(57)【要約】  前立腺癌を有する被検者へ以下の構造式によって表される化合物、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩の有効量を投与することを含んでなる、前立腺癌を有する被検者を治療するための方法。構造式に図示される可変基は、本明細書で定義される。
2014507443.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の構造式：
【化１】
2014507443.tif 000018
［式中：
Ｚは、ＯＨ、ＳＨ、又はＮＨ２であり；
Ｘは、ＣＲ４又はＮであり；
Ｒ１は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＳＨ、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアルケニル、置換されていてもよいアルキニル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいシクロアルケニル、置換されていてもよいヘテロシクリル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいアラルキル、置換されていてもよいヘテロアラルキル、ハロ、シアノ、ニトロ、グアナジノ、ハロアルキル、ヘテロアルキル、アルコキシ又はシクロアルコキシ、ハロアルコキシ、−ＮＲ１０Ｒ１１、−ＯＲ７、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ７、−Ｃ（Ｓ）Ｒ７、−Ｃ（Ｏ）ＳＲ７、−Ｃ（Ｓ）ＳＲ７、−Ｃ（Ｓ）ＯＲ７、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ１０Ｒ１１、−Ｃ（ＮＲ８）ＯＲ７、−Ｃ（ＮＲ８）Ｒ７、−Ｃ（ＮＲ８）ＮＲ１０Ｒ１１、−Ｃ（ＮＲ８）ＳＲ７、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ７、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲ７、−ＯＣ（Ｓ）ＯＲ７、−ＯＣ（ＮＲ８）ＯＲ７、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ７、−ＳＣ（Ｏ）ＯＲ７、−ＳＣ（ＮＲ８）ＯＲ７、−ＯＣ（Ｓ）Ｒ７、−ＳＣ（Ｓ）Ｒ７、−ＳＣ（Ｓ）ＯＲ７、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＯＣ（Ｓ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＯＣ（ＮＲ８）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＳＣ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＳＣ（ＮＲ８）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＳＣ（Ｓ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＯＣ（ＮＲ８）Ｒ７、−ＳＣ（ＮＲ８）Ｒ７、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−ＮＲ７Ｃ（Ｓ）Ｒ７、−ＮＲ７Ｃ（Ｓ）ＯＲ７、−ＮＲ７Ｃ（ＮＲ８）Ｒ７、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）ＯＲ７、−ＮＲ７Ｃ（ＮＲ８）ＯＲ７、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＮＲ７Ｃ（Ｓ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＮＲ７Ｃ（ＮＲ８）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＳＲ７、−Ｓ（Ｏ）ｐＲ７、−ＯＳ（Ｏ）ｐＲ７、−ＯＳ（Ｏ）ｐＯＲ７、−ＯＳ（Ｏ）ｐＮＲ１０Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）ｐＯＲ７、−ＮＲ８Ｓ（Ｏ）ｐＲ７、−ＮＲ７Ｓ（Ｏ）ｐＮＲ１０Ｒ１１、−ＮＲ７Ｓ（Ｏ）ｐＯＲ７、−Ｓ（Ｏ）ｐＮＲ１０Ｒ１１、−ＳＳ（Ｏ）ｐＲ７、−ＳＳ（Ｏ）ｐＯＲ７、−ＳＳ（Ｏ）ｐＮＲ１０Ｒ１１、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ７）２、又は−ＳＰ（Ｏ）（ＯＲ７）２であり；
Ｒ２は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＲ７Ｈ、−ＯＲ１５、−ＳＲ１５、−ＮＨＲ１５、−Ｏ（ＣＨ２）ｍＯＨ、−Ｏ（ＣＨ２）ｍＳＨ、−Ｏ（ＣＨ２）ｍＮＲ７Ｈ、−Ｓ（ＣＨ２）ｍＯＨ、−Ｓ（ＣＨ２）ｍＳＨ、−Ｓ（ＣＨ２）ｍＮＲ７Ｈ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＳＣ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ７、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ７、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲ７、−ＳＣ（Ｏ）ＯＲ７、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）ＯＲ７、−ＯＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−ＳＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−ＮＲ７ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−ＯＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＲ７、−ＳＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＲ７、−ＮＲ７ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＲ７、−ＯＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＳＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＮＲ７ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＯＳ（Ｏ）ｐＲ７、−ＳＳ（Ｏ）ｐＲ７、−ＮＲ７Ｓ（Ｏ）ｐＲ７、−ＯＳ（Ｏ）ｐＮＲ１０Ｒ１１、−ＳＳ（Ｏ）ｐＮＲ１０Ｒ１１、−ＮＲ７Ｓ（Ｏ）ｐＮＲ１０Ｒ１１、−ＯＳ（Ｏ）ｐＯＲ７、−ＳＳ（Ｏ）ｐＯＲ７、−ＮＲ７Ｓ（Ｏ）ｐＯＲ７、−ＯＣ（Ｓ）Ｒ７、−ＳＣ（Ｓ）Ｒ７、−ＮＲ７Ｃ（Ｓ）Ｒ７、−ＯＣ（Ｓ）ＯＲ７、−ＳＣ（Ｓ）ＯＲ７、−ＮＲ７Ｃ（Ｓ）ＯＲ７、−ＯＣ（Ｓ）ＮＲ３０Ｒ３１、−ＳＣ（Ｓ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＮＲ７Ｃ（Ｓ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＯＣ（ＮＲ８）Ｒ７、−ＳＣ（ＮＲ８）Ｒ７、−ＮＲ７Ｃ（ＮＲ８）Ｒ７、−ＯＣ（ＮＲ８）ＯＲ７、−ＳＣ（ＮＲ８）ＯＲ７、−ＮＲ７Ｃ（ＮＲ８）ＯＲ７、−ＯＣ（ＮＲ８）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＳＣ（ＮＲ８）ＮＲ１０Ｒ１１、又は−ＮＲ７Ｃ（ＮＲ８）ＮＲ１０Ｒ１１であり；
Ｒ３は、−Ｈ、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアルケニル、置換されていてもよいアルキニル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいシクロアルケニル、置換されていてもよいヘテロシクリル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいアラルキル、置換されていてもよいヘテロアラルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシアルキル、ハロアルキル、ヘテロアルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−（ＣＨ２）ｍＣ（Ｏ）ＯＲ７、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ７、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ７、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）ｐＲ７、−Ｓ（Ｏ）ｐＯＲ７、又は−Ｓ（Ｏ）ｐＮＲ１０Ｒ１１であり；
Ｒ４は、−Ｈ、−ＯＨ、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアルケニル、置換されていてもよいアルキニル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいシクロアルケニル、置換されていてもよいヘテロシクリル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいアラルキル、置換されていてもよいヘテロアラルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシアルキル、ハロ、シアノ、ニトロ、グアナジノ、ハロアルキル、ヘテロアルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ７、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ７、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−ＳＲ７、−Ｓ（Ｏ）ｐＲ７、−ＯＳ（Ｏ）ｐＲ７、−Ｓ（Ｏ）ｐＯＲ７、−ＮＲ８Ｓ（Ｏ）ｐＲ７、−Ｓ（Ｏ）ｐＮＲ１０Ｒ１１であるか又は、Ｒ３とＲ４は、それらが付く炭素原子と一緒になって、置換されていてもよいシクロアルケニル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロシクリル、又は置換されていてもよいヘテロアリールを形成し；
Ｒ７とＲ８は、それぞれの出現につき、独立して、−Ｈ、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアルケニル、置換されていてもよいアルキニル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいシクロアルケニル、置換されていてもよいヘテロシクリル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいアラルキル、又は置換されていてもよいヘテロアラルキルであり；
Ｒ１０とＲ１１は、それぞれの出現につき、独立して、−Ｈ、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアルケニル、置換されていてもよいアルキニル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいシクロアルケニル、置換されていてもよいヘテロシクリル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいアラルキル、又は置換されていてもよいヘテロアラルキルである；又はＲ３０とＲ３１は、それらが付く窒素と一緒になって、置換されていてもよいヘテロシクリル又は置換されていてもよいヘテロアリールを形成し；
Ｒ１５は、それぞれの出現につき、独立して、低級アルキルであり；
ｐは、それぞれの出現につき、独立して、１又は２であり；そして
ｍは、それぞれの出現につき、独立して、１、２、３、又は４である］によって表されるトリアゾロン化合物、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩の約２ｍｇ／ｍ２〜約２６０ｍｇ／ｍ２の量を投与することを含んでなる、前立腺癌を有する被検者を治療する方法。
【請求項２】
トリアゾロン化合物が：
３−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−４−（１−エチル−インドール−４−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−４−（１−イソプロピル−インドール−４−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−４−（インドール−４−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−４−（１−メトキシエチル−インドール−４−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１−イソプロピル−インドール−４−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−４−（１−ジメチルカルバモイル−インドール−４−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１−プロピル−インドール−４−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１，２，３−トリメチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（２，３−ジメチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１−アセチル−２，３−ジメチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１−プロピル−２，３−ジメチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１−ｎ−ブチル−インドール−４−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１−ｎ−ペンチル−インドール−４−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１−ｎ−ヘキシル−インドール−４−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシ−５−シクロプロピル−フェニル）−４−（１−（１−メチルシクロプロピル）−インドール−４−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシ−５−シクロプロピル−フェニル）−４−（１，２，３−トリメチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１−メチル−３−エチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１，３−ジメチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１−メチル−３−イソプロピル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１，２−ジメチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（Ｎ−メチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１，３−ジメチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシ−５−シクロプロピル−フェニル）−４−（１，３−ジメチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシ−５−シクロプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１Ｈ−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１，２−ジメチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−エチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、及び
３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−プロピル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、
５−ヒドロキシ−４−（５−ヒドロキシ−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−イソプロピルフェニル二水素リン酸塩、
５−ヒドロキシ−４−（５−ヒドロキシ−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−イソプロピルフェニルリン酸ナトリウム、
２−（４−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−５−イル）−５−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−５−ヒドロキシ−４−イソプロピルフェニル二水素リン酸塩、
４−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−５−イル）−５−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピルフェニル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル二水素リン酸塩、
４−（４−（１’，３’−ジヒドロスピロ［［１，３］ジオキソラン−２，２’−インデン］−５’−イル）−５−メルカプト−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−５−ヒドロキシ−２−イソプロピルフェニル二水素リン酸塩、
２−（３，４−ジメトキシフェネチル）−５−ヒドロキシ−４−（５−ヒドロキシ−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）フェニル二水素リン酸塩、
４−（４−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−５−イル）−５−（フェニルアミノ）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−５−ヒドロキシ−２−イソプロピルフェニル二水素リン酸塩、
５−ヒドロキシ−２−イソプロピル−４−（５−メルカプト−４−（４−メトキシベンジル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）フェニル二水素リン酸塩、
５−ヒドロキシ−４−（５−ヒドロキシ−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−イソプロピルフェニル二水素リン酸塩二水素リン酸塩、
５−ヒドロキシ−４−（５−ヒドロキシ−４−（４−メトキシベンジル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−イソプロピルフェニル二水素リン酸塩、
４−（４−（（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン−６−イル）メチル）−５−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−５−ヒドロキシ−２−イソプロピルフェニル二水素リン酸塩、
４−（４−（４−ブロモ−２−メチルフェニル）−５−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−３−ヒドロキシフェニル二水素リン酸塩、及び
４−（４−（１，３−ジメチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−エチル−５−ヒドロキシフェニル二水素リン酸塩、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩からなる群より選択される、請求項１の方法。
【請求項３】
前立腺癌を有する被検者へ３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物の約２ｍｇ／ｍ２〜約２６０ｍｇ／ｍ２の量を投与することを含んでなる、前立腺癌を有する被検者を治療するための方法。
【請求項４】
前立腺癌を有する被検者へ５−ヒドロキシ−４−（５−ヒドロキシ−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−イソプロピルフェニル二水素リン酸塩、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物の約２ｍｇ／ｍ２〜約２６０ｍｇ／ｍ２の量を投与することを含んでなる、前立腺癌を有する被検者を治療するための方法。
【請求項５】
前立腺癌を有する被検者がドセタキセルベースの化学療法で以前に治療された、請求項１〜４のいずれか１項の方法。
【請求項６】
投与されるトリアゾロン化合物の量が約７５ｍｇ／ｍ２〜約２６０ｍｇ／ｍ２である、請求項１〜５のいずれか１項の方法。
【請求項７】
投与されるトリアゾロン化合物の量が約１００ｍｇ／ｍ２〜約２６０ｍｇ／ｍ２である、請求項６の方法。
【請求項８】
投与されるトリアゾロン化合物の量が約１２５ｍｇ／ｍ２〜約２６０ｍｇ／ｍ２である、請求項７の方法。
【請求項９】
投与されるトリアゾロン化合物の量が約１５０ｍｇ／ｍ２〜約２６０ｍｇ／ｍ２である、請求項８の方法。
【請求項１０】
投与されるトリアゾロン化合物の量が約１７５ｍｇ／ｍ２〜約２６０ｍｇ／ｍ２である、請求項９の方法。
【請求項１１】
投与されるトリアゾロン化合物の量が、約７５ｍｇ／ｍ２、約８５ｍｇ／ｍ２、約１００ｍｇ／ｍ２、約１１０ｍｇ／ｍ２、約１１５ｍｇ／ｍ２、約１２０ｍｇ／ｍ２、約１４５ｍｇ／ｍ２、約１５０ｍｇ／ｍ２、約１７５ｍｇ／ｍ２、約１８０ｍｇ／ｍ２、約２１５ｍｇ／ｍ２、又は約２６０ｇ／ｍ２である、請求項１〜６のいずれか１項の方法。
【請求項１２】
トリアゾロン化合物が静脈内注入によって投与される、請求項１〜１１のいずれか１項の方法。
【請求項１３】
注入が末梢静脈内注入である、請求項１２の方法。
【請求項１４】
トリアゾロン化合物が６０分にわたって注入される、請求項１３の方法。
【請求項１５】
１以上の追加の治療薬剤を投与することをさらに含んでなる、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
追加の治療薬剤がパクリタキセル類似体である、請求項１５の方法。
【請求項１７】
パクリタキセル類似体がドセタキセルである、請求項１６の方法。
【請求項１８】
前立腺癌を有する被検者へドセタキセルの有効量と３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物の有効量を投与することを含んでなる、前立腺癌を有する被検者を治療する方法。
【請求項１９】
前立腺癌を有する被検者へドセタキセルの有効量と３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物の相乗作用量を投与することを含んでなる、前立腺癌を有する被検者を治療する方法。
【請求項２０】
前立腺癌を有する被検者へドセタキセルの相乗作用量と３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物の相乗作用量を投与することを含んでなる、前立腺癌を有する被検者を治療する方法。
【請求項２１】
前立腺癌が、転移性前立腺癌、転移性ホルモン抵抗性前立腺癌、又は転移性去勢抵抗性前立腺癌である、請求項１〜１９のいずれか１項の方法。
【請求項２２】
前立腺癌がドセタキセルベースの化学療法で以前に治療された、請求項１〜１９のいずれか１項の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連特許出願への相互参照
本出願は、米国仮特許出願番号：６１／４４６，０９９（２０１１年２月２４日出願）及び６１／４９１，５３１（２０１１年５月３１日出願）に対する優先権の利益を主張する。これら出願のぞれぞれの内容は、その全体において参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
悪性の癌細胞を引き起こすゲノム異常を解明することにおいて多大な進展がなされてきたものの、現行の利用可能な化学療法は依然として不満足であって、癌と診断された患者の大多数でその予後は依然として暗い。ほとんどの化学療法剤は、悪性腫瘍の表現型の発現に関与すると考えられる特定の分子標的に作用する。しかしながら、複雑なシグナル伝達経路のネットワークが細胞増殖を調節していて、大多数の悪性腫瘍は、これらの経路における多数の遺伝的異常によって促進される。故に、癌を有する患者を治すのに、１つの分子標的に作用する治療薬剤が完全に有効である可能性が低いのである。
【０００３】
熱ショックタンパク質（ＨＳＰ）は、上昇温度と、紫外線のような他の環境ストレスに応答して上方調節される１群のシャペロンタンパク質である。ＨＳＰは、他の細胞タンパク質（クライアントタンパク質と呼ばれる）へシャペロンとして作用し、その適切な折り畳み及び修復を促進し、誤って折り畳まれたクライアントタンパク質の再折り畳みに役立つ。いくつかの知られたＨＳＰのファミリーがあって、それぞれがそれ自身のクライアントタンパク質のセットを有する。Ｈｓｐ９０ファミリーは、最も豊富なＨＳＰファミリーの１つであって、ストレス下にない細胞において約１〜２％のタンパク質を占めて、ストレス下の細胞では約４〜６％へ増加する。Ｈｓｐ９０の阻害は、ユビキチンプロテアソーム経路を介したそのクライアントタンパク質の分解をもたらす。他のシャペロンタンパク質と異なり、Ｈｓｐ９０のクライアントタンパク質は、ほとんどがシグナル伝達に関与するプロテインキナーゼ又は転写因子であって、そのクライアントタンパク質のいくつかは、癌の進行に関与することが示されてきた。
【発明の概要】
【０００４】
今回、ある種のトリアゾロンＨｓｐ９０阻害剤が、転移性前立腺癌、転移性ホルモン抵抗性前立腺癌、又は転移性去勢抵抗性前立腺癌、又はドセタキセルベースの化学療法で以前に治療された前立腺癌といった前立腺癌のある患者を治療するのに特に有効であることを見出した。
【０００５】
本発明の方法は、式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）のＨｓｐ９０阻害化合物又は表１若しくは２中の化合物、又はそれらの医薬的に許容される塩又は互変異性体を前立腺癌の治療に利用する。
【０００６】
１つの態様において、該方法には、前立腺癌を有する被検者へ式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）のトリアゾロン化合物又は表１若しくは２中の化合物の約２ｍｇ／ｍ２〜約５００ｍｇ／ｍ２の量を投与する工程が含まれる。１つの態様では、式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）又は表１若しくは２中の化合物を毎週投与してよい。１つの態様では、式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）又は表１若しくは２中の化合物を週２回投与してよい。１つの態様では、該化合物を約３週間投与してよい。別の態様では、約７日の無投薬の後で週２回、３週間の投与を繰り返してよい。１つの態様では、約７日の無投薬の後で週２回の投与を２回以上繰り返してよい。これらの態様のいずれにおいても、トリアゾロン化合物は、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、その医薬的に許容される塩であり得る。これらの態様のいずれにおいても、トリアゾロン化合物は、５−ヒドロキシ−４−（５−ヒドロキシ−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−イソプロピルフェニル二水素リン酸塩、又はその互変異性体、その医薬的に許容される塩であり得る。
【０００７】
また、ある種のトリアゾロンＨｓｐ９０阻害剤とタキサンの組合せが前立腺癌を有する被検者を治療するのに驚くほど有効であることが見出されている。本明細書に開示する特別な組合せ療法は、ほとんど副作用のない有意な抗癌効果を示すことによって、驚くべき生物学的活性を証明する。１つの態様において、この組合せには、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、その医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物とタキサンが含まれる。１つの態様において、この組合せには、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、その医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物とドセタキセルが含まれる。１つの態様において、この組合せには、５−ヒドロキシ−４−（５−ヒドロキシ−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−イソプロピルフェニル二水素リン酸塩、又はその互変異性体、その医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物とタキサンが含まれる。１つの態様において、この組合せには、５−ヒドロキシ−４−（５−ヒドロキシ−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−イソプロピルフェニル二水素リン酸塩、又はその互変異性体、その医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物とドセタキセルが含まれる。
【０００８】
別の態様において、前立腺癌を有する被検者を治療する組合せ方法には、本明細書に記載のＨｓｐ９０阻害剤とタキサンの有効量を該被検者へ投与する工程が含まれる。１つの態様において、Ｈｓｐ９０阻害剤とタキサンの投与は、同時になされる。別の態様において、Ｈｓｐ９０阻害剤とタキサンの投与は、連続的になされる。これらの態様のいずれにおいても、タキサンは、ドセタキセル、パクリタキセル、又はＡｂｒａｘａｎｅ（登録商標）であり得る。これらの態様のいずれにおいても、Ｈｓｐ９０阻害剤は、式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）によって表される化合物、又は表１若しくは表２中の化合物である。これらの態様のいずれにおいても、Ｈｓｐ９０阻害剤は、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物であり得る。これらの態様のいずれにおいても、Ｈｓｐ９０阻害剤は、５−ヒドロキシ−４−（５−ヒドロキシ−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−イソプロピルフェニル二水素リン酸塩、又はその互変異性体、その医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物であり得る。
【０００９】
１つの態様において、本方法には、本明細書に記載のＨｓｐ９０阻害剤の、タキサンと組み合わせて前立腺癌を治療するための医薬の製造への使用が含まれる。
【００１０】
ある態様において、本明細書に記載の方法は、本明細書に記載のＨｓｐ９０阻害化合物のタキサンとの組成物をその必要な被検者における前立腺癌の治療に提供する。
【００１１】
別の態様において、本方法にはまた、式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）の化合物又は表１若しくは２中の化合物で治療されている前立腺癌を有する被検者の治療応答をモニターすることが含まれ、該方法は、（ａ）前記化合物での治療の前に、該被検者に由来する生体試料中のマスピン（maspin）のレベルを定量すること；（ｂ）該化合物の投与の間又は後での時点で、該被検者に由来する生体試料中のマスピンのレベルを定量すること；及び（ｃ）治療の間又は後での該被検者に由来する生体試料中のマスピンのレベルを治療前のそれと比較することを含んでなり、ここで生体試料中のマスピンレベルの増加は、トリアゾロン化合物での治療に対する陽性応答の指標となる。１つの態様において、該被検者は、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、その医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物で治療することができる。１つの態様において、該被検者は、５−ヒドロキシ−４−（５−ヒドロキシ−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−イソプロピルフェニル二水素リン酸塩、又はその互変異性体、その医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物で治療することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】図１は、ガネテスピブ（ganetespib）（化合物１）又は１７−ＡＡＧでの処理後のＰＣ３及びＤＵ１４５の細胞周期分析を示す。
【図２】図２は、ガネテスピブ又は１７−ＡＡＧがＰＣａ細胞中の様々な濃度でアポトーシスを誘発したことを示す。
【図３】図３は、前立腺癌細胞がガネテスピブ又は１７−ＡＡＧで２４時間処理されて、顕微鏡検査（左パネル）、ＦＡＣＳによるアネキシンＶＩ染色、又は全体／ホスホロＭＣＬ−１（抗アポトーシスＢｃｌ−２ファミリータンパク質）の発現についてのウェスタンブロットによって分析されたことを示す。
【図４】図４は、ガネテスピブ又は１７−ＡＡＧでの２４時間処理によって、ＡＲ依存性前立腺癌細胞であるＬＮＣａＰ細胞の多重発癌性Ｈｓｐ９０クライアントタンパク質が破壊されたことを示す。
【図５】図５は、ガネテスピブ又は１７−ＡＡＧでの２４時間処理によって、ＡＲ依存性前立腺癌細胞である２２Ｒｖ１細胞の多重発癌性Ｈｓｐ９０クライアントタンパク質が破壊されたことを示す。
【図６】図６は、ガネテスピブ又は１７−ＡＡＧでの２４時間処理によって、ＡＲ依存性前立腺癌細胞であるＤＵ１４５細胞の多重発癌性Ｈｓｐ９０クライアントタンパク質が破壊されたことを示す。
【図７】図７は、ＬＮＣａＰの前立腺癌細胞における、指定の薬物量と時間でのガネテスピブ又は１７−ＡＡＧでの処理後のＨｓｐ９０クライアントタンパク質の動態応答を示した。
【図８】図８は、ＤＵ１４５の前立腺癌細胞における、指定の薬物量と時間でのガネテスピブ又は１７−ＡＡＧでの処理後のＨｓｐ９０クライアントタンパク質の動態応答を示す。
【図９】図９は、ＰＣ３の前立腺癌細胞における、指定の薬物量と時間でのガネテスピブ又は１７−ＡＡＧでの処理後のＨｓｐ９０クライアントタンパク質の動態応答を示す。
【図１０】図１０は、ガネテスピブがマスター細胞周期レギュレーターのＣＤＫ１とＤＮＡ損傷チェックポイントのＣＨＫ１を不安定にしたことを示す。
【図１１】図１１は、ＰＣ３細胞の殺傷において、ＡＺＤ−７７６２によるＣＨＫシグナル伝達の阻害がガネテスピブと相乗していたことを示す。
【図１２】図１２は、ＰＣ３異種移植片をヌードマウスへ移植して、ガネテスピブ、１５０ｍｇ／ｋｇで週１回、又は５０ｍｇ／ｋｇで週２回、４週間での処理を続けたことを示す。ガネテスピブは、担体に対して強力な単剤活性を示して、％  Ｔ／Ｃ値は、それぞれ１７、３であった。
【図１３】図１３は、ガネテスピブによるＨｓｐ９０の阻害がＤＵ−１４５前立腺癌細胞においてＪＡＫ／ＳＴＡＴ経路の内因性でサイトカイン媒介性の活性化、並びにマイトジェンシグナル伝達を破壊することを示す。示したように、ＤＵ−１４５前立腺癌細胞をＩＬ−６の非存在又は存在下にガネテスピブで処理して、ウェスタンブロットによって分析した。
【図１４】図１４は、ガネテスピブが強力な単剤活性を発揮することを示す。
【図１５】図１５は、ガネテスピブ、ドセタキセル、又はこの２剤の組合せで７２時間処理したＤＵ−１４５細胞と、アラマーブルー（alamarBlue）による細胞生存度の定量を示し、この組合せ処理の有意な利益を示唆する。
【図１６】図１６は、ガネテスピブ、ドセタキセル、又はこの２剤の組合せで１日目と２日目に１時間処理したＬＮＣａＰ細胞を示す。２４時間後、生存度を顕微鏡検査によって評価した。両剤への短い曝露のほうがいずれかの薬剤単独よりもずっと大きな細胞死を示す。
【図１７】図１７は、ＤＵ−１４５細胞におけるガネテスピブとドセタキセルの同時処理についての正規化アイソボログラムであって、この組合せ処理の相乗効果を示唆する。
【図１８】図１８は、活性炭処理済培地において２４時間培養してから、１０ｎＭアンドロゲン（Ｒ１８８１）の非存在又は存在下に２５０ｎＭガネテスピブ、１μＭゲルダナマイシン（ＧＡ）、又は担体で２４時間処理したＬＮＣａＰ細胞について例証する。
【図１９】図１９は、０、１０、又は２５ｎＭのガネテスピブで２４時間処理した２２Ｒｖ１細胞を示す。ＡＲ、リン酸化及び全ＡＫＴ、ＰＡＲＰ、及びＧＡＰＤＨに対する抗体を使用して、細胞溶解液を免疫ブロットした。全長ＡＲと末端切断Ｖ７受容体アイソフォームの発現を矢印により示す。
【図２０】図２０は、３ｎｇのｐＣＲ３．１−ＡＲ又は０．５ｎｇのｐＣＲ３．１−ＡＲＶ７のプラスミドで一過的にトランスフェクトしてそれぞれ全長ＡＲタンパク質とＶ７末端切断ＡＲタンパク質の発現を誘導したＨｅＬａ細胞を示す。感染から２４時間後、示すように、細胞を１０ｎＭ  Ｒ１８８１、１ｍＭ  ＧＡ、又は２５０ｎＭガネテスピブで処理した。細胞溶解液をＳＤＳ−ＰＡＧＥによって分離して、抗ＡＲ抗体で免疫ブロットした。抗アクチン抗体を使用して、全タンパク質レベルを定量した。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
他に特定しなければ、本明細書に使用する下記の用語は、以下のように定義される：
本明細書に使用するように、「アルキル」という用語は、１〜１０個の炭素原子を有する、飽和、直鎖又は分岐鎖、非環式の炭化水素を意味する。代表的な直鎖アルキルには、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル、及びｎ−デシルが含まれ；一方、代表的な分岐鎖アルキルには、イソプロピル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソペンチル、２−メチルブチル、３−メチルブチル、２−メチルペンチル、３−メチルペンチル、４−メチルペンチル、２−メチルヘキシル、３−メチルヘキシル、４−メチルヘキシル、５−メチルヘキシル、２，３−ジメチルブチル、２，３−ジメチルペンチル、２，４−ジメチルペンチル、２，３−ジメチルヘキシル、２，４−ジメチルヘキシル、２，５−ジメチルヘキシル、２，２−ジメチルペンチル、２，２−ジメチルヘキシル、３，３−ジメチルペンチル、３，３−ジメチルヘキシル、４，４−ジメチルヘキシル、２−エチルペンチル、３−エチルペンチル、２−エチルヘキシル、３−エチルヘキシル、４−エチルヘキシル、２−メチル−２−エチルペンチル、２−メチル−３−エチルペンチル、２−メチル−４−エチルペンチル、２−メチル−２−エチルヘキシル、２−メチル−３−エチルヘキシル、２−メチル−４−エチルヘキシル、２，２−ジエチルペンチル、３，３−ジエチルヘキシル、２，２−ジエチルヘキシル、３，３−ジエチルヘキシル、等が含まれる。「（Ｃ１−Ｃ６）アルキル」という用語は、１〜６個の炭素原子を有する、飽和、直鎖又は分岐鎖、非環式の炭化水素を意味する。本明細書に記載の化合物に含まれるアルキル基は、１以上の置換基で置換されていてもよい。
【００１４】
本明細書に使用するように、「アルケニル」という用語は、２〜１０個の炭素原子を有して少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する、直鎖又は分岐鎖、非環式の炭化水素を意味する。代表的な直鎖（Ｃ２−Ｃ１０）アルケニルと分岐鎖（Ｃ２−Ｃ１０）アルケニルには、ビニル、アリル、１−ブテニル、２−ブテニル、イソブチレニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−メチル−１−ブテニル、２−メチル−２−ブテニル、２，３−ジメチル−２−ブテニル、１−ヘキセニル、２−ヘキセニル、３−ヘキセニル、１−ヘプテニル、２−ヘプテニル、３−ヘプテニル、１−オクテニル、２−オクテニル、３−オクテニル、１−ノネニル、２−ノネニル、３−ノネニル、１−デセニル、２−デセニル、３−デセニル、等が含まれる。本明細書に記載の化合物に含まれるアルケニル基は、１以上の置換基で置換されていてもよい。
【００１５】
本明細書に使用するように、「アルキニル」という用語は、２〜１０個の炭素原子を有して少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を有する、直鎖又は分岐鎖、非環式の炭化水素を意味する。代表的な直鎖アルキニルと分岐鎖アルキニルには、アセチレニル、プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、１−ペンチニル、２−ペンチニル、３−メチル−１−ブチニル、４−ペンチニル、１−ヘキシニル、２−ヘキシニル、５−ヘキシニル、１−ヘプチニル、２−ヘプチニル、６−ヘプチニル、１−オクチニル、２−オクチニル、７−オクチニル、１−ノニニル、２−ノニニル、８−ノニニル、１−デシニル、２−デシニル、９−デシニル、等が含まれる。本明細書に記載の化合物に含まれるアルキニル基は、１以上の置換基で置換されていてもよい。
【００１６】
本明細書に使用するように、「シクロアルキル」という用語は、３〜２０個の炭素原子を有する、飽和、単環式又は多環式、非芳香族の炭化水素を意味する。代表的なシクロアルキルには、シクロプロピル、１−メチルシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロノニル、シクロデシル、オクタヒドロペンタレニル、等が含まれる。本明細書に記載の化合物に含まれるシクロアルキル基は、１以上の置換基で置換されていてもよい。
【００１７】
本明細書に使用するように、「シクロアルケニル」という用語は、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合をその環系に有して３〜２０個の炭素原子を有する、単環式又は多環式、非芳香族の炭化水素を意味する。代表的なシクロアルケニルには、シクロペンテニル、シクロペンタジエニル、シクロヘキセニル、シクロヘキサジエニル、シクロヘプテニル、シクロヘプタジエニル、シクロヘプタトリエニル、シクロオクテニル、シクロオクタジエニル、シクロオクタトリエニル、シクロオクタテトラエニル、シクロノネニル、シクロノナジエニル、シクロデセニル、シクロデカジエニル、１，２，３，４，５，８−ヘキサヒドロナフタレニル、等が含まれる。本明細書に記載の化合物に含まれるシクロアルケニル基は、１以上の置換基で置換されていてもよい。
【００１８】
本明細書に使用するように、「アルキレン」という用語は、２つの付加点を有するアルキル基を意味する。「（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン」という用語は、１〜６個の炭素原子を有するアルキレン基を意味する。直鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン基が好ましい。アルキレン基の非限定的な例には、メチレン（−ＣＨ２−）、エチレン（−ＣＨ２ＣＨ２−）、ｎ−プロピレン（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、イソプロピレン（−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−）、等が含まれる。本明細書に記載の化合物に含まれるアルキレン基は、１以上の置換基で置換されていてもよい。
【００１９】
本明細書に使用するように、「低級」という用語は、４個までの原子を有する基に関連する。例えば、「低級アルキル」は、１〜４個の炭素原子を有するアルキル残基を意味し、「低級アルコキシ」は、「−Ｏ−（Ｃ１−Ｃ４）アルキル」を意味して、「低級アルケニル」又は「低級アルキニル」は、２〜４個の炭素原子を有するアルケニル又はアルキニル残基を意味する。
【００２０】
本明細書に使用するように、「ハロアルキル」という用語は、１以上（すべてが含まれる）の水素残基がハロ基（複数）に置き換わっているアルキル基を意味し、ここでそれぞれのハロ基は、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、及び−Ｉより独立して選択される。例えば、「ハロメチル」という用語は、１〜３個の水素残基（複数）がハロ基に置き換わったメチルを意味する。代表的なハロアルキル基には、トリフルオロメチル、ブロモメチル、１，２−ジクロロエチル、４−ヨードブチル、２−フルオロペンチル、等が含まれる。
【００２１】
本明細書に使用するように、「アルコキシ」は、別の部分へ酸素リンカーを介して付加するアルキル基である。本明細書に記載の化合物に含まれるアルコキシ基は、１以上の置換基で置換されていてもよい。
【００２２】
本明細書に使用するように、「ハロアルコキシ」は、別の部分へ酸素リンカーを介して付加するハロアルキル基である。
【００２３】
本明細書に使用するように、「芳香族環」又は「アリール」という用語は、６〜１５個の炭素原子を含有して、少なくとも１つの環が芳香族である、単環式又は多環式の炭化水素を意味する。好適なアリール基の例には、フェニル、トリル、アントラセニル、フルオレニル、インデニル、アズレニル、及びナフチル、並びに、５，６，７，８−テトラヒドロナフチルのようなベンゾ縮合炭素環式部分が含まれる。本明細書に記載の化合物に含まれるアリール基は、１以上の置換基で置換されていてもよい。１つの態様において、アリール基は、本明細書において「（Ｃ６）アリール」と呼ばれる、６個の炭素原子を含む単環式の環である。
【００２４】
本明細書に使用するように、「アラルキル」という用語は、別の基へ（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン基によって付加するアリール基を意味する。代表的なアラルキル基には、ベンジル、２−フェニル−エチル、ナフト−３−イル−メチル、等が含まれる。本明細書に記載の化合物に含まれるアラルキル基は、１以上の置換基で置換されていてもよい。
【００２５】
本明細書に使用するように、「ヘテロシクリル」という用語は、典型的には５〜２０個の成員と少なくとも１つのヘテロ原子を含有する、単環式又は多環式、飽和又は不飽和、非芳香族の環又は環系を意味する。複素環式の環系は、飽和環（複数）又は不飽和非芳香族環（複数）、又はこれらの混合物を含有し得る。３〜１０員の複素環は、５個までのヘテロ原子を含有し得て、７〜２０員の複素環は、７個までのヘテロ原子を含有し得る。典型的には、複素環は、少なくとも１つの炭素原子環員を有する。それぞれのヘテロ原子は、窒素（これは、酸化（例、Ｎ（Ｏ））又は四級化され得る）、酸素、及びイオウ（スルホキシド及びスルホンが含まれる）より独立して選択される。複素環は、どのヘテロ原子又は炭素原子を介しても付加してよい。代表的な複素環には、モルホリニル、チオモルホリニル、ピロリジノニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、ヒダントイニル、バレロラクタミル、オキシラニル、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロピリンジニル、テトラヒドロピリミジニル、テトラヒドロチオフェニル、テトラヒドロチオピラニル、等が含まれる。ヘテロ原子は、当業者に知られた保護基で置換されてよく、例えば、窒素原子をｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基で置換してよい。さらに、本明細書に記載の化合物に含まれるヘテロシクリルは、１以上の置換基で置換されていてもよい。本定義において考慮されるのは、そのような置換された複素環式基の安定した異性体だけである。
【００２６】
本明細書に使用するように、「複素芳香族」、「ヘテロアリール」という用語、又は類似の用語は、少なくとも１つの環が芳香族である、少なくとも１つのヘテロ原子を含有する単環式又は多環式の不飽和残基を意味する。多環式ヘテロアリール環は、少なくとも１つのヘテロ原子を含有しなければならないが、多環式ヘテロアリール部分のすべての環がヘテロ原子を含有するに及ばない。それぞれのヘテロ原子は、窒素（これは、酸化（例、Ｎ（Ｏ））又は四級化され得る）、酸素、及びイオウ（スルホキシド及びスルホンが含まれる）より独立して選択される。代表的なヘテロアリール基には、ピリジル、１−オキソ−ピリジル、フラニル、ベンゾ［１，３］ジオキソリル、ベンゾ［１，４］ジオキシニル、チエニル、ピロリル、オキサゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、イソオキサゾリル、キノリニル、ピラゾリル、イソチアゾリル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル、トリアゾリル、チアジアゾリル、イソキノリニル、インダゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾフリル、インドリジニル、イミダゾピリジル、テトラゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾオキサジアゾリル、インドリル、テトラヒドロインドリル、アザインドリル、イミダゾピリジル、キナゾリニル、プリニル、ピロロ［２，３］ピリミジニル、ピラゾロ［３，４］ピリミジニル、イミダゾ［１，２−ａ］ピリジル、及びベンゾチエニルが含まれる。１つの態様において、複素芳香族環は、５〜８員の単環式ヘテロアリール環より選択される。複素芳香族環又はヘテロアリール環の付加点は、炭素原子でもヘテロ原子でもよい。本明細書に記載の化合物に含まれるヘテロアリール基は、１以上の置換基で置換されていてもよい。本明細書に使用するように、「（Ｃ５）ヘテロアリール」という用語は、該環の少なくとも１つの炭素原子が、例えば、酸素、イオウ、又は窒素のようなヘテロ原子に置き換わっている、５員の複素芳香族環を意味する。代表的な（Ｃ５）ヘテロアリールには、フラニル、チエニル、ピロリル、オキサゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、イソオキサゾリル、ピラゾリル、イソチアゾリル、ピラジニル、トリアゾリル、チアジアゾリル、等が含まれる。本明細書に使用するように、「（Ｃ６）ヘテロアリール」という用語は、該環の少なくとも１つの炭素原子が、例えば、酸素、イオウ、又は窒素のようなヘテロ原子に置き換わっている、６員の芳香族複素環式環を意味する。代表的な（Ｃ６）ヘテロアリールには、ピリジル、ピリダジニル、ピラジニル、トリアジニル、テトラジニル、等が含まれる。
【００２７】
本明細書に使用するように、「ヘテロアラルキル」という用語は、別の基へ（Ｃ１−Ｃ６）アルキレンによって付加するヘテロアリール基を意味する。代表的なヘテロアラルキルには、２−（ピリジン−４−イル）−プロピル、２−（チエン−３−イル）−エチル、イミダゾール−４−イル−メチル、等が含まれる。本明細書に記載の化合物に含まれるヘテロアラルキル基は、１以上の置換基で置換されていてもよい。
【００２８】
本明細書に使用するように、「ハロゲン」又は「ハロ」という用語は、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、又は−Ｉを意味する。
【００２９】
本明細書に使用するように、「ヘテロアルキル」という用語は、その鎖中の内部炭素原子の１以上がヘテロ原子に置き換わっている直鎖又は分岐鎖アルキル基を意味する。例えば、ヘテロアルキルは、式：−［ＣＨ２］ｘ−Ｚ−［ＣＨ２］ｙ［ＣＨ３］によって表され、ここで、ｘは、正の整数であり、ｙは、ゼロ又は正の整数であり、Ｚは、Ｏ、ＮＲ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、又はＳ（Ｏ）２であって、ここで炭素原子の置換は、不安定な化合物をもたらさない。本明細書に記載の化合物に含まれるヘテロアルキル基は、１以上の置換基で置換されていてもよい。
【００３０】
アルキル、アルキレン、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクリル、アリール、アラルキル、ヘテロアリール、及びヘテロアラルキル基に適した置換基には、本明細書に記載の化合物の反応性又は生物学的活性に有意に悪影響を及ぼすことなく、本明細書に記載の安定した化合物を生成する置換基が含まれる。アルキル、アルキレン、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクリル、アリール、アラルキル、ヘテロアリール、及びヘテロアラルキルへの置換基の例には、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、ヘテロアルキル、アルコキシ（このそれぞれが独立して置換されていてもよい）、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２８Ｒ２９、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ２８Ｒ２９、−Ｃ（ＮＲ４２）ＮＲ２８Ｒ２９、−ＮＲ４３Ｃ（Ｏ）Ｒ４１、−ＮＲ４３Ｃ（Ｓ）Ｒ４１、−ＮＲ４３Ｃ（ＮＲ４２）Ｒ４１、ハロ、−ＯＲ４３、シアノ、ニトロ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ４３、−Ｃ（Ｓ）Ｒ４３、−Ｃ（ＮＲ４２）Ｒ４３、−ＮＲ２８Ｒ２９、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ４３、−Ｃ（Ｓ）ＯＲ４３、−Ｃ（ＮＲ４２）ＯＲ４３、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ４３、−ＯＣ（Ｓ）Ｒ４３、−ＯＣ（ＮＲ４２）Ｒ４３、−ＮＲ４０Ｃ（Ｏ）ＮＲ２８Ｒ２９、−ＮＲ４３Ｃ（Ｓ）ＮＲ２８Ｒ２９、−ＮＲ４３Ｃ（ＮＲ４２）ＮＲ２８Ｒ２９、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ２８Ｒ２９、−ＯＣ（Ｓ）ＮＲ２８Ｒ２９、−ＯＣ（ＮＲ４２）ＮＲ２８Ｒ２９、−ＮＲ４３Ｃ（Ｏ）ＯＲ４１、−ＮＲ４３Ｃ（Ｓ）ＯＲ４１、−ＮＲ４３Ｃ（ＮＲ４２）ＯＲ４１、−Ｓ（Ｏ）ｋＲ４３、−ＯＳ（Ｏ）ｋＲ４３、−ＮＲ４３Ｓ（Ｏ）ｋＲ４３、−Ｓ（Ｏ）ｋＮＲ２８Ｒ２９、−ＯＳ（Ｏ）ｋＮＲ２８Ｒ２９、−ＮＲ４３Ｓ（Ｏ）ｋＮＲ２８Ｒ２９、グアニジノ、−Ｃ（Ｏ）ＳＲ４１、−Ｃ（Ｓ）ＳＲ４１、−Ｃ（ＮＲ４２）ＳＲ４１、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲ４１、−ＯＣ（Ｓ）ＯＲ４１、−ＯＣ（ＮＲ４２）ＯＲ４１、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ４３、−ＳＣ（Ｏ）ＯＲ４１、−ＳＣ（ＮＲ４２）ＯＲ４１、−ＳＣ（Ｓ）Ｒ４３、−ＳＣ（Ｓ）ＯＲ４１、−ＳＣ（Ｏ）ＮＲ２８Ｒ２９、−ＳＣ（ＮＲ４２）ＮＲ２８Ｒ２９、−ＳＣ（Ｓ）ＮＲ２８Ｒ２９、−ＳＣ（ＮＲ４２）Ｒ４３、−ＯＳ（Ｏ）ｋＯＲ４１、−Ｓ（Ｏ）ｋＯＲ４１、−ＮＲ４０Ｓ（Ｏ）ｋＯＲ４１、−ＳＳ（Ｏ）ｋＲ４３、−ＳＳ（Ｏ）ｋＯＲ４１、−ＳＳ（Ｏ）ｋＮＲ２８Ｒ２９、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ４１）２、又は−ＳＰ（Ｏ）（ＯＲ４１）２が含まれる。加えて、アルキル、シクロアルキル、アルキレン、ヘテロシクリル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、アラルキル、及びヘテロアラルキル基のどの飽和部分も、＝Ｏ、＝Ｓ、又は＝Ｎ−Ｒ４２で置換されてよい。
【００３１】
それぞれのＲ２８、Ｒ２９、及びＲ４０は、独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、又はヘテロアラルキルであり、ここでＲ２８、Ｒ２９、又はＲ４０によって表されるそれぞれのアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、又はヘテロアルキルは、独立して置換されていてもよい。
【００３２】
それぞれのＲ４１及びＲ４３は、独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、又はヘテロアラルキルであり、ここでＲ４１又はＲ４３によって表されるそれぞれのアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、及びヘテロアラルキルは、独立して未置換であってもよい。
【００３３】
それぞれのＲ４２は、独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｒ４３、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２８Ｒ２９、−Ｓ（Ｏ）ｐＲ４３、又は−Ｓ（Ｏ）ｐＮＲ２８Ｒ２９であり、ここでＲ４２によって表されるそれぞれのアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、及びヘテロアラルキルは、独立して置換されていてもよい。
【００３４】
変数ｋは、０、１、又は２である。
【００３５】
ヘテロシクリル、ヘテロアリール、又はヘテロアラルキル基が窒素原子を含有する場合、それは、置換されていても未置換でもよい。ヘテロアリール基の芳香族環中の窒素原子が置換基を有する場合、その窒素は、酸化されていても四級窒素であってもよい。
【００３６】
本明細書に記載の化合物は、本明細書においてその化学構造及び／又は化学名によって明確化される。化合物が化学構造と化学名の両方によって言及されて、化学構造と化学名が抵触する場合は、化学構造が化合物の本体を決定する。
【００３７】
安定した構造をもたらす置換基の選択及び組合せだけが考慮される。そのような選択及び組合せは、当業者に明らかであって、過度な実験なしに決定され得る。
【００３８】
本明細書に使用するように、「被検者」、「患者」及び「哺乳動物」という用語は、可換的に使用される。「被検者」及び「患者」という用語は、動物（例えば、ニワトリ、ウズラ、七面鳥のようなトリ、又は哺乳動物）、好ましくは、非霊長動物（例、ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ウサギ、モルモット、ラット、ネコ、イヌ、及びマウス）及び霊長動物（例、サル、チンパンジー、及びヒト）が含まれる哺乳動物、より好ましくはヒトに言及する。１つの態様において、被検者は、家畜動物（例、ウマ、ウシ、ブタ、又はヒツジ）、又はペット（例、イヌ、ネコ、モルモット、又はウサギ）のような非ヒト動物である。好ましい態様において、被検者は、ヒトである。
【００３９】
本明細書に使用するように、「本発明の化合物（複数）」、「トリアゾロン化合物」という用語、又は類似の用語は、式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）のいずれもの化合物、又は表１又は表２中の化合物、又はその医薬的に許容される塩を意味する。
【００４０】
本明細書に使用するように、「医薬的に許容される塩」という用語は、カルボン酸官能基のような酸性官能基を有する、式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）のいずれもの化合物、又は表１又は表２中の化合物と医薬的に許容される無機又は有機塩基より製造される塩を意味する。好適な塩基には、ナトリウム、カリウム、及びリチウムのようなアルカリ金属の水酸化物；カルシウム及びマグネシウムのようなアルカリ土類金属の水酸化物；アルミニウム及び亜鉛のような他の金属の水酸化物；アンモニア、及び未置換又はヒドロキシ置換されたモノ、ジ、又はトリアルキルアミン；ジシクロヘキシルアミン；トリブチルアミン；ピリジン；Ｎ−メチル、Ｎ−エチルアミン；ジエチルアミン；トリエチルアミン；モノ、ビス、又はトリス−（２−ヒドロキシエチル）アミン、２−ヒドロキシ−ｔｅｒｔ−ブチルアミン、又はトリス−（ヒドロキシメチル）メチルアミンのようなモノ、ビス、又はトリス−（２−ヒドロキシ−低級アルキルアミン）；Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）アミン又はトリ（２−ヒドロキシエチル）アミンのようなＮ，Ｎ−ジ低級アルキル−Ｎ−（ヒドロキシ低級アルキル）−アミン；Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミンといった有機アミン類；並びにアルギニン、リジン、等のようなアミノ酸が含まれる。「医薬的に許容される塩」という用語はまた、アミン官能基のような塩基性官能基を有する、式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）のいずれもの化合物、又は表１又は表２中の化合物と医薬的に許容される無機又は有機酸より製造される塩を意味する。好適な酸には、硫酸水素、クエン酸、酢酸、シュウ酸、塩酸（ＨＣｌ）、臭化水素酸（ＨＢｒ）、ヨウ化水素酸（ＨＩ）、硝酸、二硫化水素、リン酸、イソニコチン酸、オレイン酸、タンニン酸、パントテン酸、サッカリン酸、乳酸、サリチル酸、酒石酸、重酒石酸、アスコルビン酸、コハク酸、マレイン酸、ベジル酸、フマル酸、グルコン酸、グルカロン酸、ギ酸、安息香酸、グルタミン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、パモ酸、及びｐ−トルエンスルホン酸が含まれる。
【００４１】
医薬的に許容される担体は、本明細書に記載の化合物（複数）の生物学的活性を不当に阻害しない不活性成分を含有し得る。医薬的に許容される担体は、生体適合性であるべきである、即ち、無害で、非炎症性、非免疫原性であって、被検者への投与時に他の望まれない反応がないものであるべきである。Remington, J. P.「レミントン製剤科学（Remington's Pharmaceutical Sciences）」（Mack Pub. Co., 第17版、1985）に記載のような、標準の医薬製剤化技術を利用することができる。非経口投与に適した医薬担体には、例えば、滅菌水、生理学的食塩水、静菌性生理食塩水（約０．９％  ｍｇ／ｍｌのベンジルアルコールを含有する生理食塩水）、リン酸緩衝化生理食塩水、ハンクス溶液、乳酸リンゲル液、等が含まれる。当該技術分野では、硬ゼラチン又はシクロデキストリンのようなコーティング剤に組成物を被包化するための方法が知られている。Baker et al.「生理活性物質の制御放出（Controlled Release of Biological Active Agents）」（ジョン・ウィリー・アンド・サンズ、1986）を参照のこと。
【００４２】
本明細書に使用するように、「有効量」という用語は、疾患又は障害の重症度、継続期間、進行、又は発現を低下させるか又は改善する、疾患又は障害の発現を遅らせる、疾患又は障害の進展を遅延させるか又は停止させる、疾患又は障害の退縮を引き起こす、疾患又は障害に関連した症状の再発、発症、発現、又は進行を防ぐか又は遅らせる、又は別の療法の治療効果（複数）を高めるか又は改善するのに十分である、本明細書に記載の化合物の量を意味する。被検者へ投与される化合物の正確な量は、投与の形式、疾患又は状態の種類及び重症度、並びに、健康全般、年齢、性別、体重、及び耐薬性といった被検者の特性に依存するものである。例えば、増殖性の疾患又は障害では、有効量の決定は、細胞増殖の度合い、重症度、及び型にも依存する。当業者は、上記や他の因子に依拠して、適正な投与量を決定することができよう。他の治療薬剤と同時投与される場合（例えば、抗癌剤と同時投与される場合）、どの追加治療薬剤（複数）の「有効量」も、使用する薬物の種類に依存するものである。承認済みの治療薬剤については好適な投与量が知られていて、当業者は、被検者の状態、治療される状態（複数）の種類、及び使用されている本明細書に記載の化合物の量に従って調整することができる。量が明白に注記されない症例では、有効量を仮定すべきである。本明細書に記載の化合物の有効量の非限定的な例を本明細書の下記に提供する。具体的な態様において、前立腺癌又はその１以上の症状を治療する、管理する、又は改善する方法には、その必要な被検者へ本明細書に記載の１以上の化合物の少なくとも２５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１００ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１２５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１５０ｍｇ／ｋｇ、又は少なくとも２００ｍｇ／ｋｇ、又はそれ以上の用量を毎日１回、２日毎に１回、３日毎に１回、４日毎に１回、５日毎に１回、６日毎に１回、７日毎に１回、８日毎に１回、１０日毎に１回、２週毎に１回、３週毎に１回、又は１ヶ月に１回投与することが含まれる。この１日用量は、単一の分量で投与することができる。あるいは、１日用量を数分量（典型的には、等しい分量）へ分割して、１日につき２回、３回、４回、又はそれ以上の回数で投与することができる。
【００４３】
前立腺癌又はその１以上の症状を治療する、管理する、又は改善するために使用されてきたか又は現在使用されている、本明細書に記載のトリアゾロン化合物の化合物以外の治療薬剤の投与量は、本発明の組合せ療法において使用することができる。好ましくは、この組合せ療法において使用されるそれぞれ個別の治療薬剤の投与量は、疾患又は障害又はその１以上の症状を治療する、管理する、又は改善するために独立的に与えられる場合の個々の治療薬剤の用量より低い。前立腺癌又はその１以上の症状の治療、管理、又は改善に現在使用されている治療薬剤の推奨投与量は、当該技術分野のどの参考文献からも入手することができる。例えば、「グッドマン・ギルマンの薬理書（Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics）」第9版（Hardman, et al．監修、ニューヨーク：マクグローヒル（1996））；「米国医薬品集（Physician's Desk Reference）」第57版（メディカル・エコノミクス社、ニュージャージー州モントベール（2003））を参照のこと。
【００４４】
本明細書に使用するように、「治療する」、「治療」及び「治療すること」という用語は、１以上の療法（例、本明細書に記載の化合物のような１以上の治療薬剤）の投与より生じる、疾患又は障害の進行、重症度、及び／又は継続期間の低下又は改善、疾患又は障害の発現の遅延、又は疾患又は障害の１以上の症状（好ましくは、１以上の識別可能な症状）の改善を意味する。「治療する」、「治療」及び「治療すること」という用語には、疾患又は障害を発症するリスクの低下と、疾患又は障害の再発の遅延又は阻害も含まれる。具体的な態様において、「治療する」、「治療」及び「治療すること」という用語は、必ずしも患者によって識別可能ではない、腫瘍の増殖のような、疾患又は障害の少なくとも１つの測定可能な身体パラメータの改善を意味する。他の態様において、「治療する」、「治療」及び「治療すること」という用語は、身体的には識別可能な症状の安定化による、生理学的には身体パラメータの安定化による、又はその両方による、疾患又は障害（例、前立腺癌）の進行の阻害を意味する。別の態様では、増殖性の疾患又は障害を「治療する」、その「治療」、及びそれを「治療すること」という用語は、腫瘍サイズ又は癌性細胞数の低下又は安定化、及び／又は腫瘍形成の遅延を意味する。
【００４５】
本明細書に使用するように、「治療薬剤」及び「治療薬剤（複数）」という用語は、疾患又は障害（例えば、癌）又はその１以上の症状の治療に使用し得るあらゆる薬剤（複数）を意味する。ある態様において、「治療薬剤」という用語は、本明細書に記載の化合物を意味する。ある他の態様において、「治療薬剤」という用語は、本明細書に記載の化合物を意味しない。好ましくは、治療薬剤は、疾患又は障害（例えば、癌）又はその１以上の症状の治療に有用であることが知られているか、そのために使用されてきたか又は現在使用されている薬剤である。
【００４６】
本明細書に使用するように、「相乗的」という用語は、一緒になるときに、個々の療法の相加効果より有効である、本明細書に記載の化合物と別の治療薬剤の組合せに言及する。療法の組合せ（例、治療薬剤の組合せ）の相乗効果は、治療薬剤（複数）の１以上のより低い投与量、及び／又は疾患又は障害（例、癌）のある被検者への薬剤（複数）のより低頻度の投与の使用を可能にする。本明細書に記載のトリアゾロン化合物のタキサンとの組合せ療法は、とりわけ、その治療薬のより低い頻度の投与を可能にする可能性がある。１以上の治療薬剤のより低い投与量を利用する、及び／又は治療薬剤をより低い頻度で投与する能力は、疾患又は障害の治療における療法の効力を低下させること無く、該薬剤の被検者への投与に関連した毒性を低下させる可能性がある。加えて、相乗効果は、疾患又は障害（例、癌）の予防、管理、又は治療において、向上した薬剤の効力をもたらす可能性がある。最後に、組合せ療法の相乗効果は、一方の治療薬剤単独の使用に関連した有害又は望まれない副作用を回避又は抑制する場合がある。
【００４７】
本明細書に使用するように、「組み合わせて」という用語は、１より多い治療薬剤の使用に関連する。「組み合わせて」という用語の使用は、癌に罹患した被検者へ治療薬剤を投与するときの順序を制限しない。本明細書に記載の化合物のような第一治療薬剤は、抗癌剤のような第二治療薬剤又は治療の前立腺癌を有する被検者への投与に先立って（例えば、５分、１５分、３０分、４５分、１時間、２時間、４時間、６時間、１２時間、２４時間、４８時間、７２時間、９６時間、１週、２週、３週、４週、５週、６週、８週、又は１２週前に）、それと同時に、又はそれに続いて（例、５分、１５分、３０分、４５分、１時間、２時間、４時間、６時間、１２時間、２４時間、４８時間、７２時間、９６時間、１週、２週、３週、４週、５週、６週、８週、又は１２週後に）投与することができる。
【００４８】
本明細書に使用するように、「療法（複数）」及び「療法」という用語は、癌の予防、治療、管理、又は改善に使用し得るあらゆるプロトコール（複数）、方法（複数）、及び／又は薬剤（複数）に言及し得る。
【００４９】
本明細書に使用するように、「プロトコール」には、投薬スケジュールと投薬レジメンが含まれる。本明細書のプロトコールとは、使用の方法であって、療法プロトコールが含まれる。
【００５０】
本明細書に使用するように、「前立腺癌」、「転移性前立腺癌」、「ホルモン難治性前立腺癌」、「転移性ホルモン抵抗性前立腺癌」、「ホルモン非依存性前立腺癌」、「ホルモン依存性前立腺癌」、又は「転移性去勢抵抗性前立腺癌」という用語は、当該技術分野でのその通常の意味を担う。知られているように、前立腺癌は、米国における男性の癌関連死の第二の主因である。例えば、Jemal et al (2010), Cancer statistics, 2010. CA Cancer J Clin 60 277-300 を参照のこと。この癌種の顕著な特徴は、前立腺腫瘍がその発症、増殖、及び存続についてアンドロゲンに決定的に依存していて、その形質転換効果がアンドロゲン受容体（ＡＲ）シグナル伝達軸の活性化を介して主に媒介されることである。例えば、Balk et al (2008), AR, the cell cycle, and prostate cancer［ＡＲ、細胞周期、及び前立腺癌］Nucl Recept Signal 6 e001；Chen et al (2008), Targeting the androgen receptor pathway in prostate cancer［前立腺癌におけるアンドロゲン受容体経路の標的化］Curr Opin Pharmacol 8 440-448； Li et al (2009), Mechanism of androgen receptor action［アンドロゲン受容体作用の機序］Maturitas 63 142-148 を参照のこと。アンドロゲン除去療法は、局所進行性又は転移性の疾患を提示する患者に対する現行の前立腺癌治療の基礎である。これは、典型的には、黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）アゴニストのような選択的抗アンドロゲン剤、又はビカルタミドのようなより新しいＡＲ阻害剤を使用する化学的去勢を介して達成される。例えば、Scher et al (2004), Targeting the androgen receptor: improving outcomes for castration-resistant prostate cancer［アンドロゲン受容体の標的化：去勢抵抗性前立腺癌のアウトカムの改善］Endocr Relat Cancer 11 459-476 を参照のこと。このアプローチは、初めは、化学的寛解を引き起こすが、ほとんどの患者は、最終的には転帰して、１８〜２４ヶ月のメジアン以内に去勢抵抗性の疾患へ進行する。例えば、Lonergan et al (2011), Androgen receptor signaling in prostate cancer development and progression［前立腺癌の発症及び進行におけるアンドロゲン受容体のシグナル伝達］J Carcinog 10 20 を参照のこと。しばしば「アンドロゲン非依存性」と呼ばれるが、今日では、これらの腫瘍は、ＡＲシグナル伝達に依存し続けることが明らかであって、去勢環境におけるＡＲの再活性化についていくつかの機序が提唱されてきた。しかしながら、進行性及び転移性の前立腺癌への治療選択肢が限られているために、去勢抵抗性腫瘍は、この疾患の致死相を代表して、患者の予後は暗い。アンドロゲン除去療法の効力が不完全であること、そしてより新しい標的化実験アプローチからの生存利益が乏しいことにより、患者アウトカムを改善するための新規治療戦略への喫緊のニーズが強調される。例えば、Lassi et al (2010), Update on castrate-resistant prostate cancer［去勢抵抗性前立腺癌の最新状況］: 2010. Curr Opin Oncol 22 263-267 を参照のこと。
【００５１】
本明細書に使用するように、血清レベルマスピンの定量的リアルタイムＰＣＲ検出の方法の１つについて、ここで例証のためにのみ記載する。Drachenberg et al, Circulating levels of interleukin-6 in patients with hormone refractory prostate cancer［ホルモン難治性前立腺癌の患者におけるインターロイキン−６の循環レベル］Prostate, 1999; 41:127-33 に記載のように、患者血液試料より全ＲＮＡを抽出した。ＲＮＡの量は、インタクト１８Ｓ及び２８Ｓ  ｒＲＮＡを示すアガロースゲル電気泳動法によって、そしてＡ２６０ｎｍ／Ａ２８０ｎｍ比を１．８と２の間に示すＵＶ分光光度法によって検証した。各ＲＮＡ試料の１マイクログラムを上記引用文献に記載のように２０ｍＬ反応液において逆転写した。リアルタイムＰＣＲでは、生じるｃＤＮＡの１ｍＬをＳＹＢＲ  Ｇｒｅｅｎ  ＰＣＲ  Ｍａｓｔｅｒｍｉｘ（Stratagene）（カリフォルニア州ラホヤ）と３００ｎＭのＰＣＲプライマーと混合した。マスピンコーディング配列のプライマーは、５’−ＣＴＡＣＴＴＴＧＴＴＧＧＣＡＡＧＴＧＧＡＴＧＡＡ−３’と５’−ＡＣＴＧＧＴＴＴＧＧＴＧＴＣＴＧＴＣＴＴＧＴＴＧ−３’であった。ＧＡＰＤＨのプライマーは、Twillie et al, Interleukin-6: a candidate mediator of human prostate cancer morbidity［インターロイキン−６：ヒト前立腺癌罹病性の候補メディエーター］Urology, 1995; 45:542-9 による参考文献にすでに記載された通りであった。リアルタイムＰＣＲの熱プロファイルは、１サイクルの９５℃／１０分、４０サイクルの９５℃／３０秒→５５℃／１分→７２℃／３０秒、１サイクルの９５℃／分、そして最後に４１サイクルの９５℃→（５５℃＋１℃／サイクル）／３０秒であった。Stratagene Ｍｘ４０００ＴＭＭｕｌｔｉｐｌｅｘ  Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ  ＰＣＲシステムのビルトインソフトウェアを使用して、臨界閾値サイクル数（Ｃｔ）を得た。マスピン特異的ｃＤＮＡ分子種の測定値は、内部対照ＧＡＰＤＨの測定値により正規化した。
【００５２】
本明細書に使用するように、化合物を「実質的に」含む組成物とは、該組成物が、約８０重量％より多く、より好ましくは約９０重量％より多く、なおより好ましくは約９５重量％より多く、そして最も好ましくは約９７重量％より多くの該化合物を含有することを意味する。
【００５３】
本明細書に使用するように、タキサン類には、パクリタキセル（例、Ｔａｘｏｌ（登録商標））、ドセタキセル、及び他のパクリタキセル類似体が含まれる。パクリタキセルは、微小管形成を高めて安定化させることによって作用することができる抗癌薬である。このように、「パクリタキセル類似体」という用語は、本明細書において、基本のパクリタキセル骨格を有して、微小管形成を安定化させる化合物を意味するように定義される。「Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標）」とも呼ばれるドセタキセルを含めて、多くのパクリタキセル類似体が知られている。
【００５４】
加えて、パクリタキセル類似体はまた、ポリアクリルアミドのような医薬的に許容されるポリマーへ結合していても、それからペンダントさせてもよい。「パクリタキセル類似体」という用語には、それが本明細書において使用されるように、そのようなポリマー連結タキサン類が含まれる。
【００５５】
本明細書に記載の方法は、以下の詳細な説明と例解の実施例（これは、本発明の非限定的な態様を例示するために企図される）を参照にしてより完全に理解することができる。
【００５６】
本明細書に記載の方法は、式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）の化合物又は表１若しくは表２に示される化合物、及びその互変異性体又はその医薬的に許容される塩を利用する。
【００５７】
【化１】
2014507443.tif 000003
【００５８】
又はその互変異性体、又はその医薬的に許容される塩［式中：
Ｚは、ＯＨ、ＳＨ、又はＮＨ２であり；
Ｘは、ＣＲ４又はＮであり；
Ｒ１は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＳＨ、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアルケニル、置換されていてもよいアルキニル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいシクロアルケニル、置換されていてもよいヘテロシクリル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいアラルキル、置換されていてもよいヘテロアラルキル、ハロ、シアノ、ニトロ、グアナジノ、ハロアルキル、ヘテロアルキル、アルコキシ又はシクロアルコキシ、ハロアルコキシ、−ＮＲ１０Ｒ１１、−ＯＲ７、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ７、−Ｃ（Ｓ）Ｒ７、−Ｃ（Ｏ）ＳＲ７、−Ｃ（Ｓ）ＳＲ７、−Ｃ（Ｓ）ＯＲ７、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ１０Ｒ１１、−Ｃ（ＮＲ８）ＯＲ７、−Ｃ（ＮＲ８）Ｒ７、−Ｃ（ＮＲ８）ＮＲ１０Ｒ１１、−Ｃ（ＮＲ８）ＳＲ７、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ７、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲ７、−ＯＣ（Ｓ）ＯＲ７、−ＯＣ（ＮＲ８）ＯＲ７、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ７、−ＳＣ（Ｏ）ＯＲ７、−ＳＣ（ＮＲ８）ＯＲ７、−ＯＣ（Ｓ）Ｒ７、−ＳＣ（Ｓ）Ｒ７、−ＳＣ（Ｓ）ＯＲ７、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＯＣ（Ｓ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＯＣ（ＮＲ８）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＳＣ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＳＣ（ＮＲ８）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＳＣ（Ｓ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＯＣ（ＮＲ８）Ｒ７、−ＳＣ（ＮＲ８）Ｒ７、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−ＮＲ７Ｃ（Ｓ）Ｒ７、−ＮＲ７Ｃ（Ｓ）ＯＲ７、−ＮＲ７Ｃ（ＮＲ８）Ｒ７、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）ＯＲ７、−ＮＲ７Ｃ（ＮＲ８）ＯＲ７、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＮＲ７Ｃ（Ｓ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＮＲ７Ｃ（ＮＲ８）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＳＲ７、−Ｓ（Ｏ）ｐＲ７、−ＯＳ（Ｏ）ｐＲ７、−ＯＳ（Ｏ）ｐＯＲ７、−ＯＳ（Ｏ）ｐＮＲ１０Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）ｐＯＲ７、−ＮＲ８Ｓ（Ｏ）ｐＲ７、−ＮＲ７Ｓ（Ｏ）ｐＮＲ１０Ｒ１１、−ＮＲ７Ｓ（Ｏ）ｐＯＲ７、−Ｓ（Ｏ）ｐＮＲ１０Ｒ１１、−ＳＳ（Ｏ）ｐＲ７、−ＳＳ（Ｏ）ｐＯＲ７、−ＳＳ（Ｏ）ｐＮＲ１０Ｒ１１、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ７）２、又は−ＳＰ（Ｏ）（ＯＲ７）２であり；
Ｒ２は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＲ７Ｈ、−ＯＲ１５、−ＳＲ１５、−ＮＨＲ１５、−Ｏ（ＣＨ２）ｍＯＨ、−Ｏ（ＣＨ２）ｍＳＨ、−Ｏ（ＣＨ２）ｍＮＲ７Ｈ、−Ｓ（ＣＨ２）ｍＯＨ、−Ｓ（ＣＨ２）ｍＳＨ、−Ｓ（ＣＨ２）ｍＮＲ７Ｈ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＳＣ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ７、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ７、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲ７、−ＳＣ（Ｏ）ＯＲ７、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）ＯＲ７、−ＯＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−ＳＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−ＮＲ７ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−ＯＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＲ７、−ＳＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＲ７、−ＮＲ７ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＲ７、−ＯＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＳＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＮＲ７ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＯＳ（Ｏ）ｐＲ７、−ＳＳ（Ｏ）ｐＲ７、−ＮＲ７Ｓ（Ｏ）ｐＲ７、−ＯＳ（Ｏ）ｐＮＲ１０Ｒ１１、−ＳＳ（Ｏ）ｐＮＲ１０Ｒ１１、−ＮＲ７Ｓ（Ｏ）ｐＮＲ１０Ｒ１１、−ＯＳ（Ｏ）ｐＯＲ７、−ＳＳ（Ｏ）ｐＯＲ７、−ＮＲ７Ｓ（Ｏ）ｐＯＲ７、−ＯＣ（Ｓ）Ｒ７、−ＳＣ（Ｓ）Ｒ７、−ＮＲ７Ｃ（Ｓ）Ｒ７、−ＯＣ（Ｓ）ＯＲ７、−ＳＣ（Ｓ）ＯＲ７、−ＮＲ７Ｃ（Ｓ）ＯＲ７、−ＯＣ（Ｓ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＳＣ（Ｓ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＮＲ７Ｃ（Ｓ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＯＣ（ＮＲ８）Ｒ７、−ＳＣ（ＮＲ８）Ｒ７、−ＮＲ７Ｃ（ＮＲ８）Ｒ７、−ＯＣ（ＮＲ８）ＯＲ７、−ＳＣ（ＮＲ８）ＯＲ７、−ＮＲ７Ｃ（ＮＲ８）ＯＲ７、−ＯＣ（ＮＲ８）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＳＣ（ＮＲ８）ＮＲ１０Ｒ１１、又は−ＮＲ７Ｃ（ＮＲ８）ＮＲ１０Ｒ１１であり；
Ｒ３は、−Ｈ、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアルケニル、置換されていてもよいアルキニル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいシクロアルケニル、置換されていてもよいヘテロシクリル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいアラルキル、置換されていてもよいヘテロアラルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシアルキル、ハロアルキル、ヘテロアルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−（ＣＨ２）ｍＣ（Ｏ）ＯＲ７、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ７、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ７、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）ｐＲ７、−Ｓ（Ｏ）ｐＯＲ７、又は−Ｓ（Ｏ）ｐＮＲ１０Ｒ１１であり；
Ｒ４は、−Ｈ、−ＯＨ、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアルケニル、置換されていてもよいアルキニル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいシクロアルケニル、置換されていてもよいヘテロシクリル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいアラルキル、置換されていてもよいヘテロアラルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシアルキル、ハロ、シアノ、ニトロ、グアナジノ、ハロアルキル、ヘテロアルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ７、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ７、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１１、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−ＳＲ７、−Ｓ（Ｏ）ｐＲ７、−ＯＳ（Ｏ）ｐＲ７、−Ｓ（Ｏ）ｐＯＲ７、−ＮＲ８Ｓ（Ｏ）ｐＲ７、−Ｓ（Ｏ）ｐＮＲ１０Ｒ１１であるか又は、Ｒ３とＲ４は、それらが付く炭素原子と一緒になって、置換されていてもよいシクロアルケニル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロシクリル、又は置換されていてもよいヘテロアリールを形成し；
Ｒ７とＲ８は、それぞれの出現につき、独立して、−Ｈ、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアルケニル、置換されていてもよいアルキニル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいシクロアルケニル、置換されていてもよいヘテロシクリル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいアラルキル、又は置換されていてもよいヘテロアラルキルであり；
Ｒ１０とＲ１１は、それぞれの出現につき、独立して、−Ｈ、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアルケニル、置換されていてもよいアルキニル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいシクロアルケニル、置換されていてもよいヘテロシクリル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいアラルキル、又は置換されていてもよいヘテロアラルキルである；又はＲ１０とＲ１１は、それらが付く窒素と一緒になって、置換されていてもよいヘテロシクリル又は置換されていてもよいヘテロアリールを形成し；
Ｒ１５は、それぞれの出現につき、独立して、低級アルキルであり；
ｐは、それぞれの出現につき、独立して、１又は２であり；そして
ｍは、それぞれの出現につき、独立して、１、２、３、又は４である］。
【００５９】
１つの態様では、式（Ｉ）又は（Ｉａ）において、ＸがＣＲ４である。別の態様では、式（Ｉ）又は（Ｉａ）において、ＸがＮである。別の態様では、式（Ｉ）又は（Ｉａ）において、Ｒ１が、−Ｈ、低級アルキル、低級アルコキシ、低級シクロアルキル、及び低級シクロアルコキシからなる群より選択される。別の態様では、式（Ｉ）又は（Ｉａ）において、Ｒ１が、−Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、及びシクロプロポキシからなる群より選択される。別の態様では、式（Ｉ）又は（Ｉａ）において、Ｒ３が、−Ｈ、低級アルキル、低級シクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２７）２、及び−Ｃ（Ｏ）ＯＨからなる群より選択され、ここでＲ２７は、−Ｈ又は低級アルキルである。別の態様では、式（Ｉ）又は（Ｉａ）において、Ｒ３が、−Ｈ、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−（ＣＨ２）ｍＣ（Ｏ）ＯＨ、−ＣＨ２ＯＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、及び−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２からなる群より選択される。１つの態様では、Ｒ４がＨ又は低級アルキルである。別の態様では、式（Ｉ）又は（Ｉａ）において、Ｒ４が、−Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、又はシクロプロピルからなる群より選択される。別の態様では、式（Ｉ）又は（Ｉａ）において、Ｒ１が、−Ｈ、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、低級アルコキシ、及び低級アルキルアミノからなる群より選択される。別の態様では、式（Ｉ）又は（Ｉａ）において、Ｒ１が、−Ｈ、−ＯＨ、メトキシ、及びエトキシからなる群より選択される。別の態様では、式（Ｉ）又は（Ｉａ）において、Ｚが−ＯＨである。別の態様では、式（Ｉ）又は（Ｉａ）において、Ｚが−ＳＨである。別の態様では、式（Ｉ）又は（Ｉａ）において、Ｒ２が、−Ｈ、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、低級アルコキシ、及び低級アルキルアミノからなる群より選択される。別の態様では、式（Ｉ）又は（Ｉａ）において、Ｒ２が、−Ｈ、−ＯＨ、メトキシ、及びエトキシからなる群より選択される。別の態様では、式（Ｉ）又は（Ｉａ）において、Ｒ１が、−Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、及びシクロプロポキシからなる群より選択され；Ｒ３が、−Ｈ、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−（ＣＨ２）ｍＣ（Ｏ）ＯＨ、−ＣＨ２ＯＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、及び−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２からなる群より選択され；Ｒ４が、−Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、又はシクロプロピルからなる群より選択され；Ｒ２が、−Ｈ、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、低級アルコキシ、及び低級アルキルアミノからなる群より選択され；そしてＺがＯＨである。別の態様では、式（Ｉ）又は（Ｉａ）において、Ｒ１が、−Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、及びシクロプロポキシからなる群より選択され；Ｒ３が、−Ｈ、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−（ＣＨ２）ｍＣ（Ｏ）ＯＨ、−ＣＨ２ＯＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、及び−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２からなる群より選択され；Ｒ４が、−Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、又はシクロプロピルからなる群より選択され；Ｒ２が、−Ｈ、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、低級アルコキシ、及び低級アルキルアミノからなる群より選択され；そしてＺがＳＨである。
【００６０】
別の態様では、該化合物が：３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１，３−ジメチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１，３−ジメチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−イソプロピル−インドール−４−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インダゾール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インダゾール−６−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−４−（１−エチル−インドール−４−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−４−（１−イソプロピル−インドール−４−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−４−（インドール−４−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−４−（１−メトキシエチル−インドール−４−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１−イソプロピル−インドール−４−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−４−（１−ジメチルカルバモイル−インドール−４−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１−プロピル−インドール−４−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１，２，３−トリメチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（２，３−ジメチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１−アセチル−２，３−ジメチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１−プロピル−２，３−ジメチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１−ｎ−ブチル−インドール−４−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１−ｎ−ペンチル−インドール−４−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１−ｎ−ヘキシル−インドール−４−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−シクロプロピル−フェニル）−４−（１−（１−メチルシクロプロピル）−インドール−４−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−シクロプロピル−フェニル）−４−（１，２，３−トリメチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１−メチル−３−エチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１，３−ジメチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１−メチル−３−イソプロピル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１，２−ジメチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（Ｎ−メチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１，３−ジメチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−シクロプロピル−フェニル）−４−（１，３−ジメチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−シクロプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１Ｈ−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１，２−ジメチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−エチル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−プロピル−インドール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩からなる群より選択される。
【００６１】
別の態様では、式（Ｉ）又は（Ｉａ）において、ＸがＮである。
【００６２】
別の態様では、該化合物が、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１−エチル−ベンゾイミダゾール−４−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１−エチル−ベンゾイミダゾール−４−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾールＨＣＬ塩、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（２−メチル−３−エチル−ベンゾイミダゾール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１−エチル−２−メチル−ベンゾイミダゾール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−２−トリフルオロメチル−ベンゾイミダゾール−５−イル）−５−メルカプト−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩からなる群より選択される。
【００６３】
ｉ）例示のトリアゾロン化合物
本明細書に記載の例示化合物を、互変異性体又は医薬的に許容される塩を含めて、下記の表１に図示する。
【００６４】
表１
【００６５】
【表１−１】
2014507443.tif 000004
【００６６】
【表１−２】
2014507443.tif 000005
【００６７】
【表１−３】
2014507443.tif 000006
【００６８】
【表１−４】
2014507443.tif 000007
【００６９】
【表１−５】
2014507443.tif 000008
【００７０】
【表１−６】
2014507443.tif 000009
【００７１】
【表１−７】
2014507443.tif 000010
【００７２】
【表１−８】
2014507443.tif 000011
【００７３】
【表１−９】
2014507443.tif 000012
【００７４】
【表１−１０】
2014507443.tif 000013
【００７５】
【表１−１１】
2014507443.tif 000014
【００７６】
表２：式（Ｉａ）による化合物
【００７７】
【表２】
2014507443.tif 000015
【００７８】
開示の方法に使用される化合物は、米国特許公開公報番号２００６−０１６７０７０、及びＷＯ２００９／０２３２１１に開示される方法に従って製造することができる。
【００７９】
本明細書に記載の化合物は、典型的には、下記に示されるような、そして表１及び２に示す互変異性体の構造によって例示されるような互変異性体の構造をとることができる：
【００８０】
【化２】
2014507443.tif 000016
【００８１】
これらのトリアゾロンＨｓｐ９０阻害剤は、転移性前立腺癌、転移性ホルモン抵抗性前立腺癌、又は転移性去勢抵抗性前立腺癌、又はドセタキセルベースの化学療法で以前に治療された前立腺癌のような前立腺癌のある患者を治療するのに特に有効である。
【００８２】
本方法は、Ｈｓｐ９０阻害性の式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）の化合物又は表１若しくは２中の化合物、又はその医薬的に許容される塩又は互変異性体を前立腺癌の治療に利用する。
【００８３】
１つの態様において、本方法には、前立腺癌を有する被検者へ式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）のトリアゾロン化合物又は表１若しくは２中の化合物の約２ｍｇ／ｍ２〜約５００ｍｇ／ｍ２の量を投与する工程が含まれる。１つの態様において、投与されるトリアゾロン化合物は、約２ｍｇ／ｍ２〜約２６０ｍｇ／ｍ２である。１つの態様では、式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）又は表１若しくは２中の化合物を毎週投与してよい。１つの態様では、式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）又は表１若しくは２中の化合物を週２回投与してよい。１つの態様では、該化合物を約３週間投与してよい。別の態様では、週２回、３週間の投与を約７日の休薬の後で繰り返してよい。１つの態様では、７日の休薬後に週２回の投与を２回以上繰り返してよい。上記態様のいずれでも、トリアゾロン化合物は、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩であってよい。上記態様のいずれでも、トリアゾロン化合物は、５−ヒドロキシ−４−（５−ヒドロキシ−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−イソプロピルフェニル二水素リン酸塩、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩であってよい。上記態様のいずれでも、前立腺癌は、転移性ホルモン抵抗性前立腺癌であってよい。上記態様のいずれでも、前立腺癌は、転移性去勢抵抗性前立腺癌であってよい。上記態様のいずれでも、前立腺癌は、ドセタキセルベースの化学療法で以前に治療されてよい。
【００８４】
１つの態様において、投与される式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）又は表１若しくは２中の化合物の量は、約２ｍｇ／ｍ２〜約５００ｍｇ／ｍ２、例えば、約１００ｍｇ／ｍ２〜約５００ｍｇ／ｍ２、約１２５ｍｇ／ｍ２〜約５００ｍｇ／ｍ２、約１５０ｍｇ／ｍ２〜約５００ｍｇ／ｍ２、又は約１７５ｍｇ／ｍ２〜約５００ｍｇ／ｍ２、又は約２ｍｇ／ｍ２〜約２６０ｍｇ／ｍ２である。１つの態様において、投与される式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）又は表１若しくは２中の化合物の量は、約１００ｍｇ／ｍ２〜約３００ｍｇ／ｍ２、約１２５ｍｇ／ｍ２〜約３００ｍｇ／ｍ２、約１５０ｍｇ／ｍ２〜約３００ｍｇ／ｍ２、又は約１７５ｍｇ／ｍ２〜約３００ｍｇ／ｍ２である。いくつかの態様において、投与される式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）又は表１若しくは２中の化合物の量は、約２ｍｇ／ｍ２、４ｍｇ／ｍ２、約７ｍｇ／ｍ２、約１０ｍｇ／ｍ２、約１４ｍｇ／ｍ２、約１９ｍｇ／ｍ２、約２３ｍｇ／ｍ２、約２５ｍｇ／ｍ２、約３３ｍｇ／ｍ２、約３５ｍｇ／ｍ２、約４０ｍｇ／ｍ２、約４８ｍｇ／ｍ２、約４９ｍｇ／ｍ２、約５０ｍｇ／ｍ２、約６５ｍｇ／ｍ２、約７５ｍｇ／ｍ２、約８５ｍｇ／ｍ２、約１００ｍｇ／ｍ２、約１１０ｍｇ／ｍ２、約１１５ｍｇ／ｍ２、約１２０ｍｇ／ｍ２、約１４５ｍｇ／ｍ２、約１５０ｍｇ／ｍ２、約１７５ｍｇ／ｍ２、約１８０ｍｇ／ｍ２、約２１５ｍｇ／ｍ２、又は約２６０ｍｇ／ｍ２である。
【００８５】
「週２回」という言葉には、式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）又は表１若しくは２中の化合物の、約７日で２回の投与が含まれる。例えば、式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）の化合物又は表１若しくは２中の化合物の第一用量を１日目に投与して、式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）又は表１若しくは２中の化合物の第二用量は、２日目、３日目、４日目、５日目、６日目、又は７日目に投与してよい。いくつかの態様において、週２回投与は、１日目と３日目、又は１日目と４日目に生じる。
【００８６】
いくつかの態様において、式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）又は表１若しくは２中の化合物は、週２回で周期的に投与される。例えば、式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）又は表１若しくは２中の化合物を、第一期間の間に投与して、「休薬」期を続けてから、第二期間の間に投与する。「休薬」という言葉には、第一投薬期と第二投薬期の間の期間が含まれて、ここでは式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）又は表１若しくは２中の化合物が被検者へ投与されない。好ましい周期は、式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）又は表１若しくは２中の化合物を上記に記載の用量で週の間に２回、３週連続で投与して、１回の休薬週を続けることである。次いで、この周期を下記に記載のように繰り返す。
【００８７】
「１周期」という言葉には、式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）又は表１若しくは２中の化合物が投与される間の第一期間と、それに続く休薬期間が含まれる。この投薬周期を繰り返すことが可能であって、当業者は、そのような周期的な投薬レジメンに適した時間の長さを決定することができよう。１つの態様では、この周期が少なくとも１回繰り返される。１つの態様では、この周期が２回以上繰り返される。１つの態様では、この周期が３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５回以上、又は当業者によって決定されるように、医学的に必要な多くの回数だけ繰り返される。１つの態様では、患者が部分寛解（例えば、腫瘍増殖の測定可能な変数が５０％以上低下すること）又は完全寛解（例えば、癌の非存在）の状態にあると判定されるまで、この周期が繰り返される。当業者は、当該技術分野でよく知られた定型法を使用して、患者の寛解状態を判定することができよう。
【００８８】
また、ある種のトリアゾロンＨｓｐ９０阻害剤とタキサンの組合せが前立腺癌を有する被検者を治療するのに驚くほど有効であることが見出されている。本明細書に開示する特別な組合せ療法は、副作用をほとんど伴わずに有意な抗癌効果を示すことによって、驚くべき生物学的活性を証明する。１つの態様において、この組合せには、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物とタキサンが含まれる。１つの態様において、この組合せには、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物とドセタキセルが含まれる。１つの態様において、この組合せには、５−ヒドロキシ−４−（５−ヒドロキシ−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−イソプロピルフェニル二水素リン酸塩、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物とタキサンが含まれる。１つの態様において、この組合せには、５−ヒドロキシ−４−（５−ヒドロキシ−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−イソプロピルフェニル二水素リン酸塩、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物とドセタキセルが含まれる。
【００８９】
別の態様において、前立腺癌を有する被検者を治療するこの組合せ方法には、該被検者へ本明細書に記載のＨｓｐ９０阻害剤の有効量とタキサンを投与する工程が含まれる。１つの態様において、Ｈｓｐ９０阻害剤とタキサンの投与は、同時になされる。別の態様において、Ｈｓｐ９０阻害剤とタキサンの投与は、連続的になされる。これら態様のいずれにおいても、タキサンは、ドセタキセル、パクリタキセル、又はＡｂｒａｘａｎｅ（登録商標）であってよい。これら態様のいずれにおいても、Ｈｓｐ９０阻害剤は、式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）によって表される化合物、又は表１又は表２中の化合物である。これら態様のいずれにおいても、Ｈｓｐ９０阻害剤は、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物であってよい。これら態様のいずれにおいても、Ｈｓｐ９０阻害剤は、５−ヒドロキシ−４−（５−ヒドロキシ−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−イソプロピルフェニル二水素リン酸塩、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物であってよい。
【００９０】
１つの態様において、当該方法にはまた、前立腺癌を有する被検者へ式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）によって表されるトリアゾロン化合物又は表１又は表２中の化合物の有効量をパクリタキセル又はパクリタキセル類似体の有効量と組み合わせて投与することを含んでなる、該被検者を治療することが含まれる。別の態様において、当該方法には、前立腺癌を有する被検者へパクリタキセル又はパクリタキセル類似体の有効量と３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１，３−ジメチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物の有効量を投与することを含んでなる、該被検者を治療することが含まれる。
【００９１】
別の態様において、当該方法には、前立腺癌を有する被検者へドセタキセルの有効量と３−（２，４−ジヒドロキシ−５−エチル−フェニル）−４−（１，３−ジメチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物の有効量を投与することを含んでなる、該被検者を治療することが含まれる。別の態様において、当該方法には、前立腺癌を有する被検者へパクリタキセル又はパクリタキセル類似体の有効量と３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１，３−ジメチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物の有効量を投与することを含んでなる、該被検者を治療することが含まれる。
【００９２】
別の態様において、当該方法には、前立腺癌を有する被検者へドセタキセルの有効量と３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１，３−ジメチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物の有効量を投与することを含んでなる、該被検者を治療することが含まれる。なお別の態様において、当該方法には、前立腺癌を有する被検者へパクリタキセル又はパクリタキセル類似体の有効量と３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物の有効量を投与することを含んでなる、該被検者を治療することが含まれる。
【００９３】
なお別の態様において、当該方法には、前立腺癌を有する被検者へパクリタキセル又はパクリタキセル類似体の有効量と３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物の相乗作用量を投与することを含んでなる、該被検者を治療することが含まれる。さらなる態様において、当該方法には、前立腺癌を有する被検者へドセタキセルの有効量と３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物の有効量を投与することを含んでなる、該被検者を治療することが含まれる。
【００９４】
さらなる態様において、当該方法には、前立腺癌を有する被検者へドセタキセルの有効量と３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物の相乗作用量を投与することを含んでなる、該被検者を治療することが含まれる。さらなる態様において、当該方法には、前立腺癌を有する被検者へドセタキセルの相乗作用量と３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物の相乗作用量を投与することを含んでなる、該被検者を治療することが含まれる。
【００９５】
別の態様において、当該方法には、前立腺癌を有する被検者へパクリタキセル又はパクリタキセル類似体の有効量と３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−イソプロピル−インドール−４−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物の有効量を投与することを含んでなる、該被検者を治療することが含まれる。別の態様において、当該方法には、前立腺癌を有する被検者へドセタキセルの有効量と３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−イソプロピル−インドール−４−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物の有効量を投与することを含んでなる、該被検者を治療することが含まれる。
【００９６】
なお別の態様において、当該方法には、前立腺癌を有する被検者へパクリタキセル又はパクリタキセル類似体の有効量と５−ヒドロキシ−４−（５−ヒドロキシ−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−イソプロピルフェニル二水素リン酸塩、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物の有効量を投与することを含んでなる、該被検者を治療することが含まれる。なお別の態様において、当該方法には、前立腺癌を有する被検者へドセタキセルの有効量と５−ヒドロキシ−４−（５−ヒドロキシ−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−イソプロピルフェニル二水素リン酸塩、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物の有効量を投与することを含んでなる、該被検者を治療することが含まれる。
【００９７】
なお別の態様において、当該方法には、前立腺癌を有する被検者へドセタキセルの有効量と５−ヒドロキシ−４−（５−ヒドロキシ−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−イソプロピルフェニル二水素リン酸塩、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物の相乗作用量を投与することを含んでなる、該被検者を治療することが含まれる。１つの態様において、式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）又は表１若しくは２中の化合物は、末梢静脈内注入のような静脈内注入によって投与される。１つの態様において、式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）又は表１若しくは２中の化合物は、６０分にわたって注入される。
【００９８】
いくつかの態様において、トリアゾロン化合物とパクリタキセル類似体は、同時に、又は別々に、又は連続的に投与される。いくつかの態様において、当該方法は、１以上の追加の治療薬剤を投与することをさらに含んでなる。
【００９９】
１つの態様において、当該方法には、本明細書に記載のＨｓｐ９０阻害剤の、前立腺癌をタキサンと組み合わせて治療するための医薬の製造への使用が含まれる。これら態様のいずれにおいても、タキサンは、ドセタキセル、パクリタキセル、又はＡｂｒａｘａｎｅ（登録商標）であってよい。ある態様において、本明細書に記載の方法は、本明細書に記載のＨｓｐ９０阻害化合物のタキサンとの組成物を、その必要な被検者における前立腺癌の治療に提供する。これら態様のいずれでも、タキサンは、ドセタキセル、パクリタキセル、又はＡｂｒａｘａｎｅ（登録商標）であってよい。
【０１００】
１つの態様において、当該方法には、パクリタキセル類似体の有効量と請求項１に定義されるような式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）のトリアゾロン化合物又は表１又は表２中の化合物、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩の有効量へ癌又は腫瘍細胞を曝露することを含んでなる、該細胞の増殖を阻害することが含まれる。
【０１０１】
１つの態様において、当該方法には、パクリタキセル類似体の有効量と請求項１に定義されるような式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）のトリアゾロン化合物又は表１又は表２中の化合物、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩の有効量へその必要な被検者中の癌又は腫瘍細胞を曝露することを含んでなる、前記被検者中の該細胞の増殖を阻害することが含まれる。
【０１０２】
１つの態様において、当該方法には、パクリタキセル類似体の有効量と３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物の有効量へ癌又は腫瘍細胞を曝露することを含んでなる、該細胞の増殖を阻害することが含まれる。１つの態様において、当該方法には、ドセタキセルの有効量と３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物の有効量へ癌又は腫瘍細胞を曝露することを含んでなる、該細胞の増殖を阻害することが含まれる。
【０１０３】
１つの態様において、当該方法には、パクリタキセル類似体の有効量と３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物の有効量へその必要な被検者中の癌又は腫瘍細胞を曝露することを含んでなる、前記被検者中の該細胞の増殖を阻害することが含まれる。１つの態様において、当該方法には、ドセタキセルの有効量と３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物の有効量へその必要な被検者中の癌又は腫瘍細胞を曝露することを含んでなる、前記被検者中の該細胞の増殖を阻害することが含まれる。
【０１０４】
組合せ療法の治療薬剤は、被検者、好ましくはヒト被検者へ同じ医薬組成物で投与することができる。代わりの態様において、組合せ療法の治療薬剤は、被検者へ別々の医薬組成物で同時に投与することができる。この治療薬剤は、被検者へ同じ又は異なる投与経路によって投与してよい。
【０１０５】
本明細書に記載の方法には、前立腺癌への既存治療薬剤に対して完全に又は部分的に抵抗する被検者において前立腺癌又はその１以上の症状を管理する、治療する、又は改善することが含まれ、前記方法は、前記被検者へ本明細書に記載の１以上の化合物の有効量の用量とタキサンの有効量の用量を投与することを含んでなる。
【０１０６】
本明細書に記載の方法にはまた、本明細書に記載の１以上の化合物をタキサンと組み合わせて、他の療法に対しては抵抗するが、これらの療法に対してはもはや抵抗しないことが証明された患者へ投与することによって、前立腺癌又はその症状を治療する、管理する、又は改善することが含まれる。
【０１０７】
本明細書に記載の方法は、前立腺癌の治療及び改善に有用である。具体的な態様では、本明細書に記載の１以上のトリアゾロン化合物、又はその医薬的に許容される塩をタキサンと組み合わせて投与する。別の態様では、本明細書に記載の１以上のトリアゾロン化合物、又はその医薬的に許容される塩を含んでなる組成物と１以上の他の治療薬剤をタキサンと組み合わせて投与する。本明細書で使用される医薬組成物は、企図される投与経路と適合可能であるように製剤化される。投与経路の例には、非経口（例、静脈内、皮内、皮下）、経口（例、吸入）、鼻腔内、経皮（局所）、経粘膜、及び直腸投与が含まれる。具体的な態様において、該組成物は、ヒトへの静脈内、皮下、筋肉内、経口、鼻腔内、又は局所投与に適合した医薬組成物として、定型的な手順に従って製剤化される。好ましい態様では、ヒトへの皮下投与のための定型的な手順に従って、医薬組成物を製剤化する。
【０１０８】
典型的な医薬組成物及び剤形は、１以上の賦形剤を含む。好適な賦形剤は、製剤学の技術分野の当業者によく知られている。
【０１０９】
本明細書に記載のトリアゾロン化合物はまた、当業者によく知られている制御放出手段又は送達デバイスによって製剤化又は投与することができる。例には、米国特許第３，８４５，７７０号；３，９１６，８９９号；３，５３６，８０９号；３，５９８，１２３号；及び４，００８，７１９号、５，６７４，５３３号、５，０５９，５９５号、５，５９１，７６７号、５，１２０，５４８号、５，０７３，５４３号、５，６３９，４７６号、５，３５４，５５６号、及び５，７３３，５６６号に記載されるものが含まれる。
【０１１０】
一般に、本明細書に記載の状態へのトリアゾロン化合物の推奨１日用量範囲は、１日につき約０．０１ｍｇ〜約１０００ｍｇの範囲内にあり、１日１回単独の用量として、好ましくは、１日を通した分割用量として与えられる。１つの態様において、この１日用量は、１日２回、等しく分割された用量で投与される。具体的には、１日用量の範囲は、１日につき約５ｍｇ〜約５００ｍｇ、より特別には、１日につき約１０ｍｇと約２００ｍｇの間であるべきである。患者を管理する場合には、その療法は、より低い用量、おそらくは約１ｍｇ〜約２５ｍｇで始めて、必要であれば、患者の全体的な応答に依存して、単回用量又は分割用量として１日につき約２００ｍｇ〜約１０００ｍｇまで増加させるべきである。当業者に明らかであるように、ある症例では、有効成分の投与量を本明細書に開示した範囲の外側で使用することが必要になる場合もある。さらに、臨床医又は治療医師には、個々の患者応答に関連して、療法をどのように、そしていつ中断する、調整する、又は終了させるかがわかるものである。
【０１１１】
当業者によって容易に理解されるように、異なる被検者には、異なる治療有効量が適用可能であり得る。同様に、このような癌を予防する、管理する、治療する、又は改善するのに十分ではあるが、本明細書に記載のトリアゾロン化合物に関連した副作用を引き起こすには不十分であるか又はそれを抑えるには十分である量も、上記に記載の投与量と投薬頻度スケジュールに含まれる。さらに、本明細書に記載のトリアゾロン化合物の多数の投与量を患者に投与するとき、すべての投与量が同一である必要はない。例えば、患者へ投与すべき投与量は、該化合物の予防又は治療効果を向上させるために増やしても、特定の患者が経験している１以上の副作用を抑えるために減らしてもよい。
【０１１２】
具体的な態様では、癌又はその１以上の症状を患者において予防する、治療する、管理する、又は改善するために投与される本明細書に記載のトリアゾロン化合物を含んでなる組成物の投与量は、１５０μｇ／ｋｇ、好ましくは２５０μｇ／ｋｇ、５００μｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、７５ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ、１２５ｍｇ／ｋｇ、１５０ｍｇ／ｋｇ、又は２００ｍｇ以上／ｋｇ（患者体重）である。別の態様において、癌又はその１以上の症状を患者において予防する、治療する、管理する、又は改善するために投与される本明細書に記載の化合物を含んでなる組成物の投与量は、０．１ｍｇ〜２０ｍｇ、０．１ｍｇ〜１５ｍｇ、０．１ｍｇ〜１２ｍｇ、０．１ｍｇ〜１０ｍｇ、０．１ｍｇ〜８ｍｇ、０．１ｍｇ〜７ｍｇ、０．１ｍｇ〜５ｍｇ、０．１〜２．５ｍｇ、０．２５ｍｇ〜２０ｍｇ、０．２５〜１５ｍｇ、０．２５〜１２ｍｇ、０．２５〜１０ｍｇ、０．２５〜８ｍｇ、０．２５ｍｇ〜７ｍｇ、０．２５ｍｇ〜５ｍｇ、０．５ｍｇ〜２．５ｍｇ、１ｍｇ〜２０ｍｇ、１ｍｇ〜１５ｍｇ、１ｍｇ〜１２ｍｇ、１ｍｇ〜１０ｍｇ、１ｍｇ〜８ｍｇ、１ｍｇ〜７ｍｇ、１ｍｇ〜５ｍｇ、又は１ｍｇ〜２．５ｍｇの単位用量である。この単位用量は、１日につき１、２、３、４回又はそれ以上、又は２、３、４、５、６又は７日毎に１回、又は週１回、２週毎に１回、３週毎に１回、又は月１回で投与することができる。
【０１１３】
ある態様において、本明細書に記載のトリアゾロン化合物をタキサンと組み合わせて投与するとき、これらの療法薬は、５分未満隔てて、３０分未満隔てて、１時間隔てて、約１時間隔てて、約１〜約２時間隔てて、約２時間〜約３時間隔てて、約３時間〜約４時間隔てて、約４時間〜約５時間隔てて、約５時間〜約６時間隔てて、約６時間〜約７時間隔てて、約７時間〜約８時間隔てて、約８時間〜約９時間隔てて、約９時間〜約１０時間隔てて、約１０時間〜約１１時間隔てて、約１１時間〜約１２時間隔てて、約１２時間〜１８時間隔てて、１８時間〜２４時間隔てて、２４時間〜３６時間隔てて、３６時間〜４８時間隔てて、４８時間〜５２時間隔てて、５２時間〜６０時間隔てて、６０時間〜７２時間隔てて、７２時間〜８４時間隔てて、８４時間〜９６時間隔てて、又は９６時間〜１２０時間隔てて投与される。１つの態様では、２以上の療法薬が同じ患者来診のうちに投与される。
【０１１４】
ある態様では、本明細書に記載の１以上の化合物とタキサンが周期的に投与される。サイクリング（Cycling）療法には、第一療法（例、第一の予防又は治療薬剤）のある期間の投与に続く、第二療法（例、第二の予防又は治療薬剤）のある期間の投与に続く、第三療法（例、第三の予防又は治療薬剤）のある期間の投与、等とこの連続投与を繰り返すことを伴う。即ち、このサイクルは、薬剤の１つに対する抵抗性の発現を抑えるため、薬剤の１つの副作用を回避するか又は抑制するため、及び／又は治療の効力を高めるためのものである。
【０１１５】
ある態様では、本明細書に記載の同じ化合物の投与を繰り返してよくて、この投与は、少なくとも１日、２日、３日、５日、１０日、１５日、３０日、４５日、２ヶ月、７５日、３ヶ月、又は６ヶ月離してよい。他の態様では、同じ予防又は治療薬剤の投与を繰り返してよくて、この投与は、少なくとも１日、２日、３日、５日、１０日、１５日、３０日、４５日、２ヶ月、７５日、３ヶ月、又は６ヶ月離してよい。
【０１１６】
具体的な態様では、前立腺癌のような増殖性障害又はその１以上の症状を予防する、治療する、管理する、又は改善する方法があって、前記方法は、その必要な被検者へ本明細書に記載の１以上の化合物の少なくとも１５０μｇ／ｋｇ、好ましくは、少なくとも２５０μｇ／ｋｇ、少なくとも５００μｇ／ｋｇ、少なくとも１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１００ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１２５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１５０ｍｇ／ｋｇ、又は少なくとも２００ｍｇ／ｋｇ又はそれ以上の用量を毎日１回、好ましくは、２日毎に１回、３日毎に１回、４日毎に１回、５日毎に１回、６日毎に１回、７日毎に１回、８日毎に１回、１０日毎に１回、２週毎に１回、３週毎に１回、又は１ヶ月に１回投与することを含んでなる。あるいは、その用量は、分量へ分割されて（典型的には等しい用量）、１日につき２回、３回、又は４回以上投与することができる。
【０１１７】
１つの態様では、タキサン（例、パクリタキセル又はドセタキセル）を３週毎に１回のスケジュールで投与して、Ｈｓｐ阻害剤（例、ガネテスピブ）を第１及び第２週に投与し（その後、１週の休薬）、その後で再び開始する。あるいは、パクリタキセル又はドセタキセルについて、６０ｍｇ／ｍ２の出発用量から７５ｍｇ／ｍ２へ上昇させる、３週毎に１回のレジメンを使用する。別の代替態様では、パクリタキセル又はドセタキセルで、３０ｍｇ／ｍ２で開始して３５ｍｇ／ｍ２へ上昇させる、３週オン／１週オフのレジメンを使用する。Ｈｓｐ９０阻害剤の量は、上記に記載のように、忍容性と効力に従って調整する。
【０１１８】
別の代替態様では、パクリタキセルを週１回投与する（典型的な用量：９０ｍｇ／ｍ２、範囲：７０〜１００ｍｇ／ｍ２）。あるいは、それを３週毎に１回投与する。用量は、３週毎に１回投与する場合、１７５〜２２５ｍｇ／ｍ２の範囲に及ぶ。Ｈｓｐ９０阻害剤の用量は、上記に記載のように、通常、完全な単剤用量（例、２００ｍｇ／ｍ２）であるか又は忍容性に依っては、それ未満である。
【０１１９】
別の代替態様では、ドセタキセルを３週毎に１回投与する（用量レベル：７５ｍｇ／ｍ２、範囲：６０〜１００ｍｇ／ｍ２）。それは、週１回、３０〜４０ｍｇ／ｍ２の範囲で投与することもできる。Ｈｓｐ９０阻害剤の用量は、上記に記載のように、通常、完全な単剤用量（例、２００ｍｇ／ｍ２）であるか又は忍容性に依っては、それ未満である。
【０１２０】
あるいは、治療サイクルは、週１回、２週間の治療に続き、１週の休薬期を含む。治療サイクルは、３週毎に繰り返される。Ｈｓｐ９０阻害剤（１５０ｍｇ／ｍ２又は２００ｍｇ／ｍ２）を各サイクルの１日目と８日目に投与して、各サイクルの１日目にドセタキセル（６０ｍｇ／ｍ２又は７５ｍｇ／ｍ２）を投与する。この治療を３週毎に繰り返す。
【０１２１】
別の代替態様では、被検者に２００ｍｇ／ｍ２のＨｓｐ９０阻害剤を投与して、ドセタキセルの２５ｍｇ／ｍ２、３０ｍｇ／ｍ２、又は３５ｍｇ／ｍ２を３週連続して続けて、１週の休薬間隔を続ける。次いで、治療を繰り返す。
【０１２２】
本明細書に記載の組合せ療法では、癌のような増殖性障害又はその１以上の症状を予防する、治療する、管理するために使用されてきたか又は現在使用されている、本明細書に記載の化合物以外の予防薬剤又は治療薬剤の投与量をさらに使用することができる。好ましくは、本明細書に記載の組合せ療法では、増殖性障害又はその１以上の症状を予防する、治療する、管理する、又は改善するために使用されてきたか又は現在使用されている投与量より低い投与量を使用する。癌のような増殖性障害又はその１以上の症状の予防、治療、管理、又は改善に現在使用されている薬剤の推奨投与量は、Hardman, et al．監修「グッドマン・ギルマンの薬理書（Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics）」第9版（1996）、マクグローヒル、ニューヨーク；「米国医薬品集（Physician's Desk Reference）」（PDR）第57版（2003）、メディカル・エコノミクス社、ニュージャージー州モントベールが含まれる、当該技術分野の参考文献より入手することができる。
【０１２３】
別の態様において、本方法には、式（Ｉ）若しくは（Ｉａ）の化合物又は表１若しくは２中の化合物で治療されている、前立腺癌を有する被検者の治療応答をモニターすることも含まれ、該方法は、（ａ）前記化合物での治療の前に、該被検者に由来する生体試料中のマスピンのレベルを定量すること；（ｂ）該化合物の投与の間又は後での時点で、該被検者に由来する生体試料中のマスピンのレベルを定量すること；及び（ｃ）治療の間又は後での該被検者に由来する生体試料中のマスピンのレベルを治療前のそれと比較することを含んでなり、ここで生体試料中のマスピンレベルの増加は、トリアゾロン化合物での治療に対する陽性応答の指標となる。１つの態様において、被検者は、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物で治療することができる。１つの態様において、被検者は、５−ヒドロキシ−４−（５−ヒドロキシ−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−イソプロピルフェニル二水素リン酸塩、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物で治療することができる。
【０１２４】
別の態様において、本方法には、３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピル−フェニル）−４−（１−メチル−インドール−５−イル）−５−ヒドロキシ−［１，２，４］トリアゾール、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物で治療されている、前立腺癌を有する被検者の治療応答をモニターすることも含まれ、該方法は、（ａ）前記化合物での治療の前に、該被検者に由来する生体試料中のマスピンのレベルを定量すること；（ｂ）該化合物の投与の間又は後での時点で、該被検者に由来する生体試料中のマスピンのレベルを定量すること；及び（ｃ）治療の間又は後での該被検者に由来する生体試料中のマスピンのレベルを治療前のそれと比較することを含んでなり、ここで生体試料中のマスピンレベルの増加は、トリアゾロン化合物での治療に対する陽性応答の指標となる。
【０１２５】
別の態様において、本方法には、５−ヒドロキシ−４−（５−ヒドロキシ−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−イソプロピルフェニル二水素リン酸塩、又はその互変異性体、又は医薬的に許容される塩のトリアゾロン化合物で治療されている、前立腺癌を有する被検者の治療応答をモニターすることも含まれ、該方法は、（ａ）前記化合物での治療の前に、該被検者に由来する生体試料中のマスピンのレベルを定量すること；（ｂ）該化合物の投与の間又は後での時点で、該被検者に由来する生体試料中のマスピンのレベルを定量すること；及び（ｃ）治療の間又は後での該被検者に由来する生体試料中のマスピンのレベルを治療前のそれと比較することを含んでなり、ここで生体試料中のマスピンレベルの増加は、トリアゾロン化合物での治療に対する陽性応答の指標となる。
【０１２６】
上記態様のいずれにおいても、前立腺癌は、転移性前立腺癌、転移性ホルモン抵抗性前立腺癌、又は転移性去勢抵抗性前立腺癌、又はドセタキセルベースの化学療法で以前に治療された前立腺癌であってよい。上記態様のいずれにおいても、生体試料は、該被検者に由来する血清試料である。
【０１２７】
以下の実施例は、本明細書に記載の態様について例解することだけを企図するのであって、本発明の範囲を限定するものと決して解釈してはならない。
【実施例】
【０１２８】
実施例１：
材料と方法
ＬＮＣａＰ、ＶＣａＰ、２２Ｒｖ１、ＤＵ１４５、及びＰＣ３ヒト前立腺癌細胞系とＨｅＬａ細胞は、いずれも American Type Culture Collection（バージニア州マナッサス、アメリカ）より購入した。供給業者によって推奨される培養液を使用して、５％（ｖ／ｖ）ＣＯ２中３７℃での標準技術に従って、細胞を維持して培養した。ＲＡＦ１（Santa Cruz Biotechnology，カリフォルニア州サンタクルーズ、アメリカ）、ｐ−ＥＧＦＲ（Ｔｙｒ１０６８）（Invitrogen，カリフォルニア州カールスバッド、アメリカ）、及びアクチン（GE Healthcare，イギリス）を除いて、すべての一次抗体を Cell Signaling Technology（マサチューセッツ州ビバリー、アメリカ）より購入した。Ｈｓｐ９０阻害剤のガネテスピブと１７−ＡＡＧは、Synta Pharmaceuticals 社で合成した。メチルトリエノロン（Ｒ１８８１）は、パーキン・エルマー（マサチューセッツ州ボストン、アメリカ）より購入した。
【０１２９】
細胞生存度アッセイ
CellTiter-Glo 蛍光細胞生存度アッセイ（プロメガ、ウィスコンシン州マジソン、アメリカ）を製造業者のプロトコールに従って使用して、細胞生存度についてアッセイした。９６ウェルプレートに同一３検体で５ｘ１０３個の細胞／ウェルを播いてから２４時間後に、細胞に勾配濃度のガネテスピブ又は１７−ＡＡＧを７２時間投薬した。この細胞へ Cell Titer-Glo（５０％  ｖ／ｖ）を加えて、このプレートを１０分間インキュベートした後で、SpectraMax Plus 384 マイクロプレートリーダー（Molecular Devices，カリフォルニア州サニーベール、アメリカ）において蛍光検出をした。対照のパーセントに対してデータを正規化して、ＩＣ５０値を使用して、各細胞系の感度を定量した。
【０１３０】
ウェスタンブロッティング
前立腺癌細胞系をＲＩＰＡ緩衝液（Cell Signaling Technology，マサチューセッツ州ビバリー、アメリカ）に溶解させて、ＨｅＬａ細胞は、０．４Ｍ  ＮａＣｌを含有する１Ｘレポーター溶解緩衝液（プロメガ、ウィスコンシン州マジソン、アメリカ）を使用して、４ラウンドの凍結／融解によって溶解させた。溶解液を遠心分離によって澄明化させて、等量のタンパク質をＳＤＳ−ＰＡＧＥによって分割した後で、ニトロセルロース膜へ移した。この膜を、０．５％  Ｔｗｅｅｎ入りのＴＢＳ中５％スキムミルクでブロックして、指定の抗体で免疫ブロットした。Odyssey システム（LI-COR，ネブラスカ州リンカーン、アメリカ）を使用して、抗原−抗体複合体を可視化した。
【０１３１】
定量的ＲＴ−ＰＣＲ
ＬＮＣａＰ細胞を活性炭処理済み培地において２４時間培養してから、１０ｎＭメチルトリエノロン（Ｒ１８８１）の非存在又は存在下に２５０ｎＭガネテスピブ、１μＭゲルダナマイシン、又は担体（vehicle）で２４時間処理した。ＴＲＩｚｏｌ試薬（Invitrogen，ニューヨーク州グランドアイランド、アメリカ）を使用する後処理で、ＬＮＣａＰ細胞よりＲＮＡを調製した。既報の前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、膜貫通プロテアーゼ、セリン２（ＴＭＰＲＳＳ２）、及び１８Ｓプライマーのセットを標的遺伝子発現に使用して、ABI 7500 Fast の配列検出系においてＳＹＢＲグリーンＰＣＲ  Ｍａｓｔｅｒミックスを使用して分析した。例えば、Agoulnik et al（2006），Androgens modulate expression of transcription intermediary factor 2, an androgen receptor coactivator whose expression level correlates with early biochemical recurrence in prostate cancer［アンドロゲンは、その発現レベルが前立腺癌における早期の生化学的再発に相関するアンドロゲン受容体コアクチベータである、転写共役因子２の発現を調節する］Cancer Res 66 10594-10602 を参照のこと。ＰＳＡとＴＭＰＲＳＳ２のｍＲＮＡレベルを１８Ｓ  ｍＲＮＡの数値に対して正規化した。
【０１３２】
ＨｅＬａ細胞の一過性トランスフェクション
先に記載のようなポリＬ−リジン共役アデノウイルス媒介ＤＮＡ移入技術を使用して、ＨｅＬａ細胞を一過的にトランスフェクトした。例えば、Nazareth et al（1996），Activation of the human androgen receptor through a protein kinase A signaling pathway［プロテインキナーゼＡシグナル伝達経路を介したヒトアンドロゲン受容体の活性化］J Biol Chem 271 19900-19907 を参照のこと。使用したプラスミド構築体は、ｐＣＲ３．１−ＡＲ（全長ＡＲをコードする）とｐＣＲ３．１−Ｖ７（Ｖ７末端切断ＡＲアイソフォームをコードする。ベイラー医科大学、Manjula Nakka と William Krause より贈られた）であった。この発現試験のために、ＨｅＬａ細胞を３ｎｇのｐＣＲ３．１−ＡＲ又は０．５ｎｇのｐＣＲ３．１−Ｖ７で２４時間トランスフェクトした。細胞をＲ１８８１（１０ｎＭ）、ＧＡ（１μＭ）、及び／又はＳＴＡ９０９０（２５０ｎＭ）又は担体（エタノール及びＤＭＳＯ）で２４時間処理した後で、溶解と免疫ブロッティングをした。ＡＲと変異体の活性に対するＨｓｐ９０阻害剤の効果を判定するために、ＨｅＬａ細胞を２５０ｎｇのＧＲＥ−ルシフェラーゼ受容体、３０ｎｇのｐＣＲ３．１β−ガラクトシダーゼ、３ｎｇのｐＣＲ３．１−ＡＲ、又は０．０３ｎｇのｐＣＲ３．１−Ｖ７で一過的にトランスフェクトして、上記のように処理した。ルシフェラーゼ活性とβ−ガラクトシダーゼ活性を測定して、先に記載のように、ルシフェラーゼレベルをβ−ガラクトシダーゼレベルへ正規化した。例えば、Agoulnik et al（2003），Repressors of androgen and progesterone receptor action［アンドロゲン及びプロゲステロン受容体作用のレプレッサー］J Biol Chem 278 31136-31148 を参照のこと。
【０１３３】
フローサイトメトリー
細胞周期の分析のために、ＰＣ３細胞とＤＵ１４５細胞を６ウェルプレートにおいて０．３ｘ１０６個の細胞／５ｍＬで一晩播いてから、増加濃度のガネテスピブ（０〜５００ｎＭ）へ２４時間曝露した。細胞を採取して、BD Cycle TEST PLUS 試薬キット（BD Biosciences，カリフォルニア州サンホセ、アメリカ）を製造業者の説明書に従って使用して、ヨウ化プロピジウムで染色した。FACS Caliber サイトメーター（BD Biosciences，マサチューセッツ州ビレリカ、アメリカ）を使用して、２万個の細胞についてそのＤＮＡ含量を分析した。ＤＵ１４５細胞系におけるアポトーシスアッセイでは、細胞をガネテスピブ（１０、１００、又は５００ｎＭ）、１７−ＡＡＧ（５００又は１０００ｎＭ）又は対照（ＤＭＳＯ）で２４時間処理した。処理後、細胞を採取してフルオレセイン共役抗アネキシンＶ抗体（BD Biosciences）を使用して染色して、フローサイトメトリーによってアポトーシスを評価した。
【０１３４】
in vivo 前立腺異種移植片モデル
８週齢の雌性免疫不全ヌードマウス（チャールズ・リバー・ラボラトリーズ、マサチューセッツ州ウィルミントン）を病原体フリーの環境に維持して、すべての in vivo 手順は、Synta Pharmaceuticals 社の動物実験委員会（Institutional Animal Care and Use Committee）によって承認された。このヌードマウスへＰＣ３腫瘍細胞を皮下移植した。定着した腫瘍（１００〜２００ｍｍ３）を担うマウスを８匹の処理群へ無作為化して、担体又は１０／１８ＤＲＤ（１０％  ＤＭＳＯ，１８％  Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＲＨ４０，３．６％デキストロース、６８．４％水）に製剤化したガネテスピブのいずれかを尾静脈より静脈内投薬した。各腫瘍の幅（Ｗ）、長さ（Ｌ）、及び厚さ（Ｔ）のノギス測定値によって、式：Ｖ＝０．５２３６（ＬＷＴ）を使用して、腫瘍体積（Ｖ）を計算した。先に記載のように、腫瘍増殖阻害を判定した。例えば、Proia et al（2011），Multifaceted intervention by the Hsp90 inhibitor ganetespib（STA-9090）in cancer cells with activated JAK/STAT signaling［ＪＡＫ／ＳＴＡＴシグナル伝達が活性化された癌細胞におけるＨｓｐ阻害剤、ガネテスピブ（ＳＴＡ−９０９０）による多面的な介入］PLoS One 6 e18552 を参照のこと。
【０１３５】
実験結果
ガネテスピブは、アンドロゲン受容体状態に関係なく、前立腺癌細胞において細胞死を強力に誘発する
最初の検証は、前立腺癌細胞系のパネルを使用して、ガネテスピブの in vitro での増殖阻害効果に関して実施した。すべての事例において、ガネテスピブは、細胞生存度を用量依存的な様式で低下させて、第一世代のアンサマイシンＨｓｐ９０阻害剤、１７−ＡＡＧより強力であった（表１）。
【０１３６】
【表３】
2014507443.tif 000017
【０１３７】
ＡＲ陰性細胞系のＤＵ１４５及びＰＣ３において、７２時間での細胞傷害性ＩＣ５０値は、それぞれ１２ｎＭと７７ｎＭであった。ＡＲ陽性、アンドロゲン依存性の細胞系、ＬＮＣａＰ及びＶＣａＰは、ガネテスピブ曝露に対してより影響された（８ｎＭと７ｎＭのＩＣ５０値）。ＡＲ陽性であるが、アンドロゲン応答性はごく弱い２２Ｒｖ１細胞系は、ガネテスピブに対して最大の感受性（ＩＣ５０，２ｎＭ）を顕示した。これらのデータは、ガネテスピブによるＨｓｐ９０阻害が前立腺癌細胞系において、そのＡＲ状態にもアンドロゲン感受性にも関係なく、強力な細胞傷害効果を生じたことを証明する。
【０１３８】
ガネテスピブによる、前立腺癌細胞におけるＡＲ活性と多数の発癌シグナル伝達経路の同調阻害
標的化されたクライアントタンパク質の分解は、Ｈｓｐ９０阻害の特徴である。前立腺腫瘍進行に関連することが知られているＨｓｐ９０クライアントタンパク質における発現の変化を検証した。ＡＲ陽性ＬＮＣａＰ細胞をガネテスピブ又は１７−ＡＡＧで２４時間処理して、タンパク質レベルをウェスタンブロットによって定量した（図４）。ガネテスピブ処理は、強力で用量依存性のＡＲレベルの減少をもたらした。対照処理されたＬＮＣａＰ細胞では、ＡＲ染色が主に核へ区画化された。ガネテスピブ（１００ｎＭ）への４時間の曝露後、染色の強度は有意に減衰し、核局在化が失われて、微かな細胞質染色だけが検出可能であった。ＡＲ受容体発現のＨｓｐ９０指向性の喪失は、結果的に、ＡＲ指向性の遺伝子調節の抑制をもたらした。このことを示すために、ＬＮＣａＰ細胞を活性炭処理済培地において２４時間培養してから、アンドロゲン（Ｒ１８８１）の非存在又は存在下にガネテスピブ、ゲルダナマイシン（ＧＡ、１７−ＡＡＧが誘導される親化合物）、又は担体で２４時間処理した。ＡＲ特異的な転写活性の読取り値として、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）及び膜貫通プロテアーゼ、セリン２（ＴＭＰＲＳＳ２）のｍＲＮＡレベルを測定して、１８Ｓ  ｍＲＮＡ値に対して正規化した（図１８）。両方の遺伝子のアンドロゲン誘導性の発現により、Ｒ１８８１曝露は、対照細胞においてＰＳＡレベルとＴＭＰＲＳＳ２レベルを増加させた。この誘導は、いずれか一方のＨｓｐ９０阻害剤の存在下で有意に阻害された（＊ｐ＜０．００１）（図１８）。
【０１３９】
重要にも、ガネテスピブはまた、ＬＮＣａＰ細胞において、ＩＧＦ−ＩＲとリン酸化ＥＧＦＲ受容体（前立腺癌の発病との関連が以前示唆された）、並びに下流エフェクターのＡＫＴ及びｐ７０  Ｓ６Ｋの分解を誘導した（図４）。さらに、これらタンパク質レベルの低下には、ＰＡＲＰ切断（アポトーシスのマーカー）の同時増加が伴った。表１に示す感受性の差に一致して、ガネテスピブは、これら発癌タンパク質及びシグナル伝達経路の標的化された喪失を誘導するのに、１７−ＡＡＧと比べてより強力であった。
【０１４０】
構成的に活性なＡＲ変異体の発現は、ガネテスピブへの抵抗性を付与しない
選択的にスプライスされる末端切断型ＡＲアイソフォームの発現は、去勢抵抗性表現型の発現の１つの潜在的な機序である。例えば、Dehm et al（2008），Splicing of a novel androgen receptor exon generates a constitutively active androgen receptor that mediates prostate cancer therapy resistance［新規アンドロゲン受容体エクソンのスプライシングは、前立腺癌療法に対する抵抗性を媒介する構成的に活性なアンドロゲン受容体を産生する］Cancer Res 68 5469-5477 を参照のこと。例えば、２２Ｒｖ１細胞系は、全長ＡＲタンパク質だけでなく、カルボキシル末端のリガンド結合性ドメインを欠く構成的に活性な変異体を発現して、それによって外因性アンドロゲンに対するその依存性を低下させる。例えば、Hu et al（2009），Ligand-independent androgen receptor variants derived from splicing of cryptic exons signify hormone-refractory prostate cancer［潜在性エクソンのスプライシングより誘導されるリガンド非依存性アンドロゲン受容体変異体は、ホルモン難治性前立腺癌であることを示す］Cancer Res 69 16-22；Li et al（2011），Intragenic rearrangement and altered RNA splicing of the androgen receptor in a cell-based model of prostate cancer progression［前立腺癌進行の細胞ベースモデルにおけるアンドロゲン受容体の遺伝子内再構成と改変したＲＮＡスプライシング］Cancer Res 71 2108-2117。注目すべきことに、２２Ｒｖ１細胞は、ガネテスピブ処理の効果に対して急性的に影響されることが見出された（表１）。図１８に示すように、２５ｎＭ用量のガネテスピブでさえ、全長ＡＲの分解、ｐ−ＡＫＴ／ＡＫＴ活性の不安定化、及びアポトーシス（開裂したＰＡＲＰ）を引き起こすのに十分であった。対照的に、末端切断されたアイソフォーム（既知のＶ７変異体に対応する）の発現は、Ｈｓｐ９０阻害によってさほど影響されなかった（図１９）。この知見を拡張するために、全長受容体とＶ７受容体よりＨｅＬａ細胞への一過性トランスフェクションを行った（図２０）。アンドロゲン処理は、全長ＡＲの発現を２４時間で増加させて、この応答は、１ｍＭ  ＧＡ又は２５０ｎＭガネテスピブのいずれかの存在下で完全に無効にされた。いずれのＨｓｐ９０阻害剤も、アンドロゲン刺激の非存在下でＡＲの標的化された分解に有効であったが、いずれの阻害剤も、変異体受容体の発現を有意には変化させなかった（図２０）。同様に、ＧＡとガネテスピブは、全長ＡＲ活性を強く阻害したが、ルシフェラーゼアッセイによって示されるように、構成的なＶ７活性に対してさほど有効でなかった。末端切断型ＡＲアイソフォームは、Ｈｓｐ９０阻害に対してより影響されないように見えるが、この系におけるガネテスピブの強力な活性は、多数のシグナル伝達経路に対するその併発的な影響が、構成的に活性な変異体の発現によって提供される選択的な利点を克服することが可能であることを示唆する。
【０１４１】
ガネテスピブは、ＡＲ陰性前立腺癌細胞において多数の発癌性Ｈｓｐ９０クライアントタンパク質を阻害して、細胞死を引き起こした
アンドロゲン非依存性ＤＵ１４５細胞系は、ＡＲ受容体発現を欠いている。しかしながら、これら細胞の増殖及び生存は、そのリガンドによるＥＧＦＲの自己分泌活性化がもたらす、発癌性ＳＴＡＴ活性化を介して調節されると報告されてきた。例えば、Connolly et al（1991），Autocrine regulation of DU145 human prostate cancer cell growth by epidermal growth factor-related polypeptides［表皮増殖因子関連ポリペプチドによる、ＤＵ１４５ヒト前立腺癌細胞増殖の自己分泌調節］Prostate 19 173-180。さらに、この系はまた、ＪＡＫ／ＳＴＡＴシグナル伝達経路の持続的活性化をもたらす自己分泌ＩＬ−６サイトカインシグナル伝達ループを発現する。ガネテスピブは、ＥＧＦＲに効果的に標的化して、これらの細胞におけるＳＴＡＴ３シグナル伝達を用量依存的な様式で完全に無効にした（図６）。加えて、ｐ−ＡＫＴ、ＲＡＦ１、及びｐ−ＥＲＫ１／２により媒介されるＩＧＦ−ＩＲ及び下流のシグナル伝達経路も、ＬＮＣａＰ細胞において観測されるものと同様に、ガネテスピブ曝露に続いて不安定化された（図３）。開裂ＰＡＲＰ発現における相関的な増加は、これらシグナル伝達経路の同時遮断がアポトーシスの引き金になったことを示して、このことは、アネキシンＶ染色によってさらに裏付けられた（図３）。細胞を上昇用量のガネテスピブ又は１７−ＡＡＧで２４時間処理してから、フローサイトメトリーによって分析した。ガネテスピブ処理は、アポトーシス細胞の用量依存的な増加をもたらした。高用量の１７−ＡＡＧに続いてアポトーシス細胞の同等の比率が見られたが、この応答は、５００ｎＭの曝露レベルまでに飽和した。
【０１４２】
ガネテスピブによるＨｓｐ９０クライアントタンパク質分解の動態
Ｈｓｐ９０阻害に応答したクライアントタンパク質の喪失の動態についての実験も実施した。ＬＮＣａＰ細胞において、１００ｎＭガネテスピブ処理は、速やかに（３時間以内に）ＡＲ発現の測定可能な低下をもたらして、この効果は、４８時間の時間経過にわたって持続された（図７）。ｐ−ＡＫＴ／ＡＫＴの不安定化は、１８時間で生じる、比較的後の事象であって、その動態は、開裂ＰＡＲＰの上昇で観測されるものに適合した。興味深いことに、ガネテスピブはまた、Ｇ２／Ｍチェックポイントの重要な制御因子であるサイクリン依存性キナーゼ１（ＣＤＫ１）の全形態とリン酸化形態の両方の一時的な喪失を２４時間までに引き起こして、この効果は、少なくとも４８時間まで継続した（図７）。
【０１４３】
標的化されたＡＫＴ分解の動態は、ＡＲ陰性前立腺細胞系のＤＵ１４５及びＰＣ３でも同様であった（それぞれ、図８及び９）。ＤＵ１４５細胞では、ｐ−ＥＧＦＲ発現の有意な低下にもガネテスピブ又は１７−ＡＡＧのいずれかへの１８時間の曝露が必要とされた一方で、ＩＧＦ−ＩＲ及びｐ−ＳＴＡＴ３の不安定化は、６時間までに明白であった（図８）。ＬＮＣａＰ細胞と同様に、ＰＣ３前立腺細胞は、等しい用量の１７−ＡＡＧに比べて、ガネテスピブ処理の効果に対して有意により影響された（図９）。ＤＵ１４５の結果に一致して、ガネテスピブは、この系においてＩＧＦ−１Ｒレベルを６時間までに低下させて、４８時間の時間経過にわたって、この受容体の持続的な喪失が観測された。加えて、ＡＫＴ調節に先行する、ＲＡＦ１タンパク質発現の強力で時間依存的な低下も観測された（図９）。
【０１４４】
ガネテスピブによる細胞周期タンパク質発現の調節は、増殖停止とアポトーシスを引き起こす
ガネテスピブ処理が、発癌性シグナル伝達経路に加えて、細胞周期制御タンパク質に対して甚大な効果を発揮し得て、それがその抗腫瘍活性に寄与することがすでに報告された。Proia et al（2011），Multifaceted intervention by the Hsp90 inhibitor ganetespib (STA-9090) in cancer cells with activated JAK/STAT signaling［ＪＡＫ／ＳＴＡＴシグナル伝達が活性化された癌細胞におけるＨｓｐ阻害剤、ガネテスピブ（ＳＴＡ−９０９０）による多面的な介入］PLoS One 6 e18552 を参照のこと。細胞周期分析より、ガネテスピブ曝露がＤＵ１４５細胞とＰＣ３細胞の両方においてＧ２／Ｍ期での用量依存的な細胞蓄積をもたらして、Ｓ期の併発的な喪失を伴うことが明らかになった（図１）。両方の細胞系において、ＣＤＫ１、並びにＣＨＫ１（Ｇ２／Ｍチェックポイントの完全性に本質的な役割を担う別のキナーゼ）のタンパク質発現の対応する低下が観測された（図１０）。次に、アンドロゲン依存性ＶＣａＰ前立腺細胞において、発癌性シグナル伝達と細胞周期シグナル伝達の両方に対するガネテスピブの併発的な影響についてのより広汎な特性決定を実施した。ＬＮＣａＰ系において見られるように（図４）、これらの細胞のガネテスピブ処理は、ＡＲ及びＩＧＦ−ＩＲの分解を引き起こして、ｐ−ＡＫＴ／ＡＫＴレベルを用量依存的な様式で低下させた（図４）。加えて、ＣＤＫ１の全形態とリン酸化形態の両方の喪失が用量に応じて観測された。まとめると、これらのデータは、ガネテスピブによるＨｓｐ９０阻害の結果としての前立腺癌細胞における発癌性シグナル伝達の遮断にチェックポイント制御の喪失とＧ２／Ｍ停止が付随することを示唆する。さらに、我々は、リン酸化ヒストンＨ２ＡＸ及びＰＡＲＰ開裂の併発的な上昇を観測した（図４）。Ｈ２ＡＸのリン酸化形態は、ＤＮＡ二重鎖切断形成の鋭敏な指標であるので、上記のデータは、Ｇ２／Ｍ停止が後続のアポトーシスをもたらすことを示唆する。
【０１４５】
ガネテスピブは、アンドロゲン非依存性ＰＣ３腫瘍増殖を in vivo で阻害する
最後に、ＰＣ３腫瘍異種移植片の増殖に対する単剤ガネテスピブ処理の効力試験を実施して、ガネテスピブの強力な in vitro 効果が in vivo 腫瘍活性へ翻案されるかどうかを判定した。すでに、週１回投薬レジメンでのガネテスピブの最大無重篤毒性量（ＨＮＳＴＤ）は、１５０ｍｇ／ｋｇであると決定されている。Ying et al（2011），Ganetespib, a unique triazolone-containing Hsp90 inhibitor, exhibits potent antitumor activity and a superior safety profile for cancer therapy［独自のトリアゾロン含有Ｈｓｐ阻害剤であるガネテスピブは、強力な抗腫瘍活性と癌療法への優れた安全性プロフィールを示す］Mol Cancer Ther 2012; 11: 475-484 を参照のこと。図１２に示すように、このスケジュールで処理されたマウスは、対照動物に比較して、腫瘍体積の有意な減少を示した（Ｔ／Ｃ値：１７％）。この用量でも、そのレジメンは、十分忍容された。これらのデータは、ガネテスピブ処理がアンドロゲン非依存性の腫瘍増殖を有意に阻害し得ることを示す。
【０１４６】
短く要約すると、ガネテスピブ又は第一世代のＨｓｐ９０阻害剤、１７−ＡＡＧの有効性をホルモン依存性（ＬＮＣａＰ，２２Ｒｖ１）とホルモン非依存性（ＰＣ−３，ＤＵ−１４５）の両方のＰＣａ細胞系において検証した。ガネテスピブは、細胞のＡＲ状態に関係なく、低いナノモル濃度の活性を示して、ＩＣ５０は、１７−ＡＡＧより３〜７倍低かった。処理済の培養物において、ガネテスピブは、アポトーシス（アネキシンＶ陽性）細胞の集団を増加させて、その外観は、抗アポトーシスタンパク質、Ｍｃｌ−１の用量依存的な分解に並行した。これら細胞系のいずれにおいても、ガネテスピブ曝露によって、マスター細胞周期制御因子Ｃｄｋ１とＤＮＡ損傷チェックポイントタンパク質Ｃｈｋ１は、完全に不安定化された。このことがＧ２／Ｍにおける細胞停止をもたらした（図１〜１０）。興味深いことに、Ｃｈｋ１の下方調節に応答して、Ｃｈｋ２の別個のアイソフォームの発現が高められ、潜在的なフィードバックループが示唆された。いくつかのクライアントタンパク質（ＡＲ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＥＧＦＲ、ＲＡＦ１、及びＪＡＫ２）とＰＣａ進行の原因となるそれらのエフェクターの、ガネテスピブに応答した安定性についても評価すると、様々な動態であるにせよ、有意な分解／不活性化が観測された。ＰＣ３異種移植片をヌードマウスへ移植して、ガネテスピブ（週１回、１５０ｍｇ／ｋｇ又は週２回、５０ｍｇ／ｋｇ）で４週間の処理を続けた。ガネテスピブは、担体に対して強力な単剤活性を示して、％Ｔ／Ｃ値は、それぞれ１７、３であった（図１２）。結論として、ガネテスピブは、ＰＣａ細胞の増殖、生存、及び細胞分裂に必要とされる重要なシグナル伝達成分へ標的化するその能力により、前立腺癌細胞系のパネルにおいて前臨床活性を示した、きわめて強力なＨｓｐ９０阻害剤である。
【０１４７】
実施例２：ガネテスピブ及びドセタキセルの前立腺癌細胞における組合せ処理
材料及び方法
細胞系
ヒトＤＵ−１４５前立腺癌細胞（American Type Culture Collection）を４ｍＭ  Ｌ−グルタミン、抗生物質（ペニシリン  １００ＩＵ／ｍｌとストレプトマイシン  １００μｇ／ｍｌ）、及び１０％胎仔ウシ血清（Sigma Aldrich）入りのダルベッコ改良イーグル培地において増殖させた。３７℃、５％  ＣＯ２の雰囲気で細胞を維持した。
【０１４８】
細胞生存度アッセイ
アラマーブルー（alamarBlue）アッセイ（Invitrogen）を使用して、細胞生存度を測定した。簡潔に言えば、９６ウェルプレートに５０００個の細胞で、同一３検体で細胞を播いて、３７℃、５％  ＣＯ２の雰囲気で２４時間インキュベートしてから、薬物又は担体（０．３％  ＤＭＳＯ）を培養液へ加えた。７２時間後、ウェルへ１０μｌ／ウェルのアラマーブルーを加えて、３７℃、５％  ＣＯ２の雰囲気でさらに３時間インキュベートした。蛍光（５６０ＥＸ／５９０ＥＭｎＭ）をＳｐｅｃｔｒａＭａｘマイクロプレートリーダー（Molecular Devices）で測定して、得られるデータを使用して細胞生存度を計算して、担体対照へ正規化した。
【０１４９】
ドセタキセル及びガネテスピブでの組合せ試験
１μＭの最大濃度から出発する化合物の３倍連続希釈系列を使用して、ドセタキセル又はガネテスピブの半最大阻害濃度（ＩＣ５０）を決定した。薬物への７２時間の曝露の後で、細胞生存度を測定した。ＸＬＦｉｔソフトウェア（ID Business Solutions）を使用して、データを使用してＩＣ５０値を計算した。この結果より、図１４に示すように、ＤＵ−１４５細胞において、ガネテスピブは１４ｎＭのＩＣ５０を有して、ドセタキセルは１ｎＭのＩＣ５０を有する。次いで、各剤のＩＣ５０に基づいて、ドセタキセルとガネテスピブの間の組合せを同時に実施した。この組合せ薬物、並びに各薬剤単独を細胞とともに３日間インキュベートしてから、アラマーブルーアッセイを使用して、対照に対する生存細胞の割合を決定した。図１５に示すように、ガネテスピブとドセタキセルの組合せは、該化合物の低用量で、いずれか一方の薬剤単独に比べて増強された細胞傷害性を示した。
【０１５０】
次いで、この組合せ実験からのデータを使用して、メジアン効果分析ソフトウェアＣａｌｃｕＳｙｎ  ２．０（CalcuSyn 社）を使用して、併用指数値（combination index values）を導いた。次いで、図１７に示すように、正規化アイソボログラムを確定すると、大多数の組合せ点が相乗的であって、相加的な関係を確定する直線より上の点は、拮抗作用を反映することを示した。上記の実験は、前立腺癌の治療におけるドセタキセルとガネテスピブの組合せ療法の明瞭な相乗作用を示した（図１３〜１７）。
【０１５１】
本明細書に引用されるすべての特許公開公報、特許出願、特許、及び他の文献は、その全体において参照により組み込まれる。抵触が生じる場合は、諸定義を含めて、本特許明細書が基準となる。加えて、本明細書を通して、材料、方法、及び実施例は、例示に他ならず、限定的であることを決して企図しない。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【国際調査報告】
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