(57)【要約】  本発明は、シドフォビルと、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）またはヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）と、任意に、可塑剤とを含有する凍結乾燥組成物に関する。詳しくは、本発明は、シート状多孔質固体マトリックスを形成するかかる組成物に関する。また、本発明は、かかる組成物の製造方法に関する。さらに、本発明は、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）感染症およびＨＰＶ関連悪性腫瘍、特に、ＨＰＶ病変および子宮頸がんの治療に用いるためのかかる組成物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）０．１〜５ｍｇ／ｃｍ２の量のシドフォビルと、
（ｂ）１〜１７ｍｇ／ｃｍ２の量のヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）またはヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）と、任意に、
（ｃ）０〜５ｍｇ／ｃｍ２の量の可塑剤と
を含有してなるシート状凍結乾燥組成物。
【請求項２】
（ａ）０．１〜５ｍｇ／ｃｍ２の量のシドフォビルと、
（ｂ）１〜１７ｍｇ／ｃｍ２の量のヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）と、
（ｃ）０．５〜４ｍｇ／ｃｍ２の量の可塑剤と
を含有してなる、請求項１に記載の凍結乾燥組成物。
【請求項３】
ＨＥＣが、７〜１０．５ｍｇ／ｃｍ2、５〜１０ｍｇ／ｃｍ2、８〜１０ｍｇ／ｃｍ2または１０〜１６ｍｇ／ｃｍ2の量で存在している、請求項１または２に記載の凍結乾燥組成物。
【請求項４】
ＨＥＣが、ＨＥＣ  Ｈ４０００およびＨＥＣ  ２５０ＨＨＸからなる群より選ばれたものであり、好ましくはＨＥＣ  ２５０Ｍ、ＨＥＣ  ２５０ＨＸ、好ましくはＨＥＣ  ２５０ＭまたはＨＸである、請求項１〜３のいずれかに記載の凍結乾燥組成物。
【請求項５】
高粘度組成物として存在している、請求項１〜４のいずれかに記載の凍結乾燥組成物。
【請求項６】
（ａ）０．１〜５ｍｇ／ｃｍ２の量のシドフォビルと、
（ｂ）１〜１７ｍｇ／ｃｍ２の量のヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）と、
（ｃ）０〜５ｍｇ／ｃｍ２の量の可塑剤と
を含有してなる、請求項１に記載の凍結乾燥組成物。
【請求項７】
ＨＰＭＣが、２．５〜８ｍｇ／ｃｍ2、４〜８ｍｇ／ｃｍ2または８〜１５ｍｇ／ｃｍ2の量で存在している、請求項６に記載の凍結乾燥組成物。
【請求項８】
ＨＰＭＣ  Ｅ５、ＨＰＭＣ  Ｅ１５、ＨＰＭＣ  ４０００およびＨＰＭＣ  Ｋ１５からなる群より選ばれたものであり、好ましくはＨＰＭＣ  Ｅ５またはＨＰＭＣ  Ｅ１５である、請求項６または７に記載の凍結乾燥組成物。
【請求項９】
低粘度組成物として存在している、請求項６〜８のいずれかに記載の凍結乾燥組成物。
【請求項１０】
前記可塑剤が、ポリエチレングリコール４００（ＰＥＧ４００）、ポリエチレングリコール４０００（ＰＥＧ４０００）およびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群から選ばれ、好ましくはＰＥＧ４００である、請求項１〜７に記載の凍結乾燥組成物。
【請求項１１】
水が１〜１０重量％の量で存在し、および／またはＮａＯＨが０．１５〜０．２５重量％の量で存在する、請求項１〜８のいずれかに記載の凍結乾燥組成物。
【請求項１２】
前記組成物が、多孔質で、展性のあるマトリックスである、請求項１〜１１のいずれかに記載の凍結乾燥組成物。
【請求項１３】
医薬に用いるため、好ましくは医薬に用いるため、好ましくはヘルペスウイルス、ポックスウイルス、パピローマウイルス、アデノウイルス、天然痘ウイルスまたはヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）などのヒトＤＮＡウイルスによる感染症、あるいは膣、頸部、肛門生殖器部、粘膜、口腔領域上皮もしくは皮膚のウイルス誘発性病変もしくは疣贅、ＨＰＶウイルス感染、より具体的には頸部または頸部粘膜表面へのＨＰＶウイルス感染によって引き起こされる前癌病変および／または新生物もしくは癌を含む群より選ばれたものなどの随伴病状の治療に用いるための、請求項１〜１２のいずれかに記載の凍結乾燥組成物。
【請求項１４】
医薬に用いるため、好ましくはヘルペス、ポックス、パピローマウイルス、アデノウイルス、天然痘ウイルスまたはヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）感染症などのヒトＤＮＡウイルスによる感染症、あるいは膣、頸部、肛門生殖器部、粘膜、口腔領域上皮もしくは皮膚のウイルス誘発性病変もしくは疣贅、ウイルス感染、より具体的には頸部または頸部粘膜表面へのウイルス感染によって引き起こされる前癌病変および／または新生物もしくは癌を含む群より選ばれたものなどの随伴病状の治療に用いるための、請求項１〜１２のいずれかに記載の凍結乾燥組成物の再水和後に得られたゲル様組成物。
【請求項１５】
前記組成物が投与前に再水和されている、ヒトＤＮＡウイルス感染症または随伴病状の治療に用いるための請求項２〜５のいずれかに記載の凍結乾燥組成物。
【請求項１６】
投与前に再水和されないものである、ヒトＤＮＡウイルス感染症または随伴病状の治療に用いるための請求項６〜９のいずれかに記載の凍結乾燥組成物。
【請求項１７】
膣、頸部、肛門生殖器部、粘膜、口腔領域上皮または皮膚への局所薬物送達に用いるための請求項１〜１６のいずれかに記載の凍結乾燥組成物または請求項１４に記載のゲル様組成物。
【請求項１８】
（ａ）水にＨＥＣまたはＨＰＭＣを分散させて、均一化組成物を得る工程；
（ｂ）任意に、工程（ａ）で得られた組成物に可塑剤を分散させて、均一化組成物を得る工程；
（ｃ）工程（ｂ）で得られた組成物中に、あるいは可塑剤を添加しない場合には工程（ａ）で得られた組成物中に、シドフォビルを分散させ、任意にＮａＯＨ  ２Ｍ溶液を添加して、均一化組成物を得る工程；
（ｄ）工程（ｃ）で得られた組成物を凍結乾燥させる工程
を含み、工程（ａ）でＨＥＣが用いられる場合、工程（ｂ）において、可塑剤が添加される必要がある、請求項１〜１２のいずれかに記載の凍結乾燥組成物の製造方法。
【請求項１９】
工程（ｃ）の前記均一化組成物が、１〜１７ｍｇ／ｃｍ2のＨＥＣまたはＨＰＭＣを含有している、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
工程（ｃ）の均一化組成物が、７〜１０．５ｍｇ／ｃｍ2、５〜１０ｍｇ／ｃｍ2、８〜１０ｍｇ／ｃｍ2または１０〜１６ｍｇ／ｃｍ2のＨＥＣと、１．５〜３３ｍｇ／ｃｍ2の可塑剤とを含有するものである、請求項１７〜１８のいずれかに記載の方法。
【請求項２１】
工程（ｃ）の均一化組成物が、２．５〜８ｍｇ／ｃｍ2、４〜８ｍｇ／ｃｍ2または８〜１５ｍｇ／ｃｍ2のＨＰＭＣと、０〜５ｍｇ／ｃｍ2の可塑剤とを含有するものである、請求項１７〜１９のいずれかに記載の方法。
【請求項２２】
工程（ｃ）の均一化組成物が、０．１〜５ｍｇ／ｃｍ2のシドフォビルを含有するものである、請求項１７〜２１のいずれかに記載の方法。
【請求項２３】
工程（ｃ）の均一化組成物が、６〜８、好ましくは６．５〜７．５のｐＨを有するものである、請求項１７〜２２のいずれかに記載の方法。
【請求項２４】
工程（ｃ）の均一化組成物が、ＮａＯＨを含有するものである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
請求項１〜１２のいずれかに記載の凍結乾燥組成物を再水和させるステップを含む、請求項１４に記載のゲル様組成物の調製方法。
【請求項２６】
１〜１７ｍｇ／ｃｍ2のＨＥＣまたはＨＰＭＣと、０〜５ｍｇ／ｃｍ2の可塑剤と、０．１〜５ｍｇ／ｃｍ2のシドフォビルとを含有し、ＨＥＣが用いられる場合、１．５〜３ｍｇ／ｃｍ2の前記可塑剤が存在している水溶性組成物を凍結乾燥させることによって得られるシート状多孔質展性マトリックス。
【請求項２７】
前記水溶性組成物が、
−  ７〜１０．５ｍｇ／ｃｍ2、５〜１０ｍｇ／ｃｍ2、８〜１０ｍｇ／ｃｍ2または１０〜１６ｍｇ／ｃｍ2のＨＥＣと、
−  １．５〜３ｍｇ／ｃｍ2の可塑剤と、
−  ０．１〜５ｍｇ／ｃｍ2のシドフォビルと
を含有するものである、請求項２５に記載のマトリックス。
【請求項２８】
前記水溶性組成物が、
−  ２．５〜８ｍｇ／ｃｍ2、４〜８ｍｇ／ｃｍ2または８〜１５ｍｇ／ｃｍ2のＨＰＭＣと、
−  ０〜５ｍｇ／ｃｍ2の可塑剤と、
−  ０．１〜５ｍｇ／ｃｍ2のシドフォビルと
を含有するものである、請求項２５に記載のマトリックス。
【請求項２９】
請求項１〜１２のいずれかに記載のシート状凍結乾燥組成物または請求項２５〜２７に記載のマトリックスを含有してなる薬物送達アプリケータ。
【請求項３０】
膣キャップもしくは頸部カバーペッサリーの形で、（５〜１５）任意に、有効成分が拡散するのを妨げる薬物不透過性バリアを含有するか、または膣挿入具、膣クリーム挿入具もしくはタンポン挿入具の形である、請求項２８に記載の薬物送達アプリケータ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ウイルス感染症の治療に関する。詳しくは、本発明は、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）感染症および関連悪性病変を治療するための製剤に関する。本発明は、具体的には、一般的な薬物送達、局所適用または粘膜送達のための固形剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヘルペス、ポックス、パピローマウイルス、アデノウイルス、天然痘ウイルスなどのＤＮＡウイルスは、ヒトにおいて多くの異なる感染性疾患を引き起こし得る。一例として、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）は、ヒトに感染しうる非エンベロープＤＮＡウイルスのパピローマウイルス科ファミリーのメンバーである。すべてのパピローマウイルスと同様に、ＨＰＶは、厳密に上皮親和性であり、皮膚または粘膜の重層上皮においてのみ増殖性感染を確立する。２００種類近くの既知のＨＰＶの大部分は、ほとんどの人々では症状を引き起こさないが、一部の種類は疣贅を引き起こし得、他のものは種々の癌、特に最も子宮頸癌につながり得る。
【０００３】
典型的には、３０〜４０種類を超えるＨＰＶが性的接触を介して伝染し、肛門生殖器部に感染する。性的に伝染した一部のＨＰＶ型は、生殖器疣贅を引き起こし得る。皮膚疣贅を引き起こすものとは異なり、「高リスク」ＨＰＶ型の持続感染は、前癌病変および浸潤癌に進行し得る。ＨＰＶ感染は、ほぼすべての子宮頸癌症例の原因であるが、これらの型の感染のほとんどは、疾患を引き起こさない。
【０００４】
若い女性におけるほとんどのＨＰＶ感染は一時的なものであり、長期的な深刻性はほとんどない。感染の７０％が１年で消失し、９０％が２年で消失する。しかしながら、感染が持続する場合（感染した女性の５％〜１０％）、浸潤子宮頸癌に進行し得る子宮頸前癌（頸部上の病変）を発症する高リスクがある。このプロセスは、通常１５〜２０年で起こり、前癌症状を検出および治療するための多くの機会があり、治癒率は高いことが多い。
【０００５】
ワクチン接種は、ＨＰＶ感染症を予防するのに有効な方法であるが、治療の選択肢は、限られ、高額であり、多くの場合は、耐容性良好ではない。古典的な治療アプローチは、細胞破壊性で、かつ細胞毒性の物質、外科的方法、レーザーおよび凍結療法を、可能であれば免疫療法と組み合わせたものを含む。近年では、非環式ヌクレオシドホスホネートであるシドフォビルが、ヘルペス、ポックス、パピローマウイルス、アデノウイルス、天然痘ウイルスなどのいくつかのＤＮＡウイルスの様々な臨床徴候の治療において有効であることが証明されており、特に、シドフォビルは、ＨＰＶ誘発性上皮細胞増殖の治療に用いられている。イン・ビトロでは、シドフォビルでのＨＰＶ陽性細胞の治療は、細胞増殖の濃度および時間依存的な阻害をもたらした。アポトーシスの種々のパラメータは、シドフォビルによる治療後の細胞死の機序がアポトーシスに基づくものであることを示している。シドフォビルによる静脈内（全身性）治療は、播種性乳頭腫症を安定化させることが示されている。乳頭腫病変を有する患者におけるシドフォビルの局所腫瘍内注射は、腫瘍を完全に退縮させることが示されている。また、シドフォビルの局所ゲルは、重度の再発性肛門生殖器ＨＰＶ病変および子宮頸部上皮内新生物の治療で成功裏に使用されている。シドフォビルは、アポトーシスを誘導し得ることが証明されているので、乳頭腫瘍の退縮は、少なくとも部分的には、シドフォビルによるアポトーシスの誘導に起因し得る。
【０００６】
上記のように、種々の製剤および投与経路が、シドフォビルを適用するのに現在使用されている。しかしながら、各適用には特定の欠点がある。静脈内注射によるシドフォビル水溶液の全身投与は、おそらくは、全身性副作用につながる。シドフォビルの濃度を増加させて、腎毒性がもたらされ得る標的部位で適切なシドフォビル量を確保する必要がある。一方、標的部位におけるシドフォビルの局所注射は、確実に標的部位を適切に網羅するのに複数回の注射を必要とし得る。注射用のシドフォビル水溶液の代替物として、クリーム、ゲルおよびフィルムが局所適用用に開発されており、これらは標的部位への局所適用を保証し得る。しかしながら、クリーム中のシドフォビルの安定性は低く、その活性は急速に低下する。加えて、フィルムの調製は加熱工程を含み、加熱によってもたらされるシドフォビルの分解リスクを伴い得る。
【０００７】
したがって、本発明の目的は、現在公知の製剤の欠点を克服する新規なシドフォビル製剤を提供することである。
【発明の概要】
【０００８】
広範囲の調査を実施した後、本発明者らは、シドフォビルと、ヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）またはヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）と、任意に、可塑剤とを含有する凍結乾燥組成物を含有する特定の製剤が、既存のシドフォビル製剤の有益かつ有利な代替物となることを見出した。
【０００９】
したがって、一つの側面では、本発明は、
（ａ）０．１〜５．０ｍｇ／ｃｍ２の量のシドフォビルと、
（ｂ）１．０〜１７．０ｍｇ／ｃｍ２の量のヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）またはヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）と、任意に、
（ｃ）０〜５．０ｍｇ／ｃｍ２の量の可塑剤と
を含有するシート状凍結乾燥組成物に関する。
【００１０】
好ましい実施形態では、本発明の凍結乾燥組成物は、
（ａ）０．１〜５ｍｇ／ｃｍ２、好ましくは２．０〜５．０ｍｇ／ｃｍ２の量のシドフォビルと、
（ｂ）１．０〜１７．０ｍｇ／ｃｍ２、好ましくは７．０〜１０．５ｍｇ／ｃｍ２の量のＨＥＣと、
（ｃ）０．５〜４．０ｍｇ／ｃｍ２の量の可塑剤と
を含有する。
好ましくは、ＨＥＣは、ＨＥＣ  Ｈ４０００、ＨＥＣ  ２５０Ｍ、ＨＥＣ  ２５０ＨＸおよびＨＥＣ  ２５０ＨＨＸからなる群より選ばれ、最も好ましくはＨＥＣ  ２５０ＭまたはＨＥＣ  ２５０ＨＸである。
【００１１】
他の好ましい実施形態では、本発明の凍結乾燥組成物は、
（ａ）０．１〜５ｍｇ／ｃｍ２の量のシドフォビルと、
（ｂ）１．０〜１７．０ｍｇ／ｃｍ２の量のＨＰＭＣと、
（ｃ）０．０〜５．０ｍｇ／ｃｍ２の量の可塑剤と
を含有する。前記ＨＰＭＣは、好ましくはＨＰＭＣ  Ｅ５、ＨＰＭＣ  Ｅ１５、ＨＰＭＣ  ４０００およびＨＰＭＣ  Ｋ１５からなる群より選ばれ、最も好ましくはＨＰＭＣ  Ｅ５またはＨＰＭＣ  Ｅ１５である。
【００１２】
本発明者らは、驚くべきことに、かかる製剤が凍結乾燥後に、乾燥し、固体であり、操作容易でかつ展性のある多孔質乾燥固体マトリックス自体がスポンジ様構造として存在するマトリックスを形成することを見出した。
【００１３】
既知のクリームまたはゲルとは対照的に、本発明の組成物は、優れたシドフォビル安定性を示す。したがって、有利なことに、本発明の組成物は、冷蔵保存する必要があるゲルおよびクリームとは対照的に周囲（室）温度で保存することができる。
【００１４】
また、フィルムの調製とは対照的に、本発明の組成物の調製では加熱工程がないことにより、加熱によってもたらされるシドフォビルの分解リスクが除かれる。
【００１５】
本発明の凍結乾燥組成物への少量の水の添加は、撹拌を必要とせずに、粘膜付着性ゲルへのスポンジ様構造の迅速な変換が可能になる。ポリマーの種類および濃度を変化させることによって、再水和速度と再水和に必要な水の量とを容易に調節することができることが見出された。特に、ポリマーの濃度を増加させると、再水和速度が減少することが見出された。徐々に再水和する必要があるかどうかに応じて（例えば、徐放用途の場合）、より高濃度のポリマーを本発明の組成物に用いることができる。本発明者らは、ＨＰＭＣ系スポンジが再水和のために、ＨＥＣ系スポンジよりも少ない量の水を必要とすることも見出したが、これは、投与様式に影響を及ぼし得る。ＨＰＭＣ系スポンジは、直接的に、すなわち、適用前に再水和せずに投与してもよい。イン・サイチュでは、再水和は、最少量の膣液の助けを借りて子宮で起こり得る。これは、ＨＰＭＣ  Ｅ５、ＨＰＭＣ  Ｅ１５、ＨＰＭＣ  ４０００およびＨＰＭＣ  Ｋ１５に特に当てはまり、ＨＰＭＣ  Ｅ５およびＨＰＭＣ  Ｅ１５に特に最も当てはまる。
【００１６】
一方、ＨＥＣ系スポンジを投与前に再水和させ、ゲル様組成物を得てもよく、続いて、得られたゲル様組成物を被験体の膣または頸部に適用することができる。本発明のＨＥＣ系組成物の再水和は、ＨＰＭＣ系組成物の場合よりも多くの量の水を用いて行なわれうる。本発明の組成物の再水和後に得られるゲルの粘度は、（可塑剤の種類または濃度によってではなく）ポリマーの種類および濃度によって決定することがさらに見出された。これにより、必要に応じて、ポリマーの種類および濃度を変化させることによって、粘度を容易に調節することが可能になる。特に、本発明者らは、同じ条件および成分量を用いると、ＨＥＣ系スポンジは、再水和後にＨＰＭＣ系スポンジよりも粘性になり、それら自体がゲルとなることを見出した。これは、ＨＥＣ  Ｈ４０００、ＨＥＣ  ２５０Ｍ、ＨＥＣ  ２５０ＨＸおよびＨＥＣ  ２５０ＨＨＸに特に当てはまり、ＨＥＣ  ２５０ＭおよびＨＥＣ  ２５０ＨＸに特に最も当てはまる。
【００１７】
粘度の違いは、本発明の組成物を被験体に適用する方法を決定する際に重要である。粘性が少ないＨＰＭＣ系組成物の利点は、ゲル様構造をイン・サイチュで形成するのに必要な水が少ないことである。したがって、再水和を誘導するために水を添加する必要なく、それらを被験体に容易に内用することができる。イン・サイチュでは、前記再水和は、体液を用いて被験体の体腔で起こるであろう。ＨＥＣ系組成物はより粘性であり、例えば、肛門生殖器部により容易に局所適用することができるゲルを形成するのに有利である。
【００１８】
したがって、本発明は、本発明の凍結乾燥組成物、特に本発明のＨＥＣ系凍結乾燥組成物の再水和後に得られたゲル様組成物をも提供する。
【００１９】
一実施形態では、本発明の凍結乾燥組成物中の可塑剤は、存在する場合には、ポリエチレングリコール４００または４０００（ＰＥＧ４００または４０００）およびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群より選ばれる。好ましい実施形態では、本発明の組成物中の可塑剤は、存在する場合には、ＰＥＧ、より好ましくはＰＥＧ４００である。
【００２０】
別の実施形態では、本発明の凍結乾燥組成物は、１〜１０重量％、好ましくは１〜８重量％の量の水をさらに含有する。
【００２１】
一実施形態では、本発明の凍結乾燥組成物は、ＮａＯＨをさらに含有する。シドフォビルの可溶化を促進するために、ＮａＯＨは、一般に、凍結乾燥前の組成物に添加される。さらなる実施形態では、マトリックスの凍結乾燥前および再水和後において、本発明の組成物は、６〜８、好ましくは６．５〜７．５のｐＨを有する。
【００２２】
好ましくは、本発明の組成物中のＨＰＭＣは、ＨＰＭＣ  Ｅ５、ＨＰＭＣ  Ｅ１５、ＨＰＭＣ  ４０００およびＨＰＭＣ  Ｋ１５からなる群より選ばれ；本発明の組成物中のＨＥＣは、ＨＥＣ  Ｈ４０００、ＨＥＣ  ２５０Ｍ、ＨＥＣ  ２５０ＨＸおよびＨＥＣ  ２５０ＨＨＸからなる群より選ばれる。
【００２３】
本発明者らは、展性のあるスポンジを形成する、ＨＰＭＣ、ＮａＣＭＣまたはＨＥＣなどの種々のセルロース誘導体を含有する凍結乾燥プラセボ組成物とは対照的に、ＨＰＭＣ系およびＨＥＣ系組成物のみが、シドフォビルを添加する場合に、展性のあるスポンジを凍結乾燥後に形成しうることを示した。
【００２４】
予想外にも、シドフォビルの存在下でのＮａＣＭＣ、カルボマー９７４ＰまたはＨＰＣなどの他のポリマーに基づく他の試験組成物は、展性のあるスポンジを形成しないか、または他の望ましくない特徴を示し、例えば非常に硬くおよび／または脆く、過度に粘着性であるかまたは全く接着性ではなく、構造的な欠陥を示すかまたは再水和の遅延もしくは困難性を示す。本発明者らは、シドフォビルの添加は、凍結乾燥スポンジの構造的および機能的な特徴が変化することを示した。さらに、本発明者らは、シドフォビルの本発明の組成物への添加が、プラセボスポンジと比較してスポンジの孔構造を変化させることを示した。特に、シドフォビルは、特にＨＰＭＣ系組成物の場合に孔構造を弱体化させるようであることが見出された。
【００２５】
一つの側面では、本発明は、特に、ヘルペス、ポックス、パピローマウイルス、アデノウイルス、天然痘ウイルスなどのヒトＤＮＡウイルス、好ましくはＨＰＶ、ＣＭＶ、ＢＫウイルス、天然痘、ＨＳＶまたはＶＺＶによる感染に関連するすべての病状、または随伴病状、例えば膣、頸部、肛門生殖器部、粘膜、口腔領域上皮または皮膚のウイルス誘発性病変または疣贅、ウイルス感染、より具体的には頸部または頸部粘膜表面へのウイルス感染によって引き起こされる前癌病変および／または新生物もしくは癌を含む群より選ばれるものの治療のために局所薬物送達において用いるための、本明細書に記載の凍結乾燥組成物に関する。特に、ＨＰＶ感染および病状が想定される。「ＨＰＶまたはＤＮＡウイルス感染に関連する病状」という用語は、限定されないが、頸部、子宮、肛門生殖器部または皮膚のＨＰＶまたはＤＮＡウイルス誘発性病変または疣贅、より具体的には頸部または頸部粘膜表面へのＨＰＶまたはＤＮＡウイルス感染によって引き起こされる前癌病変および／または新生物もしくは癌を包含する。別の側面では、本発明は、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）感染症の治療に用いるための、本明細書に記載の凍結乾燥組成物に関する。さらに別の側面では、本発明は、子宮頸癌の治療に用いるための、本明細書に記載の凍結乾燥組成物に関する。また、本発明は、本発明の凍結乾燥組成物を用いて、ＨＰＶまたはＤＮＡウイルス感染症の治療方法を提供する。前記組成物の投与は、凍結乾燥組成物を例えば膣挿入具上に載せて、または膣キャップもしくは子宮キャップに固定して頸部に挿入することによって直接的に行なうことができる。代替的に、本発明の組成物をその投与前に再水和し、続いて頸部でゲル様組成物として適用することができる。本明細書において定義されるＨＰＶまたはＤＮＡウイルス感染に関連する病状、特にＨＰＶもしくはＤＮＡウイルス感染症、またはＨＰＶもしくはＤＮＡウイルス誘発性病変、前癌病変もしくは癌、特に子宮頸癌を治療、軽減または排除するために、治療を何回も反復することができる。
【００２６】
さらなる側面では、本発明は、
（ａ）水中にポリマーを分散させて、均一化（ｈｏｍｏｇｅｎｉｚｅｄ）組成物を得る工程；
（ｂ）任意に、工程（ａ）で得られた組成物中に可塑剤を分散させて、均一化組成物を得る工程；
（ｃ）工程（ｂ）で得られた組成物中に、あるいは可塑剤を添加しない場合には工程（ａ）で得られた組成物中に、シドフォビルを分散させ、任意にＮａＯＨ  ２Ｍ溶液を添加して、均一化組成物を得る工程；
（ｄ）工程（ｃ）で得られた組成物を凍結乾燥させる工程
を含む、本明細書に記載の凍結乾燥組成物の製造方法に関する。
本発明の方法の好ましい実施形態では、
（ａ）０．１〜５．０ｍｇ／ｃｍ２の量のシドフォビルを添加し、
（ｂ）１．０〜１７．０ｍｇ／ｃｍ２の量のヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）またはヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）を添加し、任意に、
（ｃ）０〜５．０ｍｇ／ｃｍ２の量の可塑剤を添加し、ここで、ＨＥＣを用いる場合には０．５〜４．０ｍｇ／ｃｍ２の前記可塑剤が存在する。
【００２７】
本発明の方法の特に好ましい実施形態では、
（ａ）０．１〜５ｍｇ／ｃｍ２、好ましくは２．０〜５．０ｍｇ／ｃｍ２の量のシドフォビルを添加し、
（ｂ）１．０〜１７．０ｍｇ／ｃｍ２、好ましくは７．０〜１０．５ｍｇ／ｃｍ２の量のＨＥＣを添加し、
（ｃ）０．５〜４．０ｍｇ／ｃｍ２の量の可塑剤を添加する。
【００２８】
好ましくは、本発明の組成物中のＨＥＣは、ＨＥＣ  Ｈ４０００、ＨＥＣ  ２５０Ｍ、ＨＥＣ  ２５０ＨＸおよびＨＥＣ  ２５０ＨＨＸ、最も好ましくはＨＥＣ  ２５０Ｍおよび２５０ＨＸからなる群より選ばれる。
【００２９】
さらなる実施形態では、工程（ｃ）で得られた均一化組成物は、凍結乾燥前に、０．１０〜０．３０重量％、好ましくは約０．２０または０．２１％の量のＮａＯＨを含有する。
【００３０】
他の好ましい実施形態では、本発明の凍結乾燥組成物は、
（ａ）０．１〜５ｍｇ／ｃｍ２の量のシドフォビルを添加すること；
（ｂ）１．０〜１７．０ｍｇ／ｃｍ２の量のＨＰＭＣを添加すること；および
（ｃ）０．０〜５．０ｍｇ／ｃｍ２の量の可塑剤を添加すること
を含有する。
【００３１】
好ましくは、前記ＨＰＭＣは、ＨＰＭＣ  Ｅ５、ＨＰＭＣ  Ｅ１５、ＨＰＭＣ  ４０００およびＨＰＭＣ  Ｋ１５、最も好ましくはＨＰＭＣ  Ｅ５およびＥ１５からなる群より選ばれる。
【００３２】
さらなる実施形態では、工程（ｃ）で得られた均一化組成物は、凍結乾燥前に、０．１０〜０．３０重量％、好ましくは約０．２０または０．２１％の量のＮａＯＨを含有する。
【００３３】
好ましくは、前記可塑剤は、ポリエチレングリコール４００または４０００（ＰＥＧ４００または４０００）およびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群より選ばれる。好ましい実施形態では、本発明の組成物中の可塑剤は、存在する場合には、ＰＥＧ、より好ましくはＰＥＧ４００である。
【００３４】
さらなる実施形態では、工程（ｃ）で得られた均一化組成物は、０．３５〜３．５重量％のＨＥＣまたはＨＰＭＣを含有する。特定の実施形態では、工程（ｃ）で得られた均一化組成物は、１〜２．５重量％のＨＥＣと、０．２〜１重量％の可塑剤とを含有する。他の特定の実施形態では、工程（ｃ）で得られた均一化組成物は、０．３５〜３．５重量％のＨＰＭＣと、０〜１重量％の可塑剤とを含有する。さらに別の実施形態では、工程（ｃ）の均一化組成物は、０．１０〜１．５重量％のシドフォビルを含有する。一実施形態では、工程（ｃ）で得られた均一化組成物は、６〜８、好ましくは６．５〜７．５のｐＨを有する。
【００３５】
さらなる実施形態では、工程（ｃ）で得られた均一化組成物は、凍結乾燥前に、０．１０〜０．３０重量％、好ましくは約０．２０または０．２１％の量のＮａＯＨを含有する。
【００３６】
一実施形態では、本発明の組成物を製造するための凍結乾燥は、晶析装置、またはモールド、または本発明のシート様凍結乾燥組成物を作製するのに使用され得る任意の他の公知のデバイスもしくは反応器で実施することができる。
【００３７】
本発明の別の側面は、０．３５〜３．５重量％のＨＥＣまたはＨＰＭＣと、０〜１重量％の可塑剤と、０．１０〜１．５重量％のシドフォビルとを含有する水性組成物の凍結乾燥によって得られた展性のあるシート状多孔質固体マトリックスに関する。
【００３８】
特定の実施形態では、このマトリックスは、１〜２．５０重量％のＨＥＣと、０．２〜１重量％の可塑剤と、０．１０〜１．５重量％のシドフォビルとを含有する。
【００３９】
他の特定の実施形態では、このマトリックスは、０．３５〜３．５０重量％のＨＰＭＣと、０〜１重量％の可塑剤と、０．１０〜１．５重量％のシドフォビルとを含有する。
【００４０】
一実施形態では、このマトリックスは、１〜１７ｍｇ／ｃｍ２のＨＥＣまたはＨＰＭＣと、０〜５ｍｇ／ｃｍ２の可塑剤と、０．１〜５ｍｇ／ｃｍ２のシドフォビルとを含有する。
【００４１】
特定の実施形態では、このマトリックスは、７〜１０．５ｍｇ／ｃｍ２のＨＥＣと、１．５〜５ｍｇ／ｃｍ２の可塑剤と、０．１〜５ｍｇ／ｃｍ２のシドフォビルと、好ましくはポリマーとしてのＨＥＣ  ２５０ＭまたはＨＥＣ  ２５０ＨＸとを含有する。
【００４２】
他の特定の実施形態では、このマトリックスは、１〜１７ｍｇ／ｃｍ２のＨＰＭＣと、０〜５ｍｇ／ｃｍ２の可塑剤と、０．１〜５ｍｇ／ｃｍ２のシドフォビルと、好ましくはポリマーとしてのＨＰＭＣ  Ｅ５またはＥ１５とを含有する。
【００４３】
本発明のさらなる態様は、薬物不透過性バリア上に配置された本明細書に記載の本発明のシート状凍結乾燥組成物または展性のあるマトリックスを含有する薬物送達アプリケータに関する。
【００４４】
一実施形態では、薬物不透過性バリアは、頸部の外周全体に適合するように構成されているキャップである。
【図面の簡単な説明】
【００４５】
【図１Ａ】保持時間（ｍｉｎ）に応じた吸光度（ＡＵ）を示すシドフォビルのＨＰＬＣクロマトグラム。（Ａ）キャリブレーションしたシドフォビルのクロマトグラム；（Ｂ）ＨＰＭＣ  Ｅ５を含有する本発明の一実施形態の凍結乾燥組成物に由来するＴ０のシドフォビルのクロマトグラム；（Ｃ、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧ）本発明の一実施形態の凍結乾燥組成物に由来するＴ１、Ｔ３、Ｔ６、Ｔ９およびＴ１２、すなわち４５℃で１カ月間、３カ月間、６カ月間、９カ月間および１２カ月間保存した後のシドフォビルのクロマトグラム。
【図１Ｂ】保持時間（ｍｉｎ）に応じた吸光度（ＡＵ）を示すシドフォビルのＨＰＬＣクロマトグラム。（Ａ）キャリブレーションしたシドフォビルのクロマトグラム；（Ｂ）ＨＰＭＣ  Ｅ５を含有する本発明の一実施形態の凍結乾燥組成物に由来するＴ０のシドフォビルのクロマトグラム；（Ｃ、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧ）本発明の一実施形態の凍結乾燥組成物に由来するＴ１、Ｔ３、Ｔ６、Ｔ９およびＴ１２、すなわち４５℃で１カ月間、３カ月間、６カ月間、９カ月間および１２カ月間保存した後のシドフォビルのクロマトグラム。
【図１Ｃ】保持時間（ｍｉｎ）に応じた吸光度（ＡＵ）を示すシドフォビルのＨＰＬＣクロマトグラム。（Ａ）キャリブレーションしたシドフォビルのクロマトグラム；（Ｂ）ＨＰＭＣ  Ｅ５を含有する本発明の一実施形態の凍結乾燥組成物に由来するＴ０のシドフォビルのクロマトグラム；（Ｃ、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧ）本発明の一実施形態の凍結乾燥組成物に由来するＴ１、Ｔ３、Ｔ６、Ｔ９およびＴ１２、すなわち４５℃で１カ月間、３カ月間、６カ月間、９カ月間および１２カ月間保存した後のシドフォビルのクロマトグラム。
【図１Ｄ】保持時間（ｍｉｎ）に応じた吸光度（ＡＵ）を示すシドフォビルのＨＰＬＣクロマトグラム。（Ａ）キャリブレーションしたシドフォビルのクロマトグラム；（Ｂ）ＨＰＭＣ  Ｅ５を含有する本発明の一実施形態の凍結乾燥組成物に由来するＴ０のシドフォビルのクロマトグラム；（Ｃ、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧ）本発明の一実施形態の凍結乾燥組成物に由来するＴ１、Ｔ３、Ｔ６、Ｔ９およびＴ１２、すなわち４５℃で１カ月間、３カ月間、６カ月間、９カ月間および１２カ月間保存した後のシドフォビルのクロマトグラム。
【図１Ｅ】保持時間（ｍｉｎ）に応じた吸光度（ＡＵ）を示すシドフォビルのＨＰＬＣクロマトグラム。（Ａ）キャリブレーションしたシドフォビルのクロマトグラム；（Ｂ）ＨＰＭＣ  Ｅ５を含有する本発明の一実施形態の凍結乾燥組成物に由来するＴ０のシドフォビルのクロマトグラム；（Ｃ、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧ）本発明の一実施形態の凍結乾燥組成物に由来するＴ１、Ｔ３、Ｔ６、Ｔ９およびＴ１２、すなわち４５℃で１カ月間、３カ月間、６カ月間、９カ月間および１２カ月間保存した後のシドフォビルのクロマトグラム。
【図１Ｆ】保持時間（ｍｉｎ）に応じた吸光度（ＡＵ）を示すシドフォビルのＨＰＬＣクロマトグラム。（Ａ）キャリブレーションしたシドフォビルのクロマトグラム；（Ｂ）ＨＰＭＣ  Ｅ５を含有する本発明の一実施形態の凍結乾燥組成物に由来するＴ０のシドフォビルのクロマトグラム；（Ｃ、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧ）本発明の一実施形態の凍結乾燥組成物に由来するＴ１、Ｔ３、Ｔ６、Ｔ９およびＴ１２、すなわち４５℃で１カ月間、３カ月間、６カ月間、９カ月間および１２カ月間保存した後のシドフォビルのクロマトグラム。
【図１Ｇ】保持時間（ｍｉｎ）に応じた吸光度（ＡＵ）を示すシドフォビルのＨＰＬＣクロマトグラム。（Ａ）キャリブレーションしたシドフォビルのクロマトグラム；（Ｂ）ＨＰＭＣ  Ｅ５を含有する本発明の一実施形態の凍結乾燥組成物に由来するＴ０のシドフォビルのクロマトグラム；（Ｃ、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧ）本発明の一実施形態の凍結乾燥組成物に由来するＴ１、Ｔ３、Ｔ６、Ｔ９およびＴ１２、すなわち４５℃で１カ月間、３カ月間、６カ月間、９カ月間および１２カ月間保存した後のシドフォビルのクロマトグラム。
【図２Ａ】保持時間（ｍｉｎ）に応じた吸光度（ＡＵ）を示すシドフォビルのＨＰＬＣクロマトグラム。（Ａ）ＨＥＣ  ２５０ＨＸを含有する本発明の一実施形態の凍結乾燥組成物由来のＴ０のシドフォビルのクロマトグラム；（ＢおよびＣ）本発明の一実施形態の凍結乾燥組成物（Ｔ１およびＴ３、すなわち４５℃で１カ月間および３カ月間保存した後）からのシドフォビルのクロマトグラム。
【図２Ｂ】保持時間（ｍｉｎ）に応じた吸光度（ＡＵ）を示すシドフォビルのＨＰＬＣクロマトグラム。（Ａ）ＨＥＣ  ２５０ＨＸを含有する本発明の一実施形態の凍結乾燥組成物由来のＴ０のシドフォビルのクロマトグラム；（ＢおよびＣ）本発明の一実施形態の凍結乾燥組成物（Ｔ１およびＴ３、すなわち４５℃で１カ月間および３カ月間保存した後）からのシドフォビルのクロマトグラム。
【図２Ｃ】保持時間（ｍｉｎ）に応じた吸光度（ＡＵ）を示すシドフォビルのＨＰＬＣクロマトグラム。（Ａ）ＨＥＣ  ２５０ＨＸを含有する本発明の一実施形態の凍結乾燥組成物由来のＴ０のシドフォビルのクロマトグラム；（ＢおよびＣ）本発明の一実施形態の凍結乾燥組成物（Ｔ１およびＴ３、すなわち４５℃で１カ月間および３カ月間保存した後）からのシドフォビルのクロマトグラム。
【図３Ａ】時間（ｈｏｕｒｓ）に応じた拡散シドフォビルのパーセンテージ（％）を示すフランツ拡散セルを用いて測定した場合のシドフォビルの拡散動態。（Ａ）カルボマーゲル（従来技術）と比較した本発明の一実施形態の種々の凍結乾燥組成物（ＨＰＭＣ  Ｅ５系）中のシドフォビルの拡散動態；（Ｂ）カルボマーゲル（従来技術）と比較した種々のＮａＣＭＣ系組成物中のシドフォビルの拡散動態；（Ｃ）カルボマーゲル（従来技術）と比較した種々のＨＥＣ  ２５０Ｍ系および２５０ＨＸ系組成物中のシドフォビルの拡散動態。
【図３Ｂ】時間（ｈｏｕｒｓ）に応じた拡散シドフォビルのパーセンテージ（％）を示すフランツ拡散セルを用いて測定した場合のシドフォビルの拡散動態。（Ａ）カルボマーゲル（従来技術）と比較した本発明の一実施形態の種々の凍結乾燥組成物（ＨＰＭＣ  Ｅ５系）中のシドフォビルの拡散動態；（Ｂ）カルボマーゲル（従来技術）と比較した種々のＮａＣＭＣ系組成物中のシドフォビルの拡散動態；（Ｃ）カルボマーゲル（従来技術）と比較した種々のＨＥＣ  ２５０Ｍ系および２５０ＨＸ系組成物中のシドフォビルの拡散動態。
【図３Ｃ】時間（ｈｏｕｒｓ）に応じた拡散シドフォビルのパーセンテージ（％）を示すフランツ拡散セルを用いて測定した場合のシドフォビルの拡散動態。（Ａ）カルボマーゲル（従来技術）と比較した本発明の一実施形態の種々の凍結乾燥組成物（ＨＰＭＣ  Ｅ５系）中のシドフォビルの拡散動態；（Ｂ）カルボマーゲル（従来技術）と比較した種々のＮａＣＭＣ系組成物中のシドフォビルの拡散動態；（Ｃ）カルボマーゲル（従来技術）と比較した種々のＨＥＣ  ２５０Ｍ系および２５０ＨＸ系組成物中のシドフォビルの拡散動態。
【図４】ＨＰＭＣ  Ｅ５を含有する本発明の一実施形態の組成物の外層の倍率２５ｘでの走査電子顕微鏡観察（ＳＥＭ）。（左の画像）可塑剤としてＰＥＧ４００を含有する本発明の一実施形態の組成物のＳＥＭ；（右の画像）可塑剤としてＰＧを含有する本発明の一実施形態の組成物のＳＥＭ。
【図５】ＨＰＭＣ  Ｅ５を含有する組成物の倍率１００ｘでの走査電子顕微鏡観察（ＳＥＭ）。（Ａ）可塑剤としてＰＥＧ４００（左の画像）またはＰＧ（右の画像）を含有するプラセボ組成物のＳＥＭ；（Ｂ）可塑剤としてＰＥＧ４００（左の画像）またはＰＧ（右の画像）を含有する本発明の一実施形態の組成物のＳＥＭ。
【図６】ＨＰＭＣ  Ｅ５を含有する組成物の倍率４０００ｘでの走査電子顕微鏡観察（ＳＥＭ）。（Ａ）可塑剤としてＰＥＧ４００をそれぞれ含有するプラセボ組成物（左の画像）または本発明の一実施形態の組成物（右の画像）のＳＥＭ；（Ｂ）可塑剤としてＰＧをそれぞれ含有するプラセボ組成物（左の画像）または本発明の一実施形態の組成物（右の画像）のＳＥＭ。
【図７】ポリマーとしてＨＰＭＣ  Ｅ５と、可塑剤としてＰＥＧ４００とを含有するプラセボ組成物の走査電子顕微鏡観察（ＳＥＭ）。（Ａ）７．９５ｍｇ／ｃｍ２（左の画像）または１５．９１ｍｇ／ｃｍ２（右の画像）のポリマーを含有する組成物の外層の（倍率２５ｘでのＳＥＭ。（Ｂ）７．９５ｍｇ／ｃｍ２（左の画像）または１５．９１ｍｇ／ｃｍ２（右の画像）のポリマーを含有する組成物の倍率１００ｘでのＳＥＭ。
【図８】ＨＰＭＣ  Ｅ５を含有するプラセボ組成物の走査電子顕微鏡観察（ＳＥＭ）。（Ａ）可塑剤として０ｍｇ／ｃｍ２（左の画像）または１．９８ｍｇ／ｃｍ２（中央の画像）または３．９７ｍｇ／ｃｍ２（右の画像）のＰＥＧ４００を含有する組成物の外層の倍率２５ｘでのＳＥＭ。（Ｂ）可塑剤として０ｍｇ／ｃｍ２（左の画像）または１．９８ｍｇ／ｃｍ２（中央の画像）または３．９７ｍｇ／ｃｍ２（右の画像）のＰＥＧ４００を含有する組成物の倍率１００ｘでのＳＥＭ。
【図９】ポリマーとしてＨＰＭＣ  Ｅ５（左の画像）またはＨＰＭＣ  ４０００（中央の画像）またはＨＰＭＣ  Ｋ１５（右の画像）を含有するプラセボ組成物（Ａ）または本発明の一実施形態の組成物（Ｂ）の倍率１００ｘでの走査電子顕微鏡観察（ＳＥＭ）。
【図１０】ＨＥＣ  ２５０ＨＸを含有する組成物の走査電子顕微鏡観察（ＳＥＭ）。（Ａ）可塑剤として１．９８ｍｇ／ｃｍ２のＰＥＧ４００を含有するプラセボ組成物（左の画像）、または可塑剤として１．９８ｍｇ／ｃｍ２のＰＥＧ４００を含有する本発明の一実施形態の組成物（右の画像）の外層の倍率２５ｘでのＳＥＭ。（Ｂ）可塑剤として１．９８ｍｇ／ｃｍ２のＰＥＧ４００を含有するプラセボ組成物（左の画像）、または可塑剤として１．９８ｍｇ／ｃｍ２のＰＥＧ４００を含有する本発明の一実施形態の組成物（右の画像）の倍率１００ｘでのＳＥＭ。
【図１１】ポリマーとしてＨＥＣ  ２５０ＨＸを含有する組成物の走査電子顕微鏡観察（ＳＥＭ）。可塑剤としてＰＥＧ４００をそれぞれ含有するプラセボ組成物の倍率４０００ｘでのＳＥＭ（左の画像）または本発明の一実施形態の組成物の倍率７５０ｘでのＳＥＭ（中央の画像）または本発明の一実施形態の組成物の倍率４０００ｘでのＳＥＭ（右の画像）。
【図１２Ａ】ＮａＣＭＣを含有する本発明の一実施形態の再水和された凍結乾燥組成物またはＨＰＭＣを含有する本発明の一実施形態の再水和された凍結乾燥組成物の粘度。回転速度（秒−１）に応じて、粘度（Ｐａ．ｓ）を示す。（上のグラフ）全般的な概要；（下のグラフ）上のグラフにおける指示位置の詳細。参照の順序は、上の曲線から開始して図中の曲線の順序に従う。
【図１２Ｂ】ＮａＣＭＣを含有する本発明の一実施形態の再水和された凍結乾燥組成物またはＨＰＭＣを含有する本発明の一実施形態の再水和された凍結乾燥組成物の粘度。回転速度（秒−１）に応じて、粘度（Ｐａ．ｓ）を示す。（上のグラフ）全般的な概要；（下のグラフ）上のグラフにおける指示位置の詳細。参照の順序は、上の曲線から開始して図中の曲線の順序に従う。
【図１３】可塑剤に応じた、ＮａＣＭＣを含有するかまたはＨＰＭＣ  Ｅ５を含有する本発明の一実施形態の再水和された凍結乾燥組成物の粘度。回転速度（秒−１）の関数として粘度（Ｐａ．ｓ）を示す。参照の順序は、上の曲線から開始して図中の曲線の順序に従う。
【図１４Ａ】ＨＥＣ  ２５０Ｍ  ４％を含有するゲル（凍結乾燥なし）、すなわち、平均偏差（ａｄ）３ｇの水で再水和させた後にＨＥＣ  ２５０Ｍ  ４％を含有するスポンジと、シドフォビルを有するカルボマーゲルとの粘度の比較。回転速度（秒−１）の関数として粘度（Ｐａ．ｓ）を示す。（上のグラフ）全般的な概要；（下のグラフ）上のグラフにおける指示位置の詳細。参照の順序は、上の曲線から開始して図中の曲線の順序に従う。
【図１４Ｂ】ＨＥＣ  ２５０Ｍ  ４％を含有するゲル（凍結乾燥なし）、すなわち、平均偏差（ａｄ）３ｇの水で再水和させた後にＨＥＣ  ２５０Ｍ  ４％を含有するスポンジと、シドフォビルを有するカルボマーゲルとの粘度の比較。回転速度（秒−１）の関数として粘度（Ｐａ．ｓ）を示す。（上のグラフ）全般的な概要；（下のグラフ）上のグラフにおける指示位置の詳細。参照の順序は、上の曲線から開始して図中の曲線の順序に従う。
【図１５−１】ＨＥＣ  ２５０ＨＸ  ３％を含有するゲル（凍結乾燥なし）、すなわち、平均偏差３ｇの水で再水和させた後にＨＥＣ  ２５０ＨＸ  ３％を含有するスポンジと、シドフォビルを有するカルボマーゲルとの粘度の比較。回転速度（秒−１）の関数として粘度（Ｐａ．ｓ）を示す。（上のグラフ）全般的な概要；（下のグラフ）上のグラフにおける指示位置の詳細。参照の順序は、上の曲線から開始して図中の曲線の順序に従う。
【図１５−２】ＨＥＣ  ２５０ＨＸ  ３％を含有するゲル（凍結乾燥なし）、すなわち、平均偏差３ｇの水で再水和させた後にＨＥＣ  ２５０ＨＸ  ３％を含有するスポンジと、シドフォビルを有するカルボマーゲルとの粘度の比較。回転速度（秒−１）の関数として粘度（Ｐａ．ｓ）を示す。（上のグラフ）全般的な概要；（下のグラフ）上のグラフにおける指示位置の詳細。参照の順序は、上の曲線から開始して図中の曲線の順序に従う。
【図１６−１】異なる種類のＨＰＭＣまたはＨＥＣを含有する本発明の一実施形態の再水和され凍結乾燥組成物の粘度。組成物を、その粘度に応じて分類する。回転速度（秒−１）の関数として粘度（Ｐａ．ｓ）を示す。（上のグラフ）全般的な概要；（下のグラフ）上のグラフにおける指示位置の詳細。参照の順序は、上の曲線から開始して図中の曲線の順序に従う。
【図１６−２】異なる種類のＨＰＭＣまたはＨＥＣを含有する本発明の一実施形態の再水和され凍結乾燥組成物の粘度。組成物を、その粘度に応じて分類する。回転速度（秒−１）の関数として粘度（Ｐａ．ｓ）を示す。（上のグラフ）全般的な概要；（下のグラフ）上のグラフにおける指示位置の詳細。参照の順序は、上の曲線から開始して図中の曲線の順序に従う。
【図１７】脱水した粉末形態のシドフォビルを本発明の一実施形態の組成物と比較した示差走査熱量測定。時間（分）および温度（℃）の関数として熱流量（ｍＷ）を示す。
【発明を実施するための形態】
【００４６】
詳細な説明
本発明の本方法およびプロダクトを説明する前に、本発明は、記載されている特定の方法、成分、プロダクトまたは組み合わせに限定されず、このような方法、成分、プロダクトおよび組み合わせは、当然のことながら変化してもよいことを理解されるべきである。本明細書において使用される専門用語が限定することを意図しないことも理解されるべきである。
【００４７】
本明細書において、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、特に明記しない限り、単数形および複数形の両方の指示対象を含む。
【００４８】
本明細書において、「含有している（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含有する（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「から構成されている（ｃｏｍｐｒｉｓｅｄ  ｏｆ）」という用語は、「含んでいる（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」または「含有している（含んでいる）（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」、「含有する（含む）（ｃｏｎｔａｉｎｓ）」と同じ意味であり、包括的または被限定的であり、追加の、記載されていないメンバー、要素または方法のステップを排除するものではない。
本明細書において使用される場合、「含有している（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含有する（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「から構成されている（ｃｏｍｐｒｉｓｅｄ  ｏｆ）」という用語は、「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」、「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｓ）」および「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｓ  ｏｆ）」という用語を含むことを理解されるであろう。
【００４９】
端点による数値範囲の記載は、各範囲内に包含されたすべての数および分数ならびに記載されている端点を含む。
【００５０】
本明細書において、「約（ａｂｏｕｔ）」または「およそ（ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ）」という用語は、パラメータ、量、時間的な期間などの測定可能な値について言及する場合、開示される本発明を実施するのに適切である限り、特定値からの＋／−１０％以下、好ましくは＋／−５％以下、より好ましくは＋／−１％以下、さらにより好ましくは＋／−０．１％以下の変動を包含することを意味する。「約」または「およそ」の修飾語が言及する値は、それ自体も明確に好ましく開示されていることが理解されるべきである。
【００５１】
「１つ以上」または「少なくとも１つ」という用語、例えばメンバーグループの１つ以上または少なくとも１つのメンバーは、さらなる例示によってそれ自体は明確であるが、前記用語は、とりわけ、前記メンバーのいずれか１つ、または前記メンバーのいずれか２つ以上、例えば前記メンバーの任意の３以上、４以上、５以上、６以上または７以上など、最大ですべての前記メンバーについての言及を包含する。
【００５２】
本明細書において引用されるすべての参照文献は、参照によりその全体が本明細書に引用される。特に、本明細書において具体的に言及されるすべての参照文献の教示は、参照により引用される。
【００５３】
特に定義されない限り、技術的および科学的な用語を含む本発明の開示に使用されるすべての用語は、本発明が属する分野の当業者によって一般的に理解されている意味を有する。本発明の教示をより良く認識するために、さらなるガイダンスによって用語の定義を含める。
【００５４】
以下の文章では、本発明の様々な側面をより詳細に定義する。特に明確な反対の指示がない限り、このように定義される各側面は、任意の他の１つまたは複数の側面と組み合わせてもよい。特に、好ましいものまたは有利なものとして示されている任意の特徴は、好ましいものまたは有利なものとして示されている任意の他の１つまたは複数の特徴と組み合わせてもよい。
【００５５】
本明細書全体を通して、「一実施形態（ｏｎｅ  ｅｍｂｏｄｉｍｅｎｔ）」または「一実施形態（ａｎ  ｅｍｂｏｄｉｍｅｎｔ）」についての言及は、その実施形態に関連して記載されている特定の特徴（ｆｅａｔｕｒｅ）、構造または特徴（ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ）が本発明の少なくとも１つの実施形態に含まれることを意味する。したがって、本明細書全体を通して種々の場所にある「一実施形態では（ｉｎ  ｏｎｅ  ｅｍｂｏｄｉｍｅｎｔ）」または「一実施形態では（ｉｎ  ａｎ  ｅｍｂｏｄｉｍｅｎｔ）」という語句が現れるのは、必ずしもすべてがその同じ実施形態について言及するものではないが、言及するものであってもよい。さらに、１つ以上の実施形態において、本開示から当業者には明らかであるように、特定の特徴（ｆｅａｔｕｒｅ）、構造または特徴（ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ）は任意の適切な方法で組み合わせてもよい。さらに、本明細書に記載のいくつかの実施形態は、他の実施形態に含まれる他の特徴ではなくいくつかの特徴を含むが、当業者によって理解されているように、異なる実施形態の特徴の組み合わせは本発明の範囲内であることを意味し、異なる実施形態を形成する。例えば、添付の特許請求の範囲では、本願の実施形態のいずれかを任意に組み合わせて用いることができる。
【００５６】
本発明は、
（ａ）０．１〜５ｍｇ／ｃｍ２の量のシドフォビルと、
（ｂ）１．５〜１７ｍｇ／ｃｍ２の量のヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）またはヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）と、任意に、
（ｃ）０〜５ｍｇ／ｃｍ２の量の生体適合性可塑剤と
を含有するシート状凍結乾燥組成物に関する。
【００５７】
本発明の組成物の特に好ましい実施形態を表Ａ〜表Ｄに列挙する。表Ａ〜表Ｄには、凍結乾燥後の添加剤（ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ）のｍｇ／ｃｍ２単位での濃度および凍結乾燥前の添加剤（ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ）の重量％単位での濃度が列挙されている（表Ａでは、ポリマーとしてＨＰＭＣを有し、可塑剤を有しない；表Ｂでは、ポリマーとしてＨＰＭＣを有し、可塑剤としてＰＥＧ４００を有する；表Ｃでは、ポリマーとしてＨＰＭＣを有し、可塑剤としてＰＧを有する；表Ｄでは、ポリマーとしてＨＥＣを有し、可塑剤としてＰＥＧ４００を有する）。表Ａ〜表Ｄの値は、各特定値の±１０％の偏差で示す（例えば、３．９７ｍｇ／ｃｍ２のＨＰＭＣ  Ｅ５±１０％は、３．９７−０．３９７ｍｇ／ｃｍ２〜３．９７＋０．３９７ｍｇ／ｃｍ２の範囲である；０．４２％のＰＥＧ４００±１０％は、０．４２−０．０４２％〜０．４２＋０．０４２％の範囲である）。
【００５８】
【表１】
2014520834.tif 000002
【００５９】
【表２】
2014520834.tif 000003
【００６０】
【表３】
2014520834.tif 000004
【００６１】
【表４】
2014520834.tif 000005
【００６２】
別の実施形態では、本発明は、治療有効量の前述した凍結乾燥組成物と、さらなる薬学的に許容され得る担体とを含有する医薬組成物を提供する。
【００６３】
本実施形態の一つの側面では、前記医薬組成物は、抗ウイルス剤をさらに含有する。抗ウイルス剤は、インターフェロン、イミキモド、ホルムアルデヒド、グルタラール、シメチジン、５−フルオロウラシル、トリクロロ酢酸、ブレオマイシン、ポドフィロックス、ポドフィルム、またはＨＰＶ感染症、ＨＰＶ感染組織もしくはＨＰＶ感染細胞の治療に有用な任意の他の抗ウイルス組成物であり得る。
【００６４】
さらに別の実施形態では、本発明は、ＨＰＶ感染症、ＨＰＶ感染組織またはＨＰＶ感染細胞の治療方法であって、感染部位、感染組織または細胞を本明細書に記載の凍結乾燥組成物に接触させるステップを含む方法を提供する。本発明の一つの側面では、この方法は、細胞を抗ウイルス剤に接触させるステップをさらに含む。抗ウイルス剤は、インターフェロン、イミキモド、ホルムアルデヒド、グルタラール、シメチジン、５−フルオロウラシル、トリクロロ酢酸、ブレオマイシン、ポドフィロックス、ポドフィルム、またはＨＰＶ感染症、ＨＰＶ感染組織もしくはＨＰＶ感染細胞の治療に有用な任意の他の抗ウイルス組成物であり得る。前記のさらなる抗ウイルス剤は、本発明の凍結乾燥組成物中に含有させることもできるし、本発明の凍結乾燥組成物の投与と同時、または投与前、または投与後に投与することもできる。
【００６５】
１５０種類を超えるＨＰＶが存在すると認められている。これらの中で、以下のものは、子宮頸癌のリスクを伴う種類として分類されている：ＨＰＶ−１、６、１１、１６、１８、２６、３１、３３、３５、３９、４０、４２、４３、４４、４５、５１、５２、５３、５４、５６、５８、５９、６１、６６、６８、７０、７２、７３、８１、８２およびＣＰ６１０８。１６型および１８型は、一般に、子宮頸癌症例の約７０％の原因であると認められている。３１型とともに、それらは、子宮頸癌の主要リスク因子である。本明細書に記載の任意の実施形態において、前記ＨＰＶは、ＨＰＶ１１、ＨＰＶ１６、ＨＰＶ１８、ＨＰＶ１、ＨＰＶ６、任意のさらなる前記に列挙されたＨＰＶ型、およびそれらの任意の組み合わせであり得る。
【００６６】
本発明の凍結乾燥組成物、または本明細書において定義される医薬組成物の投与は、直接的に、すなわち、凍結乾燥マトリックスを再水和せずに、例えば、膣挿入具、タンポン挿入具、子宮頸部キャップ、頸部を覆うペッサリー、または凍結乾燥マトリックスをＨＰＶ感染組織または細胞に配置するのに使用され得る任意の他の器具を用いることによって行うことができる。この概要では、凍結乾燥構造物（ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ）は、適用部位に元来存在する体液を用いてイン・サイチュで再水和されるであろう。
【００６７】
代替的には、本発明の凍結乾燥組成物、または本明細書において定義される医薬組成物を使用前に再水和することにより、例えば、膣クリーム挿入具、タンポン挿入具、子宮頸部キャップ、頸部を覆うペッサリー、またはゲルをＨＰＶ感染組織または細胞に配置するのに使用され得る任意の他の器具を用いて局所適用されうるゲル様組成物を作り出すことができる。
【００６８】
本発明によれば、組成物または医薬組成物の「有効量」は、ＨＰＶ感染症を治療するか、またはＨＰＶ感染症の重症度を低減するのに有効な量である。
【００６９】
典型的には、ＨＰＶ感染症は、皮膚、粘膜、肛門生殖器部、外陰部、膣および頸部（膣と子宮との間の管）で起こり、そこで病変、前癌病変、生殖器疣贅、ポリープ、嚢胞、良性新生物および最終的には癌（これは下層組織に転移して、血管内を循環し得る）を引き起こし得る。子宮頸癌は膣出血を伴って現れ得るが、癌がその進行期に入るまで、症状は、存在しないことがある。また、口腔または口腔領域の上皮ＨＰＶ感染が頻繁に起こっている。口腔または口腔領域は、唇、口、喉、喉頭などを包含する。したがって、本発明の（医薬）組成物の好ましい標的部位は、ＨＰＶに感染することが最も多い外陰部、膣部および頸部、特にこれらの領域の粘膜組織である。
【００７０】
次に、以下の実施例によって本発明を説明するが、これは本発明の範囲を何ら限定するものではない。
【実施例】
【００７１】
実施例１：凍結乾燥の条件
展性のある多孔質マトリックスを得るための、生体接着性ポリマーと、任意の（ｏｐｔｉｏｎａｌｌｙ）可塑剤および／またはシドフォビルとを含有する水性組成物の凍結乾燥は、以下のプロトコールに従って実施した。
【００７２】
ゆっくりと撹拌しながら完全に均一化するまで、ポリマーを蒸留水中に分散させる。任意に、可塑剤を添加した後、完全に均一化するまで、得られた分散液を再度撹拌する。シドフォビルを分散させ、２Ｍ  ＮａＯＨ原液を添加してｐＨ７にする。得られた混合物を晶析装置に移し、凍結乾燥させる。凍結乾燥の条件は、以下のとおりである。
【００７３】
【表５】
2014520834.tif 000006
【００７４】
実施例２：凍結乾燥組成物の成分
凍結乾燥後に所望の「スポンジ」構造をもたらす能力について、以下の成分および混合物を評価した。
生体接着性ポリマー：
−ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）
ＨＰＭＣ  Ｅ５：粘度：５ｍＰａ．ｓ（＝５ｃｐ）（２％水溶液）
ＨＰＭＣ  Ｅ１５：粘度：１２〜１８ｍＰａ．ｓ（２％水溶液）
ＨＰＭＣ  ４０００：粘度：４０００〜５６００ｍＰａ．ｓ（２％水溶液）
ＨＰＭＣ  Ｋ１５：粘度：１１２５０〜２１０００ｍＰａ．ｓ（２％水溶液）
−カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＮａＣＭＣ）
−ヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）
ＨＥＣ  Ｎａｔｒｏｓｏｌ  ２５０ＨＸ：粘度：１５００〜２５００ｍＰａ．ｓ（１％水溶液）
ＨＥＣ  Ｎａｔｒｏｓｏｌ  ２５０ＨＨＸ：粘度：３５００〜５５００ｍＰａ．ｓ（１％水溶液）
ＨＥＣ  Ｎａｔｒｏｓｏｌ  ２５０Ｍ：粘度：４５００〜６５００ｍＰａ．ｓ（２％水溶液）
ＨＥＣ  Ｈ４０００：粘度：４５００〜６５００ｍＰａ．ｓ（２％水溶液）
−カルボマー９７４Ｐ
−ヒドロキシプロピルセルロース（Ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｒｙｌｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）（ＨＰＣ）
ＨＰＣ  ＬＦ：粘度：７５〜１５０ｍＰａ．ｓ（５％水溶液）
ＨＰＣ  ＨＦ：粘度：１５００〜３０００ｍＰａ．ｓ（１％水溶液）
ＨＰＣ  ＧＦ：粘度：１５０〜４００ｍＰａ．ｓ（２％水溶液）
可塑剤：
−ポリエチレングリコール４００（ＰＥＧ４００）
−ポリエチレングリコール４０００（ＰＥＧ４０００）
−プロピレングリコール（ＰＧ）
【００７５】
実施例３：様々な凍結乾燥プラセボ組成物の評価
様々な条件および成分濃度を試験して、凍結乾燥物の所望の特徴を評価した。所望の特徴は、乾燥時には容易に展延可能（ｍａｌｌｅａｂｌｅ）であり、中粘度を有するゲルに容易におよび／または迅速に再水和させることができる（すなわち、過度に液性ではなく、過度に粘性ではない）スポンジ組織である。
【００７６】
比較を容易にするために、以下の条件を一定にした：晶析装置の直径（４ｃｍ）、成分を分散させるために用いた水の量（平均偏差６ｇ、これは、水を組成物に凍結乾燥前の最終組成物の最大６ｇで添加したことを意味する）、および凍結乾燥サイクル。
【００７７】
最初の事例では、プラセボ凍結乾燥物を評価した（すなわち、シドフォビルなし）。表１は、ポリマーおよび可塑剤の試験濃度を列挙する。
【００７８】
【表６】
2014520834.tif 000007
2014520834.tif 000008
2014520834.tif 000009
【００７９】
ＨＰＭＣ系組成物、ＨＥＣ系組成物およびＮａＣＭＣ系組成物は、ポリマーの試験濃度および粘度にかかわらず、所望の特徴を有するスポンジの形成が可能であったことが見出された。ＨＰＭＣ  Ｅ５系組成物、ＨＰＭＣ  Ｅ１５系組成物、ＨＰＭＣ  ４０００系組成物およびＨＰＭＣ  Ｋ１５系組成物、ならびにＨＥＣ  Ｈ４０００系組成物、ＨＥＣ  ２５０Ｍ系組成物、ＨＥＣ  ２５０ＨＨＸ系組成物およびＨＥＣ  ２５０ＨＸ系組成物は、スポンジの形成が可能であった。ＨＰＣ  ＧＦ系組成物は、可塑剤の非存在下で用いた場合には、所望の特徴を有するスポンジの形成が可能であったが、可塑剤の存在下では、生体接着性フィルムの形成をもたらしたか、またはスポンジ様組織が示されなかった。カルボマー系ならびにＨＰＣ  ＬＦ系およびＨＰＣ  ＨＦ系組成物はそれぞれ粉末またはスポンジになり、非常に粘着性であったが、あまり展性がなかった。所望の特徴を有するスポンジは、ＨＰＭＣ  Ｅ５系とＨＰＣ  ＧＦ系との組み合わせの組成物およびＨＰＭＣ  ４０００系とＨＰＣ  ＧＦ系との組み合わせの組成物を用い、可塑剤の存在下で得られた。
【００８０】
ＰＥＧ系スポンジは、ＰＧ系スポンジよりも破断耐性があるようであった。ＰＥＧ４００およびＰＥＧ４０００は、両方とも、所望の特徴を有するスポンジを得るのに用いることができるが、より高濃度のＰＥＧ４０００は脆い（ｂｒｉｔｌｌｅ）スポンジをもたらすことが多い。
【００８１】
異なる種類のポリマーの残存水量を表２に列挙する。
【００８２】
【表７】
2014520834.tif 000010
【００８３】
ＮａＣＭＣ系スポンジは、例えば、ＨＰＭＣ系スポンジよりも多くの残存水を保持していると思われる。分散液を調製するための水の量を変化させても（４、５および６ｍｌ）、凍結乾燥後の最終残存水量には影響がなかったことが見出された。
【００８４】
再水和速度の評価では、直径１．２ｃｍの円板を５０μｌの蒸留水で再水和させたか、またはスポンジ全体を平均偏差３ｇの蒸留水で再水和させた。スポンジの再水和は、様々な粘度を有するゲルの形成をもたらした。再水和速度は、ポリマーの性質および量に依存していたので、容易に調節されうる。例えば、ＨＥＣ  ２５０ＨＸ系および２５０Ｍ系スポンジは、ＨＥＣ  ２５０ＨＨＸ系およびＨ４０００系スポンジよりも速い再水和が可能であったことが見出された。ポリマーの区別に関係なく、ポリマーの濃度を増加させると、再水和速度が減少した。
【００８５】
実施例４：様々なシドフォビルを含有する凍結乾燥組成物の評価
様々な条件および成分濃度を試験して、凍結乾燥物の所望の特徴を評価した。所望の特徴は、乾燥時には容易に展延可能であり、中粘度を有するゲルに迅速に再水和させることができる（すなわち、過度に液性ではなく、過度に粘性ではない）スポンジテクスチャである。
【００８６】
比較を容易にするために、凍結乾燥サイクルを一定にし、ほとんどの条件では、晶析装置の直径は４ｃｍであり、成分を分散させるために添加した水の量は平均偏差６ｇであった。
【００８７】
表３〜表４５は、各試験組成物の条件および評価を列挙する。ポリマーの種類（ＨＰＭＣ、ＮａＣＭＣ、ＨＥＣ、カルボマーまたはＨＰＣ）、可塑剤の種類（可塑剤なし、ＰＥＧ４００またはＰＧ）およびシドフォビルの、凍結乾燥スポンジにおけるｍｇ／ｃｍ２単位での濃度および凍結乾燥前の水性組成物における重量％単位での濃度を示す。加えて、ＮａＯＨの量（２Ｍ原液として提供した）、晶析装置の（したがって凍結乾燥後のスポンジの）直径（環状構造）、凍結乾燥前の水性組成物の重量、凍結乾燥後のスポンジの重量、および凍結乾燥後のスポンジ中の残存水のパーセンテージを示す。
【００８８】
組成物へのシドフォビルの添加は、スポンジの特性を改変することがわかる。ポリマーとしてＨＰＭＣ、ＨＥＣおよびＮａＣＭＣに基づき、良質なプラセボスポンジを得られうるのに対して、シドフォビルを有するＮａＣＭＣ系スポンジは非常に硬くて脆くなると思われる（濃度および条件にかかわらない）。ＨＰＭＣ系スポンジは、展性があり、良質であるが、それらのプラセボカウンターパートとはわずかに異なる外観を有し、スポンジを二つ折りすると非常にかすかな亀裂が生じる。それらのプラセボカウンターパートとは対照的に、シドフォビルを含有するＨＥＣ  ２５０ＨＸ系スポンジは、スポンジの破断を防ぐために可塑剤を必要とする（過度に脆い（ｂｒｉｔｌｌｅ））。
【００８９】
展性があり、良質なＰＥＧ４００系スポンジとは対照的に、ＰＧ系スポンジはごくわずかな展性があり、脆いと思われる。
【００９０】
試験ポリマーにかかわらず、ポリマーの濃度を増加させると、再水和速度が減少することが見出された。
【００９１】
凍結乾燥後に良質で展性のあるスポンジとなる組成物のいくつかの具体例を表３〜表４５に示す。いくつかの事例では、それらの再水和能力も試験した。比較のために、展性のないスポンジが得られた条件も示す。
【００９２】
【表８】
2014520834.tif 000011
【００９３】
【表９】
2014520834.tif 000012
【００９４】
【表１０】
2014520834.tif 000013
【００９５】
【表１１】
2014520834.tif 000014
【００９６】
【表１２】
2014520834.tif 000015
【００９７】
【表１３】
2014520834.tif 000016
【００９８】
【表１４】
2014520834.tif 000017
【００９９】
【表１５】
2014520834.tif 000018
【０１００】
【表１６】
2014520834.tif 000019
【０１０１】
【表１７】
2014520834.tif 000020
【０１０２】
【表１８】
2014520834.tif 000021
【０１０３】
【表１９】
2014520834.tif 000022
【０１０４】
【表２０】
2014520834.tif 000023
【０１０５】
【表２１】
2014520834.tif 000024
【０１０６】
【表２２】
2014520834.tif 000025
【０１０７】
【表２３】
2014520834.tif 000026
【０１０８】
【表２４】
2014520834.tif 000027
【０１０９】
【表２５】
2014520834.tif 000028
【０１１０】
【表２６】
2014520834.tif 000029
【０１１１】
【表２７】
2014520834.tif 000030
【０１１２】
【表２８】
2014520834.tif 000031
【０１１３】
【表２９】
2014520834.tif 000032
【０１１４】
【表３０】
2014520834.tif 000033
【０１１５】
【表３１】
2014520834.tif 000034
【０１１６】
【表３２】
2014520834.tif 000035
【０１１７】
【表３３】
2014520834.tif 000036
【０１１８】
【表３４】
2014520834.tif 000037
【０１１９】
【表３５】
2014520834.tif 000038
【０１２０】
【表３６】
2014520834.tif 000039
【０１２１】
【表３７】
2014520834.tif 000040
【０１２２】
【表３８】
2014520834.tif 000041
【０１２３】
【表３９】
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【０１２４】
【表４０】
2014520834.tif 000043
【０１２５】
【表４１】
2014520834.tif 000044
【０１２６】
【表４２】
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【０１２７】
【表４３】
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【０１２８】
【表４４】
2014520834.tif 000047
【０１２９】
【表４５】
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【０１３０】
【表４６】
2014520834.tif 000049
【０１３１】
【表４７】
2014520834.tif 000050
【０１３２】
【表４８】
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【０１３３】
【表４９】
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【０１３４】
【表５０】
2014520834.tif 000053
【０１３５】
再水和後、ゲル様組成物を得ることができる。好ましいゲル様組成物は、典型的には、約２％のシドフォビルと４％のＨＥＣ２５０Ｍとを含有する。組成物は、典型的には、７．２のｐＨ値に達するような量でＨＣＬとＮａＯＨとを含有する。ゲル様組成物の残りの成分は、１００％に達するまで水である。必要な場合には、抗菌剤を添加して保存期間をさらに改善することができる。一例は、ベンジルアルコール（約２％）である。
【０１３６】
実施例５：スポンジ中の含水量
カール・フィッシャー（Ｋａｒｌ  Ｆｉｓｈｅｒ）法（Ｍｅｔｌｅｒ  ＤＬ３５）によって、凍結乾燥後のスポンジ中の残存水を測定した。表４６から、残存水のパーセンテージは、ポリマーに応じて、およびシドフォビルの存在に応じて変化することがわかる。
【０１３７】
【表５１】
2014520834.tif 000054
2014520834.tif 000055
【０１３８】
ＨＰＭＣ系スポンジおよびＨＥＣ系スポンジでは、ＮａＣＭＣ系スポンジよりも残存含水量が少ない。
【０１３９】
凍結乾燥前の水性組成物を得るために添加した水の量（４、５または６ｍｌを試験した）は、凍結乾燥後の残存水の量に影響を及ぼさなかったことが立証された。
【０１４０】
実施例６：シドフォビルの均一性
スポンジを４個の部分に切断し、クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によりシドフォビルの用量を試験することによって、スポンジ内部に存在するシドフォビルの均一性を試験した。条件は以下のとおりである：
−固定相：ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ（登録商標）１００ＲＰ−１８ｅ（エンドキャップ）（５μｍ）、２５０ｍｍｘ４ｍｍ、内径（ｄ．ｉ．）の分析用ＬｉＣｈｒｏｃａｒｔ（登録商標）カラム
−移動相：ＨＰＬＣ緩衝液ｐＨ６．５／ＡＣＮ（９０／１０、ｍ／ｍ）
−流量：１ｍｌ／分
−温度：３０℃
−検出：分光光度吸収、ＵＶ２７５ｎｍ
−注入量：２０μｌ
ＨＰＬＣ緩衝液の組成は、
−５ｍＭ硫酸水素テトラブチルアンモニウム
−５ｍＭリン酸二水素アンモニウム
−アンモニウムでｐＨを６．５に調整
である。
【０１４１】
理論上の予想用量に対するパーセンテージとして、ＨＰＭＣ  Ｅ５系スポンジの結果を表４７に列挙する。
【０１４２】
【表５２】
2014520834.tif 000056
【０１４３】
実施例７：シドフォビルの安定性
凍結乾燥スポンジを袋に入れて（ＰＥＴ／ＡＩ／ＥＺ）、湿気、光および酸素を遮断した。スポンジを３つの異なる温度：４℃、２５℃および４５℃に維持した。図１は、ＨＰＭＣ  Ｅ５（７．９５ｍｇ／ｃｍ２）、ＰＥＧ４００（１．９８ｍｇ／ｃｍ２）およびシドフォビル（４．７７ｍｇ／ｃｍ２）を含んだスポンジのクロマトグラムを示す。図１Ａ、図１Ｂ、図１Ｃ、図１Ｄ、図１Ｅ、図１Ｆおよび図１Ｇはそれぞれ、４５℃におけるキャリブレーション（１００μｇ／ｍｌ）、Ｔ０のスポンジ、ならびにＴ１、Ｔ３、Ｔ６、Ｔ９およびＴ１２（すなわち、それぞれ１カ月後、３カ月後、６カ月後、９カ月後および１２カ月後）のスポンジのクロマトグラムを表す。図２Ａ、図２Ｂおよび図２Ｃはそれぞれ、ＨＥＣ  ２５０ＨＸ（７．９５ｍｇ／ｃｍ２）、ＰＥＧ４００（１．９８ｍｇ／ｃｍ２）およびシドフォビル（４．７７ｍｇ／ｃｍ２）を含有するスポンジであって、４５℃におけるＴ０、Ｔ１およびＴ３（すなわち、１カ月後および３カ月後）のスポンジのクロマトグラムを表す。（スポンジの維持温度にかかわらず）ピーク領域は狭いこと、およびキャリブレーションのクロマトグラムではピークは等しく存在することがわかる。したがって、これらのスポンジは、試験条件下で安定である。
【０１４４】
実施例８：シドフォビルの拡散
フランツ拡散セルを用いて、シドフォビルの拡散を測定した。直径１．２ｃｍの凍結乾燥物をセルに入れて、３５０μｌのリン酸緩衝液（ｐＨ５、３７℃）で再水和させた。１ｍｌ用量のＨＰＬＣによって、拡散動態を評価する。ポリマーを変え（ＨＰＭＣ  Ｅ５、ＮａＣＭＣ、ＨＥＣ  ２５０ＨＸおよびＨＥＣ  ２５０Ｍ）、可塑剤（ＰＥＧ４００）の存在または非存在も変えた。シドフォビルの濃度を一定にした。図３Ａ、図３Ｂおよび図３Ｃによれば、ＨＰＭＣ系スポンジでは１時間後にプラトーに達し、ＮａＣＭＣ系およびＨＥＣ  ２５０Ｍ系スポンジでは２時間後にプラトーに達し、ＨＥＣ  ２５０ＨＸ系スポンジでは３時間後にプラトーに達するようである。それにもかかわらず、シドフォビルは、別な組成物から素早く拡散する。
【０１４５】
実施例９：顕微鏡分析
走査電子顕微鏡法によって、ＨＰＭＣ  Ｅ５系スポンジ、ＨＰＭＣ  ４０００系スポンジ、ＨＰＭＣ  Ｋ１５系スポンジおよびＨＥＣ  ２５０ＨＸ系スポンジの構造を評価した。異なる種類のポリマーを有するスポンジ、種々の濃度のポリマーを有するスポンジ、シドフォビルを有するかまたは有しないスポンジ、可塑剤を有するかまたは有しないスポンジ、ならびに種々の可塑剤（ＰＥＧ４００またはＰＧ）および種々の濃度の可塑剤を有するスポンジの間で、孔構造を比較した。
【０１４６】
図４〜図８は、ＨＰＭＣ  Ｅ５系スポンジの種々の倍率での写真である。図４から、ＰＧ系スポンジの外層は、ＰＥＧ４００系スポンジよりも多くの溝を有することが明らかである。図５から、ＰＥＧ４００系スポンジでは、孔がＰＧ系スポンジよりも良く組織化されていることが明らかである。ＰＥＧ４００系スポンジがより耐久性であることの確認として、ＰＧは、孔がより脆弱になる孔構造崩壊をもたらすと思われる。同様に、スポンジへのシドフォビルの添加は、孔構造をより脆弱にさせると思われる。図６から、可塑剤としてＰＥＧ４００またはＰＧのいずれを用いるかにかかわらず、プラセボスポンジでは孔表面は滑らかであるのに対して、シドフォビルを含有するスポンジでは表面は粒状であると思われる。シドフォビルは均一に分布していると思われる。図７から、ポリマーの濃度の増加（７，９５ｍｇ／ｃｍ２から１５．９１ｍｇ／ｃｍ２ＨＰＭＣ  Ｅ５）は、より小さな孔を有するより高密度のスポンジ構造をもたらすことが明らかである。図８から、ＰＥＧ４００可塑剤の存在下では、孔構造がより良く組織化されていると思われる。また、ＰＥＧ４００可塑剤の濃度を増大させることによって、スポンジの外層上で観察される溝がより少なくなり、孔がより小さくなると思われる。図９は、シドフォビルを有しないかまたは有するＨＰＭＣ  Ｅ５系スポンジ、ＨＰＭＣ  ４０００系スポンジまたはＨＰＭＣ  Ｋ１５系スポンジの走査電子顕微鏡画像を示す。ＨＰＭＣポリマーの分子量は、孔径に影響を与えると思われ、孔は、ポリマーの分子量とともに増加する。シドフォビルの存在下では、より小さな孔が観察される。また、シドフォビルが存在することにより、組織化された孔が少なくなるが、より高分子量のＨＰＭＣポリマー系スポンジでは、これが特により顕著である。
【０１４７】
図１０および図１１は、ＨＥＣ  ２５０ＨＸポリマー系スポンジの写真を表す。図１０から、シドフォビルの存在下では、孔がより小さいように思われる。図１１から、プラセボスポンジでは孔表面は滑らかであるのに対して、シドフォビルを含むスポンジでは、表面は、粒状であると思われる。シドフォビルは、結晶形として均一に分布していると思われる。
【０１４８】
実施例１０：空隙率およびスポンジの厚さ
スポンジの厚さに影響を及ぼすパラメータを評価するために実験を行なった。凍結乾燥前の水性組成物中のポリマーの量を増加させることにより、凍結乾燥後のスポンジの厚さがごくわずかに増加したことが見出された。一方、凍結乾燥前の混合物に添加する水の量を増加させることによって、凍結乾燥後のスポンジの厚さを実質的に増加させることができた。少なくとも８ｇ（８、９、１２または１５ｇ）の混合物を用いて、より厚いスポンジが得られた。また、ＰＧ系組成物は、より厚いスポンジを得ることが可能であったのに対して、同じ条件下のＰＥＧ４００系組成物は液化したと思われた。より長い凍結乾燥サイクルが必要であり得る。
【０１４９】
実施例１１：粘度
レオメータ（ＡＲＥＳ  Ｇ２，ＴＡ  ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ）を用いて、再水和後のスポンジの粘度を評価した（ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ）。比較を容易にするために、以下のパラメータを一定にした：スポンジの表面、および再水和のための水の量（図１４および図１５以外は９００μｌ）。測定は、３７℃、回転速度１〜１００秒−１で２４０秒間実施した。
【０１５０】
図１２から、ＮａＣＭＣ系スポンジは、ＨＰＭＣ  Ｅ５系スポンジよりも粘性であることが明らかである。異なるＨＰＭＣ  Ｅ５濃度間では、粘度の違いは観察されなかった。ＨＰＭＣ  Ｅ１５系スポンジは、ＨＰＭＣ  Ｅ５系スポンジよりも粘性であると思われた（ＮａＣＭＣ系スポンジの粘度に近い）。図１３から、粘度は、可塑剤（ＰＥＧ４００またはＰＧ）の性質によって影響を受けないことが明らかである。
【０１５１】
図１４および図１５から、凍結乾燥組成物の粘度は、凍結乾燥工程によって影響を受けないと思われる。再水和されたＨＥＣ  ２５０Ｍ系およびＨＥＣ  ２５０ＨＸ系スポンジの粘度は、（凍結乾燥されなかった）ＨＥＣ  ２５０ＭおよびＨＥＣ  ２５０ＨＸゲルの粘度と同等であり、シドフォビルを含有するカルボマーゲルの粘度に近い。
【０１５２】
図１６から、粘度は、ポリマーの種類よって影響を受けないことが明らかである：ＨＭＰＣ  Ｋ１５、ＨＰＭＣ  ４０００（ＨＰＣ  ＧＦを有するかまたは有しない）、ＨＥＣ  ２５０ＨＸ、ＨＥＣ  ２５０Ｍ、ＨＰＭＣ  Ｅ１５およびＨＰＭＣ  Ｅ５を粘度の減少にしたがって分類する。さらに、ポリマーの濃度の増加に伴い、粘度が増加する。
【０１５３】
実施例１２：示差走査熱量測定によるスポンジの測定
示差走査熱量測定（ＤＳＣ  ２５  Ｍｅｔｔｌｅｒ  Ｔｏｌｅｄｏ、制御はＴＣ１５  ＴＡ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｒによって制御される）によって、凍結乾燥物の温度遷移、およびポリマーとシドフォビルとの間の最終的な相互作用を評価した。温度は、３５℃〜３００℃まで１分あたり１０℃上昇させた。図１７から、脱水した粉末形態のシドフォビルは、２８０℃で吸熱ピークを示すことが明らかである。凍結乾燥組成物の製造方法によってシドフォビルが塩に変換されるので、異なるスポンジの熱量分析では、このピークは存在しない。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図１Ｄ】
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【図１Ｅ】
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【図１Ｆ】
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【図１Ｇ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１３】
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【図１４Ａ】
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【図１４Ｂ】
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【図１５−１】
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【図１５−２】
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【図１６−１】
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【図１６−２】
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【図１７】
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【国際調査報告】
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