(57)【要約】  本発明は、アルベカシン及び塩化物イオンを含有する水性液体医薬組成物を提供する。この組成物をエアゾール化し、患者に吸引させる、上気道又は下気道の疾患を治療或いは予防するための方法に使用する場合に、この組成物は忍容性が高い。さらに、本発明は、アルベカシン塩酸塩を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
アルベカシン及び塩化物イオンを含有する水性液体医薬組成物であり、
前記アルベカシンの濃度が遊離塩基換算で少なくとも１００ｍｇ／ｍｌであり、
前記塩化物イオンのモル量の前記アルベカシンのモル量に対する比が、少なくとも０．９：１である水性液体医薬組成物。
【請求項２】
硫酸イオンのモル量が、前記アルベカシンのモル量の２００ｍｏｌ％より少ない、請求項１に記載の水性液体医薬組成物。
【請求項３】
前記塩化物イオンのモル量の前記アルベカシンのモル量に対する比が、少なくとも３：１である、請求項１又は２に記載の水性液体医薬組成物。
【請求項４】
前記塩化物イオンのモル量の前記アルベカシンのモル量に対する比が、少なくとも５：１である、請求項３に記載の水性液体医薬組成物。
【請求項５】
硫酸イオンを実質的に含まない、請求項１〜４のうちのいずれか一項に記載の水性液体医薬組成物。
【請求項６】
少なくとも３５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇのオスモル濃度を有する、請求項１〜５のうちのいずれか一項に記載の水性液体医薬組成物。
【請求項７】
５５０〜１５００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇのオスモル濃度を有する、請求項１〜６のうちのいずれか一項に記載の水性液体医薬組成物。
【請求項８】
３〜７のｐＨを有する、請求項１〜７のうちのいずれか一項に記載の水性液体医薬組成物。
【請求項９】
５〜７のｐＨを有する、請求項１〜８のうちのいずれか一項に記載の水性液体医薬組成物。
【請求項１０】
前記アルベカシンが、分子として又はコロイドとして溶解している、請求項１〜９のうちのいずれか一項に記載の水性液体医薬組成物。
【請求項１１】
前記水性液体医薬組成物をエアゾール化し、得られたエアゾールを患者に吸引させる工程を含む、上気道又は下気道の疾患を治療或いは予防するための方法に使用される、請求項１〜１０のうちのいずれか一項に記載の水性液体医薬組成物。
【請求項１２】
アルベカシン塩酸塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、上気道又は下気道の疾患を治療或いは予防するための方法に有益な、アルベカシン及び塩化物イオンを含有する水性液体医薬組成物に関する。本発明はまた、アルベカシン塩酸塩にも関する。
【背景技術】
【０００２】
アミノグリコシドは、放線菌目の細菌、より具体的にはストレプトマイセス属又はミクロモノスポラ属由来の殺菌性抗生物質である。これらは、グリコシド結合によって環状アミノ糖が結合したアミノシクリトールを含有するポリカチオン性化合物である。一般に、アミノグリコシドは硫酸塩として使用される。しかしながら、各アミノグリコシドは毒性学的に同様な特徴を有し、主にその聴器毒性のため、使用が制限されている。他の一般的な副作用として、腎毒性や、神経筋遮断活性、交差反応性を含むアレルギーが挙げられる。各アミノグリコシドは同様な抗菌スペクトルを有し、細菌リボソームの３０Ｓ部及びある程度の５０Ｓ部に不可逆的に結合して細菌のタンパク質合成を妨害するように作用すると考えられている。アミノグリコシドは、グラム陰性桿菌に対して最も強い活性を示す。ブルセラ属、カリマトバクテリウム属、カンピロバクター属、サイトロバクター属、エシェリキア属、エンテロバクター属、クレブシエラ属、プロテウス属、プロビデンシア属、シュードモナス属、セラチア属、ビブリオ属及びエルシニア属を含むグラム陰性種が、アミノグリコシドに対する感受性が高いと報告されている。さらに、黄色ブドウ球菌のようなグラム陽性株は、硫酸ゲンタマイシンのようなアミノグリコシドに対して特に感受性が高い。また、一部の放線菌及びマイコプラズマも、アミノグリコシドに対する感受性が高いであろう。細菌の耐性は、通常、プラスミドを介した不活性化酵素の産生と関連している。アミノグリコシドは、その抗菌スペクトルに基づき、胆道感染症、ブルセラ症、猫ひっかき病、嚢胞性線維症、心内膜炎、子宮内膜炎、胃腸炎、鼠径肉芽腫、リステリア症、髄膜炎、外耳炎、中耳炎、骨盤内炎症性疾患、腹膜炎、腺ペスト、肺炎、敗血症、皮膚感染症、尿路感染症のような感染症の治療、並びに、外科系感染症の予防や、免疫不全患者及び集中治療中の患者の治療に使用される。アミノグリコシドは、濃度が最小阻止濃度より低下した後もその抗細菌活性が持続するという抗生物質持続効果を有する（Ｍａｒｔｉｎｄａｌｅ−Ｔｈｅ  ｃｏｍｐｌｅｔｅ  ｄｒｕｇ  ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ、１９９９年、第３２版、Ｋ．Ｐａｒｆｉｔｔ（編）、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ）。
【０００３】
アルベカシンは、ジベカシン由来のアミノグリコシドであり、アルベカシン硫酸塩として、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌による重度の感染症の治療に使用される（Ｍａｒｔｉｎｄａｌｅ−Ｔｈｅ  ｃｏｍｐｌｅｔｅ  ｄｒｕｇ  ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ、１９９９年、第３２版、Ｋ．Ｐａｒｆｉｔｔ（編）、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ）。アルベカシンは、特開昭５６−０５１４９９号公報及び特開昭５８−１３４０９９号公報において初めて記載され、非経口適用のためのアルベカシン硫酸塩溶液として市販されている。
【０００４】
アミノグリコシドは胃腸管に殆ど吸収されることはないため、アミノグリコシドは好適には静脈投与されている。しかしながら、治療用量と中毒量との差が小さいため、全身性の重度の副作用（聴器毒性や腎毒性等）が発生する可能性が高い。また、アミノグリコシドは脂質膜を通って気管支分泌物に拡散しづらいことから、呼吸器感染症の治療には、比較的多い用量の非経口投与を行わなければならない。これにより、阻害濃度以下のアミノグリコシドしか感染部位に現れず、その効能が損なわれてしまう。アミノグリコシドの毒性を回避し、かつその効能を上げるための幾つかの手法が提案されている（Ｒａｔｊｅｎら、「Ａｍｉｎｏｇｌｙｃｏｓｉｄｅ  ｔｈｅｒａｐｙ  ａｇａｉｎｓｔ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ｉｎ  ｃｙｓｔｉｃ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ：Ａ  ｒｅｖｉｅｗ」、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｙｓｔｉｃ  Ｆｉｂｒｏｓｉｓ、８（２００９）３６１−３６９）。例えば、米国特許第６，２２１，３８８号明細書には、リポソームにカプセル封入されたアミノグリコシド処方物が記載されており、米国特許第５，５０８，２６９号明細書には、感染した気道にトブラマイシンを直接投与することが記載されている。
【０００５】
例えば、ゲンタマイシン、トブラマイシン及びアミカシンのエアゾール化を評価して、毒性を回避しながら、気道中における濃度を上げる試みが実施されている。吸入用アミノグリコシド処方物の例としては、ＴＯＢＩ（登録商標）（米国特許第５，５０８，２６９号明細書）、Ｂｒａｍｉｔｏｂ（登録商標）（米国特許第６，９８７，０９４号明細書）、及びＡｒｉｋａｃｅ（登録商標）（米国特許第７，７１８，１８９号明細書）がある。しかしながら、これらの処方物の幾つかは、非常に長い噴霧化時間を必要とし、患者コンプライアンスが低下する原因となっている。
【発明の概要】
【０００６】
本発明の目的は、短時間（即ち、患者にとって許容可能な時間）内に噴霧化可能な、高濃度で忍容性（ｔｏｌｅｒａｔｅｄ）が十分に高い吸引用アルベカシン処方物を提供することである。
【０００７】
高濃度の吸引用アルベカシン処方物を開発中に、本発明者らは、忍容性の高い吸引用処方物を製造するために一般に使用されている手法、例えば、生理的な張度（ｔｏｎｉｃｉｔｙ）に近い張度にすること、ｐＨの最適化、及び浸透性陰イオンを特定の濃度にすることは、十分ではなかったことを見出した。これらの手法で製造されたアルベカシン処方物により、健常者は直ちに咳反応を起こした。したがって、高濃度の吸引用アルベカシン処方物を処方する別の手法が求められていた。
【０００８】
本発明者らは、驚くべきことに、アルベカシンの硫酸塩の形態が他の忍容性の高い吸引用アミノグリコシド処方物（例えば、ＴＯＢＩ（登録商標）、Ａｒｉｋａｃｅ（登録商標））に使用されているにもかかわらず、上記刺激がこの硫酸塩形態に関連していることを見出した。上述の課題を解決するために、アルベカシン溶液中の硫酸イオンを完全に又は部分的に置換する、ある濃度の塩化物イオンが必要であることが見出された。
【０００９】
したがって、本発明は、アルベカシン及び塩化物イオンを含有する水性液体医薬組成物であり、アルベカシンの濃度が遊離塩基換算で少なくとも１００ｍｇ／ｍｌであり、塩化物イオンのモル量のアルベカシンのモル量に対する比が少なくとも０．９：１である水性液体医薬組成物を提供する。
【００１０】
前記組成物は、上気道又は下気道の疾患を治療或いは予防するための方法に使用できる。前記疾患を治療或いは予防するための方法は、前記組成物をエアゾール化し、得られたエアゾールを患者に吸引させる工程を含む。
【００１１】
さらに、本発明は、アルベカシンの新規な塩の形態、つまり、アルベカシン塩酸塩を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】図１は、実施例２で得られたアルベカシン塩酸塩の示差走査熱量測定曲線を示す。
【００１３】
【図２】図２は、実施例２で得られたアルベカシン塩酸塩の熱重量分析曲線を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明に係る医薬組成物は、エアゾール形態での気道投与に非常に適した水性液体である。
【００１５】
組成物という用語は、化合物の混合物を意味する。組成物の同意語として、処方物（ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）や製剤（ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ）がある。本発明に係る組成物は、より具体的には、水性液体、即ち、液状担体又は溶媒が、主に或いは完全に、水からなる液体系である。特定の場合に、この液状担体に、水と少なくとも部分的に混和可能な、１種又は複数種の液体を少量含有させることができる。
【００１６】
本発明に係る組成物は、好ましくは無菌の組成物である。無菌（ｓｔｅｒｉｌｉｔｙ）という用語は、通常の薬学的意味で理解されるものである。例えば、オートクレーブ滅菌法や濾過滅菌法等の複数の無菌化方法が、液体組成物に対して利用可能である。一括処理するものであるオートクレーブ滅菌法に対し、生産ラインで実施できる濾過滅菌法が特に好ましい。
【００１７】
本発明に係る組成物の活性化合物は、アミノグリコシド系抗生物質のアルベカシンである。この組成物は、上気道又は下気道の疾患、特に上気道又は下気道の感染症を予防等する方法に使用し得る。かかる感染症は、疾患の主な原因であってもよく、上気道又は下気道の基礎疾患が既にある場合における感染症であってもよい。このような主要疾患及び基礎疾患の例としては、急性副鼻腔炎及び慢性副鼻腔炎（ｓｉｎｕｓｉｔｉｓ）、鼻炎、蓄膿症（ｒｈｉｎｏｓｉｎｕｓｉｔｉｓ）、鼻茸、鼻せつ、鼻血、下気道疾患に関連する鼻及び副鼻腔の状況、例えば、耳の炎症等の耳疾患に関連する鼻及び副鼻腔の状況、アレルギー、口腔咽頭感染症、喉頭気管気管支炎、気管支炎、びまん性細気管支炎や閉塞性細気管支炎のような細気管支炎、気管支拡張症、肺胞炎、肺炎、例えば、院外感染性肺炎、院内感染性肺炎、人工呼吸器関連肺炎、医療ケア関連肺炎、誤嚥性肺炎、脂肪肺炎、好酸球性肺炎、化学性肺炎、非定型肺炎及び重症急性呼吸器疾患、急性増悪を伴う又は伴わない肺感染症、例えば、気道における細菌性、ウイルス性、真菌性及び原虫性感染症、気腫、サルコイドーシス、結核、非結核性抗酸菌肺疾患、実質炎疾患若しくは障害及び／又は嚢胞性線維症や特発性肺線維症を含む線維性疾患若しくは障害、肺動脈性肺高血圧症、間質性肺疾患、百日咳、並びに、肺、幹細胞又は骨髄を移植した後の拒絶反応がある。
【００１８】
アミノグリコシド系抗生物質は、硫酸塩として一般的に使用される。Ｍａｒｔｉｎｄａｌｅの第３２版（Ｔｈｅ  ｃｏｍｐｌｅｔｅ  ｄｒｕｇ  ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ、１９９９年、Ｋ．Ｐａｒｆｉｔｔ（編）、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ）に記載の全てのアミノグリコシドについて（即ち、アミカシン、アプラマイシン、アルベカシン、アストロマイシン、カプレオマイシン、ジベカシン、ジヒドロストレプトマイシン、フラミセチン、ゲンタマイシン、イセパマイシン、カナマイシン、ミクロノマイシン、ネオマイシン、ネチルマイシン、パロモマイシン、リボスタマイシン、シソマイシン、ストレプトマイシン及びトブラマイシン）、これらは、硫酸塩として使用されることが記載されている。例外は、酸性硫酸塩や重硫酸塩の形態でも使用されるカナマイシンと、硫酸塩が殆どの場合使用されるがウンデセン酸ネオマイシン又は塩酸塩形態でも使用されるネオマイシンと、硫酸塩形態が最も使用されるがストレプトマイシン塩酸塩形態でも存在するストレプトマイシンである。
【００１９】
アルベカシンは、その硫酸塩としてのみ利用可能である。
一般に及び本明細書において、アルベカシンの用量又は濃度は、その遊離塩基換算で示す。
【００２０】
本発明の液体組成物中、及びそれから生成されたエアゾールの分散相中のアルベカシンの濃度は、少なくとも１００ｍｇ／ｍｌであり、比較的高い。高濃度であることは、吸引用処方物として幾つかの利点がある。例えば、標的部位において治療濃度に到達し易いこと、標的部位において治療濃度に到達させるための吸引に必要とされる体積を減少させること、それにより、噴霧化時間の短縮化、作用の長期化、さらに、適用回数の減少が挙げられる。
【００２１】
本発明の液体組成物中、及びそれから生成されたエアゾールの分散相中のアルベカシンの濃度は、少なくとも１２０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも１５０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも２００ｍｇ／ｍｌ、又は少なくとも２５０ｍｇ／ｍｌであることが好ましい。
【００２２】
忍容性を向上させるために、上気道及び／又は下気道に投与（ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ）するための医薬組成物は、可能な限り、生理的な張度又はオスモル濃度を有するべきである。この生理的な張度（約２９０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ。これは、生理液（ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｆｌｕｉｄｓ）のオスモル濃度である）から外れると、即ち、低張溶液及び高張溶液は、吸入において咳反射を誘発し得ることが知られている（Ｌｏｗｒｙら、「Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｐＨ  ａｎｄ  ｏｓｍｏｌａｒｉｔｙ  ｏｎ  ａｅｒｏｓｏｌ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｃｏｕｇｈ  ｉｎ  ｎｏｒｍａｌ  ｖｏｌｕｎｔｅｅｒｓ」、Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ７４（１９８８）３７３−３７６）。さらに、生理的な張度から外れると、これらの溶液が投与される表面に刺激を与え得る。これは、（高張溶液又は低張溶液がそれぞれ投与される際に）水がこの表面の細胞から流出／流入するためである。もっとも、高張溶液は、低張溶液よりも刺激が少なく、呼吸器におけるある条件下では別の利点を有する場合もある。高張溶液の主な利点は、不要な粘液の産生を伴う疾患において除去される粘液の量が増加することに関連するものである。Ｗｅｂｅｒら（「Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｎｅｂｕｌｉｓｅｒ  ｔｙｐｅ  ａｎｄ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ  ｏｎ  ｄｅｖｉｃｅ  ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ」、Ｐａｅｄｉａｔｒｉｃ  Ｐｕｌｍｏｎｏｌｏｇｙ２３（１９９７）２４９−２６０）は、吸引される抗生物質溶液の最適なオスモル濃度は、１５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇと５５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇとの間であると示唆している。
【００２３】
エアゾールを吸入して咳及び気管支収縮を軽減させることに関し、文献で更に示唆されていることは、最適なｐＨが２．６超かつ１０．０未満であること（Ｌｏｗｒｙら、「Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｐＨ  ａｎｄ  ｏｓｍｏｌａｒｉｔｙ  ｏｎ  ａｅｒｏｓｏｌ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｃｏｕｇｈ  ｉｎ  ｎｏｒｍａｌ  ｖｏｌｕｎｔｅｅｒｓ」、Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ７４（１９８８）３７３−３７６）、浸透性陰イオンが３１ｍＭと３００ｍＭとの間の濃度で存在すること（Ｗｅｂｅｒら、「Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｎｅｂｕｌｉｓｅｒ  ｔｙｐｅ  ａｎｄ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ  ｏｎ  ｄｅｖｉｃｅ  ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ」、Ｐａｅｄｉａｔｒｉｃ  Ｐｕｌｍｏｎｏｌｏｇｙ２３（１９９７）２４９−２６０；Ｅｓｃｈｅｎｂａｃｈｅｒら、「Ａｌｔｅｒａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｏｓｍｏｌａｒｉｔｙ  ｏｆ  ｉｎｈａｌｅｄ  ａｅｒｏｓｏｌｓ  ｃａｕｓｅ  ｂｒｏｎｃｈｏｃｏｎｓｔｒｉｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｏｕｇｈ，  ｂｕｔ  ａｂｓｅｎｃｅ  ｏｆ  ａ  ｐｅｒｍｅａｎｔ  ａｎｉｏｎ  ｃａｕｓｅｓ  ｃｏｕｇｈ  ａｌｏｎｅ」、Ａｍ．Ｒｅｖ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｄｉｓ．１２９（１９８４）２１１−２１５）である。
【００２４】
本発明の発明者らは、ｐＨが約７．０で、張度がほぼ生理的な約３００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約３８０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇであって、かつ、浸透性陰イオン（約３４ｍＭ〜約４６ｍＭ）を含有させるためにＮａＣｌが添加された、高濃度のアルベカシン硫酸塩溶液を吸入すると、咳反応を防ぐことを目的として、現在の技術水準に基づいて最適化されているにもかかわらず、直ちに過度の咳が引き起こされることを見出した。フェノールやピロ亜硫酸ナトリウム等の保存剤と共にトブラマイシン硫酸塩溶液を吸引すると、同様の咳応答や気管支収縮が見られる。しかしながら、この試験に供されたアルベカシン硫酸塩処方物は、咳応答又は気管支収縮を引き起こすことが知られている保存剤も賦形剤も含有されていなかった。
【００２５】
さらに、保存剤や他の重要な賦形剤を処方物から除外するため、米国特許第５，５０８，２６９号明細書、米国特許第号６，９８７，０９４明細書、及び国際公報第２００５／０３７２５６号に記載されているように、塩化ナトリウムの濃度を少なく（例えば、生理食塩水の代わりに、１／４に希釈した生理食塩水に）することによって、例えば、トブラマイシン処方物の忍容性を向上させること、或いは、塩化ナトリウムさえも処方物から除外することが示唆されている。しかしながら、本発明の発明者らによって確認試験に供された高濃度のアルベカシン溶液は、処方物の組成物及びその塩化ナトリウム濃度が、一般に忍容性の高い、市販の吸引用アミノグリコシド処方物（ＴＯＢＩ（登録商標））の組成物と近いにもかかわらず、依然として、直ちに咳反応を引き起こすものであった。
【００２６】
すなわち、従来技術によって示唆される溶液は、忍容性の高い吸引用アルベカシン組成物を処方する目的には十分ではなかったことが見出された。
【００２７】
一方、本発明者らは、高濃度の処方物による刺激がアルベカシンの硫酸塩形態に関連していることを見出した。特に、公知の吸引用アミノグリコシド処方物はアミノグリコシド硫酸塩を含有しているので（例えば、ＴＯＢＩ（登録商標）、Ａｒｉｋａｃｅ（登録商標））、この発見は予期していなかったことである。しかしながら、市販のアルベカシン硫酸塩の代わりにアルベカシン塩基を用い、ｐＨ調節用に塩酸を使用すると、咳反応を引き起こすことなく吸引できる高濃度のアルベカシン溶液が得られた。このアルベカシン塩酸塩処方物は、対応する硫酸塩よりも非常に高いオスモル濃度、並びに、従来技術において推奨される浸透性陰イオン濃度よりも高い浸透性陰イオン濃度を示した。これにもかかわらず、この処方物は、吸入しても忍容性が優れていた。モルモットモデルやヒト協力者において示されたように、咳反応も気管支収縮も引き起こされることはなかった。
【００２８】
より具体的には、本発明者らは、処方物中に、ある最小限の濃度の塩化物イオンが必要であることを見出した。ｐＨ調節用に塩酸又は硫酸のいずれか或いは両方を使用して、アルベカシン塩基から異なる処方物を調製した。塩化物イオンのモル量のアルベカシンのモル量に対する比が０．１６：１である処方物は、直ちに咳を引き起こしたが、この比を少なくとも０．９：１に増加した処方物は、非常に忍容性が高かった。
【００２９】
したがって、本発明に係る組成物中の塩化物イオンのモル量のアルベカシンのモル量に対する比は、少なくとも０．９：１である。好ましくは、この比は、少なくとも３：１であり、より好ましくは少なくとも５：１である。
【００３０】
塩化物イオンのモル量のアルベカシンのモル量に対する比が非常に高いうえに、これによりオスモル濃度も非常に高い処方物は、この比が０．９：１未満の処方物を吸引した場合と比べて、忍容性が高かった。
【００３１】
他の態様において、高濃度の吸引用アルベカシン溶液中の硫酸イオンの量を低くすることが有益であることが見出された。
【００３２】
したがって、本発明に係る水性液体医薬組成物中の硫酸イオンのモル量は、好ましくは、アルベカシンのモル量の２００ｍｏｌ％より少ない。より好ましくは、本発明に係る水性液体医薬組成物中の硫酸イオンのモル量は、アルベカシンのモル量の５０ｍｏｌ％よりも少ない。この組成物は硫酸イオンを実質的に含まない、即ち、硫酸イオンを、不可避的な不純物としてのみ含むことが更に好ましい。
【００３３】
さらに、本発明者らによって、初めて、固体のアルベカシン塩酸塩が凍結乾燥により製造された。示差走査熱量測定及び熱重量分析によって評価されたように、アモルファス固体が得られた。この薬物化合物は、旋光度［α］２０Ｄが＋７９．８°であることを特徴としていた。加えて、その構造式及び位置番号を核磁気共鳴によって分析した。また、イオンクロマトグラフィーを使用して、アルベカシン塩酸塩固体中の塩化物含有量を決定した。この薬物化合物は、塩化物の数で約３．５〜４．０に相当する１９．６６％の塩化物を含有していたことが見出された。
【００３４】
したがって、本発明は、（固体）アルベカシン塩酸塩も提供する。この新規な化合物は、本発明に係る水性液体医薬組成物の製造に有益である。
【００３５】
前記アルベカシン塩酸塩は、以下の工程を含む方法によって製造し得る：（１）アルベカシン遊離塩基を蒸留水に溶解する（好ましくは、約０．５ｍｏｌ／ｌの濃度に）；（２）この溶液のｐＨを、塩酸水溶液（好ましくは、約６ｍｏｌ／ｌの濃度を有する）を添加して、約７に調節する；（３）この結果得られた溶液を、必要に応じて、蒸留水（好ましくは、アルベカシン１モル当たり約０．５リットル）で希釈してもよい；（４）次いで、この溶液を凍結乾燥して、アルベカシン塩酸塩を得る。
【００３６】
高浸透圧性のアルベカシン塩酸塩組成物は、吸引しても忍容性が高いことが示されたので、本発明の液体組成物のオスモル濃度を、一般に許容される最大忍容可能レベルを越えて増加させることができる。組成物のオスモル濃度は、好ましくは少なくとも３５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇである。より好ましくは、オスモル濃度は５５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜１５００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇの範囲である。さらに、オスモル濃度は８００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇと１５００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇとの間、及び１０００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇと１５００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇとの間の範囲にし得る。
【００３７】
前記医薬組成物は、張度調節用賦形剤、ｐＨ調節／緩衝用賦形剤等の賦形剤、抗酸化剤、界面活性剤、徐放用又は持続する局所保持用賦形剤、矯味剤、甘味剤及び香味剤を含有し得る。これらの賦形剤は、処方物の安定性、エアゾール化、吸入した処方物の忍容性及び／又は効能を維持する、最適なｐＨ、粘度、表面張力及び味を得るために使用される。
【００３８】
必要な場合、本発明の組成物中に、張度調節用賦形剤を更に含ませることができる。本明細書で使用されるように、張度調節用の成分又は賦形剤とは、浸透活性であり、かつ、液体医薬処方物のオスモル濃度又は張度を調節する目的で一般的な実施において使用される１種又は複数種の薬学的賦形剤と理解される。そのような、一般的に使用される賦形剤の例としては、塩化ナトリウムやマンニトールがある。張度を調節するために使用できる他の塩としては、グルコン酸ナトリウム、ピルビン酸ナトリウム及び塩化カリウムがある。炭水化物も、この目的で使用できる。例としては、グルコース、ラクトース、スクロース、トレハロース等の糖類、更にキシリトール、ソルビトール、イソマルトール等の糖アルコール類がある。
【００３９】
好ましくは、本発明の液体組成物は、塩化ナトリウムを含有する。好ましくは、塩化ナトリウムの濃度は、１〜５ｇ／ｌ、より好ましくは２〜３ｇ／ｌ、より好ましくは約２．５ｇ／ｌである。
【００４０】
本発明者らは、前記水性液体医薬組成物のｐＨが好ましくは弱酸性から中性の範囲、即ち、前記組成物が好ましくは約３〜約７の間の範囲のｐＨを有すべきことを見出した。約５〜約７の範囲のｐＨが特に好ましい。この酸性のｐＨが、アミノグリコシド溶液の貯蔵の際しばしば見られる変色を防止するのに役立つことが見出された。
【００４１】
前記組成物に、溶液のｐＨ値を調節及び／又は緩衝するための１種又は複数種の賦形剤を含有させることができる。ｐＨを調節し必要に応じて緩衝するために、生理学的に許容可能な酸類、塩基類、塩類及びこれらの組み合わせを使用し得る。ｐＨ値を下げるために、或いは、緩衝系で酸性成分として適用される目的でしばしば使用される賦形剤は、強い無機酸類（ｍｉｎｅｒａｌ  ａｃｉｄｓ）、特に硫酸や塩酸である。本発明では、ｐＨを調節するために塩酸を使用することが特に好ましく、これにより、アルベカシン塩酸塩がその場で形成される。もっとも、中位の強度の無機酸類（ｉｎｏｒｇａｎｉｃ  ａｃｉｄｓ）や有機酸類、並びに酸性塩類も使用し得る。例えば、リン酸、クエン酸、酒石酸、コハク酸、フマル酸、メチオニン、ナトリウム又はカリウムとの酸性リン酸水素塩、乳酸、グルクロン酸等がある。ｐＨを上げるために、或いは、緩衝系で塩基性成分として適切である賦形剤としては、特に、水酸化ナトリウム等の無機塩基類（ｍｉｎｅｒａｌ  ｂａｓｅｓ）、又は、例えば、水酸化マグネシウム、水酸化カルシウム、水酸化アンモニウム等の他のアルカリ金属水酸化物及び酸化物並びにアルカリ土類水酸化物及び酸化物、酢酸アンモニウム等の塩基性アンモニウム塩、リシン等の塩基性アミノ酸、炭酸ナトリウム、炭酸マグネシウム、炭酸水素ナトリウム等の炭酸塩、クエン酸ナトリウム等のクエン酸塩がある。
【００４２】
前記組成物に、２つの成分からなる緩衝系も含有させることができる。最も好ましい緩衝系の１つには、クエン酸及びクエン酸ナトリウムが含有されている。もっとも、他の緩衝系も使用し得る。
【００４３】
抗酸化剤は、活性剤の酸化及び／又はストレスを受けた組織及び細胞の酸化損傷を防止又は抑制する天然又は合成物質である。抗酸化剤は、それ自体で易酸化性なアジュバント（即ち、一次抗酸化剤）であってもよく、還元剤として作用するアジュバント（即ち、還元型抗酸化剤）であってもよい。このような抗酸化剤としては、例えば、酢酸トコフェロール、リコピン、還元グルタチオン、カタラーゼ、ペルオキシドジスムターゼ等がある。酸化反応を抑制するために使用される他のアジュバントは、相乗効果型抗酸化剤であり、酸化過程には直接的に作用しないが、酸化反応を触媒することが知られている金属イオンとの錯体形成を通じて間接的に作用する。よく使用される相乗効果型抗酸化剤は、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）とその誘導体である。更に有用な抗酸化剤（一次、還元型及び／又は相乗効果型抗酸化作用メカニズム）は、アスコルビン酸とその塩、アスコルビン酸のエステル、フマル酸とその塩、リンゴ酸とその塩、クエン酸とその塩、ブチルヒドロキシアニソール、ブチルヒドロキシトルエン、没食子酸プロピル、及びマルトールである。一般に使用される抗酸化剤の代替物として、アセチルシステイン、Ｒ−システイン、ビタミンＥ  ＴＰＧＳ、ピルビン酸とそのマグネシウム塩及びナトリウム塩、及びグルコン酸とそのマグネシウム塩及びナトリウム塩等の物質も、吸引用処方物に有益であり得る。グルコン酸の塩は、ストレスを受けた組織及び細胞に対して抗酸化効果を有すると評されており、酸素ラジカルが誘導して炎症過程が持続する際に、この塩は、炎症の治療において特に有利となり得るという別の利点を有する。また、ピルビン酸塩も、そのような生体内での抗酸化効果を有すると考えられている。
【００４４】
本発明に係る液体組成物は、エチレンジアミン四酢酸ナトリウム塩（Ｎａ−ＥＤＴＡ）を含むことが好ましい。好ましくは、Ｎａ−ＥＤＴＡの濃度は、０．０１重量％〜０．５重量％、より好ましくは約０．０２重量％である。
【００４５】
酸化を防止しかつ不要な変色の防止に寄与するための更なる処置は、窒素又はアルゴン等の不活性ガスによって溶液の上で酸素を置換することである。
【００４６】
さらに、液体組成物の表面張力は、最適な噴霧化にとって重要である。表面張力は、約２５ｍＮ／ｍと８０ｍＮ／ｍとの間、より好ましくは３０ｍＮ／ｍ〜７５ｍＮ／ｍの間の範囲であるべきである。表面張力がこの範囲の下限の方にある組成物は、気道粘膜への良好な分散性を示すと予想される。さらに、一次包装から前記組成物が良好に無くなるように表面張力を調節する必要がある場合もある。これは、高濃度のアミノグリコシド処方物はその糖の性質のために粘着性があり得るため、特に重要となり得る。
【００４７】
上記理由から、また更に、安定化、矯味及び／又は徐放のために、表面活性材料（又は界面活性剤）を含ませて、表面張力を調節してもよい。表面活性賦形剤の他の利点は、これらがアルベカシンの菌体への浸透性を向上させ得ることであり、この結果、より顕著な抗細菌活性を得られる。加えて、界面活性剤は、細菌や真菌によって形成されたバイオフィルムを破壊又は分散させるのに役立ち、粘液様細菌形態に対するアルベカシンの抗細菌効能が向上されることが文献に示唆されている。
【００４８】
界面活性剤は、少なくとも１つの比較的親水性の分子領域と少なくとも１つの比較的親油性の分子領域とを有する材料であり、親水性−親油性相界面に集まり、表面張力を低減する。表面活性材料は、イオン性でも、非イオン性でもよい。特に好ましい界面活性剤は、良好な生理的適合性を有し、経口から又は鼻から吸入しても安全と思われるものである。好ましい界面活性剤は、例えば、チロキサポール、ポリソルベート８０等のポリソルベート類、レシチン、ビタミンＥ  ＴＰＧＳ、及びマクロゴール−１５−ヒドロキシステアレート等のマクロゴールヒドロキシステアレート類である。界面活性剤成分も、ポリソルベート８０とビタミンＥ  ＴＰＧＳとの組み合わせのように２つ以上の界面活性剤の混合物を含有してもよい。
【００４９】
粘膜への刺激を回避するために、気道へ投与される前記界面活性剤成分の溶液中の合計含有量は、最大でも約５％（ｗ／ｖ）に制限すべきである。特に好ましい濃度は、約０．０１％〜約２．０％（ｗ／ｖ）の間、及び約０．０２％〜約１％（ｗ／ｖ）の間である。
【００５０】
好ましくは、本発明の液体組成物は、０．０１％〜０．５％（ｗ／ｖ）、より好ましくは０．０３％〜０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０、レシチン又はビタミンＥ  ＴＰＧＳを含む。
【００５１】
本発明の幾つかの実施形態において、矯味剤も有用な賦形剤となり得る。吸引用処方物の味が不良であると、極めて不快で苛立たしい。このような吸入した際の不良な味覚は、経口から吸入する際にエアゾール液滴が直接経口及び咽頭部に付着すること、鼻から吸入する際に薬物が鼻から口へ送り出されること、呼吸器の粘膜毛様体による除去に関連して気道から口へ薬物が送り出されることから生じる。本明細書で使用されるように、矯味剤は、水系の味を改善することが可能な任意の薬学的に許容可能な化合物又は化合物の混合物であるが、この改善を達成するメカニズムは問われない。例えば、矯味剤は、そのひどい味を誤魔化す、即ち、その味が感じられる強さを低減するものでもよく、別の、典型的にはより快い、香味剤を前記組成物に添加してその味を矯正してもよい。これにより、受けた感覚全体としての印象が向上される。他の矯味メカニズムとしては、錯体形成、カプセル封入、包埋、その他として薬物と前記組成物の他の化合物との間の相互作用がある。
【００５２】
前記矯味剤として、例えば、サッカリン、アスパルテーム、シクラマート、スクラロース、アセスルファム、ネオテーム、ソーマチン、ネオヘスペリジン等、並びに、例えば、サッカリンのナトリウム塩及びアセスルファムのカリウム塩等のそれらの塩及び溶媒和物、薬学的に許容可能な甘味剤の群から選択できる。さらに、スクロース、トレハロース、フルクトース、ラクトース等の糖類、又はキシリトール、マンニトール、イソマルターゼ等の糖アルコール類を使用できる。更に有益な矯味剤としては、薬学的に許容可能な界面活性剤、アルカリ金属塩類又はアルカリ土類金属塩類、クエン酸、乳酸等の有機酸類、及びアルギニン等のアミノ酸が挙げられる。また、精油の成分（例えば、メントール、チモール、シネオール）等の芳香香味剤を、本発明に係る組成物の味及び忍容性を向上させるために使用し得る。
【００５３】
ある実施形態において、本発明に係る組成物が気道の粘膜表面へ多く付着するように賦形剤を添加できる。これにより、例えば、前記組成物が投与された部位での滞留時間の延長及び薬能を向上に寄与し得る。このような賦形剤は、粘膜付着性賦形剤、増粘性賦形剤、及び／又はゲル形成剤であってもよい。例としては、ポリビニルピロリドン、デキストラン、加工澱粉、キトサン、カルボマー等のポリマー、ヒドロキシプロピルメチルセルロース等のセルロース誘導体、及びプロピレングリコールやグリセロール等の粘稠液がある。
【００５４】
さらに、気道に対して有利な効果のある賦形剤を添加できる。例えば、グルコン酸マグネシウム等のマグネシウム塩を添加できる。マグネシウムは、粘液の粘度を低減する酵素であるドルナーゼアルファの酵素活性を増加させることが知られている。これは、気道粘液が粘性を増して化膿する、細菌性感染症や炎症に特に有益である。加えて、グルコン酸の陰イオンの浸透性は低く、粘膜毛様体による除去を促進し得る。さらに、グルコン酸マグネシウムは、細胞保護的な、生物学的抗酸化効果を有する場合がある。
【００５５】
好ましくは、本発明に係る組成物は、アルベカシンの分子溶液として処方される。他方で、活性剤（アルベカシン）を、水性液体中でコロイドとして分散させることもできる。ミセル、混合ミセル、コロイド錯体及びリポソーム等のコロイド担体系は、活性剤の標的送達に有益であり得る。
【００５６】
本発明の更に他の態様によれば、本発明に係る医薬組成物は、上気道又は下気道の疾患を治療或いは予防するための方法に使用される。このような疾患は、特に、細菌のアルベカシンに対する感受性が高い細菌性感染症によって生じ、又はそのような感染症に関連する。
【００５７】
この疾患を治療又は予防するための方法は、前記組成物をエアゾール化し、得られたエアゾールを患者に吸引させる工程を含む。エアゾールは、本明細書において、系として定義され、この系は、連続気相と、前記系に分散された、液体及び／又は固体粒子の非連続相又は分散相とを含有する。分散された液相と連続気相とを含有するエアゾールを、「液体エアゾール」、又はおそらくより適切には「エアゾール化された液体」という場合がある。
【００５８】
この実施形態において、前記分散相は、実質的に液滴からなる。分散相の液滴は、液体環境においてアルベカシンを含有する。この液体環境は、主に水相であり、上述したような賦形剤を更に含んでいても含んでいなくてもよい。好ましくは、この液相は、分子性溶液又はコロイド分散液中にアルベカシンを含む。当業者であれば、本明細書で上記のように開示された液体組成物に関する特徴及び好ましいものが、この組成物から生成されるエアゾールの分散相にも適用され得ること、またその逆も同様であることを理解するであろう。
【００５９】
前記エアゾールの連続気相は、薬学的に許容可能な任意の気体又は気体の混合物から選択し得る。例えば、この気体としては、エアゾール生成器として噴霧器を使う吸引療法では最も一般的なものがあり、単純に空気でもよく、圧縮空気でもよい。或いは、他の気体や気体混合物、例えば酸素や二酸化炭素が多い空気、又は窒素と酸素の混合物を使用し得る。
【００６０】
本発明の組成物から生成されるエアゾールの分散相は、好ましくは約１μｍ〜約６μｍ、より好ましくは約２μｍ〜約４．５μｍ又は約１．５μｍ〜約４μｍの空気動力学的中央粒子径（ＭＭＡＤ）を示す。ＭＭＡＤは、液体エアゾールに対するカスケード衝撃法を用いて測定され、エアゾール化された薬物の質量の５０％が含まれる境となる直径を示す。すなわち、薬物質量の５０％が、ＭＭＡＤ未満の直径を有する液滴に含まれる。
【００６１】
エアゾールの分散相を規定する他のパラメータは、エアゾール化された液体粒子又は液滴の粒度分布である。幾何標準偏差（ＧＳＤ）は、生成されたエアゾール粒子又は液滴の粒子或いは液滴のサイズ分布の広さを表すためにしばしば使われる単位である。
【００６２】
上記範囲内の精密なＭＭＡＤの選択には、エアゾールが付着する標的領域又は組織を考慮すべきである。例えば、意図される吸入が経口からなのか鼻からなのか、並びに、口腔咽頭、気管支、肺、鼻及び／又は鼻傍洞のいずれへの送達が注目されているのかに応じて、最適な液滴径は異なる。加えて、患者の年齢及び呼吸パターンも、肺へ薬物を送達するために最適な粒度を決定する上で重要な要因である。
【００６３】
上気道、特に副鼻腔の粘膜、中鼻道自然口ルート（ｏｓｔｅｏｍｅａｔａｌ  ｃｏｍｐｌｅｘ）、鼻傍腔の治療には、２．０μｍ〜４．５μｍの範囲のＭＭＡＤが特に適切である。
【００６４】
肺送達を意図する場合には、前記エアゾールは、好ましくは５．０μｍ未満のＭＭＡＤを有する。好ましくは、ＭＭＡＤは約２．０μｍ〜約４．５μｍの範囲であり、ＧＳＤは約１．２〜約２．２、好ましくは約１．２〜約１．８、より好ましくは約１．４〜約１．６の範囲である。気管支及び細気管支を含む肺において、エアゾール化された薬物の量と比べて、局所的に高い薬物濃度を実現するために、このような粒度パラメータ及び粒度分布パラメータは、特に有益である。これに関連して考慮しなければならないのは、中枢気道へ付着させる場合に比べて肺深部への付着させる場合にはＭＭＡＤを小さくする必要があること、並びに、乳児や幼い子供の場合には約１．５μｍ〜約３μｍの範囲のより小さい液滴サイズがより好ましいことである。
【００６５】
前記エアゾールは、任意の従来のエアゾール生成器を使って生成できる。本明細書で使用されるように、エアゾール生成器は、エアゾールを生成及び放出可能な装置又は装置の組み合わせである。本発明によれば、この装置は、液体材料を分散された液相にエアゾール化することが可能である。典型的には、このような装置は、噴霧器と呼ばれる。装置の種類及びモデルに応じて、本発明のエアゾール生成器は、圧縮器を必要とし、又は備える場合がある。言い換えると、エアゾール生成器という用語は、エアゾールを製造・放出して、動物又はヒト患者にそのエアゾールを投与するのに必要な完全な装置又は集合体として使用される。好ましくは、噴霧器は、ジェット型、超音波型、ピエゾ電気型、ジェット衝突型、電気流体力学型、毛管力型、孔開き膜型又は孔開き振動膜型噴霧器から選択される。
【００６６】
エアゾールを上部気道に投与するための好ましいエアゾール生成器は、孔開き振動膜原理を利用してエアゾールを生成する噴霧器である。例えば、ｅＦｌｏｗ（登録商標）として知られる装置があるが、これはエアゾールをパルス変動させて放出可能でもある。この種類の噴霧器は、エアゾール流を鼻に導くための鼻部材を有する。このような改良型電子噴霧器によって生成されたエアゾールは、エアゾールが連続的に生成される場合よりも、更に良好に副鼻腔又は鼻傍腔に到達できる。このパルス変動する圧力波によって、これらの腔はより集中的に換気されるため、同時に投与されるエアゾールは、これらの腔に更に良好に分散される。このような電子噴霧装置の例は、国際公報第２００９／０２７０９５号に開示されている。
【００６７】
意図される使用が、気管支又は肺深部等の下気道の罹患した（又は罹患する可能性のある）部位への活性剤（即ち、アルベカシン）の送達である場合、ピエゾ電気型、電気流体力学型又は孔開き膜型噴霧器を選択してエアゾールを生成することが特に好ましい。適切な噴霧器の例として、Ｉ−Ｎｅｂ（登録商標）、Ｍｉｃｒｏ  Ａｉｒ（登録商標）、Ｍｕｌｔｉｓｏｎｉｃ（登録商標）、Ｒｅｓｐｉｍａｔｅ（登録商標）、ｅＦｌｏｗ（登録商標）、ＡｅｒｏＮｅｂ（登録商標）、ＡｅｒｏＮｅｂ  Ｐｒｏ（登録商標）及びＡｅｒｏＤｏｓｅ（登録商標）の装置ファミリーが挙げられる。薬物の標的を下気道に定めるための、特に好ましい噴霧器は、ｅＦｌｏｗ（登録商標）電子振動膜型噴霧器である。
【００６８】
他の好ましい噴霧器の概念として、国際公報第２００７／０２００７３号に記載されているような治験用ｅＦｌｏｗ（登録商標）クローズドシステムがある。このシステムは適応型振動膜噴霧器であって、薬物溶液を含有するアンプルを噴霧器保持容器の閉塞キャップに挿入できる。欧州特許第２，０６２，６０８号明細書に記載されているようなアンプルは、噴霧器に組み込まれた開封システムによって噴霧器キャップが閉じられたときのみ開封される。これにより、薬物溶液が直ちに噴霧器保持容器に流入できるため、エアゾールの損失の軽減化と合わせてより再現可能で正確な投薬が実現される。
【００６９】
本発明に係るアルベカシンを投与する特に好ましい噴霧器の概念として、病院環境での呼吸装置システムの配管回線に設置されるように設計された孔開き振動膜型噴霧器がある。このような噴霧器は、国際公報第２００９／１３５８７１号に記載されている。このような噴霧器システムによって本発明のアルベカシン組成物を噴霧化することは、例えば、院内感染性肺炎、院外感染性肺炎、人工呼吸器関連肺炎（ＨＡＰ、ＣＡＰ、ＶＡＰ）及び病院での治療を必要とする他の呼吸器疾患の治療に特に有利である。
【００７０】
肺送達又は副鼻腔送達のいずれに対応されていようとも、前記噴霧器は、好ましくは、好ましい出力速度で単位用量をエアゾール化できるように選択又は構成されるべきである。単位用量とは、本明細書において、一回の投与で投与される活性化合物を有効量含有する液体組成物の体積と定義される。噴霧器が、このような単位用量を少なくとも約０．１ｍｌ／分の速度で、或いは、前記組成物の比重が通常１前後であることを前提として、少なくとも約１００ｍｇ／分の速度で送達できることが好ましい。噴霧器としては、それぞれ少なくとも約０．１５ｍｌ／分、或いは、１５０ｍｇ／分の出力速度を達成可能であることがより好ましい。更なる実施形態において、噴霧器の出力速度は、少なくとも約０．２ｍｌ／分、０．３ｍｌ／分、０．４ｍｌ／分、０．５ｍｌ／分、０．６ｍｌ／分、０．７ｍｌ／分、０．８ｍｌ／分、０．９ｍｌ／分又は１ｍｌ／分である。
【００７１】
さらに、噴霧器の出力速度は、液体組成物の噴霧化時間を短くするために選択されるべきである。噴霧化時間が、出力速度及びエアゾール化される組成物の体積に依存するのは明らかである。好ましくは、噴霧器は、有効用量の活性化合物を含有する、ある体積の液体組成物を、約２０分以内にエアゾール化できるように選択又は構成されるべきである。単位用量の噴霧化時間としては約１０分以内であることがより好ましい。更なる実施形態において、噴霧器は、単位用量当たり約６分以内、より好ましくは約３分以内の噴霧化時間を実現するように選択又は構成される。噴霧化時間としては、約０．５分〜約３分の範囲であることが現時点で最も好ましい。
【００７２】
噴霧化時間を短くするために、処方物の体積は小さいことが好ましい。この体積は、用量体積、用量単位体積又は単位用量体積とも呼ばれ、一回の投与に使用されることを意図された体積であると理解されるべきである。具体的には、この体積は、約０．３ｍｌ〜約３．５ｍｌ、好ましくは約０．４ｍｌ〜約３．５ｍｌの範囲でもよい。ある量が残ることが望まれる、又は役立つ場合、この残留量は、１ｍｌ未満、より好ましくは０．５ｍｌ未満、最も好ましくは０．２ｍｌ未満であるべきである。そして、効果的に噴霧化される体積は、好ましくは約０．１ｍｌ〜約２．５ｍｌ又は約０．２５ｍｌ〜約２．５ｍｌの範囲であり、より好ましくは約０．２ｍｌ〜約１．５ｍｌ又は約０．５ｍｌ〜約１．５ｍｌの範囲である。
【００７３】
本発明の特定の実施形態では、本明細書において上述のように定義された水性液体組成物を製造するための方法を提供する。この方法は、（ａ）前記組成物の成分を準備し；（ｂ）工程（ａ）で準備された成分を組み合わせて、水性液体組成物を形成し；（ｃ）工程（ｂ）で得られた組成物を濾過滅菌し；（ｄ）工程（ｃ）で得られた、濾過滅菌された組成物を、無菌条件下で無菌容器に充填する工程を含む。工程（ａ）〜（ｄ）は、この順番で実施される。必要に応じて、この方法は、別の工程を含んでいてもよく、（ａ）〜（ｄ）の各工程は、複数のサブ工程を含んでいてもよい。
【００７４】
典型的に溶液の変色と関連するアルベカシンの変質を回避するために、全ての溶液を窒素等の不活性ガスで飽和させて、酸素を排出することが推奨される。
【００７５】
次に、この結果得られた水溶液を濾過滅菌する。どのように適切なフィルターを選択し、濾過滅菌法プロセスを行うか自体は、当業者に知られている。典型的には、孔の大きさが０．２２μｍのフィルター、及び必要に応じて孔の大きさが０．４５μｍの前置フィルターに通す１回又は２回の濾過が推奨される。
【００７６】
その後の無菌溶液の最終容器への充填は、無菌条件下で、不活性ガスで飽和された雰囲気中で行われる。予め殺菌されたガラスバイアルを容器として選択し得る。特に、用量体積を約０．２ｍｌ〜約５ｍｌの範囲にして、製品を一用量単位毎に包装する場合、成形同時充填（ｂｌｏｗ−ｆｉｌｌ−ｓｅａｌ）過程設計を採用して順次製造された無菌のプラスチックバイアルを使用することがより好ましい。或いは、アルミニウム、アルミニウムがコーティングされたポリマー、又は他の適切なポリマー材料混合物からなるブリスターを、単位用量の投与用の包装材として使用し得る。これにより、液体薬物処方物の無菌充填が可能となる。
【００７７】
成形同時充填バイアルは、瓶形状のデザインで形成し得る。これには、ひねる又は折ることによって除去できる閉塞部が備えられていてもよい。このように形成された開口部によって、滴下による投薬を可能にし、その中身を完全に空にすることができ、薬局方で述べらているような投与均一性が満たされる。この開口部を更に、ルアー接続部又はルアーロック接続部に嵌合するように設計してもよい。この様に、例えば、容器の中身を吸い上げ噴霧器に移動するために、ルアー接続部を備えた一般的な注射器を、容器にしっかりと接続し得る。
【００７８】
より好ましくは、前記成形同時充填バイアルを、対応するように構成された噴霧器の接続部材に充分しっかりと接続するように設計し得る。これにより、欧州特許第２，０６２，６０８号明細書に記載されているような吸引器の保持容器に製剤を直接充填できる。このような適応型噴霧器の例としては、治験用ｅＦｌｏｗ（登録商標）クローズドシステム孔開き振動膜型噴霧器がある。このバイアルを、噴霧器保持容器の覆蓋の中に設置し、この覆蓋を噴霧器上に嵌合させることによってバイアルを貫通させる。このシステムによって、噴霧器の薬剤カップに薬物を充填したときに薬物が確実にこぼれないようにして、推奨された用量が薬剤ラベルに要求されているように投与される。
【００７９】
１又は複数の一次包装手段を、段ボール箱等の１つの二次包装手段内に包装してもよい。
本発明を以下の実施例によって説明するが、これらの実施例によって本発明の範囲が限定されるものと理解すべきではない。
【実施例】
【００８０】
（実施例１）
１００ｍｇ／ｍｌ及び１５０ｍｇ／ｍｌのアルベカシン硫酸塩系アルベカシン溶液（本発明に係るものではない）
安定剤として０．０２％Ｎａ−ＥＤＴＡを含有する、１００ｍｇ／ｍｌのアルベカシン（その硫酸塩を使用）の溶液を調製した。ｐＨを硫酸で調節し、塩化ナトリウムを添加してオスモル濃度を調節した。加えて、安定剤として０．０２％Ｎａ−ＥＤＴＡを含有する、１５０ｍｇ／ｍｌのアルベカシン処方物（硫酸塩として使用されたアルベカシン）も調製した。これらの処方物を濾過滅菌し、ガラスバイアルに充填した。両処方物のアルベカシン濃度を、その塩基濃度で表した。これらの処方物の組成を表１に示す。塩化物イオンのモル量のアルベカシンのモル量に対する比も表１に示す。物理化学的パラメータを表２に示す。本実施例は比較目的である。
【００８１】
【表１】
2014526481.tif 000002
【００８２】
【表２】
2014526481.tif 000003
【００８３】
両処方物のエアゾール性能を、治験用ｅＦｌｏｗ（登録商標）インラインシステムで評価した。中央粒子径（ＭＭＤ）と粒度分布（幾何標準偏差：ＧＳＤ）並びに総出力速度（ＴＯＲ）を測定した。粒度パラメータはレーザ回折によって測定した。結果を表３に示す。
【００８４】
【表３】
2014526481.tif 000004
【００８５】
両処方物の吸入によって、咳が誘発された。しかし、アルベカシンが５０ｍｇ／ｍｌの濃度となるように処方物を希釈しただけで、吸入されてもより忍容性の高い処方物となった。
【００８６】
（実施例２）
アルベカシン塩酸塩の調製及び分析
３．０ｇ（５．３６ｍｍｏｌ）のアルベカシン遊離塩基（力価：９８８μｇ／ｍｇ）を、１１ｍｌの蒸留水に溶解した。この溶液のｐＨを、６ｍｏｌ／ｌの塩酸水溶液を添加して約７．０に調節した。この結果得られた溶液を、３ｍｌの蒸留水を添加して希釈し、次いで凍結乾燥して、３．８２ｇの固体アルベカシン塩酸塩を得た。
【００８７】
以下の分析を行った：
ＤＳＣ（示差走査熱量測定）走査は、アルミニウム製圧着パンにおいて、ガス流量が５０ｍｌ／分のＮ２雰囲気下で、温度範囲３０℃〜２８０℃、加熱速度５℃／分の条件で記録した。結果を図１に示す。ＤＳＣ走査において、明確な吸熱反応のピークは観察されず、アルベカシン塩酸塩がアモルファス固体であったことを示している。
【００８８】
ＴＧＡ（熱重量分析）走査は、白金製オープンパンにおいて、ガス流量が６０ｍｌ／分のＮ２雰囲気下で、温度範囲３０℃〜２８０℃、加熱速度５℃／分の条件で記録した。結果を図２に示す。
【００８９】
１Ｈ及び１３Ｃ  ＮＭＲ（核磁気共鳴）スペクトルは、濃度が３０ｍｇ／ｍの酸化重水素溶液において、３−（トリメチルシリル）プロピオン酸−ｄ４ナトリウム塩を内部標準化合物として用いて記録した。観察されたシグナル及び以下の構造式に示される位置番号に基づくシグナルの帰属を、それぞれ表４及び５にまとめる。
【００９０】
【化１】
2014526481.tif 000005
【００９１】
【表４】
2014526481.tif 000006
【００９２】
【表５】
2014526481.tif 000007
【００９３】
旋光度［α］２０Ｄを、日本薬局方（第２．４９節）に準じて決定した（乾燥後、０．２５ｇ／水２５ｍｌ、１００ｍｍ）。表６に示すように、アルベカシン塩酸塩の旋光度［α］２０Ｄは、＋７９．８°であった。
【００９４】
【表６】
2014526481.tif 000008
【００９５】
イオンクロマトグラフィーによって塩化物に対するアッセイを以下の条件で行った：試料溶液：７ｍｇ（乾燥後）／２００ｍｌ；標準溶液：Ｃｌ−８ｍｇ／ｌ及びＣｌ−６ｍｇ／ｌ（２つの濃度点による検量線用）；検出器：電気伝導度検出；カラム：ＡＳ１２Ａ（４ｘ２００ｍｍ、ＤＩＯＮＥＸ）、ＡＧ１２Ａ（４ｘ５０ｍｍ、ＤＩＯＮＥＸ）；カラム温度：約３５℃の一定温度；移動相：ＤＩＯＮＥＸ陰イオン交換溶離液ＡＳ１２Ａ（２．７ｍｍｏｌ／ｌのＮａ２ＣＯ３／０．３ｍｍｏｌ／ｌのＮａＨＣＯ３）、移動相の流量：１．５ｍｌ／分；注入した溶液の体積：２５μｌ。結果を表７に示す。塩化物含有量は１９．６６％であった。
【００９６】
【表７】
2014526481.tif 000009
【００９７】
表８における計算に基づき、アルベカシン塩酸塩中の塩酸塩単位の数は、３．５〜４．０と考えられる。
【００９８】
【表８】
2014526481.tif 000010
【００９９】
（実施例３）
モルモット咳モデルにおけるアルベカシン硫酸塩溶液とアルベカシン塩酸塩溶液との比較
モルモット咳誘発モデルを使用して、アルベカシンの硫酸塩及び塩酸塩の形態間の、咳誘発における違いを調べた。試験に供された物質は、市販のアルベカシン硫酸塩（ＡＢＫ−Ｈ２ＳＯ４）、及び実施例２に記載の方法によってアルベカシン遊離塩基から調製されたアルベカシン塩酸塩（ＡＢＫ−ＨＣｌ）であった。投薬溶液の濃度を２５ｍｇ／ｍｌに設定した。加えて、生理食塩水を陰性対照剤として使用し、クエン酸（３０ｍｇ／ｍｌ）を陽性対照剤として使用した。
【０１００】
Ｈａｒｔｌｅｙ系統の雄モルモットを実験に供し、１０匹のこの動物で１群を構成した。柔軟で薄いゴムプレートが頚部に取り付けられたモルモットを、２つのチャンバーからなる箱の中に固定した。これらのチャンバーを、吸引ポンプ（ＰＵＬ１２３−ＫＳ−６５０、Ｍ・Ｉ・Ｐ・Ｓ株式会社）を使って一定の流量で吸引することによって換気した。咳を以下の指標を基に検出した：症状の観察、多機能呼吸測定装置（Ｗｉｎ  Ｐｕｌｍｏｓ−Ｉ、Ｍ・Ｉ・Ｐ・Ｓ株式会社）を使用したｄｏｕｂｌｅ  ｆｌｏｗ  ｐｌｅｔｈｙｓｍｏｇｒａｐｈ法による体幹側の呼吸パターンの分析、及び圧力トランスデューサ（血圧モニタリングキット、日本ベクトン・ディッキンソン株式会社）によって測定される頭部側及び体幹側チャンバーの気圧の変化。頭部側及び体幹側チャンバー内の気圧の典型的な変化、及び咳をしたときの体幹側の呼吸パターンの典型的な変化と共に、症状観察中に咳動作が認められた場合に咳反射が起こったと決定した。被検物質を電子振動膜型噴霧器（ｅＦｌｏｗ（登録商標）、パリファーマ社）を使って噴霧化し、このエアゾールを頭部側のチャンバーに導入した。これにより、自発的に呼吸しているモルモットに１０分間このエアゾールを吸引させた。そして、咳反射の発生回数を数えた。
【０１０１】
結果を表９に示す。各値は、平均±標準偏差（ｎ＝１０）を表す。
本実施例において使用されたアルベカシンの濃度は、本発明に係るものではない。
【０１０２】
【表９】
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【０１０３】
生理食塩水群と比べて、クエン酸群における咳反射の発生回数は有意に多かった。アルベカシンに関しては、咳反射の発生回数は、硫酸塩群よりも、塩酸塩群の方が有意に少なかった。
【０１０４】
以上より、アルベカシンに関して、塩酸塩形態による咳誘発は、硫酸塩形態よりも弱かったことが示された。
【０１０５】
（実施例４）
１５０ｍｇ／ｍｌ及び１００ｍｇ／ｍｌのアルベカシン塩基由来アルベカシン塩酸塩溶液
０．９ｇのアルベカシン塩基を４ｇの０．５％（ｗ／ｗ）塩化ナトリウム溶液に溶解し、ｐＨが１０．９６の強アルカリ溶液を得た。ｐＨを、塩酸（３２％（ｗ／ｗ）ＨＣｌ溶液）を使って６．７７に調節し、０．５％（ｗ／ｗ）塩化ナトリウム溶液を最終重量が６ｇになるまで添加した。塩化物イオンのモル量のアルベカシンのモル量に対する比は約３．７：１であった。
【０１０６】
この処方物を無菌条件下で濾過滅菌した。処方物のオスモル濃度はかなり高く、１３７９ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇであった。しかし、予想外に、この処方物が吸入されても、実施例１に記載のアルベカシン硫酸塩系処方物と比べて、忍容性は非常に高かった。塩化物系処方物は、咳反射を誘発しなかった。
【０１０７】
１ｍｌの上記１５０ｍｇ／ｍｌの処方物を０．５ｍｌの０．９％（ｗ／ｗ）塩化ナトリウム溶液で希釈し、１００ｍｇ／ｍｌのアルベカシン塩化物系アルベカシン処方物を得た。０．９％（ｗ／ｗ）塩化ナトリウム溶液で希釈すると、塩化物イオンのモル量のアルベカシンのモル量に対する比は約４：１と算出された。
この処方物も、実施例１に記載のアルベカシン硫酸塩処方物と比べて、忍容性が良く、咳反射を誘発しなかった。
【０１０８】
（実施例５）
塩化物イオンのモル量のアルベカシンのモル量に対する比が異なる場合の評価
塩化物イオンのモル量のアルベカシン（遊離塩基）のモル量に対する比が異なる４つの処方物を、表１０に示すように調製した。全ての処方物には、１５０ｍｇ／ｍｌのアルベカシン遊離塩基が含有されていた。
【０１０９】
【表１０】
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【０１１０】
盲検法によって、３人の男性協力者が、ｅＦｌｏｗ（登録商標）電子振動膜型噴霧器（パリファーマ社）を使って４つ全ての処方物を吸引した。全ての協力者が、処方物Ｄを吸入すると直ちに咳き込んだ。処方物Ａ、Ｂ及びＣは、処方物Ｄよりも非常に忍容性が高かった。被験者は、これら３つの処方物からの副作用を全く説明しなかったか、咳は軽微で忍容できる程度であることのみを述べた。
【０１１１】
同じ協力者が、実施例１に記載の実験に参加し、１００ｍｇ／ｍｌのアルベカシンのみを含有する実施例１の処方物よりも、処方物Ａ、Ｂ及びＣを忍容できたことを報告した。処方物Ｄと比べて、処方物Ａ、Ｂ及びＣを吸入してもより忍容できたことは、塩化物イオンのモル量のアルベカシンのモル量に対する比がより高かったことと関連するものである。
【０１１２】
（実施例６）
好中球減少マウスにおける、緑膿菌によって生じた実験的肺炎に対するアルベカシン吸入の治療効果
好中球減少マウスにおける、緑膿菌によって生じた実験的肺炎に対するアルベカシン吸入の治療効果を、アミカシン及びトブラマイシンの治療効果と比較した。
【０１１３】
シクロホスファミド（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社）を、生理食塩水に溶解した。１５０ｍｇ／ｋｇ及び１００ｍｇ／ｋｇのシクロホスファミド溶液をそれぞれ感染４日前及び１日前に腹腔内注入することにより、４〜５週齢のＣｒｌｊ：ＣＤ１（ＩＣＲ）雄マウスを免疫抑制した。その後、アミノグリコシド修飾酵素をコードするａａｃ（６’）−Ｉａｅを有するアミカシン−及びトブラマイシン−耐性緑膿菌を鼻腔内に接種することによって肺感染症を引き起こした。感染２時間後に、食塩水に溶解しているこれらの抗生物質を、電子振動膜型噴霧器（ｅＦｌｏｗ（登録商標）、パリファーマ社、スプレー流量：約０．５ｍｌ／分）を使って各マウスに投与した。感染２０時間後に、肺１つ当たりの生存細胞を数えた。アルベカシンの用量として、３ｍｇ／ｍｌ、１０ｍｇ／ｍｌ及び３０ｍｇ／ｍｌとする３つのレベルを設定した。アミカシン及びトブラマイシンの各用量は、１０ｍｇ／ｍｌ、３０ｍｇ／ｍｌ及び１００ｍｇ／ｍｌの３つのレベルとした。吸入時間は５分間とした。他方、無処理対照群には生理食塩水を投与した。結果を表１１に示す。
【０１１４】
無処理対照群と比べて、アルベカシン、アミカシン及びトブラマイシンは、全ての用量レベルにおいて、肺の生存細胞数を有意に減少させたことを結果は示している。さらに、アルベカシンの治療効果は、同じ用量（１０ｍｇ／ｍｌ又は３０ｍｇ／ｍｌ）のアミカシン及びトブラマイシンの効果よりも有意に優れていた。
本実施例において使用されたアルベカシンの濃度は、本発明に係るものではない。
【０１１５】
【表１１】
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【０１１６】
（実施例７）
１５０ｍｇ／ｍｌ、１２５ｍｇ／ｍｌ及び１００ｍｇ／ｍｌのアルベカシン塩基由来アルベカシン塩酸塩溶液
０．５％（ｗ／ｗ）塩化ナトリウム溶液の代わりに蒸留水を使用した以外は、実施例４と同様にして、更に１５０ｍｇ／ｍｌのアルベカシン塩酸塩を含有する処方物を調製した。この溶液のｐＨを、３２％（ｗ／ｗ）ＨＣｌ溶液で７．１５に調節した。実施例４の処方物は忍容性が高かったが、ＮａＣｌを除外したことにより処方物のオスモル濃度をある程度低くすることができ、これにより忍容性が更に向上した。最終処方物において測定されたオスモル濃度は１０９１ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇであった。塩化物イオンのモル量のアルベカシンのモル量に対する比は、約３．５：１であった。
【０１１７】
続いて、この処方物を２回蒸留水で希釈した。これにより、１２５ｍｇ／ｍｌのアルベカシンを含み、オスモル濃度が８８２ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇの処方物、並びに、１００ｍｇ／ｍｌのアルベカシンを含み、オスモル濃度が６８０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇの溶液を得た。これらの処方物における塩化物イオンのモル量のアルベカシンのモル量に対する比も約３．５：１であった。
【０１１８】
（実施例８）
吸引用アルベカシン塩酸塩処方物
投与性及び表面の潤滑性を向上させるために、アルベカシン塩酸塩処方物に更にイオン性又は非イオン性の界面活性剤を含有させてもよい。表面張力を低減させる異なる賦形剤を更に含有させた組成物を以下の表にまとめた。
【０１１９】
【表１２】
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【０１２０】
（実施例９）
ｐＨが３の１５０ｍｇ／ｍｌのアルベカシン塩酸塩溶液
１５．０ｇのアルベカシン塩基及び０．２５ｇのＮａＣｌを、約７０ｇの精製水に溶解した。ｐＨを、塩酸（３２％ｗ／ｗ）及び１Ｎ水酸化ナトリウム溶液を使って約３に調節した。ｐＨ調節後、精製水を１００ｍｌまで添加し、処方物を物理化学的に特徴付けた。この結果得られた処方物のｐＨは３．１であった。この処方物は、１２８８ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇのオスモル濃度を有し、表面張力は７３．６２ｍＮ／ｍで、粘度は１．８１ｍＰａ・ｓであることが測定された。この処方物は、粒子のない透明な溶液であった。
【０１２１】
（実施例１０）
オスモル濃度の決定
アルベカシンの塩酸塩及び硫酸塩のオスモル濃度を比較するために、アルベカシン遊離塩基濃度が１５０ｍｇ／ｍｌである、アルベカシン塩酸塩水溶液及びアルベカシン硫酸塩水溶液を調製した。アルベカシン遊離塩基を溶解するために、試験Ａでは蒸留水を使用したが、試験Ｂでは０．２５％（ｗ／ｗ）塩化ナトリウム水溶液を使用した。調製した溶液を異なるアリコートに分割して、ｐＨを塩酸又は硫酸のいずれかで調節して（その結果、それぞれアルベカシン塩酸塩溶液及びアルベカシン硫酸塩溶液が得られる）、ｐＨが約８．０、７．０、６．５及び５．７の溶液を得た。これらの溶液のオスモル濃度を測定した。加えて、これらアルベカシン塩酸塩溶液及びアルベカシン硫酸塩溶液の混合物（比は９：１；同じｐＨの溶液を混合した）のオスモル濃度を測定して、アルベカシン硫酸塩溶液をアルベカシン塩酸塩溶液に添加することによるオスモル濃度の変化を評価した。
【０１２２】
【表１３】
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【０１２３】
【表１４】
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【０１２４】
（実施例１１）
１００ｍｇ／ｍｌのアルベカシン処方物
表１５に示すようにｐＨを調節するために塩酸（ＨＣｌ）及び硫酸（Ｈ２ＳＯ４）の混合物を使い、１００ｍｇ／ｍｌのアルベカシン処方物を調製した。処方物Ｂには０．２５％のＮａＣｌを更に含有させた。オスモル濃度、ｐＨ及び外観に関して、これらの処方物を特徴付けた。
【０１２５】
【表１５】
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【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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