(57)【要約】  一腕の抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む薬学的製剤及びその使用が本明細書に提供される。
2014522843.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体が、配列ＫＳＳＱＳＬＬＹＴＳＳＱＫＮＹＬＡ（配列番号１）を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号２）を含むＨＶＲ−Ｌ２、配列ＱＱＹＹＡＹＰＷＴ（配列番号３）を含むＨＶＲ−Ｌ３、配列ＧＹＴＦＴＳＹＷＬＨ（配列番号４）を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列ＧＭＩＤＰＳＮＳＤＴＲＦＮＰＮＦＫＤ（配列番号５）を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び配列ＡＴＹＲＳＹＶＴＰＬＤＹ（配列番号６）を含むＨＶＲ−Ｈ３を含み、抗ｃ−ｍｅｔ抗体が単一の抗原結合腕を含み、Ｆｃ領域を含み、Ｆｃ領域が第一及び第二Ｆｃポリペプチドを含み、第一及び第二Ｆｃポリペプチドが複合体中で存在する抗ｃ−ｍｅｔ抗体；
（ｂ）ｐＨ５．０−５．４のヒスチジン緩衝液；
（ｃ）糖類；及び
（ｄ）ポリソルベートが０．０２％ｗ／ｖを超えて存在するポリソルベート
を含む薬学的製剤。
【請求項２】
抗ｃ−ｍｅｔ抗体が、（ａ）配列：ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＹＴＦＴＳＹＷＬＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＧＭＩＤＰＳＮＳＤＴＲＦＮＰＮＦＫＤＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＴＹＲＳＹＶＴＰＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号１９）を含む重鎖可変ドメイン及び（ｂ）配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＳＳＱＳＬＬＹＴＳＳＱＫＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＹＡＹＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号２０）を含む軽鎖可変ドメインを含む、請求項１に記載の薬学的製剤。
【請求項３】
第一及び第二Ｆｃポリペプチドが、前記抗原結合腕を含むＦａｂ分子と比較して、前記抗体断片の安定性を増加させるＦｃ領域を形成する、請求項２に記載の薬学的製剤。
【請求項４】
抗ｃ−ｍｅｔ抗体が、（ａ）配列番号１９のアミノ酸配列、ＣＨ１配列、及び第一Ｆｃポリペプチドを含む第一ポリペプチド、及び（ｂ）配列番号２０のアミノ酸配列及びＣＬ１配列を含む第二ポリペプチドを含む、請求項１から３の何れか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項５】
抗ｃ−ｍｅｔ抗体が（ｃ）第二Ｆｃポリペプチドを含む第三ポリペプチドを更に含む、請求項４に記載の薬学的製剤。
【請求項６】
第一Ｆｃポリペプチドが、図２に示されるＦｃ配列（配列番号１７）を含み、第二Ｆｃポリペプチドが図３に示されるＦｃ配列（配列番号１８）を含む、請求項１から５の何れか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項７】
抗ｃ−ｍｅｔ抗体がオナルツズマブである、請求項１から６の何れか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項８】
抗ｃ−ｍｅｔ抗体がオナルツズマブと同じエピトープに結合する、請求項１から７の何れか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項９】
抗ｃ−ｍｅｔ抗体が、約１０ｍｇ／ｍＬから約１００ｍｇ／ｍＬの間（例えば約１５ｍｇ／ｍＬから約７５ｍｇ／ｍＬ）の濃度で存在する、請求項１から８の何れか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項１０】
抗ｃ−ｍｅｔ抗体が約６０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する、請求項９に記載の薬学的製剤。
【請求項１１】
糖類が約７５ｍＭから約２００ｍＭ（例えば約１００ｍＭから約１５０ｍＭ）の濃度で存在する、請求項１から１０の何れか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項１２】
抗ｃ−ｍｅｔ抗体が約１２０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する、請求項１１に記載の薬学的製剤。
【請求項１３】
糖類が二糖類である、請求項１から１２の何れか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項１４】
二糖類がトレハロースである、請求項１３に記載の薬学的製剤。
【請求項１５】
二糖類がスクロースである、請求項１３に記載の薬学的製剤。
【請求項１６】
ヒスチジン緩衝液が約１ｍＭから約５０ｍＭ（例えば約１ｍＭから約２５ｍＭ）の濃度である、請求項１から１５の何れか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項１７】
ヒスチジン緩衝液が約１０ｍＭの濃度である、請求項１６に記載の薬学的製剤。
【請求項１８】
ヒスチジン緩衝液がヒスチジン酢酸塩である、請求項１から１７の何れか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項１９】
ポリソルベートが０．０２％を超え及び０．１％未満の濃度で存在する、請求項１から１８の何れか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項２０】
ポリソルベートが約０．０４％の濃度で存在する、請求項１９に記載の薬学的製剤。
【請求項２１】
ポリソルベートがポリソルベート２０である、請求項１から２０の何れか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項２２】
製剤が希釈剤（例えば０．９％のＮａＣｌ）で希釈される、請求項１から２１の何れか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項２３】
抗ｃ−ｍｅｔ抗体が約１ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する、請求項２２に記載の薬学的製剤。
【請求項２４】
ｃ−ｍｅｔ活性化細胞増殖を阻害する方法であって、前記方法が請求項１から２３の何れか一項に記載の薬学的製剤の有効量を細胞又は組織と接触させることを含む方法。
【請求項２５】
ＨＧＦ／ｃ−ｍｅｔシグナル伝達軸の調節不全に関連する疾患を調節する方法であって、前記方法が、請求項１から２３の何れか一項に記載の薬学的製剤の有効量を被験体に投与することを含む方法。
【請求項２６】
増殖性疾患を有する被験体を治療する方法であって、前記方法が請求項１から２３の何れか一項に記載の薬学的製剤の有効量を被検体に投与することを含む方法。
【請求項２７】
増殖性疾患が癌である、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
癌が、肺癌（非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ））、グリア芽腫、膵臓癌、肉腫、腎細胞癌、肝細胞癌、胃癌、結腸直腸癌及び／又は乳癌である、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
第二治療薬を更に含む、請求項２４から２８の何れか一項に記載の方法。
【請求項３０】
請求項１から２３の何れか一項に記載の薬学的製剤を作成する方法。
【請求項３１】
請求項１から２３の何れか一項に記載の薬学的製剤をその中に含有する容器を含む製造品。
【請求項３２】
請求項３１の製造品を作成する方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の開示】
【０００１】
関連出願への相互参照
本出願は、２０１１年６月３０日に出願された米国特許出願第６１／５０３，５１３号に対する優先権の利益を主張し、その全ての内容はその全体が参照により本明細書に援用される。
【０００２】
配列表
本出願は、ＥＦＳ−Ｗｅｂ経由でＡＳＣＩＩフォーマットで提出された配列表を含み、その全体が本明細書中で参照することにより援用される。前記ＡＳＣＩＩコピーは、２０１２年２月１６日に作成され、Ｐ４６９０Ｒ１ＷＯ.ｔｘｔと命名され、２２，５５３バイトの大きさである。
【技術分野】
【０００３】
抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む薬学的製剤及びその使用が本明細書に提供される。
【背景技術】
【０００４】
背景
賦形剤は、活性化合物の安定化を補助するために薬学的製剤に添加される。活性化合物と賦形剤の適合性は、医薬製剤の品質と安定性のために重要である。賦形剤は活性化合物の安定化に重要であるが、賦形剤は問題を生じる場合がある：賦形剤が分解しそれによって安定化のその機序を失うか又は活性化合物と相互作用する分解物を生成する場合がある。
【０００５】
活性化合物がポリペプチド、例えば抗体である薬学的製剤は、ポリペプチドは、一般的に、従来の有機分子及び無機分子より大きくかつより複雑である（例えば、ポリペプチドは、複雑な三次元構造に加えて、複数の官能基を有する）ため特別な問題を引き起こし得る。加えて、ポリペプチドが生物学的に活性であるために、薬学的ポリペプチド製剤は、薬学的ポリペプチド製剤の物理的および化学的安定性を維持しつつ、同時にポリペプチドのアミノ酸の少なくともコア配列のコンホメーションの完全性を完全なままに保持せねばならない。賦形剤は水溶液中で一般に安定である；しかし、薬学的ポリペプチド製剤中の賦形剤はポリペプチドと相互作用することができ、製剤中で分解を受け、タンパク質の安定化を阻むことができ、または分解物がポリペプチドと相互作用し（活性の損失など）難題をもたらし得る。従って、薬学的製剤の非活性成分とポリペプチド活性剤との相互作用の評価は化学的及び物理的安定性を保証するため重要である。
【０００６】
ポリソルベートは、界面誘導性凝集及び表面吸着に対して活性化合物を安定化するために使用される非イオン性界面活性剤である。ポリソルベートは、例えば撹拌（例えば振盪又は撹拌）、凍結／解凍、及び凍結乾燥など様々なストレスに対して効果的であり得る。薬学的ポリペプチド製剤では、ポリソルベートは表面への吸着を最小限にし、気液界面張力を低減し、従ってタンパク質の変性率を低下させる。薬学的製剤中のポリソルベートの欠損は製剤の不安定化を生じ得る。更に、ポリソルベートは、酸化及び加水分解によって分解することができ、長期保存にわたって薬学的製剤中でポリソルベートの見かけの濃度の低下につながることができる。ポリソルベート（例えば、ポリソルベート２０）は切断されて分解物（例えば、遊離ラウリン酸及びソルビタンポリオキシエチレン側鎖）を生成することができる。これらのポリソルベート分解物は非分解性ポリソルベートより界面活性が弱く、それゆえ薬学的製剤の化学的及び物理的安定性が損なわれることがある。更に、一部のポリソルベート分解物は不溶であり、それらがインタクトなポリソルベートによって可溶化されていない場合、即ち、もし分解したポリソルベート２０：インタクトなポリソルベート２０の比率が高すぎる場合、粒子を形成することができる。
【０００７】
ポリソルベートの分解速度及び程度は、活性化合物の化学的及び物理的特性によって影響され、そしてポリソルベートの安定化能力は異なる活性化合物を含む異なる薬学的製剤の間で変わることができる。特に、ポリソルベートはタンパク質を安定化するためにタンパク質製剤に含まれているので、薬学的ポリペプチド製剤中でのポリソルベートの濃度の減少及び分解物分子の蓄積は、タンパク質安定性において潜在的な関心事である。
【０００８】
ＨＧＦ／Ｃ−ｍｅｔ経路をターゲットとした数々の分子が報告されている。これらの分子は、ｃ−ｍｅｔの細胞外ドメインの一部、及び例えば米国特許第５，６８６，２９２号、Martens, T. et al., Clin. Cancer Res. 12 (20 Pt. 1):6144 (2006)；米国特許第６，４６８，５２９号；国際公開第２００６／０１５３７１号；国際公開第２００７／０６３８１６号、及び国際公開第２０１０／０４５３４５号に記載される抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む。抗ｃ−ｍｅｔ抗体の二価の形態は二量体化を促進することが示されており、ｃ−ｍｅｔ（アゴニスト機能）の活性化につながるが、逆に、一価抗体はｃ−ｍｅｔ活性（拮抗的機能）を阻害することが示されている。拮抗機能を必要とする病的状態の治療のために、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の二価性は所望されないアゴニスト作用をもたらす可能性があり、従って、病的状態の治療のために、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の標的への結合に際し、一価の特性はアンタゴニスト活性を確実にするために必要とされる。Ｆａｂ断片と片腕抗体は一価抗体の例である。片腕の抗体は、一般的にＦａｂよりも長い半減期を有する。しかし、片腕抗体は単一軽鎖及び単一重鎖（並びに追加のＦｃ領域）を含むため、もし片腕抗体構造が安定化されていない場合、ポリペプチドは、潜在的に二つの重鎖および二つの軽鎖を有する二価抗体を形成することができる可能性がある。一価抗体の凝集（多量体及びオリゴマーの形成）及び／又は抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む薬学的製剤中で一価構造を維持できないことは所望されないアゴニスト作用をもたらし得る。薬学的製剤中で抗ｃ−ｍｅｔ抗体の凝集の最小化は、このように、特に重要である。従って、ＨＧＦ／ｃ−ｍｅｔ経路を標的にする分子における著しい進展にもかかわらず、ｃ−ｍｅｔの抗体の凝集を最小限に抑える安定した薬学的製剤が依然として必要である。
【０００９】
本明細書に引用される全ての参考文献は、特許出願および刊行物を含み、その全体が参考により援用される。
【００１０】
発明の開示
抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は液体の薬学的製剤である。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は安定した薬学的製剤である。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は安定した液体の薬学的製剤である。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、アンタゴニスト抗ｃ−ｍｅｔ抗体である。
【００１１】
例えば、本明細書で提供されるのは、（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体；（ｂ）ｐＨが５．０から５．４のヒスチジン緩衝液；（ｃ）糖類；及び（ｄ）ポリソルベートが０．０２％ｗ／ｖを超えて存在するポリソルベートを含んでなる薬学的製剤である。
【００１２】
任意の製剤の幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、配列ＫＳＳＱＳＬＬＹＴＳＳＱＫＮＹＬＡ（配列番号１）を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号２）を含むＨＶＲ−Ｌ２、配列ＱＱＹＹＡＹＰＷＴ（配列番号３）を含むＨＶＲ−Ｌ３、配列ＧＹＴＦＴＳＹＷＬＨ（配列番号４）を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列ＧＭＩＤＰＳＮＳＤＴＲＦＮＰＮＦＫＤ（配列番号５）を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び配列ＡＴＹＲＳＹＶＴＰＬＤＹ（配列番号６）を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、（ａ）配列：ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＹＴＦＴＳＹＷＬＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＧＭＩＤＰＳＮＳＤＴＲＦＮＰＮＦＫＤＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＴＹＲＳＹＶＴＰＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号１９）を含む重鎖可変ドメイン、及び（ｂ）配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＳＳＱＳＬＬＹＴＳＳＱＫＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＹＡＹＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号２０）を含む軽鎖可変ドメインを含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、単一の抗原結合腕を含み、かつＦｃ領域を含み、ここでＦｃ領域は、第一及び第二Ｆｃポリペプチドを含み、前記第一及び第二Ｆｃポリペプチドは複合体中に存在する。幾つかの実施態様において、第一及び第二Ｆｃポリペプチドは、前記抗原結合腕を含むＦａｂ分子と比較して、前記抗体断片の安定性を増加させるＦｃ領域を形成する。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、（ａ）配列番号１９のアミノ酸配列、ＣＨ１配列、及び第一Ｆｃポリペプチドを含む第一ポリペプチド、及び（ｂ）配列番号２０のアミノ酸配列及びＣＬ１配列を含む第二ポリペプチドを含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は（ｃ）第二Ｆｃポリペプチドを含む第三ポリペプチドを更に含む。幾つかの実施態様において、第一Ｆｃポリペプチドは、図２に示されるＦｃ配列（配列番号１７）を含み、第二Ｆｃポリペプチドは図３に示されるＦｃ配列（配列番号１８）を含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体はオナルツズマブ（onartuzumab）である。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体はオナルツズマブと同じエピトープに結合する。
【００１３】
任意の製剤の幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、約１０ｍｇ／ｍＬから約１００ｍｇ／ｍＬの間（例えば約１５ｍｇ／ｍＬから約７５ｍｇ／ｍＬ）の濃度で存在する。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は約６０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。
【００１４】
任意の製剤の幾つかの実施態様において、糖類は約７５ｍＭから約２００ｍＭ（例えば約１００ｍＭから約１５０ｍＭ）の濃度で存在する。幾つかの実施態様において、糖類は約１２０ｍＭの濃度で存在する。幾つかの実施態様において、糖類は二糖類である。幾つかの実施態様において、二糖類はトレハロースである。幾つかの実施態様において、二糖類はスクロースである。
【００１５】
任意の製剤の幾つかの実施態様において、ヒスチジン緩衝液は約１ｍＭから約５０ｍＭ（例えば約１ｍＭから約２５ｍＭ）の濃度で存在する。幾つかの実施態様において、ヒスチジン緩衝液は約１０ｍＭの濃度で存在する。幾つかの実施態様において、ヒスチジン緩衝液はヒスチジン酢酸塩である。
【００１６】
任意の製剤の幾つかの実施態様において、ポリペプチドは０．０２％を超える濃度及び０．１％未満の濃度で存在する。幾つかの実施態様において、ポリソルベートは、約０．０４％の濃度で存在する。幾つかの実施態様において、ポリソルベートは、ポリソルベート２０である。
【００１７】
任意の製剤の幾つかの実施態様において、製剤は希釈剤（例えば０．９％のＮａＣｌ）で希釈される。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は約１ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。
【００１８】
本明細書で提供されるのは、ｃ−ｍｅｔ活性化細胞増殖を阻害する方法であり、前記方法は本明細書に記述される薬学的製剤の有効量を（例えば希釈時に）細胞又は組織と接触させることを含む。
【００１９】
また本明細書で提供されるのは、ＨＧＦ／ｃ−ｍｅｔシグナル伝達軸の調節不全に関連する疾患を調節する方法であり、前記方法は、被験体に本明細書に記載の薬学的製剤の有効量を（例えば希釈の際に）投与することを含む。
【００２０】
更に本明細書で提供されるのは、増殖性疾患を有する被験体を治療する方法であり、前記方法は、被験体に本明細書に記載の薬学的製剤の有効量を（例えば希釈の際に）投与することを含む。幾つかの実施態様において、増殖性疾患は癌である。幾つかの実施態様において、癌は、肺癌（非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ））、グリア芽腫、膵臓癌、肉腫、腎細胞癌、肝細胞癌、胃癌、結腸直腸癌及び／又は乳癌である。幾つかの実施態様において、本明細書に記載の薬学的製剤を製造する方法が提供される。
【００２１】
提供されるのは、本明細書に記載の薬学的製剤を作成する方法である。
【００２２】
加えて、本明細書に提供されるのは、（例えば希釈の際に）明細書に記載の薬学的製剤をその中に含む容器を含んでなる製造品である。本明細書に提供されるのは、（例えば希釈の際に）本明細書に記載の薬学的製剤を含んでなる製造品を作成する方法である。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
図面の説明
【図１】図１は、短半減期と長半減期のアゴニスト及びｃ−ｍｅｔアンタゴニストの一般構造を示す。
【図２】図２は、ＭｅｔＭＡｂ（オナルツズマブ又はＯＡ５Ｄ５．ｖ２）のフレームワーク（ＦＲ）、超可変領域（ＨＶＲ）、第一定常領域（ＣＬ又はＣＨ１）及びＦｃ領域（Ｆｃ）のアミノ酸配列を示す。示されるＦｃ配列は、国際公開第２００５／０６３８１６号に記載される「ホール」（空洞）変異のＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ及びＹ４０７Ｖを含む。
【図３】図３は、国際公開第２００５／０６３８１６号に記載される「ノブ」（突起）変異のＴ３６６Ｗを含むＦｃポリペプチドの配列を示す。幾つかの実施態様において、この配列を含むＦｃポリペプチドは、図１のＦｃ配列を含むＦｃポリペプチドと複合体を形成しＦｃ領域を生成する。図３に開示される配列は配列番号１８の残基６〜２２７を示す。
【図４】図４は、ｐＨが５．２、５．７、及び６．２で、２０ｍｇ／ｍＬのオナルツズマブ、１０ｍＭのヒスチジン酢酸塩、１２０ｍＭのトレハロース、０．０２％のポリソルベート２０の製剤について、４０℃での経時（日数）的な高分子量種（ＨＭＷＳ）の割合によって示される凝集体形成率を示す。
【図５】図５は、ｐＨが５．１、５．４、及び５．７で、４０ｍｇ／ｍＬのオナルツズマブ、１０ｍＭのヒスチジン酢酸塩、１２０ｍＭのトレハロース、０．０２％のポリソルベート２０の製剤について、２５°Ｃでの経時（日数）的な高分子量種（ＨＭＷＳ）の割合によって示される凝集体形成率を示す。
【図６】図６は、ｐＨが５．１、５．４、及び５．７で、４０ｍｇ／ｍＬのオナルツズマブ、１０ｍＭのヒスチジン酢酸塩、１２０ｍＭのトレハロース、０．０２％のポリソルベート２０の製剤について、４０°Ｃでの経時（日数）的な高分子量種（ＨＭＷＳ）の割合によって示される凝集体形成率を示す。
【図７】図７は、ｐＨが５．１、５．４、及び５．７で、４０ｍｇ／ｍＬのオナルツズマブ、１０ｍＭのヒスチジン酢酸塩、１２０ｍＭのトレハロース、０．０２％のポリソルベート２０の製剤について、２５℃及び４０℃での経時（日数）的な主ピークの割合によって示され、イオン交換クロマトグラフィー（ＩＥＣ）により測定された化学的安定性を示す。
【図８】図８は、６０ｍｇ／ｍＬのオナルツズマブ、１０ｍＭのヒスチジン酢酸塩、ｐＨ５．４、及び０．０２％ポリソルベート２０又は０．０４％ポリソルベート２０を含む１２０ｍＭのスクロースの製剤について、４０℃での経時（数週）的なインタクトなポリソルベートの割合を示す。
【図９】図９は、０．９％のＮａＣｌを含むＩＶバッグ中で１ｍｇ／ｍＬに希釈されたオナルツズマブの凝集体形成の割合を示す。凝集率は、（ａ）四角形で示されるようにｐＨ５．４で室温に保たれた６０ｍｇ／ｍＬのオナルツズマブ、１０ｍＭのヒスチジン酢酸塩、１２０ｍＭのトレハロース、及び０．０２％のポリソルベート２０、及び（ｂ）丸印で示すようにｐＨ５．４で３０℃で、６０ｍｇ／ｍＬのオナルツズマブ、１０ｍＭのヒスチジン酢酸塩、１２０ｍＭのスクロース、及び０．０４％のポリソルベート２０の希釈製剤について攪拌による経時（時間）的な高分子量種（ＨＭＷＳ）の割合により示される。
【００２４】
詳細の説明
抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む安定な薬学的製剤が本明細書に提供される。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、アンタゴニスト抗ｃ−ｍｅｔ抗体である。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、一価の抗ｃ−ｍｅｔ抗体である。加えて、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の薬学的製剤を含んでなるキット及び製造品及び抗ｃ−ｍｅｔ抗体の薬学的製剤の使用が提供される。
【００２５】
Ｉ．定義
用語「薬学的製剤」は、活性化合物の生物学的活性が有効であることを許容するような形態であって、製剤を投与する被検体にとって毒性である他の成分を含まない調製物を指す。「薬学的に許容される」賦形剤（ビヒクル、添加剤）は、活性化合物の有効用量を提供するために合理的に被験体に投与することができるものである。
【００２６】
「安定な」製剤は、ポリペプチドが、貯蔵時及び／又は投与の最中に（例えばＩＶバッグ内での希釈後）、その中で本質的にその物理的安定性及び／又は化学的安定性及び／又は生物学的活性を保持するものであるタンパク質の安定性を測定するための様々な分析技法が当技術分野で利用でき、例えば、Peptide and Protein Drug Delivery, 247-301, Vincent Lee Ed., Marcel Dekker, Inc., New York, New York, Pubs. (1991)及びJones, A. Adv. Drug Delivery Rev. 10: 29-90 (1993)に総説されている。安定性は、選択された期間について、選択された温度で測定することができる。
【００２７】
ポリペプチドは、一定時間の化学的安定性が、タンパク質が依然としてその生物学的活性及び例えば日米ＥＵ医薬品規制調和国際会議によって決定されるような許容される安全性プロフィール（例えば、色及び／又は明瞭さの目視検査により又はＵＶ光散乱により又はサイズ排除クロマトグラフィーによって測定される場合に例えば、凝集、沈殿及び／又は変性に関して商業的に許容されるレベル）を保持すると考えられる場合、薬学的製剤中での「物理的な安定性を保持する」。
【００２８】
ポリペプチドは、一定時間の化学的安定性が、タンパク質が依然としてその生物学的活性を保持すると考えられるような場合、薬学的製剤中で「その化学的安定性を保持する」。化学的安定性は、タンパク質の化学的に改変された形態を検出および定量することによって評価することができる。化学的変化は、サイズ排除クロマトグラフィー、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ及び／又はマトリックス支援レーザー脱離イオン化／飛行時間型質量分析（MALDI/ TOF MS）を用いて、例えば、評価することができるサイズの修飾（例えばクリッピング）を含み得る。化学的変化の他のタイプは、例えば、イオン交換クロマトグラフィーによって評価できる電荷の変化が挙げられる。
【００２９】
「薬学的に許容される担体」は、被検体に非毒性であり、有効成分以外の製剤処方中の成分を指す。薬学的に許容される担体は、限定されないが、緩衝剤、賦形剤、安定剤、又は保存剤を含む。
【００３０】
「ヒスチジン緩衝液」は、ヒスチジンイオンを含む緩衝液である。
【００３１】
「糖類」は、本明細書において一般組成（ＣＨ２Ｏ）ｎ及びそれらの誘導体を含む。
【００３２】
用語「抗ｃ−ｍｅｔ抗体」及び「ｃ−ｍｅｔに結合する抗体」は、ｃ−ｍｅｔを標的とし、診断薬剤及び／又は治療的薬剤として有用であるように、十分な親和性でｃ−ｍｅｔに結合することができる抗体を指す。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の、無関係な、非ｃ−ｍｅｔタンパク質への結合の程度は、例えば、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）によって測定される場合、抗体のｃ−ｍｅｔへの結合の約１０％未満である。幾つかの実施態様において、ｃ−ｍｅｔへ結合する抗体は、解離定数（Ｋｄ）が、≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、又は≦０．００１ｎＭ（例えば、１０−８Ｍ未満、例えば、１０−８Ｍから１０−１３Ｍ、例えば、１０−９Ｍから１０−１３Ｍ）である。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、異なる種由来のｃ−ｍｅｔの間で保存されているｃ−ｍｅｔのエピトープに結合する。
【００３３】
用語「抗体」は最も広い意味で使用され、特にモノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば二重特異性抗体）、一価抗体、多価抗体、及びそれらが所望の生物学的活性を示す限り抗体断片（例えばＦａｂ及び／又は単一腕抗体）を網羅する。
【００３４】
抗体の「クラス」は、その重鎖が保有する定常ドメイン又は定常領域のタイプを指す。抗体の５つの主要なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ，及びＩｇＭがあり、これらのうちのいくつかは、「サブクラス」（アイソタイプ）（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、及びＩｇＡ２）へとさらに分割され得る。免疫グロブリンの異なるクラスに対応する重鎖定常ドメインは、それぞれα、δ、ε、γ、及びμと呼ばれる。
【００３５】
「抗体断片」は、インタクトな抗体が結合する抗原を結合するインタクトな抗体の一部を含むインタクトな抗体以外の分子を指す。抗体断片の例としては、限定されないが、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２；ダイアボディ；直鎖状抗体；単鎖抗体分子（例えばｓｃＦｖ）；及び抗体断片から形成される多重特異性抗体を含む。
【００３６】
用語「完全長抗体」、「インタクトな抗体」及び「全抗体」は、本明細書中で互換的に使用され、天然型抗体構造と実質的に類似の構造を有するか、又は本明細書で定義されるＦｃ領域を含む重鎖を有する抗体を指す。
【００３７】
「遮断抗体」又は「アンタゴニスト抗体」は、結合する抗原の生物学的活性を（部分的又は完全にのどちらかで）著しく阻害する抗体である。
【００３８】
参照抗体として「同一のエピトープに結合する抗体」とは、競合アッセイにおいて５０％以上、参照抗体のその抗原への結合をブロックする抗体、逆に競合アッセイにおいて５０％以上、その抗体のその抗原への結合をブロックするその参照抗体を指す。典型的な競合アッセイが、本明細書において提供される。
【００３９】
本明細書における目的のための「アクセプターヒトフレームワーク」とは、下記に定義されるように、ヒト免疫グロブリンフレームワーク又はヒトコンセンサスフレームワークから得られる軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）フレームワーク又は重鎖可変ドメイン（ＶＨ）フレームワークのアミノ酸配列を含有するフレームワークである。ヒト免疫グロブリンのフレームワーク又はヒトコンセンサスフレームワーク「に由来する」アクセプターヒトフレームワークは、その同一のアミノ酸配列を含んでもよく、又はそれはアミノ酸配列の変化を含み得る。幾つかの実施態様において、アミノ酸変化の数は、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、又は２以下である。幾つかの実施態様において、ＶＬアクセプターヒトフレームワークは、Ｖはヒト免疫グロブリンのフレームワーク配列又はヒトコンセンサスフレームワーク配列に、配列が同一である。
【００４０】
用語「可変領域」又は「可変ドメイン」は、抗体の抗原への結合に関与する抗体の重鎖または軽鎖のドメインを指す。天然型抗体の可変重鎖ドメイン及び軽鎖（それぞれＶＨおよびＶＬ）は、４つの保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）と３つの超可変領域（ＨＶＲ）を含む各ドメインを持ち、一般的に似たような構造を有する。（例えば、Kindt et al. Kuby Immunology, 第６版, W.H. Freeman and Co., ９１頁 (2007)を参照）。単一のＶＨ又はＶＬドメインが、抗原結合特異性を付与するのに十分であり得る。更に、特定の抗原に結合する抗体は、相補的なＶＬ又はＶＨドメインのそれぞれのライブラリーをスクリーニングするために、抗原に特異的に結合する抗体由来のＶＨ又はＶＬドメインを用いて単離することができる。例えば、Portolano et al., J. Immunol. 150:880-887 (1993); Clarkson et al., Nature 352:624-628 (1991)を参照。
【００４１】
本明細書で使用される用語「超可変領域」又は「ＨＶＲ」は、配列が超可変であるか、及び／又は構造的に定義されたループ（「超可変ループ」）を形成する抗体可変ドメインの各領域を指す。一般的に、天然型４本鎖抗体体は、ＶＨ（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）に３つ、及びＶＬ（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）に３つの６つのＨＶＲを含む。ＨＶＲは、一般的に超可変ループ由来及び／又は「相補性決定領域」（ＣＤＲ）由来のアミノ酸残基を含み、後者は、最高の配列可変性であり、及び／又は抗原認識に関与している。典型的な超可変ループはアミノ酸残基２６−３２（Ｌ１）、５０−５２（Ｌ２）、９１−９６（Ｌ３）、２６−３２（Ｈ１）、５３−５５（Ｈ２）、及び９６−１０１（Ｈ３）で生じる。（Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)）。典型的なＣＤＲ（ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２、及びＣＤＲ−Ｈ３）は、アミノ酸残基Ｌ１の２４−３４、Ｌ２の５０−５６、Ｌ３の８９−９７、Ｈ１の３１−３５Ｂ、Ｈ２の５０−６５、及びＨ３の９５−１０２に生じる。（Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 第５版、Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991))。ＶＨのＣＤＲ１の例外を除いて、ＣＤＲは一般的に超可変ループを形成するアミノ酸残基を含む。ＣＤＲは、抗原に接触する残基である「特異性決定残基」又は「ＳＤＲ」をも含む。ＳＤＲは、略称（abbreviated-）ＣＤＲ、又はａ−ＣＤＲと呼ばれる、ＣＤＲの領域内に含まれている。典型的なａ−ＣＤＲ（ａ−ＣＤＲ−Ｌ１、ａ−ＣＤＲ−Ｌ２、ａ−ＣＤＲ−Ｌ３、ａ−ＣＤＲ−Ｈ１、ａ−ＣＤＲ−Ｈ２、及びａ−ＣＤＲ−Ｈ３）は、アミノ酸残基Ｌ１の３１−３４、Ｌ２の５０−５５、Ｌ３の８９−９６、Ｈ１の３１−３５Ｂ、Ｈ２の５０−５８、及びＨ３の９５−１０２に生じる。（Almagro and Fransson, Front.Biosci.13:1619-1633 (2008)を参照）特に断らない限り、可変ドメイン内のＨＶＲ残基及び他の残基（例えば、ＦＲ残基）は、上掲のＫａｂａｔらに従い、本明細書において番号が付けられる。
【００４２】
「フレームワーク」又は「ＦＲ」は、超可変領域（ＨＶＲ）残基以外の可変ドメイン残基を指す。可変ドメインのＦＲは、一般的に４つのＦＲのドメイン：ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及びＦＲ４からなる。従って、ＨＶＲ及びＦＲ配列は一般にＶＨ（又はＶＬ）の以下の配列に現れる：ＦＲ１−Ｈ１（Ｌ１）−ＦＲ２−Ｈ２（Ｌ２）−ＦＲ３−Ｈ３（Ｌ３）−ＦＲ４。
【００４３】
「Ｎ末端切断重鎖」なる句は本明細書で使用される場合、完全長免疫グロブリン重鎖の全てではないが一部を含むポリペプチドを指し、ここで欠損部分は重鎖のＮ末端領域上に通常位置しているものである。欠損部分は、限定されないが、可変ドメイン、ＣＨ１、及びヒンジ配列の一部又は全てを含む。一般に、野生型ヒンジ配列が存在しない場合には、Ｎ末端切断重鎖の残りの定常ドメインは、別のＦｃ配列（即ち本明細書に記載される「第一」Ｆｃポリペプチド）への結合が可能である成分を含むであろう。例えば、前記成分はジスルフィド結合を形成することができる改変された残基又は付加されたシステイン残基でありうる。
【００４４】
本明細書で使用される用語「Ｆｃ領域」は、一般に、免疫グロブリン重鎖のＣ末端ポリペプチドを含む二量体複合体を指し、ここで、Ｃ末端ポリペプチド配列は、インタクトな抗体のパパイン消化により得ることができるものである。Ｆｃ領域は、天然型又は変異体Ｆｃ配列を含んでもよい。免疫グロブリン重鎖のＦｃ領域の境界は様々であり得るが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は、通常、Ｆｃ配列の位置Ｃｙｓ２２６のアミノ酸残基から、又はＰｒｏ２３０から、そのカルボキシル末端へ伸展するように定義される。しかし、Ｆｃ配列のＣ末端リジン（Ｌｙｓ４４７）は存在しているか又は存在していない場合がある。免疫グロブリンのＦｃ配列は、一般に、２つの定常ドメイン、ＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメインを含み、任意でＣＨ４ドメインを含む。本明細書の「Ｆｃポリペプチド」により、Ｆｃ領域を構成するポリペプチドの一つを意味する。Ｆｃポリペプチドは、任意の適切な免疫グロブリン、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４サブタイプ、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＤ又はＩｇＭから得られ得る。幾つかの実施態様において、Ｆｃポリペプチドは、野生型ヒンジ配列の一部又は全部を（一般に、そのＮ末端で）含む。幾つかの実施態様において、Ｆｃポリペプチドは、機能性又は野生型ヒンジ配列を含まない。
【００４５】
「Ｆｃレセプター」又は「ＦｃＲ」は、抗体のＦｃ領域に結合するレセプターを記述する。幾つかの実施態様において、ＦｃＲは天然型ヒトＦｃＲである。幾つかの実施態様では、ＦｃＲはＩｇＧ抗体（ガンマレセプター）と結合するもので、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ及びＦｃγＲＩＩＩサブクラスのレセプターを含み、これらのレセプターの対立遺伝子変異体、選択的にスプライシングされた形態のものも含まれる。ＦｃγＲＩＩレセプターには、ＦｃγＲＩＩＡ（「活性型レセプター」）及びＦｃγＲＩＩＢ（「阻害型レセプター」）が含まれ、主としてその細胞質ドメインは異なるが、類似のアミノ酸配列を有するものである。活性型レセプターＦｃγＲＩＩＡは、細胞質ドメインに免疫受容活性化チロシンモチーフ（ＩＴＡＭ）を含んでいる。活性化レセプターＦｃγＲＩＩＢは、その細胞質ドメインに、免疫受容抑制性チロシンモチーフ（ＩＴＩＭ）を含む。（例えば、Daeron, Annu. Rev. Immunol. 15:203-234 (1997)を参照）。ＦｃＲは、例えば、Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol. 9: 457-92 (1991); Capel et al., Immunomethods 4: 25-34 (1994)；及びde Haas et al., J. Lab. Clin. Med. 126: 330-41 (1995)に総説される。他のＦｃＲは、将来同定されるべきものを含み、本明細書にて用語「ＦｃＲ」により網羅される。
【００４６】
用語「Ｆｃレセプター」には、母性ＩｇＧの胎児への移送を担い（Guyer等, J. Immunol. 117:587 (1976)及びKim等, J. Immunol.24:249 (1994))、免疫グロブリンのホメオスタシスを調節する新生児性レセプターＦｃＲｎも含まれる。ＦｃＲｎへの結合の測定方法は公知である（例としてGhetie and Ward., Immunol. Today 18(12):592-598 (1997); Ghetie et al., Nature Biotechnology, 15(7):637-640 (1997); Hinton et al., J. Biol. Chem. 279(8):6213-6216 (2004)；国際公開第２００４／９２２１９号（Hinton et al.）を参照）。
【００４７】
インビボでのヒトＦｃＲｎへの結合とヒトＦｃＲｎ高親和性結合ポリペプチドの血清半減期は、例えばヒトＦｃＲｎを発現するトランスジェニックマウス又は形質転換されたヒト細胞株、又はＦｃ変異形ポリペプチドを投与された霊長類動物においてアッセイすることができる。国際公開第２０００／４２０７２号（Presta）にＦｃＲへの結合を向上又は減弱させた抗体変異体が述べられている。例えば、Shields等, J. Biol. Chem. 9(2): 6591-6604 (2001)も参照のこと。
【００４８】
「ヒンジ領域」、「ヒンジ配列」、及びそれらの変形は、本明細書にて使用される場合、当技術分野で既知の意味を含み、例えば、Janeway et al., Immuno Biology: the immune system in health and disease, (Elsevier Science Ltd., NY) (第４版, 1999); Bloom et al., Protein Science (1997), 6:407-415; Humphreys et al., J. Immunol. Methods (1997), 209:193-202に説明されている。
【００４９】
他に示されない限り、「多価抗体」なる表現は、３つ以上の抗原結合部位を含む抗体を指すために本明細書を通して使用される。多価抗体は、３つつ以上の抗原結合部位を有するように好ましくは操作されており、一般的に天然配列のＩｇＭ又はＩｇＡ抗体ではない。
【００５０】
「Ｆｖ」断片は、完全な抗原認識及び結合部位を含む抗体断片である。この領域は、密接な会合をなした一つの重鎖と１つの軽鎖可変ドメインの二量体であって、例えばｓｃＦｖにおいては本質的に共有結合することができる二量体からなる。各可変ドメインの３つのＨＶＲが、ＶＨ−ＶＬ二量体の表面上で抗原結合部位を定めるために相互作用するのはこの立体配置においてである。まとめると、６つのＨＶＲ又はそのサブセットは、抗体に抗原結合特異性を付与する。しかしながら、単一の可変ドメイン（又は抗原に特異的な３つのＨＶＲのみを含んでなるＦｖの半分）でさえ、通常結合部位全体よりは低い親和性ではあるが、抗原を認識し結合する能力を持つ。
【００５１】
「Ｆａｂ」断片は、軽鎖の可変及び定常ドメインと重鎖の可変ドメイン及び第一定常領域（ＣＨ１）を含む。Ｆ（ａｂ’）２抗体断片は一対のＦａｂ断片を含み、一般にそれらの間のヒンジシステインによってそのカルボキシ末端近傍に共有結合して連結される抗体断片の他の化学結合も当該分野で知られている。
【００５２】
語句「抗原結合腕」は、本明細書で使用する場合、対象の標的分子に特異的に結合する能力を有する抗体断片の構成部分を指す。一般的にかつ好ましくは、抗原結合腕は免疫グロブリンポリペプチド配列、例えば、ＨＶＲ及び／又は免疫グロブリン軽鎖及び重鎖の可変ドメイン配列の複合体である。
【００５３】
「単鎖Ｆｖ」又は「ｓｃＦｖ」抗体断片は、抗体のＶＨドメイン及びＶＬドメインを含み、これらのドメインは単一のポリペプチド鎖に存在する。一般に、ｓＦｖポリペプチドはＶＨ及びＶＬドメイン間にポリペプチドリンカーを更に含み、それはｓＦＶが抗原結合に望まれる構造を形成するのを可能にする。ｓｃＦｖの総説については、Pluckthun in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, 第113巻, Rosenburg and Moore eds., Springer-Verlag, New York, 頁269-315 (1994)を参照。
【００５４】
用語「ダイアボディ」は、２つの抗原結合部位を持つ小さな抗体断片を指し、その断片は、同一ポリペプチド鎖（ＶＨ及びＶＬ）の軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に連結した重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む。同一鎖の２つのドメイン間に対合を可能にするには短すぎるリンカーを用いることにより、そのドメインは別の鎖の相補的ドメインと強制的に対合し、２つの抗原結合部位を作り出す。ダイアボディは、例えば、欧州特許第４０４０９７号；国際公開９３／１１１６１号；及びHollinger等, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90: 6444-6448 (1993)により十分に記載されている。
【００５５】
「線形抗体」という表現は、Zapata等, Protein Eng. 8(10):1057-1062 (1995)に記載された抗体を意味する。簡単に言えば、これらの抗体は、相補的な軽鎖ポリペプチドと共に抗原結合領域の対を形成する一対の直列のＦｄセグメント（ＶＨ−ＣＨ１−ＶＨ−ＣＨ１）を含む。直鎖状抗体は二重特異性であっても単一特異性であってもよい。
【００５６】
本明細書で使用される用語「モノクローナル抗体」とは、実質的に均一な抗体の集団から得られる抗体を意味し、すなわち、例えば、天然に生じる変異を含み、又はモノクローナル抗体製剤の製造時に発生し、一般的に少量で存在している変異体などの、可能性のある変異体抗体を除き、集団を構成する個々の抗体は同一であり、及び／又は同じエピトープに結合する。異なる決定基（エピトープ）に対する異なる抗体を一般的に含む、ポリクローナル抗体調製物とは対照的に、モノクローナル抗体調製物の各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対するものである。従って、修飾語「モノクローナル」は、実質的に均一な抗体の集団から得られる抗体の特徴を示し、任意の特定の方法による抗体の産生を必要とするものとして解釈されるべきではない。例えば、使用されるモノクローナル抗体は、限定されないが、ハイブリドーマ法、組換えＤＮＡ法、ファージディスプレイ法、ヒト免疫グロブリン遺伝子座の全部又は一部を含むトランスジェニック動物を利用する方法を含む様々な技術によって作成され、モノクローナル抗体を作製するためのそのような方法及び他の例示的な方法は、本明細書に記載されている。
【００５７】
用語「キメラ」抗体は、重鎖及び／又は軽鎖の一部分が特定の起源又は種から由来し、一方重鎖及び／又は軽鎖の残りが異なる起源又は種から由来する抗体を指す。
【００５８】
「ヒトコンセンサスフレームワーク」とは、ヒト免疫グロブリンＶＬ又はＶＨフレームワーク配列の選択において最も一般的に存在するアミノ酸残基を表すフレームワークである。一般的には、ヒト免疫グロブリンＶＬ又はＶＨ配列の選択は、可変ドメイン配列のサブグループからのものである。一般的には、配列のサブグループは、Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest,第５版, NIH出版91-3242, Bethesda MD (1991),第1-3巻にあるサブグループである。一実施態様において、ＶＬについて、サブグループは上掲のＫａｂａｔらにあるサブグループカッパＩである。一実施態様において、ＶＨについて、サブグループは上掲のKabatらにあるサブグループＩＩＩである。
【００５９】
「ヒト化」抗体は、非ヒトＨＶＲ由来のアミノ酸残基、及びヒトＦＲ由来アミノ酸残基を含むキメラ抗体を指す。所定の実施態様において、ヒト化抗体は、少なくとも一つ、典型的には２つの可変ドメインの全てを実質的に含み、ＨＶＲ（例えば、ＣＤＲ）の全て又は実質的に全てが、非ヒト抗体のものに対応し、全てまたは実質的にＦＲの全てが、ヒト抗体のものに対応する。ヒト化抗体は、任意で、ヒト抗体由来の抗体定常領域の少なくとも一部を含んでもよい。抗体の「ヒト化型」、例えば、非ヒト抗体は、ヒト化を遂げた抗体を指す。
【００６０】
「ヒト抗体」は、ヒト又はヒト細胞により産生されるか、又はヒト抗体のレパートリー又は他のヒト抗体をコードする配列を利用した非ヒト起源に由来する抗体のそれに対応するアミノ酸配列を有するものである。ヒト抗体のこの定義は、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を特に除外する。
【００６１】
「ネイキッド抗体」とは、異種の部分（例えば、細胞傷害性部分）又は放射性標識にコンジュゲートしていない抗体を指す。ネイキッド抗体は薬学的製剤中に存在してもよい。
【００６２】
「天然型抗体」は、天然に生じる様々な構造をとる免疫グロブリン分子を指す。例えば、天然型ＩｇＧ抗体は、ジスルフィド結合している２つの同一の軽鎖と２つの同一の重鎖から成る約１５０，０００ダルトンのヘテロ四量体糖タンパク質である。Ｎ末端からＣ末端に、各重鎖は、可変重鎖ドメイン又は重鎖可変ドメインとも呼ばれる可変領域（ＶＨ）を有し、３つの定常ドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３）が続く。同様に、Ｎ末端からＣ末端に、各軽鎖は、可変軽鎖ドメイン又は軽鎖可変ドメインとも呼ばれる可変領域（ＶＬ）を有し、定常軽鎖（ＣＬ）ドメインが続く。抗体の軽鎖は、その定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ（κ）とラムダ（λ）と呼ばれる、２つのタイプのいずれかに割り当てることができる。
【００６３】
「親和性」とは、分子（例えば、抗体）の単一結合部位とその結合パートナー（例えば、抗原）との間の非共有結合相互作用の総和の強度を指す。本明細書で使用する場合、特に断らない限り、「結合親和性」は、結合対（例えば、抗体と抗原）のメンバー間の１：１の相互作用を反映している本質的な結合親和性を指す。そのパートナーＹに対する分子Ｘの親和性は、一般的に解離定数（Ｋｄ）で表すことができる。親和性は、本明細書に記載したものを含む、当技術分野で知られている一般的な方法によって測定することができる。結合親和性を測定するための具体的な例示であって典型的な実施態様は、以下で説明される。
【００６４】
「親和性成熟」抗体とは、その改変を有していない親抗体と比較して、抗原に対する抗体の親和性に改良を生じせしめる、その一又は複数のＨＶＲにおいて一又は複数の改変を持つものである。
【００６５】
指定された抗体の「生物学的特徴」を有する抗体は、同じ抗原に結合する他の抗体とは区別したその抗体の生物学的特徴の一以上を有するものである。
【００６６】
抗体の「機能的抗原結合部位」は標的抗原に結合することができるものである。抗原結合部位の抗原結合親和性は、必ずしも抗原結合部位が由来する親抗体ほど強くないが、しかし、抗原に結合する能力は、抗原への抗体結合を評価するための公知の種々の方法の何れかを用いて測定可能でなければならない。更に本明細書において多価抗体の抗原結合部位の各々の抗原結合親和性は、定量的に同じである必要はない。本明細書中の多量体抗体に対して、機能的抗原結合部位の数は、米国特許出願公開第２００５０１８６２０８号の実施例２に記載したように超遠心分離分析を用いて評価することができる。分析のこの方法によれば、多量体抗体に対する標的抗原の異なった比率を組み合わせて、複合体の平均分子量は機能的結合部位の異なった数を仮定して計算される。これらの理論値を、機能的結合部位の数を評価するために得られた実際の実験値と比較する。
【００６７】
「種依存性抗体」は、二番目の哺乳動物種からの抗原の相同体に対して有している結合親和性よりも、一番目の哺乳動物種からの抗原に対してより強力な結合親和性を有する抗体である。通常、種依存性抗体は、ヒト抗原（すなわち、約１×１０−７Ｍ以下、好ましくは約１×１０−８以下、最も好ましくは約１×１０−９Ｍ以下の結合親和性（Ｋｄ）値を有する）と「特異的に結合」するが、その非ヒト抗原に対する結合親和性よりも、少なくとも約５０倍、又は少なくとも約５００倍、又は少なくとも約１０００倍弱い、二番目の非ヒト哺乳動物種からの抗原の相同体に対する結合親和性を有する。種依存性抗体は、上で定義した種々の型の抗体の何れかとすることができる。幾つかの実施態様において、種依存性抗体は、ヒト化又はヒト抗体である。
【００６８】
「単離された」抗体は、その自然環境の成分から分離されたものである。幾つかの実施態様において、抗体は、例えば、電気泳動（例えば、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、等電点電気泳動（ＩＥＦ）、キャピラリー電気泳動）又はクロマトグラフィー（例えば、イオン交換又は逆相ＨＰＬＣ）により決定されるように、９５％以上または９９％の純度に精製される。抗体純度の評価法の総説としては、例えばFlatman et al., J. Chromatogr. B 848:79-87 (2007)を参照のこと。
【００６９】
本明細書で用いる「実質的に類似」、「実質的に同じ」なる用語は、当業者が、２つの値の間の差異が、その値（例えばＫｄ値）によって測定される生物学的特性という脈絡の中で、わずかに又は全く生物学的及び／又は統計学的有意性がないと考慮するであろうほどに、２つの数値（例えば、一つは抗体に関連するもの、他方は参照／比較抗体に関連するもの）の間の十分高度な類似性を指す。
【００７０】
本明細書で用いる「実質的に減少」、「実質的に異なる」という句は、当業者が、２つの値の間の差異が、その値（例えばＫｄ値）によって測定される生物学的特性という脈絡の中で、統計学的に有意であると考慮するであろうほどに、２つの数値（一般には、一つは分子に関連するもの、他方は参照／比較分子に関連するもの）の間の十分に高度な違いを指す。
【００７１】
「エフェクター機能」とは、抗体のアイソタイプにより変わる、抗体のＦｃ領域に起因する生物学的活性を指す。抗体エフェクター機能の例としては、Ｃ１ｑ結合及び補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）；Ｆｃ受容体結合；抗体依存性細胞媒介性細胞障害（ＡＤＣＣ）；貪食、細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体）のダウンレギュレーション、及びＢ細胞の活性化を含む。
【００７２】
「イムノコンジュゲート」は、一以上の異種分子にコンジュゲートした抗体であり、限定されないが、細胞傷害性薬物を含む。
【００７３】
本明細書で用いられる「細胞傷害性薬物」という用語は、細胞の機能を阻害又は阻止し及び／又は細胞死又は破壊を生ずる物質を指す。細胞傷害性薬物は、限定されないが、放射性同位体（例えば、Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｒｅ１８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、Ｂｉ２１２、Ｐ３２、Ｐｂ２１２及びＬｕの放射性同位体）：化学療法剤又は薬物（例えば、メトトレキセート、アドリアマイシン、ビンカアルカロイド（ビンクリスチン、ビンブラスチン、エトポシド）、ドキソルビシン、メルファラン、マイトマイシンＣ、クロラムブシル、ダウノルビシンまたは他の挿入剤）；成長阻害剤；酵素及びその断片、例えば核酸分解酵素など；抗生物質；小分子毒素などの毒素、又は細菌、真菌、植物又は動物由来の酵素活性毒素（それらの断片及び／又はその変異体を含む）；及び以下に開示される様々な抗腫瘍剤又は抗癌剤を包含する。
【００７４】
「障害」は本明細書に記述される物質／分子又は方法による治療から利益を得る任意の状態である。これには、哺乳動物に問題の疾患に罹らせる病的状態を含む慢性及び急性の障害又は疾患が含まれる。ここで治療されるべき障害の非限定的な例としては、悪性及び良性腫瘍；非白血病及びリンパ系の悪性腫瘍；神経細胞、グリア、星状細胞、視床下部及び他の腺、マクロファージ、上皮、間質及び胞胚腔の障害；及び炎症性、免疫性、その他の血管新生に関連する障害を含む。
【００７５】
用語「細胞増殖性障害」及び「増殖性疾患」は、ある程度の異常な細胞増殖に関連する障害を言う。一実施態様において、細胞増殖性疾患は癌である。
【００７６】
本明細書で用いられる「腫瘍」は、悪性又は良性に関わらず、全ての新生細胞成長及び増殖、及び全ての前癌性及び癌性の細胞及び組織を意味する。「癌」、「癌性」、「細胞増殖性疾患」、「増殖性疾患」及び「腫瘍」という用語はここで意味するように相互排他的ではない。
【００７７】
用語「癌」及び「癌性」は、無秩序な細胞成長／細胞増殖を典型的に特徴とする、哺乳動物における生理学的状態を記述する。癌の例には、限定されないが、癌腫、リンパ腫（例えば、ホジキンリンパ腫と非ホジキンリンパ腫）、芽細胞腫、肉腫、及び白血病を含む。そのような癌のより具体的な例は、扁平上皮癌、小細胞肺癌、非小細胞肺がん、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腹膜癌、肝細胞癌、消化器癌、膵臓癌、神経膠腫を含む、子宮頚癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝癌、乳癌、結腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜、子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌、肝臓癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝癌、白血病、及びその他のリンパ増殖性疾患、及び様々な型の頭頸部癌を含む。幾つかの実施態様において、癌はトリプルネガティブ（ＥＲ−、ＰＲ−、ＨＥＲ２−）癌である。幾つかの実施態様において、癌は局所再発又は転移性疾患を有する乳房の任意の組織学的に確認されたトリプルネガティブ（ＥＲ−、ＰＲ−、ＨＥＲ２−）腺癌を含むトリプルネガティブ転移性乳癌であり、例えばここで局所再発疾患は治癒を目的とした切除に適していない。
【００７８】
「転移」とは、身体のその原発部位から他の場所への癌の広がりを意味する。癌細胞は、原発腫瘍から離脱してリンパ管や血管に浸透し、血流を介して循環し、体の他の部分の正常組織中の離れた病巣で増殖する（転移する）ことができる。転移は局所的又は離れていることも可能である。転移は、腫瘍細胞が原発腫瘍から離脱し、血流を介して移動し、離れた部位で停止することを条件とした逐次プロセスである。新しい部位で、細胞は血液供給を確立し、そして増殖して生命を脅かす塊を形成することができる。腫瘍細胞内の刺激性と抑制性の両方の分子経路がこの挙動を制御し、離れた部位における腫瘍細胞と宿主細胞間の相互作用もまた重要である。
【００７９】
本明細書で用いられるように、「治療」（及び「治療する(treat)」または「治療している(treating)」など文法上の変形）は、治療されている個体の自然経過を変えようと試みる臨床的介入を指し、予防のために、または臨床病理の過程においてのいずれかで実行できる。治療の望ましい効果は、限定されないが、疾患の発症又は再発を予防すること、症状の緩和、疾患の直接的または間接的な病理学的帰結の縮小、転移を予防すること、疾患の進行の速度を遅らせること、疾患状態の改善又は緩和、及び寛解又は予後の改善を含む。幾つかの実施態様において、抗体は、疾患の発症を遅延させるか又は疾患の進行を遅くするために使用される。
【００８０】
薬剤、例えば、薬学的製剤の「有効量」とは、所望の治療的又予防的結果を達成するために必要な用量及び期間での、有効な量を指す。
【００８１】
「治療有効量」は、哺乳動物における疾患又は障害を治療又は予防する治療薬の量を指す。腫瘍の場合は、治療的有効量の治療薬は、癌細胞の数を減少させる、腫瘍の大きさを小さくする、癌細胞の周辺器官への浸潤を阻害する（すなわち、ある程度遅くする、好ましくは止める）、腫瘍の転移を阻害する（すなわち、ある程度遅くする、好ましくは止める）、腫瘍の成長をある程度阻害する、及び／又は疾患に関連する一又は複数の症状をある程度和らげうる。薬物が、成長を妨げ及び／又は現存の癌細胞を死滅させる範囲において、それは細胞分裂停止性及び／又は細胞障害性である。癌治療においては、インビボにおける効力は、例えば生存期間、病状の進行時間（ＴＴＰ）、応答速度（ＲＲ）、応答期間、及び／又は生活の質の測定により測定される。
【００８２】
「個体」又は「被検体」は、哺乳動物である。哺乳動物は、限定されないが、家畜動物（例えば、ウシ、ヒツジ、ネコ、イヌ、ウマ）、霊長類（例えば、ヒト、サルなどの非ヒト霊長類）、ウサギ、げっ歯類（例えば、マウス及びラット）を含む。所定の実施態様において、個体又は被検体はヒトである。
【００８３】
用語「抗癌治療法」は、癌を治療するのに有用な治療法を指す。抗癌治療剤の例には、限定されないが、例えば、化学療法剤、増殖阻害剤、細胞傷害性薬剤、放射線療法に用いられる薬剤、抗血管新生剤、アポトーシス剤、抗チューブリン剤、及び癌を治療するための他の薬剤、抗ＣＤ２０抗体、血小板由来成長因子阻害剤（例えば、ＧｌｅｅｖｅｃＴＭ（メシル酸イマチニブ））、ＣＯＸ−２阻害剤（例えば、セレコキシブ）、インターフェロン、サイトカイン、次の標的、ＰＤＧＦＲ−ベータ、ＢｌｙＳ、ＡＰＲＩＬ、ＢＣＭＡ受容体、ＴＲＡＩＬ／Ａｐｏ２の一以上に特異的に結合するアンタゴニスト（例えば中和抗体）、及び他の生物活性薬剤及び有機化学薬剤などが含まれる。その組合せもまた含まれる。
【００８４】
本明細書で用いられる「細胞障害性剤」という用語は、細胞の機能を阻害又は阻止し及び／又は細胞破壊を生ずる物質を指す。その用語は、放射性同位体（例えば、Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｒｅ１８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、Ｂｉ２１２、Ｐ３２及びＬｕの放射性同位体）、化学療法剤（例えば、メトトレキセート、アドリアマイシン、ビンカアルカロイド（ビンクリスチン、ビンブラスチン、エトポシド）、ドキソルビシン、メルファラン、マイトマイシンＣ、クロラムブシル、ダウノルビシンまたは他の挿入剤）、酵素及びその断片、例えば核酸分解酵素など、抗生物質、小分子毒素などの毒素、又は細菌、真菌、植物又は動物由来の酵素活性毒素（それらの断片及び／又はその変異体を含む）、及び以下に開示される様々な抗腫瘍剤又は抗癌剤を包含する。他の細胞傷害性薬物は以下に記述される。殺腫瘍剤は、腫瘍細胞の破壊を引き起こす。
【００８５】
「化学療法剤」は、癌の治療に有用な化合物を指す。化学療法剤の例には、アルキル化剤、例えばチオテパ及びシクロホスファミド（ＣＹＴＯＸＡＮ（登録商標））；スルホン酸アルキル、例えばブスルファン、インプロスルファン及びピポスルファン（piposulfan）；アジリジン類、例えばベンゾドーパ（benzodopa）、カルボコン、メツレドーパ（meturedopa）、及びウレドーパ（uredopa）；アルトレトアミン（altretamine）、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホラミド（triethylenethiophosphaoramide）及びトリメチローロメラミン（trimethylolomelamine）を含むエチレンイミン類及びメチラメラミン類；アセトゲニン（特にブラタシン及びブラタシノン）；デルタ−９−テトラヒドロカナビノール（ドロナビノール、ＭＡＲＩＮＯＬ（登録商標）；βラパチョーネ；ラパコール；コルヒチン；ベツリン酸；カンプトセシン（合成アナログトポテカン（ＨＹＣＡＭＴＩＮ（登録商標）、ＣＰＴ−１１（イリノテカン、ＣＡＭＰＴＯＳＡＲ（登録商標）を含む）、アセチルカンプトテシン、スコポレクチン（scopolectin）及び９−アミノカンプトテシン；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシン及びビゼレシン合成アナログを含む）；ポドフィロトキシン；ポドフィリン酸（podophyllinic acid）；テニポシド；クリプトフィシン（特にクリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）；ドラスタチン；ドゥオカルマイシン（合成アナログ、ＫＷ−２１８９及びＣＢ１−ＴＭ１を含む）；エロイテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチン；スポンギスタチン；クロランブシル、クロロナファジン（chlornaphazine）、チョロホスファミド（cholophosphamide）、エストラムスチン、イフォスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシドヒドロクロリド、メルファラン、ノベンビチン（novembichin）、フェネステリン（phenesterine）、プレドニムスチン（prednimustine）、トロフォスファミド（trofosfamide）、ウラシルマスタードなどのナイトロジェンマスタード；カルムスチン、クロロゾトシン（chlorozotocin）、フォテムスチン（fotemustine）、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチンなどのニトロスレアス（nitrosureas）；抗生物質、例えばエネジイン抗生物質（例えば、カリケアマイシン（calicheamicin）、特にカリケアマイシンγ１Ｉ及びカリケアマイシンωＩ１（例えばNicolaou et al., Agnew Chem Intl. Ed. Engl. 33:183-186(1994)参照）；ＣＤＰ３２３、経口α−４インテグリン阻害剤；ダイネマイシン（dynemicin）Ａを含むダイネマイシン；エスペラマイシン；並びにネオカルチノスタチン発色団及び関連する色素タンパクエネジイン抗生物質発色団）、アクラシノマイシン類（aclacinomysins）、アクチノマイシン、オースラマイシン（authramycin）、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン（cactinomycin）、カラビシン（carabicin）、カルミノマイシン、カルジノフィリン（carzinophilin）、クロモマイシン類、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン（detorbicin）、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ドキソルビシン（ＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ（登録商標）、モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン、ドキソルビシンＨＣｌリポソーム��射剤（ＤＯＸＩＬ（登録商標）、リポソームドキソルビシンＴＬＣＤ−９９（ＭＹＯＣＥＴ（登録商標））、ペグ化リポソームドキソルビシン（ＣＡＥＬＹＸ（登録商標）、及びデオキシドキソルビシンを含む）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マーセロマイシン（marcellomycin）、マイトマイシンＣのようなマイトマイシン、マイコフェノール酸（mycophenolic acid）、ノガラマイシン（nogalamycin）、オリボマイシン（olivomycins）、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン（potfiromycin）、ピューロマイシン、ケラマイシン（quelamycin）、ロドルビシン（rodorubicin）、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン（tubercidin）、ウベニメクス、ジノスタチン（zinostatin）、ゾルビシン（zorubicin）；代謝拮抗剤、例えばメトトレキセート、ゲムシタビン（gemcitabine）（ＧＥＭＺＡＲ（登録商標））、テガフル（tegafur）（ＵＦＴＯＲＡＬ（登録商標））、カペシタビン（capecitabine）（ＸＥＬＯＤＡ（登録商標））、エポチロン（epothilone）、及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）；葉酸アナログ、例えばデノプテリン（denopterin）、メトトレキセート、プテロプテリン（pteropterin）、トリメトレキセート（trimetrexate）；プリンアナログ、例えばフルダラビン（fludarabine）、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン；ピリミジンアナログ、例えばアンシタビン、アザシチジン（azacitidine）、６−アザウリジン（azauridine）、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン（enocitabine）、フロキシウリジン（floxuridine）；アンドロゲン類、例えばカルステロン（calusterone）、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン（testolactone）；抗副腎剤、例えばアミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン；葉酸リプレニッシャー（replenisher）、例えばフロリン酸（frolinic acid）；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン（amsacrine）；ベストラブシル（bestrabucil）；ビサントレン（bisantrene）；エダトラキセート（edatraxatｅ）；デフォファミン（defofamine）；デメコルシン（demecolcine）；ジアジコン（diaziquone）；エルフォルニチン（elfornithine）；酢酸エリプチニウム（elliptinium）；エポチロン；エトグルシド（etoglucid）；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダイニン（lonidainine）；メイタンシン（maytansine）及びアンサマイトシン類（ansamitocins）のようなメイタンシノイド類（maytansinoids）；ミトグアゾン（mitoguazone）；ミトキサントロン；モピダンモール（mopidanmol）；ニトラクリン（nitracrine）；ペントスタチン；フェナメット（phenamet）；ピラルビシン；ロソキサントロン（losoxantron）；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖類複合体（JHS Natural Products, Eugene, OR）；ラゾキサン（razoxanｅ）；リゾキシン（rhizoxin）；シゾフィラン；スピロゲルマニウム（spirogermanium）；テニュアゾン酸（tenuazonic acid）；トリアジコン（triaziquone）；２，２’，２’’−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（trichothecenes）（特に、Ｔ−２トキシン、ベラキュリンＡ（verracurin A）、ロリジンＡ（roridin A）及びアングイジン（anguidine））；ウレタン；ビンデシン（ＥＬＤＩＳＩＮＥ（登録商標）、ＦＩＬＤＥＳＩＮ（登録商標））；ダカルバジン；マンノムスチン（mannomustine）；ミトブロニトール；ミトラクトール（mitolactol）；ピポブロマン（pipobroman）；ガシトシン（gacytosine）；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；チオテパ；タキソイド、例えばパクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（登録商標））、パクリタキセルのアルブミン操作ナノ粒子製剤（ＡＢＲＡＸＡＮＥＴＭ）、及びドキセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標））；クロランブシル；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；プラチナ剤、例えばシスプラチン、オキサリプラチン（例えばＥＬＯＸＡＴＩＮ（登録商標））及びカルボプラチン；ビンカ類でチューブリン重合の微小管形成を阻害するもの、例えばビンブラスチン（ＶＥＬＢＡＮ（登録商標）、ビンクリスチン（ＯＮＣＯＶＩＮ（登録商標））、ビンデシン（ＥＬＤＩＳＩＮＥ（登録商標）、ＦＩＬＤＥＳＩＮ（登録商標））、及びビノレルビン（ＮＡＶＥＬＢＩＮＥ（登録商標））；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ロイコボビン（leucovovin）；ノバントロン（novantrone）；エダトレキセート；ダウノマイシン；アミノプテリン；イバンドロナート（ibandronate）；トポイソメラーゼ阻害薬ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチロールニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸などのレチノイド、例えば、ベキサロテン（ＴＡＲＧＲＥＴＩＮ（登録商標））；ビスホスホネート、例えばクロドロネート（例えばＢＯＮＥＦＯＳ（登録商標）又はＯＳＴＡＣ（登録商標））、エチドロン酸（ＤＩＤＲＯＣＡＬ（登録商標））、ＮＥ−５８０９５、ゾレドロン酸／ゾレドロネート（ＺＯＭＥＴＡ（登録商標））、アレンドロネート（ＦＯＳＡＭＡＸ（登録商標））、パミドロン酸（ＡＲＥＤＩＡ（登録商標））、チルドロン酸（ＳＫＥＬＩＤ（登録商標））、又はリセドロン酸（ＡＣＴＯＮＥＬ（登録商標））；トロキサシタビン（troxacitabine）（１，３−ジオキソランヌクレオシドシトシン類似体）；アンチセンスオリゴヌクレオチド、特に異常な細胞増殖に結びつくシグナル伝達経路における遺伝子の発現を阻害するもの、例えばＰＫＣ−α、Ｒａｆ、及びＨ−Ｒａｓ、及び上皮増殖因子受容体（ＥＧＦ−Ｒ）；ＴＨＥＲＡＴＯＰＥ（登録商標）ワクチン及び遺伝子治療ワクチン等のワクチン、例えばＡＬＬＯＶＥＣＴＩＮ（登録商標）ワクチン、ＬＥＵＶＥＣＴＩＮ（登録商標）ワクチン、及びＶＡＸＩＤ（登録商標）ワクチン；トポイソメラーゼ１阻害薬（例えばＬＵＲＴＯＴＥＣＡＮ（登録商標））；ｒｍＲＨ（例えばＡＢＡＲＥＬＩＸ（登録商標））；ＢＡＹ４３９００６（ソラフェニブ；Bayer）；ＳＵ−１１２４８（スニチニブ、ＳＵＴＥＮＴ（登録商標）、Pfizer）；ペリフォシン（perifosine）、ＣＯＸ−２阻害剤（例えばセレコキシブ又はエトリコキシブ）、プロテオゾーム阻害剤（例えばＰＳ３４１）；ボルテゾミブ（ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標））；ＣＣＩ−７７９；チピファルニブ（tipifarnib）（Ｒ１１５７７）；オラフィニブ（orafenib）、ＡＢＴ５１０；ＢＣＬ−２阻害剤、例えばオブリメルセンナトリウム（oblimersen sodium）（ＧＥＮＡＳＥＮＳＥ（登録商標））；ピクサントロン；ＥＧＦＲ阻害剤（以下の定義を参照）；チロシンキナーゼ阻害剤；セリン−スレオニンキナーゼ阻害剤、例えばラパマイシン（シロリムス、ＲＡＰＡＭＵＮＥ（登録商標））；ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、例えばロナファーニブ（ＳＣＨ６６３６，ＳＡＲＡＳＡＲＴＭ）；及び上述したものの何れかの薬学的に許容可能な塩、酸又は誘導体：並びに上記のうち２以上の組合せ、例えば、シクロフォスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、及びプレドニソロンの併用療法の略称であるＣＨＯＰ；及び５−ＦＵ及びロイコボリンとオキサリプラチン（ＥＬＯＸＡＴＩＮＴＭ）を組合せた治療法の略称であるＦＯＬＦＯＸが含まれる。
【００８６】
ここで定義された化学療法剤には、癌の増殖を促進しうるホルモンの作用を調節、低減、遮断、又は阻害するように働く「抗ホルモン剤」又は「内分泌治療剤」が含まれる。それらはそれ自体がホルモンであってもよく、限定するものではないが、混合アゴニスト／アンタゴニストプロファイルを持つ抗エストロゲン、例えばタモキシフェン（ＮＯＬＶＡＤＥＸ（登録商標））、４−ヒドロキシタモキシフェン、トレミフェン（ＦＡＲＥＳＴＯＮ（登録商標））、イドキシフェン、ドロロキシフェン、ラロキシフェン（raloxifene）（ＥＶＩＳＴＡ（登録商標））、トリオキシフェン（trioxifene）、ケオキシフェン（keoxifene）、及びＳＥＲＭ３などの選択的なエストロゲン受容体調節因子（ＳＥＲＭ）；アゴニスト特性を有さない純粋な抗エストロゲン類、例えばフルベストラント（ＦＡＳＬＯＤＥＸ（登録商標））、及びＥＭ８００（このような薬剤はエストロゲン受容体（ＥＲ）二量体化をブロックし、ＤＮＡ結合を阻害し、ＥＲ代謝回転を増加させ、及び／又はＥＲレベルを抑制しうる）；アロマターゼインヒビター、例えば、ホルメスタン及びエキセメスタン（ＡＲＯＭＡＳＩＮ（登録商標））などのステロイド系アロマターゼインヒビター、及びアナストロゾール（ＡＲＩＭＩＤＥＸ（登録商標））、レトロゾール（ＦＥＭＡＲＡ（登録商標））及びアミノグルテチミドなどの非ステロイド性アロマターゼインヒビター、及びボロゾール（ＲＩＶＩＳＯＲ（登録商標））、メゲストロールアセテート（ＭＥＧＡＳＥ（登録商標））、ファドロゾール及び４（５）−イミダゾールを含む他のアロマターゼインヒビター；黄体形成ホルモン放出ホルモンアゴニスト、例えばロイプロリド（ＬＵＰＲＯＮ（登録商標）及びＥＬＩＧＡＲＤ（登録商標））、ゴセレリン、ブセレリン、及びトリプトレリン；性ステロイド、例えばプロゲスチン、例えばメゲストロールアセテート及びメドロキシプロゲステロンアセテート、エストロゲン、例えばジエチルスチルベストロール及びプレマリン、及びアンドロゲン／レチノイド、例えばフルオキシメステロン、全てのトランスレチオニン酸及びフェンレチニド；オナプリストン；抗プロゲステロン；エストロゲン受容体下方制御因子（ＥＲＤ）；抗アンドロゲン類、例えばフルタミド、ニルタミド及びビカルタミド；及び上記の何れかの薬学的に許容可能な塩、酸又は誘導体；並びに、上記のうちの２以上の組合せを含む。
【００８７】
この出願で用いられる用語「プロドラッグ」なる用語は、親薬剤と比較して腫瘍細胞に対する細胞障害性が低く、酵素的に活性化又はより活性な親形態に変換されうる薬学的に活性な物質の前駆体又は誘導体の形態を指す。例として、Wilman, "Prodrugs in Cancer Chemotherapy" Biochemical Society Transactions, 14, 頁375-382, 615th Meeting Belfast (1986)及びStella et al., "Prodrugs: A Chemical Approach to Targeted Drug Delivery," Directed Drug Delivery, Borchardt et al., (ed.), 頁247-267, Humana Press (1985)を参照のこと。プロドラッグには、限定するものではないが、ホスファート含有プロドラッグ、チオホスファート含有プロドラッグ、スルファート含有プロドラッグ、ペプチド含有プロドラッグ、Ｄ−アミノ酸修飾プロドラッグ、グリコシル化プロドラッグ、β−ラクタム含有プロドラッグ、任意に置換されたフェノキシアセトアミド含有プロドラッグ、又は任意に置換されたフェニルアセトアミド含有プロドラッグ、より活性のある細胞毒のない薬剤に転換可能な５−フルオロシトシン及び他の５−フルオロウリジンプロドラッグを含む。限定はしないが、使用されるプロドラッグ形態に誘導体化可能な細胞障害性剤の例には、前記の化学療法剤が含まれる。
【００８８】
本明細書で使用する「増殖阻害剤」は、細胞（例えばインビトロ又はインビボの何れかにおいて増殖がＨＧＦ／ｃ−ｍｅｔの活性化に依存している細胞）の増殖を阻害する化合物又は組成物を指す。よって、増殖阻害剤は、Ｓ期でＨＧＦ／ｃ−ｍｅｔ依存性細胞の割合を有意に減少させるものである。増殖阻害剤の例は、細胞周期の進行を（Ｓ期以外の位置で）阻害する薬剤、例えばＧ１停止又はＭ期停止を誘発する薬剤を含む。古典的なＭ期ブロッカーには、ビンカ（ビンクリスチン及びビンブラスチン）、タキサン、及び例えばドキソルビシン、エピルビシン、ダウノルビシン、エトポシド、及びブレオマイシンなどのトポイソメラーゼＩＩ阻害剤が含まれる。Ｇ１を停止させるそれらの薬剤はまた、Ｓ期停止にも波及し、例えば、ＤＮＡアルキル化剤、例えば、タモキシフェン、プレドニゾン、ダカルバジン、メクロレタミン、シスプラチン、メトトレキセート、５−フルオロウラシル、及びアラ−Ｃである。更なる情報は、The Molecular Basis of Cancer, Mendelsohn及びIsrael, 編, 第1章, 表題「Cell cycle regulation, oncogene, and antineoplastic drugs」, Murakami等, (WB Saunders: Philadelphia, 1995)、特に１３頁に見出すことができる。タキサン類（パクリタキセル及びドセタキセル）は、共にイチイに由来する抗癌剤である。ヨーロッパイチイに由来するドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）、ローン・プーラン ローラー）は、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（登録商標）、ブリストル−マイヤー スクウィブ）の半合成類似体である。パクリタキセル及びドセタキセルは、チューブリン二量体から微小管の集合を促進し、細胞の有糸分裂を阻害する結果となる脱重合を防ぐことによって微小管を安定化にする。
【００８９】
「放射線療法」とは、正常に機能する能力を制限するか、又は完全に細胞を破壊するために、細胞に十分な損傷を誘導するために指定されたγ線又はβ線の使用を意味する。治療の用量及び持続時間を決定するための当技術分野で公知の多くの方法が存在することが理解されるであろう。典型的な治療法は一回の投与として与えられ、典型的な投与量は、１日あたり１０から２００単位（グレイ）の範囲である。
【００９０】
用語「同時に」は、投与の少なくとも一部が時間的に重なる二以上の治療剤の投与を意味するために使用される。従って、同時投与とは、一以上の他の薬剤の投与を中止した後に一以上の薬剤投与が継続する場合の投与計画を含む。
【００９１】
「低減する又は阻害する」とは、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％又はそれ以上の全体的減少を引き起こす能力を意味する。低減する又は阻害するとは、治療する疾患の症状、転移の存在又は大きさ、又は原発腫瘍の大きさを指しうる。
【００９２】
用語「パッケージ挿入物」は、効能、用法、用量、投与、併用療法、禁忌についての情報、及び／又はそのような治療用製品の使用に関する警告を含む、治療用製品の商用パッケージに慣習的に含まれている説明書を指すために使用される。
【００９３】
本明細書に記載される本発明の態様及び実施態様は、態様及び実施態様を「含む」及び／又は「から本質的になる」を含む。
【００９４】
本明細書で使用されるように、単数形の「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、特に指示がない限り、複数への参照が含まれる。
【００９５】
当業者によって理解されるように、本明細書中の「およそ」の値又はパラメーターへの言及は、その値又はパラメーター自体に対する実施態様を含む（記載する）。例えば、「およそＸ」との記載には「Ｘ」の記載が含まれる。
【００９６】
ＩＩ．薬学的製剤
抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は液体の薬学的製剤である。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は安定した薬学的製剤である。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は安定した液体の薬学的製剤である。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、アンタゴニスト抗ｃ−ｍｅｔ抗体である。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、一価の抗ｃ−ｍｅｔ抗体である。抗ｃ−ｍｅｔ抗体の凝集の薬学的製剤中での最小化は特に重要である。抗ｃ−ｍｅｔ抗体の二価の形態は二量体化を促進することが示されており、ｃ−ｍｅｔ（アゴニスト機能）の活性化につなが、逆に、一価抗体はｃ−ｍｅｔ活性（拮抗的機能）を阻害する。一価抗体の凝集（多量体及びオリゴマーの形成）及び／又は抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む薬学的製剤中で一価構造を維持できないことは所望されないアゴニスト作用をもたらし得る。
【００９７】
特に、本明細書中で提供されるのは（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体及び（ｂ）ポリソルベートの濃度は０．０２％ｗ／ｖより大きいポリソルベートを含む薬学的製剤である。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体；（ｂ）ポリソルベート、ここでポリソルベートの濃度は０．０２％ｗ／ｖより大きく、（ｃ）ヒスチジン緩衝液（例えば、ｐＨが５．０と５．４の間のヒスチジン緩衝液）を含む。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体；（ｂ）ｐＨが５．０から５．４のヒスチジン緩衝液；（ｃ）糖類；及び（ｄ）ポリソルベート濃度が０．０２％ｗ／ｖより大きいポリソルベートを含む。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は液体の薬学的製剤である。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は安定した薬学的製剤である。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は安定した液体の薬学的製剤である。
【００９８】
薬学的製剤において有用な抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、ＩＩＩ項に記載されている。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、アンタゴニスト抗ｃ−ｍｅｔ抗体である。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、一価の抗ｃ−ｍｅｔ抗体である。例えば、幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は単一の抗原結合腕を含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、単一の抗原結合腕を含み、かつＦｃ領域を含み、ここでＦｃ領域は、第一及び第二Ｆｃポリペプチドを含み、前記第一及び第二Ｆｃポリペプチドは複合体中に存在する。幾つかの実施態様において、第一及び第二Ｆｃポリペプチドは、前記抗原結合腕を含むＦａｂ分子と比較して、前記抗体断片の安定性を増加させるＦｃ領域を形成する。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、（ｉ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｉｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；（ｉｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３；（ｉｖ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｖ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；及び（ｖｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、（ａ）配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン、及び（ｂ）配列番号２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、（ａ）配列番号１９のアミノ酸配列、ＣＨ１配列、及び第一Ｆｃポリペプチドを含む第一ポリペプチド、（ｂ）配列番号２０のアミノ酸配列及びＣＬ１配列を含む第二ポリペプチド、及び第二Ｆｃポリペプチドを含む第三ポリペプチドを含む。幾つかの実施態様において、第一Ｆｃポリペプチドは、図２に示されるＦｃ配列（配列番号１７）を含み、第二Ｆｃポリペプチドは図３に示されるＦｃ配列（配列番号１８）を含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体はオナルツズマブ（onartuzumab）である。
【００９９】
本明細書に記載される任意の薬学的製剤の幾つかの実施態様において、薬学的製剤の抗ｃ−ｍｅｔ抗体は約１０ｍｇ／ｍＬと約１００ｍｇ／ｍＬの間の濃度で存在する。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体（例えばオナルツズマブ）の濃度は、約１０ｍｇ／ｍＬから約５０ｍｇ／ｍＬの間、約１０ｍｇ／ｍＬから約７５ｍｇ／ｍＬの間、約２５ｍｇ／ｍＬから約７５ｍｇ／ｍＬの間、約５０ｍｇ／ｍＬから約１００ｍｇ／ｍＬの間、約５０ｍｇ／ｍＬから約７５ｍｇ／ｍＬの間、及び／又は約７５ｍｇ／ｍＬから約１００ｍｇ／ｍＬの間の何れかである。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体（例えばオナルツズマブ）の濃度は、約２０ｍｇ／ｍＬ、約３０ｍｇ／ｍＬ、約４０ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ、約６０ｍｇ／ｍＬ、約７０ｍｇ／ｍＬ又は約１００ｍｇ／ｍＬの何れかより大きい。例えば、幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体が約５０ｍｇ／ｍＬから約７５ｍｇ／ｍＬの間の濃度で存在する抗ｃ−ｍｅｔ抗体（例えばオナルツズマブ）；（ｂ）ｐＨが５．０から５．４のヒスチジン緩衝液；（ｃ）糖類；及び（ｄ）ポリソルベート濃度が０．０２％ｗ／ｖより大きいポリソルベートを含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体（例えばオナルツズマブ）の濃度は、約１５０ｍｇ／ｍＬ、約１２５ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ又は約７５ｍｇ／ｍＬの何れかよりも小さい。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体（例えばオナルツズマブ）の濃度は、約２０ｍｇ／ｍＬ、約３０ｍｇ／ｍＬ、約４０ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ、約６０ｍｇ／ｍＬ、約７０ｍｇ／ｍＬ又は約８０ｍｇ／ｍＬの何れかである。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体（例えばオナルツズマブ）の濃度は、約６０ｍｇ／ｍＬである。
【０１００】
薬学的製剤は、好ましくはポリソルベートを含む。ポリソルベートは一般に凝集体形成（振とう又は輸送の際に発生するものなど）を減少させる量で含有される。ポリソルベートの例には、限定されないが、ポリソルベート２０（ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート）、ポリソルベート４０（ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノパルミテート）、ポリソルベート６０（ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノステアレート）、及び／又はポリソルベート８０（ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート）を含む。幾つかの実施態様において、ポリソルベートはポリソルベート２０（ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート）である。本明細書に記載される任意の薬学的製剤の幾つかの実施態様において、ポリソルベートの濃度は、長期保存に際して及び／又は（例えばＩＶバッグ中での希釈後）投与の最中に凝集体を最小にし及び／又は安定性を維持するのに十分である。幾つかの実施態様において、ポリソルベートの濃度は、０．０２％ｗ／ｖより大きい、約０．０３％ｗ／ｖ％に等しいかそれ以上、又は約０．０４％ｗ／ｖに等しいかそれ以上である。幾つかの実施態様において、ポリソルベートの濃度は０．０２％ｗ／ｖより大きく約０．１％ｗ／ｖ未満である。幾つかの実施態様において、ポリソルベートの濃度は０．０３％ｗ／ｖより大きく約０．１％ｗ／ｖ未満である。幾つかの実施態様において、ポリソルベートの濃度は０．０３％ｗ／ｖ、０．０４％ｗ／ｖ、又は０．０５％ｗ／ｖである。幾つかの実施態様において、ポリソルベートは、約０．０４％ｗ／ｖの濃度で存在する。例えば、幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体（例えばオナルツズマブ）；（ｂ）ｐＨが５．０から５．４のヒスチジン緩衝液；（ｃ）糖類；及び（ｄ）ポリソルベート２０の濃度が０．０４％ｗ／ｖより大きいポリソルベート２０を含む。
【０１０１】
薬学的製剤は、好ましくは糖類を含む。糖類は、単糖類、二糖類、三糖類、多糖類、糖アルコール、還元性糖、非還元性糖などを含む。糖の更なる例としては、限定されないが、グルコース、スクロース、トレハロース、ラクトース、フルクトース、マルトース、デキストラン、グリセリン、デキストラン、エリスリトール、グリセロール、アラビトール、シリトール（sylitol）、ソルビトール、マンニトール、メリビオース、メレジトース、ラフィノース、マンノトリオース、スタキオース、マルトース、ラクツロース、マルツロース、グルシトール、マルチトール、ラクチトール、イソ−マルツロースなどを含む。幾つかの実施態様では、糖は二糖類である。幾つかの実施態様において、糖類は非還元性二糖類である。幾つかの実施態様において、糖類はトレハロースである。幾つかの実施態様において、糖類はスクロースである。例えば、幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体（例えばオナルツズマブ）；（ｂ）ｐＨが５．０から５．４のヒスチジン緩衝液；（ｃ）スクロース；及び（ｄ）ポリソルベートの濃度が０．０２％ｗ／ｖより大きいポリソルベートを含む。
【０１０２】
糖類は、一般的に凝集体形成を減少させる量で含まれる。本明細書に記載される任意の薬学的製剤の幾つかの実施態様において、糖類は約５０ｍＭから約２５０ｍＭの間、約７５ｍＭから約２００ｍＭの間、約７５ｍＭから約１５０ｍＭの間、約１００ｍＭから約１５０ｍＭの間，又は約１１０ｍＭから約１３０ｍＭの間の何れかの濃度で存在する。幾つかの実施態様において、糖類は約５０ｍＭ、約７５ｍＭ、約１００ｍＭ、約１１０ｍＭ、又は約１１５ｍＭの何れかより大きい大きい濃度で存在する。幾つかの実施態様において、糖類は約１００ｍＭ、約１１０ｍＭ、約１２０ｍＭ、約１３０ｍＭ、又は約１４０ｍＭの何れかの濃度で存在する。幾つかの実施態様において、糖類は約１２０ｍＭの濃度で存在する。例えば、幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体（例えばオナルツズマブ）；（ｂ）ｐＨが５．０から５．４のヒスチジン緩衝液；（ｃ）スクロースが約１２０ｍＭの濃度で存在するするスクロース；及び（ｄ）ポリソルベートの濃度が０．０２％ｗ／ｖより大きいポリソルベートを含む。
【０１０３】
薬学的製剤は、好ましくはヒスチジン緩衝液を含む。ヒスチジン緩衝液の例としては、限定されないが、ヒスチジン塩化物、ヒスチジンコハク酸塩、ヒスチジン酢酸塩、ヒスチジンリン酸塩、ヒスチジン硫酸塩を含む。幾つかの実施態様において、ヒスチジン緩衝液はヒスチジン酢酸塩である。本明細書に記載される任意の薬学的製剤の幾つかの実施態様において、ヒスチジン緩衝液の濃度は約１ｍＭから約５０ｍＭの間、約１ｍＭから約３５ｍＭの間、約１ｍＭから約２５ｍＭの間、１ｍＭから約２０ｍＭの間、約７．５ｍＭから約１２．５ｍＭの間，又は約５ｍＭから約１５ｍＭの間の何れかである。幾つかの実施態様において、ヒスチジン緩衝液の濃度は５ｍＭ、７．５ｍＭ、又は１０ｍＭの何れかと等しいかそれ以上である。幾つかの実施態様において、ヒスチジン緩衝液の濃度は約５ｍＭ、約７．５ｍＭ、約１０ｍＭ、約１２．５ｍＭ、又は約１５ｍＭの何れかである。幾つかの実施態様において、ヒスチジン緩衝液の濃度は約１０ｍＭの濃度である。本明細書に記載される任意の薬学的製剤の幾つかの実施態様において、ヒスチジン緩衝液はｐＨが５．０から５．４の間のｐＨ、例えば、ｐＨが約５．０、ｐＨが約５．１、ｐＨが約５．２、ｐＨが約５．３，又はｐＨが約５．４の何れかである。幾つかの実施態様において、ｐＨはｐＨ５．１から５．４の間である。例えば、幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体（例えばオナルツズマブ）；（ｂ）ヒスチジン酢酸塩緩衝液が約１０ｍＭの濃度であるｐＨ５．４のヒスチジン酢酸塩緩衝液；（ｃ）糖類；及び（ｄ）ポリソルベートの濃度が０．０２％ｗ／ｖより大きいポリソルベートを含む。
【０１０４】
幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体が約５０ｍｇ／ｍＬから約７５ｍｇ／ｍＬの間の濃度で存在する抗ｃ−ｍｅｔ抗体（例えばオナルツズマブ）；（ｂ）ヒスチジン酢酸塩緩衝液が約１ｍＭから約２０ｍＭの間の濃度であるｐＨ５．０から５．４のヒスチジン酢酸塩緩衝液；（ｃ）スクロースが約１００ｍＭから約１５０ｍＭの間の濃度であるスクロース；（ｄ）ポリソルベート２０の濃度が０．０２％ｗ／ｖより大きいポリソルベート２０を含む。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体が約６０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する抗ｃ−ｍｅｔ抗体（例えばオナルツズマブ）；（ｂ）ヒスチジン酢酸塩緩衝液が約１０ｍＭの間の濃度であるｐＨ５．４のヒスチジン酢酸塩緩衝液；（ｃ）スクロースが約１２０ｍＭの濃度であるスクロース；（ｄ）ポリソルベート２０の濃度が約０．０４％ｗ／ｖであるポリソルベート２０を含む。
【０１０５】
また、本明細書中の薬学的製剤は、治療される特定の徴候の必要に応じて、一よりも多い活性な化合物、好ましくは互いに悪影響を与えない相補的活性を有するものを含有してもよい。そのような分子は意図する目的に有効な量で適切に組み合わせる。
【０１０６】
更に、本明細書に提供されるのは、バイアル及び本明細書に記載の薬学的製剤を含むバイアルをファイリングする方法である。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、注射器による穿孔可能な栓付きのバイアル中に、好ましくは水性形態で提供される。バイアルは約２〜８℃で並びに上限３０℃までで２４時間、それを必要としている被験体に投与されるまで好ましく貯蔵される。バイアルは、例えば１５ｃｃのバイアル（例えば６００ｍｇの用量について）又は２０ｃｃのバイアル（例えば９００ｍｇの用量について）であってよい。
【０１０７】
投与のための薬学的製剤は、好ましくは液体製剤（凍結乾燥されていない）であって、事前の凍結乾燥に供されていない。薬学的製剤は凍結乾燥されてもよいが、好ましくはそうではない。本明細書に記載される任意の薬学的製剤の幾つかの実施態様において、薬学的製剤、薬学的製剤は凍結乾燥された薬学的製剤である。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は液体製剤である。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、塩化ナトリウムのような塩を等張化させる量（tonicifying amount）含まない。本明細書に記載される任意の薬学的製剤の幾つかの実施態様において、薬学的製剤は希釈される。
【０１０８】
本明細書に記載される任意の薬学的製剤の幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む薬学的製剤は安定である。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む薬学的製剤は物理的に安定である。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む薬学的製剤は化学的に安定である。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む薬学的製剤は物理的に安定でかつ化学的に安定である。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、アンタゴニスト抗ｃ−Ｍｅｔ抗体を含み、及び薬学的製剤のアゴニスト活性は実質的に検出不可能である。アゴニスト及び／又はアゴニスト活性を検出する方法は当該技術分野で、例えば参照により全体が援用される米国特許第６，２０７，１５２号に知られている。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は実質的に非免疫原性である。
【０１０９】
任意の薬学的製剤の幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、約２週間又は約４週間約４０℃で、約１ヶ月間又は約３ヶ月間約２５℃で、約６ヶ月間、約１年間、又は約２年間約５℃で、及び／又は約３ヶ月間、約６ヶ月間、又は約１年間約−２０℃での貯蔵後に凝集体形成の増大を有意には生じない。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、約２週間又は約４週間約４０℃で、約１ヶ月間又は約３ヶ月間約２５℃で、約６ヶ月間、約１年間、又は約２年間約５℃で、及び／又は約３ヶ月間、約６ヶ月間、又は約１年間約−２０℃での貯蔵後に（例えばｐＨ５．７での類似の形成と比較して）凝集体形成を低減するか又はその低下したレベルを有する。
【０１１０】
高分子量種（ＨＭＷＳ）は、一般的に、参照分子よりも大きい。例えば、オナルツズマブは約１００ｋＤａ（９９，１６１ダルトン）であり、従って、ＨＭＷＳは約１００ｋＤａより大きい。二価抗体の大きさはおよそ１５０ｋＤａであり、オナルツズマブの二量体は約２００ｋＤａである。任意の薬学的製剤の幾つかの実施態様において、薬学的製剤は（例えば貯蔵に際して）約１．５％、約１．２５％、約１％、約０．７５％、約０．５％、約０．２５％，約０．２０％又は約０．１５％の何れか未満のＨＭＷＳを含む。任意の薬学的製剤の幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、約２週間又は約４週間約４０℃で、約１ヶ月間又は約３ヶ月間約２５℃で、約６ヶ月間、約１年間、又は約２年間約５℃で、及び／又は約３ヶ月間、約６ヶ月間、又は約１年間約−２０℃での貯蔵後にＨＭＷＳの割合を有意には増大しない。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、約２週間又は約４週間約４０℃で、約１ヶ月間又は約３ヶ月間約２５℃で、約６ヶ月間、約１年間、又は約２年間約５℃で、及び／又は約３ヶ月間、約６ヶ月間、又は約１年間約−２０℃での貯蔵後に（例えばｐＨ５．７での類似の形成と比較して）ＨＭＷＳを低減するか又はその低下したレベルを有する。任意の薬学的製剤の幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、約１５日間、約３０日間、約４５日間、又は約６０日間の何れかの間約４０℃で、又は約３０日間又は約６０日間約２５℃での貯蔵後にＨＭＷＳの割合を有意には増大させない。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、約１５日間、約３０日間、約４５日間、又は約６０日間の何れかの間約４０℃で、あるいは約３０日間又は約６０日間、約２５℃での貯蔵後ＨＭＷＳのレベルを低下又は減少させる（例えばｐＨ５．７での類似製剤と比較して）。
【０１１１】
低分子量種（ＨＭＷＳ）は、一般的に、参照分子よりも小さい。例えば、オナルツズマブは約１００ｋＤａ（９９，１６１ダルトン）であり、従って、ＬＭＷＳは約１００ｋＤａより小さい。任意の薬学的製剤の幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、約２週間又は約４週間約４０℃で、約１ヶ月間又は約３ヶ月間約２５℃で、約６ヶ月間、約１年間、又は約２年間約５℃で、及び／又は約３ヶ月間、約６ヶ月間、又は約１年間約−２０℃での貯蔵後にＬＭＷＳの分解及び／又は割合を有意には増大しない（例えばｐＨ５．７での類似製剤と比較して）。任意の薬学的製剤の幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、約１５日間、約３０日間、約４５日間、又は約６０日間の何れかの間約４０℃で、約３０日間又は約６０日間、約２５℃での貯蔵後にＬＭＷＳの分解及び／又は割合を有意には増大しない（例えばｐＨ５．７での類似製剤と比較して）。
【０１１２】
任意の薬学的製剤の幾つかの実施態様において、薬学的製剤中のインタクトなポリソルベートの割合は、約２週間又は約４週間約４０℃で、約１ヶ月間又は約３ヶ月間約２５℃で、約６ヶ月間、約１年間、又は約２年間約５℃で、及び／又は約３ヶ月間、約６ヶ月間、又は約１年間約−２０℃での貯蔵後に約７５％、約８０％、約８５％又は約９０％の何れかよりも大きい。幾つかの実施態様において、薬学的製剤中のインタクトなポリソルベートの割合は、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約６週間、約７週間、又は約８週間の何れかの間約４０℃での貯蔵後に、約７５％、約８０％、約８５％又は約９０％の何れかよりも大きい。
【０１１３】
任意の薬学的製剤の幾つかの実施態様において、薬学的製剤中の分解したポリソルベートの割合は、約２週間又は約４週間約４０℃で、約１ヶ月間又は約３ヶ月間約２５℃で、約６ヶ月間、約１年間、又は約２年間約５℃で、及び／又は約３ヶ月間、約６ヶ月間、又は約１年間約−２０℃での貯蔵後に約２５％、約２０％、約１５％又は約１０％の何れかよりも少ない。幾つかの実施態様において、薬学的製剤中の分解したポリソルベートの割合は、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約６週間、約７週間、又は約８週間の何れかの間約４０℃での貯蔵後に、約２５％、約２０％、約１５％又は約１０％の何れかよりも少ない。
【０１１４】
幾つかの実施態様において、薬学的製剤中のインタクトなポリソルベートに対する分解したポリソルベートの割合は、約２週間又は約４週間約４０℃で、約１ヶ月間又は約３ヶ月間約２５℃で、約６ヶ月間、約１年間、又は約２年間約５℃で、及び／又は約３ヶ月間、約６ヶ月間、又は約１年間約−２０℃での貯蔵後に約０．２５、約０．２０、約０．１５又は約０．１０の何れかよりも少ない。幾つかの実施態様において、薬学的製剤中のインタクトなポリソルベートに対する分解したポリソルベートの割合は、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約６週間、約７週間、又は約８週間の何れかの間約４０℃での貯蔵後に、約０．２５、約０．２０、約０．１５又は約０．１０の何れかよりも少ない。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む薬学的製剤は、ｐＨ５．７でポリソルベートの濃度が０．０２％以下である類似製剤よりもより安定である。
【０１１５】
更に、薬学的製剤は、（例えばＩＶバック中で希釈後に）貯蔵の際及び／又は投与期間中安定であることが実証されている望ましくは一つのものである。様々な安定性のアッセイが、製剤の安定性を確認するため、当業者に利用可能である。例えば、製剤は、少なくとも約１ヶ月又は少なくとも約３ヶ月の間約２５℃で；少なくとも約６ヶ月又は少なくとも約１年の間約５℃で；及び／又は少なくとも約６ヶ月又は少なくとも約１年の間約−２０℃で貯蔵の際に安定であることが見いだされたものであり得る。更に、薬学的製剤は、薬学的製剤の凍結（例えば−７０℃）及び解凍の後、好ましくは安定している。水性薬学的製剤を凍結乾燥中に同時乾燥を生じさずに凍結することが本明細書に具体的に熟慮され、例えばステンレスタンク内でその長期的な貯蔵が容易となる。薬学的製剤の凍結は本明細書に具体的に熟慮される。従って、薬学的製剤は、凍結及び融解の際に安定性について試験することができる。別の実施態様において、製剤はステンレススチールタンク内に提供される。ステンレススチールタンク内の製剤は任意で凍結させ、凍結乾燥しない。
【０１１６】
インビボ投与に使用される薬学的製剤は無菌でなければならない。これは、滅菌濾過膜を通す濾過を製剤の調製の前後に含む、ヒト被験体への投与に適した無菌の医薬製剤を生成するための当業者に公知の手順に従って達成することができる。
【０１１７】
任意の薬学的製剤の幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む薬学的製剤は、希釈剤（例えば生理食塩水）による希釈の際に安定である。例えば、本明細書に与えられるのは、本明細書中に記載希釈した医薬品製剤を含むＩＶバッグである。幾つかの実施態様において、希釈剤は、生理食塩水（例えば、０．９％塩化ナトリウム）である。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の濃度は、約０．５ｍｇ／ｍＬ、約１ｍｇ／ｍＬ、約１．５ｍｇ／ｍＬ、約２ｍｇ／ｍＬ、約３ｍｇ／ｍＬ、約４ｍｇ／ｍＬ又は約５ｍｇ／ｍＬの何れかまで希釈される。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の濃度は、約０．５−５ｍｇ／ｍＬ、約０．５−２．５ｍｇ／ｍＬ、又は約０．５−１．５ｍｇ／ｍＬの間の何れかまで希釈される。従って、本明細書中で提供されるのは（ａ）抗体濃度が約１ｍｇ／ｍＬである抗ｃ−ｍｅｔ抗体及び（ｂ）ポリソルベートの濃度は０．０００３３％ｗ／ｖより大きいポリソルベートを含む薬学的製剤である。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、（ａ）抗体濃度が約１ｍｇ／ｍＬである抗ｃ−ｍｅｔ抗体；（ｂ）ポリソルベートの濃度が０．０００３３％ｗ／ｖより大きいポリソルベート、（ｃ）ヒスチジン緩衝液（例えば、ｐＨが５．０と５．４の間のヒスチジン緩衝液）を含む。任意の薬学的製剤の幾つかの実施態様において、薬学的製剤はＩＶバッグ及び／又はＩＶ投与セットにおいて安定（例えば物理的に安定）である。
【０１１８】
任意の薬学的製剤の幾つかの実施態様において、薬学的製剤（例えば希釈後）は、約３０分間、約１時間、約１．５時間、又は約２時間の何れかの間、約７５、約１００、約１２５、又は約１５０ｒｐｍの何れかでの攪拌の際安定である。任意の薬学的製剤の幾つかの実施態様において、薬学的製剤は（例えば希釈後）約１．５％、約１．２５％、約１％、約０．７５％、約０．５％、約０．２５％，約０．２０％又は約０．１５％の何れか未満のＨＭＷＳを（例えば攪拌の際）含む。
【０１１９】
本明細書に提供されるのは、本明細書に記載のように製剤を調製することを含む薬学的製剤の製造方法である。幾つかの実施態様において、本方法は更に、製剤中の抗ｃ−ｍｅｔ抗体の物理的安定性、化学的安定性、又は生物学的活性を評価すること含む。
【０１２０】
安定性は、処方の前後並びに貯蔵後、投与期間中、及び／又は上記温度での攪拌の際に、製剤中の抗体の物理的安定性、化学的安定性、及び／又は生物学的活性を評価することによって試験することができる。物理的及び／又は安定性は、（例えば、サイズ排除クロマトグラフィーを用いて、濁度を測定することにより、及び／又は目視検査により）凝集体形成を評価すること；陽イオン交換クロマトグラフィー又はキャピラリーゾーン電気泳動を用いて、電荷の不均一性を評価することにより；アミノ末端又はカルボキシ末端配列分析；質量分析；還元されたインタクトな抗体を比較するＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析；ペプチドマップ分析（トリプシン又はＬＹＳ−Ｃなど）；抗体の生物学的活性又は抗原結合機能を評価することなどを含む様々な異なる方法で定性的及び／又は定量的に評価することができる。不安定性は、凝集、脱アミド化（例えば、アスパラギンの脱アミド）、酸化（例えば、メチオニンの酸化）、異性化（例えば、Ａｓｐ異性化）、クリッピング／加水分解／断片化（例えば、ヒンジ領域の断片化を）、コハク酸イミド形成、不対システイン、Ｎ末端伸長、Ｃ末端のプロセシング、グリコシル化の違い等をもたらし得る。生物学的活性又は抗原結合機能は、当業者に利用可能な種々の技術を用いて評価することができる。
【０１２１】
RemingtonのPharmaceutical Sciences 第18版, Gennaro, A. 編. (1990) に記載されているような一以上の他の薬学的に許容される担体、賦形剤又は安定剤を、製剤の所望の特性に悪影響を与えないことを条件として製剤中に含めることができる。許容される担体、賦形剤又は安定化剤は、用いられる用量及び濃度で受容者に非毒性であり、追加の緩衝剤；共溶媒；アスコルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤；ＥＤＴＡなどのキレート剤；金属錯体（例えばＺｎ−タンパク質複合体）；ポリエステルなどの生分解性ポリマー；及び／又はナトリウムなどの塩形成対イオンを含む。
【０１２２】
ＩＩＩ．抗Ｃ−Ｍｅｔ抗体
本明細書に記載の薬学的製剤における使用のための抗ｃ−ｍｅｔ抗体が本明細書に提供される。有用な抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、ｃ−ｍｅｔに十分な親和性および特異性で結合し、一つ以上のｃ−ｍｅｔ活性を低減又は阻害することができる抗体を含む。薬学的製剤中の抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、限定されないがｃ−ｍｅｔの活性化、下流分子のシグナル伝達（例えば、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）のリン酸化）、細胞増殖、細胞遊走、細胞生存、細胞形態形成および血管新生を含むＨＧＦ／ｃ−ｍｅｔに関連する作用の一以上の態様を調節することに使用することができる。これらの作用は、ｃ−ｍｅｔへのリガンド（例えばＨＧＦ）結合の破壊、ｃ−ｍｅｔのリン酸化、及び／又はｃ−ｍｅｔの多量体化を含む生物学的に関連する任意の機構によって調節することができる。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、アンタゴニスト抗ｃ−ｍｅｔ抗体である。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体はｃ−ｍｅｔ／ＨＧＦが関与している疾患又は状態を干渉する。
【０１２３】
本明細書に記載される何れかの抗ｃ−ｍｅｔ抗体製剤の幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は抗ｃ−ｍｅｔ抗体断片である。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、アンタゴニスト抗ｃ−ｍｅｔ抗体である。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は一価である。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体断片は単一の抗原結合腕及びＦｃ領域を含む。抗ｃ−ｍｅｔ抗体断片は本明細書に記載され、片腕形態で当該技術分野で知られている。従って、幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔの抗体断片は、Ｆｃ領域を含む片腕抗体（即ち重鎖可変ドメイン及び軽鎖可変ドメインは単一抗原結合腕を形成する）であり、Ｆｃ領域は、第一及び第二Ｆｃポリペプチドを含み、第一及び第二Ｆｃポリペプチドは複合体中に存在する。幾つかの実施態様において、第一及び第二Ｆｃポリペプチドは、前記抗原結合腕を含むＦａｂ分子と比較して、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の安定性を増加させるＦｃ領域を形成する。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、（ａ）配列番号１９のアミノ酸配列、ＣＨ１配列、及び第一Ｆｃポリペプチドを含む第一ポリペプチド、及び（ｂ）配列番号２０のアミノ酸配列及びＣＬ１配列を含む第二ポリペプチドを含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は（ｃ）第二Ｆｃポリペプチドを含む第三ポリペプチドを更に含む。
【０１２４】
幾つかの実施態様において、本明細書に記載される薬学的製剤のの抗ｃ−ｍｅｔ抗体断片は二価抗体の抗原結合部位を含み、よって抗原に結合する能力を保持する。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体断片はＦｃ領域を含み、二価抗体中に存在するときＦｃ領域に通常関連する生物学的機能、例えばＦｃＲｎ結合、抗体半減期の調節、ＡＤＣＣ機能及び補体結合などの少なくとも一を保持する幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体断片はＡＤＣＣ機能及び／又は補体結合活性を持たない。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体断片は、二価抗体に実質的に類似したインビトロでの半減期を有する一価抗体である。例えば、そのような抗体断片は、その断片にインビトロで安定性を付与することができるＦｃ配列に連結された抗原結合腕を含む。幾つかの実施態様において、Ｆｃポリペプチドは、野生型ヒンジ配列の一部又は全部を（一般に、そのＮ末端で）含む。幾つかの実施態様において、Ｆｃポリペプチドは、機能性又は野生型ヒンジ配列を含まない。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体断片は国際公開第２００５／０６３８１６号に記述される片腕抗体である。幾つかの実施態様において、片腕抗体は、国際公開第２００５／０６３８１６号; Ridgeway, J et al, Prot Eng (1996) 9:617-21;及びZhu Z et al. Prot Sci (1997) 6:781-8に記載される「ノブ」及び「ホール」を構成するＦｃ変異を含む。幾つかの実施態様において、Ｆｃ領域は少なくとも一の突起（ノブ）及び少なくとも一の空洞（ホール）を含み、例えば国際公開第２００５／０６３８１号に記載されるように、突起と空洞の存在は、突起を含むＦｃポリペプチドと空洞を含むＦｃポリペプチドの間の複合体の形成を増強する。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体のＦｃ領域は第一及び第二ポリペプチドを含み、第一及び第二ポリペプチドの各々は、野生型ヒトＦｃに関して一以上の変異を含む。幾つかの実施態様において、空洞の変異はＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ及び／又はＹ４０７Ｖである。幾つかの実施態様において、突起の変異はＴ３６６Ｗである。幾つかの実施態様において、第一ポリペプチドは、図２に示されるＦｃ配列を含み、第二ポリペプチドは図３に示されるＦｃ配列を含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、ホモ二量体化を最小限にしつつ、抗体断片内のＦｃ配列のヘテロ二量体化を促進する少なくとも一の特徴を含み得る。
【０１２５】
本明細書に記載される何れかの抗ｃ−ｍｅｔ抗体の幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体はアンタゴニスト抗ｃ−ｍｅｔ抗体である。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体又はアンタゴニスト抗ｃ−ｍｅｔ抗体をブロッキングすることは抗原の生物学的活性を完全に阻害する。アンタゴニスト機能を必要とする病的状態の治療のために、そして抗ｃ−ｍｅｔ抗体の二価性が、標的抗原への結合の際に望ましくないアゴニスト作用を生じる場合（それがＦａｂ断片としてアンタゴニスト抗ｃ−ｍｅｔ抗体あるにもかかわらず）、片腕抗体（すなわち、単一の抗原結合腕を含む抗体）の一価の特性は、標的分子への抗ｃ−ｍｅｔの抗体の結合に際し、アンタゴニスト機能を生じ及び／又は確実にする。更に、Ｆｃ領域を含む片腕抗体は、類似した／実質的に同一の抗原結合特性を有するＦａｂの形態に比べて、優れた薬物動態学的属性（生体内の半減期の拡張及び／又はクリアランス速度の減少など）により特徴付けられ、従って、従来の一価Ｆａｂ抗体の使用における主な欠点を克服している。
【０１２６】
本明細書に記載の薬学的製剤に有用な抗ｃ−ｍｅｔ抗体（片腕抗体として提供されてもよい）には当技術分野で知られているものが挙げられる（例えば、全体が参考として援用されるMartens, T. et al., Clin. Cancer Res. 12 (20 Pt. 1):6144 (2006); 米国特許第６，４６８，５２９号；国際公開第２００６／０１５３７１号；国際公開第２００７／０６３８１６号及び国際公開第２０１０／０４５３４５号を参照）。幾つかの実施態様において、本明細書に記載の薬学的製剤に使用のための抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（ＡＴＣＣ）受託番号ＡＴＣＣ ＨＢ−１１８９４（ハイブリドーマ１Ａ３．３．１３）又はＨＢ−１１８９５（ハイブリドーマ５Ｄ５．１１．６）の元に寄託されたハイブリドーマ細胞株により産生されるモノクローナル抗体のＨＶＲ配列を一以上含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、ＡＴＣＣ受託番号ＡＴＣＣ ＨＢ−１１８９４（ハイブリドーマ１Ａ３．３．１３）又はＨＢ−１１８９５（ハイブリドーマ５Ｄ５．１１．６）の軽鎖可変ドメインのＨＶＲの一以上及び／又は重鎖可変ドメインのＨＶＲの一以上、及びＦｃポリペプチドを含む片腕抗体である。
【０１２７】
抗ｃ−ｍｅｔ抗体の薬学的製剤の幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は図２に示されるＨＶＲ１−ＬＣ、ＨＶＲ２−ＬＣ及びＨＶＲ３−ＬＣ配列（配列番号１〜３）の一以上を含む軽鎖可変ドメインを含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は図２に示されるＨＶＲ１−ＨＣ、ＨＶＲ２−ＨＣ及びＨＶＲ３−ＨＣ配列（配列番号４〜６）の一以上を含む重鎖可変ドメインを含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、図２に示されるＨＶＲ１−ＬＣ、ＨＶＲ２−ＬＣ及びＨＶＲ３−ＬＣ配列（配列番号１〜３）の一以上を含む軽鎖可変ドメイン及び図２に示されるＨＶＲ１−ＨＣ、ＨＶＲ２−ＨＣ及びＨＶＲ３−ＨＣ配列（配列番号４〜６）を含む。幾つかの実施態様において、重鎖可変ドメインは、図２に示されるＨＶＲ１−ＨＣ、ＨＶＲ２−ＨＣ及びＨＶＲ３−ＨＣ配列（配列番号４〜６）の一以上、及び図２に示されるＦＲ１−ＨＣ、ＦＲ２−ＨＣ、ＦＲ３−ＨＣ及びＦＲ４−ＨＣ配列（配列番号１１〜１４）の一以上を含む。幾つかの実施態様において、軽鎖可変ドメインは、図２に示されるＨＶＲ１−ＬＣ、ＨＶＲ２−ＬＣ及びＨＶＲ３−ＬＣ配列（配列番号１〜３）の一以上、及び図２に示されるＦＲ１−ＨＣ、ＦＲ２−ＨＣ、ＦＲ３−ＨＣ及びＦＲ４−ＨＣ配列（配列番号７〜１０）の一以上を含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、軽鎖可変ドメインのＨＶＲの一以上（配列番号１〜３）及び／又は重鎖可変ドメインのＨＶＲの一以上（配列番号４〜６）及びＦｃポリペプチドを含む片腕抗体である。
【０１２８】
抗ｃ−ｍｅｔ抗体の薬学的製剤の幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、（ｉ）Ａ１−Ａ１７がＫＳＳＱＳＬＬＹＴＳＳＱＫＮＹＬＡ（配列番号２３）である配列Ａ１−Ａ１７を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｉｉ）Ｂ１−Ｂ７がＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号２４）である配列Ｂ１−Ｂ７を含むＨＶＲ−Ｌ２；（ｉｉｉ）；Ｃ１−Ｃ９がＱＱＹＹＡＹＰＷＴ（配列番号２５）であるＨＶＲ−Ｌ３；（ｉｖ）Ｄ１−Ｄ１０がＧＹＴＦＴＳＹＷＬＨ（配列番号２６）であるＨＶＲ−Ｈ１；Ｅ１−Ｅ１８がＧＭＩＤＰＳＮＳＤＴＲＦＮＰＮＦＫＤ（配列番号２７）であるＨＶＲ−Ｈ１；（ｖ）Ｅ１−Ｅ１８がＧＭＩＤＰＳＮＳＤＴＲＦＮＰＮＦＫＤ（配列番号２７）であるＨＶＲ−Ｈ２；及び（ｖｉ）Ｆ１−Ｆ１１がＸＹＧＳＹＶＳＰＬＤＹ（配列番号２８）であってＸがＲでないＨＶＲ−Ｈ３からなる群から選択される少なくとも一つ、二つ、三つ、四つ、又は五つのＨＶＲ配列、及び（ｂ）変異体ＨＶＲ配列が配列番号２３、２４、２５、２６、２７、又は２８に示される配列の少なくとも一残基の修飾を含む、少なくとも一の変異体ＨＶＲを含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体のＨＶＲ−Ｌ１は配列番号２３の配列を含む。幾つかの実施態様において、ＨＶＲ−Ｌ２は、配列番号２４の配列を含む。幾つかの実施態様において、ＨＶＲ−Ｌ３は、配列番号２５の配列を含む。幾つかの実施態様において、ＨＶＲ−Ｈ１は、配列番号２６の配列を含む。幾つかの実施態様において、ＨＶＲ−Ｈ２は、配列番号２７の配列を含む。幾つかの実施態様において、ＨＶＲ−Ｈ３は、配列番号２８の配列を含む。幾つかの実施態様において、ＨＶＲ−Ｈ３は、ＴＹＧＳＹＶＳＰＬＤＹ（配列番号２９）を含む。幾つかの実施態様において、ＨＶＲ−Ｈ３は、ＳＹＧＳＹＶＳＰＬＤＹ（配列番号３０）を含む。幾つかの実施態様において、これらの配列を（本明細書に記載のように組み合わせて）含む抗ｃ−ｍｅｔ抗体はヒト化又はヒトのものである。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、軽鎖可変ドメインのＨＶＲの一以上（配列番号２３〜２５）及び／又は重鎖可変ドメインのＨＶＲの一以上（配列番号２６〜２０）及びＦｃポリペプチドを含む片腕抗体である。
【０１２９】
本明細書に提供されるのはまた、一つ、二つ、三つ、四つ、五つ、又は六つのＨＶＲを含んでなる薬学的製剤において使用のための抗ｃ−ｍｅｔ抗体であり、各ＨＶＲは配列番号２３、２４、２５、２６、２７、２８，及び２９からなる群から選択される配列を含む、からなる、又はから本質的になり、配列番号２３はＨＶＲ−Ｌ１に対応し、配列番号２４はＨＶＲ−Ｌ２に対応し、配列番号２５はＨＶＲ−Ｌ３に対応し、配列番号２６はＨＶＲ−Ｈ１に対応し、配列番号２７はＨＶＲ−Ｈ２に対応し、及び配列番号２６、２７又は２８はＨＶＲ−Ｈ３に対応する。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体はＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２、ＨＶＲ−Ｌ３、ＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２，及びＨＶＲ−Ｈ３を含み、ここで各々は順番に配列番号２３、２４、２５、２６、２７、及び２９を含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体はＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２、ＨＶＲ−Ｌ３、ＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２，及びＨＶＲ−Ｈ３を含み、ここで各々は順番に配列番号２３、２４、２５、２６、２７、及び３０を含む。
【０１３０】
変異体ＨＶＲはＨＶＲ中に一以上の残基の修飾を含み得る。幾つかの実施態様において、ＨＶＲ−Ｌ２変異体は、以下の位置：Ｂ１（Ｍ又はＬ）、Ｂ２（Ｐ、Ｔ、Ｇ又はＳ）、Ｂ３（Ｎ、Ｇ、Ｒ又はＴ）、Ｂ４（Ｉ、Ｎ又はＦ）、Ｂ５（Ｐ、Ｉ、Ｌ又はＧ）、Ｂ６（Ａ、Ｄ、Ｔ又はＶ）及びＢ７（Ｒ、Ｉ、Ｍ又はＧ）の任意の組み合わせにおいて１〜５（１、２、３、４又は５）の置換を含む。幾つかの実施態様において、ＨＶＲ−Ｈ１変異体は、以下の位置：Ｄ３（Ｎ、Ｐ、Ｌ、Ｓ、Ａ、Ｉ）、Ｄ５（Ｉ、Ｓ又はＹ）、Ｄ６（Ｇ、Ｄ、Ｔ、Ｋ、Ｒ）、Ｄ７（Ｆ、Ｈ、Ｒ、Ｓ、Ｔ又はＶ）及びＤ９（Ｍ又はＶ）の任意の組み合わせにおいて１〜５（１、２、３、４又は５）の置換を含む。幾つかの実施態様において、ＨＶＲ−Ｈ２変異体は、以下の位置：Ｅ７（Ｙ）、Ｅ９（Ｉ）、Ｅ１０（Ｉ）、Ｅ１４（Ｔ又はＱ）、Ｅ１５（Ｄ、Ｋ、Ｓ、Ｔ又はＶ）、Ｅ１６（Ｌ）、Ｅ１７（Ｅ、Ｈ、Ｎ又はＤ）及びＥ１８（Ｙ、Ｅ又はＨ）の任意の組み合わせにおいて１〜４（１、２、３、又は４）の置換を含む。幾つかの実施態様において、ＨＶＲ−Ｈ３変異体は、以下の位置：Ｆ１（Ｔ、Ｓ）、Ｆ３（Ｒ、Ｓ、Ｈ、Ｔ、Ａ、Ｋ）、Ｆ４（Ｇ）、Ｆ６（Ｒ、Ｆ、Ｍ、Ｔ、Ｅ、Ｋ、Ａ、Ｌ、Ｗ）、Ｆ７（Ｌ、Ｉ、Ｔ、Ｒ、Ｋ、Ｖ）、Ｆ８（Ｓ、Ａ）、Ｆ１０（Ｙ、Ｎ）及びＦ１１（Ｑ、Ｓ、Ｈ、Ｆ）の任意の組み合わせにおいて１〜５（１、２、３、４又は５）の置換を含む。各位置に続く括弧内の文字は説明的置換（即ち置換(replacement)）アミノ酸を示し；当業者には明らかなように、本明細書に記載される文脈における置換アミノ酸としての他のアミノ酸の適合性は、当技術分野で公知及び／又は本明細書に記載の技術を用いて日常的に評価することができる。幾つかの実施態様において、ＨＶＲ−Ｌ１は、配列番号２３の配列を含む。幾つかの実施態様において、変異体ＨＶＲ−Ｈ３におけるＦ１はＴである。幾つかの実施態様において、変異体ＨＶＲ−Ｈ３におけるＦ１はＳである。幾つかの実施態様において、変異体ＨＶＲ−Ｈ３におけるＦ３はＲである。幾つかの実施態様において、変異体ＨＶＲ−Ｈ３におけるＦ３はＳである。幾つかの実施態様において、変異体ＨＶＲ−Ｈ３におけるＦ７はＴである。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、Ｆ１がＴ又はＳ，Ｆ３がＲ又はＳ，及びＦ７がＴである変異体ＨＶＲ−Ｈ３を含む。
【０１３１】
幾つかの実施態様において、薬学的製剤の抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、Ｆ１がＴ，Ｆ３がＲ及びＦ７がＴである、変異体ＨＶＲ−Ｈ３を含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、Ｆ１がＳである変異体ＨＶＲ−Ｈ３を含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、Ｆ１がＴ，及びＦ３がＲである変異体ＨＶＲ−Ｈ３を含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、Ｆ１がＳ，Ｆ３がＲ及びＦ７がＴである、変異体ＨＶＲ−Ｈ３を含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、Ｆ１がＴ，Ｆ３がＳ、Ｆ７がＴ、及びＦ８がＳである、変異体ＨＶＲ−Ｈ３を含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、Ｆ１がＴ，Ｆ３がＳ、Ｆ７がＴ、及びＦ８がＡである、変異体ＨＶＲ−Ｈ３を含む。幾つかの実施態様において、前記変異体ＨＶＲ−Ｈ３抗体は、ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２、ＨＶＲ−Ｌ３、ＨＶＲ−Ｈ１及びＨＶＲ−Ｈ２を更に含み、各々は順番に配列番号１、２、３、４、及び５に示される配列を含む。幾つかの実施態様において、これらの抗体は更に、ヒトサブグループＩＩＩ重鎖フレームワークコンセンサス配列を含む。これらの抗体の幾つかの実施態様において、フレームワークコンセンサス配列は、位置７１、７３、及び／又は７８に置換を含む。これらの抗体の幾つかの実施態様において、位置７１はＡ，７３はＴ及び／又は７８はＡである。これらの抗体の幾つかの実施態様において、これらの抗体はヒトκＩ軽鎖フレームワークコンセンサス配列を更に含む。
【０１３２】
幾つかの実施態様において、薬学的製剤の抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、Ｂ６がＶである変異体ＨＶＲ−Ｌ２を含む。幾つかの実施態様において、前記変異体ＨＶＲ−Ｌ２抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ３、ＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２及びＨＶＲ−Ｈ３を更に含み、ここで各々は順番に配列番号２３、２５、２６、２７及び２８に示される配列を含む。幾つかの実施態様において、前記変異体ＨＶＲ−Ｌ２抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ３、ＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２及びＨＶＲ−Ｈ３を更に含み、各々は順番に配列番号２３、２５、２６、２７、及び２９に示される配列を含む。幾つかの実施態様において、前記変異体ＨＶＲ−Ｌ２抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ３、ＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２及びＨＶＲ−Ｈ３を更に含み、各々は順番に配列番号２３、２５、２６、２７、及び３０に示される配列を含む。幾つかの実施態様において、これらのｃ−ｍｅｔ抗体は更に、ヒトサブグループＩＩＩ重鎖フレームワークコンセンサス配列を含む。これらのｃ−ｍｅｔ抗体の幾つかの実施態様において、フレームワークコンセンサス配列は、位置７１、７３、及び／又は７８に置換を含む。幾つかの実施態様において、位置７１はＡ，７３はＴ及び／又は７８はＡである。これらのｃ−ｍｅｔ抗体の幾つかの実施態様において、これらの抗体はヒトκＩ軽鎖フレームワークコンセンサス配列を更に含む。
【０１３３】
幾つかの実施態様において、薬学的製剤の抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、Ｅ１４がＴ，Ｅ１５がＫ及びＥ１７がＥである、変異体ＨＶＲ−Ｈ２を含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、Ｅ１７がＥである、変異体ＨＶＲ−Ｈ２を含む。幾つかの実施態様において、前記変異体ＨＶＲ−Ｈ３抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２、ＨＶＲ−Ｌ３、ＨＶＲ−Ｈ１，及びＨＶＲ−Ｈ３を更に含み、各々は順番に配列番号２３、２４、２５、２６、及び２８に示される配列を含む。幾つかの実施態様において、前記変異体ＨＶＲ−Ｈ２抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２、ＨＶＲ−Ｌ３、ＨＶＲ−Ｈ１，及びＨＶＲ−Ｈ３を更に含み、各々は順番に配列番号２３、２４、２５、２６、及び２９に示される配列を含む。幾つかの実施態様において、前記変異体ＨＶＲ−Ｈ２抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２、ＨＶＲ−Ｌ３、ＨＶＲ−Ｈ１，及びＨＶＲ−Ｈ３を更に含み、各々は順番に配列番号２３、２４、２５、２６、及び３０に示される配列を含む。幾つかの実施態様において、これらのｃ−ｍｅｔ抗体は更に、ヒトサブグループＩＩＩ重鎖フレームワークコンセンサス配列を含む。これらのｃ−ｍｅｔ抗体の幾つかの実施態様において、フレームワークコンセンサス配列は、位置７１、７３、及び／又は７８に置換を含む。幾つかの実施態様において、位置７１はＡ，７３はＴ及び／又は７８はＡである。これらのｃ−ｍｅｔ抗体の幾つかの実施態様において、これらのｃ−ｍｅｔ抗体はヒトκＩ軽鎖フレームワークコンセンサス配列を更に含む。
【０１３４】
幾つかの実施態様において、薬学的製剤の抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、（ａ）配列：ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＹＴＦＴＳＹＷＬＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＧＭＩＤＰＳＮＳＤＴＲＦＮＰＮＦＫＤＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＴＹＲＳＹＶＴＰＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号１９）を含む重鎖可変ドメイン、及び／又は（ｂ）配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＳＳＱＳＬＬＹＴＳＳＱＫＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲ  ＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＹＡＹＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号２０）を含む軽鎖可変ドメインを含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は（ａ）軽鎖可変ドメイン（配列番号２０）及び／又は（ｂ）重鎖可変ドメイン（配列番号１９）及び（ｃ）Ｆｃポリペプチドを含んでなる片腕抗体である。
【０１３５】
幾つかの実施態様において、薬学的製剤の抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、配列：ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＹＴＦＴＳＹＷＬＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＧＭＩＤＰＳＮＳＤＴＲＦＮＰＮＦＫＤＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＴＹＲＳＹＶＴＰＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号１９）を含む重鎖可変ドメインのＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２及びＨＶＲ−Ｈ３及び／又は（ｂ）配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＳＳＱＳＬＬＹＴＳＳＱＫＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＹＡＹＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号２０）を含む軽鎖可変ドメインのＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２，及びＨＶＲ−Ｌ３を含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は（ａ）軽鎖可変ドメイン（配列番号２０）及び／又は（ｂ）重鎖可変ドメイン（配列番号１９）及び（ｃ）Ｆｃポリペプチドを含んでなる片腕抗体である。
【０１３６】
幾つかの実施態様において、薬学的製剤の抗ｃ−ｍｅｔ抗体は抗ｃ−ｍｅｔ抗体断片であり、抗体断片は（ａ）配列番号１９を含む重鎖可変ドメイン、ＣＨ１配列（例えば配列番号１６）、及び第一Ｆｃポリペプチドを含む第一ポリペプチド；及び（ｂ）配列番号２０を含む軽鎖可変ドメイン、及びＣＬ１配列（配列番号１５）を含む第二ポリペプチドを含む。
【０１３７】
幾つかの実施態様において、薬学的製剤の抗ｃ−ｍｅｔ抗体は抗ｃ−ｍｅｔ抗体断片であり、抗体断片が（ａ）配列番号１９を含む重鎖可変ドメイン、ＣＨ１配列（例えば配列番号１６）及び第一Ｆｃポリペプチドを含む第一ポリペプチド；（ｂ）配列番号２０を含む軽鎖可変ドメイン、及びＣＬ１配列（例えば配列番号１５）を含む第二ポリペプチド；及び（ｃ）第二Ｆｃポリペプチドを含む第三ポリペプチドを含み、重鎖可変ドメインと軽鎖可変ドメインは複合体として存在し単一抗原結合腕を形成し、かつ第一及び第二Ｆｃポリペプチドが複合体中に存在する。幾つかの実施態様において、第一及び第二Ｆｃポリペプチドは、前記抗原結合腕を含むＦａｂ分子と比較して、前記抗体断片の安定性を増加させるＦｃ領域を形成する。幾つかの実施態様において、Ｆｃ領域はヒトＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、２、３又は４）のものである。幾つかの実施態様において、第一Ｆｃポリペプチドは、図２に示されるＦｃ配列（配列番号１７）を含み、第二Ｆｃポリペプチドは図３に示されるＦｃ配列（配列番号１８）を含む。幾つかの実施態様において、第一Ｆｃポリペプチドは、図３に示されるＦｃ配列を含み（配列番号１８）、第二Ｆｃポリペプチドは図２に示されるＦｃ配列を含む（配列番号１７）。
【０１３８】
幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は抗ｃ−ｍｅｔ抗体又はその断片であり、抗体が（ａ）配列番号１９を含む重鎖可変ドメイン、ＣＨ１配列、及び第一Ｆｃポリペプチドを含む第一ポリペプチド；（ｂ）配列番号２０を含む軽鎖可変ドメイン、及びＣＬ１配列を含む第二ポリペプチド；及び（ｃ）第二Ｆｃポリペプチドを含む第三ポリペプチドを含み、ここで重鎖可変ドメインと軽鎖可変ドメインは複合体として存在して単一抗原結合腕を形成し、かつ第一及び第二Ｆｃポリペプチドが複合体中に存在し、前記抗原結合腕を含むＦａｂ分子と比較して前記抗体断片の安定性を増加させるＦｃ領域を形成する。
幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、（ａ）重鎖可変ドメインを含む第一ポリペプチド（該ポリペプチドは配列：ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＹＴＦＴＳＹＷＬＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＧＭＩＤＰＳＮＳＤＴＲＦＮＰＮＦＫＤＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＴＹＲＳＹＶＴＰＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＳＣＡＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＶＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号２１）を含み）；（ｂ）軽鎖可変ドメインを含む第二ポリペプチド（該ポリペプチドは配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＳＳＱＳＬＬＹＴＳＳＱＫＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＹＡＹＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号２２）を含み）；及びＦｃ配列を含む第三ポリペプチド（該ポリペプチドは配列：ＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＷＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１８）を含む）を含み、ここで重鎖可変ドメインと軽鎖可変ドメインは複合体として存在して単一抗原結合腕を形成し、かつ第一及び第二Ｆｃポリペプチドは複合体中に存在する。幾つかの実施態様において、第一及び第二Ｆｃポリペプチドは、前記抗原結合腕を含むＦａｂ分子と比較して、前記抗体断片の安定性を増加させるＦｃ領域を形成する。
【０１３９】
幾つかの実施態様において、本明細書に記載される抗ｃ−ｍｅｔ抗体の何れかをコードするポリヌクレオチドは、抗ｃ−ｍｅｔ抗体が産生されるように発現される。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の何れかをコードするポリヌクレオチドはインビトロ又はインビボで（例えばＣＨＯ細胞又は大腸菌細胞中で）発現される。
【０１４０】
幾つかの実施態様において、本明細書に記載される薬学的製剤中で使用のための抗ｃ−ｍｅｔ抗体はオナルツズマブ（同義的にＭｅｔＭＡｂと称す）、Ｆｃ領域を含む片腕抗体である。ＭｅｔＭＡｂの配列は図２及び３に示される。ＭｅｔＭＡｂ（ＯＡ５Ｄ５ｖ２及びオナルツズマブとも称す）はまた例えば国際公開第２００６／０１５３７１号；国際公開第２０１０／０４３４５号；及びJin et al, Cancer Res (2008) 68:4360に記述される。ＭｅｔＭＡｂのバイオシミラー版も考慮され、製剤で使用するために本明細書に包含される。
【０１４１】
幾つかの実施態様において、薬学的製剤中の抗ｃ−ｍｅｔ抗体はｃ−ｍｅｔのＳｅｍａドメイン又はその変異体の少なくとも一部に特異的に結合する。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、アンタゴニストである。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔアンタゴニスト抗体は、ＬＤＡＱＴ（配列番号３１）（例えばｃ−ｍｅｔの残基２６９−２７３）、ＬＴＥＫＲＫＫＲＳ（配列番号３２）（例えばｃ−ｍｅｔの残基３００−３０８）、ＫＰＤＳＡＥＰＭ（配列番号３３）（例えばｃ−ｍｅｔの残基３５０−３５７）及びＮＶＲＣＬＱＨＦ（配列番号３４）（例えばｃ−ｍｅｔの残基３８１−３８８）からなる群から選択される配列の少なくとも一に特異的に結合する。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔアンタゴニスト抗体は、ＬＤＡＱＴ（配列番号３１）（例えばｃ−ｍｅｔの残基２６９−２７３）、ＬＴＥＫＲＫＫＲＳ（配列番号３２）（例えばｃ−ｍｅｔの残基３００−３０８）、ＫＰＤＳＡＥＰＭ（配列番号３３）（例えばｃ−ｍｅｔの残基３５０−３５７）及びＮＶＲＣＬＱＨＦ（配列番号３４）（例えばｃ−ｍｅｔの残基３８１−３８８）からなる群から選択される配列の少なくとも一のうちの一部又は全てにより形成される高次構造エピトープに特異的に結合する。幾つかの実施態様において、アンタゴニスト抗体は、配列ＬＤＡＱＴ（配列番号３１）、ＬＴＥＫＲＫＫＲＳ（配列番号３２）、ＫＰＤＳＡＥＰＭ（配列番号３３）及び／又はＮＶＲＣＬＱＨＦ（配列番号３４）と少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９８％の配列同一性又は類似性をを有するアミノ酸配列に特異的に結合する。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、アンタゴニスト抗ｃ−ｍｅｔ抗体である。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、片腕抗体である。関心のある抗体が結合した抗原上のエピトープに結合する抗体をスクリーニングするために、Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, Ed Harlow and David Lane (1988）に記載されるようにルーチンのクロスブロッキングアッセイを行うことができる。
【０１４２】
本明細書に記載される抗ｃ−ｍｅｔ抗体の何れかの幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、限定されないがｃ−ｍｅｔの細胞外部分へのＨＧＦの結合及び受容体多量体化を含むＨＧＦ／ｃ−ｍｅｔの活性化を妨害し得る。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体はＨＧＦ／ｃ−ｍｅｔの異常で所望されないシグナル伝達と関連した病的状態を治療または診断するのに有用である。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、ｃ−ｍｅｔリガンド結合、ｃ−ｍｅｔ二量体化、活性化、及びＨＧＦ／ｃ−ｍｅｔシグナル伝達と関連した他の生物学的／生理学的活性の調節を含むＨＧＦ／ｃ−ｍｅｔ経路を調節しうる。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体はＨＧＦ／ｃ−ｍｅｔシグナル伝達経路を破壊し得る。本明細書に記載される抗ｃ−ｍｅｔ抗体の何れかの幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体のｃ−ｍｅｔへの結合はＨＧＦによるｃ−ｍｅｔ活性化を阻害する。本明細書に記載される抗ｃ−ｍｅｔ抗体の何れかの幾つかの実施態様において、細胞中で抗ｃ−ｍｅｔ抗体のｃ−ｍｅｔへの結合は、細胞の増殖、生存、飛散、形態形成及び／又は運動性を阻害する。
【０１４３】
幾つかの場合、リガンド（例えばＨＧＦなど）のｃ−ｍｅｔへの結合を阻害しない抗ｃ−ｍｅｔ抗体を有することが有利であり得る。従って、幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、ｃ−ｍｅｔ上のＨＧＦ結合部位に結合しない。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、ｃ−ｍｅｔに対するＨＧＦ結合を実質的に阻害しない。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、ｃ−ｍｅｔに対する結合についてＨＧＦと実質的に競合しない。一例では、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、１つ又は複数の他のアンタゴニストと組み合わせて使用することができ、ここでアンタゴニストは、ＨＧＦ／ｃ−ｍｅｔの軸内の異なるプロセス及び／又は機能を標的としていることを特徴とする。このように、幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、（例えばアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション寄託番号ＡＴＣＣ ＨＢ−１１８９４（ハイブリドーマ１Ａ３．３．１３）の下で寄託されたハイブリドーマ細胞株によって産生されたモノクローナル抗体のＦａｂ断片のような）別のｃ−ｍｅｔアンタゴニストが結合するエピトープとは異なるｃ−ｍｅｔ上のエピトープに結合する。別の実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション寄託番号ＡＴＣＣ ＨＢ−１１８９４（ハイブリドーマ１Ａ３．３．１３）で寄託されたハイブリドーマ細胞株により産生されるモノクローナル抗体のＦａｂ断片とは区別される（即ちＦａｂ断片ではない）。
【０１４４】
幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は第一動物種に結合し、第二動物種のｃ−ｍｅｔ抗体には特異的に結合しない。幾つかの実施態様において、第一動物種は、ヒト及び／又は霊長類（例えば、カニクイザル）であり、第二動物種はネズミ科（例えば、マウス）及び／又はイヌである。幾つかの実施態様において、第一動物種はヒトである。幾つかの実施態様において、第一動物種は、霊長類、例えば、カニクイザルである。幾つかの実施態様において、第一動物種は、ネズミ科、例えば、マウスである。幾つかの実施態様において、第一動物種はイヌである。
【０１４５】
幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、前記被験体において免疫原性応答をほとんど又は全く誘発しない。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は臨床的に受容可能なレベル又はそれ未満で免疫原性応答を誘発する。
【０１４６】
本明細書に記載される抗ｃ−ｍｅｔ抗体の何れかの幾つかの実施態様において、変更された抗体は、全てではないが一部のエフェクター機能を有している。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は補体枯渇及び／又はＡＤＣＣ活性を持たない。幾つかの実施態様において、産生される免疫グロブリンのＦｃ活性は、所望の特性のみが維持されていること（例えば、補体枯渇及び／又はＡＤＣＣ活性ではなく半減期）を確認するために測定される。インビトロ及び／又はインビボでの細胞毒性アッセイを、ＣＤＣ活性及び／又はＡＤＣＣ活性の減少／枯渇を確認するために行うことができる。例えば、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）結合アッセイは、抗体がＦｃγＲ結合を欠くが（それゆえ、おそらくＡＤＣＣ活性を欠く）、ＦｃＲｎ結合能力を保持していることを確認するために行うことができる。ＡＤＣＣ、ＮＫ細胞を媒介する初代細胞は、ＦｃγＲＩＩＩのみを発現するが、単球はＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ及びＦｃγＲＩＩＩを発現する。造血細胞におけるＦｃＲの発現は、Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol. 9:457-492 (1991)の464頁の表３に要約されている。目的の分子のＡＤＣＣ活性を評価するためのインビトロでのアッセイの一例が、米国特許第５，５００，３６２号又は米国特許第５，８２１，３３７号に記載されている。このようなアッセイに有用なエフェクター細胞には、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞が含まれる。あるいは、又は更に、目的の分子のＡＤＣＣ活性は、Clynes et al., PNAS USA 95:652-656 (1998)に開示されるように、インビボで、例えば動物モデルにおいて評価することができる。Ｃ１ｑ結合アッセイはまた、抗体が体Ｃ１ｑを結合することができないこと、したがって、ＣＤＣ活性を欠いていることを確認するために行うことができる。補体活性を評価するために、ＣＤＣアッセイが、例えばGazzano-Santoro et al., J. Immunol. Methods 202:163 (1996)に記載されるように実施することができる。ＦｃＲｎ結合、及びインビボでのクリアランス／半減期の測定はまた、当該分野で公知の方法を用いて行うことができる。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体はグリコシル化されている。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は非グリコシル化（aglycosylated）されている。
【０１４７】
本明細書に記載される製剤の抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、当該分野で公知の種々のアッセイにより、それらの物理的／化学的性質及び生物学的機能について特徴づけることができる。精製された抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、限定されないが、Ｎ末端配列決定、アミノ酸分析、非変性サイズ排除高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、質量分析法、イオン交換クロマトグラフィー及びパパイン消化を含む、一連のアッセイによって更に特徴づけることができる。
【０１４８】
本明細書に記載される抗ｃ−ｍｅｔ抗体の何れかの幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、（１）ローリー法により判定して抗体の９５重量％超、および最も好ましくは９９重量％超まで、（２）スピニングカップシークエネーターを使用することにより、Ｎ末端もしくは内部アミノ酸配列の少なくとも１５残基を得るのに十分な程度まで、または（３）クーマシーブルーもしくは銀染色を用いる還元もしくは非還元条件下でＳＤＳ−ＰＡＧＥにより均一になるまで精製される。
【０１４９】
幾つかの実施態様において、以下のセクション１−８で説明されるように、上記実施態様のいずれかに記載の抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、単独または組み合わせで、任意の特徴を組み込むことができる：
【０１５０】
１．抗体親和性
幾つかの実施態様において、本明細書において与えられる抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、解離定数（Ｋｄ）が、≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、又は≦０．００１ｎＭ（例えば、１０−８Ｍ未満、例えば、１０−８Ｍから１０−１３Ｍ、例えば、１０−９Ｍから１０−１３Ｍ）である。
【０１５１】
その受容体へのリガンドの結合親和性は、種々のアッセイの何れかを用いて決定し、様々な定量値で表すことができる。当該分野で公知であり、本明細書で使用することができる抗原結合アッセイは、限定されないが、例えば、ウェスタンブロット、ラジオイムノアッセイ、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、「サンドイッチ」免疫アッセイ、表面プラズモン共鳴に基づくアッセイ（例えば、PCT出願公開番号ＷＯ２００５／０１２３５９に記載のようにＢＩＡｃｏｒｅアッセイなど）、免疫沈降アッセイ、蛍光イムノアッセイ、及びプロテインＡイムノアッセイなどの技術を用いた任意の直接的又は競合的結合アッセイを含む。
【０１５２】
従って、幾つかの実施態様において、結合親和性はＫｄ値として表され、（最小化結合活性効果を持つなど）固有の結合親和性を反映している。選択される抗ｃ−ｍｅｔ抗体はｃ−ｍｅｔに対する十分強い結合親和性を通常有し、例えば、抗体はヒトｃ−ｍｅｔにＫｄ値が１００ｎＭ−１ｐＭの間で結合し得る。
【０１５３】
２．抗体断片
幾つかの実施態様において、本明細書に記載される薬学的製剤の抗ｃ−ｍｅｔ抗体は抗体断片である。抗体断片は、限定されないが、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、一腕抗体、及びｓｃＦｖ断片、及び下記の他の断片を含む。所定の抗体断片の総説については、 Hudson et al. Nat. Med. 9:129-134 (2003)を参照。ｓｃＦｖ断片の総説については、例えば、Pluckthun, The Pharmacology of Monoclonal Antibodies,第113巻, Rosenburg and Moore 編, (Springer-Verlag, New York), 頁269-315 (1994)を参照；また、国際公開第９３／１６１８５号；及び米国特許第５，５７１，８９４号及び第５，５８７，４５８号も参照。サルベージ受容体結合エピトープ残基を含み、かつインビボ半減期を増加させたＦａｂ及びＦ（ａｂ’）２断片の議論については、米国特許第５８６９０４６号を参照のこと。他の一価抗体形式は、例えば国際公開第２００７０４８０３７号、国際公開第２００８１４５１３７号、国際公開第２００８１４５１３８号及び国際公開第２００７０５９７８２号に記載される。一腕抗体は例えば国際公開第２００５／０６３８１６号に記載される。ダイアボディは２価または二重特異性であり得る２つの抗原結合部位を有する抗体断片である。例えば、欧州特許第４０４，０９７号；国際公開第１９９３／０１１６１号； Hudson et al., Nat. Med. 9:129-134 (2003); 及びHollinger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 6444-6448 (1993)を参照。トリアボディ及びテトラボディもまた Hudson et al., Nat. Med. 9:129-134 (2003）に記載されている。
【０１５４】
単一ドメイン抗体は、抗体の重鎖可変ドメインの全て又は一部、又は軽鎖可変ドメインの全て又は一部を含む抗体断片である。幾つかの実施態様において、単一ドメイン抗体は、ヒト単一ドメイン抗体である(Domantis, Inc., Waltham, MA; 例えば、米国特許第６，２４８，５１６ Ｂ１号を参照）。
【０１５５】
抗体断片は様々な技術で作成することができ、限定されないが、本明細書に記載するように、インタクトな抗体の分解、並びに組換え宿主細胞（例えば、大腸菌やファージ）による生産を含む。
【０１５６】
３．キメラ及びヒト化抗体
幾つかの実施態様において、本明細書に記載される薬学的製剤の抗ｃ−ｍｅｔ抗体はキメラ抗体である。所定のキメラ抗体は、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号、及びMorrison et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81:6851-6855 (1984))に記載されている。一例において、キメラ抗体は、非ヒト可変領域（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、又はサル等の非ヒト霊長類由来の可変領域）及びヒト定常領域を含む。更なる例において、キメラ抗体は、クラスまたはサブクラスが親抗体のものから変更された「クラススイッチ」抗体である。キメラ抗体は、その抗原結合断片を含む。
【０１５７】
幾つかの実施態様において、キメラ抗体は、ヒト化抗体である。典型的には、非ヒト抗体は、ヒトに対する免疫原性を低減するために、親の非ヒト抗体の特異性と親和性を保持したまま、ヒト化されている。一般に、ヒト化抗体は、ＨＶＲ、例えば、ＣＤＲ（またはその一部）が、非ヒト抗体から由来し、ＦＲ（またはその一部）がヒト抗体配列に由来する、一以上の可変ドメインを含む。ヒト化抗体はまた、任意で、ヒト定常領域の少なくとも一部をも含む。幾つかの実施態様において、ヒト化抗体の幾つかのＦＲ残基は、例えば抗体特異性又は親和性を回復もしくは改善するめに、非ヒト抗体（例えば、ＣＤＲ残基が由来する抗体）由来の対応する残基で置換されている。
【０１５８】
ヒト化抗体およびそれらの製造方法は、例えば、Almagro and Fransson, Front. Biosci. 13:1619-1633 (2008)に総説され、更に、 Riechmann et al., Nature 332:323-329 (1988); Queen et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 86:10029-10033 (1989); 米国特許第５，８２１，３３７号、第７，５２７，７９１号、第６，９８２，３２１号及び第７，０８７，４０９号；Kashmiri et al., Methods 36:25-34 (2005) （ＳＤＲ（ａ−ＨＶＲ）グラフティングを記述）；Padlan, Mol. Immunol. 28:489-498 (1991) （「リサーフェシング」を記述）；Dall'Acqua et al., Methods 36:43-60 (2005) （「ＦＲシャッフリング」を記述）；及びOsbourn et al., Methods 36:61-68 (2005) 及びKlimka et al., Br. J. Cancer, 83:252-260 (2000) （ＦＲのシャッフリングへの「誘導選択」アプローチを記述）に記載されている。
【０１５９】
ヒト化に用いられ得るヒトフレームワーク領域は、限定されないが、「ベストフィット」法を用いて選択されるフレームワーク領域（例えば、Sims et al. J. Immunol. 151:2296 (1993)）；軽鎖または重鎖の可変領域の特定のサブグループのヒト抗体のコンセンサス配列由来のフレームワーク領域（例えば、Carter et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:4285 (1992)；及びPresta et al. J. Immunol., 151:2623 (1993)を参照）；ヒト成熟（体細胞変異）フレームワーク領域またはヒト生殖細胞系フレームワーク領域（例えば、Almagro and Fransson, Front. Biosci. 13:1619-1633 (2008)を参照）；及びＦＲライブラリスクリーニング由来のフレームワーク領域（例えば、Baca et al., J. Biol. Chem. 272:10678-10684 (1997)及び Rosok et al., J. Biol. Chem. 271:22611-22618 (1996)を参照）を含む。
【０１６０】
４．ヒト抗体
幾つかの実施態様において、本明細書に記載される薬学的製剤の抗ｃ−ｍｅｔ抗体はヒト抗体である。ヒト抗体は、当技術分野で公知の様々な技術を用いて生産することができる。ヒト抗体は一般的にvan Dijk and van de Winkel, Curr. Opin. Pharmacol. 5: 368-74 (2001)及びLonberg, Curr. Opin. Immunol. 20:450-459 (2008)に記載されている。
【０１６１】
ヒト抗体は、抗原チャレンジに応答して、インタクトなヒト抗体又はヒト可変領域を持つ又はインタクトな抗体を産生するように改変されたトランスジェニック動物に、免疫原を投与することにより調製することができる。このような動物は、典型的には、内因性免疫グロブリン遺伝子座を置換するか、又は染色体外に存在するかもしくは動物の染色体にランダムに組み込まれている、ヒト免疫グロブリン遺伝子座の全てまたは一部を含む。このようなトランスジェニックマウスでは、内因性免疫グロブリン遺伝子座は、一般的に不活性化される。トランスジェニック動物からヒト抗体を得るための方法の総説については、 Lonberg, Nat. Biotech. 23:1117-1125 (2005)を参照。また、例えば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥＴＭ技術を記載している、米国特許第６，０７５，１８１号及び６，１５０，５８４号；ＨｕＭａｂ（登録商標）技術を記載している米国特許第５，７７０，４２９号；Ｋ−Ｍ ＭＯＵＳＥ（登録商標）技術を記載している米国特許第７，０４１，８７０号及び、ＶｅｌｏｃｉＭｏｕｓｅ（登録商標）技術を記載している米国特許出願公開第２００７／００６１９００号）も参照のこと。このような動物で生成されたインタクトな抗体由来のヒト可変領域は、例えば、異なるヒト定常領域と組み合わせることにより、更に改変される可能性がある。
【０１６２】
ヒト抗体は、ハイブリドーマベース法によって作成することができる。ヒトモノクローナル抗体の産生のためのヒト骨髄腫及びマウス−ヒトヘテロ細胞株が記載されている。（例えば、Kozbor J. Immunol., 133: 3001 (1984); Brodeur et al., Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications, 頁51-63 (Marcel Dekker, Inc., New York, 1987); 及びBoerner et al., J. Immunol., 147: 86 (1991)を参照）。ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術によって生成されたヒト抗体は、Li et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 103:3557-3562 (2006)に記載されている。更なる方法は、例えば、米国特許第７，１８９，８２６号（ハイブリドーマ細胞株からのモノクローナルヒトＩｇＭ抗体の産生を記載している）及びNi, Xiandai Mianyixue, 26(4):265-268 (2006) （ヒト−ヒトハイブリドーマを記載している）に記載されたものを含む。ヒトハイブリドーマ技術（トリオーマ技術）もまた、Vollmers and Brandlein, Histology and Histopathology, 20(3):927-937 (2005) 及びVollmers and Brandlein, Methods and Findings in Experimental and Clinical Pharmacology, 27(3):185-91 (2005)に記載される。
【０１６３】
ヒト抗体はまた、ヒト由来のファージディスプレイライブラリーから選択されたＦｖクローン可変ドメイン配列を単離することによって生成され得る。このような可変ドメイン配列は、次に所望のヒト定常ドメインと組み合わせてもよい。抗体ライブラリーからヒト抗体を選択するための技術が、以下に説明される。
【０１６４】
５．ライブラリー由来の抗体
本明細書に記載される薬学的製剤の抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、所望の活性または活性を有する抗体についてコンビナトリアルライブラリーをスクリーニングすることによって単離することができる。例えば、様々な方法が、ファージディスプレイライブラリーを生成し、所望の結合特性を有する抗体についてのライブラリーをスクリーニングするために、当該技術分野で知られている。そのような方法は、例えば、Hoogenboom et al. in Methods in Molecular Biology 178:1-37 (O'Brien et al., ed., Human Press, Totowa, NJ, 2001)に総説され、更に、例えば、McCafferty et al., Nature 348:552-554; Clackson et al., Nature 352: 624-628 (1991); Marks et al., J. Mol. Biol. 222: 581-597 (1992); Marks and Bradbury, in Methods in Molecular Biology 248:161-175 (Lo, ed., Human Press, Totowa, NJ, 2003); Sidhu et al., J. Mol. Biol. 338(2): 299-310 (2004); Lee et al., J. Mol. Biol. 340(5): 1073-1093 (2004); Fellouse, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101(34): 12467-12472 (2004); 及びLee et al., J. Immunol. Methods 284(1-2): 119-132(2004)に概説されている。
【０１６５】
幾つかのファージディスプレイ法において、ＶＨ及びＶＬ遺伝子のレパートリーがポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）により個別にクローニングされ、ファージライブラリーにランダムに再結合され、その後、Winter et al., Ann. Rev. Immunol., 12: 433-455 (1994)に記載されるように、抗原結合ファージについてスクリーニングすることができる。ファージは、通常、抗体断片を、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片、またはＦａｂ断片のいずれかとして提示する。免疫された起源からのライブラリーは、ハイブリドーマを構築する必要性を伴うことなく免疫原に高親和性抗体を提供する。代わりに、Griffiths et al., EMBO J, 12: 725-734 (1993)に記載されるように、ナイーブなレパートリーが、任意の免疫感作無しで、広範囲の非自己抗原及び自己抗原に対して、抗体の単一起源を提供するために、（例えば、ヒトから）クローン化することができる。最後に、ナイーブなライブラリはまた、Hoogenboom and Winter, J. Mol. Biol., 227: 381-388 (1992)に記載されるように、非常に可変なＣＤＲ３領域をコードし、インビトロで再構成を達成するために、幹細胞由来の未転位Ｖ遺伝子セグメントをクローニングし、ランダム配列を含むＰＣＲプライマーを使用することにより合成することができる。ヒト抗体ファージライブラリーを記述する特許公報は、例えば、米国特許第５，７５０，３７３号、及び米国特許出願公開第２００５／００７９５７４号、第２００５／０１１９４５５号、第２００５／０２６６０００号、第２００７／０１１７１２６号、第２００７／０１６０５９８号、第２００７／０２３７７６４号、第２００７／０２９２９３６号及び第２００９／０００２３６０を含む。
【０１６６】
ヒト抗体ライブラリーから単離された抗体又は抗体断片は、本明細書でヒト抗体又はヒト抗体の断片とみなされる。
【０１６７】
６．多重特異性抗体
幾つかの実施態様において、本明細書に記載される薬学的製剤の抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、多重特異性抗体、例えば、二重特異性抗体である。多重特異性抗体は、少なくとも二つの異なる部位に対して結合特異性を有するモノクローナル抗体である。幾つかの実施態様において、結合特異性の一つは抗原に対してであり、他は、任意の他の抗原に対してである。幾つかの実施態様において、二重特異性抗体は、抗原の２つの異なるエピトープに結合することができる。二重特異性抗体はまた、抗原を発現する細胞に細胞傷害性薬物を局所化するために用いることができる。二重特異性抗体は、全長抗体又は抗体断片として調製することができる。
【０１６８】
多重特異性抗体を作製するための技術は、限定されないが、異なる特異性を有する２つの免疫グロブリン重鎖−軽鎖対の組換え共発現（Milstein and Cuello, Nature 305: 537 (1983)）、国際公開第９３／０８８２９号、及びTraunecker et al., EMBO J. 10: 3655 (1991)を参照）及び「ノブ・イン・ホール（knob-in-hole）」エンジニアリング（例えば、米国特許第５，７３１，１６８号を参照）を含む。多重特異抗体はまた、抗体のＦｃ−ヘテロ２量体分子を作成するための静電ステアリング効果を操作すること（国際公開第２００９／０８９００４Ａ１号）；２つ以上の抗体又は断片を架橋すること（例えば米国特許第４，６７６，９８０号、及びBrennan et al., Science, 229: 81 (1985)を参照）；２重特異性抗体を生成するためにロイシンジッパーを使用すること（例えば、Kostelny et al., J. Immunol., 148(5):1547-1553 (1992)を参照）；二重特異性抗体フラグメントを作製するため、「ダイアボディ」技術を使用すること（例えば、Hollinger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:6444-6448 (1993)を参照）；単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）ダイマーを使用すること（例えば、Gruber et al., J. Immunol., 152:5368 (1994)を参照）；及び、例えばTutt et al. J. Immunol. 147: 60 (1991)に記載されているように、三重特異性抗体を調製することによって作成することができる。
【０１６９】
「オクトパス抗体」を含む、３つ以上の機能性抗原結合部位を持つ改変抗体もまた本明細書に含まれる（例えば、米国特許出願公開第２００６／００２５５７６Ａ１号を参照）。
【０１７０】
本明細書中の抗体又は断片はまた、ｃ−ｍｅｔ並びにその他の異なる抗原（例えば米国特許出願公開第２００８／００６９８２０号参照）に結合する抗原結合部位を含む、「２重作用（Dual Acting）ＦＡｂ」又は「ＤＡＦ」を含む。
【０１７１】
７．抗体変異体
幾つかの実施態様において、本明細書に記載される薬学的製剤で使用のための抗ｃ−ｍｅｔ抗体のアミノ酸配列変異体が意図される。例えば、抗体の結合親和性及び／又は他の生物学的特性を改善することが望まれ得る。抗体のアミノ酸配列変異体は、抗体をコードするヌクレオチド配列に適切な改変を導入することにより、又はペプチド合成によって調製することができる。このような改変は、例えば、抗体のアミノ酸配列内における、残基の欠失、及び／又は挿入及び／又は置換を含む。最終コンストラクトが所望の特性、例えば、抗原結合を有していることを条件として、欠失、挿入、及び置換の任意の組み合わせが、最終コンストラクトに到達させるために作成され得る。
【０１７２】
ａ．置換、挿入、及び欠失変異体
幾つかの実施態様において、本明細書に記載される薬学的製剤で使用のための、一以上のアミノ酸置換を有する抗ｃ−ｍｅｔ抗体変異体が提供される。置換型変異誘発の対象となる部位は、ＨＶＲとＦＲを含む。保存的置換は、表１の「保存的置換」の見出しの下に示されている。より実質的な変更が、表１の「典型的な置換」の見出しの下に与えられ、アミノ酸側鎖のクラスを参照して以下に更に説明される。アミノ酸置換は、目的の抗体に導入することができ、その産物は、所望の活性、例えば、抗原結合の保持／改善、免疫原性の減少、又はＡＤＣＣ又はＣＤＣの改善についてスクリーニングされる。
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【０１７３】
アミノ酸は共通の側鎖特性に基づいてグループに分けることができる：
（１）  疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
（２）  中性の親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
（３）  酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
（４）  塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
（５）  鎖配向に影響する残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
（６）  芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
【０１７４】
非保存的置換は、これらの分類の一つのメンバーを他の分類に交換することを必要とするであろう。
【０１７５】
置換変異体の一つのタイプは、親抗体（例えば、ヒト化又はヒト抗体など）の一以上の高頻度可変領域残基の置換を含む。一般的には、更なる研究のために選択され得られた変異体は、親抗体と比較して、特定の生物学的特性の改変（例えば、改善）（例えば、親和性の増加、免疫原性を減少）を有し、及び／又は親抗体の特定の生物学的特性を実質的に保持しているであろう。典型的な置換型変異体は、親和性成熟抗体であり、例えば、本明細書に記載されるファージディスプレイに基づく親和性成熟技術を用いて、簡便に生成され得る。簡潔に言えば、一つ以上のＨＶＲ残基が変異し、変異体抗体は、ファージ上に表示され、特定の生物学的活性（例えば、結合親和性）についてスクリーニングされる。
【０１７６】
変更（例えば、置換）は、例えば抗体の親和性を向上させるために、ＨＶＲで行うことができる。このような変更は、ＨＶＲの「ホットスポット」、すなわち、体細胞成熟過程中に高頻度で変異を受けるコドンにコードされた残基で（例えばChowdhury, Methods Mol. Biol. 207:179-196 (2008)を参照）、及び／又はＳＤＲ（ａ−ＣＤＲ）で行うことができ、得られた変異体ＶＨ又はＶＬが結合親和性について試験される。二次ライブラリから構築し選択し直すことによる親和性成熟が、例えばHoogenboom et al. in Methods in Molecular Biology 178:1-37 (O'Brien et al., ed., Human Press, Totowa, NJ, (2001)に記載されている。親和性成熟の幾つかの実施態様において、多様性が、種々の方法（例えば、変異性ＰＣＲ、鎖シャッフリング、又はオリゴヌクレオチド指定突然変異誘発）のいずれかにより、成熟のために選択された可変遺伝子中に導入される。次いで、二次ライブラリーが作成される。次いで、ライブラリーは、所望の親和性を持つ抗体変異体を同定するためにスクリーニングされる。多様性を導入するするもう一つの方法は、いくつかのＨＶＲ残基（例えば、一度に４から６残基）がランダム化されたＨＶＲ指向のアプローチを伴う。抗原結合に関与するＨＶＲ残基は、例えばアラニンスキャニング突然変異誘発、またはモデリングを用いて、特異的に同定され得る。ＣＤＲ−Ｈ３及びＣＤＲ−Ｌ３がしばしば標的にされる。
【０１７７】
幾つかの実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、そのような改変が抗原に結合する抗体の能力を実質的に低下させない限りにおいて、一以上のＨＶＲ内で生じる可能性がある。例えば、実質的に結合親和性を低下させない保存的改変（例えば本明細書で与えられる保存的置換）をＨＶＲ内で行うことができる。このような改変は、ＨＶＲ「ホットスポット」又はＳＤＲの外側であってもよい。上記に与えられた変異体ＶＨ又はＶＬ配列の幾つかの実施態様において、各ＨＶＲは不変であるか、又はわずか１個、２個または３個のアミノ酸置換が含まれているかの何れかである。
【０１７８】
突然変異誘発のために標的とすることができる抗体の残基又は領域を同定するための有用な方法は、Cunningham and Wells (1989) Science, 244:1081-1085により説明されるように、「アラニンスキャニング変異誘発」と呼ばれる。この方法では、標的残基の残基またはグループ（例えば、ａｒｇ、ａｓｐ、ｈｉｓ、ｌｙｓ及びｇｌｕなどの荷電残基）が同定され、抗原と抗体との相互作用が影響を受けるかどうかを判断するために、中性または負に荷電したアミノ酸（例えば、アラニンまたはポリアラニン）に置換される。更なる置換が、最初の置換に対する機能的感受性を示すアミノ酸の位置に導入され得る。代わりに、又は更に、抗原抗体複合体の結晶構造が、抗体と抗原との接触点を同定する。そのような接触残基及び隣接残基が、置換の候補として標的とされるか又は排除され得る。変異体はそれらが所望の特性を含むかどうかを決定するためにスクリーニングされ得る。
【０１７９】
アミノ酸配列挿入は、一残基から百以上の残基を含有するポリペプチド長にわたるアミノ及び／又はカルボキシル末端融合、並びに単一または複数のアミノ酸残基の配列内挿入を含む。末端挿入の例としては、Ｎ末端メチオニン残基を有する抗体が含まれる。抗体分子の他の挿入変異体は、酵素に対する抗体のＮ末端またはＣ末端への融合（例えばＡＤＥＰＴの場合）、または抗体の血清半減期を増加させるポリペプチドへの融合を含む。
【０１８０】
ｂ．グリコシル化変異体
幾つかの実施態様において、本明細書で提供される抗体は、抗体がグリコシル化される程度を増加または減少するように改変される。抗体へのグリコシル化部位の付加または欠失は、一以上のグリコシル化部位が作成または削除されるようにアミノ酸配列を変えることによって簡便に達成することができる。
【０１８１】
抗体がＦｃ領域を含む場合には、それに付着する糖を変えることができる。哺乳動物細胞によって生成された天然型抗体は、典型的には、Ｆｃ領域のＣＨ２ドメインのＡｓｎ２９７にＮ−結合により一般的に付着した分岐鎖、二分岐オリゴ糖を含んでいる。例えばWright et al. TIBTECH 15:26-32 (1997)を参照。オリゴ糖は、様々な炭水化物、例えば、二分岐オリゴ糖構造の「幹」のＧｌｃＮＡｃに結合した、マンノース、Ｎ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、ガラクトース、シアル酸、並びにフコースを含み得る。幾つかの実施態様において、抗体のオリゴ糖の改変は、一定の改善された特性を有する抗体変異体を作成するために行われ得る。
【０１８２】
幾つかの実施態様において、抗体変異体は、Ｆｃ領域に（直接または間接的に）付着されたフコースを欠いた糖鎖構造を有して提供される。例えば、このような抗体のフコース量は、１％から８０％、１％から６５％、５％から６５％、または２０％から４０％であり得る。フコースの量は、例えば、国際公開第２００８／０７７５４６号に記載されているように、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析法によって測定されるＡｓｎ２９７に付着しているすべての糖構造の合計（例えば、コンプレックス、ハイブリッド及び高マンノース構造）に対して、Ａｓｎ２９７の糖鎖中のフコースの平均量を計算することによって決定される。Ａｓｎ２９７は、Ｆｃ領域（Ｆｃ領域残基のＥＵ番号付け）でおよそ２９７の位置に位置するアスパラギン残基を指し、しかし、Ａｓｎ２９７もまた位置２９７の上流または下流のおよそ±３アミノ酸に、すなわち抗体の軽微な配列変異に起因して、位置２９４と３００の間に配置され得る。このようなフコシル化変異体はＡＤＣＣ機能を改善させた可能性がある。例えば、米国特許出願公開第２００３／０１５７１０８号（Presta, L.）；米国特許出願公開第２００４／００９３６２１号（協和発酵工業株式会社）を参照。「フコース非修飾」又は「フコース欠損」抗体変異体に関連する出版物の例としては、米国特許出願公開第２００３／０１５７１０８号、国際公開第２０００／６１７３９号、国際公開第２００１／２９２４６号、米国特許出願公開第２００３／０１１５６１４号、米国特許出願公開第２００２／０１６４３２８号、米国特許出願公開第２００４／００９３６２１号、米国特許出願公開第２００４／０１３２１４０号、米国特許出願公開第２００４／０１１０７０４号、米国特許出願公開第２００４／０１１０２８２号、米国特許出願公開第２００４／０１０９８６５号、国際公開第２００３／０８５１１９号、国際公開第２００３／０８４５７０号、国際公開第２００５／０３５５８６号、国際公開第２００５／０３５７７８号、国際公開第２００５／０５３７４２号、国際公開第２００２／０３１１４０号、Okazaki et al. J. Mol. Biol. 336:1239-1249 (2004); Yamane-Ohnuki et al. Biotech. Bioeng. 87: 614 (2004)が含まれる。非フコシル化抗体を産生する能力を有する細胞株の例としては、タンパク質フコシル化を欠損しているＬｅｃ１３ ＣＨＯ細胞（Ripka et al. Arch. Biochem. Biophys. 249:533-545 (1986)；米国特許出願公開第２００３／０１５７１０８ Ａ１号， Presta, L；及び国際公開第２００４／０５６３１２ Ａ１号, Adams et al., 特に第１１章）、及びノックアウト細胞株、アルファ−１、６−フコシルトランスフェラーゼ遺伝子、ＦＵＴ８、ノックアウトＣＨＯ細胞（例えば、Yamane-Ohnuki et al. Biotech. Bioeng. 87: 614 (2004); Kanda, Y. et al., Biotechnol. Bioeng., 94(4):680-688 (2006)；及び国際公開第２００３／０８５１０７号を参照）を含む。
【０１８３】
抗体変異体が、例えば、抗体のＦｃ領域に結合した二分岐オリゴ糖がＧｌｃＮＡｃによって二分されている二分オリゴ糖とともに更に与えられる。このような抗体変異体はフコシル化を減少させ、及び／又はＡＤＣＣ機能を改善している可能性がある。そのような抗体変異体の例は、例えば、国際公開第２００３／０１１８７８号（Jean-Mairettら）；米国特許第６，６０２，６８４号（Umanaら）；及び米国特許出願公開第２００５／０１２３５４６号（Umanaら）に記載されている。Ｆｃ領域に結合したオリゴ糖内に少なくとも１つのガラクトース残基を持つ抗体変異体も提供される。このような抗体変異体はＣＤＣ機能を改善させた可能性がある。このような抗体変異体は、例えば、国際公開第１９９７／３００８７号（Patelら）；国際公開第１９９８／５８９６４号（Raju, S.）；及び国際公開第１９９９／２２７６４号（Raju, S.）に記載されている。
【０１８４】
ｃ．Ｆｃ領域変異体
幾つかの実施態様において、１つまたは複数のアミノ酸改変を、本明細書に記載される薬学的製剤の抗ｃ−ｍｅｔ抗体のＦｃ領域に導入することができ、それによってＦｃ領域変異体を生成する。Ｆｃ領域の変異体は、１つまたは複数のアミノ酸位置においてアミノ酸修飾（例えば置換）を含むヒトＦｃ領域の配列（例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４のＦｃ領域）を含んでもよい。
【０１８５】
幾つかの実施態様において、考慮されるのは、インビボにおける抗体の半減期が重要であるが、ある種のエフェクター機能（例えば補体およびＡＤＣＣなど）が不要または有害である用途のための望ましい候補とならしめる、全てではないが一部のエフェクター機能を有する抗体変異体である。インビトロ及び／又はインビボでの細胞毒性アッセイを、ＣＤＣ活性及び／又はＡＤＣＣ活性の減少／枯渇を確認するために行うことができる。例えば、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）結合アッセイは、抗体がＦｃγＲ結合を欠くが（それゆえ、おそらくＡＤＣＣ活性を欠く）、ＦｃＲｎ結合能力を保持していることを確認するために行うことができる。ＡＤＣＣ、ＮＫ細胞を媒介する初代細胞は、ＦｃγＲＩＩＩのみを発現するが、単球はＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ及びＦｃγＲＩＩＩを発現する。造血細胞におけるＦｃＲの発現は、Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol. 9:457-492 (1991)の４６４ページの表３に要約されている。目的の分子のＡＤＣＣ活性を評価するためのインビトロアッセイの非限定的な例は、米国特許第５，５００，３６２号（例えば、Hellstrom, I. et al. Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 83:7059-7063 (1986)を参照）及びHellstrom, I et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 82:1499-1502 (1985); 5,821,337 （例えば、Bruggemann, M. et al., J. Exp. Med. 166:1351-1361 (1987)を参照）に説明される。あるいは、非放射性アッセイ法を用いることができる（例えば、フローサイトメトリー用のＡＣＴＩＴＭ非放射性細胞傷害性アッセイ（CellTechnology, Inc. Mountain View, CA；及びCytoTox 96（登録商標）非放射性細胞毒性アッセイ(Promega, Madison, WI）を参照。このようなアッセイに有用なエフェクター細胞には、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞が含まれる。あるいは、又は更に、目的の分子のＡＤＣＣ活性は、Clynes et al., PNAS USA 95:652-656 (1998)に開示されるように、インビボで、例えば動物モデルにおいて評価することができる。Ｃ１ｑ結合アッセイはまた、抗体が体Ｃ１ｑを結合することができないこと、したがって、ＣＤＣ活性を欠いていることを確認するために行うことができる。例えば、国際公開第２００６／０２９８７９号及び国際公開第２００５／１００４０２号のＣ１ｑおよびＣ３ｃ結合ＥＬＩＳＡを参照。補体活性化を評価するために、ＣＤＣアッセイを行うことができる（例えば、Gazzano-Santoro et al., J. Immunol. Methods 202:163 (1996); Cragg, M.S. et al., Blood 101:1045-1052 (2003);及びCragg, M.S. and M.J. Glennie, Blood 103:2738-2743 (2004)を参照）。ＦｃＲｎ結合、及びインビボでのクリアランス／半減期の測定はまた、当該分野で公知の方法を用いて行うことができる（例えば、Petkova, S.B. et al., Int'l. Immunol. 18(12):1759-1769 (2006)を参照）。
【０１８６】
エフェクター機能が減少した抗体は、Ｆｃ領域の残基２３８、２６５、２６９、２７０、２９７、３２７、３２９の一つ以上の置換を有するものが含まれる（米国特許第６７３７０５６号）。そのようなＦｃ変異体は、残基２６５及び２９７のアラニンへの置換を有する、いわゆる「ＤＡＮＡ」Ｆｃ変異体を含む、アミノ酸位置２６５、２６９、２７０、２９７及び３２７の２以上での置換を有するＦｃ変異体を含む（米国特許第７，３３２，５８１号）。
【０１８７】
ＦｃＲへの結合を改善又は減少させた特定の抗体変異体が記載されている。（例えば、米国特許第６，７３７，０５６号；国際公開第２００４／０５６３１２号、及びShields et al., J. Biol. Chem. 9(2): 6591-6604 (2001)を参照）。
【０１８８】
幾つかの実施態様において、抗体変異体はＡＤＣＣを改善する１つまたは複数のアミノ酸置換、例えば、Ｆｃ領域の位置２９８、３３３、及び／又は３３４における置換（ＥＵの残基番号付け）を含む。
【０１８９】
幾つかの実施態様において、改変された（すなわち改善されたか減少した）Ｃ１ｑ結合及び／又は補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を生じる、Ｆｃ領域における改変がなされ、例えば、米国特許第６，１９４，５５１号、国際公開第９９／５１６４２号、及びIdusogie et al. J. Immunol. 164: 4178-4184 (2000)に説明される。
【０１９０】
増加した半減期を持ち、胎仔への母性ＩｇＧの移送を担う、新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）への結合が改善された抗体(Guyer et al., J. Immunol. 117:587 (1976) 及びKim et al., J. Immunol. 24:249 (1994))が、米国特許出願公開第２００５／００１４９３４Ａ１号（Hinton et al.）に記載されている。これらの抗体は、ＦｃＲｎへのＦｃ領域の結合を改善する一つまたは複数の置換を有するＦｃ領域を含む。このようなＦｃ変異体は、Ｆｃ領域の残基：２３８、２５６、２６５、２７２、２８６、３０３、３０５、３０７、３１１、３１２、３１７、３４０、３５６、３６０、３６２、３７６、３７８、３８０、３８２、４１３、４２４又は４３４の一以上の置換、例えば、Ｆｃ領域の残基４３４の置換を有するものが含まれる（米国特許第７，３７１，８２６号）。
【０１９１】
Duncan & Winter, Nature 322:738-40 (1988); 米国特許第５，６４８，２６０号；米国特許第５，６２４，８２１号；及び、Ｆｃ領域の変異体の他の例に関しては国際公開第９４／２９３５１号も参照のこと。
【０１９２】
ｄ．システイン操作抗体変異体
幾つかの実施態様において、本明細書に記載される薬学的製剤の抗ｃ−ｍｅｔ抗体の一以上の残基がシステイン残基で置換されている、システイン改変抗体、例えば、「ｔｈｉｏＭＡｂｓ」を作成することが望まれ得る。特定の実施態様において、置換された残基は、抗体のアクセス可能な部位で生じる。それらの残基をシステインで置換することにより、反応性チオール基は、それによって抗体のアクセス可能な部位に配置され、本明細書中でさらに記載されるように、イムノコンジュゲーを作成するために、例えば薬物部分またはリンカー−薬剤部分などの他の部分に抗体をコンジュゲートするために使用することができる。ある実施態様において、一以上の以下の残基がシステインで置換され得る：軽鎖のＶ２０５（Kabatの番号付け）；重鎖のＡ１１８（EU番号付け）；及び重鎖Ｆｃ領域のＳ４００（EU番号付け）。システイン改変抗体は、例えば、米国特許第７５２１５４１号に記載のように生成され得る。
【０１９３】
ｅ．抗体誘導体
幾つかの実施態様において、本明細書に記載される薬学的製剤の抗ｃ−ｍｅｔ抗体は、当技術分野で知られ容易に入手される追加の非タンパク質部分を含むように更に改変することができる。抗体の誘導体化に適した部分としては、限定されないが、水溶性ポリマーを含む。水溶性ポリマーの非限定的な例は、限定されないが、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコールの共重合体、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ−１，３−ジオキソラン、ポリ−１，３，６−トリオキソラン、エチレン／無水マレイン酸共重合体、ポリアミノ酸（単独重合体又はランダム共重合体の何れか）及びデキストラン又はポリ（ｎ−ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロピレングリコール単独重合体、プロピレンオキシド／エチレンオキシド共重合体、ポリオキシエチル化ポリオール（例えばグリセロール）、ポリビニルアルコール及びこれらの混合物を包含する。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドはその水中での安定性に起因して製造における利点を有し得る。ポリマーは何れかの分子量のものであってよく、そして分枝鎖又は未分枝鎖であってよい。抗体に結合するポリマーの数は変動してよく、そして、一以上の重合体が結合する場合は、それらは同じか又は異なる分子であることができる。一般的に、誘導体化に使用するポリマーの数及び／又は種類は、限定されないが、向上させるべき抗体の特定の特性又は機能、抗体誘導体が限定された条件下で治療に使用されるのか等を含む考慮に基づいて決定することができる。
【０１９４】
別の実施態様において、放射線への曝露によって選択的に加熱され得る抗ｃ−ｍｅｔ抗体と非タンパク質部分とのコンジュゲートが提供される。幾つかの実施態様において、非タンパク質部分はカーボンナノチューブである（Kam et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 102: 11600-11605 (2005）。放射線は、任意の波長であって良いが、限定されないものの、通常の細胞に害を与えないが、抗体−非タンパク質部分の近位細胞が死滅される温度に非タンパク質部分を加熱する波長が含まれる。
【０１９５】
８．イムノコンジュゲート
化学療法剤又は薬物、成長抑制剤、毒素（例えば、タンパク質毒素、細菌、真菌、植物、または動物起源の酵素活性毒素、又はそれらの断片）、又は放射性同位元素など、一以上の細胞傷害性薬物にコンジュゲートした抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含むイムノコンジュゲートが本明細書に記載される薬学的製剤の使用のために考慮される。
【０１９６】
幾つかの実施態様において、イムノコンジュゲートは、抗体−薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）であって、そこでは抗体は、限定されないが、メイタンシノイド（米国特許第５２０８０２０号、第５４１６０６４号及び欧州特許ＥＰ０ ４２５２３５ Ｂ１を参照）；モノメチルアウリスタチン薬物部分ＤＥ及びＤＦ（ＭＭＡＥ及びＭＭＡＦ）（米国特許第５６３５４８３号及び５７８０５８８号及び７４９８２９８号を参照）などのアウリスタチン；ドラスタチン、カリケアマイシン又はその誘導体（米国特許第５７１２３７４号、第５７１４５８６号、第５７３９１１６号、第５７６７２８５号、第５７７０７０１号、第５７７０７１０号、第５７７３００１号、及び第５８７７２９６号を参照；Hinman et al., Cancer Res. 53:3336-3342 (1993);及びLode et al., Cancer Res. 58:2925-2928 (1998)); ダウノマイシン又はドキソルビシンなどのアントラサイクリン(Kratz et al., Current Med. Chem. 13:477-523 (2006); Jeffrey et al., Bioorganic & Med. Chem. Letters 16:358-362 (2006); Torgov et al., Bioconj. Chem. 16:717-721 (2005); Nagy et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97:829-834 (2000); Dubowchik et al., Bioorg. & Med. Chem. Letters 12:1529-1532 (2002); King et al., J. Med. Chem. 45:4336-4343 (2002);及び米国特許第６，６３０，５７９号を参照）；メトトレキサート、ビンデシン；ドセタキセル、パクリタキセル、ラロタキセル、テセタキセル、及びオルタタキセルなどのタキサン；トリコテセン；及びＣＣ１０６５を含む一つ以上の薬物とコンジュゲートしている。
【０１９７】
幾つかの実施態様において、イムノコンジュゲートは、酵素的に活性な毒素又はその断片にコンジュゲートした、本明細書に記載の抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含み、限定されないが、ジフテリアＡ鎖、ジフテリア毒素の非結合活性断片、（緑膿菌からの）外毒素Ａ鎖、リシンＡ鎖、アブリンＡ鎖、モデクシン（modeccin）Ａ鎖、アルファ−サルシン、アレウリテス・フォーディ（Aleurites fordii）タンパク質、ジアンチン（dianthin）タンパク質、フィトラカ・アメリカーナ（Phytolaca americana）タンパク質（ＰＡＰＩ、ＰＡＰＩＩ、及びＰＡＰ−Ｓ）、モモルディカ・チャランチア（momordica charantiａ）インヒビター、クルシン（curcin）、クロチン（crotin）、サパオナリア・オフィシナリス（sapaonaria oficinalis）インヒビター、ゲロニン（gelonin）、ミトゲリン（mitogellin）、レストリクトシン（restrictocin）、フェノマイシン（phenomycin）、エノマイシン（enomycin）及びトリコテセン（tricothecene）が含まれる。
【０１９８】
幾つかの実施態様において、イムノコンジュゲートは、放射性コンジュゲートを形成するために放射性原子にコンジュゲートした本明細書に記載されるような抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む。様々な放射性同位体が放射性コンジュゲートの生産のために入手可能である。例としては、Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｒｅ１８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、Ｂｉ２１２、Ｐ３２、Ｐｂ２１２及びＬｕの放射性同位体を含む。検出のために放射性複合体を使用するとき、それはシンチグラフィー試験のための放射性原子、例えばＴｃ９９ｍ又はＩ１２３、又は核磁気共鳴（ＮＭＲ）画像化（磁気共鳴画像化ＭＲＩとしても知られている）のためのスピン標識、例えば再びヨウ素−１２３、ヨウ素−１３１、インジウム−１１１、フッ素−１９、炭素−１３、窒素−１５、酸素−１７、ガドリニウム、マンガン又は鉄を含んでよい。
【０１９９】
抗ｃ−ｍｅｔ抗体と細胞傷害性薬物のコンジュゲートは、様々な二官能性タンパク質カップリング剤、例えば、Ｎ−スクシンイミジル３−（２−ピリジルチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）、スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート（ＳＭＣＣ）、イミノチオラン（ＩＴ）、イミドエステルの２官能性誘導体（例えばジメチルアジピミデートＨＣｌ）、活性エステル（例えばジスクシンイミジルズベレート）、アルデヒド（例えばグルタルアルデヒド）、ビス−アジド化合物（例えばビス（ｐ−アジドベンゾイル）ヘキサンジアミン）、ビスジアゾニウム誘導体（例えばビス（ｐ−ジアゾニウムベンゾイル）エチレンジアミン）、ジイソシアネート（例えばトルエン２，６−ジイソシアネート）及びビス活性フッ素化合物（例えば１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼン）などを使用して作成され得る。Vitetta et al., Science 238:1098 (1987)に記載されるように、例えば、リシンイムノトキシンを調製することができる。カーボン−１４−標識１−イソチオシアナトベンジル−３−メチルジエチレントリアミン五酢酸（ＭＸ−ＤＴＰＡ）は、放射性ヌクレオチドの抗体へのコンジュゲーションのためのキレート剤の例である国際公開第９４／１１０２６号を参照。リンカーは、細胞中に細胞毒性薬物の放出を容易にする「切断可能なリンカー」であり得る。例えば、酸に不安定なリンカー、ペプチダーゼ過敏性リンカー、光解離性リンカー、ジメチルリンカー又はジスルフィド含有リンカー（Chari et al., Cancer Res. 52:127-131 (1992);米国特許第５，２０８，０２０号）が使用され得る。
【０２００】
本明細書において、イムノコンジュゲート又はＡＤＣは、限定されないが、市販の（例えばPierce Biotechnology, Inc., Rockford, IL., U.S.Aからの）、ＢＭＰＳ、ＥＭＣＳ、ＧＭＢＳ、ＨＢＶＳ、ＬＣ−ＳＭＣＣ、ＭＢＳ ＭＰＢＨ、ＳＢＡＰ、ＳＩＡ、ＳＩＡＢ、ＳＭＣＣ、ＳＭＰＢ、ＳＭＰＨ、スルホ−ＥＭＣＳ、スルホ−ＧＭＢＳ、スルホ−ＫＭＵＳ、スルホ−ＭＢＳ、スルホ−ＳＩＡＢ、スルホ−ＳＭＰＢ、及びスルホ−ＳＭＰＢ、ＳＶＳＢ（スクシンイミジル（４−ビニルスルホン）ベンゾエート）を含むクロスリンカー試薬を用いて調製されるコンジュゲートを明示的に意図する。
【０２０１】
ＩＶ．組換え方法及び組成物
本明細書に記載される薬学的製剤の何れかにおいて使用のための抗ｃ−ｍｅｔ抗体は組換え法及び、例えば米国特許第４，８１６，５６７号に記載される組成物により産生され得る。一実施態様において、抗体をコードする単離された核酸が提供される。このような核酸は、抗体のＶＬを含むアミノ酸配列、及び／又は抗体のＶＨを含むアミノ酸配列（例えば、抗体の軽鎖及び／又は重鎖）をコードし得る。更なる実施態様において、そのような核酸を含む一以上のベクター（例えば、発現ベクター）が提供される。更なる実施態様において、そのような核酸を含む宿主細胞が提供される。一実施態様において、宿主細胞は以下を含む（例えば、以下で形質転換される）：（１）抗体のＶＬを含むアミノ酸配列、及び抗体のＶＨを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含むベクター、又は（２）抗体のＶＬを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含む第一ベクター、及び抗体のＶＨを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含む第二ベクター。一腕抗体の産生は、例えば国際公開第２００５／０６３８１６号に記載される。
【０２０２】
一実施態様において、宿主細胞は、真核生物、例えばチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、またはリンパ系細胞（例えば、Ｙ０、ＮＳ０、Ｓｐ２０細胞）である。一実施態様において、抗体を作成する方法が提供され、その方法は、上記のように、抗体の発現に適した条件下で、抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を培養することを含み、および必要に応じて、宿主細胞（または宿主細胞培養培地）から抗体を回収することを含む。
【０２０３】
抗体の組換え生産のために、例えば上述したように、抗体をコードする核酸が単離され、宿主細胞内でのさらなるクローニング及び／又は発現のために１つ以上のベクターに挿入される。このような核酸は、容易に単離され、従来の手順を用いて（例えば、抗体の重鎖と軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合できるオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）配列決定することができる。
【０２０４】
抗体をコードするベクターのクローニング又は発現に適切な宿主細胞は、本明細書に記載の原核細胞又は真核細胞を含む。例えば、特に、グリコシル化およびＦｃエフェクター機能が必要ない場合には、抗体は、細菌で産生することができる。細菌における抗体断片およびポリペプチドの発現については、例えば、米国特許第５，６４８，２３７号、第５，７８９，１９９号及び第５，８４０，５２３号、国際公開第０５／０６３８１６号を参照。（また、大腸菌における抗体の発現を説明している、Charlton, Methods in Molecular Biology, 第248巻(B.K.C. Lo, ed., Humana Press, Totowa, NJ, 2003), 頁245-254も参照）。発現の後、抗体は可溶性画分において細菌の細胞ペーストから単離され得、更に精製することができる。
【０２０５】
原核生物に加えて、糸状菌又は酵母菌のような真核微生物は、菌類や酵母菌株を含む抗体をコードするベクターのための、適切なクローニング宿主又は発現宿主であり、そのグリコシル化経路が、「ヒト化」されており、部分的または完全なヒトのグリコシル化パターンを有する抗体の生成をもたらす。Gerngross, Nat. Biotech. 22:1409-1414 (2004)、及びLi et al., Nat. Biotech. 24:210-215 (2006)を参照。
【０２０６】
グリコシル化抗体の発現に適した宿主細胞はまた、多細胞生物（無脊椎動物と脊椎動物）から派生している。無脊椎動物細胞の例としては、植物および昆虫細胞が挙げられる。多数のバキュロウイルス株が同定され、これらは特にSpodoptera frugiperda細胞のトランスフェクションのために、昆虫細胞と組み合わせて使用することができる。
【０２０７】
植物細胞培養を宿主として利用することができる。例えば、米国特許第５９５９１７７号、第６０４０４９８号、第６４２０５４８号、第７１２５９７８号及び第６４１７４２９号（トランスジェニック植物における抗体産生に関するＰＬＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳＴＭ技術を記載）を参照。
【０２０８】
脊椎動物細胞もまた宿主として用いることができる。例えば、懸濁液中で増殖するように適合されている哺乳動物細胞株は有用であり得る。有用な哺乳動物宿主細胞株の他の例は、ＳＶ４０（ＣＯＳ−７）で形質転換されたサル腎臓ＣＶ１株；ヒト胚腎臓株（Graham et al., J. Gen Virol. 36:59 (1977）に記載された２９３細胞又は２９３細胞；ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ）；マウスのセルトリ細胞（Mather, Biol. Reprod. 23:243-251 (1980)に記載されるＴＭ４細胞）；サル腎細胞（ＣＶ１）；アフリカミドリザル腎細胞（ＶＥＲＯ−７６）；ヒト子宮頚癌細胞（ＨｅＬａ）；イヌ腎臓細胞（ＭＤＣＫ；バッファローラット肝臓細胞（ＢＲＬ ３Ａ）；ヒト肺細胞（Ｗ１３８）；ヒト肝細胞（ＨｅｐＧ２）；マウス乳腺腫瘍（ＭＭＴ０６０５６２）；例えばMather et al., Annals N.Y. Acad. Sci. 383:44-68 (1982)に記載されるＴＲＩ細胞；ＭＲＣ５細胞；及びＦＳ４細胞である。他の有用な哺乳動物宿主細胞株は、ＤＨＦＲ−ＣＨＯ細胞（Urlaub et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4216 (1980)）を含むチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞；及びＹ０、ＮＳ０およびＳｐ２／０などの骨髄腫細胞株を含む。抗体産生に適した特定の哺乳動物宿主細胞系の総説については、例えば、Yazaki and Wu, Methods in Molecular Biology,第248巻 (B.K.C. Lo, ed., Humana Press, Totowa, NJ), 頁255-268 (2003)を参照。
【０２０９】
Ｖ．治療の用途及び方法
本明細書に提供される抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む薬学的製剤は、ＨＧＦ／ｃ−ｍｅｔシグナル伝達軸の調節不全に関連する疾患状態を調節するのに有用である。ＨＧＦ／ｃ−ｍｅｔシグナル伝達経路は、例えば、細胞増殖及び血管新生を含む複数の生物学的及び生理学的機能に関与する。
【０２１０】
本明細書に提供されるのは、ｃ−ｍｅｔ活性化細胞増殖を阻害する方法であり、前記方法は（例えば、希釈の際に（例えば、本明細書に記載の希釈された薬学的製剤））、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の有効量を含む本明細書に記載の医薬製剤と細胞及び組織を接触させることを含み、それによってｃ−ｍｅｔ活性化に関連する細胞増殖が阻害される。幾つかの実施態様において、細胞増殖性疾患は、ｃ−ｍｅｔの発現又活性の増加又は肝細胞増殖、又はその両方に関連している。幾つかの実施態様において、癌は、ｃ−ｍｅｔ陽性である（例えば、免疫組織化学によりｃ−ｍｅｔの高レベルを発現する）。幾つかの実施態様において、細胞増殖は癌である。幾つかの実施態様において、癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、グリア芽腫、膵臓癌、肉腫、腎細胞癌、肝細胞癌、胃癌、結腸直腸癌又は乳癌である。幾つかの実施態様において、癌は、ステージＩＩＩｂ及び／又はステージＩＶである。幾つかの実施態様において、癌は局所進行性または転移性の癌である。幾つかの実施態様において、治療は第二選択又は第三選択治療（例えば第二選択又は第三選択ＮＳＣＬＣ治療）である。幾つかの実施態様において、癌はＥＧＦＲ変異体である。幾つかの実施態様において、癌はＥＧＦＲ野生型である。幾つかの実施態様において、癌は、ｃ−ｍｅｔ陽性である（例えば、免疫組織化学（ＩＨＣ）によりｃ−ｍｅｔの高レベルを発現する）。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体が約５０ｍｇ／ｍＬから約７５ｍｇ／ｍＬの間の濃度で存在する抗ｃ−ｍｅｔ抗体（例えばオナルツズマブ）；（ｂ）ヒスチジン酢酸塩緩衝液が約１ｍＭから約２０ｍＭの間の濃度であるｐＨ５．０から５．４のヒスチジン酢酸塩緩衝液；（ｃ）スクロースが約１００ｍＭから約１５０ｍＭの間の濃度であるスクロース；（ｄ）ポリソルベートの濃度が０．０２％ｗ／ｖより大きいポリソルベートを含む。
【０２１１】
本明細書に提供されるのは、被験体においてｃ−ｍｅｔ活性化の調節不全に関連する病的状態を治療する方法であり、前記方法は本明細書に記載するｃ−ｍｅｔ抗体の有効量を含む薬学的製剤（例えば、希釈の際に（例えば、本明細書に記載される希釈された薬学的製剤））を被験体に投与することを含み、それによって前記状態が治療される。幾つかの実施態様において、病的状態は癌である。幾つかの実施態様において、癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、グリア芽腫、膵臓癌、肉腫、腎細胞癌、肝細胞癌、胃癌、結腸直腸癌又は乳癌である。幾つかの実施態様において、癌は、ステージＩＩＩｂ及び／又はステージＩＶの癌である。幾つかの実施態様において、癌は局所進行性または転移性の癌である。幾つかの実施態様において、治療は第二選択又は第三選択治療（例えば第二選択又は第三選択ＮＳＣＬＣ治療）である。ｃ−ｍｅｔ活性化（及びシグナル伝達）の調節不全は多数の細胞変化に起因することができ、例えばＨＧＦ（ｃ−ｍｅｔの同族のリガンド）及び／又はｃ−ｍｅｔ自体の過剰発現が含まれる。幾つかの実施態様において、癌はＥＧＦＲ変異体である。幾つかの実施態様において、癌はＥＧＦＲ野生型である。幾つかの実施態様において、癌は、ｃ−ｍｅｔ陽性である（例えば、ＩＨＣによりｃ−ｍｅｔの高レベルを発現する）。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体が約５０ｍｇ／ｍＬから約７５ｍｇ／ｍＬの間の濃度で存在する抗ｃ−ｍｅｔ抗体（例えばオナルツズマブ）；（ｂ）ヒスチジン酢酸塩緩衝液が約１ｍＭから約２０ｍＭの間の濃度であるｐＨ５．０から５．４のヒスチジン酢酸塩緩衝液；（ｃ）スクロースが約１００ｍＭから約１５０ｍＭの間の濃度であるスクロース；（ｄ）ポリソルベート２０の濃度が０．０２％ｗ／ｖより大きいポリソルベート２０を含む。
【０２１２】
また本明細書に提供されるのは、ｃ−ｍｅｔ又は肝細胞増殖因子、またはその両方を発現する細胞の増殖を阻害する方法であり、前記方法は、本明細書に記載の抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む薬学的製剤（例えば、希釈の際に（例えば、本明細書に記載の希釈された薬学的製剤））と前記細胞を接触させ、それによって前記細胞の増殖の阻害を引き起こすことを含む。幾つかの実施態様において、前記細胞の増殖は、ｃ−ｍｅｔまたは肝細胞増殖因子またはその両方の増殖増強作用に少なくとも部分的に依存する。幾つかの実施態様において、細胞は（パラクリン作用を通じて）異なる細胞によって発現されるＨＧＦにより接触される。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体が約５０ｍｇ／ｍＬから約７５ｍｇ／ｍＬの間の濃度で存在する抗ｃ−ｍｅｔ抗体（例えばオナルツズマブ）；（ｂ）ヒスチジン酢酸塩緩衝液が約１ｍＭから約２０ｍＭの間の濃度であるｐＨ５．０から５．４のヒスチジン酢酸塩緩衝液；（ｃ）スクロースが約１００ｍＭから約１５０ｍＭの間の濃度であるスクロース；（ｄ）ポリソルベート２０の濃度が０．０２％ｗ／ｖより大きいポリソルベート２０を含む。
【０２１３】
また本明細書に提供されるのは、薬学的製剤を投与することを含む、癌を治療又は予防するための方法であって、（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体が約５０ｍｇ／ｍＬから約７５ｍｇ／ｍＬの間の濃度で存在する抗ｃ−ｍｅｔ抗体（例えばオナルツズマブ）；（ｂ）ヒスチジン酢酸塩緩衝液が約１ｍＭから約２０ｍＭの間の濃度であるｐＨ５．０から５．４のヒスチジン酢酸塩緩衝液；（ｃ）スクロースが約１００ｍＭから約１５０ｍＭの間の濃度であるスクロース；（ｄ）ポリソルベート２０の濃度が０．０２％ｗ／ｖより大きいポリソルベート２０を（例えば約０．７５、約１、又は約１．２５ｍｇ／ｍＬの何れかに希釈の際（例えば本明細書に記載の希釈された薬学的製剤）含む。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体が約６０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する抗ｃ−ｍｅｔ抗体（例えばオナルツズマブ）；（ｂ）ヒスチジン酢酸塩緩衝液が約１０ｍＭの間の濃度であるｐＨ５．４のヒスチジン酢酸塩緩衝液；（ｃ）スクロースが約１２０ｍＭの濃度であるスクロース；（ｄ）ポリソルベート２０の濃度が約０．０４％ｗ／ｖであるポリソルベート２０を含む。幾つかの実施態様において、癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、グリア芽腫、膵臓癌、肉腫、腎細胞癌、肝細胞癌、胃癌、結腸直腸癌又は乳癌である。幾つかの実施態様において、癌は、ステージＩＩＩｂ及び／又はステージＩＶの癌である。幾つかの実施態様において、癌は局所進行性または転移性の癌である。幾つかの実施態様において、治療は第二選択又は第三選択治療（例えば第二選択又は第三選択ＮＳＣＬＣ治療）である。幾つかの実施態様において、癌はＥＧＦＲ変異体である。幾つかの実施態様において、癌はＥＧＦＲ野生型である。幾つかの実施態様において、癌は、ｃ−ｍｅｔ陽性である（例えば、ＩＨＣによりｃ−ｍｅｔの高レベルを発現する）。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の用量は約１５ｍｇ／ｋｇである。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の用量は、２１日のサイクルの第１日に投与される約１５ｍｇ／ｋｇである。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の用量は約１０ｍｇ／ｋｇである。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の用量は、２８日のサイクルの第１日及び第１５日に投与される約１０ｍｇ／ｋｇである。
【０２１４】
本明細書に記載される方法は、任意の適切な病理学的状態、例えば、ＨＧＦ／ｃ−ｍｅｔシグナル伝達経路の調節不全に関連する細胞及び／又は組織に作用するように使用することができる。本明細書に記載される方法の何れかの幾つかの実施態様において、本明細書に記載の方法において標的とされる細胞は癌細胞である。例えば、癌細胞は、乳癌細胞、結腸直腸癌細胞、肺癌細胞、（例えば甲状腺の）乳頭癌細胞、大腸癌細胞、膵臓癌細胞、卵巣癌細胞、子宮頸部癌細胞、中枢神経系癌細胞、骨肉腫細胞、腎癌細胞、肝細胞癌細胞、膀胱癌細胞、胃癌細胞、頭頸部扁平上皮癌細胞、メラノーマ細胞及び白血病細胞からなる群から選択されるものであり得る。幾つかの実施態様において、本明細書に記載の方法において標的とされる細胞は、過剰増殖性及び／又は過形成性細胞である。幾つかの実施態様において、本明細書に記載の方法において標的とされる細胞は、異形成細胞である。更に別の実施態様において、本明細書に記載の方法において標的とされる細胞は、転移細胞である。
【０２１５】
本明細書に記載される何れかの方法の幾つかの実施態様において、この方法はさらに、追加の治療工程を含む。例えば、幾つかの実施態様において、この方法は、標的細胞及び／又は組織（例えば癌細胞）が放射線治療又は第二治療薬（例えば、化学療法剤）に曝露されることを特徴とするさらなる工程を含む。例えば、（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体が約５０ｍｇ／ｍＬから約７５ｍｇ／ｍＬの間の濃度で存在する抗ｃ−ｍｅｔ抗体（例えばオナルツズマブ）；（ｂ）ヒスチジン酢酸塩緩衝液が約１ｍＭから約２０ｍＭの間の濃度であるｐＨ５．０から５．４のヒスチジン酢酸塩緩衝液；（ｃ）スクロースが約１００ｍＭから約１５０ｍＭの間の濃度であるスクロース；（ｄ）ポリソルベート２０の濃度が０．０２％ｗ／ｖより大きいポリソルベート２０を（例えば約０．７５、約１、又は約１．２５ｍｇ／ｍＬの何れかに希釈の際（例えば本明細書に記載の希釈された薬学的製剤）含む薬学的製剤及び（ｉｉ）第二治療薬を投与することを含む、癌を治療又は予防するための方法が提供される。幾つかの実施態様において、第二治療薬はＥＧＦＲ阻害剤（例えば、エルロチニブ）、ＶＥＧＦ阻害剤（例えば、ベバシズマブ）、タキサン（例えば、パクリタキセル）である。
【０２１６】
本明細書に記載される任意の方法の幾つかの実施態様において、この方法はさらに、第二の治療薬の有効量を投与することを含む。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の用量は約１５ｍｇ／ｋｇである。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の用量は約１０ｍｇ／ｋｇである。
【０２１７】
幾つかの実施態様において、第二治療薬は、ＥＧＦＲ阻害剤である。幾つかの実施態様において、ＥＧＦＲ阻害剤はエルロチニブ（Ｎ−（３−エチニルフェニル）−６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）−４−キナゾリンアミン）である。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の用量は、２１日のサイクルの第１日に投与される約１５ｍｇ／ｋｇである。例えば、提供されるのは、（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体が約５０ｍｇ／ｍＬから約７５ｍｇ／ｍＬの間の濃度で存在する抗ｃ−ｍｅｔ抗体（例えばオナルツズマブ）；（ｂ）ヒスチジン酢酸塩緩衝液が約１ｍＭから約２０ｍＭの間の濃度であるｐＨ５．０から５．４のヒスチジン酢酸塩緩衝液；（ｃ）スクロースが約１００ｍＭから約１５０ｍＭの間の濃度であるスクロース；（ｄ）ポリソルベート２０の濃度が０．０２％ｗ／ｖより大きいポリソルベート２０を（例えば約０．７５，約１，又は約１．２５ｍｇ／ｍＬの何れかに希釈の際（例えば本明細書に記載の希釈された薬学的製剤）含む薬学的製剤（ここで抗ｃ−ｍｅｔ抗体は３週間毎に１５ｍｇ／ｋｇの用量で投与される）、及び（ｉｉ）エルロチニブ（Ｎ−（３−エチニルフェニル）−６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）−４−キナゾリンアミン）（ここでエルロチニブは３週間のサイクルの各々の日に１５０ｍｇの用量で投与される）を投与することを含む、癌（例えばＮＳＣＬＣ）を治療する方法である。
【０２１８】
幾つかの実施態様において、第二治療薬は、タキサン（例えば、パクリタキセル）である。幾つかの実施態様において、癌は乳癌である。幾つかの実施態様において、乳癌は、ＥＲ陰性、ＰＲ陰性、及びＨＥＲ２陰性（ＥＲ−、ＰＲ−、及びＨＥＲ２−；又はトリプルネガティブ）転移性乳癌である。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の用量は、２８日のサイクルの第１日及び第１５日に約１０ｍｇ／ｋｇである。例えば、提供されるのは、癌（例えば乳癌）を治療する方法であって、（ｉ）（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体が約５０ｍｇ／ｍＬから約７５ｍｇ／ｍＬの間の濃度で存在する抗ｃ−ｍｅｔ抗体（例えばオナルツズマブ）；（ｂ）ヒスチジン酢酸塩緩衝液が約１ｍＭから約２０ｍＭの間の濃度であるｐＨ５．０−５．４のヒスチジン酢酸塩緩衝液；（ｃ）スクロースが約１００ｍＭから約１５０ｍＭの間の濃度であるスクロース；及び（ｄ）ポリソルベート２０の濃度が０．０２％ｗ／ｖより大きいポリソルベート２０を含む薬学的製剤（例えば本明細書に記載の希釈された薬学的製剤）であって、抗ｃ−ｍｅｔ抗体が２８日のサイクルの第１日及び第１５日に１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される薬学的製剤；及び（ｉｉ）２８日のサイクルの第１日、第８日、及び第１５日に静脈内注入により９０ｍｇ／ｍ２の用量で投与されるパクリタキセルを投与することを含む。幾つかの実施態様において、本方法は、患者の生存を増加させ、癌の再発の患者のリスクを減少させ、及び／又は患者の生存の可能性を増加させる。幾つかの実施態様において、本方法はさらに、抗ＶＥＧＦ抗体（例えば、ベバシズマブ）の投与を含む。例えば、提供されるのは、癌（例えば乳癌）を治療する方法であって、（ｉ）（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体が約５０ｍｇ／ｍＬから約７５ｍｇ／ｍＬの間の濃度で存在する抗ｃ−ｍｅｔ抗体（例えばオナルツズマブ）；（ｂ）ヒスチジン酢酸塩緩衝液が約１ｍＭから約２０ｍＭの間の濃度であるｐＨ５．０−５．４のヒスチジン酢酸塩緩衝液；（ｃ）スクロースが約１００ｍＭから約１５０ｍＭの間の濃度であるスクロース；及び（ｄ）ポリソルベート２０の濃度が０．０２％ｗ／ｖより大きいポリソルベート２０を含む薬学的製剤（例えば本明細書に記載の希釈された薬学的製剤）であって、抗ｃ−ｍｅｔ抗体が２８日のサイクルの第１日及び第１５日に１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される薬学的製剤；（ｉｉ）抗ＶＥＧＦ抗体が２８日のサイクルの第１日及び第１５日に１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される抗ＶＥＧＦ抗体（例えばベバシズマブ）；及び（ｉｉｉ）パクリタキセルが２８日のサイクルの第１日、第８日、及び第１５日に静脈内注入により９０ｍｇ／ｍ２の用量で投与されるパクリタキセルを投与することを含む。
【０２１９】
抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む薬学的製剤は、治療において、単独で、または他の薬剤と組み合わせて使用することができる。例えば、抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む薬学的製剤は、第二治療薬（例えば、別の抗体、化学療法剤）（化学療法剤のカクテルを含む）、他の細胞傷害性薬物、抗血管新生剤、サイトカイン、及び／又は増殖阻害剤）と同時投与することができる。幾つかの実施態様において、第二治療薬は同時または逐次投与される。第二の治療薬は、抗ｃ−ｍｅｔの抗体を含む薬学的製剤とは別々に投与されるが、同じ治療レジメンの一部としてすることができる。薬学的製剤の抗ｃ−ｍｅｔ抗体は腫瘍増殖を阻害するが、腫瘍増殖を阻害する一以上の他の治療薬とそれを組み合わせることが特に望ましい。例えば、抗ｃ−ｍｅｔの抗体を含む薬学的製剤は、例えば結腸直腸癌、転移性乳癌及び腎臓癌を含む本明細書に記載の疾患の何れか治療における治療計画でＥＧＦＲ阻害剤、抗ＶＥＧＦ抗体及び／又は抗ＥｒｂＢ抗体と組み合わせてもよい。
【０２２０】
上記のこうした併用療法は、併用投与（２つ以上の薬剤が、同一または別々の製剤に含まれている）を同時に、及び、薬学的製剤の投与が、追加の治療薬及び／又はアジュバントの投与の前、及び／又はその後に起きうる分離投与を包含する。
【０２２１】
従って、本明細書に記載の任意の方法の幾つかの実施態様において、本方法は、細胞を標的とすることを含み、ここで、ｃ−ｍｅｔ又は肝細胞増殖因子若しくはその両方が、同じ組織起源の正常細胞と比較して前記細胞（例えば癌細胞）によってより豊富に発現されることを特徴とする。ｃ−ｍｅｔ発現細胞は、種々の供給源由来のＨＧＦによって、即ち自己分泌的又は傍分泌的に調節することができる。ｃ−ｍｅｔの活性化及び／又はシグナル伝達はまた、リガンドとは独立して生じる可能性がある。それゆえ、任意の方法の幾つかの実施態様において、標的細胞におけるｃ−ｍｅｔの活性化は、リガンドとは独立して生じる。
【０２２２】
抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む薬学的製剤は、治療の目的のためにヒト被験体に投与することができる。更に、抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む薬学的製剤は、獣医学的目的のために、又はヒト疾患の動物モデルとして、免疫グロブリンが交差反応する抗原を発現する非ヒト哺乳動物（例えば、霊長類、ブタ又はマウス）に投与することができる。
【０２２３】
抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む薬学的製剤は、限定されないが、悪性及び良性腫瘍；非白血病及びリンパ系の悪性腫瘍；神経細胞、グリア、星状細胞、視床下部及び他の腺、マクロファージ、上皮、間質及び胞胚腔の障害；及び炎症性、血管新生及び免疫学的疾患を含む、一以上の抗原分子の異常な発現及び／又は活性に関連する疾患、障害を治療し、阻害し、その進行を遅らせ、その再発を予防／遅延させ、寛解又は予防するために使用することができる。
【０２２４】
本方法の任意の幾つかの実施態様において、細胞傷害性薬剤とコンジュゲートした抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含むイムノコンジュゲートを含む薬学的製剤が患者に投与される。幾つかの実施態様において、細胞に結合し内部移行するイムノコンジュゲート及び／又は抗原は、結合した標的細胞を死滅させることにおいてイムノコンジュゲートの治療的有効性の増大をもたらす。幾つかの実施態様において、細胞傷害性薬剤は、標的又は標的細胞内の核酸と干渉する。
【０２２５】
抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む薬学的製剤（および任意の追加の治療薬）は、任意の適切な手段によって投与することができ、経口、肺内、および鼻腔内、及び局所治療が所望される場合、病巣内投与が含まれる。非経口注入には、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内、又は皮下投与が含まれる。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は静脈内に投与される。投薬は、その投与が短期間か又は長期であるかどうかに部分的に依存し、任意の適切な経路、例えば、静脈内または皮下注射などの注射により行うことができる。限定されないが、様々な時間点にわたる、単一または複数回投与、ボーラス投与、パルス注入を含む様々な投与スケジュールが本明細書で考えられている。
【０２２６】
抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含有する薬学的製剤は良好な医療行為に合致した方法で服用され投与される。この観点において考慮すべき要因は、治療すべき特定の障害、治療すべき特定の哺乳類、個々の患者の臨床状態、障害の原因、薬剤送達部位、投与方法、投与日程及び医療従事者が知る他の要因を包含する。抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含有する薬学的製剤は、必要ではないが任意で、問題となる障害の予防又は治療のために、現在使用中の一又は複数の薬剤ともに処方される。そのような他の薬剤の有効量は製剤中に存在する抗体の量、障害又は治療の種類及び上記した他の要因に依存する。これらは一般的には上文で使用されるのと同じ用量及び投与経路において、又は、これまでに用いられた用量の１％から９９％で、又は経験的に／臨床的に妥当であると決定された任意の用量及び任意の経路により使用される。
【０２２７】
疾患の予防又は治療のためには、薬学的製剤の抗ｃ−ｍｅｔ抗体の適切な用量（単独で使用されるか、又は、一以上の更なる治療的薬剤との組み合わされる場合）は治療すべき疾患の種類、抗体の種類、疾患の重症度及び経過、薬学的製剤中の抗ｃ−ｍｅｔ抗体を予防又は治療目的のいずれにおいて投与するか、以前の治療、患者の臨床的履歴及び抗ｃ−ｍｅｔ抗体に対する応答性、及び担当医の判断に依存する。抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む薬学的製剤は、患者に対して、単回、又は一連の治療にわたって適切に投与される。疾患の種類及び重症度に応じて、例えば一回以上の別個の投与によるか、連続注入によるかに関わらず、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の約１０ｍｇ／ｋｇ、約１５ｍｇ／ｋｇ又はそれ以上（例えば１５−２０ｍｇ／ｋｇ）用量が患者へ投与される。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の用量は約１５ｍｇ／ｋｇである。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の用量は、２１日のサイクルの第１日に投与される約１５ｍｇ／ｋｇである。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の用量は約１０ｍｇ／ｋｇである。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の用量は、２８日のサイクルの第１日及び第１５日に投与される約１０ｍｇ／ｋｇである。
【０２２８】
投与量は、断続的に、例えば、毎週、隔週、３週間ごと又は４週間ごとの何れかについて投与することができ得る。
【０２２９】
数日間以上に渡る反復投与の場合には、状態に応じて、治療は疾患症状の望まれる抑制が起こるまで持続するであろう。しかしながら、他の投与計画は有効でありうる。この治療の進行は、従来技術及びアッセイにより容易にモニターされる。
【０２３０】
ＶＩ．製造品
上述した障害の治療、予防及び／又は診断のために、本明細書に記載される抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む薬学的製剤を含む製造品が提供される。製造品は、容器と容器上ないしは容器に付随するラベルないしはパッケージ挿入物を具備する。好適な容器は、例としてボトル、バイアル、シリンジ、ＩＶ輸液バッグ等を含む。容器はガラス又はプラスチックなどの様々な物質から形成されうる。容器は、疾患の治療、予防、及び／又は診断に有効である、それ自体か、又はその他の組成物と併用される抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む薬学的製剤を収容し、無菌のアクセスポートを有し得る（例えば、容器は皮下注射針による穴あきストッパーを有する静脈内溶液バッグ又はバイアルであってよい）。例えば、本明細書に提供されるのは、（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体が約５０ｍｇ／ｍＬから約７５ｍｇ／ｍＬの間の濃度で存在する抗ｃ−ｍｅｔ抗体（例えばオナルツズマブ）；（ｂ）ヒスチジン酢酸塩緩衝液が約１ｍＭから約２０ｍＭの間の濃度であるｐＨ５．０から５．４のヒスチジン酢酸塩緩衝液；（ｃ）スクロースが約１００ｍＭから約１５０ｍＭの間の濃度であるスクロース；（ｄ）ポリソルベート２０の濃度が０．０２％ｗ／ｖより大きいポリソルベート２０を含有する薬学的製剤を入れた容器を含んでなる製造品及びキットである。幾つかの実施態様において、薬学的製剤は、（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体が約６０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する抗ｃ−ｍｅｔ抗体（例えばオナルツズマブ）；（ｂ）ヒスチジン酢酸塩緩衝液が約１０ｍＭの間の濃度であるｐＨ５．４のヒスチジン酢酸塩緩衝液；（ｃ）スクロースが約１２０ｍＭの濃度であるスクロース；（ｄ）ポリソルベートの濃度が約０．０４％ｗ／ｖであるポリソルベートを含む。ラベルまたはパッケージ挿入物は、組成物が選択される疾患、例えば癌の治療のために使用されることを示している。幾つかの実施態様において、癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、グリア芽腫、膵臓癌、肉腫、腎細胞癌、胃癌、結腸直腸癌又は乳癌である。幾つかの実施態様において、癌は、ステージＩＩＩｂ及び／又はステージＩＶの癌である。幾つかの実施態様において、癌は局所進行性または転移性の癌である。幾つかの実施態様において、治療は第二選択又は第三選択治療（例えば第二選択又は第三選択ＮＳＣＬＣ治療）である。幾つかの実施態様において、癌はＥＧＦＲ変異体である。幾つかの実施態様において、癌はＥＧＦＲ野生型である。幾つかの実施態様において、癌は、ｃ−ｍｅｔ陽性である（例えば、免疫組織化学によりｃ−ｍｅｔの高レベルを発現する）。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の用量は約１５ｍｇ／ｋｇである。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の用量は、２１日のサイクルの第１日に投与される約１５ｍｇ／ｋｇである。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の用量は約１０ｍｇ／ｋｇである。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の用量は、２８日のサイクルの第１日及び第１５日に投与される約１０ｍｇ／ｋｇである。
本実施態様の製造品は、第一及び第二抗体組成物が、特定の状態、例えば癌を治療するために使用することができることを示したパッケージ挿入物を更に含む。幾つかの実施態様において、癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、グリア芽腫、膵臓癌、肉腫、腎細胞癌、胃癌、結腸直腸癌又は乳癌である。幾つかの実施態様において、癌は、ステージＩＩＩｂ及び／又はステージＩＶである。幾つかの実施態様において、癌は局所進行性または転移性の癌である。幾つかの実施態様において、治療は第二選択又は第三選択治療（例えば第二選択又は第三選択ＮＳＣＬＣ治療）である。幾つかの実施態様において、癌はＥＧＦＲ変異体である。幾つかの実施態様において、癌はＥＧＦＲ野生型である。幾つかの実施態様において、癌は、ｃ−ｍｅｔ陽性である（例えば、免疫組織化学によりｃ−ｍｅｔの高レベルを発現する）。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の用量は約１５ｍｇ／ｋｇである。幾つかの実施態様において、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の用量は、２１日のサイクルの第１日に投与される約１５ｍｇ／ｋｇである。
【０２３１】
別法として、または加えて、任意の製造品の幾つかの実施態様において、製造品は、薬学的に許容されるバッファー、例えば注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝化生理食塩水、リンガー溶液およびデキストロース溶液を含む第二（または第三）の容器をさらに含んでもよい。これは、他のバッファー、希釈剤、フィルター、針、およびシリンジを含む、商業的およびユーザーの立場から望まれる他の物質のさらに含んでもよい。
【０２３２】
更に、製造品は、（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体を含む本明細書に記載の薬学的製剤をその中に含む第一容器；及び（ｂ）組成物が更なる細胞障害性薬剤を含有する組成物をその中に含む第二の容器を含み得る。例えば、製造品が（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体が約５０ｍｇ／ｍＬから約７５ｍｇ／ｍＬの間の濃度で存在する抗ｃ−ｍｅｔ抗体（例えばオナルツズマブ）；（ｂ）ヒスチジン酢酸塩緩衝液が約１ｍＭから約２０ｍＭの間の濃度であるｐＨ５．０から５．４のヒスチジン酢酸塩緩衝液；（ｃ）スクロースが約１００ｍＭから約１５０ｍＭの間の濃度であるスクロース；（ｄ）ポリソルベート２０の濃度が０．０２％ｗ／ｖより大きいポリソルベート２０を含む薬学的製剤を含む第一容器、及び（ｉｉ）組成物が第二治療薬を含む該組成物を中に含む第二容器を含み得る。
【０２３３】
幾つかの実施態様において、第二治療薬は、ＥＧＦＲ阻害剤である。幾つかの実施態様において、ＥＧＦＲ阻害剤はエルロチニブ（Ｎ−（３−エチニルフェニル）−６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）−４−キナゾリンアミン）である。幾つかの実施態様において、製造品は、抗ｃ−ｍｅｔ抗体製剤の２１日サイクルの初日に投与される約１５ｍｇ／ｋｇの投与のため、及びエルロチニブの３週間のサイクルの各日に１５０ｍｇの投与のための説明書を含む。幾つかの実施態様において、製造品は癌（例えばＮＳＣＬＣ）の治療のための説明書を含む。
【０２３４】
幾つかの実施態様において、第二治療薬は、タキサン（例えば、パクリタキセル）である。幾つかの実施態様において、製造品は、抗ｃ−ｍｅｔ抗体製剤の２８日サイクルの第１日及び第１５日で約１０ｍｇ／ｋｇの投与、及びパクリタキセルの２８日サイクルの第１日、第８日及び第１５日で静脈注射による９０ｍｇ／ｍ２の投与についての説明書を含む。幾つかの実施態様において、製造品は組成物をその中に含む第三容器を含み、ここで該組成物は第三治療薬を含み、該第三治療薬は抗ＶＥＧＦ抗体（例えば、ベバシズマブ）である。幾つかの実施態様において、製造品は、抗ｃ−ｍｅｔ抗体製剤の２８日サイクルの第１日及び第１５日で約１０ｍｇ／ｋｇの投与、及びパクリタキセルの２８日サイクルの第１日、第８日及び第１５日で静脈注射による９０ｍｇ／ｍ２の投与、及び抗ＶＥＧＦ抗体（例えば、ベバシズマブ）の２８日サイクルの第１日及び第１５日で１０ｍｇ／ｋｇの投与についての説明書を含む。幾つかの実施態様において、製造品は癌の治療のための説明書を含む。幾つかの実施態様において、乳癌（例えば、ＥＲ陰性、ＰＲ陰性、及びＨＥＲ２陰性（ＥＲ−、ＰＲ−、及びＨＥＲ２−；又はトリプルネガティブ）転移性乳癌）である。幾つかの実施態様において、本方法は、患者の生存を増加させ、癌の再発の患者のリスクを減少させ、及び／又は患者の生存の可能性を増加させる。
【０２３５】
上記の製造品のいずれかは、抗ｃ−ｍｅｔ抗体の代わりか又はそれに加えて、本明細書に開示される抗ｃ−ｍｅｔ抗体のイムノコンジュゲートを含み得ることが理解される。
本明細書に更に提供されるのは本明細書に記載される任意の製造品を作成する方法である。
【０２３６】
典型的な実施態様
１．
（ａ）抗ｃ−ｍｅｔ抗体；
（ｂ）ｐＨ５．０−５．４のヒスチジン緩衝液；
（ｃ）糖類；及び
（ｄ）ポリソルベートが０．０２％ｗ／ｖを超えて存在するポリソルベート
を含む薬学的製剤。
２．
抗ｃ−ｍｅｔ抗体が、配列ＫＳＳＱＳＬＬＹＴＳＳＱＫＮＹＬＡ（配列番号１）を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号２）を含むＨＶＲ−Ｌ２、配列ＱＱＹＹＡＹＰＷＴ（配列番号３）を含むＨＶＲ−Ｌ３、配列ＧＹＴＦＴＳＹＷＬＨ（配列番号４）を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列ＧＭＩＤＰＳＮＳＤＴＲＦＮＰＮＦＫＤ（配列番号５）を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び配列ＡＴＹＲＳＹＶＴＰＬＤＹ（配列番号６）を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、実施態様１に記載の薬学的製剤。
３．
抗ｃ−ｍｅｔ抗体が、（ａ）配列：ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＹＴＦＴＳＹＷＬＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＧＭＩＤＰＳＮＳＤＴＲＦＮＰＮＦＫＤＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＴＹＲＳＹＶＴＰＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号１９）を含む重鎖可変ドメイン、及び（ｂ）配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＳＳＱＳＬＬＹＴＳＳＱＫＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＹＡＹＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号２０）を含む軽鎖可変ドメインを含む、実施態様１又は２の何れか一項に記載の薬学的製剤。
４．
抗ｃ−ｍｅｔ抗体が、単一の抗原結合腕を含み、かつＦｃ領域を含み、ここでＦｃ領域は、第一及び第二Ｆｃポリペプチドを含み、前記第一及び第二Ｆｃポリペプチドは複合体中に存在する、実施態様１から３の何れか一項に記載の薬学的製剤。
５．
第一及び第二Ｆｃポリペプチドが、前記抗原結合腕を含むＦａｂ分子と比較して、前記抗体断片の安定性を増加させるＦｃ領域を形成する、実施態様４に記載の薬学的製剤。
６．
抗ｃ−ｍｅｔ抗体が、（ａ）配列番号１９のアミノ酸配列、ＣＨ１配列、及び第一Ｆｃポリペプチドを含む第一ポリペプチド、及び（ｂ）配列番号２０のアミノ酸配列及びＣＬ１配列を含む第二ポリペプチドを含む、実施態様１から５の何れか一項に記載の薬学的製剤。
７．
抗ｃ−ｍｅｔ抗体が（ｃ）第二Ｆｃポリペプチドを含む第三ポリペプチドを更に含む、実施態様６に記載の薬学的製剤。
８．
第一Ｆｃポリペプチドが、図２に示されるＦｃ配列（配列番号１７）を含み、第二Ｆｃポリペプチドが図３に示されるＦｃ配列（配列番号１８）を含む、実施態様１から７の何れか一項に記載の薬学的製剤。
９．
抗ｃ−ｍｅｔ抗体がオナルツズマブである、実施態様１から８の何れか一項に記載の薬学的製剤。
１０．
抗ｃ−ｍｅｔ抗体がオナルツズマブと同じエピトープに結合する、実施態様１から８の何れか一項に記載の薬学的製剤。
１１．
抗ｃ−ｍｅｔ抗体が、約１０ｍｇ／ｍＬから約１００ｍｇ／ｍＬの間（例えば約１５ｍｇ／ｍＬから約７５ｍｇ／ｍＬ）の濃度で存在する、実施態様１から１０の何れか一項に記載の薬学的製剤。
１２．
抗ｃ−ｍｅｔ抗体が約６０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する、実施態様１１に記載の薬学的製剤。
１３．
糖類が約７５ｍＭから約２００ｍＭ（例えば約１００ｍＭから約１５０ｍＭ）の濃度で存在する、実施態様１から１２の何れか一項に記載の薬学的製剤。
１４．
抗ｃ−ｍｅｔ抗体が約１２０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する、実施態様１３に記載の薬学的製剤。
１５．
糖類は二糖類である、実施態様１から１４の何れか一項に記載の薬学的製剤。
１６．
二糖類がトレハロースである、実施態様１５に記載の薬学的製剤。
１７．
二糖類がスクロースである、実施態様１５に記載の薬学的製剤。
１８．
ヒスチジン緩衝液が約１ｍＭから約５０ｍＭ（例えば約１ｍＭから約２５ｍＭ）の濃度である、実施態様１から１７の何れか一項に記載の薬学的製剤。
１９．
ヒスチジン緩衝液が約１０ｍＭの濃度である、実施態様１８に記載の薬学的製剤。
２０．
ヒスチジン緩衝液がヒスチジン酢酸塩である、実施態様１から１９の何れか一項に記載の薬学的製剤。
２１．
ポリソルベートが０．０２％を超え及び０．１％未満の濃度で存在する、実施態様１から２０の何れか一項に記載の薬学的製剤。
２２．
ポリソルベートが約０．０４％の濃度で存在する、実施態様２１に記載の薬学的製剤。
２３．
ポリソルベートがポリソルベート２０である、実施態様１から２２の何れか一項に記載の薬学的製剤。
２４．
製剤が希釈剤（例えば０．９％のＮａＣｌ）で希釈される、実施態様１から２３の何れか一項に記載の薬学的製剤。
２５．
抗ｃ−ｍｅｔ抗体が約１ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する、実施態様２４に記載の薬学的製剤。
２６．
ｃ−ｍｅｔ活性化細胞増殖を阻害する方法であって、前記方法が実施態様１から２５の何れか一項に記載の薬学的製剤の有効量を細胞又は組織と接触させることを含む方法。
２７．
ＨＧＦ／ｃ−ｍｅｔシグナル伝達軸の調節不全に関連する疾患を調節する方法であって、前記方法が、実施態様１から２５の何れか一項に記載の薬学的製剤の有効量を被験体に投与することを含む方法。
２８．
増殖性疾患を有する被験体を治療する方法であって、前記方法が実施態様１から２５の何れか一項に記載の薬学的製剤の有効量を被検体に投与することを含む方法。
２９．
増殖性疾患が癌である、実施態様２８に記載の方法。
３０．
癌が、肺癌（非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ））、グリア芽腫、膵臓癌、肉腫、腎細胞癌、肝細胞癌、胃癌、結腸直腸癌及び／又は乳癌である、実施態様２９に記載の方法。
３１．
第二治療薬を更に含む、実施態様２６から３０の何れか一項に記載の方法。
３２．
実施態様１から２５の何れか一項に記載の薬学的製剤を作成する方法。
３３．
実施態様１から２５の何れか一項に記載の薬学的製剤をその中に含有する容器を含む製造品。
３４．
実施態様３３の製造品を作成する方法。
【０２３７】
以下は薬学的製剤の例である。上記提供される一般的な説明を前提として、他の様々な実施態様が実施され得ることが理解される。
【実施例】
【０２３８】
実施例１  液体オナルツズマブ製剤中での凝集及び化学的安定性におけるｐＨ及び緩衝液の影響
最初の抗ｃ−ｍｅｔ抗体であるオナルツズマブの製剤は、時間をかけて５℃で貯蔵される場合、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）により検出される低分子量種（ＬＭＷＳ）の増加を示した。ＬＭＷＳの増加のため、液体製剤は最初は探究されず、凍結乾燥製剤を２０ｍｇ／ｍＬのオナルツズマブ、１０ｍＭのヒスチジンコハク酸塩、４％のトレハロース二水和物、０．０２％ポリソルベート２０、ｐＨ５．７で開発した。
【０２３９】
液体製剤の可能性を進展させ決定し、抗体濃度を増加させることを目指して、ｐＨ及び賦形剤のスクリーンを行った。
【０２４０】
種々の濃度（２０〜１００ｍｇ／ｍＬ）でのオナルツズマブの粘度及び安定性を異なる緩衝液中：ａ）１０ｍＭのヒスチジン酢酸塩、０．０２％ポリソルベート２０、及び１２０ｍＭのトレハロース、ｂ）１０ｍＭのヒスチジンコハク酸塩、０．０２％ポリソルベート２０、及び１２０ｍＭのトレハロース、及びｃ）２００ｍＭのアルギニンコハク酸塩及び０．０２％ポリソルベート２０で評価した。アルギニンコハク酸塩を含有する製剤は加速された温度においてより速い凝集体形成を成した（データ非表示）。粘度は評価されたすべての製剤について許容できるものであった。
【０２４１】
オナルツズマブの凝集及び化学的安定性におけるｐＨの影響が以下の液体製剤で評価された：ａ）１０ｍＭのヒスチジン酢酸塩、１２０ｍＭのトレハロース、０．０２％ポリソルベート２０、ｐＨ５．２における２０ｍｇ／ｍＬのオナルツズマブ、ｂ）１０ｍＭのヒスチジン酢酸塩、１２０ｍＭのトレハロース、０．０２％ポリソルベート２０、ｐＨ５．７における２０ｍｇ／ｍＬのオナルツズマブ、及びｃ）１０ｍＭのヒスチジン酢酸塩、１２０ｍＭのトレハロース、０．０２％ポリソルベート２０、ｐＨ６．２における２０ｍｇ／ｍＬのオナルツズマブ。サンプルは、時間をかけて２５℃又は４０℃で維持され、凝集体形成及び化学的安定性を約１５日ごとに評価した。凝集体形成は、ＴＳＫ Ｇ３０００ ＳＷＸＬサイズ排除カラムを用いて大きさの不均一性の変化を特徴付けるサイズ排除クロマトグラフィーを用いて測定した。
【０２４２】
図４に示すように、ｐＨ５．２又は５．７のどちらかと比較して、４０℃での高分子量種（ＨＭＷＳ）の％により示されるように、より高いｐＨ６．２で凝集体形成の増加をもたらした。ｐＨ５．２での形成はＨＭＷＳの％により示されるように最低の凝集体形成を示した。
【０２４３】
オナルツズマブの凝集及び化学的安定性におけるｐＨの影響が以下の液体製剤を含むより高い抗体濃度を用いて評価された：ａ）１０ｍＭのヒスチジン酢酸塩、１２０ｍＭのトレハロース、０．０２％ポリソルベート２０、ｐＨ５．２における４０ｍｇ／ｍＬのオナルツズマブ、ｂ）１０ｍＭのヒスチジン酢酸塩、１２０ｍＭのトレハロース、０．０２％ポリソルベート２０、ｐＨ５．４における４０ｍｇ／ｍＬのオナルツズマブ、及びｃ）１０ｍＭのヒスチジン酢酸塩、１２０ｍＭのトレハロース、０．０２％ポリソルベート２０、ｐＨ５．７における４０ｍｇ／ｍＬのオナルツズマブ。サンプルは、時間をかけて２５℃又は４０℃で維持され、凝集体形成及び化学的安定性を約４週間ごとに評価した。凝集体形成は上述のように測定された。図５及び６に示すように、加速された温度（２５℃及び４０℃）でのＨＭＷＳの％により示されるように、ｐＨ５．７と比べてより低いｐＨ（例えばｐＨ５．４及び５．１）で凝集体形成の低下をもたらした。
【０２４４】
化学的安定性は、Ｄｉｏｎｅｘ ＷＣＸ−１０イオン交換カラム（ＩＥＣ）及び塩勾配による溶出を用いて電荷不均一性の変化を特徴付ける陽イオン交換クロマトグラフィーを用いて測定した。
【０２４５】
図７に示すように、より低いｐＨでは凝集体形成の低下をもたらしたものの、加速された温度の２５℃及び４０℃でｐＨ５．１及び５．７の間でＩＥＣにより測定された場合、類似の化学的安定性が存在した。これらの知見に基づいて、ヒスチジン緩衝液（例えばヒスチジン酢酸塩）でｐＨ５．４を含有する製剤を更なる実験に利用した。
【０２４６】
実施例２  ポリソルベート劣化の速路と程度におけるポリソルベートの濃度の影響
ポリソルベートは、表面への吸着を最小限にし、気液界面張力を低減し、従ってタンパク質の変性率を低下させるためにポリソルベート製剤中で利用される。薬学的製剤中のポリソルベートの欠損は製剤の不安定化を生じ得る。更に、ポリソルベートは、酸化及び加水分解によって分解することができ、長期保存にわたって薬学的製剤中でポリソルベートの見かけの濃度の低下につながることができる。これらのポリソルベート分解物は非分解性ポリソルベートより界面活性が弱く、それゆえ薬学的製剤の化学的及び物理的安定性が損なわれることがある。更に、一部のポリソルベート分解物は不溶であり、それらがインタクトなポリソルベートによって可溶化されていない場合、即ち、もし分解したポリソルベート２０：インタクトなポリソルベート２０の比率が高すぎる場合、粒子を形成することができる。
【０２４７】
ポリソルベートの分解の速度と程度は、６０ｍｇ／ｍＬのオナルツズマブを１０ｍＭのヒスチジン酢酸塩、１２０ｍＭのスクロース、０．０２％のポリソルベート２０，ｐＨ５．４に含むオナルツズマブ製剤で４０℃で経時的に評価した。ポリソルベート２０の濃度は、混合モードイオン交換カラム及びその後のステップ勾配による溶出によるポリソルベートの保持に基づくアッセイで評価した。検出は、蒸発光散乱検出器（ＥＬＳＤ）を用いて行った。分解速度及びインタクトなポリソルベート２０に対する分解したポリソルベート２０の比率は、４０℃で経時的にオナルツズマブ製剤において予想されるよりも高かった。予測される分解速度及びインタクトなポリソルベート２０に対する分解したポリソルベート２０の比率が高いことにより、オナルツズマブ製剤の不安定性と長期保存後の粒子形成をもたらす結果となった。
【０２４８】
ポリソルベート２０の割合はオナルツズマブ製剤で増加し、ポリソルベートの分解の速度と程度は、ａ）６０ｍｇ／ｍＬのオナルツズマブを１０ｍＭのヒスチジン酢酸塩、１２０ｍＭのスクロース、０．０２％のポリソルベート２０、ｐＨ５．４を含むオナルツズマブ製剤、及びｂ）６０ｍｇ／ｍＬのオナルツズマブを１０ｍＭのヒスチジン酢酸塩、１２０ｍＭのスクロース、０．０４％のポリソルベート２０、ｐＨ５．４を含むオナルツズマブ製剤で上述するように経時的に評価された。驚くことに、図８に示すように、ポリソルベート２０の増加は、オナルツズマブ製剤を安定化するために利用可能なポリソルベート２０の全体レベルの増加のみならず、インタクトなポリソルベート２０対分解されたポリソルベートの比率を４０℃で経時的に更に減少させ、それによって長期間保存後のオナルツズマブ製剤の安定性を更に増加させた。
【０２４９】
実施例３  希釈及び攪拌時に高分子量種の％におけるポリソルベートの濃度の影響
投与前に、オナルツズマブ製剤は静脈注入用に希釈剤（例えば生理食塩水）で希釈する。希釈の際、ポリソルベート２０の濃度は著しく減少し、オナルツズマブ製剤の安定性は、例えば、オナルツズマブ製剤（例えばＩＶバッグ及び／又はＩＶ投与セット）が（例えば輸送の最中に）攪拌されるときに、ＨＭＷＳの％が証拠となるようにポリペプチドの凝集によって損なわれ得る。前に議論したように、一価のオナルツズマブの凝集（多量体及びオリゴマーの形成）及び／又は一価の構造を維持できないことは、所望されないアゴニスト作用につながる可能性がある。
【０２５０】
希釈時のポリソルベートの安定性及び凝集の程度を評価するために、ａ）６０ｍｇ／ｍＬのオナルツズマブを１０ｍＭのヒスチジン酢酸塩、１２０ｍＭのスクロース、０．０２％のポリソルベート２０、ｐＨ５．４を含むオナルツズマブ製剤、及びｂ）６０ｍｇ／ｍＬのオナルツズマブを１０ｍＭのヒスチジン酢酸塩、１２０ｍＭのスクロース、０．０４％のポリソルベート２０、ｐＨ５．４を含むオナルツズマブ製剤を、０．９％のＮａＣｌでＩＶＨバッグ（ＰＶＣ）中で１ｍｇ／ｍＬまで希釈した。バッグは、（ａ）製剤用に室温で及び（ｂ）製剤用に３０℃で（オービタルシェーカー、１００ｒｐｍで）撹拌した。
図９に示すように、攪拌時のＨＭＷＳの％は、０．０２％のポリソルベートを含有する製剤（ａ）と比べて０．０４％のポリソルベート２０を含有する製剤（ｂ）で著しく減少した。
【０２５１】
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【０２５２】
上述の発明は、理解を明確にする目的のために例示および実施例によってある程度詳細に説明してきたが、説明や例は、本発明の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。すべての特許および本明細書に引用される科学文献の開示は、参照によりその全体が援用される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【配列表】
2014522843000001.app
【国際調査報告】
2014522843.tif 000013
2014522843.tif 000014
2014522843.tif 000015