(57)【要約】全粒またはふすまおよび胚芽画分もしくは成分を、酸や緑茶抽出物などのリパーゼ阻害剤による処理にかけることにより、思いがけなく優秀な貯蔵寿命の延長および優秀なビスケット焙焼機能性を示す、安定化全粒小麦粉などの安定化穀粉を、リパーゼを阻害するための加熱を行いまたは行わずに製造することができる。リパーゼ阻害剤による処理は、全粒もしくは実をテンパリングする際、またはふすまおよび胚芽画分もしくは成分の加水処理の際に行うことができる。
2014510544.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
安定化穀粉の製造方法であって、
全粒のふすまおよび胚芽をリパーゼ阻害剤で処理してリパーゼを阻害し１００°Ｆ（３７．８℃）で３０日間貯蔵したときの遊離脂肪酸含有量が約４２００ｐｐｍ未満である安定化穀粉を得るステップを含み、
処理する際のリパーゼ阻害剤の濃度が、少なくとも約０．８モル濃度であり、処理する際の阻害剤の量が、全粒１００ｌｂ当たり少なくとも０．１モルの阻害剤である、
ことを特徴とする方法。
【請求項２】
ふすまおよび胚芽を、全粒または実をテンパリングする際に、リパーゼ阻害剤の水溶液で処理することを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３】
処理した穀粒を製粉して安定化全粒粉を得ることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項４】
全粒を製粉してふすまおよび胚芽画分またはふすま成分を得て、ふすまおよび胚芽画分またはふすま成分をリパーゼ阻害剤で処理して、安定化されたふすまおよび安定化された胚芽画分または安定化されたふすま成分を得ることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項５】
リパーゼ阻害剤処理を５０℃未満の温度で行うことを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項６】
リパーゼ阻害剤処理を９８℃以下の温度で行うことを特徴とする請求項４に記載の方法。
【請求項７】
リパーゼ阻害剤処理により穀粉のｐＨが６未満に低下することを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項８】
リパーゼ阻害剤処理により穀粉のｐＨが６未満に低下することを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項９】
テンパリングして全粒中の最終含水量を全粒の重量を基準として１０重量％から１４重量％にすることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項１０】
安定化穀粉において、乳酸溶媒保持容量（ＳＲＣ）が６５以上であり、乳酸ＳＲＣの水ＳＲＣに対する比が１より大きいことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
リパーゼ阻害剤は、酸性成分を含むことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
酸性成分は、有機酸および無機酸からなる群から選択される少なくとも１種の酸を含むことを特徴とする請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
リパーゼ阻害剤は、有機酸を含むことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
リパーゼ阻害剤は、乳酸であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
リパーゼ阻害剤は、無機酸を含むことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
リパーゼ阻害剤は、塩酸およびリン酸からなる群から選択される少なくとも１種の無機酸を含むことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
リパーゼ阻害剤は、緑茶抽出物または緑茶を含むことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
リパーゼ阻害剤は、酸および緑茶を含むことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
リパーゼ阻害剤の量は、全粒の重量を基準として少なくとも３０００ｐｐｍの乳酸であることを特徴とする請求項１４に記載の方法。
【請求項２０】
リパーゼ阻害剤の量は、全粒の重量を基準として少なくとも３００ｐｐｍの阻害剤であることを特徴とする請求項１６に記載の方法。
【請求項２１】
リパーゼを３８℃未満の温度で阻害することを特徴とする請求項３に記載の方法。
【請求項２２】
処理する際のリパーゼ阻害剤の量は、全粒１００ｌｂ当たり１モルから５モルの阻害剤であることを特徴とする請求項６に記載の方法。
【請求項２３】
リパーゼを８０℃から９８℃の温度で阻害することを特徴とする請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
リパーゼ活性を低下させて１００°Ｆ（３７．８℃）で３０日間貯蔵したときの遊離脂肪酸含有量が約３，０００ｐｐｍ未満である安定化穀粉を得ることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
安定化穀粉において１００°Ｆ（３７．８℃）で３０日間貯蔵したときの遊離脂肪酸含有量が約２，０００ｐｐｍから約２，８００ｐｐｍであることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項２６】
１００°Ｆ（３７．８℃）で３０日間貯蔵したときの安定化穀粉の遊離脂肪酸含有量が３，０００ｐｐｍ未満に低減され、
処理する際の水溶液中のリパーゼ阻害剤の濃度が２モル濃度から７モル濃度であり、
処理する際の阻害剤の量が全粒１００ｌｂ当たり１モルから５モルの阻害剤である、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項２７】
リパーゼ阻害剤による処理は、穀粉のｐＨをｐＨ４．４から５．８に低下させるようなものであることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項２８】
処理したふすまおよび胚芽画分またはふすま成分を内胚乳画分に配合して安定化全粒粉を得ることを特徴とする請求項４に記載の方法。
【請求項２９】
全粒を製粉してふすまおよび胚芽画分またはふすま成分と内胚乳画分を得て、
ふすまおよび胚芽画分またはふすま成分をリパーゼ阻害剤で処理してふすまおよび胚芽画分またはふすま成分を加水処理し、
加水処理されたふすまおよび胚芽画分またはふすま成分を加熱にかけて抽出可能な酵素活性と遊離脂肪酸の産生の両方が低減されるようにリパーゼを阻害して安定化されたふすまおよび安定化された胚芽画分または安定化されたふすま成分を得、
これを内胚乳画分に配合して安定化全粒粉を得る、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３０】
ふすまおよび胚芽画分またはふすま成分に水を散布し、前記画分または成分を混合または撹拌することによりふすまおよび胚芽画分またはふすま成分を熱安定化より前にリパーゼ阻害剤で加水処理することを特徴とする請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
加水処理したふすまおよび加水処理した胚芽画分または加水処理したふすま成分を加熱にかけて９８℃未満の温度でリパーゼを阻害することを特徴とする請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】
加水処理したふすまおよび加水処理した胚芽画分または加水処理したふすま成分を加熱にかけて１００℃から１４０℃の温度でリパーゼを阻害することを特徴とする請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
リパーゼを３８℃未満の温度で阻害することを特徴とする請求項４に記載の方法。
【請求項３４】
リパーゼを３８℃未満の温度で阻害することを特徴とする請求項２９に記載の方法。
【請求項３５】
リパーゼを熱を適用せずに阻害することを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３６】
安定化全粒粉において、
示差走査熱量測定（ＤＳＣ）によって測定されるデンプン糊化度が約２５％未満であり、
乳酸溶媒保持容量（ＳＲＣ乳酸）が６５％以上であり、
乳酸ＳＲＣの炭酸ナトリウム−水溶媒保持容量（ＳＲＣ炭酸ナトリウム）に対する比が１より大きい、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３７】
リパーゼを熱を適用せずに阻害または不活性化することを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項３８】
リパーゼを熱を適用せずに阻害または不活性化することを特徴とする請求項４に記載の方法。
【請求項３９】
リパーゼを熱を適用せずに阻害または不活性化することを特徴とする請求項２８に記載の方法。
【請求項４０】
穀粉が全粒小麦粉であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項４１】
リパーゼの少なくとも一部分を可逆的に阻害することを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項４２】
リパーゼの少なくとも一部分を不可逆的に阻害することを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項４３】
リパーゼの一部分を不可逆的に阻害することを特徴とする請求項４１に記載の方法。
【請求項４４】
リパーゼを可逆的に阻害し、次いで、不可逆的に阻害することを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項４５】
リパーゼを酸によって可逆的に阻害することを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項４６】
リパーゼを酸によって不可逆的に阻害することを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項４７】
リパーゼを酸によって可逆的に阻害し、次いで、加熱によって不可逆的に阻害することを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項４８】
全粒粉の貯蔵寿命を延長する方法であって、  全粒をリパーゼ阻害剤の存在下でテンパリングしてリパーゼを阻害するステップと、
全粒を製粉して１００°Ｆ（３７．８℃）で３０日間貯蔵したときの遊離脂肪酸含有量が約４２００ｐｐｍ未満である安定化全粒粉を得るステップと、
を含み、
テンパリングの際のリパーゼ阻害剤の濃度が少なくとも約０．８モル濃度であり、
処理する際の阻害剤の量が全粒１００ｌｂ当たり少なくとも０．１モルの阻害剤である、
ことを特徴とする方法。
【請求項４９】
リパーゼを熱を適用せずに阻害することを特徴とする請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
テンパリングして全粒中の最終含水量を全粒の重量を基準として１０重量％から１４重量％にすることを特徴とする請求項４８に記載の方法。
【請求項５１】
リパーゼ阻害剤を用いたテンパリングのステップによって全粒粉のｐＨが６未満に低下することを特徴とする請求項４８に記載の方法。
【請求項５２】
安定化全粒粉において、
乳酸溶媒保持容量（ＳＲＣ）が６５以上であり、
乳酸ＳＲＣの水ＳＲＣに対する比が１より大きい、
ことを特徴とする請求項４８に記載の方法。
【請求項５３】
リパーゼ阻害剤は有機酸および無機酸からなる群から選択される少なくとも１種の酸を含むことを特徴とする請求項４８に記載の方法。
【請求項５４】
少なくとも１種の酸は有機酸を含むことを特徴とする請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
リパーゼ阻害剤は乳酸であることを特徴とする請求項４８に記載の方法。
【請求項５６】
少なくとも１種の酸は無機酸を含むことを特徴とする請求項５３に記載の方法。
【請求項５７】
リパーゼ阻害剤は塩酸およびリン酸からなる群から選択される少なくとも１種の無機酸を含むことを特徴とする請求項４８に記載の方法。
【請求項５８】
リパーゼ阻害剤は緑茶抽出物または緑茶を含むことを特徴とする請求項４８に記載の方法。
【請求項５９】
リパーゼ阻害剤は酸および緑茶を含むことを特徴とする請求項４８に記載の方法。
【請求項６０】
リパーゼ阻害剤の量は全粒の重量を基準として少なくとも約３０００ｐｐｍの有機酸であることを特徴とする請求項５４に記載の方法。
【請求項６１】
リパーゼ阻害剤の量は全粒の重量を基準として少なくとも約３００ｐｐｍの阻害剤であることを特徴とする請求項５６に記載の方法。
【請求項６２】
リパーゼを３８℃未満の温度で阻害することを特徴とする請求項４８に記載の方法。
【請求項６３】
処理する際のリパーゼ阻害剤の量は全粒１００ｌｂ当たり少なくとも２モルの阻害剤であることを特徴とする請求項４８に記載の方法。
【請求項６４】
リパーゼ活性を低下させて１００°Ｆ（３７．８℃）で３０日間貯蔵したときの遊離脂肪酸含有量が約３，０００ｐｐｍ未満である安定化全粒粉を得ることを特徴とする請求項４８に記載の方法。
【請求項６５】
安定化全粒粉において１００°Ｆ（３７．８℃）で３０日間貯蔵したときの遊離脂肪酸含有量が約２，０００ｐｐｍから約２，８００ｐｐｍであることを特徴とする請求項４８に記載の方法。
【請求項６６】
１００°Ｆ（３７．８℃）で３０日間貯蔵したときの安定化穀粉の遊離脂肪酸含有量が３，０００ｐｐｍ未満に低減され、
処理する際の水溶液中のリパーゼ阻害剤の濃度が約２モル濃度から約７モル濃度であり、
処理する際の阻害剤の量が全粒もしくは実または全粒粉１００ｌｂ当たり約１モルから約５モルの阻害剤である、
ことを特徴とする請求項４８に記載の方法。
【請求項６７】
リパーゼ阻害剤による処理は全粒粉のｐＨをｐＨ４．４から５．８に低下させるようなものであることを特徴とする請求項４８に記載の方法。
【請求項６８】
ｐＨは４．４から５．８であることを特徴とする請求項１に記載の方法によって得られる安定化全粒粉。
【請求項６９】
ふすま、胚芽、および内胚乳を含み、ふすま内に吸収されてリパーゼを阻害するリパーゼ阻害剤を有する結果、安定化穀粉において、１００°Ｆ（３７．８℃）で３０日間貯蔵したときの遊離脂肪酸含有量が約４２００ｐｐｍ未満となり、ｐＨが４．４から５．８となることを特徴とする安定化全粒粉。
【請求項７０】
リパーゼ阻害剤は、乳酸、リン酸、塩酸、緑茶抽出物、および緑茶からなる群から選択される少なくとも１つの構成員を含み、
１００°Ｆ（３７．８℃）で３０日間貯蔵したときの遊離脂肪酸含有量は３，０００ｐｐｍ未満である、
ことを特徴とする、請求項６９に記載の安定化全粒粉。
【請求項７１】
リパーゼ阻害剤の量が安定化全粒粉１００ｌｂ当たり少なくとも０．１モルの阻害剤であり、
示差走査熱量測定（ＤＳＣ）によって測定されるデンプン糊化度が約２５％未満であり、
乳酸溶媒保持容量（ＳＲＣ乳酸）が６５％以上であり、
乳酸ＳＲＣの炭酸ナトリウム−水溶媒保持容量（ＳＲＣ炭酸ナトリウム）に対する比が１より大きい、
安定化全粒小麦粉であることを特徴とする請求項６９に記載の安定化全粒粉。
【請求項７２】
リパーゼの少なくとも一部分が可逆的に阻害または可逆的に不活性化されている安定化全粒粉であることを特徴とする請求項６９に記載の安定化全粒粉。
【請求項７３】
ふすまを含み、ふすま内に吸収されてリパーゼを阻害するリパーゼ阻害剤を有する結果、
安定化ふすまもしくは安定化胚芽画分または安定化ふすま成分において
１００°Ｆ（３７．８℃）で３０日間貯蔵したときの遊離脂肪酸含有量が４２００ｐｐｍ未満となりｐＨが４．４から５．８となる、
ことを特徴とする安定化ふすまもしくは胚芽画分またはふすま成分。
【請求項７４】
９５℃で１か月の加速貯蔵後のヘキサナール含有量が安定化全粒粉の重量を基準として約２００ｐｐｍ未満であることを特徴とする請求項６９に記載の安定化全粒粉。
【請求項７５】
９５℃で１か月の加速貯蔵後のヘキサナール含有量が安定化全粒粉の重量を基準として約１０ｐｐｍ未満であることを特徴とする請求項７４に記載の安定化全粒粉。
【請求項７６】
貯蔵中に穀粉に生じる生穀粉臭が評点１を、白色粉の袋を開放しておいたものを連想させる穀粉香の最低強度とし評点１００を最高強度とする１から１００のスコアまたはスケールを使用しての熟練した味覚パネルによる官能評価に基づき、
安定化処理なしでまたは熱安定化だけを使用して製造した対照と比べて少なくとも５％低減されている、
ことを特徴とする請求項６９に記載の安定化全粒粉。
【請求項７７】
９２°Ｆ（３３．３℃）で５８日の貯蔵中に穀粉に生じる生穀粉臭が評点１を、白色粉の袋を開放しておいたものを連想させる穀粉香の最低強度とし評点１００を最高強度とする１から１００のスコアまたはスケールを使用しての熟練した味覚パネルによる官能評価に基づき、
９以下のスコアを有する、
ことを特徴とする請求項６９に記載の安定化全粒粉。
【請求項７８】
好気性寒天平板菌数（ＡＰＣ）が１５０ＣＦＵ／ｇ未満であり、
耐熱性芽胞数が７５ＣＦＵ／ｇ未満である、
ことを特徴とする請求項７７に記載の安定化全粒粉。
【請求項７９】
耐熱性芽胞数が１０ＣＦＵ／ｇ未満であることを特徴とする請求項６９に記載の安定化全粒粉。
【請求項８０】
安定化全粒粉と、
少なくとも１種の糖と、
少なくとも１種の油脂と、
前記全粒粉を安定化させるリパーゼ阻害剤と、
を含み、
風味および後味のプラスの官能属性が、評点１を官能属性の最低強度とし評点１００を最高強度とする１から１００のスケールを使用しての熟練した味覚パネルによる官能評価に基づき、
安定化処理なしでまたはリパーゼ阻害剤なしで熱安定化だけを使用して製造した対照と比べて少なくとも３％増加している、
ことを特徴とする焙焼品。
【請求項８１】
プラスの官能属性が少なくとも７％増加していることを特徴とする請求項８０に記載の焙焼品。
【請求項８２】
焙焼品はクッキーであり、
プラスの官能属性は、甘い風味、シナモンの風味、香ばしい後味、バニラの後味、および蜂蜜の後味を含む、
ことを特徴とする請求項８０に記載の焙焼品。
【請求項８３】
歯に対する粘着性の印象および粒子の量の印象といったマイナスの官能属性が、評点１を官能属性の最低強度とし評点１００を最高強度とする１から１００のスケールを使用しての熟練した味覚パネルによる官能評価に基づき、
安定化処理なしでまたはリパーゼ阻害剤なしで熱安定化だけを使用して製造した対照と比べて少なくとも３％減少している、
ことを特徴とする請求項８０に記載の焙焼品。
【請求項８４】
マイナスの官能属性が少なくとも７％減少していることを特徴とする請求項８３に記載の焙焼品。
【請求項８５】
１００°Ｆ（３７．８℃）で３０日間貯蔵したときの遊離脂肪酸含有量が、
全粒粉の重量を基準として約４２００ｐｐｍ未満である、
ことを特徴とする請求項８０に記載の焙焼品。
【請求項８６】
リパーゼ阻害剤は、アルカリ硫酸水素塩、亜硫酸水素塩、メタ重亜硫酸塩、およびメタ重硫酸塩、有機酸、無機酸、緑茶または緑茶抽出物、ローズマリー抽出物、二酸化硫黄、システイン、チオグリコール酸、グルタチオン、硫酸水素からなる群から選択される少なくとも１つの構成員を含むことを特徴とする請求項８０に記載の焙焼品。
【請求項８７】
２０重量％から８０重量％の安定化全粒小麦粉、０重量％から５０重量％の全糖固形物含有量またはテクスチャー付与原材料含有量、および３０重量％までの少なくとも１種の油脂を含むドウから焙焼されており、各重量パーセンテージは、ドウの重量を基準としたものであることを特徴とする請求項８０に記載の焙焼品。
【請求項８８】
４０重量％から６５重量％の安定化全粒小麦粉と、１５重量％から２５重量％の少なくとも１種の糖と、５重量％から２５重量％の少なくとも１種の油脂とを含むドウから焙焼されており、各重量パーセンテージは、ドウの重量を基準としたものであることを特徴とする請求項８０に記載の焙焼品。
【請求項８９】
リパーゼ阻害剤の量が安定化全粒粉１００ｌｂ当たり少なくとも０．１モルの阻害剤であることを特徴とする請求項８０に記載の焙焼品。
【請求項９０】
リパーゼ阻害剤の量が安定化全粒粉１００ｌｂ当たり１モルから５モルの阻害剤であることを特徴とする請求項８９に記載の焙焼品。
【請求項９１】
安定化全粒粉と、
少なくとも１種の糖と、
少なくとも１種の油脂と、
前記全粒粉を安定化するリパーゼ阻害剤と、
を含み、
１から１００のスケールに基づき、
ａ）甘い風味というプラスの官能属性についてのスコアが３１より高く、
ｂ）シナモンの風味というプラスの官能属性についてのスコアが１０より高く、
ｃ）香ばしい後味というプラスの官能属性についてのスコアが３１．５より高く、
ｄ）バニラの後味というプラスの官能属性についてのスコアが１７．５より高く、
ｅ）蜂蜜の後味というプラスの官能属性についてのスコアが２３．６より高く、
ｆ）歯に対する粘着性の印象というマイナスの官能属性についてのスコアが５２未満であり、
ｇ）粒子の量の印象というマイナスの官能属性についてのスコアが３６未満であり、
各属性についてのスコアは、評点１を官能属性の最低強度とし評点１００を最高強度とする１から１００のスケールを使用しての熟練した味覚パネルによる複数のサンプルの官能評価によって得たものである、
ことを特徴とする焙焼品。
【請求項９２】
安定化処理なしで製造またはリパーゼ阻害剤を使用せずに熱安定化だけを使用して製造した全粒粉で作られている以外は同じ組成を有する対照サンプルについて甘い風味というプラスの属性で３０未満のスコアが得られることを特徴とする請求項９１に記載の焙焼品。
【請求項９３】
４０重量％から６５重量％の安定化全粒小麦粉と、
１５重量％から２５重量％の少なくとも１種の糖と、
５重量％から２５重量％の少なくとも１種の油脂と、
を含むドウから焙焼されており、
各重量パーセンテージはドウの重量を基準としたものであることを特徴とする請求項９１に記載の焙焼品。
【請求項９４】
リパーゼ阻害剤の量は安定化全粒粉１００ｌｂ当たり少なくとも０．１モルの阻害剤であることを特徴とする請求項９１に記載の焙焼品。
【請求項９５】
リパーゼ阻害剤の量は安定化全粒粉１００ｌｂ当たり１モルから５モルの阻害剤であることを特徴とする請求項９１に記載の焙焼品。
【請求項９６】
焙焼品において、１００°Ｆ（３７．８℃）で３０日間貯蔵したときの遊離脂肪酸含有量が全粒粉の重量を基準として４２００ｐｐｍ未満であることを特徴とする請求項９１に記載の焙焼品。
【請求項９７】
リパーゼ阻害剤は、乳酸、クエン酸、アスコルビン酸、ソルビン酸、酒石酸、リンゴ酸、フマル酸、酢酸、シュウ酸、塩酸、リン酸、硫酸、緑茶または緑茶抽出物、およびこれらの混合物からなる群から選択される少なくとも１つの構成員を含むことを特徴とする請求項９１に記載の焙焼品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、酸敗を引き起こす酵素の阻害または低減によって全粒粉の貯蔵寿命を延長する方法に関する。本発明はまた、安定化全粒粉、およびそうした安定化穀粉から作られた焙焼品などの食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
全粒粉の遊離脂肪酸含有量は、貯蔵中に増加し、その結果、全粒粉および全粒粉で作られた製品は、その後酸敗した風味となり、貯蔵寿命が短くなる。リパーゼは、脂質を加水分解して遊離脂肪酸を生成する、全粒粉中の酵素である。一般に、遊離脂肪酸の生成および酸敗を引き起こす原因となる酵素、ならびに酵素が作用する脂質は、全粒または実を製粉して精白小麦粉を製造する際に、大部分がふすまおよび胚芽と共に除去されるため、ふすまおよび胚芽を含んだ全粒小麦粉は、精白小麦粉より不安定である。全粒小麦粉を７５°Ｆでわずか３０日間貯蔵すると、全粒粉で作られた製品中に望ましくない匂いおよび風味が現れる結果となることもある。不快な匂いの出現には、穀粉中への酸素の取込み速度の増大および酸敗の酸化成分の生成と相関した、穀粉中の遊離脂肪酸量の増加が伴う。穀粉変敗の原因となる酵素を不活性化するのに熱および水分処理が一般に使用されるが、最近では、こうした処理は、酸化型酸敗の検出に使用される一般的なマーカーであるヘキサナール生成によって測定される酸化型酸敗の原因となることが、エン麦粉において示されている。この酸化型酸敗の増加は、製粉や熱および水分処理などによって、脂質を安定させる傾向のある細胞構造が崩壊するため、または熱に不安定な抗酸化物質が不活性化されるためであると考えられている。また、酵素を不活性化するための熱および水分処理の使用は、タンパク質の機能性およびデンプンの機能性に不利な影響を及ぼすことがあり、そのためドウの機械適性および焙焼特性にも不利な影響を及ぼしかねない、タンパク質の変性およびデンプンの糊化をもたらす傾向がある。安定化温度、含水量、および処理時間を増して、より強度の酵素不活性化を実現することは、タンパク質の機能性およびデンプンの機能性に関わる問題を悪化させる傾向がある。
【０００３】
無傷の非発芽小麦の製粉品において加水分解型酸敗を引き起こすリパーゼは、ほとんどふすま成分だけに見られる。他の重要な脂質分解酵素であるリポキシゲナーゼ（ＬＰＯ）は、ほとんど胚芽だけに存在し、同様に酸敗の出現に関与する。したがって、ふすまを含んだ小麦粉またはグラハム粉は、ふすまおよび胚芽をほとんどまたは全く含まない白色粉より、はるかに酸敗が出現しやすい。
【０００４】
高抽出率（ｈｉｇｈ  ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ）小麦粉において、酸敗を引き起しながら生じる、酵素を触媒とした脂質分解は、リパーゼの作用に続くＬＰＯの作用によって起こると考えられている。ほとんど穀粒のふすま部分だけに見られる酵素であるリパーゼは、製粉の際に活性化されたとき、穀粒中に自然発生する不安定な油と反応し、不安定な油を遊離脂肪酸（ＦＦＡ）に分解すると考えられている。この過程には、数週間、または数ヶ月もかかることがある。次いで、ほとんど穀粒の胚芽部分だけに見られる酵素であるＬＰＯが、酸素の存在下でＦＦＡを酸化させて、過酸化物などの揮発性分解産物を産生し、さらに揮発性分解産物が、酸敗性アルデヒドを生じる。水分の存在なしでは、ＦＦＡの酸化も、非常にゆっくりとした過程であり、顕著な量の酸敗性アルデヒドを検出できるまでに長くて数週間かかることもある。しかし、水分、または大抵はドウ後処理段階の際に小麦粉に多量に加えられる水の存在下では、酵素を触媒とした遊離脂肪酸の酸化は、ほんの２〜３分のうちに、多量の酸敗性アルデヒドの生成を引き起こしながら、際立って非常に急速に進行する傾向がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】米国特許出願公開第２００７０２９２５８３号明細書
【特許文献２】国際公開第２００７／１４９３２０号
【特許文献３】米国特許仮出願第６１／４５７，３１５号明細書
【特許文献４】国際出特許願第ＰＣＴ／ＵＳ１２／２６４９０号明細書
【特許文献５】米国特許出願公開第２００５／０１３６１７３号明細書
【特許文献６】米国特許出願公開第２００６／００７３２５８号明細書
【特許文献７】米国特許出願公開第２００７／０２６９５７９号明細書
【特許文献８】米国特許第７，２５８，８８８号明細書
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Atwell et al., "The Terminology And Methodology Associated With Basic Starch Phenomena," Cereal Foods World, Vol.33, No.3, pgs. 306-311 (March 1988)
【非特許文献２】"Jong,C.; Badings,H.T.; Journal of High Resolution Chromatography; 1990; Determination of Free Fatty Acids in Milk and Cheese Procedures for Extraction, Clean up, and Capillary Gas Chromatography Analysis"
【非特許文献３】"Worthington, Von.; The Worthington Manual; 1993 from Worthington Biochemical Corporation, 730 Vassar Avenue, Lakewood, New Jersey 08701"
【非特許文献４】(1993) Reagent Chemicals ACS Specifications, 8th ed. 95 Worthington, C.C (1988) in Worthington Enzyme Manual (Worthington, C.C. ed.) 212-214, Worthington Biochemical Corporation, Freehold, NJ
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
したがって、酵素的分解に対して安定化された全粒粉の製造方法が、長年にわたり切実に求められている。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
一実施形態では、全粒またはふすまおよび胚芽画分もしくは成分をリパーゼ阻害剤での処理にかけて、１００°Ｆで３０日間貯蔵したときの遊離脂肪酸含有量が４２００ｐｐｍ未満である安定化穀粉を得ることにより、意外にも優れた長期貯蔵寿命および優れたビスケット焙焼機能性を示す、安定化全粒小麦粉などの安定化穀粉を、リパーゼの阻害または不活性化のために加熱しまたは加熱せずに製造することができ、処理の際の阻害剤の量は、全粒１００ｌｂ当たり少なくとも０．１モルの阻害剤である。本発明の実施形態では、リパーゼ阻害剤での処理は、水溶液中で濃度を少なくとも０．８モル濃度として施され、全粒粉、ふすまおよび胚芽画分または成分のｐＨを６未満、好ましくは５．８以下、たとえば、４．４から５．８に下げることができる。別の実施形態では、リパーゼ阻害剤での処理は、全粒をテンパリングする際、またはふすまおよび胚芽画分もしくは成分を加水処理する際に実施することができる。
【０００９】
別の実施形態では、貯蔵寿命が延長され、焙焼機能性が改良された、ふすま、胚芽、および内胚乳を含む安定化全粒粉の製造方法が開示され、ふすまおよび胚芽をリパーゼ阻害剤で処理するステップと、デンプン糊化が、示差走査熱量測定によって測定したとき１０％未満でもよく、乳酸溶媒保持容量（ｌａｃｔｉｃ  ａｃｉｄ  ｓｏｌｖｅｎｔ  ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ  ｃａｐａｃｉｔｙ）が７０％を越える安定化全粒粉を製造するステップとを含む。
【００１０】
さらに別の実施形態では、貯蔵寿命が延長され、焙焼機能性が改良された、ふすま、胚芽、および内胚乳を含む安定化全粒粉が開示され、安定化全粒粉は、１００°Ｆで３０日間貯蔵したときの遊離脂肪酸含有量が４２００ｐｐｍ未満であり、示差走査熱量測定によって測定したときのデンプン糊化が１０％未満であり、乳酸溶媒保持容量は、７０％を越えている。
【００１１】
本発明の別の態様では、ふすまおよび胚芽は、全粒を製粉した後にリパーゼ阻害剤で処理してもよい。
【００１２】
本発明の別の実施形態では、安定化全粒粉と、少なくとも１種の糖と、少なくとも１種の油脂と、全粒粉を安定化させるリパーゼ阻害剤とを含んだ焙焼品が提供され、焙焼品は、評点１を官能属性の最低強度とし、評点１００を最高強度とする、１から１００のスケールを使用しての、熟練した味覚パネルによる官能評価に基づき、安定化処理なしで、またはリパーゼ阻害剤なしで熱安定化だけを使用して製造した対照と比べて、少なくとも３％、プラスの官能属性が増加し、マイナスの官能属性が減少している。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】全粒のリパーゼ阻害剤による処理を本発明の方法に従ってテンパリングの際に行う、安定化全粒粉の製造についての流れ工程ブロック略図である。
【図２】ふすまおよび胚芽画分または成分を本発明の方法に従ってリパーゼ阻害剤で処理する、安定化全粒粉の製造についての流れ工程ブロック略図である。
【図３】実施例２の全粒粉について、抽出可能なリパーゼ活性に対するｐＨの影響を示すプロットグラフである。
【図４】９２°Ｆで３０日後に生成した総遊離脂肪酸を、実施例３の全粒粉の初期ｐＨに対してプロットしたグラフである。
【図５】実施例３の全粒粉において生成した遊離脂肪酸の抑制についての酸濃度および酸タイプの効果を示すプロットグラフである。
【図６】９２°Ｆで２８日後の実施例７の全粒粉の遊離脂肪酸含有量に対する乳酸およびテンパリング水レベルの効果を示す、二変数分析プロットグラフである。
【図７】実施例７の全粒粉について、乳酸ＳＲＣ値によって測定される穀粉強度に対するテンパリング時間および乳酸添加量の影響を示すプロットグラフである。
【図８】実施例７の最終全粒粉における遊離脂肪酸（ＦＦＡ）生成を、小麦に適用した酸の濃度および量に対して示すプロットグラフである。
【図９】実施例７の微細ふすまおよび縮小穀粉について、ｐＨを酸濃度に対して示すプロットグラフである。
【図１０】実施例７の全粒粉において生成した遊離脂肪酸（ＦＦＡ）をｐＨに対して、また小麦に適用した酸濃度を示すグラフである。
【図１１】テンパリング水中の乳酸濃度が、９２°Ｆで２８日後の実施例７の全粒粉の乳酸ＳＲＣ／水ＳＲＣ比に与える影響を示すプロットグラフである。
【図１２】テンパリング水中の乳酸濃度が、９２°Ｆで２８日後の実施例７の全粒粉の乳酸ＳＲＣ／水ＳＲＣ比に与える影響を示すプロットグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
ここで、本発明の種々の実施形態の特定の詳細な態様に言及する。開示する実施形態は、本発明を単に例示するものであり、数多くの代替的な形態において体現することができると理解されたい。したがって、本明細書で開示する詳細な項目は、限定するものとは解釈されず、単に、本発明のいずれかの態様の典型的な基盤として、および／または当業者に本発明を様々に用いるよう教示するための典型的な基盤として解釈される。
【００１５】
実施例中、または別段特記する場合を除き、材料および／または使用の量を示す、本記述におけるすべての数量は、本発明の最も広い範囲を述べる際に「約」という語によって修飾されると理解されたい。記載された数値範囲内での実施が一般に好ましい。
【００１６】
詳細な成分および／または条件は、当然のことながら、様々となり得るので、本発明が、以下で記載する詳細な実施形態および方法に限定されないことも理解されたい。さらに、本明細書で使用する術語は、本発明の特定の実施形態について記載する目的のためだけに使用され、決して限定するものではない。特に、図面は、原寸に比例していない。
【００１７】
また、本明細書および付属の請求項において使用するとき、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈からそうでないと明示されない限り、複数の指示対象を含むことにも留意しなければならない。たとえば、単数の成分への言及は、複数の成分を含むものとする。
【００１８】
本出願では終始、刊行物を参照文献として引用する場合、本発明が関係する現況技術についてより十分に説明するために、そうした刊行物の全体としての開示が、参照により本出願に全体として援用される。
【００１９】
用語「全粒」は、加工前の、たとえば、小麦粒または種実としての全体としての穀粒を包含する。米国食品医薬局（ＦＤＡ）２００６年２月１５日ドラフトガイダンスに示されているとおり、また本明細書で使用するとき、用語「全粒」は、主な構成要素（デンプン質の内胚乳、胚芽、およびふすま）が、無傷の穀粒中に存在するのと同じ相対的割合で存在する、穀粒の無傷の実、粉砕した実、挽き割りにした実、または薄片にした実からなる禾穀粒（ｃｅｒｅａｌ  ｇｒａｉｎ）を包含する。ＦＤＡは、このような穀粒として、大麦、蕎麦、ブルグア小麦（ｂｕｌｇｕｒ）、トウモロコシ、キビ、ｆｌｅｅ、ライ麦、エンバク、モロコシ、小麦、およびワイルドライスを挙げることができると概説している。
【００２０】
用語「精白小麦粉製品」とは、９８％以上がＵ．Ｓ．Ｗｉｒｅ７０篩（２１０ミクロン）を通過する粒度という、精白小麦粉製品のＦＤＡ規格を満たす小麦粉である。
【００２１】
用語「製粉」は、本明細書で使用するとき、全粒をロール掛けし、破断し、篩分けし、選別してその構成成分に分離するステップを包含し、これによっても、構成成分の粒度は多少縮小することがある。
【００２２】
用語「粉砕」は、本明細書で使用するとき、限定はしないが、粒子を互いに衝突させる、または粒度を機械的に縮小することを含めて、粒度を縮小することに向けられた任意の工程を包含する。
【００２３】
用語「テンパリング」とは、本明細書で使用するとき、ふすまを砕けにくくし、種実の内胚乳を柔らかくする、すなわち、穀粉分離効率を向上させるために、製粉前に小麦に水を加える工程である。
【００２４】
用語「加水処理」または「後加水」とは、本明細書で使用するとき、製粉後または粉砕後の含水状態を調節して、個々の構成成分の含水量を調節する、および／または最終穀粉の含水量を調節するステップを指す。
【００２５】
また、本明細書で使用するとき、リパーゼまたは酵素の「阻害」とは、リパーゼまたは酵素が、その酵素産物をもはや産生しない、またはその酵素産物の産生を実質上減少させていることを意味する。用語「阻害」は、本明細書で使用するとき、リパーゼまたは酵素が不活性化され、または実質上不活性化される、リパーゼ不活性化をさらに包含する。たとえば、リパーゼ阻害は、リパーゼ酵素によってトリグリセリドが加水分解されず、穀粉中に遊離脂肪酸が遊離しないことを意味する。酵素によるその酵素産物の産生能の阻害は、可逆的である場合もあり、または不可逆的である場合もある。たとえば、酵素を加熱して酵素を変性させると、酵素を不可逆的に不活性化することができる。酵素阻害剤での処理では、酵素を可逆的または不可逆的に不活性化することができる。たとえば、酸で処理してリパーゼを阻害すると、酵素産物の産生、すなわち、遊離脂肪酸の生成が低減される。しかし、可逆的な阻害では、抽出可能な酵素活性または測定可能なリパーゼ活性が依然として存在し得る。酵素を引き出してその活性を測定するとき、酵素を、その活性が復活または逆転するより高いｐＨ環境に置くことにより、その活性に対する阻害が排除されることがある。また、酸処理では、リパーゼ阻害を不可逆的にし、またはリパーゼ不活性化を不可逆的にする程度にｐＨを低下させることもできるので、酵素産物の生成も低減され、抽出可能な酵素活性も低下する。
【００２６】
さらに他の実施形態では、リパーゼの全部または一部を可逆的または不可逆的に阻害または不活性化することができる。本発明の実施形態では、リパーゼの全部または一部を、まず、第１の安定化段階において可逆的に阻害または不活性化し、次いで、第２の安定化段階において不可逆的に阻害または不活性化することができる。リパーゼ阻害剤は、全粒粉またはふすまおよび胚芽画分もしくは成分中に保持されて、リパーゼを実質上阻害または不活性化し、さもなければリポキシゲナーゼが作用して最終的に酸敗性アルデヒドを生じることになる、遊離脂肪酸の生成を実質上低減することができる。別の実施形態では、リパーゼ阻害剤は、遊離脂肪酸の生成を低減し、また全粒、ふすまおよび胚芽画分もしくは成分、またはデンプンが、熱安定化で生じる高温および水分に曝される量の削減を可能にする。露出の低減は、ドウ機械適性、デンプン機能性、および焙焼特性に悪影響を及ぼしかねない過剰のデンプン糊化およびタンパク質の変性または変質を回避する一助となる。リパーゼの可逆的な阻害または可逆的な不活性化にリパーゼ阻害剤を使用することで、思いがけず、リパーゼが、熱による消滅または変性または永久的な不活性化をより受けやすくなることが見出された。リパーゼ阻害剤を熱安定化と共に用いると、有効もしくは活性リパーゼまたは抽出可能なリパーゼ活性の量、または遊離脂肪酸の産生量が思いがけず少なくなる。非常に細かい粉砕が用いられるときでさえ、遊離脂肪酸産生の実質的な減少が、より緩やかな安定化温度、より少ない水、またはより短い安定化時間で、デンプンの糊化ならびにタンパク質の変性および変質の低減を伴って実現される。
【００２７】
（全粒粉および酸敗の問題）
上述のとおり、酸敗の問題は、全粒粉の貯蔵寿命が制限される問題である。いくつかの理論が提起されており、その一部を以下で概説するが、それらは、本明細書に記載の実施形態のいずれをも限定するものではない。
【００２８】
穀物製品における酸敗は、加水分解（酵素的）もしくは酸化的分解反応による場合もあり、または両方による場合もある。しばしば、加水分解によって、産物が後続の酸化型酸敗に傾くことがある。自然の力によって、種子には、酸敗および腐敗を防ぐためのいくつかの保護特性が備わっており、種子は、発芽および成長に相応しい環境を獲得する前に、不利な条件の期間を乗り切ることが可能である。脂質材料、たとえば種子油が、空気や酵素などの反応物または触媒と相互に作用し得ないとき、酸敗が出現する恐れはより少ない。禾穀穀粒にある１つの保護特性は、貯蔵脂質と酵素のための別個の区画が設けられているために、貯蔵脂質と酵素が相互に作用できないことである。
【００２９】
禾穀穀粒の製粉は、別個の区画、すなわち、ふすま、胚芽、および内胚乳を、穀粒の脂質と酵素成分が相互に作用できるように砕くものであり、酸敗の出現を大幅に増加させる。ふすま粒子によって引き起こされるザラザラした感触を減らすために製粉を強めることは、表面積を拡大させ、脂質の自然のカプセル化を弱め、脂質と酵素成分の相互作用を増大させ、それによって酸敗の出現を増加させる傾向がある。
【００３０】
したがって、高抽出率穀粉、すなわち、相当な量のふすまおよび胚芽を含んだ穀粉は、白色粉よりも安定でない。高抽出率穀粉を長期間貯蔵すると、しばしば酸敗が出現する。酸敗は、内発的な脂質との反応から直接または間接的に生じる不利な品質要素を含み、穀粉の焙焼品質の低下、望ましくない味と匂い、および／または許容されない機能特性を引き起こす。高抽出率穀粉において酸敗が出現する主な理由は、不安定な天然の油の酵素的分解である。不安定な天然の油は、高抽出率穀粉を作るのに使用される穀粒の胚芽部分中に豊富な供給量で含まれている。一方、白色粉は、主として穀粒の内胚乳部分から作られ、一般にふすまおよび胚芽を実質的に含まないので、不安定な天然の油脂をほとんどまたは全く含有しない。
【００３１】
（酸敗および関連する問題の解決法）
本発明の創意に富む態様は、ふすま、胚芽、および内胚乳を自然の割合で含んだ全粒粉ならびに安定化全粒粉を含んだ製品の貯蔵寿命を、リパーゼ阻害剤を使用して延長する方法を提供する。リパーゼ阻害剤は、全粒粉中に保持されると、リパーゼを阻害して、遊離脂肪酸生成を低減する。本発明の実施形態では、リパーゼ阻害剤を、熱安定化と共にまたは熱安定化なしで用いて、リパーゼを永久的または不可逆的に阻害して、遊離脂肪酸生成を低減することができる。リパーゼ阻害剤により、遊離脂肪酸生成は低減され、同時に、デンプン糊化およびタンパク質変性もしくは変質を増加させる傾向があり、ドウ機械適性、デンプン機能性、および焙焼特性に悪影響を及ぼしかねない高い温度および湿度に全粒を曝す量が削減される。
【００３２】
熱安定化を用いる実施形態では、リパーゼの阻害または可逆的な不活性化にリパーゼ阻害剤を使用することで、思いがけず、リパーゼが熱によるリパーゼの消滅または変性または永久的な不活性化をより受けやすくなることが見出された。リパーゼの熱に対する感受性の増大は、阻害剤の作用によるリパーゼ分子の開放またはアンフォールディングのためであると考えられる。リパーゼ阻害剤を熱安定化と共に用いると、有効もしくは活性リパーゼまたは抽出可能なリパーゼ活性、または遊離脂肪酸産生の量が思いがけず少なくなる。非常に細かい粉砕が用いられるときでさえ、遊離脂肪酸産生の実質的な減少が、より穏やかな安定化温度、より少ない水、またはより短い安定化時間で、デンプンの糊化ならびにタンパク質の変性および変質の低減を伴って実現される。熱安定化のための加熱設備または蒸気注入を加えることが実現可能でない、または空間、時間、もしくは費用を考慮したために制限されることのある、現存する穀粉製粉所でも、本発明の方法によれば、リパーゼ阻害剤の使用によって、遊離脂肪酸産生の実質上の低減を容易に実現することができる。
【００３３】
この方法を用いると、９８％以上がＵ．Ｓ．Ｗｉｒｅ７０篩（２１０ミクロン）を通過する全粒小麦粉の製造など、非常に細かい粒度の安定化全粒粉さえ製造することができる。安定化全粒粉は、摩損によるデンプン損傷度ならびに熱および水分処理によるデンプン糊化またはタンパク質変性の度合いが低い状態で製造することができる。本発明の一態様では、安定化全粒小麦粉は、ドウおよび焙焼機能性を有しており、精白小麦粉の粒度に迫る粒度を有することもある。安定化全粒小麦粉は、卓越したオーブン展延性（ｏｖｅｎ  ｓｐｒｅａｄ）および外観ならびにざらつかない口当たりを有する、クッキー、クラッカー、スナックなどの焙焼品を作るための、機械適性、シート形成適性の高いドウの安定した大量生産において使用することができる。
【００３４】
本発明の別の態様では、この方法を使用すると、思いがけず弱い炭酸ナトリウム−水分吸着、および思いがけず長い貯蔵寿命を示し、加速貯蔵条件下、１か月以上での遊離脂肪酸含有量およびヘキサナール含有量が思いがけず少ない、非常に細かく粉砕された全粒小麦粉などの安定化全粒粉、および非常に細かく粉砕された安定化ふすま成分を製造することができる。遊離脂肪酸産生を実質的に低減するための高レベルのリパーゼ酵素阻害および／または不活性化は、高温安定化処理によって失われる抗酸化物質やビタミンなどの必須栄養素を思いがけず高レベルで保持しながら実現することができる。さらに、アクリルアミド生成も、本発明の安定化条件を使用して、思いがけず低いレベルに制御することができる。
【００３５】
本発明の実施形態では、全粒または実のふすまおよび胚芽をリパーゼ阻害剤の水溶液で処理して、リパーゼを阻害または不活性化し、１００°Ｆで３０日間貯蔵したときの遊離脂肪酸含有量が約４２００ｐｐｍ未満、好ましくは約３，５００ｐｐｍ未満、最も好ましくは約３，０００ｐｐｍ未満、たとえば２，０００ｐｐｍから約２８００ｐｐｍである安定化全粒粉を得ることにより、全粒粉の貯蔵寿命を延長する。処理する際の水溶液中のリパーゼ阻害剤の濃度が少なくとも約０．８モル濃度、好ましくは少なくとも約２モル濃度、たとえば約２モル濃度から約７モル濃度、最も好ましくは約３モル濃度から約５モル濃度、たとえば約３．３モル濃度から約４モル濃度であり、処理の際に用いる阻害剤の量が、全粒もしくは実または全粒粉１００ｌｂ当たり少なくとも０．１モル、たとえば、少なくとも約０．３モル、好ましくは約１モルから約５モル、最も好ましくは約２モルから約４モルの阻害剤であるとき、思いがけなく優秀な結果が得られる。
【００３６】
本発明の一態様では、全粒または実をテンパリングする際に、テンパリング媒質として用いられるリパーゼ阻害剤の水溶液でふすまおよび胚芽を処理して、リパーゼを阻害または不活性化することができる。本発明の実施形態では、処理した全粒を製粉して、加熱や蒸熱（ｓｔｅａｍｉｎｇ）などの別のいかなる安定化も行うことなく、安定化全粒粉を得ることもでき、または場合により、第２の段階の安定化を用いることもできる。本発明の実施形態では、第１の安定化段階で得た、阻害剤処理し、テンパリングした全粒を、ａ）加熱もしくは蒸熱による第２の安定化段階にかける、またはｂ）製粉して、阻害剤により安定化されたふすまおよび胚芽画分を得、そのふすまおよび胚芽画分を、加熱または蒸熱による第２の安定化段階にかけることができる。
【００３７】
本発明の別の態様では、全粒を製粉した後に、ふすまおよび胚芽をリパーゼ阻害剤で処理することもできる。安定化された穀粉またはふすまおよび胚芽画分もしくは成分は、テンパリングを行いまたは行っていない全粒または実を製粉して、ふすまおよび胚芽画分を得ることにより製造することができ、そのふすまおよび胚芽画分をリパーゼ阻害剤の水溶液で処理または加水処理して、リパーゼを阻害または不活性化すると、１００°Ｆで３０日間貯蔵したときの遊離脂肪酸含有量が約４２００ｐｐｍ未満、好ましくは約３，５００ｐｐｍ未満、最も好ましくは約３，０００ｐｐｍ未満、たとえば２，０００ｐｐｍから約２８００ｐｐｍである、安定化全粒粉または安定化されたふすまおよび胚芽画分を得ることができる。処理または加水処理の際の水溶液中のリパーゼ阻害剤の濃度が、少なくとも約０．８モル濃度、好ましくは少なくとも約２モル濃度、たとえば約２モル濃度から約７モル濃度、最も好ましくは約３モル濃度から約５モル濃度、たとえば約３．３モル濃度から約４モル濃度であり、処理または加水処理の際に用いる阻害剤の量が、全粒もしくは実または全粒粉１００ｌｂ当たり少なくとも０．１モル、たとえば少なくとも約０．３モル、好ましくは約１モルから約５モル、最も好ましくは約２モルから約４モルの阻害剤であるとき、思いがけなく優秀な結果が得られる。本発明の実施形態では、処理されたふすまおよび胚芽画分または成分を内胚乳画分と合わせて、安定化全粒粉を得、または加熱や蒸熱などの別のいかなる安定化も行うことなく使用することができ、または場合により第２の段階の安定化を用いてもよい。本発明の実施形態では、第１の安定化段階で得た、阻害剤処理し、テンパリングしたふすまおよび胚芽画分を、場合により、加熱または蒸熱による第２の安定化段階にかけてもよい。
【００３８】
本発明の実施形態では、リパーゼを阻害または不活性化するための、リパーゼ阻害剤の水溶液での処理は、温度約５０℃未満、好ましくは約３８℃未満、たとえば約２４℃から約３０℃で行うことができる。このような実施形態において、処理は、熱の適用なしで行ってもよいし、または取捨選択可能な熱安定化段階と共に行ってもよい。取捨選択可能な熱安定化段階を用いる実施形態では、リパーゼが温度約９８℃未満で阻害または不活性化されるように、蒸気を適用しない低温熱安定化を行うことができ、たとえば、低熱安定化は、温度約８０℃から約９８℃で行うことができる。本発明の他の実施形態では、リパーゼ阻害剤の水溶液で処理した後に、蒸気を用いるまたは用いない高温熱安定化を温度約１００℃から約１４０℃で行って、リパーゼを阻害または不活性化することもできる。
【００３９】
本発明の別の態様では、安定化された全粒粉またはふすまおよび胚芽画分もしくは成分は、ｐＨが６未満、好ましくは５．８以下、たとえば４．４から５．８、１００°Ｆで３０日間貯蔵したときの遊離脂肪酸含有量が約４２００ｐｐｍ未満、好ましくは約３，５００ｐｐｍ未満、最も好ましくは約３，０００ｐｐｍ未満、たとえば２，０００ｐｐｍから約２８００ｐｐｍ未満、乳酸溶媒保持容量（ＳＲＣ乳酸）が６５％以上、好ましくは７０％超、および乳酸ＳＲＣの炭酸ナトリウム−水溶媒保持容量（ＳＲＣ炭酸ナトリウム）に対する比が１超、好ましくは１．１超で提供される。本発明の実施形態では、ふすま、胚芽、および内胚乳を有する安定化全粒粉は、Ｎｏ．３５（５００ミクロン）Ｕ．Ｓ．標準篩において０重量％、Ｎｏ．７０（２１０ミクロン）Ｕ．Ｓ標準篩において約１０重量％以下の細かい粒度分布を有するものでよい。本発明の実施形態では、安定化全粒粉は、Ｎｏ．１００（１４９ミクロン）Ｕ．Ｓ標準篩で少なくとも約８５重量％、たとえば約９０重量％から約９８重量％の粒度分布を有するものでよい。本発明の態様では、安定化されたふすまおよび胚芽画分またはふすま成分は、Ｎｏ．３５（５００ミクロン）Ｕ．Ｓ標準篩において０重量％、Ｎｏ．７０（２１０ミクロン）Ｕ．Ｓ標準篩において約２０重量％以下の細かい粒度分布を有するものでよい。
【００４０】
開示の全体が参照により本明細書にそれぞれ援用される、それぞれＨａｙｎｅｓらの特許文献１および特許文献２は、全禾穀粒を微粉砕して粉砕全禾穀粒を得ることによる、安定化全粒粉の製造を開示している。
【００４１】
開示の全体が参照により本明細書に援用される、同時係属の、Ｄｅｒｗｉｎ  Ｇ．Ｈａｗｌｅｙらの名前での２０１１年２月２４日出願の「Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ａｎｄ  Ａｐｐａｒａｔｕｓ  Ｆｏｒ  Ｍａｓｓ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ  Ｗｈｏｌｅ  Ｇｒａｉｎ  Ｆｌｏｕｒ」についての特許文献３、およびＨａｗｌｅｙらの名前での２０１２年２月２４日出願のその特許文献４は、２種のふすまおよび胚芽画分および内胚乳画分を使用して、細かい粒度を有し、良好な焙焼機能性を示す安定化全粒粉を高処理量で製造できることを開示している。
【００４２】
同時係属の、Ｄｅｒｗｉｎ  Ｇ．Ｈａｗｌｅｙらの名前での２０１１年２月２４日出願の特許文献３、Ｄｅｒｗｉｎ  Ｇ．Ｈａｗｌｅｙらの名前での２０１２年２月２４日出願の特許文献４、ならびにそれぞれＨａｙｎｅｓらの特許文献１および特許文献２によれば、メタ重亜硫酸ナトリウム、ソルビン酸などの有機酸、二酸化硫黄、システイン、チオグリコール酸、グルタチオン、硫化水素、または他の食用還元剤による処理など、食用安定剤を、単独でまたは熱処理と組み合わせて使用して、保持または回収された粉砕ふすまおよび胚芽画分の少なくとも１つまたはすべてを安定化し、または酵素的に不活性化することができる。
【００４３】
本発明の一態様は、安定化穀粉、安定化ふすまおよび胚芽画分、または安定化ふすま成分、たとえば、ふすまに非常に豊富な安定化小麦成分、ならびに安定化ふすま成分または安定化ふすまおよび胚芽画分を含んだ安定化全粒粉、たとえば、安定化小麦ふすま成分を含有する安定化全粒小麦粉を、リパーゼ阻害剤の使用によって、デンプンを実質上損傷することなく、または焙焼機能性に悪影響を及ぼすことなく製造する方法を提供する。このような方法は、テンパリングを行いまたは行わずに、また熱安定化を行いまたは行わずに用いることができる。リパーゼ阻害剤での処理により、全粒中に存在するリパーゼの少なくとも一部分を可逆的または不可逆的に阻害することができる。この方法を用いると、遊離脂肪酸産生を思いがけなく少なくし、デンプン糊化およびタンパク質変性も思いがけなく少なくすることにより、粗く粉砕されたものでも、非常に細かく粉砕されたものでもよい、穀粉ならびにふすまおよび胚芽画分またはふすま成分の貯蔵寿命を延長することができる。安定化条件は、微細な全粒粉粒度が得られるときでさえ、安定化全粒粉のドウ機械適性または焙焼機能性に悪影響を及ぼさないものである。安定化ふすま成分は、微細なふすま成分粒度が得られるときでさえ、デンプン損傷およびデンプン糊化が少なく、タンパク質機能性が高い。無傷の穀粒のように内胚乳、ふすま、および胚芽を自然な割合で含んだ全粒小麦粉は、デンプンおよびタンパク質機能性が思いがけなく高く、デンプン損傷が少なく、タンパク質変性が少なく、糊化の度合いが低く、貯蔵寿命が思いがけなく長い。テンパリングまたは後加水の際の水溶液中のリパーゼ阻害剤の濃度、およびテンパリングまたは後加水の際に用いる阻害剤の量は、乳酸溶媒保持容量（ＳＲＣ）、乳酸ＳＲＣの水ＳＲＣに対する比、および乳酸ＳＲＣの炭酸ナトリウムＳＲＣに対する比によって証明される、思いがけなく優秀なデンプンおよびタンパク質機能性および焙焼特性を実現しながら、遊離脂肪酸産生の低減が思いがけなく優秀となるものである。
【００４４】
リパーゼ阻害剤は、製品の食味もしくは風味、匂い、または口当たりに実質上悪影響を及ぼすことなく、穀粉またはふすまおよび胚芽画分またはふすま成分によって吸収され、その中に保持され得る、非毒性のいかなる食用リパーゼ阻害剤でもよい。本発明の実施形態で用いるリパーゼ阻害剤は、可逆的阻害剤、不可逆的阻害剤、およびその組合せまたは混合物でよい。可逆的阻害剤は、酵素に、水素結合、疎水性相互作用、イオン結合などの非共有相互作用によって結合し得る。阻害剤と活性部位間の複数の弱い結合を組み合わせると、強力かつ特異的な結合が生じることもある。基質および不可逆的阻害剤とは対照的に、可逆的阻害剤は、酵素に結合したときに、一般に化学反応を受けず、希釈または透析によって容易に除去することができる。用いることのできる可逆的阻害剤として、種々の濃度の酵素基質が阻害剤に及ぼす影響に従って分類される４種の可逆的酵素阻害剤、すなわち、競合的阻害剤、不拮抗阻害剤、混合阻害剤、および非競合的阻害剤が挙げられる。不可逆的阻害剤は通常、酵素を共有的に修飾し、したがって、阻害は逆転されることがない。不可逆的阻害剤は、多くの場合、ナイトロジェンマスタード、アルデヒド、ハロアルカン、アルケン、Ｍｉｃｈａｅｌアクセプター、スルホン酸フェニル、フルオロホスホネートなどの反応性官能基を含んでいる。こうした求電子基は、アミノ酸側鎖と反応して、共有結合付加体を形成する。修飾される残基は、ヒドロキシル基やスルフヒドリル基などの求核基を含んでいる側鎖を有する残基であり、こうした残基として、アミノ酸のセリン（ＤＦＰ、右のとおり）、システイン、スレオニン、またはチロシンが挙げられる。
【００４５】
用いることのできる、具体例としてのリパーゼ阻害剤は、アルカリ硫酸水素塩、亜硫酸水素塩、メタ重亜硫酸塩（ｍｅｔａｂｉｓｕｌｆｉｔｅ）、およびメタ重硫酸塩（ｍｅｔａｂｉｓｕｌｆａｔｅ）、たとえば、メタ重亜硫酸ナトリウム、有機酸、無機酸、緑茶または緑茶抽出物、ローズマリー抽出物、二酸化硫黄、システイン、チオグリコール酸、グルタチオン、硫酸水素、他の食用還元剤、およびこれらの混合物である。用いることのできる好ましいリパーゼ阻害剤は、酸性成分、たとえば、少なくとも１種の有機酸、たとえば、乳酸、クエン酸、アスコルビン酸、ソルビン酸、酒石酸、リンゴ酸、フマル酸、酢酸、シュウ酸、および少なくとも１種の無機酸、たとえば、塩酸、リン酸、硫酸、および緑茶または緑茶抽出物、ならびにこれらの混合物である。特定の実施形態では、乳酸、塩化水素酸、およびリン酸が、リパーゼ阻害剤としての使用に好ましい。
【００４６】
酸性成分をリパーゼ阻害剤として用いる実施形態では、リパーゼ阻害剤での処理により、全粒粉、ふすまおよび胚芽画分または成分のｐＨが、ｐＨ６未満、好ましくは５．８以下、たとえば４．４から５．８に低下してもよい。
【００４７】
リパーゼ阻害剤は、水に溶解させ、ふすまおよび胚芽に吸収させるために、１）全粒もしくはふすまおよび胚芽画分もしくはふすま成分をリパーゼ阻害剤溶液に浸漬する、または２）リパーゼ阻害剤溶液を全粒もしくはふすまおよび胚芽画分もしくはふすま成分に散布することにより、室温付近で適用することができる。好ましい実施形態では、リパーゼ阻害剤の水溶液は、全粒をテンパリングするためのテンパリング媒質として用いる。他の好ましい実施形態では、リパーゼ阻害剤の水溶液は、ハイドレーターにおいて、溶液を撹拌しながらふすまおよび胚芽画分またはふすま成分に散布して、画分または成分を加水処理することにより適用する。
【００４８】
別の実施形態では、テンパリングまたは後加水の際の水溶液中のリパーゼ阻害剤の濃度は、少なくとも約０．８モル濃度、好ましくは少なくとも約２モル濃度、たとえば約２モル濃度から約７モル濃度、最も好ましくは約３モル濃度から約５モル濃度、たとえば約３．３モル濃度から約４モル濃度である。別の実施形態では、テンパリングまたは後加水の際に用いる阻害剤の量は、全粒もしくは実または全粒粉１００ｌｂ当たり少なくとも０．１モル、たとえば少なくとも約０．３モル、好ましくは約１モルから約５モル、最も好ましくは約２モルから約４モルの阻害剤である。用いるリパーゼ阻害剤の量は、その分子量に応じて決まるので、量はモルで表示する。たとえば、塩酸をリパーゼ阻害剤として用いるとき、塩酸は、全粒の重量を基準として少なくとも約３００ｐｐｍの量で使用することができ、乳酸は、全粒の重量を基準として少なくとも約３０００ｐｐｍの量で用いることができる。
【００４９】
本発明の実施形態では、リパーゼ阻害剤の水溶液を用いたテンパリングおよび後加水のステップを実施して、全粒または実の重量を基準として約１０重量％から約１４重量％という全粒中の最終含水量を実現することができる。
【００５０】
含水量が約８％から約１５重量％である全禾穀粒を用いることができ、含水量約１０重量％から約１４．５重量％が製粉または粉砕の目的には好ましく、含水量約１２．５重量％から約１３．５重量％が特に好ましい。穀粒中に水分があまりに少量しか存在しない場合、穀粒は、望ましくなく砕かれ、損傷したデンプンが生じることもある。水分の量が多すぎると、穀粒が過剰のデンプン糊化を受けやすくなることがあり、また穀粒の製粉または粉砕も難しくなることがある。こうした理由のために、製粉の直前には、約１０重量％から約１４．５重量％の穀粒含水量が好ましい。穀粒の含水量が少なすぎる場合、製粉前に、乾燥した穀粒に水分を加えて、含水量を製粉に許容されるレベルに増やすことができる。水分付加は、穀粒をリパーゼ阻害剤の水溶液でテンパリングし、またはその表面にリパーゼ阻害剤の水溶液を散布し、十分な時間をかけて吸い取らせて、リパーゼ阻害剤のふすまおよび胚芽全体への吸収および分布を可能にすることにより実現できる。
【００５１】
全粒は、主として、内胚乳、ふすま、および胚芽を、それぞれ多い割合順に含んでいる。小麦全粒では、たとえば、約１３重量％の圃場水分で、無傷の穀粒の重量を基準として、内胚乳またはデンプンが約８３重量％、ふすまが１４．５重量％、胚芽が約２．５重量％である。内胚乳は、デンプンを含有し、タンパク質含有量が胚芽およびふすまより少ない。また粗脂肪および灰分も少ない。ふすま（果皮または外皮）は、外皮の真下にある成熟した子房壁であり、種皮に至るまでの外側のすべての細胞層を包含する。ふすまには、セルロースやペントサンなどの非デンプン多糖が多い。ふすままたは果皮は、繊維含有量が多いために非常に丈夫となる傾向があり、特に大きな粒度で存在するとき、乾いたざらざらした口当たりを与える。また、穀粒のリパーゼおよびリポキシゲナーゼの大部分を含んでおり、安定化する必要がある。粉砕または製粉の程度が増すにつれて、ふすま粒度はデンプンの粒度に近付き、ふすまとデンプンの分離がより難しくなる。また、機械エネルギー投入量およびふすまの摩損が内胚乳と比べて増加し、またデンプン粒が破裂するために、デンプン損傷が増える傾向もある。また、機械的に損傷を受けたデンプンは、より糊化しやすくなる傾向もある。胚芽は、高い脂肪油含有量を特徴とする。胚芽は、粗タンパク質、糖、および灰分も豊富である。
【００５２】
本発明の実施形態では、ふすま画分の含水量は、実または穀粒の内側部分を実質上加湿せずに、外側部分が加湿されるよう、全粒をテンパリングすることにより制御できる。このような処理では、実または穀粒の内部または内胚乳から得られる微細な画分を乾燥させる必要が回避され、または実質的に低減される一方、実の外側またはふすまおよび胚芽部分が、安定化処理のために加湿される。表面またはふすまの加湿を実現するのに使用できるテンパリング方法には、たとえば、全粒を浴または大桶に限定された時間浸漬するものが含まれる。他の実施形態では、全粒の表面に水を散布し、テンパリングを可能にすることができる。本発明の一部の実施形態によれば、約１０分から約２４時間のテンパリング時間を費やすことができる。穀粒をより長い時間浸漬することは、水が穀粒中に深く浸透する結果となり、穀粒の内側部分が加湿され、デンプン糊化が過剰となることがあるので、望ましくない。
【００５３】
他の実施形態では、全粒ではなく、または全粒に加えて、１もしくは複数のふすまおよび胚芽画分またはふすま成分を、ふすまおよび胚芽画分またはふすま成分において所望の含水量が実現されるように加湿することができる。本発明の実施形態では、ふすまおよび胚芽画分またはふすま成分を、安定化の前に、リパーゼ阻害剤の水溶液でそのような程度に加水処理して、加水処理されたふすまおよび胚芽画分またはふすま成分が、加水処理されたふすまおよび胚芽画分またはふすま成分の重量を基準として約１０重量％から約２０重量％の含水量となるようにすることができる。
【００５４】
本発明の実施形態では、全粒または実のふすまおよび胚芽を、熱安定化を行いまたは行わずに、リパーゼ阻害剤の水溶液で処理して、リパーゼを実質的に阻害または不活性化すると、リパーゼ阻害剤を少なくとも約０．８モル濃度、好ましくは少なくとも約２モル濃度、たとえば約２モル濃度から約７モル濃度、最も好ましくは約３モル濃度から約５モル濃度、たとえば約３．３モル濃度から約４モル濃度の濃度で用いたとき、１００°Ｆで３０日間貯蔵したときの遊離脂肪酸含有量が約４２００ｐｐｍ未満、好ましくは約３，５００ｐｐｍ未満、最も好ましくは約３，０００ｐｐｍ未満、たとえば２，０００ｐｐｍから約２８００ｐｐｍである安定化穀粉が得られる。また、リパーゼ阻害剤を熱安定化と組み合わせて使用すると、熱安定化単独の使用またはリパーゼ阻害剤単独の使用と比べて、遊離脂肪酸産生の低減が思いがけなく優秀となる。熱処理と組み合わせた酸処理は安定化利益が高められているため、酸処理または熱処理単独では実現することのできない、より低いリパーゼ活性、および貯蔵中のより少ない遊離脂肪酸生成が可能になる。遊離脂肪酸生成を低減するためにリパーゼ阻害剤と熱安定化を使用することで、熱処理単独による遊離脂肪酸の低減、またはリパーゼ阻害剤処理単独での低減と比べて、思いがけない相乗効果が得られることがわかった。
【００５５】
リパーゼの実質的な阻害または可逆的な阻害または可逆的な不活性化にリパーゼ阻害剤を使用すると、思いがけなく、リパーゼが、熱によるリパーゼの消滅または変性または永久的な不活性化をより受けやすくなると考えられている。リパーゼの熱に対する感受性の増大は、阻害剤の作用によるリパーゼ分子の開放またはアンフォールディングのためであると考えられる。リパーゼ阻害剤を熱安定化と共に用いると、有効もしくは活性リパーゼまたは抽出可能なリパーゼ活性、または遊離脂肪酸産生の量が思いがけず少なくなる。非常に細かい粉砕が用いられるときでさえ、遊離脂肪酸産生の実質的な減少が、より穏やかな安定化温度、より少ない水、またはより短い安定化時間で、デンプンの糊化ならびにタンパク質の変性および変質の低減を伴って実現される。
【００５６】
本発明の実施形態では、リパーゼを阻害または不活性化するためのリパーゼ阻害剤の水溶液での処理は、温度約５０℃未満、好ましくは約３８℃未満、たとえば約２４℃から約３０℃で行うことができる。このような実施形態において、処理は、熱の適用なしで行ってもよいし、または取捨選択可能な熱安定化段階と共に行ってもよい。取捨選択可能な熱安定化段階を用いる実施形態では、リパーゼが温度約９８℃未満で阻害または不活性化されるように、蒸気を適用しない低温熱安定化を行うことができ、たとえば、低熱安定化は、温度約８０℃から約９８℃で行うことができる。本発明の他の実施形態では、リパーゼ阻害剤の水溶液で処理した後に、蒸気を用いるまたは用いない高温熱安定化を温度約１００℃から約１４０℃、好ましくは約１１５℃から約１２５℃で行って、リパーゼを阻害または不活性化することもできる。本発明の実施形態では、熱処理時間は、約０．２５分から約１２分、好ましくは約１分から約７分でよく、一般に、より低い温度およびより少ない含水量ではより長い処理時間が用いられる。
【００５７】
本発明の実施形態では、安定化温度および安定化時間ならびに含水量は、安定化された粉砕または製粉粗画分またはふすま成分における安定化の結果として生じるデンプン糊化が、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）によって測定したとき、約２５％未満、好ましくは約１０％未満、最も好ましくは約５％未満となり得るように制御することができる。本発明において実現される、低度のデンプン糊化および低度のデンプン損傷は、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）によって測定したとき、約６５℃から約７０℃のピーク温度で、安定化されたふすま成分または粉砕粗画分中のデンプンの重量を基準として、約４Ｊ／ｇを越える、好ましくは約５Ｊ／ｇを越えるデンプン融解エンタルピーによって例証される。実施形態において、安定化ふすま成分は、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）によって測定したとき、約６０℃から約６５℃のピーク温度で、安定化された粉砕粗画分の重量を基準として、約２Ｊ／ｇを越えるデンプン融解エンタルピーを有するものでよい。一般に、デンプン糊化は、ａ）十分な量、一般に、デンプンの重量を基準として少なくとも約３０重量％で水がデンプンに加えられ、混合されたとき、ｂ）デンプンの温度が少なくとも約８０℃（１７６°Ｆ）、好ましくは１００℃（２１２°Ｆ）またはそれ以上に上昇したときに起こる。糊化温度は、デンプンとの相互作用に利用可能な水の量に応じて決まる。利用可能な水の量が少ない程、一般に糊化温度が高い。糊化は、顆粒の膨潤、本来のクリスタリットの融解、複屈折の消失、デンプンの可溶化など、性質の不可逆的な変化として出現する、デンプン粒内の分子秩序の崩壊（破壊）であると定義することができる。糊化の初期段階の温度およびそれが起こる温度範囲は、デンプン濃度、観察方法、顆粒タイプ、および観察される顆粒集団内の不均質性に左右される。ペースト化は、デンプンの溶解において、第１の段階の糊化に続く第２段階の現象である。ペースト化は、顆粒の膨潤の増進、顆粒からの分子成分（すなわち、アミロースに続いてアミロペクチン）の滲出、および最終的には、顆粒の完全な崩壊を伴う。非特許文献１を参照されたい。
【００５８】
本発明の方法で得られる、ふすま、胚芽、および内胚乳を有する安定化全粒粉は、６５％以上、好ましくは７０％を越える乳酸溶媒保持容量（ＳＲＣ乳酸）、および１を越える、好ましくは１．１を越える乳酸ＳＲＣの炭酸ナトリウム−水溶媒保持容量（ＳＲＣ炭酸ナトリウム）に対する比が示すとおり、優秀な焙焼機能性およびタンパク質機能性を呈する。
【００５９】
本発明の実施形態では、安定化全粒粉は、Ｎｏ．３５（５００ミクロン）Ｕ．Ｓ標準篩において０重量％、Ｎｏ．７０（２１０ミクロン）Ｕ．Ｓ標準篩において約２０重量％以下、好ましくは約１０または５重量％以下の粒度分布を有するものでよい。本発明の別の実施形態では、安定化全粒粉は、Ｎｏ．７０（２１０ミクロン）Ｕ．Ｓ標準篩で約１００重量％までの粒度分布を有するものでよい。また、安定化全粒粉は、１４９ミクロン以下が少なくとも７５重量％、好ましくは少なくとも８５重量％、たとえば約９０重量％から約９８重量％であり、２５０ミクロンを超えるのが５重量％以下である粒度分布を有するものでもよい。本発明の態様では、安定化されたふすまおよび胚芽画分またはふすま成分は、Ｎｏ．３５（５００ミクロン）Ｕ．Ｓ標準篩において０重量％、Ｎｏ．７０（２１０ミクロン）Ｕ．Ｓ標準篩において約２０重量％以下の細かい粒度分布を有するものでよい。
【００６０】
図１に概略的に示すように、本発明の実施形態では、安定化全粒粉は、小麦種実１などの全粒を、テンパリングステップ５の際に、乳酸と緑茶抽出物の混合物などのリパーゼ阻害剤３で処理することにより製造できる。リパーゼ阻害剤３は、水７と予め混合して、リパーゼ阻害剤３の水溶液１０とすることができる。リパーゼ阻害剤３の水溶液１０は、テンパリングステップ５において、小麦種実３をテンパリングするために、大桶の中で小麦種実１に混加することができる。テンパリングステップ５の際、リパーゼ阻害剤３は、依然として無傷の種実１のふすまおよび胚芽に、好ましくは無傷の種実１の内胚乳に浸透することなく、吸収されて、ふすまおよび胚芽中のリパーゼの少なくとも一部分を阻害または不活性化して、遊離脂肪酸産生を低減する。テンパリングした全粒１２を、穀粉製粉操作１５において製粉して、内胚乳画分１８または流れ２０と、ふすまおよび胚芽画分もしくはふすま成分２２または流れ２５を得ることができる。ふすまおよび胚芽画分またはふすま成分２２は、取捨選択可能な熱安定化装置操作３０または第２の段階の安定化において場合により熱安定化して、安定化ふすまおよび胚芽画分または安定化ふすま成分３２を得ることもできる。熱安定化または第２段階の安定化３０を用いると、追加の量のリパーゼを可逆的もしくは不可逆的に阻害もしくは不活性化すること、および／または第１の段階の安定化もしくはテンパリングステップ５においてリパーゼ阻害剤３により可逆的に阻害もしくは可逆的に不活性化されたリパーゼを不可逆的に阻害もしくは不活性化することができる。スクリューコンベヤーなどの従来の混合および運搬設備を使用して、安定化ふすまおよび胚芽画分または安定化ふすま成分３２を内胚乳画分２０と合わせると、安定化全粒粉４０を得ることができる。
【００６１】
図２に概略的に示すように、本発明の他の実施形態では、安定化全粒粉は、ふすまおよび胚芽画分もしくはふすま成分２００または流れ２０２を、加水処理ステップ２０５もしくは第１の安定化段階の際に、または別個のステップとして、乳酸と緑茶抽出物の混合物などのリパーゼ阻害剤２０３で処理することにより製造できる。特に、リパーゼ阻害剤は、いずれかの溶液にして、または適合する他のいずれかの送達機構によって送達することができる。一実施形態では、リパーゼ阻害剤２０３は、水２０７と予め混合して、リパーゼ阻害剤２０３の水溶液２１０とすることができる。他の実施形態では、他の溶媒を水と共にまたは水なしで用いて、テンパリングもしくは加水処理の際または別個のリパーゼ処理ステップにおいてリパーゼ阻害剤を送達するための溶液を作ることができる。ふすまおよび胚芽画分またはふすま成分２００は、種実をリパーゼ阻害剤なしで従来のようにして場合により水でテンパリングする、取捨選択可能なテンパリングステップ２１３において、全粒２１２を場合によりテンパリングすることによって得てもよい。場合によりテンパリングした全粒２１４を、穀粉製粉操作２１５において製粉して、内胚乳画分２１８または流れ２２０と、ふすまおよび胚芽画分もしくはふすま成分２００または流れ２０２を得ることができる。リパーゼ阻害剤２０３の水溶液２１０は、加水処理ステップ２０５または第１の安定化段階において、ふすまおよび胚芽画分または成分２００の加水処理または浸漬のためのハイドレーターにて、ふすまおよび胚芽画分またはふすま成分２００に混加し、または散布することができる。加水処理ステップ２０５の際、リパーゼ阻害剤２０３は、ふすまおよび胚芽画分またはふすま成分２００に吸収されて、ふすまおよび胚芽中のリパーゼの少なくとも一部分を阻害または不活性化して、遊離脂肪酸を低減する。第１の安定化段階２０５からの加水処理され安定化されたふすまおよび胚芽画分またはふすま成分２２２は、取捨選択可能な熱安定化装置操作２３０または第２の段階の安定化において場合により熱安定化して、安定化ふすまおよび胚芽画分または安定化ふすま成分２３２を得ることもできる。熱安定化または第２の段階の安定化２３０を用いると、追加の量のリパーゼを可逆的もしくは不可逆的に阻害もしくは不活性化すること、および／または第１の段階の安定化または加水処理ステップ２０５においてリパーゼ阻害剤２０３により可逆的に阻害または可逆的に不活性化されたリパーゼを不可逆的に阻害または不活性化することができる。スクリューコンベヤーなどの従来の混合および運搬設備を使用して、安定化ふすまおよび胚芽画分または安定化ふすま成分２３２を内胚乳画分２２０と合わせると、安定化全粒粉２４０を得ることができる。
【００６２】
全粒の製粉は、その開示の全体が参照によりそれぞれ本明細書に援用される、Ｋｏｒｏｌｅｈｕｋの特許文献５、Ｋｏｒｏｌｅｈｕｋの特許文献６、それぞれＨａｙｎｅｓらの特許文献１および特許文献２、Ｄｒｅｅｓｅらの特許文献７、ならびにＤｒｅｅｓｅらの特許文献８で開示されているものなど、ふすまおよび胚芽画分またはふすま成分と内胚乳画分を得るため、また諸粒度分布を有する穀粉ならびに画分および成分を得るための、既知の穀粉製粉および／または粉砕操作を使用して行うことができる。好ましい実施形態では、そのすべての開示の全体が参照によりそれぞれ本明細書に援用される、それぞれＨａｙｎｅｓらの特許文献１および特許文献２、ならびにそれぞれＤｅｒｗｉｎ  Ｇ，Ｈａｗｌｅｙらの名前での同時係属の２０１１年２月２４日出願の特許文献３および２０１２年２月２４日出願の特許文献４で開示されているような、ふすまおよび胚芽画分またはふすま成分と内胚乳画分を得るため、また諸粒度分布を有する穀粉ならびに画分および成分を得るための、穀粉製粉および／または粉砕操作を用いることができる。本発明の実施形態では、本明細書で開示するようなリパーゼ阻害剤での処理による安定化を、前記出願、公告、および特許で開示されているものなどの熱または蒸気安定化法と共に用いて、本明細書で開示する方法によって製造される穀粉ならびに画分および成分の安定性を高め、または貯蔵寿命を延ばすことができる。
【００６３】
たとえば、本発明の実施形態では、前記の、それぞれＤｅｒｗｉｎ  Ｇ，Ｈａｗｌｅｙらの名前での同時係属の２０１１年２月２４日出願の特許文献３および２０１２年２月２４日出願の特許文献４で開示されているとおりの製粉および粉砕操作を用いて、Ｎｏ．３５（５００ミクロン）Ｕ．Ｓ．標準篩において０重量％、Ｎｏ．７０（２１０ミクロン）Ｕ．Ｓ標準篩において約２０重量％以下、好ましくは約１０重量％以下の粒度分布を有する安定化全粒粉、またはＮｏ．７０（２１０ミクロン）Ｕ．Ｓ標準篩で約１００重量％までの粒度分布を有する安定化全粒粉、または１４９ミクロン以下が少なくとも７５重量％、好ましくは少なくとも８５重量％であり、２５０ミクロンを越えるのが５重量％以下である粒度分布を有する安定化全粒粉を製造することができる。
【００６４】
本発明の他の実施形態では、前記のそれぞれＨａｙｎｅｓらの特許文献１および特許文献２で開示されているとおりの製粉および粉砕操作を用いて、Ｎｏ．３５（５００ミクロン）Ｕ．Ｓ．標準篩において約１０重量％未満、好ましくは約５重量％未満、Ｎｏ．６０（２５０ミクロン）Ｕ．Ｓ標準篩において約２０重量％から約４０重量％、Ｎｏ．１００（１４９ミクロン）Ｕ．Ｓ標準篩において約１０重量％から約６０重量％、好ましくは約２０重量％から約４０重量％、Ｎｏ．１００（１４９ミクロン）Ｕ．Ｓ標準篩で約７０重量％未満、たとえば約１５重量％から約５５重量％の粒度分布を有する安定化全粒粉を製造することができる。
【００６５】
安定化は、回分式、半回分式、または連続式で行うことができ、連続式が好ましい。バッチクッカー、ミキサー、回転ドラム、連続ミキサー、押出機などの既知の加熱容器を粗画分の加熱に用いて、それを安定化することができる。加熱装置は、安定化温度の外部制御のための加熱もしくは冷却ジャケット、および／または水分および熱を粗画分に直接注入するための蒸気注入ノズルを備えた、ジャケット付き容器でよい。他の実施形態では、粗いふすま画分の加熱に赤外（ＩＲ）放射またはエネルギーを用いて、画分を安定化することができる。好ましい実施形態では、連続式での画分の安定化に、Ｂｅｐｅｘが製造した安定化機器、またはＬａｕｈｏｆｆふすまクッカーを用いることができる。粉砕または製粉を熱安定化と同時に行う実施形態では、加熱されたローラを用いることができる。このような実施形態では、温度および含水量を上向きに調節して安定化時間を短縮して、目標とする粒度分布の実現に所望される粉砕時間と一致させることができる。
【００６６】
本発明の実施形態では、熱処理された画分は、周囲空気中で冷ますことができる。他の実施形態では、熱処理後の粉砕または製粉されたふすまおよび胚芽画分またはふすま成分の冷却を、デンプンの望ましくない糊化がさらに最小限に抑えられるように、場合により制御してもよい。一般に、約６０℃より低い温度では、安定化されたふすま成分に、さらに著しい糊化は起こらない。熱処理された粗画分は、次いで、室温、すなわち約２５℃に冷却することができる。本発明の実施形態では、表面温度約２５℃を実現するのに使用する平均冷却速度を、約１℃／分から約３℃／分の温度低下とすることができる。
【００６７】
冷却速度は、好ましくは、熱処理後の粗画分におけるデンプンのさらなる糊化が最小限に抑えられるように選択すべきであるが、リパーゼおよびＬＰＯのさらなる不活性化が必要である場合、それを妨げるほど速くすべきでない。リパーゼまたはＬＰＯのさらなる不活性化が所望されない場合、冷却を行って、熱処理された粗画分の温度を直ちに約６０℃未満に低下させることができる。
【００６８】
本発明の実施形態では、本発明の工程に使用することのできる冷却装置として、熱処理された粗画分が、重力を受けてまたはコンベヤー装置に載って通過する冷却管または冷却トンネルが挙げられる。熱処理された粗画分が冷却装置を通過する間、粗画分もしくはふすま成分に冷気をかけ、または通すことができる。送られた冷却空気は、次いで、たとえばフードによって集め、または吸い上げ、サイクロンセパレータにおいてさらに処理することができる。好ましい冷却装置は、冷却管またはトンネルの長さに沿った多方面の領域に冷却空気を供給する。冷却空気は、熱処理された粗画分に接触する前に低温装置に通して、周囲空気の温度より低い温度を実現することが好ましい。
【００６９】
冷却後、熱処理された粗画分の含水量を、場合により、乾燥によってさらに減少させてもよい。約６０℃未満の乾燥温度が好ましいために、乾燥工程の間にデンプンのさらなる糊化は起こらない。一実施形態では、乾燥温度は、約０℃から約６０℃の範囲である。しかし、周囲温度での乾燥が、より低い温度での乾燥よりも費用がかからず、乾燥の際に、熱処理された粗画分におけるデンプンのさらなる糊化を防ぐ。乾燥は、相対湿度の低い雰囲気中で行うことが好ましく、好ましくは、減圧雰囲気中で行うことができる。熱処理、加水処理、および取捨選択可能な冷却によって含水量が所望の範囲に達する場合、乾燥ステップは必要と考えられない。
【００７０】
（安定化全粒粉の製造）
本発明の実施形態では、リパーゼ阻害剤で安定化した全粒を粉砕して、安定化全粒粉を得ることができる。本発明の他の実施形態では、安定化ふすま成分または安定化ふすまおよび胚芽画分を、内胚乳画分と配合して、本発明の安定化全粒小麦粉などの安定化全粒粉を得ることができる。安定化全粒小麦粉などの安定化全粒粉は、ふすま、胚芽、および内胚乳を含む。本発明の実施形態では、内胚乳の一部分だけしか、リパーゼ阻害剤による安定化および／または熱安定化にかけられていなくてもよいが、ふすまおよび胚芽の少なくとも相当な部分が、リパーゼ阻害剤および／または加熱による安定化にかけられている。安定化ふすま成分または安定化ふすまおよび胚芽画分は、内胚乳画分が派生している同じ全粒由来であることが好ましい。しかし、他の実施形態では、安定化ふすま成分または安定化ふすまおよび胚芽画分は、異なる穀粒供給源から派生し、または取得した内胚乳画分と配合または調合することができる。しかし、各実施形態において、安定化ふすま成分と内胚乳画分は、内胚乳、ふすま、および胚芽を、無傷の穀粒中に存在するのと同じまたは実質上同じ相対的割合で含んだ安定化全粒粉が得られるように配合または調合する。他の実施形態では、主として内胚乳を含んでいる安定化白色粉などの、安定化全粒粉以外の安定化穀粉を、本発明の実施形態に従うリパーゼ阻害剤処理を使用して製造することができる。
【００７１】
ふすま、胚芽、およびデンプンを含む、粉砕または製粉した熱処理された粗画分からなる安定化ふすま画分を、当業界で知られている従来の計量および調合機械を使用して、内胚乳画分と調合、配合、または混加すると、少なくとも実質上均質な安定化全粒粉を得ることができる。用いることのできる混合または調合装置の例として、バッチミキサー、回転ドラム、連続ミキサー、および押出機が挙げられる。
【００７２】
安定化全粒小麦粉などの安定化全粒粉の含水量は、安定化全粒粉の重量を基準として、約１０重量％から約１４．５重量％の範囲でよく、水分活性は、約０．７未満でよい。実施形態において、安定化全粒小麦粉は、タンパク質含有量が約１０重量％から約１４重量％、たとえば約１２重量％であり、脂肪含有量が約１重量％から約３重量％、たとえば約２重量％であり、灰分含有量が約１．２重量％から約１．７重量％、たとえば約１．５重量％であるものでよく、パーセンテージはそれぞれ、安定化全粒粉の重量を基準とする。
【００７３】
安定化全粒小麦粉は、オーブン展延性またはクッキー展延性が、ＡＡＣＣ１０−５３卓上法に従って測定したとき、もとの焙焼前ドウ直径の少なくとも約１３０％となることもある、優れた焙焼機能性を示す。
【００７４】
開示する実施形態は、ありとあらゆるタイプの小麦に適用できる。それに限定しないが、小麦粒は、軟質／軟質および軟質／硬質小麦粒から選択することができる。小麦粒は、白または赤小麦粒、硬質小麦粒、軟質小麦粒、冬小麦粒、春小麦粒、デューラム小麦粒、またはこれらの組合せを含むものでよい。本発明の種々または特定の実施形態または態様に従って加工することのできる他の全粒の例として、たとえば、エンバク、トウモロコシ、米、ワイルドライス、ライ麦、大麦、蕎麦、ブルグア小麦、キビ、モロコシなど、および全粒の混合物が挙げられる。
【００７５】
本発明の実施形態では、安定化ふすま成分または原材料、および安定化全粒小麦粉などの安定化全粒粉に、加速貯蔵条件下で、原料安定性の向上および１か月より長い貯蔵寿命、たとえば２か月以上が実現される。より安定した食品は、同様の条件下で、安定性の劣る食品より、酸敗に至る前により長期間貯蔵することができる。酸敗の存在は、官能検査（たとえば、食味および／もしくは匂い分析）、リポキシゲナーゼもしくはリパーゼ活性レベル測定、遊離脂肪酸レベル測定、および／またはヘキサナールレベル測定を含めて、多種多様な異なる方法でモニターおよび測定することができる。
【００７６】
本発明の他の実施形態では、安定化ふすま成分、または安定化全粒小麦粉などの安定化全粒粉を、精白小麦粉に配合、混加、または調合して、強化小麦粉などの、強化された穀粉、製品、または原材料を得ることができる。強化小麦粉製品は、安定化ふすま成分、または安定化全粒小麦粉などの安定化全粒粉を、強化小麦粉製品などの強化穀粉製品の全重量を基準として、約１４重量％から約４０重量％、たとえば約２０重量％から約３０重量％の量で含んだものでよい。
【００７７】
安定化全粒小麦粉などの安定化全粒粉を用いると、様々な食品において精白小麦粉、または他の穀粉を部分的または完全に置き換えることができる。たとえば、本発明の実施形態では、精白小麦粉の少なくとも約１０重量％、多くとも約１００重量％、たとえば約３０重量％から約５０重量％を、安定化全粒小麦粉で置き換えて、精白小麦粉製品の栄養価を高めることができ、製品の外観、テクスチャー、香り、または食味を損なうことは、あるとしてもわずかしかない。
【００７８】
本発明の実施形態で得られる安定化ふすま成分、および安定化全粒小麦製品などの安定化全粒製品は、包装し、安定して貯蔵し、後にまたは直ちに食物生産にさらに使用することができる。安定化ふすま製品および穀粉製品は、水および他の適用可能な食品原材料を加え、混合し、付形し、焙焼または油揚するなどによって、完成食品にさらに加工する準備ができている。安定化されたふすまおよび全粒小麦粉などの全粒粉を含んだドウは、大量生産体制で、連続的に製造および機械加工する、たとえば、シート形成、積層、成形、押出、または同時押出にかけ、切断することができる。完成全粒製品（たとえば、ビスケット、クッキー、クラッカー、スナックバーなど）は、全粒の食味の特徴を伴って、心地よいテクスチャーを有する。
【００７９】
本発明の安定化ふすま成分、および安定化全粒小麦粉製品などの安定化全粒粉製品は、広範な種類の食品において使用することができる。その食品には、穀粉食品およびビスケット型製品、特にパスタ製品、即席シリアル、および菓子が含まれる。一実施形態では、食品は、ベーカリー製品またはスナック食品でよい。ベーカリー製品としては、クッキー、クラッカー、ピザ皮、パイ皮、パン、ベーグル、プレッツェル、ブラウニー、マフィン、ワッフル、ペストリー、ケーキ、クイックブレッド、甘いロールパン、ドーナツ、果実と穀物のバー、トルティーヤ、および半焙焼（ｐａｒ−ｂａｋｅｄ）ベーカリー製品を挙げることができる。スナック製品としては、スナックチップス、および押出によるパフ状スナックを挙げることができる。特に、食品は、クッキー、クラッカー、およびシリアルクランチバーから選択されるものでよい。クッキーは、バータイプの製品、押出、同時押出、シート形成および切断、回転成形、ワイヤーカットされたクッキー、またはサンドウィッチクッキーでよい。製造することのできるクッキーの具体例として、シュガーウエファース、果実を詰めたクッキー、チョコチップクッキー、シュガークッキーなどが挙げられる。クラッカーは、発酵タイプまたは非発酵タイプのクラッカー、およびグラハムクラッカーでよい。製造される焙焼品は、全脂肪のクラッカーもしくはクッキーでもよいし、または減脂肪、低脂肪、もしくは無脂肪の製品でもよい。
【００８０】
水に加えて、安定化全粒小麦粉などの安定化全粒粉に混加することのできる、クッキー、クラッカー、およびスナック原材料には、強化小麦粉、植物性ショートニング、糖、食塩、高フルクトースコーンシロップ、膨張剤、風味料、および着色料が含まれる。使用することのできる強化小麦粉としては、ナイアシン、還元鉄、チアミン硝酸塩、およびリボフラビンで強化した小麦粉が挙げられる。使用することのできる植物性ショートニングとしては、部分的に水素添加された大豆油から作られたものが挙げられる。使用することのできる膨張剤としては、リン酸カルシウムおよび重曹が挙げられる。使用することのできる着色料としては、アナトー抽出物やターメリックオレオレジンなどの植物性着色料が挙げられる。
【００８１】
一部の実施形態では、作られるドウとして、前述のクッキー、クラッカー、およびスナック原材料の種々の組合せを含むドウが挙げられる。一部の実施形態によれば、前述の原材料のすべてを均質に混加し、水の量を制御して、所望の稠度のドウを形成する。次いで、ドウを断片にし、焙焼または油揚すると、優れた水分、形状、外観、およびテクスチャー属性を有する製品を製造することができる。
【００８２】
本発明の実施形態では、安定化全粒粉、およびクッキー、ビスケット、クラッカーなどの焙焼品組成物中に使用することのできる取捨選択可能な他の穀粉などの、本発明の穀粉成分の合計量は、内包物の重量を含めずにドウの重量を基準として、たとえば約２０重量％から約８０重量％、好ましくは約４５重量％から約７５重量％の範囲でよい。別段指摘しない限り、重量パーセントはすべて、菓子または味付きのチップまたは具材、ナッツ、レーズンなどの内包物を除き、ドウまたは調合品を形成する全原材料の合計重量を基準としたものである。したがって、「ドウの重量」は、内包物の重量を含まないが、「ドウの全重量」は、内包物の重量を含む。
【００８３】
製造される製品のテクスチャーを変更するのに使用することのできる、工程に適合した原材料として、スクロース、フルクトース、ラクトース、デキストロース、ガラクトース、マルトデキストリン、コーンシロップ固形物、加水分解水添デンプン、タンパク質加水分解物、グルコースシロップ、これらの混合物などの糖が挙げられる。フルクトース、マルトース、ラクトース、デキストロースなどの還元糖、または還元糖の混合物は、褐変を促進するのに使用することができる。具体例としてのフルクトース供給源には、転化シロップ、高フルクトースコーンシロップ、糖蜜、ブラウンシュガー、メープルシロップ、これらの混合物などが挙げられる。
【００８４】
糖などのテクスチャー付与原材料は、結晶性もしくは粒状スクロース、粒状ブラウンシュガー、結晶性フルクトースなど、固体もしくは結晶の形で、またはスクロースシロップや高フルクトースコーンシロップなど、液体の形で、他の原材料に混加することができる。本発明の実施形態では、保湿糖、たとえば、高フルクトースコーンシロップ、マルトース、ソルボース、ガラクトース、コーンシロップ、グルコースシロップ、転化シロップ、蜂蜜、糖蜜、フルクトース、ラクトース、デキストロース、およびこれらの混合物を使用して、焙焼製品のかみ応えを高めることができる。
【００８５】
保湿糖に加えて、糖でない、またはスクロースと比べて低度の甘味を有する、他の保湿剤、または保湿剤の水溶液も、ドウまたはバッター中に用いることができる。たとえば、グリセロール、糖アルコール、たとえば、マンニトール、マルチトール、キシリトール、およびソルビトール、ならびに他のポリオールを保湿剤として使用することができる。保湿剤ポリオール（すなわち、多価アルコール）の追加の例としては、グリコール、たとえばプロピレングリコール、および水添グルコースシロップが挙げられる。他の保湿剤として、糖エステル、デキストリン、加水分解水添デンプン、および他のデンプン加水分解産物が挙げられる。
【００８６】
実施形態において、たとえば製造されたドウの、全糖固形物含有量、またはテクスチャー付与原材料含有量は、内包物の重量を含めずにドウの重量を基準として、０重量％から約５０重量％までの範囲でよい。
【００８７】
糖固形物は、ポリデキストロース、ホロセルロース、微結晶性セルロース、これらの混合物などの、従来の糖代用品または従来の増量剤で、全部または一部を置き換えることができる。ポリデキストロースは、減カロリーの焙焼品を作るのに好ましい糖代用品または増量剤である。具体例としての置き換え量は、もとの糖固形物含有量の少なくとも約２５重量％、たとえば、少なくとも約４０重量％、好ましくは約５０重量％から約７５重量％でよい。
【００８８】
実施形態において、ポリデキストロースなどの、従来の糖代用品、従来の増量剤、または従来の穀粉代用品の量は、内包物の重量を含めずにドウの重量を基準として、約１０重量％から約３５重量％、たとえば約１５重量％から約２５重量％でよい。
【００８９】
ドウの含水量は、ドウの適正な形成、機械加工、および切断を可能にする所望の稠度を得るのに十分なものとすべきである。ドウの全含水量は、別途加えられる原材料として含まれる水、ならびに穀粉（普通約１２％から約１４重量％の水分を含有する）がもたらす水分、ＩＩＩ型難消化性デンプン原材料などの増量剤または穀粉代用品の含水量、および高フルクトースコーンシロップ、転化シロップ、他の液体保湿剤など、調合品に含まれる他のドウ添加物の含水量を包含する。
【００９０】
別途加えられる水を含めて、ドウまたはバッター中のすべての水分供給源を考慮に入れると、使用することのできるドウまたはバッターの全含水量は、内包物の重量を含めずにドウまたはバッターの重量を基準として、一般に約５０重量％未満、好ましくは約３５重量％未満である。たとえば、用いるクッキードウは、含水量が、内包物の重量を含めずにドウの重量を基準として、約３０重量％未満、一般に約１０重量％から約２０重量％であるものでよい。
【００９１】
本発明のドウおよび焙焼品を得るのに使用することのできる油脂性組成物としては、バターなどの、焙焼用途に有用な既知のいずれかのショートニングまたは脂肪調合品もしくは組成物を挙げることができ、こうした油脂性組成物は、従来の食品用グレードの乳化剤を含んでもよい。精留、部分的な水素添加、および／またはエステル交換にかけた植物油、ラード、魚油、およびこれらの混合物が、本発明で使用することのできるショートニングまたは脂肪の具体例である。工程に適合したものである、食用の減カロリーもしくは低カロリーの部分的可消化もしくは非可消化脂肪、脂肪代用品、または合成脂肪、たとえば、スクロースポリエステルやトリアシルグリセリドを使用してもよい。硬質および軟質脂肪またはショートニングと油の混合物を使用して、油脂性組成物の所望の稠度または融解プロフィールを実現することもできる。本発明で使用する油脂性組成物を得るのに使用できる食用トリグリセリドの具体例としては、植物供給源由来の自然に発生するトリグリセリド、たとえば、大豆油、パーム核油、パーム油、菜種油、ベニバナ油、ゴマ油、ヒマワリ種子油、およびこれらの混合物が挙げられる。いわし油、メンヘーデン油、ババス油、ラード、獣脂などの魚油および動物油も使用してよい。合成トリグリセリド、ならびに脂肪酸の天然トリグリセリドを使用して、油脂性組成物を得ることもできる。脂肪酸は、８から２４個の炭素原子の鎖長を有するものでよい。たとえば約７５°Ｆから約９５°Ｆの室温で固体または半固体のショートニングまたは脂肪を使用することができる。好ましい油脂性組成物は、大豆油を含む。実施形態において、ドウは、少なくとも１種の油脂を、ドウの重量を基準として約３０重量％まで、たとえば約５重量％から約２５重量％含むものでよい。
【００９２】
本発明の実施形態に従って製造することのできる焙焼品には、減脂肪、低脂肪、または無脂肪製品でもある、減カロリー焙焼品が含まれる。本明細書で使用するとき、減脂肪食品とは、その脂肪含有量が、標準または従来の製品から少なくとも２５重量％減少している製品である。低脂肪製品は、基準量または表示分量当たり脂肪３グラム以下の脂肪含有量を有する。しかし、少ない基準量（すなわち、３０グラム以下またはテーブルスプーン２杯分以下の基準量）では、低脂肪製品は、製品５０グラム当たり３グラム以下の脂肪含有量を有する。無脂肪またはゼロ脂肪製品は、基準量および表示分量当たり脂肪０．５グラム未満の脂肪含有量を有する。塩味のクラッカーなどの付け合わせクラッカーについては、基準量は１５グラムである。スナックとして使用されるクラッカー、およびクッキーについては、基準量は３０グラムである。すなわち、低脂肪クラッカーまたはクッキーの脂肪含有量は、したがって、５０グラム当たり３グラム以下、または最終製品の全重量を基準として約６％以下の脂肪となる。無脂肪の付け合わせクラッカーは、１５グラム当たり０．５グラム未満、または最終製品の重量を基準として約３．３３％未満の脂肪含有量を有することになる。
【００９３】
ドウは、前述したものに加えて、クラッカーおよびクッキーに従来用いられている他の添加物も含んでよい。そのような添加物として、たとえば、従来の量の、乳副産物、卵または卵副産物、ココア、バニラまたは他の風味料を挙げることができる。
【００９４】
焙焼品に含めるのに適するタンパク質供給源を、用いるドウに含めると、メイラード褐変を促進することができる。タンパク質供給源としては、無脂肪粉乳固形物、乾燥または粉末卵、これらの混合物などを挙げることができる。タンパク質供給源の量は、たとえば、内包物の重量を含めずにドウの重量を基準として、約５重量％までの範囲でよい。
【００９５】
ドウ組成物は、内包物を含めずにドウの重量を基準として、約５重量％までの膨張系を含んだものでよい。使用することのできる化学膨張剤またはｐＨ調整剤の具体例としては、アルカリ材料および酸材料、たとえば、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素アンモニウム、リン酸酸性カルシウム（ｃａｌｃｉｕｍ  ａｃｉｄ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、酸性ピロリン酸ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ  ａｃｉｄ  ｐｙｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、リン酸二アンモニウム、酒石酸、これらの混合物などが挙げられる。酵母は、単独で使用しても、または化学膨張剤と組み合わせて使用してもよい。
【００９６】
用いるドウは、抗かび剤または保存料、たとえば、プロピオン酸カルシウム、ソルビン酸カリウム、ソルビン酸などを含んでよい。対微生物貯蔵安定性を確保するための、例示的な量は、内包物の重量を含めないドウの約１重量％までの範囲でよい。
【００９７】
乳化剤を有効な乳化量でドウに含めてもよい。使用することのできる具体例としての乳化剤には、モノおよびジグリセリド、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、レシチン、ステアロイル乳酸（ｓｔｅａｒｏｙｌ  ｌａｃｔｙｌａｔｅ）、およびこれらの混合物が挙げられる。使用することのできるポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルの具体例は、水溶性ポリソルベート、たとえば、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノステアレート（ポリソルベート６０）、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート（ポリソルベート８０）、およびこれらの混合物である。使用することのできる天然レシチンの例には、ダイズ、ナタネ、ヒマワリ、トウモロコシなどの植物から派生したもの、および卵黄などの動物供給源から派生したものが含まれる。大豆油由来のレシチンが好ましい。ステアロイル乳酸の具体例は、アルカリおよびアルカリ土類ステアロイル乳酸、たとえば、ステアロイル乳酸ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ  ｓｔｅａｒｏｙｌ  ｌａｃｔｙｌａｔｅ）、ステアロイル乳酸カルシウム（ｃａｌｃｉｕｍ  ｓｔｅａｒｏｙｌ  ｌａｃｔｙｌａｔｅ）、およびこれらの混合物である。使用することのできる乳化剤の具体例としての量は、内包物の重量を含めないドウの約３重量％までの範囲でよい。
【００９８】
ドウの製造は、クッキーおよびクラッカードウの製造において使用される従来のドウ混合技術および設備を使用して行うことができる。
【００９９】
焙焼時間および温度は、ドウまたはバッター調合品、オーブンのタイプなどによって異なるが、一般に、市販用のクッキー、ブラウニー、およびケーキ焙焼時間は、約２．５分から約１５分の範囲でよく、焙焼温度は、約２５０°Ｆ（１２１℃）から約６００°Ｆ（３１５℃）の範囲でよい。
【０１００】
焙焼製品は、保存料なしでの対微生物貯蔵安定性のために、約０．７未満、好ましくは約０．６未満の相対蒸気圧（「水分活性」）を有するものでよい。クッキー、ブラウニー、およびケーキ製品は、一般に、含水量が、内包物を除いた焙焼製品の重量を基準として約２０重量％未満、たとえば、クッキーでは約２重量％から約９重量％である。
【０１０１】
たとえば、本発明の実施形態では、貯蔵安定性のあるクラッカーまたはクッキー、たとえばグラハムクラッカーを製造するためのドウは、安定化全粒小麦粉を約４０重量％から約６５重量％、スクロースなどの少なくとも１種の糖を約１５重量％から約２５重量％、植物油やショートニングなどの少なくとも１種の油脂を約５重量％から約２５重量％、高フルクトースコーンシロップや蜂蜜などの少なくとも１種の保湿糖を約０重量％から約１０重量％、無脂肪粉乳固形物などのタンパク質供給源を約０重量％から約１重量％、食塩などの風味料を約０重量％から約１重量％、炭酸水素アンモニウムや炭酸水素ナトリウムなどの膨張剤を約０．５重量％から約１．５重量％、および追加の水を約８重量％から約２０重量％含むものでよく、各重量パーセンテージは、ドウの重量を基準としており、重量パーセンテージは、合計１００重量％となる。
【０１０２】
本発明の実施形態では、安定化全粒粉、および安定化全粒粉を含んだ焙焼品は、安定化全粒粉の製造に使用したのと同じまたは実質上同じ量のリパーゼ阻害剤、たとえば乳酸を含有してよい。たとえば、安定化全粒粉、およびそれを含んだ焙焼品は、全粒粉１００ｌｂ当たり少なくとも０．１モル、たとえば少なくとも約０．３モル、好ましくは約１モルから約５モル、最も好ましくは約２モルから約４モルの阻害剤を含有してよい。
【０１０３】
（穀粉属性）
安定化全粒粉の製造における処理または加水処理の際に、全粒または全粒粉１００ｌｂ当たり少なくとも約０．１モルの量の乳酸などのリパーゼ阻害剤、たとえば、全粒の重量を基準として少なくとも約３０００ｐｐｍの乳酸を使用すると、安定化全粒粉に、それぞれ、安定化処理なしで、またはリパーゼ阻害剤を使用せずに熱安定化だけを使用して製造した全粒粉と比べて、
ａ）貯蔵中に穀粉に生成する遊離脂肪酸（ＦＦＡ）および／またはヘキサナールによって測定される、優秀な鮮度の延長、
ｂ）貯蔵中に穀粉に生じる生穀粉臭の低減などの優秀な官能属性、および
ｃ）芽胞数によって測定される、優秀な対微生物安定性
が備わる。
【０１０４】
実施形態において、安定化全粒小麦粉は、９５℃で１か月間加速貯蔵した後、安定化全粒粉の重量を基準として、約２００ｐｐｍ未満、好ましくは約１００ｐｐｍ未満、最も好ましくは約１０ｐｐｍ未満という思いがけず低いヘキサナール含有量を示し得る。
【０１０５】
また、実施形態では、貯蔵中、たとえば９２°Ｆでの加速貯蔵条件下で５８日間の貯蔵中に穀粉に生じる生穀粉臭が、評点１を、白色粉の袋を開放しておいたものを連想させる穀粉香の最低強度とし、評点１００を最高強度とする１から１００のスケールを使用しての、熟練した味覚パネルによる官能評価に基づき、安定化処理なしで、または熱安定化だけを使用して製造した対照と比べて、少なくとも３％、たとえば少なくとも５％、好ましくは少なくとも７％、最も好ましくは少なくとも１０％低減される場合がある。低減パーセンテージまたはスコアは、ふすま加水処理レベルやリパーゼ阻害剤のレベルなどの処理条件に応じて変わることがある。たとえば、本発明の実施形態において、安定化全粒粉は、ふすま加水処理レベルや、リパーゼ阻害剤、たとえば乳酸のレベルなどの処理条件に応じて、１から１００のスケールで、９．５を越える対照スコアと比べて、９以下のスコアを有するものでよい。
【０１０６】
加えて、実施形態では、安定化全粒粉の製造において有機酸などのリパーゼ阻害剤を使用することで、耐熱性芽胞が、安定化処理なしで製造、または熱安定化だけを使用して製造した全粒粉と比べて、少なくとも約５０％、好ましくは少なくとも約７５％、最も好ましくは少なくとも約９０％減少し得る。たとえば、実施形態において、リパーゼ阻害剤で安定化した全粒粉は、好気性寒天平板菌数（Ａｅｒｏｂｉｃ  Ｐｌａｔｅ  Ｃｏｕｎｔ）（ＡＰＣ）が、約１５０ＣＦＵ／ｇ未満、好ましくは約１００ＣＦＵ／ｇ未満、最も好ましくは約７５ＣＦＵ／ｇ未満であり、耐熱性芽胞数が、約７５ＣＦＵ／ｇ未満、好ましくは約５０ＣＦＵ／ｇ未満、最も好ましくは約１０ＣＦＵ／ｇ未満のものでよい。
焙焼品官能属性
【０１０７】
さらに、熟成し、リパーゼを阻害し、安定化した全粒粉を使用して製造したクッキーなどの焙焼品は、安定化処理なしで製造、またはリパーゼ阻害剤を使用せず熱安定化だけを使用して製造した全粒粉で作られていることを除き、同じ組成で構成されている焙焼品または対照サンプルと比べて、後味や印象などの、優秀な風味の持続期間および他の官能属性の延長を示す。
【０１０８】
たとえば、実施形態では、グラハムクラッカーについての甘い風味、シナモンの風味、香ばしい後味、バニラの後味、および蜂蜜の後味といったプラスの官能属性などの焙焼品官能属性は、評点１を、甘い風味、シナモンの風味などの属性の最低強度とし、評点１００を最高強度とする１から１００のスケールを使用しての、熟練した味覚パネルによる官能評価に基づき、安定化処理なしで、または熱安定化だけを使用して製造した対照と比べて、少なくとも３％、たとえば少なくとも５％、好ましくは少なくとも７％、最も好ましくは少なくとも１０％、増大することがあり、歯に対する粘着性の印象および粒子の量の印象といったマイナスの官能属性は、減少することがある。パーセンテージの増加もしくはパーセンテージの減少またはスコアは、ふすま加水処理レベルやリパーゼ阻害剤のレベルなどの処理条件に応じて変わることがある。
【０１０９】
また、実施形態では、安定化全粒粉を用いて製造されたクッキーなどの焙焼品は、ふすま加水処理レベルや、リパーゼ阻害剤、たとえば乳酸のレベルなどの処理条件に応じて、甘い風味というプラスの属性について、１から１００のスケールで、３１より高いスコアを有することがあり、これに比べて、安定化処理なしで製造、またはリパーゼ阻害剤を使用せず熱安定化だけを使用して製造した全粒粉を用いて作られた対照サンプルについての対照スコアは、３０未満である。また、１から１００のスケールで、焙焼品は、プラスの官能属性について、シナモンの風味が１０より高く、香ばしい後味が３１．５より高く、バニラの後味が１７．５より高く、蜂蜜の後味が２３．６より高いスコアを有し、マイナスの官能属性について、歯に対する粘着性の印象が５２未満であり、粒子の量の印象が３６未満のスコアを有する。
【０１１０】
似通った改善点を示すのに評価対象とすることのできる具体例となる官能属性には、香り、外観、手触り、テクスチャー／口当たり、風味、および後味／印象などの部門が含まれる。評価対象とすることのできる、こうした部門内の詳細な官能属性の具体例は、以下のとおりである。
ａ）香り：甘い、バニラ様、糖蜜様、メープル様、蜂蜜様、香ばしい、穀粉様、シナモン様、小麦様、ふすま様、およびボール紙様の属性、
ｂ）外観：褐色、むらのある色、目に見える粒子、および逆コントラストの属性、
ｃ）手触り：表面の粗さ（上部）、でこぼこな表面（上部）、でこぼこな表面（底部）、粉状の皮、割れにくい、ポキッと折れる、きれいに割れる、くず、層の量、および密度の属性、
ｄ）テクスチャー／口当たり：最初のかみ切りにくさ、最初の歯応え、パリッとした、脆い、乾いた、粒子の量、粒子の大きさ、硬直した、溶解速度、歯への粘つき、口をコーティングする、および口を乾かす属性、
ｅ）風味：香ばしい、小麦、ふすま、甘い、苦い、塩気のある、バニラ、穀粉、シナモン、蜂蜜、糖蜜、メープル、およびボール紙の属性、および
ｆ）後味／印象：香ばしい、小麦様、ふすま様、甘い、苦い、バニラ様、シナモン様、蜂蜜様、糖蜜様、歯への粘つき、粒子状物質の量、口を乾かす、口をコーティングする、唾液を出す、金属様、および後に残る属性。
【０１１１】
本発明を以下の非限定的な実施例によって例示するが、実施例において、そうでないと指摘しない限り、部、パーセンテージ、および比はすべて、重量によるものであり、温度はすべて℃とし、すべての温度は大気温度である。
【実施例１】
【０１１２】
（Ａ部．全粒小麦の酸性化）
この実施例の目的は、ｐＨの下がった非漂白全粒粉を製造するために、軟質赤小麦種実を酸含有水でどのようにテンパリングするかを説明することである。１３．０５％という初期小麦水分は、周囲温度で小麦に水を加え、水を８時間保っておくことにより、１４．０％の最終種実水分に増加する。加える水の量は、表１に従って算出される。
【０１１３】
【表１】
2014510544.tif 000003
【０１１４】
（手順）
汚れを取った小麦サンプル（８００ｇ）をプラスチックの気密広口瓶に秤量し、表２に示すとおりの特定の量の酸を含有する、対応する量のテンパリング水と混合する。小麦を周囲温度で８時間テンパリングする。たとえば、小麦８００ｇ中８５０ｐｐｍの乳酸濃度を得るには、０．８０ｇの８５％乳酸溶液を７．８８ｇの水道水に加える。酸を含んだテンパリング水を小麦に加えたなら、広口瓶を密閉し、１０分毎に１分間、６回手で振盪し、終夜静置する。
【０１１５】
表２に、この実施例で試した異なる３種類の酸、乳酸、リン酸、および塩酸を示す。表には、（１）小麦の重量、（２）初期小麦水分、（３）乾燥重量小麦、（４）加えた各酸溶液の量、（５）乾燥重量ベースで表示した酸の量（ｄｗｂ）、（６）テンパリング水の量、（７）小麦種実を調質するために加えた合計での水（テンパリング水＋酸溶液からの水）、（８）百万分率（ｐｐｍ）で表示した、小麦に加えた酸（ｄｗｂ）の量、（９）テンパリングした種実の水分を示す。
【０１１６】
【表２】
2014510544.tif 000004
【０１１７】
酸水溶液を８００ｇ分の小麦種実に加える：
［乳酸、乾燥重量（ｐｐｍまたは（μｇ／ｇ小麦）］＊８００＝合計酸乾燥重量、
合計酸乾燥重量／乳酸分子量＝酸モル数、
％水＊８００ｇ小麦＝水合計量（ｇ）／体積当量（１ｍｌ）、
水（ｍｌ）／１０００＝水合計量（Ｌ）、
［酸濃度］＝酸モル数／水リットル数＝モル濃度（Ｍ）、
［［加えた酸（ｄｗｂ）、種実百万ｇ当たりのｇ］／酸の分子量、ｇ）］＝種実１ｇ当たりの酸モル数、
種実１ｇ当たりの酸モル数／０．００２２ｌｂ／ｇ＝“酸（１ｌｂ当たりのモル）＊１００＝“酸（１００ｌｂ当たりのモル数）
【０１１８】
（Ｂ部．小麦の製粉）
この手順の目的は、Ａ部で記載したとおりにテンパリングした小麦種実から全粒粉を製造することであった。
【０１１９】
（手順）
テンパリングした小麦サンプルを、２つの単位装置からなるＣｈｏｐｉｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍｉｌｌ  ＣＤ１（Ｃｈｏｐｉｎ、フランス）で製粉した。第１の単位装置は、２つの歯付ロールからなるローラーミルであり、第２の単位装置は、縮小のための滑面練りロールであった。第１の単位装置の歯付ロールから、主要な３画分、すなわち、右側の収集受皿の粗穀粉セモリナ、左側の収集受皿の微砕穀粉、および粗ふすまが得られる。セモリナは、縮小ロールで加工され、それから縮小余りかすと縮小穀粉の２つの画分が得られる。
【０１２０】
表３に、穀粉抽出収率を示す。収率は、製粉された小麦を基準として算出した。穀粉収率は、この研究では、収率＝１００×［（粗ふすまおよび微細ふすま重量＋余りかす重量）／小麦重量］として算出した。
【０１２１】
【表３】
2014510544.tif 000005
【０１２２】
（概要）
小麦種実を、異なる種類および量の酸を含有する水でテンパリングした。加える水分は、テンパリングした後の最終種実水分が、小麦の製粉に好ましい水分範囲であると考えられる１４％になるように、初期小麦種実水分に従って調節した。テンパリング水に加える酸の量は、３７０ｐｐｍから１０，０００ｐｐｍ（小麦の初期重量当たりの酸乾燥重量）の範囲が試験されるように調節した。すべての種類および量の酸処理について、正常な製粉挙動が観察された。穀粉抽出収率は、概して約６７％から６８％であり、すべての製粉画分を合わせて、ふすま、胚芽、および内胚乳の自然な割合を有する全粒粉とした。
【実施例２】
【０１２３】
（酸処理した種実からの粗粉砕ふすまの製造および全粒粉とする再配合）
この手順の目的は、酸処理した小麦の製粉から得られた粗ふすま画分および縮小余りかすの粒度を縮小することであった。第１の歯付ロールからの粗ふすまおよび縮小ロールからの粗余りかすを、密閉された広口瓶において液体窒素で凍結させ、次いで、Ｐｅｒｔｅｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍｉｌｌ  ３１００（Ｐｅｒｔｅｎ、スウェーデン）（１６，８００ｒｐｍにセットしたハンマー回転速度、篩の目の開きは０．５ｍｍである）によって粉砕した。粉砕後、粗粉砕材料を、残りの穀粉画分（微砕穀粉＋縮小穀粉）と再配合して、全粒粉とした。全粒粉粒度分布をＲｏｔｏ  Ｔａｐによって求めた。一様な機械的作用を使用して、正確な信頼できる結果を確実なものとするこの方法は、広範な種類の製品および原材料に適用できる。このシェーカーは、手篩で使用される、円を描き軽くたたく動きを再現する。この方法は、以下の変更および改造により、ＡＳＴＡ  １０．０  ＲｏＴａｐ  Ｓｈａｋｅｒ法を適合させたものである。
【０１２４】
（装置）用いた装置：
１．自動タイマーを備えたＴｙｌｅｒ  ＲｏＴａｐ電動試験篩シェーカー（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）
２．Ｕ．Ｓ標準篩＃２０、＃３５、＃４０、＃５０、＃６０、＃８０、＃１００、底部分離受皿、およびカバー
３．天秤、０．１ｇの精度
４．網清掃用ブラシ
５．ケイ素粉末流動助剤（Ｓｙｌｏｉｄ＃２４４、Ｗ．Ｒ．Ｇｒａｃｅ＆Ｃｏ．）
【０１２５】
（手順）用いた手順：
１．汚れがなく、十分に乾燥し、風袋を計った篩を使用する。
２．指定の大きさのサンプルを正確に秤量（０．１ｇ単位まで）して２５０ｍｌまたは４００ｍｌビーカーに入れる。
３．適切な篩および底部の受皿の風袋を個々に計る。
４．最も粗い目を最上部とし、最も細かい目が最低部になるまで細かさが増す状態で、篩をシェーカーに積み重ねる。底部の受皿をその下に置く。
５．サンプルをビーカーから一番上の篩に定量的に移す。
６．篩カバー、次いで円形のフレームであるシェーカープレートを最上部に載せ、タップアームを降ろす。
７．タイマーを５分間にセットする。
８．振盪完了後、ＲｏＴａｐから篩を取り外し、各篩および受皿を個別に慎重に秤量する。
【０１２６】
（計算）用いた計算：
１．１段篩を使用する。
【０１２７】
【数１】
2014510544.tif 000006
【０１２８】
ｂ．篩通過％＝１００−篩上％
２．３段篩以上を使用する。
篩Ａ（Ｓａ）、粗目、上部
篩Ｂ（Ｓｂ）、中目、中部
篩Ｃ（Ｓｃ）、細目、底部など
【０１２９】
【数２】
2014510544.tif 000007
【０１３０】
３．上記の計算を行う前に、サンプルに加えたケイ素粉末流動助剤の量を、受皿における重量から差し引くべきである。
４．すべての網（プラス受皿）上のパーセンテージの合計は、１００％に等しいか極めて近いはずである。
【０１３１】
全粒粉ｐＨは、１０％スラリー（９部の水に対して１部の穀粉）において、Ａ−５８９０５−６６ハイパフォーマンスコンビネーションｐＨ電極を備えたＣｏｍｉｎｇ  ｐＨメーター３６０ｉを使用して測定した。灰分は、穀粉中の灰分測定についてのＡＯ  ＡＣ公定法９２３．０３に従って定量する。穀粉水分は、ＡＡＣＣ法４４−１５Ａに従って定量した。
【０１３２】
表４に、（１）水分、（２）ｐＨ、（３）灰分含有量、および（４）粒度分布の全粒粉特性を示す。
【０１３３】
【表４】
2014510544.tif 000008
【０１３４】
抽出可能なリパーゼ活性を各穀粉について求めた。リパーゼ活性を求めるのに使用した方法は、以下のとおりである。
【０１３５】
（Ａ．装置）
１．Ｅｍ４４２およびＥｘ３００ｎｍのフィルターを備えたＴＤ−７００蛍光光度計（Ｔｕｒｎｅｒ  Ｄｅｓｉｇｎ）
２．分析用天秤（±０．０００１）
３．ピペットマン、１０μｌ、５０μｌ、および５０００μｌと、それぞれのチップ
４．２０ｍｌのキャップ付きガラス製シンチレーションバイアル（ＶＷＲ  ＃６６０２２−０６０）
５．５０ｍｌの遠心管（ＶＷＲ  ＃２０１７０−１７０）
６．冷却遠心機（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ａｌｌｅｇｒａ  Ｘ１５Ｒ）
７．２５ｍｌおよび１０００ｍｌの栓付きメスフラスコ
８．１５００ｍｌのビーカー
９．撹拌棒
１０．ボルテックスミキサー
１１．使い捨てキュベット、４．５ｍｌ（ＶＷＲ  ＃５８０１７−８７５）
１２．使い捨てキュベット用のキャップ（ＶＷＲ  ＃２４７７５−０８３）
１３．絶縁された氷受皿（ＶＷＲ  ＃３５７５１−０４６）
１４．シェーカー／ロッカー（ＶＷＲ  ＃１４００３−５８０）
１５．タイマー
【０１３６】
（Ｂ．試薬）
１．脱イオン水
２．ヘプタン酸４−メチルウンベリフェリル（４−ＭＵＨ）（Ｓｉｇｍａ  ＃Ｍ２５１４）
３．２−メトキシエタノール（Ｆｌｕｋａ  ＃６４７１９）
４．トリズマ塩酸塩（Ｓｉｇｍａ  ＃Ｔ−５９４１）
５．１Ｎ水酸化ナトリウム（Ｆｉｓｈｅｒ  ＃ＳＳ２６６）
６．氷
【０１３７】
（Ｃ．溶液）
１．アッセイ緩衝液（０．２ＭトリスＨＣｌ、ｐＨ７．４）
・３１．５２ｇのトリズマ塩酸塩（Ｂ−５）を秤量して１５００ｍｌのビーカー（Ａ−８）に入れる。
・約９００ｍｌの脱イオン水を加え、撹拌棒を加え、溶解させる。
・１Ｎ水酸化ナトリウムでｐＨを７．４に調整する。
・１０００ｍｌのメスフラスコ（Ａ−７）に移し、脱イオン水でメスアップする。
２．基質原液（０．５％の４−ＭＵＨ  ２−メトキシエタノール溶液、Ｗ／Ｖ）
・０．０７２０ｇから０．０７２５ｇのヘプタン酸４−メチルウンベリフェリル（Ｂ−２）を秤量して２０ｍｌのバイアル（Ａ−４）に入れる。
・バイアルに１５ｍｌの２−メトキシエタノール（Ｂ−３）を加える。
・ボルテックス撹拌して粉末を溶解させる。
・室温で貯蔵し、１週間後に廃棄する。
３．基質希釈標準溶液（０．０３％の４−ＭＵＨ（Ｗ／Ｖ）を６％の２−メトキシエタノール（Ｖ／Ｖ）水溶液に溶かした溶液）
・基質原液（Ｃ−２）から１．５ｍｌの一定分量を取り出し、ピペットで２５ｍｌのメスフラスコ（Ａ−７）に移す。
・脱イオン水で希釈してメスアップする。
・十分に混合する。
・試験毎に基質原液（Ｃ−２）から新鮮な基質希釈標準溶液を作製する。
４．氷／水混合物（氷浴）
絶縁された受皿（Ａ−１３）に氷を入れ、約半分の体積の冷水を加える。
５．穀粉サンプル溶液
・アッセイ緩衝液（Ｃ−１）を氷浴（Ｃ−４）で予め冷やす。
・０．１ｇのサンプル（０．１０００ｇにできるだけ近く）を秤量して５０ｍｌの遠心管（Ａ−５）に入れる。
・チルドしたアッセイ緩衝液（Ｃ−１）２０ｍｌを加える。
・ボルテックス撹拌して溶解させる。
・管を氷浴に水平に入れ、シェーカー（Ａ−１４）（＃２スピード設定、１６ストローク／分）において３０分間ゆっくりと揺らす。
・サンプルを５℃で１０分間、４７５０ｒｐｍで遠心分離する（Ａ−６）。
・上清をアッセイに使用する。
【０１３８】
（Ｄ．蛍光光度計の校正）
（Ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ，Ｍｕｌｔｉ−Ｏｐｔｉｏｎａｌ，Ｒａｗ  Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ  ＰｒｏｃｅｄｕｒｅについてＴＤ−７００操作マニュアルを参照されたい）
・蛍光光度計をオンにする（Ｈｏｍｅ画面が現れるまで待つ）
・「ＨＯＭＥ」画面から＜ＥＮＴ＞を押してＳｅｔｕｐ＆Ｃａｌを呼び出す。
・校正の＃２を選択する。
・３０００μｌのアッセイ緩衝液（Ｃ−１、室温）を含有するキュベットをサンプルチャンバーに入れる。
・＜ＥＮＴ＞を押す。
・Ｓｅｔ  Ｓａｍｐｌｅ＝１００についてＯＫの＃１を押す（デフォルト設定の１００、Ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ  Ｆａｃｔｏｒが確立されるまで待つ、読みは約１００になるはずである）。
・＜ＥＮＴ＞を押す。
・Ｎｏ  Ｓｕｂｔｒａｃｔ  Ｂｌａｎｋの＃９を押す（Ｈｏｍｅ画面に戻る）
【０１３９】
（Ｅ．サンプル試験）
・キュベット（Ａ−１１）に適切なサンプルＩＤで予め名前をつける。
・計器（Ｄ−３）の校正にブランクとして以前に使用したキュベットに、１０μｌの基質希釈標準溶液（Ｃ−３）を加える。
・キャップ（Ａ−１２）をし、５回反転させて混合する。
・蛍光光度計（Ａ−１）のサンプル区画にキュベットを入れる。  ・蛍光光度計のふたを閉じた直後にタイマーをスタートさせ、０．５、１、２、３、４、および５分の時点で読み取られる蛍光強度（ＦＩ）を記録する。
・蛍光光度計のサンプル区画からキュベットを取り出す。
・２９５０μｌのアッセイ緩衝液（Ｃ−１、室温）を、予め名前をつけたサンプルキュベット（Ｅ−１）にピペットで移す。
・最初の抽出穀粉サンプル（Ｃ−５）の上清溶液５０μｌをピペットで移す。
・１０μｌの基質希釈標準溶液（Ｃ−３）を加える。
・後続のすべてのサンプルについて、直ちにステップＥ−３からＥ−６を繰り返す。
【０１４０】
（Ｆ．計算）
・各サンプルについて、反応曲線としてＦＩ値をインキュベート時間に対してプロットする。
・反応曲線についてＥｘｃｅｌスプレッドシートの最小回帰を使用して傾き（ΔＦＩ／分）を求める。
・以下のようにΔＦＩ／分をサンプル重量によって０．１０００ｇに正規化する。
・正規化ΔＦＩ／分＝傾き×（０．１０００ｇ／サンプル重量ｇ）
・リパーゼ活性をΔＦＩ／分／１ｇとして報告する。
【０１４１】
種々の全粒粉についての抽出可能なリパーゼ活性を図３に示す。
【０１４２】
（概要および結論）
麦種実を、酸を含有する水でテンパリングした後、製粉し、再配合して全粒小麦粉とすることにより、未処理の対照よりｐＨの低い全粒粉が製造された。すべての小麦が正常な製粉成果を示した。粗画分は、粉砕してから再配合して全粒粉とした。最終穀粉の粒度分布は、試験変動要素間で似通っており、穀粉重量の約１５％が＞２５０ｕｍであり、約５０％から６０％が＜１５０ｎｍであった。灰分含有量は、ふすま材料の量を示唆するものである。穀粉製粉における灰分測定の使用は、ふすま、糊粉、および胚芽では、内胚乳より灰分（ミネラル）の濃度が高いことに基づく。灰分含有量は、広く使用されている、精白穀粉純度の指数であり、製粉工程の際の種実成分の機械的分離を測定する手段となる。この場合では、灰分は、ふすま、胚芽、および内胚乳の自然な割合を有する全粒粉を製造するために、粗粉砕画分が、穀粉内胚乳と完全に再現可能に再配合されていることの指標として使用する。最終穀粉のｐＨは、全種実のテンパリングに使用した酸の量および種類に応じて変わった。全粒粉における抽出可能なリパーゼ活性は、調査した範囲（ｐＨ＝６．６（未処理対照）から下へｐＨ＝４．５まで）のｐＨに応じて低下した。
【実施例３】
【０１４３】
（全粒粉安定性に対する酸テンパリングの効果）
この実施例の目的は、貯蔵中の全粒粉の安定性に対する酸テンパリングの効果を試験することであった。密閉したガラス製広口瓶において９２°Ｆの加速貯蔵条件下で３０日間穀粉を貯蔵した後、生成した遊離脂肪酸の量を測定した。全粒粉は、実施例１および２に記載の工程に従って調製した。試験した穀粉は、以下のものであった。（１）未処理の軟質赤穀粉（対照）、（２）乳酸で処理してｐＨ６．３０とした軟質赤穀粉、（３）乳酸で処理してｐＨ５．２４とした軟質赤穀粉、（４）乳酸で処理してｐＨ４．９５とした軟質赤穀粉、（５）乳酸で処理してｐＨ４．６５とした軟質赤穀粉、（６）乳酸で処理してｐＨ４．５４とした軟質赤穀粉、（７）リン酸で処理してｐＨ６．１６とした軟質赤穀粉、（８）リン酸で処理してｐＨ５．６７とした軟質赤穀粉、（９）リン酸で処理してｐＨ４．６４とした軟質赤穀粉、（１０）塩酸で処理してｐＨ６．１８とした軟質赤穀粉、（１１）塩酸で処理してｐＨ５．０７とした軟質赤穀粉、（１２）塩酸で処理してｐＨ４．４８とした軟質赤穀粉。結果を、未処理の対照穀粉中に生成した遊離脂肪酸の量と比較した。全粒粉は、穀粉を製粉して得られた自然な割合のふすま成分と内胚乳で製造した。全粒粉灰分含有量を使用して、組成を確認した。
【０１４４】
全粒粉（新鮮な穀粉および３０日間熟成させた穀粉）の遊離脂肪酸含有量は、以下の方法に従って求めた。
【０１４５】
穀粉の遊離脂肪酸含有量は、非特許文献２に記載の方法を適合させた。遊離脂肪酸を含有する脂質抽出物は、食物から、酸性化有機溶媒での抽出によって得られる。無水脂質抽出物を弱アニオン交換ＳＰＥカートリッジに通して、同時抽出された材料、特に中性グリセリドから遊離脂肪酸を単離する。
【０１４６】
手順は以下のとおりである。
（装置）
ａ．電子圧力制御（ＥＰＣ）および水素炎イオン化検出器（ＦＩＤ）を備えた、内径０．５３ｍｍカラムへのキャピラリーオンカラム注入に適合したガスクロマトグラフ（ＧＣ）［例：ＨＰ５８９０シリーズＩＩ］
ｂ．ＧＣと適合可能なオートサンプラー［例：ＨＰ７６７３］
ｃ．クロマトグラフィーデータを収集し、統計値を計算し、結果を表にまとめることのできるソフトウェアシステム
ｄ．０．０００１ｇの測定能力、１５０ｇの許容重量を有する分析用天秤
ｅ．温度制御を備えた３０００ｒｐｍ（２０５０ｒｃｆ）が可能な遠心機（取捨選択可能）
ｆ．サンプルを２５０００ｒｐｍでホモジナイズすることのできるＰｏｌｙｔｒｏｎ［例：Ｂｒｉｎｋｍａｎｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｐｏｌｙｔｒｏｎ  Ｋｉｎｅｍａｔｉｃａ  ＡＧ  Ｍｏｄｅｌ  ＰＴ  １３００Ｄ］
ｇ．ボルテックスミキサー
ｈ．不活性なプラスチック成分を含む溶媒分散剤［例：Ｂｒｉｎｋｍａｎｎ−２（１〜５ｍＬ）容量  Ｃａｔ＃２２２２０１０−１および１（５〜２５ｍＬ）容量  Ｃａｔ＃２２２２０３０−６］
ｉ．オートサンプラーバイアル用のクリンパー
【０１４７】
（補給材料）
１．カラム：ＳｔａｂｉｌｗａｘＤＡ  ０．２５ｕ、０．５３ｍｍ×１５ｍ［Ｒｅｓｔｅｋ  Ｃｏｒｐ．＃１１０２２］
２．ＳＰＥカートリッジ：Ｂｏｎｄ  ｅｌｕｔｅ  ＮＨ２、３ｃｃ、５００ｍｇ、ステンレス鋼フリット付き［Ｖａｒｉａｎ  Ｐａｒｔ＃  １２１２−４０３８］
３．テフロン（登録商標）ライナー付きねじ込みキャップを備えたガラス製遠心試験管、サイズ：１６×１２５ｍｍ
４．テフロン（登録商標）ライナー付きねじ込みキャップを備えたＣｏｒｅｘガラス製遠心管、４５ｍＬ［例：ＣＯＲＥＸ  ＩＩ  Ｎｏ．８４２２−Ａ］
５．Ｗｈａｔｍａｎ濾紙＃１、直径１２５ｍｍ
６．Ｐｙｒｅｘ（登録商標）ブランドの濾過漏斗、短足型
７．使い捨て培養管、ホウケイ酸ガラス１６×１５０ｍｍ［例：ＶＷＲ  Ｃａｔ＃４７７２９−５８０］
８．テフロン（登録商標）ライナー付きねじ込みキャップを備えたガラス製バイアル、４ｍＬ［例：Ｋｉｍｂｌｅ  Ｃａｔ＃６０９４０Ａ４］
９．テフロン（登録商標）ライナー付きキャップを備えたオートサンプラーバイアル、ホウケイ酸ガラス、クリンプトップ
１０．テフロン（登録商標）ライナー付きねじ込みキャップを備えた琥珀色のホウケイ酸ボトル、１００ｍＬ
１１．テフロン（登録商標）ライナー付きねじ込みキャップを備えた透明なホウケイ酸ボトル、２５０ｍＬ
１２．メスシリンダー：２５０ｍＬ、１００ｍＬ
１３．メスフラスコ：２５０ｍＬ、１００ｍＬ
１４．ガラス製計量ピペット  クラスＡ  ５、２、１ｍＬ、および目盛り付き１０、５ｍＬ
１５．使い捨てパスツールピペット：５  ３／４および９インチ
１６．マイクロスパチュラ、スパチュラ、およびポリプロピレン製サンプル移送管
【０１４８】
（試薬／溶液）
試薬および標準液
１．エタノール−  ２００プルーフ、無水、９９．５％＋、アンバーガラス器で貯蔵されたもの［Ａｌｄｒｉｃｈ  ＃４５，９８３−６または同等物］
２．ヘキサン−  ＧＣグレード［Ｂ＆Ｊ  ＃２１６−４または同等物］
３．イソプロパノール−  ＧＣグレード［Ｂ＆Ｊ  ＃３２３−４または同等物］
４．メチル−ｔｅｒｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）−  ＧＣグレード［Ｂ＆Ｊ  ＃２４２−４または同等物］
５．塩化メチレン−  ＧＣグレード［Ｂ＆Ｊ  ＃２９９−４または同等物］
６．酢酸−  プロピオン酸レベルについてモニターされる純度［Ａｌｄｒｉｃｈ  ＃３２，ＯＯ９−９または同等物］
７．硫酸−  ＡＣＳ試薬、９５．０〜９８．０％［Ｆｉｓｈｅｒ  Ｒｅａｇｅｎｔ  ＡＣＳ  ＃Ａ８ＯＯ−５００または同等物］
８．水  タイプ１［Ｆｉｓｈｅｒ  ＨＰＬＣ  ＃Ｗ５−４または同等物］
９．珪藻土［Ｌｅｃｏ  ｐａｒｔ＃５０２−３２７または同等物］
１０．標準液  純度＞９９．０％  ３：０、４：０、６：０、８：０、９：０、１０：０、１１：Ｏ、１２：０、１３：０、１４：０、１６：０、１８：０［例：３：０  Ａｌｄｒｉｃｈ  ＃２４，０３５−４、４：０  Ａｌｄｒｉｃｈ  ＃Ｂ１０，３５０−０、６：０  Ａｌｄｒｉｃｈ  ＃１５，３７４−５、８：０  Ａｌｄｒｉｃｈ  ＃０−３９０−７、９：Ｏ  Ｓｉｇｍａ  ＃Ｎ−５５０２、１０：０  Ａｌｄｒｉｃｈ  ＃１５，３７６−１、１１：０  Ｓｉｇｍａ  ＃Ｕ−５５０３、１２：Ｏ  Ａｌｄｒｉｃｈ  ＃１５，３７８−８、１３：０  Ｓｉｇｍａ  ＃Ｔ−０５０２、１４：Ｏ  Ａｌｄｒｉｃｈ  ＃１５−３７９−６、１６：Ｏ  Ｎｕ−Ｃｈｅｃｋ−Ｐｒｅｐ，ｉｎｃ．＞９９％、１８：０  Ｎｕ−Ｃｈｅｃｋ−Ｐｒｅｐ，Ｉｎｃ．＞９９％］
【０１４９】
（調製すべき溶液）
１．２．５Ｍ硫酸：７ｍＬの濃硫酸をタイプ１の水で希釈して体積を５０ｍＬとする。
２．１：１（ｖ／ｖ）のＭＴＢＥ：ヘキサン
３．２：１（ｖ／ｖ）の塩化メチレン：２−プロパノール
４．２％酢酸ＭＴＢＥ溶液：５ｍＬの濃酢酸をＭＴＢＥで希釈して体積を２５０ｍＬとする。
５．１：１（ｖ／ｖ）のヘキサン：２−プロパノール、作業の合間のシリンジ用すすぎ溶媒
６．標準液（標準調製法  添付書類１３．１を参照されたい）
ａ．内部標準：１１：０、代用標準：９：０および１３：０
ｂ．マトリックススパイク（ＭＳ）標準エタノール作業溶液：約５０μｇ／ｍＬのＭＳ。このレベルは、低レベルから中レベルの定量に適切となり得る。一般に、ＦＦＡレベルは、所与のマトリックス内で甚だしく変動する。したがって、個々のＦＦＡにつき様々な量のスパイク溶液がマトリックス毎に必要な場合もある。
ｃ．ヘキサン中の校正標準液により、線形範囲を確立する：オンカラム範囲１〜２００μｇ／ｇ（ｐｐｍ）、遊離脂肪酸標準：３：０、４：０、６：０、８：０、９：０  代理標準１０：０、１１：０  内部標準１２：０、１３：０  代理標準１４：０、１６：０、および１８：０。補足説明：１８：１および１８：２の計算は、１８：０の反応率に基づく。
ｄ．継続校正標準液は、２％酢酸ＭＴＢＥ溶液中に調製し、最終溶離溶液：２％酢酸／ＭＴＢＥ中に調製した約５０μｇ／ｍＬの校正標準液＃３を目下使用して、サンプルをひとまとめに扱う。
チェックサンプル、ブランク、デュープリケート、およびマトリックススパイク
新しいロットのＳＰＥカートリッジを使用する前に、中レベル標準液を用いて適切な溶離画分を決定しなければならない。各回分のサンプルでブランクを調製する。回分内で、各調査は２通りを１組含む。マトリックススパイクは、すべての新しいマトリックスについて、また均質性が問題である場合に実施する。初期校正検証（ＩＣＶ）を準備して、校正標準液が正しく調製されているか検証すべきである。現在、この分析に適するチェックサンプルは存在しない。
【０１５０】
（サンプル調製および貯蔵）
ａ．初期サンプル貯蔵：個々のサンプルにつき指定されたとおりの冷凍、冷蔵、または室温
ｂ．活性リパーゼを含むサンプルには、酵素不活性化などの特別な取り扱いが必要となる場合もある。
ｃ．サンプリング：室温、よく混合−均質
ｄ．サンプル抽出物：よく換気されたフードまたは爆発防止冷蔵庫において、しっかりと密閉された、ねじ式キャップのテフロン（登録商標）ライナー付きバイアルに入れて貯蔵された溶液。
ｅ．サンプル単離物：最終溶出液は、酸と有機溶媒の混合物である。サンプル単離物は、いかなる塩基からも離れた、認可された易燃性物質貯蔵域で貯蔵すべきである。
【０１５１】
（サンプルクリーンアップ）
サンプル抽出の手順：固体および液体マトリックス
４５ｍＬのガラス製遠心試験管に、次の順に加える。
サンプル              １．０〜１．０５ｇ            ±０．０００１ｇまでの表示重量
作業内部標準溶液      １．０ｍＬ                    ピペット
エタノール            １．０ｍＬ                    ピペット
２．５Ｍ  Ｈ２ＳＯ４    ０．３ｍＬ                    ピペット
ボルテックス撹拌して、均質な混合物とする。
珪藻土１                ４．５±０．１ｇ
を加える。
十分にボルテックス撹拌する。
少なくとも１０分で平衡にさせる２。
１：１（ｖ／ｖ）のＭＴＢＥ：ヘキサン  １５．０ｍＬ  溶媒ディスペンサー
を加える。
１水分の非常に少ないサンプル（例−穀粉）の場合では、珪藻土は、溶媒を多量に吸収し過ぎる。そのような場合では、３．５ｇが勧められる。
２サンプルと珪藻土の相互作用のための最小時間は、５分である。珪藻土は水を吸収する。サンプルに水分が存在すると、再現性のない結果になることもある。３：０および４：０は、容易に水層に分配される。最小時間として１０分を設定しておく。これにより安全域が設けられて、相互作用を完了させることが可能になる。
【０１５２】
（抽出工程）：
Ｐｏｌｙｔｒｏｎ：設定２４，０００ｒｐｍ、時間：マトリックスの固さに応じて２５〜４５秒。注意：手袋をはめる。Ｐｏｌｙｔｒｏｎチップを温水ですすぎ、タオルで乾かした後、チップを再び２−プロパノールですすぎ、タオルで乾かす。Ｋｉｍｗｉｐｅｓまたは使い捨てペーパータオルを使用することができる。Ｐｏｌｙｔｒｏｎプローブを、さらにすすぐ必要があることもある。考えられる一部の懸案事項として、高い脂肪含有量、高いＦＦＡ含有量、および活性リパーゼが挙げられる。サンプルより前の最終すすぎは、２−プロパノールでなければならない。１１，４の注記を参照されたい。次に、サンプルをボルテックス撹拌し、遠心管の中身全部をＷｈａｔｍａｎ  ＃１紙で濾過する。濾液を１６×１２５ｍｍのガラス製ねじ式キャップ試験管に集める。別の選択肢：上清体積を最大にするために、３０００ｒｐｍで３０分管遠心分離する。この選択肢を選ぶ場合、溶媒揮発性に関する注意を考慮しなければならない。上清を１６×１２５ｍｍのガラス製ねじ式キャップ試験管に移す。
【０１５３】
（遊離脂肪酸の単離）
ＳＰＥカートリッジを３Ｌのヘキサンで慣らす。この場合では溶媒ディスペンサーが適当である。特に、この時点でサンプル抽出物をすぐに移せない場合、このステップにおいて、有害な影響なしに追加の溶媒を加えることができる。追加のヘキサンにより、カートリッジが乾ききるのが防止される。ＳＰＥカートリッジの筒をサンプル抽出物で満たす。この移送はパスツールピペットで十分である。ＳＰＥに載せた抽出物の体積は、約３ｍＬである。乾燥させずに完全に排出させる。２ｍＬの塩化メチレン：２−プロパノール溶液で２回洗浄して、中性グリセリドを除去する。溶媒ディスペンサーが推奨される。完全に排出させる。２％酢酸−ＭＴＢＥ  ２．５ｍｌをピペットで移す。溶出液を廃棄する。ＳＰＥカートリッジをサンプル収集バイアルに移す。２回目の２％酢酸−ＭＴＢＥ  ２．５ｍｌをピペットで移す。ＦＦＡを含有する溶出液を４ｍＬのバイアルに直接集める。十分に混合する。
遊離脂肪酸の溶離体積は、ＳＰＥカートリッジの新しい各ロットについて検証しなければならない。１ｍＬの中レベル作業標準液（校正＃３、ヘキサン中）を慣らしたカートリッジに適用し、次いで以下のとおりに溶離を行う。
画分１  ２×２ｍＬ  塩化メチレン：２−プロパノール  廃棄
画分２  １．５ｍＬ  ２％酢酸ＭＴＢＥ溶液            廃棄
画分３  １．０ｍＬ  ２％酢酸ＭＴＢＥ溶液            収集
画分４  １．５ｍＬ  ２％酢酸ＭＴＢＥ溶液            収集
画分５  １．０ｍＬ  ２％酢酸ＭＴＢＥ溶液            収集
画分６  １．０ｍＬ  ２％酢酸ＭＴＢＥ溶液            収集
画分３から６を分析して、すべての遊離脂肪酸の溶離に必要となる溶液の最適体積を求める。
適切な画分が決まったなら、スクリーン工程を使用して、次の新しいロットのＳＰＥカートリッジを有効にすることができる。ブランク抽出物は、新旧のロットのカートリッジに分けることができる。単離物のＧＣ分析が相関すれば、それ以上の措置は必要でない。そうでなければ、前述のステップに従って適正な画分を最適化しなければなない。
【０１５４】
（計器の設定）
計器：オンカラム注入が可能なＧＣ、０．５３ｍｍカラム、ＥＰＣ、オートサンプラー
カラム：ＳｔａｂｉｌｗａｘＤＡ：０．２５ミクロン、０．５３ｍｍ×１５ｍ
キャリヤーガス：１０．０ｍＬ／分の水素一定流量、またはＥＰＣを６０℃で２．０ｐｓｉに設定
温度プログラム：６０℃で０．５分保持、５０°／分で１００℃まで、１０°／分で２５０℃まで、１分保持
注入温度：オーブントラックモード差３℃
注入体積：１μＬ
検出器：水素炎イオン化検出器、２６０℃、範囲０
【０１５５】
（分析）
初期分析：
まず、計器ブランク分析、すなわち２％酢酸ＭＴＢＥ溶液で、異物を含まない系であることが実証されなければならない。次に、標準溶液（１ｐｐｍ）で、各化合物について許容される検出が示されるはずである。３番目に、５ｐｐｍから２００ｐｐｍの５点校正を準備して、定量化のための許容される操作範囲を確立すべきである。
計算は、平均反応率または線形回帰に基づくものでよい。反応率の計算を選ぶ場合、相対標準偏差（ＲＳＤ）が、各化合物について平均の２０％以内でなければならない。あるいは、線形回帰係数（Ｒ２）法では、問題の各化合物に０．９９９の値が求められる。この校正は、二次的な標準供給源から準備されたＩＣＶによって検証すべきである。ＩＣＶにおいて、すべての化合物が、目下の校正の±５％以内となるべきである。
【０１５６】
（継続的な分析）：
各起動時に、計器ブランクおよび中レベル標準を、サンプルより前に分析するものとする。ブランクにより、異物の存在がないことが実証されなければならない。中レベル標準は、目下の校正に基づき、期待値の１０％以内でなければならない。１５のサンプルのどれもが、中レベル標準でひとまとめに扱われなければならない。中レベル標準が１０％の限界を超える場合、修正措置を講じなければならず、その標準より前のすべてのサンプルを分析し直さなければならない。１８：０ピーク形状を使用して、入口の状況をモニターすることができる。ステアリン酸ピーク形状の降下〜先細りは、カラムの前端への付着を示すものである。ステアリン酸の実際の消失は、注入ポートの漏れまたは汚染を示すものである。修正措置については、添付書類１３．２で論述する。
【０１５７】
（評価、計算および結果の表示）
評価および計算
すべてのクロマトグラムをピーク形状に対して評価する。不完全なピーク形状は、操作設定の問題を表している。この問題は、さらなる分析を行う前に対処しておかなければならない。ＧＣインレットおよびカラムガイドラインについては、添付書類１３．２を参照されたい。さらに保持時間について標準液を評価する。個々のＦＦＡに対して許容される保持時間窓は、現在の校正標準液の±０．０２分である。さらに、サンプルＦＦＡレベルは確立された校正限界内にあるべきである。いずれかの成分が校正上限量を上回る場合、そのサンプルを適当に希釈し、再分析しなければならない。
この方法は、内部標準定量法をベースとする。５点校正曲線は、５から２００ｐｐｍの範囲である。５つの反応率が平均される。次いでこの平均反応率を使用して不明ＦＦＡを計算する。各化合物は、それ自体の反応率を有する。
【０１５８】
（反応率の計算）：
反応率（ＲＦ）：ＲＦｘ＝（ＡｘＣｉｓ）／（ＡｉｓＣｘ）
平均反応率（ＲＦａｖｇ）：ＲＦＸａｖｇ−（ＲＦＸ１＋ＲＦＸ２＋ＲＦＸ３＋ＲＦＸ４＋ＲＦｘ５）／５
（式中、ＲＦＸ＝化合物Ｘの反応率；Ａｘ＝化合物Ｘのピーク領域；Ｃｉｓ＝加えた内部標準の合計（μｇ）；Ａｉｓ＝内部標準のピーク領域；Ｃｘ＝化合物Ｘの合計（μｇ）；ＲＦｘａｖｇ＝５点校正から導かれる化合物Ｘに対する平均反応率である）
【０１５９】
（不明濃度の計算）：
不明サンプル濃度（μｇ／ｇ）＝（Αｘ＊ＣｉＳ）／（Ａｉｓ＊ＲＦＸａｖｇ＊Ｗ）
（式中、Ｗ＝サンプルの重量（単位：ｇ）である）
【０１６０】
（結果の表示）
結果は、最も近い自然数に四捨五入され、ｐｐｍ、μｇ／ｇまたはｍｇ／Ｋｇで報告される。サンプルデータ作成以前に、実験室は、検出および実用的な定量限界を確立しなければならない。最も低い校正点を下回る結果はどれも、その値より下、＜５ｐｐｍであると報告される。
【０１６１】
アミン相に保持されたＦＦＡは、メチル−ｔｅｒｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）中の２％酢酸と共に溶出される。抽出物は、キャピラリーカラム、Ｓｔａｂｉｌｗａｘ上でクロマトグラフィーにかける。化合物は、炎イオン化（ＦＩＤ）で検出する。偶数の脂肪酸、４：０から１８：０の量（３：０を含む）を、内部標準定量法を使用して求める。１１：０、１８：１および１８：２の計算は、１８：０標準液をベースとする。穀粉内に見出されたテトラデカン酸（１４：０）、ヘキサデカン酸（１６：０）、オクタデカン酸（１８：０）、オクタデセン酸（１８：１）およびオクタデカジエン酸（１８：２）の量を一緒に加えたものが、表１に示されている、穀粉の総遊離脂肪酸含有量を構成する。
【０１６２】
表５は、９２Ｆ°で３０日間貯蔵後に全粒粉中に生成された総遊離脂肪酸の結果を含有する。示されているのは、（１）酸タイプ（２）酸の量（３）テンパリング水中の酸モル濃度（４）種実１００重量当たりの酸モル数（５）初期ｐＨ（６）最終ｐＨ（７）穀粉中の遊離脂肪酸濃度（８）対照穀粉と比較した場合の遊離脂肪酸の減量（％）である。
【０１６３】
【表５】
2014510544.tif 000009
【０１６４】
図４は、初期穀粉ｐＨの関数としての、９２°Ｆで３０日後に生成した総遊離脂肪酸のプロットを示す。ｐＨに加えて、穀粉中に生成した遊離脂肪酸の抑制についての酸濃度の影響が図５に示されている。
【０１６５】
（概要）
酸性化を介した安定化は、全粒粉中に生成した遊離脂肪酸の量を減少させた。３０日後の遊離脂肪酸レベルは、未処理の対照において３７５７ｐｐｍであった。約ｐＨ＝４．５での穀粉脂肪酸生成は、乳酸処理では１３８２ｐｐｍに減少し、リン酸処理では１５９２ｐｐｍに減少し、塩酸処理では７４６ｐｐｍに減少した。酸濃度は、穀粉中に生成した遊離脂肪酸の減少にも関連している。
【０１６６】
５６日の貯蔵期間にわたり穀粉ｐＨがわずかに下向きになる傾向が観察された。この変化は、おそらく穀粉中に生成されたより多くの酸性脂肪酸によるもので、未処理の対照穀粉において際立っていた。生成した遊離脂肪酸の全減少は、ｐＨに応じて、１０％の減少から８０％の減少までの範囲であった。リポキシゲナーゼ酵素の重要な基質である遊離脂肪酸のこの減少は、穀粉中の酸化脂肪の量を、香り／風味の閾値である約３，０００ｐｐｍ（または総脂質含有量の１０％）未満に大幅に減少させ、したがって貯蔵寿命を大幅に延ばすと考えられている。
【実施例４】
【０１６７】
（乳酸で安定化した全粒粉の焙焼機能）
この実施例では、本発明に従って酸で安定化した全粒粉の焙焼機能を未処理の全粒粉の焙焼機能と比較した。ふすまと胚芽と内胚乳との自然の割合で作られた全粒粉が、焙焼に使用された試験用配合と共に表６に列挙されている。実施例２に記載されているＲｏＴａｐ法を使用して全粒粉の粒度分布を測定した。前の実施例に記載されている方法に従って、穀粉水分、灰分、容水量、炭酸塩水保持容量およびリパーゼ活性も測定した。全粒粉の焙焼機能性を評価するために使用したクッキー試験焙焼方法は、ＡＡＣＣ  １０−５３  Ｃｏｏｋｉｅ  Ｔｅｓｔ  Ｂａｋｉｎｇであった。
【０１６８】
溶媒保持容量（ＳＲＣ）は、特定の穀粉成分、たとえば損傷したデンプン量などの機能をモニターするための実用的な試験としての役目を果たす。使用されたＳＲＣアッセイ法は、以下の手順に従って、ＡＡＣＣ方法５６−１０を適応し、これを修正した：
【０１６９】
（材料）：
−５０ｍｌ遠心管＋キャップ
−５重量％の炭酸ナトリウム溶媒
−遠心分離（ＩＥＣ、Ｃｅｎｔｒａ  ＧＰ８、２６９ローター、２１３０ｒｐｍ）
【０１７０】
（手順）：
１．５０ｍｌ遠心管＋キャップを秤量する（特別な管に対してはＯ−リングシールの重量）
２．秤量し、５．００ｇのふすま−胚芽混合物を各管に加える（混合物の含水量を求める）
３．２５ｇの溶媒（予め秤量した溶媒アリコート）を各管に加える
４．２０分間水和させ、５分毎に振盪する（５、１０、１５、２０）
５．１０００ｘｇで１５分間遠心分離する
６．上清をデカントし、４５°の角度で５分間、９０°の角度で５分間排水する。
７．キャップを戻し、ペレットを秤量する
８．計算する：
【０１７１】
【数３】
2014510544.tif 000010
【０１７２】
（方法）：
【０１７３】
原材料の機能性評価ならびに官能分析および機械的テクスチャー分析（ＴＡＸＴ２テクスチャーアナライザーの３点曲げまたは穿刺試験による機械的テクスチャー分析）の間の予測的相互関係の評価のために、ＡＡＣＣ  １０−５３クッキー試験焙焼方法をＮａｂｉｓｃｏ  Ｂｉｓｃｕｉｔ  Ｃｏｍｐａｎｙで設計した。ＵＳＤＡ  Ｓｏｆｔ  Ｗｈｅａｔ  Ｑｕａｌｉｔｙ  Ｌａｂ（Ｗｏｏｓｔｅｒ  Ｏｈｉｏ）により確認されたように、この試験は、ＡＡＣＣ  １０−５２  Ｓｕｇａｒ−Ｓｎａｐ  Ｃｏｏｋｉｅ  Ｔｅｓｔ  Ｂａｋｉｎｇ法を改善したものである。ＡＡＣＣ  １０−５３試験は、１９９２年のＳｏｆｔ  Ｗｈｅａｔ  Ｑｕａｌｉｔｙ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅによる共同試験後、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｅｒｅａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｓの正式な方法として採用された。この試験に使用された設備、クッキードウ組成物、混合手順、焙焼手順、測定手順などは以下の通りである：
【０１７４】
（設備）
用いた設備は：
湿度計、穀粉水分測定のための使い捨てサンプルパン、
サーモカップルを備えたデジタル温度計（オメガモデル８７２Ａ）、
３−クオートのミキシングボウルおよび櫂を備えたＣ−１００  Ｈｏｂａｒｔ  Ｍｉｘｅｒ、
ナショナルテストベーキングオーブン、
アルミニウムクッキーシート−幅２６ｃｍ×長さ３０ｃｍ、２つのゲージ棒、幅１２ｍｍ×長さ３０ｃｍ×高さ７ｍｍ付きクッキーカッター（６０ｍｍ内径）、
スリーブ付めん棒（スリーブのラインがめん棒全体に走っている）、
へら、茶色の吸収紙、アルミ箔、プラスチックビーカー、
ＴＡ−ＸＴ２テクスチャーアナライザー＊＊ドウレオロジーについての取捨選択可能な試験＊＊−特別寸法のパン１０ｃｍ、長さ１０．５ｃｍ、高さ３．２ｃｍ、を含む。
【０１７５】
４個の試験用クッキーを作るための標準調合ＡＡＣＣ  １０−５３  Ｓｉｎｇｌｅ  Ｂａｔｃｈは、以下の通り：
【０１７６】
（段階−１）
脱脂粉乳の粉末  ２．２５ｇ
塩  ２．８１ｇ
炭酸水素ナトリウム  ２．２５ｇ
植物性ショートニング（Ｓａｎｓ  Ｔｒａｎｓ３９、Ｃａｒｇｉｌｌ）  ９０．００ｇ
【０１７７】
（段階−２）
炭酸水素アンモニウム  １．１３ｇ
高フルクトースコーンシロップ；４２％フルクトース、７１％固体  ３．３８ｇ
水＊  ４９．５０ｇ
【０１７８】
（段階−３）
穀粉（水分１３％）  ２２５．００ｇ
【０１７９】
各焙焼日には穀粉含水量を測定する；含水量１３％からの偏差に対する補正のために穀粉および水のレベルを調整する
・穀粉含水量を記録し、方程式にＦＭとして挿入して、１バッチ当たりの実際の穀粉重量を計算する
【０１８０】
【数４】
2014510544.tif 000011
【０１８１】
・１バッチ当たりの実際の穀粉重量を記録し、方程式にＡＦＷとして挿入して、１バッチ当たりに加えた実際の水量を計算する
・・実際に加えた水（ｇ）＝４９．５ｇ＋２２５−ＡＦＷ＊２２５ｇ
【０１８２】
（一般的混合手順）
使用した一般的混合手順：
段階−１：乾燥原材料をブレンドする（脱脂粉乳、塩、炭酸水素塩、糖）
脂肪を加える
Ｈｏｂａｒｔ撹拌機内で低速で３分間混合する；１分間混合するたびに、櫂およびボウル側面のかき取りを行う。
段階−２：炭酸水素アンモニウムを水中に溶解する；高フルクトースコーンシロップを加える
全溶液を段階−１に加える；
低速で１分間混合し、３０秒混合するたびにボウルおよび櫂のかき取りを行う。
中間速度で２分間混合し、３０秒混合するたびにボウルおよび櫂のかき取りを行う。
段階−３：穀粉を加える、液体混合物に３回畳み込む；低速で２分間混合し、３０秒混合するたびに櫂およびボウルのかき取りを行う。
【０１８３】
焙焼時間の測定
使用した焙焼測定は以下の通りである：
焙焼時間とは、４００Ｆ°での調合品の焙焼中、１３．８５％の減量を生じるのに必要な時間として定義される。
焙焼時間を測定するには：
【０１８４】
調合品を４００Ｆ°で１０、１１、１２、１３分間、および一部の全粒粉については１６分間まで焙焼し、１分間の間隔をあけて焙焼シート＋クッキーの重さを量る。
焙焼中の減量（％）と焙焼時間（分）とを対比したものをプロットする
１３．５８％の減量を実現するために必要な焙焼時間を補間する
【０１８５】
（焙焼仕様）
使用した焙焼仕様は以下の通りである：
オーブンを４００Ｆ°（２０２℃）に予熱する
冷たいクッキーシートの重量を記録する
標準焙焼時間の間オーブン内にクッキーシートを置く；高温のシートの重量を記録する
クッキーの試験焙焼のための４つのドウブランクの調製のための手順：
【０１８６】
変形を最小にして、ドウを４つの６０ｇ小片に分け、クッキーシート上に置く。クッキーシートのゲージ棒を横切るようにめん棒を横たえ、追加的圧縮力がかからないようにめん棒の重量でドウ小片を圧縮する。めん棒を手に取り、クッキーシートの端のゲージ棒の上に置き、自分から離れるように１回だけロールする。６０ｍｍカッターでクッキーを切り、小さいへらでドウ断片を慎重に持ち上げる。水平ゆがみを回避するためカッターはまっすぐに持ち上げる。
【０１８７】
ドウブランクおよびクッキーシートの重量を記録する。
【０１８８】
オーブン内にドウブランクおよびクッキーシートを、シーティングの方向に置く。４００Ｆ°で既定の焙焼時間の間、クッキーを焙焼する。
【０１８９】
クッキーを載せたクッキーシートを、オーブンから取り出してから直ちに秤量する。
平坦なへらでシートからクッキーを慎重に取り出し、クッキーをシーティングし、焙焼した方向と同じ方向に、茶色紙上に平置きする。
【０１９０】
幾何学的測定（少なくとも３０分間クッキーを冷却した時点で行う）
幅−シーティングした方向に対して垂直方向の直径。めん棒−スリーブラインが計量スティック全長にわたり平行となるよう、４個のクッキーを列に並べる。測定をｃｍで記録する。
【０１９１】
長さ−シーティングした方向に対して平行方向の直径。めん棒−スリーブラインが計量スティックと垂直となるようクッキーを９０°回転させる。測定をｃｍで記録する。
【０１９２】
積み重ねの高さ−４個のクッキーを積み重ね、積み重ねたものをフラットガイドの間に横にして置く。高さを記録する。
【０１９３】
表６において、対照および乳酸処理した穀粉（２通り）に対するＳＲＣおよび焙焼結果が示されている。表に含まれているのは、（１）酸処理条件（２）灰分（３）水、スクロース、炭酸ナトリウムおよび乳酸溶媒に対する穀粉の溶媒保持容量（６）穀粉のｐＨ（７）クッキーの幅、クッキーの長さおよび積み重ねの高さである。
【０１９４】
【表６】
2014510544.tif 000012
【０１９５】
熟練したパネルが試食した場合、クッキーは、対照と比較して、より香ばしく、より甘く、よりカラメル化していると記載された。クッキーのテクスチャーはより硬かった。
【０１９６】
概要
乳酸で安定化した全粒粉は、未処理の全粒粉と同様の焙焼品質を実証している。風味におけるいくつかの利点、さらにカラメル化され、甘く、香ばしいことが指摘された。
【実施例５】
【０１９７】
（パートＡ．全粒小麦の酸性化）
この実施例の目的は、軟質赤小麦種実の水分およびミル性能についての水レベル、酸濃度およびテンパリング時間の変動要素の関係を理解することである。表７は、加えた水、酸濃度、テンパリングホールドタイムおよび小麦１００重量当たりの酸のモル数を示す。
【０１９８】
【表７】
2014510544.tif 000013
【０１９９】
（手順）
【０２００】
汚れを取った小麦サンプル（８００ｇ）をプラスチックの気密広口瓶に秤量し、表７に示されている通りの特定の量の酸を含有する、対応する量のテンパリング水と混合する。周辺温度で、２０分、４時間、または８時間の間隔で小麦をテンパリングする。たとえば、小麦８００ｇ中３０００ｐｐｍの乳酸濃度を得るため、１％の水分増加に対して、２．７１ｇの８８．５％乳酸溶液を７．６９ｇの水道水に加える。酸を含んだテンパリング水を小麦に加えたなら、広口瓶を密閉し、１０分毎に１分間、６回手で振盪し、次いで終夜静置する。
【０２０１】
表８は、（１）小麦の重量（２）初期小麦水分（３）百万分率（ｐｐｍ）で表示した、小麦に加えた酸（ｄｗｂ）の量（４）テンパリング時間（５）テンパリング水の％（ｗｔ／ｗｔ）（７）小麦種実を加湿するために加えた合計での水（テンパリング水＋酸溶液からの水）（８）加えた８８．５％乳酸溶液の量（９）加えた水（１０）テンパリングした種実の水分を示す。
【０２０２】
【表８】
2014510544.tif 000014
【０２０３】
（パートＢ．小麦製粉）
【０２０４】
この手順の目的は、パートＡに記載されている通りにテンパリングした小麦種実から全粒粉を製造することにあった。
（手順）
【０２０５】
テンパリングした小麦サンプルは、実施例１で以前に記載した通りＣｈｏｐｉｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍｉｌｌ  ＣＤＩ（Ｃｈｏｐｉｎ、フランス）で製粉した。表９は、穀粉抽出収率を示す。収率は、製粉した小麦に基づき計算した。この研究において、穀粉収量は、収量＝１００×［（粗ふすまおよび微細ふすま重量＋余りかす重量）／小麦重量］として計算した。
【０２０６】
【表９】
2014510544.tif 000015
（概要）
【０２０７】
小麦種実を異なる量の酸を含有する水でテンパリングした。テンパリング後の最終種実水分が１、３、および５％に増加するように、初期小麦種実水分に従って加える水分を調節した。テンパリング水に加えた酸の量は、０ｐｐｍから９，０００ｐｐｍの範囲（小麦の初期重量当たりの酸乾燥重量）が試験されるよう調節した。すべてのタイプおよび量の酸処理について、正常な製粉挙動が観察された。穀粉抽出収率は通常、概して６５％から７０％であり、すべての製粉画分を再配合して、ふすま、胚芽および内胚乳の自然な割合を有する全粒粉とした。
【実施例６】
【０２０８】
酸処理した種実からの粗粉砕ふすまの製造および全粒粉とする再配合
【０２０９】
この手順の目的は、酸処理した小麦の製粉から得られた粗ふすま画分および縮小余りかすの粒度を縮小することであった。第１の歯付ロールからの粗ふすまおよび縮小ロールからの粗余りかすを凍結し、粉砕し、実施例２に記載されているように再配合して全粒粉とした。全粒粉の粒度分布を以前に記述されたＲｏｔｏ  Ｔａｐ法で求めた。
【０２１０】
モデル＃Ａ−５８９０５−６６高性能コンビネーションｐＨ電極を備えたＣｏｒｎｉｎｇ  ｐＨメーター３６０ｉを使用して、１０％スラリー（穀粉１部に対して水９部）中の全粒粉のｐＨを測定した。穀粉中の灰分の測定に対してＡＯＡＣの正式な方法９２３．０３に従って灰分を求める。ＡＡＣＣ法４４−１５Ａに従って穀粉水分を求めた。
【０２１１】
表１０は、全粒粉特性である（１）酸の量（２）ｐＨ（３）穀粉の水分（４）灰分含有量および（５）粒度分布を示す。
【０２１２】
【表１０】
2014510544.tif 000016
【０２１３】
抽出可能なリパーゼ活性を各穀粉について求めた。リパーゼ活性を求めるために使用した方法は、実施例２に記載されている通りである。
【０２１４】
様々な全粒粉に対する抽出可能なリパーゼ活性が表１１に示されている：
【０２１５】
【表１１】
2014510544.tif 000017
（概要および結論）
【０２１６】
最終穀粉の粒度分布は、試験変動要素である最終水分、テンパリング時間およびｐＨの間で同様であり、穀粉重量の約１０％から１５％が＞２５０μｍであり、約６０％から７５％が＜１５０μｍであった。穀粉製粉における灰分測定の使用は、ふすま、糊粉、および胚芽では、内胚乳より灰分（ミネラル）の濃度が高いことに基づく。灰分含有量は、広く使用されている、精白穀粉純度の指標であり、製粉工程の際の種実成分の機械的分離を測定する手段となる。この場合では、灰分は、ふすま、胚芽および内胚乳の自然な割合を有する全粒粉を作るために、粗粉砕画分が穀粉内胚乳と完全に再現可能に再配合されていることの指標として使用する。最終穀粉のｐＨは、全種実のテンパリングに使用した酸の量に応じて変わった。全粒粉における抽出可能なリパーゼ活性は、より低いｐＨでわずかに低減した。
【実施例７】
【０２１７】
全粒粉安定性および機能に対する酸テンパリングの影響
【０２１８】
この実施例の目的は、９２Ｆ°で２８日間密閉したガラス広口瓶内で貯蔵した、実施例５および６で調製した全粒粉の中に生成した遊離脂肪酸の量を測定することであった。全粒粉機能を、実施例４に記載されている溶媒保持容量試験で試験した。
Ａ．全粒粉中の遊離脂肪酸生成に対する、変動要素である加えた酸、加えたテンパリング水、およびテンパリング時間の影響
【０２１９】
実施例５および６で調製した全粒粉（新鮮な穀粉および２８日間熟成した穀粉）の遊離脂肪酸含有量を実施例４に開示された方法に従って求めた。
【０２２０】
表１２は、（１）加えた乳酸の重量（２）小麦に加えた水の合計（％）（ｗｔ／ｗｔ）、小麦種実中の自然発生以外のすべての供給源（３）テンパリング時間（４）酸濃度（５）穀粉のｐＨ（６）初期遊離脂肪酸含有量（７）９２Ｆ°で２８日間貯蔵した穀粉の遊離脂肪酸含有量（８）未処理の対照と比較した、遊離脂肪酸の減少（％）を示す。
【０２２１】
８００ｇバッチの小麦種実に対して酸濃度を計算する：
［乳酸、乾燥重量（ｐｐｍまたは（μｇ／ｇ小麦）］＊８００＝合計酸乾燥重量
合計酸乾燥重量／乳酸分子量＝酸のモル数
％水＊小麦８００ｇ＝水の合計（ｇ）／容量当量（１ｍｌ）；水（ｍｌ）／１０００＝水合計量（Ｌ）
［酸濃度］＝酸モル数／水リットル数＝モル濃度（Ｍ）
【０２２２】
結果は表１２に示されている：
【０２２３】
【表１２】
2014510544.tif 000018
【０２２４】
Ｄｅｓｉｇｎ  Ｅｘｐｅｒｔ（著作権）ソフトウェア（Ｓｔａｔ−Ｅａｓｅ、Ｉｎｃ．）を使用した統計分析は、穀粉のもととなる穀物のテンパリングに使用するために加えた乳酸の量および加えた水の量の有意な影響を確認した。
【０２２５】
図６は、９２°Ｆで２８日後に生成した総遊離脂肪酸に対する２つの変動要素の分析プロットを示す。９２°Ｆで２８日後の全粒粉の遊離脂肪酸含有量に対する、乳酸およびテンパリング水の影響が図６に示されている。変動要素Ａは、穀粉に加えた乳酸濃度であり、変動要素Ｃは、小麦種実のテンパリング水レベルである。最適なテンパリング条件がプロットの右下すみに表されている；より多量の乳酸を加え、より低量の水を加えた場合に、貯蔵寿命にわたって遊離脂肪酸の生成が最低の全粒粉が製造された。
Ｂ．ＳＲＣで測定した場合の全粒粉機能に対する酸テンパリングの影響
【０２２６】
実施例４に記載されているＳＲＣ方法を使用して、全粒粉機能特性に対する変化を測定した。
【０２２７】
表１３は、穀粉工程変動要素である（１）加えた乳酸（２）加えたテンパリング水（３）水中の酸濃度（４）テンパリング時間および（５）４つの溶媒；水、スクロース、炭酸ナトリウム、乳酸に対する溶媒保持容量の値（６）乳酸のＳＲＣを水のＳＲＣで割ったものを示す。
【０２２８】
【表１３】
2014510544.tif 000019
【０２２９】
Ｄｅｓｉｇｎ  Ｅｘｐｅｒｔ（著作権）ソフトウェアを使用した統計分析により、テンパリング時間および加えた乳酸量は、図７に示されているような乳酸のＳＲＣ値で測定される穀粉強度を低減しなかったことが示された。図７は、テンパリング時間および乳酸量（ｐｐｍ）の関数として、全粒粉のＳＲＣ（６８、６９、７０）をプロットしたものである。さらに、水のＳＲＣ値により測定される一般の穀粉吸収は、軟質の小麦穀粉に対して低いことが望まれるが、酸処理の関数として変化を示さず、乳酸のＳＲＣを水のＳＲＣで割った割合は、処理の関数として変化しなかった（たとえば高い比は、より強い穀粉および低い吸収を示す）。
【０２３０】
テンパリングした小麦の製粉により小麦種実の４つの画分が製造され、これらを合わせることによって全穀粉を作る。画分は、小麦種実の外層から内層へ移動して、粗ふすま、微細ふすま、縮小穀粉および微砕穀粉である。表１４は、全穀粉へと再配合する前のこれら製粉された画分のそれぞれの水分およびｐＨを測定したものを示す。
【０２３１】
表１４で示されているのは：（１）微砕穀粉中の水分およびｐＨの分布（２）粗ふすま中の水分およびｐＨの分布（３）縮小穀粉中の水分およびｐＨの分布（４）微細ふすま中の水分およびｐＨの分布（５）それぞれの画分のそれぞれの重量である。
【０２３２】
【表１４】
2014510544.tif 000020
【０２３３】
貯蔵の間に全粒粉中に生成したＦＦＡは、図８に示されている通り適用した酸の量および濃度に相関する。図８は、小麦に適用した酸濃度および量の関数として最終穀粉中の遊離脂肪酸（ＦＦＡ）の生成を示す。最も大きな減少が０．６７Ｍを超える際に見られ、加えた酸の量の増加も遊離脂肪酸の生成を減少させる。
【０２３４】
図９は、微細ふすまおよび縮小穀粉に対する酸濃度の関数としてのｐＨを示す。図９に示されている通り、大部分のリパーゼ活性が存在する微細ふすま画分、および縮小穀粉画分（ふすまに最も近い穀粉部分）は、小麦に適用される酸濃度が増加するにつれてｐＨの有意な降下を実証している。
【０２３５】
図１０に示されている通り、穀粉中に生成される遊離脂肪酸（ＦＦＡ）は、ｐＨが低減するにつれて低減し、小麦に適用される酸濃度もまた遊離脂肪酸生成に影響を与える。最終全粒粉中に生成される遊離脂肪酸は、図１０に示されている通り、全粒粉のｐＨが低減するにつれて減少している。遊離脂肪酸生成の減少に対して好ましい影響を見るためには、小麦に適用する酸濃度は最小レベルよりも上でなければならない。
【０２３６】
図１１および図１２は、９２°Ｆで２８日後の全粒粉の、乳酸のＳＲＣ／水のＳＲＣの割合に対するテンパリング水中乳酸濃度の影響を示す。穀粉吸収およびグルテン強度に対する酸濃度の影響が、図１１では、乳酸のＳＲＣを水のＳＲＣで割った割合として、図１２では、乳酸のＳＲＣを炭酸ナトリウムのＳＲＣで割った割合として表示されることで示されている。すべての場合において、割合は、少なくとも未処理の対照穀粉と同じ位高いままであり、これは穀粉機能に対して有害な影響がないことを示している。
概要
【０２３７】
酸性化による安定化は、全粒粉中に生成される遊離脂肪酸の量を減少させた。２８日後の遊離脂肪酸レベルは、未処理の対照では３００４ｐｐｍであった。約９０００ｐｐｍの乳酸濃度および４．５ｐＨでの穀粉の脂肪酸生成は、１４２５ｐｐｍまで減少した。
【０２３８】
テンパリング時間（２０分から８時間）は、脂肪酸生成により測定した全粒粉貯蔵寿命に対してわずかな影響しか及ぼさなかった。一般に、遊離脂肪酸生成は、加えた酸の量が増加し、酸濃度が増加するにつれて低減した。
【０２３９】
生成した遊離脂肪酸の全減少は、１６％の減少から５４％までの減少の範囲であった。より小さな減少が５％のテンパリング水条件で見られ、ここでは酸濃度は減少したが、あまり効果はなかった。リポキシゲナーゼ酵素の重要な基質である遊離脂肪酸のこの減少は、穀粉中の酸化脂肪の量を、香り／風味の閾値である約３，０００ｐｐｍ（または総脂質含有量の１０％）未満に大幅に減少させ、したがって貯蔵寿命を大幅に延ばしたと考えられている。
【０２４０】
乳酸で安定化した全粒粉は、未処理の全粒粉と同様のＳＲＣを実証している。他の溶媒のいずれについてもいかなる傾向も見られず、乳酸のＳＲＣを炭酸ナトリウムのＳＲＣで割った割合については、優れた品質のビスケット穀粉に期待されるものと同じ位低い穀粉吸収、および十分に強いグルテンを示す対照穀粉と異ならなかった。
【実施例８】
【０２４１】
（リパーゼ活性阻害に対する酸の影響）
【０２４２】
この実施例の目的は、酵素を酸溶液中で４０分間予備インキュベーションした後、リパーゼ活性に対する、酸タイプおよび濃度の影響を試験することであった。以下の酸およびレベルを試験した；（１）５ｍｌの乳酸（８ｇ／１０００ｍｌ  ｐＨ２．５７）、２０μｌのリパーゼおよび９８０μｌの水を加え、阻害４０分間；（２）５ｍｌの乳酸（２ｇ／１０００ｍｌ  ｐＨ２．８５）、２０μｌのリパーゼおよび９８０μｌの水を加え、阻害４０分間；（３）５ｍｌの乳酸（１６ｇ／１０００ｍｌ、ｐＨ２．４８）、２０μｌのリパーゼおよび９８０μｌの水を加え、阻害４０分間；（４）５ｍｌの酢酸（１ｇ／１０００ｍｌ  ｐＨ２．８０）、２０μｌのリパーゼおよび９８０μｌの水を加え、阻害４０分間；（５）５ｍｌのＨＣＬ（４ｇ／１０００ｍｌ、ｐＨ１．５）、２０μｌのリパーゼおよび９８０μｌの水を加え、阻害４０分間；（６）５ｍｌの緑茶抽出物（８ｇ／１０００ｍｌ）、２０μｌのリパーゼおよび９８０μｌの水を加え、阻害４０分間。
【０２４３】
結果を、対照リパーゼ酵素活性（ニホンコウジカビ（Ａｅｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）からのＮｏｖｏｚｙｍｅリパーゼ２０μｌ  ２０μ／μｌ、対照、ｐＨ４．１４、０．２９ｍｌの０．１Ｎ  ＫＯＨを加えることによって、ｐＨを７．８４に調整し、次いで２０μｌのリパーゼおよび９８０μｌの水を加え、タイマーを始動させておよび滴定を開始）と比較した。
【０２４４】
リパーゼ（３．１．１．３）活性は、非特許文献３に記述された方法から適応した。
【０２４５】
手順は以下の通りである：
リパーゼＩ．Ｕ．Β．：３．１．１．３トリアシルグリセロールアシルヒドロラーゼ
膵臓リパーゼ（ＰＬ）は、膵液の外分泌酵素の１つであり、グリセロールおよび長鎖脂肪酸の乳化エステルの加水分解を触媒する。この基質は単一分子ではなく、凝集した脂質の非水系相（Brockerhoff and Jensen (1974)）である。作用基質の特徴は、水性媒体と相互作用する、エステル分子、ミセルまたはモノ分子フィルムの凝集体である。酵素活性は、界面上の基質分子の濃度と直接関連している（Esposito et al 1973；Lagocki et al 1973）。ＰＬは、第一級エステル基を最も容易に攻撃する。モノグリセリドは不完全な基質である。（これは腸壁を介して吸収され、再形成してリンパカイロミクロンとなる２−モノグリセリドである）。膵臓リパーゼは、Brockerhoff and Jensen (1974)、およびDesnuelle (1972)により十分に再調査されてきた。Liberman and Ollis (1975)は、ステンレススチールおよびポリアクリルアミドビーズ上に固定化したリパーゼについて報告した。流動床式リサイクル反応器を使用して、酵素基質の親和性が変化しないことが指摘された。
（ブタ膵臓からのリパーゼの特性）：
【０２４６】
２つのリパーゼが存在する。リパーゼＡはリパーゼＢよりも酸性である；さもなければ、この２つのアイソザイムはほとんど同じである（Verger et al 1969）。通常、コファクターは酵素に結合する（Maylie et al 1971）。２つのコリパーゼがErlanson et al (1973)により精製された。これらは、分子量１１，０００を有するかなり類似したポリペプチド鎖であった。（Borgstrom et al (1974)）も参照されたい。Borgstrom and Earlanson (1973)は、コリパーゼは、これらが化学量論的関係で相互作用するという意味で、リパーゼに対してコエンザイムとして分類してもよいことを指摘した。
（酵素反応）
分子量：４５，０００〜５０，０００（Verger et al 1969）
【０２４７】
組成物：アミノ酸組成物は、イソロイシン以外はほとんど同一であるが、これはBrockerhoff and Jensen (1974)（表ＩＶ−３、４３頁）に示されている。両方とも炭水化物部分を含有する（Garner and Smith 1972）。ヒスチジンは活性サイトに関与している。（Semeriva et al 1971）Hultin (1992)を参照されたい。アミド生成による遊離カルボキシル基の改質は、酵素を不活化する（Semeriva et al 1972）。Desnuelle (1972)によると、リパーゼ中のカルボキシルは活性酵素を安定化する、すなわち、疎水性界面での吸着から酵素構造が生じる。ＰＬは２つのジスルフィド基を含有するが、これらは酵素活性に関与しない（Verger et al 1971）。ジイソプロピルフルオロリン酸（ＤＦＰ）はチロシン残基に結合するが、阻害性はない（Maylie et al 1969）。Rovery et al. (1973)も参照されたい。
減衰係数：Ｅ１％２６０＝１３．３（Desnuelle (1972)）
等電点：リパーゼＡ＝４．９（Brockerhoff and Jensen (1974)）およびリパーゼＢ＝５．０
【０２４８】
活性：「触媒特性」に関するDesnuelle (1972)（５８６頁）を参照されたい。Momsen and Broeckman (1976a and b)は、タウロデオキシコール酸塩およびコリパーゼの影響について報告している。０．３ｍＭまでの低濃度では、胆汁酸塩はリパーゼの安定性を５倍まで増加させる。より高いレベル（０．３〜０．８ｍＭ）ではあるが、臨界ミセル濃度より下においては、胆汁酸塩は、基質界面上への酵素吸着を妨げ、したがって脂肪分解を阻害する。コリパーゼは、リパーゼ−胆汁酸塩錯体の表面に高親和性結合部位を提供することによってこの阻害作用に対抗する。Borgstrom and Elanson (1973)、Borgstrom et al (1974)、およびKaimal and Saroja (1989)も参照されたい。胆汁塩なしのコリパーゼは、活性を穏やかに刺激するだけである。Brockman et al (1973)は、可溶性トリグリセリドたとえばトリプロピオニンなどに対するＰＬ活性について報告している。これは、疎水性表面の存在下で刺激される。Santhanam and Wagle (1971)は、タンパク質キナーゼ、Ｍｇ２＋、ＡＴＰおよびｃＡＭＰがＰＬ活性を刺激することを示している。
【０２４９】
特異性：ＰＬは、側鎖特異性の広域スペクトルを有する（Lagocki et al 1973）。Savary (1972)およびBrockerhoff (1969a)も参照されたい。
【０２５０】
活性化剤：Ｃａ２＋は活性に必要とされる［Ｓｒ２＋およびＭｇ２＋はあまり効果的ではない活性化剤である（Sarda et al 1957）］。
【０２５１】
阻害剤：ヴェルセン、Ｚｎ２＋、Ｃｕ２＋、Ｈｇ２＋、ヨウ素、ＰＣＭＢ（Willis 1960）。ＤＦＰは阻害しない。
【０２５２】
安定剤：溶液中にプロテイナーゼを含有する不純な調製物を安定化するためにＤＦＰを使用することができる。
【０２５３】
安定性：ブタ膵臓リパーゼの高度に精製された、均質の調製物は、極度に不安定である。
リパーゼ（ＥＣ３．１．１．３）の酵素アッセイ
【０２５４】
原理：
【０２５５】
【化１】
2014510544.tif 000021
【０２５６】
条件：Ｔ＝２５℃、ｐＨ＝８．０
【０２５７】
（方法：滴定）
【０２５８】
（試薬）：
Ａ．オリーブ油基質（オリーブ油）（Ｓｉｇｍａ  Ｌｉｐａｓｅ  Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ、Ｓｉｇｍａ  Ｓｔｏｃｋ  Ｎｏ．８００−１を使用）
Ｂ．３０００ｍＭ塩化ナトリウム溶液（ＮａＣｌ）（塩化ナトリウム、Ｓｉｇｍａ  Ｐｒｏｄ、Ｎｏ．Ｓ−９６２５を使用して、脱イオン水中で１００ｍｌを調製）
Ｃ．０．５％アルブミン。毎日新しいものを調製。
Ｄ．７５ｍＭの塩化カルシウム溶液（ＣａＣｌ２）（塩化カルシウム二水和物、Ｓｉｇｍａ  Ｐｒｏｄ、Ｎｏ．Ｃ−３８８１を使用して脱イオン水中で２５ｍｌを調製）。
Ｅ．１０ｍＭ  水酸化ナトリウム溶液−標準化（ＮａＯＨ）（水酸化ナトリウム、無水  Ｓｉｇｍａ  Ｓｔｏｃｋ  Ｎｏ．５０５−８を使用して冷たい脱イオン水中で５０ｍｌを調製。ＡＣＳ試薬手順により標準化）
Ｆ．５ｍＭ  塩化カルシウム溶液（塩化カルシウム二水和物、Ｓｉｇｍａ  Ｐｒｏｄ．Ｎｏ．Ｃ−３８８１を使用して脱イオン水中に２５ｍｌを調製）
Ｇ．リパーゼ酵素溶液（使用直前に、２０，０００〜３０，０００単位／ｍｌのリパーゼを含有する懸濁液を冷たい試薬Ｆ中に調製）
Ｈ．オリーブ油−アラビアガム乳剤：アラビアガム１６．５グラムを試薬グレードの水１３０ｍｌに溶解することによって調製。材料を溶液中に入れたら、試薬グレードの水で最終容量１６５ｍｌに希釈する。試薬グレードのオリーブ油２０ｍｌおよびクラッシュアイス１５グラムを加える。この混合物をＷａｒｉｎｇブレンダー内で低速で３分間ブレンドし、ガラス綿を介して乳剤を濾過する。毎日新しいものを調製する。
（酵素）：
【０２５９】
１ｍｇ／ｍｌの濃度で酵素を試薬グレード水に溶解する。さらに５ｍＭ  塩化カルシウム中で希釈物を作る。
（手順）：
【０２６０】
滴定は、実験室用ｐＨメーター（Ａ−５８９０５−６６高性能コンビネーションｐＨ電極を備えたＣｏｒｎｉｎｇ  ｐＨメーター３６０ｉ）を用いて測定することができる。
試薬  容量（ｍｌ）
脱イオン水  ５．００
試薬Ｈ（オリーブ油）  ５．００
試薬Ｂ（ＮａＣｌ）  ２．００
試薬Ｃ（アルブミン）  ２．００
試薬Ｄ（ＣａＣｌ２）  １．００
【０２６１】
ブランク率の測定：反応混合物のｐＨを８．０に調整し、定率を実現した後３〜４分間の間ｐＨを８．０に維持するのに必要な滴定剤の容量を記録する。毎分加える滴定剤の容量として、曲線の最終の直線部分から「ブランク率」を求める。
【０２６２】
サンプルの測定：時間ゼロで、適当に希釈した酵素を加え、必要に応じてｐＨを８．０に再調整する。ｐＨを５〜６分間の間８．０に維持するのに必要な滴定剤の容量を記録する。曲線の直線部分から毎分加える滴定剤の容量として、「サンプル率」を求める。
【０２６３】
（計算）
【０２６４】
【数５】
2014510544.tif 000022
【０２６５】
参考文献：非特許文献４
【０２６６】
（注意）：
１．ＮａＯＨ溶液の標準化は非特許文献４に記載されている。
２．このアッセイは、引用された参考文献をベースとする。
３．Ｓｉｇｍａ  ＰｒｏｄｕｃｔまたはＳｔｏｃｋ番号が特定されている場合、同等の試薬で置き換えてもよい。
【０２６７】
【表１５】
2014510544.tif 000023
【０２６８】
酸濃度を計算する：
合計酸乾燥重量／酸分子量＝酸モル数
水合計量（１５ｍｌ）／１０００＝水合計量（Ｌ）
［酸濃度］＝酸モル数／水リットル数＝モル濃度（Ｍ）
（概要）
【０２６９】
各酸タイプ、および試験した濃度は、４０分の前処理後、対照（酸を使用しないで前処理）と比較して、酵素活性を低減させた。酵素活性は、より高濃度の酸およびより低いｐＨで、処理後により低くなることが観察された。非常に低いｐＨ値、たとえばｐＨ１．５などは、酵素に完全な活性損失をもたらした。緑茶抽出物もまたリパーゼ活性を阻害した。
【実施例９】
【０２７０】
（全粒粉安定性に対する抗酸化剤テンパリングの影響）
【０２７１】
この実施例の目的は、貯蔵中の全粒粉の安定性に対する、抗酸化剤テンパリングの影響を試験することであった。密閉したガラス広口瓶において８２Ｆ°の加速貯蔵条件下で３０日間穀粉を貯蔵した後、生成した遊離脂肪酸の量を測定した。全粒粉は、実施例１および２に記載されている工程に従って調製した。試験した抗酸化剤は、以下のものであった。（１）未処理の軟質赤穀粉（対照）、（２）セルロースで処理した軟質赤穀粉、（３）ＮａＣｌで処理した軟質赤穀粉、（４）ＴＢＨＱで処理した軟質赤穀粉、（５）ローズマリー抽出物で処理した軟質赤穀粉、（６）緑茶抽出物で処理した軟質赤穀粉、（７）乳酸で処理してｐＨ６．１６にした軟質赤穀粉、（８）リン酸で処理してｐＨ５．６７にした軟質赤穀粉、（９）リン酸で処理してｐＨ４．６４にした軟質赤穀粉、（１０）塩酸で処理してｐＨ５．５５にした軟質赤穀粉、（１１）実施例１に記載されている方式でＢＨＴで処理した軟質赤穀粉。テンパリングした小麦は、実施例２に記載されている方式で細かく砕いて穀粉にした。貯蔵時の全粒粉中に生成した遊離脂肪酸の量を、未処理の対照穀粉中に生成した遊離脂肪酸の量と比較した。全粒粉を、製粉した穀粉から得たふすま成分および内胚乳の自然の割合で作り、全粒粉の灰分含有量を使用して組成を確認した。
【０２７２】
全粒粉（新鮮な穀粉および熟成させた穀粉）の遊離脂肪酸含有量を、実施例３に記載されている方法に従って求めた。
【０２７３】
表１６は、８２Ｆ°で６週間まで貯蔵した後、全粒粉中に生成した総遊離脂肪酸の結果を含有する。示されているのは、（１）処理タイプ（２）処理量（３）リパーゼ活性（４）ｐＨ（５）ヘキサナール（６）遊離脂肪酸濃度である。
【０２７４】
【表１６】
2014510544.tif 000024
（概要）
【０２７５】
８２°Ｆで貯蔵後の全粒粉脂肪酸含有量は、小麦を緑茶抽出物または乳酸のいずれかで処理した対照と比較して減少した。遊離脂肪含有量の小さな減少が試験した他の処理に対して指摘された。
【実施例１０】
【０２７６】
（分離したふすまの酸処理）
【０２７７】
この実施例の目的は、分離したふすまの酸処理の安定化効力を試験することである。粗ふすま粒子として内胚乳から分離したふすまおよび胚芽に、またはふすまをより微細な粒子へと粉砕した後に、乳酸を含む水を加える。乳酸を加えた後、９０℃で１０分間の加熱を適用することによっていくつかのサンプルをさらに安定化させる。ふすまおよび胚芽は、ふすま、胚芽および内胚乳の自然の割合に再配合することによって、全粒粉を作る。自然の割合は、最終穀粉重量のうち、ふすまを３２％に、内胚乳を６８％に再配合することによって実現された。全粒粉を密閉した容器内に置き、１００Ｆ°で３０日間貯蔵する。リパーゼ活性および穀粉中に生成した遊離脂肪酸を貯蔵開始および終了時に測定することによって、長期にわたる穀粉の新鮮さおよび安定性を評価する。穀粉品質の変化を溶媒保持容量で測定する。
【０２７８】
（材料）：
（１）軟質の白色小麦から分離した粗ふすま／胚芽
（２）粗粉砕ふすま／胚芽
（３）水または水中の乳酸
（４）内胚乳
【０２７９】
実施例２に開示されている方法に従ってリパーゼを測定し、実施例３に開示されている方法に従って、穀粉中の脂肪酸を測定し、実施例４に開示されている溶媒保持容量試験に従って穀粉品質を測定する。
【０２８０】
表１７は、内胚乳からふすまおよび胚芽を分離し、水に溶解した乳酸を粗いまたは細かく粉砕したふすまに加えることによって生成された穀粉を示す。ふすまに加えた乳酸の量が表に示されている。示されている中で、ふすまは、酸を加えた後、９０℃で１０分間加熱処理もしている。
【０２８１】
【表１７−１】
2014510544.tif 000025
【０２８２】
【表１７−２】
2014510544.tif 000026
【０２８３】
表１８は、１００Ｆ°で３０日間まで貯蔵した後、全粒粉中に生成した総遊離脂肪酸の結果を含有する。示されているのは、（１）穀粉（２）酸（乾燥ｗｔ／ｗｔふすま）（３）加熱する（４）全粒粉を作る内胚乳の％（５）ふすまのｐＨ（６）粒度（９）リパーゼ活性（１０）遊離の脂肪酸濃度、初期値および２１日後の値（１１）貯蔵された穀粉中のＦＦＡ生成の阻害（％）である。
【０２８４】
【表１８】
2014510544.tif 000027
【０２８５】
貯蔵中の各穀粉の溶媒保持容量試験を使用して、それぞれの各処理後の穀粉の品質を評価する。特に重要なのは、穀粉のグルテンが機能的なままであることを示す、乳酸溶媒保持性の維持によって測定される穀粉のグルテン強度である。穀粉の全吸収は、低いままであり、対照値と変わるべできはない。表１９は、各穀粉のＳＲＣプロファイルを示す。
【０２８６】
【表１９】
2014510544.tif 000028
【０２８７】
（概要）
ふすまおよび胚芽の酸処理は、加熱処理などの従来の安定化方法を向上させた。酸処理および加熱処理の両方を受けたふすまから作られた穀粉におけるリパーゼ活性１４１単位／ｇおよびこの中で生成した遊離脂肪酸１１２７ｐｐｍは、未処理の対照の２８２単位／ｇおよび３９４１ｐｐｍより低く、加熱処理のみで安定化したふすまより思いがけず低い（２０１単位／ｇおよび３０１４ｐｐｍ）。酸処理を熱処理と組み合わせることによりもたらされる安定化の向上という利益が、リパーゼ活性の低下および貯蔵中の遊離脂肪酸の生成の低下を可能にし、これらは、酸処理または加熱処理のいずれかを単独で行うことでは実現できない。加熱処理単独では遊離脂肪酸の２３．５％の減少、または酸処理単独では３７．６６％の減少に留まったのと比較して、遊離脂肪酸の生成を７１．４０％減少させた、酸と加熱による安定化の有意な相乗効果が存在する。
【実施例１１】
【０２８８】
（非加熱安定化および加熱安定化の相乗効果）
【０２８９】
この実施例の目的は、全粒粉貯蔵寿命に対する非加熱および加熱安定化の間の相乗効果を特定することであった。
（材料）：
（１）全粒粉製粉トライアル：
・２％テンパリング水を用いて典型的な４時間の間、乳酸（６０００ｐｐｍ）を用いて／用いずに小麦種実をテンパリングした。
・テンパリングしたＳＷＷ全粒小麦粉対照：全粒粉小麦８０００ｋｇに対して水１６０ｋｇを使用。
・乳酸を用いてテンパリングしたＳＷＷ全粒粉：全粒粉小麦４０００ｋｇに対して、水７６．７２ｋｇおよび乳酸２７．２８ｋｇを使用した。
・４時間テンパリング後、小麦を製粉機で製粉する。乳酸を用いた／用いなかったふすまおよび胚芽を収集し、乳酸を用いた／用いなかった内胚乳もまた収集した。
【０２９０】
（２）ふすまおよび胚芽を実験室内で加熱／水分安定化させた。
【０２９１】
乳酸を用いなかったＢ＆Ｇ３０ｇを、９つの穴を有するホイルバッグ（７インチ×６．５インチ）に詰め、次いでこのバッグを１４０℃で１０分間加熱した。
【０２９２】
乳酸を用いたＢ＆Ｇ３０ｇを９つの穴を有するホイルバッグ（７インチ×６．５インチ）に詰め、次いでこのバッグを１４０℃で１０分間加熱した。
【０２９３】
全粒粉の再構成が表２０に示されている：
【０２９４】
【表２０】
2014510544.tif 000029
【０２９５】
調製した全粒粉（新鮮な穀粉および３３日間熟成した穀粉）の遊離脂肪酸（ＦＦＡ）含有量およびリパーゼ活性を実施例４に開示されている方法に従って分析し、結果が表２１に示されている。穀粉の粒度分布が表２２に示されている：
【０２９６】
【表２１】
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【０２９７】
【表２２】
2014510544.tif 000031
【０２９８】
（概要）
【０２９９】
表２０〜２２に示されている通り：
・加熱安定化と共に乳酸（ＬＡ）処理した全粒粉（ＷＧ）は、加熱安定化なしでＬＡ処理したＷＧと比較して、リパーゼ活性が２４１から１４１単位／ｇに減少した。
・加熱安定化と共にＬＡ処理したＷＧは、加熱安定化なしでＬＡ処理したＷＧと比較して、遊離脂肪酸（ＦＦＡ）が２４５７から１１２７ｐｐｍに減少した。
・非加熱および加熱安定化の間に有意な相乗効果（７１．４０％阻害）が存在する（２３．５％＋３７．６６％の組合せ阻害）。
【実施例１２】
【０３００】
この実施例では、加熱安定化した全粒小麦粉対照、加熱安定化および本発明によるリパーゼ阻害剤としての乳酸の両方を使用して安定化した全粒小麦粉、ならびに安定化した穀粉で作った低脂肪ビスケットまたは全麦クラッカーの官能属性を専門家試食パネルが評価した。使用した安定化全粒小麦粉は、ビスケットが作られた時点で５８日経過しており、ビスケットは、６週間熟成させてからこれらの官能属性について評価した。１０２°Ｆでの穀粉遊離脂肪酸（ＦＦＡ）を第０日目、ならびに第３０日目、第４５日目、および第６０日目に求めた。
【０３０１】
評価対象の加熱安定化した全粒小麦粉サンプルまたは作業のそれぞれは、ほぼ同じ粒度分布を有した。各サンプルに対する加熱安定化は、対照サンプルに対して、さらに加熱安定化および乳酸の両方を使用して製造されたサンプルに対して、１８８°Ｆの加熱安定化温度を使用して同様に行った。安定化に使用されたふすまの加水処理レベルは、４．５重量％および７．５重量％であった。安定化に用いた乳酸の量は、対照サンプルでは０であり、本発明のサンプルでは、全粒粉の重量を基準として３０００ｐｐｍおよび６０００ｐｐｍであった。評価対象の安定化した全粒小麦粉は表２３に示されている：
【０３０２】
【表２３】
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【０３０３】
ビスケットを製造するために用いた各ドウは、同量の安定化した全粒小麦粉（ドウ重量を基準として約５７重量％）、ならびに同量のスクロース、油、塩、脱脂粉乳固形、高フルクトースコーンシロップ、炭酸水素アンモニウム、炭酸水素ナトリウム、および水を含有した。ドウは、ジャケット付きファリノグラフのようなミキシングボウルおよびブレード内で原材料を混合することで製造し、ドウをシーティングし、積層し、小片に切り、焙焼することによって、含水量３．５重量％のビスケットを得た。
官能属性の評価方法
【０３０４】
記述式パネル（ｎ＝１２）が生成物を評価した。パネリストは、官能の鋭さおよび記述能力に基づき選択された。パネリストらは、司会による討議セッションを介してすべての様相にわたってサンプルの特性を記載する語彙を開発した。
【０３０５】
サンプルは、彼らが作った語彙を使用してパネリストが個別に評価した。サンプルは、目隠し付で、および提示順序による偏りを最小限に抑えるようにバランスのとれた設計で提示された。各パネリストは、すべての属性について３回ずつ、すべての生成物を評価した。
【０３０６】
ウェブベースのデータ収集システム（Ｃｏｍｐｕｓｅｎｓｅ  ａｔ  Ｈａｎｄ、カナダ）を使用してデータ収集した。評価に使用した体系化されていないラインスケールを分析用に１００点スケールに電子的に変換した。
サンプルセットを評価するために使用した属性および定義
【０３０７】
官能属性、属性定義、および官能属性評価を行うための判定またはパネリストへの指示が表２４に示されている：
【０３０８】
【表２４】
2014510544.tif 000033
【０３０９】
これらの貯蔵寿命にわたるビスケットサンプルの香り、風味、および後味／印象特性に対する官能属性平均値が表２５に示されている：
【０３１０】
【表２５】
2014510544.tif 000034
【０３１１】
（結果の考察）
表２５に示されている通り、乳酸処理および低温加熱（１８８°Ｆ）の両方を使用して安定化した全粒粉は、低温加熱安定化（１８８°Ｆ）のみで安定化し、乳酸処理しなかった全粒粉を使用した対照に対するスコア、２９．９１スケール単位（作業１）と比較して、甘い風味をより多く保持する、少なくとも３２．０８スケール単位（作業２、３、４、および５）の優れた焙焼をもたらし、これは甘い風味スコアの少なくとも７．２％の増加である。
【０３１２】
また、表２５に示されている通り、乳酸処理および低温加熱（１８８°Ｆ）の両方を使用して安定化した全粒粉は、低温加熱安定化（１８８°Ｆ）のみで安定化し、乳酸処理をしなかった全粒粉を使用した対照に対するスコア、９．４７スケール単位（作業１）と比較して、シナモン風味をより多く保持する、少なくとも１１．２１スケール単位（作業２、３、４．および５）の優れた焙焼をもたらし、これは、シナモン風味スコアの少なくとも１８．３％の増加である。
【０３１３】
負の属性である生穀粉の香りは、表２５に示されている通り、９．６２スケール単位のスコアをつけた対照（作業１）と比較して、８．９４スケール単位、最大９でより低いままであり（作業２、３、４、および５）、これは穀粉香りスコアの少なくとも７％の低減であった。
【０３１４】
作業番号１（乳酸なし；対照として機能）と比較して、乳酸（作業２、３、４、および５）を用いたすべてのサンプルは、生穀粉の香りが低く、甘い風味がより高く、シナモン風味がより高く、香ばしい後味がより高く、歯への粘着性が低く、および粒子の量の印象がより弱い。
【０３１５】
作業番号１（乳酸なし；対照として機能）と比較して：ａ）６０００ｐｐｍ乳酸（作業２および４）を使用するが、３０００ｐｐｍの乳酸（作業３および５）を使用せずに製造されたサンプルは、バニラ後味がより高く、ｂ）３０００ｐｐｍ乳酸および４．５％のふすま加水処理を使用して製造されたサンプル（作業５）以外の、乳酸を用いたすべてのサンプル（作業２、３、および４）は、蜂蜜後味がより高い。
【０３１６】
貯蔵期間にわたり穀粉に生成した遊離脂肪酸（ＦＦＡ）で測定されるような、全粒粉およびこれを含有する製品の新鮮さ、ならびに熟成した穀粉で作られた製品中の風味保持性は、乳酸処理なしで安定化された対照全粒粉の新鮮さ、および対照穀粉を含有する製品の風味保持性と比較して、表２５で実証されているように、全粒小麦粉を安定化するために乳酸処理および低温加熱処理の両方を使用することで延長する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【国際調査報告】
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