(57)【要約】  本発明は、微細組織及び骨のテクスチャを測定するための磁気共鳴ベースの技術を使用して、肝疾患及びその他の線維性疾患の存在の指標を検知するための方法である。  具体的には、本発明は、臓器を通る断面積にわたる特定の疾患プロセスに特徴的な空間波長を測定することによって、肝疾患、肺疾患及びその他の線維性疾患の存在及び重篤度の評価を容易にするための、上記のような従来技術の改良に焦点を当てたものである。結果はマッピング技術を用いて表示してよい。このようにして、ＭＲデータの解像度を、現行のＭＲ画像診断で可能なものよりはるかに拡張することができ、これによって、これらの疾患の進行に関わる退行プロセスの特徴として知られる、微細スケールの構造及び組織の変化を測定できる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者の疾患に応じて前記患者の臓器内の線維構造の進行を評価する方法であって：
磁場勾配を適用しながら、前記患者の標的領域内に位置決めした選択的に励起された内部容積の取得軸に沿った空間符号化ＭＲエコーを取得すること；
前記選択的に励起された内部容積の前記取得軸に沿った前記空間符号化ＭＲエコーを分析して、前記内部容積の空間符号化軸に沿った関心領域のテクスチャ性波長のスペクトルを、前記疾患のマーカとして得ること；
同一の又は異なる患者から採取した前記臓器の対応する関心領域における公知のテクスチャ性波長のスペクトルと比較することによって、前記関心領域のテクスチャ性波長の前記スペクトルから線維症の前記進行を評価すること
を含む、方法。
【請求項２】
前記状態又は疾患を評価することは、前記テクスチャ性波長の前記スペクトルの選択された範囲を分析することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記関心領域における線維症の進行を評価するために、前記構造性波長の前記選択された範囲内で相対的積分強度を用いることを更に含む、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
単一の取得容積又は一連の取得容積からの前記テクスチャ性波長のスペクトルを用いて、前記臓器において疾患の状態を評価するため及び進行を監視するための、数字、グレートーン又は色として積分強度を表示する選択された波長範囲内の積分強度のマップを生成することを更に含む、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
特定の疾患との最良の相互間をもたらすために、関心対象の前記波長範囲の前記選択において組織学を用いることを更に含む、請求項３に記載の方法。
【請求項６】
臓器の標的面積を包含するために交互取得容積を使用して、前記臓器における線維症の進行を評価するために、前記交互容積の各取得軸に沿った１つ又は複数の関心領域で分析を行うことを更に含む、請求項１に記載の方法
【請求項７】
前記標的疾患において関心対象の前記波長範囲を考慮したアレイにおける前記取得容積の断面を選択することを更に含む、請求項１、２、３、６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記臓器内の線維構造の進行の評価の一部として、前記ＭＲエコーデータからの少なくとも１つの他のマーカを生成及びマッピングすることを更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
疾患の進行に関する関心対象の前記構造性波長の範囲内にあるデータを用いて引き出された複数のマーカからなる群から、他のマーカを選択して、
ａ）テクスチャ性波長のスペクトル内の様々なピークの高さの比を採取して、マーカを得；
ｂ）様々なピークの積分強度の比又は前記ピークの正規化強度の比を採取し；
ｃ）ここの構造性波長の特徴を互いに、又はいくつかの引き出されたスペクトル特徴と比較し；又は
ｄ）統計的変換方法を用いて、データからノイズを除外する、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
多数の関心領域に関して、特定の波長範囲の積分強度の空間変動を用いて、臓器内の関心領域全体にわたる線維構造の変動を評価して、前記臓器の疾患の均一性を評価するために、前記方法を繰り返すことを更に含む、請求項１、２、３、５、６、９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記臓器における多数の関心領域を横切る線維構造における変動をマッピングするために、前記多数の関心領域に関して前記方法を繰り返すことを更に含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
治療に対する反応の評価のために疾患の進行又は治療の経過にわたってＭＲスキャンを繰り返すことを更に含む、請求項１、２、３、６、１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
関心対象の前記臓器の外側に収まる交互アレイの部分を取り除くために、セグメンテーションを用いることを更に含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記患者に外因性ＭＲコントラスト又は外因性ＭＲ造影剤の投与を用いることを更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記造影剤の取り込み及び排除の経過を辿るために、前記外因性ＭＲ造影剤の投与後に様々な時点でのデータ取得測定を繰り返すことを更に含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記線維構造を脈管構造と区別して、前記線維構造の進行を最も強く表す波長範囲を前記脈管構造から識別し、また前記脈管構造による前記空間符号化ＭＲエコーの減算処理によって、前記空間符号化ＭＲエコーを補正できるようにするために、前記方法を繰り返す、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
関心対象の前記臓器の外側に収まる交互アレイの部分を取り除くために、セグメンテーションを用いることを更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
肝臓、肺、心筋線維症、筋線維症、嚢胞性線維症、膵臓線維症の線維構造の進行を評価するために、前記方法を使用することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
交互又は単一の内部容積の複数のセットに対して前記方法を実行して、臓器の複数の異なる面において線維構造の変動を決定することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２０】
臓器全体にわたる関心領域に関して前記方法を反復し、疾患の段階のタイプを評価する、請求項１、２、３、６、１４、１５、１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
疾患プロセスに固有の所定の波長範囲から得た代替マーカを使用して、色、色調、数値、又はアイコンの密度等の、前記マーカの大きさを表示する他の計量法でマッピングすることを更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
前記エコー信号を正規化して信号強度の差を補正し、これによって患者間の評価の比較を可能とすることを更に含む、請求項１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
この出願は２０１１年９月２６日に出願された米国仮特許出願第６１／５３９２７６号の利益を主張する。
【０００２】
本発明は、肝疾患、肺疾患、嚢胞性線維症、腸線維症、膵臓線維症、骨髄線維症、関節線維症、筋ジストロフィ、腎臓疾患における腎線維症等の線維性疾患、並びに付随する組織及び臓器の機能不全が線維症の構造の発生に関与する他の疾患の、臨床診療並びに臨床及び前診療研究における診断評価及び監視の分野に関する。
【背景技術】
【０００３】
米国では、５５０万人もの人々がＣＬＤ（慢性肝疾患）又はその進行形態である肝硬変に罹患していると推定されており、米国の医療制度は毎年およそ１６億ドルを費やし、１年に２万７千件の死亡の原因となっている。英国では、肝疾患は５番目に多い死因である（非特許文献１を参照のこと）。世界のその他の国においても、主要な健康上の問題と考えられる。肝疾患には多くの原因があるが、疾患の大多数に関する最も一般的な特徴は線維症であり、これは長い年月をかけて進行していく。進行した線維症は、肝硬変、門脈高血圧症（肝臓を通した血流の減少）及び肝臓の機能の低下又は機能不全につながる。疾患が進行した患者の管理は移植に限定されるが、これは結果が不確実であり、この点から癌腫又は他の合併症の発生により良好でない予後がもたらされる場合がある。このため、早期に、即ち管理の広範な選択肢が利用可能である時点で肝疾患を診断すること、及び治療に対する疾患の進行／後退を監視する能力は、医療において大いに必要とされている。
【０００４】
肝疾患の根本的な原因は異なるが、線維症は特にこの疾患の全ての変種において発生する。これは、他の臓器を攻撃する他の線維性疾患（例えば肺疾患）においてもそうであるように、肝臓の損傷に対する主要な創傷治癒反応である（非特許文献１を参照のこと）。肝線維症は、「細胞外マトリクスタンパク質の過剰蓄積」と定義されている（非特許文献２を参照のこと）。一般に線維症は長い年月をかけて進行する。１０年又はそれ以上に至る相当な期間、線維症が特に進行したものになるまで、患者は限られた症状しか経験しない可能性がある（非特許文献３、非特許文献４を参照のこと）。進行した段階において、患者は、門脈高血圧症（肝臓を通した血流の減少）の結果である肝機能の低下に苦しむことになる（非特許文献４、非特許文献５を参照のこと）。
【０００５】
肝硬変は線維症の最終段階であり、この段階では、肝臓の機能、構造及び外観は、疾患の進行を逆転させるための措置を講じなければ肝不全が避けられない状態にまで大幅に変化している（非特許文献４、非特許文献５、非特許文献６を参照のこと）。しかしながら、疾患が進行した段階においてでさえ、４０％もの患者は無症状であり得る（非特許文献５を参照のこと）。また、肝臓における肝硬変の進行は、肝臓癌が発生するリスクの増加をもたらす（非特許文献１、非特許文献２、非特許文献４を参照のこと）。従って、進行した線維症は高い死亡率及び死をもたらすことは明らかである。
【０００６】
殆どの疾患の場合と同様に、早期検出により疾患治療法の殆どの選択肢及び最良の予後が可能となる。十分に早く検出できれば、肝疾患は可逆的である。肝線維症に対する主な対応は、可能であれば、根本的な原因を治療又は除去することである（非特許文献２、非特許文献４を参照のこと）。かなり早い段階では、これはライフスタイルを変えることと同様に簡単である。抗線維化治療及び抗炎症剤の使用を目的とした研究が期待できる結果を示している。開発中の他の治療は、線維症に関連する様々な要因を阻害することを目的としており、これには、肝細胞の細胞死、星細胞等の筋線維芽細胞の活性化／蓄積、コラーゲン生成又は分解の促進が含まれる（非特許文献２を参照のこと）。疾患の管理において必要とされているのに加えて、この治療の開発の一端として、疾患の進行及び後退を監視するための生体内評価の手段が必要とされている。
【０００７】
現在、診断は肝機能検査、撮像技術及び生体組織検査を通して行うことができる。５つの段階によって疾患の進行を定義する生体組織検査に関連するいくつかの標準的な病期分類システムが存在し、上記５つの段階とは一般に；Ｆ０  線維症が存在しない；Ｆ１  線維性組織が門脈管の周りに広がっている；Ｆ２  線維性組織が門脈三管から伸びる；Ｆ３  隔壁が中心静脈と門脈管とを結合する；Ｆ４  肝硬変‐線維性隔壁に囲まれた再生した肝細胞（非特許文献７を参照のこと）である。
【０００８】
ＣＬＤ（慢性肝疾患）は、線維性組織の形成の広範なパターンをもたらし、介在する肝臓組織は、微視的及び／又は巨視的な結節性組織形態において比較的肥大し、これは進行に従ってより顕著になる（非特許文献４を参照のこと）。進行中の肝炎において、急性の又は慢性の炎症のいずれかの設定において、「進行中」の要素は一般に炎症細胞の浸潤及び壊死の組織学的測定に関する。現在、生体組織検査は、肝疾患の定量化された診断プロセスのための至適基準のままである。生体組織検査による疾患の定量化の有意な制約は、肝疾患は、それが臓器全体にわたっていてもセンチメートル規模であっても、特徴として不均一であるという点である。従って、肝臓周辺の１つの部位から数立方ミリメートルを採取する生体組織検査は、肝臓の一般状態を正確に表していない可能性がある。また、臨床医及び／又は患者は、侵襲的でしばしば非常に苦痛である、潜在的に重篤な合併症のリスクを伴う検査（出血、胆嚢穿刺等）、並びに患者が生体組織検査後の観察のために医療センターで数時間を費やすことになる通例の勧告を嫌がるため、肝臓の生体組織検査への依存は、治療の利用を制限してしまう場合もある（非特許文献８を参照のこと）。肝臓の生体組織検査を受ける患者のおよそ２〜３％は、副作用の管理のための入院が必要となる（非特許文献９、非特許文献１０を参照のこと）。患者の３０％は処置中にかなりの痛みを経験し、生体組織検査される患者の０．０１〜０．３％において致命的な合併症が報告されている（非特許文献１１、非特許文献１２を参照のこと）。従って、肝線維症の危険性がある患者のおよそ５％のみが生体組織検査を受ける。摘出された組織は組織学によって分析され、これを行うには時間がかかる。更なる懸念は、分析は主観的であり、診断にはかなり大きな変動が発生し（３５％にまでなり得る）、これが誤診につながるという事実である（非特許文献１３、非特許文献８を参照のこと）。臨床診療及び治療法の発展両方のために、肝臓の重要な領域を可視化することができる、ＭＲベースの評価等の生体組織検査のための非侵襲的な代替法を提供する能力が、大きな進歩となるであろう。
【０００９】
臨床診療では、ライフスタイル評価後、症状がある場合、慢性感染症があるかどうかを決定するために肝臓血清試験が指示される。陽性の結果は肝細胞癌の危険性を示すため、患者は、腫瘍の形成を強調表示するためのＧｄ造影剤を用いた磁気共鳴映像法（ＭＲ  ｉｍａｇｉｎｇ）を勧められる。評価のこの段階で、線維化の発達の程度を評価する能力により、疾患の存在及び段階の決定のために大いに必要とされるマーカが提供される。しかしながら解像度に限界があるために、現在の磁気共鳴映像法技術は、これらの目的のために信頼性のある評価を提供できていない。ＭＲベースの多数のアプローチが試みられているが、いずれもＣＬＤに関連する微細な組織変化を定量化するための非侵襲的自動又は半自動診断を提供していない。著しい開発努力が続けられてきたあるアプローチは、非増強（非特許文献１４を参照のこと）又はコントラスト増強ＭＲＩ（ＣＥ−ＭＲＩ）（非特許文献１５、非特許文献１６、非特許文献１７を参照のこと）を使用し、ここでは、肝臓の形態分析がこの分析的アプローチの構成要素として使用される（非特許文献１８を参照のこと）。超小型常磁性酸化鉄細網内皮取り込み剤（ｕｌｔｒａ−ｓｍａｌｌ  ｐａｒａｍａｇｎｅｔｉｃ  ｉｒｏｎ−ｏｘｉｄｅ  ｒｅｔｉｃｕｌｏｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｕｐｔａｋｅ  ａｇｅｎｔ）及びガドリニウムベースの薬剤の使用を組み合わせるデュアルコントラスト技術は、肝線維症（ＨＦ）を写し出すことが報告されている（非特許文献７を参照のこと）。残念ながら、酸化鉄の薬剤は臨床的にはもはや容易に入手可能なものではなく、また形態学的アプローチは定性的であり、自動化に適していない。
【００１０】
近年、ＭＲＩ又は超音波ベースのいずれのエラストグラフィも、線維化の度合いに関連する組織の剛性の測定からの推測によって、肝線維症を検出及び定量化するために採用されている（非特許文献１９を参照のこと）。これらのアプローチ及び特に磁気共鳴ベースの技術は、発展的であり、かなりの専門技術を必要とし、更なるハードウェア及びセットアップ又は熟練した操作者による別個の試験を必要とし、患者にとって厄介である。これは、慢性ＨＣＶ、原発性胆汁性肝硬変、移植された肝臓におけるＣ型肝炎の再発及び慢性Ｂ型肝炎を含む肝疾患の範囲において、線維症を病期分類するために使用されてきた（非特許文献２０を参照のこと）。
【００１１】
コンピュータ断層撮影（ＣＴ）は、肝硬変及び病変、即ち肝臓の組織形態が大きく変化している部分を有する肝臓の優れた画像を提供できる。コンピュータ断層撮影は更に、肝臓自体の外側で発生する肝疾患に関連する問題（腹水症、脾腫）を撮影できる（非特許文献７を参照のこと）。しかしながら、線維症の初期段階に対する感受性はかなり低く、主に呼吸及び心拍周期からの運動が原因で、線維症がはっきりと見えない（非特許文献１１を参照のこと）。造影剤を用いて撮影を増強でき、またその一方で息止め法により血流（動脈及び静脈）の異なるフェーズの間に得られるスキャンを用いて撮影をある程度増強できる（非特許文献２１を参照のこと）。更なる欠点は、患者が電離放射線（Ｘ線）に被曝されることであり、これはスクリーニング又は長期間の監視のためのこのモダリティの使用を制限する。
【００１２】
陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）及び単光子断層撮影（ＳＰＥＣＴ）は、いずれも放射性トレーサを使用し、従って幾分かの放射線被爆の欠点がある。更に、ＰＥＴはサイクロトロンが近傍に存在する必要がある。それらは構造ではなく機能の画像を提供し、疾患の影響を評価するために使用されるが、空間分解能が限られている。ＰＥＴは肝臓の転移癌を検出するために使用され、ＭＲＩと同等の結果が得られてきたが、Ｙａｎｇら（非特許文献２０を参照のこと）は、空間分解能が限られていること、及び更に肝臓における病変を解剖学的に見つけることがより困難であることを発見した。従って、これらが肝疾患の監視及び診断において使用されることはめったにない（非特許文献２１を参照のこと）。
【００１３】
超音波診断は、肝疾患の診断及び監視において用いられる多くの技術を包含する。超音波画像診断は、肝疾患のための臨床用途において最も広く利用されている画像モダリティである。これはＣＴの様に肝硬変の診断に成功しているが、あまり進行していない線維症に関しては、結果が変化しやすく限定されている。操作者、機械、及び患者の生理的状態の間でばらつきがあるため、結果の再現性もまた問題である（非特許文献２１を参照のこと）。
【００１４】
現在の評価技術がこれらの様々な問題を有するため、疾患の存在及び進行の決定を可能にする線維化の評価の非侵襲的方法によって、この疾患を治療するための努力が促進されることになる。
【００１５】
肺疾患は付随する線維化反応を有する別の病的状態である（図４を参照のこと）。特発性肺線維症（ＩＰＦ）は、一般に間質性肺疾患（ＩＬＤ）としてグループ化された２００以上の病気の中で最も一般的なものである（非特許文献２２を参照のこと）。ＩＰＦの原因は、多くのＩＬＤと同様に不明であるが、ＩＰＦと、喫煙及び埃への曝露（非特許文献２３を参照のこと）等の要因との関連は、肺高血圧症の発生の増大を伴い、ＩＰＦに関連する線維症が肺組織に対する物理的損傷の結果であることを示唆している（非特許文献２４を参照のこと）。ＩＰＦはまた、肺癌の発生の増大にも関連する。
【００１６】
この病的状態でもまた、疾患のより早期のエビデンスを検出でき、疾患の管理のためにより多くの選択肢が利用可能となる。ＩＰＦの予後は不良であるが、現行の治療は一般に効果がなく、ＩＰＦの機構の理解及び新しい薬剤の開発への関心が高まることにより、治療における将来的な成功のための希望をもたらす。従って、ＩＰＦの迅速で高精度な非侵襲的評価及び監視には大きな価値がある。
【００１７】
血清バイオマーカ、高分解能コンピュータ断層撮影（ＨＲＣＴ）、ＰＥＴ、肺活量測定、足踏み検査及び生体組織検査を含む数多くの技術が、ＩＰＦの診断のために評価されている（非特許文献２２、非特許文献２１を参照のこと）。これらは全てが大きな欠点を有しており、血清バイオマーカ及びＰＥＴは最小限の診断精度しか提供できない。肺活量測定及び足踏み検査は生存と何らかの相関関係はあるが、治療試験において統計的な差を示していない。ＨＲＣＴはＩＰＦの診断のための臨床基準として登場し、線維症の半定量的測定をもたらすことができる（非特許文献２５を参照のこと）が、以下のような複数の大きな欠点に悩まされている。
１）ＨＲＣＴのためのＡＵＣは約０．６に過ぎないため、感度及び特異度の組み合わせが悪い。
２）かなり多くの場合において、疾患の外観は定まっておらず、決定的にＩＰＦを識別できない（非特許文献２６を参照のこと）。
３）ＨＲＣＴは薄い切片を必要とし、従って有意な放射線量を必要とする。
【００１８】
生体組織検査は決定的であるが、高侵襲性であり、患者の健康状態がそれを受け入れられない場合があるため、選択できないことが多い（非特許文献２３、非特許文献２７を参照のこと）。
【００１９】
その上、現在の技術で早期検出の可能性を有するものがないため、ＩＰＦは診断までの長期間「無症状」状態で存在することが十分理解されている（非特許文献２４を参照のこと）。肺線維症を早期において検出するための非侵襲的なツールが明らかに必要である。
【００２０】
肝臓及び肺に加えて、人体の殆どの臓器及び組織は線維症に冒されることがあり、細胞外物質の蓄積及び／又は細胞外物質による通常組織の置換により、主としてコラーゲンが形成される。心臓内の右心室の心筋は、催不整脈性右室心筋症／異形成症（ＡＲＶＣ／Ｄ）において、線維性脂肪組織によって置換できる（非特許文献２７を参照のこと）。病気の範囲（炎症、結合組織および浸潤性）が原因で拡張型心筋症（ＤＣＭ）が発生する可能性があり、これは心筋線維症につながり、ここで心筋線維症の存在を識別するために、後期ガドリニウム増強ＭＲＩを使用できる（非特許文献２８を参照のこと）。肝臓と同様に、（炎症性腸疾患の結果としての）腸内の炎症及び潰瘍性大腸炎が線維化反応をもたらす（非特許文献２８を参照のこと）。同時に、英国では、クローン病及び潰瘍性大腸炎が、約２５万人に影響を与えている。脾臓において、様々な化学物質（非特許文献２９を参照のこと）によって誘発される損傷に続いて柔組織線維症及び嚢胞性線維症が発生することがあり、また膵線維症は様々な原因の慢性膵炎の特徴である（非特許文献３０を参照のこと）。また、好酸球性食道炎で苦しむ人々において、食道にも線維症が発生することが観察されており、胃食道逆流症は今日の臨床診療において直面する最も一般的な問題の１つである（非特許文献３１を参照のこと）。
【００２１】
線維症は、筋骨格系（骨格、関節、筋肉等）の構成要素において、発生できる。骨では、一次及び二次性骨髄線維症は、骨髄が線維性組織に取って代わられることになる（非特許文献３２を参照のこと）。何らかの形の損傷の結果としての関節内の瘢痕組織の形成が原因で運動が制限されると記載したように、関節の大部分は関節線維症を経験することがある（非特許文献３３を参照のこと）。細胞外マトリクスの堆積が漸進的に正常組織を改造、破壊、及び置換する筋肉の線維症は、全ての神経変性筋疾患の特徴である。
【００２２】
線維症は、泌尿器系を構成する臓器にも発生することがある。線維症の発生は進行性であり、透析又は腎臓移植が必要となる。細胞外マトリクスは、腎臓の機能性濾過ユニット（腎小体）の周りに堆積し、尿細管を取り囲む間質において、腎臓組織の微細な構造を歪め、これは腎実質の崩壊及び腎機能の損失につながる（非特許文献３４を参照のこと）。膀胱壁の層内の線維性組織の異常な堆積は、腎線維症および腎不全に寄与し得る膀胱容量の変化につながる。膀胱における線維症は、小児における二分脊椎に続発し、深刻な罹患率となる（非特許文献３５を参照のこと）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００２３】
【非特許文献１】Ｎ．Ｃ．  Ｈｅｎｄｅｒｓｏｎ，  Ｓ．Ｊ．  Ｆｏｒｂｅｓ，  “Ｈｅｐａｔｉｃ  ｆｉｂｒｏｇｅｎｅｓｉｓ：  Ｆｒｏｍ  ｗｉｔｈｉｎ  ａｎｄ  ｏｕｔｗｉｔｈ”，  Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ，  ２５４，  １３０-１３５，  ２００８
【非特許文献２】Ｒ．  Ｂａｔａｌｌｅｒ  ａｎｄ  Ｄ．Ａ．  Ｂｒｅｎｎｅｒ，  “Ｌｉｖｅｒ  Ｆｉｂｒｏｓｉｓ”  Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ，  １１５，  ２０９−２１８，  ２００５
【非特許文献３】Ｓ．Ｌ．  Ｆｒｉｅｄｍａｎ，  “Ｈｅｐａｔｉｃ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ−Ｏｖｅｒｖｉｅｗ”，  Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ，  ２５４，  １２０−１２９，  ２００８
【非特許文献４】Ｍ．  Ｐｉｎｚａｎｉ，  Ｋ．  Ｒｏｍｂｏｕｔｓ，  “Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗ：  Ｌｉｖｅｒ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ：  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  ｂｅｎｃｈ  ｔｏ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｔａｒｇｅｔｓ”  Ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ  ａｎｄ  Ｌｉｖｅｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ，  ３６，  ２３１-２４２，  ２００４
【非特許文献５】Ｓ．Ｌ．  Ｆｒｉｅｄｍａｎ，  “Ｌｉｖｅｒ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ  -  ｆｒｏｍ  ｂｅｎｃｈ  ｔｏ  ｂｅｄｓｉｄｅ”，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，  ３８，  Ｓ３８-Ｓ５３，  ２００３
【非特許文献６】Ｒ．Ｇ．  Ｗｅｌｌｓ，  “Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｏｆ  ｌｉｖｅｒ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ：  Ｎｅｗ  ｉｎｓｉｇｈｔｓ  ｉｎｔｏ  ａｎ  ｏｌｄ  ｐｒｏｂｌｅｍ”  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｏｄａｙ：  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，  ３，  ４，  ４８９−４９５，  ２００６
【非特許文献７】Ｓ．Ｃ．  Ｆａｒｉａ，  Ｋ．  Ｇａｎｅｓａｎ，  Ｉ．  Ｍｗａｎｇｉ，  Ｍ．  Ｓｈｉｅｈｍｏｒｔｅｚａ，  Ｂ．  Ｖｉａｍｏｎｔｅ，  Ｓ．  Ｍａｚｈａｒ，  Ｍ．  Ｐｅｔｅｒｓｏｎ，  Ｙ．  Ｋｏｎｏ，  Ｃ．  Ｓａｎｔｉｌｌａｎ，  Ｇ．  Ｃａｓｏｌａ  Ｃ．Ｂ．  Ｓｉｒｌｉｎ，  “ＭＲ  Ｉｍａｇｉｎｇ  ｏｆ  Ｌｉｖｅｒ  Ｆｉｂｒｏｓｉｓ：  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｓｔａｔｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｒｔ”，  ＲａｄｉｏＧｒａｐｈｉｃｓ，  ２９，  １６１５-１６３５，  ２００９
【非特許文献８】Ｄ．Ｃ．  Ｒｏｃｋｅｙ，  Ｓ．Ｈ．  Ｃａｌｄｗｅｌｌ，  Ｚ．Ｄ．  Ｇｏｏｄｍａｎ，  Ｒ．Ｃ．  Ｎｅｌｓｏｎ  ａｎｄ  Ａ．Ｄ．  Ｓｍｉｔｈ，  “Ｌｉｖｅｒ  ｂｉｏｐｓｙ”，  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，  ４９，  ３，１０１７−１０４４，  ２００９
【非特許文献９】Ｔ．  Ｐａｓｈａ，  Ｓ．  Ｇａｂｒｉｅｌ，  Ｔ  Ｔｈｅｒｎｅａｕ，  Ｅ．Ｒ．  Ｄｉｃｋｓｏｎ  Ａｎｄ  Ｋ．Ｄ．  Ｌｉｎｄｏｒ，  “Ｃｏｓｔ−Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓ  ｏｆ  Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ−Ｇｕｉｄｅｄ  Ｌｉｖｅｒ  Ｂｉｏｐｓｙ”，  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，  ２７，  ５，  １２２０−１２２６，  １９９８
【非特許文献１０】ＣＨ．  Ｊａｎｅｓ  ａｎｄ  Ｋ．Ｄ．  Ｌｉｎｄｏｒ，  “Ｏｕｔｃｏｍｅ  ｏｆ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ  Ｈｏｓｐｉｔａｌｉｚｅｄ  ｆｏｒ  Ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ａｆｔｅｒ  Ｏｕｔｐａｔｉｅｎｔ  Ｌｉｖｅｒ  Ｂｉｏｐｓｙ”，  Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，  １１８，  ２，  ９６−９８，  １９９３
【非特許文献１１】Ｆ．Ｄ．  Ｓｒｙｇｌｅｙ  ａｎｄ  Ｋ．  Ｐａｔｅｌ，  “Ｎｏｎｉｎｖａｓｉｖｅ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｌｉｖｅｒ  Ｆｉｂｒｏｓｉｓ  ｉｎ  Ｃｈｒｏｎｉｃ  Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ”，  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｒｅｐｏｒｔｓ，  ７，  １６４-１７２，  ２００８
【非特許文献１２】Ｔ．  Ｇｉｌｍｏｒｅ，  Ａ．  Ｂｕｒｒｏｕｇｈｓ，  Ｉ．Ｍ．  Ｍｕｒｒａｙ−Ｌｙｏｎ，  Ｒ．  Ｗｉｌｌｉａｍｓ，  Ｄ．  Ｊｅｎｋｉｎｓ，  Ａ．  Ｈｏｐｋｉｎｓ，  “Ｉｎｄｉｃａｔｉｏｎｓ，  ｍｅｔｈｏｄｓ，  ａｎｄ  ｏｕｔｃｏｍｅｓ  ｏｆ  ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ  ｌｉｖｅｒ  ｂｉｏｐｓｙ  ｉｎ  Ｅｎｇｌａｎｄ  ａｎｄ  Ｗａｌｅｓ：  ａｎ  ａｕｄｉｔ  ｂｙ  ｔｈｅ  Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｒｏｙａｌ  Ｃｏｌｌｅｇｅ  ｏｆ  Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ  ｏｆ  Ｌｏｎｄｏｎ”，  Ｇｕｔ，  ３６，  ４３７−４４１，  １９９５
【非特許文献１３】ＮＨ．  Ａｆｄｈａｌ，  “Ｂｉｏｐｓｙ  ｏｒ  Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ｏｆ  Ｌｉｖｅｒ  Ｆｉｂｒｏｓｉｓ？”，  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ５０，  ８，  １２９９−１３００，  ２００４
【非特許文献１４】Ｍｉｔｃｈｅｌｌ  ＤＧ，  Ｎａｖａｒｒｏ  ＶＪ，  Ｈｅｒｒｉｎｅ  ＳＫ，  Ｂｅｒｇｉｎ  Ｄ，  Ｐａｒｋｅｒ  Ｌ，  Ｆｒａｎｇｏｓ  Ａ，  ｅｔ  ａｌ．  “Ｃｏｍｐｅｎｓａｔｅｄ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ：  ｕｎｅｎｈａｎｃｅｄ  ＭＲ  ｉｍａｇｉｎｇ  ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃ  ｇｒａｄｉｎｇ  ａｎｄ  ｓｔａｇｉｎｇ”．  Ａｂｄｏｍ  Ｉｍａｇｉｎｇ  ２００７
【非特許文献１５】Ｓｅｍｅｌｋａ  ＲＣ，  Ｃｈｕｎｇ  ＪＪ，  Ｈｕｓｓａｉｎ  ＳＭ，  Ｍａｒｃｏｓ  ＨＢ，  Ｗｏｏｓｌｅｙ  ＪＴ，  “Ｃｈｒｏｎｉｃ  Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ：  Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｅａｒｌｙ  Ｐａｔｃｈｙ  ａｎｄ  Ｌａｔｅ  Ｌｉｎｅａｒ  Ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ  Ｐａｔｔｅｒｎｓ  ｏｎ  Ｇａｄｏｌｉｎｉｕｍ−  Ｅｎｈａｎｃｅｄ  ＭＲ  Ｉｍａｇｅｓ  ｗｉｔｈ  Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ  Ｉｎｉｔｉａｌ  Ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅ”，  Ｊｏｕｒｎａｌ  Ｏｆ  Ｍａｇｎｅｔｉｃ  Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ  Ｉｍａｇｉｎｇ，  １３，３８５-３９１，  ２００１
【非特許文献１６】Ａｇｕｉｒｒｅ  ＤＡ，  Ｂｅｈｌｉｎｇ  ＣＡ，  Ａｌｐｅｒｔ  Ｅ，  Ｈａｓｓａｎｅｉｎ  ＴＩ，  Ｓｉｒｌｉｎ  ＣＢ．  Ｌｉｖｅｒ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ：  ｎｏｎｉｎｖａｓｉｖｅ  ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ｗｉｔｈ  ｄｏｕｂｌｅ  ｃｏｎｔｒａｓｔ  ｍａｔｅｒｉａｌ−ｅｎｈａｎｃｅｄ  ＭＲ  ｉｍａｇｉｎｇ．  Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ  ２００６；２３９：４２５−４３７
【非特許文献１７】Ｍａｒｔｉｎ  ＤＲ，  Ｓｅｉｂｅｒｔ  Ｄ，  Ｙａｎｇ  Ｍ，  Ｓａｌｍａｎ  Ｋ，  Ｆｒｉｃｋ  ＭＰ．  Ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｏｕｓ  ａｒｔｅｒｉａｌ  ｐｈａｓｅ  ｌｉｖｅｒ  ｐｅｒｆｕｓｉｏｎ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｔｒａｎｓｉｅｎｔ  ａｃｕｔｅ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ：  ｆｉｎｄｉｎｇｓ  ｏｎ  ｇａｄｏｌｉｎｉｕｍ−ｅｎｈａｎｃｅｄ  ＭＲＩ．  Ｊ  Ｍａｇｎ  Ｒｅｓｏｎ  Ｉｍａｇｉｎｇ  ２００４；２０：８３８−８４２
【非特許文献１８】Ｍａｒｔｉｎ  ＤＲ，  Ｓｅｍｅｌｋａ  ＲＣ．  Ｍａｇｎｅｔｉｃ  ｒｅｓｏｎａｎｃｅ  ｉｍａｇｉｎｇ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｌｉｖｅｒ：  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ａｎｄ  ａｐｐｒｏａｃｈ  ｔｏ  ｃｏｍｍｏｎ  ｄｉｓｅａｓｅｓ．  Ｓｅｍｉｎ  Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ  ＣＴ  ＭＲ  ２００５；２６：１１６−１３１
【非特許文献１９】Ｙｉｎ  Ｍ，  Ｃｈｅｎ  Ｊ，  Ｇｌａｓｅｒ  ＫＪ，  Ｔａｌｗａｌｋａｒ  ＪＡ，  Ｅｈｍａｎ  ＲＬ．  Ａｂｄｏｍｉｎａｌ  ｍａｇｎｅｔｉｃ  ｒｅｓｏｎａｎｃｅ  ｅｌａｓｔｏｇｒａｐｈｙ．  Ｔｏｐ  Ｍａｇｎ  Ｒｅｓｏｎ  Ｉｍａｇｉｎｇ  ２００９；２０：７９−８７
【非特許文献２０】Ｍ．  Ｙａｎｇ，  Ｄ．Ｒ．  Ｍａｒｔｉｎ，  Ｎ．  Ｋａｒａｂｕｌｕｔ  ａｎｄ  Ｍ．Ｐ．  Ｆｒｉｃｋ，  “Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｏｆ  ＭＲ  ａｎｄ  ＰＥＴ  Ｉｍａｇｉｎｇ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｌｉｖｅｒ  Ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ”，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍａｇｎｅｔｉｃ  Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ  Ｉｍａｇｉｎｇ，  １７，  ３４３-３４９，  ２００３
【非特許文献２１】Ｓ．  Ｂｏｎｅｋａｍｐ，  Ｉ．  Ｋａｍｅｌ，  Ｓ．  Ｓｏｌｇａ  ａｎｄ  Ｊ．  Ｃｌａｒｋ，  “Ｃａｎ  ｉｍａｇｉｎｇ  ｍｏｄａｌｉｔｉｅｓ  ｄｉａｇｎｏｓｅ  ａｎｄ  ｓｔａｇｅ  ｈｅｐａｔｉｃ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ  ａｎｄ  ｃｉｒｒｈｏｓｉｓ  ａｃｃｕｒａｔｅｌｙ？”，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，  ５０，  １７-３５，  ２００９
【非特許文献２２】Ｍｉｃｈｉｅｌ  Ｔｈｏｍｅｅｒ  ｅｔ．ａｌ，  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ  ｏｆ  Ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｉｎ  Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  Ｆｉｂｒｏｓｉｓ，  Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  １１：８９，  ２０１０
【非特許文献２３】Ｔａｌｍａｄｇｅ  Ｅ，  Ｋｉｎｇ，  Ｊｒ．，  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ  Ｌｕｎｇ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ，  Ａｍ．  Ｊ．  Ｒｅｓｐｉｒ．  Ｃｒｉｔ．  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．，  １７２，  ２６８−２７９，  ２００５
【非特許文献２４】Ｂｒｅｔｔ  Ｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ，  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃｏｕｒｓｅ  ａｎｄ  Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｉｎ  Ｉｄｉｏｐａｔｈｉｃ  Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  Ｆｉｂｒｏｓｉｓ，    Ａｍ．  Ｊ．  Ｒｅｓｐｉｒ．  Ｃｒｉｔ．  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．，  １８３，  ４３１−４４０，  ２０１１
【非特許文献２５】Ｃ．  Ｉｓａｂｅｌｌａ  Ｓ．  Ｓｉｌｖａ  ｅｔ  ａｌ，  Ｎｏｎｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ  Ｐｎｅｕｍｏｎｉａ  ａｎｄ  Ｉｄｉｏｐａｔｈｉｃ  Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  Ｆｉｂｒｏｓｉｓ：  Ｃｈａｎｇｅｓ  ｉｎ  Ｐａｔｔｅｒｎ  ａｎｄ  Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｄｉｓｅａｓｅ  ｏｖｅｒ  Ｔｉｍｅ，  Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ，  ２４７  （１），  ２５１−２５９，  ２００８
【非特許文献２６】Ｎ．  Ｓｖｅｒｚｅｌａｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ，  Ｈｉｇｈ  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｃｏｍｐｕｔｅｄ  Ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｆｏｌｌｏｗ−ｕｐ  ｏｆ  Ｉｄｉｏｐａｔｈｉｃ  Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  Ｆｉｂｒｏｓｉｓ，  Ｒａｄｉｏｌ．  ｍｅｄ．，  １１５，  ５２６−５３８，  ２０１０
【非特許文献２７】Ｓ．  Ｂｏｈｌａ  ａｎｄ  Ｊ  Ｓｃｈｕｌｚ−Ｍｅｎｇｅｒ，  “Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｍａｇｎｅｔｉｃ  Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ  Ｉｍａｇｉｎｇ  ｏｆ  Ｎｏｎ−ｉｓｃｈａｅｍｉｃ  Ｈｅａｒｔ  Ｄｉｓｅａｓｅ：  Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ  ａｎｄ  Ｅｍｅｒｇｉｎｇ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ”，  Ｈｅａｒｔ，  Ｌｕｎｇ  ａｎｄ  Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，  １９，  １１７-１３２，  ２０１０
【非特許文献２８】Ｆ．  Ｒｉｅｄｅｒ  ａｎｄ  Ｃ．  Ｆｉｏｃｃｈｉ，  “Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ  ｉｎ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｂｏｗｅｌ  ｄｉｓｅａｓｅ-Ｃｕｒｒｅｎｔ  ｋｎｏｗｌｅｄｇｅ  ａｎｄ  ｆｕｔｕｒｅ  ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ”，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｒｏｈｎ’ｓ  ａｎｄ  Ｃｏｌｉｔｉｓ，  ２，  ２７９-２９０，  ２００８
【非特許文献２９】Ａ．Ｗ．  Ｓｕｔｔｉｅ，  “Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｓｐｌｅｅｎ”，  Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，  ３４，  ４６６，  ２００６
【非特許文献３０】Ｐ．Ｓ．  Ｈａｂｅｒ，  Ｇ．Ｗ．  Ｋｅｏｇｈ，  Ｍ．Ｖ．  Ａｐｔｅ，  Ｃ．Ｓ．  Ｍｏｒａｎ，  Ｎ．Ｌ．  Ｓｔｅｗａｒｔ，  Ｄ．Ｈ．Ｇ．  Ｃｒａｗｆｏｒｄ，  Ｒ．Ｃ．  Ｐｉｒｏｌａ，  Ｇ．Ｗ．  ＭｃＣａｕｇｈａｎ，  Ｇ．Ａ．  Ｒａｍｍ，  Ｊ．Ｓ．  Ｗｉｌｓｏｎ，  “Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  Ｓｔｅｌｌａｔｅ  Ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  Ｈｕｍａｎ  ａｎｄ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  Ｆｉｂｒｏｓｉｓ”，  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，  １５５，  ４，  １０８７−１０９５，  １９９９
【非特許文献３１】Ｆ．  Ｒｉｅｄｅｒ，  Ｐ．  Ｂｉａｎｃａｎｉ，  Ｋ．  Ｈａｒｎｅｔｔ，  Ｌ．  Ｙｅｒｉａｎ，  Ｇ．Ｗ．  Ｆａｌｋ，  “Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｍｅｄｉａｔｏｒｓ  ｉｎ  ｇａｓｔｒｏｅｓｏｐｈａｇｅａｌ  ｒｅｆｌｕｘ  ｄｉｓｅａｓｅ：  ｉｍｐａｃｔ  ｏｎ  ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ  ｍｏｔｉｌｉｔｙ，  ｆｉｂｒｏｓｉｓ  ａｎｄ  ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ”，  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ａｎｄ  Ｌｉｖｅｒ  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，  ２９８，  Ｇ５７１−Ｇ５８１，  ２０１０
【非特許文献３２】Ｎ．  Ｓｒｉｎｉｖａｓａｉａｈ，  Ｍ．Ｋ．  Ｚｉａ  ａｎｄ  Ｖ．  Ｍｕｒａｌｉｋｒｉｓｈｎａｎ，  “Ｐｅｒｉｔｏｎｉｔｉｓ  ｉｎ  ｍｙｅｌｏｆｉｂｒｏｓｉｓ：  ａ  ｃａｕｔｉｏｎａｒｙ  ｔａｌｅ”，  Ｈｅｐａｔｏｂｉｌｉａｒｙ  Ｐａｎｃｒｅａｔ．  Ｄｉｓ．  Ｉｎｔ．  ９，６，  ６５１−６５３，  ２０１０
【非特許文献３３】Ｍ．  Ｍａｒｔｉｎ  Ｊ．  Ｇｉｌｌｅｓｐｉｅ，  Ｊ  Ｆｒｉｅｄｌａｎｄ  Ａｎｄ  Ｋ．Ｅ．  Ｄｅｈａｖｅｎ，  “Ａｒｔｈｒｏｆｉｂｒｏｓｉｓ：  Ｅｔｉｏｌｏｇｙ，  Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ，  Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ  Ａｎｄ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ”，  Ｏｐｅｒａｔｉｖｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ｉｎ  Ｓｐｏｒｔｓ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，  ６，  ２，  １０２−１１０，  １９９８
【非特許文献３４】Ｙ  Ｌｉｕ，  “Ｒｅｎａｌ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ：  Ｎｅｗ  ｉｎｓｉｇｈｔｓ  ｉｎｔｏ  ｔｈｅ  ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ”，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，  ６９，  ２１３−２１７，  ２００６）
【非特許文献３５】Ｐ．Ｄ．  Ｍｅｔｃａｌｆｅ，  Ｊ．  Ｗａｎｇ，  Ｈ．  Ｊｉａｏ，  Ｙ．  Ｈｕａｎｇ，  Ｋ．  Ｈｏｒｉ，  Ｂ．Ｄ．  Ｍｏｏｒｅ，  Ｅ．Ｅ．  Ｔｒｅｄｇｅｔ，  “Ｂｌａｄｄｅｒ  ｏｕｔｌｅｔ  ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｏｎ：  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｆｒｏｍ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ｔｏ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ”，  ＢＪＵ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，  １０６，  １１，  １６８６−１６９４，  ２０１０
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２４】
疾患の発病に付随する線維化応答には偏在する性質があり、また多数の疾患の病態において進行するため、組織線維症のための低コストで非侵襲的な評価技術は直接的に、及び治療に対する反応の長期的な監視を可能にすることによって、患者の予後を大いに改善するであろう。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】図１は、ａ）前頭面に位置合わせした交互に選択的に励起した内側容積を示す。ｂ）右側の解剖学的肝葉に位置するプリズムの重ね撮り画像であり、参照画像はプリズムアレイが位置する部分のものを示す。
【図２】図２は、グレード０（疾患なし）からグレード４（肝硬変）へと発展する線維症の進行を示す組織学的試料である。
【図３】図３は、ａ）０．５ｍｍ〜１ｍｍｂ）１ｍｍ〜３ｍｍｃ）３ｍｍ〜５ｍｍの間の最も高い強度を表示する波長スペクトルであり、横に同一の範囲に関して対応する強度マップを示す。マップの特定の領域は、矢印が示す個別のスペクトルから生成される。
【図４】図４は、（Ａ）が正常な肺胞を表示する組織学的試料、（Ｂ）が特発性肺線維症肺胞を患った人間の肺胞を表示する組織学的試料である。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
本発明は例えば、線維性疾患の評価及び監視のための、米国特許第７９３２７２０号（磁気共鳴微細テクスチャ測定技術）及び米国特許７９０３２５１（微細構造の特徴を臓器の関心領域全体にわたってマッピングする技術）に開示された方法を適用することによって実行でき、具体的には、特定の疾患における臓器の退化及び回復に付随する組織に特徴的な標的波長範囲の変化の測定、並びに疾患の発病、進行及び重篤度の評価及び監視が可能な様式で測定した情報の表示によって実行できる。
【００２７】
以下で使用する用語法を定義するために、関心対象の解剖学的構造の内部容積は、磁場勾配及びＲＦ（無線周波数）パルスの適切なシーケンシングによって励起される。容積内の選択した方向に沿った読出し勾配の適用によって、細かくサンプリングされた１Ｄデータを取得できる。データ取得は、選択的に励起された内部容積の取得軸に沿った、空間符号化ＭＲエコーの取得である。
【００２８】
内部容積は、多数の形状及びサイズに画定でき、一例としては、垂直な磁気勾配の適用及び帯域幅が適切に選択された２つのＲＦパルスの連続的な適用によって、直角プリズム形状の容積を励起できる。例えばプリズムの長軸に沿った読出し勾配の適用により、細かくサンプリングされたエコーデータをこの軸に沿って取得できる。直角プリズムは、データを取得するための１つの可能な容積であり、他の多くの「容積」も使用可能である。
【００２９】
読出し勾配は、エコーデータ取得方向を画定する。これ以降、用語「エコーデータ取得方向（ｒｅａｄｏｕｔ  ｇｒａｄｉｅｎｔ  ｄｉｒｅｃｔｉｏｎ）」は、「取得軸（ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ  ａｘｉｓ）」又は「データ取得の方向（ｄｉｒｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｄａｔａ  ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ）」又は「データ取得方向（ｄａｔａ  ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ  ｄｉｒｅｃｔｉｏｎ）」又は「取得方向（ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ  ｄｉｒｅｃｔｉｏｎ）」と相互交換可能に使用してもよい。更に、ＭＲデータが励起される組織の容積を特定するために、「選択的に励起された内側容積（ｓｅｌｅｃｔｉｖｅｌｙ−ｅｘｃｉｔｅｄ  ｉｎｎｅｒ  ｖｏｌｕｍｅ）」、「内側容積（ｉｎｎｅｒ−ｖｏｌｕｍｅ）」及び「取得容積（ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ  ｖｏｌｕｍｅ）」もまた以下において相互交換可能に使用してもよい。微細構造の特徴を臓器の関心領域全体にわたってマッピングするための従来技術では、１回の連続したデータ取得において、交互に扱われる各容積の取得軸に沿ってデータを取得できるように、複数の取得容積を交互に扱うことによって、大きな面積の対象範囲を得る（図１を参照のこと）。
【００３０】
本発明は、構造性波長（テクスチャ性波長としても知られる）又はＭＲデータに由来する疾患の進行の指標となる他のマーカの測定及びマッピングによって、肝疾患及び他の線維性疾患の発病及び進行を検知するための技術からなる。具体的には、本技術によって、肝疾患の進行及び上述の「背景技術」の項で列挙したものを含む広範な線維性疾患の進行に付随する微細なスケールの線維構造の評価が容易になる。更に、これらの応用は、疑わしい肝疾患において慣例的なＭＲ検査に加えて、ＨＣＣ（原発性肝細胞癌）のリスクを除外するために採り入れることができるもの等の低コスト、非侵襲的かつ迅速な付加要素として本技術を実装できるように設計される。
【００３１】
従来技術の磁気共鳴微細テクスチャ測定技術は、組織の構造性（テクスチャ性）波長のスペクトルを得るために使用できる（どのようなものが得られようとも、本発明はテクスチャ性波長のスペクトルに適用される）ものであるが、これは、肝疾患（慢性又は急性）及び他の疾患状態の早期段階を表す微細テクスチャの変化を検出する解像度性能を提供する。断面領域にわたる構造性波長データをマッピングするための技術（これは従来技術であってよい）、及び特定の疾患の評価に適切な構造性波長からマーカを得るための適切な応用と組み合わせることによって、組み合わせた技術を疾患の早期及び後期段階の評価に適用できる。
【００３２】
１つの応用は、疾患の組織学的データ（図２を参照のこと）、共焦点顕微鏡検査、生体ファントムの測定又は他のそのような特定の疾患の発生において予想される組織の変化から得られる情報を監視する、それらからマーカを得る、及びそれらをマッピングするために特定の構造性波長範囲の選択の基礎を作ることである。単一の取得容積又は取得容積の交互の組から得たエコーデータから様々な方法によって得られた量のマッピングは、波長範囲内の積分強度、ピーク強度の比、正規化強度、積分強度の比、ピーク位置、個別の構造性波長範囲における特徴を互いに若しくは生成されたスペクトルの特徴と比較、又は例えばデータからノイズを取り除くために統計的変換方法の使用によって、疾患の評価及び病期分類のために使用できる（図３を参照のこと）。
【００３３】
従来技術において既に説明したように、肝疾患の進行は線維性組織（相互接続を形成できる剛性セプタ）の形成を伴う。コラーゲン性線維の間に形成されるこれらの相互接続は、中心静脈と門脈三管との間及び／又は幹細胞周辺に架橋を形成する。従って、これらの線維の形成及び接続に応じて組織の構造的パターンの変化が起こり、中心静脈と門脈三管との間の分離、即ち血管間間隙並びに最終的には小葉間の分離及び／又は中心静脈間の分離を表すより大きな構造性波長に向かって進行する。より長い波長のテクスチャへのこのような進行には、より短い波長範囲への減衰が伴う。
【００３４】
肝臓において、より大きな構造、即ち肝臓の小葉又は中心静脈間分離の一般的な幅は、およそ１ｍｍ〜３ｍｍの幅となることが、組織学によって示されている。血管間（例えば門脈三管間）分離などのより小さな特徴部分は、１ｍｍ以下の規模である。肝臓の小葉の通常の寸法に加えて、従来の磁気共鳴画像診断で見ることができる３ｍｍ〜５ｍｍの範囲内にある肝臓の血管構造（例えば門脈三管構造の第３の門脈枝又は左及び右肝静脈のより小さい枝）が存在する。肝疾患及び肝線維症が進行するに従って、この血管構造は変化する。従って、肝線維症を検知する関心領域の波長範囲は、ミリメートル未満の範囲から約５ｍｍ又は６ｍｍまでを包含する。
【００３５】
健康な肝臓において、関心対象の特徴的なテクスチャ性波長範囲は、健康な血管間分離によって生成される（即ち肝小葉の古典的モデルにおける中心静脈間及び門脈三管間）。反復する中心静脈間パターンは、〜２ｍｍの特徴的波長を有し、門脈三管のネットワークのより微細なテクスチャは１ｍｍより小さい波長を有する。ＣＬＤの発生において、門脈三管間の線維症の架橋により、門脈三管間分離の幾分規則的なパターンから生じる１ｍｍ未満又は約１ｍｍのより微細なテクスチャが次第に見えにくくなる。更に、この線維症の架橋は、肝小葉周辺において血管の間で架橋することにより、肝小葉を次第に包囲し、これは１ｍｍ超のより大きなテクスチャを増強する役割をする。
【００３６】
ＣＬＤの進行を辿るために、これらの３つの疾患に関連する波長範囲を選択して、疾患の病期分類のために監視できる。これらの選択された波長範囲に収まる構造性スペクトルデータから得られたマーカを、何らかの定量化測定基準（ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｍｅｔｒｉｃ）を用いて、マッピングできる。例えば、従来技術において記載したように、ある断面領域にわたる構造性波長データをマッピングするために、異なる色又はモノトーン強度を０．５６〜１ｍｍ、１．００〜３．００ｍｍ、３．００〜５．００ｍｍの範囲のそれぞれに割り当てることができ、各交互取得容積に沿った一続きのＲＯＩ（関心領域）において色がマッピングされる。組織学又は他の形態の組織評価によって提供されるような疾患の情報に基づいて、疾患の進行に関する波長が識別されると、これらの範囲に収まる構造性波長データから得られた様々なマーカを評価でき、単独で又は複数で単一の出力マップ上にマッピングできる。標的波長範囲内のデータは、これらのマーカを生成するために使用されるか、又は正規化のために行われ得るような構造性波長スペクトル上のこれらの範囲外に収まるデータと何らかの方法で比較できる。
【００３７】
データ取得の際に、交互取得容積は臓器の関心領域を包含するように位置決めされる。肝臓において、交互取得容積は、右側の解剖学的肝葉に位置決めすることができ、肝臓周辺付近又は肝臓周辺にわたる容積の端部を有する。組織学的生体組織検査は肝臓周辺に関して右側の肝葉から得られるため、右側の解剖学的肝葉を選択できる。しかしながら、この技術の利点は、肝臓の左葉に適用して左葉における肝疾患の評価ができる点である。よって、標的とする特定の範囲の構造性波長により、臓器全体にわたって及び小さなＲＯＩ内を局所的にモニタリングできる。データ取得後、セグメンテーションアルゴリズムを用いて、検討中の臓器から外れる交互取得容積のアレイの領域を削除する。
【００３８】
脈管構造から線維症を区別する等のために造影剤の取り込み及び排除の流れを辿るために、造影剤の投与後に様々な時点でのデータ取得測定を繰り返すことにより、これら２つのタイプの構造において最も強く表わされる様々な波長範囲を識別でき、また脈管構造に起因する信号の減算処理によるデータの補正が可能となる。
【００３９】
取得容積の断面寸法は、関心対象の波長範囲を考慮して選択される。上述の肝臓の寸法の場合、断面寸法の規模は一辺が数ｍｍ程度である。断面領域は：１）各ボクセル内において、検討中の最大テクスチャの複数回の発生をサンプリングでき；２）より大きなボクセルをサンプリングすることによってＳ／Ｎ比を増大させることができる程十分に大きく、また３）テクスチャ情報の局在化が可能となる程十分に小さい。内部容積の長さは、臓器又は関心対象の解剖学的面積のサイズに適するように選択され、肝臓の場合選択的に励起された内部容積の寸法は数１０ｍｍである。
【００４０】
臓器において、多数の取得容積からのエコーデータを取得して、アレイ内の一続きのＲＯＩから構造性波長スペクトルを生成する。この取得は肝臓における息止めによって実施でき、必要となる取得時間は他の疾患に関するコントラスト及び信号強度に依存する。図１に示すように、１つの取得における肝臓の対象範囲を最大とするために、対向する頂点を前頭面に位置合わせして、肝臓評価における取得容積を互いに隣接するように設けることができる。これら容積は肝臓の右葉の全部又は後部のいずれかに位置することができ、門脈及び右肝静脈との交差を回避するよう位置決めされる。
【００４１】
一般に、取得容積の位置及び配向は、臓器の関心対象の面積を包含するように調節できる。関心対象の臓器を異なる方向から調査できるように、多数の交互容積取得を連続して行うことができる。臓器を通して異なる角度に位置合わせされた取得容積は、疾患マーカとして使用するために線維化の進行の異方性を評価するために使用できる。
【００４２】
本発明はまた、患者間での及び更に低いレベルでは臓器間での回避できない信号の差を補正するための正規化方法の使用も含む。これらの差は、臓器に対するコイルの近位部分における変動、使用するコイルのタイプ、及び肝臓組織における化学的相違から生じる。比較することができる異なる試験からの強度測定を確実にするために、様々な患者からのデータを正規化する３つの基本的な方法を開発した：１）臓器の境界内に収まった交互アレイの全部分から平均ＭＲ信号強度へと正規化する；２）臓器の境界内で、アレイの各別個の取得容積から平均ＭＲ信号強度へと正規化する；又は３）臓器の境界内に収まる交互アレイの取得容積に沿って画定された各別個のＲＯＩから平均ＭＲ信号強度へと正規化する。試験間のデータを正規化する２つの更なる方法は、１）データのノイズレベルに対して正規化する方法、及び２）患者の隣、試験中の（そしてデータ取得中にそこから信号が記録される）臓器の近位に配置した較正標準装置の使用により正規化する方法である。
【００４３】
各取得容積に沿ったＲＯＩに局在する構造性波長スペクトルは、各取得容積からの正規化エコー信号をウィンドウイング及びフィルタリングすることにより、及びスライドウィンドウを用いて全てのセグメントに関してこのプロセスを繰り返すことにより、生成できる。続いて、以下に記載したように選択される１つ又は複数の波長域における平均強度は、色、色相、又は各フィルタリングされたセグメントの中心におけるマップ上にプロットされたインジケータを決定する。
【００４４】
この技術の肝疾患への１つの用途は、生体組織検査をするかどうかの決定を助けることである。疑わしい慢性肝疾患ＣＬＤの場合、ＨＣＣを除外するために通常ＭＲＩを勧められるが、そのスキャンに本技術が追加されれば実質的にコストがかからず、有意な付加価値が提供される。このようなものとして、及び特に現段階で診断が良好でない疾患の早期において、この技術を生体組織検査の代わりに用いてもよい。
【００４５】
肝臓疾患における本技術の応用に加えて、疾患の進行を示す構造性波長範囲の標的選択により、本技術を様々な線維性疾患に応用できる。肝臓疾患の場合と同様に、取得容積の断面、アレイごとの容積の数、標的臓器又は解剖学的構造、コントラスト機構、及び適用する特定のエコー由来のマーカは、固有のものであり、疾患の状態に特有の進行中の病的状態の評価のために選択される。組織学を含む従来のノウハウは、特定のプロトコルを提供する。これらの疾患の部分的なリストは、従来技術のセクションに付記する。
【００４６】
このように本発明は多数の態様を有し、これらの態様は必要に応じて、単独で又は様々な組み合わせ若しくは部分組み合わせで実施してもよい。本明細書では、限定を目的としてではなく説明を目的として、本発明の特定の好ましい実施形態を開示及び説明したが、当業者は、以下の請求項に完全に定義された本発明の精神及び範囲から逸脱することなく、形態及び詳細に関する様々な変更を行うことができることを理解されたい。
【図１】
2014527901.tif 000002
【図２】
2014527901.tif 000003
【図３】
2014527901.tif 000004
【図４】
2014527901.tif 000005