(57)【要約】  本発明は、望まれない細胞の存在を特徴とする病態を予防または治療するための薬剤を提供し、本薬剤は、（ｉ）前記望まれない細胞への標的化が可能である標的化部分と、（ｉｉ）Ｔ細胞抗原とを含み、前記望まれない細胞の近傍での前記薬剤中の切断部位の選択的切断により前記標的化部分から前記Ｔ細胞抗原を放出させることができる。
2014509605.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
望まれない細胞の存在を特徴とする病態を予防または治療するための薬剤であって、
（ｉ）前記望まれない細胞への標的が可能である標的化部分と、
（ｉｉ）Ｔ細胞抗原と
を含み、前記望まれない細胞の近傍での前記薬剤中の切断部位の選択的切断により前記標的化部分から前記Ｔ細胞抗原を放出させることができる薬剤。
【請求項２】
前記Ｔ細胞抗原が、被験体における既存のＴ細胞応答の惹起が可能であるものである、請求項１に記載の薬剤。
【請求項３】
前記切断部位の選択的切断が、望まれない細胞の近傍および外部での前記Ｔ細胞抗原の放出を可能にする、請求項１または２に記載の薬剤。
【請求項４】
前記切断部位の選択的切断が、前記望まれない細胞の細胞表面でのまたは付近でのＴ脂肪抗原の放出を可能にする、請求項１〜３のいずれかに記載の薬剤。
【請求項５】
前記標的化部分が、前記望まれない細胞によって発現される物質の特異的結合パートナーである、または被験体への投与後に前記望まれない細胞の近傍に蓄積することができる非特異的分子である、請求項１〜４のいずれかに記載の薬剤。
【請求項６】
前記特異的結合パートナーが、抗体、ホルモン、成長因子、サイトカインもしくは受容体リガンドのいずれかであり、または前記非特異的分子が、ポリエチレングリコール；デキストラン；ポリアミノ酸；非腫瘍特異的タンパク質、例えば免疫グロブリン；アルブミン；もしくはヒドロキシプロピルメチルアクリルアミドのいずれかである、請求項５に記載の薬剤。
【請求項７】
前記抗体が、Ｈｅｒ２／Ｎｅｕ；ＣＤ２２；ＥｐＣＡＭ（ＣＤ３２６）；ＥＧＦＲ；ＰＭＳＡ；ＣＤ３０；ＣＤ２０；ＣＤ３３；膜ＩｇＥ；ＩｇＥ受容体（ＣＤ２３）、ＣＤ８０；ＣＤ８６；ＣＤ２；ＣＡ１２５；炭酸脱水酵素ＩＸ；ＣＤ７０；ＣＤ７４；ＣＤ５６；ＣＤ４０；ＣＤ１９；ｃ−ｍｅｔ／ＨＧＦＲ；ＴＲＡＩＬ−Ｒ１；ＤＲ５；ＰＤ−１；ＰＤ１Ｌ；ＩＧＦ−１Ｒ；ＶＥＧＦ−Ｒ２；前立腺幹細胞抗原（ＰＳＣＡ）；ＭＵＣ１；ＣａｎＡｇ；メソテリン；Ｐ−カドヘリン；ミオスタチン（ＧＤＦ８）；ＣＲＩＰＴＯ（ＴＤＧＦ１）；ＡＣＶＲＬ１／ＡＬＫ１；ＭＵＣ５ＡＣ；ＣＥＡＣＡＭ；ＳＬＣ４４Ａ４；ＣＤ２／ＣＳ１；ＣＤ１３７；ＣＸＣＲ４；ニューロピリン１；グリピカン；ＨＥＲ３／ＥＧＦＲ；ＰＤＧＦＲａおよびＥｐｈＡ２のいずれかに対して特異的である、請求項６に記載の薬剤。
【請求項８】
前記抗体が、抗上皮成長因子受容体抗体、例えばセツキシマブ、抗Ｈｅｒ２抗体、抗ＣＤ２０抗体、例えばリツキシマブ、抗ＣＤ２２抗体、例えばイノツズマブ、抗ＣＤ７０抗体、抗ＣＤ３３抗体、例えばｈｐ６７．６またはゲムツズマブ、抗ＭＵＣ１抗体、例えばＧＰ１．４およびＳＭ３、抗ＣＤ４０抗体、抗ＣＤ７４抗体、抗Ｐ−カドヘリン抗体、抗ＥｐＣＡＭ抗体、抗ＣＤ１３８抗体、抗Ｅ−カドヘリン抗体、抗ＣＥＡ抗体および抗ＦＧＦＲ３抗体である、請求項６に記載の薬剤。
【請求項９】
前記標的化部分が、ＩＬ−２、ＥＧＦ、ＶＥＧＦ、Ｆｌｔ３Ｌ、ＨＧＦ、ＩＧＦ、ＩＬ−６、ＩＬ−４、Ｔｏｌｌ様受容体または黒色腫刺激ホルモン（ＭＳＨ）のいずれかである、請求項６に記載の薬剤。
【請求項１０】
Ｔ細胞抗原が、ペプチド、ポリペプチド、ホスホペプチドまたは脂質、例えばリン脂質もしくはスフィンゴ脂質、のいずれかである、請求項１〜９のいずれかに記載の薬剤。
【請求項１１】
前記抗原が、ウイルス由来抗原である、請求項１０に記載の薬剤。
【請求項１２】
前記抗原が、水痘帯状疱疹ウイルス、単純ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス、エプスタイン・バーウイルス、アデノウイルス、ライノウイルス、インフルエンザウイルスに由来する、または破傷風トキソイドなどのワクチンに由来する、請求項１０または１１に記載の薬剤。
【請求項１３】
前記Ｔ細胞抗原が、ＭＨＣクラスＩ拘束性抗原、ＭＨＣクラスＩＩ拘束性抗原、またはグループ１ＣＤ１分子に結合することができる抗原である、請求項１〜１２のいずれかに記載の薬剤。
【請求項１４】
前記切断部位が、酵素、例えば、プロテアーゼ（例えば、システインプロテアーゼ、アスパルチルプロテアーゼ、セリンプロテアーゼ、マトリックスメタロプロテアーゼ、前立腺特異的抗原またはＣＤ１０）、ヌクレアーゼ（例えば、ＤＮａｓｅ）、リパーゼ、リアーゼ、ホスファターゼまたはカルボヒドラーゼのいずれかによって切断可能であり；場合により、前記切断部位が、マトリックスメタロプロテアーゼＭＭＰ２またはＭＭＰ１４によって切断可能である、請求項１〜１３のいずれかに記載の薬剤。
【請求項１５】
前記望まれない細胞の存在を特徴とする病態が、腫瘍（良性もしくは悪性）、自己免疫病態（例えば、糖尿病）、心血管疾患、変性疾患、アレルギー性疾患（例えば、喘息）、神経変性疾患、例えばアルツハイマー病、移植患者または感染症のいずれかである、請求項１〜１４のいずれかに記載の薬剤。
【請求項１６】
前記望まれない細胞の存在を特徴とする病態が腫瘍であり、前記Ｔ細胞抗原がペプチドであり、および前記Ｔ細胞抗原が、プロテアーゼ切断部位の選択的切断によって放出される、請求項１〜１５のいずれかに記載の薬剤。
【請求項１７】
医学に使用するための、請求項１〜１６のいずれかに記載の薬剤。
【請求項１８】
請求項１〜１６のいずれかに記載の薬剤と医薬的に許容され得る担体、希釈剤または賦形剤とを含む医薬組成物。
【請求項１９】
望まれない細胞の存在を特徴とする病態を予防または治療する方法であって、請求項１〜１６のいずれかに記載の薬剤を被験体に投与することを含む方法。
【請求項２０】
前記被験体に前記薬剤を投与する段階の前に、（ｉ）前記被験体のＭＨＣ対立遺伝子、（ｉｉ）Ｔ細胞抗原に対する前記被験体の細胞傷害性Ｔ細胞応答、（ｉｉｉ）前記被験体における前記望まれない細胞の発現プロファイルのいずれか１つを判定する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記病態の予防または治療に好適なさらなる治療薬を投与することをさらに含む、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２２】
望まれない細胞の存在を特徴とする病態の予防または治療において使用するための請求項１〜１６のいずれかに記載の薬剤。
【請求項２３】
望まれない細胞の存在を特徴とする病態を予防または治療するための医薬品の製造における請求項１〜１６のいずれかに記載の薬剤の使用。
【請求項２４】
望まれない細胞の存在を特徴とする病態の予防または治療において使用するための、（ｉ）請求項１〜１６のいずれかに記載の薬剤と（ｉｉ）該病態の予防または治療に好適なさらなる治療薬とを含む組成物。
【請求項２５】
望まれない細胞の存在を特徴とする病態を予防または治療するための医薬品の製造における、（ｉ）請求項１〜１６のいずれかに記載の薬剤と（ｉｉ）該病態の予防または治療に好適なさらなる治療薬とを含む組成物の使用。
【請求項２６】
（ｉ）請求項１〜１６のいずれかに記載の薬剤と（ｉｉ）前記病態の予防または治療に好適なさらなる治療薬とを含む組成物。
【請求項２７】
前記さらなる治療薬が、ワクチン、免疫賦活薬、抗癌剤、本発明の薬剤に対する抗体応答の阻害剤、およびプロテアーゼ阻害剤のうちのいずれか１つ以上である、請求項２１に記載の方法、請求項２２に記載の薬剤、請求項２３もしくは２５に記載の使用、または請求項２４もしくは２６に記載の組成物。
【請求項２８】
望まれない細胞の存在を特徴とする病態を予防または治療するためのパーツキットであって、（ｉ）前記望まれない細胞への標的化が可能であり、かつ第一の結合パートナーに付けられている標的化部分と、（ｉｉ）前記第一の結合パートナーへの結合が可能である第二の結合パートナーに付けられているＴ細胞抗原とを含み、前記望まれない細胞の近傍における切断部位の前記Ｔ細胞抗原と第二の結合パートナーの間での選択的切断により前記第二の結合パートナーから前記Ｔ細胞抗原を放出させることができるパーツキット。
【請求項２９】
（ｉ）望まれない細胞への標的化が可能である標的化部分と、（ｉｉ）Ｔ細胞抗原と、（ｉｉｉ）被験体の（ａ）ＭＨＣ対立遺伝子、（ｂ）Ｔ細胞抗原に対する細胞傷害性Ｔ細胞応答および（ｃ）該被験体における望ましくない細胞の発現プロファイルのうちの１つ以上の評定するための１つ以上の試薬とを含む、パーツキット。
【請求項３０】
望まれない細胞の存在を特徴とする病態を予防または治療する方法であって、（ｉ）前記望まれない細胞への標的化が可能であり、かつ第一の結合パートナーに付けられている標的化部分と、（ｉｉ）前記第一の結合パートナーへの結合が可能である第二の結合パートナーに付けられているＴ細胞抗原であって、前記望まれない細胞の近傍における切断部位の前記Ｔ細胞抗原と第二の結合パートナーの間での選択的切断により前記第二の結合パートナーから放出させることができるＴ細胞抗原とを被験体に投与することを含む方法。
【請求項３１】
望まれない細胞への標的化が可能であり、かつ第一の結合パートナーに付けられている標的化部分、および前記第一の結合パートナーへの結合が可能である第二の結合パートナーに付けられているＴ細胞抗原であって、前記望まれない細胞の近傍における切断部位の該Ｔ細胞抗原と第二の結合パートナーの間での選択的切断により前記第二の結合パートナーから該Ｔ細胞抗原を放出させることができる、被験体における望まれない細胞を特徴とする病態の予防または治療において使用するための標的化部分およびＴ細胞抗原。
【請求項３２】
望まれない細胞の存在を特徴とする前記病態が、腫瘍（良性もしくは悪性）、自己免疫病態、心血管疾患、変性疾患、糖尿病、アレルギー反応、神経変性疾患、例えばアルツハイマー病、移植患者または感染症のいずれかである、請求項１９〜２１、２７および３０のいずれかに記載の方法、請求項２２または２７に記載の薬剤、請求項２５または２７に記載の使用、請求項２６または２７に記載の組成物、請求項２８に記載のパーツキット、ならびに請求項３１に記載の標的化部分およびＴ細胞抗原。
【請求項３３】
望まれない細胞の存在を特徴とする病態を予防または治療するための薬剤であって、（ｉ）前記望まれない細胞への標的化が可能である標的化部分と、（ｉｉ）Ｔ細胞抗原と、（ｉｉｉ）前記標的化部分とＴ細胞抗原の間に切断可能部位とを含み、前記切断可能部位を前記望まれない細胞の近傍で選択的に切断することができる薬剤。
【請求項３４】
（ｉ）Ｔ細胞抗原と（ｉｉ）切断可能部位とを含む分子であって、前記切断可能部位が、望まれない細胞への標的化が可能である標的化部分に該分子を付けることを可能にする連結部分を含有し、および前記切断可能部位を前記望まれない細胞の近傍で選択的に切断することができる分子。
【請求項３５】
ペプチド：ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＱＫＷＮＫＷＡＬＳＲＡＳＡＬＡＳＡＬＣ（配列番号２８３）、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＱＨＳＳＫＬＱＬＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ（配列番号２８５）、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＱＧＧＧＧＦＧＧＧＧＦＧＧＧＧＦＣ（配列番号２８７）、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＱＫＱＳＲＫＦＶＰＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ（配列番号２８８）、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＱＣＰＧＲＶＶＧＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ（配列番号２８９）、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＱＹＬＧＲＳＹＫＶＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ（配列番号２９０）、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＱＧＰＱＧＩＡＳＱＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ（配列番号２９２）、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＱＰＱＧ−ＩＡＧＱＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ（配列番号２９３）、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＱＶＬＫＶＬＫＶＬＫＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ（配列番号２９５）、ＫＴＰＲＶＴＧＧＧＡＭＡＩＰＶＳＬＲＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ（配列番号２７３）、ＤＤＹＳＮＴＨＳＴＲＹＶＴＩＰＶＳＬＲＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ（配列番号２７４）、ＲＮＬＶＰＭＶＡＴＶＱＩＰＶＳＬＲＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ（配列番号２７５）、ＹＶＬＥＥＴＳＶＭＬＩＰＶＳＬＲＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ（配列番号２７７）、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＱＧＡＬＡＬＡＬＡＬＣ（配列番号２７８）、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＱＧＰＬＧＡＬＡＬＡＬＡＬＡＬＡＬＡＬＡＬＡＬＡＬＡＬＣ（配列番号２７９）、またはＮＬＶＰＭＶＡＴＶＬＰＲＳＡＫＥＬＲＣ（配列番号２８０）、ＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＣＰＧＲＶＶＧＧＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２９７）、ＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＧＧＲＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２９８）、ＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＹＬＧＲＳＹＫＶＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２９９）、ＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＬＧＲＫＩＱＩＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号３００）、ＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＬＶＰＲＧＳＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号３０１）、ＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＲＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号３０４）、ＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＡＡＰＶＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号３０５）、ＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＫＱＬＲＶＶＮＧＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号３０６）、ＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＳＫＹＱＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号３０７）、ＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＧＧＧＧＦＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号３０８）のいずれかを含む、請求項３４に記載の分子。
【請求項３６】
前記標的化部分が請求項２に記載のとおりである、および／または前記Ｔ細胞抗原が請求項３に記載のとおりである、請求項２８、２９および３２のいずれかに記載のパーツキット、請求項３０または３２に記載の方法、請求項３１または３２に記載の標的化部分およびＴ細胞抗原、請求項３２または３３に記載の薬剤、ならびに請求項３４または３５に記載の分子。
【請求項３７】
前記切断部位が、請求項４または５に記載のとおり選択的に切断される、請求項２８、２９、３２または３６のいずれかに記載のパーツキット、請求項３０、３２および３６のいずれかに記載の方法、請求項３１、３２または３６のいずれかに記載の標的化部分およびＴ細胞抗原、請求項３２、３３または３６に記載の薬剤、ならびに請求項３４〜３６のいずれかに記載の分子。
【請求項３８】
前記標的化部分およびＴ細胞抗原が、単一ペプチド鎖によってコードされている、請求項１〜１７、２２、２７、３２、３３、３６および３７のいずれかに記載の薬剤、請求項１８、２４、２６、２７および３２のいずれかに記載の組成物、請求項１９〜２１、２７および３２のいずれかに記載の方法、ならびに請求項２３、２５、２７および３２のいずれかに記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、免疫療法薬に関する。詳細には、本発明は、腫瘍または他の病原性細胞などの望まれない細胞の存在を特徴とする病態を予防または治療するために使用することができる薬剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
悪性疾患を標的にする免疫療法戦略は、トランスレーショナル臨床研究の活発な領域であり、数十年にわたって続いている。現行モデルは、癌が、宿主の免疫療法操作で治療することができる機能性または体質性免疫不全のいずれかを表すことを必要とする。これらの努力は、おおまかに２つの群に分類することができる。第一のものは、ワクチン接種、サイトカイン支持（ＩＬ−２、ＩＦＮγ）または免疫抑制環境低減（イピリムマブ）などの処置により内因性抗腫瘍免疫の増強または支持に役立ち、その一方で第二のものは、機能的免疫応答要素（抗体での受動免疫療法、ＴＣＲ移入、幹細胞移植および養子免疫療法）を用いて絶対的欠乏の回復に努める。これらのアプローチは、非常に有効な機能的抗腫瘍応答が実際に可能であるという主張によって統一されている。有効な抗腫瘍免疫応答について議論の余地のない証拠が場合によっては存在するが、腫瘍免疫学のこの心柱は、大きな努力にもかかわらず大部分の癌患者にとって有効な免疫療法がないという臨床の現状による抗しがたい反撃を受ける。ほぼすべての癌ワクチン接種試験により陰性結果が得られ、陽性データが得られたものは、殆どの場合、わずかな効果しか実証になかった。少数の例外を除き、抗体は、腫瘍学の領域では非常にささやかな臨床的恩恵しかもたらさないというのが実情である。
【０００３】
内因性細胞傷害性抗ウイルス免疫応答をその代わりに悪性組織を標的にするように効率的に分子的に再指向させることができる治療戦略を開発することができれば、これは、悪性疾患を治療するための新たな強力で安全なアプローチとなり得る。
【０００４】
大部分の細胞傷害性治療用抗体は、それらの抗癌効果を送達するために免疫エフェクター機序、例えば、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）および抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）に依存する。重要なこととして、すべての細胞（健常および悪性両方）は、免疫応答による攻撃を制限して自己免疫を防ぐための非常に多数の機序を有する。これは、高レベルの組織反応性抗体が、臓器炎症を誘発することが多いが、完全な臓器破壊に誘導しない自己免疫疾患に関連して明白である。実際、完全組織破壊が観察される自己免疫疾患、例えば糖尿病が、抗体指向性機序ではなくＣＴＬ応答に依存することは公知である。
【０００５】
治療用抗体の不良な効力を改善するために、細胞傷害性エフェクター機序（例えば糖鎖工学）とよりよく連動する免疫コンジュゲート（放射性核種／毒素）および改変抗体が用いられている。しかし、かかる薬剤の臨床試験は、依然として大そう期待外れであり、毒性に悩まされる。一例は、抗腫瘍薬を腫瘍に選択的に標的化させるために開発された抗体−薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）である（米国特許第５，７７３，００１号明細書；米国特許第５，７６７，２８５号明細書；米国特許第５，７３９，１１６号明細書；米国特許第５，６９３，７６２号明細書；米国特許第５，５８５，０８９号明細書；米国特許出願公開第２００６／００８８５２２号明細書；米国特許出願公開第２０１１／０００８８４０号明細書；米国特許第７，６５９，２４１号明細書；Ｈｕｇｈｅｓ（２０１０）Ｎａｔ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ  ９：６６５、Ｌａｓｈ（２０１０）；Ｉｎ  ｖｉｖｏ：Ｔｈｅ  Ｂｕｓｉｎｅｓｓ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  Ｒｅｐｏｒｔ  ３２−３８；Ｍａｈａｔｏ  ｅｔ  ａｌ（２０１１）Ａｄｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ  Ｒｅｖ  ６３：６５９；Ｊｅｆｆｒｅｙ  ｅｔ  ａｌ（２００６）ＢＭＣＬ  １６：３５８；Ｄｒｕｇｓ  Ｒ  Ｄ  １１（１）：８５−９５を参照されたし）。ＡＤＣは、一般に、腫瘍細胞上に存在する標的に対するモノクローナル抗体と、細胞傷害薬と、前記抗体を前記薬物に付けるリンカーとを含む。しかし、現在、少数のＡＤＣしか後期臨床段階になく、後期臨床段階にあるものは、臨床的成功が達成困難と判明している。
【０００６】
したがって、より大きな効力およびより低い毒性を有するより有効な免疫療法薬が依然として求められている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】米国特許第５，７７３，００１号明細書
【特許文献２】米国特許第５，７６７，２８５号明細書
【特許文献３】米国特許第５，７３９，１１６号明細書
【特許文献４】米国特許第５，６９３，７６２号明細書
【特許文献５】米国特許第５，５８５，０８９号明細書
【特許文献６】米国特許出願公開第２００６／００８８５２２号明細書
【特許文献７】米国特許出願公開第２０１１／０００８８４０号明細書
【特許文献８】米国特許第７，６５９，２４１号明細書
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Ｈｕｇｈｅｓ（２０１０）Ｎａｔ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ  ９：６６５
【非特許文献２】Ｌａｓｈ（２０１０）；Ｉｎ  ｖｉｖｏ：Ｔｈｅ  Ｂｕｓｉｎｅｓｓ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  Ｒｅｐｏｒｔ  ３２−３８
【非特許文献３】Ｍａｈａｔｏ  ｅｔ  ａｌ（２０１１）Ａｄｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ  Ｒｅｖ  ６３：６５９
【非特許文献４】Ｊｅｆｆｒｅｙ  ｅｔ  ａｌ（２００６）ＢＭＣＬ  １６：３５８；Ｄｒｕｇｓ  Ｒ  Ｄ  １１（１）：８５−９５
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の薬剤は、再指向性免疫療法の一例である。これは、外来抗原を保有する細胞を通常は標的にする既存の免疫応答を、癌などの病態における望まれない細胞を標的にするように再指向させる概念を指す。この概念は、望まれない細胞が免疫細胞の標的になるために、その望まれない細胞上でのマーカー抗原の提示を必要とする。
【００１０】
国際公開第９５／１７２１２号パンフレットには、ペプチド性Ｔ細胞抗原と細胞結合パートナーから成るコンジュゲート、および再指向性免疫療法におけるそれらの使用が記載されている。前記コンジュゲートは、標的細胞およびＴ細胞抗原に対して選択性を有する結合パートナーを含み、ならびに癌、自己免疫疾患、糖尿病またはアレルギー性疾患の治療においてＴ細胞の特異的細胞傷害性を誘導すると述べられている。前記コンジュゲートは、表面受容体への前記結合パートナーへの結合後に標的細胞に内在化すると述べられており、前記Ｔ細胞抗原は、前記コンジュゲートからプロセッシングされ、前記細胞の表面でＭＨＣ分子との複合体の形態で発現される。その結果、前記標的細胞に対するＴ細胞の細胞傷害性が誘導される。
【００１１】
しかし、どの結合パートナーが、内在化を可能にするのか、したがってＴ細胞抗原のその後の提示を可能にするのか、およびどれがしないのかを、国際公開第９５／１７２１２号パンフレットから予測することは難しい。さらに、国際公開第９５／１７２１２号パンフレットに記載されているコンジュゲートは、ＭＨＣクラスＩ抗原プロセッシング経路を効率的に標的化しない。ＭＨＣクラスＩ経路の利点は、ＭＨＣクラスＩＩ分子とは異なり、ＭＨＣクラスＩ分子がすべての細胞タイプ上に存在する点である。
【００１２】
Ｓｍｉｔｈ  ｅｔ  ａｌ（Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １６９：９９−１０７，２００２）には、腫瘍細胞のＭＨＣクラスＩ経路に細胞傷害性Ｔ細胞エピトープを送達するための、その後、それらの腫瘍細胞を溶解するための、リシンの使用が記載されている。しかし、リシンは高毒性であり、および殆どの細胞タイプに結合することができるので腫瘍細胞に対して選択的でない。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明の薬剤は、上記の問題のすべてを回避し、その上、特異性を向上させることを目的とするものであり、ならびに細胞に先ず内在化することなくおよび古典的抗原プロセッシング経路に拘束されることなくＴ細胞抗原を提示することができることを活用する。プロテオソームによる標的細胞内タンパク質分解、ＴＡＰによるペプチド輸送、およびＥＲ内へのＭＨＣクラスＩペプチド負荷により細胞内区画からペプチドを連続供給する古典的ＭＨＣクラスＩプロセッシング経路に加えて、抗原を内在化せずに提示することもできる。このあまり指向性でない機序は、ＭＨＣ分子に対する一部のＭＨＣ結合ペプチドの低い親和性のため、一部のＭＨＣクラスＩ会合ペプチドの短い半減期に依存する。ペプチドの解離は、膜のＴ細胞抗原（例えばペプチド）に結合することができる空のＭＨＣクラスＩ分子をもたらす。同様に、Ｔ細胞抗原は、ＭＨＣクラスＩＩ分子に結合することができるので、本発明は、細胞膜に抗原を直接負荷するためのクラスＩＩ抗原プロセッシング経路も回避する。さらに、グループＩのＣＤ１分子（ＣＤ１ａ、ＣＤ１ｂおよびＣＤ１ｃ）は、細胞傷害性アルファベータＴ細胞にはもちろん、細胞傷害性ガンマデルタＴ細胞にも脂質を提示することが判明した（Ｐｏｒｃｅｌｌｉ  ｅｔ  ａｌ（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ，３４１，４４７−４５０）。
【００１４】
本発明者らは、Ｔ細胞抗原に極めて近接した切断部位であって、望まれない細胞の近傍で選択的に切断される切断部位を導入することにより、該Ｔ細胞抗原を該望まれない細胞の近傍で標的化部分から遊離させることができ、するとそのＴ細胞抗原が例えば空のＭＨＣ分子またはグループＩのＣＤ１分子により結合され、Ｔ細胞応答を惹起することができることを見出した。このように、前記細胞への前記薬剤の内在化、および前記古典的プロセッシング経路への前記抗原の指向が必要なく；前記薬剤は、国際公開第９５／１７２１２号パンフレットの場合のようなＭＨＣクラスＩＩ発現細胞のみに比べＭＨＣクラスＩ分子を発現する細胞を標的にすることができ；ならびに前記望まれない細胞の近傍でのみ切断される切断部位のおかげで特異性が増加される。例えば、腫瘍細胞は、腫瘍が局所組織の浸潤および代謝のために必要とするプロテアーゼを分泌するので、前記薬剤に腫瘍特異的プロテアーゼ切断部位を含めることにより、該薬剤の腫瘍に対する特異性は増加される。
【００１５】
したがって、内在化および古典的プロセッシングの要件を迂回してＴ細胞抗原がＴ細胞に効率的に提示されるようにするための切断部位の使用は、本発明の重要な利点ということになる。前記切断部位の存在は、すべての細胞が再指向性免疫療法を受け入れられるようになり、ＭＨＣクラスＩＩ分子を発現する抗原提示細胞の比較的小さい集団ばかりでないことを意味する。これは、殆どの腫瘍細胞がＭＨＣクラスＩＩ分子を発現しない腫瘍には特に重要である。前記切断部位により、Ｔ細胞抗原が首尾よく内在化されることばかりでなく、それらが適切な細胞プロセッシング経路に正確に進入して細胞表面で提示されることを確実にすることに関わる難題も回避することができる。内在化の必要性を迂回することにより、前記切断部位は、隣接腫瘍細胞および間質非悪性組織、例えば、血管の腫瘍−線維芽細胞を標的にできるようにする。それは、古典的抗原プロセッシングにおいて動作する腫瘍逃避機序も回避する。したがって、概して言えば、前記切断部位は、より多くの細胞タイプへの免疫療法のより単純でより有効な再指向方法に備えるものである。
【００１６】
本発明と交差提示との相違に注目することは重要である。本発明において、前記薬剤の標的化部分は、望まれない細胞の近傍に直接Ｔ細胞抗原を持って行くように機能する。すると前記望まれない細胞は、Ｔ細胞抗原を標的化部分から切断され次第その表面に提示することができるので、その望まれない細胞は、既存のＴ細胞応答の標的になる。これにより、その望まれない細胞への既存の免疫応答の再指向が可能になるので、抗原提示細胞（ＡＰＣ）による共刺激は不要である。一方、交差提示は、抗原がプロフェッショナルＡＰＣに移入され、するとそのプロフェッショナルＡＰＣがＭＨＣクラスＩ分子上でそれをナイーブＴ細胞に提示して、その抗原に対して特異的な一次細胞傷害性Ｔ細胞応答を生じさせる機序を指す。この過程は、先ずクラスＩ関連ペプチド抗原を認識しなければならない、そしてまたＡＰＣ上で共刺激、すなわちヘルパーＴ細胞によってもたらされるシグナル、に遭遇するに違いない、ナイーブＴ細胞の活性化に重要である。したがって、交差提示では、ＡＰＣが細胞傷害性Ｔ細胞を共刺激し、それによって新たな免疫応答を生じさせることができるように、望まれない細胞ではなくＡＰＣを標的にする。
【００１７】
外因性抗原の交差提示の効率を向上させることは、有効な細胞免疫応答を生じさせるワクチンの開発において重要な課題である。国際公開第２００８／０１９３６６号パンフレット、欧州特許第１  ９４８  ８０２明細書、米国特許出願公開第２００４／０００１８５３号明細書、国際公開第２００５／０８７８１３号パンフレット、欧州特許第１  ６６４  ２７０号明細書、Ｋａｗａｍｕｒａ  ｅｔ  ａｌ（Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １６８：５７０９，２００２）、およびＨｏｗｌａｎｄ  ｅｔ  ａｌ（Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ  ３１（７）：６０７，２００８）には、抗原が内在化され、ナイーブＴ細胞に提示されるＡＰＣへの抗原の標的化による外因性抗原の交差提示の向上方法が記載されている。例えば、国際公開第２００８／０１９３６６号パンフレットでは、抗原をＡＰＣの貪食空胞内に放出することができ、それによって抗原をＭＨＣクラスＩ分子上に交差提示することができるように、ＡＰＣにより貪食され得る粒子に抗原を付けることが論じられている。類似して、欧州特許第１  ９４８  ８０２号明細書では、ＡＰＣへの抗原の内在化を促進するために抗体Ｆｃ断片に抗原を付けることが論じされている。しかし、いずれの上記文献も、望まれない細胞への抗原の標的化に言及しておらず；むしろ、抗原がＡＰＣの特定化されたサブセットに標的化され、するとそのＡＰＣが、望まれない細胞を死滅させるように細胞傷害性Ｔ細胞を活性化する。同様に、いずれの文献にも、既存の免疫応答の使用および再指向は記載されておらず、Ｔ細胞抗原を内在化の必要なく細胞の表面に提示することができるという開示もない。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
本発明の第一の態様は、望まれない細胞の存在を特徴とする病態を予防または治療するための薬剤を提供し、本薬剤は、（ｉ）前記望まれない細胞への標的化が可能である標的化部分と、（ｉｉ）Ｔ細胞抗原とを含み、前記望まれない細胞の近傍での前記薬剤中の切断部位の選択的切断により前記標的化部分から前記Ｔ細胞抗原を放出させることができる。
【００１９】
標的化部分
「標的化部分」には、本発明者らは、望まれない細胞への標的化が可能である任意の部分という意味を含める。好ましくは、標的化部分は、望まれない細胞への選択的標的化が可能である。例えば、標的化部分が、正常細胞を標的にするより大きい程度に望まれない細胞を選択的に標的にすると、および最も好ましくは望まれない細胞のみを標的にすると好ましい。
【００２０】
標的化部分の正常細胞への結合が、それらを他の治療手段に機能的に置換することができる場合、またはそれらが生命にとって不可欠でない場合、許容され得ることは理解されるであろう。したがって、癌細胞ばかりでなく、例えば内分泌組織または器官も標的にする標的化部分も、除外されない。この場合、標的化部分は、望まれない細胞と治療手段によって機能的に置換することができる他の細胞の両方に対する免疫応答を再指向させるように動作する。例えば救命現場では、組織または器官は、その機能が生命にとって不可欠でないならば、例えば精巣、前立腺もしくは膵臓の場合、またはホルモン補充療法により供給され得るならば、犠牲にされることがある。かかる考慮は、例えば甲状腺、副甲状腺、副腎皮質および卵巣にも当てはまるだろう。
【００２１】
したがって、標的化部分は、望まれる細胞ではなく望まれない細胞への選択的標的化が可能である部分ということになり、この場合の望まれない細胞は、その宿主に存在することが望まれない細胞および場合により、その宿主に存在することが望ましいが、その存在を治療手段により機能的に置換することができる細胞を含み得る。
【００２２】
前記薬剤中の切断部位は、Ｔ細胞抗原が放出される位置に関する特異性を付与するので、その切断部位が切断されない近傍でのその標的化部分の正常細胞への結合も許容され得ることも理解される。
【００２３】
しかし、最も好ましくは、標的化部分は、任意の他の細胞ではなく望まれない細胞に選択的に標的化にする。
【００２４】
１つの実施形態において、前記標的化部分は、望まれない細胞によって発現されるまたは望まれない細胞と会合しているエンティティー（物質）の特異的結合パートナーである。典型的に、発現されるエンティティーは、望まれない細胞上で選択的に発現される。例えば、前記発現されるエンティティーの存在度は、治療される体内の他の細胞上より望まれない細胞上でのほうが典型的に１０または１００または５００または１０００または５０００または１００００高い。しかし、上で述べたように、前記切断部位は、Ｔ細胞抗原が放出される位置に関する追加の特異性をもたらすので、その結合パートナーは、前記体内の他の細胞に比べて望まれない細胞上に同様に存在するまたはさらには望まれない細胞上で過小発現されるエンティティーを結合することができる。
【００２５】
「結合パートナー」には、本発明者らは、特定の細胞によって発現されるエンティティーに結合する分子という意味を含める。好ましくは、結合パートナーは、そのエンティティーに選択的に結合する。例えば、結合パートナーが、別の細胞（例えば正常細胞タイプ）によって発現される少なくとも１つの他のエンティティーに対してより少なくとも５または１０倍低いおよび好ましくは１００または５００倍低いＫｄ値（解離定数）（すなわち、より高い親和性）、を有すると好ましい。さらに好ましくは、そのエンティティーの結合パートナーは、別の細胞（例えば正常細胞タイプ）によって発現される少なくとも１つの他のエンティティーに対してより１０００または５０００倍低いＫｄ値を有する。Ｋｄ値は、当分野において周知の方法を用いて容易に決定することができる。しかし、上で論じたように、結合パートナーが、望まれない細胞によっておよび正常細胞（但し、該正常細胞を機能的に置換することができるか、でなければ該正常細胞が生命に不可欠でないことを条件とする）によって発現されたエンティティーに選択的に結合することができることは理解される。例えば、リンパ腫の場合、（すべてのＢ細胞を標的にする）抗ＣＤ２０は非常に有効であり、健常および悪性Ｂ細胞すべてを死滅させる。しかし、これは、Ｂ細胞が健康にとって決定的なものでないとき、許容され得る。さらに、黒色腫、リンパ腫、前立腺癌、甲状腺、精巣または卵巣癌の場合、健常な対応組織を標的にすることも許容されるだろう。
【００２６】
典型的に、結合パートナーは、宿主の任意の正常細胞中でより望まれない細胞中または上に有意に高い濃度で存在するまたは該結合パートナーに接近できるエンティティーに結合するものである。したがって、結合パートナーは、正常細胞より相当多い量で発現される望まれない細胞上の表面分子または抗原に結合することができる。同様に、結合パートナーは、正常細胞によるより大きな程度に望まれない細胞によって細胞外液に分泌されたエンティティーに結合することができる。例えば、結合パートナーは、細胞膜上で発現される腫瘍関連抗原または腫瘍細胞外液に分泌された腫瘍関連抗原に結合することができる。
【００２７】
前記標的化部分は、ポリペプチド、ペプチド、小分子またはペプチドミメティックのいずれであってもよい。
【００２８】
好ましい実施形態において、前記標的化部分は、望まれない細胞によって発現される抗原に結合する抗体である。好ましい抗体標的としては以下のものが挙げられる（カッコ内に望まれない細胞タイプの例を伴う）：Ｈｅｒ２／Ｎｅｕ（上皮悪性病変）；ＣＤ２２（Ｂ細胞、自己免疫または悪性病変）；ＥｐＣＡＭ（ＣＤ３２６）（上皮悪性病変）；ＥＧＦＲ（上皮悪性病変）；ＰＭＳＡ（前立腺癌腫）；ＣＤ３０（Ｂ細胞悪性病変）；ＣＤ２０（Ｂ細胞、自己免疫、アレルギー性または悪性病変）；ＣＤ３３（骨髄性悪性病変）；膜ＩｇＥ（アレルギー性Ｂ細胞）；ＩｇＥ受容体（ＣＤ２３）（アレルギー疾患における肥満細胞またはＢ細胞）、ＣＤ８０（Ｂ細胞、自己免疫、アレルギー性または悪性病変）；ＣＤ８６（Ｂ細胞、自己免疫、アレルギー性または悪性病変）；ＣＤ２（Ｔ細胞またはＮＫ細胞リンパ腫）；ＣＡ１２５（卵巣癌腫を含む多数の癌）；炭酸脱水酵素ＩＸ（腎細胞癌腫を含む多数の癌）；ＣＤ７０（Ｂ細胞、自己免疫、アレルギー性または悪性病変）；ＣＤ７４（Ｂ細胞、自己免疫、アレルギー性または悪性病変）；ＣＤ５６（Ｔ細胞またはＮＫ細胞リンパ腫）；ＣＤ４０（Ｂ細胞、自己免疫、アレルギー性または悪性病変）；ＣＤ１９（Ｂ細胞、自己免疫、アレルギー性または悪性病変）；ｃ−ｍｅｔ／ＨＧＦＲ（胃腸管および肝臓悪性病変；ＴＲＡＩＬ−Ｒ１（卵巣および結腸直腸癌種を含む多数の悪性病変）；ＤＲ５（卵巣および結腸直腸癌腫を含む多数の悪性病変）；ＰＤ−１（Ｂ細胞、自己免疫、アレルギー性または悪性病変）；ＰＤ１Ｌ（上皮腺癌を含む多数の悪性病変）；ＩＧＦ−１Ｒ（上皮癌腫を含む殆どの悪性病変）；ＶＥＧＦ−Ｒ２（上皮腺癌を含む大多数の悪性病変と関連付けられる脈管系）；前立腺幹細胞抗原（ＰＳＣＡ）（前立腺腺癌）；ＭＵＣ１（上皮悪性病変）；ＣａｎＡｇ（腫瘍、例えば、結腸および膵臓の癌腫）；メソテリン（中皮腫ならびに卵巣および膵臓腺癌を含む多くの腫瘍）；Ｐ−カドヘリン（乳腺癌を含む、上皮悪性病変）；ミオスタチン（ＧＤＦ８）（肉腫ならびに卵巣および膵臓腺癌を含む多くの腫瘍）；ＣＲＩＰＴＯ（ＴＤＧＦ１）（結腸、乳、肺、卵巣および膵臓癌を含む上皮悪性病変）；ＡＣＶＲＬ１／ＡＬＫ１（白血病およびリンパ腫を含む多数の悪性病変）；ＭＵＣ５ＡＣ（乳腺癌を含む、上皮悪性病変）；ＣＥＡＣＡＭ（乳腺癌を含む、上皮悪性病変）；ＣＤ１３７（Ｂ細胞またはＴ細胞、自己免疫、アレルギー性または悪性病変）；ＣＸＣＲ４（Ｂ細胞またはＴ細胞、自己免疫、アレルギー性または悪性病変）；ニューロピリン１（肺癌を含む、上皮悪性病変）；グリピカン（肝臓、脳および乳癌を含む多数の癌）；ＨＥＲ３／ＥＧＦＲ（上皮悪性病変）；ＰＤＧＦＲａ（上皮悪性病変）；ＥｐｈＡ２（神経芽腫、黒色腫、乳癌および小細胞肺癌種を含む多数の癌）；およびＣＤ１３８（骨髄腫）。
【００２９】
特に好ましい抗体としては、抗上皮成長因子受容体抗体、例えばセツキシマブ、抗Ｈｅｒ２抗体、抗ＣＤ２０抗体、例えばリツキシマブ、抗ＣＤ２２抗体、例えばイノツズマブ、抗ＣＤ７０抗体、抗ＣＤ３３抗体、例えばｈｐ６７．６またはゲムツズマブ、抗ＭＵＣ１抗体、例えばＧＰ１．４およびＳＭ３、抗ＣＤ４０抗体、抗ＣＤ７４抗体、抗Ｐ−カドヘリン抗体、抗ＥｐＣＡＭ抗体、抗ＣＤ１３８抗体、抗Ｅ−カドヘリン抗体、抗ＣＥＡ抗体および抗ＦＧＦＲ３抗体が挙げられる。
【００３０】
前記標的化部分により標的化され得る、腫瘍関連抗原、免疫細胞関連抗原および感染試薬関連抗原の例を表１に与える。
【００３１】
表１：標的化のための細胞表面抗原
ａ）腫瘍関連抗原
2014509605.tif 000003
１Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ  ｅｔ  ａｌ（１９８６）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．４６，３９１７−３９２３
２Ｃｌａｒｋｅ  ｅｔ  ａｌ（１９８５）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８２，１７６６−１７７０
他の抗原としては、アルファフォエトプロテイン（ａｌｐｈａｆｏｅｔｏｐｒｏｔｅｉｎ）、Ｃａ−１２５および前立腺特異的抗原が挙げられる。
【００３２】
ｂ）免疫細胞抗原
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【００３３】
ｃ）感染因子関連抗原
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【００３４】
あるいは、前記標的化部分は、望まれない細胞によって発現されるエンティティーまたは望まれない細胞と別様に会合されるエンティティーに、非免疫的意味で、特異的に結合する任意の化合物またはその部分であってもよい。したがって、その特異的結合パートナーは、ホルモン、成長因子、サイトカインまたは受容体リガンド（例えばアゴニストもしくはアンタゴニスト）のいずれかであり得る。
【００３５】
例えば、サイトカインは、毒素を侵入してくる細菌に標的化するために以前に使用されている。遺伝子工学を用いて、例えばＩＬ−２と結合ドメイン削除シュードモナス外毒素タンパク質とを含有する組換えタンパク質が生産されている（Ｌｏｒｄｅｒｂｏｕｍ−Ｇａｌｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ，１９８８（６２））。この免疫毒素は、実験的動物モデルにおいて有効であった（Ｋｏｚａｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０（６３））。ＩＬ−４、ＩＬ−６、アルファ−ＭＳＨ、ＥＧＦおよびＴＮＦ−アルファを用いて融合タンパク質も生産されており（Ｗａｌｄｍａｎｎ  １９９２（３５）に総説されている）、これらのすべてが本発明における標的化部分としての使用に適している。
【００３６】
特に有用な標的化部分としては、サイトカイン、例えば、ＩＬ−２、ＥＧＦ、ＶＥＧＦ、Ｆｌｔ３Ｌ、ＨＧＦ、ＩＧＦ、ＩＬ−６またはＩＬ−４が挙げられる。ＩＬ−２およびＩＬ−４は、高親和性ＩＬ−２受容体を発現する成熟Ｔ細胞白血病／リンパ腫細胞（これらに対して、正常休止細胞はＩＬ−２を発現しない）またはＩＬ−４受容体を発現するＴ細胞を標的にすることができる。ヒトＩＬ−４受容体に結合するモノクローナル抗体ＭＲ６が、クローン化ヘルパーＴ細胞のＩＬ−４誘導増殖およびポリクローナルＢ細胞によるＩｇＥの生産を阻害できることは、以前に証明されている（Ｌａｒｃｈｅ  ｅｔ  ａｌ，１９８８（３６））。かかる標的化部分を使用して、自己免疫疾患またはアレルギーにおいてリンパ球様細胞亜集団を排除することができる。
【００３７】
インスリン様成長因子（ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−１１）は、悪性細胞によって優先的に取り込まれるので、該成長因子を使用して腫瘍細胞を標的にすることができる。同様に、ＥＧＦを使用して、ＥＧＦ受容体をアップレギュレートする悪性細胞を標的にすることができる。また、腫瘍関連血管はＶＥＧＦ受容体を過発現するので、ＶＥＧＦ成長因子のファミリーによる標的になり得る。
【００３８】
Ｆｌｔ３受容体は、白血病の際に過発現され、急性および慢性白血病ならびに骨髄増殖性障害の治療標的であり得る。
【００３９】
骨髄腫細胞は、ＩＬ−６受容体を発現し、およびまたＩＬ−６を分泌し、このＩＬ−６は、自己分泌式に細胞増殖を刺激するように作用する。したがって、ＩＬ−６を骨髄腫のための標的化部分として使用することができる。
【００４０】
もう１つの例では、前記標的化部分は黒色腫刺激ホルモン（ＭＳＨ）であり、このＭＳＨは、黒色腫細胞において非常に多数、発現されるＭＳＨ受容体に結合する。
【００４１】
当業者が任意の所与の望まれない細胞についての好適な結合パートナーを、例えば、その望まれない細胞に対して特異的な表面抗原または分子を同定し、その抗原または分子についての結合パートナーを見つけることにより、容易に選択できることは理解される。上に記載したような腫瘍関連抗原、免疫細胞抗原および感染因子に対する抗体およびそれらの断片に関して、既に相当な研究が行われている。したがって、適便には、所与の細胞タイプについての適切な標的化部分の選択は、一般的に、文献の検索を伴う。あるいは、望まれない細胞を患者から（例えば生検により）採取し、その細胞に対する抗体を調製する。かかる「テーラーメイド」抗体は既に公知である。抗体が、それらを得た患者からの腫瘍細胞への結合ばかりでなく、多数の他の患者についての腫瘍細胞への結合も付与することは実証されている。それ故、複数のかかる抗体が市販されている。所与の望まれない細胞についての好適な結合パートナーの他の同定方法としては、遺伝学的アプローチ（例えばマイクロアレイ）、プロテオミクスアプローチ（例えば示差質量分析）、免疫学的アプローチ（例えば、腫瘍細胞での動物の免疫処置、そして悪性細胞を特異的に標的にする抗体分泌クローンの同定）、およびｉｎ  ｓｉｌｉｃｏアプローチ（システム生物学的アプローチを用いて標的を同定する）が挙げられる。
【００４２】
さらなる選択的標的および好適な結合パートナーを表２に示す。
【００４３】
表２：腫瘍選択的標的および腫瘍関連抗原についての結合パートナー
2014509605.tif 000006
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【００４４】
様々な癌の予防または治療の際に有用なさらなる標的を下に提供する。
【００４５】
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【００４６】
望まれない細胞の存在を特徴とする様々な病態の予防または治療に有用ななおさらなる選択的標的を下に提供する。下の例のすべてについて、治療用抗体は、既に入手可能であり、または当業者によって容易に調製され得る。
【００４７】
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【００４８】
本明細書において用いる場合、用語「抗体」は、ポリクローナル、モノクローナル、キメラ、一本鎖、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ発現ライブラリによって生産される断片、および二重特異性抗体を含むが、これらに限定されない。かかる断片は、標的物質に対するそれらの結合活性を保持する完全抗体の断片、Ｆｖ、Ｆ（ａｂ’）およびＦ（ａｂ）２断片、ならびに抗体の抗原結合部位を含む一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）、融合タンパク質および他の合成タンパク質を含む。抗体の一部分しか含まない標的化部分は、血液からのクリアランス率を最適化するため有利であることがあり、およびＦｃ部分のために非特異的結合を受ける可能性が低いことがある。ドメイン抗体（ｄＡｂ）、ダイアボディ、ラクダ化抗体および改変ラクダ化抗体も含まれる。さらに、ヒトに投与するための抗体およびその断片は、ヒト化抗体であってもよく、ヒト化抗体は、今や当分野において周知である（Ｊａｎｅｗａｙ  ｅｔ  ａｌ（２００１）Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ．，５ｔｈ  ｅｄ．，Ｇａｒｌａｎｄ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ）；Ａｎ  ｅｔ  ａｌ（２００９）Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｆｒｏｍ  Ｂｅｎｃｈ  ｔｏ  Ｃｌｉｎｉｃ，ＩＳＢＮ：９７８−０−４７０−１１７９１−０）。
【００４９】
非対称型ＩｇＧ様抗体（例えば、Ｔｒｉｏｍａｂ／クアドローマ、Ｔｒｉｏｎ  Ｐｈａｒｍａ／Ｆｒｅｓｅｎｉｕｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈ；ノブ・イントゥ・ホール（ｋｎｏｂｓ−ｉｎｔｏ−ｈｏｌｅｓ）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ；Ｃｒｏｓｓ  ＭＡｂｓ、Ｒｏｃｈｅ；静電整合抗体（ｅｌｅｃｔｒｏｓｔａｔｉｃａｌｌｙ  ｍａｔｃｈｅｄ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）、ＡＭＧＥＮ；ＬＵＺ−Ｙ、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ；鎖交換操作ドメイン（ｓｔｒａｎｄ  ｅｘｃｈａｎｇｅ  ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ  ｄｏｍａｉｎ：ＳＥＥＤ）ボディ、ＥＭＤ  Ｓｅｒｏｎｏ；バイオロニック（ｂｉｏｌｏｎｉｃ）、Ｍｅｒｕｓ；およびＦａｂ交換抗体、Ｇｅｎｍａｂ）、対称型ＩｇＧ様抗体（例えば、二重標的化（ＤＴ）−Ｉｇ、ＧＳＫ／Ｄｏｍａｎｔｉｓ；ツー・イン・ワン（ｔｗｏ−ｉｎ−ｏｎｅ）抗体、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ；架橋ＭＡｂｓ、カルマノス癌センター（ｋａｒｍａｎｏｓ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｎｔｅｒ）；ｍＡｂ２、Ｆ−ｓｔａｒ；およびＣｏｖ  Ｘ−ｂｏｄｙ、Ｃｏｖ  Ｘ／Ｐｆｉｚｅｒ）、ＩｇＧ融合体（例えば、二重可変ドメイン（ＤＶＤ）−Ｉｇ、Ａｂｂｏｔｔ；ＩｇＧ様二重特異性抗体、Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙ；Ｔｓ２Ａｂ、Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ／ＡＺ；ＢｓＡｂ、ＺｙｍｏＧｅｎｅｔｉｃｓ；ＨＥＲＣＵＬＥＳ、Ｂｉｏｇｅｎ  Ｉｄｅｃ；ＴｖＡｂ、Ｒｏｃｈｅ）、Ｆｃ融合体（例えば、ＳｃＦｖ／Ｆｃ融合体、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎ；ＳＣＯＲＰＩＯＮ、Ｅｍｅｒｇｅｎｔ  ＢｉｏＳｏｌｕｔｉｏｎｓ／Ｔｒｕｂｉｏｎ、ＺｙｍｏＧｅｎｅｔｉｃｓ／ＢＭＳ；二重親和性再標的化技術（Ｆｃ−ＤＡＲＴ）、ＭａｃｒｏＧｅｎｉｃｓ；二重（ＳｃＦｖ）２−Ｆａｂ、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）Ｆａｂ融合体（例えば、Ｆ（ａｂ）２、Ｍｅｄａｒｅｘ／ＡＭＧＥＮ；二重作用またはＢｉｓ−Ｆａｂ、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ；ドック・アンド・ロック（Ｄｏｃｋ−ａｎｄ−Ｌｏｃｋ：ＤＮＬ）、ＩｍｍｕｎｏＭｅｄｉｃｓ；二価二重特異性、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ；およびＦａｂ−Ｆｖ、ＵＣＢ−Ｃｅｌｌｔｅｃｈ）、ＳｃＦｖ系およびダイアボディ系抗体（例えば、二重特異性Ｔ細胞エンゲイジャ（ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｅｎｇａｇｅｒ：ＢｉＴＥ）、Ｍｉｃｒｏｍｅｔ；タンデムダイアボディ（Ｔａｎｄａｂ）、Ａｆｆｉｍｅｄ；ＤＡＲＴ、ＭａｃｒｏＧｅｎｉｃｓ；一本鎖ダイアボディ、Ａｃａｄｅｍｉｃ；ＴＣＲ様抗体、ＡＩＴ、Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｌｏｇｉｃｓ；ヒト血清アルブミンＳｃＦｖ融合体、Ｍｅｒｒｉｍａｃｋ；およびＣＯＭＢＯＤＩＥＳ、Ｅｐｉｇｅｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈ）、ＩｇＧ／非ＩｇＧ融合体（例えば、免疫細胞毒素（ｉｍｍｕｎｏｃｙｔｏｋｉｎ）、ＥＭＤＳｅｒｏｎｏ、Ｐｈｉｌｏｇｅｎ、ＩｍｍｕｎＧｅｎｅ、ＩｍｍｕｎｏＭｅｄｉｃｓ；スーパー抗原融合タンパク質、Ａｃｔｉｖｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ；ならびに免疫動員性抗癌ｍＴＣＲ（ｉｍｍｕｎｅ  ｍｏｂｉｌｉｓｉｎｇ  ｍＴＣＲ  Ａｇａｉｎｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ）、ＩｍｍＴＡＣ）およびオリゴクローナル抗体（例えば、ＳｙｍｐｈｏｇｅｎおよびＭｅｒｕｓ）も含まれる。
【００５０】
前記抗体は、参照により本明細書に援用されている、Ｃａｒｔｅｒ（２００６）「Ｐｏｔｅｎｔ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ｂｙ  ｄｅｓｉｇｎ」，Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．６（５）：３４３−５７、およびＣａｒｔｅｒ（２０１１）「Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｔｏ  ｃｕｒｒｅｎｔ  ａｎｄ  ｆｕｔｕｒｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ：ａ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅ」，Ｅｘｐ  Ｃｅｌｌ  Ｒｅｓ．３１７（９）：１２６１−９によって記載された抗体様足場のいずれかを、本明細書に記載する特異性決定領域と共に有することができる。したがって、用語「抗体」は、アフィボディおよび非免疫グロブリン系フレームワークも含む。例としては、アドネクチン、アンチカリン、アフィリン、トランスボディ、ダルピン、トリマーＸ、マイクロプロテイン、フィノマー、アビマー、セントグリンおよびカルビター（エカランチド）が挙げられる。
【００５１】
完全抗体ではなく抗体断片を使用することの利点は、数倍である。断片のより小さいサイズは、改善された薬理学的特性、例えば、より良好な固形組織侵入をもたらすことができる。さらに、抗原結合断片、例えば、Ｆａｂ、Ｆｖ、ＳｃＦｖおよびｄＡｂ抗体断片を大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）または酵母において発現させ、そこらから分泌することができ、したがって、それらにより研究室での適便な生産および商業規模での経済的生産が可能になる。
【００５２】
前記抗体は、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＡ、ＩｇＭおよびＩｇＤクラスのいずれのものであってもよく、ならびに任意の種に由来するものであってよい。前記抗体がＩｇＧである場合、それは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４のいずれであってもよい。しかし、前記薬剤が、特定の宿主への投与のためのものであるときには、その抗体または少なくともその抗体の定常領域はその宿主に由来するほうが好ましい。例えば、前記薬剤がヒトに投与されることとなるとき、好ましくはその抗体はヒト抗体またはヒト化抗体である、など。
【００５３】
望まれない細胞によって発現される特定の抗原に結合する好適な抗体を当業者は当分野における旧来の技術を用いて作ることができる。モノクローナル抗体および抗体断片の調製方法は当分野において周知であり、それらとしては、ハイブリドーマ技術（Ｋｏｈｌｅｒ  ＆  Ｍｉｌｓｔｅｉｎ（１９７５）「Ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ  ｃｕｌｔｕｒｅｓ  ｏｆ  ｆｕｓｅｄ  ｃｅｌｌｓ  ｓｅｃｒｅｔｉｎｇ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｏｆ  ｐｒｅｄｅｆｉｎｅｄ  ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ．Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：４９５−４９７）；抗体ファージディスプレイ（Ｗｉｎｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ（１９９４）「Ｍａｋｉｎｇ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｂｙ  ｐｈａｇｅ  ｄｉｓｐｌａｙ  ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．」Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２：４３３−４５５）；リボソームディスプレイ（Ｓｃｈａｆｆｉｔｚｅｌ  ｅｔ  ａｌ（１９９９）「Ｒｉｂｏｓｏｍｅ  ｄｉｓｐｌａｙ：ａｎ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｆｒｏｍ  ｌｉｂｒａｒｉｅｓ．」Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２３１：１１９−１３５）；および反復コロニー・フィルタ・スクリーニング（Ｇｉｏｖａｎｎｏｎｉ  ｅｔ  ａｌ（２００１）「Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎｔｉ−ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｆｒｏｍ  ａ  ｌａｒｇｅ  ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ  ｒｅｐｅｒｔｏｉｒｅ  ｂｙ  ｃｏｌｏｎｙ  ｆｉｌｔｅｒ  ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ．」Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２９：Ｅ２７）が挙げられる。さらに、本発明での使用に好適な抗体および抗体断片は、例えば、次の出版物に記載されている：「Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ」，Ｈｕｒｒｅｌｌ（ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，１９８２）；「Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ」，Ｈ．Ｚｏｌａ，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，１９８７，ＩＳＢＮ：０−８４９３６−４７６−０；「Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ」１ｓｔ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｈａｒｌｏｗ  ＆  Ｌａｎｅ，Ｅｄｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８８．ＩＳＢＮ  ０−８７９６９−３１４−２；「Ｕｓｉｎｇ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ」２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｈａｒｌｏｗ  ＆  Ｌａｎｅ，Ｅｄｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９９．ＩＳＢＮ  ０−８７９６９−５４３−９；および「Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ」Ｓｔｅｆａｎ  Ｄｕｂｅｌ，Ｅｄ．，１ｓｔ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，−Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，Ｗｅｉｎｈｅｉｍ，２００７．ＩＳＢＮ：３−５２７−３１４５３−９。
【００５４】
特異的結合パートナーである前記標的化部分の代替として、前記標的化部分は、被験体への投与後、望まれない細胞の近傍での蓄積が可能である非特異的分子であってもよい。例えば、高分子が腫瘍内に非特異的に蓄積することは公知である。腫瘍内に非特異的に蓄積することが公知の高分子としては、アルブミン、免疫グロブリン、トランスフェリン、リポソーム、ナノ粒子（例えばコロイド状ナノ粒子）および生体分解性ポリマーが挙げられ、前記生体分解性ポリマーとしては、デキストラン、ポリエチレングリコール、ポリリシンおおびヒドロキシプロピルメチルアクリルアミドが挙げられる。高分子は、ヌードマウスにおいてヒト異種移植腫瘍内に腫瘍１グラムにつき投与用量の約２．０％まで蓄積する。ポリエチレングリコールおよびデキストランなどの高分子は、それらが付けられている物質のクリアランス率を変更すること、および腫瘍内のそれらの濃度を変更することが判明した（Ｍｅｌｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ，１９８７；Ｅｎｏ−Ａｍｍｏｑｕａｙｅ  ｅｔ  ａｌ，１９９６）。例外的腫瘍では、非特異的高分子が、分泌抗原に対する抗体より高濃度で蓄積することもある（Ｓｅａｒｌｅ  ｅｔ  ａｌ，１９８１）。
【００５５】
かかる高分子が腫瘍内に蓄積するという発見は、血管透過性・滞留亢進（ＥＰＲ）効果と呼ばれており、腫瘍毛細血管の漏出および不十分なリンパ排液に帰せられている（Ｍａｔｓｕｍｕｒａ  ＆  Ｍａｃｄａ，１９８６）。
【００５６】
したがって、前記望まれない細胞が腫瘍細胞であるとき、前記標的化部分は、腫瘍内に蓄積するこれらの高分子のいずれかであり得る。好ましくは、本発明において使用する高分子は親水性であり、ならびに体液および非経口投与用の従来の流体に可溶性であることを特徴とする。好適には、前記高分子は、反復投与中の全身性蓄積を回避するために生体分解性である。しかし、明らかに、それは、望まれない細胞（例えば腫瘍）の部位に蓄積することができないほど速く分解してはならない。好ましくは、かかる高分子標的化部分を含む薬剤の分子量およびサイズは、尿排泄の腎閾値（ＭＷ６０，０００）のものを上回る。これは、血液濃度を有効な血液：腫瘍濃度勾配を生じさせるために十分なものにするのに役立つからである。少なくとも８００，０００まで、例えば１６０，０００までの分子量が一般に好適である。前記高分子は、好ましくは、細網内皮系によって容易に捕捉されないものである。与えた分子量は、水和物の水を一切含まない。
【００５７】
サブユニットとして利用可能であり、かつ生体分解性でない高分子を生体分解性連結ユニットによって連結させることができ、その結果、それらの非生体分解性成分は腎臓によって濾過され、尿に排泄される。
【００５８】
あるいは、そのコンジュゲートの任意の非生体分解性部分の分子量が腎閾値（約７００００）未満であり、その結果、その生体分解性部分の分解後、残りの非生体分解性部分が腎臓によって排泄されるように、前記高分子を製造するために使用するポリマーが生体分解性でないと好ましい。
【００５９】
適便には、前記高分子は、デキストラン、ポリアミノ酸、ナノ粒子（例えばコロイド状ナノ粒子）、または非腫瘍特異的タンパク質、例えば免疫グロブリン、アルブミンもしくはトランスフェリン、のいずれかであり得る。好適には、それは、スチレンと無水マレイン酸のコポリマーであり得、またはポリアスパラギン酸、ポリ−Ｌ−リシン、ポリエチレンイミンもしくはポリエチレングリコールであり得る。
【００６０】
かかる高分子は、国際公開第１９９８／０２４４７８号パンフレットに記載されているように、メラニン細胞指向性酵素プロドラッグ療法（ｍｅｌａｎｏｃｙｔｅ−ｄｉｒｅｃｔｅｄ  ｅｎｚｙｍｅ  ｐｒｏｄｒｕｇ  ｔｈｅｒａｐｙ：ＭＤＥＰＴ）において使用されることは理解される。
【００６１】
望まれない細胞
望まれない細胞は、宿主に存在することが望ましくない任意の細胞であり得る。したがって、この細胞は、腫瘍細胞（良性もしくは悪性）、腫瘍微小環境、例えば腫瘍線維芽細胞もしくは腫瘍血管、からの細胞、ウイルス感染細胞、遺伝子療法の一部として導入された細胞、または特別な理由で破壊したい正常細胞であり得る。例えば、免疫細胞の亜集団を排除すること、例えば、自己免疫疾患の際にＴリンパ球をおよびアレルギー性疾患の際にＢリンパ球を排除することが望ましいことがある。
【００６２】
「望まれない細胞の存在を特徴とする病態」には、本発明者らは、その病理の少なくとも一部分が、望まれない細胞の存在によって媒介される任意の生物学的または医学的病態または障害を含める。望まれない細胞の存在によって前記病態が引き起こされることがあり、でなければ望まれない細胞の存在が前記病態の結果であることがある。特定の病態の例としては、腫瘍（良性または悪性）、自己免疫病態、心血管疾患、変性疾患、糖尿病、アレルギー性疾患（例えば喘息）、神経変性疾患、例えばアルツハイマー病、移植患者および感染症が挙げられる。前記薬剤が、再生医療（例えば、実験室で成長させた器官または組織）においも有用であることは理解されるであろう。前記病態が腫瘍（例えば悪性疾患）であり、前記望まれない細胞が腫瘍細胞または腫瘍関連組織であると、特に好ましい。
【００６３】
自己免疫疾患についての望まれない細胞は、適応または先天免疫応答の細胞、好ましくはＴ細胞、しかしさらに好ましくはＢ細胞を表し得る。心血管疾患についての望まれない細胞は、アテローム病変内の細胞、例えばマクロファージを表し得る。変性疾患についての望まれない細胞は、神経変性性変化を誘導する細胞を表し得、例えば、アルツハイマー病の場合、それらは小膠細胞または星状細胞であり得る。他の変性疾患については、変性またはアポトーシスの過程を助長する任意の細胞を標的と考えることができる。望まれない組織が増加する加齢などの過程については、例えば、両性前立腺肥大（ｂｅｎｉｇｎ  ｐｒｏｓｔａｔｉｃ  ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉｓ）の場合は、非悪性前立腺組織が好ましい標的であるだろう。アレルギー性疾患については、アレルギー反応に関与する細胞、例えば組織肥満細胞を理想的標的と考えることができるが、ＩｇＥ分泌細胞、例えば、形質細胞またはＢ細胞も理想的標的と考えることができる。移植の場合、同種異系反応性リンパ球が好ましい標的細胞の代表であるだろう。感染症に関しては、ウイルス、細菌または真菌病原体を保有する任意の細胞、例えば、ＨＩＶ感染細胞を好ましい標的細胞と考えることができる。
【００６４】
ある実施形態において、前記望まれない細胞は、交差提示能力を有するプロフェッショナル抗原提示細胞などの抗原提示細胞ではない。
【００６５】
Ｔ細胞抗原
「Ｔ細胞抗原」には、本発明者らは、Ｔ細胞に提示してＴ細胞応答を惹起することができる任意の抗原という意味を含める。例えば、Ｔ細胞抗原は、ＭＨＣ分子によりまたはグループＩのＣＤ１分子によりＴ細胞に提示され得る。抗原が細胞表面に提示されると、その細胞は外来のものとみなされ、そしてＴ細胞であって、一部が、外来生物、例えばウイルス、真菌、細菌、マイコバクテリアもしくは原生動物によって感染された外来細胞を排除する天然機能を有するＴ細胞、または癌性（例えば悪性）になったＴ細胞の標的になる。したがって、Ｔ細胞抗原が、望まれない細胞上の分子によって提示されることが可能であるものであり得ることは、理解されるであろう。しかし、Ｔ細胞抗原を望まれない細胞以外の細胞だが、望まれない細胞のやはり近傍の細胞上で提示することができること、およびその後のＴ細胞活性化のため、例えば活性化されたＴ細胞によるサイトカインの局所生産により、望まれない細胞を死滅させることが可能である。かかる間接的死滅作用は、例えば、腫瘍血管および／または腫瘍成長を支持する間質細胞の標的化に望ましいことがある。
【００６６】
前記Ｔ細胞抗原が、本発明の薬剤を投与する被験体における既存のＴ細胞応答を惹起することができるものであることは理解されるであろう。典型的に、前記Ｔ細胞抗原は、ＡＰＣにおける交差提示によりその抗原に対する新たな一次Ｔ細胞応答を生じさせるものではない。別の言い方をすると、前記Ｔ細胞抗原は、前記被験体における多数のＴ細胞が既に感作されているものである。被験体の細胞が所与の抗原に感作されているかどうかの判定は、その被験体からの単離末梢単核血液細胞をその抗原と接触させること、ならびにさらに下でおよび実施例において説明するような細胞増殖についての標準的アッセイを用いることによって行うことができる。
【００６７】
ある実施形態において、本発明の薬剤は、その中に含有されるＴ細胞抗原に対して特異的な新らたなＴ細胞応答を生じさせるものではない。したがって、本発明は、望まれない細胞の存在を特徴とする病態を予防または治療するための薬剤を含み、この薬剤は、（ｉ）前記望まれない細胞への標的化が可能である標的化部分と、（ｉｉ）Ｔ細胞抗原とを含み、前記望まれない細胞の近傍での前記薬剤中の切断部位の選択的切断により前記標的化部分から前記Ｔ細胞抗原を放出させることができ、および前記Ｔ細胞抗原は、被験体における既存のＴ細胞応答の惹起が可能である。
【００６８】
「Ｔ細胞抗原」には、本発明者らは、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、γδＴ細胞およびＮＫ−Ｔ細胞をはじめとする、Ｔ細胞のすべてのタイプを含める。好ましくは、Ｔ細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞応答を惹起するために細胞傷害性Ｔ細胞である。
【００６９】
当分野において公知であるように、抗原提示の機序は、Ｔ細胞のタイプに依存することとなる。一般に、ＣＤ４＋  Ｔ細胞は、ＭＨＣクラスＩＩ分子に結合したペプチド抗原を認識し、ＣＤ８＋  Ｔ細胞は、ＭＨＣクラスＩ分子に結合したペプチド抗原を認識し、γδＴ細胞は、グループＩのＣＤ１分子に結合した小型リン酸化分子、アルキルアミンまたは脂質を認識し、およびＮＫ−Ｔ細胞は、グループＩのＣＤ１分子に結合した脂質抗原を認識する。その抗原がＴ細胞応答を惹起するならばいずれの提示経路を用いてもよいことは理解される。したがって、前記Ｔ細胞抗原は、ＭＨＣクラスＩもしくはＭＨＣクラスＩＩ分子への結合が可能であるものであってもよいし、またはグループＩのＣＤ１分子への結合が可能であるものであってもよい。
【００７０】
好ましくは、前記Ｔ細胞抗原は、免疫優性抗原（例えば、既存の免疫優性応答を惹起する抗原）である。「免疫優性の」には、本発明者らは、抗原が、高い規模、感度、組織ホーミング特性、および抗原保有細胞を死滅させる効率を伴うＴ細胞応答を惹起するという意味を含める。一般に、免疫優性応答は、被験体のＣＤ８＋またはＣＤ４＋Ｔ細胞の０．１％より多くを含む。所与の抗原についてのＴ細胞応答の程度の判定は、例えば、その被験体からの単離末梢単核血液細胞をその抗原と接触させること、および当分野において公知の細胞増殖についての標準的アッセイを用いることによって行うことができる。免疫応答の程度を判定するための好適なアッセイとしては、ＥＬＩＳｐｏｔ、細胞内サイトカイン染色、ＨＬＡ−ペプチド四量体染色、増殖アッセイ、活性化アッセイ（例えばＣＤ６９）、ＣＤ１０７動員アッセイまたは代謝アッセイ（例えばＭＴＴ）が挙げられる。
【００７１】
好適なＴ細胞抗原の例としては、ペプチド、ポリペプチド、リンペプチド、または脂質、例えばリン脂質もしくはスフィンゴ脂質のいずれかが挙げられ、これらの各々についてのさらなる例を下で提供する。
【００７２】
Ｔ細胞抗原がペプチドまたはポリペプチドであるとき、典型的に、それは、ＭＨＣ分子に結合したときにＴ細胞受容体によって認識されることが可能であるものである。前記Ｔ細胞抗原は、ＭＨＣクラスＩ分子にしか結合しないＭＨＣクラスＩ拘束性抗原であってもよいし、またはＭＨＣクラスＩＩ分子にしか結合しないＭＨＣクラスＩＩ拘束性抗原であってもよい。前記抗原が特定の変異体ＨＭＣクラスＩおよび／もしくはＭＨＣクラスＩＩ分子（例えば、特定の被験体において見つけられる天然変異体）にしか結合しないことがあること、または前記抗原が、任意のＭＨＣクラスＩおよび／もしくはＭＨＣクラスＩＩ分子への結合が可能であることがあること（すなわち、前記抗原が無差別であること）は理解される。
【００７３】
１つの実施形態において、前記Ｔ細胞抗原は、ＭＨＣクラスＩ分子、例えばＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−ＢおよびＨＬＡ−Ｃのいずれか、への結合が可能である。ＭＨＣクラスＩ分子はすべての細胞タイプで発現されるので、これにより本発明の薬剤は任意の望まれない細胞に対する免疫応答を再指向させることが可能になる。最も好ましくは、前記ペプチドは、白人およびアジア人人口の９０％より多くをカバーすると考えられる、ＨＬＡタイプＡ１、Ａ２．１、Ａ３．２、Ａ１１、Ａ２４、Ｂ７、Ｂ８、Ｂ３５、Ｂ４４、Ｃｗ１、Ｃｗ２、Ｃｗ３、Ｃｗ４およびＣｗ６またはこれらの混合物に結合することができる。
【００７４】
もう１つの実施形態において、前記Ｔ細胞抗原は、ＭＨＣクラスＩＩ分子、例えばＨＬＡ−ＤＰ、ＨＬＡ−ＤＱまたはＨＬＡ−ＤＲのいずれか、への結合が可能である。共通ＭＨＣクラスＩＩタイプとしては、ＤＲ１、ＤＲ３、ＤＲ４、ＤＲ７、ＤＲ５２、ＤＱ１、ＤＱ２、ＤＱ４、ＤＱ８およびＤＰ１が挙げられる。ＭＨＣクラスＩＩ分子は、抗原提示細胞、例えば樹状細胞、Ｂ細胞およびマクロファージ、をはじめとする免疫細胞上で発現される。したがって、前記Ｔ細胞がＭＨＣクラスＩＩ拘束性であるとき、本発明の薬剤を使用して、リンパ腫または自己免疫疾患などの病態を治療することができる。
【００７５】
使用することができる無差別ペプチドの例は、Ａｌｅｘａｎｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ（２０００）Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １６４：１６２５−１６３３において定義されているＰＡＤＲＥ  ＭＨＣクラスＩＩエピトープ；ａＫＸＶＡＡＷＴＬＫＡＡａＺＣ（ａ＝ｄ−アラニン、Ｘ＝Ｌ−シクロヘキシルアラニン、Ｚ＝アミノカプロン酸）（配列番号１）である。このエピトープは人工であるので、本発明の薬剤を投与する前に、先ず、それをワクチンで患者に導入して免疫応答を生じさせる必要がある。使用することができるもう１つの無差別ペプチドは、破傷風フラグメントＣペプチドである。
【００７６】
適便には、前記Ｔ細胞抗原は、ＭＨＣ分子によって認識される免疫原性ペプチドである。かかるペプチドは、通常、９から２２アミノ酸長（ＭＨＣクラスＩＩ複合体での認識のために）または８から１３アミノ酸長（ＭＨＣクラスＩ複合体での認識のために）を有する。好ましくは、前記ペプチドは、免疫優性ペプチドである。
【００７７】
免疫優性ペプチドの例としては、内因性抗ウイルス応答を惹起するウイルス由来ペプチドが挙げられる。例えば、前記ペプチドは、内因性ウイルス、例えば、水痘帯状疱疹ウイルス、単純ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス、エプスタイン・バーウイルス、またはインフルエンザに由来し得る。特に好ましい例としては、ヒトサイトメガロウイルス（ＣＭＶもしくはヒトヘルペスウイルス５／ＨＨＶ５）またはエプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶもしくはＨＨＶ４）；ヘルペスウイルス、例えばＨＨＶ１、ＨＨＶ２およびＨＨＶ３；インフルエンザウイルスＡ；インフルエンザウイルスＢ；ライノウイルス；アデノウイルス；およびヘパドナウイルス科（Ｈｅｐａｄｎａｖｉｒｉｄａｅ）に由来するペプチドが挙げられる。
【００７８】
ヒトサイトメガロウイルス（ＨＨＶ５）については、免疫優性抗原が十分に特性付けされており（参照により本明細書に援用されているＳｙｌｗｅｓｔｅｒ  ＡＷ  ｅｔ  ａｌ  Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ．２００５  Ｓｅｐ  ５；２０２（５）：６７３−８５を参照されたし）、Ｓｙｌｗｅｓｔｅｒ  ｅｔ  ａｌに記載されている任意のかかる抗原を本発明において使用することができる。詳細には、Ｓｙｌｅｓｔｅｒらは２１３の予測されたヒトＣＭＶタンパク質について、１０アミノ酸がオーバーラップしている連続１５ｍｅｒペプチドを合成した。これは、ＯＲＦまたはサブＯＲＦ特異的ミックス（ｓｕｂ−ＯＲＦ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｍｉｘｅｓ）に配列された１３，６８７ペプチドを生じさせた。ＯＲＦ：ＵＬ５５（ｇＢ）、ＵＬ８３（ｐｐ６５）、ＵＬ８６、ＵＬ９９（ｐｐ２８）、ＵＬ１２２（ＩＥ２）、ＵＬ３６、ＵＬ４８、ＵＬ３２（ｐｐ１５０）、ＵＬ１１３、ＩＲＳ−１、ＵＬ１２３（ＩＥ１）、ＵＬ２５、ＵＬ１４１、ＵＬ５２およびＵＬ８２（ｐｐ７１）に由来するペプチドは、殆どのＣＤ４＋  Ｔ細胞応答を惹起することが判明したので、前記ペプチドがこれらのＯＲＦの１つに由来すると特に好ましい。あるいは、ＯＲＦ：ＵＬ４８、ＵＬ８３（ｐｐ６６）、ＵＬ１２３（ＩＥ１）、ＵＬ１２３（ＩＥ２）、ＵＳ３２、ＵＬ２８、ＵＳ２９、ＵＳ３、ＵＬ３２（ｐｐ１５０）、ＵＬ５５（ｇＢ）、ＵＬ９４、ＵＬ６９、ＵＬ１０５、ＵＬ８２（ｐｐ７１）およびＵＬ９９（ｐｐ２８）に由来するペプチドは、殆どのＣＤ８＋  Ｔ細胞応答を惹起することが判明したので、前記ペプチドがこれらのＯＲＦの１つに由来すると特に好ましい。
【００７９】
特定のサイトメガロウイルスＴ細胞を下に列挙する。
【００８０】
サイトメガロウイルス抗原、例えばＩＥ１、についてのＣＤ８＋  Ｔ細胞エピトープとしては、ＹＩＬＥＥＴＳＶＭ（配列番号２）、ＹＶＬＥＥＴＳＶＭ（配列番号３）、ＶＬＥＥＴＳＶＭＬ（配列番号４）、ＶＬＡＥＬＶＫＱＩ（配列番号５）、ＡＴＴＦＬＱＴＭＬＲ（配列番号６）、ＥＶＩＳＶＭＫＲＲ（配列番号７）、ＣＲＶＬＣＣＹＶＬ（配列番号８）、ＥＬＲＲＫＭＭＹＭ（配列番号９）、ＥＬＫＲＫＭＩＹＭ（配列番号１０）、ＱＩＫＶＲＶＤＭＶ（配列番号１１）、ＣＶＥＴＭＣＮＥＹ（配列番号１２）、ＲＲＫＭＭＹＭＣＹ（配列番号１３）、ＫＲＫＭＩＹＭＣＹ（配列番号１４）、ＲＲＩＥＥＩＣＭＫ（配列番号１５）、ＤＥＬＲＲＫＭＭＹ（配列番号１６）、ＫＥＶＮＳＱＬＳＬ（配列番号１７）、ＥＥＡＩＶＡＹＴＬ（配列番号１８）およびＦＰＫＴＴＮＧＣＳＱＡ（配列番号１９）が挙げられ；ｐｐ６５についてのＣＤ８＋  Ｔ細胞エピトープとしては、ＹＳＥＨＰＴＦＴＳＱＹ（配列番号２０）、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２１）、ＭＬＮＩＰＳＩＮＶ（配列番号２２）、ＲＩＦＡＥＬＥＧＶ（配列番号２３）、ＱＹＤＶＰＡＡＬＦ（配列番号２４）、ＦＴＳＱＹＲＩＱＧＫＬ（配列番号２５）、ＶＹＡＬＰＬＫＭＬ（配列番号２６）、ＱＹＶＫＶＹＬＥＳＦ（配列番号２７）、ＦＶＦＰＴＫＤＶＡＬＲ（配列番号２８）、ＹＴＰＤＳＴＰＣＨＲ（配列番号２９）、ＤＴＰＶＬＰＨＥＴＲ（配列番号３０）、ＴＰＲＶＴＧＧＧＡＭ（配列番号３１）、ＲＰＨＥＲＮＧＦＴＶＬ（配列番号３２）、ＩＰＳＩＮＶＨＨＹ（配列番号３３）、ＦＰＴＫＤＶＡＬ（配列番号３４）、ＣＰＳＱＥＰＭＳＩＹＶＹ（配列番号３５）、ＱＰＳＬＩＬＶＳＱＹ（配列番号３６）、ＳＥＨＰＴＦＴＳＱＹ（配列番号３７）、ＥＦＦＤＡＮＤＩＹ（配列番号３８）が挙げられ；ｐｐ１５０についてのＣＤ８＋  Ｔ細胞エピトープとしては、ＴＴＶＹＰＰＳＳＴＡＫ（配列番号３９）、ＱＴＶＴＳＴＰＶＱＧＲ（配列番号４０）、ＮＶＲＲＳＷＥＥＬ（配列番号４１）、ＫＡＲＤＨＬＡＶＬ（配列番号４２）が挙げられ；ｇＢについてのＣＤ８＋  Ｔ細胞エピトープとしては、ＲＩＷＣＬＶＶＣＶ（配列番号４３）が挙げられ；ならびにｐｐ５０についてのＣＤ８＋  Ｔ細胞エピトープとしては、ＶＴＥＨＤＴＬＬＹ（配列番号４４）、ＲＧＤＰＦＤＫＮＹ（配列番号４５）、ＴＶＲＳＨＣＶＳＫ（配列番号４６）が挙げられる。
【００８１】
サイトメガロウイルス抗原、例えばｐｐ５、についてのＣＤ４＋  Ｔ細胞エピトープとしては、ＰＱＹＳＥＨＰＴＦＴＳＱＹＲＩＱ（配列番号４７）、ＦＴＳＱＹＲＩＱＧＫＬＥＹＲＨＴ（配列番号４８）、ＬＬＱＴＧＩＨＶＲＶＳＱＰＳＬ（配列番号４９）、ＮＰＱＰＦＭＲＰＨＥＲＮＧＦＴ（配列番号５０）、ＥＰＤＶＹＹＴＳＡＦＶＦＰＴＫ（配列番号５１）、ＩＩＫＰＧＫＩＳＨＩＭＬＤＶＡ（配列番号５２）、ＡＧＩＬＡＲＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号５３）、ＫＹＱＥＦＦＷＤＡＮＤＩＹＲＩ（配列番号５４）が挙げられ；ｇＢについてのＣＤ４＋  Ｔ細胞エピトープとしては、ＤＹＳＮＴＨＳＴＲＹＶ（配列番号５５）、ＣＭＬＴＩＴＴＡＲＳＫＹＰＹＨ（配列番号５６）、およびＶＦＥＴＳＧＧＬＶＶＦＷＱＧＩ（配列番号５７）が挙げられ；ＩＥ１についてのＣＤ４＋  Ｔ細胞エピトープとしては、ＶＲＶＤＭＶＲＨＲＩＫＥＨＭＬＫＫＹＴＱ（配列番号５８）およびＮＹＩＶＰＥＤＫＲＥＭＷＭＡＣＩＫＥＬＨ（配列番号５９）が挙げられ；ならびにｇＨについてのＣＤ４＋  Ｔ細胞エピトープとしては、ＨＥＬＬＶＬＶＫＫＡＱＬ（配列番号６０）が挙げられる。
【００８２】
エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶまたはＨＨＶ４）についての免疫優性タンパク質も十分に特性付けされており、Ｈｉｓｌｏｐ  ＡＤ  ｅｔ  ａｌ  Ａｎｎｕ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００７；２５：５８７−６１７（参照により本明細書に援用されている）に提供されている。Ｈｉｓｌｏｐ  ｅｔ  ａｌから改作したＴ細胞エピトープのリストを下に提供する。
【００８３】
表３：ＥＢＶ溶解および潜在サイクルタンパク質中で同定されたＣＤ８＋およびＣＤ４＋  Ｔ細胞エピトープ（Ｈｉｓｌｏｐ  ｅｔ  ａｌから改作）
ＣＤ８＋  Ｔ細胞エピトープ
2014509605.tif 000015
2014509605.tif 000016
2014509605.tif 000017
【００８４】
ＣＤ４＋  Ｔ細胞エピトープ
2014509605.tif 000018
2014509605.tif 000019
2014509605.tif 000020
【００８５】
免疫優性ペプチドのさらなる例としては、ＨＬＡ−Ａ＊０２０１拘束性エピトープ（ＨＣＭＶ  ｐｐ６５  ４９５−５０４−ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２１）、ＨＣＭＶ  ＩＥ１  ＶＬＥＥＴＳＶＭＬ（配列番号４）、ＥＢＶ  ＬＭＰ−２  ３５６−３６４  ＦＬＹＡＬＡＬＬＬ（配列番号１２７）、ＥＢＶ  ＢＭＬＦ−１  ２５９−２６７  ＧＬＣＴＬＶＡＭＬ（配列番号１５５））；ＨＬＡ−Ａ＊０１０１拘束性エピトープ（ＨＣＭＶ  ｐｐ５０  ２４５−２５３−ＶＴＥＨＤＴＬＬＹ（配列番号４４）；ＨＣＭＶ  ｐｐ６５  ３６３−３７３−ＹＳＥＨＰＴＦＴＳＱＹ）（配列番号２０）；ＨＬＡ−Ａ＊０３０１拘束性エピトープ（ＨＣＭＶ  ｐｐ５０−ＴＶＲＳＨＣＶＳＫ（配列番号４６））；ＨＬＡ−Ｂ＊０７０２拘束性エピトープ（ＨＣＭＶ  ｐｐ６５  ４１７−４２６  ＴＰＲＶＴＧＧＧＡＭ（配列番号３１）、ｐｐ６５  ２６５−２７５  ＲＰＨＥＲＮＧＦＴＶＬ（配列番号３２））；およびＨＬＡ−Ｂ＊０８０１拘束性エピトープ（ＨＣＭＶ  ＩＥ１  ８８−９６−ＥＬＫＲＫＭＭＹＭ（配列番号２５３）、ＩＥ１  ８８−９６  ＱＩＫＶＲＶＤＭＶ（配列番号１１）、ＥＢＶ  ＢＺＬＦ−１  １９０−１９７  ＲＡＫＦＫＱＬＬ（配列番号１５２）が挙げられ、これらのいずれも本発明に関連して使用することができる。
【００８６】
前記Ｔ細胞抗原（例えばエピトープ）が、生ワクチン、例えば、麻疹、流行性耳下腺炎、風疹（ＭＭＲ）もしくはＨＨＶ３に由来するものであってもよく；または細胞内細菌、例えば、マイコバクテリア、特に、ＢＣＧでの免疫処置により誘発されたものに由来するものであってもよいことは理解される。かかるペプチドは当分野において周知である。同様に、前記Ｔ細胞抗原（例えばエピトープ）は、破傷風トキソイド、例えば、Ｐ２、Ｐ４またはＰ３０に由来するものであってもよい。したがって、前記Ｔ細胞抗原（例えばエピトープ）が、感染因子に対する以前の予防接種によって生成された被験体における既存の免疫応答を惹起するものであり得ることは理解されるであろう。したがって、Ｔ細胞抗原に感作されたＴ細胞の数を増加させるために、そのＴ細胞抗原を含むワクチンを被験体に予防接種することまたはそのワクチンで被験体を追加免疫することが望ましいことがあるということになる。例えば、前記被験体に、関連Ｔ細胞抗原を含む本発明の薬剤を投与する前に、破傷風毒素を予防接種してもよい。
【００８７】
多くの人は、小児期にこれらのワクチンの予防接種を受けるので、これらのＴ細胞抗原に感作されているＴ細胞を含有する可能性が高いことは理解されるであろう。したがって、１つの実施形態において、前記Ｔ細胞抗原は、小児用ワクチンにおいて見つけられるものである。
【００８８】
好ましくはないが、前記Ｔ細胞抗原（例えばエピトープ）は、被験体のＴ細胞をｉｎ  ｖｉｔｒｏで抗原に曝露することによって生成されたその被験体における既存の免疫応答を惹起するものであってもよい。
【００８９】
周知の化学的手順、例えば、溶液もしくは固相合成、または当分野において周知であるような従来の溶液法によりカップリングされたタンパク質断片を用いて始める溶液中での半合成によって、ペプチドを生産することができる。あるいは、組換え法をはじめとする確立された方法によってペプチドを合成することができる。
【００９０】
前記Ｔ細胞抗原がポリペプチドまたはポリペプチドであるほうが好ましいが、他の抗原も免疫応答の惹起が可能であるので、本発明において有用であることは分かる。例えば、γδＴ細胞は、ＭＨＣ関連ペプチド抗原を認識せず、ＭＨＣ拘束性ではない。一部のγδＴ細胞クローンは、ＣＤ１分子と呼ばれる「非古典的な」クラスＩのＭＨＣ様分子によって提示され得る、小型リン酸化分子、ピロリン酸化化合物（例えば、ＨＭＢＰＰ（Ｅ−４−ヒドロキシ−３−メチル−ブタ−２−エニル−ピロホスファート）およびＩＰＰ（イソペンテニルピロホスファート））、アルキルアミンまたは脂質（例えばリン酸化脂質）を認識する。同様に、ＮＫ−Ｔ細胞（例えばＶα２４Ｖβ１１細胞）は、ＣＤ１分子に結合した脂質（例えば、α−ｇａｌ−セラミドなどのセラミド）を認識する。したがって、前記Ｔ細胞抗原は、Ｔ細胞応答を惹起することが公知であるこれらの分子のいずれかであり得る。
【００９１】
前記薬剤が自己免疫またはアレルギー性疾患を治療するためのものであるとき、前記Ｔ細胞抗原がそれぞれ自己抗原またはアレルゲンであり得ることは理解されるであろう。このように、障害の一因となる免疫応答を望まれない細胞に再指向させて、その障害と戦う。
【００９２】
前記Ｔ細胞抗原は、Ｔ細胞応答の惹起がなお可能であるならば、化学的に修飾されていてもよいことは理解される。かかる化学修飾としては、例えば、一定のアレルギー患者にはニッケル原子が結合したペプチドを認識するＴ細胞があることが証明されている（Ｒｏｍａｇｎｏｌｉ  ｅｔ  ａｌ  １９９１，ＥＭＢＯ  Ｊ  １０：１３０３−１３０６）ので、ニッケルなどの金属の付加を挙げることができる。免疫原性を強化する有機分子によって前記Ｔ細胞抗原を修飾することもできる（Ｒｏｍｅｒｏ  ｅｔ  ａｌ  １９９３，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １５０：３８２５−３８３１）。他の修飾としては、リン酸化、アセチル化、アルキル化、アシル化、シトルリン化（ｃｉｔｒｕｌｉｎａｔｉｏｎ）、ニトロ化、硫酸化およびヒドロキシル化、酸または塩基との塩を形成すること、末端カルボキシル基のエステルまたはアミドを形成すること、およびＮ−ｔ−ブトキシカルボナールなどのアミノ酸保護基を付けることが挙げられる。
【００９３】
前記Ｔ細胞抗原がペプチドであるとき、そらは、ＤＮＡによってコードされた天然に存在するアミノ酸、および／または「Ｄ」異性体形態のアミノ酸をはじめとする１つ以上の非天然アミノ酸（但し、それが対応するＴ細胞によって認識されることを条件とする）を含み得ることは理解される。したがって、前記ペプチドは、ペプチド「模倣体」、すなわち、上述のペプチドのいずれかの構造的特徴を模倣するペプチドミメティックであってもよい。例えば、前記Ｔ細胞抗原は、レトロ−インベルソ型ペプチドであってもよい。
【００９４】
同様に、前記Ｔ細胞抗原は、ペプチドのとき、ミモトープ、すなわち、天然エピトープの構造を模倣する天然または非天然アミノ酸から成るペプチドであってもよい。ミモトープは、多くの場合、Ｔ細胞をより強力に刺激する。
【００９５】
好ましくは、前記Ｔ細胞抗原は、Ｔリンパ球不在下では実質的に非毒性である。「実質的に非毒性」は、本発明者らは、抗原が、シュードモナス外毒素などの毒素と比較して相当低い毒性を有する、または好ましくは検出可能な毒性を有さないことを意図する。
【００９６】
当業者は、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｍｍｕｎｅｅｐｉｔｏｐｅ．ｏｒｇ（Ｖｉｔａ  Ｒ，Ｚａｒｅｂｓｋｉ  Ｌ，Ｇｒｅｅｎｂａｕｍ  ＪＡ，Ｅｍａｍｉ  Ｈ，Ｈｏｏｆ  Ｉ，Ｓａｌｉｍｉ  Ｎ，Ｄａｍｌｅ  Ｒ，Ｓｅｔｔｅ  Ａ，Ｐｅｔｅｒｓ  Ｂ．Ｔｈｅ  ｉｍｍｕｎｅ  ｅｐｉｔｏｐｅ  ｄａｔａｂａｓｅ  ２．０．Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２０１０  Ｊａｎ；３８（Ｄａｔａｂａｓｅ  ｉｓｓｕｅ）：Ｄ８５４−６２．Ｅｐｕｂ  ２００９  Ｎｏｖ  １１）で利用可能なデータベースを用いて、本発明において使用することができるさらなるＴ細胞抗原を同定することができるだろう。
【００９７】
選択的切断
「望まれない細胞の近傍での前記薬剤中の切断部位の選択的切断により前記標的化部分から放出される」には、本発明者らは、Ｔ細胞抗原と標的化部位の間の切断部位が望まれない細胞の近傍で選択的に切断されることによりＴ細胞抗原が標的化部分から放出されるという意味を含める。
【００９８】
「望まれない細胞の近傍で選択的に切断可能である切断部位」には、本発明者らは、標的化部分からＴ細胞抗原を放出させるために、望まれない細胞の近傍に選択的に存在する分子によってのみ切断され得る部位という意味を含める。好ましくは、前記切断部位を切断する分子は、前記望まれない細胞の近傍の外部の分子の濃度より少なくとも５倍または１０倍高い濃度で、およびさらに好ましくは少なくとも１００または５００または１０００倍高い濃度で前記望まれない細胞の近傍に存在する。最も好ましくは、前記切断部位を切断する分子は、前記望まれない細胞の近傍でしか見つけられない。例えば、前記望まれない細胞が特定の腫瘍細胞（例えば乳房腫瘍細胞）であるとき、前記切断部位は、その特定の腫瘍（例えば乳房腫瘍）内に選択的に存在するが、その特定の腫瘍（例えば乳房腫瘍）の近傍の外部には存在しない分子によって切断されるものであり得る。
【００９９】
「細胞の近傍で」には、本発明者らは、該細胞の表面でもしくは表面付近でまたは両方、あるいは、該細胞を直接包囲する環境内で、例えば、血液、リンパおよび他の体液中でという意味を含める。特に好まし実施形態において、前記切断部位は、望まれない細胞の外部で、その表面で、またはその表面の付近で選択的に切断され、その結果、Ｔ細胞抗原は内在化される必要なく該望まれない細胞によってＴ細胞に提示され得る。
【０１００】
前記切断部位は、望まれない細胞の近傍で選択的に切断され、その結果、Ｔ細胞抗原は、望まれる細胞によってではなく望まれない細胞によって優先的に提示される。したがって、前記切断部位は、Ｔ細胞抗原が望まれない細胞の近傍で（例えば、細胞表面でまたは細胞表面付近で）、望まれる細胞の近傍で放出される程度より少なくとも５倍または１０倍多く、およびさらに好ましくは少なくとも１００または５００または１０００倍多く放出されるように、選択的に切断されるものであるほうが好ましい。最も好ましくは、前記Ｔ細胞抗原は、望まれる細胞の近傍で放出されず、したがって、望まれる細胞によって提示されない。
【０１０１】
所与の望まれない細胞について、当業者は、当分野において確立された方法を用いて、該望まれない細胞の近傍で選択的に切断可能である適切な切断部位を同定することができるだろう。例えば、ペプチドライブラリを調べること、および切断後の断片化プロファイルのＭＳ分析を研究することにより、どのプロテアーゼが、どのペプチドを切断するかを評定することができる。また、下にさらに記載するような、プロテアーゼ切断モチーフおよびペプチド切断データについての発行文献を検索することができる。遺伝子発現およびプロテオミクスデータを分析して、特定の望まれない細胞によってどのプロテアーゼが発現されるのかを同定することもできる。
【０１０２】
望まれない細胞の近傍で選択的に選択可能である切断部位のため、Ｔ細胞抗原は、該望まれない細胞の近傍で選択的に放出される。本発明者らは、これにより、望まれない細胞がＴ細胞抗原をＴ細胞に提示することが可能になり、その結果、それらの望まれない細胞に対する既存の免疫応答を再指向させることが可能になると考えている。
【０１０３】
好ましい実施形態において、前記切断部位は、前記望まれない細胞の近傍および前記望まれない細胞の外部で、例えば、その細胞表面で切断されるものである。このように、Ｔ細胞抗原を、内在化する必要なく、および適切なプロセッシング経路を要することなく、その細胞の外面の近傍で放出させ、Ｔ細胞に直接提示することができる。したがって、本発明は、望まれない細胞の存在を特徴とする病態を予防または治療するための薬剤を含み、この薬剤は、（ｉ）前記望まれない細胞への標的化が可能である標的化部分と、（ｉｉ）Ｔ細胞抗原とを含み、前記望まれない細胞の近傍および外部での前記薬剤中の切断部位の選択的切断により前記標的化部分から前記Ｔ細胞抗原を放出させることができる。好ましくは、前記Ｔ細胞抗原は、その抗原に対して新たな一次Ｔ細胞応答を生じさせず、むしろ被験体における既存のＴ細胞応答を惹起するものである。
【０１０４】
しかし、本発明者らはまた、Ｔ細胞抗原が、古典的抗原プロセッシングを受ける必要なく該細胞の内部に放出され得、なおＴ細胞に提示され得ると考えている。したがって、前記切断部位が、細胞表面で切断される必要なく、細胞内で、例えば、受容体サイクリング経路経由でまたは小胞（例えば飲作用胞）などの膜付近区画内で切断されてもよいことは理解されるだろう。
【０１０５】
前記切断部位は、膜に結合していてもよいし、していなくてもよい酵素、例えばプロテアーゼ、ヌクレアーゼ、リパーゼ、リアーゼ、ホスファターゼまたはカルボヒドラーゼのいずれか、によって切断可能であるものであり得る。
【０１０６】
一般に、前記切断部位は、プロテアーゼ切断部位である。したがって、望まれない細胞が腫瘍細胞であるとき、その切断部位は、腫瘍細胞の近傍に存在するプロテアーゼによって選択的に切断可能であり得る。言い換えると、前記プロテアーゼ切断部位は、腫瘍関連プロテアーゼによって切断可能であるものであり得る。腫瘍発達中に腫瘍がプロテアーゼを異所発現し、それによりそれらの局所組織への浸潤およびことによると転移が可能になることは周知である。
【０１０７】
前記プロテアーゼとしては、システインプロテアーゼ（カテプシンファミリーＢ、Ｌ、Ｓなどを含む）、アスパルチルプロテアーゼ（カテプシンＤおよびＥを含む）およびセリンプロテアーゼ（カテプシンＡおよびＧ、トロンビン、プラスミン、ウロキナーゼ、組織プラスミノゲン活性化因子を含む）のいずれかを挙げることができる。前記プロテアーゼは、膜結合型（ＭＭＰ１４−１７およびＭＭＰ２４−２５）および分泌型（ＭＭＰ１−１３およびＭＭＰ１８−２３およびＭＭＰ２６−２８）の両方を含むメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ１−２８）であってもよい。前記プロテアーゼは、プロテアーゼのジスインテグリンおよびメタロプロテアーゼ（Ａ  Ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉｎ  ａｎｄ  Ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ：ＡＤＡＭ）ファミリーおよびトロンボスポンジンモチーフを伴うジスインテグリンまたはメタロプロテアーぜ（Ａ  Ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉｎ，ｏｒ  Ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ  ｗｉｔｈ  Ｔｈｒｏｍｂｏｓｐｏｎｄｉｎ  Ｍｏｔｉｆｓ：ＡＤＡＭＴＳ）ファミリーに属することもある。他の例としては、ＣＤ１０（ＣＡＬＬＡ）および前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）が挙げられる。前記プロテアーゼが膜結型であってもよいし、なくてもよいことは理解される。
【０１０８】
プロテアーゼ切断部位は科学文献で周知であり、かかる切断部位を含むリンカー配列は、確立された遺伝子工学技術を用いて、または当分野において公知の人工的合成技術によって容易に構築することができる。
【０１０９】
前記プロテアーゼ切断部位は、選択されたプロテアーゼの様々な腫瘍タイプにおける発現を示す下の表４に収載するプロテアーゼのいずれかによって切断可能であるものであり得る。それらのプロテアーゼの候補基質を提供する。例えば、特定の腫瘍タイプを治療するために、当業者は、この表から分かるようなその腫瘍タイプにおいて高度に発現されることが公知のプロテアーゼによって選択的に切断されるプロテアーゼ切断部位を概して選択することとなる。例えば、乳癌を治療するためには、ｕＰＡ、ｔＰＡ、マトリプターゼ、マトリプターゼ２、カテプシンＫ、カテプシンＯ、ＭＭＰ１、ＭＭＰ２、ＭＭＰ３、ＭＭＰ１１、ＭＭＰ１２、ＭＭＰ１７、ＡＤＡＭ９、ＡＤＡＭ１２、ＡＤＡＭ１５、ＡＤＡＭ１７、ＡＤＡＭ２８またはＡＤＡＭＴＳ１５のいずれかによって切断可能なプロテアーゼ切断部位を使用するほうが好ましい、など。
【０１１０】
同様に、表５は、ＡＤＡＭプロテアーゼ過発現が報告されている腫瘍部位を収載しており、そのため、ある実施形態における切断部位は、表５に収載されているＡＤＡＭプロテアーゼの１つによって選択的に切断可能である。相応じて、その薬剤を使用して、対応する腫瘍タイプを予防または治療することができる。
【０１１１】
前記切断部位は、以下ヒトプロテアーゼのいずれかによって選択的に切断可能であり得る（ＭＥＲＯＰＳペプチドデータベース番号をカッコ内に提供する；Ｒａｗｌｉｎｇｓ  Ｎ．Ｄ．，Ｍｏｒｔｏｎ  Ｆ．Ｒ．，Ｋｏｋ，Ｃ．Ｙ．，Ｋｏｎｇ，Ｊ．＆  Ｂａｒｒｅｔｔ  Ａ．Ｊ．（２００８）ＭＥＲＯＰＳ：ｔｈｅ  ｐｅｐｔｉｄａｓｅ  ｄａｔａｂａｓｅ．Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．３６  Ｄａｔａｂａｓｅ  ｉｓｓｕｅ，Ｄ３２０−３２５）：ペプチンＡ（ＭＥＲ０００８８５）、ガストリクシン（ＭＥＲ０００８９４）、メマプシン−２（ＭＥＲ００５８７０）、レニン（ＭＥＲ０００９１７）、カテプシンＤ（ＭＥＲ０００９１１）、カテプシンＥ（ＭＥＲ０００９４４）、メマプシン−１（ＭＥＲ００５５３４）、ナプシンＡ（ＭＥＲ００４９８１）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ０３４ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１４０３８）、ペプシンＡ４（ＭＥＲ０３７２９０）、ペプシンＡ５（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０３７２９１）、ｈＣＧ１７３３５７２（ホモサピエンス）型推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ１０７３８６）、ナプシンＢ偽遺伝子（ＭＥＲ００４９８２）、ＣＹＭＰ  ｇ．ｐ．（ホモサピエンス）（ＭＥＲ００２９２９）、サブファミリーＡ１Ａ未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ１８１５５９）、マウス乳癌ウイルスレトロペプシン（ＭＥＲ０４８０３０）、ウサギ内因性レトロウイルスエンドペプチダーゼ（ＭＥＲ０４３６５０）、Ｓ７１関連ヒト内因性レトロペプシン（ＭＥＲ００１８１２）、ＲＴＶＬ−Ｈ型推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０４７１１７）、ＲＴＶＬ−Ｈ型推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０４７１３３）、ＲＴＶＬ−Ｈ型推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０４７１６０）、ＲＴＶＬ−Ｈ型推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０４７２０６）、ＲＴＶＬ−Ｈ型推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０４７２５３）、ＲＴＶＬ−Ｈ型推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０４７２６０）、ＲＴＶＬ−Ｈ型推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０４７２９１）、ＲＴＶＬ−Ｈ型推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０４７４１８）、ＲＴＶＬ−Ｈ型推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０４７４４０）、ＲＴＶＬ−Ｈ型推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０４７４７９）、ＲＴＶＬ−Ｈ型推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０４７５５９）、ＲＴＶＬ−Ｈ型推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０４７５８３）、ＲＴＶＬ−Ｈ型推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１５４４６）、ヒト内因性レトロウイルスレトロペプシンホモログ１（ＭＥＲ０１５４７９）、ヒト内因性レトロウイルスレトロペプシンホモログ２（ＭＥＲ０１５４８１）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子１（ホモサピエンス染色体１４）（ＭＥＲ０２９９７７）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子２（ホモサピエンス染色体８）（ＭＥＲ０２９６６５）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子３（ホモサピエンス染色体１７）（ＭＥＲ００２６６０）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子３（ホモサピエンス染色体１７）（ＭＥＲ０３０２８６）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子３（ホモサピエンス染色体１７）（ＭＥＲ０４７１４４）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子５（ホモサピエンス染色体１２）（ＭＥＲ０２９６６４）、内因性レトロウイルスレトロペプシン��遺伝子６（ホモサピエンス染色体７）（ＭＥＲ００２０９４）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子７（ホモサピエンス染色体６）（ＭＥＲ０２９７７６）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子８（ホモサピエンス染色体Ｙ）（ＭＥＲ０３０２９１）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子９（ホモサピエンス染色体１９）（ＭＥＲ０２９６８０）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子１０（ホモサピエンス染色体１２）（ＭＥＲ００２８４８）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子１１（ホモサピエンス染色体１７）（ＭＥＲ００４３７８）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子１２（ホモサピエンス染色体１１）（ＭＥＲ００３３４４）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子１３（ホモサピエンス染色体２および類似物）（ＭＥＲ０２９７７９）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子１４（ホモサピエンス染色体２）（ＭＥＲ０２９７７８）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子１５（ホモサピエンス染色体４）（ＭＥＲ０４７１５８）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子１５（ホモサピエンス染色体４）（ＭＥＲ０４７３３２）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子１５（ホモサピエンス染色体４）（ＭＥＲ００３１８２）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子１６（ＭＥＲ０４７１６５）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子１６（ＭＥＲ０４７１７８）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子１６（ＭＥＲ０４７２００）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子１６（ＭＥＲ０４７３１５）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子１６（ＭＥＲ０４７４０５）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子１６（ＭＥＲ０３０２９２）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子１７（ホモサピエンス染色体８）（ＭＥＲ００５３０５）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子１８（ホモサピエンス染色体４）（ＭＥＲ０３０２８８）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子１９（ホモサピエンス染色体１６）（ＭＥＲ００１７４０）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子２１（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０４７２２２）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子２１（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０４７４５４）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子２１（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０４７４７７）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子２１（ホモサピエンス）（ＭＥＲ００４４０３）、内因性レトロウイルスレトロペプシン偽遺伝子２２（ホモサピエンス染色体Ｘ）（ＭＥＲ０３０２８７）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７０４６）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７０５２）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７０７６）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７０８０）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７０８８）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７０８９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（Ｍ��Ｒ０４７０９１）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７０９２）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７０９３）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７０９４）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７０９７）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７０９９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１０１）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１０２）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１０７）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１０８）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１０９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１１０）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１１１）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１１４）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１１８）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１２１）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１２２）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１２６）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１２９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１３０）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１３４）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１３５）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１３７）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１４０）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１４１）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１４２）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１４８）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１４９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１５１）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１５４）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１５５）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１５６）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１５７）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１５９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１６１）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１６３）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１６６）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１７１）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１７３）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１７４）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１７９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１８３）、サブ��ァミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１８６）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１９０）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１９１）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１９６）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１９８）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７１９９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２０１）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２０２）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２０３）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２０４）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２０５）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２０７）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２０８）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２１０）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２１１）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２１２）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２１３）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２１５）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２１６）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２１８）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２１９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２２１）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２２４）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２２５）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２２６）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２２７）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２３０）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２３２）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２３３）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２３４）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２３６）、サ
ブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２３８）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２３９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２４０）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２４２）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２４３）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２４９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２５１）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２５２）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２５４）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２５５）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２６３）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２６５）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２６６）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２６７）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２６８）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２６９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２７２）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２７３）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２７４）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２７５）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２７６）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２７９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２８０）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２８１）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２８２）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２８４）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２８５）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２８９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２９０）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２９４）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２９５）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７２９８）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３００）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３０２）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３０４）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３０５）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３０６）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３０７）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３１０）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３１１）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３１４）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３１８）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３２０）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３２１）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３２２）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３２６）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３２７）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３３０）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３３３）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３６２）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３６６）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３６９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３７０）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３７１）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３７５）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３７６）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３８１）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３８３）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３８４）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３８５）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３８８）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３８９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３９１）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３９４）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７３９６）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４００）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４０１）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４０３）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４０６）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４０７）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４１０）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４１１）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４１３）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４１４）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４１６）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４１７）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４２０）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４２３）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４２４）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４２８）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４２９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４３１）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４３４）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４３９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４４２）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４４５）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４４９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４５０）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４５２）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４５５）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４５７）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４５８）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４５９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４６３）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４６８）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４６９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４７０）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４７６）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４７８）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４８３）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４８８）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４８９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４９０）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４９３）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４９４）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４９５）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４９６）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４９７）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７４９９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７５０２）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７５０４）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７５１１）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７５１３）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７５１４）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７５１５）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７５１６）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７５２０）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７５３３）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７５３７）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７５６９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７５７０）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７５８４）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７６０３）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７６０４）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７６０６）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７６０９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７６１６）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７６１９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７６４８）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７６４９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４７６６２）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４８００４）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４８０１８）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４８０１９）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４８０２３）、サブファミリーＡ２Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０４８０３７）、サブファミリーＡ２Ａ未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ０４７１６４）、サブファミリーＡ２Ａ未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ０４７２３１）、サブファミリーＡ２Ａ未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ０４７３８６）、皮膚アスパラギン酸プロテアーゼ（ＭＥＲ０５７０９７）、プレセニリン１（ＭＥＲ００５２２１）、プレセニリン２（ＭＥＲ００５２２３）、ＩＭＰＡＳ１ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１９７０１）、ＩＭＰＡＳ１ペプチダーゼ（ＭＥＲ１８４７２２）、ＩＭＰＡＳ４ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１９７１５）、ＩＭＰＡＳ２ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１９７０８）、ＩＭＰＡＳ５ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１９７１２）、ＩＭＰＡＳ３ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１９７１１）、可能性のあるファミリーＡ２２偽遺伝子（ホモサピエンス染色体１８）（ＭＥＲ０２９９７４）、可能性のあるファミリーＡ２２偽遺伝子（ホモサピエンス染色体１１）（ＭＥＲ０２３１５９）、カテプシンＶ（ＭＥＲ００４４３７）、カテプシンＸ（ＭＥＲ００４５０８）、カテプシンＦ（ＭＥＲ００４９８０）、カテプシンＬ（ＭＥＲ０００６２２）、カテプシンＳ（ＭＥＲ０００６３３）、カテプシンＯ（ＭＥＲ００１６９０）、カテプシンＫ（ＭＥＲ０００６４４）、カテプシンＷ（ＭＥＲ００３７５６）、カテプシンＨ（ＭＥＲ０００６２９）、カテプシンＢ（ＭＥＲ０００６８６）、ジペプチジル−ペプチダーゼＩ（ＭＥＲ００１９３７）、ブレオマイシンヒドロラーゼ（動物）（ＭＥＲ００２４８１）、尿細管
間質性腎炎抗原（ＭＥＲ０１６１３７）、尿細管間質性腎炎抗原関連タンパク質（ＭＥＲ０２１７９９）、カテプシンＬ様偽遺伝子１（ホモサピエンス）（ＭＥＲ００２７８９）、カテプシンＢ様偽遺伝子（染色体４、ホモサピエンス）（ＭＥＲ０２９４６９）、カテプシンＢ様偽遺伝子（染色体１、ホモサピエンス）（ＭＥＲ０２９４５７）、ＣＴＳＬＬ  ２ｇ．ｐ．（ホモサピエンス）（ＭＥＲ００５２１０）、ＣＴＳＬＬ３  ｇ．ｐ．（ホモサピエンス）（ＭＥＲ００５２０９）、カルパイン−１（ＭＥＲ０００７７０）、カルパイン−２（ＭＥＲ０００９６４）、カルパイン−３（ＭＥＲ００１４４６）、カルパイン−９（ＭＥＲ００４０４２）、カルパイン−８（ＭＥＲ０２１４７４）、カルパイン−１５（ＭＥＲ００４７４５）、カルパイン−５（ＭＥＲ００２９３９）、カルパイン−１１（ＭＥＲ００５８４４）、カルパイン−１２（ＭＥＲ０２９８８９）、カルパイン−１０（ＭＥＲ０１３５１０）、カルパイン−１３（ＭＥＲ０２０１３９）、カルパイン−１４（ＭＥＲ０２９７４４）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ２５３ペプチダーゼ（ＭＥＲ００５５３７）、Ｃａｌｐａｍｏｄｕｌｉｎ（ＭＥＲ０００７１８）、仮説タンパク質ｆｌｊ４０２５１（ＭＥＲ００３２０１）、ユビキチニルヒドラーゼ−Ｌ１（ＭＥＲ０００８３２）、ユビキチニルヒドラーゼ−Ｌ３（ＭＥＲ０００８３６）、ユビキチニルヒドラーゼ−ＢＡＰ１（ＭＥＲ００３９８９）、ユビキチニルヒドラーゼ−ＵＣＨ３７（ＭＥＲ００５５３９）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ５（ＭＥＲ００２０６６）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ６（ＭＥＲ０００８６３）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ４（ＭＥＲ００１７９５）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ８（ＭＥＲ００１８８４）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ１３（ＭＥＲ００２６２７）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ２（ＭＥＲ００４８３４）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ１１（ＭＥＲ００２６９３）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ１４（ＭＥＲ００２６６７）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ７（ＭＥＲ００２８９６）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ９Ｘ（ＭＥＲ００５８７７）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ１０（ＭＥＲ００４４３９）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ１（ＭＥＲ００４９７８）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ１２（ＭＥＲ００５４５４）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ１６（ＭＥＲ００５４９３）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ１５（ＭＥＲ００５４２７）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ１７（ＭＥＲ００２９００）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ１９（ＭＥＲ００５４２８）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ２０（ＭＥＲ００５４９４）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ３（ＭＥＲ００５５１３）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ９Ｙ（ＭＥＲ００４３１４）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ１８（ＭＥＲ００５６４１）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ２１（ＭＥＲ００６２５８）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ２２（ＭＥＲ０１２１３０）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ３３（ＭＥＲ０１４３３５）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ２９（ＭＥＲ０１２０９３）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ２５（ＭＥＲ０１１１１５）、ユ��キチン特異的ペプチダーゼ３６（ＭＥＲ０１４０３３）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ３２（ＭＥＲ０１４２９０）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ２６（ホモサピエンス型）（ＭＥＲ０１４２９２）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ２４（ＭＥＲ００５７０６）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ４２（ＭＥＲ０１１８５２）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ４６（ＭＥＲ０１４６２９）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ３７（ＭＥＲ０１４６３３）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ２８（ＭＥＲ０１４６３４）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ４７（ＭＥＲ０１４６３６）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ３８（ＭＥＲ０１４６３７）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ４４（ＭＥＲ０１４６３８）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ５０（ＭＥＲ０３０３１５）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ３５（ＭＥＲ０１４６４６）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ３０（ＭＥＲ０１４６４９）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ０９１ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１４７４３）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ４５（ＭＥＲ０３０３１４）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ５１（ＭＥＲ０１４７６９）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ３４（ＭＥＲ０１４７８０）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ４８（ＭＥＲ０６４６２０）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ４０（ＭＥＲ０１５４８３）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ４１（ＭＥＲ０４５２６８）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ３１（ＭＥＲ０１５４９３）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１２９ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１６４８５）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ４９（ＭＥＲ０１６４８６）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１８７ペプチダーゼ（ＭＥＲ０５２５７９）、ＵＳＰ１７様ペプチダーゼ（ＭＥＲ０３０１９２）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ５４（ＭＥＲ０２８７１４）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ５３（ＭＥＲ０２７３２９）、ユビキチン特異的エンドペプチダーゼ３９［誤解を招く］（ＭＥＲ０６４６２１）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ０９０非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０１４７３９）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ４３［誤解を招く］（ＭＥＲ０３０１４０）、ユビキチン特異的ペプチダーゼ５２［誤解を招く］（ＭＥＲ０３０３１７）、ＮＥＫ２偽遺伝子（ＭＥＲ０１４７３６）、Ｃ１９偽遺伝子（ホモサピエンス：染色体５）（ＭＥＲ０２９９７２）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ０８８ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１４７５０）、オートファギン−２（ＭＥＲ０１３５６４）、オートファギン−１（ＭＥＲ０１３５６１）、オートファギン−３（ＭＥＲ０１４３１６）、オートファギン−４（ＭＥＲ０６４６２２）、Ｃｅｚａｎｎｅ脱ユビキチン化ペプチダーゼ（ＭＥＲ０２９０４２）、Ｃｅｚａｎｎｅ−２ペプチダーゼ（ＭＥＲ０２９０４４）、腫瘍壊死因子アルファ誘導タンパク質３（ＭＥＲ０２９０５０）、ＴＲＡＢＩＤペプチダーゼ（ＭＥＲ０２９０５２）、ＶＣＩＰ１３５脱ユビキチン化ペプチダーゼ（ＭＥＲ１５２３０４）、Ｏｔｕｂａｉｎ−１（ＭＥＲ０２９０５６）、Ｏｔｕｂａｉｎ−２（ＭＥＲ０２９０６１）、ＣＹＬＤタンパク質（ＭＥＲ０３０１０４）、ＵｆＳＰ１ペプチダーゼ（ＭＥＲ０４２７２４）、ＵｆＳＰ２ペプチダーゼ（ＭＥＲ０６０３０６）、Ｄ��ＢＡ脱ユビキチン化酵素（ＭＥＲ０８６０９８）、ＫＩＡＡ０４５９（ホモサピエンス）様タンパク質（ＭＥＲ１２２４６７）、Ｏｔｕｄ１タンパク質（ＭＥＲ１２５４５７）、グリコシルトランスフェラーゼ２８ドメイン含有１、アイソフォームＣＲＡ＿ｃ（ホモサピエンス）様（ＭＥＲ１２３６０６）、ｈｉｎ１Ｌ  ｇ．ｐ．（ホモサピエンス）（ＭＥＲ１３９８１６）、アタキシン−３（ＭＥＲ０９９９９８）、ＡＴＸＮ３Ｌ推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ１１５２６１）、ジョセフィンドメイン含有１（ホモサピエンス）（ＭＥＲ１２５３３４）、ジョセフィンドメイン含有２（ホモサピエンス）（ＭＥＲ１２４０６８）、ＹＯＤ１ペプチダーゼ（ＭＥＲ１１６５５９）、レグマイン（植物アルファ型）（ＭＥＲ０４４５９１）、レグマイン（ＭＥＲ００１８００）、グリコシルホスファチジルイノシトール：タンパク質トランスアミダーゼ（ＭＥＲ００２４７９）、レグマイン偽遺伝子（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０２９７４１）、ファミリーＣ１３未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ１７５８１３）、カスパーゼ−１（ＭＥＲ０００８５０）、カスパーゼ−３（ＭＥＲ０００８５３）、カスパーゼ−７（ＭＥＲ００２７０５）、カスパーゼ−６（ＭＥＲ００２７０８）、カスパーゼ−２（ＭＥＲ００１６４４）、カスパーゼ−４（ＭＥＲ００１９３８）、カスパーゼ−５（ＭＥＲ００２２４０）、カスパーゼ−８（ＭＥＲ００２８４９）、カスパーゼ−９（ＭＥＲ００２７０７）、カスパーゼ−１０（ＭＥＲ００２５７９）、カスパーゼ−１４（ＭＥＲ０１２０８３）、パラカスパーゼ（ＭＥＲ０１９３２５）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１４３ペプチダーゼ（ＭＥＲ０２１３０４）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１８６ペプチダーゼ（ＭＥＲ０２０５１６）、推定カスパーゼ（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０２１４６３）、ＦＬＩＰタンパク質（ＭＥＲ００３０２６）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１４２タンパク質（ＭＥＲ０２１３１６）、カスパーゼ−１２偽遺伝子（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０１９６９８）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ０９３カスパーゼ偽遺伝子（ＭＥＲ０１４７６６）、サブファミリーＣ１４Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１８５３２９）、サブファミリーＣ１４Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１７９９５６）、セパラーゼ（ホモサピエンス型）（ＭＥＲ０１１７７５）、セパラーゼ様偽遺伝子（ＭＥＲ０１４７９７）、ＳＥＮＰ１ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１１０１２）、ＳＥＮＰ３ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１１０１９）、ＳＥＮＰ６ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１１１０９）、ＳＥＮＰ２ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１２１８３）、ＳＥＮＰ５ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１４０３２）、ＳＥＮＰ７ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１４０９５）、ＳＥＮＰ８ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１６１６１）、ＳＥＮＰ４ペプチダーゼ（ＭＥＲ００５５５７）、ピログルタミル−ペプチダーゼＩ（脊椎動物）（ＭＥＲ０１１０３２）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ０７３ペプチダーゼ（ＭＥＲ０２９９７８）、ソニックヘッジホッグタンパク質（ＭＥＲ００２５３９）、イディアンヘエジホッグタンパク質（ＭＥＲ００２５３８）、デザート・ヘッジホッグ・タンパク質（ＭＥＲ０１２１７０）、ジペプチジル−ペプチダーゼＩＩＩ（ＭＥＲ００４２５２）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１６４タンパク質（ＭＥＲ０２０４１０）、ＬＯＣ１３８９７１  ｇ．ｐ．（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０２００７４）、Ａｔｐ２３ペプチダーゼ（ＭＥＲ０６０６４２）、ｐｒｅｎｙｌペプチダーゼ１（ＭＥＲ００４２４６）、アミノペプチダーゼＮ（ＭＥＲ０００９９７）、アミノペプチダーゼＡ（ＭＥＲ００１０１２）、ロイコトリエンＡ４ヒドラーゼ（ＭＥＲ００１０１３）、ピログルタミル−ペプチダーゼＩＩ（ＭＥＲ０１２２２１）、サイトゾルアラニルアミノペプチダーゼ（ＭＥＲ００２７４６）、シスチニルアミノペプチダーゼ（ＭＥＲ００２０６０）、アミノペプチダーゼＢ（ＭＥＲ００１４９４）、アミノペプチダーゼＰＩＬＳ（ＭＥＲ００５３３１）、アルギニルアミノペプチダーゼ様１（ＭＥＲ０１２２７１）、白血球由来アルギニンアミノペプチダーゼ（ＭＥＲ００２９６８）、アミノペプチダーゼＱ（ＭＥＲ０５２５９５）、アミノペプチダーゼＯ（ＭＥＲ０１９７３０）、ＴＡＴＡ結合タンパク質関連因子（ＭＥＲ０２６４９３）、アンジオテンシン変換酵素ペプチダーゼユニット１（ＭＥＲ００４９６７）、アンジオテンシン変換酵素ペプチダーゼユニット２（ＭＥＲ００１０１９）、アンジオテンシン変換酵素−２（ＭＥＲ０１１０６１）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１５３タンパク質（ＭＥＲ０２０５１４）、Ｔｈｉｍｅｔオリゴペプチダーゼ（ＭＥＲ００１７３７）、ノイロイシン（ＭＥＲ０１０９９１）、ミトコンドリア中間体ペプチダーゼ（ＭＥＲ００３６６５）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１５４タンパク質（ＭＥＲ０２１３１７）、レイシマロニシン−２（ＭＥＲ０１４４９２）、レイシマロニシン−３（ＭＥＲ１８００３１）、マトリックスメタロペプチダーゼ−１（ＭＥＲ００１０６３）、マトリックスメタロペプチダーゼ−８（ＭＥＲ００１０８４）、マトリックスメタロペプチダーゼ−２（ＭＥＲ００１０８０）、マトリックスメタロペプチダーゼ−９（ＭＥＲ００１０８５）、マトリックスメタロペプチダーゼ−３（ＭＥＲ００１０６８）、マトリックスメタロペプチダーゼ−１０（ホモサピエンス型）（ＭＥＲ００１０７２）、マトリックスメタロペプチダーゼ−１１（ＭＥＲ００１０７５）、マトリックスメタロペプチダーゼ−７（ＭＥＲ００１０９２）、マトリックスメタロペプチダーゼ−１２（ＭＥＲ００１０８９）、マトリックスメタロペプチダーゼ−１３（ＭＥＲ００１４１１）、膜
型マトリックスメタロペプチダーゼ−１（ＭＥＲ００１０７７）、膜型マトリックスメタロペプチダーゼ−２（ＭＥＲ００２３８３）、膜型マトリックスメタロペプチダーゼ−３（ＭＥＲ００２３８４）、膜型マトリックスメタロペプチダーゼ−４（ＭＥＲ００２５９５）、マトリックスメタロペプチダーゼ−２０（ＭＥＲ００３０２１）、マトリックスメタロペプチダーゼ−１９（ＭＥＲ００２０７６）、マトリックスメタロペプチダーゼ−２３Ｂ（ＭＥＲ００４７６６）、膜型マトリックスメタロペプチダーゼ−５（ＭＥＲ００５６３８）、膜型マトリックスメタロペプチダーゼ−６（ＭＥＲ０１２０７１）、マトリックスメタロペプチダーゼ−２１（ＭＥＲ００６１０１）、マトリックスメタロペプチダーゼ−２２（ＭＥＲ０１４０９８）、マトリックスメタロペプチダーゼ−２６（ＭＥＲ０１２０７２）、マトリックスメタロペプチダーゼ−２８（ＭＥＲ０１３５８７）、マトリックスメタロペプチダーゼ−２３Ａ（ＭＥＲ０３７２１７）、マクロファージエラスターゼホモログ（染色体８、ホモサピエンス）（ＭＥＲ０３００３５）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１５６タンパク質（ＭＥＲ０２１３０９）、マトリックスメタロペプチダーゼ様１（ＭＥＲ０４５２８０）、サブファミリーＭ１０Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１７５９１２）、サブファミリーＭ１０Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１８７９９７）、サブファミリーＭ１０Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１８７９９８）、サブファミリーＭ１０Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１８００００）、メプリンアルファサブユニット（ＭＥＲ００１１１１）、メプリンベータサブユニット（ＭＥＲ００５２１３）、プロコラーゲンＣ−ペプチダーゼ（ＭＥＲ００１１１３）、哺乳動物Ｔｏｌｌｏｉｄ様１タンパク質（ＭＥＲ００５１２４）、哺乳動物型Ｔｏｌｌｏｉｄ様２タンパク質（ＭＥＲ００５８６６）、ＡＤＡＭＴＳ９ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１２０９２）、ＡＤＡＭＴＳ１４ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１６７００）、ＡＤＡＭＴＳ１５ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１７０２９）、ＡＤＡＭＴＳ１６ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１５６８９）、ＡＤＡＭＴＳ１７ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１６３０２）、ＡＤＡＭＴＳ１８ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１６０９０）、ＡＤＡＭＴＳ１９ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１５６６３）、ＡＤＡＭ８ペプチダーゼ（ＭＥＲ００３９０２）、ＡＤＡＭ９ペプチダーゼ（ＭＥＲ００１１４０）、ＡＤＡＭ１０ペプチダーゼ（ＭＥＲ００２３８２）、ＡＤＡＭ１２ペプチダーゼ（ＭＥＲ００５１０７）、ＡＤＡＭ１９ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１２２４１）、ＡＤＡＭ１５ペプチダーゼ（ＭＥＲ００２３８６）、ＡＤＡＭ１７ペプチダーゼ（ＭＥＲ００３０９４）、ＡＤＡＭ２０ペプチダーゼ（ＭＥＲ００４７２５）、ＡＤＡＭＤＥＣ１ペプチダーゼ（ＭＥＲ０００７４３）、ＡＤＡＭＴＳ３ペプチダーゼ（ＭＥＲ００５１００）、ＡＤＡＭＴＳ４ペプチダーゼ（ＭＥＲ００５１０１）、ＡＤＡＭＴＳ１ペプチダーゼ（ＭＥＲ００５５４６）、ＡＤＡＭ２８ペプチダーゼ（ホモサピエンス型）（ＭＥＲ００５４９５）、ＡＤＡＭＴＳ５ペプチダーゼ（ＭＥＲ００５５４８）、ＡＤＡＭＴＳ８ペプチダーゼ（ＭＥＲ００５５４５）、ＡＤＡＭＴＳ６ペプチダーゼ（ＭＥＲ００５８９３）、ＡＤＡＭＴＳ７ペプチダーゼ（ＭＥＲ００５８９４）、ＡＤＡＭ３０ペプチダーゼ（ＭＥＲ００６２６８）、ＡＤＡＭ２１ペプチダーゼ（ホモサピエンス型）（ＭＥＲ００４７２６）、ＡＤＡＭＴＳ１０ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１４３３１）、ＡＤＡＭＴＳ１２ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１４３３７）、ＡＤＡＭＴＳ１３ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１５４５０）、ＡＤＡＭ３３ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１５１４３）、Ｏｖａｓｔａｃｉｎ（ＭＥＲ０２９９９６）、ＡＤＡＭＴＳ２０ペプチダーゼ（ホモサピエンス型）（ＭＥＲ０２６９０６）、プロコラーゲンＩ  Ｎ−ペプチダーゼ（ＭＥＲ００４９８５）、ＡＤＡＭ２タンパク質（ＭＥＲ００３０９０）、ＡＤＡＭ６タンパク質（ＭＥＲ０４７０４４）、ＡＤＡＭ７タンパク質（ＭＥＲ００５１０９）、ＡＤＡＭ１８タンパク質（ＭＥＲ０１２２３０）、ＡＤＡＭ３２タンパク質（ＭＥＲ０２６９３８）、非ペプチダーゼホモログ（ホモサピエンス染色体４）（ＭＥＲ０２９９７３）、ファミリーＭ１２非ペプチダーゼホモログ（ホモサピエンス染色体１６）（ＭＥＲ０４７６５４）、ファミリーＭ１２非ペプチダーゼホモログ（ホモサピエンス染色体１５）（ＭＥＲ０４７２５０）、ＡＤＡＭ３Ｂタンパク質（ホモサピエンス型）（ＭＥＲ００５１９９）、ＡＤＡＭ１１タンパク質（ＭＥＲ００１１４６）、ＡＤＡＭ２２タンパク質（ＭＥＲ００５１０２）、ＡＤＡＭ２３タンパク質（ＭＥＲ００５１０３）、ＡＤＡＭ２９タンパク質（ＭＥＲ００６２６７）、ＡＤＡＭ２１ペプチダーゼプレプロタンパク質に類似したタンパク質（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０２６９４４）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ２２５ペプチダーゼホモログ（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０４７４７４）、推定ＡＤＡＭ偽遺伝子（染色体４、ホモサピエンス）（ＭＥＲ０２９９７５）、ＡＤＡＭ３Ａ  ｇ．ｐ．（ホモサピエンス）（ＭＥＲ００５２００）、ＡＤＡＭ１  ｇ．ｐ．（ホモサピエンス）（ＭＥＲ００３９１２）、サブファミリーＭ１２Ｂ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１８８２１０）、サブファミリーＭ１２Ｂ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１８８２１１）、サブファミリーＭ１２Ｂ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１８８２１２）、サブファミリーＭ１２Ｂ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１８８２２０）、ネプリリシン（ＭＥＲ００１０５０）、エンドセリン変換酵素１（ＭＥＲ００１０５７）、エンドセリン変換酵素２（ＭＥＲ００４７７６）、ＤＩＮＥペプチダーゼ（ＭＥＲ００５１９７）、ネプリリシン−２（ＭＥＲ０１３４０６）、ケル血液型タンパク質（ＭＥＲ００１０５４）、ＰＨＥＸペプチダーゼ（ＭＥＲ００２０６２）、ｉ−ＡＡＡペプチダーゼ（ＭＥＲ００１２４６）、ｉ−ＡＡＡペプチダーゼ（ＭＥＲ００５７５５）、Ｐａｒａｐｌｅｇｉｎ（ＭＥＲ００４４５４）、Ａｆｇ３様タンパク質２（ＭＥＲ００５４９６）、Ａｆｇ３様タンパク質１Ａ（ＭＥＲ０１４３０６）、ｐａｐｐａｌｙｓｉｎ−１（ＭＥＲ００２２１７）、ｐａｐｐａｌｙｓｉｎ−２（ＭＥＲ０１４５２１）、ファルネシル化タンパク質変換酵素１（ＭＥＲ００２６４６）、メタロプロテアーゼ関連タンパク質−１（ＭＥＲ０３０８７３）、アミノペプチダーゼＡＭＺ２（ＭＥＲ０１１９０７）、アミノペプチダーゼＡＭＺ１（ＭＥＲ０５８２４２）、カルボキシペプチダーゼＡ１（ＭＥＲ００１１９０）、カルボキシペプチダーゼＡ２（ＭＥＲ００１６０８）、カルボキシペプチダーゼＢ（ＭＥＲ００１１９４）、カルボキシペプチダーゼＮ（ＭＥＲ００１１９８）、カルボキシペプチダーゼＥ（ＭＥＲ００１１９９）、カルボキシペプチダーゼＭ（ＭＥＲ００１２０５）、カルボキシペプチダーゼＵ（ＭＥＲ００１１９３）、カルボキシペプチダーゼＡ３（ＭＥＲ００１１８７）、メタロカルボキシペプチダーゼＤペプチダーゼユニット１（ＭＥＲ００３７８１）、メタロカルボキシペプチダーゼＺ（ＭＥＲ００３４２８）、メタロカルボキシペプチダーゼＤペプチダーゼユニット２（ＭＥＲ００４９６３）、カルボキシペプチダーゼＡ４（ＭＥＲ０１３４２１）、カルボキシペプチダーゼＡ６（ＭＥＲ０１３４５６）、カルボキシペプチダーゼＡ５（ＭＥＲ０１７１２１）、メタロカルボキシペプチダーゼＯ（ＭＥＲ０１６０４４）、サイトゾルカルボキシペプチダーゼ様タンパク質５（ＭＥＲ０３３１７４）、サイトゾルカルボキシペプチダーゼ３（ＭＥＲ０３３１７６）、サイトゾルカルボキシペプチダーゼ６（ＭＥＲ０３３１７８）、サイトゾルカルボキシペプチダーゼ１（ＭＥＲ０３３１７９）、サイトゾルカルボキシペプチダーゼ２（ＭＥＲ０３７７１３）、メタロカルボキシペプチダーゼＤ非ペプチダーゼユニット（ＭＥＲ００４９６４）、脂肪細胞エンハンサー結合タンパク質１（ＭＥＲ００３８８９）、カルボキシペプチダーゼ様タンパク質Ｘ１（ＭＥＲ０１３４０４）、カルボキシペプチダーゼ様タンパク質Ｘ２（ＭＥＲ０７８７６４）、サイトゾルカルボキシペプチダーゼ（ＭＥＲ０２６９５２）、ファミリーＭ１４非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１９９５３０）、インスリジン（ＭＥＲ００１２１４）、ミトコンドリアプロセッシングペプチダーゼベータサブユニット（ＭＥＲ００４４９７）、ナーディライシン（ＭＥＲ００３８８３）、ユーピトリリシン（ｅｕｐｉｔｒｉｌｙｓｉｎ）（ＭＥＲ００４８７７）、ミトコンドリアプロセッシングペプチダーゼ非ペプチダーゼアルファサブユニット（ＭＥＲ００１４１３）、ユビキノール−シトクロムｃレダクターゼコアタンパク質Ｉ（ＭＥＲ００３５４３）、ユビキノール−シトクロムｃレダクターゼコアタンパク質ＩＩ（ＭＥＲ００３５４４）、ユビキノール−シトクロムｃレダクターゼコアタンパク質ドメイン２（ＭＥＲ０４３９９８）、インスリジンユニット２（ＭＥＲ０４６８２１）、ナーディライシンユニット２（ＭＥＲ０４６８７４）、インスリジンユニット３（ＭＥＲ０７８７５３）、ミトコンドリアプロセッシングペプチダーゼサブユニットアルファユニット２（ＭＥＲ１２４４８９）、ナーディライシンユニット３（ＭＥＲ１４２８５６）、ＬＯＣ１３３０８３  ｇ．ｐ．（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０２１８７６）、サブファミリーＭ１６Ｂ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１８８７５７）、ロイシルアミノペプチダーゼ（動物）（ＭＥＲ００３１００）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ０４０ペプチダーゼ（ＭＥＲ００３９１９）、ロイシルアミノペプチダーゼ−１（線虫属型）（ＭＥＲ０１３���１６）、メチオニルアミノペプチダーゼ１（ＭＥＲ００１３４２）、メチオニルアミノペプチダーゼ２（ＭＥＲ００１７２８）、アミノペプチダーゼＰ２（ＭＥＲ００４４９８）、Ｘａａ−Ｐｒｏジペプチダーゼ（真核生物）（ＭＥＲ００１２４８）、アミノペプチダーゼＰ１（ＭＥＲ００４３２１）、ミトコンドリア中間体切断ペプチダーゼ５５ｋＤａ（ＭＥＲ０１３４６３）、ミトコンドリアメチオニルアミノペプチダーゼ（ＭＥＲ０１４０５５）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ０２０ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０１０９７２）、増殖関連タンパク質１（ＭＥＲ００５４９７）、クロマチン特異的転写因子１４０ｋＤａサブユニット（ＭＥＲ０２６４９５）、増殖関連タンパク質１様（ホモサピエンス染色体Ｘ）（ＭＥＲ０２９９８３）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ２２６ペプチダーゼホモログ（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０５６２６２）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ２２７ペプチダーゼホモログ（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０４７２９９）、サブファミリーＭ２４Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１７９８９３）、アスパルチルアミノペプチダーゼ（ＭＥＲ００３３７３）、Ｇｌｙ−Ｘａａカルボキシペプチダーゼ（ＭＥＲ０３３１８２）、カルノシンジペプチダーゼＩＩ（ＭＥＲ０１４５５１）、カルノシンジペプチダーゼＩ（ＭＥＲ０１５１４２）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１６１タンパク質（ＭＥＲ０２１８７３）、アミノアシラーゼ（ＭＥＲ００１２７１）、グルタミン酸カルボキシペプチダーゼＩＩ（ＭＥＲ００２１０４）、ＮＡＡＬＡＤＡＳＥ  Ｌペプチダーゼ（ＭＥＲ００５２３９）、グルタミン酸カルボキシペプチダーゼＩＩＩ（ＭＥＲ００５２３８）、血漿グルタミン酸カルボキシペプチダーゼ（ＭＥＲ００５２４４）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１０３ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１５０９１）、Ｆｘｎａペプチダーゼ（ＭＥＲ０２９９６５）、トランスフェリン受容体タンパク質（ＭＥＲ００２１０５）、トランスフェリン受容体２タンパク質（ＭＥＲ００５１５２）、グルタミニルシクラーゼ（ｃｙｃｌｉｓｅ）（ＭＥＲ０１５０９５）、グルタミン酸カルボキシペプチダーゼＩＩ（ホモサピエンス）型非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０２６９７１）、ＮＩＣＡＬＩＮ（ＭＥＲ０４４６２７）、膜ジペプチダーゼ（ＭＥＲ００１２６０）、膜結合ジペプチダーゼ−２（ＭＥＲ０１３４９９）、膜結合ジペプチダーゼ−３（ＭＥＲ０１３４９６）、ジヒドロ−オロ
ターゼ（ＭＥＲ００５７６７）、ジヒドロピリミジナーゼ（ＭＥＲ０３３２６６）、ジヒドロピリミジナーゼ関連タンパク質−１（ＭＥＲ０３０１４３）、ジヒドロピリミジナーゼ関連タンパク質−２（ＭＥＲ０３０１５５）、ジヒドロピリミジナーゼ関連タンパク質−３（ＭＥＲ０３０１５１）、ジヒドロピリミジナーゼ関連タンパク質−４（ＭＥＲ０３０１４９）、ジヒドロピリミジナーゼ関連タンパク質−５（ＭＥＲ０３０１３６）、仮説タンパク質様５７３０４５７Ｆ１１ＲＩＫ（ＭＥＲ０３３１８４）、１３０００１９ｊ０８ｒｉｋタンパク質（ＭＥＲ０３３１８６））、グルタミンアミノヒドロラーゼ（ＭＥＲ０３７７１４）、Ｋａｅ１推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ００１５７７）、ＯＳＧＥＰＬ１様タンパク質（ＭＥＲ０１３４９８）、Ｓ２Ｐペプチダーゼ（ＭＥＲ００４４５８）、サブファミリーＭ２３Ｂ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１９９８４５）、サブファミリーＭ２３Ｂ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１９９８４６）、サブファミリーＭ２３Ｂ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１９９８４７）、サブファミリーＭ２３Ｂ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１３７３２０）、サブファミリーＭ２３Ｂ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ２０１５５７）、サブファミリーＭ２３Ｂ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１９９４１７）、サブファミリーＭ２３Ｂ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１９９４１８）、サブファミリーＭ２３Ｂ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１９９４１９）、サブファミリーＭ２３Ｂ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１９９４２０）、サブファミリーＭ２３Ｂ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１７５９３２）、サブファミリーＭ２３Ｂ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１９９６６５）、Ｐｏｈ１ペプチダーゼ（ＭＥＲ０２０３８２）、Ｊａｂ１／ＭＰＮドメイン金属酵素（ＭＥＲ０２２０５７）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１６５ペプチダーゼ（ＭＥＲ０２１８６５）、Ｂｒｃｃ３６イソペプチダーゼ（ＭＥＲ０２１８９０）、ヒストンＨ２ＡデユビキチナーゼＭＹＳＭ１（ＭＥＲ０２１８８７）、ＡＭＳＨ脱ユビキチン化ペプチダーゼ（ＭＥＲ０３０１４６）、推定ペプチダーゼ（ホモサピエンス染色体２）（ＭＥＲ０２９９７０）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１６８タンパク質（ＭＥＲ０２１８８６）、ＣＯＰ９シグナロソームサブユニット６（ＭＥＲ０３０１３７）、２６Ｓプロテアソーム非ＡＴＰａｓｅ調節サブユニット７（ＭＥＲ０３０１３４）、真核生物翻訳開始因子３サブユニット５（ＭＥＲ０３０１３３）、ＩＦＰ３８ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０３０１３２）、サブファミリーＭ６７Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１９１１８１）、サブファミリーＭ６７Ａ未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ１９１１４４）、グランザイムＢ（ホモサピエンス型）（ＭＥＲ０００１６８）、ｔｅｓｔｉｓｉｎ（ＭＥＲ００５２１２）、トリプターゼベータ（ＭＥＲ０００１３６）、カリクレイン関連ペプチダーゼ５（ＭＥＲ００５５４４）、Ｃｏｒｉｎ（ＭＥＲ００５８８１）、カリクレイン関連ペプチダーゼ１２（ＭＥＲ００６０３８）、ＤＥＳＣ１ペプチダーゼ（ＭＥＲ００６２９８）、トリプターゼガンマ１（ＭＥＲ０１１０３６）、カリクレイン関連ペプチダーゼ１４（ＭＥＲ０１１０３８）、ヒアルロナン結合ペプチダーゼ（ＭＥＲ００３６１２）、膜貫通型ペプチダーゼ、セリン４（ＭＥＲ０１１１０４）、腸セリンペプチダーゼ（ｒｏｄｅｎｔ）（ＭＥＲ０１６１３０）、副腎分泌セリンペプチダーゼ（ＭＥＲ００３７３４）、トリプターゼデルタ１（ホモサピエンス）（ＭＥＲ００５９４８）、マトリプターゼ−３（ＭＥＲ０２９９０２）、ｍａｒａｐｓｉｎ（ＭＥＲ００６１１９）、トリプターゼ−６（ＭＥＲ００６１１８）、ｏｖｏｃｈｙｍａｓｅ−１ドメイン１（ＭＥＲ０９９１８２）、膜貫通型ペプチダーゼ、セリン３（ＭＥＲ００５９２６）、カリクレイン関連ペプチダーゼ１５（ＭＥＲ００００６４）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ０３１ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１４０５４）、ＴＭＰＲＳＳ１３ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１４２２６）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ０３８ペプチダーゼ（ＭＥＲ０６２８４８）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ２０４ペプチダーゼ（ＭＥＲ０２９９８０）、カチオン性トリプシン（ホモサピエンス型）（ＭＥＲ００００２０）、エラスターゼ−２（ＭＥＲ０００１１８）、マンナン結合レクチン関連セリンペプチダーゼ−３（ＭＥＲ０３１９６８）、カテプシンＧ（ＭＥＲ００００８２）、ミエロブラスチン（ＭＥＲ０００１７０）、グランザイムＡ（ＭＥＲ００１３７９）、グランザイムＭ（ＭＥＲ００１５４１）、キマーゼ（ホモサピエンス型）（ＭＥＲ０００１２３）、トリプターゼアルファ（ＭＥＲ０００１３５）、グランザイムＫ（ＭＥＲ００１９３６）、グランザイムＨ（ＭＥＲ０００１６６）、キモトリプシンＢ（ＭＥＲ０００００１）、エラスターゼ−１（ＭＥＲ００３７３３）、膵エンドペプチダーゼＥ（ＭＥＲ０００１４９）、膵エラスターゼＩＩ（ＭＥＲ０００１４６）、エンテロペプチダーゼ（ＭＥＲ００２０６８）、キモトリプシンＣ（ＭＥＲ０００７６１）、プロスタシン（ＭＥＲ００２４６０）、カリクレイン１（ＭＥＲ００００９３）、カリクレイン関連ペプチダーゼ２（ＭＥＲ００００９４）、カリクレイン関連ペプチダーゼ３（ＭＥＲ０００１１５）、メソトリプシン（ＭＥＲ００００２２）、補体成分Ｃ１ｒ様ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１６３５２）、補体因子Ｄ（ＭＥＲ０００１３０）、補体成分活性化Ｃ１ｒ（ＭＥＲ０００２３８）、補体成分活性化Ｃ１ｓ（ＭＥＲ０００２３９）、補体成分Ｃ２ａ（ＭＥＲ０００２３１）、補体因子Ｂ（ＭＥＲ０００２２９）、マンナン結合レクチン関連セリンペプチダーゼ１（ＭＥＲ０００２４４）、補体因子Ｉ（ＭＥＲ０００２２８）、膵エンドペプチダーゼＥのＢ型（ＭＥＲ０００１５０）、膵エラスターゼＩＩＢ（ＭＥＲ０００１４７）、凝固因子ＸＩＩａ（ＭＥＲ０００１８７）、血漿カリクレイン（ＭＥＲ０００２０３）、凝固因子Ｘｉａ（ＭＥＲ０００２１０）、凝固因子ＩＸａ（ＭＥＲ０００２１６）、凝固因子ＶＩＩａ（ＭＥＲ０００２１５）、凝固因子Ｘａ（ＭＥＲ０００２１２）、トロンビン（ＭＥＲ０００１８８）、プロテインＣ（活性化型）（ＭＥＲ０００２２２）、アクロシン（ＭＥＲ００００７８）、ヘプシン（ＭＥＲ０００１５６）、肝細胞成長因子活性化因子（ＭＥＲ０００１８６）、マンナン結合レクチン関連セリンペプチダーゼ２（ＭＥＲ００２７５８）、ｕ−プラスミノゲン活性化因子（ＭＥＲ０００１９５）、ｔ−プラスミノゲン活性化因子（ＭＥＲ０００１９２）、プラスミン（ＭＥＲ０００１７５）、カリクレイン関連ペプチダーゼ６（ＭＥＲ００２５８０）、ニューロトリプシン（ＭＥＲ００４１７１）、カリクレイン関連ペプチダーゼ８（ＭＥＲ００５４００）、カリクレイン関連ペプチダーゼ１０（ＭＥＲ００３６４５）、ｅｐｉｔｈｅｌｉａｓｉｎ（ＭＥＲ００３７３６）、カリクレイン関連ペプチダーゼ４（ＭＥＲ００５２６６）、プロセミン（ｐｒｏｓｅｍｉｎ）（ＭＥＲ００４２１４）、
ｃｈｙｍｏｐａｓｉｎ（ＭＥＲ００１５０３）、カリクレイン関連ペプチダーゼ１１（ＭＥＲ００４８６１）、カリクレイン関連ペプチダーゼ１１（ＭＥＲ２１６１４２）、トリプシン−２型Ａ（ＭＥＲ００００２１）、ＨｔｒＡ１ペプチダーゼ（ホモサピエンス型）（ＭＥＲ００２５７７）、ＨｔｒＡ２ペプチダーゼ（ＭＥＲ２０８４１３）、ＨｔｒＡ２ペプチダーゼ（ＭＥＲ００４０９３）、ＨｔｒＡ３ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１４７９５）、ＨｔｒＡ４ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１６３５１）、Ｔｙｓｎｄ１ペプチダーゼ（ＭＥＲ０５０４６１）、ＴＭＰＲＳＳ１２ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１７０８５）、ＨＡＴ様推定ペプチダーゼ２（ＭＥＲ０２１８８４）、トリプシンＣ（ＭＥＲ０２１８９８）、カリクレイン関連ペプチダーゼ７（ＭＥＲ００２００１）、マトリプターゼ（ＭＥＲ００３７３５）、カリクレイン関連ペプチダーゼ１３（ＭＥＲ００５２６９）、カリクレイン関連ペプチダーゼ９（ＭＥＲ００５２７０）、マトリプターゼ−２（ＭＥＲ００５２７８）、臍帯（ｕｍｂｅｌｉｃａｌ）静脈ペプチダーゼ（ＭＥＲ００５４２１）、ＬＣＬＰペプチダーゼ（ＭＥＲ００１９００）、Ｓｐｉｎｅｓｉｎ（ＭＥＲ０１４３８５）、ｍａｒａｐｓｉｎ−２（ＭＥＲ０２１９２９）、補体因子Ｄ様推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０５６１６４）、ｏｖｏｃｈｙｍａｓｅ−２（ＭＥＲ０２２４１０）、ＨＡＴ様４ペプチダーゼ（ＭＥＲ０４４５８９）、ｏｖｏｃｈｙｍａｓｅ１ドメイン１（ＭＥＲ０２２４１２）、表皮特異的ＳＰ様推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０２９９００）、精巣セリンペプチダーゼ５（ＭＥＲ０２９９０１）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ２５８ペプチダーゼ（ＭＥＲ０００２８５）、Ｐｏｌｙｓｅｒａｓｅ−ＩＡユニット１（ＭＥＲ０３０８７９）、Ｐｏｌｙｓｅｒａｓｅ−ＩＡユニット２（ＭＥＲ０３０８８０）、精巣セリンペプチダーゼ２（ヒト型）（ＭＥＲ０３３１８７）、仮説アクロシン様ペプチダーゼ（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０３３２５３）、ＨＡＴ様５ペプチダーゼ（ＭＥＲ０２８２１５）、Ｐｏｌｙｓｅｒａｓｅ−３ユニット１（ＭＥＲ０６１７６３）、Ｐｏｌｙｓｅｒａｓｅ−３ユニット２（ＭＥＲ０６１７４８）、トリプトファン／セリンプロテアーゼに類似したペプチダーゼ（ＭＥＲ０５６２６３）、Ｐｏｌｙｓｅｒａｓｅ−２ユニット１（ＭＥＲ０６１７７７）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１２３ペプチダーゼ（ＭＥＲ０２１９３０）、ＨＡＴ様２ペプチダーゼ（ＭＥＲ０９９１８４）、ｈＣＧ２０４１４５２様タンパク質（ＭＥＲ０９９１７２）、ｈＣＧ２２０６７（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０９９１６９）、脳レスキュー因子−１（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０９８８７３）、ｈＣＧ２０４１１０８（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０９９１７３）、Ｐｏｌｙｓｅｒａｓｅ−２ユニット２（ＭＥＲ０６１７６０）、Ｐｏｌｙｓｅｒａｓｅ−２ユニット３（ＭＥＲ０６５６９４）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ２０１（ペプチダーゼホモログ）ＭＥＲ０９９１７５、分泌トリプシン様セリンペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０３００００）、Ｐｏｌｙｓｅｒａｓｅ−１Ａユニット３（ＭＥＲ０２９８８０）、アズロシジン（ＭＥＲ０００１１９）、ハプトグロビン−１（ＭＥＲ０００２３３）、ハプトグロビン関連タンパク質（ＭＥＲ０００２３５）、マクロファージ刺激タンパク質（ＭＥＲ００１５４６）、肝細胞成長因子（ＭＥＲ０００１８５）、プロテインＺ（ＭＥＲ０００２２７）、ＴＥＳＰ１タンパク質（ＭＥＲ０４７２１４）、ＬＯＣ１３６２４２タンパク質（ＭＥＲ０１６１３２）、血漿カリクレイン様タンパク質４（ＭＥＲ０１６３４６）、ＰＲＳＳ３５タンパク質（ＭＥＲ０１６３５０）、ＤＫＦＺｐ５８６Ｈ２１２３様タンパク質（ＭＥＲ０６６４７４）、アポリポタンパク質（ＭＥＲ０００１８３）、ｐｓｉ−ＫＬＫ１偽遺伝子（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０３３２８７）、トリプターゼ偽遺伝子Ｉ（ＭＥＲ０１５０７７）、トリプターゼ偽遺伝子ＩＩ（ＭＥＲ０１５０７８）、トリプターゼ偽遺伝子ＩＩＩ（ＭＥＲ０１５０７９）、サブファミリーＳ１Ａ未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ２１６９８２）、サブファミリーＳ１Ａ未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ２１６１４８）、アミドホスホリボシルトランスフェラーゼ前駆体（ＭＥＲ００３３１４）、グルタミン−フルクトース−６−リン酸トランスアミナーゼ１（ＭＥＲ００３３２２）、グルタミン：フルクトース−６−リン酸アミドトランスフェラーゼ（ＭＥＲ０１２１５８）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１４４タンパク質（ＭＥＲ０２１３１９）、アスパラギンシンセターゼ（ＭＥＲ０３３２５４）、ファミリーＣ４４非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１５９２８６）、ファミリーＣ４４未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ１８５６２５）ファミリーＣ４４未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ１８５６２６）、ｓｅｃｅｒｎｉｎ  １（ＭＥＲ０４５３７６）、ｓｅｃｅｒｎｉｎ  ２（ＭＥＲ０６４５７３）、ｓｅｃｅｒｎｉｎ  ３（ＭＥＲ０６４５８２）、酸性セラミダーゼ前駆体（ＭＥＲ１００７９４）、Ｎ−アシルエタノールアミン酸性アミダーゼ前駆体（ＭＥＲ１４１６６７）、プロテオソーム触媒サブユニット１（ＭＥＲ０００５５６）、プロテオソーム触媒サブユニット２（ＭＥＲ００２６２５）、プロテオソーム触媒サブユニット３（ＭＥＲ００２１４９）、プロテオソーム触媒サブユニット１ｉ（ＭＥＲ０００５５２）、プロテオソーム触媒サブユニット２ｉ（ＭＥＲ００１５１５）、プロテオソーム触媒サブユニット３ｉ（ＭＥＲ０００５５５）、プロテオソーム触媒サブユニット５ｔ（ＭＥＲ０２６２０３）、タンパク質セリンキナーゼｃ１７（ＭＥＲ０２６４９７）、プロテオソームサブユニットアルファ６（ＭＥＲ０００５５７）、プロテオソームサブユニットアルファ２（ＭＥＲ０００５５０）、プロテオソームサブユニットアルファ４（ＭＥＲ０００５５４）、プロテオソームサブユニットアルファ７（ＭＥＲ０３３２５０）、プロテオソームサブユニットアルファ５（ＭＥＲ０００５５８）、プロテオソームサブユニットアルファ１（ＭＥＲ０００５４９）、プロテオソームサブユニットアルファ３（ＭＥＲ０００５５３）、プロテオソームサブユニットＸＡＰＣ７（ＭＥＲ００４３７２）、プロテオソームサブユニットベータ３（ＭＥＲ００１７１０）、プロテオソームサブユニットベータ２（ＭＥＲ００２６７６）、プロテオソームサブユニットベータ１（ＭＥＲ０００５５１）、プロテオソームサブユニットベータ４（ＭＥＲ００１７１１）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ２３０ペプチダーゼホモログ（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０４７３２９）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ２３１偽遺伝子（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０４７１７２）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ２３２偽遺伝子（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０４７３１６）、グリコシルアスパラギナーゼ前駆体（ＭＥＲ００３２９９）、イソアスパルチルジペプチダーゼ（トレオニン型）（ＭＥＲ０３１６２２）、Ｔａｓｐａｓｅ−１（ＭＥＲ０１６９６９）、ガンマ−グルタミルトランスフェラーゼ５（哺乳動物型）（ＭＥＲ００１９７７）、ガンマ−グルタミルトランスフェラーゼ１（哺乳動物型）（ＭＥＲ００１６２９）、ガンマ−グルタミルトランスフェラーゼ２（ホモサピエンス）（ＭＥＲ００１９７６）、ガンマ−グルタミルトランスフェラーゼ様タンパク質４（ＭＥＲ００２７２１）、ガンマ−グルタミルトランスフェラーゼ様タンパク質３（ＭＥＲ０１６９７０）、ガンマ−グルタミルトランスフェラーゼ１前駆体の類似物（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０２６２０４）、ガンマ−グルタミルトランスフェラーゼ１前駆体の類似物（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０２６２０５）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ２１１推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０２６２０７）、ガンマ−グルタミルトランスフェラーゼ６（ＭＥＲ１５９２８３）、ガンマ−グルタミルトランスペプチダーゼホモログ（染色体２、ホモサピエンス）（ＭＥＲ０３７２４１）、ポリシスチン−１（ＭＥＲ１２６８２４）、ＫＩＡＡ１８７９タンパク質（ＭＥＲ１５９３２９）、多発性嚢胞腎１様３（ＭＥＲ１７２５５４）、ガンマ−グルタミルヒドロラーゼ（ＭＥＲ００２９６３）、グアニン５”−一リン酸シンセターゼ（ＭＥＲ０４３３８７）、カルバモイル−リン酸シンターゼ（ホモサピエンス型）（ＭＥＲ０７８６４０）、ジヒドロ−オロターゼ（Ｎ末端ユニット）（ホモサピエンス型）（ＭＥＲ０６０６４７）、ＤＪ−１推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ００３３９０）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１００推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１４８０２）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１０１非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０１４８０３）、ＫＩＡＡ０３６１タンパク質（ホモサピエンス型）（ＭＥＲ０４２８２７）、ＦＬＪ３４２８３タンパク質（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０４４５５３）、非ペプチダーゼホモログ染色体２１オープンリーディングフレーム３３（ホモサピエンス）（ＭＥＲ１６００９４）、ファミリーＣ５６非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１７７０１６）、ファミリーＣ５６非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１７６６１３）、ファミリーＣ５６非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１７６９１８）、ＥＧＦ様モジュール含有ムチン様ホルモン受容体様２（ＭＥＲ０３７２３０）、ＣＤ９７抗原（ヒト型）（ＭＥＲ０３７２８６）、ＥＧＦ様モジュール含有ムチン様ホルモン受容体様３（ＭＥＲ０３７２８８）、ＥＧＦ様モジュール含有ムチン様ホルモン受容体様１（ＭＥＲ０３７２７８）、ＥＧＦ様モジュール含有ムチン様ホルモン受容体様４（ＭＥＲ０３７２９４）、カドヘリンＥＧＦ  ＬＡＧ七回膜貫通型Ｇ型受容体２前駆体（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０４５３９７）、Ｇｐｒ６４（ハツカネズミ）型タンパク質（ＭＥＲ１２３２０５）、���ＰＲ５６（ホモサピエンス）型タンパク質（ＭＥＲ１２２０５７）、ラトロフィリン２（ＭＥＲ１２２１９９）、ラトロフィリン−１（ＭＥＲ１２６３８０）、ラトロフィリン３（ＭＥＲ１２４６１２）、プロトカドヘリンＦｌａｍｉｎｇｏ  ２（ＭＥＲ１２４２３９）、ＥＴＬタンパク質（ＭＥＲ１２６２６７）、Ｇタンパク共役受容体１１２（ＭＥＲ１２６１１４）、７回膜貫通型ヘリックス受容体（ＭＥＲ１２５４４８）、Ｇｐｒ１１４タンパク質（ＭＥＲ１５９３２０）、ＧＰＲ１２６血管誘導性Ｇタンパク共役受容体（ＭＥＲ１４００１５）、ＧＰＲ１２５（ホモサピエンス）型タンパク質（ＭＥＲ１５９２７９）、ＧＰＲ１１６（ホモサピエンス）型Ｇタンパク共役受容体（ＭＥＲ１５９２８０）、ＧＰＲ１２８（ホモサピエンス）型Ｇタンパク共役受容体（ＭＥＲ１６２０１５）、ＧＰＲ１３３（ホモサピエンス）型タンパク質（ＭＥＲ１５９３３４）、ＧＰＲ１１０  Ｇタンパク共役受容体（ＭＥＲ１５９２７７）、ＧＰＲ９７タンパク質（ＭＥＲ１５９３２２）、ＫＰＧ＿００６タンパク質（ＭＥＲ１６１７７３）、
ＫＰＧ＿００８タンパク質（ＭＥＲ１６１８３５）、ＫＰＧ＿００９タンパク質（ＭＥＲ１５９３３５）、未割り当てホモログ（ＭＥＲ１６６２６９）、ＧＰＲ１１３タンパク質（ＭＥＲ１５９３５２）、脳特異的血管新生阻害剤２（ＭＥＲ１５９７４６）、ＰＩＤＤ自己プロセッシングタンパク質ユニット１（ＭＥＲ０２０００１）、ＰＩＤＤ自己プロセッシングタンパク質ユニット２（ＭＥＲ０６３６９０）、ＭＵＣ１自己切断ムチン（ＭＥＲ０７４２６０）、ジストログリカン（ＭＥＲ０５４７４１）、プロタンパク質転換酵素９（ＭＥＲ０２２４１６）、サイト−１ペプチダーゼ（ＭＥＲ００１９４８）、フリン（ＭＥＲ０００３７５）、プロタンパク質転換酵素１（ＭＥＲ０００３７６）、プロタンパク質転換酵素２（ＭＥＲ０００３７７）、プロタンパク質転換酵素４（ＭＥＲ０２８２５５）、ＰＡＣＥ４プロタンパク質転換酵素（ＭＥＲ０００３８３）、プロタンパク質転換酵素５（ＭＥＲ００２５７８）、プロタンパク質転換酵素７（ＭＥＲ００２９８４）、トリペプチジル−ペプチダーゼＩＩ（ＭＥＲ０００３５５）、サブファミリーＳ８Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ２０１３３９）、サブファミリーＳ８Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１９１６１３）、サブファミリーＳ８Ａ未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ１９１６１１）、サブファミリーＳ８Ａ未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ１９１６１２）、サブファミリーＳ８Ａ未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ１９１６１４）、トリペプチジル−ペプチダーゼＩ（ＭＥＲ００３５７５）、プロリルオリゴペプチダーゼ（ＭＥＲ０００３９３）、ジペプチジル−ペプチダーゼＩＶ（真核生物）（ＭＥＲ０００４０１）、アシルアミノアシル−ペプチダーゼ（ＭＥＲ０００４０８）、線維芽細胞活性化タンパク質アルファサブユニット（ＭＥＲ０００３９９）、ＰＲＥＰＬ  Ａタンパク質（ＭＥＲ００４２２７）、ジペプチジル−ペプチダーゼ８（ＭＥＲ０１３４８４）、ジペプチジル−ペプチダーゼ９（ＭＥＲ００４９２３）、ＦＬＪ１推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１７２４０）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１９４推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１７３５３）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１９５推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１７３６７）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１９６推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１７３６８）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１９７推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１７３７１）、Ｃ１４ｏｒｆ２９タンパク質（ＭＥＲ０３３２４４）、仮説タンパク質（ＭＥＲ０３３２４５）、仮説エステラーゼ／リパーゼ／チオエステラーゼ（ＭＥＲ０４７３０９）、Ｐｒｏｔｅｉｎ  ＢＡＴ５（ＭＥＲ０３７８４０）、仮説タンパク質ｆｌｊ４０２１９（ＭＥＲ０３３２１２）、仮説タンパク質ｆｌｊ３７４６４（ＭＥＲ０３３２４０）、仮説タンパク質ｆｌｊ３３６７８（ＭＥＲ０３３２４１）、ジペプチジルペプチダーゼホモログＤＰＰ６（ＭＥＲ０００４０３）、ジペプチジルペプチダーゼホモログＤＰＰ１０（ＭＥＲ００５９８８）、ハツカネズミ染色体２０オープンリーディングフレーム１３５に類似したタンパク質（ＭＥＲ０３７８４５）、キヌレニンホルムアミダーゼ（ＭＥＲ０４６０２０）、サイログロブリン前駆体（ＭＥＲ０１１６０４）、アセチルコリン��ステラーゼ（ＭＥＲ０３３１８８）、コリンエステラーゼ（ＭＥＲ０３３１９８）、カルボキシルエステラーゼＤ１（ＭＥＲ０３３２１３）、肝カルボキシルエステラーゼ（ＭＥＲ０３３２２０）、カルボキシルエステラーゼ３（ＭＥＲ０３３２２４）、カルボキシルエステラーゼ２（ＭＥＲ０３３２２６）、胆汁酸塩依存性リパーゼ（ＭＥＲ０３３２２７）、カルボキシルエステラーゼ関連タンパク質（ＭＥＲ０３３２３１）、ニューロリジン３（ＭＥＲ０３３２３２）、ニューロリジン４、Ｘ連鎖型（ＭＥＲ０３３２３５）、ニューロリジン４、Ｙ連鎖型（ＭＥＲ０３３２３６）、エステラーゼＤ（ＭＥＲ０４３１２６）、アリールアセトアミドデアセチラーゼ（ＭＥＲ０３３２３７）、ＫＩＡＡ１３６３様タンパク質（ＭＥＲ０３３２４２）、ホルモン感受性リパーゼ（ＭＥＲ０３３２７４）、ニューロリジン１（ＭＥＲ０３３２８０）、ニューロリジン２（ＭＥＲ０３３２８３）、ファミリーＳ９非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ２１２９３９）、ファミリーＳ９非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ２１１４９０）、サブファミリーＳ９Ｃ未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ１９２３４１）、ファミリーＳ９未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ２０９１８１）、ファミリーＳ９未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ２００４３４）、ファミリーＳ９未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ２０９５０７）、ファミリーＳ９未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ２０９１４２）、セリンカルボキシペプチダーゼＡ（ＭＥＲ０００４３０）、卵黄形成カルボキシペプチダーゼ様タンパク質（ＭＥＲ００５４９２）、ＲＩＳＣペプチダーゼ（ＭＥＲ０１０９６０）、ファミリーＳ１５未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ１９９４４２）、ファミリーＳ１５未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ２００４３７）、ファミリーＳ１５未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ２１２８２５）、リソソームＰｒｏ−Ｘａａカルボキシペプチダーゼ（ＭＥＲ０００４４６）、ジペプチジル−ペプチダーゼＩＩ（ＭＥＲ００４９５２）、胸腺特異的セリンペプチダーゼ（ＭＥＲ００５５３８）、エポキシドヒドロラーゼ様推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０３１６１４）、Ｌｏｃ３２８５７４様タンパク質（ＭＥＲ０３３２４６）、アブヒドロラーゼドメイン含有タンパク質４（ＭＥＲ０３１６１６）、エポキシドヒドロラーゼ（ＭＥＲ０００４３２）、中胚葉特異的転写物タンパク質（ＭＥＲ１９９８９０）、中胚葉特異的転写物タンパク質（ＭＥＲ０１７１２３）、サイトゾルエポキシドヒドロラーゼ（ＭＥＲ０２９９９７）、サイトゾルエポキシドヒドロラーゼ（ＭＥＲ２１３８６６）、仮説タンパク質ＦＬＪ２２４０８の類似物（ＭＥＲ０３１６０８）、ＣＧＩ−５８推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０３０１６３）、ウィリアム・ビューレン症候群クリティカル領域タンパク質２１エポキシドヒドロラーゼ（ＭＥＲ０３１６１０）、エポキシドヒドロラーゼ（ＭＥＲ０３１６１２）、仮説タンパク質ｆｌｊ２２４０８（エポキシドヒドロラーゼ）（ＭＥＲ０３１６１７）、モノグリセリドリパーゼ（ＭＥＲ０３３２４７）、仮説タンパク質（ＭＥＲ０３３２４９）、バラシクロビルヒドロラーゼ（ＭＥＲ０３３２５９）、Ｃｃｇ１相互作用因子ｂ（ＭＥＲ２１０７３８）、グリコシ��アスパラギナーゼ前駆体（ＭＥＲ００３２９９）、イソアスパルチルジペプチダーゼ（トレオニン型）（ＭＥＲ０３１６２２）、Ｔａｓｐａｓｅ−１（ＭＥＲ０１６９６９）、ガンマ−グルタミルトランスフェラーゼ５（哺乳動物型）（ＭＥＲ００１９７７）、ガンマ−グルタミルトランスフェラーゼ１（哺乳動物型）（ＭＥＲ００１６２９）、ガンマ−グルタミルトランスフェラーゼ２（ホモサピエンス）（ＭＥＲ００１９７６）、ガンマ−グルタミルトランスフェラーゼ様タンパク質４（ＭＥＲ００２７２１）、ガンマ−グルタミルトランスフェラーゼ様タンパク質３（ＭＥＲ０１６９７０）、ガンマ−グルタミルトランスフェラーゼ１前駆体の類似物（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０２６２０４）、ガンマ−グルタミルトランスフェラーゼ１前駆体の類似物（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０２６２０５）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ２１１推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０２６２０７）、ガンマ−グルタミルトランスフェラーゼ６（ＭＥＲ１５９２８３）、ガンマ−グルタミルトランスペプチダーゼホモログ（染色体２、ホモサピエンス）（ＭＥＲ０３７２４１）、ポリシスチン−１（ＭＥＲ１２６８２４）、ＫＩＡＡ１８７９タンパク質（ＭＥＲ１５９３２９）、多発性嚢胞腎１様３（ＭＥＲ１７２５５４）、ガンマ−グルタミルヒドロラーゼ（ＭＥＲ００２９６３）、グルタミン５”−一リン酸シンセターゼ（ＭＥＲ０４３３８７）、カルバモイル−リン酸シンターゼ（ホモサピエンス型）（ＭＥＲ０７８６４０）、ジヒドロ−オロターゼ（Ｎ末端ユニット）（ホモサピエンス型）（ＭＥＲ０６０６４７）、ＤＪ−１推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ００３３９０）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１００推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１４８０２）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１０１非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ０１４８０３）、ＫＩＡＡ０３６１タンパク質（ホモサピエンス型）（ＭＥＲ０４２８２７）、。ＦＬＪ３４２８３タンパク質（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０４４５５３）、非ペプチダーゼホモログ染色体２１オープンリーディングフレーム３３（ホモサピエンス）（ＭＥＲ１６００９４）、ファミリーＣ５６非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１７７０１６）、ファミリーＣ５６非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１７６６１３）、ファミリーＣ５６非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１７６９１８）、ＥＧＦ様モジュール含有ムチン様ホルモン受容体様２（ＭＥＲ０３７２３０）、ＣＤ９７抗原（ヒト型）（ＭＥＲ０３７２８６）、ＥＧＦ様モジュール含有ムチン様ホルモン受容体様３（ＭＥＲ０３７２８８）、ＥＧＦ様モジュール含有ムチン様ホルモン受容体様１（ＭＥＲ０３７２７８）、ＥＧＦ様モジュール含有ムチン様ホルモン受容体様４（ＭＥＲ０３７２９４）、カドヘリンＥＧＦ  ＬＡＧ七回膜貫通型Ｇ型受容体２前駆体（ホモサピエンス）（ＭＥＲ０４５３９７）、Ｇｐｒ６４（ハツカネズミ）型タンパク質（ＭＥＲ１２３２０５）、ＧＰＲ５６（ホモサピエンス）型タンパク質（ＭＥＲ１２２０５７）、ラトロフィリン２（ＭＥＲ１２２１９９）、ラトロフィリン−１（ＭＥＲ１２６３８０）、ラトロフィリン３（ＭＥＲ１２４６１２）、プロトカドへリンＦｌａｍｉｎｇｏ  ２（ＭＥＲ１２４２３９）、ＥＴＬタンパク質（Ｍ���Ｒ１２６２６７）、Ｇタンパク共役受容体１１２（ＭＥＲ１２６１１４）、７回膜貫通型ヘリックス受容体（ＭＥＲ１２５４４８）、Ｇｐｒ１１４タンパク質（ＭＥＲ１５９３２０）、ＧＰＲ１２６血管誘導性Ｇタンパク共役受容体（ＭＥＲ１４００１５）、ＧＰＲ１２５（ホモサピエンス）型タンパク質（ＭＥＲ１５９２７９）、ＧＰＲ１１６（ホモサピエンス）型Ｇ−タンパク質結合受容体（ＭＥＲ１５９２８０）、ＧＰＲ１２８（ホモサピエンス）型Ｇ−タンパク質結合受容体（ＭＥＲ１６２０１５）、ＧＰＲ１３３（ホモサピエンス）型タンパク質（ＭＥＲ１５９３３４）ＧＰＲ１１０  Ｇ−タンパク質結合受容体（ＭＥＲ１５９２７７）、ＧＰＲ９７タンパク質（ＭＥＲ１５９３２２）、ＫＰＧ＿００６タンパク質（ＭＥＲ１６１７７３）、ＫＰＧ＿００８タンパク質（ＭＥＲ１６１８３５）、ＫＰＧ＿００９タンパク質（ＭＥＲ１５９３３５）、未割り当てホモログ（ＭＥＲ１６６２６９）、ＧＰＲ１１３タンパク質（ＭＥＲ１５９３５２）、脳特異的血管新生阻害剤２（ＭＥＲ１５９７４６）、ＰＩＤＤ自己プロセッシングタンパク質ユニット１（ＭＥＲ０２０００１）、ＰＩＤＤ自己プロセッシングタンパク質ユニット２（ＭＥＲ０６３６９０）、ＭＵＣ１自己切断ムチン（ＭＥＲ０７４２６０）、ジストログリカン（ＭＥＲ０５４７４１）、プロタンパク質転換酵素９（ＭＥＲ０２２４１６）、サイト−１ペプチダーゼ（ＭＥＲ００１９４８）、フリン（ＭＥＲ０００３７５）、プロタンパク質転換酵素１（ＭＥＲ０００３７６）、プロタンパク質転換酵素２（ＭＥＲ０００３７７）、プロタンパク質転換酵素４（ＭＥＲ０２８２５５）、ＰＡＣＥ４プロタンパク質転換酵素（ＭＥＲ０００３８３）、プロタンパク質転換酵素５（ＭＥＲ００２５７８）、プロタンパク質転換酵素７（ＭＥＲ００２９８４）、トリペプチジル−ペプチダーゼＩＩ（ＭＥＲ０００３５５）、サブファミリーＳ８Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ２０１３３９）、サブファミリーＳ８Ａ非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ１９１６１３）、サブファミリーＳ８Ａ未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ１９１６１１）、サブファミリーＳ８Ａ未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ１９１６１２）、サブファミリーＳ８Ａ未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ１９１６１４）、トリペプチジル−ペプチダーゼＩ（ＭＥＲ００３５７５）、プロリルオリゴペプチダーゼ（ＭＥＲ０００３９３）、ジペ
プチジル−ペプチダーゼＩＶ（真核生物）（ＭＥＲ０００４０１）、アシルアミノアシル−ペプチダーゼ（ＭＥＲ０００４０８）、線維芽細胞活性化タンパク質アルファサブユニット（ＭＥＲ０００３９９）、ＰＲＥＰＬ  Ａタンパク質（ＭＥＲ００４２２７）、ジペプチジル−ペプチダーゼ８（ＭＥＲ０１３４８４）、ジペプチジル−ペプチダーゼ９（ＭＥＲ００４９２３）、ＦＬＪ１推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１７２４０）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１９４推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１７３５３）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１９５推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１７３６７）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１９６推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１７３６８）、Ｍｅｒｎａｍｅ−ＡＡ１９７推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０１７３７１）、Ｃ１４ｏｒｆ２９タンパク質（ＭＥＲ０３３２４４）、仮説タンパク質（ＭＥＲ０３３２４５）、仮説エステラーゼ／リパーゼ／チオエステラーゼ（ＭＥＲ０４７３０９）、Ｐｒｏｔｅｉｎ  ＢＡＴ５（ＭＥＲ０３７８４０）、仮説タンパク質ｆｌｊ４０２１９（ＭＥＲ０３３２１２）、仮説タンパク質ｆｌｊ３７４６４（ＭＥＲ０３３２４０）、仮説タンパク質ｆｌｊ３３６７８（ＭＥＲ０３３２４１）、ジペプチジルペプチダーゼホモログＤＰＰ６（ＭＥＲ０００４０３）、ジペプチジルペプチダーゼホモログＤＰＰ１０（ＭＥＲ００５９８８）、ハツカネズミ染色体２０オープンリーディングフレーム１３５に類似したタンパク質（ＭＥＲ０３７８４５）、キヌレニンホルムアミダーゼ（ＭＥＲ０４６０２０）、サイログロブリン前駆体（ＭＥＲ０１１６０４）、アセチルコリンエステラーゼ（ＭＥＲ０３３１８８）、コリンエステラーゼ（ＭＥＲ０３３１９８）、カルボキシルエステラーゼＤ１（ＭＥＲ０３３２１３）、肝カルボキシルエステラーゼ（ＭＥＲ０３３２２０）、カルボキシルエステラーゼ３（ＭＥＲ０３３２２４）、カルボキシルエステラーゼ２（ＭＥＲ０３３２２６）、胆汁酸塩依存性リパーゼ（ＭＥＲ０３３２２７）、カルボキシルエステラーゼ関連タンパク質（ＭＥＲ０３３２３１）、ニューロリジン３（ＭＥＲ０３３２３２）、ニューロリジン４、Ｘ連鎖型（ＭＥＲ０３３２３５）、ニューロリジン４、Ｙ連鎖型（ＭＥＲ０３３２３６）、エステラーゼＤ（ＭＥＲ０４３１２６）、アリールアセトアミドデアセチラーゼ（ＭＥＲ０３３２３７）、ＫＩＡＡ１３６３様タンパク質（ＭＥＲ０３３２４２）、ホルモン感受性リパーゼ（ＭＥＲ０３３２７４）、ニューロリジン１（ＭＥＲ０３３２８０）、ニューロリジン２（ＭＥＲ０３３２８３）、ファミリーＳ９非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ２１２９３９）、ファミリーＳ９非ペプチダーゼホモログ（ＭＥＲ２１１４９０）、サブファミリーＳ９Ｃ未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ１９２３４１）、ファミリーＳ９未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ２０９１８１）、ファミリーＳ９未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ２００４３４）、ファミリーＳ９未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ２０９５０７）、ファミリーＳ９未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ２０９１４２）、セリンカルボキシペプチダーゼＡ（ＭＥＲ０００４３０）、卵黄形成カルボキシペプチダーゼ様タンパク質（ＭＥＲ００５４９２）、ＲＩＳＣペプチダーゼ（Ｍ��Ｒ０１０９６０）、ファミリーＳ１５未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ１９９４４２）、ファミリーＳ１５未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ２００４３７）、ファミリーＳ１５未割り当てペプチダーゼ（ＭＥＲ２１２８２５）、リソソームＰｒｏ−Ｘａａカルボキシペプチダーゼ（ＭＥＲ０００４４６）、ジペプチジル−ペプチダーゼＩＩ（ＭＥＲ００４９５２）、胸腺特異的セリンペプチダーゼ（ＭＥＲ００５５３８）、エポキシドヒドロラーゼ様推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０３１６１４）、Ｌｏｃ３２８５７４様タンパク質（ＭＥＲ０３３２４６）、アブヒドロラーゼドメイン含有タンパク質４（ＭＥＲ０３１６１６）、エポキシドヒドロラーゼ（ＭＥＲ０００４３２）、中胚葉特異的転写物タンパク質（ＭＥＲ１９９８９０）、中胚葉特異的転写物タンパク質（ＭＥＲ０１７１２３）、サイトゾルエポキシドヒドロラーゼ（ＭＥＲ０２９９９７）、サイトゾルエポキシドヒドロラーゼ（ＭＥＲ２１３８６６）、仮説タンパク質ＦＬＪ２２４０８の類似物（ＭＥＲ０３１６０８）、ＣＧＩ−５８推定ペプチダーゼ（ＭＥＲ０３０１６３）、ウィリアム・ビューレン症候群クリティカル領域タンパク質２１エポキシドヒドロラーゼ（ＭＥＲ０３１６１０）、エポキシドヒドロラーゼ（ＭＥＲ０３１６１２）、仮説タンパク質ｆｌｊ２２４０８（エポキシドヒドロラーゼ）（ＭＥＲ０３１６１７）、モノグリセリドリパーゼ（ＭＥＲ０３３２４７）、仮説タンパク質（ＭＥＲ０３３２４９）、バラシクロビルヒドロラーゼ（ＭＥＲ０３３２５９）、Ｃｃｇ１相互作用因子ｂ（ＭＥＲ２１０７３８）。
【０１１２】
所与の望まれる細胞タイプについて、当業者が、例えば科学文献を調べてどのプロテアーゼがその細胞タイプによって過発現されるかを判定することにより、使用する適切なプロテアーゼ切断部位を容易に決定することができることは、理解されるであろう。Ｏｎｃｏｍｉｎｅ（ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｏｎｃｏｍｉｎｅ．ｏｒｇ）は、オンライン癌遺伝子発現データベースであるので、本発明の薬剤が癌治療用であるとき、当業者は、このＯｎｃｏｍｉｎｅデータベースを検索して、所与の癌タイプの治療に適切であろう特定のプロテアーゼ切断部位を同定することができる。代替データベースとしては、Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ）、特に（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ／ｇｘａ）が挙げられる。プロテアーゼデータベースとしては、ＰＭＡＰ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓ．ｏｒｇ）、ＥｘＰＡＳｙ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｃｕｔｔｅｒ（ｈｔｔｐ：／／ｃａ．ｅｘｐａｓｙ．ｏｒｇ／ｔｏｏｌｓ／ｐｅｐｔｉｄｅ  ｃｕｔｔｅｒ）およびＰＭＡＰ．Ｃｕｔ  ＤＢ（ｈｔｔｐ：／／ｃｕｔｄｂ．ｂｕｒｎｈａｍ．ｏｒｇ）が挙げられる。
【０１１３】
多数の可能性のある切断部位を含むペプチドのライブラリをスクリーニングし、所与の望まれない細胞（例えば腫瘍）についての最適な切断部位を評価することが望ましいことがあることを特筆する。かかるペプチドは、下で論ずる標的化部分にＴ細胞抗原を連結するためのリンカーとして有用であり得る。
【０１１４】
表４：特定の腫瘍を治療するための好ましいプロテアーゼ切断部位を示すマトリックス
2014509605.tif 000021
2014509605.tif 000022
2014509605.tif 000023
2014509605.tif 000024
2014509605.tif 000025
2014509605.tif 000026
2014509605.tif 000027
【０１１５】
表５：ＡＤＡＭ過発現が報告されている腫瘍部位
2014509605.tif 000028
【０１１６】
多数のタンパク質分解性ＡＤＡＭ（ジスインテグリンおよびメタロプロテアーゼ）が癌において検出されており、ｍＲＮＡまたはタンパク質レベルは、正常組織に比べてアップレギュレートされることが判明している（Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｃａｎｃｅｒ  ８，９３２−９４１（Ｄｅｃｅｍｂｅｒ  ２００８）｜ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎｒｃ２４５９から改作）。
【０１１７】
１つの実施形態において、前記プロテアーゼは、エラスターゼであり得る。
【０１１８】
他の切断部位としては、一定の条件下で望まれない細胞の近傍（例えば腫瘍微小環境）において不安定である連結が挙げられる。例えば、前記切断部位は、低酸素腫瘍微小環境において還元され得るジスルフィド結合を含むことがあり、または酸性条件で破断するｐＨ感受性部分を含むことがある。しかし、前記切断部位は、望まれない細胞の近傍で選択的に切断可能でなければならないので、かかる連結が、望まれる細胞の近傍と比較して望まれない細胞の近傍でのほうが不安定でなければならない、好ましくは、望まれない細胞の近傍でのみ不安定でなければならないことは理解されるであろう。
【０１１９】
あるいは、前記切断部位は、望まれない細胞の近傍で（例えば、ヌクレアーゼにより）選択的に切断される核酸（例えばＤＮＡまたはＲＮＡ）を含むことがある。他の切断部位としては、適切な酵素により切断可能であり得るホスファート、脂質またはジスルフィド含有部分が挙げられる。
【０１２０】
本発明の薬剤の合成
適便には、Ｔ細胞抗原をリンカーにより標的化部分に連結させる。「リンカー」には、本発明者らは、標的化部分をＴ細胞抗原に付ける化学的部分であって、本明細書に記載の望まれない細胞の近傍で選択的に切断可能である切断部分を含む化学的部分という意味を含める。
【０１２１】
Ｔ細胞抗原を標的化部分に共有結合で結合させることもでき、非共有結合で結合させることもできることは理解される。
【０１２２】
好ましくは、Ｔ細胞抗原を標的化部分に共有結合で付ける。
【０１２３】
１つの実施形態では、Ｔ細胞抗原と標的化部分をリンカーによって共有結合で付ける。
【０１２４】
例えば、架橋分子の従来の方法のいずれか、例えばＯ’Ｓｕｌｌｉｖａｎ  ｅｔ  ａｌ  Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．（１９７９）１００，１００−１０８に一般に記載されているものにより、および実施例２で説明するように、Ｔ細胞抗原（例えばペプチド）と標的化部分を共有結合で連結させることができる。例えば、Ｔ細胞抗原（例えばペプチド）または標的化部分の一方のチオール基を富化し、他方を、それらのチオール基との反応が可能である二官能性薬剤、例えば、ヨード酢酸のＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＮＨＩＡ）またはＮ−スクシンイミジル−３−（２−ピリジルジチオ）プロピオナート（ＳＰＤＰ）、それらのコンジュゲートされる化学種間にジスルフィド架橋を組み込むヘテロ二官能性架橋剤と反応させる。例えばｍ−マレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルで達成される、アミドおよびチオエーテル結合は、一般に、ジスルフィド結合よりｉｎ  ｖｉｖｏ安定性である。
【０１２５】
ビスマレイミド試薬がチオール基（例えば、抗体のシステイン残基のチオール基）を別のチオール含有部分（例えば、Ｔ細胞抗原またはリンカー中間体のチオール基）に逐次的または同時的様式で付けることができることは公知である。マレイミドに加えて、チオール基と反応性である他の官能基としては、ヨードアセトアミド、ブロモアセトアミド、ビニルピリジン、ジスルフィド、ピリジルジスルフィド、イソシアナートおよびイソチオシアナートが挙げられる。
【０１２６】
さらなる有用な架橋剤としては、穏やかな条件下でのスルフヒドリル基の脱保護を可能にする第一アミンのためのチオール化試薬であるＳ−アセチルチオグリコール酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＳＡＴＡ）（Ｊｕｌｉａｎ  ｅｔ  ａｌ（１９８３）Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１３２，６８）；スベリミド酸ジメチル・二塩酸塩；およびＮ，Ｎ’−ｏ−フェニレンジマレイミドが挙げられる。
【０１２７】
特に好ましい架橋剤としては、４−［Ｎ−マレイミドメチル］シクロヘキサン−１−カルボン酸スルホスクシンイミジル（Ｓｕｌｆｏ−ＳＭＣＣ）、６−（３’−［２−ピリジルジチオ］−プロピオンアミド）ヘキサン酸スルホスクシンイミジル（Ｓｕｌｆｏ−ＬＣ−ＳＰＤＰ）およびＮ−［β−マレイミドプロピオン酸］ヒドラジド・トリフルオロ酢酸塩（ＢＭＰＨ）が挙げられる。
【０１２８】
ホモ二官能性およびヘテロ二官能性架橋化学作用が、標的化部分をＴ細胞抗原に連結させるのに適しているであろうこと、および任意のかかる化学作用を用いることができることは理解されるであろう。例えば、シュタウディンガー・ライゲーション・ケミストリー（ホスフィン−アゾ化学作用）を用いるクリックケミストリーを用いることができる。
【０１２９】
Ｔ細胞抗原および標的化部分を互いに直接架橋させる必要はなく、１つ以上のスペーサー部分によって付けてもよいことは理解される。例えば、Ｔ細胞抗原をある化学部分に架橋させることができ、そして次にその化学部分を標的化部分に架橋させる。１つの実施形態において、かかるスペーサー部分は、下で論じるような、望まれない細胞の近傍で選択的に切断可能である切断部位を含むことがある。前記スペーサー部分が、立体障害の防止およびプロテアーゼ切断の助長に役立ち得ることは理解されるであろう。
【０１３０】
表６および７は、好適なＴ細胞抗原ペプチドの例、およびそれらを本発明の薬剤に組み込むことができる方法を提供するものである。例えば、Ｔ細胞抗原ペプチドを第一のスペーサー部分によってプロテアーゼ切断部位に連結させることができ、そして次にそのプロテアーゼ切断部位を第二のスペーサー部分によってリンカー部分に連結させることができる。そのリンカー部分を使用して、最終ペプチドを標的化部分に付けることができる。表６および７は、対応するプロテアーゼ切断部位を切断するプロテアーゼも収載している。
【０１３１】
本発明の薬剤に（例えば、抗体などの適切な標的化部分に付けることにより）組み込むことができる、Ｔ細胞抗原およびプロテアーゼ切断部位を含有するペプチドのさらなる例を下の表に収載する。
【０１３２】
2014509605.tif 000029
【０１３３】
Ｔ細胞抗原がペプチドであるときの特に好ましい実施形態では、そのＴ細胞抗原ペプチドを、直接またはスペーサー部分により間接的に、標的化部分にそのＮ末端で付ける。これを図９Ｂに示し、この図９ＢはＴ細胞エピトープおよびプロテアーゼ切断部分を含む３つのペプチドを収載している。ペプチド（ｉ）および（ｉｉ）は、Ｎ末端にＴ細胞エピトープを有し、したがって、該エピトープは、該エピトープのＣ末端に連結されたスペーサー部分（プロテアーゼ切断部位およびシステインカップリング残基を含む）によって標的化部分に付けられている。対照的に、ペプチド（ｉｉｉ）は、同じＴ細胞エピトープを含むが、該エピトープは、該エピトープのＮ末端に連結されたスペーサー部分（プロテアーゼ切断部位およびシステインカップリング残基を含む）によって標的化部分に付けられている。ペプチド（ｉ）および（ｉｉ）の場合、Ｔ細胞エピトープのＮ末端は標的化部分からはるかに離れており（配置：Ｎ末端−（Ｔ細胞エピトープ）−Ｃ末端−標的化部分）、これに対してペプチド（ｉｉｉ）の場合、Ｔ細胞エピトープのＣ末端が標的化部分からはるかに離れている（配置：Ｃ末端−（Ｔ細胞エピトープ）−Ｎ末端−標的化部分）。言い換えると、ペプチド（ｉｉｉ）の配置は、ペプチド（ｉ）および（ｉｉ）のものの逆である。両方の配置を本発明に関連して用いることができるが、ペプチド（ｉｉｉ）の配置のほうが好ましい。表７は、好適なＴ細胞抗原の例、およびＴ細胞抗原を直接またはスペーサー部分により間接的に標的化部分にそのＮ末端で付けることとなるようにＴ細胞抗原を本発明の薬剤に組み込む方法を提供する。
【０１３４】
上述にかんがみて、本発明が、望まれない細胞の存在を特徴とする病態を予防または治療するための薬剤であって、（ｉ）前記望まれない細胞への標的化が可能である標的化部分；（ｉｉ）Ｔ細胞抗原；および（ｉｉｉ）前記標的化部分と前記Ｔ細胞抗原の間に切断部位を含み、前記切断部位を前記望まれない細胞の近傍で選択的に切断することができる薬剤を提供することは理解される。
【０１３５】
Ｔ細胞抗原と標的化部分を共有結合で付ける、および該抗原と標的化部分の両方がペプチドまたはポリペプチドである、特定の実施形態において、前記２成分が、核酸分子によってコードされ得る融合ポリペプチドの一部分であり得ることは理解される。本発明は、かかる核酸分子およびそれらを含有する宿主細胞を包含する。例えば、当分野において十分に確立されている遺伝子工学技術を用いてＴ細胞抗原を含有するように抗体標的化部分を遺伝子操作することができる。したがって、望まれない細胞上に提示されてＴ細胞応答を惹起することが可能であるようにＴ細胞抗原を放出することができるのであれば、Ｔ細胞抗原が標的化部分のポリペプチド配列内に埋め込まれていてもよいことは理解されるであろう。例えば、Ｔ細胞抗原は、標的化部分のペプチド内に存在し、該Ｔ細胞抗原に２つの切断部位（各々が望まれない細胞の近傍で選択的に切断され得る）が隣接していることがある。あるいは、Ｔ細胞抗原は、標的化部分の一方の末端に存在し、１つの切断部位が切断されることにより放出され得る。好適には、Ｔ細胞抗原および標的化部分は、両方の部分がそれらのそれぞれの活性を保持するように切断されるので、前記薬剤を望まれない細胞に標的化することができ、Ｔ細胞抗原が望まれない細胞によって提示されて、免疫応答を惹起することができる。典型的には、Ｔ細胞抗原と標的化部分を、下で説明するような望まれない細胞の近傍で選択的に切断可能である切断部位を含むリンカーペプチドによって連結させる。好適なリンカーペプチドは、典型的にランダムコイル配座をとるものであり、例えば、該ポリペプチドは、アラニンもしくはプロリンまたはアラニンとプロリン残基の混合物を含有し得る。好ましくは、前記リンカーは、２と１００の間、さらに好ましくは２と５０の間、およびさらにいっそう好ましくは４と２０の間のアミノ酸残基を含有する。標的化部分とＴ細胞抗原の両方を同じポリペプチドの一部として有する特定の例を図７に示し、この場合、ＳｃＦｖ抗体様断片、プロテアーゼ切断部位およびＴ細胞エピトープが単一ポリペプチド鎖としてコードされている。図７Ｄに与える特定の例のポリペプチドを含めて、かかるポリペプチドが本発明の範囲内であることは理解されるであろう。
【０１３６】
好適な標的化部分をコードするポリヌクレオチドは、当分野において公知であり、それらを公知の配列から、例えば、望まれない細胞上で発現される表面マーカーと相互作用することが公知であるタンパク質の配列、またはＧｅｎＢａｎｋ、ＥＭＢＬおよびｄｂＥＳＴデータベースなどのヌクレオチド配列データベースに収容されているタンパク質の配列から容易に設計することができる。好適なＴ細胞抗原をコードするポリヌクレオチドは、当分野において公知であり、それらを公知の配列から容易に設計し、作ることができる。
【０１３７】
好適なリンカーペプチドをコードするポリヌクレオチドをリンカーペプチド配列から容易に設計し、作ることができる。
【０１３８】
したがって、本発明において使用する薬剤をコードするポリヌクレオチドは、周知の遺伝子工学技術を用いて容易に構築することができる。
【０１３９】
表６：ペプチドＴ細胞抗原、スペーサーおよびリンカーの例。「最終ペプチド」は、本発明者らは、例えばシステインチオール基による架橋により、標的化部分に付けられるペプチドを意図する
2014509605.tif 000030
【０１４０】
表７：ペプチドＴ細胞抗原、スペーサーおよびリンカーの例。「最終ペプチド」は、本発明者らは、例えばシステインチオール基による架橋により、標的化部分に付けられるペプチドを意図する
2014509605.tif 000031
【０１４１】
次に、核酸を好適な宿主において発現させて、本発明の薬剤を生産する。例えば、本明細書に収録されている技術にかんがみて適切に変更した公知の技術に従って、本発明の薬剤をコードする核酸を使用して発現ベクターを構築することができ、次にそれを使用して、本発明の本発明の薬剤の発現および生産のために適している宿主を形質転換させる。
【０１４２】
本発明の薬剤をコードする核酸を、適切な宿主への組込みのために多種多様な他の核酸配列に連結させることができることは理解される。その随伴核酸は、当分野において周知であるように、宿主の性質、核酸を宿主に導入する手法、およびエピソーム維持もしくは組み込みが所望されるかどうかに依存することとなる。
【０１４３】
代替実施形態では、Ｔ細胞抗原と標的化部分を非共有結合で付ける。非共有結合については、免疫学的結合、またはビオチン／アビジンもしくはストレプトアビジンそれぞれによるような結合が好ましい。例えば、前記標的化部分は、１つの特異性が望まれない細胞によって発現されるエンティティーに対するものであり、１つの特異性がＴ細胞抗原またはその一部分に対するものである、二重特異性抗体であってもよい。また、Ｔ細胞抗原を別の物質にカップリングさせことが可能であり、するとその物質に二重特異性抗体の特異性が指向されることとなる。例えば、前記Ｔ細胞抗原は、前記二重特異性抗体によって認識されるさらなるペプチド配列を含有することがある。別の可能性は、前記Ｔ細胞抗原をビオチンにカップリングさせる一方で前記標的化部分を例えばストレプトアビジンにカップリングさせることを含み、およびその逆も含む。非共有結合性相互作用を形成することができる他の手段としては、ロイシンジッパー配列または親和性結合が挙げられる。いずれにせよ、Ｔ細胞抗原を標的化部分から放出させることができるように、望まれない細胞の近傍で選択的に切断可能である切断部位がＴ細胞抗原と標的化部分の間にあらねばならない。
【０１４４】
本明細書に記載するアミノ酸残基は、一般に天然「Ｌ」異性体形態である。しかし、一定の状況では「Ｄ」異性体形態の残基をＬアミノ酸残基の代わりに用いることができるが、但し、本発明の薬剤がその機能、すなわち、望まれない細胞の存在を特徴とする病態を予防または治療する機能をなお維持することを条件とする。前記定義は、特に別の指示がない限り、アミノ酸類似体（例えば、ペニシラミン、３−メルカプト−Ｄ−バリン）をはじめとるす化学的に修飾されたアミノ酸、天然に存在する非タンパク質新生アミノ酸（例えばノルロイシン）、ベータ−アミノ酸、アザペプチド、Ｎ−メチル化アミノ酸、およびアミノ酸に特有のものであることが当分野において公知である特性を有する化学的に合成された化合物も含む。用語「タンパク質新生の」は、そのアミノ酸を周知の代謝経路によって細胞内のタンパク質に組み込むことができることを示す。前記定義は、官能性側基が化学的に誘導体化されているアミノ酸も含む。かかる誘導体化分子としては、例えば、遊離アミノ基がアミン塩酸塩、ｐ−トルエンスルホニル基、カルボベンゾキシ基、ｔ−ブチルオキシカルボニル基、クロロアセチル基またはホルミル基を形成するように誘導体化されている分子が挙げられる。遊離カルボキシル基を誘導体化して塩、メチルおよびエチルエステルもしくは他のタイプのエステル、またはヒドラジドを形成することができる。遊離ヒドロキシル基を誘導体化して、Ｏ−アシルまたはＯ−アルキル誘導体を形成することができる。２０の標準アミノ酸についての１つ以上の天然に存在するアミノ酸誘導体を含有するペプチド部分も誘導体として含まれる。
【０１４５】
したがって、本発明の薬剤のペプチド部分が、ペプチド「模倣体」、すなわち、本明細書に記載のアミノ酸配列を含むまたはから成るペプチドの構造的特徴を模倣するペプチドミメティックであり得ることは理解される。ペプチドミメティックは、治療的使用の点、分解に対する耐性の点、透過性の点、または可能性のある経口投与の点でよりいっそう有利である場合がある。
【０１４６】
ペプチド模倣体の設計の主目的は、ペプチターゼによる切断および不活性化に対する模倣体の感受性を低減させることであった。１つのアプローチ、例えば、Ｓｈｅｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ（１９９０）によって開示されたアプローチでは、１つ以上のアミド結合が様々な化学的官能基によって本質的に等配電子的に置換された。この段階的アプローチは、活性類似体が得られる点で多少の成功を収めている。幾つかの事例では、これらの類似体は、それらの天然に存在する対応品より長い生物学的半減期を有することが証明された。別のアプローチでは、様々なコードされていないまたは修飾されたアミノ酸、例えば、Ｄ−アミノ酸およびＮ−メチルアミノ酸が、哺乳動物ペプチドを修飾するために使用された。あるいは、推定生物活性配座が、環化などの共有結合修飾により、またはγ−ラクタムもしくは他のタイプの架橋の組込みにより安定化された（Ｖｅｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ，１９７８；およびＴｈｏｒｓｅｔｔ  ｅｔ  ａｌ，１９８３）。Ｒｉｃｈ（１９８６）によって開示された別のアプローチは、酵素阻害剤設計に遷移状態類似体を応用することによりペプチド擬態を設計するものであった。例えば、スタチンの第二アルコールが、ペプシン基質の固着（ｓｅｓｓｉｌｅ）アミド結合の四面体遷移状態によく似ていることは公知である。他のアプローチとしては、アザペプチドおよびベータ−アミノ酸の使用が挙げられる。
【０１４７】
「ペプチドミメティック」の定義には、レトロ−インベルソ型ペプチドも含まれる。レトロ−インベルソ型ペプチド（全−Ｄ−レトロ型またはレトロ−エナンチオ型ペプチドとしても公知）には、本発明者らは、Ｌ−アミノ酸のすべてがＤアミノ酸で置換されているペプチドであって、ペプチド結合が逆であるペプチドという意味を含める。例えば、前記ペプチドは、親Ｌ−配列のものとは逆の順序で組み立てられたＤ−アミノ酸から成る。レトロ−インベルソ型ペプチドは、当分野において公知の方法、例えば、Ｍｅｚｉｅｒｅ  ｅｔ  ａｌ（１９９７）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５９  ３２３０−３２３７に記載されているものなどによって合成することができる。このアプローチは、偽ペプチドであって、主鎖に関わる変更を含み、側鎖の配向に関わる変更を含まず、側鎖が親ペプチドに依然として非常に類似している偽ペプチドを作ることを含む。レトロ−インベルソ型ペプチドは、タンパク質分解に対してはるかに耐性である。
【０１４８】
したがって、本明細書に記載の標的化部分、Ｔ細胞抗原、切断部位、スペーサー部分および標的化部分のいずれかがペプチドまたはポリペプチドであるとき、これらのペプチドまたはポリペプチドのうちのいずれか１つ以上の代わりに、その親ペプチドまたはポリペプチドのそれぞれの活性を保持する対応するペプチドミメティックを用いることができることは理解されるであろう。これは、本発明の薬剤にプロテアーゼ耐性を付与すること、およびそれによってその安定性を向上させることに役立ち得る。したがって、例えば、１つ以上のペプチドスペーサー部分によってＴ細胞抗原を標的化部分に付けるとき、それらのスペーサー部分の１つ以上が、ペプチドミメティックであること、例えば、前記スペーサー部分の天然に存在するアミノ酸の１つ以上を例えば安定性を向上させるために置換または修飾することが望ましいことがある。
【０１４９】
本発明の薬剤のペプチド部分の安定性を増加させるためのもう１つのアプローチは、一方または両方の末端に安定化基を有するアプローチである。典型的な安定化基は、アミド、アセチル、ベンジル、フェニル、トシル、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニル、ベンジルオキシカルボニルおよびこれらに類する末端基修飾を含む。追加の修飾としては、エキソペプチダーゼ活性を阻害するために、末端に「Ｌ」アミノ酸の代わりに「Ｄ」アミノ酸を、およびアミノもしくはカルボキシ末端ではなくアミドを、またはアミノ末端ではなくアセチルを使用することが挙げられる。したがって、本発明の薬剤が露出したペプチド末端を有するときは必ず、末端がキャッピング部分、好ましくは、２００Ｄａ未満の分子量である部分を有し得ることは理解される。さらなるキャッピング部分としては、ナフチル基またはポリエチレングリコール基が挙げられる。レトロ−インベルソ型ペプチドが既に比較的安定しており、そのため追加のキャピング部分を必要としないこともあることは理解される。
【０１５０】
好ましくは、本発明の薬剤は、３７℃で少なくとも２４時間の血漿中半減期を有する。
【０１５１】
本発明の薬剤を、例えばビオチン化によって、または当分野において公知の任意の検出可能標識、例えば、放射性標識、蛍光標識もしくは酵素的標識の組込みによって、より容易に検出できるように修飾することが望ましいことがある。
【０１５２】
本発明の特に好まし実施形態は、癌を予防または治療するための薬剤を提供し、この薬剤は、（ｉ）前記癌への標的化が可能である標的化部分と、（ｉｉ）免疫原性Ｔ細胞ペプチドとを含み、前記癌の近傍での選択的切断により前記標的化部分から前記Ｔ細胞ペプチドを放出させることができる。
【０１５３】
前記癌は、任意の癌、例えば、乳癌、卵巣癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、膀胱癌、腎癌、黒色腫、肺癌、前立腺癌、精巣癌、甲状腺癌、脳癌、食道癌、胃癌、膵臓癌、結腸直腸癌、肝臓癌、白血病、骨髄腫、非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、急性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ芽球性白血病、リンパ増殖性障害、骨髄異形成障害、骨髄増殖性疾患および前癌性疾患であり得る。
【０１５４】
上で説明したように、本発明者らは、本発明の薬剤を使用して、特定の望まれない細胞を特異的に死滅させるように既存の免疫応答を再指向させることができることを証明した。任意の望まれない細胞をこのようにして標的にすることができるので、本発明の薬剤は、有意な治療的可能性をもたらす。
【０１５５】
したがって、本発明の第二の態様は、望まれない細胞の存在を特徴とする病態を予防または治療する方法を提供し、この方法は、本発明の第一の態様による薬剤を被験体に投与することを含む。
【０１５６】
したがって、前記方法は、望まれない細胞（例えば癌）を特徴とする病態を有する被験体または該病態を発現するリスクのある被験体を同定すること、本発明の第一の態様による薬剤を前記被験体に投与すること、および前記望まれない細胞の数を判定するための試験の実施によりまたは前記被験体の臨床症状のモニタリングにより前記被験体における前記望まれない細胞のレベルをモニターすることを含み得る。前記モニタリング段階の結果に依存して、より多くの前記薬剤の投与が必要になることもある。
【０１５７】
同様に、本発明は、望まれない細胞の存在を特徴とする病態の予防または治療の際に使用するための、本発明の第一の態様による薬剤を含む。
【０１５８】
本発明は、望まれない細胞の存在を特徴とする病態を予防または治療するための医薬品の製造における、本発明の第一の態様による薬剤の使用も含む。
【０１５９】
前記病態および望まれない細胞についての選好は、本発明の第一の態様に関して上で説明したとおりである。好ましくは、前記望まれない細胞は腫瘍細胞であり、前記病態は腫瘍である。
【０１６０】
病態の予防または治療には、本発明者らは、患者における症状の低減もしくは緩和（すなわち、姑息的使用）、症状の悪化もしくは進行の予防、障害の（例えば、原因因子の阻害もしくは排除による）治療、またはその病態もしくは障害がない被験体における該病態もしくは障害の予防という意味を含める。
【０１６１】
患者に投与するための最も適切な薬剤が診療所において決定され、選択または調製される、診療所における個別化医療に本発明の薬剤が適していることは理解されるであろう。例えば、薬剤を被験体に投与する段階の前に、次にうちのいずれか１つを判定することができる：（ｉ）被験体のＨＭＣ対立遺伝子、（ｉｉ）Ｔ細胞抗原に対する被験体の細胞傷害性Ｔ細胞応答、および（ｉｉｉ）標的化部分の標的であり得る分子および／または本発明の薬剤中の切断部位を切断することができる酵素に関する望まれない細胞の発現プロファイル。被験体のＨＭＣ対立遺伝子は、抗原レベルでの血清学的アッセイにより、または遺伝子レベルでのＤＮＡアッセイを用いることにより評定することができる。所与の抗原が被験体における特定の細胞傷害性Ｔ細胞応答を刺激するかどうかの判定は、該被験体からの単離末梢単核血液細胞を該抗原と接触させること、および細胞増殖についての標準的アッセイを用いることによって行うことができる。望まれない細胞の発現プロファイルの評定は、核酸（例えばＤＮＡもしくはＲＮＡ転写産物）またはタンパク質レベルを測定するための常例的アッセイを用いて生検試料で行うことができる。例えば、トランスクリプトミクス技術またはプロテオミクス技術を用いることができる。このようにして、例えば望まれない細胞によって発現される表面マーカーに特異的に結合する、目的に合った標的化部分を同定することが可能となる。望まれない細胞の近傍で選択的に切断することができる適切なプロテアーゼ切断部位を同定することも可能であり得る。
【０１６２】
したがって、本発明の第二の態様の方法は、（ｉ）望まれない細胞（例えば癌）の存在を特徴とする病態を有する被験体、または該病態を発現するリスクのある被験体を同定する段階、（ｉｉ）前記被験体から試料を採取する段階、（ｉｉｉ）前記試料を分析して、その被験体における病態を予防または治療するために最適な標的化部分、Ｔ細胞抗原および／または切断部位を同定する段階、（ｉｉｉ）本発明の薬剤を調製する段階、（ｉｖ）前記薬剤を前記被験体に投与する段階、および（ｖ）望まれない細胞の数を判定するための試験の実施または前記被験体の臨床症状のモニタリングのいずれかにより前記被験体における望まれない細胞のレベルをモニターする段階を含み得る。
【０１６３】
装置を用いて、特定の患者に使用するために最も適している薬剤を選択することおよび場合により調製することができることは理解される。例えば、前記装置は、被験体からの１つ以上の試料の自動分析を行うことができ、この分析に基づいて、その被験体のためのテーラーメイド薬剤を選択することおよび場合により調製することができる。例えば、前記装置は、前記試料に関する血清学的アッセイを行って被験体のＭＨＣ対立遺伝子を判定することができ、これに基づいて様々なペプチドを細胞傷害性Ｔ細胞応答を惹起する点でのそれらの効率について試験して、その患者での使用に最良のＴ細胞抗原を同定することができる。同様に、前記装置は、被験体からの（例えば生検試料からの）望まれない細胞の発現プロファイルを行って、その望まれない細胞に結合するであろう好適な標的化部分を決定すること、および／またはその望まれない細胞の近傍で選択的に切断されるであろう好適な切断部位を決定することができる。
【０１６４】
診療所においてこれらの段階のいずれか１つ以上の行うことにより、特定の被験体の目的に合った薬剤を調製することができる。例えば、前記薬剤は、患者のＭＨＣ分子に結合し、強力なＴ細胞応答を惹起することが分かっているＴ細胞抗原と、望まれない細胞によって発現される表面マーカーに選択的に結合することが分かっている標的化部分と、前記望まれない細胞の近傍での前記Ｔ細胞抗原の放出を可能にするプロテアーゼ切断部位とを含有し得る。
【０１６５】
１つの実施形態では、本発明の第一の態様による薬剤に加えてさらなる治療薬を前記被験体に投与する。例えば、特定の病態を予防または治療するための薬剤を投与するとき、その病態との戦いに有用であることが公知のさらなる治療薬を投与することができる。一例として、前記薬剤が癌を治療するためのものであるとき、さらなる抗癌剤（例えば抗新生物化学療法薬）を本発明の薬剤と一緒に被験体に投与することができる。同様に、前記さらなる治療薬は、アレルギー性疾患、炎症性疾患、再生医療および神経変性疾患に治療応用されていることが公知であるものであり得る。
【０１６６】
前記さらなる薬剤が本発明の薬剤と同じ時点で投与（すなわち、場合により併用製剤（ｃｏ−ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）で、同時投与）されることもあり、または異なる時点で投与（すなわち逐次投与）されることもあることは理解される。
【０１６７】
前記さらなる治療薬は、ワクチン；免疫賦活薬；抗癌剤；本発明の薬剤に対する抗体応答を阻害する薬剤；および／またはプロテアーゼ阻害剤のいずれか１つ以上であり得る。
【０１６８】
例えば、使用する特定のＴ細胞抗原に対するエフェクター免疫応答を追加免疫するために、被験体にＴ細胞抗原を予防接種すること；および／または免疫賦活剤、例えばＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＦＮα、ＧＭ−ＣＳＦ、メトホルミン、レナリドマイドを投与すること；および／または抗免疫調節剤（ａｎｔｉ−ｉｍｍｕｎｏｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  ａｇｅｎｔ）、例えばイピリムマブ（ｌｐｉｌｉｍｕｍａｂ）、を投与することが望ましいことがあり；これらのすべてをさらなる治療薬と考えることができる。
【０１６９】
前記被験体が、免疫抑制剤の投与を受けている被験体である場合には、本発明の薬剤を投与するときまたは前に、これらの免疫抑制剤を該被験体から（例えば、治療を中止することにより）抜くことも理解される。
【０１７０】
同様に、有害な抗体応答がｉｎ  ｖｉｖｏで惹起される本発明の薬剤に関係する一切の免疫原性の問題点を回避することを目的とした方法を用いることが望ましいことがある。例えば、Ｂ細胞の活性を阻害することが公知である１つ以上の薬剤、例えば、リツキシマブ、シクロホスファミド、Ｓｙｋ阻害剤、抗ＢＡＦＦ抗体（例えばベリムマブ）、抗Ｄ２２抗体、抗Ｃ２０抗体および抗Ｃ１９抗体（これらのすべをさらなる治療薬と考えることができる）も被験体に投与することがある。この場合、前記Ｂ細胞の阻害剤を本発明の薬剤の前に、例えば、Ｂ細胞を除去する前処置として被験体に投与すると、特に好ましい。
【０１７１】
もう１つの実施形態では、本発明の薬剤の標的選択性を向上させるために特定のプロテアーゼ阻害剤を投与することが適切であることがある。例えば、標的化部分が、心臓および乳房組織両方における細胞に結合するが、乳房におけるものしか標的にできないことが分かっている場合、乳房ではなく心臓でのＴ細胞抗原の放出の原因となるプロテアーゼを選択的に阻害する薬剤を投与することが望ましいだろう。言い換えると、Ｔ細胞抗原を放出させることが可能であるプロテアーゼであって、しかし望まれない細胞の近傍に（例えば、望まれない細胞の表面にまたは表面付近に）ではなく望まれる細胞の近傍に（例えば、望まれる細胞の表面にまたは表面付近に）存在するプロテアーゼを阻害するための薬剤を投与する。これは、万一、望まれない細胞の近傍に存在するものもあり、望まれる近傍に存在するものもある多数のプロテアーゼによって本発明の薬剤のプロテアーゼ切断部位が切断可能である場合、特に有用である。この場合、望まれる細胞の近傍に存在するプロテアーゼを阻害するが、それにもかからわず切断部位を切断することが可能であり、したがって、本発明の薬剤からＴ細胞抗原を放出させることが可能であるプロテアーゼ阻害剤を投与することにより、標的化特異性を向上させることができる。前記阻害剤の投与の効果は、Ｔ細胞抗原が望まれない細胞の近傍で優先的に放出されることを確実にするものであろう。例えば、癌を有する患者が、ＭＭＰ２および他のプロテアーゼが活性である活動性関節リウマチも有し、ならびに本発明の薬剤中の１つ以上の切断部位がＭＭＰ２をはじめとする多数のプロテアーゼによって切断可能である場合、ＭＭＰ２を阻害して関節炎罹患関節での本薬剤の切断を防止するが、別のプロテアーゼによる癌部位での切断を保持することは有益であり得る。
【０１７２】
したがって、本発明は、望まれない細胞の存在を特徴とする病態の予防または治療に使用するための（ｉ）本発明の第一の態様による薬剤と（ｉｉ）さらなる治療薬とを含む組成物を含む。本発明の薬剤とさらなる治療薬を同時に投与してもよいし、または逐次的に投与してもよいとすれば、本発明が、さらなる治療薬の投与を受けている被験体における望まれない細胞の存在を特徴とする病態の予防または治療において使用するための本発明の第一の態様による薬剤を含むことは、理解されるであろう。したがって、本発明は、本発明の第一の態様による薬剤の投与を受けている被験体における望まれない細胞の存在を特徴とする病態の予防または治療において使用するための治療薬を含むということにもなる。
【０１７３】
同様に、本発明は、望まれない細胞の存在を特徴とする病態を予防または治療するための医薬品の製造における、（ｉ）本発明の第一の態様による薬剤と（ｉｉ）さらなる治療薬とを含む組成物の使用を含む。重ねて、本発明の薬剤とさらなる治療薬を同時に投与してもよいし、または逐次的に投与してもよいとすれば、本発明が、さらなる治療薬の投与を受けている被験体における望まれない細胞の存在を特徴とする病態を予防または治療するための医薬品の製造における本発明の第一の態様による薬剤を含む組成物の使用を含むことは、理解されるであろう。したがって、本発明は、本発明の第一の態様による薬剤の投与を受けている被験体における望まれない細胞の存在を特徴とする病態を予防または治療するための医薬品の製造における治療薬の使用を含むことにもなる。
【０１７４】
本発明は、（ｉ）本発明の第一の態様による薬剤と（ｉｉ）望まれない細胞の存在を特徴とする同じ病態の予防または治療に好適なさらなる治療薬とを含む組成物も提供する。直ぐ前の２段落で述べた治療薬が、本発明の薬剤によって治療可能である病態と同じ、望まれない細胞の存在を特徴とする病態の処置に好適な薬剤であり得ることは理解されるであろう。
【０１７５】
本発明の第三の態様は、医学に使用するための本発明の第一の態様による薬剤を提供する。
【０１７６】
本発明の第四の態様：本発明の第一の態様による薬剤と医薬的に許容され得る担体、希釈剤または賦形剤とを含む医薬組成物。
【０１７７】
本発明の薬剤を単独で投与することが可能であるが、１つ以上の許容され得る担体と共に医薬製剤としてそれを提供するほうが好ましい。前記担体（単数または複数）は、前記治療薬と適合性であり、その賦形剤に有害でないという意味で「許容され得」なければならない。典型的に、前記担体は、無菌または発熱物質不含である水または食塩水であろう。
【０１７８】
適宜、前記製剤を単位剤形で適便に提供することができ、および薬学技術分野において周知の任意の方法によって調製することができる。かかる方法は、活性成分（望まれない細胞を特徴とする病態を治療または予防するための薬剤）と、１つ以上の補助成分を構成する担体とを会合させる段階を含む。一般に、前記活性成分と液体担体もしくは微粉固体担体または両方とを均一かつ均質に会合させ、その後、必要に応じてその生成物を造形することにより、製剤を調製する。
【０１７９】
経口投与に好適な本発明による製剤を、各々が所定量の活性成分を含有する個別単位、例えば、カプセル、カシェ剤もしくは錠剤として；粉末もしくは顆粒として；水性液もしくは非水性液中の溶液もしくは懸濁液として；または水中油型エマルジョンもしくは油中水型エマルジョンとして提供することができる。前記活性成分をボーラス、舐剤またはペーストとして提供することもできる。
【０１８０】
錠剤は、場合により１つ以上の補助成分と共に、圧縮または成形することによって製造することができる。圧縮錠剤は、結合剤（例えば、ポビドン、ゼラチン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース）、滑沢剤、不活性希釈剤、保存薬、崩壊剤（例えば、デンプングリコール酸ナトリウム、架橋ポビドン、架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム）、界面活性剤または分散剤と場合により混合された、粉末または顆粒などの易流動形態の活性成分を好適な機械で圧縮することにより調製することができる。成形錠剤は、不活性液体希釈剤で湿潤させた粉末化合物の混合物を好適な機械で成形することによって製造することができる。場合により、錠剤にコーティングしてもよく、または錠剤に刻み目を入れてもよく、および例えば、所望の放出プロファイルを生じさせるために様々な比率でヒドロキシプロピルメチルセルロースを使用して、中の活性成分の放出を遅速または制御するように錠剤を調合することができる。
【０１８１】
口内への局所投与に好適な製剤としては、着香された基剤、通常はスクロース、中の活性薬剤とアラビアゴムまたはトラガカントゴムとを含むロゼンジ；不活性基剤、例えばゼラチンおよびグリセリン、またはスクロース、中の活性成分とアラビアゴムとを含む香剤；および好適な液体担体中の活性成分を含むマウスウォッシュが挙げられる。
【０１８２】
非経口投与に好適な製剤としては、酸化防止剤と緩衝剤と静菌薬とその製剤を所期のレシピエントの血液と等張性にする溶質とを含有し得る、水性および非水性滅菌注射溶液；ならびに懸濁化剤および増粘剤を含み得る、水性および非水性滅菌懸濁液が挙げられる。前記製剤を単位用量または多用量容器、例えば密封アンプルおよびバイアルで提供することができ、ならびに前記製剤を、使用直前に滅菌液体担体、例えば、注射用蒸留水を添加するだけでいいフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保管することができる。即時注射溶液および懸濁液を、前に説明した種類の滅菌粉末、顆粒および錠剤から調製することができる。
【０１８３】
本発明の薬剤を坐剤もしくはペッサリーの形態で投与することができ、またはローション、溶液、クリーム、軟膏もしくは散布剤の形態で局所適用することができる。前記薬剤を、例えば皮膚パッチの使用により、経皮投与することもできる。
【０１８４】
好ましい単位投薬製剤は、活性成分の日用量もしくは単位、サブ日用量（ｄａｉｌｙ  ｓｕｂ−ｄｏｓｅ）、またはそれらの適切な分割量を含有するものである。
【０１８５】
上で詳細に述べた成分に加えて、本発明の製剤が、問題となる製剤のタイプを顧慮して当分野における従来の他の薬剤を含み得る、例えば、経口投与に好適なものが着香剤を含み得ることは理解されるはずである。
【０１８６】
個体に投与する薬剤の量は、個々の個体の病態との戦いに有効な量である。医師はその量を決めることができる。
【０１８７】
好ましくは、本明細書に記載する本発明の任意の態様に関連して、治療する被験体はヒトである。あるいは、前記被験体は、動物、例えば、飼いならされた動物（例えば、イヌもしくはネコ）、実験動物（例えば、実験用齧歯動物、例えばマウス、ラットもしくはウサギ）、または農業において重要な動物（すなわち家畜）、例えばウマ、ウシ、ヒツジもしくはヤギであることもある。
【０１８８】
本発明は、望まれない細胞の存在を特徴とする病態を予防または治療するためのパーツキットを提供し、このキットは、（ｉ）前記望まれない細胞への標的化が可能であり、かつ第一の結合パートナーに付けられている標的化部分と、（ｉｉ）前記第一の結合パートナーへの結合が可能である第二の結合パートナーに付けられるＴ細胞抗原とを含み、前記望まれない細胞の近傍における切断部位の前記第二の結合パートナーとＴ細胞抗原の間での選択的切断により前記第二の結合パートナーから前記Ｔ細胞抗原を放出させることができる。
【０１８９】
前記病態、望まれない細胞、標的化部分およびＴ細胞抗原の選好は、上で定義したとおりである。前記パーツキットが癌の予防または治療用であると、特に好ましい。
【０１９０】
前記第一および第二の結合パートナーには、本発明者らは、互いに選択的に結合する任意の２つの部分という意味を含める。最も好ましくは、前記第一および第二結合パートナーは、互いにのみ結合し、任意の他の部分に結合しない。非共有結合、例えば、ビオチン／アビジンもしくはストレプトアビジン間のもの、または非免疫学的結合が好ましい。したがって、前記第一の結合パートナーはビオチンであることがあり、および前記第二の結合パートナーはアビジンであることがあり、ならびに逆の場合もある。あるいは、前記第一の結合パートナーは抗原であることがあり、および前記第二の結合パートナーは、その抗原に特異的な抗体であることがあり、ならびに逆の場合もある。しかし、選択的に互いに結合する第一の結合パートナーと第二の結合パートナーの任意のペアを使用することができ、好適なペアは当業者に公知であろう。
【０１９１】
前記キットにより、先ず被験体に標的化部分を投与し、Ｔ細胞抗原を投与する前に該被験体における該標的化部分の正確な位置を（例えば、該標的化部分を検出可能に標識する（例えば放射性標識する）ことにより）確立することが可能であることは、理解されるであろう。その後、第一の結合パートナーに結合する第二の結合パートナーにより、前記Ｔ細胞抗原を望まれない細胞に標的化する。前記望まれない細胞の近傍に来ると、前記Ｔ細胞抗原は、前記第二の結合パートナーから、該第二の結合パートナーとＴ細胞抗原の間の切断部位の選択的切断により放出されることとなり、それにより、前記Ｔ細胞抗原が前記望まれない細胞の表面で提示されて、その望まれない細胞に対する既存の免疫応答を再指向させることが可能になる。
【０１９２】
したがって、本発明は、望まれない細胞の存在を特徴とする病態を予防または治療する方法をさらに提供し、この方法は、（ｉ）前記望まれない細胞への標的化が可能である標的化部分であって、第一の結合パートナーに付けられている標的化部分と、（ｉｉ）前記第一の結合パートナーへの結合が可能である第二の結合パートナーに付けられているＴ細胞抗原であって、前記望まれない細胞の近傍での前記第二の結合パートナーとＴ細胞抗原の間での前記切断部位の選択的切断によって前記第二の結合パートナーから放出させることができるＴ細胞抗原とを被験体に投与することを含む。好ましくは、前記標的化部分を前記Ｔ細胞抗原の前に投与して、例えば、前記望まれない細胞における該標的化部分の正確な位置を確立することを可能にする。しかし、前記標的化部分を前記Ｔ細胞抗原と同じ時点で投与してもよい。
【０１９３】
同様に、本発明は、被験体における望まれない細胞を特徴とする病態の予防または治療において使用するための、望まれない細胞への標的化が可能である標的化部分であって第一の結合パートナーに付けられている標的化部分と、前記第一の結合パートナーへの結合が可能である第二の結合パートナーに付けられているＴ細胞抗原であって、前記望まれない細胞の近傍における切断部位の前記第二の結合パートナーとＴ細胞抗原の間での選択的切断により前記第二の結合パートナーから放出させることができるＴ細胞抗原とを提供する。好ましくは、前記標的化部分を前記Ｔ細胞抗原の前に投与して、例えば、前記望まれない細胞における該標的化部分の正確な位置を確立することを可能にする。しかし、前記標的化部分を前記Ｔ細胞抗原と同じ時点で投与してもよい。前記標的化部分とＴ細胞抗原を、前記第一の結合パートナーと第二の結合パートナーの結合により互いに付けることができることは理解される。
【０１９４】
本発明によって提供するさらなるパーツキットは、（ｉ）望まれない細胞への標的化が可能である標的化部分、（ｉｉ）Ｔ細胞抗原、および（ｉｉｉ）被験体の（ａ）ＭＨＣ対立遺伝子、（ｂ）Ｔ細胞抗原に対する細胞傷害性Ｔ細胞応答および（ｃ）該被験体における望まれない細胞の発現プロファイルのうちの１つ以上の評定するための１つ以上の手段または試薬を含む。
【０１９５】
前記標的化部分およびＴ細胞抗原についての選好は、本明細書に記載のものを含む。このパーツキットが、本発明の第一の態様において定義したとおりの特定の薬剤を所与の患者の目的に合せるのに有用であり得ることは理解されるであろう。被験体の（ａ）ＭＨＣ対立遺伝子、（ｂ）Ｔ細胞抗原に対する細胞傷害性Ｔ細胞応答および（ｃ）該被験体における望まれない細胞の発現プロファイルを評定するために使用することができる好適な手段または試薬は周知であり、当分野において広範に入手可能である。１つの実施形態において、前記パーツキットは本発明の第一の態様の薬剤を含み、該キットを使用して、その薬剤が特定の患者に好適であるかどうかを判定することができる。
【０１９６】
本発明は、（ｉ）Ｔ細胞抗原と（ｉｉ）切断部位とを含む分子であって、前記切断部位が、望まれない細胞への標的化が可能である標的化部分に該分子を付けることを可能にする連結部分を含有し、および前記切断部位を前記望まれない細胞の近傍で選択的に切断することができる分子も提供する。
【０１９７】
前記分子が、標的化部分を伴わない、本発明の第一の態様の薬剤の部分を表すことがあることは理解される。したがって、前記Ｔ細胞抗原、前記切断部位、標的化部分に前記切断部位を付ける方法（例えば、システイン残基などのチオール基を含むリンカー部分による）、前記標的化部分および望まれない細胞についての選好は、本発明の第一の態様に関して上で定義したものすべてを含む。
【０１９８】
特定の実施形態において、前記分子は、上の表６に収載した最終ペプチドを含み、この場合、表６に収載した「エピトープ」が前記分子のＴ細胞抗原に対応し、および表６に収載した「切断配列」が前記切断部位に対応する。したがって、前記分子は、以下のペプチドのいずれかを含み得るまたはから成り得る：
ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＱＫＷＮＫＷＡＬＳＲＡＳＡＬＡＳＡＬＣ（配列番号２８３）、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＱＨＳＳＫＬＱＬＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ（配列番号２８５）、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＱＧＧＧＧＦＧＧＧＧＦＧＧＧＧＦＣ（配列番号２８７）、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＱＫＱＳＲＫＦＶＰＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ（配列番号２８８）、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＱＣＰＧＲＶＶＧＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ（配列番号２８９）、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＱＹＬＧＲＳＹＫＶＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ（配列番号２９０）、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＱＧＰＱＧＩＡＳＱＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ（配列番号２９２）、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＱＰＱＧ−ＩＡＧＱＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ（配列番号２９３）、およびＮＬＶＰＭＶＡＴＶＱＶＬＫＶＬＫＶＬＫＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ（配列番号２９５）。
【０１９９】
特定の実施形態において、前記分子は、上の表７に収載した最終ペプチドを含み、この場合、表７に収載した「エピトープ」が前記分子のＴ細胞抗原に対応し、および表７に収載した「切断部位」が前記切断部位に対応する。したがって、前記分子は、以下のペプチドのいずれかを含み得るまたはから成り得る：
ＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＣＰＧＲＶＶＧＧＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２９７）、ＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＧＧＲＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２９８）、ＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＹＬＧＲＳＹＫＶＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２９９）、ＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＬＧＲＫＩＱＩＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号３００）、ＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＬＶＰＲＧＳＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号３０１）、ＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＲＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号３０４）、ＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＡＡＰＶＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号３０５）、ＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＫＱＬＲＶＶＮＧＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号３０６）、ＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＳＫＹＱＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号３０７）、およびＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＧＧＧＧＦＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号３０８）。
【０２００】
もう１つの実施形態において、前記分子は、以下のペプチドのいずれかを含むまたはから成る：ＫＴＰＲＶＴＧＧＧＡＭＡＩＰＶＳＬＲＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ（配列番号２７３）、ＤＤＹＳＮＴＨＳＴＲＹＶＴＩＰＶＳＬＲＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ（配列番号２７４）、ＲＮＬＶＰＭＶＡＴＶＱＩＰＶＳＬＲＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ（配列番号２７５）、ＹＶＬＥＥＴＳＶＭＬＩＰＶＳＬＲＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ（配列番号２７７）、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＱＧＡＬＡＬＡＬＡＬＣ（配列番号２７８）、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＱＧＰＬＧＡＬＡＬＡＬＡＬＡＬＡＬＡＬＡＬＡＬＡＬＡＬＣ（配列番号２７９）、またはＮＬＶＰＭＶＡＴＶＬＰＲＳＡＫＥＬＲＣ（配列番号２８０）。
【０２０１】
ある実施形態において、本明細書に記載する標的化部分は、セツキシマブであり、前記Ｔ細胞抗原は、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２１）を含み、および前記切断部位は、ＭＭＰ１４切断配列を含む。
【０２０２】
ある実施形態において、本明細書に記載する標的化部分は、リツキシマブ（Ｒｅｔｕｘｉｍａｂ）であり、前記Ｔ細胞抗原は、ＤＹＳＮＴＨＳＴＲＹＶ（配列番号５５）を含み、および前記切断部位は、ＭＭＰ２切断配列を含む。
【０２０３】
ある実施形態において、本明細書に記載する標的化部分は、リツキシマブ（Ｒｅｔｕｘｉｍａｂ）であり、前記Ｔ細胞抗原は、ＴＰＲＶＴＧＧＧＡＭ（配列番号３１）を含み、および前記切断部位は、ＭＭＰ２切断配列を含む。
【０２０４】
ある実施形態において、本明細書に記載する標的化部分は、ｈＰ６７．６（ゲムツズマブ親抗体）であり、前記Ｔ細胞抗原は、ＴＰＲＶＴＧＧＧＡＭ（配列番号３１）を含み、および前記切断部位は、ＭＭＰ２切断配列を含む。
【０２０５】
ある実施形態において、本明細書に記載する標的化部分は、セツキシマブであり、前記Ｔ細胞抗原は、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２１）を含み、および前記切断部位は、次の切断配列のいずれかを含む：ｕＰａ／ｔＰａ切断配列（ＣＰＧＲ−ＶＶＧＧ）（配列番号２５４）、プラスミン／ＴＭＰＲＳＳ２切断配列（ＧＧＲ−Ｘ）（配列番号２５６）、Ｃ１ｓ切断（ＹＬＧＲ−ＳＹＫＶ）（配列番号２５７）、ＭＡＳＰ２切断配列（ＳＬＧＲ−ＫＩＱＩ）（配列番号２５９）、トロンビン切断配列（ＬＶＰＲＧＳ）（配列番号２６０）、トリプシン切断配列（ＸＸＸＲ−Ｘ）（配列番号２６１）、エラスターゼ２切断配列（ＡＡＰＶ−Ｘ）（配列番号２６２）、ＭＴ−ＳＰ１／ＳＴ１４切断配列（ＫＱＬＲ−ＶＶＮＧ）（配列番号２６３）、ＰＳＡ切断配列（ＳＳＫＹＱ）（配列番号２６５）、またはカテプシンＢ切断配列（ＧＧＧＧ−Ｆ）（配列番号２６７）。
【０２０６】
以下の図および実施例を用いて本発明をさらに詳細に説明することとする。
【図面の簡単な説明】
【０２０７】
【図１】図１は、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２１）含有ＭＭＰ１４切断配列にコンジュゲートさせたセツキシマブ（Ｓｕｌｐｈｏ−ＳＭＭＣを使用してセツキシマブに連結させたＮＬＶＰＭＶＡＴＶＬＰＲＳＡＫＥＬＲＣ（配列番号２８０））で染色したＭＭＰ１４を形質導入したＭＤＡ．ＭＢ．２３１細胞を示す図である。
【図２】図２は、プロテアーゼ切断配列（ＤＤＹＳＮＴＨＳＴＲＹＶＴＩＰＶＳＬＲＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ）（配列番号２７４）を含有するＨＬＡクラスＩＩペプチドＤＹＳＮＴＨＳＴＲＹＶ（配列番号５５）にコンジュゲートさせたリツキシマブで染色したＢ−ＬＣＬ細胞を示す図である。
【図３】図３は、Ｓｕｌｐｈｏ−ＳＭＣＣを使用してリツキシマブ（Ｒｅｔｕｘｉｍａｂ）に連結させたプロテアーゼ切断配列（ＫＴＰＲＶＴＧＧＧＡＭＡＩＰＶＳＬＲＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ）（配列番号２７３）を含有するＨＬＡクラスＩペプチドＴＰＲＶＴＧＧＧＡＭ（配列番号３１）にコンジュゲートさせたリツキシマブで染色したＢ−ＬＣＬ細胞を示す図である。
【図４】図４は、以下を示す図である。（Ａ）本発明の例示的実施形態の模式図。（Ｂ）ウイルスペプチド送達の設計および機序を示す概略図。（ｉ）プロテアーゼ認識ドメインとＴ細胞ペプチド抗原とを含有する合成ペプチドに共有結合で連結させた、腫瘍細胞を標的にすることができるモノクローナル抗体から成る好ましい標的化分子。（ｉｉ）ペプチド−コンジュゲートを特異的抗体により標的細胞に送達し、そのペプチドを腫瘍細胞の付近で切断する。放出されたより小さいウイルスペプチドは、細胞表面の空のＭＨＣクラスＩまたはＩＩ分子に受動的に連結する。すると、それらのＭＨＣ−ペプチド複合体は、腫瘍細胞溶解を媒介する特異的循環Ｔ細胞によって認識される。
【図５】図５は、再指向されたウイルス特異的Ｔ細胞のｉｎ  ｖｉｔｒｏ活性を示す図である。（Ａ）リツキシマブ（抗ＣＤ２０）へのコグネイト抗原ＴＰＲＶＴＧＧＧＡＭ（配列番号３１）ペプチドのコンジュゲーションを通してのＣＤ８＋サイトメガロウイルス特異的細胞傷害性Ｔリンパ球によるリンパ芽球様リンパ腫細胞系の認識。認識は、前記ペプチドにＭＭＰ２切断モチーフが隣接している場合にのみ存在する。対照は、腫瘍細胞単独、ＣＴＬ単独、およびＳｕｌｐｈｏ−ＳＭＣＣを使用してリツキシマブ（Ｒｅｔｕｘｉｍａｂ）に連結させた遊離ＴＰＲペプチド（ＫＴＰＲＶＴＧＧＧＡＭＡＩＰＶＳＬＲＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ）（配列番号２７３）でパルスした腫瘍細胞である。（Ｂ）ＨＬＡ−ＤＲ７＋拘束性エピトープＤＹＳＮＴＨＳＴＲＹＶ（配列番号５５）（ＤＹＳＮ）に対して特異的なＣＤ４＋サイトメガロウイルス特異的Ｔ細胞の再指向。リンパ芽球様細胞系を、切断部位を伴わないＤＹＳＮペプチド（ＩＰＤＤＹＳＮＴＨＳＴＲＹＶＣ）（配列番号３０９）、プロテアーゼ切断部位を含有する「ＤＹＳＮ−プロテアーゼ切断部位」（ＤＤＹＳＮＴＨＳＴＲＹＶＴＩＰＶＳＬＲＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ）（配列番号２７４）または対照ペプチドと架橋したリツキシマブと共にインキュベートし、洗浄した。その後、腫瘍細胞を一晩、ＤＹＳＮ特異的ＣＤ４＋Ｔ細胞と共にインキュベートし、ＩＦＮγ放出を用いてＥＬＩＳＡによりＴ細胞認識を判定した。ＤＹＳＮペプチドに隣接してプロテアーゼ切断部位を含めることにより、ＣＤ４＋Ｔ細胞による腫瘍細胞の認識が劇的に増加する。（Ｃ）サイトメガロウイルスｐｐ６５（ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ）（配列番号２１）エピトープに対して特異的なサイトメガロウイルス特異的ＣＤ８＋ＣＴＬを使用する乳癌腫細胞系ＭＤＡ−ＭＢ２３１に対する適用。ＭＭＰ１４切断部位と組み合わせたペプチドのコンジュゲーションは、Ｓｕｌｐｈｏ−ＳＭＣＣを使用してセツキシマブに連結させた細胞（ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＬＰＲＳＡＫＥＬＲＣ；配列番号２８０）の死滅を媒介する。示していないさらなるデータは、ＭＭＰ１４切断部位を欠くペプチドコンジュゲートがセツキシマブ単独に匹敵する死滅作用をを示すことを示す。
【図６】図６は、ＡＰＥＣアプローチを用いる腫瘍細胞系のｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏ標的化を示す図である。（Ａ）２つの乳房癌腫細胞系ＭＣＦ７およびＭＢ−ＭＤＡ２３１におけるＥＧＦＲ発現。（Ｂ）セツキシマブとコンジュゲートさせたプロテアーゼ切断部位を含有するＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２１）ペプチド（ＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＡＩＰＶＳＬＲＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ；配列番号２７６）を使用するＥＧＦＲ＋細胞系ＭＤＡ−ＭＢ２３１の標的化成功。（Ｃ）ＥＧＦＲを発現しないＭＣＦ−７をセツキシマブ免疫コンジュゲートは標的にしない。（Ｂ）および（Ｃ）の両方において、Ｂ−ＲＰＨは、Ｔ細胞によって認識されないように設計したＨＬＡミスマッチペプチドであり、ＶＬＥ−プロテアーゼ切断ペプチドは、ＨＬＡマッチペプチドである。このペプチドは、Ｔ細胞が前記プロテアーゼ切断配列の一部分を認識しないことを保証するための前記プロテアーゼ切断配列の対照であるべく設計されている。ＶＬＥ−プロテアーゼ切断ペプチドに対する応答は無視できるので、ＮＬＶ−プロテアーゼ切断ペプチドで見られる応答は、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２１）配列に負わされ、プロテアーゼ切断配列には負わされない。
【図７】図７は、ＡＰＥＣアプローチを用いる腫瘍細胞系のｉｎ  ｖｉｖｏ標的化を示す図である。（Ａ）セツキシマブ−ペプチドコンジュゲートを腹腔内注射により与えると、ヒトＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌細胞系をＣＭＶ特異的Ｔ細胞によって根絶することができることを実証するｉｎ  ｖｉｖｏ異種移植データ。セツキシマブ−ペプチド複合体単独は、腫瘍成長を制御することができず（上方）、ＣＭＶ特異的Ｔ細胞もできない（中央）。しかし、両方の組み合わせは、この進行性乳癌腫瘍の根絶をｉｎ  ｖｉｖｏで生じさせる。（Ｂ）ＣＭＶ特異的Ｔ細胞エピトープおよびプロテアーゼ切断部位と連結された抗Ｍｕｃ１抗体を使用する結腸直腸細胞系Ｃｏｌｏ２０５の標的化成功。ＧＰ１．４およびＳＭ３は、十分に特性付けされている抗ＭＵＣ１特異的抗体である。（Ｃ）この抗Ｍｕｃ１抗体−ペプチドコンジュゲートはまた、膵臓癌腫細胞系Ｐａｎｃ１を非常に効率的に標的化する。ＭＨ１、ＳＭ３およびＧＰ１．４は、すべて十分に特性付けされているＭＵＣ１特異的モノクローナル抗体である。ＭＨ１は、ＭＵＣ１の細胞質テールに対して特異的であり、したがってインタクト腫瘍細胞に結合せず、これに対してＳＭ３およびＧＰ１．４は、ＭＵＣ１糖タンパク質の細胞外部分に結合する。図７Ａについて使用したペプチドは、逆配列（ＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＡＩＰＶＳＬＲＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ）（配列番号２７６）を用いるＮＬＶペプチドである。図７ＢおよびＣにおけるペプチドは、次のとおりである：プロテアーゼ切断部位を含有するＮＬＶＲ（ＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＡＩＰＶＳＬＲＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ）（配列番号２７６）、ＮＬＶ−Ｒと同じプロテアーゼ切断部位を含有し、ウイルスエピトープの配向がＮＬＶ−Ｒと異なるＲＮＬＶ（ＲＮＬＶＰＭＶＡＴＶＱＩＰＶＳＬＲＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ）（配列番号２７５）、および前記プロテアーゼ切断配列を含有せず、対照ペプチドとして使用されるビオチンペプチド（ビオチン−ＰＦＭＲＰＨＥＲＮＧＦＴＶＬＣ：配列番号３２０）。（Ｄ）（Ａ）において使用したのと同じペプチド配列をコードするが、ｓｃＦｖ単一ポリペプチド鎖内に含有されている一本鎖断片Ｖ（ｓｃＦｖ）タンパク質構築物は、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞系に対してｉｎ  ｖｉｔｒｏで活性を明示する。前記ＳｃＦｖ構築物内のプロテアーゼ切断部位は、ＩＰＶＳＬＲＳ（配列番号３１０）である。
【図８】図８は、抗体−ペプチドコンジュゲートの血漿安定性および腫瘍Ｂ細胞の特異的標的化を示す図である。（Ａ）サイトメガロウイルスに由来するＭＨＣクラスＩペプチドとコンジュゲートさせたリツキシマブで細胞を標識した後のＣＤ８＋サイトメガロウイルス特異的細胞傷害性Ｔ細胞によるリンパ芽球様細胞系または健常Ｂ細胞の認識。健常Ｂ細胞は全く認識されず、これに対して標的細胞は、Ｔ細胞が特異的であるウイルスペプチドの存在下でのみ認識される。このデータは、健常組織と比較して悪性細胞に対するＡＰＥＣの特異性の証拠となる。（Ｂ）抗体ペプチド−エピトープコンジュゲート（ＡＰＥＣ）を３７℃、ヒト血漿中でインキュベートし、ＥＬＩＳＡによりアッセイして該ペプチドコンジュゲーションの安定性を判定した。ＡＰＥＣの半減期は≒５０分であり、そのペプチドのＣ末端へのアセチル基の付加により改変されない。図８において使用したペプチド配列は、プロテアーゼ切断部位ＩＰＶＳＬＲＳ（配列番号３１０）を含有するＮＬＶ−プロテアーゼ切断−逆（ＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＡＩＰＶＳＬＲＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ）（配列番号２７６）、プロテアーゼ切断部位ＩＰＶＳＬＲＳ（配列番号３１０）を含有するＶＬＥ−プロテアーゼ切断（ＹＶＬＥＥＴＳＶＭＬＩＰＶＳＬＲＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＣ）（配列番号２７７）、および前記プロテアーゼ切断配列を有さない対照ペプチドとして使用したビオチン−ＲＰＨ（ビオチン−ＰＦＭＲＰＨＥＲＮＧＦＴＶＬＣ：配列番号３２０）であった。
【図９】図９は、（Ａ）サイトメガロウイルスｐｐ６５タンパク質のアミノ酸配列（配列番号３１８）；（Ｂ）実施例において言及する幾つかのペプチド構築物のアミノ酸配列を示す図である。キー：太字で下線付き＝Ｔ細胞エピトープ；囲い枠内＝可動性リンカー；イタリック体＝プロテアーゼ認識部位；囲い枠内の太字＝親ｐｐ６５のとおりのエピトープ伸長残基；二重下線付き＝スルフヒドリルを有するカップリング残基。
【図１０】図１０は、以下を示す図である。（Ａ）外部タンパク質分解活性の依存：標的細胞をパラホルムアルデヒドで軽度に固定し、またはせず、その後、ペプチド（ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ）（配列番号２１）、または無関係のペプチド（ＶＬＥ）もしくはコグネイトペプチド（ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ：配列番号２１−プロテアーゼ切断部位）のいずれかとコンジュゲートさせたセツキシマブ、いずれかと共にインキュベートし、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２１）特異的Ｔ細胞とインキュベートした。データは、固定された細胞が抗体−ペプチドコンジュゲートをプロセッシングできること、したがって、プロセッシングのために内在化が必要ないことを実証する。（Ｂ）受容体ペプチドアゴニスト（ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＡＩＰＶＳＬＲＳＡＡＡＦＣＤＧＦＹＡＣＹＭＤＶ）（配列番号３１１）＝ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２１）およびプロテアーゼ切断部位ＡＩＰＶＳＬＲ（配列番号３１３）を伴うＨｅｒ２／ｎｅｕアゴニストペプチド［ＦＣＤＧＦＹＡＣＹＭＤＶ］（配列番号３１２）；ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＡＩＰＶＳＬＲＳＡＡＡＹＣＲＤＹＤＹＤＧＲＹＦＤＣＹ（配列番３１４号）＝ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２１）およびプロテアーゼ切断部位ＡＩＰＶＳＬＲ（配列番号３１３）を伴うＥＧＦＲアゴニストペプチド（ＹＣＲＤＹＤＹＤＧＲＹＦＤＣＹ）（配列番号３１９）を使用して、Ｔ細胞をＥＧＦＲ＋腫瘍細胞に対して再指向させることができることの証拠となるデータ（Ｐｏｎｄｅ  ｅｔ  ａｌ，Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ  ２１（８）：２５５０−３）。
【図１１】図１１は、以下を示す図である。（Ａ）ＨＬＡ−クラスＩＩペプチド（ＤＲ７拘束性）ＰＤＤＹＳＮＴＨＳＴＲＹＶＣ（配列番号３０９）とコンジュゲートさせたＩＬ−２（Ａ）およびＩＬ−４（Ｂ）を用い、ならびにビオチン−ＲＰＨ（ビオチン−ＰＦＭＲＰＨＥＲＮＧＦＴＶＬＣ：配列番号３２０）を対照ペプチドとして使用する、サイトカインを標的化部分として使用できることの実証。標的細胞をサイトカイン−ペプチド複合体で標識し、ＤＹＳＮ特異的ＣＤ４Ｔ細胞と共に４または２４時間培養した後、ＤＲ７拘束性ペプチド（ＰＤＤＹＳＮ）で標識した標的細胞に対して４および２４時間（Ａ）ならびに２４時間（Ｂ）後に強いＴ細胞応答があり、対照ペプチド（ビオチン−ＲＰＨ）を使用すると応答がない。
【図１２】図１２は、腫瘍細胞系の範囲よるＴ細胞認識を示す図である。８つのＨＬＡ−Ａ＊０２０１  ＮＣＩ−６０細胞系はすべて、コグネイト抗原でパルスしたとき、ＨＬＡ−Ａ＊０２０１拘束性ＣＭＶ特異的Ｔ細胞によって認識される。
【図１３】図１３は、抗体−ペプチド−エピトープコンジュゲート（ＡＰＥＣ）アプローチを用いるヒト癌腫細胞系のｉｎ  ｖｉｔｒｏ標的化を示す図である。（Ａ）セツキシマブ−ペプチドコンジュゲートを使用して癌腫細胞系を標的化できたことを示す初期データ。陽性対照は、コグネイトウイルスペプチドでパルスした腫瘍−図１２の場合と同様−である。（Ｂ）前記ペプチドへのプロテアーゼ切断部位の導入は、腫瘍細胞の有効な標的化に非常に重要である。切断配列を有さないペプチド（ＰＣ）は切断されず、したがってＴ細胞により認識されない。（Ｃ）セツキシマブ−ＭＭＰ２−ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２１）ＡＰＥＣを使用して、本発明者らは、７つのＨＬＡ−Ａ＊０２０１  ＮＣＩ−６０細胞系のうちの４つを首尾よく標的化することができる。ＮＣＩ−Ｈ５２２およびＣｏｌｏ２０５も弱く認識されるが、ＨＣＴ−１１６は認識されない。Ｃａｋｉ−２はＨＬＡ−Ａ＊０２０１でなく、単に対照としての役割を果たす。（Ｄ）本発明者らは、セツキシマブ配列およびＮ末端連結ＭＭＰ２−ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２１）に基づきｓｃＦＶタンパク質を生産した。この薬剤もまた、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでＭＤＡ−ＭＢ−２３１腫瘍細胞を標的にすることができる（赤色で示す）。（Ｅ）セツキシマブＡＰＥＣのｉｎ  ｖｉｔｒｏ力価の評定。これらの実験は、２〜５ｕｇ／ｍｌ（１３〜３０ｎＭ）の間のＥＣ５０を示唆する。図１３において、ペプチドエピトープがＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２１）であるとき、使用したペプチドは、プロテアーゼ切断配列ＡＩＰＶＳＬＲ（配列番号３１３）を含有するＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＡＩＰＶＳＬＲＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２７６）（「ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ−ＰＣ」）、およびプロテアーゼ切断部位を含有しないＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号３１５）（「ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ」）であった。
【図１４】図１４は、以下を示す図である。（Ａ）免疫組織化学的検査によりＣＤ８＋  Ｔ細胞を示す４つの腺癌の免疫組織化学的検査は、ヒト癌腫において豊富なＤＣ８＋  Ｔ細胞浸潤を示す。（Ｂ）抗Ｍｕｃ１（ＳＭ３）−（プロテアーゼ切断）−ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２１）ＡＰＥＣを使用して、本発明者らは、膵臓癌腫細胞系Ｐａｎｃ−１を首尾よく標的化することができる。（Ｃ）リツキシマブ−プロテアーゼ切断）−ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２１）ＡＰＥＣを使用して、本発明者らは、モデル腫瘍Ｂ細胞系（ＬＣＬ）（黒棒）を差別的に標的化することができ、健常Ｂ細胞（白棒）の標的化を回避することができる。（Ｄ）リツキシマブ−ＰＣ−ＤＹＳＮＴＨＳＴＲＹＶ（配列番５５号）を使用して、本発明者らは、ＣＤ４＋  Ｔ細胞応答を惹起するＨＬＡクラスＩＩ由来ペプチドを用いてモデル腫瘍Ｂ細胞系（ＬＣＬ）を首尾よく標的化することができる。（Ｅ）セツキシマブ−ＭＭＰ２−ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２１）ＡＰＥＣを使用して、本発明者らは、予め固定しておいた標的細胞（黒棒）を未固定細胞（白棒）において見られるものと同様のレベルで首尾よく標的化することができる。（Ｆ）黒色腫細胞系Ｕ２６６を標的化するための抗ＣＤ１３８抗体の使用。ＰＣ＝プロテアーゼ切断。「Ｕ２６６＋ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２１）＋Ｔ細胞」は、遊離ペプチドエピトープ（すなわち、無リンカーなど）としての単独の天然９アミノ酸ペプチドに対応し、これは本質的に最大可能応答であるので陽性対照として役立つ。図１４において、ペプチドエピトープが、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２１）であるとき、使用したペプチドは、プロテアーゼ切断配列ＡＩＰＶＳＬＲ（配列番号３１３）を含有するＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＡＩＰＶＳＬＲＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２７６）（「ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ−ＰＣ」）、およびプロテアーゼ切断部位を含有しないＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＡＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号３１５）（「ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ」）であった。
【実施例１】
【０２０８】
セツキシマブ−ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２１）コンジュゲートによるＴ細胞の刺激
要約
本発明者らは、切断部位を有するおよび有さないＨＬＡ−Ｂ７ペプチドにコンジュゲートさせたセツキシマブを含む薬剤と乳癌細胞を接触させた。Ｔ細胞へのその後の曝露は、切断部位を含有する薬剤と乳癌細胞を接触させたとき、Ｔ細胞応答を生じさせる結果となった。
【０２０９】
結果
乳癌についてのモデルとして使用されることが多いＭＤＡ．ＭＢ．２３１細胞にＭＭＰ１４遺伝子を形質導入して、該細胞内でのＭＭＰ１４タンパク質の発現を確実にした。コンジュゲートさせていない（１）またはＲＰＨＥＲＮＧＦＴＶＬ（配列番号３２）、ＨＬＡ−Ｂ７ペプチド（２）、ＭＭＰ１４切断配列を有さないＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２１）（３）もしくは切断配列を含むＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２１）にコンジュゲートさせたセツキシマブで標的細胞（１ｘ１０５）を染色した後、染色された細胞を一晩インキュベートした。翌日、それらの細胞を洗浄し、ＮＬＶ特異的Ｔ細胞をその培養物（１ｘ１０４）に添加し、一晩インキュベートした。上清を回収し、ＥＬＩＳＡを用いて、各培養物、ｎ＝３、におけるＩＦＮ−γの存在を判定した。結果を図１に示す。
【０２１０】
セツキシマブのみを使用しておよびミスマッチＨＬＡ−ペプチドとコンジュゲートしているセツキシマブを使用して染色した細胞と共に培養したＴ細胞からは、ＩＦＮ−γ放出が殆どなかった。妥当なペプチドとコンジュゲートしているがＭＭＰ１４切断部位を欠くセツキシマブを使用して染色した細胞と共に培養したＴ細胞もまたＩＦＮ−γを殆ど生産しなかったが、ＭＭＰ１４切断部位を含有する妥当なペプチドとコンジュゲートしているセツキシマブを使用して染色した細胞と共に培養したＴ細胞は、大量のＩＦＮ−γを生産した。
【実施例２】
【０２１１】
リツキシマブ（Ｒｅｔｕｘｉｍａｂ）−ＤＹＳＮＴＨＳＴＲＹＶ（配列番号５５）コンジュゲートによるＣＤ４＋Ｔ細胞の刺激
要約
本発明者らは、切断部位を有するおよび有さないサイトメガロウイルスＨＬＡクラスＩＩ拘束性ペプチドＤＹＳＮＴＨＳＴＲＹＶ（配列番号５５）にコンジュゲートさせたリツキシマブ（Ｒｅｔｕｘｉｍａｂ）を含む薬剤とＢリンパ芽球様細胞（Ｂ−ＬＣＬ）を接触させた。ＣＤ４＋Ｔ細胞へのその後の曝露は、切断部位を含有する薬剤とＢ−ＬＣＬ細胞を接触させたとき、Ｔ細胞応答を生じさせる結果となった。
【０２１２】
結果
プロテアーゼ切断配列を含有しない無関係のミスマッチペプチドＲＰＨＥＲＮＧＦＴＶＬ（配列番号３２）、ＨＬＡ−Ｂ７ペプチド（１）、プロテアーゼ切断配列を有する無関係のミスマッチＨＬＡクラスＩペプチドＶＬＥＥＥＴＳＶＭＬ（配列番号３１６）、ＨＬＡＡ−Ａ２ペプチド（２）、プロテアーゼ切断配列を有さない関連ペプチドＤＹＳＮＴＨＳＴＲＹＶ（配列番号５５）（３）、またはプロテアーゼ切断配列を含む関連ペプチドＤＹＳＮＴＨＳＴＲＹＶ（配列番号５５）（４）にコンジュゲートさせたリツキシマブでＢ−ＬＣＬ細胞を染色した後、染色された細胞を一晩インキュベートした。翌日、それらの細胞を洗浄し、ＤＹＳＮ特異的ＣＤ４＋Ｔ細胞をその培養物に添加し、一晩インキュベートした。上清を回収して、各培養物、ｎ＝３、におけるＩＦＮ−γの存在を判定した。プロテアーゼ切断部位を有さないミスマッチＨＬＡ−ペプチドとコンジュゲートしているリツキシマブを使用して染色した細胞と共に培養したＣＤ４＋Ｔ細胞からは、ＩＦＮ−γが殆ど放出されなかった。妥当なペプチドとコンジュゲートしているがプロテアーゼ切断部位を欠くリツキシマブを使用して染色した細胞と共に培養したＣＤ４＋Ｔ細胞もまたＩＦＮ−γを殆ど生産しなかったが、プロテアーゼ切断部位を含有する妥当なペプチドとコンジュゲートしているリツキシマブを使用して染色した細胞と共に培養したＴ細胞は、大量のＩＦＮ−γを生産した。しかし、プロテアーゼ切断配列を含有するＨＬＡミスマッチペプチドとコンジュゲートしているリツキシマブと共にＴ細胞を培養したとき、ＩＦＮ−γは全く生産されなかった。結果を図２に示す。
【０２１３】
リツキシマブ（Ｒｅｔｕｘｉｍａｂ）−ＴＰＲＶＴＧＧＧＡＭコンジュゲートによるＣＤ４＋Ｔ細胞の刺激を示す同様の実施例を図３に示す。
【実施例３】
【０２１４】
システイニル化ペプチドの抗体への化学的コンジュゲーションについての標準操作手順
１．システイニル化ペプチドをＤＭＳＯに溶解して５ｍｇ／ｍｌの最終濃度にする。
２．１ｍｇの４−［Ｎ−マレイミドメチル］シクロヘキサン−１−カルボン酸スルホスクシンイミジル（Ｓｕｌｆｏ−ＳＭＣＣ）を計量し、５００μｌのリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）に溶解する。
ａ．他のヘテロ二官能性架橋剤、例えば、特に、６−（３’−［２−ピリジルジチオ］−プロピオンアミド）ヘキサン酸スルホスクシンイミジル（Ｓｕｌｆｏ−ＬＣ−ＳＰＤＰ）およびＮ−［β−マレイミドプロピオン酸］ヒドラジド・トリフルオロ酢酸塩（ＢＭＰＨ）をＳｕｌｆｏ−ＳＭＣＣの代わりに使用してもよい。
３．２０μｌの抗体（１ｍｇ／ｍｌ、２０μｇの抗体）を添加してＳｕｌｆｏ−ＳＭＣＣを溶解し、室温で１時間インキュベートする。
４．プロテインＧカラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を、先ずそのカラムを１３，０００ｒｐｍで３０秒間回転させることにより洗浄して、エタノール（保存用緩衝液）を除去する。
５．５００μｌのＰＢＳを添加し、プロテインＧビーズを十分に混合した後、１３，０００ｒｐｍで３０秒間回転させる。溶出液を除去し、さらに２回繰り返す。
６．抗体−ＳＭＣＣをプロテインＧカラムに添加し、十分に混合し、５分間インキュベートする。１３，０００ｒｐｍで３０秒間遠心分離し、溶出液を除去する。
７．５００μｌのＰＢＳを添加し、ビーズを十分に混合した後、１３，０００ｒｐｍで３０秒間回転させ、溶出液を除去することにより、抗体を洗浄する。この段階をさらに２回繰り返す。
８．結合した抗体を溶出させるために、１２５μｌの０．１Ｍ酢酸をビーズに添加し、２分間、室温でインキュベートする。１．５ｍｌエッペンドルフ内にカラムを配置し、１３，０００ｒｐｍで３０秒間回転させ、溶出液を収集する。
９．段階８を繰り返す。
１０．２５０μｌの０．２Ｍ  Ｎａ２ＨＣＯ３を添加し、室温で５分間放置する。
１１．予めＤＭＳＯに溶解しておいた２μｌのペプチドをＳＭＣＣ活性化抗体に添加し、室温で２時間インキュベートする。
１２．段階４から１０を繰り返して、抗体から過剰な未結合ペプチドを除去する。
１３．２５０μｌの０．２Ｍ  Ｎａ２ＨＣＯ３を添加した後、保存前にさらなる５００μｌのＰＢＳを添加する。
１４．抗体を４℃で保存する。
【実施例４】
【０２１５】
乳癌の治療
ＰＲＳＡ−ＫＥＬＲ（配列番号３２１）プロテアーゼ切断部位（マトリックスメタロプロテアーゼ１４（ＭＭＰ１４）によって切断可能）を含むリンカーにより、サイトメガロウイルスに由来するペプチドＴ細胞抗原、例えばＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２１）、に付けられているセツキシマブを含む薬剤を調製する。この薬剤を医薬的に許容され得る賦形剤と配合し、乳癌などの上皮悪性病変を有する患者に投与する。この薬剤、セツキシマブ、は乳癌細胞に標的化され、結合すると、ＭＭＰ１４と接触する。そのプロテアーゼ切断部位の切断によりＴ細胞抗原、ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号２１）が放出され、その後、それが乳癌細胞の表面のＨＬＡ−Ａ＊０２０１分子に結合する。Ｔ細胞抗原を発現する乳癌細胞は、宿主免疫系により、そのエフェクターＣＤ８Ｔ細胞による細胞溶解の標的にされる。
【実施例５】
【０２１６】
Ｂ細胞リンパ腫（例えば、慢性リンパ球性白血病）の治療
ＴＩＰＶ−ＳＬＲＳ（配列番号３１７）プロテアーゼ切断部位（マトリックスメタロプロテアーゼ２（ＭＭＰ２）によって切断可能）を含むリンカーにより、サイトメガロウイルスに由来するＨＬＡクラスＩＩペプチドＴ細胞抗原、例えばＤＹＳＮＴＨＳＴＲＹＶ（配列番号５５）、に付けられているリツキシマブを含む薬剤を調製する。この薬剤を医薬的に許容され得る賦形剤と配合し、Ｂ細胞リンパ腫（例えば、慢性リンパ球性白血病）を有する患者に投与する。この薬剤、リツキシマブ、はＢ細胞に標的化され、結合すると、プロテアーゼと接触する。そのプロテアーゼ切断部位のその後の切断によりＴ細胞抗原、ＤＹＳＮＴＨＳＴＲＹＶ（配列番号５５）が放出され、その後、それがＢ細胞の表面のＨＬＡ−ＤＲ＊０１０７分子に結合する。すると、Ｔ細胞抗原を発現するＢ細胞は、宿主免疫系により、そのエフェクターＣＤ４Ｔ細胞による細胞溶解の標的にされるだろう。
【実施例６】
【０２１７】
腸癌の治療
ＣＰＧＲ−ＶＶＧＧ（配列番号２５４）プロテアーゼ切断部位（ｕＰＡにより切断可能）を含むリンカーによりサイトメガロウイルスに由来するペプチドＴ抗原に付けられているセツキシマブを含む薬剤を調製する。この薬剤を医薬的に許容され得る賦形剤と配合し、腸癌患者に投与する。
【実施例７】
【０２１８】
Ｂ細胞リンパ腫（例えば、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ））の治療
ＰＱＧ−ＩＡＧＱ（配列番号２６９）プロテアーゼ切断部位（ＭＭＰ２により切断可能）を含むリンカーによりサイトメガロウイルスに由来するペプチドＴ細胞抗原に付けられているリツキシマブ（Ｒｅｔｕｘｉｍａｂ）を含む薬剤を調製する。この薬剤を医薬的に許容され得る賦形剤と配合し、Ｂ細胞リンパ腫（例えばＣＬＬ）癌患者に投与する。
【実施例８】
【０２１９】
リツキシマブ−ＴＰＲＶＴＧＧＧＡＭ（配列番号３１）コンジュゲートによるＴ細胞の刺激
要約
本発明者らは、切断部位を有するおよび有さないサイトメガロウイルスペプチドＴＰＲＶＴＧＧＧＡＭ（配列番号３１）にコンジュゲートさせたリツキシマブ（Ｒｅｔｕｘｉｍａｂ）を含む薬剤とＢリンパ芽球様細胞（Ｂ−ＬＣＬ）を接触させた。Ｔ細胞へのその後の曝露は、切断部位を含有する薬剤とＢ−ＬＣＬ細胞を接触させたとき、Ｔ細胞応答を生じさせる結果となった。
【０２２０】
結果
ＲＰＨＥＲＮＧＦＴＶＬ（配列番号３２）、ＨＬＡ−Ｂ７ペプチド（１）、プロテアーゼ切断配列を含有する無関係のミスマッチＨＬＡクラスＩペプチド、ＶＬＥＥＥＴＳＶＭＬ（配列番号３１６）、（ＨＬＡ−Ａ２ペプチド）（２）、プロテアーゼ切断配列を有する関連ペプチドＴＰＲＶＴＧＧＧＡＭ（配列番号３１）（３）または前記切断配列を有さない関連ペプチドＴＰＲＶＴＧＧＧＡＭ（配列番号３１）にコンジュゲートさせたリツキシマブで細胞を染色した後、染色された細胞を一晩、３７℃でインキュベートした。翌日、それらの細胞を洗浄し、ＴＰＲ特異的Ｔ細胞をその培養物に添加し、一晩インキュベートした。上清を回収して各培養物、ｎ＝３、におけるＩＦＮ−γの存在を判定した。結果を図３に示す。
プロテアーゼ切断部位を有するまたは有さないミスマッチＨＬＡ−ペプチドとコンジュゲートさせたリツキシマブ（１および２）を使用して染色した細胞と共に培養したＴ細胞からは、ＩＦＮ−γが殆ど放出されなかった。妥当なペプチドとコンジュゲートされているがプロテアーゼ切断部位を欠くリツキシマブを使用して染色した細胞と共に培養したＴ細胞もまたＩＦＮ−γを殆ど放出しなかった（４）が、プロテアーゼ切断部位を含有する妥当なペプチドとコンジュゲートしているリツキシマブを使用して染色した細胞と共に培養したＴ細胞（３）は、大量のＩＦＮ−γを生産した。
【実施例９】
【０２２１】
Ｂ細胞リンパ腫（例えば、慢性リンパ球性白血病）の治療
ＴＩＰＶ−ＳＬＲＡ（配列番号３１７）プロテアーゼ切断部位（マトリックスメタロプロテアーゼ２（ＭＭＰ２）により切断可能）によりサイトメガロウイルス由来のＨＬＡクラスＩペプチドＴ細胞抗原、例えばＴＰＲＶＴＧＧＧＡＭ（配列番号３１）、に付けられているリツキシマブを含む薬剤を調製する。この薬剤を医薬的に許容され得る賦形剤と配合し、Ｂ細胞リンパ腫（例えば、慢性リンパ球性白血病）を有する患者に投与する。この薬剤、リツキシマブ、は、Ｂ細胞に標的化され、結合するとプロテアーゼと接触する。そのプロテアーゼ切断部位の切断によりＴ細胞抗原、ＴＰＲＶＴＧＧＧＡＭ（配列番号３１）が放出され、その後、それがＢ細胞の表面のＨＬＡ−Ｂ＊０７０２分子に結合する。すると、Ｔ細胞抗原を発現するＢ細胞は、宿主免疫系により、そのエフェクターＣＤ８Ｔ細胞による細胞溶解の標的にされるだろう。
【実施例１０】
【０２２２】
抗ウイルス免疫応答のｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏ再指向による腫瘍標的化
要約
本発明者らは、腫瘍に付随するタンパク質分解環境を活用することにより、ウイルスペプチドを送達して腫瘍部位で放出するように抗体を改変することができ、かくて定住抗ウイルスＴ細胞が腫瘍細胞を特異的に死滅させることができるようになることを証明した。本発明者らは、１５のＨＬＡ−Ａ２＋腫瘍細胞系（ＴＨＰ−１（急性単球性白血病）；Ａ４９８（腎細胞癌腫）；ＭＤＡ−ＭＢ−２３１およびＭＣＦ−７（乳房細胞腺癌）；ＮＣＩ−Ｈ５２２（非小細胞肺癌腫）；Ｏｖｃａｒ−３（卵巣腺癌）；Ｃｏｌｏ２０５およびＨＣＴ−１１６（結腸直腸癌腫））をスクリーニングし、コグネイトウイルスペプチドでパルスすると１００％がヒト抗ウイルスＴ細胞によって認識され死滅させられることを証明した（図１２）。さらに、本発明者らは、分子アプローチと細胞アプローチの両方を用いて、免疫優性抗ウイルスＣＤ８＋  Ｔ細胞が様々な人腫瘍内に存在することを実証して、かかるアプローチの理論的解釈を提供した。
【０２２３】
結果
Ｔ細胞エピトープペプチドを臨床利用可能な抗体セツキシマブおよびリツキシマブと共有結合で連結させることにより、抗体−ペプチドエピトープコンジュゲート（ＡＰＥＣ）を生成した。溶解状態のＡＰＥＣも、プレートに結合したＡＰＥＣも、コグネイトＴ細胞を活性化できなかった。健常なＣＤ２０＋  Ｂ細胞結合リツキシマブ−ＡＰＥＣ（ＲＰＥＣ）もＴ細胞をｉｎ  ｖｉｔｒｏで活性化できなかった。しかし、ＣＤ２０＋リンパ腫細胞系は、結合したペプチドのタンパク質分解性放出によってｉｎ  ｖｉｔｒｏでＲＰＥＣに結合されると、Ｔ細胞によって効率的に標的化され得た。これは、差別的腫瘍標的化の証拠となる（図５）。
固形腫瘍モデルとして乳癌を用いて、セツキシマブ−ＡＰＥＣ（ＣＰＥＣ）を使用してＥＧＦ受容体を悪性細胞系ＭＤＡ−ＭＢ−２３１に標的化した。結果は、標的細胞がＣＰＥＣによって結合されたときのＴ細胞認識を明示した（ｐ＜０．０１）（図６）。図７Ｂおよび７Ｃにより、抗Ｍｕｃ１抗体ペプチドコンジュゲートを使用する結腸直腸腺癌細胞系および膵臓癌腫細胞系の標的化成功も実証される。
異種移植マウスモデルを使用するｉｎ  ｖｉｖｏデータは、Ｔ細胞単独またはＣＰＥＣ単独のいずれかで治療したマウスと比較して、ＣＰＥＣおよびＴ細胞で治療したマウスにおける有意な効力の証拠となる（図７Ａを参照されたし）。前記コンジュゲートを腹腔内注射で与え、腫瘍を皮下的に与えるので、これらのデータは、ｉｎ  ｖｉｖｏ血漿安定性の証拠にもなる。
図７Ｄは、ウイルスペプチド配列をそのポリペプチド鎖の一部として含有するタンパク質を使用するＴ細胞の標的化成功を実証するものである。プロテアーゼ認識ドメインおよびＴ細胞エピトープをコードする一本鎖断片Ｖ（ｓｃＦｖ）抗体様構築物を調製し、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞をｉｎ  ｖｉｔｒｏで効率的に標的化することを証明した。
図８Ａは、本発明によるコンジュゲートを使用して癌細胞を選択的に標的化できることを示すものである。ウイルスペプチドとコンジュゲートしているリツキシマブでのリンパ芽球様細胞または健常Ｂ細胞の標識後、健常Ｂ細胞は全く認識されず、これに対してリンパ芽球様細胞は、Ｔ細胞が特異的であるウイルスペプチドの存在下でのみ認識される。
図８Ｂは、本発明によるコンジュゲートの血漿および血清安定性を実証するものである。
図１０Ａは、細胞表面で、全複合体の内在化経由でなく起こるセツキシマブ−ペプチド複合体の作用の機序を実証するものである。標的細胞の化学的固定により、前記複合体の内在化が阻害され、固定細胞を使用する陽性ＩＦＮ−γ応答は、ＡＰＥＣの外部プロセッシングを明示するであろう。結果は、化学的に固定された標的細胞が、それらをセツキシマブ−ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ−プロテアーゼ切断と共にインキュベートすると、標的細胞を化学的に固定しなかったときに見られるのもと同様の、Ｔ細胞によるＩＦＮ−γ生産を誘導する能力を明示することを示す。同様に、化学的に固定した標的細胞は、無関係のＡＰＥＣ（セツキシマブ−ＶＬＥＥＴＳＶＭＬ−プロテアーゼ切断）で標識すると、未処置の標的細胞において見られるものに似て、ＩＦＮ−γ応答を誘導できない。
図１０Ｂは、ペプチドを抗体の代わりに標的化部分として使用できることを実証するものである。受容体ペプチド（ＥＧＦ−ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＡＩＰＶＳＬＲＳＡＡＡＹＣＲＤＹＤＹＤＧＲＹＦＤＣＹ）（配列番号３１４）Ｐｏｎｄｅ  ｅｔ  ａｌ（２０１１）Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ，２１またはＨｅｒ２−ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（ＮＬＶＰＭＶＡＴＶＡＩＰＶＳＬＲＳＡＡＡＦＣＤＧＦＹＡＣＹＭＤＶ）（配列番号３１１）Ｐａｒｋ  ｅｔ  ａｌ（２０００）Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  １８）という名のプロテアーゼ切断配列とウイルスエピトープとを含有するＥＧＦ受容体またはＨｅｒ２／ｎｅｕ受容体のいずれかに直接結合しているペプチドを合成した。いずれかのペプチドで標識した標的細胞は、標的細胞を外因性ウイルスペプチドでパルスしたときに見られるものに似て、ウイルス特異的ＣＤ８＋  Ｔ細胞からのＩＦＮ−γ応答を誘導することができた。いずれかの受容体ペプチドを除去すると、標的細胞はＴ細胞によって認識されなかった。
図１３は、抗−ＥＧＦＲセツキシマブおよびペプチドで形成された抗体ペプチドエピトープ複合体が、このペプチドがプロテアーゼ切断部位を含有したときだけだが、これらの悪性細胞系を標的にするように抗原特異的Ｔ細胞を再標的化できたことを示すものである。
図１４は、抗原特異的Ｔ細胞が腫瘍部位にあること、および他の抗体（例えば、抗ＭＵＣ１抗体ＳＭ３）をこのアプローチに使用できることを示すものである。この図は、健常な細胞と比較して悪性細胞の選択的標的化の証拠にもなる。例えば、抗ＣＤ２０リツキシマブＡＰＥＣは、悪性リンパ腫細胞をｉｎ  ｖｉｔｒｏで効率的に標的化するが、末梢血由来の健常Ｂ細胞には近づかないでいる（図１４Ｃ）。この図は、ＣＤ４＋細胞傷害性Ｔ細胞を使用するＭＨＣクラスＩＩ拘束性ペプチドへの適用性（図１４Ｄ）、およびＡＰＥＣアプローチが標的細胞の抗原プロセッシング能力を必要としないこと（図１４Ｅ）（これは、ペプチド切断が細胞膜で起こっていることを示唆する）も示す。
【０２２４】
考察
この方法での腫瘍標的化は、腫瘍細胞内でのインタクト抗原プロセッシングシステムの必要を迂回する。本発明者らは、プロテアーゼ切断部位のプロセッシングおよびＭＨＣクラスＩ／ＩＩ分子へのペプチドのその後の負荷が、古典的抗原プロセッシング要素の必要なく、細胞外で起こると考えている。
さらに、これらの結果は、異なる抗体へのペプチドのコンジュゲーションにより、乳癌、多発性骨髄腫、急性骨髄性白血病および膵臓癌をはじめとする多くの異なる悪性病変の標的化が可能になることを明示している。したがって、この機序の免疫療法の可能性は、広範囲にわたる。
【０２２５】
異種移植研究
異種移植モデルは、ＮＯＧマウス（ＮＯＤ  Ｒａｇ２−／−γｃ−／−）（Ｍ．Ｉｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  １００，３１７５（２００２））を使用する。標準的な実験室組織培養技術を用いて腫瘍細胞系を成長させ、マトリゲルで皮下注射し、放置して≒７日間、生着させる。ヒトＣＤ４＋およびＣＤ８＋  Ｔ細胞を、標準的な技術を用いて培養し、および健常な研究所ドナーから培養する。１０６Ｔ細胞を各研究マウスに腹腔内注入する。抗体またはＡＰＥＣをその腹腔に注射する。マウスに１２０ｍｇ／ｋｇのルシフェリンを週１回注射し、ＩＶＩＳ  Ｓｐｅｃｔｒｕｍ（Ｃａｌｉｐｅｒ  Ｌｉｆｅｓｃｉｅｎｃｉｅｓ）を使用して細胞の成長および転移性播種をモニターする。増殖動態の定量化を判定し、実験エンドポイントで各器官からの発光シグナルを測定することにより転移を定量する。
【０２２６】
参考文献
Ｂａｒｇｏｕ，Ｒ．，Ｌｅｏ，Ｅ．，Ｚｕｇｍａｉｅｒ，Ｇ．，Ｋｌｉｎｇｅｒ，Ｍ．，Ｇｏｅｂｅｌｅｒ，Ｍ．，Ｋｎｏｐ，Ｓ．，Ｎｏｐｐｅｎｅｙ，Ｒ．，Ｖｉａｒｄｏｔ，Ａ．，Ｈｅｓｓ，Ｇ．，Ｓｃｈｕｌｅｒ，Ｍ．，Ｅｉｎｓｅｌｅ，Ｈ．，Ｂｒａｎｄｌ，Ｃ．，Ｗｏｌｆ，Ａ．，Ｋｉｒｃｈｉｎｇｅｒ，Ｐ．，Ｋｌａｐｐｅｒｓ，Ｐ．，Ｓｃｈｍｉｄｔ，Ｍ．，Ｒｉｅｔｈｍｕｌｌｅｒ，Ｇ．，Ｒｅｉｎｈａｒｄｔ，Ｃ．，Ｂａｅｕｅｒｌｅ，Ｐ．Ａ．，＆Ｋｕｆｅｒ，Ｐ．（２００８）Ｔｕｍｏｒ  ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｂｙ  ｖｅｒｙ  ｌｏｗ  ｄｏｓｅｓ  ｏｆ  ａ  Ｔ  ｃｅｌｌ−ｅｎｇａｇｉｎｇ  ａｎｔｉｂｏｄｙ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３２１，９７４−９７７．
Ｂａｒｇｏｕ  Ｒ，Ｌｅｏ  Ｅ，Ｚｕｇｍａｉｅｒ  Ｇ，ｅｔ  ａｌ（２００８）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３２１（５８９１），９７４−９７７．
Ｂｅｌｌｏｓｉｌｌｏ，Ｂ．，Ｖｉｌｌａｍｏｒ，Ｎ．，Ｌｏｐｅｚ−Ｇｕｉｌｌｅｒｍｏ，Ａ．，Ｍａｒｃｅ，Ｓ．，Ｅｓｔｅｖｅ，Ｊ．，Ｃａｍｐｏ，Ｅ．，Ｃｏｌｏｍｅｒ，Ｄ．，＆Ｍｏｎｔｓｅｒｒａｔ，Ｅ．（２００１）Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｃｅｌｌ  ｄｅａｔｈ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｂｙ  ｒｉｔｕｘｉｍａｂ  ｉｎ  Ｂ−ｃｅｌｌｌｙｍｐｈｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ  ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ  ｉｓ  ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｂｙ  ａ  ｃａｓｐａｓｅ−ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ  ｔｈｅ  ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｒｅａｃｔｉｖｅ  ｏｘｙｇｅｎ  ｓｐｅｃｉｅｓ．Ｂｌｏｏｄ  ９８，２７７１−２７７７．
Ｂａｅｕｅｒｌｅ  ＰＡ，Ｒｅｉｎｈａｒｄｔ  Ｃ．（２００９）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ６９（１２），４９４１−４９４４．
Ｂｅｒｔｉｌａｃｃｉｏ，Ｍ．Ｔ．，Ｓｃｉｅｌｚｏ，Ｃ．，Ｓｉｍｏｎｅｔｔｉ，Ｇ．，Ｐｏｎｚｏｎｉ，Ｍ．，Ａｐｏｌｌｏｎｉｏ，Ｂ．，Ｆａｚｉ，Ｃ．，Ｓｃａｒｆｏ，Ｌ．，Ｒｏｃｃｈｉ，Ｍ．，Ｍｕｚｉｏ，Ｍ．，Ｃａｌｉｇａｒｉｓ−Ｃａｐｐｉｏ，Ｆ．，＆Ｇｈｉａ，Ｐ．（２０１０）Ａ  ｎｏｖｅｌ  Ｒａｇ２−／−ｇａｍｍａｃ−／−−ｘｅｎｏｇｒａｆｔ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ＣＬＬ．Ｂｌｏｏｄ  １１５，１６０５−１６０９．
Ｂｏｎｎｅｔ，Ｄ．＆Ｄｉｃｋ，Ｊ．Ｅ．（１９９７）Ｈｕｍａｎ  ａｃｕｔｅ  ｍｙｅｌｏｉｄ  ｌｅｕｋｅｍｉａ  ｉｓ  ｏｒｇａｎｉｚｅｄ  ａｓ  ａ  ｈｉｅｒａｒｃｈｙ  ｔｈａｔ  ｏｒｉｇｉｎａｔｅｓ  ｆｒｏｍ  ａ  ｐｒｉｍｉｔｉｖｅ  ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ  ｃｅｌｌ．Ｎａｔ．Ｍｅｄ．３，７３０−７３７．
Ｃｌａｒｋｅ，Ｗ．Ｔ．＆Ｍａｒｋｓ，Ｐ．Ｗ．（２０１０）Ｇｅｍｔｕｚｕｍａｂ  ｏｚｏｇａｍｉｃｉｎ：ｉｓ  ｔｈｅｒｅ  ｒｏｏｍ  ｆｏｒ  ｓａｌｖａｇｅ？    Ｂｌｏｏｄ  １１６，２６１８−２６１９．
Ｉｒｖｉｎｅ，Ｄ．Ｊ．，Ｐｕｒｂｈｏｏ，Ｍ．Ａ．，Ｋｒｏｇｓｇａａｒｄ，Ｍ．，＆Ｄａｖｉｓ，Ｍ．Ｍ．（２００２）Ｄｉｒｅｃｔ  ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｌｉｇａｎｄ  ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ．Ｎａｔｕｒｅ  ４１９，８４５−８４９．
Ｌｏｉｓｅｌ，Ｓ．，Ｓｔｅｒ，Ｋ．Ｌ．，Ｑｕｉｎｔｉｎ−Ｒｏｕｅ，Ｉ．，Ｐｅｒｓ，Ｊ．Ｏ．，Ｂｏｒｄｒｏｎ，Ａ．，Ｙｏｕｉｎｏｕ，Ｐ．，＆Ｂｅｒｔｈｏｕ，Ｃ．（２００５）Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ  ｏｆ  ａ  ｎｏｖｅｌ  ｈｕｍａｎ  Ｂ−ＣＬＬ−ｌｉｋｅ  ｘｅｎｏｇｒａｆｔ  ｍｏｄｅｌ  ｉｎ  ｎｕｄｅ  ｍｏｕｓｅ．Ｌｅｕｋ．Ｒｅｓ．２９，１３４７−１３５２．
Ｌｕｔｔｅｒｂｕｅｓｅ，Ｒ．，Ｒａｕｍ，Ｔ．，Ｋｉｓｃｈｅｌ，Ｒ．，Ｌｕｔｔｅｒｂｕｅｓｅ，Ｐ．，Ｓｃｈｌｅｒｅｔｈ，Ｂ．，Ｓｃｈａｌｌｅｒ，Ｅ．，Ｍａｎｇｏｌｄ，Ｓ．，Ｒａｕ，Ｄ．，Ｍｅｉｅｒ，Ｐ．，Ｋｉｅｎｅｒ，Ｐ．Ａ．，Ｍｕｌｇｒｅｗ，Ｋ．，Ｏｂｅｒｓｔ，Ｍ．Ｄ．，Ｈａｍｍｏｎｄ，Ｓ．Ａ．，Ｂａｅｕｅｒｌｅ，Ｐ．Ａ．，＆Ｋｕｆｅｒ，Ｐ．（２００９）Ｐｏｔｅｎｔ  ｃｏｎｔｒｏｌ  ｏｆ  ｔｕｍｏｒ  ｇｒｏｗｔｈ  ｂｙ  ＣＥＡ／ＣＤ３−ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｓｉｎｇｌｅ−ｃｈａｉｎ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｓ  ｔｈａｔ  ａｒｅ  ｎｏｔ  ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅｌｙ  ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ  ｂｙ  ｓｏｌｕｂｌｅ  ＣＥＡ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．３２，３４１−３５２．
Ｍａｙｅｓ，Ｓ．，Ｂｒｏｗｎ，Ｎ．，＆Ｉｌｌｉｄｇｅ，Ｔ．Ｍ．（２０１１）Ｎｅｗ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｄｒｕｇ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ  ｆｏｒ  ｌｙｍｐｈｏｍａ．Ｅｘｐｅｒｔ．Ｏｐｉｎ．ＢｉｏＩ．Ｔｈｅｒ．
Ｍｏｏｒｅ  ＰＡ，Ｚｈａｎｇ  Ｗ，Ｒａｉｎｅｙ  ＧＪ，ｅｔ  ａｌ（２０１１）Ｂｌｏｏｄ  ２８；１１７（１７），４５４２−５１．
Ｓｃｈｍｉｅｇｅｌ，Ｗ．，Ｓｃｈｍｉｅｌａｕ，Ｊ．，Ｈｅｎｎｅ−Ｂｒｕｎｓ，Ｄ．，Ｊｕｈｌ，Ｈ．，Ｒｏｅｄｅｒ，Ｃ．，Ｂｕｇｇｉｓｃｈ，Ｐ．，Ｏｎｕｒ，Ａ．，Ｋｒｅｍｅｒ，Ｂ．，Ｋａｌｔｈｏｆｆ，Ｈ．，＆Ｊｅｎｓｅｎ，Ｅ．Ｖ．（１９９７）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｅｐｉｄｅｒｍａｌ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｐｒｏｖｉｄｅｓ  ａｎ  ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｐｐｒｏａｃｈ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｃａｎｃｅｒ．Ｐｒｏｃ．ＮａｔＩ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ  ＵＳＡ，９４，１２６２２−１２６２６．
Ｐａｒｋ  ＢＷ，Ｚｈａｎｇ  ＨＴ，Ｗｕ  Ｃ，Ｂｅｒｅｚｏｖ  Ａ，Ｚｈａｎｇ  Ｘ，Ｄｕａ  Ｒ，Ｗａｎｇ  Ｑ，Ｋａｏ  Ｇ，Ｏ’Ｒｏｕｒｋｅ  ＤＭ，Ｇｒｅｅｎｅ  ＭＩ，Ｍｕｒａｌｉ  Ｒ．（２０００）．Ｒａｔｉｏｎａｌｌｙ  ｄｅｓｉｇｎｅｄ  ａｎｔｉ−ＨＥＲ２／ｎｅｕ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｍｉｍｅｔｉｃ  ｄｉｓａｂｌｅｓ  Ｐ１８５ＨＥＲ２／ｎｅｕ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｋｉｎａｓｅｓ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ａｎｄ  ｉｎ  ｖｉｖｏ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１８（２），１９４−８
Ｐｏｎｄｅ  ＤＥ，Ｓｕ  Ｚ，Ｂｅｒｅｚｏｖ  Ａ，Ｚｈａｎｇ  Ｈ，Ａｌａｖｉ  Ａ，Ｇｒｅｅｎｅ  ＭＩ，Ｍｕｒａｌｉ  Ｒ．（２０１１）Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ａｎｔｉ−ＥＧＦ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃｓ（ＡＥＲＰ）ａｓ  ｔｕｍｏｒ  ｉｍａｇｉｎｇ  ａｇｅｎｔ．Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，２１（８），２５５０−３．
Ｓｍａｌｌ  ＥＪ，Ｓｃｈｅｌｌｈａｍｍｅｒ  ＰＦ，Ｈｉｇａｎｏ  ＣＳ，ｅｔ  ａｌ（２００６）Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ  ２４（１９），３０８９−３０９４．
Ｓｔａｅｒｚ  ＵＤ  Ｂｅｖａｎ  ＭＪ．（１９８６）Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ８３（５），１４５３−１４５７．
Ｓｙｋｕｌｅｖ，Ｙ．，Ｊｏｏ，Ｍ．，Ｖｔｕｒｉｎａ，Ｉ．，Ｔｓｏｍｉｄｅｓ，Ｔ．Ｊ．，＆Ｅｉｓｅｎ，Ｈ．Ｎ．（１９９６）Ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｔｈａｔ  ａ  ｓｉｎｇｌｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ−ＭＨＣ  ｃｏｍｐｌｅｘ  ｏｎ  ａ  ｔａｒｇｅｔ  ｃｅｌｌ  ｃａｎ  ｅｌｉｃｉｔ  ａ  ｃｙｔｏｌｙｔｉｃ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ．，４，５６５−５７１．
Ｔｏｓｏｌｉｎｉ，Ｍ．，Ｋｉｒｉｌｏｖｓｋｙ，Ａ．，Ｍｌｅｃｎｉｋ，Ｂ．，Ｆｒｅｄｒｉｋｓｅｎ，Ｔ．，．Ｍａｕｇｅｒ，Ｓ．，Ｂｉｎｄｅａ，Ｇ．，Ｂｅｒｇｅｒ，Ａ．，Ｂｒｕｎｅｖａｌ，Ｐ．，Ｆｒｉｄｍａｎ，Ｗ．Ｈ．，Ｐａｇｅｓ，Ｆ．，＆Ｇａｌｏｎ，Ｊ．（２０１１）Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｉｍｐａｃｔ  ｏｆ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  ｃｌａｓｓｅｓ  ｏｆ  ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ  Ｔ  ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  ａｎｄ  ｈｅｌｐｅｒ  ｃｅｌｌｓ（Ｔｈｌ，ｔｈ２，ｔｒｅｇ，ｔｈ１７）ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ  ｃａｎｃｅｒ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，７１，１２６３−１２７１．
Ｚｈｏｕ，Ｘ．，Ｈｕ，Ｗ．，＆Ｑｉｎ，Ｘ．（２００８）Ｔｈｅ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  ａｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｒｉｔｕｘｉｍａｂ  ｆｏｒ  Ｂ−ｃｅｌｌ  ｌｙｍｐｈｏｍａ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅｒａｐｙ．Ｏｎｃｏｌｏｇｉｓｔ．，１３，９５４−９６６．
【図１】
2014509605.tif 000032
【図２】
2014509605.tif 000033
【図３】
2014509605.tif 000034
【図４−１】
2014509605.tif 000035
【図４−２】
2014509605.tif 000036
【図５】
2014509605.tif 000037
【図６−１】
2014509605.tif 000038
【図６−２】
2014509605.tif 000039
【図７−１】
2014509605.tif 000040
【図７−２】
2014509605.tif 000041
【図８】
2014509605.tif 000042
【図９】
2014509605.tif 000043
【図１０】
2014509605.tif 000044
【図１１】
2014509605.tif 000045
【図１２】
2014509605.tif 000046
【図１３−１】
2014509605.tif 000047
【図１３−２】
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【図１４−１】
2014509605.tif 000049
【図１４−２】
2014509605.tif 000050
【図１４−３】
2014509605.tif 000051
【配列表】
2014509605000001.app
【国際調査報告】
2014509605.tif 000052
2014509605.tif 000053
2014509605.tif 000054