(57)【要約】  ポリウレタン微粒子は、ポリ（アルキレンオキシド）部分、カプロラクトン部分およびウレタン部分を含む構造単位由来である。微粒子は、活性物質を含み、０．１〜１００ミクロンの粒径を有することができる。注射用の微粒子は１５〜８０ミクロン、エアロゾルとして使用するための微粒子は１〜３ミクロン、また眼内使用のための微粒子は０．０２〜２ミクロンの粒径を有する。分散性は１〜３の範囲にある。
2014525945.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリマーがポリ（アルキレンオキシド）部分、カプロラクトン部分およびウレタン部分を含む構造単位由来のポリウレタンであるポリマー微粒子であって、０．０１〜１００ミクロンの粒径を有するポリマー微粒子。
【請求項２】
活性物質をさらに含む、請求項１に記載の微粒子。
【請求項３】
活性物質がタンパク質またはペプチドである、請求項２に記載の微粒子。
【請求項４】
１５〜８０ミクロンの粒径を有する、注射用の請求項１に記載の微粒子。
【請求項５】
１〜３ミクロンの範囲の見かけの空気動力学径を有する、エアロゾルとして使用するための請求項１に記載の微粒子。
【請求項６】
０．０２〜２ミクロンの粒径を有する、眼内使用のための請求項１に記載の微粒子。
【請求項７】
リン酸緩衝食塩水中５０℃で１カ月後にポリマーの平均分子量の減少が６０〜９０％、特に７０〜８５％である、請求項１から６のいずれかに記載の微粒子。
【請求項８】
リン酸緩衝食塩水中３７℃で６カ月後にポリマーの平均分子量の減少が３０〜８０％、特に４０〜７０％である、請求項１から６のいずれかに記載の微粒子。
【請求項９】
３７℃のリン酸緩衝食塩水への膨潤性が１０〜１００％である、請求項１から８のいずれかに記載の微粒子。
【請求項１０】
活性物質が名目上（ｎｏｍｉｎａｌｌｙ）３０日、６０日、９０日または１２０日で放出される、請求項２から９のいずれかに記載の微粒子。
【請求項１１】
分散性スパン（ｄｉｓｐｅｒｓｉｖｉｔｙ  ｓｐａｎ）が１〜３、好ましくは１．１〜２．５、特に１．２〜２．０の範囲にある、請求項１から１０のいずれかに記載の微粒子。
【請求項１２】
ヒトまたは動物患者の体内で完全に吸収される、請求項１から１１のいずれかに記載の微粒子。
【請求項１３】
ポリマーが
（ａ）カプロラクトンおよびポリ（アルキレンオキシド）部分の共重合単位を含むプレポリマーと；
（ｂ）カプロラクトンおよびＣ2〜Ｃ6ジオールの共重合単位を含むポリカプロラクトンジオールと；
（ｃ）ジイソシアネートと
を共に反応させることにより得ることができる、請求項１から１２のいずれかに記載の微粒子。
【請求項１４】
活性物質を患者に送達するための請求項１に記載の微粒子の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、カプロラクトン、ポリオールおよびジイソシアネートを含む構造単位由来の生体吸収性（ｂｉｏｒｅｓｏｒｂａｂｌｅ）ポリマー微粒子、その製造ならびに医薬活性物質を送達するためのその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）は、最も一般的な、よく研究された生体吸収性ポリマーの１つである。ＰＣＬホモポリマーの反復分子構造は、５個の非極性メチレン基および単一の比較的極性のエステル基からなる。この高分子量ポリエステルは、従来、環状モノマー、すなわち、ε−カプロラクトンの開環重合により製造される。重合を開始するために触媒を使用し、反応速度を制御し、平均分子量を調節するためにアルコールなどの開始剤を使用することができる。ＰＣＬは、６０℃の低い融点および−６０℃のガラス転移温度を有する優れた機械的特性の半結晶性（約４０〜５０％）の、強く、延性の、疎水性ポリマーである。
【０００３】
ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）は、生体適合性の高水溶性（親水性）ポリマーである。ポリ（エチレングリコール）は、繰り返し単位−ＣＨ2ＣＨ2Ｏ−を含むポリ（エチレンオキシド）である。ＰＥＧは、６０℃の低い融点および−５５℃〜−７０℃のガラス転移温度を有する結晶性（約９０〜９５％）ポリマーである。これらの二官能性化合物は、ヒドロキシル末端基を含み、これがジイソシアネートとさらに反応して鎖延長することができる、または開環重合のため開始剤として使用することができる。ＰＥＧは、架橋ポリウレタンヒドロゲル（ＥＰ公開ＥＰ００１６６５２およびＥＰ００１６６５４）ならびに直鎖状ポリウレタンヒドロゲル（ＰＣＴ公開ＷＯ２００４０２９１２５）に組み込まれる周知の構造単位である。
【０００４】
両親媒性ブロックコポリマー、例えば、ＰＥＧ−ＰＣＬコポリマーが、ミセル担体、ポリマー小胞およびポリマーマトリクスとして医学および生物学の分野で近年注目を集めている。トリブロックコポリマーＰＣＬ−ＰＥＧ−ＰＣＬは、ブレンド中で独特な相挙動および１種のブロックのみが可溶性である選択溶媒中で高分子ミセル様コア−シェルナノ構造を形成する能力を有する（Ｊ．Ｐｏｌｙｍ．Ｓｃｉ．Ｐａｒｔ  Ａ  Ｐｏｌｙｍ．Ｃｈｅｍ．、１９９７、３５、７０９〜７１４；Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．、２００１、５３、９５〜１０８）。
【０００５】
しかしながら、上記ポリマーは、いくつかの実用的欠点に悩まされている。分解速度および機構は、ポリマーの化学構造などのいくつかの因子、および分解媒体などの周囲環境条件に依存するように思われる。両親媒性ポリエステルの分解プロセスでは２つの段階が同定されている。最初に、エステル結合のランダム加水分解性鎖切断により分解が進行し、分子量の減少をもたらす；第２の段階で、鎖切断に加えて測定可能な重量損失が観察される。別の知見は、ポリカプロラクトンが例えばポリ乳酸よりもはるかに遅く分解するというものである。ポリカプロラクトンの長い分解時間（約２４カ月）は、通常医学用途にとって不利である。
【０００６】
特許公開ＷＯ２００５／０６８５３３は、カプロラクトンおよびポリエチレングリコールのプレポリマーをジイソシアネートと反応させて形成される生分解性ポリウレタンポリマーを開示している。ポリマーは、薬物送達媒体、例えば、マイクロスフェアとして使用され得る。しかしながら、この公開は、第１のプレポリマーが高分子量ＰＥＧを含み、第２のプレポリマーが低分子量ＰＥＧを含むポリマーを明確には開示していない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
我々の先行特許公開ＷＯ２００８／０４７１００は、活性物質の持続送達のためのカプロラクトン、ポリ（アルキレンオキシド）およびジイソシアネートに基づく構造単位由来の生体吸収性カプロラクトン−ポリウレタンポリマーを記載している。本発明の目的は、患者に投与するのに適した微粒子形態のこの一般的型のポリマーを提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、ポリマーがポリ（アルキレンオキシド）部分、カプロラクトン部分およびウレタン部分を含む構造単位由来のポリウレタンであるポリマー微粒子であって、０．０１〜１００ミクロンの粒径を有するポリマー微粒子を提供する。
【０００９】
微粒子は、一般的に、特に持続放出を目的とする医薬活性物質を含む。
【００１０】
本発明はまた、微粒子の製造および活性物質を患者に送達するためのその使用に関する。
【００１１】
粒径は、投与の標的および様式によって変わる。例えば、注射による投与を目的とする微粒子は、一般的に１０〜１００ミクロン、特に１５〜８０ミクロン、とりわけ２０〜６０ミクロン、有利には２５〜５０ミクロンの範囲の粒径を有し得る。エアロゾルとしての投与を目的とする微粒子は、１〜３ミクロンの見かけの空気動力学径の範囲の粒径を有し得る。目への眼内投与を目的とする微粒子は、０．０２〜２ミクロン、特に０．０５〜１ミクロン、とりわけ０．１〜０．５ミクロンの粒径を有し得る。好ましくは、粒径の変動の程度の指標である分散性スパン（ｄｉｓｐｅｒｓｉｖｉｔｙ  ｓｐａｎ）は、１〜３、好ましくは１．１〜２．５、とりわけ１．２〜２．０の範囲にある。
【００１２】
粒径はまた、活性物質の送達速度を含む活性物質の放出プロファイルおよび投与の全体時間も決定し得る。活性物質の放出は、微粒子の構造内からの活性物質の拡散によるものであり得る。放出はまた、例えば活性物質の脱出をもたらすカプロラクトン部分中のエステル結合の加水分解によるポリマーの分子量の減少によるポリマーの分解によるものであり得る。放出はまた、活性物質の遊離をもたらす、物理的侵食（ｐｈｙｓｉｃａｌ  ｅｒｏｓｉｏｎ）によるポリマーの質量損失によるものであり得る。この侵食機構は、特に高分子量活性物質の放出に関連し得る。任意の所与の状況で、放出機構はこれら全ての複合相互作用であり、結果として選択される放出プロファイルに適した粒径の予測は困難である。
【００１３】
最終的に、ポリマーは生体吸収され、患者の体から排出されるだろう。
【００１４】
したがって、活性物質放出プロファイルはまた、通常は加水分解による、ポリマーの分解によるポリマーの分子量の減少に影響され得る。例えば、好ましいポリマーは、以下の通りリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中でのインキュベーションにより測定される分解を有する：
５０℃で１カ月、分子量６０〜９０％、特に７０〜８５％の減少；および
３７℃で６カ月、分子量３０〜８０％、特に４０〜７０％の減少。
【００１５】
活性物質の放出はまた、ポリマーの膨潤度（または膨潤率）にも影響される。高い膨潤度は、活性物質のより速い速度の放出をもたらし得る。３７℃のＰＢＳへの好ましい膨潤性（ｓｗｅｌｌａｂｉｌｉｔｙ）は、０．５〜１０００％、１〜５００％、５〜２５０％、１０〜１００％、とりわけ２０〜７０％である。特定の用途のためには、膨潤性は以下の範囲で選択され得る：１０〜３０％、３０〜６０％、６０〜１００％、１００〜１５０％および１５０〜２２５％。急速なポリマー分解および結果として急速な薬物放出を促進するための高い膨潤が肺送達に特に必要とされ得る。
【００１６】
放出速度は、活性物質および選択された投与体制により決定される。活性物質を放出する全体時間は治療用途に依存し、時間、日、週、月またはさらには年の程度であり得る。好ましい放出時間は、名目上は（ｎｏｍｉｎａｌｌｙ）２時間、２４時間、１０日、３０日、６０日、９０日および１２０日である。活性物質の全てが微粒子から放出され得る、またはよりもっともらしくは大部分、例えば元の薬物充填の６０重量％、７０重量％、８０重量％、９０重量％または９５重量％が放出される。活性物質の初期バースト（ｉｎｉｔｉａｌ  ｂｕｒｓｔ）送達は、特別な用途を除いて一般的に回避されるべきである。一般的に、有効治療期間にわたる薬物の実質的に一定な放出が好まれるはずである。
【００１７】
本発明の好ましい実施形態によると、ポリマーは、
（ａ）カプロラクトンおよびポリ（アルキレンオキシド）部分の共重合単位を含むプレポリマーと；
（ｂ）カプロラクトンおよびＣ2〜Ｃ6ジオールの共重合単位を含むポリカプロラクトンジオールと；
（ｃ）ジイソシアネートと
を共に反応させることにより得ることができる。
【００１８】
あるいは、本発明は、結合した言及成分（ａ）、（ｂ）および（ｃ）由来の部分を含むポリマーを提供する。
【００１９】
好ましくは、プレポリマー（成分（ａ））のポリ（アルキレンオキシド）部分は、ポリ（Ｃ2〜Ｃ3アルキレンオキシド）またはその混合物から選択される。最も好ましいのは、例えばポリ（Ｃ2アルキレンオキシド）ジオール、すなわち、ポリ（エチレンオキシド）ジオール、例えばポリ（エチレングリコール）由来のポリ（Ｃ2アルキレンオキシド）である。一般的におよび望ましくは、ポリ（アルキレンオキシド）部分は、対象ポリマーが水性環境中で分解するのを助けるために水溶性であるべきである。
【００２０】
ポリエチレンオキシドの一例であるポリ（エチレングリコール）は、エチレンオキシドをエチレングリコールに添加して構造ＨＯ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）nＨ（式中、ｎは分子量に依存する１〜８００の整数である）を有する二官能性ポリエチレングリコールを得ることにより調製され得る。ポリエチレンオキシドは、繰り返し単位（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）を含み、エチレンオキシドを、反応性水素原子を含む化合物に段階的に添加することにより好都合に調製される。
【００２１】
本発明に使用するポリ（エチレングリコール）は、一般的に約２００ｇ／ｍｏｌ〜約３５，０００ｇ／ｍｏｌ、特に約３００ｇ／ｍｏｌ〜約１０，０００ｇ／ｍｏｌ、とりわけ約４００ｇ／ｍｏｌ〜約８０００ｇ／ｍｏｌ、例えば約４００、６００、２０００、４０００または８０００ｇ／ｍｏｌの平均分子量を有する直鎖状ポリオールである。
【００２２】
そのため、好ましくは、成分（ａ）は、カプロラクトンおよび比較的低〜中範囲の分子量のポリ（エチレングリコール）のコポリマーを含む。
【００２３】
成分（ａ）は、例えば、カプロラクトンとポリ（アルキレンオキシド）部分を含むポリオールとを共に重合して、対象ポリマーの調製にプレポリマーとして使用するための直鎖状ジヒドロキシル末端カプロラクトン−ポリ（アルキレンオキシド）コポリマーを得ることにより製造され得る。
【００２４】
例えば、ε−カプロラクトンを、開環反応で、ポリ（エチレングリコール）と反応させて、対象ポリマーの調製にプレポリマーとして使用するための直鎖状ジヒドロキシ末端カプロラクトン−ポリ（エチレングリコール）コポリマーを得ることができる。
【００２５】
このようなプレポリマーは、典型的にはＡＢＡ構造、例えば（ＣＡＰ）n−ＰＥＧ−（ＣＡＰ）n、すなわち、ＰＥＧ単位に隣接する連続カプロラクトン単位のブロックを有するもの、例えば−ＣＡＰ−ＣＡＰ−ＣＡＰ−ＰＥＧ−ＣＡＰ−ＣＡＰ−ＣＡＰ−を有し、ポリカプロラクトンセグメントの各ブロック中のカプロラクトンの連続単位の平均数（すなわち、ｎの値）は、一般的に約３〜５０の間、好ましくは約４〜３５の間、典型的には約５〜３１の間であり、例えば、５、９．５および３１単位から選択される。
【００２６】
典型的には、成分（ａ）の調製では、重合は触媒下で進行する。重合に有用な典型的な触媒は、第一スズオクトアート、アルミニウムイソプロポキシドおよび／またはチタンｎ−ブトキシドである。
【００２７】
当業者であれば、プレポリマー（成分（ａ））の調製で、本明細書中上記のように好ましくはポリ（エチレングリコール）（すなわち、ＰＥＧ）であるポリ（アルキレンオキシド）部分を開始剤とみなすことができることは認識されよう。使用する正確な反応条件は当業者により容易に決定されよう。生成物に、弾性、分解および放出速度などの異なる特性が望まれる場合、この開環重合に他のコモノマー、コポリマーおよび触媒を使用してもよく、このような他の成分の選択は当業者に明らかであろう。
【００２８】
一般的に、プレポリマーの調製で、カプロラクトンと開始剤（例えば、ＰＥＧ）のモル比は、一般的に５：１〜最大１００：１、例えば１０：１〜５０：１、特に２０：１〜３０：１の範囲にある。
【００２９】
ポリカプロラクトンジオール（成分（ｂ））のＣ2〜Ｃ6ジオール成分は、プレポリマージオール成分（ａ）に含まれるポリ（アルキレンオキシド）部分と比べて比較的低い分子量を有する任意の有機ジオールであり得る。
【００３０】
例えば、Ｃ2〜Ｃ6ジオールは、構造：ＨＯ−（ＣＨ2）m−ＯＨ（式中、ｍは２〜６から選択される数である）を有するジオール、例えば、１，２−エチレングリコール、１，４−ブタンジオール、１，５−ペンタンジオールまたは１，６−ヘキサンジオールから選択され得る。
【００３１】
あるいは、Ｃ2〜Ｃ6ジオールは、ポリ（アルキレンオキシド）ジオールから選択される低分子量ポリマーまたはオリゴマーであるジオールから選択され得る。
【００３２】
好ましくは、このようなポリ（アルキレンオキシド）ジオールは、ポリ（Ｃ2〜Ｃ3アルキレンオキシド）ジオールまたはその混合物から選択される。最も好ましいのは、低分子量ポリ（Ｃ2アルキレンオキシド）ジオール、すなわち、低分子量ポリ（エチレンオキシド）ジオール、例えば低分子量ポリ（エチレングリコール）である。
【００３３】
典型的には、低分子量ポリ（エチレングリコール）は以下の構造：ＨＯ−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−Ｈ（式中、ｎは２または３から選択される数である）を有する、すなわち、低分子量ポリエチレングリコールが好ましい。代わりに好ましいジオールはエチレングリコール自体（すなわち、式中ｎが１である）である。
【００３４】
最も好ましいジオールはジエチレングリコール、すなわち構造ＨＯ−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ2−ＯＨを有するエチレングリコールダイマーである。
【００３５】
一般的におよび望ましくは、Ｃ2〜Ｃ6ジオールは、対象ポリマーが水性環境中で分解するのを助けるために水溶性であるべきである。
【００３６】
ポリカプロラクトンジオール（成分（ｂ））のカプロラクトン部分は、好ましくはε−カプロラクトン由来である。したがって、ポリカプロラクトンジオールは、好ましくはそれ自体がポリカプロラクトンジオールに組み込まれる開始剤として低分子量ジオールを使用して、開環反応でε−カプロラクトンから得られる。例えば、このようなポリカプロラクトンジオールは、開環反応で、ε−カプロラクトンおよびジエチレングリコールを反応させて直鎖状ジヒドロキシル末端ポリ（コ−カプロラクトン−ジエチレングリコール）を得ることにより調製され得る。ポリカプロラクトンジオールの調製に触媒を使用してもよい。適当な触媒としては、第一スズオクトアート、アルミニウムイソプロポキシドおよび／またはチタンｎ−ブトキシドが挙げられる。
【００３７】
カプロラクトンと低分子量ジオール開始剤の比は、当業者に容易に利用可能な原理にしたがって選択され得る。典型的には、低分子量ポリ（エチレングリコール）を低分子量ジオールとして使用する場合、カプロラクトン：エチレングリコールの比は約４：約２程度であり、コポリマーは例として以下の構造：ＯＨ−ＣＡＰ−ＣＡＰ−ＥＧ−ＥＧ−ＣＡＰ−ＣＡＰ−ＯＨ（ここで、ＣＡＰは適当な配向の開いたカプロラクトン環、すなわち単位−（ＣＨ2）5Ｃ（Ｏ）Ｏ−または−Ｏ（Ｏ）Ｃ（ＣＨ2）5−を表し、ＥＧはエチレングリコール単位を表す）を有し得る。コポリマー分子中のＣＡＰ単位の順および配置は変化し得ることが認識される。
【００３８】
ジイソシアネート成分（ｃ）は、好ましくは１，４−ブタンジイソシアネート、１，６−ヘキサメチレンジイソシアネートまたはＬ−リジンジイソシアネート等である。
【００３９】
このようなジイソシアネートは、毒性分解生成物を回避すべき用途、例えば生物医学的用途に特に適している。
【００４０】
１，４−ブタンジイソシアネートが好ましい。
【００４１】
既知の生物医学的および生分解性ポリウレタンは、通常芳香族、環状脂肪族または脂肪族ジイソシアネートを含み、これらは分解すると毒性物質またはフラグメントを産生し得る。ポリウレタンの分解では、任意の未反応ジイソシアネート構造単位がその対応するアミンに加水分解することが一般的に認められている。これらのジアミンのほとんどは毒性、発癌性および／または変異原性であることが知られている。国際公開ＷＯ９９６４４９１では、非毒性１，４−ブタンジイソシアネート（ＢＤＩ）の使用が、均一なブロック長を有する生物医学的ポリウレタンの製造で示されている。本発明の出願人は、１，４−ブタンジイソシアネートを使用することが、分解すると、哺乳動物細胞中に存在する、プトレシンとしても知られている１，４−ブタンジアミンをもたらすので、いくつかの利点を有すると考えている（Ｊ．Ｐｏｌｙｍ．Ｂｕｌｌ．、１９９７、３８、２１１〜２１８）。
【００４２】
したがって、本発明の少なくとも一実施形態の追加の利点は、非毒性、生体適合性ポリマーおよび分解生成物をもたらすポリウレタンの製造への生体適合性出発材料の使用である。
【００４３】
しかしながら、分解生成物の毒性があまり重要ではない用途では、ポリウレタンを形成するために一般的に使用されている任意のジイソシアネート（上に列挙されているものを含み、ジシクロヘキシルメタン−４，４−ジイソシアネートおよびジフェニルメタン−４，４−ジイソシアネートなどのジイソシアネートを含む）を使用することができる。
【００４４】
本発明の生体吸収性ポリマーは、動物の生理学的環境中で分解することができ、分解生成物は腎臓を通して排出されるまたは完全に生体吸収される。１つの定義によると、生分解性ポリマーは、加水分解性または酸化的分解のための酵素または微生物を要する。しかし、一般に、生体内で経時的にその質量を喪失するポリマーは、吸収性（ａｂｓｏｒｂａｂｌｅ）、再吸収性（ｒｅｓｏｒｂａｂｌｅ）、生体吸収性（ｂｉｏｒｅｓｏｒｂａｂｌｅ）または生体分解性ポリマーと呼ばれる。この専門用語は、ポリマー分解様式にかかわらず、換言すれば酵素および非酵素分解の両方ならびに／あるいは侵食に関して本発明で適用される。
【００４５】
本発明のポリマーは、長期間にわたって水、緩衝水溶液、生理学的流体、土壌、堆肥、海水および淡水などの中で分解する。ポリマーの組成および温度が異なる分解速度をもたらし得るが、これは当業者により容易に決定され得る。時々、活性物質は、有意な質量損失（例えば、５重量％未満、２重量％未満または１重量％未満）が起こる前にほとんど送達されてしまう。他の場合、とりわけタンパク質の送達では、質量損失が活性物質の送達に有意に貢献し得る。
【００４６】
一般的に、使用中、ポリマーを１０℃〜９５℃、好ましくは２５℃〜４５℃、典型的には３０℃〜３８℃、例えば３７℃の温度に供することができる。
【００４７】
ポリマーが完全に分解する、すなわち、その質量の全てを失うのにかかる時間は、広く変化し得る、例えば典型的には１日〜２５０週間、好ましくは１週間〜１５０週間、好ましくは２週間〜１００週間、例えば２週間〜６０週間、例えば４週間または５２週間程度である。
【００４８】
分解時間は目的とする最終用途に適合させることができる。
【００４９】
上に示すように、本発明の生体吸収性ポリマーを製造するために使用する重合プロセスは、典型的には高分子量ポリ（ブロック−カプロラクトン−ｃｏ−ＰＥＧ）ウレタンを得るための開環重合および重付加反応を含む。したがって、本発明はまた、ポリマーを製造するために使用するプロセスに及ぶ。
【００５０】
ポリマーは、
（１）
（ａ）カプロラクトンおよびポリ（アルキレンオキシド）部分の共重合単位を含むプレポリマーと；
（ｂ）カプロラクトンおよびＣ2〜Ｃ6ジオールの共重合単位を含むポリカプロラクトンジオールと；
（ｃ）ジイソシアネートと
を用意するステップと：
（２）成分（ａ）、（ｂ）および（ｃ）を共に反応させるステップと
により調製され得る。
【００５１】
対象ポリマーの調製では、プレポリマー成分（ａ）を成分（ｂ）および（ｃ）と反応させて最終ポリマーを得ることができる。好ましくは、プレポリマーを最初に例えば成分（ｂ）と混合する（例えば、ブレンドする）ことにより合わせて、その後成分（ｃ）ジイソシアネートと反応させる。
【００５２】
当業者であれば、他の様式の操作を使用してポリマーを製造することができることを認識する。
【００５３】
成分（ａ）プレポリマーは、一般的にカプロラクトンおよびポリ（アルキレンオキシド）ジオールを共に重合することにより製造する。好ましくは、この重合反応中に触媒を使用する。反応は、好ましくは乾燥窒素ガスの雰囲気下などの不活性雰囲気下で行う。
【００５４】
適当な触媒としては、第一スズオクトアート、アルミニウムイソプロポキシドおよび／またはチタンｎ−ブトキシドが挙げられる。
【００５５】
異なるモル比の成分（ａ）（プレポリマー）、成分（ｂ）（例えば、ポリ（コ−カプロラクトン−ジエチレングリコール））およびジイソシアネート（例えば、ＢＤＩ）を使用することにより、最終ポリマー生成物の相構造、分解速度よび機械特性を適合させることができる。当業者であれば、最終所望ポリマー生成物特性を得るのに適当な成分比および反応時間、温度および他の条件を賢明に選択することができる。
【００５６】
一般的に、成分（ａ）と成分（ｂ）と成分（ｃ）のモル比は、０．０２〜２．０：１．０：１．０２〜３．０、特に０．１５〜１．５：１．０：１．２〜２．５、特に０．２〜１．０：１．０：１．２５〜２．０の範囲にある。好ましい範囲は０．２５〜１．０：１．０：１．２５〜２．０である。
【００５７】
本明細書中上記のように、本発明は、典型的には対象生体吸収性ポリマーの製造に、開環重合および鎖延長反応を含む２段階重合法を使用する。このまっすぐな２段階プロセスは、ポリマー成分（ａ）および（ｂ）、ならびに最終ポリマーの構造および特性を適合させるためのいくつかの汎用性のある可能性を提供するので、ポリマーを多種多様な目的に使用することが可能になる。記載する合成ステップ中、成分（ａ）または（ｂ）の製造中、あるいは最終ポリマーの調製中のいずれかで、多数のモノマーおよび低分子量ポリマーを導入することができる。したがって、モル組成を変化させることにより、上記材料を使用して、最終ポリマーで多種多様なポリマー特性を得ることができる。本発明は、限られた構造特性のバリエーション、遅い分解および溶解速度を含む、カプロラクトン／ＰＥＧに基づくコポリマーが遭遇する典型的な欠点の解決策を提供する。
【００５８】
一般的に、本発明で示されるポリウレタンの製造に、任意の従来重合反応器、例えばバッチ反応器、連続撹拌槽型反応器（ＣＳＴＲ）、押出機、反応射出成形（ＲＩＭ）、反応塔、パイプ型反応器および／またはメルトミキサー（ｍｅｌｔ  ｍｉｘｅｒ）を使用することができる。これらの生分解性ポリマーのさらなる加工は、熱可塑性ポリマーに適した従来加工法、例えば射出成形、押出成形、引抜成形、ブロー成形、真空成形、溶液流延ならびに他の成形および流延技術、ならびに分散、発泡およびフィルム形成技術により行うことができる。
【００５９】
わずか数種のモノマーおよびポリマーのみが適合型非毒性生体吸収性ポリマーに必要とされる要求を満たすように思われる。共重合を使用して分解速度を増加させることができ、コモノマーの構造、モル組成およびポリマー分子量を変化させることにより、カプロラクトンコポリマーの分解速度を変えることができる。分解媒体も分解挙動に影響を及ぼし得る。
【００６０】
本発明のポリマー微粒子は、通常、薬物送達装置として適用され得る。異なる充填薬物についての各個々の成分または相の透過性は、ポリマーに充填されている特定の薬物の特性に依存して大きく異なり得るので、各ブロックの非常に親水性および疎水性の性質を合わせた、高結晶性ブロックおよびゴム状ブロックからなるポリマーの相挙動は、ポリマーを薬物送達システムとして望ましいものにする。さらに、本発明の柔軟なプロセスにより、選択されるポリマーの特性を所望の薬物に合わせること、およびどのように薬物が充填され、その後ポリマーから放出されるかを適合させることが可能になる。これにより、選択薬物についての所望の放出プロファイルを生み出す機会が提供される。
【００６１】
本発明の生体吸収性ポリマー微粒子は広範囲の用途に適用することができ、このような用途は本発明の範囲に含まれる。ポリマー微粒子を薬物送達システム用のマトリクスとして使用することができる。潜在的に任意の薬物を本発明の生体吸収性ポリマー微粒子に充填することができる。微粒子を別々の単離粒子としてまたは微粒子が固体マトリクスに融合した形態で使用することができる。
【００６２】
そのため、本発明はまた、活性物質を含む生体吸収性ポリマー微粒子を含む制御放出組成物を提供する。活性物質は、ヒトまたは動物用途の医薬活性物質であり得る。制御放出組成物の特定の特徴は、ラクチドもグリコリド内容物も用いずに速い薬物放出を達成することができることである。
【００６３】
本発明のポリマー微粒子は、当業者に容易に利用可能な技術のいずれかを使用して調製することができる。特に、微粒子は、二重エマルジョン技術を使用して微粒子を沈殿させることによりうまく調製されてきた。水中油中水型（Ｗ／Ｏ／Ｗ）エマルジョン技術では、活性物質を水に溶解して溶液を得て、この溶液を、溶解ポリマーを含む有機溶媒（「油」）に乳化して油中水型エマルジョンを得る。次いで、このエマルジョンを水にホモジナイズして最終水中油中水型エマルジョンを形成する。次いで、溶媒を例えば蒸発により除去して微粒子を沈殿させる。
【００６４】
水中油中固体型（Ｓ／Ｏ／Ｗ）技術では、固体形態の活性物質を（Ｗ／Ｏ／Ｗ技術の活性物質溶液ではなくて）油に乳化する。固体活性物質を単独で使用してもよい。タンパク質およびペプチドの場合、活性物質を、単独でまたは共結晶性（ｃｏ−ｃｒｙｓｔａｌｌｉｎｅ）材料（例えば、アミノ酸）と共に再結晶して単結晶または共結晶を形成することができる。固体活性物質をタンパク質コーティングされた微結晶の形態で使用してもよい。結晶の粒径は１〜５０ミクロン、とりわけ２〜２５ミクロンの領域にあり得る。
【００６５】
微粒子は、添加界面活性物質、例えばＴｗｅｅｎの存在下でも非存在下でも調製することができる。界面活性物質の使用は、より大きな微粒子サイズを支持する傾向がある。
【００６６】
特に興味深い医薬活性物質としては、インターフェロンα、βおよびγ、インスリン、ヒト成長ホルモン、リュープロリドなどのタンパク質；オキシトシン拮抗薬などのペプチド；酵素および酵素阻害剤；ベンゾジアゼピン（例えば、ミダゾラム）；抗片頭痛薬（例えば、トリプトファン、エルゴタミンおよびその誘導体）；抗感染症薬（例えば、アゾールおよび、細菌性膣症もしくはカンジダ用の治療薬）；ならびに眼科用薬（例えば、ラタノプロスト）が挙げられる。
【００６７】
活性物質の詳細なリストとしては、Ｈ２受容体拮抗薬、抗ムスカリン薬、プロスタグランジン類似体、プロトンポンプ阻害剤、アミノサリチル酸、副腎皮質ステロイド、キレート剤、強心配糖体、ホスホジエステラーゼ阻害剤、チアジド、利尿薬、炭酸脱水酵素阻害剤、降圧薬、抗がん剤、抗うつ薬、カルシウムチャネル遮断薬、鎮痛薬、オピオイド拮抗薬、抗血小板薬、抗凝固薬、線維素溶解剤、スタチン、アドレナリン受容体作動薬、β遮断薬、抗ヒスタミン薬、呼吸刺激薬、粘液溶解薬（mucolytic）、去痰薬、ベンゾジアゼピン、バルビツレート、抗不安薬、統合失調症治療薬、三環系抗うつ薬、５ＨＴ1拮抗薬、アヘン剤、５ＨＴ1作動薬、制吐薬、抗てんかん薬、ドーパミン作動薬、抗生物質、抗真菌薬、駆虫薬、抗ウイルス薬、抗原虫薬、抗糖尿病薬、インスリン、甲状腺毒素、女性ホルモン、男性ホルモン、抗エストロゲン薬、視床下部、下垂体ホルモン、下垂体後葉ホルモン拮抗薬、抗利尿ホルモン拮抗薬、ビスホスホネート、ドーパミン受容体刺激薬、アンドロゲン、非ステロイド系抗炎症薬、免疫抑制剤、局所麻酔薬、鎮静薬、抗乾癬薬(antipsioriatic)、銀塩、局所抗菌薬、ワクチンが挙げられる。
【００６８】
本発明の実施形態を、単なる例として記載する。
【図面の簡単な説明】
【００６９】
【図１】動的光散乱により決定される、実施例１１で調製した微粒子の粒度分布を示す図である。
【図２】実施例１７で調製した微粒子のＳＥＭ像を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００７０】
ポリウレタンの合成は２段階重合反応である。第１のステップは、ＰＥＧおよび触媒としての第一スズオクトアートを使用したカプロラクトンの開環であり、プレポリマーと呼ばれるＰＣＬ−ＰＥＧ−ＰＣＬブロックコポリマーをもたらす。次いで、プレポリマーをポリカプロラクトン−ジオールおよびブタンジイソシアネートを用いて鎖延長して最終生分解性ポリウレタンを形成する。ポリカプロラクトン−ジオールは、カプロラクトンおよびジエチレングリコールの反応生成物である。最終ポリマーは、硬質ブロックおよび軟質ブロックへのマイクロスフェア分離を受けると考えられているので、セグメント化ポリウレタンと呼ぶことができる。非常に大まかに言えば、軟質ブロックはプレポリマーで構成されており、硬質ブロックはポリカプロラクトン−ジオールおよびウレタン部分（ジイソシアネート由来）で構成されている。
【００７１】
我々は、生分解性ポリマーマトリクスからの生理活性化合物の制御放出を可能にする媒体を製造するために、生理活性分子を生分解性ポリウレタンから作られたマイクロスフェアに組み込んでいる。この実験研究の目的は、エマルジョン溶媒蒸発技術を使用して固体または水性形態のいずれかの代表的なタンパク質分子としてウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を使用して微粒子を合成することであった。このプロセス中、生理活性分子をポリマーマイクロスフェアに封入し、次いでこれを回収することができる。水中油中水型（ｗ／ｏ／ｗ）エマルジョンでは、水性形態の生理活性分子を有機溶媒に溶解したポリマーとホモジナイズして油中水型エマルジョンを形成する。次いで、このｗ／ｏエマルジョンを第２の水相に移し、再度ホモジナイズして最終ｗ／ｏ／ｗエマルジョンを形成する。
【００７２】
生理活性分子を固体形態のポリマー相に直接添加して、最終水中油中固体型（ｓ／ｏ／ｗ）エマルジョンを形成することもできる。固体形態の生理活性物質を有機溶媒に溶解したポリマーとホモジナイズして油中固体型エマルジョンを形成する。次いで、このｓ／ｏエマルジョンを水相に移し、ホモジナイズして最終ｓ／ｏ／ｗエマルジョンを形成する。我々は、再結晶した単結晶または共結晶としての、水性または固体形態のＢＳＡを使用して形成したＢＳＡを含む微粒子の粒径および分布を試験した。実験は、界面活性物質（Ｔｗｅｅｎ  ８０、ＰＥＧ６０００、ＰＶＰおよびＰＶＡ）の存在下および非存在下の両方で行った。ＰＶＰはポリビニルピロリドンであり、ＰＶＡはポリ酢酸ビニルである。
【実施例１】
【００７３】
その後のポリウレタン合成のための異なる構造およびブロック長を有する直鎖状生体吸収性プレポリマーの製造
ＰＥＧブロック（４００、２０００および８０００ｇ／ｍｏｌ）とカプロラクトンブロック（５００〜３５００ｇ／ｍｏｌ）の長さを変化させた。標的プレポリマー分子量は、７０００〜１１０００ｇ／ｍｏｌの間となるように選択した。プレポリマーバッチサイズは約５００〜６００ｇとした。プレポリマーを、以下の通りその組成を変化させて調製した（表１参照）：バッチＡ）プレポリマーＡを、７４１８ｇ／ｍｏｌの理論分子量を標的にして、ＰＥＧ４００  ３２．０１ｇ（１６．０ｍｏｌ％）、カプロラクトン５６１．５８ｇ（９８．４ｍｏｌ％）およびスズ（ＩＩ）オクトアート０．６０８ｇ（０．０３ｍｏｌ％）から作った、バッチＢ）プレポリマーＢを、７５９２ｇ／ｍｏｌの理論分子量を標的にして、ＰＥＧ２０００  １４９．８１ｇ（２．０ｍｏｌ％）、カプロラクトン４１８．８４ｇ（９７．９ｍｏｌ％）およびスズ（ＩＩ）オクトアート０．４５ｇ（０．０３ｍｏｌ％）から作った、バッチＣ）プレポリマーＣを、９０２７ｇ／ｍｏｌの理論分子量を標的にして、ＰＥＧ８０００  ４６１．９３ｇ（１０．０ｍｏｌ％）、カプロラクトン５９．３０ｇ（９０．０ｍｏｌ％）およびスズ（ＩＩ）オクトアート０．０７ｇ（０．０３ｍｏｌ％）から作った、バッチＤ）プレポリマーＤを、７５９２ｇ／ｍｏｌの理論分子量を標的にして、ＰＥＧ２０００  ３９４．８６ｇ（２．０ｍｏｌ％）、カプロラクトン１１０３．９５ｇ（９７．９７ｍｏｌ％）およびスズ（ＩＩ）オクトアート１．２０ｇ（０．０３ｍｏｌ％）から作った。
【００７４】
【表１】
2014525945.tif 000003
【００７５】
分子量（ＭｎおよびＭｗ）と分子量分布を、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）システムと組み合わせた三倍角光散乱（triple angle light scattering）により種々のプレポリマーについて測定した。表２を参照されたい。
【００７６】
【表２】
2014525945.tif 000004
【実施例２】
【００７７】
直鎖状生体吸収性ヒドロゲルプレポリマーおよびポリマー（プレポリマーＡおよびポリマー１）の製造
撹拌タンク型反応器に、乾燥ＰＥＧ４００（ＭＷ４００ｇ／ｍｏｌ）３２．０１ｇ（１６．０ｍｏｌ％）、カプロラクトン５６１．５８ｇ（９８．４ｍｏｌ％）およびスズ（ＩＩ）オクトアート０．６０８ｇ（０．０３ｍｏｌ％）をこの順で供給した。乾燥窒素を反応器に連続的にパージした。反応器を油浴および６０ｒｐｍの混合速度を使用して１５５℃に予熱した。ＰＥＧ４００を反応器に添加する前にロータリーエバポレーター（ｒｏｔａ−ｅｖａｐｏｒａｔｏｒ）で乾燥および溶融させた。次いで、ε−カプロラクトンを添加し、最後に触媒スズ（ＩＩ）オクトアートを添加した。ＰＥＧ−ＰＣＬプレポリマーの予備重合時間は５時間とした。プレポリマーの理論分子量は７４１８ｇ／ｍｏｌであった。
【００７８】
ポリマー調製のために、低分子量ポリ（ε−カプロラクトン）ジオール（ＭＷ５３０ｇ／ｍｏｌ）（ＰＣＬＤＩ）６．６０ｇおよび上記プレポリマー９０．２ｇを反応器に添加する前にロータリーエバポレーターで乾燥および溶融させた。乾燥窒素を反応器に連続的にパージした。反応器を油浴および７５ｒｐｍの混合速度を使用して１１０℃に予熱した。１：１：２のモル比のＰＥＧ−ＰＣＬプレポリマー：ＰＣＬＤＩ：ＢＤＩで１，４−ブタンジイソシアネート（ＢＤＩ）２．２１ｍｌを反応器に供給した。重合時間は６分とした。ポリマーをアルミニウムパンにこすり落とし、さらなる試験のためにデシケーター中で保管した（ポリマー１）。
【００７９】
ＤＳＣ分析により、ガラス転移温度（Ｔg）および融点（Ｔm）がそれぞれ−５７．１℃および５２．２℃であることが明らかになった。
【実施例３】
【００８０】
異なる構造の直鎖状生体吸収性ポリマーの製造
プレポリマーＢ（実施例１の表１）およびポリカプロラクトンジオール（ＭＷ約５３０ｇ／ｍｏｌ）を、予熱した（１１０℃）反応器に供給する前に、真空下９０℃で少なくとも１時間混合、乾燥および溶融させた。反応混合物を窒素下で混合（７５ｒｐｍ）した。１，４−ブタンジイソシアネートを反応器に供給した。プレポリマー、ポリ（ε−カプロラクトン）ジオールおよびＢＤＩ間のモル比は１：１：２とした。反応時間は１３分とした。
【００８１】
ＤＳＣ分析により、−５３．７℃および１．６℃の２つのガラス転移温度（Ｔg）が存在することと融点（Ｔm）が５１．３℃であることが明らかになった。
【実施例４】
【００８２】
異なる構造の直鎖状生体吸収性ポリマーの製造
プレポリマーが実施例１の表１のプレポリマーＣであることを除いて、実施例３のように鎖延長重合を行った。反応時間は１５分とした。
【００８３】
ＤＳＣ分析により、ガラス転移温度（Ｔg）および融点（Ｔm）がそれぞれ−５９．１℃および５３℃であることが明らかになった。
【実施例５】
【００８４】
異なる構造の直鎖状生体吸収性ポリマーの製造
プレポリマーが実施例１の表１のプレポリマーＣであることとプレポリマー、ポリ（ε−カプロラクトン）ジオールおよびＢＤＩ間のモル比が０．２５：１．７５：２であることを除いて、実施例３のように鎖延長重合を行った。反応時間は１２分とした。
【００８５】
ＤＳＣ分析により、ガラス転移温度（Ｔg）が−３８．６℃であることと５１．１℃および９５．９℃の２つの溶融吸熱（Ｔm）が存在することが明らかになった。
【実施例６】
【００８６】
異なる構造の直鎖状生体吸収性ポリマーの製造
プレポリマーが実施例１の表１のプレポリマーＣであることとプレポリマー、ポリ（ε−カプロラクトン）ジオールおよびＢＤＩ間のモル比が０．０５：１．９５：２であることを除いて、実施例３のように鎖延長重合を行った。反応時間は２０分とした。
【実施例７】
【００８７】
異なる構造の直鎖状生体吸収性ポリマーの製造
プレポリマーが実施例２の表１のプレポリマーＤであることを除いて、実施例３のように鎖延長重合を行った。反応時間は２０分とした。
【００８８】
ＤＳＣ分析により、ポリマーが−６２．５℃および１０．６℃のガラス転移温度（Ｔg）を有することと融点（Ｔm）が５２．３℃であることが明らかになった。
【００８９】
【表３】
2014525945.tif 000005
【実施例８】
【００９０】
選択された数の生体吸収性ポリマーについて分子量決定を行った。これを表４に示す。ポリマーの分子量はその機械的特性を決定し、その分解特性に影響を及ぼす。そのため、分子量値を決定することの重要性は明らかである。
【００９１】
これらの型のポリマーは、最も良い場合でも１００，０００（Ｍn）の分子量を有すると予想される。合理的な機械的特性を有するまたは化合物をポリマーとみなすためのＭnについての最小値は３０，０００である。本発明では、Ｍnの分子量値は我々の期待値を超え、ほとんどの場合で約８０，０００の値が得られた。
【００９２】
【表４】
2014525945.tif 000006
【実施例９】
【００９３】
ホットプレスを使用した熱可塑性ポリマーの加工−フィルム製造
表３の生体吸収性ポリマー１、２、３、４および６を、ホットプレスを使用して加工する前に真空下で一晩乾燥させた。上および下プレート温度を１６０℃に設定した。２枚のテフロンシートを型とホットプレートの間に置いた。溶融時間は２分とし、引き続いて圧力（約１７０ｂａｒ）下で３０秒維持した。正確な量のポリマーを使用して型に充填した。室温に冷却した後、試料を機械的に打ち抜き、さらなる分析のために冷凍庫に保った。
【実施例１０】
【００９４】
リン酸緩衝食塩水溶液中３７℃および５０℃でのポリマー分解および膨潤研究
合成ポリマーの生体吸収性およびその生理活性薬剤を放出する能力を証明するために、いくつかのポリマーを選択して生分解および膨潤試験を行った。
【００９５】
分解試験および膨潤用のポリマー試料は、フィルムをホットプレスし、そこから標本を打ち抜くことにより、生分解性ポリマーから製造した。２種の異なる型の分解試験が存在した：ｐＨ７．４のリン酸緩衝食塩水溶液中３７℃で１２カ月間の試験およびｐＨ７．４のリン酸緩衝食塩水溶液中５０℃で１２カ月間の加速試験（適切な場合）。初めに、試料を毎週、そして１カ月後には１カ月に１回またはさらに少ない頻度で採取した。
【００９６】
ポリマー１についての分解および膨潤結果は表５に見ることができる。
【００９７】
【表５】
2014525945.tif 000007
【００９８】
ポリマー２についての分解および膨潤結果は表６に見ることができる。
【００９９】
【表６】
2014525945.tif 000008
【０１００】
ポリマー３についての分解および膨潤結果は表７に見ることができる。このポリマーのＰＢＳへの溶解は速かったので、膨潤測定は試験の最初の５分で可能であるだけであった。
【０１０１】
【表７】
2014525945.tif 000009
【０１０２】
ポリマー４についての分解および膨潤結果は表８に見ることができる。このポリマーのＰＢＳへの溶解は速かったので、膨潤および侵食測定は試験の最初の６時間で可能であるだけであった。
【０１０３】
【表８】
2014525945.tif 000010
【０１０４】
ポリマー６についての分解および膨潤結果は表９に見ることができる。
【０１０５】
【表９】
2014525945.tif 000011
【実施例１１】
【０１０６】
界面活性物質としてＴｗｅｅｎ  ８０（登録商標）を用いたジクロロメタン（ＤＣＭ）溶液中５％ポリマーを使用した微粒子の調製
ポリマー６  ０．５ｇをＤＣＭ１０ｇに溶解し、油相（Ｏ）を形成した。ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）０．１ｇを蒸留水（ｄＨ2Ｏ）０．５ｇに溶解して内水相（Ｗ1）を形成した。Ｔｗｅｅｎ  ８０（登録商標）１．５ｇをｄＨ2Ｏ４８．５ｇに溶解して外水相（Ｗ2）を形成した。Ｗ1およびＯを、高せん断ミキサーを使用して４０００ｒｐｍで５．５分間ホモジナイズして油中水型（Ｗ1／Ｏ）エマルジョンを形成した。結果として生じたＷ1／Ｏエマルジョン５ｇを外水相（Ｗ2）に移し、７０００ｒｐｍでホモジナイズして最終水中油中水型（Ｗ1／Ｏ／Ｗ2）エマルジョンを形成した。油相から溶媒を除去するために、エマルジョンを、マグネチックスターラーを使用して６５０ｒｐｍで２４時間撹拌した。
【実施例１２】
【０１０７】
界面活性物質を用いないＤＣＭ溶液中５％ポリマーを使用した微粒子の調製
外水相がｄＨ2Ｏ  ５０ｇのみからなることを除いて実施例１１のように配合物を調製した。
【実施例１３】
【０１０８】
界面活性物質としてＴｗｅｅｎ  ８０（登録商標）を用いた固体タンパク質配合物、ＤＣＭ溶液中５％ポリマーを使用した微粒子の調製
ＢＳＡを水相に相対して固体配合物に使用した（バリンとの共結晶として）ことを除いて実施例１１のように配合物を調製した。この固体ＢＳＡ配合物０．１ｇを油相に直接添加し、ホモジナイズして油中固体型（ｓ／ｏ）エマルジョンを形成した。
【実施例１４】
【０１０９】
界面活性物質を用いない固体タンパク質配合物、ＤＣＭ溶液中５％ポリマーを使用した微粒子の調製
ＢＳＡを水相に相対して固体配合物に使用した（バリンとの共結晶として）ことを除いて実施例１１のように配合物を調製した。この固体ＢＳＡ配合物０．１ｇを油相に直接添加し、ホモジナイズして油中固体型（ｓ／ｏ）エマルジョンを形成した。外水相はｄＨ2Ｏ  ５０ｇのみからなっていた。
【実施例１５】
【０１１０】
界面活性物質としてＴｗｅｅｎ  ８０（登録商標）を用いたＤＣＭ溶液中２．５％ポリマーを使用した微粒子の調製
２．５％ポリマー溶液を形成するためのポリマー０．２５ｇをＤＣＭ１０ｇに溶解したことを除いて実施例１１のように配合物を調製した。
【実施例１６】
【０１１１】
界面活性物質としてＴｗｅｅｎ  ８０（登録商標）を用いたＤＣＭ溶液中５％ポリマーを使用した微粒子の調製
（Ｗ1／Ｏ）エマルジョンのＷ2への添加速度を減少させたことを除いて実施例１１のように配合物を調製した。
【実施例１７】
【０１１２】
界面活性物質としてＴｗｅｅｎ  ８０（登録商標）を用いた酢酸エチル（ＥＡ）溶液中１％ポリマーを使用した微粒子の調製
ポリマー０．１ｇをＥＡ１０ｇに溶解したことを除いて実施例１１のように配合物を調製した。
【実施例１８】
【０１１３】
界面活性物質としてＴｗｅｅｎ  ８０（登録商標）を用いたＥＡ溶液中２．５％ポリマーを使用した微粒子の調製
ポリマー０．２５ｇをＥＡ１０ｇに溶解したことを除いて実施例１１のように配合物を調製した。
【実施例１９】
【０１１４】
界面活性物質としてＴｗｅｅｎ  ８０（登録商標）を用いたＥＡ溶液中５％ポリマーを使用した微粒子の調製
ポリマー０．５ｇをＥＡ１０ｇに溶解したことを除いて実施例１１のように配合物を調製した。
【実施例２０】
【０１１５】
界面活性物質としてＰＥＧ６０００を用いたＥＡ溶液中１％ポリマーを使用した微粒子の調製
ポリマー０．１ｇをＥＡ１０ｇに添加し、外水相がｄＨ2Ｏ  ４８．５ｇ中ＰＥＧ６０００  １．５ｇからなることを除いて実施例１１のように配合物を調製した。
【実施例２１】
【０１１６】
界面活性物質としてＰＶＰを用いたＥＡ溶液中１％ポリマーを使用した微粒子の調製
ポリマー０．１ｇをＥＡ１０ｇに添加し、外水相がｄＨ2Ｏ  ４８．５ｇ中ＰＶＰ１．５ｇからなることを除いて実施例１１のように配合物を調製した。
【実施例２２】
【０１１７】
界面活性物質としてＰＶＡを用いたＥＡ溶液中１％ポリマーを使用した微粒子の調製
ポリマー０．１ｇをＥＡ１０ｇに添加し、外水相がｄＨ2Ｏ  ４８．５ｇ中ＰＶＡ１．５ｇからなることを除いて実施例１１のように配合物を調製した。
【実施例２３】
【０１１８】
微粒子の粒径決定
動的光散乱は、形成した微粒子の粒度分布を決定するために使用することができる方法である。動的光散乱粒度測定では、体積中位径Ｄ（ｖ、０．５）は粒度分布の５０％が上にあり、５０％が下にある直径である。Ｄ（ｖ、０．９）は、体積分布の９０％がこの値より下にある値である。Ｄ（ｖ、０．１）は、体積分布の１０％がこの値より下にある値である。スパンは、以下の式で示される、１０％、５０％および９０％分位数（ｑｕａｎｔｉｌｅ）に基づく分布の幅である：
【０１１９】
【数１】
2014525945.tif 000012
【０１２０】
種々の微粒子調製物を溶媒除去および遠心分離後に回収し、２０００ｒｐｍで撹拌ながら、Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ中ｄＨ2Ｏ（分散媒体として作用する）に直接添加して測定した。図１は、実施例１１で調製した微粒子から得られた典型的な粒度分布曲線を示している。
【０１２１】
表１０は、実施例１１、実施例１２、実施例１３、実施例１４、実施例１５、実施例１６、実施例１８、実施例１９、実施例２０、実施例２１、実施例２２で調製した微粒子についての平均粒径（Ｄ（ｖ、０．５））および粒度分布（スパン）を要約している。
【０１２２】
【表１０】
2014525945.tif 000013
【実施例２４】
【０１２３】
微粒子の画像分析
走査型電子顕微鏡法（ＳＥＭ）は、粒子形態を研究するために一般的に使用される技術である。実施例１７で調製した微粒子をＰｏｌａｒｏｎ  ＳＣ５１５  ＳＥＭコーティングシステムを使用した画像法の前に金コーティングした。次いで、これらをＪＥＯＬ  ６４００走査型電子顕微鏡で観察した。画像を、Ｓｃａｎｄｉｕｍソフトウェアを使用してとらえた。図２は、１０ミクロン未満の大きさの平均粒径を有する概して球形の粒子の形成を示している。
【図１】
2014525945.tif 000014
【図２】
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【国際調査報告】
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