(57)【要約】  本発明は、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を使用して、対象において喘息、例えば、軽度または中等度喘息を治療するための方法および組成物を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を含む単離された組成物であって、約０．３ｍｇ／ｋｇの用量で対象の静脈内に投与される場合、抗体またはその抗原結合部分が
（ａ）約１５００から約２７００μｇｈ／ｍｌの間の曲線下面積（ＡＵＣ）、
（ｂ）約６５から１２５ｍＬ／ｋｇの間の分布容積、
（ｃ）約５から約８μｇ／ｍｌの間のピーク濃度（Ｃｍａｘ）および
（ｄ）約０．１から約０．２ｍｌ／ｈ／ｋｇの間の排除速度
を示すことができる組成物。
【請求項２】
抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を含む単離された組成物であって、約３ｍｇ／ｋｇの用量で対象の静脈内に投与される場合、抗体またはその抗原結合部分が
（ａ）約２１０００から約３３５００μｇｈ／ｍｌの間の曲線下面積（ＡＵＣ）、
（ｂ）約５５から約１００ｍＬ／ｋｇの間の分布容積、
（ｃ）約５５から約９０μｇ／ｍｌの間のピーク濃度（Ｃｍａｘ）および
（ｄ）約０．０８から約０．１５ｍｌ／ｈ／ｋｇの間の排除速度
を示すことができる組成物。
【請求項３】
抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を含む単離された組成物であって、約１０ｍｇ／ｋｇの用量で対象の静脈内に投与される場合、抗体またはその抗原結合部分が
（ａ）約７５から約１００μｇｈ／ｍｌの間の曲線下面積（ＡＵＣ）、
（ｂ）約９０から約１３０ｍＬ／ｋｇの間の分布容積、
（ｃ）約１８５から約２５０μｇ／ｍｌの間のピーク濃度（Ｃｍａｘ）および
（ｄ）約０．１から約０．１５ｍｌ／ｈ／ｋｇの間の排除速度
を示すことができる組成物。
【請求項４】
抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を含む単離された組成物であって、約０．３ｍｇ／ｋｇの用量で対象の皮下に投与される場合、抗体またはその抗原結合部分が
（ａ）約１２５から約８００μｇｈ／ｍｌの間の曲線下面積（ＡＵＣ）および
（ｂ）約１．０から約６．０μｇ／ｍｌの間のピーク濃度（Ｃｍａｘ）
を示すことができる組成物。
【請求項５】
抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を含む単離された組成物であって、約３ｍｇ／ｋｇの用量で対象の皮下に投与される場合、抗体またはその抗原結合部分が
（ａ）約１１００から約８５００μｇｈ／ｍｌの間の曲線下面積（ＡＵＣ）および
（ｂ）約１２から約６０μｇ／ｍｌの間のピーク濃度（Ｃｍａｘ）
を示すことができる組成物。
【請求項６】
抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分が、１３Ｃ５．５またはその抗原結合部分である、請求項１から５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
組成物が、医薬組成物である、請求項１から５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
対象に請求項１から５のいずれか一項に記載の組成物を投与し、それによって前記対象における喘息を治療するまたは予防することを含む、対象において喘息を治療するまたは予防する方法。
【請求項９】
組成物が、１回投与される、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
組成物が、毎週投与される、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
組成物が、約３週間投与される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
喘息が、軽度から中等度喘息である、請求項８に記載の方法。
【請求項１３】
追加の薬剤を前記対象に投与することをさらに含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１４】
前記追加の薬剤が、治療剤、造影剤、細胞毒性剤、血管新生阻害剤、キナーゼ阻害剤、共刺激分子遮断剤、接着分子遮断剤、抗サイトカイン抗体またはその機能的断片、メトトレキサート、シクロスポリン、ラパマイシン、ＦＫ５０６、検出可能な標識またはレポーター、ＴＮＦアンタゴニスト、抗リウマチ薬、筋肉弛緩剤、麻酔薬、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、鎮痛剤、麻酔、鎮静剤、局所麻酔、神経筋肉遮断剤、抗微生物剤、抗乾癬剤、コルチコステロイド、アナボリックステロイド、エリスロポエチン、免疫化、イムノグロブリン、免疫抑制剤、成長ホルモン、ホルモン置換薬、放射性薬剤、抗うつ剤、抗精神病薬、刺激物質、喘息薬、βアゴニスト、吸引用ステロイド、経口ステロイド、エピネフリンまたは類似体、サイトカインおよびサイトカインアンタゴニストからなる群から選択される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を対象の静脈内に投与し、
（ａ）約５から約２３５μｇ／ｍＬの間の最大血清濃度（Ｃｍａｘ）および
（ｂ）約１５００から約９８０００μｇｈ／ｍＬの間の血清濃度−時間曲線下面積（ＡＵＣ）
からなる群から選択される少なくとも１つの薬物動態学的特徴が、抗体またはその抗原結合部分の前記対象への投与に続いて実現されることを含む、対象において喘息を治療する方法。
【請求項１６】
抗体またはその抗原結合部分が約０．３ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
Ｃｍａｘが、約５から約１０μｇ／ｍＬの間である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
ＡＵＣが、約１５００から約２７００μｇｈ／ｍＬの間である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
抗体またはその抗原結合部分が、約３ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項１５に記載の方法。
【請求項２０】
Ｃｍａｘが、約５５から約９０μｇ／ｍＬの間である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
ＡＵＣが、約２００００から約３４０００μｇｈ／ｍＬの間である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２２】
抗体またはその抗原結合部分が、約１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項１５に記載の方法。
【請求項２３】
Ｃｍａｘが、約１９０から約２３５μｇ／ｍＬの間である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
ＡＵＣが、約７５０００から約１０００００μｇｈ／ｍＬの間である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
Ｃｍａｘ値が、用量正規化後、約２０から約３０（μｇ／ｍＬ）／（ｍｇ／ｋｇ）の間である、請求項１５に記載の方法。
【請求項２６】
ＡＵＣが、用量正規化後、約６０００から約１００００（μｇｈ／ｍＬ）（ｍｇ／ｋｇ）の間である、請求項１５に記載の方法。
【請求項２７】
抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を対象に皮下投与し、
（ａ）約１から約６０μｇ／ｍＬの間の最大血清濃度（Ｃｍａｘ）および
（ｂ）約１２５から約８１００μｇｈ／ｍＬの間の血清濃度−時間曲線下面積（ＡＵＣ）
からなる群から選択される少なくとも１つの薬物動態学的特徴が、抗体またはその抗原結合部分の前記対象への投与に続いて実現されることを含む、対象において喘息を治療する方法。
【請求項２８】
抗体またはその抗原結合部分が、約０．３ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
Ｃｍａｘが、約１から約６μｇ／ｍＬの間である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
ＡＵＣが、約１００から約８００μｇｈ／ｍＬの間である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３１】
抗体またはその抗原結合部分が、約３ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項２７に記載の方法。
【請求項３２】
Ｃｍａｘが、約１２から約６０μｇ／ｍＬの間である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
ＡＵＣが、約１１００から約８１００μｇｈ／ｍＬの間である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分が、１３Ｃ５．５またはその抗原結合部分である、請求項１５または２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分が、１回投与される、請求項１５または２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分が、毎週投与される、請求項１５または２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７】
抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分が、３週間投与される、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記喘息が、軽度から中等度喘息である、請求項１５または２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９】
追加の薬剤の投与をさらに含む、請求項１５または２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０】
前記追加の薬剤が、治療剤、造影剤、細胞毒性剤、血管新生阻害剤、キナーゼ阻害剤、共刺激分子遮断剤、接着分子遮断剤、抗サイトカイン抗体またはその機能的断片、メトトレキサート、シクロスポリン、ラパマイシン、ＦＫ５０６、検出可能な標識またはレポーター、ＴＮＦアンタゴニスト、抗リウマチ剤、筋肉弛緩剤、麻酔薬、非ステロイド抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、鎮痛剤、麻酔、鎮静剤、局所麻酔、神経筋肉遮断剤、抗微生物剤、抗乾癬剤、コルチコステロイド、アナボリックステロイド、エリスロポエチン、免疫化、イムノグロブリン、免疫抑制剤、成長ホルモン、ホルモン置換薬、放射性医薬、抗うつ剤、抗精神病薬、刺激物質、喘息薬、βアゴニスト、吸入用ステロイド、経口ステロイド、エピネフリンまたは類似体、サイトカイン、およびサイトカインアンタゴニストからなる群から選択される、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を約０．３ｍｇ／ｋｇの用量で対象の皮下に投与し、
（ａ）約２４日から３１日の間の半減期、
（ｂ）約３日から約５日の間のＴｍａｘおよび
（ｃ）少なくとも約６０％の生物学的利用率
からなる群から選択される少なくとも１つの薬物動態学的特徴が、抗体またはその抗原結合部分の前記対象への投与に続いて実現されることを含む、対象において喘息を治療する方法。
【請求項４２】
生物学的利用率が、少なくとも約７０％である、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を約３ｍｇ／ｋｇの用量で対象の皮下に投与し、
（ａ）約２３日から２６日の間の半減期、
（ｂ）約５日以下のＴｍａｘおよび
（ｃ）少なくとも約６０％の生物学的利用率
からなる群から選択される少なくとも１つの薬物動態学的特徴が、抗体またはその抗原結合部分の前記対象への投与に続いて実現されることを含む、対象において喘息を治療する方法。
【請求項４４】
生物学的利用率が、少なくとも約７０％である、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を約０．３ｍｇ／ｋｇの用量で対象の静脈内に投与し、
（ａ）約０．１１から約０．１９ｍＬ／ｈｒ／ｋｇの間の排除速度および
（ｂ）約７０から約１３０ｍＬ／ｋｇの間の分布容積からなる群から選択される少なくとも１つの薬物動態学的特徴が、抗体またはその抗原結合部分の前記対象への投与に続いて実現されることを含む、対象において喘息を治療する方法。
【請求項４６】
抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を約３ｍｇ／ｋｇの用量で対象の静脈内に投与し、
（ａ）約０．０８から約０．１４ｍＬ／ｈｒ／ｋｇの間の排除速度および
（ｂ）約５５から約１００ｍＬ／ｋｇの間の分布容積からなる群から選択される少なくとも１つの薬物動態学的特徴が、抗体またはその抗原結合部分の前記対象への投与に続いて実現されることを含む、対象において喘息を治療する方法。
【請求項４７】
抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を約１０ｍｇ／ｋｇの用量で対象の静脈内に投与し、
（ａ）約０．０９から約０．１３ｍＬ／ｈｒ／ｋｇの間の排除速度および
（ｂ）約８５から約１３０ｍＬ／ｋｇの間の分布容積からなる群から選択される少なくとも１つの薬物動態学的特徴が、抗体またはその抗原結合部分の前記対象への投与に続いて実現されることを含む、対象において喘息を治療する方法。
【請求項４８】
抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分が、１３Ｃ５．５またはその抗原結合部分である、請求項４１から４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４９】
抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分が、１回投与される、請求項４１から４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５０】
抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分が、毎週投与される、請求項４１から４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５１】
抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分が、３週間投与される、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
前記喘息が、軽度から中等度喘息である、請求項４１から４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５３】
追加の薬剤を、前記対象に投与することをさらに含む、請求項４１から４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５４】
前記追加の薬剤が、治療剤、造影剤、細胞毒性剤、血管新生阻害剤、キナーゼ阻害剤、共刺激分子遮断剤、接着分子遮断剤、抗サイトカイン抗体またはその機能的断片、メトトレキサート、シクロスポリン、ラパマイシン、ＦＫ５０６、検出可能な標識またはレポーター、ＴＮＦアンタゴニスト、抗リウマチ薬、筋肉弛緩剤、麻酔薬、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、鎮痛剤、麻酔、鎮静剤、局所麻酔、神経筋肉遮断剤、抗微生物剤、抗乾癬剤、コルチコステロイド、アナボリックステロイド、エリスロポエチン、免疫化、イムノグロブリン、免疫抑制剤、成長ホルモン、ホルモン置換薬、放射性医薬、抗うつ剤、抗精神病薬、刺激物質、喘息薬、βアゴニスト、吸入用ステロイド、経口ステロイド、エピネフリンまたは類似体、サイトカインおよびサイトカインアンタゴニストからなる群から選択される、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記対象が、ヒトである、請求項１から５のいずれか一項に記載の組成物または請求項１５、２７、４１、４３もしくは４５から４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５６】
抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を含む単離された組成物であって、約０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇの用量で対象に静脈内投与されると、抗体またはその抗原結合部分が本明細書、表または図に記載される薬物動態パラメータのいずれかを示すことができる組成物。
【請求項５７】
抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を含む単離された組成物であって、約０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇまたは３ｍｇ／ｋｇの用量で対象に皮下投与されると、抗体またはその抗原結合部分が本明細書、表または図に記載される薬物動態パラメータのいずれかを示すことができる組成物。
【請求項５８】
抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を、約０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇの用量で対象の静脈内に投与し、本明細書、表または図に記載される薬物動態学的特徴のうちの少なくとも１つが、抗体またはその抗原結合部分の前記対象への投与に続いて実現されることを含む、対象において喘息を治療するまたは予防する方法。
【請求項５９】
抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を、約０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇの用量で対象の皮下に投与し、本明細書、表または図に記載される薬物動態学的特徴のうちの少なくとも１つが、抗体またはその抗原結合部分の前記対象への投与に続いて実現されることを含む、対象において喘息を治療するまたは予防する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１１年７月１３日提出の米国特許仮出願第６１／５０７３４７号明細書の優先権を主張するものであり、前記特許文献はこれによりその全内容を参照により本明細書に組み込む。
【背景技術】
【０００２】
喘息は、喘鳴音、息切れ、胸苦しさおよび咳により特徴付けられる気道の慢性炎症性障害である。米国ではおよそ２０００万人が喘息に罹り、喘息患者の約７５％が成人である。成人喘息患者のうち、喘息患者のおよそ６０％が軽度疾患、約２０％が中等度疾患、残りの２０％が重度疾患に罹っている。
【０００３】
インターロイキン−１３（ＩＬ−１３）は、上昇レベルのＩＬ−１３が喘息患者の肺に存在し、これらのレベルは疾患重症度と相関している点で、ヒト喘息の病変形成において極めて重要であると考えられている（図１）。同様に、増加したＩＬ−１３は、中等度から重症喘息の患者で吸入コルチコステロイド（ＩＣＳ）または全身性コルチコステロイドで治療され、症状を示し続けている患者の唾液にも肺検体にも存在する。さらに、ヒトＩＬ−１３遺伝子多型は喘息およびアトピー（アレルギー性過敏症）に関連している。ＩＬ−１３は２種類の受容体、ＩＬ−１３Ｒα１およびＩＬ−１３Ｒα２に結合する。ＩＬ−１３は、喘息の複数の前臨床モデルにおいて様々な手段のＩＬ−１３アンタゴニズムを使用して有効性が実証されているので、十分に確認された喘息の標的である。
【０００４】
種々のヒト障害におけるヒトＩＬ−１３の役割のせいで、治療方針はＩＬ−１３活性を阻害するまたは相殺するように設計されてきた。特に、ＩＬ−１３に結合して中和する抗体がＩＬ−１３活性を阻害する手段として求められてきた。しかし、喘息を治療するためにＩＬ−１３に結合することができる改良された抗体の必要性が当技術分野には存在する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を使用して、喘息、例えば、軽度または中等度喘息を治療するための方法および組成物を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
一態様では、本発明は抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を含む単離された組成物であって、約０．３ｍｇ／ｋｇの用量で対象の静脈内に投与される場合、抗体またはその抗原結合部分が（ａ）約１５００から約２７００μｇｈ／ｍｌの間の曲線下面積（ＡＵＣ）；（ｂ）約６５から１２５ｍＬ／ｋｇの間の分布容積；（ｃ）約５から約８μｇ／ｍｌの間のピーク濃度（Ｃｍａｘ）および（ｄ）約０．１から約０．２ｍｌ／ｈ／ｋｇの間の排除速度を示すことができる組成物を提供する。
【０００７】
別の態様では、本発明は抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を含む単離された組成物であって、約３ｍｇ／ｋｇの用量で対象の静脈内に投与される場合、抗体またはその抗原結合部分が（ａ）約２１０００から約３３５００μｇｈ／ｍｌの間の曲線下面積（ＡＵＣ）；（ｂ）約５５から約１００ｍＬ／ｋｇの間の分布容積；（ｃ）約５５から約９０μｇ／ｍｌの間のピーク濃度（Ｃｍａｘ）および（ｄ）約０．０８から約０．１５ｍｌ／ｈ／ｋｇの間の排除速度を示すことができる組成物を提供する。
【０００８】
別の態様では、本発明は抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を含む単離された組成物であって、約１０ｍｇ／ｋｇの用量で対象の静脈内に投与される場合、抗体またはその抗原結合部分が（ａ）約７５から約１００μｇｈ／ｍｌの間の曲線下面積（ＡＵＣ）；（ｂ）約９０から約１３０ｍＬ／ｋｇの間の分布容積；（ｃ）約１８５から約２５０μｇ／ｍｌの間のピーク濃度（Ｃｍａｘ）および（ｄ）約０．１から約０．１５ｍｌ／ｈ／ｋｇの間の排除速度を示すことができる組成物を提供する。
【０００９】
さらに別の態様では、本発明は抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を含む単離された組成物であって、約０．３ｍｇ／ｋｇの用量で対象の皮下に投与される場合、抗体またはその抗原結合部分が（ａ）約１２５から約８００μｇｈ／ｍｌの間の曲線下面積（ＡＵＣ）；および（ｂ）約１．０から約６．０μｇ／ｍｌの間のピーク濃度（Ｃｍａｘ）を示すことができる組成物を提供する。
【００１０】
別の態様では、本発明は抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を含む単離された組成物であって、約３ｍｇ／ｋｇの用量で対象の皮下に投与される場合、抗体またはその抗原結合部分が（ａ）約１１００から約８５００μｇｈ／ｍｌの間の曲線下面積（ＡＵＣ）；および（ｂ）約１２から約６０μｇ／ｍｌの間のピーク濃度（Ｃｍａｘ）を示すことができる組成物を提供する。
【００１１】
一実施形態では、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分は１３Ｃ５．５またはその抗原結合部分である。別の実施形態では、組成物は医薬組成物である。
【００１２】
別の態様では、本発明は、対象に本発明の組成物を投与しそれによって喘息を治療するまたは予防することにより、対象において喘息を治療するまたは予防する方法を提供する。一実施形態では、組成物は１回投与される。別の実施形態では、組成物は毎週投与される。さらに別の実施形態では、組成物は約３週間投与される。
【００１３】
一実施形態では、喘息は軽度から中等度喘息である。別の実施形態では、対象はヒトである。
【００１４】
別の実施形態では、方法は追加の薬剤の投与をさらに含む。一実施形態では、追加の薬剤は、治療剤、造影剤、細胞毒性剤、血管新生阻害剤、キナーゼ阻害剤、共刺激分子遮断剤、接着分子遮断剤、抗サイトカイン抗体またはその機能的断片、メトトレキサート、シクロスポリン、ラパマイシン、ＦＫ５０６、検出可能な標識またはレポーター、ＴＮＦアンタゴニスト、抗リウマチ薬、筋肉弛緩剤、麻酔薬、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＴＨＥ）、鎮痛剤、麻酔、鎮静剤、局所麻酔、神経筋肉遮断剤、抗微生物剤、抗乾癬剤、コルチコステロイド、アナボリックステロイド、エリスロポエチン、免疫化、イムノグロブリン、免疫抑制剤、成長ホルモン、ホルモン置換薬、放射性薬剤、抗うつ剤、抗精神病薬、刺激物質、喘息薬、βアゴニスト、吸引用ステロイド、経口ステロイド、エピネフリンまたは類似体、サイトカインおよびサイトカインアンタゴニストからなる群から選択される。
【００１５】
別の態様では、本発明は抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を対象の静脈内に投与し、（ａ）約５から約２３５μｇ／ｍＬの間の最大血清濃度（Ｃｍａｘ）および（ｂ）約１５００から約９８０００μｇｈ／ｍＬの間の血清濃度−時間曲線下面積（ＡＵＣ）からなる群から選択される少なくとも１つの薬物動態学的特徴が、抗体またはその抗原結合部分の対象への投与に続いて実現されることにより、対象において喘息を治療する方法を提供する。
【００１６】
一実施形態では、抗体またはその抗原結合部分は約０．３ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。一実施形態では、Ｃｍａｘは約５から約１０μｇ／ｍＬの間である。一実施形態では、ＡＵＣは約１５００から約２７００μｇｈ／ｍＬの間である。
【００１７】
別の実施形態では、抗体またはその抗原結合部分は約３ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。一実施形態では、Ｃｍａｘは約５５から約９０μｇ／ｍＬの間である。別の実施形態では、ＡＵＣは約２００００から約３４０００μｇｈ／ｍＬの間である。
【００１８】
別の実施形態では、抗体またはその抗原結合部分は約１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。一実施形態では、Ｃｍａｘは約１９０から約２３５μｇ／ｍＬの間である。一実施形態では、ＡＵＣは約７５０００から約１０００００μｇｈ／ｍＬの間である。
【００１９】
別の実施形態では、Ｃｍａｘ値は用量正規化後、約２０から約３０（μｇ／ｍＬ）／（ｍｇ／ｋｇ）の間である。別の実施形態では、ＡＵＣは用量正規化後、約６０００から約１００００（μｇｈ／ｍＬ）／（ｍｇ／ｋｇ）の間である。
【００２０】
別の態様では、本発明は抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を対象に皮下投与し、（ａ）約１から約６０μｇ／ｍＬの間の最大血清濃度（Ｃｍａｘ）および（ｂ）約１２５から約８１００μｇｈ／ｍＬの間の血清濃度−時間曲線下面積（ＡＵＣ）からなる群から選択される少なくとも１つの薬物動態学的特徴が、抗体またはその抗原結合部分の対象への投与に続いて実現されることにより、対象において喘息を治療する方法を提供する。
【００２１】
一実施形態では、抗体またはその抗原結合部分は約０．３ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。一実施形態では、Ｃｍａｘは、約１から約６μｇ／ｍＬの間である。別の実施形態では、ＡＵＣは、約１００から約８００μｇｈ／ｍＬの間である。
【００２２】
別の実施形態では、抗体またはその抗原結合部分は約３ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。一実施形態では、Ｃｍａｘは、約１２から約６０μｇ／ｍＬの間である。別の実施形態では、ＡＵＣは、約１１００から約８１００μｇｈ／ｍＬの間である。
【００２３】
一実施形態では、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分は１３Ｃ５．５またはその抗原結合部分である。別の実施形態では、対象はヒトである。別の実施形態では、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分は１回投与される。別の実施形態では、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分は毎週投与される。さらに別の実施形態では、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分は約３週間投与される。
【００２４】
一実施形態では、喘息は軽度から中等度喘息である。
【００２５】
別の実施形態では、方法は追加の薬剤の投与をさらに含む。一実施形態では、追加の薬剤は、治療剤、造影剤、細胞毒性剤、血管新生阻害剤、キナーゼ阻害剤、共刺激分子遮断剤、接着分子遮断剤、抗サイトカイン抗体またはその機能的断片、メトトレキサート、シクロスポリン、ラパマイシン、ＦＫ５０６、検出可能な標識またはレポーター、ＴＮＦアンタゴニスト、抗リウマチ薬、筋肉弛緩剤、麻酔薬、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＴＨＥ）、鎮痛剤、麻酔、鎮静剤、局所麻酔、神経筋肉遮断剤、抗微生物剤、抗乾癬剤、コルチコステロイド、アナボリックステロイド、エリスロポエチン、免疫化、イムノグロブリン、免疫抑制剤、成長ホルモン、ホルモン置換薬、放射性薬剤、抗うつ剤、抗精神病薬、刺激物質、喘息薬、βアゴニスト、吸引用ステロイド、経口ステロイド、エピネフリンまたは類似体、サイトカインおよびサイトカインアンタゴニストからなる群から選択される。
【００２６】
別の態様では、本発明は抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を約０．３ｍｇ／ｋｇの用量で対象の皮下に投与し、（ａ）約２４から３１日の間の半減期（ｂ）約３から約５日の間のＴｍａｘおよび（ｃ）少なくとも約６０％の生物学的利用率からなる群から選択される少なくとも１つの薬物動態学的特徴が、抗体またはその抗原結合部分の対象への投与に続いて実現されることにより、対象において喘息を治療するための方法を提供する。一実施形態では、生物学的利用率は少なくとも約７０％である。
【００２７】
別の態様では、本発明は抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を約３ｍｇ／ｋｇの用量で対象の皮下に投与し、（ａ）約２３から２６日の間の半減期（ｂ）約５日以下のＴｍａｘおよび（ｃ）少なくとも約６０％の生物学的利用率からなる群から選択される少なくとも１つの薬物動態学的特徴が、抗体またはその抗原結合部分の対象への投与に続いて実現されることにより、対象において喘息を治療する方法を提供する。一実施形態では、生物学的利用率は少なくとも約７０％である。
【００２８】
別の態様では、本発明は抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を約０．３ｍｇ／ｋｇの用量で対象の静脈内に投与し、（ａ）約０．１１から約０．１９ｍＬ／ｈｒ／ｋｇの間の排除速度および（ｂ）約７０から約１３０ｍＬ／ｋｇの間の分布容積からなる群から選択される少なくとも１つの薬物動態学的特徴が、抗体またはその抗原結合部分の対象への投与に続いて実現されることを含む、対象において喘息を治療する方法を提供する。
【００２９】
別の態様では、本発明は抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を約３ｍｇ／ｋｇの用量で対象の静脈内に投与し、（ａ）約０．０８から約０．１４ｍＬ／ｈｒ／ｋｇの間の排除速度および（ｂ）約５５から約１００ｍＬ／ｋｇの間の分布容積からなる群から選択される少なくとも１つの薬物動態学的特徴が、抗体またはその抗原結合部分の対象への投与に続いて実現されることにより、対象において喘息を治療する方法を提供する。
【００３０】
別の態様では、本発明は抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を約１０ｍｇ／ｋｇの用量で対象の静脈内に投与し、（ａ）約０．０９から約０．１３ｍＬ／ｈｒ／ｋｇの間の排除速度および（ｂ）約８５から約１３０ｍＬ／ｋｇの間の分布容積からなる群から選択される少なくとも１つの薬物動態学的特徴が、抗体またはその抗原結合部分の対象への投与に続いて実現されることを含む、対象において喘息を治療する方法を提供する。
【００３１】
一実施形態では、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分は１３Ｃ５．５またはその抗原結合部分である。別の実施形態では、対象はヒトである。一実施形態では、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分は１回投与される。別の実施形態では、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分は毎週投与される。さらに別の実施形態では、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分は３週間投与される。
【００３２】
一実施形態では、喘息は軽度から中等度喘息である。
【００３３】
別の実施形態では、方法は追加の薬剤の投与をさらに含む。一実施形態では、追加の薬剤は、治療剤、造影剤、細胞毒性剤、血管新生阻害剤、キナーゼ阻害剤、共刺激分子遮断剤、接着分子遮断剤、抗サイトカイン抗体またはその機能的断片、メトトレキサート、シクロスポリン、ラパマイシン、ＦＫ５０６、検出可能な標識またはレポーター、ＴＮＦアンタゴニスト、抗リウマチ薬、筋肉弛緩剤、麻酔薬、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＴＨＥ）、鎮痛剤、麻酔、鎮静剤、局所麻酔、神経筋肉遮断剤、抗微生物剤、抗乾癬剤、コルチコステロイド、アナボリックステロイド、エリスロポエチン、免疫化、イムノグロブリン、免疫抑制剤、成長ホルモン、ホルモン置換薬、放射性薬剤、抗うつ剤、抗精神病薬、刺激物質、喘息薬、βアゴニスト、吸引用ステロイド、経口ステロイド、エピネフリンまたは類似体、サイトカインおよびサイトカインアンタゴニストからなる群から選択される。
【００３４】
一実施形態では、対象はヒトである。
【００３５】
別の態様では、本発明は抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を含む単離された組成物であって、約０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇの用量で対象に静脈内投与されると、抗体またはその抗原結合部分が本明細書、表または図に記載される薬物動態パラメータのいずれかを示すことができる組成物を提供する。
【００３６】
別の態様では、本発明は抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を含む単離された組成物であって、約０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇまたは３ｍｇ／ｋｇの用量で対象に皮下投与されると、抗体またはその抗原結合部分が本明細書、表または図に記載される薬物動態パラメータのいずれかを示すことができる組成物を提供する。
【００３７】
別の態様では、本発明は抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を、約０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇの用量で対象の静脈内に投与し、本明細書、表または図に記載される薬物動態学的特徴のうちの少なくとも１つが、抗体またはその抗原結合部分の対象への投与に続いて実現されることにより、対象において喘息を治療するまたは予防する方法を提供する。
【００３８】
さらに別の態様では、本発明は抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を、約０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇの用量で対象の皮下に投与し、本明細書、表または図に記載される薬物動態学的特徴のうちの少なくとも１つが、抗体またはその抗原結合部分の対象への投与に続いて実現されることにより、対象において喘息を治療するまたは予防する方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００３９】
【図１】ＩＬ−１３発現が肺機能障害に先行することを示す図である。
【図２】抗ＩＬ−１３抗体である１３Ｃ５．５が、独自のエピトープおよび分化系統を有するハイブリドーマ由来であることを示す図である。
【図３】抗ＩＬ−１３抗体である１３Ｃ５．５が肺においてＩＬ−１３を中和することを示す図である。
【図４】第Ｉ相臨床試験において使用されるファーストインヒューマン（ＦＩＨ）投与の模式図を示している図である。
【図５】健康な対象への１３Ｃ５．５の単回０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇおよび１０ｍｇ／ｋｇ静脈内注入後の均等目盛での平均１３Ｃ５．５血清濃度−時間プロファイルを示す図である。
【図６】抗ＩＬ−１３抗体である１３Ｃ５．５の薬物動態パラメータを示す図である。
【図７】健康な対象および喘息対象への１３Ｃ５．５の単回０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇおよび１０ｍｇ／ｋｇ静脈内注入後の均等目盛での平均１３Ｃ５．５血清濃度−時間プロファイルを示す図である。
【図８】抗ＩＬ−１３抗体である１３Ｃ５．５の薬物動態パラメータを示す図である。
【図９】抗ＩＬ−１３抗体である１３Ｃ５．５の薬物動態パラメータを示す図である。
【図１０】抗ＩＬ−１３抗体である１３Ｃ５．５の薬物動態パラメータを示す図である。皮下投与に続く生物学的利用率は約７０％と推定された。
【図１１】１３Ｃ５．５の週３回０．３ｍｇ／ｋｇ（８群）および３ｍｇ／ｋｇ（９群）皮下注射に続く平均用量正規化されたＣｍａｘ値を示す図である（臨床試験の第３部）。
【図１２】１３Ｃ５．５の週３回０．３ｍｇ／ｋｇ（８群）および３ｍｇ／ｋｇ（９群）皮下注射に続く平均用量正規化されたＡＵＣ０−１６８値を示す図である（臨床試験の第３部）。
【発明を実施するための形態】
【００４０】
本発明は、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を使用して、喘息、例えば、軽度または中等度喘息を治療するための方法および組成物を提供する。
【００４１】
本発明をさらに容易に理解し得るために、いくつかの用語をまず定義する。
【００４２】
本明細書において使用される「ポリペプチド」という用語は、アミノ酸のあらゆるポリマー鎖を表す。「ペプチド」および「タンパク質」という用語は、ポリペプチドという用語と互換的に使用され、同じく、アミノ酸のポリマー鎖を表す。「ポリペプチド」という用語は、固有または人工のタンパク質、タンパク質断片およびタンパク質配列のポリペプチド類似体を包含する。ポリペプチドは、単量体または多量体であり得る。
【００４３】
「単離されたタンパク質」または「単離されたポリペプチド」という用語は、その由来起源または由来源のために、その固有の状態において当該タンパク質またはポリペプチドとともに存在する天然に随伴される成分を伴わないタンパク質またはポリペプチドであり、同じ種に由来する他のタンパク質を実質的に含まず、異なる種から得られた細胞によって発現され、または天然には存在しない。したがって、化学的に合成されたポリペプチド、またはポリペプチドが本来由来する細胞とは異なる細胞系の中で合成されたポリペプチドは、それに本来付随している成分から「単離」されている。タンパク質は、本分野で周知のタンパク質精製技術を使用し、単離によって、本来付随している成分が実質的に存在しないようにすることもできる。
【００４４】
本明細書において使用される「回収する」という用語は、例えば、本分野で周知のタンパク質精製技術を使用して、単離によって、ポリペプチドなどの化学種を、本来付随する成分を実質的に含まないようにする方法を表す。
【００４５】
用語「ＩＬ−１３」および「ＩＬ−１３野生型」（本明細書ではＩＬ−１３、ＩＬ−１３ｗｔと略記される。）は、本明細書で使用されるように、主にＴヘルパー２細胞により分泌されるサイトカインを含む。前記用語は１３ｋＤａポリペプチドの単量体タンパク質を含む。ＩＬ−１３の構造は、例えば、Ｍｏｙ，Ｄｉｂｌａｓｉｏ  ｅｔ  ａｌ．２００１年  Ｊ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ  ３１０  ２１９−３０頁にさらに記載されている。用語ＩＬ−１３は、標準組換え発現法により調製することが可能な組換えヒトＩＬ−１３（ｒｈＩＬ−１３）を含むことが意図されている。ヒトＩＬ−１３のアミノ酸配列、配列番号１は当技術分野では公知である。
【００４６】
ヒトＩＬ−１３の配列−配列番号１
【００４７】
【化１】
2014520847.tif 000002
【００４８】
用語「ＩＬ−１３バリアント」（本明細書ではＩＬ−１３ｖと略記される。）は、本明細書で使用されるように、配列番号１のアミノ酸残基１３０がアルギニンからグルタミンに変えられているＩＬ−１３のバリアント（Ｒ１３０Ｑ）を含む。
【００４９】
本明細書で使用される「生物活性」とは、サイトカインのあらゆる固有の生物学的特性のことである。ＩＬ−１３の生物学的特性には、ＩＬ−１３受容体に結合することを含むが、これに限定されない（他の例には、ヒトＢ細胞内でＩｇＥに転換し、炎症性サイトカイン産生を抑制するイムノグロブリンアイソタイプが含まれる。）。
【００５０】
第二の化学種との抗体、タンパク質またはペプチドの相互作用に関して、本明細書において使用される「特異的結合」または「特異的に結合する」という用語は、相互作用が、化学種、例えば、抗体上の特定の構造（例えば、抗原決定基またはエピトープ）の存在に依存し、例えば、抗体がタンパク質一般ではなく、特異的なタンパク質構造を認識し、結合することを意味する。抗体がエピトープ「Ａ」に対して特異的であれば、標識された「Ａ」および抗体を含有する反応中での、エピトープＡを含有する分子（すなわち、標識されていない遊離のＡ）の存在は、抗体に結合した、標識されたＡの量を減少させる。
【００５１】
本明細書において使用される「抗体」という用語は、４つのポリペプチド鎖（２つの重（Ｈ）鎖および２つの軽（Ｌ）鎖）から構成されるあらゆる免疫グロブリン（Ｉｇ）分子またはＩｇ分子の本質的なエピトープ結合特性を保持したすべての機能的断片、変異体、バリアントまたはこれらの誘導体を広く表すものとする。このような変異体、バリアントまたは誘導体抗体のフォーマットは、本分野において公知である。これらの非限定的な実施形態は、本明細書に論述されている。一実施形態では、本発明の組成物および方法において使用される抗体は、米国特許第７，９１５，３８８号に記載される抗ＩＬ−１３抗体１３Ｃ５．５であり、前記特許文献は参照により本明細書に組み込む。別の実施形態では、本発明の組成物および方法において使用される抗体は、抗体６Ａ１、３Ｇ４、トラロキヌマブ（ｔｒａｌｏｋｉｎｕｍａｂ）、レブリキズマブ（ｌｅｂｒｉｋｉｚｕｍａｂ）、ＱＡＺ−５７６、ＩＭＡ−６３８またはＩＭＡ−０２６である。
【００５２】
完全長の抗体において、各重鎖は、重鎖可変領域（本明細書において、ＩＩＣＶＲまたはＶＩＩと略称される。）および重鎖定常領域から構成される。重鎖定常領域は、３つのドメインＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３から構成される。各軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書において、ＬＣＶＲまたはＶＬと略称される。）および軽鎖定常領域から構成される。軽鎖定常領域は、１つのドメインＣＬから構成される。ＶＨおよびＶＬ領域は、より保存された領域（フレームワーク領域（ＦＲ）と称される。）が散在された超可変領域（相補性決定領域（ＣＤＲ）と称される。）へ、さらに細分割することが可能である。各ＶＨおよびＶＬは、ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順で、アミノ末端からカルボキシ末端に配置された３つのＣＤＲおよび４つのＦＲから構成される。免疫グロブリン分子は、あらゆる種類（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡおよびＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２）またはサブクラスであり得る。
【００５３】
本明細書において使用される抗体の「抗原結合部分」（または単に「抗体部分」）という用語は、抗原（例えば、ＩＬ−１３）に特異的に結合する能力を保持する、抗体の１つ以上の断片を表す。抗体の抗原結合機能は、完全長抗体の断片によって実行可能であることは示されている。このような抗体の実施形態は、二特異的、二重特異的または多重特異的フォーマットでもあり得、２つまたはそれ以上の異なる抗原に特異的に結合する。抗体の「抗原結合部分」という用語に包含される結合断片の例には、（ｉ）Ｆａｂ断片（ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインからなる一価断片）、（ｉｉ）Ｆ（ａｂ’）２断片（ヒンジ領域において、ジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片）、（ｉｉｉ）ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片、（ｉｖ）抗体の単一アームのＶＬおよびＶＨドメインからなるＦｖ断片、（ｖ）単一の可変ドメインを含むｄＡｂ断片（Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ  ３４１：５４４−５４６、参照により本明細書に組み込まれる、Ｗｉｎｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＣＴ公開ＷＯ９０／０５１４４Ａ１）および（ｖｉ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）が含まれる。さらに、Ｆｖ断片の２つのドメインであるＶＬおよびＶＨは別個の遺伝子によってコードされているが、これらは、ＶＬおよびＶＨ領域が対合して一価分子を形成している単一のタンパク質鎖として、これらの作製を可能とする合成リンカーによって、組換え法を用いて連結することが可能である（一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として知られている。例えば、Ｂｉｒｄ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６およびＨｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：５８７９−５８８３を参照）。このような一本鎖抗体も、抗体の「抗原結合部分」という用語に包含されるものとする。ダイアボディなどの一本鎖抗体の他の形態も包含される。ダイアボディは、ＶＨおよびＶＬドメインが一本鎖ポリペプチド鎖上に発現されているが、同一鎖上にある２つのドメイン間での対合を可能とするには短すぎるリンカーを使用することにより、両ドメインを別の鎖の相補的ドメインと対合するように強制し、２つの抗原結合部位を作出する二価の二特異的抗体である（例えば、Ｈｏｌｌｉｇｅｒ，Ｐ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：６４４４−６４４８；Ｐｏｌｊａｋ，Ｒ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ２：１１２１−１１２３を参照）。このような抗体結合部分は、本分野において公知である（Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ  ａｎｄ  Ｄｕｂｅｌ  ｅｄｓ．，Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ（２００１）Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ．Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ．７９０  ｐｐ．（ＩＳＢＮ３−５４０−４１３５４−５）。
【００５４】
本明細書で使用される「抗体構築物」という用語は、リンカーポリペプチドまたは免疫グロブリン定常ドメインに連結された本発明の抗原結合部分のうちの１つ以上を含むポリペプチドを表す。リンカーポリペプチドはペプチド結合により結合された２つ以上のアミノ酸残基を含み、１つ以上の抗原結合部分を連結するのに使用される。該リンカーポリペプチドは当技術分野では周知である（例えば、Ｈｏｌｌｉｇｅｒ，Ｐ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：６４４４−６４４８頁；Ｐｏｌｊａｋ，Ｒ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ２：１１２１−１１２３頁参照）。免疫グロブリン定常ドメインとは、重または軽鎖定常ドメインを表す。ヒトＩｇＧ重鎖および軽鎖定常ドメインアミノ酸配列は当技術分野では公知であり、その内容の全体が参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第７，９１５，３８８号の表２に開示されている。
【００５５】
さらに、抗体またはその抗原結合部分は、前記抗体または抗体部分と１つ以上の他のタンパク質もしくはペプチドとの共有結合または非共有結合により形成されるさらに大きな免疫接着分子の一部であり得る。該免疫接着分子の例は、四量体ｓｃＦｖ分子を作製するためのストレプトアビジンコア領域の使用（Ｋｉｐｒｉｙａｎｏｖ，Ｓ．Ｍ．、ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｈｕｍａｎ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ  ６：９３−１０１頁）ならびに二価およびビオチン化ｓｃＦｖ分子を作製するためのシステイン残基、マーカーペプチドおよびＣ末端ポリヒスチジンタグの使用（Ｋｉｐｒｉｙａｎｏｖ，Ｓ．Ｍ．、ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３１：１０４７−１０５８頁）を含む。ＦａｂおよびＦ（ａｂ’）２断片などの抗体部分は、全抗体のそれぞれパパインまたはペプシン消化などの従来の技法を使用して全抗体から調製することが可能である。さらに、抗体、抗体部分および免疫接着分子は、本明細書に記載されている標準組換えＤＮＡ技法を使用して得ることが可能である。
【００５６】
本明細書で使用される「単離された抗体」は、異なる抗原特異性を有する他の抗体が実質的にない抗体（例えば、ＩＬ−１３に特異的に結合する単離された抗体はＩＬ−１３以外の抗原に特異的に結合する抗体が実質的にない。）を表すものとする。しかし、ＩＬ−１３に特異的に結合する単離された抗体は、他の種由来のＩＬ−１３分子などの他の抗原に交差反応性を有し得る。さらに、単離された抗体は、他の細胞物質および／または化学物質が実質的にないことがあり得る。
【００５７】
本明細書において使用される「ヒト抗体」という用語は、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域および定常領域を有する抗体を含むものとする。本発明のヒト抗体は、例えば、ＣＤＲ、特にＣＤＥ３中に、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列によってコードされないアミノ酸残基（例えば、インビトロでのランダムな突然変異導入もしくは部位特異的突然変異導入によって、またはインビボでの体細胞変異によって導入された変異）を含み得る。しかしながら、本明細書において使用される「ヒト抗体」という用語は、マウスなどの別の哺乳動物種の生殖系列に由来するＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列上に移植された抗体を含まないものとする。
【００５８】
本明細書において使用される「組換えヒト抗体」という用語は、宿主細胞中に形質移入された組換え発現ベクターを用いて発現された抗体（その内容が参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第７，９１５，３８８号にさらに記載されている。）、組換えコンビナトリアルヒト抗体ライブラリーから単離された抗体（Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  Ｈ．Ｒ．，（１９９７）ＴＩＢ  Ｔｅｃｈ．１５：６２−７０；Ａｚｚａｚｙ  Ｈ．，ａｎｄ  Ｈｉｇｈｓｍｉｔｈ  Ｗ．Ｅ．，（２００２）Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．３５：４２５−４４５；Ｇａｖｉｌｏｎｄｏ  Ｊ．Ｖ．，ａｎｄ  Ｌａｒｒｉｃｋ  Ｊ．Ｗ．（２００２）ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ２９：１２８−１４５；Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  Ｈ．，ａｎｄ  Ｃｈａｍｅｓ  Ｐ．（２０００）Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｔｏｄａｙ  ２１：３７１−３７８）、ヒト免疫グロブリン遺伝子に対して遺伝子導入されている動物（例えば、マウス）から単離された抗体（例えば、Ｔａｙｌｏｒ，Ｌ．Ｄ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９２）Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２０：６２８７−６２９５；Ｋｅｌｌｅｒｍａｎｎ  Ｓ−Ａ．，ａｎｄ  Ｇｒｅｅｎ  Ｌ．Ｌ．（２００２）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １３：５９３−５９７；Ｌｉｔｔｌｅ  Ｍ．ｅｔ  ａｌ（２０００）Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｔｏｄａｙ  ２１：３６４−３７０参照）またはヒト免疫グロブリン遺伝子配列の、他のＤＮＡ配列へのスプライシングを含む他のいずれかの手段によって調製され、発現され、作製され、もしくは単離された抗体など、組換え手段によって調製され、発現され、作製され、もしくは単離されたすべてのヒト抗体を含むものとする。このような組換えヒト抗体は、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域および定常領域を有する。しかしながら、ある種の実施形態において、このような組換えヒト抗体は、インビトロ突然変異導入（または、ヒトＩｇ配列に対して遺伝子導入された動物が使用される場合には、インビボ体細胞突然変異導入）に供され、したがって、組換え抗体のＶＨおよびＶＬ領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖系列ＶＨおよびＶＬ配列に由来し、これらの配列に関連しつつも、インビボで、ヒト抗体生殖系列レパートリー内には、天然に存在しない場合があり得る配列である。一実施形態は、Ｊｅｒｍｕｔｕｓ  ｅｔ  ａｌ．、ＰＣＴ出願番号ＷＯ  ２００５／００７６９９  Ａ２に開示されているライブラリーなどのヒトＩｇファージライブラリーを使用するなどの、しかしこれに限定されない当技術分野で周知の技法を使用して産生することができるヒトＩＬ−１３に結合することができる完全ヒト抗体を提供する。
【００５９】
「キメラ抗体」という用語は、ヒト定常領域に連結されたマウス重鎖および軽鎖可変領域を有する抗体など、ある種に由来する重鎖および軽鎖可変領域配列ならびに別の種に由来する定常領域配列を含む抗体を表す。
【００６０】
「ＣＤＲ移植された抗体」という用語は、マウスＣＤＲの１つ以上（例えば、ＣＤＲ３）がヒトＣＤＲ配列で置換されているマウス重鎖および軽鎖可変領域を有する抗体など、ある種に由来する重鎖および軽鎖可変領域配列を含むが、ＶＨおよび／またはＶＬのＣＤＲ領域の１つ以上の配列が、別の種のＣＤＲ配列と置換されている抗体を表す。
【００６１】
用語「ヒト化抗体」とは、非ヒト種（例えば、マウス）由来の重鎖および軽鎖可変領域配列を含むが、ＶＨおよび／またはＶＬ配列の少なくとも１部がより「ヒトに近い」、すなわち、ヒト生殖系列可変配列により類似しているように変更されている抗体のことである。ヒト化抗体の一種は、ＣＤＲ移植抗体であり、この抗体ではヒトＣＤＲ配列が非ヒトＶＨおよびＶＬ配列中に導入されて対応する非ヒトＣＤＲ配列に取って代わっている。一実施形態では、ヒト化抗ヒトＩＬ−１３抗体および抗原結合部分が提供される。該抗体は、Ｋａｓａｉａｎ  ｅｔ  ａｌ  ＰＣＴ出願番号ＷＯ  ２００５／１２３１２６  Ａ２に開示されている抗体などの、伝統的ハイブリドーマ技術、続いてインビトロ遺伝子操作を使用するヒト化を使用してマウス抗ＩＬ−１３モノクローナル抗体を得ることにより産生された。
【００６２】
「Ｋａｂａｔ番号」、「Ｋａｂａｔ定義」および「Ｋａｂａｔ標識」という用語は、本明細書において、互換的に使用される。本分野において認められているこれらの用語は、抗体またはその抗原結合部分の重鎖および軽鎖可変領域中の他のアミノ酸残基に比べて、より可変的な（すなわち、超可変的な）アミノ酸残基に付番するシステムを表す（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９７１）Ａｎｎ．ＮＹ  Ａｃａ，Ｓｃｉ．１９０：３８２−３９１およびＫａｂａｔ，Ｅ．Ａ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  ＮＯ．９１−３２４２）。重鎖可変領域の場合、超可変領域は、ＣＤＲ１に対するアミノ酸位置３１から３５、ＣＤＲ２に対するアミノ酸位置５０から６５およびＣＤＲ３に対するアミノ酸位置９５から１０２にわたる。軽鎖可変領域の場合、超可変領域は、ＣＤＲ１に対するアミノ酸位置２４から３４、ＣＤＲ２に対するアミノ酸位置５０から５６およびＣＤＲ３に対するアミノ酸位置８９から９７にわたる。
【００６３】
本明細書で使用されるように、用語「アクセプター」および「アクセプター抗体」とは、フレームワーク領域のうちの１つ以上のアミノ酸配列の少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％を提供するまたはコードする抗体または核酸配列のことである。いくつかの実施形態では、用語「アクセプター」とは、定常領域を提供するまたはコードする抗体アミノ酸または核酸配列のことである。さらに別の実施形態では、用語「アクセプター」とは、フレームワーク領域のうちの１つ以上および定常領域を提供するまたはコードする抗体アミノ酸または核酸配列のことである。特定の実施形態では、用語「アクセプター」とは、フレームワーク領域のうちの１つ以上のアミノ酸配列の少なくとも８０％、好ましくは少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または１００％を提供するまたはコードするヒト抗体アミノ酸または核酸配列のことである。この実施形態に従って、アクセプターは、ヒト抗体の１つ以上の特定の位置に存在しない少なくとも１個、少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個または少なくとも１０個のアミノ酸残基を含有し得る。アクセプターフレームワーク領域および／またはアクセプター定常領域は、例えば、生殖系列抗体遺伝子、成熟抗体遺伝子、機能的抗体（例えば、当技術分野で周知の抗体、開発中の抗体または市販されている抗体）に由来する、またはそれらから得られてもよい。
【００６４】
本明細書で使用される「ＣＤＲ」という用語は、抗体可変配列内の相補性決定領域を表す。重鎖および軽鎖の各可変領域中には３つのＣＤＲが存在し、これらは、各可変領域に対して、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３と表記される。本明細書において使用される「ＣＤＲセット」という用語は、抗原に結合することが可能な単一の可変領域中に存在する３つのＣＤＲの群を表す。これらのＣＤＲの正確な境界は、異なる系に従って、異なって定義されてきた。Ｋａｂａｔによって記載された系（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９８７）ａｎｄ（１９９１））は、抗体のいずれの可変領域に対しても適用可能な明瞭な残基付番系を提供するのみならず、３つのＣＤＲを定義する正確な残基境界を提供する。これらのＣＤＲは、ＫａｂａｔＣＤＲと称され得る。Ｃｈｏｔｈｉａおよび共同研究者（Ｃｈｏｔｈｉａ＆Ｌｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７（１９８７）およびＣｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３４２：８７７−８８３（１９８９））は、ＫａｂａｔＣＤＲ内のある種の亜部分が、アミノ酸配列のレベルで大きな多様性を有するにも関わらず、ほぼ同一のペプチド骨格立体構造を採ることを見出した。これらの亜部分は、Ｌ１、Ｌ２およびＬ３またはＨ１、Ｈ２およびＨ３（「Ｌ」および「Ｈ」は、それぞれ、軽鎖および重鎖領域を表記する。）と表記される。これらの領域は、ＣｈｏｔｈｉａＣＤＲと称される場合があり、これは、ＫａｂａｔＣＤＲと重複する境界を有する。ＫａｂａｔＣＤＲと重複するＣＤＲを定義する他の境界が、Ｐａｄｌａｎ（ＦＡＳＥＢ  Ｊ．９，１３３−１３９（１９９５））およびＭａｃＣａｌｌｕｍ（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２（５）：７３２−４５（１９９６））によって記載されている。さらに別のＣＤＲ境界定義が、上記系の１つに厳格に従わない場合があり得るが、それにも関わらず、ＫａｂａｔＣＤＲと重複するが、これらは、特定の残基または残基の群またはさらにはＣＤＲ全体が、抗原結合に著しい影響を与えないという予測または実験的な発見に照らして、短縮または延長され得る。本明細書に使用されている方法は、これらの系のいずれかに従って定義されたＣＤＲを使用し得るが、好ましい実施形態は、ＫａｂａｔまたはＣｈｏｔｈｉａによって定義されたＣＤＲを使用する。
【００６５】
本明細書で使用されるように、「カノニカル」残基という用語は、Ｃｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９０７頁（１９８７）；Ｃｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２７：７９９頁（１９９２）、これらの両文献は参照により本明細書に組み込まれている。）により定義される特定のカノニカルＣＤＲ構造を定義するＣＤＲまたはフレームワークにおける残基を表す。Ｃｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．によれば、多くの抗体のＣＤＲの決定的に重要な部分は、アミノ酸配列のレベルでは大きな多様性があるにもかかわらずほぼ同一のペプチド骨格確証を有している。各カノニカル構造は、主に、ループを形成するアミノ酸残基の近接セグメントに対して一組のペプチド骨格回旋角を特定する。
【００６６】
本明細書で使用されるように、「ドナー」および「ドナー抗体」という用語は、１つ以上のＣＤＲを提供する抗体を表す。好ましい実施形態では、ドナー抗体はフレームワーク領域が得られるまたは由来する抗体とは異なる種由来の抗体である。ヒト化抗体という状況では、「ドナー抗体」という用語は１つ以上のＣＤＲを提供する非ヒト抗体を表す。
【００６７】
本明細書で使用される「フレームワーク」または「フレームワーク配列」という用語は、ＣＤＲを差し引いた可変領域の残りの配列を表す。ＣＤＲ配列の正確な定義は、異なる系によって決定され得るので、フレームワーク配列の意義は、これに対応して、異なる解釈に供せられる。６つのＣＤＲ（軽鎖のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２およびＣＤＲ−Ｌ３ならびに重鎖のＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２およびＣＤＲ−Ｈ３）は、軽鎖および重鎖上のフレームワーク領域も、各鎖上の４つの亜領域（ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３およびＦＲ４）に分割し、ＣＤＲ１はＦＲ１とＦＲ２の間に位置し、ＣＤＲ２はＦＲ２とＦＲ３の間に、ＣＤＲ３はＦＲ３とＦＲ４の間に位置する。他者によって表記されるように、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３またはＦＲ４として特定の亜領域を特定せずに、フレームワーク領域は、天然に存在する単一の免疫グロブリン鎖の可変領域内の組み合わされたＦＲを表す。本明細書において使用される、１つのＦＲは、４つの亜領域の１つを表し、複数のＦＲは、フレームワーク領域を構成する４つの亜領域の２つまたはそれ以上を表す。
【００６８】
ヒト重鎖および軽鎖アクセプター配列は当技術分野では公知である。本発明の一実施形態では、ヒト重鎖および軽鎖アクセプター配列は、その内容が参照により本明細書に組み込まれている、米国特許第７，９１５，３８８号に開示されている表３および表４に記載される配列から選択される。
【００６９】
本明細書において使用される「生殖系列抗体遺伝子」または「遺伝子断片」という用語は、特定の免疫グロブリンの発現のために遺伝的再編成および変異をもたらす成熟プロセスを経ていない非リンパ系細胞によってコードされる免疫グロブリン配列を表す。（例えば、Ｓｈａｐｉｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２２（３）：１８３−２００（２００２）；Ｍａｒｃｈａｌｏｎｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｖ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．４８４：１３−３０（２００１）参照）。本発明の様々な実施形態によって提供される利点の１つは、生殖系列抗体遺伝子は、成熟した抗体遺伝子より、種内の個体に特徴的な必須のアミノ酸配列構造を保存する傾向がより大きく、このため、その種において治療的に使用された場合に、外来源に由来するものと認識される可能性がより低いという認識から生じる。
【００７０】
本明細書で使用されるように、「キー」残基という用語は、抗体、特にヒト化抗体の結合特異性および／または親和性により多くの影響を及ぼす可変領域内のある種の残基を表す。キー残基は、以下の：ＣＤＲに隣接する残基、潜在的グリコシル化部位（はＮ−またＯ−グリコシル化部位のどちらかであり得る）、希少残基、抗原と相互作用することができる残基、ＣＤＲと相互作用することができる残基、カノニカル残基、重鎖可変領域と軽鎖可変領域間の接触残基、Ｖｅｒｎｉｅｒゾーン内の残基および可変重鎖ＣＤＲ１のＣｈｏｔｈｉａ定義と第一の重鎖フレームワークのＫａｂａｔ定義間で重複する領域における残基のうちの１つ以上を含むが、これらに限定されない。
【００７１】
本明細書で使用されるように、「ヒト化抗体」という用語は、目的の抗原に免疫特異的に結合し、ヒト抗体のアミノ酸配列を実質的に有するフレームワーク（ＦＲ）領域および非ヒト抗体のアミノ酸配列を実質的に有する相補的決定領域（ＣＤＲ）を含む抗体またはそのバリアント、誘導体、類似体もしくは断片である。ＣＤＲに関して、本明細書において使用される「実質的に」という用語は、非ヒト抗体ＣＤＲのアミノ酸配列に対して、少なくとも８０％、好ましくは少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を有するＣＤＲを表す。ヒト化抗体は、少なくとも１つの、典型的には２つの可変ドメイン（Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、ＦａｂＣ、Ｆｖ）のすべてを実質的に含み、ＣＤＲ領域のすべてまたは実質的にすべては非ヒト免疫グロブリン（すなわち、ドナー抗体）のものに対応し、フレームワーク領域のすべてまたは実質的にすべてが、ヒト免疫グロブリンコンセンサス配列のものである。好ましくは、ヒト化抗体はイムノグロブリン定常領域（Ｆｃ）、典型的にはヒトイムノグロブリンの定常領域の少なくとも一部も含む。いくつかの実施形態において、ヒト化抗体は、軽鎖と、重鎖の少なくとも可変ドメインの両方を含有する。この抗体は、重鎖のＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２、ＣＨ３およびＣＨ４領域も含み得る。いくつかの実施形態において、ヒト化抗体は、ヒト化軽鎖のみを含有する。いくつかの実施形態において、ヒト化抗体は、ヒト化重鎖のみを含有する。特定の実施形態において、ヒト化抗体は、軽鎖のヒト化可変ドメインおよび／またはヒト化重鎖のみを含有する。
【００７２】
本発明の一実施形態では、ヒト化抗ＩＬ−１３抗体は１３Ｃ５．５である。１３Ｃ５．５は、配列番号２（重鎖可変領域）および配列番号３（軽鎖可変領域）の配列を有する。米国特許第７，９１５，３８８号も参照されたい。前記特許文献の全内容は参照により本明細書に組み込む。
【００７３】
配列番号２−重鎖可変領域１３Ｃ５．５
【００７４】
【化２】
2014520847.tif 000003
【００７５】
配列番号３−軽鎖可変領域１３Ｃ５．５
【００７６】
【化３】
2014520847.tif 000004
【００７７】
ヒト化抗体は、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＤ、ＩｇＡおよびＩｇＥを含むどんなクラスの免疫グロブリンからでも、および限定なしにＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３およびＩｇＧ４を含むどんなアイソタイプからでも選択され得る。ヒト化抗体は、１つを超えるクラスまたはアイソタイプ由来の配列を含み得、特定の定常ドメインを、当技術分野で周知の技法を使用して所望のエフェクター機能を最適化するように選択し得る。
【００７８】
ヒト化抗体のフレームワークおよびＣＤＲ領域は、親配列に正確に一致する必要はなく、例えば、ドナー抗体ＣＤＲまたはコンセンサスフレームワークは、その部位のＣＤＲまたはフレームワーク残基がドナー抗体にもコンセンサスフレームワークにも一致しないように、少なくとも１つのアミノ酸残基の置換、挿入および／または欠失により変異誘発され得る。しかし、好ましい実施形態では、該変異は広範にはならない。通常、ヒト化抗体残基の少なくとも８０％、好ましくは少なくとも８５％、さらに好ましくは少なくとも９０％、最も好ましくは少なくとも９５％は、親ＦＲおよびＣＤＲ配列の残基に一致する。本明細書で使用されるように、「コンセンサスフレームワーク」という用語は、コンセンサス免疫グロブリン配列におけるフレームワーク領域を表す。本明細書で使用されるように、「コンセンサス免疫グロブリン配列」という用語は、関連する免疫グロブリン配列のファミリーにおいて最も頻繁に存在するアミノ酸（またはヌクレオチド）から形成される配列を表す（例えば、Ｗｉｎｎａｋｅｒ、Ｆｒｏｍ  Ｇｅｎｅｓ  ｔｏ  Ｃｌｏｎｅｓ（Ｖｅｒｌａｇｓｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ、Ｗｅｉｎｈｅｉｍ、Ｇｅｒｍａｎｙ  １９８７参照）。免疫グロブリンのファミリーでは、コンセンサス配列における各位置は、そのファミリーにおいてその位置に最も頻繁に存在するアミノ酸により占められている。２つのアミノ酸が同じように頻繁に存在する場合、どちらでもコンセンサス配列に含まれることが可能である。
【００７９】
本明細書で使用されるように、「Ｖｅｒｎｉｅｒ」ゾーンとは、Ｆｏｏｔｅ  ａｎｄ  Ｗｉｎｔｅｒ（１９９２年、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２４：４８７−４９９頁、この文献は参照により本明細書に組み込まれている。）により記載されているように、抗原に合わせてＣＤＲ構造を適合させそのフィットを微調整し得るフレームワーク残基のサブセットを表す。Ｖｅｒｎｉｅｒゾーン残基はＣＤＲの基礎をなす層を形成し、ＣＤＲの構造および抗体の親和性に影響を及ぼし得る。
【００８０】
用語「多価結合タンパク質」は、２つ以上の抗原結合部位を含む結合タンパク質を意味するのに本明細書では使用される。多価結合タンパク質は、好ましくは３つ以上の抗原結合部位を有するように操作されており、一般には天然に存在するタンパク質ではない。用語「多重特異的結合タンパク質」とは、２つ以上の関連するまたは無関係な標的に結合することができる結合タンパク質のことである。本明細書で使用される二重可変ドメイン（ＤＶＤ）結合タンパク質は、２つ以上の抗原結合部位を含む結合タンパク質であり、四価または多価結合タンパク質である。該ＤＶＤは単一特異性、すなわち、１つの抗原に結合することができるまたは多重特異性、すなわち、２つ以上の抗原に結合することができるのでもよい。２つの重鎖ＤＶＤポリペプチドおよび２つの軽鎖ＤＶＤポリペプチドを含むＤＶＤ結合タンパク質はＤＶＤ  Ｉｇと呼ばれる。ＤＶＤ  Ｉｇのそれぞれ半分は、重鎖ＤＶＤポリペプチドおよび軽鎖ＤＶＤポリペプチドおよび２つの抗原結合部位を含む。それぞれの結合部位は重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインを含み、抗原結合部位あたり全部で６つのＣＤＲが抗原結合に関与している。
【００８１】
本明細書で使用されるように、「中和する」という用語は、結合タンパク質がサイトカインに特異的に結合する場合のサイトカインの生物学的活性の中和を表す。好ましくは、中和結合タンパク質は、ＩＬ−１３への結合および／またはＩＬ−１３が、ＩＬ−１３の生物学的活性および／またはＩＬ−１３の阻害となる、中和抗体である。好ましくは、中和結合タンパク質はＩＬ−１３および／またはＩＬ−１３に結合し、ＩＬ−１３および／またはＩＬ−１３の生物学的活性を少なくとも約２０％、４０％、６０％、８０％、８５％またはそれより多く減少する。中和結合タンパク質によるＩＬ−１３および／またはＩＬ−１３の生物学的活性の阻害は、当技術分野で周知のＩＬ−１３および／またはＩＬ−１３生物学的活性の１つ以上の指標を測定することにより評価することが可能である。例えば、Ａ−５４９細胞によるＴＡＲＣ（ＣＣＬ−１７）のヒトＩＬ−１３誘導産生の阻害は測定することが可能である（米国特許第７，９１５，３８８号の実施例１．１Ｃ参照。前記特許文献の内容は参照により本明細書に組み込む。）。
【００８２】
用語「活性」には、抗原に対する抗体、例えば、ＩＬ−１３抗原に結合する抗ＩＬ−１３抗体の結合特異性／親和性および／または抗体、例えば、ＩＬ−１３へのその結合、例えば、ＩＬ−１３の生物活性を阻害する抗ＩＬ−１３抗体の中和能力などの活性が含まれる。例えば、Ａ−５４９細胞によるＴＡＲＣ（ＣＣＬ−１７）のヒトＩＬ−１３誘導産生の阻害（米国特許第７，９１５，３８８号の実施例１．１Ｃ参照。前記特許文献の内容は参照により本明細書に組み込む。）。
【００８３】
「エピトープ」という用語には、免疫グロブリンまたはＴ細胞受容体に特異的に結合することができる、あらゆるポリペプチド決定基が含まれる。ある種の実施形態において、エピトープ決定基は、アミノ酸、糖側鎖、ホスホリルまたはスルホリルなどの分子の化学的に活性な表面基を含み、ある種の実施形態において、特異的な三次元構造的特徴および／または特異的な電荷特徴を有し得る。エピトープとは、抗体によって結合される抗原の領域である。ある種の実施形態において、抗体が、タンパク質および／または高分子の複雑な混合物中で、その標的抗原を優先的に認識する場合に、抗体は抗原を特異的に結合すると言われる。
【００８４】
本明細書において使用される「表面プラズモン共鳴」という用語は、例えば、ＢＩＡｃｏｒｅシステム（Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｓｅｎｓｏｒ  ＡＢ、Ｕｐｐｓａｌａ、ＳｗｅｄｅｎおよびＰｉｓｃａｔａｗａｙ、Ｎ．Ｊ．）を用いて、バイオセンサーマトリックス内のタンパク質濃度の変化を検出することによって、リアルタイムな生物特異的相互作用の分析を可能とする光学現象を表す。さらなる記載については、Ｊｏｎｓｓｏｎ，Ｕ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９３）Ａｎｎ．Ｂｉｏｌ．Ｃｌｉｎ．５１：１９−２６；Ｊｏｎｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  １１：６２０−６２７；Ｊｏｈｎｓｓｏｎ，Ｂ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｒｅｃｏｇｎｉｔ．８：１２５−１３１；およびＪｏｈｎｎｓｏｎ，Ｂ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９８：２６８−２７７を参照されたい。
【００８５】
本明細書において使用される「Ｋｏｎ」という用語は、本分野で知られている抗体／抗原複合体を形成する、抗体と抗原の結合についての結合速度（ｏｎ  ｒａｔｅ）定数を表すものとする。
【００８６】
本明細書において使用される「Ｋｏｆｆ」という用語は、抗体の、本分野で知られている抗体／抗原複合体からの解離についての解離速度（ｏｆｆ  ｒａｔｅ）定数を表すものとする。
【００８７】
本明細書において使用される「ＫＤ」という用語は、本分野で知られている特定の抗体−抗原相互作用の解離定数を表すものとする。
【００８８】
本明細書において使用される「標識された結合タンパク質」という用語は、結合タンパク質の同定を与える標識が取り込まれたタンパク質を表す。好ましくは、標識は、検出可能なマーカーであり、例えば、放射性標識されたアミノ酸の取り込み、または印を付けたアビジン（例えば、光学的方法または比色分析法によって検出することができる、蛍光マーカーまたは酵素活性を含有するストレプトアビジン）によって検出することができるビオチン部分のポリペプチドへの付着である。ポリペプチド用の標識の例には、以下の放射性同位体または放射性核種（例えば、３Ｈ、１４Ｃ、３５Ｓ、９０Ｙ、９９Ｔｃ、１１１Ｉｎ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、１７７Ｌｕ、１６６Ｈｏまたは１５３Ｓｍ）；蛍光標識（例えば、ＦＩＴＣ、ローダミン、ランタニドリン光体）、酵素的標識（例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ、ルシフェラーゼ、アルカリホスファターゼ）；化学発光マーカー；ビオチニル基；二次レポーターによって認識される所定のポリペプチドエピトープ（例えば、ロイシンジッパー対配列、二次抗体に対する結合部位、金属結合ドメイン、エピトープタグ）；および磁気薬剤、例えば、ガドリニウムキレートが含まれるが、これらに限定されない。
【００８９】
「抗体連結体」という用語は、第二の化学部分（治療剤または細胞毒性剤など）に化学的に連結された、抗体などの結合タンパク質を表す。本明細書において、「薬剤」という用語は、化学的化合物、化学的化合物の混合物、生物学的高分子または生物由来物質から作製された抽出物を表記するために使用される。好ましくは、治療剤または細胞毒性剤には、百日咳毒素、タキソール、サイトカラシンＢ、グラミシジンＤ、臭化エチジウム、エメチン、マイトマイシン、エトポシド、テノポシド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジヒドロキシアントラシンジオン、ミトキサントロン、ミトラマイシン、アクチノマイシンＤ、１−デヒドロテストステロン、グルココルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロールおよびピューロマイシンならびにこれらの類似体または相同体が含まれるが、これらに限定されるものではない。
【００９０】
本明細書において使用される「結晶」および「結晶化された」という用語は、結晶の形態で存在する抗体またはその抗原結合部分を表す。結晶は、物質の固体状態の一形態であり、これは、非晶質の固体状態または液体の結晶状態などの他の形態とは異なる。結晶は、原子、イオン、分子（例えば、抗体などのタンパク質）または分子集合体（例えば、抗原／抗体複合体）の規則的な反復する三次元配列から構成される。これらの三次元配列は、本分野においてよく理解されている特異的な数学的関係に従って整列されている。結晶中で反復されている基礎的単位または構築ブロックは、非対称単位と呼ばれる。所定の十分に整えられた結晶的対称性に合致する配置での非対称単位の反復は、結晶の「単位格子」を与える。すべての三次元中での規則的な転換による単位格子の反復は、結晶を与える。Ｇｉｅｇｅ，Ｒ．  ａｎｄ  Ｄｕｃｒｕｉｘ，Ａ．Ｂａｒｒｅｔｔ，Ｃｒｙｓｔａｌｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，２ｎｄ  ｅａ．，ｐｐ．２０１−１６，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．（１９９９）を参照されたい。
【００９１】
本明細書において言及される「ポリヌクレオチド」という用語は、２つまたはそれ以上のヌクレオチド（リボヌクレオチドもしくはデオキシヌクレオチドのいずれかまたはヌクレオチドのいずれかのタイプの修飾された形態）のポリマー形態を意味する。本用語は、ＤＮＡの一本鎖および二本鎖形態を含むが、好ましくは二本鎖ＤＮＡである。
【００９２】
本明細書において使用される「単離されたポリペプチド」という用語は、（例えば、ゲノム、ｃＤＮＡもしくは合成起源またはこれらのいくつかの組合せの）ポリヌクレオチドを意味するものとし、その起源のために、「単離されたポリヌクレオチド」は、「単離されたポリヌクレオチド」が本来その中でともに見出されるポリヌクレオチドの全部または一部と会合していない、本来連結されていないポリヌクレオチドに作用可能に連結されている、またはより大きな配列の一部として本来存在しない、ことを意味する。
【００９３】
本明細書において使用される「ベクター」という用語は、核酸分子に連結されている別の核酸を輸送することができる該核酸分子を表すものとする。ベクターの１つの種類は「プラスミド」であり、これは、その中にさらなるＤＮＡセグメントを連結し得る環状二本鎖ＤＮＡループを表す。ベクターの別の種類はウイルスベクターであり、ここで、追加のＤＮＡセグメントはウイルスゲノム中に連結され得る。ある種のベクターは、当該ベクターがその中に導入された宿主細胞中で自律的複製を行うことができる（例えば、細菌の複製起点を有する細菌ベクターおよびエピソーム哺乳動物ベクター）。他のベクター（例えば、非エピソーム哺乳動物ベクター）は、宿主細胞中へ導入されて、宿主細胞のゲノム中に組み込まれることが可能であり、これにより、宿主ゲノムとともに複製される。さらに、ある種のベクターは、それらが作用可能に連結されている遺伝子の発現を誘導することが可能である。このようなベクターは、本明細書において、「組換え発現ベクター」（または単に、「発現ベクター」）と称される。一般に、組換えＤＮＡ技術において有用な発現ベクターは、しばしば、プラスミドの形態である。プラスミドは、最も一般的に使用されるベクターの形態であるので、本明細書において、「プラスミド」および「ベクター」は互換的に使用され得る。しかしながら、本発明は、均等な機能を果たす、ウイルスベクターなどの（例えば、複製欠損レトロウイルス、アデノウイルスおよびアデノ随伴ウイルス）発現ベクターのような他の形態を含むものとする。
【００９４】
「作用可能に連結された」という用語は、記載された成分をそれらを所期の様式で機能させることができる関係にある併置状態を表す。コード配列に対して「作用可能に連結された」制御配列は、制御配列と適合的な条件下で、コード配列の発現が達成されるように連結されている。「作用可能に連結された」配列は、目的の遺伝子と連続する発現調節配列および目的の遺伝子を調節するように、トランスにてまたは離れて作用する発現調節配列の両方を含む。本明細書において使用される「発現調節配列」という用語は、連結されているコード配列の発現およびプロセッシングに影響を与えるために必要であるポリヌクレオチド配列を表す。発現調節配列には、適切な転写開始、終結、プロモーターおよびエンハンサー配列；スプライシングおよびポリアデニル化シグナルなどの効率的なＲＮＡプロセッシングシグナル；細胞質ｍＲＮＡを安定化させる配列；翻訳効率を増強する配列（すなわち、Ｋｏｚａｋコンセンサス配列）；タンパク質の安定性を増強する配列；および所望であれば、タンパク質分泌を増強させる配列が含まれる。このような調節配列の性質は、宿主生物に応じて異なる。原核生物では、このような調節配列は、一般に、プロモーター、リボソーム結合部位および転写終結配列を含む。真核生物では、一般に、このような調節配列には、プロモーターおよび転写終結配列が含まれ得る。「調節配列」という用語は、その存在が発現およびプロセッシングに不可欠である成分を含むものとし、その存在が有利である追加の成分、例えば、リーダー配列および融合対配列も含むことが可能である。本発明のタンパク質構築物は、発現カセット、ベクター、組換え宿主細胞を含む当技術分野で公知の発現ベクターおよび宿主細胞、ならびに組換えポリタンパク質および単一オープンリーディングフレーム由来のプレタンパク質の組換え発現およびタンパク質プロセシングのための方法を使用して発現させ精製し得る（例えば、ＷＯ  ２００７／０１４１６２参照。前記特許文献の全内容は参照により本明細書に組み込む。）。
【００９５】
本明細書において定義される「形質転換」とは、外来ＤＮＡが宿主細胞に入るすべてのプロセスを表す。形質転換は、本分野で周知の様々な方法を用いて、自然の条件または人工の条件下で起こり得る。形質転換は、原核または真核宿主細胞中へ外来核酸配列を挿入するためのいずれかの公知の方法に依拠し得る。本方法は、形質転換されている宿主細胞に基づいて選択され、ウイルス感染、電気穿孔、リポフェションおよび粒子照射を含み得るが、これらに限定されない。このような「形質転換された」細胞には、挿入されたＤＮＡが、自律的に複製するプラスミドとして、または宿主染色体の一部として、その中で複製することできる安定に形質転換された細胞が含まれる。これらには、挿入されたＤＮＡまたはＲＮＡを、限られた時間にわたって一過性に発現する細胞も含まれる。
【００９６】
本明細書において使用される「組換え宿主細胞」（または単に、「宿主細胞」）という用語は、外来ＤＮＡがその中に導入されている細胞を表すものとする。このような用語は、当該細胞を表すのみならず、このような細胞の子孫も表すことを理解すべきである。突然変異または環境的な影響のために、後続の世代中にある種の修飾が生じ得るので、このような子孫は、実際には親細胞と同一でないことがあり得るが、本明細書において使用される「宿主細胞」という用語の範囲になお含まれる。好ましくは、宿主細胞には、生物のいずれかの界から選択される原核および真核細胞が含まれる。好ましい真核細胞には、原生生物、真菌、植物および動物細胞が含まれる。最も好ましくは、宿主細胞には、原核細胞株、Ｅ．コリ（Ｅ．ｃｏｌｉ）；哺乳動物細胞株ＣＨＯ、ＨＥＫ２９３およびＣＯＳ；昆虫細胞株Ｓｆ９および真菌細胞サッカロミセス・セレビシアエが含まれるが、これらに限定されるものではない。
【００９７】
組換えＤＮＡ、オリゴヌクレオチド合成および組織培養および形質転換（例えば、電気穿孔、リポフェクション）に対しては標準的な技術が使用され得る。酵素反応および精製技術は、製造業者の説明書に従って、または本分野で一般的に遂行されているように、または本明細書に記載されているように、実施され得る。一般に、先述の技術および手順は、本分野で周知の慣用的な方法に従い、ならびに本明細書を通じて引用および論述されている様々な一般的参考文献およびより具体的な参考文献中に記載されているように、実施し得る。例えば、任意の目的で参照により本明細書に組み込まれる、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（２ｄ  ｅｄ．，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．（１９８９））を参照されたい。
【００９８】
本分野において公知であり、本明細書において使用される「トランスジェニック生物」とは、導入遺伝子を含有する細胞を有する生物を表し、生物中に導入された導入遺伝子（または生物の子孫）は、生物中に自然に発現されていないポリペプチドを発現する。「導入遺伝子」とは、細胞のゲノム中に安定におよび作用可能に組み込まれているＤＮＡ構築物であり、この細胞からトランスジェニック生物が発達し、トランスジェニック生物の１つ以上の細胞種または組織中で、コードされた遺伝子産物の発現を誘導する。
【００９９】
「制御する」または「調節する」という用語は互換的に使用され、本明細書において使用される場合、目的の分子の活性（例えば、ＩＬ−１３の生物学的活性）の変化または変更を表す。調節は、目的の分子の一定の活性または機能の規模の増加または減少であり得る。分子の典型的な活性および機能には、結合特性、酵素活性、細胞受容体活性化およびシグナル伝達が含まれるが、これらに限定されない。
【０１００】
これに対応して、本明細書において使用される「調節物質」という用語は、目的の分子の活性または機能（例えば、ＩＬ−１３の生物学的活性）を変化または変更させることが可能な化合物である。例えば、調節物質は、調節物質の不存在下で観察される活性または機能の規模と比べて、分子のある種の活性または機能の規模の増加または減少を引き起こし得る。ある種の実施形態において、調節物質は、分子の少なくとも１つの活性または機能の規模を減少させる阻害剤である。典型的な阻害剤には、タンパク質、ペプチド、抗体、ペプチバディ、炭水化物または小有機分子が含まれるが、これらに限定されるものではない。ペプチバディは、例えば、ＷＯ０１／８３５２５に記載されている。
【０１０１】
本明細書において使用される「アゴニスト」という用語は、目的分子と接触したときに、アゴニストの不存在下で観察される活性または機能の規模と比べて、分子のある種の活性または機能の規模の増加を引き起こす調節物質を表す。興味深い特定のアゴニストには、ＩＬ−１３ポリペプチドまたはポリペプチド、核酸、炭水化物またはＩＬ−１３に結合する他のすべての分子が含まれるが、これらに限定されるものではない。
【０１０２】
本明細書において使用される「アンタゴニスト」または「阻害剤」という用語は、目的分子と接触したときに、アンタゴニストの不存在下で観察される活性または機能の規模と比べて、分子のある種の活性または機能の規模の減少を引き起こす調節物質を表す。興味深い具体的なアンタゴニストには、ＩＬ−１３および／またはＩＬ−１３の生物学的または免疫学的活性を遮断または調節するアンタゴニストが含まれる。ＩＬ−１３および／またはＩＬ−１３のアンタゴニストおよび阻害剤には、タンパク質、核酸、炭水化物またはＩＬ−１３および／またはＩＬ−１３に結合する他のすべての分子が含まれ得るが、これらに限定されるものではない。
【０１０３】
用語「受容体への結合を阻害する」とは、その受容体のうちの１つ以上へのＩＬ−１３の結合を妨げる結合タンパク質の能力のことである。受容体への結合の該阻害により、その受容体へのＩＬ−１３の結合により媒介される生物活性は減少するまたは無効になる。
【０１０４】
本明細書において使用される「有効量」という用語は、疾患もしくはその１つもしくはそれ以上の症候の重度および／または持続時間を低下もしくは軽減し、疾患の進行を抑制し、疾患の退行を引き起こし、疾患に伴う１つもしくはそれ以上の症候の再発、発達、発症もしくは進行を予防し、疾患を検出し、または別の療法（例えば、予防的または治療的剤）の予防的または治療的効果を増強もしくは改善するのに十分である療法の量を表す。
【０１０５】
用語「試料」は、本明細書で使用されるように、その最も広い意味で使用される。「生体試料」は、本明細書で使用されるように、生物またはかつては生きていた生物由来のどんな量の物質でも含むが、これらに限定されない。該生物には、ヒト、マウス、ラット、サル、イヌ、ウサギおよび他の動物が含まれるが、これらに限定されない。該物質には、血液、血清、尿、滑液、細胞、器官、組織、骨髄、リンパ節および脾臓が含まれるが、これらに限定されない。
【０１０６】
用語「Ｃｍａｘ」とは、その投与後に対象において観察される薬剤の最大またはピーク血清または血漿濃度のことである。
【０１０７】
一実施形態では、本発明の抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分（例えば、１３Ｃ５．５などのヒト化抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分）は静脈内に投与され、約５から約２３５μｇ／ｍＬの間の最大血清濃度（Ｃｍａｘ）；約５から約８μｇ／ｍｌの間のピーク濃度（Ｃｍａｘ）；約５から約１０μｇ／ｍＬの間のＣｍａｘ；約５５から約９０μｇ／ｍｌの間のピーク濃度（Ｃｍａｘ）；約１８５から約２５０μｇ／ｍｌの間のピーク濃度（Ｃｍａｘ）；約１９０から約２３５μｇ／ｍＬの間のＣｍａｘを示す。別の実施形態では、Ｃｍａｘは約５から約５０の間、約５０から約７５の間、約７５から約１００の間、約１００から約１２５の間、約１２５から約１５０の間、約１５０から約１７５の間、約１７５から約２００の間または約２００から約２３５μｇ／ｍＬの間である。
【０１０８】
別の実施形態では、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分（例えば、１３Ｃ５．５などのヒト化抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分）は静脈内に投与され、用量正規化後、約２０から約３０（μｇ／ｍＬ）／（ｍｇ／ｋｇ）の間のＣｍａｘ値を示す。別の実施形態では、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分は静脈内に投与され、用量正規化後、約２０、約２１、約２２、約２３、約２４、約２５、約２６、約２７、約２８、約２９および約３０（μｇ／ｍＬ）／（ｍｇ／ｋｇ）のＣｍａｘ値を示す。別の実施形態では、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分は静脈内に投与され、用量正規化後、約１０から約４０（μｇ／ｍＬ）／（ｍｇ／ｋｇ）の間のＣｍａｘ値を示す。
【０１０９】
別の実施形態では、本発明の抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分（例えば、１３Ｃ５．５などのヒト化抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分）は皮下に投与され、約１から約６０μｇ／ｍＬの間の最大血清濃度（Ｃｍａｘ）；約１．０から約６．０μｇ／ｍｌの間のピーク濃度（Ｃｍａｘ）；約６から約１２μｇ／ｍｌの間のＣｍａｘ値；約１２から約６０μｇ／ｍｌの間のピーク濃度（Ｃｍａｘ）；約１から約１０の間、約１０から約２０の間、約２０から約３０の間、約３０から約４０の間、約４０から約５０の間、約５０から約６０の間、約２０から約６０の間、または約４０から約６０μｇ／ｍｌの間のＣｍａｘ値を示す。
【０１１０】
用語「Ｔｍａｘ」とはＣｍａｘが生じた時間のことである。一実施形態では、本発明の抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分（例えば、１３Ｃ５．５などのヒト化抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分）は静脈内にまたは皮下に投与され、約１から約５日の間のＴｍａｘ；約３から５日の間のＴｍａｘ；約５日以下のＴｍａｘ；約１日のＴｍａｘ、約２日のＴｍａｘ、約３日のＴｍａｘ、約４日のＴｍａｘ、約５日のＴｍａｘ、約６日のＴｍａｘ、約７日のＴｍａｘ、約８日のＴｍａｘ、約９日のＴｍａｘ、または約１０日のＴｍａｘを示す。
【０１１１】
用語「生物学的利用率」または「Ｆ％」とは、所与の剤形の投与後に吸収され体循環に入る用量の割合またはパーセントのことである。抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分の用量は、いかなる経路を通じても、好ましくは、静脈内または皮下注射を介して投与され得る。一実施形態では、本発明の抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分（例えば、１３Ｃ５．５などのヒト化抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分）は静脈内にまたは皮下に投与され、少なくとも約６０％の生物学的利用率を示す。別の実施形態では、抗体またはその抗原結合部分は、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％または少なくとも約１００％の生物学的利用率を示す。
【０１１２】
用語「ＡＵＣ」または「曲線下面積」は排除と関係している。排除速度が高いほどより小さなＡＵＣと関係しており、排除速度が低いほどより大きなＡＵＣ値と関係している。ＡＵＣ値が高いほどより遅い排除速度を表す。
【０１１３】
一実施形態では、本発明の抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分（例えば、１３Ｃ５．５などのヒト化抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分）は静脈内に投与され、約７５から約１０００００μｇｈ／ｍＬの間の曲線下面積（ＡＵＣ）、約７５から約１００の間；約１５００から約２７００μｇｈ／ｍｌの間；約１５００から約３０００の間；約２１０００から約３３５００μｇｈ／ｍｌの間；約１５００から約９８０００の間；約２００００から約３４０００μｇｈ／ｍｌの間；約３４０００から約４００００の間；約４００００から約５００００の間；約５００００から約６００００の間；約６００００から約７５０００の間；約７５０００から約１０００００μｇｈ／ｍｌの間；約７５、約１００、約１５０、約２００、約２５０、約３００、約３５０、約４００、約４５０、約５００、約５５０、約６００、約６５０、約７００、約７５０、約８００、約８５０、約９００、約９５０、約１０００；約１１００；約１２００；約１３００；約１４００；約１５００；約１６００；約１７００；約１８００；約１９００；約２０００；約２２５０；約２５００；約２７５０；約３０００；約４０００；約５０００；約６０００；約７０００；約８０００；約９０００；約１００００；約１２０００；約１５０００；約２００００；約２５０００；約３００００；約３５０００；約４００００；約４５０００；約５００００；約５５０００；約６００００；約６５０００；約７００００；約７５０００；約８００００；約８５０００；約９００００；約９５０００または約１０００００μｇｈ／ｍＬのＡＵＣを示す。
【０１１４】
別の実施形態では、ＡＵＣは用量正規化後、約６０００から約１００００（μｇｈ／ｍＬ）／（ｍｇ／ｋｇ）の間、用量正規化後、約７０００から約９０００の間、約６０００、約６５００、約７０００、約７５００、約８０００、約８５００、約９０００、約９５００または約１０００００（μｇｈ／ｍＬ）／（ｍｇ／ｋｇ）である。
【０１１５】
別の実施形態では、本発明の抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分（例えば、１３Ｃ５．５などのヒト化抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分）は皮下に投与され、約１２５から約８１００μｇｈ／ｍＬの間；約１２５から約８００μｇｈ／ｍｌの間；約８００から約１１００の間；約１１００から約８１００の間；約１００から約８００μｇｈ／ｍｌの間；約１２５；約１５０；約１７５；約２００；約２５０；約３００；約３５０；約４００；約４５０；約５００；約５５０；約６００；約６５０；約７００；約７５０、；約８００；約８５０：約９００；約９５０；約１０００；約１１００；約１２００；約１３００；約１４００；約１５００；約１６００；約１７００；約１８００；約１９００；約２０００；約２２５０；約２５００；約３０００；約３５００；約４０００；約４５００；約５０００；約５５００；約６０００；約６５００；約７０００；約７５００；約８０００または約８１００μｇｈ／ｍＬの曲線下面積（ＡＵＣ）を示す。
【０１１６】
本明細書で使用されるように、用語「排除速度」はＡＵＣ、または曲線下面積に関係している。排除速度が高いほどより小さなＡＵＣと関係しており、排除速度が低いほどより大きなＡＵＣ値と関係している。ＡＵＣ値が高いほどより遅い排除速度を表す。
【０１１７】
一実施形態では、本発明の抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分（例えば、１３Ｃ５．５などのヒト化抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分）は静脈内に投与され、約０．０８から約０．２ｍｌ／ｈ／ｋｇの間；約０．０８から約０．１５ｍｌ／ｈ／ｋｇの間；約０．１から約０．１５ｍｌ／ｈ／ｋｇの間；約０．１１から約０．１９ｍＬ／ｈ／ｋｇの間；約０．０８から約０．１４ｍＬ／ｈ／ｋｇの間；約０．０９から約０．１３ｍＬ／ｈ／ｋｇの間；約０．０８；約０．０９；約０．１；約０．１１；約０．１２；約０．１３；約０．１４；約０．１５；約０．１６；約０．１７；約０．１８；約０．１９；約２．０；約２．１；約２．２；約２．３；約２．４または約２．５ｍＬ／ｈ／ｋｇの排除速度を示す。
【０１１８】
本明細書で使用されるように、用語「分布容積」は、投与後の血漿と身体のその他の部分間の薬剤、例えば、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分の分布を定量するのに使用される用語である。分布容積は、薬剤の目的の血液濃度を生じるために薬剤の全量が均一に分布する必要があると考えられる理論的容積である。
【０１１９】
一実施形態では、本発明の抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分（例えば、１３Ｃ５．５などのヒト化抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分）は静脈内に投与され、約５５から約１３０ｍＬ／ｋｇの間；約６５から約１２５ｍＬ／ｋｇの間；約５５から約１００ｍＬ／ｋｇの間；約９０から約１３０ｍＬ／ｋｇの間；約７０から約１３０ｍＬ／ｋｇの間；約８５から約１３０ｍＬ／ｋｇの間；約１００から約１３０の間；約１１０から約１２０の間；約５５、約６０、約６５、約７０、約７５、約８０、約８５、約９０、約９５、約１００、約１０５、約１１０、約１１５、約１２０、約１２５、約１３０または約１３５ｍＬ／ｋｇの分布容積を示す。
【０１２０】
一実施形態では、本発明の抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分（例えば、１３Ｃ５．５などのヒト化抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分）は静脈内にまたは内皮に投与され、約２４から３１日の間、約２３から２６日の間、約１０から約４０日の間、約２０から約３０日の間、約１０日、約１５日、約１６日、約１７日、約１８日、約１９日、約２０日、約２１日、約２２日、約２３日、約２４日、約２５日、約２６日、約２７日、約２８日、約２９日、約３０日、約３１日、約３２日、約３３日、約３４日、約３５日、約３６日、約３７日、約３８日、約３９日または約４０日の半減期を有する。
【０１２１】
用語「投与（ｄｏｓｉｎｇ）」または「投与する（ｄｏｓｅ）」または「投薬（ｄｏｓａｇｅ）」は、本明細書で使用されるように、治療目的（例えば、喘息の治療）を達成するための物質（例えば、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分）の投与のことである。
【０１２２】
一実施形態では、本発明の組成物は１回投与される。別の実施形態では、本発明の組成物は毎週投与される。別の実施形態では、本発明の組成物は２週間投与される。別の実施形態では、本発明の組成物は３週間投与される。別の実施形態では、組成物は４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、３カ月、４カ月、５カ月、６カ月、７カ月、８カ月、９カ月、１０カ月、１１カ月、１２カ月、１３カ月、１４カ月、１５カ月、１６カ月、１７カ月、１８カ月、１９カ月、２０カ月、２１カ月、２２カ月、２３カ月、２年、３年、４年、５年、１０年または対象の一生の間投与される。
【０１２３】
「第二の薬剤と組み合わせた第一の薬剤」という語句中の用語「組合せ」には、第一の薬剤と第二の薬剤の同時投与、例えば、前記２種類の薬剤は同じ医薬として許容される担体中に溶解されるもしくは混合されてもよく、または第一の薬剤に続いて第二の薬剤の投与、または第二の薬剤に続いて第一の薬剤の投与が含まれる。したがって、本発明は、組合せ治療処置の方法および組合せ医薬組成物を含む。
【０１２４】
「併用治療的処置」という語句中の用語「併用」には、第二の薬剤の存在下で薬剤を投与することが含まれる。併用治療的処置法には、第一、第二、第三または追加の薬剤が同時投与される方法が含まれる。併用治療的処置法には、第一のまたは追加の薬剤が第二または追加の薬剤の存在下で投与され、例えば、第二のまたは追加の薬剤がすでに投与されていることがある方法も含まれる。併用治療的処置法には、異なる実行者により段階的に実施されてもよい。例えば、ある実行者は第一の薬剤を対象に投与し、第二の実行者は第二の薬剤を前記対象に投与してもよく、投与ステップは、同時にもしくはほぼ同時にまたは第一の薬剤（および追加の薬剤）が第二の薬剤（および追加の薬剤）の存在下での後投与である限り、離れた時間に実施してもよい。実行者と対象が同じ実体（例えば、ヒト）であり得る。
【０１２５】
用語「併用療法」とは、本明細書で使用されるように、２つ以上の治療物質、例えば、抗ＩＬ−１３抗体および別の薬剤の投与のことである。その他の薬剤は、抗ＩＬ−１３抗体の投与と同時に、先立ってまたは続いて投与してもよい。
【０１２６】
本明細書で使用される用語「キット」とは、ＩＬ−１３関連障害の治療のために本発明の抗ＩＬ−１３抗体と一緒に投与する成分を含む包装製品のことである。キットは好ましくは、キットの成分を保持するボックスまたは容器を含む。ボックスまたは容器にはラベルまたは食品医薬品局認可プロトコールが添付されている。ボックスまたは容器は、好ましくはプラスチック、ポリエチレン、ポリプロピレン、エチレンまたはプロピレン容器内に含有される本発明の成分を保持する。前記容器は蓋付きチューブまたはビンであることが可能である。キットは抗ＩＬ−１３抗体を投与するための使用説明書も含むことが可能である。
【０１２７】
次の小節では本発明の種々の態様がさらに詳細に説明される。
【０１２８】
Ｉ．ＩＬ−１３に結合する抗体
本発明は喘息の治療のための抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を使用するための方法および組成物を提供する。一態様では、本発明は、ＩＬ−１３に高親和性、遅い解離速度および高中和能力で結合する単離されたマウスモノクローナル抗体またはそれらの抗原結合部分を含む組成物および／または使用する方法を提供する。第二の態様では、本発明は、ＩＬ−１３に結合するキメラ抗体を含む組成物および／または使用する方法を提供する。第三の態様では、本発明は、ＩＬ−１３に結合するヒト化抗体またはそれらの抗原結合部分を含む組成物および／または使用する方法を提供する。好ましくは、抗体またはそれらの部分は単離された抗体である。好ましくは、抗体は、中和する抗ＩＬ−１３および／またはヒト化もしくはヒト抗ＩＬ−１３抗体である。
【０１２９】
Ａ．抗ＩＬ−１３抗体を作製する方法
本発明の組成物および／または方法において使用される抗体は、当技術分野で公知のいくつかの技法のうちのいずれにより作製されてもよい。例えば、前記抗体は、米国特許第７９１５３３８号に開示される技法を使用して作製することが可能であり、前記特許文献の全内容は参照により本明細書に組み込む。
【０１３０】
１．ハイブリドーマ技術を使用する抗ＩＬ−１３モノクローナル抗体
モノクローナル抗体は、ハイブリッドーマ、組換えおよびファージディスプレイ技術またはこれらの組合せの使用など、本分野で公知の多様な技術を用いて調製することが可能である。例えば、モノクローナル抗体は、本分野において公知であり、例えば、Ｈａｒｌｏｗ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，２ｎｄ  ｅｄ．１９８８）；Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇ，ｅｔ  ａｌ．，ｉｎ：Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｔ−ＣｅＩｌ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ  ５６３−６８１（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎ．Ｙ．，１９８１）（前記参考文献は、その全体が参照により組み込まれる。）に教示されているものなど、ハイブリッドーマ技術を用いて作製することが可能である。本明細書において使用される「モノクローナル抗体」という用語は、ハイブリドーマ技術を通じて産生された抗体に限定されない。「モノクローナル抗体」という用語は、あらゆる真核、原核またはファージクローンなど、単一のクローンに由来する抗体を表し、それが産生される方法によらない。
【０１３１】
ハイブリドーマ技術を使用して特異的抗体を作製しスクリーニングするための方法は当技術分野では常用であり周知である。一実施形態では、本発明は、モノクローナル抗体を作製する方法の他にも本発明の抗体を分泌するハイブリドーマ細胞を培養することを含む方法により産生される抗体も提供し、好ましくは、前記ハイブリドーマは本発明の抗原で免疫されたマウスから単離された脾細胞を骨髄腫細胞と融合させ、次に本発明のポリペプチドに結合することができる抗体を分泌するハイブリドーマクローンを求めて前記融合から生じるハイブリドーマをスクリーニングすることにより作製される（実施例１．２参照）。簡潔に述べると、マウスはＩＬ−１３抗原で免疫することが可能である。好ましい実施形態では、ＩＬ−１３抗原はアジュバンドと一緒に投与されて免疫応答を刺激する。該アジュバンドは、完全または不完全フロイントアジュバンド、ＲＩＢＩ（ムラミルジペプチド）またはＩＳＣＯＭ（免疫賦活性複合体）を含む。該アジュバンドは、ポリペプチドを限局性沈着に隔離することによりポリペプチドを急速な分散から保護し得、または該アジュバンドは、宿主を刺激してマクロファージおよび免疫系の他の成分に対して走化性である因子を分泌させる物質を含有し得る。好ましくは、ポリペプチドが投与される場合、免疫スケジュールは、数週間にわたり繰り広げられるポリペプチドの２回以上の投与を含むことになる。
【０１３２】
ＩＬ−１３抗原を用いた動物の免疫化後、抗体および／または抗体産生細胞は前記動物から得られる。抗ＩＬ−１３抗体含有血清は、動物を出血させるまたは屠殺することにより動物から得る。血清はそれが動物から得られるままに使用してもよく、免疫グロブリン画分を血清から得てもよく、または抗ＩＬ−１３抗体を血清から精製してもよい。このようにして得られる血清または免疫グロブリンはポリクローナルであり、したがって、不均一に並んだ特性を有する。
【０１３３】
免疫応答が検出される、例えば、マウス血清中で抗原ＩＬ−１３に特異的な抗体が検出されると、マウス脾臓が回収されて脾細胞が単離される。次に、脾細胞は、周知の技法により、任意の適切な骨髄腫細胞、例えば、ＡＴＣＣから入手可能な細胞系統ＳＰ２０由来の細胞に融合される。ハイブリドーマは限界希釈により選択されクローニングされる。次に、ハイブリドーマクローンは、ＩＬ−１３に結合することができる抗体を分泌する細胞について当技術分野で公知の方法によりアッセイされる。腹水液は、一般に高レベルの抗体を含有するが、マウスを陽性ハイブリドーマクローンで免疫することにより作製することが可能である。
【０１３４】
別の実施形態では、抗体産生不死化ハイブリドーマは免疫された動物から調製し得る。免疫後、動物は屠殺され、脾Ｂ細胞は当技術分野で周知の不死化骨髄腫細胞に融合される。例えば、上記Ｈａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｌａｎｅを参照されたい。好ましい実施形態では、骨髄腫細胞は免疫グロブリンポリペプチドを分泌しない（非分泌細胞系統）。融合および抗生物質選択後、ハイブリドーマは、ＩＬ−１３もしくはこの一部、またはＩＬ−１３を発現している細胞を使用してスクリーニングされる。好ましい実施形態では、最初のスクリーニングは酵素結合免疫アッセイ（ＥＬＩＳＡ）または放射免疫アッセイ（ＲＩＡ）、好ましくはＥＬＩＳＡを使用して実施される。ＥＬＩＳＡスクリーニングの例は、ＷＯ  ００／３７５０４に提供されており、この特許文献は参照により本明細書に組み込まれている。
【０１３５】
抗ＩＬ−１３抗体産生ハイブリドーマは、選択され、クローニングされ、頑強なハイブリドーマ増殖、高抗体産生および下でさらに考察されるような所望の抗体特徴を含む所望の特徴についてさらにスクリーニングされる。ハイブリドーマは、同系動物において、免疫系を欠く動物、例えば、ヌードマウスにおいて、またはインビトロ細胞培養において、インビボで培養し拡大し得る。ハイブリドーマを選択し、クローニングし、拡大する方法は当業者には周知である。
【０１３６】
好ましい実施形態では、ハイブリドーマは、上記のようにマウスハイブリドーマである。別の好ましい実施形態では、ハイブリドーマは、ラット、ヒツジ、ブタ、ヤギ、ウシまたはウマなどの非ヒト非マウス種において産生される。別の実施形態では、ハイブリドーマは、ヒト非分泌骨髄腫が抗ＩＬ−１３抗体を発現するヒト細胞と融合されているヒトハイブリドーマである。
【０１３７】
特異的エピトープを認識する抗体断片は公知の技法により作製し得る。例えば、本発明のＦａｂおよびＦ（ａｂ’）２断片は、パパイン（Ｆａｂ断片を作製するため）またはペプシン（Ｆ（ａｂ’）２断片を作製するため）などの酵素を使用して、免疫グロブリン分子のタンパク質切断により作製し得る。Ｆ（ａｂ’）２断片は可変領域、軽鎖定常領域および重鎖のＣＨ１ドメインを含有する。
【０１３８】
２．ＳＬＡＭを使用する抗ＩＬ−１３モノクローナル抗体
本発明の組成物および／または方法において使用される組換え抗体はまた、米国特許第７，９１５，３８８号および第５，６２７，０５２号；ＰＣＴ出願番号ＷＯ  ９２／０２５５１；Ｂａｂｃｏｏｋ，Ｊ．Ｓ．ｅｔ  ａｌ．（１９９６）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９３：７８４３−７８４８頁に記載されているように、当技術分野で選択リンパ球抗体法（ｔｈｅ  ｓｅｌｅｃｔｅｄ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｍｅｔｈｏｄ（ＳＬＡＭ））と呼ばれる手法を使用して単一の単離されたリンパ球から作製されてもよく、内容の全体が各々、参照により本明細書に組み込まれる。簡潔に述べると、対象の抗体を分泌する単細胞、例えば、上記に記載されている免疫された動物のいずれか１つに由来するリンパ球は、抗原特異的溶血プラークアッセイを使用してスクリーニングされ、抗原ＩＬ−１３、ＩＬ−１３のサブユニットまたはその断片は、ビオチンなどのリンカーを使用してヒツジ赤血球に結合され、ＩＬ−１３に対する特異性を有する抗体を分泌する単細胞を同定するのに使用される。対象の抗体分泌細胞の同定に続いて、重鎖および軽鎖可変領域ｃＤＮＡは、逆転写酵素ＰＣＲにより細胞から救出され、次にこれらの可変領域は、ＣＯＳまたはＣＨＯ細胞などの哺乳動物宿主細胞において、適切な免疫グロブリン定常領域（例えば、ヒト定常領域）という状況で発現されることが可能である。増幅された免疫グロブリン配列で形質移入され、インビボで選択されたリンパ球に由来する宿主細胞は、次いで、例えば、ＩＬ−１３に対する抗体を発現する細胞を単離するために、形質移入された細胞をパニングすることによって、インビトロで、さらに分析および選択を行うことが可能である。増幅された免疫グロブリン配列は、さらに、ＰＣＴ公開ＷＯ９７／２９１３１およびＰＣＴ公開ＷＯ００／５６７７２に記載されているものなど、インビトロでのアフィニティー成熟方法によるなど、インビトロで操作することが可能である。
【０１３９】
３．トランスジェニック動物を使用する抗ＩＬ−１３モノクローナル抗体
本発明の組成物および／または方法において使用される抗体はまた、ＩＬ−１３抗原を有するヒト免疫グロブリン遺伝子座のいくつかまたはすべてを含む非ヒト動物を免疫することによって産生されてもよい。好ましい実施形態において、非ヒト動物は、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥトランスジェニックマウス（ヒト免疫グロブリン遺伝子座の巨大断片を含み、マウス抗体産生を欠失している改変されたマウス系統）である。例えば、Ｇｒｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ７：１３−２１（１９９４）ならびに米国特許第５，９１６，７７１号；第５，９３９，５９８号；第５，９８５，６１５号；第５，９９８，２０９号；第６，０７５，１８１号；第６，０９１，００１号；第６，１１４，５９８号および第６，１３０，３６４号を参照されたい。１９９１年７月２５日に公開されたＷＯ９１／１０７４１；１９９４年２月３日に公開されたＷＯ９４／０２６０２；ともに１９９６年１０月３１日に公開されたＷＯ９６／３４０９６およびＷＯ９６／３３７３５；１９９８年４月２３日に公開されたＷＯ９８／１６６５４；１９９８年６月１１日に公開されたＷＯ９８／２４８９３；１９９８年１１月１２日に公開されたＷＯ９８／５０４３３；１９９９年９月１０日に公開されたＷＯ９９／４５０３１；１９９９年１０月２１日に公開されたＷＯ９９／５３０４９；２０００年２月２４日に公開されたＷＯ００  ０９５６０；および２０００年６月２９日に公開されたＷＯ００／０３７５０４も参照されたい（内容の全体が各々、参照により本明細書に明示的に組み込まれる。）。ＸＥＮＯＭＯＵＳＥトランスジェニックマウスは、完全なヒト抗体の成人様ヒトレパートリーを産生し、抗原特異的Ｍａｂを生成する。ＸＥＮＯＭＯＵＳＥトランスジェニックマウスは、ヒト重鎖遺伝子座およびｘ軽鎖遺伝子座のメガ塩基サイズの生殖系列配置ＹＡＣ断片の導入を通じて、ヒト抗体レパートリーの約８０％を含有する。その開示が参照により本明細書に組み込まれる、Ｍｅｎｄｅｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  １５：１４６−１５６（１９９７）、Ｇｒｅｅｎ  ａｎｄ  Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１８８：４８３−４９５（１９９８）を参照されたい。
【０１４０】
４．組換え抗体ライブラリーを使用する抗ＩＬ−１３モノクローナル抗体
本発明の組成物および／または方法において使用される抗体を作製するために、インビトロ法も使用することが可能であり、抗体ライブラリーは、所望の結合特異性を有する抗体を同定するためにスクリーニングされる。組換え抗体ライブラリーのこのようなスクリーニングの方法は、本分野において周知であり、例えば、Ｌａｄｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，米国特許第５，２２３，４０９号；Ｋａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＣＴ公開ＷＯ９２／１８６１９；Ｄｏｗｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＣＴ公開ＷＯ９１／１７２７１；Ｗｉｎｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＣＴ公開ＷＯ９２／２０７９１；Ｍａｒｋｌａｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＣＴ公開ＷＯ９２／１５６７９；Ｂｒｅｉｔｌｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＣＴ公開ＷＯ９３／０１２８８；ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＣＴ公開ＷＯ９２／０１０４７；Ｇａｒｒａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＣＴ公開ＷＯ９２／０９６９０；Ｆｕｃｈｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ９：１３７０−１３７２；Ｈａｙ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２）Ｈｕｍ  Ａｎｔｉｂｏｄ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ  ３：８１−８５；Ｈｕｓｅ  ｅｔ  ａｌ．（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４６：１２７５−１２８１；ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ（１９９０）３４８：５５２−５５４；Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９９３）ＥＭＢＯ  Ｊ．  １２：７２５−７３４；Ｈａｗｋｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２）Ｊ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ  ２２６：８８９−８９６；Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ  ３５２：６２４−６２８；Ｇｒａｍ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２）ＰＮＡＳ  ８９：３５７６−３５８０；Ｇａｒｒａｄ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ９：１３７３−１３７７；Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｎｕｃ  Ａｃｉｄ  Ｒｅｓ  １９：４１３３−４１３７；およびＢａｒｂａｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）ＰＮＡＳ  ８８：７９７８−７９８２、米国特許出願公開第２００３０１８６３７４号、およびＰＣＴ公開ＷＯ９７／２９１３１（これらは各々、その内容が参照により本明細書に組み込まれる。）に記載されている方法が含まれる。
【０１４１】
組換え抗体ライブラリーは、ＩＬ−１３で免疫された対象由来もしくはＩＬ−１３由来、またはＩＬ−１３の一部で免疫された対象由来もしくはＩＬ−１３の一部由来であり得る。代わりに、組換え抗体ライブラリーは、未処置の対象、すなわち、ヒトＩＬ−１３で免疫されたことのないヒト対象由来のヒト抗体ライブラリーなどの、ＩＬ−１３で免疫されたことのない対象由来であり得る。本発明の抗体は、ヒトＩＬ−１３を含むペプチドを用いて組換え抗体ライブラリーをスクリーニングし、それによりＩＬ−１３を認識する抗体を選択することにより選択される。該スクリーニングおよび選択を行うための方法は、前段落における参考文献において記載されるように、当技術分野では周知である。特定のＫｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１３から解離する抗体などの、ＩＬ−１３に対して特定の結合親和性を有する本発明の抗体を選択するためには、表面プラズモン共鳴という当技術分野で公知の方法を使用して、所望のＫｏｆｆ速度定数を有する抗体を選択することができる。特定のＩＣ５０を有する抗体などの、ＩＬ−１３に対して特定の中和活性を有する本発明の抗体を選択するためには、ＩＬ−１３活性の阻害を評価するための当技術分野で公知の標準法を使用し得る。
【０１４２】
一態様では、本発明は、ヒトＩＬ−１３に結合する単離された抗体またはその抗原結合部分に関する。好ましくは、前記抗体は中和抗体である。様々な実施形態では、前記抗体は組換え抗体またはモノクローナル抗体である。
【０１４３】
例えば、本発明の抗体は、本分野で公知の様々なファージディスプレイ法を用いて作製することも可能である。ファージディスプレイ法では、機能的抗体ドメインは、これらをコードしているポリヌクレオチド配列を担持するファージ粒子の表面上にディスプレイされる。特に、このようなファージは、レパートリーまたはコンビナトリアル抗体ライブラリー（例えば、ヒトまたはマウス）から発現される抗原結合ドメインをディスプレイするために使用することが可能である。目的の抗原に結合する抗原結合ドメインを発現するファージは、抗原を用いて、例えば、標識された抗原または固体表面もしくはビーズに結合もしくは捕捉された抗原を用いて、選択または同定することが可能である。これらの方法で使用されるファージは、典型的には、ファージ遺伝子ＩＩＩまたは遺伝子ＶＩＩＩタンパク質のいずれかに組換え的に融合されたＦａｂ、Ｆｖまたはジスルフィドで安定化されたＦｖ抗体ドメインとともにファージから発現されたｆｄおよびＭ１３結合ドメインを含む糸状ファージである。本発明の抗体を作製するために使用することが可能なファージディスプレイ法の例には、Ｂｒｉｎｋｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  １８２：４１−５０（１９９５）；Ａｍｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  １８４：１７７−１８６（１９９５）；Ｋｅｔｔｌｅｂｏｒｏｕｇｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２４：９５２−９５８（１９９４）；Ｐｅｒｓｉｃ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅ  １８７  ９−１８（１９９７）；Ｂｕｒｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ５７：１９１−２８０（１９９４）；ＰＣＴ出願ＰＣＴ／ＧＢ９１／０１１３４；ＰＣＴ公開ＷＯ９０／０２８０９；ＷＯ９１／１０７３７；ＷＯ９２／０１０４７；ＷＯ９２／１８６１９；ＷＯ９３／１１２３６；ＷＯ９５／１５９８２；ＷＯ９５／２０４０１；ならびに米国特許第５，６９８，４２６号；第５，２２３，４０９号；第５，４０３，４８４号；第５，５８０，７１７号；第５，４２７，９０８号；第５，７５０，７５３号；第５，８２１，０４７号；第５，５７１，６９８号；第５，４２７，９０８号；第５，５１６，６３７号；第５，７８０，２２５号；第５，６５８，７２７号；第５，７３３，７４３号および第５，９６９，１０８号（これらは各々、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。）に開示されているものが含まれる。
【０１４４】
上記参考文献に記載されるように、ファージ選択後、ヒト抗体または他の所望されるすべての抗原結合断片を含む完全な抗体を作製するために、ファージから得た抗体コード領域を単離および使用し、例えば、以下に詳述されているように、哺乳動物細胞、昆虫細胞、植物細胞、酵母および細菌など、あらゆる所望の宿主中で発現させることが可能である。例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ９２／２２３２４；Ｍｕｌｌｉｎａｘ  ｅｔ  ａｌ．，ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  １２（６）：８６４−８６９（１９９２）；およびＳａｗａｉ  ｅｔ  ａｌ．，ＡＪＲＩ  ３４：２６−３４（１９９５）；およびＢｅｔｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４０：１０４１−１０４３（１９８８）（前記参考文献は、その全体が参照により組み込まれる。）に開示されている方法などの本分野で公知の方法を用いて、Ｆａｂ、Ｆａｂ’およびＦ（ａｂ’）２断片を組換え的に産生するための技術も使用することが可能である。一本鎖Ｆｖおよび抗体を作製するために使用することが可能な技術の例には、米国特許第４，９４６，７７８号および第５，２５８，４９８号；Ｈｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  ２０３：４６−８８（１９９１）；Ｓｈｕ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  ９０：７９９５−７９９９（１９９３）；ならびにＳｋｅｒｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４０：１０３８−１０４０（１９８８）に記載されているものが含まれる。
【０１４５】
ファージディスプレイによる組換え抗体ライブラリーのスクリーニングに代えて、巨大なコンビナトリアルライブラリーをスクリーニングするための本分野で公知の他の方法を、本発明の二重特異性抗体の同定のために適用することが可能である。代替的発現系の１つの種類は、ＳｚｏｓｔａｋおよびＲｏｂｅｒｔｓによるＰＣＴ公開ＷＯ９８／３１７００ならびにＲｏｂｅｒｔｓ，Ｒ．Ｗ．ａｎｄ  Ｓｚｏｓｔａｋ，Ｊ．Ｗ．（１９９７）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９４，１２２９７−１２３０２に記載されているような、組換え抗体ライブラリーがＲＮＡ−タンパク質融合物として発現されるものである。この系において、ピューロマイシン、ペプチジルアクセプター抗生物質をそれらの３’末端に担持する合成ｍＲＮＡのインビトロ翻訳によって、ｍＲＮＡおよびこれがコードするペプチドまたはタンパク質の間に共有結合的融合物が作製される。したがって、特異的なｍＲＮＡは、コードされているペプチドまたはタンパク質、例えば抗体またはその一部の特性（抗体またはその一部の、二重特異性抗原への結合など）に基づいて、ｍＲＮＡの複雑な混合物（例えば、コンビナトリアルライブラリー）から濃縮することが可能である。このようなライブラリーのスクリーニングから回収された、抗体またはその一部をコードする核酸配列は、上記のような組換え手段によって（例えば、哺乳動物宿主細胞中で）発現されることが可能であり、さらに、最初に選択された配列中に変異が導入されているｍＲＮＡ−ペプチド融合物のスクリーニングのさらなるラウンドによって、または上記のように、組換え抗体のインビトロでの親和性成熟のためのその他の方法によって、さらなる親和性成熟に供することが可能である。
【０１４６】
別のアプローチにおいて、本発明の組成物および／または方法において使用される抗体は、本分野で公知の酵母ディスプレイ法を用いて作製することも可能である。酵母ディスプレイ法では、抗体ドメインを酵母細胞壁に繋留し、これらを酵母の表面上にディスプレイするために、遺伝学的な方法が使用される。特に、このような酵母は、レパートリーまたはコンビナトリアル抗体ライブラリー（例えば、ヒトまたはマウス）から発現される抗原結合ドメインをディスプレイするために使用することが可能である。本発明の抗体を作製するために使用することが可能な酵母ディスプレイ法の例には、参照により本明細書に組み込まれる、Ｗｉｔｔｒｕｐ  ｅｔ  ａｌ．米国特許第６，６９９，６５８号に開示されているものが含まれる。
【０１４７】
Ｂ．組換えＩＬ−１３抗体の作製
本発明の組成物および／または方法において使用される抗体は、当技術分野で公知のいくつかの技法のうちのいずれによっても作製され得る。例えば、重鎖および軽鎖をコードする発現ベクターが標準技法により宿主細胞にトランスフェクトされる、宿主細胞からの発現。「トランスフェクション」という用語の様々な形は、外来性ＤＮＡを原核または真核宿主細胞に導入するために一般に使用される多種多様な技法、例えば、エレクトロポレーション、リン酸カルシウム沈殿、ＤＥＡＥデキストラントランスフェクションおよび同類のものを包含するものとする。本発明の抗体を原核宿主細胞でも真核宿主細胞でも発現させることは可能であるが、真核細胞における抗体の発現のほうが好ましく、最も好ましくは哺乳動物宿主細胞においてである。なぜならば、該真核細胞（および、特に哺乳動物細胞）は原核細胞よりも正確にフォールディングされ免疫学的に活性な抗体を組立て分泌する可能性が高いからである。
【０１４８】
本発明の組換え抗体を発現するのに好ましい哺乳動物宿主細胞は、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ細胞）（例えば、Ｒ．Ｊ．Ｋａｕｆｍａｎ  ａｎｄ  Ｐ．Ａ．Ｓｈａｒｐ（１９８２）Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１５９：６０１−６２１頁に記載されているＤＨＦＲ選択マーカーと一緒に使用される、Ｕｒｌａｕｂ  ａｎｄ  Ｃｈａｓｉｎ、（１９８０）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７７：４２１６−４２２０頁に記載されているｄｈｆｒ−ＣＨＯ細胞を含む。）、ＮＳＯ骨髄腫細胞、ＣＯＳ細胞およびＳＰ２細胞を含む。抗体遺伝子をコードする組換え発現ベクターが哺乳動物宿主細胞に導入されると、宿主細胞において抗体の発現を、またはさらに好ましくは、宿主細胞が培養されている培地への抗体の分泌を可能にするのに十分な期間宿主細胞を培養することにより抗体は産生される。抗体は、標準タンパク質精製法を使用して培地から回収することが可能である。
【０１４９】
宿主細胞を使用して、Ｆａｂ断片またはｓｃＦｖ分子などの機能的抗体断片を作製することも可能である。上の手法の変動は本発明の範囲内であることは理解される。例えば、本発明の抗体の軽鎖および／または重鎖のどちらかの機能的断片をコードするＤＮＡを用いて宿主細胞をトランスフェクトするのが望ましいこともある。組換えＤＮＡ技術を使用して、対象の抗原への結合に必要ではない軽鎖と重鎖のどちらかまたは両方をコードするＤＮＡの一部または全部を除去することも可能である。該切断型ＤＮＡ分子から発現される分子も本発明の抗体に包含される。さらに、１つの重鎖および１つの軽鎖が本発明の抗体でありもう１つの重鎖および軽鎖が対象の抗原以外の抗原に特異的である二機能的抗体は、標準化学架橋法により本発明の抗体を第二の抗体に架橋させることにより作製し得る。
【０１５０】
本発明の抗体またはその抗原結合部分の組換え発現のための好ましい系では、抗体重鎖と抗体軽鎖の両方をコードする組換え発現ベクターはリン酸カルシウム媒介トランスフェクションによりｄｈｆｒ−ＣＨＯ細胞に導入される。組換え発現ベクター内では、抗体重鎖および軽鎖遺伝子は、それぞれ前記遺伝子の高レベルの転写を推進するＣＭＶエンハンサー／ＡｄＭＬＰプロモーター調節エレメントに作用可能に連結されている。組換え発現ベクターはＤＨＦＲ遺伝子も担っており、これのせいでメトトレキサート選択／増幅を使用して前記ベクターでトランスフェクトされたＣＨＯ細胞の選択が可能になる。選択された形質転換体宿主細胞は培養されて、抗体重鎖および軽鎖の発現が可能になり無傷の抗体は培地から回収される。標準分子生物学技法を使用して、組換え発現ベクターを調製し、宿主細胞をトランスフェクトし、形質転換体について選択し、前記宿主細胞を培養し、培地から抗体を回収する。さらに、本発明は、本発明の組換え抗体が合成されるまで適切な培地において本発明の宿主細胞を培養することにより、本発明の組換え抗体を合成する方法を提供する。前記方法は、培地から組換え抗体を単離することをさらに含むことが可能である。
【０１５１】
１．抗ＩＬ−１３抗体
米国特許第７，１９５，３８８号（前記特許文献の内容は参照により本明細書に組み込む。）の表５は、本発明の組成物および／または方法において使用される好ましい抗ＩＬ−１３抗体のＶＨおよびＶＬ領域のアミノ酸配列のリストである。これらの単離された抗ＩＬ−１３抗体ＣＤＲ配列は、本発明に従って単離され、米国特許第７１９５３８８号（前記特許文献の内容は参照により本明細書に組み込む。）の表６に収載されるＣＤＲ配列を含むポリペプチドを含むＩＬ−１３結合タンパク質のファミリーを確立する。ＩＬ−１３に関して好ましいＩＬ−１３結合および／もしくは中和活性を有する本発明のＣＤＲならびに／またはＩＬ−１３を産生し選択するため、本明細書で具体的に記載される方法を含む、本発明の結合タンパク質を産生し、ＩＬ−１３ならびに／またはそれらの結合タンパク質のＩＬ−１３結合および／もしくは中和特徴を評価するための当技術分野で公知の標準法を使用し得る。
【０１５２】
一実施形態では、本発明の組成物および／または方法において使用される抗体は、抗体１３Ｃ５．５である（米国特許第７，９１５，３８８号参照。前記特許文献の内容は参照により本明細書に組み込む。）。１３Ｃ５．５は、インターロイキン１３（ＩＬ−１３）のヘリックスＡおよびＤに大きな親和性で結合するヒト化抗体である（図１参照）。１３Ｃ５．５の重鎖および軽鎖可変領域配列は、それぞれ配列番号２および配列番号３として上に記載されている。
【０１５３】
２．抗ＩＬ−１３キメラ抗体
キメラ抗体は、抗体の異なる部分が、マウスモノクローナル抗体由来の可変領域およびヒト免疫グロブリン定常領域を有する抗体などの異なる動物種由来である分子である。キメラ抗体を作製するための方法は当技術分野では公知であり、実施例２．１において詳細に考察されている。例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２９：１２０２頁（１９８５）；Ｏｉ  ｅｔ  ａｌ．、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ４：２１４頁（１９８６）；Ｇｉｌｌｉｅｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９８９）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  １２５：１９１−２０２頁；米国特許第５，８０７，７１５号；米国特許第４，８１６，５６７号；および米国特許第４，８１６，３９７号を参照されたい。これらの文献は参照によりその全体を本明細書に組み込まれている。さらに、適切な抗原特異性のマウス抗体分子由来の遺伝子を適切な生物学的活性のヒト抗体分子由来の遺伝子と一緒にスプライスすることによる「キメラ抗体」の作製のために開発された技法（Ｍｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．、１９８４、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８１：８５１−８５５頁；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．、１９８４、Ｎａｔｕｒｅ  ３１２：６０４−６０８頁；Ｔａｋｅｄａ  ｅｔ  ａｌ．、１９８５、Ｎａｔｕｒｅ  ３１４：４５２−４５４頁、これらの文献は参照によりその全体を本明細書に組み込まれている。）を使用することが可能である。
【０１５４】
一実施形態では、本発明の組成物および／または方法において使用されるキメラ抗体は、セクション１に記載されているマウスモノクローナル抗ヒトＩＬ−１３抗体の重鎖定常領域をヒトＩｇＧ１定常領域で置き換えることにより作製される。特定の実施形態では、本発明のキメラ抗体は、米国特許第７１９５３８８号に開示されている、配列番号３４、配列番号３６、配列番号４１、配列番号４２、配列番号４６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）および配列番号３５、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３または配列番号４７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
【０１５５】
３．抗ＩＬ−１３ヒト化抗体
ヒト化抗体は、非ヒト種に由来する１つ以上の相補性決定領域（ＣＤＲ）と、ヒト免疫グロブリン分子由来のフレームワーク領域とを有する所望の抗原に結合する非ヒト種抗体に由来する抗体分子である。公知のヒトＩｇ配列は、例えば、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．Ｈｅａｌｔｈ（１９８３）（全体が参照により本明細書に組み込まれる。）に開示されている。このような導入された配列は、免疫原性を低下させるために、または結合、親和性、結合速度、解離速度、結合力、特異性、半減期もしくは本分野で公知の他のいずれかの適切な特性を減少、増強もしくは修飾するために使用することが可能である。
【０１５６】
ヒトフレームワーク領域中のフレームワーク残基は、抗原結合を変化させるために、好ましくは抗原結合を改善させるために、ＣＤＲドナー抗体由来の対応する残基で置換され得る。これらのフレームワーク置換は、本分野で周知の方法によって、例えば、抗原結合にとって重要なフレームワーク残基を同定するために、ＣＤＲとフレームワーク残基の相互作用をモデリングすることによって、および特定の位置における異常なフレームワーク残基を同定するための配列比較によって同定される（例えば、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｑｕｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，米国特許第５，５８５，０８９号；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３頁（１９８８）を参照されたい。）。三次元免疫グロブリンモデルが一般的に利用可能であり、当業者によく知られている。選択された候補免疫グロブリン配列が採り得る三次元立体構造を図式および表示するコンピュータプログラムを利用可能である。これらのディスプレイの検査は、候補免疫グロブリン配列の機能における残基の推定される役割の分析、すなわち、候補免疫グロブリンがその抗原に結合する能力に影響を与える残基の分析を可能とする。このようにして、ＦＲ残基は、所望される抗体特性（標的抗原に対して増加された親和性など）が達成されるように、コンセンサスおよび輸入配列から選択され、組み合わせることが可能である。一般に、ＣＤＲ残基は、抗原結合に影響を与えることに直接、および最も実質的に関与する。抗体は、Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２頁（１９８６）；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：１５３４頁（１９８８））、Ｓｉｍｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２２９６頁（１９９３）；Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１頁（１９８７）、Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８９：４２８５頁（１９９２）；Ｐｒｅｓｔａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２６２３頁（１９９３）、Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ２８（４／５）：４８９−４９８頁（１９９１）；Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ７（６）：８０５−８１４頁（１９９４）；Ｒｏｇｕｓｋａ．ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  ９１：９６９−９７３頁（１９９４）；ＰＣＴ公開ＷＯ９１／０９９６７、ＰＣＴ／ＵＳ９８／１６２８０、ＵＳ９６／１８９７８、ＵＳ９１／０９６３０、ＵＳ９１／０５９３９、ＵＳ９４／０１２３４、ＧＢ８９／０１３３４、ＧＢ９１／０１１３４、ＧＢ９２／０１７５５；ＷＯ９０／１４４４３、ＷＯ９０／１４４２４、ＷＯ９０／１４４３０、ＥＰ２２９２４６、ＥＰ５９２，１０６；ＥＰ５１９，５９６、ＥＰ２３９，４００、米国特許第５，５６５，３３２号、第５，７２３．３２３号、第５，９７６，８６２号、第５，８２４，５１４号、第５，８１７，４８３号、第５，８１４，４７６号、第５，７６３，１９２号、第５，７２３，３２３号、第５，７６６，８８６号、第５，７１４，３５２号、第６，２０４，０２３号、第６，１８０，３７０号、第５，６９３，７６２号、第５，５３０，１０１号、第５，５８５，０８９号、第５，２２５，５３９号；第４，８１６，５６７号（各々の全体がその中で引用される参考文献を含めて参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているものなどの（但し、これらに限定されない。）、本分野で公知の様々な技術を用いてヒト化することが可能である。
【０１５７】
Ｃ．抗体および抗体産生細胞系統の作製
好ましくは、本発明の組成物および／または方法において使用するための抗ＩＬ−１３抗体は、例えば、当技術分野で公知のいくつかのインビトロおよびインビボアッセイのうちのいずれか１つにより評価した場合、ＩＬ−１３活性を減少するまたは中和する高い能力を示す（例えば、米国特許第７，１９５，３８８号の実施例１．１．Ｃ参照。前記特許文献の全内容は参照により本明細書に組み込む。）。例えば、これらの抗体は、Ａ−５４９細胞によるＩＬ−１３に誘導されるＴＡＲＣの産生を、少なくとも約１０−８Ｍ、約１０−９Ｍまたは約１０−１０Ｍの範囲のＩＣ５０値で中和する。
【０１５８】
好ましい実施形態では、単離された抗体またはその抗原結合部分は、ヒトＩＬ−１３に結合し、前記抗体またはその抗原結合部分は、表面プラズモン共鳴により決定された場合に、約０．１ｓ−１もしくはそれ未満のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１３から解離する、または約１×１０−６Ｍもしくはそれ未満のＩＣ５０でヒトＩＬ−１３および／もしくはヒトＩＬ−１３活性を阻害する。代わりに、前記抗体またはその抗原結合部分は、表面プラズモン共鳴により決定された場合に、約１×１０−２ｓ−１もしくはそれ未満のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１３から解離し得る、または約１×１０−７Ｍもしくはそれ未満のＩＣ５０でヒトＩＬ−１３および／もしくはヒトＩＬ−１３活性を阻害し得る。代わりに、前記抗体またはその抗原結合部分は、表面プラズモン共鳴により決定された場合に、約１×１０−３ｓ−１もしくはそれ未満のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１３から解離し得る、または約１×１０−８Ｍもしくはそれ未満のＩＣ５０でヒトＩＬ−１３および／もしくはヒトＩＬ−１３を阻害し得る。代わりに、前記抗体またはその抗原結合部分は、表面プラズモン共鳴により決定された場合に、約１×１０−４ｓ−１もしくはそれ未満のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１３から解離し得る、または約１×１０−９Ｍもしくはそれ未満のＩＣ５０でヒトＩＬ−１３および／もしくはヒトＬ−１３活性を阻害し得る。代わりに、前記抗体またはその抗原結合部分は、表面プラズモン共鳴により決定された場合に、約１×１０−５ｓ−１もしくはそれ未満のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１３から解離し得る、または約１×１０−１０Ｍもしくはそれ未満のＩＣ５０でヒトＩＬ−１３および／もしくはヒトＩＬ−１３活性を阻害し得る。代わりに、前記抗体またはその抗原結合部分は、表面プラズモン共鳴により決定された場合に、約１×１０−５ｓ−１もしくはそれ未満のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１３から解離し得る、または約１×１０−１１Ｍもしくはそれ未満のＩＣ５０でヒトＩＬ−１３および／もしくはヒトＩＬ−１３活性を阻害し得る。
【０１５９】
ＩＬ−１３は、細胞表面上のＩＬ−１３受容体（ＩＬ−１３Ｒ）である、ＩＬ−１３Ｒα１鎖（ＩＬ−１３Ｒα１）およびＩＬ−４Ｒ鎖（ＩＬ−４Ｒ）からなるヘテロ二量体に結合することによりその作用を発揮する。ＩＬ−１３はＩＬ−１３Ｒα１にまず低親和性（ＫＤ＝２−１０ｎＭ）で結合し、次にＩＬ−４Ｒを複合体まで動員し、高親和性受容体（ＫＤ＝０．０３−０．４ｎＭ）を生じる（Ａｍａｎ、Ｍ．Ｊ．、ｅｔ  ａｌ．１９９６年  Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１、２９２６５−２９２７０頁；Ｍｉｌｏｕｘ、ｅｔ  ａｌ．１９９７年  ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．４０１、１６３−１６６頁；Ａｎｄｒｅｗｓ、ｅｔ  ａｌ  ２００２年  Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７、４６０７３−４６０７８頁）。ＩＬ−１３Ｒがヘテロ二量体化すると、ヤヌスキナーゼ、すなわち、それぞれＩＬ−１３Ｒα１およびＩＬ−４Ｒと構成的に会合しているＴＹＫ２およびＪＡＫ１が活性化され、続いて転写６のシグナルトランスデューサーおよび活性化因子（ＳＴＡＴ６）が活性化される（Ｉｚｕｈａｒａ、Ｋ．、ａｎｄ  Ａｒｉｍａ、Ｋ．２００４年  Ｄｒｕｇ  Ｎｅｗｓ  Ｐｅｒｓｐｅｃｔ．１７、９１−９８頁）。ＩＬ−１３に高親和性（０．２５−１．２ｎＭ）で結合するもう１つのＩＬ−１３結合ユニット、ＩＬ−１３Ｒα２鎖（ＩＬ−１３Ｒα２）も存在する（Ｃａｐｕｔ、ｅｔ  ａｌ  １９９６年  Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１、１６９２１−１６９２６頁；Ｄｏｎａｌｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ  １９９８年  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６１、２３１７−２３２４頁）。ＩＬ−１３  ＩＬ−１３Ｒ２複合体に関与することが分かっている他の受容体分子はない。ＩＬ−１３Ｒ２は、最初は非シグナル伝達「デコイ」受容体として作用すると考えられている。しかし、ＩＬ−１３Ｒ２はＩＬ−１３に結合することができ、ＡＰ−１経路を通じてシグナルを伝達し、マクロファージを含むある種の細胞型においてＴＮＦ−ベータを産生させ、今度は肺線維症をもたらすことが後に発見された（Ｆｉｃｈｔｎｅｒ−Ｆｅｉｇｌ、２００６年  Ｎａｔ  Ｍｅｄ  １２：９９−１０６頁）。したがって、ＩＬ−１３Ｒα１／ＩＬ−４ＲαとＩＬ−１３Ｒα２経路の両方が、喘息および他の肺炎症病状の全体的病態生理の一因となる。したがって、両方の受容体へのＩＬ−１３結合をブロックする治療的抗ＩＬ−１３抗体のほうが１つの受容体のみをブロックする抗体よりも効果的である。
【０１６０】
一態様では、本発明は、ＩＬ−１３Ｒα１とＩＬ−１３Ｒα２の両方へのＩＬ−１３の結合をブロックするモノクローナル抗体を使用する組成物および／または方法を提供する。細胞表面でのＥＬＩＳＡベースの受容体結合アッセイでも１２５−Ｉ−標識ＩＬ−１３結合アッセイでも、１３Ｃ５はマウスバージョンでもヒト化バージョン（すなわち、１３Ｃ５．５）でも、両方の受容体へのＩＬ−１３結合を効果的にブロックすることができることが実証された。２５Ｃ８および３３Ｃ３を含む、１３Ｃ５と同じ系列における抗体も両方の受容体へのＩＬ−１３結合をブロックすることができた。１３Ｃ５のエピトープマッピングにより、その結合部位にはヒトＩＬ−１３のＣ末端へリックスＤ領域（残基ＶＲＤＴＫ  ＩＥＶＡＱ  ＦＶＫＤＬ  ＬＬＨＬＫ  ＫＬＦＲＥ  ＧＲ、配列番号１のアミノ酸１０４−１３０に一致する。）が含まれることが示された。Ｃ末端へリックスＤ領域は、ＩＬ−１３受容体との相互作用に関与していると提唱されてきた（Ｚｕｅｇｇ  ｅｔ  ａｌ  ２００１年  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．７９：３３２−９頁）。１３Ｃ５．５抗体のＦａｂ部分と複合体を形成するヒトＩＬ−１３の結晶構造により、１３Ｃ５．５はヒトＩＬ−１３のＣ末端へリックスＤ領域ならびにＮ末端へリックスＡ領域に結合することが示された。好ましくは、抗体またはその抗原結合断片は、前記抗体またはその抗原結合断片が配列番号１の組織分布的領域Ｓｅｒ２６−Ｔｈｒ２７−Ａｌａ２８−Ｌｅｕ２９−Ａｒｇ３０−Ｇｌｕ３１−Ｌｅｕ３２−Ｉｌｅ３３−Ｇｌｕ３４−Ｇｌｕ３５−Ｌｅｕ３６−Ｖａｌ３７−Ａｓｎ３８およびＬｙｓ１２３−Ｌｙｓ１２４−Ｌｅｕ１２５−Ｐｈｅ１２６−Ａｒｇ１２７−Ｇｌｕ１２８−Ｇｌｙ１２９−Ａｒｇ１３０により定義されるエピトープに結合しているＩＬ−１３がＩＬ−１３受容体への結合を阻害されるようにヒトＩＬ−１３に結合する。好ましくは、抗体またはその抗原結合断片は、前記抗体またはその抗原結合断片が配列番号１の組織分布的領域Ａｒｇ３０−Ｇｌｕ３１−Ｌｅｕ３２−Ｉｌｅ３３−Ｇｌｕ３４−Ｇｌｕ３５−Ｌｅｕ３６−Ｖａｌ３７−Ａｓｎ３８およびＬｙｓ１２３−Ｌｙｓ１２４−Ｌｅｕ１２５−Ｐｈｅ１２６−Ａｒｇ１２７により定義されるエピトープに結合しているＩＬ−１３がＩＬ−１３アルファ２受容体への結合を阻害されるようにヒトＩＬ−１３に結合する。
【０１６１】
ある種の実施形態では、抗体は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＭまたはＩｇＤ定常領域などの重鎖定常領域を含む。好ましくは、重鎖定常領域はＩｇＧ１重鎖定常領域またはＩｇＧ４重鎖定常領域である。さらに、抗体は、軽鎖定常領域、すなわち、κ軽鎖定常領域またはλ軽鎖定常領域のどちらかを含むことが可能である。好ましくは、抗体はκ軽鎖定常領域を含む。代わりに、抗体部分は、例えば、Ｆａｂ断片または一本鎖Ｆｖ断片であることが可能である。
【０１６２】
抗体エフェクター機能を変えるＦｃ部分におけるアミノ酸残基の置換は当技術分野では公知である（Ｗｉｎｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．、米国特許第５，６４８，２６０号および米国特許第５，６２４，８２１号）。抗体のＦｃ部分は、いくつかの重要なエフェクター機能、例えば、サイトカイン誘導、ＡＤＣＣ、食作用、補体依存性細胞障害（ＣＤＣ）ならびに抗体および抗原−抗体複合体の半減期／排除速度を媒介する。いくつかの場合、これらのエフェクター機能は治療抗体に望ましいが、他の場合には治療目的によっては不必要であるまたは有害でさえあることもある。ある種のヒトＩｇＧアイソタイプ、特にＩｇＧ１およびＩｇＧ３は、それぞれＡＤＣＣならびにＦｃγＲおよび補体Ｃ１ｑへの結合を介したＣＤＣを媒介する。新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）は、抗体の循環半減期を決定する決定的に重要な成分である。さらに別の実施形態では、抗体のエフェクター機能が変わるように、抗体の定常領域、例えば、抗体のＦｃ領域において少なくとも１つのアミノ酸残基が置換される。
【０１６３】
一実施形態では、本発明の方法および組成物は、標識された結合タンパク質を使用し、ここで、本発明の抗体または抗体部分は、別の機能的分子（例えば、別のペプチドまたはタンパク質）へ誘導体化され、または連結される。例えば、本発明の標識された結合タンパク質は、別の抗体（例えば、二特異的抗体またはダイアボティ）、検出可能な薬剤、細胞毒性剤、薬剤および／または別の分子（ストレプトアビジンコア領域またはポリヒスチジンタグなど）との、抗体または抗体部分の会合を媒介可能なタンパク質もしくはペプチドなどの１つ以上の他の分子実体へ、（化学的カップリング、遺伝的融合、非共有会合またはその他によって）本発明の抗体または抗体部分を機能的に連結することによって誘導することが可能である。
【０１６４】
本発明の抗体または抗体部分を誘導体化し得る有用な検出可能な薬剤には、蛍光化合物が含まれる。典型的な蛍光検出可能な薬剤には、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアナート、ローダミン、５−ジメチルアミン−１−ナフタレンスルホニルクロリド、フィコエリトリンなどが含まれる。抗体は、アルカリホスファターゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ、グルコースオキシダーゼなどの検出可能な酵素でも誘導体化され得る。抗体が検出可能な酵素で誘導体化される場合には、検出可能な反応産物を生成させるために、本酵素が使用するさらなる試薬を添加することによって抗体が検出される。例えば、検出可能な薬剤西洋ワサビペルオキシダーゼが存在する場合には、過酸化水素およびジアミノベンジジンの添加は、検出可能な発色した反応産物をもたらす。抗体は、ビオチンを用いて誘導体化し、アビジンまたはストレプトアビジン結合の間接的な測定を通じても検出され得る。
【０１６５】
別の実施形態では、本発明の組成物および方法は、結晶化された結合タンパク質を使用する。好ましくは、本発明は、本明細書で開示されている完全な抗ＩＬ−１３抗体およびこれらの断片の結晶、ならびにこのような結晶を含む製剤および組成物に関する。一実施形態において、結晶化された結合タンパク質は、結合タンパク質の可溶性対応物より大きなインビボ半減期を有する。別の実施形態において、結合タンパク質は、結晶化後の生物活性を保持する。
【０１６６】
本発明の結晶化された結合タンパク質は、本分野で公知の方法に従って、および参照により本明細書に組み込まれる、ＷＯ０２０７２６３６に開示されているように産生され得る。
【０１６７】
さらに別の実施形態では、本発明の組成物および／または方法は、抗体またはその抗原結合部分が１つ以上の炭水化物残基を含む、グリコシル化された結合タンパク質を使用する。新生インビボタンパク質産生は、翻訳後修飾として知られるさらなるプロセッシングを経ることがあり得る。特に、糖（グリコシル）残基は、酵素的に付加され得る（グリコシル化として知られる方法）。共有結合されたオリゴ糖側鎖を有する得られたタンパク質は、グリコシル化されたタンパク質または糖タンパク質として知られる。抗体は、Ｆｃドメイン中、および可変ドメイン中に１つ以上の炭水化物残基を有する糖タンパク質である。Ｆｃドメイン中の炭水化物残基は、抗体の抗原結合または半減期に対する効果を最小限に抑えながら、Ｆｃドメインのエフェクター機能に対して重要な効果を有する（Ｒ．Ｊｅｆｆｅｒｉｓ，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｐｒｏｇ．２１（２００５），ｐ．１１−１６）。これに対して、可変ドメインのグリコシル化は、抗体の抗原結合活性に対して影響を及ぼし得る。可変ドメイン中のグリコシル化は、おそらくは、立体的な妨害のために、抗体結合親和性に対して負の影響を有し得（Ｃｏ，Ｍ．Ｓ．，ｅｔ  ａｌ．，ＭｏＩ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．（１９９３）３０：１３６１−１３６７）または抗原に対する増加した親和性をもたらし得る（Ｗａｌｌｉｃｋ，Ｓ．Ｃ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．（１９８８）１６８：１０９９−１１０９；Ｗｒｉｇｈｔ，Ａ．，ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．（１９９１）１０：２７１７−２７２３）。
【０１６８】
本発明の一態様は、結合タンパク質のＯ結合型またはＮ結合型グリコシル化部位が変異されているグリコシル化部位変異体を作製することに関する。当業者は、標準的な周知の技術を用いて、このような変異体を作製することが可能である。生物学的活性を保持するが、増加または減少した結合活性を有するグリコシル化部位変異体が、本発明の別の目的である。
【０１６９】
さらに別の実施形態において、本発明の抗体または抗原結合部分のグリコシル化は修飾される。例えば、無グリコシル化抗体を作製することが可能である（すなわち、抗体は、グリコシル化を欠如する。）。グリコシル化は、例えば、抗原に対する抗体の親和性を増加させるために改変することが可能である。このような炭水化物修飾は、例えば、抗体配列内のグリコシル化の１つ以上の部位を変化させることによって達成することが可能である。例えば、それによって、当該部位のグリコシル化を除去するために、１つ以上の可変領域グリコシル化部位の除去をもたらす１つ以上のアミノ酸置換を施すことが可能である。このような無グリコシル化は、抗原に対する抗体の親和性を増加させ得る。このようなアプローチは、ＰＣＴ公開ＷＯ２００３０１６４６６Ａ２ならびに米国特許第５，７１４，３５０号および第６，３５０，８６１号に、さらに詳しく記載されている（それらの各々はその全体が参照により本明細書に組み込まれる。）。
【０１７０】
これに加えてまたはこれに代えて、フコシル残基の減少した量を有する低フコシル化抗体または増加した二分岐ＧｌｃＮＡｃ構造を有する抗体など、グリコシル化の変化した種類を有する本発明の修飾された抗体を作製することが可能である。このような変化されたグリコシル化パターンは、抗体のＡＤＣＣ能力を増加させることが示されている。このような炭水化物修飾は、例えば、変化したグリコシル化機構を有する宿主細胞中で抗体を発現させることによって達成することが可能である。変化したグリコシル化機構を有する細胞は本分野において記載されており、その中で、本発明の組換え抗体を発現させることによって、変化したグリコシル化を有する抗体を産生するための宿主細胞として使用することができる。例えば、Ｓｈｉｅｌｄｓ，Ｒ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７：２６７３３−２６７４０；Ｕｍａｎａ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．１７：１７６−１、および欧州特許ＥＰ１，１７６，１９５；ＰＣＴ公開ＷＯ０３／０３５８３５、ＷＯ９９／５４３４２  ８０（それらの各々はその全体が参照により本明細書に組み込まれる。）を参照されたい。
【０１７１】
タンパク質グリコシル化は、対象のタンパク質のアミノ酸配列およびその中でタンパク質が発現される宿主細胞に依存する。異なる生物は、異なるグリコシル化酵素（例えば、グリコシル転移酵素およびグリコシダーゼ）を産生し得、利用可能な異なる基質（ヌクレオチド糖）を有し得る。このような要因のために、タンパク質グリコシル化パターンおよびグリコシル残基の組成は、タンパク質がその中で発現されている宿主系に応じて異なり得る。本発明において有用なグリコシル残基には、グルコース、ガラクトース、マンノース、フコース、ｎ−アセチルグルコサミンおよびシアル酸が含まれ得るが、これらに限定されない。好ましくは、グリコシル化された結合タンパク質は、グリコシル化パターンがヒトであるように、グリコシル残基を含む。
【０１７２】
異なるタンパク質グリコシル化は異なるタンパク質特性をもたらし得ることが、当業者に公知である。例えば、酵母などの微生物宿主中で産生され、酵母内在経路を用いてグリコシル化された治療用タンパク質の効力は、ＣＨＯ細胞株などの哺乳動物細胞中で発現された同じタンパク質の効力と比べて低下され得る。また、このような糖タンパク質は、ヒトにおいて免疫原性であり得、投与後に、減少したインビボ半減期を示し得る。ヒトおよび他の動物中の特異的な受容体は、特異的なグリコシル残基を認識し得、血流からのタンパク質の迅速な除去を促進し得る。他の有害な効果は、タンパク質の折り畳み、溶解度、プロテアーゼに対する感受性、運搬、輸送、区画化、分泌、他のタンパク質または因子による認識、抗原性またはアレルゲン性の変化が含まれ得る。したがって、当業者は、グリコシル化の特異的な組成およびパターン、例えば、ヒト細胞中または意図される対象動物の種特異的細胞中で産生されるものと同一または少なくとも類似のグリコシル化組成およびパターンを有する治療タンパク質を選択し得る。
【０１７３】
宿主細胞のものとは異なるグリコシル化されたタンパク質を発現することは、異種グリコシル化酵素を発現するために宿主細胞を遺伝的に修飾することによって達成され得る。本分野で公知の技術を使用して、当業者は、ヒトタンパク質グリコシル化を呈する抗体またはその抗原結合部分を作製し得る。例えば、酵母株中で産生されたグリコシル化されたタンパク質（糖タンパク質）が、動物細胞、特にヒト細胞のものと同一のタンパク質グリコシル化を呈するように（米国特許出願第２００４００１８５９０号および第２００２０１３７１３４号、ならびにＰＣＴ公開ＷＯ２００５１００５８４Ａ２号（それらの各々の内容の全体は参照により本明細書に組み込まれる。））、酵母株は、天然に存在しないグリコシル化酵素を発現するように遺伝的に修飾されている。
【０１７４】
本発明の方法および／または組成物は、本発明のこのような結合タンパク質に対して特異的な抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体を使用することも可能である。抗Ｉｄ抗体は、別の抗体の抗原結合領域と一般的に付随する固有の決定基を認識する抗体である。抗Ｉｄは、結合タンパク質またはそのＣＤＲ含有領域で動物を免疫化することによって調製することが可能である。免疫された動物は、免疫抗体のイディオタイプ決定基を認識し、これに応答し、抗Ｉｄ抗体を産生する。抗Ｉｄ抗体は、さらに別の動物における免疫応答を誘導して、いわゆる抗抗Ｉｄ抗体を産生する「免疫原」として使用することも可能である。
【０１７５】
さらに、ライブラリーのメンバー宿主細胞がバリアントグリコシル化パターンを有する目的のタンパク質を産生するように、様々なグリコシル化酵素を発現するように遺伝学的に改変された宿主細胞のライブラリーを用いて、目的のタンパク質を発現させ得ることが、当業者によって理解されている。次いで、当業者は、特定の新規グリコシル化パターンを有する目的のタンパク質を選択および単離し得る。好ましくは、特に選択された新規グリコシル化パターンを有するタンパク質は、改善または改変された生物学的特性を示す。
【０１７６】
ＩＩ．本発明の組成物
本発明は、本発明の抗体またはその抗原結合部分および医薬として許容される担体を含む組成物、例えば、医薬組成物も提供する。本発明の組成物は、約０．３ｍｇ／ｋｇの用量で対象の静脈内に投与される場合、抗体またはその抗原結合部分が（ａ）約１５００から約２７００μｇｈ／ｍｌの間の曲線下面積（ＡＵＣ）；（ｂ）約６５から１２５ｍＬ／ｋｇの間の分布容積；（ｃ）約５から約８μｇ／ｍｌの間のピーク濃度（Ｃｍａｘ）および（ｄ）約０．１から約０．２ｍｌ／ｈ／ｋｇの間の排除速度を示すことができるように、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を含む。
【０１７７】
別の態様では、本発明は、約３ｍｇ／ｋｇの用量で対象の静脈内に投与される場合、抗体またはその抗原結合部分が（ａ）約２１０００から約３３５００μｇｈ／ｍｌの間の曲線下面積（ＡＵＣ）；（ｂ）約５５から約１００ｍＬ／ｋｇの間の分布容積；（ｃ）約５５から約９０μｇ／ｍｌの間のピーク濃度（Ｃｍａｘ）および（ｄ）約０．０８から約０．１５ｍｌ／ｈ／ｋｇの間の排除速度を示すことができるように、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を含む単離された組成物を提供する。
【０１７８】
別の態様では、本発明は、約１０ｍｇ／ｋｇの用量で対象の静脈内に投与される場合、抗体またはその抗原結合部分が（ａ）約７５から約１００μｇｈ／ｍｌの間の曲線下面積（ＡＵＣ）；（ｂ）約９０から約１３０ｍＬ／ｋｇの間の分布容積；（ｃ）約１８５から約２５０μｇ／ｍｌの間のピーク濃度（Ｃｍａｘ）および（ｄ）約０．１から約０．１５ｍｌ／ｈ／ｋｇの間の排除速度を示すことができるように、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を含む単離された組成物を提供する。
【０１７９】
さらに別の態様では、本発明は、約０．３ｍｇ／ｋｇの用量で対象の皮下に投与される場合、抗体またはその抗原結合部分が（ａ）約１２５から約８００μｇｈ／ｍｌの間の曲線下面積（ＡＵＣ）；および（ｂ）約１．０から約６．０μｇ／ｍｌの間のピーク濃度（Ｃｍａｘ）を示すことができるように、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を含む単離された組成物を提供する。
【０１８０】
別の態様では、本発明は、約３ｍｇ／ｋｇの用量で対象の皮下に投与される場合、抗体またはその抗原結合部分が（ａ）約１１００から約８５００μｇｈ／ｍｌの間の曲線下面積（ＡＵＣ）；および（ｂ）約１２から約６０μｇ／ｍｌの間のピーク濃度（Ｃｍａｘ）を示すことができるように、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を含む単離された組成物を提供する。
【０１８１】
別の態様では、本発明は、約０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇの用量で対象に静脈内投与されると、抗体またはその抗原結合部分が本明細書、表または図に記載される薬物動態パラメータのいずれかを示すことができるように、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を含む単離された組成物を提供する。
【０１８２】
別の態様では、本発明は、約０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇまたは３ｍｇ／ｋｇの用量で対象に皮下投与されると、抗体またはその抗原結合部分が本明細書、表または図に記載される薬物動態パラメータのいずれかを示すことができるように、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を含む単離された組成物を提供する。
【０１８３】
本発明の抗体を含む医薬組成物は、疾患を診断し、検出し、もしくはモニタリングし、疾患または１つもしくはそれ以上のその症候を予防し、治療し、管理し、もしくは軽減する上で、および／または研究において使用されるが、これらに限定されない。特定の実施形態において、組成物は、１つ以上の本発明の抗体を含む。別の実施形態において、医薬組成物は、１つ以上の本発明の抗体、および喘息などのＩＬ−１３活性が有害である疾患を治療するための、本発明の抗体以外の１つ以上の予防または治療剤を含む。好ましくは、予防剤または治療剤は、疾患または１つもしくはそれ以上のその症候の予防、治療、管理または軽減に有用であることが知られており、または疾患または１つもしくはそれ以上のその症候の予防、治療、管理または軽減においてこれまで使用されており、もしくは現在使用されている。これらの実施形態に従えば、組成物は、担体、希釈剤または賦形剤をさらに含み得る。
【０１８４】
典型的には、本発明の医薬組成物中は、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分および医薬として許容される担体を含む。本明細書において使用される「医薬として許容される担体」には、生理的に適合性がある、あらゆる溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤などが含まれる。医薬として許容される担体の例には、水、生理的食塩水、リン酸緩衝化された生理的食塩水、デキストロース、グリセロール、エタノールなどのうちの１つ以上およびこれらの組合せが含まれる。多くの場合、等張剤、例えば、糖、マニトール、ソルビトールなどの多価アルコールまたは塩化ナトリウムを組成物中に含めることが好ましい。医薬として許容される担体は、抗体または抗体部分の保存期間または有効性を増強する、湿潤剤または乳化剤、防腐剤または緩衝剤などの補助物質の微量をさらに含み得る。
【０１８５】
様々な送達系が公知であり、例えば、リポソーム、微粒子、ミクロカプセル、抗体または抗体断片を発現することができる組換え細胞、受容体によって媒介されるエンドサイトーシス（例えば、Ｗｕ  ａｎｄ  Ｗｕ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６２：４４２９−４４３２（１９８７）参照）、レトロウイルスまたは他のベクターなどの一部としての核酸の構築物に封入して、本発明の１つもしくはそれ以上の抗体または本発明の１つもしくはそれ以上の抗体および疾患または１つもしくはそれ以上のその症候を予防し、管理し、治療し、もしくは軽減するのに有用な予防剤または治療剤の組合せを投与するために使用することが可能である。本発明の予防剤または治療剤を投与する方法には、非経口投与（例えば、皮内、筋肉内、腹腔内、静脈内および皮下）、硬膜外投与、腫瘍内投与および粘膜投与（例えば、鼻内および経口経路）が含まれるが、これらに限定されない。さらに、例えば、吸入装置または噴霧器およびエアロゾル化剤を加えた製剤の使用によって、経肺投与を使用することが可能である。例えば、米国特許第６，０１９，９６８号、第５，９８５，３２０号、第５，９８５，３０９号、第５，９３４，２７２号、第５，８７４，０６４号、第５，８５５，９１３号、第５，２９０，５４０号、および第４，８８０，０７８号；ならびにＰＣＴ公開ＷＯ９２／１９２４４、ＷＯ９７／３２５７２、ＷＯ９７／４４０１３、ＷＯ９８／３１３４６およびＷＯ９９／６６９０３（これらは各々、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。）を参照されたい。一実施形態において、本発明の抗体、組合せ療法または本発明の組成物は、ＡｌｋｅｒｍｅｓＡＩＲ（登録商標）経肺薬物送達技術（Ａｌｋｅｒｍｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，Ｍａｓｓ．）を用いて投与される。特定の実施形態において、本発明の予防剤または治療剤は、筋肉内、静脈内、腫瘍内、経口、鼻内、経肺または皮下投与される。予防剤または治療剤は、あらゆる都合のよい経路によって、例えば、注入もしくはボーラス注射によって、上皮または粘膜皮下の裏打ち（例えば、口粘膜、直腸および腸粘膜など）を通じた吸収によって投与され得、生物学的に活性な他の薬剤と一緒に投与され得る。投与は、全身または局所であり得る。
【０１８６】
特定の実施形態において、治療を必要としている部位へ局所的に、本発明の組成物を投与することが望ましい場合があり得る。これは、例えば、局所的注入によって、注射によって、またはインプラントの手段によって達成され得るが、これらに限定されるものではなく、前記インプラントは、シアラスチック（ｓｉａｌａｓｔｉｃ）膜、ポリマー、繊維性マトリックス（例えば、Ｔｉｓｓｕｅｌ（商標））またはコラーゲンマトリックスなどの、膜およびマトリックスを含む多孔性または非多孔性材料である。一実施形態において、本発明の１つ以上の抗体アンタゴニストの有効量は、疾患またはその症候を予防し、治療し、管理し、および／または軽減するために、対象の罹患した部位へ局所的に投与される。別の実施形態において、本発明の１つ以上の抗体の有効量は、疾患または１つもしくはそれ以上のその症候を予防し、治療し、管理し、および／または軽減するために、本発明の抗体以外の１つ以上の治療薬（例えば、１つ以上の予防剤または治療剤）の有効量と組み合わせて、対象の罹患した部位へ局所的に投与される。
【０１８７】
別の実施形態において、本発明の予防剤または治療剤は、調節された放出系または徐放系に入れて送達することが可能である。一実施形態において、調節された放出または徐放を達成するためにポンプを使用し得る（Ｌａｎｇｅｒ，上記；Ｓｅｆｔｏｎ，１９８７，ＣＲＣ  Ｃｒｉｔ．Ｒｅｆ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｅｎｇ．１４：２０；Ｂｕｃｈｗａｌｄ  ｅｔ  ａｌ，１９８０，Ｓｕｒｇｅｒｙ  ８８：５０７；Ｓａｕｄｅｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２１：５７４参照）。別の実施形態において、本発明の治療薬の調節された放出または徐放を達成するために、ポリマー材料を使用することが可能である。（例えば、Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，Ｌａｎｇｅｒ  ａｎｄ  Ｗｉｓｅ（ｅｄｓ．），ＣＲＣ  Ｐｒｅｓ．，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，Ｆｌａ．（１９７４）；Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ，Ｄｒｕｇ  Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ，Ｓｍｏｌｅｎ  ａｎｄ  Ｂａｌｌ（ｅｄｓ．），Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８４）；Ｒａｎｇｅｒ  ａｎｄ  Ｐｅｐｐａｓ，１９８３，Ｊ．，Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｓｃｉ．Ｒｅｖ．Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．２３：６１を参照されたい。Ｌｅｖｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９８５，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２８：１９０；Ｄｕｒｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９，Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．２５：３５１；Ｈｏｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．７  １：１０５も参照されたい。）；米国特許第５，６７９，３７７号；米国特許第５，９１６，５９７号；米国特許第５，９１２，０１５号；米国特許第５，９８９，４６３号；米国特許第５，１２８，３２６号；ＰＣＴ公開ＷＯ９９／１５１５４；およびＰＣＴ公開ＷＯ９９／２０２５３も参照されたい。徐放製剤中で使用されるポリマーの例には、ポリ（２−ヒドロキシエチルメタクリラート）、ポリ（メチルメタクリラート）、ポリ（アクリル酸）、ポリ（エチレン−コビニルアセタート）、ポリ（メタクリル酸）、ポリグリコリド（ＰＬＧ）、ポリ無水物、ポリ（Ｎ−ビニルピロリドン）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリアクリルアミド、ポリ（エチレングリコール）、ポリラクチド（ＰＬＡ）、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）およびポリオルトエステルが含まれるが、これらに限定されるものではない。好ましい実施形態において、徐放製剤中で使用されるポリマーは、不活性であり、溶脱可能な不純物を含まず、保存時に安定であり、無菌であり、生物分解性である。さらに別の実施形態において、調節された放出系または徐放系は、予防剤または治療剤の近くに配置されて、全身投薬量の一部のみを必要とするようにすることができる（例えば、Ｇｏｏｄｓｏｎ，ｉｎ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，ｓｕｐｒａ，ｖｏｌ．２，ｐｐ．１１５−１３８（１９８４）参照）。
【０１８８】
徐放系は、Ｌａｎｇｅｒ（１９９０，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９：１５２７−１５３３）による概説中に論述されている。本発明の１つ以上の治療剤を含む徐放製剤を作製するために、当業者に公知のあらゆる技術を使用することが可能である。例えば、米国特許第４，５２６，９３８号、ＰＣＴ公開ＷＯ９１／０５５４８、ＰＣＴ公開ＷＯ９６／２０６９８、Ｎｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，“Ｉｎｔｒａｔｕｍｏｒａｌ  Ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｈｙ  ｏｆ  ａ  Ｈｕｍａｎ  Ｃｏｌｏｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｘｅｎｏｇｒａｆｔ  Ｕｓｉｎｇ  ａ  Ｓｕｓｔａｉｎｅｄ−Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｇｅｌ，”Ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ＆Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  ３９：１７９−１８９，Ｓｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，“Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｍｅｄｉａｔｅｄ  Ｌｕｎｇ  Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｏｆ  Ｌｏｎｇ−Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ  Ｅｍｕｌｓｉｏｎｓ，”ＰＤＡ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ５０：３７２−３９７，Ｃｌｅｅｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，“Ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｆｏｒ  ａ  ｂＦＧＦ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｆｏｒ  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ，”Ｐｒｏ．Ｌｎｔ’ｌ．Ｓｙｍｐ．Ｃｏｎｔｒｏｌ．Ｒｅｌ．Ｂｉｏａｃｔ．Ｍａｔｅｒ．２４：８５３−８５４およびＬａｍ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，“Ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｆｏｒ  Ｌｏｃａｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，”Ｐｒｏｃ．ｌｎｔ’ｌ．Ｓｙｍｐ．Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｒｅｌ．Ｂｉｏａｃｔ．Ｍａｔｅｒ．２４：７５９−７６０（これらは各々、その全体が参照として本明細書に組み込まれる。）を参照されたい。
【０１８９】
本発明の医薬組成物は、その予定された投与経路と適合的であるように製剤化される。投与の経路の例には、非経口、例えば、静脈内、皮内、皮下、経口、鼻内（例えば、吸入）、経皮（例えば、局所）、経粘膜および直腸投与が含まれるが、これらに限定されない。特異的な実施形態において、組成物は、ヒトへの静脈内、皮下、筋肉内、経口、鼻内または局所投与に適合された医薬組成物として、定型的な手法に従って製剤化される。典型的には、静脈内投与のための組成物は、無菌の等張水性緩衝液中の溶液である。必要な場合には、組成物は、可溶化剤および注射の部位における痛みを和らげるための局所麻酔剤（リグノカムンｌｉｇｎｏｃａｍｎｅ）なども含み得る。
【０１９０】
本発明の組成物が局所的に投与されるべき場合には、組成物は、軟膏、クリーム、経皮パッチ、ローション、ゲル、シャンプー、スプレー、エアロゾル、溶液、エマルジョンの形態でまたは当業者に周知の他の形態で製剤化することが可能である。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ａｎｄ  Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ，１９ｔｈ  ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂ．Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．（１９９５）を参照されたい。噴霧不能な局所剤形の場合には、局所適用に適合性のある担体または１つもしくはそれ以上の賦形剤を含み、好ましくは水より大きな動粘性係数を有する粘性ないし半固体または固体の形態が通常使用される。適切な製剤は、所望であれば、滅菌され、または、例えば、浸透圧などの様々な特性に影響を及ぼすための補助剤（例えば、防腐剤、安定化剤、湿潤剤、緩衝剤または塩）と混合された、溶液、懸濁液、エマルジョン、クリーム、軟膏（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、粉末、リニメント剤、軟膏（ｓａｌｖｅ）など（これらに限定されない）を含む。他の適切な局所剤形には、好ましくは固体または液体不活性担体と組み合わされた活性成分が、加圧された揮発性物質（例えば、ｆｒｅｏｎなどの気体状噴射剤）との混合物中または搾り出し瓶中に梱包されている噴霧可能なエアロゾル調製物が含まれる。所望であれば、医薬組成物および剤形に、加湿剤または湿潤剤も添加することが可能である。このような追加の成分の例は、本分野において周知である。
【０１９１】
本発明の組成物の鼻内投与の場合には、組成物は、エアロゾル形態、スプレー、ミスト中に、または点鼻薬の形態で製剤化することが可能である。特に、本発明に従って使用するための予防剤または治療剤は、適切な噴射剤（例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素またはその他の適切な気体）を用いて、加圧されたパックまたは噴霧器からエアロゾルスプレー提示の形態で都合よく送達することが可能である。加圧されたエアロゾルの場合には、投薬単位は、定量された量を送達するためのバルブを付与することによって決定され得る。化合物とラクトースまたはデンプンなどの適切な粉末基剤との粉末混合物を含有する、吸入装置またはガス注入装置で使用するためのカプセルおよびカートリッジ（例えば、ゼラチンから構成される。）を製剤化し得る。
【０１９２】
経口投与の場合、本発明の組成物は、錠剤、カプセル、カシェ剤、ゲルキャップ、溶液、懸濁液などの形態で、組成物を経口的に製剤化することが可能である。錠剤またはカプセルは、従来の手段によって、結合剤（例えば、予めゼラチン化されたトウモロコシデンプン、ポリビニルピロリドンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース）；充填剤（例えば、ラクトース、微結晶セルロースまたはリン酸水素カルシウム）；潤滑剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルクまたはシリカ）；崩壊剤（例えば、イモデンプンまたはグリコール酸デンプンナトリウム）；または湿潤剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム）などの、医薬として許容される賦形剤とともに調製することが可能である。錠剤は、本分野において周知な方法によって被覆され得る。経口投与用の液体調製物は、溶液、シロップもしくは懸濁液の形態（これらに限定されない。）を採り得、または、使用前に、水もしくは他の適切なビヒクルを用いて構成するための乾燥製品として与えられ得る。このような液体調製物は、慣用の手段によって、懸濁剤（例えば、ソルビトールシロップ、セルロース誘導体または硬化食用脂肪）；乳化剤（例えば、レシチンまたはアカシア）；非水性ビヒクル（例えば、アーモンド油、油状エステル、エチルアルコールまたは分画された植物油）；および防腐剤（例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチルもしくはプロピルまたはソルビン酸）などの医薬として許容される添加物とともに調製され得る。調製物は、適宜、緩衝液塩、着香剤、着色剤および甘味剤も含有し得る。経口投与用調製物は、予防剤または治療剤の遅い放出、調節された放出または徐放のために、適切に製剤化され得る。
【０１９３】
本発明の方法は、例えば、吸入装置または噴霧器の使用、エアロゾル化剤とともに製剤化された組成物の使用によって、経肺投与を含み得る。例えば、米国特許第６，０１９，９６８号、第５，９８５，３２０号、第５，９８５，３０９号、第５，９３４，２７２号、第５，８７４，０６４号、第５，８５５，９１３号、第５，２９０，５４０号、および第４，８８０，０７８号；ならびにＰＣＴ公開ＷＯ９２／１９２４４、ＷＯ９７／３２５７２、ＷＯ９７／４４０１３、ＷＯ９８／３１３４６およびＷＯ９９／６６９０３（これらは各々、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。）を参照されたい。特定の実施形態において、本発明の抗体、組合せ療法および／または本発明の組成物は、ＡｌｋｅｒｍｅｓＡＩＲ（商標）経肺薬物送達技術（Ａｌｋｅｒｍｅｓ，Ｉｎｃ．Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，Ｍａｓ．）を用いて投与される。
【０１９４】
本発明の方法はまた、注射による（例えば、ボーラス注射または連続的注入による）非経口投与のために製剤化された組成物の投与を含み得る。注射用製剤は、添加された防腐剤とともに、単位剤形で（例えば、アンプルまたは複数投薬容器に入れて）与え得る。組成物は、油性または水性ビヒクル中の懸濁液、溶液またはエマルジョンなどの形態を採り得、懸濁剤、安定化剤および／または分散剤などの処方剤を含有し得る。あるいは、活性成分は、使用前に適切なビヒクル（例えば、発熱物質を含まない無菌水）で構成するための粉末形態であり得る。
【０１９５】
本発明の方法は、さらに、デポ調製物として製剤化された組成物の投与を含み得る。このような長期作用製剤は、（例えば、皮下または筋肉内への）植え込みによって、または筋肉内注射によって投与され得る。したがって、例えば、組成物は、適切なポリマー材料もしくは疎水性材料（例えば、許容される油中のエマルジョンとして）またはイオン交換樹脂とともに、または難溶性誘導体として（例えば、難溶性塩として）調合され得る。
【０１９６】
本発明の方法は、中性または塩形態として製剤化された組成物の投与を包含する。医薬として許容される塩には、塩酸、リン酸、酢酸、シュウ酸、酒石酸などに由来するものなどの陰イオンとともに形成された塩、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アンモニウム、水酸化カルシウム、水酸化第二鉄、イソプロピルアミン、トリエチルアミン、２−エチルアミノエタノール、ヒスチジン、プロカインなどに由来するものなど、陽イオンとともに形成された塩が含まれる。
【０１９７】
一般的には、組成物の成分は、別個に、または単位剤形中に（例えば、活性剤の量を示した注射器またはにおい袋など、密閉された容器中の凍結乾燥された乾燥粉末または無水濃縮物として）一緒に混合されて供給される。投与の様式が注入である場合には、組成物は、医薬等級の無菌水または生理的食塩水を含有する注入瓶を用いて分配することが可能である。投与の様式が注射による場合には、注射用の無菌水または生理的食塩水の注射器は、投与前に成分が混合され得るように提供することが可能である。
【０１９８】
本発明の組成物は、薬剤の量を示した注射器またはにおい袋など、密閉された容器中に梱包されてもよい。一実施形態において、本発明の組成物は、密閉された容器中の凍結乾燥された乾燥無菌粉末または無水濃縮物として供給されてもよく、対象に投与するための適切な濃度になるように（例えば、水または生理的食塩水で）再構成することができる。好ましくは、本発明の組成物は、少なくとも５ｍｇ、より好ましくは、少なくとも１０ｍｇ、少なくとも１５ｍｇ、少なくとも２５ｍｇ、少なくとも３５ｍｇ、少なくとも４５ｍｇ、少なくとも５０ｍｇ、少なくとも７５ｍｇまたは少なくとも１００ｍｇの単位投薬量で、密封された容器中の凍結乾燥された乾燥無菌粉末として供給される。本発明の凍結乾燥された予防もしくは治療剤または医薬組成物は、その元の容器中で、２℃と８℃の間で保存されるべきであり、本発明の予防剤もしくは治療剤または医薬組成物は、再構成後、１週以内、好ましくは５日以内、７２時間以内、４８時間以内に、２４時間以内に、１２時間以内に、６時間以内に、５時間以内に、３時間以内に、または１時間以内に投与されるべきである。別の実施形態において、本発明の予防剤もしくは治療剤の１つもしくはそれ以上または本発明の医薬組成物は、薬剤の量および濃度を示す密閉された容器中に、液体形態で供給される。好ましくは、投与された組成物の液体形態は、少なくとも０．２５ｍｇ／ｍｌ、より好ましくは、少なくとも０．５ｍｇ／ｍｌ、少なくとも１ｍｇ／ｍｌ、少なくとも２．５ｍｇ／ｍｌ、少なくとも５ｍｇ／ｍｌ、少なくとも８ｍｇ／ｍｌ、少なくとも１０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも１５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２５ｍｇ／ｍｌ、少なくとも５０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも７５ｍｇ／ｍｌ、少なくとも１００ｍｇ／ｍｌで、密封された容器中に供給される。液体形態は、その元の容器中で、２℃と８℃の間で保存されるべきである。
【０１９９】
本発明の組成物は、好ましくは非経口投与に適している。例えば、本発明の組成物は、０．１−２５０ｍｇ／ｍＬの抗体を含有する注射可能溶液として調製されてもよい。注射可能溶液は、フリント容器または琥珀色の容器、注射器または予め充填されたシリンジ中の液体または凍結乾燥された剤形から構成され得る。緩衝液は、ｐＨ５．０から７．０（最適にはｐＨ６．０）のＬ−ヒスチジン（１−５０ｍＭ）、最適には５−１０ｍＭであり得る。他の適切な緩衝液には、コハク酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、リン酸ナトリウムまたはリン酸カリウムが含まれるが、これらに限定されない。０−３００ｍＭの濃度に（最適には、液体剤形に対して１５０ｍＭ）の溶液の毒性を修飾するために、塩化ナトリウムを使用することが可能である。凍結乾燥された剤形に対して、凍結保護剤、主に、０−１０％のスクロース（最適には、０．５−１．０％）を含めることが可能である。他の適切な凍結保護剤には、トレハロースおよびラクトースが含まれる。凍結乾燥された剤形に対して、充填剤、主に、１−１０％のマニトール（最適には、２４％）を含めることが可能である。液体および凍結乾燥された両剤形において、安定化剤、主に１−５０ｍＭのＬ−メチオニン（最適には、５−１０ｍＭ）を使用することが可能である。他の適切な充填剤には、グリシン、アルギニンが含まれ、０−０．０５％のポリソルベート−８０（最適には、０．００５−０．０１％）として含めることが可能である。さらなる界面活性剤には、ポリソルベート２０およびＢＲＩＪ界面活性剤が含まれるが、これらに限定されない。非経口投与用の注射可能な溶液として調製された本発明の抗体または抗体部分を含む医薬組成物は、治療用タンパク質（例えば、抗体）の吸収または分散を増加させるために使用されるものなど、アジュバントとして有用な薬剤をさらに含むことが可能である。特に有用なアジュバントは、Ｈｙｌｅｎｅｘ（商標）（組換えヒトヒアルロニダーゼ）などのヒアルロニダーゼである。注射可能な溶液中へのヒアルロニダーゼの添加は、非経口投与、特に皮下投与後に、ヒト生物学的利用可能性を改善する。痛みおよび不快感がより小さく、注射部位反応の発生を最小限に抑えながら、より大きな注射部位容量（すなわち、１ｍＬより大きい）も可能である（参照により本明細書に組み込まれるＷＯ２００４０７８１４０、ＵＳ２００６１０４９６８を参照）。
【０２００】
本発明の組成物は、様々な形態であり得る。これらには、例えば、液体溶液（例えば、注射可能な溶液および注入可能な溶液）など、分散液または懸濁液、錠剤、丸薬、粉末、リポソームおよび坐薬などの、液体、半固体および固体剤形が含まれる。好ましい形態は、予定される投与の様式および治療用途に依存する。典型的な好ましい組成物は、他の抗体を用いたヒトの受動免疫に対して使用される組成物と同様の組成物など、注射可能溶液または注入可能溶液の形態である。投与の好ましい様式は、非経口（例えば、静脈内、皮下、腹腔内、筋肉内）である。好ましい実施形態において、抗体は、静脈内注入または注射によって投与される。別の好ましい実施形態において、抗体は、筋肉内注入または皮下注射によって投与される。
【０２０１】
治療組成物は、典型的には、製造および保存の条件下で、無菌および安定でなければならない。組成物は、溶液、ミクロエマルジョン、分散液、リポソームまたは高薬物濃度に適したその他の秩序化された構造として製剤化することが可能である。無菌注射可能溶液は、本明細書に列記されている成分の１つまたは組合せを加えた適切な溶媒中に、必要な量で活性な化合物（すなわち、抗体、抗体部分）を取り込ませた後、必要に応じて、濾過滅菌を行うことによって調製することが可能である。一般的に、分散液は、塩基性分散溶媒および上記に列記されたものから得られる必要なその他の成分を含有する無菌ビヒクル中に活性化合物を取り込ませることによって調製される。無菌注射可能溶液の調製のための凍結乾燥された無菌粉末の場合には、好ましい調製の方法は、予め滅菌濾過されたその溶液から、あらゆる追加の所望される成分を加えた活性成分の粉末を与える真空乾燥および粉末乾燥である。溶液の適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティング材料を使用することによって、分散液の場合に必要な粒径を維持することによって、および界面活性剤を使用することによって維持することができる。注射可能組成物の延長された吸収は、吸収を遅延させる薬剤、例えば、モノステアリン酸塩およびゼラチンを組成物中に含めることによって実現することができる。
【０２０２】
本発明の組成物は、本分野で公知の様々な方法によって投与することが可能であるが、多くの治療用途において、好ましい投与経路／様式は皮下注射、静脈内注射または注入である。当業者によって理解されるように、投与の経路および／または様式は、所望される結果に応じて変動する。ある種の実施形態において、活性化合物は、インプラント、経皮パッチおよび微小封入された送達系を含む徐放製剤など、迅速な放出に対して化合物を保護する担体とともに調製され得る。エチレン酢酸ビニル、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステルおよびポリ乳酸など、生物分解可能な生物適合性ポリマーを使用することが可能である。このような製剤の多くの調製方法は、特許が付与されているまたは一般的に当業者に公知である。例えば、Ｓｕｓｔａｉｎｅｄ  ａｎｄ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｊ．Ｒ．Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，ｅｄ．，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９７８を参照されたい。
【０２０３】
ある種の実施形態において、本発明の組成物は、例えば、不活性希釈剤または同化可能な食用担体とともに経口投与され得る。また、化合物（および、所望であれば、その他の成分）は、硬いもしくは軟らかい殻のゼラチンカプセル中に封入され、錠剤へと圧縮され、または患者の食事中に直接取り込ませ得る。経口治療投与の場合、化合物は、賦形剤とともに取り込まれ、摂取可能な錠剤、口腔錠、トローチ、カプセル、エリキシル、懸濁液、シロップ、ウェハースなどの形態で使用され得る。非経口投与以外によって本発明の化合物を投与するために、その不活化を妨げるための物質で化合物を被覆し、またはその不活化を妨げるための物質とともに化合物を同時投与することが必要であり得る。
【０２０４】
補助的活性化合物も、組成物中に取り込ませることが可能である。ある種の実施形態において、本発明の抗体または抗体部分は、ＩＬ−１３活性が有害である障害を治療するのに有用な１つ以上のさらなる治療剤とともに共製剤化され、および／または同時投与される。例えば、本発明の抗ＩＬ−１３抗体または抗体部分は、他の錠剤に結合する１つ以上のさらなる抗体（例えば、他のサイトカインに結合する抗体または細胞表面分子に結合する抗体）とともに共製剤化され、および／または同時投与され得る。さらに、本発明の１つ以上の抗体は、先述の治療剤の２つまたはそれ以上と組み合わせて使用され得る。このような組合せ療法は、投与される治療剤のより低い投薬量を有利に使用し得るので、様々な単独療法に伴って生じ得る毒性または合併症が回避される。
【０２０５】
ある種の実施形態において、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分は、本分野で公知の半減期延長ビヒクルに連結される。このようなビヒクルには、Ｆｃドメイン、ポリエチレングリコールおよびデキストランが含まれるが、これらに限定されない。このようなビヒクルは、例えば、任意の目的で参照により本明細書に組み込まれる、米国出願第０９／４２８，０８２号および公開されたＰＣＴ出願ＷＯ９９／２５０４４に記載されている。
【０２０６】
本発明の医薬組成物は、本発明の「治療的有効量」のまたは「予防的有効量」の抗体または抗体部分を含み得る。「治療的有効量」とは、目的の治療結果を達成するのに必要な投薬量で必要な期間、効果的な量のことである。抗体または抗体部分の治療的有効量は、当業者によって決定されてもよく、個人の病状、年齢、性別および体重などの要因ならびに個人において目的の応答を誘発する抗体または抗体部分の能力に従って変化し得る。治療的有効量は、抗体または抗体部分のいかなる毒性または有害効果よりも治療的に有益な効果のほうがまさる量でもある。「予防的有効量」とは、目的の予防結果を達成するのに必要な投薬量で必要な期間、効果的な量のことである。典型的には、予防投与量は、疾患の初期段階に先立ってまたは初期段階で対象において使用されるために、予防的有効量は治療的有効量よりも少ないことになる。
【０２０７】
投与計画は、最適の目的応答（例えば、治療的または予防的応答）を与えるように調整し得る。例えば、単回ボーラスを投与してもよく、数回の分割用量を時間をかけて投与してもよく、または治療的状況の要件が指示する通りに用量を比例的に減らすまたは増やしてもよい。投与の容易さおよび投薬量の均一性のために非経口組成物を投薬単位形態で処方するのが基本的には有利である。本明細書で使用される投薬単位形態とは、治療を受ける哺乳動物対象のための単位投薬量として適している物理的に別々の単位のことであり、それぞれの単位は、必要とされる医薬としての担体と併せて目的の治療効果を生じるように計算された所定量の活性化合物を含有している。本発明の投薬単位形態の仕様は、（ａ）活性化合物の独自の特徴および達成すべき特定の治療的または予防的効果、ならびに（ｂ）個人における敏感性の治療のための該活性化合物を配合する技術に固有の限界により規定され直接依拠している。
【０２０８】
治療的または予防的有効量の本発明の抗体または抗体部分の例となる非限定的範囲は、０．１−２０ｍｇ／ｋｇ、さらに好ましくは１−１０ｍｇ／ｋｇである。一実施形態では、治療的または予防的有効量の抗体またはその抗原結合部分は０．３ｍｇ／ｋｇである。別の実施形態では、治療的または予防的有効量の抗体またはその抗原結合部分は３ｍｇ／ｋｇである。別の実施形態では、治療的または予防的有効量の抗体またはその抗原結合部分は１０ｍｇ／ｋｇである。さらに別の実施形態では、治療的または予防的有効量の抗体またはその抗原結合部分は０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．７ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、０．９ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．２５ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、３．５ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、４．５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、５．５ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、６．５ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、８．５ｍｇ／ｋｇ、９ｍｇ／ｋｇ、９．５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１１ｍｇ／ｋｇ、１２ｍｇ／ｋｇ、１３ｍｇ／ｋｇ、１４ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、１６ｍｇ／ｋｇ、１７ｍｇ／ｋｇ、１８ｍｇ／ｋｇ、１９ｍｇ／ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇである。投薬量値は、軽減すべき病状の種類および重症度によって異なり得ることは留意するべきである。どんな特定の対象でも、特定の投与計画は、個人の必要性および組成物を投与するまたは組成物の投与を管理する人間の専門的判断に従って時間をかけて調整するべきであることならびに本明細書に記載される投薬量範囲は例にすぎず、主張される組成物の範囲または実行を限定することを意図していないことはさらに理解されるべきである。
【０２０９】
ＩＩＩ．本発明の方法
別の態様では、本出願は、対象において、喘息などのＩＬ−１３関連障害を治療する（例えば、治癒させる、抑制する、寛解する、その発症を遅延するもしくは予防する、またはその再発を予防する。）または予防する方法を特徴とする。方法には、対象にＩＬ−１３結合剤（特に、アンタゴニスト）例えば、本明細書に記載される抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を、喘息などのＩＬ−１３関連障害を治療するまたは予防するのに十分な量で投与することが含まれる。ＩＬ−１３アンタゴニスト、例えば、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分を単独でまたは本明細書に記載される他の治療方法と組み合わせて対象に投与することが可能である。
【０２１０】
一実施形態では、対象は哺乳動物、例えば、例えば呼吸器障害（例えば、喘息（例えば、アレルギー性および非アレルギー性喘息または軽度喘息または中等度喘息）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）ならびに気道炎症、好酸球増加症、線維症および過剰粘液産生を伴う他の病状）；アトピー性障害（例えば、アトピー性皮膚炎およびアレルギー性鼻炎）を含む１つ以上のＩＬ−１３関連障害に罹っているヒトである。したがって、本開示には、本明細書に記載される治療のためのＩＬ−１３結合剤（例えば、本明細書に記載される抗ＩＬ−１３抗体またはその断片）の使用および本明細書に記載される治療用の薬物を調製するためのＩＬ−１３結合剤（例えば、本明細書に記載される抗ＩＬ−１３抗体またはその断片）の使用が含まれる。
【０２１１】
ＩＬ−１３関連障害の例には、呼吸器障害、例えば、喘息（例えば、アレルギー性および非アレルギー性喘息（例えば、例えば低年齢児における、例えば、呼吸器多核体ウイルス（ＲＳＶ）の感染に起因する喘息））、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）ならびに気道炎症、好酸球増加症、線維症および過剰粘液産生、例えば、嚢胞性線維症および肺線維症を伴う他の病状のうちの１つ以上から選択される障害が含まれるが、これらに限定されない。
【０２１２】
他の実施形態では、本出願は、呼吸器障害、例えば、喘息（例えば、アレルギー性および非アレルギー性喘息）；アレルギー；慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）；ならびに気道炎症、好酸球増加症、線維症および過剰粘液産生、例えば、嚢胞性線維症および肺線維症を伴う病状に伴う１つ以上の症状を治療する（例えば、減少する、寛解する。）方法を提供する。例えば、喘息の症状には、喘鳴音、息切れ、気管支収縮、気道過敏、減少した肺気量、線維症、気道炎症および粘液産生が含まれるが、これらに限定されない。方法は、ＩＬ−１３アンタゴニスト、例えば、ＩＬ−１３抗体またはその断片を、１つ以上の症状を治療する（例えば、減少する、寛解する。）または予防するのに十分な量で対象に投与することを含む。ＩＬ−１３抗体は治療的にまたは予防的にまたはその両方で投与することができる。ＩＬ−１３アンタゴニスト、例えば、抗ＩＬ−１３抗体またはその抗原結合部分は単独でまたは本明細書に記載される他の治療方法と組み合わせて対象に投与することが可能である。好ましくは、対象は哺乳動物、例えば、本明細書に記載される喘息などのＩＬ−１３関連障害に罹っているヒトである。
【０２１３】
別の態様では、本出願は、試料（例えば、血清、血漿、組織、生検などの生体試料）中のＩＬ−１３の存在をインビトロで検出するための方法を提供する。主題の方法を使用して、障害、例えば、喘息、例えば、軽度または中等度喘息を診断することが可能である。方法には、（ｉ）試料または対照試料を本明細書に記載される抗ＩＬ−１３抗体またはその断片に接触させる、（ｉｉ）抗ＩＬ−１３抗体またはその断片と試料または対照試料間での複合体の形成を検出し、対照試料と比べた試料中での複合体の形成における統計的に有意な変化が試料中でのＩＬ−１３の存在を示すことを含む。
【０２１４】
さらに別の態様では、本出願は、ＩＬ−１３の存在をインビボで検出するための方法（例えば、対象におけるインビボ撮像）を提供する。主題の方法を使用して、障害、例えば、ＩＬ−１３関連障害、例えば、喘息、例えば、軽度または中等度喘息を診断することが可能である。方法には、（ｉ）本明細書に記載される抗ＩＬ−１３抗体またはその断片を、抗体または断片をＩＬ−１３に結合させる条件下で対象または対照対象に投与し、（ｉｉ）抗体または断片とＩＬ−１３間での複合体の形成を検出し、対照対象と比べた対象における複合体の形成における統計的に有意な変化がＩＬ−１３の存在を示すことを含む。
【０２１５】
本発明の抗体またはその抗原結合部分は単独でまたは組み合わせて使用して該疾患を治療することができる。本発明の抗体またはその抗原結合部分は、単独でまたは追加の薬剤、例えば、治療剤と組み合わせて使用できることは理解されるべきであり、前記追加の薬剤はその意図される目的のために当業者により選択される。例えば、追加の薬剤は、本発明の抗体により治療されている疾患または病状を治療するのに有用であると当該技術分野で承認されている治療剤であることが可能である。追加の薬剤は、治療組成物に有益な特質を与える薬剤、例えば、組成物の粘性をもたらす薬剤でも可能である。
【０２１６】
本発明内に含むことができる組合せは、その意図される目的に有用な組合せであることはさらに理解されるべきである。下に記載される薬剤は説明を目的とするもので限定されることを意図してはいない。組合せは、本発明の一部であり、本発明の抗体と下のリストから選択される少なくとも１つの追加の薬剤であることが可能である。組合せは、その組合せが、形成された組成物がその意図された機能を果たすことができるようであれば、２つ以上の追加の薬剤、例えば、２つまたは３つの追加の薬剤も含むことが可能である。
【０２１７】
組合せ療法は、さらに本明細書に記載されているように、１つ以上の追加の治療剤、例えば、１つ以上のサイトカインおよび成長因子阻害剤、免疫抑制剤、抗炎症剤（例えば、全身性抗炎症剤）、線維化抑制剤、代謝阻害剤、酵素阻害剤および／または細胞傷害性もしくは細胞分裂阻害剤と同時に処方されるおよび／または同時投与される１つ以上のＩＬ−１３アンタゴニスト、例えば、抗ＩＬ−１３抗体またはその断片を含むことが可能である。
【０２１８】
１つ以上のＩＬ−１３アンタゴニスト、例えば、抗ＩＬ−１３抗体またはその断片と同時投与されるおよび／または同時に処方されることが可能な好ましい追加の治療剤の例には、吸引用ステロイド；ベータアゴニスト、例えば、短時間作用性または長時間作用性ベータアゴニスト；ロイコトリエンまたはロイコトリエン受容体のアンタゴニスト；ＡＤＶＡＩＲなどの複合薬；ＩｇＥ阻害剤、例えば、抗ＩｇＥ抗体（例えば、ＸＯＬＡＩＲ）；ホスホジエステラーゼ阻害剤（例えば、ＰＤＥ４阻害剤）；キサンチン；抗コリン剤；クロモリンなどのマスト細胞安定化剤；ＩＬ−４阻害剤；ＩＬ−５阻害剤；エオタキシン／ＣＣＲ３阻害剤；Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３およびＨ４を含むヒスタミンまたはその受容体のアンタゴニストならびにプロスタグランジンＤまたはその受容体のアンタゴニスト（ＤＰ１およびＣＲＴＨ２）のうちの１つ以上が含まれるがこれらに限定されない。該組合せを使用して喘息および他の呼吸器障害を治療することができる。１つ以上の抗ＩＬ−１３抗体またはその断片と同時投与されるおよび／または同時に処方されることが可能な治療剤の追加の例には、とりわけ、ＴＮＦアンタゴニスト（例えば、ＴＮＦ受容体、例えば、ｐ５５もしくはｐ７５ヒトＴＮＦ受容体またはそれらの誘導体、例えば、７５ｋＤ  ＴＮＦＲ−ＩｇＧ（７５ｋＤ  ＴＮＦ受容体−ＩｇＧ融合タンパク質、ＥＮＢＲＥＬ）の可溶性断片）；ＴＮＦ酵素アンタゴニスト、例えば、ＴＮＦ変換酵素（ＴＡＣＥ）阻害剤；ムスカリン受容体アンタゴニスト；ＴＧＦベータアンタゴニスト；インターフェロンガンマ；パーフェニドン；化学療法薬、例えば、メトトレキサート、レフルノミドもしくはシロリムス（ラパマイシン）またはそれらの類似体、例えば、ＣＣＩ−７７９；ＣＯＸ２およびｃＰＬＡ２阻害剤；ＮＳＡＩＤ；免疫調節剤；ｐ３８阻害剤、ＴＰＬ−２、ＭＫ−２およびＮＦｋＢ阻害剤のうちの１つ以上が含まれる。
【０２１９】
別の好ましい組合せは、サイトカイン抑制性抗炎症薬（ＣＳＡＩＤ）；その他のヒトサイトカインまたは増殖因子（例えば、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１８、ＩＬ−２１、ＩＬ−３１、インターフェロン、ＥＭＡＰ−ＩＩ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＦＧＦ，ＥＧＦ、ＰＤＧＦおよびエドセリン−１、ならびにこれらのサイトカインおよび成長因子の受容体）に対する抗体またはこれらのアンタゴニストである。本発明の抗体またはその抗原結合部分は、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤ４５、ＣＤ６９、ＣＤ８０（Ｂ７．１）、ＣＤ８６（Ｂ７．２）、ＣＤ９０、ＣＴＬＡまたはＣＤ１５４を含むこれらのリガンド（ｇｐ３９またはＣＤ４０Ｌ）などの細胞表面分子に対する抗体と組み合わせることが可能である。
【０２２０】
治療剤の好ましい組合せは、異なる点で、炎症カスケードを干渉し得る。好ましい例には、キメラ、ヒト化またはヒトＴＮＦ抗体、Ｄ２Ｅ７（ＰＣＴ公開ＷＯ９７／２９１３１）、ＣＡ２（Ｒｅｍｉｃａｄｅ（商標））、ＣＤＰ５７１、および可溶性ｐ５５またはｐ７５ＴＮＦ受容体、これらの誘導体、（ｐ７５ＴＮＦＲＩｇＧ（Ｅｎｂｒｅｌ（商標））またはｐ５５ＴＮＦＲ１ｇＧ（Ｌｅｎｅｒｃｅｐｔ）およびＴＮＦ変換酵素（ＴＡＣＥ）阻害剤などのようなＴＮＦアンタゴニストが含まれる。同様にＩＬ−１阻害剤（インターロイキン−１変換酵素阻害剤、ＩＬ−１ＲＡなど）は、同じ理由のために有効であり得る。他の好ましい組合せには、インターロイキン４が含まれる。さらに別の好ましい組合せは、ＩＬ−１３機能と平行して、ＩＬ−１３機能に依存して、またはＩＬ−１３機能と協調して作用し得る喘息反応の他の中心的プレーヤーである。特に好ましくは、ＩＬ−９抗体を含むＩＬ−９アンタゴニストである。ＩＬ−１３およびＩＬ−９は重複するが異なる機能を有しこの両方に対するアンタゴニストの組合せが最も効果的である可能性があることが明らかにされている。さらに別の好ましい組合せは抗ＩＬ−５抗体である。さらに他の好ましい組合せには、ＭＣＰ−１、ＭＣＰ−４、エオタキシン、ＲＡＮＴＥＳ、ＭＤＣ、ＣＣＬ−１２およびＣＣＬ−１７（ＴＡＲＣ）を含むケモカインならびにＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４およびＣＸＣＲ４を含むケモカイン受容体のアンタゴニストが含まれる。さらに組合せは、哺乳類酸性キチナーゼ、ＣＲＨＴ２、キマーゼ、Ｓ１Ｐ１、Ｓ１Ｐ２、Ｔｙｋ２、ＲＯＣＫＩＩ、Ｓｔａｔ６、ｐ３８、ＮＦｋＢ、ホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ−４）、マスト細胞トリターゼ（ｔｒｙｔａｓｅ）、ＮＯ、アデノシン、ＩＫＫ２、ＧＡＴＡ３、ＩＣＡＭ−１、ＶＣＡＭ−１およびＩＣＯＳを含む喘息メディエーターに対するアンタゴニストを含むことが可能である。
【０２２１】
本明細書で使用されるように、用語「ＩＬ−１３活性が有害である障害」は、障害に罹っている対象におけるＩＬ−１３の存在が、障害の病態生理の原因であるまたは障害の悪化の一因となる要因のどちらかであることが明らかにされているまたはどちらかであると疑われている疾患および他の障害を含むことが意図されている。一実施形態では、ＩＬ−１３活性が有害である障害は、喘息、例えば、軽度喘息または中等度喘息である。したがって、ＩＬ−１３活性が有害である障害は、ＩＬ−１３活性を減少させれば障害の症状および／または進行を軽減すると予測されている障害である。該障害は、例えば、障害に罹っている対象の生体体液中のＩＬ−１３の濃度の増加（例えば、対象の血清、血漿、滑液、等におけるＩＬ−１３の濃度の増加）により証明し得、前記濃度の増加は、例えば、上記の抗ＩＬ−１３抗体を使用して検出することが可能である。本発明の抗体を用いて治療することができる障害の非限定的例には、喘息、例えば、軽度または中等度喘息、ならびに本発明の抗体の医薬組成物に適した下のセクションで考察される障害が含まれる。
【０２２２】
ＩＬ−１３は、喘息に伴う病理的応答を引き起こすのに中心的役割を有すると関連付けられてきた。しかし、差次的免疫学的経路の他のメディエーターも喘息病変形成に関与しており、ＩＬ−１３に加えてこれらのメディエーターをブロックすれば、追加の治療効果が得られる。したがって、本発明の結合タンパク質を、ＤＶＤがＩＬ−１３および腫瘍懐死因子α（ＴＮＦα）などの炎症性サイトカインを含むが、これらに限定されない標的対に結合することができるＤＶＤ−Ｉｇタンパク質に組み込み得る。ＴＮＦαは喘息における炎症応答を増幅させることがあり、疾患重症度と関連している可能性がある（ＭｃＤｏｎｎｅｌｌ、ｅｔ  ａｌ．、Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｉｎ  Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ（２００１）、３１（Ｎｅｗ  Ｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  Ａｓｔｈｍａ、Ａｌｌｅｒｇｙ  ａｎｄ  ＣＯＰＤ）、２４７−２５０頁）。これにより、ＩＬ−１３とＴＮＦαの両方をブロックすれば、特に重症気道疾患において有益な効果がある可能性があることが示唆される。好ましい実施形態では、本発明のＤＶＤ−Ｉｇは標的であるＩＬ−１３およびＴＮＦαに結合し、喘息を治療するために使用される。
【０２２３】
本発明は、いかなる点でも限定的であると見なされるべきではない以下の実施例によりさらに説明される。本出願全体で引用されている、文献引用、交付済み特許および公開された特許出願を含むすべての引用文献の内容は、これによって参照により本明細書に明白に組み込む。ここに添付されるすべての図および表の内容、ならびに米国特許第７，９１５，３８８号の全内容は参照により本明細書に明白に組み込む。
【実施例】
【０２２４】
実施例への序論
喘息は、喘鳴音、息切れ、胸苦しさおよび咳を特徴とする気道の慢性炎症性障害である。米国ではおよそ２０００万人が喘息に罹り、喘息患者の約７５％が成人である。成人喘息患者のうち、喘息患者のおよそ６０％が軽度疾患、約２０％が中等度疾患、残りの２０％が重度疾患に罹っている。
【０２２５】
インターロイキン−１３（ＩＬ−１３）は、上昇レベルのＩＬ−１３が喘息患者の肺に存在し、これらのレベルは疾患重症度と相関している点で、ヒト喘息の病変形成において極めて重要であると考えられている（図１）。同様に、増加したＩＬ−１３は、中等度から重症喘息の患者で吸入コルチコステロイド（ＩＣＳ）または全身コルチコステロイドで治療され、症状を示し続けている患者の唾液にも肺検体にも存在する。さらに、ヒトＩＬ−１３遺伝子多型は喘息およびアトピー（アレルギー性過敏症）に関連している。ＩＬ−１３は２種類の受容体、ＩＬ−１３Ｒα１およびＩＬ−１３Ｒα２に結合する。ＩＬ−１３は、喘息の複数の前臨床モデルにおいて様々な手段のＩＬ−１３アンタゴニズムを使用して有効性が実証されているので、十分に確認された喘息の標的である。
【０２２６】
１３Ｃ５．５は、ヒト野生型およびバリアントＩＬ−１３に特異的なヒト化組換えイムノグロブリンＩｇＧ１（ＩｇＧ１、κ）モノクローナル抗体（ｍＡｂ）である。ＩＬ−１３受容体α１とα２の両方へのＩＬ−１３の結合をブロックする１３Ｃ５．５は、ＩＬ−１３上の独自のエピトープを認識し（図２）、現在までに解析された他の類似のＩＬ−１３結合抗体は、結晶学および生化学的特徴付けにより決定された場合、α１受容体のみをブロックする。１３Ｃ５．５はＩＬ−１３に対して選択的であり他のサイトカインを認識しない。重鎖における２つの残基（Ｌ２４０ＡおよびＬ２４１Ａ）は変異されてＦｃガンマ受容体および補体結合を妨げた。同様に、１３Ｃ５．５はヒト全血細胞に結合してまたは刺激してサイトカインを放出させることはない。重鎖および軽鎖可変領域は、それぞれ配列番号２および配列番号３として上に記載されている。
【０２２７】
１３Ｃ５．５はヒト野生型ＩＬ−１３にもバリアントＩＬ−１３にも高親和性および効力で結合するが、バリアントＩＬ−１３はヒト喘息患者の約２０％に存在するのでこの点は重要である。１３Ｃ５．５はマウス、ヒツジまたはイヌＩＬ−１３とは交差反応しない。１３Ｃ５．５は、ヒトｒＩＬ−１３と比べて、カニクイザルｒＩＬ−１３とは５１分の１のインビトロ効力で、ラットｒＩＬ−１３とは１５５分の１のインビトロ効力で確かに交差反応する。１３Ｃ５．５の親和性および効力はインビトロではカニクイザルおよびラットｒＩＬ−１３に対して低いが、１３Ｃ５．５は、インビトロでは４．１ｎＭの最大半量抑制濃度（ＩＣ５０）でカニクイザルｒＩＬ−１３を、１２．４ｎＭのＩＣ５０でラットｒＩＬ−１３を完全に中和する。
【０２２８】
１３Ｃ５．５の単回投与に続く最初の薬物動態解析は、スプラーグドーリーラットおよびカニクイザルにおいて実行された（図３）。１３Ｃ５．５は一般には、低排除、低分布容積および高生物学的利用率を示した。半減期はラットではおよそ１２から１６日間、サルでは６から１１日間の変動があった。１３Ｃ５．５の薬物動態は一般にはメスとオスのサルおよびラット間で類似していた。
【０２２９】
１３Ｃ５．５は、４週間のラットおよび２週間のサル毒性研究において十分忍容性があり、ヒト臨床試験の推奨される開始量と比べて十分な安全域を有している。繰り返される服用毒性研究中の無毒性量（ＮＯＡＥＬ）は、ラットおよびカニクイザルでは１５００ｍｇ／ｋｇ／静脈内（ＩＶ）投与を経た服用ならびにカニクイザルでは２００ｍｇ／ｋｇ／皮下（ＳＣ）投与を経た服用であった。
【０２３０】
この研究は軽度から中等度の制御喘息に罹ったまたは罹っていない成人対象における第Ｉ相ファーストインヒューマン研究であった。このプラセボ対照研究では、静脈内に投与される１３Ｃ５．５の４つの単回漸増用量（０．３、１．０、３．０および１０．０ｍｇ／ｋｇ）および週３回の皮下服用として投与される１３Ｃ５．５の２つの用量（０．３および３．０ｍｇ／ｋｇ）が評価された。
【０２３１】
健康な対象および軽度から中等度制御喘息に罹っている対象において行われた１３Ｃ５．５の研究により、１３Ｃ５．５のヒト薬物動態および生物学的利用率ならびに標的疾患徴候における１３Ｃ５．５の単回および複数漸増用量を用いた忍容性、安全性および免疫原性に関する標準データの収集が可能になった。
【０２３２】
実験プロトコール
これは、逐次設計に従って行われた第Ｉ相、単回および複数漸増用量、プラセボ対照、二重盲検、無作為化３部研究であった。一般的に健康な成人（ｎ＝２０）および軽度から中等度制御喘息に罹っている成人（ｎ＝２７）が選択基準に従って選択されて、研究に参加した。１日あたりコホートあたり１以下の対象が投与された。
【０２３３】
研究の第１部は、４つの群（１群から４群）で構成され、それぞれの群に５件の対象であった。第１部では、選択基準を満たしたのち、一般的に健康な成人（ｎ＝２０）は次の４つの単一服用群の１つに割り当てられた。  
１群（０．３ｍｇ／ｋｇ  １３Ｃ５．５またはプラセボの静脈内注入）
２群（１．０ｍｇ／ｋｇ  １３Ｃ５．５またはプラセボの静脈内注入）
３群（３．０ｍｇ／ｋｇ  １３Ｃ５．５またはプラセボの静脈内注入）または
４群（１０．０ｍｇ／ｋｇ  １３Ｃ５．５またはプラセボの静脈内注入）
それぞれの群内では、４件の対象は無作為に１３Ｃ５．５を受け、１件の対象は無作為にプラセボを受けた。服用コホート内のすべての対象が少なくとも最小１週間安全評価を順調に完了した後、新しいコホートには用量漸増が行われた。
【０２３４】
研究の第２部は、３つの群（５群から７群）で構成され、５件の対象は５群、６群および７群のそれぞれに無作為化された。第２部では、選択基準を満たしたのち、軽度から中等度制御喘息に罹った成人対象（ｎ＝１５）は３つの単一投与群の１つに割り当てられた。
５群（０．３ｍｇ／ｋｇ  １３Ｃ５．５またはプラセボの静脈内注入）
６群（３．０ｍｇ／ｋｇ  １３Ｃ５．５またはプラセボの静脈内注入）または
７群（１０．０ｍｇ／ｋｇ  １３Ｃ５．５またはプラセボの静脈内注入）
５群、６群および７群内では、４件の対象は無作為に１３Ｃ５．５を受け、１件の対象は無作為にプラセボを受けた。
【０２３５】
図４に示されるように、第１部の同じ服用レベルおよび第２部でのすべてのもっと低い服用レベルのすべての対象が最後の服用後に少なくとも最小１週間安全評価を順調に完了した後に第２部でのコホートでの投与を開始させた。
【０２３６】
研究の第３部は２つの群（８群および９群）で構成され、６件の対象は８群および９群のそれぞれに無作為化された。第３部では、選択基準を満たした後、軽度から中等度制御喘息に罹った成人対象（ｎ＝１２）は２つの群の１つに割り当てられた。
８群（０．３ｍｇ／ｋｇ  １３Ｃ５．５またはプラセボの皮下注入、週３回服用）
９群（３．０ｍｇ／ｋｇ  １３Ｃ５．５またはプラセボの皮下注入、週３回服用）
８群および９群内では、４件の対象は無作為に１３Ｃ５．５を受け、２件の対象は無作為にプラセボを受けた。
【０２３７】
第２部の同じ服用レベルおよび第１部でのさらに高い１服用レベルおよび第３部でのすべてのさらに低い服用レベル内のすべての対象が、最後の服用後に少なくとも最小１週間安全評価を順調に完了した後に第３部のコホートでの投与を開始させた（図４）。
【０２３８】
研究は、研究員および対象にそれぞれの群内での処置割り当てが見えないように二重盲検法で行われた。安全性の評価では、メディカルモニターは処置割り当てに非盲検であった。投与群の図は表１に示されている。
【０２３９】
【表１】
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【０２４０】
第１部および第２部では、研究薬またはプラセボは研究１日目に投与群ごとに投与された。第３部では、研究薬またはプラセボは研究１日目、８日目および１５日目に投与群ごとに投与された。研究８日目および１５日目の研究薬投与は、コホート８および９において２４時間期間の予定服用内で行われていた可能性がある。最小の１週間が異なる服用レベルを分けていた。
【０２４１】
対象は、ＩＶ投与群にいる場合（第１部および第２部）はおよそ４から６日間またはＳＣ投与群にいる場合（第３部）はおよそ６から８日間研究施設に拘束され監督された。拘束は、研究１日目の投与に先立って３日ウィンドウ（すなわち、研究３日目から研究１日目）内のいつでも生じていてよいベースライン日の午後に開始され、ＩＶ投与群に登録された対象の４８時間血液試料の収集（研究３日目）後またはＳＣ投与群に登録された対象の９６時間血液試料の収集（研究５日目）後に終了した。拘束中の過激な活動は認められなかった。
【０２４２】
さらに、第３部の対象は研究８日目および１５日目に研究施設に２４時間拘束された。拘束中、対象は１３Ｃ５．５またはプラセボのいずれかのＳＣ投与を受け、生命徴候、安全性評価、実験的評価、薬物動態およびＡＤＡ、バイオマーカー試料採取、心電図（ＥＣＧ）ならびに肺機能検査（ＰＦＴ）について評価された。
【０２４３】
対象は、脂肪から１日のカロリーのおよそ３０％、炭水化物から１日のカロリーの４５％以下を提供し、拘束中の全食事についておよそ１９００カロリー／日を提供する標準化された食事を受けた。全食事の組成（タンパク質、脂肪、炭水化物および総カロリー）は、栄養士により決定され、原資料と一緒に記録が残された。研究のそれぞれの部における拘束中、対象は研究で与えられる予定食事および渇きを癒す水のみを消費した。対象は他の食物と飲物はすべて控えた。
【０２４４】
第１部および第２部では、研究１日目は投与前の８時間から投与完了のおよそ２時間後まで、渇きを癒す水以外、食物も飲物も与えられなかった。
【０２４５】
第３部では、研究１日目、８日目および１５日目は、投与前の８時間から研究１日目は投与完了のおよそ２時間後まで、渇きを癒す水以外、食物も飲物も与えられなかった。
【０２４６】
組入基準
対象は以下の基準を満たした場合に、研究参加に適格であった。
１．男性または女性、年齢は１８から５５歳の間で、始めと終わりを含む。
２．２部および３部では、スクリーニングに先立つ少なくとも６カ月間の喘息の診断：
下に定義される軽度から中等度制御喘息対象
喘息の症候性対照では４パフ以下／週で所定の短時間作用性ベータアゴニストの使用
長時間作用性ベータアゴニスト（ＬＡＢＡ）は、吸引用ステロイド剤と同時に使用されるのであれば、処方通りに服用していてもよい。ＬＡＢＡは、スクリーニングＰＦＴが実施される前の１２時間は投与されず、検査の完了時に再開することができる。
【０２４７】
ＩＣＳによる場合は、中間服用量まで使用していてもよい（１日４４０ｍｃｇまでのフルチカゾンＭＤＳ／ＨＦＡまたは１日５００ｍｃｇまでのフルチカゾンＤＰＴの等価物として定義される。）
３．第２部および第３部では、スクリーニングおよびベースライン来診時では強制呼気量１（ＦＥＶ１）≧７０％であった。
４．第２部および第３部では、ＩＣＳによる場合、研究１日目および服用前の≧４週間の間の安定したＩＣＳ服用量は研究中ずっと安定したままであると予想された。スクリーニング来診前の少なくとも４週間はＩＣＳを使用していたに違いない。
５．第２部および第３部では、喘息に罹った対象は、病歴に利用可能な陽性のメタコリン負荷試験結果（ここ１２カ月以内）であった、または吸入アルブテロールまたは噴霧アルブテロール（または等価短時間作用性ベータアゴニスト）の２から４回吸入の少なくとも３０分間後に検査された場合、最大努力からＦＥＶ１の少なくとも１２％の増加を示すことにより肺機能測定において気道回復能を示した。いずれの１回のセッションでも回復能を実証するための最大２回の試みを実施することができた。対象は、必要であれば繰り返し検査のために別の日に戻ってきていることもある。回復能または回復能を確認するメタコリン負荷試験は、ここ１２カ月以内に実施された場合には診療記録に記述されている可能性がある。陽性メタコリン負荷は、肺機能検査についての米国胸部学会基準を使用して≦８．０ｍｇ／ｍＬのメタコリンの服用量でのＰＣ２０と定義された（メタコリンおよび運動負荷試験の指針１９９９参照。Ａｍ  Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．、Ｖｏｌ．１６１、３０９−３２９頁、２０００年）。
６．第２部および第３部では、対象は、
喘息症状≦２日／週（すなわち、咳、喘鳴音、息切れ）
夜間の目覚め≦前４週間期間中２回
通常活動への支障なし
喘息症状管理のための短時間作用性ベータアゴニスト４吸入以下／週（運動誘発性気管支痙攣の予防のための予防的使用は除外する。）
により定義される場合、研究１日目に先立つ少なくとも４週間は管理良好な喘息に罹っていた。
７．女性の場合、対象は以下の基準のうちの１つを満たした：
少なくとも２年間は閉経後
外科的に不妊（両側卵巣摘出術、卵管結紮術または子宮摘出術）。卵管結紮術を受けたことにある女性は、拘束１日目に開始して
子宮内避妊（ＩＵＤ）器具
バリアー法（殺精子剤付きペッサリーまたは殺精子剤付きコンドーム）
ホルモン避妊薬の注射、経口、経皮、膣または移植法
を含む、研究薬物処置の１６０日目まで第二の避妊法の使用に同意することを求められた。
８．女性たちは、研究１日目に先立つ２８日以内および研究１日目投与に先立つ３日間のウィンドウ（すなわち、研究３日目から研究１日目）のいずれの時点で起こっていてもよいベースラインで得られた血清検体のスクリーニングで実施された妊娠検査で陰性結果であった。
９．男性の場合、対象は外科的に不妊であるまたは研究中および最後の研究薬物投与後１６０日間は、以下の産児制限法のうちの少なくとも１つを実践していた：
対象はコンドームを使用するおよび相手の女性はＩＵＤを使用した。
【０２４８】
対象はコンドームを使用するおよび相手の女性はホルモン避妊薬の経口、注射または移植法を使用した。
【０２４９】
対象はコンドームを使用するおよび相手の女性はバリアー法（殺精子ゼリーまたはクリーム付の避妊用スポンジ、ペッサリーまたは膣リング）を使用した。
【０２５０】
さらに、男性対象は、研究中および研究薬物の最後の服用後１６０日間は精子を提供しないことに同意した。
１０．第１部では、肥満度指数（ＢＭＩ）は１８から２９で、始めと終わりを含んだ。第２部および第３部では、ＢＭＩは１８から３４で、始めと終わりを含んだ。ＢＭＩは、ｋｇ体重割るメートル身長の二乗として計算された。体重は１２０ｋｇを超えなかった。
１１．病歴、身体検査、生命徴候、研究所プロファイルおよび１２誘導心電図（ＥＣＧ）の結果に基づく（軽度中等度制御喘息ならびに軽度中等度アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎および胃食道逆流性疾患などの関連する病状以外の）一般的健康状態。
１２．任意のスクリーニングまたは研究特有の手順の行為に先立って、ＩＲＢにより承認されたインフォームドコンセントに自発的に署名し日付をつけた。
【０２５１】
除外基準
対象は以下の基準のいずれかを満たした場合に、研究参加に不適格であった。
１．対象はＩＣＳの同時使用なしでＬＡＢＡ療法を使用していた。
２．第２部および第３部では、研究１日目から８週以内に喘息悪化した。
３．第２部および第３部では、研究１日目から４週以内に上気道感染した。
４．第２部および第３部では、研究１日目から６カ月以内に全身性コルチコステロイドを必要とする喘息悪化または全身性コルチコステロイドを必要とする他の理由。
５．第２部および第３部では、研究１日目から６カ月以内に救急治療室（ＥＲ）来診、入院または医療介入を必要とする喘息悪化。
６．任意の薬物、生物製剤、食物またはワクチンに対する臨床的に重要なアレルギー反応、すなわち、アナフィラキシーの病歴（研究員につき）。
７．任意のＩｇＧ含有薬剤に対する大きな免疫反応の病歴。
８．研究１日目から６カ月以内に、≧１０％の体表面積を含むまたは低から中程度効能コルチコステロイド外用薬もしくは一般用皮膚軟化剤の使用以外の医学的処置を必要とするアトピー性皮膚炎の病歴。
９．糖尿病（Ｉ型またはＩＩ型）の病歴またはスクリーニング時の糖尿病を示唆する空腹時血清グルコースレベル（空腹時血清グルコース≧１２６ｍｇ／ｄＬ）。
１０．研究薬物の構成物に対するアレルギー反応または著しい敏感性の病歴。
１１．結核（ＴＢ）またはリステリア症の病歴。
１２．入院またはスクリーニングから３０日以内のＩＶ抗生物質、ＩＶ抗ウイルス薬もしくはＩＶ抗真菌薬または研究１日目に先立つ１４日以内の経口抗生物質／抗ウイルス薬を用いた処置を必要とした持続性慢性または活動性感染の病歴
１３．対象は潜在的ＴＢ感染について評価された。対象は、証拠として陰性胸部Ｘ線および陰性ツベルクリン（ＰＰＤ）皮膚検査によりＴＢ感染または曝露の非存在を実証した。
１４．Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、Ｃ型肝炎ウイルス抗体（ＨＣＶ  Ａｂ）またはＨＩＶ抗体（ＨＩＶ  Ａｂ）についての陽性検査結果。
１５．住血吸虫症血清学に関する陽性検査結果。
１６．２週間の持続期間よりも大きな不可解な下痢または腹痛の病歴。
１７．無処置の寄生虫感染の病歴。
１８．遺伝的または後天性免疫不全の病歴。
１９．第２部および第３部では、研究薬物投与に先立つ２週間以内の任意の非必須薬物、ビタミンおよび／またはハーブサプリメントの使用。第１部では、研究薬物投与に先立つ２週間以内の任意の投薬、店頭薬物またはハーブサプリメントの使用。
２０．第２部および第３部では、対象は研究１日目から５カ月以内にゾレア（登録商標）を服用していた。
２１．第２部および第３部では、対象はベースラインに先立つ３カ月で免疫療法服用に変化があった。
２２．研究薬物投与に先立つ３０日または５半減期以内（どちらでも長いほう）に任意の薬物を注射により受けた。
２３．研究薬物投与に先立つ３０日または５半減期以内（どちらでも長いほう）に任意の治験薬を受けた。
２４．首尾よく処置された非転移性皮膚扁平上皮細胞または基底細胞癌以外の癌またはリンパ増殖性疾患の病歴。
２５．癲癇、任意の臨床的に重要な心臓、呼吸器（軽度または中等度喘息は除く。）、腎臓、肝臓、胃腸、血液学的、リウマチ学もしくは精神医学的疾患もしくは障害、非治癒傷もしくは再発性不十分な創傷治癒または任意の制御されていない内科疾患の病歴。さらに、以下のものは除外された。慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、うっ血性心不全、肺塞栓症、好酸球増加を伴う敗浸潤、薬物に続発する現在の咳、声帯機能障害。
２６．任意の第一度近親者に心肺突然死の病歴。
２７．妊娠または授乳女性。
２８．薬物またはアルコール乱用の最近（６カ月）の履歴。
２９．研究薬物投与に先立つ３カ月内の任意の生ワクチンを受けた。
３０．スクリーニング時または入院時の依存性薬物、アルコールまたはコチニンについての陽性スクリーニング。
３１．適切な医療関係者により評価された場合、スクリーニング時の胸部Ｘ線検査が任意の臨床的に重要な異常（石灰化肉芽腫および／または肋膜瘢痕化を含む。）を示している。
３２．投与に先立つ１４日以内に熱性疾患。
３３．フリデリカ（Ｆｒｉｄｅｒｉｃａ）補正（ＱＴｃＦ）女性で＞４５０ｍｓｅｃおよび男性で＞４３０ｍｓｅｃによるベースラインＱＴｃ間隔を有する対象。
３４．研究薬物投与に先立つ８週間以内にかなりの血液量を提供したもしくは失った（血漿交換を含む。）または任意の血液産物の輸血を受けた。
３５．対象が喫煙者であったまたは研究薬物投与に先行する６カ月期間内で喫煙の履歴があった。
３６．別の臨床研究に現在登録している。
３７．本研究に以前登録していた。
３８．いかなる理由であれ、研究員または医療モニターにより、１３Ｃ５．５を受けるには不適切な候補者と見なされた。
【０２５２】
施された処置
第１部および第２部では、単回服用量の１３Ｃ５．５または１３Ｃ５．５プラセボ（０．３、１．０、３．０または１０．０ｍｇ／ｋｇ）は研究１日目の午前にそれぞれの対象に静脈内投与された。第３部では、合計３服用量の１３Ｃ５．５または１３Ｃ５．５プラセボ（０．３または３．０ｍｇ／ｋｇ）は研究１日目、８日目および１５日目の午前に皮下投与された。ＩＶ注入では、投与に先立って留置カテーテルが静脈内に挿入され、１ｍＬの１３Ｃ５．５プラセボが流された。１３Ｃ５．５または１３Ｃ５．５プラセボは、仰臥位の対象におよそ１２０分かけて持続注入により静脈内に投与された。注入に続いて、１ｍＬの１３Ｃ５．５プラセボ流が投与され、ラインは０．９％等張食塩水液を用いた注入の完了に続いて最小でも２時間維持された。対象は、注入前の少なくとも５分間および注入終了後３０分まで仰臥位のままでいた。
【０２５３】
ＳＣ服用では、研究薬物は、どんな血管、皮膚の厚くなったところもしくは柔らかいところ、傷痕、線維組織、妊娠線、挫傷、発赤、母斑または他の皮膚の不完全なところも避けて、腹部の左上腹部に皮下投与された。対象はそれぞれの注入に続いて少なくとも３０分間仰臥位のままでいた。
【０２５４】
対象は９つの投与群のうちの１つに割り当てられた（表２）。それぞれのＩＶ注入群内では、４件の対象は無作為に１３Ｃ５．５を受け、１件の対象はプラセボを受けた。それぞれのＳＣ群内では、４件の対象は１３Ｃ５．５を受け、２件の対象はプラセボを受けた。服用コホート内のすべての対象が最小１週間安全性評価を順調に完了した後にはじめて新しいコホートについて服用量漸増が行われた。
【０２５５】
【表２】
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【０２５６】
ＩＶ投与では、ＰＦＳ中の試験薬物は１３Ｃ５．５プラセボでさらに希釈され、投与のために注射器内で混合された。ＳＣ投与では、希釈は必要ではなかったが、材料は投与のために注射器に移された。試験薬物は２℃から８℃／３６℃から４６℃で保存され、光から保護され、凍結されなかった。
【０２５７】
対象を処置群に割り当てる方法
研究の第１部の健康な対象は、研究に登録されると、それぞれ１群、２群、３群および４群に対して１１０１、１２０１、１３０１および１４０１から始まる固有の連続番号を割り当てられた。第２部において軽度から中等度の制御喘息に罹った対象は、それぞれ５群、６群および７群に対して２５０１、２６０１および２７０１から始まる固有の連続番号を割り当てられた。第３部において軽度から中等度の制御喘息に罹った対象は、それぞれ８群および９群に対して３８０１および３９０１から始まる固有の連続番号を割り当てられた。対象は１３Ｃ５．５またはプラセボを受けるよう無作為に割り当てられた。無作為化スケジュールは研究の開始前にコンピュータにより作成された。
【０２５８】
研究における服用量の選択
ファーストインヒューマン（ＦＩＨ）試験のための最大推奨開始用量（ＭＲＳＤ）は、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）産業用ガイダンス「成人健常志願者での薬物治療学のための臨床試験の安全な開始用量の評価」に従って計算された。ガイダンス通りに、ＩＶで投与される分子量（ＭＷ）＞１０００００ダルトンのタンパク質のＭＲＳＤは、体表面積スケーリングを使用するのではなくｍｇ／ｋｇにより種間で正規化することにより見積もられるべきである。さらに、カニクイザルｒＩＬ−１３またはラットｒＩＬ−１３と比べたヒトについての１３Ｃ５．５インビトロおよびインビボデータは、それぞれ約８−１５５倍の効力シフトを示しており、これらのデータは最終ＭＲＳＤ評価に含まれた。
【０２５９】
２週間繰り返し投薬カニクイザル研究から得られた無毒性量（ＮＯＡＥＬ）、安全係数１０およびインビボ薬理学データからのサルとヒトｒＩＬ−１３間の８倍効力シフトに基づいて、ＭＲＳＤは１９ｍｇ／ｋｇと決定された。同様に、４週間繰り返し投薬ラット研究から得られた無毒性量（ＮＯＡＥＬ）、安全係数１０およびインビボ薬理学データからのラットとヒトｒＩＬ−１３間の５２倍効力シフトに基づいて、ＭＲＳＤは３ｍｇ／ｋｇと決定された。さらに、インビトロ薬理学データを使用する１５５倍の効力シフトを使用する場合、ヒトＭＲＳＤは１ｍｇ／ｋｇと決定された。
【０２６０】
服用量範囲は用量比例を確立するように本試験では評価され、適切な安全域を可能にするように低用量が選択され、免疫原性の可能性は最小限に抑えられた。第２相に進むのに先立って健康と管理された喘息集団の両方での高用量の安全域を評価するために高用量が選択されて、概念証明研究における適切な用量範囲設計が可能になった。安全性および忍容性は、複数投与に進むのに先立つ単一漸増用量に続いて確立された。皮下複数投与は、生物学的利用率、喘息集団における潜在的曝露応答関係および免疫原性を評価するのに重要であった。
【０２６１】
前および併用療法
第１部では、併用薬は研究全体で許可されるべきではなかった。
【０２６２】
第２部および第３部では、救済療法としての短時間作用性ベータアゴニストの使用は研究中許可された。低から中程度用量ＩＣＳ使用、および鼻コルチコステロイド使用は研究中許可された。長時間作用性ベータアゴニスト使用は、ＬＡＢＡがスクリーニング時にＩＣＳと同時に使用されていた場合は、処方通りに患者に許可された。研究期間のために喘息薬物を変更する計画はあるべきではなかった。
【０２６３】
全身性コルチコステロイド使用は喘息悪化の制御が必要である場合には許可されたが、対象は１３Ｃ５．５を用いたいかなる追加の治療からも中断されるべきであった。全身性コルチコステロイドの使用が必要な対象は研究に残り、安全性評価のためにフォローされることになった。
【０２６４】
既存の病状の治療に必要な重要な薬物のみが研究中は許可された。これらには、高脂血症治療剤、高血圧治療剤、制酸薬、ヒスタミン−２受容体アンタゴニスト、プロトンポンプ阻害薬およびアスピリンまたは非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）などの鎮痛剤が含まれた。抗ヒスタミン薬使用、一般用皮膚軟化薬使用および／または低から中程度効力外用ステロイド薬（クラスＩＶ、Ｖ、ＶＩまたはＶＩＩ）使用は組入基準を満たしているアトピー性皮膚炎に罹った対象には許可された。鼻用コルチコステロイド使用はアレルギー性鼻炎に罹った対象には許可された。対象は研究１日目に先立つ最小８週間許可された薬物を継続して服用しており、研究中ずっと継続して服用した。１日２ｇ以下のアセトアミノフェンの使用は研究者の裁量により時々許可された。
【０２６５】
不必要な薬物の使用はやめさせられたが、対象が何か一般用または処方薬物、ビタミンおよび／もしくはハーブサプリメントの服用を報告した場合は、または何か薬物の投与が研究薬物投与に先立つ３０日から研究終了までずっと必要になった場合は、薬物の名称、用量および回数を含む投薬情報、開始および終了日を含む投与の日付ならびに使用理由が記録され、メディカルモニターが告知された。
【０２６６】
１３Ｃ５．５およびＡＤＡアッセイ
１３Ｃ５．５アッセイのための血液試料および抗薬物抗体（ＡＤＡ）は、表３に示されるように、研究中ずっと入手された。それぞれの血液試料が収集された時間は、原資料におよび適切な電子症例報告書（ｅＣＲＦ）に最寄りの分まで記録された。採血のタイミングは投薬を除いて他のどんな予定された研究活動よりも優先された。
【０２６７】
薬物測定のための追加の血液試料は、有害事象のせいで中止された場合には、対象から収集されていることもあり、試料が採取された時刻および日付は記録されることになった。
【０２６８】
試料は研究１日目の予定時間の±５分以内に、研究２日目から６日目までずっと予定時間の±１時間以内に、研究７日目から１２７日目までずっと予定時間の±３時間以内に収集されることになっていた。
【０２６９】
【表３】
2014520847.tif 000007
【０２７０】
１３Ｃ５．５についてのＭＤＳアッセイおよびＡＤＡについてのスクリーニングアッセ
イの結果はこの研究のために報告された。
【０２７１】
１３Ｃ５．５アッセイのための血液試料は静脈穿刺によりゲル分離器なしで適切にラベルを付けた空気を抜いた血清収集管に収集された。ＩＶ研究薬物投与（第１部および第２部）では、１３Ｃ５．５用の試料は、０時（服用前）にならびに研究１日目の研究薬物投与の開始に続いて２、３、４、６、１０、１４、２４、４８、７２、９６、１２０、１６８、３３６、５０４、６７２、１００８、１３４４、２０１６および２６８８時に収集された。ＳＣ研究薬物投与では（第３部）、１３Ｃ５．５アッセイ用の試料は、０時（服用前）にならびに研究１日目の研究薬物投与の開始に続いて８、２４、４８、７２、９６、１２０、１６８、３３６、３６０、３８４、４０８、４３２、４５６、５０４、６７２、１００８、１３４４、２０１６、２３５２および３０２４時に収集された。１６８時および３３６時の試料は、それぞれ研究８日目および１５日目に投薬の直前に収集された。１３Ｃ５．５アッセイ用の血液試料は、該当する場合は、早期中止来診時に入手された。試料ごとに必要な血清容積は表３に収載されている。血液は遠心分離前に室温で３０分間凝固させておいた。
【０２７２】
ＡＤＡアッセイのための血液試料は静脈穿刺によりゲル分離器なしで適切にラベルを付けた空気を抜いた血清収集管に収集された。ＩＶ研究薬物投与では、ＡＤＡアッセイ用の血液試料は、研究１日目に０時（投薬前）にならびに研究１５日目、２９日目、５７日目、８５日目および１１３日目に収集された。ＳＣ研究薬物投与では、ＡＤＡアッセイ用の血液試料は、研究１日目および１５日目に０時（投薬前）にならびに研究２９日目、４３日目、５７日目、８５日目、９９日目および１２７日目に収集された。ＡＤＡアッセイ用の血液試料も、該当する場合は、早期中止来診時に入手された。試料ごとに必要な血清容積は表３に収載されている。血液は遠心分離前に室温で３０分間凝固させておいた。
【０２７３】
薬物動態変数
ＩＶ投薬後の１３Ｃ５．５の薬物動態パラメータの値は、非区画法を使用して推定された。
【０２７４】
最大観察血清濃度（Ｃｍａｘ）およびＣｍａｘまでの時間（ピーク時間、Ｔｍａｘ）は、血清濃度−時間データから直接決定された。
【０２７５】
明らかな終末期排泄速度定数の値（β、ベータ）は、プロファイルの終末対数線形期からの時間データに対する血清濃度の対数の最小二乗直線回帰の傾きから得られた。終末対数線形期は、Ｐｈｏｅｎｉｘ（商標）ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（登録商標）バージョン６．１（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ、ＣＡ）および目視検査を使用して確認された。最小の３つの濃度−時間データポイントを使用してβを決定した。対象ごとに使用された実時間は、計算された薬物動態パラメータの表に見出し得る。終末期排泄半減期（ｔ１／２）は、ｌｎ（２）／βとして計算された。
【０２７６】
時間０から最終測定可能濃度の時間（ＡＵＣｔ）までの血漿濃度−時間曲線下の面積（ＡＵＣ）は、線形台形規則により計算された。ＡＵＣは、最後の測定可能血漿濃度（Ｃｔ）をβで割ることにより無限時間に外挿された。ＡＵＣの外挿された部分をＡＵＣｅｘｔにより表示すると、時間０から無限時間までのＡＵＣ（ＡＵＣ∞、ＡＵＣｉｎｆ）は以下の通りに計算された。
【０２７７】
ＡＵＣ∞＝ＡＵＣｔ＋ＡＵＣｅｘｔ
全ＡＵＣ∞への外挿されたＡＵＣ（ＡＵＣｅｘｔ）の貢献の割合は、ＡＵＣｅｘｔをＡＵＣ∞で割り、この商に１００を掛けることにより計算された。
【０２７８】
排除値（ＣＬ）は投与された用量をＡＵＣ∞で割ることにより計算された。分布容積（Ｖｄβ、ＶＤＢ）値は、ＣＬをβで割ることにより計算された。定常状態（Ｖｓｓ）での分布容積の推定値も提示された。
【０２７９】
用量正規化されたＣｍａｘ、ＡＵＣｔおよびＡＵＣ∞も第１部および第２部におけるすべての群について計算された。
【０２８０】
第３部におけるＳＣ投与群では、Ｃｍａｘ、Ｔｍａｘおよび投与後０から１６８時間までのＡＵＣ（ＡＵＣ０−１６８）は第一および第三服用後に推定された。ベータおよびｔ１／２は、第３のＳＣ投与に続いて推定された。さらに、用量正規化されたＣｍａｘおよびＡＵＣ０−１６８は、第３部で８群および９群について計算された。研究１日目のＡＵＣ０−１６８に対する研究１５日目のＡＵＣ０−１６８についての累積比（Ｒａｃ）も計算された。
【０２８１】
薬物動態
第１部、第２部および第３部のそれぞれで、１３Ｃ５．５およびＡＤＡの血清濃度ならびに薬物動態パラメータ値が、対象ごとにおよび投与群ごとに作表され、要約統計量がサンプリング時間ごとにおよびパラメータごとにコンピュータ処理された。
【０２８２】
健康対象（第１部）におけるすべての１３Ｃ５．５単回用量計画（群）では、
線形薬物動態および用量比例性の問題に取り組むために、用量正規化Ｃｍａｘ、用量正規化ＡＵＣ、Ｔｍａｘおよびβに関する解析が実施された。ＣｍａｘおよびＡＵＣについて対数変換が用いられた。パラメータごとに、一元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）が実施された。対象は用量レベルにより分類された。回帰係数が０．１０のレベルで統計的に有意である場合は、体重または別のサイズ基準がＣｍａｘおよびＡＵＣのモデルにおいて共変数として含まれることになった。最終モデルの枠内では、最高用量は最低用量と比較された。ＣｍａｘおよびＡＵＣの対数では、９５％信頼間隔ならびに点推定値が、最低用量の中央値に対する最高用量の中間値の比について与えられた。点推定値および９５％信頼間隔は、対数平均の差に対応する推定値および信頼限界をべき乗することにより得られた。少なくとも４つの１３Ｃ５．５用量レベルが研究された場合、用量レベル平均における対比で有意レベル０．０５でも試験が実施され、対比は用量の対数とほぼ線形傾向に敏感であるように選択された。
【０２８３】
ＡＮＯＶＡは、軽度から中等度の制御喘息に罹った対象における単回用量計画についても行われた（第２部）。モデルの枠内で、最高用量と最低用量間に差はないという仮説が試験された。解析は、２つの集団（健康対象および軽度から中等度の制御喘息に罹った対象）について一緒に実施することができたまたはできなかった（解析は一緒には実施されなかった。）。解析が２つの集団について一緒に実施されていた場合、２つの集団が共有する用量レベルからのデータのみが含まれることになった。この場合、モデルは集団、用量レベルおよび用量レベルによる集団の相互作用に影響を及ぼしていたと考えられる。体重または別のサイズ基準を、ＣｍａｘおよびＡＵＣのモデルに含めることもできた。集団−用量相互作用に関する統計が０．１０のレベルで有意であった場合、推定値および他の推論が集団ごとに別々に与えられていたと考えられる。そうでなければ、推定値および他の推論は用量レベル主効果に基づいていたことになった。
【０２８４】
ＡＮＯＶＡは、単回用量計画の薬物動態パラメータに対応する薬物動態パラメータで複数用量計画（第３部）についても実施された。共変数としてサイズの基準を含めるかどうかに関する決定は第１部および第２部の結果に一部基づいていた。ＣｍａｘおよびＡＵＣでは、点推定値および９５％信頼間隔が、第１部について説明されたように、２つの用量の中央値の比について与えられた。
【０２８５】
欠測値およびモデル侵害
おそらく研究薬物と関連する早期中断に起因する欠測値があった場合には、欠測値の結果としてのバイアスの可能性が考慮されていたと考えられる。
【０２８６】
薬物動態変数（Ｃｍａｘ、ＡＵＣ、等）の値は、不明の個々の濃度値を置き換えずに、利用可能なデータを使用するだけでおよび必要であれば薬物動態変数のいくつかの欠測値を用いた解析を実施して、通常は決定される。しかし、単離された個々の血清試料の不明の濃度値は、そうした値が研究結果に影響を与えるまたは点推定値に意味のある影響を与える可能性がある場合は、置き換える（帰属させる）こともできた。
【０２８７】
変数の確率分布が、ＡＮＯＶＡ（ＡＮＣＯＶＡよりもむしろＡＮＯＶＡがすべての部について実施された。）からの結論が影響を受けていた可能性があるまたは点推定値が誤解を生む程度に非対称であった場合は、およその対称分布を生じる変換（ＣｍａｘおよびＡＵＣの場合の対数に代わる物）が求められることになっていた。満足のいく変換が見つけられなかった場合または確率分布の両テールがかなり長いと思われた場合、ノンパラメトリック分析法を実施することができた。用量レベルが結論が影響を受けた可能性がある程度に一定しない分散を有する場合、一定しない分散を見越した近似法が使用されると考えられた。
【０２８８】
［実施例１］：健康対象および喘息対象における漸増単回用量（１群から７群まで）
健康対象（１群から４群まで）への０．３ｍｇ／ｋｇから１０ｍｇ／ｋｇ  １３Ｃ５．５の単一ＩＶ注入後の平均±標準偏差（ＳＤ）血清濃度−時間プロファイルは、それぞれ均等目盛および対数線形目盛で図５および６に提示されている。健康対象および軽度から中等度喘息に罹った対象（１群、３群から７群まで）への０．３ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇ  １３Ｃ５．５の単回ＩＶ注入後の平均±ＳＤ血清濃度−時間プロファイルは、それぞれ均等目盛および対数線形目盛で図７および８に提示されている。
【０２８９】
健康対象および喘息対象への１３Ｃ５．５の単回ＩＶ注入後の１３Ｃ５．５の平均±ＳＤ薬物動態パラメータは表４に示されている。
【０２９０】
【表４】
2014520847.tif 000008
【０２９１】
ＩＶ投与に続いて、曝露は、ＡＵＣおよびＣｍａｘにより決定される場合、０．３ｍｇ／ｋｇから１０ｍｇ／ｋｇ範囲にわたり用量依存的に増加すると思われた。健康対象および喘息対象における１３Ｃ５．５への曝露（ＡＵＣおよびＣｍａｘ）は試験された用量（０．３ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇおよび１０ｍｇ／ｋｇ  ＩＶ）では類似していた。１３Ｃ５．５の薬物動態は、小さな分布容積および長い半減期を有する典型的なイムノグロブリンＧ１（ＩｇＧ１）と類似していた。１３Ｃ５．５の調和平均±偽ＳＤ半減期は１６．４±６．３５日から２６．７±４．５２日におよび、平均Ｖｄβは、０．３ｍｇ／ｋｇから１０ｍｇ／ｋｇ用量範囲にわたるＩＶ注入に続いて７２．８から１０８．９ｍＬ／ｋｇの範囲であった。
【０２９２】
健康対象および喘息対象における漸増１３Ｃ５．５単回ＩＶ注入についてパーセントＣＶとして表される１３Ｃ５．５のＣｍａｘ、ＡＵＣｔおよびＡＵＣ∞における全変動は表５に示されている。
【０２９３】
【表５】
2014520847.tif 000009
【０２９４】
［実施例２］：健康対象および喘息対象における用量比例性および薬物動態線形性（第１部および第２部）
０．３から１０ｍｇ／ｋｇ用量範囲にわたる１３Ｃ５．５の単回ＩＶ注入の投与に続く１３Ｃ５．５についての平均±ＳＤ用量正規化ＣｍａｘおよびＡＵＣ∞値は、表４に提示されている。用量レベルに対する１３Ｃ５．５の平均±ＳＤ用量正規化ＣｍａｘおよびＡＵＣ∞値は図９に提示されている。
【０２９５】
健康対象および軽度から中等度喘息に罹っている対象における薬物動態線形性および用量比例性の問題に取り組むために、薬物動態パラメータに関してＡＮＯＶＡが実施された。対象は処置群（計画）により分類された。
【０２９６】
健康対象では、１３Ｃ５．５薬物動態はＣｍａｘおよびＡＵＣにおいては用量比例であった。平均Ｃｍａｘ、ＡＵＣｔまたはＡＵＣ∞値は、最高用量（１０ｍｇ／ｋｇ）と最低用量（０．３ｍｇ／ｋｇ）間で類似していた。用量範囲（０．３から１０ｍｇ／ｋｇ）にわたる１３Ｃ５．５用量正規化Ｃｍａｘまたは用量正規化ＡＵＣの変化には統計的に有意な傾向（ｐ＞０．０５）はなかった。しかし、検出力は投与群のそれぞれにおける対象の数が少ないせいで低かった。βについての統計検定に基づいて、最高用量のｔ１／２値（２６．７±４．５２日、１０ｍｇ／ｋｇ）は、最低用量０．３ｍｇ／ｋｇの値１７．４±３．３４日よりも統計的に有意に長かった（表４）。その結果は、０．３から１０ｍｇ／ｋｇ用量範囲にわたる１３Ｃ５．５ｔ１／２の増加には統計的に有意な傾向（ｐ＜０．０５）が存在することも示していた。
【０２９７】
軽度から中等度喘息に罹っている対象では、最高用量（１０ｍｇ／ｋｇ）の用量正規化Ｃｍａｘは、最低用量０．３ｍｇ／ｋｇの用量正規化Ｃｍａｘよりも統計的に有意に高かった。最高用量の用量正規化ＡＵＣｔおよびＡＵＣ∞値は、最低用量の用量正規化ＡＵＣｔおよびＡＵＣ∞値よりも統計的に有意に大きかった（ｐ＜０．０５）。しかし、用量比例性からの観察された逸脱は小さく、中央値の比の推定値は３３倍の用量範囲にわたりＣｍａｘで１．３およびＡＵＣで１．４であった。
［実施例３］：喘息対象における週３回ＳＣ注射（８群および９群）
８群（０．３ｍｇ／ｋｇ）および９群（３．０ｍｇ／ｋｇ）に対する１３Ｃ５．５の週３回ＳＣ投与に続く１３Ｃ５．５の平均±ＳＤ血清濃度対時間プロファイルは、均等目盛および対数線形目盛で図１０に提示されている。
【０２９８】
０．３ｍｇ／ｋｇまたは３．０ｍｇ／ｋｇ  １３Ｃ５．５の週３回投与に続く１３Ｃ５．５の平均±ＳＤ薬物動態パラメータは、表６に示されている。１３Ｃ５．５の週３回投与に続く蓄積は、ＣｍａｘおよびＡＵＣ値が１３Ｃ５．５の週３回０．３ｍｇ／ｋｇまたは３．０ｍｇ／ｋｇ投与に続いておよそ３倍であるので、線形であると思われる。Ｔｍａｘは、１３Ｃ５．５の第一および第三の０．３および３．０ｍｇ／ｋｇ投与に続いて類似していると思われる。１３Ｃ５．５についての調和平均±偽ＳＤ半減期は、３日間の０．３および３．０ｍｇ／ｋｇのＳＣ投与後それぞれ２７．２９±３．３３および２４．３０±１．２３日であった。ＩＶおよびＳＣデータの同時薬物動態モデリングを使用して、１３Ｃ５．５の推定生物学的利用率はおよそ７０％であった。
【０２９９】
【表６】
2014520847.tif 000010
【０３００】
軽度から中等度喘息に罹っている対象における１３Ｃ５．５の週３回ＳＣ投与に続くパーセントＣＶとして表される１３Ｃ５．５のＣｍａｘおよびＡＵＣ０−１６８における全変動は表７に示されている。
【０３０１】
【表７】
2014520847.tif 000011
【０３０２】
［実施例４］：用量比例性および薬物動態線形性（第３部）
１３Ｃ５．５  ０．３または３．０ｍｇ／ｋｇの週３回ＳＣ服用の投与に続く１３Ｃ５．５についての平均±ＳＤ用量正規化ＣｍａｘおよびＡＵＣ∞値は表６に提示されている。用量レベルに対する１３Ｃ５．５の平均±ＳＤ用量正規化ＣｍａｘおよびＡＵＣ∞値は、それぞれ図１１および１２に提示されている。
【０３０３】
薬物動態線形性および用量比例性の問題に取り組むために、薬物動態パラメータに関してＡＮＯＶＡが実施された。対象は治療群（計画）により分類された。
【０３０４】
週３回ＳＣ服用を投与された軽度から中等度喘息に罹っている対象では、１３Ｃ５．５薬物動態はＣｍａｘおよびＡＵＣにおいて用量線形であった。平均Ｔｍａｘ、ＣｍａｘおよびＡＵＣ０−１６８値は、１日目と１５日目の両方で、最高用量（３．０ｍｇ／ｋｇ）と最低用量（０．３ｍｇ／ｋｇ）間で類似していた。注意すべきことに、検出力は投与群のそれぞれにおける対象の数が少ないせいで低かった。
【０３０５】
実施例１−４についての統計／解析
共変数の調整は実施されなかった。
【０３０６】
対象１２０２および１３０４は研究から早期中断し、彼らの最後のアッセイ血液試料はそれぞれ６７２時間および９６時間で収集された。これら２件の対象では、薬物動態パラメータはＣｍａｘおよびＴｍａｘを除いて計算されなかった。対象１１０３は研究から早期中断し、彼の最後のアッセイ血液試料は投与後およそ８９４時間で収集された。この対象では、薬物動態パラメータは計算された。個々のサンプリング時間の不明の濃度の少数の場合はあったが、信頼性のある薬物動態パラメータの値の決定が妨げられることはなかった。
【０３０７】
その利用可能なデータが薬物動態の値の決定を保証した対象は統計解析に含まれた。この研究は単一研究センターで行われ、したがって、複数のセンターについての配慮は必要ではなかった。
【０３０８】
実施例１−４についての結論
単回用量投与後の１３Ｃ５．５の薬物動態は、長い半減期および小さな分布容積を有するＩｇＧの薬物動態と一致していた。１３Ｃ５．５の単回ＩＶ注入を投与された対象では、１３Ｃ５．５への全身曝露（ＡＵＣおよびＣｍａｘ）は、健康対象では０．３から１０ｍｇ／ｋｇの用量範囲にわたり用量比例的に増加したが、軽度から中等度の制御喘息に罹った対象では、ＡＵＣおよびＣｍａｘは同じ３３倍用量範囲にわたり用量比例的よりもわずかに多く増加した（３０から４０％）。週３回ＳＣ服用を投与された軽度から中等度喘息に罹った対象では、１３Ｃ５．５薬物動態は、０．３と３．０ｍｇ／ｋｇ用量間ではＡＵＣとＣｍａｘの両方において用量線形であった。１３Ｃ５．５の蓄積は週３回のＳＣ投与に続いて約３倍と予想された通りであった。
【０３０９】
研究中、１３Ｃ５．５は、単回用量として１０ｍｇ／ｋｇ  ＩＶまでまたは０．３および３ｍｇ／ｋｇ  ＳＣの複数用量として投与された場合、十分忍容性があり安全であった。健康成人における有害事象プロファイルは喘息に罹った対象において観察されるプロファイルと類似していた。治療中に発生する有害事象における用量関連増加または投与特異的傾向は認められなかった。研究のそれぞれの部では、上気道感染またはウイルス上気道感染を報告した対象の割合は、プラセボを受けた対象と比べて１３Ｃ５．５を受けた対象間のほうが大きかった。これらの事象はすべて軽度または中等度の重症度であり、研究薬物とおそらくまたは多分関係があると研究者が判断した対象はいなかった。しかし、気道感染の発生は将来の研究において厳密にモニターされ続けることになる。１件のプラセボ対象を含めて、増加した血液ＣＰＫの複数の事象が報告され、これらの事象は研究場所での最初の拘束に続いて起きており、それぞれの場合に、ＣＰＫの一時的上昇および増加した身体活動の履歴を伴っていた。
【０３１０】
１３Ｃ５．５  ０．３ｍｇ／ｋｇ処置群における１件の対象は、研究者により研究薬物投与とは関係はないと評価されたバニオン切除術のための入院加療という重篤有害事象を経験した。治療中に発生する有害事象のせいで研究薬物を中断した対象はいなかった。１件の対象における注入部位疼痛の報告以外に、注入関連反応の有害事象は報告されず、喘息および肺活量測定データの悪化を表し得る事象の再調査をしたが、喘息対象における基礎疾患の悪化は示唆されなかった。
【０３１１】
生命徴候、ＥＣＧ変数および検査室測定を含む他の安全性解析において臨床的に重要な傾向は検出されなかった。
【０３１２】
均等
当業者であれば、本明細書に記載される特定の実施形態に対する多くの等価物を日常実験のみを使用して認識するまたは確認することができる。該等価物は以下の特許請求の範囲により包含されることが意図されている。
【図１】
2014520847.tif 000012
【図２】
2014520847.tif 000013
【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
2014520847.tif 000019
【図９】
2014520847.tif 000020
【図１０】
2014520847.tif 000021
【図１１】
2014520847.tif 000022
【図１２】
2014520847.tif 000023
【配列表】
2014520847000001.app
【国際調査報告】
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