(57)【要約】本発明は、プロスタサイクリンの徐放組成物、ならびに特に肺動脈高血圧の予防および／または治療におけるそれの使用に関するものである。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
プロスタサイクリン化合物を含み、１以上の製薬上許容される賦形剤を含んでもよい医薬組成物であって、前記プロスタサイクリン化合物の濃度が、単回の皮下もしくは筋肉注射後少なくとも１２時間にわたり血漿中で治療上効果的なレベルのプロスタサイクリンを維持する上で十分な濃度である医薬組成物。
【請求項２】
前記医薬組成物が、少なくとも０．０５ｍｇ／ｍＬの濃度で前記プロスタサイクリン化合物を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
少なくとも０．０５ｍｇ／ｍＬの濃度でプロスタサイクリン化合物を含む請求項１または２に記載の医薬組成物であって、前記医薬組成物の単一用量が前記プロスタサイクリン化合物少なくとも０．０５ｍｇを含む医薬組成物。
【請求項４】
医薬組成物の投与間隔が、少なくとも約１２時間、例えば少なくとも１６時間、代表的には少なくとも１日である、請求項１から３のうちのいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
プロスタサイクリン化合物を含み、１以上の製薬上許容される賦形剤を含んでいてもよい医薬組成物であって、前記医薬組成物が哺乳動物、特にヒトにおいてイン・ビボで、前記プロスタサイクリン化合物の急激な増加が実質的に起こらない薬物動態プロファイルを有する医薬組成物。
【請求項６】
前記医薬組成物が哺乳動物、特にヒトにおいてイン・ビボで、前記プロスタサイクリン化合物の急激な増加が実質的に起こらない薬物動態プロファイルを有する、請求項１から４のうちのいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
プロスタサイクリン化合物を含み、１以上の製薬上許容される賦形剤を含んでいてもよい医薬組成物であって、前記医薬組成物が、哺乳動物、特にヒトにおいて、５未満、例えば３未満または２未満の前記プロスタサイクリン化合物のピーク／トラフ比を示す医薬組成物。
【請求項８】
前記医薬組成物が、哺乳動物、特にヒトにおいて、５未満、例えば３未満または２未満の前記プロスタサイクリン化合物のピーク／トラフ比を示す、請求項１から６のうちのいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
プロスタサイクリン化合物を含み、１以上の製薬上許容される賦形剤を含んでいてもよい医薬組成物であって、前記プロスタサイクリン化合物が遊離プロスタサイクリンの活性の＜２０％、好ましくは＜１０％、より好ましくは＜５％の活性を有する医薬組成物。
【請求項１０】
前記プロスタサイクリン化合物が遊離プロスタサイクリンの活性の＜２０％、好ましくは＜１０％、より好ましくは＜５％の活性を有する、請求項１から８のうちのいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
プロスタサイクリンプロドラッグを含み、１以上の製薬上許容される賦形剤を含んでいてもよい医薬組成物であって、前記プロスタサイクリンプロドラッグの皮下もしくは筋肉投与後に、投与されたプロスタサイクリン用量のうちの５０％強が血液側内に放出可能である医薬組成物。
【請求項１２】
前記プロスタサイクリンプロドラッグの皮下もしくは筋肉投与後に、投与されたプロスタサイクリン用量のうちの５０％強が血液側内に放出可能である、請求項１から１０のうちのいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記プロスタサイクリン化合物が、デポー、好ましくはポリマーゲル、さらにより好ましくはヒドロゲル、最も好ましくは水和ポリマーマトリックス中にある、請求項１から１０のうちのいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記プロスタサイクリン化合物が、デポー中の化合物に、好ましくはポリマーゲルに、さらにより好ましくはヒドロゲルに、最も好ましくは十分に水和したポリマーマトリックスに共有結合的に連結されている、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記プロスタサイクリン化合物が、プロスタサイクリンのプロドラッグである、請求項１から１５のうちのいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記プロドラッグの修飾基が直鎖もしくは分岐のＰＥＧ部分を含む、請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
プロスタサイクリンプロドラッグを含む医薬組成物であって、前記プロスタサイクリン化合物が血漿依存的にプロスタサイクリンを放出する医薬組成物。
【請求項１８】
注射、好ましくは皮下注射もしくは筋肉注射によって投与される、請求項５から１７のうちのいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
肺高血圧、虚血性疾患、好ましくは末梢動脈疾患などの末梢血管疾患、レイノー病およびレイノー症候群などのレイノー現象、全身性硬化症などの強皮症、心筋虚血、虚血性脳卒中、腎不全、指潰瘍などの虚血性潰瘍、心不全、特には鬱血性心不全、門脈肺高血圧、間質性肺疾患、特発性肺線維症、抗凝血を必要とする状態、特には心筋梗塞後、心臓手術後、血栓性微小血管症、体外循環、網膜中心静脈閉塞症、アテローム性動脈硬化症、炎症疾患、特にはＣＯＰＤ、乾癬、高血圧、特には子癇前症、生殖および分娩、癌その他の制御されない細胞増殖の状態、細胞／組織保存およびプロスタサイクリン治療が有益な役割を有すると思われる他の新たに生じる治療分野の治療もしくは予防で使用される、請求項１から１８のうちのいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
肺高血圧の治療方法であって、肺高血圧患者に対して、
（ａ）ポリマーキャリア連結プロスタサイクリンプロドラッグ、および適宜に１以上の製薬上許容される賦形剤、または
（ｂ）プロスタサイクリン化合物および少なくとも一つのポリマー、および適宜に１以上の製薬上許容される賦形剤
を含む医薬組成物を皮下投与もしくは筋肉投与する段階を含み、
前記医薬組成物が、少なくとも１２時間の期間にわたって、治療上有効量の遊離プロスタサイクリン化合物を放出する治療方法。
【請求項２１】
（ｂ）の医薬組成物が、約０．０５から約１０重量％の前記プロスタサイクリン化合物および約０．５から約２０重量％の総ポリマー含有量を含む、請求項２０に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
肺動脈高血圧（ＰＡＨ）は、肺動脈、肺静脈または肺毛細管における血圧上昇であり、それによって息切れ、眩暈および他の症状が生じ、そのいずれも労作によって増悪する。ＰＡＨは、運動耐容能の顕著な低下および心不全を伴う重篤な疾患である。それは、年間で約２から３例／１００万人および罹患率約１５例／１００万人の奇病である。未治療ＰＡＨ患者の生存率中位値は、診断時点から２から３年の範囲であり、死因は通常は右心不全である。
【背景技術】
【０００２】
肺動脈高血圧には、肺につながる血管および肺内の血管の血管収縮または拘縮が関与する。時間が経つと、線維症のために、罹患血管がより硬直し、より厚くなり、それによって肺内部での血圧がさらに上昇し、その血流が障害される。さらに、心臓の作業負荷が増えることで、右心室の肥大が生じ、そのために最終的に右心不全が引き起こされる。肺を通る血流が減少すると、心臓の左側に送られる血液が減るため、特に身体活動時に、酸素供給が必要レベル以下となる。
【０００３】
ＰＡＨ治療のために多くの薬剤が導入されてきたが、そのうちプロスタサイクリン類が一般に最も有効であると考えられている。あるプロスタサイクリンは、エポプロステロールであり、それは合成プロスタサイクリンであって、フロラン（Ｆｌｏｌａｎ（登録商標）（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）として市販されている。それは連続輸液によって患者に投与され、半永久的な中心静脈カテーテルが必要であり、それが原因となって肺血症や血栓症が生じる可能性がある。フロラン（登録商標）は不安定であることから、投与中は氷の上に置いた状態に保たなければならない。それの半減期は３から５分しかないため、輸液は夜間および日中にわたって連続して行わなければならず、いかなる形でも中断があると致死的になり得る。従って、フロラン（登録商標）によるＰＡＨの治療は、患者にとっては非常に大きな負担である。
【０００４】
従って、例えばＵＳ４３０６０７５ＡおよびＥＰ１５９７８４Ｂ１に記載されているように、他のプロスタノイド類を開発することが必要とされていた。そのようなプロスタグランジンの一つが商品名リモジュリン（登録商標）（Ｕｎｉｔｅｄ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）を有するトレプロスチニルである。トレプロスチニルの半減期は４時間であるが、トレプロスチニルはなお、輸液ポンプを介した連続皮下輸液または連続静脈輸液として投与する必要があり、患者はそれを常時装着しなければならない。
【０００５】
トレプロスチニルにも連続輸液が必要であるため、薬剤送達のいかなる中断も致死的となる可能性があることから、トレプロスチニルよりかなり長い作用期間を有するプロスタサイクリン化合物を開発する必要がある。
【０００６】
トレプロスチニルの皮下輸液は非常に多くの場合、患者が疼痛に耐えることができないために、投与形態を静脈輸液に切り換えるほどに苦痛を伴う。しかしながら、静脈リモジュリン（登録商標）による敗血症リスクの増大が報告されている。
【０００７】
皮下輸液には疼痛が伴うことから、皮下投与によって投与可能であるが、疼痛の割合が軽減されるプロスタサイクリンを開発する必要がある。
【０００８】
商品名ＴＹＶＡＳＯ（登録商標）（Ｕｎｉｔｅｄ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）で市販されている吸入型のトレプロスチニルが２００９年７月にＦＤＡによって承認されるまでは、ベンタビス（登録商標）（Ｂａｉｅｒ）として市販されている別のプロスタサイクリンであるイロプロスト（イロメジン）が米国および欧州で使用承認された唯一の吸入型のプロスタサイクリンであった。
【０００９】
吸入型のプロスタサイクリンは、投与期間を通じて薬剤の血漿レベルが完全に有効なものにならないという欠点があることから、重篤な患者ではあまり望ましい吸入療法ではない。
【００１０】
特に、より重篤な患者では、プロスタサイクリン類がＰＡＨの標準治療である。吸入型のトレプロスチニルは、より簡便であり、皮下輸液されるトレプロスチニルでは頻繁に生じる強い疼痛を伴わないが、吸入は比較的効果が低いため、処方されることはあまり多くない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】ＵＳ４３０６０７５Ａ
【特許文献２】ＥＰ１５９７８４Ｂ１
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
従って、患者に取ってより効果的で苦痛のないプロスタサイクリン治療を提供することが必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
この目的は、プロスタサイクリン化合物および適宜に１以上の製薬上許容される賦形剤を含む医薬組成物であって、単回の皮下もしくは筋肉注射後少なくとも１２時間にわたり、血漿中で治療上効果的なレベルのプロスタサイクリンを維持する上で十分なプロスタサイクリン化合物濃度を有する組成物によって達成される。
【００１４】
別の実施形態において本発明は、疾患の治療および／または予防で使用される、プロスタサイクリン化合物および適宜に１以上の製薬上許容される賦形剤を含む医薬組成物であって、プロスタサイクリン化合物濃度が、単回の皮下もしくは筋肉注射後少なくとも１２時間にわたり、血漿中で治療上効果的なレベルのプロスタサイクリンを維持する上で十分である医薬組成物に関するものである。
【００１５】
この目的はさらに、プロスタサイクリン化合物および適宜に１以上の製薬上許容される賦形剤を含む医薬組成物であって、哺乳動物、特にヒトにおいてイン・ビボで、プロスタサイクリン化合物の急激な増加が実質的に起こらない薬物動態プロファイルを有する医薬組成物によって達成される。
【００１６】
さらに別の実施形態において本発明は、疾患の治療および／または予防で使用される、プロスタサイクリン化合物および適宜に１以上の製薬上許容される賦形剤を含む医薬組成物であって、哺乳動物、特にヒトにおいてイン・ビボで、プロスタサイクリン化合物の急激な増加が実質的に起こらない薬物動態プロファイルを有する医薬組成物に関するものである。
【００１７】
この目的はさらに、プロスタサイクリン化合物および適宜に１以上の製薬上許容される賦形剤を含む医薬組成物であって、５未満、例えば３未満または２未満のピーク／トラフ比を示す医薬組成物によって達成される。
【００１８】
別の実施形態において本発明は、疾患の治療および／または予防で使用される、プロスタサイクリン化合物および適宜に１以上の製薬上許容される賦形剤を含む医薬組成物であって、プロスタサイクリン化合物のピーク／トラフ比が５未満、例えば３未満または２未満である医薬組成物に関する。
【００１９】
この目的はさらに、プロスタサイクリン化合物および適宜に１以上の製薬上許容される賦形剤を含む医薬組成物であって、前記プロスタサイクリン化合物が遊離プロスタサイクリンの活性の＜２０％、好ましくは＜１０％、より好ましくは＜５％の活性を有する医薬組成物によって達成される。
【００２０】
別の実施形態において本発明は、疾患の治療および／または予防に使用される、プロスタサイクリン化合物および適宜に１以上の製薬上許容される賦形剤を含む医薬組成物であって、前記プロスタサイクリン化合物が遊離プロスタサイクリンの活性の＜２０％、好ましくは＜１０％、より好ましくは＜５％の活性を有する医薬組成物に関するものである。
【００２１】
この目的はさらに、プロスタサイクリンプロドラッグおよび適宜に１以上の製薬上許容される賦形剤を含む医薬組成物であって、前記プロスタサイクリンプロドラッグの皮下もしくは筋肉投与後に、投与されたプロスタサイクリン用量のうちの５０％強が血液側内に放出可能である医薬組成物によって達成される。
【００２２】
好ましい実施形態において、プロドラッグの修飾基は直鎖もしくは分岐のＰＥＧ部分を含む。
【００２３】
別の実施形態において本発明は、疾患の治療および／または予防で使用される、プロスタサイクリン化合物および適宜に１以上の製薬上許容される賦形剤を含む医薬組成物であって、前記プロスタサイクリンプロドラッグの皮下もしくは筋肉投与後に、投与されたプロスタサイクリン用量の５０％強が血液側内に放出可能である医薬組成物に関するものである。
【００２４】
前記プロスタサイクリン化合物および医薬組成物ならびに本発明の使用における医薬組成物は、皮下組織における受容体へのプロスタサイクリンの結合を阻害する保護キャリア部分のために皮下注射に関連する疼痛を低減しながら、同時に患者の血漿中で比較的一定のプロスタサイクリンレベルを与える。
【００２５】
その目的は、プロスタサイクリン化合物ならびにプロスタサイクリン化合物および適宜に１以上の製薬上許容される賦形剤を含む医薬組成物であって、処置を必要とする患者に投与した場合に、化合物の吸収が十分早く、その化合物からのプロスタサイクリンの放出が十分に遅いことで、遊離プロスタサイクリンへの皮下曝露が低減される医薬組成物によっても達成される。
【００２６】
別の実施形態において本発明は、疾患の治療および／または予防で使用されるプロスタサイクリン化合物および適宜に１以上の製薬上許容される賦形剤を含む医薬組成物であって、患者、好ましくはヒト患者における化合物の吸収が十分早く、その化合物からのプロスタサイクリンの放出が十分に遅いことで、遊離プロスタサイクリンへの皮下曝露が低減される医薬組成物に関するものである。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】総トレプロスチニル含有量と比較したトレプロスチニル放出％として表した各種時点での緩衝液および緩衝ラット血漿中のトレプロスチニル放出を示す図である（実施例２９参照）。
【図２】皮下注射後のサルにおける２週間より長い期間にわたる長期間のトレプロスチニル抱合体２５循環を示す図である（実施例３０参照）。
【図３】化合物２５の単一用量静脈注射ならびにそれに続く総トレプロスチニルおよびキャリア含有量についての血漿分析を示す図である（実施例３０参照）。
【図４】化合物２５の単一用量静脈注射ならびにそれに続く遊離トレプロスチニルについての血漿分析を示す図である（実施例３２参照）。
【図５】化合物２５の単一用量皮下注射およびそれに続く遊離トレプロスチニルについての血漿分析を示す図である（実施例３２参照）。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
前記プロスタサイクリン化合物および医薬組成物ならびに本発明の使用における医薬組成物は、哺乳動物、特にヒトに投与されるべきものである。特に、それらは、プロスタサイクリンによる処置を必要とする患者、特にはヒト患者に投与される。
【００２９】
そのようなプロスタサイクリン化合物は、同量の相当する遊離プロスタサイクリンの皮下もしくは筋肉輸液と比較して、皮下もしくは筋肉投与に対する投与後の組織に対する既知のプロスタサイクリン有害効果（紅斑、浮腫、線維症および出血など）の誘発が少ない。
【００３０】
本発明において、用語は下記の意味を有して用いられる。
【００３１】
「医薬」、「生理活性分子」、「生理活性部分」、「生理活性剤」、「活性剤」、「活性物質」などの用語は、生物、例えばウィルス、細菌、真菌、植物、動物およびヒト（これらに限定されるものではない）の物理特性または生化学的特性に影響を与え得る物質を意味する。特に、本明細書で使用される場合、それらの用語は、生物、特にはヒトその他の動物における疾患の診断、治癒、緩和、治療もしくは予防のための、または生物、特にヒトもしくは動物の物理的もしくは精神的安寧を高めるための物質を含む。本発明によれば、プロスタサイクリン類は医薬である。
【００３２】
「医薬組成物の総ポリマー含有量」は、前記医薬組成物からのプロスタサイクリンの完全除去後の合計ポリマー濃度を意味する。
【００３３】
本明細書で使用される場合、「プロスタサイクリン」という用語は、プロスタノイド受容体、例えばＤＰ１、ＤＰ２、ＥＰ１、ＥＰ２、ＥＰ３、ＥＰ４、ＦＰ、ＩＰおよびＴＰなど（これらに限定されるものではない）を刺激することでプロスタサイクリンと同様の治療効果を誘発することができる非プロスタノイド系生理活性部分などの生理活性部分を意味するものであり、例えばエポプロステロール、イロプロスト、トレプロスチニル、ベラプロスト、ＯＮＯ−１３０１およびＮＳ−３０４／ＡＣＴ−２９３９８７／セレキシパグ、低分子量ＰＥＧに結合したプロスタサイクリン（低分子量ＰＥＧは１０ｋＤａより小さい分子量を有する）、ベラプロストナトリウム、エポプロステロールナトリウム、ボセンタンと組み合わせたイロプロスト、クエン酸シルデナフィルと組み合わせたイロプロスト、トレプロスチニル、ｐｅｇ化トレプロスチニル、トレプロスチニルジエタノールアミンおよびトレプロスチニルナトリウム、２−｛４−［（５，６−ジフェニルピラジン−２−イル）（イソプロピル）アミノ］ブトキシ｝−Ｎ−（メチルスルホニル）アセトアミド、｛４−［（５，６−ジフェニルピラジン−２−イル）（イソプロピル）アミノ］ブトキシ｝酢酸、８−［１，４，５−トリフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル−オキシ］オクタン酸、イソカルバサイクリン、シカプロスト、［４−［２−（１，１−ジフェニルエチルスルファニル）−エチル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−８−イルオキシ］−酢酸Ｎ−メチル−ｄ−グルカミン、７，８−ジヒドロ−５−（２−（１−フェニル−１−ピリド−３−イル−メチミノキシ）−エチル）−ａ−ナフチルオキシ酢酸、（５−（２−ジフェニルメチルアミノカルボキシ）−エチル）−ａ−ナフチルオキシ酢酸、２−［３−［２−（４，５−ジフェニル−２−オキサゾリル）エチル］フェノキシ］酢酸、［３−［４−（４，５−ジフェニル−２−オキサゾリル）−５−オキサゾリル］フェノキシ］酢酸、ボセンタン、１７α，２０−ジメチル−δ６，６ａ−６ａ−カルバＰＧＩ１、１５−デオキシ−１６α−ヒドロキシ−１６β，２０−ジメチル−δ６，６ａ−６ａ−カルバＰＧＩ１およびペントキシフィリン（１−｛５−オキソヘキシル｝−３，７−ジメチルキサンチン）などである。プロスタサイクリン化合物はプロドラッグの形態であっても良く、その場合に、血漿中に放出される化合物は、プロドラッグの投与後に生成する活性プロスタサイクリンである。
【００３４】
「プロスタサイクリン化合物」という用語は、遊離プロスタサイクリン、プロスタサイクリン抱合体、非共有結合的もしくは共有結合的に結合したプロスタサイクリンを有するプロスタサイクリンデポー、およびポリマーキャリア連結したプロスタサイクリンプロドラッグを含むプロスタサイクリンプロドラッグを指す。
【００３５】
ターゲティング部分は、例えばプロドラッグなどの分子中に存在する場合に、投与を受けた生物の特定のターゲティング領域におけるそのような比較的大分子の優先的な局在を可能とする部分である。そのような特定ターゲティング領域は、臓器、ある種の細胞型または細胞内コンパートメントであると考えられる。「優先的局在」とは、患者に投与された生理活性部分の少なくとも１０％、好ましくは少なくとも２０％、より好ましくは少なくとも３０％が前記特定ターゲティング領域に到達することを意味する。
【００３６】
ターゲティング部分は、大きさに応じて下記の３種類に分けることができる。
【００３７】
−小分子ターゲティング部分、例えばＣ−グルクロニド、コバラミン、ビタミン類（例えば、葉酸（葉酸塩）および類縁体および誘導体）、炭水化物、ビスホスホネート類、Ｎ−アセチルガラクトサミン、
−ペプチド類、例えばボンベシン、ソマトスタチン、ＬＨＲＨ、ＥＧＦ、ＶＥＧＦ、ｈＣＧ、黄体形成ホルモン（ＬＨ）の断片、オクトレオチド、バプレオチド、ランレオチド、ＲＣ−３９４０シリーズ、デカペプチル、リュプロン、ゾラデックス、セトロレリクス、ペプチド類またはＮＧＲもしくはＲＧＤモチーフを含みそれらモチーフから誘導されるペプチド模倣薬、例えばＣＮＧＲＣ（直鎖）、ＧＮＧＲＧ（環状）、ＡＣＤＣＲＧＤＣＦＣＧ（環状）、ＣＤＣＲＧＤＣＦＣ、ＣＮＧＲＣ（環状）、ＣＲＧＤＣＧＧ、ＣＮＧＲＣ、またはＡＴＷＬＰＰＲ、トロンボスポンジン（ＴＳＰ）−１模倣薬、（ＲＧＤペプチド模倣薬）、ＣＴＴＨＷＧＦＴＬＣ、ＣＧＮＫＲＴＲＧＣ、神経ペプチドサブスタンスＰ、ＳＳＰ、Ｓａｒ９、サブスタンスＰのＭｅｔ（Ｏ２）１１類縁体、コレシストキニン（ＣＣＫ）、コルチコトロピン放出ホルモン／因子（ＣＲＨ／ＣＲＦ）、デルモルフィン、ＦＧＦ−２または塩基性線維芽細胞成長因子、ガラニン、メラノプシン、ニューロテンシンなどの他のペプチド類、
−ならびにタンパク質または巨大分子ターゲティング部分、例えばＩＬ−２、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＮＦ−ａ、トランスフェリン、免疫グロブリン類、アセチル化ＬＤＬ、ラクトフェリン（Ｌｆ）（ラクトトランスフェリンとも称される）およびラクトフェリシン（Ｌｃｉｎ）、ガンボギン（ＧＡ）、抗体断片およびアフィニティ足場タンパク質。
【００３８】
基本的に、細胞表面受容体のリガンドは、ターゲティング部分として有利に用いることができる。例えば、ＡＴＷＬＰＰＲペプチドはＶＥＧＦの強力な拮抗薬であり、トロンボスポンジン−１（ＴＳＰ−１）は内皮細胞におけるアポトーシスを誘発し、ＲＧＤ−モチーフ模倣体はインテグリン受容体を遮断し、ＮＧＲ含有ペプチドはアミノペプチダーゼＮを阻害し、ＨＷＧＦの配列を含む環状ペプチドはＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９を選択的に選択する。ＬｙＰ−１ペプチドは腫瘍リンパ管に特異的に結合する。他のリガンドの例には、ライブラリースクリーンから確認されるペプチドリガンド、腫瘍細胞特異的ペプチド類、腫瘍細胞特異的アプタマー、腫瘍細胞特異的炭水化物、腫瘍細胞特異的モノクローナルもしくはポリクローナル抗体、ＦａｂまたはｓｃＦｖ（すなわち、単鎖可変領域）断片、例えばＥｐｈＡ２への抗体のＦａｂ断片または転移癌細胞で特異的に発現され特異的にアクセス可能な他のタンパク質、組み合わせライブラリ由来の小有機分子、増殖因子、例えばＥＧＦ、ＦＧＦ、インシュリンおよびインシュリン様増殖因子、ならびに相同ポリペプチド、ソマトスタチンおよびそれの類縁体、トランスフェリン、リポタンパク質複合体、胆汁酸塩、選択（ｓｅｌｅｃｔｉｎｇ）、ステロイドホルモン類、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ含有ペプチド、レチノイド類、各種ガレクチン、δ−オピオイド受容体リガンド、コレシストキニンＡ受容体リガンド、アンギオテンシンＡＴ１またはＡＴ２受容体に特異的なリガンド、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体λリガンド、ペニシリンなどのβ−ラクタム系抗生物質、抗菌薬を含む小有機分子、ならびに腫瘍細胞表面または感染性微生物で優先的に発現される受容体に特異的に結合する他の分子、受容体または他の細胞表面タンパク質の結晶構造に基づく特定の受容体の結合ポケットに適合するよう設計された抗菌薬および他の薬剤、腫瘍抗原もしくは腫瘍細胞の表面上で優先的に発現される他の分子のリガンド、またはこれらの分子のいずれかの断片などがある。ターゲティング部分として機能し得る腫瘍特異的抗原の例には、ＥｐｈＡ２などのエフリンファミリーのタンパク質の構成員の細胞外エピトープなどがある。ＥｐｈＡ２発現は、正常細胞における細胞−細胞接合部に制限されるが、ＥｐｈＡ２は転移腫瘍細胞における細胞表面全体に分布している。従って、転移細胞上のＥｐｈＡ２は、例えば免疫原に接合した抗体のＦａｂ断片への結合にアクセス可能であるが、そのタンパク質は正常細胞上のＦａｂ断片への結合にアクセス可能ではないことで、転移癌細胞に特異的なターゲティング部分を生じると考えられる。
【００３９】
そのようなターゲティング部分の別の例には、ＦＳＨ−３３、アラトスタチン１、肝臓癌ターゲティングペプチド、ペプチドＧＦＥ、抗ＥＧＦＲ抗体および／または抗体断片、特にはセツキシマブ、ＣｅｎｄＲ、ｉＲＧＤペプチド（ＲＧＤ−ＣｅｎｄＲハイブリッドペプチド）、ＣＥＡなどの癌特異的エピトープに結合する小分子、抗体および／または抗体断片、ガストリン放出ペプチド受容体、ソマトスタチン受容体、ガラニン受容体、卵胞刺激ホルモン受容体、ｐ３２タンパク質、線維芽細胞成長因子受容体、ＨｅｐＧ２、上皮細胞成長因子受容体、インテグリンαｖβ６、ニューロフィリン−１受容体およびＶＥＧＦ受容体がある。
【００４０】
薬剤の「遊離型」とは、例えばキャリアに連結したプロドラッグから放出された後などの修飾されていない薬理活性型での薬剤を指す。プロスタサイクリンの「遊離型」は、抱合体、キャリア連結プロドラッグもしくはデポーから放出された後などの修飾されていない薬理活性型でのプロスタサイクリンを指す。
【００４１】
本明細書で使用される場合、「プロドラッグ」という用語は、生体変換を受けてから薬理効果を示すようになるプロスタサイクリン化合物を意味するものとする。従って、プロドラッグは、親分子における望ましくない特性を変更もしくは消去するために一時的に使用される特殊な無毒性保護基を含む生理活性部分と見ることができる。例えば、プロドラッグは、生体加水分解し得るアミドおよび生体加水分解し得るエステルであることができ、ａ）そのようなプロドラッグにおける生体加水分解し得る官能基が化合物に含まれる化合物、およびｂ）所定の官能基で生理的に酸化もしくは還元され得る化合物も包含する。代表的なプロドラッグは、所定の活性物質と改善された物理化学特性もしくは薬物動態特性を生じさせ、通常は加水分解的開裂によってイン・ビボで容易に除去可能な過渡的キャリア基との一時的連結を含むキャリア連結プロドラッグ；活性化基の露出後にのみ、キャリア基の開裂が有効となるカスケードプロドラッグであることができる。
【００４２】
プロスタサイクリンなどの薬剤の物理化学特性もしくは薬物動態特性を高めるため、イン・ビボで当該薬剤をキャリアに接合させることができる。薬剤が可逆的にキャリアおよび／または連結基（リンカー）に結合している場合、そのような系は一般に「キャリア連結プロドラッグ」と称される。ＩＵＰＡＣが提供する定義（２０１１年３月７日に利用可能となったｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｈｅｍ．ｑｍｕｌ．ａｃ．ｕｋ／ｉｕｐａｃ／ｍｅｄｃｈｅｍ／ａｈ．ｈｔｍｌ下に提供）によれば、キャリア連結プロドラッグは、所定の活性物質と改善された物理化学特性もしくは薬物動態特性を生じさせ、通常は加水分解的開裂によってイン・ビボで容易に除去可能な可逆性キャリア基との一時的連結を含むプロドラッグである。
【００４３】
「修飾基」という用語は、プロスタサイクリン薬剤ではないプロドラッグの部分を指すことから、例えばキャリアならびに存在する場合は可逆的プロドラッグ連結基部分および／または１以上のスペーサー部分／複数部分を意味する。
【００４４】
「可逆的プロドラッグ連結基（リンカー）」または「過渡的プロドラッグ連結基」という用語は、一方の末端で、可逆的連結を介してプロスタサイクリンに結合しており、別の末端で、キャリア部分に永久的に結合しているスペーサー部分への永久的な結合を介して結合しているか、キャリア部分への永久的結合を介して直接結合している部分を指す。そのような可逆的プロドラッグ連結基は、生理条件（ｐＨ７．４、３７℃の緩衝水溶液）下で非酵素的に加水分解的分解を受ける、すなわち開裂可能であり、半減期は例えば１時間から３ヶ月の範囲である。可逆的連結は、例えば、アコチニル、アセタール、アミド、無水カルボン酸、エステル、イミン、ヒドラゾン、マレアミド酸アミド、オルトエステル、ホスファミド、ホスホエステル、ホスホシリルエステル、シリルエステル、スルホン酸エステル、芳香族カーバメートおよびそれらの組み合わせである。
【００４５】
永久的連結は、生理条件（ｐＨ７．４、３７℃の緩衝水溶液）下で非酵素的に加水分解的分解を受け、半減期は６ヶ月以上であり、例えばアミドである。
【００４６】
例えば、ある官能基が別の官能基につながっている場合、得られる化学構造は「連結」と称される。例えば、アミン基とカルボキシル基の反応によって、アミド連結が生じる。
【００４７】
本明細書で使用される場合、「実質的に急激な増加がない」または「実質的に急上昇のない」という用語（両方の用語は本明細書の記載においては互換的に使用される。）は、プロスタサイクリン化合物を哺乳動物、特にはヒトに投与すると、皮下もしくは筋肉投与などの投与から最初の４８時間中の血漿中の検出可能なプロスタサイクリン化合物のピーク濃度の、投与から最初の４８時間中のピーク濃度後の血漿中の検出可能なプロスタサイクリン化合物の最低濃度の比が２未満（実質的に急上昇が検出できない）、好ましくは１．５未満（検出可能な急上昇がない）であることを意味するものである。
【００４８】
本明細書で使用される場合、「急上昇」という用語は、プロドラッグまたは活性プロスタサイクリン化合物であることができるプロスタサイクリン化合物を哺乳動物、特にヒトに投与すると、皮下もしくは筋肉投与などの投与から最初の４８時間中の血漿中の検出可能なプロスタサイクリン化合物のピーク濃度の、投与から最初の４８時間中のピーク濃度後の血漿中の検出可能なプロスタサイクリン化合物の最低濃度の比が２以上であることを意味するものである。
【００４９】
本明細書で使用されるプロスタサイクリン化合物の「治療上有効量」は、哺乳動物、特にヒトにおける所定の疾患およびそれの合併症の治癒、改善または臨床的発現の部分停止を行うのに十分な量を意味する。これを達成するのに十分な量は、「治療上有効量」と定義される。各目的に効果的な量は、疾患もしくは損傷の重度ならびに対象者の体重および全身状態によって決まる。適切な用量の測定は、通常の実験を用い、数値のマトリックスを構築し、そのマトリックスにおける各種点を調べることによって（いずれも、熟練の医師の通常の技術の範囲内である）、達成できることは明らかであろう。
【００５０】
本明細書で使用される場合、「ヒドロゲル」という用語は、多量の水を取り込むことができる三次元の親水性もしくは両親媒性のポリマーネットワークを意味するものとする。そのネットワークは、ホモポリマーまたはコポリマーからなり、共有結合的な化学もしくは物理（イオン性、粗疎水性相互作用、絡み合い）架橋の存在のために不溶である。その架橋がネットワーク構造および物理的完全性を提供する。ヒドロゲルは、水との熱力学的適合性を示し、それによって水系媒体中で膨潤することができる。ネットワークの鎖は小孔が存在し、これらの小孔のかなりの部分が１ｎｍから１０００ｎｍの寸法のものとなるような形でつながっている。
【００５１】
「ゲル」という用語は、架橋されていないゼリー状ポリマー溶液を指す。
【００５２】
本明細書で使用される場合、「デポー」という用語は、長期間にわたって活性化合物を定常的に放出することができる、代表的には皮下注射もしくは筋肉注射として注射されるプロスタサイクリン化合物の薬剤送達系を意味するものである。
【００５３】
本明細書で使用される場合、「ピーク濃度」という用語は、プロスタサイクリン化合物投与後に得られる最高濃度を意味するものである。
【００５４】
本明細書で使用される場合、「ピーク／トラフ比」という用語は、投与間の所定期間内における哺乳動物、特にヒトに投与された化合物の最高定常状態血漿濃度とプロスタサイクリン化合物の最低定常状態血漿濃度との間の比率を意味するものとする。
【００５５】
「アルキル」は、直鎖（直線、分岐していない）もしくは分岐の炭素鎖（置換されていないアルキル）を意味する。適宜に、アルキル炭素の１以上の水素原子が、本明細書で示されているように置換基によって置き換わっていることができる。概して、好ましいアルキルはＣ１−６アルキルである。
【００５６】
「Ｃ１−４アルキル」は、例えば存在する場合、分子末端での１から４個の炭素原子を有するアルキル鎖（置換されていないＣ１−４アルキル）を意味し、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、または分子の２個の部分がアルキル基によって連結されている場合は例えば−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＣＨ３）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ（Ｃ２Ｈ５）−、−Ｃ（ＣＨ３）２−（Ｃ１−４アルキレンとも称される）である。適宜に、Ｃ１−４アルキル炭素の１以上の水素原子が、本明細書で示される置換基によって置き換わっていてもよい。従って、「Ｃ１−５０アルキル」は、１から５０個の炭素原子を有するアルキル鎖を意味する。
【００５７】
「Ｃ１−６アルキル」は、例えば存在する場合、分子末端での１から６個の炭素原子を有するアルキル鎖を意味し、Ｃ１−４アルキル、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、または分子の２個の部分がアルキル基によって連結されている場合は例えば−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＣＨ３）−、−Ｃ（ＣＨ２）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ（Ｃ２Ｈ５）−、−Ｃ（ＣＨ３）２−（Ｃ１−６アルキレンとも称される）である。Ｃ１−６アルキル炭素の１以上の水素原子が、本明細書で示される置換基によって置き換わっていてもよい。Ｃ１−１５アルキルまたはＣ１−１５アルキレンという用語は、相応に定義される。
【００５８】
「Ｃ２−６アルケニル」は、例えば存在する場合、分子末端での２から６個の炭素原子を有するアルケニル鎖を意味し、−ＣＨ＝ＣＨ２、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ２、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−ＣＨ３、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ２、または例えば分子の２個の部分がアルケニル基によって連結されている場合は−ＣＨ＝ＣＨ−である。Ｃ２−６アルケニル炭素の１以上の水素原子が、本明細書で示される置換基によって置き換わっていてもよい。
【００５９】
Ｃ２−４アルケニルという用語は、相応に定義される。
【００６０】
「Ｃ２−６アルキニル」は、例えば存在する場合、分子末端での２から６個の炭素原子を有するアルキニル鎖を意味し、−Ｃ≡ＣＨ、−ＣＨ２−Ｃ≡ＣＨ、ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ≡ＣＨ、ＣＨ２−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ３、または例えば分子の２個の部分がアルキニル基によって連結されている場合は−Ｃ≡Ｃ−である。Ｃ２−６アルキニル炭素の１以上の水素原子が、本明細書で示される置換基によって置き換わっていてもよい。Ｃ２−４アルキニルという用語は、相応に定義される。
【００６１】
「Ｃ２−５０アルケニル」は、例えば存在する場合、分子末端での２から５０個の炭素原子を有する分岐もしくは分岐していないアルケニル鎖（置換されていないＣ２−５０アルケニル）を意味し、−ＣＨ＝ＣＨ２、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ２、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−ＣＨ３、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ２、または例えば分子の２個の部分がアルケニル基によって連結されている場合は−ＣＨ＝ＣＨ−である。適宜に、Ｃ２−５０アルケニル炭素の１以上の水素原子が、さらに具体的に記載の置換基によって置き換わっていてもよい。従って、「アルケニル」という用語は、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を有する炭素鎖に関するものである。適宜に、１以上の三重結合が生じ得る。「Ｃ２−１５アルケニル」という用語は、相応に定義される。
【００６２】
「Ｃ２−５０アルキニル」は、例えば存在する場合、分子末端での２から５０個の炭素原子を有する分岐もしくは分岐していないアルキニル鎖（置換されていないＣ２−５０アルキニル）を意味し、−Ｃ≡ＣＨ、−ＣＨ２−Ｃ≡ＣＨ、ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ≡ＣＨ、ＣＨ２−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ３、または例えば分子の２個の部分がアルキニル基によって連結されている場合は−Ｃ≡Ｃ−である。適宜に、Ｃ２−５０アルキニル炭素の１以上の水素原子が、さらに具体的に記載の置換基によって置き換わっていてもよい。従って、「アルキニル」という用語は、少なくとも１個の炭素三重結合を有する炭素鎖に関するものである。適宜に、１以上の二重結合が生じ得る。
【００６３】
「Ｃ３−７シクロアルキル」または「Ｃ３−７シクロアルキル環」は、少なくとも部分的に飽和している炭素−炭素二重結合を有していてもよい３から７個の炭素原子を有する環状アルキル鎖（置換されていないＣ３−７シクロアルキル）を意味し、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロヘプチルである。適宜に、シクロアルキル炭素の１以上の水素原子は、本明細書に示される置換基によって置き換わっていてもよい。「Ｃ３−７シクロアルキル」または「Ｃ３−７シクロアルキル環」という用語は、ノルボルナン（ノルボルナニル）またはノルボルネン（ノルボルネニル）などの架橋二環も含む。従って、「Ｃ３−５シクロアルキル」は、３から５個の炭素原子を有するシクロアルキルを意味する。従って、「Ｃ３−１０シクロアルキル」は、３から１０個の炭素原子を有するシクロアルキルを意味する。
【００６４】
「ハロゲン」は、フルオロ、クロロ、ブロモまたはヨードを意味する。ハロゲンがフルオロまたはクロロであることが好ましい。
【００６５】
「４から７員複素環式」または「４から７員複素環」は、最大数以下の二重結合を含んでいてもよい４、５、６もしくは７個の環原子を有する環（完全飽和、部分飽和もしくは不飽和である芳香族もしくは非芳香族環）であって、少なくとも１個の環原子から４個までの環原子が硫黄（−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−など）、酸素および窒素（＝Ｎ（Ｏ）−など）からなる群から選択されるヘテロ原子によって置き換わっており、環が炭素もしくは窒素原子を介して分子の残りの部分に連結されているもの（置換されていない４から７員複素環）を意味する。完全性を期すには、本発明の一部の実施形態において、４から７員複素環は別の溶液を満たすべきであることが示される。４から７員複素環の例は、アゼチジン、オキセタン、チエタン、フラン、チオフェン、ピロール、ピロリン、イミダゾール、イミダゾリン、ピラゾール、ピラゾリン、オキサゾール、オキサゾリン、イソオキサゾール、イソオキサゾリン、チアゾール、チアゾリン、イソチアゾール、イソチアゾリン、チアジアゾール、チアジアゾリン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン、ピロリジン、イミダゾリジン、ピラゾリジン、オキサゾリジン、イソオキサゾリジン、チアゾリジン、イソチアゾリジン、チアジアゾリジン、スルホラン、ピラン、ジヒドロピラン、テトラヒドロピラン、イミダゾリジン、ピリジン、ピリダジン、ピラジン、ピリミジン、ピペラジン、ピペリジン、モルホリン、テトラゾール、トリアゾール、トリアゾリジン、テトラゾリジン、ジアゼパン、アゼピンまたはホモピペラジンである。適宜に、４から７員複素環の１以上の水素原子は置換基によって置き換わっていてもよい。
【００６６】
「８から１１員ヘテロ二環式」または「８から１１員ヘテロ二環」は、８から１１個の環原子を有する２個の環の複素環系であって、少なくとも１個の環原子が両方の環によって共有され、最大数までの二重結合（完全飽和、部分飽和もしくは不飽和である芳香族もしくは非芳香族環）を含んでいても良く、少なくとも１個の環原子から６個までの環原子が硫黄（−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−など）、酸素および窒素（＝Ｎ（Ｏ）−など）からなる群から選択されるヘテロ原子によって置き換わっており、その環が炭素もしくは窒素原子を介して分子の残りの部分に連結しているもの（置換されていない８から１１員ヘテロ二環）を意味する。８から１１員ヘテロ二環の例は、インドール、インドリン、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、ベンゾオキサゾール、ベンゾイソオキサゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾイソチアゾール、ベンズイミダゾール、ベンズイミダゾリン、キノリン、キナゾリン、ジヒドロキナゾリン、キノリン、ジヒドロキノリン、テトラヒドロキノリン、デカヒドロキノリン、イソキノリン、デカヒドロイソキノリン、テトラヒドロイソキノリン、ジヒドロイソキノリン、ベンゾアゼピン、プリンまたはプテリジンである。８から１１員のヘテロ二環という用語は、１，４−ジオキサ−８−アザスピロ［４．５］デカンなどの２個の環のスピロ構造または８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタンなどの架橋複素環も含む。「９から１１員ヘテロ二環式」または「９から１１員ヘテロ二環」という用語は、相応に定義される。
【００６７】
「脂肪族」という用語は、完全飽和を意味する。
【００６８】
「中断されている」という用語は、例えば連結基もしくはスペーサーの２個の炭素原子間に、または炭素鎖の個々の末端で個々の炭素原子と水素原子との間に、基（−Ｏ−または−ＮＨ−など）が挿入されていることを意味する。
【００６９】
概して、「置換されている」という用語は好ましくは、同一であるか異なっている置換基を指し、それは独立にハロゲン、ＣＮ、ＣＯＯＲｂ９、ＯＲｂ９、Ｃ（Ｏ）Ｒｂ９、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｂ９Ｒｂ９ａ）、Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒｂ９Ｒｂ９ａ）、Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒｂ９Ｒｂ９ａ）、Ｓ（Ｏ）２Ｒｂ９、Ｓ（Ｏ）Ｒｂ９、Ｎ（Ｒｂ９）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒｂ９ａＲｂ９ｂ）、ＳＲｂ９、Ｎ（Ｒｂ９Ｒｂ９ａ）、ＮＯ２、ＯＣ（Ｏ）Ｒｂ９、Ｎ（Ｒｂ９）Ｃ（Ｏ）Ｒｂ９ａ、Ｎ（Ｒｂ９）Ｓ（Ｏ）２Ｒｂ９ａ、Ｎ（Ｒｂ９）Ｓ（Ｏ）Ｒｂ９ａ、Ｎ（Ｒｂ９）Ｃ（Ｏ）ＯＲｂ９ａ、Ｎ（Ｒｂ９）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｂ９ａＲｂ９ｂ）、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒｂ９Ｒｂ９ａ）、Ｔｂ、Ｃ１−５０アルキル、Ｃ２−５０アルケニルおよびＣ２−５０アルキニルからなる群から選択され、
Ｔｂ、Ｃ１−５０アルキル、Ｃ２−５０アルケニルおよびＣ２−５０アルキニルは、同一であるか異なっている１以上のＲｂ１で置換されていても良く、Ｃ１−５０アルキル；Ｃ２−５０アルケニル；およびＣ２−５０アルキニルはＴｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−；−Ｏ−；−Ｃ（Ｏ）−；−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｂ１１）−；−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒｂ１１）−；−Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒｂ１１）−；−Ｓ（Ｏ）２−；−Ｓ（Ｏ）−；−Ｎ（Ｒｂ１１）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒｂ１１ａ）−；−Ｓ−；−Ｎ（Ｒｂ１１）−；−ＯＣ（Ｏ）Ｒｂ１１；−Ｎ（Ｒｂ１１）Ｃ（Ｏ）−；−Ｎ（Ｒｂ１１）Ｓ（Ｏ）２−；−Ｎ（Ｒｂ１１）Ｓ（Ｏ）−；−Ｎ（Ｒｂ１１）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；−Ｎ（Ｒｂ１１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｂ１１ａ）−；および−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒｂ１１Ｒｂ１１ａ）からなる群から選択される１以上の基によって中断されていても良く；
Ｒｂ９、Ｒｂ９ａ、Ｒｂ９ｂは独立に、Ｈ；Ｔｂ；およびＣ１−５０アルキル；Ｃ２−５０アルケニル；およびＣ２−５０アルキニルからなる群から選択され、
Ｔｂ、Ｃ１−５０アルキル、Ｃ２−５０アルケニルおよびＣ２−５０アルキニルは、同一であるか異なっている１以上のＲｂ１０で置換されていても良く、Ｃ１−５０アルキル；Ｃ２−５０アルケニル；およびＣ２−５０アルキニルはＴｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｂ１１）−、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒｂ１１）−、−Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒｂ１１）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒｂ１１）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒｂ１１ａ）−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒｂ１１）−、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｂ１１、−Ｎ（Ｒｂ１１）Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒｂ１１）Ｓ（Ｏ）２−、−Ｎ（Ｒｂ１１）Ｓ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒｂ１１）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｎ（Ｒｂ１１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｂ１１ａ）−および−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒｂ１１Ｒｂ１１ａ）からなる群から選択される１以上の基によって中断されていても良く、
Ｔｂは、フェニル、ナフチル、インデニル、インダニル、テトラリニル、Ｃ３−１０シクロアルキル、４から７員複素環、および９から１１員ヘテロ二環からなる群から選択され、Ｔｂは同一であるか異なっている１以上のＲｂ１０で置換されていても良く、
Ｒｂ１０は、ハロゲン、ＣＮ、オキソ（＝Ｏ）、ＣＯＯＲｂ１２、ＯＲｂ１２、Ｃ（Ｏ）Ｒｂ１２、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｂ１２Ｒｂ１２ａ）、Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒｂ１２Ｒｂ１２ａ）、Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒｂ１２Ｒｂ１２ａ）、Ｓ（Ｏ）２Ｒｂ１２、Ｓ（Ｏ）Ｒｂ１２、Ｎ（Ｒｂ１２）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒｂ１２ａＲｂ１２ｂ）、ＳＲｂ１２、Ｎ（Ｒｂ１２Ｒｂ１２ａ）、ＮＯ２、ＯＣ（Ｏ）Ｒｂ１２、Ｎ（Ｒｂ１２）Ｃ（Ｏ）Ｒｂ１２ａ、Ｎ（Ｒｂ１２）Ｓ（Ｏ）２Ｒｂ１２ａ、Ｎ（Ｒｂ１２）Ｓ（Ｏ）Ｒｂ１２ａ、Ｎ（Ｒｂ１２）Ｃ（Ｏ）ＯＲｂ１２ａ、Ｎ（Ｒｂ１２）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｂ１２ａＲｂ１２ｂ）、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒｂ１２Ｒｂ１２ａ）またはＣ１−６アルキルであり、Ｃ１−６アルキルは同一であるか異なっている１以上のハロゲンで置換されていても良く、
Ｒｂ１１、Ｒｂ１１ａ、Ｒｂ１２、Ｒｂ１２ａ、Ｒｂ１２ｂは独立にＨ；またはＣ１−６アルキルからなる群から選択され、Ｃ１−６アルキルは同一であるか異なっている１以上のハロゲンで置換されていてもよい。
【００７０】
「中断されている」という用語は、２個の炭素原子間に基が挿入されていること、または炭素鎖の末端で炭素と水素の間に挿入されていることを意味する。
【００７１】
概して、「含む」または「含有する」という用語は、「からなる」または「からなるものである」も包含している。
【００７２】
「製薬上許容される」という用語は、動物、好ましくはヒトでの使用においてＥＭＡ（欧州）および／またはＦＤＡ（ＵＳ）および／またはいずれか他の国内規制当局などの規制当局によって承認されていることを意味する。
【００７３】
「医薬組成物」または「組成物」は、１以上の薬剤またはプロドラッグ、特にはプロスタサイクリン化合物、および１以上の不活性成分を含む組成物、ならびに直接もしくは間接に、いずれか２以上の成分の組み合わせ、複合化もしくは凝集によって生じる、または１以上の成分の解離によって生じる、または１以上の成分の他の種類の反応もしくは相互作用から生じる製造品を意味する。従って、本発明の医薬組成物は、本発明の水溶性キャリア連結プロドラッグおよび製薬上許容される賦形剤を混合することで得ることができる組成物を包含する。
【００７４】
「乾燥組成物」は、プロスタサイクリン化合物を含む医薬組成物が容器に入った乾燥型で提供されることを意味する。乾燥に好適な方法は、噴霧乾燥および凍結乾燥（冷凍乾燥）である。プロスタサイクリン化合物を含むそのような乾燥組成物は、最大１０％、好ましくは５％未満、より好ましくは２％未満の残留含水量を有する（カール・フィッシャーに従って測定）。好ましい乾燥方法は凍結乾燥である。「凍結乾燥組成物」は、プロスタサイクリン化合物を含む医薬組成物を最初に冷凍し、次に減圧によって水分減少を行うことを意味する。この用語法は、最終容器への組成物の充填前に製造工程で行われる追加の乾燥段階を排除するものではない。
【００７５】
「凍結乾燥」（冷凍乾燥）は、組成物を冷凍し、次に周囲の圧力を下げ、そして適宜に加熱することで組成物中の凍った水を固相から直接昇華させて気体とすることができることを特徴とする脱水工程である。代表的には、昇華した水は凝結によって回収する。
【００７６】
「再生」は、液体を加えることで組成物の元の形態に戻すことを意味する。
【００７７】
「再生溶液」は、投与を必要とする患者への投与の前にプロスタサイクリン化合物を含む医薬組成物の乾燥組成物を再生するのに用いられる液体を指す。
【００７８】
「容器」は、プロスタサイクリン化合物を含む医薬組成物が入っており、再生まで保存することができる容器を意味する。
【００７９】
本明細書で使用される場合のプロスタサイクリン化合物の「治療上有効量」は、所定の疾患およびそれの合併症の治癒、改善もしくは臨床的発現の部分的停止を行う上で十分な量を意味する。これを行うのに十分な量が、「治療上有効量」と定義される。各目的のための有効量は、疾患もしくは損傷の重度ならびに対象者の体重および全身状態によって決まる。適切な用量の測定は、通常の実験を用い、数値のマトリックスを構築し、そのマトリックスにおける各種点を調べることによって（いずれも、熟練の医師および獣医の通常の技術の範囲内である）、達成できることは明らかであろう。
【００８０】
「緩衝液」または「緩衝剤」は、ｐＨを所望の範囲に維持する化合物を指す。生理的に耐容される緩衝液は、例えば、リン酸ナトリウム、コハク酸塩、ヒスチジン、重炭酸塩、クエン酸塩および酢酸塩、硫酸塩、硝酸塩、塩化物、ピルビン酸塩である。Ｍｇ（ＯＨ）２またはＺｎＣＯ３などの制酸剤も用いることができる。緩衝能力を調節して、ｐＨ安定性に対して最も感受性の条件に適合させることができる。
【００８１】
「賦形剤」は、治療剤とともに投与される化合物を指し、例えば緩衝剤、等張性調節剤、保存剤、安定剤、抗吸着剤、酸化保護剤または他の補助剤である。しかしながら、場合により、一つの賦形剤が二重もしくは三重の機能を有することができる。
【００８２】
「凍結乾燥防止剤（ｌｙｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔ）」は、対象のタンパク質と国合わせた場合に、乾燥した際、特には凍結乾燥およびその後の貯蔵時におけるタンパク質の化学的および／または物理的不安定性を大幅に防止もしくは軽減する分子である。凍結乾燥防止剤の例には、ショ糖もしくはトレハロースなどの糖類；グルタミン酸モノナトリウムまたはヒスチジンなどのアミノ酸類；ベタインなどのメチルアミン類；硫酸マグネシウムなどの離液性塩類；三価またはそれ以上の糖アルコール類などの多価アルコール類、例えばグリセリン、エリスリトール、グリセロール、アラビトール、キシリトール、ソルビトールおよびマンニトール；エチレングリコール；プロピレングリコール；ポリエチレングリコール；プルロニック類；ヒドロキシアルキルデンプン類、例えばヒドロキシエチルデンプン（ＨＥＳ）およびそれらの組み合わせなどがある。
【００８３】
「界面活性剤」は、液体の表面張力を低下させる湿潤剤を指す。
【００８４】
「等張性調節剤」は、注射デポーで浸透圧差による細胞損傷から生じ得る疼痛を低下させる化合物を指す。
【００８５】
「安定剤」という用語は、ポリマープロドラッグを安定化させるのに用いられる化合物を指す。安定化は、タンパク質安定化力の強化により、変性状態の不安定化により、または賦形剤のタンパク質への直接結合により達成される。
【００８６】
「抗吸着剤」は、主としてイオン性もしくはノニオン性界面活性剤もしは他のタンパク質または組成物の容器の内表面に競争的にコーティングもしくは吸着させるのに用いられる可溶性ポリマーを指す。賦形剤の選択される濃度および種類は、回避されるべき効果によって決まるが、代表的には、ＣＭＣ値のすぐ上の界面で界面活性剤の単層が形成される。
【００８７】
「酸化保護剤」は、アスコルビン酸、エクトイン、メチオニン、グルタチオン、モノチオグリセロール、モリン、ポリエチレンイミン（ＰＥＩ）、没食子酸プロピル、ビタミンＥ、クエン酸などのキレート剤、ＥＤＴＡ、ヘキサリン酸塩、チオグリコール酸などの抗酸化剤を指す。
【００８８】
「抗菌剤」は、細菌、真菌、酵母、原虫などの微生物を殺すか増殖を阻害し、および／またはウィルスを破壊する化学物質を指す。
【００８９】
「容器の密閉」は、容器が気密状態となって、外部と内部の間でガス交換が全くなく、内容物が無菌に維持されるような形で容器を閉じることを意味する。
【００９０】
「製薬上許容される」は、有効成分の生理活性の効果性を妨害せず、投与される宿主に対して毒性がない賦形剤および／または添加剤を包含することを意味する。
【００９１】
「試薬」という用語は、分子の組立工程で使用される中間体または出発材料を指す。
【００９２】
「誘導体」という用語は、保護基および／または活性化基で好適に置換されている化学的官能基または当業者に公知の相当する化学官能基の活性化型を指す。例えば、カルボキシル基の活性化型には、スクシニミジルエステル、ベンゾトリアジルエステル、ニトロフェニルエステル、ペンタフルオロフェニルエステル、アザベンゾトリアジルエステル、アシルハロゲニド、混成もしくは対称無水物、アシルイミダゾールなどの活性エステルなどがあるが、それらに限定されるものではない。
【００９３】
「非酵素的に開裂可能な連結基」という用語は、酵素活性なしに生理的条件下で加水分解的に分解可能な連結基を指す。
【００９４】
「非生理活性連結基」は、生理活性部分から誘導される薬剤（Ｄ−Ｈ）の薬理効果を示さない連結基を意味する。
【００９５】
「スペーサー」、「スペーサー基」、「スペーサー分子」および「スペーサー部分」という用語は互換的に使用され、Ｃ１−５０アルキル、Ｃ２−５０アルケニルまたはＣ２−５０アルキニル（断片が−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、４から７員複素環、フェニルおよびナフチルから選択される１以上の基によって中断されていてもよい）などの二つの部分を連結するのに好適な部分を指す。
【００９６】
「結合型」または「部分」という表現は、より大きい分子の一部である下位構造を指す。「結合型」という表現を用いて、試薬、出発材料または当業界で公知の仮説の出発材料を命名または列記することで部分の呼称を簡単にし、それにより、「結合型で」は、例えば１以上の水素ラジカル（−Ｈ）、または試薬もしくは出発材料に存在する１以上の活性化基もしくは保護基がその部分に存在しないことを意味する。
【００９７】
「連続放出」とは、プロスタサイクリン化合物の中断のない放出を指す。
【００９８】
本明細書で使用される場合、単一プロスタサイクリン化合物用量はｍｇ単位で与えられ、医薬組成物中のプロスタサイクリン化合物の濃度はｍｇ／ｍＬで与えられる。プロスタサイクリン化合物がプロドラッグである場合、その濃度は当該プロドラッグからの遊離プロスタサイクリンの定量的放出に基づくものである。当業界で公知の方法により、組成物の少量サンプルについて、プロスタサイクリン濃度における上昇が認められなくなるまでプロスタサイクリン放出条件下に置き（緩衝水溶液ｐＨ７．４、３７℃、または高ｐＨでの加速条件）、放出プロスタサイクリンの合計量を求める。可溶性キャリアの場合、定量的放出は定量的加水分解と同義であることは明らかである。
【００９９】
プロスタサイクリン化合物の「活性」は、ヒトおよび／またはラット血小板のＡＤＰおよびコラーゲン誘発凝集によって測定される。ヒトおよびラット血小板凝集に対するプロスタサイクリン化合物の効果は、当業界で公知の方法によって評価することができる。血小板は、ヒト志願者または雄Ｗｉｓｔａｒラットから得られる。ＡＤＰまたはコラーゲンによる凝集の誘発に先だって、１分間にわたって適切な試験品とともに前インキュベートする。血小板を、ＩＣ５０を測定するのに十分な濃度で並行してプロスタサイクリン化合物のプロドラッグおよび遊離型のプロスタサイクリンとともにインキュベートする。プロスタサイクリン化合物のプロドラッグは、相当する遊離型のプロスタサイクリンのＩＣ５０値と比較してＩＣ５０値が少なくとも２０倍高い場合に不活性である。
【０１００】
本発明は、プロスタサイクリン化合物および適宜に１以上の製薬上許容される賦形剤を含む医薬組成物であって、単回の皮下注射もしくは筋肉注射から少なくとも１２時間にわたって血漿中の治療上効果的なレベルのプロスタサイクリンを維持するのに十分なプロスタサイクリン化合物濃度を有することを特徴とする医薬組成物に関するものである。
【０１０１】
別の実施形態において、本発明は、疾患の治療および／または予防で使用されるプロスタサイクリン化合物および適宜に１以上の製薬上許容される賦形剤を含む医薬組成物であって、プロスタサイクリン化合物の濃度が、単回の皮下注射もしくは筋肉注射から少なくとも１２時間にわたって血漿中の治療上効果的なレベルのプロスタサイクリンを維持するのに十分である医薬組成物に関するものである。
【０１０２】
そのような濃度は、対象者によって変わり、個々の対象者における治療ウィンドウによって決まるが、少なくとも１２時間の間治療効果が存在するようにするのに十分である必要がある。
【０１０３】
好ましくは、プロスタサイクリン化合物を含むそのような医薬組成物または使用のための医薬組成物はさらに、少なくとも０．０５ｍｇ／ｍＬの濃度でプロスタサイクリン化合物を含むことを特徴とする。
【０１０４】
さらにより好ましくは、プロスタサイクリン化合物を含むそのような医薬組成物または使用のための医薬組成物は、さらに少なくとも０．０５ｍｇ／ｍＬの濃度でプロスタサイクリン化合物を含み、当該医薬組成物の単一用量が少なくとも０．０５ｍｇのプロスタサイクリン化合物を含む。
【０１０５】
さらにより好ましくは、プロスタサイクリン化合物を含むそのような医薬組成物または使用のための医薬組成物はさらに、少なくとも約１２時間、例えば少なくとも１６時間、代表的には少なくとも１日の医薬組成物投与間の間隔を示す。
【０１０６】
さらにより好ましくは、プロスタサイクリン化合物を含むそのような医薬組成物または使用のための医薬組成物はさらに、哺乳動物、特にはヒトにおいてイン・ビボで薬物動態プロファイルを示し、実質的にプロスタサイクリン化合物の急上昇がない。
【０１０７】
さらにより好ましくは、プロスタサイクリン化合物を含むそのような医薬組成物または使用のための医薬組成物はさらに、哺乳動物、特にはヒトにおいて５未満、例えば３未満、または２未満のピーク／トラフ比を示すことを特徴とする。
【０１０８】
さらにより好ましくは、プロスタサイクリン化合物を含むそのような医薬組成物または使用のための医薬組成物はさらに、プロスタサイクリン化合物が遊離プロスタサイクリンの＜２０％の活性、好ましくは＜１０％、より好ましくは＜５％の活性を有することを特徴とする。
【０１０９】
遊離プロスタサイクリンの活性は、例えばプロドラッグまたはデポーからの放出後に遊離プロスタサイクリンが得られる相当する遊離プロスタサイクリンの活性と理解されることは明らかである。
【０１１０】
さらに、本発明の別の態様は、哺乳動物、特にはヒトにおいてイン・ビボで薬物動態プロファイルを示し、実質的にプロスタサイクリン化合物の急上昇がないプロスタサイクリン化合物を含むそのような医薬組成物または使用のための医薬組成物に関する。
【０１１１】
好ましくは、プロスタサイクリン化合物を含むそのような医薬組成物または使用のための医薬組成物は、哺乳動物、特にはヒトにおいて５未満、例えば３未満、または２未満のピーク／トラフ比を示す。
【０１１２】
さらにより好ましくは、プロスタサイクリン化合物を含むそのような医薬組成物または使用のための医薬組成物はさらに、プロスタサイクリン化合物は、プロスタサイクリン化合物が遊離プロスタサイクリンの＜２０％の活性、好ましくは＜１０％、より好ましくは＜５％の活性を有することを特徴とする。
【０１１３】
さらにより好ましくは、プロスタサイクリン化合物を含むそのような医薬組成物または使用のための医薬組成物はさらに、哺乳動物、好ましくはヒト、より好ましくはヒト患者に対して、注射によって、例えば皮下注射もしくは筋肉注射によって投与されることを特徴とする。
【０１１４】
哺乳動物、好ましくはヒト、より好ましくはヒト患者に対して、例えばヒトなどの対象者に対して注射器によって有効用量を投与するために投与されるべき体積は、好ましくは３ｍＬ未満、代表的には２ｍＬ以下である。
【０１１５】
さらに、本発明の別の態様はさらに、プロスタサイクリン化合物が哺乳動物、特にはヒトにおいて５未満、例えば３未満、または２未満のピーク／トラフ比を示すプロスタサイクリン化合物を含むそのような医薬組成物または使用のための医薬組成物に関するのものである。
【０１１６】
さらにより好ましくは、プロスタサイクリン化合物を含むそのような医薬組成物または使用のための医薬組成物はさらに、そのプロスタサイクリン化合物が遊離プロスタサイクリンの＜２０％の活性、好ましくは＜１０％、より好ましくは＜５％の活性を有することを特徴とする。
【０１１７】
さらにより好ましくは、プロスタサイクリン化合物を含むそのような医薬組成物または使用のための医薬組成物はさらに、哺乳動物、好ましくはヒト、より好ましくはヒト患者に対して、注射によって、例えば皮下注射もしくは筋肉注射によって投与されることを特徴とする。
【０１１８】
さらに、本発明の別の態様はさらに、プロスタサイクリン化合物が遊離プロスタサイクリンの＜２０％の活性、好ましくは＜１０％、より好ましくは＜５％の活性を有する、プロスタサイクリン化合物を含む医薬組成物または使用のための医薬組成物に関するものである。
【０１１９】
さらにより好ましくは、プロスタサイクリン化合物を含むそのような医薬組成物または使用のための医薬組成物はさらに、注射によって、例えば皮下注射もしくは筋肉注射によって投与されることを特徴とする。
【０１２０】
別の好ましい実施形態において、本発明は、皮下注射もしくは筋肉注射で使用されるプロスタサイクリン化合物を含む医薬組成物に関するものである。
【０１２１】
別の好ましい実施形態において、本発明は、プロスタサイクリン化合物を含む医薬組成物であって、当該医薬組成物が、プロスタサイクリン化合物が血漿依存的にプロスタサイクリンを放出することを特徴とする医薬組成物に関するものである。好ましくは、当該プロスタサイクリン化合物は、酵素依存的にプロスタサイクリンを放出する。
【０１２２】
「血漿依存的」という用語は、ｐＨ７．４の緩衝液中およびｐＨ７．４の緩衝８０％血漿中で独立に３７℃で測定されるプロスタサイクリン化合物からのプロスタサイクリンの放出動力学が、５０％のみ、好ましくは４０％のみ、より好ましくは３０％のみ、さらにより好ましくは２０％のみ、最も好ましくは１０％のみ変動することを意味する。
【０１２３】
「酵素依存的」という用語は、プロスタサイクリン化合物からのプロスタサイクリンの放出に酵素の存在が必要ないことを意味する。
【０１２４】
好ましくは、本発明の全ての上記の態様および実施形態のプロスタサイクリン化合物は、デポー、好ましくはポリマーゲル、より好ましくはヒドロゲル、例えば十分に水和したポリマーマトリックス中であるプロスタサイクリン化合物または使用のための医薬組成物を含む。
【０１２５】
別の好ましい実施形態において、本発明の全ての上記の態様および実施形態のプロスタサイクリン化合物または使用のための医薬組成物は、デポー中の化合物に、好ましくはポリマーゲルに、さらにより好ましくはヒドロゲルに、最も好ましくは十分に水和したポリマーマトリックスに共有結合的に連結されている。
【０１２６】
さらにより好ましくは、本発明のプロスタサイクリン化合物を含む医薬組成物または使用のための医薬組成物はさらに、哺乳動物、好ましくはヒト、より好ましくはヒト患者に対して、注射、例えば皮下注射もしくは筋肉注射によって投与されることを特徴とする。
【０１２７】
さらにより好ましくは、本発明の全ての上記の態様および実施形態の医薬組成物または使用のための医薬組成物に含まれるプロスタサイクリン化合物は、プロドラッグであり、それはさらに、前記プロスタサイクリンプロドラッグの皮下投与もしくは筋肉投与後に、投与されたプロスタサイクリン用量の５０％を超える量が血液側内に放出可能であることを特徴とする。
【０１２８】
さらに、本発明の別の態様は、プロスタサイクリンプロドラッグを含む医薬組成物または使用のための医薬組成物であって、当該プロスタサイクリンプロドラッグの皮下投与もしくは筋肉投与後に、投与されたプロスタサイクリン用量の５０％強が血液側内に放出可能であることを特徴とする医薬組成物である。
【０１２９】
より好ましくは、前記プロスタサイクリン化合物はプロスタサイクリンのプロドラッグであり、さらにより好ましくはキャリア連結プロスタサイクリンプロドラッグであり、さらにより好ましくはポリマーキャリア連結プロスタサイクリンプロドラッグ（キャリア連結プロスタサイクリンプロドラッグのキャリア部分が少なくとも１種類のポリマーを含むことを意味する）である。
【０１３０】
好ましくは、プロスタサイクリン化合物は下記式（Ｉ）のキャリア連結プロスタサイクリンプロドラッグまたはそれの製薬上許容される塩である。
【化１】
2014522878.tif 000002
【０１３１】
式中、各Ｔは独立にプロスタサイクリン含有部分であり、好ましくはそのキャリア連結プロスタサイクリンプロドラッグは式（Ｉ）のキャリア連結トレプロスチニルプロドラッグであり、Ｔは下記構造（ｉ）から（ｖ）から選択される部分：
【化２】
2014522878.tif 000003
【０１３２】
2014522878.tif 000004
【０１３３】
であり、点線はＸ０への結合を示し；
ｙは１から６４の範囲の、好ましくは１から１６の範囲の整数であり、より好ましくはｙは１、２、３、４、５、６、７８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５および１６から選択され、さらにより好ましくはｙは８であり、
各Ｘ０は独立に（Ｘ０Ａ）ｍ１−（Ｘ０Ｂ）ｍ２であり；
ｍ１；ｍ２は独立に０または１であり；
Ｘ０ＡはＴ０であり；
Ｘ０Ｂは分岐もしくは分岐していないＣ１−１５アルキレン基であり、それは置換されていないか１以上の同一であるか異なっているＲ３で置換されており；
Ｒ３は、ハロゲン；Ｃ１−６アルキル；ＣＮ；Ｃ（Ｏ）Ｒ４；Ｃ（Ｏ）ＯＲ４；ＯＲ４；Ｃ（Ｏ）Ｒ４；Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ４Ｒ４ａ）；Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ４Ｒ４ａ）；Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ４Ｒ４ａ）；Ｓ（Ｏ）２Ｒ４；Ｓ（Ｏ）Ｒ４；Ｎ（Ｒ４）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ４ａＲ４ｂ）；ＳＲ４；Ｎ（Ｒ４Ｒ４ａ）；ＮＯ２；ＯＣ（Ｏ）Ｒ４；Ｎ（Ｒ４）Ｃ（Ｏ）Ｒ４ａ；Ｎ（Ｒ４）ＳＯ２Ｒ４ａ；Ｎ（Ｒ４）Ｓ（Ｏ）Ｒ４ａ；Ｎ（Ｒ４）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ４ａＲ４ｂ）；Ｎ（Ｒ４）Ｃ（Ｏ）ＯＲ４ａ；ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ４Ｒ４ａ）；またはＴ０であり；
Ｒ４、Ｒ４ａ、Ｒ４ｂは独立に、Ｈ；Ｔ０；Ｃ１−６アルキル；Ｃ２−６アルケニル；およびＣ２−６アルキニルからなる群から選択され、Ｃ１−６アルキル；Ｃ２−６アルケニル；およびＣ２−６アルキニルは、１以上の同一であるか異なっているＲ５によって置換されていても良く；
Ｒ５は、ハロゲン；ＣＮ；Ｃ（Ｏ）Ｒ６；Ｃ（Ｏ）ＯＲ６；ＯＲ６；Ｃ（Ｏ）Ｒ６；Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６Ｒ６ａ）；Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ６Ｒ６ａ）；Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６Ｒ６ａ）；Ｓ（Ｏ）２Ｒ６；Ｓ（Ｏ）Ｒ６；Ｎ（Ｒ６）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ６ａＲ６ｂ）；ＳＲ６；Ｎ（Ｒ６Ｒ６ａ）；ＮＯ２；ＯＣ（Ｏ）Ｒ６；Ｎ（Ｒ６）Ｃ（Ｏ）Ｒ６ａ；Ｎ（Ｒ６）ＳＯ２Ｒ６ａ；Ｎ（Ｒ６）Ｓ（Ｏ）Ｒ６ａ；Ｎ（Ｒ６）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６ａＲ６ｂ）；Ｎ（Ｒ６）Ｃ（Ｏ）ＯＲ６ａ；ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６Ｒ６ａ）であり；
Ｒ６、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂは独立に、Ｈ；Ｃ１−６アルキル；Ｃ２−６アルケニル；およびＣ２−６アルキニルからなる群から選択され、Ｃ１−６アルキル；Ｃ２−６アルケニル；およびＣ２−６アルキニルは１以上の同一であるか異なっているハロゲンで置換されていても良く；
Ｔ０は、フェニル；ナフチル；アズレニル；インデニル；インダニル；Ｃ３−７シクロアルキル；３から７員複素環；または８から１１員ヘテロ二環であり、Ｔ０は１以上の同一であるか異なっているＲ７で置換されていても良く；
Ｒ７は、ハロゲン；ＣＮ；ＣＯＯＲ８；ＯＲ８；Ｃ（Ｏ）Ｒ８；Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８Ｒ８ａ）；Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ８Ｒ８ａ）；Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８Ｒ８ａ）；Ｓ（Ｏ）２Ｒ８；Ｓ（Ｏ）Ｒ８；Ｎ（Ｒ８）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ８ａＲ８ｂ）；ＳＲ８；Ｎ（Ｒ８Ｒ８ａ）；ＮＯ２；ＯＣ（Ｏ）Ｒ８；Ｎ（Ｒ８）Ｃ（Ｏ）Ｒ８ａ；Ｎ（Ｒ８）Ｓ（Ｏ）２Ｒ８ａ；Ｎ（Ｒ８）Ｓ（Ｏ）Ｒ８ａ；Ｎ（Ｒ８）Ｃ（Ｏ）ＯＲ８ａ；Ｎ（Ｒ８）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８ａＲ８ｂ）；ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８Ｒ８ａ）；オキソ（＝Ｏ）（環は少なくとも部分的に飽和している）；Ｃ１−６アルキル；Ｃ２−６アルケニル；またはＣ２−６アルキニルであり、Ｃ１−６アルキル；Ｃ２−６アルケニル；およびＣ２−６アルキニルは１以上の同一であるか異なっているＲ９で置換されていても良く；
Ｒ８、Ｒ８ａ、Ｒ８ｂは独立に、Ｈ；Ｃ１−６アルキル；Ｃ２−６アルケニル；およびＣ２−６アルキニルからなる群から選択され、Ｃ１−６アルキル；Ｃ２−６アルケニル；およびＣ２−６アルキニルは１以上の同一であるか異なっているＲ１０で置換されていても良く；
Ｒ９、Ｒ１０は独立に、ハロゲン；ＣＮ；Ｃ（Ｏ）Ｒ１１；Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１；ＯＲ１１；Ｃ（Ｏ）Ｒ１１；Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）；Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）；Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）；Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１；Ｓ（Ｏ）Ｒ１１；Ｎ（Ｒ１１）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１１ａＲ１１ｂ）；ＳＲ１１；Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）；ＮＯ２；ＯＣ（Ｏ）Ｒ１１；Ｎ（Ｒ１１）Ｃ（Ｏ）Ｒ１１ａ；Ｎ（Ｒ１１）ＳＯ２Ｒ１１ａ；Ｎ（Ｒ１１）Ｓ（Ｏ）Ｒ１１ａ；Ｎ（Ｒ１１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１ａＲ１１ｂ）；Ｎ（Ｒ１１）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１ａ；およびＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）からなる群から選択され；
Ｒ１１、Ｒ１１ａ、Ｒ１１ｂは独立に、Ｈ；Ｃ１−６アルキル；Ｃ２−６アルケニル；およびＣ２−６アルキニルからなる群から選択され、Ｃ１−６アルキル；Ｃ２−６アルケニル；およびＣ２−６アルキニルは１以上の同一であるか異なっているハロゲンで置換されていても良く；
Ｚ１は、共有結合的に結合したポリマー、好ましくは製薬上許容されるポリマーを含むキャリアであり、
前記キャリアは部分Ｘ０に共有結合的に結合しており、ただしｍ１、ｍ２のうちの一つが１であり、前記キャリアはｍ１、ｍ２＝０の場合はＴに共有結合的に結合している。
【０１３４】
驚くべき点として、そのようなキャリア連結トレプロスチニルプロドラッグを用いて、トレプロスチニルの製剤を得ることができ、それは少なくとも部分的に上記で言及した欠点を克服するものであることが見出された。
【０１３５】
本発明の範囲内で、下記のような意味を有する用語が用いられる。
【０１３６】
本発明において、キャリア連結トレプロスチニルプロドラッグまたはそれの製薬上許容される塩は、トレプロスチニルをそれの遊離型で、またはそれの製薬上許容される塩として含まずに、結合型で含む。トレプロスチニルは、それの官能基の一つを介して、例えばヒドロキシルまたはカルボキシルを介して、分子の残りの部分に結合しており、部分Ｘ０に連結されている、またはｍ１およびｍ２が両方とも０である場合は式（Ｉ）の部分Ｚ１に連結されている部分Ｔの一部として結合している。これは、本発明によるキャリア連結トレプロスチニルプロドラッグが生理活性部分としてトレプロスチニルを含むことを意味する。投与を必要とする患者に投与した場合に、キャリア連結トレプロスチニルプロドラッグからの生理活性部分の開裂のために、トレプロスチニルはそれの遊離型で放出されるか、それの製薬上許容される塩として放出される。すなわち、キャリア連結トレプロスチニルプロドラッグは１以上の部分Ｔを含み、部分Ｔはそれぞれ部分Ｘ０によって置換されており（ただし、ｍ１およびｍ２のうちの少なくとも一方が１である）、その部分Ｘ０は次にキャリアＺ１に共有結合的に結合している。前記キャリアは、共有結合ポリマー、好ましくは少なくとも５００ダルトンの分子量を有する製薬上許容されるポリマーを含む。
【０１３７】
別の好ましい実施形態において、前記ポリマー、好ましくは製薬上許容されるポリマーの分子量は１６０ｋＤａ以下、好ましくは約１００ｋＤａ以下、さらにより好ましくは約５０ｋＤａ以下である。
【０１３８】
好ましくは、部分Ｘ０（ただし、ｍ１およびｍ２のうちの少なくとも一方が１である）および部分Ｔが炭酸エステルまたはエステル連結によって連結されており、最も好ましくは部分Ｘ０および部分Ｔがエステル連結によって連結されている。
【０１３９】
好ましくは、部分Ｘ０は置換されていない。より好ましくは、各部分Ｘ０は置換されていない。
【０１４０】
ある好ましい実施形態において、ｍ１は０であり、ｍ２は１である。
【０１４１】
別の好ましい実施形態において、ｍ１およびｍ２の両方が０である。
【０１４２】
好ましくは、下位構造Ｘ０−Ｚ１はＣ（Ｒ１Ｒ２）−ＣＨ２−Ｚ１（Ｒ１、Ｒ２は独立に、ＨおよびＣ１−４アルキルからなる群から選択され、ただしＲ１、Ｒ２のうちの少なくとも一方がＨ以外である）；または（ＣＨ２）ｎ−Ｚ１（ｎは２、３、４、５、６、７または８である）である。
【０１４３】
好ましくは、キャリアＺ１は、アミド基を介して部分Ｘ０に共有結合的に結合している。
【０１４４】
好ましくは、Ｒ３は、ハロゲン；ＣＮ；Ｃ（Ｏ）Ｒ４；Ｃ（Ｏ）ＯＲ４；ＯＲ４；Ｃ（Ｏ）Ｒ４；Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ４Ｒ４ａ）；Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ４Ｒ４ａ）；Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ４Ｒ４ａ）；Ｓ（Ｏ）２Ｒ４；Ｓ（Ｏ）Ｒ４；Ｎ（Ｒ４）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ４ａＲ４ｂ）；ＳＲ４；Ｎ（Ｒ４Ｒ４ａ）；ＮＯ２；ＯＣ（Ｏ）Ｒ４；Ｎ（Ｒ４）Ｃ（Ｏ）Ｒ４ａ；Ｎ（Ｒ４）ＳＯ２Ｒ４ａ；Ｎ（Ｒ４）Ｓ（Ｏ）Ｒ４ａ；Ｎ（Ｒ４）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ４ａＲ４ｂ）；Ｎ（Ｒ４）Ｃ（Ｏ）ＯＲ４ａ；ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ４Ｒ４ａ）；またはＴ０である。
【０１４５】
好ましくは、Ｒ４、Ｒ４ａ、Ｒ４ｂは独立に、Ｈ；Ｔ０；Ｃ１−４アルキル；Ｃ２−４アルケニル；およびＣ２−４アルキニルからなる群から選択され、Ｃ１−４アルキル；Ｃ２−４アルケニル；およびＣ２−４アルキニルは、１以上の同一であるか異なっているＲ５によって置換されていてもよい。
【０１４６】
より好ましくは、前記キャリア連結トレプロスチニルプロドラッグは、下記式（ＩＩ）のものである。
【化３】
2014522878.tif 000005
【０１４７】
式中、
Ｔ、ｙおよびＺ１は式（Ｉ）で定義のように使用され、
Ｒａ１は、置換されていないアルキル；置換されているアルキル；置換されていないフェニル；置換されているフェニル；置換されていないナフチル；置換されているナフチル；置換されていないインデニル；置換されているインデニル；置換されていないインダニル；置換されているインダニル；置換されていないテトラリニル；置換されているテトラリニル；置換されていないＣ３−１０シクロアルキル；置換されているＣ３−１０シクロアルキル；置換されていない４から７員複素環；置換されている４から７員複素環；置換されていない９から１１員ヘテロ二環；および置換されている９から１１員員ヘテロ二環の群から選択され；
Ｒａ２は、Ｈ、置換されていないアルキル、および置換されているアルキルから選択され；
Ｒａ３およびＲａ４は独立に、Ｈ、置換されていないアルキル、および置換されているアルキルからなる群から選択され；
ｎは０または１であり；
Ｒａ１およびＲａ３がそれらが結合している原子とともに、環Ａを形成していても良く；
Ａは、Ｃ３−１０シクロアルキル；４から７員脂肪族複素環；および９から１１員員脂肪族ヘテロ二環からなる群から選択され、Ａは置換されていないか置換されており；
Ｑはスペーサー部分であり；
好ましくは、Ｒａ１はＣ１−６アルキルまたは置換されているＣ１−６アルキル、より好ましくはＣ１−４アルキルまたは置換されているＣ１−４アルキルである。
【０１４８】
より好ましくは、Ｒａ１は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、およびベンジルから選択される。
【０１４９】
好ましくは、Ｒａ２はＨである。
【０１５０】
好ましくは、Ｒａ３は、Ｈ、Ｃ１−６アルキルまたは置換されているＣ１−６アルキル、より好ましくはＣ１−４アルキルまたは置換されているＣ１−４アルキルである。より好ましくは、Ｒａ３は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、およびベンジルから選択される。
【０１５１】
より好ましくは、Ｒａ３はＨである。
【０１５２】
好ましくは、Ｒａ４は、Ｈ、Ｃ１−６アルキルまたは置換されているＣ１−６アルキル、より好ましくはＣ１−４アルキルまたは置換されているＣ１−４アルキルから選択される。より好ましくは、Ｒａ４は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、およびベンジルから選択される。
【０１５３】
より好ましくは、Ｒａ４はＨである。
【０１５４】
別の好ましい実施形態において、Ｒａ１およびＲａ３がそれらが結合している原子とともに環Ａを形成しており；Ａはシクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロヘキサン、シクロヘプタンからなる群から選択される。
【０１５５】
好ましくは、式（ＩＩ）におけるＱは、ＣＯＯＲａ９；ＯＲａ９；Ｃ（Ｏ）Ｒａ９；Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ９Ｒａ９ａ）；Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒａ９Ｒａ９ａ）；Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ９Ｒａ９ａ）；Ｓ（Ｏ）２Ｒａ９；Ｓ（Ｏ）Ｒａ９；Ｎ（Ｒａ９）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒａ９ａＲａ９ｂ）；ＳＲａ９；Ｎ（Ｒａ９Ｒａ９ａ）；ＯＣ（Ｏ）Ｒａ９；Ｎ（Ｒａ９）Ｃ（Ｏ）Ｒａ９ａ；Ｎ（Ｒａ９）Ｓ（Ｏ）２Ｒａ９ａ；Ｎ（Ｒａ９）Ｓ（Ｏ）Ｒａ９ａ；Ｎ（Ｒａ９）Ｃ（Ｏ）ＯＲａ９ａ；Ｎ（Ｒａ９）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ９ａＲａ９ｂ）；ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ９Ｒａ９ａ）；Ｗ；Ｃ１−５０アルキル；Ｃ２−５０アルケニル；およびＣ２−５０アルキニルから選択され、
Ｗ、Ｃ１−５０アルキル、Ｃ２−５０アルケニルおよびＣ２−５０アルキニルは、１以上の同一であるか異なっているＲａ１０で置換されていても良く、
Ｃ１−５０アルキル；Ｃ２−５０アルケニル；およびＣ２−５０アルキニルは、−Ｗ−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−；−Ｏ−；−Ｃ（Ｏ）−；−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ１１）−；−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒａ１１）−；−Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ１１）−；−Ｓ（Ｏ）２−；−Ｓ（Ｏ）−；−Ｎ（Ｒａ１１）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒａ１１ａ）−；−Ｓ−；−Ｎ（Ｒａ１１）−；−ＯＣ（Ｏ）Ｒａ１１；−Ｎ（Ｒａ１１）Ｃ（Ｏ）−；−Ｎ（Ｒａ１１）Ｓ（Ｏ）２−；−Ｎ（Ｒａ１１）Ｓ（Ｏ）−；−Ｎ（Ｒａ１１）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；−Ｎ（Ｒａ１１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ１１ａ）−；および−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ１１Ｒａ１１ａ）からなる群から選択される１以上の基によって中断されていても良く；
Ｒａ９、Ｒａ９ａ、Ｒａ９ｂは独立に、Ｈ；Ｗ；およびＣ１−５０アルキル；Ｃ２−５０アルケニル；およびＣ２−５０アルキニルからなる群から選択され、
Ｗ、Ｃ１−５０アルキル、Ｃ２−５０アルケニルおよびＣ２−５０アルキニルは、１以上の同一であるか異なっているＲａ１０で置換されていても良く、
Ｃ１−５０アルキル；Ｃ２−５０アルケニル；およびＣ２−５０アルキニルは、Ｗ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−；−Ｏ−；−Ｃ（Ｏ）−；−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ１１）−；−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒａ１１）−；−Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ１１）−；−Ｓ（Ｏ）２−；−Ｓ（Ｏ）−；−Ｎ（Ｒａ１１）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒａ１１ａ）−；−Ｓ−；−Ｎ（Ｒａ１１）−；−ＯＣ（Ｏ）Ｒａ１１；−Ｎ（Ｒａ１１）Ｃ（Ｏ）−；−Ｎ（Ｒａ１１）Ｓ（Ｏ）２−；−Ｎ（Ｒａ１１）Ｓ（Ｏ）−；−Ｎ（Ｒａ１１）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；−Ｎ（Ｒａ１１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ１１ａ）−；および−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ１１Ｒａ１１ａ）からなる群から選択される１以上の基によって中断されていても良く；
Ｗは、フェニル；ナフチル；インデニル；インダニル；テトラリニル；Ｃ３−１０シクロアルキル；４から７員複素環；または９から１１員員ヘテロ二環からなる群から選択され；Ｗは、１以上の同一であるか異なっているＲａ１０で置換されていても良く；
Ｒａ１０は、ハロゲン；ＣＮ；オキソ（＝Ｏ）；ＣＯＯＲａ１２；ＯＲａ１２；Ｃ（Ｏ）Ｒａ１２；Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ１２Ｒａ１２ａ）；Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒａ１２Ｒａ１２ａ）；Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ１２Ｒａ１２ａ）；Ｓ（Ｏ）２Ｒａ１２；Ｓ（Ｏ）Ｒａ１２；Ｎ（Ｒａ１２）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒａ１２ａＲａ１２ｂ）；ＳＲａ１２；Ｎ（Ｒａ１２Ｒａ１２ａ）；ＮＯ２；ＯＣ（Ｏ）Ｒａ１２；Ｎ（Ｒａ１２）Ｃ（Ｏ）Ｒａ１２ａ；Ｎ（Ｒａ１２）Ｓ（Ｏ）２Ｒａ１２ａ；Ｎ（Ｒａ１２）Ｓ（Ｏ）Ｒａ１２ａ；Ｎ（Ｒａ１２）Ｃ（Ｏ）ＯＲａ１２ａ；Ｎ（Ｒａ１２）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ１２ａＲａ１２ｂ）；ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ１２Ｒａ１２ａ）；またはＣ１−６アルキルであり、Ｃ１−６アルキルは、１以上の同一であるか異なっているハロゲンで置換されていても良く；
Ｒａ１１、Ｒａ１１ａ、Ｒａ１２、Ｒａ１２ａ、Ｒａ１２ｂは独立に、Ｈ；およびＣ１−６アルキルからなる群から選択され、Ｃ１−６アルキルは、同一であるか異なっている１以上のハロゲンで置換されていてもよい。
【０１５６】
式（ＩＩ）において、部分Ｘ０は下記式（ＩＩａ）のものである。
【化４】
2014522878.tif 000006
【０１５７】
式中、
星印でマークを付けた点線はＴへの結合を示し、マークのない点線はキャリア連結トレプロスチニルプロドラッグの残りの部分への結合を示し、
Ｑ、Ｒａ１、Ｒａ２、Ｒａ３、およびＲａ４は、式（ＩＩ）で定義のように使用される。
【０１５８】
好ましくは、Ｘ０は、下記の構造：
【化５】
2014522878.tif 000007
【０１５９】
から選択され、
星印でマークを付けた点線はＴへの結合を示し、
マークのない点線はキャリア連結トレプロスチニルプロドラッグの残りの部分への結合を示す。
【０１６０】
好ましくは、式（Ｉ）のキャリア連結トレプロスチニルプロドラッグの全ての部分Ｔが同じ構造を有する。
【０１６１】
好ましくは、式（Ｉ）の全ての部分Ｔが式（ｖ）の構造を有する。
【０１６２】
式（Ｉ）の好ましい下位構造−Ｘ０−Ｔは、下記の構造から選択される。
【化６】
2014522878.tif 000008
【０１６３】
2014522878.tif 000009
【０１６４】
2014522878.tif 000010
【０１６５】
式中、点線はＺ１への結合を示す。
【０１６６】
キャリアＺ１は、共有結合ポリマー、好ましくは製薬上許容されるポリマーを含む。
【０１６７】
好ましいポリマーは、２−メタクリロイル−オキシエチルホスホイルコリン類、ヒドロゲル類、ＰＥＧ系ヒドロゲル類、ポリ（アクリル酸）類、ポリ（アクリレート）類、ポリ（アクリルアミド）類、ポリ（アルキルオキシ）ポリマー類、ポリ（アミド）類、ポリ（アミドアミン）類、ポリ（アミノ酸）類、ポリ（無水物）類、ポリ（アスパルタミド）類、ポリ（酪酸）類、ポリ（グリコール酸）類、ポリブチレンテレフタレート類、ポリ（カプロラクトン）類、ポリ（カーボネート）類、ポリ（シアノアクリレート）類、ポリ（ジメチルアクリルアミド）類、ポリ（エステル）類、ポリ（エチレン）類、ポリ（エチレングリコール）類、ポリ（エチレンオキサイド）類、ポリ（エチルホスフェート）類、ポリ（エチルオキサゾリン）類、ポリ（グリコール酸）類、ポリ（アクリル酸ヒドロキシエチル）類、ポリ（ヒドロキシエチルオキサゾリン）類、ポリ（ヒドロキシメタクリレート）類、ポリ（ヒドロキシプロピルメタクリルアミド）類、ポリ（ヒドロキシプロピルメタクリレート）類、ポリ（ヒドロキシプロピルオキサゾリン）類、ポリ（イミノカーボネート）類、ポリ（乳酸）類、ポリ（乳酸−コ−グリコール酸）類、ポリ（メタクリルアミド）類、ポリ（メタクリレート）類、ポリ（メチルオキサゾリン）類、ポリ（有機ホスファゼン）類、ポリ（オルトエステル）類、ポリ（オキサゾリン）類、ポリ（プロピレングリコール）類、ポリ（シロキサン）類、ポリ（ウレタン）類、ポリ（ビニルアルコール）類、ポリ（ビニルアミン）類、ポリ（ビニルメチルエーテル）類、ポリ（ビニルピロリドン）類、シリコーン類、セルロース類、カルボメチルセルロース類、ヒドロキシプロピルメチルセルロース類、キチン類、キトサン類、デキストラン類、デキストリン類，ゼラチン類、ヒアルロン酸類および誘導体、マンナン類、ペクチン類、ラムノガラクツロナン類、デンプン類、ヒドロキシアルキルデンプン類、ヒドロキシエチルデンプン類および他の炭水化物系ポリマー類、キシラン類ならびにこれらのコポリマー類から選択される。
【０１６８】
好ましくは、キャリアＺ１は、ポリ（オキサゾリン）またはＰＥＧ系ポリマーを含む。最も好ましくは、キャリアＺ１はＰＥＧ系ポリマーを含む。
【０１６９】
１実施形態において、キャリアＺ１は、当業界で公知のヒドロゲルであることができる（ポリマーの一つの選択肢として）。好適なヒドロゲルは、ＷＯ−Ａ２００６／００３０１４またはＥＰ−Ａ１６２５８５６に記載されている。キャリアＺ１がヒドロゲルである場合、それがＷＯ−Ａ２０１１／０１２７１５（参照によって本明細書に組み込まれる）に開示のＰＥＧ系ヒドロゲルであることが好ましい。
【０１７０】
好ましくは、キャリアＺ１は水溶性キャリアである。
【０１７１】
１実施形態において、キャリアＺ１は下記式（ＩＩＩ）の構造を有する。
【化７】
2014522878.tif 000011
【０１７２】
式中、
点線はＸ０への結合を示し、
式（ＩＩＩ）のｍ、ｎおよびｐのそれぞれは独立に、５から５００の範囲の整数であり、
式（ＩＩＩ）のｑは２から３２の範囲である。
【０１７３】
好ましくは、式（ＩＩ）におけるｑは２から１４の範囲の整数であり、より好ましくは式（ＩＩ）のｑは６である。
【０１７４】
好ましくは、式（ＩＩＩ）のｍ、ｎおよびｐのそれぞれは独立に、１０から２５０、より好ましくは５０から１５０の範囲である。好ましくは、式（ＩＩＩ）におけるｍ、ｎおよびｐは同一である。
【０１７５】
別の実施形態において、前記キャリアＺ１は下記式（ＩＶ）の構造を有する。
【化８】
2014522878.tif 000012
【０１７６】
式中、点線はＸ０への結合を示し、ただしｍ１、ｍ２のうちの一方が１であり、ｍ１、ｍ２＝０の場合にキャリアはＴに共有結合的に結合しており、
式（ＩＶ）のｍ、ｎおよびｐのそれぞれは独立に５から５００の範囲の整数であり、式（ＩＶ）のｑは０から１４の範囲である。
【０１７７】
好ましくは、式（ＩＶ）におけるｑは２から６の範囲の整数であり、より好ましくは式（ＩＶ）のｑは２である。
【０１７８】
好ましくは、式（ＩＶ）におけるｍ、ｎおよびｐのそれぞれは独立に１０から２５０、より好ましくは５０から１５０の範囲である。好ましくは、式（ＩＶ）におけるｍ、ｎおよびｐは同一である。
【０１７９】
別の好ましい実施形態において、Ｚ１は下記式（Ｖ）の構造を有する。
【化９】
2014522878.tif 000013
【０１８０】
式中、
ＰＯＬｘは、０．５ｋＤａから１６０ｋＤａの範囲の分子量を有するポリマー部分であり、
Ｈｙｐ１およびＨｙｐ２は独立に超分岐部分であり、
ｍｘは０または１である。
【０１８１】
ポリマー部分ＰＯＬｘは、０．５ｋＤａから１６０ｋＤａ、好ましくは２ｋＤａから８０ｋＤａ、より好ましくは５ｋＤａから４０ｋＤａの分子量を有する。
【０１８２】
ＰＯＬｘは、例えばポリペプチド類、２−メタクリロイル−オキシエチルホスホイルコリン類、水溶性ヒドロゲル類、水溶性ＰＥＧ系ヒドロゲル類、水溶性ヒアルロン酸系ヒドロゲル類、ポリ（アクリル酸）類、ポリ（アクリレート）類、ポリ（アクリルアミド）類、ポリ（アルキルオキシ）ポリマー類、ポリ（アミド）類、ポリ（アミドアミン）類、ポリ（アミノ酸）類、ポリ（無水物）類、ポリ（アスパルタミド）類、ポリ（酪酸）類、ポリ（グリコール酸）類、ポリブチレンテレフタレート類、ポリ（カプロラクトン）類、ポリ（カーボネート）類、ポリ（シアノアクリレート）類、ポリ（ジメチルアクリルアミド）類、ポリ（エステル）類、ポリ（エチレン）類、ポリ（エチレングリコール）類、ポリ（エチレンオキサイド）類、ポリ（エチルホスフェート）類、ポリ（エチルオキサゾリン）類、ポリ（グリコール酸）類、ポリ（アクリル酸ヒドロキシエチル）類、ポリ（ヒドロキシエチルオキサゾリン）類、ポリ（ヒドロキシメタクリレート）類、ポリ（ヒドロキシプロピルメタクリルアミド）類、ポリ（ヒドロキシプロピルメタクリレート）類、ポリ（ヒドロキシプロピルオキサゾリン）類、ポリ（イミノカーボネート）類、ポリ（乳酸）類、ポリ（乳酸−コ−グリコール酸）類、ポリ（メタクリルアミド）類、ポリ（メタクリレート）類、ポリ（メチルオキサゾリン）類、ポリ（有機ホスファゼン）類、ポリ（オルトエステル）類、ポリ（オキサゾリン）類、ポリ（プロピレングリコール）類、ポリ（シロキサン）類、ポリ（ウレタン）類、ポリ（ビニルアルコール）類、ポリ（ビニルアミン）類、ポリ（ビニルメチルエーテル）類、ポリ（ビニルピロリドン）類、シリコーン類、セルロース類、カルボメチルセルロース類、ヒドロキシプロピルメチルセルロース類、キチン類、キトサン類、デキストラン類、デキストリン類，ゼラチン類、ヒアルロン酸類および誘導体、官能化ヒアルロン酸類、マンナン類、ペクチン類、ラムノガラクツロナン類、デンプン類、ヒドロキシアルキルデンプン類、ヒドロキシエチルデンプン類および他の炭水化物系ポリマー類、キシラン類ならびにこれらのコポリマー類からなるポリマーの群から選択することができる。
【０１８３】
式（Ｖ）のポリマー部分ＰＯＬｘは、直鎖もしくは分岐のポリマーを含むことができる。好ましくは、式（Ｖ）のＰＯＬｘは、直鎖ポリマーを含む、特にはそれからなるものである。
【０１８４】
ある好ましい実施形態において、式（Ｖ）のＰＯＬｘは、ＰＥＧ系ポリマーまたはポリ（オキサゾリン）系ポリマー、より好ましくは直鎖ＰＥＧ系ポリマーを含み、特にはそれからなるものである。さらにより好ましくは、式（Ｖ）のＰＯＬｘは、ＰＥＧ系直鎖ポリマーからなる。
【０１８５】
式（Ｖ）におけるｍが０である場合、式（Ｖ）のＰＯＬｘが、式Ｘ１−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐ−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−Ｘ２−の構造を含むこと、好ましくはその構造からなることが好ましく、ｎは２、３もしくは４から選択され；ｐは５から２０００の範囲の整数であり、好ましくはｐは１０から１０００の範囲の整数であり、より好ましくはｐは１００から１０００の範囲の整数であり；Ｘ２は式（Ｖ）のＰＯＬｘおよびＨｙｐ２を共有結合的に連結する官能基であり；Ｘ１は、Ｈ、ＣＨ３およびＣ２Ｈ５から選択される。
【０１８６】
式（Ｖ）におけるｍが１である場合、式（Ｖ）のＰＯＬｘが、式Ｘ３−（ＣＨ２）ｎ１−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐ−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ２−Ｘ２−の構造を含むこと、好ましくはその構造からなることが好ましく、ｎ１およびｎ２は独立に２、３および４から選択され；ｐは５から２０００の範囲の整数であり、好ましくはｐは１０から１０００の範囲の整数であり、より好ましくはｐは１００から１０００の範囲の整数であり；Ｘ２およびＸ３はそれぞれ、式（Ｖ）のＰＯＬｘをＨｙｐ１およびＨｙｐ２に共有結合的に連結する官能基である。
【０１８７】
好ましい実施形態において、式（Ｖ）でのｍｘは０である。
【０１８８】
別の好ましい実施形態において、式（Ｖ）のＰＯＬｘはポリペプチド（またはタンパク質）、特には下記で定義の非免疫原性ポリペプチドである。
【０１８９】
好ましくは、式（Ｖ）のポリマー部分ＰＯＬｘは、少なくとも約１００個のアミノ酸残基を含む、特には少なくとも約１００個のアミノ酸残基からなるポリペプチドである。好ましい実施形態において、アラニン、セリンおよび／またはプロリン残基から選択されるアミノ酸が存在し、特には主として存在し、ポリペプチド部分は好ましくは、生理的条件でランダムコイル配置を有する。式（Ｖ）のそのようなポリペプチド部分ＰＯＬｘは、凍結乾燥物または乾燥組成物で存在する場合は、過渡的にも一時的にもランダムコイルを形成できないことは明らかである。
【０１９０】
式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘは、最大で約１０００アミノ酸残基、好ましくは最大で約９００アミノ酸残基、より好ましくは最大で約８００アミノ酸残基、さらにより好ましくは最大で約７００アミノ酸残基、特に好ましくは最大で約６００アミノ酸残基からなるアミノ酸配列を有するランダムコイル配置を有することができる。従って、ランダムコイル配置を形成するアミノ酸配列は、最大で約５００アミノ酸残基または最大で約４５０アミノ酸残基からなるものであることができる。
【０１９１】
ランダムコイル配置を形成するアミノ酸配列が最大で約１２００および約１５００以下のアミノ酸残基からなることができることも本明細書において想到される。従って、ランダムコイル配置を形成するアミノ酸配列は、約１００から約１５００アミノ酸残基からなるものであることができる。
【０１９２】
特定の実施形態において、ランダムコイル配置を形成する前記アミノ酸配列は、本明細書において特性決定された約１００から１０００アミノ酸残基、すなわち下記で定義の主残基もしくは固有残基としてアラニン、セリンおよび／またはプロリンを含むものである。
【０１９３】
好ましい実施形態において、式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘは、主としてアミノ酸残基アラニン、セリンおよびプロリンのうちの一つ、二つまたは三つからなることで、プロリン残基は式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘの好ましくは約４％から約４０％を表す。アラニンおよびセリン残基は、式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘの残りの少なくとも６０％から９６％を含む。しかしながら、下記において本明細書で詳細に記載のように、式（Ｖ）の前記ポリペプチド部分ＰＯＬｘは、アラニン、セリンおよびプロリンとは異なる別のアミノ酸、すなわちマイナー構成成分としてのアミノ酸を含んでいてもよい。
【０１９４】
本明細書で使用される「マイナー構成成分（少量構成成分）」という用語は、最大で１０％（すなわち１００アミノ酸中の最大で１０アミノ酸）がアラニン、セリンおよびプロリンとは異なり得ること、好ましくは最大で８％（すなわち１００アミノ酸中の最大で８アミノ酸）がアラニン、セリンおよびプロリンとは異なり得ること、より好ましくは最大で６％（すなわち１００アミノ酸中の最大で６アミノ酸）がアラニン、セリンおよびプロリンとは異なり得ること、さらにより好ましくは最大で５％（すなわち１００アミノ酸中の最大で５アミノ酸）がアラニン、セリンおよびプロリンとは異なり得ること、特に好ましくは最大で４％（すなわち１００アミノ酸中の最大で４アミノ酸）がアラニン、セリンおよびプロリンとは異なり得ること、より特に好ましくは最大で３％（すなわち１００アミノ酸中の最大で３アミノ酸）がアラニン、セリンおよびプロリンとは異なり得ること、さらにより特に好ましくは最大で２％（すなわち１００アミノ酸中の最大で２アミノ酸）がアラニン、セリンおよびプロリンとは異なり得ること、そして最も好ましくは最大で１％（すなわち１００アミノ酸中の最大で２アミノ酸）がアラニン、セリンおよびプロリンとは異なり得ることを意味する。アラニン、セリンおよびプロリンとは異なる前記アミノ酸は、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｖａｌ、セレノシステイン、セレノメチオニンおよびヒドロキシプロリンを含む天然もしくはタンパク質原性アミノ酸の群から選択することができる。少量構成要素は、非天然アミノ酸から選択することもできる。
【０１９５】
「少なくとも約１００／１５０／２００／２５０／３００／３００／３５０（など）アミノ酸残基」という用語は、簡明な数のアミノ酸残基に限定されるものではなく、さらなる１０％から２０％の残基を含むまたは１０％から２０％未満の残基を含むアミノ酸伸長も含む。例えば、「少なくとも約１００アミノ酸残基」は、本発明の主旨から外れない限り、８０から１００および約１００から１２０アミノ酸残基を包含することもできる。
【０１９６】
１実施形態において、式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘは複数のポリマーカセットを含み、そのポリマーカセットは、１種類、２種類もしくは３種類のＡｌａ、ＳｅｒおよびＰｒｏから選択されるアミノ酸からなり、６以下の連続アミノ酸残基が同一であり、前記プロリン残基は式（Ｖ）の前記ポリペプチド部分ＰＯＬｘのアミノ酸の４％強および４０％未満を構成する。
【０１９７】
式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘは、複数の、特には２個、３個、４個、５個もしくはそれより多い同一のポリマーカセットまたは複数の同一ではないポリマーカセットを含むことができる。Ａｌａ、ＳｅｒおよびＰｒｏ残基からなるポリマーカセットの例を本明細書において下記に提供するが、これらに限定されるものではなく、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３および配列番号１４またはこれら配列のペプチド断片もしくは多量体を参照する。ポリマーカセットは、少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０またはそれより多いアミノ酸残基からなることができ、各ポリマーカセットは、Ａｌａ、ＳｅｒおよびＰｒｏ残基を含む。
【０１９８】
１実施形態において、本発明によるポリマーカセットは１００以下のアミノ酸残基を含む。好ましくは、本明細書で定義のポリマーカセットは、約４％強、好ましくは約５％強、さらにより好ましくは約６％強、特に好ましくは約８％強、より特に好ましくは約１０％強、さらにより特に好ましくは約１５％強、最も好ましくは約２０％強のプロリン残基を含む。本明細書で定義のそのようなポリマーカセットは好ましくは、約４０％未満または約３５％未満のプロリン残基を含む。
【０１９９】
ある好ましい実施形態において、式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘは、下記式（ａ）を含み、特にはその式からなる。
【化１０】
2014522878.tif 000014
【０２００】
この式はさらに、本明細書で定義のプロリン残基を含み、
ｘは独立に、０から６の整数から選択され、
各ｙは独立に、１から６の範囲の整数から選択され、
各ｚは独立に、１から６の範囲の整数から選択される。
【０２０１】
ｎは、式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘが少なくとも約１００アミノ酸残基、特には少なくとも約１００から約３０００アミノ酸残基、好ましくは約２０００、より好ましくは約１０００アミノ酸残基からなるような整数である。
【０２０２】
別の好ましい実施形態において、式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘは、５以下の同一連続アミノ酸残基、より好ましくは４以下の同一連続アミノ酸残基、最も好ましくは３以下の同一連続アミノ酸残基を含む。
【０２０３】
本明細書において上記で既に示したように、式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘは、１実施形態においてプロリン残基を含み、当該プロリン残基は、約４％強、好ましくは約５％強、さらにより好ましくは約６％強、特に好ましくは約８％強、より特に好ましくは約１０％強、さらにより特に好ましくは約１５％強、最も好ましくは約２０％強の式（Ｖ）のＰＯＬｘのアミノ酸を構成している。
【０２０４】
別の好ましい実施形態において、式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘは、式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘを構成するアミノ酸の約４％強であるが約５０％未満、好ましくは約１０％強であるが約５０％未満、最も好ましくは約２０％強であるが約５０％未満のアラニン残基を含む。
【０２０５】
さらに別の好ましい実施形態において、式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘは、式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘを構成するアミノ酸の約４％強で約５０％未満、好ましくは約１０％強であるが約５０％未満、最も好ましくは約２０％強であるが約５０％未満のセリン残基を含む。
【０２０６】
好ましくは、式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘは、式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘを構成するアミノ酸の約３５％プロリン残基、約５０％アラニン残基および約１５％セリン残基を含む。あるいは、式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘは、式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘを構成するアミノ酸の約３５％プロリン残基、約１５％アラニン残基および約５０％セリン残基を含むことができる。
【０２０７】
好ましくは、式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘは、下記のアラニン−セリンポリマーカセットのうちの１以上を含む。
【０２０８】
配列番号１
ＡＡＡＡＳＳＡＳＳＡＳＳＳＳＳＡＡＡＳＡ
配列番号２
ＡＡＳＡＡＡＳＳＡＡＡＳＡＡＡＡＳＡＳＳ
配列番号３
ＡＳＡＳＡＳＡＳＡＳＡＳＳＡＡＳＡＡＳＡ
配列番号４
ＳＡＡＳＳＳＡＳＳＳＳＡＡＳＳＡＳＡＡＡ
配列番号５
ＳＳＳＳＡＡＳＡＡＳＡＡＡＡＡＳＳＳＡＳ
配列番号６
ＳＳＡＳＳＳＡＡＳＳＳＡＳＳＳＳＡＳＡＡ
配列番号７
ＳＡＳＡＳＡＳＡＳＡＳＡＡＳＳＡＳＳＡＳ
配列番号８
ＡＳＳＡＡＡＳＡＡＡＡＳＳＡＡＳＡＳＳＳ
得られるアミノ酸配列がさらに、本明細書において上記で定義のプロリン残基をさらに含む場合に、これらのアラニン−セリンポリマーカセットの多量体は、ランダムコイル配置を形成することができる。
【０２０９】
好ましい実施形態において、式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘは、下記のポリマーカセットのうちの１以上を含む。
【０２１０】
配列番号９
ＡＳＰＡＡＰＡＰＡＳＰＡＡＰＡＰＳＡＰＡ
配列番号１０
ＡＡＰＡＳＰＡＰＡＡＰＳＡＰＡＰＡＡＰＳ
配列番号１１
ＡＰＳＳＰＳＰＳＡＰＳＳＰＳＰＡＳＰＳＳ
配列番号１５
ＳＡＰＳＳＰＳＰＳＡＰＳＳＰＳＰＡＳＰＳ
配列番号１５は、最後のセリンが脱離し、別のセリンが開始アミノ酸として付加されている環状に順序を変えた形での本明細書で提供の配列番号１１に相当する。結果的に、この改変された配列の多量体は、最初および最後の残基を除き、非改変配列の多量体と実質的に同じ内部繰り返し単位を有する。従って、配列番号１５は、式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘについての別のポリマーカセットの１例と見なすことができる。他のポリマーカセットおよび本明細書で提供されるアミノ酸ポリマーの（より短い）ペプチド断片もしくは環状に順序を変えた型も、式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘのポリマーカセットとして用いることが可能であることは、当業者には明瞭である。
【０２１１】
さらに、ランダムコイル配置を形成するさらに別の例示的なアミノ酸ポリマーは、下記の配列からなる群から選択され得るアミノ酸配列を含むことができる。
【０２１２】
配列番号１２
ＳＳＰＳＡＰＳＰＳＳＰＡＳＰＳＰＳＳＰＡ
配列番号１３
ＡＡＳＰＡＡＰＳＡＰＰＡＡＡＳＰＡＡＰＳＡＰＰＡ
配列番号１４
ＡＳＡＡＡＰＡＡＡＳＡＡＡＳＡＰＳＡＡＡ
従って、式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘの好ましいポリマーカセットは、下記の配列から選択される。
【０２１３】
ＡＳＰＡＡＰＡＰＡＳＰＡＡＰＡＰＳＡＰＡ（配列番号９）、
ＡＡＰＡＳＰＡＰＡＡＰＳＡＰＡＰＡＡＰＳ（配列番号１０）、
ＡＰＳＳＰＳＰＳＡＰＳＳＰＳＰＡＳＰＳＳ（配列番号１１）、
ＳＳＰＳＡＰＳＰＳＳＰＡＳＰＳＰＳＳＰＡ（配列番号１２）、
ＡＡＳＰＡＡＰＳＡＰＰＡＡＡＳＰＡＡＰＳＡＰＰＡ（配列番号１３）、および
ＡＳＡＡＡＰＡＡＡＳＡＡＡＳＡＰＳＡＡＡ（配列番号１４）、
または環状に順序を変えた型またはこれら配列の全体もしくは一部としてのこれら配列の多重体。
【０２１４】
やはり、これら配列および本明細書で上記で提供の配列のペプチド断片または多重体または環状に順序を変えた型も、本発明の文脈において、式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘのポリマーカセットとして用いることができる。当業者であれば、生理条件下でランダムコイル配置を形成し、本明細書で定義のように主としてアラニン、セリンおよびプロリンから構築されるさらなるアミノ酸ポリマーカセットを容易に得ることができる。式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘに使用されるアミノ酸ポリマーカセットを形成するランダムコイル配置のそのような他のおよびさらなる例は、特には、上記で示した具体的なポリマーカセットの組み合わせおよび／またはペプチド断片または環状に順序を変えた型を含むことができる。
【０２１５】
従って、前記例示的ポリマーカセットは、新たに組み合わせてさらなるポリマーカセットを形成することができる個々のペプチド断片を提供することもできる。
【０２１６】
上記によれば、式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘは、上記で本明細書において開示の配列番号９、１０、１１、１２、１３または１４を有するアミノ酸配列のいずれか一つからなる配列の多重体を含むことができるか、複数のアミノ酸配列配列番号９、１０、１１、１２、１３および１４からなる配列の多重体を含むことができる。さらに、これら例示された配列のペプチド断片または環状に順序を変えた型を用いて、式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘのさらなるポリマーカセットを構築することの可能であることが想到される。
【０２１７】
別の実施形態において、式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘは、配列番号９、１０、１１、１２、１３、１４、１５からなる群から選択されるアミノ酸配列の（環状）順列またはこれら（環状）順序変え配列の多重体からなる配列の多重体を含むことができる。
【０２１８】
さらに別の実施形態において、式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘは、配列番号９、１０、１２、１３、１４、１５からなる群から選択されるアミノ酸配列のペプチド断片／部分またはこれら例示のポリマーカセットの多重体からなる多重体を含むことができる。
【０２１９】
式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘの形成に用いられるこれら配列のペプチド断片は、前記配列番号９、１０、１１、１２、１３および１４からなる群から選択されるアミノ酸配列の少なくとも３、好ましくは少なくとも４、より好ましくは少なくとも５、さらにより好ましくは少なくとも６、さらにより好ましくは少なくとも８、特に好ましくは少なくとも１０、より特に好ましくは少なくとも１２、さらにより特に好ましくは少なくとも１４、好ましくは少なくとも６、さらにより好ましくは少なくとも８、特に好ましくは少なくとも１０、より特に好ましくは少なくとも１２、さらにより特に好ましくは少なくとも１４、さらにより特に好ましくは少なくとも１６、最も好ましくは少なくとも１８連続アミノ酸からなるものであることができる。
【０２２０】
例えば、上記で確認された分布全体についての規則ならびにアラニン、セリンおよびプロリンの量が尊重される限りにおいて、本発明のポリマーカセットの個々のペプチド断片を、別の個々のポリマーカセットと組み合わせることができる。やはり、これらのポリマーカセットは、さらなるアミノ酸残基を含むこともできるが、微小もしくは少量構成要素としてのみ、すなわち個々のポリマーカセットの最大で１０％、好ましくは最大で２％である。ポリマーカセットを含む式（Ｖ）部分のＰＯＬｘは、本発明の１実施形態において、少なくとも約１００アミノ酸残基からなる。個々のポリマーカセットを組み合わせて、より長いランダムコイル形成アミノ酸ポリマーを形成することができ、それによって式（Ｖ）のポリペプチド部分ＰＯＬｘの最大長は約３０００アミノ酸である。
【０２２１】
好ましくは、式（Ｖ）のＰＯＬｘは、特には永久的連結により、より好ましくは永久的アミド連結によって、式（Ｖ）のＨｙｐ１およびＨｙｐ２に共有結合的に連結されている。
【０２２２】
本発明のキャリア連結トレプロスチニルプロドラッグにおいて、式（Ｖ）のＨｙｐ１およびＨｙｐ２の官能基が式（Ｉ）の部分Ｘ０に連結されている。
【０２２３】
式（Ｖ）の超分岐部分Ｈｙｐ１およびＨｙｐ２はそれぞれ独立に、結合型で、グリセロール、ペンタエリスリトール、ジペンタエリスリトール、トリペンタエリスリトール、ヘキサグリセリン、ショ糖、ソルビトール、果糖、マンニトール、グルコース、セルロース、アミロース類、デンプン類、ヒドロキシアルキルデンプン類、ポリビニルアルコール類、デキストラン類、ヒアルロナン類、ジリジン、トリリジン、テトラリジン、ペンタリジン、ヘキサリジン、ヘプタリジン、オクタリジン、ノナリジン、デカリジン、ウンデカリジン、ドデカリジン、トリデカリジン、テトラデカリジン、ペンタデカリジン、ヘキサデカリジン、ヘプタデカリジン、オクタデカリジン、ノナデカリジン、トリオルニチン、テトラオルニチン、ペンタオルニチン、ヘキサオルニチン、ヘプタオルニチン、オクタオルニチン、ノナオルニチン、デカオルニチン、ウンデカオルニチン、ドデカオルニチン、トリデカオルニチン、テトラデカオルニチン、ペンタデカオルニチン、ヘキサデカオルニチン、ヘプタデカオルニチン、オクタデカオルニチン、ノナデカオルニチン、トリジアミノ酪酸、テトラジアミノ酪酸、ペンタジアミノ酪酸、ヘキサジアミノ酪酸、ヘプタジアミノ酪酸、オクタジアミノ酪酸、ノナジアミノ酪酸、デカジアミノ酪酸、ウンデカジアミノ酪酸、ドデカジアミノ酪酸、トリデカジアミノ酪酸、テトラデカジアミノ酪酸、ペンタデカジアミノ酪酸、ヘキサデカジアミノ酪酸、ヘプタデカジアミノ酪酸、オクタデカジアミノ酪酸、ノナデカジアミノ酪酸、ジ（グルタミン酸）、トリ（グルタミン酸）、テトラ（グルタミン酸）、ペンタ（グルタミン酸）、ヘキサ（グルタミン酸）、ヘプタ（グルタミン酸）、オクタ（グルタミン酸）、ノナ（グルタミン酸）、デカ（グルタミン酸）、ウンデカ（グルタミン酸）、ドデカ（グルタミン酸）、トリデカ（グルタミン酸）、テトラデカ（グルタミン酸）、ペンタデカ（グルタミン酸）、ヘキサデカ（グルタミン酸）、ヘプタデカ（グルタミン酸）、オクタデカ（グルタミン酸）、ノナデカ（グルタミン酸）、ジ（アスパラギン酸）、トリ（アスパラギン酸）、テトラ（アスパラギン酸）、ペンタ（アスパラギン酸）、ヘキサ（アスパラギン酸）、ヘプタ（アスパラギン酸）、オクタ（アスパラギン酸）、ノナ（アスパラギン酸）、デカ（アスパラギン酸）、ウンデカ（アスパラギン酸）、ドデカ（アスパラギン酸）、トリデカ（アスパラギン酸）、テトラデカ（アスパラギン酸）、ペンタデカ（アスパラギン酸）、ヘキサデカ（アスパラギン酸）、ヘプタデカ（アスパラギン酸）、オクタデカ（アスパラギン酸）、ノナデカ（アスパラギン酸）、ポリエチレンイミン類、および低分子量ＰＥＩを含む、特にはそれらからなる群から選択される。
【０２２４】
好ましい実施形態において、式（Ｖ）の超分岐部分Ｈｙｐ１およびＨｙｐ２はそれぞれ独立に、結合型で、ジリジン、トリリジン、テトラリジン、ペンタリジン、ヘキサリジン、ヘプタリジン、オクタリジン、ノナリジン、デカリジン、ウンデカリジン、ドデカリジン、トリデカリジン、テトラデカリジン、ペンタデカリジン、ヘキサデカリジン、ヘプタデカリジン、オクタデカリジン、ノナデカリジン、トリオルニチン、テトラオルニチン、ペンタオルニチン、ヘキサオルニチン、ヘプタオルニチン、オクタオルニチン、ノナオルニチン、デカオルニチン、ウンデカオルニチン、ドデカオルニチン、トリデカオルニチン、テトラデカオルニチン、ペンタデカオルニチン、ヘキサデカオルニチン、ヘプタデカオルニチン、オクタデカオルニチン、ノナデカオルニチン、トリジアミノ酪酸、テトラジアミノ酪酸、ペンタジアミノ酪酸、ヘキサジアミノ酪酸、ヘプタジアミノ酪酸、オクタジアミノ酪酸、ノナジアミノ酪酸、デカジアミノ酪酸、ウンデカジアミノ酪酸、ドデカジアミノ酪酸、トリデカジアミノ酪酸、テトラデカジアミノ酪酸、ペンタデカジアミノ酪酸、ヘキサデカジアミノ酪酸、ヘプタデカジアミノ酪酸、オクタデカジアミノ酪酸、ノナデカジアミノ酪酸、ジ（グルタミン酸）、トリ（グルタミン酸）、テトラ（グルタミン酸）、ペンタ（グルタミン酸）、ヘキサ（グルタミン酸）、ヘプタ（グルタミン酸）、オクタ（グルタミン酸）、ノナ（グルタミン酸）、デカ（グルタミン酸）、ウンデカ（グルタミン酸）、ドデカ（グルタミン酸）、トリデカ（グルタミン酸）、テトラデカ（グルタミン酸）、ペンタデカ（グルタミン酸）、ヘキサデカ（グルタミン酸）、ヘプタデカ（グルタミン酸）、オクタデカ（グルタミン酸）、ノナデカ（グルタミン酸）、ジ（アスパラギン酸）、トリ（アスパラギン酸）、テトラ（アスパラギン酸）、ペンタ（アスパラギン酸）、ヘキサ（アスパラギン酸）、ヘプタ（アスパラギン酸）、オクタ（アスパラギン酸）、ノナ（アスパラギン酸）、デカ（アスパラギン酸）、ウンデカ（アスパラギン酸）、ドデカ（アスパラギン酸）、トリデカ（アスパラギン酸）、テトラデカ（アスパラギン酸）、ペンタデカ（アスパラギン酸）、ヘキサデカ（アスパラギン酸）、ヘプタデカ（アスパラギン酸）、オクタデカ（アスパラギン酸）、ノナデカ（アスパラギン酸）、ポリエチレンイミン類、および低分子量ＰＥＩを含む群、特にはそれらからなる群から選択される。
【０２２５】
より好ましくは、式（Ｖ）の超分岐部分Ｈｙｐ１およびＨｙｐ２は独立に、結合型でトリリジン、テトラリジン、ペンタリジン、ヘキサリジン、ヘプタリジン、オクタリジン、ノナリジン、デカリジン、ウンデカリジン、ドデカリジン、トリデカリジン、テトラデカリジン、ペンタデカリジン、ヘキサデカリジン、およびヘプタデカリジンを含む群、より好ましくはそれらからなる群から選択され、さらにより好ましくはＨｙｐ１およびＨｙｐ２は独立に、結合型で、トリリジン、ヘプタリジンまたはペンタデカリジンを含む、好ましくはそれらからなる群から選択される。
【０２２６】
より好ましくは、式（Ｖ）のＨｙｐ１およびＨｙｐ２は独立に、下記構造のいずれかから選択される。
【化１１】
2014522878.tif 000015
【０２２７】
2014522878.tif 000016
【０２２８】
2014522878.tif 000017
【０２２９】
式中、
星印でマークを付けた点線は、式（Ｖ）のＰＯＬｘへの結合を示し、
マークのない点線はＸ０への結合を示し、
ｑｘは０から１５、好ましくは３から７、さらにより好ましくは６の整数である。
【０２３０】
好ましくは、式（Ｖ）のＨｙｐ１およびＨｙｐ２はそれぞれ、ヘプタリジニル基であり、特には式（Ｖ）のＨｙｐ１およびＨｙｐ２はそれぞれ、上記式（ｉｉ−ｘ）の構造を有する。
【０２３１】
好ましくは、式（Ｖ）のＨｙｐ１およびＨｙｐ２は同じ構造を有する。
【０２３２】
式（Ｖ）のＨｙｐ１およびＨｙｐ２の官能基は、式（Ｖ）のＨｙｐ１およびＨｙｐ２のＸ０への直接連結のための結合箇所としての役割を果たす。Ｘ０に結合していない残りの官能基は、互いに独立に好適なキャッピング試薬でキャッピングすることができるか、特に永久的連結を介して少なくとも一つのターゲティング部分に連結されていてもよい。
【０２３３】
従って、本発明の水溶性キャリア連結プロドラッグにおいて、式（Ｖ）のハイパーリンク部分Ｈｙｐ１およびＨｙｐ２は、式（Ｖ）のＰＯＬｘに連結されており、式（Ｖ）のＨｙｐ１およびＨｙｐ２の官能基は式（Ｉ）のＸ０、永久的連結、ターゲティング部分および／またはキャッピング基に連結されている。
【０２３４】
好ましい実施形態において、式（Ｖ）の超分岐部分Ｈｙｐ１およびＨｙｐ２の全ての官能基が式（Ｉ）のＸ０に連結されている。
【０２３５】
好ましくは、式（Ｖ）の超分岐部分Ｈｙｐ１およびＨｙｐ２は独立に、０．１ｋＤａから４ｋＤａ、より好ましくは０．４ｋＤａから２ｋＤａの範囲の分子量を有する。好ましくは、式（Ｖ）の超分岐部分Ｈｙｐ１およびＨｙｐ２はそれぞれ独立に少なくとも３個の分岐を有し、それぞれ独立に、少なくとも４個のＸ０、永久的連結および／またはキャッピング基に接合しており、それぞれ独立に最大で６３個の分岐を有し、それぞれ独立に最大で６４個のＸ０、永久的連結および／またはキャッピング基に接合している。式（Ｖ）の超分岐部分Ｈｙｐ１およびＨｙｐ２がそれぞれ独立に少なくとも７個の分岐を有し、それぞれ独立に、少なくとも８個のＸ０、永久的連結および／またはキャッピング基に接合しており、それぞれ独立に最大で３１個の分岐を有し、それぞれ独立に最大で３２個のＸ０、永久的連結および／またはキャッピング基に接合していることが好ましい。
【０２３６】
好ましくは、式（Ｖ）の超分岐部分Ｈｙｐ１およびＨｙｐ２はそれぞれ独立に、超分岐ポリペプチドである。好ましくは、そのような超分岐ポリペプチドは、結合型でのリジンを含む。好ましくは、式（Ｖ）の各超分岐部分Ｈｙｐ１およびＨｙｐ２は独立に、０．１ｋＤａから４ｋＤａ、特には０．４ｋＤａから２ｋＤａの範囲の分子量を有する。
【０２３７】
好ましくは、ｍｘは０であり、式（Ｖ）のＰＯＬ−Ｈｙｐ２−は、下記の構造から選択される。
【化１２】
2014522878.tif 000018
【０２３８】
2014522878.tif 000019
【０２３９】
式中、
点線はＸ０への結合を示し、ただしｍ１、ｍ２のうちの一つが１であり、ｍ１、ｍ２＝０の場合には前記キャリアはＴに共有結合的に結合しており、
ｐｘは、５から２０００、好ましくは１０から１０００、特には１００から１０００の整数であり、
ｑｘは、０から１５、好ましくは３から７の整数であり、より好ましくはｑｘは６である。
【０２４０】
別の好ましい実施形態において、式（Ｉ）のＺ１は、下記式（ＶＩ）の構造を有する。
【化１３】
2014522878.tif 000020
【０２４１】
式中、
Ｂは分岐核であり、
各Ａは独立に、ポリ（エチレングリコール）系ポリマー鎖であり、
各Ｈｙｐｙは独立に分岐部分であり、
ｎは３から３２の整数である。
【０２４２】
好ましい実施形態において、式（ＶＩ）の分岐核Ｂは、
−少なくとも２個のヒドロキシル基を含む多価アルコール（好ましくは、官能基をさらに含み、それは好ましくは別のアミノ基もしくはカルボン酸基、より好ましくは別のカルボン酸基である）
（好ましくはＢは、グリセロール、ペンタエリスリトール、ジペンタエリスリトール、トリペンタエリスリトール、ヘキサグリセリン、ショ糖、ソルビトール、果糖、マンニトール、グルコース、セルロース、アミロース類、デンプン類、ヒドロキシアルキルデンプン類、ポリビニルアルコール類、デキストラン類およびヒアルロナン類から選択される。）
または
−少なくとも２個のアミン基を含むポリアミン（好ましくは、さらに官能基を含み、それは好ましくは別のヒドロキシル基またはカルボン酸基、より好ましくはカルボン酸基である）
（好ましくは、オルニチン、ジオルニチン、トリオルニチン、テトラオルニチン、ペンタオルニチン、ヘキサオルニチン、ヘプタオルニチン、オクタオルニチン、ノナオルニチン、デカオルニチン、ウンデカオルニチン、ドデカオルニチン、トリデカオルニチン、テトラデカオルニチン、ペンタデカオルニチン、ヘキサデカオルニチン、ヘプタデカオルニチン、オクタデカオルニチン、ノナデカオルニチン、ジアミノ酪酸、ジ（ジアミノ酪酸）、トリ（ジアミノ酪酸）、テトラ（ジアミノ酪酸）、ペンタ（ジアミノ酪酸）、ヘキサ（ジアミノ酪酸）、ヘプタ（ジアミノ酪酸）、オクタ（ジアミノ酪酸）、ノナ（ジアミノ酪酸）、デカ（ジアミノ酪酸）、ウンデカ（ジアミノ酪酸）、ドデカ（ジアミノ酪酸）、トリデカ（ジアミノ酪酸）、テトラデカ（ジアミノ酪酸）、ペンタデカ（ジアミノ酪酸）、ヘキサデカ（ジアミノ酪酸）、ヘプタデカ（ジアミノ酪酸）、オクタデカ（ジアミノ酪酸）、ノナデカ（ジアミノ酪酸）、リジン、ジリジン、トリリジン、テトラリジン、ペンタリジン、ヘキサリジン、ヘプタリジン、オクタリジン、ノナリジン、デカリジン、ウンデカリジン、ドデカリジン、トリデカリジン、テトラデカリジン、ペンタデカリジン、ヘキサデカリジン、ヘプタデカリジン、オクタデカリジン、ノナデカリジン、オリゴリジン類、ポリエチレンイミン類およびポリビニルアミン類から選択される）
から選択される部分を含み、好ましくはそれらからなり、
前記多価アルコールまたはポリアミンは結合型のものである。
【０２４３】
好ましい実施形態において、式（ＶＩ）の分岐核Ｂは、ペンタエリスリトールを含み、好ましくはそれからなる。
【０２４４】
好ましくは、式（ＶＩ）の分岐核Ｂに連結されたポリ（エチレングリコール）系ポリマー鎖Ａは直鎖ＰＥＧ鎖からなり、それの一方の末端は式（ＶＩ）のＢに連結されており、他方の末端は式（ＶＩ）のＨｙｐｙに連結されている。式（ＶＩ）のＰＥＧ系鎖Ａは、分岐ＰＥＧ鎖の場合にはアルキル基もしくはアリール基によって終結していても良く、および／または分岐もしくは直鎖ＰＥＧ鎖の場合はそれによって中断されていても良く、ヘテロ原子および／または官能基によって置換されていてもよいことは明らかである。
【０２４５】
式（ＶＩ）の分岐核Ｂから伸長する式（ＶＩ）の各下位構造Ａ−Ｈｙｐｙは、互いに独立に、同一もしくは異なる下位構造Ａ−Ｈｙｐｙであることができる。ある好ましい実施形態において、式（ＶＩ）の全ての下位構造Ａ−Ｈｙｐｙが同一である。
【０２４６】
式（ＶＩ）の各Ａおよび各Ｈｙｐｙは独立に、他の部分ＡおよびＨｙｐｙから選択されてもよい。好ましくは、式（ＶＩ）のＢに連結された全ての下位構造Ａ−Ｈｙｐｙは同一構造を有する。
【０２４７】
好ましくは、式（ＶＩ）のＰＥＧ系ポリマー鎖Ａは、永久的連結を介してＢに連結されている。
【０２４８】
式（ＶＩ）におけるｎは３から３２の整数である。好ましくは、ｎは３から１６の整数であり、より好ましくはｎは４から８の整数であり、最も好ましくはｎは４である。
【０２４９】
好ましい実施形態において、式（ＶＩ）のｎは４であり、ｍは２である。
【０２５０】
１実施形態において、式（ＶＩ）のＰＥＧ系ポリマー鎖Ａは、直鎖もしくは分岐のＰＥＧ系ポリマー鎖から選択される。好ましくは、Ａは直鎖ＰＥＧ系ポリマー鎖である。
【０２５１】
好ましくは、式（ＶＩ）の各Ａは独立に、下記式から選択される。
【化１４】
2014522878.tif 000021
【０２５２】
式中、
ｎ１およびｎ２は独立に、１、２、３および４から、好ましくは１、２および３から選択され；
ｐは５から２０００の範囲の整数であり、好ましくはｐは１０から１０００の範囲の整数であり、より好ましくはｐは１００から１０００の範囲の整数であり；
Ｘ３およびＸ２は独立に、それぞれＢまたはＨｙｐｙに共有結合的に連結されている官能基である。
【０２５３】
好ましくは、式（ＶＩ）の部分Ａと部分Ｈｙｐｙとの間の連結は、永久的連結であり、より好ましくはアミン基、アミド基、カーバメート基、チオエーテル基、エーテル基から選択される群を含む、特にはそれらからなる連結基を含む永久的連結であり、最も好ましくは式（ＶＩ）の部分Ａと部分Ｈｙｐｙとの間の永久的連結はアミド連結である。
【０２５４】
好ましい実施形態において、式（ＶＩ）の下位構造Ｂ−（Ａ）ｎは、例えばＪｅｎＫｅｍ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、ＵＳＡの製品リスト（２０１１年３月８日にｈｔｔｐ：／／ｊｅｎｋｅｍｕｓａ．ｎｅｔ／ｐｅｇｐｒｏｄｕｃｔｓ２．ａｓｐｘ  ｏｎ  Ｍａｒｃｈ  ８からのダウンロードによってアクセス）に詳細に記載されている多分岐ＰＥＧ誘導体であり、例えば、特にはペンタエリスリトール核を含む４分岐ＰＥＧ誘導体、ヘキサグリセリン核を含む８分岐ＰＥＧ誘導体、およびトリペンタエリスリトール核を含む８分岐ＰＥＧ誘導体である。最も好ましいものは、下記のものから選択される部分を含む、特にはそれらからなる式（ＶＩ）の下位構造Ｂ−（Ａ）ｎである。
【０２５５】
それぞれ結合型での、ペンタエリスリトール核を含む４分岐ＰＥＧアミン：
【化１５】
2014522878.tif 000022
【０２５６】
（ｎは４００から２０００の範囲である）；
ペンタエリスリトール核を含む４分岐ＰＥＧカルボキシル：
【化１６】
2014522878.tif 000023
【０２５７】
（ｎは４００から２０００の範囲である）；
ヘキサグリセリン核を含む８分岐ＰＥＧアミン：
【化１７】
2014522878.tif 000024
【０２５８】
（ｎは４００から２０００の範囲であり；
Ｒ＝ヘキサグリセリン核構造である）；
ヘキサグリセリン核を含む８分岐ＰＥＧカルボキシル：
【化１８】
2014522878.tif 000025
【０２５９】
（ｎは４００から２０００の範囲であり；
Ｒ＝ヘキサグリセリン核構造である）；
トリペンタエリスリトール核を含む８分岐ＰＥＧアミン：
【化１９】
2014522878.tif 000026
【０２６０】
（ｎは４００から２０００の範囲であり；
Ｒ＝トリペンタエリスリトール核構造である）；
およびトリペンタエリスリトール核を含む８分岐ＰＥＧカルボキシル：
【化２０】
2014522878.tif 000027
【０２６１】
（ｎは４００から２０００の範囲であり；
Ｒ＝トリペンタエリスリトール核構造である）。
【０２６２】
好ましい実施形態において、式（ＶＩ）の下位構造Ｂ−（Ａ）ｎの分子量は、１ｋＤａから８０ｋＤａ、より好ましくは１ｋＤａから４０ｋＤａ、さらにより好ましくは１０ｋＤａから４０ｋＤａの範囲である。末端アミン基またはカルボキシル基はそれぞれ、式（ＶＩ）の部分Ｈｙｐｙへの接合に用いられることは明らかである。
【０２６３】
式（ＶＩ）の部分Ｈｙｐｙの官能基は、式（Ｉ）の部分Ｘ０に連結されている。
【０２６４】
好ましい実施形態において、式（ＶＩ）の部分Ｈｙｐｙは、アミド基、カーバメート基、エステル基、エーテル基、アミン基、チオエーテル基から選択される官能基を介して式（Ｉ）の部分Ｘ０に連結されている。好ましくは、式（ＶＩ）の部分Ｈｙｐｙは、アミド基、チオエーテル基および／またはエーテル基を介して、さらにより好ましくはアミド基を介して式（Ｉ）の部分Ｘ０に連結されている。
【０２６５】
適宜に、式（Ｉ）の部分Ｘ０に連結されていない式（ＶＩ）の部分Ｈｙｐｙの官能基は、好適なキャッピング試薬によってキャッピングされていても良く、および／または特には永久的連結を介して少なくとも一つのターゲティング部分に連結されていてもよい。従って、式（ＶＩ）の部分Ｈｙｐｙは、式（Ｉ）の部分Ｘ０、キャッピング部分および／またはターゲティング部分に連結していてもよい。好ましくは、式（ＶＩ）の部分Ｈｙｐｙの官能基は、式（Ｉ）の部分Ｘ０に連結されており、キャッピング部分および／またはターゲティング部分には連結されていない。ターゲティング部分が存在する場合、それは直接またはスペーサー部分を介して間接に式（ＶＩ）の部分Ｈｙｐｙに接合されていることができる。
【０２６６】
好適なキャッピング部分の例は、直鎖、分岐もしくは環状Ｃ１−８アルキル基である。
【０２６７】
１実施形態において、式（ＶＩ）の各分岐部分Ｈｙｐｙは、少なくとも２個の式（Ｉ）の部分Ｘ０に直接または間接に連結されている。より好ましくは、式（ＶＩ）の各分岐部分Ｈｙｐｙは、少なくとも３個の式（Ｉ）の部分Ｘ０に直接または間接に連結されている。最も好ましくは、式（ＶＩ）の各分岐部分Ｈｙｐｙは、少なくとも４個の式（Ｉ）の部分Ｘ０に直接または間接に連結されている。
【０２６８】
式（ＶＩ）の分岐部分Ｈｙｐｙは、
−少なくとも２個のヒドロキシル基を含む結合型での多価アルコール（好ましくは、官能基をさらに含み、それは好ましくは別のヒドロキシル基もしくはカルボン酸基、より好ましくは別のヒドロキシル基である）
（好ましくは、グリセロール、ペンタエリスリトール、ジペンタエリスリトール、トリペンタエリスリトール、ヘキサグリセリン、ショ糖、ソルビトール、果糖、マンニトール、グルコース、セルロース、アミロース類、デンプン類、ヒドロキシアルキルデンプン類、ポリビニルアルコール類、デキストラン類およびヒアルロナン類から選択される。）
または
−少なくとも２個のアミン基を含む結合型のポリアミン（好ましくは、さらに官能基を含み、それは好ましくは別のアミン基またはカルボン酸基、より好ましくはカルボン酸基である）
（好ましくは、オルニチン、ジオルニチン、トリオルニチン、テトラオルニチン、ペンタオルニチン、ヘキサオルニチン、ヘプタオルニチン、オクタオルニチン、ノナオルニチン、デカオルニチン、ウンデカオルニチン、ドデカオルニチン、トリデカオルニチン、テトラデカオルニチン、ペンタデカオルニチン、ヘキサデカオルニチン、ヘプタデカオルニチン、オクタデカオルニチン、ノナデカオルニチン、ジアミノ酪酸、ジ（ジアミノ酪酸）、トリ（ジアミノ酪酸）、テトラ（ジアミノ酪酸）、ペンタ（ジアミノ酪酸）、ヘキサ（ジアミノ酪酸）、ヘプタ（ジアミノ酪酸）、オクタ（ジアミノ酪酸）、ノナ（ジアミノ酪酸）、デカ（ジアミノ酪酸）、ウンデカ（ジアミノ酪酸）、ドデカ（ジアミノ酪酸）、トリデカ（ジアミノ酪酸）、テトラデカ（ジアミノ酪酸）、ペンタデカ（ジアミノ酪酸）、ヘキサデカ（ジアミノ酪酸）、ヘプタデカ（ジアミノ酪酸）、オクタデカ（ジアミノ酪酸）、ノナデカ（ジアミノ酪酸）、リジン、ジリジン、トリリジン、テトラリジン、ペンタリジン、ヘキサリジン、ヘプタリジン、オクタリジン、ノナリジン、デカリジン、ウンデカリジン、ドデカリジン、トリデカリジン、テトラデカリジン、ペンタデカリジン、ヘキサデカリジン、ヘプタデカリジン、オクタデカリジン、ノナデカリジン、オリゴリジン類、トリオルニチン、テトラオルニチン、ペンタオルニチン、ヘキサオルニチン、ヘプタオルニチン、オクタオルニチン、ノナオルニチン、デカオルニチン、ウンデカオルニチン、ドデカオルニチン、トリデカオルニチン、テトラデカオルニチン、ペンタデカオルニチン、ヘキサデカオルニチン、ヘプタデカオルニチン、オクタデカオルニチン、ノナデカオルニチン、トリジアミノ酪酸、テトラジアミノ酪酸、ペンタジアミノ酪酸、ヘキサジアミノ酪酸、ヘプタジアミノ酪酸、オクタジアミノ酪酸、ノナジアミノ酪酸、デカジアミノ酪酸、ウンデカジアミノ酪酸、ドデカジアミノ酪酸、トリデカジアミノ酪酸、テトラデカジアミノ酪酸、ペンタデカジアミノ酪酸、ヘキサデカジアミノ酪酸、ヘプタデカジアミノ酪酸、オクタデカジアミノ酪酸、ノナデカジアミノ酪酸から選択される）、
−または、少なくとも２個のカルボキシレート基（好ましくはさらに官能基を含み、それは好ましくは別のアミノ基またはカルボン酸基、より好ましくは別のカルボン酸基である）を含む結合型でのポリカルボキシレート
（好ましくは、ジ（グルタミン酸）、トリ（グルタミン酸）、テトラ（グルタミン酸）、ペンタ（グルタミン酸）、ヘキサ（グルタミン酸）、ヘプタ（グルタミン酸）、オクタ（グルタミン酸）、ノナ（グルタミン酸）、デカ（グルタミン酸）、ウンデカ（グルタミン酸）、ドデカ（グルタミン酸）、トリデカ（グルタミン酸）、テトラデカ（グルタミン酸）、ペンタデカ（グルタミン酸）、ヘキサデカ（グルタミン酸）、ヘプタデカ（グルタミン酸）、オクタデカ（グルタミン酸）、ノナデカ（グルタミン酸）、ジ（アスパラギン酸）、トリ（アスパラギン酸）、テトラ（アスパラギン酸）、ペンタ（アスパラギン酸）、ヘキサ（アスパラギン酸）、ヘプタ（アスパラギン酸）、オクタ（アスパラギン酸）、ノナ（アスパラギン酸）、デカ（アスパラギン酸）、ウンデカ（アスパラギン酸）、ドデカ（アスパラギン酸）、トリデカ（アスパラギン酸）、テトラデカ（アスパラギン酸）、ペンタデカ（アスパラギン酸）、ヘキサデカ（アスパラギン酸）、ヘプタデカ（アスパラギン酸）、オクタデカ（アスパラギン酸）、ノナデカ（アスパラギン酸）、ポリエチレンイミン類およびポリビニルアミン類から選択される）
から選択される結合型での部分を含み、好ましくはそれらからなる。
【０２６９】
好ましい実施形態において、式（ＶＩ）の部分Ｈｙｐｙは、結合型でのジリジン、トリリジン、テトラリジン、ペンタリジン、ヘキサリジン、ヘプタリジン、オクタリジン、ノナリジン、デカリジン、ウンデカリジン、ドデカリジン、トリデカリジン、テトラデカリジン、ペンタデカリジン、ヘキサデカリジン、ヘプタデカリジン、オクタデカリジン、ノナデカリジン、トリオルニチン、テトラオルニチン、ペンタオルニチン、ヘキサオルニチン、ヘプタオルニチン、オクタオルニチン、ノナオルニチン、デカオルニチン、ウンデカオルニチン、ドデカオルニチン、トリデカオルニチン、テトラデカオルニチン、ペンタデカオルニチン、ヘキサデカオルニチン、ヘプタデカオルニチン、オクタデカオルニチン、ノナデカオルニチン、トリジアミノ酪酸、テトラジアミノ酪酸、ペンタジアミノ酪酸、ヘキサジアミノ酪酸、ヘプタジアミノ酪酸、オクタジアミノ酪酸、ノナジアミノ酪酸、デカジアミノ酪酸、ウンデカジアミノ酪酸、ドデカジアミノ酪酸、トリデカジアミノ酪酸、テトラデカジアミノ酪酸、ペンタデカジアミノ酪酸、ヘキサデカジアミノ酪酸、ヘプタデカジアミノ酪酸、オクタデカジアミノ酪酸、ノナデカジアミノ酪酸、ジ（グルタミン酸）、トリ（グルタミン酸）、テトラ（グルタミン酸）、ペンタ（グルタミン酸）、ヘキサ（グルタミン酸）、ヘプタ（グルタミン酸）、オクタ（グルタミン酸）、ノナ（グルタミン酸）、デカ（グルタミン酸）、ウンデカ（グルタミン酸）、ドデカ（グルタミン酸）、トリデカ（グルタミン酸）、テトラデカ（グルタミン酸）、ペンタデカ（グルタミン酸）、ヘキサデカ（グルタミン酸）、ヘプタデカ（グルタミン酸）、オクタデカ（グルタミン酸）、ノナデカ（グルタミン酸）、ジ（アスパラギン酸）、トリ（アスパラギン酸）、テトラ（アスパラギン酸）、ペンタ（アスパラギン酸）、ヘキサ（アスパラギン酸）、ヘプタ（アスパラギン酸）、オクタ（アスパラギン酸）、ノナ（アスパラギン酸）、デカ（アスパラギン酸）、ウンデカ（アスパラギン酸）、ドデカ（アスパラギン酸）、トリデカ（アスパラギン酸）、テトラデカ（アスパラギン酸）、ペンタデカ（アスパラギン酸）、ヘキサデカ（アスパラギン酸）、ヘプタデカ（アスパラギン酸）、オクタデカ（アスパラギン酸）、ノナデカ（アスパラギン酸）、ポリエチレンイミン類および低分子量ＰＥＩを含む、特にはそれらからなる群から選択される。
【０２７０】
より好ましくは、式（ＶＩ）の部分Ｈｙｐｙは、結合型で、トリリジン、テトラリジン、ペンタリジン、ヘキサリジン、ヘプタリジン、オクタリジン、ノナリジン、デカリジン、ウンデカリジン、ドデカリジン、トリデカリジン、テトラデカリジン、ペンタデカリジン、ヘキサデカリジンおよびヘプタデカリジンを含む、特にはそれらからなる群から選択され、さらにより好ましくは式（ＶＩ）の部分Ｈｙｐｙは、好ましくは結合型で、トリリジン、ヘプタリジンまたはペンタデカリジンを含み、好ましくはそれらからなる。
【０２７１】
好ましい実施形態において、式（ＶＩ）の部分Ｈｙｐｙは、０．１ｋＤａから４ｋＤａ、より好ましくは０．２ｋＤａから２ｋＤａの範囲の分子量を有する。
【０２７２】
別の好ましい実施形態において、式（ＶＩ）の各分岐部分Ｈｙｐｙは、少なくとも一つの分岐を有し、少なくとも２個の式（Ｉ）の部分Ｘ０に接合しており、最大で６３個の分岐を有し、最大で６４個の式（Ｉ）の部分Ｘ０に接合しており、より好ましくは式（ＶＩ）の各分岐部分Ｈｙｐｙは、少なくとも１個の分岐を有し、少なくとも２個の式（Ｉ）の部分Ｘ０に接合しており、最大で３１個の分岐を有し、最大で３２個の式（Ｉ）の部分Ｘ０に接合している。
【０２７３】
好ましい実施形態において、式（ＶＩ）のＺ１は、四級炭素、特には分岐核部分Ｂの四級炭素を含み、式（ＶＩ）のＢは結合型でのペンタエリスリトールである。好ましくは、式（ＶＩ）の各Ａは独立に、永久的共有結合連結による分岐核部分ペンタエリスリトールの−ＣＨ２−Ｏ−部分を介してペンタエリスリトールの四級炭素に末端で結合しているＰＥＧ系ポリマー鎖であり、ＰＥＧ系ポリマー鎖の遠位末端は共有結合的に式（ＶＩ）の分岐部分Ｈｙｐｙに結合しており、式（ＶＩ）の各分岐部分Ｈｙｐｙは、式（Ｉ）の部分Ｘ０に接合している。
【０２７４】
ある好ましい実施形態において、式（ＶＩ）の分岐部分Ｈｙｐｙは、少なくとも２個のアミン基を含む分岐ポリアミン類を含み、好ましくはそれらからなる。好ましくは、少なくとも２個のアミン基を含む分岐ポリアミンは、結合型で１以上のリジン残基を含む。好ましくは、式（ＶＩ）の各分岐部分Ｈｙｐｙは、０．１ｋＤａから４ｋＤａ、特には０．２から２ｋＤａのの範囲の分子量を有する。好ましい実施形態において、式（ＶＩ）の部分：
【化２１】
2014522878.tif 000028
【０２７５】
（式中、ｎ＝４である）は、同一もしくは異なる分岐部分Ｈｙｐｙからなり、各部分Ｈｙｐｙは独立に選択することができる。好ましい実施形態において、式（ＶＩ）の全ての部分Ｈｙｐyが同一である。
【０２７６】
好ましい実施形態において、式（ＶＩ）の部分Ｈｙｐｙは、結合型で１から３２個のリジンを含み、特にはそれらからなり、好ましくは結合型で１、３、７もしくは１５個のリジンからなり、より好ましくは結合型で１、３もしくは７個のリジンからなる。最も好ましくは、式（ＶＩ）のＨｙｐｙは、ヘプタリジニルを含み、特にはそれからなる。
【０２７７】
好ましくは、式（ＶＩ）の部分：
【化２２】
2014522878.tif 000029
【０２７８】
（ｎは好ましくは４である）は、１ｋＤａから１６０ｋＤａ、より好ましくは１ｋＤａから８０ｋＤａ、さらにより好ましくは１０ｋＤａから４０ｋＤａの範囲の分子量を有する。
【０２７９】
式（ＶＩ）の好ましい部分：
【化２３】
2014522878.tif 000030
【０２８０】
は、下記の構造（ｉ−ｙ）から（ｉｉｉ−ｙ）から選択される。
【化２４】
2014522878.tif 000031
【０２８１】
2014522878.tif 000032
【０２８２】
式中、
点線は式（Ｉ）の部分Ｘ０への結合を示し、ただしｍ１、ｍ２のうちの一つが１であり、ｍ１、ｍ２＝０の場合キャリアはＴに共有結合的に結合しており、
ｐは、５から２０００、好ましくは１０から１０００、より好ましくは１０から５００、最も好ましくは１００から１０００の整数であり、
ｑは１または２である。
【０２８３】
好ましい実施形態において、式（ＶＩ）のＢはペンタエリスリトールである。
【０２８４】
別の好ましい実施形態において、式（Ｉ）のＺ１はタンパク質キャリアであり、それは少なくとも１００アミノ酸残基のアミノ酸配列を含み、特にはそれらからなる。
【０２８５】
別の好ましい実施形態において、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１は、ランダムコイル配置である。
【０２８６】
別の好ましい実施形態において、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１は、アラニン、セリンおよびプロリン残基を含み、特にはそれらからなる。
【０２８７】
好ましい実施形態において、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１は、少なくとも１００アミノ酸残基のアミノ酸配列を含み、特にはそれからなり、
前記少なくとも１００アミノ酸残基アミノ酸配列は、ランダムコイル配置であり、
前記少なくとも１００アミノ酸残基のアミノ酸配列はアラニン、セリンおよびプロリン残基を含む。
【０２８８】
好ましくは、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１は、アラニン、セリンおよびプロリン残基からなる少なくとも約１００アミノ酸残基、少なくとも１００アミノ酸残基を含むアミノ酸配列からなり、それは生理的条件でランダムコイル配置を有する。式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１が、凍結乾燥品または乾燥組成物で存在する場合は、過渡的にも一時的にもランダムコイルを形成できないことは明らかである。
【０２８９】
１実施形態において、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１は、最大で約３０００アミノ酸残基の、好ましくは最大で約１５００アミノ酸残基の、より好ましくは最大で約９００アミノ酸残基の、さらにより好ましくは最大で約７００アミノ酸残基の、特に好ましくは最大で約６００アミノ酸残基のアミノ酸配列を有するランダムコイル配置を有する。従って、ランダムコイル配置を形成するアミノ酸配列は、長さにおいて最大で約５００アミノ酸残基または最大で約４５０アミノ酸残基のものである。
【０２９０】
従って、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１、特には式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１のランダムコイル配置を形成するアミノ酸配列は、長さにおいて約１００から約３０００アミノ酸残基である。
【０２９１】
特定の実施形態において、約１００から１０００アミノ酸残基のランダムコイル配置を形成する前記アミノ酸配列は、本明細書において特性決定されている通りであり、すなわち主残基としてのアラニン、セリンおよびプロリンならびに下記で定義の固有の残基を含む。
【０２９２】
式（Ｉ）のタンパク質キャリア部分Ｚ１は、主として３種類のアミノ酸残基アラニン、セリンおよびプロリンからなり、３種類のアミノ酸全てが式（Ｉ）のタンパク質キャリア部分Ｚ１に存在し、それによりプロリン残基は、好ましくは約４％から約４０％の式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１を表す。アラニンおよびセリン残基は好ましくは、残りの少なくとも６０％から９６％の式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１を含む。しかしながら、本明細書において下記で詳細に説明するように、前記式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１は、アラニン、セリンおよびプロリンとは異なる別のアミノ酸を、すなわちマイナー構成成分として含むこともできる。
【０２９３】
本明細書で使用される「マイナー構成成分」という用語は、最大で１０％（すなわち、１００アミノ酸のうちの最大で１０）がアラニン、セリンおよびプロリンと異なり得ること、好ましくは最大で８％（すなわち、１００アミノ酸のうちの最大で８）がアラニン、セリンおよびプロリンと異なり得ること、より好ましくは最大で６％（すなわち、１００アミノ酸のうちの最大で６）がアラニン、セリンおよびプロリンと異なり得ること、さらにより好ましくは最大で５％（すなわち、１００アミノ酸のうちの最大で５）がアラニン、セリンおよびプロリンと異なり得ること、特に好ましくは最大で４％（すなわち、１００アミノ酸のうちの最大で４）がアラニン、セリンおよびプロリンと異なり得ること、より特に好ましくは最大で３％（すなわち、１００アミノ酸のうちの最大で３）がアラニン、セリンおよびプロリンと異なり得ること、さらにより特に好ましくは最大で２％（すなわち、１００アミノ酸のうちの最大で２）がアラニン、セリンおよびプロリンと異なり得ること、最も好ましくは式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１をコードする最大で１％（すなわち、最大でアミノ酸１００個のうち１個）がアラニン、セリンおよびプロリンと異なり得ることを意味する。アラニン、セリンおよびプロリンと異なる前記アミノ酸は、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、ＴｙｒおよびＶａｌからなる天然もしくはタンパク質原性アミノ酸の群から選択され得る。マイナー構成成分は、例えば、ヒドロキシプロリンまたはセレノメチオニンまたは他の変性天然アミノ酸などの非天然アミノ酸類からも選択され得る。
【０２９４】
「少なくとも約１００／１５０／２００／２５０／３００／３００／３５０（など）アミノ酸残基」という用語は、簡明な数のアミノ酸残基に限定されるものではなく、さらなる１０％から２０％の残基を含むまたは１０％から２０％未満の残基を含むアミノ酸伸長も含む。例えば、「少なくとも約１００アミノ酸残基」は、８０から１００および約１００から１２０アミノ酸残基を包含することもできる。
【０２９５】
１実施形態において、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１は複数のポリマーカセットを含み、そのポリマーカセットは、１種類、２種類もしくは３種類のＡｌａ、Ｓｅｒおよび／またはＰｒｏからなり、そのポリマーカセットの、好ましくは式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１の６以下の連続アミノ酸残基が同一であり、前記プロリン残基は前記式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１のアミノ酸の４％強および４０％未満を構成する。
【０２９６】
１実施形態において、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１は、複数のアミノ酸反復を含み、好ましくはそれからなり、
前記反復はＡｌａ、ＳｅｒおよびＰｒｏ残基からなり、
式（Ｉ）のタンパク質キャリア部分Ｚ１の６以下の連続アミノ酸残基が同一である。
【０２９７】
好ましい実施形態において、前記プロリン残基は、式（Ｉ）のタンパク質キャリア部分Ｚ１のアミノ酸の４％強および４０％未満を構成する。
【０２９８】
別の好ましい実施形態において、式（Ｉ）のタンパク質キャリア部分Ｚ１は、ランダムコイル配置を形成する約１００から３０００アミノ酸残基のアミノ酸配列を含み、特にはそれからなる。
【０２９９】
式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１は、複数の同一のポリマーカセットまたは複数の同一ではないポリマーカセットを含むことができる。Ａｌａ、Ｓｅｒおよび／またはＰｒｏ残基からなるポリマーカセットの例を本明細書において下記に提供するが、これらに限定されるものではなく、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３および配列番号１４またはこれら配列のペプチド断片もしくは多量体を参照する。ポリマーカセットは、少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０またはそれより多いアミノ酸残基からなることができ、各ポリマーカセットは、Ａｌａ、Ｓｅｒおよび／またはＰｒｏ残基、好ましくはＡｌａ、ＳｅｒおよびＰｒｏ残基を含む。
【０３００】
１実施形態において、ポリマーカセットは１００以下のアミノ酸残基を含む。好ましくは、本明細書で定義のポリマーカセットは、約４％強、好ましくは約５％強、さらにより好ましくは約６％強、特に好ましくは約８％強、より特に好ましくは約１０％強、さらにより特に好ましくは約１５％強、最も好ましくは約２０％強のプロリン残基を含む。本明細書で定義のそのようなポリマーカセットは好ましくは、約４０％未満または約３５％未満のプロリン残基を含む。
【０３０１】
ある実施形態において、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１は、下記式（ｂ）である。
【化２５】
2014522878.tif 000033
【０３０２】
この式はさらに、本明細書で定義のプロリン残基を含み、
ｘは独立に、０から６の整数から選択され、
各ｙは独立に、１から６の範囲の整数から選択され、
各ｚは独立に、１から６の範囲の整数から選択される。
【０３０３】
ｖは、タンパク質キャリアＺ１が少なくとも約１００アミノ酸残基、特には少なくとも約１００から約３０００アミノ酸残基、好ましくは約２０００、より好ましくは約１０００アミノ酸残基からなるような整数である。
【０３０４】
１実施形態において、式（ｂ）のｖ個のＡｌａｙＳｅｒｚモノマー部分の式（ｂ）のｙおよび式（ｂ）のｚが全てが同一である。別の実施形態において、式（ｂ）のｖ個のＡｌａｙＳｅｒｚモノマー部分の式（ｂ）のｙおよび式（ｂ）のｚは異なっている。
【０３０５】
好ましい実施形態において、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１は、５以下の同一連続アミノ酸残基、より好ましくは４以下の同一連続アミノ酸残基、最も好ましくは３以下の同一連続アミノ酸残基を含む。
【０３０６】
本明細書において上記で既に示したように、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１は、プロリン残基を含み、当該プロリン残基は、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１を構成するアミノ酸の約４％強、好ましくは約５％強、さらにより好ましくは約６％強、特に好ましくは約８％強、より特に好ましくは約１０％強、さらにより特に好ましくは約１５％強、最も好ましくは約２０％強を構成している。そのようなプロリン残基は、式（ｂ）におけるいかなる位置でも導入可能である。好ましくは、前記プロリン残基は、式（ｂ）のｖ個のＡｌａｙＳｅｒｚモノマーの１以上に存在することができ、それらは同一の位置または異なる位置に存在することができる。
【０３０７】
別の好ましい実施形態において、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１は、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１を構成するアミノ酸の約４％強であるが約５０％未満、好ましくは約１０％強であるが約５０％未満、最も好ましくは約２０％強であるが約５０％未満のアラニン残基を含む。
【０３０８】
さらに別の好ましい実施形態において、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１は、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１を構成するアミノ酸の約４％強で約５０％未満、好ましくは約１０％強であるが約５０％未満、最も好ましくは約２０％強であるが約５０％未満のセリン残基を含む。
【０３０９】
従って、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１は、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１を構成するアミノ酸の約３５％プロリン残基、約５０％アラニン残基および約１５％セリン残基を含む。あるいは、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１は、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１を構成するアミノ酸の約３５％プロリン残基、約１５％アラニン残基および約５０％セリン残基を含むことができる。
【０３１０】
好ましくは、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１は、下記のアラニン−セリンポリマーカセットのうちの１以上を含む。
【０３１１】
配列番号１
ＡＡＡＡＳＳＡＳＳＡＳＳＳＳＳＡＡＡＳＡ
配列番号２
ＡＡＳＡＡＡＳＳＡＡＡＳＡＡＡＡＳＡＳＳ
配列番号３
ＡＳＡＳＡＳＡＳＡＳＡＳＳＡＡＳＡＡＳＡ
配列番号４
ＳＡＡＳＳＳＡＳＳＳＳＡＡＳＳＡＳＡＡＡ
配列番号５
ＳＳＳＳＡＡＳＡＡＳＡＡＡＡＡＳＳＳＡＳ
配列番号６
ＳＳＡＳＳＳＡＡＳＳＳＡＳＳＳＳＡＳＡＡ
配列番号７
ＳＡＳＡＳＡＳＡＳＡＳＡＡＳＳＡＳＳＡＳ
配列番号８
ＡＳＳＡＡＡＳＡＡＡＡＳＳＡＡＳＡＳＳＳ
ただし、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１はさらに、本明細書に記載のプロリン残基を含む。
【０３１２】
得られるアミノ酸配列がさらに、本明細書において上記で定義のプロリン残基をさらに含む場合に、これらのアラニン−セリンポリマーカセットの多量体は、ランダムコイル配置を形成することができる。
【０３１３】
好ましい実施形態において、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１は、下記のポリマーカセットのうちの１以上を含み、このましくはこれらからなる。
【０３１４】
配列番号９
ＡＳＰＡＡＰＡＰＡＳＰＡＡＰＡＰＳＡＰＡ
配列番号１０
ＡＡＰＡＳＰＡＰＡＡＰＳＡＰＡＰＡＡＰＳ
配列番号１１
ＡＰＳＳＰＳＰＳＡＰＳＳＰＳＰＡＳＰＳＳ
配列番号１５
ＳＡＰＳＳＰＳＰＳＡＰＳＳＰＳＰＡＳＰＳ
配列番号１５は、最後のセリンが脱離し、別のセリンが開始アミノ酸として付加されている環状に順序を変えた形での本明細書で提供の配列番号１１に相当する。結果的に、この改変された配列の多量体は、最初および最後の残基を除き、非改変配列の多量体と実質的に同じ内部繰り返し単位を有する。従って、配列番号１５は、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１についての別のポリマーカセットの１例と見なすことができる。他のポリマーカセットおよび本明細書で提供されるアミノ酸ポリマーの（より短い）ペプチド断片もしくは環状に順序を変えた型も、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１のポリマーカセットとして用いることが可能であることは、当業者には明瞭である。
【０３１５】
さらに、ランダムコイル配置を形成するさらに別の例示的なアミノ酸ポリマーは、下記のものからなる群から選択され得るアミノ酸配列を含むことができる。
【０３１６】
配列番号１２
ＳＳＰＳＡＰＳＰＳＳＰＡＳＰＳＰＳＳＰＡ
配列番号１３
ＡＡＳＰＡＡＰＳＡＰＰＡＡＡＳＰＡＡＰＳＡＰＰＡ、および
配列番号１４
ＡＳＡＡＡＰＡＡＡＳＡＡＡＳＡＰＳＡＡＡ
従って、式（Ｉ）のＺ１の好ましいポリマーカセットは、下記の配列から選択される。
【０３１７】
ＡＳＰＡＡＰＡＰＡＳＰＡＡＰＡＰＳＡＰＡ（配列番号９）、
ＡＡＰＡＳＰＡＰＡＡＰＳＡＰＡＰＡＡＰＳ（配列番号１０）、
ＡＰＳＳＰＳＰＳＡＰＳＳＰＳＰＡＳＰＳＳ（配列番号１１）、
ＳＳＰＳＡＰＳＰＳＳＰＡＳＰＳＰＳＳＰＡ（配列番号１２）、
ＡＡＳＰＡＡＰＳＡＰＰＡＡＡＳＰＡＡＰＳＡＰＰＡ（配列番号１３）、および
ＡＳＡＡＡＰＡＡＡＳＡＡＡＳＡＰＳＡＡＡ（配列番号１４）、
または環状に順序を変えた型またはこれら配列の全体もしくは一部としてのこれら配列の多重体。
【０３１８】
１実施形態において、式（Ｉ）のタンパク質キャリア部分Ｚ１は、下記のものからなる群から選択される少なくとも一つのアミノ酸配列を含む。
【０３１９】
ＡＳＰＡＡＰＡＰＡＳＰＡＡＰＡＰＳＡＰＡ（配列番号９），
ＡＡＰＡＳＰＡＰＡＡＰＳＡＰＡＰＡＡＰＳ（配列番号１０），
ＡＰＳＳＰＳＰＳＡＰＳＳＰＳＰＡＳＰＳＳ（配列番号１１），
ＳＳＰＳＡＰＳＰＳＳＰＡＳＰＳＰＳＳＰＡ（配列番号１２），
ＡＡＳＰＡＡＰＳＡＰＰＡＡＡＳＰＡＡＰＳＡＰＰＡ（配列番号１３）、および
ＡＳＡＡＡＰＡＡＡＳＡＡＡＳＡＰＳＡＡＡ（配列番号１４）；
ならびに環状に順序を変えた型またはこれら配列の全体もしくは一部としてのこれら配列の多重体。
【０３２０】
やはり、これら配列および本明細書で上記で提供の配列のペプチド断片または多重体または環状に順序を変えた型も、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１におけるポリマーカセットとして用いることができる。
【０３２１】
従って、前記例示的ポリマーカセットは、新たに組み合わせてさらなるポリマーカセットを形成することができる個々のペプチド断片を提供することもできる。
【０３２２】
上記によれば、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１は、上記で本明細書において開示の配列番号９、１０、１１、１２、１３または１４を有するアミノ酸配列のいずれか一つからなる多重体を含むことができるか、複数のアミノ酸配列配列番号９、１０、１１、１２、１３および１４からなる配列の多重体を含むことができる。さらに、これら例示された配列のペプチド断片または環状に順序を変えた型を用いて、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１のさらなるポリマーカセットを構築することの可能であることが想到される。
【０３２３】
別の実施形態において、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１は、配列番号９、１０、１１、１２、１３、１４、１５からなる群から選択されるアミノ酸配列の（環状）順列ならびにこれら（環状）順序変え配列の多重体を含む、好ましくはこれらからなる多重体を含むことができる。
【０３２４】
さらに別の実施形態において、式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１は、配列番号９、１０、１２、１３、１４、１５からなる群から選択されるアミノ酸配列のペプチド断片／部分ならびにこれら例示のポリマーカセットの多重体からなる多重体を含む、好ましくはそれらからなることができる。
【０３２５】
式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１の形成に用いられるこれら配列のペプチド断片は、前記配列番号９、１０、１１、１２、１３および１４からなる群から選択されるアミノ酸配列の少なくとも３、好ましくは少なくとも４、より好ましくは少なくとも５、さらにより好ましくは少なくとも６、さらにより好ましくは少なくとも８、特に好ましくは少なくとも１０、より特に好ましくは少なくとも１２、さらにより特に好ましくは少なくとも１４、好ましくは少なくとも６、さらにより好ましくは少なくとも８、特に好ましくは少なくとも１０、より特に好ましくは少なくとも１２、さらにより特に好ましくは少なくとも１４、さらにより特に好ましくは少なくとも１６、最も好ましくは少なくとも１８連続アミノ酸からなるものであることができる。
【０３２６】
例えば、上記で確認された分布全体についての規則ならびにアラニン、セリンおよびプロリンの量が尊重される限りにおいて、ポリマーカセットの個々のペプチド断片を、別の個々のポリマーカセットと組み合わせることができる。やはり、これらのポリマーカセットは、さらなるアミノ酸残基を含むこともできるが、微小もしくは少量構成要素としてのみ、すなわち個々のポリマーカセットの最大で１０％、好ましくは最大で２％である。前記個々のポリマーカセットは、少なくとも約１００アミノ酸残基からなる。個々のポリマーカセットを組み合わせて、より長いランダムコイル形成アミノ酸ポリマーを形成することができ、それによって式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１の最大長は約３０００アミノ酸である。式（Ｉ）のタンパク質キャリアＺ１の好ましいマイナー構成成分はリジンである。
【０３２７】
プロスタサイクリン化合物を含む医薬組成物は、１以上の賦形剤を含む。賦形剤は、緩衝剤、等張性調整剤、保存剤、安定剤、抗吸着剤、酸化防止剤、増粘剤／粘度増強剤または他の助剤として分類することができる。場合により、これらの成分は二重または三重の機能を有することができる。本発明によるプロスタサイクリン化合物を含む医薬組成物は、以下のものからなる群から選択される１以上の賦形剤を含む。
【０３２８】
（ｉ）緩衝剤：リン酸ナトリウム、重炭酸塩、コハク酸塩、ヒスチジン、クエン酸塩および酢酸塩、硫酸塩、硝酸塩、塩化物、ピルビン酸塩などのｐＨを所望の範囲に保持するための生理的に耐容される緩衝剤。Ｍｇ（ＯＨ）２またはＺｎＣＯ３などの制酸剤も使用することができる。緩衝能力は、ｐＨ安定性に最も感度の高い条件に適合するように調節することができる。
【０３２９】
（ｉｉ）等張性調整剤：注射デポーでの浸透圧差に起因する細胞損傷によりもたらされる恐れのある痛みを軽減するためのもの。グリセリンや塩化ナトリウムがその例である。効果的な濃度は、血清についての２８５から３１５ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇの想定浸透圧重量モル濃度を用いた浸透圧法によって測定することができる。
【０３３０】
（ｉｉｉ）保存剤および／または抗菌剤：複数用量非経口製剤は、注射の際に患者が感染するリスクを最少にするのに十分な濃度での保存剤の添加を必要とし、相当する規制要件は確立されている。代表的な保存剤には、ｍ−クレゾール、フェノール、メチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、ブチルパラベン、クロロブタノール、ベンジルアルコール、硝酸フェニル水銀、チメロサール、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、安息香酸、クロロクレゾールおよび塩化ベンザルコニウムなどがある。
【０３３１】
（ｉｖ）安定剤：安定化は、タンパク質安定化力の強化、変性状態の不安定化、またはタンパク質への添加剤の直接結合によって達成される。安定剤は、アラニン、アルギニン、アスパラギン酸、グリシン、ヒスチジン、リシン、プロリンなどのアミノ酸、グルコース、スクロース、トレハロースなどの糖類、グリセロール、マンニトール、ソルビトールなどのポリオール、リン酸カリウム、硫酸ナトリウムなどの塩、ＥＤＴＡ、六リン酸塩などのキレート剤、二価金属イオン（亜鉛、カルシウム等）などの配位子、他の塩またはフェノール誘導体などの有機分子であってよい。さらに、オリゴマーまたはポリマー、例えばシクロデキストリン、デキストラン、デンドリマー、ＰＥＧもしくはＰＶＰまたはプロタミンもしくはＨＳＡを用いることができる。
【０３３２】
（ｖ）抗吸着剤：主にイオン性もしくはノニオン性界面活性剤または他のタンパク質もしくは可溶性ポリマーが、組成物の容器の内面をコーティングするまたは競争的に吸着させるのに使用される。好適な界面活性剤には、例えばラウリル硫酸アンモニウムおよびラウリル硫酸ナトリウムなどのアルキル硫酸塩類；ラウレス硫酸ナトリウムおよびミレス硫酸ナトリウムなどのアルキルエーテル硫酸塩類；スルホコハク酸ジオクチルナトリウム類、パーフルオロオクタンスルホン酸塩、パーフルオロブタンスルホン酸塩、アルキルベンゼンスルホン酸塩などのスルホン酸類；アルキルアリールエーテルリン酸塩およびアルキルエーテルリン酸塩などのリン酸塩類；脂肪酸塩（石鹸）またはステアリン酸ナトリウム、ラウロイルサルコシン酸ナトリウム、パーフルオロノナン酸塩、パーフルオロオクタン酸塩などのカルボン酸塩類；オクテニジン二塩酸塩；臭化セチルトリメチルアンモニウム、塩化セチルトリメチルアンモニウム、塩化セチルピリジニウム、ポリエトキシル化牛脂アミン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、５−ブロモ−５−ニトロ−１，３−ジオキサン、塩化ジメチルジオクタデシルアンモニウム、臭化ジオクタデシルジメチルアンモニウムなどの四級アンモニウムカチオン類；３−［（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−１−プロパンスルホネート、コカミドプロピルヒドロキシスルタイン、アミノ酸類、イミノ酸類、コカミドプロピルベタイン、レシチンなどの両性イオン類；セチルアルコール、ステアリルアルコール、セトステアリルアルコール、オレイルアルコールなどの脂肪族アルコール類；オクタエチレングリコールモノデシルエーテル、ペンタエチレングリコールモノデシルエーテル；ポリオキシプロピレングリコールアルキルエーテル類などのポリオキシエチレングリコールアルキルエーテル類；デシルグルコシド、ラウリルグルコシド、オクチルグルコシドなどのグルコシドアルキルエーテル類；Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００などのポリオキシエチレングリコールオクチルフェノールエーテル類；ノノキシノール−９などのポリオキシエチレングリコールアルキルフェノールエーテル類；ラウリン酸グリセリルなどのグリセロールアルキルエステル類；ポリソルベート類などのポリオキシエチレングリコールソルビタンアルキルエステル類；ソルビタンアルキルエステル類；コカミドＭＥＡおよびコカミドＤＥＡ；ドデシルジメチルアミンオキサイド；ポロキサマー類（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８）、ＰＥＧドデシルエーテル（Ｂｒｉｊ３５）、ポリソルベート２０および８０などのポリエチレングリコールおよびポリプロピレングリコールのブロックコポリマー類があり、他の抗吸着剤はデキストラン、ポリエチレングリコール、ＰＥＧ−ポリヒスチジン、ＢＳＡおよびＨＳＡおよびゼラチン類である。賦形剤の選択される濃度および種類は、回避すべき作用によって決まるが、一般に、ＣＭＣ値のすぐ上で、界面において界面活性剤の単分子層が形成される。
【０３３３】
（ｖｉ）凍結保護剤および／または凍結防止剤：凍結乾燥または噴霧乾燥の際、添加剤は、水素結合切断および水の除去によって引き起こされる不安定化作用に対抗することができる。このために、糖類およびポリオールを用いることができるが、界面活性剤、アミノ酸、非水溶媒および他のペプチドについても相当する好ましい効果が認められる。トレハロースは、水分による凝集を減少させるのに特に効果的であり、また、タンパク質疎水基が水に曝露されて引き起こされる可能性のある熱安定性も改善される。また、マンニトールやスクロースも凍結保護剤／凍結防止剤単独としてまたは互いに組み合わせて用いられる。ここで、マンニトール：スクロースの比が大きいと、凍結乾燥されたケーキの物理的安定性が向上することが知られている。マンニトールもトレハロースと組み合わせることができる。トレハロースもソルビトールと組み合わせることができる。あるいは、ソルビトールは単独の保護物質として用いられる。デンプンまたはデンプン誘導体も使用することができる。
【０３３４】
（ｖｉｉ）酸化防止剤：抗酸化剤、例えばアスコルビン酸、エクトイン、メチオニン、グルタチオン、モノチオグリセロール、モリン、ポリエチレンイミン（ＰＥＩ）、没食子酸プロピル、ビタミンＥ、キレート剤、例えばクエン酸、ＥＤＴＡ、六リン酸塩、チオグリコール酸。
【０３３５】
（ｖｉｉｉ）展着剤または拡散剤：結合組織の細胞間隙において見られるヒアルロン酸、多糖など（これらに限定されるものではない）の間質腔中の細胞外マトリクスの成分の加水分解によって結合組織の浸透性を改変する。ヒアルロニダーゼなど（これに限定されるものではない）の展着剤は細胞外マトリクスの粘度を一時的に低下させ、注入された薬物の拡散を促進する。
【０３３６】
（ｉｘ）他の助剤：例えば湿潤剤、粘度調整剤、抗生物質、ヒアルロニダーゼ。塩酸および水酸化ナトリウムなどの酸および塩基は、製造の際のｐＨ調整に必要な助剤である。
【０３３７】
一般的実施形態において、乾燥型もしくは液体型で本発明のプロスタサイクリン化合物を含む医薬組成物は、単一用量組成物または複数用量組成物として提供され得る。
【０３３８】
本発明の１実施形態において、プロスタサイクリン化合物を含む液体もしくは乾燥医薬組成物は単一用量として提供され、それはその組成物が供給される容器が１医薬用量を含むことを意味する。
【０３３９】
あるいは、プロスタサイクリン化合物を含む液体もしくは乾燥医薬組成物は複数用量組成物であり、それはその組成物が供給される容器が複数の治療用量を含むことを意味するものであり、すなわち複数用量組成物は少なくとも２用量を含む。プロスタサイクリン化合物を含むそのような複数用量組成物は、それを必要とする異なる患者に用いることができるか、患者１名に用いることができ、その場合は残りの用量は初回用量投与後用時まで保存することができる。
【０３４０】
本発明の別の態様において、プロスタサイクリン化合物を含む医薬組成物は容器に入っている。液体もしくは乾燥組成物に好適な容器は、例えば注射器、バイアル、栓およびシール付きバイアル、アンプルおよびカートリッジである。特に、本発明によるプロスタサイクリン化合物を含む液体もしくは乾燥組成物は、注射器に入れて提供される。プロスタサイクリン化合物を含む医薬組成物が乾燥医薬組成物である場合、その容器は好ましくは二重チャンバー注射器である。そのような実施形態では、前記乾燥医薬組成物が、二重チャンバー注射器の第１のチャンバーに入れて提供され、再生溶液が二重チャンバー注射器の第２のチャンバーに入れて提供される。
【０３４１】
プロスタサイクリン化合物を含む乾燥組成物を、それを必要とする患者に投与する前に、その乾燥組成物を再生する。再生は、プロスタサイクリン化合物を含む乾燥組成物が入っているバイアル、注射器、二重チャンバー注射器、アンプルおよびカートリッジなどの容器中で行うことができる。再生は、所定量の再生溶液を乾燥組成物に加えることによって実施する。再生溶液は、水または緩衝液などの滅菌した液体であり、これは別の添加物、例えば保存剤および／または抗菌剤、例えばベンジルアルコールおよびクレゾールをさらに含むことができる。好ましくは、再生溶液は滅菌水である。乾燥組成物を再生する場合、それは「再生医薬組成物」または「再生組成物」も称される。
【０３４２】
本発明の別の態様は、本発明のプロスタサイクリン化合物を含む再生医薬組成物または液体医薬組成物の投与方法に関する。プロスタサイクリン化合物を含む医薬組成物は、皮内、皮下、筋肉、静脈、骨内および腹腔内を含む吸入、注射のしくは輸液の方法で投与することができる。好ましくは、プロスタサイクリン化合物を含む医薬組成物は皮下投与する。
【０３４３】
本発明のプロスタサイクリン化合物を含む乾燥医薬組成物の好ましい投与方法は、吸入を介したものである。
【０３４４】
別の実施形態において、本発明のプロスタサイクリン化合物を含む再生医薬組成物もしくは液体医薬組成物が第１の投与方法を介して投与され、本発明のプロスタサイクリン化合物を含む第２の再生医薬組成物もしくは液体医薬組成物が同時または連続で第２の投与方法を介して投与される。前記第１および第２の投与方法は、局所、経腸投与、非経腸投与、吸入、注射、または輸液、動脈内、皮内、皮下、筋肉、静脈、骨内、および腹腔内、髄腔内、関節内、眼窩内、心腔内、経気管、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、髄腔内、脳室内または胸骨内投与のいずれかの組み合わせであることができる。
【０３４５】
別の態様は、治療上有効量の本発明のプロスタサイクリン化合物および適宜に１以上の製薬上許容される賦形剤を含む再生組成物の調製方法であって、
・本発明のプロスタサイクリン化合物を含む医薬組成物を再生溶液と接触させる段階を含む方法である。
【０３４６】
別の態様は、治療上有効量の本発明のプロスタサイクリン化合物および適宜に１以上の製薬上許容される賦形剤を含む再生医薬組成物である。
【０３４７】
本発明の別の態様は、プロスタサイクリン化合物の乾燥組成物の製造方法である。１実施形態において、そのような乾燥組成物は、
（ｉ）プロスタサイクリン化合物を１以上の賦形剤と混合し、
（ｉｉ）単一用量もしくは複数用量に相当する量を好適な容器に移し入れ、
（ｉｉｉ）当該容器中の組成物を乾燥し、
（ｉｖ）容器を密閉する
ことで製造される。
【０３４８】
好適な容器は、バイアル、注射器、二重チャンバー注射器、アンプルおよびカートリッジである。
【０３４９】
本発明の別の態様は、パーツのキットである。
【０３５０】
投与装置が単に皮下用注射器である場合、そのキットは、注射器、針ならびに注射器で使用するためのプロスタサイクリン化合物含有乾燥医薬組成物を含む容器および再生溶液を含む第２の容器を含むことができる。
【０３５１】
医薬組成物が液体組成物である場合、そのキットは、注射器、針ならびに注射器で使用するためのプロスタサイクリン化合物含有液体医薬組成物を含む容器を含むことができる。
【０３５２】
より好ましい実施形態では、注射器具は単なる皮下用注射器以外のものであり、その場合、再生もしくは液体プロスタサイクリンの入った別個の容器を、容器中の液体組成物が使用の際に注射器具の出口と流体で連結されるように注射器具とかみ合うように作られている。投与装置の例には、皮下用注射器およびペン型注射装置などがあるが、これらに限定されるものではない。特に好ましい注射器具はペン型注射装置であり、その場合に容器はカートリッジ、好ましくは使い捨てカートリッジである。適宜に、前記パーツのキットは、怪我を防ぐために、使用後に針にキャッピングまたはカバーを施すのに用いることができる針用の安全装置を含む。
【０３５３】
好ましいパーツのキットは、針および本発明による組成物を含み、再生溶液をさらに含んでいてもよい容器を含むものであり、その容器は針とともに用いるように作られている。好ましくは、容器は二重チャンバー型注射器である。
【０３５４】
別の態様では、本発明は、ペン型注射装置で使用するための上記で説明したプロスタサイクリン化合物を含む医薬組成物を含むカートリッジを提供する。このカートリッジは、単一用量または複数用量のプロスタサイクリン化合物を含むことができる。
【０３５５】
本発明のさらに別の態様は、本発明のプロスタサイクリン化合物を含む医薬組成物または医薬品として使用するための本発明の医薬組成物である。
【０３５６】
別の実施形態において、本発明は、医薬品の製造のための、特には下記の特徴のうちの１以上を有する医薬品の製造のための、本発明のプロスタサイクリン化合物または医薬組成物に関するものである。
【０３５７】
本発明による医薬組成物に含まれるプロスタサイクリン化合物が１以上の酸性もしくは塩基性基を含む場合、本発明は、それらの相当する医薬としてまたは毒性学的に許容される塩、特にはそれらの医薬として利用可能な塩も含む。従って、酸性基を含む本発明によるプロスタサイクリン化合物を含む医薬組成物は、本発明に従って、例えばアルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩として、またはアンモニウム塩として用いることができる。そのような塩のより詳細な例には、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、あるいはアンモニアまたは例えばエチルアミン、エタノールアミン、トリエタノールアミンもしくはアミノ酸などの有機アミンとの塩などがある。１以上の塩基性基、すなわちプロトン化可能な基を含む本発明によるプロスタサイクリン化合物を含む医薬組成物は、無機酸もしくは有機酸との付加塩の形態で存在することができ、そのような形態で本発明に従って使用することができる。好適な酸についての例には、塩化水素、臭化水素、リン酸、硫酸、硝酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸類、シュウ酸、酢酸、酒石酸、乳酸、サリチル酸、安息香酸、ギ酸、プロピオン酸、ピバリン酸、ジエチル酢酸、マロン酸、コハク酸、ピメリン酸、フマル酸、マレイン酸、リンゴ酸、スルファミン酸、フェニルプロピオン酸、グルコン酸、アスコルビン酸、イソニコチン酸、クエン酸、アジピン酸および当業者には公知の他の酸などがある。本発明によるプロスタサイクリン化合物を含む医薬組成物が同時に分子中に酸性基および塩基性基を含む場合、本発明は、言及した塩型に加えて、内部塩またはベタイン（両性イオン）も含む。個々の塩は、当業者に公知である一般的な方法によって、例えば溶媒もしくは分散剤中で有機もしくは無機の酸もしくは塩基とそれらを接触させることで、または他の塩とのアニオン交換もしくはカチオン交換によって得ることができる。本発明は、生理的適合性が低いために医薬において使用するには直接好適ではないが、化学反応のためのもしくは製薬上許容される塩の製造のための中間体として使用可能であるプロドラッグの全ての塩も含む。
【０３５８】
本発明のさらに別の態様は、１以上の状態の治療を必要とする哺乳動物患者、好ましくはヒトにおいて治療、管理、遅延もしくは予防する方法であって、前記患者に対して、治療上有効量のプロスタサイクリン化合物または本発明のプロスタサイクリン化合物もしくはそれの製薬上許容される塩を含む医薬組成物を投与することを含む方法である。
【０３５９】
本発明はさらに、肺高血圧の治療方法であって、肺高血圧患者に対して、
（ａ）ポリマーキャリア連結プロスタサイクリンプロドラッグ、および適宜に１以上の製薬上許容される賦形剤、または
（ｂ）プロスタサイクリン化合物および少なくとも一つのポリマー、および適宜に１以上の製薬上許容される賦形剤
を含む医薬組成物を皮下投与もしくは筋肉投与する段階を含み、
前記医薬組成物が、少なくとも１２時間の期間にわたって、治療上有効量の遊離プロスタサイクリン化合物を放出する方法に関するものである。
【０３６０】
ある好ましい実施形態において、（ｂ）の医薬組成物製剤は、約０．０５から約１０重量％のプロスタサイクリン化合物、より好ましくは０．０１から５重量％のプロスタサイクリン化合物、最も好ましくは０．１から約２重量％のプロスタサイクリン化合物、ならびに約０．５から約２０重量％の総ポリマー含有量、好ましくは約１から約１０重量％の総ポリマー含有量、最も好ましくは約１から約７重量％の総ポリマーを含む。
【０３６１】
好ましい実施形態において、本発明の医薬組成物は、プロスタサイクリンの徐放製剤である。
【０３６２】
前記プロスタサイクリン化合物、およびプロスタサイクリン化合物を含む医薬組成物、および本発明の使用のためのプロスタサイクリン化合物を含む医薬組成物は、例えば、肺高血圧、虚血性疾患（例えば、末梢動脈疾患などの末梢血管疾患、レイノー病およびレイノー症候群などのレイノー現象、全身性硬化症などの強皮症、心筋虚血（心筋梗塞)、虚血性脳卒中、腎不全）、指潰瘍などの虚血性潰瘍、心不全（鬱血性心不全など）、門脈肺高血圧、間質性肺疾患、特発性肺線維症、抗凝血を必要とする状態（例えば、心筋梗塞後、心臓手術後）、血栓性微小血管症、体外循環、網膜中心静脈閉塞症、アテローム性動脈硬化症、炎症疾患（例えば、ＣＯＰＤ、乾癬）、高血圧（例えば、子癇前症）、生殖および分娩、癌その他の制御されない細胞増殖の状態、細胞／組織保存およびプロスタサイクリン治療が有益な役割を有すると思われる他の新たに生じる治療分野の治療および／または予防に用いることができる。
【０３６３】
従って本発明は、肺高血圧、虚血性疾患、好ましくは末梢動脈疾患などの末梢血管疾患、レイノー病およびレイノー症候群などのレイノー現象、全身性硬化症などの強皮症、心筋梗塞、虚血性脳卒中、腎不全、指潰瘍などの虚血性潰瘍、心不全、特には鬱血性心不全、門脈肺高血圧、間質性肺疾患、特発性肺線維症、抗凝血を必要とする状態、特には心筋梗塞後、心臓手術後、血栓性微小血管症、体外循環、網膜中心静脈閉塞症、アテローム性動脈硬化症、炎症疾患、特にはＣＯＰＤ、乾癬）、高血圧、特には子癇前症、生殖および分娩、癌その他の制御されない細胞増殖の状態、細胞／組織保存およびプロスタサイクリン治療が有益な役割を有すると思われる他の新たに生じる治療分野の治療または予防で使用される本発明の医薬組成物に関する。
【０３６４】
図１は、総トレプロスチニル含有量と比較したトレプロスチニル放出％として表した各種時点での緩衝液および緩衝ラット血漿中のトレプロスチニル放出を示す図である（実施例２９参照）。
【０３６５】
図２は、皮下注射後のサルにおける２週間より長い期間にわたる長期間のトレプロスチニル抱合体２５循環を示す図である（実施例３０参照）。
【０３６６】
図３は、化合物２５の単一用量静脈注射ならびにそれに続く総トレプロスチニルおよびキャリア含有量についての血漿分析を示す図である（実施例３０参照）。
【０３６７】
図４は、化合物２５の単一用量静脈注射ならびにそれに続く遊離トレプロスチニルについての血漿分析を示す図である（実施例３２参照）。
【０３６８】
図５は、化合物２５の単一用量皮下注射およびそれに続く遊離トレプロスチニルについての血漿分析を示す図である（実施例３２参照）。
【０３６９】
（実施例）
材料、方法および分析
製造物の精製
順相精製をＢｉｏｔａｇｅ「Ｉｓｏｌｅｒａ  ｏｎｅ」精製システム（Ｂｉｏｔａｇｅ  ＡＢ、スウェーデン）で行った。Ｂｉｏｔａｇｅ  ＫＰ−Ｓｉｌシリカカートリッジ。ヘプタン／酢酸エチルまたはジクロロメタン／メタノールの勾配を用いた。生成物は、２５４および２８０ｎｍで検出および回収した。
【０３７０】
分取ＲＰ−ＨＰＬＣには、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ（商標名）ＢＥＨ３００  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  ５μｍ、１５０×１０ｍｍ、流量６ｍＬ／分、またはＷａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ（商標名）ＢＥＨ３００  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  １０μｍ、１５０×３０ｍｍ、流量４０ｍＬ／分を搭載したＷａｔｅｒｓ  ６００制御装置および２４８７デュアル吸光検出器を用いた。溶離液Ａ（０．０５体積％ＴＦＡまたは０．０１体積％ＨＣｌを含む水）およびＢ（０．０５体積％ＴＦＡまたは０．０１体積％ＨＣｌを含むアセトニトリル）の勾配を用いた。
【０３７１】
別段の断りがなければ、生成物を含有するＨＰＬＣ分画を蓄積し、凍結乾燥した。
【０３７２】
自動フラッシュクロマトグラフィー
自動フラッシュクロマトグラフィーを、Ｂｉｏｔａｇｅ  ＫＰ−Ｓｉｌシリカカートリッジを用いるＢｉｏｔａｇｅ「Ｉｓｏｌｅｒａ  ｏｎｅ」精製システム（Ｂｉｏｔａｇｅ  ＡＢ、スウェーデン）で行った。生成物は、２５４および２８０ｎｍで検出および回収した。
【０３７３】
ＬＣ／ＭＳ分析
５μｍ  Ｒｅｐｒｏｓｉｌ  Ｐｕｒ  ３００Å  ＯＤＳ−３カラム（７５×１．５ｍｍ）（Ｄｒ．  Ｍａｉｓｃｈ，  Ａｍｍｅｒｂｕｃｈ、ドイツ；流量：３５０μＬ／分、代表的な勾配：５分間かけて１０％から９０％ＭｅＣＮ／水、０．０５％ＴＦＡ）を搭載した２６９５サンプルマネージャー、２４８７デュアル吸光検出器およびＺＱ４０００ＥＳＩ装置からなるＷａｔｅｒｓの装置、またはＷａｔｅｒｓ  ＡＣＱＵＩＴＹ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ３００  Ｃ１８  ＲＰカラム（２．１×５０ｍｍ、３００Å、１．７μｍ、流量：０．２５ｍＬ／分；溶媒Ａ：ＵＰ−Ｈ２Ｏ＋０．０４％ＴＦＡ、溶媒Ｂ：ＵＰ−アセトニトリル＋０．０５％ＴＦＡを搭載したＴｈｅｒｍｏ  ＬＴＱ  Ｏｒｂｉｔｒａｐ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ高分解能／高精度質量分析装置に連結されたＡｃｑｕｉｔｙ  ＰＤＡ検出器を有するＷａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣで、分析ＲＰ−ＨＰＬＣ／ＥＳＩ−ＭＳを行った。
【０３７４】
ＡＣＱＵＩＴＹＵＰＬＣ（登録商標）ＢＥＨ３００  Ｃ１８  ＲＰカラム（Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、２．１×５０ｍｍ、３００Å、１．７μｍ、流量：０．２５ｍＬ／分；溶媒Ａ：ＵＰ−Ｈ２Ｏ＋０．０４％ＴＦＡ、溶媒Ｂ：ＵＰ−ＭｅＣＮ＋０．０５％ＴＦＡを搭載したＴｈｅｒｍｏ  ＬＴＱ  Ｏｒｂｉｔｒａｐ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ高分解能／高精度質量分析装置に連結されたＡｃｑｕｉｔｙ  ＰＤＡ検出器を有するＷａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣからなるＷａｔｅｒｓ／Ｔｈｅｒｍｏ装置で、ＲＰ−ＵＰＬＣ／ＥＳＩ−ＭＳを行った。
【０３７５】
ＴｒａｎｓＣｏｎ  ５ｋＤａ  ＰＥＧ連結基トレプロスチニルから放出されるトレプロスチニルの測定のための代表的な勾配は、流量０．２５ｍＬ、勾配：１０分間かけての３０％から５０％Ｂである。
【０３７６】
ＲＰ−ＨＰＬＣ精製
分取ＲＰ−ＨＰＬＣには、次のカラム：Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ（商標名）ＢＥＨ３００  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  ５μｍ、１５０×１０ｍｍ、流量６ｍＬ／分、またはＷａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ（商標名）ＢＥＨ３００  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  １０μｍ、１５０×３０ｍｍ、流量４０ｍＬ／分を搭載したＷａｔｅｒｓ  ６００制御装置および２４８７デュアル吸光検出器を用いた。溶媒系Ａ（０．０５体積％ＴＦＡまたは０．０１体積％ＨＣｌ含有水）および溶媒系Ｂ（０．０５体積％ＴＦＡまたは０．０１体積％ＨＣｌ含有アセトニトリル）の直線勾配
精製手順の代表的勾配は次のとおりである：
流量６ｍＬ／分、溶媒Ａ：Ｈ２Ｏ＋０．０５％ＴＦＡ、溶媒Ｂ：ＭｅＣＮ＋０．０５％ＴＦＡ、代表的勾配：１４分かけて１％から９５％Ｂ
流量６ｍＬ／分、溶媒Ａ：Ｈ２Ｏ＋０．０５％ＴＦＡ、溶媒Ｂ：ＭｅＣＮ＋０．０５％ＴＦＡ、代表的勾配：１４分かけて１０％から８０％Ｂ
流量４０ｍＬ／分、溶媒Ａ：Ｈ２Ｏ＋０．０５％ＴＦＡ、溶媒Ｂ：ＭｅＣＮ＋０．０５％ＴＦＡ、代表的勾配：１４分かけて４０％から９５％Ｂ
別段の断りがなければ、生成物を含有するＨＰＬＣ分画を蓄積し、凍結乾燥した。
【０３７７】
化学物質および医薬物質
トレプロスチニル酸は、Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ｔｅｃｈｗｅｌｌ  Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏ．，  Ｌｔｄ．（上海、中華人民共和国）またはＣｈｉｒｏｇａｔｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｃ．（Ｙａｎｇｍｅｉ、台湾）から購入した。６−（Ｓ−トリチルメルカプト）ヘキサン酸は、Ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ（Ｓｔｒａｓｂｏｕｒｇ、フランス）から購入した。シス−シクロヘキサンジカルボン酸無水物は、Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒ  ＧＭＢＨ  ＆  Ｃｏ  ＫＧ（Ｋａｒｌｓｒｕｈｅ、ドイツ）から購入した。２−クロロトリチルクロライド樹脂（１％、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ（登録商標）ＤＶＢ）は、Ｍｅｒｃｋ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ  ＧＭＢＨ（ドイツ）から得た。６−（Ｓ−トリチルスルファニル）−ヘキサンアミンは、ＷＯ−Ａ２００９／１３３１３７に従って合成した。本研究で使用したＰＥＧ類は、ＮＯＦ  Ｅｕｒｏｐｅ  Ｎ．  Ｖ．（Ｇｒｏｂｂｅｎｄｏｎｋ、ベルギー）から入手した。他の化学物質はいずれも、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ  ＧＭＢＨ（Ｔａｕｆｋｉｒｃｈｅｎ、ドイツ）から購入した。分析ＲＰ−ＨＰＬＣ用の水およびアセトニトリルはＢｉｏｓｏｌｖｅ  Ｂ．  Ｖ．から購入し、ＴＦＡはＴｈｅｒｍｏ  ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから購入した。
【０３７８】
実施例１
３−ヒドロキシブタン酸１のベンジル保護
【化２６】
2014522878.tif 000034
【０３７９】
３−ヒドロキシブタン酸１（４３４ｍｇ、４．１７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶かし、ＢｎＢｒ（７００μＬ、５．８９ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（２．５ｇ、７．６７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、密閉管中で４から６時間還流した。冷却して室温とした後、反応混合物を濾過し、残留物をＥｔＯＡｃで数回洗浄した。有機溶媒を除去し、生成物をシリカでの自動フラッシュクロマトグラフィーによって１回で精製して（ＳＮＡＰ２５ｇカートリッジ、流量３０ｍＬ／分、溶媒Ａ：ＤＣＭ、溶媒Ｂ：ＭｅＯＨ；勾配：１９ＣＶかけての０％から５％Ｂ）、原料を除去し、所望のベンジル保護３−ヒドロキシブタン酸２を黄色油状物として得た。   
収量：３６１ｍｇ（４５％）
ＭＳ：ｍ／ｚ２１７．１＝［Ｍ＋Ｎａ］＋（ＭＷ＋Ｎａ計算値２１７．２）。
【０３８０】
実施例２
ベンジル化３−ヒドロキシブタン酸２のトレプロスチニルとのカップリング反応
【化２７】
2014522878.tif 000035
【０３８１】
トレプロスチニル酸（１０．５ｍｇ、０．０２６８ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（４．５ｍＬ）およびＤＣＣ（９．４ｍｇ、０．０４５５ｍｍｏｌ）に溶かし、ＨＯＢＴ（７．５ｍｇ、０．０４８９ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（７．５ｍｇ、０．０６１３ｍｍｏｌ）をその溶液に加えた。次に、ベンジル化３−ヒドロキシブタン酸２（１５ｍｇ、０．０７７２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（０．５ｍＬ）に溶かし、反応混合物に加えた。消費が完了するまで、混合物を室温で撹拌した（分析ＲＰ−ＨＰＬＣ）。揮発性溶媒を減圧下に除去し、残留物を小さいシリカカラム（３ｍＬシリカ、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（１００：０）からＤＣＭ／ＭｅＯＨ（９５：５））で精製して、所望の連結基トレプロスチニル３を黄色油状物を得た。   
収量：８ｍｇ（５０％）  
ＭＳ：ｍ／ｚ５８９．３＝［Ｍ＋Ｎａ］＋（ＭＷ＋Ｎａ計算値５８９．７）。
【０３８２】
実施例３
ベンジルエステル３の水素化反応
【化２８】
2014522878.tif 000036
【０３８３】
ベンジルエステル３（１３ｍｇ、０．０２２９ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（４ÅＭＳ、２ｍＬ）に溶かし、５％パラジウム／活性炭（５％Ｐｄ、１５ｍｇ）を加えた。水素を溶液に３０分間吹き込んだ。消費が完了するまで、水素雰囲気下に反応混合物をさらに１２．５時間撹拌した（分析ＲＰ−ＨＰＬＣ）。混合物をセライトで濾過し、ＥｔＯＡｃで数回洗浄した。有機溶媒を減圧下に除去し、残留物をＲＰ−ＨＰＬＣ（溶媒Ａ：０．０５％ＴＦＡ含有Ｈ２Ｏ、溶媒Ｂ：０．０５％ＴＦＡ含有ＭｅＣＮ、勾配：２０分かけて１％から９５％Ｂ、流量：６ｍＬ／分）を用いて精製した。生成物含有分画を蓄積し、凍結乾燥して、４を白色固体として得た。   
収量：１．９ｍｇ（２９％） 
ＭＳ：ｍ／ｚ４９９．３＝［Ｍ＋Ｎａ］＋（ＭＷ＋Ｎａ計算値４９９．６）。
【０３８４】
実施例４
直鎖ＰＥＧ  ５ｋＤａアミンと連結基トレプロスチニル４とのカップリング反応
【化２９】
2014522878.tif 000037
【０３８５】
連結基トレプロスチニル４（１．９ｍｇ、３．９８μｍｏｌ）および直鎖ＰＥＧ  ５ｋＤａアミン（８６ｍｇ、１７．２μｍｏｌ）をＴＨＦ／ＭｅＣＮ（４ÅＭＳ；１．５ｍＬ：０．５ｍＬ）およびＥｔ３Ｎ（４０μＬ）に溶かし、触媒量のＤＭＡＰおよびＴ３Ｐ（ＥｔＯＡｃ中５０％、５０μＬ、７３．２μｍｏｌ）を順次加えた。反応混合物を室温で１２時間撹拌した。反応混合物をＨ２Ｏ  ２０μＬで希釈し、揮発性溶媒を減圧下に除去した。残留物を、ＲＰ−ＨＰＬＣ（溶媒Ａ：０．０５％ＴＦＡ含有Ｈ２Ｏ、溶媒Ｂ：０．０５％ＴＦＡ含有ＭｅＣＮ、勾配：２０分かけて１０％から８０％Ｂ、流量：６ｍＬ／分）を用いて精製した。生成物含有分画を蓄積し、凍結乾燥して、ＴｒａｎｓＣｏｎ  ＰＥＧ連結基トレプロスチニル５を白色固体として得た。
【０３８６】
収量：１２．５ｍｇ（５８％）。
【０３８７】
ＭＳ：ポリマー分布における一つの代表的ピークについてｍ／ｚ１３７８．６＝［Ｍ＋４Ｈ］４＋（計算値１３７８．９）。
【０３８８】
実施例５
ＴｒａｎｓＣｏｎ  ＰＥＧ連結基トレプロスチニル５のトレプロスチニル放出の動態
ＴｒａｎｓＣｏｎ  ＰＥＧ連結基トレプロスチニル５（０．５から１．５ｍｇ）をｐＨ７．４加水分解緩衝液（６０ｍＭリン酸ナトリウム、３ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０、１ｍＬ）中３７℃でインキュベートし、小分けサンプルを、放出トレプロスチニルに関して各種時間点でＵＰＬＣによって分析した。
【０３８９】
ＴｒａｎｓＣｏｎ  ＰＥＧ連結基トレプロスチニル５の加水分解動態の半減期測定
所定期間にわたりｐＨ７．４および３７℃でインキュベーションした後の放出トレプロスチニルのパーセントを、ＲＰ−ＵＰＬＣクロマトグラムでの相当するピーク（放出物対抱合体）を積分することで測定した。次に、表１に示したデータを時間に対してプロットした。一次速度則適合を用いることで、５からのトレプロスチニル放出についての４．２０日の半減期が得られた。
【表１】
2014522878.tif 000038
【０３９０】
実施例６
中間体６ａ／６ｂの合成
【化３０】
2014522878.tif 000039
【０３９１】
６−（Ｓ−トリチルスルファニル）−ヘキサンアミン（合成については、ＷＯ−Ａ２００９／１３３１３７を参照する）（５０７ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（４ｍＬ）に溶かし、反応混合物にシス−１，２−シクロヘキサンジカルボン酸無水物（２５１ｍｇ、１．６３ｍｍｏｌ）を室温で加えた。ＤＩＰＥＡ（０．７０ｍＬ、４．０６ｍｍｏｌ）を加え、６−（Ｓ−トリチルスルファニル）−ヘキサンアミン（ＬＣ／ＭＳ）が完全に消費されるまで混合物を室温で撹拌した。揮発性溶媒を減圧下に除去し、残留物をＨ２Ｏ／ＭｅＣＮ（６：１、１８ｍＬ）に溶かし、生成物をＲＰ−ＨＰＬＣ（溶媒Ａ：０．０５％ＴＦＡ含有Ｈ２Ｏ、溶媒Ｂ：０．０５％ＴＦＡ含有ＭｅＣＮ、勾配：１６分かけて４０％から９５％Ｂ、流量：４０ｍＬ／分）によって精製した。合わせた分画を飽和ＮａＨＣＯ３溶液（ｐＨ約６）で中和し、有機溶媒を減圧下に除去した。
【０３９２】
残った水相をＤＣＭで２回抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ４で脱水し、溶媒を減圧下に除去して、６ａ／６ｂをラセミ混合物として得た。   
収量：５８０ｍｇ（８１％）
ＭＳ：ｍ／ｚ５５２．２３＝［Ｍ＋Ｎａ］＋（ＭＷ＋Ｎａ計算値５５２．６２ｇ／ｍｏｌ）。
【０３９３】
実施例７
中間体７ａ／７ｂの合成
【化３１】
2014522878.tif 000040
【０３９４】
Ｎ−Ｂｏｃ−１，６−ヘキサンジアミン（２７０ｍｇ、１．２５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶かし、反応混合物にシス−１，２−シクロヘキサンジカルボン酸無水物（２３１ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ）を室温で加えた、。ＤＩＰＥＡ（０．６５ｍＬ、３．７６ｍｍｏｌ）を加え、Ｎ−Ｂｏｃ−１，６−ヘキサンジアミンが消費されるまで（ＬＣ／ＭＳ）混合物を室温で撹拌した。反応混合物をＨ２Ｏ／ＭｅＣＮ（９：１）で希釈し、生成物をＲＰ−ＨＰＬＣ（溶媒Ａ：０．０５％ＴＦＡ含有Ｈ２Ｏ、溶媒Ｂ：０．０５％ＴＦＡ含有ＭｅＣＮ、勾配：１６分かけて１０％から８０％Ｂ、流量：４０ｍＬ／分）によって精製した。合わせた分画を飽和ＮａＨＣＯ３溶液（ｐＨ約６）で中和し、有機溶媒を減圧下に除去した。残った水相をＤＣＭで数回抽出した。有機層をＭｇＳＯ４で脱水し、溶媒を減圧下に除去して、７ａ／７ｂをラセミ混合物として得た。   
収量：４１０ｍｇ（８８％）   
ＭＳ：ｍ／ｚ３７１．３９＝［Ｍ＋Ｈ］＋（ＭＷ＋Ｈ計算値３７１．２７ｇ／ｍｏｌ）。
【０３９５】
実施例８
Ｄｍｏｂ保護トレプロスチニル８の合成
【化３２】
2014522878.tif 000041
【０３９６】
トレプロスチニル（６１ｍｇ、０．１５６ｍｍｏｌ）をトルエン（乾燥、モレキュラーシーブス、２．５ｍＬ）に溶かし、シリル化試薬ＢＳＡ（０．６ｍＬ、０．２４５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１２時間撹拌した。揮発性溶媒を減圧下に除去し、それ以上精製せずにＴＭＳ保護トレプロスチニルを用いた。
【０３９７】
ＴＭＳ保護トレプロスチニルをＤＣＭ（２．５ｍＬ）およびＨ２Ｏ（６０μＬ）に溶かした。ＤＣＭ（１ｍＬ）に溶かしたＤＭＡＰ（７６ｍｇ、０．６２４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ・ＨＣｌ（１１９ｍｇ、０．６２４ｍｍｏｌ）およびＤｍｏｂ−アルコール（１０５ｍｇ、０．６２４ｍｍｏｌ）を加えた。反応が完結する（ＬＣ／ＭＳ）まで、反応混合物を室温で撹拌した。溶液をＤＣＭで希釈し、ＮａＣｌで飽和した０．１Ｎ  ＨＣｌ溶液を加えることで反応停止した。水相をＤＣＭで数回抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ４で脱水し、溶媒を減圧下に除去して粗生成物８を得た。粗生成物を、ＲＰ−ＨＰＬＣ（溶媒Ａ：０．０５％ＴＦＡ含有Ｈ２Ｏ、溶媒Ｂ：０．０５％ＴＦＡ含有ＭｅＣＮ、勾配：１６分かけて３５％から８５％Ｂ、流量：４０ｍＬ／分）を用いて精製した。合わせたＨＰＬＣ分画を飽和ＮａＨＣＯ３溶液を加えることでｐＨ約７に調節し、ＭｅＣＮを減圧下に除去した。残ったＨ２Ｏ層をＤＣＭで数回抽出し、合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下に除去して生成物８を無色固体として得た。
【０３９８】
収量：６９ｍｇ（８２％）。
【０３９９】
ＭＳ：ｍ／ｚ５６３．２０ｇ／ｍｏｌ＝［Ｍ＋Ｎａ］＋（ＭＷ＋Ｎａ計算値５６３．６７ｇ／ｍｏｌ）。
【０４００】
実施例９
トレプロスチニル連結基チオールの合成
【化３３】
2014522878.tif 000042
【０４０１】
カルボン酸６ａ／６ｂ（１４７ｍｇ、０．２７７ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ・ＨＣｌ（５３ｍｇ、０．２７７ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（３４ｍｇ、０．２７７ｍｍｏｌ）をＤＣＭ  ０．５ｍＬに溶かした。Ｄｍｏｂ保護トレプロスチニル８（４３ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）をＤＣＭ  ０．５ｍＬに溶かし、反応混合物に加えた。８の消費が完了するまで（終夜、ＬＣ／ＭＳ）、混合物を室温で撹拌した。揮発性溶媒を減圧下に除去した。残留物をＨＦＩＰ（２ｍＬ）、ＴＦＡ（１００μＬ）およびＴＥＳ（５０μＬ）に溶かし、室温で３０分間撹拌した（ＬＣ／ＭＳ）。揮発分を減圧下に除去した。残留物をＨ２Ｏ／ＭｅＣＮ（９／１、０．０５％ＴＦＡ、２ｍＬ）に溶かし、４種類の可能な異性体の混合物をＲＰ−ＨＰＬＣ（溶媒Ａ：０．０５％ＴＦＡ含有Ｈ２Ｏ、溶媒Ｂ：０．０５％ＴＦＡ含有ＭｅＣＮ、勾配：１６分かけて６０％から８５％Ｂ、流量：６ｍＬ／分）によって精製した。生成物異性体は、三つの分離可能なピークとして溶出した。溶出時間が最も短いピーク（化合物「９ｘ」）を含む分画を蓄積し、それ以上処理せずにＰＥＧ化段階で用いた。可能な異性体９ａ、９ｂ、９ｃまたは９ｄへの９ｘの構造割り当ては、この実験では行わなかった。９ｘの収量はエルマン試験を用いることで求めた。   
収量：８．１ｍｇ（２６％）
ＭＳ：ｍ／ｚ６８２．２１ｇ／ｍｏｌ＝［Ｍ＋Ｎａ］＋（ＭＷ＋Ｎａ計算値６８２．４０ｇ／ｍｏｌ）。
【０４０２】
実施例１０
トレプロスチニル連結基アミンの合成
【化３４】
2014522878.tif 000043
【０４０３】
2014522878.tif 000044
【０４０４】
カルボン酸７ａ／７ｂ（５０ｍｇ、０．１３４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ・ＨＣｌ（２６ｍｇ、０．１３４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（１６ｍｇ、０．１３４ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（０．３ｍＬ）に溶かした。Ｄｍｏｂ保護トレプロスチニル８（３６ｍｇ、０．０６６ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（０．５ｍＬ）に溶かし、反応混合物に加えた。消費が完了するまで（ＬＣ／ＭＳ）、混合物を室温で撹拌した。揮発性溶媒を減圧下に除去した。残留物をＨ２Ｏ／ＭｅＣＮ（９／１、０．０５％ＴＦＡ、２ｍＬ）に溶かし、ＲＰ−ＨＰＬＣ：Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｈｙｐｅｒｓｉｌ  Ｇｏｌｄ  ＰＦＰカラム、１５０×１０ｍｍ、溶媒Ａ：０．０５％ＴＦＡ含有Ｈ２Ｏ、溶媒Ｂ：０．０５％ＴＦＡ含有ＭｅＣＮ、勾配：１６分かけて３５％から５５％Ｂ、流量：６ｍＬ／分により、モノカップリング生成物（１個の７ａ／７ｂ分子にカップリングしたトレプロスチニル）を、二重カップリング生成物（２個の７ａ／７ｂ分子にカップリングしたトレプロスチニル）から分離した。モノカップリング生成物を含むＨＰＬＣ分画を蓄積し、凍結乾燥した。凍結乾燥物をＨＦＩＰ（０．９ｍＬ）、ＤＣＭ（０．１ｍＬ）、ＴＦＡ（１００μＬ）およびＴＥＳ（２０μＬ）に溶かし、室温で１０分間撹拌した。揮発分を減圧下に除去し、残留物をＨ２Ｏ／ＭｅＣＮ（９／１、０．０５％ＴＦＡ、２ｍＬ）に溶かし、ＲＰ−ＨＰＬＣ（溶媒Ａ：０．０５％ＴＦＡ含有Ｈ２Ｏ、溶媒Ｂ：０．０５％ＴＦＡ含有ＭｅＣＮ、勾配：１６分かけて３５％から５５％Ｂ、流量：６ｍＬ／分）によって４種類の可能な異性体の混合物を精製した。生成物異性体は、三つの分離可能なピークとして溶出した。溶出時間が最も短いピーク（化合物「１０ｘ」）を含む分画を蓄積し、それ以上処理せずにＰＥＧ化段階で用いた。可能な異性体１０ａ、１０ｂ、１０ｃまたは１０ｄへの１０ｘの構造割り当ては、この実験では行わなかった。１０ｘの収量は、トレプロスチニル較正曲線（２８０ｎｍ）を用いることでＨＰＬＣによって推算した。   
収量：３．０ｍｇ
ＭＳ：ｍ／ｚ６４３．２８ｇ／ｍｏｌ＝［Ｍ＋Ｎａ］＋（ＭＷ＋Ｎａ計算値６４３．４５ｇ／ｍｏｌ）。
【０４０５】
実施例１１
トレプロスチニル連結基アミンの直鎖ＰＥＧ  ５ｋＤａ  ＮＨＳによるＰＥＧ化反応
【化３５】
2014522878.tif 000045
【０４０６】
2014522878.tif 000046
【０４０７】
トレプロスチニル連結基アミン１０ｘ（０．６ｍｇ、１μｍｏｌ溶液、ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．０５％ＴＦＡ、５ｍＬ）に、直鎖ＰＥＧ  ５ｋＤａ  ＮＨＳ（２３ｍｇ、４．６μｍｏｌ）を加えた。０．５Ｍ  ｐＨ７．４緩衝液（０．５Ｍリン酸塩溶液、０．６ｍＬ）を加えることで溶液を中和した。Ｈ２Ｏ（１ｍＬ）を加えて透明溶液を得て、反応混合物を室温で１時間インキュベートした。次に、ＲＰ−ＨＰＬＣ（溶媒Ａ：０．０１％ＨＣｌ含有Ｈ２Ｏ、溶媒Ｂ：０．０１％ＨＣｌ含有ＭｅＣＮ、勾配：１６分かけて１０％から７０％Ｂ、流量：６ｍＬ／分）によって反応混合物を精製して、凍結乾燥後にＴｒａｎｓＣｏｎ直鎖５ｋＤａ  ＰＥＧトレプロスチニル１１を得た。
【０４０８】
収量：３ｍｇ。
【０４０９】
実施例１２
トレプロスチニル連結基チオールの直鎖ＰＥＧ  ４０ｋＤａマレイミドによるＰＥＧ化反応
【化３６】
2014522878.tif 000047
【０４１０】
ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ（０．０５％ＴＦＡ、８７ｍＬ）中のトレプロスチニル連結基チオール９ｘ（６．２ｍｇ、９．４２μｍｏｌ）溶液に、直鎖ＰＥＧ  ４０ｋＤａマレイミド（４６３ｍｇ、１１．３μｍｏｌ）を加えた。溶液を、ｐＨ７．４緩衝液（０．５Ｍリン酸塩、４．４ｍＬ）を加えることで中和した。１時間のインキュベーション後、追加量の直鎖４０ｋＤａ  Ｍａｌ−ＰＥＧ（７３ｍｇ、１７８μｍｏｌ）およびＨ２Ｏ（５ｍＬ）を加え、反応溶液をさらに１．５時間インキュベートした。ＲＰ−ＨＰＬＣ（溶媒Ａ：０．０１％ＨＣｌ含有Ｈ２Ｏ、溶媒Ｂ：０．０１％ＨＣｌ含有ＭｅＣＮ、勾配：１６分かけて３０％から５０％Ｂ、流量：４０ｍＬ／分）によって反応混合物を精製して、凍結乾燥後にＴｒａｎｓＣｏｎ直鎖４０ｋＤａ  ＰＥＧトレプロスチニル１２を得た。
【０４１１】
収量：３２１ｍｇ（８２％）。
【０４１２】
実施例１３
トレプロスチニル連結基チオールの４分岐ＰＥＧ２０ｋＤａマレイミドによるＰＥＧ化反応
【化３７】
2014522878.tif 000048
【０４１３】
ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ（０．０５％ＴＦＡ、５．７ｍＬ）中のトレプロスチニル連結基チオール９ｘ（２．５４ｍｇ、３．８４μｍｏｌ）溶液に、４分岐ＰＥＧ  ２０ｋＤａマレイミド（２１ｍｇ、０．９８μｍｏｌ）を加えた。ｐＨ７．４緩衝液（０．５Ｍリン酸塩、３．０ｍＬ）を加えることで溶液を中和した。反応混合物が再度透明溶液となるまで、Ｈ２Ｏ（３ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で２時間インキュベートし、次にＲＰ−ＨＰＬＣ（溶媒Ａ：０．０１％ＨＣｌ含有Ｈ２Ｏ、溶媒Ｂ：０．０１％ＨＣｌ含有ＭｅＣＮ、勾配：１６分かけて４５％から８５％Ｂ、流量：４０ｍＬ／分）によって精製して、凍結乾燥後にＴｒａｎｓＣｏｎ４分岐ＰＥＧ２０ｋＤａトレプロスチニル１３を得た。
【０４１４】
収量：１４ｍｇ（６６％）。
【０４１５】
実施例１４
ＴｒａｎｓＣｏｎ  ＰＥＧ連結基トレプロスチニル化合物１１および１２のトレプロスチニル放出動態
実施例５に従って、放出動態を求めた。化合物１１および１２については、トレプロスチニル放出半減期４．３日（±０．７日）が得られた。
【０４１６】
実施例１５
ＴｒａｎｓＣｏｎ  ＰＥＧ連結基トレプロスチニル化合物１３のトレプロスチニル放出動態
ＴｒａｎｓＣｏｎ  ＰＥＧ連結基トレプロスチニル１３（２．５ｍｇ）をｐＨ７．４加水分解緩衝液（６０ｍＭリン酸ナトリウム、３ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０、１ｍＬ）中にて３７℃でインキュベートし、小分けサンプルを放出トレプロスチニルについて各種時間点でＵＰＬＣによって分析した。小分けサンプルの総加水分解後のトレプロスチニルの面積に関して、放出トレプロスチニルのパーセントを求めた（加水分解溶液５０μＬおよび５Ｎ  ＮａＯＨ  ２５μＬを２０分間混合した。ＡｃＯＨ  ２５μＬを加え、得られた溶液をＬＣＭＳによって分析した。）。
【０４１７】
一次速度則適合を用いることで、１３からのトレプロスチニル放出について５日間の半減期が得られた。
【０４１８】
実施例１６
構成単位１４の合成
構成単位１４を、下記の図式に従って合成した。
【化３８】
2014522878.tif 000049
【０４１９】
Ｍｍｔ−クロライド（３ｇ、９．７１ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２０ｍＬ）に溶かし、エチレンジアミン（６．５ｍＬ、９７．１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）中溶液に滴下した。２時間後、溶液をジエチルエーテル（３００ｍＬ）に投入し、３０／１（体積比）ブライン／０．１Ｍ  ＮａＯＨ溶液（それぞれ５０ｍＬ）で３回およびブライン（５０ｍＬ）で１回洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、揮発分を減圧下に除去した。Ｍｍｔ−保護アミン（３．１８ｇ、９．５６ｍｍｏｌ）をそれ以上精製せずに次の段階で用いた。
【０４２０】
Ｍｍｔ−保護アミン（３．１８ｇ、９．５６ｍｍｏｌ）を脱水ＤＣＭ（３０ｍＬ）に溶かした。６−（Ｓ−トリチルメルカプト）ヘキサン酸（４．４８ｇ、１１．４７ｍｍｏｌ）、ＰｙＢＯＰ（５．９６ｇ、１１．４７ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（５．０ｍＬ、２８．６８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で３０分間撹拌した。溶液をジエチルエーテル（２５０ｍＬ）で希釈し、３０／１（体積比）ブライン／０．１Ｍ  ＮａＯＨ溶液で３回（それぞれ５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で１回洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、揮発分を減圧下に除去した。アミドを、０．０２％（体積比）ジエチルメチルアミンを含むヘプタン／酢酸エチルで溶離を行うフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。   
収量：５．６９ｇ（８．０７ｍｍｏｌ）
ＭＳ：ｍ／ｚ７０５．４＝［Ｍ＋Ｈ］＋（ＭＷ＝７０５．０）。
【０４２１】
アミド（３．１９ｇ、４．５３ｍｍｏｌ）を脱水ＴＨＦ（５０ｍＬ）に溶かし、ＢＨ３・ＴＨＦ（１Ｍ溶液、８．５ｍＬ、８．５ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を室温で１６時間撹拌した。追加のＢＨ３・ＴＨＦ（１Ｍ溶液、１４ｍＬ、１４ｍｍｏｌ）を加え、室温でさらに１６時間撹拌した。メタノール（８．５ｍＬ）を加えることで反応停止した。Ｎ，Ｎ−ジメチル−エチレンジアミン（３ｍＬ、２７．２ｍｍｏｌ）を加え、溶液を加熱還流し、３時間撹拌した。反応混合物を放冷して室温とし、酢酸エチル（３００ｍＬ）で希釈し、飽和Ｎａ２ＣＯ３水溶液（１００ｍＬで２回）および飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１００ｍＬで２回）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、揮発分を減圧下に除去して、粗アミン中間体（３．２２ｇ）を得た。
【０４２２】
アミン中間体（３．２２ｇ）をＤＣＭ（５ｍＬ）に溶かした。ＤＣＭ（５ｍＬ）に溶かしたＢｏｃ２Ｏ（２．９７ｇ、１３．６９ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（３．９５ｍＬ、２２．６５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で３０分間撹拌した。Ｂｏｃ−およびＭｍｔ−保護中間体を、フラッシュクロマトグラフィーによって精製した。
【０４２３】
収量：３．００ｇ（３．７９ｍｍｏｌ）   
ＭＳ：ｍ／ｚ７９１．４＝［Ｍ＋Ｈ］＋、５１９．３＝［Ｍ−Ｍｍｔ＋Ｈ］＋（ＭＷ計算値７９１．１）。
【０４２４】
０．４Ｍ  ＨＣｌ水溶液（４８ｍＬ）をＢｏｃ−およびＭｍｔ−保護中間体のアセトニトリル（４５ｍＬ）中溶液に加えた。混合物をアセトニトリル（１０ｍＬ）で希釈し、室温で１時間撹拌した。次に、５Ｍ  ＮａＯＨ水溶液を加えることで反応混合物のｐＨ値を５．５に調節した。アセトニトリルを減圧下に除去し、水溶液をＤＣＭで抽出した（１００ｍＬで４回）。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、揮発分を減圧下に除去した。粗アミン１４をそれ以上精製せずに用いた。
【０４２５】
収量：２．５２ｇ（３．１９ｍｍｏｌ）。粗アミン１４のＭＷ７９１．１ｇ／ｍｏｌと仮定した。
【０４２６】
ＭＳ：ｍ／ｚ５１９．３＝［Ｍ＋Ｈ］＋（ＭＷ計算値５１９．８ｇ／ｍｏｌ）。
【０４２７】
実施例１７
連結基構成単位１５ａ、１５ｂおよび１５ｃの合成
連結基構成単位１５ａを、下記図式に従って合成した。
【化３９】
2014522878.tif 000050
【０４２８】
アミン１４（５０３ｍｇ、０．６３５ｍｍｏｌ、粗１のＭＷ７９１．１ｇ／ｍｏｌと仮定）をＤＭＦ  ４ｍＬ（脱水、モレキュラーシーブス）に溶かした。Ｆｍｏｃ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌａ−ＯＨ（３１０ｍｇ、０．９５３ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ（４０８ｍｇ、０．９５３ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（３３２μＬ、１．９０６ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で３時間撹拌した。ピペリジン１５０μＬおよびＤＢＵ  １５０μＬを混合物に加え、撹拌をさらに６０分間続けた。酢酸４００μＬを加え、生成物をＨＰＬＣによって精製した。生成物１５ａを含むＨＰＬＣ分画を飽和ＮａＨＣＯ３溶液で中和し、ＤＣＭで２回抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、揮発分を減圧下に除去した。   
収量：２０３ｍｇ（０．３３６ｍｍｏｌ）
ＭＳ：ｍ／ｚ６０４．１＝［Ｍ＋Ｈ］＋（ＭＷ計算値６０３．９ｇ／ｍｏｌ）。
【０４２９】
連結基構成単位１５ｂ
【化４０】
2014522878.tif 000051
【０４３０】
Ｆｍｏｃ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌａ−ＯＨに代えてＦｍｏｃ−Ａｉｂ−ＯＨを用いた以外は、１５ａについて記載の方法に従って連結基構成単位１５ｂを合成した。   
収量：９５ｍｇ（０．１６１ｍｍｏｌ）
ＭＳ：ｍ／ｚ６０４．２＝［Ｍ＋Ｈ］＋（ＭＷ計算値６０３．９ｇ／ｍｏｌ）。
【０４３１】
連結基構成単位１５ｃ
【化４１】
2014522878.tif 000052
【０４３２】
Ｆｍｏｃ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌａ−ＯＨに代えてＦｍｏｃ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｉｂ−ＯＨを用いた以外は、１５ａについて記載の方法に従って連結基構成単位１５ｃを合成した。
【０４３３】
収量：１４９ｍｇ（０．２４１ｍｍｏｌ）。
【０４３４】
ＭＳ：ｍ／ｚ６１９．０＝［Ｍ＋Ｈ］＋（ＭＷ計算値６１７．９ｇ／ｍｏｌ）。
【０４３５】
実施例１８
トレプロスチニル−連結基チオール１６ａ、１６ｂ、１６ｃ、１６ｄ、１６ｅおよび１６ｆの合成
トレプロスチニル−連結基チオール１６ａ／１６ｂを、下記の図式に従って合成した。
【化４２】
2014522878.tif 000053
【０４３６】
2014522878.tif 000054
【０４３７】
ＰＥフリットを取り付けた１０ｍＬ単回使用注射器リアクターに、２−クロロトリチルクロライド（ＴＣＰ）樹脂（１５３ｍｇ、負荷量１．２２ｍｍｏｌ／ｇ、０．１８６ｍｍｏｌ）を入れた。トレプロスチニル（５４ｍｇ、０．１３８ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６０μＬ、０．３４６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（無水、モレキュラーシーブス）中溶液をリアクター中に引き入れた。リアクターを室温で２時間撹拌した。メタノール２００μＬを加え、リアクターをさらに１０分間撹拌した。溶液を取り出し、樹脂をＤＣＭ（５回）、ＤＭＦ（５回）およびＤＣＭ（１０回）で洗浄した。樹脂を真空乾燥した（１ｍｂａｒ）。重量基準で、０．７２ｍｍｏｌ／ｇＴＣＰ樹脂のトレプロスチニル負荷量が得られた。
【０４３８】
ＴＨＦ  ９００μＬ（脱水、モレキュラーシーブス）および１Ｍ  ＬｉＯＥｔ／ＴＨＦ溶液３００μＬ（３００μｍｏｌ）を、ＰＥフリットを取り付けた単回使用２ｍＬ注射器リアクター中にトレプロスチニル負荷ＴＣＰ樹脂３０ｍｇ（２１，６μｍｏｌ）を引き込んだ。リアクターを室温で４０分間撹拌した。溶液を取り出し、樹脂をＴＨＦで洗浄した（２回）。ビス（ペンタフルオロフェニル）カーボネート（１００ｍｇ、２５４μｍｏｌ）のＴＨＦ（１ｍＬ）中溶液を注射器に引き込み、それを室温で９０分間撹拌した。溶液を取り出し、樹脂をＴＨＦ（５回）およびＤＭＦ（５回）で洗浄した。連結基構成単位１５ａ（５０ｍｇ、８３μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（５０μＬ、２８７μｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（１ｍｇ、８μｍｏｌ）のＤＭＦ（脱水、モレキュラーシーブス）３００μＬ中溶液を注射器に引き込んだ。注射器を室温で３時間撹拌した。溶液を取り出し、樹脂をＤＭＦ（１０回）およびＤＣＭ（１０回）で洗浄した。開裂カクテルＨＦＩＰ／ＤＣＭ／ＴＥＳ９０／１０／２（体積比）５００μＬとともに１０分間インキュベートすることで（３回）、生成物を樹脂から開裂させた。樹脂をＤＣＭ  ５００μＬで洗浄した（２回）。合わせた開裂液および洗浄液にＴＦＡ（２５０μＬ）を加え、混合物を室温で１０分間インキュベートした。揮発分を減圧下に除去した。残留物についてＨＰＬＣ精製を行うことで、チオール１６ａ／１６ｂを２種類の位置異性体の混合物として得た。ＨＰＬＣ溶出液を、それ以上精製せずに次の段階で用いた。
【０４３９】
ＭＳ：ｍ／ｚ６７８．１＝［Ｍ＋Ｈ］＋（ＭＷ計算値６７８．０ｇ／ｍｏｌ）。
【０４４０】
トレプロスチニル連結基チオール１６ｃ／１６ｄ
【化４３】
2014522878.tif 000055
【０４４１】
連結基構成単位１５ｂを１５ａに代えて用いた以外は、１６ａ／１６ｂに記載の方法に従ってトレプロスチニル連結基チオール１６ｃ／１６ｄを合成した。チオール１６ｃ／１６ｄを異性体の混合物として得た。ＨＰＬＣ溶出物を、それ以上処理せずに次の段階で用いた。   
ＭＳ：ｍ／ｚ６７８．１＝［Ｍ＋Ｈ］＋（ＭＷ計算値６７８．０ｇ／ｍｏｌ）。
【０４４２】
トレプロスチニル連結基チオール１６ｅおよび１６ｆ
【化４４】
2014522878.tif 000056
【０４４３】
連結基構成単位１５ｃを１５ａに代えて用いた以外は、１６ａ／１６ｂについて記載の方法に従ってトレプロスチニル連結基チオール１６ｅおよび１６ｆを合成した。構造１６ｅおよび１６ｆに割り当てた２種類の異性体をＨＰＬＣによって分離した。ＨＰＬＣ溶出物を、それ以上処理せずに次の段階で用いた。   
１５ｅ  ＭＳ：ｍ／ｚ６９３．０＝［Ｍ＋Ｈ］＋（ＭＷ計算値６９２．０ｇ／ｍｏｌ）。
【０４４４】
１５ｆ  ＭＳ：ｍ／ｚ６９３．０＝［Ｍ＋Ｈ］＋（ＭＷ計算値６９２．０ｇ／ｍｏｌ）。
【０４４５】
実施例１９
連結基構成単位１７ａおよび１７ｂの合成
連結基構成単位１７ａおよび１７ｂを、下記図式に従って合成した。
【化４５】
2014522878.tif 000057
【０４４６】
Ｌ−Ｆｍｏｃ−Ｄｐｒ（Ｂｏｃ）−ＯＨ（１００ｍｇ、０．２３４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ  ０．５ｍＬ（脱水、モレキュラーシーブス）に溶かした。６−（Ｓ−トリチルスルファニル）−ヘキサンアミン（７１ｍｇ、０．１８９ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ（９７ｍｇ、０．２２７ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６６μＬ、０．３７８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。ピペリジン（５０μＬ、０．５０５ｍｍｏｌ）およびＤＢＵ（４０μＬ、０．３３６ｍｍｏｌ）を加え、撹拌を１０時間続けた。シス−シクロヘキサンジカルボン酸無水物（６００ｍｇ、３．８９ｍｍｏｌ）を加え、撹拌を１時間続けた。溶液を水／アセトニトリルで反応停止し、酢酸で酸性とした。構成単位をＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した。先に溶出したジアステレオマー１７ａおよび後で溶出したジアステレオマー１７ｂの構造割り当ては任意に行い、逆になることも考えられる。
【０４４７】
収量：１７ａ：３０ｍｇ（０．０４２ｍｍｏｌ）、１７ｂ：４２ｍｇ（０．０５９ｍｍｏｌ）
ＭＳ：ｍ／ｚ７１６．２＝［Ｍ＋Ｈ］＋（ＭＷ計算値７１６．０ｇ／ｍｏｌ）。
【０４４８】
実施例２０
トレプロスチニル連結基チオール１８ａ／１８ｂの合成
【化４６】
2014522878.tif 000058
【０４４９】
連結基構成単位１７ａ（１１ｍｇ、１２μｍｏｌ）、ＥＤＣ・ＨＣｌ（７．４ｍｇ、３８．５μｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（４．７ｍｇ、３８．５μｍｏｌ）をＤＣＭ  ３００μＬ（脱水、モレキュラーシーブス）に溶かした。溶液を、フリットを取り付けた単回使用２ｍＬ注射器リアクター中のトレプロスチニル負荷ＴＣＰ樹脂１５ｍｇ（１０．８μｍｏｌ、０．７２ｍｍｏｌ／ｇ、実施例３参照）に引き込んだ。リアクターを室温で１５時間撹拌した。溶液を取り出し、樹脂をＤＣＭで洗浄した（１０回）。樹脂をＨＦＩＰ／ＤＣＭ３０／７０（体積比）５００μＬとともに１０分間インキュベート（３回）することで生成物を開裂させた。樹脂をＤＣＭ  ５００μＬで洗浄した（２回）。合わせた開裂溶液および洗浄溶液に、ＴＦＡ  ２５０μＬを加え、混合物を室温で１０分間インキュベートした。揮発分を減圧下に除去した。残留物について、ＲＰ−ＨＰＬＣ精製を行って、チオール１８ａ／１８ｂを２種類の位置異性体の混合物として得た。ＨＰＬＣ溶出液を、それ以上精製せずに次の段階で用いた。   
収量：１８ａ／１８ｂ  １．５ｍｇ（２μｍｏｌ）（エルマン試験によるチオール定量によって求めた値）。   
ＭＳ：ｍ／ｚ７４６．２＝［Ｍ＋Ｈ］＋（ＭＷ計算値７４６．０ｇ／ｍｏｌ）。
【０４５０】
実施例２１
ＰＥＧ−連結基−薬剤抱合体１９ａ／ｂ、１９ｃ／６ｄ、１９ｅ、１９ｆおよび１９ｇ／１９ｈの合成
ＰＥＧ−連結基−薬剤抱合体を、下記の図式に従って製造した。
【化４７】
2014522878.tif 000059
【０４５１】
トレプロスチニル連結基チオール１６ａ／１６ｂ、１６ｃ／１６ｄ、１６ｅ、１６ｆおよび１８ａ／１８ｂのＨＰＬＣ溶出液に、過剰の直鎖ＰＥＧ  ５ｋＤａマレイミドを加えた。ｐＨ７．４緩衝液（０．５Ｍリン酸塩）を加えることで混合物を中和し、室温でインキュベートした。チオールの消費が完了した後（約１時間）、混合物を酢酸で酸性とし、ＲＰ−ＨＰＬＣによって過剰のＰＥＧ−マレイミドから分離した。ＨＰＬＣ溶出液を凍結乾燥して、それぞれＰＥＧ−連結基−薬剤抱合体１９ａ／ｂ、１９ｃ／１９ｄ、１９ｅ、１９ｆおよび１９ｇ／１９ｈを得た。
【０４５２】
実施例２２
ＰＥＧ抱合体１９ａ／ｂ、１９ｃ／１９ｄ、１９ｅ、１９ｆおよび１９ｇ／１９ｈからの薬剤放出半減期の測定
【化４８】
2014522878.tif 000060
【０４５３】
ＰＥＧ−連結基−薬剤抱合体１９ａ／ｂ、１９ｃ／１９ｄ、１９ｅ、１９ｆおよび１９ｇ／１９ｈをｐＨ７．４緩衝液（６０ｍＭリン酸ナトリウム、３ｍＭＥＤＴＡ、０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０、１ｍＬ）に溶かし、３７℃でインキュベートした。各種時間点で、小分けサンプルをＵＰＬＣによって分析して、放出トレプロスチニルの量を求め、それを時間に対してプロットした。薬剤放出は一次速度則に従うことが認められた。曲線適合ソフトウェアを用いて、個々の抱合体からの薬剤放出の半減期を測定した（表１）
【表２】
2014522878.tif 000061
【０４５４】
実施例２３
中間体２０の合成
【化４９】
2014522878.tif 000062
【０４５５】
２，４，６−トリメトキシベンズアルデヒド（４．２２ｇ、２１．５１ｍｍｏｌ）のメタノール／ＤＣＭ１／１（体積比）８８ｍＬ中溶液をメタノール４４ｍＬ中の６−（Ｓ−トリチルスルファニル）−ヘキサンアミン（６．７４ｇ、１７．９５ｍｍｏｌ）および水素化シアノホウ素ナトリウム（１．５８ｇ、２５．１４ｍｍｏｌ）に滴下することで、６−（Ｓ−トリチルスルファニル）−ヘキサンアミンのアミノ基をＴｍｏｂ（２，４，６−トリメトキシベンジル）保護した。混合物を室温で１．５時間撹拌し、０．４Ｎ  ＨＣｌ水溶液９５ｍＬで反応停止した。室温で３０分間さらに撹拌した後、混合物をで抽出し酢酸エチル（４回）。合わせた有機層を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２回）およびブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、溶媒を減圧下に除去した。
【０４５６】
０．１％（体積比）トリエチルアミンを含むＤＣＭ／メタノールで溶離を行うフラッシュクロマトグラフィーによってＴｍｏｂ保護アミン２０を精製した。
【０４５７】
収量：５．８８ｇ（５５％）。
【０４５８】
ＭＳ：ｍ／ｚ５５６．３＝［Ｍ＋Ｈ］＋（ＭＷ計算値５５５．７９ｇ／ｍｏｌ）。
【０４５９】
実施例２４
中間体２１の合成
【化５０】
2014522878.tif 000063
【０４６０】
（１Ｒ，２Ｓ）−シクロヘキサンジカルボン酸１−メチルエステル、ＣＡＳ番号８８３３５−９２−６（合成については、Ｒ．  Ｍａｎｚａｎｏ  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．  ２０１０，  ７５（１５），  ５４１７−５４２０参照）（５０６ｍｇ、２．７２ｍｍｏｌ）をトルエン（１１ｍＬ、脱水）に溶かした。塩化チオニル（１．０９ｍＬ、１５．０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を圧力管中６０℃で１時間加熱した。揮発分を減圧下に除去した。Ｔｍｏｂ保護アミン２０（１．６６ｇ、２．９９ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１．１２ｍＬ、６．４３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３０ｍＬ、脱水）中溶液を加え、混合物を室温で２時間撹拌した。酢酸エチルを加え、有機層を０．１Ｎ  ＨＣｌ水溶液で洗浄した（２回）。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、溶媒を減圧下に除去した。酢酸エチル／ヘプタンで溶離を行うフラッシュクロマトグラフィーによって、メチルエステル２１を精製した。   
収量：１．５５ｇ（７９％）
ＭＳ：ｍ／ｚ７４６．１＝［Ｍ＋Ｎａ］＋（ＭＷ計算値７２３．９８ｇ／ｍｏｌ）。
【０４６１】
実施例２５
中間体２２の合成
【化５１】
2014522878.tif 000064
【０４６２】
メチルエステル２１（３．１２ｇ、４．３１ｍｍｏｌ）をイソプロパノール（１０ｍＬ）に溶かした。１Ｍ  ＬｉＯＨ水溶液３５ｍＬを加え、混合物を室温で５日間撹拌した。酢酸エチルを加え、有機層を０．０５Ｎ  ＨＣｌ水溶液（２回）およびブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、溶媒を減圧下に除去した。０．１％ギ酸（体積比）を含む酢酸エチル／ヘプタンで溶離を行うフラッシュクロマトグラフィーによって２２を精製した。   
収量：２．４１ｇ（７９％）
ＭＳ：ｍ／ｚ７１０．１＝［Ｍ＋Ｈ］＋（ＭＷ計算値７０９．９５ｇ／ｍｏｌ）。
【０４６３】
実施例２６
中間体６ａの合成
【化５２】
2014522878.tif 000065
【０４６４】
化合物２２（１．２３ｇ、１．７４ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１８ｍＬ）に溶かした。ＴＦＡ（２ｍＬ）およびＴＥＳ（６００μＬ）を加え、混合物を室温で４０分間撹拌した。揮発分を減圧下に除去した。残留物をＤＣＭ（２０ｍＬ）に溶かし、トリチルクロライド（７２８ｍｇ、２．６１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で２時間撹拌した。ＤＣＭを減圧下に除去した。溶離液として０．１％ギ酸（体積比）を含む酢酸エチル／ヘプタンを用いるフラッシュクロマトグラフィー、次にＲＰ−ＨＰＬＣ精製を行って、カルボン酸６ａを精製した。   
収量：６１５ｍｇ（６７％）
ＭＳ：ｍ／ｚ５５２．２＝［Ｍ＋Ｎａ］＋（ＭＷ計算値５２９．７５ｇ／ｍｏｌ）。
【０４６５】
実施例２７
トレプロスチニル連結基チオール２４ａの合成
【化５３】
2014522878.tif 000066
【０４６６】
Ｄｍｏｂ保護トレプロスチニル８（１００ｍｇ、０．１８５ｍｍｏｌ）、カルボン酸６ａ（１９５ｍｇ、０．３６８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ・ＨＣｌ（７２ｍｇ、０．３７６ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（４３ｍｇ、０．３５２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１．８ｍＬ、脱水、モレキュラーシーブス）に溶かした。混合物を室温で１日間撹拌した。酢酸エチルを加え、有機層を０．１Ｎ  ＨＣｌ水溶液（３回）およびブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、溶媒を減圧下に除去した。
【０４６７】
残留物をＨＦＩＰ（５ｍＬ）、ＴＦＡ（２５０μＬ）およびＴＥＳ（２５０μＬ）に溶かし、室温で３０分間撹拌した。沈殿を濾去し、濾液を減圧下に溶媒留去した。
【０４６８】
ＵＰＬＣ分析で、４／１比の位置異性体２４ａおよび２４ｂ（カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ１００×２．１ｍｍ、１．７μｍ  ＸＢ−Ｃ１８シリカ、孔径１００Å、Ｐｈｅｎｏｍｏｎｅｘ  Ｌｔｄ，  Ａｓｃｈａｆｆｅｎｂｕｒｇ、ドイツ；流量０．２５ｍＬ／分；溶媒Ａ：水＋０．０５％ＴＦＡ（体積比）、溶媒Ｂ：アセトニトリル＋０．０４％ＴＦＡ；勾配：３０％から５８％Ｂ（１０分）、５８％Ｂ定組成（１０分）、５８％から８０％Ｂ（５分）、８０％から９９％（５分）、波長２８０ｎｍ）が明らかになった。２４ａが化合物９ｘと同一であると判明した。
【０４６９】
残留物をアセトニトリル／水に取り、２４ａをＲＰ−ＨＰＬＣ（溶媒Ａ：Ｈ２Ｏ＋０．０１％ＨＣｌ、溶媒Ｂ：ＭｅＣＮ＋０．０１％ＨＣｌ、勾配：１６分かけて６０％から８５％Ｂ）によって精製した。異性体２４ａが最初に溶出し、次に異性体２４ｂが溶出した。純粋な２４ａを含む分画を合わせ、凍結乾燥した。２４ａおよび２４ｂを含む混合分画について再精製を行った。   
収量２４ａ：２９．５ｍｇ（２４％） 
ＭＳ：ｍ／ｚ６６０．３＝［Ｍ＋Ｈ］＋（ＭＷ計算値６５９．９ｇ／ｍｏｌ）。   
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δ［ｐｐｍ］）：７．０７（ｔ、１Ｈ）、６．８０（ｄ、１Ｈ）、６．７１（ｄ、１Ｈ）、５．８６（ｂｓ、１Ｈ）、４．７８−４．６３（ｍ、３Ｈ）、３．５３（ｂｓ、１Ｈ）、３．１４−３．０３（ｍ、１Ｈ）、３．０３−２．８３（ｍ、２Ｈ）、２．８２−２．６６（ｍ、２Ｈ）、２．６６−２．５８（ｍ、１Ｈ）、２．５８−２．４６（ｍ、４Ｈ）、２．４６−２．３１（ｍ、１Ｈ）、２．３１−２．１３（ｍ、１Ｈ）、２．１３−１．９２（ｍ、２Ｈ）、１．９２−１．８１（ｍ、１Ｈ）、１．７５−１．５１（ｍ、７Ｈ）、１．５１−１．２１（ｍ、２１Ｈ）、１．２１−１．０８（ｍ、１Ｈ）、０．９０（ｔ、３Ｈ）。
【０４７０】
１３Ｃ−ＮＭＲ（１２６ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３、δ［ｐｐｍ］）：１７４．７、１７４．２、１７１．７、１５５．２、１４０．６、１２７．５、１２６．３、１２１．８、１０９．７１、７８．８、７２．４、６５．８、４８．３、４３．９、４２．５、４０．４、３９．７、３７．４、３７．３、３５．４、３４．００、３３．０、３２．９、３２．１、２９．３、２８．４、２８．１、２７．０、２６．４、２５．５、２４．６、２４．２、２３．２、２２．８、１４．２。
【０４７１】
実施例２８
トレプロスチニル連結基チオール２４ａの４分岐ＰＥＧ  ２０ｋＤａマレイミドによるＰＥＧ化反応
【化５４】
2014522878.tif 000067
【０４７２】
トレプロスチニル連結基チオール２４ａ（７．５ｍｇ、１１．３μｍｏｌ）のアセトニトリル／水９／１（体積比）（２ｍＬ）中溶液を、４分岐ＰＥＧ  ２０ｋＤａマレイミド（５３．５ｍｇ、２．５４μｍｏｌ）のアセトニトリル／水１／１（体積比）（２ｍＬ）中溶液と混合した。ｐＨ７．４緩衝液（５０ｍＭリン酸塩、０．８ｍＬ）を加えることで、ｐＨを７．０に調節した。反応混合物を室温で１．５時間撹拌し、ＲＰ−ＨＰＬＣ（溶媒Ａ：０．０１％ＨＣｌ含有Ｈ２Ｏ、溶媒Ｂ：０．０１％ＨＣｌ含有ＭｅＣＮ、勾配：１６分間かけて４５％から８５％Ｂ）によって精製した。生成物を含む分画を蓄積し、アセトニトリルを減圧下に除去した。ｐＨ７．４緩衝液（リン酸塩、０．５Ｍ）を加えることで溶液を中和した。溶液を濃縮し、限外濾過によって（Ｖｉｖａｓｐｉｎ遠心濃縮装置、１０ｋＤａカットオフを有するＰＥＳ）、緩衝液を４６ｇ／Ｌマンニトールを含む１０ｍＭ  ｐＨ７．０リン酸溶液と交換して、２５の最終溶液８．５ｍＬを得た。ＵＰＬＣおよびＳＥＣ分析で均一物であることが明らかになった。塩基性加水分解（小分けサンプル３０μＬを０．５Ｍ  ＮａＯＨ  ３５μＬで処理した）後にトレプロスチニル含有量の定量によって濃度を求めた。室温で３０分間インキュベートした後、酢酸３５μＬを加えた。トレプロスチニル較正曲線を用いることで、ＵＰＬＣによってトレプロスチニル含有量を求めた。総トレプロスチニル含有量が２．０ｍｇであることが認められ、それは３０ｍｇの２５に相当する。収量：ＰＥＧ原料基準で５０％。
【０４７３】
実施例２９
ＴｒａｎｓＣｏｎ  ＰＥＧ連結基トレプロスチニル化合物２５のトレプロスチニル放出動態
２５からのトレプロスチニル放出動態について実施例１５に記載のように測定し、化合物１３から得られた結果と比較した。半減期（５日）に差は認められなかった。
【０４７４】
実施例３０
ラット血清中でのＴｒａｎｓＣｏｎ  ＰＥＧ連結基トレプロスチニル化合物１３のトレプロスチニル放出動態
ｐＨ７．５ＨＥＰＥＳ緩衝液（１ＭＨＥＰＥＳ、３ｍＭＥＤＴＡ）１５０μＬをラット血清１．２ｍＬ（ＷＩＳＴＡＲラットＬｉヘパリン血漿、Ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  Ｎｏｖｉ，  ＭＩ，  ＵＳＡ）と混合した。ＴｒａｎｓＣｏｎ  ＰＥＧ連結基トレプロスチニル１３溶液１５０μＬ（１０ｍＭリン酸塩４６ｇ／Ｌマンニトール緩衝液ｐＨ７．０  １．５ｍＬ中１３  ０．１５ｍｇ）を加えた。ｐＨ電極によって、混合物のｐＨが７．４であることが確認された。混合物を３７℃でインキュベートした。所定の時間点で、小分けサンプル１００μＬを抜き取った。小分けサンプル１００μＬを、放出および総トレプロスチニル含有量について分析した。
【０４７５】
放出トレプロスチニルの分析に関しては、小分けサンプル１００μＬに内部標準（２．８μｇ／ｍＬトルブタミドのメタノール／水１／１（体積比）中溶液）２０μＬを加え、Ｏｓｔｒｏ９６ウェルプレート（Ｗａｔｅｒｓ  ＧｍｂＨ，  Ｅｓｃｈｂｏｒｎ、ドイツ）に移し入れた。３倍体積の予冷した（０から５℃）１％ギ酸を含むアセトニトリルを加えることで血漿タンパク質を沈殿させた。陽圧をかけ（４バール、Ｗａｔｅｒｓ  Ｐｏｓｉｔｉｖｅ  Ｐｒｅｓｓｕｒｅ−９６  Ｐｒｏｃｅｓｓｏｒ）、溶出液を凍結乾燥した。凍結乾燥物を１０ｍＭギ酸アンモニウムｐＨ４．０／アセトニトリル７／３（体積比）４０μＬに溶かした。溶液を遠心し、上清についてＵＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳにより放出トレプロスチニルのアッセイを行った。
【０４７６】
総トレプロスチニル含有量（放出およびキャリア結合トレプロスチニルの合計）を分析するため、１００μＬ小分けサンプルに内部標準（２．８μｇ／ｍＬトルブタミドのメタノール／水１／１（体積比）中溶液）２０μＬを加え、０．５Ｍ  ＬｉＯＨ  ５０μＬを加えた。混合物を振盪器中にて室温で２時間インキュベートした。１Ｍ  ＨＣｌ  ２５μＬを加えた後、混合物をＯｓｔｒｏ９６ウェルプレート（Ｗａｔｅｒｓ  ＧｍｂＨ，  Ｅｓｃｈｂｏｒｎ、ドイツ）に移し入れた。３倍体積の予冷した（０から５℃）１％ギ酸を含むアセトニトリルを加えることで血漿タンパク質を沈殿させた。陽圧をかけ（４バール、Ｗａｔｅｒｓ  Ｐｏｓｉｔｉｖｅ  Ｐｒｅｓｓｕｒｅ−９６  Ｐｒｏｃｅｓｓｏｒ）、溶出液を凍結乾燥した。凍結乾燥物を１０ｍＭギ酸アンモニウムｐＨ４．０／アセトニトリル７／３（体積比）１００μＬに溶かした。溶液を遠心し、上清についてＵＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳにより総トレプロスチニル含有量のアッセイを行った。
【０４７７】
トレプロスチニル含有量測定のためのＵＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ法
ＥＳＩプローブを介してＴｈｅｒｍｏ  ＬＴＱ  Ｏｒｂｉｔｒａｐ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ質量分析装置に連結されており、Ｗａｔｅｒｓ  ＢＥＨ  Ｃ１８（５０×２．１ｍｍ（内径）、粒径１．７μｍ）を分析カラム（移動相Ａ：１０ｍＭギ酸アンモニウムｐＨ４．６、移動相Ｂ：メタノール、Ｔ＝２２℃）として用いるＷａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣを用いて、血漿トレプロスチニル濃度の定量を行った。勾配システムは、流量０．２５ｍＬ／分での４分以内で０．１％Ｂから９５％Ｂの直線勾配、９５％Ｂによる定組成洗浄期（０．５分）および再コンディショニング期（２．４分）を含むものであった。選択された反応モニタリング（ＳＲＭ、陰イオン化）モードでイオンの検出を行って、トレプロスチニルについてのｍ／ｚ３８９．２前駆体イオン／ｍ／ｚ３３１．２生成物イオンおよび内部標準（ＩＳ）トルブタミドについてのｍ／ｚ２６９．１前駆体イオン／ｍ／ｚ１７０．０生成物イオンでの遷移ペアをモニタリングした。
【０４７８】
較正標準の公称トレプロスチニル濃度に対して抽出ピーク面積比：面積トレプロスチニル／面積トルブタミドをプロットすることで、較正曲線を得た。標準的なソフトウェアを用いて、結果を線形回帰に適合させた。
【０４７９】
各種時間点での定量実験の抽出ピーク面積比：面積トレプロスチニル／面積トルブタミドを用いて、較正曲線に従ってトレプロスチニル含有量を計算した。
【０４８０】
時間点でのトレプロスチニル放出は、総トレプロスチニル含有量と比較したトレプロスチニル放出％として表した（図１参照）。一次速度則適合を用いることで、３７℃での緩衝ラット血清における２５からのトレプロスチニルの放出動態について半減期４．５日が得られ、それは３７℃でのｐＨ７．４緩衝液中の放出動態と良好な一致を示している（実施例１５）。
【０４８１】
実施例３１
サルにおけるＰＥＧトレプロスチニル抱合体２５のＰＫ
それぞれ雄カニクイザル３匹において皮下注射および静脈注射により、単回投与として用量レベル０．５ｍｇ／ｋｇで、２５（１０ｍＭ  ｐＨ７．０リン酸塩中３ｍｇ／ｍＬ、４６ｇ／Ｌマンニトール）を与えた。２週間にわたり、所定の時間点で採血を行った。血漿について、ＰＥＧ含有量および総トレプロスチニル含有量（放出およびキャリア結合トレプロスチニルの合計）のアッセイを行った。キャリア結合トレプロスチニルと比較して遊離トレプロスチニルの排出が早いため、トレプロスチニル血漿レベルは、遊離トレプロスチニルレベルではなくトレプロスチニル抱合体の存在を反映するものである。
【０４８２】
総トレプロスチニル含有量を分析するため、カニクイザルにおける血漿サンプル１００μＬおよびトレプロスチニル標準に内部標準（２．８μｇ／ｍＬトルブタミドのメタノール／水１／１（体積比）中溶液）２０μＬを加え、０．５Ｍ  ＬｉＯＨ  ５０μＬを加えた。混合物を振盪器中にて室温で２．５時間インキュベートした。１Ｍ  ＨＣｌ  ２５μＬを加えた後、混合物をＯｓｔｒｏ９６ウェルプレート（Ｗａｔｅｒｓ  ＧｍｂＨ，  Ｅｓｃｈｂｏｒｎ、ドイツ）に移し入れた。３倍体積の予冷した（０から５℃）１％ギ酸を含むアセトニトリルを加えることで血漿タンパク質を沈殿させた。陽圧をかけ（４バール、Ｗａｔｅｒｓ  Ｐｏｓｉｔｉｖｅ  Ｐｒｅｓｓｕｒｅ−９６  Ｐｒｏｃｅｓｓｏｒ）、溶出液を凍結乾燥した。凍結乾燥物を１０ｍＭギ酸アンモニウムｐＨ４．０／アセトニトリル７／３（体積比）１００μＬに溶かした。溶液を遠心し、上清についてＵＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳにより総トレプロスチニル含有量のアッセイを行った。
【０４８３】
トレプロスチニル含有量測定のためのＵＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ法
ＥＳＩプローブを介してＴｈｅｒｍｏ  ＬＴＱ  Ｏｒｂｉｔｒａｐ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ質量分析装置に連結されており、Ｗａｔｅｒｓ  ＢＥＨ  Ｃ１８（５０×２．１ｍｍ（内径）、粒径１．７μｍ）を分析カラム（移動相Ａ：１０ｍＭギ酸アンモニウムｐＨ４．６、移動相Ｂ：メタノール、Ｔ＝２２℃）として用いるＷａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣを用いて、血漿トレプロスチニル濃度の定量を行った。勾配システムは、流量０．２５ｍＬ／分での４分以内で０．１％Ｂから９５％Ｂの直線勾配、９５％Ｂによる定組成洗浄期（０．５分）および再コンディショニング期（２．４分）を含むものであった。選択された反応モニタリング（ＳＲＭ、陰イオン化）モードでイオンの検出を行って、トレプロスチニルについてのｍ／ｚ３８９．２前駆体イオン／ｍ／ｚ３３１．２生成物イオンおよび内部標準（ＩＳ）トルブタミドについてのｍ／ｚ２６９．１前駆体イオン／ｍ／ｚ１７０．０生成物イオンでの遷移ペアをモニタリングした。
【０４８４】
カニクイザル血漿で調製した較正標準の公称トレプロスチニル濃度に対して抽出ピーク面積比：面積トレプロスチニル／面積トルブタミドをプロットすることで、較正曲線を得た。標準的なソフトウェアを用いて、結果を線形回帰に適合させた。
【０４８５】
各種時間点での定量実験の抽出ピーク面積比：面積トレプロスチニル／面積トルブタミドを用いて、較正曲線によるトレプロスチニル含有量を計算した。
【０４８６】
総ＰＥＧ含有量の分析のため、血漿サンプルについて塩基性前インキュベーションを行って、２５からの均一なＰＥＧ材料を得た。これは、２５の注射後に、経時的なキャリア分子からの４種類のトレプロスチニルの順次放出が生じるため、異なるトレプロスチニルキャリア種が発生するという事実に基づいたものであった。
【０４８７】
血清サンプル５０μＬおよびカニクイザル血清における２５ＰＥＧトレプロスチニル抱合体標準を、２００ｍＭ  ＨＥＰＥＳ溶液（ｐＨ７．５）５０μＬで希釈し、０．５Ｍ  ＬｉＯＨ  ５０μＬを加えた。混合物を、振盪器において室温で２時間インキュベートした。１Ｍ  ＨＣｌ  ５０μＬを加えた後、Ｌｉｆｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  Ｉｎｃ．  Ｗｅｓｔ  Ｃｈｅｓｔｅｒ，  ＰＡ，  ＵＳＡからの高感度ＰＥＧＥＬＩＳＡキットＰ−０００３を用い、製造者のマニュアルに従って混合物のアッセイを行った。
【０４８８】
較正標準の公称ＰＥＧ濃度に対して４５０ｎｍでの吸収値をプロットすることで、較正曲線を得た。標準的なソフトウェアを用い、結果をＳ字曲線に適合させた。
【０４８９】
各種時間点での定量の４５０ｎｍの吸収値を用いて、較正曲線に従ってＰＥＧ含有量を計算した。
【０４９０】
結果：２５の単回投与皮下注射後の総トレプロスチニル含有量分析で、サルにおける２週間を超えるトレプロスチニル抱合体の長期循環期間がわかる（図２）
２５の単回投与静脈注射および総トレプロスチニル含有量についての血漿分析により、同様の循環期間が明らかになった（図３）。標準的なソフトウェアを用いることで、見かけの一次総トレプロスチニル排出半減期２．９日（速度定数ｋａｐｐａｒｅｎｔ：０．２３９／日）が得られた。
【０４９１】
対照的に、ＰＥＧキャリア含有量についての血漿分析により、排出がかなり遅いことが分かった（図３）。標準的なソフトウェアを用いて一次速度則として適合させることで、ＰＥＧキャリア排出半減期６．６日（速度定数ｋＰＥＧｅｌｉｍ：０．１０５／日）が得られた。
【０４９２】
例えばＰＥＧキャリアからの１から４種類のトレプロスチニルの順次連結基加水分解／放出によって生じる各種トレプロスチニルキャリア種の排出速度定数は等しいと仮定する。
【０４９３】
ＰＥＧキャリアと比較した総トレプロスチニルの見かけの排出半減期が短いことは、ＰＥＧキャリアの排出と連結基加水分解によるトレプロスチニル放出の組み合わせに基づくものである。ｋａｐｐａｒｅｎｔ（０．２３９／日）およびｋＰＥＧｅｌｉｍ（０．１０５／日）の測定された速度定数値から、連結基開裂定数ｋｌｉｎｋｅｒによる一次トレプロスチニル放出を計算することができる。
【０４９４】
ｅｘｐ（−ｋａｐｐａｒｅｎｔｔ）＝ｅｘｐ（−ｋＰＥＧｅｌｉｍｔ）×ｅｘｐ（−ｋｌｉｎｋｅｒｔ）＝ｅｘｐ（−ｔ［ｋＰＥＧｅｌｉｍ＋ｋｌｉｎｋｅｒ］）
対数化および再配列後に、ｋｌｉｎｋｅｒを下記に従って計算することができる。
【０４９５】
ｋｌｉｎｋｅｒ＝ｋａｐｐａｒｅｎｔ−ｋＰＥＧｅｌｉｍ；ｋｌｉｎｋｅｒ＝０．２３９／日−０．１０５／日＝０．１３４／日
式ｔｈａｌｆ  ｌｉｆｅ  ｔｉｍｅ＝ｌｎ（２）／ｋを用いることで、連結基加水分解によるトレプロスチニル放出の半減期が５．２日と計算され、それはイン・ビトロで求めた連結基トレプロスチニル放出半減期５日と良好な一致を示している。
【０４９６】
実施例３２
ラットにおけるＰＥＧトレプロスチニル抱合体２５および遊離トレプロスチニルのＰＫ
２５（３ｍｇ／ｍＬ緩衝液（１０ｍＭ  ｐＨ７．０リン酸塩、４６ｇ／Ｌマンニトール））を、雄ウィスターラットそれぞれにおいて、単回投与として用量レベル５．５ｍｇ／ｋｇで注射した。動物３匹に皮下注射で投与を行い、動物３匹に静脈注射で投与を行った。２週間にわたり所定の時間点で採血を行った。酸性クエン酸塩緩衝液（０．５Ｍクエン酸ナトリウム、ｐＨ４．０）５０μＬを含む採血管に直接採血した（２５０μＬ）。血漿について、遊離トレプロスチニル含有量および総トレプロスチニル含有量（遊離およびキャリア結合トレプロスチニルの合計）のアッセイを行った。
【０４９７】
遊離トレプロスチニルの分析のため、血漿５０μＬを氷上で解凍し、酸性クエン酸緩衝液５μＬおよび内部標準（０．２８μｇ／ｍＬトルブタミドのメタノール／水１／１（体積比）中溶液）１０μＬと混合した。サンプルを、Ｏｓｔｒｏ９６ウェルプレート（Ｗａｔｅｒｓ  ＧｍｂＨ，  Ｅｓｃｈｂｏｒｎ、ドイツ）に移し入れ、予冷した（０から５℃）１％ギ酸を含むアセトニトリル４００μＬを急速に加えることで血漿タンパク質を沈殿させた。陽圧をかけ（４バール、Ｗａｔｅｒｓ  Ｐｏｓｉｔｉｖｅ  Ｐｒｅｓｓｕｒｅ−９６  Ｐｒｏｃｅｓｓｏｒ）、溶出液を回収した。次に、ウェルプレートを、１体積％ギ酸を含む氷冷アセトニトリル１００μＬで２回洗った。溶出液を２ｍＬバイアルに移し入れ、エッペンドルフ・サーモミキサーに入れ（１０℃で）、溶出液を緩やかな窒素気流下に４５分間かけて濃縮して、最終体積６０から８０μＬとした。溶媒混合物（ギ酸／アセトニトリル７／３（体積比）でｐＨ４．０に調節した１０ｍＭギ酸アンモニウム水溶液）３０μＬを各バイアルに加え、溶液をＵＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって分析した。
【０４９８】
較正標準を調製するため、ブランク血漿サンプルにトレプロスチニルを加え、同様に処理した。
【０４９９】
遊離トレプロスチニル含有量の測定のためのＵＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ法
ＥＳモードでのＡｇｉｌｅｎｔ  Ｔｒｉｐｌｅｑｕａｄ  ６４６０システム（ＭａｓｓＨｕｎｔｅｒ  Ｘｃａｌｉｂｕｒソフトウェア）に連結されたＡｇｉｌｅｎｔ  １２９０  ＵＨＰＬＣを用いて、血漿トレプロスチニル濃度の定量を行った。分析カラムとして、Ｗａｔｅｒｓ  ＢＥＨ  Ｃ１８を用いた（５０×２．１ｍｍ（内径）、粒径１．７μｍ）。移動相Ａ：１０ｍＭギ酸アンモニウムｐＨ５．７、移動相Ｂ：メタノール。勾配システムは、流量０．２００ｍＬ／分（Ｔ＝４０℃）での８分以内で３５％Ｂから９９％Ｂの直線勾配、９９％Ｂによる定組成洗浄期（０．９分）および再コンディショニング期（３分）を含むものであった。
【０５００】
ＳＲＭモードでイオンの検出を行って、トレプロスチニルについてのｍ／ｚ３８９．１前駆体イオン／ｍ／ｚ３３１．１生成物イオンおよび内部標準（ＩＳ）トルブタミドについてのｍ／ｚ２６９．０前駆体イオン／ｍ／ｚ１６９．９生成物イオンでの遷移ペアをモニタリングした。
【０５０１】
較正標準の公称トレプロスチニル濃度に対して抽出ピーク面積比：面積トレプロスチニル／面積トルブタミドをプロットすることで、較正曲線を得た。標準的なソフトウェアを用いて、結果を線形回帰に適合させた。
【０５０２】
各種時間点での定量実験の抽出ピーク面積比：面積トレプロスチニル／面積トルブタミドを用いて、較正曲線によってトレプロスチニル含有量を計算した。
【０５０３】
総トレプロスチニル血漿含有量を、実施例３１に示したように求めた。
【０５０４】
結果：２５の単回投与皮下注射後の遊離および総トレプロスチニル含有量分析によって、静注後（図４）または皮下注射後（図５）のラットで４日間を超える長期のトレプロスチニル抱合体循環および遊離トレプロスチニルのバーストレス（ｂｕｒｓｔｌｅｓｓ）放出が明らかになる。
【０５０５】
実施例３３
ラセミ混合物６ａ／６ｂのエナンチオマー分離による中間体６ａの単離
ラセミ混合物６ａ／６ｂ（１０７ｇ）を、アセトニトリル／酢酸１０００／１（体積比）を溶離液として用いるＣｈｉｒａｌｐａｋ  ＩＡカラム（２５０×７６ｍｍ、２０μｍ、流量２７０ｍＬ／分）で分離した。第２の溶出エナンチオマー（６ａ）の合わせた溶出液を５体積％水と混合し、減圧下に溶媒留去した。残留物をＤＣＭ（５００ｍＬ）に取り、０．１Ｍ  ＨＣｌ（５００ｍＬ、２回）およびブライン（５００ｍＬ）で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、溶媒を減圧下に除去した。   
収量：２８．９ｇ（２７％）
ＭＳ：ｍ／ｚ５５２．２＝［Ｍ＋Ｎａ］＋（ＭＷ計算値５２９．７５ｇ／ｍｏｌ）。   
Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＩＣカラム（４．５×２５０ｍｍ、５μｍ、溶離液：アセトニトリル／酢酸１０００／１（体積比）、流量：１ｍＬ／分、２３０ｎｍ）によって測定した６ａ／６ｂのエナンチオマー比：９７．５／２．５。
【０５０６】
実施例３４
改善されたトレプロスチニル連結基チオール２４ａ合成
【化５５】
2014522878.tif 000068
【０５０７】
Ｄｍｏｂ保護トレプロスチニル８（２００ｍｇ、０．３７０ｍｍｏｌ）、カルボン酸２３（２９４ｍｇ、０．５５５ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ・ＨＣｌ（２４８ｍｇ、１．２９５ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（１５８ｍｇ、１．２９５ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２．９ｍＬ、脱水、モレキュラーシーブス）に溶かした。混合物を室温で１日間撹拌した。酢酸エチルを加え、有機層を０．１Ｎ  ＨＣｌ水溶液（３回）およびブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、溶媒を減圧下に除去した。
【０５０８】
残留物をＨＦＩＰ（８ｍＬ）に溶かした。ＴＦＡ（２００μＬ）およびＴＥＳ（２００μＬ）を加えた後、混合物を室温で３０分間撹拌した。溶液をヘプタン（１６ｍＬ、６回）で抽出し、ＤＣＭ（１６ｍＬ）で希釈した。溶液を水で抽出した（１６ｍＬ、３回）。合わせた水相をＤＣＭ（８ｍＬ）で逆抽出した。合わせたＤＣＭ相を減圧下に溶媒留去した。
【０５０９】
ＵＰＬＣ分析で、位置異性体２４ａおよび２４ｂの比が９／であることがわかった（カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ  １００×２．１ｍｍ、１．７μｍ  ＸＢ−Ｃ１８シリカ、孔径１００Å、Ｐｈｅｎｏｍｏｎｅｘ  Ｌｔｄ，  Ａｓｃｈａｆｆｅｎｂｕｒｇ、ドイツ；流量０．２５ｍＬ／分；溶媒Ａ：水＋０．０５％ＴＦＡ（体積比）、溶媒Ｂ：アセトニトリル＋０．０４ＴＦＡ；勾配：３０％から５８％Ｂ（１０分）、５８％Ｂ定組成（１０分）、５８％から８０％Ｂ（５分）、８０％から９９％（５分）、波長２８０ｎｍ）。
【０５１０】
残留物をアセトニトリル／水に取り、２４ａをＲＰ−ＨＰＬＣ（溶媒Ａ：Ｈ２Ｏ＋０．０１％ＨＣｌ、溶媒Ｂ：ＭｅＣＮ＋０．０１％ＨＣｌ、勾配：１５分かけて５７％から６２％Ｂ）によって単離した。混合分画について再精製を行った。純粋な２４ａを含む分画を合わせ、凍結乾燥した。   
収量２４ａ：９８ｍｇ（３９％）
ＭＳ：ｍ／ｚ６６０．３＝［Ｍ＋Ｈ］＋（ＭＷ計算値６５９．９ｇ／ｍｏｌ）。
【０５１１】
略称
ＡｃＯＨ：酢酸
ＡＩＢ：２−アミノイソ酪酸
ＢｎＢｒ：臭化ベンジル
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−
ＢＳＡ：Ｎ，Ｏ−ビス−（トリメチルシリル）−アセトアミド
ＣＯＭＵ：（１−シアノ−２−エトキシ−２−オキソエチリデンアミノオキシ）ジメチルアミノ−モルホリノ−カルベニウム・ヘキサフルオロホスフェート
ｄ：日
ＤＩＰＥＡ：ジイソプロピルエチルアミン
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＭＡＰ：４−（ジメチルアミノ）ピリジン
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
Ｄｍｏｂ：２，４−ジメトキシベンジル
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
Ｄｐｒ：２，３−ジアミノプロピオン酸
ＥＤＣ：Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ′−エチルカルボジイミド
ＥＤＴＡ：エチレンジアミン・四酢酸ジナトリウム塩・２水和物
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル
ｅｑ：当量
ｈ：時間
ＨＦＩＰ：１，１，１，３，３，３−ヘキサフルオロイソプロパノール
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー
ＬＣ／ＭＳ：質量分析結合液体クロマトグラフィー
Ｍａｌ：マレイミド
ＭｅＯＨ：メタノール
ＭｅＣＮ：アセトニトリル
ｍｉｎ：分
Ｍｍｔ：４−メトキシトリフェニルメチル
ｍｏｌ．：分子
ｍ／ｚ：質量／電荷
ＮａＯＨ：水酸化ナトリウム
ＮＨＳ：Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド
ＰＥＧ：ポリエチレングリコール
Ｐｆｐ：ペンタフルオロフェニル
ＰｙＢＯＢ：ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシトリピロリジンホスホニウム・ヘキサフルオロホスフェート
ＰＰ：ポリプロピレン
ＲＴ：室温
ＲＰ：逆相
ｓａｔ．：飽和
ｓｏｌｎ．：溶液
Ｔ：温度
Ｔ３Ｐ：プロピルホスホン酸無水物
ＴＣＰ：２−クロロトリチルクロライド樹脂
ＴＥＳ：トリエチルシラン
Ｔｒｔ：トリチル
Ｔｍｏｂ：２，４，６−トリメトキシベンジル
ＴＭＳ：トリメチルシリル
ＴｒａｎｓＣｏｎ：過渡的に抱合
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＵＰＬＣ：超高速液体クロマトグラフィー
ＵＶ：紫外線。
【図１】
2014522878.tif 000069
【図２】
2014522878.tif 000070
【図３】
2014522878.tif 000071
【図４】
2014522878.tif 000072
【図５】
2014522878.tif 000073
【配列表】
2014522878000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成26年4月8日(2014.4.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
プロスタサイクリン化合物を含み、１以上の製薬上許容される賦形剤を含んでいても良い医薬組成物であって、前記プロスタサイクリン化合物の濃度が、単回の皮下もしくは筋肉注射後少なくとも１２時間にわたり血漿中で治療上効果的なレベルのプロスタサイクリンを維持する上で十分な濃度である医薬組成物。
【請求項２】
前記医薬組成物が、少なくとも０．０５ｍｇ／ｍＬの濃度で前記プロスタサイクリン化合物を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
少なくとも０．０５ｍｇ／ｍＬの濃度でプロスタサイクリン化合物を含む請求項１または２に記載の医薬組成物であって、前記医薬組成物の単一用量が前記プロスタサイクリン化合物少なくとも０．０５ｍｇを含む医薬組成物。
【請求項４】
医薬組成物の投与間隔が、少なくとも約１２時間、例えば少なくとも１６時間、代表的には少なくとも１日である、請求項１から３のうちのいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
プロスタサイクリン化合物を含み、１以上の製薬上許容される賦形剤を含んでいても良い医薬組成物であって、前記医薬組成物が哺乳動物、特にヒトにおいてイン・ビボで、前記プロスタサイクリン化合物の急激な増加が実質的に起こらない薬物動態プロファイルを有する医薬組成物。
【請求項６】
前記医薬組成物が哺乳動物、特にヒトにおいてイン・ビボで、前記プロスタサイクリン化合物の急激な増加が実質的に起こらない薬物動態プロファイルを有する、請求項１から４のうちのいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
プロスタサイクリン化合物を含み、１以上の製薬上許容される賦形剤を含んでいても良い医薬組成物であって、前記医薬組成物が、哺乳動物、特にヒトにおいて、５未満、例えば３未満または２未満の前記プロスタサイクリン化合物のピーク／トラフ比を示す医薬組成物。
【請求項８】
前記医薬組成物が、哺乳動物、特にヒトにおいて、５未満、例えば３未満または２未満の前記プロスタサイクリン化合物のピーク／トラフ比を示す、請求項１から６のうちのいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
プロスタサイクリン化合物を含み、１以上の製薬上許容される賦形剤を含んでいても良い医薬組成物であって、前記プロスタサイクリン化合物が遊離プロスタサイクリンの活性の＜２０％、好ましくは＜１０％、より好ましくは＜５％の活性を有する医薬組成物。
【請求項１０】
前記プロスタサイクリン化合物が遊離プロスタサイクリンの活性の＜２０％、好ましくは＜１０％、より好ましくは＜５％の活性を有する、請求項１から８のうちのいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
プロスタサイクリンプロドラッグを含み、１以上の製薬上許容される賦形剤を含んでいても良い医薬組成物であって、前記プロスタサイクリンプロドラッグの皮下もしくは筋肉投与後に、投与されたプロスタサイクリン用量のうちの５０％強が血液側内に放出可能である医薬組成物。
【請求項１２】
前記プロスタサイクリンプロドラッグの皮下もしくは筋肉投与後に、投与されたプロスタサイクリン用量のうちの５０％強が血液側内に放出可能である、請求項１から１０のうちのいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記プロスタサイクリン化合物が、デポー、好ましくはポリマーゲル、さらにより好ましくはヒドロゲル、最も好ましくは水和ポリマーマトリックス中にある、請求項１から１０のうちのいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記プロスタサイクリン化合物が、デポー中の化合物に、好ましくはポリマーゲルに、さらにより好ましくはヒドロゲルに、最も好ましくは十分に水和したポリマーマトリックスに共有結合的に連結されている、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記プロスタサイクリン化合物が、プロスタサイクリンのプロドラッグである、請求項１から１４のうちのいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記プロドラッグの修飾基が直鎖もしくは分岐のＰＥＧ部分を含む、請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
プロスタサイクリンプロドラッグを含む医薬組成物であって、前記プロスタサイクリン化合物が血漿依存的にプロスタサイクリンを放出する医薬組成物。
【請求項１８】
注射、好ましくは皮下注射もしくは筋肉注射によって投与される、請求項５から１７のうちのいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
肺高血圧、虚血性疾患、好ましくは末梢動脈疾患などの末梢血管疾患、レイノー病およびレイノー症候群などのレイノー現象、全身性硬化症などの強皮症、心筋虚血、虚血性脳卒中、腎不全、指潰瘍などの虚血性潰瘍、心不全、特には鬱血性心不全、門脈肺高血圧、間質性肺疾患、特発性肺線維症、抗凝血を必要とする状態、特には心筋梗塞後、心臓手術後、血栓性微小血管症、体外循環、網膜中心静脈閉塞症、アテローム性動脈硬化症、炎症疾患、特にはＣＯＰＤ、乾癬、高血圧、特には子癇前症、生殖および分娩、癌その他の制御されない細胞増殖の状態、細胞／組織保存およびプロスタサイクリン治療が有益な役割を有すると思われる他の新たに生じる治療分野の治療もしくは予防で使用される、請求項１から１８のうちのいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
肺高血圧の治療用の医薬組成物であって、
（ａ）ポリマーキャリア連結プロスタサイクリンプロドラッグ、および適宜に１以上の製薬上許容される賦形剤、または
（ｂ）プロスタサイクリン化合物および少なくとも一つのポリマー、および適宜に１以上の製薬上許容される賦形剤
を含み、前記医薬組成物は肺高血圧患者に対して皮下投与もしくは筋肉投与するためのものであり、
少なくとも１２時間の期間にわたって、治療上有効量の遊離プロスタサイクリン化合物を放出するものである前記医薬組成物。
【請求項２１】
（ｂ）の医薬組成物が、約０．０５から約１０重量％の前記プロスタサイクリン化合物および約０．５から約２０重量％の総ポリマー含有量を含む、請求項２０に記載の医薬組成物。
【国際調査報告】
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