(57)【要約】本発明は式Ｉの化合物2014532644.tif 000043またはその薬学的塩；該化合物を使用して骨関節炎および骨関節炎に関連する疼痛を治療する方法；ならびに該化合物を調製する方法を提供する。
2014532644.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式：
【化１】
2014532644.tif 000039
（式中、
ＡはＣＨまたはＮであり、
ＸはＣＨまたはＮであり、
Ｒ１は−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＯ２Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ４、および−ＮＨＳＯ２ＣＨ３から選択され、
Ｒ２は−Ｃ３−４アルキル、−ＯＣＨ（ＣＨ３）２、および−ＳＣＨ（ＣＨ３）２から選択され、
各Ｒ３は独立してＨおよび−ＣＨ３から選択され、
Ｒ４は４−モルホリニル、１−ピペリジニル、４−チオモルホリニル、−ＮＨ（ＣＨ２）３ＯＨ、および４−メチル−１−ピペラジニルから選択され、
但し、ＡまたはＸの一方がＮである場合、ＡまたはＸの他方はＣＨである）
を有する化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項２】
ＡがＣＨである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ＸがＣＨである、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１が−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２または−Ｃ（Ｏ）Ｒ４である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項５】
Ｒ２が−Ｃ３−４アルキルおよび−ＳＣＨ（ＣＨ３）２から選択される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項６】
Ｒ２がイソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、および−ＳＣＨ（ＣＨ３）２から選択される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項７】
Ｒ２がイソプロピルまたはｔｅｒｔ−ブチルである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項８】
各Ｒ３が−ＣＨ３である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項９】
各Ｒ３がＨである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１０】
Ｒ４が４−モルホリニル、１−ピペリジニル、４−チオモルホリニル、および４−メチル−１−ピペラジニルである、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１１】
Ｒ４が４−モルホリニルまたは４−メチル−１−ピペラジニルである、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１２】
Ｒ４が４−メチル−１−ピペラジニルである、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１３】
ＡがＣＨであり、
ＸがＣＨであり、
Ｒ１が−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２、または−Ｃ（Ｏ）Ｒ４であり、
Ｒ２が−Ｃ３−４アルキル、−ＯＣＨ（ＣＨ３）２、および−ＳＣＨ（ＣＨ３）２から選択され、
各Ｒ３が独立してＨまたは−ＣＨ３であり、
Ｒ４が４−モルホリニル、１−ピペリジニル、４−チオモルホリニル、−ＮＨ（ＣＨ２）３ＯＨ、および４−メチル−１−ピペラジニルから選択される、
請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１４】
ＡがＣＨであり、
ＸがＣＨであり、
Ｒ１が−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２、または−Ｃ（Ｏ）Ｒ４であり、
Ｒ２が−Ｃ３−４アルキルから選択され、
各Ｒ３が独立してＨまたは−ＣＨ３であり、
Ｒ４が４−モルホリニル、１−ピペリジニル、４−チオモルホリニル、−ＮＨ（ＣＨ２）３ＯＨ、および４−メチル−１−ピペラジニルから選択される、
請求項１３に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１５】
ＡがＣＨであり、
ＸがＮであり、
Ｒ１が−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２であり、
Ｒ２が−Ｃ３−４アルキルであり、
Ｒ３がＨまたは−ＣＨ３である、
請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１６】
ＡがＮであり、
ＸがＣＨであり、
Ｒ１が−Ｃ（Ｏ）Ｒ３または−Ｃ（Ｏ）Ｒ４であり、
Ｒ２が−Ｃ３−４アルキルであり、
Ｒ３がＨまたは−ＣＨ３であり、
Ｒ４が４−モルホリニルである、
請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１７】
Ｒ２がｔｅｒｔ−ブチルである、請求項１５もしくは１６に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１８】
４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］安息香酸である化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１９】
請求項１〜１８のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩と、少なくとも１種の薬学的に許容可能な担体、賦形剤、または希釈剤とを含む、医薬組成物。
【請求項２０】
請求項１８に記載の化合物と、さらに１種以上の治療剤とを含む、医薬組成物。
【請求項２１】
治療を必要とする患者における骨関節炎疼痛を治療する方法であって、請求項１９または２０に記載の医薬組成物の有効量を前記患者に投与することを含む、方法。
【請求項２２】
治療に使用するための請求項１〜１８のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項２３】
骨関節炎の治療に使用するための請求項１〜１８のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項２４】
医薬の製造に使用するための請求項１〜１８のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用。
【請求項２５】
式ＩＩ
【化２】
2014532644.tif 000040
（式中、
ＲはＣ１−４アルキル、Ｃ１−４ハロアルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−４アルキル−Ｃ３−６シクロアルキル、フェニル、およびＣ１−５アルキルフェニルから選択され、
ＡはＣＨまたはＮであり、
ＸはＣＨまたはＮであり、
Ｒ１は、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＯ２Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ４、および−ＮＨＳＯ２ＣＨ３から選択され、
Ｒ２は、−Ｃ３−４アルキル、−ＯＣＨ（ＣＨ３）２、および−ＳＣＨ（ＣＨ３）２から選択され、
各Ｒ３は独立して、Ｈおよび−ＣＨ３から選択され、
Ｒ４は、４−モルホリニル、１−ピペリジニル、４−チオモルホリニル、−ＮＨ（ＣＨ２）３ＯＨ、および４−メチル−１−ピペラジニルから選択され、
但し、ＡまたはＸのうちの一方がＮである場合、ＡまたはＸのうちの他方はＣＨである）
に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項２６】
式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩を調製する方法であって、
【化３】
2014532644.tif 000041
（式中、
ＡはＣＨまたはＮであり、
ＸはＣＨまたはＮであり、
Ｒ１は−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＯ２Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ４、および−ＮＨＳＯ２ＣＨ３から選択され、
Ｒ２は−Ｃ３−４アルキル、−ＯＣＨ（ＣＨ３）２、および−ＳＣＨ（ＣＨ３）２から選択され、
各Ｒ３は独立してＨおよび−ＣＨ３から選択され、
Ｒ４は４−モルホリニル、１−ピペリジニル、４−チオモルホリニル、−ＮＨ（ＣＨ２）３ＯＨ、および４−メチル−１−ピペラジニルから選択され、
但し、ＡまたはＸのうちの一方がＮである場合、ＡまたはＸのうちの他方はＣＨである）
前記方法は、式ＩＩの化合物
【化４】
2014532644.tif 000042
（式中、Ｒ１〜Ｒ４は上記の通りであり、
ＲはＣ１−４アルキル、Ｃ１−４ハロアルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−４アルキル−Ｃ３−６シクロアルキル、フェニル、およびＣ１−５アルキルフェニルから選択される）
を脱エステル化して、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩を得ることを含む、方法。
【請求項２７】
ａ）２θにおいて５．４、７．５、１４．６、および１９．９＋／−０．２、または
ｂ）２θにおいて５．４、７．５、１４．６、１６．０、１９．４、および１９．９＋／−０．２、または
ｃ）２θにおいて５．４、７．５、１４．６、１５．７、１６．０、１９．４、１９．９および２２．１＋／−０．２
におけるピークを含むＣｕＫα源（λ＝１．５４０５６Å）から得られるＸ線粉末回折パターンにより特徴付けられる結晶形態の４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］安息香酸である化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は置換ピラゾール類似体に関する。
【背景技術】
【０００２】
骨関節炎は、骨、滑液、および関連する線維性関節組織を含む、関節軟骨および関節周囲構造の進行性破壊により特徴付けられる複合変性疾患である。既存の薬物治療は、骨関節炎に関連する疼痛を減少できるが、時間が経つと中等度の効果のみになる。ケア療法の現在の基準の各々は様々な危険性／有益性の判断を有する。個体は特定の薬物治療に対して難治性になるならびに／あるいは予め存在するもしくは発生した心臓血管および／または胃腸状態に起因する治療に対して禁忌を示す。したがって、骨関節炎に起因する疼痛を治療および軽減するためのさらなる治療選択についての必要性が存在する。
【０００３】
レチノイド（ＲＡＲアゴニストを含む）は、動物モデルにおいて疼痛を引き起こしおよび／または悪化させることが知られており、軟骨についての異化活性を示し、動物モデルにおいて骨関節炎様のプロセスを誘導する。ＲＡＲ拮抗活性を示す化合物は、骨関節炎疼痛を患っている患者についての代替の治療計画を提供し得る。
【０００４】
特許文献１は、以下の化合物：
【化１】
2014532644.tif 000003
を含む化合物を開示しており、炎症および関節炎に関連する疼痛を治療するのに有用であると開示している。しかしながら、その化合物は、ＲＡＲガンマ拮抗作用を示すとは記載されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】米国特許第５，４６４，１７８号
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、骨関節炎のための代替治療、特に骨関節炎に関連する疼痛のための代替治療を提供する。本発明はまた、骨関節炎治療計画のためのケアの現在の基準下での他の薬物との望ましくない相互作用の危険性ならびに予め存在するまたは発生した心臓血管および／または胃腸状態の危険性の減少などの１つ以上の欠陥に対処できる。さらに、本発明の化合物は、ＲＡＲγに選択的に結合し、したがって、広範囲の毒性副作用が付随し得る非選択的ＲＡＲアンタゴニストよりも利点を提供できる。
【０００７】
本発明は、以下の式Ｉ：
【化２】
2014532644.tif 000004
（式中、ＡはＣＨまたはＮであり、ＸはＣＨまたはＮであり、Ｒ１は、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＯ２Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ４、および−ＮＨＳＯ２ＣＨ３から選択され、Ｒ２は、−Ｃ３−４アルキル、−ＯＣＨ（ＣＨ３）２、および−ＳＣＨ（ＣＨ３）２から選択され、各Ｒ３は独立して、Ｈおよび−ＣＨ３から選択され、Ｒ４は、４−モルホリニル、１−ピペリジニル、４−チオモルホリニル、−ＮＨ（ＣＨ２）３ＯＨ、および４−メチル−１−ピペラジニルから選択され、但し、ＡまたはＸのうちの一方はＮであり、ＡまたはＸのうちの他方ＣＨである）
を有する化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【０００８】
本発明はまた、ＡおよびＸの両方がＣＨである、上記の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。別の形態において、ＡはＮであり、ＸはＣＨである。さらに別の形態において、ＡはＣＨであり、ＸはＮである。
【０００９】
本発明はまた、Ｒ１が−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２または−Ｃ（Ｏ）Ｒ４から選択される、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。他の実施形態において、Ｒ１は−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２または−Ｃ（Ｏ）Ｒ４から選択され、Ｒ２は−Ｃ３−４アルキル、−ＯＣＨ（ＣＨ３）２、および−ＳＣＨ（ＣＨ３）２から選択され、より好ましくはＲ２はイソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチルおよび−ＳＣＨ（ＣＨ３）２である。別の形態において、Ｒ１が−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２または−Ｃ（Ｏ）Ｒ４から選択される場合、Ｒ２はイソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、−ＯＣＨ（ＣＨ３）２、および−ＳＣＨ（ＣＨ３）２から選択され、各Ｒ３は独立して、Ｈ、または−ＣＨ３であり、Ｒ４は４−モルホリニル、１−ピペリジニル、４−チオモルホリニルおよび４−メチル−１−ピペラジニルから選択される。別の形態において、Ｒ１は−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２であり、Ｒ２はイソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、−ＯＣＨ（ＣＨ３）２、および−ＳＣＨ（ＣＨ３）２から選択され、Ｒ３は独立して、Ｈ、または−ＣＨ３である。別の形態において、Ｒ１は−Ｃ（Ｏ）Ｒ４であり、Ｒ２は−Ｃ３−４アルキル、−ＯＣＨ（ＣＨ３）２、および−ＳＣＨ（ＣＨ３）２から選択され、Ｒ４は４−モルホリニル、１−ピペリジニル、４−チオモルホリニル、および４−メチル−１−ピペラジニルから選択される。より好ましくはＲ１は−Ｃ（Ｏ）Ｒ４であり、Ｒ２はイソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチルおよび−ＳＣＨ（ＣＨ３）２から選択され、Ｒ４は４−モルホリニル、１−ピペリジニル、４−チオモルホリニル、および４−メチル−１−ピペラジニルであり、より好ましくはＲ１は−Ｃ（Ｏ）Ｒ４であり、Ｒ２はイソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチルおよび−ＳＣＨ（ＣＨ３）２から選択され、Ｒ４は４−モルホリニルまたは４−メチル−１−ピペラジニルである。なおさらにより好ましくは、Ｒ１は−Ｃ（Ｏ）Ｒ４であり、Ｒ２はｔｅｒｔ−ブチルであり、Ｒ４は４−メチル−１−ピペラジニルである。
【００１０】
本発明はまた、Ｒ２が好ましくは、−Ｃ３−４アルキル、および−ＳＣＨ（ＣＨ３）２から選択される、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。より好ましくはＲ２はイソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、および−ＳＣＨ（ＣＨ３）２から選択される。さらにより好ましくはＲ２はイソプロピルまたはｔｅｒｔ−ブチルである。
【００１１】
一実施形態において、本発明はまた、各Ｒ３が−ＣＨ３である、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。別の実施形態において、本発明は、各Ｒ３がＨである、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【００１２】
本発明は、Ｒ４が４−モルホリニル、１−ピペリジニル、４−チオモルホリニル、および４−メチル−１−ピペラジニルから選択される、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。より好ましくはＲ４は１−ピペリジニル、４−モルホリニル、および４−メチル−１−ピペラジニルから選択される。より好ましくはＲ４は４−モルホリニルまたは４−メチル−１−ピペラジニルである。さらにより好ましくはＲ４は４−メチル−１−ピペラジニルである。
【００１３】
本発明はまた、ＡがＣＨであり、Ｒ１が−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＯ２Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ４、および−ＮＨＳＯ２ＣＨ３から選択され、Ｒ２が−Ｃ３−４アルキル、−ＯＣＨ（ＣＨ３）２、および−ＳＣＨ（ＣＨ３）２から選択され、各Ｒ３が独立して、Ｈまたは−ＣＨ３であり、Ｒ４が４−モルホリニル、１−ピペリジニル、４−チオモルホリニル、−ＮＨ（ＣＨ２）３ＯＨおよび４−メチル−１−ピペラジニルから選択される、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【００１４】
本発明はまた、ＡがＣＨであり、ＸがＣＨであり、Ｒ１が−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２または−Ｃ（Ｏ）Ｒ４であり、Ｒ２が−Ｃ３−４アルキル、−ＯＣＨ（ＣＨ３）２、および−ＳＣＨ（ＣＨ３）２から選択され、各Ｒ３が独立して、Ｈまたは−ＣＨ３であり、Ｒ４が４−モルホリニル、１−ピペリジニル、４−チオモルホリニル、−ＮＨ（ＣＨ２）３ＯＨおよび４−メチル−１−ピペラジニルから選択される、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【００１５】
本発明はまた、ＡがＣＨであり、ＸがＣＨであり、Ｒ１が−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２または−Ｃ（Ｏ）Ｒ４であり、Ｒ２は−Ｃ３−４アルキルから選択され、各Ｒ３は独立して、Ｈまたは−ＣＨ３であり、Ｒ４は４−モルホリニル、１−ピペリジニル、４−チオモルホリニル、−ＮＨ（ＣＨ２）３ＯＨおよび４−メチル−１−ピペラジニルから選択される、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【００１６】
本発明はまた、ＡがＣＨであり、ＸがＮであり、Ｒ１が−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２であり、Ｒ２が−Ｃ３−４アルキルであり、Ｒ３はＨまたは−ＣＨ３である、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。好ましくは、Ｒ２はｔｅｒｔ−ブチルである。
【００１７】
本発明はまた、ＡがＮであり、ＸがＣＨであり、Ｒ１が−ＳＯ２ＣＨ３または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２であり、Ｒ２が−Ｃ３−４アルキルである、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。好ましくは、Ｒ２はｔｅｒｔ−ブチルである。
【００１８】
本発明の特定の好ましい化合物は、４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］安息香酸、またはその薬学的に許容可能な塩である。
【００１９】
本発明はまた、式Ｉ、またはその薬学的に許容可能な塩について上記の形態のいずれかにおける化合物と、少なくとも１種の薬学的に許容可能な担体、賦形剤、または希釈剤とを含む医薬組成物を提供する。
【００２０】
本発明はまた、式Ｉ、またはその薬学的に許容可能な塩について上記の形態のいずれかにおける化合物と、少なくとも１種の薬学的に許容可能な担体、賦形剤、または希釈剤と、１種以上の治療剤とを含む医薬組成物を提供する。
【００２１】
本発明は治療を必要とする患者における骨関節炎を治療する方法を提供する。その方法は、式Ｉ、またはその薬学的に許容可能な塩について上記の形態のいずれかにおける有効量の化合物を患者に投与することを含む。
【００２２】
本発明はまた、治療を必要とする患者における骨関節炎を治療する方法を提供する。その方法は、式Ｉ、またはその薬学的に許容可能な塩について上記の形態のいずれかにおける化合物を含む有効量の医薬組成物を患者に投与することを含む。
【００２３】
本発明はまた、治療に使用するための式Ｉまたはその薬学的に許容可能な塩について上記の形態のいずれかにおける化合物を提供する。
【００２４】
本発明はまた、骨関節炎の治療に使用するため、より特には骨関節炎に関連する疼痛の治療に使用するための式Ｉまたはその薬学的に許容可能な塩について上記の形態のいずれかにおける化合物を提供する。
【００２５】
本発明はまた、医薬の製造に使用するための式Ｉまたはその薬学的に許容可能な塩について上記の形態のいずれかにおける化合物を提供する。好ましくは、医薬は骨関節炎を治療するためである。さらにより好ましくは、医薬は骨関節炎に関連する疼痛を治療するためである。
【００２６】
本発明はまた、式ＩＩ：
【化３】
2014532644.tif 000005
（式中、ＲはＣ１−４アルキル、Ｃ１−４ハロアルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−４アルキル−Ｃ３−６シクロアルキル、フェニル、およびＣ１−５アルキルフェニルから選択され、ＡはＣＨまたはＮであり、ＸはＣＨまたはＮであり、Ｒ１は、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＯ２Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ４、および−ＮＨＳＯ２ＣＨ３から選択され、Ｒ２は、−Ｃ３−４アルキル、−ＯＣＨ（ＣＨ３）２、および−ＳＣＨ（ＣＨ３）２から選択され、各Ｒ３は独立して、Ｈおよび−ＣＨ３から選択され、Ｒ４は、４−モルホリニル、１−ピペリジニル、４−チオモルホリニル、−ＮＨ（ＣＨ２）３ＯＨ、および４−メチル−１−ピペラジニルから選択され、但し、ＡまたはＸのうちの一方がＮである場合、ＡまたはＸのうちの他方はＣＨである）
に記載の中間体を提供する。
【００２７】
本発明はまた、式Ｉの化合物
【化４】
2014532644.tif 000006
（ＡはＣＨまたはＮであり、ＸはＣＨまたはＮであり、Ｒ１は、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＯ２Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ４）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ４、および−ＮＨＳＯ２ＣＨ３から選択され、Ｒ２は、−Ｃ３−４アルキル、−ＯＣＨ（ＣＨ３）２、および−ＳＣＨ（ＣＨ３）２から選択され、各Ｒ３は独立して、Ｈ、および−ＣＨ３から選択され、Ｒ４は、４−モルホリニル、１−ピペリジニル、４−チオモルホリニル、−ＮＨ（ＣＨ２）３ＯＨ、および４−メチル−１−ピペラジニルから選択される）
を調製する方法を提供する。その方法は、式ＩＩの化合物
【化５】
2014532644.tif 000007
（式中、Ｒ１〜Ｒ４は上記の通りであり、Ｒは、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４ハロアルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−４アルキル−Ｃ３−６シクロアルキル、フェニル、およびＣ１−５アルキルフェニルから選択される）
を脱エステル化して式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を得ることを含む。
【００２８】
本発明はまた、ａ）２θにおいて５．４、７．５、１４．６、および１９．９＋／−０．２、またはｂ）２θにおいて５．４、７．５、１４．６、１６．０、１９．４および１９．９＋／−０．２、またはｃ）２θにおいて５．４、７．５、１４．６、１５．７、１６．０、１９．４、１９．９および２２．１＋／−０．２におけるピークを含むＣｕＫα源（λ＝１．５４０５６Å）から得られるＸ線粉末回折パターンにより特徴付けられる結晶形態の４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］安息香酸である化合物を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００２９】
【図１】図１は、結晶性４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］安息香酸についての代表的なＸＲＤパターンのスペクトログラムである。ＸＲＤスペクトログラムは以下に記載するように得た。
【発明を実施するための形態】
【００３０】
本明細書で使用する場合、アルキルという用語は、直鎖、例えば、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３または分枝鎖、すなわち、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ（ＣＨ３）３または−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２であってもよい炭素置換基を指す。
【００３１】
好ましくは、上記の化合物の形態全てについて、Ｒ２置換基についてのアルキル鎖は、分枝アルキル鎖、好ましくはイソプロピルアルキル基またはｔｅｒｔ−ブチル基である。
【００３２】
本明細書で使用する場合、Ｃ１−４ハロアルキルという用語は、水素の１つ以上がハロゲンで置換される１〜４個の炭素の炭化水素置換基を指す。ハロアルキルは、水素原子が全てハロゲン原子で置換されているパーハロアルキルであってもよい。あるいは、１、２、３またはそれ以上の水素が、ハロゲンにより置換されていてもよい。さらに、ハロゲンは同じ炭素原子に結合する必要はない。
【００３３】
「患者」とは、哺乳動物、好ましくはヒトを指す。
【００３４】
「薬学的に許容可能な塩」という用語は、臨床的および／または獣医的使用に許容可能であるとみなされる本発明の化合物の塩を指す。薬学的に許容可能な塩およびそれらを調製するための一般的方法は当該技術分野において周知である。例えば、Ｐ．Ｓｔａｈｌら、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ、Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｕｓｅ、（ＶＣＨＡ／Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ、２００２）；Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅら、「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ」、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｖｏｌ．６６、Ｎｏ．１、１９７７年１月を参照のこと。
【００３５】
即時のスキーム、調製例、実施例および手順に使用される用語および略語は、他に指定されない限り、それらの通常の意味を有する。
【００３６】
本明細書に使用される場合、以下の用語は示した意味を有する：「ＡｃＯＨ」とは酢酸を指し、「ＡＴＲＡ」とは全てのトランスレチノイン酸を指し、「ＢＯＰ」とはベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェートを指し、「ＣＤＩ」とは１，１’−カルボニルジイミダゾールを指し、「ＣＨＡＰＳ」とは３−［（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−１−プロパンスルホネート水和物を指し、「ＤＣＭ」とはジクロロメタンを指し、「ＤＤＱ」とは２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノ−１，４−ベンゾキノンまたは４，５−ジクロロ−３，６−ジオキソ−シクロヘキサ−１，４−ジエン−１，２−ジカルボニトリルを指し、「ＤＭＦ」とはジメチルホルムアミドを指し、「ＤＭＳＯ」とはメチルスルホキシドを指し、「ＤＴＴ」とはジチオスレイトールを指し、「ＥＤＣＩ」とは１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩を指し、「ＥｔＯＡｃ」とは酢酸エチルを指し、「ＥｔＯＨ」とはエタノールを指し、「ＦＢＳ」とはウシ胎仔血清を指し、「ＨＥＰＥＳ」とは４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸を指し、「ＨＯＢＴ」とは１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物を指し、ＬＣ−ＥＳ／ＭＳとは液体クロマトグラフィーエレクトロスプレー質量分析を指し、「ＭｅＯＨ」とはメタノールを指し、「ＭＴＢＥ」とはメチルｔ−ブチルエーテルを指し、「ＰＣＰＮｉＣｌ」とはリン−炭素−リン原子がピンサー複合体におけるニッケルに結合する試薬を指し、「ＳＰＡ」とはシンチレーション近接アッセイを指し、「ＴＦＡ」とはトリフルオロ酢酸を指し、「ＴＨＦ」とはテトラヒドロフランを指し、「ＴＴＮＰＢ」とはテトラヒドロ−５，５，８，８−テトラメチル−２−ナフタレニル）−１−プロペニル］安息香酸を指す。
【００３７】
本発明の化合物は、当該技術分野において公知の様々な手順および以下のスキーム１〜５に示されている一般的手順により調製され得る。しかしながら、以下の説明は、本発明の範囲を限定することを決して意図するものではない。例えば、記載されている経路の各々についての特定の合成工程は、本発明のさらなる化合物を調製するために、異なる様式で、または異なるスキームからの工程と共に組み合わされてもよい。
【００３８】
試薬および開始物質は、当業者に容易に入手可能であるか、または有機および複素環化学の標準的な技術から選択される手順、ならびに以下の実施例１に記載した手順により作製され得る。
【００３９】
置換基Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ａ、およびＸは、以前に示されているように定義される。他の可変物はスキームに付随している文章において定義される。反対に指定されない限り、以下の調製例および実施例の名称は、Ｓｙｍｙｘ  Ｄｒａｗ（登録商標）バージョン３．２（Ｓｙｍｙｘ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ，Ｉｎｃ．）におけるＩＵＰＡＣ命名特性を使用して行う。
【化６】
2014532644.tif 000008
【００４０】
スキーム１は式（８）により示される本発明の化合物の合成を示す。
【００４１】
工程Ａにおいて、式（１）のアルデヒド（Ａ＝ＣＨまたはＮ）は、４−アセチル安息香酸（２）と縮合して、式（３）のプロペニル安息香酸を生じる。反応は、１２時間〜２日間、１０〜８０℃の温度にてＥｔＯＨおよび水の混合物中で進行する。
【００４２】
工程Ｂにおいて、プロペニル安息香酸（３）は、酸触媒を使用して安息香酸エステル（４）にエステル化される；好ましくは、安息香酸エステルは、４〜２４時間、−１０〜５０℃にてＭｅＯＨ中のメタンスルホン酸を使用して調製される安息香酸メチルである。
【００４３】
工程Ｃにおいて、安息香酸エステル（４）は、式（５）（Ｘ＝ＣＨまたはＮ）のフェニルまたはピリジルヒドラジンと反応して式（６）のジヒドロピラゾールを生じる。好ましい条件は、８〜２４時間、７０℃〜還流温度の溶媒の温度にて１−ブタノールおよび酢酸の混合物を使用する。
【００４４】
工程Ｄにおいて、ジヒドロピラゾール（６）は式（７）のピラゾールベンゾエートに酸化される。文献はこのような酸化について当業者に様々な選択肢を提供する。好ましい条件は、４〜２４時間、５０℃〜還流温度の溶媒にて１，２−ジクロロエタンおよび酢酸の混合物中の酸化マンガン（ＩＶ）を使用する。他の好ましい条件は還流トルエン中のＤＤＱを使用する。
【００４５】
工程Ｅにおいて、ピラゾールベンゾエート（７）は、０〜６０℃にて４〜２４時間、ＴＨＦ／ＭｅＯＨまたはＴＨＦ／ＭｅＯＨ／水の混合物中の無機塩基、好ましくは水酸化リチウムを使用して式（８）のピラゾール安息香酸に加水分解される。
【００４６】
式（１）のベンズアルデヒドまたはピリジン−４−カルボキシアルデヒドは商業的に利用可能であるかまたは文献の手順により容易に調製され得る。同様に、式（５）のフェニルおよびピリジルヒドラジンは商業的に利用可能であるかまたは容易に調製され得る。
【００４７】
【化７】
2014532644.tif 000009
スキーム２は、Ｒ２ａ＝ＩまたはＲ２であり、Ｒ３ａがＮ（Ｒ３）２またはＲ４である、本発明の化合物（１２）を作製するための代替手段を示す。
【００４８】
工程Ａにおいて、安息香酸またはピコリン酸（９）はアミド化されて、式（１０）のベンズアミドまたはピリジンカルボキサミドを形成する。カルボン酸からアミドを作製するために当業者に利用可能な種々のカップリング試薬および反応条件が存在する。好ましい条件は、適切なアミンの存在下でジイソプロピルエチルアミンなどの有機塩基と共に、ＤＭＦなどの不活性溶媒中のカップリング試薬としてＢＯＰを使用する。他の好ましい条件はジクロロメタン中のＥＤＣＩおよびＨＯＢＴを使用する。あるいは、カルボニルイミジダゾールはＣＤＩを使用してインサイチュで作製され、次いでアミンと反応する。
【００４９】
工程Ｂにおいて、Ｒ２ａ＝Ｉであり、Ａ＝ＣＨである場合、ヨードｔ−ブチルフェニル（１０）は式（１１）のイソプロピルチオフェニルに変換される。反応は、亜鉛およびニッケルＰＣＰピンサー複合体、例えば［ＮｉＣｌ｛Ｃ６Ｈ３−２，６−（ＯＰＰｈ２）２｝］（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．２００６、４９、５０５９）の存在下で１，２−ジイソプロピルスルファンを使用してＤＭＦなどの不活性溶媒中で実施される。反応は４〜２４時間、８０〜１２０℃の温度で進行する。
【００５０】
工程Ｃにおいて、式（１１）または（１０）の安息香酸エステルは、スキーム１、工程Ｅについて以前に記載されているように加水分解される。
【００５１】
安息香酸またはピコリン酸（９）は、スキーム１、工程Ｃについて記載されているようにメチルプロペノイルベンゾエート（３）を用いて対応するヒドラジンを環化することにより作製され得る。
【００５２】
【化８】
2014532644.tif 000010
スキーム３は本発明の化合物（１５）を導くさらなる化学修飾を示す。
【００５３】
ニトロフェニルまたは２−ニトロピリジル（１３）は、スキーム１、工程Ｃについて記載されているようにプロペノイルベンゾエート（４）を用いて対応するヒドラジンを環化することにより作製され得る。４−（ニトロフェニル）ヒドラジンおよび５−ヒドラジニル−２−ニトロ−ピリジンは商業的に利用可能であるか、または当業者に公知の化学を使用して作製され得る。あるいは、アニリンまたは２−アミノピリジン（１４）は、当業者により後で遊離アミンに変換される他のフェニルヒドラジンまたはヒドラジノピリジン中間体を使用して得られ得る。必要な場合、適切な保護基が使用されてもよい。
【００５４】
工程Ａにおいて、式（１３）のニトロフェニルまたは２−ニトロピリジルは、式（１４）のアニリンまたは２−アミノピリジルに還元される。還元は、鉄および塩化アンモニウムの存在下でＭｅＯＨおよび水の溶媒混合物中に実施される。反応物は１〜８時間、還流温度で加熱される。
【００５５】
還元後、生じたアミンは、ピリジンの存在下で塩化メタンスルホニルを使用して工程Ｂにおいてスルホニル化される。加水分解、工程Ｃは、スキーム１、工程Ｅにおいて以前に記載されている通りである。
【００５６】
【化９】
2014532644.tif 000011
スキーム４は、本発明の化合物（８）を生じる、ピラゾールコアを構築する代替経路を示す。
【００５７】
工程Ａにおいて、フェニルまたはピリジルヒドラジン（５）は、４−（２−メトキシカルボニル−アセチル）−ベンゾエート（１６ａ、Ｒａ＝ＣＯ２Ｍｅ）を用いてまたは４−（２−シアノアセチル）ベンゾエート（１６ｂ、Ｒ＝ＣＮ）を用いて環化されて、ヒドロキシピラゾール（１７ａ、Ｙ＝ＯＨ）（Ｓｙｎｌｅｔｔ  ２００４、７９５）またはアミノピラゾール（１７ｂ、Ｙ＝ＮＨ２）をそれぞれ生じる。反応は溶媒の還流温度にてＭｅＯＨ（安息香酸メチルについて）などのプロトン性溶媒中で進行する。
【００５８】
工程Ｂにおいて、ヒドロキシピラゾール（１７ａ）およびアミノピラゾール（１７ｂ）は、ブロモピラゾール（１８ａ）およびヨードピラゾール（１８ｂ）にそれぞれに変換される。溶媒の還流温度にて、アセトニトリルなどの不活性溶媒中の三臭化リンを使用してブロモピラゾール（１８ａ）が形成される。ヨードピラゾール（１８ｂ）が、ジヨードメタンを添加してまたは添加せずにヨウ化銅（Ｉ）などの適切なヨウ化物源の存在下で、亜硝酸イソアミルまたは亜硝酸ｔ−ブチルなどの亜硝酸アルキルを使用してアミノピラゾール（１７ｂ）の酸化的脱アミノ反応により形成される。反応は、１〜１２時間にわたって６０〜８５℃にて、アセトニトリルなどの不活性溶媒中で行われる。
【００５９】
工程Ｃにおいて、式（７）のｔｅｒｔ−ブチルフェニルまたはｔｅｒｔ−ピリジルピラゾールは、ブロモまたはヨードピラゾール（１８ａまたは１８ｂ）と、フェニルまたは４−ピリジルボロン酸エステル（１９）との間のクロスカップリング反応を使用して得られる。ボロン酸エステルが示されているが、ボロン酸はそれら自体でＳｕｚｕｋｉ反応と同様に作用できることは当業者に公知である。さらに、このような反応に使用され得る種々の反応条件およびＰｄ触媒が存在することは当業者に公知である。Ｚ＝Ｂｒ（１８ａ）である場合の好ましい条件は、炭酸ナトリウム水溶液などの無機塩基の存在下で、ＴＨＦなどの不活性溶媒中でテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）などのパラジウム触媒を使用する。反応は約５０〜６５℃にて２〜２４時間にわたって進行する。Ｚ＝Ｉ（１８ｂ）である場合の好ましい条件は、炭酸カリウムなどの無機塩基の存在下で、ＴＨＦ／水の溶媒混合物中でビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリドを使用する。反応は約６０℃〜溶媒の還流温度にて２〜２４時間進行する。
【００６０】
加水分解、工程Ｄはスキーム１、工程Ｅに以前に記載されている通りである。
【００６１】
ボロン酸エステル（１９）または類似のボロン酸は、文献の手順を使用して、または文献の手順を適応することにより容易に作製され得る（例えば、Ｏｒｇ  Ｓｙｎ  ２００５、８２、１２６を参照のこと）。
【００６２】
【化１０】
2014532644.tif 000012
スキーム５は、Ｒ３ａがＮ（Ｒ３）２またはＲ４である、本発明の化合物（８）を作製するための別の合成経路を例示する。
【００６３】
工程Ａにおいて、アミノピラゾール安息香酸またはピコリン酸（２０）はアシル化されて式（２１）のベンズアミドまたはピリジンカルボキサミドを形成する。カルボン酸からアミドを作製するために当業者に利用可能な種々のカップリング試薬および反応条件が存在する。好ましい条件は、ＴＨＦなどの不活性溶媒中でＣＤＩを使用してインサイチュでカルボニルイミダゾールを生成する。この後、４５〜７０℃にて、モルホリン、チオモルホリン、ピペリジン、または１−メチルピペラジンなどの環状アミンと反応させる。
【００６４】
工程Ｂにおいて、アミノピラゾール（２１）は、スキーム４、工程Ｂについて以前に記載されているように、サントマイヤー反応を使用してヨードピラゾール（２２）に変換される。
【００６５】
工程Ｃにおいて、ヨードピラゾール（２２）とフェニルまたは４−ピリジルボロン酸エステル（またはボロン酸）との間のクロスカップリング反応は、スキーム４、工程Ｃにおいて実質的に以前に記載されているように進行し、その後、工程Ｄにおいて加水分解される。
【実施例】
【００６６】
調製例１
３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルベンズアルデヒド
１−ブロモ−３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルベンゼン（５．００ｇ，１８．５７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５０ｍＬ）中に窒素雰囲気下で溶解する。−７８℃に冷却する。ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中の２．５Ｍ）（２２．２９ｍＬ，５５．７２ｍｍｏｌ）を−７８℃でゆっくり加える。−７８℃で約３０分間撹拌する。ＤＭＦ（４．３１ｍＬ，５５．７２ｍｍｏｌ）を滴下して加える。混合物を０℃まで温め、２．５時間撹拌する。ＮＨ４Ｃｌ（３０ｍＬ）水溶液を混合物に注ぐ。ＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機部分をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾過物を回収し、減圧下で濃縮する。残留物を、０−１０％のＥｔＯＡｃ／石油エーテルの勾配で溶出するフラッシュクロマトグラフィーを使用して精製して、標題化合物（２．９６ｇ，７３％）を白色固体として得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ２１９  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００６７】
調製例２
１−（ブロモメチル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ヨード−ベンゼン
１−ｔｅｒｔ−ブチル−３−ヨード−５−メチルベンゼン（１．１４ｇ，４．１４ｍｍｏｌ）を四塩化炭素（２０ｍＬ）中に溶解する。過酸化ベンゾイル（０．０４ｇ，０．１６６ｍｍｏｌ）を加える。混合物を加熱して還流させ、Ｎ−ブロモコハク酸イミド（１．４７ｇ，８．２８ｍｍｏｌ）を加える。混合物を一晩還流温度で撹拌する。反応物を水（１００ｍＬ）に注ぎ、ジクロロメタン（２×５０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機物を飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾過物を回収し、減圧下で濃縮する。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、１−（ブロモメチル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ヨード−ベンゼンを、１−ｔｅｒｔ−ブチル−３−（ジブロモメチル）−５−ヨードベンゼン（１．２４ｇ）（モノ−ブロモ／ジブロモの比率が約１．５／１）との混合物として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．２９−１．３０（ｍ，９Ｈ），１．３１−１．３２（ｍ，６Ｈ），４．３９（ｓ，２Ｈ），６．５３（ｓ，０．４３Ｈ），７．３４（ｓ，１Ｈ），７．４８（ｓ，０．４３Ｈ），７．５６（ｓ，１Ｈ），７．６２−７．６５（ｍ，１．４９Ｈ），７．７４（ｓ，０．５６Ｈ）。
【００６８】
調製例３
３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ヨード−ベンズアルデヒド
１−（ブロモメチル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ヨード−ベンゼン（３．８０ｇ，１０．７６ｍｍｏｌ）をジメチルスルホキシド（２０ｍＬ）中に溶解する。１００℃まで加熱し、４時間撹拌する。反応物を室温まで冷却する。混合物を水（４０ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）の間で分離する。有機部分をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾過物を回収し、減圧下で濃縮する。０−５％のＥｔＯＡｃ／石油エーテルの勾配でフラッシュクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）システム、８０ｇカードリッジ）によって精製して、標題化合物（１．９０ｇ，６１％）を得る。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．３６（ｓ，９Ｈ），７．８７（ｓ，１Ｈ），７．９７（ｓ，１Ｈ），８．０３（ｓ，１Ｈ），９．９２（ｓ，１Ｈ）。
【００６９】
調製例４
３−ブロモ−５−ｔｅｒｔ−ブチルフェノール
窒素雰囲気下で、１，３−ジブロモ−５−ｔｅｒｔ−ブチルベンゼン（１０．００ｇ，３４．２５ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（３０ｍＬ）中に溶解する。−７８℃まで冷却する。ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中の２．５Ｍ）（１４．３８ｍＬ，３５．９６ｍｍｏｌ）を−７８℃でゆっくり加える。得られた混合物を３０分間−７８℃で撹拌する。トリメトキシボラン（４．８８ｍＬ，４２．８１ｍｍｏｌ）を１０分にわたって加える。室温まで温め、１時間撹拌する。混合物を０℃まで冷却する。ＡｃＯＨ（１３．７４ｍＬ，２３９．７２ｍｍｏｌ）を加え、１０分間撹拌する。過酸化水素（４．１１ｍＬ，１３４．９３ｍｍｏｌ）及び水（０．７１８ｍＬ）をゆっくり加え、３時間撹拌する。水（５ｍＬ）を加え、ＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機部分をブラインで洗浄する。粗物質を、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ（１０：１）で溶出するフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、標題化合物（６．４６ｇ，８２％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ（７９Ｂｒ／８１Ｂｒ）２２７／２２９  ［Ｍ−Ｈ］−。
【００７０】
調製例５
１−ブロモ−３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロポキシ−ベンゼン
３−ブロモ−５−ｔｅｒｔ−ブチルフェノール（２．００ｇ，８．７３ｍｍｏｌ）及び２−ブロモプロパン（１．２７ｍＬ，１３．０９ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１０ｍＬ）中に溶解する。炭酸カリウム（３．６２ｇ，２６．１９ｍｍｏｌ）を加える。５０℃まで加熱し、２時間撹拌する。ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、反応混合物を水（３×２０ｍＬ）で洗浄する。有機部分を減圧下で乾燥し、濃縮する。粗混合物を、石油エーテルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、標題化合物（２．００ｇ，８５％）を透明液体として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３３００ＭＨｚ）δ１．２８（ｓ，９Ｈ），１．３２−１．３６（ｄ，６Ｈ），４．４７−４．５２（ｍ，１Ｈ），６．８１−６．８６（ｍ，２Ｈ），７．０６−７．０８（ｔ，１Ｈ）。
【００７１】
調製例６
３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロポキシ−ベンズアルデヒド
１−ブロモ−３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロポキシベンゼン（２．００ｇ，７．３８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５０ｍＬ）中に窒素雰囲気下で溶解する。溶液を−７８℃まで冷却する。ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中の２．５Ｍ）（８．８５ｍＬ，２２．１２ｍｍｏｌ）を−７８℃でゆっくり加え、温度を−７０℃以下に維持する。混合物を３０分間−７８℃で撹拌する。ＤＭＦ（１．７１ｍＬ，２２．１２ｍｍｏｌ）を混合物に−７８℃で滴下して加える。混合物を０℃まで温め、２．５時間撹拌する。反応物をＮＨ４Ｃｌ水溶液でクエンチする。ＥｔＯＡｃで抽出し、合わせた有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。得られた残留物を、約０−１０％のＥｔＯＡｃ／石油エーテルの勾配で溶出する、シリカ上のフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、標題化合物（１．３５ｇ，８３％）を得る。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ１．３４（ｓ，９Ｈ），１．３５−１．３７（ｔ，６Ｈ），４．５９−４．６７（ｍ，１Ｈ），７．１８−７．２１（ｍ，２Ｈ），７．４５−７．４６（ｔ，１Ｈ），９．９５（ｓ，１Ｈ）。
【００７２】
調製例７
４−［（Ｅ）−３−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）プロパ−２−エノイル］安息香酸
４−アセチル安息香酸（１５．００ｇ，９１．３７ｍｍｏｌ）を、エタノール（８０ｍＬ）、及び水（４０ｍＬ）中に溶解する。水酸化ナトリウム（３．６５ｇ，９１．２６ｍｍｏｌ）を加える。混合物を室温で３０分間撹拌する。３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルベンズアルデヒド（２０．００ｇ，９１．６０ｍｍｏｌ）を加える。混合物を室温で２日間撹拌する。反応物を２ＮのＨＣｌ（１０ｍＬ）でクエンチする。約ｐＨ＝２に２ＮのＨＣｌ（２０ｍＬ）で調整する。得られた白色固体を濾過し、エタノール（１００ｍＬ）で洗浄する。固体を減圧下で乾燥させて、標題化合物（１８．３０ｇ，５５％）を白色固体として得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ３６５  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７３】
以下の表１に示す中間体を、４−アセチル安息香酸及び１．０５−１．１当量の固体ＮａＯＨ又は５ＮのＮａＯＨとともに適切なベンズアルデヒドを用いて、基本的に調製例７に記載したような手順に従って調製する。酸性化時に固体を濾過し、石油エーテルで洗浄する。
【表１】
2014532644.tif 000013
【００７４】
調製例１０
メチル−４−［（Ｅ）−３−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）プロパ−２−エノイル］ベンゾエート
４−［（Ｅ）−３−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）プロパ−２−エノイル］安息香酸（２．３０ｇ，６．３１ｍｍｏｌ）をメタノール（２５０ｍＬ）中に溶解し、０℃まで冷却する。メタンスルホン酸（４．１４ｍＬ，６３．１０ｍｍｏｌ）を０℃で加える。混合物を一晩撹拌し、室温まで温める。混合物を減圧下で濃縮する。ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）を混合物に加える。有機物をＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍＬ）で洗浄する。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾過物を回収し、減圧下で濃縮する。残留物を、０−１０％のＥｔＯＡｃ／石油エーテルの勾配で溶出するフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、標題化合物（１．９０ｇ，８０％）を白色固体として得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ３７９  ［Ｍ＋Ｈ］＋．
【００７５】
以下の表２に示す中間体を、適切なプロペノイル安息香酸を用いて、基本的に調製例１０に記載したような手順に従って調製する。
【表２】
2014532644.tif 000014
【００７６】
調製例１３
２−メチルスルファニル−５−ニトロ−ピリジン
２−クロロ−５−ニトロピリジン（２．２０ｇ，１３．８８ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（３．００ｍＬ，２１．５２ｍｍｏｌ）をメタノール（２０ｍＬ）中に溶解する。メチルメルカプタンナトリウム（１．００ｇ，１４．２７ｍｍｏｌ）をメタノール（１０ｍＬ）中に室温で加え、２時間撹拌する。反応溶液を減圧下で濃縮する。１０％のＫ２ＣＯ３水溶液を得られた残留物に加える。混合物をジクロロメタンで３回抽出する。合わせた有機部分をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、標題化合物（２．３ｇ，１３．５１ｍｍｏｌ，９７％）を黄色固体として得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  １７１  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７７】
調製例１４
２−メチルスルホニル−５−ニトロ−ピリジン
２−（メチルチオ）−５−ニトロピリジン（２．３０ｇ，１３．５１ｍｍｏｌ）をアセトン（２０ｍＬ）中に溶解する。２Ｎの硫酸（２５ｍＬ，５０．００ｍｍｏｌ）を滴下して加える。ＫＭｎＯ４（３．００ｇ，１８．９８ｍｍｏｌ）を水（５０ｍＬ）中に滴下して加え、スラリーを得る。混合物を室温で一晩撹拌する。固体を濾過する。固体をＥｔＯＨ／ＭｅＯＨ（１０：１）の加温混合物と共に撹拌する。得られた不均質混合物を２ｃｍのシリカを通して濾過して、不溶性塩を除去する。濾過物を濃縮して、標題化合物（１．８０ｇ，６６％）を淡黄色固体として得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ２０３  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７８】
調製例１５
６−メチルスルホニルピリジン−３−アミン
２−（メチルスルホニル）−５−ニトロピリジン（１．８０ｇ，８．９０ｍｍｏｌ）を水（２５ｍＬ）及びメタノール（２５ｍＬ）中に溶解する。鉄（１．４９ｇ，２６．６８ｍｍｏｌ）、及び塩化アンモニウム（２．８６ｇ，５３．４７ｍｍｏｌ）を加える。１時間還流温度で撹拌する。混合物を濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄する。濾過物をＥｔＯＡｃで抽出する。有機部分をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾過物を回収し、濾過物を減圧下で濃縮して、標題化合物（１．４０ｇ，９１％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  １７３  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７９】
調製例１６
（６−メチルスルホニル−３−ピリジル）ヒドラジン塩酸塩
６−（メチルスルホニル）ピリジン−３−アミン（０．５０ｇ，２．９０ｍｍｏｌ）を濃塩酸（６ｍＬ）中に溶解する。亜硝酸ナトリウム（０．２４ｇ，３．４８ｍｍｏｌ）を水（１０ｍＬ）中に、−１０〜−１５℃でゆっくりと滴下して加える。混合物を２時間、−１０〜−１５℃で撹拌する。二酸化スズ（２．２０ｇ，１１．６０ｍｍｏｌ）を濃塩酸（１５ｍＬ）中に−５℃で滴下して加える。混合物を１時間−５℃で撹拌する。得られた黄色固体を濾過し、ジエチルエーテルで洗浄して、標題化合物（０．２７０ｇ，４２％）を黄色固体として得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  １８８  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８０】
調製例１７
４−アミノ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−ベンゼンスルホンアミド
４−アセトアミドベンゼン−１−スルホニルクロライド（１．１３ｇ，４．８４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２０ｍＬ）中に溶解する。ジメチルアミン（ＴＨＦ中の２Ｍ，１０ｍＬ，２０．００ｍｍｏｌ）を撹拌しながらゆっくり加える。混合物を一晩撹拌する。混合物を減圧下で濃縮する。残留物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）中に溶解する。有機部分を２ＮのＮａＯＨ及びブラインで洗浄する。Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾過物を回収し、濃縮して乾燥させる。得られた油をエタノール中に溶解する。濃塩酸（１０ｍＬ，１１６．４３ｍｍｏｌ）を加える。混合物を加熱して還流させ、４時間撹拌する。物質を減圧下で濃縮する。残留物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）及び水（５０ｍＬ）中に溶解する。約ｐＨ＝１０に２ＮのＮａＯＨで調整する。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾過物を回収し、濾過物を濃縮して乾燥させて、標題化合物（０．８５ｇ，８８％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ２０１  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８１】
調製例１８
４−ヒドラジノ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−ベンゼンスルホンアミド塩酸塩
４−アミノ−Ｎ，Ｎ−ジメチルベンゼンスルホンアミド（２００ｍｇ，０．９９９ｍｍｏｌ）を濃塩酸（４ｍＬ）中に溶解する。０℃まで冷却する。亜硝酸ナトリウム（８０ｍｇ，１．１６ｍｍｏｌ）を水（０．４ｍＬ）中に０℃で滴下して加える。混合物を０℃で１時間撹拌する。濃ＨＣｌ（０．８ｍＬ）中の二酸化スズ（７６０ｍｇ，４．０１ｍｍｏｌ）の溶液を混合物に０℃で滴下して加える。混合物を０℃で１時間撹拌する。溶液を約ｐＨ＝１０に２ＮのＮａＯＨで調整する。混合物をＥｔＯＡｃで抽出する。有機部分を減圧下で濃縮する。２ＮのＨＣｌ（５ｍＬ，１０．００ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１時間撹拌する。溶液を減圧下で濃縮して、標題化合物（１８０ｍｇ）を得る。粗生成物を更なる精製をすることなく次の工程に直接用いる。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ２１６  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８２】
調製例１９
４−［３−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−５−（４−メトキシカルボニルフェニル）−３，４−ジヒドロピラゾール−２−イル］安息香酸
（Ｅ）−メチル４−（３−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）アクリロイル）ベンゾエート（１．００ｇ，２．６４ｍｍｏｌ）、及び４−ヒドラジニル安息香酸（０．６４ｇ，４．２３ｍｍｏｌ）を１−ブタノール（１００ｍＬ）中に溶解する。酢酸（５８ｍＬ）を加え、１２０℃まで２０時間加熱する。混合物を減圧下で濃縮する。固体をＭｅＯＨ（３×１０ｍＬ）で洗浄し、標題化合物（１．０２ｇ，７５％）を白色固体として得る。
【００８３】
以下の表３に示す中間体を、特に指定がない限り、５／４〜１０／３の様々な比率の１−ブタノール／ＡｃＯＨの溶媒系において、適切なヒドラジン（１．６−２当量）及び適切な安息香酸メチルを用いて、基本的に調製例１９に記載したような手順に従って調製する。
【表３】
2014532644.tif 000015
【００８４】
調製例２４
５−ブロモピリジン−２−カルボン酸
５−ブロモピコリノニトリル（１ｇ，５．４６ｍｍｏｌ）を、丸底フラスコ内の濃ＨＣｌ（１３．４ｍＬ，１３９．６６ｍｍｏｌ）に加える。混合物を一晩撹拌しながら加熱して還流させる。混合物を室温まで冷却する。得られた白色固体を濾過し、水で洗浄する。固体を減圧下で乾燥させて、５−ブロモピリジン−２−カルボン酸（０．７０７ｇ，６４％）を白色固体として得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ２０２  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８５】
調製例２５
５−ブロモ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−ピリジン−２−カルボキサミド
５−ブロモピリジン−２−カルボン酸（０．７１ｇ，３．５０ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のジメチルアミン塩酸塩（０．３２ｇ，３．９２ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（０．７７ｇ，４．０２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ（０．３５ｇ、２．２９ｍｍｏｌ）、及びトリエチルアミン（１．４７ｍＬ，１０．５５ｍｍｏｌ）の溶液に加える。混合物を４０時間室温で撹拌する。混合物を減圧下で濃縮する。残留物をジクロロメタン（２０ｍＬ）及び水（５ｍＬ）に溶解する。混合物をＮａＨＣＯ３水溶液（２×１０ｍＬ）で洗浄する。合わせた有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾過物を回収し、減圧下で濃縮する。得られた残留物を、０−６０％のＥｔＯＡｃ／石油エーテルの勾配で２０分にわたって溶出するフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、標題化合物（０．６７ｇ，８４％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  （７９Ｂｒ／８１Ｂｒ）  ２２９／２３１  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８６】
調製例２６
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［［６−（ジメチルカルバモイル）−３−ピリジル］アミノ］カルバメート
ｔｅｒｔ−ブチルカルバゼート（２．１８ｇ，１６．４９ｍｍｏｌ）、５−ブロモ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−ピリジン−２−カルボキサミド（３．４４ｇ，１５．０２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（３４０ｍｇ，１．５０ｍｍｏｌ）、ナトリウムｔ−ブトキシド（２．０５ｇ，２１．０１ｍｍｏｌ）、及び４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテン（０．８９ｇ，１．５１ｍｍｏｌ）を、トルエン（５０ｍＬ）中に溶解する。反応容器を３回窒素でパージする。混合物を８５℃まで加熱し、６時間撹拌する。物質を珪藻土で濾過し、ＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ）で洗浄する。混合物を減圧下で濃縮する。得られた残留物を、０−１５％のＭｅＯＨ／ＤＣＭの勾配で３０分にわたって溶出するフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、標題化合物（０．４２ｇ，１０％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ２８１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８７】
調製例２７
メチル４−［３−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−２−［６−（ジメチルカルバモイル）−３−ピリジル］−３，４−ジヒドロピラゾール−５−イル］ベンゾエート
ジ−ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［［６−（ジメチルカルバモイル）−３−ピリジル］アミノ］カルバメート（４２０ｍｇ，１．５０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２０ｍＬ）中に溶解する。ＴＦＡ（５ｍＬ）を撹拌しながら一度に加える。室温で２時間撹拌する。混合物を減圧下で濃縮して油を得る。油を１−ブタノール（２０ｍＬ）及びＡｃＯＨ（５ｍＬ）中に溶解する。メチル４−［（Ｅ）−３−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）プロパ−２−エノイル］ベンゾエート（６００ｍｇ，１．５９ｍｍｏｌ）を反応混合物に加える。反応容器を３回窒素でパージする。混合物を１２０℃まで加熱し、１０時間撹拌する。混合物を減圧下で濃縮する。得られた残留物を、１：１のＤＣＭ／ＥｔＯＡｃで溶出する、分取ＴＬＣによって精製して、標題化合物（８５ｍｇ，１１％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ５４１  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８８】
調製例２８
メチル４−［３−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−２−（４−ニトロフェニル）−３，４−ジヒドロピラゾール−５−イル］ベンゾエート
メチル４−［（Ｅ）−３−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）プロパ−２−エノイル］ベンゾエート（２００ｍｇ，０．５２８ｍｍｏｌ）及び（４−ニトロフェニル）ヒドラジン（９０ｍｇ，０．５８８ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（４ｍＬ）中に溶解する。メタンスルホン酸（０．１４ｍＬ，２．０８ｍｍｏｌ）を加える。溶液を１２０℃までマイクロ波照射を用いて３０分間加熱する。反応物をＮａ２ＣＯ３水溶液（０．２ｍＬ）でクエンチする。得られた固体を濾過し、固体をＭｅＯＨで洗浄して、標題化合物（２７０ｍｇ，定量的）を黄色固体として得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ５１４  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８９】
調製例２９
４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−３−（４−メトキシカルボニルフェニル）ピラゾール−１−イル］安息香酸
４−［３−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−５−（４−メトキシカルボニルフェニル）−３，４−ジヒドロピラゾール−２−イル］安息香酸（１．０２ｇ，１．９９ｍｍｏｌ）を１，２−ジクロロエタン（２０ｍＬ）中に溶解する。酢酸（７７ｍＬ）及び酸化マンガン（ＩＶ）（４．８４ｇ，５５．７１ｍｍｏｌ）を加える。混合物を７０℃まで加熱し、一晩撹拌する。混合物を濾過し、ジクロロメタンで洗浄する。混合物を減圧下で濃縮する。粗生成物を、１：１のジクロロメタン：石油エーテルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーを使用して精製して、標題化合物（１．０１ｇ，９９％）を白色固体として得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ５１１  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９０】
調製例３０
メチル４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−［４−（ピペリジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］ベンゾエート
ピペリジン（０．０２９ｇ，０．３５３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（６ｍＬ）中に溶解する。４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−３−（４−メトキシカルボニルフェニル）ピラゾール−１−イル］安息香酸（０．１２０ｇ，０．２３５ｍｍｏｌ）及びジイソプロピルエチルアミン（０．０５ｍＬ，０．２８２ｍｍｏｌ）を加える。混合物を約１０分間撹拌する。ＢＯＰ（０．１２４ｇ，０．２８２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を約３時間室温で加熱する。水（３ｍＬ）を加え、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で抽出する。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾過物を回収し、濾過物を減圧下で濃縮して乾燥させる。粗生成物を、４：１の石油エーテル／ＥｔＯＡｃで溶出する分取ＴＬＣによって精製して、標題化合物（０．１０８ｇ，８０％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ５７８  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９１】
以下の表４に示す中間体を、適切なアミンを用いて、基本的に調製例３０に記載したような手順に従って調製する。例えば、調製例３１では、アンモニア（メタノール中の２．０Ｍ溶液）を用いる。
【表４】
2014532644.tif 000016
【００９２】
調製例３７
４−［５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ヨード−フェニル）−３−（４−メトキシカルボニルフェニル）ピラゾール−１−イル］安息香酸
４−［５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ヨード−フェニル）−３−（４−メトキシカルボニルフェニル）ピラゾール−１−イル］安息香酸（１．３４ｇ，２．３０ｍｍｏｌ）を１，２−ジクロロエタン（５０ｍＬ）中に溶解する。ＡｃＯＨ（１０ｍＬ）及び酸化マンガン（ＩＶ）（５．６０ｇ，６４．４２ｍｍｏｌ）を加える。混合物を一晩室温で撹拌する。混合物を濾過し、ＤＣＭで洗浄する。濾過物を減圧下で濃縮する。粗物質を、３−２５％のＥｔＯＡｃ／石油エーテルの勾配で溶出するフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、標題化合物（０．９８ｇ，７３％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ５８１  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９３】
調製例３８
メチル４−［５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ヨード−フェニル）−１−［４−（ジメチルカルバモイル）フェニル］ピラゾール−３−イル］ベンゾエート
４−［５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ヨード−フェニル）−３−（４−メトキシカルボニルフェニル）ピラゾール−１−イル］安息香酸（１．４０ｇ，２．４１ｍｍｏｌ）、ジメチルアミン塩酸塩（０．４３ｇ，５．３１ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（１．１６ｇ，６．０３ｍｍｏｌ）、及びＨＯＢＴ（０．９２ｇ，６．０３ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（２０ｍＬ）中に溶解する。室温で一晩撹拌する。反応物をＮａＨＣＯ３水溶液（１０ｍＬ）でクエンチする。ＤＣＭ（２０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機部分をＮａＨＣＯ３水溶液（２×１０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。得られた残留物を、０−６０％のＥｔＯＡｃ／石油エーテルの勾配で４０分にわたって溶出する、シリカ上でのフラッシュクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）システム、２５ｍＬ／分で４０ｇカードリッジ）によって精製して、標題化合物（１．２０ｇ，８２％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ６０８  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９４】
調製例３９
メチル−４−［５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ヨード−フェニル）−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］ベンゾエート
標題化合物を、基本的に調製例３８に記載されたような手順に従って、４−［５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ヨード−フェニル）−３−（４−メトキシカルボニルフェニル）ピラゾール−１−イル］安息香酸とともに１−メチルピペラジンを用いて調製する。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ６６３  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９５】
調製例４０
メチル４−［５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロピルスルファニル−フェニル）−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］ベンゾエート
メチル４−（５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ヨードフェニル）−１−（４−（ジメチルカルバモイル）フェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ベンゾエート（０．２８ｇ，０．４６１ｍｍｏｌ）及び１，２−ジイソプロピルスルファン（０．０３７ｍＬ，０．２３２ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（２ｍＬ）中に溶解する。亜鉛（０．０３ｇ，０．４５４ｍｍｏｌ）、及び（ＳＰ−４−３０−［２，６−ビス［（ジメチルホスフィノ−κＰ）オキシ］フェニル−κＣ］クロロ−ニッケル（（ＰＣＰ）ＮｉＣｌ）（０．０１ｇ，０．０１７ｍｍｏｌ）（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．２００６，４９，５０５９に従って調製された試薬）を加える。反応容器を３回窒素でパージする。混合物を１１０℃で４時間撹拌しながら加熱する。混合物を水（２０ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出する。合わせた抽出物をブライン（２×１０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮する。粗混合物を、０−２０％のＥｔＯＡｃ／石油エーテルの勾配で３０分にわたって溶出する、シリカ上でのフラッシュクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）システム、２５ｍＬ／分で２０ｇカードリッジ）によって精製して、メチル４−［５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロピルスルファニル−フェニル）−１−［４−（ジメチルカルバモイル）フェニル］ピラゾール−３−イル］ベンゾエート及び出発材料（メチル４−（５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ヨードフェニル）−１−（４−（ジメチルカルバモイル）フェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ベンゾエート）の混合物を白色固体（２１０ｍｇ）として得る。混合物（２１０ｍｇ）を乾燥ＤＭＦ（２ｍＬ）中に溶解する。１，２−ジイソプロピルスルファン（０．０３７ｍＬ，０．２３２ｍｍｏｌ）、亜鉛（０．０３ｇ，０．４５４ｍｍｏｌ）、及び（ＰＣＰ）ＮｉＣｌ（０．０１ｇ，０．０１７ｍｍｏｌ）を加える。反応容器を３回窒素でパージする。混合物を１１０℃で加熱し、一晩撹拌する。混合物を水（２０ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出する。合わせた抽出物をブライン（２×１０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。粗混合物を、０−２０％のＥｔＯＡｃ／石油エーテルの勾配で３０分にわたって溶出する、シリカ上でのフラッシュクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）システム、２５ｍＬ／分で２０ｇカードリッジ）によって精製して、１９０ｍｇの粗物質を得る。粗生成物を、分取ＨＰＬＣ（Ｓｐｒｉｎｇ  Ｃｏｌｕｍｎ（商標）Ｃ１８、２５０×２５０ｍｍ、１０μｍ粒子、水中で０．０５％ＴＦＡとともに７５−１００％のアセトニトリルの勾配で溶出）によって精製して、標題化合物（０．１０ｇ，３９％）を油として得る。ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ５５６  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９６】
調製例４１
メチル４−［５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロピルスルファニル−フェニル）−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］ベンゾエート
標題化合物を、基本的に調製例４０に記載されたような手順に従って、ジイソプロピルスルファン及びメチル４−［５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ヨード−フェニル）−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］ベンゾエートを用いて精製する。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ６１１  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９７】
調製例４２
４−［５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロポキシ−フェニル）−３−（４−メトキシカルボニルフェニル）ピラゾール−１−イル］安息香酸
４−［３−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロポキシ−フェニル）−５−（４−メトキシカルボニルフェニル）−３，４−ジヒドロピラゾール−２−イル］安息香酸（０．５０ｇ，０．９７１ｍｍｏｌ）を、トルエン（１０ｍＬ）中に溶解する。ＤＤＱ（０．４４ｇ，１．９４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２時間撹拌しながら加熱して還流させる。反応物を減圧下で濃縮する。残留物を、３０：１のジクロロメタン／ＭｅＯＨで溶出する分取ＴＬＣによって精製して、標題化合物（０．４７ｇ，９４％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ５１３  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９８】
以下の表５に示す中間体を、適切なジヒドロピラゾールを用いて、基本的に調製例４２に記載したような手順に従って調製する。粗生成物を、石油エーテル／ＥｔＯＡｃで溶出する分取ＴＬＣを用いて精製する。
【表５】
2014532644.tif 000017
【００９９】
調製例４７
メチル４−［５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロポキシ−フェニル）−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］ベンゾエート
１−メチルピペラジン（７０ｍｇ，０．７０２ｍｍｏｌ）及び４−［５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロポキシ−フェニル）−３−（４−メトキシカルボニルフェニル）ピラゾール−１−イル］安息香酸（１８０ｍｇ，０．３５１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）中に溶解する。１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１１８ｍｇ，０．８７８ｍｍｏｌ）及びＥＤＣＩ（１６８ｍｇ，０．８７８ｍｍｏｌ）を加える。混合物を３時間室温で撹拌する。水（３ｍＬ）及びＮａＨＣＯ３水溶液（１０ｍＬ）を加え、ＥｔＯＡｃ（３×１０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して乾燥させる。得られた残留物を、１０：１のＤＣＭ／ＭｅＯＨで溶出する分取ＴＬＣによって精製して、標題化合物（１４０ｍｇ，６７％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ５９５  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１００】
調製例４８
メチル４−［１−（４−アミノフェニル）−５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）ピラゾール−３−イル］ベンゾエート
メチル４−（５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−（４−ニトロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ベンゾエート（２３０ｍｇ，０．４５０ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（８ｍＬ）及び水（８ｍＬ）中に溶解する。鉄（８０ｍｇ，１．４３０ｍｍｏｌ）及び塩化アンモニウム（１２０ｍｇ，２．２４０ｍｍｏｌ）を一度に加える。混合物を加熱して還流させ、２時間撹拌する。混合物を濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄する。混合物を３回ＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機部分をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、標題化合物（２１０ｍｇ，９７％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ４８２  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１０１】
調製例４９
メチル４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−［４−（メタンスルホンアミド）フェニル］ピラゾール−３−イル］ベンゾエート
メチル４−［１−（４−アミノフェニル）−５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）ピラゾール−３−イル］ベンゾエート（２１０ｍｇ，０．４３６ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０ｍＬ）中に溶解する。ピリジン（０．０４ｍＬ，０．４９５ｍｍｏｌ）を加え、５分間撹拌する。メタンスルホニルクロライド（０．０４ｍＬ，０．５１７ｍｍｏｌ）を一度に加え、一晩撹拌する。反応物をＮａ２ＣＯ３水溶液でクエンチする。混合物を３回ＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機部分をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して乾燥させる。得られた残留物を、８−６０％のＥｔＯＡｃ／石油エーテルの勾配で溶出するフラッシュクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）システム、２５ｍＬ／分で２０ｇカードリッジ）によって精製して、標題化合物（２３０ｍｇ，９４％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ５６０  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１０２】
調製例５０
２−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン
約１５分間、窒素をＤＭＦ（１５０ｍＬ）に通して泡立て、その後、試薬を加える。次いで、１−ブロモ−３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルベンゼン（２０．９３ｇ，７７．７４ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラト）ジボロン（２２．７０ｇ，８９．４０ｍｍｏｌ）、及び（１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン）パラジウム（ＩＩ）クロライド（３．１７ｇ，３．８９ｍｍｏｌ）をＤＭＦ中に溶解する。１０分間撹拌する。酢酸カリウム（２２．８９ｇ，２３３．２３ｍｍｏｌ）を加え、７分間、アルゴンを溶液に通して泡立てる。反応物を８５℃まで２４時間撹拌しながら加熱する。反応物を水（１．５Ｌ）で希釈する。得られた茶色の沈殿物を真空濾過により回収し、水で洗浄する。残留物をジクロロメタン中に溶解する。この溶液を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾過物を回収し、減圧下で濃縮する。得られた固体を高温ヘキサン（４００ｍＬ）で粉砕し、濾過し、ヘキサンで洗浄する。濾過物を濃縮して、約３００ｍＬの体積にする。溶液をフリーザーに一晩置く。固体を真空濾過で回収し、冷ヘキサンでリンスする。濾過物を減圧下で濃縮して、１５０ｍＬの体積にする。この混合物をフリーザー内で約１．５時間冷却する。得られた固体を、真空濾過で回収し、冷ヘキサンでリンスする。２つの生産物を合わせ、高真空下で乾燥させて、標題化合物（２１．８５ｇ，８９％）を淡褐色結晶固体として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．３３（ｓ，１２Ｈ），１．３３（ｓ，１８Ｈ），７．５３（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６５（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ）。
【０１０３】
調製例５０Ａ：代替手順
２−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン
リアクターに１−ブロモ−３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルベンゼン（１８２．０ｇ，１．１１５ｍｏｌ）、ビス（ピナコラト）ジボロン（１９７．４ｇ，１．２８１ｍｏｌ）、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）クロライド（２７．６ｇ，０．０５６ｍｏｌ）、酢酸カリウム（１９９．０ｇ，３．３４７ｍｏｌ）及びＤＭＦ（１．２Ｌ）を入れる。得られた溶液を８５℃で５時間加熱する。反応混合物を２５℃で冷却し、水（６Ｌ）を加え、茶色の沈殿物を形成する。濾過し、固体を水で洗浄する。固体を回収する。固体をＤＣＭ（１．８２Ｌ）中に溶解し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾過物を回収し、溶媒を蒸発させる。残留物を熱ヘキサン（３．２Ｌ）で粉砕し、濾過して、触媒を除去する。濾過物を約１．８Ｌまで濃縮する。この溶液を１５℃まで冷却し、４８時間撹拌する。濾過して、固体を回収し、外気で乾燥させて、標題化合物（１５０．０ｇ，７０％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ３１７  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１０４】
調製例５１
３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェノール
３−ブロモ−５−ｔｅｒｔ−ブチルフェノール（２．２９ｇ，１０．００ｍｍｏｌ）、４，，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ−１，３，２−ジオキサボロラン（３．０４６ｇ，１２．０ｍｍｏｌ）、（１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン）パラジウム（ＩＩ）クロライド（０．８２０ｇ，１．００ｍｍｏｌ）、１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン（０．５６０ｇ，１．００ｍｍｏｌ）、及び酢酸カリウム（２．９４ｇ，３０．００ｍｍｏｌ）を、１，４−ジオキサン（８０ｍＬ）中に溶解する。反応容器を３回窒素でパージする。混合物を８０℃で加熱し、一晩撹拌する。混合物を珪藻土で濾過し、固体ケーキをＥｔＯＡｃでリンスする。濾過物を減圧下で濃縮する。粗混合物を、０−２０％のＥｔＯＡｃ／石油エーテルの勾配で３０分にわたって溶出するシリカ上のフラッシュクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）システム、２５ｍＬ／分で２０ｇカードリッジ）によって精製して、標題化合物（２．２６ｇ；８２％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ２７５  ［Ｍ−Ｈ］−。
【０１０５】
調製例５２
２−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロポキシ−フェニル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン
３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェノール（２００ｍｇ，０．７２４ｍｍｏｌ）、及び２−ブロモプロパン（１７８ｍｇ，１．４４８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３ｍＬ）中に溶解する。炭酸カリウム（３００ｍｇ，２．１４９ｍｍｏｌ）を撹拌しながら一度に加える。混合物を一晩撹拌しながら９０℃まで加熱する。混合物を室温まで冷却し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈する。合わせた有機物を水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾過物を回収し、減圧下で濃縮する。粗混合物を、０−５０％のＥｔＯＡｃ／石油エーテルの勾配で２０分にわたって溶出するシリカ上のフラッシュクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）システム、３０ｍＬ／分で２０ｇカードリッジ）によって精製して、標題化合物（１５２ｍｇ，６６％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ３１９  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１０６】
調製例５３
２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン
１，５−シクロオクタジエン）（メトキシ）イリジウム（Ｉ）ダイマー（Ｉｒ（ＯＭｅ）（ＣＯＤ））２）（０．０５ｇ，０．０７５ｍｍｏｌ）、４−ｔｅｒｔ−ブチル−２−（４−ｔｅｒｔ−ブチル−２−ピリジル）ピリジン（０．０４ｇ，０．１５ｍｍｏｌ）、及びビス（ピナコラト）ジボロン（２．６７ｇ，１０．５０ｍｍｏｌ）を、窒素で２０分間パージしておいたヘキサン（３０ｍＬ）に加える。５５℃にて予熱したオイルバスに入れる。１０分間撹拌する。２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルピリジン（３．８１ｇ，１９．９０ｍｍｏｌ）を加え、５５℃で７２時間加熱する。混合物を室温まで冷却し、減圧下で濃縮して、標題化合物（５．２０ｇ，８２％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  （ｍ／ｚ）  ３１８  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１０７】
調製例５４
３−ブロモ−５−ホルミル−ｔｅｒｔ−ブチルベンゼン
１，３−ジブロモ−ｔｅｒｔ−ブチルベンゼン（６．０９３ｇ，２０．８７ｍｍｏｌ）を５０ｍＬのＴＨＦ（５０ｍＬ）中に溶解し、−７８℃に冷却する。ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中の２．５Ｍ）（９．１８ｍＬ，２２．９５ｍｍｏｌ）を１０分にわたって滴下して加え、１５分間撹拌する。ＤＭＦ（３．２３ｍＬ，４１．７３ｍｍｏｌ）を一度に加え、３０分間撹拌する。反応混合物をＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）及び１ＮのＨＣｌ（４０ｍＬ）で希釈する。水層をＥｔＯＡｃ（２×４０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機部分をブライン（１００ｍＬ）で洗浄する。硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾過物を回収し、減圧下で濃縮する。得られた残留物を、ヘキサンから１０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンの勾配で３０分にわたって溶出するフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、標題化合物（４．０２ｇ）を淡黄色油として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１．２７−１．２７（ｍ，９Ｈ），７．８３（ｓ，２Ｈ），７．８９−７．８８（ｍ，１Ｈ），９．９３（ｓ，１Ｈ）。
【０１０８】
調製例５５
１−（３−ブロモ−５−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）エタノール
３−ブロモ−５−ホルミル−ｔｅｒｔ−ブチルベンゼン（３．６２４ｇ，１５．０３ｍｍｏｌ）をジエチルエーテル（５０ｍＬ）中に溶解する。臭化メチルマグネシウム（５．５１ｍＬ，１６．５３ｍｍｏｌ）を１０分にわたってゆっくりと加える。反応混合物を１８時間撹拌する。反応混合物を飽和塩化アンモニウム（５０ｍＬ）へ注ぎ、ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出する。有機部分を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。得られた残留物を、ヘキサンから１０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンの勾配で３０分にわたって溶出するフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、標題化合物（３．４９ｇ）を透明油として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．２３−１．２２（ｓ，９Ｈ），１．２５（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ），４．６８−４．６２（ｍ，１Ｈ），５．１９（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ），７．３２−７．２８（ｍ，３Ｈ）。
【０１０９】
調製例５６
１−（３−ブロモ−５−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）エタノン
１−（３−ブロモ−５−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）エタノール（３．４９ｇ，１３．５７ｍｍｏｌ）をクロロホルム（１００ｍＬ）中に溶解し、次いでクロロクロム酸ピリジニウム（４．４８ｇ，２０．３６ｍｍｏｌ）を加える。混合物を７２時間室温で撹拌する。５ＮのＮａＯＨ（１５０ｍＬ）を加え、沈殿物を溶解するまで撹拌する。水層をジクロロメタン（２×１００ｍＬ）で抽出する。合わせた有機部分を１ＮのＨＣｌ（１５０ｍＬ）で洗浄する。有機物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾過物を回収し、減圧下で濃縮する。残留物を、ヘキサンから２０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンの勾配で３０分にわたって溶出するフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、標題化合物（２．６２ｇ）を透明油として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．２６（ｓ，９Ｈ），２．５５（ｓ，３Ｈ），７．７７（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．８５（ｔ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），７．８７（ｔ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ）。
【０１１０】
調製例５７
２−（３−ブロモ−５−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）プロパン−２−オール
１−（３−ブロモ−５−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）エタノン（０．８０ｇ，３．１５ｍｍｏｌ）をジエチルエーテル（４０ｍＬ）中に溶解する。臭化メチルマグネシウム（１．５８ｍＬ，４．７３ｍｍｏｌ）を加え、次いで７２時間撹拌する。反応物を１Ｎの塩酸（５０ｍＬ）中に注ぐ。ジエチルエーテル（２×５０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機部分を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾過物を濃縮し、減圧下で濃縮して、標題化合物（０．８２ｇ，９６％）を白色固体として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．２４（ｓ，９Ｈ），１．３８（ｓ，６Ｈ），５．０９（ｓ，１Ｈ），７．３１（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４０（ｔ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ），７．４４（ｔ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ）。
【０１１１】
調製例５８
１−ブロモ−３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロピル−ベンゼン
２−（３−ブロモ−５−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）プロパン−２−オール（０．８２ｇ，３．０２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２０ｍＬ）中に溶解する。ＴＦＡ（２．２９ｍＬ，３０．２４ｍｍｏｌ）を加え、次いでトリエチルシラン（２．４２ｍＬ，１５．１２ｍｍｏｌ）を加える。反応物を１８時間撹拌する。反応物を飽和重炭酸ナトリウム（５０ｍＬ）に注ぎ、ＤＣＭ（２×４０ｍＬ）で２回抽出する。合わせた有機部分を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾過物を回収し、減圧下で濃縮する。得られた残留物を、ヘキサンから１０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンの勾配で３０分にわたって溶出するフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、標題化合物（０．６０ｇ，７８％）を透明液体として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．１６（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，６Ｈ），１．２３（ｓ，９Ｈ），２．８９−２．８２（ｍ，１Ｈ），７．２２−７．２０（ｍ，２Ｈ），７．３０（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ）。
【０１１２】
調製例５９
（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロピル−フェニル）ボロン酸
１−ブロモ−３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロピルベンゼン（０．３５ｇ，１．３７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）中に窒素雰囲気下で溶解する。溶液を−７８℃に冷却する。ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中の２．５Ｍ）（０．６６ｍＬ，１．６５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を−７８℃で２０分間撹拌する。トリメチルボラン（０．２ｍＬ，１．７６ｍｍｏｌ）を−７８℃で加え、−７８℃で２時間撹拌する。反応物を水（２０ｍＬ）でクエンチする。混合物をＥｔＯＡｃ（２×４０ｍＬ）で抽出する。ＥｔＯＡｃ抽出物を回収し、粗混合物を、１：５のＥｔＯＡｃ／石油エーテルで溶出する分取ＴＬＣを用いて精製して、標題化合物（０．１９ｇ，６３％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ２１９  ［Ｍ−Ｈ］−。
【０１１３】
調製例６０
メチル４−［５−ヒドロキシ−１−（４−メチルスルホニルフェニル）ピラゾール−３−イル］ベンゾエート
４−メチルスルホニルフェニルヒドラジン塩酸塩（１３．４０ｇ，５７．１５ｍｍｏｌ）、及び４−（２−メトキシカルボニル−アセチル）−安息香酸メチルエステル（１０．００ｇ，４２．３ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）中に溶解する。混合物を加熱して還流させ、一晩撹拌する。反応物を室温まで冷却する。ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）を加え、０℃まで冷却する。固体を真空濾過を用いて濾過し、次いで固体を冷ＭｅＯＨで洗浄する。固体を減圧下で乾燥させて、標題化合物（１４．３ｇ，９１％）を淡褐色固体として得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ３７３  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１４】
調製例６１
メチル４−［５−ブロモ−１−（４−メチルスルホニルフェニル）ピラゾール−３−イル］ベンゾエート
メチル４−［５−ヒドロキシ−１−（４−メチルスルホニルフェニル）ピラゾール−３−イル］ベンゾエート（２．００ｇ，５．３７１ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（８ｍＬ）中に溶解する。三臭化リン（２．５５ｍＬ，２６．８５ｍｍｏｌ）を加える。反応物を加熱して還流させ、一晩撹拌する。三臭化リン（１．２７３ｍＬ，１３．４３ｍｍｏｌ）を加え、７２時間撹拌する。三臭化リン（１．２７ｍＬ，１３．４３ｍｍｏｌ）を加え、２４時間撹拌する。反応物を室温まで冷却する。混合物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液に対してゆっくりと注ぐ。得られた混合物をＤＣＭで抽出する。合わせた抽出物を減圧下で濃縮する。得られた残留物を、０−５％のＥｔＯＡｃ／ＤＣＭの勾配でシリカゲル（４０ｇ）上でのフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、標題化合物（０．９５ｇ，４１％）を白色結晶固体として得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  （７９Ｂｒ／８１Ｂｒ）  ４３５／４３７  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１５】
調製例６２
メチル４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−（４−メチルスルホニルフェニル）ピラゾール−３−イル］ベンゾエート
メチル４−［５−ブロモ−１−（４−メチルスルホニルフェニル）ピラゾール−３−イル］ベンゾエート（７５ｍｇ，０．１７２ｍｍｏｌ）、２−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（８２ｍｇ，０．２５８ｍｍｏｌ）、（テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（４０ｍｇ，０．０３４ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（１．７ｍＬ）、及び２Ｎの炭酸ナトリウム水溶液（０．２８４ｍＬ，０．５６９ｍｍｏｌ）を、スターラーバーを備えた８ｍＬスクリューキャップバイアル（隔壁を含む）に加える。アルゴンで１〜２分間パージする。反応フラスコを６５℃のオイルバスに置き、反応物を一晩撹拌する。反応物を室温まで冷却し、水で希釈する。水溶液をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた抽出物を減圧下で濃縮する。ヘキサン中で２０−５０％のＥｔＯＡｃの勾配で溶出するラジアルクロマトグラフィー（シリカゲル、２ｍｍプレート）によって精製して、標題化合物（６０ｍｇ，６４％）を白色固体泡状物として得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ５４５  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１６】
調製例６３
メチル４−［５−アミノ−１−（４−シアノフェニル）ピラゾール−３−イル］ベンゾエート
ヒドラジニルベンゾニトリル塩酸塩（１．８６ｇ，１０．９７ｍｍｏｌ）及びメチル４−（２−シアノアセチル）ベンゾエート（２．０３ｇ，９．９９ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（４０ｍＬ）中に懸濁する。反応物を一晩撹拌しながら加熱して還流する。反応混合物を室温まで冷却する。混合物を濾過し、固体を石油エーテル（４０ｍＬ）で洗浄する。得られた固体を真空で乾燥させて生成物（２．０２ｇ）を得る。濾過物を減圧下で濃縮する。得られた残留物を、０−７０％のＥｔＯＡｃ／ＤＣＭの勾配（４０分間）でのシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）システム、４０ｍＬ／分で４０ｇカードリッジ）によって精製して、追加生成物（０．４２ｇ）を得る。２つのロットの精製した生成物（２．４４ｇ，７７％）を合わせる。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ３１９  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１７】
調製例６４
メチル４−［１−（４−シアノフェニル）−５−ヨード−ピラゾール−３−イル］ベンゾエート
メチル４−［５−アミノ−１−（４−シアノフェニル）ピラゾール−３−イル］ベンゾエート（２．０２ｇ，６．４ｍｍｏｌ）及びヨウ化銅（Ｉ）（１．２１ｇ，６．４ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（８０ｍＬ）中に懸濁する。ｔ−ブチルニトリル（１．３１ｇ，１２．７ｍｍｏｌ）を撹拌しながら加える。混合物を７５℃まで３時間撹拌しながら加熱する。混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で冷却する。有機物を希釈Ｎａ２Ｓ２Ｏ３（３×）及びブラインで洗浄する。有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾過物を回収し、減圧下で濃縮して乾燥させる。粗混合物を、３０分にわたって０−５０％のＥｔＯＡｃ／石油エーテル勾配でシリカ上のフラッシュクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）システム、２５ｍＬ／分で２０ｇカードリッジ）によって精製して、標題化合物（１．５４ｇ，５７％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ４３０  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１８】
調製例６５
メチル４−［１−（４−カルバモイルフェニル）−５−ヨード−ピラゾール−３−イル］ベンゾエート
メチル４−［１−（４−シアノフェニル）−５−ヨード−ピラゾール−３−イル］ベンゾエート（０．２０６ｇ，０．４８０ｍｍｏｌ）をＴＦＡ（３ｍＬ）中に溶解する。硫酸（０．７５ｍＬ）を混合物を撹拌しながらゆっくり加える。混合物を一晩撹拌しながら４５℃まで加熱する。混合物を氷水へ注ぎ、イソプロパノール／ＤＣＭ（１：２比，３×５０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機物をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾過物を回収し、減圧下で濃縮して乾燥させて、標題化合物（０．２０５ｇ，９６％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ４４８  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１９】
調製例６６
４−［５−アミノ−３−（４−メトキシカルボニルフェニル）ピラゾール−１−イル］安息香酸
４−ヒドラジニル安息香酸（１．６７ｇ，１０．９８ｍｍｏｌ）及びメチル４−（２−シアノアセチル）ベンゾエート（２．０３ｇ，９．９９ｍｍｏｌ）をメタノール（４０ｍＬ）中に懸濁する。加熱して還流させ、一晩撹拌する。反応物を室温まで冷却する。得られた固体を濾過し、石油エーテルで洗浄し、標題化合物（２．９２ｇ，８７％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ３３８  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２０】
調製例６６Ａ：代替手順
４−［５−アミノ−３−（４−メトキシカルボニルフェニル）ピラゾール−１−イル］安息香酸
リアクターに酢酸（２５Ｌ）、４−ヒドラジノ安息香酸塩酸塩（１１１５．０ｇ，５．９１１ｍｏｌ）及びメチル４−シアノアセチルベンゾエート（１２００．０ｇ，５．９１１ｍｏｌ）を１３℃で入れる。混合物を８０℃まで加熱し、２０時間撹拌する。反応混合物を２０℃まで冷却し、濾過して黄色濾過ケーキを得る。濾過ケーキをヘキサン（５Ｌ）で粉砕し、濾過して標題化合物（１６２１ｇ，８１％）を黄色固体として得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ３３８  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２１】
調製例６７
メチル４−［５−アミノ−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］ベンゾエート
リアクターにＴＨＦ（１８．６Ｌ）及び４−［５−アミノ−３−（４−メトキシカルボニルフェニル）ピラゾール−１−イル］安息香酸（６２０ｇ，１．８４０ｍｏｌ）を１５℃で入れる。ＣＤＩ（３８７ｇ，２．３９２ｍｏｌ）をバッチ内に加え、混合物を加熱して還流させ、２．５時間撹拌する。Ｎ−メチルピペラジン（３６０ｍＬ，２．７６０ｍｏｌ）を還流温度で２５分にわたって滴下して加える。次いで１７時間還流で撹拌する。２０℃まで冷却し、水（７Ｌ）及びＥｔＯＡｃ（１８Ｌ）を加える。２つの相に分ける。水溶液をＥｔＯＡｃ（２×１０Ｌ）で抽出する。有機層を合わせ、１ＭのＮａＯＨ（２．５Ｌ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾過物を回収し、減圧下で濃縮して、黄色固体を得る。ヘプタン／ＭＴＢＥ／ＭｅＯＨ（４／４／１，１０Ｌ）の溶媒混合物を加え、０．５時間撹拌する。固体を濾過により回収する。得られた物質を乾燥させて、標題化合物（６１０ｇ，７７％）を黄色固体として得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ４２０  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２２】
調製例６８
メチル４−［５−ヨード−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］ベンゾエート
リアクターにアセトニトリル（２１Ｌ）、メチル４−［５−アミノ−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］ベンゾエート（１０７０ｇ，２．５５４ｍｏｌ）、ジヨードメタン（１３６２ｇ，５．１０１ｍｏｌ）及びヨウ化銅（Ｉ）（９７０ｇ，５．１０５ｍｏｌ）を入れる。。混合物を８０℃まで撹拌しながら加熱する。イソアミルニトリル（８９６ｇ，７．６５８ｍｏｌ）を８０℃で滴下して加え、次いで、得られた懸濁液を８０℃で１時間撹拌する。混合物を１７℃まで冷却し、４８時間置く。ＮＨ４Ｃｌ（１０Ｌ）及びＥｔＯＡｃ（５０Ｌ）の飽和水溶液を加える。２つの相に分ける。有機層をＮａ２Ｓ２Ｏ３（１０Ｌ）の飽和水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。濾過し、濾過物を回収し、濾過物を蒸発させて、オレンジ色油を得る。残留物を、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（５０／１から５／１まで）で溶出するカラムクロマトグラフィーによって精製して、標題化合物（３８１ｇ，２８％）を茶色油として得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ５３１  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２３】
調製例６９
メチル４−［５−ヨード−１−［４−（モルホリン−４−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］ベンゾエート
４−（５−アミノ−３−（４−（メトキシカルボニル）フェニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）安息香酸（２．５６ｇ，７．６０ｍｍｏｌ）及びヨウ化銅（Ｉ）（１．４４ｇ，７．６０ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（８０ｍＬ）中に懸濁する。ｔ−ブチルニトリル（１．８ｍＬ，１５．１ｍｍｏｌ）を一度に加える。混合物を７５℃まで加熱し３時間撹拌する。混合物を濾過し、固体をアセトニトリルで洗浄して、４−（５−ヨード−３−（４−（メトキシカルボニル）フェニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）安息香酸（３．７ｇ）の粗混合物を得る。４−（５−ヨード−３−（４−（メトキシカルボニル）フェニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）安息香酸（３．７ｇ）を乾燥ＤＭＦ（５０ｍＬ）中に溶解する。ジイソプロピルエチルアミン（１．８ｍＬ，１０．３ｍｍｏｌ）及びモルホリン（１．２ｍＬ，１３．８ｍｍｏｌ）を加え、１０分間撹拌する。ＢＯＰ（４．５２ｇ，１０．２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２４時間撹拌する。混合物を水（２００ｍＬ）でクエンチする。混合物をＥｔＯＡｃ（４×６０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機部分を水（４×５０ｍＬ）及びブライン（２×５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾過物を回収し、減圧下で濃縮する。粗生成物を、水中の０．０５％ＴＦＡを用いて４５−１００％アセトニトリルの勾配で溶出する、分取ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  Ｓｕｎｆｉｒｅ（商標）カラムＣ１８、４．６ｍｍ×１５０ｍｍ、５μｍ分子サイズ）によって精製して、標題化合物（０．８８ｇ，２３％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ５１８  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２４】
調製例７０
メチル４−［１−［４−（ジメチルカルバモイル）フェニル］−５−ヨード−ピラゾール−３−イル］ベンゾエート
メチル４−［１−（４−カルバモイルフェニル）−５−ヨード−ピラゾール−３−イル］ベンゾエート（２２３ｍｇ，０．４９９ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）中に溶解する。０℃まで冷却する。水素化ナトリウム（油中の６０％）（６０ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）を少量ずつ１０分にわたって０℃で撹拌しながら加える。混合物を１時間撹拌し、ヨウ化メチル（９３μＬ，１．５ｍｍｏｌ）を一度に加える。混合物を室温まで温め、１８時間撹拌する。反応物をＮＨ４Ｃｌ水溶液（２０ｍＬ）でクエンチする。混合物をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機部分をブライン（２×２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して乾燥させる。粗混合物を、０−４０％のＥｔＯＡｃ／ジクロロメタンの勾配で溶出する、シリカ上のフラッシュクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）システム、２５ｍＬ／分で２０ｇカードリッジ）によって精製して、標題化合物（１７５ｍｇ，７４％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ４７６  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２５】
調製例７１：調製例３６の中間体への代替経路
メチル４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］ベンゾエート
リアクターにメチル４−［５−ヨード−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］ベンゾエート（３８０ｇ，０．７２０ｍｏｌ）、２−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（２９６ｇ，０．９３６ｍｏｌ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロライド（５０ｇ，０．０７２ｍｏｌ）、炭酸カリウム（２９７ｇ，２．１５０ｍｏｌ）、ＴＨＦ（１１．４Ｌ）及び水（０．７６Ｌ）を入れる。反応物を８５℃まで１時間加熱する。２５℃まで冷却し、濾過して、２層の濾過物を得る。層を分け、ＥｔＯＡｃ（２×５Ｌ）で水層を抽出する。有機層を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾過物を回収し、溶媒を蒸発させて、濃暗褐色油を得る。油を、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（５０／１から２０／１まで）で溶出するカラムクロマトグラフィーによって精製して、生成物を濃茶色油として得る。油を、アセトニトリル／ヘキサン／ＭＴＢＥ（２／１／１，２Ｌ）の溶媒混合物中で１時間粉砕する。濾過して固体を回収し、外気で乾燥させて、標題化合物（３６０ｇ，８４％）の生成物を灰色固体として得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ５９３  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２６】
調製例７２
メチル４−［５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロポキシ−フェニル）−１−（４−カルバモイルフェニル）ピラゾール−３−イル］ベンゾエート
メチル４−［１−（４−カルバモイルフェニル）−５−ヨード−ピラゾール−３−イル］ベンゾエート（１１６ｍｇ，０．２５９ｍｍｏｌ）、２−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロポキシ−フェニル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（１００ｍｇ，０．３１４ｍｍｏｌ）、及び炭酸カリウム（１０８ｍｇ，０．７８１ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１５ｍＬ）及び水（３ｍＬ）中に溶解する。ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロライド（３０ｍｇ，０．０４３ｍｍｏｌ）を加える。反応容器を窒素で３回パージする。混合物を８５℃まで４時間撹拌しながら加熱する。混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈する。合わせた有機物をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾過物を回収し、減圧下で濃縮して乾燥させる。粗混合物を、０−５０％のＥｔＯＡｃ／ジクロロメタンの勾配で２５分にわたって溶出する、シリカ上のフラッシュクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）システム、２５ｍＬ／分で１２ｇカードリッジ）によって精製して、標題化合物（１０５ｍｇ，７９％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ５１２  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２７】
以下の表６に示す中間体を、適切なヨードピラゾール及びボロン酸又はエステル（１．２−１．５当量）を用いて、基本的に調製例７２に記載したような手順に従って調製する。
【表６】
2014532644.tif 000018
【０１２８】
調製例７９
メチル４−［１−（４−カルバモイルフェニル）−５−（２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ピリジル）ピラゾール−３−イル］ベンゾエート
メチル４−（５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロポキシフェニル）−１−（４−シアノフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ベンゾエート（２２０ｍｇ，０．４４７ｍｍｏｌ）をＴＦＡ（４ｍＬ）中に溶解する。硫酸（１ｍＬ）をゆっくり加える。混合物を４５℃まで加熱し、一晩撹拌する。混合物を氷水中に注ぎ、約ｐＨ＝８に２ＮのＮａＯＨ（１５ｍＬ）で調整する。混合物をＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機部分をブライン（３×１０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾過物を回収し、濃縮して乾燥させて、標題化合物（２１０ｍｇ，９２％）を白色固体として得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ５１１  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２９】
実施例１
４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］安息香酸
【化１１】
2014532644.tif 000019
リアクターにＴＨＦ（１７９０Ｌ）、メチル４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］ベンゾエート（３５８ｇ，０．６０５ｍｏｌ）及び水（１１４０ｍＬ）を８−１２℃にて入れる。水酸化リチウム一水和物（３８ｇ，０．９０５ｍｏｌ）を一度に加える。混合物を１６時間８−１２℃で撹拌する。ＥｔＯＡｃ（３０Ｌ）を加え、混合物をｐＨ＝５に１ＮのＨＣｌで調整する。２つの層に分け、水層をＥｔＯＡｃ（２×１０Ｌ）で抽出する。有機層を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を除去して、固体を得る。物質を、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（２０／１）で溶出するカラムクロマトグラフィーによって精製して、生成物を淡黄色固体として得る。固体を、アセトニトリル／ＭＴＢＥ（１／３，４Ｌ）の溶媒混合物中で１時間粉砕する。濾過して、固体を回収し、真空下で５０℃で７２時間乾燥させて、標題化合物（２６４．２ｇ，７５％）を白色固体として得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ５７９  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３０】
結晶化手順
４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］安息香酸の結晶性遊離塩基を、６３．６ｍｇの４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］安息香酸を２０ｍＬバイアル中に入れることにより調製する。４ｍＬのＭｅＯＨを加えて、白色固体を含むスラリーを調製する。６０℃まで加熱したスラリー撹拌プレートをバイアルに置き、１０００ｒｍで２時間撹拌する。その後、サンプルを室温まで冷却する。得られた白色固体を真空濾過によって単離し、真空オーブン内で７０℃に設定して一晩乾燥させる。
【０１３１】
代替結晶化手順
結晶性４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］安息香酸をまた、２０ｍＬバイアル内に６９ｍｇの４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］安息香酸及び３ｍｇの同じ形態の種晶を入れることにより調製することができ、２ｍＬのＭｅＯＨを加えて、白色固体を含むスラリーを調製する。スラリーを６０℃まで加熱し、１０００ｒｐｍで４時間撹拌する。その後、撹拌を止めて、サンプルを室温まで冷却し、朝まで置いて、透明であるかわずかに黄色の上澄みの下に白色固体の厚い層を得る。白色固体を真空濾過により単離し、窒素ストリーム下で１０分間乾燥させて、その後、新しい釣り合い重り付き（ｔａｒｅｄ）のバイアルに入れる。この得られた物質は、以下に示すようにＸ線粉末回折によって検査することができる。追加のこの物質を、７０℃に設定した真空オーブン内に入れ、完全に乾燥させることができる。
【０１３２】
実施例２
４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−［４−（ピペリジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］安息香酸
【化１２】
2014532644.tif 000020
メチル４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−［４−（ピペリジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］ベンゾエート（１２１ｍｇ，０．２０９ｍｍｏｌ）を、水（１ｍＬ）、ＴＨＦ（３ｍＬ）、及びメタノール（１ｍＬ）中に溶解する。ＬｉＯＨ（１１ｍｇ，２５１ｍｍｏｌ）を加える。混合物を約３時間撹拌する。混合物のｐＨを２ＮのＨＣｌでｐＨ＝７に調整する。混合物をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で希釈する。有機物を２ＮのＨＣｌ（４ｍＬ）及びＮａＣｌ飽和水溶液（１０ｍＬ）で洗浄する。有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。粗生成物を、１０：１のジクロロメタン／メタノールで溶出する分取ＴＬＣによって精製して、標題化合物（７５ｍｇ，６４％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ５６４  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３３】
以下の表７に示す中間体を、適切な安息香酸メチル前駆体を用いて、基本的に実施例２に記載したような手順に従って調製する。
【表７−１】
2014532644.tif 000021
【表７−２】
2014532644.tif 000022
【表７−３】
2014532644.tif 000023
【０１３４】
実施例１２
４−［５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロピルスルファニル−フェニル）−１−［４−（ジメチルカルバモイル）フェニル］ピラゾール−３−イル］安息香酸
【化１３】
2014532644.tif 000024
メチル４−［５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロピルスルファニル−フェニル）−１−［４−（ジメチルカルバモイル）フェニル］ピラゾール−３−イル］ベンゾエート（１００ｍｇ，０．１８０ｍｍｏｌ）を、メタノール（２ｍＬ）及びＴＨＦ（６ｍＬ）中に溶解する。１ＭのＬｉＯＨ（２ｍＬ）を撹拌しながら一度に加える。混合物を３時間室温で撹拌する。混合物を２ＮのＨＣｌで酸性化して約ｐＨ＝２にし、ＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機部分をブライン（２×１０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、標題化合物（８２ｍｇ，８４％）を白色固体として得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ５４２  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３５】
実施例１３
４−［５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロピルスルファニル−フェニル）−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］安息香酸
【化１４】
2014532644.tif 000025
メチル４−［５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロピルスルファニル−フェニル）−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］ベンゾエート（３０ｍｇ，０．０４９ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（３ｍＬ）及びメタノール（１ｍＬ）中に溶解する。１Ｎの水酸化リチウム（１．０ｍＬ，１．０ｍｍｏｌ）を加える。反応物を６時間撹拌する。約ｐＨ＝６に１ＮのＨＣｌで調整する。ＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）で抽出する。有機部分を水（２×２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して標題化合物（２５ｍｇ，８５％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ５９７  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３６】
実施例１４
４−［５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロポキシ−フェニル）−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］安息香酸
【化１５】
2014532644.tif 000026
メチル４−［５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロポキシ−フェニル）−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］ベンゾエート（０．１４ｇ，０．２３５ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（３ｍＬ）、メタノール（１ｍＬ）、及び水（１ｍＬ）中に溶解する。ＬｉＯＨ（０．０１５ｇ，０．３５３ｍｍｏｌ）を加え、４時間撹拌する。約ｐＨ＝７に２ＮのＨＣで調整する。層を分け、有機層をＮａＣｌ水溶液（１０ｍＬ）で洗浄する。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、標題化合物（１３５ｍｇ，９９％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ５８１  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３７】
実施例１５
４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−（６−メチルスルホニル−３−ピリジル）ピラゾール−３−イル］安息香酸
【化１６】
2014532644.tif 000027
メチル４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−（６−メチルスルホニル−３−ピリジル）ピラゾール−３−イル］ベンゾエート（１０２ｍｇ，０．１８７ｍｍｏｌ）を、水（３ｍＬ）、ＴＨＦ（９ｍＬ）、及びメタノール（３ｍＬ）中に溶解する。ＬｉＯＨ（１６ｍｇ，０．３７４ｍｍｏｌ）を一度に加える。混合物を一晩撹拌する。溶液を約ｐＨ＝２に２ＮのＨＣｌで調整する。混合物を３回ＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機物をブライン（３×５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。得られた残留物を、分取ＴＬＣによって精製して、標題化合物（８５ｍｇ，８６％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ５３２  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３８】
実施例１６
４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−［６−（ジメチルカルバモイル）−３−ピリジル］ピラゾール−３−イル］安息香酸
【化１７】
2014532644.tif 000028
メチル４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−［６−（ジメチルカルバモイル）−３−ピリジル］ピラゾール−３−イル］ベンゾエート（調製例２７は不適切であり、代わりに調製例４４を使用する）（６０ｍｇ，０．１１１ｍｍｏｌ）を、ＭｅＯＨ（４ｍＬ）及びＴＨＦ（１ｍＬ）中に溶解する。１ＭのＬｉＯＨ（０．５ｍＬ）を一度に加える。混合物を５時間室温で撹拌する。混合物を約ｐＨ＝６−７に２ＮのＨＣｌで調整する。ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で抽出する。有機部分をブライン（２×２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。得られた残留物を、１０：１のＤＭＣ／ＭｅＯＨで溶出する分取ＴＬＣによって精製して、標題化合物（３０ｍｇ，５１％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ５２５  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３９】
実施例１７
４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−［４−（メタンスルホンアミド）フェニル］ピラゾール−３−イル］安息香酸
【化１８】
2014532644.tif 000029
メチル４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−［４−（メタンスルホンアミド）フェニル］ピラゾール−３−イル］ベンゾエート（２３０ｍｇ，４１１ｍｍｏｌ）を、メタノール（３ｍＬ）及びＴＨＦ（３ｍＬ）中に溶解する。１ＭのＬｉＯＨ（１ｍＬ，１．０ｍｍｏｌ）を一度に加える。混合物を一晩撹拌する。反応物をＨＣｌ希釈水溶液でクエンチする。混合物を３回ＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機部分をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して乾燥させる。得られた残留物を、２：１のＥｔＯＡｃ／石油エーテルで溶出する、分取ＴＬＣによって精製して、標題化合物（２００ｍｇ，８９％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ５４６  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１４０】
実施例１８
４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−［４−（ジメチルスルファモイル）フェニル］ピラゾール−３−イル］安息香酸
【化１９】
2014532644.tif 000030
メチル４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−［４−（ジメチルスルファモイル）フェニル］ピラゾール−３−イル］ベンゾエート（０．１１ｇ，０．１９２ｍｍｏｌ）を、メタノール（１ｍＬ）及びＴＨＦ（６ｍＬ）中に溶解する。１ＮのＬｉＯＨ（４０ｍｇ，０．９５３ｍｍｏｌ）を一度に加える。混合物を室温で一晩撹拌する。反応混合物を水で希釈する。ＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機部分をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、標題化合物（１１０ｍｇ，１００％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ５６０  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１４１】
実施例１９
４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−（４−メチルスルホニルフェニル）ピラゾール−３−イル］安息香酸
【化２０】
2014532644.tif 000031
メチル４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−（４−メチルスルホニルフェニル）ピラゾール−３−イル］ベンゾエート（５８ｍｇ，０．１０６ｍｍｏｌ）を、エタノール（２．５ｍＬ）及びＴＨＦ（３ｍＬ）中に溶解する。水酸化ナトリウム（０．０６４ｍＬ，０．３１９ｍｍｏｌ）を室温で加える。反応物を５０℃で２時間撹拌しながら加熱する。反応物を室温まで冷却する。反応物を水で希釈し、約ｐＨ＝１−２に１ＮのＨＣｌで調整する。１０分間撹拌し、４℃まで冷却する。得られた結晶物を真空濾過により回収し、水でリンスして、標題化合物（４９ｍｇ，８７％）を白色結晶性固体として得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ５３１  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１４２】
実施例２０
４−［５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロポキシ−フェニル）−１−（４−カルバモイルフェニル）ピラゾール−３−イル］安息香酸
【化２１】
2014532644.tif 000032
メチル４−［５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロポキシ−フェニル）−１−（４−カルバモイルフェニル）ピラゾール−３−イル］ベンゾエート（１０５ｍｇ，０．２０５ｍｍｏｌ）をメタノール（６ｍＬ）及びＴＨＦ（２ｍＬ）中に溶解する。１ＭのＬｉＯＨ（２ｍＬ）を撹拌しながら一度に加える。混合物を１８時間撹拌する。２ＮのＨＣｌを加えてｐＨ＝６にする。ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で抽出する。有機部分をブライン（２×２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して乾燥させる。粗混合物を、０−２０％のメタノール／ジクロロメタンの勾配で２５分にわたって溶出する、シリカ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）システム、２５ｍＬ／分で１２ｇカードリッジ）を用いて精製して、標題化合物（９３ｍｇ，９１％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ４９８  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１４３】
実施例２１
４−［５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロポキシ−フェニル）−１−［４−（モルホリン−４−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］安息香酸
【化２２】
2014532644.tif 000033
メチル４−（５−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−５−イソプロポキシフェニル）−１−（４−（モルホリン−４−カルボニル）フェニル）−ピラゾール−３−イル）ベンゾエート（検査調製例７３）（１６０ｍｇ，０．２７５ｍｍｏｌ）を、メタノール（６ｍＬ）及びＴＨＦ（２ｍＬ）中に溶解する。１ＭのＬｉＯＨ（２ｍＬ）を一度に加え、一晩撹拌する。約ｐＨ＝６に２ＮのＨＣｌで調整する。ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機物をブライン（２×２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して乾燥させて、標題化合物（１３６ｍｇ，８７％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ    ５６８  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１４４】
実施例２２
４−［１−（４−カルバモイルフェニル）−５−（２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ピリジル）ピラゾール−３−イル］安息香酸
【化２３】
2014532644.tif 000034
メチル４−［１−（４−カルバモイルフェニル）−５−（２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ピリジル）ピラゾール−３−イル］ベンゾエート（２１０ｍｇ，０．４１１ｍｍｏｌ）を、メタノール（６ｍＬ）及びＴＨＦ（２ｍＬ）中に溶解する。１ＭのＬｉＯＨ（１ｍＬ）を一度に加える。混合物を１８時間撹拌する。混合物を約ｐＨ＝６に２ＮのＨＣｌで調整し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機部分をブライン（２×２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して乾燥させて、標題化合物（１８０ｍｇ，８８％）を白色固体として得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ４９７  ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１４５】
Ｘ線粉末回折
実施例１について上記されているように調製され得る結晶性４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］安息香酸のＸＲＤパターンを、３５ｋＶおよび５０ｍＡで作動する、ＣｕＫａ源λ＝１．５４０６０ÅおよびＶａｎｔｅｃ検出器を備えたＢｒｕｋｅｒ  Ｄ４  ＥｎｄｅａｖｏｒＸ線粉末回折計で得る。２θにおいて０．００９°のステップサイズおよび０．５秒／ステップの走査速度、ならびに０．６ｍｍの発散、５．２８の固定した散乱防止、および９．５ｍｍの検出器スリットを用いて、２θにおいて４〜４０°で試料を走査する。乾燥粉末を石英試料ホルダに充填し、スライドガラスを使用して滑らかな面を得る。結晶形態回折パターンを室温および相対湿度で収集する。２θにおいて±０．２のピーク位置変動は、示された結晶形態の明確な識別を妨げずに電位変化を考慮に入れる。結晶形態の確認は、識別ピーク（２θの単位）、典型的により突出したピークの任意の固有の組み合わせに基づいてなされ得る。周囲温度および相対湿度にて収集した結晶形態回折パターンを、８．８５３および２６．７７４度２θにてＮＩＳＴ６７５標準ピークに基づいて調整した。
【０１４６】
したがって、実施例１について上記したように調製した４−［５−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−１−［４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）フェニル］ピラゾール−３−イル］安息香酸の遊離塩基の調製した試料を、０．２度の回折角についての許容差を用いて、以下の表８に記載した回折ピーク（２θ値）を有するとして、特に１９．８５１、７．４９８および１４．５８８からなる群から選択されるピークの１つ以上と組み合わされた５．４１４におけるピークを有するとしてＣｕＫａ放射線を使用してＸＲＤパターンにより特徴付ける。
【０１４７】
【表８】
2014532644.tif 000035
【０１４８】
アッセイ
以下のアッセイプロトコルならびに本発明の化合物および／または方法の有用性および効果を示すその結果を例示目的のために与え、それらは決して限定することを意図するわけではない。
【０１４９】
ＲＡＲα、βおよびγ結合アッセイ
結合パートナーＲＸＲαで二量体化する場合、ＲＡＲ受容体に競合的に結合するそれらの能力を測定することによりＲＡＲα、βおよびγに対する結合について化合物を評価できる。バキュロウイルス発現系において調製したＲＡＲα、β又はγ二量体（全てのＲＡＲを有するパートナーとしてＲＸＲαを有する）受容体を使用したシンチレーション近接アッセイ（ＳＰＡ）技術により競合的結合アッセイを実施できる。ケイ酸イットリウムストレプトアビジンでコーティングしたＳＰＡビーズに対する受容体の結合についてビオチン化オリゴヌクレオチド：５’−ＡＴＡＡＴＧＴＡＧＧＴＡＡＴＡＧＧＴＣＡＣＣＡＧＧＡＧＧＴＣＡＡＡＧＧ−３’を使用する。１つのウェルにつき、室温にて３０分間、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．８、８０ｍＭのＫＣｌ、０．５ｍＭのＭｇＣｌ２、１ｍＭのＤＴＴ、０．５％のＣＨＡＰＳおよび１６．６μｇのウシ血清アルブミンを含有する結合緩衝液中の８２．７μｇのＳＰＡビーズと共に０．１ｎＭをプレインキュベートする。次いで２，０００ｒｐｍにて３分間、混合物を回転させてビーズ−オリゴミックスをペレット化する。上清を除去し、上記の同じ結合緩衝液中でビーズ−オリゴペレットを再懸濁するが、それはさらに、ここでまた、１４％グリセロール、５μｇの断片化したサケ精子ＤＮＡ、０．５μｇのＲＡＲα、１．０μｇのＲＡＲβ、または０．２５μｇのＲＡＲγ受容体のそれぞれも含有する。約１１．３μＣｉの３Ｈ４−［（Ｅ）−２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−５，５，８，８−テトラメチル−２−ナフタレニル）−１−プロペニル］安息香酸（ＴＴＮＰＢ）、および（５ｎＭ〜１０μｍ）範囲の複数の濃度の試験化合物の存在下で結合アッセイを実施する。１μＭの非標識ＴＴＮＰＢの存在下で非特異的結合を決定できる。用量反応曲線を４−パラメータロジスティックフィットに適合した後、化合物についてのＩＣ５０を計算するためにデータを使用する。チェン−プルソフ式を使用して、化合物についてのＩＣ５０（ｎＭ）値をＫｉに変換し、飽和結合によりＫｄを決定できる。本明細書に開示した実施例に記載した化合物の全ては、２０ｎＭ未満の測定したＫｉで本明細書に実質的に記載したＲＡＲγ結合アッセイにおける活性を示す。本明細書に開示される実施例に記載した化合物の全ては、１００ｎＭ超の測定したＫｉで本明細書に実質的に記載したＲＡＲβ結合アッセイにおける低い活性を示す。本明細書に開示される実施例に記載した化合物の全ては、１００ｎＭ超の測定したＫｉで本明細書に実質的に記載されるＲＡＲα結合アッセイにおいて低い活性を示す。実施例の４つの結果を以下の表９に示す：
【表９】
2014532644.tif 000036
【０１５０】
このアッセイの結果は、本明細書に開示される実施例がＲＡＲγ受容体に結合すること、およびＲＡＲα、およびＲＡＲβ受容体よりＲＡＲγ受容体についての実施例の選択性を支持する。
【０１５１】
ＲＡＲ受容体アンタゴニスト活性を決定するためのＧａｌ４受容体アッセイ
細胞ベースのアッセイに関して、ヒト胚腎臓ＨＥＫ２９３細胞を、Ｆｕｇｅｎｅを使用して受容体および受容体遺伝子プラスミドでトランスフェクトする。ルシフェラーゼ受容体ｃＤＮＡの上流のアデノウイルスの５つのＧａｌ４結合部位および主要後期プロモーターを含有する受容体プラスミドを、ＳＶ４０プロモーターを使用してＧａｌ４  ＤＮＡ結合ドメイン（ＤＢＤ）およびＲＡＲαリガンド結合ドメイン（ＬＢＤ）、Ｇａｌ４（ＤＢＤ）ＲＡＲγ（ＬＢＤ）、またはＧａｌ４（ＤＢＤ）ＲＡＲβ（ＬＢＤ）ハイブリッド受容体を構成的に発現するプラスミド一緒にトランスフェクトする。５％活性炭処理済（ｃｈａｒｃｏａｌ−ｓｔｒｉｐｐｅｄ）ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）を含むＤＭＥＭ培地中で、ポリ−ｄ−リシンでコーティングしたＴ１７５ｃｍフラスコ中で細胞をトランスフェクトする。一晩のインキュベーション後、トランスフェクトした細胞をトリプシン処理し、５％活性炭処理済ＦＢＳを含有するＤＭＥＭ培地入りの不透明な９６ウェルディッシュに播種し、４時間インキュベートし、半対数希釈率（ｈａｌｆ ｌｏｇ ｄｉｌｕｔｉｏｎ）で０．１７ｎＭ〜１０μＭの試験化合物に曝露する。試験化合物のアンタゴニスト活性を決定するために、各受容体についてのアゴニストのＥＣ８０濃度もまた、培地（ＲＡＲαおよびＲＡＲγについて１５ｎＭの全てのトランスレチノイン酸、ＡＴＲＡ、ＲＡＲβについて１０ｎＭのＡＴＲＡ）に加える。化合物との２４時間のインキュベーション後、細胞を溶解し、ルシフェラーゼ活性を測定する。データを４パラメーターフィットロジスティックにフィッティングして、ＩＣ５０値を測定する。最大阻害％を、ＡＴＲＡの非存在下で０．２５％ＤＭＳＯに対する細胞応答に対して決定する。本明細書に開示した実施例の化合物の全ては、２５０ｎＭ未満の測定したＫｂで本明細書に実質的に記載されるＧａｌ４受容体アッセイにおける活性を示す。４つの化合物の結果を表１０に示す。
【表１０】
2014532644.tif 000037
【０１５２】
Ｇａｌ４受容体アッセイの結果は、本明細書に開示される実施例がＲＡＲγアンタゴニストであることを支持する。
【０１５３】
ＲＡＲγＳＲＣ−２コアクチベーター動員アッセイ（アゴニスト様式）
ＲＡＲγＳＲＣ−２コアクチベーター動員アッセイは、受容体複合体に対するコアクチベーターＳＲＣ−２の動員を高める化合物の能力を決定するためにその結合パートナーＲＸＲαを有するＲＡＲγのリガンド結合ドメイン（ＬＢＤ）を利用する。ＳＲＣ２の増強した動員はＲＡＲγ受容体のアゴニストの確認を反映することが知られている。ＲＡＲγＬＢＤおよびＳＲＣ２ペプチドはＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ（登録商標）ビーズに共有結合するので、増強したタンパク質間相互作用はエネルギー移動により評価できる。６Ｘ−ヒスチジンで標識したヒトＲＡＲγＬＢＤおよびＧＳＴで標識したｈＳＲＣ−２タンパク質を使用したＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ（登録商標）技術（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  ＵＳＡ）を使用してコアクチベーター動員アッセイを実施する。未標識のＲＸＲαＬＢＤをサイレントヘテロダイマーパートナーとして加える。ニッケルキレートドナービーズを使用してＲＡＲ  γＬＢＤに結合し、抗ＧＳＴアクセプタービーズを使用してＳＲＣ−２に結合する。連続希釈した試験化合物を、白色３８４の浅いウェルプロキシプレート中の１５μｌ／ウェルの最終体積で、２５ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）、１００ｍＭのＮａＣｌ、０．１％のウシ血清アルブミン（画分Ｖ）を含有する緩衝液、ならびに１６．６７μｇ／ｍｌのニッケルキレートドナービーズおよび１６．６７μｇ／ｍｌの抗ＧＳＴアクセプタービーズを含有する２ｍＭのＤＴＴ中の１０μＭ〜５００ｐＭ〜２０ｎＭの範囲の濃度のヒトＲＡＲγ受容体、２５ｎＭのＲＸＲα  ＬＢＤ、および５ｎＭのＳＲＣ−２タンパク質に加える。ＲＡＲアゴニスト、ＴＴＮＰＢを、各プレートにおける標準物として使用し、１００ｎＭ〜５ｐＭの範囲の濃度で加える。室温にて１２時間のインキュベーション後、励起および蛍光用の標準ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ（登録商標）パラメーターを使用してＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｅｎｖｉｓｉｏｎでプレートを読み取る。データを使用して、用量反応曲線を４パラメーターロジスティックフィットにフィッティングした後、化合物についてのＥＣ５０を算出する。比較物としてＴＴＮＰＢ標準曲線のフィッティングした上部を使用して刺激パーセントを算出する。本明細書に開示した実施例の全ては、このアッセイにおいて５０％未満の最大刺激を示す。４つの化合物の結果を表１０に示す。
【表１１】
2014532644.tif 000038
【０１５４】
このアッセイの結果により、本明細書に開示される実施例は有意なＲＡＲγアゴニスト活性を示さないことが示される。
【０１５５】
疼痛のヨード酢酸モノナトリウム（ＭＩＡ）モデル
ラットの膝関節内へのモノヨード酢酸（ＭＩＡ）の注射は急性炎症損傷を生じ、次いで注射した関節における関節組織の慢性変性に発展する。関節損傷から生じた疼痛は、インキャパシタンステスタを使用して後肢に負荷する重量差により測定できる。ＭＩＡモデルは文献において十分に記載されており、種々の機構および化合物についての疼痛に対する効果を実証するために使用されている。効果は重量分布を部分的に正規化する化合物の能力により慣例的に測定される。標準的なＭＩＡにおいて達成され得る最大効果は研究される機構に依存するが、しかしながら、多くの機構に関して、達成される最大効果は負荷する重量差の２５％〜５０％減少を生じる。
【０１５６】
約１５０〜１７０ｇで６〜８週齢の雄のＬｅｗｉｓラットを使用する。動物を少なくとも７２時間環境に順応させる。投薬スケジュールおよびインキャパシタンステスタの校正に必要な場合、体重を記憶する。ブロックランダム化割り当てツール（ＢＲＡＳＴ）を使用して動物を処置群に割り当てる。
【０１５７】
ＭＩＡナトリウム塩（Ｓｉｇｍａ製）。−８０℃にてＭＩＡ塩を保存する。５０μｌの無菌０．９％生理食塩水中でＭＩＡ、０．３ｍｇを調製する。調製したＭＩＡ溶液をシリンジにロードし、その日にラットに注射する。
【０１５８】
イソフルランで動物を麻酔する。頸骨と大腿骨との間の関節腔に置くために膝関節を曲げる。７０％エタノールで注射部位を除菌し、関節腔内にＭＩＡまたは生理食塩水をゆっくり注射する。右膝にＭＩＡ（５０μｌ）を注射し、左膝（反対側の対照）に無菌生理食塩水（５０μｌ）を注射する。
【０１５９】
インキャパシタンステスタ読み取り−重量負荷測定用のインキャパシタンステスタ（Ｃｏｌｕｍｂｕｓ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、Ｃｏｌｕｍｂｕｓ、ＯＨ）。ラットをプレキシガラスチャンバに置き、各後肢を別のフォースプレート（圧力センサ）に置く。ラットを少なくとも５分間、チャンバに順応させる。合計で３回の１秒の読み取りは、ラットをチャンバに置いている間、左および右後肢の両方に与えられる圧力の量を反映するとみなされる。各後肢により与えられる力はグラムで測定し、左後肢重量分布−右後肢重量分布として算出する。したがって、各動物についての最後の肢重量分布は、３回の１秒の読み取りの平均である。
【０１６０】
ＲＡＲγアンタゴニストについての研究：ＭＩＡ注射後９日目に１回、ラットにＲＡＲγアンタゴニストを投与し、投与後２時間、疼痛について各ラットを測定する。１０〜１５分の疼痛測定を可能にするために各ラットへの投与間隔は１０〜１５分にする。ほとんどの化合物は、用量反応研究に進む前に、１または３ｍｇ／ｋｇの化合物での単回用量研究における疼痛の減少について最初にスクリーニングされる。別の用量反応研究を実施し、結果を組み合わせることにより、ＲＡＲγアンタゴニストについて用量反応曲線およびＥＤ５０値を生成し、ここで、２つの研究は、１）０．１、０．３および１．０ｍｇ／ｋｇにおけるビヒクル、ＲＡＲγアンタゴニスト、ならびに２）１、３および１０ｍｇ／ｋｇにおけるビヒクル、ＲＡＲγアンタゴニストであるか、または用量反応研究として、全ての動物を、０．１、０．３、１．０、３．０および１０ｍｇ／ｋｇ（実施例１のみ）にて同じ研究において試験する。研究のいずれかの種類についての用量体積は５ｍｌ／ｋｇである。
【０１６１】
標準的なＭＩＡモデルにおける用量反応研究において、実施例１の化合物は、０．１ｍｇ／ｋｇの用量におけるビヒクルと比較して疼痛を有意に阻害する。
【０１６２】
本発明の例示した化合物は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．Ｅａｓｔｏｎ  Ｐａ．１９９０に見出されるものなどの受容される実施に従って医薬組成物に容易に製剤化され得る。経口投与が典型的に骨関節炎治療のための好ましい投与経路である。好ましい医薬組成物は、経口投与のための錠剤またはカプセル剤として製剤化され得る。錠剤またはカプセル剤は有効量で本発明の化合物を含んでもよい。
【０１６３】
医薬組成物は、関節炎、より特には骨関節炎、さらにより好ましくは骨関節炎に関連する疼痛を治療するのに有効な量で患者に投与される。患者を治療するのに適切な量または有効な投与量は医療提供者により決定でき、受容者の年齢、健康および体重、併用療法の種類、もしあれば、治療頻度ならびに所望される効果の性質に依存し得る。標準的な臨床技術を使用して典型的な投薬レベルは最適化されてもよく、投与様式および患者の状態に依存する。
【０１６４】
本発明の化合物は、１種以上の治療剤、例えば、鎮痛剤および／またはＮＳＡＩＤ（非ステロイド性抗炎症薬）またはＣＯＸ−２阻害剤、例えば、アスピリン、アセトアミノフェン、セレコキシブ、ジクロフェナク、イブプロフェン、インドメタシン、およびナプロキセン、または他の抗炎症薬と組み合わせて利用されてもよい。
【図１】
2014532644.tif 000044
【国際調査報告】
2014532644.tif 000045
2014532644.tif 000046
2014532644.tif 000047