(57)【要約】本発明は、ピリジン、それらの誘導体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び水和物に関する。本発明の化合物及び組成物は、プロテインキナーゼ阻害活性を有し、プロテインキナーゼ媒介疾患及び状態の治療に有用であると考えられる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物又はプロドラッグ又はエナンチオマー、又は代謝産物。
【化１】
2014526524.tif 000026
（式中、
Ｒ１は、水素、置換又は非置換Ｃ１〜６アルキルであり、
Ｒ２は、水素、置換又は非置換Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３、又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３であり、
Ｒ３は、置換又は非置換Ｃ１〜６アルキルであり、
但し、Ｒ１及びＲ２は同時に水素ではなく、Ｒ２が水素である場合、Ｒ１は、置換又は非置換重水素化Ｃ１〜６アルキルである。）
【請求項２】
Ｒ１が、水素、メチル、及びエチルからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１が、ＣＤ３又はＣＤ２ＣＤ３である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ２が、水素、ＣＨ３Ｃ（＝Ｏ）−（アセチル）、ＣＨ３ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）−、ＣＨ３ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）−からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−エチルピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン、
Ｎ−（３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド、
Ｎ−（３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−メチルピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド、
Ｎ−（３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−エチルピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド、
３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−Ｎ−エチル−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン、
３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−Ｎ−プロピルピリジン−２−アミン、
３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−ｄ３−メチル−ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン、
３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−ｄ５−エチル−ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン、
（Ｓ）−Ｎ−（３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド、
（Ｓ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−メチルピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン、
（Ｓ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−ｄ３−メチル−ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン、
（Ｓ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−エチルピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン、
（Ｓ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−ｄ５−エチル−ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン、
（Ｒ）−Ｎ−（３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド、
（Ｒ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−ｄ３−メチル−ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン、
（Ｒ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−ｄ５−エチル−ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン、及び
（Ｒ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−エチルピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミンからなる群から選択される化合物又はその薬学的に許容される塩、又はその溶媒和物。
【請求項６】
前記請求項のいずれか一項に記載の化合物及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項７】
抗新生物剤、免疫抑制剤、免疫賦活剤、又はそれらの組み合わせを更に含む、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
薬剤として使用するための、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物又は請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項９】
過剰増殖疾患を治療又は予防するための、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物又は請求項６に記載の医薬組成物の使用。
【請求項１０】
キナーゼシグナル伝達を調節するための、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項１１】
ＡＬＫキナーゼ媒介疾患を治療又は予防するための、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項１２】
新生物形成を治療するための、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項１３】
新生物形成を治療するための、１つ又は複数の抗癌剤と組み合わせた請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、キナーゼ阻害剤、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、プロドラッグ、及び代謝産物、その調製方法、並びに癌等のキナーゼ媒介疾患及び状態を治療するためのそのような化合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
関連出願の相互参照
本発明は、２０１１年９月２１日に出願された米国特許仮出願第６１／６２６，１０４号の利益を主張するものであり、その文献は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０００３】
プロテインキナーゼは、標的タンパク質基質のリン酸化を触媒する酵素の大規模ファリミーである。リン酸化は、通常、ホスフェート基をＡＴＰからタンパク質基質に移行させる反応である。ホスフェート基をタンパク質基質に結合させる一般的な地点には、例えば、チロシン残基、セリン残基、又はトレオニン残基が含まれる。プロテインキナーゼファミリーのキナーゼの例には、限定ではないが、以下のものが含まれる：Ａｂｌ１（ｖ−Ａｂｌエーベルソンマウス白血病ウィルス癌遺伝子相同体１）、Ａｋｔ、Ａｌｋ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ１、Ｂｌｋ、Ｂｒｋ、Ｂｔｋ、ｃ−Ｋｉｔ、ｃ−Ｍｅｔ、ｃ−Ｓｒｃ、ｃ−Ｆｍｓ、ＣＤＫ１〜１０、ｂ−Ｒａｆ、ｃ−Ｒａｆ１、ＣＳＦ１Ｒ、ＣＳＫ、ＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ２、ＥｒｂＢ３、ＥｒｂＢ４、Ｅｒｋ、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＦＧＦＲ５、Ｆｌｔ−１、Ｆｐｓ、Ｆｒｋ、Ｊａｋ、ＫＤＲ、ＭＥＫ、ＰＤＧＦＲ、ＰＩＫ、ＰＫＣ、ＰＹＫ２、Ｒｏｓ、Ｔｉｅ、Ｔｉｅ２、及びＺａｐ７０。プロテインキナーゼは、多数の細胞プロセスで活性があるため、重要な治療標的として注目されている。
【０００４】
ＡＬＫ（未分化リンパ腫キナーゼ）は、アミノ末端シグナルペプチドを有する細胞外ドメイン、インスリン受容体基質−１の結合部位を内包する膜近傍セグメントを有する細胞内ドメイン、及びカルボキシ末端キナーゼドメインで構成される１６２０個アミノ酸の膜貫通型タンパク質である。ＡＬＫは、インスリン受容体チロシンキナーゼのメンバーであり、棘皮動物微小管結合タンパク質様４（ＥＭＬ４）は、微小管及び微小管結合タンパク質の形成に関与する１２０ＫＤａの細胞質タンパク質である。ＥＭＬ４−ＡＬＫは、ＥＭＬ４のエキソン１〜１３をＡＬＫのエキソン２０〜２９に連結する染色体２の短腕の逆位から生じる新規の融合遺伝子である。ＥＭＬ４−ＡＬＫ融合体の存在は、ＮＳＣＬＣ（非小細胞肺癌）患者のおよそ３〜１３％で特定されている。
【０００５】
ｃ−Ｍｅｔ（ＭＥＴ又はＭＮＮＧ  ＨＯＳトランスフォーミング遺伝子）は、肝細胞増殖因子受容体（ＨＧＦＲ）として知られているタンパク質をコードする癌原遺伝子である。肝細胞増殖因子受容体タンパク質は、チロシンキナーゼ活性を有する。主要単鎖前駆体タンパク質は、翻訳後に切断されて、アルファ及びベータサブユニットを生成し、それらはジスルフィド結合で結合されて成熟受容体を形成する。癌における異常なＭＥＴ活性化は、予後不良と相関しており、異常活性ＭＥＴは、腫瘍成長、腫瘍に栄養を供給する新しい血管の形成（血管新生）、及び他の臓器への癌拡散（転移）の引き金となる。ＭＥＴは、腎臓、肝臓、胃、胸部、及び脳の癌を含む、多くのタイプのヒト悪性疾患で調節解除されている。
【０００６】
そのため、ＰＫ阻害剤として機能する低分子を特定する試みがなされている。例えば、アミノへテロアリール化合物ジアリール尿素（特許文献１）が、ＡＬＫ／ｃ−ＭＥＴ阻害剤として記載されている。アザインドール誘導体（特許文献２）が、ＡＬＫ／ＥＧＦＲキナーゼ阻害剤として記載されている。
【０００７】
したがって、ＡＬＫ及び他のキナーゼ活性等のプロテインキナーゼを独立して又は一緒にのいずれかで阻害することができる化合物は、癌等のヒト疾患を治療するために使用することができる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】国際公開第２００４／０７６４１２号
【特許文献２】国際公開第２０１０／０６８２９２号
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Ｌｉａｎｇ及びＣｈｅｎによるＥｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｐａｔｅｎｔｓ，１１（６），９８１−９８６（２００１）
【非特許文献２】Ｒ．Ｌａｒｏｃｋ，Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ，ＶＣＨ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ  （１９８９）
【非特許文献３】Ｔ．Ｗ．  Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，３ｒｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ（１９９９）
【非特許文献４】Ｌ．Ｆｉｅｓｅｒ  ａｎｄ  Ｍ．Ｆｉｅｓｅｒ，Ｆｉｅｓｅｒ  ａｎｄ  Ｆｉｅｓｅｒ’ｓ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ（１９９４）
【非特許文献５】Ａ．Ｋａｔｒｉｔｚｋｙ  ａｎｄ  Ａ．Ｐｏｚｈａｒｓｋｉ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２ｎｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ（２００１）
【非特許文献６】Ｍ．Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ，Ａ．Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ，Ｔｈｅ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｂｅｒｌｉｎ  Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ（１９８４）
【非特許文献７】Ｊ．Ｓｅｙｄｅｎ−Ｐｅｎｎｅ，Ｒｅｄｕｃｔｉｏｎｓ  ｂｙ  ｔｈｅ  Ａｌｕｍｉｎｏ−  ａｎｄ  Ｂｏｒｏｈｙｄｒｉｄｅｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，２ｎｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，（１９９７）
【非特許文献８】Ｌ．Ｐａｑｕｅｔｔｅ，ｅｄｉｔｏｒ，Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ（１９９５）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明は、式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物又はプロドラッグ又はエナンチオマー、又は代謝産物を提供する：
【００１１】
【化１】
2014526524.tif 000002
式中、
Ｒ１は、水素、置換又は非置換Ｃ１〜６アルキルであり、
Ｒ２は、水素、置換又は非置換Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３、又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３であり、
Ｒ３は、置換又は非置換Ｃ１〜６アルキルであり、
但し、Ｒ１及びＲ２は同時に水素ではない。
【００１２】
本発明は、上述の式Ｉの化合物及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を更に提供する。
【００１３】
本発明は、治療上有効量の上述の式Ｉの化合物のいずれかを哺乳動物被験体に投与することを含む、キナーゼシグナル伝達を調節する方法を更に提供する。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明の幾つかの実施形態では、式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物又はエナンチオマー、又はプロドラッグ又は代謝産物が提供される：
【００１５】
【化２】
2014526524.tif 000003
式中、
Ｒ１は、水素、置換又は非置換Ｃ１〜６アルキルであり、
Ｒ２は、水素、置換又は非置換Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３、又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３であり、
Ｒ３は、置換又は非置換Ｃ１〜６アルキルであり、
但し、Ｒ１及びＲ２は同時に水素ではなく、Ｒ２が水素である場合、Ｒ１は、置換又は非置換重水素化Ｃ１〜６アルキルである。
【００１６】
ある実施形態では、Ｒ１は水素であり、Ｒ２はＣ１〜４アルキル又はＣ１〜４アシルである。他の実施形態では、Ｒ１は、メチル又はエチルであり、Ｒ２は、Ｃ１〜４アルキル又はＣ１〜４アシルである。他の実施形態では、Ｒ１は、ＣＤ３又はＣＤ２ＣＤ３であり、Ｒ２は、水素、Ｃ１〜４アルキル、又はＣ１〜４アシルである。好ましい実施形態では、Ｒ１は、ＣＤ３又はＣＤ２ＣＤ３であり、Ｒ２は水素である。好ましい実施形態では、Ｒ１は、水素、メチル、又はエチルであり、Ｒ２は、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３（つまり、アセチル）である。好ましい実施形態では、Ｒ１は、水素、メチル、又はエチルであり、Ｒ２は、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２ＣＨ３である。
【００１７】
ある実施形態では、限定ではないが、以下のものからなる群から選択される化合物：
３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−エチルピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン、
Ｎ−（３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド、
Ｎ−（３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−メチルピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド、
Ｎ−（３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−エチルピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド、
３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−Ｎ−エチル−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン、
３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−Ｎ−プロピルピリジン−２−アミン、
３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−ｄ３−メチル−ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン、
３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−ｄ５−エチル−ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン、
（Ｓ）−Ｎ−（３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド、
（Ｓ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−メチルピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン、
（Ｓ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−ｄ３−メチル−ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン、
（Ｓ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−エチルピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン、
（Ｓ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−ｄ５−エチル−ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン、
（Ｒ）−Ｎ−（３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド、
（Ｒ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−ｄ３−メチル−ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン、
（Ｒ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−ｄ５−エチル−ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン、及び
（Ｒ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−エチルピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン等、
又はそれらの薬学的に許容される塩、溶媒和物、又はプロドラッグ、又は代謝産物が提供される。
【００１８】
幾つかの実施形態では、本発明の化合物は、エナンチオマーである。他の実施形態では、本発明の化合物は、ジアステレオマーである。別の実施形態では、本発明の化合物の重水素濃縮は、少なくとも約１％である。
【００１９】
幾つかの実施形態では、本発明は、本発明の化合物及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。ある実施形態では、上記組成物は、プロテインキナーゼにより調節される疾患の治療用である。ある実施形態では、上記組成物は、過剰増殖疾患及び／又は血管新生障害の治療用である。幾つかの実施形態では、上記医薬組成物は、抗新生物剤、免疫抑制剤、免疫賦活剤、又はそれらの組み合わせを更に含む。他の実施形態では、上記医薬組成物は、経口、非経口、又は静脈内投与に好適である。
【００２０】
幾つかの実施形態では、本発明は、本明細書に記載の本発明の化合物のいずれかを治療上有効量で哺乳動物被験体に投与することを含む、キナーゼシグナル伝達を調節する方法を提供する。
【００２１】
他の実施形態では、本発明は、本明細書において、ＡＬＫ（融合体及び／又は変異体キナーゼを全て含む）、ｃ−Ｍｅｔ媒介疾患を治療又は予防する方法であって、本明細書に記載の本発明の化合物のいずれかを治療上有効量で哺乳動物被験体に投与することを含む方法を提供する。
【００２２】
更に別の態様では、本明細書において、ＡＬＫ（融合体及び／又は変異体キナーゼを全て含む）及びｃ−Ｍｅｔキナーゼを両方とも阻害する方法であって、本明細書に記載の本発明の化合物のいずれかを治療上有効量で哺乳類被験体に投与することを含む方法が提供される。
【００２３】
他の実施形態では、本発明は、本明細書に記載の本発明の化合物のいずれかを治療上有効量で、その必要性のある哺乳動物被験体に投与することを含む、新生物を治療する方法を提供する。ある実施形態では、新生物は、皮膚癌、白血病、結腸癌、腎細胞癌、消化管間葉性癌、固形腫瘍癌、骨髄腫、乳癌、膵臓癌、非小細胞肺癌、非ホジキンリンパ腫、肝細胞癌、甲状腺癌、膀胱癌、結腸直腸癌、及び前立腺癌から選択される。幾つかの実施形態では、本方法は、１つ又は複数の抗癌剤を投与することを更に含む。
【００２４】
他の実施形態では、本明細書に記載の本発明の化合物のいずれかを治療上有効量で哺乳動物被験体に投与することを含む、過剰増殖及び／又は血管新生を治療又は予防する方法が提供される。
【００２５】
以下の定義は、本明細書に記載の本発明の理解を支援するはずである。
【００２６】
用語「アルキル」は、置換されていなくともよく、又は随意に１つ又は複数の官能基で置換されていてもよい、直鎖、分岐、環式の炭化水素基を含むことが意図される。Ｃ１〜Ｃ６アルキルは、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、及びＣ６アルキル基を含むことが意図される。アルキルの例には、これらに限定されないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、シクロプロピル等が含まれる。アルキルは、置換されていてもよく又は置換されていなくともよい。例示的な置換アルキル基には、これらに限定されないが、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ヒドロキシメチル（hydoxymethyl）、ベンジル等が含まれる。
【００２７】
ハロゲンは、フッ素、塩素、臭素、及びヨウ素を意味する。
【００２８】
また、本発明は、１つ又は複数の原子が、同じ原子番号を有するが、自然界に通常見出される原子質量又は質量数とは異なる原子質量又は質量数を有する原子で置換されている、本発明のアイソトープ標識化合物を含む。本発明の化合物への包含に好適な同位体の例には、重水素等の水素及び１３Ｃ等の炭素の同位体が含まれる。
【００２９】
重水素（Ｄ又は２Ｈ）は、水素の非放射性安定同位体であり、重水素の自然存在量は、０．０１５％である。化合物は、その重水素レベルが、自然存在量レベル０．０１５％を超えて濃縮されていれば、非天然であるとみなされるべきである。本発明の化合物では、特定の位置が重水素であると指定される場合、重水素の存在量は、０．０１５％である重水素の自然存在量よりも実質的に大きいことが理解される。重水素として指定される位置は、典型的には、前記化合物の重水素であるとして指定される各原子において、少なくとも３０００倍の最小同位体濃縮を有する。自然存在量の安定水素の濃縮は、本発明の化合物の安定同位体の置換度と比較して、少なくて取るに足りないものである。
【００３０】
用語「薬学的に許容される」は、本発明の化合物に関して使用される場合、被験体に投与するのに安全な化合物の形態を指すことが意図される。例えば、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）等の所管当局又は規制当局により、経口摂取又は任意の他の投与経路による哺乳動物使用が承認されている、本発明の化合物の遊離塩基、塩形態、溶媒和物、水和物、プロドラッグ、又は誘導体形態は、薬学的に許容される。
【００３１】
語句「有効量」は、代替療法に典型的に伴う有害副作用を回避しつつ、各作用剤単独での治療よりも、障害重症度及び発生頻度が改善するという目標を達成することになる各作用剤の量を定量化することが意図される。有効量は、１つの実施形態では、単一の剤形又は複数の剤形で投与される。
【００３２】
また、幾つかの実施形態では、本発明の化合物は、複数の互変異性型で表される。本発明は、本明細書に記載の化合物の互変異性型を全て含む。
【００３３】
また、１つの実施形態では、上記化合物は、ｃｉｓ−又はｔｒａｎｓ−又はＥ−又はＺ−二重結合異性体を有する。そのような化合物のそのような異性体は全て本発明に含まれる。
【００３４】
本発明は、ＡＬＫ及び／又はｃＭｅｔキナーゼを含むがそれらに限定されない１つ又は複数のシグナル伝達経路を調節することができる化合物を提供する。
【００３５】
用語「調節する」とは、上記化合物が存在すると、上記経路（又はその成分）の機能的な活性が、その正常な活性と比較して変更されることを意味する。この効果は、増加、アゴナイズ、増大、増強、促進、刺激、低下、阻止、阻害、低減、縮小、アンタゴナイズ等を含む、調節のあらゆる品質又は程度を含む。
【００３６】
また、本発明の化合物は、これらに限定されないが、以下のものを含む下記プロセスの１つ又は複数を調節することができる：例えば、細胞成長（例えば、分化、細胞生存、及び／又は増殖を含む）、腫瘍細胞成長（例えば、分化、細胞生存、及び／又は増殖を含む）、腫瘍退縮、血管内皮細胞成長（例えば、分化、細胞生存、及び／又は増殖を含む）、血管新生（血管増殖）、リンパ脈管新生（リンパ管増殖）、及び／又は血球新生（例えば、Ｔ細胞及びＢ細胞発生、樹状細胞発生等）。
【００３７】
任意の理論又は作用機序により拘束されることは望まないが、本発明の化合物は、キナーゼ活性を調節する能力を有することが見出された。しかしながら、本発明の方法は、いかなる特定の機序又は上記化合物が治療効果を達成する様式にも限定されない。語句「キナーゼ活性」とは、アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）のガンマ−ホスファートを、タンパク質基質のアミノ酸残基（例えば、セリン、トレオニン、又はチロシン）に移転させる触媒活性を意味する。化合物は、キナーゼ活性を調節することができる。例えば、キナーゼのＡＴＰ結合ポケットをＡＴＰと直接的に競合することにより、その活性に影響を及ぼす酵素構造の立体構造変化をもたらすことにより（例えば、生物学的に活性な三次元構造を破壊することにより）、不活性立体構造のキナーゼに結合して固定すること等により、キナーゼ活性を阻害することができる。
【００３８】
製剤及び使用方法
本発明の化合物及び／又は組成物で癌を治療するための投与される化合物（複数可）の量及び投与計画は、被験体の年齢、体重、性別、及び医学的状態、疾患のタイプ、その疾患の重症度、投与の径路及び頻度、並びに使用される特定の化合物を含む、様々な要因に依存する。したがって、投与計画は、幅広く変動する場合があるが、標準的方法を使用して日常的に決定することができる。以下の１日用量が適切である場合があり、本明細書で開示された使用方法全てに有用なはずである：約０．０１〜５００ｍｇ／ｋｇ、有利には約０．０１〜約５０ｍｇ／ｋｇ、より有利には約０．０１〜約３０ｍｇ／ｋｇ、更により有利には約０．１〜約１０ｍｇ／ｋｇ。１日用量は、１日当たり１〜４回量で投与してもよい。
【００３９】
記載されている方法では、本発明の化合物を単独で投与することが可能な場合があるが、投与される化合物は、通常、医薬組成物中の活性成分として存在するだろう。したがって、本発明の別の実施形態では、本明細書に記載されているような希釈剤、賦形剤、アジュバント等を含む薬学的に許容される担体（本明細書では「担体」物質と総称される）及び必要に応じて他の活性成分との組み合わせで本発明の化合物を含む医薬組成物が提供される。本発明の医薬組成物は、有効量の本発明の化合物又は有効用量の本発明の化合物を含んでいてもよい。本発明の化合物の有効用量は、化合物の有効量未満の量、化合物の有効量と同量、又は化合物の有効量を超える量を含み、例えば、錠剤及びカプセル等の、２単位以上の用量が、有効量の化合物を投与するのに必要である医薬組成物、又はその代わりに粉末及び液体等の、有効量の化合物が組成物の一部を投与することにより投与される多用量医薬組成物である。
【００４０】
投与径路
好適な投与経路には、これらに限定されないが、経口投与、静脈内投与、直腸内投与、エアゾル投与、非経口投与、点眼投与、肺内投与、径粘膜投与、経皮投与、膣内投与、経耳投与、経鼻投与、及び局所投与が含まれる。加えて、例示に過ぎないが、非経口送達には、筋肉内注射、皮下注射、静脈内注射、髄内注射、並びに髄腔内注射、直接脳室内注射、腹腔内注射、リンパ管内注射、及び鼻腔内注射が含まれる。
【００４１】
本発明の化合物は、経口投与してもよい。経口投与は、えん下を含み、したがって化合物は胃腸管に進入してもよく、又は化合物が口から直接的に血流に進入することによる頬側投与若しくは舌下投与を使用してもよい。経口投与に好適な製剤には、以下のものが含まれる：錠剤等の固形製剤、微粒子、液体、又は粉末を含有するカプセル剤、トローチ剤（液体充填を含む）、咀嚼剤、多粒子及びナノ粒子、ゲル剤、固溶剤、リポソーム、薄膜（粘膜付着を含む）、オブル（ovule）、スプレー剤、及び液剤が含まれる。
【００４２】
また、本発明の化合物は、非特許文献１に記載のもの等の迅速溶解剤形、迅速崩壊剤形に使用してもよく、この文献の開示全体は、参照により本明細書に組み込まれる。
【００４３】
非経口投与用の製剤は、即時放出及び／又は放出調節するように製剤化してもよい。放出調節製剤には、遅延放出、持続放出、パルス放出、制御放出、標的放出、プログラム放出が含まれる。したがって、本発明の化合物は、活性化合物の放出調節を提供する埋込み徐放性製剤としての固形、半固形、又はチキソトローフ液体として製剤化してもよい。そのような製剤の例には、薬物コーティングステント及びＰＧＬＡミクロスフェアが含まれる。
【００４４】
組み合わせ
本発明の化合物は、唯一の活性医薬品として投薬又は投与することができるが、１つ又は複数の本発明の化合物と組み合わせて又は他の作用剤と共に使用することもできる。組み合わせて投与される場合、治療剤は、様々な時点で同時又は逐次投与される別々の組成物として製剤化してもよく、又は治療剤は、単一組成物として投与してもよい。
【００４５】
生物学的アッセイ：
前述のように、本発明で定義された化合物は、抗増殖活性を有する。こうした特性は、例えば、以下に記載の手順の１つ又は複数を使用して評価することができる。
【００４６】
ＡＬＫキナーゼを阻害する試験化合物の能力を決定するｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイ
ａ）キナーゼ標識Ｔ７ファージ株を、ＢＬ２１株由来の大腸菌宿主で調製した。大腸菌を対数増殖期まで増殖させ、Ｔ７ファージに感染させ、溶解するまで３２℃で振とうしてインキュベートした。溶解産物を遠心分離及びろ過して細胞残屑を除去した。残りのキナーゼは、ＨＥＫ−２９３細胞で産生した後、ｑＰＣＲ検出のためにＤＮＡで標識した。ストレプトアビジンコーティング磁気ビーズを、ビオチン化低分子リガンドにより３０分間室温で処理して、キナーゼアッセイ用の親和性樹脂を生成した。未結合リガンドを除去し、非特異的結合を低減させるために、リガンド付ビーズを、過剰量ビオチンでブロッキングし、ブロッキング緩衝液（ＳｅａＢｌｏｃｋ（Ｐｉｅｒｃｅ社）、１％ＢＳＡ、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０、１ｍＭ  ＤＴＴ）で洗浄した。キナーゼ、リガンド付親和性ビーズ、及び試験化合物を１×結合緩衝液（２０％ＳｅａＢｌｏｃｋ、０．１７×ＰＢＳ、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０、６ｍＭ  ＤＴＴ）に混合することにより、結合反応を構築した。反応は全て、ポリスチレン製９６ウエルプレートでの最終容積０．１３５ｍｌ中で実施した。アッセイプレートを、室温で１時間振とうさせてインキュベートし、親和性ビーズを洗浄緩衝液（１×ＰＢＳ、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０）で洗浄した。その後、ビーズを、溶出緩衝液（１×ＰＢＳ、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０、０．５μＭ非ビオチン化親和性リガンド）に再懸濁し、３０分間室温で振とうさせてインキュベートした。溶出液中のキナーゼ濃度を、ｑＰＣＲで測定した。
【００４７】
ｂ）以下の条件及び手順でキナーゼアッセイを実施するための代替方法：試薬：基本反応緩衝液；２０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ（ｐＨ７．５）、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１ｍＭ  ＥＧＴＡ、０．０２％Ｂｒｉｊ３５、０．０２ｍｇ／ｍｌ  ＢＳＡ、０．１ｍＭ  Ｎａ３ＶＯ４、２ｍＭ  ＤＴＴ、１％ＤＭＳＯ。
【００４８】
反応手順：
１．新しく調製した基本反応緩衝液で表示の基質を調製する。
２．任意の必要な補助因子を上記の基質溶液に送達する。
３．表示のキナーゼを基質溶液に送達し、穏やかに混合する。
４．ＤＭＳＯ中の化合物をキナーゼ反応混合液に送達する。
５．３３Ｐ−ＡＴＰ（比活性  ０．０１μＣｉ／μｌ最終）を反応混合液に送達して、反応を開始させる。
６．キナーゼ反応液を室温で１２０分間インキュベートする。
７．反応液をＰ８１イオン交換紙（Ｗｈａｔｍａｎ社  カタログ番号３６９８−９１５）にスポッティングする。
８．フィルターを０．７５％リン酸で十分に洗浄する。
１０μＭから始めた３倍連続希釈を用いて、化合物を１０用量ＩＣ５０法で試験した。反応は、１０μＭ  ＡＴＰで実施した。
【００４９】
ｃ）以下の条件及び手順でキナーゼアッセイを実施するための代替方法：アッセイは、Ｋｉｎａｓｅ−Ｇｌｏ  Ｐｌｕｓ  ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ  ｋｉｎａｓｅアッセイキット（Ｐｒｏｍｅｇａ社）を使用して実施した。このキットは、キナーゼ反応後に溶液中に残存するＡＴＰ量を定量化することにより、キナーゼ活性を測定する。アッセイの発光シグナルは、存在するＡＴＰの量と相関しており、キナーゼ活性の量と逆相関する。
【００５０】
化合物を、１０％ＤＭＳＯ及び５μｌ希釈液で希釈し、ＤＭＳＯの終濃度が反応の全てで１％となるように、５０μｌの反応液に添加した。酵素反応は全て３０℃で４０分間実施した。５０μｌ反応混合液は、４０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、ｐＨ７．４、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、０．１ｍｇ／ｍｌ  ＢＳＡ、１ｍＭ  ＤＴＴ、０．２ｍｇ／ｍｌ基質ペプチド、１０μＭ  ＡＴＰ、及びＡＬＫを含有する（表２．３．１）。酵素反応の後、５０μｌのＫｉｎａｓｅ−Ｇｌｏ  Ｐｌｕｓ  Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ  ｋｉｎａｓｅアッセイ溶液（Ｐｒｏｍｅｇａ社）を、各反応に添加し、プレートを室温で５分間インキュベートした。発光シグナルを、ＢｉｏＴｅｋ社製Ｓｙｎｅｒｇｙ２マイクロプレートリーダを使用して測定した。ＡＬＫ活性アッセイは、各濃度で重複して実施した。発光データは、コンピュータソフトウェアＧｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍを使用して分析した。ＡＬＫが存在しない場合（Ｌｕｔ）とＡＬＫが存在する場合（Ｌｕｃ）との発光強度の差を、１００％活性（Ｌｕｔ−Ｌｕｃ）として定義した。化合物の存在下での発光シグナル（Ｌｕ）を使用し、％活性を、％活性＝｛（Ｌｕｔ−Ｌｕ）／（Ｌｕｔ−Ｌｕｃ）｝×１００％として計算した。式中、Ｌｕ＝化合物の存在下での発光強度（０未満の活性パーセントは全て、表中では０と示されている）。その後、数式Ｙ＝Ｂ＋（Ｔ−Ｂ）／１＋１０（（ＬｏｇＥＣ５０−Ｘ）×Ｈｉｌｌ傾き）で生成したシグモイド状の用量−反応曲線の非線形回帰分析を使用して、％活性の値対一連の化合物濃度をプロットした。式中、Ｙ＝活性パーセント、Ｂ＝最小活性パーセント、Ｔ＝最大活性パーセント、Ｘ＝化合物の対数、及びＨｉｌｌ傾き＝傾き係数又はＨｉｌｌ係数である。ＩＣ５０値は、最大半量活性パーセントを引き起こす濃度により決定した。
【００５１】
ＢＡＦ３−ＥＭＬ４−ＡＬＫ細胞アッセイ：
ＢＡＦ３−ＥＭＬ４−ＡＬＫ安定細胞系を確立する方法：新しいチューブに５×１０６個のＢＡＦ３細胞を移し、細胞をペレットにし、吸引によりＰＢＳを除去する。細胞を１ｍｌのエレクトロポレーション緩衝液に再懸濁する。これにより５×１０６個の細胞が提供される。２００μｌの細胞懸濁液をＥＰチューブに移し、５ｕｇのＤＮＡを添加し、軽くはじいて氷上に１０分間静置する。２００μｌの細胞懸濁液をピペットで２ｍｍエレクトロポレーションキュベットに移す。キュベットをショックポッドに配置し、蓋を閉じて、パルスボタンを押す。パラメータ設定：指数関数的（Expentional）減衰パルス：ＶＯＬ＝２００Ｖ；ＣＡＰ＝９００ｕＦ、ＲＥＳ＝１０００Ω。全細胞をエレクトロポレーションキュベットから６ウエルプレートに移し、５ｎｇ／ｍｌのＩＬ３を含有する２ｍｌのＤＭＥＭ  Ｆ１２を添加する。２４時間後、培地を、２μｇ／ｍｌのブラスチシジンＳ及び５ｎｇ／ｍｌのＩＬ３を含有するＤＭＥＭ  Ｆ１２に置換し、３日間維持する。培地を、２ｕｇ／ｍｌのブラスチシジンＳ及び２．５ｎｇ／ｍｌのＩＬ３を含有するＤＭＥＭ  Ｆ１２に変更し、３日間維持する。培地を、２ｕｇ／ＭｌのブラスチシジンＳを含有するＤＭＥＭ  Ｆ１２に変更し、培養を維持する。
【００５２】
ＭＴＴ細胞増殖アッセイ：１００μｌ培地を用いた１ウエル当たり５×１０３個の細胞を、９６ウエルプレートに播種した。２４時間後、種々の濃度の化合物を有する１００μｌの新しい培地。細胞を化合物で７２時間処理した後、２０μｌのＭＴＴ（５ｍｇ／ｍｌ）を各ウエルに添加した。プレートを３７℃で４時間インキュベートする。プレートを８００ｇで１０分間遠心分離する。培地を吸引し、１５０μｌのＤＭＳＯを各ウエルに添加する。プレートを１０分間穏やかに振とうする。５７０ｎｍの吸光度をプレートリーダで測定する：ＩＲ＝（ＷＣ−ＷＴ）／ＷＣ。
【００５３】
以下の表Ａには、本発明の代表的な化合物、並びにＡＬＫキナーゼアッセイ及びＢＡＦ３−ＥＭＬ４−ＡＬＫ細胞アッセイにおけるそれらの活性が列挙されている。これらのアッセイでは、以下の分類を使用した：ＩＣ５０が、Ｉ≧１μＭ、１μＭ＞ＩＩ＞０．１μＭ、及びＩＩＩ≦０．１μＭ。
【００５４】
【表１】
2014526524.tif 000004
【００５５】
例えば、ＡＬＫキナーゼアッセイで試験した場合、化合物２０のＩＣ５０は、２．６０ｎＭであり、化合物２２のＩＣ５０は、１．３５ｎＭである。
【００５６】
ｉｎ  ｖｉｖｏ実験の代表的なプロトコールは、以下の通りである：ヌードマウスに皮下ＥＭＬ４−ＡＬＫ−ＢＡＦ３細胞系異種移植モデルを確立し、化合物のｉｎ  ｖｉｖｏ治療効力を評価する。動物：雄Ｂａｌｂ／ｃヌードマウス（６〜８週齢）を、ＳＬＡＣ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌ社、上海、中国から取得した。動物を、上部無菌フィルター付きケージをＨＥＰＡろ過換気ラックに収容したＳＰＦ条件下で飼育した。動物は、無菌げっ歯動物用食餌及び水を自由に摂取した。細胞系：ＢＡＦ３−ＥＭＬ４−ＡＬＫ安定細胞系、腫瘍遺伝子融合体ＥＭＬ４−ＡＬＫを発現することができたＢＡＦ３細胞。胸腺欠損マウスのｓ．ｃ．異種移植モデル：胸腺欠損マウスへの移植用細胞を、１２００ｒ／分で５分間遠心分離することにより回収し、ペレットにした。細胞を１回洗浄し、無菌ＰＢＳ緩衝液に再懸濁して、２００μｌ中５×１０６個にした。その後、細胞を各マウスの右肩甲部にｓ．ｃ．移植し、２００〜３００ｍｍ３に成長させた後で、化合物を投与した。投与製剤の調製：各化合物を、０．５％  ＣＭＣ−Ｎａに再懸濁した。無作為化：腫瘍容積が２００〜３００ｍｍ３に近づいたら、腫瘍容積によりマウスを５群に無作為化することになる。その日をＤ１と称し、その日に治療を開始することになる。投与：用量は、経口経管栄養針を用いて１日１回、日数分投与することになる。腫瘍の容積が２００〜３００ｍｍ３になった際に、経口投与経管栄養により０．５％  ＣＭＣ−Ｎａの溶液で投与する化合物の治療を開始した。観察：接種後、動物の罹患率及び死亡率を毎日チェックすることになる。日常的モニタリングの際に、腫瘍成長及び治療が及ぼす、運動性等の正常な挙動、体重増加／喪失（体重は、週２回又は１日おきに測定されることになる）、目やに／毛のもつれ（eye/hair matting）、及び任意の他の異常な効果に関するあらゆる効果について、動物をチェックすることになる。死亡及び観察された臨床徴候は、各サブセット内の動物数に基づいて記録することになる。腫瘍サイズの測定：腫瘍容積は、３日毎に電子バーニヤ式ノギスで測定することにより決定し、その長さ×幅２×０．５の積として計算した。効果の研究：腫瘍容積は、表示されている日の平均腫瘍容積±ＳＤとして示した。薬物治療マウスの阻害パーセント（％）値を、媒体治療マウスと比較して測定した。値は以下のように計算する：腫瘍成長阻害（ＴＧＩ、％）＝１００−［ＭＴＶ治療／ＭＴＶ対照］×１００。治療群対対照群の有意差（ｐ＜０．０５）は、ｔ検定を使用して決定した。研究エンドポイントで血液を採取した後、頸椎脱臼によりマウスの安楽死を実施し、まず腫瘍組織を採取し、その後腹腔を切開し、肝臓及び脾臓を切除し、次に胆のう（gallblader）をそれぞれ摘出した後、計量した。治療群対対照群間で、臓器重量及び臓器／身体「重量」比を比較した。比率は以下のように計算した：比率＝臓器重量／（体重−腫瘍重量）。また、臓器重量及び臓器／身体「重量」比は両方とも、平均±ＳＤとして示し、治療群と対照群との有意差（ｐ＜０．０５）は、ｔ検定を使用して決定した。
【００５７】
以下の表Ｂには、本発明の代表的な化合物、及び上述のヌードマウスでの皮下ＥＭＬ４−ＡＬＫ−ＢＡＦ３細胞系異種移植モデルにおけるそれらの活性が列挙されている。化合物１８及びクリゾチニブ（Crizotinib）は、経口経管栄養により４０ｍｇ／ｋｇで１日１回、日数分投与した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ、％）を計算した。化合物１８は、クリゾチニブと比較して、有意に良好な腫瘍成長阻害を示した。研究終了時に、肝臓重量を測定した。肝臓重量は、それぞれ、化合物１８では１．３１８グラム、クリゾチニブでは１．１７２グラム、及び対照群では１．５２３だった。
【００５８】
【表２】
2014526524.tif 000005
【００５９】
以下の表Ｃには、本発明の代表的な化合物、及び上述のヌードマウスでの皮下ＥＭＬ４−ＡＬＫ−ＢＡＦ３細胞系異種移植モデルにおけるそれらの活性が列挙されている。化合物２０及び２２を、経口経管栄養針により４０ｍｇ／ｋｇで１日１回、日数分投与した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ、％）を計算した。化合物２０及び２２は、有意な腫瘍成長阻害を示す。
【００６０】
【表３】
2014526524.tif 000006
【００６１】
化合物の合成
所望の手順により式Ｉの化合物を合成する場合、幾つかの実施形態でのステップは、本明細書に記載の手順を含む化合物の調製に好適な順序で、又は本明細書に記載のステップの代替的順序で実施される。１つの実施形態では、必要に応じて、その前又はその後に追加の保護／脱保護ステップがある。幾つかの実施形態では、中間体は、単離されるか又はそのままで使用され、精製されるか又は精製されない。本明細書に記載の阻害化合物の合成に有用な合成化学変換及び保護基方法論（保護及び脱保護）は、当技術分野で公知であり、例えば、非特許文献２〜８に記載のものが含まれる。
【００６２】
本発明の出発物質は、公知であるか、又は市販されているか、又は当技術分野で公知の方法で若しくはその類似方法で合成することができる。多数の出発物質は、公知のプロセスにより調製することができ、特に、実施例に記載のプロセスを使用して調製することができる。出発物質を合成する際、幾つかの場合、官能基は、必要に応じて好適な保護基で保護される。保護基、それらの導入、及び除去は、上述されている。
【００６３】
式Ｉの化合物を、以下のスキームに記載の手順により合成した。置換基は、更なる記述がある場合を除いて、上記の式Ｉで定義した通りである。下述の合成方法は、例示に過ぎず、本発明の化合物は、代替経路により合成することもできる。
【００６４】
本発明の化合物の合成を、スキーム１に記載した。
【００６５】
Ａのアミノ基（「Ｐ」は、Ｂｏｃ、Ｆｍｏｃ、又はＣｂｚ等の、ピペリジンの窒素の保護基を表わす）を、アシル化又はアルキル化により置換して、Ｂを生成することができる。Ｂの保護基を脱保護してＣを生成した。Ｃを更にアルキル化して、Ｄを得ることができた。
【００６６】
【化３】
2014526524.tif 000007
【００６７】
化合物１〜９の合成を、スキーム２に記載した。
【００６８】
【化４】
2014526524.tif 000008
【００６９】
実施例
プロトンＮＭＲスペクトル
別様の指定がない限り、１Ｈ  ＮＭＲスペクトルは全て、Ｖａｒｉａ社製Ｍｅｒｃｕｒｙ３００、４００、５００ＭＨｚ機器又はＢｒｕｋｅｒ社製４００及び５００ＭＨｚ機器で実施した。特徴付けの場合、観察されたプロトンは全て、表示されている適切な溶媒におけるテトラメチルシラン（ＴＭＳ）又は他の内部標準値からのダウンフィールド百万分率（ｐｐｍ）として報告されている。
【００７０】
実施例１：３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−エチルピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン（化合物７）の合成。
【００７１】
【化５】
2014526524.tif 000009
ステップ１．  １−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）エタノール（化合物１）
２，６−ジクロロ−３−フルオロアセトフェノン（３ｇ、１４．５ｍｍｏｌ、１．０当量）を、氷浴を使用して０℃のＴＨＦ中で１０分間撹拌し、水素化アルミニウムリチウム（５５１ｍｇ、１４．５ｍｍｏｌ、１．０当量）をゆっくりと添加した。反応を室温で３時間撹拌した。反応を氷浴で冷却し、水を滴加した後、１５％ＮａＯＨ（０．６ｍＬ）をゆっくりと添加した。混合物を、室温で３０分間撹拌し、１５％ＮａＯＨ（２ｍＬ）、ＭｇＳＯ４を添加し、混合物をろ過して固形物を除去した。固形物をＴＨＦで洗浄し、ろ過液を濃縮して、１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）エタノール（２．８ｇ）を黄色油状物として得た。収率（９２．３％）。
【００７２】
ステップ２．  ３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−２−ニトロピリジン（化合物２）
トリフェニルホスフィン（２．９ｇ、１１．１ｍｍｏｌ、１．５当量）及びＤＥＡＤ（１．８ｇ、１０．４ｍｍｏｌ、１．４当量）の０℃撹拌ＴＨＦ溶液に、１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）エタノール（１．５５ｇ、７．４ｍｍｏｌ、１．０当量）及び３−ヒドロキシ−２−ニトロピリジン（１．１４ｇ、８．１ｍｍｏｌ、１．１の当量）の溶液を添加した。その結果生じた明るいオレンジ色の溶液を、室温で４時間、窒素下で撹拌した。その時点で出発物質は全て消費されていた。溶媒を除去し、粗生成物を、シリカゲルのクロマトグラフィで精製して、３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−２−ニトロピリジン（１．２ｇ）をピンク色の固形物として得た。収率（４８．６％）。
【００７３】
ステップ３．  ３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）ピリジン−２−アミン（化合物３）
ＡｃＯＨ（５０ｍＬ）及びＥｔＯＨ（３０ｍＬ）の溶液に、３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−２−ニトロピリジン（１．１ｇ、３．３ｍｍｏｌ、１．０当量）及び鉄チップ（１．９ｇ、３３．２ｍｍｏｌ、１０当量）を添加した。反応をゆっくりと加熱して還流させ、１時間撹拌した。反応を室温に冷却し、その後酢酸エチル及び水を添加した。炭酸ナトリウムを付加することにより、溶液を注意深く中和した。一緒にした有機抽出液を、飽和炭酸水素ナトリウム（bicarbonate sodium）、水、及びブラインで洗浄し、その後無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮して乾燥させ、３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）ピリジン−２−アミン（９５０ｍｇ）を薄いピンク色の固形物として得た。収率（８６．３％）。
【００７４】
ステップ４．  ５−ブロモ−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）ピリジン−２−アミン（化合物４）
３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）ピリジン−２−アミン（１．０ｇ、３．０ｍｍｏｌ、１．０当量）のアセトニトリル撹拌溶液を、氷浴を使用して０℃に冷却した。この溶液に、Ｎ−ブロモスクシンイミド（５４６．６ｍｇ、３．２ｍｍｏｌ、１．０５当量）を数回に分けて添加した。反応を０℃で１５分間撹拌した。反応を、減圧下で濃縮して乾燥させた。その結果生じた暗色油を酢酸エチルに溶解し、シリカゲルのカラムクロマトグラフィで精製して、５−ブロモ−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）ピリジン−２−アミン（８５０ｍｇ）を、白色固形物として得た。収率（６８．７％）。
【００７５】
ステップ５．  ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（６−アミノ−５−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシラート（化合物５）
窒素雰囲気下のｔｅｒｔ−ブチル４−（４，５−ジヒドロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシラート（７６０ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ、１．０当量）、５−ブロモ−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）ピリジン−２−アミン（９４３ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ、１．２５当量）、及びＮａ２ＣＯ３（６３６ｍｇ、６．０ｍｍｏｌ、３．０当量）の混合物を、ＤＭＦ（２０ｍＬ）、水（５ｍＬ）、及びＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（７３ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ、０．０５当量）で処理した。混合物を窒素バブルで２分間パージし、その後１００℃で一晩撹拌し、室温に冷却し、水（１００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（６×５０ｍＬ）で抽出した。一緒にした有機層を、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルのフラッシュカラムクロマトグラフィで精製して、表題化合物（８００ｍｇ）を得た。収率（７２．７％）。
【００７６】
ステップ６．  ３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン（化合物６）。
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（６−アミノ−５−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシラート（３３０ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ、１．０当量）のＤＣＭ溶液（２０ｍＬ）に、ジオキサンの飽和ＨＣｌ溶液（７ｍＬ）を添加した。ＴＬＣが出発物質の消失を示すまで、反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物のｐＨを、飽和炭酸水素ナトリウムで８に調整した。水溶液を、酢酸エチル（８×２０ｍＬ）で抽出し、一緒にした有機層を、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルのカラムクロマトグラフィで精製して、表題化合物２４０ｍｇを得た（収率８９％）。
【００７７】
ステップ７．  ３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−エチルピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン。
３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン（４５ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）及びＥｔ３Ｎ（３０ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ、３．０当量）のＤＭＦ溶液（２ｍＬ）に、ＥｔＩ（１９ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。反応混合物を、室温で一晩撹拌した。出発物質の消失がＴＬＣにより示され、水（２０ｍＬ）で反応を停止させた。水溶液を、酢酸エチル（８×２０ｍＬ）で抽出し、一緒にした有機層を、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルのカラムクロマトグラフィで精製して、３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−エチルピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミンを、３５ｍｇの白色に近い固形物として得た（収率７３．２％）。Ｈ−ＮＭＲ−ＰＨ−ＮＣ−ＬＸ−００７−０（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３、ｐｐｍ）：７．７６〜７．５７（１Ｈ、ｄ）、７．５６（１Ｈ、ｓ）、７．５０（１Ｈ、ｓ）、７．３３〜７．２８（１Ｈ、ｍ）、７．０５（１Ｈ、ｔ、Ｊ＝１１．７２Ｈｚ）、６．８７（１Ｈ、ｍ）、６．１１．〜６．０４（１Ｈ、ｄｄ）、４．７５（２Ｈ、ｓ）、４．１４（１Ｈ、ｍ）、３．１７〜３．０１（１Ｈ、ｍ）、２．５０〜２．４５（２Ｈ、ｍ）、２．１７〜２．０２（６Ｈ、ｍ）、１．８６〜１．８４（３Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ）、１．１６〜１．１１（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝１９．２Ｈｚ）。
【００７８】
実施例２：Ｎ−（３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド（化合物９）の合成
【００７９】
【化６】
2014526524.tif 000010
ステップ１．  ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（６−アセトアミド−５−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシラート（化合物８）。
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（６−アミノ−５−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシラート（５００ｍｇ、０．９１ｍｍｏｌ）及びピリジン（２８８ｍｇ、３．６４ｍｍｏｌ、４．０当量）のＤＣＭ溶液（２０ｍＬ）に、塩化アセチル（８７ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。反応混合物を、室温で一晩撹拌した。出発物質の消失がＴＬＣにより示され、水（２０ｍＬ）で反応を停止させた。水溶液を、酢酸エチル（８×２０ｍＬ）で抽出し、一緒にした有機層を、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルのカラムクロマトグラフィで精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（６−アセトアミド−５−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシラートを、４５０ｍｇの白色に近い固形物として得た（収率８３．５％）。
【００８０】
ステップ２．  Ｎ−（３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（６−アセトアミド−５−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシラート（３８０ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ、１．０当量）の酢酸エチル溶液（１５ｍＬ）に、ジオキサンの飽和ＨＣｌ溶液（１５ｍＬ）を添加した。ＴＬＣが出発物質の消失を示すまで、反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物のｐＨを、飽和炭酸水素ナトリウムで８に調整した。水溶液を、酢酸エチル（８×２０ｍＬ）で抽出し、一緒にした有機層を、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルのカラムクロマトグラフィで精製して、Ｎ−（３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドを、１９７ｍｇの白色に近い固形物として得た。（収率５８．８％）。Ｈ−ＮＭＲ−ＰＨ−ＮＣ−ＬＸ−００７−０（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６、ｐｐｍ）：８．０７（１Ｈ、ｓ）、８．００（１Ｈ、ｓ、ｂｒ）、７．５６（１Ｈ、ｓ）、７．５０（１Ｈ、ｓ）、７．２７〜７．２２（１Ｈ、ｍ）、７．２３（１Ｈ、ｓ）、６．０７．〜６．０３（１Ｈ、ｍ）、４．２０〜４．１４（１Ｈ、ｍ）、３．２２〜３．１９（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝１２．８Ｈｚ）、２．７３（２Ｈ、ｔ、Ｊ＝１２Ｈｚ）、２．１３〜２．１０（２Ｈ、ｍ）、１．９０〜１．７７（８Ｈ、ｍ、Ｊ）、１．１９〜１．１７（３Ｈ、ｍ）。
【００８１】
実施例３：Ｎ−（３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−エチルピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド（化合物１０）の合成
【００８２】
【化７】
2014526524.tif 000011
Ｎ−（３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド（４５ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ、１．０当量）及びＥｔ３Ｎ（２８ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ、３．０当量）の氷浴ＤＭＦ溶液（２ｍＬ）に、ブロモエタン（２０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ、２．０当量）を数回に分けてゆっくりと添加した。反応混合物を、室温で２０時間撹拌した。出発物質の消失がＴＬＣにより示され、水（２０ｍＬ）で反応を停止させ、酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出し、一緒にした有機層を、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、濃縮した。粗生成物を、シリカゲルカラムで精製して、２０ｍｇのＮ−（３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−エチルピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドを得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、５００Ｈｚ）：δ１．１２〜１．１８（ｍ、３Ｈ）、δ１．７８（ｄ、Ｊ＝６．５Ｈｚ、３Ｈ）、δ２．０６（ｓ、３Ｈ）、δ２．１０〜２．１４（ｍ、２Ｈ）、δ２．７０〜２．８１（ｍ、２Ｈ）、δ３．０９〜３．１（ｍ、２Ｈ）、δ３．３６〜３．４２（ｍ、２Ｈ）、δ４．２５〜４．３３（ｍ、１Ｈ）、δ５．６０〜５．７５（ｍ、１Ｈ）、δ６．１３〜６．１７（ｍ、１Ｈ）、δ７．３６（ｓ、１Ｈ）、δ７．１５〜７．１９（ｍ、１Ｈ）、δ７．４９〜７．５４（ｍ、２Ｈ）、δ７．７９（ｓ、１Ｈ）、δ８．２２（ｓ、１Ｈ）、δ９．４５（ｓ、１Ｈ）。
【００８３】
実施例４：３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−Ｎ−エチル−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン（化合物１１）の合成
【００８４】
【化８】
2014526524.tif 000012
ステップ１．  ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（５−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−６−アミノピリジン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシラート（１５０ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ、１．０当量）のＤＭＦ溶液（２ｍＬ）に、ＮａＨ（２９ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ、４．４当量）を氷浴で添加した。反応混合物を室温で０．５時間撹拌した。その後、ヨードエタン（５４ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ、１．２７当量）のＤＭＦ溶液（１ｍＬ）を添加し、室温で一晩撹拌した。その結果生じた混合物を、２０ｍｌのＨ２Ｏで反応停止させ、ＥＡ（３×２０ｍＬ）で抽出した。粗生成物をシリカゲルカラムで精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（５−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−６−（エチルアミノ）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシラートを、８５ｍｇの白色に近い固形物として得た。
【００８５】
ステップ２．  ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（５−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−６−（エチルアミノ）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシラート（８５ｍｇ、０．１４７ｍｍｏｌ、１．０当量）のＴＨＦ溶液（１ｍＬ）に、濃縮ＨＣｌ（１ｍＬ）を氷浴で添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物のｐＨを、飽和炭酸水素ナトリウムで９に調整した。水溶液を、酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出し、一緒にした有機層を、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、濃縮した。粗生成物を調製用ＴＬＣで精製して、２１ｍｇの表題化合物を得た。
【００８６】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、５００Ｈｚ）：δ１．５７（ｄ、Ｊ＝６．２Ｈｚ、３Ｈ）、δ１．７２〜２．０６（ｍ、６Ｈ）、δ２．１０（ｍ、３Ｈ）、δ２．３５〜２．５９（ｍ、２Ｈ）、δ３．０１〜３．０４（ｍ、２Ｈ）、δ４．１５〜４．２０（ｍ、１Ｈ）、δ５．７９〜５．８２（ｍ、１Ｈ）、δ７．１６〜７．２０（ｍ、１Ｈ）、δ７．２３（ｓ、１Ｈ）、δ７．５２〜７．５５（ｍ、１Ｈ）、δ７．６４〜７．６６（ｍ、１Ｈ）、δ７．７４（ｓ、１Ｈ）、δ８．１８（ｓ、１Ｈ）、δ８．１９（ｓ、１Ｈ）。δ９．７３（ｓ、１Ｈ）。
【００８７】
実施例５：３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−Ｎ−プロピルピリジン−２−アミン（化合物１２）の合成
【００８８】
【化９】
2014526524.tif 000013
化合物１２を、化合物１１の合成について記載したのと同様の手順を使用して、白色に近い固形物としてのｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（５−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−６−アミノピリジン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシラート及びヨードプロパンから、白色に近い固形物として調製した。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、５００Ｈｚ）：δ０．８８〜０．９１（ｍ、３Ｈ）、δ１．２３（ｍ、２Ｈ）、δ１．５５〜１．６２（ｍ、５Ｈ）、δ１．８０〜２．００（ｍ、４Ｈ）、δ２．６８〜２．７３（ｍ、２Ｈ）、δ３．１１〜３．１４（ｍ、２Ｈ）、δ４．２２（ｍ、１Ｈ）、δ５．８２〜５．８３（ｍ、１Ｈ）、δ６．１５〜６．１７（ｍ、１Ｈ）、δ６．９８（ｓ、１Ｈ）、δ７．１５〜７．１９（ｍ、１Ｈ）、δ７．４９〜７．５４（ｍ、２Ｈ）、δ７．５９（ｓ、１Ｈ）、δ７．７９（ｓ、１Ｈ）、δ７．９１（ｓ、１Ｈ）。
【００８９】
実施例６：（Ｓ）−Ｎ−（３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド（化合物１３）の合成
【００９０】
【化１０】
2014526524.tif 000014
化合物１３を、白色に近い固形物としての（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（６−アミノ−５−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシラート（（Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エタノールからの、化合物ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（６−アミノ−５−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシラートの合成について記載したのと同様の手順を使用して）及び塩化アセチルから、化合物９の合成について記載したのと同様の手順を使用して、白色に近い固形物として調製した。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、３００Ｈｚ）：δ１．８０（ｄ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、３Ｈ）、δ２．１０（ｓ、３Ｈ）、δ２．２０〜２．２２（ｍ、２Ｈ）、δ３．０６〜３．１０（ｍ、２Ｈ）、δ３．３９〜３．４１（ｍ、２Ｈ）、δ３．５７〜３．６０（ｍ、２Ｈ）、δ４．５〜４．６（ｍ、１Ｈ）、δ５．７５〜５．８０（ｍ、１Ｈ）、δ６．１５〜６．２５（ｍ、１Ｈ）、δ７．４２〜７．４８（ｍ、１Ｈ）、δ７．５４〜７．９５（ｍ、１Ｈ）、δ７．８４（ｓ、１Ｈ）、δ８．２３（ｓ、２Ｈ）、δ８．９３（ｂｒｓ、１Ｈ）、９．４８（ｂｒｓ、１Ｈ）。
【００９１】
実施例７：（Ｓ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−メチルピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン（化合物１４）の合成
【００９２】
【化１１】
2014526524.tif 000015
化合物１４を、化合物７の合成について記載したのと同様の手順を使用して、白色に近い固形物としての（Ｓ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン及びヨードメタンから、白色に近い固形物として調製した。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、５００Ｈｚ）：δ１．８０（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、３Ｈ）、δ１．９２〜１．９６（ｍ、４Ｈ）、δ２．０８（ｍ、２Ｈ）、δ２．２２（ｓ、３Ｈ）、δ２．８５〜２．８７（ｍ、２Ｈ）、δ４．０５〜４．１０（ｍ、１Ｈ）、δ５．６１（ｓ、２Ｈ）、δ６．０６〜６．１０（ｍ、１Ｈ）、δ６．８９（ｓ、１Ｈ）、δ７．４１〜７．４５（ｍ、１Ｈ）、δ７．５２（ｓ、１Ｈ）、δ７．５５〜７．５８（ｍ、１Ｈ）、δ７．７５（ｓ、１Ｈ）、δ７．９２（ｓ、１Ｈ）。
【００９３】
実施例８：（Ｓ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−ｄ３−メチル−ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン（化合物１５）の合成
【００９４】
【化１２】
2014526524.tif 000016
化合物１５を、化合物７の合成について記載したのと同様の手順を使用して、白色に近い固形物としての（Ｓ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン及びＣＤ３Ｉから、白色に近い固形物として調製した。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、５００Ｈｚ）：δ１．７９（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、３Ｈ）、δ１．９１〜１．９８（ｍ、４Ｈ）、δ２．０２〜２．０７（ｍ、２Ｈ）、δ２．８３〜２．８５（ｍ、２Ｈ）、δ４．０３〜４．０９（ｍ、１Ｈ）、δ５．６１（ｓ、２Ｈ）、δ６．０６〜６．１０（ｍ、１Ｈ）、δ６．８８（ｓ、１Ｈ）、δ７．４１〜７．４５（ｍ、１Ｈ）、δ７．５２（ｓ、１Ｈ）、δ７．５５〜７．５８（ｍ、１Ｈ）、δ７．７５（ｓ、１Ｈ）、δ７．７９（ｓ、１Ｈ）。
【００９５】
実施例９：（Ｓ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−エチルピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン（化合物１６）の合成
【００９６】
【化１３】
2014526524.tif 000017
化合物１６を、化合物７の合成について記載したのと同様の手順を使用して、白色に近い固形物としての（Ｓ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン及びヨードエタンから、白色に近い固形物として調製した。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、５００Ｈｚ）：δ１．００〜１．０１（ｍ、３Ｈ）、δ１．７９〜１．８０（ｄ、Ｊ＝６．５５Ｈｚ、３Ｈ）、δ１．８９〜１．９３（ｍ、２Ｈ）、δ１．９７〜２．０３（ｍ、４Ｈ）、δ２．３６（ｍ、２Ｈ）、δ２．９３〜２．９５（ｍ、２Ｈ）、δ４．０８（ｍ、１Ｈ）、δ５．６０（ｓ、２Ｈ）、δ６．０６〜６．１０（ｍ、１Ｈ）、δ６．８９（ｓ、１Ｈ）、δ７．４１〜７．４５（ｍ、１Ｈ）、δ７．５２（ｓ、１Ｈ）、δ７．５５〜７．５７（ｍ、１Ｈ）、δ７．７４（ｓ、１Ｈ）、δ７．９３（ｓ、１Ｈ）。
【００９７】
実施例１０：（Ｓ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−ｄ５−エチル−ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン（化合物１７）の合成
【００９８】
【化１４】
2014526524.tif 000018
化合物１７を、化合物７の合成について記載したのと同様の手順を使用して、（Ｓ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン及びＣＤ２ＣＤ３Ｉから、白色に近い固形物として調製した。
【００９９】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、５００Ｈｚ）：δ１．８０（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、３Ｈ）、δ１．８９〜１．９３（ｍ、２Ｈ）、δ１．９７〜２．０２（ｍ、４Ｈ）、δ２．９２〜２．９４（ｍ、２Ｈ）、δ４．０７（ｍ、１Ｈ）、δ５．６０（ｓ、１Ｈ）、δ６．０６〜６．１０（ｍ、１Ｈ）、δ６．８９（ｓ、１Ｈ）、δ７．４１〜７．４５（ｍ、１Ｈ）、δ７．５１（ｓ、１Ｈ）、δ７．５５〜７．５７（ｍ、１Ｈ）、δ７．７４（ｓ、１Ｈ）、δ７．９３（ｓ、１Ｈ）。
【０１００】
実施例１１：（Ｒ）−Ｎ−（３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド（化合物１８）の合成
【０１０１】
【化１５】
2014526524.tif 000019
ステップ１．  （Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（６−アミノ−５−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシラート（４ｇ、７．２７ｍｍｏｌ、１．０当量）及びピリジン（２．３ｇ、２９．１ｍｍｏｌ、４．０当量）の５０ｍｌ  ＤＣＭ溶液に、塩化アセチル（０．８６ｇ、１０．９ｍｍｏｌ、１．５当量）を氷浴で添加した。反応混合物を、室温で一晩撹拌した。その結果生じた混合物を、Ｈ２Ｏで洗浄した（３×２０ｍＬ）。有機層を乾燥及び濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムで精製して、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（６−アセトアミド−５−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシラート、１．６６ｇを得た（収率３８．６％）。
【０１０２】
ステップ２．  （Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（６−アセトアミド−５−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシラート（５００ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ、１．０当量）のＤＣＭ溶液（５ｍＬ）に、トリフルオロ酢酸（２ｍｌ）を氷浴で添加した。反応混合物を、室温で２時間撹拌した。反応混合物のｐＨを、飽和炭酸水素ナトリウムで９に調整した。水溶液を、酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出し、一緒にした有機層を、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムで精製して、（Ｒ）−Ｎ−（３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド、２５０ｍｇを得た（収率６０．２％）。
【０１０３】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００Ｈｚ）：δ１．８８（ｄ、Ｊ＝６．４Ｈｚ、３Ｈ）、δ１．９０〜１．９４（ｍ、２Ｈ）、δ２．１６〜２．２０（ｍ、２Ｈ）、δ２．４８（ｓ、３Ｈ）、δ２．７６〜２．８２４（ｍ、２Ｈ）、δ３．２５〜３．２８（ｍ、２Ｈ）、δ３．６９〜３．７４（ｍ、１Ｈ）、δ４．２２〜４．２６（ｍ、１Ｈ）、δ６．１０〜６．１５（ｍ、１Ｈ）、δ７．０５〜７．０７（ｍ、１Ｈ）、δ７．０９（ｓ、１Ｈ）、δ７．３０〜７．３３（ｍ、１Ｈ）、δ７．５９（ｓ、１Ｈ）、δ７．６２（ｓ、１Ｈ）、δ８．０６（ｓ、１Ｈ）、δ８．１２（ｓ、１Ｈ）。ＭＳ  ｍ／ｚ  ４９３［Ｍ＋１］。
【０１０４】
実施例１２：（Ｒ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−メチルピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン（化合物１９）の合成。
【０１０５】
【化１６】
2014526524.tif 000020
化合物１９を、化合物７の合成について記載したのと同様の手順を使用して、白色に近い固形物としての（Ｒ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン及びヨードメタンから、白色に近い固形物として調製した。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、５００Ｈｚ）：δ１．８０（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、３Ｈ）、δ１．９４〜１．９９（ｍ、４Ｈ）、δ２．１７〜２．１９（ｍ、２Ｈ）、δ２．２８（ｓ、３Ｈ）、δ２．９２（ｍ、２Ｈ）、δ４．１１（ｍ、１Ｈ）、δ５．６２（ｓ、２Ｈ）、δ６．０６〜６．１０（ｍ、１Ｈ）、δ６．８９（ｓ、１Ｈ）、δ７．４１〜７．４５（ｍ、１Ｈ）、δ７．５３（ｓ、１Ｈ）、δ７．５５〜７．５７（ｍ、１Ｈ）、δ７．７５（ｓ、１Ｈ）、δ７．９３（ｓ、１Ｈ）。ＭＳ  ｍ／ｚ  ４６５［Ｍ＋１］。
【０１０６】
実施例１３：（Ｒ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−ｄ３−メチルピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン（化合物２０）の合成
【０１０７】
【化１７】
2014526524.tif 000021
化合物２０を、化合物７の合成について記載したのと同様の手順を使用して、白色に近い固形物としての（Ｒ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン及びＣＤ３Ｉから、白色に近い固形物として調製した。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、５００Ｈｚ）：δ１．８０（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、３Ｈ）、δ１．９１〜１．９８（ｍ、４Ｈ）、δ２．０７（ｍ、２Ｈ）、δ２．８４〜２．８７（ｍ、２Ｈ）、δ４．０５〜４．０９（ｍ、１Ｈ）、δ５．６２（ｓ、２Ｈ）、δ６．０６〜６．１０（ｍ、１Ｈ）、δ６．８９（ｓ、１Ｈ）、δ７．４１〜７．４５（ｍ、１Ｈ）、δ７．５２（ｓ、１Ｈ）、δ７．５５〜７．５７（ｍ、１Ｈ）、δ７．７５（ｓ、１Ｈ）、δ７．９２（ｓ、１Ｈ）。ＭＳ  ｍ／ｚ  ４６８［Ｍ＋１］。
【０１０８】
実施例１４：（Ｒ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−エチルピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン（化合物２１）の合成
【０１０９】
【化１８】
2014526524.tif 000022
化合物２１を、化合物７の合成について記載したのと同様の手順を使用して、白色に近い固形物としての（Ｒ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン及びＣＨ２ＣＨ３Ｉから、白色に近い固形物として調製した。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、５００Ｈｚ）：δ１．０１（ｔ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、３Ｈ）、δ１．８０（ｄ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、３Ｈ）、δ１．８９〜２．０２（ｍ、６Ｈ）、δ２．３６（ｍ、２Ｈ）、δ２．９３〜２．９５（ｍ、２Ｈ）、δ４．０８（ｍ、１Ｈ）、δ５．６２（ｓ、２Ｈ）、δ６．０６〜６．１０（ｍ、１Ｈ）、δ６．８９（ｓ、１Ｈ）、δ７．４１〜７．４５（ｍ、１Ｈ）、δ７．５１（ｓ、１Ｈ）、δ７．５５〜７．５７（ｍ、１Ｈ）、δ７．７４（ｓ、１Ｈ）、δ７．９３（ｓ、１Ｈ）。ＭＳ  ｍ／ｚ  ４７８［Ｍ＋１］。
【０１１０】
実施例１５：（Ｒ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（１−ｄ５−エチルピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン（化合物２２）の合成。
【０１１１】
【化１９】
2014526524.tif 000023
化合物２２を、化合物７の合成について記載したのと同様の手順を使用して、白色に近い固形物としての（Ｒ）−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）−５−（１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−アミン及びＣＤ２ＣＤ３Ｉから、白色に近い固形物として調製した。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、５００Ｈｚ）：δ１．８０（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）、δ１．８９−２．０２（ｍ、６Ｈ）、δ２．９３（ｍ、２Ｈ）、δ４．０８（ｍ、１Ｈ）、δ５．６２（ｓ、２Ｈ）、δ６．０６−６．１０（ｍ、１Ｈ）、δ６．８９（ｓ、１Ｈ）、δ７．４１−７．４５  （ｍ、１Ｈ）、δ７．５２（ｓ、１Ｈ）、δ７．５５−７．５７（ｍ、１Ｈ）、δ７．７４（ｓ、１Ｈ）、δ７．９３（ｓ、１Ｈ）。ＭＳ  ｍ／ｚ  ４８４［Ｍ＋１］。
【０１１２】
実施例１６：
ＰＫ（薬物動態）の代表的なプロトコールは。以下の通りである：使用した動物は、ウィスターラット、雄、及び体重約３００〜３５９グラムだった。化合物２１及び２２を、カセット投与により、ＩＶ又は経口のいずれかで同じ動物に投与した。各化合物の用量は、ＩＶでは１ｍｇ／ｋｇ（容積５ｍｌ／ｋｇ）、経口では２ｍｇ／ｋｇ（容積１０ｍｌ／ｋｇ）である。ＩＶ用の製剤にはＰＢＳを用い、化合物が全て溶解するまで希釈ＨＣｌでｐＨを調整する。経口製剤には、０．５％ナトリウム−ＣＭＣ懸濁液を使用した。試料採取：ＩＶ径路の場合、血漿試料を、０．０８３、０．２５、０．５、１、１．５、２、４、６、８、１２、２４時間の時点で採取した。経口経路の場合、血漿試料を、０．１６７、０．３３、０．５、１、２、４、６、８、１２、２４時間の時点で採取した。分析：ＬＣ−ＭＳ／ＭＳを使用して、ＰＫパラメータ：ｔ１／２、ｔｍａｘ、Ｃｍａｘ、Ｖｓｓ、及びＡＵＣ等を計算する。
【０１１３】
下記の表Ｄには、化合物２１及び２２、並びに同じ動物への各容量当たりＩＶカセット１ｍｇ／ｋｇによる、それらのＰＫ特性が列挙されている。
【０１１４】
【表４】
2014526524.tif 000024
【０１１５】
下記の表Ｅには、化合物２１及び２２、並びに同じ動物への各容量当たりＩＶカセット２ｍｇ／ｋｇによる、それらのＰＫ特性が列挙されている。
【０１１６】
【表５】
2014526524.tif 000025
【０１１７】
化合物２２は、２０．７７％の生物学的利用能を示し、化合物２１は、１６．８２％の生物学的利用能を示した。
【国際調査報告】
2014526524.tif 000027
2014526524.tif 000028
2014526524.tif 000029
2014526524.tif 000030
2014526524.tif 000031
2014526524.tif 000032
2014526524.tif 000033