(57)【要約】本願は、細菌性ジャイレースおよび／またはトポイソメラーゼＩＶを阻害する、式Ｉ：2014502640.tif 000055の化合物の固体形態、および薬学的に許容されるこれらの塩、ならびに前記化合物および塩を含む医薬組成物を対象とする。これらの化合物および塩は、細菌感染症の処置において有用である。本願は、（Ｒ）−１−エチル−３−［６−フルオロ−５−［２−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）ピリミジン−５−イル］−７−（テトラヒドロフラン−２−イル）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］尿素（「６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物」）の固体形態に関する。
2014502640.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１６】
2014502640.tif 000051
の化合物の固体形態Ｉ。
【請求項２】
Ｘ線粉末回折パターン（ＸＲＰＤ）が約５〜約３８度２θから収集されるとき、９．３、１１．７、１２．１、１２．４、１４．５、１５．９、１６．３、１６．６、１８．５、１９．４、２１．５、２２．３、２２．８、２３．８、２４．５、２５．７、２８．１、２８．４、３０．３、および３３．４からなる群から選択される、ＣｕＫα放射線を使用して測定した場合の少なくとも３つのおおよそのピーク位置（度２θ±０．２）を含む前記ＸＲＰＤを特徴とする、請求項１に記載の固体形態Ｉ。
【請求項３】
Ｘ線粉末回折パターン（ＸＲＰＤ）が約５〜約３８度２θから収集されるとき、９．３、１６．６、１８．５、１９．４、２１．５、および２５．７からなる群から選択される、ＣｕＫα放射線を使用して測定した場合の少なくとも３つのおおよそのピーク位置（度２θ±０．２）を含む前記ＸＲＰＤを特徴とする、請求項１に記載の固体形態Ｉ。
【請求項４】
図１と実質的に同様の、ＣｕＫα放射線を使用して測定した場合のＸ線粉末回折パターンを特徴とする、請求項３に記載の固体形態Ｉ。
【請求項５】
温度が１分当たり約１０℃でスキャンされる示差走査熱量測定によって測定される場合に約３１８℃の開始温度を有する吸熱ピークをさらに特徴とする、請求項４に記載の固体形態Ｉ。
【請求項６】
請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物の結晶形Ｉを調製するための方法であって、アルコールおよびエーテルを含む溶媒系中に遊離塩基の固体材料を懸濁させるステップと、前記固体を単離するステップとを含む、方法。
【請求項７】
式（Ｉ）：
【化１７】
2014502640.tif 000052
の化合物の塩酸塩。
【請求項８】
形態ＩＩの固体形態である、請求項７に記載の塩酸塩。
【請求項９】
前記形態ＩＩの固体形態が、Ｘ線粉末回折パターン（ＸＲＰＤ）が約５〜約３８度２θから収集されるとき、６．７、９．２、１６．７、１８．６、１９．５、２０．５、２５．６、および２７．５からなる群から選択される、ＣｕＫα放射線を使用して測定した場合の少なくとも３つのおおよそのピーク位置（度２θ±０．２）を含む前記ＸＲＰＤを特徴とする、請求項８に記載の塩酸塩。
【請求項１０】
前記形態ＩＩの固体形態が、図４と実質的に同様の、ＣｕＫα放射線を使用して測定した場合のＸ線粉末回折パターンを特徴とする、請求項８に記載の塩酸塩。
【請求項１１】
前記形態ＩＩの固体形態が、温度が１分当たり約１０℃でスキャンされる示差走査熱量測定によって測定される場合に約２５２℃の開始温度を有する吸熱ピークをさらに特徴とする、請求項９に記載の塩酸塩。
【請求項１２】
請求項８に記載の式（Ｉ）の化合物の塩酸塩の固体形態ＩＩを調製するための方法であって、１つまたは複数のエーテル溶媒および水を含む酸性溶媒混合物中に６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の遊離塩基を懸濁させるステップを含む、方法。
【請求項１３】
式Ｉ：
【化１８】
2014502640.tif 000053
の６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の非晶形ＩＩＩ。
【請求項１４】
識別できる回折ピークをまったく含まない広いハローによって特徴付けられる、ＣｕＫα放射線を使用したＸ線粉末回折パターン（ＸＲＰＤ）を特徴とする、請求項１３に記載のフルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の非晶形ＩＩＩ。
【請求項１５】
請求項１３に記載の６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の非晶形ＩＩＩを調製するための方法であって、前記６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の溶液を、凍結乾燥、噴霧乾燥、ドラム乾燥、またはパルス変換乾燥させるステップを含む、方法。
【請求項１６】
式Ｉ：
【化１９】
2014502640.tif 000054
の６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物のメシル酸塩の非晶形ＩＶ。
【請求項１７】
識別できる回折ピークをまったく含まない広いハローによって特徴付けられる、ＣｕＫα放射線を使用したＸ線粉末回折パターン（ＸＲＰＤ）を特徴とする、請求項１６に記載の６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物のメシル酸塩の非晶形ＩＶ。
【請求項１８】
前記形態ＩＩの固体形態が、最大７５％の相対湿度を伴った４０℃で、少なくとも１カ月間安定である、請求項８に記載の塩酸塩。
【請求項１９】
最大７５％の相対湿度を伴った４０℃で、少なくとも１カ月間安定である、請求項２に記載の固体形態Ｉ。
【請求項２０】
請求項１に記載の化合物、および薬学的に許容される担体、アジュバント、またはビヒクルを含む、医薬組成物。
【請求項２１】
患者における院内または非院内細菌感染症を制御、処置、またはその進行、重症度、もしくは影響を低減する方法であって、前記患者に、請求項２０に記載の医薬組成物を投与するステップを含む、方法。
【請求項２２】
前記細菌感染症が、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ  ｃｏｍｐｌｅｘ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍａｂｓｃｅｓｓｕｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｋａｎｓａｓｉｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｕｌｃｅｒａｎｓ、Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ、またはβ−溶血性ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉのうちの１つまたは複数の存在を特徴とする、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記細菌感染症が、以下、即ち、上気道感染症、下気道感染症、耳感染症、胸膜肺感染症および気管支感染症、複雑性尿路感染症、単純性尿路感染症、腹腔内感染症、心血管感染症、血流感染症、敗血症、菌血症、ＣＮＳ感染症、皮膚感染症および軟部組織感染症、ＧＩ感染症、骨関節症および関節感染症、生殖器感染症、眼感染症、または肉芽腫性感染症、単純性皮膚および皮膚構造感染症（ｕｎｃｏｍｐｌｉｃａｔｅｄ  ｓｋｉｎ  ａｎｄ  ｓｋｉｎ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ）（ｕＳＳＳＩ）、複雑性皮膚および皮膚構造感染症（ｃｏｍｐｌｉｃａｔｅｄ  ｓｋｉｎ  ａｎｄ  ｓｋｉｎ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ）（ｃＳＳＳＩ）、カテーテル感染症、咽頭炎、副鼻腔炎、外耳炎、中耳炎、気管支炎、膿胸、肺炎、市中細菌性肺炎（ＣＡＢＰ）、院内肺炎（ＨＡＰ）、院内細菌性肺炎、人工呼吸器関連肺炎（ＶＡＰ）、糖尿病性足感染症、バンコマイシン耐性ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｉ感染症、膀胱炎および腎盂腎炎、腎結石、前立腺炎、腹膜炎、複雑性腹腔内感染症（ｃＩＡＩ）、ならびに他の腹腔内（ｉｎｔｅｒ−ａｂｄｏｍｉｎａｌ）感染症、透析関連腹膜炎、内臓膿瘍、心内膜炎、心筋炎、心膜炎、輸血関連敗血症、髄膜炎、脳炎、脳膿瘍、骨髄炎、関節炎、生殖器潰瘍、尿道炎、膣炎、子宮頸管炎、歯肉炎、結膜炎、角膜炎、眼内炎（ｅｎｄｏｐｈｔｈａｌｍｉｔｉｓａ）、嚢胞性線維症患者の感染症、または発熱性好中球減少症患者の感染症のうちの１つまたは複数から選択される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記細菌感染症が、以下、即ち、市中細菌性肺炎（ＣＡＢＰ）、院内肺炎（ＨＡＰ）、院内細菌性肺炎、人工呼吸器関連肺炎（ＶＡＰ）、菌血症、糖尿病性足感染症、カテーテル感染症、単純性皮膚および皮膚構造感染症（ｕＳＳＳＩ）、複雑性皮膚および皮膚構造感染症（ｃＳＳＳＩ）、バンコマイシン耐性ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｉ感染症、または骨髄炎のうちの１つまたは複数から選択される、請求項２３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願への相互参照）
本出願は、２０１１年１月１４日に出願された米国仮特許出願第６１／４３３，１６９号の利益を米国特許法§１１９の下、主張する。この米国仮特許出願第６１／４３３，１６９号の全内容が、参考として本明細書に援用される。
【背景技術】
【０００２】
（本願の背景）
抗生物質に対する細菌耐性は、長い間認識されてきており、これは、今日では、深刻な世界的健康問題であると考えられている。耐性の結果として、いくつかの細菌感染症は、抗生物質で処置することが困難であり、または処置不能でさえある。この問題は、細菌のある特定の系統、例えば、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ（ＳＰ）、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、およびＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓなどにおける多剤耐性の最近の展開を伴って特に深刻となっている。バンコマイシン耐性ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓの出現は、特に憂慮すべきことであった。その理由は、バンコマイシンは、以前は、この感染症を処置するための唯一の有効な抗生物質であり、多くの感染症にとって「最後の手段」の薬物であると考えられていたためである。ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｉなどの多くの他の薬物耐性細菌は、生命を危うくする疾患を引き起こさないが、耐性を誘発する遺伝子が、メチシリン耐性がすでに蔓延しているＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓなどのより死に至る危険のある生物に蔓延し得るという恐怖がある（非特許文献１；非特許文献２）。
【０００３】
別の懸念は、どの程度急速に抗生物質耐性が蔓延し得るかである。例えば、１９６０年代まで、ＳＰは、ペニシリンに普遍的に感受性であり、１９８７年では、米国において、ＳＰ系統の０．０２％のみが耐性であった。しかし、１９９５年までに、ペニシリンに対するＳＰの耐性は、約７パーセントであり、米国の一部の地域では３０％もの高さであることが報告された（非特許文献３）。
【０００４】
特に、病院は、薬物耐性生物の形成および伝播の中心として機能を果たす。病院内で発生する感染症は、院内感染として公知であり、ますます深刻な問題となっている。毎年病院内で感染する２００万の米国人のうち、これらの感染症の半分超が少なくとも１つの抗生物質に耐性となる。疾病管理センターは、１９９２年に、１３，０００を超える病院患者が抗生物質処置に耐性である細菌感染症で死亡したことを報告した（非特許文献４）。
【０００５】
薬物耐性細菌を退治する必要性、および利用可能な薬物の機能停止の増大の結果として、新規抗生物質を発見する関心が復活している。新規抗生物質を開発するための１つの魅力的なストラテジーは、ＤＮＡ複製に必要な、したがって、細菌性細胞増殖および分裂に必要な細菌酵素である、ＤＮＡジャイレースおよび／またはトポイソメラーゼＩＶを阻害することである。ジャイレースおよび／またはトポイソメラーゼＩＶ活性は、ＤＮＡ転写、修復、および組換えにおける事象にも関連する。
【０００６】
ジャイレースは、ＤＮＡのトポロジカル異性体の相互変換を触媒する酵素の群であるトポイソメラーゼの１つである（一般に、非特許文献５；非特許文献６；非特許文献７を参照）。ジャイレース自体は、ＤＮＡスーパーコイル形成を制御し、親二本鎖のＤＮＡ鎖が複製プロセスの間によりが戻される際に起こるトポロジカルストレスを軽減する。ジャイレースは、弛緩型閉環状二本鎖ＤＮＡの、組換えにとってより好都合である負高次らせんへの変換も触媒する。スーパーコイル形成反応の機構は、ＤＮＡの一領域周囲へのジャイレースのラッピング、その領域における二本鎖破壊、破壊箇所を通じたＤＮＡの第２の領域の通過、および破壊された鎖の再結合を伴う。このような開裂機構は、ＩＩ型トポイソメラーゼの特徴である。スーパーコイル形成反応は、ＡＴＰがジャイレースに結合することによって推進される。次いで、ＡＴＰは、反応の間に加水分解される。このＡＴＰの結合および後続の加水分解は、ＤＮＡに結合したジャイレースの活性に必要であるこのジャイレースのコンホメーション変化を引き起こす。ＤＮＡスーパーコイル形成（または弛緩）のレベルは、ＡＴＰ／ＡＤＰ比に依存することも判明している。ＡＴＰの非存在下で、ジャイレースは、スーパーコイルＤＮＡを弛緩することができるだけである。
【０００７】
細菌ＤＮＡのジャイレースは、２つのＡ（ＧｙｒＡ）および２つのＢサブユニット（ＧｙｒＢ）からなる４００キロダルトンのタンパク質四量体である。ＤＮＡの結合および開裂は、ＧｙｒＡに関連し、一方、ＡＴＰは、ＧｙｒＢタンパク質によって結合および加水分解される。ＧｙｒＢは、ＡＴＰａｓｅ活性を有するアミノ末端ドメイン、ならびにＧｙｒＡおよびＤＮＡと相互作用するカルボキシ末端ドメインからなる。対照的に、真核生物のＩＩ型トポイソメラーゼは、負のスーパーコイルおよび正のスーパーコイルを弛緩することができるが、負のスーパーコイルを導入することができないホモ二量体である。理想的には、細菌ＤＮＡのジャイレースおよび／またはトポイソメラーゼＩＶの阻害に基づく抗生物質は、この酵素に選択的であり、真核生物のＩＩ型トポイソメラーゼに対して相対的に不活性であるはずである。
【０００８】
トポイソメラーゼＩＶは主に、ＤＮＡ複製の最後に、連結した染色体二量体を分離する。
【０００９】
広く使用されているキノロン抗生物質は、細菌ＤＮＡジャイレース（ＧｙｒＡ）および／またはトポイソメラーゼＩＶ（ＰａｒＣ）を阻害する。キノロンの例として、早期の化合物、例えば、ナリジクス酸およびオキソリン酸など、ならびに後期の化合物であるより強力なフルオロキノロン、例えば、ノルフロキサシン、シプロフロキサシン、およびトロバフロキサシンなどが挙げられる。これらの化合物は、ＧｙｒＡおよび／またはＰａｒＣに結合し、開裂された複合体を安定化させ、したがって、全体的なジャイレースの機能を阻害し、細胞死に導く。フルオロキノロンは、ジャイレース（ＧｙｒＡ）および／またはトポイソメラーゼＩＶ（ＰａｒＣ）の触媒サブユニットを阻害する（非特許文献７を参照）。しかし、薬剤耐性も、このクラスの化合物の問題として認識されている（非特許文献８）。キノロンでは、他のクラスの抗生物質と同様に、より早期の化合物に曝された細菌は、同じクラスのより強力な化合物に対する交差耐性を急速に発達させることが多い。
【００１０】
触媒ターンオーバーに必要なエネルギーの供給／ＡＴＰ加水分解を介した酵素のリセットに関与する関連サブユニットは、それぞれＧｙｒＢ（ジャイレース）およびＰａｒＥ（トポイソメラーゼＩＶ）である（非特許文献９）。ＧｙｒＢおよびＰａｒＥサブユニット中のこれらの同じＡＴＰ結合部位を標的にする化合物は、様々な細菌感染症を処置するのに有用であるはずである（非特許文献１０）。
【００１１】
ＧｙｒＢに結合する公知の阻害剤はより少ない。例として、クマリン、ノボビオシン、およびクメルマイシンＡ１、シクロチアリジン、シノジン、およびクレロシジンが挙げられる。クマリンは、非常にしっかりとＧｙｒＢに結合することが示されている。例えば、ノボビオシンは、タンパク質との水素結合のネットワーク、およびいくつかの疎水性接触を作る。ノボビオシンとＡＴＰは、ＡＴＰ結合部位内で確かに結合するように思われるが、２つの化合物の結合配向（ｂｏｕｎｄ  ｏｒｉｅｎｔａｔｉｏｎ）における重なりは最小である。重なり部分は、ノボビオシンの糖ユニットおよびＡＴＰアデニンである（非特許文献１１）。
【００１２】
クマリン耐性細菌については、最も蔓延している点変異は、クマリン環のカルボニルに結合する表面アルギニン残基（Ｅ．ｃｏｌｉのＧｙｒＢ中のＡｒｇ１３６）におけるものである。この変異を有する酵素は、より低いスーパーコイル形成およびＡＴＰａｓｅ活性を示すが、これらはまた、クマリン薬物による阻害に対して感受性がより低い（非特許文献１２）。
【００１３】
ジャイレーススーパーコイル形成の強力な阻害剤であるにもかかわらず、クマリンは、抗生物質として広く使用されていない。これらは、細菌において浸透性が低く、真核生物に毒性であり、水溶性が乏しいために、一般に適当でない（非特許文献１１）。これらの欠点を克服し、好ましくは、活性のためにＡｒｇ１３６への結合を利用しない新規の有効なＧｙｒＢおよびＰａｒＥ阻害剤を有することが望ましい。このような阻害剤は、他のクラスの抗生物質を悩ます耐性問題の履歴を伴わない魅力的な抗生物質候補であるはずである。
【００１４】
抗生物質に対する細菌耐性は、重要な公衆衛生問題となっているので、より新しく、より強力な抗生物質を開発する必要性が継続している。より具体的には、細菌感染症を処置するのに以前に使用されていない新しいクラスの化合物を代表する抗生物質が必要とされている。ＧｙｒＢ（ジャイレース）およびＰａｒＥ（トポイソメラーゼＩＶ）サブユニットの両方におけるＡＴＰ結合部位を標的にする化合物は、様々な細菌感染症を処置するのに有用であるはずである。このような化合物は、耐性菌の形成および伝播がますます蔓延した状態になりつつある病院における院内感染を処置するのに特に有用であるはずである。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１５】
【非特許文献１】Ｄｅ  Ｃｌｅｒｑら、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ａｎｔｉ−ｉｎｆｅｃｔｉｖｅ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎａｌ  Ｄｒｕｇｓ、１９９９年、１巻、１号
【非特許文献２】Ｌｅｖｙ、「Ｔｈｅ  Ｃｈａｌｌｅｎｇｅ  ｏｆ  Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ」、Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ａｍｅｒｉｃａｎ、１９９８年３月
【非特許文献３】Ｌｅｗｉｓ、ＦＤＡ  Ｃｏｎｓｕｍｅｒ  ｍａｇａｚｉｎｅ  （１９９５年９月）；Ｔｈｅ  Ｍｅｄｉｃａｌ  ＲｅｐｏｒｔｅｒにおけるＧｅｒｓｈｍａｎ、１９９７年
【非特許文献４】Ｌｅｗｉｓ、「Ｔｈｅ  Ｒｉｓｅ  ｏｆ  Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ−Ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ」、ＦＤＡ  Ｃｏｎｓｕｍｅｒ  ｍａｇａｚｉｎｅ、１９９５年９月
【非特許文献５】ＫｏｒｎｂｅｒｇおよびＢａｋｅｒ、ＤＮＡ  Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ、２版、１２章、１９９２年、Ｗ．  Ｈ．  Ｆｒｅｅｍａｎおよび共著者
【非特許文献６】Ｄｒｌｉｃａ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ、１９９２年、６巻、４２５頁
【非特許文献７】ＤｒｌｉｃａおよびＺｈａｏ、Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ、１９９７年、６１巻、３７７〜３９２頁
【非特許文献８】ＷＨＯ  Ｒｅｐｏｒｔ、「Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｑｕｉｎｏｌｏｎｅｓ  ｉｎ  Ｆｏｏｄ  Ａｎｉｍａｌｓ  ａｎｄ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  Ｉｍｐａｃｔ  ｏｎ  Ｈｕｍａｎ  Ｈｅａｌｔｈ」、１９９８年
【非特許文献９】Ｃｈａｍｐｏｕｘ，  Ｊ．Ｊ．、Ａｎｎｕ．  Ｒｅｖ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．、２００１年、７０巻、３６９〜４１３頁
【非特許文献１０】Ｃｈａｒｉｆｓｏｎら、Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．、２００８年、５１巻、５２４３〜５２６３頁
【非特許文献１１】Ｍａｘｗｅｌｌ、Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ、１９９７年、５巻、１０２頁
【非特許文献１２】Ｍａｘｗｅｌｌ、Ｍｏｌ．  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．、１９９３年、９巻、６８１頁
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１６】
（本願の要旨）
本願は、（Ｒ）−１−エチル−３−［６−フルオロ−５−［２−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）ピリミジン−５−イル］−７−（テトラヒドロフラン−２−イル）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］尿素（「６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物」）の固体形態に関する。一実施形態では、本願は、Ｘ線粉末回折パターン（ＸＲＰＤ）が約５〜約３８度２シータ（２θ）から収集されるとき、９．３、１１．７、１２．１、１２．４、１４．５、１５．９、１６．３、１６．６、１８．５、１９．４、２１．５、２２．３、２２．８、２３．８、２４．５、２５．７、２８．１、２８．４、３０．３、および３３．４からなる群から選択される、ＣｕＫα放射線を使用して測定した場合の少なくなくとも３つのおおよそのピーク位置（度２θ±０．２）を含むＸＲＰＤを特徴とする６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の固体形態Ｉを提供する。固体形態Ｉは、図１と実質的に同様の、ＣｕＫα放射線を使用して測定した場合のＸ線粉末回折パターン、および温度が１分当たり約１０℃でスキャンされる示差走査熱量測定によって測定される場合に約３１８℃の開始温度を有する吸熱ピークも特徴とし得る。本願は、アルコールおよびエーテルを含む溶媒系中に遊離塩基の固体材料を懸濁させ、固体を単離することによって、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の結晶形Ｉを調製するための方法も提供する。
【００１７】
本願の別の実施形態は、Ｘ線粉末回折パターン（ＸＲＰＤ）が約５〜約３８度２θから収集されるとき、６．７、９．２、１６．７、１８．６、１９．５、２０．５、２５．６、および２７．５からなる群から選択される、ＣｕＫα放射線を使用して測定した場合の少なくとも３つのおおよそのピーク位置（度２θ±０．２）を含むＸＲＰＤを特徴とする、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の塩酸塩の固体形態ＩＩを提供する。固体形態ＩＩは、図４と実質的に同様の、ＣｕＫα放射線を使用して測定した場合のＸ線粉末回折パターン、および温度が１分当たり約１０℃でスキャンされる示差走査熱量測定によって測定される場合に約２５２℃の開始温度を有する吸熱ピークも特徴とし得る。６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の塩酸塩の固体形態ＩＩは、１つまたは複数のエーテル溶媒および水を含む酸性溶媒混合物中に６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の遊離塩基を懸濁させることによって調製され得る。
【００１８】
本願のさらなる実施形態は、識別できる回折ピークをまったく含まない広いハローによって特徴付けられる、ＣｕＫα放射線を使用したＸ線粉末回折パターン（ＸＲＰＤ）を特徴とする、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物（遊離塩基）の非晶形ＩＩＩである。本願のさらなる実施形態は、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物（遊離塩基）の非晶形ＩＩＩを調製するための方法であって、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の溶液を、凍結乾燥、噴霧乾燥、ドラム乾燥、またはパルス変換乾燥（ｐｕｌｓｅ  ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ  ｄｒｙｉｎｇ）させるステップを含む、方法である。
【００１９】
本願のさらに別の実施形態は、識別できる回折ピークをまったく含まない広いハローによって特徴付けられる、ＣｕＫα放射線を使用したＸ線粉末回折パターン（ＸＲＰＤ）を特徴とする、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物のメシル酸塩の非晶形ＩＶである。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】図１は、約５〜約３８度２θから収集される６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物（遊離塩基）の固体形態ＩのＸ線粉末回折パターンを示す図である。
【図２】図２は、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物（遊離塩基）の固体形態ＩのＤＳＣ（示差走査熱量測定）サーモグラムを示す図である。
【図３】図３は、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物（遊離塩基）の固体形態ＩのＴＧＡ（熱重量分析）サーモグラムを示す図である。
【図４】図４は、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の塩酸塩の固体形態ＩＩのＸ線粉末回折パターンを示す図である。
【図５】図５は、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の塩酸塩の固体形態ＩＩのＤＳＣサーモグラムを示す図である。
【図６】図６は、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の固体形態ＩＩのＴＧＡサーモグラムを示す図である。
【図７】図７は、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物（遊離塩基）の非晶形ＩＩＩのＸ線粉末回折パターンである。
【図８】図８は、１つの小さい発熱、その後の３つのより大きい吸熱を呈する、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素（遊離塩基）の非晶形ＩＩＩのＤＳＣサーモグラムを示す図である。
【図９】図９は、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物のメシル酸塩の非晶形ＩＶのＸ線粉末回折パターンである。
【図１０】図１０は、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物のメシル酸塩の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルである。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本願は、（Ｒ）−１−エチル−３−［６−フルオロ−５−［２−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）ピリミジン−５−イル］−７−（テトラヒドロフラン−２−イル）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］尿素（「６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物」）の新規の実質的に純粋な固体形態を対象とする。
【００２２】
本発明者らは、本化合物の遊離塩基結晶形（形態Ｉ）、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の薬学的に許容される塩の結晶形（形態ＩＩ、塩酸塩に対応）、遊離塩基の非晶形（形態ＩＩＩ）、および本化合物のメシル酸塩の非晶形（形態ＩＶ）を発見した。
【００２３】
したがって、本願の一態様は、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物（遊離塩基）の新規固体形態Ｉである。一態様では、本願は、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の固体形態Ｉを調製するためのプロセスを提供する。
【００２４】
６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の実質的に純粋な固体形態Ｉは、本化合物を、アルコールおよびエーテルを含む溶媒系と接触させ、固体を単離することによって、非晶質化合物または結晶化合物から調製され得る。６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物は、周囲温度で溶媒中に６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の溶液を飽和させ、この混合物を長時間（例えば、一晩）静置することによって、溶媒と接触させることができる。あるいは、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物は、高温で（例えば、還流させながら）溶媒に溶解させ、その後、室温以下にこの溶液を冷却し、固体形態Ｉを単離することができる。
【００２５】
本プロセスの一実施形態では、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の実質的に純粋な固体形態Ｉは、室温で適当な溶媒中の本化合物の飽和溶液を調製し、生じる形態Ｉを単離することによって、本化合物の非晶形または結晶形から調製され得る。実際には、これは、溶液が室温に冷却させられるとき、飽和溶液が得られ、この飽和溶液から形態Ｉが析出し、これを単離することができるように、高温（還流まで）で、溶媒中に十分な量の６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物を溶解させることによって達成することができる。他の実施形態では、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物は、溶媒中の化合物の溶解度を改変することによって、反応混合物から単離される場合がある。例えば、溶媒の一部もしくはすべてを除去するか、または混合物の温度を下げることにより、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の溶解度を低減することができ、固体形態Ｉが析出し得る。あるいは、混合物に第２の溶媒を添加することにより、本化合物の固体形態Ｉを析出させることができる。
【００２６】
一実施形態では、形態Ｉを調製するための溶媒は、エタノールとエチルエーテルの混合物である。得られた固体を単離すると、形態Ｉがもたらされる。
【００２７】
６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の固体形態Ｉは、以下の特性、即ち、１分当たり１０℃のスキャン速度を使用する示差走査熱量測定によって求められる場合の、約２５０℃の広い吸熱、約３１８℃の外挿開始点を有する融解吸熱、およびＸＲＰＤパターンがＣｕ  Ｘ線管源を備えた粉末回折計を使用して測定された、本質的に表１および図１に示されるＸ線粉末回折パターンによって同定され得る。試料をＣｕ  Ｋα１放射線で照射し、ＸＲＰＤデータを約５〜約４０°２θから収集した。当業者であれば、ＸＲＰＤピークの相対強度が、試験下の試料の配向、ならびに使用される計測器の型および設定に応じて著しく変化する場合があり、その結果、本明細書に含まれるＸＲＰＤトレースの強度が、例示的な程度までのものであり、絶対比較に使用されることは意図されていないことを認識するであろう。
【００２８】
図１は、約５〜約４０度２θから収集された６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物（遊離塩基）の固体形態ＩのＸ線粉末回折パターンである。５％以上の相対強度を有するＸ線粉末回折パターンに該当するピークを、表１に列挙する。
【００２９】
図２は、約２５０℃の開始転移点を有する広い吸熱、および約３１８℃の開始転移点を有する吸熱を呈する、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の固体形態ＩのＤＳＣサーモグラムを示す。当業者であれば、吸熱のピークおよび開始温度が実験条件に応じて変化し得ることを認識するであろう。図２中のデータは、固体の試料２．５ｍｇを、約３５℃で約１０分間平衡化して収集した。データ収集期間の間、１分当たり約１０℃の速度で温度を上昇させた。
【００３０】
図３は、５０〜３００℃の温度範囲における約１５％の初期重量損失と、３００〜４００℃の間の約２５％の追加の重量損失を呈する、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の固体形態ＩのＴＧＡ（熱重量分析）サーモグラムである。
【００３１】
一実施形態では、本発明は、式（Ｉ）：
【００３２】
【化１】
2014502640.tif 000003
の化合物の固体形態Ｉを提供する。
【００３３】
別の実施形態では、固体形態Ｉは、Ｘ線粉末回折パターン（ＸＲＰＤ）が約５〜約３８度２θから収集されるとき、９．３、１１．７、１２．１、１２．４、１４．５、１５．９、１６．３、１６．６、１８．５、１９．４、２１．５、２２．３、２２．８、２３．８、２４．５、２５．７、２８．１、２８．４、３０．３、および３３．４からなる群から選択される、ＣｕＫα放射線を使用して測定した場合の少なくなくとも３つのおおよそのピーク位置（度２θ±０．２）を含むＸＲＰＤを特徴とする。
【００３４】
別の実施形態では、固体形態Ｉは、Ｘ線粉末回折パターン（ＸＲＰＤ）が約５〜約３８度２θから収集されるとき、９．３、１６．６、１８．５、１９．４、２１．５、および２５．７からなる群から選択される、ＣｕＫα放射線を使用して測定した場合の少なくとも３つのおおよそのピーク位置（度２θ±０．２）を含むＸＲＰＤを特徴とする。
【００３５】
別の実施形態では、固体形態Ｉは、図１と実質的に同様の、ＣｕＫα放射線を使用して測定した場合のＸ線粉末回折パターンを特徴とする。
【００３６】
別の実施形態では、固体形態Ｉは、温度が１分当たり約１０℃でスキャンされる示差走査熱量測定によって測定される場合に約３１８℃の開始温度を有する吸熱ピークをさらに特徴とする。
【００３７】
別の実施形態では、本発明は、式（Ｉ）の化合物の結晶形Ｉを調製するための方法であって、アルコールおよびエーテルを含む溶媒系中に遊離塩基の固体材料を懸濁させるステップと、この固体を単離するステップとを含む、方法を提供する。
【００３８】
別の実施形態では、固体形態Ｉは、最大７５％の相対湿度を伴った４０℃で、少なくとも１カ月間安定である。
【００３９】
【表１−１】
2014502640.tif 000004
【００４０】
【表１−２】
2014502640.tif 000005
別の態様では、本願は、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の塩酸付加塩の結晶形ＩＩを提供する。一実施形態では、本願は、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の固体形態ＩＩを調製するためのプロセスを提供する。６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の薬学的に許容される塩酸付加塩は、当業者に公知の任意の方法によって調製され得る。
【００４１】
いくつかの実施形態では、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の塩酸付加塩は、化合物の溶液に酸を添加により形成されると析出し得る。他の実施形態では、酸付加塩は、溶媒中の塩の溶解度を改変することによって、反応混合物から単離され得る。例えば、溶媒の一部もしくはすべてを除去するか、または混合物の温度を下げることにより、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の塩酸塩の溶解度を低減することができ、塩が析出する。あるいは、混合物に第２の溶媒を添加することにより、塩を析出させることができる。
【００４２】
さらなる実施形態では、本化合物のモノ酸付加塩が調製されるまで、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の溶液にガス状塩酸を通してバブリングさせてもよい。ある特定の実施形態では、化学量論量の塩酸と６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物を一緒に混合することによって、本化合物のモノ酸付加塩を形成することができる。例えば、極性溶媒中の６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の溶液を、化学量論量の塩酸の水溶液と混合することができる。６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の塩酸塩の固体形態ＩＩを調製するのに適当となり得る極性溶媒の例には、ジエチルエーテルおよびテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）などのエーテルが含まれる。
【００４３】
特定の実施形態では、ＴＨＦ中の化学量論量の６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物と塩酸水溶液を徐々に混合し、この混合物を室温で一晩撹拌した。６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の固体白色塩酸塩が析出した。この固体を単離し、水で洗浄し、真空下で乾燥させた。
【００４４】
６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の固体形態ＩＩは、以下の特性、即ち、１分当たり１０℃のスキャン速度を使用する示差走査熱量測定によって求められる場合の、約２１０℃のピーク温度を有する広い吸熱、約２５２℃の外挿開始点を有する融解吸熱、およびＸＲＰＤパターンがＣｕ  Ｘ線管源を備えた粉末回折計を使用して測定された、本質的に表２および図４に示されるＸ線粉末回折パターンによって同定され得る。試料をＣｕ  Ｋα１放射線で照射し、ＸＲＰＤデータを約５〜約４０°２θから収集した。当業者であれば、ＸＲＰＤピークの相対強度が試料の配向に応じて著しく変化し得ることを認識するであろう。
【００４５】
図４は、約５〜約３８度２θから収集された６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の塩酸塩の固体形態ＩＩのＸ線粉末回折パターンである。５％以上の相対強度を有するＸ線粉末回折パターンに該当するピークを、表２に列挙する。
【００４６】
図５は、約２１０℃の吸熱および約２５２℃の吸熱を呈する、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の塩酸塩の固体形態ＩＩのＤＳＣサーモグラムを示す。吸熱のピークおよび開始温度は、実験条件に応じて変化し得ることを、当業者は認識するはずである。図５中のデータは、固体の試料１ｍｇを、約３５℃で約１０分間平衡化して収集した。データ収集期間の間、１分当たり約１０℃の速度で温度を上昇させた。
【００４７】
図６は、１００〜２２０℃の間の約８％の初期重量損失と、その後の約２４０〜２７０℃の間の追加の約８％の第２の重量損失と、その後の２７０〜３００℃の間の約３％の第３の重量損失を呈する、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の固体形態ＩＩのＴＧＡサーモグラムである。当業者であれば、重量損失の開始温度が実験条件に応じて変化し得ることを認識するであろう。出願者らは、ＤＳＣにおける吸熱およびＴＧＡにおける重量損失の特定の説明に拘束されることを望まないが、ＤＳＣにおける大きいピークを伴った転移は、ＴＧＡにおける重量損失によって示唆される材料の分解と結びついている融解転移に起因すると思われる。
【００４８】
一実施形態では、本発明は、式（Ｉ）：
【００４９】
【化２】
2014502640.tif 000006
の化合物の塩酸塩を提供する。
【００５０】
別の実施形態では、塩酸塩は、形態ＩＩの固体形態である。
【００５１】
別の実施形態では、形態ＩＩの固体形態の塩酸塩は、Ｘ線粉末回折パターン（ＸＲＰＤ）が約５〜約３８度２θから収集されるとき、６．７、９．２、１６．７、１８．６、１９．５、２０．５、２５．６、および２７．５からなる群から選択される、ＣｕＫα放射線を使用して測定した場合の少なくなくとも３つのおおよそのピーク位置（度２θ±０．２）を含むＸＲＰＤを特徴とする。
【００５２】
別の実施形態では、形態ＩＩの固体形態の塩酸塩は、図４と実質的に同様の、ＣｕＫα放射線を使用して測定した場合のＸ線粉末回折パターンを特徴とする。
【００５３】
別の実施形態では、形態ＩＩの固体形態の塩酸塩は、温度が１分当たり約１０℃でスキャンされる示差走査熱量測定によって測定される場合に約２５２℃の開始温度を有する吸熱ピークをさらに特徴とする。
【００５４】
さらに別の実施形態では、本発明は、式（Ｉ）の化合物の塩酸塩の固体形態ＩＩを調製するための方法であって、１つまたは複数のエーテル溶媒および水を含む酸性溶媒混合物中で、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の遊離塩基を懸濁させるステップを含む、方法を提供する。
【００５５】
別の実施形態では、形態ＩＩの固体形態の塩酸塩は、最大７５％の相対湿度を伴った４０℃で、少なくとも１カ月間安定である。
【００５６】
【表２】
2014502640.tif 000007
本願の別の態様は、非晶質６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物（遊離塩基）を含む組成物を提供することである。用語「非晶質」は、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物またはその塩に対して本明細書で適用する場合、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素分子が無秩序配置で全般的に存在し、区別可能な結晶格子または単位セルを形成しない固体状態形態を指す。Ｘ線粉末回折にかけられる場合、完全に非晶質の化合物は、結晶形の回折パターン特性を生じない。部分的に非晶質の材料のＸ線粉末回折は、試料の結晶性部分からの回折ピークが弱すぎてノイズに対して観察可能になり得ないために、結晶形に特徴的な特徴を依然として欠いている場合がある。図７は、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物（遊離塩基）の非晶形ＩＩＩのＸ線粉末回折パターンである。
【００５７】
図８は、小さい発熱、その後の３つのより大きい吸熱を呈する、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素（遊離塩基）の非晶形ＩＩＩのＤＳＣサーモグラムを示す。小さい発熱の開始温度は、１２７℃であり、一方、３つの吸熱の開始温度は、１８３℃、２２６℃、および２７９℃である。当業者であれば、発熱のピークおよび開始温度ならびに吸熱のピークおよび開始温度が実験条件に応じて変化し得ることを認識するであろう。図８中のデータは、非晶質６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の試料２．９ｍｇを、約３５℃で約１０分間平衡化して収集した。データ収集期間の間、１分当たり約１０℃の速度で温度を上昇させた。
【００５８】
別の実施形態では、本発明は、式Ｉ：
【００５９】
【化３】
2014502640.tif 000008
のフルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の非晶形ＩＩＩを提供する。
【００６０】
別の実施形態では、フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の非晶形ＩＩＩは、識別できる回折ピークをまったく含まない広いハローによって特徴付けられる、ＣｕＫα放射線を使用したＸ線粉末回折パターン（ＸＲＰＤ）を特徴とする。
【００６１】
さらに別の実施形態では、本発明は、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の非晶形ＩＩＩを調製するための方法であって、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の溶液を凍結乾燥、噴霧乾燥、ドラム乾燥、またはパルス変換乾燥させるステップを含む、方法を提供する。
【００６２】
別の態様では、本願は、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物のメシル酸塩の非晶質固相形態ＩＶを提供する。一実施形態では、本願は、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物のメシル酸塩の固体形態ＩＶを調製するためのプロセスを提供する。６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の薬学的に許容されるメタンスルホン酸塩は、当業者に公知の任意の方法によって調製され得る。例えば、メタンスルホン酸の溶液を、本化合物のモノ酸付加塩が調製されるまで、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の溶液に添加することができる。一実施形態では、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物のメシル酸塩は、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の溶液に酸を添加すると析出し得る。他の実施形態では、酸付加塩は、溶媒中の塩の溶解度を改変することによって、反応混合物から単離され得る。例えば、溶媒の一部もしくはすべてを除去するか、または混合物の温度を下げることにより、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物のメシル酸塩の溶解度を低減することができ、塩が析出する。したがって、いくつかの実施形態では、非晶質材料は、溶媒から、または例えば、ロータリーエバポレーターを使用して溶媒の一部を蒸発させることによって溶液を濃縮した後の溶液から析出した後収集される。あるいは、混合物に第２の溶媒を添加することにより、塩を析出させることができる。
【００６３】
６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物のメシル酸塩は、当業者の公知の任意の方法を使用して非晶質固体形態に変換され得る。非晶質６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物のメシル酸塩は、結晶形に特徴的な回折パターンが存在しないことを特徴とし得る。部分的に非晶質の６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物のメシル酸塩のＸ線粉末回折は、試料の結晶性部分からの回折ピークが弱すぎてノイズに対して観察可能になり得ないために、結晶形に特徴的な特徴を依然として欠いている場合がある。図９は、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物のメシル酸塩の非晶形ＩＶのＸ線粉末回折パターンである。
【００６４】
一実施形態では、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の非晶質メシル酸塩は、適切な溶媒中の塩の溶液を噴霧乾燥させることによって調製され得る。噴霧乾燥は、当技術分野で周知であり、医薬品などの熱に敏感な材料を乾燥させるのに使用されることが多い。噴霧乾燥は、非常に良く再現され得る一貫した粒子分布ももたらす。粉末を乾燥させるのに任意のガスを使用することができるが、空気が一般に使用される。材料が空気に敏感である場合、不活性ガス、例えば、窒素またはアルゴンなどを使用することができる。塩の溶液、スラリー、懸濁液、またはエマルジョンを変換して固体粉末を生成する任意の方法が、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物のメシル酸塩の固体非晶形ＩＶを調製するのに適当となり得る。例えば、フリーズドライ、ドラム乾燥、またはパルス変換乾燥を使用することによって、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の非晶質メシル酸塩を生成することができる。
【００６５】
一実施形態では、極性溶媒中の６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の溶液を、冷却器を備えたナノ噴霧乾燥器を使用して噴霧乾燥することができる。入口温度は、８０〜１２０℃に保持することができる。
【００６６】
別の実施形態では、本発明は、式Ｉ：
【００６７】
【化４】
2014502640.tif 000009
の６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物のメシル酸塩の非晶形ＩＶを提供する。
【００６８】
別の実施形態では、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物のメシル酸塩の非晶形ＩＶは、識別できる回折ピークをまったく含まない広いハローによって特徴付けられる、ＣｕＫα放射線を使用したＸ線粉末回折パターン（ＸＲＰＤ）を特徴とする。
【００６９】
６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の遊離塩基ならびにメシル酸塩のそれぞれの固体形態ＩおよびＩＩならびに非晶質固体形態ＩＩＩおよびＩＶは、本明細書に記載されるＸＲＰＤ、ＤＳＣ、ＴＧＡ、ならびに他の特性に加えて、それだけに限らないが、水または１つもしくは複数の溶媒分子の存在などの記載されていない他の特性も有する場合があることが理解されるべきである。
【００７０】
Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）：結晶形のＸＲＰＤパターンは、シールド管源およびＨｉ−Ｓｔａｒエリア検出器（Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＸＳ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）を備えたＢｒｕｋｅｒ  Ｄ８  Ｄｉｓｃｏｖｅｒシステムを使用して、反射モードで、室温で記録した。Ｘ線発生器は、４０ｋＶの電圧および３５ｍＡの電流で稼働させていた。粉末試料を、Ｓｉゼロバックグラウンドウエハー上に置いた。２つのフレームを、それぞれ１２０秒の露光時間で合わせた。データをその後、３°〜４１°２θの範囲にわたって、０．０２°のステップサイズで積分し、合体させて１つの連続パターンにした。
【００７１】
非晶形のＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）：非晶質固体形態のＸＲＰＤパターンは、Ｖａｎｔｅｃ−１位置敏感型検出器（Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＸＳ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）を備えたＢｒｕｋｅｒ  Ｄ８  Ａｄｖａｎｃｅシステムを使用して、反射モードで、室温で記録した。Ｘ線発生器は、４０ｋＶの電圧および４５ｍＡの電流で稼働させていた。粉末試料を、Ｓｉゼロバックグラウンドホルダー上に置き、検出器の可変スリットを使用して連続モードで実験する間、１５ｒｐｍで回転させた。０．０１４４６５３度の増分（０．２５秒／ステップ）で、３〜４０度でデータを収集した。
【００７２】
示差走査熱量測定（ＤＳＣ）：ＤＳＣは、ＤＳＣ  Ｑ２０００示差走査熱量計（ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｎｅｗ  Ｃａｓｔｌｅ、ＤＥ）を使用して、材料の試料に対して実施した。計測器をインジウムで較正した。約１〜２ｍｇの試料を計量してアルミニウムパンに入れ、これを、ピン−ホール無しまたはピン−ホール付きの蓋を使用してクリンプした（ｃｒｉｍｐｅｄ）。５０ｍＬ／分の窒素を流しながら、１０℃／分の加熱速度で、３０℃からプロット中に示した温度まで、ＤＳＣ試料をスキャンした。変調ＤＳＣ（ＭＤＳＣ）下で実行した試料は、２または３℃／分のランプ速度で６０秒毎に＋１℃および−１℃変調された。
【００７３】
データをＴｈｅｒｍａｌ  Ａｄｖａｎｔａｇｅ  Ｑ  Ｓｅｒｉｅｓ（商標）ソフトウェアによって収集し、Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ２０００ソフトウェア（ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｎｅｗ  Ｃａｓｔｌｅ、ＤＥ）によって分析した。
【００７４】
熱重量分析（ＴＧＡ）：Ｍｏｄｅｌ  Ｑ５０００  Ｔｈｅｒｍｏｇｒａｖｉｍｅｔｒｉｃ  Ａｎａｌｙｚｅｒ（ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｎｅｗ  Ｃａｓｔｌｅ、ＤＥ）を、ＴＧＡ測定に使用した。１０℃／分の加熱速度で、３０℃からプロット上に示した温度まで、約３〜５ｍｇの重量を有する試料をスキャンした。データをＴｈｅｒｍａｌ  Ａｄｖａｎｔａｇｅ  Ｑ  Ｓｅｒｉｅｓ（商標）ソフトウェアによって収集し、Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ２０００ソフトウェア（ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｎｅｗ  Ｃａｓｔｌｅ、ＤＥ）によって分析した。
【００７５】
本発明は、式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩、および薬学的に許容される担体、アジュバント、またはビヒクルを含む医薬組成物も提供する。
【００７６】
本発明は、患者における院内細菌感染症または非院内細菌感染症を制御、処置、またはその進行、重症度、もしくは影響を低減する方法であって、式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩を含む医薬組成物を前記患者に投与するステップを含む、方法も提供する。
【００７７】
別の実施形態では、本発明は、患者における院内細菌感染症または非院内細菌感染症を制御、処置、またはその進行、重症度、もしくは影響を低減する方法であって、式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩を含む医薬組成物を前記患者に投与するステップを含み、細菌感染症は、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ  ｃｏｍｐｌｅｘ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｂｓｃｅｓｓｕｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｋａｎｓａｓｉｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｕｌｃｅｒａｎｓ、Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ、またはβ−溶血性ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉのうちの１つまたは複数の存在を特徴とする、方法を提供する。
【００７８】
別の実施形態では、本発明は、患者における院内細菌感染症または非院内細菌感染症を制御、処置、またはその進行、重症度、もしくは影響を低減する方法であって、式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩を含む医薬組成物を前記患者に投与するステップを含み、細菌感染症は、以下、即ち、上気道感染症、下気道感染症、耳感染症、胸膜肺感染症および気管支感染症、複雑性尿路感染症、単純性尿路感染症、腹腔内感染症、心血管感染症、血流感染症、敗血症、菌血症、ＣＮＳ感染症、皮膚感染症および軟部組織感染症、ＧＩ感染症、骨関節症および関節感染症、生殖器感染症、眼感染症、または肉芽腫性感染症、単純性皮膚および皮膚構造感染症（ｕＳＳＳＩ）、複雑性皮膚および皮膚構造感染症（ｃＳＳＳＩ）、カテーテル感染症、咽頭炎、副鼻腔炎、外耳炎、中耳炎、気管支炎、膿胸、肺炎、市中細菌性肺炎（ＣＡＢＰ）、院内肺炎（ＨＡＰ）、院内細菌性肺炎、人工呼吸器関連肺炎（ＶＡＰ）、糖尿病性足感染症、バンコマイシン耐性ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｉ感染症、膀胱炎および腎盂腎炎、腎結石、前立腺炎、腹膜炎、複雑性腹腔内感染症（ｃＩＡＩ）、ならびに他の腹腔内感染症、透析関連腹膜炎、内臓膿瘍、心内膜炎、心筋炎、心膜炎、輸血関連敗血症、髄膜炎、脳炎、脳膿瘍、骨髄炎、関節炎、生殖器潰瘍、尿道炎、膣炎、子宮頸管炎、歯肉炎、結膜炎、角膜炎、眼内炎、嚢胞性線維症患者の感染症、または発熱性好中球減少症患者の感染症のうちの１つまたは複数から選択される、方法を提供する。
【００７９】
別の実施形態では、細菌感染症は、以下、即ち、市中細菌性肺炎（ＣＡＢＰ）、院内肺炎（ＨＡＰ）、院内細菌性肺炎、人工呼吸器関連肺炎（ＶＡＰ）、菌血症、糖尿病性足感染症、カテーテル感染症、単純性皮膚および皮膚構造感染症（ｕＳＳＳＩ）、複雑性皮膚および皮膚構造感染症（ｃＳＳＳＩ）、バンコマイシン耐性ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｉ感染症、または骨髄炎のうちの１つまたは複数から選択される。
【００８０】
別の実施形態によれば、本発明は、生物学的試料中の細菌量を減少させるか、または抑制する方法を提供する。この方法は、前記生物学的試料を式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩と接触させるステップを含む。
【００８１】
用語「生物学的試料」には、本明細書において、細胞培養液またはその抽出物、哺乳動物から得られる生検物質またはその抽出物、および血液、唾液、尿、糞便、精液、涙、もしくは他の体液、またはこれらの抽出物が含まれる。用語「生物学的試料」には生体も含まれ、この場合、「本発明の化合物を生物学的試料と接触させること」は、用語「前記化合物または前記化合物を含む組成物を哺乳動物に投与すること」と同義である。
【００８２】
本発明のジャイレースおよび／もしくはトポイソメラーゼＩＶ阻害剤、またはこれらの医薬用塩を製剤化して、動物またはヒトに投与するための医薬組成物にすることができる。細菌量を計れる程度に減少させるのに十分な量のジャイレースおよび／またはトポイソメラーゼＩＶ阻害剤ならびに薬学的に許容される担体を含む、細菌感染症を処置または予防するのに有効なこれらの医薬組成物は、本発明の別の実施形態である。用語「細菌量を計れる程度に減少させる」は、本明細書において、前記阻害剤を含有する試料と、細菌のみを含有する試料との間の細菌数の測定可能な変化を意味する。
【００８３】
別の実施形態によれば、本発明の方法は、霊長類、げっ歯類、爬虫類、およびトリを含めた、動物園動物、実験室動物、人のコンパニオンアニマル、および家畜を含むが、これらに限定されない獣医分野における患者を処置するのに有用である。前記動物の例として、それだけに限らないが、モルモット、ハムスター、アレチネズミ、ラット、マウス、ウサギ、イヌ、ネコ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ウシ、ヤギ、シカ、アカゲザル、サル、タマリン（ｔａｍａｒｉｎｄｓ）、類人猿、ヒヒ、ゴリラ、チンパンジー、オランウータン、テナガザル、ダチョウ、ニワトリ、シチメンチョウ、アヒル、およびガチョウが挙げられる。
【００８４】
用語「非院内感染」は、地域感染型感染症とも呼ばれる。
【００８５】
別の実施形態では、細菌感染症は、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ、またはＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓのうちの１つまたは複数の存在を特徴とする。
【００８６】
別の実施形態では、細菌感染は、Ｅ．ｃｏｌｉ、Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、またはＨａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅのうちの１つまたは複数の存在を特徴とする。
【００８７】
別の実施形態では、細菌感染症は、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ  ｃｏｍｐｌｅｘ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｂｓｃｅｓｓｕｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｋａｎｓａｓｉｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｕｌｃｅｒａｎｓ、Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、およびＣｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｏｍａｔｉｓのうちの１つまたは複数の存在を特徴とする。
【００８８】
別の実施形態では、細菌感染症は、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ  ｃｏｍｐｌｅｘ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｂｓｃｅｓｓｕｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｋａｎｓａｓｉｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｕｌｃｅｒａｎｓ、Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ、またはβ−溶血性ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉのうちの１つまたは複数の存在を特徴とする。
【００８９】
いくつかの実施形態では、細菌感染症は、メチシリン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、フルオロキノロン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、バンコマイシン中間体耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、リネゾリド耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、ペニシリン耐性Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、マクロライド耐性Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、フルオロキノロン耐性Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、バンコマイシン耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ、リネゾリド耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ、フルオロキノロン耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ、バンコマイシン耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍ、リネゾリド耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍ、フルオロキノロン耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍ、アンピシリン耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍ、マクロライド耐性Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、β−ラクタム耐性Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、フルオロキノロン耐性Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、β−ラクタム耐性Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、メチシリン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、メチシリン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、バンコマイシン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、フルオロキノロン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、マクロライド耐性Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、イソニアジド耐性Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、リファンピン耐性Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、メチシリン耐性コアグラーゼ陰性ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ、フルオロキノロン耐性コアグラーゼ陰性ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ、糖ペプチド中間体耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、バンコマイシン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、ヘテロバンコマイシン中間体耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、ヘテロバンコマイシン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、マクロライド−リンコサミド−ストレプトグラミン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ、β−ラクタム耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ、β−ラクタム耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍ、ケトライド耐性Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、ケトライド耐性Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ、マクロライド耐性Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ、バンコマイシン耐性ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、フルオロキノロン耐性Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ、多剤耐性Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、またはセファロスポリン耐性Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅのうちの１つまたは複数の存在を特徴とする。
【００９０】
別の実施形態によれば、メチシリン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉは、メチシリン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、メチシリン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、またはメチシリン耐性コアグラーゼ陰性ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓから選択される。
【００９１】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物の一形態または薬学的に許容されるその塩が、地域感染型ＭＲＳＡ（即ち、ｃＭＲＳＡ）を処置するのに使用される。
【００９２】
他の実施形態では、式（Ｉ）の化合物の一形態または薬学的に許容されるその塩が、それだけに限らないが、ダプトマイシン耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍ、およびダプトマイシン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓを含めたダプトマイシン耐性生物を処置するのに使用される。
【００９３】
別の実施形態によれば、フルオロキノロン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉは、フルオロキノロン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、フルオロキノロン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、またはフルオロキノロン耐性コアグラーゼ陰性ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓから選択される。
【００９４】
別の実施形態によれば、糖ペプチド耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉは、糖ペプチド中間体耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、バンコマイシン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、バンコマイシン中間体耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、ヘテロバンコマイシン中間体耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、またはヘテロバンコマイシン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓから選択される。
【００９５】
別の実施形態によれば、マクロライド−リンコサミド−ストレプトグラミン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉは、マクロライド−リンコサミド−ストレプトグラミン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓである。
【００９６】
別の実施形態によれば、リネゾリド耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｉは、リネゾリド耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ、またはリネゾリド耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍから選択される。
【００９７】
別の実施形態によれば、糖ペプチド耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｉは、バンコマイシン耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍ、またはバンコマイシン耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓから選択される。
【００９８】
別の実施形態によれば、β−ラクタム耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓは、β−ラクタム耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍである。
【００９９】
別の実施形態によれば、ペニシリン耐性Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉは、ペニシリン耐性Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅである。
【０１００】
別の実施形態によれば、マクロライド耐性Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉは、マクロライド耐性Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａである。
【０１０１】
別の実施形態によれば、ケトライド耐性Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉは、マクロライド耐性Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、およびケトライド耐性Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓから選択される。
【０１０２】
別の実施形態によれば、フルオロキノロン耐性Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉは、フルオロキノロン耐性Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅである。
【０１０３】
別の実施形態によれば、β−ラクタム耐性Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓは、β−ラクタム耐性Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅである。
【０１０４】
別の実施形態によれば、フルオロキノロン耐性Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓは、フルオロキノロン耐性Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅである。
【０１０５】
別の実施形態によれば、マクロライド耐性Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓは、マクロライド耐性Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅである。
【０１０６】
別の実施形態によれば、マクロライド耐性Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａは、マクロライド耐性Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅである。
【０１０７】
別の実施形態によれば、イソニアジド耐性Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍは、イソニアジド耐性Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓである。
【０１０８】
別の実施形態によれば、リファンピン耐性Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍは、リファンピン耐性Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓである。
【０１０９】
別の実施形態によれば、β−ラクタム耐性Ｍｏｒａｘｅｌｌａは、β−ラクタム耐性Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓである。
【０１１０】
別の実施形態によれば、細菌感染症は、以下のうちの１つまたは複数の存在を特徴とする：メチシリン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、フルオロキノロン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、バンコマイシン中間体耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、リネゾリド耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、ペニシリン耐性Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、マクロライド耐性Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、フルオロキノロン耐性Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、バンコマイシン耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ、リネゾリド耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ、フルオロキノロン耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ、バンコマイシン耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍ、リネゾリド耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍ、フルオロキノロン耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍ、アンピシリン耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍ、マクロライド耐性Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、β−ラクタム耐性Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、フルオロキノロン耐性Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、β−ラクタム耐性Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、メチシリン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、メチシリン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、バンコマイシン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、フルオロキノロン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、マクロライド耐性Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、イソニアジド耐性Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、リファンピン耐性Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、フルオロキノロン耐性Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ、またはセファロスポリン耐性Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ。
【０１１１】
別の実施形態によれば、細菌感染症は、以下のうちの１つまたは複数の存在を特徴とする：メチシリン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、メチシリン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、メチシリン耐性コアグラーゼ陰性ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ、フルオロキノロン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、フルオロキノロン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、フルオロキノロン耐性コアグラーゼ陰性ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ、バンコマイシン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、糖ペプチド中間体耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、バンコマイシン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、バンコマイシン中間体耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、ヘテロバンコマイシン中間体耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、ヘテロバンコマイシン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、バンコマイシン耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍ、バンコマイシン耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ、ペニシリン耐性Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、マクロライド耐性Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、フルオロキノロン耐性Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、マクロライド耐性Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ、またはβ−ラクタム耐性Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ。
【０１１２】
別の実施形態によれば、細菌感染症は、以下のうちの１つまたは複数の存在を特徴とする：メチシリン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、バンコマイシン耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍ、バンコマイシン耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ、バンコマイシン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、バンコマイシン中間体耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、ヘテロバンコマイシン中間体耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、ヘテロバンコマイシン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、多剤耐性Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、イソニアジド耐性Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、およびリファンピン耐性Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ。
【０１１３】
本発明の化合物の薬学的に許容される塩には、薬学的に許容される無機酸、有機酸、無機塩基、および有機塩基に由来するものが含まれる。適切な酸塩の例として、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、硫酸水素塩、酪酸塩、クエン酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、グリコール酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、パルモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、サリチル酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシル酸塩、およびウンデカン酸塩が挙げられる。シュウ酸などの他の酸は、それ自体では薬学的に許容されないが、本発明の化合物およびこれらの薬学的に許容される酸付加塩を得るとき、中間体として有用な塩を調製するのに使用され得る。
【０１１４】
適切な塩基に由来する塩には、アルカリ金属（例えば、ナトリウムおよびカリウム）、アルカリ土類金属（例えば、マグネシウム）、アンモニウム、およびＮ＋（Ｃ１〜４アルキル）４の塩が含まれる。本発明は、本明細書に開示される化合物の任意の塩基性窒素含有基の四級化も想定している。水溶性もしくは油溶性、または水分散性もしくは油分散性の生成物を、このような四級化によって得ることができる。
【０１１５】
本発明の医薬組成物は、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩、および薬学的に許容される担体を含む。このような組成物は、追加の治療剤を場合により含むことができる。このような作用物質として、それだけに限らないが、抗生物質、抗炎症剤、マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤、リポキシゲナーゼ阻害剤、サイトカインアンタゴニスト、免疫抑制剤、抗がん剤、抗ウイルス剤、サイトカイン、成長因子、増殖因子、免疫調節剤、プロスタグランジン、または抗血管過剰増殖化合物が挙げられる。
【０１１６】
用語「薬学的に許容される担体」は、本発明の化合物と一緒に患者に投与することができ、本発明の化合物の薬理学的活性を消失させない無毒性担体を指す。
【０１１７】
本発明の医薬組成物に使用することができる薬学的に許容される担体として、それだけに限らないが、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、ヒト血清アルブミンなどの血清タンパク質、リン酸塩などのバッファー物質、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩、もしくは硫酸プロタミンなどの電解質、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース系物質、ポリエチレングリコール、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、羊毛脂、およびα−トコフェロールなどの自己乳化薬物送達系（ＳＥＤＤＳ）、ポリエチレングリコール１０００スクシネート、または他の同様のポリマー送達マトリックスが挙げられる。
【０１１８】
用語「薬学的有効量」は、患者における細菌感染症を処置するか、または寛解させるのに有効な量を指す。用語「予防有効量」は、患者における細菌感染症を予防するか、または実質的に和らげるのに有効な量を指す。
【０１１９】
処置または予防される特定の状態または疾患状態に応じて、その状態を処置または予防するのに通常投与される追加の治療剤を、本発明の阻害剤と一緒に投与することができる。このような治療剤として、それだけに限らないが、抗生物質、抗炎症剤、マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤、リポキシゲナーゼ阻害剤、サイトカインアンタゴニスト、免疫抑制剤、抗がん剤、抗ウイルス剤、サイトカイン、成長因子、増殖因子、免疫調節剤、プロスタグランジン、または抗血管過剰増殖化合物が挙げられる。
【０１２０】
本発明の化合物は、細菌感染症レベルをｉｎ  ｖｉｖｏで制御するため、および疾患を処置するか、または細菌によって媒介される影響の進行もしくは重症度を低減するための従来の様式で使用され得る。処置のこのような方法、これらの投与量レベル、および必要条件は、利用可能な方法および技法から当業者によって選択され得る。
【０１２１】
例えば、本発明の化合物は、細菌感染症または疾患を罹患している患者に、薬学的に許容される様式で、かつその感染症または疾患の重症度を和らげるのに有効な量で投与するために、薬学的に許容されるアジュバントと一緒に組み合わせられ得る。
【０１２２】
あるいは、本発明の化合物を、長期間にわたって、細菌感染症または疾患に対して個体を処置または保護するための組成物および方法において使用することができる。一実施形態では、本発明の化合物を、１〜２週間の期間にわたって、細菌感染症または疾患に対して個体を処置または保護するための組成物および方法において使用することができる。別の実施形態では、本発明の化合物を、４〜８週間の期間にわたって、細菌感染症または疾患に対して個体を処置または保護するための組成物および方法において使用することができる（例えば、心内膜炎または骨髄炎を有するか、またはこれらを発症するリスクのある患者の処置において）。別の実施形態では、本発明の化合物を、８〜１２週間の期間にわたって、細菌感染症または疾患に対して個体を処置または保護するための組成物および方法において使用することができる。この化合物は、医薬組成物中の酵素阻害剤の従来の利用と一致する様式で、単独で、または本発明の他の化合物と一緒に、このような組成物に使用され得る。例えば、本発明の化合物は、細菌感染症または疾患に対して長期間にわたって個体を保護するために、ワクチンに慣例的に使用される薬学的に許容されるアジュバントと組み合わされ、予防有効量で投与され得る。
【０１２３】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩は、細菌感染症を予防するために予防的に使用され得る。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を、歯科的処置または外科的処置の前、最中、または後に使用することによって、細菌性心内膜炎において遭遇されるものなどの日和見感染症を予防することができる。他の実施形態では、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩は、それだけに限らないが、抜歯、歯周処置、歯科インプラント配置、および歯内手術を含めた歯科処置において予防的に使用され得る。他の実施形態では、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩は、それだけに限らないが、一般的な手術、呼吸器手術（扁桃摘出術／アデノイド切除）、消化管手術（上部ＧＩおよび待期的小腸手術、食道硬化療法および拡張、大腸切除、緊急虫垂切除）、外傷手術（穿通性腹部手術）、尿生殖路手術（前立腺切除術、尿道拡張、膀胱鏡検査、膣式子宮摘出術または腹式子宮摘出術、帝王切開）、移植手術（腎臓、肝臓、膵臓、または腎臓移植）、頭頸部手術（皮膚切除、頸部廓清術、喉頭切除、頭頸部がん手術、下顎骨折）、整形外科手術（関節全置換術、外傷性開放骨折）、血管手術（末梢血管処置）、心胸郭手術、冠状動脈バイパス手術、肺切除、ならびに脳手術を含めた外科手術において予防的に使用され得る。
【０１２４】
用語「細菌感染症を予防する」は、本明細書において、別段の指定のない限り、細菌感染症を予防するための、本発明のジャイレースおよび／またはトポイソメラーゼＩＶ阻害剤などの抗生物質の予防的使用を意味する。ジャイレースおよび／またはトポイソメラーゼＩＶ阻害剤を用いた処置は、ジャイレースおよび／またはトポイソメラーゼＩＶ阻害剤に感受性である生物によって引き起こされる感染症を予防するのに予防的に行われ得る。予防的処置が考慮され得る状態の１つの一般的なセットは、個体が、例えば、弱くなった免疫、手術、外傷、体内の人工デバイスの存在（一時的もしくは永続的）、解剖学的欠損、高レベルの細菌への曝露、または疾患を引き起こす病原体への予想される曝露に起因して、感染症に対してより脆弱であるときである。免疫を弱まらせ得る要因の例には、化学療法、放射線療法、糖尿病、年齢の進行、ＨＩＶ感染症、および移植が含まれる。解剖学的欠損の例は、心臓弁の欠損であり、これは、細菌性心内膜炎のリスクを増大させる。人工デバイスの例には、人工関節、手術用ピン、カテーテルなどが含まれる。ジャイレースおよび／またはトポイソメラーゼＩＶ阻害剤の予防的使用が適切となり得る状況の別のセットは、個体同士間の病原体の蔓延（直接的または間接的）を予防することである。病原体の蔓延を予防するための予防的使用の具体例は、健康管理機関（例えば、病院または養護ホーム）の者によるジャイレースおよび／またはトポイソメラーゼＩＶ阻害剤の使用である。
【０１２５】
式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩は、様々な細菌感染症に対する療法または予防の効果を増大させるために、他の抗生物質と共投与されてもよい。本発明の化合物が他の作用物質と併用療法で投与される場合、これらは、患者に順次または同時に投与され得る。あるいは、本発明による医薬組成物または予防用組成物は、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩と別の治療剤または予防剤との組合せを含む。
【０１２６】
いくつかの実施形態では、追加の１つまたは複数の治療剤は、天然ペニシリン、ペニシリナーゼ耐性ペニシリン、抗緑膿菌性ペニシリン、アミノペニシリン、第一世代セファロスポリン、第二世代セファロスポリン、第三世代セファロスポリン、第四世代セファロスポリン、カルバペネム、セファマイシン、キノロン、フルオロキノロン、アミノグリコシド、マクロライド、ケトライド、ポリミキシン、テトラサイクリン、糖ペプチド、ストレプトグラミン、オキサゾリジノン、リファマイシン、またはスルホンアミドから選択される抗生物質である。
【０１２７】
いくつかの実施形態では、追加の１つまたは複数の治療剤は、ペニシリン、セファロスポリン、キノロン、アミノグリコシド、またはオキサゾリジノンから選択される抗生物質である。
【０１２８】
他の実施形態では、追加の治療剤は、ベンザチンペニシリンＧ、ペニシリンＧ、およびペニシリンＶを含めた天然ペニシリンから、クロキサシリン、ジクロキサシリン、ナフシリン、およびオキサシリンを含めたペニシリナーゼ耐性ペニシリンから、カルベニシリン、メズロシリン、ピペルシリン、ピペルシリン／タゾバクタム、チカルシリン（Ｔｉｃａｒｉｃｉｌｌｉｎ）、およびチカルシリン／クラブラネートを含めた抗緑膿菌性ペニシリンから、アモキシシリン、アンピシリン、およびアンピシリン／スルバクタムを含めたアミノペニシリンから、セファゾリン、セファドロキシル、セファレキシン、およびセファドリン（Ｃｅｐｈａｄｒｉｎｅ）を含めた第一世代セファロスポリンから、セファクロル、セファクロル−ＣＤ、セファマンドール、セフォニシド（Ｃｅｆｏｎａｃｉｄ）、セフプロジル、ロラカルベフ、およびセフロキシムを含めた第二世代セファロスポリンから、セフジニル、セフィキシム、セフォペラゾン、セフォタキシム、セフポドキシム、セフタジジム、セフチブテン、セフチゾキシム（Ｃｅｆｔｉｚｏｘｍｅ）、およびセフトリアキソンを含めた第三世代セファロスポリンから、セフェピム、セフタロリン、およびセフトビプロールを含めた第四世代セファロスポリンから、セフォテタンおよびセフォキシチンを含めたセファマイシンから、ドリペネム、イミペネム、およびメロペネムを含めたカルバペネムから、アズトレオナムを含めたモノバクタムから、シノキサシン、ナリジクス酸、オキソリニック酸、およびピペミド酸を含めたキノロンから、ベシフロキサシン、シプロフロキサシン、エノキサシン、ガチフロキサシン、グレパフロキサシン、レボフロキサシン、ロメフロキサシン、モキシフロキサシン、ノルフロキサシン、オフロキサシン、およびスパルフロキサシンを含めたフルオロキノロンから、アミカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、ネチルマイシン、スペクチノマイシン、ストレプトマイシン、およびトブラマイシンを含めたアミノグリコシドから、アジスロマイシン、クラリスロマイシン、およびエリスロマイシンを含めたマクロライドから、テリスロマイシンを含めたケトライドから、クロルテトラサイクリン、デメクロサイクリン、ドキシサイクリン、ミノサイクリン、およびテトラサイクリンを含めたテトラサイクリンから、オリタバンシン、ダルババンシン、テラバンシン、テイコプラニン、およびバンコマイシンを含めた糖ペプチドから、ダルホプリスチン／キヌプリスチンを含めたストレプトグラミンから、リネゾリドを含めたオキサゾリドンから、リファブチンおよびリファンピンを含めたリファマイシンから、ならびにバクチトラシン（ｂａｃｔｉｔｒａｃｉｎ）、コリスチン、チガシル、ダプトマイシン、クロラムフェニコール、クリンダマイシン、イソニアジド、メトロニダゾール、ムピロシン、ポリミキシンＢ、ピラジナミド、トリメトプリム／スルファメトキサゾール、およびスルフイソキサゾールを含めた他の抗生物質から選択される。
【０１２９】
他の実施形態では、追加の治療剤は、ペニシリンＧを含めた天然ペニシリンから、ナフシリンおよびオキサシリンを含めたペニシリナーゼ耐性ペニシリンから、ピペルシリン／タゾバクタムを含めた抗緑膿菌性ペニシリンから、アモキシシリンを含めたアミノペニシリンから、セファレキシンを含めた第一世代セファロスポリンから、セファクロル、セファクロル−ＣＤおよびセフロキシムを含めた第二世代セファロスポリンから、セフタジジムおよびセフトリアキソンを含めた第三世代セファロスポリンから、セフェピムを含めた第四世代セファロスポリンから、イミペネム（Ｉｍｅｐｅｎｅｍ）、メロペネム、エルタペネム、ドリペネム、パニペネム、およびビアペネムを含めたカルバペネムから、シプロフロキサシン、ガチフロキサシン、レボフロキサシン、およびモキシフロキサシンを含めたフルオロキノロンから、トブラマイシンを含めたアミノグリコシドから、アジスロマイシンおよびクラリスロマイシンを含めたマクロライドから、ドキシサイクリンを含めたテトラサイクリンから、バンコマイシンを含めた糖ペプチドから、リファンピンを含めたリファマイシンから、ならびにイソニアジド、ピラジナミド、チガシル、ダプトマイシン、またはトリメトプリム／スルファメトキサゾールを含めた他の抗生物質から選択される。
【０１３０】
いくつかの実施形態では、固体形態の式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩は、グラム陽性感染症を処置するために投与され得る。いくつかの実施形態では、組成物は、固体、液体（例えば、懸濁液）、またはｉｖ（例えば、一形態の式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を液体中に溶解させ、それがｉｖ投与される）組成物である。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む組成物は、追加の抗生物質剤、例えば、天然ペニシリン、ペニシリナーゼ耐性ペニシリン、抗緑膿菌性ペニシリン、アミノペニシリン、第一世代セファロスポリン、第二世代セファロスポリン、第三世代セファロスポリン、第四世代セファロスポリン、カルバペネム、セファマイシン、キノロン、フルオロキノロン、アミノグリコシド、マクロライド、ケトライド、ポリミキシン、テトラサイクリン、糖ペプチド、ストレプトグラミン、オキサゾリジノン、リファマイシン、またはスルホンアミドと併用して投与される。いくつかの実施形態では、固体形態の式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む組成物は、経口投与され、追加の抗生物質剤、例えば、天然ペニシリン、ペニシリナーゼ耐性ペニシリン、抗緑膿菌性ペニシリン、アミノペニシリン、第一世代セファロスポリン、第二世代セファロスポリン、第三世代セファロスポリン、第四世代セファロスポリン、カルバペネム、セファマイシン、キノロン、フルオロキノロン、アミノグリコシド、マクロライド、ケトライド、ポリミキシン、テトラサイクリン、糖ペプチド、ストレプトグラミン、オキサゾリジノン、リファマイシン、またはスルホンアミドは、ｉｖ投与される。
【０１３１】
いくつかの実施形態では、固体形態の式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩は、グラム陰性感染症を処置するために投与され得る。いくつかの実施形態では、組成物は、固体、液体（例えば、懸濁液）、またはｉｖ（例えば、一形態の式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を液体中に溶解させ、それがｉｖ投与される）組成物である。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む組成物は、天然ペニシリン、ペニシリナーゼ耐性ペニシリン、抗緑膿菌性ペニシリン、アミノペニシリン、第一世代セファロスポリン、第二世代セファロスポリン、第三世代セファロスポリン、第四世代セファロスポリン、カルバペネム、セファマイシン、モノバクタム、キノロン、フルオロキノロン、アミノグリコシド、マクロライド、ケトライド、ポリミキシン、テトラサイクリン、またはスルホンアミドから選択される追加の抗生物質剤と併用して投与される。いくつかの実施形態では、固体形態の式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む組成物は、経口投与され、追加の抗生物質剤、例えば、天然ペニシリン、ペニシリナーゼ耐性ペニシリン、抗緑膿菌性ペニシリン、アミノペニシリン、第一世代セファロスポリン、第二世代セファロスポリン、第三世代セファロスポリン、第四世代セファロスポリン、カルバペネム、セファマイシン、モノバクタム、キノロン、フルオロキノロン、アミノグリコシド、マクロライド、ケトライド、ポリミキシン、テトラサイクリン、またはスルホンアミドは、経口投与される。いくつかの実施形態では、追加の治療剤はｉｖ投与される。
【０１３２】
上述した追加の治療剤は、複数回投薬レジメンの一部として、阻害剤含有組成物と別個に投与され得る。あるいは、これらの作用物質は、単一組成物中の阻害剤と一緒に混合された単一剤形の一部とすることができる。
【０１３３】
本発明の医薬組成物は、経口的に、非経口的に、吸入スプレーによって、局所的に、経直腸的に、経鼻的に、頬側に、経膣的に、または移植されたリザーバを介して投与され得る。本発明の医薬組成物は、任意の従来の無毒性の薬学的に許容される担体、アジュバント、またはビヒクルを含有し得る。いくつかの場合では、製剤のｐＨを、薬学的に許容される酸、塩基、またはバッファーを用いて調整することによって、製剤化された化合物、またはその送達形態の安定性を増強することができる。用語の非経口は、本明細書において、皮下、皮内、静脈内、筋肉内、関節内、滑液包内、胸骨内、クモ膜下、病巣内、および頭蓋内の注射または注入技法を含む。
【０１３４】
医薬組成物は、例えば、滅菌した注射可能な水性または油性の懸濁液としての、滅菌した注射可能な調製物の形態であってもよい。この懸濁液は、適切な分散剤または湿潤剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ８０など）、および懸濁剤を使用して、当技術分野で公知の技法によって製剤化され得る。滅菌した注射可能な調製物は、無毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の滅菌注射用溶液または懸濁液、例えば、１，３−ブタンジオール溶液であってもよい。使用することができる、許容されるビヒクルおよび溶媒の中には、マンニトール、水、リンガー液、および等張性塩化ナトリウム溶液がある。さらに、滅菌した固定油が、溶媒または懸濁化媒質として慣用的に使用される。この目的で、合成モノグリセリドまたは合成ジグリセリドを含めた任意の無刺激性固定油を使用することができる。オレイン酸およびそのグリセリド誘導体などの脂肪酸は、天然の薬学的に許容される油、例えば、オリーブ油またはヒマシ油などと同様に、特にこれらのポリオキシエチル化型で、注入可能医薬品の調製に有用である。これらの油溶液または懸濁液は、Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ  Ｈｅｌｖｅｔｉｃａに記載されているものなどの長鎖アルコール希釈剤もしくは分散剤、または同様のアルコールも含有する場合がある。
【０１３５】
本発明の医薬組成物は、それだけに限らないが、カプセル、錠剤、ならびに水性懸濁液および水溶液を含めた任意の経口的に許容される剤形で経口投与され得る。経口用途用の錠剤の場合では、一般に使用される担体には、ラクトースおよびコーンスターチが含まれる。ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤も一般に添加される。カプセル形態での経口投与については、有用な希釈剤には、ラクトース、および乾燥コーンスターチが含まれる。水性懸濁液および水溶液、ならびにプロピレングリコールが経口投与される場合、活性成分は、乳化剤および懸濁剤と組み合わされる。必要に応じて、ある特定の甘味料および／または香味料および／または着色剤が添加される場合がある。
【０１３６】
本発明の医薬組成物は、直腸投与のために坐剤の形態で投与され得る。これらの組成物は、本発明の化合物を、室温で固体であるが、直腸温度で液体であり、したがって、直腸内で融解して活性成分を放出する適切な非刺激性賦形剤と混合することによって調製され得る。このような材料には、それだけに限らないが、カカオバター、蜜ろう、およびポリエチレングリコールが含まれる。
【０１３７】
本発明の医薬組成物の局所投与は、所望の処置が、局所的な適用によって容易にアクセス可能な領域または臓器を伴う場合、特に有用である。皮膚に局所的に塗布する場合、医薬組成物は、担体中に懸濁または溶解した活性成分を含有する適切な軟膏で製剤化されるべきである。本発明の化合物の局所投与用担体として、それだけに限らないが、鉱油、流動パラフィン、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン、乳化ろう、および水が挙げられる。あるいは、医薬組成物は、担体中に懸濁または溶解した活性化合物を含有する適切なローション剤またはクリームで製剤化されてもよい。適切な担体として、それだけに限らないが、鉱油、ソルビタンモノステアレート、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、セテアリールアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコール、および水が挙げられる。本発明の医薬組成物は、直腸用坐剤製剤によって、または適切な浣腸製剤で下部腸管に局所的に適用されてもよい。局所的に投与される経皮パッチも本発明に含まれる。
【０１３８】
本発明の医薬組成物は、鼻エアロゾルまたは吸入によって投与され得る。このような組成物は、医薬製剤の分野で周知である技法によって調製され、ベンジルアルコール、または他の適切な保存剤、生体利用率を増強するための吸収プロモーター、フルオロカーボン、および／または当技術分野で公知である他の可溶化剤もしくは分散剤を使用して、生理食塩水の溶液として調製され得る。
【０１３９】
別の実施形態によれば、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩は、埋め込み型デバイスまたは留置デバイスなどを用いて、移植によって（例えば、外科的に）送達され得る。埋め込み型デバイスまたは留置デバイスは、被験体中に永久に、または一時的にあるようにデザインされ得る。埋め込み型デバイスならびに留置デバイスの例として、それだけに限らないが、コンタクトレンズ、中心静脈カテーテル、ならびに無針コネクタ、気管内チューブ、子宮内デバイス、機械心臓弁、ペースメーカー、腹膜透析カテーテル、腰および膝の代替品などの人工関節、中耳腔換気用チューブ、導尿カテーテル、ボイスプロステーシス、ステント、吐出ポンプ、血管フィルター、ならびに移植可能な制御放出組成物が挙げられる。生物膜は、埋め込み型または留置医療用デバイスを有する患者の健康に有害となり得、その理由は、これらは、体内に人工基質を導入し、持続感染を引き起こし得るためである。したがって、埋め込み型デバイスまたは留置デバイスの中または上に式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を供給することにより、生物膜の生成を予防または低減することができる。さらに、埋め込み型デバイスまたは留置デバイスは、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩のデポーまたはリザーバとして使用され得る。任意の埋め込み型デバイスまたは留置デバイスを、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を送達するのに使用することができるが、ただし、ａ）デバイス、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩、および式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む任意の医薬組成物は生体適合性であり、ｂ）デバイスは、有効量の式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を送達または放出することによって、処置される患者に治療効果を付与され得る。
【０１４０】
埋め込み型デバイスまたは留置デバイスを介した治療剤の送達は、当技術分野で公知である。例えば、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎａｌ  Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ  Ｒｅｐｏｒｔｓ、２００１年、３巻：２８〜３６頁に公開されたＨｏｆｍａらによる「Ｒｅｃｅｎｔ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ  ｉｎ  Ｃｏａｔｅｄ  Ｓｔｅｎｔｓ」を参照。これに引用された参考文献を含むその内容全体は、参考として本明細書に援用される。埋め込み型デバイスの他の説明は、米国特許第６，５６９，１９５号、および同第６，３２２，８４７号、ならびに米国特許出願第２００４／００４４４０５号、同第２００４／００１８２２８号、同第２００３／０２２９３９０号、同第２００３／０２２５４５０号、同第２００３／０２１６６９９号、および同第２００３／０２０４１６８号に見出すことができ、これらのそれぞれは、その全体が参考として本明細書に援用される。
【０１４１】
いくつかの実施形態では、埋め込み型デバイスはステントである。特定の一実施形態では、ステントは、インターロックメッシュケーブル（ｉｎｔｅｒｌｏｃｋｅｄ  ｍｅｓｈｅｄ  ｃａｂｌｅ）を含むことができる。各ケーブルは、構造支柱用金属ワイヤ、および治療剤を送達するためのポリマーワイヤを含むことができる。ポリマーワイヤは、治療剤の溶液中にポリマーを浸漬することによって添加され得る。あるいは、ポリマー前駆体溶液からワイヤを形成する間に、ポリマーワイヤ中に治療剤を埋め込むことができる。
【０１４２】
他の実施形態では、埋め込み型デバイスまたは留置デバイスは、治療剤を含むポリマー被膜で被覆され得る。ポリマー被膜は、治療剤の放出速度を制御するようにデザインされ得る。治療剤の制御放出は、様々な技術を利用することができる。ポリマー物質中に活性剤の不均一溶液および／または分散液を組み込んでいるモノリシック層または被膜を有するデバイスが公知であり、この場合、作用物質は、ポリマーを通じてポリマー−流体界面に拡散し、周囲流体中に放出されるので、作用物質の拡散が律速である。いくつかのデバイスでは、可溶性物質もポリマー材料中に溶解または分散させ、その結果、材料が溶解した後、追加の孔またはチャネルが残される。マトリックスデバイスは一般に、同様に拡散に制限されるが、デバイスのチャネルまたは他の内部形状も、流体への作用物質の放出に役割を果たす。チャネルは、既存のチャネル、または放出される作用物質もしくは他の可溶性物質の後に残されるチャネルであり得る。
【０１４３】
浸食性または分解性のデバイスは一般に、ポリマー中に物理的に固定化された活性剤を有する。活性剤を、ポリマー材料全体にわたって溶解かつ／または分散させてもよい。ポリマー材料は、多くの場合、不安定な結合の加水分解を通じて経時的に、加水分解的に分解され、ポリマーが流体中へと浸食することを可能にし、流体中に活性剤を放出する。親水性ポリマーの浸食速度は一般に、疎水性ポリマーと比べてより速い。疎水性ポリマーは、表面から内側に浸食されて、活性剤をほとんど純粋に表面拡散させると考えられている。親水性ポリマーは、水がポリマーの表面を貫通することを可能にし、表面の真下の不安定な結合の加水分解を可能にし、これは、ポリマーを均質に、またはバルクで浸食させることができると考えられている。
【０１４４】
埋め込み型デバイスまたは留置デバイスの被膜は、それぞれが、治療剤の異なる放出速度を有するポリマーのブレンドを含むことができる。例えば、被膜は、ポリ乳酸／ポリエチレンオキシド（ＰＬＡ−ＰＥＯ）コポリマーおよびポリ乳酸／ポリカプロラクトン（ＰＬＡ−ＰＣＬ）コポリマーを含み得る。ポリ乳酸／ポリエチレンオキシド（ＰＬＡ−ＰＥＯ）コポリマーは、ポリ乳酸／ポリカプロラクトン（ＰＬＡ−ＰＣＬ）コポリマーと比べて、治療剤のより高い放出速度を呈することができる。経時的に送達される治療剤の相対量および投与速度は、遅放出性ポリマーに対する速放出性ポリマーの相対量を制御することによって制御することができる。初期放出速度をより速くするために、速放出性ポリマーの比率を、遅放出性ポリマーに対して増大させることができる。投与量のほとんどが長時間にわたって放出されることが望まれる場合、ポリマーのほとんどを遅放出性ポリマーとすることができる。デバイスは、デバイスにポリマー、活性剤、および溶媒の溶液または分散液を吹き付けることによって被覆され得る。溶媒は、ポリマーおよび活性剤の被膜を残して蒸発することができる。活性剤を、ポリマー中に溶解かつ／または分散させてもよい。いくつかの実施形態では、コポリマーをデバイス上に押し出すことができる。
【０１４５】
１日当たり、体重１ｋｇ当たり約０．０１〜約１００ｍｇの間、好ましくは１日当たり、体重１ｋｇ当たり０．５〜約７５ｍｇの間、最も好ましくは、１日当たり、体重１ｋｇ当たり約１〜５０ｍｇの間の活性成分化合物の投与量レベルが、細菌感染症を予防および処置するための単剤療法において有用である。
【０１４６】
一般に、本発明の医薬組成物は、１日当たり約１〜５回、または代わりに、持続注入として投与されることになる。あるいは、本発明の組成物は、パルス製剤で投与してもよい。このような投与は、長期療法または救急療法として使用され得る。単一剤形を生成するのに担体材料と組み合わせることができる活性成分の量は、処置されるホスト、および特定の投与方法に応じて変化する。一般的な調製物は、約５％〜約９５％の活性化合物（ｗ／ｗ）を含有することになる。好ましくは、このような調製物は、約２０％〜約８０％の活性化合物を含有する。
【０１４７】
本発明の組成物が、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩と１つまたは複数の追加の治療剤または予防剤との組合せを含む場合、化合物および追加の作用物質の両方は、単剤療法投与法で通常投与される投与量の約１０％〜８０％の間の投与量レベルで存在するはずである。
【０１４８】
患者の状態が改善した後、維持用量の本発明の化合物、組成物、または組合せを、必要であれば投与することができる。その後、投与量もしくは投与の頻度、または両方を、改善された状態が保持されるレベルに、症状に応じて低減することができ、症状が所望レベルに軽減したとき、処置を終えるべきである。しかし、患者は、いずれかの再発または疾患症状の後、長期間ベースの間欠的処置を必要とする場合がある。
【０１４９】
当業者が理解するように、上記に列挙したものより低い、または高い用量を必要とする場合がある。任意の特定の患者に対する具体的な投与量および処置レジメンは、使用される特定の化合物の活性、年齢、体重、全体的な健康状態、性別、飲食物、投与の時間、排泄率、薬物の組合せ、疾患の重症度および過程、ならびに疾患に対する患者の処置、および治療医師の判断を含めた様々な要因に依存することになる。
【０１５０】
別の実施形態によれば、本発明は、細菌感染症、または疾患状態を処置または予防するための方法であって、本明細書に記載される任意の化合物、医薬組成物、または組合せを患者に投与するステップを含む、方法を提供する。用語「患者」は、本明細書において、動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトを意味する。
【０１５１】
本発明の化合物は、ジャイレースＢおよび／またはトポイソメラーゼＩＶ酵素に有効に結合する市販の試薬としても有用である。市販の試薬として、本発明の化合物およびこれらの誘導体は、細菌性ジャイレースＢおよび／もしくはトポイソメラーゼＩＶ、またはこれらの相同体についての生化学的アッセイまたは細胞アッセイにおいて、ジャイレースＢおよび／またはトポイソメラーゼＩＶ活性を遮断するのに使用され得、あるいは親和性クロマトグラフィー用途用のテザー係留された基質（ｔｅｔｈｅｒｅｄ  ｓｕｂｓｔｒａｔｅ）としての安定な樹脂に結合するように誘導体化され得る。市販のジャイレースＢおよび／またはトポイソメラーゼＩＶ阻害剤を特徴付けるこれらの使用および他の使用は、当業者に明白となるであろう。
【実施例】
【０１５２】
本発明がより完全に理解されるために、以下のスキームおよび実施例を示す。これらの実施例は、例示目的だけのものであり、本発明の範囲を限定するものとして決して解釈されるべきでない。
【０１５３】
以下の定義は、本明細書で使用される用語および略語を説明するものである：
Ａｃ  アセチル
Ｂｕ  ブチル
Ｅｔ  エチル
Ｐｈ  フェニル
Ｍｅ  メチル
ＴＨＦ  テトラヒドロフラン
ＤＣＭ  ジクロロメタン
ＣＨ２Ｃｌ２  ジクロロメタン
ＥｔＯＡｃ  酢酸エチル
ＣＨ３ＣＮ  アセトニトリル
ＥｔＯＨ  エタノール
Ｅｔ２Ｏ  ジエチルエーテル
ＭｅＯＨ  メタノール
ＭＴＢＥ  メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル
ＤＭＦ  Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＡ  Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド
ＤＭＳＯ  ジメチルスルホキシド
ＨＯＡｃ  酢酸
ＴＥＡ  トリエチルアミン
ＴＦＡ  トリフルオロ酢酸
ＴＦＡＡ  トリフルオロ酢酸無水物
Ｅｔ３Ｎ  トリエチルアミン
ＤＩＰＥＡ  ジイソプロピルエチルアミン
ＤＩＥＡ  ジイソプロピルエチルアミン
Ｋ２ＣＯ３  炭酸カリウム
Ｎａ２ＣＯ３  炭酸ナトリウム
Ｎａ２Ｓ２Ｏ３  チオ硫酸ナトリウム
Ｃｓ２ＣＯ３  炭酸セシウム
ＮａＨＣＯ３  炭酸水素ナトリウム
ＮａＯＨ  水酸化ナトリウム
Ｎａ２ＳＯ４  硫酸ナトリウム
ＭｇＳＯ４  硫酸マグネシウム
Ｋ３ＰＯ４  リン酸カリウム
ＮＨ４Ｃｌ  塩化アンモニウム
ＬＣ／ＭＳ  液体クロマトグラフィー／質量スペクトル
ＧＣＭＳ  ガスクロマトグラフィー質量スペクトル
ＨＰＬＣ  高速液体クロマトグラフィー
ＧＣ  ガスクロマトグラフィー
ＬＣ  液体クロマトグラフィー
ＩＣ  イオンクロマトグラフィー
ＩＭ  筋肉内
ＣＦＵ／ｃｆｕ  コロニー形成単位
ＭＩＣ  最小阻害濃度
Ｈｒまたはｈ  時間
ａｔｍ  気圧
ｒｔまたはＲＴ  室温
ＴＬＣ  薄層クロマトグラフィー
ＨＣｌ  塩酸
Ｈ２Ｏ  水
ＥｔＮＣＯ  イソシアン酸エチル
Ｐｄ／Ｃ  炭素上のパラジウム
ＮａＯＡｃ  酢酸ナトリウム
Ｈ２ＳＯ４  硫酸
Ｎ２  窒素ガス
Ｈ２  水素ガス
ｎ−ＢｕＬｉ  ｎ−ブチルリチウム
ＤＩ  脱イオン化された
Ｐｄ（ＯＡｃ）２  酢酸パラジウム（ＩＩ）
ＰＰｈ３  トリフェニルホスフィン
ｉ−ＰｒＯＨ  イソプロピルアルコール
ＮＢＳ  Ｎ−ブロモスクシンイミド
Ｐｄ［（Ｐｈ３）Ｐ］４  テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）
ＰＴＦＥ  ポリテトラフルオロエチレン
ｒｐｍ  毎分回転数
ＳＭ  出発物質
Ｅｑｕｉｖ．  当量
１Ｈ−ＮＭＲ  プロトン核磁気共鳴。
【０１５４】
化合物の合成
（実施例）
６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物
（Ｒ）−１−エチル−３−（６−フルオロ−５−（２−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）ピリミジン−５−イル）−７−（テトラヒドロフラン−２−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）尿素の合成
スキーム３は、６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物を調製するための方法を提供する。
【０１５５】
【化５】
2014502640.tif 000010
（実施例１．ａ）
２−（２−フルオロ−６−ニトロ−フェニル）−２，３−ジヒドロフラン（１５Ａ）および２−（２−フルオロ−６−ニトロ−フェニル）−２，５−ジヒドロフラン（１５Ｂ）の調製
【０１５６】
【化６】
2014502640.tif 000011
２−ブロモ−１−フルオロ−３−ニトロ−ベンゼン（１４）（２００．３ｇ、９８％、８９２．３ｍｍｏｌ、Ｂｏｓｃｈｅ  Ｆ６６５７）、１，４−ジオキサン（９８１．５ｍＬ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  ３６０４８１）および２，３−ジヒドロフラン（２）（３４１．１ｍＬ、９９％、４．４６２ｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ  ２０００１８）を反応フラスコに入れ、続いてＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１５５．４ｍＬ、８９２．３ｍｍｏｌ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  ５５００４３）およびブロモ（トリ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィン）パラジウム（Ｉ）ダイマー（６．９３６ｇ、８．９２３ｍｍｏｌ、Ｊｏｈｎｓｏｎ  Ｍａｔｔｈｅｙ  Ｃ４０９９）を加えた。この混合物を還流させて２時間撹拌した（ＨＰＬＣは、出発アリールブロマイドの９８％消費を示した）。この反応混合物を冷却し、濾過により沈殿物を除去し、ＥｔＯＡｃでリンスし、濾液を真空濃縮して、濃い赤褐色の半固体の油状物とした。この半固体の油状物をＣＨ２Ｃｌ２に溶解させ、シリカのプラグを通してＣＨ２Ｃｌ２で溶出し、真空濃縮して、１５Ａおよび１５Ｂの混合物を濃い琥珀色の油状物として得た（２９１．３ｇ）。この粗生成物をさらに精製することなく先に進んだ。主生成物は、２−（２−フルオロ−６−ニトロ−フェニル）−２，３−ジヒドロフラン（１５Ａ）（９６％）であった：ＬＣＭＳ（Ｃ１８カラム、ギ酸モディファイアを用いて、５分間かけて１０〜９０％ＣＨ３ＣＮ／水勾配で溶出）Ｍ＋１：２１０．２３（３．１３分間）；１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ７．５４  （ｄｔ，  Ｊ  ＝  ８．０，  １．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４３  （ｔｄ，  Ｊ  ＝  ８．２，  ５．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３２  （ｄｄｄ，  Ｊ  ＝  ９．７，  ８．３，  １．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．３３  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ４．９，  ２．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．８０  （ｔ，  Ｊ  ＝  １０．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．０６  （ｑ，  Ｊ  ＝  ２．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．１８  −  ３．０７  （ｍ，  １Ｈ），  ２．９４  −  ２．８２  （ｍ，  １Ｈ）  ｐｐｍ．副生成物は、２−（２−フルオロ−６−ニトロ−フェニル）−２，５−ジヒドロフラン（１５Ｂ）（４％）であった：ＧＣＭＳ（Ａｇｉｌｅｎｔ  ＨＰ−５ＭＳ  ３０ｍ×２５０μｍ×０．２５μｍカラム、６０℃で２分間から３００℃に１５分間かけて加熱、流速１ｍＬ／分）Ｍ＋１：２１０（１１．９５分間）。１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ７．４７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４３  −  ７．３４  （ｍ，  １Ｈ），  ７．３０  −  ７．２３  （ｍ，  １Ｈ），  ６．２１  −  ６．１５  （ｍ，  １Ｈ），  ６．１１  −  ６．０６  （ｍ，  １Ｈ），  ５．９７  −  ５．９１  （ｍ，  １Ｈ），  ４．８９  −  ４．７３  （ｍ，  ２Ｈ）  ｐｐｍ。
【０１５７】
（実施例１．ｂ）
３−フルオロ−２−テトラヒドロフラン−２−イル−アニリン（１６）の調製
【０１５８】
【化７】
2014502640.tif 000012
窒素下、炭素上の５％パラジウム（３７．３ｇ、５０％ウェット、８．７６ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ  ３３０１１６）をＰａｒｒボトル内に入れ、続いてＭｅＯＨ（７０ｍＬ、ＪＴ−Ｂａｋｅｒ  ９０９３３３）を加えた。ＭｅＯＨ（１１７ｍＬ）中の２−（２−フルオロ−６−ニトロフェニル）−２，３−ジヒドロフランおよび２−（２−フルオロ−６−ニトロフェニル）−２，５−ジヒドロフラン（１５Ａ＆１５Ｂ）（１８６．６ｇ、８９２．１ｍｍｏｌ）の粗混合物をＰａｒｒボトルに添加し、続いてＮＥｔ３（１２４．３ｍＬ、８９２．１ｍｍｏｌ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  ４７１２８３）を加えた。Ｐａｒｒ振盪機にボトルを置き、Ｈ２で飽和させた。４５ｐｓｉ  Ｈ２を添加した後、出発物質の消費が完了するまで反応混合物を振盪した（ＨＰＬＣおよびＬＣＭＳは、完全な反応を示した）。反応混合物を窒素でパージし、セライト（商標）を通して濾過し、ＥｔＯＡｃでリンスした。濾液をロータリーエバポレーターにおいて濃縮して、褐色の油状物を得、これをＥｔ２Ｏに溶解させ、水（２×）で洗浄した。エーテル相を１Ｎ  ＨＣｌ水溶液（５×２５０ｍＬ）で抽出し、これをＥｔ２Ｏ（３×）で洗浄し、続いて６Ｎ  ＮａＯＨ水溶液でｐＨ１２〜１４となるまで塩基性化した。塩基性水相をジクロロメタン（ＣＨ２Ｃｌ２、４×）で抽出し、合わせた有機抽出物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、ＣＨ２Ｃｌ２から２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出しつつシリカのパッドを通して濾過した。所望の濾液を減圧下で濃縮して、１６を淡褐色の油状物として得た（１２１．８ｇ、８４％ＧＣＭＳプラスＮＭＲ純度）。ＧＣＭＳ（Ａｇｉｌｅｎｔ  ＨＰ−５ＭＳ  ３０ｍ×２５０μｍ×０．２５μｍカラム、６０℃で２分間〜３００℃に１５分間かけて加熱、流速１ｍＬ／分）Ｍ＋１：１８２．０（１１．４４分間）。ＬＣＭＳ（Ｃ１８カラム、ギ酸モディファイアを用いて、５分間かけて１０〜９０％ＣＨ３ＣＮ／水勾配で溶出）Ｍ＋１：１８２．１０（２．６１分間）。１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ６．９７  （ｔｄ，  Ｊ  ＝  ８．１，  ６．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．４３  −  ６．３５  （ｍ，  ２Ｈ），  ５．２１  −  ５．１３  （ｍ，  １Ｈ），  ４．５４  （ｓ，  ２Ｈ），  ４．１６  −  ４．０７  （ｍ，  １Ｈ），  ３．９０  −  ３．８１  （ｍ，  １Ｈ），  ２．２３  −  ２．００  （ｍ，  ４Ｈ）  ｐｐｍ．次の通り、追加の収穫物を得た。合わせたエーテル相を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、デカントし、減圧下で濃縮した。油状物を真空蒸留し（約１５ｔｏｒｒ）、留出物を１０１〜１０８℃で収集した。ＥｔＯＨ（１容量）中の蒸留油状物の溶液に撹拌下２℃で、ｉＰｒＯＨ中５ＭのＨＣｌ（１ｅｑ）を徐々に添加した。得られた懸濁液を室温にし、ＥｔＯＡｃ（３容量、ｖｏｌ／ｖｏｌ）で希釈し、２時間撹拌した。白色の固体を濾過により収集し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、減圧下で乾燥して、生成物の２回目の収穫物をＨＣｌ塩として得た。母液を濃縮してスラリーとし、ＥｔＯＡｃで希釈し、固体を濾過により収集し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、真空乾燥して、生成物の３回目の収穫物としてＨＣｌ塩を得た。ＬＣ��Ｓ（Ｃ１８カラム、ギ酸モディファイアを用いて、５分間かけて１０〜９０％ＣＨ３ＣＮ／水勾配で溶出）Ｍ＋１：１８２．１０（２．５８分間）。１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  １０．７３  （ｂｒ．ｓ，  ３Ｈ），  ７．６６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３３  （ｔｄ，  Ｊ  ＝  ８．２，  ５．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１３  −  ７．０５  （ｍ，  １Ｈ），  ５．２６  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ９．０，  ６．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．３８  −  ４．２８  （ｍ，  １Ｈ），  ４．００  −  ３．９１  （ｍ，  １Ｈ），  ２．５９  −  ２．４６  （ｍ，  １Ｈ），  ２．３０  −  １．９５  （ｍ，  ３Ｈ）  ｐｐｍ．３回の収穫の全収率は、７６％であった。
【０１５９】
（実施例１．ｃ）
４−ブロモ−３−フルオロ−２−テトラヒドロフラン−２−イル−アニリン（１７）の調製。
【０１６０】
【化８】
2014502640.tif 000013
メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１．４５６Ｌ）およびアセトニトリル（４８５ｍＬ）中の３−フルオロ−２−テトラヒドロフラン−２−イル−アニリン（１６）（１３１．９ｇ、９２％、６６９．７ｍｍｏｌ）の溶液を−２０℃まで冷却し、これに撹拌下、Ｎ−ブロモスクシンイミド（１２０．４ｇ、９９％、６６９．７ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｂ８１２５５）を３回に分けて添加して、約−１５℃を下回る反応温度を維持した。完全に添加した後、撹拌を−１５〜−１０℃で３０分間継続した。後処理したアリコートの１Ｈ  ＮＭＲは、出発アニリンの９６％消費を示した。さらに４．８２ｇのＮＢＳを反応混合物に添加し、−１０℃でさらに３０分間撹拌した。１Ｎ  Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液（６７０ｍＬ）を反応混合物に添加した。冷浴を除去し、混合物を２０分間撹拌し、次にＥｔＯＡｃで希釈した。層を分離した。有機相を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２×）、水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、デカントし、減圧下で濃縮して、濃い琥珀色の油状物を得た。残渣をヘキサンで希釈し、２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンから５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンでシリカの短いプラグを通して溶出した。所望の濾液を真空濃縮して、１７を濃い琥珀色の油状物として得た（１８２．９ｇ、９０％収率；８６％ＮＭＲ純度）。ＬＣＭＳ（Ｃ１８カラム、ギ酸モディファイアを用いて、５分間かけて１０〜９０％ＡｃＮ／水勾配で溶出）Ｍ＋１：２６０．１２（３．２０分間）。１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ７．１５  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．６，  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．３０  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．７，  １．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．１９  −  ５．１２  （ｍ，  １Ｈ），  ４．５８  （ｓ，  ２Ｈ），  ４．１６  −  ４．０７  （ｍ，  １Ｈ），  ３．９０  −  ３．８１  （ｍ，  １Ｈ），  ２．２３  −  １．９９  （ｍ，  ４Ｈ）  ｐｐｍ。
【０１６１】
（実施例１．ｄ）
Ｎ−（４−ブロモ−３−フルオロ−６−ニトロ−２−テトラヒドロフラン−２−イル−フェニル）−２，２，２−トリフルオロ−アセトアミド（１８）の調製。
【０１６２】
【化９】
2014502640.tif 000014
トリフルオロ酢酸無水物（５６５．３ｍＬ、４．０６７ｍｏｌ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  １０６２３２）に撹拌下２℃で、ニートの４−ブロモ−３−フルオロ−２−テトラヒドロフラン−２−イル−アニリン（１７）（１２３．０ｇ、８６％、４０６．７ｍｍｏｌ）を濃厚油状物として、滴下漏斗により約２０分間かけて徐々に添加した（反応温度は１３℃まで上昇）。残りの油状物を無水ＴＨＦ（３５ｍＬ）でリンスして反応混合物に入れた。冷浴を除去し、反応液を３５℃に加熱し、続いてＮＨ４ＮＯ３（４．８８ｇ×２０回、１．２２ｍｏｌ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ａ７４５５）を２．５時間かけて数回に分けて添加し、必要なときのみ氷水浴を用いて反応温度を３０〜４１℃の間に維持して、発熱を制御した。完全に添加した後、反応混合物をさらに１０分間撹拌した（ＨＰＬＣは、反応９９％完了を示した）。これをクラッシュアイス（１．２３ｋｇ）に徐々に注ぎ、１時間撹拌して、濾過可能な固体沈殿物を生成させ、これを収集し、水、控えめな量の飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で、再度水で（ｐＨ７となるまで）洗浄した。対流式オーブンにおいて一晩４０℃、続いてオーブンにおいて減圧下で５０℃一晩生成物を乾燥させて、１８をベージュ色の固体として得た（１５２．５ｇ、９０％収率；９６％ＨＰＬＣ純度）。ＬＣＭＳ（Ｃ１８カラム、ギ酸モディファイアを用いて、５分間かけて１０〜９０％ＣＨ３ＣＮ／水勾配で溶出）Ｍ＋１：４０１．３０（３．４１分間）。１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  １０．５６  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．２２  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １０．３，  ６．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．２２  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １５．８，  ７．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．９９  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １６．１，  ７．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ２．５０  −  ２．３８  （ｍ，  １Ｈ），  ２．２２  −  ２．１１  （ｍ，  ２Ｈ），  １．８６  −  １．７１  （ｍ，  １Ｈ）  ｐｐｍ。
【０１６３】
（実施例１．ｅ）
４−ブロモ−３−フルオロ−６−ニトロ−２−テトラヒドロフラン−２−イル−アニリン（１９）の調製。
【０１６４】
【化１０】
2014502640.tif 000015
反応フラスコにＮ−（４−ブロモ−３−フルオロ−６−ニトロ−２−テトラヒドロフラン−２−イル−フェニル）−２，２，２−トリフルオロ−アセトアミド（１８）（２４２．３ｇ、６０４．１ｍｍｏｌ）、１，４−ジオキサン（１．２１２Ｌ）、水性２Ｍ硫酸（３６２．４ｍＬ、７２４．９ｍｍｏｌ）を入れ、還流させて５日間撹拌した（ＨＰＬＣは、９８％転換を示した）。この反応混合物を冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で中和し、層を分離し、水相をＥｔＯＡｃで再度抽出した（２×）。合わせた有機相をブライン（２×）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空濃縮して、１９を緑褐色の固体として得た（１８１．７ｇ、９４％収率；９５％ＨＰＬＣ純度）。この生成物をさらに精製することなく次のステップを行った。ＬＣＭＳ（Ｃ１８カラム、ギ酸モディファイアを用いて、５分間かけて１０〜９０％ＣＨ３ＣＮ／水勾配で溶出）Ｍ＋１：３０５．２０（３．６３分間）。１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ８．３５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４５  （ｓ，  ２Ｈ），  ５．２３  −  ５．１６  （ｍ，  １Ｈ），  ４．２３  −  ４．１４  （ｍ，  １Ｈ），  ３．９３  −  ３．８４  （ｍ，  １Ｈ），  ２．３１  −  １．９６  （ｍ，  ４Ｈ）  ｐｐｍ。
【０１６５】
（実施例１．ｆ）
２−［５−（４−アミノ−２−フルオロ−５−ニトロ−３−テトラヒドロフラン−２−イル−フェニル）ピリミジン−２−イル］プロパン−２−オール（２０）の調製。
【０１６６】
【化１１】
2014502640.tif 000016
１，４−ジオキサン（４．２０Ｌ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  ３６０４８１）中の４−ブロモ−３−フルオロ−６−ニトロ−２−テトラヒドロフラン−２−イル−アニリン（１９）（５２５．０ｇ、１．７２１ｍｏｌ、Ｂｒｉｄｇｅ  Ｏｒｇａｎｉｃｓ  Ｃｏ．）の溶液に撹拌下、ＮａＨＣＯ３の１．２Ｍ水溶液（４．３０２Ｌ、５．１６３ｍｏｌ）を添加した。撹拌下の混合物に窒素流を通して２時間泡立て、続いて２−［５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリミジン−２−イル］プロパン−２−オール（７）（５４５．４ｇ、２．０６５ｍｏｌ、Ｂｒｉｄｇｅ  Ｏｒｇａｎｉｃｓ  Ｃｏ．）および１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンジクロロパラジウムジクロロメタン付加物（４２．１６ｇ、５１．６３ｍｍｏｌ、Ｓｔｒｅｍ  ４６０４５０）を添加した。反応混合物を還流させて一晩撹拌し、冷却し、ＥｔＯＡｃ（８．４Ｌ）で希釈し、層を分離した。有機相を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液、続いてブラインで洗浄した。水相をＥｔＯＡｃ（４Ｌ）で再度抽出し、この有機抽出物をブラインで洗浄した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、フロリジル（登録商標）の短いプラグを通して濾過し、ＥｔＯＡｃで溶出し、濾液をロータリーエバポレーターにおいて濃縮して、暗褐色の湿った固体を得た。これをＣＨ２Ｃｌ２に溶解させ、シリカゲルのパッド上にロードし、ヘキサン、続いて２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、続いて５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出した。ロータリーエバポレーターにおいて所望の濾液を濃縮して濃厚懸濁液とし、固体を濾過により収集し、ＭＴＢＥと摩砕し、真空乾燥して、２０を鮮黄色の固体として得た（５５．８％収率、９０〜９７％ＨＰＬＣ純度）。濾液を濃縮し、上述の精製を反復して、２０の２回目の収穫物を鮮黄色の固体として得た（１９．７％収率）。濾液を再度濃縮して、暗褐色の油状物を得、これをトルエンおよび最小ＣＨ２Ｃｌ２と共にシリカカラム上にロードした。これをＥｔＯＡｃ／ヘキサン（０％〜５０％）により溶出した。所望の画分を濃縮してスラリーとし、ＭＴＢＥ／ヘキサンで希釈した。固体を濾過により収集し、最小ＭＴＢＥで洗浄して、２０の３回目の収穫物を鮮黄色の固体として得た（４．９％収率）ところ、３回の収穫から８０％の全収率が得られた。ＬＣＭＳ（Ｃ１８カラム、ギ酸モディファイアを用いて、５分間かけて１０〜９０％ＣＨ３ＣＮ／水勾配で溶出）Ｍ＋１：３６３．４８（２．９５分間）。１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ８．８４  （ｄ，  Ｊ  ＝  １．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ８．２７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６２  （ｓ，  ２Ｈ），  ５．３１  −  ５．２４  （ｍ，  １Ｈ），  ４．６３  （ｓ，  １Ｈ），  ４．２７  −  ４．１８  （ｍ，  １Ｈ），  ３．９７  −  ３．８７  （ｍ，  １Ｈ），  ２．３３  −  ２．０５  （ｍ，  ４Ｈ），  １．６４  （ｓ，  ６Ｈ）  ｐｐｍ。
【０１６７】
（実施例１．ｇ）
２−［５−（４，５−ジアミノ−２−フルオロ−３−テトラヒドロフラン−２−イル−フェニル）ピリミジン−２−イル］プロパン−２−オール（２１）の調製。
【０１６８】
【化１２】
2014502640.tif 000017
窒素下、炭素上の５％パラジウム（１４．２１ｇ、５０％ウェット、３．３３９ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ  ３３０１１６）をＰａｒｒボトル内に入れ、続いて、ＭｅＯＨ（２４２ｍＬ、ＪＴ−Ｂａｋｅｒ  ９０９３３３）およびＮＥｔ３（４６．５４ｍＬ、３３３．９ｍｍｏｌ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  ４７１２８３）を加えた。２−［５−（４−アミノ−２−フルオロ−５−ニトロ−３−テトラヒドロフラン−２−イル−フェニル）ピリミジン−２−イル］プロパン−２−オール（２０）（１２１．０ｇ  ３３３．９ｍｍｏｌ）を熱ＴＨＦ（３６０ｍＬ）に溶解させ、冷却し、反応混合物に添加し、２０の残量をさらに１回のＴＨＦ（１２４ｍＬ）でリンスした。ボトルをＰａｒｒ振盪機に置き、Ｈ２で飽和させた。４５ｐｓｉでＨ２を添加した後、２０の消費が完了するまでボトルを振盪した（ＨＰＬＣおよびＬＣＭＳは、完全な反応を示した）。この反応混合物を窒素でパージし、セライト（商標）を通して濾過し、ＥｔＯＡｃでリンスした。これを、ペーパー（ガラスマイクロファイバー）を通して再濾過し、濾液を真空濃縮した。反応を同一スケールでさらに３回反復し、バッチを合わせて、２１を褐色の固体として得た（４４７ｇ、９９％収率；９３％ＨＰＬＣ純度）。ＬＣＭＳ（Ｃ１８カラム、ギ酸モディファイアを用いて、５分間かけて１０〜９０％ＣＨ３ＣＮ／水勾配で溶出）Ｍ＋１：３３３．４６（１．７９分間）。１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ８．８１  （ｄ，  Ｊ  ＝  １．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．６９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．２７  −  ５．２０  （ｍ，  １Ｈ），  ４．７３  （ｓ，  １Ｈ），  ４．７０  （ｓ，  ２Ｈ），  ４．２３  −  ４．１４  （ｍ，  １Ｈ），  ３．９４  −  ３．８６  （ｍ，  １Ｈ），  ３．２２  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．３２  −  ２．２２  （ｍ，  １Ｈ），  ２．１８  −  １．９９  （ｍ，  ３Ｈ），  １．６３  （ｓ，  ６Ｈ）  ｐｐｍ。
【０１６９】
（実施例１．ｈ）
１−エチル−３−［６−フルオロ−５−［２−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）ピリミジン−５−イル］−７−テトラヒドロフラン−２−イル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］尿素（２２）の調製
【０１７０】
【化１３】
2014502640.tif 000018
２−［５−（４，５−ジアミノ−２−フルオロ−３−テトラヒドロフラン−２−イル−フェニル）ピリミジン−２−イル］プロパン−２−オール（２１）（１１１．３ｇ、３３４．９ｍｍｏｌ）および１，４−ジオキサン（５５６．５ｍＬ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  ３６０４８１）の懸濁液に撹拌下、１−エチル−３−（Ｎ−（エチルカルバモイル）−Ｃ−メチルスルファニル−カルボンイミドイル）尿素（１０）（９３．３６ｇ、４０１．９ｍｍｏｌ、ＣＢ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ）を添加し、続いてＮａＯＡｃ三水和物（１５８．１ｇ）を１ＮのＨ２ＳＯ４水溶液（１．１００Ｌ）に溶解させることにより調製したｐＨ３．５バッファー（１．１１３Ｌ）を加えた。反応混合物を還流させて一晩撹拌し（ＨＰＬＣは、完全な転換を示した）、室温に冷却し、撹拌下の飽和ＮａＨＣＯ３（２．２３Ｌ）水溶液に数回に分けて注いで（起泡を最小限にするため）、ｐＨ８〜９とした。得られた混合物を３０分間撹拌し、固体を濾過により収集し、大量の水で洗浄して中性ｐＨとし、次により控えめな量のＥｔＯＨで洗浄した。固体を減圧下で乾燥させて、２２をオフホワイトの黄色がかった固体として得た（１３５．２ｇ、９４％収率；９９％ＨＰＬＣ純度）。ＬＣＭＳ（Ｃ１８カラム、ギ酸モディファイアを用いて、５分間かけて１０〜９０％ＣＨ３ＣＮ／水勾配で溶出）Ｍ＋１：４２９．５８（２．０３分間）。１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＭｅＯＤ）  δ  ８．９５  （ｄ，  Ｊ  ＝  １．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．４５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．３８  （ｂｒ．ｓ，  １Ｈ），  ４．２７  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １４．９，  ７．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．０１  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １５．１，  ７．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．３７  −  ３．２９  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．５５  （ｂｒ．ｓ，  １Ｈ），  ２．１９  −  ２．０７  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．０２  −  １．８２  （ｂｒ．ｓ，  １Ｈ），  １．６３  （ｓ，  ６Ｈ），  １．２１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ３Ｈ）  ｐｐｍ。
【０１７１】
（実施例１．ｉ）
１−エチル−３−［６−フルオロ−５−［２−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）ピリミジン−５−イル］−７−［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イル］−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］尿素（２３）のキラルクロマトグラフィー単離
【０１７２】
【化１４】
2014502640.tif 000019
ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＩＣ（登録商標）カラム（Ｃｈｉｒａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ製）において、２５℃でＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＴＥＡ（６０／４０／０．１）で溶出して、１−エチル−３−［６−フルオロ−５−［２−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）ピリミジン−５−イル］−７−テトラヒドロフラン−２−イル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］尿素（２２）（１３３．６０ｇ）のラセミ試料を分割し、所望のエナンチオマー２３をオフホワイトの固体として得た（６６．８ｇ、４５％収率；９９．８％ＨＰＬＣ純度、９９＋％ｅｅ）。分析的キラルＨＰＬＣ保持時間は、７．７分間であった（ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＩＣ（登録商標）４．６×２５０ｍｍカラム、流速１ｍＬ／分、３０℃）。固体を２：１ＥｔＯＨ／Ｅｔ２Ｏ（５容量）に懸濁させ、１０分間撹拌し、濾過により収集し、２：１ＥｔＯＨ／Ｅｔ２Ｏで洗浄し、減圧下で乾燥して、白色の固体を得た（６０．６ｇ）。
【０１７３】
単結晶Ｘ線回折解析により、２３の構造および絶対立体化学を確認した。密封したチューブＣｕ  Ｋ−アルファ源（Ｃｕ  Ｋα放射線、γ＝１．５４１７８Å）およびＡｐｅｘ  ＩＩ  ＣＣＤ検出器を備えるＢｒｕｋｅｒ  Ａｐｅｘ  ＩＩ回折計において、単結晶回折データを取得した。０．１５×０．１５×０．１０ｍｍの寸法を有する結晶を選択し、鉱物油を用いてきれいにし、ＭｉｃｒｏＭｏｕｎｔにマウントし、Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＰＥＸＩＩシステムの中央に置いた。逆格子空間において分離した４０フレームの３回のバッチを得て、配向マトリックスおよび初期セルパラメータをもたらした。最終セルパラメータを得て、データ収集が完了した後に、完全データセットに基づき精緻化した。系統的非存在および強度統計に基づき構造を解明し、中心を外れたＰ２１空間群において精緻化した。
【０１７４】
各フレーム３０秒間の曝露による０．５°ステップを用いて、０．８５Åの分解能まで逆格子空間の回折データセットを得た。１００（２）Ｋにおいてデータを収集した。ＡＰＥＸＩＩソフトウェアを用いて、強度の統合およびセルパラメータの精緻化を達成した。データ収集後の結晶の観察は、分解の兆候を示さなかった。図２に示す通り、構造において２個の対称的な独立した分子が存在し、対称的な独立した分子のどちらもＲ異性体である。
【０１７５】
Ａｐｅｘ  ＩＩソフトウェアを用いてデータを収集、精緻化および整理した。ＳＨＥＬＸＳ９７（Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ、１９９０）プログラム（複数可）を用いて構造を解明し、ＳＨＥＬＸＬ９７（Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ、１９９７）プログラムを用いて構造を精緻化した。結晶は、Ｐ２１空間群を有する単斜セルを示す。格子パラメータは、ａ＝９．９０１６（２）Å、ｂ＝１０．９１８４（２）Å、ｃ＝１９．２９７５（４）Å、β＝１０２．８２６（１）°である。体積＝２０３４．１９（７）Å３。
【０１７６】
（実施例１．ｊ）
１−エチル−３−［６−フルオロ−５−［２−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）ピリミジン−５−イル］−７−［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イル］−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］尿素のメタンスルホン酸塩（２４）の調製。
【０１７７】
【化１５】
2014502640.tif 000020
ジクロロメタン（６０ｍＬ、Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ  ９３１５３３）および無水エタノール（１５ｍＬ、Ｐｈａｒｍｃｏ−ＡＡＰＥＲ  １１１０００２００）中の１−エチル−３−［６−フルオロ−５−［２−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）ピリミジン−５−イル］−７−［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イル］−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］尿素（２３）（１５．０５ｇ、３５．１３ｍｍｏｌ）の懸濁液に撹拌下、メタンスルホン酸（２．３９２ｍＬ、３６．８９ｍｍｏｌ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  ４７１３５６）を添加した。清澄な溶液が観察されるまで室温で撹拌した。約１時間かけてヘプタン（３００ｍＬ）を徐々に添加し、固体沈殿物を濾過（Ｗｈａｔｍａｎ  ＧＦ／Ｆガラスマイクロファイバーペーパー上に置かれたＷｈａｔｍａｎ  ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ＃３ペーパーを使用）により収集した。真空オーブンにおいて減圧下で一晩４０℃にて乾燥して（硫酸カルシウムおよび水酸化カリウムでデシケートし）、２４を白色の固体として得た（１３．４６ｇ、９９＋％ＨＰＬＣ純度、９９＋％ｅｅ）。分析的キラルＨＰＬＣは、ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＩＣ（登録商標）４．６×２５０ｍｍカラムにおいて、流速１ｍＬ／分、３０℃でＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＴＥＡ（６０／４０／０．１）により溶出して、８．６分間の保持時間を有する１種のエナンチオマーを示す。濾液から、白色の固体生成物２４の２回目の収穫物（４．３６ｇ、９８％ＨＰＬＣ純度、９９＋％ｅｅ）を得た。ＬＣＭＳ（Ｃ１８カラム、ギ酸モディファイアを用いて、５分間かけて１０〜９０％ＣＨ３ＣＮ／水勾配で溶出）Ｍ＋１：４２９．５８（２．０３分間）。１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＭｅＯＤ）  δ  ９．００  （ｄ，  Ｊ  ＝  １．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．６７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．３９  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．３０  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １４．９，  ６．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．０３  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １４．８，  ７．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．４０  −  ３．３１  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．７２  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．７０  −  ２．６０  （ｍ，  １Ｈ），  ２．２１  −  ２．０８  （ｍ，  ２Ｈ），  １．９８  −  １．８４  （ｍ，  １Ｈ），  １．６５  （ｓ，  ６Ｈ），  １．２２  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ３Ｈ）  ｐｐｍ。
【０１７８】
（実施例１．ｋ）
１−エチル−３−［６−フルオロ−５−［２−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）ピリミジン−５−イル］−７−テトラヒドロフラン−２−イル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］尿素の調製
２−［５−（４，５−ジアミノ−２−フルオロ−３−テトラヒドロフラン−２−イル−フェニル）ピリミジン−２−イル］プロパン−２−オール（７．２２０ｇ、２１．７２ｍｍｏｌ）、および１−エチル−３−（Ｎ−（エチルカルバモイル）−Ｃ−メチルスルファニル−カルボンイミドイル）尿素（６．０５４ｇ、２６．０６ｍｍｏｌ、ＣＢ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ）の１，４−ジオキサン（３６．１ｍＬ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  ３６０４８１）溶液に、１ＮのＨ２ＳＯ４水溶液（３７ｍＬ）中にＮａＯＡｃ三水和物（５．３２ｇ）を溶解させることによって調製したｐＨ３．５のバッファー（７２．２ｍＬ）を添加した。この反応混合物を、還流させながら一晩撹拌し（ＨＰＬＣは、完全な変換を示した）、室温に冷却し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１４４ｍＬ）の撹拌溶液中に少量ずつ注ぎ（起泡）、ｐＨ８〜９にした。これを２０分間撹拌し、固体を濾過によって収集し、水で大量に洗浄して中性ｐＨにし、次いでより少なめにＥｔＯＨで洗浄した。固体を減圧下で乾燥させ、ベージュ色固体を得た（７．９０ｇ、９９％のＨＰＬＣ純度）。ＬＣＭＳ（ギ酸モディファイアを用いて、５分にわたって１０〜９０％のＣＨ３ＣＮ／水の勾配で溶出するＣ１８カラム）Ｍ＋１：４２９．４５（２．０３分）。ＨＰＬＣ保持時間は、３．８９分であった（０．１％のＴＦＡモディファイアおよび１ｍＬ／分の流量を用いて、８分にわたって１０〜９０％のＣＨ３ＣＮ／水の勾配で溶出するＹＭＣ  ＯＤＳ−ＡＱ  １５０×３．０ｍｍカラム）。
【０１７９】
形態Ｉの調製
（実施例１．ｌ）
（Ｒ）−１−エチル−３−［６−フルオロ−５−［２−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）ピリミジン−５−イル］−７−（テトラヒドロフラン−２−イル］−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］尿素のキラルクロマトグラフィー単離
１−エチル−３−［６−フルオロ−５−［２−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）ピリミジン−５−イル］−７−テトラヒドロフラン−２−イル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］尿素のラセミ試料（１３３．６０ｇ）を、２５℃で、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＴＥＡ（６０／４０／０．１）で溶出するＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＩＣ（登録商標）カラム（Ｃｈｉｒａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ製）で分割して、オフホワイト色固体として所望のエナンチオマーを得た（６６．８ｇ、９９．８％のＨＰＬＣ純度、９９＋％のｅｅ）。分析的キラルＨＰＬＣ保持時間は、７．７分であった（ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＩＣ（登録商標）４．６×２５０ｍｍカラム、１ｍＬ／分の流量、３０℃）。固体を２：１のＥｔＯＨ／Ｅｔ２Ｏ（５容積）中に懸濁させ、１０分間撹拌し、濾過によって収集し、２：１のＥｔＯＨ／Ｅｔ２Ｏで洗浄し、減圧下で乾燥させて、白色固体を得た（６０．６ｇ）。１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＭｅＯＤ）  δ  ８．９５  （ｄ，  Ｊ  ＝  １．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．４５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．３８  （ｂｒ．ｓ，  １Ｈ），  ４．２７  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １４．９，  ７．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．０１  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １５．１，  ７．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．３７  −  ３．２９  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．５５  （ｂｒ．ｓ，  １Ｈ），  ２．１９  −  ２．０７  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．０２  −  １．８２  （ｂｒ．ｓ，  １Ｈ），  １．６３  （ｓ，  ６Ｈ），  １．２１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ３Ｈ）  ｐｐｍ。
【０１８０】
形態ＩＩの調製
（実施例１．ｍ）
６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物１００ｍｇに、ＴＨＦ  １ｍｌを添加した。化学量論量のＨＣｌを、１２Ｍの水溶液として添加した。次いでＭＴＢＥ  ４ｍＬを添加し、懸濁液を、室温で撹拌しながら一晩平衡化させた。次いでこれを濾過し、白色固体を真空下で数時間乾燥させた。
【０１８１】
形態ＩＩＩの調製
（実施例１．ｎ）
６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物１００ｍｇを量り分け、ジクロロメタン／メタノールの１：１（ｖ：ｖ）混合物２００ｍＬ中に溶解させた。１００％の噴霧率で、冷却器が取り付けられたＢｕｃｈｉ  Ｂ−９０  Ｎａｎｏ噴霧乾燥器（ポンププログラム２）でこの溶液を噴霧乾燥させた。１０１℃の入り口温度を使用し、窒素流量は１０Ｌ／分であり、窒素の最大圧力は１０ｐｓｉであり、ＣＯ２の最大圧力は１５ｐｓｉであった。白色粉末５５ｍｇを回収した。
【０１８２】
冷却器が取り付けられたＢｕｃｈｉ  Ｂ−９０  Ｎａｎｏ噴霧乾燥器で、噴霧乾燥を実施した。６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の溶液を、ＣＨ２Ｃｌ２：メタノール（１：１）から構成される溶媒系中で調製し、以下に列挙したパラメータに従って噴霧した。
【０１８３】
形態ＩＶの調製
（実施例１．ｏ）
（Ｒ）−１−エチル−３−［６−フルオロ−５−［２−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）ピリミジン−５−イル］−７−（テトラヒドロフラン−２−イル）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］尿素のメタンスルホン酸塩の調製
ジクロロメタン（２２．８ｍＬ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  ２７０９９７）および無水エタノール（２．５ｍＬ）中の（Ｒ）−１−エチル−３−［６−フルオロ−５−［２−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）ピリミジン−５−イル］−７−（テトラヒドロフラン−２−イル）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］尿素（２．５３０ｇ、５．９０５ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液を、氷−水浴で冷却した。メタンスルホン酸（０．４０２ｍＬ、６．２０ｍｍｏｌ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  ４７１３５６）を添加し、冷浴を取り除き、室温で１０分間撹拌した。３０℃で、ロータリーエバポレーターでこの混合物を濃縮して、濃密油状物にし、次いで撹拌中のＥｔ２Ｏに徐々に添加し、残留生成物をＣＨ２Ｃｌ２ですすいでエーテル中に入れた。ゴム状析出物を、これが分解してペースト状固体になるまで撹拌し、これを濾過によって収集し、Ｅｔ２Ｏで洗浄し、減圧下で乾燥させて、オフホワイト色固体を得た（２．８５ｇ、９９％のＨＰＬＣ純度、９９＋％のｅｅ）。ＬＣＭＳ（ギ酸モディファイアを用いて、５分にわたって１０〜９０％のＣＨ３ＣＮ／水の勾配で溶出するＣ１８カラム）Ｍ＋１：４２９．５１（２．４９分）。ＨＰＬＣ保持時間は、３．８６分であった（０．１％のＴＦＡモディファイアおよび１ｍＬ／分の流量を用いて、８分にわたって１０〜９０％のＣＨ３ＣＮ／水の勾配で溶出するＹＭＣ  ＯＤＳ−ＡＱ  １５０×３．０ｍｍカラム）。分析的キラルＨＰＬＣによって１つのエナンチオマーが示され、保持時間は、３０℃で１ｍＬ／分の流量を用いて、ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＩＣ（登録商標）４．６×２５０ｍｍカラムで、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＴＥＡ（６０／４０／０．１）で溶出して７．８分であった。１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＭｅＯＤ）  δ  ８．９９  （ｄ，  Ｊ  ＝  １．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．６７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．３８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．３０  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １５．０，  ６．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．０２  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １４．８，  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．３８  −  ３．３０  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．７３  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．７０  −  ２．６０  （ｍ，  １Ｈ），  ２．２０  −  ２．０７  （ｍ，  ２Ｈ），  １．９９  −  １．８４  （ｍ，  １Ｈ），  １．６４  （ｓ，  ６Ｈ），  １．２２  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ３Ｈ）  ｐｐｍ。
【０１８４】
（実施例１．ｐ）
安定性データ
６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物のメシル酸塩は、１週間の時点で、２５℃／６０％のＲＨで化学的および物理的に不安定であり、４０℃／周囲で貯蔵したとき、ｔ＝２週間で化学的に不安定であることが判明した。
【０１８５】
遊離塩基の６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物は、１カ月の時点で、すべての貯蔵条件（２５℃／６０％のＲＨ、４０℃／周囲、および４０℃／７５％のＲＨ）下で化学的および物理的に安定であった。ＸＲＰＤパターンにおいて小さな変化が観察されたが、すべては、時間ゼロ（ｔ＝０）におけるものと同じ形態であるとみなされた。
【０１８６】
６−フルオロベンゾイミダゾリル尿素化合物の塩酸塩は、１カ月の時点で、すべての貯蔵条件（２５℃／６０％のＲＨ、４０℃／周囲、および４０℃／７５％のＲＨ）下で化学的および物理的に安定であった。
【０１８７】
（実施例２）
酵素学研究
後述する実験において、本発明の化合物の酵素阻害活性を決定することができる。
【０１８８】
ＤＮＡジャイレースＡＴＰａｓｅアッセイ
ピルビン酸キナーゼ／乳酸脱水素酵素によるＡＤＰ産生を、ＮＡＤＨの酸化に結び付けて考えることにより、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ  ＤＮＡジャイレースのＡＴＰ加水分解活性を測定する。この方法は、以前に記載されている（ＴａｍｕｒａおよびＧｅｌｌｅｒｔ、１９９０年、Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．、２６５巻、２１３４２頁）。
【０１８９】
１００ｍＭ  ＴＲＩＳ  ｐＨ７．６、１．５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１５０ｍＭ  ＫＣｌを含有する緩衝溶液において、ＡＴＰａｓｅアッセイを３０℃で行った。カップリングシステムは、２．５ｍＭホスホエノールピルビン酸、２００μＭニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤＨ）、１ｍＭ  ＤＴＴ、３０μｇ／ｍｌピルビン酸キナーゼおよび１０μｇ／ｍｌ乳酸脱水素酵素の最終濃度を含有する。酵素（９０ｎＭ最終濃度）および化合物のＤＭＳＯ溶液（３％最終濃度）を添加する。反応混合物を１０分間３０℃でインキュベートする。最終濃度０．９ｍＭのＡＴＰの添加により、反応を開始し、３４０ナノメートルで１０分の経過にわたり、ＮＡＤＨ消失率をモニターする。率対濃度プロファイルからＫｉおよびＩＣ５０値を決定する。
【０１９０】
【表３】
2014502640.tif 000021
ＤＮＡ  Ｔｏｐｏ  ＩＶ  ＡＴＰａｓｅアッセイ
Ｓ．ａｕｒｅｕｓ  ＴｏｐｏＩＶ酵素によるＡＴＰからＡＤＰへの転換を、ＮＡＤＨからＮＡＤ＋への転換に結び付けて考え、３４０ｎｍにおける吸光度の変化により反応の進行を測定する。ＴｏｐｏＩＶ（６４ｎＭ）を、バッファー中の選択された化合物（３％ＤＭＳＯ最終）と共に１０分間３０℃でインキュベートする。バッファーは、１００ｍＭ  Ｔｒｉｓ７．５、１．５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、２００ｍＭ  Ｋ・グルタメート、２．５ｍＭホスホエノールピルビン酸、０．２ｍＭ  ＮＡＤＨ、１ｍＭ  ＤＴＴ、５μｇ／ｍＬ直鎖化ＤＮＡ、５０μｇ／ｍＬ  ＢＳＡ、３０μｇ／ｍＬピルビン酸キナーゼおよび１０μｇ／ｍＬ乳酸脱水素酵素（ｌａｃｔａｔｅ  ｄｅｈｙｒｏｄｇｅｎａｓｅ）（ＬＤＨ）からなる。ＡＴＰにより反応を開始し、２０分間３０℃でＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ  ＳｐｅｃｔｒａＭＡＸプレートリーダーにおいて、率を継続的にモニターする。密接な結合阻害剤のためのＭｏｒｒｉｓｏｎ方程式に適合させた、率対選択された化合物の濃度のプロットから、阻害定数ＫｉおよびＩＣ５０を決定する。
【０１９１】
【表４】
2014502640.tif 000022
（実施例３）
液体培地における感受性試験
本発明の化合物を、液体培地における感受性試験により抗菌活性に関して試験した。このようなアッセイは、このような実施を統制する最新のＣＬＳＩ文書の指針内で行われ得る。「Ｍ０７−Ａ８  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｄｉｌｕｔｉｏｎ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ  Ｔｅｓｔｓ  ｆｏｒ  Ｂａｃｔｅｒｉａ  ｔｈａｔ  Ｇｒｏｗ  Ａｅｒｏｂｉｃａｌｌｙ；  Ａｐｐｒｏｖｅｄ  Ｓｔａｎｄａｒｄ−−Ｅｉｇｈｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（２００９年）」。「Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ  ｉｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ」（Ｖ．  Ｌｏｒｉａｎ編集、出版社Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ、１９９６年）等、他の刊行物は、研究室の抗生物質試験における基本的な実際の技法を提供する。用いた具体的なプロトコールは、次の通りであった。
【０１９２】
プロトコール＃１：微量希釈ブロス方法を用いた化合物のジャイレースＭＩＣの決定
材料：
丸底９６ウェルマイクロタイタープレート（Ｃｏｓｔａｒ  ３７８８）
Ｍｕｅｌｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎ  ＩＩ寒天プレート（ＭＨＩＩ；ＢＢＬプレミックス）
Ｍｕｅｌｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎ  ＩＩ液体ブロス（ＭＨＩＩ；ＢＢＬプレミックス）
ＢＢＬ  Ｐｒｏｍｐｔ接種システム（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｂ２６３０６）
Ｔｅｓｔ  Ｒｅａｄｉｎｇ  Ｍｉｒｒｏｒ（Ｆｉｓｈｅｒ）
細菌を画線してシングルコロニーとした寒天プレート、新たに調製
無菌ＤＭＳＯ
ヒト血清（Ｕ．Ｓ．Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ  Ｓ１０１０−５１）
溶血させたウマ血液（Ｑｕａｄ  Ｆｉｖｅ  ２７０−１００）
レサズリン０．０１％
スプラーグドーリーラット（Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ  Ｒａｔ）血清（Ｕ．Ｓ．  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ  １０１１−９０ＢまたはＶａｌｌｅｙ  ＢｉｏＭｅｄｉｃａｌ  ＡＳ３０６１ＳＤ）
プールしたマウス血清（Ｖａｌｌｅｙ  ＢｉｏＭｅｄｉｃａｌ  ＡＳ３０５４）  。
【０１９３】
株（培地、ブロスおよび寒天）：
１．Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ＃２９２１３
ａ．ＭＨＩＩ
ｂ．ＭＨＩＩ＋５０％ヒト血清
ｃ．ＭＨＩＩ＋５０％ラット血清
ｄ．ＭＨＩＩ＋５０％マウス血清
２．Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ＃２９２１３ＧｙｒＢ  Ｔ１７３Ｉ（ＭＨＩＩ）
３．Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、ＪＭＩコレクション株；表９を参照（ＭＨＩＩ）
４．Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、ＪＭＩコレクション株；表９を参照（ＭＨＩＩ）
５．Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ  ＡＴＣＣ＃２９２１２（ＭＨＩＩ＋３％  溶血させたウマ血液）
６．Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍ  ＡＴＣＣ＃４９６２４（ＭＨＩＩ＋３％  溶血させたウマ血液）
７．Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ、ＪＭＩコレクション株；表９を参照（ＭＨＩＩ＋３％  溶血させたウマ血液）
８．Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍ、ＪＭＩコレクション株；表９を参照（ＭＨＩＩ＋３％  溶血させたウマ血液）
９．Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ  ＡＴＣＣ＃１００１５（ＭＨＩＩ＋３％  溶血させたウマ血液）
１０．Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、ＪＭＩコレクション株；表９を参照（ＭＨＩＩ＋３％  溶血させたウマ血液）
１１．β−ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃ  ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ、群Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｇ）ＪＭＩコレクション株；表９を参照（ＭＨＩＩ＋３％  溶血させたウマ血液）
１２．Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ１０９８７（ＭＨＩＩ）
１３．Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ１４５７９（ＭＨＩＩ）
１４．Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ  ＡＴＣＣ６６３８（ＭＨＩＩ）
１５．Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ（１６８）ＡＴＣＣ６０５１（ＭＨＩＩ）  。
【０１９４】
接種物プレップ（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ＋５０％血清以外のあらゆる株に関する）：
１．ＢＢＬ  Ｐｒｏｍｐｔキットを使用して、上に表示する適切な寒天培地において増殖した培養物から、５個の大型または１０個の小型の十分に離間したコロニーをつついて、キットに提供されている１ｍＬの無菌食塩水に接種した。
２．約３０秒間ウェルをボルテックスして、約１０８細胞／ｍＬの懸濁液を生じた。実際の密度は、この懸濁液の希釈物をプレーティングする（ｐｌａｔｅ  ｏｕｔ）ことにより確認することができた。
３．試験する化合物のプレート毎に０．１５ｍＬの細胞を１５ｍＬ（約１０６細胞／ｍＬ）無菌ブロス（または後述を参照）に移すことにより、懸濁液を１／１００希釈し、次に回旋して混合した。化合物２３または２４を含む、化合物（＞８化合物）の２枚以上のプレートを試験する場合、容積はそれに応じて増加した。
【０１９５】
ａ．Ｅ．ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｅ．ｆａｅｃｉｕｍおよびＳ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅに関しては、１４．１ｍＬ  ＭＨＩＩ＋０．９ｍＬの溶血させたウマ血液を用いた。
４．５０μｌの細胞（約５×１０４細胞）を用いて、ブロス（後述を参照）に希釈した薬物を５０μｌ含有する各マイクロタイターウェルに接種した。
【０１９６】
薬物希釈、接種、ＭＩＣの決定：
１．全薬物／化合物ストックは通常、１００％ＤＭＳＯにおいて１２．８ｍｇ／ｍＬ濃度で調製した。
２．薬物／化合物ストックを、５０μＬのＤＭＳＯにおいて２００×所望の最終濃度に希釈した。ＭＩＣの出発濃度が８μｇ／ｍＬ最終濃度である場合、６．２５μＬのストック＋４３．７５μＬ  ＤＭＳＯを必要とした。各２００×ストックを、新しい９６ウェルマイクロタイタープレートのカラム１の別個の列に置いた。
３．２５μＬのＤＭＳＯを、２００×化合物ストックを含有するマイクロタイタープレートの全列のカラム２〜１２に添加し、カラム１の２５μＬをカラム１１まで系列的に希釈し、カラム毎にチップを交換した。即ち、２５μＬ化合物＋２５μＬ  ＤＭＳＯ＝２×希釈。対照のため、系列の最後に「化合物なし」ＤＭＳＯウェルを残した。
４．試験した株（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ＋５０％ヒト血清を除く）毎に、マトリックスピペッターを用いて５０μＬのＭＨＩＩブロスを有する２枚のマイクロタイタープレートを調製した。
５．５０μｌの細胞の添加前に、５０μＬの培地／マイクロタイターウェルに０．５μＬの各希釈物を移した（ｗ／マトリックス自動ピペッター）。化合物の通常の出発濃度は、培地＋細胞に１／２００希釈した後に８μｇ／ｍＬであった  −  化合物濃度は、マイクロタイタープレートの列にわたり２×ステップで減少した。全ＭＩＣは、２連で行った。
６．全ウェルに、５０μｌの希釈細胞懸濁液（前述を参照）を接種して、最終容積１００μｌとした。
７．接種物を添加した後、手動の多チャネルピペッターにより、各ウェルを徹底的に混合した。同一マイクロタイタープレートにおける低濃度から高濃度の薬物に向かう場合、同一チップを用いた。
８．プレートを３７℃で少なくとも１８時間インキュベートした。
９．１８時間後にｔｅｓｔ  ｒｅａｄｉｎｇ  ｍｉｒｒｏｒによりプレートを観測して、ＭＩＣを、増殖が観察されなかった（ウェルにおける光学的透明性）薬物の最低濃度として記録した。
【０１９７】
Ｓ．ａｕｒｅｕｓ＋５０％ヒト血清、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ＋５０％ラット血清またはＳ．ａｕｒｅｕｓ＋５０％マウス血清の調製。
１．１５ｍＬのＭＨＩＩ＋１５ｍＬヒト血清を合わせることにより、５０％血清培地を調製した  −  合計３０ｍＬ。２枚以上の化合物プレートを試験する場合、容積を３０ｍＬ増分で増加させた。
２．上に記載されている通り、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ＃２９２１３の同じＢＢＬ  Ｐｒｏｍｐｔ接種物を用いて、上述において調製した３０ｍＬ（約５×１０５細胞／ｍＬ）の５０％ヒト血清培地に０．１５ｍＬの細胞を移すことにより１／２００希釈し、回旋して混合した。
３．所望の数のマイクロタイタープレートの全試験ウェルを、５０％血清培地における１００μＬ細胞で満たした。
４．０．５μＬの各化合物希釈物を１００μＬの細胞／培地に移した（ｗ／マトリックス自動ピペッター）。化合物の通常の出発濃度は、培地＋細胞に１／２００希釈した後に８μｇ／ｍＬであった  −  化合物濃度は、マイクロタイタープレートの列にわたり２×ステップで減少した。全ＭＩＣは、２連で行った。
５．手動の多チャネルピペッターにより各ウェルを徹底的に混合した。同一マイクロタイタープレートにおける低濃度から高濃度の薬物に向かう場合、同一チップを用いた。
６．プレートを３７℃で少なくとも１８時間インキュベートした。インキュベーション後に、２５μＬの０．０１％レサズリンを各ウェルに添加し、３７℃で少なくとも追加的に１時間またはレサズリンの色が変化するまでインキュベートを継続した。
７．ｔｅｓｔ  ｒｅａｄｉｎｇ  ｍｉｒｒｏｒによりプレートを観測し、ＭＩＣを記録した。レサズリンを用いる場合、該色素の色は、増殖なしのウェルにおいて紺青色から明るいピンク色へと変化する。色素をピンク色にする薬物の最低濃度がＭＩＣである。
【０１９８】
プロトコール＃２：微量希釈ブロス方法を用いた、グラム陰性に対する化合物のジャイレースＭＩＣの決定
材料：
丸底９６ウェルマイクロタイタープレート（Ｃｏｓｔａｒ  ３７８８）
Ｍｕｅｌｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎ  ＩＩ寒天プレート（ＭＨＩＩ；ＢＢＬプレミックス）
Ｍｕｅｌｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎ  ＩＩ液体ブロス（ＭＨＩＩ；ＢＢＬプレミックス）
ＢＢＬ  Ｐｒｏｍｐｔ接種システム（Ｆｉｓｈｅｒ  ｂ２６３０６）
Ｔｅｓｔ  Ｒｅａｄｉｎｇ  Ｍｉｒｒｏｒ（Ｆｉｓｈｅｒ）
細菌を画線してシングルコロニーとした寒天プレート、新たに調製
無菌ＤＭＳＯ  。
【０１９９】
株（全株のためのＭＨＩＩ培地；ブロスおよび寒天）：
１．Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＡＴＣＣ＃２５９２２
２．Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、ＪＭＩコレクション株、表９を参照
３．Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉＡＧ１００  ＷＴ
４．Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＡＧ１００  ｔｏｌＣ
５．Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｂａｕｍａｎｎｉｉ  ＡＴＣＣ＃ＢＡＡ−１７１０
６．Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｂａｕｍａｎｎｉｉ  ＡＴＣＣ＃１９６０６
７．Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｂａｕｍａｎｎｉｉ、ＪＭＩコレクション株、表９を参照
８．Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ  ＡＴＣＣ＃ＢＡＡ−１７０５
９．Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ  ＡＴＣＣ＃７００６０３
１０．Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、ＪＭＩコレクション株、表９を参照
１１．Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ  ＡＴＣＣ＃２５２３８
１２．Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ  ＡＴＣＣ＃４９１４３
１３．Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、ＪＭＩコレクション株、表９を参照
１４．Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ  ＡＴＣＣ４９２４７
１５．Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ（Ｒｄ１  ＫＷ２０）ＡＴＣＣ５１９０７
１６．Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ  Ｒｄ０８９４（ＡｃｒＡ−）
１７．Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、ＪＭＩコレクション株、表９を参照
１８．Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ＰＡＯ１
１９．Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、ＪＭＩコレクション株、表９を参照
２０．Ｐｒｏｔｅｕｓ  ｍｉｒａｂｉｌｉｓ、ＪＭＩコレクション株、表９を参照
２１．Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｃｌｏａｃａｅ、ＪＭＩコレクション株、表９を参照
２２．Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ  ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ  ＡＴＣＣ  ＢＡＡ−８４
２３．Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ  ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ  ＡＴＣＣ１３６３７  。
【０２００】
接種物プレップ：
１．ＢＢＬ  Ｐｒｏｍｐｔキットを用いて、寒天培地において増殖した培養物から５個の大型または１０個の小型の十分に離間したコロニーをつついて、キットに添えられた１ｍＬ無菌食塩水に接種した。
２．約３０秒間ウェルをボルテックスし、約１０８細胞／ｍＬの懸濁液を得た。実際の密度は、この懸濁液の希釈物をプレーティングすることにより確認することができた。
３．試験する化合物のプレート毎に０．１５ｍＬの細胞を１５ｍＬ（約１０６細胞／ｍＬ）無菌ブロス（後述を参照）に移すことにより、懸濁液を１／１００希釈し、回旋して
混合した。化合物２３または２４を含む、化合物（＞８化合物）の２枚以上のプレートを試験する場合、それに応じて容積を増加させた。
４．５０μｌの細胞（約５×１０４細胞）を用いて、ブロス（後述を参照）に希釈した薬物を５０μｌ含有する各マイクロタイターウェルに接種した。
【０２０１】
薬物希釈、接種、ＭＩＣの決定：
１．全薬物／化合物ストックは通常、１００％ＤＭＳＯにおける１２．８ｍｇ／ｍＬ濃度で調製した。
２．薬物／化合物ストックを、５０μＬ  ＤＭＳＯにおいて２００×所望の最終濃度に希釈した。ＭＩＣの出発濃度が８μｇ／ｍＬ最終濃度である場合、６．２５μＬのストック＋４３．７５μＬ  ＤＭＳＯを必要とした。各２００×ストックを、新しい９６ウェルマイクロタイタープレートのカラム１の別個の列に置いた。
３．２５μＬのＤＭＳＯを、２００×化合物ストックを含有するマイクロタイタープレートの全列のカラム２〜１２に添加し、カラム１の２５μＬをカラム１１まで系列的に希釈し、カラム毎にチップを交換した。即ち、２５μＬ化合物＋２５μＬ  ＤＭＳＯ＝２×希釈。対照のため、系列の最後に「化合物なし」ＤＭＳＯウェルを残した。
４．試験した株毎に、マトリックスピペッターを用いて５０μＬのＭＨＩＩブロスを有する２枚のマイクロタイタープレートを調製した。
５．５０μｌの細胞の添加前に、５０μＬの培地／マイクロタイターウェルに０．５μＬの各希釈物を移した（ｗ／マトリックス自動ピペッター）。化合物の通常の出発濃度は、培地＋細胞に１／２００希釈した後、８μｇ／ｍＬであった  −  化合物濃度は、マイクロタイタープレートの列にわたり２×ステップで減少した。全ＭＩＣは、２連で行った。
６．全ウェルに、５０μｌの希釈細胞懸濁液（前述を参照）を接種して、最終容積１００μｌとした。
７．接種物を添加した後、各ウェルを手動の多チャネルピペッターにより徹底的に混合した。同一マイクロタイタープレートにおける低濃度から高濃度の薬物に向かう場合、同一チップを用いた。
８．プレートを３７℃で少なくとも１８時間インキュベートした。
９．１８時間後にｔｅｓｔ  ｒｅａｄｉｎｇ  ｍｉｒｒｏｒによりプレートを観測し、ＭＩＣを、増殖が観察されなかった（ウェルにおける光学的透明性）薬物の最低濃度として記録した。
【０２０２】
プロトコール＃３：寒天希釈方法を用いた化合物のジャイレースＭＩＣの決定
材料：
ペトリプレート６０×１５ｍｍ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｃａｔ．＃１２５６７１００）
遠心分離チューブ、１５ｍＬ（Ｃｏｓｔａｒ）
ＢＢＬ  Ｐｒｏｍｐｔ接種システム（Ｆｉｓｈｅｒ  ｂ２６３０６）
細菌を画線してシングルコロニーとした寒天プレート、新たに調製
無菌ＤＭＳＯ
ＧａｓＰａｋ（商標）インキュベーションコンテナ（ＢＤ  Ｃａｔ．＃２６０６７２）
ＧａｓＰａｋ（商標）ＥＺ嫌気性菌コンテナシステムサシェ（ＢＤ  Ｃａｔ．＃２６０６７８）
ＧａｓＰａｋ（商標）ＥＺ  Ｃ０２コンテナシステムサシェ（ＢＤ  Ｃａｔ．＃２６０６７９）
ＧａｓＰａｋ（商標）ＥＺ  Ｃａｍｐｙコンテナシステムサシェ（ＢＤ  Ｃａｔ．＃２６０６８０）  。
【０２０３】
株：
１．Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ  ＡＴＣＣ  ＢＡＡ−１３８２；
２．Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、ＣＭＩコレクション株、表８を参照
３．Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、ＣＭＩコレクション株、表８を参照
４．Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｆｒａｇｉｌｉｓおよびＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｓｐｐ．、ＣＭＩコレクション株、表８を参照
５．Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｐｐ．、ＣＭＩコレクション株、表８を参照
６．Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、ｓｐｐ．、ＣＭＩコレクション株、表８を参照
７．Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ  ｓｐｐ．、ＣＭＩコレクション株、表８を参照
８．Ｎ．  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ  ＡＴＣＣ  ３５５４１
９．Ｎ．  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ  ＡＴＣＣ  ４９２２６
１０．Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ、ＪＭＩコレクション株、表８を参照
１１．Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、ＪＭＩコレクション株、表８を参照  。
【０２０４】
培地調製および増殖条件：
ＣＬＳＩ刊行物「Ｍ１１−Ａ７  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ  Ｔｅｓｔｉｎｇ  ｏｆ  Ａｎａｅｒｏｂｉｃ  Ｂａｃｔｅｒｉａ；  Ａｐｐｒｏｖｅｄ  Ｓｔａｎｄａｒｄ  −  第７版（２００７年）」に従って、各微生物種に推奨される増殖培地を調製したが、例外として、Ｎ．ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅおよびＮ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓの培地は、「Ｍ０７−Ａ８  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｄｉｌｕｔｉｏｎ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ  Ｔｅｓｔｓ  ｆｏｒ  Ｂａｃｔｅｒｉａ  ｔｈａｔ  Ｇｒｏｗ  Ａｅｒｏｂｉｃａｌｌｙ；  Ａｐｐｒｏｖｅｄ  Ｓｔａｎｄａｒｄ−−第８版（２００９年）」に従って調製した。
【０２０５】
プレート注液：
１．表１に記載されている各被験化合物の１００×薬物ストックを調製した。１５ｍＬ遠心分離チューブを用いて、１００μＬの各薬物ストックを、１０ｍＬの融解した寒天（水浴において約５５℃まで冷却）に添加した。チューブを２〜３回反転することにより混合し、次に、個々にラベル付けした６０×１５ｍｍペトリ皿に注ぎ入れた。
２．慣用的な試験濃度：０．００２μｇ／ｍＬ〜１６μｇ／ｍＬ（１４プレート）であった。
３．４枚の薬物不含プレートを注いだ：２枚は陽性対照、２枚は好気的対照。
４．プレートを乾かした。同日に使用、あるいはＲＴで一晩保存、あるいは最大３日間４℃で保存した。
５．薬物濃度および株の配置に従ってプレートにラベル付けした。
【０２０６】
嫌気的環境の維持を必要とする細胞の増殖：
１．嫌気細菌を用いて行った全作業は、可能な限り迅速になされた。バイオセーフティーキャビネット内（即ち、好気的環境）で行う作業は、細胞を嫌気チャンバーに戻す前に３０分未満で完了させた。
２．嫌気細菌のインキュベーションは、ＧａｓＰａｋ（商標）チャンバーを用いて達成した。大型のボックススタイルのチャンバー（ＶＷＲ９０００３−６３６）は、２個の嫌気的サシェ（ＶＷＲ９０００３−６４２）を必要としたが、背の高いシリンダースタイルのチャンバー（ＶＷＲ９０００３−６０２）は、１個のサシェしか必要としなかった。
【０２０７】
プレート接種（バイオセーフティーキャビネット内で行った）：
１．上に記載されている個々の寒天プレート上に各株を画線した。要求される時間および環境条件（即ち、嫌気性、微好気性等）でインキュベートした。
２．直接的なコロニー懸濁方法を用いて、白金耳量の新たに画線した細胞を、約４ｍＬの０．９％ＮａＣｌ２に懸濁して、ボルテックスした。
３．懸濁液をＯ．Ｄ．６００  ０．０５（５×１０ｅ７  ｃｆｕ／ｍＬ）に調整した。ボルテックスして混合した。
４．約０．２ｍＬの調整・混合済培養物を９６ウェルプレートに移した。５つ以下の株を試験する場合、全株を共に一列に並べた。５つより多い株を試験する場合、５株以下が一列に収まるよう株をプレートに移した。このことは、小型のプレートに適合させるために必要であった。
５．多チャネルピペッターを用いて、調製した９６ウェルプレートから、各ＭＩＣ試験プレートへと０．００２ｍＬの各株をスポットした。これにより、約１×１０ｅ５  ｃｆｕ／スポットとなった。Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅを試験する場合、株は増殖の際にスウォーミングするが、多チャネルピペッタースポット間の距離は、スウォーミングする細胞がアッセイ結果を損なわないように、十分に開いている。
【０２０８】
ａ．２枚の薬物不含プレートを先ず接種し、一方、他の２枚の薬物不含プレートは、ＭＩＣ試験プレート後の最後に接種した。前者および後者は、増殖および接種対照とした。薬物不含対照の各セット由来の１枚のプレートを、要求される大気条件下でＭＩＣプレートと共にインキュベートし、１セットを好気的にインキュベートして、好気細菌によるコンタミネーションを試験した。厳密な嫌気性菌または微好気性株で作業した場合、好気的培養は、増殖に対し陰性であった。Ｎ．ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅの場合、ある程度の増殖が目に見えた。
６．接種物を乾燥させ（必要な限り短い時間）、次に、適切な数のサシェと共にＧａｓＰａｋにおいてひっくり返して置き、インキュベートした。
７．Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｓｐｐ．を、３７℃、５％ＣＯ２環境で２４時間インキュベートした。
【０２０９】
ＭＩＣの決定：
正確なインキュベーション時間後に試験プレートを検査し、陽性対照プレートにおける増殖の出現と比較して試験プレートにおける増殖の出現において著しい低下が生じた濃度におけるＭＩＣエンドポイントを読み取った。
【０２１０】
【表５】
2014502640.tif 000023
プロトコール＃４．Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属の種のためのＭＩＣの決定手順
材料
丸底９６ウェルマイクロタイタープレート（Ｃｏｓｔａｒ  ３７８８）または類似物
フィルムプレートシール（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、ＴｏｐＳｅａｌ−Ａ＃６００５２５０または類似物）
Ｍｉｄｄｌｅｂｒｏｏｋ  ７Ｈ１０ブロス、０．２％グリセロール含有
Ｍｉｄｄｌｅｂｒｏｏｋ  ７Ｈ１０寒天、０．２％グリセロール含有
Ｍｉｄｄｌｅｂｒｏｏｋ  ＯＡＤＣ  Ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ
Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓの接種物調製：
１．−７０℃に保存した調製済凍結Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓストックを用いた。Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓは、７Ｈ１０ブロス＋１０％ＯＡＤＣにおいて増殖させ、次に１００  Ｋｌｅｔｔまたは５×１０７ｃｆｕ／ｍｌの濃度で凍結した。
２．１ｍｌの凍結ストックを取り出し、これを１９ｍｌの７Ｈ１０ブロス＋１０％ＯＡＤＣに添加することにより、１：２０希釈物を調製した（最終濃度２．５×１０６ｃｆｕ／ｍｌ）。
３．この希釈物から、第二の１：２０希釈物を調製した、即ち、１ｍｌを取り出して、これを１９ｍｌの新鮮ブロスに添加した。これが、９６ウェルプレートに添加するための最終接種物である。
【０２１１】
Ｍ．ｋａｎｓａｓｉｉ、Ｍ．ａｖｉｕｍ、Ｍ．ａｂｓｃｅｓｓｕｓおよびＮｏｃａｒｄｉａ  ｓｐｃ．の接種物調製：
１．１０  Ｋｌｅｔｔまたは５×１０７／ｍｌの濃度の、７Ｈ１０ブロスにおいて増殖した培養物の調製済凍結ストックまたは新鮮培養物を用いた。
２．１．０ｍｌの培養ストックを取り出し、これを１９ｍｌの７Ｈ１０ブロスに添加することにより、１：２０希釈物を調製した（最終濃度２．５×１０６ｃｆｕ／ｍｌ）。
３．この希釈物から、１：２０希釈物を調製した、即ち、１ｍｌを取り出し、これを１９ｍｌの新鮮ブロスに添加した（最終懸濁液）。
【０２１２】
プレート調製：
１．プレートにラベル付けした。
２．多チャネル電子ピペッターを用いて、５０μｌの７Ｈ１０ブロス＋１０％ＯＡＤＣを、ＭＩＣの決定に利用されている全ウェルに添加した。
３．試験する薬物のストック溶液（例えば、１ｍｇ／ｍｌ濃度）を調製した。
４．凍結ストック溶液を解凍し、７Ｈ１０ブロス＋１０％ＯＡＤＣを用いて希釈して、作業溶液（ｗｏｒｋｉｎｇ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ）４×被験最大濃度を得た（例えば、最終濃度３２μｇ／ｍｌ、被験最高濃度８μｇ／ｍｌ）。ストック溶液から希釈物を作製した。１μｇ／ｍｌの濃度から出発するために４μｇ／ｍｌの薬物を調製し、これにより出発濃度は１μｇ／ｍｌとなった。１ｍｇ／ｍｌストックの２５μｌを取り出し、６．２ｍｌのブロスに添加した。薬物の全希釈は、ブロスにおいて行った。
５．５０μｌの４×作業溶液を、指定の列の第一のウェルに添加した。試験する全化合物に対し継続した。多チャネル電子ピペッターを用いて、４×を混合し、１１番目のウェルまで化合物を系列希釈した。残った５０μｌを廃棄した。１２番目のウェルを陽性対照として用いた。
６．Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓは、約１８日間；Ｍ．ａｖｉｕｍおよびＭ．ｋａｎｓａｓｉｉは、約７日間；ＮｏｃａｒｄｉａおよびＭ．ａｂｃｅｓｓｕｓは、約４日間、プレートをフィルムシールして３７℃でインキュベートした。
７．結果を視覚的に読み取り、記録した。増殖が観察されなかった（ウェルにおける光学的透明性）薬物の最低濃度としてＭＩＣを記録した。
【０２１３】
プロトコール＃５．Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ血清シフトＭＩＣアッセイのプロトコール
材料および試薬：
Ｃｏｓｔａｒ＃３９０４  側面が黒色の平底９６ウェルマイクロタイタープレート
Ｍｉｄｄｌｅｂｒｏｏｋ  ７Ｈ９ブロス（ＢＤ２７１３１０）、０．２％グリセロール含有
Ｍｉｄｄｌｅｂｒｏｏｋ  ＯＡＤＣ  Ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ
ウシ胎仔血清
カタラーゼ（Ｓｉｇｍａ  Ｃ１３４５）
デキストロース
ＮａＣｌ２
ＢＢＬ  Ｐｒｏｍｐｔ接種システム（Ｆｉｓｈｅｒ  ｂ２６３０６）
寒天プレート（Ｍｉｄｄｌｅｂｒｏｏｋ  ７Ｈ１１、０．２％グリセロールおよびＯＡＤＣ  ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ含有）、細菌を画線してシングルコロニーとした
無菌ＤＭＳＯ  。
【０２１４】
培地プレップ：
１．血清シフトＭＩＣのため、すべて７Ｈ９＋０．２％グリセロールの基剤を有する３種の異なる培地が必要とされる。あらゆる培地およびサプリメントをＭＩＣ前に滅菌することが重要であった。
２．下の全培地を調製し、次のセクションに記載されている通りに接種した。各培地を用いて全化合物をＭｔｂに対し試験した。
【０２１５】
ａ．７Ｈ９＋０．２％グリセロール＋１０％ＯＡＤＣ（「標準」ＭＩＣ培地）。
【０２１６】
ｂ．７Ｈ９＋０．２％グリセロール＋２ｇ／Ｌデキストロース＋０．８５ｇ／Ｌ  ＮａＣｌ＋０．００３ｇ／Ｌカタラーゼ（０％ＦＢＳ）。
【０２１７】
ｃ．２×７Ｈ９＋０．２％グリセロール＋２ｇ／Ｌデキストロース＋０．８５ｇ／Ｌ  ＮａＣｌ＋０．００３ｇ／Ｌカタラーゼ、等容積のウシ胎仔血清（５０％ＦＢＳ）と合わせる。
【０２１８】
接種物プレップ：
１．ＢＢＬ  Ｐｒｏｍｐｔを用いて、５〜１０個の十分に離間したコロニーをつついて、キットに添えられた１ｍｌの無菌食塩水に接種した。この生物は培養物において増殖が遅いため、通例、プレートは、本アッセイに用いるときには培養２〜３週間経過したものである。
２．十分にボルテックスし、次に水浴において３０秒間超音波処理して、約１０８細胞／ｍｌの懸濁液を得た。実際の密度は、この懸濁液の希釈物のプレーティングにより確認することができた。
３．ＢＢＬ  Ｐｒｏｍｐｔ懸濁液を１／２００希釈することにより（例えば、０．２ｍｌの細胞を４０ｍｌの培地に移し）、３種の培地処方物それぞれにおいて接種物を調製して、約１０６細胞／ｍｌの出発細胞密度を得た。
４．１００μｌの細胞（約５×１０４細胞）を用いて、１μｌのＤＭＳＯに溶解させた薬物（後述を参照）を含有する各マイクロタイターウェルに接種した。
【０２１９】
薬物希釈、接種、ＭＩＣの決定：
１．対照薬物ストック、イソニアジドおよびノボビオシンは、１００％ＤＭＳＯにおける１０ｍＭで調製し、一方、シプロフロキサシンおよびリファンピンは、それぞれ５０％ＤＭＳＯおよび１００％ＤＭＳＯにおいて１ｍＭで調製した。希釈物の調製  −  １００μＬのストック溶液を、９６ウェルプレートの第一のカラムに分注した。カラム１の５０μｌを、カラム２における５０μｌのＤＭＳＯに移すことにより、化合物毎に列にわたり、１１ステップの２倍系列希釈物を調製した。混合し、カラム毎にチップを交換しつつ、引き続きカラム２の５０μＬをカラム１１まで移した。対照としてカラム１２をＤＭＳＯのみのまま残した。
２．１００μｌの細胞の添加前に、１μｌの各希釈物を空のマイクロタイターウェルに移した。イソニアジドおよびノボビオシンの出発濃度は、培地＋細胞に希釈した後に１００μＭであった。シプロフロキサシンおよびリファンピンの出発濃度は、培地＋細胞に希釈した後に１０μＭであった。化合物濃度は、マイクロタイタープレートの列にわたり進む毎に２×ステップで減少した。全ＭＩＣは、３種の培地条件のそれぞれにおいて２連で行った。
３．化合物の試験セットは通例、１０ｍＭおよび５０μＬ容積であった。
４．多チャネルピペッターを用いて、マスタープレートの各カラムから全容積を取り出し、新しい９６ウェルマイクロタイタープレートの第一のカラムに移した。マスタープレートにおける化合物の各カラムについて反復し、新しい９６ウェルプレートのカラム１に移した。
５．対照化合物に関して上に記載されている通り、ＤＭＳＯを希釈剤として用いて、各化合物の２倍、１１点の希釈物を作製した。全事例において、対照のためカラム１２はＤＭＳＯのみとして残した。全希釈を完了した後、１００μｌの細胞の添加前に、対照化合物に対してなされた通り、各希釈物の１μｌを空のマイクロタイターウェルに再度移した。
６．全ウェルを１００μｌの希釈細胞懸濁液（前述を参照）で接種した。
７．接種物を添加した後、プレートの側面を穏やかにタッピングすることによりプレートを混合した。
８．プレートを加湿した３７℃チャンバーにおいて９日間インキュベートした。
９．９日目に、２５μｌの０．０１％無菌レサズリンを各ウェルに添加した。励起４９２ｎｍ、発光５９５ｎｍでバックグラウンド蛍光を測定し、プレートをさらに２４時間インキュベーターに戻した。
【０２２０】
２４時間後、励起４９２ｎｍ、発光５９５ｎｍで各ウェルの蛍光を測定した。
【０２２１】
所定の化合物によるパーセント阻害を次の通りに計算した。パーセント阻害＝１００−（［ウェル蛍光−平均バックグラウンド蛍光］／［ＤＭＳＯ対照−平均バックグラウンド蛍光］×１００）。全３種の培地条件に対し、所定の培地条件においてレサズリンの還元シグナルを≧７０％阻害する最低化合物濃度（「％−阻害」）としてＭＩＣを点数化した。
【０２２２】
表６は、本発明のベンゾイミダゾリル尿素化合物のメシル酸塩のためのＭＩＣアッセイの結果を示す。
【０２２３】
表６ならびにその後の表および実施例において、「化合物２４」は、「化合物２３」のメシル酸塩であり、化合物２４は実施例１．ｊ（上述）に従って調製されてもよい。これは、上述の実施例において使用される番号と同じである、前記化合物を同定するために使用される番号である。
【０２２４】
【表６−１】
2014502640.tif 000024
【０２２５】
【表６−２】
2014502640.tif 000025
【０２２６】
【表６−３】
2014502640.tif 000026
表７は、本発明の選択された化合物のＭＩＣ９０アッセイの結果を示す。
【０２２７】
【表７】
2014502640.tif 000027
下の表８において、用語「ＣＭＩ」は、オレゴン州ウィルソンヴィルに位置するＴｈｅ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅの略である。
【０２２８】
【表８−１】
2014502640.tif 000028
【０２２９】
【表８−２】
2014502640.tif 000029
【０２３０】
【表８−３】
2014502640.tif 000030
【０２３１】
【表８−４】
2014502640.tif 000031
【０２３２】
【表８−５】
2014502640.tif 000032
【０２３３】
【表８−６】
2014502640.tif 000033
【０２３４】
【表８−７】
2014502640.tif 000034
下の表９において、用語「ＪＭＩ」は、アイオワ州ノースリバティーに位置するＴｈｅ  Ｊｏｎｅｓ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅの略である。
【０２３５】
【表９−１】
2014502640.tif 000035
【０２３６】
【表９−２】
2014502640.tif 000036
【０２３７】
【表９−３】
2014502640.tif 000037
【０２３８】
【表９−４】
2014502640.tif 000038
【０２３９】
【表９−５】
2014502640.tif 000039
【０２４０】
【表９−６】
2014502640.tif 000040
【０２４１】
【表９−７】
2014502640.tif 000041
【０２４２】
【表９−８】
2014502640.tif 000042
【０２４３】
【表９−９】
2014502640.tif 000043
【０２４４】
【表９−１０】
2014502640.tif 000044
【０２４５】
【表９−１１】
2014502640.tif 000045
【０２４６】
【表９−１２】
2014502640.tif 000046
【０２４７】
【表９−１３】
2014502640.tif 000047
【０２４８】
【表９−１４】
2014502640.tif 000048
【０２４９】
【表９−１５】
2014502640.tif 000049
【０２５０】
【表９−１６】
2014502640.tif 000050
【図１】
2014502640.tif 000056
【図２】
2014502640.tif 000057
【図３】
2014502640.tif 000058
【図４】
2014502640.tif 000059
【図５】
2014502640.tif 000060
【図６】
2014502640.tif 000061
【図７】
2014502640.tif 000062
【図８】
2014502640.tif 000063
【図９】
2014502640.tif 000064
【図１０】
2014502640.tif 000065
【国際調査報告】
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