(57)【要約】  筋タンパク質の異化作用を最小化しつつ筋タンパク質合成を最大化するための栄養組成物、及び該栄養組成物を使用する方法が提供される。この方法において、栄養組成物は除脂肪体重の維持を提供し得、これは、特にサルコペニア及び虚弱のリスクがある高齢者において、自立性及び機能性の喪失を回避するのに有用であるだけでなく、クオリティオブライフを改善するのに有用である。栄養組成物はα−ヒドロキシイソカプロン酸を含む。栄養組成物は、他の機能性成分（例えば、これらに限定されないが、乳清タンパク質（乳清タンパク質ミセルを包含する）、プレバイオティック繊維、Ｌ−カルニチン、ヌクレオチド、アミノ酸）を含んでもよい。それを必要とする個体にそのような栄養製品を投与する方法も提供される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｉ）それを必要とする個体における筋タンパク質合成の刺激、又は
ｉｉ）それを必要とする個体における筋タンパク質の異化作用の最小化、又は
ｉｉｉ）それを必要とする個体における除脂肪体重の維持、又は
ｉｖ）それを必要とする個体における、負荷軽減により誘導される骨量減少の低減、又は
ｖ）それを必要とする個体における骨格筋萎縮の軽減、又は
ｖｉ）それを必要とする個体における高尿毒症性負荷の緩和
に使用するための栄養組成物であって、
有効量のα−ヒドロキシイソカプロン酸を含む栄養組成物。
【請求項２】
個体は、高齢者、医学的状態を有する人、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１に記載の栄養組成物。
【請求項３】
高齢者は、サルコペニア、虚弱による障害のリスクがある人を含む、請求項２に記載の栄養組成物。
【請求項４】
１日当たり約１５０ｍｇ〜約２．５ｇ、好ましくは１日当たり約１．５ｇのα−ヒドロキシイソカプロン酸を個体に供給するように個体に投与される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の栄養組成物。
【請求項５】
１日当たり約０．１５ｇ〜約１０ｇ、好ましくは１日当たり約２ｇ〜約１０ｇ、より好ましくは１日当たり約０．５ｇ〜約５ｇのα−ヒドロキシイソカプロン酸を個体に供給するように個体に投与される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の栄養組成物。
【請求項６】
１日当たり約１５０ｍｇ〜約２．５ｇ、好ましくは１日当たり約１．５ｇのα−ヒドロキシイソカプロン酸を個体に供給するように個体に投与される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の栄養組成物。
【請求項７】
ω−３脂肪酸の供給源をさらに含み、ω−３脂肪酸の供給源は、魚油、オキアミ、ω−３脂肪酸を含有する植物性供給源、亜麻仁、クルミ、藻類、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の栄養組成物。
【請求項８】
ω−３脂肪酸は、α−リノレン酸（ＡＬＡ）、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、ステアリドン酸（ＳＤＡ）、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項７に記載の栄養組成物。
【請求項９】
ω−３脂肪酸は、１日当たり約０．２５ｇ〜５．０ｇ、好ましくは１日当たり約１．０〜３．０ｇの量で供給される、請求項７又は８に記載の栄養組成物。
【請求項１０】
フラバノイド、関連フェノール化合物、ポリフェノール化合物、テルペノイド、アルカロイド、含硫黄化合物、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される植物栄養素をさらに含む、請求項１〜９のいずれか一項に記載の栄養組成物。
【請求項１１】
植物栄養素は、カロテノイド、植物ステロール、ケルセチン、クルクミン、リモニン、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１０に記載の栄養組成物。
【請求項１２】
タンパク質源をさらに含む、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の栄養組成物。
【請求項１３】
タンパク質源は少なくとも１０ｇの高品質タンパク質を栄養組成物に供給する、請求項１２に記載の栄養組成物。
【請求項１４】
タンパク質源は１日当たり少なくとも１０ｇの高品質タンパク質を個体に供給する、請求項１２に記載の栄養組成物。
【請求項１５】
タンパク質源は、乳製品ベースのタンパク質、植物ベースのタンパク質、動物ベースのタンパク質、人工タンパク質、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１２〜１４のいずれか一項に記載の栄養組成物。
【請求項１６】
乳製品ベースのタンパク質は、カゼイン、ミセルカゼイン、カゼイン塩、カゼイン加水分解物、乳清、乳清タンパク質ミセル、乳清加水分解物、乳清濃縮物、乳清単離物、乳タンパク質濃縮物、乳タンパク質単離物、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１５に記載の栄養組成物。
【請求項１７】
植物ベースのタンパク質は、大豆タンパク質、エンドウタンパク質、キャノーラタンパク質、小麦タンパク質及び分画小麦タンパク質、トウモロコシタンパク質、ゼインタンパク質、米タンパク質、オート麦タンパク質、ジャガイモタンパク質、ピーナッツタンパク質、グリーンピース粉末、サヤインゲン粉末、スピルリナ、野菜由来のタンパク質、マメ、ソバ、レンズマメ、豆類、単細胞タンパク質、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１５に記載の栄養組成物。
【請求項１８】
アカシアガム、α−グルカン、アラビノガラクタン、β−グルカン、デキストラン、フルクトオリゴ糖、フコシルラクトース、ガラクトオリゴ糖、ガラクトマンナン、ゲンチオオリゴ糖、グルコオリゴ糖、グアーガム、イヌリン、イソマルトオリゴ糖、ラクトネオテトラオース、ラクトスクロース、ラクチュロース、レバン、マルトデキストリン、ミルクオリゴ糖、部分的に加水分解されたグアーガム、ペクチンオリゴ糖、難消化性デンプン、老化デンプン、シアロオリゴ糖、シアリルラクトース、大豆オリゴ糖、糖アルコール、キシロオリゴ糖、それらの加水分解物、及びそれらの組み合わせからなる群から選択されるプレバイオティクスをさらに含む、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の栄養組成物。
【請求項１９】
アエロコッカス属、アスペルギルス属、バクテロイデス属、ビフィドバクテリウム属、カンジダ属、クロストリジウム属、デバリオマイセス属、エンテロコッカス属、フソバクテリウム属、ラクトバチルス属、ラクトコッカス属、ロイコノストック属、メリソコッカス属、ミクロコッカス属、ムコール属、オエノコッカス属、ペディオコッカス属、ペニシリウム属、ペプトストレポコッカス属、ピキア属、プロピオニバクテリウム属、シュードカテヌラータム属、リゾプス属、サッカロマイセス属、スタフィロコッカス属、ストレプトコッカス属、トルロプシス属、ワイセラ属、非複製性微生物、及びそれらの組み合わせからなる群から選択されるプロバイオティクスをさらに含む、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の栄養組成物。
【請求項２０】
アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、シトルリン、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、ヒドロキシプロリン、ヒドロキシセリン、ヒドロキシチロシン、ヒドロキシリジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、タウリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、及びそれらの組み合わせからなる群から選択されるアミノ酸をさらに含む、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の栄養組成物。
【請求項２１】
アミノ酸は、イソロイシン、ロイシン、バリン、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される分岐鎖アミノ酸である、請求項２０に記載の栄養組成物。
【請求項２２】
アスタキサンチン、カロテノイド、補酵素Ｑ１０（ＣｏＱ１０）、フラボノイド、グルタチオン、ゴジ（クコ）、ヘスペリジン、ラクトウルフベリー、リグナン、ルテイン、リコペン、ポリフェノール、セレン、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ゼアキサンチン、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される抗酸化剤をさらに含む、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の栄養組成物。
【請求項２３】
ビタミンＡ、ビタミンＢ１（チアミン）、ビタミンＢ２（リボフラビン）、ビタミンＢ３（ナイアシン又はナイアシンアミド）、ビタミンＢ５（パントテン酸）、ビタミンＢ６（ピリドキシン、ピリドキサール、ピリドキサミン、又は塩酸ピリドキシン）、ビタミンＢ７（ビオチン）、ビタミンＢ９（葉酸）、ビタミンＢ１２（種々のコバラミン；ビタミンサプリメントでは一般にシアノコバラミン）、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、Ｋ１及びＫ２（すなわち、ＭＫ−４、ＭＫ−７）、葉酸、ビオチン、コリン、及びそれらの組み合わせからなる群から選択されるビタミンをさらに含む、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の栄養組成物。
【請求項２４】
ホウ素、カルシウム、クロム、銅、ヨウ素、鉄、マグネシウム、マンガン、モリブデン、ニッケル、リン、カリウム、セレン、ケイ素、スズ、バナジウム、亜鉛、及びそれらの組み合わせからなる群から選択されるミネラルをさらに含む、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の栄養組成物。
【請求項２５】
Ｌ−カルニチンをさらに含む、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の栄養組成物。
【請求項２６】
デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）のサブユニット、リボ核酸（ＲＮＡ）のサブユニット、ＤＮＡ及びＲＮＡのポリマー形態、酵母ＲＮＡ、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１種のヌクレオチドをさらに含む、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の栄養組成物。
【請求項２７】
少なくとも１種のヌクレオチドは外因性ヌクレオチドである、請求項２６に記載の栄養組成物。
【請求項２８】
ヌクレオチドは１日当たり約０．５ｇ〜３ｇの量で供給される、請求項２６又は２７に記載の栄養組成物。
【請求項２９】
錠剤、カプセル、液体、チュアブル錠、ソフトゲル、サシェ、粉末、シロップ、液体懸濁物、エマルジョン、溶液、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される形態である、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の栄養組成物。
【請求項３０】
粉末の形態である、請求項２９に記載の栄養組成物。
【請求項３１】
経口栄養補助食品又は経管栄養である、請求項１〜３０のいずれか一項に記載の栄養組成物。
【請求項３２】
完全栄養又は不完全栄養の供給源である、請求項１〜３１のいずれか一項に記載の栄養組成物。
【請求項３３】
それを必要とする個体において筋タンパク質合成を刺激する方法であって、
有効量のα−ヒドロキシイソカプロン酸を含む栄養組成物を個体に投与するステップを含む方法。
【請求項３４】
それを必要とする個体において筋タンパク質の異化作用を最小化する方法であって、
有効量のα−ヒドロキシイソカプロン酸を含む栄養組成物を個体に投与するステップを含む方法。
【請求項３５】
それを必要とする個体において除脂肪体重を維持する方法であって、
有効量のα−ヒドロキシイソカプロン酸を含む栄養組成物を個体に投与するステップを含む方法。
【請求項３６】
それを必要とする個体において、負荷軽減により誘導される骨量減少を低減する方法であって、
有効量のα−ヒドロキシイソカプロン酸を含む栄養組成物を個体に投与するステップを含む方法。
【請求項３７】
それを必要とする個体において骨格筋萎縮を軽減する方法であって、
有効量のα−ヒドロキシイソカプロン酸を含む栄養組成物を個体に投与するステップを含む方法。
【請求項３８】
それを必要とする個体において高尿毒症性負荷を緩和する方法であって、
有効量のα−ヒドロキシイソカプロン酸を含む栄養組成物を個体に投与するステップを含む方法。
【請求項３９】
栄養組成物は請求項２〜３２のいずれか一項に記載のものである、請求項３４〜３８のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【背景】
【０００１】
[0001]本開示は、概して健康及び栄養に関する。より具体的には、本開示は、α−ヒドロキシイソカプロン酸及び誘導体を含有する栄養組成物、及びその使用方法に関する。
【０００２】
[0002]現在、多くのタイプの栄養組成物が市販されている。栄養組成物は、その特定の成分に基づいて、ある特定の消費者タイプ（例えば、若年者、高齢者、運動選手）を対象とすることができる。例えば、高齢者及びある特定の疾病を有する個体は、筋タンパク質合成の低下（例えばサルコペニア）、摂取量の減少、又は疾病若しくは炎症の存在による要求量の増加に少なくとも部分的に起因する除脂肪体重の低下をしばしば経験する可能性がある。除脂肪体重の低下は、代謝安定性（グルコース耐性、インスリン感受性）、自立性、機能性及びクオリティオブライフの喪失、並びに認知能力の低下をもたらす可能性がある。そのため、そのような個体は、筋組織の同化作用の最大化及び異化作用の最小化を指向する食餌の投与によって大きな利益を受けるであろう。食餌はまた、異なる生理学的利益をもたらす異なるタイプの機能性化合物を栄養組成物に組み合わせることによって、個体にさらなる利益を提供することもできる。
【０００３】
[0003]すなわち、栄養的支援の目的の１つは、筋肉のパフォーマンスの改善、及び／又は除脂肪体重及び筋肉強度／筋力の維持を必要とする個体に、それに関して生理学的利益をもたらす栄養組成物を提供することである。
【概要】
【０００４】
[0004]本開示は、α−ヒドロキシイソカプロン酸を有する栄養組成物、及び栄養組成物の使用方法を対象とする。一実施形態において、栄養組成物は、有効量のα−ヒドロキシイソカプロン酸を含む。別の実施形態において、栄養組成物は、有効量のα−ヒドロキシイソカプロン酸及び有効量のシトルリンを含む。さらに別の実施形態において、栄養組成物は、有効量のα−ヒドロキシイソカプロン酸及び有効量のα−ケトグルタル酸を含む。さらに別の実施形態において、栄養組成物は、有効量のα−ヒドロキシイソカプロン酸及びエイコサペンタエン酸を含む。
【０００５】
[0005]一実施形態において、α−ヒドロキシイソカプロン酸は、約０．１５〜約１０ｇ、好ましくは約２ｇ〜約１０ｇの量で存在する。α−ヒドロキシイソカプロン酸はまた、約０．５ｇ〜約５ｇ、より好ましくは約２ｇ〜５ｇ、最も好ましくは約１．５ｇの量で存在してもよい。
【０００６】
[0006]一実施形態において、栄養組成物はω−３脂肪酸の供給源を含み、ω−３脂肪酸の供給源は、魚油、オキアミ、ω−３脂肪酸を含有する植物性供給源、亜麻仁、キャノーラ油、クルミ、藻類、又はそれらの組み合わせからなる群から選択される。ω−３脂肪酸は、α−リノレン酸（ＡＬＡ）、ステアリドン酸（ＳＤＡ）、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、又はそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【０００７】
[0007]一実施形態において、栄養組成物は、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）のサブユニット、リボ核酸（ＲＮＡ）のサブユニット、ＤＮＡ及びＲＮＡのポリマー形態、酵母ＲＮＡ、又はそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１種のヌクレオチドを含む。少なくとも１種のヌクレオチドは、外因性ヌクレオチドであってもよい。ヌクレオチドは、１日当たり約０．５ｇ〜３ｇの量で供給することができる。
【０００８】
[0008]一実施形態において、栄養組成物は、フラバノイド、関連フェノール化合物、ポリフェノール化合物、テルペノイド、アルカロイド、含硫黄化合物又はそれらの組み合わせからなる群から選択される植物栄養素を含む。植物栄養素は、カロテノイド、植物ステロール、ケルセチン、クルクミン、リモニン、又はそれらの組み合わせからなる群から選択することができる。
【０００９】
[0009]一実施形態において、栄養組成物はタンパク質源を含む。タンパク質源は栄養組成物に、少なくとも１０ｇの高品質タンパク質を供給することができ、又は１日当たり少なくとも１０ｇの量のタンパク質を供給することができる。タンパク質源は、乳製品ベースのタンパク質、植物ベースのタンパク質、動物ベースのタンパク質、人工タンパク質、又はそれらの組み合わせからなる群から選択することができる。乳製品ベースのタンパク質は、カゼイン、ミセルカゼイン、カゼイン塩、カゼイン加水分解物、乳清、乳清加水分解物、乳清濃縮物、乳清単離物、乳タンパク質濃縮物、乳タンパク質単離物、又はそれらの組み合わせからなる群から選択することができる。植物ベースのタンパク質は、大豆タンパク質、エンドウタンパク質、キャノーラタンパク質、小麦タンパク質及び分画小麦タンパク質、トウモロコシタンパク質、ゼインタンパク質、米タンパク質、オート麦タンパク質、ジャガイモタンパク質、ピーナッツタンパク質、グリーンピース粉末、サヤインゲン粉末、スピルリナ、野菜由来のタンパク質、マメ、ソバ、レンズマメ、豆類、単細胞タンパク質、又はそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００１０】
[0010]一実施形態において、栄養組成物には、アカシアガム、α−グルカン、アラビノガラクタン、β−グルカン、デキストラン、フルクトオリゴ糖、フコシルラクトース、ガラクトオリゴ糖、ガラクトマンナン、ゲンチオオリゴ糖、グルコオリゴ糖、グアーガム、イヌリン、イソマルトオリゴ糖、ラクトネオテトラオース、ラクトスクロース、ラクチュロース、レバン、マルトデキストリン、ミルクオリゴ糖、部分的に加水分解されたグアーガム、ペクチンオリゴ糖、難消化性デンプン、老化デンプン、シアロオリゴ糖、シアリルラクトース、大豆オリゴ糖、糖アルコール、キシロオリゴ糖、それらの加水分解物、又はそれらの組み合わせからなる群から選択されるプレバイオティクスが含まれる。
【００１１】
[0011]一実施形態において、栄養組成物には、アエロコッカス属（Ａｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、アスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、バクテロイデス属（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、ビフィドバクテリウム属（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、カンジダ属（Ｃａｎｄｉｄａ）、クロストリジウム属（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、デバリオマイセス属（Ｄｅｂａｒｏｍｙｃｅｓ）、エンテロコッカス属（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、フソバクテリウム属（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ラクトバチルス属（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、ラクトコッカス属（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ロイコノストック属（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）、メリソコッカス属（Ｍｅｌｉｓｓｏｃｏｃｃｕｓ）、ミクロコッカス属（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ）、ムコール属（Ｍｕｃｏｒ）、オエノコッカス属（Ｏｅｎｏｃｏｃｃｕｓ）、ペディオコッカス属（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ）、ペニシリウム属（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）、ペプトストレポコッカス属（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｏｃｏｃｃｕｓ）、ピキア属（Ｐｉｃｈｉａ）、プロピオニバクテリウム属（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、シュードカテヌラータム属（Ｐｓｅｕｄｏｃａｔｅｎｕｌａｔｕｍ）、リゾプス属（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）、サッカロマイセス属（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）、スタフィロコッカス属（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）、ストレプトコッカス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、トルロプシス属（Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉｓ）、ワイセラ属（Ｗｅｉｓｓｅｌｌａ）、非複製性微生物、又はそれらの組み合わせからなる群から選択される、プロバイオティクスが含まれる。
【００１２】
[0012]一実施形態において、栄養組成物には、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、シトルリン、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、ヒドロキシプロリン、ヒドロキシセリン、ヒドロキシチロシン、ヒドロキシリジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、タウリン、トレオニン、オルニチン、トリプトファン、チロシン、バリン、又はそれらの組み合わせからなる群から選択されるアミノ酸が含まれる。一実施形態において、アミノ酸はシトルリンである。一実施形態において、アミノ酸は、イソロイシン、ロイシン、バリン、又はそれらの組み合わせからなる群から選択される分岐鎖アミノ酸である。
【００１３】
[0013]一実施形態において、栄養組成物には、アスタキサンチン、カロテノイド、補酵素Ｑ１０（ＣｏＱ１０）、フラボノイド、グルタチオン、ゴジ（クコ）、ヘスペリジン、ラクトウルフベリー、リグナン、ルテイン、リコペン、ポリフェノール、セレン、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ゼアキサンチン、又はそれらの組み合わせからなる群から選択される抗酸化剤が含まれる。
【００１４】
[0014]一実施形態において、栄養組成物には、ビタミンＡ、ビタミンＢ１（チアミン）、ビタミンＢ２（リボフラビン）、ビタミンＢ３（ナイアシン又はナイアシンアミド）、ビタミンＢ５（パントテン酸）、ビタミンＢ６（ピリドキシン、ピリドキサール、ピリドキサミン、又は塩酸ピリドキシン）、ビタミンＢ７（ビオチン）、ビタミンＢ９（葉酸）、ビタミンＢ１２（種々のコバラミン；ビタミンサプリメントでは一般にシアノコバラミン）、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、Ｋ１及びＫ２（すなわち、ＭＫ−４、ＭＫ−７）、葉酸、ビオチン、コリン、又はそれらの組み合わせからなる群から選択されるビタミンが含まれる。
【００１５】
[0015]一実施形態において、栄養組成物には、ホウ素、カルシウム、クロム、銅、ヨウ素、鉄、マグネシウム、マンガン、モリブデン、ニッケル、リン、カリウム、セレン、ケイ素、スズ、バナジウム、亜鉛、又はそれらの組み合わせからなる群から選択されるミネラルが含まれる。
【００１６】
[0016]一実施形態において、栄養組成物には、α−ケトグルタル酸、Ｌ−カルニチン、又はそれらの組み合わせからなる群から選択される化合物が含まれる。
【００１７】
[0017]一実施形態において、栄養組成物は、錠剤、カプセル、液体、チュアブル錠、ソフトゲル、サシェ（ｓａｃｈｅｔ）、粉末、シロップ、液体懸濁物、エマルジョン、溶液、又はそれらの組み合わせからなる群から選択される形態である。一実施形態において、栄養組成物は粉末の形態である。
【００１８】
[0018]一実施形態において、栄養組成物は、経口栄養補助食品、経管栄養、又はそれらの組み合わせである。
【００１９】
[0019]一実施形態において、栄養組成物は完全栄養の供給源である。別の実施形態において、栄養組成物は不完全栄養の供給源である。
【００２０】
[0020]さらに別の実施形態では、それを必要とする個体において、筋タンパク質合成を刺激する方法が提供される。この方法は、有効量のα−ヒドロキシイソカプロン酸を含む栄養組成物を個体に投与するステップを含む。
【００２１】
[0021]さらに別の実施形態では、それを必要とする個体において、筋タンパク質の異化作用を最小化する方法が提供される。この方法は、有効量のα−ヒドロキシイソカプロン酸を含む栄養組成物を個体に投与するステップを含む。
【００２２】
[0022]別の実施形態では、それを必要とする個体において、除脂肪体重を維持する方法が提供される。この方法は、有効量のα−ヒドロキシイソカプロン酸を含む栄養組成物を個体に投与するステップを含む。
【００２３】
[0023]さらに別の実施形態では、それを必要とする個体において、負荷軽減により誘導される骨量減少を低減する方法が提供される。この方法は、有効量のα−ヒドロキシイソカプロン酸を含む栄養組成物を個体に投与するステップを含む。
【００２４】
[0024]さらに別の実施形態では、それを必要とする個体において、骨格筋萎縮を軽減する方法が提供される。この方法は、有効量のα−ヒドロキシイソカプロン酸を含む栄養組成物を個体に投与するステップを含む。
【００２５】
[0025]別の実施形態では、それを必要とする個体において、高尿毒症性負荷を緩和する方法が提供される。この方法は、有効量のα−ヒドロキシイソカプロン酸を含む栄養組成物を個体に投与するステップを含む。
【００２６】
[0026]一実施形態において、個体は、高齢者、医学的状態を有する人、又はそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００２７】
[0027]一実施形態において、栄養組成物は、１日当たり約０．１５ｇ〜約１０ｇ、好ましくは１日当たり約２ｇ〜約１０ｇ、より好ましくは約０．５ｇ〜約５ｇ、より好ましくは１日当たり約１５０ｍｇ〜約２．５ｇのα−ヒドロキシイソカプロン酸を個体に供給するように個体に投与される。栄養組成物はまた、１日当たり約０．５ｇ〜約５ｇ、より好ましくは約２ｇ〜５ｇ、又は好ましくは１日当たり約１．５ｇを個体に供給するように個体に投与されてもよい。
【００２８】
[0028]一実施形態において、栄養組成物はシトルリンをさらに含む。栄養組成物は、１日当たり約１ｇ〜約１５ｇ、より好ましくは１日当たり約２ｇ〜約１５ｇ、さらに好ましくは約２ｇ〜約７ｇ、さらに好ましくは１日当たり約２ｇ〜約５ｇのシトルリンを個体に供給するように個体に投与することができる。栄養組成物は、１日当たり約４ｇ〜約７ｇのシトルリンを個体に供給するように個体に投与されてもよい。
【００２９】
[0029]一実施形態において、栄養組成物は、α−ケトグルタル酸を、オルニチンα−ケトグルタル酸、アルギニンα−ケトグルタル酸、ケトイソカプロン酸（ＫＩＣ）、又はそれらの組み合わせからなる群から選択される形態でさらに含む。栄養組成物は、１日当たり約２ｇ〜約２０ｇのα−ケトグルタル酸を個体に供給するように個体に投与されてもよい。栄養組成物はまた、１日当たり約１０ｇ〜約３０ｇのα−ケトグルタル酸を個体に供給するように個体に投与されてもよい。
【００３０】
[0030]一実施形態において、栄養組成物はエイコサペンタエン酸をさらに含む。栄養組成物は、１日当たり約０．２５ｇ〜約５ｇ、より好ましくは１日当たり約２５０ｍｇ〜約３ｇ、さらに好ましくは１日当たり約２５０ｍｇ〜１．５ｇのエイコサペンタエン酸を個体に供給するように個体に投与されてもよい。
【００３１】
[0031]一実施形態において、栄養組成物は、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）のサブユニット、リボ核酸（ＲＮＡ）のサブユニット、ＤＮＡ及びＲＮＡのポリマー形態、酵母ＲＮＡ、又はそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１種のヌクレオチドをさらに含む。少なくとも１種のヌクレオチドは外因性ヌクレオチドであってもよい。
【００３２】
[0032]一実施形態において、栄養組成物は、ロイシン、イソロイシン、バリン、又はそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１種の分岐鎖アミノ酸をさらに含む。
【００３３】
[0033]一実施形態において、栄養組成物はＬ−カルニチンをさらに含む。
【００３４】
[0034]本開示の利点は、栄養組成物の改善を実現することである。
【００３５】
[0035]本開示の別の利点は、骨格筋タンパク質合成を最大化する栄養組成物を提供することである。
【００３６】
[0036]本開示の別の利点は、骨格筋タンパク質の異化作用を最小化する栄養組成物を提供することである。
【００３７】
[0037]本開示のさらに別の利点は、除脂肪体重を維持する栄養組成物を提供することである。
【００３８】
[0038]本開示のさらに別の利点は、身体活動からの回復を改善するのに有用な栄養組成物を提供することである。
【００３９】
[0039]本開示の別の利点は、医療費を削減するのに有用な栄養組成物を提供することである。
【００４０】
[0040]本開示のさらに別の利点は、負荷軽減により誘導される骨量減少を低減するのに有用な栄養組成物を提供することである。
【００４１】
[0041]本開示のさらに別の利点は、それを必要とする個体において、骨格筋萎縮を軽減するのに有用な栄養組成物を提供することである。
【００４２】
[0042]本開示の別の利点は、高尿毒症性負荷を緩和するのに有用な栄養組成物を提供することである。
【００４３】
[0043]さらなる特徴及び利点は本明細書で説明されるが、それらは以下の詳細な説明から明らかとなる。
【詳細な説明】
【００４４】
[0044]本明細書において、「約」は、ある数値範囲内の数を指す。また、本明細書のすべての数値範囲は、該範囲内のすべての整数、自然数又は分数を包含する。
【００４５】
[0045]本明細書において、α−ヒドロキシイソカプロン酸という語は、α−ヒドロキシイソカプロン酸のアナログ（例えばケト−イソカプロン酸（ＫＩＣ））を包含する。
【００４６】
[0046]本明細書において、「アミノ酸」という語は１種又は複数種のアミノ酸を包含する。アミノ酸は、例えば、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、シトルリン、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、ヒドロキシプロリン、ヒドロキシセリン、ヒドロキシチロシン、ヒドロキシリジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、タウリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、オルニチン、又はそれらの組み合わせであり得る。
【００４７】
[0047]本明細書において、「動物」としては、これに限定されるわけではないが、哺乳動物が挙げられる。哺乳動物としては、これらに限定されるわけではないが、齧歯類、水生哺乳動物、家庭用動物（イヌ、ネコ等）、家畜（ヒツジ、ブタ、ウシ、ウマ等）及びヒトが挙げられる。「動物」又は「哺乳動物」という語が使用される場合、該一節の文脈により示される又は示されることが意図された効果を実現することが可能な任意の動物に適用されることが想定されている。
【００４８】
[0048]本明細書において、「抗酸化剤」という語は、酸化又は活性酸素種（ＲＯＳ）及び他のラジカル及び非ラジカル種によって促進される反応を阻害する、β−カロテン（ビタミンＡ前駆体）、ビタミンＣ、ビタミンＥ、セレン等の種々の物質のうちの任意の１種又は複数種を包含する。さらに、抗酸化剤は、他の分子の酸化を遅延又は抑制することが可能な分子である。抗酸化剤の非限定的な例としては、アスタキサンチン、カロテノイド、補酵素Ｑ１０（ＣｏＱ１０）、フラボノイド、グルタチオン、ゴジ（クコ）、ヘスペリジン、ラクトウルフベリー、リグナン、ルテイン、リコペン、ポリフェノール、セレン、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ゼアキサンチン、又はそれらの組み合わせが挙げられる。
【００４９】
[0049]本明細書において、「完全栄養」は、投与される動物にとって唯一の栄養供給源となるのに十分な多量栄養素（タンパク質、脂肪、炭水化物）及び微量栄養素を十分な種類及びレベルで含有する栄養製品及び組成物を包含する。患者は、そのような完全栄養組成物から自己の栄養必要量の１００％を摂取できる。
【００５０】
[0050]本明細書において、「有効量」は、欠乏を抑制し、個体の疾患又は医学的状態を治療し、あるいはより一般的には、症状を軽減し、疾患の進行を制御し、又は個体に栄養学的、生理学的若しくは医学的利益を与える量である。治療は、患者又は医者に関連するものであり得る。
【００５１】
[0051]本明細書において、「個体」及び「患者」という語は、多くの場合ヒトを意味するものとして使用されるが、ヒトに限定されるものではない。すなわち、「個体」及び「患者」は、治療から利益を受け得る医学的状態を有するか又はその危険性のある任意の動物、哺乳類又はヒトを意味する。
【００５２】
[0052]本明細書において、ω−３脂肪酸の供給源としては、例えば、魚油、オキアミ、ω−３脂肪酸の植物性供給源、亜麻仁、キャノーラ油、クルミ、及び藻類が挙げられる。ω−３脂肪酸としては、例えば、α−リノレン酸（ＡＬＡ）、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、ステアリドン酸（ＳＤＡ）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、又はそれらの組み合わせが挙げられる。
【００５３】
[0053]本明細書において、「食品グレード微生物」とは、食品用途に使用され、一般に安全とみなされている微生物を意味する。
【００５４】
[0054]本明細書において、「不完全栄養」は、投与される動物にとって唯一の栄養源となるのに十分な多量栄養素（タンパク質、脂肪、炭水化物）又は微量栄養素を十分なレベルで含有していない栄養製品又は組成物を包含する。部分的又は不完全栄養組成物は栄養補助食品として使用できる。
【００５５】
[0055]本明細書において、「長期投与」は、好ましくは６週間を超える継続投与である。「短期投与」は、６週間未満の継続投与である。
【００５６】
[0056]本明細書において、「哺乳動物」、「哺乳類」としては、これらに限定されるわけではないが、齧歯類、水生哺乳動物、家庭用動物（イヌ、ネコ等）、家畜（ヒツジ、ブタ、ウシ、ウマ等）及びヒトが挙げられる。「哺乳動物」、「哺乳類」という語が使用される場合、該動物によって示される又は示されることが意図された効果を実現することが可能な任意の動物に適用されることが想定されている。
【００５７】
[0057]「微生物」という語は、細菌、酵母及び／又は真菌、微生物を含む細胞増殖培地、又は微生物が培養された細胞増殖培地を包含する。
【００５８】
[0058]本明細書において、「ミネラル」という語は、ホウ素、カルシウム、クロム、銅、ヨウ素、鉄、マグネシウム、マンガン、モリブデン、ニッケル、リン、カリウム、セレン、ケイ素、スズ、バナジウム、亜鉛、又はそれらの組み合わせを包含する。
【００５９】
[0059]本明細書において、「非複製性」微生物とは、古典的平板培養法によって検出可能な生存細胞及び／又はコロニー形成単位が存在しないことを意味する。そのような古典的平板培養法は、微生物学の書物：Ｊａｍｅｓ  Ｍｏｎｒｏｅ  Ｊａｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｄｅｒｎ  ｆｏｏｄ  ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，７ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．，ｐ．７９０（２００５）にまとめられている。典型的には、生存細胞の欠如は、種々の濃度の細菌調製物（「非複製」サンプル）を接種して適切な条件下で（好気的及び／又は嫌気的環境で少なくとも２４時間）インキュベートした後、寒天プレート上で目視可能なコロニーがないか、又は液体増殖培地における混濁度の増加がないことによって示すことができる。例えば、ビフィズス菌（例えば、ビフィドバクテリウム・ロングム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｌｏｎｇｕｍ）、ビフィドバクテリウム・ラクティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｌａｃｔｉｓ）及びビフィドバクテリウム・ブレベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｂｒｅｖｅ））又は乳酸桿菌（例えば、ラクトバチルス・パラカゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐａｒａｃａｓｅｉ）、ラクトバチルス・ラムノサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓ））は、熱処理、特に低温／長時間の熱処理により非複製性とすることができる。
【００６０】
[0060]本明細書において、「正常な骨成長」とは、幼児期及び青年期の骨がモデリングにより形成されるプロセスのことである。これにより、ある部位での新しい骨の形成と同一骨内の他の部位からの古い骨の除去とが可能となる。このプロセスは、個々の骨がサイズを大きくし、空間中で位置を変えることを可能にする。幼児期は、外部（骨膜）表面上で新しい骨の形成が起こりながら骨の内部で吸収（骨を破壊するプロセス）が起こることによって、骨は成長する。思春期には、形成が外部表面及び内部（骨内膜）表面の両方で起こることができるので、骨はより厚くなる。リモデリングプロセスは生涯にわたって起こり、骨がそのピーク量に達する時（通常２０代前半）までに優勢なプロセスとなる。リモデリングでは、骨梁表面又は皮質内部の少量の骨が除去され、同じ部位で置換される。リモデリングプロセスは骨の形状は変えないが、骨の健康にとって不可欠である。モデリング及びリモデリングは、成人骨格の大部分が約１０年ごとに置き換えられるように生涯にわたって続く。リモデリングは成人早期までに優勢となるが、その後もモデリングは特に骨の弱体化に応答して起こり得る。
【００６１】
[0061]本明細書において、「ヌクレオチド」とは、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）、リボ核酸（ＲＮＡ）、ポリマーＲＮＡ、ポリマーＤＮＡ、又はそれらの組み合わせのサブユニットのことである。ヌクレオチドは、窒素塩基、リン酸分子、及び糖分子（ＤＮＡではデオキシリボース、及びＲＮＡではリボース）からなる有機化合物である。個々のヌクレオチドモノマー（単一ユニット）が一緒に結合してポリマー又は長鎖を形成する。外因性ヌクレオチドは、具体的には食餌による補給によって提供される。外因性ヌクレオチドは、モノマー形態であり得、例えば、５’−アデノシン一リン酸（５’−ＡＭＰ）、５’−グアノシン一リン酸（５’−ＧＭＰ）、５’−シトシン一リン酸（５’−ＣＭＰ）、５’−ウラシル一リン酸（５’−ＵＭＰ）、５’−イノシン一リン酸（５’−ＩＭＰ）、５’−チミン一リン酸（５’−ＴＭＰ）、又はそれらの組み合わせであり得る。外因性ヌクレオチドは、ポリマー形態、例えばインタクトなＲＮＡであり得る。例えば、酵母ＲＮＡ等のポリマー形態の複数の供給源が存在し得る。
【００６２】
[0062]本明細書において、「栄養製品」又は「栄養組成物」は、任意の数の任意選択の追加成分、例えば慣用の食品添加物（合成又は天然のもの）を含む。そのような成分としては、例えば、１種又は複数種の酸味料、追加の増粘剤、緩衝剤若しくはｐＨ調整剤、キレート化剤、着色剤、乳化剤、賦形剤、風味剤、ミネラル、浸透圧剤、薬学的に許容される担体、保存料、安定化剤、糖、甘味料、質感調整剤、及び／又はビタミン剤が挙げられる。任意選択の成分は、任意の適切な量で添加できる。栄養製品又は栄養組成物は、完全栄養の供給源であっても不完全栄養の供給源であってもよい。
【００６３】
[0063]本明細書において、「患者」という語は、本明細書で定義される治療を受けている又は受けようとしている動物、特に哺乳動物（特にヒト）を包含する。
【００６４】
[0064]本明細書において、「植物化学物質」又は「植物栄養素」は、多くの食品に見出される非栄養性化合物である。植物化学物質は、基本的な栄養以外の健康上の有益性を有する機能性食品であり、植物性供給源に由来する健康促進化合物である。天然のものであっても精製したものであってもよい。「植物化学物質」及び「植物栄養素」とは、植物により産生され、１又は複数の健康上の利益を使用者に付与する任意の化学物質を意味する。植物化学物質及び植物栄養素の非限定的な例としては以下のものが挙げられる。
【００６５】
ｉ）フェノール化合物、例えば：モノフェノール（例えば、アピオール、カルノソール、カルバクロール、ジラピオール、ローズマリノール）；フラボノール（例えば、ケルセチン、ギンゲロール、ケンフェロール、ミリセチン、ルチン、イソラムネチン）、フラバノン（例えば、ヘスペリジン、ナリンゲニン、シリビン、エリオジクチオール）、フラボン（例えば、アピゲニン、タンゲレチン、ルテオリン）、フラバン−３−オール（例えば、カテキン、（＋）−カテキン、（＋）−ガロカテキン、（−）−エピカテキン、（−）−エピガロカテキン、（−）−エピガロカテキンガレート（ＥＧＣＧ）、（−）−エピカテキン３−ガレート、テアフラビン、テアフラビン−３−ガレート、テアフラビン−３’−ガレート、テアフラビン−３，３’−ジガレート、テアルビジン）、アントシアニン（フラボナール）及びアントシアニジン（例えば、ペラルゴニジン、ペオニジン、シアニジン、デルフィニジン、マルビジン、ペツニジン）、イソフラボン（植物性エストロゲン）（例えば、ダイドゼイン（フォルモノネチン）、ゲニステイン（ビオカニンＡ）、グリシテイン）、ジヒドロフラボノール、カルコン、クメスタン（植物性エストロゲン）、及びクメストロールを含むフラボノイド（ポリフェノール）；フェノール酸（エラグ酸、没食子酸、タンニン酸、バニリン、クルクミン）；ヒドロキシケイ皮酸（例えば、カフェ酸、クロロゲン酸、ケイ皮酸、フェルラ酸、クマリン）；リグナン（植物性エストロゲン）、シリマリン、セコイソラリシレシノール、ピノレシノール、及びラリシレシノール）；チロソールエステル（例えば、チロソール、ヒドロキシチロソール、オレオカンタール、オレウロペイン）；スチルベノイド（例えば、レスベラトール、プテロスチルベン、ピセアタンノール）；及びプニカラギン；
ｉｉ）テルペン（イソプレノイド）、例えば：カロテン（例えば、α−カロテン、β−カロテン、γ−カロテン、δ−カロテン、リコペン、ノイロスポレン、フィトフルエン、フィトエン）、及びキサントフィル（例えば、カンタキサンチン、クリプトキサンチン、ゼアキサンチン、アスタキサンチン、ルテイン、ルビキサンチン）を含むカロテノイド（テトラテルペノイド）；モノテルペン（例えば、リモネン、ペリリルアルコール）；サポニン；フィトステロール（例えば、カンペステロール、β−シトステロール、γ−シトステロール、スティグマステロール）、トコフェロール（ビタミンＥ）、及びオメガ−３、６及び９脂肪酸（例えばγ−リノレン酸）を含む脂質；トリテルペノイド（例えば、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、モロン酸）；
ｉｉｉ）ベタレイン、例えば：ベタシアニン（例えば、ベタニン、イソベタニン、プロベタニン、ネオベタニン）；及びベタキサンチン（非グリコシド型）（例えば、インディカキサンチン、バルガキサンチン）；
ｉｖ）有機スルフィド、例えば：ジチオールチオン（イソチオシアネート）（例えばスルフォラファン）；及びチオスルホネート（アリウム化合物）（例えば、アリルメチルトリスルフィド、ジアリルスルフィド）、インドール、グルコシノレート（例えば、インドール−３−カルビノール、スルフォラファン、３，３’−ジインドリルメタン、シニグリン、アリシン、アリイン、アリルイソチオシアネート、ピペリン、ｓｙｎ−プロパンチアール−Ｓ−オキシド）；
ｖ）タンパク質阻害剤、例えばプロテアーゼ阻害剤；
ｖｉ）他の有機酸、例えば：シュウ酸、フィチン酸（イノシトールヘキサホスフェート）、酒石酸、及びアナカルジン酸；又は
ｖｉｉ）それらの組み合わせ。
【００６６】
[0072]本明細書において、“ａ”、“ａｎ”及び“ｔｈｅ”は、文脈上明らかに他の意味に解すべき場合でない限り複数の指示対象を包含する。例えば、「ポリペプチド」（“ａ  ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ”）の指示対象は２種以上のポリペプチドの混合物を包含する。
【００６７】
[0073]本明細書において、「プレバイオティクス」は、腸内で選択的に有益細菌の成長を促進するか、又は病原細菌の成長若しくは粘膜付着を阻害する食品物質である。それらは、摂取者の胃及び／又は腸上部で不活性化されず、又は胃腸管で吸収されないが、胃腸の細菌叢及び／又はプロバイオティクスによって発酵される。プレバイオティクスは、例えば、Ｇｌｅｎｎ  Ｒ．Ｇｉｂｓｏｎ  ａｎｄ  Ｍａｒｃｅｌ  Ｂ．Ｒｏｂｅｒｆｒｏｉｄ，Ｄｉｅｔａｒｙ  Ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｈｕｍａｎ  Ｃｏｌｏｎｉｃ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ：Ｉｎｔｒｏｄｕｃｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｃｏｎｃｅｐｔ  ｏｆ  Ｐｒｅｂｉｏｔｉｃｓ，Ｊ．Ｎｕｔｒ．１９９５  １２５：１４０１−１４１２において定義されている。プレバイオティクスの非限定的な例としては、アカシアガム、α−グルカン、アラビノガラクタン、β−グルカン、デキストラン、フルクトオリゴ糖、フコシルラクトース、ガラクトオリゴ糖、ガラクトマンナン、ゲンチオオリゴ糖、グルコオリゴ糖、グアーガム、イヌリン、イソマルトオリゴ糖、ラクトネオテトラオース、ラクトスクロース、ラクチュロース、レバン、マルトデキストリン、ミルクオリゴ糖、部分的に加水分解されたグアーガム、ペクチンオリゴ糖、難消化性デンプン、老化デンプン、シアロオリゴ糖、シアリルラクトース、大豆オリゴ糖、糖アルコール、キシロオリゴ糖、若しくはそれらの加水分解物、又はそれらの組み合わせが挙げられる。
【００６８】
[0074]本明細書において、プロバイオティック微生物（以下「プロバイオティクス」）は、十分な量で投与された場合に宿主に健康上の利益を与えるような、より詳細には、腸内微生物のバランスを改善することによって宿主に有益な影響を及ぼし、宿主の健康又は福祉に効果をもたらすような、食品グレードの微生物（半生存（ｓｅｍｉ−ｖｉａｂｌｅ）又は弱毒化したものを含む生存微生物、及び／又は非複製性微生物）、代謝物、微生物細胞調製物、又は微生物細胞の構成要素である。Ｓａｌｍｉｎｅｎ  Ｓ，Ｏｕｗｅｈａｎｄ  Ａ．Ｂｅｎｎｏ  Ｙ．  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓ：ｈｏｗ  ｓｈｏｕｌｄ  ｔｈｅｙ  ｂｅ  ｄｅｆｉｎｅｄ？，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｆｏｏｄ  Ｓｃｉ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．１９９９：１０，１０７−１０を参照されたい。一般に、これらの微生物は、胃腸管内の病原細菌の増殖及び／又は代謝を抑制するか又はこれらに影響を及ぼすと考えられている。プロバイオティクスは宿主の免疫機能も活性化させ得る。このため、プロバイオティクスを食品に含ませる多くの種々のアプローチがなされてきた。プロバイオティクスの非限定的な例としては、アエロコッカス、アスペルギルス、バクテロイデス、ビフィドバクテリウム、カンジダ、クロストリジウム、デバリオマイセス、エンテロコッカス、フソバクテリウム、ラクトバチルス、ラクトコッカス、ロイコノストック、メリソコッカス、ミクロコッカス、ムコール、オエノコッカス、ペディオコッカス、ペニシリウム、ペプトストレポコッカス、ピキア、プロピオニバクテリウム、シュードカテヌラータム、リゾプス、サッカロマイセス、スタフィロコッカス、ストレプトコッカス、トルロプシス、ワイセラ、又はそれらの組み合わせが挙げられる。
【００６９】
[0075]本明細書において、「タンパク質」、「ペプチド」、「オリゴペプチド」又は「ポリペプチド」という語は、単一のアミノ酸（モノマー）、ペプチド結合で連結された２つ以上のアミノ酸（ジペプチド、トリペプチド又はポリペプチド）、コラーゲン、それらの前駆体、ホモログ、アナログ、ミメティック、塩、プロドラッグ、代謝物、断片、又はそれらの組み合わせを含む任意の組成物を意味する。特に断らない限り、上記用語のいずれも交換可能に使用される。ポリペプチド（又はペプチド又はタンパク質又はオリゴペプチド）は、多くの場合、一般に天然アミノ酸と呼ばれる２０種のアミノ酸以外のアミノ酸を含有し、末端アミノ酸を含む多くのアミノ酸が天然のプロセス（例えば、グリコシル化、他の翻訳後修飾）又は当技術分野で周知の化学修飾技術によって所与のポリペプチド中で修飾されてもよいことは理解されるであろう。本発明のポリペプチドに存在し得る公知の修飾としては、これらに限定されるわけではないが、アセチル化、アシル化、ＡＤＰ−リボシル化、アミド化、フラバノイド又はヘム部分の共有結合、ポリヌクレオチド又はポリヌクレオチド誘導体の共有結合、脂質又は脂質誘導体の共有結合、ホスファチジルイノシトールの共有結合、架橋、環化、ジスルフィド結合の形成、脱メチル化、共有結合性架橋の形成、シスチンの形成、ピログルタミン酸の形成、ホルミル化、γ−カルボキシル化、糖化、グリコシル化、グリコシルホスファチジルイノシトール（ＧＰＩ）膜アンカー形成、ヒドロキシル化、ヨウ素化、メチル化、ミリストイル化、酸化、タンパク質分解プロセシング、リン酸化、プレニル化、ラセミ化、セレノイル化、硫酸化、ポリペプチドへのアミノ酸のトランスファーＲＮＡ媒介性付加（例えばアルギニル化）、及びユビキチン化が挙げられる。「タンパク質」という語は、ペプチドの交互繰り返しからなる線状又は非線状ポリペプチドを指す「人工タンパク質」も包含する。
【００７０】
[0076]タンパク質の非限定的な例としては、乳製品ベースのタンパク質、植物ベースのタンパク質、動物ベースのタンパク質及び人工タンパク質が挙げられる。乳製品ベースのタンパク質は、カゼイン、ミセルカゼイン、カゼイン塩、カゼイン加水分解物、乳清、乳清加水分解物、乳清濃縮物、乳清単離物、乳タンパク質濃縮物、乳タンパク質単離物、又はそれらの組み合わせからなる群から選択され得る。植物ベースのタンパク質としては、例えば、大豆タンパク質（例えば、濃縮物及び単離物を含むすべての形態）、エンドウタンパク質（例えば、濃縮物及び単離物を含むすべての形態）、キャノーラタンパク質（例えば、濃縮物及び単離物を含むすべての形態）、他の植物性タンパク質（商業的には、小麦タンパク質、分画小麦タンパク質、トウモロコシ、ゼインを含むその画分、米、オート麦、ジャガイモ、ピーナッツ、並びにマメ、ソバ、レンズマメ、豆類に由来する任意のタンパク質）、単細胞タンパク質、又はそれらの組み合わせが挙げられる。動物ベースのタンパク質は、牛肉、鶏肉、魚、子羊、海産物、又はそれらの組み合わせからなる群から選択され得る。
【００７１】
[0077]本出願に含まれる用量範囲はすべて、該範囲内に含まれるすべての数（自然数又は分数）を包含する。
【００７２】
[0078]本明細書において、「シンバイオティック」とは、プレバイオティクスとプロバイオティクスの両方を含み、それらが一緒になって腸の細菌叢を改善するように作用する補助剤である。
【００７３】
[0079]本明細書において、「治療」、「治療する」及び「緩和する」という語は、（標的とする病理学的状態若しくは障害を阻止する及び／又はその発症を遅延させる）予防的又は阻止的治療、並びに根治的、治癒的又は疾患修飾的治療の両方に関連する。例えば、診断された病理学的状態又は障害を根治させる、その進行を遅延させる、その症状を軽減する、及び／又はその進行を停止させる治療的措置が挙げられ、また、疾患に罹患するリスクがあるか又は疾患に罹患していることが疑われる患者、並びに病気であるか又は疾患若しくは医学的状態を患っていると診断されている患者の治療が挙げられる。該用語は、対象を完全に回復させるまで治療することを必ずしも意味しない。また、「治療」及び「治療する」という語は、疾患を患っていないが非健康的な状態（例えば、窒素不均衡、筋肉喪失）を発現しやすい個体における健康の維持及び／又は促進も指す。「治療」、「治療する」及び「緩和する」という語は、少なくとも１つの基礎的な予防又は治療措置の強化又は増強を包含する。また、「治療」、「治療する」及び「緩和する」という語は、疾患若しくは状態の食餌による管理、又は疾患若しくは状態の予防若しくは阻止のための食餌管理を包含する。
【００７４】
[0080]本明細書において、「経管栄養」は、好ましくは、経口投与によらず、経鼻胃管、経口胃管、胃管、空腸瘻管（Ｊ−管）、経皮内視鏡的胃瘻造設（ＰＥＧ）、ポート（例えば、胃、空腸へのアクセスを提供する胸壁ポート及びその他の適切なアクセスポート）を含む経路（これらに限定されない）により動物の消化器系に投与される完全又は不完全栄養製品又は組成物である。
【００７５】
[0081]本明細書において、「ビタミン」という語は、身体の健全な成長及び活動のために微量で不可欠であり、植物性及び動物性食品から自然に得られるか又は合成的に製造される、任意の種々の脂溶性又は水溶性の有機物質（非限定的な例としては、ビタミンＡ、ビタミンＢ１（チアミン）、ビタミンＢ２（リボフラビン）、ビタミンＢ３（ナイアシン、ナイアシンアミド）、ビタミンＢ５（パントテン酸）、ビタミンＢ６（ピリドキシン、ピリドキサール、ピリドキサミン、塩酸ピリドキシン）、ビタミンＢ７（ビオチン）、ビタミンＢ９（葉酸）、ビタミンＢ１２（種々のコバラミン；ビタミンサプリメントでは一般にシアノコバラミン）、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、Ｋ１及びＫ２（すなわち、ＭＫ−４、ＭＫ−７）、葉酸、ビオチン）、プロビタミン、誘導体、アナログを包含する。
【００７６】
[0082]本開示は、例えば、高齢者及び疾病を有する人を含む患者の除脂肪体重ができるだけ良好に維持されるように、筋タンパク質の異化作用を最小化しつつ筋タンパク質合成を最大化するための栄養と食品成分を組み合わせて有する栄養組成物に関する。
【００７７】
[0083]本開示の栄養組成物には、筋組織の同化作用を最大化し、かつ異化作用を最小化する他の化合物と組み合わせたα−ヒドロキシカプロン酸（ＨＩＣＡ）が含まれる。出願人は、α−ＨＩＣＡとの種々の組み合わせ物が、より良い風味プロファイル（コンプライアンスの改善、ひいては効果の改善）、及び相補的な代謝面での利益のために、優れた利益をもたらすことを見出した。例えばα−ＨＩＣＡは、タンパク質合成に直接関係する同化面での利益を有するロイシン代謝物である一方、シトルリンなどの他の化合物は、同化プロセスに補助的な利益をもたらす。
【００７８】
[0084]骨格筋タンパク質合成の翻訳調節には、開始、成長及び停止時における制御点が含まれる。リボソームサブユニット４０Ｓへのメッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）の結合に関与する翻訳開始工程の他に、リボソームサブユニット４０ＳへのイニシエーターメチオニルｔＲＮＡ（ｍｅｔ−ｔＲＮＡｉ）の結合を変調することによって制御が起こり、４３Ｓ転写開始前複合体を形成することができる。この工程において、ｅＩＦ２−ＧＴＰ−ｍｅｔ−ｔＲＮＡｉ複合体は、リボソームサブユニット４０Ｓに結合して三成分複合体を形成する。ｅＩＦ２に結合しているグアノシン三リン酸（ＧＴＰ）は、次いで加水分解を受けて、グアノシン二リン酸（ＧＤＰ）になり、リボソームサブユニット４０ＳからｅＩＦ２−ＧＤＰ複合体が放たれる。その後、ｅＩＦ２は後に続く一連の開始に関与し、かつ新たな三成分複合体を形成するために、ＧＤＰをＧＴＰに交換しなければならない。第２の翻訳開始因子であるｅＩＦ２Ｂは、ｅＩＦ２上のグアニンヌクレオチド交換を媒介し、さらにｅＩＦ２Ｂ活性の阻害により、三成分複合体形成に利用可能なｅＩＦ２−ＧＴＰの量が低下する。一部では、ｅＩＦ２Ｂの活性は、ｅＩＦ２のα−サブユニットのリン酸化によって制御され、このｅＩＦ２は、α−サブユニット上でリン酸化されると、ｅＩＦ２Ｂの競合的阻害体になる。さらにα−ＨＩＣＡは、ｅＩＦ２Ｂ活性向上及び三成分複合体形成により翻訳効率が高められることによって、全タンパク質合成に対する急性効果を媒介する。
【００７９】
[0085]本開示の栄養組成物は、１回分又はより少ない用量を数回で個体又は患者に提供することができる。しかし、本開示の栄養組成物は、１日当たり約０．１５〜約１０ｇ、好ましくは１日当たり約２ｇ〜約１０ｇ、より好ましくは１日当たり約１５０ｍｇ〜約２．５ｇのα−ＨＩＣＡを個体に提供すべきである。一実施形態では、１日当たり約０．５ｇ〜約５ｇ、より好ましくは約２ｇ〜５ｇ、さらに好ましくは１日当たり１．５ｇのα−ＨＩＣＡが個体に提供される。
【００８０】
[0087]一実施形態において、本開示の栄養組成物は、α−ＨＩＣＡ及びシトルリンを含む。シトルリンは、スイカ（シトルラス・ラナトゥス（Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ  ｌａｎａｔｕｓ））中だけに、相当な栄養量で見出されている非タンパク質性アミノ酸である。シトルリンの摂取はポリアミンの形成をもたらし得る。アグマチン、プトレシン、スペルミジン及びスペルミンなどのポリアミンは、タンパク質キナーゼＣ（ＰＫＣ）、細胞外シグナル調節キナーゼ（ＥＲＫ）、及びトランスフォーミング増殖因子β１（ＴＧＦ−β１）の上方制御を含む種々の生理学的かつ生化学的現象に関係していることが報告されている。
【００８１】
[0088]シトルリンの代謝運命は、アルギニンへの転化である。実際、シトルリンは血清アルギニンの上昇に非常に有効であり、アルギニンは生体における一酸化窒素（ＮＯ）源である。ＮＯは、血管の弛緩、及び生体中の組織への血流の送達にとって重要である。血流の改善に伴い、骨格筋組織に対してより効率的に、血液中の栄養及び他の化合物を送ることができる。さらに、ＮＯは同化シグナルであり、さらにタンパク質合成の刺激及び上述のポリアミンなどの増殖因子の放出の促進剤でもある。ＮＯはまた、インスリン及びＩＧＦ−１の放出をもたらし、同化基質の取り込み、及び該基質の生体利用率の向上をもたらすことができる。
【００８２】
[0089]Ｇｕａｄａｇｎｉ及びＢｉｏｌｏは、アルギニン及びグルタミンのレベルを部分的に維持するために、炎症を有する個体（例えば、高齢者又は疾病を有する個体）に、追加タンパク質が必要となることがあることを示している。Ｇｕａｄａｇｎｉ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏ，Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ／ｏｒ  ｉｎａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｎ  ｔｈｅ  ｎｅｅｄ  ｆｏｒ  ｄｉｅｔａｒｙ  ｐｒｏｔｅｉｎ，Ｖｏｌｕｍｅ  １２，Ｉｓｓｕｅ  ６，ｐ．６１７−６２２（２００９）を参照されたい。シトルリンは、アルギニンレベルを維持する役割をすることができる。さらに、シトルリンは、小腸内でのグルタミンのシトルリンへの転化が、外部供給されるシトルリンからのフィードバックシグナルによって低下するので、グルタミンレベルを維持する一助となり得る。上述のことにより、生体機能に必要なアルギニン及びグルタミンを供給するための、筋肉の異化作用の必要性が低下することになる。
【００８３】
[0090]α−ＨＩＣＡとシトルリンを組み合わせると、運動及び／又は身体的治療量を制限された高齢者における、除脂肪体重の維持を相乗的に改善することになることがさらに可能になる。シトルリンは、栄養不良の老化動物において、同化効果を有することが示されている。高齢者集団中における同化シグナルは、通常、下方制御される。α−ＨＩＣＡとシトルリンの両方を添加すると、このシグナルが強く高められることになる。身体活動からのこの回復改善により、疾病又は外傷による強制的な不活性化からの回復促進が可能になることになる。身体的治療セッション数の低減、及び完全に自立した生活へのより速やかな復帰、並びに仕事への復帰に基づくと、看護費用の削減も実現することができる。
【００８４】
[0091]前述の通り、本開示の栄養組成物は、１回分又はより少ない用量を数回で個体又は患者に提供することができる。しかし、本開示の栄養組成物は、１日当たり約１ｇ〜約１５ｇのシトルリン、より好ましくは１日当たり約２ｇ〜約１５ｇのシトルリン、さらに好ましくは約２ｇ〜約７ｇ、さらに好ましくは１日当たり約２ｇ〜約５ｇのシトルリンの範囲のシトルリン量を個体に提供すべきである。一実施形態において、個体には１日当たり約４ｇ〜約７ｇのシトルリンが提供される。
【００８５】
[0092]本開示の栄養組成物はまた、α−ＨＩＣＡと、グルタミンの前駆体であるα−ケトグルタル酸（ＡＫＧ）と、の相乗的組み合わせを含んでもよい。子ブタにリポ多糖（ＬＰＳ）投与によりストレスを与えた子ブタモデルでは、ＡＫＧは、腸の哺乳動物のラパマイシン標的（ｍＴＯＲ）のリン酸化を増加させて、タンパク質合成及び抗炎症応答を向上した。また、ＡＫＧは絨毛の高さを増やして腺窩の深さを減らし、したがって、吸収力を増加する可能性を高めた（アミノ酸吸収の向上）。出願人は、α−ＨＩＣＡ及びＡＫＧを含む栄養組成物のこうした潜在的利益（例えば、酸化損傷、吸収）は、栄養送達の向上をもたらし、特に炎症状態におけるさらなる同化作用をもたらし得ることを見出した。
【００８６】
[0093]前述の通り、本開示の栄養組成物は、１回分又はより少ない用量を数回で個体又は患者に提供することができる。しかし、本開示の栄養組成物は、１日当たり約２ｇ〜約２０ｇのα−ケトグルタル酸、又は１日当たり約１０ｇ〜約３０ｇの範囲のＡＫＧの量を個体に提供すべきである。ＡＫＧは、オルニチンＡＫＧ、アルギニンＡＫＧ、又はそれらの組み合わせの形態とすることができる。
【００８７】
[0094]外因性ヌクレオチドの添加は、以下の２つの機構によって、ＡＫＧをより有効にし得る。すなわち、（ｉ）腸管内でヌクレオチドを作るためにグルタミンの使用を低減することによってＡＫＧレベルを維持する、（ｉｉ）ヌクレオチドを用いた以前の研究で示された通り絨毛の高さの維持を強化することである。ヌクレオチドによってもたらされる腸の健康は、栄養失調、又は単に加齢に伴う一般的な同化作用の低下のために、高齢者においてとりわけ重要である。
【００８８】
[0095]分岐鎖アミノ酸（ＢＣＡＡ）は、不可欠アミノ酸であることが知られている。ＢＣＡＡは他の不可欠アミノ酸と一緒になって筋タンパク質合成を可能にするため、外部から供給されなければならない。ＢＣＡＡ、とりわけロイシンは、筋タンパク質合成を刺激するためのシグナル伝達分子としても働く。これには、２つの機構によるものとすることができる。第１の機構は、ロイシンが強力な分泌促進物質であるので、インスリン放出の刺激である。第２の機構は、ロイシンが筋タンパク質合成を開始する真核生物の誘導因子を刺激することができるので、より直接的である。
【００８９】
[0096]３種のＢＣＡＡ（すなわち、ロイシン、イソロイシン及びバリン）のすべてが、任意の製剤に提供されることが重要である。その理由は、１種のＢＣＡＡが大きく増加すると、他の２種のＢＣＡＡが相対的に欠乏する可能性があるからである。ＢＣＡＡは、望ましくない官能プロファイルを示すことが知られているので、α−ＨＩＣＡ及びデザイナーなどのアナログ、又は例えば、乳清タンパク質ミセルなどの高品質タンパク質の添加は、患者のコンプライアンスの改善、その結果臨床転帰を改善しつつ利益をもたらす有効な方法であり、一層良好なクオリティオブライフ及び医療経済学的利益がもたらされる。さらに、ラクトウルフベリーなどの免疫調節剤との組み合わせ物は、等級の低い炎症、同化作用の抑制、及び免疫老化のある患者（例えば、高齢者又は疾病を有する人）に相乗的な有益性をもたらすことができる。
【００９０】
[0097]別の実施形態において、本開示の栄養組成物は、α−ＨＩＣＡ及びω−３脂肪酸を含むことができる。ω−３脂肪酸の例には、例えば、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、及びα−リノレン酸（ＡＬＡ）が含まれる。オメガ−３ポリ不飽和脂肪酸であるＥＰＡは、核内因子−κβ（ＮＦ−κβ）の活性化を最小化することによって、共通の細胞のシグナル伝達経路を通じて、がん悪液質及び敗血症における骨格筋萎縮を軽減して、負荷軽減により誘導される骨量減少を低減することが示されている。出願人は、α−ＨＩＣＡ及びＥＰＡを有する栄養組成物が、ＮＦｋβの標的阻害によって、除脂肪体重の喪失及び骨のミネラル密度の弱体化の両方によって筋骨格の健康に相乗的に影響を及ぼすことを見出した。さらに、α−ＨＩＣＡ及びＥＰＡは、異化作用、非活動又は老化状態下で、それぞれ、（ｍＴＯＲ経路によって媒介される）骨格筋タンパク質合成を増強し、（ユビキチン−プロテアソーム経路によって媒介される）内因性の筋タンパク質分解を低下させることができる。栄養的な治療は除脂肪体重を維持することになり、その下にある骨に緊張性負荷をもたらし、かつ骨代謝回転に必要な骨形成刺激として作用し、さらに骨折リスクを最小化することになる。
【００９１】
[0098]除脂肪体重の維持の改善は、代謝ホメオスタシス及び機能的可動性を維持する一助となろう。さらに、骨量密度の維持は骨折リスクを低減し、こうしてクオリティオブライフ及び医療費の節約を改善することになる。
【００９２】
[0099]本開示の栄養組成物は、１回分又はより少ない用量を数回で個体又は患者に提供することができる。しかし、本開示の栄養組成物は、約０．２５ｇ〜約５ｇ、より好ましくは約２５０ｍｇ〜約３ｇ、さらに好ましくは１日当たり約２５０ｍｇ〜約１．５ｇのＥＰＡを個体に提供すべきである。一実施形態において、個体には１日当たり約７５０ｍｇのＥＰＡが提供される。
【００９３】
[00100]α−ＨＩＣＡ及びＥＰＡを有する栄養組成物の送達及び生体利用率は、（ｉ）パッケージング（例えば、ＵＶ障壁及び／又はＯ２捕捉用内部層の提供）、（ｉｉ）製造（例えば、無菌製造の提供、「ヘッドスペース」の低減、及び熱暴露の低減）、及び（ｉｉｉ）α−ＨＩＣＡとＥＰＡの両方を含有している脂質エマルジョンの封入（例えば、製造中及び初期消化中における組成物保護）によって改善することができる。さらに、ＥＰＡの植物性供給源は、官能特性の改善した長鎖ポリ不飽和脂肪酸（ＬＣ−ＰＵＦＡ）の持続可能な供給源を実現することができる。
【００９４】
[00101]本開示の栄養組成物は、筋肉消耗を防ぐために、有効量のα−ＨＩＣＡを提供することができる。筋肉消耗は、慢性腎臓病を有する個体において一般に認められる。しかし、出願人は、α−ＨＩＣＡの腎臓病患者セグメントへの施用がいくつかの利益を有することを見出した。例えば、α−ＨＩＣＡを有する栄養組成物を腎臓病患者セグメントに投与すると、窒素又はタンパク質の節約効果を実現し、かつ慢性腎不全とりわけ尿毒症を示す患者において、窒素均衡を改善することができる。分岐鎖α−ケト酸、及びα−ＨＩＣＡは、尿毒症患者の高い窒素環境からアミン基を取り上げ、こうして総合的な窒素負荷を軽減することができる。この置換はまた、患者による総タンパク質摂取量を部分的に低減し、これにより、尿毒症患者における窒素負荷のさらなる向上を低下させ、これらの両方が、尿素レベルの向上に伴う毒性を緩和する。α−ＨＩＣＡ及び／又は他のケト酸による置換を経た必要タンパク質の一部を提供することにより、筋タンパク質を支えることが可能な、患者の総タンパク質摂取量を改善することができる。
【００９５】
[00102]さらに、その前駆体であるロイシンのようなα−ＨＩＣＡは、筋タンパク質合成を刺激し、さらに／又はこの患者集団にとって有益な筋タンパク質の破壊を制限することができる。米国特許第４７５２６１９号は、混合高品質タンパク質の食餌並びにビタミン及びミネラル補助食品２０〜３０ｇ／日と一緒にした前記製品の使用を支持している。
【００９６】
[00103]出願人はまた、慢性腎臓患者、とりわけ尿毒症の罹患患者において、α−ＨＩＣＡとＬ−カルニチンとを組み合わせて有する本開示の栄養組成物が相乗効果を実証することを驚くべきことに見出した。Ｌ−カルニチンは、肝臓及び腎臓におけるアミノ酸であるリジン及びメチオニンから生合成された第四級アンモニウム化合物である。Ｌ−カルニチンは、透析患者のタンパク質の生合成の悪化、タンパク質の摂取量の低下及び透析による喪失により、腎臓疾患で不足していることが見出されている。腎臓病患者におけるＬ−カルニチン補助の利益は、エリスロポエチン耐性貧血、筋症状、心臓のパフォーマンス及び機能的能力の改善を含むことができ、この利益は筋機能をやはり支えることができる。α−ＨＩＣＡ及びＬ−カルニチンの組み合わせは、エネルギーを産出する酸化のための長鎖脂肪酸のミトコンドリアへの輸送体としてのその主要な機能により、筋機能を少なくとも一部支えることができるＬ−カルニチンを不足製品に供給しつつ尿毒症性負荷をある程度緩和する、という２つの利益を提供することになる。
【００９７】
[00104]高齢者並びに不十分な筋同化作用及び過度の筋異化作用を有する患者にとって、既存の栄養支持解決策は有効性が欠如している。さらに、高齢の個体では、自立性、機能性及びクオリティオブライフの喪失につながる、深刻な除脂肪体重喪失が存在する。さらに、高齢患者における認知能力の退行が存在し、これらの罹患率に関係する医療費は高い。除脂肪体重の喪失に対する従来の対応は、患者のタンパク質レベルを向上させることであった。
【００９８】
[00105]出願人は、追加的な有益成分の使用により、除脂肪体重の維持のための投与タンパク質のより効率的な使用が可能となることを見出した。すなわち、本開示の栄養組成物は、筋肉異化作用を低減すると同時に、筋肉の同化作用を高めることによって筋肉喪失のリスク（例えばサルコペニア、悪液質、不動化）のある高齢の個体又は患者における除脂肪体重の維持を改善する。同化作用を向上し、かつ異化作用を低減するという利益をもたらす成分は、経口補助食品と、経口又は経管栄養投与のどちらかによる完全栄養補給に適した完全栄養補給製品の両方に配合することができる。本開示の栄養組成物はまた、使用時に溶解するための粉末としてまとめてパッケージにすることもできる。
【００９９】
[00106]栄養組成物が経口補助食品である一実施形態において、この補助食品は活性成分、及び１０グラム以上の高品質タンパク質を含有している適切な栄養プロファイルを含有することができ、この高品質タンパク質は、乳清タンパク質ミセル、ＥＰＡ及びＤＨＡを有する脂質、並びにエネルギー及び嗜好性のための炭水化物として供給することができる。ビタミンＤなどのビタミン、及びミネラル、並びにラクトウルフベリーなどの成分、並びにヌクレオチドも含まれてもよい。
【０１００】
[00107]完全栄養補給製品は、生命を支えるために必要な栄養のすべて、並びに同化作用の向上及び異化作用の低下に必要な活性成分（例えば、α−ＨＩＣＡ及び／又はＬ−カルニチン、シトルリン、ＡＫＧ、ＥＰＡなどの他の有益成分）を有することができる。
【０１０１】
[00108]本開示の栄養組成物は、ヒトへの投与、特に胃腸管の任意の部分での投与に適した任意の手段によって投与することができる。経腸投与、経口投与、及び管又はカテーテルによる投与のすべてが本開示の範囲に及ぶ。栄養組成物は、経口、直腸、舌下、口唇下、口腔、局所などから選択される手段によって投与することもできる。
【０１０２】
[00109]栄養組成物が、経口投与するように製剤化される場合、この組成物は液体の経口栄養補助食品（例えば、不完全栄養補給）又は完全栄養補給とすることができる。この方法では、栄養組成物は、例えば、好都合な剤形の錠剤、カプセル、液体、チュアブル錠、ソフトゲル、サシェ、粉末、シロップ、液体懸濁物、エマルジョン及び溶液を含む、任意の公知の形態で投与することができる。ソフトカプセルでは、活性成分は、脂肪油、パラフィン油又は液体のポリエチレングリコールなどの適切な液体中に溶解又は懸濁させるのが好ましい。場合により、安定化剤を加えてもよい。
【０１０３】
[00110]本開示による適切な栄養組成物の形態には、例えば、乳児用調製粉乳、溶液、即時消費用組成物（例えば、即時飲用組成物又はインスタント飲料）、液体食品、ソフトドリンク、ジュース、スポーツドリンク、乳飲料、ミルクセーキ、ヨーグルト飲料、スープなどが含まれる。さらなる実施形態において、栄養組成物は、濃縮物、粉末、又は顆粒（例えば、発泡性顆粒）の形態で製造し販売することができ、水、又はミルク若しくはフルーツジュースなどの他の液体によって希釈し、即時消費用組成物（例えば、即時飲用組成物又はインスタント飲料）が得られる。
【０１０４】
[00111]栄養組成物は、ω−３及び／又はω−６脂肪酸の供給源を含み得る。ω−３脂肪酸の供給源の例には、例えば、魚油、オキアミ、ω−３の植物性供給源、亜麻仁、クルミ、及び藻類が含まれる。ω−３脂肪酸の非限定的な例には、α−リノレン酸（ＡＬＡ）、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）及びエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）が含まれる。ω−６脂肪酸の非限定的な例には、リノール酸（ＬＡ）、アラキドン酸（ＡＲＡ）が含まれる。
【０１０５】
[00112]好ましい実施形態において、ω−３脂肪酸は、１日当たり約０．２５ｇ〜５．０ｇ、好ましくは１日当たり約１．０〜３．０ｇの量で供給される。
【０１０６】
[00113]一実施形態において、栄養組成物は植物化学物質源を含む。植物化学物質は、他の食物の中でも、多くの果物及び野菜中に見出される非栄養性化合物である。一般に３つの主要な群に分類することができる何千もの植物化学物質が存在している。第１の群は、フラボノイドであり、関連フェノール化合物及びポリフェノール化合物である。第２の群は、テルペノイド、例えばカロテノイド及び植物ステロールである。第３の群は、アルカロイド及び含硫黄化合物である。植物化学物質は、生体中で活性があり、一般に、抗酸化剤と類似の作用をする。植物化学物質はまた、炎症プロセス、血栓形成、喘息及び糖尿病において有益な役割を果たすように見える。
【０１０７】
[00114]一実施形態において、栄養組成物はタンパク質源を含む。タンパク質源は、これらに限定されないが、動物性タンパク質（乳タンパク質、食肉タンパク質又は卵タンパク質など）、植物性タンパク質（大豆タンパク質、小麦タンパク質、米タンパク質、及びエンドウタンパク質など）又はそれらの組み合わせを含む、栄養タンパク質とすることができる。一実施形態において、タンパク質は、乳清、ニワトリ、トウモロコシ、カゼイン塩、小麦、亜麻、大豆、イナゴマメ、エンドウ又はそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【０１０８】
[00115]一実施形態において、植物性タンパク質は、製剤の正味のアルカリプロファイルをさらに増強し、かつ多量栄養源の種類を増加させるために含まれることになる。ある特定の植物性タンパク質（例えば、エンドウタンパク質単離物）の栄養プロファイルに基づくと、製剤に含むことができる植物性タンパク質源の量には限度がある。例えば、エンドウタンパク質のアミノ酸プロファイルは不可欠アミノ酸をすべて含む。エンドウタンパク質はアルギニンに比較的富むが、含硫アミノ酸であるメチオニン及びシステインは限定的である。しかし、例えば、エンドウタンパク質単離物を、こうした不足を相殺するための含硫アミノ酸を十分含有している完全タンパク質源（乳タンパク質又は完全野菜タンパク質など）と混合することが可能である。キャノーラタンパク質（すなわち、単離物、加水分解物（ｈｙｄｒｏｓｙｌａｔｅ）及び濃縮物）は、患者に必要な高品質タンパク質を送達するための、アミノ酸プロファイルをさらに増加するための含硫アミノ酸を相当量供給することができるこうした植物性タンパク質の１つである。さらに、動物由来のタンパク質は、植物性タンパク質よりも含硫アミノ酸が通常豊富である。
【０１０９】
[00116]本開示の栄養組成物は炭水化物源を含んでもよい。スクロース、ラクトース、グルコース、フルクトース、固体コーンシロップ、マルトデキストリン、変性デンプン、アミロースデンプン、タピオカデンプン、トウモロコシデンプン、又はそれらの組み合わせ（これらに限定されない。）を含む任意の適切な炭水化物を栄養組成物中に使用することができる。
【０１１０】
[00117]栄養組成物は穀物を含んでもよい。穀物は、例えば、異なる源から得られる全粒を含むことができる。異なる源には、セモリナ、トウモロコシ、粗挽き穀物、穀粉及び微粉化穀物（微粉化穀粉）を含むことができ、かつ穀類又は擬穀類を由来とすることができる。一実施形態において、穀物は全粒成分を加水分解したものである。本明細書において、「全粒成分を加水分解したもの」とは、酵素的に消化された全粒成分であるか、又は少なくともα−アミラーゼの使用により消化された全粒成分のことであり、α−アミラーゼは、活性化状態にあると、食物繊維には加水分解活性を示さない。全粒成分を加水分解したものは、プロテアーゼの使用によりさらに消化することができ、このプロテアーゼは、活性化状態にあると、食物繊維には加水分解活性を示さない。全粒成分を加水分解したものは、液体、濃縮物、粉末、ジュース、ピューレ又はそれらの組み合わせの形態で供給することができる。
【０１１１】
[00118]栄養組成物は脂肪源を含んでもよい。脂肪源は、任意の適切な脂肪又は脂肪混合物を含むことができる。例えば、脂肪源には、これらに限定されないが、植物性脂肪（例えば、オリーブオイル、コーンオイル、ひまわり油、高オレイン酸ひまわり、亜麻仁油、なたね油、キャノーラ油、高オレイン酸キャノーラ油、ヘーゼルナッツ油、大豆油、パーム油、ココナッツ油、ブラックカラントシードオイル、ルリヂサ油、レシチン）、獣脂（例えば乳脂）、又はそれらの組み合わせを含むことができる。脂肪源は、上に列挙した脂肪の精製度が低いタイプのもの（例えば、ポリフェノール含有用のオリーブオイル）とすることもできる。
【０１１２】
[00119]一実施形態において、栄養組成物は、１種又は複数種のプレバイオティクスをさらに含む。プレバイオティクスの非限定的な例には、アカシアガム、α−グルカン、アラビノガラクタン、β−グルカン、デキストラン、フルクトオリゴ糖、フコシルラクトース、ガラクトオリゴ糖、ガラクトマンナン、ゲンチオオリゴ糖、グルコオリゴ糖、グアーガム、イヌリン、イソマルトオリゴ糖、ラクトネオテトラオース、ラクトスクロース、ラクチュロース、レバン、マルトデキストリン、ミルクオリゴ糖、部分的に加水分解されたグアーガム、ペクチンオリゴ糖、難消化性デンプン、老化デンプン、シアロオリゴ糖、シアリルラクトース、大豆オリゴ糖、糖アルコール、キシロオリゴ糖、それらの加水分解物、又はそれらの組み合わせが含まれる。
【０１１３】
[00120]栄養組成物は、１種又は複数種のプロバイオティクスをさらに含むことができる。プロバイオティクスの非限定的な例には、アエロコッカス属、アスペルギルス属、バクテロイデス属、ビフィドバクテリウム属、カンジダ属、クロストリジウム属、デバリオマイセス属、エンテロコッカス属、フソバクテリウム属、ラクトバチルス属、ラクトコッカス属、ロイコノストック属、メリソコッカス属、ミクロコッカス属、ムコール属、オエノコッカス属、ペディオコッカス属、ペニシリウム属、ペプトストレポコッカス属、ピキア属、プロピオニバクテリウム属、シュードカテヌラータム属、リゾプス属、サッカロマイセス属、スタフィロコッカス属、ストレプトコッカス属、トルロプシス属、ワイセラ属、非複製性微生物、又はそれらの組み合わせが含まれる。
【０１１４】
[00121]栄養組成物中には１種又は複数種のアミノ酸が存在してもよい。アミノ酸の非限定的な例には、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、シトルリン、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、ヒドロキシプロリン、ヒドロキシセリン、ヒドロキシチロシン、ヒドロキシリジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、タウリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、又はそれらの組み合わせが含まれる。
【０１１５】
[00122]好ましい実施形態において、グルタミンは１日当たり約１０ｇ〜４０ｇの量で提供される。
【０１１６】
[00123]栄養組成物中には１種又は複数種の抗酸化剤が存在してもよい。抗酸化剤の非限定的な例には、アスタキサンチン、カロテノイド、補酵素Ｑ１０（ＣｏＱ１０）、フラボノイド、グルタチオン、ゴジ（クコ）、ヘスペリジン、ラクトウルフベリー、リグナン、ルテイン、リコペン、ポリフェノール、セレン、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ゼアキサンチン、又はこれらの組み合わせが含まれる。
【０１１７】
[00124]栄養組成物はまた、繊維又は異なる種類の繊維の混合物を含む。繊維混合物は、可溶性及び不溶性繊維の混合物を含有してもよい。可溶性繊維は、例えば、フルクトオリゴ糖、アカシアガム、イヌリンなどを含むことができる。不溶性繊維は、例えば、エンドウの外側繊維を含むことができる。
【０１１８】
[00125]本開示の栄養組成物は、不完全栄養又は完全栄養のどちらかの源とすることができる。栄養組成物は、経口投与又は経管栄養によって投与することができる。栄養組成物が、経口投与するために製剤化される場合、この組成物は液体の経口栄養補助食品又は栄養補給とすることができる。栄養組成物は、短期的又は長期的な経管栄養にも使用することができる。
【０１１９】
[00126]さらに別の実施形態では、本開示の栄養組成物を投与する方法が提供される。例えば、一実施形態では、それを必要とする個体において筋タンパク質合成を刺激する方法が提供される。別の実施形態では、それを必要とする個体において筋タンパク質の異化作用を最小化する方法が提供される。さらに別の実施形態では、それを必要とする個体において除脂肪体重を維持する方法が提供される。さらに別の実施形態では、それを必要とする個体において、負荷軽減により誘導される骨量減少を低減する方法が提供される。さらに別の実施形態では、それを必要とする個体において骨格筋萎縮を軽減する方法が提供される。別の実施形態では、それを必要とする個体において高尿毒症性負荷を緩和する方法が提供される。これらの方法は、有効量のα−ヒドロキシイソカプロン酸を含む栄養組成物を、個体に投与するステップを含む。本開示の栄養組成物はまた、上述の他の活性成分又は不活性成分も含むことができる。
【０１２０】
[0100]本明細書に記載の好ましい実施形態に対する種々の変更及び修正は当業者には明らかである。そのような変更及び修正は、本発明の精神及び範囲から逸脱することなく、かつ本発明の意図する利益を減少させることなく行うことができる。すなわち、そのような変更及び修正は添付の特許請求の範囲に包含されるものとする。
【実施例】
【０１２１】
実施例１（ラットにおける後肢の不動化後の筋肉萎縮及び回復に対するα−ＨＩＣＡの効果）：
材料及び方法：
動物プロトコル：
本明細書に記載の実験は２種の一連の実験に分けられる。いずれの試験においても、制御された環境に１週間順応させた雄のウィスターラット（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｂｒｅｅｄｉｎｇ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）を使用した。ラットは、３５０〜３７５ｇで搬送され、約１２週齢であった。水及び標準ラット餌を自由摂取させた。実験はすべて、Ｔｈｅ  Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ  Ｓｔａｔｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｃｏｌｌｅｇｅ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅの動物管理使用委員会（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ）により承認を受け、実験動物の使用に関する米国国立衛生研究所のガイドラインを厳守した。
【０１２２】
試験１：
この試験では、骨格筋における、非活動性萎縮症によって生じた通常の萎縮性反応を緩和又は防止するための種々の栄養補助食品の能力を調べた。以下のカスタムメイドの食餌、すなわち対照食（ＡＩＮ９３Ｍ）、又はａ−ヒドロキシ−イソカプロン酸（ＨＩＣＡ）若しくはロイシン（Ｌｅｕ）を補給した等カロリー・等窒素の食餌を商業的に調製した（Ｄｙｔｅｓ，Ｂｅｔｈｌｅｈｅｍ，ＰＡ）（表１）。予備試験は、ラットを最初に導入した際、ラットは種々の食餌に摂取量の変動があったことを示した。したがって、動物に、後肢を不動化する前に６日間の食餌介入をした。１日目の後に自発的な食物摂取の最も少ないことを示したＨＩＣＡ群に、すべての動物をペアフィードした。７日目に、文献（Ｋｒａｗｉｅｃ  ＢＪ，Ｆｒｏｓｔ  ＲＡ，Ｖａｒｙ  ＴＣ，Ｊｅｆｆｅｒｓｏｎ  ＬＳ  ａｎｄ  Ｌａｎｇ  ＣＨ．，Ｈｉｎｄｌｉｍｂ  ｃａｓｔｉｎｇ  ｄｅｃｒｅａｓｅｓ  ｍｕｓｃｌｅ  ｍａｓｓ  ｉｎ  ｐａｒｔ  ｂｙ  ｐｒｏｔｅａｓｏｍｅ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓ  ｂｕｔ  ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ．Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  Ｍｅｔａｂ  ２８９，Ｅ９６９−Ｅ９８０，  ２００５、又はＶａｒｇａｓ  Ｒ  ａｎｄ  Ｌａｎｇ  ＣＨ．，Ａｌｃｏｈｏｌ  ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｓ  ｌｏｓｓ  ｏｆ  ｍｕｓｃｌｅ  ａｎｄ  ｉｍｐａｉｒｓ  ｒｅｃｏｖｅｒｙ  ｏｆ  ｍｕｓｃｌｅ  ｍａｓｓ  ｒｅｓｕｌｔｉｎｇ  ｆｒｏｍ  ｄｉｓｕｓｅ  ａｔｒｏｐｈｙ．Ａｌｃｏｈｏｌ  Ｃｌｉｎ  Ｅｘｐ  Ｒｅｓ  ３２，  １２８−１３７，  ２００８）に記載の方法と同様に、すべてのラットにイソフルラン（誘導３％＋維持１．５〜２％）を用いて麻酔をかけ、ファイバーグラスキャストにより片方の後肢に不動化を施した。
【０１２３】
腓腹筋に最大の萎縮が起こるようにその足を底屈位にし、蘇生のために、暖めた（３７℃）０．９％の無菌生理食塩水１０ｍｌをラットに与えた。以前の研究により、片方の足を不動化しても、対側のキャストしていない足側からの骨格筋には、関心対象の種々のパラメーターに対して何ら影響がないことが実証されていた。したがって、対側の足は、後の実験すべてにおいて対照として機能した。キャスト後、ラットを個別に収容し、７日間のペアフィードを続けた。水を自由摂取させた。キャストをして７日後に、ペントバルビタールでラットに麻酔をかけ、キャストを非侵襲的かつ迅速（＜２分）に除去した（Ｓｔｒｙｋｅｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｋａｌａｍｚｏｏ，ＭＩ）。
【０１２４】
試験２：
この試験は、キャスト除去後、７日又は１４日の回復期間をラットに与えたこと以外は、試験１と同様に行った。本発明者らは麻酔時間を最小化することを望んでいたので、この試験の動物は、キャストの除去にはペントバルビタールの代わりにイソフルランを用いて麻酔した。
【０１２５】
【表１】
2014519483.tif 000002
値はすべてｇ／ｋｇ食餌である。
【０１２６】
分析法：
腓腹筋、肝臓及び心臓（心室のみ）におけるタンパク質合成でのインビボの速度を、文献（Ｖａｒｙ  ＴＣ  ａｎｄ  Ｌａｎｇ  ＣＨ，Ａｓｓｅｓｓｉｎｇ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ａｌｃｏｈｏｌ  ｃｏｎｓｕｍｐｔｉｏｎ  ｏｎ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｉｎ  ｓｔｒｉａｔｅｄ  ｍｕｓｃｌｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ  ４４７：  ３４３−３５５，  ２００８）に記載の方法と同様に、大量投与法を用いて測定した。血液を抜き取るため、左の頚動脈にＰ−５０カテーテルを取り付けた。［３Ｈ］−Ｌ−フェニルアラニン（Ｐｈｅ；１５０ｍＭ，３０μＣｉ／ｍｌ，１ｍｌ／１００ｇ体重）をラットに静脈（ＩＶ）注射し、血漿Ｐｈｅ濃度及び放射能を測定するために、１５分後に血液を採取した。その後、組織を迅速に削り取り、一部をフリーズクランプし、その後−７０℃で保存した。タンパク質合成の速度は、タンパク質に導入された放射能の量を血漿Ｐｈｅ比放射能で除することによって算出した。血漿Ｐｈｅの比放射能は、血漿のトリクロロ酢酸（ＴＣＡ）抽出物からの上澄み液を高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）分析することによって測定した。さらに、採取したての筋サンプルを、ウエスタンブロット及び選択したタンパク質の分析用にホモジナイズし、さらに他の組織片を後述の通りｑＲＴ−ＰＣＲに使用した。
【０１２７】
採取したての骨格筋を、２０ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、２ＥＧＴＡ、５０フッ化ナトリウム、１００塩化カリウム、０．２ＥＤＴＡ、５０β−グリセロリン酸、１ＤＴＴ、０．１フェニルメタン−フッ化スルホニル、１ベンズアミジン、及び０．５バナジン酸ナトリウム（ｍｍｏｌ／Ｌ）からなる氷冷したホモジナイズ用緩衝液中でホモジナイズした（Ｋｉｎｅｍａｔｉｃ  Ｐｏｌｙｔｒｏｎ；Ｂｒｉｎｋｍａｎｎ，Ｗｅｓｔｂｕｒｙ，ＮＹ）。遠心分離後、タンパク質を測定し、サンプル当たり等量のタンパク質を標準ＳＤＳ−ＰＡＧＥに施した。具体的には、総Ｓ６Ｋ１及びリン酸化Ｓ６Ｋ１（Ｔ３８９，Ｂｅｖｅｒｌｙ，ＭＡ）についてウエスタン解析を行った。ブロットは、増強化学ルミネセンスウエスタンブロット法用試薬（Ｓｕｐｅｒｓｉｇｎａｌ  Ｐｉｃｏ，Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ）を用いて発色した。乾燥ブロットをＸ線フィルムに暴露して直線範囲内にシグナルを得、次いでフィルムをスキャンし（Ｍｉｃｒｏｔｅｋ  ＳｃａｎＭａｋｅｒ  ＩＶ）、Ｓｃｉｏｎ  Ｉｍａｇｅ  ３ｂソフトウエア（Ｓｃｉｏｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｆｒｅｄｅｒｉｃｋ，ＭＤ）を用いて定量した。
【０１２８】
ＲＮＡ抽出及びリアルタイム定量的ＰＣＲ：
全ＲＮＡは、Ｔｒｉ−ｒｅａｇｅｎｔ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｅｎｔｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｃｉｎｃｉｎｎａｔｉ，ＯＨ）及びＲＮｅａｓｙミニキット（Ｑｉａｇｅｎ，Ｖａｌｅｎｃｉａ，ＣＡ）プロトコルを用いて抽出した。製造元の指示書に従って、ｔｒｉ−ｒｅａｇｅｎｔ８００μｌ中で骨格筋（５０〜８０ｍｇ）をホモジナイズし、次いでクロロホルム抽出した。等容積の７０％エタノールを水性相に加えて、この混合物をＱｉａｇｅｎミニスピンカラムに充填した。この工程より先は、残存ＤＮＡの汚染を除去するために室温でのＤＮａｓｅＩオンカラム処理をしたことを含めて、このＱｉａｇｅｎミニキットのプロトコルに従った。ＲＮａｓｅフリー水４０μｌを用いたカラムからＲＮＡを溶出し、１μｌをＮａｎｏＤｒｏｐ  ２０００（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）分光光度計で定量するために使用した。ＲＮＡの質は１％アガロースゲル上で分析した。製造元の指示書に従って、全ＲＮＡ（１μｇ）をｓｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔ  ＩＩＩ逆転写酵素（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）を用いて逆転写した。リアルタイム定量的ＰＣＲは、製造元の指示書（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，ＣＡ）に従い、アトロジン（Ｒｎ００５９１７３０＿ｍ１）、ｍｕｒｆ（Ｒｎ００５９０１９７＿ｍ１）、ユビキチンｂ（Ｒｎ０３０６２８０１＿ｇＨ）及びｇａｐｄｈ（Ｒｎ０１７７５７６３＿ｇ１）に関してＴａｑＭａｎ遺伝子発現アッセイ、並びに遺伝子発現マスターミックスを用いたＳｔｅｐＯｎｅＰｌｕｓシステムで、ｃＤＮＡ２５ｎｇを用いて行った。サイクリングパラメーターは、最初に９５℃で１０分、その後９５℃で１５秒及び６０℃で１分が４０サイクルであった。内在性対照に関して、標的遺伝子の遺伝子発現の表示に比較定量方法２−ΔΔＣｔを使用した（Ｌｉｖａｋ  ＫＪ  ａｎｄ  Ｓｃｈｍｉｔｔｇｅｎ  ＴＤ，Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｒｅｌａｔｉｖｅ  ｇｅｎ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｄａｔａ  ｕｓｉｎｇ  ｒｅａｌ−ｔｉｍｅ  ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ  ＰＣＲ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ２（−ΔΔＣ（Ｔ））Ｍｅｔｈｏｄ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２５：  ４０２−４０８，  ２００１）。
【０１２９】
ラットに麻酔をかけながら、［３Ｈ］−Ｐｈｅを注入する前に、動脈カテーテルから血液を採取した。標準的な血液学的かつ生化学的なエンドポイントを決定するために、血液を分注した。血液分析に関して、血液２５０〜５００μｌを、ＥＤＴＡ（ＢＤ  Ｎｏ．３６５９７４，Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を含有しているチューブに分注した。血液解析（Ｈｅｓｋａ  ＣＢＣ−Ｄｉｆｆ  Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ  Ａｎａｌｙｚｅｒ，Ｌｏｖｅｌａｎｄ，ＣＯ）には、赤血球数及び白血球数、ヘマトクリット、ヘモグロビン、血小板及び白血球分画が含まれる。メチレンブルー染色を用いて、手作業で網状赤血球を数えた。さらに、９００μｌの血液を、プロトロンビン時間（ＢＢＬ  Ｆｉｂｒｏｍｅｔｅｒ  Ｓｙｓｔｅｍ，Ｃｏｃｋｅｙｓｖｉｌｌｅ，ＭＤ）を測定するために、０．１０９Ｍクエン酸ナトリウム（ＢＤ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｎｏ．３６３０８３，Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）１００μｌを含有しているチューブに分注した。残りの血液はシリコーン被覆した採取用チューブ（ＢＤ  Ｎｏ．３６６３８１，Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）に分注して凝固させた。凝固血液サンプルを、Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ  Ａｌｌｅｇｒａ  Ｘ−１２Ｒ遠心分離器で、４℃、３５００ｒｐｍで５分間遠心分離を行い、血清を集めて保管した。血清に関する生化学分析は、Ｃｏｂａｓ  Ｍｉｒａ  Ｐｌｕｓ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ａｎａｌｙｚｅｒ（Ｄｉａｍｏｎｄ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ，Ｈｏｌｌｉｓｔｏｎ，ＭＡ）で行い、総ビリルビン、グルコース、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、アラニンアミノトランスフェラーゼ、ラクテートデヒドロゲナーゼ、アルブミン、カルシウム、クレアチニン、尿素、リン酸塩、総コレステロール、塩化物及び総タンパク質が含まれた。血清ナトリウム及びカリウムは、炎光光度計（ＩＬ９４０，Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｌｅｘｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ）によって分析した。トリグリセリド及び遊離脂肪酸（ＦＦＡ）を、比色測定した（それぞれ、Ａｂｃａｍ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ；Ｗａｋｏ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ，Ｒｉｃｈｍｏｎｄ，ＶＡ）。ＥＬＩＳＡによってインスリンを測定した（Ａｌｐｃｏ  ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ，Ｓａｌｅｍ，ＮＨ）。インスリン抵抗性の恒常性モデル評価（ＨＯＭＡ−ＩＲ）を計算し、全身インスリン抵抗性を見積もった（Ｔｕｒｎｅｒ  ＲＣ，Ｈｏｌｍａｎ  ＲＲ，Ｍａｔｔｈｅｗｓ  Ｄ，Ｈｏｃｋａｄａｙ  ＴＤ  ａｎｄ  Ｐｅｔｏ  Ｊ．Ｉｎｓｕｌｉｎ  ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ａｎｄ  ｉｎｓｕｌｉｎ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ｄｉａｂｅｔｅｓ：  ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅｉｒ  ｒｅｌａｔｉｖｅ  ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  ｂｙ  ｆｅｅｄｂａｃｋ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｆｒｏｍ  ｂａｓａｌ  ｐｌａｓｍａ  ｉｎｓｕｌｉｎ  ａｎｄ  ｇｌｕｃｏｓｅ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ．Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ２８：  １０８６−１０９６，  １９７９）。
【０１３０】
総除脂肪量及び脂肪組織量を迅速に測定するため、身体組成の縦断的及び群の差異を、１Ｈ−ＮＭＲ分析機器（Ｂｒｕｋｅｒ  ＬＦ９０  ｐｒｏｔｏｎ−ＮＭＲ  Ｍｉｎｉｓｐｅｃ，Ｂｒｕｋｅｒ  Ｏｐｔｉｃｓ，Ｗｏｏｄｌａｎｄｓ，ＴＸ）を用いて、意識のある動物で非侵襲的に追跡した。キャスト施用直前に測定を行い、キャスト除去の際及び／又は回復期間の後に再度行った。
【０１３１】
統計的解析：
各条件に関するデータは平均±平均の標準誤差（ＳＥＭ）としてまとめ、処置群当たりのラット数は図又は表の脚注に示している。データの統計的評価は、相互関係が有意な場合、事後のＳｔｕｄｅｎｔ−Ｎｅｕｍａｎ−Ｋｅｕｌｓ検定による二元配置ＡＮＯＶＡを用いて行った。同一ラットにおける右と左の腓腹筋の間の筋タンパク質合成の不動化誘発性の低下を比較するため、両側ペア検定を行った。群間の差異はＰ＜０．０５で有意とみなした。
【０１３２】
結果：
食物摂取量、体重及び臓器重量：
すべての試験で使用した動物を、基礎期間（例えばキャスト前）、不動化期間及び回復期間中の、食物摂取量及び体重変化について、全体的なパターンが得られるように一緒にした。１日後の食物摂取量は、不動化の時まで４群間に差異はなかった（例えば、２〜５日；図１Ａ）。キャスト直後に、食物摂取量がおよそ２５％低下し、この低下はすべての群において同等であった。ＨＩＣＡ群中のラットによって摂取された食物量に、ラットにペアフィードしようとする発明者らの最良の試みにもかかわらず、ＨＩＣＡ群の平均食物摂取量は、不動化の最終４日間、他のすべての群より低い傾向があった。キャストを除去すると、食物摂取量は試験期間の経過に応じて徐々に増加し、また、４群間の食物摂取量に有意差はなかった（図１Ａ）。
【０１３３】
図１Ｂは、各動物自身の初期体重で正規化した、体重の絶対変化を示している。所定の食餌を導入した際には、すべてのラットについて最初の２４時間に体重の初期低下があった。その後、体重はすべての群で徐々に増加し、いずれの群でも初期値から差異はなかった。キャストをした結果、すべてのラットは体重が減少し、その減少量はすべての群において同等であった。キャストを除去すると、体重は初め増加し、その後回復期間中に大部分は安定水準に達するように見えた。全体として、異なる栄養補助食品を摂取したラット間で、食物摂取量又は体重のいずれにも持続的な違いは存在しなかった。したがって、群間の代謝作用のいかなる差異（後述）もカロリー摂取の差異に起因していることはない。
【０１３４】
肝臓、心臓（心室のみ）、副腎、脾臓又は精巣について、臓器の総重量に差異は存在しなかった（表２）。腎臓重量は、対照、ＨＩＣＡ又はロイシンの豊富な食餌を摂取したラット間で差異はなかった。
【０１３５】
【表２】
2014519483.tif 000003
値は平均±ＳＥＭ。群当たりそれぞれｎ＝２６、２２及び２３匹のラット。同じ栄養処置の試験間の臓器重量に差異が存在しなかったので、データはすべての試験のものを一緒にした。
【０１３６】
食餌を自由摂取させたラットにおいて、０８００〜１０００時間、臓器タンパク質合成のインビボ決定速度を測定した。心臓及び肝臓におけるタンパク質合成は４群間で差異はなかった（表３）。
【０１３７】
【表３】
2014519483.tif 000004
値は平均±ＳＥＭ。群当たりそれぞれｎ＝２７、２３及び２３匹のラット。同じ栄養処置の試験間の臓器重量に差異が存在しなかったので、データはすべての試験のものを一緒にした。
【０１３８】
一般的な代謝特性、血液学的特性及び臓器特性：
４つの処置群から採取した血清について種々の生化学的エンドポイントを決定した。やはり、種々の期間、同じ食餌を摂取した群内で検出した統計的な差異は認められなかったので、すべての試験で得られたデータを一緒にした。表４に示される通り、値はすべてラットに関して正常範囲内にあったが、選択したエンドポイントに関して、群間で一部わずかではあるが、統計的な有意差が存在した。例えば、いくつかの電解質（例えば、ナトリウム、塩化物及びカルシウム）濃度に関して差異は認められなかった一方、血清カリウム濃度は、Ｌｅｕ補給群では、対照又はＨＩＣＡ給餌ラットのどちらかの値に比較して低かった。また、Ｌｅｕ群中における血清リン濃度は、対照の値と比較して１８％高かった。腎機能のマーカー（例えば、クレアチニン及びＢＵＮ）は、ＨＩＣＡとＬｅｕ補給群の両方において、対照の値と比較して概して影響がなかった。肝臓機能の代用マーカー（ＡＳＴ、ＡＬＴ、ビリルビン）は群間で差異はなかった。
【０１３９】
栄養及び代謝のマーカー（総タンパク質、アルブミン、グルコース、トリグリセリド）も４群間で差異はなかった。最後に、血清インスリン濃度は、対照とＨＩＣＡ給餌ラットの間で差異はなかった（表４）。最後に、本発明者らは、インスリン抵抗性の代用マーカーであるＨＯＭＡ−ＩＲを算出し、ＨＯＭＡ−ＩＲは、Ｌｅｕ給餌ラットにおいて、対照ラット又はＨＩＣＡ含有食餌を供したラットと比較して著しく高いことを実証した。
【０１４０】
【表４】
2014519483.tif 000005
値は平均±ＳＥＭ。４つの栄養群はそれぞれｎ＝２６、２２、２３及び２３匹。異なる文字（ａ、ｂ、ｃ）を有する平均値は同じ列内で統計的差異がある（Ｐ＜０．０５；ＡＮＯＶＡ−ＳＮＫ）。ＨＯＭＡ−ＩＲ：インスリン抵抗性の恒常性モデル評価。
【０１４１】
決定した血液学的エンドポイントはすべてげっ歯類に関して正常範囲内にあり、４群間で差異はなかった（表５）。例えば、群間で、白血球（ＷＢＣ）数、赤血球（ＲＢＣ）数又は血小板数に有意差はなかった。さらに、群間で、好中球、リンパ球、単球、好酸球又は網状赤血球の比率に差異は存在しなかった。ヘマトクリット、ヘモグロビン、平均赤血球容積（ＭＣＶ）及び平均赤血球ヘモグロビン（ＭＣＨ）にも差異はなかった。
【０１４２】
【表５】
2014519483.tif 000006
値は平均±ＳＥＭ。４つの栄養群はそれぞれｎ＝１９、１７、１５及び１５匹。略語：ＭＣＶ：平均赤血球容積；ＭＣＨ：平均赤血球ヘモグロビン；ＷＢＣ：白血球；ＲＢＣ：赤血球。単球、好酸球及び網状赤血球の比率はすべての群で各々平均＜２％となり、食餌補給の影響を受けなかった（データは示さず）。異なる文字（ａ、ｂ、ｃ）を有する平均値は同じ列内で統計的差異がある（Ｐ＜０．０５；ＡＮＯＶＡＳＮＫ）。
【０１４３】
筋肉量及びタンパク質合成：
キャストをしなかった対照の腓腹筋の湿潤重量は群間で差異はなかった（図２Ａ）。すべての群において、不動化により腓腹筋量が同程度に減少した（対照＝０．５８±０．０６ｇ；ＨＩＣＡ＝０．６１±０．０９ｇ；Ｌｅｕ＝０．５７±０．０８ｇ）。対照食を摂取したラットにおいて、キャスト除去後７日間、腓腹筋量に増加はなかった（図２Ｂ）。さらに、この時点での筋肉再生は、ａＨＩＣＡ又はＬｅｕを補給した食餌の摂取量によって変化しなかった。しかし、回復１４日目までに、すべての不動化筋肉は量を回復した（図２Ｃ）。この時点では、キャストをしなかった対側の筋肉と比較して、対照ラット及びＬｅｕ給餌ラットにおいて不動化筋肉の量の減少が依然として認められた。対照的に、ＨＩＣＡ給餌群では、キャストをした腓腹筋及びキャストをしなかった対照の腓腹筋の重量に差異はなかった。筋肉量の増加分としてデータを表すと、これらの群の差異がより明白である（図２Ｄ）。
【０１４４】
対照及びＬｅｕ給餌ラットからのキャストをしなかった筋肉中のタンパク質合成に、差異はなかった（表３）。対照的に、ＨＩＣＡ給餌ラットからのキャストをしなかった筋肉中のタンパク質合成の基礎速度は、対照の給餌ラットよりも著しく低かった（１０％）。キャストをすると、対照ラット及びＬｅｕ給餌ラットにおいて、タンパク質合成が同程度低下した。対照的に、ＨＩＣＡ含有食を給餌したラットでは、不動化誘発性の筋タンパク質合成の低下はなかった（図３Ａ右図）。７日間の回復期間後、不動化筋肉中でタンパク質合成が増加した（図３Ｂ）。タンパク質合成の増加量は、対照給餌ラット（０．４６±０．１３ｎｍｏｌ  Ｐｈｅ／ｈ／ｍｇタンパク質）と比較してＨＩＣＡ給餌ラット（０．７７±０．１７ｎｍｏｌ  Ｐｈｅ／ｈ／ｍｇタンパク質）で大きくなる傾向があったが、この差異は統計的有意性を実現しなかった。対照群及びＬｅｕ群に関して、不動化した下肢におけるタンパク質合成の速度は、回復１４日目まで、キャストをしなかった筋肉と差異がなかった（図３Ｃ）。しかし、ＨＩＣＡ給餌群の不動化筋肉におけるタンパク質合成は、対側の対照筋肉と比較して依然として増加した。やはり、筋タンパク質合成の増加量は、他の群と比較してＨＩＣＡ給餌ラットで増加する傾向があるが、この変化は統計的有意性を実現してはいなかった（図３Ｃ右図）。
【０１４５】
本発明者らは、同一期間の対照食を供した一連のペアフィードナイーブラット（ｎ＝７）に関して、腓腹筋重量及びタンパク質合成を同時に測定した。この対照ナイーブ群の左及び右の腓腹筋の重量（それぞれ、２．１７±０．０４ｇ及び２．１８±０．０５ｇ）は、対照給餌群（２．１６±０．０５ｇ）における、キャストをしなかった対照筋肉の重量と差異はなかった。さらに、ナイーブ対照ラットの左の腓腹筋中のタンパク質合成（１．３１±０．０７ｎｍｏｌ  Ｐｈｅ／ｈ／ｍｇタンパク質）及び右の腓腹筋中のタンパク質合成（１．３９±０．０８ｎｍｏｌ  Ｐｈｅ／ｈ／ｍｇタンパク質）は、対照給餌ラット（１．３６±０．０７ｎｍｏｌ  Ｐｈｅ／ｈ／ｍｇタンパク質）におけるキャストをしなかった筋肉と差異はなかった。これらのデータ、及び以前に公表されたもの（２８）は、キャストをしたラットにおける対側の筋肉は適切な内部対照であり、有意な代償性肥大を受けないことを示唆している。
【０１４６】
Ｓ６Ｋ１リン酸化：
ｍＴＯＲキナーゼ活性の変化は、その下流の基質であるＳ６Ｋ１のリン酸化状態の変化統合を通常もたらし、Ｓ６Ｋ１はタンパク質合成の速度全体の変化に比例する。キャストをしなかった対照筋肉におけるＳ６Ｋ１リン酸化（Ｔ３８９）の基礎レベルはかなりの変動を示し、そのため、種々の処置群間に統計的差異は存在しなかった（図４）。しかし、不動化は、群間で差異がなかったＳ６Ｋ１リン酸化に一貫した低下をもたらした。反対に、回復期間には、不動化筋肉中のＳ６Ｋ１リン酸化は向上する（回復７日目）か、又は対照値に戻った（回復１４日目）。
【０１４７】
考察：
基礎条件に対するＨＩＣＡ及びＬｅｕの補給効果：
この調査では、ａＨＩＣＡ又はＬｅｕのいずれかを補給した食餌の、不動化によって生じる萎縮性反応を緩和する能力、及び／又はキャスト除去後の筋肉の量を回復する能力を改善する能力を評価した。最大３週間のこうした種々の食餌の供給は、多くの生化学的及び血液学的エンドポイントに関して、対照食を供したラットと比較して統計的差異をほとんど生じなかった。さらに、種々の臓器（例えば、肝臓、心臓、脾臓、腎臓、精巣）の重量は大きく影響を受けなかった。したがって、これらの種々の栄養補助食品は明白な臓器毒性を何ら有していないように見える。
【０１４８】
これらの食餌の供給により、ラット中のＬＢＭの量又は割合、あるいは腓腹筋の量は有意に変化しなかった。さらに、肝臓又は心臓に関して、インビボで決定したタンパク質合成の速度には有意な変化は認められなかった。
【０１４９】
不動化に対する萎縮性反応：
後肢懸垂（例えば負荷無し）、長い安静、除神経及び後肢の不動化を含む、非活動性萎縮症を調べるために種々のモデルを使用した。後肢の不動化は片側又は両側のどちらかである。各モデルは他のものに比べて長所と短所を有しているが、この試験では、片側にキャストを用いて非活動性萎縮を生じさせた。このモデルにより、同じラットにおける不動化筋肉と対照筋肉の比較が可能になり、後肢筋肉組織への神経支配を維持し、かつキャスト除去後に行われることになる回復型の試験が可能になる。このモデルはまた、他のモデルよりもほぼ間違いなく、臨床的に一層適している。本発明者らの試験はまた、もはやその成長に迅速な成長相のない約１４週齢のウィスターラットでも行った。こうして、キャストをしなかった筋肉とキャストをした筋肉の間の差異は、正常な筋肉成長の障害とは反対の、萎縮性反応を表す見込みがより高い。一般に、足の不動化により、マウス、ラット及びヒトにおける筋肉量及び繊維径が減少することが報告されている。この非活動性萎縮は、タンパク質合成速度と分解速度との間の不均衡化によって引き起こされる。大多数の証拠は、不動化後６時間という早期に開始し、数日から数週間の低下が維持される、混合筋又は全筋タンパク質合成の両方が低下することを支持している。筋肉消耗症（例えば、敗血症、アルコール、過剰グルココルチコイド、炎症性サイトカイン過剰）を特徴とする他の異化作用状態では、Ｓ６Ｋ１のリン酸化の低下から明らかなように、筋タンパク質合成におけるこうした低下はｍＴＯＲの抑制活性を一時的に伴う（Ｋａｚｉ  ＡＡ，Ｐｒｕｚｎａｋ  ＡＭ，Ｆｒｏｓｔ  ＲＡ  ａｎｄ  Ｌａｎｇ  ＣＨ，Ｓｅｐｓｉｓ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｐｒｏｔｅｉｎ−ｐｒｏｔｅｉｎ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ  ｗｉｔｈｉｎ  ｍＴＯＲ  ｃｏｍｐｌｅｘ  １  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｍｏｄｕｌａｔｉｎｇ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｌｅｕｃｉｎｅ  ｏｎ  ｍｕｓｃｌｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ．Ｓｈｏｃｋ  ３５：  １１７−１２５，  ２０１１）。本発明者らの現在のデータは、非活動に応答するＳ６Ｋ１リン酸化の明確な低下を示している。
【０１５０】
萎縮性反応に対するａＨＩＣＡ又はＬｅｕによる栄養補給の影響：
ロイシンは、ｍＲＮＡ翻訳の開始を増強することにより、主に骨格筋の全タンパク質合成を刺激する（Ｄｅｎｎｉｓ  ＭＤ，Ｂａｕｍ  ＪＩ，Ｋｉｍｂａｌｌ  ＳＲ  ａｎｄ  Ｊｅｆｆｅｒｓｏｎ  ＬＳ．Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｉｎｖｏｌｖｅｄ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｃｏｏｒｄｉｎａｔｅ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍＴＯＲＣ１  ｂｙ  ｉｎｓｕｌｉｎ  ａｎｄ  ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄｓ．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２８６：  ８２８７−８２９６，  ２０１１．９）。
【０１５１】
しかし、Ｌｅｕを単独で補給した食餌をラットに供すると、腓腹筋におけるキャスト誘発性のタンパク質合成の低下を防止することはなかった。Ｌｅｕ効果の欠如に反して、αＨＩＣＡを単独で補給した食餌をラットに供すると、キャスト誘発性の筋タンパク質合成の低下を防止した。
【０１５２】
重要なことに、αＨＩＣＡが筋タンパク質合成の正常な低下を防ぐ能力があるにもかかわらず、この代謝物は、随伴する筋肉量それ自体の低下を防止しない又は緩和しない。この点では、栄養補助食品のいずれも、非活動によって生じる筋肉量の喪失を遅延することはできなかった。
【０１５３】
不動化からの回復に対するαＨＩＣＡ又はＬｅｕによる栄養補給の影響：
不動化筋肉において、キャスト除去後７日間（すなわち「回復」）、タンパク質合成が増加した。筋タンパク質合成におけるこうした代償性増加は、キャスト除去後６〜２４時間という早さで始まることが以前に報告されている。さらに、タンパク質合成の増加はＳ６Ｋ１のリン酸化の増強と一致している。
【０１５４】
７日間で不動化筋肉において確認されたタンパク質合成の代償性増加は、回復１４日目までに対照及びＬｅｕ給餌ラットにおいて基礎値に戻った。しかし、ＨＩＣＡを単独で補給したラットの不動化筋肉では、タンパク質合成は依然として増加した。タンパク質合成におけるこの増加は、不動化筋肉の量が統合増加して対照レベルに戻ることに関係していた。Ｌｅｕが豊富な食餌を供されたラットにおいて、萎縮性足の量の完全回復は腓腹筋量の部分的回復とは異なっていた。
【０１５５】
まとめると、評価した栄養補助食品の中でαＨＩＣＡだけが、筋タンパク質合成の不動化誘発性の低下を防ぐ。一括的に、補助食品のいずれも、成体ラット中における片方の後肢の不動化によって生じた筋肉量の低下を防止又は緩和しなかった。対照的に、不動化期間全体を通じて及びその後の回復の２週間のαＨＩＣＡの供給は、不動化筋肉における筋タンパク質合成の持続的な増加、及び筋肉量自体のより大きな増加量を生じさせた。筋肉の回復に対する同様の治療効果は、補給したＬｅｕを含有する食餌を摂取したラットでは観察されなかった。多くの全身及び組織特異的代謝パラメーター、並びに血液学的パラメーターに対してαＨＩＣＡ補給の明白な有害作用は存在しなかったので、本発明者らのデータは、αＨＩＣＡの供給は、非活動性萎縮からの回復の速度上昇を目的とする重要な栄養学的手法を示し得ることを示唆する。
【図面の簡単な説明】
【０１５６】
【図１】αＨＩＣＡ又はロイシン（Ｌｅｕ）の豊富な食餌を供したラットにおける、ペアフィードした対照ラットと比較した、毎日の食餌摂取量及び体重変化を示す図である。対照群、ＨＩＣＡ群及びＬｅｕ群のラットの初期絶対体重はそれぞれ、３９８±５、３９８±５、４００±５及び３９７±６ｇである。値は平均±ＳＥＭ。１〜１３日目はそれぞれｎ＝２７、２５、２３及び２３であり、回復の最初の７日間はそれぞれｎ＝１９、１５、１５及び１５であり、１４日の回復期間は群当たりｎ＝８である。
【図２】７日の不動化の終わり（図Ａ）、又は７日の不動化＋７日の回復後（図Ｂ）、又は１４日の回復後（図Ｃ）における、キャストをしなかった足（対照）又は対側の足の腓腹筋重量を示す図である。値は平均±ＳＥＭ。対照、ＨＩＣＡ及びＬｅｕ群のサンプルサイズは、不動化期間はそれぞれｎ＝８、１０、８及び９であり、７日の回復期間はｎ＝１１、７、７及び７であり、１４日の回復期間は群当たりｎ＝８である。＊Ｐ＜０．０５（同一時点における同じ群のキャストをしなかった対照の筋肉と比較）。キャストをしなかった筋肉の重量は、３つの時点のいずれについても、異なる栄養群間で差異がなかった。
【図３】７日の不動化の終わり（図Ａ）、又は７日の不動化＋７日の回復後（図Ｂ）、又は１４日の回復後（図Ｃ）における、キャストをしなかった足又は対側の足の腓腹筋におけるインビボ決定タンパク質合成を示す図である。値は平均±ＳＥＭ。対照、ＨＩＣＡ及びＬｅｕ群のサンプルサイズは、不動化期間はそれぞれｎ＝８、１０、８及び９であり、７日の回復期間はｎ＝１１、７、７及び７であり、１４日の回復期間は群当たりｎ＝８である。左図は筋タンパク質合成の絶対速度の定量値を表し、右図は、同じ動物におけるタンパク質合成（対照：キャストをしている）の変化（増加又は低下）を表す。＊Ｐ＜０．０５（同じ群のキャストをしなかった対照の筋肉と比較）。異なる栄養群間で、キャストをしなかった筋肉の重量に差異は存在しなかった。異なる文字を有する値は有意差がある（Ｐ＜０．０５）。
【図４】７日の不動化の終わり（図Ａ）、又は７日の不動化＋７日の回復後（図Ｂ）、又は１４日の回復後（図Ｃ）における、キャストをしなかった足又は対側の足の腓腹筋におけるＳ６Ｋ１リン酸化を示す図である。値は平均±ＳＥＭ。対照、ＨＩＣＡ及びＬｅｕ群のサンプルサイズは、不動化期間はそれぞれｎ＝８、１０、８及び９であり、７日の回復期間はｎ＝１１、７、７及び７であり、１４日の回復期間は群当たりｎ＝８である。各図のウエスタンブロットはすべてのサンプルを表しており、各時点のサンプルは同一ゲル上で操作している。棒グラフはすべてのイムノブロットのデンシトメトリー定量であり、棒は平均±ＳＥＭを表す。＊Ｐ＜０．０５（同じ群のキャストをしなかった対照の筋肉と比較）。異なる文字を有する値は有意差がある（Ｐ＜０．０５）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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