【事件の表示】
　特許第３０６５３２７号「ヒアルロン酸ナトリウム組成物」の請求項１、２に係る特許に対する特許異議の申立てについて、次のとおり決定する。
【結　論】
　訂正を認める。
　特許第３０６５３２７号の請求項１ないし２に係る特許を取り消す。
【理　由】
　　　　　　　　　　
１．手続の経緯
　　　　　　　　　　　
　本件特許第3065327号の請求項１及び２に係る発明については、平成2年3月16日に特許出願され、平成12年5月12日に特許権の設定登録がされた。その後、大竹恭子、生化学工業株式会社及び有限会社ツヤチャイルドにより特許異議の申立てがされ、取消理由の通知後、その指定期間内に訂正請求（その後取り下げ）がされ、再度、取消理由が通知され、平成15年11月25日に訂正請求がなされたものである。
　
２．訂正請求について
　　　　　　　　　　　　
（１）訂正の内容
　　　　　　　　　　　　
訂正事項ａ
　請求項１に記載の生理食塩水中に含有されるヒアルロン酸の濃度を「生理的食塩水中に12.0〜20.0mg/mlのヒアルロン酸ナトリウムを含有する、」に訂正する。
　　　　　　　　　　
訂正事項ｂ
　請求項１に記載のヒアルロン酸ナトリウムの動粘度を「せん断速度1秒−１及び温度25℃で測定された45,000〜64,000cSt.の範囲内の動粘度を有し、」に訂正する。
　　
訂正事項ｃ
　請求項２の記載を「動粘度が58,385cSt．、分子量が1.5百万ダルトン、及び固有粘度が2450mg/lであるか、又は動粘度が57,325cSt.、分子量が1.4百万ダルトン及び固有粘度が2239mg/lである、請求項１記載の溶液。」と訂正する。
　　　　　　　　　
（２）訂正の適否
　　　　　　　　　
　訂正事項ａは、請求項１において、溶液中のヒアルロン酸ナトリウムの濃度を、願書に添付した明細書又は図面（以下、「特許明細書」という。）の「一般に得られた溶液は，溶液あたり約12.0〜約20.0mg/mlのヒアルロン酸塩濃度を有する。」（本件特許公報２頁４欄６〜７行参照）という記載に基づき、12.0〜20.0mg/mlに限定するものであり、訂正事項ｂは、動粘度の値が特許明細書の動粘度の測定条件である「せん断速度1秒−１及び温度25℃」（本件特許公報２頁４欄３６〜３９行）での値であることを特定するものであるから、特許請求の範囲の減縮を目的とするものである。
　また、訂正事項ｃも、請求項２において、溶液の動粘度、分子量、固有粘度を、特許明細書の例１又は例２の溶液の物性である「動粘度が58,385cSt．、分子量が1.5百万ダルトン、及び固有粘度が2450ｍｇ/ｌであるか、又は動粘度が57,325cSt．、分子量が1.4百万ダルトン及び固有粘度が2239mg/l」に限定するものであるから、特許請求の範囲の減縮を目的とするものである。
　そして、上記訂正はいずれも特許明細書に記載された事項の範囲内のものであり、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものでもない。
　以上のとおりであるから、上記訂正は、特許法等の一部を改正する法律（平成6年法律第116号）附則第6条第1項の規定によりなお従前の例によるとされる、特許法第120条の4第3項において準用する平成６年法律第116号による改正前の特許法第126条第1項ただし書、第2項の規定に適合するので、当該訂正を認める。
　
３．本件発明
　　　　　　　　　　　　　
　上記訂正は、これを認容することができるから、本件請求項１〜２に係る発明は、訂正された明細書の特許請求の範囲の請求項１〜２に記載された以下のとおりのものである。（以下、それぞれ「本件発明１」「本件発明２」という。）
　　　　　　　　　　　　　
（請求項１）
「せん断速度1秒−１及び温度25℃で測定された45,000〜64,000cSt.の範囲内の動粘度を有し、そして生理的食塩水中に12.0〜20.0mg/mlのヒアルロン酸ナトリウムを含有する、手術後に低い眼内圧を患者に与えるための溶液に於て、このヒアルロン酸ナトリウムは１百万〜２百万ダルトンの範囲内の重量平均分子量を有する上記溶液。」
　　　　　　　　　　
（請求項２）
「動粘度が58,385cSt．、分子量が1.5百万ダルトン、及び固有粘度が2450mg/lであるか、又は動粘度が57,325cSt.、分子量が1.4百万ダルトン及び固有粘度が2239mg/lである、請求項１記載の溶液。」
　　　　　　　　　　　
３−１　取消理由通知書で引用された刊行物、及びそれらの記載の概要
　　　　　　　　　　　　　　　
刊行物Ａ；Glaucoma　1989；11：82-85
　　　　　　　　　　
　刊行物Ａには、４０ＫセンチストークのAmvisc（登録商標）４０は、最も広く使用されている５５ＫセンチストークのHealon（登録商標）と類似あるいはそれより少ないＩＯＰ（眼内圧）上昇を示すこと、５５ＫセンチストークでAmvisc（登録商標）より分子量が小さいが、濃度を増加させたAmvisc　Plus（登録商標）はAmvisc（登録商標）４０に比べ術後のＩＯＰを上昇させないこと、このことから、ヒアルロン酸の粘度は増加でき、低分子量のヒアルロン酸を使用することでＩＯＰ上昇は少なくできることが示唆される旨記載されている。
　　　　　　　　　　　　　　　
刊行物１；Survey of ophthalmology,Vol.34,No.4,January-February 1990,p.268-293.
　　　　（特許異議申立人生化学工業株式会社の提出した甲第１号証）
　
　刊行物１の表１にはAmvisc（登録商標）のヒアルロン酸ナトリウム濃度は１％、分子量は2×106ダルトン、Healon（登録商標）のヒアルロン酸濃度は１％、分子量は2.5〜3.8×106ダルトン、Amvisc　Plus（登録商標）のヒアルロン酸ナトリウム濃度は1.6%と記載され、Amvisc（登録商標）とAmvisc　Plus（登録商標）の緩衝溶液は生理食塩水であることが記載されている。
　また、Amvisc　Plus（登録商標）は低分子量ヒアルロン酸ナトリウム分子を使用し、濃度を高めることによってAmvisc（登録商標）に比べて高い粘度を有する製剤であり、眼内圧上昇のリスクが少ないことが記載されている。
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
刊行物２；Journal of cataract and refractive surgery,Vol.13,September 1987, p.534-536.　
　　　　（特許異議申立人生化学工業株式会社の提出した甲第２号証）
　　　　　　　　　　　　　　　
　動粘度を、コーンスピンドルＣＰ52を有するブルックフィールドデジタル粘度計モデルRVTDCP（シリアル番号AO１７５２）を用い，0.5rpm及び25℃で測定した結果、Amvisc（登録商標）の動粘度の値が41554±1221(39943〜42859)cst、Healon（登録商標）の動粘度は47271±7767(39157〜64779)cstであること、分子量は、Laurent、Ryan及びPietruszkiewiczにより記載された式
（ｎ）＝0.036Ｍ０．７８   （（ｎ）＝固有粘度　　Ｍ＝分子量　）
を用いて算出し、前者の分子量（ＭＷ）は2.04±0.17×106であり、後者の分子量は2.43±0.23×106であることが記載されている。
　この文献における分子量の測定方法についてはBiochim Biophys Acta　42:476-485 1960の論文（参照文献7）が参照されている。
　　　　　　　　　　　
３−２　対比判断
  　　　　　　　　　　　　　　
３−２−１　本件発明１について
　　　　　　　　　　　　　
  ヒアルロン酸ナトリウムを含む生理的液体は、白内障の手術において、前眼房の奥行きを維持し、角膜内皮を緩和し、術中の機械的損傷の可能性から保護するために日常的に用いられており、本出願前、刊行物Ａ、１、２に記載のAmvisc（登録商標）、Healon（登録商標）、Amvisc　Plus（登録商標）などの各種の製剤が知られている。
　刊行物Ａには、５５ＫセンチストークでAmvisc（登録商標）より分子量が小さいが、濃度を増加させたAmvisc　Plus（登録商標）はAmvisc（登録商標）４０に比べ術後のＩＯＰを上昇させないことが記載され、また、刊行物１によれば、Amvisc（登録商標）のヒアルロン酸ナトリウム濃度は1%、分子量は2×106ダルトン、Amvisc　Plus（登録商標）のヒアルロン酸ナトリウム濃度は1.6%であって、両者とも緩衝溶液は生理食塩水である。
　そうすると、Amvisc　Plus（登録商標）は動粘度は55000cst、分子量は２百万ダルトンより低く、ヒアルロン酸ナトリウム濃度1.6% 緩衝溶液として生理食塩水が使用されている製剤であると認められる。
　そこで、本件発明１のヒアルロン酸ナトリウム含有溶液とAmvisc　Plus（登録商標）の組成、物性等を対比すると、両者は、45000〜64000cstの範囲の動粘度を有する、生理的食塩水中にその濃度が12.0〜20.0mg/mlの範囲のヒアルロン酸ナトリウムを含有する溶液であって、手術後に低い眼内圧を患者に与えるための溶液である点で一致し、
　　　　　　　　　　　　
（Ａ）本件発明１では動粘度が、せん断速度１秒−１及び温度25℃で測定された値であるのに対し、刊行物Ａではその測定条件の記載がない点
（Ｂ）本件発明１では、ヒアルロン酸ナトリウムの分子量が１百万〜２百万ダルトンの範囲であるのに対し、Amvisc　Plus（登録商標）については２百万ダルトン以下ではあるが具体的分子量の値の記載がない点
　　　　　　　　　　　　　
で相違する。以下、相違点につき検討する。
　　　　　　　　
（Ａ）動粘度の測定条件について
　　　　　　　　　
　刊行物Ａには動粘度の測定条件の記載はないものの、Amvisc（登録商標）の動粘度については４０Ｋセンチストークス（40000cstと同義）、Healon（登録商標）については５５Ｋセンチストークス（55000cstと同義）との記載がある。一方、刊行物２（1987年）の、コーンスピンドルＣＰ52を有するブルックフィールドデジタル粘度計モデルRVTDCP（シリアル番号AO1752）を用い、0.5rpm及び25℃での動粘度測定条件は、本件発明１の測定条件である、せん断速度１秒−１及び温度25℃と一致するが、この文献で報告されているAmvisc（登録商標）の動粘度の値は41554±1221(39943〜42859)cst、Healon（登録商標）の動粘度は47271±7767(39157〜64779)cstであるから、刊行物ＡのAmvisc（登録商標）、Healon（登録商標）の動粘度の値および刊行物１で報告されている分子量はこの範囲内のものである。
　そうすると、同じく刊行物１で５５Ｋセンチストークス（55000cstと同義）とされるAmvisc　Plus（登録商標）の動粘度にしても上記測定条件で得られる値の範囲内のものと解することができる。　　　　　　　　
　また、刊行物１においてはAmvisc（登録商標）、Healon（登録商標）、Amvisc　Plus（登録商標）について「剪断速度2/sec、25℃」で測定されたとされる粘度の値が記載されている。粘度は動粘度とは相違するが、粘度を密度で除した値が動粘度に相当し、ヒアルロン酸溶液の密度がほぼ１であることを勘案すると、刊行物１のAmvisc（登録商標）、Hearon（登録商標）、Amvisc　Plus（登録商標）の各々の粘度として示された40000〜42000cps、40000〜64000cps、55000cpsは動粘度としては 40000〜42000cst、40000〜64000cst、55000cstと算定される。ところで、このAmvisc（登録商標）、Healon（登録商標）の動粘度の値にしても、刊行物２のせん断速度1秒−１及び温度25℃で測定された値とほぼ一致し、その分子量も刊行物２の値と一致するから、刊行物１、２の対比からもAmvisc　Plus（登録商標）の55000cstという動粘度の値も、せん断速度１秒−１及び温度25℃で測定された値の範囲内であると見ることができる。　　　　　　
　刊行物Ａ、１，２はそれぞれ1989、1990、1987年という近接した時期に同じ商品名で販売された医薬品についてなされた研究報告であるが、医薬品分野においては特に品質が一定であることが厳しく要求される上、各文献での上記各製品の動粘度や分子量範囲はよく一致するから、いずれも同じ測定条件により得られた値と解して差し支えないものと認められる。
　　　
　そうすると、刊行物Ａや刊行物１のAmvisc　Plus（登録商標）の動粘度の値は、いずれもせん断速度１秒−１及び温度25℃で測定された動粘度の値と同じであると解されるから、相違点１は実質的な相違とはいえない。
　　　　　　　　　　　　　　
（Ｂ）分子量について
　　　　　　　　　　
　刊行物Ａ、刊行物１が共に２百万ダルトン以下の分子量のヒアルロン酸ナトリウムを使用して濃度を高めることによって、高い動粘度とした製剤が従来製品より優れた効果を奏することを示しているのであるから、1.6%濃度としたときに55000cstの動粘度を示すヒアルロン酸の分子量を検討し、Amvisc　Plusと同等の効果を奏するヒアルロン酸ナトリウムの分子量を決定することは当業者が容易に行い得ることである。　　　　　　　　　　
　また、刊行物２で白内障手術において日常的に使用されているAmvisc（登録商標）およびHealon（登録商標）の組成、ｐＨ、動粘度、濃度、分子量などを比較した結果が報告されているように、すでに実用化されている製剤についての生物物理学的な性質を対比し研究することは当業者が通常行うことであるから、Amvisc（登録商標）に比べＩＯＰの上昇が少ないという、より好ましい効果を有するAmvisc　Plus（登録商標）（刊行物Ａ、Fig2）自体を入手して分子量を分析することも容易である。
　そして、これをもとにＩＯＰ上昇を減ずる効果を維持する分子量の範囲を検討し、例えば百万〜２百万ダルトンの範囲に決定することに格別な困難性を認めることはできない。
　　　　　　　　　　　　　　　
３−２−２　本件発明２について
　　　　　　　　
　本件発明２は本件発明１の溶液について、動粘度が58,385cst、分子量が1.5百万ダルトン、及び固有粘度が2450ｍｇ/ｌであるか、又は動粘度が57,325cst.、分子量が1.4百万ダルトン及び固有粘度が2239mg/lであることを特定したものである。
　しかし、ヒアルロン酸ナトリウム溶液の作用は動粘度や分子量が特定の値に一致しなければ奏されないというものではなく、上記刊行物２のAmvisc（登録商標）Healon（登録商標）に見られるように、製品自体にも一定の範囲内でのばらつきが許容されるものである。したがって、Amvisc　Plus（登録商標）の動粘度55,000cstやその分子量の決定値に近い範囲内のヒアルロン酸ナトリウム溶液として、58,385cstや57,325cstの動粘度、分子量約1.5百万ダルトンや、1.4百万ダルトンの溶液を調製し、これについての上記効果を確認することも当業者が容易になし得る範囲のことと認められる。
　なお、本件発明２では固有粘度の特定もなされているが、分子量と固有粘度とは刊行物２（ｐ535左欄）の（ｎ）＝0.036Ｍ０．７８ （（ｎ）＝固有粘度、Ｍ＝分子量　）の式の関係があるから、分子量とは独立した格別の技術的意味のある特定要件とみることはできない。
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
４．むすび
　　　　　　　　　　　　
　以上のとおり、本件発明１〜２は、上記刊行物Ａ、１、２に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものであるから、本件発明についての特許は、特許法第29条第2項の規定に違反してされたものである。
　したがって、本件発明についての特許は、特許法第113条第2号に該当し、取り消されるべきものである。
　　　　　　　　　
　よって、結論のとおり決定する。
【異議決定日】
平成１６年３月１８日（２００４．３．１８）
【訂正の要旨】
審決（決定）の【理由】欄参照。
（５４）【発明の名称】
ヒアルロン酸ナトリウム組成物
（５７）【特許請求の範囲】
１）
せん断速度１秒−１及び温度２５℃で測定された
を有し、そして
２）
動粘度が５８，３８５ｃＳｔ．、分子量が１．５百万ダルトン、及び固有粘度が２４５０ｍｇ／ｌであるか又は動粘度が５７，３２５ｃＳｔ．、分子量が１．４百万ダルトン及び固有粘度が２２３９ｍｇ／ｌである、
【発明の詳細な説明】
　本発明はヒアルロン酸ナトリウムに関し，特に眼科外科手術に於ける助剤として有用であるヒアルロン酸ナトリウムの組成物に関する。
　ヒアルロン酸ナトリウム（ＮａＨＡ）粘弾性組成物は，白内障外科手術の様な特定の眼科処置に於て広く使用されている。これらの処置でこの組成物を前眼房中に入れ，外科手術の処置を促進することができる。一般にこの組成物は外科手術の終了時に部分的に又は実質上完全に除かれる。たとえば米国特許第４，３２８，８０３号明細書参照，ここにはその場で希釈して一部除去すると提案されている。
　ときどき外科医は，外科手術助剤として粘弾性組成物を一緒に使用する外科手術の後に，増加した眼内圧（ＩＯＰ）を観察している。この増加に関する理由は，十分に分っていない。というのは一時的な増加が，粘弾性助剤を使用しない型どおりの外科手術処置の後でさえも生じるからである。たとえばルイツ（Ｒｕｉｚ），Ｒ．Ｓ．等，Ａｍｅｒ．Ｊ．ｏｆ　Ｏｐｈｔｈａｌ．，
１０３
　小柱網の妨害は，粘弾性組成物が小柱網に入る時，その生成物の粘度にも関係する。ベネデット（Ｂｅｎｅｄｅｔｔｏ），Ｏｐｈｔｈａｌ．Ｔｉｍｅｓ，４月１５日，１９８７年，第５８頁，シューベルト（Ｓｃｈｕｂｅｒｔ）等，（たとえばＥｙｅ　Ｒｅｓ．，
３９
　眼科外科手術で助剤として使用されるＮａＨＡ組成物中の粘度及び分子量双方の重要性は，手術後のＩＯＰ増加に於ける可能なファクターとしてシューベルト等，たとえばＥｙｅ　Ｒｅｓ．
３９
　手術後のＩＯＰ増加の起りうるメカニズムにかかわらず，この現象は望まれず，多くの配慮がこの問題の解決に注がれている。特にそれはヒアルロン酸ナトリウムの使用に関してである。たとえばその解決は米国特許第４，３２８，８０３号明細書中にパペ（Ｐａｐｅ）によって述べられている。それは，前房に入ったヒアルロン酸ナトリウムをその場で希釈することを提案する。
　本発明者は，特定の分子量及び粘度を有する特定のヒアルロン酸ナトリウム組成物を眼科外科手術処置に使用することができ，その使用は（これまで市販されているヒアルロン酸ナトリウム組成物の使用に比して）手術後の眼内圧の著しく小さい増加に関係することを見い出した。
　本発明は生理的食塩水中にヒアルロン酸ナトリウムを含有する溶液にあり，これは４５，０００ｃＳｔ〜６４，０００ｃＳｔの範囲内の動粘度を有し，上記ヒアルロン酸ナトリウムは１百万〜２百万ダルトンの範囲内の重量平均分子量を有する。
　この溶液は，通常の眼科外科手術で粘弾性助剤として白内障を除去するのに，緑内障を矯正するのに又は硝子体切除で硝子体と置き換えるのに有用である。この溶液は，外科手術で硝子体損失が生じる処置で特に有用であり，かつ硝子体を適当な位置に押し入れる機械装置が必要である。眼内出血又は絨毛膜様排除出血は，本発明の組成物を公知の処置で有用に使用する条件の付加的な例である。
　第１図は下記例２で観察されたＩＯＰ値のグラフによる描写である。
　医学的装置に容認されたグレート及び純度を有するヒアルロン酸ナトリウムは，よく知られた化合物であり，広範な分子量でこれを製造する方法も知られている；たとえば米国特許第４，１４１，９７３号明細書中に記載された製造法参照。
　本発明の組成物を，重量平均分子量１〜２百万ダルトンを有するヒアルロン酸ナトリウムの医学的に容認されたグレードを十分な割合の生理的食塩水中に溶解して，４５，０００〜６４，０００センチストークスの所望の範囲内に動粘度を有する溶液が得られることによって製造することができる。一般に得られた溶液は，溶液あたり約１２．０〜約２０．０ｍｇ／ｍｌのヒアルロン酸塩濃度を有する。その代りに最終生成物中に望まれるよりも低い粘度及び濃度を有する溶液を製造し，次いでＮａＨＡの最終粘度及び濃度を，溶液から水を蒸発して又は溶剤，すなわちエタノール中で再沈殿し，沈殿を減圧乾燥し，次いで沈殿を適当な生理学的溶液，すなわち塩化ナトリウム（米国薬局方）中に再溶解してヒアルロン酸ナトリウムを再処理し，ヒアルロン酸ナトリウム濃度の調整によって適切な粘度とすることによって達成する。
　本発明の組成物を製造する方法は，ヒアルロン酸ナトリウムを生理的食塩水中で，好ましくは無菌条件下通常の混合装置及び技術を用いて簡単に混合することである。
　緩衝剤，安定剤，保存剤及び滅菌剤を必要に応じて又は所望の場合本発明の溶液に通常公知の割合で加えることができる。
　眼科外科手術に於ける助剤としてＮａＨＡの粘弾性溶液を使用する方法は，公知であり，ここで詳細に説明する必要はない；たとえば米国特許第４，３２８，８０３号明細書に記載された処置参照。
　次の例及び調製に，本発明の製造及び使用の処理方法を示し，本発明を実施するにあたり最良の方法を示すが，これによって本発明は限定されない。そこでは次のテストを行う。
分子量
　記録される分子量は，重量平均分子量であり，ラウレント（Ｌａｕｒｅｎｔ）等，Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ　ｅｔ　Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃｓ　Ａｃｔａ．，
４２
動粘度：
　コーンスピンドル（Ｃｏｎｅ　ｓｐｉｎｄｌｅ）ＣＰ５２を有するブルックフィールドデジタル粘度計モデルＲＶＴＤＣＰを用いて２５℃の温度及びせん断速度１秒−１で測定する。
固有粘度（Ｉ．Ｖ．）
　固有粘度をキャノン−ウブベローデセミ−マイクロ希釈粘度計（Ｃａｎｎｏｎ−Ｕｂｂｅｌｏｈｄｅ　ｓｅｍｉ−ｍｉｃｒｏ　ｄｉｌｕｔｉｏｎ　ｖｉｓｃｏｍｅｔｅｒ），サイズ７５を用いて３７℃で測定し，ミリリットル／グラム（ｍｌ／ｇ）で記録する。
調製１．
　医学的使用に容認された純度を有し，かつ算出された重量平均分子量２．０４×１０６ダルトンを有するヒアルロン酸ナトリウムのある量を，滅菌された，発熱性物質不含の生理的食塩水中に加え，動粘度　４１．５５４センチストークス（ｃＳｔ）及びヒアルロン酸塩濃度１０．９９ｍｇ／ｍｌが得られる。この溶液は，固有粘度３０１２ｍｌ／ｇを有する。
例１
　より低い重量平均分子量約１．５×１０６ダルトンのヒアルロン酸ナトリウムのある量を，滅菌された，発熱性物質不含生理学的食塩水中に加え，動粘度平均　５８，３８５ｃＳｔ及びヒアルロン酸塩濃度　１５．２９ｍｇ／ｍｌを生じる。固有粘度は２４５０ｍｌ／ｇである。
例２
　３つの診療所で６０人のグループを選択する。各人はヒアルロン酸ナトリウムの粘弾性溶液の使用によって促進される眼科外科手術を必要とする。このグループを夫々３０人の２つのサブグループに分ける。次いで患者を，夫々外科医の標準的処置によって手術する。たとえば次の外科手術処置は外科医１によって行われる：
処置：
　局所麻酔が，２％キシロカイン，０．５％マルカイン，１：１００，０００エピネフリン及び１５０単位ヒアルロニダーゼ（Ｗｙｄａｓｅ）を用いて左眼のナドバス（ｎａｄｂａｔｈ）及び眼球後の位置で行われる。眼に，これに関して規定通りの方法及び注意を守って手術の用意をし、かつ滅菌した布でまわりを包む。シヤハル開瞼器を挿入する。４−０糸状帯縫合糸を，上方の直筋の腱の下側に置く。１８０°上方の環状切除を行う。うっ血になる。部分的に厚い角膜強膜の切開を，６６−パウフィークブレード（Ｐａｕｆｉｑｕｅ　ｂｌａｄｅ）の前方でレーザーブレードナイフで行う。前房に，１２時にレーザーブレードナイフを入れ，これを注射する。前嚢切開を３０ゲージ針で行う。
　切開を２つの方向に角膜強膜はさみを用いて行う。水晶体核を眼から取り出す。皮質残遺物を洗浄し，眼から吸引する。ヒアルロン酸ナトリウムのもとで困難なく後房中に眼内水晶体を挿入する。ミオコールを注射し，瞳孔を良好に丸くする。周辺虹彩切除を１２時に行う。切開を，１０の中断された１０−０ナイロン縫合糸で球体がテリー（Ｔｅｒｒｙ）角膜計を用いて実証されるまで閉じる。結膜を，１０−０ナイロン縫合糸を用いて４及び８時に接合する。トブラマイシン４０ｍｇ，セファジル５００ｍｇ及びバンコマイシン２５ｍｇを含有する副結膜注射を６及び１２時に，並びにセレストン６ｍｇを６時に行う。眼を眼帯で覆う。
　夫々の処置で，ヒアルロン酸ナトリウム溶液　０．５ｍｌを，外科手術の間前房に入れる。外科手術の終了後，ミオコールを注射する。診療所１での外科医（各グループ中に２０人の患者）は，外科手術の終了時に十分に洗浄しない。診療所２及び３での外科医（各グループ中に１０人の患者）は，粘弾性の十分な除去を行う。３０人の患者のいる第一のグループ――これはコントロールグループとしての役目を果す――で，使用されるヒアルロン酸ナトリウム溶液を上記調製１に従って製造する。３０人の患者のいる第二グループでその溶液を上記例１に従って製造する。
　手術前に及び外科手術の終了後定期的間隔（２，４，６，１２，２４及び４８時間）で，手術された眼に関する患者の眼内圧を測定する。テスト結果（平均値）を示す。そこでＮａＨＡ溶液の不完全な除去があり，一方表２はこれらの患者に対するＩＯＰ値（平均）を示す。そこで完全な除去がある。表３は一緒にされた値を示す。
　下記表３中に示される平均ＩＯＰ値を添付した第１図中にグラフで，手術前から手術後４８時間までの時間枠で示す。
　眼内圧はｍｍＨｇで示す。
調製２
　医学的使用に容認された純度を有し，算出された重量平均分子量２．６５×１０６ダルトンを有するヒアルロン酸ナトリウムのある量を，滅菌された，発熱性物質不含生理学的食塩水中に加え，動粘度４１．８５０ｃＳｔ及びヒアルロン酸塩濃度９．５８ｍｇ／ｍｌを有する溶液が得られる。調製物は，固有粘度３６８４ｍｌ／ｇを有する。
例３
　より低い重量平均分子量（約１．４０×１０６ダルトン）を有するヒアルロン酸ナトリウムのある量を，滅菌，発熱性物質不含生理的食塩水中に加え，動粘度　５７，３２５ｃＳｔ及びヒアルロン酸塩濃度１６．７５ｍｇ／ｍｌが得られる。調製物は，固有粘度２２３９ｍｌ／ｇを有する。
例４
　調製２及び例３のサンプルをニュージーランド白ウサギで評価する。成人ウサギ（５−６ｏｂｓ）をこの水様液交替試験に使用する。試験前のある日，スリットランプ評価によって各動物の両眼をフルオレッセン染料を用いて調べ，角膜上皮の状態を測定する。角膜上皮を，いくつの角膜浸食，潰瘍又はふぞろいがあるかどうかを測定して評価する。その試験の日に，各動物をテスト物質の注射前に再度評価する。フルオレッセン染料を，この注射前に評価に使用しない。角膜，水晶体又は結膜損傷，炎症又は不規則性が前もってある動物は，この試験に使用しない。
　全身麻酔をロンパン（Ｒｏｍｐｕｎ）（１ｍｇ／ｋｇ体重）及びケタミンＨＣｌ（５ｍｇ／ｋｇ体重）の筋肉内注射で達成する。瞳孔を，１％シクロペントラート及び１０％フエニルエピリンＨＣｌ０．０５ｍｌの局部投与で広げる。０．５％プロパラカイン１滴を水様液注射の前に局部投与する。すべての注射される溶液は滅菌され，希釈されずに投与する。
　眼に外科手術を行い，２５ケージバタフライ注入針を１０時位置に挿入する。縁に対して０．２ｍｍ前方。前房の虚脱を防止するために，テスト物質の注射を開始するまで流出管にフタをして残こす。２７ケージ針を備えた１ｃｃ注射器を２時位置に挿入する。縁に対して０．２ｍｍ前方。針の傾斜したさきを角膜内皮からはずす。前房をテスト物質０．２ｃｃで満たし，流出及び流入針を除く。眼内圧をスパイロメーターで追跡する。ＩＯＰ記録を以下に示す：
調製３
　医学的使用に容認された純度を有し，重量平均分子量１．８６×１０６ダルトンを有するヒアルロン酸ナトリウムのある量を，滅菌された，発熱性物質不含生理的食塩水中に加え，動粘度３６．０１１ｃＳｔ及びヒアルロン酸塩濃度１１．３６ｍｇ／ｍｌを有する溶液が得られる。調製物は，固有粘度２７９０ｍｌ／ｇを有する。
例５
　上記調製３のヒアルロン酸ナトリウム調製物のある量を，オートクレーブによって１２１℃に１０分間加熱する。加熱処理の後，ヒアルロン酸ナトリウムを，エタノール中に沈殿させて回収し，減圧で乾燥し，脱鉄化された発熱性物質不含水に加え，動粘度約３０，０００ｃＳｔ及びヒアルロン酸塩濃度２５．６５ｍｇ／ｍｌを有する溶液が得られる。調製物は，固有粘度１３５０ｍｌ／ｇ及び算出された分子量０．７３×１０６ダルトンを有する。
　上記調製３及び上記例５のサンプルを，猫モデルの５つの眼中に移植して評価する。制御された眼をコントロールとして使用する。ＩＯＰ測定を３０分間隔で６時間測定する。その結果は以下の通りである。
【図面の簡単な説明】
　第１図は，本発明による特定のヒアルロン酸ナトリウム溶液（例１）を使用した場合のＩＯＰ値を，手術前から手術後４８時間までを示す。