(57)【要約】  ヒト被験者における皮膚炎症は、薬学的に許容可能な担体及びＩＬ−１αに選択的に結合する薬剤の治療的有効量を含む医薬組成物を、被験者に投与することによって低減される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
被験体における皮膚炎症を治療するための、ＩＬ−１αに選択的に結合する薬剤を特徴とする使用。
【請求項２】
請求項１に記載の使用において、前記薬剤が、抗−ＩＬ−１α抗体であることを特徴とする使用。
【請求項３】
請求項２に記載の使用において、前記抗−ＩＬ−１α抗体が、モノクローナル抗体であることを特徴とする使用。
【請求項４】
請求項３に記載の使用において、前記モノクローナル抗体が、ＩｇＧ１であることを特徴とする使用。
【請求項５】
請求項３に記載の使用において、前記モノクローナル抗体が、ＭＡＢｐ１の相補性決定領域を含むことを特徴とする使用。
【請求項６】
請求項３に記載の使用において、前記モノクローナル抗体が、ＭＡＢｐ１であることを特徴とする使用。
【請求項７】
請求項１に記載の使用において、前記皮膚炎症が、尋常性座瘡に関連することを特徴とする使用。
【請求項８】
請求項１に記載の使用において、前記皮膚炎症が、尋常性乾癬に関連することを特徴とする使用。
【請求項９】
被験体における皮膚炎症を治療するための医薬組成物であり、前記医薬組成物が、ＩＬ−１αに選択的に結合する薬剤を含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項１０】
請求項９に記載の医薬組成物において、前記薬剤が、抗−ＩＬ−１α抗体であることを特徴とする医薬組成物。
【請求項１１】
請求項１０に記載の医薬組成物において、前記抗−ＩＬ−１α抗体が、モノクローナル抗体であることを特徴とする医薬組成物。
【請求項１２】
請求項１１に記載の医薬組成物において、前記モノクローナル抗体が、ＭＡＢｐ１の相補性決定領域を含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項１３】
請求項１２に記載の医薬組成物において、前記モノクローナル抗体が、ＭＡＢｐ１であることを特徴とする医薬組成物。
【請求項１４】
請求項９に記載の医薬組成物において、前記皮膚炎症が、尋常性座瘡に関連することを特徴とする医薬組成物。
【請求項１５】
請求項９に記載の医薬組成物において、前記皮膚炎症が、尋常性乾癬に関連することを特徴とする医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１１年４月１日に出願された米国仮特許出願第６１／４７０，５３８号明細書からの優先権を主張するものである。
【０００２】
連邦政府により支援された研究に関する声明
該当せず。
【０００３】
本発明は、全般的には、医学、皮膚病学、及び免疫学の分野に関する。より具体的には、本発明は、皮膚の炎症を低減するため並びに尋常性乾癬及び尋常性座瘡を含む炎症性皮膚疾患を治療するためのインターロイキン−１α（ＩＬ−１α）に特異的に結合する抗体（Ａｂｓ：ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）の使用に関する。
【背景技術】
【０００４】
炎症性皮膚疾患の座瘡、酒さ（赤鼻）、及び乾癬は、何百万人もの人々を悩ましている。これらは通常致命的ではないが、これらの病状は、肉体的不快感を引き起こし、情緒的な健康に影響を及ぼす。現在、コルチコステロイド類、ビタミンＤ同類体類、コールタール、紫外線、レチノイド類、メタトレキセート、シクロスポリン、ヒドロキシ尿素、抗生剤、及びＴＮＦα阻害剤等の生物学的薬剤を含む、炎症性皮膚疾患のための非常に多くの異なる治療法がある。これら療法は多くの患者に有用であることは証明されているが、望ましくない副作用を引き起こし、全ての病状に適するものはない。
【発明の概要】
【０００５】
本発明は、ＩＬ−１αに特異的に結合するｍＡｂが皮膚の炎症を低減するために並びに尋常性乾癬及び尋常性座瘡を含む炎症性皮膚疾患を治療するために有用であるという発見に基づく。ＩＬ−１αレベルが乾癬性皮膚において減少するという過去の報告（例えば、Ｂｏｎｉｆａｔｉら著、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｒｅｇｕｌ  Ｈｏｍｅｏｓｔ  Ａｇｅｎｔ．１９９７年１０月〜１２月；１１（４）：１３３−６）及び乾癬の発症における原因物質としてのアナキンラ（ＩＬ−１受容体拮抗薬）を示唆する報告（Ｇｏｎｚａｌｅｚ−Ｌｏｐｅｚら著、Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，１５８：１１４６−１１４８，２００８年）を含む多くの理由のために、この発見は意外なものであった。
【０００６】
したがって、本発明は、ヒト被験者における皮膚の炎症を低減する方法を特徴とする。この方法は、被験者において皮膚炎症を低減するために効果的な、薬学的に許容可能な担体及びＩＬ−１αに選択的に結合する薬剤の量を含む医薬組成物を被験者に投与するステップを含むことができる。この薬剤は、モノクローナル抗体（例えば、ＩｇＧ１イソタイプの）、ＭＡＢｐ１の相補性決定領域を含むモノクローナル抗体、又はＭＡＢｐ１等の抗−ＩＬ−１α抗体であり得る。この皮膚炎症は、尋常性座瘡及び／又は尋常性乾癬に関連し得る。
【０００７】
例えば、本発明の一態様は、任意の標準皮膚医学試験によって測定されるような、被験者における皮膚炎症の症状（例えば、発赤、腫れ、白血球侵潤、又は病巣の発達）を、少なくとも約１０％まで（例えば、少なくとも８、９、１０、１５、１７、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、又は１００％）低減するために効果的な、薬学的に許容可能な担体及び抗−ＩＬ−１αＡｂ（又はＩＬ−１αに特異的及び／又は選択的に結合する他の薬剤）の量を含む医薬組成物を被験者に投与することによって、ヒト被験者の皮膚炎症を低減する方法を特徴とする。この抗−ＩＬ−１αＡｂは、ＩｇＧ１等のｍＡｂであり得る。抗―ＩＬ−１αＡｂは、ＭＡＢｐ１として示されるｍＡｂ又はＭＡＢｐ１の１つ以上の相補性決定領域（ＣＤＲｓ：ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｉｔｙ  ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ  ｒｅｇｉｏｎｓ）を含むｍＡｂであることができる。この皮膚炎症は、座瘡又は乾癬に関連し得る。この医薬組成物は、皮下、静脈内、筋肉内、又は皮内注射によって被験者に投与され得る。この方法において、投与量は少なくとも０．２５（例えば、少なくとも０．２、０．５、０．７５、１、２、３、４、又は５）ｍｇ／ｍｌであり得る。
【０００８】
他の態様では、本発明は、被験者における皮膚炎症を処置するためのＩＬ−１αに選択的に結合する薬剤及び被験者における皮膚炎症を治療するための医薬組成物の使用を含み、この医薬組成物は、ＩＬ−１αに選択的に結合する薬剤を含む。前述において、この薬剤は、モノクローナル抗体（例えば、ＩｇＧ１イソタイプの）、ＭＡＢｐ１の相補性決定領域を含むモノクローナル抗体、又はＭＡＢｐ１等の抗−ＩＬ−１α抗体であり得、皮膚炎症は、尋常性座瘡及び／又は尋常性乾癬に関連し得る。
【０００９】
異なる旨を特記しない限り、本明細書で使用される全ての技術用語は、本発明が属する当該技術分野の当業者によって一般的に理解されるものと同一の意味を有する。生物学的用語の一般的に理解される定義は、Ｒｉｅｇｅｒら著、Ｇｌｏｓｓａｒｙ  ｏｆ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ：Ｃｌａｓｓｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ，第５版、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９１年；及びＬｅｗｉｎ著、Ｇｅｎｅｓ  Ｖ，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９４年で見ることができる。医学用語の一般的に理解される定義は、Ｓｔｅｄｍａｎ’ｓ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ，第２７版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，２０００年で見ることができる。
【００１０】
本明細書で使用するとき、「抗体」又は「Ａｂ」とは、免疫グロブリン（Ｉｇ）、同一又は異種のＩｇｓ、若しくはＩｇｓの混合物の溶液である。「Ａｂ」はまた、Ｆａｂ、Ｆａｂ’及びＦ（ａｂ’）２断片；並びにｓｃＦｖ’ｓ等の断片及び操作されたＩｇｓの変種、ヘテロ結合Ａｂｓ、並びに抗原特異性を付与するためにＩｇ由来のＣＤＲｓを使用する同様な人工分子も指す。「モノクローナル抗体」又は「ｍＡｂ」とは、１つのクローンＢ細胞系によって発現されたＡｂ又は特定の抗原の特定のエピトープと免疫反応することが可能な抗原結合部位の１つの種のみを含有するＡｂ分子の集団である。「ポリクローナルＡｂ」とは、異種Ａｂｓの混合物である。典型的には、ポリクローナルＡｂは、特定の抗原を、抗原の異なるエピトープと免疫反応する少なくともいくつかの異なるＡｂｓと結合させる無数の異なるＡｂ分子を含み得る。本明細書で使用するとき、ポリクローナル抗体Ａｂとは、２つ又はそれ以上のｍＡｂｓの混合物であり得る。
【００１１】
Ａｂの「抗原結合部分」とは、ＡｂのＦａｂ部分の可変領域内に含まれ、これは抗原特異性をＡｂに付与するＡｂの部分（即ち、典型的には、Ａｂの重鎖及び軽鎖のＣＤＲｓによって形成される三次元ポケット）である。「Ｆａｂ部分」又は「Ｆａｂ領域」とは、パパインで消化したＩｇのタンパク質分解性断片で、そのＩｇの抗原結合部分を含有するものである。「非Ｆａｂ部分」とは、Ｆａｂ部分内にはないＡｂの部分であり、例えば、「Ｆｃ部分」又は「Ｆｃ領域」である。Ａｂの「不変領域」とは、可変領域の外側のＡｂの部分である。不変領域内に一般的に包含されるものは、Ａｂの「エフェクタ部分」であり、これは、免疫応答を促進する他の免疫系成分に結合する役割を果たすＡｂの部分である。したがって、例えば、補体成分又はＦｃ受容体に結合する（その抗原結合部分を介することなく）Ａｂ上の部位は、そのＡｂのエフェクタ部分である。
【００１２】
Ａｂ等のタンパク質分子を指すとき、「精製された」とは、かかる分子に天然状態で随伴する成分から分離されていることを意味する。典型的には、非Ａｂタンパク質又は天然状態で付随する他の天然の有機分子を含まず、Ａｂ又はタンパク質が重量で少なくとも約１０％（例えば、９％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９８％、９９％、９９．９％、及び１００％）である場合、Ａｂ又はタンパク質は精製されている。純度は、任意の適切な方法、例えば、カラムクロマトグラフィー法、ポリアクリルアミドゲル電気泳動法、又はＨＰＬＣ分析法によって測定され得る。化学的に合成されたタンパク質又は天然に生じた細胞型以外の細胞型において生成された他の組換え体タンパク質も「精製される」。
【００１３】
「結合」、「結合する」、又は「反応する」とは、試料中で１つの分子が特定の第２の分子を認識しそれに付着するが、その試料中で他の分子を実質的に認識せず又は付着しないことを意味する。一般的に、別の分子に「特異的に結合する」Ａｂは、他の分子に関して、約１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１０１０、１０１１、又は１０１２リットル／モルを超えるＫｄを有する。第１の分子に「選択的に結合する」Ａｂは、第１のエピトープでこの第１の分子に特異的に結合するが、この第１のエピトープを有さない他の分子には特異的に結合しない。例えば、ＩＬ−１αに選択的に結合するＡｂは、ＩＬ−１α上のあるエピトープに特異的に結合するが、ＩＬ−１β（このエピトープを有さない）には特異的に結合しない。
【００１４】
「治療的有効量」とは、処置された動物又はヒトにおいて医学的に望ましい効果（例えば、疾患又は疾患の症状の軽減又は予防）を発揮することが可能な量である。
【００１５】
本明細書に記載されるものと同様又は等価な方法及び材料が、本発明の試験又は実施において使用され得るが、好適な方法及び材料は以下に記載されている。本明細書に記載される全ての出願及び出版物は、その全体が参照により組み込まれる。コンフリクトの場合には、定義を含めた本明細書が優先するだろう。これに加えて、以下に説明される特定の実施形態は、例示にすぎず、限定的であることを意図してはいない。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本発明は、被験者における皮膚科的病理の１つ以上の症状を軽減することを含む皮膚炎症を低減するための組成物及び方法を包含する。以下に記載される好ましい実施形態は、これら組成物及び方法の適応を例示する。しかしながら、これら実施形態の記載から、以下に提供された記載に基づいて、本発明の他の態様を実施し及び／又は実行することができる。
【００１７】
一般的方法
従来の免疫学的及び分子生物学的技法を含む方法が本明細書で記載される。免疫学的方法（例えば、抗原−Ａｂ複合体の検出及び位置確認のためのアッセイ、免疫沈降法、イムノブロッティング等）は、一般的に当該技術分野で既知であり、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、Ｃｏｌｉｇａｎら著、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ等の方法論学術論文に記載されている。分子生物学の技法は、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，第２版、第１〜３巻、Ｓａｍｂｒｏｏｋら編集、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ編集，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．，２００１年；及びＣｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ａｕｓｕｂｅｌら編集、Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  ａｎｄ  Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ等の学術論文に詳細に記載されている。Ａｂ法は、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ａｂｓ，Ｄｕｂｅｌ，Ｓ．編集，Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，２００７年に記載されている。医学的処置の一般法は、ＭｃＰｈｅｅ及びＰａｐａｄａｋｉｓ著，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ２０１０年，第４９版，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｍｅｄｉｃａｌ，２０１０年；及びＦａｕｃｉら著，Ｈａｒｒｉｓｏｎ‘ｓ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，第１７版，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ，２００８年に記載されている。皮膚病学における方法は、Ｊａｍｅｓら著，Ａｎｄｒｅｗｓ’  Ｄｉｓｅａｓｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｓｋｉｎ：Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ−Ｅｘｐｅｒｔ  Ｃｏｎｓｕｌｔ，第１１版，Ｓａｕｎｄｅｒｓ著，２０１１年；及びＢｕｒｎｓら著，Ｒｏｏｋ’ｓ  Ｔｅｘｔｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，第８版，Ｗｉｌｅｙ−Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ，２０１０年に記載されている。
【００１８】
皮膚炎症の治療
本明細書に記載の組成物及び方法は、哺乳類被験体における皮膚炎症（例えば、酒さ、湿疹、乾癬、乾燥症、皮膚炎、座瘡、壊疽性膿皮症、蕁麻疹、類苔癬病、水疱性類天疱瘡等の水疱性疾患、皮膚血管炎、及び肉芽腫性皮膚疾患）を治療するために有用であり、この方法は、被験体の炎症の少なくとも１つの特性を改善する（例えば、病巣の数又は寸法における低減、発赤の低減、及び痒みの低減）ために効果的な抗−ＩＬ−１αＡｂの量を含む医薬組成物を被験体に投与することによる。哺乳類被験体は、ヒト、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、及びブタを含む皮膚炎症を患ういずれかであり得る。ヒト被験者は、男性、女性、成人、子供、年長者（６５歳以上）、及び他の疾患を有するヒトである。特に好ましい被験者は、レチノイド、抗生剤、ステロイド又はＴＮＦα阻害剤等のサイトカイン阻害剤等の他の抗炎症剤又は抗菌剤による治療後に彼らの疾患が進行したか又はこれらに反応しなかった被験者である。抗−ＩＬ−１αＡｂが、ＭＡＢｐ１等の真のヒトＡｂである場合（例えば、ヒト被験者において天然に発現されるもの）、治療用抗体の過去の投与のためにヒトの抗ヒト抗体応答を発症した被験者が好ましい。抗−ＩＬ−１αＡｂによる治療に感受性を示すいかなるタイプの炎症性皮膚疾患も標的にされ得る。抗−ＩＬ−１αＡｂの投与は、尋常性座瘡及び尋常性乾癬を治療するために特に有効であると考えられる。
【００１９】
ＩＬ−１αを標的にする抗体及び他の薬剤
ＩＬ−１αに特異的に結合しかつ被験体において皮膚炎症の特徴及び／又は尋常性座瘡又は尋常性乾癬等の炎症性皮膚疾患を低減する任意の好適なタイプのＡｂが、本発明において使用され得る。例えば、使用される抗−ＩＬ−１αＡｂは、ｍＡｂ、ポリクローナルＡｂ、ｍＡｂｓの混合物、若しくはＡｂ断片又はｓｃＦｖ等の操作されたＡｂ様分子であり得る。ＡｂのＫａは、少なくとも１×１０９Ｍ−１又はそれより大きい（例えば、９×１０１０Ｍ−１、８×１０１０Ｍ−１、７×１０１０Ｍ−１、６×１０１０Ｍ−１、５×１０１０Ｍ−１、４×１０１０Ｍ−１、３×１０１０Ｍ−１、２×１０１０Ｍ−１、又は１×１０１０Ｍ−１を超える）ことが好ましい。好ましい実施形態では、本発明は、（ｉ）ヒトＩＬ−１αに対して非常に高い結合親和性（例えば、少なくともナノモル又はピコモルの）を呈する抗原結合可変領域及び（ｉｉ）不変領域を含有する完全なヒトｍＡｂを利用する。ヒトＡｂは、ＩｇＧ１であることが好ましいが、これはＩｇＭ、ＩｇＡ、又はＩｇＥ等の異なるイソタイプのもの、若しくはＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４等のサブクラスのものであってもよい。特に有用なｍＡｂの一例はＭＡＢｐ１であり、これは２００９年６月１日に出願された米国特許出願第１２／４５５，４５８号明細書に記載されるＩＬ−１αに特異的なＩｇＧ１  ｍＡｂである。他の有用なｍＡｂｓは、ＭＡＢｐ１の少なくとも１つのＣＤＲｓを含有するが、好ましくはＭＡＢｐ１の全てのＣＤＲｓを含有するようなｍＡｂｓである。
【００２０】
ヒトＩＬ−１αに特異的なＩｇを発現するＢリンパ球は、ヒトにおいて自然に生じるために、ｍＡｂｓを発生させる現在好まれている方法は、まず初めに被験者からかかるＢリンパ球を単離し、次いでこれが培養中で連続して複製され得るように不死化することである。ヒトＩＬ−１αに特異的なＩｇを発現する、多数の自然発生するＢリンパ球が欠乏する被験者は、かかるＢリンパ球の数を増加させるために、１つ以上のヒトＩＬ−１α抗原で免疫化されてもよい。ヒトｍＡｂｓは、ヒトＡｂ分泌細胞（例えば、ヒト血漿細胞）を不死化することによって調製される。例えば、米国特許第４，６３４，６６４号明細書を参照されたい。
【００２１】
例示的方法において、１人以上の（例えば、５、１０、２５、５０、１００、１０００人又はそれ以上の）ヒト被験者が、彼らの血液中のかかるヒトＩＬ−１αに特異的なＡｂの存在についてスクリーニングされる。次いで所望のＡｂを発現するこれら被験者が、Ｂリンパ球ドナーとして用いられることができる。１つの可能な方法において、ヒトＩＬ−１αに特異的なＡｂを発現するＢリンパ球を所有するヒトドナーから末梢血液が採取される。かかるＢリンパ球は、次いで、ヒトＩＬ−１αに特異的なＩｇを発現するＢリンパ球を選択するために、例えば細胞選別法（例えば、蛍光活性化細胞選別法、「ＦＡＣＳ（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ  ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｃｅｌｌ  ｓｏｒｔｉｎｇ）」、又は磁気ビーズ細胞選別法）によって血液試料から単離される。次いで、これら細胞は、既知の技法に従って、ウイルス形質転換（例えば、ＥＢＶを使用して）によって、又はヒト骨髄腫等の別の不死化細胞に融合することによって不死化され得る。ヒトＩＬ−１αに特異的なＩｇを発現するこの集団内のＢリンパ球が、次いで限界希釈法によって単離され得る（例えば、ヒトＩＬ−１αに特異的なＩｇに関して陽性であるマイクロタイタープレートのウェル内の細胞が選択され、継代培養され、所望のクローン細胞系が単離され得るまで、このプロセスが繰り返される）。例えば、Ｇｏｄｉｎｇ著、ＭＡｂｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，５９−１０３頁，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，１９８６年を参照されたい。ヒトＩＬ−１αに対して少なくともナノモル又はピコモルの結合親和性を有するＩｇを発現するこれらクローン細胞系が好ましい。これらクローン細胞系によって分泌されたＭＡｂｓは、塩カット、サイズ排除、イオン交換分離、及び親和性クロマトグラフィー等の従来のＩｇ精製法によって、培養基又は体液（例えば、腹水）から精製され得る。
【００２２】
不死化Ｂリンパ球は、ｍＡｂｓを直接的に生成するために、インビトロ培養において使用され得るが、ある場合には、異種発現システムを使用してｍＡｂｓを生成することが望ましい可能性がある。例えば、米国特許出願第１１／７５４，８９９号明細書に記載される方法を参照されたい。例えば、ヒトＩＬ−１αに特異的なｍＡｂをコード化する遺伝子がクローンされ、異種宿主細胞（例えば、ＣＨＯ細胞、ＣＯＳ細胞、骨髄腫細胞、及び大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）細胞）中での発現のために、発現ベクター（例えば、プラスミド系発現ベクター）に導入されることもできる。Ｉｇｓは重（Ｈ）鎖及び軽（Ｌ）鎖をＨ２Ｌ２構造で含有するために、それぞれをコード化する遺伝子が別個に単離され、異なるベクターにおいて発現され得る。
【００２３】
被験者が抗−Ａｂ応答を発症する可能性がより高いために、通常あまり好ましくないが、異なる動物種に由来の異なる部分を有する（例えば、ヒトＩｇの不変領域に融合されたマウスＩｇの可変領域）抗原結合分子であるキメラｍＡｂｓ（例えば、「ヒト化」ｍＡｂｓ）が、本発明で使用されてもよい。かかるキメラＡｂｓは、当該技術分野で既知の方法によって調製され得る。例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎら著，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１，１９８４年；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒら著，Ｎａｔｕｒｅ，３１２：６０４，１９８４年；Ｔａｋｅｄａら著，Ｎａｔｕｒｅ，３１４：４５２，１９８４年を参照されたい。同様に、Ａｂｓは、当該技術分野で既知の方法によってヒト化され得る。例えば、所望の結合特異性を備えるｍＡｂｓは、種々の製造販売業者によって、若しくは米国特許第５，６９３，７６２号明細書、同第５，５３０，１０１号明細書、又は同第５，５８５，０８９号明細書に記載されるようにヒト化され得る。
【００２４】
本明細書に記載のｍＡｂｓは、ＶＨ及びＶＬドメインシャッフリング（Ｍａｒｋｓら著，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：７７９−７８３，１９９２年）、高度可変領域（ＨＶＲｓ：ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅ  ｒｅｇｉｏｎｓ）及び／又はフレームワーク残基のランダム突然変異生成（Ｂａｒｂａｓら著，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９１：３８０９−３８１３，１９９４年；Ｓｃｈｉｅｒら著，Ｇｅｎｅ  １６９：１４７−１５５，１９９５年；Ｙｅｌｔｏｎら著，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５５：１９９４−２００４年，１９９５年；Ｊａｃｋｓｏｎら著，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５４（７）：３３１０−９，１９９５年；及びＨａｗｋｉｎｓら著，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２６：８８９−８９６，１９９２年）等の既知の方法によって、これらの結合特異性を増強又は別の方法で変更するために、親和性成熟されてもよい。Ａｂのアミノ酸配列変異体は、Ａｂをコード化するヌクレオチド配列に適切な変化を導入することによって調製され得る。これに加えて、ｍＡｂｓをコード化する核酸配列への修飾は、ある発現システムにおけるｍＡｂの生成を増強させるために、（例えば、ｍＡｂのアミノ酸配列を変更することなく）改変され得る（例えば、所与の発現システムに対するイントロン削除及び／又はコドン最適化）。本明細書に記載のｍＡｂｓは、別のタンパク質（例えば、別のｍＡｂ）又は非タンパク質分子への抱合によって修飾されることができる。例えば、ｍＡｂは、ポリエチレングリコール等の水溶性ポリマー又はカーボンナノチューブに抱合され得る（例えば、Ｋａｍら著，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １０２：１１６００−１１６０５，２００５年を参照）。米国特許出願第１１／７５４，８９９号明細書を参照されたい。
【００２５】
好ましくは、ヒトＩＬ−１αに特異的なｍＡｂの高力価が、最低限の副作用で被験者に投与され得ることを保証するために、本発明のｍＡｂ組成物は、少なくとも０．５、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０、９５、９６、９７、９８、９９、９９．９重量％又はそれ以上の重量％で純粋（いずれの賦形剤も排除して）である。本発明のｍＡｂ組成物は、単一タイプのｍＡｂ（即ち、単一のクローンＢリンパ球系から生成されたｍＡｂ）のみを含有してもよく、又は２つ又はそれ以上の（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個又はそれ以上の）異なるタイプのｍＡｂｓの混合物を含有してもよい。
【００２６】
ヒトＩＬ−１α  ｍＡｂｓの機能を変更又は増強するために、ヒトＩＬ−１α  ｍＡｂｓは、サイトトキシン等の別の分子と抱合されてもよい。ヒトＩＬ−１αに特異的なｍＡｂは、１つ以上のサイトトキシンと抱合され、ＩＬ−１αを発現する細胞をより効果的に殺傷する。本発明での使用のためのサイトトキシンは、ヒトＩＬ−１αに特異的なｍＡｂに抱合され得る任意の細胞障害剤（例えば、細胞と接触後にその細胞を殺傷することが可能な分子）であることができる。サイトトキシンの例としては、限定されるものではないが、放射線核種（例えば、３５Ｓ、１４Ｃ、３２Ｐ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、９０Ｙ、８９Ｚｒ、２０１Ｔｌ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、５７Ｃｕ、２１３Ｂｉ、及び２１１Ａｔ）、結合放射線核種、及び化学療法剤が挙げられる。サイトトキシンの更なる例としては、低代謝剤（例えば、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、メトトレキサート（ＭＴＸ）、フルダラビン等）、抗微小管剤（例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、タキサン（パクリタキセル及びドセタキセルなどの）等）、アルキル化剤（例えば、シクロホスファミド、メルファラン、ビスクロロエチルニトロソウレア（ＢＣＮＵ）等）、プラチナ剤（例えば、シスプラチン（ｃＤＤＰとも呼ばれる）、カルボプラチン、オキサリプラチン、ＪＭ−２１６、ＣＩ−９７３等）、アントラサイクリン（例えば、ドキソルビシン、ダウノルビシン等）、抗生剤（例えば、ミトマイシン−Ｃ）、トポイソメラーゼ阻害剤（例えば、エトポシド、テノポシド、及びカンプトテシン）、或いはリシン、ジフテリア毒（ＤＴ）、シュードモナス外毒素（ＰＥ）Ａ、ＰＥ４０、アブリン、サポリン、アメリカヤマゴボウウイルスタンパク質、臭化エチジウム、グルココルチコイド、炭疽毒素及びその他の他の細胞障害剤が挙げられるが、これらに限定されない。例えば、米国特許第５，９３２，１８８号明細書を参照されたい。
【００２７】
上記記載のＩＬ−１αに特異的なＡｂｓは、本発明における使用に好ましいが、場合によっては、ＩＬ−１αを特異的に標的とする他の薬剤が、それらの投与が炎症性皮膚疾患の特性の改善に導く限りにおいて、使用されてもよい。これら他の薬剤としては、抗−ＩＬ−１α  Ａｂｓの生成を引き起こすワクチン、ＩＬ−１αに結合するタンパク質又はペプチド、及びＩＬ−１αを特異的に標的とする小有機分子を挙げることができる。ＩＬ−１βを特異的に標的とする他の薬剤に特異的に結合しないものが好ましい。
【００２８】
医薬組成物及び方法
抗−ＩＬ−１α  Ａｂ組成物（及びＩＬ−１αを特異的に標的とする他の薬剤）は、投与のモード及び経路並びに標準的薬務を基準として選択される薬学的に許容可能な担体（例えば、無菌生理食塩水）中で、動物又はヒトに投与され得る。薬学的に許容可能な担体、並びに医薬処方物の列挙は、本分野における標準的なテキストであるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓで、又はＵＳＰ／ＮＦで見ることができる。他の物質がこの組成物に添加されてもよく、この組成物を安定化し及び／又は保存するために、及び／又は被験体へのそれらの投与を容易にするために、他のステップが取り入れられてもよい。
【００２９】
例えば、Ａｂ組成物は、凍結乾燥されてもよく（Ｄｒａｂｅｒら著，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ．１８１：３７，１９９５年；及びＰＣＴ／ＵＳ９０／０１３８３号明細書を参照）、ナトリウム及び塩化物イオンを含有する溶液中に溶解され、アルブミン、グルコース、マルトース、スクロース、ソルビトール、ポリエチレングリコール、及びグリシン等の１つ以上の安定化剤を含有する溶液中に溶解され、濾過され（例えば、０．４５及び／又は０．２ミクロンのフィルターを使用して）、β−プロピオラクトンと接触され、及び／又は殺菌剤（例えば、洗剤、有機溶媒、及び洗剤と有機溶媒の混合物）を含有する溶液に溶解されてもよい。
【００３０】
Ａｂ組成物は、任意の好適な技法によって、動物又はヒトに投与され得る。典型的には、かかる投与は、非経口（例えば静脈内、皮下、筋肉内、又は腹腔内投入）であるだろう。この組成物はまた、例えば、局所塗布によって標的部位（例えば、皮膚）に直接的に投与されてもよい。送達の他の方法、例えば、リポソーム送達又はこの組成物で含浸させたデバイスから拡散が、当該技術分野で既知である。この組成物は、単回ボーラスで、複数回注射で、又は連続輸注によって（例えば静脈内で又は腹腔透析によって）投与され得る。
【００３１】
治療的有効量は、処置された動物又はヒトで医学的に望ましい結果を生むことが可能な量である。抗−ＩＬ−１α  Ａｂ組成物の有効量は、皮膚炎症の１つ以上の症状における改善によって測定されるような、患者における臨床的有効性を示す量である。医学分野で周知のように、任意の１匹の動物又は１人のヒトのための投与量は、被験体のサイズ、体表面積、年齢、投与される特定の組成物、性別、投与の時間及び経路、全身の健康状態、及び同時に投与される他の薬剤を含む多くの因子に依存する。好ましい投与量は、約０．１〜５（例えば、０．０５、０．１、０．１５、０．２、０．３、０．４、０．５、１、２、３、４、５、又は６）ｍｇ／ｋｇ体重の範囲である。場合によっては、単回投与が皮膚炎症の発症の解決で有効である。他の場合には、投与は、必要に応じて（皮膚の炎症が繰り返す場合は）、例えば半週、毎週、週２回、週３回、半月、３週毎に１回、毎月、隔月で繰り返して行われる。
【００３２】
実施例
実施例１−Ｘｉｌｏｎｉｘ（商標）
Ｘｉｌｏｎｉｘ（商標）は、安定化等張緩衝液（ｐＨ６．４）中の１５ｍｇ／ｍＬのＭＡＢｐ１の無菌の注射可能な液体処方物である。５ｍＬの処方物を含有する各１０ｍＬのタイプＩホウケイ酸ガラス製血清バイアルを、２０ｍｍのＤａｉｋｙｏ  Ｆｌｕｒｏｔｅｃブチルゴムストッパ及びフリップオフアルミニウムシールで密閉する。生成物を、室温までの可動域が許容されて、５±３℃で保管する。薬剤生成物の正確な組成を以下に示す。
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【００３３】
投与の方法
好適な注射器を使用して、計算された容量を薬剤（ｍＡｂ）含有バイアル（複数可）から吸引する。次いで、薬剤を被験者に皮下注射する。
【００３４】
実施例２−尋常性座瘡の治療
１８歳の男性は、患者の腕、背中、胸及び顔に発症する中等度〜重度の尋常性座瘡を発現した。特に背中に病変部の著しい硬変があった。患者は、これが急性的に発生したと説明したが、１５歳からの進行性尋常性座瘡疾患と報告された。局所的レチノイド及びコルチコステロイドがある程度の効果で過去に使用された。更に日焼け促進器具の使用による限定的ＵＶ治療を用いたが、結果は限定的であった。患者に、Ｘｉｌｏｎｉｘ（商標）（ＭＡＢｐ１；１５ｍｇ／ｍｌ）の単回３ｍｌの皮下注射（０．６ｍｇ／ｋｇの投与量を示す）を投与した。
【００３５】
患者を注入後２時間観察した。明確な注入反応、又は薬剤に対する有害反応はなかった。２４時間後、患者を再評価した。肩及び背中上の大きな病変部は、大きさで劇的に減少した。顔面病変部の炎症性浸潤の減少は、投与前と比べての病変部のより少ない発赤及び減少した病変部サイズによって立証された。病変部は乾燥しているように見えた。
【００３６】
７２時間後に、患者を再試験した。改善は驚くべきものであった。大部分の病変部では炎症が劇的に減少し、或いは多くが完全に見えなくなった。著しい硬変を有した肩及び背中の病変部は回復し、僅かに変色し感触が柔らかいだけであった。患者の顔面は、殆ど完全に正常に見え、患者は彼の皮膚の外見に非常に満足であると述べた。注射後１週間で、患者は継続的改善を示し、皮膚の全ての領域には顕著な病変部がないように見えた。
【００３７】
実施例３−皮下注射のためのＭＡＢｐ１の処方物
Ｔ２−１８Ｃ３は、安定化等張処方物緩衝液（ｐＨ  ６．４±０．１）中の１００±５ｍｇ／ｍＬのＭＡＢｐ１の無菌液体処方物である。１．４±０．１ｍＬのこの処方物を、２０ｍｍのＤａｉｋｙｏ  Ｆｌｕｒｏｔｅｃブチルゴムストッパ及びフリップオフアルミニウムシールで密閉した２ｍＬのタイプＩホウケイ酸ガラス血清バイアル中に封入した。この生成物を室温までの可動域が許容されて、５±３℃で、直立で保管した。薬剤生成物の正確な組成を、以下の表２に示す。
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【００３８】
実施例４−乾癬の治療
Ｉ型尋常性乾癬の既往歴を有する（５歳で診断された）４８歳の男性を、Ｔ２−１８Ｃ３で処置した。患者は、彼の兄弟姉妹、父親、及び祖母が同様に発症して、尋常性乾癬の陽性の家族歴を有した。患者は、局所的レチノイド及びビタミンＤ３調製物で、以前に治療されていたが、改善は最小であった。局所的ステロイド及びＵＶ療法による以前の治療は、効果を示した。Ｔ２−１８Ｃ３の投与の前には、患者は生物学的薬剤による治療履歴はなかった。
【００３９】
患者は、０日目に、下腹部にＭＡＢｐ１の皮下注射を２回投与した（合計で１６０ｍｇのＭＡＢｐ１）。患者は注射を耐え、合併症もなかった。患者の背中を、投与後１７時間、４１時間、５日、６日及び１０日に評価した。１７時間では、病変部に関連する発赤で中等度の改善が観察された。４１時間では、病変部のサイズ及び発赤での明確に観察可能な減少で、継続的改善が認められた。５日までには、病変部の顕著な回復が観察された。この改善は、６日間を通して継続した。病変部は１０日までにほぼ完全に回復した。
【００４０】
実施例５−乾癬の治療
Ｔｒｕｅ  Ｈｕｍａｎ（商標）モノクローナル抗体ＲＡ−１８Ｃ３（ＩＬ−１αに特異的）の非盲検試験を、中等度〜重度の慢性尋常性乾癬を有するヒト被験者で行った。試験被験者は、０日、２１日、及び４２日に合計で３回の皮下注射を介して、２００ｍｇのＲＡ−１８Ｃ３の投与を受ける。ＰＡＳＩ（Ｐｓｏｒｉａｓｉｓ  Ａｒｅａ  ａｎｄ  Ｓｅｖｅｒｉｔｙ  Ｉｎｄｅｘ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ：乾癬面積及び重度指標の評価）スコアを、異なる時点で各被験者から得た。最初の５人の評価可能な被験者試験の全ては、５６日目にＰＡＳＩスコアの減少を示した（即ち、疾患の改善）。５６日目の最初の５人の評価可能な被験者のＰＡＳＩスコアの平均減少は、ほぼ５０％であった。
【００４１】
他の実施形態
本発明がその詳細な説明と併せて説明されてきたが、前述の説明は、例示を意図するもので、本発明の範囲を限定しようとするものではなく、このことは添付された請求項の範囲によって定義されることが理解されるべきである。他の態様、利点、及び変更は、以下の請求項の範囲内にある。
【国際調査報告】
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