【事件の表示】
　特許第３３０８０３４号「糖化変性タンパク質吸着体」の請求項１ないし５に係る特許に対する特許異議の申立てについて、次のとおり決定する。
【結　論】
　訂正を認める。
　特許第３３０８０３４号の請求項１ないし３に係る特許を維持する。
【理　由】
１．手続の経緯
　特許第３３０８０３４号の請求項１乃至５に係る発明は、平成５年４月２８日に特許出願され、平成１４年５月１７日に特許権の設定登録がなされ、その後、請求項１乃至５に係る特許について特許異議申立人　東レ株式会社より特許異議申立てがなされ、取消理由が通知され、その指定期間内である平成１５年１０月１７日に訂正請求がなされたものである。
　
２．訂正の適否についての判断
２−１．訂正の内容
　上記訂正請求は、願書に添付された明細書（以下、「特許明細書」という。）を訂正請求書に添付された明細書（以下、「訂正明細書」という。）のとおりに訂正することを求めるもので、その内容は以下のとおりである。
訂正事項ａ
　特許明細書の特許請求の範囲に記載の
「【請求項１】 多孔質水不溶性担体に logＰ（Ｐはオクタノール−水系での分配係数）値が2.50以上の化合物を固定してなる糖化変性タンパク質吸着体。
【請求項２】 多孔質水不溶性担体の排除限界分子量が２万以上である請求項１記載の糖化変性タンパク質吸着体。
【請求項３】 多孔質水不溶性担体が親水性であることを特徴とする請求項１記載の糖化変性タンパク質吸着体。
【請求項４】 多孔質水不溶性担体に logＰ（Ｐはオクタノール−水系での分配係数）値が2.50以上の化合物を固定してなる糖化変性タンパク質吸着体を、糖化変性タンパク質を含む体液と接触させることを特徴とする糖化変性タンパク質除去方法。
【請求項５】 液の入口、出口を有し、かつ糖化変性タンパク質吸着体の容器外への流出防止具を備えた容器内に、多孔質水不溶性担体に logＰ（Ｐはオクタノール−水系での分配係数）値が2.50以上の化合物を固定してなる糖化変性タンパク質吸着体を充填してなる糖化変性タンパク質吸着デバイス。」を、
「【請求項１】 排除限界分子量が２万以上かつ親水性である多孔質水不溶性担体に logＰ（Ｐはオクタノール−水系での分配係数）値が2.50以上の化合物を固定してなる、糖尿病患者の体液中に含まれる糖化変性タンパク質を吸着するための糖化変性タンパク質吸着体。
【請求項２】 排除限界分子量が２万以上かつ親水性である多孔質水不溶性担体に logＰ（Ｐはオクタノール−水系での分配係数）値が2.50以上の化合物を固定してなる糖化変性タンパク質吸着体を、糖化変性タンパク質を含む体液と接触させることを特徴とする糖化変性タンパク質除去方法。
【請求項３】 液の入口、出口を有し、かつ糖化変性タンパク質吸着体の容器外への流出防止具を備えた容器内に、排除限界分子量が２万以上かつ親水性である多孔質水不溶性担体に logＰ（Ｐはオクタノール−水系での分配係数）値が2.50以上の化合物を固定してなる糖化変性タンパク質吸着体を充填してなる糖化変性タンパク質吸着デバイス。」と訂正する。
訂正事項ｂ
　明細書の【０００１】段落を「【産業上の利用分野】本発明は糖尿病患者の体液に含有される糖化変性タンパク質を除去するための吸着体、これを用いた糖化変性タンパク質除去方法および糖化変性タンパク質吸着デバイスに関する。」と訂正する。
訂正事項ｃ
　明細書の【０００６】段落を「【課題を解決するための手段】本発明は(1)排除限界分子量が２万以上かつ親水性である多孔質水不溶性担体に logＰ（Ｐはオクタノール−水系での分配係数）値が2.50以上の化合物を固定してなる、糖尿病患者の体液中に含まれる糖化変性タンパク質を吸着するための糖化変性タンパク質吸着体、（2）排除限界分子量が２万以上かつ親水性である多孔質水不溶性担体に logＰ（Ｐはオクタノール−水系での分配係数）値が2.50以上の化合物を固定してなる糖化変性タンパク質吸着体を、糖化変性タンパク質を含む体液と接触させることを特徴とする糖化変性タンパク質除去方法、および（3）液の入口、出口を有し、かつ糖化変性タンパク質吸着体の容器外への流出防止具を備えた容器内に、排除限界分子量が２万以上かつ親水性である多孔質水不溶性担体に logＰ（Ｐはオクタノール−水系での分配係数）値が2.50以上の化合物を固定してなる糖化変性タンパク質吸着体を充填してなる糖化変性タンパク質吸着デバイスに関する。」と訂正する。（なお、「（1）」、「（2）」、「（3）」は、それぞれ、１、２、３が○で囲まれたものであるが、都合により上記の如く表記した。）
訂正事項ｄ
　明細書の【０００９】段落を「本発明の吸着体は、 logＰ（Ｐはオクタール−水系での分配係数）値が2.50以上の化合物を排除限界分子量が２万以上かつ親水性である多孔質水不溶性担体に固定してなる。」と訂正する。
訂正事項ｅ
　特許明細書の【００１４】段落に記載の「本発明において、多孔質水不溶性担体に固定される化合物としては、 logＰ値が2.50以上の化合物であれば特別な制限なしに用いることができる。」を、「本発明において、排除限界分子量が２万以上かつ親水性である多孔質水不溶性担体に固定される化合物としては、 logＰ値が2.50以上の化合物であれば特別な制限なしに用いることができる。」と訂正する。
訂正事項ｆ
　特許明細書の【００１７】段落に記載の「本発明に用いる水不溶性担体としては、ガラスビース、シリカゲルなどの無機担体、架橋ポリビニルアルコール、架橋ポリアクリレート、架橋ポリアクリルアミド、架橋ポリスチレンなどの合成高分子や結晶性セルロース、架橋セルロース、架橋アガロース、架橋デキストランなどの多糖類からなる有機担体、さらにはこれらの組み合わせによってえられる有機−有機、有機−無機などの複合担体などが代表例としてあげられるが、なかでも親水性担体が非特異吸着が比較的少なく糖化変性タンパク質吸着選択性が良好であるため好ましい。」を、「本発明に用いる排除限界分子量が２万以上かつ親水性である水不溶性担体としては、ガラスビース、シリカゲルなどの無機担体、架橋ポリビニルアルコール、架橋ポリアクリレート、架橋ポリアクリルアミド、架橋ポリスチレンなどの合成高分子や結晶性セルロース、架橋セルロース、架橋アガロース、架橋デキストランなどの多糖類からなる有機担体、さらにはこれらの組み合わせによってえられる有機−有機、有機−無機などの複合担体などが代表例としてあげられる。親水性担体は非特異吸着が比較的少なく糖化変性タンパク質吸着選択性が良好である。」と訂正する。
訂正事項ｇ
　特許明細書の【００１８】段落に記載の「本発明に用いる水不溶性担体にまず第一に要求される性質は、適当な大きさの細孔を多数有する、すなわち多孔質であることである。」を、「本発明に用いる排除限界分子量が２万以上かつ親水性である水不溶性担体にまず第一に要求される性質は、適当な大きさの細孔を多数有する、すなわち多孔質であることである。」と訂正する。
訂正事項ｈ
　特許明細書の【００２４】段落に記載の「本発明の吸着体は logＰ値が2.50以上の化合物を多孔質水不溶性担体に固定してえられるが、その固定化方法としては公知の種々の方法を特別な制限なしに用いることができる。」を、「本発明の吸着体は logＰ値が2.50以上の化合物を排除限界分子量が２万以上かつ親水性である多孔質水不溶性担体に固定してえられるが、その固定化方法としては公知の種々の方法を特別な制限なしに用いることができる。」と訂正する。
訂正事項ｉ
　明細書の【００４６】段落を「【発明の効果】本発明の吸着体は安価であり、かつ糖尿病患者の体液中に含まれる糖化変性タンパク質を効率よく吸着除去することができるという効果を奏する。」と訂正する。
２−２．訂正の目的の適否、新規事項の有無、及び拡張・変更の存否
　訂正事項ａは、具体的には次の３つの訂正事項を含むものである。
訂正事項ａ−１：特許明細書の請求項１、４及び５に記載の「多孔質水不溶性担体」を「排除限界分子量が２万以上かつ親水性である多孔質水不溶性担体」と訂正する。
訂正事項ａ−２：特許明細書の請求項１に記載の「糖化変性タンパク質吸着体」を「糖尿病患者の体液中に含まれる糖化変性タンパク質を吸着するための糖化変性タンパク質吸着体」と訂正する。
訂正事項ａ−３：特許明細書の請求項２及び３を削除し、同請求項４、５を各々請求項２、３に繰り上げる。
　これらの訂正事項ａ−１〜３について検討する。
　上記訂正事項ａ−１は、特許明細書の請求項１、４及び５に記載の「多孔質水不溶性担体」を「排除限界分子量が２万以上かつ親水性である」ものに限定するものであるから、特許請求の範囲の減縮を目的とした訂正に該当する。そして、多孔性水不溶性担体が排除限界分子量が２万以上かつ親水性であることは、特許明細書の請求項２，３の記載、特許明細書の【００１９】段落及び【００１７】段落の記載から導き出せることであり、また同【００３３】〜【００４１】段落の実施例１〜７に記載されているところであるから、この訂正事項は、特許明細書に記載された事項の範囲内で明細書の記載を訂正するものであると云える。しかも、この訂正事項は、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものではない。
　上記訂正事項ａ−２は、特許明細書の請求項１に記載の「糖化変性タンパク質吸着体」を糖尿病患者の体液中に含まれる糖化変性タンパク質を吸着するためのものに限定するものであるから、特許請求の範囲の減縮を目的とした訂正に該当する。そして、糖化変性タンパク質吸着体が糖尿病患者の体液中に含まれる糖化変性タンパク質を吸着するためのものであることは、特許明細書の【０００５】、【０００８】段落及び【００３３】〜【００４１】段落の実施例１〜７に記載されているところであるから、この訂正事項は、特許明細書に記載された事項の範囲内で明細書の記載を訂正するものであると云える。しかも、この訂正事項は、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものではない。
　上記訂正事項ａ−３は、請求項の削除及びそれに伴う請求項の項番の変更であるから、特許請求の範囲の減縮及び明りょうでない記載の釈明を目的とした訂正に該当する。そして、この訂正事項は、特許明細書に記載された事項の範囲内で明細書の記載を訂正するものであり、しかも、 実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものでもない。
　訂正事項ｂ〜ｉは、いずれも、特許請求の範囲の訂正に整合させて明細書の発明の詳細な説明の記載を訂正するものであるから、明りょうでない記載の釈明を目的とした訂正に該当する。そして、この訂正事項は、特許明細書に記載された事項の範囲内で明細書の記載を訂正するものであり、しかも、 実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものでもない。
２−３．むすび
　以上のとおりであるから、上記訂正は、特許法等の一部を改正する法律（平成６年法律第１１６号。以下「平成６年改正法」という。）附則第６条第１項の規定によりなお従前の例によるとされる、特許法第１２０条の４第３項において準用する平成６年改正法による改正前の特許法第１２６条第１項ただし書及び第２項の規定に適合するので、当該訂正を認める。
　
３．特許異議申立てについて
３−１．本件発明
　特許第３３０８０３４号の請求項１乃至３に係る発明（以下、「本件発明１」乃至「本件発明３」という。）は、訂正明細書の特許請求の範囲の請求項１乃至３に記載された次のとおりのものである。
【請求項１】 排除限界分子量が２万以上かつ親水性である多孔質水不溶性担体に logＰ（Ｐはオクタノール−水系での分配係数）値が2.50以上の化合物を固定してなる、糖尿病患者の体液中に含まれる糖化変性タンパク質を吸着するための糖化変性タンパク質吸着体。
【請求項２】 排除限界分子量が２万以上かつ親水性である多孔質水不溶性担体に logＰ（Ｐはオクタノール−水系での分配係数）値が2.50以上の化合物を固定してなる糖化変性タンパク質吸着体を、糖化変性タンパク質を含む体液と接触させることを特徴とする糖化変性タンパク質除去方法。
【請求項３】 液の入口、出口を有し、かつ糖化変性タンパク質吸着体の容器外への流出防止具を備えた容器内に、排除限界分子量が２万以上かつ親水性である多孔質水不溶性担体に logＰ（Ｐはオクタノール−水系での分配係数）値が2.50以上の化合物を固定してなる糖化変性タンパク質吸着体を充填してなる糖化変性タンパク質吸着デバイス。
３−２．取消理由の概要　
　当審が通知した取消理由は、下記の理由−１〜３により、本件の請求項１ないし５に係る発明の特許は、特許法第３６条第４項及び同条第５項第２号に規定する要件を満たしていない特許出願に対してなされたものであるから、本件の請求項１ないし５に係る発明の特許は、取り消されるべきものであるというものである。
（理由−１）証拠方法１〜７からみて、本件明細書に記載された測定方法によっては糖化変性タンパク質のみの量を正確に測定することができないから、本件明細書に記載された糖化変成タンパク質吸着率は実際にどのような物質の吸着率を測定しているのか不明であり、また証拠方法９，１０からみて、本件明細書の請求項１に記載された糖化変成タンパク質吸着体の効果が明確でないため、請求項１に記載の「糖化変成タンパク質吸着体」は不明確な記載であり、本件明細書には当業者が実施しうる程度にその発明が記載されていない。
（理由−２）本件明細書の比較例３の吸着体は請求項１に係る発明に包含されるものであるにもかかわらず、本件発明の効果を奏さないものであるため、本件明細書の請求項１には、本件の請求項１に係る発明の構成要件が記載されていない。
（理由−３）証拠方法１０に記載された吸着体及び比較例３の吸着体は、請求項１に記載された要件を満たすにもかかわらず、本件明細書に記載された本件の請求項１に係る発明の目的を達成していない。
　よって、請求項１には本件の請求項１に係る発明の必須構成要件が記載されているとは認められず、また、本件の請求項１に係る発明の効果が明確でない。
　また、本件の請求項１に係る発明を引用する本件の請求項２及び３に係る発明、並びに、本件の請求項１に係る発明の吸着体を用いる本件の請求項４及び５に係る発明についても同様の問題がある。
証拠方法
（１）Makita,Z.,et al;Advanced Glycosylation End Products in Patients with Diabetic Nephropathy.(1991)The New England Journal of Medicine 325:836-841
（２）Sell,D.R.,Monnier,V.M.;Structure elucidation of a senescence cross-link from human extracellular matrix:imp1ication of pentosesin aging process.(1989)J.Biol.Chem.264:21597-21602
（３）http://www.medic.kumamoto-u.ac.jp/dept/biochem2/age.html(2002)の印刷物
（４）Ahmed,M.U.,et al;Identification of Nε-carboxymethyllysine as a degradation product of fructoselysine in glycated protein.(1986)J.Biol.Chem.261:4889-4894
（５）Hayase,F.,et al;Aging of proteins:Immunological detection of aglucose-derived pyrrole formed during Maillard reaction invivo.(1989)J.Biol.Chem.263:3758-3764
（６）Krook,M.et al;Carboxyethyllysine in a protein:native carbonylreductase/NADP(+)-dependent prostaglandindehydrogenase.(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.USA.90(2):502-506
（７）Hammer,C.et al;Quantification of agepigments(lipofuscin).(1988)Comp.Biochem.Physiol.90[B]:7-17
（８）糖尿病（１）、７１９−７２４頁、日本臨床、５５巻・１９９７年増刊号
（９）東レ株式会社　機能材料研究所医療システム研究室　室長　板垣一郎による実験報告書１
（１０）東レ株式会社　機能材料研究所医療システム研究室　室長　板垣一郎による実験報告書２
３−３．証拠方法に記載された事項（翻訳は異議申立人による。）
 （１）証拠方法１には以下の記載がある。
「ごく普通のＡＧＥ特異的な化学的分析法がないので、ＡＧＥ依存性の相対蛍光のような他の方法が用いられてきた。この広く用いられている方法は、類似蛍光スペクトルを有するグルコースあるいは脂質由来酸化物のような非ＡＧＥタンパク質付加物による見せかけの寄与や非タンパク質の組織構成要素による妨害を受けてしまう。」（第８４０頁右欄４〜１１行）
（２）証拠方法２には以下の記載がある。
　第２１５９９頁左欄に「図２」が記載されており、その説明として「図２．天然のヒト硬膜（上）とリジン、アルギニン、及びリボースを一緒に８０℃で１時間加熱した合成の定温放置系（下）から分離された蛍光団Ｐ（ペントシジン）のｐＨ２，７，９と１２での吸収及び蛍光励起スペクトル。蛍光励起スペクトルは次のようにモニターされた：右の蛍光スペクトルに対して、励起は３３５ｎｍだった；左の励起スペクトルに対して蛍光は３８５ｎｍだった。」との記載がある。
（３）証拠方法３には以下の記載がある。
「これまで同定されたＡＧＥ−構造は３つのグループに分類される。１つ目のグループは、ペントシジン、クロスリン類、ベスパーリジン類、グリオキサールリジン２量体（ＧＯＬＤ）及びメチルグリオキサールリジン２量体（ＭＯＬＤ）のような蛍光性と架橋性の構造類です。２つ目のグループは、イミダゾロン類のような蛍光性だが非架橋性の構造類で、３つ目のグループは、Ｎ−カルボキシメチルリジン（ＣＭＬ）、ピラリン及びＮ−カルボキシエチルリジン（ＣＥＬ）のような非蛍光性で非架橋性の構造類を意味しています。」（第２頁２２〜２９行）
（４）証拠方法４には以下の記載がある。
　第４８９０頁に「図２」が記載されており、その説明として「図２．Ｎα，Ｎε−ジアセチル−Ｎε−カルボキシメチルリジンメチルエステルから誘導されたＣＭＬの電子衝撃マススペクトル。」との記載、及び「図２」中には「Ｎε−カルボキシメチルリジン」の構造式が記載されている。
（５）証拠方法５には以下の記載がある。
　第３７６１頁に「表１」として「酵素標識免疫固相分析法によるカプロイルピラリン−ポリ−Ｌ−リジン複合物に対する抗体の特徴化」が記載されており、各種のピラリン誘導体の構造式が記載されている。
（６）証拠方法６には以下の記載がある。
　第５０４頁左欄に「図２」が記載されており、その説明として「天然のカルボニル還元酵素／ＮＡＤＰ＋−依存性プロスタグランジン脱水素化酵素の酸性形態に於ける２３８番目で同定された異例のアミノ酸形成。試験管内合成経路は化学的に実施され、恐らく生体内でも酵素反応的に行われた。」との記載があり、「図２」中にはＮ６−カルボキシエチルリジンの構造式が記載されている。
（７）証拠方法７には以下の記載がある。
　第８〜９頁に「表２」として「分光蛍光的な加齢色素測定に関する文書資料編集」が記載されており、各種蛍光団の名前と励起最大値（ｎｍ）と蛍光最大値（ｎｍ）の値が記載されている。
（８）証拠方法８には以下の記載がある。
　第７１９頁には、「表１」として「糖尿病合併症の分類」が記載されている。
（９）証拠方法９には以下の記載がある。
　糖尿病患者が使用し得る既存の薬剤である塩酸ジセラプ（コメリアン錠（興和（株）））及びワルファリンカリウム（ワーファリン錠（エーザイ（株）））のＰＢＳ溶液について、本件明細書の実施例４に記載された方法により製造された、担体としてのＧＣＬ−２０００ｍに臭化セチルを固定してなる吸着体を用いて吸着実験をしたところ、蛍光強度（励起波長：３９０ｎｍ、蛍光波長：４５０ｎｍ）の測定により算出された吸着率は、４９．４％及び３７．６％であった旨、記載されている。
（１０）証拠方法１０には以下の記載がある。
　ウシ血清アルブミンとグルコース−６−リン酸を３７℃で５６日間反応させて得た糖化変性タンパク質について、本件明細書の実施例４に記載された方法により製造された、担体としてのＧＣＬ−２０００ｍにlogＰ値が2.50以上の５つの化合物を固定してなる吸着体を用いて吸着実験をしたところ、蛍光強度（励起波長：３９０ｎｍ、蛍光波長：４５０ｎｍ）の測定により算出された吸着率は、８〜２０％の範囲内であった旨、記載されている。
３−４．当審の判断
１）理由−１について
　たしかに、証拠方法１には、本件訂正明細書【００３５】段落に記載された蛍光光度計（励起波長３９０ｎｍ、蛍光波長４５０ｎｍ）による糖化変性タンパク質の測定方法は、「非ＡＧＥタンパク質付加物による見せかけの寄与や非タンパク質の組織構成要素による妨害を受けてしまう」ものであることが記載されている。そして、証拠方法２には、ペチトジジンと呼ばれる糖化変性部分が本件訂正明細書に記載された蛍光光度計で用いた波長と異なる励起波長、蛍光波長を示すことが記載されており、そのため、このペチトジジンと呼ばれる糖化変性部分が結合したタンパク質は、糖化変性タンパク質であるにも関わらず、本件訂正明細書に記載された方法によっては測定できないと解される。さらに、証拠方法３には、糖化変性タンパク質の１グループとして無蛍光性のものが存在することが記載されており、この無蛍光性の糖化変性タンパク質は、無蛍光性であるから当然のこととして本件訂正明細書に記載された方法によっては測定できないと解される。そして、証拠方法４の図２に記載されたＮε−カルボキシメチルリジンの構造式、証拠方法５の表１に示されたピラリン誘導体の構造式、証拠方法６の図２に示されたＮ６−カルボキシエチルリジンの構造式からみて、証拠方法４〜６に具体的に示された糖化変性タンパク質は無蛍光性であることが窺える。また、証拠方法７の表１には、励起波長：３９０ｎｍ付近、蛍光波長：４５０ｎｍ付近の蛍光を発する糖化変性タンパク質でない生体由来物質である加齢色素の存在が記載されており、これらの加齢色素は、その励起波長及び蛍光波長からみて、本件訂正明細書に記載された測定方法により測定されてしまうと解される。さらに、証拠方法８には糖尿病性合併症が記載されているところ、証拠方法９には、糖尿病患者が使用し得る既存の薬剤が本件訂正明細書の実施例４に記載された方法により製造された吸着剤により吸着されることが、本件訂正明細書に記載された測定法と同じ励起波長：３９０ｎｍ、蛍光波長：４５０ｎｍの蛍光強度を測定することにより測定できたことが記載されている。
　これら、証拠方法２〜９からみて、本件訂正明細書に記載された蛍光光度計（励起波長：３９０ｎｍ、蛍光波長：４５０ｎｍ）による測定方法は、一部の糖化変性タンパク質を測定できず、かえって生体由来及び非由来の糖化変性タンパク質でない物質に起因する蛍光を測定してしまうものであり、結局、証拠方法１に記載されているように正確性に欠け、糖尿病患者の体液中に含まれる全ての糖化変性タンパクの量のみを測定することができないものであると云える。
　しかし、証拠方法１には「ごく普通のＡＧＥ特異的な化学的分析法がないので、ＡＧＥ依存性の相対蛍光のような他の方法が用いられてきた。この広く用いられている方法は・・・」との記載もあり、この記載からも明らかなように、「ごく普通のＡＧＥ特異的な化学的分析法」は存在せず、本件訂正明細書に記載された蛍光光度計（励起波長：３９０ｎｍ、蛍光波長：４５０ｎｍ）による測定方法は、上記の如く正確性には欠けるものの、糖化変性タンパク質の測定方法として広く用いられていた方法であると云える。
　そこで、本件訂正明細書の記載を検討すると、本件発明１乃至３は、本件訂正明細書の【０００１】及び【０００５】段落に記載されているように、糖尿病患者の体液中に多量に存在する糖化変性タンパク質を効率よく吸着除去しうる吸着体を提供することを目的としたものである。そして、糖尿病患者の体液中に含まれる糖化変性タンパク質を吸着するための糖化変性タンパク質吸着体の吸着率の測定について、本件訂正明細書の【００３５】段落には、「この吸着体0.2ml に、0.1ＭＰＢＳ（pH7.2 、カルシウム、マグネシウム不含）で10倍に希釈した糖尿病患者の血漿を1.2ml 加え37℃の恒温槽中で１時間振盪した。この混合液を3000rpm で５分間遠心分離して吸着体を沈降させ、上澄み液中の糖化変性タンパク質の濃度と総タンパク量を測定した」こと、及び、上記の糖化変性タンパク質の濃度の測定を、証拠方法１の第８３８頁の方法を参照して「蛍光光度計（励起波長 390nm、蛍光波長450nm）で測定した」旨、記載されている。
　そして、糖尿病患者の体液中に多量に存在する糖化変性タンパク質には多種多様なものがあることは広く知られているところ、本件発明１乃至３は、上記のとおり、特定の糖化変性タンパク質に対する吸着体ではなく、糖尿病患者の体液中に多量に存在する多種多様な糖化変性タンパク質を効率よく吸着除去しうる吸着体を提供することを目的とするものであるから、「ごく普通のＡＧＥ特異的な化学的分析法」が存在しない以上、正確性には欠けるものの、糖化変性タンパク質の測定方法として広く用いられていた蛍光光度計（励起波長 390nm、蛍光波長450nm）による測定法を採用して糖化変性タンパク質の濃度を測定し、吸着率を測定することは、当該技術の技術水準からみて本件発明１乃至３の効果を確認する手段として妥当であったと云える。よって、かかる事項が記載されている本件訂正明細書の発明の詳細な説明の欄の記載が、当業者が本件発明１乃至３を実施し得ない程度のものであると云うことはできず、また、本件訂正明細書の請求項１に記載の「糖化変成タンパク質吸着体」は不明確な記載であるとは云えない。
　また、証拠方法１０に記載された実験結果については、牛血清アルブミンとグルコース−６−リン酸を３７℃で５６日間反応させて得た特定の１種類の糖化変性タンパク質の吸着に関する実験の結果であり、しかも、担体としてのＧＣＬ−２０００ｍにlogＰ値が2.50以上の５つの化合物を固定してなる５つの吸着体を用いているが、これらはすべて本件発明１に包含される吸着体であり、logＰ値が2.50より低い化合物を固定してなる吸着体との比較もない。よって、証拠方法１０は、牛血清アルブミンとグルコース−６−リン酸を３７℃で５６日間反応させて得た糖化変性タンパク質の吸着に際しては、本件発明１に包含される吸着体の吸着率は証拠方法１０に示される程度であったことを示すものではあるが、本件訂正明細書の【００３３】〜【００４４】段落に実施例１〜７及び比較例１〜４として記載された糖尿病患者の血漿中の糖化変性タンパク質の吸着実験の結果として本件訂正明細書【００４５】段落の表１に具体的に記載された糖化変性タンパク質吸着率の値によって示される本件発明１乃至３の効果を否定するものではない。
　したがって、証拠方法１〜１０を検討しても、本件訂正明細書の請求項１に記載の「糖化変成タンパク質吸着体」は不明確な記載であるとは云えず、また、本件訂正明細書の発明の詳細な説明の欄には、当業者が実施できる程度に本件発明１乃至３が記載されていないとも云えない。
　以上のとおりであるから、取消理由通知で通知した理由−１は、根拠のないものである。
２）理由−２について
　上述の如く訂正請求が容認されたことにより、本件訂正明細書の【００４３】段落に記載され、また同【００４５】段落にその吸着実験の結果が記載された「比較例３」は、本件発明１の、そして、本件発明２及び３における糖化変性タンパク質吸着体に包含されないものとなった。
　よって、取消理由通知で通知した理由−２は、根拠のないものである。
３）理由−３について
　証拠方法１０に記載された事項については上記１）で述べたとおりであり、本件訂正明細書に記載の「比較例３」については上記２）で述べたとおりであるから、取消理由通知で通知した理由−３も、根拠のないものである。
３−５．他の異議申立の理由及び証拠方法について
　また、他の異議申立の理由及び証拠方法を検討しても、本件発明１乃至３を取り消すことはできない。
３−６．むすび
　以上のとおりであるから、特許異議の申立ての理由及び証拠方法によっては本件発明１乃至３についての特許を取り消すことはできない。
　また、他に本件発明１乃至３についての特許を取り消すべき理由を発見しない。
　したがって、本件発明１乃至３についての特許は拒絶の査定をしなければならない特許出願に対してされたものと認めない。
　よって、特許法等の一部を改正する法律（平成６年法律第１１６号）附則第１４条の規定に基づく、特許法等の一部を改正する法律の施行に伴う経過措置を定める政令（平成７年政令第２０５号）第４条第２項の規定により、上記のとおり決定する。
【異議決定日】
平成１６年８月５日（２００４．８．５）
【訂正の要旨】
審決（決定）の【理由】欄参照。
（５４）【発明の名称】
糖化変性タンパク質吸着体
（５７）【特許請求の範囲】
　【請求項１】　
排除限界分子量が２万以上かつ親水性である
、糖尿病患者の体液中に含まれる糖化変性タンパク質を吸着するための
　
　【請求項
２
排除限界分子量が２万以上かつ親水性である
　【請求項
３
排除限界分子量が２万以上かつ親水性である
【発明の詳細な説明】
　【０００１】
　【産業上の利用分野】
　本発明は
糖尿病患者の
　【０００２】
　【従来の技術】
　糖尿病を発症すると数年後にはほとんど全例で腎糸球体に病理学的変化が出現し始める。糖尿病患者の死因は腎障害によるものも多く、最近は糖尿病性腎症による腎不全者の比率も年々増加してきている。これは腎糸球体に起こる血管障害が原因となっている（「糖尿病と腎血管動脈；プラクティス（ＰＲＡＣＴＩＣＥ）、３巻、２９８頁、１９８６年」および「糖尿病と血管のかかわり；日本糖尿病学会総会記録号、１頁、１９８８年」参照）。
　【０００３】
　糖尿病患者の血液中には、健常人に比べると多量の糖が存在するが、このような血液中に存在するブドウ糖は、酵素の関与なしにタンパク質などと結合することが知られている。非酵素的に糖が結合したタンパク質は糖化変性タンパク質となり、その後血管壁に沈着して血管障害を引き起こし、ひいては重篤な糖尿病性合併症を進行させる。糖化変性タンパク質の形態は様々であるがその一例としては、アドバンスト・グリコシレーション・エンド・プロダクツ（Ａｄｖａｎｃｅｄ　Ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ　Ｅｎｄ　Ｐｒｏｄｕｃｔｓ（ＡＧＥｓ））が知られている。これは糖化されたタンパク質が互いに架橋し合ったものを指し、糖尿病合併症の原因物質と考えられている（「ノンエンザイマティック・グリコシレーション・アンド・ザ・パソゲネシス・オブ・ダイアベティック・コンプリケーションズ；アナルズ・オブ・インターナル・メディスン（Ｎｏｎｅｎｚｙｍａｔｉｃ　Ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｔｈｅ　Ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ　ｏｆ　Ｄｉａｂｅｔｉｃ　Ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ；Ａｎｎａｌｓ　ｏｆ　Ｉｎｔｅｒｎａｌ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）、１０１巻、５２７頁、１９８４年」「アドバンスト・グリコシレーション・エンド・プロダクツ・イン・ペイシェンツ・ウィズ・ダイアベティック・ネフロパシー；ザ・ニュー・イングランド・ジャーナル・オブ・メディスン（Ａｄｖａｎｃｅｄ　Ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ　Ｅｎｄ　Ｐｒｏｄｕｃｔｓ　ｉｎ　Ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　Ｄｉａｂｅｔｉｃ　Ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ；Ｔｈｅ　Ｎｅｗ　Ｅｎｇｌａｎｄ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）、３２５巻、８３６頁、１９９１年」参照）。
　【０００４】
　現在このような糖尿病性合併症の治療はインスリン治療の強化や降圧療法に依存しているが、臨床的に顕性の腎症が発展するとその進行を止めるのが困難となる。またインスリン非依存性糖尿病に関しては現在有効な治療法はない。
　【０００５】
　【発明が解決しようとする課題】
　本発明は糖尿病性合併症患者の血液中に多量に存在する糖化変性タンパク質を効率よく吸着除去しうる安全で安価な吸着体を提供することを目的とするものである。
　【０００６】
　【課題を解決するための手段】
　本発明は▲１▼
排除限界分子量が２万以上かつ親水性である
、糖尿病患者の体液中に含まれる糖化変性タンパク質を吸着するための
排除限界分子量が２万以上かつ親水性である
排除限界分子量が２万以上かつ親水性である
　【０００７】
　【実施例】
　本発明において糖化変性タンパク質とは、タンパク質、核酸およびホルモンなどのアミノ基に還元糖が非酵素的に結合し、変性したもの全般を指す。これらには、糖化を受けシッフ塩基となったもの、アマドリ転移してケトアミンになったもの、これらが互いに架橋しあったものが含まれる（「アドバンスト・グリコシレーション・エンド・プロダクツ・イン・ティッシュー・アンド・ザ・バイオケミカル・ベーシス・オブ・ダイアベティック・コンプリケーションズ；ザ・ニュー・イングランド・ジャーナル・オブ・メディスン（Ａｄｖａｎｃｅｄ　Ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ　Ｅｎｄ　Ｐｒｏｄｕｃｔｓ　ｉｎ　Ｔｉｓｓｕｅ　ａｎｄ　ｔｈｅ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｂａｓｉｓ　ｏｆ　Ｄｉａｂｅｔｉｃ　Ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ；Ｔｈｅ　Ｎｅｗ　Ｅｎｇｌａｎｄ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）、３１８巻、１３１５頁、１９８８年」参照）。
　【０００８】
　また、体液とは血液、血漿、血清、腹水、リンパ液、関節内液およびこれらからえられた分画成分、ならびにそのほかの生体由来の液性成分をいう。
　【０００９】
　本発明の吸着体は、ｌｏｇＰ（Ｐはオクタール−水系での分配係数）値が２．５０以上の化合物を
排除限界分子量が２万以上かつ親水性である
　【００１０】
　ｌｏｇＰ値は化合物の疎水性のパラメーターとなり、代表的なオクタノール−水系での分配係数Ｐの求め方はつぎのとおりである。まず、化合物をオクタノール（もしくは水）に溶解し、これに等量の水（もしくはオクタノール）を加え、グリッフィン・フラスク・シェイカー（Ｇｒｉｆｆｉｎ　ｆｌａｓｋ　Ｓｈａｋｅｒ）（グリッフィン・アンド・ジョージ・リミテッド（Ｇｒｉｆｆｉｎ　＆　Ｇｅｏｒｇｅ　Ｌｔｄ．）製）で３０分間振盪する。その後２０００ｒｐｍで１〜２時間遠心分離し、オクタノール層および水層中の化合物濃度を分光学的またはＧＬＣなどの種々の方法で測定することにより次式で求められる。
　【００１１】
　　Ｐ＝Ｃｏｃｔ／Ｃｗ
　　Ｃｏｃｔ：オクタノール層中の化合物濃度
　　Ｃｗ：水層中の化合物濃度
　これまでに多くの研究者らにより種々の化合物のｌｏｇＰ値が実測されているが、それらの実測値はシー・ハンシュ（Ｃ．Ｈａｎｓｃｈ）らによって整理されている（「パーティション・コーフィシエンツ・アンド・ゼア・ユージズ；ケミカル・レビューズ（ＰＡＲＴＩＴＩＯＮ　ＣＯＥＦＦＩＣＩＥＮＴＳ　ＡＮＤ　ＴＨＥＩＲ　ＵＳＥＳ；Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｒｅｖｉｅｗｓ）、７１巻、５２５頁、１９７１年」参照）。
　【００１２】
　また実測値の知られていない化合物についてはアール・エフ・レッカー（Ｒ．Ｆ．Ｒｅｋｋｅｒ）がその著書（「ザ・ハイドロフォビック・フラグメンタル・コンスタント（ＴＨＥ　ＨＹＤＲＯＰＨＯＢＩＣ　ＦＲＡＧＭＥＮＴＡＬ　ＣＯＮＳＴＡＮＴ）」，エルセビア・サイエンティフィック・パブリッシング・カンパニー（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ　Ｓｃｉ．Ｐｕｂ．Ｃｏｍ．），アムステルダム（１９７７）中に示されている疎水性フラグメント定数ｆを用いて計算した値（Σｆ）が参考となる。疎水性フラグメント定数ｆは数多くのｌｏｇＰ実測値をもとに、統計学的処理を行ない決定された種々のフラグメントの疎水性を示す値であり、化合物を構成するおのおののフラグメントのｆ値の和はｌｏｇＰ値とほぼ一致する。
　【００１３】
　糖化変性タンパク質の吸着に有効な化合物の探索にあたり、種々のｌｏｇＰ値を有する化合物を固定し検討した結果、ｌｏｇＰ値２．５０以上の化合物が糖化変性タンパク質の吸着に有効であり、ｌｏｇＰ値２．５０未満の化合物は殆ど糖化変性タンパク質吸着能を示さないことがわかった。たとえばアルキルアミンを固定したばあい、アルキルアミンをｎ−ヘキシルアミン（ｌｏｇＰ＝２．０６）からｎ−オクチルアミン（ｌｏｇＰ＝２．９０）に変えると、このあいだで糖化変性タンパク質吸着能は飛躍的にに上昇することがわかった。これらの結果より本発明の吸着体への糖化変性タンパク質の吸着は、ｌｏｇＰ値２．５０以上の化合物の固定により担体上に導入された原子団と糖化変性タンパク質との間の疎水性相互作用によるものと考えられ、ｌｏｇＰ値２．５０未満の化合物では疎水性が小さすぎるために糖化変性タンパク質吸着能を示さないと考えられる。
　【００１４】
　本発明において、
排除限界分子量が２万以上かつ親水性である
　【００１５】
　ｌｏｇＰ値が２．５０以上の化合物のなかでもアルコール、アミン、チオール、カルボン酸およびその誘導体、ハロゲン化物、アルデヒド、ヒドラジド、イソシアナート、グリシジルエーテルなどのオキシラン環含有化合物、ハロゲン化シランなどのように担体への結合に利用できる官能基を有する化合物が好ましい。このような化合物の代表例としては、ｎ−ヘプチルアミン、ｎ−オクチルアミン、デシルアミン、ドデシルアミン、ヘキサデシルアミン、オクタデシルアミン、２−アミノオクテン、ナフチルアミン、フェニル−ｎ−プロピルアミン、ジフェニルメチルアミンなどのアミン類、ｎ−ヘプチルアルコール、ｎ−オクチルアルコール、ドデシルアルコール、ヘキサデシルアルコール、１−オクテン−３−オール、ナフトール、ジフェニルメタノール、４−フェニル−２−ブタノールなどのアルコール類ならびにこれらのアルコールのグリシジルエーテル類、ｎ−オクタン酸、ノナン酸、２−ノネン酸、デカン酸、ドデカン酸、ステアリン酸、アラキドン酸、オレイン酸、ジフェニル酢酸、フェニルプロピオン酸などのカルボン酸類ならびにこれらの酸ハロゲン化物、エステル、アミドなどのカルボン酸誘導体、塩化オクチル、臭化オクチル、塩化デシル、塩化ドデシルなどのハロゲン化物、オクタンチオール、ドデカンチオールなどのチオール類、ｎ−オクチルトリクロロシラン、オクタデシルトリクロロシランなどのハロゲン化シラン類、ｎ−オクチルアルデヒド、ｎ−カプリンアルデヒド、ドデシルアルデヒドなどのアルデヒド類などがあげられる。さらにこれらのほかにも、叙上の例示化合物の炭化水素部分の水素原子がハロゲン、チッ素、酸素、イオウなどのヘテロ原子を含有する置換基、他のアルキル基などで置換された化合物のうちｌｏｇＰ値が２．５０以上の化合物、前述のシー・ハンシュ（Ｃ．Ｈａｎｓｃｈ）らの総説「パーティション・コーフィシエンツ・アンド・ゼア・ユージズ；ケミカル・レビューズ（ＰＡＲＴＩＴＩＯＮ　ＣＯＥＦＦＩＣＩＥＮＴＳ　ＡＮＤ　ＴＨＥＩＲ　ＵＳＥＳ；Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｒｅｖｉｅｗｓ）、７１巻、５２５頁、１９７１年」中の５５５頁から６１３頁の表に示されているｌｏｇＰ値が２．５０以上の化合物などを用いることができるが、本発明においてはこれらのみに限定されるものではない。
　【００１６】
　なお、これらの化合物はそれぞれ単独で用いてもよいし、任意の２種類以上を組み合わせてもよく、さらにはｌｏｇＰ値が２．５０未満の化合物との組み合わせで用いてもよい。
　【００１７】
　本発明に用いる
排除限界分子量が２万以上かつ親水性である
。
は
る。
　【００１８】
　本発明に用いる
排除限界分子量が２万以上かつ親水性である
　【００１９】
　種々の排除限界分子量の担体を用いて検討した結果、糖化変性タンパク質の吸着に適当な細孔径は、排除限界分子量が２万以上であることが明らかとなった。すなわち２万未満の排除限界分子量をもつ担体を用いたばあいには糖化変性タンパク質の吸着除去量は小さくその実用性が低下する。したがって本発明に用いる担体の好ましい排除限界分子量は２万以上である。
　【００２０】
　つぎに担体の多孔構造については、吸着体の単位体積あたりの吸着能から考えて、表面多孔性よりも全多孔性が好ましく、空孔容積が２０％以上であり、比表面積が３ｍ２／ｇ以上であることが好ましい。
　【００２１】
　また担体の形状は粒状、繊維状、中空形状など任意に形状を選ぶことができ、その大きさもとくに限定されない。
　【００２２】
　さらに担体表面には、リガンドの固定化反応に用いうる官能基が存在していると好都合である。これらの官能基の代表例としては、水酸基、アミノ基、アルデヒド基、カルボキシル基、チオール基、シラノール基、アミド基、エポキシ基、ハロゲン基、サクシニルイミド基、酸無水物基などがあげられる。
　【００２３】
　つぎに本発明に用いる担体としては硬質担体、軟質担体のいずれをも用いることができるが、体外循環治療用の吸着体として使用するばあいには、カラムに充填し、通液する際などに目詰まりを生じないことが重要であり、そのためには充分な機械的強度が要求される。したがって本発明に用いる担体は硬質担体であることがより好ましい。ここでいう硬質担体とは、たとえば粒状ゲルのばあい、後記参考例に示すごとく、ゲルを円筒状カラムに均一に充填し、水性流体を流した際の圧力損失ΔＰと流量の関係が０．３ｋｇ／ｃｍ２まで直線関係にあるものをいう。
　【００２４】
　本発明の吸着体はｌｏｇＰ値が２．５０以上の化合物を
排除限界分子量が２万以上かつ親水性である
　【００２５】
　本発明の吸着体を治療に用いるばあいには種々の方法がある。最も簡便な方法としては患者の血液などの体液を体外に導出して血液バックに貯め、これに本発明の吸着体を混合して糖化変性タンパク質を除去後、フィルターを通して吸着体を除去し、血液を患者に戻す方法がある。この方法は複雑な装置を必要としないが、１回の処理量が少なく処理に時間を要し、操作が煩雑になるという欠点を有する。
　【００２６】
　つぎの方法は吸着体をカラムに充填し、体外循環回路に組み込み、オンラインで吸着除去を行なうものである。処理方法には全血を直接灌流する方法と血液から血漿を分離したのち、血漿をカラムに通す方法がある。本発明の吸着体は、いずれの方法にも用いることができるが、前述のごとくオンライン処理に最も適している。
　【００２７】
　ここでいう体外循環回路では本発明の吸着体を単独で用いることもできるが、ほかの体外循環治療システムとの併用も可能である。併用の例としては、人工透析回路などがあげられ、透析療法との組み合わせに用いることもできる。
　【００２８】
　つぎに前記糖化変性タンパク質吸着体を用いた本発明の糖化変性タンパク質吸着デバイスを、その一実施例の概略断面図である図１に基づき説明する。
　【００２９】
　図１中、１は体液の流入口、２は体液の流出口、３は本発明の糖化変性タンパク質吸着体、４および５は体液および体液に含まれる成分は通過できるが前記糖化変性タンパク質吸着体は通過できないフィルター、６はカラム、７は糖化変性タンパク質吸着デバイスである。しかしながら、糖化変性タンパク質吸着デバイスは、このような具体例に限定されるものではなく、液の入口、出口を有し、かつ糖化変性タンパク質吸着体の容器外への流出防止具を備えた容器内に前記吸着体を充填したものであれば、どのようなものでもよい。前記流出防止具には、メッシュ、不織布、綿栓などのフィルターがあげられる。また、容器の形状、材質、大きさにとくに限定はないが、好ましい具体例としては、たとえば容量１５０〜４００ｍｌ程度、直径４〜１０ｃｍ程度の透明または半透明の筒状容器などがあげられる。とくに好ましくは耐滅菌性を有する素材であるが、具体的にはシリコンコートされたガラス、ポリプロピレン、塩化ビニール、ポリカーボネート、ポリサルフォン、ポリメチルペンテンなどがあげられる。
　【００３０】
　以下実施例に基づいて本発明の吸着体をさらに詳細に説明するが、本発明はもとよりこれらに限られるものではない。
　【００３１】
参考例
　両端に孔径１５μｍのフィルターを装着したガラス製円筒カラム（内径９ｍｍ、カラム長１５０ｍｍ）にアガロースゲル（バイオラッド（Ｂｉｏ−ｒａｄ）社製のＢｉｏｇｅｌＡ−５ｍ、粒径５０〜１００メッシュ）、ビニル系ポリマーゲル（東ソー（株）製のトヨパールＨＷ−６５、粒径５０〜１００μｍ）およびセルロースゲル（チッソ（株）製のセルロファインＧＣ−７００ｍ、粒径４５〜１０５μｍ）をそれぞれ均一に充填し、ペリスタリックポンプにより水を流し、流量と圧力損失ΔＰとの関係を求めた。その結果を図２に示す。
　【００３２】
　図２に示すごとく、トヨパールＨＷ−６５およびセルロファインＧＣ−７００ｍが圧力の増加にほぼ比例して流量が増加するのに対し、ＢｉｏｇｅｌＡ−５ｍは圧密化をひきおこし、圧力を増加させても流量が増加しないことがわかる。本発明においては前者のごとく、圧力損失ΔＰと流量の関係が０．３ｋｇ／ｃｍ２まで直線関係にあるものを硬質ゲルという。
　【００３３】
実施例１
　セルロース系多孔質硬質ゲルであるＧＣＬ−２０００ｍ（チッソ（株）製、球状タンパク質の排除限界分子量３００万）１７０ｍｌに水を加え全量を３４０ｍｌとしたのち、２Ｍ水酸化ナトリウム９０ｍｌを加え４０℃とした。これにエピクロルヒドリン３１ｍｌを加え、４０℃で撹拌下２時間反応させた。反応終了後、充分に水洗し、エポキシ化ゲルをえた。
　【００３４】
　このエポキシ化ゲル１０ｍｌにｎ−オクチルアミン（ｌｏｇＰ＝２．９０）２００ｍｇを加え、５０％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液中、４５℃で静置下６日間反応させた。反応終了後、５０％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液、水の順に充分に洗浄し、ｎ−オクチルアミン固定化ゲルをえた。
　【００３５】
　この吸着体０．２ｍｌに、０．１ＭＰＢＳ（ｐＨ７．２、カルシウム、マグネシウム不含）で１０倍に希釈した糖尿病患者の血漿を１．２ｍｌ加え３７℃の恒温槽中で１時間振盪した。この混合液を３０００ｒｐｍで５分間遠心分離して吸着体を沈降させ、上澄み液中の糖化変性タンパク質の濃度と総タンパク量を測定した。糖化変性タンパク質の濃度の測定方法は多数あるが、今回は「アドバンスト・グリコシレーション・エンド・プロダクツ・イン・ペイシェンツ・ウィズ・ダイアベティック・ネフロパシー；ザ・ニュー・イングランド・ジャーナル・オブ・メディスン（Ａｄｖａｎｃｅｄ　Ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ　Ｅｎｄ　Ｐｒｏｄｕｃｔｓ　ｉｎ　Ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　Ｄｉａｂｅｔｉｃ　Ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ；Ｔｈｅ　Ｎｅｗ　Ｅｎｇｌａｎｄ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）、３２５巻、８３６頁、１９９１年」の８３８頁の方法を参照し、蛍光光度計（励起波長３９０ｎｍ、蛍光波長４５０ｎｍ）で測定した。また総タンパク量は常法にしたがって、吸光光度計（２８０ｎｍ）で測定した。結果を表１に示す。
　【００３６】
実施例２
　ｎ−オクチルアミンをドデシルアミン（Σｆ＝５．１０）に変えたほかは実施例１と同様にしてドデシルアミン固定化ゲルをえた。この吸着体を用いて実施例１とまったく同様にして吸着実験を行なった。結果を表１に示す。
　【００３７】
実施例３
　ｎ−オクチルアミンをセチルアミン（Σｆ＝７．２２）に変えたほかは実施例１と同様にしてセチルアミン固定化ゲルをえた。この吸着体を用いて実施例１とまったく同様にして吸着実験を行なった。結果を表１に示す。
　【００３８】
実施例４
　実施例１で用いたのと同じゲルＧＣＬ−２０００ｍ　１０ｍｌにｔ−ブチルアルコール１０ｍｌとカリウムブトキシド２．０ｇを加え、４０℃で１時間撹拌した。つぎに臭化セチル（固定化後Σｆ＝９．３１）２．０ｍｌを加え、４時間撹拌した。反応後ゲルを濾別エタノールおよび水で洗浄し、セチル基をエーテル結合で固定化したセルロースゲルをえた。この吸着体を用いて実施例１とまったく同様にして吸着実験を行なった。結果を表１に示す。
　【００３９】
実施例５
　担体をセルロース系多孔質ゲルであるＧＣ−７００ｍ（チッソ（株）製、球状タンパク質の排除限界分子量がリガンド固定化後で４０万）に、ｎ−オクチルアミンをセチルアミン（Σｆ＝７．２２）に変えたほかは実施例１と同様にしてセチルアミン固定化ゲルをえた。この吸着体を用いて実施例１とまったく同様にして吸着実験を行なった。結果を表１に示す。
　【００４０】
実施例６
　担体をセルロース系多孔質ゲルであるＧＣ−１００ｍ（チッソ（株）製、球状タンパク質の排除限界分子量がリガンド固定化後で３万）に、ｎ−オクチルアミンをセチルアミン（Σｆ＝７．２２）に変えたほかは、実施例１と同様にしてセチルアミン固定化ゲルをえた。この吸着体を用いて実施例１とまったく同様にして吸着実験を行なった。結果を表１に示す。
　【００４１】
実施例７
　実施例３でえられたセチルアミン固定化ゲル１ｍｌを、ポリプロピレン製小型カラムであるセパコールミニＰＰ（商品名、生化学工業（株）製）に充填し、ここへ０．１ＭＰＢＳ（ｐＨ７．２、カルシウム、マグネシウム不含）で１０倍に希釈した糖尿病患者の血漿を６ｍｌ流した。流速はペリスタリックポンプで約０．１ｍｌ／ｍｉｎに調整した。この流出液中の糖化変性タンパク質の濃度と総タンパク量を測定した。測定は実施例１と同様にして行なった。結果を表１に示す。
　【００４２】
比較例１
　ｎ−オクチルアミンをｎ−ヘキシルアミン（ｌｏｇＰ＝２．０６）に変えたほかは、実施例１と同様にしてヘキシルアミン固定化ゲルをえた。この吸着体を用いて実施例１とまったく同様にして吸着実験を行なった。結果を表１に示す。
　【００４３】
比較例２
　担体をセルロース系多孔質ゲルであるＧＣ−１００ｍに、ｎ−オクチルアミンをｎ−ヘキシルアミン（ｌｏｇＰ＝２．０６）に変えたほかは実施例１と同様にしてｎ−ヘキシルアミン固定化ゲルをえた。この吸着体を用いて実施例１とまったく同様にして吸着実験を行なった。結果を表１に示す
比較例３
　担体をセルロース系多孔質ゲルであるＧＣＬ−９０ｍ（チッソ（株）製、球状タンパク質の排除限界分子量がリガンド固定化後で１５０００）に、ｎ−オクチルアミンをセチルアミン（Σｆ＝７．２２）に変えたほかは実施例１と同様にしてセチルアミン固定化ゲルをえた。この吸着体を用いて実施例１とまったく同様にして吸着実験を行なった。結果を表１に示す。
　【００４４】
比較例４
　セチルアミン固定化ゲルをセルロース系多孔質硬質ゲルであるＧＣＬ−２０００ｍ（チッソ（株）製、球状タンパク質の排除限界分子量３００万）に変えたほかは、実施例７と同様にして吸着実験を行なった。結果を表１に示す。
　【００４５】
　【表１】
　【００４６】
　【発明の効果】
　本発明の吸着体は安価であり、かつ
糖尿病患者の
【図面の簡単な説明】
　【図１】
　本発明の糖化変性タンパク質吸着デバイスの一実施例の概略断面図である。
　【図２】
　３種類のゲルを用いて流速と圧力損失との関係を調べた結果を示すグラフである。
　【符号の説明】
　　　１　体液の流入口
　　　２　体液の流出口
　　　３　糖化変性タンパク質吸着体
　４、５　体液および体液に含まれる成分は通過できるが前記糖化変性タンパク質吸着体は通過できないフィルター
　　　６　カラム
　　　７　糖化変性タンパク質吸着デバイス