(57)【要約】  本発明は、式(Ｉ)2014530851.tif 000151〔式中、置換基Ａ、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４およびＲ５は明細書に定義したとおりである。〕の置換キナゾリン誘導体に関する。このような化合物はＰＩ３Ｋ酵素類の活性が介在する障害または疾患の処置処置に適する。
2014530851.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(Ｉ)
【化１】
2014530851.tif 000147
〔式中、置換基
Ａは場合によりＮ、ＯまたはＳから選択される１〜２個のさらなるヘテロ原子を含んでよい飽和、５〜８員単環式または６〜１２員二環式縮合、二環式架橋または二環式スピロヘテロ環式環であり、ここで、該ヘテロ環式環は非置換であるかまたは
ヒドロキシ−
ハロ−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−カルボニル−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−カルボニル−
Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−カルボニル−
オキソ(Ｏ＝)
から選択される１〜４個の置換基で置換されており；
Ｘ１およびＸ２はＣＨ、Ｎ、ＣＲであり、
ここで、Ｒは
ハロゲン−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−
から独立して選択され；
Ｘ３はＣＨ、Ｎ、ＣＲ３であり、
ここで、Ｒ３は
シアノ−
ニトロ−
ハロゲン−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−
Ｃ１−Ｃ１０−シクロアルキル−オキシ−
フェニル−オキシ−
ベンジル−オキシ−
Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−
カルボキシル−
Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−カルボニル−
アミノ−カルボニル−
Ｎ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−カルボニル−
Ｎ,Ｎ−ジ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−カルボニル−
アミノ−スルホニル−
Ｎ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−スルホニル−
Ｎ,Ｎ−ジ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−スルホニル−
１−ピロリジノ−スルホニル−
４−モルホリノ−スルホニル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−スルホニル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−スルホニル−アミノ−
から選択され；
Ｘ４はＣＨ、Ｎ、ＣＲ４であり、
ここで、Ｒ４は
Ｆ３Ｃ−
から選択され；
Ｒ５は
水素−
ハロゲン−
ヒドロキシ−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−オキシ−
アミノ−
Ｎ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−
Ｎ,Ｎ−ジ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−カルボニル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−カルボニル−アミノ−
アミノ−スルホニル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−スルホニル−アミノ−
１−ピロリジニル−
１−ピペラジニル−
から選択される；
ただし、Ｘ４がＣＨであるならば、Ｒ３およびＲ５はいずれもメトキシではない。〕
の置換キナゾリン誘導体および／または互変異性体および／またはＮ−オキシドおよび／または薬学的に許容されるその塩類。
【請求項２】
Ａが
【化２】
2014530851.tif 000148
から選択される飽和ヘテロ環であり、
これは、非置換であるかまたは
ヒドロキシ−
ハロ−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−カルボニル−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−カルボニル−
Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−カルボニル−
オキソ(Ｏ＝)
から選択される１〜４個の置換基で置換されている、
請求項１の化合物。
【請求項３】
Ｘ４がＮであり；
Ｒ５が
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−オキシ−
アミノ−
Ｎ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−
Ｎ,Ｎ−ジ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−
１−ピロリジニル−
１−ピペラジニル−
から選択され；
Ｘ３がＣＨまたはＣＲ３であり、
ここで、Ｒ３が
シアノ−
ハロゲン−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
から選択される、
請求項１または２記載の化合物。
【請求項４】
Ｘ４がＮであり；
Ｒ５が
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−オキシ−
アミノ−
Ｎ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−
Ｎ,Ｎ−ジ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−
１−ピロリジニル−
１−ピペラジニル−
から選択され；
Ｘ３がＮである、
請求項１または２記載の化合物。
【請求項５】
Ｘ４がＮであり；
Ｒ５が
水素
から選択され；
Ｘ３がＣＲ３であり、
ここで、Ｒ３が
Ｎ,Ｎ−ジ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−カルボニル−
Ｎ,Ｎ−ジ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−スルホニル−
１−ピロリジノ−スルホニル−
４−モルホリノ−スルホニル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−スルホニル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−スルホニル−アミノ−
から選択される、
請求項１または２記載の化合物。
【請求項６】
Ｘ４がＣＨであり；
Ｒ５が
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−オキシ−
アミノ−
Ｎ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−
Ｎ,Ｎ−ジ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−
から選択され；
Ｘ３がＣＲ３であり、
ここで、Ｒ３が
シアノ−
ハロゲン−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
から選択される、
請求項１または２記載の化合物。
【請求項７】
Ｘ４がＣＲ４であり、
ここで、Ｒ４が
Ｆ３Ｃ−
から選択され；
Ｒ５が
アミノ−スルホニル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−スルホニル−アミノ−
から選択され；
Ｘ３がＣＨである、
請求項１または２記載の化合物。
【請求項８】
Ａが
【化３】
2014530851.tif 000149
から選択される飽和ヘテロ環であり；
Ｘ１がＣＲ１であり、
ここで、Ｒ１がフルオロ−から選択され；
Ｘ２がＣＨであり；
Ｘ４がＮであり；
Ｒ５が
メトキシ−
から選択され；
Ｘ３がＣＨまたはＣＲ３であり、
ここで、Ｒ３が
シアノ−
から選択され；
または
Ａが
【化４】
2014530851.tif 000150
から選択される飽和ヘテロ環であり；
Ｘ１がＣＨであり；
Ｘ２がＣＨであり；
Ｘ４がＮであり；
Ｒ５が
メトキシ−
から選択され；
Ｘ３がＮである、
請求項１〜２および３または１〜２および４のいずれかに記載の化合物。
【請求項９】
医薬として使用するための、請求項１〜８のいずれかに記載の式(Ｉ)の化合物。
【請求項１０】
ＰＩ３Ｋ酵素類の活性、好ましくはＰＩ３Ｋδが介在する疾患または障害の処置用医薬の製造のために、請求項１〜８のいずれかに記載の式(Ｉ)の化合物の使用。
【請求項１１】
治療有効量の請求項１〜８のいずれかに記載の式(Ｉ)の化合物および１種以上の薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
【請求項１２】
対象におけるＰＩ３Ｋ酵素類、好ましくはＰＩ３Ｋδの活性の調節方法であって、対象に請求項１〜８のいずれかに記載の式(Ｉ)の化合物の治療有効量を投与する過程を含む、方法。
【請求項１３】
ＰＩ３Ｋ酵素類、好ましくはＰＩ３Ｋδが介在する障害または疾患の処置方法であって、対象に請求項１〜８のいずれかに記載の式(Ｉ)の化合物の治療有効量を投与する過程を含む、方法。
【請求項１４】
障害または疾患が自己免疫性障害、炎症性疾患、アレルギー性疾患、喘息およびＣＯＰＤのような気道疾患、移植片拒絶、例えば造血器起源の癌または固形腫瘍から選択される、請求項１３記載の方法。
【請求項１５】
対照におけるＰＩ３Ｋ酵素類の活性、好ましくはＰＩ３Ｋδの活性が介在する障害または疾患の処置のための、請求項１〜８のいずれかに記載の式(Ｉ)の化合物の使用。
【請求項１６】
自己免疫性障害、炎症性疾患、アレルギー性疾患、喘息およびＣＯＰＤのような気道疾患、移植片拒絶、例えば造血器起源の癌または固形腫瘍から選択される障害または疾患の処置のための、請求項１〜８のいずれかに記載の式(Ｉ)の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ホスホイノシチド３'ＯＨキナーゼファミリー(以後ＰＩ３Ｋ)、例えばインビトロおよびインビボ試験で示されるとおり、異なるパラログＰＩ３Ｋαおよびβに対する少なくとも１０倍、より好ましくは少なくとも３０倍の選択性を有して、適切には、アイソフォームＰＩ３Ｋδの活性または機能を調節、特に阻害するための形態である、例えば代謝安定性および適切な薬物動態のような価値ある薬物としての特性を有する、薬物候補である遊離形態または薬学的に許容される塩形態の新規キナゾリン誘導体の製造および使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＰＩ３Ｋδの選択的阻害は、インスリンシグナル伝達の阻害および一般的細胞増殖経路の阻害のようなＰＩ３Ｋαおよび／またはＰＩ３Ｋβが介在する可能性のある副作用を避けると予測される。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
適切には、本発明は、単独でまたは１種以上の他の薬理学的活性化合物と組み合わせての、自己免疫性障害、炎症性疾患、アレルギー性疾患、喘息およびＣＯＰＤのような気道疾患、移植片拒絶、例えば造血器起源の癌または固形腫瘍を含むが、これらに限定されないＰＩ３Ｋ関連疾患の処置に関する。
【０００４】
第一の面において、本発明は、式(Ｉ)
【化１】
2014530851.tif 000003
〔式中、
Ａは場合によりＮ、ＯまたはＳから選択される１〜２個のさらなるヘテロ原子を含んでよい飽和、５〜８員単環式または６〜１２員二環式縮合、二環式架橋または二環式スピロヘテロ環式環であり、ここで、該ヘテロ環式環は非置換であるかまたは
ヒドロキシ−
ハロ−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−カルボニル−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−カルボニル−
Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−カルボニル−
オキソ(Ｏ＝)
から選択される１〜４個の置換基で置換されており；
Ｘ１およびＸ２はＣＨ、Ｎ、ＣＲであり、
ここで、Ｒは
ハロゲン−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−
から独立して選択され；
【０００５】
Ｘ３はＣＨ、Ｎ、ＣＲ３であり、
ここで、Ｒ３は
シアノ−
ニトロ−
ハロゲン−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−
Ｃ１−Ｃ１０−シクロアルキル−オキシ−
フェニル−オキシ−
ベンジル−オキシ−
Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−
カルボキシル−
Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−カルボニル−
アミノ−カルボニル−
Ｎ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−カルボニル−
Ｎ,Ｎ−ジ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−カルボニル−
アミノ−スルホニル−
Ｎ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−スルホニル−
Ｎ,Ｎ−ジ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−スルホニル−
１−ピロリジノ−スルホニル−
４−モルホリノ−スルホニル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−スルホニル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−スルホニル−アミノ−
から選択され；
Ｘ４はＣＨ、Ｎ、ＣＲ４であり、
ここで、Ｒ４は
Ｆ３Ｃ−
から選択され；
Ｒ５は
水素−
ハロゲン−
ヒドロキシ−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−オキシ−
アミノ−
Ｎ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−
Ｎ,Ｎ−ジ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−カルボニル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−カルボニル−アミノ−
アミノ−スルホニル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−スルホニル−アミノ−
１−ピロリジニル−
１−ピペラジニル−
から選択される；
ただし、Ｘ４がＣＨであるならば、Ｒ３およびＲ５はいずれもメトキシではない。〕
のキナゾリン化合物および／またはその薬学的に許容される塩類および／または溶媒和物に関する。
【０００６】
ここに記載する式は、何れもこのような化合物の水和物、溶媒和物および多形およびこれらの混合物を表すことを意図する。
【０００７】
ここで使用する単数表現および本発明の文脈(特に特許請求の範囲の文脈)で使用する類似表現は、特に断らない限りまたは明らかに文脈から矛盾しない限り、単数および複数の両方を包含すると解釈すべきである。
【０００８】
ここに記載する全ての方法は、特に断らない限りまたは明らかに文脈から矛盾しない限り、適切な如何なる順番でも実施できる。ここに記載する任意のおよび全ての例または例示表現(例えば“のような”)は、単に本発明をより明らかにすることのみを意図し、異なって請求されている本発明の範囲を制限することを意図しない。
【０００９】
本発明は、後記の用語の定義および最終的な実施例を含む以下の記載を考慮してより完全に評価される。ここで使用する用語“含む”、“包含する”および“含んで成る”は、ここでは、その開放的、非限定的意味で使用する。式(Ｉ)の化合物が記載されているとき、これはまた式(Ｉ)の化合物の互変異性体およびＮ−オキシドも含むことを意図する。
【００１０】
化合物、塩類などについて複数形態が使用されているとき、これは単一化合物、塩なども意味する。
【００１１】
上におよび下に使用する一般的用語は、好ましくは、特に断らない限り、本明細書の文脈の範囲内で次の意味を有する。
ここで使用する用語“アルキル”は、最大２０個の炭素原子を有する、完全に飽和された、１箇所もしくは複数個所分枝を含む分枝鎖または非分枝鎖炭化水素基を言う。特に断らない限り、アルキルは、１〜１６個の炭素原子、１〜１０個の炭素原子、１〜７個の炭素原子または１〜４個の炭素原子を有する炭化水素基を言う。アルキルの代表例は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｎ−ヘキシル、３−メチルヘキシル、２,２−ジメチルペンチル、２,３−ジメチルペンチル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル、ｎ−デシルなどを含むが、これらに限定されない。典型的に、アルキル基は１〜７個、より好ましくは１〜４個の炭素を有する。
【００１２】
ここで使用する用語“ハロ−アルキル”は、１個以上のここに定義するハロ基で置換されている、ここに定義するアルキルを言う。ハロ−アルキルはモノ−ハロ−アルキル、ジ−ハロ−アルキルまたはペル−ハロ−アルキルを含むポリ−ハロ−アルキルであり得る。モノ−ハロ−アルキルはアルキル基内に１個のヨード、ブロモ、クロロまたはフルオロを有し得る。ジ−ハロ−アルキル基およびポリ−ハロ−アルキル基は、２個以上の同一ハロ原子または異なるハロ基の組み合わせをアルキル内に含む。典型的に、ポリ−ハロ−アルキルは最大１２個または１０個または８個または６個または４個または３個または２個のハロ基を含む。ハロ−アルキルの例は、フルオロ−メチル、ジ−フルオロ−メチル、トリ−フルオロ−メチル、クロロ−メチル、ジ−クロロ−メチル、トリ−クロロ−メチル、ペンタ−フルオロ−エチル、ヘプタ−フルオロ−プロピル、ジ−フルオロ−クロロ−メチル、ジ−クロロ−フルオロ−メチル、ジ−フルオロ−エチル、ジ−フルオロ−プロピル、ジ−クロロ−エチルおよびジクロロ−プロピルを含むが、これらに限定されない。ペル−ハロ−アルキルは、全ての水素原子がハロ原子で置き換えられたアルキルを言う。
【００１３】
Ａについてここで使用する用語“飽和ヘテロシクリル”は、環系、例えば５員、６員、７員または８員単環式または６員、７員、８員、９員、１０員、１１員または１２員二環系を言い、分子の残りへの結合点であるＮから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含む。ヘテロ環基は、ヘテロ原子または炭素原子で結合できる。ヘテロ環式環は、Ｎ、ＯまたはＳから選択される１〜２個のさらなるヘテロ原子を含み得る。ヘテロシクリルは、縮合または架橋環ならびにスピロ環状環も含み得る。ヘテロ環Ａの例は、
【化２】
2014530851.tif 000004
を含むが、これらに限定されない。
【００１４】
他の態様において、ヘテロ環Ａの例は、
【化３】
2014530851.tif 000005
を含むが、これに限定されない。
【００１５】
ここで使用する用語“シクロアルキル”は、３〜１２個の炭素原子の飽和または一部不飽和単環式、二環式または三環式炭化水素基を言う。特に断らない限り、シクロアルキルは、３〜１０個の環炭素原子または３〜７個の環炭素原子を有する環状炭化水素基を言う。二環式炭化水素基の例は、オクタヒドロインジル、デカヒドロナフチルを含む。三環式炭化水素の例は、ビシクロ[２.１.１]ヘキシル、ビシクロ[２.２.１]ヘプチル、ビシクロ[２.２.１]ヘプテニル、６,６−ジメチルビシクロ[３.１.１]ヘプチル、２,６,６−トリメチルビシクロ[３.１.１]ヘプチル、ビシクロ[２.２.２]オクチルを含む。四環式炭化水素基の例はアダマンチルを含む。
【００１６】
ここで使用する用語“シクロアルキル”は、好ましくはシクロプロピル、シクロペンチルまたはシクロヘキシルを言う。
【００１７】
ここで使用する用語“オキシ”は−Ｏ−結合基を言う。
ここで使用する用語“カルボキシ”または“カルボキシル”は−ＣＯＯＨである。
【００１８】
ここで使用する、全ての置換基は、構成する官能基(基)の順番を示す方法で記載する。官能基は上に定義する。その結合点は適宜ハイフン(−)またはイコール記号(＝)で示す。
【００１９】
“処置”は予防的(防止的)および治療的処置ならびに疾患または障害の進行遅延を含む。
【００２０】
“組み合わせ剤”は、一投与単位形態の固定された組み合わせであるかまたは式(Ｉ)の化合物および組み合わせ相手(例えば、“治療剤”または“併用剤”とも呼ぶ下に説明する他の薬物)を独立して同時にまたは別々に一定間隔で、特にこの間隔が、組み合わせ相手が協調できるとき、例えば相乗効果を示すことが可能なときに組み合わせて投与するためのキット・オブ・パーツを言う。ここで使用する用語“共投与”または“組み合わせ投与”などは、選択した組み合わせ相手の、それを必要とする一対象(例えば患者)への投与を包含することを意図し、複数薬剤を必ずしも同じ投与経路でまたは同時に投与するもののではない処置レジメンを包含する。ここで使用する用語“医薬組み合わせ剤”は、１種を超える活性成分の混合または組み合わせによる製品を意味し、複数活性成分の固定された組み合わせおよび固定されていない組み合わせの両者を含む。用語“固定された組み合わせ剤”は、複数活性成分、例えば式(Ｉ)の化合物および組み合わせ相手を、両者とも一患者に同時に一つの物または投与量の形態で投与することを意味する。用語“固定されていない組み合わせ剤”は、複数活性成分、例えば式(Ｉ)の化合物および組み合わせ相手を、両者とも一患者に別々の物として同時に、一緒にまたは特定の時間制限なく逐次的に投与することを意味し、ここで、このような投与は、患者体内に２化合物の治療有効レベルを提供する。後者はまたカクテル療法、例えば３種以上の活性成分の投与にも適用される。
【００２１】
本発明の種々の態様をここに開示する。各態様において特定した特性を、これと異なって特定した特性と組み合わせて、さらなる態様を提供し得る。
【００２２】
本発明は、さらに式(Ｉ)の化合物の薬学的に許容されるプロドラッグに関する。特に、本発明はまたインビボでここに定義する式(Ｉ)の化合物自体に変換する、式(Ｉ)の化合物のプロドラッグに関する。式(Ｉ)の化合物は、その記載が適切であり、好都合である限り、式(Ｉ)の化合物の対応するプロドラッグも含むと解されるべきである。
【００２３】
本発明は、さらに式(Ｉ)の化合物の薬学的に許容される代謝物にも関する。
【００２４】
一つの態様において、本発明は、式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ａは
【化４】
2014530851.tif 000006
から選択される飽和ヘテロ環であり、これは、非置換であるかまたは
ヒドロキシ−
ハロ−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−カルボニル−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−カルボニル−
Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−カルボニル−
オキソ(Ｏ＝)
から選択される１〜４個の置換基で置換されている。
【００２５】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ａは
【化５】
2014530851.tif 000007
から選択される飽和ヘテロ環であり、
これは非置換であるかまたは
ヒドロキシ−
フルオロ−
Ｃ１−Ｃ４−アルキル−
Ｃ１−Ｃ４−アルキル−カルボニル−
フルオロ−Ｃ１−Ｃ４−アルキル−
オキソ(Ｏ＝)
から選択される１〜３個の置換基で置換されている。
【００２６】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ａは
【化６】
2014530851.tif 000008
から選択される飽和ヘテロ環である。
【００２７】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ａは
【化７】
2014530851.tif 000009
から選択される飽和ヘテロ環である。
【００２８】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ｘ１はＣＨ、Ｎ、ＣＲ１であり、
ここで、Ｒ１は
ハロゲン−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−
から選択される。
【００２９】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ｘ１はＣＨ、Ｎ、ＣＲ１であり、
ここで、Ｒ１は
フルオロ−
Ｃ１−Ｃ４−アルキル−
フルオロ−Ｃ１−Ｃ４−アルキル−
から選択される。
【００３０】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ｘ１はＣＨである。
【００３１】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ｘ１はＣＲ１であり、
ここで、Ｒ１は
フルオロ−
から選択される。
【００３２】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ｘ２はＣＨ、Ｎ、ＣＲ２であり、
ここで、Ｒ２は
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
から選択される。
【００３３】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ｘ２はＣＨ、Ｎ、ＣＲ２であり、
ここで、Ｒ２は
Ｃ１−Ｃ４−アルキル−
から選択される。
【００３４】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ｘ２はＣＨである。
【００３５】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ｘ４はＮであり；
Ｒ５は
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−オキシ−
アミノ−
Ｎ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−
Ｎ,Ｎ−ジ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−
１−ピロリジニル−
１−ピペラジニル−
から選択される。
【００３６】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ｘ４はＮであり；
Ｒ５は
メトキシ−
から選択される。
【００３７】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ｘ４はＮであり；
Ｒ５は
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−オキシ−
アミノ−
Ｎ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−
Ｎ,Ｎ−ジ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−
１−ピロリジニル−
１−ピペラジニル−
から選択され；
Ｘ３はＣＨまたはＣＲ３であり、
ここで、Ｒ３は
シアノ−
ハロゲン−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
から選択される。
【００３８】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ｘ４はＮであり；
Ｒ５は
Ｃ１−Ｃ４−アルキル−
Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ−
フルオロ−Ｃ１−Ｃ４−アルキル−オキシ−
アミノ−
Ｎ−Ｃ１−Ｃ４−アルキル−アミノ−
Ｎ,Ｎ−ジ−Ｃ１−Ｃ４−アルキル−アミノ−
１−ピロリジニル−
１−ピペラジニル−
から選択され；
Ｘ３はＣＨまたはＣＲ３であり、
ここで、Ｒ３は
シアノ−
フルオロ−
クロロ−
フルオロ−Ｃ１−Ｃ４−アルキル−
Ｃ１−Ｃ４−アルキル−
から選択される。
【００３９】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ｘ４はＮであり；
Ｒ５は
メトキシ−
から選択され；
Ｘ３はＣＨまたはＣＲ３であり、
ここで、Ｒ３は
シアノ−
から選択される。
【００４０】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ｘ４はＮであり；
Ｒ５は
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−オキシ−
アミノ−
Ｎ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−
Ｎ,Ｎ−ジ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−
１−ピロリジニル−
１−ピペラジニル−
から選択され；
Ｘ３はＮである。
【００４１】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ｘ４はＮであり；
Ｒ５は
Ｃ１−Ｃ４−アルキル−
Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ−
フルオロ−Ｃ１−Ｃ４−アルキル−オキシ−
アミノ−
Ｎ−Ｃ１−Ｃ４−アルキル−アミノ−
Ｎ,Ｎ−ジ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−
１−ピロリジニル−
１−ピペラジニル−
から選択され；
Ｘ３はＮである。
【００４２】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ｘ４はＮであり；
Ｒ５は
メトキシ−
から選択され；
Ｘ３はＮである。
【００４３】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ｘ４はＮであり；
Ｒ５は
水素
から選択され；
Ｘ３はＣＲ３であり、
ここで、Ｒ３は
Ｎ,Ｎ−ジ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−カルボニル−
Ｎ,Ｎ−ジ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−スルホニル−
１−ピロリジノ−スルホニル−
４−モルホリノ−スルホニル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−スルホニル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−スルホニル−アミノ−
から選択される。
【００４４】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ｘ４はＮであり；
Ｒ５は
水素
から選択され；
Ｘ３はＣＲ３であり、
ここで、Ｒ３は
Ｃ１−Ｃ４−アルキル−スルホニル−
から選択される。
【００４５】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ｘ４はＣＨであり；
Ｒ５は
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−オキシ−
アミノ−
Ｎ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−
Ｎ,Ｎ−ジ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−
から選択され；
Ｘ３はＣＲ３であり、
ここで、Ｒ３は
シアノ−
ハロゲン−
ハロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−
から選択される。
【００４６】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ｘ４はＣＨであり；
Ｒ５は
Ｃ１−Ｃ４−アルキル−
Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ−
フルオロ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−オキシ−
アミノ−
Ｎ−Ｃ１−Ｃ４−アルキル−アミノ−
Ｎ,Ｎ−ジ−Ｃ１−Ｃ４−アルキル−アミノ−
から選択され；
Ｘ３はＣＲ３であり、
ここで、Ｒ３は
シアノ−
フルオロ−
クロロ−
フルオロ−Ｃ１−Ｃ４−アルキル−
Ｃ１−Ｃ４−アルキル−
から選択される。
【００４７】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ｘ４はＣＲ４であり、
ここで、Ｒ４は
Ｆ３Ｃ−
から選択され；
Ｒ５は
アミノ−スルホニル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−スルホニル−アミノ−
から選択され；
Ｘ３はＣＨである。
【００４８】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ｘ４はＣＲ４であり、
ここで、Ｒ４は
Ｆ３Ｃ−
から選択され；
Ｒ５は
水素−
から選択され；
Ｘ３はＣＨまたはＣＲ３であり、
ここで、Ｒ３は
Ｎ,Ｎ−ジ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−カルボニル−
Ｎ,Ｎ−ジ−Ｃ１−Ｃ７−アルキル−アミノ−スルホニル−
１−ピロリジノ−スルホニル−
４−モルホリノ−スルホニル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−スルホニル−
Ｃ１−Ｃ７−アルキル−スルホニル−アミノ−
から選択される。
【００４９】
他の態様において、本発明は、実施例に記載する式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供する。
【００５０】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、Ａは
【化８】
2014530851.tif 000010
から選択される飽和ヘテロ環であり；
Ｘ１はＣＨであり；
Ｘ２はＣＨであり；
Ｘ４はＮであり；
Ｒ５は
メトキシ−
から選択され；
Ｘ３はＮである。
【００５１】
他の態様において、本発明は式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩および／または溶媒和物を提供し、ここで、
Ａは
【化９】
2014530851.tif 000011
から選択される飽和ヘテロ環であり；
Ｘ１はＣＲ１であり、
ここで、Ｒ１は
フルオロ−
から選択され；
Ｘ２はＣＨであり；
Ｘ４はＮであり；
Ｒ５は
メトキシ−
から選択され；
Ｘ３はＣＨまたはＣＲ３であり、
ここで、Ｒ３は
シアノ−
から選択される。
【００５２】
式(Ｉ)の化合物は種々の異性形態を有し得る。ここで使用する用語“光学異性体”または“立体異性体”は、本発明の化合物にも存在する可能性がある種々の立体異性配置のすべてを含み、幾何異性体も含む。置換基がキラル中心の炭素原子に結合し得るので、本発明は、本化合物のエナンチオマー、ジアステレオマーまたはラセミ体を含む。“エナンチオマー”は互いに重なり合わない鏡像である立体異性体の対である。エナンチオマー対の１：１混合物は“ラセミ”混合物である。本用語は、適当なとき、ラセミ混合物を言うために使用する。“ジアステレオ異性体”は、少なくとも２個の不斉原子を有するが、互いに鏡像ではない立体異性体である。絶対立体化学は、カーン・インゴールド・プレローグＲ−Ｓ順位則に従い特定できる。化合物が純粋エナンチオマーであるとき、各キラル炭素での立体化学はＲまたはＳに特定し得る。絶対配置が未知である分離させた化合物は、ナトリウムＤ線波長での平面偏光を回転させる方向(右旋性または左旋性)により、(＋)または(−)と割り当て得る。ある種のここに記載する化合物は１箇所以上の不斉中心または軸を含み、それゆえに、エナンチオマー、ジアステレオマーおよび絶対立体化学の点で(Ｒ)−または(Ｓ)−と定義し得る他の立体異性形態を生じ得る。本発明は、ラセミ混合物、ジアステレオマー混合物、光学的に純粋な形態および中間の混合物を含む全てのこのような可能な異性体を包含する。光学活性(Ｒ)−および(Ｓ)−異性体は、キラルシントンまたはキラル剤を使用して製造してよくまたは慣用法を使用して分割し得る。本化合物が二重結合を含むとき、置換基はＥまたはＺ配置であり得る。本化合物が二置換シクロアルキルを含むとき、シクロアルキル置換基はｃｉｓ−またはｔｒａｎｓ−配置を有し得る。全ての互変異性形態もまた包含される。
【００５３】
ここで使用する用語“薬学的に許容される塩類”は、本発明の化合物の生物学的有効性および特性を保持し、典型的に生物学的にまたは他の点で望ましくないものではない、塩類を言う。多くの場合、本発明の化合物は、アミノ基および／またはカルボキシル基またはこれらに類する基の存在により、酸および／または塩基塩類を形成できる。
【００５４】
薬学的に許容される酸付加塩類は、無機酸類および有機酸類と形成でき、例えば、酢酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、臭化物／臭化水素酸塩、重炭酸塩／炭酸塩、重硫酸塩／硫酸塩、カンファースルホン酸塩、塩化物／塩酸塩、クロロテオフィロネート、クエン酸塩、エタンジスルホン酸塩、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、馬尿酸塩、ヨウ化水素酸塩／ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、メチル硫酸塩、ナフトエ酸酸塩、ナプシル酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オクタデカン酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、リン酸塩／リン酸水素塩／リン酸二水素塩、ポリガラクツロン酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、スルホサリチル酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩およびトリフルオロ酢酸塩である。
【００５５】
塩類を誘導し得る無機酸類は、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などを含む。
【００５６】
塩類を誘導し得る有機酸類は、例えば、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、スルホサリチル酸などを含む。薬学的に許容される塩基付加塩類は無機および有機塩基類と形成できる。
【００５７】
塩類を誘導し得る無機塩基類は、例えば、アンモニウム塩類および周期律表の１〜１２欄の金属を含む。ある態様において、塩類はナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、銀、亜鉛および銅に由来し、特に適切な塩類はアンモニウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩、カルシウム塩およびマグネシウム塩を含む。
【００５８】
塩類を誘導し得る有機塩基類は、例えば、１級、２級および３級アミン類、天然に存在する置換アミン類を含む置換アミン類、環状アミン類、塩基性イオン交換樹脂などを含む。ある種の有機アミン類はイソプロピルアミン、ベンザチン、クロリネート、ジエタノールアミン、ジエチルアミン、リシン、メグルミン、ピペラジンおよびトロメタミンを含む。
【００５９】
本発明の薬学的に許容される塩類は、親化合物から、塩基性または酸性基から、慣用の化学方法により合成できる。一般的に、このような塩類は、遊離酸形態のこれらの化合物と化学量論量の適当な塩基(例えばＮａ、Ｃａ、ＭｇまたはＫの水酸化物、炭酸塩、重炭酸塩など)を反応させることによりまたは遊離塩基形態のこれらの化合物と化学量論量の適当な酸を反応させることにより合成できる。このような反応は典型的に水または有機溶媒またはこれら２種の混合物中で行う。一般的に、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノールまたはアセトニトリルのような非水性媒体の使用が、可能であるとき、好ましい。さらなる適切な塩類の一覧は、例えば、“Remington's Pharmaceutical Sciences”, 20th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., (1985); および“Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use” by Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002)に見ることができる。
【００６０】
単離または精製目的で、薬学的に許容されない塩類、例えばピクリン酸塩または過塩素酸塩を使用することも可能である。治療使用のために、薬学的に許容される塩類または遊離化合物のみを用いる。
【００６１】
遊離形態の新規式(Ｉ)の化合物と、中間体として、例えば新規化合物の精製または同定目的で使用する塩類を含むその塩類形態のものとの密接な関係から、本明細書に記載した式(Ｉ)の化合物は、遊離形態の化合物および／または適切であり、好都合である限り、その１種以上の塩類である化合物、ならびに１種以上の溶媒和物、例えば水和物も含む。
【００６２】
ここに示す式は、何れも本化合物の非標識形態ならびに同位体標識された形態も表す。同位体標識された化合物は、１個以上の原子が選択した原子質量または質量数を有する原子に置き換わっている以外、ここに示す式により示された構造を有する。本発明の化合物に取り込むことができる同位体の例は、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素および塩素の同位体、例えば、それぞれ２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｆ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、３６Ｃｌ、１２５Ｉを含む。本発明は、種々の同位体標識されたここに定義する化合物、例えば３Ｈ、１３Ｃおよび１４Ｃのような放射性同位体が存在するものを含む。このような同位体標識された化合物は、代謝試験(１４Ｃで)、反応速度論研究(例えば２Ｈまたは３Ｈで)、薬物または基質組織分布アッセイを含む陽電子放出断層撮影(ＰＥＴ)または単光子放射型コンピュータ断層撮影法(ＳＰＥＣＴ)のような検出または造影技術または患者の放射線処置に有用である。特に、１８Ｆまたは標識化合物は、ＰＥＴまたはＳＰＥＣＴ試験のために特に望まれる。同位体標識した本発明の化合物は、下記スキームまたは実施例および製造に開示する方法を、適当な同位体標識した反応材を先に用いた非標識反応材に代えて使用することにより、製造し得る。
【００６３】
さらに、重い同位体、特に重水素(すなわち、２ＨまたはＤ)での置換は、大きな代謝安定性に起因するある種の治療利益、例えばインビボ半減期延長または必要投与量削減または治療指数改善を提供し得る。この状況での重水素は、式(Ｉ)の化合物の置換基とみなす。このような重い同位体、特に重水素の濃度は、同位体濃縮係数により定義し得る。ここで使用する用語“同位体濃縮係数”は、特定同位体の同位体存在度と天然存在度の比である。本発明の化合物における置換基が重水素であると記されているならば、このような化合物は、各指定された重水素原子について少なくとも３５００(各指定された重水素原子で５２.５％重水素取り込み)、少なくとも４０００(６０％重水素取り込み)、少なくとも４５００(６７.５％重水素取り込み)、少なくとも５０００(７５％重水素取り込み)、少なくとも５５００(８２.５％重水素取り込み)、少なくとも６０００(９０％重水素取り込み)、少なくとも６３３３.３(９５％重水素取り込み)、少なくとも６４６６.７(９７％重水素取り込み)、少なくとも６６００(９９％重水素取り込み)または少なくとも６６３３.３(９９.５％重水素取り込み)の同位体濃縮係数を有する。
【００６４】
同位体標識した式(Ｉ)の化合物は、一般的に当業者に知られた慣用法によりまたは添付する実施例および製造に使用する方法に準じて、先に使用した標識していない反応材に代えて適当な同位体標識した反応材を使用することにより製造できる。
【００６５】
本発明における薬学的に許容される溶媒和物は、結晶化溶媒が同位体置換されていてよい、例えばＤ２Ｏ、ｄ６−アセトン、ｄ６−ＤＭＳＯであるものを含む。
【００６６】
水素結合のドナーおよび／またはアクセプターとして作用できる基を含む本発明の化合物、すなわち式(Ｉ)および式(II)の化合物は、適当な共結晶形成剤と共結晶を形成する場合がある。これらの共結晶は、式(Ｉ)の化合物の化合物から、既知の共結晶形成法により製造し得る。このような方法は、式(Ｉ)の化合物と共結晶形成剤を、粉砕、加熱、共昇華、共融解または溶液中で結晶化条件下に接触させ、それにより形成した共結晶を単離することを含む。適当な共結晶形成剤は、ＷＯ２００４／０７８１６３に記載のものを含む。それゆえに、本発明は、さらに、式(Ｉ)および式(II)の化合物を含む共結晶を提供する。
【００６７】
本発明の化合物の不斉原子(例えば、炭素など)は、何れもラセミまたはエナンチオマー的に富化された形態、例えば(Ｒ)−、(Ｓ)−または(Ｒ,Ｓ)−配置形態で存在できる。ある態様において、各不斉原子は(Ｒ)−または(Ｓ)−配置において少なくとも５０％エナンチオマー過剰、少なくとも６０％エナンチオマー過剰、少なくとも７０％エナンチオマー過剰、少なくとも８０％エナンチオマー過剰、少なくとも９０％エナンチオマー過剰、少なくとも９５％エナンチオマー過剰または少なくとも９９％エナンチオマー過剰である。不飽和二重結合を有する原子での置換基は、可能であれば、ｃｉｓ−(Ｚ)−またはｔｒａｎｓ−(Ｅ)−形態で存在し得る。
【００６８】
従って、ここで使用する本発明の化合物は可能な異性体、回転異性体、アトロプ異性体、互変異性体の一つまたはそれらの混合物の形、例えば、実質的に純粋な幾何(ｃｉｓまたはｔｒａｎｓ)異性体、ジアステレオマー、光学異性体(アンチポード)、ラセミ体またはその混合物の形であり得る。
【００６９】
本発明に従い得られる異性体混合物を、当業者に周知の方法で個々の異性体に分割でき、ジアステレオ異性体は、例えば、多層溶媒混合物、再結晶および／または例えばシリカゲル上のクロマトグラフィー分割、または例えば逆相カラム上の中速液体クロマトグラフィーで分割でき、ラセミ体は、例えば、光学的に純粋な塩形成剤との塩類の形成およびそうして得られるジアステレオ異性体混合物の、例えば分別結晶または光学活性カラム剤上のクロマトグラフィーの手段による分割により分割できる。
【００７０】
最終生成物または中間体として得られるラセミ体は、何れも知られた方法により、例えば、光学活性酸または塩基を用いて得たそのジアステレオマー塩類を分割し、光学活性酸性または塩基性化合物を遊離することにより、光学アンチポードに分割できる。特に、塩基性部分をこのように用いて、本発明の化合物をその光学アンチポードに、例えば光学活性酸、例えば、酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、ジアセチル酒石酸、ジ−Ｏ,Ｏ'−ｐ−トルオイル酒石酸、マンデル酸、リンゴ酸またはカンファー−１０−スルホン酸と形成された塩の分別結晶により分割し得る。ラセミ生成物も、キラルクロマトグラフィー、例えば、キラル吸着剤を使用する高速液体クロマトグラフィー(ＨＰＬＣ)により分離できる。
【００７１】
本発明の化合物は遊離形態、その塩またはそのプロドラッグ誘導体のいずれかで得られる。
塩基性基および酸基の両者が同じ分子に存在するとき、本発明の化合物はまた分子内塩類、例えば、双性イオン分子を形成し得る。
【００７２】
本発明は、インビボで本発明の化合物に変換する本発明の化合物のプロドラッグも提供する。プロドラッグは、該プロドラッグの対象への投与後に、インビボでの生理学的作用、例えば、加水分解または代謝などにより、本発明の化合物に化学的に修飾される、活性または不活性の化合物である。プロドラッグの製造および使用に関する適性および技術は、当分野で周知である。プロドラッグは、概念的に、２個の非排他的カテゴリー、バイオプレカーサープロドラッグおよび担体プロドラッグに分けることができる。The Practice of Medicinal Chemistry, Ch. 31-32 (Ed. Wermuth, Academic Press, San Diego, Calif., 2001)参照。一般に、バイオプレカーサープロドラッグは、１個以上の保護された基を含み、代謝または加溶媒分解により活性形に変換し、不活性であるか、対応する活性医薬化合物と比較して弱い活性を有し、化合物である。活性医薬形態および全ての遊離される代謝産物のいずれも許容される低い毒性でなければならない。
【００７３】
担体プロドラッグは、例えば、作用部位への取り込みおよび／または局所送達を改善する輸送基を含む医薬化合物である。このような担体プロドラッグに望まれるのは、医薬部分と輸送部分の間の結合が共有結合であり、該プロドラッグが不活性であるか医薬化合物より低い活性であり、全ての遊離される輸送部分が許容可能な低毒性であることである。輸送部分が取り込みを促進することが意図されるプロドラッグにおいては、典型的に輸送部分の切断は急速でなければならない。そうでない場合、遅延放出を提供する部分、例えばある種のポリマーまたはシクロデキストリン類のような他の分子の利用が望まれる。担体プロドラッグは、例えば、次の１種以上の特性を改善するために使用し得る：親油性増加、薬理学的有効期間延長、部位特性増加、毒性および有害反応低減および／または医薬の製剤における改善のために使用し得る(例えば、安定性、水溶解性、望ましくない感覚受容性または物理化学的特性の抑制)。例えば、親油性は、(ａ)ヒドロキシル基の親油性カルボン酸(例えば、少なくとも１個の親油性基を有するカルボン酸)を用いるまたは(ｂ)カルボン酸の親油性アルコール類(例えば、少なくとも１個の親油性基を有するアルコール、例えば脂肪族アルコール類)を用いるエステル化により増加できる。
【００７４】
プロドラッグの例は、例えば、遊離カルボン酸類のエステル類およびチオール類のＳ−アシル誘導体およびアルコール類またはフェノール類のＯ−アシル誘導体(ここで、アシルはここに定義した意味を有する)である。適切なプロドラッグは、しばしば、当分野で慣用的に使用されている生理学的条件下での加溶媒分解により親カルボン酸に変換可能な薬学的に許容されるエステル誘導体、例えば、低級アルキルエステル類、シクロアルキルエステル類、低級アルケニルエステル類、ベンジルエステル類、モノ−またはジ−置換低級アルキルエステル類、例えばオメガ−(アミノ、モノ−またはジ−低級アルキルアミノ、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル)−低級アルキルエステル類、アルファ−(低級アルカノイルオキシ、低級アルコキシカルボニルまたはジ−低級アルキルアミノカルボニル)−低級アルキルエステル類、例えばピバロイルオキシメチルエステルなどである。加えて、アミン類はアリールカルボニルオキシメチル置換誘導体としてマスクされており、それはインビボでエステラーゼ類により開裂され、遊離薬物およびホルムアルデヒドを遊離する(Bundgaard, J. Med. Chem. 2503 (1989))。さらに、イミダゾール、イミド、インドールなどの酸性ＮＨ基を含む薬物は、Ｎ−アシルオキシメチル基でマスクされている(Bundgaard, Design of Prodrugs, Elsevier (1985))。ヒドロキシ基はエステル類およびエーテル類としてマスクされている。ＥＰ０３９,０５１(Sloan and Little)はマンニッヒベースのヒドロキサム酸プロドラッグ、その製造および使用を開示する。
【００７５】
さらに、本発明の化合物は、その塩を含みまたはその水和物の形態でも得ることができまたはその結晶化に使用した他の溶媒を含み得る。
【００７６】
本発明は、第二の面において、式(Ｉ)の化合物の製造方法に関する。式(Ｉ)の化合物またはその塩類はそれ自体知られた方法であるが、式(Ｉ)の化合物の製造についてはこれまで発表されていない方法により製造する。
【００７７】
一般的反応方法：
一つの態様において、本発明は、式II
【化１０】
2014530851.tif 000012
〔式中、置換基は上に定義したとおりである。〕
の化合物と、式III
【化１１】
2014530851.tif 000013
〔式中、置換基は上に定義したとおりであり、−Ｂ(ＯＲ')２はピナコラト−ボロンのような環状または非環状ボロン酸またはボロン酸誘導体である。〕
の化合物を、Ｐｄ(０)触媒、例えばＰｄ(ＰＰｈ３)４のような触媒の存在下、所望により、塩基、例えば塩基水溶液のような１種以上の反応助剤の存在下、所望により１種以上の希釈剤、特に極性溶媒、例えばアセトニトリルの存在下に反応させる工程ａを含む、式(Ｉ)の化合物の製造方法(方法Ａ)に関する。本反応物を、約１００〜１２０℃の温度で、例えばマイクロ波オーブン中で撹拌する。本反応は、窒素またはアルゴンのような不活性ガス雰囲気下に実施し得る。このタイプの反応は鈴木反応として知られ、典型的反応条件は当分野で知られており、本工程に適用し得る；
【００７８】
ここで、式IIの化合物を、式IV
【化１２】
2014530851.tif 000014
〔式中、置換基は上に定義したとおりである。〕
の化合物と、式Ｖ
【化１３】
2014530851.tif 000015
〔式中、置換基は上に定義したとおりである。〕
のアミンを、慣用的縮合条件下に反応させる工程ｂを含む方法により製造する。本反応は、カルボン酸および式Ｖのアミンを、適切な溶媒、塩化メチレンのようなハロゲン化炭化水素、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−２−メチル−ピロリドン、塩化メチレンまたはこのような溶媒の２種以上の混合物に溶解し、適切な塩基、例えばトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン(ＤＩＰＥＡ)またはＮ−メチルモルホリンおよびカルボン酸の反応性誘導体をインサイチュで形成する適切なカップリング剤、例えば(２−(１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(ＨＢＴＵ)の添加により行う。本反応混合物を約−２０〜５０℃、例えば−５℃〜３０℃、例えば０℃〜室温の温度で撹拌する。本反応を、不活性ガス雰囲気下、例えば窒素またはアルゴン下に行い得る；
【００７９】
ここで、式IVの化合物を、式VI
【化１４】
2014530851.tif 000016
〔式中、置換基は上に定義したとおりであり、ＲＡはＣ１−Ｃ７−アルキルから選択される。〕
の化合物の鹸化である工程ｃを含む方法により製造する。カルボン酸エステルの鹸化は、例えば水酸化リチウムのような塩基水溶液類および例えばジオキサンのような極性有機溶媒の存在下に行う。本反応は凡そ室温で行う。
【００８０】
ここで、式VIの化合物を、式VII
【化１５】
2014530851.tif 000017
〔式中、置換基は上に定義したとおりであり、ＲＡはＣ１−Ｃ７−アルキルおよび−Ｂ(ＯＲ')２はピナコラト−ボロンのような環状または非環状ボロン酸またはボロン酸誘導体から選択される。〕
の化合物と、６−ブロモ−４−クロロ−キナゾリン[38267-96-8]を、Ｐｄ(０)触媒、例えばジクロロジフェニルホスフィンパラジウム(ＰｄＣｌ２(ＰＰｈ３)２)のような触媒存在下、所望により、塩基、例えば塩基水溶液のような１種以上の反応助剤の存在下、所望により１種以上の希釈剤、特に極性溶媒、例えばアセトニトリルの存在下に反応させる工程ｄを含む方法により製造する。本反応物を、約１００〜１２０℃の温度で、例えばマイクロ波オーブン中で撹拌する。本反応は、窒素またはアルゴンのような不活性ガス雰囲気下に実施し得る。このタイプの反応は鈴木反応として知られ、典型的反応条件は当分野で知られており、本工程に適用し得る。
【００８１】
さらなる態様において、本発明は、式VIII
【化１６】
2014530851.tif 000018
〔式中、置換基は上に定義したとおりであり、−Ｂ(ＯＲ')２はピナコラト−ボロンのような環状または非環状ボロン酸またはボロン酸誘導体である。〕
の化合物と、式IX
【化１７】
2014530851.tif 000019
〔式中、置換基は上に定義したとおりであり、Ｈａｌはハロゲン、特にヨードまたはブロモである。〕
の化合物を、Ｐｄ(０)触媒、例えばＰｄ(ＰＰｈ３)４のような触媒の存在下、所望により、塩基、例えば塩基水溶液のような１種以上の反応助剤の存在下、所望により１種以上の希釈剤、特に極性溶媒、例えばアセトニトリルの存在下で反応させる工程ｅを含む、式(Ｉ)の化合物の製造方法(方法Ｂ)に関する。本反応物を、約１００〜１２０℃の温度で、例えばマイクロ波オーブン中で撹拌する。本反応は、窒素またはアルゴンのような不活性ガス雰囲気下に実施し得る。このタイプの反応は鈴木反応として知られ、典型的反応条件は当分野で知られており、本工程に適用し得る；
【００８２】
ここで、式VIIIの化合物を、式IIの化合物とジボロン誘導体、例えばビス−(ピナコラト)−ジボロンを、パラジウム触媒、例えば１,１−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]ジクロロパラジウム(ＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ)−ＣＨ２Ｃｌ２)の存在下、所望により、塩基、例えば酢酸カリウムのような塩基水溶液のような１種以上の反応助剤の存在下、所望により、１種以上の希釈剤、特に極性溶媒、例えばジオキサンの存在下に反応させる工程ｆを含む方法により製造する。本反応物を、約８０℃で数時間撹拌する；
【００８３】
ここで、式IIの化合物を、方法Ａの工程ｂ、ｃおよびｄを含む方法で製造する。
【００８４】
さらなる態様において、本発明は、式Ｘ
【化１８】
2014530851.tif 000020
〔式中、置換基は上に定義したとおりである。〕
の化合物と、式Ｖのアミンを、慣用的縮合条件下に反応させる工程ｇを含む、式(Ｉ)の化合物の方法(方法Ｃ)に関する。本反応は、カルボン酸および式Ｖのアミンを、適切な溶媒、塩化メチレンのようなハロゲン化炭化水素、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−２−メチル−ピロリドン、塩化メチレンまたはこのような溶媒の２種以上の混合物に溶解し、適切な塩基、例えばトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン(ＤＩＰＥＡ)またはＮ−メチルモルホリンおよびカルボン酸の反応性誘導体をインサイチュで形成する適切なカップリング剤、例えば(２−(１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(ＨＢＴＵ)の添加により行う。本反応混合物を約−２０〜５０℃、例えば−５℃〜３０℃、例えば０℃〜室温の温度で撹拌する。本反応を、不活性ガス雰囲気下、例えば窒素またはアルゴン下に行い得る；
【００８５】
ここで、式Ｘの化合物を、式XI
【化１９】
2014530851.tif 000021
〔式中、置換基は上に定義したとおりであり、ＲＡはＣ１−Ｃ７−アルキルから選択される。〕
の化合物の鹸化である工程ｈを含む方法により製造する。カルボン酸エステルの鹸化は、慣用の鹸化条件下、例えば水酸化リチウムのような塩基水溶液類および例えばジオキサンのような有機溶媒の存在下で行う。本反応は凡そ室温で行う；
【００８６】
ここで、式XIの化合物を、式VIの化合物と式IIIの化合物を、Ｐｄ(０)触媒、例えばＰｄ(ＰＰｈ３)４のような触媒の存在下、所望により、塩基、例えば塩基水溶液のような１種以上の反応助剤の存在下、所望により１種以上の希釈剤、特に極性溶媒、例えばアセトニトリルの存在下に反応させる工程ｉを含む方法により製造する。本反応物を、約１００〜１２０℃の温度で、例えばマイクロ波オーブン中で撹拌する。本反応は、窒素またはアルゴンのような不活性ガス雰囲気下に実施し得る。このタイプの反応は鈴木反応として知られ、典型的反応条件は当分野で知られており、本工程に適用し得る；
【００８７】
ここで、式VIの化合物は、方法Ａの工程ｄを含む方法により製造する。
【００８８】
さらなる態様において、本発明は、式IIの化合物とIIIの化合物を反応させる工程ａを含む式(Ｉ)の化合物の製造方法(方法Ｄ)に関し；
【００８９】
ここで、式IIの化合物は、式XI
【化２０】
2014530851.tif 000022
〔式中、置換基は上に定義したとおりであり、−Ｂ(ＯＲ')２はピナコラト−ボロンのような環状または非環状ボロン酸またはボロン酸誘導体である。〕
の化合物と６−ブロモ−４−クロロ−キナゾリン[38267-96-8]を、Ｐｄ(０)触媒、例えばジクロロジフェニルホスフィンパラジウム(ＰｄＣｌ２(ＰＰｈ３)２)のような触媒存在下、所望により、塩基、例えば塩基水溶液のような１種以上の反応助剤の存在下、所望により１種以上の希釈剤、特に極性溶媒、例えばアセトニトリルの存在下に反応させる、工程ｊを含む方法により製造する。本反応物を、約１００〜１２０℃の温度で、例えばマイクロ波オーブン中で撹拌する。本反応は、窒素またはアルゴンのような不活性ガス雰囲気下に実施し得る。このタイプの反応は鈴木反応として知られ、典型的反応条件は当分野で知られており、本工程に適用し得る；
【００９０】
ここで、式XIの化合物を、式XII
【化２１】
2014530851.tif 000023
〔式中、置換基は上に定義したとおりであり、Ｈａｌはハロゲン、特にヨードまたはブロモである。〕
の化合物と、ジボロン誘導体、例えばビス−(ピナコラト)−ジボロンを、パラジウム触媒、例えば１,１−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]ジクロロパラジウム(ＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ)−ＣＨ２Ｃｌ２)の存在下、所望により、塩基、例えば酢酸カリウムのような塩基水溶液のような１種以上の反応助剤の存在下、所望により、１種以上の希釈剤、例えば極性溶媒、例えばジオキサンの存在下に反応させる工程ｋを含む方法により製造する。本反応物を、約８０℃で数時間撹拌する；
【００９１】
ここで、式XIIの化合物を、式XIII
【化２２】
2014530851.tif 000024
〔式中、置換基は上に定義したとおりであり、Ｈａｌはハロゲン、特にヨードまたはブロモである。〕
の化合物と、式Ｖのアミンを慣用的縮合条件下で反応させる工程ｌを含む方法により製造する。本反応は、カルボン酸および式Ｖのアミンを、適切な溶媒、塩化メチレンのようなハロゲン化炭化水素、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−２−メチル−ピロリドン、塩化メチレンまたはこのような溶媒の２種以上の混合物に溶解し、適切な塩基、例えばトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン(ＤＩＰＥＡ)またはＮ−メチルモルホリンおよびカルボン酸の反応性誘導体をインサイチュで形成する適切なカップリング剤、例えば(２−(１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(ＨＢＴＵ)の添加により行う。本反応混合物を約−２０〜５０℃、例えば−５℃〜３０℃、例えば０℃〜室温の温度で撹拌する。本反応を、不活性ガス雰囲気下、例えば窒素またはアルゴン下に行い得る。
【００９２】
さらなる態様において、本発明は、式Ｘの化合物と式Ｖのアミンを反応させる工程ｇを含む、式(Ｉ)の化合物の製造方法(方法Ｅ)に関し；
【００９３】
ここで、式Ｘの化合物を式IVの化合物と式IIIの化合物を、Ｐｄ(０)触媒、例えばＰｄ(ＰＰｈ３)４のような触媒の存在下、所望により、塩基、例えば塩基水溶液のような１種以上の反応助剤の存在下、所望により１種以上の希釈剤、特に極性溶媒、例えばアセトニトリルの存在下に反応させる工程ｍを含む方法により製造する。本反応物を、約１００〜１２０℃の温度で、例えばマイクロ波オーブン中で撹拌する。本反応は、窒素またはアルゴンのような不活性ガス下に実施し得る。このタイプの反応は鈴木反応として知られ、典型的反応条件は当分野で知られており、本工程に適用し得る；
【００９４】
ここで、式IVの化合物を、式XIV
【化２３】
2014530851.tif 000025
〔式中、置換基は上に定義したとおりであり、−Ｂ(ＯＲ')２はピナコラト−ボロンのような環状または非環状ボロン酸またはボロン酸誘導体である。〕
の化合物と、６−ブロモ−４−クロロ−キナゾリン[38267-96-8]を、Ｐｄ(０)触媒、例えばジクロロジフェニルホスフィンパラジウム(ＰｄＣｌ２(ＰＰｈ３)２)のような触媒存在下、所望により、塩基、例えば塩基水溶液のような１種以上の反応助剤の存在下、所望により１種以上の希釈剤、特に極性溶媒、例えばアセトニトリルの存在下に反応させる工程ｎを含む方法により製造する。本反応物を、約１００〜１２０℃の温度で、例えばマイクロ波オーブン中で撹拌する。本反応は、窒素またはアルゴンのような不活性ガス雰囲気下に実施し得る。このタイプの反応は鈴木反応として知られ、典型的反応条件は当分野で知られており、本工程に適用し得る；
【００９５】
ここで、式XIVの化合物を、式XV
【化２４】
2014530851.tif 000026
〔式中、置換基は上に定義したとおりであり、Ｈａｌはハロゲン、特にヨードまたはブロモである。〕
の化合物とジボロン誘導体、例えばビス−(ピナコラト)−ジボロンを、パラジウム触媒、例えば１,１−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]ジクロロパラジウム(ＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ)−ＣＨ２Ｃｌ２)の存在下、所望により、塩基、例えば酢酸カリウムのような塩基水溶液のような１種以上の反応助剤の存在下、所望により、１種以上の希釈剤、例えば極性溶媒、例えばジオキサンの存在下に反応させる工程ｏを含む方法により製造する。本反応物を、約８０℃で数時間撹拌する。
【００９６】
保護基：
上記方法において、出発物質に存在し、反応に参加することを意図しない官能基は、必要であれば保護された形態で存在し、存在する保護基を開裂し、従って該出発化合物はまた塩形成基が存在し、塩形態での反応が可能であるならば、塩類の形態でも存在する。記載するとおりに実施するさらなる工程段階において、反応に参加すべきではない出発化合物の官能基は保護されていない形態でも例えば１個以上の保護基で保護された形態でも存在し得る。次いで、保護基を完全にまたは一部、知られた方法の一つにより除去する。保護基およびその導入および除去方法は、例えば、“Protective Groups in Organic Chemistry”, Plenum Press, London, New York 1973および“Methoden der organischen Chemie”, Houben-Weyl, 4th edition, Vol. 15/1, Georg-Thieme-Verlag, Stuttgart 1974 and in Theodora W. Greene, “Protective Groups in Organic Synthesis”, John Wiley & Sons, New York 1981に記載されている。容易に(すなわち望まない二次反応なしに)例えば加溶媒分解、還元、光分解により、または生理学的条件下(例えば酵素開裂により)容易に除去できるのが、保護基の特徴である。
【００９７】
本発明はさらに、任意の段階で得られる中間体生成物を出発物質として使用して残りの工程を行うかまたは出発物質を該反応条件下インサイチュで形成させるかまたは反応中間体のその塩または光学的に純粋なアンチポードとして使用するなどの変法を含む。
【００９８】
本発明の化合物および中間体はまた当業者に一般的に知られた方法に従い互いに変換もできる。
【００９９】
中間体および最終生成物は、既知方法に従い、例えば、クロマトグラフィー法、分配法、(再)結晶化などを使用して、後処理および／または精製できる。
【０１００】
以下に記載する事項は、本明細書に記載する全ての方法に一般的に適用され得る。
上記の全ての方法は、特に記載のものを含むそれ自体既知の反応条件下、例えば、使用する反応材に対しして不活性であり、それらを溶解する溶媒または希釈剤を含む、溶媒または希釈剤の非存在下または慣用的に存在下、触媒、縮合材または中和剤、例えば、イオン交換体、例えば、Ｈ＋形態の、例えばカチオン交換体の非存在下または存在下、反応および／または反応体の性質によって、低温、常温または高温で、例えば、約−１００〜１９０℃の範囲で、例えば、約−８０〜約１５０℃、例えば、−８０〜−６０℃の範囲を含み、室温で、−２０〜４０℃でまたは還流温度で、大気圧下または密閉容器中、適当であれば加圧下および／または不活性雰囲気、例えばアルゴンまたは窒素雰囲気下に、実施し得る。
【０１０１】
反応の全ての段階で、形成された異性体混合物を、個々の異性体、例えばジアステレオ異性体またはエナンチオマーにまたは任意の所望の異性体混合物、例えばラセミ体またはジアステレオ異性体に、例えば、上記方法に準じて、分割できる。
【０１０２】
何れかの特定の反応に適する溶媒をそこから選択し得る、当該溶媒は、特に記載したものまたは例えば、水、エステル類、例えば低級アルキル−低級アルカノエート類、例えば酢酸エチル、エーテル類、例えば脂肪族エーテル類、例えばジエチルエーテルまたは環状エーテル類、例えばテトラヒドロフランまたはジオキサン、液体芳香族炭化水素類、例えばベンゼンまたはトルエン、アルコール類、例えばメタノール、エタノールまたは１−または２−プロパノール、ニトリル類、例えばアセトニトリル、ハロゲン化炭化水素類、例えば塩化メチレンまたはクロロホルム、酸アミド類、例えばジメチルホルムアミドまたはジメチルアセトアミド、塩基類、例えばヘテロ環式窒素塩基類、例えばピリジンまたはＮ−メチルピロリジン−２−オン、カルボン酸無水物、例えば低級アルカン酸無水物、例えば酢酸無水物、環状、直鎖または分枝鎖炭化水素類、例えばシクロヘキサン、ヘキサンまたはイソペンタン、メチルシクロヘキサンまたはこれらの溶媒の混合物、例えば水溶液を、特定の方法において特に断らない限り、含む。このような溶媒混合物は、また例えば、クロマトグラフィーまたは分配などの後処理にも使用し得る。
【０１０３】
本化合物は、その塩を含み、水和物の形でも得られる可能性があり、またその結晶は、例えば、その結晶化に使用した溶媒を含み得る。異なる結晶形態が存在し得る。
【０１０４】
本発明は、また、方法の任意の段階で得られる中間体を出発物質として使用して残りの工程を行うかまたは出発物質を反応条件下で形成させるかまたは誘導体の形で、例えば、保護された形でまたは塩の形態で使用するかまたは本発明の方法により得られる化合物を該方法条件下で製造し、さらにインサイチュで処理する製造法の形態にも関する。
【０１０５】
本発明の化合物の合成に使用する全ての出発物質、中間体、反応材、酸、塩基、脱水剤、溶媒および触媒は市販されているかまたは当業者に既知の有機合成法により製造できる(Houben-Weyl 4th Ed. 1952, Methods of Organic Synthesis, Thieme, Volume 21)。
【０１０６】
ホスホイノシチド−３キナーゼ(ＰＩ３Ｋ)ファミリーのメンバーは、多くの種々の細胞における細胞増殖、分化、生存、細胞骨格リモデリングおよび細胞内小器官の輸送に関与する(Okkenhaug and Wymann, Nature Rev. Immunol. 3: 317 (2003))。
【０１０７】
今日まで、８種の哺乳動物ＰＩ３Ｋが同定されており、その遺伝子配列、構造、アダプター分子、発現、活性化方法および優先基質に基づき３つの主なクラス(Ｉ、IIおよびIII)に分類されている。
【０１０８】
ＰＩ３Ｋδは、チロシンキナーゼ結合受容体下流の二次メッセンジャーシグナルを産生するクラスＩ  ＰＩ３Ｋファミリー(ＰＩ３Ｋα、β、γおよびδ)に属する脂質キナーゼである。
【０１０９】
ＰＩ３Ｋδは、アダプタータンパク質およびホスファチジルイノシトール−４,５−ビス−ホスフェート(ＰｔｄＩｎｓＰ２)をホスファチジルイノシトール−３,４,５−トリ−ホスフェート(ＰｔｄＩｎｓＰ３)に変換するｐ１１０δ触媒サブユニットから成るヘテロ二量体である。エフェクタータンパク質はＰｔｄＩｎｓＰ３と相互作用し、細胞活性化、分化、遊走および細胞生存に関与する特異的シグナル伝達経路を有するする。
【０１１０】
ｐ１１０δおよびｐ１１０γ触媒サブユニットの発現は白血球に優先的である。発現はまた平滑筋細胞、筋細胞および内皮細胞でも見られる。対照的に、ｐ１１０αおよびｐ１１０βは全細胞型で発現される(Marone et al. Biochimica et Biophysica Acta 1784: 159 (2008))。
【０１１１】
ＰＩ３ＫδはＢ細胞発生および機能と関連する(Okkenhaug et al. Science 297: 1031 (2002))。
【０１１２】
Ｂ細胞は多くの自己免疫性およびアレルギー性疾患の病因ならびに移植片拒絶の過程においても重要な役割を有する(Martin and Chan, Annu. Rev. Immunol. 24: 467 (2006))。
【０１１３】
走化性は多くの自己免疫性または炎症性疾患、血管形成、侵襲／転移、神経変性または創傷治癒に関連する(Gerard et al. Nat. Immunol. 2: 108 (2001))。ケモカイン類に応答した白血球遊走の一時的に異なる事象は完全にＰＩ３ＫδおよびＰＩ３Ｋγに依存する(Liu et al. Blood 110: 1191 (2007))。
【０１１４】
ＰＩ３ＫαおよびＰＩ３Ｋβは、ホメオスタシス維持に必須の役割を有し、これらの分子標的の薬理学的阻害は癌治療と関連する(Maira et al. Expert Opin. Ther. Targets 12: 223 (2008))。
【０１１５】
ＰＩ３Ｋαはインスリンシグナル伝達および細胞増殖経路と関連する(Foukas et al. Nature 441: 366 (2006))。ＰＩ３Ｋδアイソフォーム選択的阻害は、高血糖および代謝または増殖調節障害のような可能性のある副作用を避けることが期待される。
【０１１６】
本発明は、第三の面において、医薬としての本発明の化合物の使用に関する。特に、式(Ｉ)の化合物は、本明細書に記載するとおり価値ある薬理学的特性を有する。本発明は、それゆえに、次に掲げる成果を提供する：
・  医薬としての／医薬として使用するためのここで定義する式(Ｉ)の化合物；
・  薬物としての／薬物として使用するためのここで定義する式(Ｉ)の化合物；
・  ＰＩ３Ｋ酵素類の活性、好ましくはＰＩ３Ｋδの活性が介在する状態、疾患または障害の予防および／または処置のための、ここで定義する式(Ｉ)の化合物；
・  ＰＩ３Ｋ酵素類の活性、好ましくはＰＩ３Ｋδの活性が介在する状態、疾患または障害の予防および／または処置用医薬の製造のための、ここで定義する式(Ｉ)の化合物の使用；
・  ＰＩ３Ｋ酵素類の活性、好ましくはＰＩ３Ｋδの活性が介在する状態、疾患または障害の予防および／または処置のための、ここで定義する式(Ｉ)の化合物の使用；
・  ＰＩ３Ｋ酵素類、好ましくはＰＩ３Ｋδの阻害のための、ここに定義する式(Ｉ)の化合物の使用；
・  自己免疫性障害、炎症性疾患、アレルギー性疾患、喘息およびＣＯＰＤのような気道疾患、移植片拒絶、例えば造血器起源の癌または固形腫瘍から選択される障害または疾患の処置のための、ここで定義する式(Ｉ)の化合物の使用；
・  対象におけるＰＩ３Ｋ酵素類、好ましくはＰＩ３Ｋδの活性を調節する方法であって、対象にここに定義する式(Ｉ)の化合物の治療有効量を投与する過程を含む、方法；
・  ＰＩ３Ｋ酵素類、好ましくはＰＩ３Ｋδが介在する障害または疾患の処置方法であって、対象にここに定義する式(Ｉ)の化合物の治療有効量を投与する過程を含む、方法；
・  細胞におけるＰＩ３Ｋ酵素類、好ましくはＰＩ３Ｋδの阻害方法であって、該細胞とここに定義する式(Ｉ)の化合物の有効量を接触させることを含む、方法。
【０１１７】
ここで使用する用語“対象”は動物を言う。典型的に動物は哺乳動物である。対象はまた例えば霊長類(例えば、ヒト)、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、マウス、魚類、鳥類などを言う。ある態様において、対象は霊長類である。さらに他の態様において、対象はヒトである。
【０１１８】
ここで使用する用語“阻害”または“阻害する”は、ある状態、症状または障害もしくは疾患の軽減または抑制または生物学的活性または過程のベースライン活性の顕著な減少を意味する。
【０１１９】
ここで使用する何らかの疾患または障害の“処置”または“処置する”なる用語は、一つの態様において、疾患または障害を寛解させる(すなわち、疾患またはその臨床的症状の少なくとも一つの進行を遅延させるまたは停止させるまたは軽減させる)ことを言う。他の態様において、“処置”または“処置する”は、患者が認識できないものも含む身体パラメータの少なくとも一つの軽減または改善を言う。さらに他の態様において、“処置”または“処置する”は、身体的(例えば、認識できる症状の安定化)または生理学的(例えば、身体パラメータの安定化)のいずれかあるいは両者での、疾患または障害の調節を言う。さらに他の態様において、“処置”または“処置する”は、疾患または障害の発現、発症または進行の予防または遅延を言う。
【０１２０】
ここで使用する対象は、このような対象が生物学的に、医学的にまたはクオリティ・オブ・ライフの点でこのような処置による利益を得るならば、“処置を必要とする”。
【０１２１】
対象化合物の“投与”または“投与する”なる用語は、本発明の化合物およびそのプロドラッグの、処置を必要とする対象への提供を意味する。１種以上のさらなる治療剤と“組み合わせた”投与は、任意の順番および任意の投与経路での同時(一緒)および連続的投与を含む。
【０１２２】
本発明は、ＰＩ３Ｋ酵素類の活性が介在する状態、疾患または障害の予防および／または処置のための新規キナゾリン誘導体の使用に関する。
【０１２３】
本発明は、リウマチ性関節炎、尋常性天疱瘡、特発性血小板減少性紫斑病、全身性エリテマトーデス、多発性硬化症、重症筋無力症、シェーグレン症候群、自己免疫性溶血性貧血、ＡＮＣＡ関連脈管炎、クリオグロブリン血症、血栓性血小板減少性紫斑病、慢性自己免疫性蕁麻疹、アレルギー(アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、アレルギー性鼻炎)、グッドパスチャー症候群および造血器起源の癌を含む、抗体産生、抗原提示、サイトカイン産生またはリンパ系器官形成のようなＢ細胞の炎症性機能の１種以上が異常であるかまたは望ましくない状態、疾患または障害の処置方法を含む。
【０１２４】
本発明は、リウマチ性関節炎、敗血症、喘息のような肺または呼吸器の障害、乾癬またはその他の疾患を含む炎症性皮膚疾患、スーパーオキシド産生、刺激された表皮内細胞浸潤または化学誘引遊走のような好中球の炎症性機能の１種以上が異常であるかまたは望ましくない状態、疾患または障害の処置方法を含む。
【０１２５】
本発明は、アレルギー性疾患(アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、アレルギー性鼻炎)ならびにＣＯＰＤ、喘息または気腫のような他の障害を含む、化学誘引遊走またはアレルゲン−ＩｇＥ介在脱顆粒のような好塩基球および肥満細胞の炎症性機能の１種以上が異常であるかまたは望ましくない状態、疾患または障害の処置方法を含む。
【０１２６】
本発明は、リウマチ性関節炎、多発性硬化症、細胞、組織または臓器移植の急性または慢性拒絶反応または造血器起源の癌を含む、サイトカイン産生または細胞介在細胞毒性のようなＴ細胞の炎症性機能の１種以上が異常であるかまたは望ましくない状態、疾患または障害の処置方法を含む。
【０１２７】
さらに、本発明は、神経変性疾患、心血管疾患および血小板凝集の処置方法を含む。
【０１２８】
さらなる態様において、本発明は、上記障害または疾患、特にＰＩ３Ｋ酵素類の阻害に応答する疾患の１種以上を処置する過程または方法に関する。式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩をそのまままたは医薬組成物の形態で、予防的にまたは治療的に、好ましくは該疾患に対する有効量で、このような処置を必要とする温血動物、例えばヒトに投与でき、該化合物は特に医薬組成物の形態で使用する。
【０１２９】
さらなる態様において、本発明は、ＰＩ３Ｋ酵素類が介在する上記疾患の１種以上の治療的およびまた予防的管理のための、式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩そのまままたは少なくとも１種の薬学的に許容される担体との医薬組成物の形態の使用に関する。
【０１３０】
さらなる態様において、本発明は、上記疾患、特に自己免疫性障害、炎症性疾患、アレルギー性疾患、喘息およびＣＯＰＤのような気道疾患、移植片拒絶、例えば造血器起源の癌または固形腫瘍から選択される障害または疾患の１種以上の治療的およびまた予防的管理のための医薬組成物の製造のための、式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩、特に好ましいとされる式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩の使用に関する。
【０１３１】
本発明は、第四の面において、本発明の化合物を含む医薬組成物に関する。本発明は、それゆえに次のものを提供する：
・  ここに定義する化合物および１種以上の担体／添加物を含む(すなわち包含するまたはから成る)医薬組成物；
・  治療有効量のここに定義する式(Ｉ)の化合物および１種以上の薬学的に許容される担体／添加物を含む医薬組成物。
【０１３２】
ここで使用する用語“薬学的に許容される担体”は、当業者に知られるとおり、任意のおよび全ての溶媒、分散媒体、コーティング剤、界面活性剤、抗酸化剤、防腐剤(例えば、抗細菌剤、抗真菌剤)、等張剤、吸収遅延剤、塩類、防腐剤、薬物、薬物安定化剤、結合剤、添加物、崩壊剤、滑沢剤、甘味剤、風味剤、色素などおよびこれらの組み合わせを含む(例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed. Mack Printing Company, 1990, pp. 1289 - 1329参照)。任意の慣用の担体が活性成分と不適合でない限り、治療または医薬組成物におけるその使用が意図される。
【０１３３】
本発明は、本発明の化合物および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。医薬組成物は、経口投与、非経腸投与および直腸投与などのような特定の投与経路用に製剤でき、さらに、本発明の医薬組成物は固体形態(カプセル剤、錠剤、丸剤、顆粒剤、散剤または坐薬を含むが、これらに限定されない)または液体形態(溶液剤、懸濁液剤またはエマルジョン剤を含むが、これらに限定されない)に製剤できる。医薬組成物を通常の操作、例えば滅菌に付してよく、また通常の不活性希釈剤、滑剤または緩衝化剤、あるいはアジュバント、例えば防腐剤、安定化剤、湿潤剤、乳化剤および緩衝液などを加えてもよい。
【０１３４】
典型的に、医薬組成物は、有効成分を
ａ)  希釈剤、例えば、ラクトース、デキストロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロースおよび／またはグリシン；
ｂ)  滑剤、例えば、シリカ、タルク、ステアリン酸、そのマグネシウム塩またはカルシウム塩および／またはポリエチレングリコール；錠剤についてはまた
ｃ)  結合剤、例えば、ケイ酸アルミニウム・マグネシウム、デンプンペースト、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロースおよび／またはポリビニルピロリドン；所望により
ｄ)  崩壊剤、例えば、デンプン類、寒天、アルギン酸またはそのナトリウム塩または起沸性混合物；および／または
ｅ)  吸収剤、着色剤、風味剤および甘味剤と共に含む錠剤またはゼラチンカプセル剤である。
【０１３５】
錠剤は当分野で知られている方法に従って、フィルムコートされていても、腸溶性コートされてもよい。
【０１３６】
経口投与用の適当な組成物は、錠剤、ロゼンジ、水性または油性懸濁液、分散性粉末または顆粒、エマルジョン、硬または軟カプセルまたはシロップまたはエリキシルの形で有効量の本発明の化合物を含む。経口使用が意図される組成物は医薬組成物の製造の分野で知られている方法に従い製造し、このような組成物は、薬学的に洗練され、のみやすい製剤を提供するために甘味剤、風味剤、着色剤および防腐剤からなる群から選択される１種以上の薬物を含み得る。錠剤は、有効成分を、錠剤の製造に適する非毒性の薬学的に許容される添加物と共に含む。これらの添加物は、例えば、不活性希釈剤、例えば炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウムまたはリン酸ナトリウム；造粒および崩壊剤、例えば、コーンデンプンまたはアルギン酸；結合剤、例えば、デンプン、ゼラチンまたはアカシア；および滑剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはタルクである。錠剤は、コーティングされていないかまたは消化管での消化および吸収を遅延させ、それにより長期間にわたる持続作用を提供するための既知方法でコーティングされている。例えば、モノステアリン酸グリセリルまたは二ステアリン酸グリセリルのような時間遅延物質を用い得る。経口使用用製剤は、有効成分が不活性固体希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウムまたはカオリンと混合されている硬ゼラチンカプセルとしてまたは有効成分が水または油媒体、例えば、ピーナツ油、液体パラフィンまたはオリーブ油と混合されている軟ゼラチンカプセルとして製剤される。
【０１３７】
ある種の注射用組成物は、水性等張溶液または懸濁液であり、坐薬は有利には脂肪エマルジョンまたは懸濁液から製造される。該組成物は滅菌してよく、またアジュバント、例えば防腐、安定化剤、湿潤剤または乳化剤、溶解促進剤、浸透圧調整用塩類および／または緩衝剤を含んでよい。さらに、それらはまた他の治療的に価値ある物質も含み得る。該組成物は、それぞれ通常の混合、造粒またはコーティング法により製造し、約０.１〜７５％または約１〜５０％の有効成分を含む。
【０１３８】
経皮適用のための適当な組成物は、有効量の本発明の化合物と担体を含む。担体は、宿主の皮膚を通過するのを助けるための吸収性の薬理学的に許容される溶媒を含む。例えば、経皮デバイスは、裏打ち部材、化合物を所望により担体と共に含む貯蔵部、場合により化合物を宿主皮膚へ制御され、かつ予定された速度で長時間にわたり送達するための速度制御バリアおよび該デバイスを皮膚に固定するための手段を含む、バンデージの形態である。
【０１３９】
例えば、皮膚および眼への局所適用に適当な組成物は、水溶液、懸濁液、軟膏、クリーム、ゲルまたは例えばエアロゾルなどによる送達のための噴霧可能製剤を含む。このような局所送達システムは、例えば、皮膚癌の処置のための、例えば、日焼け止めクリーム、ローション、スプレーなどにおける予防的使用のための経皮適用に特に適する。それゆえに、それらは特に当分野で知られている、化粧用を含む局所製剤における使用に特に適する。それらは可溶化剤、安定化剤、張性増加剤、緩衝剤および防腐剤を含んでよい。
【０１４０】
ここで使用する局所適用は、吸入または鼻腔内適用にも関する。それらは、好都合には、乾燥粉末の形で(単独で、混合物として、例えばラクトースとの乾燥混合物でまたは例えばリン脂質との混合成分粒子として)乾燥粉末吸入器からまたは適当な噴射剤を含みまたは含まずに、加圧容器、ポンプ、スプレー、アトマイザーまたはネブライザーからのエアロゾルスプレーの形で送達される。
【０１４１】
本発明はさらに、水がある種の化合物の分解を加速し得るため、本発明の化合物を有効成分として含む無水医薬組成物および投与形態を提供する。
【０１４２】
本発明の無水医薬組成物および投与形態は、無水または低水分含有成分および低水分または低湿度条件を使用して製造できる。無水医薬組成物は、その無水性が維持されるように製造および貯蔵し得る。したがって、無水組成物を、適当な製剤キットに入れることができるように、水への暴露を阻止する既知材料を使用して包装される。適当な包装の例は、密閉ホイル、プラスチック類、単位投与量容器(例えば、バイアル)、ブリスターパックおよびストリップパックを含むが、これらに限定されない。
【０１４３】
本発明は、さらに、有効成分としての本発明の化合物の分解速度を制御する１種以上の薬剤を含む医薬組成物および投与形態を提供する。ここで“安定化剤”と呼ぶこのような薬剤は、抗酸化剤、例えばアスコルビン酸、ｐＨ緩衝剤または塩緩衝剤などを含むが、これらに限定されない。
【０１４４】
生理学的に許容される担体の例は、リン酸、クエン酸および他の有機酸類のような緩衝液；アスコルビン酸を含む抗酸化剤；低分子量(約１０残基未満)ポリペチド；血清アルブミン、ゼラチンまたは免疫グロブリン類のようなタンパク質；ポリビニルピロリドンのような親水性重合体；グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニンまたはリシンのようなアミノ酸類；グルコース、マンノースまたはデキストリン類を含む単糖類、二糖類および他の炭水化物；ＥＤＴＡのようなキレート剤；マンニトールまたはソルビトールのような糖アルコール類；ナトリウムのような塩形成カウンターイオン類；および／またはTWEEN(登録商標)、ポリエチレングリコール(ＰＥＧ)およびPLURONICS(登録商標)のような非イオン性界面活性剤を含む。
【０１４５】
適切な添加物／担体は、当業者に一般的に利用可能なあらゆる固体、液体、半固体、またはエアロゾル組成物の場合、ガス状添加物であり得る。
【０１４６】
固体医薬添加物はデンプン、セルロース、タルク、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、コメ、小麦、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、塩化ナトリウム、脱脂粉乳などを含む。
【０１４７】
液体および半固体添加物はグリセロール、プロピレングリコール、水、エタノールおよび石油、動物、植物または合成起源、例えば、ピーナツ油、ダイズ油、鉱油、ゴマ油などを含む種々の油類から選択し得る。特に注射液のための、好ましい液体担体は水、食塩水、デキストロース水溶液およびグリコール類を含む。
【０１４８】
圧縮ガスをエアロゾル形態の式(Ｉ)の化合物の分散に使用し得る。この目的に適する不活性ガスは、窒素、二酸化炭素などである。他の適切な医薬添加物およびそれらの製剤は、Remington's Pharmaceutical Sciences, edited by E. W. Martin (Mack Publishing Company, l8th ed., l990)に記載されている。
【０１４９】
活性成分の投与量は処置する疾患および種、その年齢、体重および個々の状態、個々の薬物動態データおよび投与方法による。製剤中の化合物の量は、当業者が用いる全ての範囲で変わり得る。典型的に、製剤は重量パーセント(ｗｔ％)基準で、全製剤に対して約０.０１〜９９.９９wt％の式(Ｉ)の化合物を含み、残りは１種以上の適切な医薬添加物である。
【０１５０】
ここで定義する式(Ｉ)の化合物を少なくとも１種の医薬上許容される担体(例えば添加物および／または希釈剤)と共に含む医薬組成物は、慣用法で、例えば慣用の混合、造粒、コーティング、溶解または凍結乾燥工程により製造し得る。
【０１５１】
さらなる態様において、本発明は、温血動物、特にＰＩ３Ｋ酵素類の阻害に応答する疾患を有するヒトまたは商業的に有用な哺乳動物に投与するための、ＰＩ３Ｋ酵素類阻害のための有効量の式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩を少なくとも１種の薬学的に許容される担体と共に含む、医薬組成物に関する。
【０１５２】
さらなる態様において、本発明は、温血動物、特にこのような処置を必要とするヒトまたは商業的に有用な哺乳動物の、自己免疫性障害、炎症性疾患、アレルギー性疾患、喘息およびＣＯＰＤのような気道疾患、移植片拒絶、例えば造血器起源の癌または固形腫瘍から選択される障害または疾患の予防的または特に治療的管理のための医薬組成物に関する。
【０１５３】
本発明は、第五の面において、式(Ｉ)の化合物および１種以上の付加的活性成分を含む、組み合わせに関する。本発明は、それゆえに次の掲げるものを提供する：
・  治療有効量の式(Ｉ)の化合物および１種以上の治療活性剤、例えば、下に示す、例えば免疫抑制剤、免疫調節剤、抗炎症性または化学療法剤を含む、組み合わせ剤、特に医薬組み合わせ剤；
・  治療有効量のここで定義する式(Ｉ)の化合物；治療有効量の１種以上の組み合わせ相手、例えば免疫抑制剤、免疫調節剤、抗炎症性または化学療法剤；１種以上の薬学的に許容される賦形剤を含む、同時または逐次投与に適する、組み合わせ医薬組成物；
・  (ｉ)医薬としての、(ii)ＰＩ３Ｋ酵素類が介在する疾患の処置に使用するための、(iii)ＰＩ３Ｋ酵素類が介在する疾患の処置方法における、組み合わせ医薬組成物。
【０１５４】
“組み合わせ剤”により、一投与単位形態の固定された組み合わせ剤または式(Ｉ)の化合物および組み合わせ相手を独立して同時にまたは特に組み合わせ相手が協調、例えば相乗効果を示すことが環状な間隔で別々に投与し得る組合せ投与のためのキット・オブ・パーツを意味する。
【０１５５】
本発明の化合物の“治療有効量”なる用語は、対象において、生物学的または医学的応答、例えば、酵素またはタンパク質活性の低下または阻害または症状の改善、状態の軽減、疾患進行減速または遅延または疾患予防などを生じさせる本発明の化合物の量を意味する。特に限定されていない態様において、用語“治療有効量”は、対象に投与したとき、(１)(ｉ)ＰＩ３Ｋデルタの調節不全が介在するまたは(ii)ＰＩ３Ｋデルタの調節不全が関連するまたは(iii)ＰＩ３Ｋデルタの調節不全により特徴付けられる状態または障害または疾患を少なくとも一部軽減、阻害、予防および／または改善する；または(２)ＰＩ３Ｋデルタの活性を低下または阻害する、本発明の化合物の量を意味する。特に限定されていない他の態様において、用語“治療有効量”は、細胞または組織または非細胞性生物学的物質または培地に添加したとき、ＰＩ３Ｋデルタの活性を少なくとも一部低下または阻害するのに有効な本発明の化合物の量を意味する。
【０１５６】
式(Ｉ)の化合物を唯一の活性成分としてまたは、例えば同種または異種移植片急性または慢性拒絶反応または炎症性または自己免疫性障害の処置または予防のために、他の薬物、例えば免疫抑制剤または免疫調節剤または他の抗炎症剤または化学療法剤と共に、例えば悪性細胞抗増殖剤と共に、例えばアジュバントとして投与してよい。例えば、式(Ｉ)の化合物を、カルシニューリン阻害剤、例えばシクロスポリンＡまたはFK 506；ｍＴＯＲ阻害剤、例えばラパマイシン、４０−Ｏ−(２−ヒドロキシエチル)−ラパマイシン、CCI779、ABT578、AP23573、バイオリムス−７またはバイオリムス−９；免疫抑制特性を有するアスコマイシン、例えばABT-281、ASM981など；コルチコステロイド；シクロホスファミド；アザチオプレン；メトトレキサート；レフルノミド；ミゾルビン；ミコフェノール酸または塩；ミコフェノール酸モフェチル；１５−デオキシスペルグアリンまたはその免疫抑制性ホモログ、アナログまたは誘導体；例えばＷＯ０２／３８５６１またはＷＯ０３／８２８５９に開示される、ＰＫＣ阻害剤、例え実施例５６または７０の化合物；ＪＡＫ３キナーゼ阻害剤、例えばＮ−ベンジル−３,４−ジヒドロキシ−ベンジリデン−シアノアセトアミドα−シアノ−(３,４−ジヒドロキシ)−]Ｎ−ベンジルシンナムアミド(チロホスチンAG 490)、プロジギオシン２５−Ｃ(PNU156804)、[４−(４'−ヒドロキシフェニル)−アミノ−６,７−ジメトキシキナゾリン](WHI-P131)、[４−(３'−ブロモ−４'−ヒドロキシルフェニル)−アミノ−６,７−ジメトキシキナゾリン](WHI-P154)、[４−(３',５'−ジブロモ−４'−ヒドロキシルフェニル)−アミノ−６,７−ジメトキシキナゾリン]WHI-P97、KRX-211、遊離形態または薬学的に許容される塩形態、例えば一クエン酸塩の３−{(３Ｒ,４Ｒ)−４−メチル−３−[メチル−(７Ｈ−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−４−イル)−アミノ]−ピペリジン−１−イル}−３−オキソ−プロピオニトリル(別名CP-690,550)またはＷＯ０４／０５２３５９またはＷＯ０５／０６６１５６に開示された化合物；免疫抑制性モノクローナル抗体、例えば、白血球受容体、例えば、ＭＨＣ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ８、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ４０、ＣＤ４５、ＣＤ５２、ＣＤ５８、ＣＤ８０、ＣＤ８６またはそれらのリガンドに対するモノクローナル抗体；他の免疫調節性化合物、例えばＣＴＬＡ４またはその変異体の細胞外ドメインの少なくとも一部、例えば非ＣＴＬＡ４タンパク質配列に結合したＣＴＬＡ４またはその変異体の少なくとも細胞外部分を有する組み換え結合分子、例えばCTLA4Ig(例えばATCC 68629と命名)またはその変異体、例えばLEA29Y；接着分子阻害剤、例えばＬＦＡ−１アンタゴニスト、ＩＣＡＭ−１または−３アンタゴニスト、ＶＣＡＭ−４アンタゴニストまたはＶＬＡ−４アンタゴニスト；または化学療法剤、例えばパクリタキセル、ゲムシタビン、シスプラスチン、ドキソルビシンまたは５−フルオロウラシル；または抗ヒスタミン類；または鎮咳剤または気管支拡張剤；またはアンギオテンシン受容体ブロッカー；または抗感染剤と組み合わせて使用し得る。
【０１５７】
式(Ｉ)の化合物を他の免疫抑制性／免疫調節剤、抗炎症剤、化学療法剤または抗感染性治療剤と組み合わせて投与するとき、併用する免疫抑制剤、免疫調節剤、抗炎症剤、化学療法剤または抗感染性治療剤の投与量は、当然、用いる併用剤のタイプ、例えばステロイドであるか、カルシニューリン阻害剤であるか、用いる具体的薬物、処置する状態などにより変わる。
【０１５８】
実験の詳細：
出発物質の製造が特に記載されていない限り、該化合物は知られているかまたは当分野で知られたまたは後記する方法に準じて製造し得る。
【０１５９】
以下の実施例は、いかなる限定もせず、本発明を説明する。
【０１６０】
略語：
【表１】
2014530851.tif 000027
【０１６１】
全化合物はAutoNomを使用して命名した。
【０１６２】
ＬＣの詳細：
ＬＣ方法１(Ｒｔ(１))：保持時間(Ｒｔ)を、Waters HPLC alliance−ＨＴシステムとXBridge MSカラムC18 30/3.0 2.5mで、Ｈ２Ｏ(＋０.１％ギ酸)／ＣＨ３ＣＮ(＋０.１％ギ酸)９０／１０〜５／９５を１.７分間の勾配で適用し、溶媒流速として１.２mL／分および４０℃のオーブン温度で得た。
【０１６３】
ＬＣ方法２(Ｒｔ(２))：保持時間(Ｒｔ)を、Waters HPLC alliance−ＨＴシステムとXBridge MSカラムC18 30/3.0 2.5mで、Ｈ２Ｏ(＋０.１％ＴＦＡ)／ＣＨ３ＣＮ(＋０.１％ＴＦＡ)  ９０／１０〜５／９５を１.７分間の勾配で適用し、溶媒流速として１.２mL／分および４０℃のオーブン温度で得た。
【０１６４】
ＬＣ方法３(Ｒｔ(３))：保持時間(Ｒｔ)を、Waters HPLC alliance−ＨＴシステムとXBridge MSカラムC18 30/3.0 2.5mで、Ｈ２Ｏ(＋０.１％ＴＦＡ)／ＣＨ３ＣＮ(＋０.１％ＴＦＡ)  ９５／５〜５／９５を３.７分間の勾配で適用し、溶媒流速として１.２mL／分および４０℃のオーブン温度で得た。
【０１６５】
ＬＣ方法４(Ｒｔ(４))：保持時間(Ｒｔ)を、Waters HPLC alliance−ＨＴシステムとSunFireカラムC18 20×4.6mmmで、Ｈ２Ｏ(＋０.１％ＴＦＡ)／ＣＨ３ＣＮ(＋０.１％ＴＦＡ)  ９５／５〜０／１００を４分間の勾配で適用し、溶媒流速として１mL／分および４５℃のオーブン温度で得た。
【０１６６】
ＬＣ方法５(Ｒｔ(５))：保持時間(Ｒｔ)を、Waters UPLC-MSシステムとAcquity UPLC BEH C18 50×2.1mm、1.7μmカラムで、Ｈ２Ｏ(＋０.１％ギ酸)／ＣＨ３ＣＮ(＋０.１％ギ酸)９５／５  ｔｏ  １０／９０を４分間の勾配で適用し、溶媒流速として０.７mL／分および３０℃のオーブン温度で得た。
【０１６７】
ＬＣ方法６(Ｒｔ(６))：保持時間(Ｒｔ)を、Waters UPLC-MSシステムとAcquity UPLC BEH C18 50×2.1mm、1.7μmカラムで、Ｈ２Ｏ(＋０.１％ギ酸)／ＣＨ３ＣＮ(＋０.１％ギ酸)８０／２０〜５／９５を４.２分間の勾配で適用し、溶媒流速として０.７mL／分および３０℃のオーブン温度で得た。
【０１６８】
ＬＣ方法７(Ｒｔ(７))：保持時間(Ｒｔ)を、Waters HPLC alliance−ＨＴシステムとXBridge MSカラムC18 30/3.0 2.5mで、Ｈ２Ｏ(＋０.１％ギ酸)／ＣＨ３ＣＮ(＋０.１％ギ酸)９５／５〜５／９５を３.７分間の勾配で適用し、溶媒流速として１.２mL／分および４０℃のオーブン温度で得た。
【０１６９】
ＬＣ方法８(Ｒｔ(８))：保持時間(Ｒｔ)を、Waters HPLC alliance−ＨＴシステムとXBridge MSカラムC18 30/3.0 2.5mで、Ｈ２Ｏ(＋０.１％ギ酸)／ＣＨ３ＣＮ(＋０.１％ギ酸)９９／１〜５／９５を２.２分間の勾配で適用し、溶媒流速として１.２mL／分および４０℃のオーブン温度で得た。
【０１７０】
ＬＣ方法９(Ｒｔ(９))：保持時間(Ｒｔ)を、Waters HPLC alliance−ＨＴシステムとXBridge MSカラムC18 30/3.0 2.5mで、勾配Ｈ２Ｏ(＋０.１％ＴＦＡ)／ＣＨ３ＣＮ(＋０.１％ＴＦＡ)  ９９／１〜５／９５を２.２分間の勾配で適用し、溶媒流速として１.２mL／分および４０℃のオーブン温度で得た。
【０１７１】
ＬＣ方法１０(Ｒｔ(１０))：FIA-MS (MS)をWaters HPLC-MS装置で得た。
【実施例】
【０１７２】
中間体化合物の製造
中間体１：５−ブロモ−２−メトキシ−３−トリフルオロメチル−ピリジン
【化２５】
2014530851.tif 000028
２−メトキシ−３−トリフルオロメチル−ピリジン(２.７ｇ、１４.７９mmol)および１,３−ジブロモ−５,５−ジメチルヒダントイン(５.２８ｇ、１８.４８mmol)を丸底フラスコに入れた。この混合物にＴＦＡ(４０ml)をゆっくり添加した。混合物を一夜、環境温度で撹拌した(１６時間)。反応完了後、ＴＦＡ溶媒を減圧下蒸発させ、得られた残渣を飽和ＮａＨＣＯ３の添加によりｐＨ６〜７に中和した。水層をＤＣＭで２回抽出し、併せた抽出物を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮して、油状物と白色固体の混合物を得た。残渣を２０％酢酸エチル／ヘプタン(５０ml)に再溶解し、不溶性白色固体を濾別した。濾液を濃縮し、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ＥｔＯＡｃ／ヘプタン５／９５)で精製して、５−ブロモ−２−メトキシ−３−トリフルオロメチル−ピリジンを無色液体として得た(２.０８ｇ、５２％収率)。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 4.03 (s, 3H) 7.95 (d, 1H) 8.4 (d, 1H)
【０１７３】
２−メトキシ−３−トリフルオロメチル−ピリジン
【化２６】
2014530851.tif 000029
２−クロロ−３−トリフルオロメチル−ピリジン(３ｇ、１６.５３mmol)を、ナトリウムメトキシド(５.４Ｍ)のメタノール溶液(３０ml)に溶解した。混合物を環境温度で２日間撹拌した。この後、反応物を氷に入れ、ＤＣＭで３回抽出した。併せた抽出物を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮して、２−メトキシ−３−トリフルオロメチル−ピリジンを軽液体として得た(２.７ｇ、８９％収率)。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 3.98 (s, 3H) 7.2 (dd, 1H) 8.11 (d, 1H) 8.45 (d, 1H). MS: 178.1 [M+1]+, Rt(1) = 1.29 min
【０１７４】
中間体２：５−ブロモ−２−エトキシ−３−トリフルオロメチル−ピリジン
【化２７】
2014530851.tif 000030
中間体２を、中間体１に記載の方法に準じて、ナトリウムエトキシドのエタノール溶液をナトリウムメトキシド溶液の代わりに使用して、製造した。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δppm 1.33 (t, 4 H) 4.45 (q, 3 H) 8.31 (s, 1 H) 8.58 (s, 1 H)
【０１７５】
中間体３：１−[４−(５−ブロモ−２−メチル−ベンゾイル)−ピペラジン−１−イル]−エタノン
【化２８】
2014530851.tif 000031
５−ブロモ−２−メチル安息香酸(２.０ｇ、９.３０mmol)のＤＣＭ(２５mL)中の混合物ｊに、ＤＩＰＥＡ(３.２５mL、１８.６０mmol)およびＨＢＴＵ(４.２３ｇ、１１.１６mmol)をｒｔで添加した。反応混合物をｒｔで２０分間撹拌した。混合物に１−(ピペラジン−１−イル)エタノン(１.３１１ｇ、１０.２３mmol)を添加し、反応混合物をｒｔで１時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で反応停止させ、ＤＣＭで抽出した。有機層を塩水で２回洗浄し、層分離カートリッジを通して乾燥し、蒸発させた。Biotage Isoleraシステム(アミン官能化シリカKP-NH、シクロヘキサン／ＥｔＯＡｃ  ０〜１００％で溶出)を使用するフラッシュクロマトグラフィーで精製して、表題化合物(２.４７５ｇ、８２％収率)を白色泡状物として得た。MS: 325.4 [M+1]+, Rt(2) = 0.94 min
【０１７６】
中間体４：１−[４−(３−ブロモ−５−トリフルオロメチル−ベンゾイル)−ピペラジン−１−イル]−エタノン
【化２９】
2014530851.tif 000032
中間体４を、中間体３に記載の方法に準じて、３−ブロモ−５−トリフルオロメチル安息香酸を５−ブロモ−２−メチル安息香酸の代わりに使用して製造した。MS: 379.3-381.3 [M+H]+, Rt(2) = 1.129 min
【０１７７】
中間体５：１−[４−(３−ブロモ−５−メトキシ−ベンゾイル)−ピペラジン−１−イル]−エタノン
【化３０】
2014530851.tif 000033
中間体５を、中間体３に記載の方法に準じて、３−ブロモ−５−メトキシ安息香酸(中間体１７)を５−ブロモ−２−メチル安息香酸の代わりに使用して製造した。MS: 343.2 [M+H]+, Rt(2) = 1.02 min
【０１７８】
中間体６：１−[４−(３−ブロモ−５−メチル−ベンゾイル)−ピペラジン−１−イル]−エタノン
【化３１】
2014530851.tif 000034
中間体６を、中間体３に記載の方法に準じて、３−ブロモ−５−メトキシ安息香酸(中間体１７)を５−ブロモ−２−メチル安息香酸の代わりに使用して製造した。MS: 325.2-327.1 [M+H]+, Rt(2) = 0.98 min
【０１７９】
中間体７：１−[４−(３−ブロモ−５−クロロ−ベンゾイル)−ピペラジン−１−イル]−エタノン
【化３２】
2014530851.tif 000035
中間体７を、中間体３に記載の方法に準じて、３−ブロモ−５−メトキシ安息香酸(中間体１７)を５−ブロモ−２−メチル安息香酸の代わりに使用して製造した。MS: 345.2-347.1-349.0 [M+H]+, Rt(2) = 1.02 min
【０１８０】
中間体８：Ｎ−(４−ブロモ−２−(トリフルオロメチル)フェニル)メタンスルホンアミド
【化３３】
2014530851.tif 000036
２−アミノ−５−ブロモベンゾトリフルオライド(１.０ｇ、４.１７mmol)のＤＣＭ(１０mL)中の混合物に、０〜５℃で、ＮＥｔ３(１.１６mL、８.３３mmol)、次いで塩化メタンスルホニル(０.３８９mL、５mmol)を滴下した。反応混合物をｒｔで４日間撹拌した。２日間後、さらにＮＥｔ３(１.１６mL、８.３３mmol)を添加した。３日間後に進展がなかったため、さらにＮＥｔ３(０.５８０mL、４.１７mmol)および塩化メタンスルホニル(０.３２４mL、４.１７mmol)を添加した。反応が完了しなかったために、反応混合物をマイクロ波オーブンで１１０℃で２０分間加熱した。進展がなかったため、反応を停止させた。反応混合物を水およびＤＣＭで希釈した。層を分離した。有機層を水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、蒸発させた。CombiFlash Companion ISCOシステム(Redisepシリカ４０ｇカラム、シクロヘキサン／ＥｔＯＡｃ  １００：０〜７０：３０で溶出)を使用するフラッシュクロマトグラフィーでの精製で純粋化合物は得られなかった。Gilsonシステム(SunFire C18カラム、Ｈ２Ｏ＋０.１％ＴＦＡ／ＣＨ３ＣＮ  ２０％〜８５％で溶出)を使用する分取ＨＰＬＣでの精製により、表題化合物(４０４mg、３１％収率)を白色固体として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 3.12 (s, 3H) 7.55 (d, 1H) 7.91 (d, 1H) 7.92 (s, 1H) 9.56 (s, 1H). MS(10): 316.3-318.2 [M-1]-
【０１８１】
中間体９：Ｎ−(３−ブロモ−５−(トリフルオロメチル)フェニル)メタンスルホンアミド
【化３４】
2014530851.tif 000037
３−アミノ−５−ブロモベンゾトリフルオライド(１.０ｇ、４.１７mmol)のピリジン(１０mL)中の混合物に、０〜５℃で塩化メタンスルホニル(０.３８９mL、５mmol)を滴下した。反応混合物をｒｔで４日間撹拌した。反応が完了しなかったため、反応混合物をマイクロ波オーブンで１５０℃で１５分間加熱した。進展がなかったため、反応を停止させた。反応混合物を濃縮乾固し、残渣をトルエンと共蒸発させた。残渣を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で希釈し、ＤＣＭで抽出した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、蒸発させた。CombiFlash Companion ISCOシステム(Redisepシリカ１２ｇカラム、シクロヘキサン／ＥｔＯＡｃ  １００：０〜７０：３０で溶出)を使用するフラッシュクロマトグラフィーでの精製により、表題化合物(１.０５ｇ、７９％収率)を白色固体として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 3.14 (s, 3H) 7.48 (s, 1H) 7.64 (s, 1H) 7.68 (s, 1H) 10.42 (s, 1H). MS(10): 316.3-318.2 [M-1]-
【０１８２】
中間体１０：２−ジフルオロメトキシ−５−(４,４,５,５−テトラメチル−[１,３,２]ジオキサボロラン−２−イル)−ピリジン
【化３５】
2014530851.tif 000038
封管中に、２−ヒドロキシ−５−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ピリジン(３００mg、１.３５７mmol)、ナトリウムクロロジフルオロアセテート(３２０mg、２.０３６mmol)のアセトニトリル(５mL)溶液を仕込んだ。この懸濁液を８０℃に加熱し、一夜撹拌した。反応混合物をｒｔに冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、ＮａＨＣＯ３水溶液および塩水で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させた。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９５／５)により精製して、表題化合物(１９７mg、５３％収率)を得た。MS: 272.8 [M+H]+, Rt(6) = 3.12 min
【０１８３】
中間体１１：６,６−ジフルオロ−[１,４]ジアゼパン
【化３６】
2014530851.tif 000039
本化合物を、文献に従って製造した：Wellner, E.; Sandin, H.; Synthesis; 2002; 2; 223-226. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 3.47 (s, 4H) 3.89 (t, 4H)
【０１８４】
ここに記載するボロン酸類またはボロン酸エステル類は、下記一般法により製造する。
【化３７】
2014530851.tif 000040
ａ)  ビス−(ピナコラト)−ジボロン、ＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ)−ＣＨ２Ｃｌ２、ＫＯＡｃ、ジオキサン、８０℃、１６時間。
【０１８５】
中間体１２：２−メトキシ−５−(４,４,５,５−テトラメチル−[１,３,２]ジオキサボロラン−２−イル)−ニコチノニトリル
【化３８】
2014530851.tif 000041
溶液Ａ：ＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ)−ＣＨ２Ｃｌ２(０.９５８ｇ、１.１７４mmol)、ＫＯＡｃ(６.９１ｇ、７０.４mmol)およびビス−(ピナコラト)−ジボロン(７.１５ｇ、２８.２mmol)を２５０mLフラスコに入れ、脱気した。
溶液Ｂ：別のバイアルで、５−ブロモ−２−メトキシニコチノニトリル(５ｇ、２３.４７mmol)を無水ジオキサン(１００mL)に溶解した。溶液Ｂを溶液Ａに添加し、反応混合物を８０℃で１６時間加熱した。混合物をｒｔに冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、残った固体を濾別した。濾液を減圧下に蒸発させて、黒色油状物を得た。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９５／５)により精製して、表題化合物(５.７ｇ、８９％収率)をベージュ色粉末として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 1.31 (s, 12H) 4.03 (s, 3H) 8.31 (s, 1H) 8.62 (s, 1H). MS: 261.5 [M+1]+, Rt(2) = 1.47min
【０１８６】
中間体１３〜２２を、中間体１２で使用した方法に準ずる方法により、出発物質として対応する臭化アリールを使用して製造した。
【表２】
2014530851.tif 000042
【表３】
2014530851.tif 000043
(１)  ＬＣ方法１、(２)  ＬＣ方法２
【０１８７】
中間体２３：３−ブロモ−５−メトキシ安息香酸
【化３９】
2014530851.tif 000044
激しく撹拌中の１−ブロモ−３−メトキシ−５−メチルベンゼン(１ｇ、４.９７mmol)、ピリジン(３.２２mL、３９.８mmol)および水(８ml)の混合物に、ＫＭｎＯ４(３.１４ｇ、１９.８９mmol)を１０５℃で少量ずつ添加した。黒色懸濁液に変わった混合物を２４時間、１０５℃撹拌し、ｒｔに冷却し、Hyfloで濾過した。黒色残渣をＥｔＯＡｃで数回洗浄した。濾液をＥｔＡＯｃで希釈し、２Ｍ  ＨＣｌ溶液で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、表題化合物(２８１mg、２４％収率)を白色固体として得た。MS: 229.1 [M+H]+, Rt(1) = 1.18 min
【０１８８】
最終化合物の製造
【化４０】
2014530851.tif 000045
ａ)  ６−ブロモ−３Ｈ−キナゾリン−４−オンの塩素化を、慣用のオキシ塩化リン条件下、還流または１３０℃で加熱しながら、希釈(例えばＣＨ２Ｃｌ２中)または非希釈(neat)オキシ塩化リンにより行う。ｂ)６−ブロモ−４−クロロ−キナゾリンと３−(エトキシカルボニル)フェニル−ボロン酸または３−(エトキシカルボニル)フェニル−ボロネートの鈴木クロスカップリングを、好ましくはジクロロジフェニルホスフィンパラジウム(ＰｄＣｌ２(ＰＰｈ３)２)のようなパラジウム触媒、塩基水溶液および好ましくはアセトニトリルのような有機溶媒を使用する慣用の鈴木条件下に行う。反応物を、好ましくは約１００〜１２０℃の温度で、好ましくはマイクロ波オーブン中撹拌する。本反応を好ましくは窒素またはアルゴンのような不活性ガス下に実施し得る。ｃ)カルボン酸エステルの鹸化は慣用の鹸化条件下、可能な塩基水溶液類の中で水酸化リチウムが好ましく、好ましくはジオキサンのような有機溶媒を使用して行った。本反応は好ましくは室温で行う。ｄ)カルボン酸と式Ｒ”'ＮＨＲ”のアミン類の縮合を、好ましくは慣用的縮合条件下で行う。本反応を、カルボン酸および式Ｒ”'ＮＨＲ”のアミンを適切な溶媒、例えば塩化メチレンのようなハロゲン化炭化水素、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−２−メチル−ピロリドン、塩化メチレンまたはこのような溶媒の２種以上の混合物に溶解し、適切な塩基、例えばトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン(ＤＩＰＥＡ)またはＮ−メチルモルホリンおよびカルボン酸の反応性誘導体をインサイチュで形成する適切なカップリング剤、例えばおよび好ましくは(２−(１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(ＨＢＴＵ)の添加により行う。反応混合物を好ましくは約−２０〜５０℃、特に−５℃〜３０℃、例えば０℃〜室温の温度で撹拌する。本反応は、好ましくは不活性ガス、例えば窒素またはアルゴン下で実施し得る。ｅ)臭化アリールとボロン酸または式Ｒ−Ｂ(ＯＲ')２のボロネートのようなボロン酸誘導体の鈴木クロスカップリングを好ましくはパラジウムテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(Ｐｄ(ＰＰｈ３)４)のようなパラジウム触媒、塩基水溶液および好ましくはアセトニトリルのような有機溶媒を使用する慣用の鈴木条件下に行う。反応物を、好ましくは約１００〜１２０℃の温度で、好ましくはマイクロ波オーブン中撹拌する。本反応は、好ましくは窒素またはアルゴンのような不活性ガス下で実施し得る。
【０１８９】
ここに記載する最終化合物は、スキーム２に記載した一般法により製造した。
【０１９０】
実施例１：５−{４−[３−(４−アセチル−ピペラジン−１−カルボニル)−フェニル]−キナゾリン−６−イル}−２−メトキシ−ニコチノニトリル
【化４１】
2014530851.tif 000046
１−{４−[３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−ベンゾイル]−ピペラジン−１−イル}−エタノン(１００mg、０.２２８mmol)、２−メトキシ−５−(４,４,５,５−テトラメチル−[１,３,２]ジオキサボロラン−２−イル)−ニコチノニトリル(８９mg、０.２７３mmol)およびＰｄ(ＰＰｈ３)４(１３.１４mg、０.０１１mmol)の混合物に、ＤＭＥ(３mL)を添加した。反応混合物をアルゴンで通気し、１Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３水溶液(０.４５５mL、０.４５５mmol)を添加し、バイアルに蓋した。反応混合物をマイクロ波オーブンを使用して、１４０℃で１０分間加熱し、ｒｔに冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、セライトパッドで濾過し、Ｈ２Ｏ／ＥｔＯＡｃに分配した。有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させた。分取逆相Gilson HPLCでの精製と、続く併せたフラクションのPL-HCO3 MPでの中和により、表題化合物(４７mg、４１％収率)を白色粉末として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 1.98 (br.s., 3 H) 3.37-3.70 (m, 8 H) 4.07 (s, 3 H) 7.71 (dt, 1 H) 7.75 (t, 1 H) 7.91 (br.s., 1 H) 8.04 (dt, 1 H) 8.25 (d, 1 H) 8.35 (br.s., 1 H) 8.43 (dd, 1 H) 8.80 (br.s., 1 H) 8.92 (br.s., 1 H) 9.41 (s, 1 H). MS: 493.2 [M+1]+, Rt(1) = 1.14 min
【０１９１】
１−{４−[３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−ベンゾイル]−ピペラジン−１−イル}−エタノン
【化４２】
2014530851.tif 000047
３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−安息香酸(２ｇ、６.０８mmol)のＣＨ２Ｃｌ２(６０mL)溶液に、ＨＢＴＵ(２.５３ｇ、６.６８mmol)およびＤＩＰＥＡ(２.１２２mL、１２.１５mmol)を添加した。反応混合物をｒｔで１０分間撹拌し、１−ピペラジン−１−イル−エタノン(０.９３５ｇ、７.２９mmol)をｒｔで添加し、反応混合物をｒｔでさらに２時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で反応停止させ、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下に蒸発させた。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９５／５)により精製して、表題化合物(３.０３mg、９１％純度(ＨＰＬＣ)、定量的収率)を得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 2.03 (br.s., 3 H) 3.52 (br.s., 8 H) 7.69-7.76 (m, 2 H) 7.84 (s, 1 H) 7.91 (d, 1 H) 8.09 (d, 1 H) 8.19-8.22 (m, 2 H) 9.43 (s, 1 H). MS: 439.6-441.8 [M+1]+, Rt(2) = 1.02 min
【０１９２】
３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−安息香酸
【化４３】
2014530851.tif 000048
３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−安息香酸エチルエステル(１.４１ｇ、４.１１mmol)のジオキサン(４５mL)溶液に、ｒｔで１Ｍ  ＬｉＯＨ.Ｈ２Ｏ水溶液(８.２２ml、８.２２mmol)を添加し、反応混合物を３時間、ｒｔで撹拌した。１Ｍ  ＨＣｌ水溶液(５mL)で反応停止させ、形成した沈殿を濾過し、減圧下に乾燥して、表題化合物(８８０mg、６５％収率)を淡黄色固体として得た。濾液をＥｔＯＡｃで抽出し、有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させて、表題化合物(５５５mg、３５％収率)を淡黄色固体として得た。２つの単離した固体を併せて、表題化合物を淡黄色固体として得た(８８０＋５５０mg＝１.４３ｇ、定量的収率)。MS: 331.0 [M+1]+, Rt(1) = 1.14 min
【０１９３】
３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−安息香酸エチルエステル
【化４４】
2014530851.tif 000049
６−ブロモ−４−クロロ−キナゾリン(２ｇ、８.２１mmol)、３−(エトキシカルボニル)フェニル−ボロン酸(１.６７３ｇ、８.６２mmol)、Ｐｄ(ＰＰｈ３)２Ｃｌ２(０.２８８ｇ、０.４１１mmol)およびＫ３ＰＯ４(２.６２ｇ、１２.３２mmol)の混合物に、アセトニトリル(１６mL)を添加した。反応混合物をアルゴンで通気し、水(２mL)を添加し、チューブに蓋し、１００℃で１５分間、マイクロ波オーブンを使用して加熱し、ｒｔに冷却した。形成された黄色固体を濾過し、エーテルで洗浄し、減圧下に乾燥して、表題化合物(１.５４ｇ)を黄色固体として得た。濾液をＥｔＯＡｃで希釈し、有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させた。得られた残渣をＭｅＯＨで摩砕して、表題化合物を黄色固体として得た(５８０mg)。２つの固体を併せて、２.１２ｇの表題化合物を黄色固体として得た。1H-NMR (400 MHz, MeOD, 298 K): δ ppm 1.42 (t, 3 H) 4.43 (q, 2 H) 7.77 (t, 1 H) 7.97-8.07 (m, 2 H) 8.16 (dd, 1 H) 8.22 (d, 1 H) 8.29 (d, 1 H) 8.41 (s, 1 H) 9.34 (s, 1 H). MS: 357.0-359.0 [M+1]+, Rt(1) = 1.52 min
【０１９４】
６−ブロモ−４−クロロ−キナゾリン
【化４５】
2014530851.tif 000050
６−ブロモ−３Ｈ−キナゾリン−４−オン(２０ｇ、８９mmol)をＰＯＣｌ３(１４０mL)に懸濁し、３時間、１４０℃で撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮し、残渣を(５００mL)に溶解し、固形ＮａＨＣＯ３(２００ｇ)で中和した。混合物を濾過し、濾液減圧下に蒸発させて、表題化合物(２１ｇ、９５％収率)をベージュ色固体として得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3, 298 K): δ ppm 7.98 (d, 1 H) 8.09 (d, 1 H) 8.5 (s, 1 H) 9.1 (s, 1 H). MS: 243.0-244.9 [M+1]+, Rt(1) = 1.24 min
【０１９５】
実施例２：{３−[７−(２−メトキシ−ピリミジン−５−イル)−ナフタレン−１−イル]−フェニル}−(４−メチル−ピペラジン−１−イル)−メタノン
【化４６】
2014530851.tif 000051
[３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−フェニル]−(４−メチル−ピペラジン−１−イル)−メタノン(５０mg、０.１２２mmol)、２−メトキシ−ピリミジン−５−ボロン酸(２２mg、０.１４６mmol)およびＰｄ(ＰＰｈ３)４(７mg、０.００６mmol)の混合物ｏｆに、ＤＭＥ(２mL)を添加した。反応混合物をアルゴンで通気し、１Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３水溶液(０.２４３mL、０.２４３mmol)を添加し、バイアルに蓋した。反応混合物をマイクロ波オーブンを使用して、１４０℃で１０分間加熱し、ｒｔに冷却し、ＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、セライトパッドで濾過し、Ｈ２Ｏ／ＣＨ２Ｃｌ２に分配した。有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させた。分取逆相Gilson HPLCでの精製し、次いで併せたフラクションをPL-HCO3 MPで中和して、表題化合物(３８mg、７１％収率)を得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 2.15 (s, 3 H) 2.20-2.38 (m, 4 H) 3.37-3.70 (m, 4 H) 3.99 (s, 3 H) 7.65 (d, 1 H) 7.73 (t, 1 H) 7.86 (s, 1 H) 8.02 (d, 1 H) 8.24 (d, 1 H) 8.33 (s, 1 H) 8.43 (d, 1 H) 9.05 (s, 2 H) 9.41 (s, 1 H) MS: 441.1 [M+1]+, Rt(2) = 0.75 min
【０１９６】
[３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−フェニル]−(４−メチル−ピペラジン−１−イル)−メタノン
【化４７】
2014530851.tif 000052
３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−安息香酸(２ｇ、６.１６mmol)およびＨＢＴＵ(２.５７ｇ、６.７８mmol)の混合物に、ＤＭＦ(１５mL)およびＤＩＰＥＡ(２.２６mL、１２.９５mmol)を添加した。反応混合物をｒｔで１０分間撹拌し、１−メチル−ピペラジン(１.２３ｇ、１２.３３mmol)をｒｔで添加し、ＤＩＰＥＡ(２.２６mL、１２.９５mmol)を添加し、反応混合物をｒｔでさらに５分間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で反応停止させ、ＡｃＯＥｔで抽出した。有機層をＮａＨＣＯ３、塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下に蒸発させた。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９９／１〜９０／１０)で精製して、表題化合物(２.２６ｇ、９０％純度(ＨＰＬＣ)、８０％収率)を得た。1H-NMR (400 MHz, MeOD-d4, 298 K): δ ppm 2.21 (s, 3 H) 2.25-2.44 (m, 4 H) 3.37-3.70 (m, 4 H) 7.62-7.81 (m, 3 H) 7.86-7.96 (m, 1 H) 8.08 (d, 1 H) 8.17-8.24 (m, 2 H) 9.41 (s, 1 H). MS: 411.4 [M+1]+, Rt(3) = 1.38 min
【０１９７】
実施例３〜２９の化合物を、適当な出発物質を使用して、実施例１の記載に準ずる方法により製造したまたは製造できる。
実施例２０、２１および２２は精製後中和せず、ＴＦＡ塩として得た。
【表４】
2014530851.tif 000053
【表５】
2014530851.tif 000054
【０１９８】
【表６】
2014530851.tif 000055
【表７】
2014530851.tif 000056
【０１９９】
【表８】
2014530851.tif 000057
【表９】
2014530851.tif 000058
【０２００】
【表１０】
2014530851.tif 000059
【表１１】
2014530851.tif 000060
【０２０１】
【表１２】
2014530851.tif 000061
【表１３】
2014530851.tif 000062
【０２０２】
【表１４】
2014530851.tif 000063
(１)  ＬＣ方法１、(２)  ＬＣ方法２、(３)  ＬＣ方法３、(４)  ＬＣ方法４、(５)  ＬＣ方法５
【０２０３】
実施例３４：２−メトキシ−５−{４−[３−((Ｒ)−３−メチル−ピペラジン−１−カルボニル)−フェニル]−キナゾリン−６−イル}−ニコチノニトリル
【化４８】
2014530851.tif 000064
(Ｒ)−４−[３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−ベンゾイル]−２−メチル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル(１００mg、０.１９６mmol)、２−メトキシ−５−(４,４,５,５−テトラメチル−[１,３,２]ジオキサボロラン−２−イル)−ニコチノニトリル(７６mg、０.２３５mmol、８０％純度)およびＰｄ(ＰＰｈ３)４(１１.３０mg、０.００９mmol)の混合物にＤＭＥ(３mL)を添加した。反応混合物をアルゴンで通気し、１Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３水溶液(０.３９１mL、０.３９１mmol)を添加し、バイアルを蓋した。反応混合物をマイクロ波オーブンを使用して、１４０℃で１０分間加熱し、室温に冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、セライトパッドで濾過し、Ｈ２Ｏ／ＥｔＯＡｃに分配した。有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させた。残渣をＣＨ２Ｃｌ２(２ml)に溶解し、ＴＦＡ(０.３０１mL、３.９１mmol)を添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌した。この後、混合物を濃縮し、分取逆相Gilson HPLCでの精製し、次いで併せたフラクションをPL-HCO3 MPで中和して、表題化合物(３６mg、３９％収率)を白色粉末として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 0.74-1.05 (br.s., 3 H), 2.35-3.10 (m, 5 H) 3.47-3.65 (m, 1 H) 4.06 (s, 3 H) 4.33 (br.s., 1 H) 7.64 (dt, 1 H) 7.73 (t, 1 H) 7.84 (t, 1 H) 8.00 (dt, 1 H) 8.23 (d, 1 H) 8.33 (d, 1 H) 8.43 (dd, 1 H) 8.78 (br.s., 1 H) 8.90 (d, 1 H) 9.40 (s, 1 H). MS: 464.6 [M+1]+, Rt(1) = 0.98 min
【０２０４】
(Ｒ)−４−[３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−ベンゾイル]−２−メチル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化４９】
2014530851.tif 000065
３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−安息香酸(０.５ｇ、１.５１９mmol)のＣＨ２Ｃｌ２(１５mL)にＨＢＴＵ(０.６３４ｇ、１.６７１mmol)およびＤＩＰＥＡ(０.７９６mL、４.５６mmol)を添加した。反応混合物を室温で３０分間撹拌し、(Ｒ)−２−メチル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル(０.３６５ｇ、１.８２３mmol)を添加し、反応混合物を環境温度でさらに２時間撹拌した。Ｈ２Ｏで反応停止させ、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下に蒸発させた。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９５／５)により精製して、表題化合物(１ｇ、８９％純度、定量的収率)を得た。MS: 511.2-513.1 [M+1]+, Rt(1) = 1.51 min
【０２０５】
実施例３５の化合物を、適当な出発物質を使用して、実施例３４の記載に準ずる方法により製造した。
【表１５】
2014530851.tif 000066
(２)  ＬＣ方法２
【０２０６】
実施例３６：１−(４−{３−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−ベンゾイル}−２,２−ジメチル−ピペラジン−１−イル)−エタノン
【化５０】
2014530851.tif 000067
(３,３−ジメチル−ピペラジン−１−イル)−{３−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−フェニル}メタノン(１１７.７mg、０.２１３mmol)にＴＨＦ(４mL)を添加した。トリエチルアミン(０.１８８mL、０.８５１mmol)、続いて塩化アセチル(０.０２３mL、０.３１９mmol)を添加した。反応混合物を５分間、室温で撹拌した。反応混合物に、ＥｔＯＡｃを添加した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３および塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下に蒸発させた。分取逆相Gilson HPLCでの精製し、次いで併せたフラクションをPL-HCO3 MPで中和して、表題化合物(８２.７mg、７８％収率)を白色粉末として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 1.16-1.53 (m, 6 H) 1.86-2.05 (m, 3 H) 3.46-3.75 (m, 6H) 3.90 (s, 3 H) 6.88-7.00 (m, 1 H) 7.60-7.80 (m, 2 H) 7.82-8.05 (m, 2 H) 8.11 (dd, 1 H) 8.18-8.27 (m, 2 H) 8.38 (d, 1 H) 8.58 (d, 1 H) 9.38 (s, 1 H). MS: 496.5 [M+1]+, Rt(3) = 1.70 min
【０２０７】
(３,３−ジメチル−ピペラジン−１−イル)−{３−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−フェニル}−メタノン
【化５１】
2014530851.tif 000068
[３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−フェニル]−(３,３−ジメチル−ピペラジン−１−イル)−メタノン(１１１.９mg、０.２６３mmol)、６−メトキシピリジン−３−イルボロン酸(４２.４mg、０.２６３mmol)およびＰｄ(ＰＰｈ３)４(３０.４mg、０.０２６mmol)の混合物にアセトニトリル(２.５mL)を添加した。反応混合物をアルゴンで通気し、１Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３水溶液(０.７８９mL、０.７８９mmol)を添加し、バイアルを蓋した。反応混合物を１３０℃で２０分間、マイクロ波オーブンを使用して加熱し、ｒｔに冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、セライトパッドで濾過し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液／ＥｔＯＡｃに分配した。有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させて、粗製の化合物(１１７.７mg、８１％収率)を得た。MS: 454.5 [M+1]+, Rt(3) = 1.40 min
【０２０８】
[３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−フェニル]−(３,３−ジメチル−ピペラジン−１−イル)−メタノン
【化５２】
2014530851.tif 000069
３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−安息香酸(４２８.１mg、１.３０１mmol)のＤＭＦ(８mL)溶液にＨＢＴＵ(５４３mg、１.４３１mmol)およびＤＩＰＥＡ(０.４７７mL、２.７３mmol)を添加した。反応混合物をｒｔで２０分間撹拌し、２,２−ジメチル−ピペラジン(１６３mg、１.４３１mmol)およびＤＩＰＥＡ(０.４７７mL、２.７３mmol)をｒｔで添加し、反応混合物をｒｔで一夜撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で反応停止させ、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下に蒸発させた。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９９／１〜９０／１０)で精製して、表題化合物(２３４.９mg、＞９９％純度、４２.５％収率)を得た。MS: 427.1 [M+1]+, Rt(7) = 1.17 min
【０２０９】
実施例３７の化合物を、適当な出発物質を使用して、実施例３６に記載に準ずる方法により製造した。
【表１６】
2014530851.tif 000070
(３)  ＬＣ方法３
【０２１０】
実施例３８：(２,５−ジアザ−ビシクロ[２.２.１]ヘプト−２−イル)−{３−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−フェニル}−メタノン
【化５３】
2014530851.tif 000071
[３−(７−ブロモ−ナフタレン−１−イル)−フェニル]−(２,５−ジアザ−ビシクロ[２.２.１]ヘプト−２−イル)−メタノン(５６.８mg、０.１３９mmol)、６−メトキシピリジン−３−イルボロン酸(２３.３５mg、０.１５３mmol)およびＰｄ(ＰＰｈ３)４(１６.０４mg、０.０１４mmol)の混合物にアセトニトリル(１.５mL)を添加した。反応混合物をアルゴンで通気し、１Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３水溶液(０.４１６mL、０.４１６mmol)を添加し、バイアルを蓋した。反応混合物を１３０℃で２０分間、マイクロ波オーブンを使用して加熱し、ｒｔに冷却した。濾過後、混合物を直接分取逆相Gilson HPLCで精製し、次いで併せたフラクションをPL-HCO3 MPで中和して、表題化合物(２６.７mg、４４％収率)を白色粉末として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 1.50-1.85 (m, 2 H) 2.73-3.05 (m, 2 H) 3.35-3.75 (m, 3 H) 3.91 (s, 3 H) 4.35-4.70 (d, 1 H) 6.95 (d, 1 H) 7.69-7.78 (m, 2 H) 7.91-8.01 (m, 2 H) 8.10 (t, 1 H) 8.19-8.24 (m, 2 H) 8.39 (d, 1 H) 8.59 (d, 1 H) 9.38 (s, 1 H). MS: 438.2 [M+1]+, Rt(3) = 1.35 min
【０２１１】
[３−(７−ブロモ−ナフタレン−１−イル)−フェニル]−(２,５−ジアザ−ビシクロ[２.２.１]ヘプト−２−イル)−メタノン
【化５４】
2014530851.tif 000072
ＣＨ２Ｃｌ２(１０mL)に希釈したｔｅｒｔ−ブチル−５−(３−(６−ブロモキナゾリン−４−イル)ベンゾイル)−２,５−ジアザビシクロ[２.２.１]ヘプタン−２−カルボキシレート(４００.４mg、０.７８６mmol)に、ＴＦＡ(４mL、５１.９mmol)を添加した。反応混合物を３０分間、室温で撹拌した。揮発物を蒸発させ、ＥｔＯＡｃを添加した。有機層をＮａＨＣＯ３水溶液および塩水で洗浄した、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させて、粗製の化合物(１５８mg、＞９９％純度、４９.１％収率)を得た。MS : 409.0-410.9 [M+1]+, Rt(3) = 1.22 min
【０２１２】
ｔｅｒｔ−ブチル５−(３−(６−ブロモキナゾリン−４−イル)ベンゾイル)−２,５−ジアザビシクロ[２.２.１]ヘプタン−２−カルボキシレート
【化５５】
2014530851.tif 000073
３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−安息香酸(３１０mg、０.９４２mmol)のＤＭＦ(８mL)溶液にＨＢＴＵ(４２９mg、１.１３０mmol)およびＤＩＰＥＡ(０.３４５５mL、１.９８mmol)を添加した。反応混合物をｒｔで２０分間撹拌した。Ｔｅｒｔ−ブチル２,５−ジアザビシクロ[２.２.１]ヘプタン−２−カルボキシレート(３７３mg、１.８８４mmol)およびＤＩＰＥＡ(０.３４５５mL、１.９８mmol)をｒｔで添加し、反応混合物を１０分間、ｒｔで撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で反応停止させ、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下に蒸発させた。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ヘプタン／ＥｔＯＡｃ、８０／２０〜０／１００)で精製して、表題化合物(４００.４mg、＞９９％純度、８３％収率)を得た。MS: 511.3 [M+1]+, Rt(3) = 2.19 min
【０２１３】
実施例３９の化合物を、適当な出発物質を使用して、実施例３８に記載に準ずる方法により製造した。
【表１７】
2014530851.tif 000074
(３)  ＬＣ方法３
【０２１４】
実施例４０：{３−[６−(５−メチル−６−メチルアミノ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−フェニル}−(４−メチル−ピペラジン−１−イル)−メタノン
【化５６】
2014530851.tif 000075
[３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−フェニル]−(４−メチル−ピペラジン−１−イル)−メタノン(１００mg、０.２４３mmol)、メチル−[３−メチル−５−(４,４,５,５−テトラメチル−[１,３,２]ジオキサボロラン−２−イル)−ピリジン−２−イル]−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル(１０２mg、０.２９２mmol)およびＰｄ(ＰＰｈ３)４(１４.０５mg、０.０１２mmol)の混合物にＤＭＥ(３mL)を添加した。反応混合物をアルゴンで通気し、１Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３水溶液(０.４８６mL、０.４８６mmol)を添加し、バイアルを蓋した。反応混合物をマイクロ波オーブンを使用して、１４０℃で１０分間加熱し、ｒｔに冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、セライトパッドで濾過し、Ｈ２Ｏ／ＥｔＯＡｃに分配した。有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させた。残渣をＣＨ２Ｃｌ２(３ml)に溶解し、ＴＦＡ(０.５６２mL、７.２９mmol)を添加した。反応混合物を環境温度で１６時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、分取逆相Gilson HPLCで精製し、次いで併せたフラクションをPL-HCO3 MPで中和して、表題化合物(７０mg、６４％収率)を白色粉末として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 2.12 (s, 3 H) 2.15 (s, 3 H) 2.17-2.40 (m, 4 H) 2.90 (d, 3 H) 3.39-3.70 (m, 4 H) 6.28 (q, 1 H) 7.65 (br.s., 2 H) 7.74 (t, 1 H) 7.82 (s, 1 H) 7.98 (d, 1 H) 8.13 (d, 2 H) 8.33 (d, 2 H) 9.32 (s, 1 H). MS: 453.3 [M+1]+, Rt(8) = 1.25 min
【０２１５】
実施例４１の化合物を、適当な出発物質を使用して、実施例４０に記載に準ずる方法により製造した。
【表１８】
2014530851.tif 000076
(８)  ＬＣ方法８
【０２１６】
【化５７】
2014530851.tif 000077
ａ)６−ブロモ−３Ｈ−キナゾリン−４−オンの塩素化を慣用のオキシ塩化リン条件下、還流または１３０℃で希釈(例えばＣＨ２Ｃｌ２中)または非希釈(neat)オキシ塩化リン中で加熱することにより行う。ｂ)６−ブロモ−４−クロロ−キナゾリンと３−(エトキシカルボニル)フェニル−ボロン酸または３−(エトキシカルボニル)フェニル−ボロネートの鈴木クロスカップリングを、好ましくはジクロロジフェニルホスフィンパラジウム(ＰｄＣｌ２(ＰＰｈ３)２)のようなパラジウム触媒、塩基水溶液および好ましくはアセトニトリルのような有機溶媒を使用する慣用の鈴木条件下に行う。反応物を、好ましくは約１００〜１２０℃の温度で、好ましくはマイクロ波オーブン中撹拌する。本反応を好ましくは窒素またはアルゴンのような不活性ガス下に実施し得る。ｃ)カルボン酸エステルの鹸化は慣用の鹸化条件下、可能な塩基水溶液類の中で水酸化リチウムが好ましく、好ましくはジオキサンのような有機溶媒を使用して行った。本反応は好ましくは室温で行う。ｄ)カルボン酸と式Ｒ”'ＮＨＲ”のアミン類の縮合を、好ましくは慣用的縮合条件下で行う。本反応を、カルボン酸および式Ｒ”'ＮＨＲ”のアミンを適切な溶媒、例えば塩化メチレンのようなハロゲン化炭化水素、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−２−メチル−ピロリドン、塩化メチレンまたはこのような溶媒の２種以上の混合物に溶解し、適切な塩基、例えばトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン(ＤＩＰＥＡ)またはＮ−メチルモルホリンおよびカルボン酸の反応性誘導体をインサイチュで形成する適切なカップリング剤、例えばおよび好ましくは(２−(１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(ＨＢＴＵ)の添加により行う。反応混合物を好ましくは約−２０〜５０℃、特に−５℃〜３０℃、例えば０℃〜室温の温度で撹拌する。本反応は、好ましくは不活性ガス、例えば窒素またはアルゴン下で実施し得る。ｅ)ボロン酸エステルの形成を好ましくは１,１−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]ジクロロパラジウム(ＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ)−ＣＨ２Ｃｌ２)のようなパラジウム触媒、好ましくは酢酸カリウムのような塩基水溶液、好ましくはジオキサンのような有機溶媒およびビス−(ピナコラト)−ジボロンを使用して行った。反応物を好ましくは約８０℃で数時間撹拌する。ｆ)臭化アリール(Ｒ−Ｂｒ)とボロネートの鈴木クロスカップリングを好ましくはパラジウムテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(Ｐｄ(ＰＰｈ３)４)のようなパラジウム触媒、塩基水溶液および好ましくはアセトニトリルのような有機溶媒を使用する慣用の鈴木条件下に行う。反応物を、好ましくは約１００〜１２０℃の温度で、好ましくはマイクロ波オーブン中撹拌する。本反応は、好ましくは窒素またはアルゴンのような不活性ガス下で実施し得る。
【０２１７】
ここに記載する最終化合物は、スキーム３に記載した一般法に従い製造した。
【０２１８】
実施例４２：{３−[６−(６−エトキシ−５−トリフルオロメチル−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−フェニル}−(４−メチル−ピペラジン−１−イル)−メタノン
【化５８】
2014530851.tif 000078
(４−メチル−ピペラジン−１−イル)−{３−[６−(４,４,５,５−テトラメチル−[１,３,２]ジオキサボロラン−２−イル)−キナゾリン−４−イル]−フェニル}−メタノン(１００mg、０.２１８mmol)、５−ブロモ−２−エトキシ−３−(トリフルオロメチル)ピリジン(７０.７mg、０.２６２mmol)およびＰｄ(ＰＰｈ３)４(１２.６１mg、０.０１１mmol)の混合物に、ＤＭＥ(２mL)を添加した。反応混合物をアルゴンで通気し、１Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３水溶液(０.４３６mL、０.４３６mmol)を添加し、バイアルを蓋した。反応混合物をマイクロ波オーブンを使用して、１４０℃で１０分間加熱し、ｒｔに冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、セライトパッドで濾過し、Ｈ２Ｏ／ＥｔＯＡｃに分配した。有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させた。分取逆相Gilson HPLCで精製し、次いで併せたフラクションをPL-HCO3 MPで中和して、表題化合物(７０mg、６１％収率)を白色粉末として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 1.37 (t, 3 H) 2.13 (s, 3 H) 2.17 (br.s., 2 H) 2.34 (br.s., 2 H) 3.43 (br.s., 2 H) 3.62 (br.s., 2 H) 4.53 (q, 2 H) 7.65 (dt, 1 H) 7.74 (t, 1 H) 7.85 (t, 1 H) 8.02 (dt, 1 H) 8.23 (d, 1 H) 8.32 (d, 1 H) 8.44-8.47 (m, 2 H) 8.84 (d, 1 H) 9.41 (s, 1 H). MS(2) : 522.6 [M+1]+, Rt(2) = 1.16 min
【０２１９】
(４−メチル−ピペラジン−１−イル)−{３−[６−(４,４,５,５−テトラメチル−[１,３,２]ジオキサボロラン−２−イル)−キナゾリン−４−イル]−フェニル}−メタノン
【化５９】
2014530851.tif 000079
ビス−(ピナコラト)−ジボロン(４６３mg、１.８２４mmol)、ＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ)−ＣＨ２Ｃｌ２付加物(９９mg、０.１２２mmol)およびＫＯＡｃ(４７７mg、４.８６mmol)をバイアルに仕込み、アルゴン気流で２分間脱気した。別のバイアルで、[３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−フェニル]−(４−メチル−ピペラジン−１−イル)−メタノン(５００mg、１.２１６mmol)を無水ジオキサン(１０mL)に溶解した。[３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−フェニル]−(４−メチル−ピペラジン−１−イル)−メタノンのジオキサン溶液を“触媒”バイアルに添加し、８０℃で２時間加熱した。ｒｔに冷却後、酢酸エチル(３０ml)を添加し、混合物をセライトパッドで濾過した。暗色濾液を濃縮し、ヘプタン(３０ml)に希釈した。暗色沈殿が形成され、混合物を濾過し、濾液濃縮し、高減圧下に乾燥して、表題化合物を褐色固体として得た(７１０mg、５０％純度、５５％収率)。1H-NMR (400 MHz, CDCl3, 298 K): δ ppm 1.37 (s, 12 H) 2.35 (s, 3 H) 2.45 (br.s., 2 H) 2.53 (br.s., 2 H) 3.62 (br.s., 2 H) 3.85 (br.s., 2 H) 7.69 (d, 2 H) 7.84 (br.s., 1 H) 7.87 (m, 1 H) 8.12 (d, 1 H) 8.32 (dd, 1 H) 8.52 (br.s., 1 H) 9.41 (s, 1 H). MS: 459.3 [M+1]+, Rt(1) = 1.0 min
【０２２０】
実施例４３〜４８の化合物を、適当な出発物質を使用して、実施例４２の記載に準ずる方法により製造した。
【表１９】
2014530851.tif 000080
【表２０】
2014530851.tif 000081
【０２２１】
【表２１】
2014530851.tif 000082
(１)  ＬＣ方法１、(２)  ＬＣ方法２
【０２２２】
実施例４９：２−メトキシ−Ｎ,Ｎ−ジメチル−５−{４−[３−(４−メチル−ピペラジン−１−カルボニル)−フェニル]−キナゾリン−６−イル}−ベンズアミド
【化６０】
2014530851.tif 000083
２−メトキシ−５−{４−[３−(４−メチル−ピペラジン−１−カルボニル)−フェニル]−キナゾリン−６−イル}−安息香酸(５０mg、０.０８４mmol)のＣＨ２Ｃｌ２(２ml)溶液に、ＨＢＴＵ(３８.１mg、０.１０１mmol)およびＤＩＰＥＡ(０.０４４mL、０.２５１mmol)を添加した。反応混合物をｒｔで１０分間撹拌し、ジメチルアミンのＴＨＦ溶液(２Ｍ)(０.２１０mL、０.４１９mmol)をｒｔで添加し、反応混合物をｒｔでさらに３０分間撹拌した。Ｈ２Ｏで反応停止させ、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下に蒸発させた。逆相Gilson HPLCで精製し、次いで併せたフラクションをPL-HCO3 MPで中和して、表題化合物(２５mg、５８％収率)を白色粉末として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 2.15 (s, 3 H) 2.22 (br.s., 2 H) 2.36 (br.s., 2 H) 2.79 (s, 3 H), 2.99 (s, 3 H) 3.41 (br.s., 2 H) 3.62 (br.s., 2 H) 3.86 (s, 3 H) 7.22 (d, 1 H) 7.56 (d, 1 H) 7.65 (dt, 1 H) 7.73 (t, 1 H) 7.79 (dd, 1 H) 7.82 (t, 1 H) 7.98 (dt, 1 H) 8.17 (d, 1 H) 8.19 (s, 1 H) 8.38 (dd, 1 H) 9.37 (s, 1 H). MS: 510.6 [M+1]+, Rt(2) = 0.85 min
【０２２３】
２−メトキシ−５−{４−[３−(４−メチル−ピペラジン−１−カルボニル)−フェニル]−キナゾリン−６−イル}−安息香酸
【化６１】
2014530851.tif 000084
(４−メチル−ピペラジン−１−イル)−{３−[６−(４,４,５,５−テトラメチル−[１,３,２]ジオキサボロラン−２−イル)−キナゾリン−４−イル]−フェニル}−メタノン(３００mg、０.６５５mmol)、５−ブロモ−２−メトキシ−安息香酸(１８１mg、０.７８５mmol)およびＰｄ(ＰＰｈ３)４(３７.８mg、０.０３３mmol)の混合物にＤＭＥ(４mL)を添加した。反応混合物をアルゴンで通気し、１Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３水溶液(１.３０９mL、１.３０９mmol)を添加し、バイアルを蓋した。反応混合物をマイクロ波オーブンを使用して、１４０℃で１０分間加熱し、ｒｔに冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、セライトパッドで濾過し、濃縮した。分取逆相Gilson HPLCで精製し、フラクションを併せて、表題化合物(６０mg、１５％収率)を白色粉末として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 2.79 (s, 3 H) 3.03-3.82 (m, 8 H) 3.89 (s, 3 H) 7.28 (d, 1 H) 7.72 (dt, 1 H) 7.77 (t, 1 H) 7.92 (dd, 2 H) 7.98 (d, 1 H) 8.05 (dt, 1 H) 8.20-8.22 (m, 2 H) 8.41 (dd, 1 H) 9.39 (s, 1 H). MS: 483.4 [M+1]+, Rt(1) = 0.75 min
【０２２４】
【化６２】
2014530851.tif 000085
ａ)６−ブロモ−３Ｈ−キナゾリン−４−オンの塩素化を慣用のオキシ塩化リン条件下、還流または１３０℃で希釈(例えばＣＨ２Ｃｌ２中)または非希釈(neat)オキシ塩化リン中で加熱することにより行う。ｂ)６−ブロモ−４−クロロ−キナゾリンと３−(エトキシカルボニル)ピリジル−ボロン酸または３−(エトキシカルボニル)ピリジル−ボロネートの鈴木クロスカップリングを、好ましくはジクロロジフェニルホスフィンパラジウム(ＰｄＣｌ２(ＰＰｈ３)２)のようなパラジウム触媒、塩基水溶液および好ましくはアセトニトリルのような有機溶媒を使用する慣用の鈴木条件下に行う。反応物を、好ましくは約１００〜１２０℃の温度で、好ましくはマイクロ波オーブン中撹拌する。本反応を好ましくは窒素またはアルゴンのような不活性ガス下に実施し得る。ｃ)カルボン酸エステルの鹸化は慣用の鹸化条件下、可能な塩基水溶液類の中で水酸化リチウムが好ましく、好ましくはジオキサンのような有機溶媒を使用して行った。本反応は好ましくは室温で行う。ｄ)カルボン酸と式Ｒ”'ＮＨＲ”のアミン類の縮合を、好ましくは慣用的縮合条件下で行う。本反応を、カルボン酸および式Ｒ”'ＮＨＲ”のアミンを適切な溶媒、例えば塩化メチレンのようなハロゲン化炭化水素、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−２−メチル−ピロリドン、塩化メチレンまたはこのような溶媒の２種以上の混合物に溶解し、適切な塩基、例えばトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン(ＤＩＰＥＡ)またはＮ−メチルモルホリンおよびカルボン酸の反応性誘導体をインサイチュで形成する適切なカップリング剤、例えばおよび好ましくは(２−(１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(ＨＢＴＵ)の添加により行う。反応混合物を好ましくは約−２０〜５０℃、特に−５℃〜３０℃、例えば０℃〜室温の温度で撹拌する。本反応は、好ましくは不活性ガス、例えば窒素またはアルゴン下で実施し得る。ｅ)臭化アリールとボロン酸または式Ｒ(ＯＲ')２のボロネートのようなボロン酸誘導体の鈴木クロスカップリングは、好ましくはパラジウムテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(Ｐｄ(ＰＰｈ３)４)のようなパラジウム触媒、塩基水溶液および好ましくはアセトニトリルのような有機溶媒を使用する慣用の鈴木条件下に行う。反応物を、好ましくは約１００〜１２０℃の温度で、好ましくはマイクロ波オーブン中撹拌する。本反応は、好ましくは窒素またはアルゴンのような不活性ガス下で実施し得る。
【０２２５】
ここに記載する最終化合物は、スキーム４に記載した一般法により製造した。
【０２２６】
実施例５０：１−(４−{５−[６−(５−トリフルオロメチル−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−ピリジン−３−カルボニル}−ピペラジン−１−イル)−エタノン
【化６３】
2014530851.tif 000086
１−{４−[５−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−ピリジン−３−カルボニル]−ピペラジン−１−イル}−エタノン(１００mg、０.２０４mmol、９０％純度(ＵＰＬＣ))、ボロン酸３−(４,４,５,５−テトラメチル−[１,３,２]ジオキサボロラン−２−イル)−５−トリフルオロメチル−ピリジン(８０mg、０.２０４mmol、７０％純度)およびＰｄ(ＰＰｈ３)４(１１.８１mg、０.０１０mmol)の混合物に、ＤＭＥ(２mL)を添加した。反応混合物をアルゴンで通気し、１Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３水溶液(０.４０９mL、０.４０９mmol)を添加し、バイアルを蓋した。反応混合物を１２０℃で１０分間、マイクロ波オーブンを使用して加熱し、ｒｔに冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、セライトパッドで濾過し、Ｈ２Ｏ／ＥｔＯＡｃに分配した。有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させた。分取逆相Gilson HPLCで精製し、次いで併せたフラクションをPL-HCO3 MPで中和して、表題化合物(５５mg、５３％収率)を白色粉末として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 1.96 - 2.1 (br.s., 3 H) 3.41 - 3.70 (m, 8 H) 8.31 (d, 1 H) 8.40 (s, 1 H) 8.50 (s, 1 H) 8.56 (d, 1 H) 8.69 (br.s., 1 H) 8.90 (s, 1 H) 9.04 (s, 1 H) 9.20 (s., 1 H) 9.35 (br.s., 1 H) 9.49 (s, 1 H). MS: 507.6 [M+1]+, Rt(2) = 0.93 min
【０２２７】
１−{４−[５−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−ピリジン−３−カルボニル]−ピペラジン−１−イル}−エタノン
【化６４】
2014530851.tif 000087
５−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−ニコチン酸(１ｇ、３.０３mmol)のＣＨ２Ｃｌ２(１０mL)溶液にＨＢＴＵ(１.３８ｇ、３.６３mmol)およびＤＩＰＥＡ(１.０６mL、６.０６mmol)を添加した。反応混合物をｒｔで１０分間撹拌し、１−ピペラジン−１−イル−エタノン(０.４６６ｇ、３.６３mmol)をｒｔで添加し、反応混合物をｒｔでさらに３時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で反応停止させ、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下に蒸発させた。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９５／５)により精製して、表題化合物(１.１３ｇ、９０％純度、７６％収率)を得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 2.04 (br.s., 3 H) 3.41 - 3.70 (m, 8 H) 8.12 (d, 1 H) 8.24 (br.s., 2 H) 8.31 (br.s., 1 H) 8.89 (s, 1 H) 9.07 (s, 1 H) 9.47 (s, 1 H). MS: 440.4-442.4 [M+1]+, Rt(9) = 1.48 min
【０２２８】
５−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−ニコチン酸
【化６５】
2014530851.tif 000088
５−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−ニコチン酸エチルエステル(１.３４ｇ、３.７４mmol)のジオキサン(４５mL)溶液にｒｔで１Ｍ  ＬｉＯＨ.Ｈ２Ｏ水溶液(７.４８ml、７.４８mmol)を添加し、反応混合物を１.５時間、ｒｔで撹拌した。１Ｍ  ＨＣｌ水溶液(５mL)で反応停止させ、形成した沈殿を濾過し、減圧下に乾燥して、表題化合物を淡黄色固体として得た。濾液をＥｔＯＡｃで抽出し、有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させて、表題化合物を淡黄色固体として得た。２つの単離した固体を併せて、表題化合物を淡黄色固体として得た(１.１ｇ、８１％収率)。MS: 330.5-332.5 [M+1]+, Rt(2) = 0.97 min
【０２２９】
５−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−ニコチン酸エチルエステル
【化６６】
2014530851.tif 000089
６−ブロモ−４−クロロ−キナゾリン(６ｇ、２３.４１mmol)、ボロン酸５−(４,４,５,５−テトラメチル−[１,３,２]ジオキサボロラン−２−イル)−ニコチン酸エチルエステル(６.８１ｇ、２４.５８mmol)、Ｐｄ(ＰＰｈ３)２Ｃｌ２(０.８２２ｇ、１.１７mmol)およびＫ３ＰＯ４(７.４５ｇ、３５.１mmol)の混合物にアセトニトリル(９６mL)を添加した。反応混合物をアルゴンで通気し、水(１２ml)を添加し、バイアルを蓋した。反応混合物を１００℃で１２分間、マイクロ波オーブンを使用して加熱し、ｒｔに冷却した。混合物を水で反応停止させ、ジクロロメタンで抽出した。有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、セライトパッドで濾過し、蒸発させた。得られた残渣をＭｅＯＨで摩砕して、表題化合物を淡橙色固体として得た(５.３ｇ、９５％純度、６０％収率)。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 1.38 (t, 3 H) 4.41 (q, 2 H) 8.1 (d, 1 H) 8.25 (d, 2 H) 8.65 (s, 1 H) 9.22 (s, 1 H) 9.32 (s, 1 H) 9.48 (s, 1 H). MS: 358.1-360.1 [M+1]+, Rt(1) = 1.28 min
【０２３０】
実施例５１〜７４の化合物を、適当な出発物質を使用して、実施例５０の記載に準ずる方法により製造した。
【表２２】
2014530851.tif 000090
【表２３】
2014530851.tif 000091
【０２３１】
【表２４】
2014530851.tif 000092
【表２５】
2014530851.tif 000093
【０２３２】
【表２６】
2014530851.tif 000094
【表２７】
2014530851.tif 000095
【０２３３】
【表２８】
2014530851.tif 000096
【表２９】
2014530851.tif 000097
【０２３４】
【表３０】
2014530851.tif 000098
【０２３５】
実施例７５：{５−[６−(５−メチル−６−メチルアミノ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−ピリジン−３−イル}−(４−メチル−ピペラジン−１−イル)−メタノン
【化６７】
2014530851.tif 000099
[５−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−ピリジン−３−イル]−(４−メチル−ピペラジン−１−イル)−メタノン(１００mg、０.２４３mmol)、ｔｅｒｔ−ブチルメチル(３−メチル−５−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ピリジン−２−イル)(１０７mg、０.２９１mmol)およびＰｄ(ＰＰｈ３)４(１４.０１mg、０.０１２mmol)の混合物に、ＤＭＥ(２mL)を添加した。反応混合物をアルゴンで通気し、１Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３水溶液(０.４８５mL、０.４８５mmol)を添加し、バイアルを蓋した。反応混合物を１２０℃で１０分間、マイクロ波オーブンを使用して加熱し、ｒｔに冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、セライトパッドで濾過し、Ｈ２Ｏ／ＥｔＯＡｃに分配した。有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させた。残渣をＣＨ２Ｃｌ２(２ml)に溶解し、ＴＦＡ(０.３７４mL、４.８５mmol)を添加した。反応混合物を室温で３時間撹拌した。この後、混合物を濃縮し、分取逆相Gilson HPLCで精製し、次いで併せたフラクションをPL-HCO3 MPで中和して、表題化合物(３２mg、２９％収率)を白色粉末として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 2.12 (s, 3 H) 2.16 (s, 3 H) 2.25 (br.s., 2 H) 2.37 (br.s., 2 H) 2.89 (d, 3 H) 3.49 (br.s., 2 H) 3.66 (br.s., 2 H) 6.29 (q, 1 H) 7.69 (d, 1 H) 8.12 (d, 1 H) 8.16 (d, 1 H) 8.30 (t, 1 H) 8.36-8.38 (m, 2 H) 8.84 (d, 1 H) 9.12 (d, 1 H) 9.36 (s, 1 H). MS: 454.2 [M+1]+, Rt(9) = 1.21 min
【０２３６】
【化６８】
2014530851.tif 000100
ａ)６−ブロモ−３Ｈ−キナゾリン−４−オンの塩素化を慣用のオキシ塩化リン条件下、還流または１３０℃で希釈(例えばＣＨ２Ｃｌ２中)または非希釈(neat)オキシ塩化リン中で加熱することにより行う。ｂ)６−ブロモ−４−クロロ−キナゾリンと３−(エトキシカルボニル)ピリジル−ボロン酸または３−(エトキシカルボニル)ピリジル−ボロネートの鈴木クロスカップリングを、好ましくはジクロロジフェニルホスフィンパラジウム(ＰｄＣｌ２(ＰＰｈ３)２)のようなパラジウム触媒、塩基水溶液および好ましくはアセトニトリルのような有機溶媒を使用する慣用の鈴木条件下に行う。反応物を、好ましくは約１００〜１２０℃の温度で、好ましくはマイクロ波オーブン中撹拌する。本反応を好ましくは窒素またはアルゴンのような不活性ガス下に実施し得る。ｃ)臭化アリールとボロン酸または式Ｒ−Ｂ(ＯＲ')２のボロネートのようなボロン酸誘導体の鈴木クロスカップリングを好ましくはパラジウムテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(Ｐｄ(ＰＰｈ３)４)のようなパラジウム触媒、塩基水溶液および好ましくはアセトニトリルのような有機溶媒を使用する慣用の鈴木条件下に行う。反応物を、好ましくは約１００〜１２０℃の温度で、好ましくはマイクロ波オーブン中撹拌する。本反応は、好ましくは窒素またはアルゴンのような不活性ガス下で実施し得る。ｄ)カルボン酸エステルの鹸化は慣用の鹸化条件下、可能な塩基水溶液類の中で水酸化リチウムが好ましく、好ましくはジオキサンのような有機溶媒を使用して行った。本反応は好ましくは室温で行う。ｅ)カルボン酸と式Ｒ”'ＮＨＲ”のアミン類の縮合を、好ましくは慣用的縮合条件下で行う。本反応を、カルボン酸および式Ｒ”'ＮＨＲ”のアミンを適切な溶媒、例えば塩化メチレンのようなハロゲン化炭化水素、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−２−メチル−ピロリドン、塩化メチレンまたはこのような溶媒の２種以上の混合物に溶解し、適切な塩基、例えばトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン(ＤＩＰＥＡ)またはＮ−メチルモルホリンおよびカルボン酸の反応性誘導体をインサイチュで形成する適切なカップリング剤、例えばおよび好ましくは(２−(１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(ＨＢＴＵ)の添加により行う。反応混合物を好ましくは約−２０〜５０℃、特に−５℃〜３０℃、例えば０℃〜室温の温度で撹拌する。本反応は、好ましくは不活性ガス、例えば窒素またはアルゴン下で実施し得る。
【０２３７】
ここに記載する最終化合物は、スキーム５に記載した一般法に従い製造した。
【０２３８】
実施例７６：{５−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−ピリジン−３−イル}−(４−メチル−[１,４]−ジアゼパン−１−イル)−メタノン
【化６９】
2014530851.tif 000101
５−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−ニコチン酸(１００mg、０.２７９mmol)のＣＨ２Ｃｌ２(２ml)溶液にＤＩＰＥＡ(０.０９７mL、０.５５８mmol)およびプロピルホスホン酸無水物(ＤＭＦ溶液、５０％)(０.２４４mL、０.４１９mmol)を添加した。反応混合物をｒｔで３０分間撹拌し、１−メチル−[１,４]−ジアゼパン(６５.７mg、０.５５７mmol)を添加し、反応混合物を環境温度でさらに２時間撹拌した。さらに１−メチル−[１,４]−ジアゼパン(４９.２７mg、０.４１８mmol)およびＤＩＰＥＡ(０.０９７mL、０.５５８mmol)を添加し、反応混合物を環境温度で１６時間撹拌した。水で反応停止させ、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下に蒸発させた。分取逆相Gilson HPLCで精製し、次いで併せたフラクションをPL-HCO3 MPで中和して、表題化合物(５４mg、４３％収率)を白色粉末として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 1.77 (m, 1 H) 1.86 (m, 1 H) 2.17-2.28 (d, 3 H) 2.44-2.56 (m, 3 H) 2.66 (m, 1 H) 3.50-3.59 (m, 2 H) 3.63-3.72 (m, 2 H) 3.92 (s, 3 H) 6.96 (d, 1 H) 8.14-8.18 (m, 1 H) 8.22-8.24 (dd, 2 H) 8.33 (dt, 1 H) 8.43 (dd, 1 H), 8.63 (t, 1 H) 8.84 (dd, 1 H) 9.12 (dd, 1 H) 9.42 (s, 1 H). MS: 455.2 [M+1]+, Rt(2) = 0.79 min
【０２３９】
５−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−ニコチン酸
【化７０】
2014530851.tif 000102
５−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−ニコチン酸エチルエステル(０.９１ｇ、２.１９mmol、９３％純度(ＨＰＬＣ))のジオキサン(３０mL)溶液にｒｔで１Ｍ  ＬｉＯＨ.Ｈ２Ｏ水溶液(４.３８mL、４.３８mmol)を添加し、反応混合物を３時間、環境温度で撹拌した。１Ｍ  ＨＣｌ水溶液で反応停止させ、形成した沈殿を濾過し、減圧下に乾燥して、表題化合物(５７０mg、７２％収率)を淡黄色固体として得た。濾液をＥｔＯＡｃで抽出し、有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させて、表題化合物(２０５mg、２７％収率)を黄色固体として得た。２つの単離した固体を併せて、表題化合物(５７０＋２０５mg＝７７５mg、９９％収率)を得た。MS: 359.2 [M+1]+, Rt(1) = 0.96 min
【０２４０】
５−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−ニコチン酸エチルエステル
【化７１】
2014530851.tif 000103
[５−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−ニコチン酸エチルエステル(１ｇ、２.７９mmol)、２−メトキシ−５−ピリジンボロン酸(０.４４８ｇ、２.９３mmol)およびＰｄ(ＰＰｈ３)４(０.１６１mg、０.１４０mmol)の混合物にＤＭＥ(１５mL)を添加した。反応混合物をアルゴンで通気し、１Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３水溶液(５.５８mL、５.５８mmol)を添加し、バイアルを蓋した。反応混合物を１２０℃で２０分間、マイクロ波オーブンを使用して加熱し、ｒｔに冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、セライトパッドで濾過し、Ｈ２Ｏ／ＥｔＯＡｃに分配した。有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させた。残渣から表題化合物(９１０mg、９３％純度、７８％収率)を得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 1.37 (t, 3 H) 3.91 (s, 3 H) 4.42 (q, 2 H) 6.96 (d, 1 H) 8.14 (dd, 1 H) 8.23-8.25 (m, 2 H) 8.43 (dd, 1 H) 8.62 (d, 1 H) 8.72 (t, 1 H) 9.31 (dd, 2 H) 9.43 (s, 1 H). MS: 387.1 [M+1]+, Rt(2) = 1.24 min
【０２４１】
実施例７７〜８３の化合物を、適当な出発物質を使用して、実施例７６の記載に準ずる方法により製造した。
【表３１】
2014530851.tif 000104
【表３２】
2014530851.tif 000105
【０２４２】
【表３３】
2014530851.tif 000106
(１)  ＬＣ方法１、(２)  ＬＣ方法２
【０２４３】
実施例８４：{５−[６−(４−メトキシ−３−トリフルオロメチル−フェニル)−キナゾリン−４−イル]−ピリジン−３−イル}−((Ｓ)−２−メチル−ピペラジン−１−イル)−メタノン
【化７２】
2014530851.tif 000107
５−[６−(４−メトキシ−３−トリフルオロメチル−フェニル)−キナゾリン−４−イル)−ニコチン酸(７０mg、０.１６５mmol)のＣＨ２Ｃｌ２(３mL)溶液にＨＢＴＵ(６８.７mg、０.１８１mmol)およびＤＩＰＥＡ(０.０５７mL、０.３２９mmol)を添加した。反応混合物をｒｔで２０分間撹拌し、(Ｓ)−３−メチル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル(４９.４mg、０.２４７mmol)およびＤＩＰＥＡ(０.０５７mL、０.３２９mmol)を添加し、反応混合物を環境温度でさらに１時間撹拌した。反応混合物を濃縮した。残渣をＣＨ２Ｃｌ２(２ml)に溶解し、ＴＦＡ(０.１２０mL、１.６４６mmol)を添加した。反応混合物を室温で３時間撹拌した。この後、混合物を濃縮し、分取逆相Gilson HPLCで精製し、次いで併せたフラクションをPL-HCO3 MPで中和して、表題化合物(６０mg、６８％収率)を白色粉末として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 1.24 (br.s., 3 H) 2.53-2.89 (m, 7 H) 3.96 (s, 3 H) 7.41 (d, 1 H) 7.99 (d, 1 H) 8.07 (dd, 1 H) 8.21-8.23 (dd, 2 H) 8.30 (t, 1 H), 8.44 (dd, 1 H) 8.82 (d, 1 H) 9.13 (d, 1 H) 9.43 (s, 1 H). MS: 508.3 [M+1]+, Rt(1) = 0.99 min
【０２４４】
実施例８５の化合物を、適当な出発物質を使用して、実施例８４の記載に準ずる方法により製造した。
【表３４】
2014530851.tif 000108
【０２４５】
【化７３】
2014530851.tif 000109
ａ)６−ブロモ−３Ｈ−キナゾリン−４−オンの塩素化を慣用のオキシ塩化リン条件下、還流または１３０℃で希釈(例えばＣＨ２Ｃｌ２中)または非希釈(neat)オキシ塩化リン中で加熱することにより行う。ｂ)６−ブロモ−４−クロロ−キナゾリンと３−(エトキシカルボニル)フェニル−ボロン酸または３−(エトキシカルボニル)フェニル−ボロネートの鈴木クロスカップリングを、好ましくはジクロロジフェニルホスフィンパラジウム(ＰｄＣｌ２(ＰＰｈ３)２)のようなパラジウム触媒、塩基水溶液および好ましくはアセトニトリルのような有機溶媒を使用する慣用の鈴木条件下に行う。反応物を、好ましくは約１００〜１２０℃の温度で、好ましくはマイクロ波オーブン中撹拌する。本反応を好ましくは窒素またはアルゴンのような不活性ガス下に実施し得る。ｃ)臭化アリールとボロン酸または式Ｒ−Ｂ(ＯＲ')２のボロネートのようなボロン酸誘導体の鈴木クロスカップリングを好ましくはパラジウムテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(Ｐｄ(ＰＰｈ３)４)のようなパラジウム触媒、塩基水溶液および好ましくはアセトニトリルのような有機溶媒を使用する慣用の鈴木条件下に行う。反応物を、好ましくは約１００〜１２０℃の温度で、好ましくはマイクロ波オーブン中撹拌する。本反応は、好ましくは窒素またはアルゴンのような不活性ガス下で実施し得る。ｄ)カルボン酸エステルの鹸化は慣用の鹸化条件下、可能な塩基水溶液類の中で水酸化リチウムが好ましく、好ましくはジオキサンのような有機溶媒を使用して行った。本反応は好ましくは室温で行う。ｅ)カルボン酸と式Ｒ”'ＮＨＲ”のアミン類の縮合を、好ましくは慣用的縮合条件下で行う。本反応を、カルボン酸および式Ｒ”'ＮＨＲ”のアミンを適切な溶媒、例えば塩化メチレンのようなハロゲン化炭化水素、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−２−メチル−ピロリドン、塩化メチレンまたはこのような溶媒の２種以上の混合物に溶解し、適切な塩基、例えばトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン(ＤＩＰＥＡ)またはＮ−メチルモルホリンおよびカルボン酸の反応性誘導体をインサイチュで形成する適切なカップリング剤、例えばおよび好ましくは(２−(１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(ＨＢＴＵ)の添加により行う。反応混合物を好ましくは約−２０〜５０℃、特に−５℃〜３０℃、例えば０℃〜室温の温度で撹拌する。本反応は、好ましくは不活性ガス、例えば窒素またはアルゴン下で実施し得る。
【０２４６】
ここに記載する最終化合物は、スキーム６に記載した一般法により製造した。
【０２４７】
実施例８６：(４−エチル−ピペラジン−１−イル)−{３−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−フェニル}−メタノン
【化７４】
2014530851.tif 000110
撹拌中の３−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−安息香酸(１００mg、０.２８０mmol)のＣＨ２Ｃｌ２(２ml)溶液にＨＢＴＵ(１２７mg、０.３３６mmol)およびＤＩＰＥＡ(０.１４７mL、０.８３９mmol)を添加した。反応混合物をｒｔで１０分間撹拌し、１−エチル−ピペラジン(３８mg、０.３３６mmol)を添加し、得られた反応混合物をさらに３０分間、ｒｔで撹拌した。Ｈ２Ｏで反応停止させ、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下に蒸発させた。分取逆相Gilson HPLCで精製し、次いで併せたフラクションをPL-HCO3 MPで中和して、表題化合物(４０mg、３５％収率)を白色粉末として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 0.97 (t, 3 H) 2.18-2.50 (m, 6 H) 3.37-3.71 (m, 4 H) 3.91 (s, 3H) 6.97 (d, 1 H) 7.66 (d, 1 H) 7.74 (dd, 1 H) 7.83 (s, 1 H) 7.99 (d, 1 H) 8.12 (d, 1 H) 8.23 (br.s, 2 H) 8.38 (d, 1 H) 8.60 (s, 1 H) 9.39 (s, 1H). MS: 454.2 [M+1]+, Rt(2) = 0.89 min
【０２４８】
３−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−安息香酸
【化７５】
2014530851.tif 000111
３−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−安息香酸エチルエステル(８００mg、１.９１mmol)のジオキサン(２０mL)懸濁液にｒｔで１Ｍ  ＬｉＯＨ.Ｈ２Ｏ水溶液(９.５５ml、９.５５mmol)を添加し、反応混合物を４時間、ｒｔで撹拌した。１Ｍ  ＨＣｌ水溶液(５mL)で反応停止させ、形成した沈殿を濾過し、減圧下に乾燥して、表題化合物(７００mg、９０％純度、９２％収率)を淡黄色固体として得た。化合物をさらに精製することなく次工程で使用した。MS: 358.1 [M+1]+, Rt(2) = 1.11 min
【０２４９】
３−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−安息香酸エチルエステル
【化７６】
2014530851.tif 000112
３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−安息香酸エチルエステル(８４５mg、２.１７６mmol)、２−メトキシ−５−ピリジンボロン酸(３９９mg、２.６１mmol)およびＰｄ(ＰＰｈ３)４(１２６mg、０.１０９mmol)の混合物にＤＭＥ(２０mL)を添加した。反応混合物をアルゴンで通気し、１Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３水溶液(４.３５mL、４.３５mmol)を添加し、バイアルを蓋した。反応混合物を１２０℃で１５分間、マイクロ波オーブンを使用して加熱し、ｒｔに冷却し、ＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、セライトパッドで濾過し、塩水／ＣＨ２Ｃｌ２に分配した。有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させた。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９５／５)により精製して、表題化合物(８００mg、９２％純度、８８％収率)を得た。MS: 386.5 [M+1]+, Rt(2) = 1.45 min
【０２５０】
実施例８７〜９６の化合物を、適当な出発物質を使用して、実施例８６の記載に準ずる方法により製造した。
【表３５】
2014530851.tif 000113
【表３６】
2014530851.tif 000114
【０２５１】
【表３７】
2014530851.tif 000115
【表３８】
2014530851.tif 000116
【０２５２】
【表３９】
2014530851.tif 000117
(１)  ＬＣ方法１、(２)  ＬＣ方法２
【０２５３】
実施例９７：{３−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−フェニル}−((Ｒ)−２−メチル−ピペラジン−１−イル)−メタノン
【化７７】
2014530851.tif 000118
撹拌中の３−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−安息香酸(１００mg、０.２５４mmol)のＤＭＦ(２mL)溶液にＨＢＴＵ(１４４mg、０.３８１mmol)およびＤＩＰＥＡ(０.１７７mL、１.０１６mmol)を添加した。反応混合物をｒｔで３０分間撹拌し、(Ｒ)−３−メチル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル(７６mg、０.３８１mmol)を添加し、得られた反応混合物をさらに２時間、ｒｔで撹拌した。Ｈ２Ｏで反応停止させ、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下に蒸発させた。残渣をＣＨ２Ｃｌ２(３ml)に溶解し、ＴＦＡ(１ml)を添加した。反応混合物を環境温度で２時間撹拌した。この後、混合物を濃縮し、分取逆相Gilson HPLCで精製し、次いで併せたフラクションをPL-HCO3 MPで中和して、表題化合物(２９mg、２６％収率)を白色粉末として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 1.23 (d, 3 H) 2.55-3.2 (m, 7 H) 3.91 (s, 3H) 6.95 (d, 1 H) 7.62 (d, 1 H) 7.72 (t, 1 H) 7.81 (s, 1 H) 7.98 (d, 1 H) 8.11 (d, 1 H) 8.22 (d, 2 H) 8.38 (d, 1 H) 8.59 (s, 1 H) 9.38 (s, 1H). MS: 440.1 [M+1]+, Rt(2) = 0.89 min
【０２５４】
実施例９８：{３−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−フェニル}−((Ｓ)−２−メチル−ピペラジン−１−イル)−メタノン
【化７８】
2014530851.tif 000119
撹拌中の３−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−安息香酸(１１０mg、０.３０８mmol)のＤＭＦ(２.５mL)溶液にＨＢＴＵ(１７５mg、０.４６２mmol)およびＤＩＰＥＡ(０.１０８mL、０.６１６mmol)を添加した。反応混合物をｒｔで２０分間撹拌し、(Ｓ)−３−メチル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル(１２３mg、０.６１６mmol)およびＤＩＰＥＡ(０.１０８mL、０.６１６mmol)を添加し、得られた反応混合物をさらに２時間、ｒｔで撹拌した。Ｈ２Ｏで反応停止させ、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下に蒸発させた。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ヘプタン／酢酸エチル、１／１)で精製して、中間体化合物(１７０mg、９１％純度(ＵＰＬＣ)、９３％収率)、ＭＳ：５４０.３  [Ｍ＋１]＋。この残渣(１７０mg、０.２８７mmol)をＣＨ２Ｃｌ２(２ml)に溶解し、ＴＦＡ(０.３３１mL、４.３０mmol)を添加した。反応混合物を環境温度で２時間撹拌した。この後、混合物をＮａＯＨ溶液(１Ｍ)で反応停止させ、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下に蒸発させた。分取逆相Gilson HPLCで精製し、次いで併せたフラクションをPL-HCO3 MPで中和して、表題化合物(５８mg、３１％収率)を白色粉末として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 1.23 (d, 3 H) 2.55-3.15 (m, 7 H) 3.91 (s, 3H) 6.95 (d, 1 H) 7.62 (d, 1 H) 7.72 (t, 1 H) 7.81 (s, 1 H) 7.98 (dt, 1 H) 8.12 (dd, 1 H) 8.21 (d, 1 H) 8.22 (s, 1 H) 8.38 (dd, 1 H) 8.59 (d, 1 H) 9.38 (s, 1H). MS: 440.3 [M+1]+, Rt(1) = 0.85 min
【０２５５】
実施例９９：((Ｓ)−２,４−ジメチル−ピペラジン−１−イル)−{３−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−フェニル}−メタノン
【化７９】
2014530851.tif 000120
{３−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−フェニル}−((Ｓ)−２−メチル−ピペラジン−１−イル)−メタノン(５０mg、０.０９１mmol)のＭｅＯＨ(１mL)溶液に３７％ホルムアミド溶液(０.００８mL、０.１０９mmol)を添加した。反応混合物をｒｔで３０分間撹拌し、次いでＮａＢＨ３ＣＮ(６.８６mg、０.１０９mmol)を添加し、得られた反応混合物をさらに２時間、ｒｔで撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３溶液で反応停止させ、酢酸エチルで抽出した。有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下に蒸発させた。分取逆相Gilson HPLCで精製し、次いで併せたフラクションをPL-HCO3 MPで中和して、表題化合物(２０mg、４８％収率)を白色粉末として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 1.25 (d, 3 H) 1.82 (m, 1 H) 1.99 (m, 1 H) 2.11 (s, 3 H) 2.53-2.74 (m, 3 H) 3.12-3.27 (m, 2 H) 3.91 (s, 3H) 6.96 (d, 1 H) 7.63 (dt, 1 H) 7.74 (t, 1 H) 7.81 (br.s., 1 H) 7.99 (dt, 1 H) 8.11 (dd, 1 H) 8.21 (d, 1 H) 8.22 (s, 1 H) 8.39 (dd, 1 H) 8.59 (d, 1 H) 9.39 (s, 1H). MS: 454.3 [M+1]+, Rt(1) = 0.85 min
【０２５６】
【化８０】
2014530851.tif 000121
ａ)カルボン酸と式Ｒ３ＮＨＲ４のアミン類の縮合を、好ましくは慣用的縮合条件下で行う。本反応は、カルボン酸および式Ｒ３ＮＨＲ４のアミンを適切な溶媒、塩化メチレンのようなハロゲン化炭化水素、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−２−メチル−ピロリドン、塩化メチレンまたはこのような溶媒の２種以上の混合物に溶解し、適切な塩基、例えばトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン(ＤＩＰＥＡ)またはＮ−メチルモルホリンおよびカルボン酸の反応性誘導体をインサイチュで形成する適切なカップリング剤、例えばおよび好ましくは(２−(１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(ＨＢＴＵ)の添加により行う。反応混合物を好ましくは約−２０〜５０℃、特に−５℃〜３０℃、例えば０℃〜室温の温度で撹拌する。本反応は、好ましくは不活性ガス、例えば窒素またはアルゴン下で実施し得る。ｂ)ボロン酸エステルの形成を好ましくは１,１−ビス(ジフェニルホスフィノ)−フェロセン]−ジクロロパラジウム(ＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ)−ＣＨ２Ｃｌ２)のようなパラジウム触媒、好ましくは酢酸カリウムのような塩基水溶液、好ましくはジオキサンのような有機溶媒およびビス−(ピナコラト)−ジボロンを使用して行った。反応物を好ましくは約８０℃で数時間撹拌する。ｃ)６−ブロモ−４−クロロ−キナゾリンとボロネートの鈴木クロスカップリングを慣用の鈴木条件下、ジクロロジフェニルホスフィンパラジウム(ＰｄＣｌ２(ＰＰｈ３)２)、塩基水溶液および好ましくはアセトニトリルのような有機溶媒を使用して行う。反応物を、好ましくは約１００〜１２０℃の温度で、好ましくはマイクロ波オーブン中撹拌する。本反応を好ましくは窒素またはアルゴンのような不活性ガス下に実施し得る。ｄ)臭化アリールとボロン酸または式Ｒ５−Ｂ(ＯＲ')２のボロネートのようなボロン酸誘導体の鈴木クロスカップリングを好ましくはパラジウムテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(Ｐｄ(ＰＰｈ３)４)のようなパラジウム触媒、塩基水溶液および好ましくはアセトニトリルのような有機溶媒を使用する慣用の鈴木条件下に行う。反応物を、好ましくは約１００〜１２０℃の温度で、好ましくはマイクロ波オーブン中撹拌する。本反応は、好ましくは窒素またはアルゴンのような不活性ガス下で実施し得る
【０２５７】
ここに記載する最終化合物は、スキーム７に記載した一般法により製造した。
【０２５８】
実施例１００：１−(４−{５−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−２−メチル−ベンゾイル}−ピペラジン−１−イル)−エタノン
【化８１】
2014530851.tif 000122
１−{４−[５−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−２−メチル−ベンゾイル]−ピペラジン−１−イル}−エタノン(１５０mg、０.３３１mmol)、６−メトキシピリジン−３−イルボロン酸(５０.６mg、０.３３１mmol)、Ｋ３ＰＯ４(１０５mg、０.４９６mmol)およびＰｄＣｌ２(ＰＰｈ３)２(１１.６１mg、０.０１７mmol)の混合物を数分間アルゴンで通気した。混合物にアセトニトリル(４ml)、続いて水(０.４ml)を添加した。バイアルに蓋し、反応混合物を１２０℃で１０分間、マイクロ波オーブンを使用して加熱した。混合物をｒｔに冷却し、ＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、セライトパッドで濾過した。有機層を飽和重炭酸溶液で洗浄し、層分離カートリッジを通して乾燥し、蒸発させた。分取逆相Gilson HPLCで精製し、次いで併せたフラクションをSCx-2カートリッジで中和して、表題化合物(１００mg、６０％収率)を粉末として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.90-2.10 (m, 3H) 2.37 (s, 3 H) 3.20-3.80 (br. m., 8 H) 3.91 (s, 3 H), 6.96 (dd, 1 H) 7.57 (dd, 1 H) 7.73 (d, 1 H) 7.87 (dd, 1 H), 8.12 (d, 1 H) 8.18 (s, 1 H) 8.20 (s, 1 H) 8.23 (br. s., 1 H) 8.38 (dd, 1 H) 8.60 (br. s., 1 H) 9.36 (s, 1 H). MS: 482.3 [M+1]+, Rt(1) = 1.01 min
【０２５９】
１−{４−[５−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−２−メチル−ベンゾイル]−ピペラジン−１−イル}−エタノン
【化８２】
2014530851.tif 000123
６−ブロモ−４−クロロキナゾリン(１.８ｇ、７.３９mmol)(市販)、１−{４−[２−メチル−５−(４,４,５,５−テトラメチル−[１,３,２]ジオキサボロラン−２−イル)−ベンゾイル]−ピペラジン−１−イル}−エタノン(４.２３ｇ、７.３９mmol、６５％純度(ＵＰＬＣ))、Ｋ３ＰＯ４(２.３５４ｇ、１１.０９mmol)およびＰｄＣｌ２(ＰＰｈ３)２(０.２５９ｇ、０.３７０mmol)の混合物を数分間アルゴンで通気した。混合物にアセトニトリル(１５ml)、続いて水(１.５ml)を添加した。バイアルに蓋し、反応混合物を１２０℃で１０分間、マイクロ波オーブンを使用して加熱した。混合物をｒｔに冷却し、ＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、セライトパッドで濾過した。有機層を飽和重炭酸溶液で洗浄し、層分離カートリッジを通して乾燥し、蒸発させた。Biotage Isoleraシステム(アミン官能化シリカKP-NH、シクロヘキサン／ＥｔＯＡｃ  ０〜１００％で溶出)を使用するフラッシュクロマトグラフィーで精製して、表題化合物(１.６５ｇ、４９％収率)を黄色粉末として得た。MS: 453.2-455.1 [M+1]+, Rt(1) = 0.99 min
【０２６０】
実施例１０１：１−(４−{３−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−５−トリフルオロメチル−ベンゾイル}−ピペラジン−１−イル)−エタノン
【化８３】
2014530851.tif 000124
１−{４−[３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイル]−ピペラジン−１−イル}−エタノン(１２０mg、０.１９mmol、８０％純度(ＨＰＬＣ))、２−メトキシ−５−ピリジンボロン酸(３４.９mg、０.２２８mmol)およびＰｄ(ＰＰｈ３)４(１０.９８mg、０.００９mmol)の混合物にアセトニトリル(２mL)を添加した。反応混合物をアルゴンで通気し、１Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３水溶液(０.３８０mL、０.３８０mmol)を添加し、バイアルを蓋した。反応混合物を１２０℃で１０分間、マイクロ波オーブンを使用して加熱し、ｒｔに冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、セライトパッドで濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を濃縮した。分取逆相Gilson HPLCで精製し、次いで併せたフラクションをPL-SO3H MPで中和して、表題化合物(４８mg、４７％収率)を白色粉末として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 1.91 - 2.03 (br.s., 3 H) 3.36 - 3.70 (m, 8 H) 3.91 (s, 3 H) 6.98 (d, 1 H) 8.06 (br.s., 1 H) 8.14 (d, 1 H) 8.25 (d, 3 H) 8.30 (br.s., 1 H) 8.44 (d, 1 H) 8.63 (br.s., 1 H) 9.42 (s, 1 H). MS: 536.6 [M+1]+, Rt(2) = 1.18 min
【０２６１】
実施例１０２〜１０９の化合物を、適当な出発物質を使用して、実施例１０１の記載に準ずる方法により製造した。
【表４０】
2014530851.tif 000125
【表４１】
2014530851.tif 000126
【０２６２】
【表４２】
2014530851.tif 000127
(１)  ＬＣ方法１、(２)  ＬＣ方法２
【０２６３】
【化８４】
2014530851.tif 000128
ａ)６−ブロモ−３Ｈ−キナゾリン−４−オンの塩素化を慣用のオキシ塩化リン条件下、還流または１３０℃で希釈(例えばＣＨ２Ｃｌ２中)または非希釈(neat)オキシ塩化リン中で加熱することにより行う。ｂ)６−ブロモ−４−クロロ−キナゾリンと３−(エトキシカルボニル)フェニル−ボロン酸または３−(エトキシカルボニル)フェニル−ボロネートの鈴木クロスカップリングを、好ましくはジクロロジフェニルホスフィンパラジウム(ＰｄＣｌ２(ＰＰｈ３)２)のようなパラジウム触媒、塩基水溶液および好ましくはアセトニトリルのような有機溶媒を使用する慣用の鈴木条件下に行う。反応物を、好ましくは約１００〜１２０℃の温度で、好ましくはマイクロ波オーブン中撹拌する。本反応を好ましくは窒素またはアルゴンのような不活性ガス下に実施し得る。ｃ)カルボン酸エステルの鹸化は慣用の鹸化条件下、可能な塩基水溶液類の中で水酸化リチウムが好ましく、好ましくはジオキサンのような有機溶媒を使用して行った。本反応は好ましくは室温で行う。ｄ)カルボン酸と式Ｒ３ＮＨＲ４のアミン類の縮合を、好ましくは慣用的縮合条件下で行う。本反応は、カルボン酸および式Ｒ３ＮＨＲ４のアミンを適切な溶媒、塩化メチレンのようなハロゲン化炭化水素、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−２−メチル−ピロリドン、塩化メチレンまたはこのような溶媒の２種以上の混合物に溶解し、適切な塩基、例えばトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン(ＤＩＰＥＡ)またはＮ−メチルモルホリンおよびカルボン酸の反応性誘導体をインサイチュで形成する適切なカップリング剤、例えばおよび好ましくは(２−(１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(ＨＢＴＵ)の添加により行う。反応混合物を好ましくは約−２０〜５０℃、特に−５℃〜３０℃、例えば０℃〜室温の温度で撹拌する。本反応は、好ましくは不活性ガス、例えば窒素またはアルゴン下で実施し得る。ｅ)臭化アリールとボロン酸または式Ｒ５−Ｂ(ＯＲ')２のボロネートのようなボロン酸誘導体の鈴木クロスカップリングを好ましくはパラジウムテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(Ｐｄ(ＰＰｈ３)４)のようなパラジウム触媒、塩基水溶液および好ましくはアセトニトリルのような有機溶媒を使用する慣用の鈴木条件下に行う。反応物を、好ましくは約１００〜１２０℃の温度で、好ましくはマイクロ波オーブン中撹拌する。本反応は、好ましくは窒素またはアルゴンのような不活性ガス下で実施し得る。
【０２６４】
ここに記載する最終化合物は、スキーム８に記載した一般法により製造した。
【０２６５】
実施例１１０：１−(４−{３−フルオロ−５−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−ベンゾイル}−ピペラジン−１−イル)−エタノン
【化８５】
2014530851.tif 000129
１−{４−[３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−５−フルオロ−ベンゾイル]−ピペラジン−１−イル}−エタノン(１５０mg、０.３２８mmol)、６−メトキシピリジン−３−イルボロン酸(５０.２mg、０.３２８mmol)、Ｋ３ＰＯ４(１０４mg、０.４９２mmol)およびＰｄＣｌ２(ＰＰｈ３)２(１１.５１mg、０.０１６mmol)の混合物を数分間アルゴンで通気した。混合物にアセトニトリル(３ml)、続いて水(０.３ml)を添加した。バイアルに蓋し、反応混合物を１２０℃で１０分間、マイクロ波オーブンを使用して加熱した。混合物をｒｔに冷却し、ＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、セライトパッドで濾過した。有機層を飽和重炭酸溶液で洗浄し、層分離カートリッジを通して乾燥し、蒸発させた。分取逆相Gilson HPLCで精製し、次いで併せたフラクションをSCx-2カートリッジで中和して、表題化合物(６８mg、４１％収率)を粉末として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 1.88-2.06 (m, 3 H) 3.34-3.69 (m, 8 H) 3.91 (s, 3 H) 6.97 (d, 1 H) 7.58 (d, 1 H) 7.73 (s, 1 H) 7.85 (dd, 1 H) 8.15 (d, 1 H) 8.19-8.26 (m, 2 H) 8.42 (dd, 1 H) 8.62 (d, 1 H) 9.39 (s, 1 H). MS: 485.0 [M+1]+, Rt(1) = 1.04 min
【０２６６】
１−{４−[３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−５−フルオロ−ベンゾイル]−ピペラジン−１−イル}−エタノン
【化８６】
2014530851.tif 000130
３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−５−フルオロ−安息香酸(１.３６ｇ、３.７２mmol)のＣＨ２Ｃｌ２(１５mL)の混合物にＤＩＰＥＡ(１.３０mL、７.４４mmol)およびＨＢＴＵ(１.６９４ｇ、４.４７mmol)をｒｔで添加した。反応混合物をｒｔで２０分間撹拌した。混合物に１−(ピペラジン−１−イル)エタノン(０.５７２ｇ、４.４７mmol)を添加し、反応混合物をｒｔで１時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で反応停止させ、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層を塩水で２回洗浄し、層分離カートリッジを通して乾燥し、蒸発させた。Biotage Isoleraシステム(アミン官能化シリカKP-NH、シクロヘキサン／ＥｔＯＡｃ  ０〜１００％で溶出)を使用するフラッシュクロマトグラフィーで精製して、表題化合物(１.２０ｇ、６８％収率)をベージュ色泡状物として得た。MS: 457.4-459.3 [M+1]+, Rt(2) = 1.03 min
【０２６７】
３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−５−フルオロ−安息香酸
【化８７】
2014530851.tif 000131
３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−５−フルオロ−安息香酸エチルエステル(１.４１７ｇ、３.７８mmol)のジオキサン(１５mL)溶液にｒｔで２Ｍ  ＬｉＯＨ.Ｈ２Ｏ水溶液(７.５５mL、７.５５mmol)を添加し、反応混合物を２時間、ｒｔで撹拌した。２Ｍ  ＨＣｌ水溶液(５mL)で反応停止させ、形成した沈殿を濾過し、減圧下に乾燥して、表題化合物(１.３６ｇ、９９％収率)を白色固体として得た。MS: 349.0 [M+1]+, Rt(1) = 1.17 min
【０２６８】
３−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−５−フルオロ−安息香酸エチルエステル
【化８８】
2014530851.tif 000132
６−ブロモ−４−クロロキナゾリン(１.５ｇ、６.１６mmol)、３−(エトキシカルボニル)−５−フルオロフェニルボロン酸(１.３０６ｇ、６.１６mmol)、Ｋ３ＰＯ４(１.９６１ｇ、９.２４mmol)およびＰｄＣｌ２(ＰＰｈ３)２(２１６mg、０.３０８mmol)の混合物を数分間アルゴンで通気した。混合物にアセトニトリル(２４ml)、続いて水(２.４ml)を添加した。バイアルに蓋し、反応混合物を１２０℃で１０分間、マイクロ波オーブンを使用して加熱した。混合物をｒｔに冷却し、ＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、セライトパッドで濾過した。有機層を飽和重炭酸溶液で洗浄し、層分離カートリッジを通して乾燥し、蒸発させた。Biotage Isoleraシステム(アミン官能化シリカKP-NH、シクロヘキサン／ＥｔＯＡｃ  ０〜３０％で溶出)を使用するフラッシュクロマトグラフィーで精製して、表題化合物(１.４１７ｇ、６１％収率)を固体として得た。MS: 375.1-377.1 [M+1]+, Rt(1) = 1.54 min
【０２６９】
実施例１１１の化合物を、適当な出発物質を使用して、実施例１１０の記載に準ずる方法により製造した。
【表４３】
2014530851.tif 000133
(１)  ＬＣ方法１
【０２７０】
実施例１１２：１−(４−{４−[６−(２−メトキシ−ピリミジン−５−イル)−キナゾリン−４−イル]−ピリジン−２−カルボニル}−ピペラジン−１−イル)−エタノン
【化８９】
2014530851.tif 000134
２−メトキシピリミジン−５−イルボロン酸(３６.９mg、０.２４０mmol)およびＰｄ(ＰＰｈ３)４(１１.５６mg、０.０１０mmol)の混合物に１−{４−[４−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−ピリジン−２−カルボニル]−ピペラジン−１−イル}−エタノン(８８mg、０.２００mmol)のアセトニトリル(２mL)溶液を添加した。反応混合物をアルゴンで通気し、１Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３水溶液(０.４００mL、０.４００mmol)を添加し、バイアルを蓋した。反応混合物を１２０℃で１０分間、マイクロ波オーブンを使用して加熱し、ｒｔに冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、セライトパッドで濾過し、濃縮した。分取逆相Gilson HPLCで精製し、次いで併せたフラクションをPL-HCO3 MPで中和して、表題化合物(４０mg、４３％収率)を白色粉末として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 2.01 - 2.06 (d, 3 H) 3.48 (br.s., 3 H) 3.58 (br.s., 3 H) 3.65 (br.s., 1 H) 3.73 (br.s., 1 H) 3.99 (s, 3 H) 8.01 (dd, 1 H) 8.06 (br.s., 1 H) 8.28 (d, 1 H) 8.34 (d, 1 H) 8.49 (dd, 1 H) 8.87 (d, 1 H) 9.09 (s, 2 H) 9.47 (s, 1 H). MS: 470.6 [M+1]+, Rt(2) = 0.78 min
【０２７１】
実施例１１３および１１４の化合物を、適当な出発物質を使用して、実施例１１２の記載に準ずる方法により製造した。
【表４４】
2014530851.tif 000135
(２)  ＬＣ方法２
【０２７２】
【化９０】
2014530851.tif 000136
ａ)ボロン酸エステルの形成を好ましくは１,１−ビス(ジフェニルホスフィノ)−フェロセン]−ジクロロパラジウム(ＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ)−ＣＨ２Ｃｌ２)のようなパラジウム触媒、好ましくは酢酸カリウムのような塩基水溶液、好ましくはジオキサンのような有機溶媒およびビス−(ピナコラト)−ジボロンを使用して行った。反応物を好ましくは約８０℃で数時間撹拌する。ｂ)６−ブロモ−４−クロロ−キナゾリンとボロネートの鈴木クロスカップリングを慣用の鈴木条件下、ジクロロジフェニルホスフィンパラジウム(ＰｄＣｌ２(ＰＰｈ３)２)、塩基水溶液および好ましくはアセトニトリルのような有機溶媒を使用して行う。反応物を、好ましくは約１００〜１２０℃の温度で、好ましくはマイクロ波オーブン中撹拌する。本反応を好ましくは窒素またはアルゴンのような不活性ガス下に実施し得る。ｄ)臭化アリールとボロン酸または式Ｒ５−Ｂ(ＯＲ')２のボロネートのようなボロン酸誘導体の鈴木クロスカップリングを、好ましくはジクロロジフェニルホスフィンパラジウム(ＰｄＣｌ２(ＰＰｈ３)２)のようなパラジウム触媒、塩基水溶液および好ましくはアセトニトリルのような有機溶媒を使用する慣用の鈴木条件下に行う。反応物を、好ましくは約１００〜１２０℃の温度で、好ましくはマイクロ波オーブン中撹拌する。本反応は、好ましくは窒素またはアルゴンのような不活性ガス下で実施し得る。ｃ)臭化アリールとボロン酸または式Ｒ５−Ｂ(ＯＲ')２のボロネートのようなボロン酸誘導体の鈴木クロスカップリングを好ましくはパラジウムテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(Ｐｄ(ＰＰｈ３)４)のようなパラジウム触媒、塩基水溶液および好ましくはアセトニトリルのような有機溶媒を使用する慣用の鈴木条件下に行う。反応物を好ましくは約１００〜１２０℃の温度で撹拌する。本反応は、好ましくは窒素またはアルゴンのような不活性ガス下で実施し得る。ｄ)カルボン酸と式Ｒ３ＮＨＲ４のアミン類の縮合を、好ましくは慣用的縮合条件下で行う。本反応は、カルボン酸および式Ｒ３ＮＨＲ４のアミンを適切な溶媒、塩化メチレンのようなハロゲン化炭化水素、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−２−メチル−ピロリドン、塩化メチレンまたはこのような溶媒の２種以上の混合物に溶解し、適切な塩基、例えばトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン(ＤＩＰＥＡ)またはＮ−メチルモルホリンおよびカルボン酸の反応性誘導体をインサイチュで形成する適切なカップリング剤、例えば(２−(１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(ＨＢＴＵ)の添加により行うおよび好ましくはプロピルホスホン酸無水物。反応混合物を好ましくは約−２０〜５０℃、特に−５℃〜３０℃、例えば０℃〜室温の温度で撹拌する。本反応は、好ましくは不活性ガス、例えば窒素またはアルゴン下で実施し得る。
【０２７３】
ここに記載する最終化合物は、スキーム９に記載した一般法により製造した。
【０２７４】
実施例１１５：{５−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−２−メチル−フェニル}−(４−メチル−ピペラジン−１−イル)−メタノン
【化９１】
2014530851.tif 000137
５−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−２−メチル−安息香酸(５５mg、０.１４８mmol)のＣＨ２Ｃｌ２(２mL)の混合物にＤＩＰＥＡ(０.０３９mL、０.２２２mmol)および５０％プロピルホスホン酸無水物ＤＭＦ溶液(０.０６５mL、０.２２２mmol)をｒｔで添加した。反応混合物をｒｔで３０分間撹拌した。混合物１−メチルピペラジン(０.０１６mL、０.１４８mmol)を添加し、反応混合物をｒｔで１２時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で反応停止させ、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層を層分離カートリッジを通して乾燥し、蒸発させた。分取逆相ＨＰＬＣで精製し、次いで併せたフラクションをSCx-2カートリッジで中和してより、表題化合物(３２mg、４６％収率)を黄色粉末として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, 298 K): δ ppm 2.13 (s, 3 H) 2.17 (br. s., 2 H) 2.34 (d, 2 H) 2.36 (s, 3 H) 3.26 (t, 2 H) 3.65 (br. s., 2H) 3.92 (s, 3 H) 6.96 (d, 1 H) 7.56 (d, 1 H) 7.64 (d, 1 H) 7.87 (dd, 1 H) 8.12 (dd, 1 H) 8.19 (d, 1 H) 8.23 (d, 1 H) 8.38 (dd, 1 H) 8.59 (d, 1 H) 9.36 (s, 1 H). MS: 454.3 [M+1]+, Rt(1) = : 0.87 min
【０２７５】
５−[６−(６−メトキシ−ピリジン−３−イル)−キナゾリン−４−イル]−２−メチル−安息香酸
【化９２】
2014530851.tif 000138
５−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−２−メチル−安息香酸(３１８mg、０.７４１mmol)、６−メトキシピリジン−３−イルボロン酸(１１３mg、０.７４１mmol)、Ｋ３ＰＯ４(２３６mg、１.１１２mmol)およびＰｄＣｌ２(ＰＰｈ３)２(２６.０mg、０.０３７mmol)の混合物を数分間アルゴンで通気した。混合物にアセトニトリル(６ml)、続いて水(０.８ml)を添加した。バイアルに蓋し、反応混合物を１２０℃で５分間、マイクロ波オーブンを使用して加熱した。混合物をｒｔに冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、セライトパッドで濾過した。有機層を２Ｍ  ＨＣｌ溶液で洗浄した。化合物の一部が水層に残っていたため、ｐＨを約８まで塩基性化し、化合物を再びＥｔＯＡｃで抽出した。併せた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させた。ＥｔＯＡｃ／シクロヘキサンでの沈殿により、表題化合物(１６８mg、６１％収率)を黄色粉末として得た。MS: 372.2 [M+1]+. Rt(1) = 1.22 min
【０２７６】
５−(６−ブロモ−キナゾリン−４−イル)−２−メチル−安息香酸
【化９３】
2014530851.tif 000139
６−ブロモ−４−クロロキナゾリン(３００mg、１.２３２mmol)、２−メチル−５−(４,４,５,５−テトラメチル−[１,３,２]ジオキサボロラン−２−イル)−安息香酸(４９７mg、１.２３２mmol、ＵＰＬＣで純度６５％)、Ｋ３ＰＯ４(３９２mg、１.８４８mmol)およびＰｄＣｌ２(ＰＰｈ３)２(４３.２mg、０.０６２mmol)の混合物を数分間アルゴンで通気した。混合物にアセトニトリル(８ml)、続いて水(０.８ml)を添加した。バイアルに蓋し、反応混合物を１２０℃で５分間、マイクロ波オーブンを使用して加熱した。混合物をｒｔに冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、セライトパッドで濾過した。有機層を２Ｍ  ＨＣｌ溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させた。ＥｔＯＡｃ／シクロヘキサンでの沈殿により、表題化合物(３１８mg、８０％純度、６０％収率)をベージュ色粉末として得た。MS: 345.0 [M+1]+, Rt(1) = 1.23 min
【０２７７】
実施例１１６〜１１７の化合物を、適当な出発物質を使用して、実施例１１５の記載に準ずる方法により製造した。
【表４５】
2014530851.tif 000140
(１)  ＬＣ／ＭＳ方法１
【０２７８】
生物学的評価
生物学的アッセイ
１  酵素ＰＩ３ＫアルファおよびＰＩ３Ｋデルタアイソフォーム阻害の測定
１.１  脂質キナーゼ活性試験
実施例１〜１１７の化合物のＰＩ３キナーゼ阻害剤としての効果を次のとおり証明できる。
キナーゼ反応を、ハーフエリアCOSTAR、９６ウェルプレートで５０μl／ウェルの最終体積で行う。アッセイ中のＡＴＰおよびホスファチジルイノシトールの最終濃度はそれぞれ５μMおよび６μg／mlである。ＰＩ３キナーゼ、例えばＰＩ３キナーゼδの添加により反応を開始させる。
ｐ１１０δ。アッセイ成分をウェルあたり次のとおりに添加する。
・１０μl試験化合物の５％ＤＭＳＯ溶液／ウェルをカラム２−１。
・総活性を１０μlの５％vol/vol  ＤＭＳＯをカラム１の最初の４ウェルおよびカラム１２の最後の４ウェルに添加することにより測定する。
・バックグラウンドを、１０μM対照化合物をカラム１の最後の４ウェルおよびカラム１２の最初の４ウェルに添加することにより測定する。
・２mL‘アッセイミックス'をプレートあたり調製する。
１.９１２mlのＨＥＰＥＳアッセイ緩衝液
最終濃度５μM／ウェルとするための８.３３μlの３mM  ＡＴＰ原液
０.０５μＣｉ／ウェルとするための１μlの[３３Ｐ]ＡＴＰ
最終濃度６μg／ml／ウェルとするための３０μlの１mg／ml  ＰＩ原液
最終濃度１mM／ウェルとするための５μlの１Ｍ  ＭｇＣｌ２原液
・２０μlのアッセイミックスをウェルあたりに添加する。
・２ml‘酵素ミックス'をプレートあたり調製する(ｘ＊μl  ＰＩ３キナーゼｐ１１０βを２mlのキナーゼ緩衝液中)。‘酵素ミックス'をアッセイプレートへの添加中氷上に維持する。
・２０μl‘酵素ミックス'をウェルあたりに添加して、反応を開始させる。
・プレートを室温で９０分間インキュベートする。
・ウェルあたり５０μl  ＷＧＡ−ＳＰＡビーズ(小麦胚芽アグルチニン被覆シンチレーション近接アッセイビーズ)懸濁液の添加により反応を停止させる。
・アッセイプレートをTopSeal-S(ポリスチレンマイクロプレート用ヒートシール、PerkinElmer LAS [Deutschland] GmbH, Rodgau, Germany)を使用して密閉し、室温で少なくとも６０分間インキュベートする。
・アッセイプレートを１５００rpmで２分間、Jouan卓上遠心分離機(Jouan Inc., Nantes, France)で遠心分離する。
・アッセイプレートをPackard TopCountを使用して計数し、各ウェルは２０秒間計数する。
＊酵素の体積は使用する酵素活性バッチによる。
【０２７９】
より好ましいアッセイにおいて、キナーゼ反応を低体積非結合CORNING、３８４ウェル黒色プレート(Cat. No. #3676)で１０μl／ウェルの最終体積で行う。アッセイ中のＡＴＰおよびホスファチジルイノシトール(ＰＩ)の最終濃度はそれぞれ１μMおよび１０μg／mlである。ＡＴＰの添加により反応を開始させる。
アッセイ成分をウェルあたり次のとおりに添加する。
５０nl試験化合物の９０％ＤＭＳＯ溶液／ウェル、カラム１−２０、８濃度(１／３および１／３.３３連続希釈工程)を１個。
・低対照：５０nlの９０％ＤＭＳＯをカラム２３−２４の半分のウェル(最終０.４５％)。
・高対照：５０nlの参照化合物(例えばＷＯ２００６／１２２８０６の実施例７の化合物)をカラム２３−２４の残りの半分(最終２.５μM)。
・標準：試験化合物と同様に希釈した５０nlの直前に記載した参照化合物をカラム２１−２２。
・２０ml‘緩衝液'をアッセイあたりに調製する。
２００μlの１Ｍ  ＴＲＩＳ  ＨＣｌ  ｐＨ７.５(最終１０mM)
６０μlの１Ｍ  ＭｇＣｌ２(最終３mM)
５００μlの２Ｍ  ＮａＣｌ(最終５０mM)
１００μlの１０％ＣＨＡＰＳ(最終０.０５％)
２００μlの１００mM  ＤＴＴ(最終１mM)
１８.９４mlのナノピュア水
・１０ml‘ＰＩ'をアッセイあたりに調製する。
３％オクチルグルコシド中に調製した２００μlの１mg／ml  ｌ−アルファ−ホスファチジルイノシトール(Liver Bovine, Avanti Polar Lipids Cat. No. 840042C MW = 909.12)(最終１０μg／ml)
９.８mlの‘緩衝液'
・１０ml‘ＡＴＰ'をアッセイあたりに調製する。
最終濃度ｏｆ  １μM／ウェルとする６.７μlの３mM  ＡＴＰ原液
１０mlの‘緩衝液'
・２.５mlの各ＰＩ３Ｋ構築物を、‘ＰＩ'中次の最終濃度でアッセイあたり調製する。
１０nM  ＰＩ３ＫアルファEMV B1075
２５nM  ベータEMV BV949
１０nMデルタEMV BV1060
１５０nMガンマEMV BV950
・５μlの‘ＰＩ／ＰＩ３Ｋ'をウェルあたり添加する。
・５μl‘ＡＴＰ'をウェルあたり添加して、反応を開始させる。
・プレートを室温で６０分間(アルファ、ベータ、デルタ)または１２０分間(ガンマ)インキュベートする。
・１０μlキナーゼ−Ｇｌｏ(Promega Cat. No. #6714)の添加により反応を停止させる。
・アッセイプレーを１０分間後Synergy 2リーダー(BioTek, Vermont USA)で積分時間１００ミリ秒および感受性設定１９１で読む。
・アウトプット：高対照は約６０,０００カウントおよび低対照は３０,０００カウント以下であった。
・この発光アッセイは、０.４〜０.７の間のＺ'比をもたらした。
Ｚ'値はアッセイのロバスト性の普遍的測定である。０.５〜１.０の間のＺ'は優れたアッセイであると見なされる。
【０２８０】
このアッセイについて、記載するＰＩ３Ｋ構築物を次のとおり製造する。
１.２  遺伝子構築物の産生
BV-1052およびBV-1075の２種の異なる構築物を化合物スクリーニングのためのＰＩ３キナーゼαタンパク質として産生する。
【０２８１】
ＰＩ３Ｋα  BV-1052：p85(iSH2)−Glyリンカー−p110a(Ｄ２０ａａ)−Ｃ末端Hisタグ
Ｐ８５サブユニットのインターＳＨ２ドメイン(iSH2)のＰＣＲ産物およびp110-aサブユニット(最初の２０アミノ酸欠失)のＰＣＲ産物を産生し、重複ＰＣＲにより融合した。
iSH2 PCR産物を第一鎖ｃＤＮＡから、最初にプライマーgwG130-p01(5'-CGAGAATATGATAGATTATATGAAGAAT-3')(配列番号１)およびgwG130-p02(5'-TGGTTT-AATGCTGTTCATACGTTTGTCAAT-3')(配列番号２)を使用して産生する。続いて、二次ＰＣＲ反応において、Gateway(Invitrogen AG, Basel, Switzerland)組み換えAttB1部位およびリンカー配列を、それぞれプライマーgwG130-p03(5'-GGGACAAGTTTGTACAAAAAAGCAGGCTACGAAGGAGATATACATATGCGAGAATATGATAGATTATATGAAGAAT-3')(配列番号３)およびgwG152-p04(5'-TACCATAATTCCACCACCACCACCGGAAATTCCCCCTGGTTTAATGCTGTTCATACGTTTGTCAAT-3')(配列番号４)を使用してｐ８５  iSH2フラグメントの５'末端および３'末端に付加する。
p110-aフラグメントも第一鎖ｃＤＮＡからｃＤＮＡ、最初にプライマーgwG152-p01(5'-CTAGTGGAATGTTTACTACCAAATGG-3')(配列番号５)およびgwG152-p02(5'-GTTCAATG-CATGCTGTTTAATTGTGT-3')(配列番号６)を使用して産生する。
【０２８２】
続くＰＣＲ反応において、リンカー配列およびヒスチジンタグを、それぞれプライマーgw152-p03(5'-GGGGGAATTTCCGGTGGTGGTGGTGGAATTATGGTACTAGTGGAATGTTTACTACCAAATGGA-3')(配列番号７)およびgwG152-p06(5'-AGCTCCGTGATGGTGATGGTGATGTGCTCCGTTCAATGCATGCTGTTTAATTGTGT-3')(配列番号８)を使用してp110-aフラグメントの５'末端および３'末端に付加する。
p85-iSH2／p110-a融合タンパク質を、第三のＰＣＲ反応で、上記gwG130-p03プライマーおよび重複ヒスチジンタグおよびAttB2組み換え配列(5'-GGGACCACTTTGTACAAGAAAGCTGGGTTTAAGCTCCGTGATGGTGATGGTGATGTGCTCC-3')(配列番号９)を含むプライマーを使用して、iSH2フラグメントの３'末端およびp110-aフラグメントの５'末端でリンカーを重複させることにより集合させる。
この最終産物を(Invitrogen)OR反応においてドナーベクターpDONR201と再結合させて、ORF318エントリークローンを産生する。このクローンを配列決定により確認し、Gateway LR反応に使用して、インサートをGateway適合pBlueBac4.5(Invitrogen)ベクターに移動させて、バキュロウイルス発現ベクターLR410を産生する。
【０２８３】
ＰＩ３Ｋα  BV-1075：p85(iSH2)-12×Glyリンカー−p110a(Ｄ２０ａａ)−Ｃ末端Hisタグ
バキュロウイルスBV-1075の構築物を、ｐ８５フラグメントおよびベクターpBlueBac4.5にクローン化したp110-aフラグメントから成る３部ライゲーションにより産生する。ｐ８５フラグメントは、Nhe／SpeIで消化したプラスミドp1661-2由来である。p110-aフラグメントはSpeI／HindIIIフラグメントとしてLR410由来である(上記参照)。クローニングベクターpBlueBac4.5(Invitrogen)をNhe／HindIIIで消化する。これにより構築物PED 153.8を得る。
ｐ８５要素(iSH2)を、ＰＣＲにより鋳型としてORF318(上記)および１個の順方向プライマーKAC1028(5'-GCTAGCATGCGAGAATATGATAGATTATATGAAGAATATACC)(配列番号１０)および２個の逆方向プライマーKAC1029(5'-GCCTCCACCACCTCCGCCTGGTTTAATGCTGTTCATACGTTTGTC)(配列番号１１)およびKAC1039(5'-TACTAGTCCGCCTCCACCACCTCCGCCTCCACCACCTCCGCC)(配列番号１２)を使用して産生する。
２個の逆方向プライマーは重複し、１２×Glyリンカーおよびp110a遺伝子のＮ末端配列をSpeI部位に取り込む。１２×Glyリンカーは、BV1052構築物におけるリンカーを置き換える。ＰＣＲフラグメントをpCR2.1 TOPO(Invitrogen)にクローン化する。得られたクローンのうち、p1661-2が正しいと決定される。このプラスミドをNheおよびSpeIで消化し、得られたフラグメントをゲル単離し、サブクローニングのために精製する。
【０２８４】
p110-aクローニングフラグメントをクローンLR410(上記参照のSpeIおよびHindIIIでの酵素消化により産生する。SpeI部位はp110a遺伝子のコーディング領域にある。得られたフラグメントをゲル単離し、サブクローニングのために精製する。
クローニングベクター、pBlueBac4.5(Invitrogen)を、NheおよびHindIIIでの酵素消化により産生する。切断ベクターをQiagen(Quiagen N.V, Venlo, Netherlands)カラムで精製し、ウシ腸アルカリホスファターゼ(ＣＩＰ)(New England BioLabs, Ipswich, MA)で脱リン酸化する。ＣＩＰ反応完了後、切断ベクターを再びカラム精製して、最終ベクターを得る。３部ライゲーションをRoche Rapidリガーゼおよびベンダーの規格を使用して行う。
【０２８５】
ＰＩ３Ｋβ  BV-949：p85(iSH2)−Glyリンカー−p110b(完全長)−Ｃ末端Hisタグ
Ｐ８５サブユニットのインターＳＨ２ドメイン(iSH2)のＰＣＲ産物および完全長p110-bサブユニットのＰＣＲ産物を産生し、重複ＰＣＲにより縮合する。
iSH2 PCR産物を第一鎖ｃＤＮＡから、最初にプライマーgwG130-p01(5'-CGAGAATATGATAGATTATATGAAGAAT-3')(配列番号１)およびgwG130-p02(5'-TGGTTT-AATGCTGTTCATACGTTTGTCAAT-3')(配列番号２)を使用して産生する。続いて、二次ＰＣＲ反応において、Gateway(Invitrogen)組み換えAttB1部位およびリンカー配列を、それぞれプライマーgwG130-p03(5'-GGGACAAGTTTGTACAAAAAAGCAGGCTACGAAGGAGATA-TACATATGCGAGAATATGATAGATTATATGAAGAAT-3')(配列番号３)およびgwG130-p05(5'-ACTGAAGCATCCTCCTCCTCCTCCTCCTGGTTTAAT-GCTGTTCATACGTTTGTC-3')(配列番号１３)を使用してp85 iSH2フラグメントの５'末端および３'末端に付加する。
【０２８６】
p110-bフラグメントも第一鎖ｃＤＮＡから、最初にリンカー配列およびp110-bの５'末端を含むプライマーgwG130-p04(5'-ATTAAACCAGGAGGAGGAGGAGGAGGATGCTTCAGTTTCATAATGCC-TCCTGCT-3')(配列番号４)およびヒスチジンタグに融合したp110-bの３'末端配列を含むgwG130-p06(5'-AGCTCCGTGATGGTGATGGTGATGTGCTCCAGATCTGTAGTCTTT-CCGAACTGTGTG-3')(配列番号１４)を使用して産生する。
p85-iSH2／p110-b融合タンパク質を、上記gwG130-p03プライマーおよび重複ヒスチジンタグおよびAttB2組み換え配列(5'-GGGACCACTTTGTACAAGAAAGCTGGGTTT-AAGCTCCGTGATGGTGATGGTGATGTGCTCC-3')(配列番号１５)を含むプライマーを使用して、iSH2フラグメントの３'末端およびp110-bの５'末端フラグメントでリンカーの重複ＰＣＲ反応により集合させる。
この最終産物をGateway(Invitrogen)OR反応においてドナーベクターpDONR201と再結合させて、ORF253エントリークローンを産生する。このクローンを配列決定により確認し、Gateway LR反応に使用して、インサートをGateway適合pBlueBac4.5(Invitrogen)ベクターに移動させて、バキュロウイルス発現ベクターLR280を得る。
【０２８７】
ＰＩ３Ｋδ  BV-1060：p85(iSH2)−Glyリンカー−p110d(完全長)−Ｃ末端Hisタグ
Ｐ８５サブユニットのインターＳＨ２ドメイン(iSH2)のＰＣＲ産物および完全長p110-dサブユニットのＰＣＲ産物を産生し、重複ＰＣＲにより縮合する。
iSH2 PCR産物を第一鎖ｃＤＮＡから、最初にプライマーgwG130-p01(5'-CGAGAATATGATAGATTATATGAAGAAT-3')(配列番号１)およびgwG130-p02(5'-TGGTTT-AATGCTGTTCATACGTTTGTCAAT-3')(配列番号２)を使用して産生する。続いて、二次ＰＣＲ反応において、Gateway(Invitrogen)組み換えAttB1部位およびリンカー配列を、それぞれプライマーgwG130-p03(5'-GGGACAAGTTTGTACAAAAAAGCAGGCTACGAAGGAGATATACAT-ATGCGAGAATATGATAGATTATATGAAGAAT-3')(配列番号３)およびgwG154-p04(5'-TCCTCCTCCTCCTCCTCCTGGTTTAATGCTGTTCATACGTTTGTC-3')(配列番号１６)を使用してp85 iSH2フラグメントの５'末端および３'末端に付加する。
p110-aフラグメントもまた第一鎖ｃＤＮＡから、最初にプライマーgwG154-p01(5'-ATGCCCCCTGGGGTGGACTGCCCCAT-3')(配列番号１７)およびgwG154-p02(5'-CTACTG-CCTGTTGTCTTTGGACACGT-3')(配列番号１８)を使用して産生する。
続くＰＣＲ反応において、リンカー配列およびヒスチジンタグを、それぞれp110-dフラグメントの５'末端および３'末端にプライマーgw154-p03(5'-ATTAAACCAGGAGGAGGAGGAGGAGGACCCCCTGGGGTGGAC-TGCCCCATGGA-3')(配列番号１９)およびgwG154-p06(5'-AGCTCCGTGATGGTGAT-GGTGATGTGCT-CCCTGCCTGTTGTCTTTGGACACGTTGT-3')(配列番号２０)を使用して付加する。
【０２８８】
p85-iSH2／p110-d融合タンパク質を第三のＰＣＲ反応において、上記gwG130-p03プライマーおよび重複ヒスチジンタグおよびGateway(Invitrogen)AttB2組み換え配列(5'-GGGACCACTTTGTA-CAAGAAAGCTGGGTTT-AAGCTCCGTGATGGTGATGGTGATGTGCTCC-3')(配列番号２１)を含むプライマーを使用して、p110-dフラグメントのiSH2フラグメントの３'末端および５'末端でリンカーを重複させることにより集合させる。
この最終産物をGateway(Invitrogen)OR反応においてドナーベクターpDONR201と再結合させて、ORF319エントリークローンを産生する。このクローンを配列決定により確認し、Gateway LR反応に使用して、インサートをGateway適合pBlueBac4.5(Invitrogen)ベクターに移動させて、バキュロウイルス発現ベクターLR415を得る。
【０２８９】
ＰＩ３Ｋγ  ＢＶ−９５０：ｐ１１０ｇ(Ｄ１４４ａａ)−Ｃ末端Hisタグ
この構築物を、Roger Williams lab, MRC Laboratory of Molecular Biology, Cambridge, UK (November, 2003)から得る。構築物の説明は：Pacold M. E. et al. (2000) Cell 103, 931-943。
【０２９０】
１.３  タンパク質発現および精製
ＰＩ３Ｋアイソフォームのための組み換えバキュロウイルスおよびタンパク質の製造方法：
種々のＰＩ３キナーゼ遺伝子を含むpBlueBac4.5(ａ、ｂおよびｄアイソフォームについて)またはpVL1393(ｇについて)プラスミドを、BaculoGold WT genomic DNA(BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ, USA)と、業者が推奨する方法で共トランスフェクトする。続いて、トランスフェクションにより得られた組み換えバキュロウイルスをＳｆ９昆虫細胞でプラーク精製して、組み換えタンパク質を発現する数個の単離体を得る。陽性クローンを抗ＨＩＳまたは抗アイソフォーム抗体ウェスタンにより選択する。ＰＩ３Ｋアルファおよびデルタアイソフォームについて、二次的プラーク精製をＰＩ３Ｋの最初のクローンウイルスストックで行う。全バキュロウイルス単離体の増幅を低感染効率(ｍｏｉ)で行い、タンパク質産生のための高タイター、低継代数ストックを得る。バキュロウイルスをBV1052(α)およびＢＶ１０７５(α)、BV949(β)、BV1060(δ)およびBV950(γ)と名づける。
【０２９１】
タンパク質産生は、２ｌガラスエレンマイヤーフラスコ(１１０rpm)またはウェーブ・バイオリアクター(２２〜２５rpm)中、無タンパク質媒体中の懸濁Ｔｎ５(イラクサギンウワバ)またはTiniPro(Expression Systems, LLC, Woodland, CA, USA)細胞の２〜１０のmoiで３９〜４８時間の感染(継代３以下)を含む。最初に、１０ｌ作業体積ウェーブ・バイオリアクターに３ｅ５細胞／mlの密度で、半量まで(５Ｌ)播種する。リアクターを、空気(０.２ｌ／分)と混合した５％酸素を供給して、細胞増殖期の間、７２時間１５rpmで揺する。感染直前に、ウェーブ・リアクター培養物を密度、生存能について分析し、約１.５ｅ６細胞／mlに希釈する。１００〜５００mlの高タイター、低継代数ウイルスを添加し、２〜４時間時間さらに培養する。酸素を３９〜４８時間感染時間のとき３５％に上げ、プラットフォームを揺らすrpmを２５に上昇させる。感染中、細胞をVicell生存能アナライザー(Beckman Coulter, Inc, Fullerton, CA, USA)バイオプロセスで生存能、直径および密度についてモニターする。種々のパラメータおよび代謝物(ｐＨ、Ｏ２飽和、グルコースなど)のNova Bioanalyzer(NOVA Biomedical Corp., Waltham, MA, USA)読み取り値を回収するまで１２〜１８時間毎に取る。ウェーブ・バイオリアクター細胞を感染後４０時間時間以内に回収する。細胞を遠心分離(４℃で１５００rpm)により回収し、続いて、溶解および精製のためにペレットを溜める間氷上に維持する。ペレットプールは、少量の、無添加グレース媒体(プロテアーゼ阻害剤なし)で調製する。
【０２９２】
ＨＴＳ(BV1052)のためのＰＩ３Ｋアルファ精製プロトコル
ＰＩ３Ｋアルファを３工程のクロマトグラフィーで精製する：Ｎｉセファロース樹脂上の固定化金属親和性クロマトグラフィー(General Electric Companyに属するGE Healthcare, Fairfield, CT, USA)、Superdex 200 26/60カラムを使用するゲル濾過(GE Healthcare)そして最後にSP-XLカラム上のカチオン交換工程(GE Healthcare)。全緩衝液を４℃に冷蔵し、氷で冷やしながら溶解を行う。カラム分画を室温で迅速に行う。
典型的に凍結昆虫細胞を高張溶解緩衝液に溶解し、調製したIMACカラムに適用する。樹脂を３〜５カラム体積の溶解緩衝液、続いて３〜５カラム体積の４５mM  イミダゾール含有洗浄緩衝液で洗浄し、標的タンパク質２５０mM  イミダゾール含有緩衝液で溶出する。フラクションをクーマシー染色SDS-PAGEゲルで分析し、標的タンパク質含有フラクションを溜め、調製したGFCカラムに適用する。GFCカラム由来フラクションをクーマシー染色SDS-PAGEゲルで分析し、標的タンパク質含有フラクションを溜める。GFCカラム由来プールを低塩緩衝液に希釈し、調製したSP-XLカラムに適用する。本カラムを安定なＡ２８０ベースライン吸光度が達成されるまで低塩緩衝液で洗浄し、０mM  ＮａＣｌ〜５００mM  ＮａＣｌの２０カラム体積勾配を使用して溶出する。再び、SP-XLカラム由来のフラクションをクーマシー染色SDS-PAGEゲルで分析し、標的タンパク質含有フラクションを溜める。最終プールを５０％グリセロール含有貯蔵緩衝液に透析し、−２０℃で貯蔵する。最終プールをホスホイノシチトールキナーゼアッセイにおいて活性をアッセイする。
【０２９３】
ＨＴＳ(BV949)のためのＰＩ３Ｋベータ精製プロトコル
ＰＩ３Ｋベータを２工程のクロマトグラフィーで精製する：Ｎｉセファロース樹脂上の固定化金属親和性クロマトグラフィー(IMAC)(GE Healthcare)およびSuperdex 200 26/60カラム(GE Healthcare)を使用するゲル濾過(GFC)。全緩衝液を４℃に冷蔵し、氷で冷やしながら溶解を行う。カラム分画を室温で迅速に行う。
典型的に凍結昆虫細胞を高張溶解緩衝液に溶解し、調製したIMACカラムに適用する。樹脂を３〜５カラム体積の溶解緩衝液、続いて３〜５カラム体積の４５mM  イミダゾール含有洗浄緩衝液で洗浄し、標的タンパク質２５０mM  イミダゾール含有緩衝液で溶出する。フラクションをクーマシー染色SDS-PAGEゲルで分析し、標的タンパク質含有フラクションを溜め、調製したGFCカラムに適用する。GFCカラム由来フラクションをクーマシー染色SDS-PAGEゲルで分析し、標的タンパク質含有フラクションを溜める。最終プールを５０％グリセロール含有貯蔵緩衝液に透析し、−２０℃で貯蔵する。最終プールをホスホイノシチトールキナーゼアッセイにおいて活性をアッセイする。
【０２９４】
ＨＴＳ(BV950)のためのＰＩ３Ｋガンマ精製プロトコル
ＰＩ３Ｋガンマを２工程のクロマトグラフィーで精製する：Ｎｉセファロース樹脂上の固定化金属親和性クロマトグラフィー(IMAC)(GE Healthcare)およびSuperdex 200 26/60カラム(GE Healthcare)を使用するゲル濾過(GFC)。全緩衝液を４℃に冷蔵し、氷で冷やしながら細胞溶解を行う。カラム分画を室温で迅速に行う。典型的に凍結昆虫細胞を高張溶解緩衝液に溶解し、調製したIMACカラムに適用する。樹脂を３〜５カラム体積の溶解緩衝液、続いて３〜５カラム体積の４５mM  イミダゾール含有洗浄緩衝液で洗浄し、標的タンパク質２５０mM  イミダゾール含有緩衝液で溶出する。フラクションをクーマシー染色SDS-PAGEゲルで分析し、標的タンパク質含有フラクションを溜め、調製したGFCカラムに適用する。GFCカラム由来フラクションをクーマシー染色SDS-PAGEゲルで分析し、標的タンパク質含有フラクションを溜める。最終プールを５０％グリセロール含有貯蔵緩衝液に透析し、−２０℃で貯蔵する。最終プールをホスホイノシチトールキナーゼアッセイにおいて活性をアッセイする。
【０２９５】
ＨＴＳ(BV1060)のためのＰＩ３Ｋデルタ精製プロトコル
ＰＩ３Ｋデルタを３工程のクロマトグラフィーで精製する：Ｎｉセファロース樹脂上の固定化金属親和性クロマトグラフィー(GE Healthcare)、Superdex 200 26/60カラムを使用するゲル濾過(GE Healthcare)そして最後にQ-HPカラム(GE Healthcare)上のアニオン交換工程。全緩衝液を４℃に冷蔵し、氷で冷やしながら細胞溶解を行う。カラム分画を室温で迅速に行う。典型的に凍結昆虫細胞を高張溶解緩衝液に溶解し、調製したIMACカラムに適用する。樹脂を３〜５カラム体積の溶解緩衝液、続いて３〜５カラム体積の４５mM  イミダゾール含有洗浄緩衝液で洗浄し、標的タンパク質２５０mM  イミダゾール含有緩衝液で溶出する。フラクションをクーマシー染色SDS-PAGEゲルで分析し、標的タンパク質含有フラクションを溜め、調製したGFCカラムに適用する。GFCカラム由来フラクションをクーマシー染色SDS-PAGEゲルで分析し、標的タンパク質含有フラクションを溜める。GFCカラム由来プールを低塩緩衝液に希釈し、Q-HPカラムに適用する。本カラムを安定なＡ２８０ベースライン吸光度が達成されるまで低塩緩衝液で洗浄し、０mM  ＮａＣｌ〜５００mM  ＮａＣｌの２０カラム体積勾配を使用して溶出する。再び、Q-HPカラムからのフラクションをクーマシー染色SDS-PAGEゲルで分析し、標的タンパク質含有フラクションを溜める。最終プールを５０％グリセロール含有貯蔵緩衝液に透析し、−２０℃で貯蔵する。最終プールをホスホイノシチトールキナーゼアッセイにおいて活性をアッセイする。
【０２９６】
ＩＣ５０を、“excel fit”に添付されている常用の４パラメータ曲線適合により決定する。４パラメータロジスティック方程式を使用して、８濃度(通常１０μM、３.０μM、１.０μM、０.３μM、０.１μM、０.０３０μM、０.０１０μMおよび０.００３μM)の各化合物の阻害パーセンテージのＩＣ５０値(IDBS XLfit)を計算する。あるいは、ＩＣ５０値を４パラメータロジスティックモデルであるidbsXLfitモデル２０４を使用して計算する。
【０２９７】
さらに別法として、ＡＴＰ枯渇アッセイについて、試験する式(Ｉ)の化合物をＤＭＳＯに溶解し、直接白色３８４ウェルプレートに０.５μl／ウェルで分配する。反応を開始させるために、１０μlの１０nM  ＰＩ３キナーゼおよび５μg／ml  １−アルファ−ホスファチジルイノシトール(ＰＩ)、続いて１０μlの２μM  ＡＴＰを各ウェルに添加する。約５０％のＡＴＰが枯渇するまで反応を行い、２０μlのキナーゼ−Ｇｌｏ溶液(Promega Corp., Madison, WI, USA)添加により反応を停止させる。停止させた反応物を５分間インキュベートし、残ったＡＴＰを発光により検出する。ＩＣ５０値を決定する。
【０２９８】
実施例１〜１１７の化合物のいくつかは、パラログＰＩ３Ｋα、β、γおよびδに対して一定レベルの選択性を示す。
適切には、インビトロおよびインビボ試験で示されるとおり、アイソフォームＰＩ３Ｋδに、例えば、別のパラログＰＩ３Ｋαおよびβに対してより少なくとも１０倍およびより好ましくは少なくとも３０倍の選択性を有する。
これらのアッセイにおける活性範囲は、ＩＣ５０で示して、好ましくは１nM〜５０００nM、より好ましくは１nM〜約１０００nMである。
【０２９９】
細胞アッセイ
１  Ｒａｔ１細胞におけるＰＩ３Ｋアルファ、ＰＩ３ＫベータおよびＰＩ３Ｋデルタ阻害の測定
ＰＩ３Ｋ／ＰＫＢ経路の活性化の遮断における化合物の効果を、ＰＩ３−キナーゼアイソフォームｓアルファ、ベータまたはデルタの活性化体で適切に遺伝子導入したＲａｔ１細胞におけるＰＫＢ  Ｓｅｒ４７３リン酸化の化合物媒介阻害の感受性定量のためのPerkin Elmerのthe ALPHA technologyを利用する均質サンドイッチホスホ−ＥＬＩＳＡを使用した細胞設定で証明した。
【０３００】
１.１  細胞および細胞培養条件
触媒的ＰＩ３ＫクラスＩ  ｐ１１０アイソフォームα、βまたはδのｍｙｒ−ＨＡ標識された、構成的活性サブユニットを安定に発現するＲａｔ１細胞株(ｐ１１０アイソフォームのＮ末端へのミリスチル化シグナル付加は、ＰＩ３ＫおよびＳｅｒ４７３でのＰＫＢのリン酸化のような対応する下流シグナルを構成的活性化することが示されている)を、１０％熱不活性化ウシ胎児血清(Amimed, cat. No. 2-01F16-I)、１％Ｌ−グルタミン(Invitrogen, cat. No. 25030-02)、１％ペニシリン−ストレプトマイシン(GIBCO, cat. No. 15140-114)および１０μg／ml  ピューロマイシン(Sigma, cat. No. P9620)を添加したベルベッコ変法イーグル培地(ＤＭＥＭ高グルコース、GIBCO, cat. No. 41956-039)で培養した。
【０３０１】
１.２  細胞の化合物での処理およびサンプル調製
試験化合物を、ＤＭＳＯ(Merck, # 8.02912.2500)中１０mM原液として調製した。試験化合物を、９０％ＤＭＳＯ(Merck, #8.02912.2500)中、２mMから出発して８濃度の３倍連続希釈で３８４ウェルプレート(Greiner PP-Microplate, #781201)に調製した。試験化合物をマスタープレートから３８４ウェルプレートの飢餓培地にMATRIX PlateMate 2x2ピペッター(３８４ウェルヘッド)を使用して２連続１：２０希釈工程(５μl＋９５μl)で予め希釈(１：４００)した。この１：４００希釈の２５μl／ウェルを細胞培養プレートに添加した。１：８００の最終化合物希釈は、全化合物について２.５μMの出発濃度をもたらし、最終ＤＭＳＯ濃度は、対照細胞(高および低対照)についても、０.１２５％に一定にした。
【０３０２】
Ｒａｔ１−ｍｙｒ−ＨＡ−ｐ１１０アルファ、ベータおよびデルタ細胞をトリプシン処理し、CASY TT細胞カウンター(Schaerfe System GmbH, Reutlingen Germany)で計数した。ｍｙｒ−ＨＡ−ｐ１１０アルファ、ベータおよびデルタを発現するＲａｔ１細胞を３８４ウェルプレートに、１５,０００細胞／ウェルで、５０μl／ウェル完全培地中播種し、２０時間、３７℃、５％ＣＯ２で細胞層が８０〜９０％コンフルエンシーになるまでインキュベートした。試験化合物を、MATRIX PlateMate 2x2ピペッター(３８４ウェルヘッド)を使用して、マスタープレートから３８４ウェルプレートの飢餓培地への２連続１：２０希釈工程(５μl＋９５μl)により予め希釈した(１：４００)。２５μl／ウェルのこの１：４００希釈を細胞培養プレートに添加した。１：８００の最終化合物希釈は、全化合物について２.５μMの出発濃度をもたらし、最終ＤＭＳＯ濃度は、対照細胞(高および低対照)についても、０.１２５％に一定にした。１：８００の最終化合物希釈は、全化合物について２.５μMの出発濃度をもたらし、最終ＤＭＳＯ濃度は、対照細胞(高および低対照)についても、０.１２５％に一定にしたて、１０μM、３.３３３μM、１.１１１μM、０.３７０μM、０.１２３μM、０.０４１μM、０.０１４μM、０.００５μMの最終化合物濃度を得た。
【０３０３】
未処置細胞を低対照として使用し、化合物非存在下で刺激した細胞を高対照として使用した。１時間、化合物とのインキュベーション後、細胞を、０.７２％ＢＳＡで富化した１５μl  ３×溶解緩衝液(SureFire kitと５×溶液として提供)の添加により溶解して、４５μl細胞溶解物／ウェルの総体積とした。細胞溶解物を直ぐに使用するか、使用するまで−２０℃で凍結した(密閉プレート)。５μlの各溶解物をProxyプレートに移し、供給者の指示に従いSurefireビーズ、反応緩衝液(適当な抗体含有)、活性化緩衝液および希釈緩衝液と混合し、１２μl／ウェルの総体積として(アッセイ中の総最終ＢＳＡ濃度は０.１％であった)。暗所で、ＲＴて、２時間のインキュベーション後(振盪しながら)、発光をEnVision Reader(Perkin Elmer)を使用して測定した。高対照と低対照の差を１００％と取り、化合物効果を阻害パーセントとして表した。ＩＣ５０値を、用量応答曲線からグラフ外挿により決定した。
【０３０４】
２)  マウスＢ細胞活性化の決定
ＰＩ３Ｋδは、細胞をＢ細胞受容体(ＢＣＲ)を介して刺激したとき、Ｂ細胞機能を調節することが認識されている(Okkenhaug et al. Science 297: 1031 (2002))。Ｂ細胞活性化に対する化合物の阻害特性を評価するために、マウス脾臓抗体由来のマウスＢ細胞上の活性化マーカーＣＤ８６およびＣＤ６９の上方制御を、抗ＩｇＭで刺激後に測定する。ＣＤ６９は周知のＢ細胞およびＴ細胞活性化マーカーである(Sancho et al. Trends Immunol. 26: 136 (2005))。ＣＤ８６(Ｂ７−２としても知られる)は、主にＢ細胞を含む抗原提示細胞に発現される。静止Ｂ細胞はＣＤ８６を低レベルで発現するが、例えばＢＣＲまたはＩＬ−４受容体で刺激後に上方制御される。Ｂ細胞上のＣＤ８６はＴ細胞上のＣＤ２８と相互作用する。この相互作用は最適Ｔ細胞活性化および最適ＩｇＧ１応答産生のために必要である(Carreno et al. Annu Rev Immunol. 20: 29 (2002))。
Ｂａｌｂ／ｃマウスの脾臓を採取し、脾細胞を単離し、１０％ウシ胎児血清(ＦＢＳ)、１０mM  ＨＥＰＥＳ、１００単位／ml  ペニシリン／ストレプトマイシン含有ＲＰＭＩで２回洗浄した。この方法で添加したＲＰＭＩを以後培地と呼ぶ。細胞を培地中に２.５×１０６細胞／mlで調節し、２００μl細胞懸濁液(５×１０６細胞)を９６ウェルプレートの適当なウェルに添加した。
【０３０５】
次いで細胞を５０μl抗ＩｇＭ  ｍＡｂを培地(最終濃度：３０μg／ml)に添加することにより刺激した。２４時間、３７℃でインキュベーション後、細胞を次の抗体カクテルで染色した：Ｂ細胞評価のために抗マウスCD86-FITC、抗マウスCD69-PerCP-Cy5.5、抗マウスCD19-PerCPおよびＴ細胞評価のために抗マウスCD3-FITC、抗マウスCD69-PE(２μlの各抗体／ウェル)。１時間、室温(ＲＴ)で暗所でインキュベート後、細胞を９６深ウェルプレートに移した。細胞を、２％ＦＢＳ含有ＰＢＳ(１ml)で１回洗浄し、２００μlに再懸濁後、サンプルをFACS Caliburフローサイトメーターで分析した。リンパ球を、サイズおよび粒度によりＦＳＣ／ＳＳＣドットプロットをゲート開閉し、さらにＣＤ１９、ＣＤ３および活性化マーカー(ＣＤ８６、ＣＤ６９)発現について分析した。データを、ドットプロットからBD CellQestソフトウェアを使用したＣＤ１９＋またはＣＤ３＋集団内の活性化マーカーについてポジティブに染色された細胞のパーセンテージとして計算した。
【０３０６】
化合物の阻害特性を評価するために、化合物を最初にＤＭＳＯに溶解および希釈し、続いて培地で１：５０希釈した。上記のとおりＢａｌｂ／ｃマウスの脾細胞を単離し、再懸濁し、９６ウェルプレートに移した(２００μl／ウェル)。希釈した化合物または溶媒をプレートに添加し(２５μl)、３７℃で１時間インキュベートした。培養を２５μl抗ＩｇＭ  ｍＡｂ／ウェル(最終濃度３０μg／ml)で２４時間、３７℃刺激し、抗マウスCD86-FITCおよび抗マウスCD19-PerCP(２μlの各抗体／ウェル)で染色した。ＣＤ１９ポジティブＢ細胞上のＣＤ８６発現を上記のとおりフローサイトメトリーで定量した。
【０３０７】
生物学的データ
【表４６】
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【表４７】
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【表４８】
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【表４９】
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【表５０】
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【０３０８】
【表５１】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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