(57)【要約】  治療有効量のプテロスチルベンと、治療有効量のスタチン化合物と、薬学的に許容可能なキャリアとを含む薬学的組成物が提供される。薬学的組成物の実施形態は、脂質低下特性を有し得るか、あるいは神経変性疾患の一因となる炎症または炎症過程を減少させることにより酸化ストレスを処置し得る特性を有し得る。個体における脂質レベルを低下させる方法であって、治療有効量のプテロスチルベンと、治療有効量のスタチン化合物と、薬学的に許容可能なキャリアとを含む薬学的組成物をそのような処置を必要とする個体に投与するステップであって、脂質レベルが低下するステップを含む方法もまた提供される。【選択図】図２
2014526521.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療有効量のプテロスチルベンと、治療有効量のスタチンと、薬学的に許容可能なキャリアとを含むことを特徴とする脂質低下薬学的組成物。
【請求項２】
請求項１に記載の脂質低下薬学的組成物において、プテロスチルベンが約２５ｍｇ〜約５００ｍｇの量で存在し、かつ前記スタチンが約１ｍｇ〜約１００ｍｇの量で存在することを特徴とする、脂質低下薬学的組成物。
【請求項３】
請求項１に記載の脂質低下薬学的組成物において、プテロスチルベンが、約５０ｍｇ〜約１５０ｍｇの量で存在することを特徴とする、脂質低下薬学的組成物。
【請求項４】
請求項１に記載の脂質低下薬学的組成物において、前記スタチンが、アトルバスタチン、セリバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなる群から選択されることを特徴とする、脂質低下薬学的組成物。
【請求項５】
治療有効量のプテロスチルベンと、治療有効量のスタチンと、薬学的に許容可能なキャリアとを含むことを特徴とする抗炎症薬学的組成物。
【請求項６】
請求項５に記載の抗炎症薬学的組成物において、プテロスチルベンが約２５ｍｇ〜約５００ｍｇの量で存在し、かつ前記スタチンが約１ｍｇ〜約１００ｍｇの量で存在することを特徴とする、抗炎症薬学的組成物。
【請求項７】
請求項５に記載の抗炎症薬学的組成物において、プテロスチルベンが、約５０ｍｇ〜約１５０ｍｇの量で存在することを特徴とする、抗炎症薬学的組成物。
【請求項８】
請求項５に記載の脂質低下薬学的組成物において、前記スタチンが、アトルバスタチン、セリバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなる群から選択されることを特徴とする、脂質低下薬学的組成物。
【請求項９】
個体における脂質レベルを低下させる方法において、治療有効量のプテロスチルベンと、治療有効量のスタチンと、薬学的に許容可能なキャリアとを含む薬学的組成物をそのような処置を必要とする前記個体に投与するステップであって、脂質レベルが低下するステップを含むことを特徴とする方法。
【請求項１０】
請求項９に記載の方法において、合計１日用量としてのプテロスチルベンの前記治療有効量が、約５０ｍｇ〜約２５０ｍｇの範囲内にあり、合計１日用量としての前記スタチンの前記治療有効量が、約１ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲内にあることを特徴とする、方法。
【請求項１１】
請求項９に記載の方法において、前記脂質レベルの低下が、血清中の、総コレステロール（ＴＣ）、低密度リポタンパク質コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）、トリグリセリド（ＴＧ）、および低密度リポタンパク質コレステロールと高密度リポタンパク質コレステロールとの比（ＬＤＬ−Ｃ／ＨＤＬ−Ｃ）からなる群から選択されるものの低下として表されることを特徴とする、方法。
【請求項１２】
請求項１０に記載の方法において、前記個体がヒトであることを特徴とする方法。
【請求項１３】
請求項１１に記載の方法において、前記個体がヒトであることを特徴とする方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
プテロスチルベンとスタチン化合物との組み合わせが提供される。この組み合わせは、脂質代謝異常の処置、心臓血管障害の処置、酸化ストレスと関連する神経変性障害の処置、および炎症の緩和または阻害に有効である。
【背景技術】
【０００２】
スタチンは、主に肝臓においてコレステロールの生合成を低減するように作用し、３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリルコエンザイムＡ還元酵素（ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素）を阻害して脂質代謝を調節する。こうしたＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤の有益な作用は、一般に、３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡより優れており、したがってＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素を競合的に阻害することにより、内因性のコレステロール合成を減少させるそれらの能力によるものであると考えられている。
【０００３】
ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素は、コレステロールおよび多くの他の非ステロイド性イソプレノイド化合物の前駆体である、メバロネート（メバロン酸）を生成する反応を触媒する（Ｈｕｎｎｉｎｇｈａｋｅ  Ｄ．Ｂ．，ＨＭＧ−ＣｏＡ  ｒｅｄｕｃｔａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｌｉｐｉｄｏｌ．，３：２２−８，１９９２）。この上流調節作用のため、スタチンによるＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素の阻害が影響を及ぼす生化学的経路はたった１つではない。脂質に関しては、スタチンは、コレステロール生合成を阻害し、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）の取り込みおよび分解を増加させ、リポタンパク質の分泌を阻害し、ＬＤＬ酸化を阻害するように作用する。スタチンはまた、細胞内シグナル伝達経路にも影響を及ぼし、これがマクロファージへのエステル化コレステロールの蓄積の減少、血管拡張を助けるｅＮＯＳ（内皮ＮＯ合成酵素）の増加、炎症過程の緩和、ならびに血小板活性および凝固過程の修復に繋がる（Ｂｅｌｌｏｓｔａ  Ｓ．，Ｆｅｒｒｉ  Ｎ．，Ｂｅｒｎｉｎｉ  Ｆ．，Ｐａｏｌｅｔｔｉ  Ｒ．，Ｃｏｒｓｉｎｉ  Ａ．，Ｎｏｎ−ｌｉｐｉｄ−ｒｅｌａｔｅｄ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｓｔａｔｉｎｓ，Ａｎｎ．Ｍｅｄ．，３２：１６４−１７６，２０００）。
【０００４】
スタチンは、ＨＭＧ−ＣｏＡと同じ活性部位において結合することにより、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素を阻害する。この結合は、ＨＭＧ−ＣｏＡが結合するのを阻害するように作用し、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素が機能構造に達するのを妨げる。それに伴う細胞内コレステロールの減少は、ステロール調節エレメント結合タンパク質（ＳＲＥＢＰ）を小胞体から切断するタンパク質分解酵素の活性化を誘発して、それらが核レベルに移動することを可能にし、そこでそれらはＬＤＬ受容体の遺伝子発現を増加させる。肝ＬＤＬ受容体の増加は、循環ＬＤＬおよびその前駆体（例えば、Ｉ−ＬＤＬおよびＶ−ＬＤＬコレステロール）を減少させる（Ｓｅｈａｙｅｋ  Ｅ．，Ｂｕｔｂｕｌ  Ｅ．，Ａｖｎｅｒ  Ｒ．，Ｅｎｈａｎｃｅｄ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｏｆ  ｖｅｒｙ  ｌｏｗ  ｄｅｎｓｉｔｙ  ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ  ｂｙ  ｓｉｍｖａｓｔａｔｉｎ：ａ  ｎｏｖｅｌ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  ａｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ＨＭＧ−ＣｏＡ  ｒｅｄｕｃｔａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，２４：１７３−８，１９９４）。
【０００５】
プテロスチルベン（３，５−ジメトキシ−４’−ヒドロキシ−トランス−スチルベン）は、特定のベリー（例えば、ブルーベリー、クランベリー、スパークルベリー（ｓｐａｒｋｌｅｂｅｒｒｙ）、コケモモ）中および極少量でブドウ中に見出される、レスベラトロールの天然類似体である。レスベラトロールと同様、プテロスチルベンは、病原体（例えば、細菌または真菌）による攻撃を受けている時に植物によって天然に産生される、フィトアレキシンと呼ばれる化合物のクラスに属する。しかしながら、動物研究により、レスベラトロールと比べて、プテロスチルベンは、核内受容体であるペルオキシソーム増殖因子活性化受容体αアイソフォーム（ＰＰＡＲ−α）の活性化を通して脂質およびグルコースを低下させる作用を有していることが示されている（共に参照により本明細書に援用されるＲｉｍａｎｄｏ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．（２００５）５３：３４０３−３４０７および米国特許出願公開第２０１１／００６００６０号明細書）。レスベラトロールは僅かなＰＰＡＲ−α活性化しか示さないが、これはＰＰＡＲ−γ活性化物質であることが知られている。当然、プテロスチルベンは、選択的にその逆を示し、弱いＰＰＡＲ−γ活性化物質であるにすぎない。
【０００６】
プテロスチルベンは、ＰＰＡＲ−αを活性化するように作用し、これは、肝臓において、脂肪酸のβ酸化の増加ならびにトリグリセリドおよび超低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ）の合成の減少に繋がる（Ｆｒｕｃｈａｒｔ，Ｊ．−Ｃ．；Ｄｕｒｉｅｚ，Ｐ．Ａｎｔｉ−ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  ａｇｅｎｔｓ，ｎｅｗ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ．Ａｎｎ．Ｐｈａｒｍ．Ｆｒ．（２００４）６２：３−１８）。ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）アイソフォームは、標的遺伝子のプロモーター領域における特異的応答配列と相互作用することにより遺伝子発現を制御するリガンド活性化転写因子の核内受容体スーパーファミリーに属する（Ｔｕｇｗｏｏｄ  ＪＤ，Ａｌｄｒｉｄｇｅ  ＴＣ，Ｌａｍｂｅ  ＫＧ，Ｍａｃｄｏｎａｌｄ  Ｎ，Ｗｏｏｄｙａｔｔ  ＮＪ．Ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ａｎｄ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ．Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８０４，２５２，１９９６）。脂肪酸および脂質の異化、ならびに肝臓における脂肪酸酸化に関与する遺伝子の活性化に関与する主要なアイソフォームが、ＰＰＡＲ−αである（Ｆｒｕｃｈａｒｔ  Ｊ−Ｃ，Ｓｔａｅｌｓ  Ｂ，Ｄｕｒｉｅｚ  Ｐ．ＰＰＡＲ−ａｌｐｈａ  ｉｎ  ｌｉｐｉｄ  ａｎｄ  ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，ｖａｓｃｕｌａｒ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ．Ｐｒｏｇ．Ｅｘｐ．Ｃａｒｄｉｏｌ．８，３，２００３）。肝臓におけるＰＰＡＲ−αの活性化が、脂肪酸の酸化の増加ならびにトリグリセリドおよび超低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ）の合成の減少に繋がるということが示されている。これが、血漿ＨＤＬコレステロールの増加に繋がる肝臓アポリポロテイン（ａｐｏｌｉｐｏｒｏｔｅｉｎ）Ａ−ＩおよびＡ−ＩＩの発現を誘導するその能力と相俟って、ＰＰＡＲ−αを、コレステロールを低下させる分野における非常に重要な標的にしている（Ｇｅｒｖｏｉｓ  Ｐ，Ｔｏｒｒａ  ＩＰ，Ｆｒｕｃｈａｒｔ  ＪＣ，Ｓｔａｅｌｓ  Ｂ．Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｌｉｐｉｄ  ａｎｄ  ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｂｙ  ＰＰＡＲ  ａｃｔｉｖａｔｏｒｓ．Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．Ｌａｂ．Ｍｅｄ．３８，３，２０００）。フィブラート薬剤ファミリーは、公知のＰＰＡＲ−αアゴニストであり、それらのトリグリセリド低下作用およびＨＤＬコレステロール上昇作用は、主にそれらのＰＰＡＲ−α活性化によるものであると考えられている（Ｄｅｓａｉ  ＲＣ，Ｍｅｔｚｇｅｒ  Ｅ，Ｓａｎｔｉｎｉ  Ｃ，Ｍｅｉｎｋｅ  ＰＴ，Ｈｅｃｋ  ＪＶ，Ｂｅｒｇｅｒ  ＪＰ，ＭａｃＮａｕｌ  ＫＬ，Ｃａｉ  Ｔ，Ｗｒｉｇｈｔ  ＳＤ，Ａｇｒａｗａｌ  Ａ，Ｍｏｌｌｅｒ  ＤＥ，Ｓａｈｏｏ  ＳＰ．Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ｐｏｔｅｎｔ  ａｎｄ  ｓｕｂｔｙｐｅ−ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ＰＰＡＲａｌｐｈａ  ａｇｏｎｉｓｔｓ．Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．１６，１６７３，２００６）。しかしながら、スタチン−フィブラートの組み合わせは、有望ではあるが、筋肉痛などの望ましくない副作用に繋がり得るか、また��さらには筋障害／横紋筋融解症を含む状態に繋がり得る。
【０００７】
この話についてさらに詳しく述べると、レスベラトロールによるＰＰＡＲ−αの活性化に関する報告（Ｉｎｏｕｅ  Ｈ，Ｊｉａｎｇ  ＸＦ，Ｋａｔａｙａｍａ  Ｔ，Ｏｓａｄａ  Ｓ，Ｕｍｅｓｏｎｏ  Ｋ，Ｎａｍｕｒａ  Ｓ．Ｂｒａｉｎ  ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｂｙ  ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ  ａｎｄ  ｆｅｎｏｆｉｂｒａｔｅ  ａｇａｉｎｓｔ  ｓｔｒｏｋｅ  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｌｐｈａ  ｉｎ  ｍｉｃｅ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．３５２，２０３，２００３）が、プテロスチルベンを用いて行われた同様の研究に最終的に繋がった発見である（Ｒｉｍａｎｄｏ  ＡＭ，Ｎａｇｍａｎｉ  Ｒ，Ｆｅｌｌｅｒ  ＤＲ，Ｙｏｋｏｙａｍａ  Ｗ．Ｐｔｅｒｏｓｔｉｌｂｅｎｅ，ａ  ｎｅｗ  ａｇｏｎｉｓｔ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｌｐｈａ−ｉｓｏｆｏｒｍ，ｌｏｗｅｒｓ  ｐｌａｓｍａ  ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｓ  ａｎｄ  ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  ｉｎ  ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉｃ  ｈａｍｓｔｅｒｓ．Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．５３，３４０３，２００５）。米国農務省（ＵＳＤＡ）の研究者らは、Ｈ４ＩＩＥＣ３ラット肝細胞におけるＰＰＡＲ−α活性化に対するプテロスチルベン、レスベラトロール、およびフィブラート薬剤ファミリーのメンバーであるシプロフィブラートの効果を試験した。ペルオキシソーム増殖因子応答配列プロモーター領域を含有するルシフェラーゼレポーター遺伝子構築物を用いて、その研究者らは、１００μＭプテロスチルベンが、ＰＰＡＲ−α活性化を、コントロールと比較して８倍、そして１００μＭのシプロフィブラートよりほぼ２倍多く誘導する（レスベラトールは１００μＭ濃度で細胞に対して毒性があった）ことを見出した。３００μＭプテロスチルベン濃度では、誘導は、コントロールと比較して１４倍に増大した。したがって、これにより、プテロスチルベン補充もまた、薬剤フィブラートファミリーによるＰＰＡＲ−α活性化の結果としてもたらされる、トリグリセリドおよび超低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ）の合成の減少ならびに血漿ＨＤＬコレステロールの増加を生じさせるはずであることが示唆された。
【０００８】
したがって、種々の研究をまとめると、スタチンとＰＰＡＲリガンドとの組み合わせが、価値ある治療選択肢を提供し得、脂質代謝異常性心臓血管炎症性障害にかかっている糖尿病被験体および非糖尿病被験体において有益であり得ることが示唆されている。上で述べたように、長期的処置の際のスタチンと特定のＰＰＡＲリガンド（例えば、フィブラート）との組み合わせについての有害プロファイル（ａｄｖｅｒｓｅ  ｐｒｏｆｉｌｅ）は分かっておらず、調査される必要がある。しかしながら、スタチンと他のＰＰＡＲリガンド（例えば、スチルベノイド化合物）との組み合わせは、進行心臓血管障害（ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ）の予防においてかなりの利益を提供し得るであろう。
【０００９】
老化および神経変性障害に関しては、果物および野菜の食事補給が、高齢被験体と関連する欠陥を予防および逆転させる効果を有している。
【００１０】
レスベラトロールは、その強い抗酸化活性により複数の老化防止特性を有するものと認識されている。インビトロ実験により、レスベラトロールが有効なフリーラジカル捕捉剤であり、低密度リポタンパク質の酸化を阻害するということが示されている（Ｂｒｉｔｏ，ｅｔ  ａｌ．，Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ  Ｒｅｓ．（２００２）３６（６）：６２１−６３１）。ピノスチルベン、デスオキシラポンチゲニン、プテロスチルベン、レスベラトロールトリメチルエーテル、およびピセアタンノールなどの他のスチルベノイドは、ＰＰＡＲ−αを活性化することにより脂質レベルを低下させるための様々な程度の生物活性および有効性を有している。
【００１１】
上で述べたように、レスベラトロールの天然のメチルエーテル類似体であるプテロスチルベンは、レスベラトロールの抗酸化活性と同様の抗酸化活性を有することが証明されている（Ｒｉｍａｎｄｏ  ｅｔ  ａｌ．，（２００２）Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．５０：３４５３−３４５７；Ｓｔｉｖａｌａ  ｅｔ  ａｌ．，（２００１）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６（２５）：２２５８６−２２５９４）。プテロスチルベンは、一部の小型の果物（例えば、ブドウ（Ａｄｒｉａｎ  ｅｔ  ａｌ．，（２０００）Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．４８：６１０３−６１０５）およびスノキ属のベリー（ウァッキニウム・アセイ（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ  ａｓｈｅｉ  Ｒｅａｄｅ）およびウァッキニウム・スタミネウム（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ  ｓｔａｍｉｎｅｕｍ  Ｌ．））（Ｒｉｍａｎｄｏ  ｅｔ  ａｌ．，（２００４）Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．５２：４７１３−４７１９））および木本植物（Ｍａｕｒｙａ  ｅｔ  ａｌ．，（１９７７）Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．４７：１７９−１８１；Ａｍｏｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，（１９７７）Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｐｅｒｋｉｎｓ  Ｔｒａｎｓ．１９：２１１６−２１１８）中に存在する。しかしながら、Ｒｉｍａｎｄｏ，ｅｔ  ａｌ．（２００４）は、ブドウにおいては、プテロスチルベンは概して極微量で見出され、全く存在しないこともあり得ることを見出した。さらに、アノゲイスス・アクミナタ（Ａｎｏｇｅｉｓｓｕｓ  ａｃｕｍｉｎａｔａ）、ドラカエナ・コキンキネンシス（Ｄｒａｃａｅｎａ  ｃｏｃｈｉｎｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）、ドラカエナ・ロウレイリ（Ｄｒａｃａｅｎａ  ｌｏｕｒｅｉｒｉ）、グイボウルティア・テスマンニイ（Ｇｕｉｂｏｕｒｔｉａ  ｔｅｓｓｍａｎｎｉｉ）、プテロカルプス・マクロカルプス（Ｐｔｅｒｏｃａｒｐｕｓ  ｍａｃｒｏｃａｒｐｕｓ）、プテロカルプス・マルスピウム（Ｐｔｅｒｏｃａｒｐｕｓ  ｍａｒｓｕｐｉｕｍ）、プテロカルプス・サンタリヌス（Ｐｔｅｒｏｃａｒｐｕｓ  ｓａｎｔａｌｉｎｕｓ）、ウァッキニウム・アセイ（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ  ａｓｈｅｉ）、ウァッキニウム・コリュンボスム（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ  ｃｏｒｙｍｂｏｓｕｍ）、ウァッキニウム・デリキオスム（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ  ｄｅｌｉｃｉｏｓｕｍ）、ウァッキニウム・メンブラナケウム（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｍ）、ウァッキニウム・オウァトゥム（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ  ｏｖａｔｕｍ）、ウァッキニウム・オウァリフォイルム（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ  ｏｖａｌｉｆｏｉｌｕｍ）、ウァッキニウム・パルウィフロルム（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ  ｐａｒｖｉｆｌｏｒｕｍ）、ウァッキニウム・スタミネウム（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ  ｓｔａｍｉｎｅｕｍ）、ウァッキニウム・ウリギノスム（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ  ｕｌｉｇｉｎｏｓｕｍ）、およびウィティス・ウィニフレア（Ｖｉｔｉｓ  ｖｉｎｉｆｒｅａ）をはじめとする複数の植物性薬品が、プテロスチルベンを含有する。プテロスチルベンはまた、非植物性供給源（例えば、プロポリス）においても見出される。
【００１２】
ブルーベリー種のプテロスチルベン濃度量は様々である。９９ｎｇから４７５ｎｇの範囲のプテロスチルベンが、１グラムの凍結乾燥ブルーベリーから得られ得ることが報告されている。
【００１３】
研究により、抗酸化剤の作用と脳の老化および行動の有害な影響とが関連づけられている。植物の一次代謝には一般に関与しない「二次的な化学物質（ｓｅｃｏｎｄａｒｙ  ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）」の形態で果物および野菜において見出されるプテロスチルベンをはじめとする抗酸化／抗炎症性ポリフェノールの組み合わせが、こうした有害な影響を防止することにおいて有効性を示した。そういうものであるから、老化および認知欠陥を防ぎ得る果物および植物、特にその化合物を、さらに特定する必要性がある。参照により本明細書に援用される米国特許出願公開第２００９／００６９４４４号明細書を参照されたい。
【００１４】
さらに、ライフスタイルおよび食事などの要因が、血管疾患のアウトカムに悪い影響または良い影響を与え得ることが知られている。運動および食事は、プラーク形成の速度および程度を著しく低下させ得る。さらに、食事は、存在するプラークが深刻な凝血塊を結果としてもたらす可能性に大きな影響を与え得るようである。したがって、多くの食品中の化合物が、薬物処置によってもたらされる抗凝固および抗血小板凝集と同じ作用をすることは、驚くべきことではない。最近の研究により、ベリーおよびブドウをはじめとする種々の食品における抗血栓特性および抗血小板特性が証明されている。
【００１５】
上記のことから考えて、プテロスチルベンおよびスタチンの有益な特性を有する薬学的組成物を提供することが望ましいであろう。
【００１６】
（ＰＰＡＲ−α活性化経路による）プテロスチルベンの脂質低下特性と（ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害経路による）スタチンの脂質低下特性とを相乗的に向上させる方法が見出され得るならば、これは、当該技術分野への価値ある貢献となるであろう。
【００１７】
プテロスチルベンおよびスタチンの有益な特性を有する薬学的組成物を用いてｅＮＯＳの活性を向上させ、そうして血管拡張を増大し、炎症過程およびプラーク形成の減少を結果としてもたらす方法が見出され得るならば、これは、当該技術分野への価値ある貢献となるであろう。
【００１８】
さらに、プテロスチルベンをスタチンと組み合わせることにより個体における癌、神経変性疾患および老化の一因となる炎症過程を緩和または阻害する方法が見出され得るならば、これは、当該技術分野への価値ある貢献となるであろう。
【発明の概要】
【００１９】
治療有効量のプテロスチルベンと、治療有効量のスタチン化合物と、薬学的に許容可能なキャリアとを含む薬学的組成物が提供される。別の実施形態において、薬学的組成物は、プテロスチルベンとスタチン化合物との組み合わせの治療有効量を含む。
【００２０】
薬学的組成物の実施形態は、脂質低下特性を有し得る。
【００２１】
代替的な実施形態において、薬学的組成物は、例えば神経変性疾患の一因となる炎症または炎症過程を減少させることにより、酸化ストレスを処置し得る特性を有し得る。
【００２２】
個体における脂質レベルを低下させる方法であって、治療有効量のプテロスチルベンと、治療有効量のスタチン化合物と、薬学的に許容可能なキャリアとを含む薬学的組成物をそのような処置を必要とする個体に投与するステップであって、脂質レベルが低下するステップを含む方法が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】図１は、一実施形態における総コレステロール（ＴＣ、単位はｍｇ／ｄＬ）を図示したものであり、プテロスチルベン（高用量）の組み合わせの効果をスタチンを用いておよび用いずに、ならびにプテロスチルベン（低用量）の組み合わせの効果をスタチンを用いておよび用いずに示している。暗い色の中を塗りつぶした棒：初期ベースライン測定；明るい色の中を塗りつぶした棒：６〜８週間の処置の後の最終測定。
【図２】図２は、一実施形態における総ＬＤＬ−Ｃ（ｍｇ／ｄＬ）を図示したものであり、プテロスチルベン（高用量）の組み合わせの効果をスタチンを用いておよび用いずに、ならびにプテロスチルベン（低用量）の組み合わせの効果をスタチンを用いておよび用いずに示している。暗い色の中を塗りつぶした棒：初期ベースライン測定；明るい色の中を塗りつぶした棒：６〜８週間の処置の後の最終測定。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
プテロスチルベンとスタチン化合物とを含有する安全かつ有効な薬学的組成物または機能性食品組成物が提供されることとなった。一実施形態において、脂質代謝異常について個体を処置する方法は、治療有効量のプテロスチルベンと、治療有効量のスタチン化合物と、薬学的に許容可能なキャリアとを含む薬学的組成物をそのような処置を必要とする個体に投与するステップを含む。
【００２５】
別の実施形態において、個体における脂質レベルを低下させる方法は、治療有効量のプテロスチルベンと、治療有効量のスタチン化合物と、薬学的に許容可能なキャリアとを含む薬学的組成物をそのような処置を必要とする個体に投与するステップであって、脂質レベルが低下するステップを含む。
【００２６】
理論に拘束されるものではないが、スタチンとプテロスチルベン（またはフィブラートファミリーメンバーなどの他のＰＰＡＲ−α活性化物質）との組み合わせは、単なるコレステロールおよびトリグリセリドの低下を超えて心臓の健康という利益を与えることになると考えられる。ＰＰＡＲ−α活性化物質およびスタチンの両方が、アテローム性動脈硬化症からの保護を与え、ｅＮＯＳ（内皮一酸化窒素合成酵素）を活性化させることにより血管拡張薬として作用し、炎症を緩和／阻害するように作用することが示されている。
【００２７】
ＰＰＡＲ−α活性化に対するプテロスチルベンの効果は、十分に確立されている。ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）アイソフォームは、標的遺伝子のプロモーター領域における特異的応答配列と相互作用することにより遺伝子発現を制御するリガンド活性化転写因子の核内受容体スーパーファミリーに属する。脂肪酸および脂質の異化、ならびに肝臓における脂肪酸酸化に関与する遺伝子の活性化に関与する主要なアイソフォームが、ＰＰＡＲ−αである。肝臓におけるＰＰＡＲ−αの活性化が、脂肪酸の酸化の増加ならびにトリグリセリドおよび超低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ）の合成の減少に繋がるということが示されている（Ｆｒｕｃｈａｒｔ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ．Ｐｈａｒｍ．Ｆｒ．（２００４）６２：３）。この活性化が、血漿ＨＤＬコレステロールの増加に繋がる肝臓アポリポロテイン（ａｐｏｌｉｐｏｒｏｔｅｉｎ）Ａ−ＩおよびＡ−ＩＩの発現を誘導するその能力と相俟って、ＰＰＡＲ−αを、コレステロールを低下させる分野における非常に重要な標的にしている（Ｇｅｒｖｏｉｓ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．Ｌａｂ．Ｍｅｄ．（２０００）３８：３）。比較してみると、フィブラート薬剤ファミリーは、公知のＰＰＡＲ−αアゴニストであり、それらのトリグリセリド低下作用およびＨＤＬコレステロール上昇作用は、主にそれらのＰＰＡＲ−α活性化によるものであると考えられている（Ｄｅｓａｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．（２００６）１６：１６７３）。
【００２８】
脂質代謝異常は、リポタンパク質の過剰生産または欠乏を含むリポタンパク質代謝の障害である。これらの障害は、血清総コレステロール（ＴＣ）、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）コレステロールおよびトリグリセリド濃度の上昇、ならびに高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）コレステロール濃度の低下によってはっきり示され得る。超低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ）および総リポタンパク質もまた、影響を受け得る。
【００２９】
本発明の特定の実施形態において、脂質レベルの低下は、血漿または血清中の総コレステロール（ＴＣ）、低密度リポタンパク質コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）、トリグリセリド（ＴＧ）、および低密度リポタンパク質コレステロールと高密度リポタンパク質コレステロールとの比（ＬＤＬ−Ｃ／ＨＤＬ−Ｃ）から選択されるものの低下として表され得る。種々の動物種、哺乳動物、およびヒト個体における前述の脂質成分の血中レベルの測定および診断的決定は、当該技術分野においてよく知られている。
【００３０】
ＵＤＰ−グルクロノシルトランスフェラーゼ（ＵＧＴ）は、高エネルギー補因子であるＵＤＰ−グルクロン酸から、利用可能な求核中心（例えば、ヒドロキシル基、カルボキシル基、アミノ基、またはチオール基）を含有する生体異物、薬物、または内因性基質への、グルクロン酸の移動を触媒する。ＵＧＴは、肝臓および腸で主に発現される第ＩＩ相生体内変化酵素であり、小胞体の内腔表面に局在する膜結合酵素である。親基質に比べて、グルクロン酸抱合の最終生成物は、典型的により極性が高く、尿または胆汁による排泄および除去により良く適している。
【００３１】
内因性ＵＧＴ基質には、ビリルビン、中性ステロイド、胆汁酸、脂肪酸、およびレチノイドが含まれる。生体異物ＵＧＴ基質は、環境毒物（例えば、ベンゾ［ａ］ピレン）から一般的な薬剤（例えば、アセトアミノフェンおよび他のＮＳＡＩＤ）まで様々である。個々のＵＧＴアイソフォームは、基質特異性および誘導性調節の独特なパターンを示す。異なるＵＧＴが、種特異的および組織特異的に発現される。２つの主要なＵＧＴ遺伝子ファミリーは、ＵＧＴ１およびＵＧＴ２である。
【００３２】
ＰＰＡＲは、ＵＧＴの調節に関与していることが知られている。特に、ＵＧＴは、ＰＰＡＲ−γと相対するものとしてのＰＰＡＲ−αの標的である。公知のＰＰＡＲ−γ活性化物質であるレスベラトロールは、ＵＧＴのいくらかの誘導を示したが、ＰＰＡＲ−αの強力な活性化物質ではない。類似のスチルベンの群の１つの研究においては、プテロスチルベンのみがシプロフィブラートと同様にＰＰＡＲ−αを活性化した（Ｒｉｍａｎｄｏ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．（２００５）５３：３４０３−３４０７）。プテロスチルベンは、ＰＰＡＲ−γの強力な活性化物質であるとは考えられていない。この亜型選択性は、本発明のアプローチにおいてプテロスチルベンを用いてＵＧＴの発現を活性化または誘導するのに有利であると考えられる。したがって、プテロスチルベンの向上した脂質低下特性は、ＰＰＡＲ−α活性化が関与するこれらの相互に関連のある経路によってもたらされる。
【００３３】
さらに、プテロスチルベンは、血管疾患の処置または予防に有用であり得る。プテロスチルベンは、インビトロにおいてラット平滑筋細胞の増殖を阻害することが示されており、このことは、アテローム性動脈硬化症の処置のための増殖抑制剤としての可能性をそれに与えている（Ｐａｒｋ，ｅｔ  ａｌ．，Ｖａｓｃｕｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．（２０１０）５３：６１）。ＰＰＡＲ−α活性化物質およびスタチンの両方が、アテローム性動脈硬化症からの保護を与えることが示されている。別の実施形態において、治療有効量のプテロスチルベンと治療有効量のスタチン化合物との組み合わせは、アテローム性動脈硬化症を処置するために使用され得る。プテロスチルベンとスタチン化合物との組み合わせは、アテローム性動脈硬化症の処置に関して相乗効果をもたらすことが予想される。したがって、この実施形態において、プテロスチルベンとスタチンとの組み合わせは、ｅＮＯＳ（内皮一酸化窒素合成酵素）を活性化することにより血管拡張薬として相乗的に作用し得、かつ／または炎症を緩和もしくは阻害するように作用し得る。
【００３４】
大腸環境における慢性的炎症状態の存在が、結腸直腸癌の発症に関係があるとされており、炎症マーカーに対する処置レジメンが、大腸癌の危険性を緩和した。プテロスチルベンは、インビトロおよびインビボの両方において炎症促進性サイトカインマーカー（例えば、ＣＯＸ−２、ＴＮＦ−α、ＩＬ−４、ＩＬ−１−β、およびｉＮＯＳ）のレベルを下げることが示されている。（例えば、それぞれ参照により本明細書に援用されるＨｏｕｇｅｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｌａｎｔａ  Ｍｅｄ．（２００５）７１（５）：３８７−３９２；Ｐａｕｌ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｐｒｅｖ．Ｒｅｓ．（Ｐｈｉｌａ）．（２００９）２（７）：６５０−６５７；Ｐａｕｌ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ（２０１０）３１（７）：１２７２−１２７８を参照されたい。）
【００３５】
プテロスチルベンはまた、シトクロムＰ４５０の阻害剤としてもよく知られている（Ｒ．Ｍｉｋｓｔａｃｋａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｎｕｔｒ．Ｆｏｏｄ  Ｒｅｓ．（２００７）５１：５１７）。プラバスタチン以外の全てのスタチンが、肝臓においてスーパーファミリーＣＹＰ４５０イソ酵素による第Ｉ相代謝を主に受ける（Ｍ．Ｂｏｔｔｏｒｆｆ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｒｃｈ  Ｉｎｔｅｒｎ  Ｍｅｄ．（２０００）１６０：２２７３−８０；Ｂ．Ａ．Ｈａｍｅｌｉｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｓｃｉ．（１９９８）１９：２６−３７）。理論に拘束されるものではないが、プテロスチルベンが、シトクロムＰ４５０を阻害することにより、体内でのスタチンのバイオアベイラビリティを高めてスタチンがより長く血液中を循環することを可能にし、そうして有益な生化学的エンドポイントを相乗的に高める（ｐｏｔｅｎｔｉａｔｅ）のではないかと考えられる。問題は、プテロスチルベンが、スタチンを代謝する同じＰ４５０アイソザイムを阻害するか否かである。ＣＹＰ３Ａ４イソ酵素は、アトルバスタチン、ロバスタチン、およびシンバスタチンの代謝を担っており、一方、フルバスタチンおよびロスバスタチンは、どちらも主としてＣＹＰ２Ｃ９イソ酵素により代謝される。プテロスチルベンは、ＣＹＰ１Ａ１およびＣＹＰ１Ｂ１アイソザイムを阻害する（Ｒ．Ｍｉｋｓｔａｃｋａ，ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅｓ  Ｐ４５０  ＣＹＰ１Ａ１  ａｎｄ  ＣＹＰ１Ｂ１  ｂｙ  ｔｒａｎｓ−ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ  ｍｅｔｈｙｌ  ｅｔｈｅｒｓ，”Ｍｏｌ．Ｎｕｔｒ．Ｆｏｏｄ  Ｒｅｓ．（２００７）５１：５１７）が、ＣＹＰ２Ｅ１は阻害しない（Ｒ．Ｍｉｋｓｔａｃｋａ，ｅｔ  ａｌ．，“Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｎａｔｕｒａｌ  ａｎａｌｏｇｕｅｓ  ｏｆ  ｔｒａｎｓ−ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ  ｏｎ  ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅｓ  Ｐ４５０１Ａ２  ａｎｄ  ２Ｅ１  ｃａｔａｌｙｔｉｃ  ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ，”Ｘｅｎｏｂｉｏｔｉｃａ（２００６）３６：２６９）ことが示されている。
【００３６】
別の実施形態において、治療有効量のプテロスチルベンと治療有効量のスタチンとの組み合わせは、脂質代謝異常の処置のために使用され得る。別の実施形態において、治療有効量のプテロスチルベンと治療有効量のスタチンとの組み合わせは、脂質低下のため、例えば、内因性コレステロール合成の減少のために使用され得る。プテロスチルベンとスタチンとの組み合わせは、脂質代謝異常の処置および脂質低下に関して相乗効果をもたらすことが予想される。
【００３７】
別の実施形態において、治療有効量のプテロスチルベンと治療有効量のスタチンとの組み合わせは、炎症促進性サイトカインのレベルを下げるために使用され得る。プテロスチルベンとスタチンとの組み合わせは、炎症の処置、予防、および／または緩和に関して相乗効果をもたらすことが予想される。
【００３８】
有用なスタチン化合物としては、アトルバスタチン、セリバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン、シンバスタチン、ならびにその誘導体、塩、溶媒和物、およびプロドラッグが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３９】
一実施形態において、スタチンは、例えば、特にヒト患者においては、約１ｍｇ〜約１５０ｍｇの１日投薬量で提供され得る。別の好適な投薬量範囲は、１日約１５ｍｇ〜約１５０ｍｇである。別の好適な投薬量範囲は、１日約１ｍｇ〜約１００ｍｇである。別の好適な投薬量範囲は、１日約１ｍｇ〜約５０ｍｇである。別の好適な投薬量範囲は、１日約５ｍｇ〜約１００ｍｇである。別の好適な投薬量範囲は、１日約５ｍｇ〜約８０ｍｇである。別の好適な投薬量範囲は、１日約１０ｍｇ〜約８０ｍｇである。
【００４０】
理論に拘束されるものではないが、スタチンと特定の生物活性剤との組み合わせは、スタチンの活性を相乗的に高め、そうして有効性を高め得ると考えられる。例えば、スタチンへのプテロスチルベンの添加またはスタチンと組み合わせたプテロスチルベンは、スタチン用量の低減を可能にし得る。例示的実施形態において、１日７５ｍｇのスタチンで処置される患者は、プテロスチルベンを添加する場合、その服用しているスタチンの量を減らすことが可能であり得るが、依然として、同じコレステロール低下の利益を経験し続け得る。
【００４１】
プテロスチルベン（３，５−ジメトキシ−４’−ヒドロキシ−トランス−スチルベン）は、血液中で約７４〜１０５分の半減期ｔ１／２を有する経口により生体利用可能な化合物である。それに対して、レスベラトロールは、劣ったバイオアベイラビリティを有しており、ＵＧＴにより容易に代謝され、これがはるかにより短い半減期（ｔ１／２は血液中で約１０〜１４分）に繋がり、これにより、化学的予防薬としてのその有効性が妨げられる。
【００４２】
プテロスチルベン（純度９９％）は、ＣｈｒｏｍａＤｅｘ，Ｉｎｃ．（Ｉｒｖｉｎｅ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）から市販されている。
【００４３】
一実施形態において、プテロスチルベンは、例えば、特にヒト患者においては、約１０ｍｇ〜約５００ｍｇの１日投薬量で提供され得る。別の好適な投薬量範囲は、１日約２５ｍｇ〜約５００ｍｇである。別の好適な投薬量範囲は、１日約５０ｍｇ〜約２５０ｍｇである。別の好適な投薬量範囲は、１日約５０ｍｇ〜約１５０ｍｇである。別の好適な投薬量範囲は、１日約５０ｍｇ〜約１００ｍｇである。特に好適な投薬量は約１００ｍｇであり、これが毎日投与される。
【００４４】
当該スタチン投薬量は、固体もしくは液体の形態のプテロスチルベンと組み合わせて、またはブレンドとして使用される場合に特に有効であるものと考えられる。プテロスチルベンとスタチンとの組み合わせは、脂質低下および酸化ストレスの生物学的マーカーの減少に関して相乗効果をもたらすことが予想される。
【００４５】
別の実施形態において、薬学的組成物は、プテロスチルベンとスタチンとの組み合わせの治療有効量を含む。これらの成分の予想される相乗作用により、プテロスチルベンとスタチンとの組み合わせの薬学的組成物は、個々の成分が治療効果をもたらさないことがあり得る場合でさえも治療効果をもたらし得る。
【００４６】
プテロスチルベンもしくはその誘導体またはプテロスチルベンの薬学的に許容可能な塩を含有する本発明に従う組成物は、化合物をブレンドし混合するための従来の手順によって調製され得る。別の実施形態において、スタチン化合物、その誘導体または塩と組み合わせたプテロスチルベンは、化合物をブレンドし混合するための従来の手順により調製され得る。好ましくは、組成物はまた、賦形剤、最も好ましくは薬学的賦形剤も含む。賦形剤を含有しかつプテロスチルベンを組み込んだ組成物は、当該技術分野で知られている手順によって調製され得る。任意選択で、組成物は、１種または複数種の佐剤、賦形剤、キャリア、緩衝剤、希釈剤、および／または他の通例の薬学的助剤を含み得る。例えば、プテロスチルベンは、一般的な従来のキャリア、結合剤、希釈剤、および賦形剤と共に、経口投与用の錠剤、カプセル剤、散剤、懸濁剤、液剤、および非経口投与（静脈内投与、皮内投与、筋肉内投与、および皮下投与を含む）用の液剤に、ならびに経皮適用用の貼付剤上への適用のための液剤に製剤化され得る。
【００４７】
本発明の機能性食品組成物は、機能性食品的に（ｎｕｔｒａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ）受容可能なキャリアと組み合わせて投与され得る。そのような製剤中の有効成分は、１重量％〜９９重量％、あるいは０．１重量％〜９９．９重量％を構成し得る。「機能性食品的に受容可能なキャリア」とは、製剤の他の成分と適合性がありかつ使用者に有害でない任意のキャリア、希釈剤または賦形剤を意味する。有用な賦形剤としては、微結晶性セルロース、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、任意の受容可能な糖（例えば、マンニトール、キシリトール）が挙げられ、美容用途には、油性基剤が好ましい。
【００４８】
本発明の薬学的組成物は、薬学的に許容可能なキャリアと組み合わせて投与され得る。そのような製剤中の有効成分は、１重量％〜９９重量％、あるいは０．１重量％〜９９．９重量％を構成し得る。「薬学的に許容可能なキャリア」とは、製剤の他の成分と適合性がありかつ使用者に有害でない任意のキャリア、希釈剤または賦形剤を意味する。
【００４９】
送達系
好適な剤形としては、錠剤、カプセル剤、液剤、懸濁剤、散剤、ガム、および菓子が挙げられる。舌下送達系としては、舌下および舌上溶解性錠剤、液滴、および飲料が挙げられるが、これらに限定されない。食用フィルム、親水性ポリマー、口腔内溶解性フィルムまたは口腔内溶解性ストリップが使用され得る。他の有用な送達系は、経口または経鼻用の噴霧器または吸入器などを含む。
【００５０】
経口投与のためには、プテロスチルベンおよび／またはスタチンと組み合わせたプテロスチルベンは、錠剤、カプセル剤、丸剤、散剤、顆粒剤または他の好適な剤形の調製のための１種または複数種の固体不活性成分とさらに組み合わされ得る。例えば、活性薬剤は、少なくとも１種の賦形剤（例えば、充填剤、結合剤、保湿剤、崩壊剤、溶解遅延剤、吸収促進剤、湿潤剤、吸収剤、または平滑剤）と組み合わされ得る。他の有用な賦形剤としては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、マンニトール、キシリトール、甘味料、デンプン、カルボキシメチルセルロース、微結晶性セルロース、シリカ、ゼラチン、二酸化ケイ素などが挙げられる。
【００５１】
したがって、本発明の成分は、従来の佐剤、キャリア、または希釈剤と一緒に、薬学的組成物およびその単位投薬量の形態に入れられ得る。そのような形態としては、固体剤、特に錠剤、充填カプセル剤、粉末およびペレットの形態、ならびに液体剤、特に水性または非水性の液剤、懸濁剤、乳剤、エリキシル剤、およびそれらを充填したカプセル剤が全て経口用途用として挙げられ、坐剤が直腸投与用として挙げられ、そして滅菌注射可能液剤が腸管外用途用として挙げられる。そのような薬学的組成物およびその単位投薬量形態は、さらなる活性化合物または活性成分を含むかまたは含まずに、従来の成分を従来の割合で含み得、そのような単位投薬量形態は、使用されるべき所期の１日投薬量範囲に対応する任意の好適な有効量の有効成分を含有し得る。
【００５２】
本発明の成分は、多種多様な経口剤形および非経口剤形で投与され得る。当業者には、以下の剤形が、本発明の化合物または本発明の化合物の薬学的に許容可能な塩のいずれかを有効成分として含み得ることが明らかであろう。
【００５３】
本発明の化合物から薬学的組成物を調製するために、薬学的に許容可能なキャリアは、固体または液体のいずれかであり得る。固形調製物は、散剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、カシェ剤、坐剤、および分散性顆粒剤を含む。固体キャリアは、希釈剤、着香料、可溶化剤、滑沢剤、懸濁化剤、結合剤、保存剤、錠剤崩壊剤、またはカプセル封入材料としても機能し得る１種または複数種の物質であり得る。
【００５４】
散剤においては、キャリアは、微粉固体であり、これが、微粉活性成分との混合物の状態にある。錠剤においては、活性成分は、必要な結合能力を有するキャリアと好適な割合で混合され、所望の形状および大きさに圧縮されている。
【００５５】
散剤および錠剤は、好ましくは、５または１０〜約７０パーセントの活性化合物を含有する。好適なキャリアは、炭酸マグネシウム、マグネシウム状態（ｍａｇｎｅｓｉｕｍ  ｓｔａｔｅ）、タルク、糖、ラクトース、ペクチン、デキストリン、デンプン、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、低融点蝋、カカオ脂などである。用語「調製物」は、カプセル剤を提供するキャリアとしてのカプセル封入材料を伴う活性化合物の製剤を包含することが意図されており、カプセル剤において、活性成分はキャリアを伴ってかまたは伴わずにキャリアに取り囲まれており、そのようにしてキャリアが活性成分と関係している。同様に、カシェ剤およびトローチ剤が包含される。錠剤、散剤、カプセル剤、丸剤、カシェ剤、およびトローチ剤が包含される。錠剤、散剤、カプセル剤、丸剤、カシェ剤、およびトローチ剤は、経口投与に適した固体形態として使用され得る。
【００５６】
液体調製物は、液剤、懸濁剤、および乳剤、例えば、水溶液または水−プロピレングリコール溶液を含む。例えば、非経口注射液体調製物は、ポリエチレングリコール水溶液中の液剤として製剤化され得る。したがって、本発明に従う化合物は、（例えば、注射、例えば、ボーラス注射または持続注入による）非経口投与用に製剤化され得、アンプル、事前に充填された注射器、小容量注入容器において単位用量で、または保存剤を添加した複数回分の服用量を含む容器に入れて提供され得る。当該組成物は、油性または水性ビヒクル中の懸濁剤、液剤、または乳剤のような形態を取り得、懸濁化剤、安定剤および／または分散剤などの製剤化剤を含有し得る。あるいは、有効成分は、使用前に好適なビヒクル（例えば、滅菌した、発熱物質を含まない水）を用いて構成するための、滅菌固体の無菌単離によりまたは溶液からの凍結乾燥により得られた粉末形態であり得る。
【００５７】
経口用途に好適な水性液剤は、水に活性成分を溶解させ、好適な着色料、矯味矯臭剤、安定剤および濃稠化剤を所望どおりに添加することにより調製され得る。経口用途に好適な水性懸濁剤は、粘性物質（例えば、天然または合成ゴム、樹脂、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、または他のよく知られている懸濁化剤）を含む水に微粉活性成分を分散させることにより作製され得る。
【００５８】
口内の局所投与に好適な組成物としては、風味を付けた基剤（通常はスクロースおよびアカシアまたはトラガカント）中に活性薬剤を含むトローチ剤；不活性基剤（例えば、ゼラチンおよびグリセリンまたはスクロースおよびアカシア）中に有効成分を含む香錠；および好適な液体キャリア中に有効成分を含む口内洗剤が挙げられる。
【００５９】
液剤または懸濁剤は、従来の手段によって、例えばドロッパー、ピペットまたは噴霧器を用いて、鼻腔に直接適用される。当該組成物は、単回または複数回用量形態で提供され得る。気道への投与が意図される組成物（鼻腔内組成物を含む）において、当該化合物は、概して、例えば約５ミクロンまたはそれ未満の、小さな粒径を有している。そのような粒径は、当該技術分野において知られている手段によって（例えば、超微粉砕によって）得られ得る。
【００６０】
薬学的調製物は、好ましくは単位投薬量形態になっている。そのような形態において、調製物は、適切な量の活性成分を含有する単位用量に細分されている。単位投薬量形態は、個別量の調製物を包装材に入れた、包装された調製物（例えば、包装された錠剤、カプセル剤、およびバイアルまたはアンプル中の散剤）であり得、る。また、単位投薬量形態は、１つのカプセル剤、錠剤、カシェ剤またはトローチ剤自体であり得るか、またはそれは、包装された形態の適切な数のこれらの任意のものであり得る。
【００６１】
経口投与用の錠剤、カプセル剤およびトローチ剤ならびに経口用途用の液体剤は、好ましい組成物である。鼻腔または気道への適用のための液剤または懸濁剤は、好ましい組成物である。表皮への局所投与用の経皮貼付剤は好ましい。
【００６２】
製剤化および投与の技術についてのさらなる詳細は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ）の最新版に見出され得る。
【００６３】
投与経路
当該化合物は、経口投与、舌下投与、口腔粘膜投与、眼投与、経肺投与、直腸投与、および腸管外投与を含むがこれらに限定されない任意の経路により、または経口もしくは経鼻スプレー剤（例えば、霧状にした蒸気、小滴、または固体粒子の吸入）として投与され得る。腸管外投与には、例えば、静脈内投与、筋肉内投与、動脈内投与、腹腔内投与、鼻腔内投与、膣内投与、嚢内（例えば、膀胱への）投与、皮内投与、経皮投与、局所投与、または皮下投与が含まれる。薬物の全身または局所放出が後に起こることになる制御製剤中での患者体内への薬学的組成物の点滴注入もまた、本発明の範囲内で企図されている。例えば、薬物は、循環への制御放出のため、または局所部位への放出のために、デポー中に局在化され得る。
【００６４】
本発明の薬学的組成物は、経口投与、直腸投与、気管支投与、経鼻投与、経肺投与、局所（口腔粘膜および舌下を含む）投与、経皮投与、膣投与もしくは腸管外投与（皮膚、皮下、筋肉内、腹腔内、静脈内、動脈内、大脳内（ｉｎｔｒａｃｅｒｅｂａｌ）、眼内注射または注入を含む）に好適な薬学的組成物、または吸入もしくは吹入剤（散剤および液体エアロゾル投与を含む）によるもしくは徐放系による投与に好適な形態の薬学的組成物であり得る。徐放系の好適な例としては、本発明の化合物を含有する、固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスが挙げられ、当該マトリックスは、成形品（例えば、フィルムまたはマイクロカプセル）の形態であり得る。
【００６５】
理論に拘束されることを意図するものではないが、プテロスチルベン投薬量は、動物研究で用いられた投薬量から推定または変換され得る。動物研究からの用量は、Ｋｍ換算係数比を利用することによりヒト用量に変換され、ここでＫｍ換算係数は、各動物モデルにそれらの体表面積に基づいて与えられた（Ｒｅａｇａｎ−Ｓｈａｗ，ｅｔ  ａｌ．，ＦＡＳＥＢ  Ｊ．（２００７）２２：６５９−６６１）。ヒト等価用量（ｈｕｍａｎ  ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ  ｄｏｓｅ：ＨＥＤ）は、動物用量に動物のＫｍ／ヒトＫｍという比を乗じた値に相当する。例えば、高コレステロール血症ハムスターコレステロール研究において、１日当たり２．５ｍｇ／ｋｇのプテロスチルベンが、ハムスターに投与された（Ｒｉｍａｎｄｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００５）。Ｋｍ比は０．１３５である（Ｋｍ値はハムスターについては５／ヒトについては３７である）ので、この研究のヒト等価用量は、成人ヒトについて０．３３７ｍｇ／ｋｇ、すなわち１６０ポンドのヒトについて１日当たりおよそ２５ｍｇである。ラットにおける糖尿病および認知機能に関するさらなる研究は、それぞれ、１１８〜４７１ｍｇ／日および３０〜１１８ｍｇ／日のヒト等価用量を投与した（Ｐａｒｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．（２００６）７９：６４１；Ｊｏｓｅｐｈ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．（２００８）５６：１０５４４）。マウスにおけるプテロスチルベンの２８日間の亜急性毒性研究は、およそ１２５ｍｇ／日、１．２５ｇ／日、および１２．５ｇ／日の１６０ポンドヒト等価用量において、局所毒性も全身毒性も示さなかった（Ｒｕｉｚ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．（２００９）５７：３１８０）。いずれの参考文献も、参照により本明細書に援用される。
【００６６】
次に述べることは、スタチンと組み合わせたプテロスチルベンの、コレステロールを低下させかつ／または酸化ストレスについてのマーカーを含む他の測定されるエンドポイントの中で例えば血圧を低下させる有効性を評価するためのヒト臨床試験の一般的研究設計である。研究の種類は、介入である：無作為化二重盲検プラセボ対照研究。エンドポイント分類：安全性／有効性研究。
【００６７】
目的
本研究の目的は、プテロスチルベンのみ、またはプテロスチルベンとスタチン化合物との組み合わせが、包含基準を満たす脂質代謝異常にかかっている患者においてコレステロールおよび血圧を制御するのに役立ち、酸化ストレスについてのマーカーを改善するか否かを評価することである。調査者らは、これらの患者におけるプテロスチルベンの安全性を評価することになる。さらに、全研究群にわたって無作為に分散させた全被験体のうちの３３％はスタチン併用療法を受けているところであるが、依然として、直前ＴＣ≧２００ｍｇ／ｄＬ、および／またはＬＤＬ−Ｃ≧１００ｍｇ／ｄＬという包含基準を満たしているであろう。
【００６８】
研究個体群
６０名の被験体を３群に分ける：１研究群当たり２０名。研究に適当な年齢：１８〜８８歳、男女。健康なボランティアは受け入れられない。包含基準：直前のＴＣが≧２００ｍｇ／ｄＬであり、かつ／または治療を受けていない状態もしくは安定な治療を受けている状態のいずれかにおいてＬＤＬ−Ｃが≧１００ｍｇ／ｄＬである、年齢が≧１８歳の患者。いかなる併用コレステロール薬物適用も、ベースライン検査の少なくとも２ヶ月前から安定した用量で行われ、排除基準に列挙されていないものでなければならない。排除基準：著しい肝疾患、腎疾患または胃腸管疾患にかかっている患者、チアゾリジンジオンまたはフィブリン酸誘導体を受けている患者、現時点での明白な心臓血管疾患、産児制限を受けていない生殖能のある女性、および妊娠／授乳中の女性。
【００６９】
研究設計
当該研究は、脂質代謝異常の処置方法を評価する機会を提供する。他の実施形態において、当該研究は、脂質レベルを低下させるまたは他の代謝障害を処置する方法を提供し得る。他の実施形態において、当該研究は、酸化ストレスを処置する、または酸化ストレスと関連する神経変性障害を処置する方法を提供し得る。当該研究は、分子マーカーの分析から標準的な臨床的評価まで、種々のエンドポイントおよびアウトカムを利用する。この設計は、想定される薬剤および試験組み合わせを、価値ある確認データが得られ得る関連する重要なエンドポイントバイオマーカーを用いてまず臨床的に試験するので、労力の節約を可能にする。
【００７０】
臨床的測定のための評価基準：１．主要アウトカム指標：脂質検査マーカー（すなわち、ベースラインのＴＣ、ＬＤＬ−Ｃ、トリグリセリド（ＴＧ）、ＨＤＬ−Ｃ、非ＨＤＬ−Ｃの変化）；２．副次的アウトカム指標：血圧（すなわち、ベースラインの収縮期血圧および／または拡張期血圧の変化）；基本的代謝パネル（ｂａｓｉｃ  ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ｐａｎｅｌ）；ＡＳＴ（アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ）；ＡＬＴ（アラニンアミノトランスフェラーゼ）；および／または酸化ストレスマーカー（すなわち、ベースラインの尿由来ストレスマーカー（例えば、イソプロスタン：ｉＰＦ２−α−ＩＩＩ／クレアチニン；ｉＰＦ２−α−ＶＩ／クレアチニン；２，３  ジノル−ｉＰＦ２−α−ＩＩＩ／クレアチニン）の変化）。
【００７１】
被験体は、３つの群または部門（ａｒｍ）に分けられる：（１）高用量プテロスチルベン、１２５ｍｇを６〜８週間にわたり１日２回口から；（２）低用量プテロスチルベン、５０ｍｇを６〜８週間にわたり１日２回口から；（３）マッチングプラセボ、６〜８週間にわたり１日２回口から摂取；食事の１時間前または食事の２時間後のいずれか。さらに、上述のように、全研究群にわたって無作為に分散させた全被験体のうちの３３％はスタチン併用療法を受けているところである。このサブセットの患者は、約１ｍｇ〜約１５０ｍｇの範囲の１日用量でスタチン化合物の１日用量を受ける。プテロスチルベンは、ＣｈｒｏｍａＤｅｘ，Ｉｎｃ．（Ｉｒｖｉｎｅ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）によって標準化される。全ての製品が、同じような外観である。血液および尿は、初期ベースラインレベルを確立するために登録時に採取され、そして最終結果レベルを決定するために最終研究診察時に採取される。登録時に採られた血液に基づき患者のＬＤＬ−ＣまたはＴＣが包含基準外である場合は、患者は、研究薬物適用を開始することが許されない。患者は、６〜８週間の間、積極的に参加している状態にある。患者は、必要に応じて、あらゆる症候性副作用および家庭血圧をモニタリングするように求められる。全ての研究診察が、簡単な臨床検査（バイタルサインを含む）、記入された質問票（適切な場合）、自覚的有害事象の報告、ならびに臨床検査試験用の提供された空腹時の血液および尿からなる。登録診察時に、例えば印刷配布物として提供される、ライフスタイルへの治療的介入のための標準的な助言が、全ての群に与えられる。全ての血液臨床検査試験が、現場の検査室で行われる。全ての尿臨床検査試験が、酸化ストレス分析を専門とする現場外の検査室によって行われる。少なくとも４ｍＬの尿が、午前中の患者が絶食している間の診察の際に採取される。尿汚染を減少させるためのあらゆる方策および標準的予防措置に従う。尿試料は、採取から３日以内に採取検査室から−８０℃のフリーザーに移される。次いで、尿試料は、分析のために、ドライアイス上で凍った状態で送られる。錠剤の計数が、コンプライアンスを評価するために、各研究被験体について行われる。
【００７２】
上記の研究設計において、回避されるべき知られている食物作用はない。理論に拘束されるものではないが、食物の摂取は、体内でのポリフェノール化合物の吸収を妨げ得ることが、当該技術分野において知られている。当該研究は、プテロスチルベンの投与、またはプテロスチルベンとスタチンとの組み合わせの投与の間における、この食物作用を考慮に入れることが見込まれている。
【００７３】
上に列挙したイソプロスタンストレスマーカーについての有用な検出方法は、尿および血清中のイソプロスタンを測定するためのＬＣ／ＭＳ／ＭＳ方法を利用したものがＫｒｏｎｏｓ  Ｓｃｉｅｎｃｅ（Ｐｈｏｅｎｉｘ，Ａｒｉｚｏｎａ）から利用可能である。酸化ストレスマーカーの測定のための他の有用な市販の検出キットが容易に入手可能であり、よく知られている。
【００７４】
イソプロスタンは、シクロオキシゲナーゼ（ＣＯＸ）酵素の直接的な作用なしに、必須脂肪酸（主にアラキドン酸）のフリーラジカルにより触媒される過酸化から形成されるプロスタグランジン様化合物である。イソプロスタンは、非古典的エイコサノイドであり、疼痛の知覚を増大させる炎症伝達物質として強力な生物活性を有している。イソプロスタンは、動物およびヒトの両方の酸化ストレスモデルにおける正確な脂質過酸化マーカーであり、例えば、癌の発症または悪化に関与し得る脂質過酸化生成物の過剰生産がある場合に、この過程はイソプロスタン分析により評価され得る。イソプロスタンは、心臓血管疾患および神経疾患にもこのように使用され得る。イソプロスタンは、短い半減期を有するが、それらの中には、特に肺および腎臓において強力な生物活性を有し、かつ正常な生理状態でさえも機能し得るものもある。イソプロスタンは、酸化ストレスについての有用なマーカーであり、重要なことには、それらは非侵襲性の手段によってアッセイされ得る。
【００７５】
イソプロスタンは、これまでに分析された全ての生物学的流体および組織において検出されている。比較的安定なＦ２−イソプロスタンおよび尿中８−ＩｓｏＰＦ２α（ｉＰＦ２−α−ＩＩＩ）の測定は、患者における酸化ストレスの程度の決定に対する信頼できる非侵襲性のアプローチであるということが、次第に受け入れられつつある。健康なヒトにおける正常なイソプロスタンレベルが定義されているので、疾患状態の影響およびその後の治療的介入が決定され得る。したがって、尿中イソプロスタンの上昇したレベルが、フリーラジカルの過剰生成と関連付けられている多くの状態（四塩化炭素の毒作用、喫煙、アルコール依存症、肝臓の肝硬変、脳変性、虚血再潅流障害、アテローム性動脈硬化症および糖尿病を含む）において測定されている。尿中イソプロスタン分析はまた、インビボにおける抗酸化剤の有効性を評価するため、および臨床試験において抗酸化剤投与の値を確立するためにも使用されている。
【００７６】
上記の方法は、以下の実施例と関連してさらに理解され得る。本明細書で使用される場合、用語「ＨＰＭＣ」は、ヒドロキシプロピルメチルセルロースを意味する。
【実施例】
【００７７】
実施例１
臨床試験患者群に応じて、プテロスチルベンを、高１日用量（２５０ｍｇ）または低１日用量（１００ｍｇ）のいずれかとして、次のように経口投与した。高用量：１２５ｍｇのプテロスチルベンおよび３５ｍｇの微結晶性セルロースを、緑色不透明の２号サイズのＨＰＭＣカプセル中で組み合わせ、１日２回投与する。低用量：５０ｍｇのプテロスチルベンおよび１２０ｍｇの微結晶性セルロースを、緑色不透明の２号サイズのＨＰＭＣカプセル中で組み合わせ、１日２回投与する。プラセボ：緑色不透明の２号サイズのＨＰＭＣカプセル中の１７０ｍｇの微結晶性セルロース、１日２回投与。全患者群にわたって無作為に分散させた全被験体のうちの３３％は、スタチン併用療法を（ベースライン／初期測定の少なくとも約２ヶ月前から）受けていた。このサブグループの患者には、スタチンを１日約１ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲の用量で投与した。
【００７８】
図１および図２に示されるように、８週間の研究モニタリング後（最終測定）において、プテロスチルベンの投与は、患者研究群におけるＴＣおよびＬＤＬ−Ｃレベルの僅かな上昇を結果としてもたらした。低プテロスチルベン用量において、ＴＣおよびＬＤＬ−Ｃの両方の増加が、スタチンと組み合わせた場合に効果的に弱められた。したがって、患者の血液において試験されたように、ヒト被験体は、プテロスチルベンのみを投与した被験体よりも大きい程度で血漿中の脂質レベル（ＴＣおよび／またはＬＤＬ−Ｃ）の相対的低下を示すことが証明された。
【００７９】
同じ研究において、高用量のプテロスチルベンを投与した患者は、スタチンを受けた患者を含め、収縮期血圧（−７．８ｍｍＨｇ；ｐ＜０．０１）および／拡張期血圧（−７．３ｍｍＨｇ；ｐ＜０．００１）の低下を示した。
【００８０】
実施例２
実施例１を繰り返す。約８週間の研究モニタリング後において、患者の尿において試験されるように、個々のヒト被験体は、プテロスチルベンのみを投与した患者よりも大きい程度で酸化ストレスマーカーの低下を示すことが予想される。
【００８１】
前述の明細書において、本発明はその特定の実施形態に関連して記載されており、そして多くの詳細が例示の目的のために示されているが、当業者には、本発明はさらなる実施形態が可能であること、および本明細書に記載された詳細の一部は本発明の基本原理から逸脱することなく大幅に変更され得ることが明らかであろう。
【００８２】
本明細書で引用された全ての参考文献は、参照によりその全体が援用される。本発明は、その趣旨または本質的特性から逸脱することなく他の特定の形態で具現化され得、したがって、前述の明細書よりもむしろ、本発明の範囲を示している添付の特許請求の範囲が参照されるべきである。
【図１】
2014526521.tif 000003
【図２】
2014526521.tif 000004
【国際調査報告】
2014526521.tif 000005