(57)【要約】皮膚の微小循環を改善および／または促進する、または悪い皮膚の微小循環に関する疾患または状態を排除および／または軽減するための製品の調製におけるネオヘスペリジンまたはネオヘスペリジンを含む植物抽出物の使用を開示する。有効量のネオヘスペリジンまたはネオヘスペリジンを含む植物抽出物を含む組み合わせも開示する。ネオヘスペリジンが皮膚の微小循環に、特に眼の皮膚の微小循環に有益である作用も開示する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
皮膚の微小循環を改善および／または促進するための、または乏しい皮膚の微小循環と関係する疾患もしくは状態を排除および／または緩和するための製品の製造における、ネオヘスペリジンまたはネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物の使用。
【請求項２】
皮膚の微小循環が眼の皮膚の微小循環である、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
乏しい皮膚の微小循環と関係する疾患または状態が乏しい眼の皮膚の微小循環と関係する疾患または状態である、請求項１〜２のいずれか１項に記載の使用。
【請求項４】
乏しい眼の皮膚の微小循環と関係する疾患または状態が眼の下の隈である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項５】
ネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物がカラタチ（Ｐｏｎｃｉｒｕｓ  ｔｒｉｆｏｌｉａｔａ（Ｌ．）Ｒａｆ．）の果実から抽出することにより得られた抽出物である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の使用。
【請求項６】
製品が局所投与のための製品である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項７】
製品が（１）ネオヘスペリジンまたはネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物および（２）生理的に許容可能な賦形剤を含む、請求項１〜６のいずれか１項に記載の使用。
【請求項８】
（１）有効量のネオヘスペリジンまたはネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物および場合により（２）生理的に許容可能な賦形剤を含む組成物。
【請求項９】
（１）有効量のネオヘスペリジンまたはネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物および場合により（２）生理的に許容可能な賦形剤を含み、該ネオヘスペリジンまたは該ネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物がネオヘスペリジンの重量により計算した際に組成物の総重量の０．０１〜２０ｗｔ％を占める、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
ネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物がカラタチの果実から抽出することにより得られた抽出物である、請求項８〜９のいずれかに記載の組成物。
【請求項１１】
皮膚の微小循環を改善および／または促進する、または乏しい皮膚の微小循環と関係する疾患もしくは状態を排除および／または緩和するための製品である、請求項８〜１０のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１２】
局所投与のための製品である、請求項８〜１０のいずれか１項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ネオヘスペリジンの新規の使用、詳細には化粧品における新規の使用、より詳細にはネオヘスペリジンの皮膚の微小循環を改善するための化学成分としての使用、特に眼の下の隈の解消（ｄｉｓｐｅｌｌｉｎｇ）における使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
人体における眼の皮膚は人体における他の部分の皮膚と構造が異なる。第１に、頬骨の上にあり鼻梁（ｎｏｓｅ  ｂｒｉｄｇｅ）に隣接する眼の周囲の皮膚は、血管およびリンパの“輸送部位”である。この領域では、顔の細静脈が収束し、血管が微細かつ豊富である。眼の皮膚の微小循環が不十分である場合、それは乏しい血液循環または組織浮腫につながり、それは結果としてうっ血および血腫、水の蓄積（ｈｏａｒｄｉｎｇ）をもたらすであろう。一方で、眼の周囲の皮膚は非常に薄く、他の部分の皮膚の１／１０の厚さしかなく、従って眼の周囲の皮膚は光の反射後に容易に暗紫色（ａｔｒｏｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）を示し、眼の下の隈を形成する。さらに、疲労、プレッシャーおよび睡眠不足のような要因は微小循環機能不全の原因である重要な要因である。年を取るにつれて、皮膚の厚さは１０年ごとに約６％減少し、従って眼の下の隈がより明らかになる。従って、短期間か長期間かを問わず、様々な年齢の女性が眼の下の隈に悩まされた経験があり、または常に悩まされており、眼の周囲の皮膚の微小循環を改善することによりそれを改善することを必要としている。
【０００３】
多くの天然植物の抽出物が経口および静脈内のような経路によりそれらを投与した後に皮膚の微小循環を著しく改善し得ることが論文において報告されており、ここでその天然植物の抽出物には、例えばベニバナの抽出物、サルビア・ミルティオリザ（ｓａｌｖｉａ  ｍｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａ）の抽出物、イチョウの葉の抽出物、ルスクス・アクレアツスＬ．（Ｒｕｓｃｕｓ  ａｃｕｌｅａｔｕｓ  Ｌ．）の抽出物、ゲニスタの抽出物、オレンジおよびタンジェリンの抽出物、朝鮮人参の抽出物等が含まれる。一部の論文は、前記の植物抽出物から抽出された一部の単量体成分、例えばタンシノン、ジンセノサイド、β-エスシン（β−ａｅｓｃｉｎ）、ルスコゲニン、イチョウフラボン等のそれらのヒトの皮膚への局所適用後の微小循環への作用も報告した。しかし、その結果は、これらの化学物質はそれらの皮膚表面への局所投与後に皮膚の微小循環を有意に改善することはできないことを示している。
【０００４】
現在市販されているような皮膚の微小循環を改善する（例えば眼の皮膚の微小循環を改善する、例えば眼の下の隈を解消する）ための眼用製品が絶え間なく登場し、そのほとんどに何らかの植物抽出物が添加されている。しかし、一方で、その抽出物のどの成分またはその抽出物のどのクラスの成分が作用しているのかは明らかではなく、他方でこれらの製品は眼の下の隈の解消への有意な作用を有しない。皮膚の微小循環を改善するための（例えば眼の下の隈を解消するための）ほとんどの製品は、消費者により用いられた後に期待されるような作用（例えば眼の下の隈を解消する効能）をもたらさなかった。従って、皮膚の微小循環を改善するための（例えば眼の皮膚の微小循環を改善するための、例えば眼の下の隈を解消するための）製品、特に眼の下の隈を解消するためのアイケア製品を開発するために、局所適用後に皮膚の微小循環を著しく改善することができる化学物質を探し求めることは、当業者にとってなお主要な研究の方向である。
【０００５】
ネオヘスペリジンは、以下のような式を有する、ミカン科の植物であるカラタチ（Ｐｏｎｃｉｒｕｓ  ｔｒｉｆｏｌｉａｔａ（Ｌ．）Ｒａｆ．）の果実から得られるフラバノンである：
【０００６】
【化１】
2014533704.tif 000002
【０００７】
それはＣ２８Ｈ３４Ｏ１５の分子式および６１０．５６の分子量を有し、主に二水素カルコンの新規のタイプの甘味剤の調製において用いられる。文献において、ネオヘスペリジンは抗アナフィラキシーにある程度療法上有効であることが報告されている。しかし、ネオヘスペリジンが皮膚の微小循環の改善において有用であることはまだ報告されていない。皮膚の微小循環を改善することができる新規製品、特に眼の皮膚の微小循環を改善することができる製品の開発は、なお当業者に期待されている。
【発明の概要】
【０００８】
発明の内容
本発明の目的は、皮膚の微小循環の改善（例えば、眼の皮膚の微小循環の改善、例えば眼の下の隈の解消）におけるネオヘスペリジンの新規の使用を提供することである。本発明において、驚くべきことに、ネオヘスペリジンまたはネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物は皮膚の微小循環、詳細には眼の皮膚の微小循環を改善し、より詳細には眼の下の隈を有効に解消することが発見されている。本発明は上記の発見に基づいて成し遂げられている。
【０００９】
発明の要約
従って、第１観点において、本発明は、ネオヘスペリジンまたはネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物の、皮膚の微小循環を改善および／または促進するための、または乏しい皮膚の微小循環と関係する疾患もしくは状態を排除および／または緩和するための製品の製造における、例えば哺乳類（特にヒト）において皮膚の微小循環を改善および／または促進するための、または哺乳類（特にヒト）において乏しい皮膚の微小循環と関係する疾患もしくは状態を排除および／または緩和するための製品の製造における使用を提供する。
【００１０】
その皮膚の微小循環が眼の皮膚の微小循環である、本発明の第１観点に従う使用。
【００１１】
その乏しい皮膚の微小循環と関係する疾患または状態が乏しい眼の皮膚の微小循環と関係する疾患または状態である、本発明の第１観点に従う使用。
【００１２】
その乏しい眼の皮膚の微小循環と関係する疾患または状態が眼の下の隈である、本発明の第１観点に従う使用。
【００１３】
そのネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物がカラタチの果実から抽出することにより得られた抽出物である、本発明の第１観点に従う使用。
【００１４】
そのネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物がカラタチの果実から抽出することにより得られた抽出物であり、かつその抽出物が５０ｗｔ％（重量％）より少なくない量のネオヘスペリジンを含む、本発明の第１観点に従う使用。
【００１５】
好ましい態様において、その抽出物は６０ｗｔ％以上、７０ｗｔ％以上、８０ｗｔ％以上、８５ｗｔ％以上、９０ｗｔ％以上、または９５ｗｔ％以上の量のネオヘスペリジンを含む。
【００１６】
その製品が局所投与のための製品である、本発明の第１観点に従う使用。
【００１７】
その製品が外部皮膚使用のための局所投与製品である、本発明の第１観点に従う使用。
【００１８】
その製品が眼の皮膚のための局所投与製品である、本発明の第１観点に従う使用。
【００１９】
その製品が化粧品である、本発明の第１観点に従う使用。
【００２０】
その製品が溶液、エマルジョン、ペースト、クリーム、またはゲルの形態である、本発明の第１観点に従う使用。
【００２１】
その製品が（１）ネオヘスペリジンまたはネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物および（２）生理的に許容可能な賦形剤を含む、本発明の第１観点に従う使用。
【００２２】
その製品が（１）ネオヘスペリジンまたはネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物および（２）生理的に許容可能な賦形剤を含み；そのネオヘスペリジンまたはそのネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物がネオヘスペリジンの重量により計算した際にその製品の総重量の０．０１〜２０ｗｔ％を占める、本発明の第１観点に従う使用。１態様において、そのネオヘスペリジンまたはそのネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物は、ネオヘスペリジンの重量により計算した際にその製品の総重量の０．０１〜１５ｗｔ％、０．０１〜１０ｗｔ％、０．０５〜１５ｗｔ％、０．１〜１０ｗｔ％、０．２〜１０ｗｔ％、または０．２〜５ｗｔ％を占める。
【００２３】
第２観点において、本発明は、（１）有効量のネオヘスペリジンまたはネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物、および場合により（２）生理的に許容可能な賦形剤を含む組成物を提供する。
【００２４】
本発明の第２観点に従う組成物は、以下：（１）有効量のネオヘスペリジンまたはネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物、および場合により（２）生理的に許容可能な賦形剤を含み；ここでそのネオヘスペリジンまたはそのネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物は、ネオヘスペリジンの重量により計算した際にその組成物の総重量の０．０１〜２０ｗｔ％を占める。１態様において、そのネオヘスペリジンまたはそのネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物は、ネオヘスペリジンの重量により計算した際にその製品の総重量の０．０１〜１５ｗｔ％、０．０１〜１０ｗｔ％、０．０５〜１５ｗｔ％、０．１〜１０ｗｔ％、０．２〜１０ｗｔ％、または０．２〜５ｗｔ％を占める。
【００２５】
そのネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物がカラタチの果実から抽出することにより得られた抽出物である、本発明の第２観点に従う組成物。
【００２６】
そのネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物がカラタチの果実から抽出することにより得られた抽出物であり、その抽出物が５０ｗｔ％より少なくない量のネオヘスペリジンを含む、本発明の第２観点に従う組成物。好ましい態様において、その抽出物は６０ｗｔ％以上、７０ｗｔ％以上、８０ｗｔ％以上、８５ｗｔ％以上、９０ｗｔ％以上、または９５ｗｔ％以上の量のネオヘスペリジンを含む。
【００２７】
本発明の第２観点に従う組成物は、皮膚の微小循環を改善および／または促進する、または乏しい皮膚の微小循環と関係する疾患もしくは状態を排除および／または緩和するための製品である。１態様において、その皮膚の微小循環は眼の皮膚の微小循環である。１態様において、その乏しい皮膚の微小循環と関係する疾患または状態は乏しい眼の皮膚の微小循環と関係する疾患または状態である。１態様において、その乏しい眼の皮膚の微小循環と関係する疾患または状態は眼の下の隈である。
【００２８】
本発明の第２観点に従う組成物は、局所投与のための製品である。
【００２９】
本発明の第２観点に従う組成物は、外部皮膚科学的使用（ｅｘｔｅｒｎａｌ  ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌ  ｕｓｅ）のための局所投与製品である。
【００３０】
本発明の第２観点に従う組成物は、眼の皮膚のための局所投与製品である。
【００３１】
本発明の第２観点に従う組成物は、化粧品である。
【００３２】
本発明の第２観点に従う組成物は、溶液、エマルジョン、ペースト、クリーム、またはゲルの形態である。
【００３３】
第３観点において、本発明は、それを必要とする対象において皮膚の微小循環を改善および／または促進するための、または乏しい皮膚の微小循環と関係する疾患もしくは状態を排除および／または緩和するための方法であって、その対象に有効量のネオヘスペリジンまたはネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物を投与することを含む方法を提供する。
【００３４】
その皮膚の微小循環が眼の皮膚の微小循環である、本発明の第３観点に従う方法。
【００３５】
その乏しい皮膚の微小循環と関係する疾患または状態が乏しい眼の皮膚の微小循環と関係する疾患または状態である、本発明の第３観点に従う方法。
【００３６】
その乏しい眼の皮膚の微小循環と関係する疾患または状態が眼の下の隈である、本発明の第３観点に従う方法。
【００３７】
そのネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物がカラタチの果実から抽出することにより得られた抽出物である、本発明の第３観点に従う方法。
【００３８】
そのネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物がカラタチの果実から抽出することにより得られた抽出物であり、その抽出物が５０ｗｔ％より少なくない量のネオヘスペリジンを含む、本発明の第３観点に従う方法。好ましい態様において、その抽出物は６０ｗｔ％以上、７０ｗｔ％以上、８０ｗｔ％以上、８５ｗｔ％以上、９０ｗｔ％以上、または９５ｗｔ％以上の量のネオヘスペリジンを含む。
【００３９】
その有効量のネオヘスペリジンまたはネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物が局所投与製品の形態で投与される、本発明の第３観点に従う方法。
【００４０】
その有効量のネオヘスペリジンまたはネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物が外部皮膚科学的使用のための局所投与製品の形態で投与される、本発明の第３観点に従う方法。
【００４１】
その有効量のネオヘスペリジンまたはネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物が眼の皮膚のための局所投与製品の形態で投与される、本発明の第３観点に従う方法。
【００４２】
その有効量のネオヘスペリジンまたはネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物が化粧品の形態で投与される、本発明の第３観点に従う方法。
【００４３】
その有効量のネオヘスペリジンまたはネオヘスペリジンを含有する植物の抽出物が溶液、エマルジョン、ペースト、クリーム、またはゲルの形態で投与される、本発明の第３観点に従う方法。
【００４４】
本発明のあらゆる観点の、またはその観点のあらゆる態様の特徴は、その観点のあらゆる他の態様に、またはあらゆる他の観点に、またはその別の観点のあらゆる態様にも適用可能である。
【発明を実施するための形態】
【００４５】
本発明の観点および特徴を、以下のようにさらに記述する。
【００４６】
本発明で引用される全ての文献は本明細書にそのまま援用され、その文献において述べられている意味が本発明における意味と異なる場合、本発明における表現が統制するであろう。加えて、本発明で用いられる用語および句は、当業者に認識される一般的な意味を有する。たとえそうであっても、本発明はなお用語および句を可能な限り詳細に解説および説明するよう努めている。本明細書で言及される用語および句が周知の意味と一致しない場合、本発明で述べられている意味が統制するであろう。
【００４７】
本明細書で記述される際、用語“皮膚の微小循環”は、循環の末端部であり、毛細血管に属し、動脈および静脈の間の接続点であり、血液および組織細胞の物質交換が行われる場所である、皮膚の皮層下の微小血管網を指す。皮膚の微小循環は、皮膚の色、温度調節、皮膚の代謝および経皮輸送への重要な作用を有し、従って皮膚の健康状態に直接影響を及ぼす複雑な動的システムである。
本明細書で記述される際、用語“乏しい皮膚の微小循環と関係する疾患または状態”は、乏しい局所的な皮膚の微小循環または局所的な皮膚の微小循環の障害の結果もたらされる病原性もしくは非病原性の身体状態または異常な状態、例えば皮膚炎、色素沈着、皮膚の老化、蒼白、顔の充血、局所的な皮膚の鬱血および血腫、局所的な水の蓄積、ならびに眼の下の隈を指す。
【００４８】
本明細書で記述される際、例えば“皮膚の微小循環を改善および／または促進する”および“乏しい皮膚の微小循環と関係する疾患または状態を排除および／または緩和するため”という表現における用語“改善する”、“促進する”、“排除する”、および“緩和する”は、本明細書で記述される際、乏しい局所的な皮膚の微小循環または局所的な皮膚の微小循環の障害の結果もたらされる病原性もしくは非病原性の身体状態または異常な状態への有益な作用の生成、例えば局所的な皮膚の微小循環の改善、局所的な皮膚の微小循環の促進、乏しい局所的な皮膚の微小循環または局所的な皮膚の微小循環の障害の結果もたらされる病原性もしくは非病原性の身体状態または異常な状態の排除、および乏しい局所的な皮膚の微小循環または局所的な皮膚の微小循環の障害の結果もたらされる病原性もしくは非病原性の身体状態または異常な状態の緩和、例えば充血した眼の改善、色素沈着の排除、水瘤（ｈｙｄｒｏｎｃｕｓ）の排除、鬱血および血腫の緩和、眼の下の隈の排除等を指す。
【００４９】
本明細書で記述される際、用語“生理的に許容可能な”は、物質が生理的に適合性であり、詳細には、例えば皮膚と接触した際に皮膚への被刺激性（ｉｒｒｉｔａｂｉｌｉｔｙ）のような副作用をもたらさずに外部皮膚科学的使用のための製品において用いることができることを意味する。詳細には、例えば希釈剤、界面活性剤、増粘剤、皮膚軟化剤等を化粧品において用いることができる。
【００５０】
本明細書で記述される際、用語“有効量”は、対象において本発明の疾患または状態の処置、予防、低減および／または緩和を成し遂げることができる用量を指す。
【００５１】
本明細書で記述される際、用語“組成物”は“化粧品”、“化粧用組成物”、“医薬組成物”も指し、それらは全て個体において本発明の疾患、状態、または身体状態の処置、予防、低減および／または緩和のために用いることができる。
【００５２】
本明細書で記述される際、用語“個体”はさらに、“対象”、“患者”または他の動物（それはそれらにおいて見られる皮膚の微小循環を改善および／または促進するために、またはそれらにおいて見られる乏しい皮膚の微小循環と関係する疾患もしくは状態を排除および／または緩和するために本発明の組成物を投与される）、詳細には哺乳類、例えばヒト、イヌ、サル、ウシ、ウマ等、特にヒトを指し得る。
【００５３】
本明細書で記述される際、用語“眼の皮膚の微小循環”は、眼の周囲の皮膚の微小循環を指す。
【００５４】
本発明によれば、ネオヘスペリジンはミカン科の植物の果実から、もしくはトゲナシムグラ（Ｇａｌｉｕｍ  ｍｏｌｌｕｇｏ  ｌｉｎｎ．）の地上部から抽出することができ、または当技術分野で既知の化学的方法により合成することができ、もしくは生体内変換により得ることができる。ネオヘスペリジンは、純粋な化合物または５０％（ｗ／ｗ）より少なくない量のネオヘスペリジンを含有する抽出物であり得る。本発明において、ネオヘスペリジンの純粋な化合物の重量により計算して、ネオヘスペリジンは本発明の組成物中に０．０１％〜２０％（ｗ／ｗ）、好ましくは０．０５％〜１５％（ｗ／ｗ）、最も好ましくは０．１％〜１０％（ｗ／ｗ）の濃度で存在する。
【００５５】
本発明はネオヘスペリジンを含む化粧用スキンケア組成物も含む。
【００５６】
本発明は、（１）０．１重量％〜１０重量％の量で存在するネオヘスペリジン；および（２）化粧的に有効なビヒクルを含む化粧用スキンケア組成物に関する。
【００５７】
本発明の組成物中で用いられるネオヘスペリジンは、眼の下の隈を解消する作用を達成するためのものである。
【００５８】
本発明の組成物および方法はさらに、組成物を皮膚に適用した際の組成物の分配を促進するために、化粧的に許容可能なビヒクルを有効成分の希釈剤、分散剤、またはキャリヤーとしてその組成物中に含む。
【００５９】
水以外のビヒクルは、液体または固体の皮膚軟化剤、界面活性剤、溶媒、および増粘剤を含む。
【００６０】
様々なタイプの有効成分が本発明の化粧用組成物中に存在していてよい。有効物質は、皮膚軟化剤および単にその組成物の物理特性を向上させる成分とは異なる物質として定義される。
【００６１】
１態様において、本発明は以下の配合を有する組成物を提供する。
【００６２】
【表１】
2014533704.tif 000003
【００６３】
本発明によれば、眼の下の隈をネオヘスペリジンの局所投与により低減または排除することができる。
【００６４】
本発明は、化粧品におけるネオヘスペリジンの新規使用、詳細には眼の下の隈の解消において皮膚の微小循環を改善させるための化学成分としてのネオヘスペリジンの新規使用に関する。好ましくは、使用において、ネオヘスペリジンはその組成物の０．０１重量％〜１０重量％の量で存在する。
【００６５】
ネオヘスペリジンのよりよい利用のため、本発明はネオヘスペリジンの皮膚表面への局所投与の微小循環の促進への作用を研究している。その結果は、ネオヘスペリジンの局所適用後に皮膚の微小循環が著しく改善されることを示している。本出願者はアイケア製品にネオヘスペリジンを適用し、それが眼の下の隈を著しく解消することができることを見出した。
【００６６】
本発明を実施するための特定の方式
本発明は以下の実施例によりさらに記述される。しかし、本発明の範囲は以下の実施例に限定されない。当業者は、本発明の精神および範囲から逸脱することなく本発明にあらゆる変更および修正を加えることができることを理解することができるであろう。
【００６７】
本発明は、本発明において用いられる材料および実験法を一般的に、および／または具体的に記述している。本発明の目的を達成するために用いられる多くの材料および操作法は当技術分野で周知であるが、本発明はなおそれらを可能な限り詳細に記述している。本発明の文脈において、別途示さない限り、％はｗｔ％、すなわち重量百分率を表す。
【実施例】
【００６８】
実施例１：ネオヘスペリジンの局所適用の皮膚の微小循環への作用のレーザードップラーによる観察
微小循環を促進するための実験法：体重３．０ｋｇ〜３．５ｋｇの雄のアナウサギ（Ｏｒｙｃｔｏｌａｇｕｓ  ｃｕｎｉｃｕｌｕｓ）を用いた。アナウサギの背中の毛を剃った後、血流を試験するために、そのウサギの毛のない皮膚の上に１０点、すなわち右側および左側のそれぞれに関して５点マーカーペンを用いて印を付け、かつその点を描く際は大動脈を避けた。試料を塗布する前に、それぞれの実験群のウサギのその１０点における血流の基本値をレーザードップラー流速測定（Ｆｌｏｗｍｅｔｅｒｙ）により決定した。それぞれの群のウサギに対して左側の背中の上にブランク溶液を塗布し、右側の背中の上にネオヘスペリジン含有溶液を塗布し（３つの動物群に関して、その溶液の濃度はそれぞれ０．５％（ｗ／ｖ）、１％（ｗ／ｖ）および２％（ｗ／ｖ）であり、それぞれの動物に関して０．１ｍｌであった）、それぞれの濃度に関して３匹のウサギを並行して用いた。２％（ｗ／ｖ）溶液を塗布により投与した群において用いられた量と比較して１００倍の量で、類似の方法により２％（ｗ／ｖ）溶液を経口投与した。投与後、２４時間、レーザードップラー流速測定により同じ点で１時間ごとに血流値を決定し、血流の変動指数を計算してウサギの背中の血液へのネオヘスペリジンの作用を評価し、ここでより高い血流の変動指数は微小循環を促進する作用がより優れていることを示していた。実験結果をＳＰＳＳ１１．５ソフトウェアにより統計分析し、ｔ検定をその測定データに適用して実験結果を評価した。Ｐ＜０．１の場合、そのデータは統計的に有意であるとみなすことができる。表１の結果において、その２４時間試験におけるＰ＜０．１である全ての時点を列挙した。
【００６９】
【表２】
2014533704.tif 000004
【００７０】
注釈：“−”は、２％溶液を経口投与した場合その２４時間の試験の間にＰ＜０．１である時点が見られなかったことを表す。
【００７１】
その実験結果は、様々な濃度のネオヘスペリジンを含む試料をウサギの背中に塗布した後、ウサギにおいて皮膚の微小血管中の血流がブランク側と比較して有意に高められたことを示していた。
【００７２】
実施例２：ネオヘスペリジンの眼の下の隈の解消への作用
方法：２つの側の眼における２種類の配合物の８週間比較実験をその試験において用いた。
【００７３】
その試験において、中程度および重度の眼の下の隈を有する５０人のボランティアをその試験で採用し、それぞれの一対比較群の有効数が１５であるようにした。その対象をランダムに割り当て、組成物を左側／右側に同等に８週間用いて、ここで一方の側の眼にはネオヘスペリジンを含む組成物を塗布し、他方の側の眼にはネオヘスペリジンを含まない組成物を塗布した。眼の下の隈を解消する作用に関して、０週目（処置前）、２週目、４週目、６週目および８週目において有効性評価を行った。
【００７４】
有効性の評価方法：実験の０日目に撮影した対象の眼の写真をベースラインデータとして用いて、実験の２週目、４週目、６週目および８週目において写真を撮影した。ｐｈｏｔｏｓｈｏｐソフトウェアのＬａｂシステムを用いて色合い（ｃｏｌｏｒｉｔｙ）を計算および分析し、ここでＬは眼の皮膚の白色度を表し、より高いＬ値はより白い皮膚を示していた。ベースラインデータとの比較の後、ＳＰＳＳ統計データを用いてその製品の有効性を評価した。Ｐ＜０．１である場合、そのデータは統計的に有意であるとみなすことができる。
【００７５】
表２の基本配合物および表３の組成物を試験のために対象において用いた。
【００７６】
【表３】
2014533704.tif 000005
【００７７】
【表４】
2014533704.tif 000006
【００７８】
以下の一対比較を実施した：
一対比較１：組成物１（基本配合物）対組成物２（基本配合物＋０．５％ネオヘスペリジン）；
一対比較２：組成物１（基本配合物）対組成物３（基本配合物＋２％ネオヘスペリジン）；
一対比較３：組成物１（基本配合物）対組成物４（基本配合物＋１０％ネオヘスペリジン抽出物）。
【００７９】
その結果を表４Ａ〜４Ｃにおいて列挙する：
【００８０】
【表５】
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【００８１】
＊＊基本配合物＋０．５％ネオヘスペリジンは、それを６週間用いた後、基本配合物よりも有意に大きい改善をもたらした（Ｐ＜０．０５）。
【００８２】
＃有効成分を含まない基本配合物も変化をもたらし、その実験の正確さはその変化の差し引きにより高められるであろう。基礎配合物によりもたらされる変化の原因である要因には、基本配合物自体の刺激作用、熱および冷却による刺激、感情、ならびに写真環境の輝度のような非客観的要因が含まれ得るが、それらに限定されない。これらの要因はＬ値の変化の原因である可能性があり、それにより実験結果の客観性を低減する。従って、実験の間は実験条件は厳密に制御されるべきである。その実験法では、その実験の間関連のない変種（ｖａｒｉａｎｔｓ）の作用を最大限排除する、またはその釣り合いをとるために、右眼および左眼において自己対照が設定された。従って、実験群および対照群の間の違いは実験変種に起因する作用とみなすことができるであろう。例えば、その実施例において、その実験結果は基本配合物を塗布した側におけるＬ値がその試験における異なる時点において異なる程度まで増大したことを示し、これは非客観的因子がその実験条件下でＬ値への一定の作用を有していたことを示している。しかし、ネオヘスペリジンを塗布した側のＬ値はより大きな程度まで増大し、それは前者と比較して有意であり、これはその有意性がネオヘスペリジンに起因するものであったことを示している。
【００８３】
【表６】
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【００８４】
＊＊基本配合物＋２％ネオヘスペリジンは、それを４週間用いた後、基本配合物よりも有意に大きい改善をもたらした（Ｐ＜０．０５）。
【００８５】
【表７】
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【００８６】
＊＊基本配合物＋１０％ネオヘスペリジン抽出物は、それを２週間用いた後、基本配合物よりも有意に大きい改善をもたらした（Ｐ＜０．０５）。
【００８７】
前記の一対比較の結果は、ネオヘスペリジンを含む組成物がネオヘスペリジンを含まない組成物と比較して眼の下の隈を有意に改善させることを示した。その実施例は、ネオヘスペリジンは皮膚の微小循環、詳細には眼の皮膚の微小循環を改善するために有用であり、特に眼の下の隈を解消するための化粧用スキンケア製品として有用であることを示した。
【００８８】
上述の実施例は、従来の手段により処理することができる、本発明に従う局所適用のための組成物を説明している。それらは化粧的スキンケア使用に適している。特に、その組成物は、眼の下の隈を解消して眼の皮膚の外観および感触を改善するのに適している。
【国際調査報告】
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