
追加の化合物
本開示の乾燥組成物は、以下：ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）、２−メチル−２，４−ペンタンジオール（ＭＰＤ）のうち１つ以上、および／または以下の表に挙げられる化合物のうち１つ以上を、さらに含んでもよい。
【０１３４】
【表１】
0006489485.tif 000002
【０１３５】
一実施形態において、本開示の乾燥組成物は、１つ以上の抗微生物剤、例えば１つ以上の抗菌剤などを含む。
【０１３６】
一実施形態において、本開示の乾燥組成物は、塩化ベンザルコニウム（ＢＡＣ）を含む。
【０１３７】
一実施形態において、本開示の乾燥組成物は、抗微生物剤を含まない。
【０１３８】
ペーストの作成
本開示の方法に従って、生体適合性ポリマー、押し出し増強因子および１つ以上のポリオール類を、適切な水性媒体と混合してペーストを得る。混合は、当業者に公知の任意の適切な方法で、例えば、内容物を手作業で混合することにより、または電動混合装置（ハンドミキサー、キッチンミキサー、または業務用ミキサーなど）を用いることより、行ってもよい。
【０１３９】
ペーストの混合は、一般に、室温（２０〜２５℃）で行ってもよい。しかしながら、トロンビンまたは他の酵素がペーストに含まれている場合は、周知のとおりトロンビンは溶液中で自己分解しやすいため、トロンビンのタンパク質分解活性を回避または低下させるために、冷却温度で、および／または短時間のうちに、ペーストの混合を行うことが推奨される。したがって、トロンビンまたは他のタンパク質分解性酵素をペーストに含めようとする場合、ペーストの混合は、室温より低い温度、例えば約２℃〜約２０℃など、例えば約２℃〜約１５℃、好ましくは約４℃で行ってもよい。
【０１４０】
ペースト中でトロンビンの生物活性を保持する別のまたは追加の方法は、トロンビンが湿潤状態にある時間、すなわち混合時間を、最小限に抑えることである。したがってトロンビンまたは他の酵素をペーストに含めようとする場合、ペーストの混合は、通常、約５分間〜約１０時間、例えば約５分間〜約５時間など、例えば約５分間〜約２時間、好ましくは約５分間〜約１時間のうちに行われる。
【０１４１】
本発明者は、ペーストの混合を周辺温度で行っても、トロンビン活性の低下は見出されなかったと言う理由で、トロンビン活性の損失を回避するために低温でペーストの混合を行うことが必須ではないことを以前に見いだした。
【０１４２】
容器
ペーストの調製および乾燥中のペーストの保持には、当業者に公知の任意の適切な容器（バイアル、ジャー、チューブ、トレイ、カートリッジ、またはシリンジなど）を用いてもよい。
【０１４３】
一実施形態において、上記ペーストは、１つの容器で調製され、乾燥のため別の容器に移され、この場合のこのような他の容器は、バイアル、ジャー、チューブ、トレイ、カートリッジ、およびシリンジから選択してもよい。
【０１４４】
本開示による「ジャー」とは、口の広く開いた、剛性でほぼ円柱状の容器である。ジャーは、その口に設けられた、開閉可能な封鎖ユニット／蓋を備えていてもよい。
【０１４５】
容器は、任意の適切な材料、例えばガラス、セラミック、プラスチック、または金属（ステンレス鋼など）でできていてもよい。
【０１４６】
適切なプラスチック材料の例としては限定するものではないが、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリスチレン、ポリ塩化ビニル、およびポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）が挙げられる。
【０１４７】
一実施形態において、ペーストは、流動性止血組成物を分配するのに適したシリンジまたは他の既知のアプリケーターに充填され、その中で乾燥される。
【０１４８】
一実施形態において、ペーストは、シリンジなどの、組成物をペースト型で分注するために適切なアプリケーター内で乾燥される。従って、一実施形態において、本開示は、シリンジなどのアプリケーター（その中に乾燥組成物を含んでいる）に関する。
【０１４９】
本開示の乾燥組成物は、用いられる容器の形状に応じて、様々な形、形態、および大きさで調製されてもよい。乾燥組成物は、例えば、プラグ状、ディスク状、ロッド状、チューブ状、円錐シリンダー状、シート状、球状、半球状、錠剤状、ペレット状、顆粒状、またはさらには微粒子もしくは粉末（微粉砕後）であってもよい。
【０１５０】
止血性シート
一実施形態において、上記乾燥組成物は、シート型、すなわち、実質的に平坦な組成物である。
【０１５１】
シート型の乾燥組成物は、上記ペーストをある表面に薄くかつ均一に塗り広げ、続いてそのペーストを乾燥させることにより、実質的に平坦な乾燥シート組成物として得てもよい。シート型の乾燥組成物は、液体と接触すると、自然に再構成されてペーストを形成する。したがって、シート型の乾燥組成物は、伝統的に使用されてきた手術用スポンジの比較的広範囲を覆うことができるという利点と、ペーストを湿潤する時に、不均一な表面に容易に同化するというペーストの利点の両方を有する。
【０１５２】
シート型の乾燥組成物は、柔らかくかつ柔軟である。
【０１５３】
一実施形態において、本開示は、止血および／または創傷治癒に使用するためのシート型の乾燥組成物に関する。
【０１５４】
一実施形態において、シートは、使用前、すなわち創傷に貼付けられる前に、予め濡らされることはない。
【０１５５】
乾燥シート組成物の高さは、一実施形態において、約０．５ｍｍ〜約１０ｍｍ、好ましくは約１ｍｍ〜５ｍｍ、より好ましくは約１ｍｍ〜３ｍｍ、例えば約２ｍｍなどである。
【０１５６】
乾燥シート組成物の寸法（幅および奥行き）は、シートの用途に依存し、当業者によって選択することができる。乾燥シート材料は、例えば、長方形であっても、正方形であっても、または円形であってもよい。例えば、乾燥シート組成物は、例えば、約５ｃｍ×１０ｃｍ、２ｃｍ×６ｃｍ、６ｃｍ×８ｃｍ、または８ｃｍ×１２ｃｍの長方形であってもよい。
【０１５７】
一実施形態において、上記乾燥シート組成物は、使用前に所望の形に切断される。
【０１５８】
ペーストの乾燥
本開示に従って、上記ペーストを乾燥させて、乾燥組成物を得る。このペーストは、当業者に公知の任意の適切な方法で乾燥させてもよい。適切な乾燥方法の例としては、凍結乾燥および噴霧乾燥が挙げられる。
【０１５９】
一実施形態において、ペーストは、乾燥工程前に凍結される。
【０１６０】
好適な実施形態において、ペーストは、凍結乾燥される。当業者に公知の任意の適切な凍結乾燥技術および装置を用いてもよい。
【０１６１】
凍結乾燥（凍結乾燥および寒冷乾燥（ｃｒｙｏｄｅｓｉｃｃａｔｉｏｎ）としても公知である）は、傷みやすい材料を保存するのに、または材料の輸送をより簡単にするために用いられる典型的な脱水プロセスである。凍結乾燥は、材料を凍結し、次いで周囲の圧を下げて、材料中の凍結水を固相から気相へ直接昇華させることにより行う。
【０１６２】
凍結乾燥機は、基本的に３種に分類される：マニホールド凍結乾燥機、ロータリー凍結乾燥機、およびトレイ型凍結乾燥機である。２つの構成要素が、全種類の凍結乾燥機に共通する：乾燥させようとする物質が入った容器内の気体常圧を下げるための真空ポンプ、および−４０〜−８０℃に冷却した表面に水分を凝結させることで除去する冷却装置である。マニホールド、ロータリー、およびトレイ型の凍結乾燥機は、乾燥した物質が冷却装置と接する方法において異なっている。マニホールド凍結乾燥機では、短い通常は円形をした管を用いて、乾燥生成物の入った複数の容器を冷却装置と連結する。ロータリー凍結乾燥機およびトレイ型凍結乾燥機は、乾燥物質用に単独の大きな貯留容器を有する。
【０１６３】
ロータリー凍結乾燥機は、通常、ペレット、キューブおよび他の注ぎ込み可能な物質を乾燥させるのに用いられる。ロータリー乾燥機は、円筒形貯留容器を有し、この容器を乾燥中回転させることで、物質をくまなくより均一に乾燥させる。トレイ型凍結乾燥機は、通常、棚のある長方形の貯留容器を有し、その棚の上に、生成物（薬学的溶液および組織抽出物など）をトレイ、バイアル、および他の容器などに入れて、乗せてもよい。
【０１６４】
マニホールド凍結乾燥機は、通常、液状物質を小さな容器中で乾燥させる場合、および生成物を短時間の内に使用したい場合に、研究室環境で用いられる。マニホールド凍結乾燥機は、生成物を含水量５％未満に乾燥させる。加熱しない場合、一次乾燥（非結合水の除去）のみが達成され得る。二次乾燥のためにはヒーターを付ける必要があり、これにより、結合水の除去およびさらなる含水量の低下がもたらされる。
【０１６５】
トレイ型凍結乾燥機は、典型的には、マニホールド乾燥機よりも大きく、かつ洗練されている。トレイ型凍結乾燥機は、様々な材料の乾燥に用いられる。トレイ型凍結乾燥機は、長期貯蔵用に最も乾燥した生成物を生成するのに用いられる。トレイ型凍結乾燥機は、生成物を適所で凍結させ、一次（非結合水の除去）および二次（結合水の除去）の凍結乾燥の両方を行い、こうして、可能なかぎり最も乾燥した最終生成物を生成する。トレイ型凍結乾燥機は、生成物をバルクで、またはバイアルもしくは他の容器中で乾燥させることができる。バイアル中で乾燥させる場合、凍結乾燥機には密栓機構が提供され、この機構により栓を定位置に押し込んで、バイアルを密閉してから、バイアルを大気に曝すことが可能になる。これは、ワクチンなどの長期貯蔵用に用いられる。
【０１６６】
凍結乾燥可能な生成物の範囲を広げるため、生成物の品質を改善するため、およびより少ない労力でより速く生成物を得るため、改良された凍結乾燥技術が開発中である。
【０１６７】
１９３０年代以降、業務用凍結乾燥は、１種類の装置（トレイ型凍結乾燥機）に依存してきた。２００５年に、それまでよりも速くかつ労力の少ない集中凍結乾燥法が、バルク材料用に開発された。この凍結乾燥プロセスによって、単独容器から自由流動する粉末を作ることができることが証明された。「撹拌式凍結乾燥（Ａｃｔｉｖｅ  Ｆｒｅｅｚｅ  Ｄｒｙｉｎｇ）」ＡＦＤ技術として公知である、この新規プロセスは、連続動作を用いることで、物質移動を改善し、その結果切断処理時間を改善しながら、乾燥トレイへおよび乾燥トレイから下流のサイズ減少装置との移動の必要性も省かれた。
【０１６８】
凍結乾燥プロセス全体では４つの段階（前処理、凍結、一次乾燥、および二次乾燥）がある。
【０１６９】
前処理は、凍結前に生成物を処理する任意の方法を包含する。前処理としては、生成物の濃縮、配合補正（すなわち、成分を添加して安定性を向上させるおよび／または処理しやすくする）、蒸気圧の高い溶媒の減少、または表面積の増大を挙げてもよい。多くの場合、生成物を前処理する決定は、凍結乾燥の理論的知見およびその必要条件に基づくか、またはサイクル時間もしくは生成物の品質に対する考慮から要求される。前処理の方法としては、以下が挙げられる：凍結濃縮、溶液相濃縮、生成物外観を保持するための配合、反応性生成物を安定化するための配合、表面積を増大させるための配合、および蒸気圧の高い溶媒の減少。
【０１７０】
研究室では、凍結は、材料を凍結乾燥フラスコに入れ、そのフラスコを浴（シェルフリーザーと呼ばれる）中で回転させ、その浴を機械的冷却、ドライアイスとメタノール、または液体窒素により冷却することで、行われることが多い。大規模では、凍結は、通常、凍結乾燥機械を用いて行われる。この工程では、材料をその三重点、すなわち材料の固相と液相が同時に存在し得る最低温度より低く冷却することが重要である。これにより、その後の工程で、溶解ではなく昇華が起こることが確実になる。結晶が大きいほど、凍結乾燥させやすい。より大きな結晶を作るためには、生成物をゆっくりと凍結させるべきであるが、または温度を周期的に上げ下げすることも可能である。この周期的プロセスはアニーリングと呼ばれる。他の場合では、材料を素早くその共融点より低温に下げることを目的として、凍結を急速に行ったほうが好ましく、そうすることで、氷晶の形成が回避される。通常は、凍結温度は、−４０℃〜−８０℃である。凍結段階は、凍結乾燥プロセス全体において、最も重要である。なぜなら、凍結がまずく行われると生成物が損なわれる恐れがあるからである。
【０１７１】
非晶質性材料は、共融点を持たないが、臨界点を有し、生成物をこの温度より低く維持して、一次乾燥および二次乾燥の間、生成物が再溶解または崩壊するのを防がなければならない。
【０１７２】
一次および二次乾燥段階の間、圧は下げられており（数ミリバール以下の領域まで）、水の昇華のため、材料には十分な熱が供給される。必要な熱量は、昇華する分子の昇華潜熱を用いて計算することができる。この最初の乾燥段階では、材料中の水の約９５％が昇華される。この段階はゆっくり行ってもよい（工業的には数日かかってもよい）。なぜなら、加熱しすぎると、材料の構造を変化させる可能性がでてくるからである。
【０１７３】
この段階では、圧は、部分的吸引を行うことで制御される。吸引は、昇華を速めるので、計画的乾燥プロセスとして有用になる。そのうえさらに、低温の冷却装置チャンバおよび／または冷却装置プレートにより、水蒸気が再固化するための表面が提供される。この冷却装置は、材料の凍結を維持するのには何の関係なく；それよりも、水蒸気（ポンプ性能を落とす可能性がある）が真空ポンプに達するのを防ぐものである。冷却装置温度は、通常−５０℃未満である。
【０１７４】
重要なことを強調しておくと、この領域の圧において、熱は主に伝導または放射により与えられる；空気密度が低いおかげで、対流効果は無視できる。
【０１７５】
水の蒸気圧は、水蒸気が飽和しているときの圧力である。それより圧が高いと、水は凝縮する。水蒸気圧は、水で飽和している任意の気体混合物における水蒸気の部分圧である。水蒸気圧は、凍結乾燥が起こるのに必要な温度および圧を決定する。
【０１７６】
水の蒸気圧（ｍＴｏｒｒ＝ミリトル；ｍＢ＝ミリバール）
【０１７７】
【表２】
0006489485.tif 000003
【０１７８】
二次乾燥段階は、未凍結水分子を除去することを目的とする。なぜなら、氷は一次乾燥段階で除去されているからである。凍結乾燥プロセスのこの部分は、材料の吸着等温式に支配される。この段階では、温度は一次乾燥段階よりも高温に上げられ、０℃より高い温度さえ可能であり、上げることで、水分子と凍結材料の間に形成されていた任意の物理化学相互作用が破壊される。脱着を促進するため、通常、この段階でも圧は下げられている（典型的には、マイクロバールの領域）。しかしながら、圧力を上げることが有益な生成物も同様に存在する。
【０１７９】
凍結乾燥プロセスが完了したら、不活性ガス（窒素など）で真空を解除し、それから材料を密閉する。
【０１８０】
操作の終了時点において凍結乾燥した生成物に含まれる最終残留含水量は、一般に、非常に低く、例えば２％程度またはそれ未満である。
【０１８１】
凍結乾燥プロセスは、ペーストを固い「ケーキ状」組成物に変化させ、この固い「ケーキ状」組成物が、適切な量の水性媒体（水など）の添加で、すぐに使えるペーストを自然に形成し、すなわち、このペーストを形成させるために機械的混合／再構成は必要ない。
【０１８２】
一実施形態において、ペーストを凍結乾燥させることで得られる固いケーキ状構造は、水性媒体の添加前に微粉砕される。
ある別の実施形態において、本開示の乾燥組成物は、噴霧乾燥によって得られる。当業者に公知の任意の噴霧乾燥技術および装置が適用されてもよい。
【０１８３】
噴霧乾燥とは、液体またはスラリーを熱ガスで急速に乾燥させることにより乾燥粉末を生成させる方法である。通常は、空気が熱せられた乾燥媒体となる；しかしながら、液体が可燃性溶媒（エタノールなど）であるか、または生成物が酸素感受性であるならば、窒素が用いられる。
【０１８４】
噴霧乾燥機は全て、ある種のアトマイザーまたはスプレーノズルを用いて液体またはスラリーを散布して、制御された大きさの滴の霧にする。これらのうち最も一般的であるのは、ロータリーディスクおよび一流体高圧渦巻型ノズルである。あるいは、用途次第で、二流体または超音波ノズルを用いる。プロセスの必要に応じて、１０〜５００μｍの大きさの滴を、適切に選択して得ることができる。最も一般的な用途は、直径範囲が１００〜２００μｍである。得られる乾燥粉末は、自由流動するものであることが多い。
【０１８５】
噴霧乾燥機は、他の乾燥方法と比べて、生成物を非常に速く乾燥させることができる。噴霧乾燥機はまた、溶液またはスラリーを１工程で乾燥粉末に変え、これは、利益の最大化およびプロセスの簡素化にとって有利となり得る。
【０１８６】
外側包装材
一実施形態において、乾燥組成物は、例えばシリンジまたは他の収容ユニットに収容された状態で、さらに外側包装材に収容され、それにより、その乾燥製品は使用時まで無菌に保たれる。そうすると、使用者は、外側包装を取り去って乾燥組成物を無菌の場所へ移すことが可能になる。そこで、適切な量の水性媒体を加えてもよく、添加されると、すぐに使えるペーストが、機械的な振盪、撹拌、または混合をまったく必要とせずに、数秒以内に自然に形成される。
【０１８７】
外側包装材は、通常、柔軟性のある半硬質または硬質材料製であり、典型的には、プラスチック、アルミニウムホイル、および／または積層プラスチックなどの材料からなり、ここでプラスチックは、ＰＥＴ、ＰＥＴＧ、ＰＥ、ＬＬＤＰＥ、ＣＰＰ、ＰＡ、ＰＥＴＰ、ＭＥＴＰＥＴ、タイベック（Ｔｙｖｅｋ）からなる群より選択されてもよく、必要に応じて接着剤（ポリウレタンなど）により接着されているか、または同時押出成形される。
【０１８８】
一実施形態において、外側包装材は、アルミニウムホイル製外側包装材である。
【０１８９】
外側包装材は、好ましくは、完全な防湿バリアを形成する。
【０１９０】
外側包装材は、好ましくは、放射線などによる滅菌処理に耐えることができる。
【０１９１】
滅菌
本開示の乾燥組成物は、好ましくは、無菌である。当該分野で公知の任意の適切な滅菌技術を利用してもよい。滅菌は、好ましくは、包装工程後、すなわち乾燥組成物が外側包装材に収容されたときに行われる。したがって、好適な実施形態において、滅菌は、最終滅菌である。
【０１９２】
滅菌とは、感染性因子（真菌、細菌、ウイルス、プリオン、および胞子型のものなど）を効率的に殺傷または除去する任意のプロセスを示す。乾燥組成物の滅菌は、例えば、熱、化学物質、および放射線の使用を通じて達成され得る。加熱滅菌としては、オートクレーブ加熱（高温の蒸気を用いる）および乾燥加熱が挙げられる；放射線滅菌としては、Ｘ線、ガンマ線およびβ線、ＵＶ光、ならびに素粒子が挙げられる；化学滅菌としては、エチレンオキシドガス、オゾン、塩素漂白剤、グルタルアルデヒド、ホルムアルデヒド、オルトフタルアルデヒド、過酸化水素、および過酢酸の使用が挙げられる。
【０１９３】
一実施形態において、乾燥組成物は、放射線、例えばイオン化放射線により滅菌され、それにより組成物に滅菌がもたらされる。そのような放射線としては、電子線（β放射線）またはガンマ放射線が挙げられる。放射線のレベル、および組成物が照射される時間を始めとする滅菌条件とは、滅菌組成物が得られるレベルおよび条件である。滅菌条件は、現在入手可能な、固められていない止血性粉末の調製に現在採用されているものと同様である。いったん、本開示の恩恵を受けたなら、当業者は、滅菌組成物を提供するのに必要な照射レベルを容易に決定できるであろう。
【０１９４】
トロンビンおよび／または他の繊細な生物活性剤が乾燥生成物に存在する場合、滅菌は、通常、最終滅菌として、約２５ｋＧｙ以下のβ線またはガンマ線照射を用いて行われる。
【０１９５】
一実施形態において、滅菌は、エチレンオキシドを用いて行われる。
【０１９６】
乾燥加熱による滅菌は、典型的には、乾燥組成物を、１００℃〜２５０℃、例えば約１１０℃〜約２００℃などの温度に加熱することで行ってもよい。詳細には、この温度は、１１０〜１６０℃の範囲、例えば１１０〜１４０℃の範囲、または１２０〜１８０℃の範囲、または１３０〜１７０℃の範囲、または１３０〜１６０℃の範囲、または１２０〜１５０℃の範囲であってもよい。
【０１９７】
一実施形態において、乾燥組成物は、包装後に滅菌されない。乾燥組成物が無菌製造技術により製造される場合、外側包装材に入れられる時点で生成物は既に滅菌状態にあり、それ以上滅菌する必要がない。したがって、一実施形態において、本開示は、無菌技術により製造された組成物に関する。
【０１９８】
乾燥組成物の再構成
本開示の乾燥組成物は、適切な量の水性媒体の添加によって再構成され得る。ペーストを再構成するために用いられる水性媒体は、例えば、水、生理食塩水、ＣａＣｌ２溶液または緩衝化水溶液から選択されてもよい。
【０１９９】
一実施形態において、乾燥組成物を再構成するために用いられる水性媒体は水である。一実施形態において、この水性媒体の張度は、その再構成されたペーストの張度が、外科的手当におけるヒト被験体での使用に適合するように、選択される。
【０２００】
一実施形態において、乾燥組成物を再構成するために用いられる水性媒体は生理食塩水である。
【０２０１】
一実施形態において、乾燥組成物を再構成するために用いられる水性媒体は、押し出し増強因子、例えば、アルブミンを含む。この場合、この乾燥組成物は、好ましくは、押し出し増強因子を含まない。
【０２０２】
水性媒体の添加の際、すぐ使用できる流動性のペーストが自然に、すなわち、２〜３秒内に形成される。重要なことだが、ペーストを形成するのに混合は必要がない。
【０２０３】
一実施形態においては、再構成されたペーストは、乾燥工程の間にペーストから除去されるよりも多くの水を加えるせいで、乾燥前のペーストより含んでいる生体適合性ポリマーが低濃度である。
【０２０４】
一実施形態においては、本開示は、乾燥組成物を再構成するための方法であって、以下の工程：
ａ．必要に応じて押し出し増強因子を含んでいる、本明細書に記載の乾燥組成物を提供する工程と、
ｂ．水性媒体を乾燥組成物に添加する工程と、
を包含する、方法に関する。
【０２０５】
上記水性媒体は、アルブミンなどの押し出し増強因子を必要に応じて含んでもよい。
【０２０６】
上記押し出し増強因子は、乾燥組成物中に存在してもよいし、および／または再構成の液体、すなわち水性媒体中に存在してもよい。
【０２０７】
いくつかの実施形態において、再構成されたペーストは、同様の濃度のポリマー、例えば、ゼラチンを、従来用いられる流動性のペースト組成物として含むが、押し出し増強因子の存在のおかげで、本開示の再構成されたペーストは、アプリケーター、例えば、シリンジからの押し出しを比較的容易にする。
【０２０８】
一実施形態においては、上記再構成されたペーストは、従来用いられる流動性ペーストの配合よりも大量の生体適合性ポリマーを含む。増大した量のポリマーは、止血性効果の改善をもたらし得るが、一方ではやはり、例えば、シリンジからのペーストを容易に押し出すことを可能にし得る。
【０２０９】
一実施形態においては、本開示の再構成されたペーストは、約１０％〜約２５％の生体適合性ポリマー、例えば、約１０％〜約２０％の生体適合性ポリマー、例えば、約１２％〜約１８％の生体適合性ポリマーなど、例えば、約１４％〜約１６％の生体適合性ポリマー、例えば、約１５％の生体適合性ポリマーなどを含む。
【０２１０】
一実施形態においては、本開示の再構成されたペーストは、約１５％未満の生体適合性ポリマー、例えば、約１０％〜約１５％の生体適合性ポリマー、例えば、約１１％〜約１５％の生体適合性ポリマーなど、例えば約１２％〜約１５％の生体適合性ポリマー、例えば、約１３％〜約１５％の生体適合性ポリマーなど、例えば約１４％〜約１５％の生体適合性ポリマーを含む。
【０２１１】
一実施形態においては、本開示の再構成されたペーストは、約１５％超の生体適合性ポリマー、例えば、約１５％〜約２５％の生体適合性ポリマー、例えば、約１５％〜約２０％の生体適合性ポリマー、例えば、約１６％〜約２０％の生体適合性ポリマーなど、例えば、約１７％〜約２０％の生体適合性ポリマー、例えば、約１８％〜約２０％の生体適合性ポリマーなどを含む。
【０２１２】
医療用途
本開示はさらに、乾燥組成物またはその乾燥組成物から得られるペーストの、止血および／または創傷治癒を促進するための使用に関する。
【０２１３】
本開示のペーストは、例えば、一連の手術手順の中で出血制御が望まれる場面に用いてもよい。ペーストは、不規則な表面に同化して、素早く出血を止め、したがって、止血スポンジでは効果的でない、粗いか、または不均一な表面で迅速な止血を提供するのに有用である。
【０２１４】
止血性ペーストは、医療施術者、すなわち医師または看護師が必要とする時点で、手術部位において直接調製される。つまり、ペーストは、極度に緊張の高まった状況下で調製されることが多く、したがって、ペーストの調製プロセスが簡潔であり、できるだけ速く確実に止血でき、かつペーストの調製に間違いがまったく起こらないことが必須である。ペーストのコンシステンシーが止血性ペーストとして使用するのに適していること、ペーストが、効果的かつ迅速な止血を生じること、およびペーストがアプリケーター装置から容易に押し出され、その結果ペーストを塗布する外科医が、過剰な力を用いることなく、出血部位に正確にペーストを与えることができることも重要である。
【０２１５】
本開示のペーストは、現在利用可能なペースト（ＦｌｏｓｅａｌおよびＳｕｒｇｉｆｌｏなど）よりも優れており、それは、本開示のペーストが、ある量の水性媒体を乾燥組成物に加えることによって、それだけで、すぐに使える止血性ペーストが自然に、すなわち約３０秒たたないうちに、好ましくは約２０秒たたないうちに、より好ましくは約１０秒たたないうちに、さらにより好ましくは約５秒たたないうちに形成され得るという事実による。
【０２１６】
乾燥組成物に加えるべき液体の量は、当業者により調節されてもよい。正しい量の液体が添加される場合、そのようにして形成されたペーストは、常に、最適のコンシステンシーを有する。従来のペーストにはこれは常には当てはまらず、ペーストのコンシステンシーは、混合で加えられた力およびかかった時間に依存し得る。機械的混合が必要ではないことは、ペーストの調製にかかる時間が短くなり、ひいては患者の安全性が高まることも意味し、これらはどちらも、止血性ペーストをより速く患者に使用できること、および簡潔な調製方法が止血性ペーストの調製中に起こる間違いの確率を下げることという事実に起因する。
【０２１７】
トロンビンが乾燥組成物に含まれる場合、本開示は、止血性ペースト作製の現在の方法に関わる、時間がかかり間違いを起こしやすいトロンビンの希釈および添加工程を回避するという点で、さらに、従来のペーストに勝る利点を有する。
【０２１８】
一実施形態において、本開示は、出血を止める／止血を促進するための方法であって、その必要がある個体において、出血部位に、本明細書に開示の乾燥組成物または再構成されたペーストを塗布することによる方法に関する。
【０２１９】
本開示のペーストは、任意の種類の手術に用いてもよく、この手術としては、一般手術、心胸郭手術、血管手術、形成手術、小児手術、結腸直腸手術、移植手術、外科的腫瘍学、外傷手術、内分泌手術、乳房手術、皮膚手術、耳鼻咽喉手術、婦人科手術、口腔および顎顔面手術、歯科手術、整形手術、脳神経手術、眼科手術、足病学的手術、泌尿器手術が挙げられる。
【０２２０】
一実施形態において、本開示は、創傷治癒を促進する方法であって、その必要がある個体において、創傷に対して、本開示の乾燥組成物またはペーストを塗布することによる、方法に関する。
【０２２１】
「創傷」とは広義には、様々な起こり方（例えば、長期間ベッドに寝ていることによる床ずれおよび外傷に由来する創傷）で生じ、かつ様々な特性を有する、皮膚および／またはその下の（皮下）組織の損傷を示す。創傷は、その深さに応じて、４つのグレードのいずれかに分類され得る：ｉ）グレードＩ：上皮に限られた創傷；ｉｉ）グレードＩＩ：真皮に到達している創傷；ｉｉｉ）グレードＩＩＩ：皮下組織に到達している創傷；およびｉｖ）グレードＩＶ（すなわち全厚創傷）：骨が露出されている創傷（例えば、大転子または仙骨などの骨圧点）。本開示は、上記創傷の任意の種類の処置であって、本発明のペーストの乾燥組成物または再構成されたペーストを用いる処置に関する。
【０２２２】
創傷の処置は、原理上、創傷の治癒をもたらすか、または創傷の治癒の加速をもたらし得る。治癒の加速は、例えば、創傷治癒促進物質の投与の結果であってもよい。あるいは、創傷治癒は、細菌もしくはウイルスの感染を防ぐことによって、またはさもなければ創傷処置プロセスの長期化をもたらす可能性があるような感染の危険性を低下させることによって、促進され得る。
【０２２３】
一実施形態において、本開示は、骨および／または腱および／または組織の治癒を促進するための方法であって、その必要がある個体において、損傷した骨、腱、または組織に、本開示の乾燥組成物またはペーストを塗布することによる方法に関する。
【０２２４】
本明細書中に言及される「個体」とは、任意の哺乳類であってもよく、これには、限定するものではないが、齧歯目の哺乳類（マウスおよびハムスターなど）、およびウサギ目の哺乳類（ウサギなど）が挙げられる。哺乳類は、ネコ科（ネコ）およびイヌ科（イヌ）を含む食肉目に属するものであることが好ましい。哺乳類は、ウシ科（ウシ）およびイノシシ科（ブタ）を含む偶蹄目、またはウマ科（ウマ）を含む奇蹄目に属するものであることがより好ましい。哺乳類は、霊長目、セボイド目、もしくはシモイド目（サル）、または真猿亜目（ヒトおよび類人猿）に属するものであることが最も好ましい。特別に好ましい哺乳類は、ヒトである。
【０２２５】
キット
本開示はさらに、乾燥組成物および乾燥組成物の量に合致した量の水性媒体を備えており、水性媒体が添加されると、適したコンシステンシーのペーストが自然に、すなわち数秒以内に形成されるような、キットに関する。好ましくは、このキットは、止血の促進で使用するため、またはその必要な個体において創傷、骨、腱および／もしくは組織の治癒に使用するためである。
【０２２６】
したがって、一実施形態において、本開示は以下を備える止血キットに関する：
ａ）本開示の方法により得られた乾燥組成物の入った容器と、
ｂ）水性媒体の入った容器と、
ｃ）必要に応じて外側包装材と。
【０２２７】
ペーストを再構成するために用いられる水性媒体は、例えば、水、生理食塩水、ＣａＣｌ２溶液、または緩衝化水溶液から選択してもよい。
【０２２８】
一実施形態において、乾燥組成物を再構成するために用いられる水性媒体は水である。一実施形態では、水性媒体の張度は、乾燥組成物に水性媒体が添加されると、本質的に等張性のペーストが形成されるように選択される。このペーストの張度は、通常は外科的用途と適合するように選択される。
【０２２９】
一実施形態において、乾燥組成物を再構成するために用いられる水性媒体は、生理食塩水である。
【０２３０】
一実施形態において、乾燥組成物は、トロンビンを含む。
【０２３１】
一実施形態において、乾燥組成物を再構成するために用いられる水性媒体は、アルブミンのような押し出し増強因子を含む。この場合、この乾燥組成物は好ましくは、押し出し増強因子を含まない。
【実施例１】
【０２３２】
マンニトールおよびグリセロールを様々な量で含んでいる止血性ペースト
材料
５０ｇのゼラチン粉末（架橋ゼラチンスポンジを微粉砕したもの）
２００ｍｌの緩衝液
ポリオール類
５０％塩化ベンザルコニウム（ＢＡＣ）
０．９％生理食塩水
【０２３３】
マンニトールｘｇおよびグリセロールｙｇは、以下の計画どおり：
【０２３４】
【表３】
0006489485.tif 000004
【０２３５】
装置
凍結乾燥機：Ｌｅｙｂｏｌｄ−Ｈｅｒａｕｓ、Ｌｙｏｖａｃ  ＧＴ２またはＣｈｒｉｓｔ  Ａｌｐｈａ  １−４  ＬＳＣ
ミキサー：Ｋｅｎｗｏｏｄ、Ｍａｊｏｒ  ＫＭ６１６
【０２３６】
方法
緩衝液：
２．０ｇ±０．１ｇのＢＡＣ（５０％）を青キャップの２５０ｍＬビンに入れる
ＢＡＣに９８．０ｇ±０．５ｇの生理食塩水を加える
磁気撹拌子を用いて２分間混合する−これがＢＡＣストック溶液である
１２３．０ｇ±０．５ｇのグリセロールを２０００ｍＬメスフラスコに入れる
１０ｇ±０．５ｇのＢＡＣストック溶液を加える
２０００ｍＬの印まで生理食塩水を加える
フラスコに栓をして、数回上下をひっくり返す
磁気撹拌子で５±１分間混合する。
【０２３７】
ペースト：
ミキサーで撹拌しながら、緩衝液２００ｍｌにｘｇのポリオール（類）を溶解する。溶解したポリオール（類）に５０ｇのゼラチン粉末を加え、均質なペーストが得られるまで、約５分間、混合する。ペーストの混合は、室温（約２０℃）で行った。
【０２３８】
凍結乾燥：
得られるペーストを、１０ｍｌの使い捨てプラスティックシリンジに充填し（シリンジ１本あたり５．５ｍｌ）、最低でも４時間−３０℃下に置く。凍結したペーストを凍結乾燥機に移し、乾燥するまで１５時間凍結乾燥させる。
【０２３９】
再構成：
各シリンジに液体８ｍｌを加えること、すなわち、凍結乾燥プロセス中に組成物から除去された量の水を加えることによって、乾燥組成物を再構成させる。機械的な混合または撹拌は行わなかった。水を乾燥組成物に単に加えただけであって、ペーストが再形成されるまで組成物には手を触れずに放置した。
【０２４０】
結果
様々な配合について、再構成にかかる時間、すなわちどのような種類の機械的振盪撹拌もせずに、止血目的に適したペーストが自然に形成されるのに必要な時間を試験した。＊３連で決定。
【０２４１】
【表４】
0006489485.tif 000005
【０２４２】
配合１１は、陰性対照である。配合１１のペーストのコンシステンシーは、様々な量でマンニトールおよびグリセロールを含有するペーストのコンシステンシーより明らかに劣っていた。
【０２４３】
配合５
配合５は、５秒で自然に再構成された。配合５の内容を、それぞれ、ペースト（湿潤下）および乾燥組成物（乾燥下）について、以下の表に明記する。
【０２４４】
【表５】
0006489485.tif 000006
【０２４５】
したがって、配合５に含まれるグリセロールの合計パーセンテージは、ペーストの場合に６．２９％、乾燥組成物の場合に１９．６１％であった。
【０２４６】
合計ポリオール濃度（すなわちマンニトールとグリセロールの合計）は、ペーストの場合に１３．５６％、および乾燥後が４２．２７％であった。
【０２４７】
乾燥組成物でのポリオール：ゼラチンの比は、約０．７５：１であった。
【実施例２】
【０２４８】
マンニトールおよびグリセロール
実施例１に記載の方法に従って、ペーストを作り、乾燥させ、再構成させた。ペーストの内容を以下の表に示す。
【０２４９】
【表６】
0006489485.tif 000007
【０２５０】
上記の表に従って作ったペーストの自然な再構成時間は、６秒であった。
【０２５１】
合計ポリオール濃度（すなわちマンニトールとグリセロールの合計）は、ペーストの場合に１１．９７％、乾燥後が３８．７９％であった。
【０２５２】
乾燥組成物中のポリオール：ゼラチンの比は、約０．６５：１であった。
【実施例３】
【０２５３】
マンニトール
実施例１に記載の方法に従って、ペーストを作り、乾燥させ、再構成させ、ただし実施例１の緩衝液の代わりに水を用いた。ペーストの内容を以下の表に示す。
【０２５４】
【表７】
0006489485.tif 000008
【０２５５】
上記の表に従って作ったペーストの自然な再構成時間は、７秒であった。
【０２５６】
この実施例の結果によって、止血目的に適したコンシステンシーのペーストを、ゼラチン、水、および１種類のポリオール（この場合はマンニトール）のみを含む凍結乾燥ペーストから得ることができることが示される。
【０２５７】
乾燥組成物中のポリオール：ゼラチンの比は、約０．４：１であった。
【実施例４】
【０２５８】
トレハロースおよびグリセロール
実施例１に記載の方法に従って、ペーストを作り、乾燥させ、再構成させた。ペーストの内容を以下の表に示す。
【０２５９】
【表８】
0006489485.tif 000009
【０２６０】
上記の表に従って作ったペーストの自然な再構成時間は、８秒であった。
【０２６１】
合計ポリオール濃度（すなわちトレハロースとグリセロールの合計）は、ペーストの場合に１１．９７％、乾燥後が３８．７９％であった。
【０２６２】
乾燥組成物中のポリオール：ゼラチンの比は、約０．６５：１であった。
【実施例５】
【０２６３】
トロンビン
実施例１の配合５のペーストには、トロンビンを、２５００ＩＵ／生成物（８ｍｌ）の理論濃度で含んだ。そのペーストは、実施例１に記載のとおり、室温（約２０℃）で作って、混合した。
【０２６４】
この得られたペーストを、実施例１に記載のとおり、凍結乾燥により乾燥させ、再構成させた。再構成されたペーストでトロンビン活性を測定した。その結果を以下の表に示す。
【０２６５】
【表９】
0006489485.tif 000010
【０２６６】
再構成されたペーストでトロンビン活性の損失は観測されなかった。
【０２６７】
これらの結果はさらに、トロンビン活性の損失を回避するためにペーストの混合を低温で行うことは厳密には必要ではないことを示す、というのも混合を周辺温度で行った場合、トロンビン活性の低下は見られなかったからである。
【実施例６】
【０２６８】
様々なポリオール
基本的に実施例１に記載のとおり、様々なポリオール類を含むペーストを作り、乾燥させ、再構成させ、ただし実施例１の緩衝液の代わりにＢＡＣを含むＨ２Ｏを用いた。ペーストの内容を以下の表に示す。
【０２６９】
【表１０】
0006489485.tif 000011
0006489485.tif 000012
0006489485.tif 000013
0006489485.tif 000014
0006489485.tif 000015
【０２７０】
乾燥組成物でのポリオール：ゼラチンの比は、約０．４：１であった。
【０２７１】
上記の表に従って作った、各種ポリオールを含むペーストの自然な再構成時間は、以下の表および図２に示す。実験は、各種ポリオールについて５回繰り返した。
【０２７２】
再構成時間（秒）：
【０２７３】
【表１１】
0006489485.tif 000016
【０２７４】
この実験によって、水を添加すると自然に再構成される凍結乾燥ゼラチンペーストを作るのに様々な種類のポリオール類を使用できることが示される。再構成されたペーストは、止血性ペーストとして直接使用するのに適したコンシステンシーを有する。
【図１】
0006489485.tif 000017
【図２】
0006489485.tif 000018