(57)【要約】  広いスペクトルの抗菌、抗寄生虫、抗真菌活性、および／または植物抗病原性（ａｎｔｉｐａｔｈｏｇｅｎ）を有する少なくとも１種の精油と、任意に、少なくとも１種の抗生物質と、任意に、薬学的に許容される担体とを含む組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子を開示している。この組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子を使用することによって、感染症、特に細菌、寄生虫、真菌、および／または植物感染を治療する方法も開示している。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
広域スペクトルの抗菌活性、抗寄生虫活性、抗真菌活性、望ましくない植生活性、雑草活性、および／または植物抗病原性活性を有する少なくとも１種の精油または精油抽出物と、任意に、少なくとも１種の抗生物質と、任意に、薬学的に許容される担体とを含む、ナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
【請求項２】
前記少なくとも１種の抗生物質が、ベータ−ラクタミン系抗生物質、アミノシド系抗生物質、フルロキノロン系抗生物質、ホスホマイシン系抗生物質、グリコペプチド系抗生物質、ニトロフラン系抗生物質、リファマイシン系抗生物質、マクロライド系抗生物質、ニトロ−イミダゾール系抗生物質、スルファミド、トリメトプリム系抗生物質、シネルギスチン（ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｎ）系抗生物質、たとえばプリスチナマイシン、それらの薬学的に許容される塩、ならびにそれらの混合物からなる群から選択される、請求項１に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
【請求項３】
前記ベータ−ラクタミン系抗生物質が、アモキシシリン、クラブラン酸、ピペラシリンであって、タゾバクタム、クロキサシリン、セフロキシム、セフォタキシム、もしくはイムペネムに随伴していてよいか、もしくは随伴していなくてよいものであるか、または前記アミノシド系抗生物質が、ゲンタマイシンもしくはアミカシンであるか、または前記フルロキノロン系抗生物質が、シプロフロキサシンもしくはオフロキサシンであるか、または前記グリコペプチド系抗生物質が、バンコマイシンもしくはテイコプラニンであるか、または前記マクロライド系抗生物質が、ジョサマイシンもしくはクラリスロマイシンであるか、または前記シネルギスチン系抗生物質が、プリスチナマイシンもしくはそれらの薬学的に許容される塩、ならびにそれらの混合物である、請求項２に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
【請求項４】
少なくとも１種の精油が、オレガノに由来する精油、スペインまたはモロッコまたはバルカン諸国産のオレガノに由来する精油、タイムに由来する精油または精油抽出物、チョウジに由来する精油または精油抽出物、チョウジの葉に由来する精油または精油抽出物、セイボリーに由来する精油または精油抽出物、ラヴィンサラに由来する精油または精油抽出物、ゲッケイジュの葉に由来する精油または精油抽出物、オウシュウアカマツに由来する精油または精油抽出物、ユーカリに由来する精油または精油抽出物、ペーパーバークに由来する精油または精油抽出物、グリーンペーパーバークに由来する精油または精油抽出物、レッドタイムに由来する精油または精油抽出物、ケイヒに由来する精油または精油抽出物、シナモンに由来する精油または精油抽出物、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項１から３のいずれか一項に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
【請求項５】
前記精油または精油抽出物が、
オレガノに由来する精油または精油抽出物約５〜約４０重量％；および／または
タイムに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜約２５重量％；および／または
チョウジに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜７５重量％；および／または
セイボリーに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜２０重量％；および／または
ラヴィンサラに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜２０重量％；および／または
ゲッケイジュの葉に由来する精油または精油抽出物約１重量％〜２０重量％；および／または
オウシュウアカマツに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜２０重量％；および／または
ペーパーバークに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜２０重量％；および／または
シナモンに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜３０重量％
を含むか、またはそれらからなる、請求項１から４のいずれか一項に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
【請求項６】
前記精油または精油抽出物が、
オレガノに由来する精油または精油抽出物約２０重量％〜約３０重量％；および／または
タイムに由来する精油または精油抽出物約３重量％〜約１４重量％；および／または
チョウジに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜７５重量％；および／または
セイボリーに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜１２重量％；および／または
ラヴィンサラに由来する精油または精油抽出物約４重量％〜１５重量％；および／または
ゲッケイジュの葉に由来する精油または精油抽出物約４重量％〜１５重量％；および／または
オウシュウアカマツに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜１２重量％；および／または
ペーパーバークに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜１２重量％；および／または
シナモンに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜１５重量％
を含むか、またはそれらからなる、請求項１から５のいずれか一項に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
【請求項７】
前記精油が、
オレガノに由来する精油または精油抽出物約２５重量％；および／または
タイムに由来する精油または精油抽出物約９重量％；および／または
チョウジに由来する精油または精油抽出物約７０重量％；および／または
セイボリーに由来する精油または精油抽出物約６重量％；および／または
ラヴィンサラに由来する精油または精油抽出物約９重量％；および／または
ゲッケイジュの葉に由来する精油または精油抽出物約９重量％；および／または
オウシュウアカマツに由来する精油または精油抽出物約６重量％；および／または
ペーパーバークに由来する精油または精油抽出物約６重量％；および／または
シナモンに由来する精油または精油抽出物約１５重量％
を含むか、それらから本質的になるか、またはそれらからなる、請求項１から６のいずれか一項に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
【請求項８】
オレガノに由来する精油約１５重量％、チョウジに由来する精油約７０重量％、およびシナモンに由来する精油約１５重量％と、任意に、少なくとも１種の精油と共にカプセル化されているかもしくはそれに随伴している少なくとも１種の抗生物質とを含む、あるいは、チョウジまたはチョウジの葉に由来する精油抽出物約６３．２８％％、シナモンに由来する精油抽出物１１．８６％、ケイヒに由来する精油抽出物１３．５６％、ならびにオレガノ、チョウジ、および／またはシナモンに由来する精油抽出物１１．３％を含むか、それらから本質的になるか、またはそれらからなる組成物を含むか、それから本質的になるか、またはそれからなる、請求項１から８のいずれか一項に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
【請求項９】
カルバクロール約３３．２０％または７０％（カルバクロール１４．７単位グラム）を有するモロッコまたはバルカン諸国産のオレガノに由来する精油、オイゲノール８２．５７％（オイゲノール７０．６単位グラム）を有するマダガスカル産のチョウジの葉またはチョウジに由来する精油、およびトランスシンナムアルデヒド７７．５７％（トランスシンナムアルデヒド１４．７単位グラム）を有する中国産のシナモンに由来する精油を含む組成物を含む組成物、カプセル化組成物および／またはナノカプセルを含むか、それらからなるか、またはそれらからなる、請求項１から８のいずれか一項に記載のナノ粒子、カプセル化組成物。
【請求項１０】
オレガノに由来するカルバクロール抽出物約１１．８６％（カルバクロール５．２５単位グラム）、マダガスカル産のチョウジの葉またはチョウジに由来する精油抽出物であるオイゲノール６３．２８％（オイゲノール５４．１０単位グラム）、中国産のシナモンに由来する精油抽出物であるトランスシンナムアルデヒド抽出物１３．５６％（トランスシンナムアルデヒド２．５７単位グラム）、ならびにオレガノ、チョウジ、および／またはシナモンに由来するトランス−β−カリオフィレン１１．３％（トランス−β−カリオフィレン１．８０単位グラム）である、４種の精油抽出物を有する組成物から本質的になるか、またはそれからなる、ナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
【請求項１１】
前記ナノ粒子が、１ｎｍ〜１００ｎｍのサイズを有し、前記精油（複数可）１００μｌ〜５００μｌがカプセル化されているか、または前記脂質ナノカプセルが２０ｎｍ〜２００ｎｍのサイズを有し、前記精油（複数可）１００μｌ〜５００μｌがカプセル化されている、請求項１から１０のいずれか一項に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
【請求項１２】
前記組成物中に存在する前記少なくとも１種の精油（複数可）または少なくとも１種の精油抽出物がそれぞれ、０．０１重量％〜２重量％、０．０５重量％〜０．５重量％、０．０５重量％〜１重量％、０．５重量％〜８０重量％、または０．２重量％〜２５重量％の範囲の濃度でカプセル化されている、請求項１から１１のいずれか一項に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
【請求項１３】
前記薬学的に許容される担体が、生理食塩水、または緩衝生理食塩水である、請求項１から１２のいずれか一項に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
【請求項１４】
前記ナノ粒子、前記カプセル化組成物、および／または組成物が、医薬品として投与するためにさらに配合されている、請求項１から１３のいずれか一項に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
【請求項１５】
環境中における、感染因子および／または望ましくない植生もしくは雑草の量、特に細菌、寄生虫、真菌、望ましくない植生もしくは雑草、および／または植物病原体の量を低減および／または阻止および／または制限および／または遅延させる方法であって：
請求項１から１４のいずれか一項に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物を、前記感染因子（複数可）を低減および／または阻止および／または制限および／または遅延させる必要のある前記環境の周囲に散布することを含む方法。
【請求項１６】
低減されるべき細菌が、スタフィロコッカス科からの細菌、腸球菌科からの細菌、クロストリジウム科からの細菌、連鎖球菌科からの細菌、アエロコッカス科からの細菌、球菌科からの細菌、ノカルジア科からの細菌、リステリア科からの細菌、コリネバクテリウム科からの細菌、およびプロピオニバクテリウム科からの細菌の群から選択されるグラム陽性菌である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記寄生虫が、原性動物および蠕虫感染をもたらし、かつ／または皮膚、爪、または粘膜上に存在する表層真菌もしくは酵母菌感染であるか、または深部の全身真菌感染であってよい、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、望ましくない植生、雑草、および／または植物病原体を感染、特に、細菌感染、寄生虫感染、真菌感染、および／または植物病原体について予防または治療する方法であって、そのような治療を必要とする哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、および／または植物に、請求項１から１４のいずれか一項に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物を投与することを含む方法。
【請求項１９】
前記細菌、寄生虫、および／または真菌感染が、院内感染に由来する、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記寄生虫が、原性動物および蠕虫感染をもたらすか、または皮膚、爪、もしくは粘膜上に存在する表層真菌もしくは酵母菌感染であるか、または深部の全身真菌感染であってよい、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記哺乳類がヒトである、請求項１８から２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記ナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物を、経口で、または粘膜で、静脈内で、またはエアゾール剤を介して、または局所で、またはディフューザーを介して投与する、請求項１８から２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、および／または植物を感染、特に、細菌感染、寄生虫感染、真菌感染、および／または植物感染について治療する方法であって、少なくとも１種の精油を、ナノ粒子および／または脂質ナノカプセルでカプセル化し、任意に、前記少なくとも１種のカプセル化精油または少なくとも１種の精油抽出物を、少なくとも１種の抗生物質に随伴させて配合して、精油または少なくとも１種の精油抽出物と抗生物質との配合物を形成し、前記配合物を、そのような治療を必要とする哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、および昆虫、および／または植物に投与することを含む方法。
【請求項２４】
哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、および／または植物を感染、特に、細菌感染、寄生虫感染、真菌感染、および／または植物感染について治療する方法であって、少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を、ナノ粒子および／または脂質ナノカプセルでカプセル化し、前記ナノ粒子および／または脂質ナノカプセルと少なくとも１種の抗生物質とを、そのような治療を必要とする哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、および／または植物に投与することを含む方法。
【請求項２５】
前記ナノ粒子および／または前記脂質ナノカプセルと、前記少なくとも１種の抗生物質とを一緒に投与する、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を初めに投与し、前記少なくとも１種の抗生物質を前記少なくとも１種の精油の後に投与する、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記少なくとも１種の抗生物質を初めに投与し、前記少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を前記少なくとも１種の抗生物質の後に投与する、請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
精油の有効性を増大させる方法であって、少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を、１ｎｍ〜２００ｎｍのサイズを有するナノ粒子、および／または２０ｎｍ〜２００ｎｍのサイズを有する脂質ナノカプセルでカプセル化することを含む方法。
【請求項２９】
医薬品中の抗生物質の量を低減する方法であって、請求項１から１４のいずれか一項に記載の少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を、前記少なくとも１種の抗生物質の配合物に加えることを含む方法。
【請求項３０】
哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、および昆虫における感染、特に細菌感染、寄生虫感染、および／または真菌感染を治療するための医薬品を製造するための、請求項１から１４のいずれか一項に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物の使用。
【請求項３１】
前記細菌感染が、スタフィロコッカス科からの細菌、腸球菌科からの細菌、クロストリジウム科からの細菌、連鎖球菌科からの細菌、アエロコッカス科からの細菌、球菌科からの細菌、乳酸菌科からの細菌、ノカルジア科からの細菌、リステリア科からの細菌、コリネバクテリウム科からの細菌、バシラス科からの細菌、プロピオニバクテリウム科からの細菌の群から選択されるグラム陽性菌から生じている、請求項３０に記載の使用。
【請求項３２】
前記細菌、寄生虫、および／または真菌感染が院内感染である、請求項３０または３１に記載の使用。
【請求項３３】
前記寄生虫が、原性動物および蠕虫感染をもたらすか、または皮膚、爪、もしくは粘膜上に存在する表層真菌感染もしくは酵母菌感染であるか、または深部の全身真菌感染であってよい、請求項３０から３２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３４】
植物病原体、および／または望ましくない植生、および／または雑草を治療するための、請求項１から１３のいずれか一項に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物の使用。
【請求項３５】
環境中の、細菌、寄生虫、真菌、望ましくない植生、雑草、および／または植物病原体の量を低減および／または阻止および／または制限および／または遅延させる方法であって、請求項１から１３のいずれか一項に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物、またはホスファチジルコリン６９％のダイズレシチンの混合物、カプリル酸−カプリン酸トリグリセリド、ならびに遊離ポリエチレングリコール６６０およびポリエチレングリコール６６−ヒドロキシステアレートの混合物を含む中空脂質ナノカプセルを前記環境の周囲に散布することを含む方法。
【請求項３６】
物体上の、細菌、寄生虫、真菌、望ましくない植生、雑草、および／または植物病原体の量を低減および／または阻止および／または制限および／または遅延させる方法であって、請求項１から１３のいずれか一項に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物、またはホスファチジルコリン６９％のダイズレシチンの混合物、カプリル酸−カプリン酸トリグリセリド、ならびに遊離ポリエチレングリコール６６０およびポリエチレングリコール６６−ヒドロキシステアレートの混合物を含む中空脂質ナノカプセルを前記物体上またはその周囲に設置することを含む方法。
【請求項３７】
哺乳類、魚類、鳥類、爬虫類、および／または昆虫において腸内叢を維持する方法であって、哺乳類、魚類、鳥類、爬虫類、および／または昆虫に、請求項１から１４のいずれか一項に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物と、前記ナノ粒子、および／または前記カプセル化組成物に随伴しているか、またはそれにカプセル化されているかのいずれかの少なくとも１種の抗生物質とを投与することを含む方法。
【請求項３８】
哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、および／または昆虫において腸内叢を維持するための、請求項１から１３のいずれか一項に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物の使用。
【請求項３９】
細菌耐性を制御するための、請求項１から１４のいずれか一項に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物と、少なくとも１種の抗生物質との使用。
【請求項４０】
望ましくない植生および／または雑草を治療するための、請求項１から１３のいずれか一項に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、広いスペクトルの抗菌活性を有する少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物と、任意に、精油に随伴しているか、または精油もしくは少なくとも１種の精油抽出物と共にナノカプセルまたはナノ粒子中にカプセル化されている少なくとも１種の抗生物質と、任意に、薬学的に許容される担体とを含む組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子に関する。少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を含有する組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子を使用することによって、細菌感染、寄生虫感染、真菌感染、望ましくない植生もしくは雑草、および／または植物病原体を治療する方法も開示する。
【背景技術】
【０００２】
院内感染は、患者が入院している間に獲得する感染、またはナーシングホームなどの急性病治療施設以外の機関で獲得される感染を包含する何らかの健康管理に関連する感染である。それらは、新たに獲得され、入院から少なくとも４８時間後に同定される感染であるので、健康管理施設に入所する前に得られた感染は、院内の定義からは事実上、除外される。
【０００３】
最も一般的な院内感染は、尿路感染、外科手術部位の感染、肺炎、および中心血管感染が原因の原発性血流感染であり、後者は、留置中心血管カテーテルの使用によって引き起こされる。
【０００４】
フランスの病院に入院している患者のうちの６．９％、フランス以外の欧州の病院に入院している患者のうちの８〜１０％、および米国の病院に入院している患者のうちの１０％は、その滞在期間中に少なくとも１種の院内感染にかかる。それによって毎年、フランスでは約４，２００人が死亡し、欧州では５０，０００が死亡し、米国では９９，０００人が死亡する。さらに、患者は入院を、院内感染の種類に応じて４〜２４日間はどうしても延長しなければならない。
【０００５】
院内感染は、かなり経費がかかる。米国における院内感染の直接的な経費は、１年当たり約４５億ドルと推定される。英国では、１つの健康管理ユニットのための経費は、１年当たり約３６０万ポンドと推定される。
【０００６】
抗生物質、特に抗菌薬の過剰消費が、院内感染の原則的な原因である。特に病院内での抗生物質の継続的な利用によって、ある種の抗生物質に対して耐性がある細菌に有利であり、ある患者から他の患者へと伝染し得る多剤耐性の菌株に寄与する選択圧が生じている。場合によっては、この現象が、当初は使用されて細菌感染を成功裏に治療した抗生物質での治療を妨げている。他にも、あと数カ年のうちに、多くの抗生物質が細菌耐性によって、細菌感染を治療する効果がなくなるであろうことが知られている。加えて、医薬品工業は、過去１０年間、数種の抗生物質しか市場に出せなかった。
【０００７】
細菌、寄生虫、および真菌における細胞伝達は、個体群密度に依存して生じ、自己誘導物質と呼ばれる小さなフェロモン様分子の産生と、それに対する応答とに基づく。細胞間シグナル伝達経路のこの形態は、定足数感知として知られており、これは、代謝および行動活性を最適化する同じ種の間での伝達手段である。定足数感知によって調節される遺伝子は、病原性因子だけでなく、代謝プロセスに関与する他のタンパク質もコードする。
【０００８】
精油の親油性が、親水性媒体へのその生体分散性（biodisperability）のための主な欠点である。しかしながら、微生物の膜は親油性部位を有し、そこでは、精油は好ましい相互作用環境にある。フィルムが、微生物の表面上で生じ得て、微生物同士で伝達する微生物の能力を低下させる仲介物として作用する。結果として、このことによって、バイオフィルムを形成する微生物の能力が低下する。
【０００９】
伝統的に、定足数感知は、微生物が、単細胞では非効率であろうバイオフィルム形成などのプロセスを調整するか、または多すぎる微生物が小さすぎる領域でコロニー形成するのを妨げるのに役立つと考えられていた。しかしながら最近では、定足数探求は、極めて密閉されている空間に限られている単細胞に存在することが発見されている。
【００１０】
精油は、種子、根部、樹皮、木材、葉、苗条、または皮などの植物の種々の部分で見出され得る、芳香族揮発性物質が濃縮された疎水性液体である。これらは一般に、植物の分泌細胞、腺管および樹脂管で産生および貯蔵される。これらは植物から、圧搾、蒸留、抽出、吸収を包含する様々なプロセスによって、または圧力および冷浸を適用することによって得ることができる。
【００１１】
精油は、駆虫薬、殺虫薬、殺真菌薬などの多くの用途で、医薬品で、化粧品用の組成物で使用することができる。精油は、細菌細胞壁、細胞膜代謝、およびタンパク質合成に対する様々な成分の相乗的組合せ作用によって、殺菌薬として有効である。
【００１２】
たとえばＷＯ２００９／０４３９８７号は、抗感染症薬、特に殺菌薬として使用される、抗生物質と、少なくとも１種の精油とを含有する組成物を記載している。その有効性のインビボおよびインビトロ適用が、その特許出願において様々な細菌感染について証明されている。
【００１３】
リポソーム、ナノカプセル、ナノスフェアー、およびナノエマルションである活性成分の輸送を可能にする３種の超顕微鏡的仲介物が存在する。
【００１４】
リポソームは、一般に球形で、１つ以上の脂質壁から形成されている顕微鏡的ベシクルである。壁は脂質分子から調製されていて、これは、二分子膜を形成する傾向と、その表面積を最小化する傾向との両方を有する。リポソームを作る脂質分子は、親水性および親油性部分を有する。水にさらされると、脂質分子は、１つ以上の二分子膜を形成し、その際、各層中の分子の脂質末端は、膜の中心部に向けられていて、反対側の極性末端は、二分子膜のそれぞれ内側および外側表面を形成する。したがって、膜の両側は、親水性表面であり、膜内部は、親油性媒体を含む。
【００１５】
ナノスフェアーは、固体の球から成るマトリックス形の構造であり、その中に、活性成分が捕捉または溶解されている。
【００１６】
ナノカプセルは、一般に高分子の性質を有するエンベロープを含むベシクルであり、活性成分は、シェル内のエンベロープによって限定されている核中に含有されているか、またはベシクルのエンベロープ上に吸着されているようである。
【００１７】
ナノエマルションは、１０ｎｍ〜２００ｎｍの範囲内のサイズを有する水中油型または油中水型などの非常に小さな液滴の分散液である。これらは多くの場合に、乳化される系の非常に微細な分画を促進する超音波または高圧乳化分散などの高エネルギー法を使用して配合される。ナノエマルションは他にも、自発乳化または転相温度などの低エネルギー法を使用して得ることができる。
【００１８】
リポソームは、薬物の送達の際に、いくつかの重大な欠点を有する。それというのも、それらは、親油性薬物をカプセル化する能力が低く、ヒトにおいて使用するためには潜在的に毒性である有機溶媒を必要とするプロセスを介して製造され、漏れやすく、生物学的流体中で、より一般的には水溶液中で不安定であるためである。
【００１９】
その多くは塩析のプロセスによって得られるナノスフェアーも、大量のアセトンおよび塩、長時間の精製プロセス、プロセスで使用される塩と活性成分との間の非相容性の可能性、およびいずれの種類の投与にも適していない大量の残留性ポリビニルアルコールの使用などの問題を有する。
【００２０】
ナノカプセルおよびナノエマルションは他にも、その調製において障害を示す。それというのも、大量の界面活性剤および補助界面活性剤を使用し、それらは、ヒトでの使用において潜在的な毒性を示し得るためである。さらに、その配合物は、カプセル化された活性成分の化学的および生物学的活性を変更し得る高エネルギー法を必要とし得る。低エネルギー法で配合すると、関連懸濁液は、主にオストワルド熱成に関連して、運動論的不安定性を被る。
【００２１】
欧州特許第１  ２６５  ６９８（Ｂ１）号は、室温で液体または半固体である、脂質核を有する脂質ナノカプセル、これらのナノカプセルを調製する方法、および医薬品としてのその使用を記載している。
【００２２】
ＷＯ２００９／００４２１４（Ａ２）号は、活性成分がカプセルの内部でカプセル化されていて、転相温度法によって調製されるナノカプセルを調製する方法を記載している。
【００２３】
当技術分野では、感染、望ましくない植生もしくは雑草、および／または植物病原体、より具体的には細菌感染、寄生虫感染、真菌感染、望ましくない植生もしくは雑草、および／または植物病原体を治療するために使用することができる精油または精油抽出物を提供することが必要とされており、その際、より医学的に有効であるか、またはより少量で使用する場合に有効であるように、精油または精油抽出物を配合する。他にも、この技術分野では、相乗効果をもたらす精油または精油抽出物のための送達系を提供することが必要とされている。
【００２４】
さらに他の本発明の目的は、細菌、寄生虫、真菌の病原体、望ましくない植生もしくは雑草、および／または植物病原体を包絡することによって、定足数感知による病原体の病毒力を低下および／または制限および／または遅延させる方法を提供することである。
【００２５】
さらに他の目的では、本発明は、外側フィルムがナノカプセル上で機械的に形成されて、それが細菌、寄生虫、真菌の病原体、望ましくない植生もしくは雑草、および／または植物病原体の膜の親油性部位と接触する、ナノカプセルまたはナノ粒子中にカプセル化されている精油または精油抽出物を提供する。
【００２６】
本発明の概要、好ましい態様の記載、および特許請求の範囲に明示されているとおり、この必要性および他の目的は、本発明によって達成される。
【発明の概要】
【００２７】
本発明は、本明細書に記載されているとおりの広域スペクトルの抗菌活性、抗寄生虫活性、抗真菌活性、望ましくない植生活性、雑草活性、および／または植物病原性活性を有する少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を含むか、それらから本質的になるか、またはそれらからなる組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子に関する。
【００２８】
本発明は他にも、本明細書に記載されているとおりの広域スペクトルの抗菌活性、抗寄生虫活性、抗真菌活性、望ましくない植生活性、雑草活性、および／または植物病原性活性を有する少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物と、任意に、少なくとも１種の精油に随伴しているか、またはそれと共にカプセル化されている本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質と、任意に、薬学的に許容される担体とを含むか、それらから本質的になるか、またはそれらからなる組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子に関する。
【００２９】
組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子中で使用することができる少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物には、オレガノに由来する精油または精油抽出物、スペインまたはモロッコまたはバルカン諸国産のオレガノに由来する精油または精油抽出物、タイムに由来する精油または精油抽出物、チョウジに由来する精油または精油抽出物、チョウジの葉に由来する精油または精油抽出物、セイボリーに由来する精油または精油抽出物、ラヴィンサラ（ｒａｖｉｎｔｓａｒａ）に由来する精油または精油抽出物、ゲッケイジュの葉に由来する精油または精油抽出物、オウシュウアカマツに由来する精油または精油抽出物、ユーカリに由来する精油または精油抽出物、ペーパーバーク（ｐａｐｅｒ ｂａｒｋ）に由来する精油または精油抽出物、グリーンペーパーバーク（ｇｒｅｅｎ ｐａｐｅｒ ｂａｒｋ）に由来する精油または精油抽出物、レッドタイム（ｒｅｄ ｔｈｙｍｅ）に由来する精油または精油抽出物、キダチハッカに由来する精油または精油抽出物、ケイヒに由来する精油または精油抽出物、およびシナモンに由来する精油または精油抽出物が包含される。
【００３０】
他の態様では、本発明は、カルバクロール約３３．２０％または７０％（カルバクロール１４．７単位グラム）を有するモロッコまたはバルカン諸国産のオレガノに由来する精油、オイゲノール８２．５７％（オイゲノール７０．６単位グラム）を有するマダガスカル産のチョウジの葉またはチョウジに由来する精油、およびトランスシンナムアルデヒド７７．５７％（トランスシンナムアルデヒド１４．７単位グラム）を有する中国産のシナモンに由来する精油を含む組成物を含むか、それから本質的になるか、またはそれからなるカプセル化組成物に関する。
【００３１】
さらに他の態様では、本発明は、オレガノに由来するカルバクロール抽出物約１１．８６％（カルバクロール５．２５単位グラム）、マダガスカル産のチョウジの葉またはチョウジに由来する精油抽出物であるオイゲノール６３．２８％（オイゲノール５４．１０単位グラム）、中国産のシナモンに由来する精油抽出物であるトランスシンナムアルデヒド抽出物１３．５６％（トランスシンナムアルデヒド２．５７単位グラム）、ならびにオレガノ、チョウジ、および／またはシナモンに由来するトランス−β−カリオフィレン１１．３％（トランス−β−カリオフィレン１．８０単位グラム）である、４種の精油抽出物を有する組成物を含むか、それから本質的になるか、またはそれからなるカプセル化組成物に関する。
【００３２】
他の態様では、本発明は、カルバクロール約３３．２０％または７０％（カルバクロール１４．７単位グラム）を有するモロッコまたはバルカン諸国産のオレガノに由来する精油、オイゲノール８２．５７％（オイゲノール７０．６単位グラム）を有するマダガスカル産のチョウジの葉に由来する精油、およびトランスシンナムアルデヒド７７．５７％（トランスシンナムアルデヒド１４．７単位グラム）を有する中国産のシナモンに由来する精油を含む組成物を含むか、それから本質的になるか、またはそれからなるナノ粒子に関する。
【００３３】
さらに他の態様では、本発明は、オレガノに由来するカルバクロール抽出物約１１．８６％（カルバクロール５．２５単位グラム）、マダガスカル産のチョウジの葉またはチョウジに由来する精油抽出物であるオイゲノール６３．２８％（オイゲノール５４．１０単位グラム）、中国産のシナモンに由来する精油抽出物であるトランスシンナムアルデヒド抽出物１３．５６％（トランスシンナムアルデヒド２．５７単位グラム）、ならびにオレガノ、チョウジ、および／またはシナモンに由来するトランス−β−カリオフィレン１１．３％（トランス−β−カリオフィレン１．８０単位グラム）である、４種の精油抽出物を有する組成物を含むか、それから本質的になるか、またはそれからなる組成物および／またはナノ粒子に関する。
【００３４】
さらに他の態様では、本発明は、カルバクロール約６３．０９％（カルバクロール２５単位グラム）を有するスペイン産のオレガノに由来する精油、チモール約４７．３７％（チモール８．７５単位グラム）を有するスペイン産のレッドタイム（Ｔｈｙｍｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ）の精油、オイゲノール約８５．１９％（オイゲノール１８．７５単位グラム）を有するマダガスカル産のチョウジ（Ｅｕｇｅｎｉａ ｃａｒｙｏｐｈｙｌｌａｔａ）に由来する精油、チモール約２７．６８％（チモール６．２５単位グラム）を有するアルバニア産のキダチハッカの精油、ユーカリ約５５．２６％（ユーカリ９．３８単位グラム）を有するマダガスカル産のラヴィンサラに由来する精油、シネオール−１，８約４８．５６％（シネオール−１，８  ９．３８単位グラム）を有するクロアチア産のゲッケイジュの葉（Ｌａｕｒｕｓ ｎｏｂｉｌｉｓ）の精油、アルファピネン約６４．８４％（アルファピネン６．２５単位グラム）を有するオウシュウアカマツに由来する精油、およびシネオール−１，８約６２．１１％（シネオール−１，８  ６．２５単位グラム）を有する生カユブテ（ｇｒｅｅｎ Ｃａｊｅｐｕｔ）に由来する精油を含む組成物を含むか、それから本質的になるか、またはそれからなる組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子を提供する。
【００３５】
他の態様では、本発明は、オレガノに由来する精油約１５重量％、チョウジまたはチョウジの葉に由来する精油約７０重量％、およびシナモンに由来する精油約１５重量％を含むか、それらから本質的になるか、またはそれらからなる組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子に関する。少なくとも１種の抗生物質が、任意に、少なくとも１種の精油に随伴しているか、またはそれと共にカプセル化されていてよい。
【００３６】
他のアスペクトでは、本発明は、チョウジまたはチョウジの葉に由来する精油抽出物約６３．２８％、シナモンに由来する精油抽出物１１．８６％、ケイヒに由来する精油抽出物１３．５６％、およびローズマリーまたはタイムに由来する精油抽出物１１．３％を含むか、それらから本質的になるか、またはそれらからなる組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子に関する。
【００３７】
本発明で使用することができる少なくとも１種の抗生物質は、親水性または疎水性であってよく、それには、ベータ−ラクタミン（ｂｅｔａ−ｌａｃｔａｍｉｎｅ）系抗生物質、たとえばアモキシシリン（ａｍｏｘｉｃｉｌｌｉｎｅ）、アモキシシリン、およびピペラシリンであって、クラブラン酸など、タゾバクタム、クロキサシリン、セフロキシム、セフォタキシム、またはイムペネムに随伴していてよいか、または随伴していなくてよいもの、アミノシド（ａｍｉｎｏｓｉｄｅ）、たとえばゲンタマイシンおよびアミカシン、フルロキノロン（ｆｌｕｒｏｑｕｉｎｏｌｏｎｅ）系抗生物質、たとえばシプルフロキサシン（ｃｉｐｒｆｌｏｘａｃｉｎ）、オフロキサシン、ホスホマイシン系抗生物質、グリコペプチド系抗生物質、たとえばバンコマイシンおよびテイコプラニン、ニトロフラン系抗生物質、リファマイシン系抗生物質、マクロライド系抗生物質、たとえばジョサマイシンまたはクラリスロマイシン、ニトロ−イミダゾール系抗生物質、スルファミド＋トリメトプリム系抗生物質、シネルギスチン（ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｎ）系抗生物質、たとえばプリスチナマイシン、それらの薬学的に許容される塩、ならびにそれらの混合物が包含される。
【００３８】
本発明のカプセル化組成物は、脂質ナノカプセルでカプセル化されており、２０ｎｍ〜２００ｎｍの平均サイズを有する。
【００３９】
本発明のナノ粒子は、１ｎｍ〜１００ｎｍ、または１ｎｍ〜２００ｎｍ、好ましくは２０ｎｍ〜５０ｎｍ、より好ましくは約５０ｎｍの平均サイズを有する。
【００４０】
他の態様では、本発明は、環境中の感染因子（複数可）、特に細菌、寄生虫、真菌、望ましくない植生、雑草、および／または植物病原体の量を低減および／または阻止および／または制限および／または遅延させる方法を提供し、その際、前記方法は、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物と、任意に、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質とを含有する本発明の組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子を、感染因子（複数可）を低減する必要のある環境の周囲に散布することを含む。
【００４１】
哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、および／または植物を感染、特に、細菌感染、寄生虫感染、真菌感染、および／または植物病原体について予防または治療する方法であって、そのような治療を必要とする哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、および／または植物に、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を含む組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子を投与することを含む方法は、本発明のさらに他の態様である。任意に、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物に随伴しているか、またはそれと共にカプセル化されている本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質も、投与することができる。この態様では、細菌感染、寄生虫感染、および／または真菌感染は、院内感染であってよいか、または別法で植物感染であってよい。
【００４２】
望ましくない植生または雑草を予防または治療する方法であって、前記望ましくない植生または雑草に、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を含む組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子を配置することを含む方法は、本発明のさらに他の態様である。
【００４３】
他の側面では、本発明は、哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、および／または植物を感染、特に、細菌感染、寄生虫感染、真菌感染、および／または植物感染について治療する方法を提供し、その際、前記方法は、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を、脂質ナノカプセルおよび／またはナノ粒子でカプセル化し、前記カプセル化精油または少なくとも１種の精油抽出物および／またはナノ粒子を、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質と配合して、本明細書に記載されているとおりの精油または少なくとも１種の精油抽出物と抗生物質との配合物を形成し、前記配合物を、そのような治療を必要とする哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、および／または植物に投与することを含む。
【００４４】
他の側面では、本発明は、哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、および／または植物を感染、特に、細菌感染、寄生虫感染、真菌感染、および／または植物感染について治療する方法を提供し、その際、前記方法は、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質との組成物の形で配合することを含む。
【００４５】
哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、および／または植物を、感染、特に、細菌感染、寄生虫感染、真菌感染、および／または植物感染について治療する方法であって、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を、脂質ナノカプセルおよび／またはナノ粒子でカプセル化し、前記のカプセル化された、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物、および任意に、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質を、そのような治療を必要とする哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、および／または植物に投与することを含む方法は、本発明の他の態様である。この態様では、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種のカプセル化精油または少なくとも１種の精油抽出物、および本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質を一緒に投与することができるか、または本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種のカプセル化精油または少なくとも１種の精油抽出物を初めに投与することができ、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質を、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種のカプセル化精油の後に投与することができるか、または本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質を初めに投与し、本明細書に記載されている少なくとも１種のカプセル化精油または少なくとも１種の精油抽出物を、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質の後に投与するか、または本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物、および少なくとも１種の抗生物質を、ナノカプセルまたはナノ粒子中で一緒にカプセル化し、そのナノカプセルおよび／またはナノ粒子を単に投与する。
【００４６】
さらに他の側面では、哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、および／または植物を、感染、特に、細菌感染、寄生虫感染、真菌感染、および／または植物感染について治療する方法であって、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物、および本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質を、脂質ナノカプセルおよび／またはナノ粒子でカプセル化し、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を含有する前記カプセル化組成物および／またはナノ粒子、および本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種のカプセル化抗生物質を、そのような治療を必要とする哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、および／または植物に投与することを含む方法。
【００４７】
他の側面では、本発明は、細菌、寄生虫、真菌、望ましくない植生、雑草、および／または植物病原体の増殖を低減および／または阻止および／または制限および／または遅延させる方法を提供し、その際、前記方法は、そのような治療を必要とする哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、および／または植物に、組成物の形態であるか、ナノカプセル中にカプセル化されているか、ナノ粒子中にカプセル化されている本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油もしくは少なくとも１種の精油抽出物、またはホスファチジルコリン６９％のダイズレシチンの混合物、カプリル酸−カプリン酸トリグリセリド、ならびに遊離ポリエチレングリコール６６０およびポリエチレングリコール６６−ヒドロキシステアレートの混合物を含む中空脂質ナノカプセルを投与することを含む。
【００４８】
環境中の細菌、寄生虫、真菌、望ましくない植生、雑草、および／または植物病原体の量を低減および／または阻止および／または制限および／または遅延させる方法であって、本明細書に記載されているとおりの本発明の組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子、またはホスファチジルコリン６９％のダイズレシチンの混合物、カプリル酸−カプリン酸トリグリセリド、ならびに遊離ポリエチレングリコール６６０およびポリエチレングリコール６６−ヒドロキシステアレートの混合物を含む中空脂質ナノカプセルを環境に散布することによって、細菌、寄生虫、真菌、および／または植物病原体の増殖を低減および／または阻止および／または制限および／または遅延させることを含む方法。
【００４９】
物体上の細菌、寄生虫、真菌、望ましくない植生、雑草、および／または植物病原体の量を低減および／または阻止および／または制限および／または遅延させる方法であって、本明細書に記載されているとおりの本発明の組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子、またはホスファチジルコリン６９％のダイズレシチンの混合物、カプリル酸−カプリン酸トリグリセリド、ならびに遊離ポリエチレングリコール６６０およびポリエチレングリコール６６−ヒドロキシステアレートの混合物を含む中空脂質ナノカプセルを前記物体の上、またはその周囲に設置することによって、細菌、寄生虫、真菌、および／または植物病原体の増殖を低減および／または阻止および／または制限および／または遅延させることを含む方法。
【００５０】
さらに他の側面では、本発明は、精油の有効性を増大させる方法に関し、その際、前記方法は、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を、２０ｎｍ〜２００ｎｍの平均サイズを有する脂質ナノカプセルでカプセル化することを含む。
【００５１】
さらに他の側面では、本発明は、精油または精油抽出物の有効性を増大させる方法に関し、その際、前記方法は、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を、１ｎｍ〜１００ｎｍ、または１ｎｍ〜２００ｎｍ、好ましくは約２０ｎｍ〜６０ｎｍ、より好ましくは約３０ｎｍの平均サイズを有する本発明のナノ粒子中にカプセル化することを含む。
【００５２】
他の側面では、本発明は、医薬品として使用するための、特に、感染、特に、細菌感染、寄生虫感染、および／または真菌感染（たとえば院内感染）を哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、および／または昆虫において予防および／または治療するために使用するための、本発明の組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子に関する。
【００５３】
他の側面では、本発明は、植物病原体に対して使用するための本発明の組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子に関する。
【００５４】
哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、および／または昆虫における感染、特に、細菌感染、寄生虫感染、および／または真菌感染を予防および／または治療するための医薬品を製造するための本発明の組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子の使用も、本発明の他の側面である。本発明のこの側面では、細菌感染、寄生虫感染、および／または真菌感染は、院内感染であってよい。
【００５５】
植物病原体に対して使用するための組成物を製造するための本発明のカプセル化組成物、および／またはナノ粒子の使用も、本発明の他の側面である。
【００５６】
細菌耐性を制御するための本明細書に記載されているとおりの本発明の組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子の使用は、本発明の他の側面である。
【００５７】
望ましくない植生、および／または雑草を治療するための本明細書に記載されているとおりのナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物の使用も、本発明の他の側面である。
【図面の簡単な説明】
【００５８】
【図１】カプセル化または非カプセル化精油（Ｒ０７）のいずれにも曝露されなかった対照と比較しての、Ｔ０、Ｔ６（Ｔ０から６時間後）、およびＴ２４（Ｔ０から２４時間後）時間目のＰ.ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ細菌の数を示すグラフ。非カプセル化Ｒ０７  ０．１％、カプセル化Ｒ０７  ０．０５％、カプセル化Ｒ０７  ０．１％、カプセル化ＲＯ７  ０．２％、またはカプセル化Ｒ０７  ０．４％を使用した。
【図２】カプセル化または非カプセル化精油（Ｒ０７）のいずれにも曝露されなかった対照と比較しての、Ｔ０、Ｔ６（Ｔ０から６時間後）、およびＴ２４（Ｔ０から２４時間後）時間目の細菌Ｐ.ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ細菌の数を示すグラフ。非カプセル化Ｒ０７  ０．１％、精油を含まない中空脂質ナノカプセル０．０５％、または精油を含まない中空脂質ナノカプセル０．４％を使用した。前記中空脂質ナノカプセル０．０５％または０．４％と、非カプセル化Ｒ０７  ０．１％の同時投与も行った。
【図３】カプセル化または非カプセル化精油（Ｒ０７）のいずれにも曝露されなかった対照と比較しての、Ｔ０、Ｔ６（Ｔ０から６時間後）、およびＴ２４（Ｔ０から２４時間後）時間目の細菌Ａ.ｂａｕｍａｎｎｉｉ５３７７の数を示すグラフ。非カプセル化Ｒ０７  ０．１％、カプセル化Ｒ０７  ０．０５％、カプセル化Ｒ０７  ０．１％、カプセル化ＲＯ７  ０．２％、またはカプセル化Ｒ０７  ０．４％を使用した。
【図４】カプセル化または非カプセル化精油（Ｒ０７）のいずれにも曝露されなかった対照と比較しての、Ｔ０、Ｔ６（Ｔ０から６時間後）、およびＴ２４（Ｔ０から２４時間後）時間目の細菌Ａ.ｂａｕｍａｎｎｉｉ５３７７の数を示すグラフ。非カプセル化Ｒ０７  ０．１％、精油を含まない中空脂質ナノカプセル０．０５％、または精油を含まない中空脂質ナノカプセル０．４％を使用した。前記中空脂質ナノカプセル０．０５％または０．４％と、非カプセル化Ｒ０７  ０．１％の同時投与も行った。
【図５】カプセル化または非カプセル化精油（Ｒ０７）のいずれにも曝露されなかった対照と比較しての、Ｔ０、Ｔ６（Ｔ０から６時間後）、およびＴ２４（Ｔ０から２４時間後）時間目の細菌Ａ. ｂａｕｍａｎｎｉｉ ｍｕｃｏｉｄの数を示すグラフ。非カプセル化Ｒ０７  ０．０５％、カプセル化Ｒ０７  ０．０．５％、カプセル化Ｒ０７  ０．１％、カプセル化ＲＯ７  ０．２％、およびカプセル化Ｒ０７  ０．４％を使用した。
【図６】カプセル化または非カプセル化精油（Ｒ０７）のいずれにも曝露されなかった対照と比較しての、Ｔ０、Ｔ６（Ｔ０から６時間後）、およびＴ２４（Ｔ０から２４時間後）時間目の細菌Ａ. ｂａｕｍａｎｎｉｉ ｍｕｃｏｉｄの数を示すグラフ。精油Ｒ０７  ０．１％、精油を含まない中空ナノカプセル脂質０．０５％、または精油を含まない中空ナノカプセル脂質０．４％を使用した。前記中空脂質ナノカプセル０．０５％または０．４％と、非カプセル化Ｒ０７  ０．１％の同時投与も行った。
【図７】マウスに投与した場合の、Ｒ０７のＬＤ５０％を示すグラフ。このグラフから分かるとおり、投与されたＲ０７のＬＤ５０％は、体重約２０ｇのマウスで５１．３１ｍｇであり、したがって、２，５６５ｍｇ／ｋｇである。
【図８】中空およびカプセル化ナノカプセル（ＮＣＬ）をカプセル化Ｒ０７  ０．３７５ｍｇからカプセル化Ｒ０７  １２ｍｇの範囲の様々な濃度で、４日間にわたって投与した場合の、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉに感染しているマウスにおける体重減少量を示す棒グラフ。
【図９Ａ】中空およびカプセル化ナノカプセルを様々な濃度で４日間にわたって投与された、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉに感染しているマウスの様々な臨床研究の棒グラフ。図９Ａは、対照である。図９Ｂは、マウスにカプセル化Ｒ０７ナノカプセル（ＮＣＬ）１２ｍｇを投与した場合の臨床結果であり、図９Ｃは、マウスにカプセル化Ｒ０７ナノカプセル（ＮＣＬ）６ｍｇを投与した場合の臨床結果である。
【図９Ｂ】中空およびカプセル化ナノカプセルを様々な濃度で４日間にわたって投与された、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉに感染しているマウスの様々な臨床研究の棒グラフ。図９Ａは、対照である。図９Ｂは、マウスにカプセル化Ｒ０７ナノカプセル（ＮＣＬ）１２ｍｇを投与した場合の臨床結果であり、図９Ｃは、マウスにカプセル化Ｒ０７ナノカプセル（ＮＣＬ）６ｍｇを投与した場合の臨床結果である。
【図９Ｃ】中空およびカプセル化ナノカプセルを様々な濃度で４日間にわたって投与された、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉに感染しているマウスの様々な臨床研究の棒グラフ。図９Ａは、対照である。図９Ｂは、マウスにカプセル化Ｒ０７ナノカプセル（ＮＣＬ）１２ｍｇを投与した場合の臨床結果であり、図９Ｃは、マウスにカプセル化Ｒ０７ナノカプセル（ＮＣＬ）６ｍｇを投与した場合の臨床結果である。
【図１０Ａ】カプセル化ナノカプセルを様々な濃度で４日間にわたって投与された、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉに感染したマウスの様々な臨床研究の棒グラフ。図１０Ａは、マウスにカプセル化Ｒ０７ナノカプセル（ＮＣＬ）３ｍｇを投与した場合の臨床結果であり、図１０Ｂは、マウスにカプセル化Ｒ０７ナノカプセル（ＮＣＬ）１．５ｍｇを投与した場合の臨床結果であり、図１０Ｃは、マウスにカプセル化Ｒ０７ナノカプセル（ＮＣＬ）０．７５ｍｇを投与した場合の臨床結果である。
【図１０Ｂ】カプセル化ナノカプセルを様々な濃度で４日間にわたって投与された、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉに感染したマウスの様々な臨床研究の棒グラフ。図１０Ａは、マウスにカプセル化Ｒ０７ナノカプセル（ＮＣＬ）３ｍｇを投与した場合の臨床結果であり、図１０Ｂは、マウスにカプセル化Ｒ０７ナノカプセル（ＮＣＬ）１．５ｍｇを投与した場合の臨床結果であり、図１０Ｃは、マウスにカプセル化Ｒ０７ナノカプセル（ＮＣＬ）０．７５ｍｇを投与した場合の臨床結果である。
【図１０Ｃ】カプセル化ナノカプセルを様々な濃度で４日間にわたって投与された、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉに感染したマウスの様々な臨床研究の棒グラフ。図１０Ａは、マウスにカプセル化Ｒ０７ナノカプセル（ＮＣＬ）３ｍｇを投与した場合の臨床結果であり、図１０Ｂは、マウスにカプセル化Ｒ０７ナノカプセル（ＮＣＬ）１．５ｍｇを投与した場合の臨床結果であり、図１０Ｃは、マウスにカプセル化Ｒ０７ナノカプセル（ＮＣＬ）０．７５ｍｇを投与した場合の臨床結果である。
【図１１Ａ】中空およびカプセル化ナノカプセルを様々な濃度で４日間にわたって投与された、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉに感染しているマウスの様々な臨床研究の棒グラフ。図１１Ａは、マウスにカプセル化Ｒ０７ナノカプセル（ＮＣＬ）０．３７５ｍｇを投与した場合の臨床結果であり、図１１Ｂは、マウスに中空ナノカプセルを投与した場合の臨床結果である。
【図１１Ｂ】中空およびカプセル化ナノカプセルを様々な濃度で４日間にわたって投与された、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉに感染しているマウスの様々な臨床研究の棒グラフ。図１１Ａは、マウスにカプセル化Ｒ０７ナノカプセル（ＮＣＬ）０．３７５ｍｇを投与した場合の臨床結果であり、図１１Ｂは、マウスに中空ナノカプセルを投与した場合の臨床結果である。
【図１２】マウスに様々な量のカプセル化Ｒ０７ナノカプセル（ＮＣＬ）および中空ナノカプセルを投与した場合の死亡百分率を示す棒グラフ。
【図１３】ＡＭＣ（Ａｕｇｍｅｎｔｉｎ）、様々な濃度のカプセル化Ｒ０７ナノカプセル、中空ナノカプセル、Ｒ０７＋フラクトオリゴ糖（ＦＯＳ）、様々な濃度のカプセル化Ｒ０７ナノカプセル＋フラクトオリゴ糖（ＦＯＳ）を投与して４日目のマウスの糞便中に存在する乳酸菌、嫌気性細菌、大腸菌、および腸内細菌のコロニー形成単位（ＣＦＵ）の量を示す棒グラフ。
【図１４】ＡＭＣ（Ａｕｇｍｅｎｔｉｎ（登録商標））、様々な濃度のカプセル化Ｒ０７ナノカプセル、中空ナノカプセル、Ｒ０７＋フラクトオリゴ糖（ＦＯＳ）、様々な濃度のカプセル化Ｒ０７ナノカプセル＋フラクトオリゴ糖（ＦＯＳ）を投与して８日目のマウスの糞便中に存在する乳酸菌、嫌気性細菌、大腸菌、および腸内細菌のコロニー形成単位（ＣＦＵ）の量を示す棒グラフ。
【発明の詳細な説明】
【００５９】
［好ましい態様の説明］
「ＬＮＣ」は、本明細書で使用される場合、脂質ナノカプセルを意味する。それらは、ポリマーナノカプセルとリポソーム（ｌｉｐｓｏｍｅ）とのハイブリッド構造として特徴付けられ、一般に、溶媒を用いずにソフトエネルギー手順によって調製される。それらは一般に、レシチンとペグ化界面活性剤との混合物から製造される膜によって囲まれている中鎖トリグリセリドに対応する油性の核を有する。カプセル化される分子は、ナノカプセルの内部に留まる。
【００６０】
本明細書で使用される場合、「ナノ粒子」という用語は、１〜２００ナノメートルのサイズの少なくとも１つの寸法を持つ構造を有することを意味する。本発明では、そのようなナノ粒子は、親油性Ｌａｂｒａｆａｃ（登録商標）を用いずに、ポリエチレングリコールのみを用いて、様々な精油または精油の抽出物を使用して、ナノ粒子を製造することによって特徴付けられる。これらのナノ粒子は、親油性であり、カプリル酸−カプリン酸トリグリセリドの核を有さない。したがって、本発明のナノ粒子は、脂質ナノカプセルとは異なるが、ナノカプセルと同じ手順を使用して製造される。核は、親油性活性化合物のみから構成される。
【００６１】
「精油」は、本明細書で使用される場合、炭素原子が直鎖、分枝鎖、または環式になっていてよい植物性抽出物であり、それらには、エーテル、エステル、アルデヒド、およびケトンが包含される。
【００６２】
本明細書で使用される場合、「精油の抽出物」は、多くの精油から分離される精油の濃縮形態を意味し、天然由来であるか、または精油の抽出物は、化学的に合成されてよい。
【００６３】
本明細書で使用される場合、「Ｏ／ＷからＷ／Ｏ」は、エマルションに関する場合、水中油型および油中水型を意味する。
【００６４】
「哺乳類」という用語には、ヒトを包含する哺乳綱からなる様々な温血脊椎動物のうちのいずれも内包され、皮膚上を体毛が覆っていることによって、雌においては、幼動物を養う乳産生乳腺によって特徴付けられる。特に、動物も、感染、特に細菌感染、寄生虫感染、および／または真菌感染を有し得ることがよく知られているので、本発明は、ヒトの治療に限られず、他にも、獣医学的用途を内包する。
【００６５】
「昆虫」という用語には、体が３つの部分に分かれていて（頭部、腹部、および胸部）、３対の足を有し、通常、２対の羽根を有し、小さく、空気呼吸をする節足動物を含む昆虫綱の任意の生物が内包される。例には、クモ、ダニ、およびムカデが包含される。
【００６６】
「爬虫類」には、爬虫綱の様々な冷血で、通常は産卵性の脊椎動物のうちのいずれも、たとえば鱗屑の外部被覆またはハニープレート（ｈｏｎｅｙ ｐｌａｔｅｓ）を有し、肺で呼吸するヘビ、トカゲ、ワニ、またはカメが内包される。
【００６７】
「鳥類」という用語は、羽根で覆われている身体、羽根に変化している前肢、鱗状脚、くちばしを有し、歯は有さず、硬い殻の卵で幼体を産む鳥綱の任意の温血脊椎動物を意味する。鳥類の一部の例には、コマドリ、フクロウ、白鳥、および紅冠鳥（ｃａｒｄｉｎａｌ）が包含される。
【００６８】
「魚類」には、無顎軟骨魚綱（Ａｇｎａｔｈａｍ Ｃｈｏｎｎｄｒｉｃｈｔｈｙｅｓ）または硬骨魚綱に属し、えら、通常はひれを有し、典型的には鱗で被覆された長い身体を有する様々な冷血で、水生の脊椎動物のいずれも内包される。魚類の例には、ヤツメウナギ、サメ、マグロ、バス、サケ、およびマスが包含される。
【００６９】
植物には、特徴として、胚を産生し、葉緑体を含有し、セルロース細胞壁を有し、移動の力を持たない植物界の様々な光合成、真核、多細胞生物のいずれも内包される。
【００７０】
抗菌活性、抗寄生虫活性、抗真菌活性、望ましくない植生活性もしくは雑草活性、および／または植物抗病原性活性に関する場合の「広域スペクトル活性」は、その精油または精油抽出物が、細菌が原因の疾患、寄生虫が原因の疾患、真菌が原因の疾患、望ましくない植生、雑草、および／または植物病原体が原因の疾患に対して、広範な活性を有することを意味する。
【００７１】
「カプセル化された」という用語は、少なくとも１種の精油が単独で、ナノカプセルまたはナノ粒子の内部に存在することか、または他の態様では、少なくとも１種の抗生物質と少なくとも１種の精油との両方が、ナノカプセルまたはナノ粒子の内部に見出されることを意味する。
【００７２】
「Ｒ０７」という用語は、カルバクロール約３３．２０％または７０％（カルバクロール１４．７単位グラム）を有するモロッコまたはバルカン諸国産のオレガノに由来する精油、オイゲノール８２．５７％（オイゲノール７０．６単位グラム）を有するマダガスカル産のチョウジの葉に由来する精油、およびトランスシンナムアルデヒド７７．５７％（トランスシンナムアルデヒド１４．７単位グラム）を有する中国産のシナモンに由来する精油を含む組成物のための略語である。精油Ｒ０７は一般に、哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、および／または植物１ｋｇ当たり３７．５ｍｇの用量で投与される。Ｒ０７、カプセル化Ｒ０７、またはナノ粒子中のＲ０７は、１ｋｇ当たり３７．５ｍｇの用量で投与される場合、細菌腸内叢を破壊しないと特に言及されることは興味深い。Ｒ０７は、カプセル化されていてよいか、またはナノ粒子の形態であってよい。
【００７３】
「ＡＴ１１０」という用語は、４種の精油抽出物を含む組成物のための略語である。ＡＴ１１０は、オレガノに由来するカルバクロール抽出物約１１．８６％（カルバクロール５．２５単位グラム）、マダガスカル産のチョウジの葉またはチョウジに由来する精油抽出物であるオイゲノール６３．２８％（オイゲノール５４．１０単位グラム）、中国産のシナモンに由来する精油抽出物であるトランスシンナムアルデヒド抽出物１３．５６％（トランスシンナムアルデヒド２．５７単位グラム）、ならびにオレガノ、チョウジ、および／またはシナモンに由来するトランス−β−カリオフィレン１１．３％（トランス−β−カリオフィレン１．８０単位グラム）を含む。ＡＴ１１０は、１ｋｇ当たり約１０〜３７．５ｍｇの用量で投与される場合、細菌腸内叢を破壊しないと特に言及されることは興味深い。ＡＴ１１０は、上記の精油抽出物が規定の百分率で混合されている組成物の形態であってよく、ＡＴ１１０はまた、本明細書に記載されているとおりの抗生物質を伴うか、または伴わない組成物の形でカプセル化されていてもよく、かつ／または本明細書に記載されているとおりの抗生物質を伴うか、または伴わないナノ粒子の形態であってよい。
【００７４】
「抗生物質に随伴して」という専門用語は、その抗生物質が、少なくとも１種の組成物と一緒に投与されるか、少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物と共にカプセル化されているか、かつ／または少なくとも１種の精油または精油抽出物を含有するナノ粒子であってよいか、または少なくとも１種の精油または精油抽出物とは別に投与されてよいことを意味する。
【００７５】
「環境」は、本発明を使用することができる周囲を意味する。
【００７６】
「物体」という用語には、本明細書で使用される場合、細菌感染および／または寄生虫感染および／または真菌感染および／または植物病原体を有し得る任意の外面または内面が包含される。表面には、たとえば手術器具、カウンタートップ、病院家具、車いす、インキュベーター、試験管、カテーテル、挿管法用の管、尿道カテーテル、リネン製品などが包含され得る。「物体」という用語には他にも、哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、および／または植物の外面および表面が包含される。
【００７７】
「少なくとも」という用語は、本明細書で使用される場合、１つ以上を意味する。本発明の特定の態様では、これは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０を意味する。
【００７８】
「〜から本質的になる」は、精油またはその抽出物、および／または抗生物質の主な成分を包含しない他の非必須成分が、組成物、脂質ナノカプセル、および／またはナノ粒子中に配合されていてよいことを意味する。
【００７９】
「相乗作用」は、化合物または作用物質、たとえば２種以上の精油を合わせた効果が、それらの個々の効果の代数的合計よりも大きいように、２種以上の化合物または作用物質が相互作用することを意味する。これに関連して、少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物と、少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物に随伴しているか、またはそれと共にカプセル化されているか、またはそれと共にナノ粒子の形態である少なくとも１種の抗生物質とは、抗生物質の量を低減することができるような相乗効果をもたらす。
【００８０】
特定の態様では、「感染」とは、後で組織損傷をもたらし、様々な細胞または毒性機構を介しての明白な疾患への進行をもたらし得る身体部位、または組織、または植物における微生物の侵襲および増殖を意味する。これに関連して、感染には、空気感染、飛沫感染、内因性感染、トンネル感染、および日和見感染が包含される。
【００８１】
「細菌感染」は、本明細書で使用される場合、組織損傷をもたらし、疾患へと進行し得る身体部位または組織の細菌の侵襲を意味する。感染の原因となる細菌の例には、本明細書に記載されているとおりの連鎖球菌、ブドウ球菌、大腸菌などが包含される。
【００８２】
「寄生虫感染」は、その存在の一部の段階において、宿主と呼ばれる他の生体から栄養を得る植物または動物が原因である感染を意味する。例は、哺乳類などの宿主上で捕食する条虫、ノミ、ダニ、蚊などである。
【００８３】
「真菌感染」は、本明細書で使用される場合、真菌が原因である何らかの炎症性状態を意味する。真菌感染の例には、口腔カンジダ症、白癬、肺炎、カンジダ属酵母感染などが包含される。
【００８４】
「植物病原体」は、本明細書で使用される場合、植物における真菌、卵菌類、細菌、マイコプラズマ、ウイルス、ウイルス様生物、フィトプラズマ、原生動物、線虫、および寄生虫を包含する、感染症の原因である任意の生体である。植物病原体の例には、これらに限られないが、子嚢菌および担子菌に属する真菌、疫病菌、バークホルデリア、プロテオバクテリア、フィトプラズマ、およびスピロプラズマ属からの病原体が包含される。
【００８５】
本明細書で使用される場合、「定足数感知」は、本明細書に記載されているとおりの本発明のナノカプセルまたはナノ粒子を使用すると、細菌、寄生虫、真菌、および／または植物の病原体を包絡することによって、病原体の病毒力を遅延させる。
【００８６】
「除草剤」は、植物、特に、雑草、または他の望ましくない植生の成長を破壊または阻止するために使用される任意の化学薬品を意味する。これに関連して、少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を含有する組成物、カプセル化ナノカプセル、および／またはナノ粒子を、除草剤として使用することができる。
【００８７】
したがって、本発明は、広域スペクトルの抗菌活性、抗寄生虫活性、抗真菌活性、望ましくない植生、または雑草活性、および／または植物抗病原性活性を有する本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油抽出物と、任意に、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質と、任意に、薬学的に許容される担体とを含む、組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子を提供する。
【００８８】
組成物は、カルバクロール約３３．２０％または７０％（カルバクロール１４．７単位グラム）を有するモロッコまたはバルカン諸国産のオレガノに由来する精油、オイゲノール８２．５７％（オイゲノール７０．６単位グラム）を有するマダガスカル産のチョウジの葉に由来する精油、およびトランスシンナムアルデヒド７７．５７％（トランスシンナムアルデヒド１４．７単位グラム）を有する中国産のシナモンに由来する精油を含んでよい。
【００８９】
本発明の組成物はまた、オレガノに由来するカルバクロール抽出物約１１．８６％（カルバクロール５．２５単位グラム）、マダガスカル産のチョウジの葉またはチョウジに由来する精油抽出物であるオイゲノール６３．２８％（オイゲノール５４．１０単位グラム）、中国産のシナモンに由来する精油抽出物であるトランスシンナムアルデヒド抽出物１３．５６％（トランスシンナムアルデヒド２．５７単位グラム）、ならびにオレガノ、チョウジ、および／またはシナモンに由来するトランス−β−カリオフィレン１１．３％（トランス−β−カリオフィレン１．８０単位グラム）を含む４種の精油抽出物を有してよい。この組成物は、本明細書に関する場合、非カプセル化組成物であってよく、液剤として提供されるか、懸濁剤として配合されて、単独で利用されるか、または水中で希釈されるか、または再濃縮されるか、または凍結乾燥されてよい。
【００９０】
カプセル化組成物は、ポリマーナノカプセルとリポソーム（ｌｉｐｓｏｍｅ）とのハイブリッド構造によって特徴付けられる脂質ナノカプセルでカプセル化されている。脂質ナノカプセルは、レシチンおよびペグ化界面活性剤から製造される膜によって囲まれている、中鎖トリグリセリドに対応する油性の核からなる。その配合は、良好な単分散で脂質ナノカプセル形成を導く、エマルションの転相温度現象として知られているプロセスに基づく。このプロセスは、ＷＯ２００９／００４２１４（Ａ２）号に記載されており、これは、参照によって本明細書に組み込まれる。
【００９１】
本発明のカプセル化組成物は、２０ｎｍ〜２００ｎｍの平均サイズを有する。しかしながら、粒径は、４０ｎｍ〜１００ｎｍの間で変動し得る。他の側面では、サイズは、５０ｎｍ〜１８０ｎｍの間で変動し得る。
【００９２】
他の側面では、少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を、１〜２００ナノメートルのサイズの少なくとも１つの寸法を持つ構造を有するナノ粒子を形成するために使用することができる。本発明では、そのようなナノ粒子は、親油性Ｌａｂｒａｆａｃ（登録商標）を用いず、ポリエチレングリコールだけを用いて、少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を使用するナノ粒子の製造によって特徴付けられる。これらのナノ粒子は、親油性であり、カプリル酸−カプリン酸トリグリセリドの核を有さない。したがって、本発明のナノ粒子は、脂質ナノカプセルとは異なるが、カプセル化ナノカプセル組成物のプロセスと同じ転相プロセスによって製造される。
【００９３】
本発明の一側面では、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物のみが、組成物の形になっているか、カプセル化されているか、またはナノ粒子の形になっている。本発明の別の態様では、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質が、本明細書に記載されている組成物中で、少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を有する組成物に随伴していてよいか、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物と共にカプセル化されているか、またはナノ粒子に随伴していてよい。
【００９４】
本発明の組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子において使用することができる少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物には、オレガノに由来する精油または精油抽出物、スペインまたはモロッコ産のオレガノに由来する精油または精油抽出物、タイムに由来する精油または精油抽出物、チョウジに由来する精油または精油抽出物、チョウジの葉に由来する精油または精油抽出物、セイボリーに由来する精油または精油抽出物、ラヴィンサラに由来する精油または精油抽出物、ゲッケイジュの葉に由来する精油または精油抽出物、オウシュウアカマツに由来する精油または精油抽出物、ユーカリに由来する精油または精油抽出物、ペーパーバークに由来する精油または精油抽出物、グリーンペーパーバークに由来する精油または精油抽出物、レッドタイムに由来する精油または精油抽出物、キダチハッカに由来する精油または精油抽出物、ケイヒに由来する精油または精油抽出物、およびシナモンに由来する精油または精油抽出物、および／またはそれらの混合物が包含される。
【００９５】
本発明の他の側面では、少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物は、水蒸気を使用する蒸留または任意の他の公知の抽出方法によって得られ、比較的低い分子量を有するフェノールおよびアルデヒド（ａｌｄｅｈｙｄｙｅ）から主に構成され、テルペン（１３６Ｄａ）、テルペノール（１５４Ｄａ）、およびセスキテルペン（２００Ｄａ）を含有し、カプセル化されて、かつ／またはナノ粒子の形で存在する。これを、カプセル化せずに、ナノ粒子を用いずに、組成物の形態で配合することもできる。
【００９６】
組成物、カプセル化組成物中に、かつ／またはナノ粒子中に存在する精油（複数可）または精油抽出物それぞれの濃度は、使用される精油（複数可）に応じて、約０．５重量％〜８０重量％、約１重量％〜４０重量％、約０．２重量％〜２５重量％、約０．０１重量％〜２重量％、０．０５重量％〜０．５重量％、または０．０５重量％〜１重量％（たとえば０．０５重量％、０．１重量％、０．２重量％、０．３重量％、０．４重量％、または０．５重量％の量）で独立に変動してよい。
【００９７】
本発明の一態様では、組成物の形態であってよく、カプセル化されていてよく、かつ／またはナノ粒子の形態であってよい少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物は、オレガノに由来する精油または少なくとも１種の精油抽出物約５〜約４０重量％、および／またはタイムに由来する精油または少なくとも１種の精油抽出物約１重量％〜約２５重量％、および／またはチョウジに由来する精油または少なくとも１種の精油抽出物約１重量％〜７５重量％、および／またはセイボリーに由来する精油または少なくとも１種の精油抽出物約１重量％〜２０重量％、および／またはラヴィンサラに由来する精油または少なくとも１種の精油抽出物約１重量％〜２０重量％、および／またはゲッケイジュの葉に由来する精油または少なくとも１種の精油抽出物約１重量％〜２０重量％、および／またはオウシュウアカマツに由来する精油または少なくとも１種の精油抽出物約１重量％〜２０重量％、および／またはペーパーバークに由来する精油または少なくとも１種の精油抽出物約１重量％〜２０重量％、および／またはシナモンに由来する精油または少なくとも１種の精油抽出物約１重量％〜３０重量％を含むか、それらから本質的になるか、またはそれらからなる。
【００９８】
他の態様では、組成物の形であってよく、カプセル化されていてよく、かつ／またはナノ粒子の形態であってよい少なくとも１種の精油は、オレガノに由来する精油または少なくとも１種の精油抽出物約２０重量％〜約３０重量％、および／またはタイムに由来する精油または少なくとも１種の精油抽出物約３重量％〜約１４重量％、および／またはチョウジに由来する精油または少なくとも１種の精油抽出物約１重量％〜７５重量％、および／またはセイボリーに由来する精油または少なくとも１種の精油抽出物約１重量％〜１２重量％、および／またはラヴィンサラに由来する精油または少なくとも１種の精油抽出物約４重量％〜１５重量％、および／またはゲッケイジュの葉に由来する精油または少なくとも１種の精油抽出物約４重量％〜１５重量％、および／またはオウシュウアカマツに由来する精油または少なくとも１種の精油抽出物約１重量％〜１２重量％、および／またはペーパーバークに由来する精油または少なくとも１種の精油抽出物約１重量％〜１２重量％、および／またはシナモンに由来する精油または少なくとも１種の精油抽出物約１重量％〜１５重量％を含むか、それらから本質的になるか、またはそれらからなる。
【００９９】
さらに他の態様では、組成物の形であってよく、カプセル化されていてよく、かつ／またはナノ粒子の形態であってよい少なくとも１種の精油は、オレガノに由来する精油約２５重量％、および／またはタイムに由来する精油約９重量％、および／またはチョウジに由来する精油約７０重量％、および／またはセイボリーに由来する精油約６重量％、および／またはラヴィンサラに由来する精油約９重量％、および／またはゲッケイジュの葉に由来する精油約９重量％、および／またはオウシュウアカマツに由来する精油約６重量％、および／またはペーパーバークに由来する精油約６重量％、および／またはシナモンに由来する精油約１５重量％を含むか、それらから本質的になるか、またはそれらからなる。
【０１００】
他の態様では、本発明は、カルバクロール約３３．２０％または７０％（カルバクロール１４．７単位グラム）を有するモロッコまたはバルカン諸国産のオレガノに由来する精油、オイゲノール約８２．５７％（オイゲノール７０．６単位グラム）を有するマダガスカル産のチョウジの葉に由来する精油、およびトランスシンナムアルデヒド約７７．５７％（トランスシンナムアルデヒド１４．７単位グラム）を有する中国産のシナモンに由来する精油を含む組成物を含むか、それから本質的になるか、またはそれからなる組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子に関する。
【０１０１】
カプセル化されているか、またはナノ粒子の形態であるか、または組成物の形態であるオレガノに由来するカルバクロール抽出物約１１．８６％（カルバクロール５．２５単位グラム）、マダガスカル産のチョウジの葉またはチョウジに由来する精油抽出物であるオイゲノール６３．２８％（オイゲノール５４．１０単位グラム）、中国産のシナモンに由来する精油抽出物であるトランスシンナムアルデヒド抽出物１３．５６％（トランスシンナムアルデヒド２．５７単位グラム）、ならびにオレガノ、チョウジ、および／またはシナモンに由来するトランス−β−カリオフィレン１１．３％（トランス−β−カリオフィレン１．８０単位グラム）は、本発明のさらに他の側面である。
【０１０２】
さらに他の態様では、本発明は、カルバクロール約６３．０９％（カルバクロール２５単位グラム）を有するスペイン産のオレガノに由来する精油、チモール約４７．３７％（チモール８．７５単位グラム）を有するスペイン産のレッドタイム（Ｔｈｙｍｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ）の精油、オイゲノール約８５．１９％（オイゲノール１８．７５単位グラム）を有するマダガスカル産のチョウジ（Ｅｕｇｅｎｉａ ｃａｒｙｏｐｈｙｌｌａｔａ）に由来する精油、チモール約２７．６８％（チモール６．２５単位グラム）を有するアルバニア産のキダチハッカの精油、ユーカリ約５５．２６％（ユーカリ９．３８単位グラム）を有するマダガスカル産のラヴィンサラに由来する精油、シネオール−１，８約４８．５６％（シネオール−１，８  ９．３８単位グラム）を有するクロアチア産のゲッケイジュの葉（Ｌａｕｒｕｓ ｎｏｂｉｌｉｓ）の精油、アルファピネン約６４．８４％（アルファピネン６．２５単位グラム）を有するオウシュウアカマツに由来する精油、およびシネオール，１−８約６２．１１％（シネオール−１，８  ６．２５単位グラム）を有する生カユブテ（ｇｒｅｅｎ Ｃａｊｅｐｕｔ）に由来する精油を含む組成物を含むか、それから本質的になるか、またはそれからなる組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子を提供する。
【０１０３】
他の態様では、本発明は、オレガノに由来する精油１５重量％、チョウジに由来する精油７０重量％、およびシナモンに由来する精油１５重量％を含む組成物を含むか、それから本質的になるか、またはそれからなる組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子に関する。少なくとも１種の抗生物質が、任意に、少なくとも１種の精油に随伴しているか、またはそれと共にカプセル化されていてよい。
【０１０４】
他の側面では、本発明は、チョウジに由来する精油抽出物約６８．２８％、シナモンに由来する精油抽出物１１．８６％％、ケイヒに由来する精油抽出物１３．５６％、およびチョウジ、オレガノ、またはシナモンに由来する精油抽出物１１．３％を含むか、それらから本質的になるか、またはそれらからなる組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子に関する。
【０１０５】
カプセル化されていて、かつ／またはナノ粒子の形態である精油または精油抽出物の量は、様々であってよい。したがって、５０μｌ〜５００μｌが、カプセル化されてよいか、またはナノ粒子で存在してよい。他の側面では、１５０μｌ〜２５０μｌが、カプセル化されてよいか、またはナノ粒子で存在してよい。さらに他の側面では、前記精油または精油抽出物１００μｌ〜２００μｌが、カプセル化されてよいか、またはナノ粒子で存在してよい。さらに他の側面では、前記精油または精油抽出物１０μｌ〜２，０００μｌが、カプセル化されてよいか、またはナノ粒子で存在してよい。
【０１０６】
本発明の他の態様では、少なくとも１種の抗生物質が、上記のとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物と共にカプセル化されているか、またはナノ粒子で存在する。他の態様では、少なくとも１種の精油の組成物を、少なくとも１種の抗生物質と混合する。少なくとも１種の抗生物質は、親油性または疎油性であってよい。少なくとも１種の精油と共にカプセル化されていてよいか、またはそれに随伴してよい少なくとも１種の抗生物質には、ベータ−ラクタミン系抗生物質、たとえばアモキシシリン、アモキシシリン、およびピペラシリンであって、クラブラン酸、タゾバクタム、クロキサシリン、セフロキシム、セフォタキシム、またはイムペネムに随伴していてよいか、または随伴していなくてよいもの、アミノシド、たとえばゲンタマイシンおよびアミカシン、フルロキノロン（ｆｌｕｒｏｑｕｉｎｏｌｏｎｅ）系抗生物質、たとえばシプルフロキサシン（ｃｉｐｒｆｌｏｘａｃｉｎ）、オフロキサシン、ホスホマイシン系抗生物質、グリコペプチド系抗生物質、たとえばバンコマイシンおよびテイコプラニン、ニトロフラン系抗生物質、リファマイシン系抗生物質、マクロライド系抗生物質、たとえばジョサマイシンまたはクラリスロマイシン、ニトロ−イミダゾール系抗生物質、スルファミド＋トリメトプリム系抗生物質、シネルギスチン（ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｎ）系抗生物質、たとえばプリスチナマイシン、それらの薬学的に許容される塩、ならびにそれらの混合物が包含される。
【０１０７】
一側面では、組成物中か、もしくはカプセル化組成物中で本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物と共にカプセル化されているか、もしくはそれに随伴しているか、またはナノ粒子で存在するか、またはナノ粒子および本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物に随伴している本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質は、メロペネムおよびその薬学的に許容される塩から選択される。他の態様では、組成物中か、もしくはカプセル化組成物中で本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物と共にカプセル化されているか、もしくはそれに随伴しているか、またはナノ粒子で存在するか、またはナノ粒子および本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物に随伴している本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質は、リファンピシンおよびその薬学的に許容される塩から選択される。さらに他の態様では、組成物中か、もしくはカプセル化組成物中で本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物と共にカプセル化されているか、もしくはそれに随伴しているか、またはナノ粒子で存在するか、またはナノ粒子および本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物に随伴している本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質は、チゲサイクリンおよびその薬学的に許容される塩から選択される。メロペネム、リファンピシン、およびチゲサイクリン、ならびにそれらの薬学的に許容される塩の混合物は、本発明の他の側面を形成する。
【０１０８】
本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油もしくは少なくとも１種の精油抽出物を単独で有するか、もしくは一緒に配合されている本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油もしくは少なくとも１種の精油抽出物と本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質とを有する組成物、または単独でカプセル化されている本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油もしくは少なくとも１種の精油抽出物を有するか、もしくは一緒にカプセル化されている本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油もしくは少なくとも１種の精油抽出物と、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質とを有するかのいずれかのカプセル化組成物をさらに配合し、医薬品として投与することができる。同様に、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油もしくは少なくとも１種の精油抽出物を単独で有するか、または本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油もしくは少なくとも１種の精油抽出物と、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質とを一緒に有するナノ粒子をさらに配合し、医薬品として投与することができる。本発明のこの側面では、経口で、粘膜で、パッチ剤で、エアゾール剤で、静脈内で、局所で、ディフューザーなどで送達するために、カプセル化組成物および／またはナノ粒子を配合することができる。これらの配合方法は、当技術分野ではよく知られている。
【０１０９】
薬学的に許容される担体を他にも、配合物に加えることができる。
【０１１０】
たとえば、薬学的に許容される担体は、生理食塩水または緩衝生理食塩水であってよい。
【０１１１】
他の側面では、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油もしくは少なくとも１種の精油抽出物のみからなるか、もしくは本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油もしくは少なくとも１種の精油抽出物と、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質とを配合されている組成物、または単独でカプセル化されている本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油もしくは少なくとも１種の精油抽出物を有するか、もしくは一緒にカプセル化されている本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油もしくは少なくとも１種の精油抽出物と、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質とを有するかのいずれかのカプセル化配合物、または少なくとも１種の精油を単独で有するか、もしくは本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油抽出物を単独で有するか、もしくは本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油もしくは少なくとも１種の精油抽出物と、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質とを一緒に有するナノ粒子は、噴霧剤、エアゾール剤、または遅効放出マトリックス剤、またはパッチ剤に配合することができる。そのような配合物は、特定の環境、たとえば病院表面の周囲に分布させるためであるか、または空気中に噴霧されるか、またはこの適用が適切な場合には、ディフューザー中で使用されることは理解されるであろう。
【０１１２】
植物病原体を治療するためには、少なくとも１種の精油もしくは少なくとも１種の精油抽出物を有するか、もしくは本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油もしくは少なくとも１種の精油抽出物と、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質とを有するかのいずれかの組成物、単独でカプセル化されている本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油もしくは少なくとも１種の精油抽出物を有するか、もしくは一緒にカプセル化されている本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油もしくは少なくとも１種の精油抽出物と、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質とを有するかのいずれかのカプセル化組成物、および／または本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油もしくは少なくとも１種の精油抽出物を単独で有するか、もしくは本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油もしくは少なくとも１種の精油抽出物と、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質とを一緒に有するナノ粒子は、噴霧剤、エアゾール剤、または液剤の形態に配合することができる。
【０１１３】
本明細書に記載されている抗生物質と共に使用される場合、カプセル化組成物およびナノ粒子を包含する本明細書に記載されている組成物は全て、哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、および／または昆虫に投与される場合に細菌腸内叢を破壊しない。広域スペクトル抗生物質の服用による腸内細菌の数の変化が、宿主の健康および食物を消化する能力に影響を及ぼし得ることはよく知られている。腸内叢は、高いエネルギーレベルの維持に役立ち、免疫機能を増大させ、結腸中で、癌の原因となる化合物を破壊する。抗生物質を摂取することによって腸内叢の数が変化することで、炭水化物を発酵させ、胆汁酸を代謝する宿主の能力が低下し得、下痢を引き起こすことがある。したがって、本明細書に記載されているとおりの本発明の組成物を、本明細書に記載されているとおりの抗生物質と共に投与すると、宿主に、予期していなかった利益をもたらす。
【０１１４】
したがって、他の側面では、本発明は、哺乳類、魚類、鳥類、爬虫類、および／または昆虫において腸内叢を維持する方法を提供し、その際、前記方法は、哺乳類、魚類、鳥類、爬虫類、および／または昆虫に、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油もしくは少なくとも１種の精油抽出物と、本明細書に記載されているとおりの抗生物質からなる組成物、または単独でカプセル化されていて、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質に随伴している本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油もしくは少なくとも１種の精油抽出物を有するか、もしくは一緒にカプセル化されている本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油もしくは少なくとも１種の精油抽出物と、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質とを有するかのいずれかのカプセル化配合物、または本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油もしくは少なくとも１種の精油抽出物を有し、ナノ粒子に随伴している少なくとも１種の抗生物質を有するか、もしくは一緒にカプセル化されている本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油もしくは少なくとも１種の精油抽出物と、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質とを有するナノ粒子を投与することを含む。
【０１１５】
他の側面では、本発明は、環境中の感染因子（複数可）の量、特に細菌、真菌、寄生虫、望ましくない植生、雑草、および／または植物病原体の量を低減する方法を提供し、その際、前記方法は、本発明の組成物、カプセル化組成物、またはナノ粒子を、感染因子（複数可）を低減することが必要な環境の周囲に散布することを含む。この態様では、組成物、カプセル化組成物、またはナノ粒子は、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物のみを含有する。
【０１１６】
したがって、カプセル化組成物を、表面上、空気中、水中、物体上、植物上などに散布することができる。
【０１１７】
本発明の特定の態様では、低減すべき細菌は、たとえばスタフィロコッカス科、腸球菌科からの細菌、クロストリジウム科からの細菌、連鎖球菌科からの細菌、アエロコッカス科からの細菌、球菌科からの細菌、乳酸菌科からの細菌、ノカルジア科からの細菌、リステリア科からの細菌、コリネバクテリウム科からの細菌、バシラス科からの細菌、およびプロピオニバクテリウム科からの細菌から選択されるグラム陽性菌である。
【０１１８】
他の側面では、低減されるべき細菌は、ペプトコッカス属からのものである。
【０１１９】
他の側面では、低減されるべき細菌は、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ａｖｉｕｍ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｌｌｉｎａｒｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｖｉｒｉｄａｎｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ、Ａｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｖｉｒｉｄａｎｓ、Ｎｏｒｃａｄｉａ ａｓｔｅｒｏｉｄｅｓ、Ｎｏｃａｒｄｉａ ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ、Ｎｏｃａｒｄｉａ ｃａｖｉａｅ、Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｎｔｈｒａｃｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｉｓ ｃｅｒｅｕｓおよびＰｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍの群から選択されるグラム陽性菌である。
【０１２０】
本発明のさらに他の側面では、細菌は、グラム陰性菌であり、たとえばモラクセラ科からの細菌、レジオネラ科からの細菌、腸内細菌科からの細菌、シュードモナス科からの細菌、アルカリゲネス科からの細菌、スフィンゴモナス科からの細菌、パスツレラ科からの細菌、ナイセリア科からの細菌、パスツレラ科からの細菌、フラボバクテリウム科からの細菌、バクテロイデス科からの細菌、およびフソバクテリア科からの細菌からなる群から選択される。
【０１２１】
本発明のなおさらに他の側面では、細菌は、クレブシエラ属からの細菌、セラチア属からの細菌、シトロバクター属からの細菌、サルモネラ属からの細菌、赤痢菌属からの細菌、プロテウス属からの細菌、ヘモフィルス属からの細菌、カンピロバクター属からの細菌、レジオネラ属からの細菌、スフィンゴモナス属からの細菌、モラクセラ属からの細菌、キンゲラ属からの細菌、パスツレラ属からの細菌、キャプノサイトファガ属からの細菌、ナイセリア属からの細菌、バクテロイド属からの細菌、エンテロバクター属からの細菌、シュードモナス属からの細菌、フソバクテリウム属からの細菌、アクロモバクター属からの細菌、エシェリキア属からの細菌、およびアシネトバクター属からの細菌からなる群から選択されるグラム陰性菌である。
【０１２２】
本発明の他の側面では、細菌は、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｏｘｙｔｏｃａ、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｃａｌｃｏａｃｅｔｉｃｕＳ、Ｓｅｒｒａｔｉａ ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ、Ｃｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ ｆｒｅｕｎｄｉｉ、Ｃｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ ｋｏｓｅｒｉ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｐａｒａｉｎｆｌｕｅｎｚａ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ ｊｅｊｕｎｉ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ ｃｏｌｉ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｌｏｎｇｂｅａｃｈａｅ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｂｏｚｍａｎｉｉ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｍｉｃｄａｄｅｉ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ｃｌｏａｃａｅ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｈｅｒｍａｎｎｉｉ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕｔｉｄａ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｔｕｔｚｅｒｉ、Ａｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒ ｘｙｌｏｓｏｘｉｄａｎｓ、Ａｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒ ｄｅｎｉｔｒｉｆｉｃａｎｓ、Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ ｐａｕｃｉｍｏｂｉｌｉｓ、Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、Ｋｉｎｇｅｌｌａ ｋｉｎｇａｅ、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｍｕｌｔｉｃｉｄａ、Ｃａｐｎｏｃｙｔｏｐｈａｇａ ｃａｎｉｍｏｒｓｕｓ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｌａｃｔａｍｉｃａおよびＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｆｒａｇｉｌｉｓの種から選択されるグラム陰性菌である。
【０１２３】
本発明の特定の態様では、細菌は、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａまたはＡｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ ｂａｃｔｅｒｉａ（たとえばＡｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ５３７７またはＡｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ ｍｕｃｏｉｄ）である。
【０１２４】
本明細書に開示されている組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子によって低減され得る寄生虫感染には、蟯虫、Ｅｎｔｅｒｏｂｉｕｓ ｖｅｒｍｉｃｕｌａｒｉｓ、膣トリコモナス、トキソプラズマ症、ならびに腸内寄生虫、たとえばランブル鞭毛虫およびクリプトスポリジウムが包含される。分類学的には、寄生虫は、原生動物および蠕虫（Ｈｅｌｍｉｎｔｈｓ、Ｗｏｒｍｓ）である２つの主な群に分けることができる。
【０１２５】
原性動物および蠕虫感染の特性は、重要なことに様々である。原生動物は、単純な二分裂によって増殖する単細胞生物であり、そのヒト宿主内で増殖して、圧倒的な感染をもたらす数に増殖することができる。まれに例外はあるが、原性動物感染は、好酸球増加をもたらさない。
【０１２６】
蠕虫（Ｈｅｌｍｉｎｔｈｓ、Ｗｏｒｍｓ）は、多細胞であり、複雑な器官系を有する。蠕虫は、回虫と、条虫および吸虫を包含する扁虫（扁形動物）とにさらに分けることができる。
【０１２７】
原生動物とは異なり、蠕虫は、ヒト内で増殖することはないが、組織を介して移動するときに、好酸球応答を誘発し得る。大抵の蠕虫は、そのヒト宿主の外部で相当な時間を必要とする複雑な生活周期を有する。
【０１２８】
低減され得る真菌は、皮膚、爪、もしくは粘膜上に存在する表層真菌か、または酵母菌感染のいずれかであってよいか、または深部の全身真菌感染、たとえば咳、発熱、筋肉痛、頭痛および発疹をもたらす肺感染、血液感染、たとえば敗血症、ならびに中枢神経系感染、たとえば髄膜炎であってよい。
【０１２９】
低減され得る植物病原体には、子嚢菌綱からの真菌、たとえばフザリウム種、チエラヴィオプシス（Ｔｈｉｅｌａｖｉｏｐｓｉｓ）種、バーティシリウム種、およびＭａｇｍａｐｏｒｔｈ ｇｒｉｓｅａが包含される。低減され得るバシオジオミセテス（Ｂａｓｉｏｄｉｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱からの他の真菌には、リゾクトニア種、プクキニア種、およびＰｈａｋｏｓｐｏｒａ ｐａｃｈｙｒｈｉｚｉが包含される。
【０１３０】
本明細書に記載されている様々な組成物によって低減され得る他の植物病原体には、真菌様生物である卵菌類が包含される。卵菌類植物病原体の例には、フィチウム（Phythium）種、およびフチフトラ（Ｐｈｔｙｐｈｔｈｏｒａ）種が包含される。
【０１３１】
大抵の植物細菌病原体は、棒状桿菌であり、特異的な病原性因子、たとえば細胞壁崩壊酵素、毒素、エフェクタータンパク質、植物ホルモン、および菌体外多糖を有する。例には、フィトプラズマおよびスピロプラズマが包含される。
【０１３２】
追加の植物病原体には、植物ウイルス、ウイロイド、ウイルス様生物、ニームトード（ｎｅａｍｔｏｄｅｓ）、原生動物、および寄生植物、たとえばヤドリギおよびネナシカズラが包含される。
【０１３３】
さらに他の側面では、本発明は、哺乳類、昆虫、爬虫類、鳥類、魚類、望ましくない植生、雑草、および／または植物を感染、特に細菌感染、寄生虫感染、真菌感染、および／または植物病原体について予防または治療する方法を提供し、その際、前記方法は、そのような治療を必要とする哺乳類、昆虫、爬虫類、鳥類、魚類、および／または植物に、本明細書に記載されている本発明の組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子を投与することを含む。この態様では、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物は、カプセル化されているか、もしくはカプセル化されていなくてよいか、またはナノ粒子、および組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子に随伴している本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質の形態で存在してよいか、または本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物、および本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質は、組成物、カプセル化組成物、またはナノ粒子の形態の両方で存在してよい。他にも、この方法で、上記の様々な細菌、寄生虫、真菌、望ましくない植生、雑草、および／または植物病原体を治療することができる。
【０１３４】
哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、および／または植物を、感染（特に、細菌感染、寄生虫感染、真菌感染、望ましくない植生、雑草、および／または植物病原体）について治療する方法であって、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を脂質ナノカプセルでカプセル化し、前記カプセル化された、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を、本明細書に記載されているとおりのカプセル化されていない少なくとも１種の抗生物質に随伴して、そのような治療を必要とする哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、および／または植物に投与することを含む方法は、本発明の他の側面である。この特定の側面では、カプセル化された本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物、および本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質を一緒に投与するか、または本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を初めに投与し、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質を、少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物の後に投与するか、または本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質を初めに投与し、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質の後に投与する。この側面では、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物、および本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質を、この態様では使用することができる。他にも、この方法で、上記のとおりの様々な細菌、寄生虫、真菌、望ましくない植生、雑草、および／または植物を治療することができる。
【０１３５】
哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、および／または植物を、感染、または望ましくない植生、および／または雑草（特に、細菌感染、寄生虫感染、真菌感染、および／または植物病原体）について治療する方法であって、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物をナノ粒子の形態で用意し、前記カプセル化された、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を、カプセル化されていない本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質に随伴させて、そのような治療を必要とする哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、望ましくない植生、雑草、および／または植物に投与することを含む方法は、本発明の他の側面である。この特定の側面では、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を有するナノ粒子、および本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質を一緒に投与するか、または本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を初めに投与し、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質を、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物の後に投与するか、または本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質を初めに投与し、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質の後に投与する。この側面では、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物、および前記の少なくとも１種の抗生物質を、この態様では使用することができる。他にも、この方法で、上記のとおりの様々な細菌、寄生虫、真菌、望ましくない植生、雑草、および／または植物病原体を治療することができる。
【０１３６】
さらに他の側面では、本発明は、細菌、寄生虫、真菌、望ましくない植生、雑草、および／または植物病原体の増殖を低減および／または阻止および／または制限および／または遅延させる方法を提供し、その際、前記方法は、そのような治療を必要とする哺乳類、昆虫、鳥類、魚類、および／または植物に、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を有する組成物、本明細書に記載されているカプセル化精油または少なくとも１種の精油抽出物、および／または本明細書に記載されているとおりのナノ粒子、または本明細書に記載されているとおりのホスファチジルコリン６９％のダイズレシチンの混合物、カプリル酸−カプリン酸トリグリセリド、ならびに遊離ポリエチレングリコール６６０およびポリエチレングリコール６６−ヒドロキシステアレートの混合物を含む中空脂質ナノカプセルを投与することを含む。
【０１３７】
環境中の細菌、寄生虫、真菌、望ましくない植生、雑草、および／または植物病原体の量を低減および／または阻止および／または制限および／または遅延させる方法であって、本明細書に記載されているとおりの本発明の組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子、またはホスファチジルコリン６９％のダイズレシチンの混合物、カプリル酸−カプリン酸トリグリセリド、ならびに遊離ポリエチレングリコール６６０およびポリエチレングリコール６６−ヒドロキシステアレートの混合物を含む中空脂質ナノカプセルを環境に散布することによって、細菌、寄生虫、真菌、望ましくない植生、雑草、および／または植物病原体において低減および／または阻止および／または制限および／または遅延させることを含む方法。
【０１３８】
物体上の細菌、寄生虫、真菌、望ましくない植生、雑草、および／または植物病原体の量を低減および／または阻止および／または制限および／または遅延させる方法であって、本明細書に記載されているとおりの本発明の組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子、またはホスファチジルコリン６９％のダイズレシチンの混合物、カプリル酸−カプリン酸トリグリセリド、ならびに遊離ポリエチレングリコール６６０およびポリエチレングリコール６６−ヒドロキシステアレートの混合物を含む中空脂質ナノカプセルを前記物体上またはその周囲に設置することによって、細菌、寄生虫、真菌、望ましくない植生、雑草、および／または植物病原体において低減および／または阻止および／または制限および／または遅延させることを含む方法。
【０１３９】
カプセル化されて、かつ／またはナノ粒子の形態で投与される本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油（複数可）または少なくとも１種の精油抽出物、ならびに／または本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油、または少なくとも１種の精油抽出物を有する組成物、カプセル化組成物、および／もしくはナノ粒子に随伴している本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質（複数可）に応じた用量か、またはカプセル化されているか、またはナノ粒子の形態の本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物、および本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質に応じた用量で、かつ治療されるべき感染、および／または植物病原体（特に、細菌、寄生虫、真菌感染、望ましくない植生、雑草、および／または植物病原体）に応じた用量で、カプセル化組成物を投与する。したがって、肺炎を治療するために、尿路感染を治療するためとは異なる投薬量の抗生物質を使用することは、当技術分野ではよく知られている。たとえばアミノグリコシド系のゲンタマイシンは一般に、単回１日用量では５ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。しかしながら、少なくとも１種の精油および組成物のカプセル化と組合せることによる相乗効果によって、１ｍｇ／ｋｇ〜３ｍｇ／ｋｇの用量を使用することができる。
【０１４０】
本明細書に記載されている全ての方法において、細菌感染、寄生虫感染、および／または真菌感染は、院内感染に由来し得る。累積的に、または別法で、これらの方法において、哺乳類はヒト、または哺乳類であってよい。累積的に、または別法では、これらの方法において、カプセル化組成物は、経口で、または粘膜で、またはエアゾール剤を介して、または静脈内で、または局所的に投与することができる。
【０１４１】
他の態様では、本発明は、組成物中の本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物の有効性を増大させる方法（またはこの少なくとも１種の精油（複数可）または少なくとも１種の精油抽出物の量を低減する方法）を提供し、その際、前記方法は、本明細書に記載されているとおりの精油または少なくとも１種の精油抽出物を、２０ｎｍ〜２００ｎｍのサイズを有する脂質ナノカプセルでカプセル化するか、少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物をナノ粒子で配合することを含む。
【０１４２】
医薬品中の抗生物質の量を低減する方法であって、前記方法は、本明細書で定義されるとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を有する組成物、本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を有するカプセル化組成物、および／または本明細書で定義されるとおりの少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を有するナノ粒子を、組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子中に存在する少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物と共にカプセル化されているか、それらに随伴している本明細書に記載されているとおりの少なくとも１種の抗生物質と共に加えることを含む。
【０１４３】
他の側面では、本発明は、医薬品として使用するための、特に、哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、および／または昆虫における感染、特に、細菌感染、寄生虫感染、および／または真菌感染を予防および／または治療するために使用するための、本明細書に開示されているとおりの組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子に関する。
【０１４４】
本発明はまた、植物病原体を治療するための組成物として使用するための、特に、植物において真菌、卵菌類、細菌、ウイルス、線虫、原生動物、および寄生植物を予防および／または治療するために使用するための、本明細書に開示されているとおりの組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子に関する。
【０１４５】
本発明は、望ましくない植生および／または雑草を治療する方法であって、本明細書に開示されているとおりの組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子を、前記望ましくない植生、および／または雑草上に設置することによる方法に関する。
【０１４６】
植物疾患を予防および／または治療するためか、または哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、および／または昆虫における感染、特に、細菌感染、寄生虫感染、および／または真菌感染を予防および／または治療することが意図されている医薬品または組成物を製造するための本明細書に記載されているとおりの組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子の使用も、本発明の側面である。これに関連して、前記の少なくとも１種の精油および少なくとも１種の抗生物質を、これらの態様では使用することができる。他にもこれらの態様を、上記の様々な細菌、寄生虫、真菌感染、および／または植物病原体を治療するために行うことができる。他にも、細菌、寄生虫、および／または真菌感染は、院内感染であってよい。
【０１４７】
哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、および／または昆虫において腸内叢を維持するための本明細書に記載されているとおりの組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子の使用は、本発明の他の側面である。
【０１４８】
細菌耐性を制御するための本明細書に記載されているとおりの組成物、カプセル化組成物、および／またはナノ粒子の使用も、本発明のさらに他の側面である。
【０１４９】
望ましくない植生および／または雑草を治療するための本明細書に記載されているとおりのナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物の使用は、本発明の他の側面である。
【０１５０】
いくつかの本発明の態様および／または側面を記載した。しかしながら、本発明の意図および範囲から逸脱することなく、様々に変更することができることは、理解されるであろう。
【実施例】
【０１５１】
例１
転相法によって得られる基本のマイクロエマルションの調製（中空脂質ナノカプセル）
Ｌｉｐｏｉｄ  Ｓ７５−３（登録商標）（ホスファチジルコリン６９％のダイズレシチン）７５ｍｇ、親油性Ｌａｂｒａｆａｃ  ＷＬ  １３４９（登録商標）（カプリル酸−カプリン酸トリグリセリド）５０４ｍｇ、Ｓｏｌｕｔｏｌ  ＨＳ（登録商標）（遊離ポリエチレングリコール６６０およびポリエチレングリコール６６−ヒドロキシステアレートの混合物）５０４ｍｇ、水１５．３８３ｇ、および塩化ナトリウム８８ｍｇを含有するエマルション５ｇを調製した。
【０１５２】
上記の成分を全て、同じビーカー中で、磁気撹拌下に置いた。
【０１５３】
次いで、８５℃の温度が達成されるまで、熱を加えた。磁気撹拌を継続しながら、系を６０℃の温度に冷却した。これらの加熱サイクル（８５℃〜６０℃）を３回行って、さらに構造化されているマイクロエマルションを得た。
【０１５４】
次いで、転相帯域内か、またはそれに近い温度で、この場合には６５℃で、安定化させることによって、系を、そのマイクロエマルション形態で維持した。
【０１５５】
基本マイクロエマルションの希釈物を冷却した後に、中空ナノカプセルを配合する。
【０１５６】
種々の懸濁液を単独で利用するか、または水中で希釈するか、または再濃縮するか、または凍結乾燥させた。
【０１５７】
例２
精油（Ｒ０７）を装入された中空親油性ナノカプセルの調製
５０ｎｍの平均サイズを有し、精油（Ｒ０７）１００μｌまたは２００μｌを装入されているナノカプセルを調製した。組成物Ｒ０７は、カルバクロール約３３．２０％または７０％（カルバクロール１４．７単位グラム）を有するモロッコまたはバルカン諸国産のオレガノに由来する精油、オイゲノール８２．５７％（オイゲノール７０．６単位グラム）を有するマダガスカル産のチョウジの葉に由来する精油、およびトランスシンナムアルデヒド７７．５７％（トランスシンナムアルデヒド１４．７単位グラム）を有する中国産のシナモンに由来する精油を含んだ。
【０１５８】
Ｒ０７  １００μｌ、または２００μｌを、例１において記載されたとおりの転相によって得たマイクロエマルションに４５℃で、１１５ｇ／ｌの濃度で加えた。負荷されたＲ０７マイクロエマルションを希釈または冷却した後に、Ｒ０７は、ナノカプセル中にカプセル化された。
【０１５９】
例３
組成物ＡＴ１１０の調製
オレガノに由来するカルバクロール抽出物約１１．８６％（カルバクロール５．２５単位グラム）、マダガスカル産のチョウジの葉またはチョウジに由来する精油抽出物であるオイゲノール６３．２８％（オイゲノール５４．１０単位グラム）、中国産のシナモンに由来する精油抽出物であるトランスシンナムアルデヒド抽出物１３．５６％（トランスシンナムアルデヒド２．５７単位グラム）、ならびにオレガノ、チョウジ、および／またはシナモンに由来するトランス−β−カリオフィレン１１．３％（トランス−β−カリオフィレン１．８０単位グラム）を一緒に混合して、組成物ＡＴ１１０を形成した。
【０１６０】
例４
ナノ粒子の調製
Ｓｏｌｕｔｏｌ  ＨＳ（登録商標）（遊離ポリエチレングリコール６６０およびポリエチレングリコール６６−ヒドロキシステアレートの混合物）５％〜２０％、およびＬｉｐｏｉｄ  Ｓ７５−３（登録商標）（ホスファチジルコリン６９％のダイズレシチン）１％〜５％、塩化ナトリウム１〜１０％、ＡＴ１１０またはＲ０７  １０〜２０％、および水を調製した。
【０１６１】
上記の成分を全て、同じビーカー中で、磁気撹拌下に置いた。
【０１６２】
次いで、８５℃の温度が達成されるまで、熱を加えた。磁気撹拌を継続しながら、系を６０℃の温度に冷却した。これらの加熱サイクルを３回行って、さらに構造化されているマイクロエマルションを得た。
【０１６３】
次いで、転相帯域内か、またはそれに近い温度で安定化させることによって、系を、そのマイクロエマルション形態で維持した。
【０１６４】
次いで、懸濁液または負荷されたナノ粒子を得るために、この系を冷却および／または希釈した。
【０１６５】
例５
Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａでのカプセル化精油（ＲＯ７）および非カプセル化オイル（ＲＯ７）の動態研究
使用されたＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａの菌株は、２×１０８ＣＦＵ（コロニー形成単位）に対応する０．５ＭＦ（マクファーランド）の懸濁液であった。最終接種材料は、１／１００ｅＭＦ、したがって約２×１０６ＣＦＵ／ｍｌの希釈に対応した。
【０１６６】
非カプセル化精油を、その使用前に、精油（Ｒ０７）２ｍｌを取り、それにＤＭＳＯ３ｍｌを加えることによって初めに希釈した。次いで、１００ｍｇ／ｌまたは１００μｇ／ｍｌの溶液のために、希釈された精油１ｍｌをＭｕｌｌｅｒ−Ｈｉｌｔｏｎブロス３ｍｌで希釈したが、これは、１０％の濃度に対応した。１０％溶液を滅菌ミネラルウォーターで初めに希釈し、Ｍｕｌｌｅｒ−Ｈｉｌｔｏｎブロス中で最後に希釈することによって、０．０５％〜０．５％の最終濃度を得た。
【０１６７】
カプセル化および非カプセル化精油を準阻止濃度（有効濃度のすぐ下である濃度）で試験して、起こり得る相乗作用、または中立、または拮抗的関連を認めることができるようにした。
【０１６８】
菌株をＭｕｌｌｅｒ−Ｈｉｌｔｏｎブロスに入れ、上記のとおりに希釈されたカプセル化Ｒ０７精油または非カプセル化精油のいずれかと接触させた。細菌の数を０時（Ｔ０）、Ｔ０から６時間後（Ｔ６）、およびＴ０から２４時間後（Ｔ２４）に測定した。
【０１６９】
結果は、図１および２に示している。図１では、０．１％の濃度のカプセル化配合物でＴ６の時点で、非カプセル化精油Ｒ０７の活性とカプセル化精油Ｒ０７の活性との間で、０．７ｌｏｇの差がある。この差違は、非カプセル化精油Ｒ０７で、より急速な再増殖がある２４時間目にはさらにより顕著であり、係数１００である２ｌｏｇの差に至る。０．１％濃度でカプセル化精油には、抗生物質に対して多剤耐性であることが知られている菌株において静菌活性が存在することが証明された。優れた殺菌活性が、０．４％精油Ｒ０７でのカプセル化配合物には存在する。
【０１７０】
種々の懸濁液を単独で利用するか、または水中で希釈するか、または再濃縮するか、または凍結乾燥させた。
【０１７１】
例６
Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ５３７７に対するカプセル化精油（ＲＯ７）および非カプセル化オイル（ＲＯ７）の動態研究
この細菌Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ５３７７を選択したが、それというのも、この細菌は病院内における院内大発生および流行性大発生の原因である細菌として知られているためである。この細菌は、その環境に順応することができ、抗生物質に対して多剤耐性である細菌である
使用されたＡｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ５３７７の菌株は、２×１０８ＣＦＵ（コロニー形成単位）に対応する０．５ＭＦ（マクファーランド）の懸濁液であった。最終接種材料は、１／１００ｅＭＦ、したがって約２×１０６ＣＦＵ／ｍｌの希釈に対応した。
【０１７２】
非カプセル化精油（Ｒ０７）を、その使用前に、精油２ｍｌを取り、それにＤＭＳＯ３ｍｌを加えることによって初めに希釈した。次いで、１００ｍｇ／ｌまたは１００μｇ／ｍｌの溶液のために、希釈された精油１ｍｌをＭｕｌｌｅｒ−Ｈｉｌｔｏｎブロス３ｍｌで希釈したが、これは、１０％の濃度に対応した。１０％溶液を滅菌ミネラルウォーターで初めに希釈し、Ｍｕｌｌｅｒ−Ｈｉｌｔｏｎブロス中で最後に希釈することによって、０．０５％〜０．５％の最終濃度を得た。
【０１７３】
カプセル化および非カプセル化精油を準阻止濃度（有効濃度のすぐ下である濃度）で試験して、起こり得る相乗作用、または中立、または拮抗的関連を認めることができるようにした。
【０１７４】
菌株をＭｕｌｌｅｒ−Ｈｉｌｔｏｎブロスに入れ、上記のとおりに希釈されたカプセル化Ｒ０７精油または非カプセル化精油（Ｒ０７）のいずれかと接触させた。細菌の数を０時（Ｔ０）、Ｔ０から６時間後（Ｔ６）、およびＴ０から２４時間後（Ｔ２４）にカウントした。
【０１７５】
例７
Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ ｍｕｃｏｉｄに対するカプセル化精油（ＲＯ７）および非カプセル化オイル（ＲＯ７）の動態研究
使用されたＡｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ ｍｕｃｏｉｄの菌株は、２×１０８ＣＦＵ（コロニー形成単位）に対応する０．５ＭＦ（マクファーランド）の懸濁液であった。最終接種材料は、１／１００ｅＭＦ、したがって約２×１０６ＣＦＵ／ｍｌの希釈に対応した。
【０１７６】
非カプセル化精油を、その使用前に、精油２ｍｌを取り、それにＤＭＳＯ３ｍｌを加えることによって初めに希釈した。次いで、１００ｍｇ／ｌまたは１００μｇ／ｍｌの溶液のために、希釈された精油１ｍｌをＭｕｌｌｅｒ−Ｈｉｌｔｏｎブロス３ｍｌで希釈したが、これは、１０％の濃度に対応した。１０％溶液を滅菌ミネラルウォーターで初めに希釈し、Ｍｕｌｌｅｒ−Ｈｉｌｔｏｎブロス中で最後に希釈することによって、０．０５％〜０．５％の最終濃度を得た。
【０１７７】
カプセル化および非カプセル化精油を準阻止濃度（有効濃度のすぐ下である濃度）で試験して、起こり得る相乗作用、または中立、または拮抗的関連を認めることができるようにした。
【０１７８】
菌株はＭｕｌｌｅｒ−Ｈｉｌｔｏｎブロス中にあり、上記のとおりに希釈されたカプセル化Ｒ０７精油または非カプセル化精油（Ｒ０７）のいずれかと接触させた。細菌の数を０時（Ｔ０）、Ｔ０から６時間後（Ｔ６）、およびＴ０から２４時間後（Ｔ２４）に測定した。
【０１７９】
例８
少なくとも１種の精油および少なくとも１種の抗生物質のカプセル化
ナノカプセルを、例１においてのとおりに調製する。カルバクロール約６３．０９％（カルバクロール２５単位グラム）を有するスペイン産のオレガノに由来する精油、チモール約４７．３７％（チモール８．７５単位グラム）を有するスペイン産のレッドタイム（Ｔｈｙｍｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ）の精油、オイゲノール８５．１９％（オイゲノール１８．７５単位グラム）を有するマダガスカル産のチョウジ（Ｅｕｇｅｎｉａ ｃａｒｙｏｐｈｙｌｌａｔａ）に由来する精油、チモール約２７．６８％（チモール６．２５単位グラム）を有するアルバニア産のキダチハッカの精油、ユーカリ約５５．２６％（ユーカリ９．３８単位グラム）を有するマダガスカル産のラヴィンサラに由来する精油、シネオール−１，８約４８．５６％（シネオール９．３８単位グラム）を有するクロアチア産のゲッケイジュの葉（Ｌａｕｒｕｓ ｎｏｂｉｌｉｓ）の精油、アルファピネン約６４．８４％（アルファピネン６．２５単位グラム）を有するオウシュウアカマツに由来する精油、およびシネオール，１−８約６２．１１％（シネオール６．２５単位グラム）を有する生カユブテ（ｇｒｅｅｎ Ｃａｊｅｐｕｔ）に由来する精油からなる１００μｌを調製する。メロペネム１グラムおよび精油を、例１において転相によって得られたマイクロエマルションに４５℃で、１１５ｇ／ｌの濃度で加える。
【０１８０】
種々の懸濁液を単独で利用するか、または水中で希釈するか、または再濃縮するか、または凍結乾燥させた。
【０１８１】
例９
２４時間の腹腔内注射によるＲ０７のＬＤ５０の決定
６週齢の雌マウス２５匹（Ｃ３Ｈ／ＨｅＮ）をそれぞれマウス５匹からなる５群に分けた。マウスはそれぞれ体重約２０ｇであった。この例で使用される中空ナノカプセルを、例１に従って調製した。カプセル化Ｒ０７ナノカプセルは、例２に従って調製した。
【０１８２】
マウス５匹は、対照群として生理的血清の腹腔内注射１００μｌを受けた。
【０１８３】
マウス５匹はＲ０７  １２．５ｍｇを投与されたが、これは、Ｒ０７  １００μｌを生理的血清７００μｌ中で希釈することによって配合されていて、この希釈液１００μｌを各マウスに腹腔内注射した。
【０１８４】
マウス５匹はＲ０７  ２５ｍｇを投与されたが、これは、Ｒ０７  ２００μｌを生理的血清６００μｌ中で希釈することによって配合されていて、この希釈液１００μｌを各マウスに腹腔内注射した。
【０１８５】
マウス５匹はＲ０７  ５０ｍｇを投与されたが、これは、Ｒ０７  ４００μｌを生理的血清４００μｌ中で希釈することによって配合されていて、この希釈液１００μｌを各マウスに腹腔内注射した。
【０１８６】
Ｒ０７  １００μｌを各マウスに腹腔内注射することによって、マウス５匹はＲ０７  １００ｍｇを投与された。
【０１８７】
Ｒ０７配合物を、滅菌生理的血清の水溶液中、１ｇ／ｍｌの濃度で投与した。次いで、マウス５匹を、投与されたＲ０７の量が標識されているその個々のケージおよび対照群に入れた。ケージを、温度および湿度制御された室内に設置した。マウスは自由に食餌および水を与えられた。
【０１８８】
マウスの死亡率を２４時間後にチェックした。次の表Ｉは、結果を示している。
【表１】
2014507441.tif 000002
【０１８９】
次いで、マウスの死亡百分率を、投与されたＲ０７の用量（ｍｇ）に対してプロットした。このグラフは、図７に示されている。Ｙ＝１．１２７×−７．８２６１であり、線方程式（ｔｈｅ ｅｑｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｌｉｎｅ）を表している。１．１２７は、この線の傾斜である。小文字のｙは、死亡の百分率を表し、ｘは、投与されたＲ０７の用量（ミリグラム）を表している。Ｒ２は、線の相関係数を表している。したがって、死亡率５０％では、ｘ＝（５０＋７．８２６１）／１．１２７＝５１．３１ｍｇである。したがって、Ｒ０７でのＬＤ５０は、５１．３１ｍｇ、したがって２５６５ｍｇ／ｋｇである。
【０１９０】
マウスに腹腔内注射した後のＲ０７と他の抗生物質との比較を下記の表ＩＩに示す。ＬＤ５０の結果は、文献から得ることができる。
【表２】
2014507441.tif 000003
【０１９１】
したがって、他の公知の抗生物質と比較してのＬＤ５０に基づくＲ０７の毒性は、シプロフロキサシンに対しては２．２倍低く、ジョサマイシンに対しては３．３倍低く、ストレプトマイシンに対しては４．９倍低く、リファンピシンに対しては６．２倍低く、エリスロマイシンに対しては９．２倍低く、ゲンタマイシンに対しては１０．５倍低く、デメクロサイクリンに対しては２１．４倍低い。
【０１９２】
Ｒ０７の毒性は、ピペラシリンよりも３．９倍高く、アモキシシリンよりも１．４倍高いことが示された。
【０１９３】
例１０
肺モデルでのマウスにおけるナノカプセル化Ｒ０７の研究
この実験では、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉでのその感受性およびその近親交配による結果の再現性によって、雌マウスＣ３Ｈ／ＨｅＮを選択して使用した。シクロフォスファミド１５０μｌ（Ｅｎｄｏｘａｎ、１５０ｍｇ／ｋｇ）を感染の４日前および３日前に腹腔内注射することによって、マウスを一時的に好中球減少させた。マウスを一時的に免疫抑制することの重要性は、顆粒球での肺炎の発生を後日に持続しつつ、微生物ＡＹＥ Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉを肺に移植することが可能であることである。顆粒球の流入は、２日目に生じた。
【０１９４】
挿管チューブを使用して、酸素３、およびイソフルラン０．５〜１の圧力下でイソフルランで短時間麻酔されたマウスに、ＡＹＥ Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉの接種を気管内で行った。マウスが眠ったら、チューブを気管内に導入した。チューブの試験リングが、食道ではなく気道に確かに配置されていることをさらに確認した。ＡＹＥ  Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉを、生理的血清５０μｌ中５×１０６ＣＦＵ（コロニー形成単位）の懸濁液で投与した。次いで、マウスを、１ケージ当たり最大で動物５匹からなる群でケージに入れた。ケージを、温度および湿度制御された室内に設置した。マウスは自由に食餌および水を与えられた。
【０１９５】
マウスの生存を、５日間評価し、マウスの臨床基準、たとえばその体重、毛皮、運動性、および結膜炎の有無も管理した。
【０１９６】
中空ナノカプセルは、例１に従って調製した。カプセル化Ｒ０７ナノカプセルは、例２に従って調製した。マウスに投与する前に、中空ナノカプセルとカプセル化Ｒ０７ナノカプセルとの両方を、滅菌生理的血清中で希釈した。
【０１９７】
ナノカプセル中のカプセル化Ｒ０７の濃度は、２０ｍｇ／ｍｌであった。２０ｇのマウスでは、これは、１日当たりマウス１匹当たりＲ０７ ０．４ｍｇに対応する。
【０１９８】
治療薬を、無作為化され、次のとおりに８群に分けられたマウス４０匹に、３日間投与した：
群１  マウス５匹が、生理学的血清の腹腔内注射３回を４時間間隔で投与された。したがって、滅菌生理的血清２００μｌが１日３回、群１内のマウス５匹それぞれに注射された。
【０１９９】
群２  マウス５匹が、活性成分を欠いた中空ナノカプセルの腹腔内注射３回を４時間間隔で、１２ｍｇ／日の濃度で投与された。したがって、２０ｍｇ／ｍｌで中空ナノカプセル２００μｌを１日３回、群２のマウス５匹それぞれに注射した。
【０２００】
群３  マウス５匹が、カプセル化Ｒ０７の腹腔内注射を４時間間隔で、１２ｍｇ／日の濃度で投与された。したがって、２０ｍｇ／ｍｌのカプセル化Ｒ０７ナノカプセル２００μｌを、１日３回、群３のマウス５匹それぞれに注射した。
【０２０１】
群４  マウス５匹が、カプセル化Ｒ０７の腹腔内注射を４時間間隔で、６ｍｇ／日の濃度で投与された。したがって、２０ｍｇ／ｍｌのカプセル化Ｒ０７ナノカプセル４ｍｌを、滅菌生理的血清４ｍｌに加え、２００μｌを１日３回、群４のマウス５匹それぞれに注射した。
【０２０２】
群５  マウス５匹が、カプセル化Ｒ０７の腹腔内注射を４時間間隔で、３ｍｇ／日の濃度で投与された。したがって、１０ｍｇ／ｍｌのカプセル化Ｒ０７ナノカプセル４ｍｌを、滅菌生理的血清４ｍｌに加え、２００μｌを１日３回、群５のマウス５匹それぞれに注射した。
【０２０３】
群６  マウス５匹が、カプセル化Ｒ０７の腹腔内注射を４時間間隔で、１．５ｍｇ／日の濃度で投与された。したがって、５ｍｇ／ｍｌのカプセル化Ｒ０７ナノカプセル４ｍｌを、滅菌生理的血清４ｍｌに加え、２００μｌを１日３回、群６のマウス５匹それぞれに注射した。
【０２０４】
群７  マウス５匹が、カプセル化Ｒ０７の腹腔内注射を４時間間隔で、０．７５ｍｇ／日の濃度で投与された。したがって、２．５ｍｇ／ｍｌのカプセル化Ｒ０７ナノカプセル４ｍｌを、滅菌生理的血清４ｍｌに加え、２００μｌを１日３回、群７のマウス５匹それぞれに注射した。
【０２０５】
群８  マウス５匹が、カプセル化Ｒ０７の腹腔内注射を４時間間隔で、０．３７５ｍｇ／日の濃度で投与された。したがって、１．２５ｍｇ／ｍｌのカプセル化Ｒ０７ナノカプセル４ｍｌを、滅菌生理的血清４ｍｌに加え、２００μｌを１日３回、群８のマウス５匹それぞれに注射した。
【０２０６】
各群のマウスの臨床評価を５日間にわたって記録した。行った臨床評価は、各マウスの体重、毛皮の状態、運動性、および結膜炎の有無であった。次の格付けシステムを使用した：
毛皮の状態について：
０＝正常な毛皮、平滑
１＝粗く硬い毛で覆われている、脂っぽい
運動性について：
０＝正常で自発的な運動性
１＝刺激後に運動性
２＝運動性なし
結膜炎について
０＝結膜炎なし
１＝結膜炎あり
最大スコアが４である上記項目の合計が、各マウスの健康状態を表す。スコア０は、良好な健康を表している。
【０２０７】
マウスを朝および夜にチェックして、もしあれば、死亡したマウスを見つけて、死亡したマウスはケージから除去した。
【０２０８】
得られた結果を、下記の表ＩＩＩに示す。
【表３−１】
2014507441.tif 000004
【表３−２】
2014507441.tif 000005
【表３−３】
2014507441.tif 000006
【表３−４】
2014507441.tif 000007
【表３−５】
2014507441.tif 000008
【表３−６】
2014507441.tif 000009
【表３−７】
2014507441.tif 000010
【０２０９】
対照および中空ナノカプセル。最低スコアが、カプセル化Ｒ０７を０．７５ｍｙおよび１．５ｍｇで投与された群で得られた。
【０２１０】
死亡百分率
【表３−８】
2014507441.tif 000011
【表３−９】
2014507441.tif 000012
【０２１１】
体重減少
この例で示された結果から、全てのマウスでその全体重の１５％である平均３グラムの重大な体重減少が１日目にあることが明らかである。２日目に、マウスは、平均１グラムで体重減少し続けた。カプセル化Ｒ０７ナノカプセル６ｍｇを投与されたマウス５のみが、４日目から体重を回復し始めた。他のマウスでは４日目に、体重は安定したが、体重の回復はなかった。
【０２１２】
図８は、各群での平均体重の進展を示している。
【０２１３】
臨床評価スコア
結果は、図９〜１１に示されている。
【０２１４】
臨床評価スコアは、３の平均スコアを有した。
【０２１５】
死亡百分率を、次の表ＩＶに示す。
【表４】
2014507441.tif 000013
【０２１６】
各群での死亡百分率の棒グラフを図１２に示す。最も高い死亡率は、対照群においてであり、カプセル化Ｒ０７ナノカプセル１２ｍｇを投与された群３は、２日目に死亡率１００％であった。
【０２１７】
群２、４、および８では、８０％の死亡率が５日目に観察された。群５および６では、死亡率は６０％であった。最も低い死亡率は、２０％が観察された群７において観察された。
【０２１８】
群７に３日間投与された０．７５ｍｇ／マウス／日でのカプセル化Ｒ０７ナノカプセルの用量によって、マウス５匹からなる個体群のうちの８０％の生存を維持することができた。１２ｍｇ／マウス／日を投与された群３を除いて、カプセル化Ｒ０７ナノカプセルで治療されたマウスの死亡率は、対照群１よりも長く生き延びた。
【０２１９】
例１１
マウスにおける消化共生叢に対する、Ｒ０７、およびカプセル化Ｒ０７ナノカプセル、アモキシシリンおよびクラブラン酸の組合せ、およびフラクトオリゴ糖の衝撃の評価
３ヶ月齢の雌のＳｗｉｓｓマウス４５匹を無作為化し、１ケージ当たり５匹からなる９群に分けた。この例のケージを、温度および湿度制御された室内に設置した。マウスは自由に食餌および水を与えられた。
【０２２０】
９群の各マウスは、下記を投与された：
群１  対照  生理的血清１００μｌを１日３回、したがって１日当たり３００μｌを強制経口投与した。
【０２２１】
群２には、１日３回、１．４ｍｇ／ｍｌのアモキシシリンおよびクラブラン酸（Ａｕｇｍｅｎｔｉｎ）１００μｌ（２０ｇのマウスでは１日当たり０．７５ｍｇの投薬量に対応する）を強制経口投与した。
【０２２２】
群３には、１日３回、１．４ｍｇ／ｍｌのＲ０７  １００μｌ（０．４ｍｇ／マウス／日の用量に対応する）を単独で強制経口投与した。
【０２２３】
群４には、１日３回、１．４ｍｇ／ｍｌのカプセル化Ｒ０７ナノカプセル１００μｌ（０．４ｍｇ／マウス／日の用量に対応する）を強制経口投与した。
【０２２４】
群５には、１日３回、２．８ｍｇ／ｍｌのカプセル化Ｒ０７ナノカプセル１００μｌ（０．８ｍｇ／マウス／日の用量に対応する）を強制経口投与した。
【０２２５】
群６には、１日３回、２．８ｍｇ／ｍｌの中空ナノカプセル１００μｌを強制経口投与した。
【０２２６】
群７には、１日３回、１．４ｍｇ／ｍｌのＲ０７および８．６ｍｇ／ｍｌのフラクトオリゴ糖の溶液１００μｌを強制経口投与した。
【０２２７】
群８には、１日３回、１．４ｍｇ／ｍｌのカプセル化Ｒ０７ナノカプセルおよび８．６ｍｇ／ｍｌのフラクトオリゴ糖の溶液１００μｌを強制経口投与した。
【０２２８】
群９には、１日３回、２．８ｍｇ／ｍｌのＲ０７の溶液１００μｌおよび８．６ｍｇ／ｍｌのフラクトオリゴ糖を強制経口投与した。
【０２２９】
上記の投与を、４時間間隔で５日間、０日目から４日目まで実施した。
【０２３０】
各マウスの糞便を１から４日目の朝、最初に強制経口投与する前に、滅菌ピンセットを用いて収集し、滅菌エッペンドルフ管に入れ、秤量し、後で分析するために−８０℃で保存した。糞便を他にも、８日目に、最終の強制経口投与から４日後に収集した。
【０２３１】
実験の終了時に、ＣＯ２でマウスを安楽死させた。
【０２３２】
マウスの消化管の叢中に存在する細菌の数および種類の同定
糞便を室温で解凍した。それぞれの糞便を秤量し、蒸留水中で希釈し、均質化した。重量が≦０．０５０ｇであったら、蒸留水１ｍｌを使用した。重量が≦０．１００ｇであったら、蒸留水５ｍｌを使用した。重量が≧０．１００ｇであったら、蒸留水１０ｍｌを使用して、全ての重量において１０−１の希釈を得た。１０−３および１０−５の希釈も、企図した。
【０２３３】
各希釈液１００μｌを、３つの異なる種類の寒天上に画線した；血液寒天（ＢＡ）、グラム陽性細菌の選択を可能にする抗生物質阻止薬を含有する寒天（ＣＮＡ）、および色素産生尿路感染寒天である寒天（ＵＴＩ）。
【０２３４】
各試料を寒天上に画線した後に、血液寒天およびＵＴＩ寒天プレートを、微生物インキュベーター内、３７℃で２４時間、好気性条件下でインキュベートした。ＡＮＣおよびＢＡプレートを、微生物インキュベーター内、３７℃で４８時間、好気性条件、および脱酸素されたジャー内での嫌気性条件下でインキュベートした。好気性条件下で増殖した異なるコロニーの単離を、血液寒天プレート上で行った。
【０２３５】
コロニーを着色することで、細菌がグラム陽性またはグラム陰性であるかを同定し、その形態を示すことができる。カタラーゼについての試験を遂行して、ブドウ球菌属を連鎖球菌属から区別し、オキシダーゼについての試験をグラム陰性菌のために遂行し、これによって、同定系の選択が導かれた。Ｖｉｔｅｋ２（自動読み取りを伴うギャラリー）の方法を使用して、大多数の細菌を同定した。ＡＰＩギャラリーの生化学的マニュアル法を使用することによって、他の細菌を同定することが必要であった。
【０２３６】
したがって、グラム陰性非腸内細菌は、ＡＰＩ２ＯＮＥギャラリーを使用して同定し、腸内細菌は、ＡＰＩ  ２０Ｅギャラリーを使用して同定した。バシラス種は、ＡＰＩ  ２０ＥギャラリーおよびＡＰＩ  ５０ＣＨＢギャラリーを使用して同定した。
【０２３７】
結果を、下記の表ＶおよびＶＩに示す。表Ｖは、優勢な叢の対照と比較しての、投与された生成物に基づき４日目および８日目にｌｏｇ１０で得られた平均値の比較である。表ＶＩは、腸内細菌の優勢な叢での対照と比較しての、投与された生成物に基づき４日目および８日目に得られたｌｏｇ１０および標準偏差（ＳＤ）での平均値の比較である。
【表５】
2014507441.tif 000014
【表６−１】
2014507441.tif 000015
【０２３８】
これらの実験から、対照群は、糞便１グラム当たり１０８〜１０１０細菌の量で存在する主に乳酸菌および嫌気性細菌を有することが決定された。腸内細菌、腸球菌、および連鎖球菌は、糞便１グラム当たり１０５〜１０７細菌を有した。しかしながら、８日目に、腸内細菌の２ｌｏｇでの増加があった。
【０２３９】
対照群の腸内細菌の優勢な種は、大腸菌であり、ブドウ球菌の優勢な種は、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｘｙｌｏｓｕｓであり、バシラスで優勢な種は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓであった。
【０２４０】
２０ｍｇ／ｋｇ／日でのＲ０７群は、糞便中に主に乳酸菌および嫌気性細菌を有した。これら２種の個体群は、糞便１グラム当たり１０８〜１０９細菌を有し、治療期間全体を通じて安定なままであった。腸球菌および連鎖球菌が、対照群の割合と同じ割合で存在した。Ｒ０７での治療は、ブドウ球菌の３ｌｏｇの低減をもたらした。しかしながら、この低減は、治療終了から４日後には可逆性であった。したがって、８日目のブドウ球菌の量は、０日目と同じであった。
【０２４１】
Ｒ０７群での腸内細菌の優性な種は、大腸菌であり、ブドウ球菌の優勢な種は、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｘｙｌｏｓｕｓであり、バシラスで優勢な種は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓであった。
【０２４２】
２０ｍｇ／ｋｇ／日でのカプセル化Ｒ０７ナノカプセル群は、糞便中に主に乳酸菌、および嫌気性細菌を有した。これら２つの個体群は、糞便１グラム当たり１０８〜１０９細菌を有し、治療期間全体を通じて安定なままであった。腸内細菌、腸球菌、および連鎖球菌は安定しており、治療を通じて糞便１グラム当たり１０５〜１０６細菌を有した。関連叢の一部を形成していたブドウ球菌およびバシラスは、対照群で観察されたとおり変動した。
【０２４３】
カプセル化Ｒ０７ナノカプセル群における腸内細菌の優勢な種は、大腸菌であり、ブドウ球菌の優勢な種は、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｘｙｌｏｓｕｓであり、バシラスで優勢な種は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓであった。
【０２４４】
４０ｍｇ／ｋｇ／日でのカプセル化Ｒ０７ナノカプセル群は、対照群で観察されたように、治療経過の間にわたって安定なままであった主に乳酸菌および嫌気性細菌から構成された。Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓは、２日目に４ｌｏｇ低減し、３日目に３．５ｌｏｇに増加した。
【０２４５】
カプセル化Ｒ０７ナノカプセル群における腸内細菌の優勢な種は、大腸菌であり、ブドウ球菌の優勢な種は、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｘｙｌｏｓｕｓであり、バシラスでの優勢な種は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓであった。
【０２４６】
４０ｍｇ／ｋｇ／日での中空ナノカプセルは、糞便中に主に乳酸菌および嫌気性細菌を有した。これら２つの個体群は、糞便１グラム当たり１０８〜１０９細菌を有した。腸球菌、および連鎖球菌は、対照と類似した割合で存在した。関連叢の一部であったブドウ球菌およびバシラスは、変動した。
【０２４７】
中空ナノカプセル群における腸内細菌の優勢な種は、大腸菌であり、ブドウ球菌の優勢な種は、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｘｙｌｏｓｕｓであり、バシラスでの優勢な種は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓであった。
【０２４８】
アモキシシリンおよびクラブラン酸（ＡＭＣ）は、糞便１グラム当たり１０９細菌で定量化された嫌気性細菌を主に有した。乳酸菌は、ＡＭＣでの治療経過中に７ｌｏｇ低減し、この接種細菌は、８日目、したがって、治療を停止してから４日後に、６ｌｏｇの値まで戻った。ほぼ３ｌｏｇの増加が、腸内細菌で観察され、１ｌｏｇの低下が、治療から４日後に観察された。腸球菌および連鎖球菌では、２ｌｏｇの増加が観察され、治療を停止した後に、正常まで戻った。
【０２４９】
ＡＭＣ（Ａｕｇｍｅｎｔｉｎ）群における腸内細菌の優勢な種は、３日目までは大腸菌であり、その後は、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ｃｌｏａｃａｅであった。ブドウ球菌の優勢な種は、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｘｙｌｏｓｕｓであり、バシラスでの優勢な種は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓであった。
【０２５０】
２０ｍｇ／ｋｇ／日でのＲ０７およびフラクトオリゴ糖（ＦＯＳ）群は、腸内細菌の優勢な種として大腸菌を有し、ブドウ球菌の優勢な種は、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｘｙｌｏｓｕｓであり、バシラスでの優勢な種は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓであった。
【０２５１】
２０ｍｇ／ｋｇ／日でのカプセル化Ｒ０７ナノカプセル群およびフラクトオリゴ糖群は、乳酸菌および嫌気性細菌を糞便１グラム当たり１０９超の細菌で有した。腸内細菌、腸球菌、および連鎖球菌は、治療の経過を通じて安定していた。
【０２５２】
カプセル化Ｒ０７ナノカプセル群における腸内細菌の優勢な種は、大腸菌であり、ブドウ球菌の優勢な種は、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｘｙｌｏｓｕｓであり、バシラスでの優勢な種は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓであった。
【０２５３】
４０ｍｇ／ｋｇ／日でのカプセル化Ｒ０７ナノカプセル群およびフラクトオリゴ糖群は、腸内細菌を有し、これは、２日目に１．５ｌｏｇ低下し、４日目に治療を終える前に、正常まで増加した。
【０２５４】
中空ナノカプセル群における腸内細菌の優勢な種は、大腸菌であり、ブドウ球菌の優勢な種は、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｘｙｌｏｓｕｓであり、バシラスでの優勢な種は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓであった。
【０２５５】
前記から分かるとおり、２０ｍｇでのカプセル化Ｒ０７ナノカプセル、４０ｍｇでのカプセル化Ｒ０７ナノカプセル、２０ｍｇでのカプセル化Ｒ０７ナノカプセルおよびフラクトオリゴ糖、および４０ｍｇでのカプセル化Ｒ０７ナノカプセルおよびフラクトオリゴ糖の配合物は、マウスにおける消化共生叢（ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ ｃｏｍｍｅｎｓａｌ ｆｌｏｒａ）に何ら有意な効果を有さない。これに対して、アモキシシリンおよびクラブラン酸の投与は、腸内細菌の種の部分布が変化し、エンテロバクターが大腸菌に代わることによって、叢を混乱させた。
【０２５６】
例１２
ゼータ電位の測定
ゼータ電位は、水溶液中の物体のコロイド挙動を評価するために使用される界面動電測定に対応する。したがって、ゼータ電位は、懸濁液中の任意の粒子によって示される物理的特性である。
【０２５７】
このパラメーターを測定した。一般に、たとえば−３０ｍＶまたは＋３０ｍＶの非常にマイナスの値またはプラスの値は、細菌またはナノカプセルの表面上に界面動電電荷が存在することを示している。中間、たとえば−５ｍＶまたは＋５ｍＶの値は、一部の電気双極子を伴って中性である表面を示しており、その際、電荷が、粒子によって生じていることはない。
【０２５８】
中空ナノカプセルのみ、Ｒ０７がカプセル化されているナノカプセル、様々な菌株のみ、中空カプセルと共にインキュベートされた様々な菌株、またはカプセル化Ｒ０７ナノカプセルと共にインキュベートされた様々な菌株を使用して、電気泳動を介して、測定を行った。
【０２５９】
中空ナノカプセルは、例１に従って調製した。カプセル化Ｒ０７ナノカプセルは、例２に従って調製した。
【表６−２】
2014507441.tif 000016
【０２６０】
前記の結果は、中空ナノカプセルまたはＲ０７がカプセル化されているそれらのナノカプセルは、同様の値を有し、それらは、マイナスで、中性表面を有するものに近いことを示している。対照的に、種々の細菌は、非常にマイナスの値を有し、したがって、非常にマイナスの表面電荷を有し、このことは、細菌殻（ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｓｈｅｌｌ）を有するその構造に合致する。
【０２６１】
菌株が中空ナノカプセルと共にインキュベートされた場合、対照と比較して、電圧の低下が存在した。ゼータ電位は、中空ナノカプセルと共にインキュベートする前は約−３０ｍＶであり、ナノカプセルと共にインキュベートした後は約−１０ｍＶであった。菌株に対応する単一のピークのみが観察され、菌株および水性懸濁液中の他の中空ナノカプセルに対応する２つのピークは観察されなかった。
【０２６２】
菌株を、Ｒ０７がカプセル化されているナノカプセルと共にインキュベートした場合には、電圧のいっそうさらなる低下が観察された。
【０２６３】
前記の結果から、中空ナノカプセルまたはＲ０７がカプセル化されているナノカプセルのいずれかと接触すると、菌株の表面特性は変化すると結論づけることができる。ナノカプセルを様々な菌株と混合した場合に第２のピークが存在しないことは、ナノカプセルが、細菌の表面を覆うフィルムを形成していることを示している。
【０２６４】
Ｒ０７での結果によって、細菌の表面は変化し、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ ｍｕｃｏｉｄおよびＡｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ ｍｕｃｏｉｄでは、結果はより甚大であることが示されている。この細菌は、抗生物質耐性であり、抗微生物化合物に対する耐性をもたらすバイオフィルムを形成することが知られている（Ｇａｄｄｙら、Ｆｕｔｕｒｅ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ.２００９； ４：２７３〜２７８）。
【０２６５】
したがって、中空ナノカプセルまたはカプセル化Ｒ０７ナノカプセルのいずれかを用いる本発明を使用すると、定足数感知による、グラム陽性とグラム陰性細菌との両方で証明されるとおりの細胞密度に依存したシグナル伝達を阻害することができる。したがって、中空ナノカプセルまたはカプセル化Ｒ０７ナノカプセルは、細菌の増殖を妨害することができるだけではなく、病毒力因子の産生、および／またはバイオフィルムコミュニティにおける増殖を防止することもできる。
【０２６６】
例１３
Ｒ０７に対するＳＡＲＭ Ｓ. ａｕｒｅｕｓ ＡＴＣＣ２５９２３およびリファンピシンの耐性
この実験を、Ｒ０７に対するＳＡＲＭ Ｓ. ａｕｒｅｕｓ ＡＴＣＣ２５９２３およびリファンピシンの耐性のインビトロでの出現を評価するために行った。Ｒ０７は、カルバクロール約３３．２０％または７０％（カルバクロール１４．７単位グラム）を有するモロッコまたはバルカン諸国産のオレガノに由来する精油、オイゲノール８２．５４７％（オイゲノール７０．６単位グラム）を有するマダガスカル産のチョウジの葉に由来する精油、およびトランスシンナムアルデヒド７７．５７％（トランスシンナムアルデヒド１４．７単位グラム）を有する中国産のシナモンに由来する精油の３種を有する。
【０２６７】
リファンピシン（Ｒｉｆａｄｉｎｅ（登録商標）  Ｓａｎｏｆｉ  Ａｖｅｎｔｉｓ  Ｌｏｔ  Ａ０３６０）６００ｍｇ、およびＲ０７  １ｇ／ｍｌを、ＤＭＳＯ中６０％で希釈した。Ｍｕｅｌｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎ寒天を規準化ディスク拡散手順で使用して、抗微生物薬に対する、急速に増殖する好気性微生物の感染性を決定した。ＳＡＲＭ Ｓ. ａｕｒｅｕｓ ＡＴＣＣ２５９２３をプレートに画線して、約１．５ｌｏｇ８ｃｆｕ／ｍｌの０．５マクファーランド濁度標準に等しいカウントを得た。
【０２６８】
Ｒ０７およびリファンピシン濃縮液を培地に導入して、培地における生成物の準最小阻止濃度を得た。耐性の上昇を評価する試験を、最小阻止濃度（ＭＩＣ）の２倍の生成物濃度で実施した。結果を表ＶＩＩに示す：
【表７】
2014507441.tif 000017
【０２６９】
リファンピシンに対するＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓの耐性の出現が、第６継代で観察された。０．３８ｍｌ／ｌ阻止活性がリファンピシンで再出現し；したがって、当初最小阻止濃度の４７．５倍であった。
【０２７０】
Ｒ０７では、３０継代で、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓの耐性は観察されなかった。
【０２７１】
例１４
種々の微生物を使用しての、Ｒ０７の最小阻止濃度
カルバクロール約３３．２０％または７０％（カルバクロール１４．７単位グラム）を有するモロッコまたはバルカン諸国産のオレガノに由来する精油、オイゲノール８２．５７％（オイゲノール７０．６単位グラム）を有するマダガスカル産のチョウジの葉に由来する精油、およびトランスシンナムアルデヒド７７．５７％（トランスシンナムアルデヒド１４．７単位グラム）を有する中国産のシナモンに由来する精油の３種を有するＲ０７、ならびにカルバクロール約１１．８６％（カルバクロール５．２５単位グラム）からの精油、オイゲノール６３．２８％（オイゲノール５４．１０単位グラム）を有するマダガスカル産のチョウジの葉に由来する精油、およびトランスシンナムアルデヒド１３．５６％（トランスシンナムアルデヒド２．５７単位グラム）を有する中国産のシナモンに由来する精油、およびトランス−β−カリオフィレン１１．３％（トランス−β−カリオフィレン１．８単位グラム）の４種を有するＡＴ１１０の最小阻止濃度を、医学的に重要であると判断されている数種の細菌微生物について決定した。
【０２７２】
精油を他にも、それらの最小阻止濃度について個別に試験した。
【０２７３】
精油が水に溶けなかったので、各溶液を、ＤＭＳＯ中で再構成した。溶液を初めに、ＤＭＳＯ中４０％で調製し、その後、下記の表ＶＩＩＩの方法で、Ｍｕｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ寒天上に置いた：
【表８】
2014507441.tif 000018
【０２７４】
２２種の異なる微生物を試験し、その最小阻止濃度を試験した。結果を下記の表に示す：
【表９】
2014507441.tif 000019
【０２７５】
この表は、精油は、単独で使用される場合、Ｒ０７およびＡＴ１１０の組合せ精油と比較して、より高い最小阻止濃度を有することを示している。０．７６ｍｇ／ｍｌの平均最小阻止濃度を有したＲ０７およびＡＴ１１０中で配合されたものなど、精油を一緒に混合した場合と比較して、単独で使用された場合の精油の平均阻止濃度は、５倍高く、１〜２ｍｇ／ｍｌの平均濃度を有した。
【０２７６】
本発明を、様々な好ましい態様に関して記載したが、当業者であれば、本発明の範囲から逸脱することなく、様々な変更、置換、省略、および変化を加えることができることを認めるであろう。したがって、本発明の範囲は、その同等語句を包含する特許請求の範囲によって限定されることが意図されている。
【図１】
2014507441.tif 000020
【図２】
2014507441.tif 000021
【図３】
2014507441.tif 000022
【図４】
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【図５】
2014507441.tif 000024
【図６】
2014507441.tif 000025
【図７】
2014507441.tif 000026
【図８】
2014507441.tif 000027
【図９Ａ】
2014507441.tif 000028
【図９Ｂ】
2014507441.tif 000029
【図９Ｃ】
2014507441.tif 000030
【図１０Ａ】
2014507441.tif 000031
【図１０Ｂ】
2014507441.tif 000032
【図１０Ｃ】
2014507441.tif 000033
【図１１Ａ】
2014507441.tif 000034
【図１１Ｂ】
2014507441.tif 000035
【図１２】
2014507441.tif 000036
【図１３】
2014507441.tif 000037
【図１４】
2014507441.tif 000038
【手続補正書】
【提出日】平成25年11月7日(2013.11.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
広域スペクトルの抗菌活性、抗寄生虫活性、抗真菌活性、望ましくない植生活性、雑草活性、および／または植物抗病原性活性を有する少なくとも１種の精油または精油抽出物を含む組成物であって、前記精油または精油抽出物および任意に前記抗生物質は、ナノ粒子または脂質ナノカプセルでカプセル化されており、前記精油または精油抽出物は、オレガノに由来する精油、タイムに由来する精油または精油抽出物、チョウジに由来する精油または精油抽出物、セイボリーに由来する精油または精油抽出物、ラヴィンサラに由来する精油または精油抽出物、ゲッケイジュの葉に由来する精油または精油抽出物、オウシュウアカマツに由来する精油または精油抽出物、ユーカリに由来する精油または精油抽出物、ペーパーバークに由来する精油または精油抽出物、シナモンに由来する精油または精油抽出物、およびそれらの混合物からなる群から選択される組成物。
【請求項２】
ナノ粒子または脂質ナノカプセルでカプセル化された少なくとも１種の抗生物質をさらに含む請求項１に記載の組成物であって、前記少なくとも１種の抗生物質が、ベータ−ラクタミン系抗生物質、アモキシシリン、クラブラン酸、ピペラシリンであって、タゾバクタム、クロキサシリン、セフロキシム、セフォタキシム、もしくはイムペネムに随伴していてよいか、もしくは随伴していなくてよいもの、アミノシド系抗生物質、ゲンタマイシンもしくはアミカシン、フルロキノロン系抗生物質、シプロフロキサシンもしくはオフロキサシン、ホスホマイシン系抗生物質、グリコペプチド系抗生物質、バンコマイシンもしくはテイコプラニン、ニトロフラン系抗生物質、リファマイシン系抗生物質、マクロライド系抗生物質、ジョサマイシンもしくはクラリスロマイシン、ニトロ−イミダゾール系抗生物質、スルファミド、トリメトプリム系抗生物質、シネルギスチン系抗生物質、たとえばプリスチナマイシン、それらの薬学的に許容される塩、ならびにそれらの混合物からなる群から選択される組成物。
【請求項３】
少なくとも１種の精油が、スペインまたはモロッコまたはバルカン諸国産のオレガノに由来する精油、チョウジの葉に由来する精油または精油抽出物、グリーンペーパーバークに由来する精油または精油抽出物、レッドタイムに由来する精油または精油抽出物、ケイヒに由来する精油または精油抽出物、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
前記精油または精油抽出物が、
オレガノに由来する精油または精油抽出物約５〜約４０重量％、または約２０重量％〜約３０重量％、または約２５重量％；および／または
タイムに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜約２５重量％、または、約３重量％〜約１４重量％、または約９重量％；および／または
チョウジに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜７５重量％、または約７０重量％；および／または
セイボリーに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜２０重量％、または約１重量％〜１２重量％、または約６重量％；および／または
ラヴィンサラに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜２０重量％、または約４重量％〜１５重量％、または約９重量％；および／または
ゲッケイジュの葉に由来する精油または精油抽出物約１重量％〜２０重量％、または約４重量％〜１５重量％、または約９重量％；および／または
オウシュウアカマツに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜２０重量％、または約１重量％〜１２重量％、または約６重量％；および／または
ペーパーバークに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜２０重量％、または約１重量％〜１２重量％、または約６重量％；および／または
シナモンに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜３０重量％、または約１重量％〜１５重量％、または約１５重量％
を含むか、またはそれらからなる、請求項１から３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
オレガノに由来する精油約１５重量％、チョウジに由来する精油約７０重量％、およびシナモンに由来する精油約１５重量％と、任意に、少なくとも１種の精油と共にカプセル化されているかもしくはそれに随伴している少なくとも１種の抗生物質とを含む、あるいは、チョウジまたはチョウジの葉に由来する精油抽出物約６３．２８％、シナモンに由来する精油抽出物１１．８６％、ケイヒに由来する精油抽出物１３．５６％、ならびにオレガノ、チョウジ、および／またはシナモンに由来する精油抽出物１１．３％を含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
カルバクロール約３３．２０％または７０％（カルバクロール１４．７単位グラム）を有するモロッコまたはバルカン諸国産のオレガノに由来する精油、オイゲノール８２．５７％（オイゲノール７０．６単位グラム）を有するマダガスカル産のチョウジの葉またはチョウジに由来する精油、およびトランスシンナムアルデヒド７７．５７％（トランスシンナムアルデヒド１４．７単位グラム）を有する中国産のシナモンに由来する精油を含む請求項１から５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
オレガノに由来するカルバクロール抽出物約１１．８６％（カルバクロール５．２５単位グラム）、マダガスカル産のチョウジの葉またはチョウジに由来する精油抽出物であるオイゲノール６３．２８％（オイゲノール５４．１０単位グラム）、中国産のシナモンに由来する精油抽出物であるトランスシンナムアルデヒド抽出物１３．５６％（トランスシンナムアルデヒド２．５７単位グラム）、ならびにオレガノ、チョウジ、および／またはシナモンに由来するトランス−β−カリオフィレン１１．３％（トランス−β−カリオフィレン１．８０単位グラム）である、４種の精油抽出物を有する請求項１から６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
前記ナノ粒子が、１ｎｍ〜１００ｎｍのサイズを有し、前記精油（複数可）１００μｌ〜５００μｌがカプセル化されているか、または前記脂質ナノカプセルが２０ｎｍ〜２００ｎｍのサイズを有し、前記精油（複数可）１００μｌ〜５００μｌがカプセル化されている、請求項１から７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
前記組成物中に存在する前記少なくとも１種の精油（複数可）または少なくとも１種の精油抽出物がそれぞれ、０．０１重量％〜２重量％、０．０５重量％〜０．５重量％、０．０５重量％〜１重量％、０．５重量％〜８０重量％、または０．２重量％〜２５重量％の範囲の濃度でカプセル化されている、請求項１から８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記脂質ナノカプセルは、ホスファチジルコリン６９％のダイズレシチンの混合物、カプリル酸−カプリン酸トリグリセリド、ならびに遊離ポリエチレングリコール６６０およびポリエチレングリコール６６−ヒドロキシステアレートの混合物を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
生理食塩水または緩衝生理食塩水である薬学的に許容される担体をさらに含み、および／または前記組成物が、医薬品として投与するためにさらに配合されている、請求項１から１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
環境中における、スタフィロコッカス科からの細菌、腸球菌科からの細菌、クロストリジウム科からの細菌、連鎖球菌科からの細菌、アエロコッカス科からの細菌、球菌科からの細菌、ノカルジア科からの細菌、リステリア科からの細菌、コリネバクテリウム科からの細菌、およびプロピオニバクテリウム科からの細菌、原性動物および蠕虫感染をもたらす寄生虫、真菌、望ましくない植生もしくは雑草、および／または植物病原体から成る群から選択される、感染因子および／または望ましくない植生もしくは雑草の量、および／または細菌の量を低減および／または阻止および／または制限および／または遅延させる方法であって：
請求項１から１１のいずれか一項に記載の組成物を、前記感染因子（複数可）を低減および／または阻止および／または制限および／または遅延させる必要のある前記環境の周囲に散布すること、または望ましくない植生もしくは雑草を治療することを含む方法。
【請求項１３】
哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、望ましくない植生、雑草、および／または植物病原体を感染、細菌感染、寄生虫感染、真菌感染、および／または植物病原体について予防または治療するための、請求項１から１１のいずれか一項に記載の組成物を含む医薬品。
【請求項１４】
前記細菌、寄生虫、および／または真菌感染が、院内感染に由来する、請求項１３に記載の医薬品。
【請求項１５】
前記寄生虫が、原性動物および蠕虫感染をもたらすか、または皮膚、爪、もしくは粘膜上に存在する表層真菌もしくは酵母菌感染であるか、または深部の全身真菌感染であってよい、請求項１３に記載の医薬品。
【請求項１６】
前記哺乳類がヒトである、請求項１３に記載の医薬品。
【請求項１７】
前記組成物を、経口で、または粘膜で、静脈内で、またはエアゾール剤を介して、または局所で、またはディフューザーを介して投与する、請求項１３に記載の医薬品。
【請求項１８】
哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、および／または植物を感染、細菌感染、寄生虫感染、真菌感染、および／または植物感染について治療するための医薬品であって、前記医薬品は、カプセル化された精油または少なくとも１種の精油抽出物の医薬品配合物を形成するために、ナノ粒子および／または脂質ナノカプセルでカプセル化された少なくとも１種の精油を含む医薬品。
【請求項１９】
前記カプセル化された精油または少なくとも１種の精油抽出物が、少なくとも１種の抗生物質に随伴され、精油または少なくとも１種の精油抽出物と抗生物質との配合物が形成されている、請求項１８に記載の医薬品。
【請求項２０】
哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、および／または植物を感染、細菌感染、寄生虫感染、真菌感染、および／または植物感染について治療するための医薬品であって、ナノ粒子および／または脂質ナノカプセルでカプセル化された少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物および少なくとも１種の抗生物質を含む医薬品。
【請求項２１】
前記ナノ粒子および／または前記脂質ナノカプセルと、前記少なくとも１種の抗生物質とが一緒に投与される、請求項２０に記載の医薬品。
【請求項２２】
前記少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物が初めに投与され、前記少なくとも１種の抗生物質が前記少なくとも１種の精油の後に投与される、請求項２１に記載の医薬品。
【請求項２３】
前記少なくとも１種の抗生物質が初めに投与され、前記少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物が前記少なくとも１種の抗生物質の後に投与される、請求項２２に記載の医薬品。
【請求項２４】
精油の有効性を増大させる医薬品であって、１ｎｍ〜２００ｎｍのサイズを有するナノ粒子、および／または２０ｎｍ〜２００ｎｍのサイズを有する脂質ナノカプセルでカプセル化された少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を含む医薬品。
【請求項２５】
医薬品中の抗生物質の量を低減する医薬品であって、請求項１から１１のいずれか一項に記載の少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物、および前記少なくとも１種の抗生物質を含む医薬品。
【請求項２６】
哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、および昆虫における感染、スタフィロコッカス科からの細菌、腸球菌科からの細菌、クロストリジウム科からの細菌、連鎖球菌科からの細菌、アエロコッカス科からの細菌、球菌科からの細菌、乳酸菌科からの細菌、ノカルジア科からの細菌、リステリア科からの細菌、コリネバクテリウム科からの細菌、バシラス科からの細菌、プロピオニバクテリウム科からの細菌の群から選択されるグラム陽性菌から生じている細菌感染、寄生虫感染、および／または真菌感染を治療するための医薬品を製造するための、請求項１から１１のいずれか一項に記載の組成物の使用。
【請求項２７】
前記細菌、寄生虫、および／または真菌感染が院内感染である、請求項２６に記載の使用。
【請求項２８】
前記寄生虫が、原性動物および蠕虫感染をもたらすか、または皮膚、爪、もしくは粘膜上に存在する表層真菌感染もしくは酵母菌感染であるか、または深部の全身真菌感染であってよい、請求項２６または２７に記載の使用。
【請求項２９】
環境中の、細菌、寄生虫、真菌、望ましくない植生、雑草、および／または植物病原体の量を低減および／または阻止および／または制限および／または遅延させる方法であって、請求項１から１１のいずれか一項に記載の組成物、またはホスファチジルコリン６９％のダイズレシチンの混合物、カプリル酸−カプリン酸トリグリセリド、ならびに遊離ポリエチレングリコール６６０およびポリエチレングリコール６６−ヒドロキシステアレートの混合物を含む中空脂質ナノカプセルを前記環境の周囲に散布することを含む方法。
【請求項３０】
物体上の、細菌、寄生虫、真菌、望ましくない植生、雑草、および／または植物病原体の量を低減および／または阻止および／または制限および／または遅延させる方法であって、請求項１から１１のいずれか一項に記載の組成物、またはホスファチジルコリン６９％のダイズレシチンの混合物、カプリル酸−カプリン酸トリグリセリド、ならびに遊離ポリエチレングリコール６６０およびポリエチレングリコール６６−ヒドロキシステアレートの混合物を含む中空脂質ナノカプセルを前記物体上またはその周囲に設置することを含む方法。
【請求項３１】
哺乳類、魚類、鳥類、爬虫類、および／または昆虫において腸内叢を維持するための、または細菌耐性を制御するための医薬品であって、請求項１から１１のいずれか一項に記載の組成物と、前記ナノ粒子、および／または前記カプセル化組成物に随伴しているか、またはそれにカプセル化されているかのいずれかの少なくとも１種の抗生物質とを含む医薬品。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２７６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２７６】
本発明を、様々な好ましい態様に関して記載したが、当業者であれば、本発明の範囲から逸脱することなく、様々な変更、置換、省略、および変化を加えることができることを認めるであろう。したがって、本発明の範囲は、その同等語句を包含する特許請求の範囲によって限定されることが意図されている。
以下に、当初の特許請求の範囲に記載していた発明を付記する。
［１］
広域スペクトルの抗菌活性、抗寄生虫活性、抗真菌活性、望ましくない植生活性、雑草活性、および／または植物抗病原性活性を有する少なくとも１種の精油または精油抽出物と、任意に、少なくとも１種の抗生物質と、任意に、薬学的に許容される担体とを含む、ナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
［２］
前記少なくとも１種の抗生物質が、ベータ−ラクタミン系抗生物質、アミノシド系抗生物質、フルロキノロン系抗生物質、ホスホマイシン系抗生物質、グリコペプチド系抗生物質、ニトロフラン系抗生物質、リファマイシン系抗生物質、マクロライド系抗生物質、ニトロ−イミダゾール系抗生物質、スルファミド、トリメトプリム系抗生物質、シネルギスチン（ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｎ）系抗生物質、たとえばプリスチナマイシン、それらの薬学的に許容される塩、ならびにそれらの混合物からなる群から選択される、［１］に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
［３］
前記ベータ−ラクタミン系抗生物質が、アモキシシリン、クラブラン酸、ピペラシリンであって、タゾバクタム、クロキサシリン、セフロキシム、セフォタキシム、もしくはイムペネムに随伴していてよいか、もしくは随伴していなくてよいものであるか、または前記アミノシド系抗生物質が、ゲンタマイシンもしくはアミカシンであるか、または前記フルロキノロン系抗生物質が、シプロフロキサシンもしくはオフロキサシンであるか、または前記グリコペプチド系抗生物質が、バンコマイシンもしくはテイコプラニンであるか、または前記マクロライド系抗生物質が、ジョサマイシンもしくはクラリスロマイシンであるか、または前記シネルギスチン系抗生物質が、プリスチナマイシンもしくはそれらの薬学的に許容される塩、ならびにそれらの混合物である、［２］に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
［４］
少なくとも１種の精油が、オレガノに由来する精油、スペインまたはモロッコまたはバルカン諸国産のオレガノに由来する精油、タイムに由来する精油または精油抽出物、チョウジに由来する精油または精油抽出物、チョウジの葉に由来する精油または精油抽出物、セイボリーに由来する精油または精油抽出物、ラヴィンサラに由来する精油または精油抽出物、ゲッケイジュの葉に由来する精油または精油抽出物、オウシュウアカマツに由来する精油または精油抽出物、ユーカリに由来する精油または精油抽出物、ペーパーバークに由来する精油または精油抽出物、グリーンペーパーバークに由来する精油または精油抽出物、レッドタイムに由来する精油または精油抽出物、ケイヒに由来する精油または精油抽出物、シナモンに由来する精油または精油抽出物、およびそれらの混合物からなる群から選択される、［１］から［３］のいずれか一に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
［５］
前記精油または精油抽出物が、
オレガノに由来する精油または精油抽出物約５〜約４０重量％；および／または
タイムに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜約２５重量％；および／または
チョウジに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜７５重量％；および／または
セイボリーに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜２０重量％；および／または
ラヴィンサラに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜２０重量％；および／または
ゲッケイジュの葉に由来する精油または精油抽出物約１重量％〜２０重量％；および／または
オウシュウアカマツに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜２０重量％；および／または
ペーパーバークに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜２０重量％；および／または
シナモンに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜３０重量％
を含むか、またはそれらからなる、［１］から［４］のいずれか一に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
［６］
前記精油または精油抽出物が、
オレガノに由来する精油または精油抽出物約２０重量％〜約３０重量％；および／または
タイムに由来する精油または精油抽出物約３重量％〜約１４重量％；および／または
チョウジに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜７５重量％；および／または
セイボリーに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜１２重量％；および／または
ラヴィンサラに由来する精油または精油抽出物約４重量％〜１５重量％；および／または
ゲッケイジュの葉に由来する精油または精油抽出物約４重量％〜１５重量％；および／または
オウシュウアカマツに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜１２重量％；および／または
ペーパーバークに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜１２重量％；および／または
シナモンに由来する精油または精油抽出物約１重量％〜１５重量％
を含むか、またはそれらからなる、［１］から［５］のいずれか一に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
［７］
前記精油が、
オレガノに由来する精油または精油抽出物約２５重量％；および／または
タイムに由来する精油または精油抽出物約９重量％；および／または
チョウジに由来する精油または精油抽出物約７０重量％；および／または
セイボリーに由来する精油または精油抽出物約６重量％；および／または
ラヴィンサラに由来する精油または精油抽出物約９重量％；および／または
ゲッケイジュの葉に由来する精油または精油抽出物約９重量％；および／または
オウシュウアカマツに由来する精油または精油抽出物約６重量％；および／または
ペーパーバークに由来する精油または精油抽出物約６重量％；および／または
シナモンに由来する精油または精油抽出物約１５重量％
を含むか、それらから本質的になるか、またはそれらからなる、［１］から［６］のいずれか一に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
［８］
オレガノに由来する精油約１５重量％、チョウジに由来する精油約７０重量％、およびシナモンに由来する精油約１５重量％と、任意に、少なくとも１種の精油と共にカプセル化されているかもしくはそれに随伴している少なくとも１種の抗生物質とを含む、あるいは、チョウジまたはチョウジの葉に由来する精油抽出物約６３．２８％％、シナモンに由来する精油抽出物１１．８６％、ケイヒに由来する精油抽出物１３．５６％、ならびにオレガノ、チョウジ、および／またはシナモンに由来する精油抽出物１１．３％を含むか、それらから本質的になるか、またはそれらからなる組成物を含むか、それから本質的になるか、またはそれからなる、［１］から［８］のいずれか一に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
［９］
カルバクロール約３３．２０％または７０％（カルバクロール１４．７単位グラム）を有するモロッコまたはバルカン諸国産のオレガノに由来する精油、オイゲノール８２．５７％（オイゲノール７０．６単位グラム）を有するマダガスカル産のチョウジの葉またはチョウジに由来する精油、およびトランスシンナムアルデヒド７７．５７％（トランスシンナムアルデヒド１４．７単位グラム）を有する中国産のシナモンに由来する精油を含む組成物を含む組成物、カプセル化組成物および／またはナノカプセルを含むか、それらからなるか、またはそれらからなる、［１］から［８］のいずれか一に記載のナノ粒子、カプセル化組成物。
［１０］
オレガノに由来するカルバクロール抽出物約１１．８６％（カルバクロール５．２５単位グラム）、マダガスカル産のチョウジの葉またはチョウジに由来する精油抽出物であるオイゲノール６３．２８％（オイゲノール５４．１０単位グラム）、中国産のシナモンに由来する精油抽出物であるトランスシンナムアルデヒド抽出物１３．５６％（トランスシンナムアルデヒド２．５７単位グラム）、ならびにオレガノ、チョウジ、および／またはシナモンに由来するトランス−β−カリオフィレン１１．３％（トランス−β−カリオフィレン１．８０単位グラム）である、４種の精油抽出物を有する組成物から本質的になるか、またはそれからなる、ナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
［１１］
前記ナノ粒子が、１ｎｍ〜１００ｎｍのサイズを有し、前記精油（複数可）１００μｌ〜５００μｌがカプセル化されているか、または前記脂質ナノカプセルが２０ｎｍ〜２００ｎｍのサイズを有し、前記精油（複数可）１００μｌ〜５００μｌがカプセル化されている、［１］から［１０］のいずれか一に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
［１２］
前記組成物中に存在する前記少なくとも１種の精油（複数可）または少なくとも１種の精油抽出物がそれぞれ、０．０１重量％〜２重量％、０．０５重量％〜０．５重量％、０．０５重量％〜１重量％、０．５重量％〜８０重量％、または０．２重量％〜２５重量％の範囲の濃度でカプセル化されている、［１］から［１１］のいずれか一に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
［１３］
前記薬学的に許容される担体が、生理食塩水、または緩衝生理食塩水である、［１］から［１２］のいずれか一に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
［１４］
前記ナノ粒子、前記カプセル化組成物、および／または組成物が、医薬品として投与するためにさらに配合されている、［１］から［１３］のいずれか一に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物。
［１５］
環境中における、感染因子および／または望ましくない植生もしくは雑草の量、特に細菌、寄生虫、真菌、望ましくない植生もしくは雑草、および／または植物病原体の量を低減および／または阻止および／または制限および／または遅延させる方法であって：
［１］から［１４］のいずれか一に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物を、前記感染因子（複数可）を低減および／または阻止および／または制限および／または遅延させる必要のある前記環境の周囲に散布することを含む方法。
［１６］
低減されるべき細菌が、スタフィロコッカス科からの細菌、腸球菌科からの細菌、クロストリジウム科からの細菌、連鎖球菌科からの細菌、アエロコッカス科からの細菌、球菌科からの細菌、ノカルジア科からの細菌、リステリア科からの細菌、コリネバクテリウム科からの細菌、およびプロピオニバクテリウム科からの細菌の群から選択されるグラム陽性菌である、［１５］に記載の方法。
［１７］
前記寄生虫が、原性動物および蠕虫感染をもたらし、かつ／または皮膚、爪、または粘膜上に存在する表層真菌もしくは酵母菌感染であるか、または深部の全身真菌感染であってよい、［１５］に記載の方法。
［１８］
哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、望ましくない植生、雑草、および／または植物病原体を感染、特に、細菌感染、寄生虫感染、真菌感染、および／または植物病原体について予防または治療する方法であって、そのような治療を必要とする哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、および／または植物に、［１］から［１４］のいずれか一に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物を投与することを含む方法。
［１９］
前記細菌、寄生虫、および／または真菌感染が、院内感染に由来する、［１８］に記載の方法。
［２０］
前記寄生虫が、原性動物および蠕虫感染をもたらすか、または皮膚、爪、もしくは粘膜上に存在する表層真菌もしくは酵母菌感染であるか、または深部の全身真菌感染であってよい、［１９］に記載の方法。
［２１］
前記哺乳類がヒトである、［１８］から［２２］のいずれか一に記載の方法。
［２２］
前記ナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物を、経口で、または粘膜で、静脈内で、またはエアゾール剤を介して、または局所で、またはディフューザーを介して投与する、［１８］から［１］のいずれか一に記載の方法。
［２３］
哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、および／または植物を感染、特に、細菌感染、寄生虫感染、真菌感染、および／または植物感染について治療する方法であって、少なくとも１種の精油を、ナノ粒子および／または脂質ナノカプセルでカプセル化し、任意に、前記少なくとも１種のカプセル化精油または少なくとも１種の精油抽出物を、少なくとも１種の抗生物質に随伴させて配合して、精油または少なくとも１種の精油抽出物と抗生物質との配合物を形成し、前記配合物を、そのような治療を必要とする哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、および昆虫、および／または植物に投与することを含む方法。
［２４］
哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、および／または植物を感染、特に、細菌感染、寄生虫感染、真菌感染、および／または植物感染について治療する方法であって、少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を、ナノ粒子および／または脂質ナノカプセルでカプセル化し、前記ナノ粒子および／または脂質ナノカプセルと少なくとも１種の抗生物質とを、そのような治療を必要とする哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫、および／または植物に投与することを含む方法。
［２５］
前記ナノ粒子および／または前記脂質ナノカプセルと、前記少なくとも１種の抗生物質とを一緒に投与する、［２４］に記載の方法。
［２６］
前記少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を初めに投与し、前記少なくとも１種の抗生物質を前記少なくとも１種の精油の後に投与する、［２５］に記載の方法。
［２７］
前記少なくとも１種の抗生物質を初めに投与し、前記少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を前記少なくとも１種の抗生物質の後に投与する、［２５］に記載の方法。
［２８］
精油の有効性を増大させる方法であって、少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を、１ｎｍ〜２００ｎｍのサイズを有するナノ粒子、および／または２０ｎｍ〜２００ｎｍのサイズを有する脂質ナノカプセルでカプセル化することを含む方法。
［２９］
医薬品中の抗生物質の量を低減する方法であって、［１］から［１４］のいずれか一に記載の少なくとも１種の精油または少なくとも１種の精油抽出物を、前記少なくとも１種の抗生物質の配合物に加えることを含む方法。
［３０］
哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、および昆虫における感染、特に細菌感染、寄生虫感染、および／または真菌感染を治療するための医薬品を製造するための、［１］から［１４］のいずれか一に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物の使用。
［３１］
前記細菌感染が、スタフィロコッカス科からの細菌、腸球菌科からの細菌、クロストリジウム科からの細菌、連鎖球菌科からの細菌、アエロコッカス科からの細菌、球菌科からの細菌、乳酸菌科からの細菌、ノカルジア科からの細菌、リステリア科からの細菌、コリネバクテリウム科からの細菌、バシラス科からの細菌、プロピオニバクテリウム科からの細菌の群から選択されるグラム陽性菌から生じている、［３０］に記載の使用。
［３２］
前記細菌、寄生虫、および／または真菌感染が院内感染である、［３０］または［３１］に記載の使用。
［３３］
前記寄生虫が、原性動物および蠕虫感染をもたらすか、または皮膚、爪、もしくは粘膜上に存在する表層真菌感染もしくは酵母菌感染であるか、または深部の全身真菌感染であってよい、［３０］から［３２］のいずれか一に記載の使用。
［３４］
植物病原体、および／または望ましくない植生、および／または雑草を治療するための、［１］から［１３］のいずれか一に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物の使用。
［３５］
環境中の、細菌、寄生虫、真菌、望ましくない植生、雑草、および／または植物病原体の量を低減および／または阻止および／または制限および／または遅延させる方法であって、［１］から［１３］のいずれか一に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物、またはホスファチジルコリン６９％のダイズレシチンの混合物、カプリル酸−カプリン酸トリグリセリド、ならびに遊離ポリエチレングリコール６６０およびポリエチレングリコール６６−ヒドロキシステアレートの混合物を含む中空脂質ナノカプセルを前記環境の周囲に散布することを含む方法。
［３６］
物体上の、細菌、寄生虫、真菌、望ましくない植生、雑草、および／または植物病原体の量を低減および／または阻止および／または制限および／または遅延させる方法であって、［１］から［１３］のいずれか一に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物、またはホスファチジルコリン６９％のダイズレシチンの混合物、カプリル酸−カプリン酸トリグリセリド、ならびに遊離ポリエチレングリコール６６０およびポリエチレングリコール６６−ヒドロキシステアレートの混合物を含む中空脂質ナノカプセルを前記物体上またはその周囲に設置することを含む方法。
［３７］
哺乳類、魚類、鳥類、爬虫類、および／または昆虫において腸内叢を維持する方法であって、哺乳類、魚類、鳥類、爬虫類、および／または昆虫に、［１］から［１４］のいずれか一に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物と、前記ナノ粒子、および／または前記カプセル化組成物に随伴しているか、またはそれにカプセル化されているかのいずれかの少なくとも１種の抗生物質とを投与することを含む方法。
［３８］
哺乳類、鳥類、爬虫類、魚類、および／または昆虫において腸内叢を維持するための、［１］から［１３］のいずれか一に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物の使用。
［３９］
細菌耐性を制御するための、［１］から［１４］のいずれか一に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物と、少なくとも１種の抗生物質との使用。
［４０］
望ましくない植生および／または雑草を治療するための、［１］から［１３］のいずれか一に記載のナノ粒子、カプセル化組成物、および／または組成物の使用。
【国際調査報告】
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