(57)【要約】  本発明は、アポミクシスのダイズ品種およびその作出方法を提供する。本発明は、アポミクシスを付与するＡＰ１と命名された変異対立遺伝子を有するアポミクシスのダイズ植物に関する。本発明は、新規な種類および品種のアポミクシスのダイズ植物を作出するための、ＡＰ１変異対立遺伝子を含むダイズ植物の交雑に関する。
2014513541.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
市販ダイズ品種よりも高い莢転換率およびより多い植物あたりの莢数を示すダイズアポミクシス植物を作出する方法であって、
ａ．複数の複胚珠種子を選抜するステップと、
ｂ．前記種子をダイズ植物に生長させるステップと、
ｃ．約５１％を超える転換率および植物あたり少なくとも６０個の莢を有するダイズ植物を選抜し、ダイズアポミクシス植物を作出するステップ
とを含む方法。
【請求項２】
約６０％を超える転換率を有する植物を選抜する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
植物あたり少なくとも１００個の莢を有する植物を選抜する、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
ａ．雄としての選抜したアポミクシスのダイズ植物を雌としての異なるダイズ植物と交雑育種するステップと、
ｂ．雌のダイズ植物から種子を収穫するステップと、
ｃ．雌のダイズ植物からの前記種子を生長させるステップと、
ｄ．約５１％を超える転換率および植物あたり少なくとも６０個の莢を有するダイズ植物を選抜するステップ
とをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
約６０％を超える転換率を有する植物を選抜する、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
植物あたり少なくとも１００個の莢を有する植物を選抜する、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
ａ．雌としての選抜したアポミクシスのダイズ植物を雄としての異なるダイズ植物と交雑育種するステップと、
ｂ．雌のダイズ植物から種子を収穫するステップと、
ｃ．雌のダイズ植物からの前記種子を生長させるステップと、
ｄ．約５１％を超える転換率および植物あたり少なくとも６０個の莢を有するダイズ植物を選抜するステップ
とをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
約６０％を超える転換率を有する植物を選抜する、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
植物あたり少なくとも１００個の莢を有する植物を選抜する、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
アポミクシスのダイズ植物が有限生長習性を有し、成熟群ＶからＸに適合する、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
アポミクシスのダイズ植物が約５１％から約７０％の間の転換率を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
アポミクシスのダイズ植物が約７０％から約９０％の間の転換率を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
アポミクシスのダイズ植物が約９０％から約１００％の転換率を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
アポミクシスのダイズ植物が植物あたり約６０から約１００個の莢を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
アポミクシスのダイズ植物が植物あたり約１００から約２００個の間の莢を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
アポミクシスのダイズ植物が植物あたり約２００から約３００個の間の莢を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
アポミクシスのダイズ植物が植物あたり約３００から約４００個の間の莢を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
アポミクシスのダイズ植物が植物あたり４００個を超える莢を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
アポミクシスのダイズ植物がＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１１８９２で寄託された品種Ｓ−２０１である、請求項１に記載の方法。
【請求項２０】
請求項１に記載の方法で作出される、アポミクシスのダイズ植物。
【請求項２１】
請求項２０に記載のアポミクシスのダイズ植物から生産される、アポミクシスのダイズ種子。
【請求項２２】
ダイズ品種Ｓ−２０１のアポミクシスのダイズ植物であって、前記ダイズ品種の代表的種子がＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１１８９２で寄託されている、アポミクシスのダイズ植物。
【請求項２３】
請求項２２に記載のダイズ品種Ｓ−２０１の後代である、アポミクシスのダイズ植物。
【請求項２４】
代表的種子がＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１１８９２で寄託されたダイズ品種Ｓ−２０１の種子。
【請求項２５】
請求項２２に記載のアポミクシスのダイズ品種をそれ自体とまたは第２のダイズ植物と交雑することおよび得られた種子を収穫することを含む、ダイズ種子を作出する方法。
【請求項２６】
請求項２２に記載の植物を第２の異なるダイズ植物と交雑することおよび得られたＦ１雑種種子を収穫することを含む、雑種ダイズ種子を作出する方法。
【請求項２７】
請求項２６に記載の方法によって作出されるＦ１雑種種子。
【請求項２８】
請求項２７に記載の前記種子を生長させることによって作出される、アポミクシスのダイズ植物またはその一部。
【請求項２９】
所望の形質を付与する導入遺伝子を導入することを含む、請求項２２に記載のアポミクシスのダイズ植物に所望の形質を導入する方法であって、所望の形質が雄性不稔、除草剤耐性、昆虫または有害生物抵抗性、病害抵抗性、改変された脂肪酸代謝、改変された炭水化物代謝および改変されたダイズ繊維特性からなる群から選択される、方法。
【請求項３０】
所望の形質が除草剤耐性であり、耐性が、グリホセート、スルホニル尿素、イミダゾリノン、ジカンバ、グルホシネート、ホスフィノトリシン、フェノキシプロピオン酸、シクロスヘキソン、トリアジン、ベンゾニトリルおよびブロキシニルからなる群から選択される除草剤に対して付与される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
所望の形質を有する、請求項２９に記載の方法によって作出される植物。
【請求項３２】
請求項２２に記載のアポミクシスのダイズ植物に由来する近交系のダイズ植物を作出する方法であって、
ａ．ダイズ品種Ｓ−２０１植物を第２品種のダイズ植物と交雑することによって、ダイズ品種Ｓ−２０１に由来する後代植物を作出するステップと、
ｂ．前記後代植物をそれ自体とまたは第２の植物と交雑して、次世代の後代植物の種子を作出するステップと、
ｃ．前記種子から次世代の後代植物を生長させ、次世代の後代植物をそれ自体とまたは第２の植物と交雑するステップと、
ｄ．ダイズ品種Ｓ−２０１に由来する近交系のダイズ植物が作出されるまで、最後の２ステップを反復するステップ
とを含む、方法。
【請求項３３】
請求項２２に記載のアポミクシスのダイズ植物またはその一部を得ることおよびそれらから植物性商品生産物を生産することを含む、植物性商品生産物を生産する方法。
【請求項３４】
植物性商品生産物がタンパク質濃縮物、タンパク質分離物、ダイズ皮、ダイズミール、ダイズ粉またはダイズ油である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
１０００種子あたり約１から約５個の間の複胚珠種子の複胚珠種子頻度という特性を有するダイズ品種のダイズ植物であって、前記複胚珠種子頻度が変異対立遺伝子ＡＰ１によって付与され、前記変異対立遺伝子を含む種子の代表的な試料がＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１１８９２で寄託された、ダイズ植物。
【請求項３６】
前記複胚珠種子頻度が１０００種子あたり約１から約４個の複胚珠種子である、請求項３５に記載のダイズ植物。
【請求項３７】
前記複胚珠種子頻度が１０００種子あたり約１から約３個の間の複胚珠種子である、請求項３５に記載のダイズ植物。
【請求項３８】
前記複胚珠種子頻度が１０００種子あたり約１から約２個の間の複胚珠種子である、請求項３５に記載のダイズ植物。
【請求項３９】
前記複胚珠種子頻度が平均で１０００種子あたり約１．３複胚珠種子である、請求項３５に記載のダイズ植物。
【請求項４０】
アポミクシスのさらなる特性を有する、請求項３５に記載のダイズ植物。
【請求項４１】
アポミクシスのさらなる特性を有する、請求項３６に記載のダイズ植物。
【請求項４２】
アポミクシスのさらなる特性を有する、請求項３７に記載のダイズ植物。
【請求項４３】
アポミクシスのさらなる特性を有する、請求項３８に記載のダイズ植物。
【請求項４４】
アポミクシスのさらなる特性を有する、請求項３９に記載のダイズ植物。
【請求項４５】
請求項２２に記載の植物由来のプロトプラストまたは細胞からもたらされる組織培養物であって、前記細胞またはプロトプラストが、葉、花粉、胚珠、胚、子葉、胚軸、分裂組織的細胞、根、根端、雌ずい、葯、花、種子、シュート、茎、莢および葉柄からなる群から選択される植物部分からもたらされる、組織培養物。
【請求項４６】
請求項４５に記載の組織培養物から再分化されるダイズ植物。
【請求項４７】
ＡＰ１と命名された変異対立遺伝子を含むダイズ種子であって、前記対立遺伝子ＡＰ１を含む種子の代表的な試料がＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１１８９２で寄託された、ダイズ種子。
【請求項４８】
請求項４７に記載の種子を生長させて作出されるダイズ植物またはその一部。
【請求項４９】
米国の成熟群ＶからＸで育てられる市販ダイズ品種と比較して収量が増加する、
有限型のアポミクシスのダイズ植物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一般にアポミクシスのダイズ植物を提供し、より詳細には、花から莢への転換に関して５１％を超えるまたは花から莢への転換に関して６０％を超える平均転換率、および平均、植物あたり少なくとも５１個の莢または植物あたり少なくとも６０個の莢または植物あたり少なくとも１００個の莢を有するアポミクシスのダイズ植物を提供する。本発明は、アポミクシスのダイズ植物の作出方法をさらに提供する。本出願中に引用する全ての刊行物は、参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
任意の新規な望ましい植物遺伝資源の開発には多数のステップがある。植物育種は、現在の遺伝資源の問題点および欠点を解析し明確にすること、所望の目標を設定すること、ならびに特定の育種目的を明確にすることから始まる。次のステップは、所望の目標を満たす形質を持つ遺伝資源を選抜することである。目標は、単一品種内に、親の遺伝資源由来の望ましい形質の向上した組合せを兼ね備えることである。これらの重要形質には、より高い種子収量、病害抵抗性および昆虫抵抗性、より優れた茎および根、乾燥耐性および高温耐性、より優れた農業品質、除草剤抵抗性および組成に関する形質の向上が含まれ得る。
【０００３】
植物の生殖は、有性または無性に通常分類される。アポミクシスという用語は、有性生殖が様々な形態の無性生殖に置換されることと一般に認められている（Riegerら、In Glossary of Genetics and Cytogenetics、Springer-Verlag、New York、NY.、1976）。アポミクシスは、遺伝的に制御されている植物の生殖方法であり、卵核および精核が合体しないで胚が形成される。ほとんどの形態のアポミクシスでは、胚乳を生じるための極核の偽受精または受精が、種子の生存能にとって必要である。絶対的なアポミクトは、完全に閉じられた組換え系を有する、すなわち組換えは小胞子形成の間のみ起こり大胞子形成の間は起こらないと考えられている。条件的アポミクトでは、アポミクシスおよび有性方式の両方の生殖が共存する。既知のアポミクシス機構の全ては、３つの発生要素、すなわち、事前の減数分裂なしで胚形成可能な細胞の生成（アポマイオシス）、受精非依存性の自発的な胚の発生（単為生殖）および自律的に胚乳を生じる能力または受精に由来する胚乳を使用する能力を持つ（Koltunow, A.M.、Plant Cell 5、1425〜1437、1993およびCarman J.G、Biol. J. Linn. Soc. 61、51〜94、1997）。
【０００４】
アポミクシスはどんなヘテロ接合にもかかわらずいかなる遺伝子型ももたらすことができるので、純系を育てるために植物育種においてアポミクシスを使用することは経済的な可能性を有する。アポミクシスは、雌性減数分裂および配偶子合体をバイパスして、雌親と遺伝的に同一の胚を生じる生殖方法である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
ダイズ、グリシンマックス（Glycine max（L））は、有用な農作物である。したがって、植物育種家の不変の目標は、農学的にしっかりとした、安定的な高収量のダイズ品種を開発することである。この目標の根拠は、使用する耕地で生産される穀粒の量を最大にすること、および動物およびヒトの両方に食物を供給することにある。この目標を達成するために、ダイズ育種家は、優れた品種をもたらす形質を有するダイズ植物を選抜および開発しなければならない。現在の既知のダイズ品種は、花から莢への転換に関して５０％未満の平均転換率、および植物あたりたった５０個の莢の平均しか示さない。
【０００６】
したがって、花から莢へのより高い転換率および植物あたりより多い莢数があるダイズ品種を有することが望ましいと思われる。そのような品種を作出するための容易な方法があれば、さらに望ましいであろう。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の一態様では、市販ダイズ品種よりも花から莢への転換率が大きく、植物あたりの莢数が多いダイズアポミクシス植物を作出する方法であって、複数の複胚珠種子を選抜するステップと、前記種子をダイズ植物に生長させるステップと、約５１％を超える転換率および植物あたり少なくとも５１個の莢を有する植物を選抜するまたは約６０％を超える転換率および植物あたり少なくとも６０個の莢を有する植物を選抜するまたは約６０％を超える転換率および植物あたり少なくとも１００個の莢を有する植物を選抜するステップとを含む方法が提供される。選抜した植物は、アポミクシスであることのさらなる特性を有する。
【０００８】
本発明の別の態様では、親植物と比較して雑種強勢の増大を示すダイズアポミクシス植物を作出する方法に対して、選抜したアポミクシスのダイズ植物を雄として、雌としての異なるダイズ植物と交雑育種するステップと、雌のダイズ植物から複数の種子を選抜するステップと、前記種子をダイズ植物に生長させるステップと、約３０％を超える雑種強勢および植物あたり少なくとも６０個の莢を有する植物を選抜するまたは約５０％を超える雑種強勢および植物あたり少なくとも６０個の莢を有する植物を選抜するまたは約５０％を超える雑種強勢および植物あたり少なくとも１００個の莢を有する植物を選抜するステップとを含むさらなるステップが提供される。選抜した植物は、アポミクシスであることのさらなる特性を有する。
【０００９】
本発明のさらなる態様では、アポミクシスのダイズ植物品種Ｓ−２０１、ＣＮ−０６２９および７Ｂ１が提供される。これらの品種の種子および後代も提供される。
【００１０】
本発明のさらに別の態様では、ダイズ品種Ｓ−２０１植物をそれ自体とまたは第２のダイズ植物と交雑させることを含む、ダイズ種子を作出する方法であって、前記ダイズ品種の代表的種子がアメリカ培養細胞系統保存機関（ＡＴＣＣ）に寄託され、受託番号ＰＴＡ−１１８９２が割り当てられた方法が提供される。
【００１１】
本発明のさらなる態様では、所望の形質が付加されたダイズ品種Ｓ−２０１植物を作出する方法であって、所望の形質を付与する導入遺伝子をダイズ品種Ｓ−２０１植物に導入することを含み、前記ダイズ品種の代表的種子がＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１１８９２を有する方法が提供される。
【００１２】
本発明の別の態様では、ダイズ品種Ｓ−２０１に由来する近交系ダイズ植物を作出する方法であって、ダイズ品種Ｓ−２０１の植物を第２の品種のダイズ植物と交雑することによってダイズ品種Ｓ−２０１に由来する後代植物を調製し、前記ダイズ品種Ｓ−２０１の代表的種子がＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１１８９２を有するステップと、後代植物をそれ自体とまたは第２の植物と交雑して次世代の後代植物の種子を作出するステップと、前記種子から次世代の後代植物を生長させ、次世代の後代植物をそれ自体または第２の植物と交雑するステップと、ダイズ品種Ｓ−２０１に由来する近交系のダイズ植物が作出されるまで最後の２ステップを繰り返すステップとを含む方法が提供される。
【００１３】
本発明のこれらのおよび他の特色、態様および利点は、以下の図面、説明および特許請求の範囲を参照することによってより良く理解されるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】ダイズ品種Ｓ−２０１から選抜した複胚珠種子の例を示す写真である。
【図２】ダイズ品種ＣＮ−０６２９由来の１対の端部から端部の複胚珠種子の例を示す写真である。
【図３】ダイズ品種７Ｂ１由来の端部から端部および側部から側部の複胚珠の例を示す写真である。
【図４】選抜用に生長させたダイズ品種Ｓ−２０１のいくつかのダイズ植物の均一性を示す写真である。
【図５】本発明によるアポミクシスのダイズ品種の典型的な転換率を示す写真である。
【図６】植物あたり１５０個を超える莢を有する、２つの７Ｂ１植物を示す写真である。
【図７】１６個の莢を有する、７Ｂ１植物の単一の節を示す写真である。
【図８】花から莢への高い転換率を有する、７Ｂ１植物の単一の節を示す写真である。
【図９】図６、７および８に示す系統の７Ｂ１植物を示す写真である。
【図１０】７Ｂ１植物の９個の節についている９０個の莢を示す写真である。
【図１１】７Ｂ１植物の３個の節についている３８個の莢を示す写真である。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
以下の説明および例において、いくつかの用語を使用する。こうした用語が与えられるべき範囲を含めた、明細書および特許請求の範囲の明瞭かつ一貫性がある理解を提供するために、以下の定義を提供する。定義が提供されない場合は、本明細書で使用する全ての他の技術用語および科学用語は、本発明が属する分野の当業者によって通常理解されるのと同じ意味を有する。
【００１６】
対立遺伝子。対立遺伝子は、１つの形質または特性に関連する、遺伝子の１種または複数の任意の代替形態である。二倍体の細胞または生物では、所与の遺伝子の２つの対立遺伝子が１対の相同染色体上の対応する遺伝子座を占める。
【００１７】
アポミクシスの。本明細書で使用する場合、「アポミクシスの」は、アポミクシスを用いて繁殖する植物について記載する。
【００１８】
アポミクシス。有性的に繁殖することもできる、生物の無性生殖であって、受精をせずにまたは特殊化した生殖細胞を作り出すことなく胚が形成される。
【００１９】
戻し交雑。戻し交雑は育種家が雑種後代を親の一方と、例えば第１代雑種Ｆ１をＦ１雑種の親の遺伝子型の１つと、繰り返し交雑して戻す、方法である。
【００２０】
交雑育種。本明細書で使用する場合、「交雑育種」は、植物の異なる種または品種の個体を交配（交雑）して雑種を作出する行為を指す。
【００２１】
有限生長。この成長では、軸または中心の茎が、花の生殖構造の発達によって制限されて、生育期中に無限に生長または伸長しない生長。有限生長を伴う植物は、開花期が短く、茎の全長に沿って莢を生じる。
【００２２】
複胚珠種子。莢の中で１つの臍を共有する２つの生存種子の産生。一方の種子は正常種子と呼ばれ、２つめの種子は「姉妹細胞」と呼ばれる。一般的には、非常に少ない割合のダイズ植物しか複胚珠種子を生じない。
【００２３】
異所性発現。期待される時または場所を外れた遺伝子発現。
【００２４】
除雄。自家受粉を防止するための雄花または葯の除去。
【００２５】
胚。胚は、成熟種子に含まれる小さな植物である。
【００２６】
遺伝子。本明細書で使用する場合、「遺伝子」は核酸のセグメントを指す。遺伝子は、形質転換または様々な育種方法を使用して、異種からであろうと同種からであろうと、ある種のゲノム中に導入することができる。
【００２７】
遺伝子型。本明細書で使用する場合、「遺伝子型」は、細胞または生物の遺伝子構成を指す。
【００２８】
生育期。春に播種してから秋に作物を収穫するまでの期間。
【００２９】
臍。この用語は、種子が収穫される前に種子が莢についていた場所を印す、種子に残された痕跡を指す。
【００３０】
雑種。１種または複数の遺伝性の特性が異なる両親のヘテロ接合子孫。
【００３１】
雑種強勢。この用語は、種間雑種によって発現される、それらの遺伝的異質性に起因する、（通常、収量に関して）高いまたは向上した能力を指す。この高い能力は、一般的に雑種の子孫で失われるので、播種毎に新しい雑種種子を得ることを農業者に強いることになる。
【００３２】
胚軸。胚軸は、胚また実生の、子葉および根の間の部分である。したがって、胚軸はシュートと根の間の移行部とみなすことができる。
【００３３】
無限生長。この生長では、軸または中心茎が生育期中に生長または伸長し続け、開花は、茎が生長し続けながら、通常３０〜３８日間続く。無限生長を伴う植物は、開花期が長く、茎の末端の最後の３節に莢を生じない。
【００３４】
主茎。節を有する、根から末端の植物部分であり、枝をつけるものもあるし、花および莢だけをつけるものもある。これは、植物の茎である唯一の部分である。
【００３５】
成熟日。植物は、９５％の莢が成熟した色に達した時に成熟したとみなされる。日数は、８月３１日または播種日のいずれかから計算される。
【００３６】
成熟群。この用語は、主として日長または緯度に従った、それらが適応している地理的領域に基づく品種群の合意された業界区分を指す。これらは、非常に長い日長の品種（０００、００、０群）を基礎とし、非常に短い日長の品種（ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ群）まで及ぶ。
【００３７】
大胞子母細胞。胚珠の前駆体。受精後に、種子に分化するまで、２つの等しい細胞、４細胞、８細胞などに分裂する単一の細胞。アポミクシスでは、大胞子母細胞は、受精なしで分裂を開始するよう刺激され、２細胞、４細胞、８細胞などをもたらし、それらの全てが、大胞子母細胞のものと同一の、全く同じ遺伝物質を含む。分化は正常細胞と同様に起こり、生存種子を産生する。
【００３８】
減数分裂。有性生殖を行う生物において、生殖細胞をもたらす細胞分裂。核は、それぞれが半分の染色体数を含む４つの核に分裂する。
【００３９】
節。葉、莢または側枝が生長する、植物の茎上の場所。
【００４０】
胚珠。雌植物の全ての遺伝物質を含む単一の細胞。
【００４１】
転換率。本明細書で使用する場合、「転換率」という用語は、莢に転換されるまたは発達する、ダイズ植物の花の平均の割合を指す。
【００４２】
植物。本明細書で使用する場合、「植物」という用語には、種子、穀粒または葯が除去された植物を含めた、未成熟のまたは成熟した植物全体への言及が含まれる。植物をもたらす種子または胚も、植物であるとみなされる。
【００４３】
草高。草高は、土の表面から植物の最も高い場所または軸まで測り、インチで測定する。
【００４４】
植物部位。本明細書で使用する場合、「植物部位」（またはダイズ植物もしくはその部位）という用語には、これらに限定されないが、プロトプラスト、葉、茎、根、根端、葯、雌ずい、種子、穀粒、胚、花粉、胚珠、子葉、胚軸、莢、花、シュート、組織、葉柄、細胞、分裂組織的細胞などが含まれる。
【００４５】
莢。この用語は、ダイズ植物の実を指す。これは、外皮または殻（果皮）および外皮の内側にあるダイズ種子から成る。
【００４６】
倍数体。その各親から２組以上の染色体を受け取る植物。
【００４７】
後代。本明細書で使用する場合、２つのダイズ植物の交雑から作出されるＦ１ダイズ植物が含まれ、これらに限定されないが、引き続くＦ２、Ｆ３、Ｆ４、Ｆ５、Ｆ６、Ｆ７、Ｆ８、Ｆ９およびＦ１０世代の、反復親系統との交雑種がさらに含まれる。
【００４８】
総状花序。主茎に沿って花がつく花序であり、最も古い花が基部にある。総状花序は、単純でも複合でもよい。
【００４９】
比較成熟度（ＲＭ）。比較成熟度という用語は、他のダイズ品種の成熟値との比較に基づいてダイズ品種に割り当てられた数値である。ＲＭの小数点前の数は成熟群を指す。小数点に続く数は、各成熟群内の相対的な早生または晩生を指す。例えば、３．０は早生のＩＩＩ群品種であり、一方で、３．９は晩生のＩＩＩ群品種である。
【００５０】
種子収量（ブッシェル／エーカー）。ブッシェル／エーカーでの収量は、収穫時の穀粒の実際の収量である。
【００５１】
１ポンドあたりの種子。ダイズ種子は種子の大きさが変動する。したがって、１ポンドを構成するのに必要な種子数も変動する。１ポンドあたりの種子数は、所与の面積に播種するのに必要な種子のポンド値に影響を及ぼし、最終用途にも強い影響を与え得る。
【００５２】
姉妹細胞。姉妹細胞は、発生過程において全く同じ時に生じる、双子の正常な大胞子母細胞である。通常、姉妹細胞の遺伝子構成は大胞子母細胞の遺伝子構成と完全に一致する。両者共に受精すると、同一の双子の種子が生じる。１つが受精しない場合は、これは正常なやり方であるが、それは衰えて死んでしまう。しかしごく稀に、姉妹細胞は受精なしで種子の産生を続けることができ、その結果複胚珠種子となる。本発明の変異対立遺伝子より以前は、複胚珠種子は５０億に約１種子で生じる。
【００５３】
配偶子合体。受精での２つの配偶子の融合。
【００５４】
導入遺伝子。遺伝子工学によって、ある種の生物から別の種の生物に移された遺伝子。
【００５５】
以下の詳細な説明は、本発明の実施の現在の熟考された形態である。本発明の範囲が添付の特許請求の範囲によって最もよく定義されるので、この説明は、限定的な意味で解釈されるべきではないが、本発明の一般原理を例示する目的だけに行われる。
【００５６】
概して本発明は、植物と種子の両方を含めた、アポミクシスのダイズ品種を対象にする。一実施形態では、本発明のアポミクシスのダイズ植物は、正常な生育条件下で、約５１％を超える花から莢への転換率、および植物あたり少なくとも５１個の莢または植物あたり少なくとも６０個の莢を有する。別の実施形態では、本発明のアポミクシスのダイズ植物は、正常な生育条件下で、約６０％を超える花から莢への転換率、および植物あたり少なくとも６０個の莢を有する。当業者の管理の及ばない環境パラメーターが原因でこれらの値が変動し得ることは、当業者によって認識されるであろう。
【００５７】
本発明は、アポミクシスの使用を通して任意の品種の特性を固定化することができる、本発明のアポミクシスのダイズ品種を作出する方法も対象にする。一実施形態では、種子を生長させ、約５１％を超える花から莢への高転換率および植物あたり少なくとも５１個の莢または植物あたり少なくとも６０個の莢による高収量を含めた所望の形質について、得られた植物を選抜する。一実施形態では、種子を生長させ、約６０％を超える花から莢への高転換率および植物あたり少なくとも６０個の莢による高収量を含めた所望の形質について、得られた植物を選抜する。
【００５８】
雑種ダイズ品種は２つの近交系統の交雑でもよく、各近交系統は、もう一方が欠くまたはもう一方を補完する、１つまたは複数の望ましい特性を有し得る。第１世代の雑種後代はＦ１と呼ばれる。雑種の開発では、Ｆ１雑種植物のみが求められる。この雑種は、その近交の親よりも強勢である。この雑種強勢またはヘテロシスは、栄養生長の増大および収量の増大を含めた多くの点で現われ得る。
【００５９】
アポミクシス生殖を用いると、特に適応性のあるまたは雑種の遺伝子型の後代は、繰り返される生活環全体を通してそれらの遺伝的忠実性を維持すると思われる。雑種強勢の固定に加えて、アポミクシスは、雑種を作出するための効率的な雄性不稔または稔性回復系が知られていないまたは開発されていない作物において、商業的な雑種作出を可能にし得る。加えて、アポミクシスは、特に前記染色体の遺伝子内容をヒトが変化させた場合に、歪められたまたは逆位の染色体構成を有する植物の生殖能力を増大することができる。
【００６０】
アポミクシスは、多数の交雑を行う必要を取り除くことによって、より効率的に雑種を開発することができる。アポミクシスはまた、優れた雄性不稔系を有する植物種において、雑種作出を単純化し、遺伝的多様性を増大させる。絶対的なまたは高レベルのアポミクシスを制御する遺伝子を栽培種で発見すること、および純種繁殖のＦ１雑種を作出するために、交雑適合性の性×アポミクシスの遺伝子型を容易に掛け合わせることができることは、理想的であると思われる。
【００６１】
アポミクシスは、均一ならびに病害フリーおよびウイルスフリーの台木を作出するためにミカン属（Citrus）（Parlevliet J.E.ら、in Citrus. Proc. Am. Soc. Hort. Sci.、第74巻、252〜260、1959）で、ならびに改良された栽培品種を作出するために、ブッフェルグラス（Bashaw、Crop Science、第20巻、112、1980）およびイチゴツナギ属（Poa）（Pepinら、Crop Science、第11巻、445〜448、1971）で効果的に使用されるが、栽培作物にうまく伝達されていない。重要な作物へのアポミクシスの伝達は、細胞質−核雄性不稔性および高いコストの労働集約的な作出方法を必要としないで、純種繁殖の雑種の開発および雑種の商業的作出を可能にすると思われる。絶対的なアポミクシスのＦ１雑種は、種子を通して無限に純種を繁殖すると思われ、種子を通した栄養性またはクローン性の生殖方法とみなすことができる。アポミクシス的に生殖する栽培作物の開発はまた、途上国における食の安全に大きく寄与すると思われる（Wilsonら、In Proceedings of the International Workshop on Apomixis in Rice、Changsha、People's Republic of China、13 Jan.〜15 Jan.、1992. Hunan Hybrid Rice Research Center、Changsha、People'ｓ Republic of China）。
【００６２】
現在栽培されている市販のダイズ植物および種子は、花から莢への転換に関してたった５０％の平均転換率しか有さない。現在の市販のダイズ植物は、１００個までの花を有し、植物あたりたった約５０個の莢しか収穫時に有さない。これによって、現在生産されているダイズのエーカーあたりの量が制限される。一実施形態では、本発明のアポミクシスのダイズ植物は、平均で植物あたり少なくとも６０個の莢を有し、植物あたり３００または４００個を超える莢を有することが多い。別の実施形態では、本発明のアポミクシスのダイズ植物は、平均で植物あたり少なくとも１００個の莢を有し、植物あたり３００を超える莢を有することが多い。さらに、雑種交雑の一方の親のアポミクシスのおかげで、新しい品種を作出するのに使用される通常の育種よりも短い時間枠で本発明のダイズ品種が作出される。本発明のアポミクシスのダイズ品種は、雑種強勢の使用を通して、エーカーあたりのダイズの収量を現在のレベルから増大したいという願望を満たす。
【００６３】
本発明の一実施形態では、現在のダイズ品種と比較して花から莢への高い転換率が高くかつ全体の莢数が多いアポミクシスのダイズ品種を作出するための方法が提供される。この方法は、ダイズ遺伝資源の、所望の形質を有する種子ロット供給源から複胚珠種子を選抜するステップを含む。必要とする種子数は、種子の両胚珠の生存能に依存して変動し得る。複胚珠種子は、莢中の任意の位置で、正常な単一の胚珠の側面または末端に沿って姉妹細胞の発達から生じ、同じ臍を共有しなければならない。複胚珠種子は比較的高頻度で生じるが、姉妹細胞の高い死滅率のために、一般的に観察されなくなる。生存姉妹細胞の出現は、ダイズについては５０億以上に１つであると推定される。
【００６４】
たった１つの複胚珠種子を正常なダイズで見つけるためには、通常１年超かかる。たとえ１２個かそこらの複胚珠種子が同じ年に見つかるとしても、それらは親系統にそっくりであり、少しも価値がない。しかし、何年かに一度、雄のダイズ植物からの寄与なしで種を生じるので、価値がある複胚珠種子が生じ得る。すなわち、それは種子を生じるのに花粉を必要としない。代わりに、大胞子母細胞が自力で１つの胚珠の分裂を開始する。その一方、正常な分裂は受精後まで始まらない。新しい植物の生産が完結する場合は、遺伝子の全ての寄与は雌植物に由来し、純種を繁殖する。すなわち、形質は姉妹細胞の遺伝子の特性であり変化しないので、全ての形質が雌植物のものと同じである。この性質はアポミクシスである。
【００６５】
例示的な一実施形態では、商業的な開発目的に必要とされる複胚珠種子の数は、約１０，０００から３０，０００であり得る。しかし、本発明の方法は最初に選抜した複胚珠種子の数に限定されないことが認識されるであろう。本発明のアポミクシスのダイズの３つの異なる品種に関する複胚珠種子の例を図１〜３に示す。複胚珠種子は、端部から端部でもよいし、側部から側部でもよい。複胚珠配向に関して違いが生じることは観察されていない。ダイズ品種の従来の交雑育種、選抜、自家受粉ならびに／またはさらなる交雑育種およびさらなる選抜を含むダイズ品種の開発計画を通して、Ｓ−２０１と命名した系統を開発した。従来のダイズ品種と比較してＳ−２０１品種は複胚珠種子の頻度が高いことが発見された。２００９年の作物を収穫した後に、できるだけ多くの複胚珠対を見つけるために一体となって取り組んだ。数ブッシェルのＳ−２０１およびその誘導体の種子を選別することによって、３，２００を超える異なる複胚珠種子対がもたらされた。これらは、複胚珠種子およびアポミクシスの遺伝に関する多くの最近の研究の基礎を築いた。
【００６６】
次のステップでは、種子を生長させ、花から莢への転換率および植物あたりの総莢数を観察した。これらの形質について通常の数より高い系統を選抜し、本発明のアポミクシスの植物を作出するのに使用する。例えば一実施形態では、約５１％を超える転換率を有する植物を選抜することができる。別の実施形態では、約６０％を超える転換率を有する植物を選抜することができる。追加的な一実施形態では、約７０％を超える転換率を有する植物を選抜することができる。例示的な一実施形態では、約８０％を超える、さらに約９０％を超える、さらに約１００％に近づく転換率を有する植物を選抜することができる。いくつかの実施形態では、約５１％から約７０％の間の転換率を有する植物を選抜することができる。他の実施形態では、約６０％から約７０％の間の転換率を有する植物を選抜することができる。追加的な実施形態では、約７０％から約８０％の間の、または約７０％から９０％の間の転換率を有する植物を選抜することができる。さらなる実施形態では、約９０％から約１００％の間の転換率を有する植物を選抜することができる。さらに、植物あたりの莢数は、約６０個の莢を超える、または約１００個の莢を超える、または約２００個の莢を超える、または約３００個の莢を超える、さらに約４００個を超える莢でもよい。本明細書に示すように、本発明の方法によって、植物あたり４００個を超える莢を有する植物が作出される。いくつかの実施形態では、植物は、植物あたり約６０から約１００個の間の莢を有し得る。他の実施形態では、植物は、植物あたり約１００から約２００個の間の莢を有し得る。追加的な実施形態では、植物は、植物あたり約２００から約３００個の間の莢を有し得る。さらなる実施形態では、植物は、植物あたり約３００および約４００個の間の莢を有し得る。他の実施形態では、植物は、植物あたり約４００個を超える莢を有し得る。アポミクシスについて植物を試験することもでき、これは、試験する系統のいくつかの植物の全ての葯を除雄すること、および除雄した花によってつけられた莢を観察することを含む。全てではないが、Ｓ−２０１の複胚珠種子に由来するほとんどの植物およびＳ−２０１品種に由来する後代植物もアポミクシスであることの特性を有することが見出された。
【００６７】
図４は、本方法によって作出された品種のうちの１つの一例を示す。Ｓ−２０１は、１００％に近づく、平均すると９２％の花から莢への転換率を予想外に有していた。Ｓ−２０１はまた、通常の量よりも多くの複胚珠種子を予想外に生じた。一実施形態では、Ｓ−２０１は、通常の量よりも多くの複胚珠種子を生じ、１０００種子全体あたり約１から約２個の複胚珠種子を有していた。別の実施形態では、Ｓ−２０１は通常の量よりも多くの複胚珠種子を生じ、１０００種子全体あたり約１から約３個の複胚珠種子を有していた。追加的な一実施形態では、Ｓ−２０１は通常の量よりも多くの複胚珠種子を生じ、１０００種子全体あたり約１から約４個の複胚珠種子を有していた。さらなる実施形態では、Ｓ−２０１は、通常の量よりも多くの複胚珠種子を生じ、１０００種子全体あたり約１から約５個の複胚珠種子を有していた。平均すると、Ｓ−２０１は、１０００種子全体あたり約１．３個の複胚珠種子を生じた。現在のダイズ品種は、５０億に約１種子の複胚珠の頻度を有する。
【００６８】
選抜した植物からの複胚珠種子を翌年生長させ、無作為に選抜した１０個の植物について除雄を行い、それらを品種７Ｂ１（図６〜１１）として示した。各植物の１０個の花から全ての花粉を除去し、タグによってそれぞれの除雄した花が位置する場所を示した。アポミクシスは、胚珠が、通常は必要とされる受粉なしで種子を生じさせる分裂を始める場合に起こる。花を除雄した後に生じた種子はアポミクシスのためであると結論した。花粉が成熟するかなり前に葯を除去したので、選抜した植物の花に利用されるはずの花粉はなかった。こうした植物に生じた最初の莢から生長した植物は、植物において全体的に毎年観察される著しい均一性を有して、２００９年に生産された種子から少なくとも３年間アポミクシスの単一品種として存続した。加えて、最初の１０個の植物のうちの３つは、少なくとも１つの複胚珠を有する後代を生じた。
【００６９】
いかなる理論にも束縛されないが、Ｓ−２０１における複胚珠種子のこの高生産は、Ｓ−２０１品種の開発中に発生した変異対立遺伝子の存在のためであると考えられている。この変異対立遺伝子は、単独でまたはＳ−２０１に存在する他の遺伝子と合わせて働いて、より高い複胚珠種子頻度をもたらす可能性がある。この変異対立遺伝子はまた、本発明の植物および後代植物のアポミクシスの特性に影響を与える可能性があるとさらに考えられている。
【００７０】
本発明の別の実施形態では、方法は、ダイズ品種Ｓ−２０１植物またはその後代の選抜した植物と所望の形質を有する別のダイズ品種との交雑育種のステップをさらに含むことができる。例示的な一例では、ダイズ品種Ｓ−２０１植物またはその後代を雄植物として使用し、さらなる品種を雌植物として使用する。次いで、雌植物からの種子を収穫し、生長させる。次いで、上記のように、植物を所望の形質について選抜する。このステップは、付加された所望の形質を有するダイズ植物を得るために何回でも好きなだけ繰り返すことができる。付加された所望の形質は、これらに限定されないが、雄性不稔、除草剤耐性、昆虫または有害生物抵抗性、病害抵抗性、改変された脂肪酸代謝、改変された炭水化物代謝および改変されたダイズ繊維特性でもよい。代替的な一例では、付加された形質は、除草剤耐性でもよく、この耐性は、これらに限定されないが、グリホセート、スルホニル尿素、イミダゾリノン、ジカンバ、グルホシネート、ホスフィノトリシン、フェノキシプロピオン酸、シクロスヘキソン、トリアジン、ベンゾニトリルおよびブロキシニルなどの除草剤に対して付与される。（米国特許第７，８６８，２３１号、７，８６８，２３２号および７，５７２，９５８号を参照されたい。全て参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。
【００７１】
別の実施形態では、ダイズ品種Ｓ−２０１植物またはその後代を雌親として使用し、さらなる品種を雄親として使用する。
【００７２】
代替的な環境では、組換え技術などの他の方法によって、ダイズ品種Ｓ−２０１植物および／またはその後代に所望の形質を付与することができる。そうした方法は当技術分野で周知である。
【００７３】
別のアポミクシスのダイズ品種は、Ｓ−２０１と標識されたＣＮ−０６２９とのＦ４後代から選択した。この実験系統ＣＮ−０６２９を続いて使用して、新しい系統を得、それらの多くのは植物あたり４００個を超える莢を生じた。ＣＮ−０６２９、Ｓ−２０１または７Ｂ１の交雑育種では、雄としてＣＮ−０６２９、Ｓ−２０１または７Ｂ１から選抜した後代を含む交雑で、６１の異なる系統を雌として使用した。この交雑育種のＦ１世代は、転換率および莢数においてかなりの変動を示した。Ｆ１世代の多くは、１年後に育てた時に表現型の類似性を示した。そうした後代の１つは、図５〜１１に示す品種７Ｂ１であった。これらの図は、特に個々の節での植物あたりの莢数の増加を示す。
【００７４】
アポミクシスのダイズ品種Ｓ−２０１およびその後代の別の特性は、それらが有限生長特性を有することである。ほぼ全てのダイズ品種は、２つのあり得る生長習性、すなわち有限生長または無限生長のうちの１つを示す。ほとんどの無限型の品種は、成熟群ＩＶ以前に適合する。これらの品種は、米国の北部で通常育てられる。これらの品種は、重複する栄養生育期および生殖生育期を有する。開花が始まると、通常２分の１未満の主茎節が発達する。茎の上に向かって開花が進行するので、茎生長が続く。無限型の茎が頂生総状花序で終わらないか、または総状花序が非常に小さくなる。花および莢は、節の位置に応じて、異なる時間および速度で発達する。最初の花および最も遅く発達する莢を有する節は、茎の基部近くに位置する。
【００７５】
有限生長の習性を有するほとんどの品種は、成熟群ＶからＸに分類され、米国の南部で通常は育てられ、それ以上北では良く育たない。これらの品種は、ある程度異なる栄養および生殖発育期を有する。一旦開花が始まると発達する茎節はほとんどなく、茎は頂生総状花序で終わる。花および莢は、全ての茎節に関してほとんど同じ時間および速度で発達する傾向がある。有限生長習性を有する少数の品種は、北部のダイズ生産地域用に発表された。これらの品種は、半矮性として通常分類され、他の適合品種の約２分の１から３分の２の高さを獲得する。
【００７６】
本発明のアポミクシスのダイズ品種の特有の特性は、有限生長習性を有し、頂生総状花序を持つ茎を有することである。しかし、有限生長習性を有する普通のダイズと異なり、本発明のダイズ品種は、米国北部での生育を可能にする耐寒性を示す。さらに、有限または無限生長特性を有する両方の普通の品種と対照的に、本発明のダイズ品種は、花から莢へのより高い転換率および植物あたりのより多い莢数を有する。
【００７７】
本発明のアポミクシスの植物は、本明細書でＡＰ１と呼ばれる本発明の変異対立遺伝子にある程度起因し、これを、有利には、病害抵抗性、乾燥耐性、高温および／または低温耐性などの望ましい遺伝形質を含む品種に導入して、純種を繁殖する、望ましい形質を含む新しいアポミクシスの植物を作出する。
【００７８】
本発明の遺伝要因は、本発明のアポミクシスの植物を作出するのに有用である通常より多い複胚珠種子の産生、ならびに通常より高い花から莢への転換率および通常より多い莢数という特性を遺伝させることができる。ＡＰ１突然変異体は、単一の優性または部分的に優性の変異対立遺伝子であるように思われる。あるいは、この変異対立遺伝子は、発現レベルに影響する付加的な修飾遺伝子を有する優性遺伝子によって支配されている可能性がある。Ｓ−２０１および７Ｂ１を含む交雑のＦ１およびＦ２後代からの知見は、小数の遺伝子が、観察された「部分優性」におそらく関与すること、またはそれが異なる強さのいくつかの修飾因子を有する優性遺伝子であり得ることを示す。１つまたは複数の対立遺伝子の変異のために、遺伝子間のこうした関係性が報告された頻度で現われた可能性がある。こうした変異によって、以前に観察されなかった現象が発現した可能性がある。この変異対立遺伝子を他のダイズ品種に使用および伝達できることは、本発明の特色である。
【００７９】
前記は本発明の例示的な実施形態に関し、以下の特許請求の範囲に記載の本発明の趣旨および範囲に逸脱することなく変更することができることを当然ながら理解されたい。
【００８０】
本発明のさらなる実施形態
新しい分子生物学的技術の出現によって、特定のタンパク質産物をコードするなどの特定の機能を有する遺伝要素の単離および特性評価が可能になった。植物生物学分野の科学者は、特定の方法で植物の形質を変化させるために、植物ゲノムを操作して外来性の遺伝要素または追加的なもしくは改変されたバージョンの天然もしくは内在性の遺伝要素を含ませるおよび発現させることに強い関心を持っていた。異なる種からまたは同種からであろうとなかろうと、形質転換または様々な育種方法を使用してゲノム中に導入される任意のＤＮＡ配列は、本明細書ではまとめて「導入遺伝子」と呼ぶ。本発明のいくつかの実施形態では、アポミクシスのダイズの遺伝子導入変異体は少なくとも１つの導入遺伝子を含んでもよいが、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個および／または１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３または２個を超えないものを含むことができる。ここ１５から２０年にわたって、遺伝子導入植物を作出するためのいくつかの方法が開発されており、本発明は、請求するアポミクシスのダイズの遺伝子導入変異体にも関する。
【００８１】
核酸またはポリヌクレオチドは、直鎖状もしくは分枝の、一本鎖もしくは二本鎖のＲＮＡもしくはＤＮＡまたはそれらのハイブリッドを指す。これらの用語は、ＲＮＡ／ＤＮＡハイブリッドも包含する。これらの用語は、遺伝子コード領域の３’および５’末端の両方に位置する非翻訳配列、すなわちコード領域の５’末端から上流の少なくとも約１０００ヌクレオチドの配列および遺伝子コード領域の３’末端から下流の少なくとも約２００ヌクレオチドの配列も包含する。イノシン、５−メチルシトシン、６−メチルアデニン、ヒポキサンチンなどのあまり一般的ではない塩基も、アンチセンス、ｄｓＲＮＡおよびリボザイムの対形成に使用することができる。例えば、ウリジンおよびシチジンのＣ−５プロピン類似体を含むポリヌクレオチドは、高い親和性でＲＮＡに結合することおよび遺伝子発現の強力なアンチセンスインヒビターであることが示されている。ホスホジエステル骨格またはＲＮＡのリボース糖基中の２’−ヒドロキシへの修飾などの他の修飾も行うことができる。アンチセンスポリヌクレオチドおよびリボザイムは完全にリボヌクレオチドから構成されてもよいし、混合リボヌクレオチドおよびデオキシリボヌクレオチドを含んでもよい。本発明のポリヌクレオチドは、ゲノム調製、ｃＤＮＡ調製、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ合成、ＲＴ−ＰＣＲおよびｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏでの転写を含めた任意の手段によって産生することができる。
【００８２】
本発明の一実施形態は、所望の形質をさらに含むアポミクシスのダイズ植物を作出する方法であって、前記方法は、本発明のアポミクシスのダイズ植物に所望の形質を付与する導入遺伝子の導入を含む。別の実施形態は、この方法によって作出される産物である。一実施形態では、所望の形質は、除草剤抵抗性、昆虫抵抗性、病害抵抗性、フィチン酸の減少または改変された脂肪酸もしくは炭水化物代謝のうちの１つまたは複数でもよい。特定の遺伝子は、任意の当技術分野で既知のものでもよいし、または本明細書に挙げたものでもよく、以下を含む。イミダゾリノン、ジカンバ、スルホニル尿素、グリホセート、グルホシネート、トリアジン、ベンゾニトリル、シクロヘキサンジオン、フェノキシプロピオン酸およびＬ−ホスフィノトリシンに抵抗性を付与するポリヌクレオチド；バチルス・チューリンゲンシス（Bacillus thuringiensis）のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；フィターゼ、ＦＡＤ−２、ＦＡＤ−３、ガラクチノール合成酵素もしくはラフィノース合成酵素をコードするポリヌクレオチド、またはダイズシスト線虫、落葉病、疫病菌（Phytophthora）根腐病、ダイズモザイクウイルスもしくは突然死症候群へ抵抗性を付与するポリヌクレオチド。
【００８３】
生物学的および物理的な植物形質転換プロトコールを含めた、植物形質転換に関する多数の方法が開発されている。例えば、Mikiら、「Procedures for Introducing Foreign DNA into Plants」、in Methods in Plant Molecular Biology and Biotechnology、GlickおよびThompson編、CRC Press, Inc.、Boca Raton、67〜88ページ（1993）、およびArmstrong、「The First Decade of Maize Transformation：A Review and Future Perspective」、Maydica、44：101〜109（1999）を参照されたい。加えて、発現ベクターおよび植物細胞または組織形質転換に関するｉｎ  ｖｉｔｒｏ培養の方法および植物の再分化が利用可能である。例えば、Gruberら、「Vectors for Plant Transformation」、in Methods in Plant Molecular Biology and Biotechnology、GlickおよびThompson編、CRC Press, Inc.、Boca Raton、89〜119ページ（1993）を参照されたい。
【００８４】
特定のダイズ植物のゲノム中に操作された遺伝形質は、次に、植物育種分野で周知の従来の育種技術を用いて別の品種のゲノム中に移すことができる。例えば、形質転換したダイズ品種から既に開発されているダイズ品種に導入遺伝子を移すために戻し交雑の手法が一般に使用され、得られた戻し交雑転換植物は、その結果、導入遺伝子（１種または複数）を含むはずである。
【００８５】
形質転換を用いて、様々な遺伝要素を植物ゲノム中に導入することができる。こうした要素には、これらに限定されないが、遺伝子、コード配列、誘導性プロモーター、構成的プロモーターおよび組織特異的なプロモーター、促進配列ならびにシグナル配列およびターゲティング配列が含まれる。例えば、米国特許第６，１１８，０５５号に挙げられている形質、遺伝子および形質転換方法を参照されたい。
【００８６】
植物形質転換は、植物細胞で機能する発現ベクターの構築を含む。そうしたベクターは、調節エレメント（例えばプロモーター）の制御下またはこれに作動可能に連結させた遺伝子を含むＤＮＡを含有する。発現ベクターは、１種または複数のそうした作動可能に連結させた遺伝子／調節エレメントの組合せを含むことができる。導入遺伝子をダイズ植物（１種または複数）の遺伝物質に組み込むための下記の形質転換方法を用いて形質転換されたダイズ植物を提供するためには、ベクター（１種または複数）はプラスミドの形でもよく、単独または他のプラスミドと組み合わせて使用してもよい。
【００８７】
同様に、本発明によって農学的な遺伝子を形質転換植物中で発現することができる。より詳細には、植物を遺伝子操作して、農学的に興味のある様々な表現型を発現することができる。この点について関係する例示的な遺伝子には、これらに限定されないが、以下に分類するものが含まれる。
【００８８】
１．有害生物または病害に対する抵抗性を付与し、以下をコードする遺伝子。
Ａ．植物病害抵抗性遺伝子。植物防御は、植物の病害抵抗性遺伝子（Ｒ）産物と病原体の対応する非病原性（Ａｖｒ）遺伝子産物との間の特異的な相互作用によってしばしば活性化される。ある植物品種を１種または複数のクローン化した抵抗性遺伝子で形質転換して、特定の病原体株に抵抗性の植物を設計することができる。例えば、Jonesら、Science、266：789（1994）（トマト葉かび病菌（Cladosporium fulvum）抵抗性に関するトマトＣｆ−９遺伝子のクローニング）；Martinら、Science、262：1432（1993）（トマト斑葉細菌病菌（Pseudomonas syringae pv. tomato）抵抗性に関するトマトＰｔｏ遺伝子はプロテインキナーゼをコードする）；Mindrinosら、Cell、78：1089（1994）（シュードモナス・シリンゲ（Pseudomonas syringae）抵抗性に関するシロイヌナズナ（Arabidopsis）ＲＳＰ２遺伝子）；McDowell & Woffenden、Trends Biotechnol.、21（4）：178〜83（2003）；およびToyodaら、Transgenic Res.、11（6）：567〜82（2002）を参照されたい。
【００８９】
Ｂ．ダイズシスト線虫などの有害生物に抵抗性を付与する遺伝子。例えば、ＰＣＴ出願ＷＯ９６／３０５１７およびＰＣＴ出願ＷＯ９３／１９１８１を参照されたい。
【００９０】
Ｃ．バチルス・チューリンゲンシス（Bacillus thuringiensis）のタンパク質、その誘導体またはそれをモデルとした合成ポリペプチド。例えば、Ｂｔδ−エンドトキシン遺伝子のクローニングおよびヌクレオチド配列を開示する、Geiserら、Gene、48：109（1986）を参照されたい。さらに、δ−エンドトキシン遺伝子をコードするＤＮＡ分子は、アメリカ培養細胞系統保存機関、Ｍａｎａｓｓａｓ、Ｖｉｒｇｉｎｉａから、例えばＡＴＣＣ受託番号４００９８、６７１３６、３１９９５および３１９９８で購入することができる。
【００９１】
Ｄ．レクチン。例えば、いくつかのクンシラン（Clivia miniata）のマンノース結合レクチン遺伝子のヌクレオチド配列を開示する、Van Dammeら、Plant Molec. Biol、24：25（1994）を参照されたい。
【００９２】
Ｅ．アビジンなどのビタミン結合タンパク質。害虫に対する殺幼虫剤としてのアビジンおよびアビジン相同体の使用を教示する、ＰＣＴ出願ＵＳ９３／０６４８７を参照されたい。
【００９３】
Ｆ．例えば、プロテアーゼインヒビターもしくはプロテイナーゼインヒビターまたはアミラーゼインヒビターなどの酵素インヒビター。例えばAbeら、J. Biol Chem.、262：16793（1987）（イネのシステインプロテイナーゼインヒビターのヌクレオチド配列）；Huubら、Plant Molec. Biol、21：985（1993）（タバコプロテイナーゼインヒビターＩをコードするｃＤＮＡのヌクレオチド配列）；Sumitaniら、Biosci. Biotech. Biochem.、57：1243（1993）（ストレプトマイセス・ニトロポレウス（Streptomyces nitrosporeus）のαアミラーゼインヒビターのヌクレオチド配列）；および米国特許第５，４９４，８１３号（ＨｅｐｈｅｒおよびＡｔｋｉｎｓｏｎ、１９９６年２月２７日発行）を参照されたい。
【００９４】
Ｇ．昆虫特異的なホルモンまたはフェロモン。例えば、エクジステロイドもしくは幼若ホルモン、それらの変異体、それらに基づく模倣物またはそれらのアンタゴニストもしくはアゴニストなど。例えば、Hammockら、Nature、344：458（1990）による、幼若ホルモンの不活化物質であるクローン化した幼若ホルモンエステラーゼのバキュロウイルス発現の開示を参照されたい。
【００９５】
Ｈ．発現時に影響を受けた有害生物の生理機能を乱す昆虫特異的ペプチドまたは神経ペプチド。例えば、以下の開示を参照されたい。Regan、J. Biol. Chem.、269：9（1994）（発現クローニングによって昆虫利尿ホルモンレセプターをコードするＤＮＡを獲得する）；Prattら、Biochem. Biophys. Res. Comm.、163：1243（1989）（アロスタチンがジプロプテラ・プンタタ（Diploptera puntata）で同定される）；Chattopadhyayら、Critical Reviews in Microbiology、30（1）：33〜54（2004）；Zjawiony、J Nat Prod、67（2）：300〜310（2004）；Carlini & Grossi-de-Sa、Toxicon、40（11）：1515〜1539（2002）；Ussufら、Curr Sci.、80（7）：847〜853（2001）；Vasconcelos & Oliveira、Toxicon、44（4）：385〜403（2004）。昆虫特異的な麻痺性神経毒をコードする遺伝子を開示している、Ｔｏｍａｌｓｋｉらの米国特許第５，２６６，３１７号も参照されたい。
【００９６】
Ｉ．ヘビ、スズメバチなどによって天然に産生される昆虫特異的な毒液。例えば、サソリの昆虫毒性ペプチドをコードする遺伝子の植物における異種発現の開示に関する、Pangら、Gene、116：165（1992）を参照されたい。
【００９７】
Ｊ．殺虫活性を有するモノテルペン、セスキテルペン、ステロイド、ヒドロキサム酸、フェニルプロパノイド誘導体または別の非タンパク質分子の高蓄積に関与する酵素。
【００９８】
Ｋ．翻訳後修飾を含めた、生理活性分子の修飾に関与する酵素。例えば、天然・合成を問わず、解糖酵素、タンパク質分解酵素、脂肪分解酵素、ヌクレアーゼ、シクラーゼ、トランスアミナーゼ、エステラーゼ、ヒドロラーゼ、ホスファターゼ、キナーゼ、ホスホリラーゼ、ポリメラーゼ、エラスターゼ、キチナーゼおよびグルカナーゼである。カラーゼ（callase）遺伝子のヌクレオチド配列を開示する、ＰＣＴ出願ＷＯ９３／０２１９７（Ｓｃｏｔｔら）を参照されたい。キチナーゼをコードする配列を含むＤＮＡ分子は、例えばＡＴＣＣから受託番号３９６３７および６７１５２で取得することができる。タバコイモムシキチナーゼをコードするｃＤＮＡのヌクレオチド配列を教示する、Kramerら、Insect Biochem. Molec. Biol.、23：691（1993）、およびパセリのユビ４−２ポリユビキチン遺伝子のヌクレオチド配列を提供する、Kawalleckら、Plant Molec. Biol.、21：673（1993）、米国特許第７，１４５，０６０号、７，０８７，８１０号および６，５６３，０２０号も参照されたい。
【００９９】
Ｌ．シグナル伝達を刺激する分子。例えばBotellaら、Plant Molec. Biol.、24：757（1994）による、リョクトウのカルモジュリンｃＤＮＡクローンのヌクレオチド配列の開示、およびトウモロコシのカルモジュリンｃＤＮＡクローンのヌクレオチド配列を提供する、Griessら、Plant Physiol.、104：1467（1994）を参照されたい。
【０１００】
Ｍ．疎水性モーメントペプチド。真菌性植物病原体を阻害するタキプレシンのペプチド誘導体を開示する、ＰＣＴ出願ＷＯ９５／１６７７６および米国特許第５，５８０，８５２号、ならびに病害抵抗性を付与する合成抗菌性ペプチドを教示する、ＰＣＴ出願ＷＯ９５／１８８５５および米国特許第５，６０７，９１４号を参照されたい。
【０１０１】
Ｎ．膜透過酵素、チャネル形成剤またはチャネル遮断剤。例えば、Jaynesら、Plant Sci、89：43（1993）の、遺伝子導入タバコ植物にシュードモナス・ソラナセアラム（Pseudomonas solanacearum）に対する抵抗性を与えるための、セクロピン−β溶解性ペプチド類似体の異種発現の開示を参照されたい。
【０１０２】
Ｏ．ウイルス侵襲性タンパク質またはそれに由来する複合毒素。例えば、形質転換植物細胞中にウイルス外被タンパク質が蓄積すると、外被タンパク質遺伝子のウイルスおよび関連するウイルスによってもたらされるウイルス感染および／または病害発生に対して抵抗性が与えられる。Beachyら、Ann. Rev. Phytopathol.、28：451（1990）を参照されたい。アルファルファモザイクウイルス、キュウリモザイクウイルスおよびタバコモザイクウイルスに対して、外被タンパク質媒介的抵抗性が形質転換植物に付与されている。
【０１０３】
Ｐ．昆虫特異的な抗体またはそれ由来の免疫毒素。例えば、昆虫の消化管の重要な代謝機能を標的にする抗体は、影響を受ける酵素を失活させて、昆虫を殺すであろう。Taylorら、Abstract #497、Seventh Int'l Symposium on Molecular Plant-Microbe Interactions（Edinburgh、Scotland 1994）（一本鎖抗体断片の産生を介する、遺伝子導入タバコにおける酵素の不活性化）を参照されたい。
【０１０４】
Ｑ．ウイルス特異的な抗体。例えば、組換え抗体遺伝子を発現する遺伝子導入植物はウイルスの攻撃から保護されることを示す、Tavladorakiら、Nature、366：469（1993）を参照されたい。
【０１０５】
Ｒ．病原体または寄生生物によって天然に産生される発達抑止タンパク質。例えば、真菌のエンド−α−１，４−Ｄ−ポリガラクツロナーゼは、植物細胞壁のホモ−α−１，４−Ｄ−ガラクツロナーゼを可溶化することによって真菌のコロニー形成および植物栄養素の放出を促進する。Lambら、Bio/Technology、10：1436（1992）を参照されたい。マメのエンドポリガラクツロナーゼ−阻害タンパク質をコードする遺伝子のクローニングおよび特性評価は、Toubartら、Plant J、2：367（1992）によって説明される。
【０１０６】
Ｓ．植物によって天然に産生される発達抑止タンパク質。例えば、Logemannら、Bio/Technology、10：305（1992）は、オオムギのリボゾーム不活性化遺伝子を発現する遺伝子導入植物は真菌性病害に対する抵抗性が高まることを示した。
【０１０７】
Ｔ．全身獲得抵抗性（ＳＡＲ）反応に関与する遺伝子および／または病原関連遺伝子。Briggs, S.、Current Biology、5（2）（1995）；Pieterse & Van Loon、Curr. Opin. Plant Bio.、7（4）：456〜64（2004）；およびSomssich、Cell、113（7）：815〜6（2003）。
【０１０８】
Ｕ．抗真菌遺伝子。CornelissenおよびMelchers、Plant Physiol.、101：709〜712（1993）；Parijsら、Planta、183：258〜264（1991）；ならびにBushnellら、Can. J. of Plant Path.、20（2）：137〜149（1998）を参照されたい。米国特許第６，８７５，９０７号も参照されたい。
【０１０９】
Ｖ．フモニシン、ビューベリシン、モニリホルミンおよびゼアラレノンならびにそれらの構造的に関連する誘導体などに対する解毒遺伝子。例えば、米国特許第５，７９２，９３１号を参照されたい。
【０１１０】
Ｗ．シスタチンおよびシステインプロテアーゼインヒビター。米国特許第７，２０５，４５３号を参照されたい。
【０１１１】
Ｘ．デフェンシン遺伝子。ＷＯ０３／０００８６３および米国特許第６，９１１，５７７号を参照されたい。
【０１１２】
Ｙ．線虫および特にダイズシスト線虫に抵抗性を付与する遺伝子。例えば、ＰＣＴ出願ＷＯ９６／３０５１７、ＷＯ９３／１９１８１およびＷＯ０３／０３３６５１；Urwinら、Planta、204：472〜479（1998）；Williamson、Curr Opin Plant Bio.、2（4）：327〜31（1999）を参照されたい。
【０１１３】
Ｚ．疫病菌（Phytophthora）根腐病に対する抵抗性を付与する遺伝子。例えば、Ｒｐｓ１、Ｒｐｓ１ａ、Ｒｐｓ１ｂ、Ｒｐｓ１ｃ、Ｒｐｓ１ｄ、Ｒｐｓ１ｅ、Ｒｐｓ１ｋ、Ｒｐｓ２、Ｒｐｓ３ａ、Ｒｐｓ３ｂ、Ｒｐｓ３ｃ、Ｒｐｓ４、Ｒｐｓ５、Ｒｐｓ６、Ｒｐｓ７および他のＲｐｓ遺伝子などである。例えば、Shoemakerら、Phytophthora Root Rot Resistance Gene Mapping in Soybean、Plant Genome IV Conference、San Diego、Calif.（1995）を参照されたい。
【０１１４】
ＡＡ．落葉病に対する抵抗性を付与する遺伝子。例えば、米国特許第５，６８９，０３５号に記載されており、これは、この目的のために参照により組み込まれる。
【０１１５】
これらに限定されないが、形質転換および交雑を含めた種々の手段によって、先に挙げた病害または有害生物抵抗性遺伝子（Ａ〜ＡＡ）のうちのいずれかを請求するダイズ栽培品種に導入することができる。
【０１１６】
２．除草剤に対する抵抗性を付与する遺伝子。例えば以下のようなものである。
Ａ．イミダゾリノンまたはスルホニル尿素などの、生長点または分裂組織を阻害する除草剤。このカテゴリーの例示的な遺伝子は、例えば、Leeら、EMBO J.、7：1241（1988）およびMikiら、Theor. Appl. Genet.、80：449（1990）によってそれぞれ説明されているように、変異ＡＬＳおよびＡＨＡＳ酵素をコードする。
【０１１７】
Ｂ．グリホセート（変異５−エノールピルビルシキミ酸−３−リン酸合成酵素（ＥＰＳＰＳ）遺伝子およびａｒｏＡ遺伝子によってそれぞれ付与される抵抗性）および他のホスホノ化合物、例えばグルホシネート（ホスフィノトリシンアセチルトランスフェラーゼ（ＰＡＴ）およびストレプトミセス・ハイグロスコピクス（Streptomyces hygroscopicus）のＰＡＴ  ｂａｒ遺伝子）、ピリジノキシまたはフェノキシプロピオン酸およびシクロヘキサンジオン（ＡＣＣアーゼインヒビターをコードする遺伝子）などである。例えば、グリホセート抵抗性を付与することができるＥＰＳＰＳの形態のヌクレオチド配列を開示する、Ｓｈａｈらの米国特許第４，９４０，８３５号を参照されたい。Ｂａｒｒｙらの米国特許第５，６２７，０６１号もＥＰＳＰＳ酵素をコードする遺伝子を記載している。米国特許第６，５６６，５８７号、６，３３８，９６１号、６，２４８，８７６号、６，０４０，４９７号、５，８０４，４２５号、５，６３３，４３５号、５，１４５，７８３号、４，９７１，９０８号、５，３１２，９１０号、５，１８８，６４２号、４，９４０，８３５号、５，８６６，７７５号、６，２２５，１１４号、６，１３０，３６６号、５，３１０，６６７号、４，５３５，０６０号、４，７６９，０６１号、５，６３３，４４８号、５，５１０，４７１号、ＲＥ３６，４４９号、ＲＥ３７，２８７号および５，４９１，２８８号；ならびに国際公開ＥＰ１１７３５８０、ＷＯ０１／６６７０４、ＥＰ１１７３５８１およびＥＰ１１７３５８２も参照されたい。これらは、この目的のために参照により本明細書に組み込まれる。グリホセート抵抗性は、米国特許第５，７７６，７６０号および５，４６３，１７５号（この目的のために参照により本明細書に組み込まれる）により詳しく記載されているように、グリホセートキシド還元酵素をコードする遺伝子を発現する植物にも与えられる。加えて、グリホセートＮ−アセチルトランスフェラーゼをコードする遺伝子を過剰発現することによって、グリホセート抵抗性を植物に与えることができる。例えば、米国特許第７，４６２，４８１号を参照されたい。変異ａｒｏＡ遺伝子をコードするＤＮＡ分子はＡＴＣＣ受託番号３９２５６で得ることができ、この変異遺伝子のヌクレオチド配列はＣｏｍａｉの米国特許第４，７６９，０６１号に開示されている。Ｋｕｍａｄａらの欧州特許出願第０３３３０３３号およびＧｏｏｄｍａｎらの米国特許第４，９７５，３７４号は、Ｌ−ホスフィノトリシンなどの除草剤に対する抵抗性を付与するグルタミン合成酵素遺伝子のヌクレオチド配列を開示している。ＰＡＴ遺伝子のヌクレオチド配列は、Ｌｅｅｍａｎｓらの欧州特許出願第０２４２２４６号に提供されている。DeGreefら、Bio/Technology、7：61（1989）には、ホスフィノトリシンアセチルトランスフェラーゼ活性をコードするキメラｂａｒ遺伝子を発現する遺伝子導入植物の作出が記載されている。フェノキシプロピオン酸およびシクロヘキソン、例えばセトキシジムおよびハロキシホップなどに対する抵抗性を付与する遺伝子の例としては、Marshallら、Theor. Appl. Genet.、83：435（1992）に記載されている、Ａｃｃ１−Ｓ１、Ａｃｃ１−Ｓ２およびＡｃｃ２−Ｓ３遺伝子がある。
【０１１８】
Ｃ．トリアジン（ｐｓｂＡおよびｇｓ＋遺伝子）およびベンゾニトリル（ニトリラーゼ遺伝子）などの光合成を阻害する除草剤。Przibilaら、Plant Cell、3：169（1991）には、変異ｐｓｂＡ遺伝子をコードするプラスミドでのクラミドモナス（Chlamydomonas）の形質転換が記載されている。ニトリラーゼ遺伝子のヌクレオチド配列は、Ｓｔａｌｋｅｒの米国特許第４，８１０，６４８号に開示されおり、これらの遺伝子を含有するＤＮＡ分子は、ＡＴＣＣ受託番号５３４３５、６７４４１および６７４４２で入手可能である。グルタチオンＳ−トランスフェラーゼをコードするＤＮＡのクローニングおよび発現は、Hayesら、Biochem. J、285：173（1992）によって記載されている。
【０１１９】
Ｄ．アセトヒドロキシ酸合成酵素。これは、この酵素を発現する植物を多くの種類の除草剤に対して抵抗性にすることが発見されており、種々の植物に導入されている。Hattoriら、Mol. Gen. Genet.、246：419（1995）を参照されたい。除草剤に耐性を付与する他の遺伝子には、ラットのチトクロームＰ４５０７Ａ１と酵母のＮＡＤＰＨ−チトクロームＰ４５０酸化還元酵素とのキメラタンパク質をコードする遺伝子（Shiotaら、Plant Physiol.、106：17（1994））；グルタチオン還元酵素遺伝子およびスーパーオキシドジスムターゼの遺伝子（Aonoら、Plant Cell Physiol.、36：1687（1995））；および様々なホスホトランスフェラーゼの遺伝子（Dattaら、Plant Mol. Biol.、20：619（1992））が含まれる。
【０１２０】
Ｅ．プロトポルフィリノーゲン酸化酵素（ｐｒｏｔｏｘ）はクロロフィルの産生に必要であり、これは全ての植物の生存に必要である。ｐｒｏｔｏｘ酵素は、種々の除草性化合物の標的として働く。これらの除草剤はまた、存在する全ての異なる植物種の生長を阻害して、それら全体を破壊する。これらの除草剤に対して抵抗性である、ｐｒｏｔｏｘ活性が変化した植物の開発は、米国特許第６，２８８，３０６号、６，２８２，８３７号、５，７６７，３７３号および国際公開ＷＯ０１／１２８２５に記載されている。
【０１２１】
先に挙げた除草剤遺伝子（Ａ〜Ｅ）のいずれも、これらに限定されないが、形質転換および交雑を含めた種々の手段を通して本発明のアポミクシスのダイズ植物に導入することができる。
【０１２２】
３．以下のような、付加価値のある形質を付与またはそれに寄与する遺伝子。
Ａ．例えば、ステアリル−ＡＣＰ不飽和化酵素のアンチセンス遺伝子で植物を形質転換して植物のステアリン酸含量を増加させることによって改変された脂肪酸代謝。Knultzonら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA、89：2625（1992）を参照されたい。
【０１２３】
Ｂ．減少したフィチン酸含量。１）フィターゼをコードする遺伝子の導入によってフィチン酸の分解を高め、より多くの遊離リン酸を形質転換植物に付加する。クロコウジカビ（Aspergillus niger）のフィターゼ遺伝子のヌクレオチド配列の開示に関しては、例えば、Van Hartingsveldtら、Gene、127：87（1993）を参照されたい。２）フィチン酸含量を低減する遺伝子のアップレギュレーション。トウモロコシでは、これは、例えば、Raboyら、Maydica、35：383（1990）のように、低レベルのフィチン酸に特性付けられるトウモロコシ突然変異体で同定されたＬＰＡ対立遺伝子などの１種または複数の対立遺伝子と関連するＤＮＡをクローニングして、次いで再導入すること、ならびに／またはＷＯ０２／０５９３２４、米国特許出願公開第２００３／０００９０１号、ＷＯ０３／０２７２４３、米国特許出願公開第２００３／００７９２４７号、ＷＯ９９／０５２９８、米国特許第６，１９７，５６１号、米国特許第６，２９１，２２４号、米国特許第６，３９１，３４８号、ＷＯ２００２／０５９３２４、米国特許出願公開第２００３／００７９２４７号、ＷＯ９８／４５４４８、Ｗ０９９／５５８８２およびＷＯ０１／０４１４７のように、イノシトールキナーゼ活性を変化させることによって達成することができる。
【０１２４】
Ｃ．改変された炭水化物組成物。これは、例えば、デンプンの分枝様式を変化させる酵素をコードする遺伝子もしくはチオレドキシンを変化させる遺伝子、例えばＮＴＲおよび／もしくはＴＲＸなどで植物を形質転換すること（この目的のために参照により組み込まれる米国特許第６，５３１，６４８号を参照されたい）、ならびに／またはガンマゼインのノックアウトまたは突然変異体、例えばｃｓ２７またはＴＵＳＣ２７またはｅｎ２７など（この目的のために参照により組み込まれる米国特許第６，８５８，７７８号および米国特許出願公開第２００５／０１６０４８８号および２００５／０２０４４１８号を参照されたい）によってもたらされる。以下を参照されたい。Shirozaら、J. Bacteriol.、170：810（1988）（ミュータンス連鎖球菌（Streptococcus mutans）のフルクトシルトランスフェラーゼ遺伝子のヌクレオチド配列）；Steinmetzら、Mol. Gen. Genet.、200：220（1985）（枯草菌（Bacillus subtilis）のレバンスクラーゼ遺伝子のヌクレオチド配列）；Penら、Bio/Technology、10：292（1992）（バチルス・リケニフォルミス（Bacillus licheniformis）のアルファアミラーゼを発現する遺伝子導入植物の作出）；Elliotら、Plant Molec. Biol.、21：515（1993）（トマトインベルターゼ遺伝子のヌクレオチド配列）；Sogaardら、J. Biol. Chem.、268：22480（1993）（オオムギアルファアミラーゼ遺伝子の部位特異的変異誘発）；Fisherら、Plant Physiol.、102：1045（1993）（トウモロコシ胚乳デンプン分枝酵素ＩＩ）；ＷＯ９９／１０４９８（ＵＤＰ−Ｄ−キシロース４−エピメラーゼの修飾による向上した消化性および／またはデンプン抽出、Ｆｒａｇｉｌｅ１および２、Ｒｅｆ１、ＨＣＨＬ、Ｃ４Ｈ）；米国特許第６，２３２，５２９号（デンプンレベルの修飾による油を多く含む種子の作出方法（ＡＧＰ））。上述の脂肪酸修飾遺伝子を使用して、デンプン経路と油経路との相互関係を通してデンプンの含量および／または組成物に影響を及ぼすこともできる。
【０１２５】
Ｄ．ＦＡＤ−２遺伝子の修飾を介して増加したオレイン酸および／またはＦＡＤ−３遺伝子の修飾を介して減少したリノレン酸。米国特許第６，０６３，９４７号、６，３２３，３９２号および国際公開ＷＯ９３／１１２４５を参照されたい。リノレン酸は、ダイズ種子で最も豊富な５種の脂肪酸のうちの１つである。リノレン酸の低い酸化安定性は、ダイズ油が部分水添を受ける１つの理由である。部分的に水添されると、全ての不飽和脂肪酸はトランス脂肪を形成する。ダイズは米国の食用油の最大の供給源であり、４０％のダイズ油生産物は部分的に水添されている。トランス脂肪を摂取すると、心疾患の危険性が増大する。トランス脂肪を禁止する規則によって、低リノレン酸ダイズの開発が助長された。低いリノレン酸率のダイズによって、水添を必要とする頻度が低いより安定的な油が作り出される。このことによって、料理用油などの製品においてトランス脂肪フリーの代替物が提供される。
【０１２６】
Ｅ．ＷＯ０１／１２８００のように、コンジュゲートされたリノレン酸またはリノール酸含量を変化させること。ＬＥＣ１、ＡＧＰ、Ｄｅｋ１、Ｓｕｐｅｒａｌｌ、ｍｉｌｐｓおよび様々なＩｐａ遺伝子、例えばＩｐａ１、Ｉｐａ３、ｈｐｔまたはｈｇｇｔなどを改変すること。例えば、ＷＯ０２／４２４２４、ＷＯ９８／２２６０４、ＷＯ０３／０１１０１５、ＷＯ０２／０５７４３９、ＷＯ０３／０１１０１５、米国特許第６，４２３，８８６号、６，１９７，５６１号、６，８２５，３９７号、７，１５７，６２１号、米国特許出願公開第２００３／００７９２４７号およびRivera-Madrid, R.ら、Proc. Natl. Acad. Sci、92：5620〜5624（1995）を参照されたい。
【０１２７】
Ｆ．トコフェロールまたはトコトリエノールの改変など、改変された抗酸化剤の含量または組成物。例えば、米国特許第６，７８７，６８３号、７，１５４，０２９号、ＷＯ００／６８３９３（フィチル（ｐｈｙｔｌ）プレニルトランスフェラーゼ（ｐｐｔ）の改変による抗酸化剤レベルの操作を含む）；ＷＯ０３／０８２８９９（ホモゲンチジン酸ゲラニルゲラニルトランスフェラーゼ（ｈｇｇｔ）の改変による）を参照されたい。
【０１２８】
Ｇ．改変された必須種子アミノ酸。以下を参照されたい。例えば、米国特許第６，１２７，６００号（種子において必須アミノ酸の蓄積を増大させる方法）；米国特許第６，０８０，９１３号（種子において必須アミノ酸の蓄積を増大させるバイナリー方法）；米国特許第５，９９０，３８９号（高リジン）；米国特許第５，８５０，０１６号（種子のアミノ組成物の改変）；米国特許第５，８８５，８０２号（高メチオニン）；米国特許第５，８８５，８０１号（高スレオニン）；米国特許第６，６６４，４４５号（植物アミノ酸生合成酵素）；米国特許第６，４５９，０１９号（増大したリジンおよびスレオニン）；米国特許第６，４４１，２７４号（植物トリプトファン合成酵素のベータサブユニット）；米国特許第６，３４６，４０３号（メチオニン代謝酵素）；米国特許第５，９３９，５９９号（高硫黄）；米国特許第５，９１２，４１４号（増大したメチオニン）；米国特許第５，６３３，４３６号（硫黄アミノ酸含量の増大）；米国特許第５，５５９，２２３号（植物の栄養価向上のための、プログラム可能なレベルの必須アミノ酸を含む所定構造を有する合成貯蔵タンパク質）；米国特許第６，１９４，６３８号（ヘミセルロース）；米国特許第７，０９８，３８１号（ＵＤＰＧｄＨ）；米国特許第６，１９４，６３８号（ＲＧＰ）；米国特許第６，３９９，８５９号、６，９３０，２２５号、７，１７９，９５５号および６，８０３，４９８号；米国特許出願公開第２００４／００６８７６７号；ＷＯ９９／４０２０９（種子のアミノ酸組成物の改変）；ＷＯ９９／２９８８２（タンパク質のアミノ酸含量を変化させるための方法）；ＷＯ９８／２０１３３（必須アミノ酸レベルが高まったタンパク質）；ＷＯ９８／５６９３５（植物アミノ酸生合成酵素）；ＷＯ９８／４５４５８（必須アミノ酸の割合が高い操作された種子タンパク質）；ＷＯ９８／４２８３１（増大したリジン）；ＷＯ９６／０１９０５（増大したスレオニン）；ＷＯ９５／１５３９２（増大したリジン）；ＷＯ０１／７９５１６；ならびにＷＯ００／０９７０６（ＣｅｓＡ：セルロース合成酵素）。
【０１２９】
ダイズ形質転換の方法
生物学的および物理的な植物形質転換プロトコールを含めて、多数の植物形質転換方法が開発されている。例えば、Mikiら、「Procedures for Introducing Foreign DNA into Plants」、in Methods in Plant Molecular Biology and Biotechnology、GlickおよびThompson編、CRC Press, Inc.、Boca Raton、67〜88ページ（1993）を参照されたい。加えて、植物細胞または組織の形質転換および植物再分化のための発現ベクターならびにｉｎ  ｖｉｔｒｏ培養方法が利用可能である。例えば、Gruberら、「Vectors for Plant Transformation」、in Methods in Plant Molecular Biology and Biotechnology、GlickおよびThompson編、CRC Press, Inc.、Boca Raton、89〜119ページ（1993）を参照されたい。
【０１３０】
Ａ．アグロバクテリウム（Agrobacterium）媒介性形質転換。発現ベクターを植物に導入する一方法は、アグロバクテリウム（Agrobacterium）の天然の形質転換系に基づく。例えば、Horschら、Science、227：1229（1985）を参照されたい。アグロバクテリウム・ツメファシエンス（A. tumefaciens）およびアグロバクテリウム・リゾゲネス（A. rhizogenes）は植物細胞を遺伝的に形質転換する植物病原性土壌細菌である。アグロバクテリウム・ツメファシエンス（A. tumefaciens）およびアグロバクテリウム・リゾゲネス（A. rhizogenes）のＴｉおよびＲｉプラスミドはそれぞれ、植物の遺伝子形質転換に関与する遺伝子を保持する。例えば、Kado, C.I.、Crit. Rev. Plant Sci.、10：1（1991）を参照されたい．アグロバクテリウム（Agrobacterium）ベクター系およびアグロバクテリウム（Agrobacterium）媒介性の遺伝子導入方法の説明は、Gruberら、上記、Mikiら、上記およびMoloneyら、Plant Cell Reports、8：238（1989）によって提供される。１９９６年１０月８日に発行された米国特許第５，５６３，０５５号（ＴｏｗｎｓｅｎｄおよびＴｈｏｍａｓ）も参照されたい。
【０１３１】
Ｂ．直接遺伝子導入。直接遺伝子導入とまとめて呼ばれる植物形質転換のいくつかの方法は、アグロバクテリウム（Agrobacterium）媒介性形質転換の代替として開発された。一般に適用可能な植物形質転換方法は、１から４μｍの大きさのマイクロプロジェクタイルの表面にＤＮＡが担持される、マイクロプロジェクタイル媒介性形質転換である。発現ベクターは、植物細胞壁および膜を貫通するのに十分な３００から６００ｍ／ｓのスピードにマイクロプロジェクタイルを加速するバイオリスティック装置を用いて植物組織に導入される。Sanfordら、Part. Sci. Technol.、5：27（1987）；Sanford, J.C.、Trends Biotech.、6：299（1988）；Kleinら、Bio/Tech.、6：559〜563（1988）；Sanford, J.C.、Physiol Plant、7：206（1990）；Kleinら、Biotechnology、10：268（1992）。１９９１年５月１４日に発行された米国特許第５，０１５，５８０号（Ｃｈｒｉｓｔｏｕら）および１９９４年６月２１日に発行された米国特許第５，３２２，７８３号（Ｔｏｍｅｓら）も参照されたい。
【０１３２】
ＤＮＡを植物に物理的に送達するための別の方法は、標的細胞の超音波処理である。Zhangら、Bio/Technology、9：996（1991）。あるいは、発現ベクターを植物に導入するのにリポソームおよびスフェロプラスト融合が使用されている。Deshayesら、EMBO J、4：2731（1985）；Christouら、Proc Natl. Acad. Sci. USA、84：3962（1987）。ＣａＣｌ２沈殿、ポリビニルアルコールまたはポリ−Ｌ−オルニチンを使用する、プロトプラスト中へのＤＮＡの直接的な取り込みも報告されている。Hainら、Mol. Gen. Genet.、199：161（1985）およびDraperら、Plant Cell Physiol.、23：451（1982）。プロトプラストならびに細胞全体および組織全体のエレクトロポレーションも記載されている（Donnら、In Abstracts of VIIth International Congress on Plant Cell and Tissue Culture IAPTC、A2〜38、53ページ（1990）；D'Halluinら、Plant Cell、4：1495〜1505（1992）；およびSpencerら、Plant Mol. Biol、24：51〜61（1994））。
【０１３３】
ダイズ標的組織の形質転換の次に、上記の選択マーカー遺伝子の発現により、当技術分野で周知の再分化および選抜方法を使用して、形質転換された細胞、組織および／または植物を優先的に選抜することが可能になる。
【０１３４】
前述の形質転換方法は、一般的には、遺伝子導入品種を作出するのに使用されるであろう。この遺伝子導入品種は、次に、新しい遺伝子導入品種を作出するために、別の（形質転換されていないまたは形質転換された）品種と交雑することができる。あるいは、前述の形質転換技術を使用して特定のダイズ系統に操作された遺伝形質は、植物育種分野で周知の従来の戻し交雑技術を使用して別の系統に移すことができる。例えば、戻し交雑手法を使用して、公開されている非優良品種から優良品種にまたはゲノム中に外来遺伝子を含む品種からその遺伝子を含まない１つまたは複数の品種に、操作された形質を移すことができる。本明細書で使用する場合、「交雑」は、文脈に応じて、単純なｘとｙの交雑または戻し交雑のプロセスを指し得る。
【０１３５】
ＳＳＲによる遺伝マーカープロファイルおよび後代第１世代
表現型の観察に加えて、その遺伝子型によって植物を同定することができる。植物の遺伝子型は、同一品種もしくは関連品種の植物を同定することができるまたは系統を決定もしくは検証するのに使用することができる遺伝マーカープロファイルを通して特性評価することができる。遺伝マーカープロファイルは、以下の技術によって得ることができる。例えば、制限断片長多型（ＲＦＬＰ）、ランダム増幅多型ＤＮＡ法（ＲＡＰＤ）、任意プライム化ポリメラーゼ連鎖反応法（Arbitrarily Primed Polymerase Chain Reaction）（ＡＰ−ＰＣＲ）、ＤＮＡ増幅フィンガープリント法（ＤＡＦ）、配列特性化増幅領域（Sequence Characterized Amplified Regions）（ＳＣＡＲ）、増幅断片長多型（ＡＦＬＰ）、単純反復配列（ＳＳＲ）（これはマイクロサテライトとも呼ばれる）および一塩基多型（ＳＮＰ）など。例えば、Creganら、「An Integrated Genetic Linkage Map of the Soybean Genome」、Crop Science、39：1464〜1490（1999）およびBerryら、「Assessing Probability of Ancestry Using Simple Sequence Repeat Profiles：Applications to Maize Inbred Lines and Soybean Varieties」、Genetics、165：331〜342（2003）を参照されたい。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０１３６】
こうした目的に使用する特定のマーカーは、任意の特定のマーカーセットに限定されないが、品種識別の手段を提供する任意の種類のマーカーおよびマーカープロファイルを含むことが想定される。
［実施例］
【０１３７】
実施例に記載するデータは、アポミクシスのダイズ植物７Ｂ１およびＳ−２０１の選抜体の、ならびに雄親もしくは雌親としてのアポミクシス系統７Ｂ１もしくはＳ−２０１といくつかの異なる雌性もしくは雄性ダイズ系統との交雑を通してまたは自家受粉によって得たアポミクシスのダイズ植物の、顕著な形質および特性を示す。交雑および評価は、インディアナ州ブルックストンで２００７年〜２０１１年に実施した。植物を交雑し、種子を雌植物につけさせ、次いでその種子を生長させ、得られた植物を観察し、選抜した。これらの交雑および／または選抜の観察を用いて、以下の表を作成した。実施例および付随する表で示すように、作出されたアポミクシスのダイズ植物は、非常に高い莢総数および雑種強勢を示した。
【実施例１】
【０１３８】
９３ｘ１７×７Ｂ１の交雑によって作出されたアポミクシスのダイズ
以下の実施例は、雄のアポミクシス系統７Ｂ１を雌のダイズ系統９３ｘ１７と交雑することによって作出したアポミクシスのダイズ植物の形質を説明する。表１で示すように、用いた育種交雑種をカラム１に挙げ、インチでの草高をカラム２に挙げ、主茎（ＭＳ）の節数をカラム３に挙げ、主茎（ＭＳ）の莢数をカラム４に挙げ、主茎（ＭＳ）の節あたりの平均莢数をカラム５に挙げ、植物あたりの総節数をカラム６に挙げ、植物あたりの総莢数をカラム７に挙げ、節全体あたりの平均総莢数をカラム８に挙げる。
【０１３９】
【表１】
2014513541.tif 000003
【実施例２】
【０１４０】
アポミクシスのダイズ系統７Ｂ１の単一植物選抜体
以下の実施例は、７Ｂ１タグ７−２と命名されたアポミクシスのダイズ植物７Ｂ１の単一植物選抜体の形質を説明し、これは除雄試験で使用した７世代目の植物由来の単一植物選抜体であり、生じた２番目の莢に由来した。表２で示すように、植物をカラム１に挙げ、インチでの草高をカラム２に挙げ、主茎（ＭＳ）の節数をカラム３に挙げ、主茎（ＭＳ）の莢数をカラム４に挙げ、主茎（ＭＳ）の節あたりの平均莢数をカラム５に挙げ、植物あたりの総節数をカラム６に挙げ、植物あたりの総莢数をカラム７に挙げ、節全体あたりの平均総莢数をカラム８に挙げる。
【０１４１】
【表２】
2014513541.tif 000004
【実施例３】
【０１４２】
９３ｘ１２×７Ｂ１との交雑によって作出されたアポミクシスのダイズ
以下の実施例は、雄のアポミクシス系統７Ｂ１を雌のダイズ系統９３ｘ１２と交雑することによって作出したアポミクシスのダイズ植物の形質を説明する。表３で示すように、用いた育種交雑種をカラム１に挙げ、インチでの草高をカラム２に挙げ、主茎（ＭＳ）の節数をカラム３に挙げ、主茎（ＭＳ）の莢数をカラム４に挙げ、主茎（ＭＳ）の節あたりの平均莢数をカラム５に挙げ、植物あたりの総節数をカラム６に挙げ、植物あたりの総莢数をカラム７に挙げ、節全体あたりの平均総莢数をカラム８に挙げる。
【０１４３】
【表３】
2014513541.tif 000005
【実施例４】
【０１４４】
アポミクシスのダイズ系統Ｓ−２０１の単一植物選抜体
以下の実施例は、ＳＳ４０と命名されたＳ−２０１の単一植物選抜体の形質を説明する。表４で示すように、植物をカラム１に挙げ、インチでの草高をカラム２に挙げ、主茎（ＭＳ）の節数をカラム３に挙げ、主茎（ＭＳ）の莢数をカラム４に挙げ、主茎（ＭＳ）の節あたりの平均莢数をカラム５に挙げ、植物あたりの総節数をカラム６に挙げ、植物あたりの総莢数をカラム７に挙げ、節全体あたりの平均総莢数をカラム８に挙げる。
【０１４５】
【表４】
2014513541.tif 000006
【実施例５】
【０１４６】
アポミクシスのダイズ系統Ｓ−２０１の単一植物選抜体
以下の実施例は、ＤＯＳ８５と命名されたＳ−２０１の単一植物選抜体の形質を説明し、これは２００９年の８５回目の複胚珠種子選抜であった。表５で示すように、植物をカラム１に挙げ、インチでの草高をカラム２に挙げ、主茎（ＭＳ）の節数をカラム３に挙げ、主茎（ＭＳ）の莢数をカラム４に挙げ、主茎（ＭＳ）の節あたりの平均莢数をカラム５に挙げ、植物あたりの総節数をカラム６に挙げ、植物あたりの総莢数をカラム７に挙げ、節全体あたりの平均総莢数をカラム８に挙げる。
【０１４７】
【表５】
2014513541.tif 000007
【実施例６】
【０１４８】
アポミクシスのダイズ系統７Ｂ１の自家受粉試験
以下の実施例は、７Ｂ１−３と命名されたアポミクシスのダイズ植物７Ｂ１の形質を説明し、これは除雄試験のための自家受粉試験で用いられた。表６で示すように、植物をカラム１に挙げ、インチでの草高をカラム２に挙げ、主茎（ＭＳ）の節数をカラム３に挙げ、主茎（ＭＳ）の莢数をカラム４に挙げ、主茎（ＭＳ）の節あたりの平均莢数をカラム５に挙げ、植物あたりの総節数をカラム６に挙げ、植物あたりの総莢数をカラム７に挙げ、節全体あたりの平均総莢数をカラム８に挙げる。
【０１４９】
【表６】
2014513541.tif 000008
【実施例７】
【０１５０】
アポミクシスのダイズ系統７Ｂ１の自家受粉試験
以下の実施例は、７Ｂ１タグ７−１と命名されたアポミクシスのダイズ植物７Ｂ１の形質を説明し、除雄試験のための自家受粉試験で用いられた。表７で示すように、植物をカラム１に挙げ、インチでの草高をカラム２に挙げ、主茎（ＭＳ）の節数をカラム３に挙げ、主茎（ＭＳ）の莢数をカラム４に挙げ、主茎（ＭＳ）の節あたりの平均莢数をカラム５に挙げ、植物あたりの総節数をカラム６に挙げ、植物あたりの総莢数をカラム７に挙げ、節全体あたりの平均総莢数をカラム８に挙げる。
【０１５１】
【表７】
2014513541.tif 000009
【実施例８】
【０１５２】
９３ｘ２５×７Ｂ１の交雑によって作出されたアポミクシスのダイズ
以下の実施例は、雄のアポミクシス系統７Ｂ１を雌のダイズ系統９３ｘ２５と交雑することによって作出したアポミクシスのダイズ植物の形質を説明する。表８で示すように、用いた育種交雑種をカラム１に挙げ、インチでの草高をカラム２に挙げ、主茎（ＭＳ）の節数をカラム３に挙げ、主茎（ＭＳ）の莢数をカラム４に挙げ、主茎（ＭＳ）の節あたりの平均莢数をカラム５に挙げ、植物あたりの総節数をカラム６に挙げ、植物あたりの総莢数をカラム７に挙げ、節全体あたりの平均総莢数をカラム８に挙げる。
【０１５３】
【表８】
2014513541.tif 000010
【実施例９】
【０１５４】
９３ｘ５８×７Ｂ１の交雑によって作出されたアポミクシスのダイズ
以下の実施例は、雄のアポミクシス系統７Ｂ１を雌のダイズ系統９３ｘ５８と交雑することによって作出したアポミクシスのダイズ植物の形質を説明する。表９で示すように、用いた育種交雑種をカラム１に挙げ、インチでの草高をカラム２に挙げ、主茎（ＭＳ）の節数をカラム３に挙げ、主茎（ＭＳ）の莢数をカラム４に挙げ、主茎（ＭＳ）の節あたりの平均莢数をカラム５に挙げ、植物あたりの総節数をカラム６に挙げ、植物あたりの総莢数をカラム７に挙げ、節全体あたりの平均総莢数をカラム８に挙げる。
【０１５５】
【表９】
2014513541.tif 000011
【実施例１０】
【０１５６】
９３ｘ３×７Ｂ１の交雑によって作出されたアポミクシスのダイズ
以下の実施例は、雄のアポミクシス系統７Ｂ１を雌のダイズ系統９３ｘ３と交雑することによって作出したアポミクシスのダイズ植物の形質を説明する。表１０で示すように、用いた育種交雑種をカラム１に挙げ、インチでの草高をカラム２に挙げ、主茎（ＭＳ）の節数をカラム３に挙げ、主茎（ＭＳ）の莢数をカラム４に挙げ、主茎（ＭＳ）の節あたりの平均莢数をカラム５に挙げ、植物あたりの総節数をカラム６に挙げ、植物あたりの総莢数をカラム７に挙げ、節全体あたりの平均総莢数をカラム８に挙げる。
【０１５７】
【表１０】
2014513541.tif 000012
【実施例１１】
【０１５８】
９３ｘ４４×７Ｂ１の交雑によって作出されたアポミクシスのダイズ
以下の実施例は、雄のアポミクシス系統７Ｂ１を雌のダイズ系統９３ｘ４４と交雑することによって作出したアポミクシスのダイズ植物の形質を説明する。表１１で示すように、用いた育種交雑種をカラム１に挙げ、インチでの草高をカラム２に挙げ、主茎（ＭＳ）の節数をカラム３に挙げ、主茎（ＭＳ）の莢数をカラム４に挙げ、主茎（ＭＳ）の節あたりの平均莢数をカラム５に挙げ、植物あたりの総節数をカラム６に挙げ、植物あたりの総莢数をカラム７に挙げ、節全体あたりの平均総莢数をカラム８に挙げる。
【０１５９】
【表１１】
2014513541.tif 000013
【実施例１２】
【０１６０】
アポミクシスのダイズ系統Ｓ−２０１の単一植物選抜体
以下の実施例は、ＳＳ４０−２と命名されたＳ−２０１の単一植物選抜体の形質を説明し、これは実施例４で提示したものと同じ系統であるが、１年後に生育させた。表１２で示すように、植物をカラム１に挙げ、インチでの草高をカラム２に挙げ、主茎（ＭＳ）の節数をカラム３に挙げ、主茎（ＭＳ）の莢数をカラム４に挙げ、主茎（ＭＳ）の節あたりの平均莢数をカラム５に挙げ、植物あたりの総節数をカラム６に挙げ、植物あたりの総莢数をカラム７に挙げ、節全体あたりの平均総莢数をカラム８に挙げる。
【０１６１】
【表１２】
2014513541.tif 000014
【実施例１３】
【０１６２】
アポミクシスのダイズ系統Ｓ−２０１
以下の実施例は、アポミクシスのダイズ系統Ｓ−２０１の形質を説明する。表１３で示すように、植物をカラム１に挙げ、インチでの草高をカラム２に挙げ、主茎（ＭＳ）の節数をカラム３に挙げ、主茎（ＭＳ）の莢数をカラム４に挙げ、主茎（ＭＳ）の節あたりの平均莢数をカラム５に挙げ、植物あたりの総節数をカラム６に挙げ、植物あたりの総莢数をカラム７に挙げ、節全体あたりの平均総莢数をカラム８に挙げる。
【０１６３】
【表１３】
2014513541.tif 000015
【実施例１４】
【０１６４】
ＫＫ１７×７Ｂ１の交雑によって作出されたアポミクシスのダイズ
以下の実施例は、雄のアポミクシス系統７Ｂ１を雌のダイズ系統ＫＫ１７と交雑することによって作出したアポミクシスのダイズ植物の形質を説明する。表１４で示すように、用いた育種交雑種をカラム１に挙げ、インチでの草高をカラム２に挙げ、植物あたりの総節数をカラム３に挙げ、植物あたりの総莢数をカラム４に挙げ、節全体あたりの平均総莢数をカラム５に挙げる。
【０１６５】
【表１４】
2014513541.tif 000016
【実施例１５】
【０１６６】
０１ｘ４３７×７Ｂ１の交雑によって作出されたアポミクシスのダイズ
以下の実施例は、雄のアポミクシス系統７Ｂ１を雌のダイズ系統０１ｘ４３７と交雑することによって作出した２つのアポミクシスのダイズ植物の形質を説明する。表１５で示すように、用いた育種交雑種をカラム１に挙げ、インチでの草高をカラム２に挙げ、植物あたりの総節数をカラム３に挙げ、植物あたりの総莢数をカラム４に挙げ、節全体あたりの平均総莢数をカラム５に挙げる。
【０１６７】
【表１５】
2014513541.tif 000017
【実施例１６】
【０１６８】
Ｔ３００１×７Ｂ１の交雑によって作出されたアポミクシスのダイズ
以下の実施例は、雄のアポミクシス系統７Ｂ１を雌のダイズ系統Ｔ３００１と交雑することによって作出したアポミクシスのダイズ植物の形質を説明する。表１６で示すように、用いた育種交雑種をカラム１に挙げ、インチでの草高をカラム２に挙げ、植物あたりの総節数をカラム３に挙げ、植物あたりの総莢数をカラム４に挙げ、節全体あたりの平均総莢数をカラム５に挙げる。
【０１６９】
【表１６】
2014513541.tif 000018
【０１７０】
前記表１〜１６で示すように、本発明のアポミクシスのダイズ品種は、非常に増大した植物あたりの莢数および節あたりの莢数を示す。
【実施例１７】
【０１７１】
アポミクシス系統との交雑育種による雑種強勢の獲得
実施例１７は、雄の市販品種であるＤｗｉｇｈｔと雌親としてのアポミクシス系統７Ｂ１とを交雑することによる雑種強勢の獲得を説明する。雑種強勢は、１種または複数の形質の向上した能力を指し、特定のＦ１雑種で発現され、その遺伝的異質性からもたらされる。雑種の後代種子を播種する場合、この向上した能力は一般的には低減または除去される。本発明では、収穫したＦ１アポミクシスの種子を播種する場合、アポミクシスのＦ１の向上した能力は翌シーズンで維持される。本実施例では、所有の雌系統Ｆｅｍ８４Ｃとの交雑において、アポミクシス系統７Ｂ１を雄親として最初に使用し、この交雑からのアポミクシスの植物をＤｗｉｇｈｔとの交雑の雌親として使用した。本実施例および表では、市販品種Ｄｗｉｇｈｔは、植物あたり５０莢の推定平均莢数を有する。表１７で示すように、用いた育種交雑種をカラム１に挙げ、インチでの草高をカラム２に挙げ、植物あたりの総節数をカラム３に挙げ、植物あたりの総莢数をカラム４に挙げ、節全体あたりの平均総莢数をカラム５に挙げる。
【０１７２】
【表１７】
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【０１７３】
実施例１７で示すように、予想外に多い植物あたりの総莢数によって示されるように、アポミクシス系統７Ｂ１との交雑育種によっていずれの雑種強勢も獲得された。要約すれば、実施例１、３、８〜１１および１４〜１７は全て、２代以上続く播種世代にわたっていずれのＦ１雑種強勢も獲得および維持するＦ１アポミクシス系統の例を示す例である。播種されたアポミクシスのＦ１種子は、収穫され育てられた時にＦ１親系統と同じ遺伝子型を有する種子をつけた植物を生産するので、多くの播種世代にわたって収穫される種子において雑種強勢が維持される。
【実施例１８】
【０１７４】
アポミクシス系統７Ｂ１の除雄
以下の実施例は、アポミクシス系統７Ｂ１の除雄から得られたデータを説明する。本実施例では、９個の植物のアポミクシス系統７Ｂ１を生長させ、各植物のいくつかの花から全ての花粉を除去し、タグによって除雄した各花が位置する場所を示した。次いで、これらの植物を、タグで示した除雄した花の部位についた莢について観察した。ここで、除雄は花の雄部を破壊し、雄部がない花はこうした部分を有する他の花と比較されるべきでないことに留意されたい。表１８で示すように、植物をカラム１に挙げ、除雄した花の数をカラム２に挙げ、除雄した花からついた莢をカラム３に挙げ、結莢の割合をカラム４に挙げる。
【０１７５】
【表１８】
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【０１７６】
実施例１８で示すように、アポミクシスのダイズ系統７Ｂ１は、除雄した花に関して高い結莢率を有する。
【０１７７】
本発明を説明する文脈における（特に以下の特許請求の範囲の文脈において）用語「１つの（a）」および「１つの（an）」および「その（the）」ならびに類似の指示語の使用は、本明細書で別段指示がない限り、または文脈に明らかに矛盾しない限り、単数および複数の両方に及ぶものと解釈されるべきである。用語「含む（comprising）」「有する（having）」「含む（including）」および「含む（containing）」は、特に断りのない限り、制約のない用語（すなわち、「含まれるが、これらに限定されない」ことを意味する）として解釈されるべきである。本明細書の値の範囲の列挙は、本明細書で別段指示がない限り、範囲内にあるそれぞれの別個の値を個々に言及する略記法としての役割を果たすことを単に意図しており、それぞれの別個の値は、まるでそれが本明細書で個々に詳述されるかのように明細書内に組み込まれる。例えば、範囲１０〜１５が開示される場合は、例えば１１、１２、１３、および１４も開示される。本明細書に記載の全ての方法は、本明細書で別段指示がない限り、または文脈に明らかに矛盾しない限り、任意の適切な順序で実施することができる。本明細書で提供されるありとあらゆる実施例または例示的な言い回し（例えば「など」）の使用は、別段請求がない限り、本発明をより明らかにすることを単に意図するにすぎず、本発明の範囲に制限を課すものではない。本明細書のいかなる言い回しも、請求されていない任意の要素が本発明の実施に不可欠なものとして示すと解釈されるべきでない。
【０１７８】
寄託情報
上で開示され添付の特許請求の範囲に記載された本発明の変異対立遺伝子ＡＰ１を含む所有のＳ−２０１ダイズ種子の、ＫｅｎＡｖｉｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、ＬＬＣのＧ．Ｒｏｂｅｒｔ  Ｔａｙｌｏｒ代表の寄託は、アメリカ培養細胞系統保存機関（ＡＴＣＣ）、１０８０１  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｂｏｕｌｅｖａｒｄ、Ｍａｎａｓｓａｓ、Ｖｉｒｇｉｎｉａ  ２０１１０に行われた。寄託年月日は、２０１１年５月２４日であった。ＫｅｎＡｖｉｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、ＬＬＣの代表のＧ．Ｒｏｂｅｒｔ  Ｔａｙｌｏｒ発明者によって維持される２，５００種子の寄託が、米国特許出願第１３／１０２，５９１号の出願日に先立って同一の寄託から行われた。特許付与の際に、全ての制限は変更不可の形で排除されることになり、この寄託は、３７Ｃ．Ｆ．Ｒ．§§１．８０１〜１．８０９の全ての要求を満たすよう意図される。ＡＴＣＣ受託番号は、ＰＴＡ−１１８９２である。この寄託は、３０年の期間または最後の依頼の後５年またはこの特許の存続期間のいずれか長い期間、寄託機関において維持されることになり、その期間中において必要であれば交換されることになる。
【０１７９】
いくつかの例示的な態様および実施形態を上で説明してきたが、特定の変更、置換、付加およびそれらの副結合を当業者なら認識するであろう。したがって、以下の添付の特許請求の範囲および以後導入される請求項は、それらの真の趣旨および範囲内にあるように、全てのそうした変更、置換、付加および副結合を含むと解釈されることが意図される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
2014513541.tif 000028
【図９】
2014513541.tif 000029
【図１０】
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【図１１】
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【国際調査報告】
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