(57)【要約】  ヒト対象におけるがん細胞の化学療法的処置または放射線処置中にヒト対象における非がん性細胞への損傷を阻害、防止、または低減する方法は、放射線または１つもしくは複数の化学療法剤での処置前に、ヒ素および／または１つもしくは複数のヒ素化合物を治療上有効な量でヒト対象に投与することを含む。
2014513698.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
がんの処置のための放射線処置および／または化学療法的処置を必要としているヒト対象に、１つまたは複数のヒ素化合物を、１μｇ／ｋｇ／日から１２５μｇ／ｋｇ／日までの保護的な量で投与するステップであって、前記ヒ素化合物の１つまたは複数が、ヒト対象への放射線および／または１つもしくは複数の化学療法剤の投与の少なくとも１日前に、ヒト対象に投与されるステップと、
前記ヒ素化合物の１つまたは複数の投与の後に放射線および／または１つもしくは複数の化学療法剤をヒト対象に投与するステップと
を含む、ヒト対象におけるがん細胞の放射線処置および／または化学療法的処置中にヒト対象における非がん性細胞への損傷を阻害、防止、または低減する方法。
【請求項２】
１つまたは複数のヒ素化合物が三酸化ヒ素を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
１つまたは複数のヒ素化合物の保護的な量が３１μｇ／ｋｇ／日から８５μｇ／ｋｇ／日までである、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
１つまたは複数のヒ素化合物の保護的な量が４０μｇ／ｋｇ／日から７０μｇ／ｋｇ／日までである、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記ヒ素化合物の１つまたは複数が、ヒト対象への放射線の投与の少なくとも３日前にヒト対象へ投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記ヒ素化合物の１つまたは複数が、ヒト対象への放射線の投与前の少なくとも３日間連続、ヒト対象へ投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記ヒ素化合物の１つまたは複数が、ヒト対象に経口投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記ヒ素化合物の１つまたは複数が、ヒト対象に静脈内投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記対象が化学療法的処置を必要としている、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記対象が放射線処置を必要としている、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
１つまたは複数のヒ素化合物をヒト対象に投与するステップと、
前記ヒ素化合物の１つまたは複数の投与の後に、治療上許容される最大用量の１つまたは複数の化学療法剤を前記対象に供するステップであって、前記ヒ素化合物の１つまたは複数の投与後に与えられる、前記１つまたは複数の化学療法剤の前記治療上許容される最大用量が、１つまたは複数のヒ素化合物での前処置の非存在下で与えられる前記１つまたは複数の化学療法剤の治療上有効な最大用量より高い、ステップと
を含む、ヒト対象におけるがん細胞の化学療法的処置の方法。
【請求項１２】
１つまたは複数のヒ素化合物が三酸化ヒ素を含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
１つまたは複数のヒ素化合物の保護的な量が１μｇ／ｋｇ／日から１２５μｇ／ｋｇ／日までである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
１つまたは複数のヒ素化合物の保護的な量が１μｇ／ｋｇ／日から８５μｇ／ｋｇ／日までである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
１つまたは複数のヒ素化合物の保護的な量が３１μｇ／ｋｇ／日から８５μｇ／ｋｇ／日までである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１６】
前記ヒ素化合物の１つまたは複数が、ヒト対象への放射線の投与の少なくとも３日前にヒト対象へ投与される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１７】
前記ヒ素化合物の１つまたは複数が、ヒト対象への放射線の投与前の少なくとも３日間連続、ヒト対象に投与される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１８】
前記治療上許容される最大用量が、前記対象のＣＢＣをモニターすることによって決定される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１９】
前記治療上許容される最大用量が、前記対象の体重をモニターすることによって決定される、請求項１１に記載の方法。
【請求項２０】
１つまたは複数のヒ素化合物をヒト対象に投与するステップと、
前記ヒ素化合物の１つまたは複数の投与の後に、治療上許容される最大線量の放射線を前記対象に投与するステップであって、前記ヒ素化合物の１つまたは複数の投与後に与えられる、放射線の前記治療上許容される最大線量が、１つまたは複数のヒ素化合物での前処置の非存在下で与えられる放射線の治療上有効な最大線量より高い、ステップと
を含む、ヒト対象におけるがん細胞の放射線処置の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
［連邦政府支援の研究または開発に関する言明］
本発明は、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈによって授与された認可番号ＣＡ０８５６７９による政府支援でなされた。政府は本発明において一定の権利を有する。
【０００２】
［発明の分野］
本発明は、一般的に、がんの処置に関する。より具体的には、本発明は、化学がん療法および放射線がん療法によって引き起こされる副作用の寛解に向けられる。
【背景技術】
【０００３】
がんは、動物およびヒトにおける死亡原因の第１位である。この１０年間、手術に加えての化学療法および放射線療法の併用は、治癒的設定および緩和的設定においてがん患者の処置のための標準アプローチになっている。放射線および化学療法は、がん治療の成功した方法であるが、それらは、がん性細胞と正常細胞とをうまくは識別しない。したがって、がん細胞を殺害する過程において、放射線または化学療法剤はまた、正常組織も損傷し、全身性毒性および有害な副作用をもたらし、そのことは、がん患者に著しい脅威を与える場合が多い。有害な副作用はまた、許容される最大用量を大いに制限する。化学療法および放射線療法の毒性を避けるための努力は、過去における度重ねての努力にもかかわらず、大きな成果を生んでいない。
【発明の概要】
【０００４】
一態様において、本発明は、がんの処置のための放射線処置を必要としているヒト対象に、１つまたは複数のヒ素化合物を約１μｇ／ｋｇ／日から約１２５μｇ／ｋｇ／日までの保護的な量で投与することを含む、ヒト対象におけるがん細胞の放射線処置中にヒト対象における非がん性細胞への損傷を阻害、防止、または低減する方法に関する。いくつかの実施形態において、１つまたは複数のヒ素化合物の保護的な量は、約３１μｇ／ｋｇ／日から約１２５μｇ／ｋｇ／日までである。放射線は、１つまたは複数のヒ素化合物の投与の後にヒト対象に投与される。いくつかの実施形態において、三酸化ヒ素が、ヒト対象へ放射線処置を投与する前にヒト対象に投与される。いくつかの実施形態において、１つまたは複数のヒ素化合物は、ヒト対象への放射線処置の投与の少なくとも１日前にヒト対象へ投与される。いくつかの実施形態において、１つまたは複数のヒ素化合物は、ヒト対象への放射線の投与前の少なくとも３日間毎日、ヒト対象に投与される。
【０００５】
別の態様において、本発明は、化学療法的処置を必要としているヒト対象に、１つまたは複数のヒ素化合物を約１μｇ／ｋｇ／日から約１２５μｇ／ｋｇ／日までの保護的な量で投与することを含む、ヒト対象におけるがん細胞の化学療法的処置中にヒト対象における非がん性細胞への損傷を阻害、防止、または低減する方法に関する。いくつかの実施形態において、１つまたは複数のヒ素化合物の保護的な量は、約３１μｇ／ｋｇ／日から約１２５μｇ／ｋｇ／日までである。１つまたは複数の化学療法剤は、１つまたは複数のヒ素化合物の投与の後にヒト対象へ投与される。いくつかの実施形態において、三酸化ヒ素が、ヒト対象への放射線処置を投与する前にヒト対象に投与される。いくつかの実施形態において、１つまたは複数のヒ素化合物は、ヒト対象への１つまたは複数の化学療法剤の投与の少なくとも１日前にヒト対象へ投与される。いくつかの実施形態において、１つまたは複数のヒ素化合物は、ヒト対象への１つまたは複数の化学療法剤の投与前の少なくとも３日間毎日、ヒト対象に投与される。
【０００６】
別の態様において、本発明は、がんの処置のための化学療法的処置または放射線処置を必要としているヒト対象に、１つまたは複数のヒ素化合物を投与することを含む、ヒト対象におけるがん細胞の化学療法的処置または放射線処置中にヒト対象における副作用を阻害、防止、または低減する方法に関する。１つまたは複数の化学療法剤または放射線は、１つまたは複数のヒ素化合物の投与の後にヒト対象へ投与される。１つまたは複数のヒ素化合物は、化学療法剤がヒト対象に投与された場合、ヒト対象における化学療法的処置または放射線処置によって引き起こされる副作用を阻害、防止、または低減するのに十分な量で投与される。いくつかの実施形態において、１つまたは複数のヒ素化合物は、約１μｇ／ｋｇ／日から約１２５μｇ／ｋｇ／日までの保護的な量で投与される。
【０００７】
阻害、防止、または低減され得る副作用には、胃腸管系に関連した副作用、低赤血球数に関連した副作用、低白血球数に関連した副作用、低血小板数に関連した副作用、骨髄細胞欠乏に関連した副作用、心毒性に関連した副作用、および脱毛に関連した副作用が挙げられる。
【０００８】
本発明の利点は、以下の実施形態の詳細な説明の助けを借りて、以下に説明する添付の図面を参照すれば、当業者に明らかとなる。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】様々な処置条件下における、ヒト肺癌細胞を注射された雄マウスへのヒ素前処置の効果を示す図である。
【図２】様々な処置条件下における、ヒト肺癌細胞を注射された雌マウスへのヒ素前処置の効果を示す図である。
【図３】様々な処置条件下における、ヒト乳癌細胞を注射された雌マウスへのヒ素前処置の効果を示す図である。
【図４】様々な処置条件下における、ヒト結腸癌細胞を注射されたマウスへのヒ素前処置の効果を示す図である。
【図５】Ｘ線照射下でのＷＴマウス対ｐ５３  Ｒ１７２Ｐノックインマウスへのヒ素前処置の効果を示す図である。
【図６】放射線処置後の白血球数および小腸損傷へのヒ素の効果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明は、様々な改変および代替形態が可能であり得るが、その特定の実施形態が、図面において例として示され、本明細書では詳細に記載される。図面は、原寸に比例していない場合がある。しかしながら、それの図面および詳細な説明は、開示された特定の形に本発明を限定することを意図するものではなく、それとは反対に、意図は、添付の特許請求の範囲によって定義された本発明の精神および範囲内に入る全ての改変、等価物、および代替物を網羅することであることが理解されるべきである。
【００１１】
以下の定義が提供される：
本明細書に用いられる場合、用語「投与」、「投与すること」などは、組成物を対象に提供することの関連において用いられるとき、一般的に、投与される化合物が、その化合物が投与されることの意図される生物学的効果の１つまたは複数を達成するように、任意の手段によって、適切な送達媒体と組み合わせて、１つまたは複数の医薬組成物、「市販の」（ＯＴＣ）組成物、または栄養補助組成物を対象に提供することを指す。非限定的例として、組成物は、非経口、皮下、静脈内、冠内、直腸内、筋肉内、腹腔内、経皮、または口腔内の送達経路で投与され得る。代替として、または同時に、投与は、経口経路によってもよい。投与される用量は、レシピエントの年齢、健康状態、体重、および／もしくは疾患状態、もしあれば、同時処置の種類、処置の頻度、ならびに／または望まれる効果の性質に依存する。投与される薬理学的活性化合物の用量は、レシピエントの年齢、健康状態、体重、および／もしくは疾患状態、もしあれば、同時処置、処置の頻度、ならびに／または望まれる生物学的効果の性質および大きさなどの複数の因子に依存する。
【００１２】
本明細書で用いられる場合、用語「がん」は、腫瘍などの、細胞の制御されない成長または増殖の組織として定義される。特定の実施形態において、腫瘍は、局所的浸潤および転移をもたらす。
【００１３】
本明細書で用いられる場合、用語「化学療法剤」は、がんの処置として用いられる薬物、毒素、化合物、組成物、または生物学的実体として定義される。
【００１４】
本明細書で用いられる場合、用語「細胞毒」は、細胞を殺害するために用いられる薬物、毒素、化合物、組成物、または生物学的実体として定義される。実施形態において、その細胞は、がん細胞である。
【００１５】
本明細書で用いられる場合、用語「ＤＮＡ損傷性物質」は、核酸を損傷する薬物、毒素、化合物、組成物、または生物学的実体である。損傷は、核酸に対するいかなる種類のものであってもよく、例えば、ＤＮＡ二重らせん分子の一方の鎖または両方の鎖を切断すること、または１つもしくは複数のヌクレオチドの突然変異を引き起こすことである。
【００１６】
本明細書で用いられる場合、用語「薬物」は、病状または疾患の治療的処置に用いられる医薬または薬として定義される。薬物は、別の薬物または別の型の治療と組み合わせて用いられてもよく、実施形態において、がんの処置に有効である。
【００１７】
本明細書で用いられる場合、用語「薬学的に、または薬理学的に許容される」は、動物またはヒトに投与されたとき、有害な、アレルギー性の、または他の都合の悪い反応を生じない分子実体および組成物を指す。
【００１８】
本明細書で用いられる場合、用語「薬学的に許容される担体」は、ありとあらゆる溶媒、分散媒、被覆剤、抗細菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤などを含む。
【００１９】
本明細書で用いられる場合、「医薬組成物」、「医薬製剤」、「医薬調製物」などの用語は、一般的に、規定された用量の、１つまたは複数の薬理学的活性化合物を細胞、細胞群、器官または組織、動物またはヒトに送達するように適応している製剤を指す。薬理学的活性化合物を医薬調製物に組み入れる方法は、当技術分野において広く知られている。所望の生物学的結果を達成するために医薬組成物中に含まれるべき適切な規定用量の薬理学的活性化合物の決定は、当業者の技能レベルの範囲内である。医薬組成物は、徐放性または持続放出性製剤として提供されてもよい。そのような製剤は、所望の時点に大量の化合物を製剤から放出することができ、または用量に存在する化合物の比較的一定な量が所定の期間にわたって放出されることを確実にすることができる。「徐放」、「放出制御」、または「持続放出」などの用語は、薬学的分野において広く用いられており、当業者によって容易に理解される。医薬調製物は、固体、半固体、ゲル、ハイドロゲル、液体、溶液、懸濁液、乳濁液、エアロゾル、粉末、またはそれらの組み合わせとして調製され得る。典型的には薬理学的に不活性である１つまたは複数の担体、保存剤、香味料、賦形剤、被覆剤、安定剤、結合剤、溶媒、および／または助剤が医薬調製物に含まれ得る。化合物の薬学的に許容される塩がその用語の意味の範囲内に含まれることは当業者によって容易に理解されるであろう。その用語はまた、２つ以上の薬理学的活性化合物の混合物を含有する医薬組成物も包含することは、さらに当業者によって理解されるであろうし、そのような化合物は、例えば、併用療法として投与される。
【００２０】
本明細書で用いられる場合、用語「対象」は、一般的に、哺乳動物、特に、ヒトを指す。一実施形態において、ヒ素含有化合物を受ける対象は、化学療法または放射線療法に予定されている者である。例えば、対象は、化学療法または放射線療法が有利な処置であると考えられるがんと診断されている、ヒト患者または動物であり得る。
【００２１】
本明細書で用いられる場合、用語「処置すること」は、病状または疾患についての処置を施すという実施として定義される。処置は、完全な治癒を提供する必要はなく、少なくとも１つの症状が改善され、または根絶される場合には、有効とみなされる。さらに、処置は、疾患状態または病状の永久的改善を提供する必要はないが、これは好ましいことではある。
【００２２】
薬理学的活性組成物を投与されることになっている対象に関連して用いられる場合、用語「処置を必要としている」、「それを必要としている」、「そのような処置から恩恵を受けるだろう者」などは、一般的に、個人または動物が、特定の処置または医学的介入を要し、またはそれから恩恵を受けるだろうという適切なヘルスケア提供者によってなされた判断を指す。そのような判断は、ヘルスケア提供者の専門知識の領域内にある様々な因子に基づいてなされ得るが、個人または動物が、特定の医学的介入で寛解され、または処置される可能性がある状態の結果として、病気であり、または病気になるだろう、または病気になるリスクがあるという知識を含む。
【００２３】
化学療法または放射線療法に関連した「副作用」には、腹痛、胃酸過多、胃酸の逆流、脱毛（抜け毛）、貧血、食欲不振、早期の満腹感、関節痛（節々の痛み）、無気力、運動失調、高窒素血、肝毒性、気管支炎、便秘、膀胱炎、深部静脈血栓（ＤＶＴ）、消化不良、呼吸困難、浮腫、食道炎、顆粒球減少、女性化乳房、血腫、出血性膀胱炎、白血球減少、粘膜炎、筋肉痛、心筋炎、腎臓毒性、好中球減少、汎血球減少、心膜炎、咽頭炎、口内炎、血小板減少、口内乾燥、皮膚乾燥、潮紅、色素沈着過剰、爪の変化、光線過敏、放射線リコール、および発疹が挙げられるが、それらに限定されない。いくつかの実施形態において、副作用は、好中球減少（低白血球数）による副作用を含む。低白血球数は、身体における感染症の増加をもたらし得る。いくつかの実施形態において、副作用は、貧血（低赤血球数）による副作用を含む。低赤血球数は、頭痛および疲労などの副作用をもたらし得る。いくつかの実施形態において、副作用は、血小板減少（低血小板数）による副作用を含む。低血小板数は、挫傷形成の増加、点状出血、および出血（例えば、鼻、歯茎、直腸）などの副作用をもたらし得る。他の副作用には、胃腸管への副作用（例えば、吐き気、腹痛、腹部痙攣、鼓腸（ガス）、胃酸過多、胃酸の逆流、食欲不振、早期の満腹感など）が挙げられる。他の副作用には、脱毛（抜け毛）および皮膚反応（例えば、皮膚乾燥、潮紅、色素沈着過剰、爪の変化、光線過敏、放射線リコール、および発疹）が挙げられる。
【００２４】
句「治療上有効な量」および「有効な量」は、他に指示がない限り、同義語であり、処置されることになっている状態、疾患、または障害を改善するのに十分である、本発明の化合物の量を意味する。治療上有効な量、加えて、剤形、投与経路、および投与頻度を含む、本発明の化合物の、処置を必要としている患者への効果的な投与に関係した他の因子の決定は、直面している状態の特徴に依存し得、その特徴には、処置されることになっている患者および状態、特定の患者における状態の重症度、用いられることになっている特定の化合物、用いられることになっている特定の投与経路、投与頻度、ならびに用いられることになっている特定の製剤が挙げられる。患者についての治療的有効な処置計画の決定は、医学分野または獣医学分野における業者のレベル内で可能である。臨床用途において、有効な量は、Ｕ．Ｓ．Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ、または相当する外国の政府機関によって推奨される量であり得る。単一の剤形を生じるように担体材料と組み合わせることができる活性成分の量は、処置される哺乳動物宿主および特定の投与様式によって変わる。
【００２５】
本明細書で用いられる場合、用語「保護的な量」は、放射線療法または化学療法薬の正常細胞への有害な副作用を低減し、防止し、または別の形で寛解させるのに十分である、放射線療法または１つもしくは複数の化学療法剤と同時に、別々に、または連続して対象に投与されるヒ素含有化合物の有効な量を記載する。
【００２６】
本明細書で用いられる場合、用語「腫瘍細胞」は、腫瘍またはがんなどの悪性腫瘤の細胞として定義される。その細胞は、腫瘍内、もしくは腫瘍の表面上に位置する場合もあるし、またはそれは腫瘍に付随している場合もある。
【００２７】
本明細書で用いられる場合、病的状態または疾患状態を調節することに関連して用いられるときの用語「低減すること」、「阻害すること」、および「寛解させること」は、一般的に、疾患状態のマイナスの結果の少なくとも一部の防止および／または低減を指す。生化学的事象または経路の関連において用いられるとき、その用語は、一般的に、前記経路の規模または活性の正味の低減を指す。
【００２８】
本発明は、特定の化学療法または放射線療法に限定されないことは理解されるべきであり、それらの療法は、当然ながら、変わり得る。本明細書で用いられる専門用語は、特定の実施形態のみを記載することを目的とし、限定することを意図するものではないこともまた、理解されるべきである。本明細書および添付の特許請求の範囲に用いられる場合、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」および「その（ｔｈｅ）」は、内容が明らかに他に指図していない限り、単数形および複数形の指示対象を含む。
【００２９】
当業者によって理解されているように、ありとあらゆる目的のために、特に書面による説明を提供することに関して、本明細書に開示された全ての範囲は、ありとあらゆる可能な部分的範囲およびその部分的範囲の組み合わせを包含する。いずれの列挙された範囲も、その同じ範囲が、少なくとも２等分、３等分、４等分、５等分、１０等分などへ分解されることを十分に記載し、かつ可能にするものとして容易に認識することができる。非限定的例として、本明細書で論じられる各範囲は、下部３分の１、中部３分の１、および上部３分の１などへ容易に分解することができる。また当業者によって理解されているように、「に至るまで」、「少なくとも」、「より大きい」、「より少ない」などの全ての言語は、挙げられている数を含み、上記で論じられているように、後で、部分的範囲へ分解することができる範囲を指す。最後に、当業者によって理解されているように、範囲は、各個々のメンバーを含む。したがって、例えば、１〜３単位を有する群は、１単位、２単位、または３単位を有する群を指す。同様に、１〜５単位を有する群は、１単位、２単位、３単位、４単位、または５単位を有する群を指すなど。
【００３０】
がんのほとんどの型は、化学療法または放射線療法のいずれかで処置され得る。ヒ素は、乳がん、卵巣がん、結腸直腸がん、胃がん、肺がん、腎臓がん、膀胱がん、前立腺がん、尿管がん、甲状腺がん、膵臓がん、子宮頸がん、食道がん、中皮腫、頭頸部がん、肝細胞がん、黒色腫、脳がん、外陰がん、精巣がん、肉腫、腸がん、皮膚がん、白血病、およびリンパ腫などのがんの化学療法または放射線療法の処置に関連した副作用を低減するのに有用である。そのようながんについての様々な動物モデルが知られており、それらは、ヒ素の有効性、加えて、投与プロトコールおよび投薬プロトコールを探索するために用いることができる。いくつかの実施形態において、対象は、保護的な量のヒ素、その後に、ヒ素含有化合物ではない化学療法剤を受ける。
【００３１】
実施形態において、化学療法剤および／または放射線の患者への投与と共に、１つまたは複数のヒ素化合物を患者に投与することにより、がん患者における化学療法または放射線療法の副作用が阻害される方法が提供される。１つまたは複数のヒ素化合物は、副作用を低減するのに有効な量で投与されるが、それは、追加の腫瘍形成を誘発するだろう量よりはるかに少ない量である。いくつかの実施形態において、１つまたは複数のヒ素化合物は、化学療法または放射線療法の投与前に、患者へ投与される。実施形態において、１つまたは複数のヒ素化合物は、患者への化学療法または放射線療法の投与と実質的に同時に、またはそれの後に、投与される。１つまたは複数のヒ素化合物は、化学療法または放射線療法の前、それの間、およびそれの後に投与されてもよい。化学療法後および放射線療法後の副作用の重症度の低下は、化学療法または放射線療法を受けた患者によって経験される生活の質を高める。そのような向上した生活の質の表れとして、がん患者は、ヒ素での前処置を受けていない患者と比較して、より旺盛な食欲、より良い眠り、より高いレベルのエネルギー、より少ない痛み、より少ない胃腸障害、より少ない脱毛、感染発生率の低下、および望ましい体重増加を有することが観察される。
【００３２】
ヒ素は、所望の保護効果を生じる、処置（例えば、化学療法または放射線療法）の投与近くのいずれの時点でも投与することができる。一実施形態において、ヒ素は、処置の投与前に、例えば、処置の投与の１〜２日前、１〜３日前、１〜４日前、１〜５日前、または１〜１０日前に対象に投与される。いくつかの実施形態において、ヒ素は、処置の投与の１日前、２日前、３日前、４日前、または５日前に対象に投与される。適切な実施形態において、ヒ素は、処置の投与の３日前に投与される。この期間中、投与は、１日１回、１日２回、１日３回、１日４回、１日６回、または（例えば、静脈内投与により）実質的に連続して、起こってもよい。
【００３３】
典型的には、保護効果を達成するのに十分な、ヒ素組成物の有効な量は、１日あたり体重１キログラムにつき約５μｇから１日あたり体重１キログラムにつき約３，５００μｇまでの範囲である。いくつかの実施形態において、有効な量は、１日あたり体重１キログラムにつき約１０μｇから１日あたり体重１キログラムにつき約１，０００μｇまでの範囲である。他の実施形態において、有効な量は、約５〜約１，５００μｇ／ｋｇ／日、約５〜約１，０００μｇ／ｋｇ／日、約５〜約８５０μｇ／ｋｇ／日、約５〜約５００μｇ／ｋｇ／日、約５〜約３５０μｇ／ｋｇ／日、約１０〜約５００μｇ／ｋｇ／日、約１５〜約８５０μｇ／ｋｇ／日、または約１５〜約３５０μｇ／ｋｇ／日の範囲である。他の実施形態において、有効な量は、約１〜約３０μｇ／ｋｇ／日、約５〜約３０μｇ／ｋｇ／日、約５〜約２５μｇ／ｋｇ／日、約５〜約２０μｇ／ｋｇ／日、約１０〜約２０μｇ／ｋｇ／日、または約１５〜約２０μｇ／ｋｇ／日の範囲である。適切な実施形態において、用量は、約１５μｇ／ｋｇ／日、約２０μｇ／ｋｇ／日、約２５μｇ／ｋｇ／日、約３０μｇ／ｋｇ／日、約３５μｇ／ｋｇ／日、約４０μｇ／ｋｇ／日、約５０μｇ／ｋｇ／日、約１００μｇ／ｋｇ／日、約１５０μｇ／ｋｇ／日、約２５０μｇ／ｋｇ／日、または約５００μｇ／ｋｇ／日である。
【００３４】
いくつかの実施形態において、ヒトにおいて保護効果を達成するのに十分な、ヒ素組成物の有効な量は、約５〜約２００μｇ／ｋｇ／日、約１０〜約１５０μｇ／ｋｇ／日、約１５〜約１５０μｇ／ｋｇ／日、約３０〜約１５０μｇ／ｋｇ／日、約３０〜約１２５μｇ／ｋｇ／日、約３０〜約１００μｇ／ｋｇ／日、約３０〜約８５μｇ／ｋｇ／日、約１５〜約５０μｇ／ｋｇ／日；約１〜約１２５μｇ／ｋｇ／日、約１．５〜約１２５μｇ／ｋｇ／日、約３〜約１２５μｇ／ｋｇ／日、約１．５〜約６２．５μｇ／ｋｇ／日、約１〜約４０μｇ／ｋｇ／日、または約２〜約８５μｇ／ｋｇ／日の範囲である。いくつかの実施形態において、１つまたは複数のヒ素化合物の適切な総量は、約３１〜約１２５μｇ／ｋｇ／日、約３１〜約８５μｇ／ｋｇ／日、約３５〜約８０μｇ／ｋｇ／日、または約４０〜約７０μｇ／ｋｇ／日の範囲にある。
【００３５】
用いられ得るヒ素化合物の例には、酸化ヒ素（ＩＩＩ）（三酸化ヒ素（Ａｓ２Ｏ３））、酸化ヒ素（Ｖ）（Ａｓ２Ｏ５）、セレン化ヒ素（ＩＩＩ）（Ａｓ２Ｓｅ３）、硫化ヒ素（ＩＩ）（Ａｓ２Ｓ２）、硫化ヒ素（ＩＩＩ）（Ａｓ２Ｓ３）、硫化ヒ素（Ｖ）（Ａｓ２Ｓ５）、テルル化ヒ素（ＩＩＩ）（Ａｓ２Ｔｅ３）、ヒ酸ナトリウム（Ｎａ２ＨＡｓＯ４）、亜ヒ酸ナトリウム（ＮａＡｓＯ２）、ヒ酸カリウム（ＫＨ２ＡｓＯ４）、アルセニル酒石酸ナトリウム（ＮａＣ４Ｈ４ＡｓＯ６）、四硫化四ヒ素（Ａｓ４Ｓ４）、および他のヒ素誘導体が挙げられるが、それらに限定されない。
【００３６】
いくつかの実施形態において、三酸化ヒ素は、ヒト対象におけるがん細胞の放射線処置または化学療法的処置の間、ヒト対象における非がん性細胞への損傷を阻害し、低減し、または防止するために用いられ得る。三酸化ヒ素は、約１μｇ／ｋｇ／日から約１２５μｇ／ｋｇ／日までの範囲の量で投与され得る。いくつかの実施形態において、三酸化ヒ素は、約３１μｇ／ｋｇ／日から約１２５μｇ／ｋｇ／日までの範囲の量で投与され得る。いくつかの実施形態において、三酸化ヒ素は、約３１μｇ／ｋｇ／日から約８５μｇ／ｋｇ／日までの範囲の量で投与され得る。種々の実施形態において、三酸化ヒ素は、三酸化ヒ素を投与されなかった対照対象または対照対象集団と比較して、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、またはそれ以上、非がん性細胞への損傷を阻害し、低減し、または防止することができる。
【００３７】
いくつかの実施形態において、亜ヒ酸ナトリウムは、ヒト対象におけるがん細胞の放射線処置または化学療法的処置の間、ヒト対象における非がん性細胞への損傷を阻害し、低減し、または防止するために用いられ得る。亜ヒ酸ナトリウムは、約１μｇ／ｋｇ／日から約１２５μｇ／ｋｇ／日までの範囲の量で投与され得る。いくつかの実施形態において、亜ヒ酸ナトリウムは、約３１μｇ／ｋｇ／日から約１２５μｇ／ｋｇ／日までの範囲の量で投与され得る。いくつかの実施形態において、亜ヒ酸ナトリウムは、約３１μｇ／ｋｇ／日から約８５μｇ／ｋｇ／日までの範囲の量で投与され得る。いくつかの実施形態において、亜ヒ酸ナトリウムは、約３１μｇ／ｋｇ／日から約６５μｇ／ｋｇ／日までの範囲の量で投与され得る。種々の実施形態において、亜ヒ酸ナトリウムは、亜ヒ酸ナトリウムを投与されなかった対照対象または対照対象集団と比較して、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、またはそれ以上、非がん性細胞への損傷を阻害し、低減し、または防止することができる。
【００３８】
いくつかの実施形態において、三酸化ヒ素は、化学療法剤および／または放射線療法によって引き起こされる副作用を阻害し、低減し、または防止するために用いられる。三酸化ヒ素の投与後、放射線療法または１つもしくは複数の化学療法剤は、ヒト対象に投与され得る。いくつかの実施形態において、三酸化ヒ素は、放射線または１つもしくは複数の化学療法剤のヒト対象への投与の少なくとも１日前にヒト対象へ与えられる。いくつかの実施形態において、三酸化ヒ素は、放射線または化学療法剤のヒト対象への投与前の少なくとも３日間、ヒト対象に与えられる。種々の実施形態において、三酸化ヒ素は、三酸化ヒ素を投与されなかった対照対象または対照対象集団と比較して、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、またはそれ以上、１つまたは複数の副作用を阻害し、低減し、または防止することができる。
【００３９】
一態様において、随伴毒性を有する処置を、その処置の投与時点の前の１回または複数回の保護的用量のヒ素の投与と共に投与することにより、対象における疾患状態を処置するための方法が開示される。保護的な量のヒ素含有化合物の投与は、化学療法または放射線療法に関連した１つまたは複数の副作用の改善を伴う。例えば、がんおよび特定の免疫学的障害の処置に用いられる化学療法および放射線療法は、汎血球減少、または貧血、好中球減少、および血小板減少の併発を引き起こし得る。したがって、造血細胞の増加または補充がそのような処置の成功にとって重大である場合が多い。
【００４０】
ヒ素の対象への投与の効果は、処置の毒性（例えば、造血毒性）の低減であり、それゆえ、高用量および用量高密度プロトコールが特定の対象の治療計画に利用されることを可能にする。この実施形態を実施することの全体的な利益は、ヒ素の対象への投与が、造血毒性などの処置の毒性を低減し、または減少させることである。結果的に、様々な処置様式の治療上許容される最大用量が変更され得る。いくつかの場合、処置の治療上許容される最大用量は、処置前にヒ素を投与されていない対象についての治療上許容される最大用量と比べて増加させることができる。
【００４１】
一実施形態において、保護的な量のヒ素の投与は、化学療法または放射線療法の曝露後の骨髄状態の改善を伴う。対象についての骨髄状態は、以下のうちの１つまたは複数が生じたならば、改善している：がん細胞治療（例えば、放射線療法および／または化学療法）後の対象における骨髄細胞の密度が、がん細胞治療の前に対象のヒ素での前処置が行われなかった場合より高い。がん細胞治療後の対象における骨髄中の前駆細胞または幹細胞の密度が、がん細胞治療の前に対象のヒ素での前処置が行われなかった場合より高い。がん細胞治療（例えば、放射線療法および／または化学療法）後の対象における骨髄組織の質量が、がん細胞治療の前に対象のヒ素での前処置が行われなかった場合より高い。またはがん細胞治療（例えば、放射線療法および／または化学療法）後の対象における骨髄細胞増殖の速度が、がん細胞治療の前に対象のヒ素での前処置が行われなかった場合より大きい。有効性の決定は、化学療法剤または放射線剤での治療後のいかなる時点でも行うことができる。例えば、有効性の決定は、剤（例えば、化学療法剤または放射線）が対象に送達されてから１日後、２日後、３日後、４日後、５日後、６日後、７日後、８日後、９日後、１０日後、またはそれ以後に行うことができる。骨髄試料は、この分析のために、対象の身体における骨髄の任意の部分から採取することができる。その結果を、ヒ素での前処置が行われなかった場合の予想される結果と比較するために、データは、同じまたは類似した化学療法または放射線療法を受けるが、ヒ素を受けない１個または複数の対照個体から、好ましくは数個の個体から収集することができる。適切には、対照集団は、同じ状態について、例えば、同じ型のがんについて処置されることになっている。量は、対照集団と比較して、いかなる利益であれ、生じる場合の保護的な量である。例えば、値または平均値が、対照個体または対照群からの値または平均値より、正常値に近い（例えば、対照個体または対照群からの値または平均値より高い）骨髄状態パラメータ（例えば、所与の前駆体細胞型の増殖率）を、処置される個体または群が有する場合には、その処置される個体または群の骨髄状態は改善されている。任意で、必要に応じて、統計学的方法をこの解析に適用することができる。種々の実施形態において、保護的な有効な量は、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、またはそれ以上、骨髄状態を改善する量であり得る。
【００４２】
化学療法、および場合によっては、放射線療法について、治療上許容される最大用量は、対象の全血球数（「ＣＢＣ」）をモニターすることによって決定され得る。対象の骨髄への損傷は、低い赤血球数、低い白血球数、低い血小板数、またはそれらの組み合わせによって顕在化され得る。一般的に、正常の赤血球数は、血液の１マイクロリットルあたり約４５０万個から約６００万個までの範囲である。血液の１マイクロリットルあたり約４００万個より低い赤血球数は、化学療法剤用量および／または放射線線量が治療上許容される最大用量より高いことを示している可能性がある。一般的に、正常の白血球数は、血液の１マイクロリットルあたり約４，０００個から約１１，０００個までの範囲である。血液の１マイクロリットルあたり約３，５００個より低い白血球数は、化学療法剤用量および／または放射線線量が治療上許容される最大用量より高いことを示している可能性がある。一般的に、正常の血小板数は、血液の１マイクロリットルあたり約１５０，０００個から約４００，０００個までの細胞の範囲である。血液の１マイクロリットルあたり約５０，０００個より低い血小板細胞数は、化学療法剤用量および／または放射線線量が治療上許容される最大用量より高いことを示している可能性がある。治療上許容される最大用量を決定するための方法は、本明細書に参照により組み入れられている、Ｇｕｒｅｙ、「Ｈｏｗ  ｔｏ  ｃａｌｃｕｌａｔｅ  ｔｈｅ  ｄｏｓｅ  ｏｆ  ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ」、Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ（２００２）、８６：１２９７〜１３０２に記載されている。
【００４３】
したがって、いくつかの実施形態において、治療上許容される最大量は、対象のＣＢＣをモニターすることによって決定され得る。１つまたは複数の細胞カウントを一般的に許容されるレベルより下に降下させるまでに使用できる化学療法剤の量は、１つまたは複数の化学療法剤の投与前の１つまたは複数のヒ素化合物の対象への投与によって増加し得ることが見出されている。一般的に、対象に投与される化学療法剤の量を増加させることは、処置の有効性を増加させる（例えば、がん細胞が破壊される速度を増加させ、および／または再発率を低下させる）。
【００４４】
放射線療法中に、１つまたは複数の細胞カウントを一般的に許容されるレベルより下に降下させるまでに使用できる放射線線量は、放射線の対象への投与前の１つまたは複数のヒ素化合物の対象への投与によって増加し得ることもまた見出されている。一般的に、対象に投与される放射線の量を増加させることは、処置の有効性を増加させる（例えば、がん細胞が破壊される速度を増加させ、および／または再発率を低下させる）。
【００４５】
治療上許容される最大用量を決定するために他の因子が用いられてもよい。例えば、化学療法および放射線療法の副作用は、腸管粘膜への傷害であり得る。腸管粘膜への損傷は、身体が栄養分を吸収する能力に影響し得るため、これもまた、放射線療法および化学療法の用量制限副作用であり得る。いくつかの実施形態において、がん細胞治療の治療上許容される最大用量は、腸管粘膜へ許容される量の損傷を生じる用量であり得る。いくつかの実施形態において、対象の体重が、腸管粘膜の状態を決定するためにモニターされてもよい。例えば、有意な体重減少（例えば、対象の開始時の体重から３ポンドより多い処置中の体重減少）は、腸管粘膜への許容されない損傷を示し得る。腸管粘膜へ許容されない損傷が引き起こされないうちに用いられ得る化学療法剤の量は、１つまたは複数の化学療法剤の投与前の１つまたは複数のヒ素化合物の対象への投与によって増加し得ることが見出されている。腸管粘膜へ許容されない損傷が引き起こされないうちに放射線療法中に用いられ得る放射線線量は、放射線の対象への投与前の１つまたは複数のヒ素化合物の対象への投与によって増加し得ることもまた見出されている。
【００４６】
放射線療法剤および因子には、ＤＮＡ損傷を誘導する放射線および波動、例えば、γ線照射、Ｘ線、ＵＶ照射、マイクロ波、電子放出、放射性同位元素などが挙げられる。治療は、上記の型の放射線を局在性腫瘍部位に照射することによって達成され得る。これらの因子の全部が、ＤＮＡ、ＤＮＡの前駆体、ＤＮＡの複製および修復能力、ならびに染色体の集合および維持への広範な損傷をもたらす可能性が最も高い。
【００４７】
Ｘ線についての線量範囲は、長期間（３〜４週間）の５０〜２００レントゲンの一日量から、２０００〜６０００レントゲンの単一線量までの範囲である。放射性同位元素についての用量範囲は、ばらつきが大きく、同位元素の半減期、放射される放射線の強度および型、ならびに新生物細胞による取り込みに依存する。
【００４８】
化学療法剤には、ＤＮＡに直接、架橋する剤、ＤＮＡへインターカレートする剤、ならびに核酸合成に影響を及ぼすことによって染色体異常および有糸分裂異常をもたらす剤が挙げられる。化学療法剤の例には、ドキソルビシン、ダウノルビシン、マイトマイシン、アクチノマイシンＤ、ブレオマイシン、シスプラチン、エトポシド、腫瘍壊死因子、タキソール、ビンクリスチン、ビンブラスチン、カルムスチン、メルファラン（ｍｅｌｐｈａｌａｎ）、シクロホスファミド、クロランブシル、ブスルファン、フルオロウラシル（「５ＦＵ」）、およびロムスチンが挙げられるが、それらに限定されない。これらの剤のいずれかが、１つまたは複数のヒ素化合物での患者の前処置の後に、単独で、または他の剤と組み合わせて、用いられ得る。１つまたは複数のヒ素化合物での患者の前処置は、上記で列挙された化学療法剤の副作用のうちの多くの強度および発生率を、そのような剤の効力を有意に阻害することなく、低減する。
【００４９】
核酸、特にＤＮＡを直接、架橋する剤は、ＤＮＡ損傷を生じることが想定され、かつ本明細書に示されており、そのことにより相乗的抗悪性腫瘍性多剤併用療法へと至る。シスプラチンおよび他のＤＮＡアルキル化剤などの剤が用いられ得る。
【００５０】
ＤＮＡを損傷する剤にはまた、ＤＮＡ複製、有糸分裂、および染色体分離に干渉する化合物が挙げられる。これらの化合物の例には、ドキソルビシン（別名アドリアマイシン）、エトポシド（別名ＶＰ−１６）、ベラパミル、ポドフィロトキシンなどが挙げられる。これらの化合物は、新生物の処置のための臨床設定において広く用いられており、アドリアマイシンについての静脈内への２１日間隔での２５〜７５ｍｇ／ｍ２から、エトポシドについての静脈内または経口での３５〜１００ｍｇ／ｍ２までの範囲の用量で、ボーラス注入によって投与される。
【００５１】
ドキソルビシン塩酸塩、５，１２−ナフタセンジオン，（８ｓ−ｃｉｓ）−１０−（（３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−ａ−Ｌ−ｌｙｘｏ−ヘキソピラノシル）オキシ）−７，８，９，１０−テトラヒドロ−６，８，１１−トリヒドロキシ−８−（ヒドロキシアセチル）−１−メトキシ−ヒドロクロリド（ヒドロキシダウノルビシン塩酸塩、アドリアマイシン）は、広域抗悪性腫瘍性スペクトルにおいて用いられる。それはＤＮＡに結合し、核酸合成を阻害し、有糸分裂を阻害し、染色体異常を促進する。
【００５２】
単独で投与される場合、それは、甲状腺腺腫および原発性肝細胞癌の処置のための第一選択薬である。それは、卵巣腫瘍、子宮内膜腫瘍、および乳房腫瘍、気管支原性燕麦細胞癌、非小細胞肺癌、胃腺癌、網膜芽細胞腫、神経芽細胞腫、菌状息肉腫、膵癌、前立腺癌、膀胱癌、骨髄腫、びまん性組織球性リンパ腫、ウィルムス腫瘍、ホジキン病、副腎腫瘍、骨肉腫  軟部肉腫、ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、ならびに急性リンパ球性白血病の処置のための３１個の第一選択多剤併用療法薬の構成要素である。それは、島細胞がん、子宮頸がん、精巣がん、および副腎皮質がんの処置のための代替薬物である。それはまた、免疫抑制剤でもある。
【００５３】
ドキソルビシンは、吸収されにくく、典型的には、静脈内に投与される。薬物動態は、多区画性である。分布相は、１２分間および３．３時間の半減期を有する。排出半減期は、約３０時間である。４０〜５０％は、胆汁へ分泌される。残りの大部分は、肝臓で代謝されて、一部は活性代謝産物（ドキソルビシノール）になるが、数パーセントは尿へ排泄される。肝臓機能障害が存在する場合、用量は、典型的には抑制される。
【００５４】
適切な用量は、静脈内、成体、２１日間隔で６０〜７５ｍｇ／ｍ２、または３週間もしくは４週間の間隔で繰り返される２日間連続もしくは３日間連続の各日における２５〜３０ｍｇ／ｍ２、または週１回の２０ｍｇ／ｍ２である。最低用量は、高齢患者において、以前の化学療法もしくは新生物性骨髄浸潤によって引き起こされた事前の骨髄抑制がある場合、またはこの薬物が他の骨髄造血抑制薬と併用される場合に、用いられるべきである。用量は、血清ビリルビンが１．２ｍｇ／ｄＬから３ｍｇ／ｄＬの間にある場合には５０％、３ｍｇ／ｄＬより高い場合には７５％、低減されるべきである。生涯の総用量は、正常な心機能を有する患者において５５０ｍｇ／ｍ２を超えるべきではなく、縦隔放射線照射を受けたことがある者においては４００ｍｇ／ｍ２を超えるべきではない。あるいは、４週間ごとに繰り返される、３日間連続の各日における３０ｍｇ／ｍ２。例示的な用量は、１０ｍｇ／ｍ２、２０ｍｇ／ｍ２、３０ｍｇ／ｍ２、５０ｍｇ／ｍ２、１００ｍｇ／ｍ２、１５０ｍｇ／ｍ２、１７５ｍｇ／ｍ２、２００ｍｇ／ｍ２、２２５ｍｇ／ｍ２、２５０ｍｇ／ｍ２、２７５ｍｇ／ｍ２、３００ｍｇ／ｍ２、３５０ｍｇ／ｍ２、４００ｍｇ／ｍ２、４２５ｍｇ／ｍ２、４５０ｍｇ／ｍ２、４７５ｍｇ／ｍ２、５００ｍｇ／ｍ２であり得る。当然ながら、これらの用量の全ては、例示的であり、これらの点の間にある任意の用量もまた、本発明において有用であると予想される。
【００５５】
ダウノルビシン塩酸塩、５，１２−ナフタセンジオン，（８Ｓ−ｃｉｓ）−８−アセチル−１０−（（３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−ａ−Ｌ−ｌｙｘｏ−ヘキサノピラノシル）オキシ）−７，８，９，１０−テトラヒドロ−６，８，１１−トリヒドロキシ−１０−メトキシ−ヒドロクロリド、別名セルビジンは、市販されている。ダウノルビシンは、ＤＮＡへインターカレートし、ＤＮＡ指向性ＲＮＡポリメラーゼをブロックし、ＤＮＡ合成を阻害する。それは、核酸合成に干渉しない用量で、細胞分裂を阻止することができる。
【００５６】
他の薬物と併用して、それは、成体における急性骨髄球性白血病（寛解導入として）、急性リンパ球性白血病、および慢性骨髄球性白血病の急性期の第一選択化学療法に含まれる。経口吸収は悪く、それは静脈内に与えられなければならない。分布の半減期は、４５分間であり、排出の半減期は約１９時間である。それの活性代謝産物である、ダウノルビシノールの半減期は約２７時間である。ダウノルビシンは、大部分、肝臓で代謝され、胆汁へも分泌される（約４０％）。用量は、肝不全または腎不全においては低減されなければならない。
【００５７】
適切な用量（塩基当量）は、静脈内  成体、６０歳未満、３週間もしくは４週間ごとに１日間、２日間、もしくは３日間、４５ｍｇ／ｍ２／日（６０歳より上の患者については３０ｍｇ／ｍ２）、または３週間もしくは４週間ごとに３〜６日間、０．８ｍｇ／ｋｇ／日である。生涯において５５０ｍｇ／ｍ２より多くが与えられるべきではなく、ただし、胸部照射を受けたことがある場合の４５０ｍｇ／ｍ２以下を除く。子ども、年齢が２歳未満であり、または体表面が０．５ｍ未満である場合（その場合、体重に基づいた成体スケジュールが用いられる）を除いて、２５ｍｇ／ｍ２、週１回。それは、注射剤形（塩基当量）２０ｍｇ（塩酸塩の２１．４ｍｇに対応する塩基当量として）で利用できる。例示的な用量は、１０ｍｇ／ｍ２、２０ｍｇ／ｍ２、３０ｍｇ／ｍ２、５０ｍｇ／ｍ２、１００ｍｇ／ｍ２、１５０ｍｇ／ｍ２、１７５ｍｇ／ｍ２、２００ｍｇ／ｍ２、２２５ｍｇ／ｍ２、２５０ｍｇ／ｍ２、２７５ｍｇ／ｍ２、３００ｍｇ／ｍ２、３５０ｍｇ／ｍ２、４００ｍｇ／ｍ２、４２５ｍｇ／ｍ２、４５０ｍｇ／ｍ２、４７５ｍｇ／ｍ２、５００ｍｇ／ｍ２であり得る。当然ながら、これらの用量は、例示的であり、これらの点の間にある任意の用量もまた、本発明において有用であると予想される。
【００５８】
マイトマイシン（別名ムタマイシンおよび／またはマイトマイシン−Ｃ）は、抗腫瘍活性を有することが示されているＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｃａｅｓｐｉｔｏｓｕｓのブロスから単離された抗生物質である。この化合物は、熱安定性であり、高い融点を有し、有機溶媒において溶解しやすい。
【００５９】
マイトマイシンは、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）の合成を選択的に阻害する。グアニンおよびシトシンの含有量は、マイトマイシン誘導性架橋の程度と相関する。この薬物の高濃度において、細胞ＲＮＡおよびタンパク質合成もまた抑制される。
【００６０】
ヒトにおいて、マイトマイシンは、静脈内投与後、血清から迅速にクリアランスされる。３０ｍｇのボーラス注射後、血清濃度を５０％、低下させるために必要とされる時間は、１７分間である。３０ｍｇ、２０ｍｇ、または１０ｍｇの静脈内注射後、最大血清中濃度は、それぞれ、２．４ｍｇ／ｍＬ、１．７ｍｇ／ｍＬ、および０．５２ｍｇ／ｍＬであった。クリアランスは、主に肝臓における代謝によってもたらされるが、代謝は、他の組織においても起こる。クリアランスの速度は、最大血清中濃度に反比例し、それは、分解経路の飽和のためと考えられる。
【００６１】
マイトマイシンの用量の約１０％は、尿中に変化せずに排泄される。代謝経路は、比較的低い用量で飽和するため、尿中に排泄された用量のパーセントは、用量の増加と共に増加する。子どもにおいて、静脈内に投与されたマイトマイシンの排泄は同様である。
【００６２】
アクチノマイシンＤ（ダクチノマイシン）（５０−７６−０）；Ｃ６２Ｈ８６Ｎ１２Ｏ１６（１２５５．４３）は、ＤＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼを阻害する抗悪性腫瘍薬である。それは、絨毛癌、胎児性横紋筋肉腫、精巣腫瘍、およびウィルムス腫瘍の処置のための第一選択多剤併用療法薬の構成要素である。全身性処置に応答しない腫瘍は、局所的灌流に応答することがある。ダクチノマイシンは放射線療法を強化する。それは二次性（遠心性）免疫抑制剤である。
【００６３】
アクチノマイシンＤは、一次的手術、放射線療法、ならびに他の薬物、特にビンクリスチンおよびシクロホスファミドと組み合わせて用いられる。抗悪性腫瘍活性はまた、ユーイング腫瘍、カポジ肉腫、および軟部組織肉腫においても確認されている。アクチノマイシンＤは、絨毛癌の進行症例を有する女性において有効であり得る。それはまた、転移性精巣癌を有する患者においてクロラムブシルおよびメトトレキセートと併用して、一貫した応答を生じる。応答は、ホジキン病および非ホジキンリンパ腫を有する患者においても観察される場合がある。アクチノマイシンＤはまた、免疫応答、特に腎移植の拒絶反応を抑制するために用いられている。
【００６４】
用量の半分は、無傷のまま、胆汁へ排泄され、１０％が尿へ排泄され、半減期は約３６時間である。薬物用量は血液脳関門を通過しない。アクチノマイシンＤは、凍結乾燥した粉末として供給される（各バイアル中０／５ｍｇ）。通常の一日量は、１０〜１５ｍｇ／ｋｇであり、これは静脈内に５日間、与えられる。毒性の症状が引き起こされないならば、追加のコースが３〜４週間の間隔で与えられてもよい。１００〜４００ｍｇの連日注射が、子どもに１０〜１４日間、与えられている。他の投与計画において、３〜６ｍｇ／ｋｇ、合計１２５ｍｇ／ｋｇ、および７．５ｍｇ／ｋｇの週１回の維持量が用いられている。薬物を、点滴静注のチューブへ投与することがより安全であるが、皮下反応を避けるためにバイアルから薬物を引き出すのに用いられた針を廃棄するという予防措置を以て、直接的静脈内注射が与えられている。例示的な用量は、１００ｍｇ／ｍ２、１５０ｍｇ／ｍ２、１７５ｍｇ／ｍ２、２００ｍｇ／ｍ２、２２５ｍｇ／ｍ２、２５０ｍｇ／ｍ２、２７５ｍｇ／ｍ２、３００ｍｇ／ｍ２、３５０ｍｇ／ｍ２、４００ｍｇ／ｍ２、４２５ｍｇ／ｍ２、４５０ｍｇ／ｍ２、４７５ｍｇ／ｍ２、５００ｍｇ／ｍ２であり得る。当然ながら、これらの用量の全ては、例示的であり、これらの点の間にある任意の用量もまた、本発明において有用であると予想される。
【００６５】
ブレオマイシンは、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｕｓの株から単離された細胞毒性糖ペプチド抗生物質の混合物である。それは水に溶解しやすい。
【００６６】
ブレオマイシンの正確な作用機構は知られていないが、入手可能な証拠は、主要な作用様式がＤＮＡ合成の阻害であることを示すように思われ、ＲＮＡおよびタンパク質合成の阻害はより低いといういくつかの証拠がある。
【００６７】
マウスにおいて、高濃度のブレオマイシンは、皮膚、肺、腎臓、腹膜、およびリンパ管に見出される。造血組織に見出される低濃度と対照的に、皮膚および肺の腫瘍細胞は高濃度のブレオマイシンを有することが見出されている。骨髄に見出される低濃度のブレオマイシンは、その組織に見出される高レベルのブレオマイシン分解酵素に関連している可能性がある。
【００６８】
１分あたり＞３５ｍＬのクレアチニンクリアランスを有する患者において、ブレオマイシンの血漿中または血清中最終排出半減期は、およそ１１５分間である。１分あたり＜３５ｍＬのクレアチニンクリアランスを有する患者において、血漿中または血清中最終排出半減期は、クレアチニンクリアランスが減少するにつれて、指数関数的に増加する。ヒトにおいて、投与された用量の６０％〜７０％は、活性ブレオマイシンとして尿中で回収される。
【００６９】
ブレオマイシンは、緩和療法とみなされるべきである。それは、単一剤としてか、または他の認可された化学療法剤との実証済みの併用としてかのいずれかで、以下の新生物の管理において有用であることが示されている：頭頸部（口、舌、扁桃腺、上咽頭、中咽頭、洞、口蓋、唇、頬側粘膜、歯肉、喉頭蓋、咽頭を含む）、皮膚、陰茎、頸部、および外陰部などの扁平上皮癌。それはまた、リンパ腫および精巣癌の処置にも用いられている。
【００７０】
アナフィラキシー様反応の可能性のため、リンパ腫患者は、最初の２回の用量について２単位以下で処置されるべきである。急性反応が起こらなければ、標準の投与スケジュールに従ってもよい。
【００７１】
ホジキン病および精巣腫瘍の改善は、迅速であり、２週間以内に観察される。この時までに改善が見られない場合には、改善の可能性は低い。扁平上皮がんはよりゆっくりと応答し、何らかの改善が観察されるまでに３週間も要することがある。
【００７２】
ブレオマイシンは、筋肉内、静脈内、または皮下経路によって与えられてもよい。
【００７３】
シスプラチンは、転移性精巣もしくは卵巣癌、進行性膀胱がん、頭頸部がん、子宮頸がん、肺がん、または他の腫瘍などのがんを処置するために広く用いられている。シスプラチンは、単独で、または他の剤と組み合わせて、用いることができ、１５〜２０ｍｇ／ｍ２、３週間ごとに５日間、合計３回のコースの効果的な用量が、臨床適用に用いられる。例示的な用量は、０．５０ｍｇ／ｍ２、１．０ｍｇ／ｍ２、１．５０ｍｇ／ｍ２、１．７５ｍｇ／ｍ２、２．０ｍｇ／ｍ２、３．０ｍｇ／ｍ２、４．０ｍｇ／ｍ２、５．０ｍｇ／ｍ２、１０ｍｇ／／ｍ２であり得る  当然ながら、これらの用量の全ては、例示的であり、これらの点の間にある任意の用量もまた、本発明において有用であると予想される。
【００７４】
シスプラチンは、経口では吸収されず、それゆえ、静脈内に、皮下に、腫瘍内に、または腹腔内に注射によって送達されなければならない。
【００７５】
本発明の特定の態様において、シスプラチンは、非小細胞肺癌の処置においてエモジンまたはエモジン様化合物と組み合わせて用いられる。しかしながら、シスプラチンおよびエモジンまたはエモジン様化合物の組み合わせは、任意の他のｎｅｕ媒介性がんの処置に用いることができることは明らかである。
【００７６】
エトポシドは、ＶＰ１６としても知られており、主に、ブレオマイシンおよびシスプラチンと組み合わせて精巣腫瘍の処置に、シスプラチンと組み合わせて肺の小細胞癌に用いられる。それはまた、非ホジキンリンパ腫、急性非リンパ球性白血病、乳房の癌腫、および後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）に関連したカポジ肉腫に対しても活性がある。
【００７７】
エトポシドは、静脈内投与について溶液（２０ｍｇ／ｍｌ）として、および経口使用について５０ｍｇの液体入りカプセルとして入手可能である。肺の小細胞癌について、（併用療法における）静脈内用量は、多くも１００ｍｇ／ｍ２、または少なくも２ｍｇ／ｍ２であり得、日常的には３５ｍｇ／ｍ２、毎日４日間〜５０ｍｇ／ｍ２、毎日５日間もまた用いられている。経口で与えられる場合、用量は２倍にされるべきである。このように、小細胞肺癌についての用量は、高くも２００〜２５０ｍｇ／ｍ２であってもよい。（併用療法における）精巣がんについての静脈内用量は、５０〜１００ｍｇ／ｍ２、毎日５日間、または１００ｍｇ／ｍ２、１日おきに３回の投与である。治療のサイクルは、通常、３〜４週間ごとに繰り返される。この薬物は、おそらく製剤中に用いられる溶媒のせいである血圧低下および気管支痙攣を避けるために３０分〜６０分間の注入中、ゆっくり投与されるべきである。
【００７８】
腫瘍壊死因子（ＴＮＦ；カケクチン）は、いくつかの種類のがん細胞を殺害し、サイトカイン産生を活性化し、マクロファージおよび内皮細胞を活性化し、コラーゲンおよびコラゲナーゼの産生を促進し、炎症メディエータであり、また敗血症ショックのメディエータでもあり、異化反応、発熱、および睡眠を促進する糖タンパク質である。いくつかの感染病原体は、ＴＮＦ産生の刺激を通して腫瘍縮小を引き起こす。ＴＮＦは、有効用量において単独で用いられる場合、極めて有毒であり得るため、最適な投与計画は、おそらく、他の薬物と組み合わせてより低い用量でそれを用いるであろう。その免疫抑制作用は、γ−インターフェロンによって強化され、そのため、その組み合わせは危険である可能性がある。ＴＮＦとインターフェロン−αのハイブリッドもまた、抗がん活性を有することが見出されている。
【００７９】
タキソールは、トネリコ、セイヨウイチイ（Ｔａｘｕｓ  ｂｒｅｖｉｆｏｌｉａ）の樹皮から単離された実験的有糸分裂阻害剤である。それは、チューブリンに（ビンカアルカロイドによって用いられる部位とは異なる部位で）結合し、微小管の集合を促進する。タキソールは、最近、臨床的に評価されつつある。それは、悪性黒色腫および卵巣の癌腫に対する活性を有する。最大用量は、１日あたり３０ｍｇ／ｍ２で５日間、または３週間ごとに１回与えられる２１０〜２５０ｍｇ／ｍ２である。当然ながら、これらの用量の全ては、例示的であり、これらの点の間にある任意の用量もまた、本発明において有用であると予想される。図６は、ポリエチレングリコールアダプターを通しての、ペプチドと抗がん剤タキソールを運搬するリポソームとのコンジュゲーションを示す図である。
【００８０】
ビンクリスチンは、有糸分裂をブロックし、分裂中期停止を生じる。この薬物の生物学的活性の大部分が、チューブリンへ特異的に結合する能力、および微小管へと重合するタンパク質の能力をブロックする能力によって説明することができる可能性が高いように思われる。分裂装置の微小管の破壊を通して、細胞分裂は中期で停止する。有糸分裂中、染色体を正しく分離できないことは、おそらく細胞死をもたらす。
【００８１】
正常な骨髄細胞および上皮細胞に対するビンクリスチンの比較的低い毒性ゆえに、この剤は抗悪性腫瘍薬の中で珍しいものと言え、それは、他の骨髄抑制剤と組み合わせて含まれる場合が多い。
【００８２】
ビンブラスチンまたはビンクリスチンの経口投与後の予測不可能な吸収が報告されている。通常の臨床用量において、血漿中の各薬物のピーク濃度は、約０．４ｍＭである。
【００８３】
ビンブラスチンおよびビンクリスチンは、血漿タンパク質に結合する。それらは、血小板中に高度に濃縮され、白血球および赤血球中ではより小さい程度で濃縮される。
【００８４】
ビンクリスチンは、血漿からのクリアランスの多相パターンを有する。最終半減期は約２４時間である。この薬物は、肝臓で代謝されるが、生物学的活性のある誘導体は同定されていない。肝機能不全を有する患者において、用量は低減されるべきである。血漿中のビリルビンの濃度が３ｍｇ／ｄｌ（約５０ｍＭ）より高い場合には、用量の少なくとも５０％の低減が必要である。
【００８５】
硫酸ビンクリスチンは、静脈内注射用溶液（１ｍｇ／ｍｌ）として入手可能である。コルチコステロイドと共に用いられるビンクリスチンは、現在、小児白血病において寛解を導入するための選り抜きの処置である。これらの薬物についての最適な用量は、ビンクリスチン、静脈内、２ｍｇ／体表面積ｍ２、週１回、およびプレドニソロン、経口、４０ｍｇ／ｍ２、毎日であると思われる。ホジキン病または非ホジキンリンパ腫を有する成体患者は、通常、複合体プロトコールの一部としてビンクリスチンを受ける。ＭＯＰＰ投与計画に用いられる場合、ビンクリスチンの推奨用量は、１．４ｍｇ／ｍ２である。高用量のビンクリスチンは、重篤な神経毒性を経験する可能性がある成体によるより、白血病を有する子どもによって、より良く許容されるように思われる。７日間ごとより頻繁な、またはより高い用量でのこの薬物の投与は、応答速度が比例的に向上することなく、毒性症状を増加させるように思われる。ビンクリスチンの静脈内投与中の血管外遊出を避けるための予防措置もまた用いられるべきである。ビンクリスチン（およびビンブラスチン）は、匹敵する毒性があって静脈内に投与することができるものより数倍多い用量で、腫瘍の動脈血供給へ注入することができる。
【００８６】
ビンクリスチンは、ホジキン病および他のリンパ腫において有効となっている。それは、ホジキン病において単独で用いられる場合、ビンブラスチンより若干、有益性が低いように思われるが、メクロレタミン、プレドニソロン、およびプロカルバジンと共に用いられる場合（いわゆるＭＯＰＰ投与計画）、それは、この疾患の進行期（ＩＩＩおよびＩＶ）についての好ましい処置である。非ホジキンリンパ腫において、ビンクリスチンは、特にシクロホスファミド、ブレオマイシン、ドキソルビシン、およびプレドニソロンと共に用いられる場合、重要な剤である。ビンクリスチンは、リンパ球性白血病においてビンブラスチンより有用である。有益な応答は、様々な他の新生物、特に、ウィルムス腫瘍、神経芽細胞腫、脳腫瘍、横紋筋肉腫、ならびに乳房、膀胱、男性生殖器系、および女性生殖器系の癌を有する患者において報告されている。
【００８７】
用いられるビンクリスチンの用量は、個々の患者のニーズに応じて臨床医によって決定される。０．０１〜０．０３ｍｇ／ｋｇもしくは０．４〜１．４ｍｇ／ｍ２を投与することができ、または１．５〜２ｍｇ／ｍ２を投与することができる。あるいは、０．０２ｍｇ／ｍ２、０．０５ｍｇ／ｍ２、０．０６ｍｇ／ｍ２、０．０７ｍｇ／ｍ２、０．０８ｍｇ／ｍ２、０．１ｍｇ／ｍ２、０．１２ｍｇ／ｍ２、０．１４ｍｇ／ｍ２、０．１５ｍｇ／ｍ２、０．２ｍｇ／ｍ２、０．２５ｍｇ／ｍ２を、一定静脈内注入として与えることができる。当然ながら、これらの用量の全ては、例示的であり、これらの点の間にある任意の用量もまた、本発明において有用であると予想される。
【００８８】
細胞がビンブラスチンとインキュベートされる場合、微小管の溶解が起こる。ビンブラスチンまたはビンクリスチンの経口投与後の予測不可能な吸収が報告されている。通常の臨床用量において、血漿中の各薬物のピーク濃度は、約０．４ｍＭである。ビンブラスチンおよびビンクリスチンは、血漿タンパク質に結合する。それらは、血小板中に高度に濃縮され、白血球および赤血球中ではより小さい程度で濃縮される。
【００８９】
静脈内注射後、ビンブラスチンは、血漿からのクリアランスの多相パターンを有する。分布後、薬物は、約１時間および２０時間の半減期を以て、血漿から消失する。
【００９０】
ビンブラスチンは、肝臓において、生物学的活性のある誘導体デアセチルビンブラスチンへと代謝される。投与された用量の約１５％が尿中、無傷のまま検出され、約１０％が、胆汁中排泄後の糞便中で回収される。肝機能不全を有する患者においては、用量は低減されるべきである。血漿中のビリルビンの濃度が３ｍｇ／ｄｌ（約５０ｍＭ）より高い場合には、用量の少なくとも５０％の低減が必要である。
【００９１】
硫酸ビンブラスチンは、注射用調製物において入手可能である。この薬物は静脈内に与えられる。皮下遊出に対する特別の予防措置をとらなければならず、これが、痛みを伴う炎症および潰瘍を引き起こす可能性があるからである。この薬物は、循環障害がある四肢へ注射されるべきではない。０．３ｍｇ／体重ｋｇの単回投与後、骨髄抑制は、７〜１０日間でその最大に達する。中程度の白血球減少（約３０００細胞／ｍｍ３）に達していないならば、週１回の用量を、０．０５ｍｇ／体重ｋｇの増加分ずつ、徐々に増加してもよい。精巣がんを治癒させるために設計された投与計画において、ビンブラスチンは、血液細胞数または毒性にかかわらず、３週間ごとに０．３ｍｇ／ｋｇの用量で用いられる。
【００９２】
ビンブラスチンの最も重要な臨床用途は、ブレオマイシンおよびシスプラチンと併用した、転移性精巣腫瘍の治癒的治療においてである。有意な改善が５０〜９０％の症例において観察され得る、有益な応答は、様々なリンパ腫、特にホジキン病において報告されている。高い割合のリンパ腫におけるビンブラスチンの有効性は、その疾患がアルキル化剤に対して不応性である場合でも、減少することはない。それはまた、カポジ肉腫、神経芽細胞腫、およびレッテラー・シーベ病（組織球症Ｘ）において、加えて、女性における乳房の癌腫および絨毛癌において、活性がある。
【００９３】
用いられるビンブラスチンの用量は、個々の患者のニーズに応じて臨床医によって決定される。０．１〜０．３ｍｇ／ｋｇを投与することができ、または１．５〜２ｍｇ／ｍ２も投与することができる。あるいは、０．１ｍｇ／ｍ２、０．１２ｍｇ／ｍ２、０．１４ｍｇ／ｍ２、０．１５ｍｇ／ｍ２、０．２ｍｇ／ｍ２、０．２５ｍｇ／ｍ２、０．５ｍｇ／ｍ２、１．０ｍｇ／ｍ２、１．２ｍｇ／ｍ２、１．４ｍｇ／ｍ２、１．５ｍｇ／ｍ２、２．０ｍｇ／ｍ２、２．５ｍｇ／ｍ２、５．０ｍｇ／ｍ２、６ｍｇ／ｍ２、８ｍｇ／ｍ２、９ｍｇ／ｍ２、１０ｍｇ／ｍ２、２０ｍｇ／ｍ２を与えることができる。当然ながら、これらの用量の全ては、例示的であり、これらの点の間にある任意の用量もまた、本発明において有用であると予想される。
【００９４】
カルムスチン（無菌カルムスチン）は、特定の腫瘍性疾患の処置に用いられるニトロソ尿素の１つである。それは、１，３ビス（２−クロロエチル）−１−ニトロソ尿素である。それは、２１４．０６の分子量をもつ、凍結乾燥した淡黄色フレークまたは凝結した塊である。それは、アルコールおよび脂質中において高溶解性であり、水には溶解しにくい。カルムスチンは、推奨されているように、再構成後、静脈内注入によって投与される。無菌カルムスチンは、一般的に、凍結乾燥物質の１００ｍｇ単一用量バイアルにおいて入手できる。
【００９５】
カルムスチンがＤＮＡおよびＲＮＡをアルキル化することは一般的に同意されているが、それは、他のアルキル化剤と交差耐性ではない。他のニトロソ尿素と同様に、それはまた、タンパク質におけるアミノ酸のカルバモイル化によって、いくつかの重要な酵素過程を阻害する可能性がある。
【００９６】
カルムスチンは、神経膠芽腫、脳幹神経膠腫、メディロブラディオーマ（ｍｅｄｕｌｌｏｂｌａｄｙｏｍａ）、星細胞腫、上衣腫、および転移性脳腫瘍などの脳腫瘍において、単一剤として、または他の認可された化学療法剤との確立された併用療法において、緩和療法として適応される。それはまた、多発性骨髄腫を処置するためにプレドニソロンと組み合わせて用いられている。カルムスチンは、ホジキン病および非ホジキンリンパ腫の処置において、一次治療で処置されながらも再発する患者において、または一次治療に応答しない患者において、他の認可された薬物と併用した二次治療として、有用であることが証明されている。
【００９７】
以前に処置されていない患者における単一剤としてのカルムスチンの推奨用量は、６週間ごと、静脈内への１５０〜２００ｍｇ／ｍ２である。これは、単一用量として与えられてもよいし、または２日間連続で、７５〜１００ｍｇ／ｍ２などの連日注射へ分割されてもよい。カルムスチンが、他の骨髄抑制薬と組み合わせて、または骨髄予備能が枯渇している患者において、用いられる場合、用量は、それに応じて調整されるべきである。初回量の後の用量は、先行する用量に対する患者の血液学的応答に応じて調整されるべきである。他の用量、例えば、１０ｍｇ／ｍ２、２０ｍｇ／ｍ２、３０ｍｇ／ｍ２、４０ｍｇ／ｍ２、５０ｍｇ／ｍ２、６０ｍｇ／ｍ２、７０ｍｇ／ｍ２、８０ｍｇ／ｍ２、９０ｍｇ／ｍ２、１００ｍｇ／ｍ２が本発明に用いられてもよいことは当然、理解されている。当業者は、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」、第１７版を参照する。用量のいくらかの変動は、処置されることになっている対象の状態に依存して、必然的に起こる。いずれにしろ、投与の責任を担う者は、個々の対象について適切な用量を決定するであろう。
【００９８】
アルケラン、Ｌ−フェニルアラニンマスタード、フェニルアラニンマスタード、Ｌ−ＰＡＭ、またはＬ−サルコリシンとしても知られたメルファラン（ｍｅｌｐｈａｌａｎ）は、ナイトロジェンマスタードのフェニルアラニン誘導体である。メルファラン（ｍｅｌｐｈａｌａｎ）は、選ばれたヒト腫瘍性疾患に対して活性がある二機能性アルキル化剤である。それは、化学的には、４−（ビス（２−クロロエチル）アミノ）−Ｌ−フェニルアラニンとして知られている。
【００９９】
メルファラン（ｍｅｌｐｈａｌａｎ）は、この化合物の活性Ｌ−異性体であり、ＢｅｒｇｅｌおよびＳｔｏｃｋによって１９５３年に初めて合成された。メドファランとして知られたＤ−異性体は、特定の動物腫瘍に対して活性がより低く、染色体へ効果を生じるのに必要とされる用量は、Ｌ−異性体に関して必要とされる用量より多い。ラセミ（ＤＬ−）体は、メルファラン（ｍｅｒｐｈａｌａｎ）またはサルコリシンとして知られている。メルファラン（ｍｅｌｐｈａｌａｎ）は、水に不溶性であり、約２．１のｐＫａを有する。メルファラン（ｍｅｌｐｈａｌａｎ）は、経口投与用の錠剤の形で入手でき、多発性骨髄腫を処置するために用いられている。
【０１００】
入手可能な証拠により、多発性骨髄腫を有する患者の約３分の１〜２分の１が、この薬物の経口投与に対して好ましい応答を示すことが示唆されている。
【０１０１】
メルファラン（ｍｅｌｐｈａｌａｎ）は、卵巣上皮癌の処置に用いられている。卵巣癌の処置のための１つの一般的に利用される投与計画は、単一コースとして、０．２ｍｇ／ｋｇの用量で毎日５日間、メルファラン（ｍｅｌｐｈａｌａｎ）を投与することになっている。コースは、血液学的許容度に応じて、４週間または５週間ごとに繰り返される。あるいは、用いられるメルファラン（ｍｅｌｐｈａｌａｎ）の用量は、低くも０．０５ｍｇ／ｋｇ／日、または高くも３ｍｇ／ｋｇ／日、またはこれらの用量の間にある任意の用量、またはこれらの用量より高くあり得る。用量のいくらかの変動は、処置されることになっている対象の状態に依存して、必然的に起こる。いずれにしろ、投与の責任を担う者は、個々の対象について適切な用量を決定するであろう。
【０１０２】
シクロホスファミドは、２Ｈ−１，３，２−オキサザホスホリン−２−アミン，Ｎ，Ｎ−ビス（２−クロロエチル）テトラヒドロ−，２−オキシド一水和物である。Ｃｙｔｏｘａｎという名前で、Ｍｅａｄ  Ｊｏｈｎｓｏｎから入手可能、およびＮｅｏｓａｒという名前でＡｄｒｉａから入手可能である。シクロホスファミドは、トリエチルアミンの触媒作用下でジオクサン溶液中、３−アミノ−１−プロパノールとＮ，Ｎ−ビス（２−クロロエチル）ホスホロアミジン酸ジクロリド（（ＣｌＣＨ２ＣＨ２）．ｓｕｂ．２Ｎ−−ＰＯＣｌ２）を縮合することによって調製される。縮合は、ヒドロキシル基およびアミノ基の両方を含む２つであり、したがって、環化をもたらす。
【０１０３】
他のβ−クロロエチルアミノアルキル化剤と違って、それは、肝酵素によって活性化されるまで活性エチレンイモニウム型へ容易に環化しない。したがって、その物質は、胃腸管において安定で、耐容性が良く、経口および非経口経路により有効であり、局所的水疱形成、壊死、静脈炎、またはさらに疼痛を引き起こさない。
【０１０４】
成体用の適切な用量には、経口では、胃腸管許容度に応じて１〜５ｍｇ／ｋｇ／日（通常、併用）、または１〜２ｍｇ／ｋｇ／日；静脈内では、最初に、２〜５日間にわたる分割量での４０〜５０ｍｇ／ｋｇ、または７〜１０日間ごとに１０〜１５ｍｇ／ｋｇ、または３〜５ｍｇ／ｋｇ、週２回、または１．５〜３ｍｇ／ｋｇ／日が挙げられる。用量２５０ｍｇ／ｋｇ／日が、抗悪性腫瘍薬として投与される場合がある。胃腸管の有害効果のため、静脈内経路が、負荷について好ましい。維持中、３０００〜４０００／ｍｍ３の白血球数は、通常、望ましい。この薬物はまた、筋肉内に、浸潤により、または体腔へ投与されることがある。それは、１００ｍｇ、２００ｍｇ、および５００ｍｇの注射用剤形で、ならびに２５ｍｇおよび５０ｍｇの錠剤で入手できる。投与のための用量に関する詳細については、当業者は、参照により本明細書に組み入れられている、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」１５版６１章を参照されたい。
【０１０５】
クロラムブシル（別名ロイケラン）は、選ばれたヒト腫瘍性疾患に対して活性があることが見出されているナイトロジェンマスタード型の二機能性アルキル化剤である。クロラムブシルは、化学的には、４−（ビス（２−クロロエチル）アミノ）ベンゼンブタン酸として知られている。
【０１０６】
クロラムブシルは、経口投与用の錠剤の形で入手できる。それは、胃腸管から迅速かつ完全に吸収される。０．６〜１．２ｍｇ／ｋｇの単回経口投与後、血漿中クロラムブシルのピークレベルは１時間以内に達せられ、親薬物の最終半減期は、１．５時間と推定される。０．１〜０．２ｍｇ／ｋｇ／日または３〜６ｍｇ／ｍ２／日、または代替として０．４ｍｇ／ｋｇが、抗悪性腫瘍性処置に用いられ得る。処置計画は、当業者によく知られており、本明細書で参照された「Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ」および「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」に見出すことができる。
【０１０７】
クロラムブシルは、慢性リンパ性（リンパ球性）白血病、リンパ肉腫、巨大濾胞性リンパ腫、およびホジキン病を含む悪性リンパ腫の処置に適応される。それは、これらの障害のいずれにおいても治癒的ではなく、臨床的に有用な緩和を生じ得る。
【０１０８】
ブスルファン（別名ミレラン）は、二機能性アルキル化剤である。ブスルファンは、化学的には、１，４−ブタンジオールジメタンスルホネートとして知られている。
【０１０９】
ブスルファンは、ナイトロジェンマスタードの構造類似体ではない。ブスルファンは、経口投与用の錠剤の形で入手できる。各分割錠は、２ｍｇのブスルファンならびに不活性成分のステアリン酸マグネシウムおよび塩化ナトリウムを含有する。
【０１１０】
ブスルファンは、慢性骨髄性（ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ）（骨髄性（ｍｙｅｌｏｉｄ）、骨髄球性（ｍｙｅｌｏｃｙｔｉｃ）、顆粒球性）白血病の緩和処置に適応される。治癒的ではないが、ブスルファンは、顆粒球の全質量を低減し、疾患の症状を軽減し、患者の臨床状態を改善する。以前に処置されていない慢性骨髄性白血病を有する成体の約９０％が、ブスルファンの使用後、臓器肥大の退行または安定化と共に血液学的寛解を得るであろう。生存期間およびヘモグロビンレベルの維持に関して脾臓照射より優れていること、ならびに脾腫大を制御することにおいて照射法と等価であることが示されている。
【０１１１】
フルオロウラシル（「５ＦＵ」）（商標名Ａｄｒｕｃｉｌ、Ｃａｒａｃ、Ｅｆｕｄｅｘ、およびＦｌｕｏｒｏｐｌｅｘで販売されている）は、がんの処置に用いられるピリミジン類似体である薬物である。その主要な用途の一部は、結腸直腸がんおよび膵がんにおいてである。それはまた、炎症性乳がんの処置に用いられることもある。
【０１１２】
ロムスチンは、特定の腫瘍性疾患の処置に用いられるニトロソ尿素の１つである。それは、１−（２−クロロエチル）−３−シクロヘキシル−１−ニトロソ尿素である。それは、Ｃ９Ｈ１６ＣｌＮ３Ｏ２の実験式および２３３．７１の分子量をもつ黄色の粉末である。ロムスチンは、１０％エタノール中（１ｍＬあたり０．０５ｍｇ）および無水アルコール中（１ｍＬあたり７０ｍｇ）に可溶性である。ロムスチンは、水に比較的溶けにくい（１ｍＬあたり＜０．０５ｍｇ）。それは、生理的ｐＨにおいて比較的イオン化していない。ロムスチンカプセル中の不活性成分はステアリン酸マグネシウムおよびマンニトールである。
【０１１３】
ロムスチンはＤＮＡおよびＲＮＡをアルキル化することは一般的に同意されているが、それは他のアルキル化剤と交差耐性ではない。他のニトロソ尿素と同様に、それはまた、タンパク質におけるアミノ酸のカルバモイル化によって、いくつかの重要な酵素過程を阻害する可能性がある。
【０１１４】
ロムスチンは経口で与えられてもよい。３０ｍｇ／ｍ２から１００ｍｇ／ｍ２までの範囲の用量での放射性ロムスチンの経口投与後、与えられた放射活性の約半分が、２４時間以内に、分解産物の形で排泄された。
【０１１５】
代謝産物の血清中半減期は、１６時間から２日間までの範囲である。組織内レベルは、静脈内投与から１５分後において血漿中レベルに匹敵する。
【０１１６】
ロムスチンは、原発性および転移性脳腫瘍の両方について、適切な外科手術および／または放射線治療方法をすでに受けている患者において、他の処置様式に加えて単一剤として、または他の認可された化学療法剤との確立された併用療法において、有用であることが示されている。それはまた、一次治療で処置されながらも再発する患者において、または一次治療に応答しない患者において、他の認可された薬物と併用したホジキン病に対する二次治療において、有効であることが証明されている。
【０１１７】
以前に処置されていない患者における単一剤としての成体および子どもにおけるロムスチンの推奨用量は、６週間ごとの単一経口用量として１３０ｍｇ／ｍ２である。骨髄機能が損なわれた個体において、用量は、６週間ごとの１００ｍｇ／ｍ２に低減されるべきである。ロムスチンが、他の骨髄抑制薬と組み合わせて用いられる場合、用量は、それに応じて調整されるべきである。処置されることになっている個体に必要であると臨床医によって決定された場合、他の用量、例えば、２０ｍｇ／ｍ２、３０ｍｇ／ｍ２、４０ｍｇ／ｍ２、５０ｍｇ／ｍ２、６０ｍｇ／ｍ２、７０ｍｇ／ｍ２、８０ｍｇ／ｍ２、９０ｍｇ／ｍ２、１００ｍｇ／ｍ２、１２０ｍｇ／ｍ２、またはこれらの数値の間の任意の用量が用いられ得ることは理解されている。
【０１１８】
がんの成長の除去のための外科的処置は、腫瘍およびがんの処置についてのもう一つの標準方法である。これは、がんの成長全体を除去することを試みる。しかしながら、手術は、一般的に、いかなる残存する新生物細胞または悪性細胞の破壊も確実にするために化学療法および／または放射線療法と併用される。このように、手術は、腫瘍を処置するために、放射線療法および化学療法を用いることに加えて、用いられ得る。
【０１１９】
ＤＮＡ損傷の誘導は、がん細胞を殺害するための放射線療法および化学療法の両方についての主要な作用様式であり、それはまた、ｐ５３を強く活性化する。多数の証拠により、ＤＮＡ損傷性抗がん治療に誘導される急性毒性は、主に、ｐ５３によって媒介され、ｐ５３は、活性化されると、腸上皮、脾臓、骨髄、甲状腺、舌、精巣、および毛包を含む感受性組織において大量のアポトーシス性細胞死を誘導し、重篤な病理学的帰結をもたらすことが示されている。これらの観察と一致して、欠陥ｐ５３をもつ細胞は、ＤＮＡ損傷誘導性アポトーシスに抵抗性であるという所見がある。さらに、遺伝的研究により、ｐ５３欠損マウスは、放射線および化学療法によって誘導される毒性に対して不応性であることが示されている。化学療法および放射線療法に対するｐ５３媒介性病理学的応答は、ｐ５３の抑制が、有害な副作用の寛解のための可能性のあるアプローチとなり、患者がはるかにより攻撃的な（かつそれゆえに、潜在的に、より成功する）処置計画を許容することを可能にし得ることを示唆している。しかしながら、ｐ５３は、最も重要な腫瘍抑制因子の１つであり、それゆえに、それの阻害に起因する潜在的がんリスクには、対処する必要がある。
【０１２０】
ｐ５３腫瘍抑制因子は、産物が細胞周期停止、ＤＮＡ修復、老化、またはアポトーシスを媒介するいくつかの遺伝子の発現を調節する転写因子である。発がんの防止におけるｐ５３の重要な役割は、ｐ５３遺伝子座に直接、影響を及ぼす突然変異を通してか、またはその正常な制御の異常を通してかのいずれかによるがん細胞におけるそれの普遍的な不活性化によって裏付けられる。ＤＮＡ損傷応答経路および発がん性ストレス経路はｐ５３に集まって来るため、両方の経路は、ｐ５３の腫瘍抑制機能に不可欠であると考えられている。しかしながら、最近の遺伝的研究は、ＤＮＡ損傷経路よりむしろ発がん性ストレス経路が、ｐ５３媒介性腫瘍抑制に必須であることを示す有力な証拠を提供している。ｐ５３状態が、機能状態と不活性状態の間をｉｎ  ｖｉｖｏで可逆的に切り換えることができる、遺伝子操作されたマウスモデルを用いて、ｐ５３媒介性ＤＮＡ損傷応答は、腫瘍抑制に無関係であるが、病理学的帰結の原因であることが示されている。興味深いことは、急性ＤＮＡ損傷応答が鎮まるまでのｐ５３回復の遅延が、がん発生に対する保護を保持し、そのような保護がｐ１９ＡＲＦに依存するという所見である。内因性ｐ５３が、ＤＮＡ損傷活性化プロテインキナーゼ（ＡＴＭ、ＡＴＲ、またはＣｈｋ２）によってリン酸化することができない突然変異体によって置換された、マウス遺伝的研究は、急性ＤＮＡ損傷応答が、ｐ５３媒介性腫瘍抑制にとって必要ではない可能性があるという意見と一致している。ノックインマウスは、ＤＮＡ損傷誘導性アポトーシスの能力がなかったが、それにもかかわらず、がん発生から完全に保護されていた。これらの研究を合わせると、ｐ５３活性の一時的な抑制は、腫瘍抑制機能を損なうことなくＤＮＡ損傷誘導性細胞毒性を有意に低下させ得ることが示されており、がん治療保護のアプローチとして一時的なｐ５３阻害を探求するための論理的根拠が提供されている。
【０１２１】
ヒ素は、Ｒａｓ−ＧＴＰアーゼ依存性機構を通してＮＡＤＰＨオキシダーゼ活性を活性化して、活性酸素の細胞内群発を生じることにより酸化ストレスを誘導する、天然に存在する半金属である。ヒト、実験動物、および培養細胞のヒ素への曝露は、様々な多様効果と関連している。ヒ素は、確定のヒト発がん物質であるが、特に低用量における、ヒ素応答曲線の形について多くの議論がある。この議論は、ヒ素曝露を通して動物モデルにおいてがんを誘発することに一貫した成功がないため、ヒ素発がんの機構ははっきりしないままであるという事実によってさらに複雑化している。低用量データを含む疫学調査もまた、約６０ｐｐｂ（０．８μＭ）未満の濃度での飲料水中のヒ素への曝露が、対照値より低い膀胱がんまたは肺がんのリスクと関連していることを示している。しかしながら、毒性レベルで吸収された場合、ヒ素は、がんを含む重篤な健康問題を引き起こす。例えば、バングラデシュの多くの地域において、飲料水中の高濃度のヒ素は、それが、がん率の増加と相関しているため、特別な健康上の懸念となっている。しかし、ヒ素はまた、より低い用量において健康に有益な効果を生じるともてはやされてきた。例えば、１８世紀から２０世紀初期にかけて、Ｆｏｗｌｅｒ’ｓ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（１％亜ヒ酸カリウム）として知られた無機ヒ素調製物が、皮膚がん、高血圧、および関節炎を含む様々な疾患の処置に用いられた。ヒ素は、女性によって顔貌を向上させるために皮膚に塗られさえした。ヒ素に対する応答の濃度関連階層は、十分実証されている。例えば、ヒト成人包皮ケラチノサイトにおいて、５μＭ以下の濃度での２４時間のヒ素処置は、細胞増殖および細胞生存を促進することが知られている転写因子である、核内因子−κＢ（ＮＦ−κＢ）およびアクチベータータンパク質１（ＡＰ−１）活性の増強を伴う増殖の誘導が生じた。１０μＭ以上の濃度において、細胞生存率の統計学的に有意な減少が観察された。低濃度のヒ素および高濃度のヒ素によって誘導される細胞効果の異なる性質の裏付けとして、ゲノム分析は、低用量（５μＭ、非細胞毒性）および高用量（５０μＭ、細胞毒性）が、遺伝子のほとんど完全に重複していないサブセットの発現に影響することを示し、低用量における生存促進性生物学的応答から高用量における死促進性応答への定性的切り換えと一致している。合わせて考えると、入手可能な情報は、ヒ素の二相性用量応答を示している。低用量ヒ素によって誘導される効果は、高用量ヒ素の効果と大きさにおいて異なるだけではなく、性質においても異なる、すなわち、細胞保護性対細胞毒性である。
【０１２２】
以下の実施例は、本発明の好ましい実施形態を示すために含まれる。以下にある実施例に開示された技術は、本発明の実施において十分機能するように、本発明者らによって発見された技術を代表しており、したがって、その実施のための好ましい様式を構成すると考えることができることは当業者によって理解されているはずである。しかしながら、当業者は、本開示を鑑みれば、開示されている特定の実施形態に多くの変化を加えることができ、かつ本発明の精神および範囲から逸脱することなく、同様の、または類似した結果をなお得ることができることを理解するはずである。
【実施例】
【０１２３】
［低用量のヒ素は、ｐ５３活性を、その細胞質内分布を誘導することにより抑制する］
低用量（１〜１０μＭ、１２時間）における亜ヒ酸ナトリウムでの細胞の短期間処置は、Ｈｄｍ２の上方制御およびｐ５３の細胞質内の蓄積に関連している。ＭＡＰＫ経路を通して、低レベルの亜ヒ酸塩は、Ｈｄｍ２のＰ２プロモーター媒介性発現を刺激し、その後、Ｈｄｍ２は、Ｐ５３ユビキチン化および続いて核外移行を促進する。結果として、ＵＶ照射または５ＦＵ処置に応答してのｐ５３活性化およびアポトーシスが機能しないことによって証明されているように、遺伝毒性ストレスに対するｐ５３応答は損なわれる。ｐ５３活性化を妨害する亜ヒ酸塩の能力は、マウスが亜ヒ酸塩含有水を与えられた場合、５ＦＵ処置によって誘発されるｐ５３依存性組織損傷の有意な鈍化によって、さらに実証される。
【０１２４】
［担がんマウスの低用量のヒ素での前処置は、化学療法および照射誘導性殺害から正常組織を保護するが、がん細胞を保護しない］
実験において、肺癌細胞株Ａ５４９を、ヒ素の効果を評価するためのマウス異種移植モデルを作製するために用いた。胸腺欠損ヌードマウス（Ｂａｌｂ  ｃ  ｎｕ／ｎｕ、４〜６週齢）をＨａｒｌａｎ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから購入した。マウスを無菌条件下で飼育し、１２時間の明／１２時間の暗のサイクルで維持し、食物および水を随意に供給した。１００μｌの最終体積中マウスあたり３百万個の細胞としてのヒト肺癌細胞Ａ５４９（マトリゲル中５０％懸濁液としての細胞）を、Ｂａｌｂ  ｃヌードマウスの右側腹部に皮下注射した。平均腫瘍容積が約１００ｍｍ３に達したとき、マウスを以下の群へランダム化した。対照；亜ヒ酸塩のみ；５ＦＵのみ；亜ヒ酸塩および５ＦＵ；Ｘ線照射のみ；亜ヒ酸塩およびＸ線照射。ヒ素前処置について、マウスに、亜ヒ酸ナトリウムを（１．０ｍｇ／Ｌとして）含有する水を３日間、与えた。その後、マウスを、静脈内への５ＦＵ（３０ｍｇ／体重ｋｇ）か、または２Ｇｙ全身照射（「ＴＢＩ」）かのいずれかを毎日１週間、与えた。腫瘍容積を定期的に測定した。腫瘍容積を、方程式：（容積＝長さ×幅×深さ×０．５２３６ｍｍ３）を用いて計算した。体重もまた、実験期間中、モニターした。数値は、群あたり合計１０匹のマウスを用いた２つの独立した実験からの平均値±ＳＥである。
【０１２５】
媒体群または対照群において、腫瘍容積は、時間と共に増加し続けた（図１および２参照）。ヒ素処置は、移植腫瘍の成長にいかなる検出可能な効果も生じず、そのような短期間のヒ素処置は腫瘍進行の促進も阻害も引き起こさないことを示した。予想された通り、静脈内処置による５ＦＵ（３０ｍｇ／体重ｋｇ）か、または全身照射（ＴＢＩ）としての２Ｇｙでの照射のいずれかでの毎日１週間の処置は、著しい腫瘍退縮を生じた。意義深いことには、５ＦＵ誘導性腫瘍退縮または照射誘導性腫瘍退縮が、ヒ素で、またはヒ素なしで前処置された２つの群の間で区別できないという観察によって証明されているように、ヒ素前処置は、５ＦＵ誘導性腫瘍抑制および照射誘導性腫瘍抑制のどちらにもほとんど効果を示さなかった（図１および２）。したがって、本発明者らのデータは、低用量のヒ素前処置が、少なくともヒト肺癌異種移植マウスモデルにおいて、５ＦＵおよび放射線の効力に検出可能には影響しないことを示している。
【０１２６】
低用量ヒ素が、これらの担がんマウスにおいて５ＦＵまたは照射によって引き起こされる損傷から正常組織を保護することができるかどうかを試験するために、本発明者らは、実験期間中、体重変化をモニターした。実験において記載されているように処置されたマウスの体重を、実験期間中、モニターした。
【０１２７】
図１および２に示されているように、対照マウスの体重は、７週間目まで横ばい状態にならず、その後、わずかに増加した。興味深いことに、ヒ素処置マウスは、体重の減少をほとんど示さなかった。顕著な対比として、５ＦＵまたは照射のどちらで処置されたマウスも、体重が有意に減少した。これはおそらく、それらの動物における腫瘍成長がほとんど完全に抑制されていたため、処置の毒性によって引き起こされている（図１および２参照）。意義深いことには、そのような治療誘導性体重減少は、ヒ素含有水を与えられたマウスの体重の最小限の減少によって実証されているように、ヒ素前処置によって効果的に防止された。
【０１２８】
ヒ素の効果を組織レベルで評価するために、本発明者らは、化学療法および放射線処置に対して最も感受性が高い２つの組織、小腸細胞および骨髄細胞を調べた。動物全体のレベルでの観察と一致して、５ＦＵおよび放射線処置は、小腸細胞および骨髄細胞への激しい損傷を伴い、そのような損傷は、低用量ヒ素前処置によって有意に阻害された。まとめると、結果は、低用量ヒ素での短期間処置が、５ＦＵおよび照射の癌細胞を殺害する能力を損なうことなく、正常組織の顕著な保護を伴うことを示している。
【０１２９】
［最大保護を提供するためのヒ素前処置の継続期間］
次に、本発明者らは、最大保護を提供することができるヒ素前処置の継続期間を決定した。本発明者らは、担がんマウスを、飲料水中１．０ｍｇ／Ｌのヒ素で１日間、２日間、３日間、４日間、５日間、６日間、または７日間、前処置した。動物を、再び、５ＦＵ（３０ｍｇ／体重ｋｇ）で、毎日１週間、処置し、体重変化をモニターした。結果は、１日間および２日間のヒ素前処置が、３日間前処置より弱い保護を生じたが、３日間より長い前処置からの利益のさらなる増加はなかったことを示している。合わせて考えると、本発明者らのデータは、３日間のヒ素前処置が最適な保護として十分であるように思われることを示している。
【０１３０】
［ヒ素媒介性ｐ５３阻害は、一時的かつ可逆的である］
ヒ素に関連した潜在的がんリスクを認識して、本発明者らは、低用量ヒ素媒介性ｐ５３阻害が可逆的であるかどうかを調べた。５μＭ亜ヒ酸ナトリウムを含有する培地中で３日間培養した後、非形質転換型ヒト乳房上皮細胞株である、ＭＣＦ１０Ａ細胞を、ヒ素を含まない培地中で、１日間、３日間、５日間、７日間、９日間、または１１日間、回復させ、照射に対するｐ５３応答を評価した。放射線誘導性ｐ５３活性化は、ｐ５３タンパク質存在量およびｐ２１発現の誘導によって反映され、細胞がヒ素を含まない培地中で５日間、培養されてやっと検出でき、ヒ素除去から７日後、ほとんど完全に回復した。ウェスタン結果と一致して、免疫染色により、ヒ素を含まない培地中で５日間、培養された細胞において、ｐ５３の核再分布が明らかにされた。合わせて考えると、培養細胞に関する結果は、ヒ素媒介性ｐ５３阻害は、一時的であり、いったんヒ素処置が中止されたならば、完全に逆戻りし得ることを示している。
【０１３１】
次に、本発明者らは、マウスを用いて、ｐ５３活性のヒ素媒介性調節をｉｎ  ｖｉｖｏで調べた。この目的を達成するために、本発明者らは、末梢血リンパ球を用いて、照射に対するｐ５３応答をモニターした。マウスに、ヒ素を含有する水を３日間、与えた。ヒ素除去から１日後、３日後、５日後、７日後、９日後、または１１日後、全血を動物から収集した。Ｆｉｃｏｌｌ方法を用いることにより、リンパ球を単離した。細胞を２４時間、培養し、その後、２Ｇｙの線量で照射し、処置から３時間後、採取した。ウェスタン分析を実施した。細胞に基づいた研究からの結果と一致して、ヒ素を除去した後、放射線によるｐ５３活性化は、わずかにより遅い反応速度ではあるが、回復した。放射線誘導性ｐ５３蓄積およびｐ２１発現は、照射後０日目および１日目において抑制され、７日目に部分的に回復し、９日目に、未処置レベルまで完全に戻った。まとめると、本発明者らのデータは、低用量ヒ素誘導性ｐ５３抑制が一時的かつ可逆的であることを示している。
【０１３２】
［ヒト乳房ＭＤＡ  ＭＢ−３２１異種移植雌マウス］
胸腺欠損ヌードマウス（Ｂａｌｂ  ｃ  ｎｕ／ｎｕ、４〜６週齢）をＨａｒｌａｎ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから購入した。マウスを無菌条件下で飼育し、１２時間の明／１２時間の暗のサイクルで維持し、食物および水を随意に供給した。１００ｍｌの最終体積中マウスあたり３百万個の細胞としてのヒト乳癌細胞ＭＤＡ−ＭＢ−２３１（マトリゲル中５０％懸濁液としての細胞）を、Ｂａｌｂ  ｃヌードマウスの右側腹部に皮下注射した。平均腫瘍容積が約１００ｍｍ３に達したとき、マウスを以下の群へランダム化した。対照；５ＦＵのみ；亜ヒ酸塩および５ＦＵ。ヒ素前処置について、マウスに、亜ヒ酸ナトリウムを（１．０ｍｇ／Ｌとして）含有する水を３日間、与え、または腹腔内（「ＩＰ」）処置を施した（１０μｇ／日、３日間）。その後、マウスを、静脈内への５ＦＵ（３０ｍｇ／体重ｋｇ）で、毎日１週間、処置した。腫瘍容積を定期的に測定した。腫瘍容積を、方程式：（容積＝長さ×幅×深さ×０．５２３６ｍｍ３）を用いて計算した。体重を、実験期間中、モニターした。数値は、群あたり合計１０匹のマウスを用いた２つの独立した実験からの平均値±ＳＥである。この実験からの結果を図３に提示している。
【０１３３】
予想された通り、媒体群または対照群における腫瘍容積は、時間と共に増加し続けた（図３）。５ＦＵ（３０ｍｇ／体重ｋｇ、静脈内）での毎日１週間の処置は、著しい腫瘍退縮を生じた。５ＦＵ誘導性腫瘍退縮が、亜ヒ酸ナトリウムで、または亜ヒ酸ナトリウムなしで前処置された２つの群の間で区別できないという観察によって証明されているように、ヒ素前処置は、５ＦＵ誘導性腫瘍抑制にほとんど効果を示さなかった（図３）。低用量ヒ素が、これらの担がんマウスにおいて５ＦＵによって引き起こされる損傷から正常組織を保護することができるかどうかを試験するために、本発明者らは、実験期間中、体重変化をモニターした。体重の減少をほとんど示さなかった対照マウスとは顕著な対比を示して、５ＦＵで処置されたマウスは、体重の有意な減少を示した。三酸化ヒ素で前処置されたマウスの体重における最小限の減少によって実証されているように、５ＦＵ誘導性体重減少は、ヒ素前処置によってほとんど完全に防止された。
【０１３４】
［ヒト結腸癌異種移植（５ＦＵ）］
胸腺欠損ヌードマウス（Ｂａｌｂ  ｃ  ｎｕ／ｎｕ、４〜６週齢）をＨａｒｌａｎ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから購入した。マウスを無菌条件下で飼育し、１２時間の明／１２時間の暗のサイクルで維持し、食物および水を随意に供給した。１００ｍｌの最終体積中マウスあたり３百万個の細胞としてのヒト結腸癌細胞ＳＷ−４８０（マトリゲル中５０％懸濁液としての細胞）を、Ｂａｌｂ  ｃヌードマウスの右側腹部に皮下注射した。平均腫瘍容積が約１００ｍｍ３に達したとき、マウスを以下の群へランダム化した。対照；亜ヒ酸塩のみ、５ＦＵのみ；亜ヒ酸塩および５ＦＵ。ヒ素前処置について、マウスに、亜ヒ酸ナトリウムを（１．０ｍｇ／Ｌとして）含有する水を３日間、与えた。その後、マウスを、静脈内への５ＦＵ（３０ｍｇ／体重ｋｇ）で毎日１週間、処置した。腫瘍容積を定期的に測定した。腫瘍容積を、方程式：（容積＝長さ×幅×深さ×０．５２３６ｍｍ３）を用いて計算した。体重を、実験期間中、モニターした。数値は、群あたり合計１０匹のマウスを用いた２つの独立した実験からの平均値±ＳＥである。この実験からの結果を図４に提示している。
【０１３５】
予想された通り、媒体群または対照群における腫瘍容積は、時間と共に増加し続けた（図４）。ヒ素処置は、移植腫瘍の成長にいかなる検出可能な効果も生じず、そのような低用量ヒ素での短期間処置は腫瘍進行の促進も阻害も引き起こさないことを示した。５ＦＵ（３０ｍｇ／体重ｋｇ、静脈内）での毎日１週間の処置は、著しい腫瘍退縮を生じた。５ＦＵ誘導性腫瘍退縮が、亜ヒ酸ナトリウムで、または亜ヒ酸ナトリウムなしで前処置された２つの群の間で区別できないという観察によって証明されているように、ヒ素前処置は、５ＦＵ誘導性腫瘍抑制にほとんど効果を示さなかった。５ＦＵおよびヒ素の処置に対する応答において、雄マウスと雌マウスの間でほとんど差はなかった。したがって、本発明者らのデータは、短期間の低用量のヒ素前処置が、少なくともヒト結腸癌異種移植マウスモデルにおいて、５ＦＵの効力に検出可能には影響しないことを示している。
【０１３６】
低用量ヒ素が、これらの担がんマウスにおいて５ＦＵによって引き起こされる損傷から正常組織を保護することができるかどうかを調べるために、本発明者らは、実験期間中、体重変化をモニターした。体重の減少をほとんど示さなかった対照マウスおよびヒ素処置マウスとは顕著な対比を示して、５ＦＵで処置されたマウスは、体重の有意な減少を示した。これはおそらく、それらの動物における腫瘍がほとんど完全に退縮したため、処置の毒性によって引き起こされている。意義深いことには、５ＦＵ誘導性体重減少は、ヒ素含有水を与えられた雄マウスおよび雌マウスの両方の体重の最小限の減少によって実証されているように、ヒ素前処置によってほとんど完全に防止された。
【０１３７】
体重測定の結果を確証するために、本発明者らは、化学療法剤誘導性損傷に対して最も感受性が高い２つの組織、小腸細胞および骨髄細胞を調べることにより、組織レベルでヒ素の効果を評価した。動物全体での観察と一致して、５ＦＵ処置は、小腸腺窩のサイズと形態の両方における著しい変化によって証明されているように、小腸細胞への激しい損傷を伴った。そのような損傷は、低用量ヒ素前処置によって有意に寛解した。ヒ素の保護効果はまた、骨髄においても明らかである。骨髄細胞消耗は、５ＦＵ処置マウスにおいて明らかに観察されたが、この骨髄細胞性の減少は、ヒ素前処置されたマウスにおいて大幅に軽減された。まとめると、結果は、低用量ヒ素での短期間処置が、５ＦＵの癌細胞を殺害する能力を損なうことなく、正常組織の顕著な保護を伴うことを示している。
【０１３８】
［Ｃ５７ＢＬ／６  ＷＴマウスおよびＲ１７２Ｐノックインマウス］
本発明者らの前の研究により、アポトーシスの低用量ヒ素媒介性抑制の根底にある機構は、ｐ５３の阻害であることが示された。突然変異体ｐ５３発現型マウスモデルを用いて、ヒ素の観察された保護効果がｐ５３不活性化によって媒介されたのかどうかを試験した。４〜６週齢の黒色Ｃ５７ＢＬ／６  ＷＴマウスまたはｐ５３  Ｒ１７２ＰノックインマウスをＬａｚｏｎａ博士から入手した。マウスを無菌条件下で飼育し、１２時間の明／１２時間の暗のサイクルで維持し、食物および水を随意に供給し、マウスを以下の群へランダム化した。対照；Ｘ線照射のみ；亜ヒ酸塩およびＸ線照射。ヒ素前処置について、マウスに、三酸化ヒ素を（１．０ｍｇ／Ｌとして）含有する水を３日間、与えた。その後、マウスに、２Ｇｙ  ＴＢＩを毎日１週間、照射した。体重を、実験期間中、モニターした。数値は、群あたり合計１０匹のマウス用いた２つの独立した実験からの平均値±ＳＥである。この実験からの結果は、図５に提示されている。野生型同腹仔とは対照的に、ヒ素は、ｐ５３突然変異体マウスにおいて５ＦＵ誘導性毒性に対する保護をほとんど与えず、ヒ素が、ｐ５３の抑制を介して健康な正常組織に選択的な保護効果を発揮するモデルを裏付けた。
【０１３９】
［亜ヒ酸ナトリウム前処置の用量依存の研究］
群あたり６匹の雄マウスおよび６匹の雌マウスに関する亜ヒ酸ナトリウムの１２個の異なる用量を試験した。３５００μｇ／体重ｋｇを超える亜ヒ酸ナトリウム用量は、それだけで、非常に明らかな毒性を示した。結果として、本発明者らは、１５μｇ／ｋｇから３５００μｇ／ｋｇまでの７個の用量群を試験した。３日間、ヒ素で、またはヒ素なしでのいずれかで前処置されたマウスに、２Ｇｙの線量での全身照射を与えた。照射から４８時間後、動物を捕獲し、血液試料および組織を収集した。本発明者らは、毒性を評価するためのマーカーとして、ＷＢＣ（リンパ球、マクロファージ、および血小板を含む）数、ＧＩ管におけるｐ５３活性、およびＧＩ形態を用いた。これらの３つのパラメータに基づいて、合わせて考えると、保護的ヒ素用量範囲が決定され、それは、１５μｇ／体重ｋｇから１０００μｇ／体重ｋｇまでである。結果は図６に提示されている。
【０１４０】
［ヒ素での前処置後の細胞の組織学的研究］
亜ヒ酸ナトリウムで前処置されたマウスを、放射線療法（２Ｇｙまたは６Ｇｙ）または化学療法（シスプラチンまたは５−ＦＵ）に供し、様々な細胞への損傷を評価した。表１は、ヒ酸塩前処置あり、またはなしでの、化学療法または放射線療法後の腎細胞の状態を示す。
【表１】
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【０１４１】
表２は、ヒ酸塩前処置あり、またはなしでの、化学療法または放射線療法後の骨髄細胞の状態を示す。
【表２】
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【０１４２】
表３は、ヒ酸塩前処置あり、またはなしでの、化学療法または放射線療法後の脾臓細胞の状態を示す。
【表３】
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【０１４３】
表４は、ヒ酸塩前処置あり、またはなしでの、化学療法または放射線療法後の小腸細胞の状態を示す。
【表４】
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【０１４４】
表５は、ヒ酸塩前処置あり、またはなしでの、化学療法または放射線療法後の様々な組織の状態を示す。
【表５】
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【０１４５】
［動物研究からの用量変換］
マウスにおける研究から収集されたデータは、ヒトに用いられる適切な投薬範囲を決定するために用いられ得る。一実施形態において、マウス研究に基づいたヒトについての用量範囲は、以下の方程式（１）を用いて決定され得る。
ヒト等価用量（ｍｇ／ｋｇ）＝マウス用量（ｍｇ／ｋｇ）＊０．０８１
他の動物が用いられる場合には、用量範囲は、参照により本明細書に組み入れられている、Ｒｅａｇａｎ−Ｓｈａｗら、「Ｄｏｓｅ  ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ  ｆｒｏｍ  ａｎｉｍａｌ  ｔｏ  ｈｕｍａｎ  ｓｔｕｄｉｅｓ  ｒｅｖｉｓｉｔｅｄ」Ｔｈｅ  ＦＡＳＥＢ  Ｊｏｕｒｎａｌ、２２巻、２００７年、６５９〜６６１ページに教示されているように、類似した方程式に基づいて調整され得る。
【０１４６】
［ヒ素用量制限毒性研究］
三酸化ヒ素は、無菌注射用溶液中で入手できる。固体状態における分子式はＡｓ２Ｏ３である。その分子量は１９７．８グラムである。その作用機構は完全には理解されていないが、多くの種々のがん細胞株において成長を阻害し、アポトーシスを促進することが考えられる。急性前骨髄球性白血病を有する患者について５００ｍｌ  ５％グルコース生理食塩水中の、静脈内に２〜３時間かけて送達される、現在用いられている１０ｍｇ（０．１５ｍｇ／ｋｇのＦＤＡ認可用量と一致）の一日量において、血漿中ヒ素は、ｔ１／２α  ０．８９±０．２９時間およびｔ１／２β  １２．１３±３．３１時間で、迅速に平均ピークレベル６．８５μモル／Ｌ（範囲、５．５４〜７．３０μモル／Ｌ）に達した。ヒ素の連続投与はヒ素の血漿中濃度の変化を生じなかったこともまた示されている。三酸化ヒ素の代謝は、ヒ酸還元酵素による５価ヒ素から３価ヒ素への還元、ならびにメチルトランスフェラーゼによる、３価ヒ素からモノメチルアルソン酸へ、およびモノメチルアルソン酸からジメチルアルシン酸へのメチル化を含む。メチル化反応の主要な場所は肝臓であると思われる。ヒ素は、肝臓、腎臓、心臓、肺、および爪に貯蔵される。通常の排泄様式は、尿中である。現在、血液腫瘍および固形腫瘍における三酸化ヒ素の多数のＮＣＩ支援の臨床試験がある。三酸化ヒ素は、公知のヒト発がん物質であるが、非常に低いレベルでのヒトへのその効果は、議論の余地があり、いくつかのデータは、特定のがんに対するヒ素の保護効果を支持している。
【０１４７】
三酸化ヒ素の血液学的毒性評価について、ヒ素投与なしとありとの交互化学療法サイクルの比較が用いられ、血液学的評価項目への効果の測定は、反復測定設計を用いて研究される。用量の段階的増大から決定される三酸化ヒ素の用量は、臨床毒性評価のための各患者についての一定用量として用いられる。評価項目には、化学療法の交互サイクルを比較する、時間経過における血液学的パラメータ（白血球数、血小板数、およびヘマトクリット）の変化が挙げられる。毒性評価は、三酸化ヒ素の投与された用量においてｉｎ  ｖｉｔｒｏでのｐ５３活性化がブロックされている患者についてのみ実施される。これらの患者について、三酸化ヒ素は、化学療法のサイクル１、３、および５については投与されない。三酸化ヒ素は、サイクル２、４、および６について、投与される。各患者は、化学療法の偶数サイクル前に、同じ用量の三酸化ヒ素を受ける。
【表６】
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【０１４８】
［概要］
ＤＮＡ損傷の誘導は、がん細胞を殺害するための放射線療法および化学療法の両方についての主要な作用様式であり、それはまた、ｐ５３を強く活性化する。多数の証拠により、ＤＮＡ損傷性抗がん治療に誘導される急性毒性は、主に、ｐ５３によって媒介され、ｐ５３は、活性化されると、腸上皮、脾臓、骨髄、甲状腺、舌、精巣、および毛包を含む感受性組織において大量のアポトーシス性細胞死を誘導し、重篤な病理学的帰結をもたらすことが示されている。これらの観察と一致して、欠陥ｐ５３をもつ細胞は、ＤＮＡ損傷誘導性アポトーシスに抵抗性であるという所見がある。さらに、遺伝的研究により、ｐ５３欠損マウスは、放射線および化学療法によって誘導される毒性に対して不応性であることが示されている。化学療法および放射線療法に対するｐ５３媒介性病理学的応答は、ｐ５３の抑制が、有害な副作用の寛解のための可能性のあるアプローチとなり、患者がはるかにより攻撃的な（かつそれゆえに、潜在的に、より成功する）処置計画を許容することを可能にし得ることを示唆している。しかしながら、ｐ５３は、最も重要な腫瘍抑制因子の１つであり、それゆえに、それの阻害に起因する潜在的がんリスクには、対処する必要がある。
【０１４９】
ｐ５３腫瘍抑制因子は、産物が細胞周期停止、ＤＮＡ修復、老化、またはアポトーシスを媒介するいくつかの遺伝子の発現を調節する転写因子である。発がんの防止におけるｐ５３の重要な役割は、ｐ５３遺伝子座に直接、影響を及ぼす突然変異を通してか、またはその正常な制御の異常を通してかのいずれかによるがん細胞におけるそれの普遍的な不活性化によって裏付けられる。ＤＮＡ損傷応答経路および発がん性ストレス経路はｐ５３に集まって来るため、両方の経路は、ｐ５３の腫瘍抑制機能に不可欠であると考えられている。しかしながら、最近の遺伝的研究は、ＤＮＡ損傷経路よりむしろ発がん性ストレス経路が、ｐ５３媒介性腫瘍抑制に必須であることを示す有力な証拠を提供している。ｐ５３状態が、機能状態と不活性状態の間をｉｎ  ｖｉｖｏで可逆的に切り換えることができる、遺伝子操作されたマウスモデルを用いて、ｐ５３媒介性ＤＮＡ損傷応答は、腫瘍抑制に無関係であるが、病理学的帰結の原因であることが示されている。興味深いことは、急性ＤＮＡ損傷応答が鎮まるまでのｐ５３回復の遅延が、がん発生に対する保護を保持し、そのような保護がｐ１９ＡＲＦに依存するという所見である。内因性ｐ５３が、ＤＮＡ損傷活性化プロテインキナーゼ（ＡＴＭ、ＡＴＲ、またはＣｈｋ２）によってリン酸化することができない突然変異体によって置換された、マウス遺伝的研究は、急性ＤＮＡ損傷応答がｐ５３媒介性腫瘍抑制にとって必要ではない可能性があるという意見と一致している。ノックインマウスは、ＤＮＡ損傷誘導性アポトーシスの能力がなかったが、それにもかかわらず、がん発生から完全に保護されていた。これらの研究を合わせると、ｐ５３活性の一時的な抑制は、腫瘍抑制機能を損なうことなくＤＮＡ損傷誘導性細胞毒性を有意に低下させ得ることが示されており、がん治療保護のアプローチとして一時的なｐ５３阻害を探求するための論理的根拠が提供されている。
【０１５０】
ヒ素は、Ｒａｓ−ＧＴＰアーゼ依存性機構を通してＮＡＤＰＨオキシダーゼ活性を活性化して、活性酸素の細胞内群発を生じることにより酸化ストレスを誘導する、天然に存在する半金属である。ヒト、実験動物、および培養細胞のヒ素への曝露は、様々な多様効果と関連している。ヒ素は、確定のヒト発がん物質であるが、特に低用量における、ヒ素応答曲線の形について多くの議論がある。この議論は、ヒ素曝露を通して動物モデルにおいてがんを誘発することに一貫した成功がないため、ヒ素発がんの機構ははっきりしないままであるという事実によってさらに複雑化している。低用量データを含む疫学調査もまた、約６０ｐｐｂ（０．８μＭ）未満の濃度での飲料水中のヒ素への曝露が、対照値より低い膀胱がんまたは肺がんのリスクと関連していることを示している。しかしながら、毒性レベルで吸収された場合、ヒ素は、がんを含む重篤な健康問題を引き起こす。例えば、バングラデシュの多くの地域において、飲料水中の高濃度のヒ素は、それが、がん率の増加と相関しているため、特別な健康上の懸念となっている。しかし、ヒ素はまた、より低い用量において健康に有益な効果を生じると、もてはやされてきた。例えば、１８世紀から２０世紀初期にかけて、Ｆｏｗｌｅｒ’ｓ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（１％亜ヒ酸カリウム）として知られた無機ヒ素調製物が、皮膚がん、高血圧、および関節炎を含む様々な疾患の処置に用いられた。ヒ素は、女性によって顔貌を向上させるために皮膚に塗られさえした。ヒ素に対する応答の濃度関連階層は、十分実証されている。例えば、ヒト成人包皮ケラチノサイトにおいて、５μＭ以下の濃度での２４時間のヒ素処置は、細胞増殖および細胞生存を促進することが知られている転写因子である、核内因子−κＢ（ＮＦ−κＢ）およびアクチベータータンパク質１（ＡＰ−１）活性の増強を伴う増殖の誘導が生じた。１０μＭ以上の濃度において、細胞生存率の統計学的に有意な減少が観察された。低濃度のヒ素および高濃度のヒ素によって誘導される細胞効果の異なる性質の裏付けとして、ゲノム分析は、低用量（５μＭ、非細胞毒性）および高用量（５０μＭ、細胞毒性）が、遺伝子のほとんど完全に重複していないサブセットの発現に影響することを示し、低用量における生存促進性生物学的応答から高用量における死促進性応答への定性的切り換えと一致している。合わせて考えると、入手可能な情報は、ヒ素の二相性用量応答を示している。低用量ヒ素によって誘導される効果は、高用量ヒ素の効果と大きさにおいて異なるだけではなく、性質においても異なる、すなわち、細胞保護性対細胞毒性である。
【０１５１】
いかなる特定の理論にも縛られるつもりはないが、低用量ヒ素前処置は、一時的なｐ５３抑制の機構を介して正常組織を、ＤＮＡ損傷誘導性病理的帰結から効果的に保護することができると考えられる。重要なことは、保護が正常組織へ選択的であり、がん細胞は、それらの欠陥ｐ５３のため、この保護応答を共有しないという所見である。本発明者らはまた、ヒ素のｐ５３活性への効果をモニターするために末梢リンパ球を用いる方法を確立した。
【０１５２】
［例−悪性腫瘍を有するヒト対象における低用量ヒ素のｐ５３への効果］
この研究の目的は、ヒト患者においてｐ５３活性化をブロックすることにおける三酸化ヒ素の活性を評価することであった。ｐ５３の活性化を、患者のリンパ球のｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイによって測定した。
【０１５３】
［方法］
末梢血球数を抑制することが知られた化学療法を開始することになっている、白血病以外の悪性腫瘍と診断された１８歳より上の患者を研究に登録した。化学療法の各サイクル間の予想される間隔は、最低２週間であった。患者は、ヒ素前処置なしで化学療法の最初のサイクル、続いて、３日間連続のヒ素前処置を含む化学療法の第２サイクル（三酸化ヒ素は、サイクル２の間、−３日目、−２日目、および−１日目に投与された）を受けた。処置を、１／２時間かけて静脈内に０．００５ｍｇ／ｋｇの用量で与えた。
【０１５４】
ヒ素のｐ５３抑制への効果を、サイクル１／１日目（その時点において、患者はヒ素も化学療法も受けていない）におけるｐ５３活性化を、患者が３日間のヒ素前処置を受けたサイクル２／１日目におけるｐ５３活性化と比較することにより決定した。末梢リンパ球がサイクル１／１日目において培養中、２Ｇｙでの放射線照射により誘導可能なｐ５３活性化を示さなかった患者は、この実施例についての最終結果に考慮されなかった。
【０１５５】
ｐ５３活性化のアッセイについて、約１０ｍＬの全血を、各サイクルの１日目に患者から単離した。その後、リンパ球をＦｉｃｏｌｌ勾配上で分離し、細胞をＰＢＳで洗浄し、２つのアリコートへ分割し、アッセイ前に３７℃で培地中、インキュベートした。次に、アリコートの１つを２Ｇｙ放射線に曝露し、ｐ５３の活性化を誘導した。他方のアリコートを処理しなかった。細胞を収集し、溶解し、ｐ５３の活性化をＰａｔｈＳｃａｎ（登録商標）Ｐｈｏｓｐｈｏ−ｐ５３（Ｓｅｒｌ５）Ｓａｎｄｗｉｃｈ  ＥＬＩＳＡキット（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ、Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｄａｎｖｅｒｓ、ＭＡ）を用いて測定した。
【０１５６】
簡単に述べれば、このアッセイは、ホスホ−ｐ５３（Ｓｅｒ１５）タンパク質の内因性レベルを検出する固相サンドイッチ酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）である。ｐ５３ウサギモノクローナル抗体をマイクロウェル上にコーティングした。細胞可溶化液とのインキュベーション後、非ホスホ−ｐ５３タンパク質およびホスホ−ｐ５３タンパク質の両方を、コーティングされた抗体によって捕獲した。徹底的な洗浄後、ホスホ−ｐ５３（１６Ｇ８）マウスモノクローナル抗体を加えて、捕獲されたホスホ−ｐ５３タンパク質を検出した。その後、ＨＲＰ連結抗マウス抗体を用いて、結合した検出抗体を認識した。ＨＲＰ基質のＴＭＢを加えて、発色させた。この発色についての光学密度の大きさは、ホスホ−ｐ５３タンパク質の量に比例する。処理された（照射された）試料と未処理の試料におけるｐ５３の活性化を、その２つの試料間の光学密度の差を調べることにより比較した。処理された試料と未処理の試料の間の光学密度の差を、未処理の試料の光学密度で割って、パーセンテージの差（ＥＬＩＳＡパーセンテージ）を得た。
【０１５７】
［結果］
１０人の患者の予備的なコホートを研究した。この分析に含まれる患者は、三酸化ヒ素なしのサイクルとペアになった三酸化ヒ素の少なくとも１サイクルを完了する患者として定義される。コホートにおける１０人の患者のうちの１人（対象＃００７）は、サイクル１／１日目において培養中、２Ｇｙでの放射線照射により誘導可能なｐ５３活性化を示し、この患者のリンパ球が誘導性ｐ５３を有することを示した。ヒ素前処理後（サイクル２／１日目）、その対象は、培養中、２Ｇｙでの放射線照射により誘導可能なｐ５３活性化の低下を示した。対象＃００７についての結果は、下記の表６に示されている。
【表７】
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【０１５８】
この結果は、サイクル１／１日目において、患者は、強いｐ５３誘導を示したことを示す。患者が、化学療法の次のサイクルの開始前に三酸化ヒ素を受けたとき、ｐ５３の誘導は大いに抑制された。ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの２Ｇｙの放射線への曝露後、患者の末梢リンパ球におけるｐ５３活性化の妨害と細胞生存の保護との間に密接な取り決めがあるだろうことが含意される。そのようなものとして、低用量ヒ素は、ｉｎ  ｖｉｖｏで化学療法の効果からヒト対象の正常組織を保護するための方法において有用である。
【０１５９】
この特許において、特定の米国特許、米国特許出願、および他の資料（例えば、論文）は、参照により組み入れられている。しかしながら、そのような米国特許、米国特許出願、および他の資料の文章は、そのような文章と、本明細書に示されたその他の記述および図面との間に矛盾が存在しない程度で、参照により組み入れられるのみである。そのような矛盾の場合、そのような参照により組み入れられた米国特許、米国特許出願、および他の資料におけるいかなるそのような矛盾する文章も、厳密に言えば、この特許において参照により組み入れられていない。
【０１６０】
本発明の様々な態様のさらなる改変および代替の実施形態は、この記載を鑑みれば、当業者に明らかであろう。したがって、この記載は、例証としてのみ解釈されるべきであり、本発明を行う一般的な方法を当業者に教示することを目的とする。本明細書に示され、および記載された本発明の形式は、実施形態の例としてとられるべきであることは、理解されるべきである。要素および材料が、本明細書に例証および記載されたものと置き換わってもよく、部分および工程が逆転されてもよく、本発明の特定の特徴が、独立して利用されてもよく、それらは全て、本発明のこの記載の恩恵を享受した後は、当業者にとって明らかであろう。以下の特許請求の範囲に記載された本発明の精神および範囲から逸脱することなく、本明細書に記載された要素に変化が加えられ得る。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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