(57)【要約】式Ｉの抗菌化合物、ならびにその立体異性体および薬学的に許容される塩；このような化合物を含む薬学的組成物；このような化合物を投与することによって細菌感染を処置する方法；細菌感染の処置におけるこのような化合物の使用、ならびにこのような化合物を調製するためのプロセスを提供する。本発明は、新規な化合物、これらの化合物を含む薬学的処方物、ＵＤＰ−３−Ｏ−（Ｒ−３−ヒドロキシデカノイル）−Ｎ−アセチルグルコサミンデアセチラーゼ（ＬｐｘＣ）を阻害する方法、およびグラム陰性細菌感染を処置する方法を提供する。
2014501716.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化５０】
2014501716.tif 000122
の化合物、またはその立体異性体もしくは薬学的に許容される塩であって、
式中、
Ａは、置換Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルであり、少なくとも１つの置換基は、Ｃ１〜Ｃ３第一級アルコールであり、
Ｂは、存在しないか、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−または非置換フェニルであり、
Ｃは、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−または非置換フェニルであり、Ｂが−ＣＨ＝ＣＨ−である場合、Ｃは−ＣＨ＝ＣＨ−ではなく、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、水素および置換もしくは非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキルから独立に選択されるか、または
Ｒ１およびＲ２は、結合している炭素原子と一緒になって、非置換Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル基を形成するか、または
Ｒ２およびＲ３は、結合している炭素原子およびＱと一緒になって、５〜８個の環原子を有する置換もしくは非置換複素環式環を形成し、該複素環式環の１〜２個の環原子は、Ｎ、ＯおよびＳから選択され、
Ｑは、ＯまたはＮＲであり、Ｒは、水素または非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキルである、
化合物、またはその立体異性体もしくは薬学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｑが、ＮＲである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３が、水素および置換または非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキルから独立に選択される、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３が、水素および非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキルから独立に選択される、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１およびＲ２が、独立に、非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキルである、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Ａが、ヒドロキシメチルで置換されたＣ３〜Ｃ６シクロアルキルである、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｂが、−Ｃ≡Ｃ−であり、Ｃが、−Ｃ≡Ｃ−である、請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１）；
Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１Ｒ，２Ｒ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−２）；
Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１Ｓ，２Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−３）；
Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｃｉｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−４）；
Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４’−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）エチニル）ビフェニル−４−カルボキサミド（Ｉ−５）；
Ｎ−（（Ｓ）−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−３−（メチルアミノ）−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−６）；
Ｎ−（（Ｓ）−１−（ヒドロキシアミノ）−３−（２−ヒドロキシエチルアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−７）；
Ｎ−（（Ｓ）−１−（ヒドロキシアミノ）−３−（２−ヒドロキシエチルアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−８）；
Ｎ−（（Ｓ）−３−（ジメチルアミノ）−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−９）；
Ｎ−（（Ｓ）−３−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１０）；
Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１Ｓ，２Ｒ）−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルシクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１１）；
Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，３−ｃｉｓ）−３−（ヒドロキシメチル）シクロブチル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１２）；
Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，３−ｔｒａｎｓ）−３−（ヒドロキシメチル）シクロブチル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１３）；
Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，３−ｔｒａｎｓ）−３−（ヒドロキシメチル）シクロペンチル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１４）；
Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，４−ｃｉｓ）−４−（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１５）；
Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，４−ｔｒａｎｓ）−４−（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１６）；
Ｎ−（（Ｓ）−１−（１−アミノシクロブチル）−２−（ヒドロキシアミノ）−２−オキソエチル）−４−（（（ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミドトリフルオロアセテート（Ｉ−１７）；
Ｎ−（（Ｓ）−１−（１−アミノシクロブチル）−２−（ヒドロキシアミノ）−２−オキソエチル）−４−（（（ｃｉｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミドトリフルオロアセテート（Ｉ−１８）；
Ｎ−（（Ｓ）−１−（１−（ジメチルアミノ）シクロブチル）−２−（ヒドロキシアミノ）−２−オキソエチル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１９）；
Ｎ−（（Ｓ）−２−（ヒドロキシアミノ）−１−（（Ｓ）−モルホリン−３−イル）−２−オキソエチル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−２０）；
Ｎ−（（Ｓ）−２−（ヒドロキシアミノ）−１−（（Ｓ）−４−メチルモルホリン−３−イル）−２−オキソエチル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−２１）；
Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（Ｅ）−４−（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１−エン−３−イニル）ベンズアミド（Ｉ−２２）；または
Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（Ｅ）−４−（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１−エン−３−イニル）ベンズアミド（Ｉ−２３）
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１）；
Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４’−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）エチニル）ビフェニル−４−カルボキサミド（Ｉ−５）；
Ｎ−（（Ｓ）−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−３−（メチルアミノ）−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−６）；
Ｎ−（（Ｓ）−１−（ヒドロキシアミノ）−３−（２−ヒドロキシエチルアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−７）；
Ｎ−（（Ｓ）−１−（ヒドロキシアミノ）−３−（２−ヒドロキシエチルアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−８）；
Ｎ−（（Ｓ）−３−（ジメチルアミノ）−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−９）；
Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，３−ｃｉｓ）−３−（ヒドロキシメチル）シクロブチル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１２）；
Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，３−ｔｒａｎｓ）−３−（ヒドロキシメチル）シクロブチル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１３）；または
Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，３−ｔｒａｎｓ）−３−（ヒドロキシメチル）シクロペンチル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１４）
である、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１）；
Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４’−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）エチニル）ビフェニル−４−カルボキサミド（Ｉ−５）；
Ｎ−（（Ｓ）−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−３−（メチルアミノ）−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−６）；
Ｎ−（（Ｓ）−１−（ヒドロキシアミノ）−３−（２−ヒドロキシエチルアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−７）；
Ｎ−（（Ｓ）−１−（ヒドロキシアミノ）−３−（２−ヒドロキシエチルアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−８）；または
Ｎ−（（Ｓ）−３−（ジメチルアミノ）−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−９）
である、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
請求項１から１０のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩、および薬学的に許容されるキャリアまたは希釈剤を含む、薬学的組成物。
【請求項１２】
細菌感染を有する被験体を処置するための方法であって、細菌感染の処置を必要としている被験体に、治療有効量の請求項１から１０のいずれか一項に記載の化合物または請求項１１に記載の薬学的組成物を投与する工程を含む、方法。
【請求項１３】
前記細菌感染が、グラム陰性細菌感染である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
前記グラム陰性細菌感染が、
【数６１】
2014501716.tif 000123
である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記グラム陰性細菌感染が、
【数６２】
2014501716.tif 000124
である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記グラム陰性細菌感染が、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａである、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記グラム陰性細菌感染が、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉである、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
第２の抗菌剤と、
式Ｉ：
【化５１】
2014501716.tif 000125
の化合物、またはその立体異性体もしくは薬学的に許容される塩と
を含む薬学的組成物であって、
式中、
Ａは、置換Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルであり、少なくとも１つの置換基は、Ｃ１〜Ｃ３第一級アルコールであり、
Ｂは、存在しないか、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−または非置換フェニルであり、
Ｃは、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−または非置換フェニルであり、Ｂが−ＣＨ＝ＣＨ−である場合、Ｃは−ＣＨ＝ＣＨ−ではなく、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、水素および置換もしくは非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキルから独立に選択されるか、または
Ｒ１およびＲ２は、結合している炭素原子と一緒になって、非置換Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル基を形成するか、または
Ｒ２およびＲ３は、結合している炭素原子およびＱと一緒になって、５〜８個の環原子を有する置換もしくは非置換複素環式環を形成し、該複素環式環の１〜２個の環原子は、Ｎ、ＯおよびＳから選択され、
Ｑは、ＯまたはＮＲであり、Ｒは、水素または非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキルである、
薬学的組成物。
【請求項１９】
前記抗菌剤が、バンコマイシンまたはリファンピンである、請求項１８に記載の薬学的組成物。
【請求項２０】
組み合わせが、インビボ相乗作用を実証する、請求項１８に記載の薬学的組成物。
【請求項２１】
グラム陰性細菌においてデアセチラーゼ酵素を阻害する方法であって、デアセチラーゼ酵素の阻害を必要としている患者に、請求項１から１０のいずれか一項に記載の化合物または請求項１１に記載の薬学的組成物を投与する工程を含む、方法。
【請求項２２】
前記グラム陰性細菌が、
【数６３】
2014501716.tif 000126
である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
グラム陰性細菌においてＬｐｘＣを阻害する方法であって、ＬｐｘＣの阻害を必要としている患者に、請求項１から１０のいずれか一項に記載の化合物または請求項１１に記載の薬学的組成物を投与する工程を含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
Ｉ．  関連出願への相互参照
本出願は、２０１０年１１月１０日に出願された米国仮特許出願第６１／４１２，３１１号の米国特許法１１９条（ｅ）項の下での利益を主張し、上記米国仮特許出願第６１／４１２，３１１号は、その全容が参考として本明細書に援用される。
【０００２】
ＩＩ．  政府の権利についての申告
本発明は、米国国防総省（Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｄｅｆｅｎｓｅ）によって与えられたＣｏｎｔｒａｃｔ  ＨＤＴＲＡ１−０７−Ｃ−００７９のもとで政府支援によってなされた。政府は本発明において一定の権利を有する。
【背景技術】
【０００３】
ＩＩＩ．  背景
Ａ．  分野
本発明は一般に、グラム陰性細菌によってもたらされる感染の処置に関する。さらに具体的には、本明細書に記載されている本発明は、ＵＤＰ−３−Ｏ−（Ｒ−３−ヒドロキシデカノイル）−Ｎ−アセチルグルコサミンデアセチラーゼ（ＬｐｘＣ）の阻害活性によるグラム陰性感染の処置に関する。本発明は、ＬｐｘＣの小分子インヒビター、このようなインヒビターを含有する薬学的処方物、このような薬学的処方物によって患者を処置する方法、ならびにこのような薬学的処方物およびインヒビターを調製する方法を提供する。本明細書に記載されている本発明は、単独でまたは第２の抗菌剤との組み合わせにおいて、ＵＤＰ−３−Ｏ−（Ｒ−３−ヒドロキシデカノイル）−Ｎ−アセチルグルコサミンデアセチラーゼ（ＬｐｘＣ）の活性を阻害することができる化合物を投与することによる、グラム陰性感染の処置に関する。
【０００４】
Ｂ．  関連技術についての説明
過去数十年にわたり、抗微生物耐性の発生頻度、および重大な感染性疾患とのその関連は、驚くべき速度で増加してきた。抗菌耐性の問題は、複数の抗菌薬に耐性の細菌株の存在によって複雑になっている。したがって、新たな抗菌薬、特に新規な作用機序を有する抗菌薬が必要とされている。これまで利用されていないが高度に保存されている標的であるＬｐｘＣは、標的関連の自然発生の耐性に（たとえあったとしても）殆ど直面しないであろう、新たなクラスの活性殺菌性化学的実体を含む広範なスペクトルの抗菌小分子を開発するための新たな機会を提供する。ＬｐｘＣ（酵素ウリジルジホスホ−３−Ｏ−（Ｒ−ヒドロキシデカノイル）−Ｎ−アセチルグルコサミンデアセチラーゼ）は全ての対象とするグラム陰性細菌種にわたって存在し、外膜の生合成における最初の関連ステップに関与している。このように、ＬｐｘＣは生存のために必須であり、グラム陰性細菌種における抗生物質活性のための理想的な標的を提示する。
【０００５】
研究者は、リピドＡ生合成を標的とする抗菌活性を有するいくつかの化合物を同定してきた。例えば、非特許文献１；非特許文献２；特許文献１（２００１年１２月２０日に公開、１９９８年５月７日に公開された特許文献２に対応する）；特許文献３（２０００年１０月１９日に公開）；特許文献４（２００４年１１月１８日に公開）；および特許文献５（２００８年１２月１８日に公開）（全ては、抗菌抗ＬｐｘＣ活性を有する化合物を開示している）。これらのＬｐｘＣインヒビターの商業的開発は、哺乳動物におけるこれらの化合物の抗菌活性のために必要とされる濃度またはその濃度に近い濃度での毒性によって複雑化されてきた。本明細書において提示される化合物は、抗ＬｐｘＣ活性を有する他の密接に関連した化合物よりも有意に良好に許容される。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】米国特許出願公開第２００１／００５３５５５号明細書
【特許文献２】国際公開第９８／１８７５４号
【特許文献３】国際公開第００／６１１３４号
【特許文献４】米国特許出願公開第２００４／０２２９９５５号明細書
【特許文献５】国際公開第２００８／１５４６４２号
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｊａｃｋｍａｎら、Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．、２０００年、２７５巻（１５号）、１１００２〜１１００９頁
【非特許文献２】Ｗｙｃｋｏｆｆら、Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ、１９９８年、６巻（４号）、１５４〜１５９頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
この分野はこれまでにも進歩が見られてきたが、グラム陰性細菌に対する殺菌剤としての活性を有し、かつ許容される毒性／耐性プロファイルを有するＬｐｘＣインヒビターが依然として必要とされている。したがって、本発明の目的は、グラム陰性細菌感染を阻害できる無毒性抗菌薬および他の医薬品の調製において使用するための化合物およびこのような化合物の組み合わせを提供することである。本発明のさらなる目的は、抗菌剤とＬｐｘＣインヒビターとの相乗的組み合わせを提供することであり、これは、固有の抗菌特性、および他の抗菌剤に対してグラム陰性細菌の外膜の透過性を改善する能力を有する。薬物の相乗的組み合わせの使用は、従来の単一化合物による化学療法を超えた多くの利点（より低い用量の使用またはより短い処置期間による薬物の副作用の低下、入院を短縮させるような感染のより迅速な治癒、制御される病原体のスペクトルの増加、および抗生物質への耐性の発生頻度の減少を含む）を有することができる。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
ＩＶ．  概要
本発明は、新規な化合物、これらの化合物を含む薬学的処方物、ＵＤＰ−３−Ｏ−（Ｒ−３−ヒドロキシデカノイル）−Ｎ−アセチルグルコサミンデアセチラーゼ（ＬｐｘＣ）を阻害する方法、およびグラム陰性細菌感染を処置する方法を提供する。
【００１０】
一態様において、本発明は、式Ｉ：
【００１１】
【化１】
2014501716.tif 000003
【００１２】
の化合物、ならびにその立体異性体および薬学的に許容される塩（式中、Ａは、置換Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルであり、少なくとも１つの置換基は、Ｃ１〜Ｃ３第一級アルコールであり、Ｂは、存在しないか、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−または非置換フェニルであり、Ｃは、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−または非置換フェニルであり、Ｂが−ＣＨ＝ＣＨ−である場合、Ｃは−ＣＨ＝ＣＨ−ではなく、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、水素および置換または非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキルから独立に選択され、あるいはＲ１およびＲ２は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、非置換Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル基を形成し、あるいはＲ２およびＲ３は、それらが結合している炭素原子およびＱと一緒になって、５〜８個の環原子を有する置換または非置換複素環式環を形成し、複素環式環の１〜２個の環原子は、Ｎ、ＯおよびＳから選択され、Ｑは、ＯまたはＮＲであり、Ｒは、水素または非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキルである）を提供する。
【００１３】
別の態様において、本発明は、式Ｉの化合物、またはその立体異性体もしくは薬学的に許容される塩、および薬学的に許容されるキャリアまたは希釈剤を含む薬学的組成物を提供する。
【００１４】
別の態様において、本発明は、有効量の式Ｉの抗菌化合物、またはその立体異性体もしくは薬学的に許容される塩、および薬学的に許容されるキャリアまたは希釈剤を含む薬学的組成物を提供する。
【００１５】
別の態様において、本発明は、グラム陰性細菌においてデアセチラーゼ酵素を阻害し、それによって細菌増殖に影響を与える方法であって、このような阻害を必要としている患者に、式ＩのＬｐｘＣ阻害性化合物、またはその立体異性体もしくは薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法を提供する。
【００１６】
別の態様において、本発明は、グラム陰性細菌においてＬｐｘＣを阻害し、それによって細菌感染のビルレンスを調整する方法であって、このような阻害を必要としている患者に、式ＩのＬｐｘＣ阻害性化合物、またはその立体異性体もしくは薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法を提供する。
【００１７】
別の態様において、本発明は、細菌感染を有する被験体を処置するための方法であって、それを必要としている被験体に、抗菌的有効量の式Ｉの化合物、またはその立体異性体もしくは薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法を提供する。処置方法のより特定の実施形態において、細菌感染は、グラム陰性細菌感染である。１つのこのような実施形態において、細菌は、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ（例えば、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｃｅｐａｃｉａ）、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ、Ｆｒａｎｃｉｓｃｅｌｌａｃｅａｅ（例えば、Ｆｒａｎｃｉｓｃｅｌｌａ  ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ）、Ｓｅｒｒａｔｉａ、Ｐｒｏｔｅｕｓ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ、Ｃｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ、Ｐｒｏｖｉｄｅｎｃｉａ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ（例えば、Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｐｅｓｔｉｓ）、ＭｏｒｇａｎｅｌｌａまたはＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉである。１つの特定の実施形態において、細菌は、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ、Ｆｒａｎｃｉｓｃｅｌｌａｃｅａｅ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ、ＹｅｒｓｉｎｉａまたはＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉである。１つのこのような実施形態において、細菌は、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａである。別のこのような実施形態において、細菌は、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉである。別の実施形態において、細菌は、Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ  ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ、Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ  ｘｙｌｏｓｏｘｉｄａｎｓ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｓｐｅｃｉｅｓ、ＣｅｄｅｃｅａまたはＥｄｗａｒｄｓｉｅｌｌａ  ｓｐｅｃｉｅｓである。さらなる特定の実施形態において、被験体は、哺乳動物であり、特定の実施形態において、ヒトである。
【００１８】
本発明の一態様は、ＬｐｘＣのインヒビターおよび第２の抗菌剤を含む薬学的組成物を提供する。１つの実行形態において、第２の抗菌剤は、バンコマイシン、リネゾリド、アジスロマイシン、イミペネム、テイコプラニン、ダプトマイシン、クリンダマイシン、リファンピン、セフォタキシム、ゲンタマイシン、ノボビオシン、およびテラバンシンからなる群より選択される。１つのこのような実行形態において、第２の抗菌剤は、バンコマイシンまたはリファンピンである。別の実施形態において、ＬｐｘＣインヒビターは、式Ｉ：
【００１９】
【化２】
2014501716.tif 000004
【００２０】
の化合物、またはその立体異性体もしくは薬学的に許容される塩（式中、Ａは、置換Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルであり、少なくとも１つの置換基は、Ｃ１〜Ｃ３第一級アルコールであり、Ｂは、存在しないか、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−または非置換フェニルであり、Ｃは、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−または非置換フェニルであり、Ｂが−ＣＨ＝ＣＨ−である場合、Ｃは−ＣＨ＝ＣＨ−ではなく、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、水素および置換または非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキルから独立に選択され、あるいはＲ１およびＲ２は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、非置換Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル基を形成し、あるいはＲ２およびＲ３は、それらが結合している炭素原子およびＱと一緒になって、５〜８個の環原子を有する置換または非置換複素環式環を形成し、複素環式環の１〜２個の環原子は、Ｎ、ＯおよびＳから選択され、Ｑは、ＯまたはＮＲであり、Ｒは、水素または非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキルである）である。
【００２１】
本発明の別の態様は、グラム陰性細菌感染を有する患者を処置するための方法であって、相乗的量、例えば、インビボの相乗的量の抗菌剤および式ＩのＬｐｘＣインヒビターを共投与することを含む、方法を提供する。１つの実行形態において、抗菌剤は、バンコマイシン、リネゾリド、アジスロマイシン、イミペネム、テイコプラニン、ダプトマイシン、クリンダマイシン、リファンピン、セフォタキシム、ゲンタマイシン、ノボビオシン、およびテラバンシンからなる群より選択される。１つのこのような実行形態において、抗菌剤は、バンコマイシンまたはリファンピンである。
【００２２】
本発明のこのような態様および他の態様は、下記の詳細な説明を参照すると明らかである。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
Ｖ．  図面の簡単な説明
【図１】図１は、細菌株ＡＴＣＣ４３８１６における化合物Ｉ−１およびバンコマイシンのインビボ相乗作用を例示する。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
ＶＩ．  詳細な説明
本発明は、新規な化合物、グラム陰性細菌においてＬｐｘＣを阻害するための方法、および細菌感染を処置するための新規な方法を提供する。本明細書において提供する化合物は、本発明の方法において有用である薬学的処方物および医薬品に処方されることができる。本発明はまた、医薬品および薬学的処方物の調製における化合物の使用、ＬｐｘＣの阻害における化合物の使用、ならびに被験体における細菌感染の処置における化合物の使用を提供する。本発明は、単独でまたは第２の抗菌化合物の投与との組み合わせにおいて、ＵＤＰ−３−Ｏ−（Ｒ−３−ヒドロキシデカノイル）−Ｎ−アセチルグルコサミンデアセチラーゼ（ＬｐｘＣ）の活性を阻害することができる化合物を投与することによる、グラム陰性感染を処置するための組成物および方法をさらに提供する。
【００２５】
Ａ．定義
下記の略語および定義を、本出願にわたって使用する。
【００２６】
「ＬｐｘＣ」は、ＵＤＰ−３−Ｏ−（Ｒ−３−ヒドロキシデカノイル）−Ｎ−アセチルグルコサミンデアセチラーゼを示す略語である。
【００２７】
本明細書において使用する場合、別途示さない限り、下記の定義を適用する。
【００２８】
「アルキル」は、１〜１０個の炭素原子、好ましくは１〜６個の炭素原子を有する一価の飽和脂肪族ヒドロカルビル基を意味する。この用語には、例として、直鎖状および分岐状のヒドロカルビル基、例えば、メチル（ＣＨ３−）、エチル（ＣＨ３ＣＨ２−）、ｎ−プロピル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２−）、イソプロピル（（ＣＨ３）２ＣＨ−）、ｎ−ブチル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、イソブチル（（ＣＨ３）２ＣＨＣＨ２−）、ｓｅｃ−ブチル（（ＣＨ３）（ＣＨ３ＣＨ２）ＣＨ−）、ｔ−ブチル（（ＣＨ３）３Ｃ−）、ｎ−ペンチル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、およびネオペンチル（（ＣＨ３）３ＣＣＨ２−）が含まれる。
【００２９】
「アルコキシ」は、基−Ｏ−アルキルを意味し、アルキルは、本明細書に定義されている通りである。アルコキシには、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｔ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｎ−ペントキシなどが含まれる。
【００３０】
「アミノ」は、基−ＮＨ２を意味する。
【００３１】
「第一級アルコール」は、基−アルキル−ＯＨを意味し、ヒドロキシルラジカルは、第一級炭素に連結している。例には、−ＣＨ２ＯＨ（ヒドロキシメチル）、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ヒドロキシメチル）および−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＯＨ（１−ヒドロキシプロパン−２−イル）が含まれる。
【００３２】
「アルケニル」は、２〜６個の炭素原子、好ましくは２〜４個の炭素原子を有し、かつビニル（＞Ｃ＝Ｃ＜）不飽和の少なくとも１つの部位、好ましくは１〜２つの部位を有する直鎖または分岐状のヒドロカルビル基を意味する。このような基は、ビニル、アリル、およびブタ−３−エン−１−イルによって例示される。この用語に含まれるのは、ｃｉｓおよびｔｒａｎｓ異性体またはこれらの異性体の混合物である。
【００３３】
「アルキニル」は、２〜６個の炭素原子、好ましくは２〜３個の炭素原子を有し、かつ、アセチレン−Ｃ≡Ｃ−不飽和の少なくとも１つの部位、好ましくは１〜２つの部位を有する直鎖状または分岐状の一価のヒドロカルビル基を意味する。このようなアルキニル基の例には、アセチレニル（−Ｃ≡ＣＨ）、およびプロパルギル（−ＣＨ２Ｃ≡ＣＨ）が含まれる。
【００３４】
「カルボキシル」または「カルボキシ」は、−ＣＯＯＨまたはその塩を意味する。
【００３５】
「シアノ」または「ニトリル」は、基−ＣＮを意味する。
【００３６】
「シクロアルキル」は、単一を有する３〜１３個の炭素原子の環状アルキル基を意味する。シクロアルキル基の例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロオクチルなどが含まれる。
【００３７】
「グアニジノ」は、基−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２を意味する。
【００３８】
「ハロ」または「ハロゲン」は、フルオロ、クロロ、ブロモ、およびヨードを意味し、典型的にはフルオロまたはクロロである。
【００３９】
「ヒドロキシ」または「ヒドロキシル」は、基−ＯＨを意味する。
【００４０】
「複素環」、「複素環式」および「ヘテロシクリル」は、単環を有し、かつ１〜４個のヘテロ原子を含めた３〜１５個の環原子を有する飽和または不飽和基を意味する。これらの環原子は、窒素、硫黄、または酸素からなる群より選択される。１つの実行形態において、複素環式基の窒素および／または硫黄原子（複数可）は、任意選択で酸化され、Ｎ−オキシド、−Ｓ（Ｏ）−、または−ＳＯ２−部分を提供する。
【００４１】
「ニトロ」は、基−ＮＯ２を意味する。
【００４２】
「ニトロソ」は、基−ＮＯを意味する。
【００４３】
「オキソ」は、原子（＝Ｏ）を意味する。
【００４４】
「置換された」は、アルコキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アミノカルボニル、アミノチオカルボニル、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アミジノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、（カルボキシルエステル）アミノ、（カルボキシルエステル）オキシ、シアノ、グアニジノ、ハロ、ヒドロキシ、ニトロ、ＳＯ３Ｈ、スルホニル、スルホニルオキシ、チオアシル、チオール、およびアルキルチオからなる群より選択される置換基で置き換えられている１つまたは複数の水素を有する基を意味し、前記置換基は、本明細書に定義されている通りである。特定の置換環式基において、「置換された」はまた、単一の二重結合された酸素原子（オキソ基）または単一の二重結合された硫黄原子（チオキソ）によって置き換えられている２つの水素を有する基を意味する。いくつかの実行形態において、置換された基は、上記の置換基の１〜３つを有する。他の実行形態において、置換された基は、上記の置換基の１〜２つを有する。
【００４５】
「スルホニル」は、基−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−置換アルキル、−ＳＯ２−アルケニル、−ＳＯ２−置換アルケニルを意味し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、および置換アルキニルは、本明細書に定義されている通りである。スルホニルは、メチル−ＳＯ２−などの基を含む。
【００４６】
「スルホニルオキシ」は、基−ＯＳＯ２−アルキル、−ＯＳＯ２−置換アルキル、−ＯＳＯ２−アルケニル、−ＯＳＯ２−置換アルケニル、−ＯＳＯ２−アルキニル、−ＯＳＯ２−置換アルキニルを意味し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、および置換アルキニルは、本明細書に定義されている通りである。
【００４７】
「チオアシル」は、基Ｈ−Ｃ（Ｓ）−、アルキル−Ｃ（Ｓ）−、置換アルキル−Ｃ（Ｓ）−、アルケニル−Ｃ（Ｓ）−、置換アルケニル−Ｃ（Ｓ）−、アルキニル−Ｃ（Ｓ）−、および置換アルキニル−Ｃ（Ｓ）−を意味し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、および置換アルキニルは、本明細書に定義されている通りである。
【００４８】
「チオール」は、基−ＳＨを意味する。
【００４９】
「チオキソ」は、原子（＝Ｓ）を意味する。
【００５０】
「アルキルチオ」は、基−Ｓ−アルキルを意味し、アルキルは、本明細書に定義されている通りである。他の実行形態において、硫黄は、−Ｓ（Ｏ）−に酸化し得る。スルホキシドは、１つまたは複数の立体異性体として存在し得る。
【００５１】
別途示さない限り、本明細書において明示的に定義されていない置換基の命名は、官能基の終末部、続いて結合点の方向に向かって隣接する官能基を命名することによって起こる。例えば、置換基である「アリールアルキルオキシカルボニル」は、基（アリール）−（アルキル）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−を意味する。
【００５２】
一般に、特定の元素、例えば、水素またはＨへの言及は、その元素の全ての同位体を含むことを意味する。例えば、置換基が水素またはＨを含むと定義される場合、これはまた、重水素およびトリチウムを含む。
【００５３】
本発明はまた、同位体標識された本発明の化合物を含み、これは、１個または複数の原子が、自然において通常見出される原子質量または質量数とは異なる原子質量または質量数を有する原子によって置き換えられているという事実以外は、本明細書において開示されているものと構造的に同一である。本発明の化合物中に組み込むことができる同位体の例には、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素および塩素の同位体、例えば、それぞれ、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｏ、１７Ｏ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆおよび３６Ｃｌが含まれる。上記の同位体および／または他の原子の他の同位体を含有する、本発明の化合物、そのプロドラッグ、ならびに前記化合物および前記プロドラッグの薬学的に許容される塩は本発明の範囲内である。特定の同位体標識された本発明の化合物、例えば、その中に放射性同位体、例えば、３Ｈおよび１４Ｃが組み込まれているものは、薬物および／または基質組織分布アッセイにおいて有用である。トリチウム標識化、すなわち、３Ｈ同位体、および炭素−１４、すなわち、１４Ｃ同位体は、これらの調製の容易さおよび検出性のために特に好ましい。さらに、より重い同位体、例えば、重水素、すなわち、２Ｈによる置換は、より大きな代謝安定性、例えば、インビボでの半減期の増加、または投与必要量の低下からもたらされる、特定の治療上の利点を与える場合があり、したがって、ある状況において好ましい場合がある。同位体標識された本発明の化合物およびそのプロドラッグは一般に、公知または参照した手順を行うことによって、および同位体標識されていない試薬を容易に利用可能な同位体標識された試薬で置換することによって調製することができる。
【００５４】
「立体異性体」（複数可）は、同じ原子連結を有するが、空間において異なる原子配置を有する化合物を意味する。立体異性体には、ｃｉｓ−ｔｒａｎｓ異性体、ＥおよびＺ異性体、エナンチオマー、ならびにジアステレオマーが含まれる。
【００５５】
「互変異性体」は、プロトンの位置が異なる分子の代替形態、例えば、エノール−ケトおよびイミン−エナミン互変異性体、または−Ｎ＝Ｃ（Ｈ）−ＮＨ−環原子配置を含有するヘテロアリール基の互変異性形態、例えば、ピラゾール、イミダゾール、ベンゾイミダゾール、トリアゾール、およびテトラゾールを意味する。他の互変異性の環原子配置が可能であることを当業者は認識するであろう。
【００５６】
「患者」は、ヒトおよびヒトではない動物、特に、哺乳動物を意味する。
【００５７】
「薬学的に許容される塩」は、化合物の薬学的に許容される塩を意味し、この塩は、当技術分野で周知の種々の有機および無機の対イオンに由来し、ほんの一例として、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、テトラアルキルアンモニウムなど；および分子が塩基性官能基を含有するとき、有機酸または無機酸の塩、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、酒石酸塩、メシル酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、シュウ酸塩、リン酸塩、硫酸塩などが含まれる。
【００５８】
「薬学的有効量」および「治療有効量」は、特定された障害もしくは疾患、またはその症状の１つもしくは複数を処置し、かつ／あるいは疾患または障害の発生を予防するのに十分な化合物の量を意味する。
【００５９】
「相乗作用」または「相乗的」という用語は、本明細書において使用する場合、組み合わせにおいて使用したときの化合物の組み合わせ効果が、個々に使用したときの化合物の相加効果より大きいことを意味する。「相乗性」は、≦０．５の部分阻害濃度指数（ｆｒａｃｔｉｏｎａｌ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ  ｉｎｄｅｘ（ＦＩＣＩ））として定量的に定義することができ、ＦＩＣＩは、２種の化合物の組み合わせにおける個々の構成要素の部分阻害濃度（ＦＩＣ）の合計として定義され、ＦＩＣは、組み合わせにおける化合物の最小阻害濃度（ＭＩＣ）を化合物単独のＭＩＣで割った比として定義される。
【００６０】
【数１】
2014501716.tif 000005
【００６１】
代わりに、「相乗性」、より特定すると「インビボ相乗性」は、ＬｐｘＣインヒビターまたは第２の抗菌剤単独と比較して、組み合わせにおいて使用される薬剤の静的用量の少なくとも２分の１の減少として定量的に定義することができる。特定の場合において、１つの薬剤単独では、決して静的用量に達しない場合がある。このような場合において、単独では静的状態を達成することができない２種の化合物の合わせた投与によって細菌増殖を停止させることができる場合（感染後０時間で測定したＣＦＵ負荷と同一の２４時間でのＣＦＵ負荷）、組み合わせは相乗的である。
【００６２】
「共投与」は、単一の処方物の形態（例えば、本発明の化合物および第２の抗菌剤と、薬学的に許容される賦形剤とを合わせ、任意選択で、これらのそれぞれの放出速度および放出期間を独立に制御するように設計された異なる賦形剤混合物中に２つの活性成分を隔離する）にあってよく、または活性剤を含有する別々の処方物の独立の投与によってもよい。「共投与」は、本発明の化合物および第２の抗菌剤の両方が、少なくとも部分的に重複する時間の間に治療有効濃度で体内に存在する限り、同時投与（本発明の化合物および第２の抗菌剤の共投与）および時間変化投与（第２の抗菌剤の投与とは異なる時間における本発明の化合物の投与）をさらに含む。
【００６３】
「抗菌剤」という用語は、殺菌活性または静菌活性を有する薬剤を意味する。「増殖を阻害する」という用語は、特定の細菌の集団の数における増加速度を低下させることを示す。このように、この用語は、細菌集団は増加するが、増加速度が減少している状況、および集団の増殖が停止している状況、および集団中の細菌の数が減少しているか、または集団がさらに除去される状況を含む。酵素活性アッセイがインヒビターをスクリーニングするために使用される場合、酵素阻害と増殖阻害とを相関させるために、取込み／流出、溶解度、半減期などにおいて化合物に修飾を行うことができる。抗菌剤の活性は細菌に対するものと必ずしも限定されず、さらに寄生虫、ウイルス、および真菌に対する活性を包含し得る。
【００６４】
文脈が別途必要としない限り、下記の明細書および特許請求の範囲にわたって、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という単語およびそのバリエーション、例えば、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「含むこと」は、「これらに限定されないが、以下を含めた」のように、オープンで包括的な意味で解釈されるものとする。
【００６５】
この明細書にわたって「１つの実施形態」または「一実施形態」への言及は、実施形態と関連して記載する特定の特色、構造または特徴が、本発明の少なくとも１つの実施形態において含まれることを意味する。したがって、この明細書にわたって、様々な場所における「１つの実施形態において」または「一実施形態において」という語句の出現は、必ずしも全てが同じ実施形態を意味しない。さらに、特定の特色、構造、または特徴は、１つまたは複数の実施形態において任意の適切な様式で組み合わされることがある。
【００６６】
Ｂ．化合物、組成物およびその使用
一態様において、本発明は、式Ｉ：
【００６７】
【化３】
2014501716.tif 000006
【００６８】
の化合物、ならびにその立体異性体および薬学的に許容される塩（式中、Ａは、置換Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルであり、少なくとも１つの置換基は、Ｃ１〜Ｃ３第一級アルコールであり、Ｂは、存在しないか、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−または非置換フェニルであり、Ｃは、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−または非置換フェニルであり、Ｂが−ＣＨ＝ＣＨ−である場合、Ｃは−ＣＨ＝ＣＨ−ではなく、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、水素および置換または非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキルから独立に選択され、あるいはＲ１およびＲ２は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、非置換Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル基を形成し、あるいはＲ２およびＲ３は、それらが結合している炭素原子およびＱと一緒になって、５〜８個の環原子を有する置換または非置換複素環式環を形成し、複素環式環の１〜２個の環原子は、Ｎ、ＯおよびＳから選択され、Ｑは、ＯまたはＮＲであり、Ｒは、水素または非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキルである）を提供する。
【００６９】
特定の実施形態において、Ｑは、ＮＲであり、いくつかのこのような実施形態において、Ｑは、ＮＨまたはＮＣＨ３である。特定の実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、水素および置換または非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキルから独立に選択され、いくつかのこのような実施形態において、水素および非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ１およびＲ２は、独立に、非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキルである。特定の実施形態において、Ａは、ヒドロキシメチルで置換されているＣ３〜Ｃ６シクロアルキルである。他の実施形態において、ＢおよびＣの両方は、−Ｃ≡Ｃ−である。
【００７０】
本発明の一態様は、式Ｉ−Ａ：
【００７１】
【化４】
2014501716.tif 000007
【００７２】
の化合物、ならびにその立体異性体および薬学的に許容される塩（式中、Ａは、置換Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルであり、少なくとも１つの置換基は、Ｃ１〜Ｃ３第一級アルコールであり、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、水素および置換または非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキルから独立に選択され、あるいはＲ１およびＲ２は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル基を形成し、あるいはＲ２およびＲ３は、それらが結合している炭素原子および窒素と一緒になって、５〜８個の環原子を有する置換または非置換複素環式環を形成し、複素環式環の１〜２個の環原子は、Ｎ、ＯおよびＳから選択され、Ｒは、水素または非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキルである）を提供する。特定の実施形態において、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、水素および置換または非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキルから独立に選択され、いくつかのこのような実施形態において、水素および非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキルから選択される。一実施形態において、Ａは、Ｃ１〜Ｃ３第一級アルコールで一置換されたＣ３〜Ｃ６シクロアルキルである。
【００７３】
本発明の化合物は、表Ｉに一覧表示されているものを含む。表１において例示されている特定の化合物は、２つのジアステレオマーの混合物を表す。このような場合、記号「＊」は、環状部分に結合している２つの部分が互いにｔｒａｎｓであることを示す。記号「＃」は、環状部分に結合している２つの部分が互いにｃｉｓであることを示す。
【００７４】
【表１−１】
2014501716.tif 000008
【００７５】
【表１−２】
2014501716.tif 000009
【００７６】
【表１−３】
2014501716.tif 000010
【００７７】
【表１−４】
2014501716.tif 000011
【００７８】
【表１−５】
2014501716.tif 000012
【００７９】
【表１−６】
2014501716.tif 000013
【００８０】
本発明の化合物は、本明細書に記載の方法、または当技術分野で周知である他の方法を使用して容易に合成することができる。例えば、ヒドロキサム酸または多種多様の置換基を有する同様の骨格の合成は、
【００８１】
【数２】
2014501716.tif 000014
【００８２】
【数３】
2014501716.tif 000015
【００８３】
（これらは、参照により本明細書中に組み込まれている）において包括的に概説されている。
【００８４】
別の態様において、本発明は、式Ｉの化合物またはその立体異性体もしくは薬学的に許容される塩、および薬学的に許容されるキャリアまたは希釈剤を含む薬学的組成物を提供する。
【００８５】
別の態様において、本発明は、グラム陰性細菌においてデアセチラーゼ酵素を阻害し、それによって細菌増殖に影響を与える方法であって、このような阻害を必要としている患者に、式Ｉの化合物またはその立体異性体もしくは薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法を提供する。
【００８６】
別の態様において、本発明は、グラム陰性細菌においてＬｐｘＣを阻害し、それによって細菌感染のビルレンスを調整する方法であって、このような阻害を必要としている患者に、式Ｉの化合物またはその立体異性体もしくは薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法を提供する。本発明の化合物を使用したＬｐｘＣを阻害する方法の特定の実施形態において、ＬｐｘＣに関して、化合物のＩＣ５０値は、１０μＭ以下である。他の実施形態において、ＩＣ５０値は、１μＭ以下であり、０．１μＭ以下であり、０．０５０μＭ以下であり、０．０３０μＭ以下であり、０．０２５μＭ以下であり、または０．０１０μＭ以下である。
【００８７】
別の態様において、本発明は、グラム陰性細菌感染を有する被験体を処置するための方法であって、それを必要としている被験体に、抗菌的有効量の式Ｉの化合物またはその立体異性体もしくは薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法を提供する。１つのこのような実施形態において、細菌は、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ（例えば、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｃｅｐａｃｉａ）、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ、Ｆｒａｎｃｉｓｃｅｌｌａｃｅａｅ（例えば、Ｆｒａｎｃｉｓｃｅｌｌａ  ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ）、Ｓｅｒｒａｔｉａ、Ｐｒｏｔｅｕｓ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ、Ｃｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ、Ｐｒｏｖｉｄｅｎｃｉａ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ（例えば、Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｐｅｓｔｉｓ）、ＭｏｒｇａｎｅｌｌａまたはＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉである。１つの特定の実施形態において、細菌は、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ、Ｆｒａｎｃｉｓｃｅｌｌａｃｅａｅ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ、ＹｅｒｓｉｎｉａまたはＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉである。１つのこのような実施形態において、細菌は、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａである。別のこのような実施形態において、細菌は、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉである。別の実施形態において、細菌は、Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ  ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ、Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ  ｘｙｌｏｓｏｘｉｄａｎｓ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｓｐｅｃｉｅｓ、ＣｅｄｅｃｅａまたはＥｄｗａｒｄｓｉｅｌｌａ  ｓｐｅｃｉｅｓである。
【００８８】
特定の実施形態において、被験体は、哺乳動物でよく、いくつかの実施形態において、ヒトでよい。
【００８９】
本発明による処置の影響を受けやすい細菌感染は、細菌種、ならびに１つまたは複数のさらなる感染因子、例えば、細菌、ウイルス、寄生虫および真菌によってもたらされる一次感染および共感染を含む。
【００９０】
本発明の化合物は、細菌が産生する内毒素によって、特に、グラム陰性細菌、およびリポ多糖（ＬＰＳ）または内毒素の生合成においてＬｐｘＣを使用する細菌によってもたらされる状態を処置するために使用することができる。
【００９１】
本発明の化合物はまた、敗血症、敗血症性ショック、全身性炎症、局所性炎症、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）および慢性気管支炎の急性増悪（ＡＥＣＢ）などの細菌が産生するリピドＡおよびＬＰＳまたは内毒素によってもたらされるか、または増悪する状態の処置において有用である。これらの状態について、処置は、本発明の化合物、または任意選択で第２の薬剤（第２の薬剤は、第２の抗菌剤もしくは非抗菌剤である）との本発明の化合物の組み合わせを投与することを含む。
【００９２】
敗血症、敗血症性ショック、全身性炎症、局所性炎症、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）および慢性気管支炎の急性増悪（ＡＥＣＢ）について、代表的な非抗菌剤は、内毒素受容体結合抗体、内毒素結合抗体、抗ＣＤ１４結合タンパク質抗体、抗リポ多糖結合タンパク質抗体およびチロシンキナーゼインヒビターを含めた抗内毒素を含む。
【００９３】
重大または慢性の気道感染の処置において、本発明の化合物はまた、吸入によって投与される非抗菌剤と共に使用し得る。この処置において使用される代表的な非抗菌剤には、抗炎症性ステロイド、非ステロイド性抗炎症剤、気管支拡張剤、粘液溶解薬、抗喘息治療剤および肺液界面活性剤が含まれる。特に、非抗菌剤は、アルブテロール、サルブテロール、ブデソニド、ベクロメタゾン、デキサメタゾン、ネドクロミル、ベクロメタゾン、フルチカゾン、フルニソリド、トリアムシノロン、イブプロフィン、ロフェコキシブ、ナプロキセン、セレコキシブ、ネドクロミル、イプラトロピウム、メタプロテレノール、ピルブテロール、サルメテロール、ホルモテロール、インダカテロール、気管支拡張剤、粘液溶解薬、カルファクタント、ベラクタント、ポラクタントアルファ、サーファキシンまたはプルモザイム（またドルナーゼアルファ（ｄｏｍａｓｅ  ａｌｆａ）と称される）でよい。
【００９４】
本発明の化合物は、重大または慢性の気道感染の処置のために、単独で、または第２の抗菌剤と組み合わせて使用することができ、該気道感染には、重大な肺感染および院内感染、例えば、
【００９５】
【数４】
2014501716.tif 000016
【００９６】
によってもたらされるもの、共同体肺感染、例えば、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  Ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ種、Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、Ｂｒａｎｈａｍｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ種、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ種、およびＰｒｏｔｅｕｓ種によってもたらされるもの、他の細菌種、例えば、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ種、Ｓｈｉｇｅｌｌａ種、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ種、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ、ＶｉｂｒｉｏｎａｃｅａｅおよびＢｏｒｄｅｔｅｌｌａ種によってもたらされる感染、ならびにＢｒｕｃｅｌｌａ種、Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ  ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓおよび／またはＹｅｒｓｉｎｉａ  Ｐｅｓｔｉｓによってもたらされる感染が含まれる。
【００９７】
グラム陰性細菌感染に感染した被験体を処置するために使用するとき、本発明の化合物は、グラム陰性細菌を第２の抗菌剤の作用に対して感作させるために使用することができる。
【００９８】
本発明は、式Ｉの化合物、またはその立体異性体もしくは薬学的に許容される塩を含む化合物の新規な組み合わせ、およびグラム陰性細菌に感染した被験体を処置する方法を提供する。本明細書において提供する新規な組み合わせは、本発明の方法において有用な薬学的処方物および医薬品に処方することができる。本発明はまた、医薬品および薬学的処方物の調製において新規な組み合わせを使用すること、患者において細菌感染を処置することにおいて該組み合わせを使用することを提供する。
【００９９】
チェッカーボードアッセイと称される相乗作用を評価するための１つの古典的な方法を使用して、抗菌剤の有効性を予測するが、これはＳｃｒｉｂｎｅｒら、（１９８２年、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ、２１巻（６号）：９３９〜９４３頁）およびＧｏｏｄｍａｎ  ＆  Ｇｉｌｍａｎ（１９８０年、Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、第６版、１０９７〜１０９８頁）に記載されている。チェッカーボードアッセイは、ブロス中の個々の、および組み合わせた抗生物質の連続２倍希釈を含み、次いでこれに、試験する微生物を接種する。インキュベーション後に、個々の、および組み合わせで使用された各薬物の最小阻害濃度（ＭＩＣ）を決定する（ＭＩＣは、該培地中で増殖を阻害する薬物の最小濃度であることに注意されたい）。相乗性は、組み合わせて使用するときの、各薬物のＭＩＣの減少によって示される。拮抗作用は、組み合わせて使用するときの、いずれかまたは両方の薬物のＭＩＣの増加によって示される。相乗作用を評価する代替方法は、参照により本明細書中にその全体が組み込まれているＧｒｅｃｏら、Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ、４７巻（２号）：３３１〜２８５頁（１９９５年）に概説されている。
【０１００】
しかし、チェッカーボードアッセイにおける陽性結果（すなわち、ＭＩＣ未満で相乗作用を示す）は、必ずしもインビボでの相乗的挙動をもたらさない。米国特許出願公開第２００４−２２９９５５Ａ１号は、Ｅ．  ｃｏｌｉ株ＡＴＣＣ２５９２２に対する、エリスロマイシンとＬｐｘＣインヒビターであるＮ−［（１Ｓ）−１−（アミノメチル）−２−（ヒドロキシアミノ）−２オキソエチル］−４−（４−｛４−［（｛［（３メチルフェニル）メチル］アミノ｝アセチル）アミノ］フェニル｝ブタ−１，３ジイニル）ベンズアミドとの間の強力な相乗作用を報告している。国際ＰＣＴ特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／３３９１０号は、エリスロマイシンおよび種々のＬｐｘＣインヒビターの組み合わせが、相乗作用をインビボで示さないことを実証した。
【０１０１】
グラム陰性細菌における必須の遺伝子であるＬｐｘＣは、酵素であるウリジルジホスホ−３−Ｏ−（Ｒ−ヒドロキシデカノイル）−Ｎ−アセチルグルコサミンデアセチラーゼをコードする。この酵素は、リピドＡ（全てのグラム陰性細菌の必須構成要素であるリポ多糖の脂質部分）の生合成における早期関連ステップを触媒する。ＭＩＣ超で、ＬｐｘＣインヒビターは外膜を破壊し、したがって他の抗菌化合物が外膜を通ることを可能にすると予想される。これらの薬剤が外膜を通ると、これらはバンコマイシンと同様に周辺質の標的に影響を与え得、またはこれらは次いで内膜を通して拡散して、細胞内標的、例えば、リボソーム（エリスロマイシン）もしくはＲＮＡポリメラーゼ（リファンピン）と相互作用し得る。ＬｐｘＣインヒビターの非存在下では、バンコマイシンなどの薬剤がそれらの標的にアクセスする能力は、外膜によって大幅に低下する。したがって、理論に束縛されるものではないが、観察された相乗作用の根底にあり得る生化学的機序は、ＬｐｘＣインヒビターと合わせたときの、バンコマイシンなどの薬剤への外膜の透過性の増強であると考えられる。
【０１０２】
一実施形態において、式Ｉの化合物、またはその立体異性体もしくは薬学的に許容される塩と組み合わせて使用される第２の抗菌剤は、バンコマイシン、リネゾリド、アジスロマイシン、イミペネム、テイコプラニン、ダプトマイシン、クリンダマイシン、リファンピン、セフォタキシム、ゲンタマイシン、ノボビオシンまたはテラバンシンである。１つのこのような実施形態において、第２の抗菌剤は、バンコマイシン、テイコプラニン、リファンピン、アジスロマイシン、テラバンシンまたはノボビオシンである。１つのこのような実施形態において、第２の抗菌剤は、バンコマイシンまたはリファンピンである。本発明のいくつかの実施形態において、第２の抗菌剤および／あるいは式Ｉの化合物、またはその立体異性体もしくは薬学的に許容される塩は、治療量未満（ｓｕｂ−ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ）の用量で投与され、治療量未満の用量は、単独で投与された場合、細菌感染を処置するのに不十分な用量である。
【０１０３】
本発明の薬学的組成物は、１種もしくは複数の薬学的に許容されるキャリアまたは希釈剤と一緒に処方物される、式Ｉの化合物、またはその立体異性体もしくは薬学的に許容される塩を含む。本明細書において使用する場合、「薬学的に許容されるキャリア」という用語は、任意のタイプの無毒性で不活性な固体、半固体または液体の充填剤、希釈剤、カプセル化材料または処方助剤を意味する。薬学的に許容されるキャリアとしての役割を果たすことができる材料のいくつかの例は、糖、例えば、ラクトース、グルコースおよびスクロース；デンプン、例えば、トウモロコシデンプンおよびポテトデンプン；セルロースおよびその誘導体、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロース；トラガカント粉末；麦芽；ゼラチン；タルク；賦形剤、例えば、カカオバターおよび坐剤ワックス；油、例えば、落花生油、綿実油；サフラワー油；ゴマ油；オリーブ油；トウモロコシ油およびダイズ油；グリコール、例えば、プロピレングリコール；エステル、例えば、オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチル；寒天；緩衝剤、例えば、水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウム；アルギン酸；発熱物質なしの水；等張食塩水；リンゲル液；エチルアルコール、およびリン酸緩衝液であり、他の無毒性で適合性の滑沢剤、例えば、ラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウム、ならびに着色剤、放出剤、コーティング剤、甘味剤、矯味矯臭剤および香料、保存剤および抗酸化剤がまた、処方者の判断によって組成物中に存在することができる。本発明の薬学的組成物は、ヒトおよび他の動物に、経口的、直腸、非経口的（静脈内、筋肉内もしくは皮下注射によって）、大槽内、膣内、腹腔内、局所的（粉末、軟膏剤、もしくはドロップ剤によって）、頬側、または経口もしくは鼻用スプレー、または吸入のための液体エアロゾルもしくは乾燥粉末処方物として投与することができる。
【０１０４】
経口投与のための液体投薬形態には、薬学的に許容されるエマルジョン、マイクロエマルジョン、溶液、懸濁物、シロップおよびエリキシルが含まれる。活性化合物に加えて、液体投薬形態は、例えば、水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油（特に、綿実油、ラッカセイ油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油、およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにこれらの混合物などの当技術分野で一般に使用される不活性な希釈剤を含有し得る。不活性な希釈剤以外に、経口組成物はまた、アジュバント、例えば、湿潤剤、乳化剤および懸濁化剤、甘味剤、矯味矯臭剤、および香料を含むことができる。
【０１０５】
注射用調製物、例えば、無菌注射用の水性または油性の懸濁物は、適切な分散化剤または湿潤剤および懸濁化剤を使用して、公知の技術によって処方し得る。無菌の注射用調製物はまた、無毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の無菌の注射用溶液、懸濁物またはエマルジョン、例えば、１，３−ブタンジオール中の溶液でよい。用いてもよい許容されるビヒクルおよび溶媒には、水、リンゲル液、１％リドカイン、Ｕ．Ｓ．Ｐ．および等張塩化ナトリウム溶液がある。さらに、無菌の固定油は、溶媒または懸濁媒として従来通り用いられる。この目的のために、合成のモノまたはジグリセリドを含めた任意の無刺激性の固定油を用いることができる。さらに、オレイン酸などの脂肪酸が、注射剤の調製において使用される。
【０１０６】
注射用処方物は、例えば、細菌保持フィルターを通す濾過によって、あるいは使用前に滅菌水または他の無菌の注射用媒体に溶解または分散させることができる無菌の固体組成物の形態の滅菌剤を組み込むことによって、無菌化することができる。
【０１０７】
薬物の作用を長くするために、皮下または筋肉内注射からの薬物の吸収を遅延させることが望ましいことが多い。これは、乏しい水溶解度を有する結晶性またはアモルファス性の材料の液体懸濁物の使用によって達成し得る。薬物の吸収速度は、その溶解速度によって決まることが多く、溶解速度は結晶サイズおよび結晶形態によって決まり得る。あるいは、非経口的に投与される薬物形態の吸収の遅延は、薬物を油ビヒクルに溶解または懸濁させることによって達成し得る。注射用デポー形態は、生分解性ポリマー、例えば、ポリラクチド−ポリグリコリドにおいて薬物のマイクロカプセルマトリックスを形成させることによって作製される。薬物とポリマーとの比、および用いる特定のポリマーの性質によって、薬物放出の速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例には、ポリ（オルトエステル）およびポリ（無水物）が含まれる。注射用デポー処方物はまた、薬物を身体組織と適合性のリポソームまたはマイクロエマルジョン中に捕捉することによって調製し得る。
【０１０８】
直腸または膣投与のための組成物は好ましくは、本発明の化合物と、適切な非刺激性の賦形剤またはキャリア、例えば、カカオバター、ポリエチレングリコールまたは坐剤ワックス（周囲温度で固体であるが、体温で液体であり、したがって直腸または膣腔中で融解し、活性化合物を放出する）とを混合することによって調製することができる坐剤である。
【０１０９】
経口投与のための固体投薬形態には、カプセル剤、錠剤、丸剤、粉末、および顆粒剤が含まれる。このような固体投薬形態において、活性化合物は、少なくとも１種の不活性な薬学的に許容される賦形剤またはキャリア、例えば、クエン酸ナトリウムまたは第二リン酸カルシウム、ならびに／あるいはａ）充填剤または増量剤、例えば、デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、およびケイ酸、ｂ）結合剤、例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギネート、ゼラチン、ポリビニルピロリジノン、スクロース、およびアカシア、ｃ）保湿剤、例えば、グリセロール、ｄ）崩壊剤、例えば、寒天、炭酸カルシウム、ポテトデンプンまたはタピオカデンプン、アルギン酸、特定のシリケート、および炭酸ナトリウム、ｅ）溶解遅延剤（ｓｏｌｕｔｉｏｎ  ｒｅｔａｒｄｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）、例えば、パラフィン、ｆ）吸収促進剤、例えば、第四級アンモニウム化合物、ｇ）湿潤剤、例えば、アセチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロール、ｈ）吸収剤、例えば、カオリンおよびベントナイトクレイ、ならびにｉ）滑沢剤、例えば、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、ならびにこれらの混合物と混合される。カプセル剤、錠剤および丸剤の場合、投薬形態はまた緩衝剤を含み得る。
【０１１０】
同様のタイプの固体組成物はまた、ラクトースまたは乳糖などの賦形剤、および高分子量ポリエチレングリコールなどを使用して、軟質および硬質の充填ゼラチンカプセル剤中の充填剤として用いてもよい。
【０１１１】
錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸剤、および顆粒剤の固体投薬形態は、コーティングおよびシェル、例えば、腸溶性コーティングおよび、薬学的処方物の技術分野において周知の他のコーティングと共に調製することができる。これらの固体投薬形態は、乳白剤を任意選択で含有してもよく、これらの固体投薬形態はまた、任意選択で遅延した様式で、腸管の特定の部分において活性成分（複数可）のみを、または活性成分（複数可）を優先的に放出するような組成物でよい。使用することができる埋め込み組成物の例には、ポリマー物質およびワックスが含まれる。
【０１１２】
同様のタイプの固体組成物はまた、ラクトースまたは乳糖などの賦形剤、および高分子量ポリエチレングリコールなどを使用して、軟質および硬質の充填ゼラチンカプセル剤中の充填剤として用いてもよい。
【０１１３】
抗菌化合物はまた、上で述べたような１種または複数の賦形剤を有するマイクロカプセル化された形態にあってよい。錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸剤、および顆粒剤の固体投薬形態は、コーティングおよびシェル、例えば、腸溶性コーティング、放出制御コーティング、および薬学的処方物の技術分野において周知の他のコーティングと共に調製することができる。このような固体投薬形態において、活性化合物を、少なくとも１種の不活性な希釈剤、例えば、スクロース、ラクトースまたはデンプンと混合し得る。このような投薬形態はまた、通常の慣行のように、不活性な希釈剤以外のさらなる物質、例えば、錠剤化滑沢剤および他の錠剤化助剤、例えば、ステアリン酸マグネシウムおよび微結晶性セルロースを含有し得る。カプセル剤、錠剤および丸剤の場合、投薬形態はまた、緩衝剤を含み得る。投薬形態は、乳白剤を任意選択で含有してもよく、投薬形態はまた、任意選択で遅延した様式で、腸管の特定の部分において活性成分（複数可）のみを、または活性成分（複数可）を優先的に放出するような組成物でよい。使用することができる埋め込み組成物の例には、ポリマー物質およびワックスが含まれる。
【０１１４】
本発明の化合物の局所的または経皮的投与のための投薬形態には、軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤、ローション剤、ゲル剤、粉末、溶液、スプレー剤、吸入剤またはパッチが含まれる。活性構成要素を、必要に応じて、無菌状態下にて薬学的に許容されるキャリアおよび任意の必要とされる保存剤または緩衝液と混合する。眼科用処方物、点耳剤などはまた、本発明の範囲内であると意図される。
【０１１５】
軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤およびゲル剤は、本発明の活性化合物に加えて、賦形剤、例えば、動物性および植物性脂肪、油、ワックス、パラフィン、デンプン、トラガント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルクおよび酸化亜鉛、またはこれらの混合物を含有し得る。
【０１１６】
本発明の組成物はまた、液体エアロゾルまたは吸入可能な乾燥粉末としての送達のために処方し得る。液体エアロゾル処方物は、終末細気管支および呼吸細気管支（細菌は、気管支感染、例えば、慢性気管支炎および肺炎を有する患者において存在する）に送達することができる粒径へと主に霧状にされ得る。病原性細菌は、気道全体、気管支、細気管支および肺実質まで、特に、終末細気管支および呼吸細気管支において一般に存在する。感染の増悪の間、細菌はまた肺胞中に存在することができる。液体エアロゾルおよび吸入可能な乾燥粉末処方物は好ましくは、気管支内分枝全体にわたって終末細気管支まで、および最終的には実質組織まで送達される。
【０１１７】
本発明のエアロゾル化処方物は、主に１〜５μｍの質量媒体平均直径を有するエアロゾル粒子の形成を可能とするように好ましくは選択される、エアロゾル形成デバイス、例えば、ジェット、振動多孔プレートまたは超音波ネブライザーを使用して送達し得る。さらに、処方物は好ましくは、バランスのとれた容量オスモル濃度、イオン強度およびクロリド濃度、ならびに感染の部位に有効用量の本発明の化合物を送達することができる最も小さなエアロゾル化可能容積を有する。さらに、エアロゾル化処方物は好ましくは、気道の機能性に悪影響を与えず、望ましくない副作用をもたらさない。
【０１１８】
本発明のエアロゾル処方物の投与に適したエアロゾル化デバイスには、例えば、本発明の処方物を、主に１〜５ｐｍの範囲のサイズのエアロゾル粒径へと霧状にすることができる、ジェット、振動多孔プレート、超音波ネブライザーおよび高エネルギー乾燥粉末吸入器が含まれる。「主に」とは、本出願において、全ての生じたエアロゾル粒子の少なくとも７０％、しかし好ましくは９０％超が、１〜５μｍの範囲であることを意味する。ジェットネブライザーは、液体溶液をエアロゾル液滴にする空気圧によって作動する。振動多孔プレートネブライザーは、多孔プレートを通して溶媒液滴を押し出す、迅速に振動する多孔プレートによって生じる音波真空を使用することによって作動する。超音波ネブライザーは、液体を小さなエアロゾル液滴に剪断するピエゾ・エレクトリック・クリスタルによって作動する。例えば、ＡｅｒｏＮｅｂおよびＡｅｒｏＤｏｓｅ振動多孔プレートネブライザー（ＡｅｒｏＧｅｎ，Ｉｎｃ．、Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ、Ｃａｌｉｆ．）、Ｓｉｄｅｓｔｒｅａｍ７ネブライザー（Ｍｅｄｉｃ−Ａｉｄ  Ｌｔｄ．、Ｗｅｓｔ  Ｓｕｓｓｅｘ、Ｅｎｇｌａｎｄ）、Ｐａｒｉ  ＬＣ７およびＰａｒｉ  ＬＣ  Ｓｔａｒ７ジェットネブライザー（Ｐａｒｉ  Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  Ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ，Ｉｎｃ．、Ｒｉｃｈｍｏｎｄ、Ｖａ．）、ならびにＡｅｒｏｓｏｎｉｃ（ＤｅＶｉｌｂｉｓｓ  Ｍｅｄｉｚｉｎｉｓｃｈｅ  Ｐｒｏｄｕｋｔｅ（Ｄｅｕｔｓｃｈｌａｎｄ）ＧｍｂＨ、Ｈｅｉｄｅｎ、Ｇｅｒｍａｎｙ）およびＵｌｔｒａＡｉｒｅ７（Ｏｍｒｏｎ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｉｎｃ．、Ｖｅｒｎｏｎ  Ｈｉｌｌｓ、Ｉｌｌ．）超音波ネブライザーを含めて、種々の適切なデバイスが利用可能である。
【０１１９】
本発明の化合物はまた、本発明の化合物に加えて、賦形剤、例えば、ラクトース、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウムおよびポリアミド粉末、またはこれらの物質の混合物を含有することができる局所用粉末およびスプレー剤として使用するために処方し得る。スプレー剤は、通例の噴射剤、例えば、クロロフルオロ炭化水素をさらに含有することができる。
【０１２０】
経皮パッチは、体への化合物の制御送達を実現する追加の利点を有する。このような投薬形態は、化合物を適切な媒体に溶解または分注することによって作製することができる。吸収増強剤をまた使用して、皮膚を通した化合物の流入を増加させることができる。速度は、速度制御膜を提供することによって、または化合物をポリマーマトリックスもしくはゲルに分散させることによって制御することができる。
【０１２１】
本発明の処置方法によると、細菌感染は、患者に、治療有効量の式Ｉの化合物、またはその立体異性体もしくは薬学的に許容される塩を、所望の結果を達成するために必要な量および時間で投与することによって、患者、例えば、ヒトまたは下等哺乳動物において処置または予防される。本発明の化合物の「治療有効量」とは、任意の医学的処置に適用できる妥当な利益／リスク比で、細菌感染を処置するための化合物の十分な量を意味する。しかし、本発明の化合物および組成物の総１日使用量は、正しい医学的判断の範囲内で主治医が決定することが理解される。任意の特定の患者のための特定の治療有効用量レベルは、処置される障害および障害の重症度；用いる特定の化合物の活性；用いる特定の組成物；患者の年齢、体重、身体全体の健康、性別および食事；用いる特定の化合物の投与時間、投与経路、および排出率；処置期間；用いる特定の化合物と組み合わせて、または同時に使用される薬物；ならびに医学の技術分野において周知の同様の要因を含めた種々の要因によって決まる。
【０１２２】
単一用量または分割用量においてヒトまたは他の哺乳動物に投与される本発明の化合物の総１日用量は、例えば、０．０１〜２００ｍｇ／ｋｇ体重、またはより通常には０．１〜５０ｍｇ／ｋｇ体重の量でよい。特定の実施形態において、ヒトまたは他の哺乳動物に投与される総１日用量は、１．０〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、または５．０〜２５ｍｇ／ｋｇ体重である。単一用量の組成物は、１日用量を構成するこのような量またはその約数の量を含有し得る。一般に、本発明による処置レジメンは、このような処置を必要としている患者に、単一用量または複数用量で１日当たり約１０ｍｇ〜約１５ｇの本発明の化合物（複数可）、より通常には単一用量または複数用量で１日当たり１００ｍｇ〜５ｇ、またより通常には２５０ｍｇ〜１ｇを投与することを含む。
【０１２３】
処方方法は当技術分野で周知であり、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｅａｓｔｏｎ、Ｐａ．、第１９版（１９９５年）に開示されている。本発明において使用するための薬学的組成物は、無菌の発熱性ではない液体溶液または懸濁物、コーティングされたカプセル剤、坐剤、凍結乾燥した粉末、経皮パッチまたは当技術分野において公知の他の形態の形態にあってよい。
【０１２４】
本出願において使用される「キット」は、薬学的組成物を含有するための容器を含み、また分割容器、例えば、分割ボトルまたは分割ホイルパケットを含み得る。容器は、薬学的に許容される材料、例えば、紙もしくは段ボールの箱、ガラスもしくはプラスチックのボトルもしくはジャー、再密封可能なバッグ（例えば、異なる容器へ入れるための錠剤の「補充品」を保持する）、または治療スケジュールによってパックから押し出される個々の用量を有するブリスターパックでできている、当技術分野において公知のような任意の従来の形状または形態でよい。用いられる容器は、関与する正確な投薬形態によって決まることができ、例えば、従来の段ボール箱は一般に、液体懸濁物を保持するために使用されない。複数の容器を、単一のパッケージ中で一緒に使用し、単一の投薬形態を市販することは実現可能である。例えば、錠剤は、ボックス内に含有されているボトル中に含有されていてもよい。
【０１２５】
このようなキットの一例は、いわゆる、ブリスターパックである。ブリスターパックは、パッケージング産業において周知であり、薬学的単位投薬形態（錠剤、カプセル剤など）のパッケージングのために広範に使用されている。ブリスターパックは一般に、好ましくは透明なプラスチック材料のホイルでカバーされた相対的に硬い材料のシートからなる。パッケージングプロセスの間、プラスチックホイルにおいてくぼみを形成する。くぼみはパッケージングされる個々の錠剤またはカプセル剤のサイズおよび形状を有するか、あるいはパッケージングされる複数の錠剤および／またはカプセル剤を収容するサイズおよび形状を有し得る。次に、錠剤またはカプセル剤を、くぼみにそれに応じて置き、相対的に硬い材料のシートを、くぼみが形成された方向とは反対のホイルの面においてプラスチックホイルに対して密封する。その結果、錠剤またはカプセル剤は、所望の通り、プラスチックホイルとシートとの間のくぼみの中に、個々に密封または集合的に密封される。好ましくはシートの強度は、錠剤またはカプセル剤を、くぼみの上へ手で加えた圧力によってブリスターパックから取り出すことができ、それによって開口部がくぼみの場所でシートに形成される強度である。次いで、錠剤またはカプセル剤を、前記開口部から取り出すことができる。
【０１２６】
記載式の記憶補助を提供することが望ましい場合があり、記載式の記憶補助は、医師、薬剤師または他の医療提供者、または被験体のための情報および／または指示を含有するタイプのもの（例えば、錠剤またはカプセル剤の隣にある数の形態（それによって、数は、このように特定された錠剤もしくはカプセル剤を摂取すべきレジメンの日に相当する）、または同じタイプの情報を含有するカードである）である。このような記憶補助の別の例は、例えば、下記のようにカード上にプリントされたカレンダーである。「第１週、月曜日、火曜日、．．．」など、「第２週、月曜日、火曜日、．．．」など。記憶補助の他のバリエーションは、容易に明らかである。「１日用量」は、所与の日に摂取する、単一の錠剤もしくはカプセル剤、またはいくつかの錠剤もしくはカプセル剤でよい。キットが別々の組成物を含有するとき、キットの１種または複数の組成物の１日用量は、１種の錠剤またはカプセル剤からなることができ、一方、キットの別の１種または複数の組成物の１日用量は、いくつかの錠剤またはカプセル剤からなることができる。
【０１２７】
キットの別の特定の実施形態は、これらの使用目的に従って１日用量を一回ずつ分注するように設計されたディスペンサーである。好ましくは、ディスペンサーは、レジメンに従うことをさらに容易にするための記憶補助を備えている。このような記憶補助の一例は、分注された１日用量の数を示す機械的計数器である。このような記憶補助の別の例は、液晶表示器とカップリングした電池式のマイクロチップメモリ、または例えば、最後の１日用量が摂取された日付を表示し、かつ／またはいつ次の用量を摂取するかを思い出させる可聴式合図のシグナルである。
【０１２８】
本発明のキットはまた、本発明の化合物に加えて、１種または複数のさらなる薬学的活性化合物を含み得る。例えば、さらなる化合物は第２の抗菌薬である。さらなる化合物を、本発明の化合物と同じ投薬形態で、または異なる投薬形態で投与し得る。同様に、さらなる化合物は、本発明の化合物と同時に、または異なるときに投与することができる。
【０１２９】
また、本化合物の組成物を、同様のスペクトルの他の公知の抗菌剤と組み合わせて使用して、（１）この化合物のスペクトルによってカバーされる重度のグラム陰性感染の処置を増強するか、または（２）この化合物に加えて異なるスペクトルの別の薬剤を必要とし得る複数の生物が疑われる重度の感染への適用を付け加えてもよい。可能性のある薬剤には、アミノグリコシド、ペニシリン、セファロスポリン、フルオロキノロン、マクロライド、糖ペプチド、リポペプチドおよびオキサゾリジノンのメンバーが含まれる。処置は、本発明の化合物および第２の抗菌化合物の両方を有する組成物の投与、または本発明の化合物の投与と、それに続くかもしくはそれに先行する第２の抗菌剤の投与を含むことができる。
【０１３０】
例示のために提示し、かつ本発明の概念の範囲を制限するものではない、下記の実施例を参照することにより、上記をさらに理解し得る。
【実施例】
【０１３１】
ＶＩＩ．  実施例
下記の実施例に関して、本発明の化合物は、２６９０分離モジュール（Ｍｉｌｆｏｒｄ、Ｍａｓｓ．）を有するＷａｔｅｒｓ  Ｍｉｌｌｅｎｉｕｍクロマトグラフィーシステムを使用して、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって特性決定した。分析カラムは、Ａｌｌｔｅｃｈ（Ｄｅｅｒｆｉｅｌｄ、Ｉｌｌ．）からのＡｌｌｔｉｍａ  Ｃ−１８逆相（４．６×２５０ｍｍ）であった。典型的には５％アセトニトリル／９５％水で開始し、４０分の期間にわたって１００％アセトニトリルに進行する勾配溶出を使用した。全ての溶媒は、０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を含有した。化合物は、２２０ｎｍまたは２５４ｎｍで紫外線光（ＵＶ）吸収によって検出した。場合によって、純度は、ガラスまたはプラスチックで裏打ちされたシリカゲルプレート、例えば、Ｂａｋｅｒ−Ｆｌｅｘシリカゲル１Ｂ２−Ｆフレキシブルシートを使用して、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）によって評価した。ＴＬＣ結果は、紫外線光下で視覚的に、または周知のヨウ素蒸気および他の様々な染色技術を用いることによって容易に検出した。
【０１３２】
質量分析は、２つのＬＣＭＳ機器の１つで行った。Ｗａｔｅｒｓシステム（Ａｌｌｉａｎｃｅ  ＨＴ  ＨＰＬＣおよびＭｉｃｒｏｍａｓｓ  ＺＱ質量分析計；カラム：Ｅｃｌｉｐｓｅ  ＸＤＢ−Ｃ−１８、２．１×５０ｍｍ；溶媒系：水中の５〜９５％（または３５〜９５％、または６５〜９５％または９５〜９５％）のアセトニトリル、０．０５％ＴＦＡを有する；流量０．８ｍＬ／分；分子量範囲５００〜１５００；コーン電圧２０Ｖ；カラム温度４０℃）、あるいはＨｅｗｌｅｔｔ  Ｐａｃｋａｒｄシステム（シリーズ１１００ＨＰＬＣ；カラム：Ｅｃｌｉｐｓｅ  ＸＤＢ−Ｃ１８、２．１×５０ｍｍ；溶媒系：水中の１〜９５％アセトニトリル、０．０５％ＴＦＡを有する；流量０．４ｍＬ／分；分子量範囲１５０〜８５０；コーン電圧５０Ｖ；カラム温度３０℃）。全ての質量は、プロトン化親イオンの質量として報告する。
【０１３３】
ＧＣＭＳ分析は、Ｈｅｗｌｅｔ  Ｐａｃｋａｒｄ機器（Ｍａｓｓ  Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ検出器５９７３を有するＨＰ６８９０シリーズガスクロマトグラフ；インジェクター容量：１μＬ；最初のカラム温度：５０℃；最終カラム温度：２５０Ｃ；傾斜時間：２０分；ガス流量：１ｍＬ／分；カラム：５％フェニルメチルシロキサン、モデル＃ＨＰ１９０９１５−４４３、寸法：３０．０ｍ×２５ｍ×０．２５ｍ）で行った。
【０１３４】
核磁気共鳴（ＮＭＲ）分析は、Ｖａｒｉａｎ３００ＭＨｚ  ＮＭＲ（Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ、Ｃａｌｉｆ．）で行った。スペクトル参照は、ＴＭＳまたは溶媒の公知の化学シフトであった。いくつかの化合物試料は、高温（例えば、７５℃）で操作し、試料の溶解度の増加を促進した。
【０１３５】
本発明の化合物のいくつかの純度は、元素分析によって評価した（Ｄｅｓｅｒｔ  Ａｎａｌｙｔｉｃｓ、Ｔｕｃｓｏｎ、Ａｒｉｚ．）。
【０１３６】
融点は、Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｄｅｖｉｃｅｓ  Ｍｅｌ−Ｔｅｍｐ装置（Ｈｏｌｌｉｓｔｏｎ、Ｍａｓｓ．）で決定した。
【０１３７】
調製的分離は、Ｆｌａｓｈ４０クロマトグラフィーシステムおよびＫＰ−Ｓｉｌ、６０Ａ（Ｂｉｏｔａｇｅ、Ｃｈａｒｌｏｔｔｅｓｖｉｌｌｅ、Ｖａ．）を使用して、またはシリカゲル（２３０〜４００メッシュ）パッキング材料を使用したフラッシュカラムクロマトグラフィーによって、またはＣ−１８逆相カラムを使用したＨＰＬＣによって行った。Ｆｌａｓｈ４０Ｂｉｏｔａｇｅシステムおよびフラッシュカラムクロマトグラフィーのために用いる典型的な溶媒は、ジクロロメタン、メタノール、酢酸エチル、ヘキサン、アセトン、ヒドロキシルアミン水溶液およびトリエチルアミンであった。逆相ＨＰＬＣのために用いる典型的な溶媒は、０．１％トリフルオロ酢酸を有する様々な濃度のアセトニトリルおよび水であった。
【０１３８】
Ａ．Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１）の合成
【０１３９】
【化５】
2014501716.tif 000017
【０１４０】
メチル２−エチニルシクロプロパンカルボキシレート（２）
ラセミのエチル２−ホルミルシクロプロパンカルボキシレート１（１０ｇ、７０．３ｍｍｏｌ）およびベストマン大平試薬（１６．４ｇ、８５ｍｍｏｌ）を、Ｎ２下で無水メタノール（１００ｍｌ）に溶解した。次いで、炭酸カリウム（１９．４ｇ、１４１ｍｍｏｌ）を少しずつゆっくり加え、溶液を１８時間撹拌した。溶媒を減圧下で２０℃にて除去し、水（１００ｍｌ）を加え、生成物をジクロロメタン（２×２００ｍｌ）で抽出し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、ゆっくり濃縮し、ラセミのメチル２−エチニルシクロプロパンカルボキシレート（４．１６ｇ）を得て、これをＮＭＲによって確認した。
【０１４１】
（２−エチニルシクロプロピル）メタノール（３）
次いで、水素化ホウ素リチウム（１７５ｍｇ、８．０６ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（２０ｍｌ）中のラセミのメチル２−エチニルシクロプロパンカルボキシレート（１ｇ、２０．６ｍｍｏｌ）に窒素下でゆっくりと加え、撹拌を２時間続けた。反応混合物を数滴の酢酸でクエンチし、溶媒を除去した。粗生成物を酢酸エチル（２×５０ｍｌ）で抽出し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、ゆっくり濃縮し、ラセミの（２−ｔｒａｎｓ−エチニルシクロプロピル）メタノール３を黄色の液体（７３５ｍｇ）として得て、次のステップのためにそのまま使用した。
【０１４２】
【化６】
2014501716.tif 000018
【０１４３】
（２Ｓ）−メチル３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−（４−（（２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエート（５）
ＣｕＣｌ（４２ｍｇ、０．４１６ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（２０ｍｌ）、メタノール（１０ｍｌ）およびブチルアミン（１０ｍｌ）の混合物中のラセミの（２−ｔｒａｎｓ−エチニルシクロプロピル）メタノール（４００ｍｇ、４．１６ｍｍｏｌ）、メチル２−（Ｓ）−（４−（ブロモエチニル）ベンズアミド）−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタノエート（１．９ｇ、４．１６ｍｍｏｌ）の撹拌した溶液に窒素下でゆっくりと加え、続いていくつかの結晶のヒドロキシルアミン塩酸塩（３０ｍｇ）を加えた。撹拌を４時間続けた。溶媒を減圧下で除去し、水（１００ｍｌ）を加え、酢酸エチル（２×１５０ｍｌ）で抽出し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮し、ＩＳＣＯ上で精製し、４３２ｍｇの（２−Ｓ）−メチル３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−（４−（（２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエートを得た。
【０１４４】
Ｉ−１：Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド
（２−Ｓ）−メチル３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−（４−（（２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエート５（０．３７０ｇ、０．８１４ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（２５ｍｌ）に溶解し、ＴＦＡ（２ｍｌ）で処理し、２０分間撹拌した。過剰な溶媒およびＴＦＡを減圧下で除去し、脱保護された材料を得て、これをＩＰＡ（１０ｍＬ）に再溶解し、ヒドロキシルアミン水溶液（５０％、２ｍＬ、過剰量）で処理し、冷蔵庫内に２日間保持した。過剰な溶媒を減圧下で除去し、粗生成物を逆相ＨＰＬＣによって精製し、４２ｍｇのＩ−１をそのトリフルオロ酢酸塩として得た。ＬＣ−ＭＳ（Ｍ＋１）３７０、化学式：Ｃ２０Ｈ２３Ｎ３Ｏ４、正確な質量：３６９．１７。１ＨＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６），  ＴＦＡ塩：  δ  ０．９  （ｍ，  ２Ｈ）  １．２４（ｓ，  ３Ｈ），  １．２９  （ｓ，  ３Ｈ），  １．４０（ｍ，  １Ｈ），  ３．２４（ｍ，  １Ｈ），  ３．４（ｍ，  １Ｈ），  ４．６４（ｄ，  １Ｈ），  ４．６９（ｄ，  １Ｈ），  ７．６１（ｄ，  ２Ｈ），  ７．８８（ｄ，  ２Ｈ），  ７．９０（ｂｒ．ｄ，  １ＮＨ），  ８．６５（ｄ，  １ＮＨ），  ９．１（ｂｒ．Ｓ，  ＯＨ）。
【０１４５】
Ｂ．Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１Ｒ，２Ｒ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−２）の合成
【０１４６】
【化７】
2014501716.tif 000019
【０１４７】
（Ｅ）−４−ヒドロキシブタ−２−エニルアセテート（２）
【０１４８】
【数５】
2014501716.tif 000020
【０１４９】
（Ｅ）−ブタ−２−エン−１，４−ジオール１（２６４ｇ、３．０ｍｏｌ）のＴＨＦ（１．５Ｌ）溶液に、−２０℃下で水素化ナトリウム（１２０ｇ、３．０ｍｏｌ）を少しずつ加えた。添加すると、混合物の撹拌を−２０℃で３０分間続けた。次いで、塩化アセチル（２３５．５ｇ、３ｍｏｌ）を滴下で添加し、混合物を室温に温め、室温でさらに３時間撹拌を続けた。混合物を濾過し、残渣をＴＨＦで洗浄した。合わせた有機層を乾燥させ、濃縮し、粗製物２を得て、これをシリカゲルカラム（ＰＥ：ＥＡ＝５：１〜２：１）によって精製し、２（２１０ｇ）を無色の油として得た。収率：５４％。１ＨＮＭＲ：ＣＰ−０００５０６５−０４３  （ＣＤＣｌ３，４００  Ｍ  ＨＺ）  δ：  ５．８５（ｍ  ，１Ｈ），  ５．６２（ｍ，  １Ｈ），  ４．６７（ｔ，  Ｊ＝６．２  Ｈｚ，２Ｈ），  ４．２６  （ｔ  ，  Ｊ＝６．０  Ｈｚ，２Ｈ），  ２．１０（ｓ，１Ｈ），  ２．０６（ｓ，３Ｈ）。
【０１５０】
（Ｅ）−４−オキソブタ−２−エニルアセテート（３）
【０１５１】
【数６】
2014501716.tif 000021
【０１５２】
二酸化マンガン（活性、１３０５ｇ、１５ｍｏｌ）のジクロロメタン（２．５Ｌ）懸濁物に、（Ｅ）−４−ヒドロキシブタ−２−エニルアセテート２（１９５ｇ）を少しずつ加えた。混合物の撹拌を室温で４８時間続けた。混合物を濾過し、残渣をジクロロメタンで洗浄した。合わせた有機層を乾燥させ、濃縮し、粗製物３を得て、これをシリカゲルカラム（ＰＥ：ＥＡ＝１０：１〜５：１）によって精製し、３（１３０ｇ）を無色の油として得た。収率：６４％。１ＨＮＭＲ：ＣＰ−０００５０６５−０４４（ＣＤＣｌ３，４００  Ｍ  ＨＺ）  δ：  １０．０１（ｄ，  Ｊ＝６．４Ｈｚ  ，１Ｈ），  ６．５２（ｍ，  １Ｈ），  ６．１０（ｍ  ，１Ｈ），  ５．０８  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．１０（ｓ，３Ｈ）。
【０１５３】
（Ｅ）−４，４−ジエトキシブタ−２−エニルアセテート（４）
【０１５４】
【数７】
2014501716.tif 000022
【０１５５】
（Ｅ）−４−オキソブタ−２−エニルアセテート３（９６．０ｇ、０．７５ｍｏｌ）およびトリエトキシメタン（１３３．２ｇ、０．９ｍｏｌ）のエタノール（５００ｍｌ）溶液に、硝酸アンモニウム（３．０ｇ、０．０３８ｍｏｌ）を加え、混合物の撹拌を室温で１５時間続けた。混合物を８００ｍｌのＥｔＯＡｃで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウムで洗浄した。水層を、ＥｔＯＡｃ（３００ｍｌ×２）で逆抽出した。合わせた有機層を乾燥させ、濃縮し、粗製物４（１４０ｇ）を赤色の油として得て、これを次のステップのためにさらに精製することなく使用した。
【０１５６】
（４Ｒ，５Ｒ，Ｅ）−ジイソプロピル−２−（３−アセトキシプロパ−１−エニル）−１，３−ジオキソラン−４，５−ジカルボキシレート（５）
【０１５７】
【数８】
2014501716.tif 000023
【０１５８】
（Ｅ）−４，４−ジエトキシブタ−２−エニルアセテート４（６０．６ｇ、０．３ｍｏｌ）および（２Ｒ，３Ｒ）−ジイソプロピル２，３−ジヒドロキシスクシネート（７７．２ｇ、０．３３ｍｏｌ）のベンゼン（５００ｍｌ）溶液に、ＰＰＴＳ（３．８ｇ、１５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を９０℃に加熱し、エタノールを１５時間蒸留除去した。混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。シリカゲル（ＰＥ：ＥＡ＝５０：１〜３０：１）によって精製し、無色の油として３８．５ｇの５を得た。収率：３７．３％。ＧＣＭＳ：ＣＰ−０００５０６５−０７０−２（８５％の純度）。
【０１５９】
（４Ｒ，５Ｒ）−ジイソプロピル−２−（（１Ｓ，２Ｒ）−２−（アセトキシメチル）シクロプロピル）−１，３−ジオキソラン−４，５−ジカルボキシレート（６）
【０１６０】
【数９】
2014501716.tif 000024
【０１６１】
（４Ｒ，５Ｒ，Ｅ）−ジイソプロピル−２−（３−アセトキシプロパ−１−エニル）−１，３−ジオキソラン−４，５−ジカルボキシレート５（３４．４ｇ、０．１ｍｏｌ）のヘキサン（１．５Ｌ）溶液に、ジエチル亜鉛（ヘキサン中１Ｍ、５００ｍＬ）をアルゴン下で−２０℃にて少しずつ加えた。添加すると、ジヨードエタンを、−２０℃未満で強く撹拌しながら滴下で添加した。混合物を室温に温め、さらに８時間撹拌を続けた。反応混合物を８００ｍｌの冷たい塩化アンモニウム水溶液でクエンチし、次いでエーテル（８００ｍｌ×５）で抽出した。合わせた有機層をチオ硫酸ナトリウム水溶液、水、ブラインで洗浄し、次いで乾燥させ、濃縮し、粗製物６を得て、これをシリカゲルカラム（ＰＥ：ＥＡ＝３０：１〜１０：１）によって精製し、６（１６ｇ）を無色の油として得た。収率：４４．７％。１ＨＮＭＲ：ＰＯ５  （ＣＤＣｌ３，４００  ＭＨＺ）  δ：  ５．１３（ｍ  ，２Ｈ），  ４．９５（ｄ，  Ｊ＝５．６  Ｈｚ  ，１Ｈ），  ４．６７（ｄ，  Ｊ＝３．６  Ｈｚ，１Ｈ），  ４．５７  （ｄ，  Ｊ＝４．０  Ｈｚ，１Ｈ），  ４．０７（ｍ，１Ｈ），  ３．８８（ｍ，１Ｈ），  ２．０６（ｓ，３Ｈ），  １．３８（ｓ，１２Ｈ），  １．２３（ｍ，１Ｈ），  ０．８３（ｍ，１Ｈ），  ０．６６（ｍ，１Ｈ）。
【０１６２】
（（１Ｒ，２Ｒ）−２−ホルミルシクロプロピル）メチルアセテート（７）
【０１６３】
【数１０】
2014501716.tif 000025
【０１６４】
１４０ｍｌの８０％酢酸中の（４Ｒ，５Ｒ）−ジイソプロピル−２−（（１Ｓ，２Ｒ）−２−（アセトキシメチル）シクロプロピル）−１，３−ジオキソラン−４，５−ジカルボキシレート６（１４．３ｇ、４０ｍｍｏｌ）の混合物を、８０℃に加熱し、この温度で２時間撹拌を続けた。ＴＬＣによって６が殆ど残っていないことが示されたとき、混合物を３００ｍｌの飽和炭酸水素ナトリウムに滴下で添加し、次いでジクロロメタン（２００ｍｌ×３）で抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、乾燥させ、濃縮し、粗製物７を得て、これをシリカゲルカラム（ＰＥ：ＥＡ＝１０：１〜５：１）によって精製し、７（３．５ｇ）を無色の油として得た。収率：６２％。１ＨＮＭＲ：ＣＰ−０００５０６５−０７２（ＣＤＣｌ３，４００  Ｍ  ＨＺ）  δ：  ９．１５（ｓ，  １Ｈ），  ４．１１（ｍ，  １Ｈ），  ３．９１  （ｍ  ，１Ｈ）  ，  ２．０８  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．１０（ｓ，３Ｈ），  １．８８（ｍ  ，２Ｈ），  １．３９（ｍ，  １Ｈ），  １．１２（ｍ  ，１Ｈ）。
【０１６５】
（（１Ｒ，２Ｒ）−２−（２，２−ジブロモビニル）シクロプロピル）メチルアセテート（８）
【０１６６】
【数１１】
2014501716.tif 000026
【０１６７】
四臭化炭素（１３．９ｇ、４２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３０ｍＬ）溶液に、トリフェニルホスフィン（２２．０ｇ、８４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５０ｍＬ）溶液を−２０℃にてアルゴン下で滴下で添加した。混合物の撹拌をこの温度で３０分間続け、次いで−７８℃に冷却した。（（１Ｒ，２Ｒ）−２−ホルミルシクロプロピル）メチルアセテート７（３．００ｇ、２１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（４０ｍｌ）溶液を滴下で添加し、温度をさらに３０分維持した。混合物を３０分にわたり室温に温めた。溶媒を除去し、シリカゲルカラム（ＰＥ：ＥＡ＝１００：１〜５０：１）によって精製し、８を無色の油（４．３ｇ）として得た。収率：６９％。１ＨＮＭＲ：ＣＰ−０００５０６５−０７５（ＣＤＣｌ３，４００  Ｍ  ＨＺ）  δ：  ５．８５（ｄ，  Ｊ＝８．８Ｈｚ  ，１Ｈ），  ３．９８（ｍ，  ２Ｈ），  ２．０９  （ｍ  ，３Ｈ）  ，  １．６１  （ｍ，  １Ｈ），  １．３５（ｍ，１Ｈ），  ０．８８（ｍ，  ２Ｈ）。
【０１６８】
メチル４−（（（１Ｒ，２Ｒ）−２−（アセトキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンゾエート（１０）
【０１６９】
【数１２】
2014501716.tif 000027
【０１７０】
（（１Ｒ，２Ｒ）−２−（２，２−ジブロモビニル）シクロプロピル）メチルアセテート８（４．３ｇ、１４．５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２ｄｂａ２（８６．３ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、トリ（４−メチルフェニル）ホスフィン（２０４ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（４．３５ｇ、４３．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１００ｍＬ）溶液を、アルゴン下でメチル４−エチニルベンゾエート９（２．６４ｇ、１１ｍｍｏｌ）で処理した。混合物の撹拌を室温で５時間続けた。ＴＬＣによって化合物８が殆ど残っていないことが示されたとき、反応物をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で希釈し、水（３×１００ｍＬ）で洗浄し、有機層を乾燥させ、濃縮し、粗製物１０を得て、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝５０：１〜３０：１）によって精製し、１０（２．０ｇ）を黄色の固体として得た。収率：４６．５％、ＬＣＭＳ：ＣＰ−０００５０６５−０８５−２（ＥＳＩ）ｍ／ｚ＝２９７（Ｍ＋１）純度：９２．４％（２１４ｎｍ）。
【０１７１】
４−（（（１Ｒ，２Ｒ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）安息香酸（１１）
【０１７２】
【数１３】
2014501716.tif 000028
【０１７３】
メチル４−（（（１Ｒ，２Ｒ）−２−（アセトキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンゾエート１０（１．９２ｇ、６．５ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（４０ｍＬ）に溶解し、次いで水酸化ナトリウム（２．６０ｇ、６５ｍｍｏｌ）の水（１０ｍＬ）溶液を加えた。混合物の撹拌を室温８時間続けた。ＬＣＭＳによって化合物１０が殆ど残っていないことが示されたとき、溶媒を減圧下で除去し、残渣を水（５０ｍＬ）で希釈し、ｐＨを４．０に調節し、酢酸エチル（４×５０ｍＬ）で抽出し、有機層を乾燥させ、濃縮し、粗製物１１（１．４ｇ）を黄色の固体として得て、これを次のステップのためにそれ以上精製することなく使用した。ＬＣＭＳ：ＣＰ−０００５０６５−０８８−３（ＥＳＩ）ｍ／ｚ＝２４１（Ｍ＋１）純度：８９％（２１４ｎｍ）。収率：８９％。
【０１７４】
（Ｓ）−メチル２−（４−（（（１Ｒ，２Ｒ）−２−（アセトキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタノエート（１２）
【０１７５】
【数１４】
2014501716.tif 000029
【０１７６】
４−（（（１Ｒ，２Ｒ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）安息香酸１１（１．２０ｇ、５．０ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（２．３４ｇ、６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍＬ）溶液を、（Ｓ）−メチル２−アミノ−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタノエート（１．４８ｇ、６．０ｍｍｏＬ）およびＤＩＰＥＡ（３．５８ｇ、２０ｍｍｏＬ）で処理した。混合物の撹拌を室温で５時間続けた。ＬＣＭＳによって化合物１１が殆ど残っていないことが示されたとき、反応物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、５％塩化リチウム（３×５０ｍＬ）で洗浄し、有機層を乾燥させ、濃縮し、１２を黄色の油として得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝２：１）による精製によって、２．０ｇの１２を無色の油として得た。収率：７０％、ＬＣＭＳ：ＣＰ−０００５０６５−０９１−３（ＥＳＩ）ｍ／ｚ＝４６９（Ｍ＋１）純度：９５％（２１４ｎｍ）。
【０１７７】
（Ｓ）−メチル３−アミノ−２−（４−（（（１Ｒ，２Ｒ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエート塩酸塩（１３）
【０１７８】
【数１５】
2014501716.tif 000030
【０１７９】
（Ｓ）−メチル２−（４−（（（１Ｒ，２Ｒ）−２−（アセトキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタノエート１２（１．８７ｇ、４．０ｍｍｏＬ）をメタノール（５０ｍＬ）に溶解し、乾燥ＨＣｌｇで１０分間処理した。ＬＣＭＳによって化合物１２が殆ど残っていないことが示されたとき、ＨＣｌ流を停止した。減圧下で溶媒を除去し、１３（１．４５ｇ）を黄色の固体として得た。収率：９１％、ＬＣＭＳ：ＣＰ−０００５０６５−０９６−４−ＬＣＭＳＡ０１９（ＥＳＩ）ｍ／ｚ＝３６９（Ｍ＋１）純度：９８％（２１４ｎｍ）。１Ｈ  ＮＭＲ：ＣＰ−０００５０６５−０９６−４  （ＤＭＳＯ−ｄ６，  ４００  ＭＨｚ）  δ：９．０４（ｄ，  Ｊ＝６．８Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．３６（ｓ  ，３Ｈ），  ７．９８（ｄ，  Ｊ＝６．４Ｈｚ  ，  ２Ｈ），  ７．６４（ｄ，  Ｊ＝６．８Ｈｚ  ，  ２Ｈ），  ４．８９（ｄ，  Ｊ＝６．８Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．７３（ｓ，  ３Ｈ），  ３．４４（ｍ，  １Ｈ），  ３．２２（ｍ，  １Ｈ），  １．４８（ｍ，  ２Ｈ），  １．４０（ｓ，  ６Ｈ），  ０．９４（ｍ，  ２Ｈ）。
【０１８０】
【化８】
2014501716.tif 000031
【０１８１】
（Ｓ）−メチル３−アミノ−２−（４−（（（１Ｒ，２Ｒ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエート塩酸塩１３（１．２５ｇ、３．１ｍｍｏｌ）を、ＬＣＭＳによってほぼ完了するまで、イソプロパノール（１０ｍＬ）および５０％ヒドロキシルアミン水溶液（４．１ｍＬ、６１．７ｍｍｏｌ、２０当量）で処理した。
【０１８２】
粗材料を、逆相ＨＰＬＣ（水中の０〜３０％アセトニトリルの勾配、それぞれが０．１％ＴＦＡを含有、１２０分にわたる）によって精製し、所望の画分をプールし、凍結乾燥し、Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１Ｒ，２Ｒ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミドをそのトリフルオロ酢酸塩（白色の固体、６４７ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ、４３％）として得た。質量分析データ：予測値（Ｍ＋１）：３７０．４、観測値：３７０．２。プロトンＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ｄｍｓｏ−ｄ６）：  １１．２０  （ｓ，  １Ｈ），  ９．４３  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．５５  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９．６Ｈｚ），  ８．００  （ｂｒ  ｓ，  ３Ｈ），  ７．８９  （ｄｄ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  １．８，  ６．６Ｈｚ），  ７．６０  （ｄｄ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  ２．０，  ６．８Ｈｚ），  ８．６６  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９．２Ｈｚ），  ３．３９  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ４．８，  １１．６Ｈｚ），  ３．２２  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．８，  １１．４Ｈｚ），  １．３９  −  １．４６  （ｍ，  ２Ｈ），  １．３０  （ｓ，  ３Ｈ），  １．２５  （ｓ，  ３Ｈ），  ０．８４  −  ０．９３  （ｍ，  ２Ｈ）。
【０１８３】
Ｃ．Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１Ｓ，２Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−３）の合成
【０１８４】
【化９】
2014501716.tif 000032
【０１８５】
（４Ｓ，５Ｓ，Ｅ）−ジイソプロピル−２−（３−アセトキシプロパ−１−エニル）−１，３−ジオキソラン−４，５−ジカルボキシレート（５）
【０１８６】
【数１６】
2014501716.tif 000033
【０１８７】
（Ｅ）−４，４−ジエトキシブタ−２−エニルアセテート４（７５ｇ、０．３７ｍｏｌ）およびジイソプロピル（−）−（Ｓ，Ｓ）−タルトレート（８６．８ｇ、０．３ｍｏｌ）のベンゼン（８００ｍｌ）溶液に、ＰＰＴＳ（４．６６ｇ、０．０１８５ｍｏｌ）を加え、混合物を９℃に加熱し、エタノールを１５時間蒸留除去した。混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。蒸留によって精製し、化合物５（５０．０ｇ、３９％）を無色の油として得た。１Ｈ  ＮＭＲ：  （ＣＤＣｌ３，  ４００  ＭＨｚ）  δ：６．０４−６．０１（ｍ，  １Ｈ），  ５．８１−５．８０  （ｍ  ，１Ｈ），  ５．５７（ｄ，  Ｊ  ＝  ８Ｈｚ  ，  １Ｈ），  ５．０７−５．０１（ｍ，  ２Ｈ），  ４．６５（ｄ，  Ｊ  ＝  ４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．５７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．５４−４．５３  （ｍ，  ２Ｈ），  １．９９（ｓ，  ３Ｈ），  １．２３−１．１９（ｍ，  １２Ｈ）。
【０１８８】
（４Ｓ，５Ｓ）−ジイソプロピル−２−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−（アセトキシメチル）シクロプロピル）−１，３−ジオキソラン−４，５−ジカルボキシレート（６）
【０１８９】
【数１７】
2014501716.tif 000034
【０１９０】
（４Ｓ，５Ｓ，Ｅ）−ジイソプロピル−２−（３−アセトキシプロパ−１−エニル）−１，３−ジオキソラン−４，５−ジカルボキシレート５（４０ｇ、０．１２ｍｏｌ）のヘキサン（１．０Ｌ）溶液に、ジエチル亜鉛（ヘキサン中１Ｍ、１．１６Ｌ）を少しずつアルゴン下で−２０℃にて加えた。添加すると、ジヨードメタン（６２３ｇ、２．４０ｍｏｌ）を、−２０℃未満で強く撹拌しながら滴下で添加した。混合物を室温に温め、さらに８時間撹拌を続けた。反応混合物を８００ｍｌの冷たい塩化アンモニウム水溶液によってクエンチし、次いでエーテル（８００ｍＬ×５）で抽出した。合わせた有機層をチオ硫酸ナトリウム水溶液、水、ブラインで洗浄し、次いで乾燥させ、濃縮し、粗化合物６を得て、これをシリカゲルカラム（石油エーテル中の酢酸エチル（３％〜１０％ｖ／ｖ）を伴う）によって精製し、化合物６（２０．０ｇ、５０％）を無色の油として得た。１Ｈ  ＮＭＲ：  （ＣＤＣｌ３，４００  ＭＨｚ）  δ：  ５．１５−５．０８  （ｍ  ，２Ｈ），  ４．９５（ｄ，  Ｊ  ＝  ５．６  Ｈｚ  ，１Ｈ），  ４．６７（ｄ，  Ｊ  ＝  ３．６  Ｈｚ，１Ｈ），  ４．５７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ４．０  Ｈｚ，１Ｈ），  ４．０７−４．０４  （ｍ，１Ｈ），  ３．９１−３．８６（ｍ，１Ｈ），  ２．０６（ｓ，３Ｈ），  １．４０−１．３７（ｍ，１Ｈ），  １．３１−１．２８  （ｍ，１２Ｈ），  １．２４−１．２２（ｍ，１Ｈ），  ０．８５−０．８２（ｍ，１Ｈ），  ０．６８−０．６３（ｍ，１Ｈ）。
【０１９１】
（（１Ｓ，２Ｓ）−２−ホルミルシクロプロピル）メチルアセテート（７）
【０１９２】
【数１８】
2014501716.tif 000035
【０１９３】
２００ｍｌの８０％酢酸中の（４Ｓ，５Ｓ）−ジイソプロピル−２−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−（アセトキシメチル）シクロプロピル）−１，３−ジオキソラン−４，５−ジカルボキシレート６（２０．０ｇ、５５．８ｍｍｏｌ）の混合物を８０℃に加熱し、この温度で２時間撹拌を続けた。ＴＬＣによって６が殆ど残っていないことが示されたとき、混合物を水（１５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２００ｍｌ×３）で抽出した。合わせた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム、水、ブラインで洗浄し、次いで乾燥させ、濃縮し、粗化合物７を得て、これをシリカゲルカラム（石油エーテル中の酢酸エチル（８％〜２０％ｖ／ｖ）を伴う）によって精製し、化合物７（３．０、３８％）を無色の油として得た。１Ｈ  ＮＭＲ：  （ＣＤＣｌ３，  ４００  ＭＨｚ）  δ：  ９．１５（ｄ，  Ｊ  ＝  ４．８，  １Ｈ），  ４．１４−４．０９（ｍ，  １Ｈ），  ３．９５−３．９０  （ｍ  ，１Ｈ）  ，  ２．０８  （ｓ，  ３Ｈ），  １．９２−１．８８（ｍ，２Ｈ），  １．３８−１．３６（ｍ  ，１Ｈ），  １．１２−１．０９（ｍ  ，１Ｈ）。
【０１９４】
（（１Ｓ，２Ｓ）−２−（２，２−ジブロモビニル）シクロプロピル）メチルアセテート（８）
【０１９５】
【数１９】
2014501716.tif 000036
【０１９６】
四臭化炭素（１３．９ｇ、４２．０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３０ｍＬ）溶液に、トリフェニルホスフィン（２２．０ｇ、８４．０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５０ｍＬ）溶液を−２０℃にてアルゴン下で滴下で添加した。混合物の撹拌をこの温度で３０分間続け、次いで−７８℃に冷却した。（（１Ｓ，２Ｓ）−２−ホルミルシクロプロピル）メチルアセテート７（３．０ｇ、２１．０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（４０ｍＬ）溶液を滴下で添加し、温度をさらに３０分間維持した。混合物を室温に３０分にわたって温めた。溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルカラム（石油エーテルを伴う）によって精製し、化合物８（３．２０ｇ、５１％）を無色の油として得た。ＧＣ−ＭＳによって確認した。
【０１９７】
メチル４−（（（１Ｓ，２Ｓ）−２−（アセトキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンゾエート（１０）
【０１９８】
【数２０】
2014501716.tif 000037
【０１９９】
（（１Ｓ，２Ｓ）−２−（２，２−ジブロモビニル）シクロプロピル）メチルアセテート８（３．２ｇ、１０．８５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２ｄｂａ２（６２．４ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、トリ（４−メチルフェニル）ホスフィン（１５３ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１．４４ｇ、１４．２５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍＬ）溶液を、アルゴン下でメチル４−エチニルベンゾエート９（２．４３ｇ、１５．２ｍｍｏｌ）で処理した。混合物の撹拌を室温で一晩続けた。反応物をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で希釈し、水（３×１００ｍＬ）で洗浄し、合わせた有機層を乾燥させ、濃縮し、粗化合物１０を得て、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル中の酢酸エチル（３％〜１０％ｖ／ｖ）を伴う）によって精製し、化合物１０（１．４ｇ、４６．５％）を黄色の固体として得た。ＬＣ−ＭＳ：２９７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２００】
４−（（（１Ｓ，２Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）安息香酸（１１）
【０２０１】
【数２１】
2014501716.tif 000038
【０２０２】
メチル４−（（（１Ｓ，２Ｓ）−２−（アセトキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンゾエート１０（１．４ｇ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液に、水酸化ナトリウム（７５ｍｇ、１８．９ｍｍｏｌ）の水（１０ｍＬ）溶液を加えた。混合物の撹拌を室温で一晩続けた。この後に、溶媒を減圧下で除去し、残渣を水（５０ｍＬ）で希釈し、１ＭのＨＣｌでｐＨを４．０に調節し、次いでＥｔＯＡｃ（４×５０ｍＬ）で抽出し、有機層を乾燥させ、濃縮し、化合物１１（１．０５ｇ、９３％）を黄色の固体として得て、これを次のステップのためにそれ以上精製することなく使用した。ＬＣ−ＭＳ：２４１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２０３】
（Ｓ）−メチル３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−（４−（（（１Ｓ，２Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエート（１２）
【０２０４】
【数２２】
2014501716.tif 000039
【０２０５】
４−（（（１Ｓ，２Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）安息香酸１１（１．０５ｇ、４．３８ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１．８３ｇ、４．８１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２５ｍＬ）溶液に、（Ｓ）−メチル２−アミノ−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタノエート（１．０７６ｇ、４．３８ｍｍｏＬ）およびＤＩＰＥＡ（１．６９ｇ、１３．１ｍｍｏＬ）を加えた。混合物の撹拌を室温で５時間続けた。この後に、反応物を水（２０ｍＬ）で希釈し、次いで酢酸エチル（６０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を水およびブラインで洗浄し、次いで乾燥させ、濃縮し、化合物１２を黄色の油（１．３５ｇ、６５％）として得た。ＬＣ−ＭＳ：４６９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２０６】
（Ｓ）−メチル３−アミノ−２−（４−（（（１Ｓ，２Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエート塩酸塩（１３）
【０２０７】
【数２３】
2014501716.tif 000040
【０２０８】
（Ｓ）−メチル３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−（４−（（（１Ｓ，２Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエート１２（１．３ｇ、２．７８ｍｍｏｌ）のメタノール（２０ｍＬ）溶液を、ＨＣｌ装置に取り付けた。次いで、ＴＬＣによって出発材料が全て消費されたことが示されるまで、反応物を室温で撹拌した。この後、溶液を減圧下で濃縮し、１３を黄色の固体（１．１ｇ、９８％）として得た。ＬＣ−ＭＳ：３６９［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ−ＮＭＲ：  （ＤＭＳＯ−ｄ６，  ４００  ＭＨｚ）  δ：９．０４（ｄ，  Ｊ  ＝  ６．８Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．３８（ｓ  ，３Ｈ），  ７．９８（ｄ，  Ｊ  ＝  ６．８Ｈｚ  ，  ２Ｈ），  ７．６４（ｄ，  Ｊ  ＝  ６．４Ｈｚ  ，  ２Ｈ），  ４．８８（ｄ，  Ｊ  ＝  ６．８Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．７２（ｓ，  ３Ｈ），  ３．４５−３．４２（ｍ，  １Ｈ），  ３．２８−３．２４（ｍ，  １Ｈ），  １．４９−１．４６（ｍ，  ２Ｈ），  １．４０（ｓ，  ６Ｈ），  ０．９５−０．９０（ｍ，  ２Ｈ）。
【０２０９】
【化１０】
2014501716.tif 000041
【０２１０】
（Ｓ）−メチル３−アミノ−２−（４−（（（１Ｓ，２Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエート塩酸塩１３（１．１５ｇ、２．８ｍｍｏｌ）を、ＬＣＭＳによってほぼ完了するまで、イソプロパノール（１０ｍＬ）および５０％ヒドロキシルアミン水溶液（３．８ｍＬ、５６．８ｍｍｏｌ、２０当量）で処理した。
【０２１１】
粗材料を逆相ＨＰＬＣ（水中の０〜３０％アセトニトリルの勾配、それぞれが０．１％ＴＦＡを含有、１２０分にわたる）によって精製し、所望の画分をプールし、凍結乾燥し、Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１Ｓ，２Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミドをそのトリフルオロ酢酸塩（白色の固体、４４６ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ、３３％）として得た。質量分析データ：予測値（Ｍ＋１）：３７０．４、観測値：３７０．２。プロトンＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ｄｍｓｏ−ｄ６）：  １１．２０  （ｓ，  １Ｈ），  ９．２２  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．５５  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９．６Ｈｚ），  ７．９９  （ｂｒ  ｓ，  ３Ｈ），  ７．８９  （ｄｄ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  ２．０，  ６．８Ｈｚ），  ７．６１  （ｄｄ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  １．６，  ６．８Ｈｚ），  ４．６６  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９．６Ｈｚ），  ３．４０  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．０，  １１．４Ｈｚ），  ３．２２  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．８，  １１．８Ｈｚ），  １．３８  −  １．４６  （ｍ，  ２Ｈ），  １．３０  （ｓ，  ３Ｈ），  １．２５  （ｓ，  １Ｈ），  ０．８４  −  ０．９３  （ｍ，  ２Ｈ）。
【０２１２】
Ｄ．Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４’−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）エチニル）ビフェニル−４−カルボキサミド（Ｉ−５）の合成
【０２１３】
【化１１】
2014501716.tif 000042
【０２１４】
丸底フラスコに、メチル４’−ブロモビフェニル−４−カルボキシレート（２．０ｇ、６．８７ｍｍｏｌ、１．０当量）、それに続いてＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解したラセミの２−ｔｒａｎｓ−エチニルシクロプロピル）メタノール（０．９９１ｇ、１０．３０ｍｍｏｌ、１．５当量）の溶液を加えた。これに、パラジウムジクロリドビス−トリフェニルホスフィン（２４１ｍｇ、０．３４３ｍｍｏｌ、０．０５当量）、ヨウ化銅（Ｉ）（１３１ｍｇ、０．６８７ｍｍｏｌ、０．１当量）、次いでトリエチルアミン（６．８７ｍＬ、４９．３ｍｍｏｌ、７．１８当量）を加えた。反応物を７５℃で約２時間撹拌した。反応物を室温に冷却し、固体を濾別し、ＴＨＦですすいだ。溶液を、フリーザーに５日間置いた。乾燥するまで濃縮する。ＤＣＭを加え、沈殿物が形成される。沈殿物を濾過し、最低限のＤＣＭですすぐ。ＴＬＣは、ｐｐｔが主として生成物（約１．５ｇの固体）を含有することを示す。ヘキサン（５ｍＬ）中の１０％ＥｔＯＡｃで粉砕し、溶媒をピペットで除去し、ＴＬＣは、固体が生成物および液体が除去された出発材料−ブロミドおよびいくらかのベースライン不純物を含有することを示す。さらなるヘキサン（５ｍＬ）中の１０％ＥｔＯＡｃを加え、３０分間撹拌し、濾過し、ヘキサン（５ｍＬ）中の１０％ＥｔＯＡｃですすぎ、固体を乾燥させた。９００ｍｇの粗メチル４’−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）エチニル）ビフェニル−４−カルボキシレートを得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  ０．８２−０．８５  （ｍ，  ２Ｈ），  １．３５−１．４３  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．２３−３．２９  （ｍ，  １Ｈ），  ３．４０−３．４２  （ｍ，  １Ｈ），  ３．８４  （ｓ，  ３Ｈ），  ４．６５−４．６７  （ｔ，  １Ｈ），  ７．４３−７．４５  （ｄ，  ２Ｈ），  ７．６７−７．７０  （ｄ，  ２Ｈ），  ７．８０−７．８２  （ｄ，  ２Ｈ），  ７．９９−８．０１  （ｄ，  ２Ｈ）。
【０２１５】
【化１２】
2014501716.tif 000043
【０２１６】
メチル４’−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）エチニル）ビフェニル−４−カルボキシレート（９００ｍｇ、２．９４ｍｍｏｌ、１．０当量）を、メタノール（５ｍＬ）、ＤＭＦ（２ｍＬ）、およびＴＨＦ（５ｍＬ）に溶解した。室温で１．０ＭのＮａＯＨ（４．４１ｍＬ、４．４０７ｍｍｏｌ、１．５当量）を加えた。反応物を４日間撹拌した。反応物を濃縮し、ＭｅＯＨおよびＴＨＦを除去し、６ＮのＨＣｌ（約５ｍＬ）で約３のｐＨに酸性化した。ＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出し、有機層を合わせ、飽和ＮａＣｌで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、濃縮した。８９０ｍｇの４’−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）エチニル）ビフェニル−４−カルボン酸を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  ０．７９−０．８８  （ｍ，  ２Ｈ），  １．３４−１．４４  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．２２−３．２６  （ｍ，  １Ｈ），  ３．４０−３．４４  （ｍ，  １Ｈ），  ７．４２−７．４４  （ｄ，  ２Ｈ），  ７．６６−７．６８  （ｄ，  ２Ｈ），  ７．７６−７．７８  （ｄ，  ２Ｈ），  ７．９７−７．９９  （ｄ，  ２Ｈ），  ８．１０  （ｓ，  １Ｈ）。
【０２１７】
【化１３】
2014501716.tif 000044
【０２１８】
（Ｓ）−メチル２−アミノ−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタノエート（１５０ｍｇ、０．６０９ｍｍｏｌ、１．０当量）および４’−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）エチニル）ビフェニル−４−カルボン酸（１７８ｍｇ、０．６０９ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解した。これに、ＤＩＰＥＡ（０．２６６ｍＬ、１．５２３ｍｍｏｌ、２．５当量）、次いでＨＡＴＵ（２７８ｍｇ、０．７３１ｍｍｏｌ、１．２当量）を加えた。これを室温で約４８時間撹拌した。反応物を１Ｍのクエン酸および酢酸エチルに分配した。有機物を半飽和塩化ナトリウム、飽和炭酸水素ナトリウム、次いで飽和塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、蒸発乾固させた。３７０ｍｇの粗（Ｓ）−メチル３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−（４’−（（（１Ｓ，２Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）エチニル）ビフェニル−４−イルカルボキサミド）−３−メチルブタノエートを得た。ＬＣＭＳ  Ｍ＋１、予測値＝５２１．３、観測値＝５２１．３。
【０２１９】
【化１４】
2014501716.tif 000045
【０２２０】
（Ｓ）−メチル−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−（４’−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）エチニル）ビフェニル−４−イルカルボキサミド）−３−メチルブタノエート（粗製物）を、メタノール（１ｍＬ）に溶解した。室温でジオキサン（１．２８３ｍＬ、５．１３ｍｍｏｌ、８．４３当量）中の４．０ＭのＨＣｌを加えた。反応は、９０分後に完了した（ＨＰＬＣ）。反応物を、ロータリーエバポレーター上で０℃にて濃縮した。これに、ＩＰＡ（１ｍＬ）、次いでヒドロキシルアミン溶液（０．８０４ｍＬ、１２．１８ｍｍｏｌ、２０当量）を加えた。フラスコを４℃で約１２０時間置いた。反応物をゴム状の塊に濃縮した（反応物を０℃で保持しながら）。これに、水（３ｍＬ）およびＡＣＮ（０．５ｍＬ）を加えた。０℃である間に、ＴＦＡ（３ｍＬ）を使用して酸性化した。さらなる水（１ｍＬ）およびＡＣＮ（１ｍＬ）を加えた。ＲＰ  ＨＰＬＣ（１’’カラム、２５ｍＬ／分、水／ＡＣＮ中０．１％ＴＦＡ、１０％Ｂで平衡化）によって精製した。シリンジフィルター（２×６．５ｍＬ）を使用して、１’’カラム（１０ｍＬ／分、５％Ｂ）に充填した。１分にわたり２５ｍＬ／分に傾斜させた。１５分間１０％Ｂ、次いで８０分にわたり１０〜７０％Ｂとし、生成物は４１〜４８分で溶出した。所望の画分を合わせ、凍結し、凍結乾燥器上に置いた。１０５ｍｇのＮ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４’−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）エチニル）ビフェニル−４−カルボキサミド（Ｉ−５）、ＴＦＡを得た。ＬＣＭＳ  Ｍ＋１、予測値＝４２２．２、観測値＝４２２．２。１Ｈ  ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  ０．８０−０．８８  （ｍ，  ２Ｈ），  １．２７  （ｓ，  ３Ｈ），  １．３１  （ｓ，  ３Ｈ），  １．３６−１．４４  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．２１−３．２９  （ｍ，  １Ｈ），  ３．４０−３．４５  （ｍ，  １Ｈ），  ４．６５−４．７１  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．４４−７．４６  （ｄ，  ２Ｈ），  ７．６８−７．７１  （ｄ，  ２Ｈ），  ７．７９−７．８１  （ｄ，  ２Ｈ），  ７．９７−７．９９  （ｄ，  ２Ｈ），  ８．４６−８．４８  （ｄ，  １Ｈ），  ９．２２  （ｓ，  １Ｈ），  １１．２１  （ｂｒ，  １Ｈ）。
【０２２１】
Ｅ．Ｎ−（（Ｓ）−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−３−（メチルアミノ）−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−６）およびＮ−（（Ｓ）−１−（ヒドロキシアミノ）−３−（２−ヒドロキシエチルアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−７）の合成
【０２２２】
【化１５】
2014501716.tif 000046
【０２２３】
２５０ｍＬの丸底フラスコ中に、ＤＭＦ（２０ｍｌ）中のＮ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１）（１．２ｇ、３．２５ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（２ｍＬ、１４．３５ｍｍｏｌ）、およびホルムアルデヒド（０．２ｇ、６．６６ｍｍｏｌ）を加え、黄色の溶液を得た。反応混合物を３時間撹拌した。過剰なホルムアルデヒドをｎ−ブチルアミン（２ｍｌ）でクエンチした。シアノ水素化ホウ素ナトリウム（５７０ｍｇ、１４．３ｍｍｏｌ）および酢酸（４ｍｌ）を、室温で０℃にて加えた。反応混合物を、ＬＣＭＳによってチェックした。溶媒を除去した後、生成物をＨＰＬＣによって精製し、４４０ｍｇのＮ−（（Ｓ）−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−３−（メチルアミノ）−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−６）を得た。ＬＣ−ＭＳ（Ｍ＋１）３８４；化学式：Ｃ２１Ｈ２５Ｎ３Ｏ４、正確な質量：３８３．１８。１ＨＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６），  ＴＦＡ塩：  δ０．８８  （ｍ，  ２Ｈ）  １．３０（ｓ，  ３Ｈ），  １．３５  （ｓ，  ３Ｈ），  １．４４（ｍ，  １Ｈ），  ２．５１（ｓ，  Ｈ），  ３．３９（ｍ，  １Ｈ），  ３．４１（ｍ，  １Ｈ），  ４．７（  ｂｒ．ｄ，  １Ｈ），  ４．８４（ｄ，  １Ｈ），  ７．５８（ｄ，  ２Ｈ），  ７．９１（ｄ，  ２Ｈ），  ８．５１  （ｂｒ．ｍ，  １ＮＨ）  ８．６４（ｄ，  １ＮＨ），  ９．２３（Ｓ，  ＮＨ）  ．  １１．１７（ｓ，  ＯＨ）。
【０２２４】
２５０ｍＬの丸底フラスコに、ＤＭＦ（２０ｍｌ）中のＮ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１）（１ｇ、２．７１ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．３７７ｍｌ、２．７１ｍｍｏｌ）、およびアセトアルデヒド（０．１１９ｇ、２．７１ｍｍｏｌ）を加え、黄色の溶液を得た。反応混合物を３時間撹拌した。シアノ水素化ホウ素ナトリウム（５７０ｍｇ、１４．３ｍｍｏｌ）および酢酸（２ｍｌ）を、室温で加えた。反応混合物を、ＬＣＭＳによってチェックした。反応混合物を濃縮し、生成物をＨＰＬＣによって精製し、６４２ｍｇのＮ−（（Ｓ）−１−（ヒドロキシアミノ）−３−（２−ヒドロキシエチルアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−７）を得た。ＬＣ−ＭＳ（Ｍ＋１）３９８；化学式：Ｃ２２Ｈ２７Ｎ３Ｏ４、正確な質量：３９７．２０。１ＨＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６），  ＴＦＡ塩：  δ０．８５  （ｍ，  ２Ｈ），  １．１４（ｔ，  ３Ｈ），  １．２９（ｓ，  ３Ｈ），  １．３９  （ｓ，  ３Ｈ），  １．４４（ｍ，  １Ｈ），  ２．９６（ｂｒ．ｍ，  ２Ｈ）  ３．２４（ｍ，  ２Ｈ）  ３．３９（ｍ，  ２Ｈ），  ４．６４（  ｂｒ．ｄ，  １Ｈ），  ４．８５（ｄ，  １Ｈ），  ７．６０（ｄ，  ２Ｈ），  ７．９２（ｄ，  ２Ｈ），  ８．５９  （ｂｒ．ｍ，  １ＮＨ）  ８．４５（ｂｒｔ，  １ＮＨ），  ９．２３（Ｓ，  ＮＨ），  １１．１５（ｓ，  ＯＨ）。
【０２２５】
Ｆ．Ｎ−（（Ｓ）−１−（ヒドロキシアミノ）−３−（２−ヒドロキシエチルアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−８）の合成
【０２２６】
【化１６】
2014501716.tif 000047
【０２２７】
２５０ｍＬの丸底フラスコ（ｔ＝ｇ）に、ＤＭＦ（２０ｍｌ）中のＮ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（１ｇ、２．７１ｍｍｏｌ）、およびトリエチルアミン（０．３７７ｍｌ、２．７１ｍｍｏｌ）を加え、黄色の溶液を得た。２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）アセトアルデヒド（０．４９４ｇ、２．８３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１８時間撹拌し、乾燥するまで濃縮した。残渣をＴＨＦ（１５ｍｌ）および酢酸（２ｍｌ）に溶解し、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（６００ｍｇ、１５ｍｍｏｌ）を室温で加えた。反応混合物を、ＬＣＭＳによってチェックした。室温で２時間撹拌した後、ＴＦＡ（５ｍｌ）を加え、さらに３時間撹拌した。反応の完了をＬＣＭＳによって確認し、反応物を濃縮し、生成物をＨＰＬＣ上で精製し、３７０ｍｇのＮ−（（Ｓ）−１−（ヒドロキシアミノ）−３−（２−ヒドロキシエチルアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−８）を得た。ＬＣ−ＭＳ（Ｍ＋１）４１４；化学式：Ｃ２２Ｈ２７Ｎ３Ｏ５、正確な質量：４１３．２０；１ＨＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６），  ＴＦＡ塩：  δ０．８８  （ｍ，  ２Ｈ）  １．３０（ｓ，  ３Ｈ），  １．３５  （ｓ，  ３Ｈ），  １．４４（ｍ，  １Ｈ），  ３．２２（ｍ，  ２Ｈ），  ３．３９（ｍ，  ２Ｈ），  ４．６４（ｂｒ．ｄ，  １Ｈ），  ４．９０（ｄ，  １Ｈ），  ５．２５（ｂｒ．  Ｓ，  １Ｈ）  ７．６０（ｄ，  ２Ｈ），  ７．９１（ｄ，  ２Ｈ），  ８．５９  （ｂｒ．ｍ，  １ＮＨ）  ８．７１（ｄ，  １ＮＨ），  ９．２６（Ｓ，  ＮＨ）  ．  １１．１９（ｓ，  ＯＨ）。
【０２２８】
Ｇ．Ｎ−（（Ｓ）−３−（ジメチルアミノ）−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−９）の合成
【０２２９】
【化１７】
2014501716.tif 000048
【０２３０】
Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（３００ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に溶解し、パラホルムアルデヒド（７３２ｍｇ、８．１ｍｍｏｌ、１０当量）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．５６ｍＬ、３．３ｍｍｏｌ、４当量）で室温にて１６時間処理した。トリフルオロ酢酸（１．３ｍＬ、１６．２ｍｍｏｌ、２０当量）およびシアノ水素化ホウ素ナトリウム（１０１ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ、２当量）を導入した。
【０２３１】
粗材料を逆相ＨＰＬＣによって精製し、所望の画分をプールし、凍結乾燥し、Ｎ−（（Ｓ）−３−（ジメチルアミノ）−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミドをそのトリフルオロ酢酸塩（白色の固体、２．９ｍｇ、５．３μｍｏｌ、０．７％）として得た。質量分析データ：予測値（Ｍ＋１）：３９８．５、観測値：３９８．２。プロトンＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ｄｍｓｏ−ｄ６）：  １１．１６  （ｓ，  １Ｈ），  ９．２５  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ９．０５  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．６８  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  １０．０Ｈｚ），  ７．９４  （ｄｄ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  １．６，  ８．０ＨＺ），  ７．５９  （ｄｄ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  １．８，  ８．２Ｈｚ），  ５．０６  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９．６Ｈｚ），  ３．４  （水でピークが不明瞭），  ３．２１  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．２，  １１．２Ｈｚ），  ２．７５  （ｄ，  ３Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．６Ｈｚ），  ２．７３  （ｄ，  ３Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．２Ｈｚ），  １．４８  （ｓ，  ３Ｈ），  １．３９  −  １．４５  （ｍ，  ２Ｈ），  １．２８  （ｓ，  ３Ｈ），  ０．８５  −  ０．９１  （ｍ，  ２Ｈ）。
【０２３２】
Ｈ．Ｎ−（（Ｓ）−３−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１０）の合成
【０２３３】
【化１８】
2014501716.tif 000049
【０２３４】
撹拌した４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）安息香酸（７５０ｍｇ、３．１２ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（５７０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（３．４ｍｌ、過剰量）のＤＭＦ（３０ｍｌ）溶液に室温で、（Ｓ）−メチル２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−メチルブタノエート塩酸塩（４０２ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を周囲温度で１時間撹拌し、続いて水（５０ｍｌ）によって希釈した。溶液を酢酸エチル（１００ｍｌ×３）およびブライン（２０ｍｌ）で抽出した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、蒸発させた。このように得られた生成物（１．３ｇ）をＩＰＡ（２０ｍＬ）に溶解し、ＮＨ２ＯＨ（１０ｍＬ、過剰量）で処理し、室温で３日間撹拌した。過剰な溶媒を除去し、粗生成物を逆相ＨＰＬＣ上で精製し、１７８ｍｇのＮ−（（Ｓ）−３−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１０）を得た。ＬＣ−ＭＳ（Ｍ＋１）３７１；化学式：Ｃ２０Ｈ２２Ｎ２Ｏ５、正確な質量：３７０．１５。１ＨＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６），  ：  δ０．８８  （ｍ，  ２Ｈ）  １．１１（ｓ，  ３Ｈ），  １．１６  （ｓ，  ３Ｈ），  １．４４（ｍ，  １Ｈ），  ３．２０（ｍ，  １Ｈ），  ３．４０（ｍ，  ２Ｈ），  ４．３４（  ｄ，  １Ｈ），  ４．８４（ｄ，  １Ｈ），  ７．５８（ｄ，  ２Ｈ），  ７．８４（ｄ，  ２Ｈ），  ７．６（ｄ，  １ＮＨ），  ８．８８（ｂｒ．ｓ，  ＮＨ）  ．  １０．５７（ｓ，  ＯＨ）。
【０２３５】
Ｉ．Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１Ｓ，２Ｒ）−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルシクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１１）の合成
【０２３６】
【化１９】
2014501716.tif 000050
【０２３７】
（Ｓ，Ｅ）−エチル３−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）−２−メチルアクリレート（３）
【０２３８】
【数２４】
2014501716.tif 000051
【０２３９】
撹拌したＤ−マンニトールジアセトニド１（１３．０ｇ、４９．６ｍｍｏｌ）の炭酸水素ナトリウム（５％ａｑ、６０ｍｌ）溶液に、過ヨウ素酸ナトリウムの飽和溶液（１２．７４ｇ、５９．５ｍｍｏｌ）を室温にて滴下で添加した。添加すると、混合物の撹拌を室温で２時間続けた。次いで、エチル２−（ジエトキシホスホリル）プロパノエート２（２３．０ｇ、９９．２ｍｍｏｌ）、続いて炭酸カリウム（１４．３ｇ、１０３．６ｍｍｏｌ）を加え、混合物の撹拌を室温でさらに１２０時間続けた。混合物を５００ｍｌの水に加え、ＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮し、次いでクロマトグラフ（ＰＥ：ＥＡ（３０／１））にかけ、所望の化合物３（５．５ｇ）を無色の油（収率：５１．８％）として得た。
【０２４０】
（Ｓ，Ｅ）−３−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）−２−メチルプロパ−２−エン−１−オール（４）
【０２４１】
【数２５】
2014501716.tif 000052
【０２４２】
（Ｓ，Ｅ）−エチル３−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）−２−メチルアクリレート３（５．３５ｇ、５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５０ｍｌ）溶液に、アルゴン下で０℃にてＤＩＢＡＬ−Ｈ（５０ｍＬ、５０ｍｍｏｌ）の溶液を滴下で添加した。添加すると、混合物の撹拌を０℃で３時間続けた。ＴＬＣによって化合物３が殆ど残っていないことが示されたとき、反応物を３０ｍｌのアンモニア水でクエンチし、３００ｍｌのジクロロメタンと共にさらに１時間撹拌した。混合物を濾過し、残渣をＴＨＦで洗浄し、合わせた有機層を乾燥させ、濃縮し、粗製物４を得て、これをシリカゲルカラム（ＰＥ：ＥＡ＝１０：１〜５：１）によって精製し、無色の油として３．０ｇの化合物４を得た。収率：７０％。
【０２４３】
（Ｓ，Ｅ）−３−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）−２−メチルアリルアセテート（５）
【０２４４】
【数２６】
2014501716.tif 000053
【０２４５】
（Ｓ，Ｅ）−３−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）−２−メチルプロパ−２−エン−１−オール４（２．９２ｇ、１７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍｌ）溶液に、トリエチルアミン（４．３ｇ、４２．５ｍｍｏｌ）を加えた。次いで、アルゴン下で０℃にて塩化アセチル（２．７ｇ、３４ｍｍｏｌ）を滴下で添加した。添加すると、混合物の撹拌を０℃で３時間続けた。ＴＬＣによって化合物４が殆ど残っていないことが示されたとき、反応物を１５０ｍｌの水に注いだ。ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮し、次いでクロマトグラフ（ＰＥ：ＥＡ（１０／１））にかけ、所望の化合物５（３．４ｇ）を無色の油（収率：８９％）として得た。
【０２４６】
（（ｔｒａｎｓ）−２−（（Ｓ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）−１−メチルシクロプロピル）メチルアセテート（６）
【０２４７】
【数２７】
2014501716.tif 000054
【０２４８】
（Ｓ，Ｅ）−３−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）−２−メチルアリルアセテート５（３．２ｇ、１５ｍｍｏｌ）のヘキサン（２００ｍＬ）溶液に、アルゴン下で−２０℃にてジエチル亜鉛（ヘキサン中１Ｍ、７５ｍＬ）を少しずつ加えた。添加の後、−２０℃未満で強く撹拌しながらジヨードメタン（４０ｇ、１５０ｍｍｏｌ）を滴下で添加した。混合物の撹拌を−２０℃未満でさらに８時間続け、室温に温め、さらに８時間撹拌を続けた。反応混合物を１００ｍｌの冷たいＮＨ４Ｃｌ水溶液でクエンチし、次いでエーテル（１００ｍｌ×５）で抽出した。合わせた有機層をチオ硫酸ナトリウム水溶液、水、ブラインで洗浄し、次いで乾燥させ、濃縮し、粗製物６を得て、これをシリカゲルカラム（ＰＥ：ＥＡ＝３０：１〜２０：１）によって精製し、６（３．０ｇ）を無色の油として得た。収率：８８％。
【０２４９】
（（ｔｒａｎｓ）−２−（（Ｓ）−１，２−ジヒドロキシエチル）−１−メチルシクロプロピル）メチルアセテート（７）
【０２５０】
【数２８】
2014501716.tif 000055
【０２５１】
３０ｍｌの８０％酢酸中の（（ｔｒａｎｓ）−２−（（Ｓ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）−１−メチルシクロプロピル）メチルアセテート６（２．９７ｇ、１３ｍｍｏｌ）の混合物の撹拌を室温で１５時間続けた。ＴＬＣによって６が殆ど残っていないことが示されたとき、混合物を３００ｍｌの飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に滴下で添加した。次いで、ジクロロメタン（２００ｍｌ×３）で抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、乾燥させ、濃縮し、粗製物７を得て、シリカゲルカラム（ＰＥ：ＥＡ＝３：１〜１：１）によって精製し、化合物７（１．５ｇ）を無色の油として得た。収率：６２％。
【０２５２】
（（ｔｒａｎｓ）−２−ホルミル−１−メチルシクロプロピル）メチルアセテート（８）
【０２５３】
【数２９】
2014501716.tif 000056
【０２５４】
撹拌した（（ｔｒａｎｓ）−２−（（Ｓ）−１，２−ジヒドロキシエチル）−１−メチルシクロプロピル）メチルアセテート７（１．４１ｇ、７．５ｍｍｏｌ）の炭酸水素ナトリウム（５％ａｑ）（２０ｍｌ）溶液に、過ヨウ素酸ナトリウムの飽和溶液（１．９３ｇ、９ｍｍｏｌ）を室温にて滴下で添加した。添加すると、混合物の撹拌を室温で２時間続けた。ＴＬＣによって７が殆ど残っていないことが示されたとき、混合物を５０ｍｌの水に加え、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮し、次いでクロマトグラフ（ＰＥ：ＥＡ（２０／１））にかけ、所望の化合物８（１．０ｇ）を無色の油（収率：８５％）として得た。
【０２５５】
（（ｔｒａｎｓ）−２−エチニル−１−メチルシクロプロピル）メタノール（９）
【０２５６】
【数３０】
2014501716.tif 000057
【０２５７】
（（ｔｒａｎｓ）−２−ホルミル−１−メチルシクロプロピル）メチルアセテート８（７８０ｍｇ、５ｍｍｏｌ）のメタノール（１５ｍＬ）溶液に、ベストマン試薬（１．４４ｇ、７．５ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（２．０７ｇ、１５ｍｍｏｌ）を加え、混合物の撹拌を室温で５時間続けた。ＴＬＣによって８が殆ど残っていないことが示されたとき、反応混合物を水（２０ｍＬ）で希釈した。エーテル（２０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機層を乾燥させ、濃縮し、粗製物９を得て、これをシリカゲルカラム（ＰＥ：Ｅｔ２Ｏ＝１０：１〜５：１）によって精製し、９を無色の油（４００ｍｇ）として得た。収率：７３％。
【０２５８】
メチル４−（（（ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルシクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンゾエート（１１）
【０２５９】
【数３１】
2014501716.tif 000058
【０２６０】
（（ｔｒａｎｓ）−２−エチニル−１−メチルシクロプロピル）メタノール９（４００ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（１２６ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（６８．４ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１．０９ｇ、１０．８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液を、メチル４−（ブロモエチニル）ベンゾエート１０（８７０ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）でアルゴン下にて処理した。混合物の撹拌を室温で５時間続けた。ＴＬＣによって化合物９が殆ど残っていないことが示されたとき、溶媒を減圧下で除去し、残渣を水（５０ｍＬ）で希釈し、ジクロロメタン（３×５０ｍＬ）で抽出し、有機層を乾燥させ、濃縮し、粗製物１１を赤色の油として得て、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝２０：１〜１０：１）によって精製し、１１（４３０ｍｇ）を黄色の固体として得た。収率：４０％。
【０２６１】
４−（（（１Ｓ，２Ｒ）−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルシクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）安息香酸（ＡＣＨＬ０２−１１２−中間体−Ａ）
【０２６２】
【数３２】
2014501716.tif 000059
【０２６３】
撹拌したメチル４−（（（ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルシクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンゾエート１１（４００ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１６ｍｌ）溶液に、水酸化リチウム一水和物（２４０ｍｇ、６ｍｍｏｌ）の水（４ｍＬ）溶液を加えた。添加すると、混合物の撹拌を室温で１５時間続けた。ＬＣＭＳによって化合物１１が殆ど残っていないことが示されたとき、混合物を５０ｍｌの水に加えた。０℃にて１ＭのＨＣｌでｐＨを３．０に調節し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮し、所望の化合物（３７０ｍｇ）を黄色の粉末として得た（収率：９２％）。ＬＣＭＳ：ＣＰ−０００４３４４−００６−３−０３６６５−ＬＣＭＳＡ０３５（ＥＳＩ）ｍ／ｚ＝２５５（Ｍ＋１）。１ＨＮＭＲ：  ＣＰ−０００４３４４−００６−３  （ＤＭＳＯ−ｄ６，  ４００  ＭＨｚ）  δ：１３．１（ｓ，  １Ｈ），  ７．９１（ｄ，  Ｊ＝８．４  Ｈｚ  ，  ２Ｈ），  ７．６２（ｄ，  Ｊ＝８．４Ｈｚ  ，  ２Ｈ），  ４．７５（ｓ，  １Ｈ），  ３．２２（ｍ，  ２Ｈ），  １．５９（ｍ，  １Ｈ），  １．１８（ｓ，  ３Ｈ），  １．０８（ｍ，  １Ｈ），  ０．６６（ｍ，  １Ｈ）。
【０２６４】
【化２０】
2014501716.tif 000060
【０２６５】
（Ｓ）−メチル２−アミノ−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタノエート（３４７ｍｇ、１．４０８ｍｍｏｌ、１．０当量）および４−（（（１Ｓ，２Ｒ）−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルシクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）安息香酸（３５８ｍｇ、１．４０８ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ＤＭＦ（３ｍＬ）に溶解した。これに、ＤＩＰＥＡ（０．６１５ｍＬ、３．５２ｍｍｏｌ、２．５当量）、次いでＨＡＴＵ（６４２ｍｇ、１．６８９ｍｍｏｌ、１．２当量）を加えた。これを室温で約１６時間撹拌した。反応物を１Ｍのクエン酸および酢酸エチルに分配した。有機物を半飽和塩化ナトリウム、飽和炭酸水素ナトリウム、次いで飽和塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、蒸発乾固させた。９１２ｍｇの粗（Ｓ）−メチル３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−（４−（（（１Ｓ，２Ｒ）−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルシクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエートを得た。ＬＣＭＳ  Ｍ＋１、予測値＝４８３．２、観測値＝４８３．２。
【０２６６】
【化２１】
2014501716.tif 000061
【０２６７】
（Ｓ）−メチル−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−（４−（（（１Ｓ，２Ｒ）−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルシクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエート（粗製物）を、メタノール（１ｍＬ）に溶解した。室温でジオキサン（２．９７ｍＬ、１１．８６ｍｍｏｌ、８．４３当量）中の４．０ＭのＨＣｌを加えた。反応は６０分後に完了した（ＨＰＬＣ）。反応物をロータリーエバポレーター上で０℃にて濃縮した。これに、ＩＰＡ（２ｍＬ）、次いでヒドロキシルアミン溶液（１．８５９ｍＬ、２８．１ｍｍｏｌ、２０当量）を加えた。フラスコを４℃で約４０時間置いた。反応物をゴム状の塊に濃縮した（反応物を０℃で保持しながら）。これに、水（３ｍＬ）およびＡＣＮ（０．５ｍＬ）を加えた。０℃である間に、ＴＦＡ（３ｍＬ）を使用して酸性化した。さらなる水（１ｍＬ）およびＡＣＮ（１ｍＬ）を加えた。ＲＰ  ＨＰＬＣ（２’’カラム、５０ｍＬ／分、水／ＡＣＮ中０．１％ＴＦＡ、５％Ｂで平衡化）によって精製した。シリンジフィルター（２×６．５ｍＬ）を使用して、２’’カラム（１０ｍＬ／分、５％Ｂ）に充填した。１分にわたり５０ｍＬ／分に傾斜させた。６６分にわたり５〜３０％Ｂとし、生成物は２５％Ｂで溶出する。所望の画分を合わせ、凍結し、凍結乾燥器上に置いた。４１０ｍｇのＮ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１Ｓ，２Ｒ）−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルシクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１１）、ＴＦＡを得た。ＬＣＭＳ  Ｍ＋１、予測値＝３８４．２、観測値＝３８４．２。１Ｈ  ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  ０．６１−０．６４  （ｔ，  １Ｈ），  １．０２−１．０６  （ｍ，  １Ｈ），  １．１６  （ｓ，  ３Ｈ），  １．２５  （ｓ，  ３Ｈ），  １．３０  （ｓ，  ３Ｈ），  １．５５−１．６０  （ｍ，  １Ｈ），  ３．１７−３．２９  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．６５−４．６７  （ｄ，  １Ｈ），  ７．６１−７．６３  （ｄ，  ２Ｈ），  ７．８８−７．９０  （ｄ，  ２Ｈ），  ７．９８  （ｓ，  ２Ｈ），  ８．５３−８．５６  （ｄ，  １Ｈ），  ９．２１  （ｂｒ，  １Ｈ），  １１．１９  （ｓ，  １Ｈ）。
【０２６８】
Ｊ．Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，３−ｃｉｓ）−３−（ヒドロキシメチル）シクロブチル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１２）およびＮ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，３−ｔｒａｎｓ）−３−（ヒドロキシメチル）シクロブチル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１３）の合成
【０２６９】
【化２２】
2014501716.tif 000062
【０２７０】
３−メチレンシクロブタンカルボン酸（２）
【０２７１】
【数３３】
2014501716.tif 000063
【０２７２】
３−メチレンシクロブタンカルボニトリル１（２７．９ｇ、０．３ｍｏｌ）のエタノール（２００ｍＬ）および水（２００ｍＬ）溶液を、水酸化カリウム（８４ｇ、１．５ｍｏｌ）で処理した。このように得られた混合物を撹拌し、１０５℃に４時間加熱した。エタノールを減圧下で除去した。残渣を０℃に冷却し、ｐＨを１〜２に調節し、次いで酢酸エチルで抽出し、硫酸ナトリウム４上で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した（３０．２ｇ、収率＝９０％）。
【０２７３】
メチル３−メチレンシクロブタンカルボキシレート（３）
【０２７４】
【数３４】
2014501716.tif 000064
【０２７５】
３−メチレンシクロブタンカルボン酸２（２９．１２ｇ、０．２６ｍｏｌ）、炭酸カリウム（７０．２ｇ、０．５２ｍｏｌ）、アセトン（５００ｍＬ）および硫酸ジメチル（３９．３１２ｇ、０．３１２ｍｏｌ）の混合物を、２時間加熱還流させた。反応混合物を室温に冷却し、濾過した。溶媒を減圧下で除去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、所望の生成物を無色の油として得た（２７．５ｇ、収率＝８４％）。
【０２７６】
メチル３−（ヒドロキシメチル）シクロブタンカルボキシレート（４）
【０２７７】
【数３５】
2014501716.tif 000065
【０２７８】
乾燥した三つ口フラスコに、メチル３−メチレンシクロブタンカルボキシレート３（２４．４６ｇ、０．２１ｍｏｌ）および乾燥ＴＨＦ（１３０ｍｌ）をチャージし、−１０℃に冷却し、次いでボラン−ＴＨＦ錯体（７０．０ｍＬ）をシリンジによって滴下で添加した。このように得られた混合物を室温で４時間撹拌し、−２０℃〜−１０℃に冷却した。メタノールを加え、１５分間撹拌した。水酸化ナトリウム（３Ｍ、３０ｍＬ）および過酸化水素（３４．０ｇ、０．２１０ｍｏｌ）を順々に加えた。混合物を２時間撹拌し、飽和亜硫酸ナトリウム溶液（１００ｍＬ）を加えた。反応混合物を水で希釈し、次いで酢酸エチルで抽出し、水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（２８．７３ｇ、９５％）によって精製した。
【０２７９】
（ｔｒａｎｓ）−メチル３−ホルミルシクロブタンカルボキシレート（５ａ）および（ｃｉｓ）−メチル３−ホルミルシクロブタンカルボキシレート（５ｂ）
【０２８０】
【数３６】
2014501716.tif 000066
【０２８１】
塩化オキサリル（１７．８ｇ、１３９ｍｍｏｌ、２．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（４５０ｍＬ）溶液に、ジクロロメタン（５０ｍＬ）中のＤＭＳＯ（２１．７ｇ、２７８ｍｍｏｌ、４．０当量）を−７８℃でゆっくりと加えた。３０分後、ジクロロメタン（１５０ｍＬ）中のメチル３−（ヒドロキシメチル）シクロブタンカルボキシレート４（１０ｇ、６９．４ｍｍｏｌ、１．０当量）を−７８℃にて滴下で添加した。混合物を−７８℃でさらに２時間撹拌し、次いでトリエチルアミン（７０ｇ、７００ｍｍｏｌ、１０．０当量）を−７８℃で加えた。２０分後、混合物を室温に温め、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液を加えた。層を分離し、水層をジクロロメタン（３×２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（硫酸ナトリウム）、濾過し、濃縮し、粗生成物をｃｉｓおよびｔｒａｎｓ異性体の混合物として得た。精製を行ない、シリカカラムによって５ａ（ｔｒａｎｓ、３．１ｇ）および５ｂ（ｃｉｓ、２．９ｇ）を得た。
【０２８２】
（ｃｉｓ）−メチル３−（２，２−ジブロモビニル）シクロブタンカルボキシレート（６ｂ）
【０２８３】
【数３７】
2014501716.tif 000067
【０２８４】
四臭化炭素（１３．５６ｇ、４０．８９ｍｍｏｌ、２．０当量）のジクロロメタン（４０ｍＬ）溶液に、−２０℃未満にてアルゴン下でトリフェニルホスフィン（２１．４１ｇ、８１．８０ｍｍｏｌ、４．０当量）のジクロロメタン（８０ｍＬ）溶液を滴下で添加した。混合物の撹拌を−２０℃で３０分間続け、次いで−７８℃に冷却した。８０ｍＬのジクロロメタン中の（ｃｉｓ）−メチル３−ホルミルシクロブタンカルボキシレート５ｂ（２．９ｇ、２０．４０ｍｍｏｌ、１．０当量）を滴下で添加し、−７８℃でさらに１時間撹拌を続けた。混合物を室温に温めた。反応混合物を、撹拌した３００ｍＬのＰＥに滴下で添加した。混合物を濾過し、残渣をＰＥで洗浄した。合わせた有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮し、標的化合物を得て、これをシリカゲルカラムによって精製した（２．３ｇ、収率＝３７％）。
【０２８５】
（（ｃｉｓ）−３−（２，２−ジブロモビニル）シクロブチル）メタノール（７ｂ）
【０２８６】
【数３８】
2014501716.tif 000068
【０２８７】
ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解した化合物６ｂ（２．５ｇ、８．４ｍｍｏｌ、１．０当量）に、水素化ホウ素リチウム（２０３ｍｇ）を０℃にて加えた。反応混合物の撹拌を室温で３時間続けた。水（５ｍＬ）を加え、酢酸エチルで抽出した。合わせた酢酸エチル層を乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗製物を、シリカゲルカラム（ＰＥ：ＥＡ＝５：１）によって精製した（１．８８ｇ、収率＝８３％）。
【０２８８】
メチル４−（（（ｃｉｓ）−３−（ヒドロキシメチル）シクロブチル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンゾエート（９ｂ）
【０２８９】
【数３９】
2014501716.tif 000069
【０２９０】
乾燥ＤＭＦ（３０ｍＬ）中の（（ｃｉｓ）−３−（２，２−ジブロモビニル）シクロブチル）メタノール７ｂ（１．８８ｇ、６．９ｍｍｏｌ、１．０当量）、メチル４−エチニルベンゾエート８（１．５６ｇ、９．７ｍｍｏｌ、１．４当量）、トリ（４−メチルフェニル）ホスフィン（９８ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ、０．０４当量）、Ｐｄ（ｄｂａ）４（６４ｍｇ、０．０６９ｍｍｏｌ、０．０１当量）の混合物に、トリエチルアミン（２．１１ｇ、２０．９ｍｍｏｌ、３．０当量）を窒素雰囲気下にて加えた。反応混合物の撹拌を８０℃で１５時間続けた。ＬＣＭＳによって反応をモニターした。反応混合物をＮＨ４Ｃｌ水溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出した。合わせた酢酸エチル層を水、ブラインで洗浄し、乾燥させた。溶媒を減圧下で蒸発させ、粗製物を得て、これをシリカゲルカラム（ＰＥ：ＥＡ＝５：１）によって精製した（４５０ｍｇ、収率＝２４％）。
【０２９１】
４−（（（ｃｉｓ）−３−（ヒドロキシメチル）シクロブチル）ブタ−１，３−ジイニル）安息香酸（ＡＣＨＬ０２−１４６−ｃｉｓ）
【０２９２】
【数４０】
2014501716.tif 000070
【０２９３】
メチル４−（（（ｃｉｓ）−３−（ヒドロキシメチル）シクロブチル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンゾエート９ｂ（４５０ｍｇ、１．０当量）のＴＨＦ（２００ｍＬ）溶液に、水酸化リチウム一水和物（２８２ｍｇ、４．０当量）を加え、次いで混合物を２５℃で５時間反応させた。次いで、反応溶媒を除去し、３ＮのＨＣｌでＰＨ５〜６に中和し、酢酸エチルで抽出した。合わせた酢酸エチル層をブラインで洗浄し、乾燥させた。溶媒を蒸発させ、標的化合物（４００ｍｇ、収率＝９４％）を得た。
【０２９４】
（ｔｒａｎｓ）−メチル３−（２，２−ジブロモビニル）シクロブタンカルボキシレート（６ａ）
【０２９５】
【数４１】
2014501716.tif 000071
【０２９６】
四臭化炭素（１１．２ｇ、３３．８０ｍｍｏｌ、２．０当量）のジクロロメタン（４０ｍＬ）溶液に、−２０℃未満にてアルゴン下でトリフェニルホスフィン（１７．７ｇ、６７．６０ｍｍｏｌ、４．０当量）のジクロロメタン（８０ｍＬ）溶液を滴下で添加した。混合物の撹拌を−２０℃で３０分間続け、次いで−７８℃に冷却した。８０ｍＬのジクロロメタン中の（ｔｒａｎｓ）−メチル３−ホルミルシクロブタンカルボキシレート５ａ（２．４ｇ、１６．９０ｍｍｏｌ、１．０当量）を滴下で添加し、−７８℃でさらに１時間撹拌を続けた。混合物を室温に温めた。反応混合物を、撹拌した３００ｍＬのＰＥに滴下で添加した。濾過し、残渣をＰＥで洗浄した。合わせた有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮し、標的化合物を得て、これをシリカゲルカラムによって精製した（２．５ｇ、収率＝５０％）。
【０２９７】
（（ｔｒａｎｓ）−３−（２，２−ジブロモビニル）シクロブチル）メタノール（７ａ）
【０２９８】
【数４２】
2014501716.tif 000072
【０２９９】
ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解した（ｔｒａｎｓ）−メチル３−（２，２−ジブロモビニル）シクロブタンカルボキシレート６ａ（２．５ｇ、８．４ｍｍｏｌ、１．０当量）に、０℃で水素化ホウ素リチウム（２０３ｍｇ）を加えた。反応混合物の撹拌を室温で３時間続けた。水（５ｍＬ）を加え、酢酸エチルで抽出した。合わせた酢酸エチル層を乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗製物を、シリカゲルカラム（ＰＥ：ＥＡ＝５：１）によって精製した（１．７０ｇ、収率＝７５％）。
【０３００】
メチル４−（（（ｔｒａｎｓ）−３−（ヒドロキシメチル）シクロブチル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンゾエート（９ａ）
【０３０１】
【数４３】
2014501716.tif 000073
【０３０２】
乾燥ＤＭＦ（３０ｍＬ）中の（（ｔｒａｎｓ）−３−（２，２−ジブロモビニル）シクロブチル）メタノール７ａ（１．７０ｇ、６．３ｍｍｏｌ、１．０当量）、化合物８（１．４１ｇ、８．８ｍｍｏｌ、１．４当量）、トリ（４−メチルフェニル）ホスフィン（８９ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ、０．０４当量）、Ｐｄ（ｄｂａ）４（５８ｍｇ、０．０６３ｍｍｏｌ、０．０１当量）の混合物に、窒素下でトリエチルアミン（１．９１ｇ、１８．９ｍｍｏｌ、３．０当量）を加えた。反応混合物の撹拌を８０℃で１５時間続けた。ＬＣＭＳによって反応をモニターした。反応混合物をＮＨ４Ｃｌ水溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出した。合わせた酢酸エチル層を水、ブラインで洗浄し、乾燥させた。溶媒を減圧下で蒸発させ、粗製物を得て、これをシリカゲルカラム（ＰＥ：ＥＡ＝５：１）によって精製した（５５０ｍｇ、収率＝３３％）。
【０３０３】
４−（（（ｔｒａｎｓ）−３−（ヒドロキシメチル）シクロブチル）ブタ−１，３−ジイニル）安息香酸（ＡＣＨＬ０２−１４６−ｔｒａｎｓ）
【０３０４】
【数４４】
2014501716.tif 000074
【０３０５】
メチル４−（（（ｔｒａｎｓ）−３−（ヒドロキシメチル）シクロブチル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンゾエート９ａ（５５０ｍｇ、１．０当量）のＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液に、水酸化リチウム一水和物（３４５ｍｇ、４．０当量）を加え、次いで混合物を２５℃で５時間反応させた。次いで、反応溶媒を除去し、３ＮのＨＣｌでｐＨ５〜６に中和し、酢酸エチルで抽出した。合わせた酢酸エチル層をブラインで洗浄し、乾燥させた。溶媒を蒸発させ、標的化合物（３４０ｍｇ、収率＝６５％）を得た。
【０３０６】
【化２３】
2014501716.tif 000075
【０３０７】
（Ｓ）−メチル２−アミノ−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタノエート（３８７ｍｇ、１．５７３ｍｍｏｌ、１．０当量）および４−（（（１，３−ｃｉｓ）−３−（ヒドロキシメチル）シクロブチル）ブタ−１，３−ジイニル）安息香酸（４００ｍｇ、１．５７３ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ＤＭＦ（３ｍＬ）に溶解した。これに、ＤＩＰＥＡ（０．６８７ｍＬ、３．９３ｍｍｏｌ、２．５当量）、次いでＨＡＴＵ（７１８ｍｇ、１．８８８ｍｍｏｌ、１．２当量）を加えた。これを室温で約１６時間撹拌した。反応物を１Ｍのクエン酸および酢酸エチルに分配した。有機物を半飽和塩化ナトリウム、飽和炭酸水素ナトリウム、次いで飽和塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、蒸発乾固させた。１．０３５ｇの粗（Ｓ）−メチル３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−（４−（（（１，３−ｃｉｓ）−３−（ヒドロキシメチル）シクロブチル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエートを得た。ＬＣＭＳ  Ｍ＋１、予測値＝４８３．２、観測値＝４８３．２。
【０３０８】
【化２４】
2014501716.tif 000076
【０３０９】
（Ｓ）−メチル３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−（４−（（（１，３−ｃｉｓ）−３−（ヒドロキシメチル）シクロブチル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエート（粗製物）を、メタノール（１ｍＬ）に溶解した。室温でジオキサン（３．３ｍＬ、１３．２６ｍｍｏｌ、８．４３当量）中の４．０ＭのＨＣｌを加えた。反応は６０分後に完了した（ＨＰＬＣ）。反応物を、ロータリーエバポレーター上で０℃にて濃縮した。これに、ＩＰＡ（２ｍＬ）、次いでヒドロキシルアミン溶液（２ｍＬ、３１．５ｍｍｏｌ、２０当量）を加えた。フラスコを４℃で２４時間置いた。反応物をゴム状の塊に濃縮した（反応物を０℃で保持しながら）。これに、水（３ｍＬ）およびＡＣＮ（０．５ｍＬ）を加えた。０℃である間に、ＴＦＡ（３ｍＬ）を使用して酸性化する。さらなる水（１ｍＬ）およびＡＣＮ（１ｍＬ）を加えた。ＲＰ  ＨＰＬＣ（２’’カラム、５０ｍＬ／分、水／ＡＣＮ中０．１％ＴＦＡ、５％Ｂで平衡化）によって精製した。シリンジフィルター（２×６ｍＬ）を使用して、２’’カラム（１０ｍＬ／分、５％Ｂ）に充填する。１分にわたり５０ｍＬ／分に傾斜させる。５５分にわたり５〜３５％Ｂとし、生成物は２４．５〜２６％Ｂで溶出した。所望の画分を合わせ、凍結し、凍結乾燥器上に置いた。４６０ｍｇのＮ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，３−ｃｉｓ）−３−（ヒドロキシメチル）シクロブチル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド、ＴＦＡを得た。ＬＣＭＳ  Ｍ＋１、予測値＝３８４．２、観測値＝３８４．２。１Ｈ  ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  １．２５  （ｓ，  ３Ｈ），  １．３０  （ｓ，  ３Ｈ），  １．８１−１．８８  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．２３−２．３４  （ｍ，  ３Ｈ），  ３．０８−３．１５  （ｍ，  １Ｈ），  ３．３０−３．３１  （ｄ，  １Ｈ），  ４．５４  （ｂｒ，  １Ｈ），  ４．６５−４．６７  （ｄ，  １Ｈ），  ７．６１−７．６４  （ｄ，  ２Ｈ），  ７．８９−７．９１  （ｄ，  ２Ｈ），  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ８．５４−８．５６  （ｄ，  １Ｈ），  ９．２２  （ｂｒ，  １Ｈ），  １１．２０  （ｓ，  １Ｈ）。
【０３１０】
【化２５】
2014501716.tif 000077
【０３１１】
（Ｓ）−メチル２−アミノ−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタノエート（３２９ｍｇ、１．３７７ｍｍｏｌ、１．０当量）および４−（（（１，３−ｔｒａｎｓ）−３−（ヒドロキシメチル）シクロブチル）ブタ−１，３−ジイニル）安息香酸（３４０ｍｇ、１．３７７ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ＤＭＦ（３ｍＬ）に溶解した。これに、ＤＩＰＥＡ（０．５８４ｍＬ、３．３４ｍｍｏｌ、２．５当量）、次いでＨＡＴＵ（６１０ｍｇ、１．６０５ｍｍｏｌ、１．２当量）を加えた。これを室温で約１６時間撹拌した。反応物を１Ｍのクエン酸および酢酸エチルに分配した。有機物を半飽和塩化ナトリウム、飽和炭酸水素ナトリウム、次いで飽和塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、蒸発乾固させた。９９０ｍｇの粗（Ｓ）−メチル３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−（４−（（（１，３−ｔｒａｎｓ）−３−（ヒドロキシメチル）シクロブチル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエートを得た。ＬＣＭＳ  Ｍ＋１、予測値＝４８３．２、観測値＝４８３．２。
【０３１２】
【化２６】
2014501716.tif 000078
【０３１３】
（Ｓ）−メチル−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−（４−（（（１，３−ｔｒａｎｓ）−３−（ヒドロキシメチル）シクロブチル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエート（粗製物）を、メタノール（１ｍＬ）に溶解した。室温でジオキサン（２．８２ｍＬ、１１．２７ｍｍｏｌ、８．４３当量）中の４．０ＭのＨＣｌを加えた。反応は６０分後に完了した（ＨＰＬＣ）。反応物を、ロータリーエバポレーター上で０℃にて濃縮した。これに、ＩＰＡ（２ｍＬ）、次いでヒドロキシルアミン溶液（１．７７ｍＬ、２６．７ｍｍｏｌ、２０当量）を加えた。フラスコを４℃で９６時間置いた。次いで、反応物をゴム状の塊に濃縮した（反応物を０℃で保持しながら）。これに、水（３ｍＬ）およびＡＣＮ（０．５ｍＬ）を加えた。ＴＦＡ（３ｍＬ）を使用して、溶液を０℃で酸性化した。さらなる水（１ｍＬ）およびＡＣＮ（１ｍＬ）を加えた。化合物をＲＰ  ＨＰＬＣ（２’’カラム、５０ｍＬ／分、水／ＡＣＮ中０．１％ＴＦＡ、５％Ｂで平衡化）によって精製した。シリンジフィルター（２×７ｍＬ）を使用して、２’’カラム（１０ｍＬ／分、５％Ｂ）に充填した。１分にわたり５０ｍＬ／分に傾斜させ、５５分にわたり５〜３５％Ｂとした。生成物は２２．９〜２５．５％Ｂで溶出した。所望の画分を合わせ、凍結し、凍結乾燥器上に置いた。プロセスによって、４１０ｍｇのＮ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，３−ｔｒａｎｓ）−３−（ヒドロキシメチル）シクロブチル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド、ＴＦＡを得た。ＬＣＭＳ  Ｍ＋１、予測値＝３８４．２、観測値＝３８４．２。１Ｈ  ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  １．２５  （ｓ，  ３Ｈ），  １．３０  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．０７−２．１１  （ｔ，  ４Ｈ），  ２．４０−２．４３  （ｍ，  １Ｈ），  ３．２２−３．２６  （ｍ，  １Ｈ），  ３．３７−３．３８  （ｄ，  １Ｈ），  ４．５７  （ｂｒ，  １Ｈ），  ４．６５−４．６７  （ｄ，  １Ｈ），  ７．６２−７．６４  （ｄ，  ２Ｈ），  ７．８９−７．９１  （ｄ，  ２Ｈ），  ７．９７  （ｓ，  ２Ｈ），  ８．５４−８．５６  （ｄ，  １Ｈ），  ９．２１  （ｂｒ，  １Ｈ），  １１．１９  （ｓ，  １Ｈ）。
【０３１４】
Ｋ．Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，３−ｔｒａｎｓ）−３−（ヒドロキシメチル）シクロペンチル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１４）の合成
【０３１５】
【化２７】
2014501716.tif 000079
【０３１６】
（ｃｉｓ）−シクロペンタン−１，３−ジカルボン酸（２）
【０３１７】
【数４５】
2014501716.tif 000080
【０３１８】
５℃に冷却した撹拌した過マンガン酸カリウム（４７ｇ、０．２９７ｍｏｌ）および硫酸マグネシウム（４．３ｇ、３５．４ｍｍｏｌ）の水（５００ｍＬ）懸濁物に、ビシクロ［２．２．１］ヘプタ−２−エン１（１０ｇ、０．１０６ｍｏｌ）のアセトン（１５ｍＬ）溶液を一度に加えた（５℃〜４０℃）。氷浴を除去し、反応物をさらに２時間撹拌した。この後に、混合物を濾過し、濾液を亜硫酸水素ナトリウムで処理し、１ＮのＨＣｌでｐＨ＝２に酸性化した。次いで、酢酸エチル（８００ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機層を水（１Ｌ）、ブライン（１Ｌ）で洗浄し、乾燥させ、濃縮し、標的化合物２（７．５ｇ、４６％）を次のステップのために精製せずに白色の固体として得た。
【０３１９】
（ｃｉｓ）−ジメチルシクロペンタン−１，３−ジカルボキシレート（３）
【０３２０】
【数４６】
2014501716.tif 000081
【０３２１】
撹拌した（ｃｉｓ）−シクロペンタン−１，３−ジカルボン酸２（７．５ｇ、４７．５ｍｍｏｌ）のメタノール（２００ｍＬ）溶液に、氷浴において塩化チオニル（２２．６ｇ、０．１９ｍｏｌ）を加えた。次いで、反応混合物を一晩加熱還流させた。この後に、混合物を濃縮し、化合物３（８．３ｇ、９４％）を次のステップのために精製せずに黄色の油として得た。ＧＣ−ＭＳによって確認した。
【０３２２】
シクロペンタン−１，３−ジイルジメタノール（４）
【０３２３】
【数４７】
2014501716.tif 000082
【０３２４】
撹拌したＬＡＨ（３．４ｇ、８９．２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）溶液に、（ｃｉｓ）−ジメチルシクロペンタン−１，３−ジカルボキシレート３（８．３ｇ、４４．６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液を氷浴において加えた。次いで、反応混合物を室温で一晩撹拌した。この後に、混合物を水（６．５ｍＬ）で希釈し、次いで濾過し、濾液を濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝２：１）によって精製し、化合物４（４．０ｇ、６９％）を黄色の油として得た。ＨＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ０．５３−０．５０  （ｍ，  １Ｈ），  ０．９６−１．００  （ｍ，  ２Ｈ），  １．２９−１．３５  （ｍ，  ２Ｈ），  １．４７−１．５４  （ｍ，  １Ｈ），  １．６６−１．７３  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．９８−３．０１  （ｍ，  ４Ｈ），  ４．２９  （ｓ，  １Ｈ）。
【０３２５】
３−（ヒドロキシメチル）シクロペンチル）メチルアセテート（５）
【０３２６】
【数４８】
2014501716.tif 000083
【０３２７】
撹拌したシクロペンタン−１，３−ジイルジメタノール４（４．０ｇ、３１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６０ｍＬ）溶液に、氷浴においてＮａＨ（６０％）（１．１ｇ、２８ｍｏｌ）を加えた。次いで、反応混合物を氷浴において０．５時間撹拌し、次いで塩化アセチル（２．７ｇ、３４ｍｍｏｌ）を、反応混合物に加えた。混合物を室温で一晩撹拌した。この後に、混合物を水（１．０ｍＬ）で希釈し、次いで濾過し、濾液を濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、化合物５（１．７ｇ、２５％）を黄色の油として得た。ＨＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ０．８４−０．８７  （ｍ，  １Ｈ），  １．２８−１．３１  （ｍ，  ２Ｈ），  １．６２−１．６５  （ｍ，  ２Ｈ），  １．８０−１．８３  （ｍ，  １Ｈ），  １．９９  （ｓ，  １Ｈ），  ２．１０−２．１８  （ｍ，  １Ｈ），  ３．２６−３．２９  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．８９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８，  ２Ｈ），  ４．４３  （ｓ，  １Ｈ）。
【０３２８】
３−ホルミルシクロペンチル）メチルアセテート（６）
【０３２９】
【数４９】
2014501716.tif 000084
【０３３０】
撹拌した３−（ヒドロキシメチル）シクロペンチル）メチルアセテート５（１．７ｇ、９．９ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）溶液に、ＰＣＣ（６．４ｇ、２９．７ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた。次いで、反応混合物を室温で一晩撹拌した。この後に、混合物を濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝６：１）によって精製し、化合物６（０．７ｇ、４４％）を黄色の油として得た。
【０３３１】
３−エチニルシクロペンチル）メタノール（７）
【０３３２】
【数５０】
2014501716.tif 000085
【０３３３】
撹拌した３−ホルミルシクロペンチル）メチルアセテート６（０．７ｇ、４．１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（５０ｍＬ）溶液に、炭酸カリウム（０．８５ｇ、６．１５ｍｍｏｌ）およびベストマン試薬（１．１８ｇ、６．１５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌した。この後に、混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、エーテル（８０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機層を乾燥させ、濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝２：１）によって精製し、化合物７（０．３１ｇ、６０％）を黄色の油として得た。
【０３３４】
メチル４−（（３−（ヒドロキシメチル）シクロペンチル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンゾエート（ＡＣＨＬ０２−１４９）
【０３３５】
【数５１】
2014501716.tif 000086
【０３３６】
窒素下で、ＤＩＰＥＡ（９３６ｍｇ、７．２６ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（６０ｍＬ）中の３−エチニルシクロペンチル）メタノール７（０．３ｇ、２．４２ｍｍｏｌ）、メチル４−（ブロモエチニル）ベンゾエート８（０．７ｇ、２．９ｍｍｏｌ）、ＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２（７０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）およびＣｕＩ（４６ｍｇ、０．２４２ｍｍｏｌ）の混合物に室温にて滴下で添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌した。ＬＣＭＳによって反応をモニターした。反応混合物を水（６０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（８０ｍＬ×３）で抽出した。酢酸エチル層を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液、水およびブラインで洗浄した。乾燥させた後、酢酸エチル溶液を減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラム（ＰＥ：ＥＡ＝５：１）によって精製し、（ｃｉｓおよびｔｒａｎｓ異性体の混合物として）化合物ＡＣＨＬ０２−１４９（１４０ｍｇ、２５％）を得た。Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：  ７．９５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．９１  （ｓ，  １Ｈ），  ３．６１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ４Ｈｚ，１Ｈ），  ３．５３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８Ｈｚ，  １Ｈ），  ２．８９−２．８７  （ｍ，  １Ｈ），  ２．４３−２．４０  （ｍ，  １Ｈ），  ２．２１−２．１７  （ｍ，  １Ｈ），  ２．０２−１．９９  （ｍ，  １Ｈ），  １．８２−１．７６  （ｍ，  １Ｈ），  １．５４−１．４５  （ｍ，１Ｈ  ），  １．３６−１．３１  （ｍ，１Ｈ）。
【０３３７】
【化２８】
2014501716.tif 000087
【０３３８】
メチル４−（（３−（ヒドロキシメチル）シクロペンチル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンゾエート（１１５ｍｇ、０．４０７ｍｍｏｌ、１．０当量）をＭｅＯＨ（５ｍＬ）に溶解し、続いて水酸化リチウム（２９．３ｍｇ、１．２２２ｍｍｏｌ、３．０当量）および水（５ｍＬ）を加えた。これを室温で約７２時間撹拌した。反応物を濃縮し、ＭｅＯＨを除去し、６ＮのＨＣｌ（約５ｍＬ）で約３のｐＨに酸性化した。ＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出し、有機層を合わせ、飽和ＮａＣｌで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、濃縮する。０．１４ｇの粗４−（（３−（ヒドロキシメチル）シクロペンチル）ブタ−１，３−ジイニル）安息香酸を得た。ＬＣＭＳ  Ｍ＋１、予測値＝２６９．１、観測値＝２６９．１。
【０３３９】
【化２９】
2014501716.tif 000088
【０３４０】
（Ｓ）−メチル２−アミノ−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタノエート（１００ｍｇ、０．４０６ｍｍｏｌ、１．０当量）および４−（（３−（ヒドロキシメチル）シクロペンチル）ブタ−１，３−ジイニル）安息香酸（粗製物）（理論上１０９ｍｇ、０．４０６ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解した。これに、ＤＩＰＥＡ（０．１７７ｍＬ、１．０１６ｍｍｏｌ、２．５当量）、次いでＨＡＴＵ（１８５ｍｇ、０．４８８ｍｍｏｌ、１．２当量）を加えた。これを室温で約１６時間撹拌した。反応物を１Ｍのクエン酸および酢酸エチルに分配した。有機物を半飽和塩化ナトリウム、飽和炭酸水素ナトリウム、次いで飽和塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、蒸発乾固させた。５００ｍｇの粗（Ｓ）−メチル３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−（４−（（３−（ヒドロキシメチル）シクロペンチル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエートを得た。ＬＣＭＳ  Ｍ＋１、予測値＝４９７．３、観測値＝４９７．２。
【０３４１】
【化３０】
2014501716.tif 000089
【０３４２】
（２Ｓ）−メチル−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−（４−（（３−（ヒドロキシメチル）シクロペンチル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエート（粗製物）を、メタノール（１ｍＬ）に溶解した。室温でジオキサン（０．８５７ｍＬ、３．４３ｍｍｏｌ、８．４３当量）中の４．０ＭのＨＣｌを加えた。反応は３時間後に完了した（ＨＰＬＣ）。反応物を、ロータリーエバポレーター上で０℃にて濃縮した。これに、ＩＰＡ（１ｍＬ）、次いでヒドロキシルアミン溶液（０．５３７ｍＬ、８．１４ｍｍｏｌ、２０当量）を加えた。フラスコを４℃で１６８時間置く。反応物をゴム状の塊に濃縮した（反応物を０℃で保持しながら）。これに、水（３ｍＬ）およびＡＣＮ（０．５ｍＬ）を加えた。０℃である間に、ＴＦＡ（３ｍＬ）を使用して酸性化した。さらなる水（１ｍＬ）およびＡＣＮ（１ｍＬ）を加えた。ＲＰ  ＨＰＬＣ（１’’カラム、２０ｍＬ／分、水／ＡＣＮ中０．１％ＴＦＡ、５％Ｂで平衡化）によって精製した。シリンジフィルター（２×８ｍＬ）を使用して、１’’カラム（１０ｍＬ／分、５％Ｂ）に充填した。１分にわたり２０ｍＬ／分に傾斜させた。８０分にわたり５〜１９％Ｂとし、生成物が１９％Ｂで溶出する。所望の画分を合わせ、凍結し、凍結乾燥器上に置いた。１４５ｍｇのＮ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（３−（ヒドロキシメチル）シクロペンチル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド、Ｉ−１４、ＴＦＡを得た。ＬＣＭＳ  Ｍ＋１、予測値＝３９８．２、観測値＝３９８．２。１Ｈ  ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  １．２５  （ｓ，  ３Ｈ），  １．２９  （ｓ，  ３Ｈ），  １．３８−１．４５  （ｍ，  １Ｈ），  １．５３−１．７７  （ｍ，  ２Ｈ），  １．８８−２．１７  （ｍ，  ３Ｈ），  ２．８３−２．９１  （ｍ，  １Ｈ），  ３．２１−３．３８  （ｍ，  ４Ｈ），  ４．５２  （ｂｒ，  １Ｈ），  ４．６５−４．６７  （ｄ，  １Ｈ），  ７．６１−７．６３  （ｄ，  ２Ｈ），  ７．８８−７．９０  （ｄ，  ２Ｈ），  ７．９７  （ｓ，  ２Ｈ），  ８．５３−８．５６  （ｄ，  １Ｈ），  ９．２１  （ｂｒ，  １Ｈ），  １１．１９  （ｓ，  １Ｈ）。
【０３４３】
Ｌ．Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，４−ｃｉｓ）−４−（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１５）およびＮ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，４−ｔｒａｎｓ）−４−（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１６）の合成
【０３４４】
【化３１】
2014501716.tif 000090
【０３４５】
ステップ１：ジメチルシクロヘキサン−１，４−ジカルボキシレート（２）
【０３４６】
【数５２】
2014501716.tif 000091
【０３４７】
メタノール（５００ｍＬ）を氷塩浴中で冷却し、塩化チオニル（１３８ｇ、４．０当量）を滴下で添加した。生成したＨＣｌのメタノール溶液に、シクロヘキサン−１，４−ジカルボン酸１（５０ｇ、１．０当量）を加え、反応混合物を１時間還流させた。ＴＬＣによって反応をモニターした。溶媒を蒸発させ、残渣を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル層をＮａＨＣＯ３溶液、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。溶媒を蒸発させ、標的化合物（５６．４ｇ、９７％）を得た。
【０３４８】
ステップ２：シクロヘキサン−１，４−ジイルジメタノール（３）
【０３４９】
【数５３】
2014501716.tif 000092
【０３５０】
氷冷却したＬｉＡｌＨ４のＴＨＦ懸濁物に、０℃でジメチルシクロヘキサン−１，４−ジカルボキシレート２の溶液を滴下で添加した。反応混合物の撹拌を室温で３０分間続けた。ＴＬＣによって反応をモニターした。１２当量の水（３２．４ｍＬ）を加え、反応物をクエンチした。反応混合物を濾過し、濾液を濃縮した。残渣をＥｔ２Ｏで希釈し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。Ｅｔ２Ｏを除去し、標的化合物を集め、これを次のステップのためにそれ以上精製することなく使用した（１９．９ｇ、９２％）。
【０３５１】
ステップ３：（４−（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル）メチルアセテート（４）
【０３５２】
【数５４】
2014501716.tif 000093
【０３５３】
氷冷却したＮａＨおよびシクロヘキサン−１，４−ジイルジメタノール３のＴＨＦ懸濁物に、ＡｃＣｌを０℃にて滴下で添加した。反応物の撹拌を１５℃で３時間続けた。ＴＬＣによって反応をモニターした。１当量のＨ２Ｏ（２．５ｍＬ）を加え、反応物をクエンチした。反応混合物を濾過し、濾液を酢酸エチルで希釈した。酢酸エチル層をブライン（５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。溶媒を減圧下で除去した。残渣をシリカゲルカラム（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝５０：１〜１０：１）によって精製し、標的化合物（８．６ｇ、３３％）を得た。
【０３５４】
ステップ４：（４−ホルミルシクロヘキシル）メチルアセテート（５）
【０３５５】
【数５５】
2014501716.tif 000094
【０３５６】
塩化オキサリルのＤＣＭ（６０ｍＬ）溶液に、ＤＣＭ（６０ｍＬ）中のＤＭＳＯを−７８℃にて滴下で添加した。３０分後、ＤＣＭ（８０ｍＬ）中の（４−（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル）メチルアセテート４を−７８℃にて滴下で添加した。反応混合物を−７８℃でさらに２時間撹拌し、次いでＴＥＡを−７８℃にて滴下で添加し、反応物をクエンチした。反応混合物を室温に温めた。反応混合物をＤＣＭで希釈し、飽和塩化アンモニウム水溶液およびブラインで洗浄した。ＤＣＭ層を乾燥させ、濃縮した。残渣をシリカゲルカラム（ＤＣＭ）によって精製し、標的化合物（９．０ｇ、ジクロロメタンでまだ湿っている）を得た。
【０３５７】
ステップ５：（４−エチニルシクロヘキシル）メタノール（６）
【０３５８】
【数５６】
2014501716.tif 000095
【０３５９】
ＣＨ３ＯＨ（１００ｍＬ）中の（４−ホルミルシクロヘキシル）メチルアセテート５（８．５ｇ、１．０当量）、Ｋ２ＣＯ３（１９．０４ｇ、３．０当量）の混合物に、ベストマン試薬（１１．５６ｇ、１．３当量、８０％）を０℃にて加えた。混合物を室温で１５時間撹拌した。ＴＬＣによって反応をモニターした。混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出し、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗製物をシリカゲルカラム（ＰＥ：ＥＡ＝３：１）によって精製し、標的化合物（２．６ｇ、４０％）を得た。
【０３６０】
ステップ６：メチル４−（（４−（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンゾエート（８）
【０３６１】
【数５７】
2014501716.tif 000096
【０３６２】
窒素下で、ＤＩＰＥＡ（３．９２ｇ、３．０当量）を、室温でＴＨＦ（１５０ｍＬ）中の（４−エチニルシクロヘキシル）メタノール６（１．４ｇ、１．０当量）、メチル４−（ブロモエチニル）ベンゾエート７（２．９ｇ、１．２当量）、ＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２（２１３ｍｇ、０．０３当量）およびＣｕＩ（１９４ｍｇ、０．１当量）の混合物に滴下で添加した。反応混合物を、室温で一晩撹拌した。ＬＣＭＳによって反応をモニターした。反応混合物を水（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３００ｍＬ）で抽出した。酢酸エチル層を、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液、水およびブラインで洗浄した。乾燥させた後、酢酸エチル溶液を減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラム（ＰＥ：ＥＡ＝５：１〜３：１）によって精製し、標的化合物（ｃｉｓおよびｔｒａｎｓ異性体の混合物として、１．２ｇ、４０％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：  ７．９５９−７．９３７（ｄ，  Ｊ＝８．８Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．６８２−７．６６０（ｄ，  Ｊ＝８．８Ｈｚ，  ２Ｈ），  ４．４２１−４．３９５（ｔ，  Ｊ＝５．２Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．８６０（ｓ．３Ｈ），  ３．２０７−３．１７９（ｔ，  Ｊ＝５．６Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．０８５（ｓ，  １Ｈ），  １．９８０−１．９４１  （ｍ，  ２Ｈ），  １．７４７−１．７０８（ｍ，  ２Ｈ），  １．３６６−１．３２８（ｍ，  ３Ｈ），  ０．９３５−０．８９７（ｍ，  ２Ｈ）。
【０３６３】
【化３２】
2014501716.tif 000097
【０３６４】
４−（（４−（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル）ブタ−１，３−ジイニル）安息香酸（２）
【０３６５】
【数５８】
2014501716.tif 000098
【０３６６】
メチル４−（（４−（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンゾエート１（１．２ｇ、４．１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液に、水酸化リチウム一水和物（５１７ｍｇ、１２．３ｍｍｏｌ）の水（５ｍＬ）溶液を加えた。混合物の撹拌を室温で一晩続けた。この後に、溶媒を減圧下で除去し、残渣を水（４０ｍＬ）で希釈し、１ＭのＨＣｌでｐＨを４．０に調節し、次いで酢酸エチル（３×６０ｍＬ）で抽出した。有機層を乾燥させ、濃縮し、４−（（４−（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル）ブタ−１，３−ジイニル）安息香酸２（１．０ｇ、９３％）を黄色の固体として得て、これを次のステップのためにそれ以上精製することなく使用した。ＬＣ−ＭＳ：２８３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３６７】
（Ｓ）−メチル３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−（４−（（４−（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエート（３）
【０３６８】
【数５９】
2014501716.tif 000099
【０３６９】
４−（（４−（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル）ブタ−１，３−ジイニル）安息香酸２（１．０５ｇ、３．７２ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１．５５ｇ、４．１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２５ｍＬ）溶液に、（Ｓ）−メチル２−アミノ−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタノエート（９１５ｍｇ、３．７２ｍｍｏＬ）およびＤＩＰＥＡ（１．４４ｇ、１１．２ｍｍｏＬ）を加えた。混合物の撹拌を室温で５時間続けた。この後に、反応物を水（２０ｍＬ）で希釈し、次いで酢酸エチル（６０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を水、次いでブラインで洗浄し、乾燥させ、濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ  ２：１）によって精製し、（Ｓ）−メチル３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−（４−（（４−（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエート３を黄色の固体（１．６ｇ、８５％）として得た。ＬＣ−ＭＳ：５１１［Ｍ＋Ｈ］＋４５５［Ｍ−５６］。
【０３７０】
（Ｓ）−メチル３−アミノ−２−（４−（（４−（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエート塩酸塩（４）
【０３７１】
【数６０】
2014501716.tif 000100
【０３７２】
（Ｓ）−メチル３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−（４−（（４−（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエート３（１．６ｇ、３．１４ｍｍｏｌ）のメタノール（２０ｍＬ）溶液を、ＨＣｌ装置に取り付けた。次いで、ＴＬＣによって出発材料が全て消費されたことが示されるまで、反応物を室温で撹拌した。この後、溶液を減圧下で濃縮し、（Ｓ）−メチル３−アミノ−２−（４−（（４−（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエート塩酸塩４を黄色の固体（１．４ｇ、９９％）として得た。ＬＣ−ＭＳ：４１１［Ｍ＋Ｈ］＋。ｃｉｓおよびｔｒａｎｓ異性体をキラルＨＰＬＣによって分離し、（Ｓ）−メチル３−アミノ−２−（４−（（（１，４−ｃｉｓ）−４−（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエート（ＡＣＨＬ０２−１４８−カップリング、９０ｍｇ）をピーク１として、および（Ｓ）−メチル３−アミノ−２−（４−（（（１，４−ｔｒａｎｓ）−４−（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエート（ＡＣＨＬ０２−１４７−カップリング、７５０ｍｇ）をピーク２として得た。
【０３７３】
【化３３】
2014501716.tif 000101
【０３７４】
（Ｓ）−メチル−３−アミノ−２−（４−（（（１，４−ｔｒａｎｓ）−４−（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエート（７５０ｍｇ、１．８２７ｍｍｏｌ、１．０当量）を、丸底フラスコに加えた。これに、ＩＰＡ（６ｍＬ）を加え、懸濁物を５分間超音波処理し、次いでＴＨＦ（２ｍＬ）を加えて、溶液を形成させた。ヒドロキシルアミン溶液（２．４ｍＬ、３６．５ｍｍｏｌ、２０当量）を加え、フラスコを４℃で約９６時間置いた。反応物を濃縮し、（反応物を０℃で保持しながら）ＩＰＡおよびＴＨＦを除去した。０℃である間に、ＴＦＡ（４ｍＬ）を使用して酸性化した。さらなるＡＣＮ（２ｍＬ）を加えた。ＲＰ  ＨＰＬＣ（２’’カラム、５０ｍＬ／分、水／ＡＣＮ中０．１％ＴＦＡ、１０％Ｂで平衡化）によって精製した。シリンジフィルター（３×８ｍＬ）を使用して、２’’カラム（１０ｍＬ／分、１０％Ｂ）に充填した。１分にわたり５０ｍＬ／分に傾斜させた。６０分にわたり１０〜４０％Ｂとし、生成物は３０．５〜３５％Ｂで溶出する。所望の画分を合わせ、凍結し、凍結乾燥器上に置いた。７０６ｍｇのＮ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，４−ｔｒａｎｓ）−４−（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド、Ｉ−１６、ＴＦＡを得た。ＬＣＭＳ  Ｍ＋１、予測値＝４１２．２、観測値＝４１２．２。１Ｈ  ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  ０．８４−０．９４  （ｍ，  ２Ｈ），  １．２５  （ｓ，  ３Ｈ），  １．３０  （ｓ，  ３Ｈ），  １．３２−１．３６  （ｍ，  １Ｈ），  １．６８−１．７２  （ｍ，  ２Ｈ），  １．９０−１．９５  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．３９−２．４２  （ｍ，  １Ｈ），  ３．１５−３．１８  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．３８−４．４０  （ｔ，  １Ｈ），  ４．６５−４．６７  （ｄ，  １Ｈ），  ７．６２−７．６４  （ｄ，  ２Ｈ），  ７．８９−７．９１  （ｄ，  ２Ｈ），  ７．９８  （ｂｒ，  ２Ｈ），  ８．５４−８．５６  （ｄ，  １Ｈ），  ９．２２  （ｂｒ，  １Ｈ），  １１．２１  （ｂｒ，  １Ｈ）。
【０３７５】
【化３４】
2014501716.tif 000102
【０３７６】
（Ｓ）−メチル−３−アミノ−２−（４−（（（１，４−ｃｉｓ）−４−（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエート（９０ｍｇ、０．２１９ｍｍｏｌ、１．０当量）を、丸底フラスコに加えた。これに、ＩＰＡ（０．５ｍＬ）を加え、溶液を２分間ボルテックスし、次いでヒドロキシルアミン溶液（０．２９ｍＬ、４．３８ｍｍｏｌ、２０当量）を加え、フラスコを４℃で約７２時間置いた。反応物を濃縮し、（反応物を０℃で保持しながら）ＩＰＡを除去した。０℃である間に、ＴＦＡ（３ｍＬ）を使用して酸性化した。アセトニトリル（０．５ｍＬ）を加えた。ＲＰ  ＨＰＬＣ（１’’カラム、２５ｍＬ／分、水／ＡＣＮ中０．１％ＴＦＡ、１０％Ｂで平衡化）によって精製した。シリンジフィルター（７ｍＬ）を使用して、１’’カラム（１０ｍＬ／分、１０％Ｂ）に充填した。１分にわたり２５ｍＬ／分に傾斜させた。９０分にわたり１０〜４０％Ｂとし、生成物は２５．５〜２８％Ｂで溶出する。所望の画分を合わせ、凍結し、凍結乾燥器上に置いた。５３ｍｇのＮ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，４−ｃｉｓ）−４−（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド、Ｉ−１５、ＴＦＡを得た。ＬＣＭＳ  Ｍ＋１、予測値＝４１２．２、観測値＝４１２．２。１Ｈ  ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  １．２０−１．３５  （ｍ，  ２Ｈ），  １．２６  （ｓ，  ３Ｈ），  １．３０  （ｓ，  ３Ｈ），  １．４７−１．５９  （ｍ，  ４Ｈ），  １．７１−１．７５  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．９７−２．９９  （ｍ，  １Ｈ），  ３．２１−３．２２  （ｄ，  ２Ｈ），  ４．３０  （ｂｒ，  １Ｈ），  ４．６５−４．６８  （ｄ，  １Ｈ），  ７．６４−７．６６  （ｄ，  ２Ｈ），  ７．８９−７．９１  （ｄ，  ２Ｈ），  ７．９８  （ｂｒ，  ２Ｈ），  ８．５４−８．５６  （ｄ，  １Ｈ），  ９．２２  （ｂｒ，  １Ｈ），  １１．２０  （ｓ，  １Ｈ）。
【０３７７】
Ｍ．Ｎ−（（Ｓ）−１−（１−アミノシクロブチル）−２−（ヒドロキシアミノ）−２−オキソエチル）−４−（（（ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミドトリフルオロアセテート（Ｉ−１７）およびＮ−（（Ｓ）−１−（１−アミノシクロブチル）−２−（ヒドロキシアミノ）−２−オキソエチル）−４−（（（ｃｉｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミドトリフルオロアセテート（Ｉ−１８）の合成
【０３７８】
【化３５】
2014501716.tif 000103
【０３７９】
４−（（（ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）安息香酸（２０５ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ、１当量）および（Ｓ）−メチル−２−アミノ−２−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）シクロブチル）アセテート（２２０ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ、１当量）を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）に溶解した。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．４５ｍＬ、２．６ｍｍｏｌ、３当量）、続いてＨＡＴＵ（３５６ｍｇ、０．９４ｍｍｏｌ、１．１当量）を加えた。混合物を室温で２．５時間保持し、次いで１Ｍのクエン酸および酢酸エチルに分配した。有機物を１Ｍのクエン酸、飽和炭酸水素ナトリウム、次いで飽和塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、蒸発乾固させ、（Ｓ）−メチル２−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）シクロブチル）−２−（４−（（（ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）アセテートを得た（５５０ｍｇの粗製物、１３４％、それ以上精製することなく使用した）。
【０３８０】
【化３６】
2014501716.tif 000104
【０３８１】
（Ｓ）−メチル２−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）シクロブチル）−２−（４−（（（ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）アセテート（５５０ｍｇの粗製物、１．１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（６ｍＬ）に溶解し、６ｍＬのトリフルオロ酢酸で１０分間室温にて処理した。揮発性物質を除去し、残渣をジクロロメタンから再蒸発させ、（Ｓ）−メチル２−（１−アミノシクロブチル）−２−（４−（（（ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）アセテートをそのトリフルオロ酢酸塩として得て、これをそれ以上精製することなく使用した。
【０３８２】
【化３７】
2014501716.tif 000105
【０３８３】
上記の反応において得た粗（Ｓ）−メチル２−（１−アミノシクロブチル）−２−（４−（（（ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）アセテートトリフルオロアセテートをイソプロパノール（２ｍＬ）に溶解し、５０％ヒドロキシルアミン水溶液（２ｍＬ）で４℃にて２０時間処理した。揮発性物質を除去し、残渣をトリフルオロ酢酸を有する水／アセトニトリル（酸性化）に溶解した。材料を、下記の勾配を使用して逆相ＨＰＬＣ（２’’カラム、５０ｍＬ／分、水／ＡＣＮ中０．１％ＴＦＡ、２％で平衡化）によって精製した。
２％、１０分
２〜１５、５分
１５〜４５、３００分。
【０３８４】
生成物は５８分〜７８分で溶出し、所望の画分を凍結乾燥し、Ｎ−（（Ｓ）−１−（１−アミノシクロブチル）−２−（ヒドロキシアミノ）−２−オキソエチル）−４−（（（ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミドをそのトリフルオロ酢酸塩（白色の固体、１２０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ、４−（（（ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）安息香酸から２８％）として得た。質量分析データ：予測値（Ｍ＋１）：３８２．４、観測値：３８２．１。プロトンＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ｄｍｓｏ−ｄ６）：  １１．３  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ９．２４  （ｓ，  １Ｈ），  ８．６２  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ８．８Ｈｚ），  ８．１７  （ｂｒ  ｓ，  ３Ｈ），  ７．８６  （ｄ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  ８．４Ｈｚ），  ７．６３  （ｄ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  ８．４Ｈｚ），  ４．９２  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９．２Ｈｚ），  ４．６９  （ｔ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．８Ｈｚ），  ３．４０  （ｍ，  １Ｈ），  ３．２６  （ｍ，  １Ｈ），  ２．１２  −  ２．２１  （ｍ，  ４Ｈ），  １．８９  （ｍ，  １Ｈ），  １．８０  （ｍ，  １Ｈ），  １．３９  −  １．４６  （ｍ，  ２Ｈ），  ０．８４  −  ０．９３  （ｍ，  ２Ｈ）。不純な画分の再精製によって、さらに８０ｍｇを得た。
【０３８５】
【化３８】
2014501716.tif 000106
【０３８６】
主にＮ−（（Ｓ）−１−（１−アミノシクロブチル）−２−（ヒドロキシアミノ）−２−オキソエチル）−４−（（（ｃｉｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（主要な異性体における不純物）を含有する画分を、別々に凍結乾燥し、同じ勾配下で再精製した。所望の画分をプールし、凍結乾燥し、Ｎ−（（Ｓ）−１−（１−アミノシクロブチル）−２−（ヒドロキシアミノ）−２−オキソエチル）−４−（（（ｃｉｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミドをそのトリフルオロ酢酸塩（３．２ｍｇ、８．４ｕｍｏｌ、４−（（（ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）安息香酸から１％）として得た。質量分析データ：予測値（Ｍ＋１）：３８２．４、観測値：３８２．１。プロトンＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ｄｍｓｏ−ｄ６）：  １１．３０  （ｂｓ  ｓ，  １Ｈ），  ９．２４  （ｓ，  １Ｈ），  ８．６２  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９．２Ｈｚ），  ８．１６  （ｂｒ  ｓ，  ３Ｈ），  ７．８６  （ｄ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  ７．６Ｈｚ），  ７．６５  （ｄ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  ７．６Ｈｚ），  ４．９２  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９．２Ｈｚ），  ４．７０  （ｔ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．２Ｈｚ），  ３．４９  （ｍ，  １Ｈ），  ３．４０  （ｍ，  １Ｈ），  ２．１２  −  ２．２２  （ｍ，  ４Ｈ），  １．８２−１．９５  （ｍ，  １Ｈ），  １．７０  −  １．８０  （ｍ，  ２Ｈ），  １．３６  （ｍ，  １Ｈ），  １．０８  （ｍ，  １Ｈ），  ０．５８  （ｍ，  １Ｈ）。
【０３８７】
Ｎ．Ｎ−（（Ｓ）−１−（１−（ジメチルアミノ）シクロブチル）−２−（ヒドロキシアミノ）−２−オキソエチル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１９）の合成
【０３８８】
【化３９】
2014501716.tif 000107
【０３８９】
Ｎ−（（Ｓ）−１−（１−アミノシクロブチル）−２−（ヒドロキシアミノ）−２−オキソエチル）−４−（（（ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミドトリフルオロアセテートＩ−１７（８０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ、１当量）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８００μＬ）に溶解し、パラホルムアルデヒド（４８．５ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ、１０当量）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（５６μＬ、０．３２ｍｍｏｌ、２当量）で室温にて２１時間処理した。シアノ水素化ホウ素ナトリウム（３０ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ、３当量）、続いてメタノール（８００μＬ）および酢酸（２８μＬ、０．４８ｍｍｏｌ、３当量）を加えた。混合物を室温で３日間保持し、次いでさらなるシアノ水素化ホウ素ナトリウムおよび酢酸（２８μＬ）を加えた。さらに１日後室温で、さらなる２８μＬの酢酸を加えた。さらに１日後室温で、材料を、下記の勾配を使用して逆相ＨＰＬＣ（１’’カラム、２０ｍＬ／分、水／アセトニトリル中０．１％ＴＦＡ、２％で平衡化）によって精製した。
２％、５分
２〜１８％、５分
１８〜９８％、８０分。
【０３９０】
所望の画分をプールし、凍結乾燥し、Ｎ−（（Ｓ）−１−（１−（ジメチルアミノ）シクロブチル）−２−（ヒドロキシアミノ）−２−オキソエチル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミドをそのトリフルオロ酢酸塩（６３ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ、７４％）として得た。質量分析データ：予測値（Ｍ＋１）：４１０．５、観測値：４１０．２。プロトンＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ｄｍｓｏ−ｄ６）：  １１．２９  （ｓ，  １Ｈ），  ９．７２  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ９．３０  （ｓ，  １Ｈ），  ８．９５  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９．２Ｈｚ），  ７．８８  （ｄ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  ８．４Ｈｚ），  ７．６１  （ｄ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  ８．４Ｈｚ），  ５．０５  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９．２Ｈｚ），  ４．７  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ３．４０  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．２，  １１．６Ｈｚ），  ３．２２  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ６．４，  １１．２Ｈｚ），  ２．７６  （ｄ，  ３Ｈ，  Ｊ  ＝  ４．４Ｈｚ），  ２．６８  （ｄ，  ３Ｈ，  Ｊ  ＝  ４．４Ｈｚ），  ２．３３  −  ２．４２  （ｍ，  ３Ｈ），  １．６２  −  １．７８  （ｍ，  ２Ｈ），  １．３７  −  １．４６  （ｍ，  ２Ｈ），  ０．８４  −  ０．９２  （ｍ，  ２Ｈ）。
【０３９１】
Ｏ．Ｎ−（（Ｓ）−２−（ヒドロキシアミノ）−１−（（Ｓ）−モルホリン−３−イル）−２−オキソエチル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−２０）の合成
【０３９２】
【化４０】
2014501716.tif 000108
【０３９３】
事前に冷却した（Ｒ）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）モルホリン−３−カルボン酸１（５ｇ、０．０２１６２ｍｏｌ）の乾燥エーテル（１６０ｍＬ）懸濁物に、トリエチルアミン（３．９１ｍＬ、０．０２８１ｍｏｌ）を−１６℃にて滴下で添加し、５分後に、このように得られた混合物をクロロギ酸イソブチル（３．３７ｍＬ、０．０２６００ｍｏｌ）でゆっくりと−１５℃にて３０分の期間処理し、次いで反応混合物を−１５℃〜６℃で１６時間（一晩）撹拌し、ＬＣＭＳによって反応プロセスをモニターし、濾過し、固体をエーテル（３０ｍＬ×２）で洗浄し、濾液を次のステップに移した。前の濾液を、ジアゾメタン（０．２４ｍｏｌ）のエーテル（４８０ｍＬ）溶液で０〜７℃にて１６時間（一晩）処理し、次いで反応物を氷酢酸（５ｍＬ）、水（５０ｍＬ）でクエンチし、有機層を炭酸水素ナトリウム（５０ｍＬ×２）、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、水層をエーテル（２００ｍＬ×２）で再抽出し、合わせた有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濃縮し、粗残渣を得て、これをシリカゲルクロマトグラフィー（溶出液として石油中の２０％酢酸エチル）によって精製し、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル−３−（２−ジアゾアセチル）モルホリン−４−カルボキシレート２を黄色の固体として得た。４．５６ｇ（８７％純度、ＬＣＭＳ、２５４ｎｍ）、収率：７７％、２ステップ。
【０３９４】
【化４１】
2014501716.tif 000109
【０３９５】
事前に冷却した（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル−３−（２−ジアゾアセチル）モルホリン−４−カルボキシレート２（４．５５ｇ、１７．８２４ｍｍｏｌ）および安息香酸銀（２５ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）のメタノール（３０ｍＬ）懸濁物に、トリエチルアミン（２５０μＬ、１．７８ｍｍｏｌ）を滴下で添加し、懸濁物を暗中２５℃で１６時間撹拌し（一晩、油浴）、次いで濾過し、濾液を蒸発乾固させ、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（溶出液として石油中の１０％酢酸エチル）によって精製し、（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル−３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）モルホリン−４−カルボキシレート３を無色の固体（３．３４ｇ、収率：７８％）として得た。
【０３９６】
【化４２】
2014501716.tif 000110
【０３９７】
事前に冷却した（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル−３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）モルホリン−４−カルボキシレート３（２．７３７ｇ、０．０１０６ｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）溶液に、ＮａＨＭＤＳ（８．１５ｍＬ、０．０１５９ｍｏｌ）を−１００℃でゆっくりと加え、このように得られた懸濁物を−１００℃で１時間撹拌し、次いでトリシリルアジド（５．９９ｇ、０．０１７０ｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液をゆっくりと加え（内部温度を−１００℃未満に保持）、−１００℃でさらに１時間撹拌を続けた。氷酢酸（３．１８ｇ、０．０５３０ｍｏｌ）を迅速に加え、反応物をクエンチし、反応混合物を室温に温め、３時間撹拌し、最終的にＤＣＭ（２００ｍＬ×２）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）、ブライン（１００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濃縮し、粗残渣を得て、これを逆相クロマトグラフィー（勾配：５分間水中の１０％アセトニトリル、３分以内で水中の３０％アセトニトリルに増加させる、３分間水中の３０％アセトニトリル、水中の３０〜４５％アセトニトリル、３分、５分間水中の４５％アセトニトリル；流量：３０ｍＬ／分）によって精製し、（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル−３−（１−アジド−２−メトキシ−２−オキソエチル）モルホリン−４−カルボキシレート４（２つのジアステレオ異性体の混合物）を白色の固体（１．２２ｇ、収率：３８％）として得た。
【０３９８】
【化４３】
2014501716.tif 000111
【０３９９】
ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ（２０ｍＬ／３ｍＬ）中の（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル−３−（１−アジド−２−メトキシ−２−オキソエチル）モルホリン−４−カルボキシレート４（１．２ｇ、４ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ（２００ｍｇ、１５％ｗｔ）、２ＭのＨＣｌ（２ｍＬ、４ｍｍｏｌ）の混合物を脱気し、水素ガスで３０℃にて１ａｔｍ下で１６時間処理した。混合物を濾過し、固体をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機物を水（２０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（２０ｍＬ、ｐＨ≧８に調節）で洗浄し、次いで無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濃縮し、粗残渣を得て、これを逆相クロマトグラフィー（勾配：５分間水中の１０％アセトニトリル、３分以内で水中の３０％アセトニトリルに増加させる、３分間水中の３０％アセトニトリル、水中の３０〜４５％アセトニトリル、３分、５分間水中の４５％アセトニトリル；流量：３０ｍＬ／分）によって精製した。次いで、精製した残渣をキラル分離に供し、（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル−３−（（Ｓ）−１−アミノ−２−メトキシ−２−オキソエチル）モルホリン−４−カルボキシレート（ＳＭ６８−Ａ、１７０ｍｇ、黄色の油）；（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル−３−（（Ｒ）−１−アミノ−２−メトキシ−２−オキソエチル）モルホリン−４−カルボキシレート（ＳＭ６８−Ｂ、２３０ｍｇ、黄色の固体）；およびＳＭ６８−Ｃ（３０ｍｇ、黄色の油）を得た。総収率：４１％。
【０４００】
【化４４】
2014501716.tif 000112
【０４０１】
４−（（（ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）安息香酸（１４０ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）および（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル−３−（（Ｓ）−１−アミノ−２−メトキシ−２−オキソエチル）モルホリン−４−カルボキシレート（１６０ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解した。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２５５μＬ、１．４６ｍｍｏｌ）、続いてＨＡＴＵ（２６６ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で３０分間保持し、次いで１Ｍのクエン酸および酢酸エチルに分配した。有機物を１Ｍのクエン酸、飽和炭酸水素ナトリウム、次いで飽和塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、蒸発乾固させた。３８０ｍｇの粗（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル−３−（（Ｓ）−１−（４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−２−メトキシ−２−オキソエチル）モルホリン−４−カルボキシレートを得た。
【０４０２】
【化４５】
2014501716.tif 000113
【０４０３】
（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル−３−（（Ｓ）−１−（４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−２−メトキシ−２−オキソエチル）モルホリン−４−カルボキシレート（粗製物、３８０ｍｇ）をジクロロメタン（４ｍＬ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（４ｍＬ）を加えた。５分後室温で混合物を１０ｍＬのジクロロメタンで希釈し、蒸発させた。このように得られた（Ｓ）−メチル−２−（４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−２−（（Ｓ）−モルホリン−３−イル）アセテート２，２，２−トリフルオロアセテートを、次のステップにおいて粗製物で使用した。
【０４０４】
【化４６】
2014501716.tif 000114
【０４０５】
（Ｓ）−メチル−２−（４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド）−２−（（Ｓ）−モルホリン−３−イル）アセテート２，２，２−トリフルオロアセテート（上記の反応からの粗製物）をイソプロパノール（１ｍＬ）に溶解し、ヒドロキシルアミン水溶液（５０％、１ｍＬ）を加えた。溶液を４℃で１８時間保持し、次いで蒸発させた。水を加え、混合物をＴＦＡで酸性化した。粗材料を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（２’’カラム、５０ｍＬ／分、水／ＡＣＮ中０．１％ＴＦＡ、２％で平衡化）によって精製した。
２％、１０分
２〜１１％、５分
１１〜４１％、３００分。
【０４０６】
所望の化合物は８８〜９９分で溶出した。所望の画分を凍結乾燥し、Ｎ−（（Ｓ）−２−（ヒドロキシアミノ）−１−（（Ｓ）−モルホリン−３−イル）−２−オキソエチル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミドＩ−２０をそのトリフルオロ酢酸塩（白色の固体、１１８ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ、４−（（（ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）安息香酸から５２％）として得た。質量分析データ：予測値（Ｍ＋１）：３９８．２、観測値：３９８．１。プロトンＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ｄｍｓｏ−ｄ６）：  １１．１７  （ｓ，  １Ｈ），  ９．１４  （ｓ，  １Ｈ），  ９．０８  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．９３  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．８３  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ８．４Ｈｚ），  ７．８９  （ｄ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  ８．０Ｈｚ），  ７．６２  （ｄ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  ８．０Ｈｚ），  ４．６９  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ４．６３  （ｔ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ８．８ＨＺ），  ３．８３  −  ３．８６  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．６０  −  ３．６６  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．５０  （ｔ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  １１．０Ｈｚ），  ３．３９  （ｍ，  １Ｈ），  ３．２０  −  ３．２３  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．０５  （ｍ，  １Ｈ），  １．３９  −  １．４５  （ｍ，  ２Ｈ），  ０．８７  −  ０．９２  （ｍ，  ２Ｈ）。
【０４０７】
Ｐ．Ｎ−（（Ｓ）−２−（ヒドロキシアミノ）−１−（（Ｓ）−４−メチルモルホリン−３−イル）−２−オキソエチル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−２１）の合成
【０４０８】
【化４７】
2014501716.tif 000115
【０４０９】
Ｎ−（（Ｓ）−２−（ヒドロキシアミノ）−１−（（Ｓ）−モルホリン−３−イル）−２−オキソエチル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミドトリフルオロアセテートＩ−２０（１０ｍｇ、２０μｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１００μＬ）に溶解した。パラホルムアルデヒド（５．９ｍｇ、２００μｍｏｌ）、続いてＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（６．８μＬ、３９μｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１９時間撹拌した。シアノ水素化ホウ素ナトリウム（３．７ｍｇ、５９μｍｏｌ）、メタノール（１００μＬ）および酢酸（４．５μＬ、７８μｍｏｌ）を加え、混合物を室温でさらに３日間撹拌した。混合物を、ＲＰ  ＨＰＬＣ（２’’カラム、５０ｍＬ／分、水／ＡＣＮ中０．１％ＴＦＡ、２％で平衡化）によって精製した。
２％、１０分
２〜１５％、５分
１５〜９５％、８０分。
【０４１０】
生成物は、２３分〜２４分で溶出した。所望の画分を凍結乾燥し、Ｎ−（（Ｓ）−２−（ヒドロキシアミノ）−１−（（Ｓ）−４−メチルモルホリン−３−イル）−２−オキソエチル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミドをそのトリフルオロ酢酸塩（７．０ｍｇ、１３μｍｏｌ、６８％）として得た。質量分析データ：予測値（Ｍ＋１）：４１１．２、観測値：４１２．２。
【０４１１】
Ｑ．Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（Ｅ）−４−（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１−エン−３−イニル）ベンズアミド（Ｉ−２２）の合成
【０４１２】
【化４８】
2014501716.tif 000116
【０４１３】
（Ｓ）−メチル３−アミノ−２−（４−（Ｅ）−４−（１Ｓ，２Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１−エン−３−イニル）ベンズアミド）−３−メチルブタノエート（４００ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ、１．０当量）を、丸底フラスコに加えた。これに、イソプロピルアルコール（２．０ｍＬ）を加え、溶液を２分間ボルテックスし、フラスコを氷浴中で冷却し、次いでヒドロキシルアミン溶液（１．４ｍＬ、２１．６０ｍｍｏｌ、２０当量）を加え、フラスコを４℃で概ね４８時間置いた。反応物を濃縮し、（０℃で）イソプロピルアルコールを除去し、次いでＴＦＡ（３ｍＬ）を使用して０℃で酸性化した。さらなる水（１５ｍＬ）およびＡＣＮ（３ｍＬ）を加えた。生成物を、逆相ＨＰＬＣ（２’’カラム、５０ｍＬ／分、水／ＡＣＮ中０．１％ＴＦＡ、２％Ｂで平衡化）によって精製した。シリンジフィルター（２４ｍＬ）を使用してカラムを１０ｍＬ／分、２％Ｂで充填し、次いで１分にわたり５０ｍＬ／分に傾斜させた。勾配２％Ｂ〜９５％Ｂで、７３分にわたり操作した。所望の画分を合わせ、凍結し、凍結乾燥器上に置いた。反応によって、１７７ｍｇのＮ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（Ｅ）−４−（（１，２−ｔｒａｎｓ）２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１−エン−３−イニル）ベンズアミド、Ｉ−２２、ＴＦＡを得た。ＬＣＭＳ  Ｍ＋１、予測値＝３７２．２、観測値＝３７２．２。１Ｈ  ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ０．７７−０．８１  （ｍ，  ２Ｈ），  １．２５  （ｓ，  ３Ｈ），  １．３０  （ｓ，３Ｈ），  １．３４−１．３７  （ｍ，  １Ｈ），  ３．２０−３．２４  （ｄｄ，  １Ｈ），  ３．３７−３．４１  （ｄｄ，  １Ｈ），  ４．６５−４．６７  （ｄ，  １Ｈ），  ６．４３−６．４７  （ｄ，  １Ｈ），  ６．８７−６．９１  （ｄ，  １Ｈ），  ７．５５−７．５７  （ｄ，  ２Ｈ），  ７．８４−７．８６  （ｄ，  ２Ｈ），  ７．９９  （ｂｒ，  ２Ｈ），  ８．３８−８．４１  （ｄ，１Ｈ），  ９．２２  （ｂｒ，  １Ｈ），  １１．２０  （ｓ，  １Ｈ）。
【０４１４】
Ｒ．抗微生物活性
細菌のスクリーニングおよび培養
細菌分離株は、周囲空気中、ミュラー−ヒントン寒天（Ｂｅｃｋｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ、Ｆｒａｎｋｌｉｎ  Ｌａｋｅｓ、ＮＪ）上での３５℃にて一晩の継代によって、−７０℃の凍結ストックから培養した。試験した臨床分離株は、米国および外国の様々な地理的に多様な病院から得た（Ｆｏｃｕｓ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、Ｈｅｒｎｄｏｎ、ＶＡおよびＪＭＩ、Ｎｏｒｔｈ  Ｌｉｂｅｒｔｙ、ＩＡ）。品質管理された株は、米国培養細胞系統保存機関（（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）ＡＴＣＣ；Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、Ｍｄ．）からであった。
【０４１５】
感受性試験
最小阻害濃度（ＭＩＣ）を、臨床検査標準協議会（ＣＬＳＩ）のガイドラインに従って、ブロス微量希釈法によって決定した。手短に言えば、生物懸濁物を、０．５マックファーランド標準に調節し、３×１０５〜７×１０５コロニー形成単位（ＣＦＵ）／ｍＬの最終接種材料を生じさせた。薬物希釈物および接種材料を、無菌のカチオン調節ミュラー−ヒントンブロス（Ｂｅｃｋｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）中で作製した。１００μＬの接種材料容積を、２倍連続希釈の薬物を有する１００μＬのブロスを含有するウェルに加えた。全ての接種した微量希釈トレーを、周囲空気中３５℃にて１８〜２４時間インキュベートした。インキュベーションに続いて、目に見える増殖を防止した薬物の最も低い濃度（ＯＤ６００ｎｍ＜０．０５）を、ＭＩＣとして記録した。アッセイの成績は、ＣＬＳＩのガイドラインに従って、実験室の品質管理された株および規定されたＭＩＣスペクトルを有する化合物であるレボフロキサシンを使用することによってモニターした。典型的には、本発明の化合物は、０．０３〜１６μｇ／ｍＬのＭＩＣ値を有する。この目的のために、特定の代表的な化合物についてのデータを、下記の表ＩＩに示す。
【０４１６】
【表２】
2014501716.tif 000117
【０４１７】
ＭＩＣの凡例：
Ａ＝２．０μｇ／ｍＬ以下のＭＩＣ
Ｂ＝２．０μｇ／ｍＬ超から１６．０μｇ／ｍＬのＭＩＣ
Ｃ＝１６．０μｇ／ｍＬ超のＭＩＣ
＊ＡＥＣＯ００１は、Ｅ．  ｃｏｌｉ（ＡＴＣＣ２５９２２）である。ＡＰＡＥ００１は、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ（ＡＴＣＣ２７８５３）である。ＡＫＰＮ００１は、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ（ＡＴＣＣ４３８１６）である。ＡＰＡＥ００２は、正常レベルの流出活性を発現しているＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａの臨床分離株である。
【０４１８】
Ｓ．インビボ忍容性
各化合物を、マウスに皮下注射によって投与した。マウスを、１８〜２８℃および約５０％湿度で群で収容（ケージごとに５匹）し、標準的げっ歯類用飼料を与えた。水および食物を自由に与えた。マウスに、体重ｋｇ当たり２０ｍＬ以下の皮下用量を与えた。
【０４１９】
３匹のマウスの群に、２０ｍＭの酢酸緩衝液（ｐＨ５）中の１５％Ｃａｐｔｉｓｏｌからなる処方物中の、皮下注射による試験化合物の単一用量として、５０ｍｇ／ｋｇ／日、１００ｍｇ／ｋｇ／日、２００ｍｇ／ｋｇ／日、４００ｍｇ／ｋｇ／日または６００ｍｇ／ｋｇ／日を投与した。皮下注射を肩甲骨間領域の背中に行った。１０〜２０ｍＬ／ｋｇの容積を、この領域に注射した。針の先端が皮下ポケット内に入る深さまで、針を皮膚の表面に沿って挿入した。プランジャーへの穏やかで安定した圧力を使用して、シリンジの内容物を排出した。
【０４２０】
投与後種々の時点：３０秒〜１分、５分、１５分、３０分、４５分、１時間、７５分、９０分、１０５分、２時間、およびその後毎時に、動物がほぼベースラインまで回復の徴候を示すまで、または投与後４時間まで（最初に到来した方）、観察を行った。動物が警戒しており、正常、および反応性に見えた場合、マウスをモニターする最小時間範囲は投与後３０分であった。動物が毒性作用を示した場合、動物がほぼベースラインまで回復の徴候を示すまで、または投与後４時間まで（最初に到来した方）、動物を密接にモニターした。生存および活動レベルのモニタリングを含めた臨床所見のために、動物を投与後７２時間保持した。観察は、中枢神経系の窮迫（例えば、発作、不活発、横臥位、静止、活動亢進）、神経筋の異常（例えば、運動失調、単収縮、痙攣、広げた肢、ジャンプまたはキック）、自律神経症状（例えば、唾液分泌、流涙、排尿、排便、立毛または目を細めること）、呼吸窮迫（例えば、努力性呼吸または速い呼吸、抑制、浅速呼吸または喘ぎ呼吸）、常同行動（例えば、反復性咀嚼、回転行動、ぺーシング、毛づくろい、嗅ぐ動作、頭の動きまたは猫背の姿勢）、ならびに異常行動、例えば、逃避行動または激しい震えの症状を考慮した。
【０４２１】
公知の化合物であるＮｏ＿ａｌｃ（その合成および活性は、国際ＰＣＴ公開第２００８／０６６７６号；化合物９１〜１２に開示されている）は、マウスの皮下に注射したときに、マウスにおいて５０ｍｇ／ｋｇ未満の最大耐用量を示したが、一方、皮下注射による３０ｍｇ／ｋｇの用量は、マウスにおいてＫ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａに対する静的用量として必要である。単純にシクロプロピル基のヒドロキシメチル置換によってこの公知の化合物とは異なる本発明の化合物Ｉ−１は、Ｎｏ＿ａｌｃの抗微生物活性と匹敵する抗微生物活性を有するが、哺乳動物において実質的により許容される（マウスにおいて皮下に注射されたときに、概ね２００ｍｇ／ｋｇの最大耐用量）。
【０４２２】
【化４９】
2014501716.tif 000118
【０４２３】
表ＩＩＩは、皮下に投与したマウスの観察結果を提供する。忍容性を、臨床所見によって特性決定した。クラスＡは、毒性症状がない動物から毒性症状が殆どない動物（例えば、動くときの時々の短い休止、僅かな努力性呼吸、または迅速な回復（例えば、１０分以内）を伴う僅かな不活発）に割り当てた。クラスＢは、いくらかの毒性症状、例えば、動くときのより長い休止、より長い回復時間（１時間まで）を伴う僅かな不活発（その間に動物はまだ動き回ることができる）を示す動物に割り当てた。クラスＣは、中等度から重度の毒性症状、例えば、不活発、横臥、目を細めることおよび努力性呼吸を伴う不活発、重度の単収縮（ジャンプ、キック）、または逃避行動を有する動物に割り当てた。最後に、クラスＤは、臨床所見時間内（投与後７２時間まで）に任意の致死効果（安楽死を必要とする瀕死状態を含めた）が起こったときに割り当てた。
【０４２４】
【表３】
2014501716.tif 000119
【０４２５】
Ｔ．第２の抗菌剤との相乗作用
細菌分離株は、周囲空気中、ミュラー−ヒントン寒天（Ｂｅｃｋｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ、Ｆｒａｎｋｌｉｎ  Ｌａｋｅｓ、ＮＪ）上での３５℃にて一晩の継代によって、Ｋ．  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ（ＡＴＣＣ４３８１６）の−７０℃の凍結ストックから培養した。最小阻害濃度（ＭＩＣ）を、臨床検査標準協議会（ＣＬＳＩ）のガイドラインに従って、ブロス微量希釈法によって決定した。手短に言えば、生物懸濁物を、０．５マックファーランド標準に調節し、３×１０５〜７×１０５コロニー形成単位（ＣＦＵ）／ｍＬの最終接種材料を生じさせた。薬物希釈物および接種材料を、無菌のカチオン調節ミュラー−ヒントンブロス（Ｂｅｃｋｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）中で作製した。１００μＬの接種材料容積を、２倍連続希釈の薬物を有する１００μＬのブロスを含有するウェルに加えた。全ての接種した微量希釈トレーを、周囲空気中３５℃にて１８〜２４時間インキュベートした。インキュベーションに続いて、目に見える増殖を防止した薬物の最も低い濃度（ＯＤ６００ｎｍ＜０．０５）を、ＭＩＣとして記録した。
【０４２６】
示された薬剤およびＮ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１）の組み合わせで、標準的チェッカーボードアッセイを行った。表ＩＶは、標準的な技術によって計算したＦＩＣＩを提供する。化合物Ｉ−１は、バンコマイシン、テイコプラニン、エリスロマイシン、アジスロマイシン、リファンピンおよびノボビオシンとインビトロで相乗的であった。
【０４２７】
【表４】
2014501716.tif 000120
【０４２８】
Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１）とバンコマイシンとのインビボ相乗作用を、インビボの好中球減少性大腿部有効性モデルにおいて検査した。本質的には、Ｃｒａｉｇおよびその他によって記載されたように、モデルを管理した（Ｇｕｄｍｕｎｄｓｓｏｎら、「Ｍｕｒｉｎｅ  Ｔｈｉｇｈ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  Ｍｏｄｅｌ」、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ａｎｉｍａｌ  Ｍｏｄｅｌｓ  ｏｆ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ、Ｍ．  Ａ．  ＳａｎｄｅおよびＯ．  Ｚａｋ（編）；Ｌｏｎｄｏｎ：Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、１９９９年、１３７〜１４４頁を参照されたい）。手短に言えば、マウスを、シクロホスファミドの２用量によって感染前に好中球減少性にし、次いで大腿部において筋肉内に１０３〜１０５ＣＦＵのＫ．ｐｎｅｕｍｏ．（ＡＴＣＣ４３８１６）の接種材料で感染させた。抗生物質またはビヒクル単独（陰性対照として）を、感染２時間後および１４時間後に２回投与した。微生物学的読み出し情報が薬物および細菌のインビボでの相互作用を測定するように、感染に対する白血球の作用を最小化するために、実験の期間中、動物を好中球減少性に保持した。感染２４時間後に、大腿部を収集し、ホモジナイズし、プレートに入れ、大腿部毎に生存しているＣＦＵの数を測定した。動物のサブセットからの大腿部をまた、感染２時間後に収集し、最初の抗生物質による処理の直前に存在するＣＦＵ（処理前）を記録した。感染後０時間で測定したＣＦＵ負荷と同一の、２４時間でのＣＦＵ負荷をもたらすのに必要とされる用量として定義される静的用量は、用量反応曲線からＰｒｉｚｍ（ＧｒａｐｈＰａｄソフトウェア）で標準的方法によって計算した。
【０４２９】
これらの研究の目的は、Ｉ−１と候補相乗作用剤との組み合わせが、このインビボ有効性モデルにおけるカウントにおいて各薬剤単独の合計よりも大きな減少をもたらしたか否かを定量的に評価することであった。
【０４３０】
バンコマイシンは、Ｋ．ｐｎｅｕｍｏ．（ＡＴＣＣ４３８１６）による感染の処理のために、ＬｐｘＣインヒビターと共に有意なインビボ相乗作用を提示する。図１において示すように、２２０ｍｇ／ｋｇ／日でのバンコマイシン単独による感染したマウスの処理は、ＣＦＵの有意な減少をもたらさない。しかし、化合物Ｉ−１と共投与されるとき、ＬｐｘＣインヒビターの静的用量は有意に減少する（図１および表Ｖ）。
【０４３１】
【表５】
2014501716.tif 000121
【０４３２】
総合すれば、これらのデータは、バンコマイシンが、Ｎ−（（Ｓ）−３−アミノ−１−（ヒドロキシアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）−４−（（（１，２−ｔｒａｎｓ）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ブタ−１，３−ジイニル）ベンズアミド（Ｉ−１）と驚くべきインビボ相乗作用を実証することを示す。
【０４３３】
本発明による有機化合物は、互変異性の現象を提示し得ることを理解すべきである。本明細書内の化学構造は、可能性のある互変異性形態の１つのみを表すことができるため、本発明は描いた構造の任意の互変異性形態を包含することを理解すべきである。
【０４３４】
さらに、本発明の特定の実施形態を例示のために本明細書に示し、記載してきた一方、特に上記の教示に照らして、本発明の精神および範囲から逸脱することなく当業者は修正を行ない得るため、当然ながら、本発明はそれだけに限定されないことが理解される。したがって、添付の特許請求の範囲による場合を除いて本発明は制限されない。
【０４３５】
本明細書で言及する米国特許、米国特許出願公開、米国特許出願、外国特許、外国特許出願および非特許公開資料の全ては、本記載と矛盾しない範囲で参考として本明細書中にその全体が組み込まれている。
【図１】
2014501716.tif 000127
【国際調査報告】
2014501716.tif 000128
2014501716.tif 000129
2014501716.tif 000130