【事件の表示】
　特許第３２８５４４１号「血管閉塞性疾患血漿の血漿粘度低下用吸着材及び血漿粘度低下装置」の請求項１ないし６に係る特許に対する特許異議の申立てについて、次のとおり決定する。
【結　論】
　訂正を認める。
　特許第３２８５４４１号の請求項１ないし６に係る特許を維持する。
【理　由】
１． 手続の経緯
　特許第３２８５４４１の請求項１〜６に係る発明（以下、「本件請求項１〜６発明」という。）についての出願は、平成５年１１月１７日に特許出願され、平成１４年３月８日にその発明についての特許権の設定登録がなされ、その後、その特許について、異議申立人　辻　邦夫より特許異議の申立てがなされ、取消しの理由が通知され、その指定期間内である平成１５年６月４日に訂正請求（後日取下げ）がなされた後、再度の取消しの理由が通知され、その指定期間内である平成１６年１月２９日に訂正請求がなされたものである。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
２． 訂正の適否についての判断
（１）訂正の内容
　特許権者が求めている訂正の内容は、以下のア．〜エ．のとおりである。
ア．特許請求の範囲請求項１の「疎水性構造と陰性官能基とを有する化合物を表面に有し、該陰性官能基の量が０．５μ当量／ｍｌ以上１００μ当量／ｍｌ以下であり、フィブリノーゲンおよび低比重リポ蛋白質を除去することによって血漿の粘度を低下させることを特徴とする、血管閉塞性疾患血漿の血漿粘度低下用吸着材。」を「疎水性構造と陰性官能基とを有する化合物を表面に有する架橋多孔質材からなり、該架橋多孔質材の排除限界分子量が５×１０５ 以上、１×１０８ 以下であって、該化合物がスチレンスルフォン酸、ドデシルベンゼンスルフォン酸、β−メタクリロイルオキシエチルハイドロジェンフタレート、２−アクリロイルオキシエチルフタル酸、ヘスペリチン酸、ビニル安息香酸、４−フォスフォニルスチレン等の合成化合物や、アデノシン−３’−リン酸、グアノシン−２’−リン酸、シチジン−２’−リン酸、チミジン−３’−リン酸等の核酸、エルゴチオネイン、キヌレニン、フェニルグリシン、チロシン、チロキシン、及びその誘導体、あるいはこれらを重合単位として含むオリゴマーやポリマー、のいずれかから選ばれるものであり、該陰性官能基の量が０．５μ当量／ｍｌ以上１００μ当量／ｍｌ以下であり、フィブリノーゲンおよび低比重リポ蛋白質を除去することによって血漿の粘度を低下させることを血管閉塞性疾患血漿の血漿粘度低下用吸着材」と訂正する。　　　　　　　　　　　　　　　　　　
イ．特許請求の範囲請求項４の「疎水性構造と陰性官能基とを有する化合物を表面に有し、該陰性官能基の量が０．５μ当量／ｍｌ以上１００μ当量／ｍｌ以下であって、フィブリノーゲンおよび低比重リポ蛋白質を吸着する吸着材を内蔵し、血漿の入口と出口を有する、血管閉塞性疾患血漿の血漿粘度低下装置。」を「疎水性構造と陰性官能基とを有する化合物を表面に有する架橋多孔質材からなって、該架橋多孔質材の排除限界分子量が５×１０５ 以上、１×１０８ 以下であって、該化合物がスチレンスルフォン酸、ドデシルベンゼンスルフォン酸、β−メタクリロイルオキシエチルハイドロジェンフタレート、２−アクリロイルオキシエチルフタル酸、ヘスペリチン酸、ビニル安息香酸、４−フォスフォニルスチレン等の合成化合物や、アデノシン−３’−リン酸、グアノシン−２’−リン酸、シチジン−２’−リン酸、チミジン−３’−リン酸等の核酸、エルゴチオネイン、キヌレニン、フェニルグリシン、チロシン、チロキシン、及びその誘導体、あるいはこれらを重合単位として含むオリゴマーやポリマー、のいずれかから選ばれるものであり、該陰性官能基の量が０．５μ当量／ｍｌ以上１００μ当量／ｍｌ以下であり、フィブリノーゲンおよび低比重リポ蛋白質を除去する吸着材を内蔵し、血漿の入口と出口を有する、血管閉塞性疾患血漿の血漿粘度低下装置」と訂正する。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
ウ．明細書の段落［００１０］の「上記の好ましいリガンドの具体例を例示すると、スチレンスルフォン酸、・・・中略・・・最も好ましくはポリスチレンスルフォン酸である。」を「上記のリガンドの具体例を例示すると、合成化合物としてはスチレンスルフォン酸、ドデシルベンゼンスルフォン酸、β−メタクリロイルオキシエチルハイドロジェンフタレート、２−アクリロイルオキシエチルフタル酸、ヘスペリチン酸、ビニル安息香酸、４−フォスフォニルスチレン、核酸としてはアデノシン−３’−リン酸、グアノシン−２’−リン酸、シチジン−２’−リン酸、チミジン−３’−リン酸、アミノ酸類としてはエルゴチオネイン、キヌレニン、フェニルグリシン、チロシン、チロキシン及びその誘導体、或いはこれらを重合単位として含むオリゴマーやポリマーがあげられる。
　以上の中でスチレンスルフォン酸、ビニル安息香酸のモノマー、オリゴマー、ポリマー、がより好ましい例としてあげられる。更に好ましくはポリスチレンスルフォン酸、ポリビニル安息香酸であり、最も好ましくはポリスチレンスルフォン酸である。」と訂正する。
エ．明細書の段落［００１７］（特許公報第５頁、第９欄、第３行〜第２３行）を削除する。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
（２）訂正の目的の適否、新規事項の有無及び拡張・変更の存否
Ａ）上記訂正事項ア．及びイ．はどちらも、訂正前の請求項１、４に記載の「疎水性構造と陰性官能基とを有する化合物」を上記「スチレンスルフォン酸・・・中略・・・選ばれるもの」に限定するとともに、同じく訂正前の請求項１、４に記載の「吸着材」を「架橋多孔質材からなり、該架橋多孔質材の排除限界分子量が５×１０５ 以上、１×１０８ 以下であ」るものに限定するものであるが、　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　前者の上記「スチレンスルフォン酸・・・中略・・・選ばれるもの」について、願書に添付した明細書（以下、「特許明細書」という。）には、その段落［０００７］に「疎水性構造と陰性官能基とを有する化合物（以下リガンドと称す）を表面に有する架橋多孔質材からなる吸着材を、」と記載され、同じく、その段落［００１０］に「リガンドの具体例・・・中略・・・、最も好ましくはポリスチレンスルフォン酸である。」と記載されているから、特許請求の範囲の減縮を目的とした明細書の訂正に該当するものであり、新規事項の追加に該当せず、実質的に特許請求の範囲を拡張又は変更するものではない。
　また、後者の「架橋多孔質材からなり、該架橋多孔質材の排除限界分子量が５×１０５ 以上、１×１０８ 以下であ」るものについても、特許明細書の段落［０００７］に上記「スチレンスルフォン酸・・・中略・・・選ばれるもの」の記載、同じく、特許明細書の段落［００１１］に「架橋多孔質材の排除限界分子量が・・・中略・・・吸着能力が低下する。」の記載があることから、特許請求の範囲の減縮を目的とした明細書の訂正に該当するものであり、新規事項の追加に該当せず、実質的に特許請求の範囲を拡張又は変更するものではない。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
Ｂ）上記訂正事項ウ．及びエ．は、上記訂正事項ア．及びイ．と整合を図るものであるから、明りょうでない記載の釈明を目的とした明細書の訂正に該当し、いずれも、新規事項の追加に該当せず、実質的に特許請求の範囲を拡張又は変更するものではない。
　
（３）むすび
　以上のとおりであるから、上記訂正は、特許法第１２０条の４第２項及び同条第３項において準用する第１２６条第２，３項の規定に適合するので、当該訂正を認める。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
３． 特許異議申立てについて
（１）本件の請求項１〜６に係る発明
上記２．で示したように上記訂正が認められるから、本件の請求項１〜６に係る発明は、上記訂正に係る訂正明細書の記載からみて、その特許請求の範囲の請求項１〜６に記載されたとおりのものである。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
（２）申立ての理由の概要
　特許異議申立人辻　邦夫は、本件請求項１〜６に係る発明は、　　　　　甲第１号証刊行物（「人工臓器」１６（３），１２０３−１２０６（１９８７））、　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　甲第２号証刊行物（阿岸鉄三編「吸着療法マニュアル」１３０〜１３５頁（平成４年４月３０日，金原出版発行））、　　　　　　　　　　　　　　　甲第３号証刊行物（“Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　Ｐｌａｓｍａｐｈｅｒｅｓｉｓ（ＸＩＩ）”ｐｐ７１１−７１８（１９９３））、　　　　　　　　　甲第４号証刊行物（“Ｔｈｅ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ　Ｏｒｇａｎｓ”／Ｖｏｌ．１５／ｎｏ．５，１９９２／ｐｐ３１２−３１９）、　　　　　　　　　　　　　　　　甲第５号証刊行物（阿岸鉄三編「二重濾過血漿分離交換法」１３６〜１４１頁）及び　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　甲第６号証刊行物（“Ａｃｔａ　Ｍｅｄ　Ａｕｓｔｒｉａｃａ”１１８（Ｓｕｐｐｌ．１）；６３−６５（１９９１））に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものであり、特許法第２９条第２項の規定によって特許を受けることができないものであるから、本件請求項1〜６に係る発明についての特許を取り消すべきと主張している。
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　（３）特許異議申立人が証拠として提示した上記刊行物について　　　　　ア．甲第１号証刊行物（以下、「刊行物１」という。）には、大要、以下のａ．〜ｅ．の事項が記載されている。
ａ．広義の免疫吸着法とほぼ同意と考えられるアフィニティ吸着法は、免疫関連病因物質を特異的あるいは選択的に吸着する手法として、除去目的物質に親和力を有する物質を利用するであるが、生物学的アフィニティ吸着剤は、既に免疫疾患等の治療に使用されている。ところが、これは、生理学的活性物質が必要であって、その供給、確保、操作、滅菌さらに免疫吸着材として維持することが困難であり、これらの問題を解決するため、物理化学的アフィニティ吸着剤が開発された。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
ｂ．ＩＭ−ＴＲおよびＩＭ−ＰＨは物理化学的アフィニティ吸着剤であり、これらは以前にはＩＭ−ＴおよびＩＭ−Ｐとされていた。ＩＭ−ＴＲおよびＩＭ−ＰＨは旭メディカル社により作成供給され、臨床応用あるいは試用されていた。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
ｃ．ＩＭ−ＴＲは、ポリビニルアルコールゲルの担体に、リガンドとして疎水性アミノ酸トリプトファンを固定したものものであること。同じく、ＩＭ−ＰＨは、リガンドとして疎水性アミノ酸フェニルアラニンを固定化したものであること。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
ｄ．ＩＭ−ＴＲのリガンド（トリプトファン）は、担体（ポリビニルアルコールゲル）の表面にエピクロルヒドリン由来の基によって固定化されている。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
ｅ．血漿潅流実験において、ＩＭ−ＴＲは、種々の免疾疾患患者の血漿中から免疫複合体を吸着したこと、抗アセチルコリンレセプター抗体を高率に吸着すること、重症筋無力症の治療に有用であり、また、多発性硬化症にも著効例が報告されている。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
イ．甲第２号証刊行物（以下、「刊行物２」という。）には、イムソーバ（ＩＭ−ＴＲ）の「誕生」、「基礎研究」及び「臨床応用」についての説明及び、イムソーバ（ＩＭ−ＰＨ）の「誕生」及び「基礎的研究」についての説明がなされており、これに関連し、刊行物１と同旨の説明に加えて、大要、以下ａ．及びｂ．の事項が記載されている。
ａ．吸着材イムソーバＩＭ−ＴＲのゲル保持量は１０ｍｇ／ｍｌゲルであること。
ｂ．ｔｒｙｐｔｏｐｈａｎ−ＰＶＡ　ｂｅａｄｓを用いた免疫吸着材は、旭メディカル(株)で開発され、１９８９年に許可（承認番号（０１Ｂ）第１１２８号）され販売されており、商品名は、選択的血漿成分吸着器「イムソーバＴＲ−３５０」であること。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
ウ．甲第３号証刊行物（以下、「刊行物３」という。）には、大要、以下の事項が記載されている。
　４つの方法によるプラズマフェレーシス、即ち、中空繊維濾過膜を用いた二重濾過（ＤＦＰＰ）、並びに、デキストランサルフェート（ＤＳ）、フェニルアラニン（ＩＭＰ）、トリプトファン（ＩＭＴ）を用いた吸着療法を行い、プラズマフェレーシスの手法の違いによる処理後の血液及び血漿の粘度変化の違いを調査したところ、その結果は、以下のとおりであった。
・ＩＭＴ処理前後における全血の粘度の変化は、特にｓｈｅａｒ　ｒａｔｅ　１１５ｓ−１において顕著に減少すること。
・ 上記４つの方法によるプラズマフェレーシスの前後における血漿の粘度の変化がに示されており、いずれの手法においても血漿の粘度が顕著に減少すること。
・上記４つの手法における第２フィルターもしくは第２カラムの前後（第1フィルターではいずれも血球と血漿の分離が行われ、分離された血漿が第２フィルターもしくは第２カラムに通される）における血漿粘度の変化が示されており、上記ＤＦＰＰおよびＩＭＴにおいて血漿の粘度が顕著に減少すること。
・第２カラム前後におけるラボでの測定結果によれば、ＩＭＴを用いた処理の前後においてフィブリノーゲンが顕著に減少していること。　　　　　　　　　
エ．甲第４号証刊行物（以下、「刊行物４」という。）には、大要、以下の事項が記載されている。
　旭メディカル（株）社製イムソーバＴＲ−３５０及びイムソーバＰＨー３５０その他の市販の４つの吸着材について、血漿療法のターゲット物質に対する吸着能力を試験した結果、イムソーバＴＲ―３５０がＬＤＬ（ＬＤＬ−ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ）に対する吸着能力を有していること（除去率４２％）。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
オ．甲第５証刊行物（以下、「刊行物５」という。）には、大要、以下ａ．及びｂ．の事項が記載されている。
ａ．病因的根拠について
・末梢動脈の機能的、あるいは器質的な挟細化によって本来は粘調度の高くない血液が相対的高粘調度血症の状態を示すことによると想定される病態（末梢循環障害）があること。
・血漿中に存在する蛋白成分の量ではアルブミングロブリンフィブリノーゲンの順であるが、粘調度を上昇させる影響力では、アルブミングロブリンフィブリノーゲンの順であるとの報告があること。
・ 相対的高粘調度血症を是正することが、末梢抵抗が減弱し、末梢循環が改善されるとの報告があること。その手法として、二重濾過血漿分離交換法により、末梢循環を改善することが可能と考えらること。
ｂ．臨床例について
　慢性腎不全、動脈硬化症、狭心症、二次性副甲状腺機能亢進症と診断され、大動脈・細動脈ともに高度な硬化所見が認められた間欠性跛行を訴える患者に対し、動脈硬化症に由来する末梢動脈挟細化による循環障害と判断し、大分子除去による血液粘稠度降下、ひいては末梢循環の改善を目論んで、濾過血漿分離交換法を行った結果、症状の軽減が認められ、血中フィブリノーゲン値およびβ-リポプロテイン値の降下と血液粘稠度の降下が認められたこと。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
カ．甲第６証刊行物（以下、「刊行物６」という。）には、大要、以下ａ．〜ｅ．の事項が記載されている。
ａ．フィブリノーゲンおよび高分子量血漿蛋白質の除去とへマトクリットの低減という治療概念を組み合わせて黄斑症を有する１６患者に適用した。
ｂ．へマトクリットは赤血球アフェレシスにより低減させ、フィブリノーゲンおよび血漿蛋白質は血漿交換法により除去したこと。
ｃ．１６例の黄斑症患者のうち９例において視力の有意な上昇が起こったこと。
ｄ．血漿粘度はフィブリノーゲンおよび高分子量蛋白質と相関すること。
ｅ．眼の循環系の疾患において、・・フィブリノーゲンを含む高分子量の血漿蛋白質の除去は、血液のレオロジー特性を改善し、視力の増加をもたらすことが可能であること。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
（４）対比・判断
ア．本件請求項１〜３発明について
　本件請求項１発明と上記刊行物１〜６に記載の事項とを対比すると、上記各刊行物１〜６に記載のものは、本件請求項１発明の「疎水性構造と陰性官能基とを有する化合物を表面に有する架橋多孔質材からな」る吸着材であって、かつ、該架橋多孔質材の排除限界分子量が「５×１０５ 以上、１×１０８ 以下であ」り、該化合物が「スチレンスルフォン酸、ドデシルベンゼンスルフォン酸、β−メタクリロイルオキシエチルハイドロジェンフタレート、２−アクリロイルオキシエチルフタル酸、ヘスペリチン酸、ビニル安息香酸、４−フォスフォニルスチレン等、アデノシン−３’−リン酸、グアノシン−２’−リン酸、シチジン−２’−リン酸、チミジン−３’−リン酸、エルゴチオネイン、キヌレニン、フェニルグリシン、チロシン、チロキシン、及びその誘導体、あるいはこれらを重合単位として含むオリゴマーやポリマー、のいずれかから選ばれるものであ」る事項を具備しておらず、当該事項により本件請求項１発明は、フィブリノーゲン及び低比重リボ蛋白質（ＬＤＬ）の両方ともに対し吸着能を発揮し、血管閉塞性疾患血漿の粘度を効率よく低下させることができる、という血漿粘度低下用吸着材として顕著な効果を奏するものである。
　ここで、さらに上記刊行物の記載事項について検討すると、上記したように、刊行物１ないし４には、ＩＭ−ＴＲ、イムソーバＴＲ−３５０あるいはＩＭ−Ｔとして、ポリビニルアルコールゲルの担体にリガンドとして疎水性アミノ酸トリプトファンを固定化したもの、及びＩＭ−ＰＨ、イムソーバＰＨ−３５０あるいはＩＭＰとして、ポリビニルアルコールゲルの担体にリガンドとして疎水性アミノ酸フェニルアラニンを固定化したものに関する記載事項があるが、トリプトファン及びフェニルアラニンは、上記本件請求項1発明において特定された化合物とは別異のものであるから、これらトリプトファン及びフェニルアラニンに関する記載事項などが、上記本件請求項１発明が具備する上記事項を示唆するものとはいえない。
　上記のことから、本件請求項１発明が上記刊行物１〜６に記載の事項から容易に発明をすることができたものとはいえない。
　また、本件請求項２、３発明は、請求項１を引用しているから、ともに同じく、上記刊行物１〜６に記載の事項から容易に発明をすることができたものとはいえない。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
イ．本件請求項４〜６発明について
　本件請求項４発明は、請求項１に係る発明の血漿粘度低下用吸着材を内蔵する、血漿の入口と出口を有する、血管閉塞性疾患血漿の血漿粘度低下装置であるから、本件請求項１発明において検討した上記の事項により、フィブリノーゲン及び低比重リボ蛋白質（ＬＤＬ）の両方ともに対し吸着能を発揮し、血管閉塞性疾患血漿の粘度を効率よく低下させることができる、という血漿粘度低下装置として顕著な効果を奏するものであり、本件請求項４発明が上記刊行物１〜６に記載の事項から容易に発明をすることができたものとはいえない。
　また、本件請求項５、６発明は、請求項４を引用しているから、ともに同じく、刊行物１〜６に記載の事項から容易に発明をすることができたものとはいえない。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
（５）むすび
　以上のとおりであるから、特許異議申立ての理由及び証拠によっては、本件請求項１〜６に係る発明についての特許を取り消すことはできない。
　また、他に本件請求項１〜６に係る発明についての特許を取り消すべき理由を発見しない。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　したがって、本件請求項１〜６に係る発明についての特許は拒絶の査定をしなければならない特許出願に対してされたものと認めない。
　よって、結論のとおり決定する。
【異議決定日】
平成１６年２月９日（２００４．２．９）
【訂正の要旨】
審決（決定）の【理由】欄参照。
（５４）【発明の名称】
血管閉塞性疾患血漿の血漿粘度低下用吸着材及び血漿粘度低下装置
（５７）【特許請求の範囲】
　【請求項１】　疎水性構造と陰性官能基とを有する化合物を表面に有
する架橋多孔質材からなり、該架橋多孔質材の排除限界分子量が５×１０５以上１×１０８以下であって、該化合物がスチレンスルフォン酸、ドデシルベンゼンスルフォン酸、β−メタクリロイルオキシエチルハイドロジェンフタレート、２−アクリロイルオキシエチルフタル酸、ヘスペリチン酸、ビニル安息香酸、４−フォスフォニルスチレン、アデノシン−３’−リン酸、グアノシン−２’−リン酸、シチジン−２’−リン酸、チミジン−３’−リン酸、エルゴチオネイン、キヌレニン、フェニルグリシン、チロシン、チロキシン、及びその誘導体、あるいはこれらを重合単位として含むオリゴマーやポリマー、のいずれかから選ばれるものであり、
　【請求項２】　化合物が、分子量６００あたりに１個以上の陰性官能基と、分子量４００あたりに１個以上の疎水性構造を有する事を特徴とする請求項１記載の血管閉塞性疾患血漿の血漿粘度低下用吸着材。
　【請求項３】　血管閉塞性疾患血漿が黄班変性症、閉塞性動脈硬化症、巣状糸球体硬化症、急性進行性糸球体腎炎、閉塞性血栓血管炎、静脈血栓症、脳血管障害、経皮的冠動脈形成術或いは心血管バイパス術後のいずれかの血漿である請求項１記載の血管閉塞性疾患血漿の血漿粘度低下用吸着材。
　【請求項４】　疎水性構造と陰性官能基とを有する化合物を表面に有
する架橋多孔質材からなって、該架橋多孔質材の排除限界分子量が５×１０５以上１×１０８以下であって、該化合物がスチレンスルフォン酸、ドデシルベンゼンスルフォン酸、β−メタクリロイルオキシエチルハイドロジェンフタレート、２−アクリロイルオキシエチルフタル酸、ヘスペリチン酸、ビニル安息香酸、４−フォスフォニルスチレン、アデノシン−３’−リン酸、グアノシン−２’−リン酸、シチジン−２’−リン酸、チミジン−３’−リン酸、エルゴチオネイン、キヌレニン、フェニルグリシン、チロシン、チロキシン、及びその誘導体、あるいはこれらを重合単位として含むオリゴマーやポリマー、のいずれかから選ばれるものであり、
　【請求項５】　分子量６００あたりに１個以上の陰性官能基と、分子量４００あたりに１個以上の疎水性構造を有する化合物を表面に有する架橋多孔質材が、フィブリノーゲンおよび低比重リポ蛋白質の吸着材として充填されている請求項４記載の血漿粘度低下装置。
　【請求項６】　血管閉塞性疾患血漿が黄班変性症、閉塞性動脈硬化症、巣状糸球体硬化症、急性進行性糸球体腎炎、閉塞性血栓血管炎、静脈血栓症、脳血管障害、経皮的冠動脈形成術或いは心血管バイパス術後のいずれかの血漿である請求項４記載の血漿粘度低下装置。
【発明の詳細な説明】
　【０００１】
　【産業上の利用分野】
　本発明は、フィブリノーゲンと低比重リポ蛋白質（以下ＬＤＬと称す）等の血漿中の高分子物質を吸着除去することによって血漿粘度を低下するための吸着材及び装置であって、体外循環治療法で血管閉塞性疾患の治療に用いることを目的とするものである。
　【０００２】
　【従来技術とその問題点】
　従来血管閉塞性疾患の治療には外科的手術やカテーテルを用いた経皮的手技等によって血管を形成する方法や、ヘパリン等の抗凝固剤やウロキナーゼ或いはプラスミノーゲン・アクチベーター等の血栓溶解酵素等を用いる内科的方法等が行われてきた。
　これに対し血管閉塞性疾患の内、閉塞性動脈硬化症や巣状糸球体硬化症では、硫酸化多糖であるデキストラン硫酸をセルロース製
の
　また膜を使って分子量で分ける二重膜濾過法が、フィブリノーゲンや低比重リポ蛋白質を除去することで、自己免疫性疾患患者血漿の粘度を低下させることを目的に試みられている。しかし二重膜濾過法では補液が必要であること、分解される物質の選択性が無いこと、除去効率も非常に低いことなどの問題点があった。
　【０００３】
　【発明が解決しようとする課題】
　本発明の目的は、体外循環により、血管閉塞性疾患血漿の粘度を効率良く低下させる吸着材及び血漿粘度低下装置を提供するにある。
　【０００４】
　【課題を解決するための手段】
　本発明は疎水性構造と陰性官能基とを有する化合物を表面に有する吸着材によって、フィブリノーゲンと低比重リポ蛋白質とを吸着することにより、血管閉塞性疾患血漿の粘度を低下させることを特徴とする。
　【０００５】
　対象疾患
　本発明の血漿粘度低下装置の目的は効率良く血漿粘度を低下することで、最終的には血液粘度を低下させることである。血液粘度は血漿粘度と、細い空間をすり抜ける際の赤血球や白血球、或いは血小板の柔軟性や粘着性等によって決まる。このため赤血球や白血球等の血球状態が血液粘度に大きく影響している場合は、本発明は必ずしも好適に用いられるとは限らない。
　発明者らの研究によると、全身性エリテマトーデスや混合性結合組織疾患などの自己免疫性疾患では血液粘度に対する血球状態の影響が大きく、本発明の目的としては必ずしも好ましくなかった。
　本発明の血漿粘度低下装置が対象とする血漿は血管閉塞性疾患血漿であって、具体的にはマキュロパシア（Ｍａｃｕｌｏｐａｔｈｉａ）等の黄班変性症、閉塞性動脈硬化症、巣状糸球体硬化症、急性進行性糸球体腎炎、閉塞性血栓血管炎、血栓性血小板減少性紫斑病、溶血性尿毒症、肝静脈血栓症、肝動脈血栓症、肝内静脈で時に見られる静脈閉塞性疾患、門脈閉塞性疾患、中心静脈カテーテル挿入患者で多く見られる静脈血栓症、脳血管障害等の疾患由来の血漿があげられる。或いは経皮的冠動脈形成術或いは心血管バイパス術後の血漿の粘度低下にも用いることができ、再狭窄防止の点で有用である。
　中でも黄班変性症、閉塞性動脈硬化症、巣状糸球体硬化症、急性進行性糸球体腎炎、閉塞性血栓血管炎、静脈血栓症、脳血管障害、経皮的冠動脈形成術或いは心血管バイパス術後の血漿により好ましく用いられ、更には黄班変性症が最も好ましく用いられる。
　【０００６】
　吸着対象物質
　本発明の血漿粘度低下装置が吸着する対象物質は、フィブリノーゲン及びＬＤＬである。これらに加えて極低比重リポ蛋白質（以下ＶＬＤＬと称す）もまた吸着することが好ましい。
　【０００７】
　血漿粘度低下装置の構成
　本発明でいう血漿粘度低下装置は、疎水性構造と陰性官能基とを有する化合物（以下リガンドと称す）を表面に有する架橋性多孔質体からなる吸着材を、入口と出口と、吸着材の漏れを防止する手段とを有する容器に充填したものである。
　本血漿粘度低下装置は血液の導入口、抗凝固剤を混合する手段、血液を灌流する手段、中空糸膜を用いた血液から血漿を分離する手段、分離した血漿を血漿粘度低下装置に灌流する手段、血漿粘度低下装置、血漿を分離した血液と粘度を低下させた血漿とを混合する手段、及び血液を導出する手段とを、この順に有する装置に組み込んで使用することができる。或いは血液の導入口、抗凝固剤を混合する手段、血液を灌流する手段、血漿粘度低下装置、血漿粘度を低下させた血液を導出する手段とを、この順に有する装置に組み込んで使用することもできる。いずれであってもよいが、特に血液から血漿を分離する手段を有する方が血小板等の血球成分への影響が少なく、望ましい。
　【０００８】
　リガンド性状
　本血漿粘度低下装置に用いるリガンドは、陰性官能基を有する化合物であることが好ましい。ここで言う陰性官能基とはカルボキシル基、硫酸基、リン酸基など、中性のｐＨで陰性を示す官能基を言う。このうちＬＤＬの吸着能力の点でカルボキシル基と硫酸基がより好ましく用いられる。最も好ましくは硫酸基があげられる。
　フィブリノーゲンは陰性官能基を多数有する親水性リガンドでも吸着することができるが、この時十分な吸着能力を得るためには、リガンドの分子量は１００，０００以上で且つ分子量２００あたりに１個以上の陰性官能基が存在することが好ましかった。一方、リガンドが高分子量になると、安定性が低下する、リガンドを架橋多孔質材に共有結合する場合の反応性が低下する、或いは実用時には血漿と接触した際、血液キニンを生成する可能性が高まる、等の問題点があった。
　以上の点より、フィブリノーゲンの吸着には疎水性構造を用いることがより好ましい。疎水性構造を置換基或いは炭化水素の形で表現して例示すると、メチル、エチル、プロビル、ブチル等の鎖式アルキル構造やベンゼン、シクロヘキセン、ベンゾフラン、ベンゾイミダゾール、インドール等の環式構造及びこれらの誘導体をいう。これらは他の置換基を有していても良い。これらの内、特に吸着能力の点で環式構造及びその誘導体であることが好ましい。
　【０００９】
　リガンドの分子量
　リガンドの分子量はいずれであっても良く、特に規定は不要であるが、ＬＤＬ、ＶＬＤＬの吸着のためには分子量が大きく、１つのリガンド化合物中に多数の陰性官能基を有することでＬＤＬ等と多点で結合しやすくなるため好ましい。一方、分子量が大きくなると、疎水性構造によって架橋多孔質体からリガンドが長く伸びにくくなり、分子量の効果が発揮されなくなる。よって好ましい分子量は２００以上５０，０００以下である。
　リガンド中での陰性官能基の密度はＬＤＬの吸着能力の点で分子量６００あたりに１個以上、更には分子量４００あたりに１個以上存在することが好ましい。また疎水性構造も分子量６００あたりに１個以上、より好ましくは分子量４００あたりに１個以上存在することである。
　【００１０】
　リガンドの具体例
　上記のリガンド
の具
合成化合物としては
核酸としては
アミノ酸類としては
、フ
、チ
ン及
ーが
　以上の中でスチレンスルフォン酸、ビニル安息香酸のモノマー、オリゴマー、ポリマ
ー、が
　【００１１】
　架橋多孔質材
　本発明でいう架橋多孔質材とは、リガンドを固定するための、通常吸着材の担体として用いられるものであって、血漿の流通性の点より架橋されている多孔質材料をいう。
　架橋多孔質材の形状としては、球状、粒状、糸状、中空糸状、平膜状等いずれも有効に用いられるが、実用時の血漿の流通面より球状又は粒状がより好ましく用いられる。球状又は粒状の平均粒経は、１０μｍから２５００μｍのものが使いやすいが、２５μｍから１０００μｍの範囲が好ましく、より好ましくは５０μｎから６００μｍである。
　架橋多孔質材の排除限界分子量は、５×１０５以上、１×１０８以下のものが好ましい。更に、ＶＬＤＬの高い吸着性能を発揮できる点より、２×１０６以上、２×１０７以下のものがより好ましい。排除限界分子量が２×１０６を下回るとＶＬＤＬの吸着能力が低下し、更に５×１０５を下回るとＬＤＬの吸着能力も又低下すること、又１×１０８を越えるとポアサイズが大きくなりすぎ、吸着に寄与する表面積が低下する結果ＬＤＬ、ＶＬＤＬ、フィブリノーゲンの吸着能力が低下する。
　【００１２】
　架橋多孔質材の材質
　架橋多孔質材の具体例を上げると、例えばメチルメタクリレート、ポリビニルアルコール、スチレン、ジビニルベンゼン、ビニルエーテル、無水マレイン酸、ポリアミド等の内の１つ又は複数を構成成分とする合成高分子、及び（又は）セルロース等の天然高分子を原料として架橋合成した硬質ゲルなどがある。これらは、ヒドロキシエチルメタクリレート、ヒドロキシエチルアクリレート等のヒドロキシ基を有する高分子材料、ビニルアミン、ジメチルアミノエチル（メタ）アクリレート等の単量体と他の重合性単量体との共重合体、セグメント化ポリウレタン、セグメント化ポリエステル等のブロック共重合体、ポリエチレンオキサイド鎖を有する単量体と他の重合性単量体との共重合体の様なグラフト共重合体等のコーティング層を有していても良い。
　これらの中でセルロファインなどの架橋合成セルロースや、ポリビニルアルコール等からなる合成高分子のゲルが、硬質であり、且つゲル表面に活性基を比較的容易に得られるため、架橋多孔質材として実用上好ましい。
　【００１３】
　架橋多孔質材へのリガンドの導入方法
　リガンドを架橋多孔質材に導入する方法には、リガンドを溶解した液中に架橋多孔質材を浸漬、或いは該液を噴霧することによってコーティングする方法、化学的に或いは放射線や電子線を用いてのグラフト法によって架橋多孔質材表面に共有結合する方法、或いは化学的方法により架橋多孔質材表面の官能基を介して共有結合する方法などがある。この中でグラフト法、官能基を介しての共有結合法が使用時のリガンドの溶出する危険性がなく、好ましい。架橋多孔質材が被覆層を有する場合はその被覆層表面に不溶化することもできる。
　架橋多孔質材表面の活性基は、リガンド中のアミノ基、水酸基、カルボキシル基などの活性水素を有する求核反応基と置換及び／又は付加反応できるものであれば良い。
　架橋多孔質材に活性基を得る方法の一例としてはハロゲン化シアン法、エピクロルヒドリン法、ビスエポキシド法、ブロモアセチルブロミド法等が知られている。架橋多孔質材の活性基の具体例としてはアミノ基、カルボキシル基、ヒドロキシル基、チオール基、酸無水物基、サクシニルイミド基、塩素基、アルデヒド基、アミド基、エポキシ基、トレシル基などがあげられる。
　この中で加熱滅菌時の安定性よりエピクロルヒドリン法で誘導されるエポキシ基が特に好ましい例としてあげられる。
　【００１４】
　吸着材表面の陰性官能基の量
　吸着材の表面の陰性官能基の量は、多すぎると血漿と接触した際にハーゲマン因子、プレカリクレインを活性化して高分子量キニノーゲンの分解を促進し、血液キニン濃度の上昇を引き起こすことがある。一方、陰性官能基の量が少なすぎると、血液キニン濃度の上昇は十分に抑制できるが、被吸着物質の吸着能力が十分に得られず、やはり好ましくない。本発明が最も優れた効果を発揮する、膨潤した吸着材容量当たりの好ましい吸着材表面の陰性官能基の量は、中性塩分解法で測定する時、０．５μ当量／ｍｌ以上１００μ当量／ｍｌ以下である。特に１．０μ当量／ｍｌ以上５０μ当量／ｍｌ以下の時、最も好ましい結果が得られる。
　【００１５】
　【実施例１】
　ポリビニルアルコール製多孔質ビーズを架橋多孔質材として用いた。多孔質ビーズは排除限界分子量が５×１０６、膨潤状態の粒子径７０μｍであった。この多孔質ビーズ１容と、スチレンスルフォン酸ナトリウム５％を溶解した１０％エタノール水溶液５容とをガラス容器に入れ、γ線２５ＫＧｙを照射して放射線グラフトして、ポリスチレンスルフォン酸をリガンドとして表面に有する吸着材を得た。
　得られた吸着材表面の陰性官能基量は中性塩分解法でもとめたところ、吸着材１ｍｌあたり２５．４μ当量であった。また固定化されたリガンドの分子量はグラフト後のエタノール水溶液中のポリスチレンスルフォン酸の分子量を、ポリエチレングリコールを対照にして高速液体クロマトグラフィーで測定したところ４４，０００であった。
　この吸着材５ｍｌを入口と出口とを有し、内部に吸着材の漏れ防止用メッシュを内蔵した円筒型容器に充填して血漿粘度低下装置とした。この血漿粘度低下装置に、抗凝固剤としてヘパリンを用いて得た黄班変性症血漿を、ペリスタポンプを用いて血漿灌流速度０．３ｍｌ／分で灌流し、血漿粘度低下装置より流出する血漿５ｍｌを１フラクションとして採取した。最初のフラクションを捨て、第２フラクションより第４フラクションまでを採取し、各フラクション中のＬＤＬ、ＶＬＤＬ、血液キニンの濃度を測定した。この時、第２フラクションより第４フラクションまでを混合し、血漿粘度を測定した。同様の方法で、抗凝固剤としてクエン酸を用いて得た黄班変性症血漿を灌流して、各フラクション中のフィブリノーゲン濃度を測定した。
　ＬＤＬ及びＶＬＤＬの濃度は比重遠心法、フィブリノーゲンは発色法により、それぞれの濃度を求め、第２フラクションより第４フラクションまでの濃度の平均値の、元の血漿濃度に対する濃度低下の割合を吸着率として求めた。血液キニンはラジオイムノアッセイ法で各フラクション濃度を測定し、第２フラクションより第４フラクションまでの最も高い濃度を、血液キニン濃度とした。血漿粘度はオスワルト粘度計を用い、水に対する相対粘度として求めた。
　元の血漿中のＬＤＬ、ＶＬＤＬ、フィブリノーゲン、血液キニンの濃度はそれぞれ、５５６ｍｇ／ｄｌ、１０９ｍｇ／ｄｌ、１６７ｍｇ／ｄｌ、４２．２ｐｇ／ｍｌであった。また相対粘度は２．０６であった。本血漿粘度低下装置灌流後のＬＤＬ、ＶＬＤＬの吸着率はそれぞれ９７．５％、９０．８％、フィブリノーゲンは検出限界以下で吸着率は８８．０％以上となった。本血漿粘度低下装置はＬＤＬ、ＶＬＤＬ、フィブリノーゲンに対して高い吸着能力を有していた。一方血液キニンは７３．１ｐｇ／ｍｌであり、上昇させなかった。
　この時の血漿粘度は１．５６、血漿粘度の低下率は２４．３％であり、優れた血漿粘度の低下機能を示した。
　【００１６】
　【実施例２】
　スチレンスルフォン酸ナトリウムをビニル安息香酸に変更し、グラフト時のビニル安息香酸の仕込み濃度を７％とした以外は実施例１と同様にして、ポリビニル安息香酸をリガンドとして表面に有する吸着材を得た。
　得られた吸着材表面の陰性官能基量は中性塩分解法でもとめたところ、吸着材１ｍｌあたり３４．２μ当量であった。また固定化されたリガンドの分子量はグラフト後のエタノール水溶液中のポリビニル安息香酸の分子量を測定することでもとめたところ、２９，０００であった。
　この吸着材を用いて実施例１と同様にして、急性進行性糸球体腎炎血漿を灌流した。
　元の血漿中のＬＤＬ、ＶＬＤＬ、フィブリノーゲン、血液キニンの濃度はそれぞれ、５３２ｍｇ／ｄｌ、１０１ｍｇ／ｄｌ、１７３ｍｇ／ｄｌ、３１．５ｐｇ／ｍｌであった。また相対粘度は１．８８であった。
　本血漿粘度低下装置灌流後のＬＤＬ、ＶＬＤＬの吸着率はそれぞれ９７．４％、９０．１％、フィブリノーゲンは検出限界以下で吸着率は８８．４％以上となった。本血漿粘度低下装置はＬＤＬ、ＶＬＤＬ、フィブリノーゲンに対して高い吸着能力を有していた。一方血液キニンは６７．５ｐｇ／ｍｌであり、上昇させなかった。
　この時の血漿粘度は１．３８、血漿粘度の低下率は２６．５％であり、優れた血漿粘度の低下機能を示した。
　【００１８】
　【比較例１】
　架橋セルロース担体に分子量５，０００のデキストラン硫酸を不溶化した市販のＬＤＬ吸着材（鐘淵化学社製、ＬＡ−１５）を用いて、実施例１と同様にして黄班変性症血漿を灌流した。
　本血漿粘度低下装置灌流後のＬＤＬ、ＶＬＤＬ、フィブリノーゲンの吸着率はそれぞれ９０．１％、８３．５％、６．６％であった。この血漿粘度低下装置はＬＤＬ、ＶＬＤＬ、の吸着能力はあるものの、フィブリノーゲンの吸着能力は有していなかった。一方血液キニンは１８，３００ｐｇ／ｍｌと非常に高く活性化し、実用上好ましくなかった。
　この時の血漿粘度は２．０４、血漿粘度の低下率は１．０％であり、血漿粘度の低下機能は全くなかった。
　【００１９】
　【比較例２】
　実施例１においてスチレンスルフォン酸に代えて、スチレンモノマーとスチレンスルフォン酸とを６：１のモル比で混合したものを用いた。他は同様に実施し、スチレンとスチレンスルフォン酸との共重合体をリガンドとする吸着材を得た。反応後のエタノール水溶液より、リガンド分子量は２８，０００であった。またこの分画を回収し、蒸発乾固した重量と、滴定によるスルフォン酸基の測定とから求めたところ、リガンド中の陰性官能基の密度は分子量およそ８００あたりに１個であった。
　この吸着材を用いて実施例１と同様にして黄班変性症血漿を灌流した。
　本血漿粘度低下装置灌流後のＬＤＬ、ＶＬＤＬ、フィブリノーゲンの吸着率はそれぞれ１３．７％、９．２％、８８．０％であった。この血漿粘度低下装置はフィブリノーゲンの吸着能力はあるものの、ＬＤＬ、ＶＬＤＬの吸着能力は有していなかった。一方リガンド中に疎水性構造を有しているため血液キニンは８６．７ｐｇ／ｍｌとほとんど上昇しなかった。
　この時の血漿粘度は１．９３、血漿粘度の低下率は６．３％であり、血漿粘度の低下機能は非常に低かった。
　【００２０】
　【発明の効果】
　本発明の血漿粘度低下装置により、血管閉塞性疾患血漿の粘度を効率良く低下させることができる。