(57)【要約】【課題】二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターを用いた癌の治療方法を提供する。【解決手段】        患者からの癌サンプルから核酸サンプルを得、  −そのサンプルをRAF もしくはRAS 突然変異試験又はPCR にかけ、RAF 又はRAS 遺伝子中の少なくとも一つの突然変異の存在を同定し、そして  −有効量の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターを、必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせて、サンプル中にRAF 又はRAS 遺伝子中の少なくとも一つの突然変異の存在が同定される患者に投与することを特徴とする治療方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
癌を有する哺乳類（好ましくはヒト）患者の治療方法であって、前記方法が
−前記患者からの癌サンプルから核酸サンプルを得、
−そのサンプルをRAF もしくはRAS 突然変異試験又はPCR にかけ、RAF 又はRAS 遺伝子中の少なくとも一つの突然変異の存在を同定し、そして
−有効量の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターを、必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせて、サンプル中にRAF 又はRAS 遺伝子中の少なくとも一つの突然変異の存在が同定される患者に投与することを特徴とする、前記治療方法。
【請求項２】
癌と診断された哺乳類（好ましくはヒト）患者における二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター（必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせての）による治療の有効性の増大された可能性を測定するための方法であって、前記方法が
−患者からの癌サンプルからの核酸サンプルをRAF もしくはRAS 突然変異試験又はPCR にかけることを含み、RAF 又はRAS 遺伝子中の少なくとも一つの突然変異の存在がその治療の薬理学的有効性の増大された可能性を示すことを特徴とする前記方法。
【請求項３】
前記RAF がBRAFである、請求項１又は２記載の方法。
【請求項４】
前記RAS がKRAS又はNRASである、請求項１、２又は３記載の方法。
【請求項５】
MEK-シグナリング経路にゆだねられる癌又はMEK が活性化される癌、特にBRAF又はRAS （例えば、KRAS及び／又はNRAS）遺伝子中に少なくとも一つの突然変異を有するこのような癌と診断された哺乳類（好ましくはヒト）患者の治療方法であって、前記方法が有効量の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターを（必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせて）患者に投与することを特徴とする前記方法。
【請求項６】
前記少なくとも一つの突然変異がBRAF遺伝子中の突然変異、特にBRAF遺伝子のコドン464-469 及び／又はコドンV600中の突然変異を含む、請求項１、２、３、４又は５記載の方法。
【請求項７】
BRAF遺伝子中の突然変異がV600E 、V600G 、V600A 及びV600K から選ばれた突然変異、もしくはV600E 、V600D 、V600K 及びV600R から選ばれた突然変異、又はV600E 、V600D 及びV600K から選ばれた突然変異、或いはV600E 、V600D 、V600M 、V600G 、V600A 、V600R 及びV600K から選ばれた突然変異である、請求項６記載の方法。
【請求項８】
前記少なくとも一つの突然変異がKRAS遺伝子中の突然変異、例えば、KRAS遺伝子のコドン12、13及び／又は61中の突然変異、特にコドン12及び／又は13中の突然変異を含む、請求項１、２、３、４又は５記載の方法。
【請求項９】
KRAS遺伝子中の突然変異がGly12Asp、Gly12Val、Gly13Asp、Gly12Cys、Gly12Ser、Gly12Ala及びGly12Argから選ばれ、又は12D 、12V 、12C 、12A 、12S 、12R 、12F 、13D 、13C 、13R 、13S 、13A 、13V 、13I 、61H 、61L 、61R 、61K 、61E 及び61P から選ばれる、請求項８記載の方法。
【請求項１０】
前記少なくとも一つの突然変異がNRAS遺伝子中の突然変異、特にNRAS遺伝子のコドン12、13及び／又は61中の突然変異を含む、請求項１、２、３、４又は５記載の方法。
【請求項１１】
NRAS遺伝子中の突然変異がp.G12D、p.G12S、p.G12C、p.G12V、p.G12A、p.G13D、p.G13R、p.G13C、p.G13A、p.Q61R、p.Q61K、p.Q61L、p.Q61H及びp.Q61Pから選ばれる、請求項１０記載の方法。
【請求項１２】
前記癌が膵臓癌 (PAC)、結腸直腸癌 (CRC)、非小細胞肺癌 (NSCLC)、卵巣癌(OC)、前立腺癌、乳癌、肝細胞癌 (HCC)、メラノーマ、及び甲状腺癌から選ばれる、請求項１から１１のいずれか１項記載の方法。
【請求項１３】
前記二重オーロラキナーゼ/MEK インヒビターが
1) N-エチル-3-[3-[[4-(4-メチルピペラジン-1-イル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
2) N-(2,2-ジフルオロエチル)-3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
3) N-(2,2-ジフルオロエチル)-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
4) N-(2-フルオロエチル)-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
5) N-エチル-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
6) 3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]-N-エチルプロプ-2-インアミド、
7) N-シクロブチル-3-[3-[[4-(4-メチルピペラジン-1-イル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
8) N-シクロプロピル-3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
9) 3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]-N-フェニルプロプ-2-インアミド、
10) N-シクロペンチル-3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
11) N-シクロペンチル-3-[3-[[4-(4-メチルピペラジン-1-イル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
12) N-シクロブチル-3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
13) 3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]-N-(2-ヒドロキシエチル)プロプ-2-インアミド、
14) 3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]-N-プロパン-2-イルプロプ-2-インアミド、
15) 3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]-N-プロパン-2-イルプロプ-2-インアミド、
16) N-(2-ヒドロキシエチル)-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
17) N-(2-フルオロフェニル)-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
18) 3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]-N-[(2S)-1-ヒドロキシプロパン-2-イル]プロプ-2-インアミド、
19) N-[(2S)-1-ヒドロキシプロパン-2-イル]-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
20) N-[(2R)-ブタン-2-イル]-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
21) N-(3-クロロフェニル)-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
22) N-(3-クロロフェニル)-3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
23) 3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]-N-フェニルプロプ-2-インアミド、
24) 3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]-N-ペンタン-3-イルプロプ-2-インアミド、及び
25) N-(3-フルオロフェニル)-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド
又はこれらの医薬上許される塩から選ばれる、請求項１から１２のいずれか１項記載の方法。
【請求項１４】
前記一種以上のその他の抗癌剤がカペシタビン、5-フルオロウラシル、オキサリプラチン、シスプラチン、カルボプラチン、ダカルバジン、テモゾラミド、フォテムスチン、イリノテカン、ゲムシタビン、ペメトレキセド、パクリタキセル、ドセタキセル、血管形成インヒビター、VEGF(R) インヒビター、EGF(R)インヒビター、IGF(R)インヒビター、坑CTLA4 抗体、BRafインヒビター、mTORインヒビター、二重PI3K/mTOR インヒビター、AKT インヒビター、及びPI3Kインヒビターからなる群から選ばれる、請求項１から１３のいずれか１項記載の方法。
【請求項１５】
前記一種以上のその他の抗癌剤がカペシタビン、5-フルオロウラシル、オキサリプラチン、シスプラチン、カルボプラチン、ダカルバジン、テモゾラミド、フォテムスチン、イリノテカン、ゲムシタビン、ペメトレキセド、パクリタキセル、ドセタキセル、ベバシズマブ、セツキシマブ、パニツムマブ、エルロチニブ、イピリムマブ、フィギツムマブ、ダロツズマブ、シクスツムマブ、ガニツマブ、BMS-754807、OSI-906 (リンシチニブ) 、PLX-4032 (ベムラフェニブ) 、GSK-2118436 (ダブラフェニブ) 、AZD-8055、BEZ-235 、BKM-120 、MK-2206 、BIBW 2992 、及びBIBF 1120 からなる群から選ばれる、請求項１から１４のいずれか１項記載の方法。
【請求項１６】
前記一種以上のその他の抗癌剤がBIBF 1120 を含む、請求項１から１３のいずれか１項記載の方法。
【請求項１７】
癌と診断された哺乳類（好ましくはヒト）患者における二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター（例えば、請求項１３記載のものから選ばれる）（必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせての）による治療の有効性の増大された可能性を測定するのに有益なキットであって、前記キットがBRAF癌遺伝子中の突然変異、例えば、BRAF遺伝子のコドン464-469 及び／又はコドンV600中の突然変異を検出するため、特にV600E 、V600G 、V600A 及びV600K から選ばれた一つ以上の突然変異を検出するため、もしくはV600E 、V600D 、V600K 及びV600R から選ばれた一つ以上の突然変異を検出するため、又はV600E 、V600D 及びV600K から選ばれた一つ以上の突然変異を検出するため、或いはV600E 、V600D 、V600M 、V600G 、V600A 、V600R 及びV600K から選ばれた一つ以上の突然変異を検出するための手段を含むことを特徴とする前記キット。
【請求項１８】
癌と診断された哺乳類（好ましくはヒト）患者における二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター（例えば、請求項１３記載のものから選ばれる）（必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせての）による治療の有効性の増大された可能性を測定するのに有益なキットであって、前記キットがKRAS癌遺伝子中の突然変異、例えば、KRAS遺伝子のコドン12、13及び／又は61中の突然変異又はコドン12及び／又は13中の突然変異を検出するため、特にGly12Asp、Gly12Val、Gly13Asp、Gly12Cys、Gly12Ser、Gly12Ala及びGly12Argから選ばれた一つ以上の突然変異を検出するため、又は12D 、12V 、12C 、12A 、12S 、12R 、12F 、13D 、13C 、13R 、13S 、13A 、13V 、13I 、61H 、61L 、61R 、61K 、61E 及び61P から選ばれた一つ以上の突然変異を検出するための手段を含むことを特徴とする前記キット。
【請求項１９】
癌と診断された哺乳類（好ましくはヒト）患者における二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター（例えば、請求項１３記載のものから選ばれる）（必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせての）による治療の有効性の増大された可能性を測定するのに有益なキットであって、前記キットがNRAS癌遺伝子中の突然変異、例えば、NRAS遺伝子のコドン12、13及び／又は61中の突然変異を検出するため、特にp.G12D、p.G12S、p.G12C、p.G12V、p.G12A、p.G13D、p.G13R、p.G13C、p.G13A、p.Q61R、p.Q61K、p.Q61L、p.Q61H及びp.Q61Pから選ばれた一つ以上の突然変異を検出するための手段を含むことを特徴とする前記キット。
【請求項２０】
KRAS中の一つ以上の突然変異（例えば、KRASのコドン12、13及び／又は61中の、例えば、Gly12Asp、Gly12Val、Gly13Asp、Gly12Cys、Gly12Ser、Gly12Ala及びGly12Argから選ばれ、又は12D 、12V 、12C 、12A 、12S 、12R 、12F 、13D 、13C 、13R 、13S 、13A 、13V 、13I 、61H 、61L 、61R 、61K 、61E 及び61P から選ばれた一つ以上の突然変異）又はBRAF中の一つ以上の突然変異(例えば、BRAF V600、例えば、V600E 、V600G 、V600A 、V600K 、V600D 及びV600R から選ばれ、又はV600E 、V600G 、V600A 、V600K 、V600D 、V600M 及びV600R から選ばれた一つ以上の突然変異)を有する結腸直腸癌 (CRC)の治療及び／又は予防における使用のための二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター（好ましくは請求項１３記載の）。
【請求項２１】
KRAS中の一つ以上の突然変異（例えば、KRASのコドン12、13及び／又は61中の、例えば、Gly12Asp、Gly12Val、Gly13Asp、Gly12Cys、Gly12Ser、Gly12Ala及びGly12Argから選ばれ、又は12D 、12V 、12C 、12A 、12S 、12R 、12F 、13D 、13C 、13R 、13S 、13A 、13V 、13I 、61H 、61L 、61R 、61K 、61E 及び61P から選ばれた一つ以上の突然変異）又は野生型遺伝子型の一つ以上の突然変異を有する膵臓癌 (PAC)の治療及び／又は予防における使用のための二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター（好ましくは請求項１３記載の）。
【請求項２２】
BRAF中の一つ以上の突然変異 (特にBRAF V600、例えば、V600E 、V600G 、V600A 、V600K 、V600D 及びV600Rから選ばれ、又はV600E 、V600G 、V600A 、V600K 、V600D 、V600M 及びV600R から選ばれた一つ以上の突然変異) 又はNRAS中の一つ以上の突然変異を有する悪性メラノーマの治療及び／又は予防における使用のための二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター（好ましくは請求項１３記載の）。
【請求項２３】
KRAS中の一つ以上の突然変異（例えば、KRASのコドン12、13及び／又は61中の、例えば、Gly12Asp、Gly12Val、Gly13Asp、Gly12Cys、Gly12Ser、Gly12Ala及びGly12Argから選ばれ、又は12D 、12V 、12C 、12A 、12S 、12R 、12F 、13D 、13C 、13R 、13S 、13A 、13V 、13I 、61H 、61L 、61R 、61K 、61E 及び61P から選ばれた一つ以上の突然変異）を有する非小細胞肺癌 (NSCLC)の治療及び／又は予防における使用のための二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター（好ましくは請求項１３記載の）。
【請求項２４】
KRAS突然変異を有する結腸直腸癌(CRC)、
野生型KRASを有する結腸直腸癌(CRC)、
KRAS突然変異を有する膵臓癌(PAC)、
野生型KRASを有する膵臓癌(PAC)、
BRAF突然変異を有するメラノーマ、
野生型BRAFを有するメラノーマ、
NRAS突然変異を有するメラノーマ、及び／又は
KRAS突然変異を有する非小細胞肺癌(NSCLC)
から選ばれた癌タイプを有する患者の治療方法（前記方法は治療有効量の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターを、必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせて、患者に投与することを含む）における使用のための
1) N-エチル-3-[3-[[4-(4-メチルピペラジン-1-イル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
2) N-(2,2-ジフルオロエチル)-3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
3) N-(2,2-ジフルオロエチル)-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
4) N-(2-フルオロエチル)-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
5) N-エチル-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
6) 3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]-N-エチルプロプ-2-インアミド、
7) N-シクロブチル-3-[3-[[4-(4-メチルピペラジン-1-イル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
8) N-シクロプロピル-3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
9) 3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]-N-フェニルプロプ-2-インアミド、
10) N-シクロペンチル-3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
11) N-シクロペンチル-3-[3-[[4-(4-メチルピペラジン-1-イル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
12) N-シクロブチル-3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
13) 3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]-N-(2-ヒドロキシエチル)プロプ-2-インアミド、
14) 3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]-N-プロパン-2-イルプロプ-2-インアミド、
15) 3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]-N-プロパン-2-イルプロプ-2-インアミド、
16) N-(2-ヒドロキシエチル)-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド,
17) N-(2-フルオロフェニル)-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
18) 3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]-N-[(2S)-1-ヒドロキシプロパン-2-イル]プロプ-2-インアミド、
19) N-[(2S)-1-ヒドロキシプロパン-2-イル]-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
20) N-[(2R)-ブタン-2-イル]-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
21) N-(3-クロロフェニル)-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
22) N-(3-クロロフェニル)-3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
23) 3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]-N-フェニルプロプ-2-インアミド、
24) 3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]-N-ペンタン-3-イルプロプ-2-インアミド、及び
25) N-(3-フルオロフェニル)-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド、
又はこれらの医薬上許される塩から好ましくは選ばれる二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター。
【請求項２５】
KRAS突然変異がKRASのコドン１2、13又は61中にあり、例えば、Gly12Asp、Gly12Val、Gly13Asp、Gly12Cys、Gly12Ser、Gly12Ala及びGly12Argから選ばれ、又は12D 、12V 、12C 、12A 、12S 、12R 、12F 、13D 、13C 、13R 、13S 、13A 、13V 、13I 、61H 、61L 、61R 、61K 、61E 及び61P から選ばれ、かつ／又は
BRAF突然変異がBRAF V600 中にあり、例えば、V600E 、V600G 、V600A 、V600K 、V600D 及びV600R から選ばれ、又はV600E 、V600G 、V600A 、V600K 、V600D 、V600M 及びV600R から選ばれ、かつ／又は
NRAS突然変異がNRASのコドン12、13又は61中にある、請求項２４記載の使用のための二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター。
【請求項２６】
治療が第一選択、第二選択又は第三選択治療である、請求項２４又は２５記載の使用のための二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター。
【請求項２７】
治療及び／又は予防が単一療法としての二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターの投与を含む、請求項２０から２６のいずれか１項記載の使用のための二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター。
【請求項２８】
治療及び／又は予防が二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター並びに
カペシタビン、5-フルオロウラシル、オキサリプラチン、シスプラチン、カルボプラチン、ダカルバジン、テモゾラミド、フォテムスチン、イリノテカン、ゲムシタビン、ペメトレキセド、パクリタキセル、ドセタキセル、血管形成インヒビター、VEGF(R) インヒビター、EGF(R)インヒビター、IGF(R)インヒビター、坑CTLA4 抗体、BRafインヒビター、mTORインヒビター、二重PI3K/mTOR インヒビター、AKT インヒビター、及びPI3Kインヒビターからなる群から選ばれた一種以上のその他の抗癌剤の投与を含む、請求項２０から２６のいずれか１項記載の使用のための二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター。
【請求項２９】
治療及び／又は予防が二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター並びに
カペシタビン、5-フルオロウラシル、オキサリプラチン、シスプラチン、カルボプラチン、ダカルバジン、テモゾラミド、フォテムスチン、イリノテカン、ゲムシタビン、ペメトレキセド、パクリタキセル、ドセタキセル、ベバシズマブ、セツキシマブ、パニツムマブ、エルロチニブ、イピリムマブ、フィギツムマブ、ダロツズマブ、シクスツムマブ、ガニツマブ、BMS-754807、OSI-906 (リンシチニブ) 、PLX-4032 (ベムラフェニブ) 、GSK-2118436 (ダブラフェニブ) 、AZD-8055、BEZ-235 、BKM-120 、MK-2206 、BIBW 2992 、及びBIBF 1120 からなる群から選ばれた一種以上のその他の抗癌剤の投与を含む、請求項２０から２６のいずれか１項記載の使用のための二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター。
【請求項３０】
治療及び／又は予防が二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター及びEGF(R) インヒビター、例えば、BIBW 2992 、セツキシマブ、パニツムマブ又はエルロチニブの投与を含む、請求項２０から２６のいずれか１項記載の使用のための二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター。
【請求項３１】
治療及び／又は予防が二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター及びVEGF(R) インヒビター、例えば、BIBF 1120 又はベバシズマブの投与を含む、請求項２０から２６のいずれか１項記載の使用のための二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター。
【請求項３２】
治療及び／又は予防が二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター及びIGF(R) インヒビター、例えば、フィギツムマブ、ダロツズマブ、シクスツムマブ、ガニツマブ、BMS-754807又はOSI-906 (リンシチニブ) の投与を含む、請求項２０から２６のいずれか１項記載の使用のための二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター。
【請求項３３】
治療及び／又は予防が二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター及びBRafインヒビター、例えば、PLX-4032 (ベムラフェニブ) 又はGSK-2118436 (ダブラフェニブ) の投与を含む、請求項２０から２６のいずれか１項記載の使用のための二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター。
【請求項３４】
治療及び／又は予防が二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター及び坑CTLA4 抗体、例えば、イピリムマブの投与を含む、請求項２０から２６のいずれか１項記載の使用のための二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター。
【請求項３５】
治療及び／又は予防が二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター及びmTORインヒビター、例えば、AZD-8055の投与を含む、請求項２０から２６のいずれか１項記載の使用のための二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター。
【請求項３６】
治療及び／又は予防が二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター及び二重PI3K/mTOR インヒビター、例えば、BEZ-235 の投与を含む、請求項２０から２６のいずれか１項記載の使用のための二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター。
【請求項３７】
治療及び／又は予防が二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター及びAKT インヒビター、例えば、MK-2206 の投与を含む、請求項２０から２６のいずれか１項記載の使用のための二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター。
【請求項３８】
治療及び／又は予防が二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター及びPI3Kインヒビター、例えば、BKM-120 の投与を含む、請求項２０から２６のいずれか１項記載の使用のための二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター。
【請求項３９】
治療及び／又は予防が二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター及びBIBW 2992 の投与を含む、請求項２０から２６のいずれか１項記載の使用のための二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター。
【請求項４０】
治療及び／又は予防が二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター及びBIBF 1120 の投与を含む、請求項２０から２６のいずれか１項記載の使用のための二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特に癌疾患（特に本明細書に記載されたこれらの癌）の、特に本明細書に記載された治療又は予防の方法における使用のための、二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター、このようなインヒビター、及び、必要により、一種以上のその他の活性物質を含む医薬組成物又は組み合わせを記載する。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００２】
一実施態様において、本発明の治療及び／又は予防方法は抗癌治療及び／又は予防を受け入れることができる患者を同定する工程を含み、前記同定は患者がMEK インヒビター治療を受け入れることができるか否かを試験することを含む。特に、前記同定は患者の癌がMEK シグナリング経路にゆだねられるか否か又はMEK が患者の癌中で活性化されるか否かを試験することを含み、特に前記同定は患者の癌中でRAF （例えば、BRAF）又はRAS （例えば、KRAS及び／又はNRAS）が突然変異されるか否かを試験することを含む。
本発明のこのような治療及び／又は予防方法は治療及び／又は予防を受け入れることができると決定された患者に本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター、医薬組成物又は組み合わせを投与することを更に含む。
更に、オーロラキナーゼ及び／又はMEK インヒビター治療を受け入れることができる患者、例えば、癌がMEK シグナリング経路にゆだねられる患者（もしくは癌中でMEK が活性化される患者）又は癌が（その腫瘍のBRAF/RAS突然変異状態にもかかわらず）MEK シグナリング経路に依存しない患者、特に癌がBRAFもしくはRAS 中に突然変異を有する患者、例えば、本明細書に特定された患者における本発明の治療及び／又は予防方法又は使用のための本明細書に夫々記載された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター、医薬組成物又は組み合わせの使用可能性が、意図されている。
更に、本発明の二重オーロラキナーゼ/MEK インヒビター、医薬組成物又は組み合わせはまたMEK 及び／又はオーロラキナーゼの抑制が有益である症状の治療に有益である。
更に、本発明はMEK （例えば、MEK1及び／又はMEK2）抑制に感受性又は応答性である癌タイプ、例えば、MAPKシグナリング経路が高活性化されるこのような癌タイプ、特にRAS （例えば、KRAS及び／又はNRAS）又はRAF （例えば、BRAF）突然変異を伴なうこのような癌タイプ、及び／又はオーロラ（特にオーロラ-B）キナーゼ抑制に感受性又は応答性である癌タイプを治療及び／又は予防するための方法に関するものであり、前記方法はこれを要する患者に治療有効量の本発明の二重オーロラキナーゼ/MEK インヒビター（必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせて）を投与することを含む。
【発明を実施するための形態】
【０００３】
本発明の意味内の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターは一種以上のオーロラキナーゼ（特にオーロラ-B）のインヒビター及び一種以上のMEK キナーゼ（MEK1及び／又はMEK2）のインヒビターの両方である化合物を表す。疑いを避けるために、本発明の意味内の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターは前記の二つの異なる性質、即ち、オーロラキナーゼインヒビター(AKI) の性質及びMEK インヒビターの性質を有する一種の化合物を表す。
オーロラキナーゼ（オーロラ-A、オーロラ-B、オーロラ-C）は増殖細胞に必須であり、有糸分裂紡錘体の生成から細胞分裂までの範囲の、有糸分裂及び還元分裂における異なる工程の主要なレギュレーターとして同定されていたセリン／スレオニンタンパク質キナーゼである。オーロラファミリーキナーゼは細胞分裂に重要であり、腫瘍形成及び癌罹病性に密接に関連していた。種々のヒトの癌では、オーロラ-A、オーロラ-B及び／又はオーロラ Cのキナーゼ活性の過剰発現及び／又はアップレギュレーションが観察されていた。オーロラキナーゼの過剰発現は癌進行及び不十分な生存予後と臨床上相関関係がある。オーロラキナーゼは細胞サイクルを調節するリン酸化イベント（例えば、ヒストンH3のリン酸化）に関係する。細胞サイクルのミスレギュレーションが細胞増殖及びその他の異常をもたらし得る。
【０００４】
セリン／スレオニンキナーゼオーロラ-Bは染色体凝縮、会合及び分離だけでなく、細胞分裂を含む、幾つかの有糸分裂プロセスの調節に関係する。オーロラＢの不活化は紡錐体組立チェックポイント (SAC)を廃止し、細胞分裂のない早期の有糸分裂出口を生じ、更なるDNA 複製を最終的に停止する多倍数体細胞をもたらす。オーロラＢインヒビターは有糸分裂オーバーライド（有糸分裂すべり）を誘発する。オーロラＢキナーゼのインヒビターはまた種々のヒトの癌細胞系の増殖をブロックし、多倍数体、老化及びアポプトーシスを誘発する。
オーロラＢインヒビターは紡錐体組立チェックポイント (SAC)を廃止し、有糸分裂オーバーライド（有糸分裂すべり）を誘発し、細胞サイクル静止よりむしろ異常な多倍数体細胞を生じる。多倍数体は有糸分裂に少しの時間を費やす。何とならば、チェックポイントコントロールがオーバーライドされ、遺伝子的に不安定になるからである。オーロラＢキナーゼの抑制はそれをその他の坑有糸分裂原理とは区別し得るアポプトーシスよりむしろ遅い老化関連細胞死滅を主として誘発し得る。この抗癌治療原理の一般適用可能性がその他のＭ期ターゲッティング薬物と共通する。オーロラキナーゼは実際に有糸分裂中に限定的に発現され、こうして増殖細胞中に専ら見られる。
MEK （マイトジェン活性化タンパク質キナーゼ／細胞外シグナル関連キナーゼキナーゼ）は種々の癌タイプで病態生理学的妥当性を有する“RAS-RAF-MEK-ERK経路”における主要なプレイヤーである。MEK の直接の下流の基質はERK であり、これはそのリン酸化状態で細胞核に入り、遺伝子発現の調節に関係する。特にRAS 又はBRAFが突然変異される場合、MEK が腫瘍中で頻繁に活性化される。BRAF突然変異及びRAS 突然変異は相互に排他的であることが知られている。文献によれば、RAF-インヒビターはKRAS突然変異癌で活性ではなく、一方、MEK インヒビター はKRAS突然変異癌及びBRAF突然変異癌の両方で主として作用し得る（また、下記の表１を参照のこと）。２種のMEK イソ型（MEK1、MEK2）の間の妥当性及び機能の差は現在まで知られていない。RAS-依存性RAF/MEK/ERK1/2 マイトジェン活性化タンパク質 (MAP)キナーゼシグナリング経路は細胞増殖及び生存の調節に重要な役割を果たす。
RAS/RAF/MEK/ERK シグナリング経路の構成的活性化は悪性形質転換に関係する。KRAS（全ての癌の約15％）及びBRAF（全ての癌の約７％）の突然変異活性化は種々のヒトの腫瘍に見られる普通の相互に排他的なイベントである（下記の表１を参照のこと）。
表1: 種々の癌におけるBRAF突然変異及びRAS 突然変異の発生
【０００５】
【表１】
2014507408.tif 000002
【０００６】
CRC: 結腸直腸癌
NSCLC: 非小細胞肺癌
HCC:  肝細胞癌
一緒にされると、本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター（発癌遺伝子突然変異とは独立の全ての癌細胞の有糸分裂に必須の標的である、オーロラＢキナーゼのインヒビターとしての）は多倍数体及び老化を誘発することにより広範囲の癌に効力を示す。加えて、MEK シグナリングの強力な抑制のために、本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターはRAS 遺伝子又はRAF 遺伝子中の突然変異による発癌遺伝子MEK シグナリングに依存する癌のサブセットに特に有効である。
【０００７】
従って、本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターは
a)MEK （例えば、MEK1及び／又はMEK2）抑制に感受性又は応答性であるこのような癌タイプ、特にMAPKシグナリング経路が、例えば、RAS 又はRAF 突然変異のために高活性化されるこのような癌タイプ、及び／又は
b)オーロラ（特にオーロラ-B）キナーゼ抑制に感受性又は応答性であるこのような癌タイプ、例えば、有糸分裂チェックポイントオーバーライド、癌細胞多倍数体及び／又は（遅い老化関連）癌細胞死滅の誘発に感受性又は応答性であるこのような癌タイプ
を治療し、かつ／又は予防するのに有益である。
それ故、例えば、本発明による治療を受け易い癌タイプとして、結腸直腸癌（結腸直腸癌腫、CRC ）（特にKRAS突然変異腫瘍又はKRAS野生型腫瘍を含む）、膵臓癌（膵臓腺癌、PAC ）（特にKRAS突然変異腫瘍又はKRAS野生型腫瘍を含む）、メラノーマ（特にBRAF突然変異又はBRAF野生型を含む）、及び／又は非小細胞肺癌（非小細胞肺癌腫、NSCLC ）（特にKRAS突然変異を含む）が挙げられるが、これらに限定されない。
本発明の特別な実施態様において、本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターがオーロラキナーゼＢのインヒビター及びキナーゼMEK1及び／又はMEK2のインヒビターの両方である。
本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターの例がWO 2010/012747に見られ、その開示が参考として本明細書にそのまま含まれる。
例えば、本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターは一般式 (1)のもの（必要によりこれらのプロドラッグ、互変異性体、ラセミ体、鏡像体、ジアステレオマー及び混合物の形態、また必要によりこれらのN-オキサイド又は薬理学上許される酸付加塩であってもよい）である。
【０００８】
【化１】
2014507408.tif 000003
【０００９】
式中、
R1は4-(4-メチルピペラジン-1-イル)-フェニル、4-(モノ- 又はジメチルアミノメチル)-フェニル、又は4-(ピロリジン-1-イルメチル)-フェニルであり、
ＲはC1-6アルキル (例えば、エチル、イソプロピル、sec-ブチル、(2R)-ブタン-2-イル又は3-ペンチル) 、モノ- 又はジフルオロ置換C1-6アルキル (例えば、2,2-ジフルオロエチル又は2-フルオロエチル) 、モノ-ヒドロキシ置換C1-6アルキル (例えば、2-ヒドロキシエチル又は(2S)-1-ヒドロキシプロパン-2-イル) 、C3-7シクロアルキル (例えば、シクロブチル、シクロプロピル又はシクロペンチル) 、フェニル、或いはモノ- 又はジ-ハロ置換フェニル (例えば、2-フルオロフェニル、3-フルオロフェニル、2-クロロフェニル又は3-クロロフェニル) である。
本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターが下記の化合物１〜25（必要によりこれらの互変異性体又は医薬上許される塩の形態であってもよい）からなる群Ａから選ばれることが好ましい。
1) N-エチル-3-[3-[[4-(4-メチルピペラジン-1-イル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド
【００１０】
【化２】
2014507408.tif 000004
【００１１】
2) N-(2,2-ジフルオロエチル)-3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド
【化３】
2014507408.tif 000005
【００１２】
3) N-(2,2-ジフルオロエチル)-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド
【化４】
2014507408.tif 000006
【００１３】
4) N-(2-フルオロエチル)-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド
【化５】
2014507408.tif 000007
【００１４】
5) N-エチル-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド
【化６】
2014507408.tif 000008
【００１５】
6) 3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]-N-エチルプロプ-2-インアミド
【化７】
2014507408.tif 000009
【００１６】
7) N-シクロブチル-3-[3-[[4-(4-メチルピペラジン-1-イル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド
【化８】
2014507408.tif 000010
【００１７】
8) N-シクロプロピル-3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド
【化９】
2014507408.tif 000011
【００１８】
9) 3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]-N-フェニルプロプ-2-インアミド
【化１０】
2014507408.tif 000012
【００１９】
10) N-シクロペンチル-3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド
【化１１】
2014507408.tif 000013
【００２０】
11) N-シクロペンチル-3-[3-[[4-(4-メチルピペラジン-1-イル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド
【化１２】
2014507408.tif 000014
【００２１】
12) N-シクロブチル-3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド
【化１３】
2014507408.tif 000015
【００２２】
13) 3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]-N-(2-ヒドロキシエチル)プロプ-2-インアミド
【化１４】
2014507408.tif 000016
【００２３】
14) 3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]-N-プロパン-2-イルプロプ-2-インアミド
【化１５】
2014507408.tif 000017
【００２４】
15) 3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]-N-プロパン-2-イルプロプ-2-インアミド
【化１６】
2014507408.tif 000018
【００２５】
16) N-(2-ヒドロキシエチル)-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド
【化１７】
2014507408.tif 000019
【００２６】
17) N-(2-フルオロフェニル)-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド
【化１８】
2014507408.tif 000020
【００２７】
18) 3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]-N-[(2S)-1-ヒドロキシプロパン-2-イル]プロプ-2-インアミド
【化１９】
2014507408.tif 000021
【００２８】
19) N-[(2S)-1-ヒドロキシプロパン-2-イル]-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド
【化２０】
2014507408.tif 000022
【００２９】
20) N-[(2R)-ブタン-2-イル]-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド
【化２１】
2014507408.tif 000023
【００３０】
21) N-(3-クロロフェニル)-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド
【化２２】
2014507408.tif 000024
【００３１】
22) N-(3-クロロフェニル)-3-[3-[[4-(ジメチルアミノメチル)アニリノ]-フェニルメチリデン]-2-オキソ-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド
【化２３】
2014507408.tif 000025
【００３２】
23) 3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]-N-フェニルプロプ-2-インアミド
【化２４】
2014507408.tif 000026
【００３３】
24) 3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]-N-ペンタン-3-イルプロプ-2-インアミド
【化２５】
2014507408.tif 000027
【００３４】
及び
25) N-(3-フルオロフェニル)-3-[2-オキソ-3-[フェニル-[4-(ピロリジン-1-イルメチル)アニリノ]メチリデン]-1H-インドール-6-イル]プロプ-2-インアミド
【化２６】
2014507408.tif 000028
【００３５】
本発明のAKI/MEK インヒビターの二重抑制活性は、例えば、文献で知られており、もしくは本明細書に記載された方法により、又はそれらと同様にして当業者に通例の方法に従って測定し得る。オーロラキナーゼ抑制活性を測定するためのアッセイだけでなく、化合物のMEK 抑制活性を測定するためのアッセイが文献から知られており、商業上入手でき、又は実施例の節に本明細書に記載される。
本明細書に記述されたように、本発明の範囲内の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターはオーロラキナーゼ及びMEK のキナーゼの両方について抑制活性を示す化合物に関する。このような抑制活性はIC50値により夫々特徴づけられる。
本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターは好ましくは下記の実施例に示されるアッセイで測定して、200 nM以下、好ましくは40 nM 以下、更に好ましくは10 nM 以下（例えば、約1 nMから約10 nM まで）のオーロラキナーゼ（特にオーロラＢキナーゼ）の抑制についてのIC50値を有することが好ましい。
本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターは好ましくは下記の実施例に示されるアッセイで測定して、1000nM以下、好ましくは200 nM以下、更に好ましくは100 nM以下、更に好ましくは50 nM 以下（例えば、30 nM 以下）のMEK キナーゼ（MEK1及び／又はMEK2）の抑制についてのIC50値を有することが好ましい。
本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターは、例えば、好ましくは下記の実施例に示されるアッセイで測定して、200 nM以下、好ましくは40 nM 以下、更に好ましくは10 nM 以下（例えば、約1 nMから約10 nM まで）のオーロラＢキナーゼの抑制についてのIC50値、及び1000 nM以下、好ましくは200 nM以下、更に好ましくは100 nM 以下、更に好ましくは50 nM 以下（例えば、約1 nMから約50 nM まで、例えば、約1 nMから約25 nM までのMEK1 IC50）のMEK キナーゼ（MEK1及び／又はMEK2）の抑制についてのIC50値を有し得る。
例示の例について、先に示された群Ａの二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター１〜６は実施例の節に示されるアッセイで測定して、約2 nMから約7 nMまでのオーロラキナーゼＢの抑制についてのIC50値及び約3 nMから約25 nM までのMEK1の抑制についてのIC50値を有する（下記の表を参照のこと）。
【００３６】
【表２】
2014507408.tif 000029
【００３７】
この二重活性はまた夫々のバイオマーカーアッセイ、例えば、ホスホ-ヒストンH3アッセイ（例えば、H460, Cellomics）（この場合、オーロラＢキナーゼ抑制についてのマーカーとしてのp-ヒストン H3 が抑制される）、及びホスホ-ERK アッセイ（例えば、SK-MEL 28、FACE ELISA） （この場合、MEK 抑制についてのマーカーとしてのp-ERK が抑制される）で確かめられる。
例えば、本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターは、好ましくは下記の実施例に示されるアッセイで測定して、1000 nM 以下、好ましくは200 nM以下、更に好ましくは100 nM以下（例えば、約10 nM から約50 nM まで）のホスホ-ヒストンH3 の還元についてのEC50値、及び1000 nM 以下、好ましくは200 nM以下、更に好ましくは100 nM以下（例えば、約30 nM から約70 nM まで）のホスホ-ERKの還元についてのEC50値を有し得る。
本発明の群Ａの或る種の例示の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターは、実施例の節に示されるアッセイで測定して、3 nMのオーロラキナーゼＢの抑制についてのIC50値及び夫々25 nM 及び4 nMのMEK1及びMEK2の抑制についてのIC50値を有し、また44 nM のホスホ-ヒストンH3の還元についてのEC50値（同調H460 NSCLC 細胞、１時間の処理、分子リン酸化アッセイ、Cellomics） 及び59 nM のホスホ-ERKの還元についてのEC50 (SK-MEL 28 メラノーマ細胞、FACE ELISA) を有する。
本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターによるMAP-キナーゼシグナリング経路の直接の抑制は更にA375メラノーマ細胞及びBRO メラノーマ細胞で確かめられる。
オーロラＢキナーゼについての抑制活性は更に多倍数体表現型により確かめられる。
本発明の群Ａの或る種の例示の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターは広範囲の濃度にわたってのDNA 含量分析(Cellomics ArrayScan) により測定されるH460細胞中の多倍数体を誘導する。7nM で、細胞の81% が化合物への42時間の暴露後に多倍数体である。
その細胞効力が10％のウシ胎児血清の存在下で行なわれるアラマー・ブルーをベースとする増殖アッセイを含む種々のアッセイで測定し得る。例えば、本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターは細胞をベースとする増殖アッセイで1000 nM 以下、好ましくは200 nM以下、更に好ましくは100 nM以下、更に好ましくは50 nM 以下（例えば、約5 nMから約20 nM まで）のEC50値を有し得る。本発明の群Ａの或る種の例示の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターは試験された５種の腫瘍細胞系の増殖を抑制する（下記の表を参照のこと）。
【００３８】
【表３】
2014507408.tif 000030
【００３９】
本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに感受性である細胞系の多くがRAS 遺伝子又はRAF 遺伝子中で突然変異される。
本発明の化合物の二重経路抑制はMEK 及びオーロラキナーゼの二重経路抑制が有益であるこのような症状の治療及び／又は予防における使用にそれらを特に有益にする。
例えば、この二重経路抑制はRAS （例えば、KRAS及び／又はNRAS）及び／又はBRAF突然変異脱調節についての証拠を含む指示を含む、種々の指示において抗癌治療に有益であると予想される。
こうして、一実施態様において、本発明は本明細書に示される一種以上のこれらの突然変異を有する癌又は腫瘍の治療における本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターの使用に関する。
別の実施態様において、MEK-シグナリング経路にゆだねる癌のサブセット、特にBRAF又はRAS （例えば、KRAS及び／又はNRAS）遺伝子中に一つ以上の突然変異を有する癌のこのようなサブセットの治療における本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターの使用に関する。
【００４０】
別の実施態様において、本発明はMEK-シグナリング経路に（癌のBRAF又はRAS 突然変異状態にもかかわらず）に依存しない癌のサブセットの治療における本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターの使用に関する。
別の実施態様において、本発明は選択的MEK （MEK1、MEK2又はMEK1/2）インヒビターによる治療に非感受性である癌のサブセットの治療における本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターの使用に関する。
別の実施態様において、本発明は選択的オーロラキナーゼ（特にオーロラＢキナーゼ）インヒビターによる治療に非感受性である癌のサブセットの治療における本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターの使用に関する。
別の実施態様において、本発明は選択的MEK （MEK1、MEK2又はMEK1/2）インヒビターによる治療に非感受性であるMEK-シグナリング経路にゆだねる癌のサブセット（特にBRAF又はRAS （例えば、KRAS及び／又はNRAS）遺伝子中に一つ以上の突然変異を有する癌のこのようなサブセット）の治療における本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターの使用に関する。
更に、本発明は治療される腫瘍、特にMEK-シグナリング経路にゆだねるこれらの腫瘍、特にBRAF又はRAS（例えば、KRAS及び／又はNRAS）遺伝子中に一つ以上の突然変異を含む腫瘍、例えば、本明細書に示された一つ以上のこれらの突然変異を有するこのような腫瘍中の細胞死滅及び／又は腫瘍退縮を生じる際の使用のための本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
【００４１】
更に、本発明は治療される腫瘍、特にMEK-シグナリング経路にゆだねるこれらの腫瘍、特にBRAF又はRAS（例えば、KRAS及び／又はNRAS）遺伝子中に一つ以上の突然変異を含む腫瘍中のアポプトーシス、老化及び／又は多倍数体を生じる際の使用のための本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
更に、本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターはまた癌中の細胞サイクル（有糸分裂チェックポイント）及びシグナル伝達の二重インヒビターとして有益である。
本発明はまたMEK-シグナリング経路にゆだねられる癌の治療における使用のための本明細書に記載された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
更に、本発明はMEK （MEK1 及び／又はMEK2）が活性化される癌（腫瘍）の治療における使用のための本明細書に記載された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
更に、本発明はBRAF又はRAS （例えば、KRAS及び／又はNRAS）が突然変異される癌（腫瘍）の治療における使用のための本明細書に記載された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
更に、本発明はBRAFが突然変異される癌（腫瘍）の治療における使用のための本明細書に記載された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
更に、本発明はKRASが突然変異される癌（腫瘍）の治療における使用のための本明細書に記載された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
更に、本発明はNRASが突然変異される癌（腫瘍）の治療における使用のための本明細書に記載された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
更に、本発明は下記の突然変異の一つ以上を含む癌（腫瘍）の治療における使用のための本明細書に記載された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する：
コドン464-469 及び／又は、特に、コドンV600中のBARF突然変異、例えば、V600E 、V600G 、V600A 及びV600K から選ばれた突然変異、もしくはV600E 、V600D 、V600K 及びV600R から選ばれた突然変異、又はV600E 、V600D 及びV600K から選ばれた突然変異、或いはV600E 、V600D 、V600M 、V600G 、V600A 、V600R 及びV600K から選ばれた突然変異;  
コドン12 (エキソン1)、コドン13 (エキソン1)及び／又はコドン61 (エキソン2)、特にコドン12及び／又は13中のKRAS突然変異、例えば、Gly12Asp、Gly12Val、Gly13Asp、Gly12Cys、Gly12Ser、Gly12Ala及びGly12Argから選ばれた突然変異、又は12D 、12V 、12C 、12A 、12S 、12R 、12F 、13D 、13C 、13R 、13S 、13A 、13V 、13I 、61H 、61L 、61R 、61K 、61E 及び61P から選ばれた突然変異;  
コドン12、13及び／又は61中のNRAS突然変異、例えば、p.G12D、p.G12S、p.G12C、p.G12V、p.G12A、p.G13D、p.G13R、p.G13C、p.G13A、p.Q61R、p.Q61K、p.Q61L、p.Q61H及びp.Q61Pから選ばれた突然変異。 
【００４２】
更に、本発明は下記の突然変異の一つ以上を含む癌（腫瘍）の治療における使用のための本明細書に記載された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する：
コドン464-469 及び／又は、特に、コドンV600中のBARF突然変異、例えば、V600E 、V600D 、V600G 、V600A 、V600R 、V600M 及びV600K から選ばれた突然変異。
更に、本発明は下記の突然変異の一つ以上を含む癌（腫瘍）の治療における使用のための本明細書に記載された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する：
コドン12、13及び／又は61、特にコドン12及び／又は13中のKRAS突然変異、例えば、Gly12Asp、Gly12Val、Gly13Asp、Gly12Cys、Gly12Ser、Gly12Ala及びGly12Argから選ばれた突然変異; 又は12D 、12V 、12C 、12A 、12S 、12R 、12F 、13D 、13C 、13R 、13S 、13A 、13V 、13I 、61H 、61L 、61R 、61K 、61E 及び61P から選ばれた突然変異。
更に、本発明は下記の突然変異の一つ以上を含む癌（腫瘍）の治療における使用のための本明細書に記載された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する：
コドン12、13及び／又は61中のNRAS突然変異、例えば、p.G12D、p.G12S、p.G12C、p.G12V、p.G12A、p.G13D、p.G13R、p.G13C、p.G13A、p.Q61R、p.Q61K、p.Q61L、p.Q61H及びp.Q61Pから選ばれた突然変異。 
本明細書に記載された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターはBRAF及び／又はRAS 突然変異癌で活性である。これは広いスペクトルの指示及び亜集団を与える。本発明の化合物についての特別な癌指示として、下記のものが挙げられる:
・メラノーマ: 高BRAF（約43 %） 及びNRAS（約20%） 突然変異状態、
・CRC: 実質的な突然変異率 (37 % KRAS、11% BRAF) 、
・膵臓: KRAS突然変異状態、約70%、高い満たされない要望、
・NSCLC: 中等度のKRAS突然変異率 (18%)。
【００４３】
更に、本発明は癌がMEK シグナリング経路にゆだねられる患者、例えば、癌がBRAF又はRAS （例えば、KRAS及び／又はNRAS）中に一つ以上の突然変異、例えば、本明細書に記載された一つ以上のこれらの突然変異を有する患者の癌（特に先に、又は後に記載されるこれらの癌から選ばれた癌）の治療及び／又は予防における使用のための本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
更に、本発明は癌細胞が異型接合又は同型接合BRAF又はRAS （例えば、KRAS及び／又はNRAS）突然変異遺伝子型により特徴づけられる患者の癌（例えば、CRC 、PAC 、NSCLC 又はメラノーマ）の治療及び／又は予防における使用のための本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
更に、本発明は癌細胞が野生型遺伝子型により特徴づけられる癌（例えば、CRC 、PAC 、NSCLC 又はメラノーマ）の治療及び／又は予防における使用のための本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
実施態様において、本発明は、例えば、KRAS中の一つ以上の突然変異（例えば、コドン12、13及び／又は61、特にコドン中に、例えば、Gly12Asp、Gly12Val、Gly13Asp、Gly12Cys、Gly12Ser、Gly12Ala及びGly12Argから選ばれた突然変異; 又は12D 、12V 、12C 、12A 、12S 、12R 、12F 、13D 、13C 、13R 、13S 、13A 、13V 、13I 、61H 、61L 、1R、61K 、61E 及び61P から選ばれた突然変異）を有する、結腸直腸癌(CRC) の治療及び／又は予防における使用のための本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
【００４４】
更なる実施態様において、本発明は、例えば、BRAF中の一つ以上の突然変異（例えば、コドン464 〜469 及び／又は、特にコドンV600中に、例えば、V600E 、V600D 、V600G 、V600A 、V600R 及びV600K から選ばれた突然変異、又はV600E 、V600D 、V600G 、V600A 、V600R 、V600M 及びV600K から選ばれた突然変異）を有する結腸直腸癌(CRC) の治療及び／又は予防における使用のための本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
更なる実施態様において、本発明は、例えば、野生型遺伝子型の結腸直腸癌(CRC) の治療及び／又は予防における使用のための本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
更なる実施態様において、本発明は、例えば、KRAS野生型遺伝子型の結腸直腸癌(CRC) の治療及び／又は予防における使用のための本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
更なる実施態様において、本発明は、例えば、KRAS中に一つ以上の突然変異（例えば、コドン12、13及び／又は61、特にコドン12及び／又は13中の、Gly12Asp、Gly12Val、Gly13Asp、Gly12Cys、Gly12Ser、Gly12Ala及びGly12Argから選ばれた突然変異; 又は12D 、12V 、12C 、12A 、12S 、12R 、12F 、13D 、13C 、13R 、13S 、13A 、13V 、13I 、61H 、61L 、61R 、61K 、61E 及び61P から選ばれた突然変異）を有する、膵臓癌(PAC) の治療及び／又は予防における使用のための本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
更なる実施態様において、本発明は、例えば、KRAS野生型遺伝子型の膵臓癌(PAC) の治療及び／又は予防における使用のための本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
更なる実施態様において、本発明は、例えば、KRAS突然変異状態にもかかわらず、膵臓癌(PAC) の治療及び／又は予防における使用のための本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
更なる実施態様において、本発明は、例えば、BRAF中の一つ以上の突然変異（例えば、コドン464 〜469 及び／又は、特に、コドンV600中の、例えば、V600E 、V600D 、V600G 、V600A 、V600R 及びV600K から選ばれた突然変異、又はV600E 、V600D 、V600G 、V600A 、V600R 、V600M 及びV600K から選ばれた突然変異）を有する、悪性メラノーマの治療及び／又は予防における使用のための本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
【００４５】
更なる実施態様において、本発明は、例えば、NRAS中に一つ以上の突然変異（例えば、コドン12、13及び／又は61中の、例えば、p.G12D、p.G12S、p.G12C、p.G12V、p.G12A、p.G13D、p.G13R、p.G13C、p.G13A、p.Q61R、p.Q61K、p.Q61L、p.Q61H及びp.Q61Pから選ばれた突然変異）を有する、悪性メラノーマの治療及び／又は予防における使用のための本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
更なる実施態様において、本発明は、例えば、野生型遺伝子型の悪性メラノーマの治療及び／又は予防における使用のための本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
更なる実施態様において、本発明は、例えば、BRAF野生型遺伝子型の悪性メラノーマの治療及び／又は予防における使用のための本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
更なる実施態様において、本発明は、例えば、KRAS中に一つ以上の突然変異（例えば、コドン12、13及び／又は61、特にコドン12及び／又は13中の、例えば、Gly12Asp、Gly12Val、Gly13Asp、Gly12Cys、Gly12Ser、Gly12Ala及びGly12Argから選ばれた突然変異; 又は12D 、12V 、12C 、12A 、12S 、12R 、12F 、13D 、13C 、13R 、13S 、13A 、13V 、13I 、61H 、61L 、61R 、61K 、61E 及び61P から選ばれた突然変異）を有する非小細胞肺癌(NSCLC) の治療及び／又は予防における使用のための本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
【００４６】
従って、本発明の治療を受け易い特別な癌タイプは
結腸直腸癌 (CRC)、特に一つ以上のKRAS突然変異を有するCRC 、
膵臓癌 (PAC)、特に一つ以上のKRAS突然変異を有するPAC 又はKRAS野生型を有するPAC 、
メラノーマ、特に一つ以上のBRAF突然変異を有するメラノーマ、及び
非小細胞肺癌 (NSCLC)、特に一つ以上のKRAS突然変異を有するNSCLC
から選ばれる。
特別な実施態様において、本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター、又はその組成物は、必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせて、例えば、通常の化学療法（例えば、オキサリプラチンをベースとする養生法及びイリノテカンをベースとする養生法）の少なくとも二つの選択の失敗後の第三選択治療として、結腸直腸癌（転移性CRC を含む、CRC ）を有する患者、特に腫瘍が一つ以上のKRAS突然変異を有するこれらのCRC 患者を治療するのに有益である。
別の実施態様において、本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター、又はその組成物は、必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせて、例えば、通常の化学療法（例えば、オキサリプラチンをベースとする養生法及びイリノテカンをベースとする養生法）及びEGFR標的療法（例えば、セツキシマブ又はパニツムマブをベースとする養生法）の失敗後の第三選択治療として、結腸直腸癌（転移性CRC を含む、CRC ）を有する患者、特に腫瘍がKRAS野生型を有するこれらのCRC 患者を治療するのに有益である。
特別な実施態様において、本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター、又はその組成物は、必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせて、例えば、第一選択治療として、膵臓癌（転移性、進行又は切除不能PAC を含む、PAC ）を有する患者、特に腫瘍が一つ以上のKRAS突然変異を有するこれらのPAC 患者を治療するのに有益である。
【００４７】
特別な実施態様において、本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター、又はその組成物は、必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせて、例えば、第一選択治療として、膵臓癌（転移性、進行又は切除不能PACC を含む、PAC ）を有する患者、特に腫瘍がKRAS野生型を有するこれらのPAC 患者を治療するのに有益である。
特別な実施態様において、本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター、又はその組成物は、必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせて、例えば、第一選択治療として、メラノーマ（転移性メラノーマを含む）を有する患者、特に腫瘍が一つ以上のBRAF突然変異を有するこれらのメラノーマ患者を治療するのに有益である。
別の実施態様において、本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター、又はその組成物は、必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせて、例えば、第一選択治療として、転移性メラノーマ（転移性メラノーマを含む）を有する患者、特に腫瘍がBRAF野生型を有するこれらのメラノーマ患者を治療するのに有益である。
別の実施態様において、本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター、又はその組成物は、必要により一種以上のその他の抗癌剤（必要によりMEK インヒビター、例えば、セルメチニブ又はGSK-1120212 とともに、又はこれを用いないで、Brafインヒビター、例えば、ベムラフェニブ又はダブラフェニブを含む）と組み合わせて、例えば、第一又は第二選択治療として、メラノーマ（転移性メタノーマを含む）を有する患者、特に腫瘍が一つ以上のBRAFKRAS突然変異を有するこれらのメラノーマ患者を治療するのに有益である。
別の実施態様において、本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター、又はその組成物は、必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせて、メラノーマ（転移性メラノーマを含む）を有する患者、特に腫瘍が一つ以上のNRAS突然変異を有するこれらのメラノーマ患者を治療するのに有益である。
更に、本発明は本明細書に記載された抗癌治療における使用のための本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
更に、本発明は本明細書に記載された癌疾患の治療及び／又は予防における使用のための医薬組成物を調製するための、必要により一種以上の本明細書に記載されたその他の抗癌剤と組み合わせての、本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターの使用に関する。
【００４８】
更に、本発明は必要により一種以上の本明細書に記載されたその他の抗癌剤と組み合わせての、本明細書に記載された癌疾患の治療及び／又は予防における使用のための本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
更に、本発明は治療有効量の本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター、及び、必要により、一種以上の本明細書に記載されたその他の抗癌剤を、これを必要とする患者に投与することを含む本明細書に記載された癌疾患の治療及び／又は予防方法に関する。
更に、本発明は本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターによる治療についての哺乳類（特にヒト）腫瘍細胞（特に先に、又は以下に記載されるこれらの腫瘍、例えば、メラノーマ、CRC 、膵臓癌又はNSCLC 腫瘍細胞から選ばれた腫瘍の細胞）の応答性を測定するための方法に関するものであり、前記方法は前記腫瘍細胞中のBRAF又はRAS （例えば、KRAS及び／又はNRAS）遺伝子中の少なくとも一つの突然変異の存在を測定することを含み、前記突然変異は細胞がおそらく応答するか、又はその治療（例えば、細胞死滅を受け、又は細胞増殖を抑制するため）に応答性であるかを示す。
更に、本発明はこれを要する患者の癌（特に先に、又は以下に記載されるこれらの癌、例えば、メラノーマ、CRC 、膵臓癌又はNSCLC から選ばれた癌）を治療するための本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターの効力を評価するための方法に関するものであり、前記方法は
−患者の癌がMEK シグナリング経路にゆだねられること又はMEK が患者の癌中で活性化されることを試験し、
特に患者由来腫瘍組織サンプル中のBRAF又はRAS （例えば、KRAS及び／又はNRAS）遺伝子中の少なくとも一つの突然変異（例えば、本明細書に記載されたこれらの突然変異の一つ以上）の存在を測定することを含み、前記存在は二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターによる治療が（例えば、腫瘍細胞死滅及び／又は腫瘍退縮を生じるのに）有効であることを示す。
【００４９】
更に、本発明は癌（特に先に、又は以下に記載されるこれらの癌、例えば、メラノーマ、CRC 、膵臓癌又はNSCLC から選ばれた癌）と診断された個体における本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター（必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせての）による治療の薬理学的有効性の増大された可能性を測定するための方法に関するものであり、前記方法は
−個体からの癌（腫瘍）サンプルからの核酸サンプルをBRAF又はRAS （例えば、KRAS又はNRAS）突然変異試験又はPCR にかけることを含み、BRAF又はRAS （例えば、KRAS及び／又はNRAS）遺伝子中の少なくとも一つの突然変異、例えば、本明細書に記載されたこれらの突然変異の一つ以上の存在がその治療の薬理学的有効性の増大された可能性を示す。
更に、本発明はこれを要する患者の癌（特に先に、又は以下に記載されるこれらの癌、例えば、メラノーマ、CRC 、膵臓癌又はNSCLC から選ばれた癌）の治療の方法における使用のための本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関するものであり、前記方法は
−患者の癌がMEK シグナリング経路にゆだねられるか、又はMEK が患者の癌中で活性化されるかを試験し、特に患者の腫瘍中のBRAF又はRAS （例えば、KRAS及び／又はNRAS）遺伝子中の一つ以上の突然変異（例えば、本明細書に記載されたこれらの突然変異の一つ以上）について試験し、そして
−必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせて、二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターを患者に投与することを含む。
更に、本発明は本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター（必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせて）を含む癌治療薬についての適格性について患者を同定する方法に関するものであり、前記方法は
−患者、特に、例えば、メラノーマ、CRC 、膵臓癌及びNSCLC から選ばれた癌を有する患者から腫瘍組織サンプルを得、
−患者の癌がMEK シグナリング経路にゆだねられるか、又はMEK が患者の癌中で活性化されるかを試験し、特に患者の腫瘍組織サンプル中のBRAF又はRAS （例えば、KRAS及び／又はNRAS）遺伝子中の少なくとも一つの突然変異（例えば、本明細書に記載されたこれらの突然変異の一つ以上）の存在を測定し、
−患者の癌がMEK シグナリング経路にゆだねられ、又はMEK が患者の癌中で活性化されると測定される場合、
特に患者の腫瘍組織サンプルがBRAF又はRAS （例えば、KRAS及び／又はNRAS）遺伝子中の少なくとも一つの突然変異（例えば、本明細書に記載されたこれらの突然変異の一つ以上）を有すると測定される場合に、患者を癌治療を受けるのに適格であると同定することを含む。
【００５０】
更に、本発明は本明細書に記載された癌患者を同定し、有効量の本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター（必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせて）を前記患者に投与することを含む癌（例えば、メラノーマ、CRC 、膵臓癌又はNSCLC ）の治療方法に関する。
更に、本発明は癌（特に先に、又は以下に記載されるこれらの癌、例えば、メラノーマ、CRC 、膵臓癌又はNSCLC から選ばれた癌）を有する哺乳類（特にヒト）患者の治療方法に関するものであり、前記方法は
−前記患者からの癌サンプルから核酸サンプルを得、
−患者の癌がMEK シグナリング経路にゆだねられるか、又はMEK が患者の癌中で活性化されるかを試験し、
特にサンプルをBRAF又はRAS （例えば、KRAS及び／又はNRAS）突然変異試験又はPCR にかけ、BRAF又はRAS （例えば、KRAS及び／又はNRAS）遺伝子中の少なくとも一つの突然変異（例えば、本明細書に記載されたこれらの突然変異の一つ以上）の存在を同定し、そして
−有効量の本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター（必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせて）を癌がMEK シグナリング経路にゆだねられ、又はMEK が患者の癌中で活性化されると測定される患者、
特にサンプル中にBRAF又はRAS （例えば、KRAS及び／又はNRAS）遺伝子中の少なくとも一つの突然変異（例えば、本明細書に記載されたこれらの突然変異の一つ以上）の存在が同定される患者に投与することを含む。
【００５１】
更に、本発明は
a)癌（例えば、進行充実性腫瘍）、例えば、結腸直腸癌 (CRC)、膵臓癌 (PAC)、メラノーマ又は非小細胞肺癌 (NSCLC)の治療を要する患者（特にヒト患者）を同定し、
b)患者の癌がMEK シグナリング経路にゆだねられ、又は患者の癌中でMAPK経路が高活性化されることを測定し、
特に患者の癌がBRAF又はRAS （例えば、KRAS及び／又はNRAS）遺伝子中の少なくとも一つの突然変異（例えば、本明細書に記載されたこれらの突然変異の一つ以上）を有することを測定し、
c)治療有効量の本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター（必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせて）を患者に投与することを含む治療方法に関する。
更に、本発明は
a)結腸直腸癌（CRC 、例えば、転移性CRC ）の治療を要する患者（特にヒト患者）を同定し、
b)患者の腫瘍がKRAS遺伝子中に一つ以上の突然変異（例えば、本明細書に記載されたこれらの突然変異の一つ以上）を有することを測定し、
c)治療有効量の本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター（必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせて）を患者に投与することを含む治療方法に関する。
【００５２】
更に、本発明は
a)結腸直腸癌（CRC 、例えば、転移性CRC ）の治療を要する患者（特にヒト患者）を同定し、
b)患者の腫瘍がKRAS野生型遺伝子を有することを測定し、
c)治療有効量の本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター（必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせて）を患者に投与することを含む治療方法に関する。
更に、本発明は
a)膵臓癌 (PAC 、例えば、転移性、切除不能又は局所進行PAC ）の治療を要する患者（特にヒト患者）を同定し、
b)患者の腫瘍がKRAS遺伝子中に一つ以上の突然変異（例えば、本明細書に記載されたこれらの突然変異の一つ以上）を有することを測定し、
c)治療有効量の本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター（必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせて）を患者に投与することを含む治療方法に関する。
更に、本発明は
a)膵臓癌 (PAC 、例えば、転移性、切除不能又は局所進行PAC )の治療を要する患者（特にヒト患者）を同定し、
b)患者の腫瘍がKRAS野生型遺伝子を有することを測定し、
c)治療有効量の本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター（必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせて）を患者に投与することを含む治療方法に関する。
【００５３】
更に、本発明は
a)メラノーマ（例えば、転移性メラノーマ）の治療を要する患者（特にヒト患者）を同定し、
b)患者の腫瘍がBRAF遺伝子中に一つ以上の突然変異（例えば、本明細書に記載されたこれらの突然変異の一つ以上）を有することを測定し、
c)治療有効量の本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター（必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせて）を患者に投与することを含む治療方法に関する。
更に、本発明は
a)メラノーマ（例えば、転移性メラノーマ）の治療を要する患者（特にヒト患者）を同定し、
b)患者の腫瘍がBRAF野生型遺伝子を有することを測定し、
c)治療有効量の本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター（必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせて）を患者に投与することを含む治療方法に関する。
或る実施態様において、本発明の治療内で、本発明の結腸直腸癌 (CRC)を有する患者の特別な亜集団は通常の化学療法（例えば、オキサリプラチンをベースとする養生法及びイリノテカンをベースとする養生法）の少なくとも二つの選択に失敗したこのような（転移性）CRC 患者を表す。
本発明の更なる実施態様において、本発明の結腸直腸癌 (CRC)を有する患者の更なる特別な亜集団はCRC 腫瘍がKRAS遺伝子中の突然変異（例えば、本明細書に記載されたこれらの突然変異の一つ以上）を有し、通常の化学療法（例えば、オキサリプラチンをベースとする養生法及びイリノテカンをベースとする養生法）の少なくとも二つの選択に失敗したこのような（転移性）CRC 患者を表す。
【００５４】
その他の或る実施態様において、本発明の治療内で、本発明の結腸直腸癌 (CRC)を有する患者の特別な亜集団は通常の化学療法（例えば、オキサリプラチンをベースとする養生法又はイリノテカンをベースとする養生法）及びEGFR標的療法（例えば、セツキシマブ又はパニツムマブをベースとする養生法）に失敗したこのような（転移性）CRC 患者を表す。
本発明の更なる実施態様において、本発明の結腸直腸癌 (CRC)を有する患者の更なる特別な亜集団はCRC 腫瘍がKRAS野生型遺伝子を有し、通常の化学療法（例えば、オキサリプラチンをベースとする養生法又はイリノテカンをベースとする養生法）及びEGFR標的療法（例えば、セツキシマブ又はパニツムマブをベースとする養生法）に失敗したこのような（転移性）CRC 患者を表す。
本発明の別の実施態様において、本発明の結腸直腸癌 (CRC)を有する患者の亜集団はEGFRインヒビター（例えば、坑EGFR抗体、例えば、セツキシマブ又はパニツムマブ）による治療に応答することができなかったこのような（転移性）CRC 患者を表す。
本発明の別の実施態様において、本発明の結腸直腸癌 (CRC)を有する患者の亜集団はCRC 腫瘍がKRAS野生型遺伝子を有し、EGFRインヒビター（例えば、坑EGFR抗体、例えば、セツキシマブ又はパニツムマブ）による治療に応答することができなかったこのような（転移性）CRC 患者を表す。
【００５５】
本発明の別の実施態様において、本発明のメラノーマを有する患者の亜集団はBRafインヒビター（例えば、ベムラフェニブ）による治療に応答することができなかったこのような（転移性、進行又は後期段階）メラノーマ患者を表す。
本発明の別の実施態様において、本発明のメラノーマを有する患者の亜集団はメラノーマ腫瘍がBRAF遺伝子中の突然変異（例えば、BRAF V600 中の、例えば、V600Eを含む、本明細書に記載されたこれらの突然変異の一つ以上）を有し、BRaf インヒビター（例えば、ベムラフェニブ又はダブラフェニブ）に応答することができなかったこのような（転移性、進行又は後期段階）メラノーマ患者を表す。
更に、本発明は必要によりその他の抗癌剤と組み合わせて、本明細書に記載された抗癌治療における使用のため、例えば、先に、また以下に記載される癌患者の治療方法における使用のための医薬組成物を調製するための本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターの使用に関する。
更に、本発明は必要によりその他の抗癌剤と組み合わせて、本明細書に記載された抗癌治療における使用のため、例えば、先に、また以下に記載される癌患者の治療方法における使用のための本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターに関する。
本発明のBARF中の突然変異の例として、コドン464-469 及び／又は、特に、コドンV600中の突然変異、例えば、V600E 、V600G 、V600A 及びV600K から選ばれた突然変異、もしくはV600E 、V600D 、V600K 及びV600R から選ばれた突然変異、又はV600E 、V600D 及びV600K から選ばれた突然変異、或いはV600E 、V600D 、V600M 、V600G 、V600A 、V600R 及びV600K から選ばれた突然変異が挙げられるが、これらに限定されない。
或る実施態様において、本発明のBARF中の突然変異の特別な例として、V600中の突然変異、特にV600E 突然変異が挙げられる。
本発明のKRAS中の突然変異の例として、コドン12、13及び／又は61、特にコドン12及び／又は13中の突然変異、例えば、Gly12Asp、Gly12Val、Gly13Asp、Gly12Cys、Gly12Ser、Gly12Ala及びGly12Argから選ばれた突然変異、又は12D 、12V 、12C 、12A 、12S 、12R 、12F 、13D 、13C 、13R 、13S 、13A 、13V 、13I 、61H 、61L 、61R 、61K 、61E 及び61P から選ばれた突然変異が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５６】
或る実施態様において、本発明のKRAS中の突然変異の特別な例として、コドン12又は13中の突然変異、特に12D 、12V 、12C 、12S 、12A 、12R 及び13D から選ばれた突然変異が挙げられる。
本発明のNRAS中の突然変異の例として、コドン12、13及び／又は61中の突然変異、例えば、p.G12D、p.G12S、p.G12C、p.G12V、p.G12A、p.G13D、p.G13R、p.G13C、p.G13A、p.Q61R、p.Q61K、p.Q61L、p.Q61H及びp.Q61Pから選ばれた突然変異が挙げられるが、これらに限定されない。
BRAF又はRAS 中の突然変異についての試験方法は当業者に知られている。例えば、臨床サンプルにおける突然変異検出に普通に使用される方法は、核酸配列決定（例えば、ジデオキシ又はピロ配列決定）、一本鎖コンフォーメーショナル多形分析、融解曲線分析、実時間PCR （例えば、標的アンプリコンに相補性の蛍光プローブを使用する融解曲線分析（これはプローブを標的から解離するのに必要とされる融解温度の差により遺伝子変異体を区別するのに使用し得る）とともに）又は対立遺伝子特異性PCR (例えば、突然変異体対野生型配列の特異的増幅を可能にするオリゴヌクレオチドプライマーを使用して、例えば、ARMSTM技術を使用して突然変異体を野生型配列から区別するのに使用される種々の様式とともに)を含んでもよく、又はこれらをベースとしてもよい。増幅産物はゲル電気泳動から実時間PCR までの範囲の種々の方法により、例えば、ScorpionTM 技術を使用して検出されてもよい。
例えば、BRAF、KRAS又はNRAS癌遺伝子中の突然変異を検出するための診断キットはピロ配列決定、Rotor遺伝子QTM(Qiagen)又はCobasTM (Roche) 技術をベースとしてもよい。
BRAF癌遺伝子中の突然変異を検出するための市販の診断キットは、例えば、特に突然変異V600E 及びV600Kを検出するための、TheraScreenTM B-Raf突然変異検出キット、もしくは特に突然変異V600E 、V600A 及びV600G を検出するための、MutectorTM B-Raf V600 突然変異検出キット、又は、例えば、コドン600 及びコドン464-469 の配列決定のための、PyroMarkTM B-Rafキットである。
KRAS癌遺伝子中の突然変異を検出するための市販の診断キットは、例えば、突然変異12Ala 、12Asp 、12Arg 、12Cys 、12Ser 、12Val 及び13Asp を検出するための、TheraScreenTM K-Ras 突然変異検出キットである。
【００５７】
BRAF癌遺伝子中の突然変異を検出するための診断キットは、例えば、特にV600E 、V600D 及びV600K から選ばれた突然変異を検出するための別型もしくはV600E 、V600D 、V600K 及びV600R から選ばれた突然変異を検出するための別型のTheraScreenTM BRAF PCRキット（Qiagen製）、又は、例えば、V600E 、V600A V600M 及びV600G から選ばれた突然変異を検出するためのTheraScreenTM BRAF Pyro キット（Qiagen製）である。
KRAS癌遺伝子中の突然変異を検出するための診断キットは、例えば、TheraScreenTM KRAS PCRキット（Qiagen製）（例えば、G12A、G12D、G12S、G12V、G12R、G12C及びG13Dから選ばれた突然変異を検出するため）、もしくはPyroMarkTM KRAS アッセイ、又は、例えば、G12A、G12D、G12S、G12V、G12R、G12C、G13D、Q61H、Q61E及びQ61Lから選ばれた突然変異を検出するためのTheraScreenTM KRAS Pyro キット（Qiagen製）である。
NRAS癌遺伝子中の突然変異を検出するための診断キットは、例えば、TheraScreenTM NRAS Pyro 又はqPCRキット（Qiagen製）である。
KRAS遺伝子中の突然変異を同定するための別の診断キットは、例えば、cobasTM KRAS突然変異試験（Roche 製）であり、これは実時間PCR 試験であり、突然変異12D 、12V 、12C 、12A 、12S 、12R 、12F 、13D 、13C 、13R 、13S 、13A 、13V 、13I 、61H 、61L,、61R 、61K 、61E 及び61P をカバーする、KRAS遺伝子のコドン12、13及び61中の突然変異の広いスペクトルを検出するのに使用し得る。
BRAF遺伝子中の突然変異を同定するための別の診断キットは、例えば、cobasTM BRAF突然変異試験（Roche 製）であり、これは実時間PCR 試験である。
突然変異試験のために、核酸を含む典型的な癌（腫瘍）サンプルが使用され、これは組織、バイオプシープローブ、細胞溶解産物、細胞培養物、細胞系、器官、細胞器官、生物学的液体、血液サンプル、尿サンプル、皮膚サンプル等からなる群から選ばれてもよい。特別な実施態様において、核酸を含む癌（腫瘍）サンプルがバイオプシープローブである。
【００５８】
更に、本発明はこれを要する癌患者、例えば、本明細書に記載された癌を有する患者のための本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターについての随伴診断としてのこのようなBRAF又はRAS 突然変異キットの使用を提供する。
更に、本発明は、癌（例えば、本明細書に記載されたこれらの癌）と診断された哺乳類、好ましくはヒト患者における、必要により一種以上のその他の抗癌剤と組み合わせての、本明細書に特定された二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターによる治療の有効性の増大された可能性を測定するのに有益なこのようなキットを提供し、前記キットはBRAF又はRAS （例えば、KRAS及び／又はNRAS）癌遺伝子中の突然変異、特に本明細書に記載された一つ以上のこのような突然変異を検出するための手段を含むことが好ましい。
本明細書に使用される二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターという用語はまたあらゆる互変異性体、医薬上許されるN-オキサイド又はこれらの塩、これらの水和物及び溶媒和物（夫々の結晶性形態を含む）を含む。
本発明の式(1) の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター化合物（例えば、群Ａの二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター化合物１〜25を含む）はWO 2010/012747に記載されたように、又はそれと同様に、例えば、下記の反応スキームに示されるように合成でき、スキーム中、R1及びＲは先に定義された意味を有し（例えば、化合物１〜25中の意味を含む）、かつＸは好適な脱離基、例えば、臭素又はヨウ素を表す。インドリノン中間体化合物は知られており、又はそれらは合成の通常の方法を使用して、又はWO 2007/122219もしくはWO 2008/152013に記載された方法と同様に、或いは下記の反応スキーム中の例の方法により示されるように合成し得る。プロピン酸アミドは知られており、又は通常の方法に従って調製し得る。
スキーム:
【００５９】
【化２７】
2014507408.tif 000031
【００６０】
更に、出発化合物又は中間体化合物に幾つかの反応性中心がある場合、反応が特別に所望の反応中心で進行することを可能にするために一つ以上の反応性中心を保護基により一時的にブロックすることが必要であり得ることが当業者に知られている。所望の反応が生じた後、保護基が好適な様式で通常除去される。多数の判明された保護基の使用についての詳細な記載が、例えば、"Protective Groups in Organic Sインthesis" T. Greene及びP. Wuts 著(John Wiley & Sons, Inc. 2007, 第４編) 又は"Protecting Groups (Thieme Foundations Organic Chemistry Series N Group" P. Kocienski著 (Thieme Medical Publishers, 2004)に見られる。
診断された疾患に応じて、改善された治療成果は本発明の二重オーロラキナーゼ/MEK インヒビターが夫々の疾患に通例の一種以上のその他の活性物質、例えば、その他の抗癌剤（例えば、細胞増殖抑制性又は細胞傷害性物質、細胞増殖インヒビター、坑血管形成物質、ステロイド或いは抗体）、特に本明細書に挙げられたこれらの（標的又は非標的）抗癌剤の中から選ばれた一種以上の活性物質と組み合わされる場合に得られるかもしれない。このような組み合わされた治療は物質の自由な組み合わせとして、又は一定の組み合わせ（パーツのキットを含む）の形態で施されてもよい。これに必要とされる組み合わせ成分の医薬製剤は医薬組成物として商業上得られてもよく、又は通常の方法を使用して当業者により製剤化されてもよい。
【００６１】
本発明内で、本発明の組み合わせ、組成物、キット又は組み合わされた使用は活性成分の同時、逐次又は別々の投与を考え得ることが理解されるべきである。活性成分は依存して、又は独立に製剤化されて投与でき、例えば、活性成分は同じ医薬組成物／投薬形態の一部として、又は別々の医薬組成物／投薬形態中で投与されてもよいことが認められるであろう。
この状況で、本発明の意味内の“組み合わせ”又は“組み合わされた”は固定形態及び非固定（例えば、自由）形態（キットを含む）及びこれらの使用、例えば、成分の同時、逐次、連続、交互又は別々の使用を含むが、これらに限定されない。
活性成分の投与は活性成分を同時投与することにより、例えば、一つの単一の、又は二つの別々の製剤又は投薬形態中で同時にそれらを投与することにより起こってもよい。また、活性成分の投与は活性成分を逐次、連続又は交互に、例えば、二つの別々の製剤又は投薬形態中で投与することにより起こってもよい。
【００６２】
本明細書に記載された治療薬中で本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターと組み合わせて投与し得るその他の抗癌剤は下記の化学治療薬から選ばれてもよい:
(i) アルキル化剤又はカルバミル化剤、例えば、ナイトロジェンマスタード（ビス-(2-クロロエチル) 基を有する） 、例えば、シクロホスファミド (CTX 、例えば、サイトキサン、シクロスチン、エンドキサン) 、クロラムブシル(CHL 、例えば、ロイケラン) 、イフォスファミド (例えば、ホロキサン) 又はメルファラン (例えば、アルケラン) 、アルキルスルホネート、例えば、ブスルファン (例えば、ミレラン) 、マンノスルファン又はトレオスルファン、ニトロソ尿素、例えば、ストレプトゾシン (例えば、ザノサール) 又はクロロエチルニトロソ尿素CENU、例えば、カルメスチンBCNUもしくはロムスチンCCNU又はフォテムスチン、ヒドラジン、例えば、プロカルバジン、トリアゼン／イミダゾテトラジン、例えば、ダカルバジン(DTIC)又はテモゾロミド (例えば、テモダール) 、又はエチレンイミン／アジリジン／メチルメラミン、例えば、マイトマイシンＣ、チオテパ又はアルトレタミン等、
(ii)白金誘導体、例えば、シスプラチン (CisP、例えば、プラチネックス、プラチノール) 、オキサリプラチン (例えば、エロキサチン) 、サトラプラチン又はカルボプラチン (例えば、カプボプラット) 等、
(iii) 坑代謝産物、例えば、葉酸アンタゴニスト、例えば、メトトレキセート (MTX 、例えば、ファルミトレキサット) 、ラルチトレキセド (例えば、トムデックス) 、エダトレキセート又はペメトレキセド (例えば、アリムタ) 、プリンアンタゴニスト、例えば、6-メルカプトプリン (6MP 、例えば、Puri-Nethol) 、6-チオグアニン、ペントスタチン、クラドリビン、クロファラビン又はフルダラビン (例えば、フルダラ) 、或いはピリミジンアンタゴニスト、例えば、シタラビン (Ara-C 、例えば、アレキサン、サイトサル) 、フロクスウリジン、5-フルオロウラシル (5-FU) （単独、又はロイコボリンと組み合わせて）、テガフル、5-アザシチジン (例えば、ビダザ) 、カペシタビン (例えば、キセロダ) 、デシタビン (例えば、ダコゲン) 又はゲムシタビン (例えば、ゲムザール) 等、
(iv)坑腫瘍／細胞傷害性抗生物質、例えば、アントラサイクリン、例えば、ダウノルビシン（その塩酸塩を含む）（リポソーム製剤を含む）、ドキソルビシン（その塩酸塩及びクエン酸塩を含む）（例えば、アドリブラスチン、アドリアマイシン（ドキシル又はカエリクスのようなリポソーム製剤を含む））、エピルビシン又はイダルビシン（その塩酸塩（例えば、イダマイシン）を含む）、アントラセンジオン、例えば、ミトキサントロン（例えば、ノバントロン）、、又はストレプトミセス、例えば、ブレオマイシン、マイトマイシン又はアクチノマイシンD/ダクチノマイシン等、
【００６３】
(v) トポイソメラーゼ (I 及びIIを含む) インヒビター、例えば、カンプトテシン及びカンプトテシン類似体、例えば、イリノテカン (例えば、カンプトサール) （その塩酸塩を含む）、トポテカン (例えば、ハイカムチン) 、ルビテカン又はジフロモテカン、エピポドフィロトキシン、例えば、エトポシド (例えば、エトポフォス) 又はテニポシド、アントラサイクリン（上記を参照のこと）、マイトキサントロン、ロソキサントロンもしくはアクチノマイシンＤ、又はアモナフィド等、 
(vi)微小管干渉剤、例えば、ビンカアルカロイド、例えば、ビンブラスチン（その硫酸塩を含む）、ビンクリスチン（その硫酸塩を含む）、ビンフルニン、ビンデシン又はビノレルビン（その酒石酸塩を含む）、タキサン（タキソイド）、例えば、ドセタキセル（例えば、タキソテール）、パクリタキセル（例えば、タキソール）又はその類似体、誘導体もしくはコンジュゲート（例えば、ラロタキセル）、或いはエポチロン、例えば、エポチロンＢ（パツピロン）、アザエポチロン（イキサベピロン）、ZK-EPO (サゴピロン) もしくはKOS-1584又はこれらの類似体、誘導体もしくはコンジュゲート等、
(vii) ホルモン治療薬、例えば、坑アンドロゲン、例えば、フルタミド、ニルタミド又はビカルタミド（カソデックス）、坑エストロゲン、例えば、タモキシフェン、ラロキシフェン又はフルベストラント、LHRHアゴニスト、例えば、ゴセレリン、ロイプロリド、ブセレリン又はトリプトレリン、GnRHアンタゴニスト、例えば、アバレリクス又はデガレリクス、アロマターゼインヒビター、例えば、ステロイド（例えば、エキセメスタン又はホルメスタン）又は非ステロイド（例えば、レトロゾール、ファドロゾール又はアナストロゾール）。
【００６４】
本明細書に記載された治療において本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターと組み合わせて投与し得るその他の抗癌剤の更なる例として、細胞シグナリングインヒビター及び／又は血管形成インヒビターが挙げられるが、これらに限定されない。
細胞シグナリングインヒビター及び／又は血管形成インヒビターとして、内皮特異性受容体チロシンキナーゼ (Tie-2)、表皮成長因子 (受容体) (EGF(R))、インスリン様成長因子 (受容体) (IGF- (R))、繊維芽細胞成長因子 (受容体) (FGF(R))、血小板由来成長因子 (受容体) (PDGF(R)) 、肝細胞成長因子 (受容体) (HGF(R))、又は血管内皮成長因子 (VEGF) もしくはVEGF受容体 (VEGFR)を標的とする（例えば、抑制する）薬剤だけでなく、トロンボスポンジン類似体、マトリックスメタロプロテアーゼ (例えば、MMP-2 又はMMP-9) インヒビター、サリドマイド又はサリドマイド類似体、インテグリン、アンギオスタチン、エンドスタチン、血管分断剤 (VDA)、プロテインキナーゼ C (PKC)インヒビター等が挙げられるが、これらに限定されない。
特別な血管形成インヒビターは血管内皮成長因子(VEGF)又はVEGF受容体 (VEGFR) を標的とする（例えば、抑制する）薬剤である。
VEGF/VEGFRを標的とする（例えば、抑制する）薬剤はVEGF又はVEGFR ファミリー (VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3) の一員以上を標的とする（例えば、抑制する）化合物に関するものであり、あらゆる血管内皮成長因子 (VEGF) リガンドのインヒビター (例えば、リガンド抗体又は可溶性受容体) だけでなく、あらゆるVEGF受容体 (VEGFR)のインヒビター (例えば、VEGFR チロシンキナーゼインヒビター、VEGFR アンタゴニスト又は受容体抗体) を含む。
VEGFR インヒビターは血管内皮成長因子 (VEGF) 受容体のファミリー、特にチロシンキナーゼのVEGFR ファミリーの一員以上を標的とする薬剤 (単一キナーゼインヒビター又は多キナーゼインヒビターとして) であり、小分子受容体チロシンキナーゼインヒビター及び坑VEGFR 抗体を含む。
【００６５】
小分子VEGFR インヒビターの例として、ソラフェニブ (ネキサバー、またRaf 、PDGFR 、Flt3、Kit 及びRETRのインヒビター) 、スニチニブ (ステント、またKit 、Flt3及びPDGFR のインヒビター) 、パゾパニブ (GW-786034、またKit 及びPDGFR のインヒビター),、セジラニブ (レセンチン、AZD-2171) 、アキシチニブ (AG-013736、またPDGFR 及びKitのインヒビター) 、バンデタニブ (ザクチマ、ZD-6474 、またEGFR及びRet のインヒビター) 、バタラニブ (またPDGFR 及びKit のインヒビター) 、モテサニブ (AMG-706 、またPDGFR 及びKit のインヒビター) 、ブリバニブ (またFGFRインヒビター) 、リニファニブ (ABT-869 、またPDGFR 、Flt3及びKit のインヒビター) 、チボザニブ (KRN-951 、またPDGFR 、Kit 、及びMAP のインヒビター) 、E-7080 (またKit 及びKdr のインヒビター) 、レゴラフェニブ (BAY-73-4506 、またTek のインヒビター) 、フォレチニブ (XL-880、またFlt3、Kit 及びMet のインヒビター) 、テラチニブ (BAY-57-9352)、MGCD-265 (またc-MET 、Tie2及びRon のインヒビター) 、ドビチニブ (またPDGFR 、Flt3、Kit 及びFGFRのインヒビター) 、BIBF 1120(またFGFR及びPDGFR のインヒビター) 、XL-184 (カボザンチニブ、またMet 、Flt3、Ret 、Tek 及びKit のインヒビター) が挙げられるが、これらに限定されない。
VEGF(R) を抑制する生物学的物体の例として、坑VEGFリガンド抗体、例えば、ベバシズマブ (アバスチン); 可溶性受容体、例えば、アフリベルセプト (VEGF-Trap);坑VEGF 受容体抗体、例えば、ラムシルマブ (IMC-1121b) 又はIMC-18F1; VEGFRアンタゴニスト、例えば、CT-322又はCDP-791 が挙げられるが、これらに限定されない。
小分子VEGFR-1 (Flt-1) インヒビターの例として、スニチニブ、セジラニブ及びドビチニブが挙げられるが、これらに限定されない。
小分子VEGFR-2 (Flk-1, Kdr)インヒビターの例として、ソラフェニブ、スニチニブ、セジラニブ及びドビチニブが挙げられるが、これらに限定されない。
小分子VEGFR-3 (Flt-4) インヒビターの例として、ソラフェニブ、スニチニブ及びセジラニブが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６６】
PDGFR を標的とする（抑制する）薬剤はPDGFR ファミリーの一員以上を標的とする（例えば、抑制する）化合物に関するものであり、血小板由来成長因子受容体 (PDGFR)ファミリーチロシンチロシンキナーゼのインヒビター (単一キナーゼインヒビター又は多キナーゼインヒビターとして) だけでなく、坑PDGFR 抗体を含む。
PDGFR インヒビターはPDGFR ファミリー、特にチロシンキナーゼのPDGFR ファミリーの一員以上を標的とする薬剤 (単一キナーゼインヒビター又は多キナーゼインヒビターとして) であり、小分子受容体チロシンキナーゼ インヒビター及び坑PDGFR 抗体を含む。
小分子PDGFR インヒビターの例として、BIBF 1120(またVEGFR 及びFGFRのインヒビター) 、アキシチニブ (またVEGFR 及びKit のインヒビター) 、ドビチニブ (またVEGFR 、Flt3、Kit 及びFGFRのインヒビター) 、スニチニブ (またVEGFR 、Flt3及びKit のインヒビター) 、モテサニブ (またVEGFR 及びKit のインヒビター) 、パゾパニブ (またVEGFR 及びKit のインヒビター) 、ニロチニブ (またAbl 及びKit のインヒビター), 、タンヅチニブ (またFlt3及びKit のインヒビター) 、バタラニブ (またVEGFR 及びKit のインヒビター) 、チボザニブ (KRN-951 、またVEGFR 、Kit 、及びMAP のインヒビター) 、AC-220 (またFlt3及びKit のインヒビター) 、TSU-68 (またFGFR及びVEGFR のインヒビター) 、KRN-633 (またVEGFR 、Kit 及びFlt3のインヒビター) 、リニフィニブ (またFlt3、Kit 及びVEGFR のインヒビター) 、ソラフェニブ (ネキサバー、またRaf 、VEGFR 、Flt3、Kit 及びRETRのインヒビター) 、イマチニブ (グレベック、またAbl 及びKit のインヒビター) が挙げられるが、これらに限定されない。坑PDGFR 抗体の例として、IMC-3G3 が挙げられるが、これらに限定されない。.
FGFRを標的とする薬剤はFGFRファミリーの一員以上を標的とする化合物に関するものであり、繊維芽細胞成長因子受容体ファミリーチロシンキナーゼのインヒビター (単一キナーゼインヒビター又は多キナーゼインヒビターとして) を含む。
【００６７】
FGFRインヒビターはFGFRファミリー (例えば、FGFR1 、FGFR2 、FGFR3) 、特にチロシンキナーゼのFGFRファミリーの一員以上を標的とする薬剤 (単一キナーゼインヒビター又は多キナーゼインヒビターとして) であり、小分子受容体チロシンキナーゼインヒビター及び坑FGFR抗体を含む。
小分子FGFRインヒビターの例として、BIBF 1120(またVEGFR 及びPDGFR のインヒビター) 、ドビチニブ (またVEGFR 、Flt3、Kit 及びPDGFR のインヒビター) 、KW-2449(またFlt3及びAbl のインヒビター) 、ブリバニブ (またVEGFR インヒビター) 、TSU-68 (またPDGFR 及びVEGFR のインヒビター) が挙げられるが、これらに限定されない。
EGFRを標的とする（例えば、抑制する）薬剤は表皮成長因子受容体ファミリー (erbB1 、erbB2 、erbB3 、erbB4)の一員以上を標的とする（例えば、抑制する）化合物に関するものであり、表皮成長因子受容体 (EGFR) ファミリーキナーゼの一員以上のインヒビター (単一キナーゼインヒビター又は多キナーゼインヒビターとして) だけでなく、表皮成長因子受容体 (EGFR) ファミリーの一員以上に結合する抗体を含む。
EGFRインヒビターはEGFRファミリー、特にチロシンキナーゼのEGFRファミリーの一員以上を標的とする薬剤 (単一キナーゼインヒビター又は多キナーゼインヒビターとして) であり、小分子受容体チロシンキナーゼインヒビター及び坑EGFR抗体を含む。
小分子表皮成長因子受容体 (EGFR) インヒビターの例として、エルロチニブ (タルセバ) 、ゲフィチニブ (イレッサ) 、BIBW 2992 、ラパチニブ (タイケルブ) 、バンデタニブ (ザクチマ、またVEGFR 及びRETRのインヒビター) 、ネラチニブ (HKI-272)、バルリチニブ、AZD-8931、AC-480、AEE-788(またVEGFR のインヒビター)が挙げられるが、これらに限定されない。
表皮成長因子受容体 (EGFR) の抗体の例として、坑ErbB1 抗体セツキシマブ、パニツムマブ又はニモツズマブ、坑ErbB2 抗体トラスツズマブ (ヘルセプチン) 、ペルツズマブ (オムニタルグ) 又はエルツマキソマブ、及び坑EGFR抗体ザルツムマブが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６８】
本発明の意味内のEGFRインヒビターは可逆的EGFRチロシンキナーゼインヒビター、例えば、ゲフィチニブ、エルロチニブ、バンデタニブもしくはラパチニブ、又は不可逆的EGFRチロシンキナーゼインヒビター、例えば、ネラチニブもしくはPF-299804 を表し得る。
本発明の意味内のEGFRインヒビターはerbB選択的インヒビター、例えば、erbB1 インヒビター (例えば、エルロチニブ、ゲフィチニブ、セツキシマブ、パニツムマブ) 、又はerbB2 インヒビター (例えば、トラスツズマブ) 、二重erbB1/erbB2 インヒビター (例えば、ラパチニブ、BIBW 2992)又はpan-erbB インヒビター (例えば、PF-299804) を表し得る。
IGF(R)インヒビターはインスリン様成長因子 (IGF) ファミリー (例えば、IGF1及び／又はIGF2) 、特にチロシンキナーゼのIGFR ファミリー、例えば、IGFR-1、及び／又はインスリン受容体経路の一員以上を標的とする薬剤 (単一キナーゼインヒビター又は多キナーゼインヒビターとして) であり、IGFR チロシンキナーゼインヒビター OSI-906(リンシチニブ) 及び1-{4-[(5-シクロプロピル-1H-ピラゾール-3-イル)アミノ]ピロロ[2,1-f][1,2,4]トリアジン-2-イル}-N-(6-フルオロ-3-ピリジニル)-2-メチル-L-プロリンアミド (BMS-754807) だけでなく、坑IGF(R)抗体フィギツムマブ、シクスツムマブ、ダロツズマブ、ガニツマブ及びロバツムマブが挙げられるが、これらに限定されない。
HGF(R)インヒビターは肝細胞成長因子 (HGF)ファミリー、特にチロシンキナーゼのHGFRファミリーの一員以上を標的とする薬剤 (単一キナーゼインヒビター又は多キナーゼインヒビターとして) であり、HGFR チロシンキナーゼインヒビターカボザンチニブ (XL-184 、またVEGFR 、Flt3、Ret 、Tek 及びKit のインヒビター) 、クリゾチニブ (またAlk のインヒビター) 、フォレチニブ (またFlt3、Kit 及びVEGFR のインヒビター) 及びチバンチニブだけでなく、坑HGF(R) 抗体フィクラツズマブ及びオナルツズマブが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６９】
血管標的薬剤 (VTA)として、血管損傷又は分断剤、例えば、5,6-ジメチルキサンテノン-4-酢酸 (DMXAA、バジメザン) 、コンブレタスタチンA4ホスフェート (ザイブレスタット) 又はコンブレタスタチンA4類似体、例えば、オムブラブリン (AVE-8062) が挙げられるが、これらに限定されない。
トロンボスポンジン類似体として、ABT-510 等が挙げられるが、これらに限定されない。
マトリックスメタロプロテアーゼ (MMP)インヒビターとして、マリマスタット等が挙げられるが、これらに限定されない。
PKC インヒビターはプロテインキナーゼC (PKC) ファミリーの一員以上を抑制する薬剤 (単一キナーゼインヒビター又は多キナーゼインヒビター) であり、エンザスタウリン、ブリオスタチン及びミドスタウリンが挙げられるが、これらに限定されない。
本発明の組み合わせ治療における使用のための血管形成インヒビターはベバシズマブ (アバスチン) 、アフリベルセプト (VEGF-トラップ) 、バンデタニブ、セジラニブ、アキシチニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、モテサニブ、バタラニブ、パゾパニブ、ドビチニブ及びBIBF 1120 から選ばれてもよい。
本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターと連係しての投与に特別な血管形成インヒビターはBIBF 1120 である。
従って、実施態様において、本発明の細胞シグナリング及び／又は血管形成インヒビターは血管形成インヒビター、例えば、VEGF又はVEGFR を標的とする薬剤を表すことが好ましい。
特別な実施態様において、本発明の意味内の血管形成インヒビター又はVEGFR インヒビターは下記の式を有するBIBF 1120 （必要によりその互変異性体又は医薬上許される塩（例えば、エタンスルホン酸塩の形態であってもよい）である。
【００７０】
【化２８】
2014507408.tif 000032
【００７１】
本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターはまたerbB1 受容体 (EGFR) 及びerbB2 (Her2/neu) 受容体チロシンキナーゼのインヒビター、特にBIBW 2992 と連係して成功裏に投与されてもよい。
従って、更なる実施態様において、本発明の細胞シグナリング及び／又は血管形成インヒビターは細胞シグナリングインヒビター、例えば、EGFRを標的とする薬剤、例えば、二重不可逆的EGFR/Her2 インヒビターを表すことが好ましい。
特別な実施態様において、本発明の意味内の細胞シグナリングインヒビター又はEGFRインヒビター (特に二重不可逆的EGFR/Her2 インヒビター) は下記の式を有するBIBW 2992 （必要によりその互変異性体又は医薬上許される塩の形態であってもよい）である。
【００７２】
【化２９】
2014507408.tif 000033
【００７３】
本明細書に記載された治療において本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターと組み合わせて投与し得るその他の抗癌剤の更に別の例として、ヒストンデアセチラーゼインヒビター、プロテアソームインヒビター、HSP90 インヒビター、キネシンスピンドルタンパク質インヒビター、シクロオキシゲナーゼインヒビター、ビスホスホネート、生物学的応答改質剤（例えば、サイトカイン、例えば、IL-2、又はインターフェロン、例えば、インターフェロン-ガンマ）、アンチセンスオリゴヌクレオチド、Toll様受容体アゴニスト、デルトイド又はレチノイド、Abl インヒビター又はBcr-Abl インヒビター、Src インヒビター、FAK インヒビター、JAK/STAT インヒビター、PI3K/PDK1/AKT/mTOR経路のインヒビター、例えば、mTORインヒビター、PI3Kインヒビター、PDK1インヒビター、AKT インヒビター又は二重PI3K/mTOR インヒビター、Ras/Raf/MEK/ERK 経路のインヒビター、例えば、ファルネシルトランスフェラーゼインヒビター又はRas （例えば、H-Ras 、K-Ras 、又はN-Ras ）もしくはRaf (A-Raf 、B-Raf 、又はC-Raf )癌遺伝子もしくは野生型イソ型のインヒビター或いはMEK インヒビター、テロメラーゼインヒビター、メチオニンアミノペプチダーゼインヒビター、ヘパラナーゼインヒビター、Flt-3R 受容体キナーゼファミリーのインヒビター、C-kit 受容体キナーゼファミリーのインヒビター、RET受容体キナーゼファミリーのインヒビター、MET 受容体キナーゼファミリーのインヒビター、RON受容体キナーゼファミリーのインヒビター、TEK/TIE 受容体キナーゼファミリーのインヒビター、CDK インヒビター、PLK インヒビター（例えば、PLK1インヒビター）、免疫治療薬、ラジオイムノ治療薬又は（坑増殖性、アポプトーシス促進性又は坑血管形成性）抗体が挙げられるが、これらに限定されない。
ヒストンデアセチラーゼ (HDAC) インヒビターとして、パノビノスタット (LBH-589) 、スベロイルアニリドヒドロキサム酸 (SAHA、ボリノスタット、ゾリンザ)、デプシペプチド (ロミデプシン) 、ベリノスタット、レスミノスタット、エンチノスタット、モセチノスタット、ギビノスタット、及びバルプロ酸が挙げられるが、これらに限定されない。
プロテアソームインヒビターとして、ボルテゾミブ (ベルカド) 、及びカルフィルゾミブが挙げられるが、これらに限定されない。
【００７４】
熱ショックタンパク質90インヒビターとして、タネスピマイシン (17-AAG) 、ゲルダマイシン、レタスピマイシン (IPI-504) 、及びAUY-922 が挙げられるが、これらに限定されない。
Ras-ファルネシルトランスフェラーゼインヒビターはファルネシルトランスフェラーゼ及びRas を抑制する化合物であり、チピファミブ (ザルネスタ) 及びロナファルニブが挙げられるが、これらに限定されない。
Abl インヒビターとして、ボスチニブ (またSrc のインヒビター) 、ダサチニブ (またBcr 及びSrc のインヒビター) 、イマチニブ (またBcr のインヒビター) 、ポナチニブ (またBcr 及びSrcのインヒビター) 及びニロチニブ (またKit 及びPDGFR のインヒビター) が挙げられるが、これらに限定されない。
mTORインヒビターとして、ラパマイシン (シロリムス、ラパムン) 又はラパロゲス、エベロリムス (セルチカン、RAD-001)、リダフォロリムス (MK-8669 、AP-23573、デフォロリムス) 、テムシロリムス (トリセル、CCI-779)、OSI-027 、INK-128 、AZD-2014、もしくはAZD-8055又は[5-[2,4-ビス [(3S)-3-メチルモルホリン-4-イル]ピリド [5,6-e]ピリミジン-7-イル]-2-メトキシフェニル]メタノール等が挙げられるが、これらに限定されない。
PI3Kインヒビターとして、BKM-120 、XL-147、RG-7321 (GDC-0941) 、CH-5132799 及びBAY-80-6946が挙げられるが、これらに限定されない。実施態様において、本発明の意味内のPI3K インヒビターはPI3K-アルファのインヒビター (例えば、BYL-719) を表す。
【００７５】
二重PI3K/mTOR インヒビターとして、BEZ-235 、XL-765、PF-4691502 、GSK-2126458 、RG-7422 (GDC-0980)及びPKI-587 が挙げられるが、これらに限定されない。
Raf インヒビターとして、ソラフェニブ (ネキサバー) もしくはPLX-4032 (ベムラフェニブ) 又はGSK-2118436 (ダブラフェニブ) が挙げられるが、これらに限定されない。実施態様において、本発明の意味内のRaf インヒビターはBRaf (例えば、BRaf V600)のインヒビター、特にBRaf V600E インヒビター (例えば、PLX-4032又はGSK-2118436 ) を表す。
デルトイド及びレチノイドとして、全トランスレチノイン酸 (ATRA) 、フェンレチニド、トレチノイン、ベキサロテン等が挙げられるが、これらに限定されない。
Toll様受容体アゴニストとして、リテニモド、アガトリモド等が挙げられるが、これらに限定されない。
アンチセンスオリゴヌクレオチドとして、オブリメルセン (ゲナセンス) が挙げられるが、これらに限定されない。
PLK インヒビターとして、PLK1インヒビターボラセルチブが挙げられるが、これらに限定されない。
AKT インヒビターとして、MK-2206 、又はN-{(1S)-2-アミノ-1-[(3,4-ジフルオロフェニル)メチル]エチル}-5-クロロ-4-(4-クロロ-1-メチル-1H-ピラゾール-5-イル)-2-フランカルボキサミドが挙げられるが、これらに限定されない。
本発明の二重化合物以外のMEK インヒビターとして、セルメチニブ (AZD-6244) 、又はN-[3-[3-シクロプロピル-5-[(2-フルオロ-4-ヨードフェニル)アミノ]-3,4,6,7-テトラヒドロ-6,8-ジメチル-2,4,7-トリオキソピリド [4,3-d]ピリミジン-1(2H)-イル]フェニル]アセトアミド (GSK-1120212)が挙げられるが、これらに限定されない。
本発明の意味内のインヒビターとして、小分子インヒビター及び抗体が挙げられるが、これらに限定されない。
【００７６】
特にことわらない限り、本明細書に挙げられるキナーゼインヒビターとして、単一キナーゼインヒビター（これらは一種のキナーゼ及び／又は一種のキナーゼイソ型を特異的に抑制する）、又は多キナーゼインヒビター（これらは２種以上のキナーゼ及び／又は２種以上のキナーゼイソ型を抑制する）（例えば、二重又は三重キナーゼインヒビター又はパン-キナーゼインヒビター）が挙げられる。
本明細書に挙げられるその他の抗癌剤（特にそれらの中でも小分子）はまたこれらのあらゆる医薬上許される塩、これらの水和物及び溶媒和物（夫々の結晶性形態を含む）を含んでもよい。
抗体は、例えば、無傷モノクローナル抗体（ヒトモノクローナル抗体、マウスモノクローナル抗体、キメラモノクローナル抗体及びヒト化モノクローナル抗体が挙げられるが、これらに限定されない）、ポリクローナル抗体、接合（モノクローナル）抗体（例えば、化学治療薬、放射性粒子、細胞トキシン等に結合されたこれらの抗体）、少なくとも２種の無傷抗体から生成された多特異性抗体、及び抗体フラグメント（それらが所望の生物学的活性を示す限り）を意味する。
本発明の組み合わせ治療内で使用し得る抗体の例は坑CD19抗体、例えば、ブリナツモマブ、坑CD20抗体、例えば、リツキシマブ (リツキサン) 、ベルツズマブ、トシツムマブ、オビヌツズマブ又はオファツムマブ (アルゼッラ) 、坑CD22抗体、例えば、エプラツズマブ、坑CD23抗体、例えば、ルミリキシマブ、坑CD30抗体、例えば、イラツムマブ、坑CD33抗体、例えば、ゲムツズマブ又はリンツズマブ、坑CD40抗体、例えば、ルカツムマブ又はダセツズマブ、坑CD51抗体、例えば、イネツムマブ、坑CD52抗体、例えば、アレムツズマブ (キャンパス) 、坑CD74 抗体、例えば、ミラツズマブ、坑CD80抗体、例えば、ガリキシマブ、坑CTLA4 抗体、例えば、トレメリムマブ又はイピリムマブ、坑TRAIL 抗体、例えば、坑TRAIL1抗体マパツムマブ又は坑TRAIL2抗体チガツズマブ、コナツムマブ又はレキサツムマブ、坑Her2/neu抗体、例えば、トラスツズマブ (ヘルセプチン) 、ペルツズマブ (オムニターグ) 又はエルツマキソマブ、坑EGFR抗体、例えば、セツキシマブ (エルビツクス) 、ニモツズマブ、ザルツムマブ又はパニツムマブ (ベクチビクス) 、坑VEGF抗体、例えば、ベバシズマブ (アバスチン) 、坑VEGFR 抗体、例えば、ラムシルマブ、坑IGFR抗体、例えば、フィギツムマブ、シクスツムマブ、ダロツズマブ又はロバツムマブ、又は坑HGFR抗体、例えば、リロツムマブ、又は接合抗体、例えば、放射能標識坑CD20抗体イブリツムマブチウキセタン (90Y-コンジュゲート、ゼバリン) 又はトシツモマブ (131I-コンジュゲート、ベキサール) 、又はイムノトキシンゲムツズマブオゾガマイシン (坑CD33カリケアマイシンコンジュゲート、ミロターグ) 、イノツズマブオザガマイシン (坑CD22カリケアマイシンコンジュゲート) 、BL-22 (坑CD22イムノトキシン) 、ブレンツキシマブベドチン (坑CD30アウリスタチンＥコンジュゲート) 、又は90Y-エプラツズマブ (坑CD22ラジオイムノコンジュゲート) であってもよい。
【００７７】
本発明の治療（単一治療又は組み合わせ治療） はまたその他の治療、例えば、手術、放射線治療（例えば、照射治療）、ラジオイムノ治療、内分泌治療、生物学的応答改質剤、高体温、低温治療及び／又はあらゆる不利な作用を軽減するための薬剤、例えば、鎮吐薬と組み合わされてもよい。
実施態様において、本発明の治療組み合わせ又は（組み合わされた）治療はまた手術及び／又は放射線治療を更に伴なってもよく、又は含んでもよい。
従って、本発明は治療有効量の本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター（好ましくは本明細書に先に示された化合物１〜25からなる群Ａから選ばれる）、又はこれらの互変異性体もしくは医薬上許される塩、及び一種以上のその他の抗癌剤（好ましくは本明細書に先に、また後に挙げられるこれらの抗癌剤から選ばれる）の投与を含むこれを要するヒト患者の癌（例えば、本明細書に記載されたものから選ばれる）の治療方法を更に提供する。
更に、本発明は本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター（好ましくは本明細書に先に示された化合物１〜25からなる群Ａから選ばれる）、又はこれらの互変異性体もしくは医薬上許される塩、及び一種以上のその他の抗癌剤（好ましくは本明細書に先に、また後に挙げられるこれらの抗癌剤から選ばれる）を含む組み合わせを更に提供する。
【００７８】
或る実施態様において、本発明の組み合わせ治療はKRAS、NRAS及び／又はBRAF（例えば、BRAF V600）突然変異を有する膵臓癌、結腸直腸癌、悪性メラノーマ、NSCLC 又はその他の進行もしくは転移性充実腫瘍を有する患者の治療に使用される。
特別な実施態様において、本発明の組み合わせ治療はKRAS中の、又は野生遺伝子型の一つ以上の突然変異を有する膵臓癌 (PAC)の患者の治療に使用される。
特別な実施態様において、本発明の組み合わせ治療はKRAS又はBRAF (例えば、BRAF V600)中に一つ以上の突然変異を有する直腸結腸癌 (CRC)の患者の治療に使用される。
特別な実施態様において、本発明の組み合わせ治療はBRAF (特にBRAF V600)又はNRAS中に一つ以上の突然変異を有する悪性メラノーマの患者の治療に使用される。
特別な実施態様において、本発明の組み合わせ治療はKRAS中に一つ以上の突然変異を有する非小細胞肺癌 (NSCLC)の患者の治療に使用される。
本発明の実施態様において、一種以上のその他の抗癌剤がカペシタビン、5-フルオロウラシル、オキサリプラチン、シスプラチン、カルボプラチン、ダカルバジン、テモゾラミド、フォテムスチン、イリノテカン、ゲムシタビン、ペメトレキセド、パクリタキセル、ドセタキセル、血管形成インヒビター、VEGF(R) インヒビター、EGF(R)インヒビター、IGF(R)インヒビター、坑CTLA4 抗体、BRafインヒビター、mTORインヒビター、二重PI3K/mTOR インヒビター、AKT インヒビター、及びPI3Kインヒビターからなる群から選ばれる。
本発明の実施態様において、一種以上のその他の抗癌剤として、血管形成インヒビターが挙げられる。或る実施態様において、血管形成インヒビターがベバシズマブである。
実施態様において、一種以上のその他の抗癌剤として、VEGF(R) インヒビターが挙げられる。或る実施態様において、VEGFR インヒビターがBIBF 1120 である。
【００７９】
実施態様において、一種以上のその他の抗癌剤として、EGF(R)インヒビターが挙げられる。或る実施態様において、EGFRインヒビターがBIBW 2992 である。別の或る実施態様において、EGFRインヒビターがセツキシマブ、パニツムマブ及びエルロチニブから選ばれる。
実施態様において、一種以上のその他の抗癌剤として、IGF(R)インヒビターが挙げられる。或る実施態様において、IGF(R)インヒビターがフィギツムマブ、ダロツズマブ、シクスツムマブ、ガニツマブ、BMS-754807及びOSI-906(リンシチニブ) から選ばれる。
実施態様において、一種以上のその他の抗癌剤として、坑CTLA4 抗体が挙げられる。或る実施態様において、坑CTLA4 抗体がイピリムマブである。
実施態様において、一種以上のその他の抗癌剤として、BRafインヒビターが挙げられる。或る実施態様において、BRafインヒビターがPLX-4032 (ベムラフェニブ) である。別の或る実施態様において、BRafインヒビターがGSK-2118436 (ダブラフェニブ) である。
実施態様において、一種以上のその他の抗癌剤として、必要により本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター以外のMEK インヒビター (例えば、セルメチニブ又はGSK-1120212) と組み合わせてのBRafインヒビター (例えば、ダブラフェニブ又はベムラフェニブ) が挙げられる。 
実施態様において、一種以上のその他の抗癌剤として、mTORインヒビターが挙げられる。或る実施態様において、mTORインヒビターが(5-{2,4-ビス[(3S)-3-メチルモルホリン-4-イル]ピリド[2,3-d]ピリミジン-7-イル}-2-メトキシフェニル)メタノール (AZD-8055) である。
実施態様において、一種以上のその他の抗癌剤として、二重PI3K/mTOR インヒビターが挙げられる。或る実施態様において、二重PI3K/mTOR インヒビターが2-メチル-2-[4-(3-メチル-2-オキソ-8-キノリン-3-イル-2,3-ジヒドロ-イミダゾ[4,5-c]キノリン-1-イル)-フェニル]-プロピオニトリル (BEZ-235)である。
【００８０】
実施態様において、一種以上のその他の抗癌剤として、PI3Kインヒビターが挙げられる。或る実施態様において、PI3Kインヒビターが5-[2,6-ジ (4-モルホリニル)-4-ピリミジニル]-4-(トリフルオロメチル)-2-ピリジンアミン (BKM-120) である。
実施態様において、一種以上のその他の抗癌剤として、AKT インヒビターが挙げられる。或る実施態様において、AKT インヒビターが8-[4-(1-アミノシクロブチル)フェニル]-9-フェニル-1,2,4-トリアゾロ [3,4-f][1,6]ナフチリジン-3(2H)-オン (MK-2206) である。別の或る実施態様において、AKT インヒビターがN-{(1S)-2-アミノ-1-[(3,4-ジフルオロフェニル)メチル]エチル}-5-クロロ-4-(4-クロロ-1-メチル-1H-ピラゾール-5-イル)-2-フランカルボキサミドである。
本発明の実施態様において、一種以上のその他の抗癌剤が
カペシタビン、5-フルオロウラシル、オキサリプラチン、シスプラチン、カルボプラチン、デカルバジン、テモゾラミド、フォテムスチン、イリノテカン、ゲムシタビン、ペメトレキセド、パクリタキセル、ドセタキセル、
ベバシズマブ、セツキシマブ、パニツムマブ、エルロチニブ、イピリムマブ、
フィギツムマブ、ダロツズマブ、シクスツムマブ、ガニツマブ、BMS-754807、OSI-906(リンシチニブ) 、PLX-4032 (ベムラフェニブ) 、GSK-2118436 (ダブラフェニブ) 、AZD-8055、BEZ-235 、BKM-120 、MK-2206 、BIBW 2992 、及びBIBF 1120 からなる群から選ばれる。
更なる実施態様（実施態様E1）において、本発明の一種以上のその他の抗癌剤がカペシタビン、5-フルオロウラシル、オキサリプラチン、シスプラチン、カルボプラチン、ダカルバジン、テモゾラミド、フォテムスチン、イリノテカン、ゲムシタビン、ペメトレキセド、パクリタキセル及びドセタキセルからなる群 (群G1) から選ばれる。
更なる実施態様 (実施態様E2) において、本発明の一種以上のその他の抗癌剤がベバシズマブ、セツキシマブ、パニツムマブ、エルロチニブ及びイピリムマブからなる群 (群G2) から選ばれる。
【００８１】
更なる実施態様 (実施態様E3) において、本発明の一種以上のその他の抗癌剤がフィギツムマブ、ダロツズマブ、シクスツムマブ、ガニツマブ、BMS-754807、OSI-906 (リンシチニブ) 、PLX-4032 (ベムラフェニブ) 、GSK-2118436 (ダブラフェニブ) 、AZD-8055、BEZ-235 、BKM-120 、MK-2206 、BIBW 2992 及びBIBF 1120 からなる群 (群G3) から選ばれる。
例えば、IGF/PI3K/AKT/mTOR軸を標的とする（例えば、抑制する）薬剤と組み合わせて本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターを使用することにより、坑腫瘍応答の改善、例えば、細胞サイクル進行の抑制又は予防、細胞増殖の抑圧、細胞成長の調節、DNA 合成の抑制又はアポプトーシスの誘発が、これらを要する患者（例えば、本明細書に記載された患者）で得られることがわかる。更に、本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターとIGF/PI3K/AKT軸のインヒビターの組み合わせはまたMEK 抑制により誘発される代償性フィードバックループをブロックし得る。
更に例えば、BRafインヒビターと組み合わせて本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターを使用することにより、抗癌作用又は坑腫瘍応答の改善、例えば、細胞増殖のブロック及び一層強い経路抑制（これは細胞増殖抑制とは反対の細胞傷害作用をもたらし得る）が、これらを要する患者（例えば、本明細書に記載された患者）で得られることがわかる。更に二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターとBRafインヒビターの組み合わせはまた発症を遅延し、特にRAS 又はBRaf突然変異腫瘍（例えば、RAS 又はBRAF V600 突然変異を有する進行充実性腫瘍、例えば、本明細書に記載されたもの）でそれらのいずれかについての薬物耐性を克服し、治療し、又は予防するのに使用し得る。
更に例えば、mTORインヒビターと組み合わせて本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターを使用することにより、抗癌作用又は坑腫瘍応答の改善、例えば、細胞増殖の抑圧、細胞成長の調節、又は細胞タンパク質翻訳の抑制／遅延が、これらを要する患者（例えば、本明細書に記載された患者）で見られることがわかる。
【００８２】
更に例えば、EGF(R)インヒビターと組み合わせて本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターを使用することにより、抗癌作用又は坑腫瘍応答の改善、例えば、細胞増殖の抑圧、例えば、EGFR突然変異を有し、もしくは有しない腫瘍における細胞傷害性の強化、又は腫瘍成長もしくはサイズの調節、増大された腫瘍退縮或いは減少された転移が、これらを要する患者（例えば、本明細書に記載された患者）で見られることがわかる。更に、二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターとEGF(R)インヒビターの組み合わせはまた発症を遅延し、それらのいずれかについての薬物耐性を克服し、治療し、又は予防するのに使用し得る。
更に例えば、血管形成インヒビター (例えば、VEGF(R) インヒビター) と組み合わせて本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターを使用することにより、抗癌作用又は坑腫瘍応答の改善、例えば、腫瘍成長の抑制又は遅延が、これらを要する患者（例えば、本明細書に記載された患者）で得られることがわかる。
更に例えば、（通常の）化学治療抗癌剤と組み合わせて本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターを使用することにより、抗癌作用又は坑腫瘍応答の改善、例えば、細胞傷害性の強化とともにそれらのいずれかについての薬物耐性の発症の有効な治療もしくは予防又は遅延に必要な（通常の）化学治療薬の処方用量の低下が、これらを要する患者（例えば、本明細書に記載された患者）で得られることがわかる。
本発明の治療の方法又は治療使用の抗癌作用として、坑腫瘍作用、応答率（例えば、全応答率）、疾患進行までの時間又は生存率（例えば、進行のない生存又は全生存）が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の治療の方法の抗癌作用として、腫瘍成長の抑制、腫瘍成長遅延、腫瘍の退縮、腫瘍の収縮、治療の停止時の腫瘍の再成長までの増大された時間、疾患進行の遅延が挙げられるが、これらに限定されない。
本発明の治療の方法又は治療使用が癌の治療を要する、温血動物、例えば、ヒトに投与される場合、前記治療の方法が、例えば、坑腫瘍作用の程度、応答率、疾患進行までの時間及び生存率の一つ以上により測定して、作用を生じることが予想される。抗癌作用として、予防措置だけでなく、既存の疾患の治療が挙げられる。
【００８３】
更に、本発明の組み合わせは単一治療におけるいずれの治療についての耐性を解消することを助けるかもしれない。
本発明の組み合わせ治療内の特別な実施態様 (実施態様F1) において、本発明の組み合わせ、組成物、方法及び使用は二重オーロラキナーゼ/MEK及びその他の抗癌剤を含む組み合わせに関するものであり、本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターは本明細書に先に示された化合物１〜25からなる群Ａから選ばれ、その他の抗癌剤は下記の表ｉ中のエントリーに従って選ばれることが好ましい。
表ｉ
【００８４】
【表４】
2014507408.tif 000034
【００８５】
或る実施態様において、本発明の結腸直腸癌 (CRC)の治療における使用について、二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターが、例えば、DNA 複製インヒビター (例えば、オキサリプラチン) 、トポイソメラーゼI インヒビター (例えば、イリノテカン) 、（経口）フルオロピリミジン (例えば、カペシタビン) 、坑血管形成剤 (例えば、ベバシズマブ) 、及び／又はEGFRインヒビター (例えば、坑EGFR抗体、例えば、セツキシマブ又はパニツムマブ) 、或いはこれらの組み合わせから選ばれた一種以上のその他の抗癌剤と組み合わされてもよい。
或る実施態様において、本発明の膵臓癌 (PAC)の治療における使用について、二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターが、例えば、ゲムシタビン、DNA 複製インヒビター (例えば、オキサリプラチン、シスプラチン) 、トポイソメラーゼI インヒビター (例えば、イリノテカン) 、フルオロピリミジン (例えば、5-FU又はカペシタラビン) 、坑血管形成剤 (例えば、ベバシズマブ) 、及び／又はEGFRインヒビター (例えば、セツキシマブ又はエルロチニブ) 、或いはこれらの組み合わせから選ばれた一種以上のその他の抗癌剤と組み合わされてもよい。
或る実施態様において、本発明のメラノーマの治療における使用について、二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターが、例えば、ダカルバジン、テモゾロミド、イピリムマブ及び／又はBRafインヒビター (例えば、ベムラフェニブ) 、或いはこれらの組み合わせから選ばれた一種以上のその他の抗癌剤と組み合わされてもよい。
【００８６】
例えば、下記の癌疾患が本発明の化合物又は組み合わせで治療し得るが、これらに限定されない：脳腫瘍、例えば、聴神経鞘腫、星状細胞腫、例えば、毛様細胞性星状細胞腫、原線維性星状細胞腫、原形質性星状細胞腫、大円形細胞性星状膠腫、未分化星状細胞腫及びグリア芽細胞腫、脳リンパ腫、脳転移、下垂体腫瘍、例えば、プロラクチノーマ(prolactinoma)、HGH（ヒト成長ホルモン）産生腫瘍及びACTH産生腫瘍（副腎皮質刺激ホルモン）、頭蓋咽頭腫、髄芽細胞腫、髄膜腫及び乏突起膠腫；神経腫瘍、例えば、栄養神経系の腫瘍、例えば、交感神経芽細胞腫、神経節神経腫、パラガングリオーマ（クロム親和性細胞腫及びクロム親和性腫瘍）及び頚動脈小体腫瘍、末梢神経系の腫瘍、例えば、切断神経腫、神経繊維腫、ノイリノーマ（神経鞘腫、シュワン鞘腫）及び悪性シュワン鞘腫だけでなく、中枢神経系の腫瘍、例えば、脳の腫瘍及び骨髄腫瘍；腸癌、例えば、直腸癌、結腸癌、肛門癌、小腸腫瘍及び十二指腸腫瘍；眼瞼腫瘍、例えば、基底細胞腫又は基底細胞癌；膵臓腺癌又は膵臓の癌腫；膀胱癌又は膀胱の癌腫；肺癌（気管支癌）、例えば、小細胞気管支癌（燕麦細胞癌）及び非小細胞気管支癌、例えば、扁平上皮癌、腺癌及び大細胞気管支癌；胸部の癌、例えば、乳癌、例えば、浸潤性腺管癌、膠様癌、小葉侵食癌、管状癌、腺のう癌及び乳頭状癌；非ホジキンリンパ腫(NHL)、例えば、バーキットリンパ腫、低悪性非ホジキンリンパ腫 (NHL)及び菌状息肉症；子宮癌もしくは子宮内膜癌又は子宮体癌；CUP 症候群（未知の原発性の癌）；卵巣癌又は卵巣癌腫、例えば、粘液性、子宮内膜の、又はしょう液性の癌；胆嚢癌；胆管癌、例えば、クラトスキン (Klatskin)腫瘍；精巣癌、例えば、精上皮腫及び非精上皮腫；リンパ腫（リンパ肉腫）、例えば、悪性リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫 (NHL)、例えば、慢性リンパ性白血病、白血性細網内症、免疫細胞腫、プラスマ細胞腫（多発性ミエローマ）、免疫芽細胞腫、バーキットリンパ腫、T-ゾーン菌状息肉腫、大細胞退生リンパ芽細胞腫及びリンパ芽細胞腫；喉頭癌、例えば、声帯の腫瘍、声門上、声門及び声門下の咽頭腫瘍；骨の癌、例えば、骨軟骨腫、軟骨腫、軟骨芽細胞腫、軟骨粘液繊維腫、骨腫、類骨骨腫、骨芽細胞腫、好酸球性肉芽腫、巨細胞腫、軟骨肉腫、骨肉腫、ユーイング肉腫、細網肉腫、形質細胞腫、線維性形成異常、若年性骨のう胞及び動脈瘤の骨のう胞；頭部／首の腫瘍、例えば、唇、舌、口の床、口腔、歯肉、口蓋、唾液腺、喉、鼻腔、副鼻腔、喉頭及び中耳の腫瘍；肝臓癌、例えば、肝細胞癌 (HCC)；白血病、例えば、急性白血病、例えば、急性リンパ性／リンパ芽球性白血病 (ALL)、急性骨髄性白血病 (AML)；慢性白血病、例えば、慢性リンパ性白血病 (CLL)、慢性骨髄性白血病 (CML)；胃癌、例えば、乳頭状腺癌、管状腺癌及び粘液性腺癌、印環細胞癌腫、扁平腺癌、小細胞癌及び未分化癌腫；メラノーマ、例えば、表在性、結節性、悪性のほくろ性の、また末端性ほくろ性のメラノーマ；腎臓癌、例えば、腎臓細胞癌もしくは副腎腫又はグラービッツ腫瘍；食道癌又は食道の癌腫；陰茎癌；前立腺癌；咽頭癌又は咽頭の癌腫、例えば、鼻咽頭癌、中咽頭癌及び下咽頭癌；網膜芽細胞腫；膣癌又は膣癌腫；扁平上皮癌、腺癌、in situ癌腫、悪性メラノー���及び肉腫；甲状腺癌、例えば、乳頭状、のう胞状また延髄の甲状腺癌、そしてまた退生癌腫；棘細胞癌、類表皮癌及び皮膚の扁平上皮癌；胸腺腫、尿道の癌及び外陰部の癌。
【００８７】
本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター又は組み合わせの治療適用可能性として、患者の第一選択治療、第二選択治療、第三選択治療又は更なる選択治療が挙げられる。癌は転移性、再発、一種以上の抗癌治療に対し耐性又は難治性であってもよい。こうして、患者は治療無経験であってもよく、一種以上の先の抗癌治療薬（これらはその疾患を完全には治癒していなかった）を受けていてもよい。
再発及び／又は一種以上のその他の（通常の）抗癌剤に対する耐性もしくはその失敗を有する患者がまた、必要により一種以上のその他の抗癌剤（併用組み合わせ又は置換治療として）と組み合わせて、例えば、第二選択又は第三選択治療サイクルのために、本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターによる治療を受け易い。
従って、本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターを伴なう開示された方法の幾つかは癌が再発した対象、もしくは癌が薬物耐性又は多薬物耐性になった対象、又は第一選択、第二選択もしくはそれ以上の選択の一種以上の抗癌剤（例えば、本明細書に挙げれた一種以上のその他の抗癌剤、特に通常の化学治療薬、標的又は非標的薬物）による（単一又は組み合わせ）治療に失敗した対象を治療するのに有効である。
【００８８】
初期に抗癌剤（例えば、本明細書に記載された抗癌剤）に応答した癌は再発することがあり、抗癌剤が、例えば、増加された用量の抗癌剤の投与にもかかわらず、癌を有する対象を治療するのに最早有効ではなくなる場合にそれが抗癌剤に耐性になる。２種以上の抗癌剤に対し耐性を発生した癌は多薬物耐性であると言われる。
従って、本発明の（組み合わせ）治療の幾つかの方法において、第二又は第三に投与される薬剤（例えば、二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター）による治療は患者が初期に、又は既に投与された一種以上の薬剤に対し耐性を有し、又は耐性を発生する場合に始められる。患者は夫々の薬剤による治療の単一コースのみ又は一種、二種又はそれ以上の薬剤による多コースを受けてもよい。
或る場合には、本発明の組み合わせ治療は、それ故、初期治療もしくは併用組み合わせ治療、置換治療又は管理治療を含んでもよい。
一種以上の活性物質、そして必要により一種以上の医薬上許される担体、賦形剤及び／又は希釈剤を含む医薬組成物は、当業者にそれ自体通例の方法に従って、又は既知の操作と同様にして調製されてもよい。本発明のこのような医薬組成物を調製するための方法は一種以上の活性物質及び一種以上の医薬上許される担体、賦形剤及び／又は希釈剤を合わせ、又は混合することを含んでもよい。
好適な製剤として、例えば、錠剤、カプセル、座薬、溶液、例えば、注射用の溶液（s.c.、i.v.、i.m.）及び注入用の溶液、エリキシル剤、エマルション又は分散可能な粉末が挙げられる。一種以上の医薬上活性な化合物の含量は全体としての組成物の0.1〜90質量％、好ましくは0.5〜50質量％の範囲、即ち、以下に明記される用量範囲を得るのに充分である量であるべきである。明記された用量は、必要により、１日に数回与えられてもよい。
【００８９】
好適な錠剤は、例えば、活性物質（必要により組み合わせてもよい）を既知の賦形剤、例えば、不活性希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、セルロース又はラクトース、崩壊剤、例えば、トウモロコシ澱粉もしくはアルギン酸又はクロスポビドン、バインダー、例えば、澱粉（例えば、前膠化澱粉）、セルロース（例えば、微結晶性セルロース）、コポビドン又はゼラチン、滑剤、潤滑剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム又はタルク及び／又は放出を遅延するための薬剤、例えば、カルボキシメチルセルロース、セルロースアセテートフタレート、又はポリ酢酸ビニルと混合することにより得られてもよい。錠剤は通常の方法、例えば、直接圧縮又はロール圧縮により調製されてもよい。錠剤はまた幾つかの層を含んでもよい。
例えば、本発明の好適な医薬組成物（特に固体経口投薬形態、例えば、錠剤）は本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターそして必要により一種以上の医薬上許される担体、賦形剤及び／又は希釈剤（典型的にはラクトース、微結晶性セルロース、前膠化澱粉、コポビドン、クロスポビドン、二酸化ケイ素及びステアリン酸マグネシウムから選ばれる）を含む。
従って、被覆錠剤は錠剤と同様にして製造されたコアーを錠剤被覆（例えば、ポリマー又は多糖をベースとし、必要により可塑剤及び顔料を含んでもよい）、に通常使用される物質、例えば、コリドン又はセラック、アラビアゴム、タルク、二酸化チタン又は糖で被覆することにより調製されてもよい。遅延放出を得、又は不適合性を防止するために、コアーはまた幾つかの層からなってもよい。同様に、錠剤被覆物はおそらく錠剤について上記された賦形剤を使用して、遅延放出を得るために幾つかの層からなってもよい。
例えば、本発明の好適な被覆錠剤はフィルム形成剤、可塑剤、滑剤そして必要により一種以上の顔料を含むフィルムコートを含む。
本発明の活性物質又はこれらの組み合わせを含むシロップ又はエリキシル剤は更に甘味料、例えば、サッカリン、シクラメート、グリセロール又は糖及び風味増強剤、例えば、風味料、例えば、バニリン又はオレンジエキスを含んでもよい。それらはまた懸濁アジュバント又は増粘剤、例えば、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、湿潤剤、例えば、脂肪アルコールとエチレンオキサイドの縮合生成物、又は防腐剤、例えば、p-ヒドロキシベンゾエートを含んでもよい。
【００９０】
注射溶液及び注入溶液は必要により乳化剤及び／又は分散剤を使用して、通常の方法で、例えば、等張剤、防腐剤、例えば、p-ヒドロキシベンゾエート、又は安定剤、例えば、エチレンジアミンテトラ酢酸のアルカリ金属塩を添加して調製され、例えば、水を希釈剤として使用する場合、有機溶媒が必要により可溶化剤又は溶解助剤として使用され、注射バイアルもしくはアンプル又は注入びんに移されてもよい。
一種以上の活性物質又は活性物質の組み合わせを含むカプセルは、例えば、活性物質を不活性担体、例えば、ラクトース又はソルビトールと混合し、それらをゼラチンカプセルに詰めることにより調製し得る。
好適な座薬は、例えば、この目的に用意された担体、例えば、中性脂肪もしくはポリエチレングリコール又はそれらの誘導体と混合することにより製造し得る。
使用し得る賦形剤として、例えば、水、医薬上許される有機溶媒、例えば、パラフィン（例えば、石油留分）、植物油（例えば、落花生油又はゴマ油）、一官能性又は多官能性アルコール（例えば、エタノール又はグリセロール）、担体、例えば、天然鉱物粉末（例えば、カオリン、クレー、タルク、チョーク）、合成鉱物粉末（例えば、高度に分散されたケイ酸及びケイ酸塩）、糖（例えば、蔗糖、ラクトース及びグルコース）、乳化剤（例えば、リグニン、使用済み亜硫酸塩液、メチルセルロース、澱粉及びポリビニルピロリドン）及び滑剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ステアリン酸及びラウリル硫酸ナトリウム）が挙げられる。
【００９１】
本発明の組み合わせの要素は当業者に通例の方法により、例えば、投与の経口、腸内、非経口（例えば、筋肉内、腹腔内、静脈内、経皮又は皮下の注射、或いは移植体）、鼻内、膣内、直腸、又は局所の投与の経路により（必要により独立に）投与されてもよく、投与の夫々の経路に適した通常の無毒性の医薬上許される担体、アジュバント及びビヒクルを含む好適な投薬単位製剤中に、単独で、又は一緒に、製剤化されてもよい。
本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターは通常の方法により、好ましくは経口経路又は非経口経路、最も好ましくは経口経路により投与される。経口投与について、錠剤は、上記担体は別にして、種々の添加剤、例えば、澱粉、好ましくはジャガイモ澱粉、ゼラチン等と一緒に添加剤、例えば、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム及びリン酸二カルシウムを含んでもよい。更に、滑剤及び／又は潤滑剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム及びタルクが錠剤形成方法に同時に使用されてもよい。水性懸濁液の場合、活性物質が上記賦形剤に加えて種々の風味増強剤又は着色剤と合わされてもよい。
非経口使用について、好適な液体担体とともに活性物質の溶液が使用されてもよい。
経口使用のための用量は１日当り1 - 2000 mg （例えば、１日当り50mgから700 mgまで）である。静脈内使用のための用量は１時間当り1 - 1000 mg 、好ましくは１時間当り５〜500 mgである。
しかしながら、体重、投与の経路、薬物に対する個体の応答、その製剤の性質及び薬物が投与される時間又は間隔に応じて、明記された量からずれることが時折必要であるかもしれない。こうして、或る場合には、先に示された最小用量より少ない量を使用することが充分であるかもしれず、一方、その他の場合には上限が超えられる必要があるかもしれない。多量を投与する場合、それらを１日にわたって広げられる幾つかの一層小さい用量にわけることが推奨されるかもしれない。
本発明は本明細書に記載された特別な実施態様によりその範囲を限定されるべきではない。本明細書に記載された改良に加えて本発明の種々の改良が本開示から当業者に明らかになり得る。このような改良は特許請求の範囲内に入ることが意図されている。
本明細書に引用された全ての特許出願が参考として本明細書にそのまま含まれる。
本発明の更なる実施態様、特徴及び利点が下記の実施例から明らかになり得る。下記の実施例は本発明の原理を例示するのに利用できるが、それを限定するものではない。
【実施例】
【００９２】
1.オーロラＢキナーゼアッセイ:
野生型(wt)ツメガエルオーロラ B/INCENP 複合体を使用する放射性キナーゼアッセイ:
タンパク質発現: 野生型(wt)ツメガエルオーロラ B60-361/ INCENP790-847 複合体の調製をSessa ら著. 2005に実質的に記載されたように行なった。
その複合体のATP-KM値は61 μM である。10 μM の基質ペプチドを使用してキナーゼアッセイを100 μM ATPの存在下で実施する。pAUB-IN847を使用してpUBS520 ヘルパープラスミドを含むE. coli 株BL21(DE3) を形質転換した。タンパク質及びそれらの突然変異体の両方を発現し、実質的に同じ条件下で精製する。タンパク質発現を0.45-0.7のOD600 で0.3 mM IPTG で誘発する。次いで発現を約12-16 時間にわたって23-25 ℃で撹拌しながら続ける。細菌細胞をベックマンJLA 8.1 ローター中で4000 rpm x 15 分で遠心分離により回収し、ペレットを溶解緩衝液 (50 mM Tris HCl pH 7.6, 300 mM NaCl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 5 %グリセロール, Roche Completeプロテアーゼインヒビター錠剤) 中で再度懸濁させる。溶解緩衝液20-30 mlをE. coli 培養液１リットル当り使用する。細胞を音波処理により溶解し、溶解産物を12000 rpm で45-60 分間にわたってJA20ローターで遠心分離により浄化する。上澄みを細菌培養液１リットル当り300 μl のGST セファロース・ファスト・フロー (Amersham Biosciences) とともにインキュベートする。その樹脂を最初にPBS 緩衝液で洗浄し、最後に溶解緩衝液で平衡にする。４℃で4-5 時間の撹拌後に、ビーズを30倍容の溶解緩衝液で洗浄し、次いで30倍容の開裂緩衝液 (50 mM Tris pH 7.6, 150 mM NaCl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA)で平衡にする。GST をオーロラＢから開裂するために、基質１ミリグラム当り10単位のPrescission プロテアーゼ (Amersham Biosciences) を添加し、インキュベーションを４℃で16時間にわたって延長する。上澄み（これは開裂産物を含む）を集め、イオン交換緩衝液 (50 mM Tris pH 7.6, 150 mM NaCl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA)で平衡にされた6 mlのResource Qカラム (Amersham Biosciences) に装填する。オーロラ B/INCENP 複合体をそのカラムのフロースルー中に集める。Resource Qカラムのフロースルーを濃縮し、SEC 緩衝液 (Tris HCl 10 mM pH 7.6, NaCl 150 mM, DTT 1 mM, EDTA 1 mM)で平衡にされたSuperdex 200サイズ排除クロマトグラフィー (SEC)カラムに装填する。オーロラ-B/INCENP を含む画分を集め、Vivaspin濃縮機 (MWカットオフ 3-5 K) を使用して12 mg/mlの最終濃度まで濃縮する。最終収量は細菌１リットル当り純粋な複合体約1-2 mgである。精製された(wt)ツメガエルオーロラ B60-361/INCENP790-847 複合体を脱塩緩衝液 (50 mM Tris/Cl pH 8.0, 150 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 0.03% Brij-35, 10% グリセロール, 1 mM DTT) 中で-80 ℃で貯蔵した。
【００９３】
アッセイ条件: 酵素活性を連続インヒビター希釈液の存在下又は不在下でアッセイした。そのキナーゼアッセイ (反応容積50 μl/ウェル) について、96-ウェル PP-Microplates (Greiner, 655 201) を使用した。25% DMSO中 10 μlの化合物に、30 μl のPROTEIN-MIX (166 μM ATP 、キナーゼ緩衝液[50 mM Tris/HCl pH 7.5, 25 mM MgCl2, 25 mM NaCl], 10 ng wt-オーロラ-B60-361/INCENP790-847) を添加し、続いて室温で15分間インキュベートした (撹拌、350 rpm)。これに、10 μl のペプチド-MIX (2x キナーゼ緩衝液, 5 mM NaF, 5 mM DTT, 1 μCi 33P-ATP, 50 μM ペプチド (ビオチン-LRRWSLGLRRWSLGLRRWSLGLRRWSLG)を添加した。その混合物を室温で60分間インキュベートし (撹拌、350 rpm) 、続いて180μlの6.4% TCA (最終濃度: 5%) を添加して反応を停止した。続いて、Multiscreen濾過プレート (Millipore, MAIP N0B 10) を100 μlの70% エタノール及び1% TCA で平衡にし、その後に停止されたキナーゼ反応液を添加した。180 μlの1% TCAで５回の洗浄後に、プレートの下部を乾燥させた。25 μl のシンチレーションカクテル (Microscint, High Efficiency LSC-Cocktail, Packard, 6013611) を添加し、とり込まれたガンマホスフェートを好適なシンチレーションカウンター中で測定した。
データ分析: インヒビター濃度を対数値に変換し、生のデータを標準化した。これらの標準化値を使用してIC50値を計算した。可変Hill傾斜とともにシグモイド曲線分析プログラム (Graph Pad Prism バージョン3.0)を使用してデータを反復計算によりフィットした。夫々のミクロタイタプレートは内部対照、例えば、ブランク、最大反応及び歴史的基準化合物を含んでいた。
【００９４】
NCI-H460細胞中のヒストンH3リン酸化の分析:
NCI-H460細胞を4000の細胞／ウェルの細胞密度で96ウェル平底Falconプレートに塗布した。翌日に、細胞を16時間にわたって300 nM BIVC0030BS で処理することによりそれらを同調させた。このCDK1インヒビターは細胞をG2で静止する。培地で１回洗浄することにより細胞を抑制性G2ブロックから放出する。有糸分裂への同調エントリーが60分後に高比率 (70-80%) の有糸分裂細胞をもたらす。新しい培地及び化合物をウェルに添加し、夫々が薬物濃度で２回反復であった。ウェル当りの最終容積は200 μlであり、試験化合物の最終濃度は10 μM 〜5 nMの範囲をカバーした。最終DMSO濃度は0.1%であった。細胞を保湿雰囲気中で37℃及び5% CO2で正確に60分間インキュベートした。培地を吸引し、細胞を固定し、室温で10分間にわたってトリトンX-100 (1:200) を含む100 μlの温かい4%ホルムアルデヒド溶液で透過性にした。ブロッキング緩衝液 (0.3% BSA/PBS) で２回洗浄した後、1:500に希釈されたポリクローナル抗体坑ホスホH3 (Ser28) の溶液50 μl を室温で１時間にわたって添加した。ブロッキング緩衝液で２回洗浄した後、細胞を暗所で室温で１時間にわたって50 μl のヤギ坑ウサギF(ab)2フラグメント Alexa Fluor 594 (1:2000) + DAPI (最終濃度300 nM) とともにインキュベートした。プレートを洗浄し、200 μlのPBS を添加し、プレートを黒色箔でシールし、Cell Cycle BioApplication プログラムを適用してCellomics ArrayScan で分析した。そのアッセイで生じたデータをプログラムPRISM (GraphPad Inc.) により分析した。インヒビター濃度を対数値に変換し、EC50を非線形回帰曲線フィット (シグモイドの用量-応答(可変傾斜))により計算した。
【００９５】
2. MEK キナーゼアッセイ:
Invitrogen のZ'-LYTETM キナーゼアッセイを使用して化合物のMEK 抑制活性を測定する。
そのZ´-LYTE（登録商標）生化学的アッセイは蛍光に基づく、結合型酵素フォーマットを使用し、タンパク質分解開裂についてのリン酸化ペプチド及び非リン酸化ペプチドの異なる感受性に基づく。ペプチド基質をFRET対を構成する２種の発蛍光団（夫々の末端で一種）で標識する。
その主反応で、そのキナーゼがATP のガンマ-ホスフェートを合成FRET-ペプチド中の単一のチロシン、セリン又はスレオニン残基に転移する。その二次反応で、部位特異性プロテアーゼが非リン酸化FRET-ペプチドを認識し、開裂する。FRET-ペプチドのリン酸化がその顕色(Development) 試薬による開裂を抑制する。開裂がFRET-ペプチドのドナー（即ち、クマリン）発蛍光団及びアクセプター（即ち、フルオレセイン）発蛍光団の間でFRETを分断し、一方、開裂されない、リン酸化FRET-ペプチドがFRETを維持する。レシオメトリック方法（これは400nmにおけるドナー発蛍光団の励起後のドナー発光対アクセプター発光の比（発光比）を計算する）を、使用して下記の式に示されるように、反応進行を定量する:
発光比= クマリン発光 (445 nM)/フルオレセイン発光 (520 nM) 。
開裂FRET-ペプチド及び非開裂FRET-ペプチドの両方が蛍光シグナルひいては発光比に寄与する。FRET-ペプチドのリン酸化の程度を発光比から計算し得る。発光比はFRET-ペプチドがリン酸化される場合（即ち、キナーゼ非抑制）に低く留まり、FRET-ペプチドがリン酸化されない場合（即ち、キナーゼ抑制）に高いであろう。
試験化合物をウェル中の1% DMSO (最終)中でスクリーニングする。10点滴定のために、３倍連続希釈を開始濃度 (1 μM) から行なう。
全てのペプチド／キナーゼ混合物を適当なキナーゼ緩衝液中で2X作用濃度まで希釈する。
全てのATP 溶液をキナーゼ緩衝液 (50 mM HEPES pH 7.5, 0.01% BRIJ-35, 10 mM MgCl2, 1 mM EGTA)中で4X作用濃度まで希釈する。
Z´-LYTE（登録商標） アッセイを使用して見掛ATP Kmを予め測定する。
【００９６】
アッセイプロトコル:
1. 2.5 μL - 4X 試験化合物又は100 nL 100X ＋2.4 μL キナーゼ緩衝液
2. 5 μL - 2X ペプチド/キナーゼ混合物
3. 2.5 μL - 4X ATP 溶液
4. 30秒のプレート振とう
5. 室温における60分のキナーゼ反応液インキュベーション
6. 5 μL -顕色試薬溶液
7. 30秒のプレート振とう
8. 室温で60分の顕色反応液インキュベーション
9. 蛍光プレートリーダーで読み取り、データを分析する
【００９７】
MAP2K1 (MEK1) 特異的アッセイ条件- カスケードフォーマット:
2X MAP2K1 (MEK1) / 不活性MAPK1 (ERK2)/Ser/Thr 03 混合物を50 mM HEPES pH 7.5、 0.01% BRIJ-35 、10 mM MgCl2、1 mM EGTA 中で調製する。最終の10 μL のキナーゼ反応液は50 mM HEPES pH 7.5、 0.01% BRIJ-35 、10 mM MgCl2、1 mM EGTA 中の1.29 - 5.18 ngのMAP2K1 (MEK1)、105 ngの不活性MAPK1 (ERK2)、及び2 μM Ser/Thr 03 からなる。１時間のキナーゼ反応液インキュベーション後に、5 μL の顕色試薬Ａの1:1024希釈液を添加する。
【００９８】
MAP2K2 (MEK2) 特異的アッセイ条件- カスケードフォーマット:
2X MAP2K2 (MEK2) /不活性MAPK1 (ERK2)/Ser/Thr 03 混合物を50 mM HEPES pH 7.5、0.01% BRIJ-35 、10 mM MgCl2 、1 mM EGTA中で調製する。最終の10 μL のキナーゼ反応液は50 mM HEPES pH 7.5、0.01% BRIJ-35 、10 mM MgCl2 、1 mM EGTA中の1.13 - 4.5 ngのMAP2K2 (MEK2) 、105 ngの不活性MAPK1 (ERK2) 、及び2 μM Ser/Thr 03からなる。１時間のキナーゼ反応液インキュベーション後に、5 μL の顕色試薬Ａの1:1024希釈液を添加する。
Z′-LYTE（登録商標） アッセイ対照:
0% リン酸化対照 (100% 抑制対照):
最大発光比を0% リン酸化対照 (100% 抑制対照) （これはATP を含まず、それ故、キナーゼ活性を示さない）により実証する。この対照は顕色反応で100%開裂されたペプチドを生じる。
100%リン酸化対照:
100%リン酸化対照（これはペプチド基質と同じ配列の合成リン酸化ペプチドからなる）を、リン酸化の％の計算を可能にするように設計する。
この対照は顕色反応で非常に低い％の開裂されたペプチドを生じる。
その0%リン酸化対照及び100%リン酸化対照が特別な反応ウェル中で得られたリン酸化の％を計算することを可能にする。対照ウェルはキナーゼインヒビターを含まない。
0%抑制対照:
スクリーン中の最小発光比を0%抑制対照（これは活性キナーゼを含む）により実証する。この対照をキナーゼ反応で10-70% リン酸化ペプチドを生成するように設計する。
【００９９】
既知のインヒビター (スタウロスポリンIC50 MEK1/MEK2 14.7 nM / 15.2 nM (100 μM ATPにおける))対象標準曲線（10点滴定）をキナーゼと同じプレートで夫々の個々のキナーゼについて実験して、キナーゼが既に測定された予想IC50範囲内で抑制されることを確実にする。
顕色反応干渉:
顕色反応干渉をATP を含まない試験化合物対照ウェル対0%リン酸化対照（これは試験化合物を含まない）を比較することにより実証する。非干渉化合物について予想される値は100%であるべきである。90% 〜110%の外のあらゆる値をフラッグ（flag）する。
試験化合物蛍光干渉:
試験化合物蛍光干渉をキナーゼ／ペプチド混合物を含まない試験化合物対照（ゼロペプチド対照）対0%抑制対照を比較することにより測定する。非蛍光化合物について予想される値は0%であるべきである。20% より大きいあらゆる値をフラッグ（flag）する。
グラフ化ソフトウェアとして、IDBSからのXLfit を使用する。その用量応答曲線はモデル番号205 （シグモイドの用量応答モデル）についての曲線フィットである。曲線の下部が-20% & 20%抑制の間にフィットしない場合、それを0%抑制にセットする。曲線の上部が70% 〜130%抑制にフィットしない場合、それを100%抑制にセットする。
SK-MEL-28 細胞中のERK のリン酸化の分析:
迅速活性化細胞をベースとするELISA (FACE) SK-MEL-28 p-ERK: 
細胞培養:
10% ウシ胎児血清、2%重炭酸Na、1%ピルビン酸Na溶液、1% NEAA 100x 及び2 mM L-グルタミンを補給したMEM 培地を使用してSK-MEL28細胞 (ヒトメラノーマ) をT75 フラスコ中で増殖させる。培養液を週２回の培地交換又は継代培養により、保湿雰囲気中で37℃及び5% CO2でインキュベートする。
アッセイ条件:
ウェル/90μl 培地当り7,500 の細胞を96ウェルプレート (平底, Costar #3598) に塗布する。翌日に、化合物 (原液: 100% DMSO中10 mM) を培地中で希釈し (原液)、又は培地＋10% DMSO中で連続希釈する (全てのその他の希釈工程) 。10 μl の希釈された化合物をウェルに添加し、DMSOの最終濃度は1%である。試験化合物の濃度は通常10マイクロモル〜2.4 ナノモル（最小）の範囲をカバーする。細胞を保湿雰囲気中で37℃及び5% CO2で２時間インキュベートする。
【０１００】
上澄みを除去する。細胞を20分間にわたって室温で150 μlのPBS 中4%ホルムアルデヒドで固定する。
細胞層を夫々５分間にわたって200 μlのPBS 中0.1% トリトンX-100で５回洗浄し、続いてブロッキング緩衝液 (TBS-T 中5%無脂肪乾燥ミルク) とともに90分間インキュベートする。
ブロッキング緩衝液を50 μl/ウェルの一次抗体 [モノクローナル坑MAP キナーゼジリン酸化Erk-1&2 (Sigma, #M8159); 1:500 Verd.] により交換し、４℃で一夜インキュベートする。
細胞層を夫々５分間にわたって200 μlのPBS 中0.1% トリトンX-100で５回洗浄する。
細胞層を50 μl/ウェルの二次抗体 [ポリクローナルウサギ坑マウスHRPO結合型、(Dako, #P0161); ブロッキング緩衝液中の1:1000希釈液] とともに１時間インキュベートする。
細胞層を夫々５分間にわたって200 μlのPBS 中0.1%トゥイーン20で５回洗浄する。
100 μl/ウェルの染色溶液 (TMB ペルオキシダーゼ基質溶液; Bender MedSystems #BMS406) を暗所で5-30分間にわたって添加することによりペルオキシダーゼ染色を行なう。100μl/ウェルの1 M リン酸を添加することにより反応を停止する。
その染色を450 nmでMultilabel Reader (Wallac Victor 2) で測定する。
データを可変ヒル傾斜(FIFTY バージョン2)でシグモイド曲線分析プログラム (Prismバージョン3.0, Graph PAD) を使用してデータを反復計算によりフィットする。
【０１０１】
In vivo 効力
本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターのin vivo 効力をヌードマウスで種々の癌遺伝子ゲノム表示を示す通常のヒト腫瘍モデルで評価する。例えば、HCT116 (K-RASG13G/D 及びPIK3CAH1047H/R突然変異体) 、及びColo205 (B-RAFV600E 突然変異体) 結腸癌、NCI-H460 (K-RASQ61H 及びPIK3CAE545K/E 突然変異体) 及びCalu-6 (K-RASQ61K 及びTP53R196* 突然変異体) 非小細胞肺癌、BxPC-3 (TP53Y220C 突然変異) 膵臓癌又はメラノーマ A-375 (B-RAFV600E 突然変異体) 細胞系に由来する外殖体は腫瘍学的化合物の前臨床評価のための実証モデルである。腫瘍細胞をヌードマウスの右側腹部に皮下(s.c.) 注射する。加えて、本発明の二重MEK/オーロラＢキナーゼインヒビターの効力をMDR1過剰発現を含むヒト結腸癌CxB1 (CxB1腫瘍移植体はまたK-RASG13D 突然変異及びTP53R175H及び P72R突然変異を示す) のヌードマウス外殖体モデルで評価する。50-100 mm3の平均体積を有する実証された腫瘍を有するマウスを治療グループ及び対照グループにランダム化する。腫瘍が約50 mm3のメジアン体積に達した時に治療を典型的に開始し、３〜６週にわたって続ける。最大寛容用量 (MTD)を外殖体実験の前に腫瘍のないヌードマウスで寛容性試験で測定する。本発明の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターを経口(p.o.)投与することが好ましい。
夫々の化合物による有効な治療はその夫々のMTD で使用される場合に治療後に増殖遅延により特徴づけられる。延長された治療が治療動物で腫瘍退縮を誘発することが好ましい。MEK の薬物動態学的抑制はMEK の直接の基質である、ERK/MAPKのリン酸化状態を測定することによりin vivo で監視し得る。免疫組織化学分析はビヒクル措置対照と較べて治療動物でpERK腫瘍レベルの有意な減少 (> 50%)を示す標的抑制を確かめる。
オーロラＢの薬物動態学的抑制はオーロラＢの基質である、ヒストンH3のリン酸化状態を測定することによりin vivo で監視し得る。免疫組織化学分析はビヒクル措置対照と較べて治療動物でリン酸化ヒストンH3腫瘍レベルの有意な減少 (> 50%)を示す標的抑制を確かめる。
例えば、最大寛容用量で投与される本発明の例示の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビターにより治療されるHCT-116 結腸癌では、オーロラＢによるヒストンH3のリン酸化が対照腫瘍と較べて少なくとも50％減少される。
同様に、A-375 メラノーマ外殖体では、MEK 基質ERK のリン酸化が対照と較べて治療腫瘍で少なくとも50％（又は更にはそれ以上）減少される。
【０１０２】
医薬製剤の実施例：
下記の製剤実施例は本発明を更に充分に説明するが、それをこれらの実施例の内容に限定しない。“活性物質”という用語は本発明の一種以上の化合物を表し、特に本発明の式(1) の二重オーロラキナーゼ/MEKインヒビター、又は別の抗癌剤とのその組み合わせを表す。
A)    錠剤                  錠剤当り
活性物質                    100mg
ラクトース                  140mg
トウモロコシ澱粉            240mg
ポリビニルピロリドン         15mg
ステアリン酸マグネシウム      5mg
500mg
微粉砕された活性物質、ラクトース及びトウモロコシ澱粉の一部を一緒に混合する。その混合物を篩分け、次いで水中ポリビニルピロリドンの溶液で湿らせ、混錬し、湿式造粒し、乾燥させる。顆粒、残りのトウモロコシ澱粉及びステアリン酸マグネシウムを篩分け、一緒に混合する。その混合物を圧縮して好適な形状及びサイズの錠剤を製造する。
B)    錠剤                        錠剤当り
活性物質                          80mg
ラクトース                        55mg
トウモロコシ澱粉                 190mg
微結晶性セルロース                35mg
ポリビニルピロリドン              15mg
ナトリウムカルボキシメチル澱粉    23mg
ステアリン酸マグネシウム           2mg
400mg
微粉砕された活性化合物、トウモロコシ澱粉の一部、ラクトース、微結晶性セルロース及びポリビニルピロリドンを一緒に混合し、その混合物を篩分け、残りのトウモロコシ澱粉及び水で処理して顆粒を生成し、これを乾燥させ、篩分ける。ナトリウムカルボキシメチル澱粉及びステアリン酸マグネシウムを添加し、混合し、その混合物を圧縮して好適なサイズの錠剤を形成する。
【０１０３】
C)    アンプル溶液
活性物質                50mg
塩化ナトリウム          50mg
注射用の水               5ml
活性物質を水にそれ自体のpH又は必要によりpH5.5〜6.5で溶解し、塩化ナトリウムを添加してそれを等張性にする。得られた溶液を濾過して発熱物質を除き、濾液を無菌条件下でアンプルに移し、次いでこれらを滅菌し、溶融によりシールする。アンプルは活性物質5mg、25mg及び50mgを含む。
【国際調査報告】
2014507408.tif 000035
2014507408.tif 000036