(57)【要約】  本発明は、懸濁液の中に生物学的に活性な菌及び／又は菌の器官及び／又は別の微生物を含んでいる液体調製物、該液体調製物を製造する方法、及び、生物学的に植物を保護するための、生物学的に植物を強化するための、又は、生物学的に土壌を改良するための、該液体調製物の使用に関する。ポリエーテル変性トリシロキサンが使用するのに好ましい液体である。本発明による調製物は、室温における容易な管理の下での貯蔵、問題のない輸送並びに容易な製造及び施用に関して、卓越している。【特許請求の範囲】
【請求項１】
生物学的な植物保護のための液体調製物であって、活性微生物又は複数種の活性微生物の混合物又は微生物の器官とポリエーテル変性トリシロキサンからなる懸濁液を含んでいる、前記液体調製物。
【請求項２】
前記ポリエーテル変性トリシロキサンが「Ｂｒｅａｋ−Ｔｈｒｕ」であることを特徴とする、請求項１に記載の液体調製物。
【請求項３】
前記ポリエーテル変性トリシロキサンが「Ｂｒｅａｋ−Ｔｈｒｕ  Ｓ  ２４０」であることを特徴とする、請求項１又は２に記載の液体調製物。
【請求項４】
前記トリシロキサンが、
【表１】
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で改質されていることを特徴とする、請求項１〜３のいずれかに記載の液体調製物。
【請求項５】
前記活性微生物又は活性微生物の混合物又は活性微生物の器官が、特定の植物病害の原因となる生物に対して拮抗作用及び／又は二重寄生作用を有していることを特徴とする、請求項１〜４のいずれかに記載の液体調製物。
【請求項６】
前記活性微生物又は活性微生物の混合物又は活性微生物の器官が、植物において現れる抵抗性誘導作用及び／若しくはストレス耐性誘導作用又は養分利用能増大作用有していることを特徴とする、請求項１〜５のいずれかに記載の液体調製物。
【請求項７】
前記微生物学的活性物質が、１種類の菌又はさまざまな菌の混合物であることを特徴とする、請求項１〜６のいずれかに記載の液体調製物。
【請求項８】
菌種アムペロミセス・クイスクアリス（Ａｍｐｅｌｏｍｙｃｅｓ  ｑｕｉｓｑｕａｌｉｓ）、ベアウベリア・バシアナ（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ  ｂａｓｓｉａｎａ）、ベアウベリア・ブロングニアルチイ（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ  ｂｒｏｎｇｎｉａｒｔｉｉ）、クロノスタキス・ロセア（Ｃｌｏｎｏｓｔａｃｈｙｓ  ｒｏｓｅａ）、コニオチリウム・ミニタンス（Ｃｏｎｉｏｔｈｙｒｉｕｍ  ｍｉｎｉｔａｎｓ）、グリオクラジウム・カテヌラツム（Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ  ｃａｔｅｎｕｌａｔｕｍ）、イサリア属種（Ｉｓａｒｉａ  ｓｐｐ．）、ラエチサリア・アルバリス（Ｌａｅｔｉｓａｒｉａ  ａｒｖａｌｉｓ）、レカニシリウム・レカニイ（Ｌｅｃａｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｌｅｃａｎｉｉ）、レカニシリウム・ムスカリウム（Ｌｅｃａｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｍｕｓｃａｒｉｕｍ）、メタリジウム・アニソプリアエ（Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕｍ  ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ）、ノムラエア・リレイイ（Ｎｏｍｕｒａｅａ  ｒｉｌｅｙｉ）、パエシロミセス・リラシヌス（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ  ｌｉｌａｃｉｎｕｓ）、ホマ・マクロストマ（Ｐｈｏｍａ  ｍａｃｒｏｓｔｏｍａ）、ピシウム・オリガンドルム（Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｏｌｉｇａｎｄｒｕｍ）、タラロミセス・フラブス（Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ  ｆｌａｖｕｓ）、テラトスペルマ・オリゴクラズム（Ｔｅｒａｔｏｓｐｅｒｍａ  ｏｌｉｇｏｃｌａｄｕｍ）、トリコデルマ属種（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｓｐｐ．）及びベルチシリウム・ビグタツム（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｂｉｇｕｔｔａｔｕｍ）のうちの１種類の菌又は複数種の菌又は１種類以上の菌の器官を含んでいることを特徴とする、請求項７に記載の液体調製物。
【請求項９】
１種類／複数種類の菌の前記器官が、胞子、分生子、分芽胞子、厚膜胞子、菌核若しくは菌糸断片のいずれかであるか又はそれら器官の混合物であることを特徴とする、請求項７又は８に記載の液体調製物
【請求項１０】
前記微生物学的活性物質が、細菌又はさまざまな細菌の混合物であることを特徴とする、請求項１〜６のいずれかに記載の液体調製物。
【請求項１１】
前記微生物学的活性物質が、ウイルス又はさまざまなウイルスの混合物であることを特徴とする、請求項１〜６のいずれかに記載の液体調製物。
【請求項１２】
前記微生物学的活性物質が、請求項７、８、１０及び１１において挙げられている微生物の混合物であるか又はいずれの場合にも当該微生物のうちの２種類の混合物であることを特徴とする、請求項１〜６のいずれかに記載の液体調製物。
【請求項１３】
液体調製物を製造する方法であって、微生物を培養し、次いで、ポリエーテル変性トリシロキサンの中に懸濁させることを特徴とする、前記方法。
【請求項１４】
前記ポリエーテル変性トリシロキサンが「Ｂｒｅａｋ−Ｔｈｒｕ」であることを特徴とする、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記ポリエーテル変性トリシロキサンが「Ｂｒｅａｋ−Ｔｈｒｕ  Ｓ  ２４０」であることを特徴とする、請求項１３又は１４に記載の方法。
【請求項１６】
菌類物質を粉砕法及び／又は分散法を用いて加工することを特徴とする、請求項１３〜１５のいずれかに記載の方法。
【請求項１７】
前記菌又は菌の特定の器官を、加工後、篩い分け法、濾過法、空気分級法又は遠心分離法を用いて分離することを特徴とする、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
菌種
【表２】
2014516042.tif 000010
を使用することを特徴とする、請求項１３〜１７のいずれかに記載の方法。
【請求項１９】
土壌中に混入するすることによる、又は、植物に対して／植物の表面上に施用することによる、又は、種子処理による、請求項１〜１２のいずれかに記載されている液体調製物の使用。
【請求項２０】
前記液体調製物を水で希釈して、使用目的に応じた望ましい使用濃度とすることを特徴とする、請求項１９に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、液体調製物、それを製造する方法及びその使用に関する。適用の範囲は、農業及び林業（これは、園芸及び果樹栽培を包含する）や、さらに、観賞植物の栽培、並びに、芝生の定着及び維持である。これに関連して、本発明の目的は、特に、生物学的な植物の保護、生物学的な植物の強化及び生物学的な土壌改良である。
【背景技術】
【０００２】
微視的な菌類又は別の微生物に基づく調製物を使用することで、生物学的な植物の保護が可能となり、従って、植物病害の原因となる生物及び有害な生物を、病害の原因となる有害な当該生物に対する作用の生態学的機序に基づいて、予防的又は治療的に防除することが可能となる。
【０００３】
トリコデルマ属各種（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｓｐｐ．）、ピシウム・オリガンドルム（Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｏｌｉｇａｎｄｒｕｍ）、バシルス属各種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐｐ．）、シュードモナス属各種（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｓｐｐ．）及びストレプトミセス属各種（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｐｐ．）などの別の微生物は、植物体内において、病害の原因となる生物又は別のストレス因子（例えば、乾燥、養分の供給不足、望ましくないｐＨレベル又は土壌中の高い塩分含有量）に対する抵抗性を増大させる反応を引き起こすことができる。
【０００４】
トリコデルマ属各種（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｓｐｐ．）、ペニシリウム・ビライイ（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｂｉｌａｉｉ）、アゾトバクテル属各種（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐｐ．）、アゾトモナス属各種（Ａｚｏｔｏｍｏｎａｓ  ｓｐｐ．）、アゾスピリウム属各種（Ａｚｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ  ｓｐｐ．）及びリゾビウム属各種（Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ  ｓｐｐ．）などのさらに別の微生物は、土壌中において、又は、直接的に植物の根において、養分利用能を改善させる。
【０００５】
そのような調製物は、環境に優しく、そして、進化を通して事実上生み出された自然の調節機構を利用する。
【０００６】
文献には、菌類微生物が生物学的植物保護剤、生物学的植物強化剤及び生物学的肥料の作用剤を構成している、さまざまな製剤又は調製物が開示されている。例えば、微生物は、例えば、顆粒水和剤（ｗａｔｅｒ−ｄｉｓｐｅｒｓｉｂｌｅ  ｇｒａｎｕｌｅｓ）（ＷＧ）、水和剤（ｗａｔｅｒ−ｄｉｓｐｅｒｓｉｂｌｅ  ｐｏｗｄｅｒｓ）（ＷＰ）、油性分散製剤（ｏｉｌ  ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎｓ）（ＯＤ）又は懸濁製剤（ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｓ）（ＳＣ）として製剤される（著者不明、２００５）。
【０００７】
該製剤は、製品が良好な貯蔵寿命を有することを保証しなければならない。このことは、当該微生物は高温下においてさえ可能な限り長期間にわたってその活力を保持することができるべきである、ということを意味する。
【０００８】
製品は、水中における良好な溶解性／分散性を有するべきであり、それによって、製品を噴霧施用又は灌漑システムを用いて使用することが可能であり、そして、当該微生物（例えば、菌の胞子又は細菌細胞）は、土壌中に、植物の表面上に、又は、有害な生物の表面上に、首尾よく分配され得る。これに関連して、当該微生物が使用される水性懸濁液の中で凝集せず、それどころか、個々に存在している（例えば、菌の胞子又は細菌細胞が、懸濁液の中で、互いから離れて浮遊している）ということは、特に重要である。使用する水性懸濁液の中で凝集が生じた場合、植物保護噴霧器のノズルが目詰まりし得るか、又は、土壌中における、植物の表面上における、若しくは、有害な生物に対する生物学的活性物質の分配が不均一になり、当該製品の作用に悪影響を及ぼす。
【０００９】
特に、その作用を完全に発揮するために（例えば、線虫類、土壌昆虫類又は土壌伝染性病害の原因となる生物を防除するために）水と一緒に土壌中に導入することが必要な微生物は、使用される懸濁液の中に比較的大きな凝集体が存在している場合には土壌構造によって最上土壌層において既に濾去されるので、その効果を失う。
【００１０】
さまざまな微生物又は微生物の器官、より特定的には、ベアウベリア属（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ）、イサリア属（Ｉｓａｒｉａ）、ノムラエア属（Ｎｏｍｕｒａｅａ）、メタリジウム属（Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕｍ）、パエシロミセス属（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ）及びペニシリウム属（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）の菌の分生子は、撥水性である。場合によっては、これら微生物のこの特性は、さらに、それらを使用する上での妨げになる。それらは、水中で充分に分散され得ず、植物又は有害な昆虫の表面上に充分に分配され得ず、及び、水と一緒に土壌中に容易に導入され得ない。
【００１１】
一部の水分散性粉末の不利な点は、使用中における粉体の流出を容易に防止することができず、従って、使用者の汚染又は環境の汚染が起こり得るということである。
【００１２】
多くの微生物学的調製物は、それらの製剤に起因して、活性因子を少量しか含んでいない。例えば、１ｇ当たり生きている菌の分生子を１×１０７又は１×１０８しか含んでいない調製物が存在している。良好な効果を示すのに必要な最少施用量（これは、多くの場合、１ヘクタール当たり１×１０１１又は１×１０１２又はそれ以上の菌分生子である）の場合、調製物中の活性物質の濃度が低いと高コストとなる（製造、貯蔵、輸送及び使用に関するコスト）。
【００１３】
生きている微生物は、使用される慣習的な溶媒の中では安定ではないので、とりわけ貯蔵寿命に関して、化学的に合成された活性物質とは異なっている。それらは、望ましくない状況に晒された場合、発芽能力を失い、そして、死ぬ。このことは、長期間貯蔵された場合や、比較的高温下でインキュベートされている間や、化学物質と接触した場合などに起こる。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１４】
【非特許文献１】著者不明（２００５）：Ｖｏｍ  Ｗｉｒｋｓｔｏｆｆ  ｚｕｍ  Ｐｒｏｄｕｋｔ−ｄｉｅ  Ｆｏｒｍｕｌｉｅｒｕｎｇ  ｍａｃｈｔ’ｓ  ［Ｆｒｏｍ  ａｃｔｉｖｅ  ｓｕｂｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  ｐｒｏｄｕｃｔ−ｔｈｅ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ  ｍａｋｅｓ  ｉｔ  ｐｏｓｓｉｂｌｅ］．ＫＵＲＩＥＲ，Ｄａｓ  Ｂａｙｅｒ  ＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅ  Ｍａｇａｚｉｎ  ｆｏｒ  ｍｏｄｅｒｎｅ  Ｌａｎｄｗｉｒｔｓｃｈａｆｔ［ＫＵＲＩＥＲ，Ｔｈｅ  Ｂａｙｅｒ  ＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅ  Ｍａｇａｚｉｎｅ  ｆｏｒ  Ｍｏｄｅｒｎ  Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ］５（１）：６−９
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
従って、本発明の目的は、活性微生物又はその器官（例えば、菌の胞子、菌の分生子、厚膜胞子、菌核、菌の菌糸の断片、細菌細胞又はウイルス）を含んでいる液体調製物を開発することである。それは、技術的な労力をほとんど伴うことなく、且つ、比較的高温においてその活力及び病原力を維持しながら、長期間（少なくとも、１２ヶ月）にわたって貯蔵可能であるべきである。さらに、それは、水中で容易に懸濁可能であるべきであり、また、植物の表面上に、標的生物の表面上に、又は、土壌中に、容易に分配可能であるべきである。当該液体調製物は、さらにまた、高度に濃厚であるべきである。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明は、請求項１、請求項１１及び請求項１５に照らして理解される。本発明の有利なさらなるデザイン、態様及び詳細は、従属請求項、本明細書及び実施例によって明らかになる。
【００１７】
本発明の出発点は、生きている微生物又はそれらの器官をポリエーテル変性トリシロキサンの中に混入させることによって上記のような液体調製物が得られるという驚くべき発見である。さらに、驚くべきことに、ポリエーテル変性トリシロキサンの中に混入された（即ち、懸濁された）生きている微生物がそれらの活力を維持するということも見いだされた。さらに、極めて驚くべきことに、そのような懸濁された生きている微生物が、１２ヶ月間にわたって貯蔵されている間、それらの活力を維持するということも見いだされた。結果として、菌の胞子が、１００％強度ポリエーテル変性トリシロキサンの中で絶滅することなく懸濁され得るという事実も、とりわけ驚くべきことであった。ポリエーテル変性トリシロキサンの中に懸濁されることで胞子の貯蔵寿命が実際に改善されるという事実は、さらに一層驚くべきことであった。
【００１８】
ポリエーテル変性トリシロキサン中の微生物又はそれらの器官の懸濁液は、分散製剤（ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ）（ＤＣ）をもたらす。これに関連して、本発明による液体調製物は、生物学的に活性な微生物又は微生物の器官（例えば、菌の胞子、菌の分生子、厚膜胞子、菌核、菌の菌糸の断片、細菌細胞又はウイルス）及びポリエーテル変性トリシロキサンで構成される懸濁液であることを特徴とする。
【００１９】
本発明は、生物学的な植物保護剤の貯蔵寿命が従来技術の製品と比較して決定的に改善されるので、有利である。本発明は、さらにまた、撥水性の微生物又はその一部分が水中に懸濁される場合と比較して純粋なポリエーテル変性トリシロキサンの中に実質的により効果的に懸濁されることが可能であり、その結果、水溶液の場合とは対照的に当該微生物のクランピングが起こらないので、有利である。
【００２０】
使用するために当該製品を水中で崩壊／懸濁させる場合、上記特性は保存されて残り、その結果、当該微生物又は微生物の器官は、植物の表面上に又は土壌中に均一に分配され得る。本発明のさらなる有利点は、純粋なポリエーテル変性トリシロキサンの中に懸濁された当該微生物又はその一部分は水と充分に混合させることが可能であり、従って、さまざまな使用濃度を得ることができるということである。
【００２１】
例えば、水性懸濁液中の菌の胞子が  製品「Ｓｉｌｗｅｔ」又は「Ｂｒｅａｋ−Ｔｈｒｕ」などに含まれているポリエーテル変性トリシロキサンの使用と同時に使用されるということは、文献から知られている（Ａｋｂａｒ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００５；Ｇａｔａｒａｙｉｈａ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１０；Ｌｅｇａｓｐｉ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０００；Ｗｅｋｅｓａ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００５）。しかしながら、この場合、該ポリエーテル変性トリシロキサンは、分生子の適用性を改善するために分生子を使用する直前に、水の中に、又は、その分生子の水性懸濁液に、混入されるのみである。該ポリエーテル変性トリシロキサンは、かくして、湿潤剤及び／又は接着剤として作用するのみである。非イオン性界面活性剤を使用することもＤＥ１０２００４０１１００７に記載されているが、それは、油性製剤に関してのみであり、純粋な界面活性剤としてではない。非イオン性界面活性剤の形態にあるポリエーテル変性トリシロキサンは、植物保護剤の中で使用されているが、それは、化学的に合成された活性物質を懸濁させるためである（ＤＥ１００３６００３Ａ１、ＵＳ６１１７８１６Ａ）。しかしながら、微生物又はそれらの器官を純粋なポリエーテル変性トリシロキサンの中で製剤して活力がある状態で長期間にわたって貯蔵可能であるということは、これまで知られていなかった。さらに、純粋なポリエーテル変性トリシロキサンの中の活性剤としての生きている微生物の製剤からなる生物学的植物保護剤も、これまで知られていない。
【００２２】
本発明は、特に、活性微生物又は複数種の活性微生物の混合物又は微生物の器官とポリエーテル変性トリシロキサンで構成される懸濁液を含んでいる生物学的な植物保護のための液体調製物を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
これに関連して、本発明による液体調製物の中の活性微生物又は活性微生物の混合物又は活性微生物の器官は、特定の植物病害の原因となる生物に対して拮抗作用及び／又は二重寄生作用（ｈｙｐｅｒｐａｒａｓｉｔｉｃ  ａｃｔｉｏｎ）を有しているのが好ましい。さらに、本発明による液体調製物の中の活性微生物又は活性微生物の混合物又は活性微生物の器官は、植物において現れる抵抗性誘導作用及び／若しくはストレス耐性誘導作用又は養分利用能増大作用有しているのが好ましい。
【００２４】
本発明によれば、本発明の液体調製物の中の活性を有する好ましい微生物学的物質は、菌、複数の菌又はさまざまな菌種の混合物である。菌の器官が使用される場合、本発明によれば、それらは、好ましくは、胞子、分生子、分芽胞子、厚膜胞子、菌核若しくは菌糸断片であり得るか、又は、それら器官の混合物であり得る。これに関連して、特定の植物病害の原因となる生物に対して拮抗作用を有する下記菌類を使用するのが好ましい：
【００２５】
【表１】
2014516042.tif 000002
土壌中の養分の利用能を改善する及び／又はストレス因子（これは、病害の原因となる有害な生物を包含する）に対する植物の抵抗性を増大させる菌類としては、好ましくは、以下のものを使用する：
ペニシリウム・ビライイ（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｂｉｌａｉｉ）、トリコデルマ属各種（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｓｐｐ．）、及び、菌根菌の群に分類され得る全ての種。
【００２６】
さらにまた、本発明に従って好ましいのは、その中の微生物学的活性物質が細菌又はさまざまな細菌の混合物である液体調製物である。これに関連して、土壌中の養分の利用能を改善する及び／又はストレス因子（これは、病害の原因となる有害な生物を包含する）に対する植物の抵抗性を増大させる細菌を使用するのが特に好ましい。好ましくは、以下の細菌類を使用する：
バシルス属各種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐｐ．）、シュードモナス属各種（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｓｐｐ．）、ストレプトミセス属各種（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｐｐ．）、アゾトバクテル属各種（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐｐ．）、アゾトモナス属各種（Ａｚｏｔｏｍｏｎａｓ  ｓｐｐ．）、アゾスピリルム属各種（Ａｚｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ  ｓｐｐ．）、及び、リゾビウム属各種（Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ  ｓｐｐ．）。
【００２７】
他の細菌類は、生物学的植物保護剤の中の活性剤として論じられているか又は既に使用されている。そのようなものの例としては、以下のものを挙げることができる：バシルス属各種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐｐ．）、セラチア属各種（Ｓｅｒｒａｔｉａ  ｓｐｐ．）、シュードモナス属各種（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｓｐｐ．）、ストレプトミセス属各種（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｐｐ．）、パステウリア属各種（Ｐａｓｔｅｕｒｉａ  ｓｐｐ．）、及び、ブルクホルデリア属各種（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｓｐｐ．）。
【００２８】
さらにまた、本発明に従って好ましいのは、その中の微生物学的活性物質がウイルス又はさまざまなウイルス類の混合物である液体調製物である。
【００２９】
さらにまた、本発明に従って好ましいのは、その中の微生物学的活性物質が上記で記載した菌類、細菌類又はウイルス類の混合物又はいずれの場合にもこれら微生物のうちの２種類の微生物の混合物である液体調製物である。
【００３０】
本発明による液体調製物は、以下のようにして製造される。
【００３１】
生物学的に活性な微生物を、自体公知の方法（例えば、液中発酵又は固体状発酵）に従って、この目的に適した増殖培地で培養する。培養後、該微生物又はその使用するのが好ましい器官を培養基質から分離する。特定の変形態様では、当該微生物で覆われている培養基質（特に、固形培養基質を使用する場合）を、予め乾燥させる。あるいは、該微生物又はその使用するのが好ましい器官を、培養基質から分離した後、例えば凍結乾燥法を用いて、乾燥させることができる。分離し、場合により乾燥させた後、該微生物又はその使用するのが好ましい器官を、ポリエーテル変性トリシロキサンの中に懸濁させる。そのトリシロキサンは、好ましくは、以下のもので改質されている：
【００３２】
【表２】
2014516042.tif 000003
ポリエーテル変性トリシロキサン「Ｂｒｅａｋ−Ｔｈｒｕ」が特に好ましく、化学名「オキシラン，  メチル−，  オキシランを有するポリマー，  モノ（３−（１，３，３，３−テトラメチル−１−（（トリメチルシリル）オキシ）ジシロキサニル）プロピル）エーテル」を有するポリエーテル変性トリシロキサン「Ｓ２４０，  ＣＡＳ  Ｎｏ．１３４１８０−７６−０」が極めて特に好ましい。
【００３３】
微生物又はその使用するのが好ましい器官を分離する前に、培養の後で、場合により、微生物で覆われている培養基質を適切な分散方法を用いて加工するか、又は、乾燥後、適切な粉砕方法を用いて加工する。次いで、微生物又はその使用するのが好ましい器官を、自体公知の方法（例えば、篩い分け法、濾過法、空気分級法、デカンテーション法又は遠心分離法）を用いて分離する。
【００３４】
本発明によれば、該液体調製物は、生物学的植物保護剤、生物学的植物強化剤又は生物学的土壌改良剤として使用し、そして、必用な場合には、水で希釈して、使用目的に応じた使用濃度とする。該調製物は、土壌中に混入する若しくは水と一緒に導入することができるか、植物に直接施用することができるか、又は、種子処理に使用することができる。
【００３５】
例えば、該調製物は、パエシロミセス・リラシヌス（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ  ｌｉｌａｃｉｎｕｓ）の分生子を活性因子として用いて、植物寄生性線虫類を生物学的に防除するために使用することができる。タラロミセス・フラブス（Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ  ｆｌａｖｕｓ）の胞子を用いる場合、該調製物は、経済的に重大なワタのしおれを引き起こす病原生物であるベルチシリウム・ダーリアエ（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｄａｈｌｉａｅ）を防除するために使用することができる。ノムラエア・リレイイ（Ｎｏｍｕｒａｅａ  ｒｉｌｅｙｉ）の胞子を用いる場合、該調製物は、チョウ類の有害なさまざまな種〔例えば、オオタバコガ（Ｈｅｌｉｃｏｖｅｒｐａ  ａｒｍｉｇｅｒａ）及びシロイチモジヨトウ（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｅｘｉｇｕａ）〕の幼虫を防除するために使用することができる。ペニシリウム・ビライイ（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｂｉｌａｉｉ）の分生子を用いる調製物を使用することで、土壌中の無機リンの利用能が増大する。
【００３６】
本発明による液体調製物は、室温において長い貯蔵寿命を有し、水中に完全に溶解するが、その際、当該活性微生物剤は水／ポリエーテル変性トリシロキサン溶液の中に懸濁される。
【００３７】
例えば、当該調製物を室温で１２ヶ月間貯蔵した後、依然として、Ｐ・リラシヌス（Ｐ．ｌｉｌａｃｉｎｕｓ）の分生子の９２．３％の活力を確認することができた。当該調製物の作用は、依然として、土壌中のサツマイモネコブセンチュウ（Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ  ｉｎｃｏｇｎｉｔａ）の個体数を明瞭に低減させるのに充分であった。従って、当該調製物は、商業用途に極めて適している。
【００３８】
該調製物は、空気を通さないように密閉されたボトル、バッグ、キャニスター又はドラムの中に入れて、空気の非存在下で、貯蔵及び輸送される。
【００３９】
該調製物は水溶性が良好であり且つ当該微生物又はその使用するのが好ましい器官の散布液中における懸濁性も良好であるであるので、施用は容易であり、そして、施用は、土壌中おける又は植物の表面おける又は防除対象の有害生物に対する当該活性因子の均一な分配を確実なものとするように、噴霧方法を用いて又は灌漑システムの中に注入することによって、実施することが可能である。
【００４０】
要約すれば、本発明による調製物は、室温における容易な管理の下での貯蔵、問題のない輸送、容易な製造及び使用に関して、優れているということが確認される。
【００４１】
代表的な実施形態を用いて本発明についてさらに詳細に説明するが、それら実施形態は本発明を制限するものではない。
【実施例】
【００４２】
実施例１
無菌状態にある適切な固体基質上で真菌パエシロミセス・リラシヌス（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ  ｌｉｌａｃｉｎｕｓ）を培養した。培養した後、当該真菌の分生子がその上に存在している培養基質を乾燥させた。
【００４３】
次いで、その分生子を、空気分級法と濾過方法を用いて、乾燥させた培養基質から分離した。この時点で、それらは、８．３％の残留水分を含んでいた。８０ｇの乾燥させた分生子粉末（これは、１ｇ当たり２．８×１０１１分生子の濃度を有していた）を１００ｍＬのポリエーテル変性トリシロキサン（市販の調製物「Ｂｒｅａｋ−Ｔｈｒｕ  Ｓ２４０」）に懸濁させた。得られた液体調製物は、１ｍＬ当たり１．４１×１０１１の分生子及び１ｍＬ当たり１．３７×１０１１の生きている分生子を含んでいた。これは、液体調製物中の生きている分生子の濃度９７．２４％に相当する。
【００４４】
その液体調製物を室温（２０〜２２℃）でインキュベートし、パエシロミセス・リラシヌス（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ  ｌｉｌａｃｉｎｕｓ）の分生子の発芽能力を月に１回測定した。発芽能力を調べるために、サンプルを定期的に採取して、１：１００００の比率で水と混合させ、この混合物の中で５時間インキュベートし、その０．１ｍＬを適切な寒天増殖培地の上に広げた。次いで、その寒天プレートを２５℃で２４時間インキュベートし、その後、顕微鏡下で調べた。この調査において、発芽した分生子（これは、発芽管の形成によって明瞭に確認され得る）の数を測定し、発芽していない分生子の数と関連させた。当該計数の結果は、下記表に示されている。
【００４５】
【表３】
2014516042.tif 000004
実施例２
ポット試験を用いて、パエシロミセス・リラシヌス（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ  ｌｉｌａｃｉｎｕｓ）に基づいて製造された液体調製物の土壌中のサツマイモネコブセンチュウ（Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ  ｉｎｃｏｇｎｉｔａ）の個体数に対する作用を調べ、また、トマトの根における当該線虫に起因する病徴に対する作用についても調べた。
【００４６】
１ｍＬ当たり正確に１×１０１１の生きている菌分生子を含んでいる、実施例１におけるのと同様の液体調製物を使用した。ポットは、それぞれ、１０００ｍＬの土壌で満たし、そして、それぞれ、サツマイモネコブセンチュウ（Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ  ｉｎｃｏｇｎｉｔａ）の５０００の卵及び幼虫を接種した。この目的を達成するために、土壌に穴を押し開け、その穴の中に線虫の懸濁液をピペットで入れた。その接種の翌日、液体調製物を施用した。この目的を達成するために、１０ｍＬの液体調製物を１０Ｌの水に混入させた。得られた分生子懸濁液から、１０ｍＬを各ポットに施用した。その後、土壌が飽和するまでポットに給水した。使用した施用量は、１ポット当たり０．０１ｍＬの液体調製物の量、又は、１ポット当たり１×１０９分生子の分生子濃度に相当する。
【００４７】
その処理の７日後、ポットに草丈約１５ｃｍのトマト植物を移植した。処理は、最初に移植の３週間後、次いで、４週間おきに、合計で３回繰り返した。該試験の評価は、移植の１４週間後（最後の施用の３週間後）に実施した。対照として、未処理の変形態様について並行して試験した。両方の変形態様（処理された変形態様及び処理されていない変形態様）について、８反復を用いて評価した。この試験の結果は、表２に示されている。
【００４８】
【表４】
2014516042.tif 000005
実施例３
無菌状態にある適切な固体基質上で真菌ノムラエア・リレイイ（Ｎｏｍｕｒａｅａ  ｒｉｌｅｙｉ）を培養した。培養した後、当該真菌の分生子がその上に存在している培養基質を乾燥させた。
【００４９】
次いで、その分生子を、空気分級法と濾過方法を用いて、乾燥させた培養基質から分離した。この時点で、それらは、９．２％の残留水分を含んでいた。７ｇの乾燥させた分生子粉末（これは、１ｇ当たり８．０３×１０１０分生子の濃度を有していた）を１００ｍＬのプロピレングリコールｎ−ブチルエーテル変性トリシロキサンに懸濁させた。得られた液体調製物は、１ｍＬ当たり５．６２×１０９の分生子及び１ｍＬ当たり５．１９×１０９の生きている分生子を含んでいた。これは、液体調製物中の生きている分生子の濃度９２．３５％に相当する。
【００５０】
その液体調製物を室温（２０〜２２℃）でインキュベートし、ノムラエア・リレイイ（Ｎｏｍｕｒａｅａ  ｒｉｌｅｙｉ）の分生子の発芽能力を月に１回測定した。発芽能力を調べるために、サンプルを定期的に採取して、１：２０００の比率で水と混合させ、この混合物の中で５時間インキュベートし、その０．１ｍＬを適切な寒天増殖培地の上に広げた。次いで、その寒天プレートを２５℃で４０時間インキュベートし、その後、顕微鏡下で調べた。この調査において、発芽した分生子（これは、発芽管の形成によって明瞭に確認され得る）の数を測定し、発芽していない分生子の数と関連させた。当該計数の結果は、表３に示されている。
【００５１】
【表５】
2014516042.tif 000006
実施例４
実験室試験において、相対空気湿度７５％及び温度２６℃＋／−２℃の小さなＰｌｅｘｉｇｌａｓ製容器（底部：１７４ｍｍ２）の中に、特別に構成された食餌を用いてシロイチモジヨトウ（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｅｘｉｇｕａ）の幼虫を維持した。孵化５日後（第２幼生期）、本発明による胞子製品で幼虫を処理した。この目的のために、トリプロピレングリコールメチルエーテル変性トリシロキサンの中に１ｍＬ当たり正確に５×１０９の生きている菌分生子を含んでいる液体調製物を使用した。噴霧懸濁液を調製するために、１０ｍＬ又は２ｍＬの該液体調製物を４Ｌの水と混合させた。得られた胞子懸濁液から、４ｍＬを１００ｃｍ２の面積に噴霧した。これは、いずれの場合にも１ヘクタール当たり４００Ｌの水と混合させた１ヘクタール当たり１０００ｍＬ又は２００ｍＬの液体調製物からなる噴霧液体施用量に相当する。施用時に、その中で当該幼虫をインキュベートした小さな容器を噴霧施用された領域上に置いた。その試験の評価は、処理の１日後、３日後及び７日後に、死んだ幼虫の数を測定して、死虫率の程度を求めることにより実施した。全体として、１容器当たり１０匹の幼虫及び１試験変形態様当たり３つの容器について試験した。
【００５２】
【表６】
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文献
【００５３】
【表７】
2014516042.tif 000008
【手続補正書】
【提出日】平成24年11月5日(2012.11.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生物学的な植物保護のための液体調製物であって、活性微生物又は複数種の活性微生物の混合物又は微生物の器官とポリエーテル変性トリシロキサンからなる懸濁液で構成される、前記液体調製物。
【請求項２】
前記ポリエーテル変性トリシロキサンが「Ｂｒｅａｋ−Ｔｈｒｕ（登録商標）」であることを特徴とする、請求項１に記載の液体調製物。
【請求項３】
前記ポリエーテル変性トリシロキサンが「Ｂｒｅａｋ−Ｔｈｒｕ（登録商標）  Ｓ  ２４０」であることを特徴とする、請求項１又は２に記載の液体調製物。
【請求項４】
前記トリシロキサンが、
【表１】
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で改質されていることを特徴とする、請求項１〜３のいずれかに記載の液体調製物。
【請求項５】
前記活性微生物又は活性微生物の混合物又は活性微生物の器官が、特定の植物病害の原因となる生物に対して拮抗作用及び／又は二重寄生作用を有していることを特徴とする、請求項１〜４のいずれかに記載の液体調製物。
【請求項６】
前記活性微生物又は活性微生物の混合物又は活性微生物の器官が、植物において現れる抵抗性誘導作用及び／若しくはストレス耐性誘導作用又は養分利用能増大作用有していることを特徴とする、請求項１〜５のいずれかに記載の液体調製物。
【請求項７】
前記微生物学的活性物質が、１種類の菌又はさまざまな菌の混合物又は１種類／複数種類の菌の器官であることを特徴とする、請求項１〜６のいずれかに記載の液体調製物。
【請求項８】
菌種アムペロミセス・クイスクアリス（Ａｍｐｅｌｏｍｙｃｅｓ  ｑｕｉｓｑｕａｌｉｓ）、ベアウベリア・バシアナ（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ  ｂａｓｓｉａｎａ）、ベアウベリア・ブロングニアルチイ（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ  ｂｒｏｎｇｎｉａｒｔｉｉ）、クロノスタキス・ロセア（Ｃｌｏｎｏｓｔａｃｈｙｓ  ｒｏｓｅａ）、コニオチリウム・ミニタンス（Ｃｏｎｉｏｔｈｙｒｉｕｍ  ｍｉｎｉｔａｎｓ）、グリオクラジウム・カテヌラツム（Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ  ｃａｔｅｎｕｌａｔｕｍ）、イサリア属種（Ｉｓａｒｉａ  ｓｐｐ．）、ラエチサリア・アルバリス（Ｌａｅｔｉｓａｒｉａ  ａｒｖａｌｉｓ）、レカニシリウム・レカニイ（Ｌｅｃａｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｌｅｃａｎｉｉ）、レカニシリウム・ムスカリウム（Ｌｅｃａｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｍｕｓｃａｒｉｕｍ）、メタリジウム・アニソプリアエ（Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕｍ  ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ）、ノムラエア・リレイイ（Ｎｏｍｕｒａｅａ  ｒｉｌｅｙｉ）、パエシロミセス・リラシヌス（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ  ｌｉｌａｃｉｎｕｓ）、ホマ・マクロストマ（Ｐｈｏｍａ  ｍａｃｒｏｓｔｏｍａ）、ピシウム・オリガンドルム（Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｏｌｉｇａｎｄｒｕｍ）、タラロミセス・フラブス（Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ  ｆｌａｖｕｓ）、テラトスペルマ・オリゴクラズム（Ｔｅｒａｔｏｓｐｅｒｍａ  ｏｌｉｇｏｃｌａｄｕｍ）、トリコデルマ属種（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｓｐｐ．）及びベルチシリウム・ビグタツム（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｂｉｇｕｔｔａｔｕｍ）のうちの１種類の菌又は複数種の菌又は１種類以上の菌の器官を含んでいることを特徴とする、請求項７に記載の液体調製物。
【請求項９】
１種類／複数種類の菌の前記器官が、胞子、分生子、分芽胞子、厚膜胞子、菌核若しくは菌糸断片のいずれかであるか又はそれら器官の混合物であることを特徴とする、請求項７又は８に記載の液体調製物
【請求項１０】
前記微生物学的活性物質が、細菌又はさまざまな細菌の混合物であることを特徴とする、請求項１〜６のいずれかに記載の液体調製物。
【請求項１１】
前記微生物学的活性物質が、ウイルス又はさまざまなウイルスの混合物であることを特徴とする、請求項１〜６のいずれかに記載の液体調製物。
【請求項１２】
前記微生物学的活性物質が、請求項７、８、１０及び１１において挙げられている微生物の混合物であるか又はいずれの場合にも当該微生物のうちの２種類の混合物であることを特徴とする、請求項１〜６のいずれかに記載の液体調製物。
【請求項１３】
液体調製物を製造する方法であって、微生物を培養し、次いで、ポリエーテル変性トリシロキサンの中に懸濁させることを特徴とする、前記方法。
【請求項１４】
前記ポリエーテル変性トリシロキサンが「Ｂｒｅａｋ−Ｔｈｒｕ（登録商標）」であることを特徴とする、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記ポリエーテル変性トリシロキサンが「Ｂｒｅａｋ−Ｔｈｒｕ（登録商標）  Ｓ  ２４０」であることを特徴とする、請求項１３又は１４に記載の方法。
【請求項１６】
菌類物質を粉砕法及び／又は分散法を用いて加工することを特徴とする、請求項１３〜１５のいずれかに記載の方法。
【請求項１７】
前記菌又は菌の特定の器官を、加工後、篩い分け法、濾過法、空気分級法又は遠心分離法を用いて分離することを特徴とする、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
菌種
【表２】
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を使用することを特徴とする、請求項１３〜１７のいずれかに記載の方法。
【請求項１９】
土壌中に混入するすることによる、又は、植物に対して／植物の表面上に施用することによる、又は、種子処理による、請求項１〜１２のいずれかに記載されている液体調製物の使用。
【請求項２０】
前記液体調製物を水で希釈して、使用目的に応じた望ましい使用濃度とすることを特徴とする、請求項１９に記載の使用。
【国際調査報告】
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