(57)【要約】  本発明は、医薬活性剤および薬物動態変性剤を含む、少なくとも２つの異なる末端基が付着している表面アミノ基を有する、デンドリマーを含む高分子に関し、医薬活性剤は、ヒドロキシル基を含み、二酸リンカーを通してデンドリマーの表面アミノ基に付着している。高分子を含む医薬組成物、および高分子を使用する治療の方法も説明される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｉ）核と、少なくとも１世代の基礎単位とを含む、デンドリマーであって、最外世代の基礎単位は、表面アミノ基を有し、少なくとも２つの異なる末端基が、前記デンドリマーの前記表面アミノ基に共有結合している、デンドリマーと、
ｉｉ）ヒドロキシル基を含む医薬活性剤の残基である、第１の末端基と、
ｉｉｉ）薬物動態変性剤である、第２の末端基と、
を含み、前記第１の末端基は、二酸リンカーまたはその薬学的に容認可能な塩を通して、前記デンドリマーの前記表面アミノ基に共有結合している、
高分子。
【請求項２】
前記薬物動態変性剤は、ポリエチレングリコールである、請求項１に記載の高分子。
【請求項３】
前記ポリエチレングリコールは、２２０〜１１００Ｄａの範囲内の分子量を有する、請求項２に記載の高分子。
【請求項４】
前記ポリエチレングリコールは、１０００〜２５００Ｄａの範囲内の分子量を有する、請求項３に記載の高分子。
【請求項５】
前記ポリエチレングリコールは、１０００〜５５００の分子量を有する、請求項２に記載の高分子。
【請求項６】
前記二酸リンカーは、以下の式を有し、
【化１】
2014520105.tif 000096
式中、Ｘは、−Ｃ１−Ｃ１０アルキルレン−、−（ＣＨ２）ｓ−Ａ−（ＣＨ２）ｔ−、およびＱから選択され、
−Ｃ（Ｏ）−Ｊ−は、欠けている、アミノ酸残基、または２〜１０個のアミノ酸残基のペプチドであり、−Ｃ（Ｏ）−は、前記アミノ酸またはペプチドのカルボキシ末端に由来し、
Ａは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ１−、−Ｎ＋（Ｒ１）２−、−Ｓ−Ｓ−、−［ＯＣＨ２ＣＨ２］ｒ−Ｏ−、−Ｙ−、および−Ｏ−Ｙ−Ｏ−から選択され、
Ｑは、Ｙまたは−Ｚ＝Ｎ−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）ｗ−Ｙ−から選択され、
Ｙは、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、およびヘテロアリールから選択され、
Ｚは、−（ＣＨ２）ｘ−Ｃ（ＣＨ３）＝、−（ＣＨ２）ｘＣＨ＝、シクロアルキル、およびヘテロシクロアルキルから選択され、
Ｒ１は、水素およびＣ１−Ｃ４アルキルから選択され、
ｓおよびｔは、独立して１および２から選択され、
ｒは、１、２、および３から選択され、
ｗは、０、１、および２から選択され、
ｘは、１、２、３、および４から選択される、
請求項１〜５のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項７】
Ｘは、−Ｃ１−Ｃ６−アルキレン、−ＣＨ２−Ａ−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−Ａ−ＣＨ２ＣＨ２−、またはヘテロアリールである、請求項６に記載の高分子。
【請求項８】
−Ｃ（Ｏ）−Ｊ−は、欠けている、アミノ酸残基、または２〜６個のアミノ酸残基のペプチドであり、−Ｃ（Ｏ）−は、前記アミノ酸またはペプチドの前記カルボキシ末端に由来する、請求項６または請求項７に記載の高分子。
【請求項９】
−Ｃ（Ｏ）−Ｊ−は、欠けている、請求項６〜８のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項１０】
−Ｃ（Ｏ）−Ｊ−は、−ＧＧＧ−、−ＧＦＬＧ−、および−ＧＩＬＧＶＰ−から選択される、請求項６〜９のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項１１】
Ａは、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＮＨ−、−Ｎ（ＣＨ３）−、−Ｎ＋（ＣＨ３）２−、−Ｏ−１，２−フェニル−Ｏ−、−Ｏ−１，３−フェニル−Ｏ−、−Ｏ−１，４−フェニル−Ｏ−、−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ−、−［ＯＣＨ２ＣＨ２］２−Ｏ−、および−［ＯＣＨ２ＣＨ２］３−Ｏ−から選択される、請求項６〜１０のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項１２】
Ｙは、ヘテロアリールまたはアリールである、請求項６〜１１のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項１３】
Ｚは、−（ＣＨ２）ｘＣ（ＣＨ３）＝、−（ＣＨ２）ｘＣＨ＝、およびシクロアルキルである、請求項６〜１２のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項１４】
Ｒ１は、水素、メチル、またはエチルである、請求項６〜１３のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項１５】
前記デンドリマーは、１〜８世代の基礎単位を有する、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項１６】
前記デンドリマーは、２〜６世代の基礎単位を有する、請求項１５に記載の高分子。
【請求項１７】
前記デンドリマーは、リシンまたはリシン類似体の基礎単位を含む、デンドリマーである、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項１８】
前記第１の末端基および前記第２の末端基は、１：１比で存在する、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項１９】
前記高分子は、封鎖基、医薬品、または標的基である、第３の末端基を含む、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項２０】
前記封鎖基は、アシル基である、請求項１９に記載の高分子。
【請求項２１】
前記第１の末端基、第２の末端基、および第３の末端基の比は、１：２：１である、請求項１９または２０に記載の高分子。
【請求項２２】
前記末端基の少なくとも５０％は、前記第１または第２の末端基のうちの１つを含む、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項２３】
前記デンドリマーの前記核上の官能基に付着した標的基をさらに含む、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項２４】
前記標的作用物質は、黄体化ホルモン放出ホルモン、黄体化ホルモン放出ホルモン類似体、ＬＹＰ−１、および抗体または抗体断片から選択される、請求項２３に記載の高分子。
【請求項２５】
前記高分子は、１０００ｎｍ未満の粒径を有する、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項２６】
前記粒径は、５〜４００ｎｍの間である、請求項２５に記載の高分子。
【請求項２７】
前記高分子は、少なくとも３０ｋＤａの分子量を有する、請求項１〜２６のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項２８】
前記医薬活性剤は、水溶液中で難溶性または不溶性である、請求項１に記載の高分子。
【請求項２９】
前記医薬活性剤は、腫瘍薬である、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項３０】
前記腫瘍薬は、ドセタキセル、パクリタキセル、カバジタキセル、カンプトテシン、イリノテカン、トポテカン、またはゲムシタビンである、請求項２９に記載の高分子。
【請求項３１】
前記医薬活性剤は、テストステロンである、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項３２】
請求項１〜３１のいずれか一項に記載の高分子と、薬学的に容認可能な担体とを含む、医薬組成物。
【請求項３３】
前記組成物は、ポリエトキシル化ヒマシ油およびポリソルベート８０を実質的に含まない、請求項３２に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
前記高分子は、徐放製剤として製剤化される、請求項３２または請求項３３に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
前記二酸リンカーは、前記医薬活性剤の制御された放出を達成するように選択される、請求項３２〜３４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
前記高分子は、５分から６０分の間に前記医薬活性剤の５０％以上を放出するように製剤化される、請求項３２または請求項３３に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
前記高分子は、２時間から４８時間の間に前記医薬活性剤の５０％以上を放出するように製剤化される、請求項３２または請求項３３に記載の医薬組成物。
【請求項３８】
前記高分子は、５日から３０日の間に前記医薬活性剤の５０％以上を放出するように製剤化される、請求項３２または請求項３３に記載の医薬組成物。
【請求項３９】
前記組成物は、経皮的送達のために製剤化される、請求項３２〜３８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
医薬活性剤が腫瘍薬である、請求項１〜３０のいずれか一項に記載の高分子の有効量、または請求項３２〜３９のいずれか一項に記載の医薬組成物を投与することを含む、癌の成長を治療または抑制する方法。
【請求項４１】
前記癌は、原発腫瘍である、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記原発腫瘍は、前立腺、精巣、肺、腎臓、結腸、膵臓、骨、脾臓、肝臓、脳、頭部および／または頸部、乳房、消化管、皮膚、または卵巣の腫瘍である、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記癌は、転移性腫瘍である、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記転移性腫瘍は、前立腺、精巣、肺、腎臓、結腸、膵臓、骨、脾臓、肝臓、脳、頭部および／または頸部、乳房、消化管、皮膚、または卵巣の腫瘍である、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記腫瘍薬が第１の末端基の前記医薬活性剤である、請求項１〜３０のいずれか一項に記載の高分子、または請求項３２〜３９に記載の医薬組成物を投与することを含む、腫瘍薬または腫瘍薬の製剤の毒性を低減させる方法。
【請求項４６】
低減させられる前記毒性は、血液毒性、神経毒性、胃腸毒性、心臓毒性、肝毒性、腎毒性、耳毒性、または脳毒性である、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記腫瘍薬が前記第１の末端基の前記医薬活性剤である、請求項１〜３０のいずれか一項に記載の高分子、または請求項３２〜３９に記載の医薬組成物を投与することを含む、腫瘍薬または腫瘍薬の製剤と関連付けられる副作用を低減させる方法。
【請求項４８】
低減させられる前記副作用は、好中球減少症、白血球減少症、血小板減少症、骨髄毒性、骨髄抑制、神経障害、疲労、非特異的神経認知問題、目まい、脳症、貧血、味覚障害、呼吸困難、便秘、食欲不振、爪の障害、体液貯留、無力症、疼痛、吐き気、嘔吐粘膜炎、脱毛症、皮膚反応、筋肉痛、過敏性、およびアナフィラキシーから選択される、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記医薬活性剤が前記腫瘍薬である、請求項３１〜３４に記載の医薬組成物を投与することを含む、腫瘍薬を用いた治療時に対象における過敏性を低減させる方法。
【請求項５０】
投与される前記医薬組成物は、可溶化賦形剤を実質的に含まない、請求項４０〜４９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５１】
前記可溶化賦形剤は、ポリエトキシル化ヒマシ油およびポリソルベート界面活性剤から選択される、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
前記ポリエトキシル化ヒマシ油は、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬである、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
前記ポリソルベート界面活性剤は、ポリソルベート８０である、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
治療計画は、コルチコステロイドおよび／または抗ヒスタミン剤を用いた前投薬の低減した量を含むか、あるいはコルチコステロイドおよび／または抗ヒスタミン剤を用いた前投薬ステップを含まない、請求項４０〜５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５５】
前記高分子は、高速注入によって、またはボーラスとして投与される、請求項４０〜５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５６】
前記医薬活性剤がテストステロンである、請求項１〜２７および３１のいずれか一項に記載の高分子、または請求項３２〜３９に記載の医薬組成物を投与することを含む、低テストステロンレベルに関係する疾患または障害を治療または予防する方法。
【請求項５７】
前記高分子は、経皮的に投与される、請求項５６に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬活性剤および薬物動態変性剤を含む、少なくとも２つの異なる末端基が付着している表面アミン基を有する、デンドリマーを含む高分子に関し、医薬活性剤は、二酸リンカーを通して共有結合している。医薬組成物および治療の方法も説明される。
【背景技術】
【０００２】
不良な水溶解度、毒性、低い生体利用効率、生物学的条件下での不安定性、作用部位を標的にすることの欠如、および急速な生体内分解を含む、医薬活性剤の製剤化および送達と関連付けられる、いくつかの困難がある。
【０００３】
これらの困難のうちのいくつかに対抗するために、医薬活性剤は、それ自体が過敏性等の副作用を引き起こし得る、およびこれらの副作用を低減させるために前投薬を必要とし得る、可溶化剤を用いて製剤化されてもよい。代替的なアプローチは、リポソーム、ミセル、またはポリマーマトリクスの中の医薬活性剤のカプセル化、あるいはリポソーム、ミセル、またはポリマーマトリクスへの医薬活性剤の付着を含む。
【０００４】
これらのアプローチは、医薬活性剤の製剤化および送達と関連付けられる問題のうちのいくつかを改善し得るが、多くが依然として欠点を有する。
【０００５】
腫瘍薬は、特に製剤化するのが困難であり、治療に使用することができる用量および用法を制限し得る、副作用を有し得る。これは、治療の低減した有効性をもたらし得る。例えば、パクリタキセル、ドセタキセル、およびカバジタキセル等のタキサン薬は、低い水溶解度を有し、しばしば、ポリエトキシル化ヒマシ油（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬ）またはポリソルベート８０等の可溶化賦形剤を用いて製剤化される。これらの可溶化賦形剤は、製剤中の薬剤の増加した量を許容するが、それ自体が過敏性を含む有意な副作用をもたらすことが知られている。過敏性を低減させるために、デキサメタゾン等のステロイドを用いた前投薬が、時には用法用量で使用される。しかしながら、これはまた、コルチコステロイドが副作用を有し、５０歳以上の乳癌患者の有意なサブセットを形成する、糖尿病患者で使用することができないため、欠点も有する。
【０００６】
医薬品をカプセル化するか、または医薬品を付着させるかのいずれかである、担体としてのリポソーム、ミセル、およびポリマーマトリクスの使用は、医薬活性剤の可溶化、場合によっては、向上した生体利用効率および標的化を可能にしながら、医薬活性剤の放出に関する困難を提示する。場合によっては、担体は、標的臓器に到達する前に医薬活性剤を放出して急速に分解する。他の場合においては、担体からの医薬活性剤の放出は、可変であり、したがって、体内または標的臓器内で薬剤の治療用量に達しない場合がある。
【０００７】
担体としてのリポソーム、ミセル、およびポリマーマトリクスの別の困難は、薬剤負荷が可変であり得ることである。これは、特定の組成物のいくつかのバッチを効果的にさせ得る一方で、他の組成物は効果的ではなく、および／または製品の可変性により臨床用途のための製品の登録の困難をもたらし得る。
【０００８】
加えて、これらの分子は、不安定な、または特徴のあまりないマトリクスであり得、多分散性を被り得、それらの性質により、分析して特徴付けることが困難であり得る。それらはまた、困難な製造経路も有し得る。特に分析およびバッチ間不一致に関して、これらの困難は、規制当局の提出および承認への経路を有意に妨げる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】WO2007/082331
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
不良な水溶解度を有する医薬活性剤を用いると、しばしば、送達方法は、例えば、非経口投与に限定される。これは、利用可能な用法用量、および送達され得る用量を制限し得る。
副作用を低減させ、用量用法を向上させ、患者における薬剤のコンプライアンスおよび有効性の向上につながり得る治療濃度域を向上させるように、薬剤を送達するための代替的な製剤および送達手段の必要性がある。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明は、部分的に、第１の末端基が二酸リンカーを通して表面アミノ基に共有結合している医薬活性剤であり、第２の末端基が薬物動態変性剤である、デンドリマーの表面アミノ基に付着した少なくとも２つの異なる末端基を有する、表面アミノ基を伴うデンドリマーを含む高分子が、医薬活性剤の高い薬剤負荷、向上した溶解度、および制御された放出を可能にし得るという発見を前提とする。
【００１２】
本発明の第１の態様では、
ｉ）核と、少なくとも１世代の基礎単位とを含む、デンドリマーであって、最外世代の基礎単位は、表面アミノ基を有し、少なくとも２つの異なる末端基が、デンドリマーの表面アミノ基に共有結合している、デンドリマーと、
ｉｉ）ヒドロキシル基を含む医薬活性剤の残基である、第１の末端基と、
ｉｉｉ）薬物動態変性剤である、第２の末端基と、
を含み、第１の末端基は、二酸リンカーまたはその薬学的に容認可能な塩を通して、デンドリマーの表面アミノ基に共有結合している、
高分子が提供される。
【００１３】
いくつかの実施形態では、医薬活性剤は、腫瘍薬、特に、ドセタキセル、パクリタキセル、カバジタキセル、カンプトテシン、トポテカン、イリノテカン、またはゲムシタビンである。他の実施形態では、医薬活性剤は、ステロイド、特にテストステロンである。いくつかの実施形態では、医薬活性剤は、水溶液中で難溶性または不溶性である。
【００１４】
いくつかの実施形態では、薬物動態変性剤は、ポリエチレングリコール、特に、２２０〜２５００Ｄａ、さらに特に５７０〜２５００Ｄａの範囲内の分子量を有するポリエチレングリコールである。いくつかの実施形態では、ポリエチレングリコールは、２２０〜１１００Ｄａ、特に５７０〜１１００Ｄａの間の分子量を有する。他の実施形態では、ポリエチレングリコールは、１０００〜５５００Ｄａ、または１０００〜２５００Ｄａ、特に１０００〜２３００Ｄａの間の分子量を有する。
【００１５】
いくつかの実施形態では、二酸リンカーは、以下の式を有し、
【化１】
2014520105.tif 000002
式中、Ｘは、−Ｃ１−Ｃ１０アルキルレン−、−（ＣＨ２）ｓ−Ａ−（ＣＨ２）ｔ−、およびＱから選択され、
−Ｃ（Ｏ）−Ｊ−は、欠けている、アミノ酸残基、または２〜１０個のアミノ酸残基のペプチドであり、−Ｃ（Ｏ）−は、アミノ酸またはペプチドのカルボキシ末端に由来し、
Ａは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ１−、−Ｎ＋（Ｒ１）２−、−Ｓ−Ｓ−、−［ＯＣＨ２ＣＨ２］ｒ−Ｏ−、−Ｙ−、および−Ｏ−Ｙ−Ｏ−から選択され、
Ｑは、Ｙまたは−Ｚ＝Ｎ−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）ｗ−Ｙ−から選択され、
Ｙは、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、およびヘテロアリールから選択され、
Ｚは、−（ＣＨ２）ｘ−Ｃ（ＣＨ３）＝、−（ＣＨ２）ｘＣＨ＝、シクロアルキル、およびヘテロシクロアルキルから選択され、
Ｒ１は、水素およびＣ１−Ｃ４アルキルから選択され、
ｓおよびｔは、独立して１および２から選択され、
ｒは、１、２、および３から選択され、
ｗは、０、１、および２から選択され、
ｘは、１、２、３、および４から選択される。
【００１６】
いくつかの実施形態では、デンドリマーは、１〜８世代の基礎単位、特に、３〜６世代の基礎単位を有する。いくつかの実施形態では、デンドリマーは、リシンまたはリシン類似体の基礎単位を含む、デンドリマーである。他の実施形態では、デンドリマーは、ポリエーテルヒドロキシアミンの基礎単位を含む。
【００１７】
いくつかの実施形態では、第１の末端基および第２の末端基は、１：１比で存在する。いくつかの実施形態では、高分子は、封鎖基、特に、酢酸塩等のアシル基である、第３の末端基を含む。いくつかの実施形態では、第１の末端基、第２の末端基、および第３の末端基の比は、１：２：１である。
【００１８】
いくつかの実施形態では、末端基の少なくとも５０％は、第１または第２の末端基を含む。
【００１９】
いくつかの実施形態では、デンドリマーは、随意にスペーサ基を通して、核上の官能基に付着した標的作用物質を含み、特に、標的作用物質は、黄体化ホルモン放出ホルモン、デスロレリン等の黄体化ホルモン放出ホルモン類似体、ＬＹＰ−１、および抗体またはその断片から選択される。
【００２０】
いくつかの実施形態では、高分子は、１０００ｎｍ未満、特に５〜１０００ｎｍの間、さらに特に５〜４００ｎｍの間、最も特に５〜５０ｎｍの間の粒径を有する。いくつかの実施形態では、高分子は、少なくとも３０ｋＤａ、特に４０〜３００ｋＤａ、さらに特に４０〜１５０ｋＤａの分子量を有する。
【００２１】
本発明の別の態様では、本発明の高分子と、薬学的に容認可能な担体とを含む、医薬組成物が提供される。いくつかの実施形態では、本組成物は、ポリエトキシル化ヒマシ油（例えば、Ｃｒｅｍｐｈｏｒ  ＥＬ）およびポリソルベート８０等の可溶化賦形剤を実質的に含まない。可溶化賦形剤を除去することによって、デンドリマーの組成物は、生命を脅かすアナフィラキシーおよび／または重度の体液貯留を含む、急性または遅延過敏性等の副作用を引き起こす可能性が低い。
【００２２】
いくつかの実施形態では、高分子は、徐放製剤として製剤化される。いくつかの実施形態では、リンカーは、医薬活性剤の制御された放出を可能にするように選択される。いくつかの実施形態では、高分子は、５分から６０分の間に医薬活性剤の５０％以上を放出するように製剤化される。他の実施形態では、高分子は、２時間から４８時間の間に医薬活性剤の５０％以上を放出するように製剤化される。さらに他の実施形態では、高分子は、５日から３０日の間に医薬活性剤の５０％以上を放出するように製剤化される。
【００２３】
本発明の別の態様では、第１の末端基の医薬活性剤が腫瘍薬である、本発明の高分子または医薬組成物の有効量を投与することを含む、癌の成長を治療または抑制する方法が提供される。
【００２４】
いくつかの実施形態では、腫瘍は、前立腺、精巣、肺、結腸、膵臓、腎臓、骨、脾臓、脳、頭部および／または頸部、乳房、消化管、皮膚、または卵巣の原発または転移性腫瘍である。
【００２５】
いくつかの実施形態では、本方法は、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬ等のポリエトキシル化ヒマシ油またはポリソルベート８０を実質的に含まない、高分子の組成物の投与を含む。
【００２６】
本発明の別の態様では、本発明の医薬組成物を投与することを含む、腫瘍薬を用いた治療時に過敏性を低減させる方法が提供され、組成物は、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬまたはポリソルベート８０等の可溶化賦形剤を実質的に含まない。
【００２７】
本発明のさらなる態様では、腫瘍薬が第１の末端基の医薬活性剤である、本発明の高分子を投与することを含む、腫瘍薬または腫瘍薬の製剤の毒性を低減させる方法が提供される。
【００２８】
いくつかの実施形態では、低減させられる毒性は、血液毒性、神経毒性、胃腸毒性、心臓毒性、肝毒性、腎毒性、耳毒性、または脳毒性である。
【００２９】
本発明のその上さらなる態様では、腫瘍薬が第１の末端基の医薬活性剤である、本発明の高分子を投与することを含む、腫瘍薬または腫瘍薬の製剤と関連付けられる副作用を低減させる方法が提供される。
【００３０】
いくつかの実施形態では、低減させられる副作用は、好中球減少症、白血球減少症、血小板減少症、骨髄毒性、骨髄抑制、神経障害、疲労、非特異的神経認知問題、目まい、脳症、貧血、味覚障害、呼吸困難、便秘、食欲不振、爪の障害、体液貯留、無力症、疼痛、吐き気、嘔吐粘膜炎、脱毛症、皮膚反応、筋肉痛、過敏性、およびアナフィラキシーから選択される。
【００３１】
いくつかの実施形態では、コルチコステロイドおよび抗ヒスタミン剤等の薬剤を用いた前投薬の必要性が低減または排除される。
【００３２】
本発明のさらに別の態様では、医薬活性剤がテストステロンである、本発明の高分子または医薬組成物を投与することを含む、低テストステロンレベルに関係する疾患または障害を治療または予防する方法が提供される。
【００３３】
いくつかの実施形態では、本組成物は、特に、随意に極微針を有する経皮的パッチによる、経皮的送達のために製剤化される。
【発明を実施するための形態】
【００３４】
「１つの」（ａ、ａｎ）および「該」（ｔｈｅ）という単数形は、文脈が特に明確に指示しない限り、複数の態様を含む。
【００３５】
本明細書および以下に続く請求項の全体を通して、文脈が特に要求しない限り、「備える」（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）という単語、ならびに「ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ」および「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」等の変形例は、規定された整数またはステップあるいは整数またはステップ群の包含を暗示するが、任意の他の整数またはステップあるいは整数またはステップ群の除外を暗示しないと理解されるであろう。
【００３６】
本明細書で使用されるように、「アルキル」という用語は、１〜１０個の炭素原子を有する、直鎖状または分岐飽和炭化水素基を指す。適切である場合、アルキル基は、特定数の炭素原子、例えば、線形または分岐配列で１、２、３、または４個の炭素原子を有するアルキル基を含む、Ｃ１−４アルキルを有してもよい。好適なアルキル基の実施例は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、２−メチルブチル、３−メチルブチル、４−メチルブチル、ｎ−ヘキシル、２−メチルペンチル、３−メチルペンチル、４−メチルペンチル、５−メチルペンチル、２−エチルブチル、３−エチルブチル、ヘプチル、オクチル、ノニル、およびデシルを含むが、それらに限定されない。
【００３７】
本明細書で使用されるような「アルキレン」という用語は、１〜１０個の炭素原子を有する、直鎖状二価アルキル基を指す。適切である場合、アルキレン基は、特定数の炭素原子を有してもよく、例えば、Ｃ１−Ｃ６アルキレンは、−ＣＨ２−、−（ＣＨ２）２−、−（ＣＨ２）３−、−（ＣＨ２）４−、−（ＣＨ２）５、および−（ＣＨ２）６−を含む。
【００３８】
本明細書で使用されるように、「シクロアルキル」という用語は、飽和または不飽和環状炭化水素を指す。シクロアルキル環は、特定数の炭素原子を含んでもよい。例えば、３〜８員シクロアルキル基は、３、４、５、６、７、または８個の炭素原子を含む。好適なシクロアルキル基の実施例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンタニル、シクロペンテニル、シクロヘキサニル、シクロヘキセニル、１，４−シクロヘキサジエニル、シクロヘプタニル、およびシクロオクタニルを含むが、それらに限定されない。
【００３９】
本明細書で使用されるように、「アリール」という用語は、各環の中で最大７個の原子の任意の安定した単環式または二環式炭素環を意味することを目的としており、少なくとも１つの環は、芳香族である。そのようなアリール 基の実施例は、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、ビフェニル、およびビナフチルを含むが、それらに限定されない。
【００４０】
本明細書で使用されるような「ヘテロシクロアルキル」または「ヘテロシクリル」という用語は、１〜４個の炭素原子が、Ｎ、Ｎ（Ｒ）、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）２、およびＯから成る基から独立して選択されるヘテロ原子によって置換されている、環状炭化水素を指す。複素環は、飽和または不飽和であり得る。好適なヘテロシクリル基の実施例は、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフェニル、ピロリジニル、ピロリニル、ピラニル、ピペリジニル、ピラゾリニル、ジチオリル、オキサチオリル、ジオキザニル、ジオキシニル、モルホリノ、およびオキサジニルを含む。
【００４１】
本明細書で使用されるような「へテロアリール」という用語は、各環の中で最大７個の原子の安定した単環式または二環式環を表し、少なくとも１つの環は、芳香族であり、少なくとも１つの環は、Ｏ、Ｎ、およびＳから成る群より選択される１〜４個のヘテロ原子を含有する。この定義の範囲内のへテロアリール基は、アクリジニル、カルバゾリル、シンノリニル、キノキサリニル、キナゾリニル、ピラゾリル、インドリル、ベンゾトリアゾリル、フラニル、チエニル、チオフェニル、３，４−プロピレンジオキシチオフェニル、ベンゾチエニル、ベンゾフラニル、ベンゾジオキサン、ベンゾジオキシン、キノリニル、イソキノリニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、イミダゾリル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリジニル、ピリミジニル、ピロリル、テトラヒドロキノリン、チアゾリル、イソチアゾリル、１，２，４−トリアゾリル、１，２，３−トリアゾリル、１，２，４−オキサジアゾリル、１，２，４−チアジアゾリル、１，３，５−トリアジニル、１，２，４−トリアジニル、１，２，４，５−テトラジニル、およびテトラゾリルを含むが、それらに限定されない。
【００４２】
「デンドリマー」という用語は、核、および核に付着した少なくとも１つの樹状突起を含有する、分子を指す。各樹状突起は、各世代の基礎単位とともに増加している複数の分岐を伴う分岐構造をもたらす、少なくとも１つの層または世代の分岐基礎単位で構成される。核に付着した樹状突起の最大数は、核上の官能基の数によって制限される。核は、樹状突起を持つのに好適な１つ以上の官能基、および随意に、特定の臓器または組織を標的にする、信号伝達する、または撮像するために好適な薬剤の付着のための追加の官能基を有してもよい。
【００４３】
本明細書で使用されるような「基礎単位」という用語は、少なくとも３つの官能基であって、核または前世代の基礎単位に付着するための１つの官能基、および次世代の基礎単位に付着するため、またはデンドリマー分子の表面を形成するための少なくとも２つの官能基を有する、分岐分子を指す。
【００４４】
「世代」という用語は、樹状突起またはデンドリマーを構成する基礎単位の層の数を指す。例えば、１世代デンドリマーは、核に付着した１層の分岐基礎単位、例えば、ｕが核に付着した樹状突起の数である、核−［［基礎単位］］ｕを有するであろう。２世代デンドリマーは、核に付着した各樹状突起の中の２層の基礎単位を有し、例えば、基礎単位が１つの分岐点を有するとき、デンドリマーは、核［［基礎単位］［基礎単位］２］ｕであってもよく、３世代デンドリマーは、核に付着した各樹状突起の中の３層の基礎単位、例えば、核−［［基礎単位］［基礎単位］２［基礎単位］４］ｕを有する、６世代デンドリマーは、核に付着した６層の基礎単位、例えば、核−［［基礎単位］［基礎単位］２［基礎単位］４［基礎単位］８［基礎単位］１６［基礎単位］３２］ｕを有する、および同等物である。最近の世代の基礎単位（最外世代）は、末端基を結合するために利用可能なデンドリマーの表面官能基化および官能基の数を提供する。例えば、２つの樹状突起が付着した（ｕ＝２）核を有するデンドリマーでは、各基礎単位が１つの分岐点を有し、６つの世代がある場合、最外世代は、末端基を結合するために利用可能な６４個の基礎単位および１２８個の官能基を有する。
【００４５】
本明細書で使用されるような「難溶性」という用語は、水中で１ｍｇ／ｍＬから１０ｍｇ／ｍＬの間で溶解度を有する、薬剤または医薬活性剤を指す。水中で１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解度を有する薬剤は、不溶性と見なされる。
【００４６】
本明細書で使用されるような「医薬活性剤」という用語は、生体内で治療効果を及ぼすために使用される、化合物を指す。この用語は、「薬剤」という用語と同義で使用される。「医薬活性剤の残基」という用語は、医薬活性剤が高分子への付着によって変性されているときの医薬活性剤である、高分子の一部を指す。
【００４７】
本明細書で使用されるような「腫瘍薬」という用語は、化学療法薬等の癌を治療するために使用される医薬活性剤を指す。
【００４８】
本明細書で使用されるような「可溶化賦形剤」という用語は、水性製剤の中へ不溶性または難溶性薬剤を可溶化するために使用される、製剤添加物を指す。実施例は、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬ、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＲＨ  ４０、およびＣｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＲＨ  ６０を含むポリエトキシル化ヒマシ油、Ｄ−α−トコフェロール−ポリエチレングリコール１０００サクシネート、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０、ｓｏｌｕｔｏｌ  ＨＳ  １５、ソルビタンモノオレエート、ポロキサマー４０７、Ｌａｂｒａｓｏｌ、および同等物等の界面活性剤を含む。
【００４９】
本発明の高分子は、薬学的に容認可能な塩の形態であってもよい。しかしながら、非薬学的に容認可能な塩もまた、薬学的に容認可能な塩の調製で中間体として有用であり得るか、あるいは貯蔵または輸送中に有用であり得るため、本発明の範囲内に入ることが理解されるであろう。好適な薬学的に容認可能な塩は、塩酸、硫酸、リン酸、硝酸、炭酸、ホウ酸、スルファミン酸、および臭化水素酸等の薬学的に容認可能な無機酸の塩、または酢酸、プロピオン酸、酪酸、酒石酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フマル酸、マレイン酸、クエン酸、乳酸、粘液酸、グルコン酸、安息香酸、コハク酸、シュウ酸、フェニル酢酸、メタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、サリチルスルファニル酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、エデト酸、ステアリン酸、パルミチン酸、オレイン酸、ラウリン酸、パントテン酸、タンニン酸、アスコルビン酸、および吉草酸等の薬学的に容認可能な有機酸の塩を含むが、それらに限定されない。
【００５０】
塩基塩は、ナトリウム、カリウム、リチウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、およびアルキルアンモニウム等の薬学的に容認可能なカチオンで形成されるものを含むが、それらに限定されない。
【００５１】
塩基性窒素含有基は、塩化、臭化、およびヨウ化メチル、エチル、プロピル、およびブチル等の低級ハロゲン化アルキル、ジメチルおよびジエチルのような硫酸ジアルキル、および同等物等の作用物質で四級化されてもよい。
【００５２】
本発明の高分子
本発明の高分子は、
ｉ）核と、少なくとも１世代の基礎単位とを含む、デンドリマーであって、最外世代の基礎単位は、表面アミノ基を有し、少なくとも２つの異なる末端基が、デンドリマーの表面アミノ基に共有結合している、デンドリマーと、
ｉｉ）ヒドロキシル基を含む医薬活性剤の残基である、第１の末端基と、
ｉｉｉ）薬物動態変性剤である、第２の末端基と、
を含み、第１の末端基は、二酸リンカーまたはその薬学的に容認可能な塩を通して、デンドリマーの表面アミノ基に共有結合している。
【００５３】
表面アミノ基を有するデンドリマーは、表面アミノ基に共有結合している、少なくとも２つの異なる末端基を有する。
【００５４】
第１の末端基は、遊離ヒドロキシル基を含む医薬活性剤の残基である。医薬活性剤は、二酸リンカーを通してデンドリマーの表面アミノ基に付着している。二酸リンカーは、医薬活性剤のヒドロキシル基とエステル結合、および表面アミノ基とアミド結合を形成する。
【００５５】
医薬活性剤は、二酸リンカーとのエステル形成に利用可能なヒドロキシル基を有し、治療効果を生じるように対象に投与される、任意の医薬活性剤であってもよい。
【００５６】
いくつかの実施形態では、医薬活性剤は、タキサン、ヌクレオシド、またはキナーゼ阻害剤等の腫瘍薬、ステロイド、オピオイド鎮痛薬、呼吸器薬、中枢神経系（ＣＮＳ）薬、高コレステロール血症薬、抗高血圧薬、免疫抑制薬、抗生物質、黄体化ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）作動薬、ＬＨＲＨ拮抗薬、抗ウイルス薬、抗レトロウイルス薬、エストロゲン受容体変調剤、ソマトスタチン模倣剤、抗炎症薬、ビタミンＤ２類似体、合成チロキシン、抗ヒスタミン剤、抗真菌薬、または非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）である。
【００５７】
好適な腫瘍薬は、パクリタキセル、カバジタキセル、およびドセタキセル等のタキサン、カンプトテシンならびにイリノテカンおよびトポテカン等のその類似体、ビンフルニン等の他の抗微小管薬、ゲムシタビン、クラドリビン、フルダラビン、カペシタビン、デシタビン、アザシチジン、クロファラビン、およびネララビン等のヌクレオシド、スプリセル、テムシロリムス、ダサチニブ、ＡＺＤ６２４４、ＡＺＤ１１５２、ＰＩ−１０３、Ｒ−ロスコビチン、オロモウシン、およびパーバラノールＡ等のキナーゼ阻害剤、イキサベピロン等のエポチロンＢ類似体、アムルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、およびバルルビシン等のアントラサイクリン、トラベクテジン等の超酸化物誘導剤、ボルテゾミブ等のプロテオソーム誘導剤および他のトポイソメラーゼ誘導剤、挿入剤、およびアルキル化剤を含む。
【００５８】
好適なステロイドは、テストステロン、ジヒドロテストステロン、およびエチニルエストラジオール等のアナボリックステロイド、およびコルチゾン、プレドニゾロン、ブデソニド、トリアムシノロン、フルチカゾン、モメタゾン、アムシノニド、フルシノロン、フルオシノニド、デソニド、ハルシノニド、プレドニカルベート、フルオコルトロン、デキサメタゾン、ベタメタゾン、およびフルプレドニジン等のコルチコステロイドを含む。
【００５９】
好適なオピオイド鎮痛薬は、モルヒネ、オキシモルホン、ナロキソン、コデイン、オキシコドン、メチルナルトレキソン、ヒドロモルホン、ブプレノルフィン、およびエトルフィンを含む。
【００６０】
好適な呼吸器薬は、気管支拡張剤、吸引ステロイド、および充血除去剤、およびより具体的には、サルブタモール、臭化イプラトロピウム、モンテルカスト、およびホルモテロールを含む。
【００６１】
好適なＣＮＳ薬は、クエチアピン等の抗精神病剤、およびベンラファキシン等の抗うつ剤を含む。
【００６２】
高コレステロール血症を制御する好適な薬剤は、エゼチミブ、およびシンバスタチン、ロバスタチン、アトルバスタチン、フルバスタチン、ピタバスタチン、プロバスタチン、およびロスバスタチン等のスタチンを含む。
【００６３】
好適な抗高血圧薬は、ロサルタン、オルメサルタン、メドキソミル、メトロロール、トラボプロスト、およびボセンタンを含む。
【００６４】
好適な免疫抑制薬は、グルココルチコイド、細胞増殖抑制剤、抗体断片、抗イムノフィリン、インターフェロン、ＴＮＦ結合タンパク質、より具体的には、タクロリムス等のカルシニューリン阻害剤、ミコフェノール酸およびミコフェノール酸モフェチル等のその誘導体、およびシクロスポリンを含む。
【００６５】
好適な抗菌剤は、アモキシシリン、メロペネム、およびクラブラン酸等の抗生物質を含む。
【００６６】
好適なＬＨＲＨ作動薬は、酢酸ゴセレリン、デスロレリン、およびリュープロレリンを含む。
【００６７】
好適なＬＨＲＨ拮抗薬は、セトロレリクス、ガニレリクス、アバレリクス、およびデガレリクスを含む。
【００６８】
好適な抗ウイルス薬は、ラミブジン、ジドブジン、アバカビル、およびエンテカビル等のヌクレオシド類似体を含み、好適な抗レトロウイルス薬は、アタザナビル、ラピナビル、およびリトナビル等のプロテアーゼ阻害剤を含む。
【００６９】
好適な選択的エストロゲン受容体変調剤は、ラロキシフェンおよびフルベストラントを含む。
【００７０】
好適なソマトスタチン模倣剤は、オクトレオチドを含む。
【００７１】
好適な抗炎症薬は、メサラジンを含み、好適なＮＳＡＩＤは、アセトアミノフェン（パラセタモール）を含む。
【００７２】
好適なビタミンＤ２類似体は、パリカルシトールを含む。
【００７３】
好適な合成チロキシンは、レボチロキシンを含む。
【００７４】
好適な抗ヒスタミン剤は、フェキソフェナジンを含む。
【００７５】
好適な抗真菌薬は、ボリコナゾール等のアゾールを含む。
【００７６】
いくつかの実施形態では、医薬活性剤は、水溶液中で難溶性または不溶性である。
【００７７】
特定の実施形態では、医薬活性剤は、ドセタキセル、パクリタキセル、テストステロン、ゲムシタビン、カンプトテシン、イリノテカン、およびトポテカン、特に、ドセタキセル、パクリタキセル、およびテストステロンから選択される、
【００７８】
医薬活性剤をデンドリマーの表面アミノ基に結合する二酸リンカーは、以下の式を有し、
【化２】
2014520105.tif 000003
式中、Ｘは、−Ｃ１−Ｃ１０アルキルレン−、−（ＣＨ２）ｓ−Ａ−（ＣＨ２）ｔ−、およびＱから選択され、
−Ｃ（Ｏ）−Ｊ−は、欠けている、アミノ酸残基、または２〜１０個のアミノ酸残基のペプチドであり、−Ｃ（Ｏ）−は、アミノ酸またはペプチドのカルボキシ末端に由来し、
Ａは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ１−、−Ｎ＋（Ｒ１）２−、−Ｓ−Ｓ−、−［ＯＣＨ２ＣＨ２］ｒ−Ｏ−、−Ｙ−、および−Ｏ−Ｙ−Ｏ−から選択され、
Ｑは、Ｙまたは−Ｚ＝Ｎ−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）ｗ−Ｙ−から選択され、
Ｙは、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、およびヘテロアリールから選択され、
Ｚは、−（ＣＨ２）ｘ−Ｃ（ＣＨ３）＝、−（ＣＨ２）ｘＣＨ＝、シクロアルキル、およびヘテロシクロアルキルから選択され、
Ｒ１は、水素およびＣ１−Ｃ４アルキルから選択され、
ｓおよびｔは、独立して１および２から選択され、
ｒは、１、２、および３から選択され、
ｗは、０、１、および２から選択され、
ｘは、１、２、３、および４から選択される。
【００７９】
いくつかの実施形態では、以下のうちの１つ以上が該当する。
Ｘは、−Ｃ１−Ｃ６−アルキレン、−ＣＨ２−Ａ−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−Ａ−ＣＨ２ＣＨ２−、またはへテロアリールである、
−Ｃ（Ｏ）−Ｊ−は、欠けている、アミノ酸残基、または２〜６個のアミノ酸残基のペプチドであり、−Ｃ（Ｏ）−は、アミノ酸またはペプチドのカルボキシ末端に由来する、
Ａは、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＮＨ−、−Ｎ（ＣＨ３）−、−Ｎ＋（ＣＨ３）２−、−Ｏ−１，２−フェニル−Ｏ−、−Ｏ−１，３−フェニル−Ｏ−、−Ｏ−１，４−フェニル−Ｏ−、−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ−、−［ＯＣＨ２ＣＨ２］２−Ｏ−、および−［ＯＣＨ２ＣＨ２］３−Ｏ−から選択され、
Ｙは、へテロアリールまたはアリール、特に、チオフェニル、３，４−プロピレンジオキシチオフェニルまたはベンゼンである、
Ｚは、−（ＣＨ２）ｘＣ（ＣＨ３）＝、−（ＣＨ２）ｘＣＨ＝、およびシクロアルキル、特に、−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）＝、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）＝、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ＝、シクロペンチル、およびシクロヘキシルである、
Ｒ１は、水素、メチル、またはエチル、特に、水素またはメチル、さらに特に、メチルである、
ｓおよびｔのうちの一方は、１であり、他方は、１または２であり、特に、ｓおよびｔの両方は、１である、
ｒは、１または２、特に２である、
ｗは、１または２、特に２である、
ｘは、２または３、特に３である。
【００８０】
いくつかの実施形態では、−Ｃ（Ｏ）−Ｊ−は、欠けている。他の実施形態では、−Ｃ（Ｏ）−Ｊ−は、アミノ酸残基または２〜６個のアミノ酸残基を有するペプチドである。これらの実施形態では、アミノ酸またはペプチドのＮ末端が、−Ｃ（Ｏ）−Ｘ−Ｃ（Ｏ）−基とアミド結合を形成する。いくつかの実施形態では、ペプチドは、プロテアーゼ等の内因性酵素によって認識および開裂される、アミノ酸配列を含むペプチドである。いくつかの実施形態では、酵素は、細胞内酵素である。他の実施形態では、酵素は、細胞外酵素である。特定の実施形態では、酵素は、腫瘍組織等の新生物組織の中または周囲に存在する酵素である。いくつかの実施形態では、ペプチドは、カプテシンＢまたは中性メタロプロテイナーゼ（ＮＭＰ）、ＭＭＰ−２、およびＭＭＰ−９等のメタロプロテイナーゼによって認識される。例示的なペプチドは、ＧＧＧ、ＧＦＬＧ、およびＧＩＬＧＶＰを含む。
【００８１】
特定の実施形態では、二酸リンカーは、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２ＯＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２ＳＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２Ｎ＋（ＣＨ３）２ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）−、
【化３】
2014520105.tif 000004
から選択される。
【００８２】
他の実施形態では、二酸リンカーはまた、ペプチドも含む。例示的な二酸リンカーは、
【化４Ａ】
2014520105.tif 000005
【化４Ｂ】
2014520105.tif 000006
【化４Ｃ】
2014520105.tif 000007
を含む。
【００８３】
いくつかの実施形態では、二酸リンカーは、薬剤の所望の放出速度を提供するように選択される。例えば、医薬品の負荷全体が短時間に必要とされる場合に、急速な放出が必要とされてもよい一方で、医薬活性剤の少ない一定の治療用量が必要とされるときには、徐放がより好適であり得る。
【００８４】
いくつかの実施形態では、放出速度は、高分子から独立して送達される薬剤よりも速く、特に、少なくとも２倍速い。いくつかの実施形態では、薬剤は、高分子から独立した薬剤よりもゆっくり放出され、特に、薬剤は、少なくとも２倍遅く放出され、さらに特に、薬剤は少なくとも１０倍遅く放出される。いくつかの実施形態では、薬剤は、実施例３９で説明されるように、少なくとも３０倍遅く放出される。低放出速度は、血漿中ではなく、活性部位で薬剤の放出を可能にするように、高分子が標的基を含む場合に、特に好適であり得る。低放出速度はまた、１週間から６ヶ月の間等の長期間にわたって、持続制御放出送達を可能にするように製剤化される薬剤にも好適であり得る。薬剤は、数日、数週間、または数ヶ月等の長期間にわたって高分子から放出されてもよい。高速放出は、好ましくは、０〜４８０分以内、特に０〜１２０分以内、さらに特に５〜６０分以内に５０％以上の放出である。中間放出は、好ましくは、１〜７２時間以内、特に２〜４８時間以内に５０％以上の放出である。徐放は、好ましくは、２日以上、特に２日〜６ヶ月、さらに特に５日〜３０日以内に５０％以上の放出である。
【００８５】
薬剤の放出速度は、二酸リンカーの選択によって制御することができる。ジグリコール酸、フェニレンジオキシ二酢酸、およびポリエチレングリコール等の、それらの骨格の中に１つ以上の酸素原子を含有する、またはカチオン性窒素原子を伴う二酸リンカーは、急速度で薬剤を放出する傾向があり、チオ二酢酸等の、それらの骨格の中に１つの硫黄原子を有する二酸リンカーは、中間放出速度を有し、１つ以上の窒素原子、２つ以上の硫黄原子、アルキル鎖、あるいは複素環またはへテロアリール基を有する、二酸リンカーは、低速で薬剤を放出する。放出速度は、１つ以上の−Ｏ−＞−Ｎ＋（Ｒ１）２−＞１つの−Ｓ−＞１つの−ＮＲ−＞−Ｎ−ＮＨ−ＳＯ２−＞−Ｓ−Ｓ−＞−アルキル−＞−ヘテロシクリル−によって要約され得る。
【００８６】
ジグリコール酸（実験３（ｂ））が、２２時間未満の半減期を伴って高速でドセタキセルを放出し、チオ二酢酸リンカー（実験８（ｃ））が、約２４〜３０時間と推定される２２時間を少し上回る半減期を伴って中間速度でドセタキセルを放出し、グルタル酸リンカー（実験５（ｂ））が、２日以上と予測される２２時間をさらに上回る半減期を伴って低速でドセタキセルを放出したことが、血漿サンプル中の高分子の研究である、表２から分かる。実験１６および１７は、血漿中でドセタキセルを実質的に放出しないが、プロテアーゼが作用部位でドセタキセルを提供するようにペプチド配列を劈開することができる腫瘍に、高分子が標的化されることを可能にする。
【００８７】
放出速度はまた、医薬活性剤の識別にも依存し得る。
【００８８】
いくつかの実施形態では、各医薬活性剤は、同一の二酸リンカーを用いてデンドリマーに付着している。他の実施形態では、医薬活性剤が異なる速度で高分子から放出されることを可能にする、２つ以上の異なる二酸リンカーが使用される。
【００８９】
第２の末端基は、吸収、分配、代謝、および／または排出を含む、医薬活性剤または高分子の薬物動態プロファイルを変性または変調する、任意の分子またはその残基であり得る、薬物動態変性剤である。特定の実施形態では、薬物動態変性剤は、高分子が、天然医薬活性剤、または非デンドリマー製剤における市販医薬活性剤の半減期を上回る半減期を有するように、医薬活性剤の血漿中半減期を引き延ばすように選択される作用物質である。好ましくは、高分子または組成物の半減期は、天然医薬活性剤、または非デンドリマー製剤における市販医薬活性剤より少なくとも２倍、より好ましくは１０倍長い。
【００９０】
いくつかの実施形態では、第２の末端基は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリエチルオキサゾリン（ＰＥＯＸ）等のポリアルキルオキサゾリン、ポリビニルピロリドン、およびポリプロピレングリコール、特に、ＰＥＧである。他の実施形態では、第２の末端基はポリエステルデンドリマーである。
【００９１】
いくつかの実施形態では、ＰＥＧは、２２０〜５５００Ｄａの間の分子量を有する。いくつかの実施形態では、ＰＥＧは、２２０〜１１００Ｄａ、特に、５７０〜１１００Ｄａの分子量を有する。他の実施形態では、ＰＥＧは、１０００〜５５００Ｄａ、特に、１０００〜２５００Ｄａまたは１０００〜２３００の分子量を有する。
【００９２】
いくつかの実施形態では、高分子は、第３の末端基を含む。第３の末端基は、デンドリマーの表面アミノ基の反応性を阻止する働きをする封鎖基である。特定の実施形態では、封鎖基は、Ｃ２−Ｃ１０アシル基等のアシル基、特に、アセチルである。他の実施形態では、第３の末端基は、第２の医薬活性剤または標的作用物質である。
【００９３】
第１の末端基および第２の末端基がある、いくつかの実施形態では、第１の末端基および第２の末端基の比は、１：２から２：１の間、特に、１：１である。
【００９４】
第１の末端基、第２の末端基、および第３の末端基がある、いくつかの実施形態では、比は、１：１：１から１：２：２、特に、１：２：１である。
【００９５】
いくつかの実施形態では、デンドリマーの表面アミノ基の全てが、第１の末端基、第２の末端基、および第３の末端基に結合されるわけではない。いくつかの実施形態では、表面アミノ基のうちのいくつかは、遊離アミノ基のままである。いくつかの実施形態では、全末端基の少なくとも５０％は、薬物動態変性剤または医薬活性剤のうちの１つを含み、特に、末端基の少なくとも７５％または少なくとも８０％は、薬物動態変性剤または医薬活性剤のうちの１つを含む。特定の実施形態では、医薬活性剤は、表面アミノ基の総数の１４％、２５％、２７％、３０％、３９％、４４％、または４８％以上に結合される。デンドリマーがＧ５ポリリシンデンドリマーである場合、医薬活性剤の総数は、好ましくは、１５よりも多く、特に２３よりも多く、さらに特に２７よりも多い。いくつかの実施形態では、薬物動態変性剤は、表面アミノ基の総数の１５％、２５％、３０％、３３％、または４６％以上に結合される。デンドリマーがＧ５ポリリシンデンドリマーである場合、薬物動態変性剤の総数は、好ましくは、２５よりも多く、特に３０よりも多い。
【００９６】
本発明の高分子は、最外世代の基礎単位が表面アミノ基を有する、デンドリマーを含む。高分子のデンドリマーの識別は、表面アミノ基を有するならば、特に重要ではない。例えば、デンドリマーは、ポリリシン、ポリリシン類似体、ポリアミドアミン（ＰＡＭＡＭ）、ポリエチレンイミン（ＰＥＩ）デンドリマー、またはポリエーテルヒドロキシルアミン（ＰＥＨＡＭ）デンドリマーであってもよい。
【００９７】
デンドリマーは、核と、１つ以上の基礎単位でできている１つ以上の樹状突起とを含む。基礎単位は、世代と呼ばれる層の中に構築される。
【００９８】
いくつかの実施形態では、基礎単位は、ポリアミン、より好ましくは、単一のカルボン酸を伴うジアミノまたはトリアミノである。好ましくは、基礎単位の分子量は、１１０Ｄａから１ＫＤａである。いくつかの実施形態では、基礎単位は、以下から選択されるリシンまたはリシン類似体である。
以下の構造を有するリシン１：
【化５】
2014520105.tif 000008
以下の構造を有するグリシル−リシン２：
【化６】
2014520105.tif 000009
ａが、１または２の整数であり、ｂおよびｃが、同一であるか、または異なり、１〜４の整数である、以下の構造を有する類似体３：
【化７】
2014520105.tif 000010
ａが、０〜２の整数であり、ｂおよびｃが、同一であるか、または異なり、２〜６の整数である、以下の構造を有する類似体４：
【化８】
2014520105.tif 000011
ａが、０〜５の整数であり、ｂおよびｃが、同一であるか、または異なり、１〜５の整数である、以下の構造を有する類似体５：
【化９】
2014520105.tif 000012
ａが、０〜５の整数であり、ｂおよびｃが、同一であるか、または異なり、０〜５の整数である、以下の構造を有する類似体６：
【化１０】
2014520105.tif 000013
ａが、０〜５の整数であり、ｂおよびｃが、同一であるか、または異なり、１〜５の整数である、以下の構造を有する類似体７：
【化１１】
2014520105.tif 000014
ａが、０〜５の整数であり、ｂ、ｃおよびｄが、同一であるか、または異なり、１〜５の整数である、以下の構造を有する類似体８：
【化１２】
2014520105.tif 000015
ａが、０〜５の整数であり、ｂおよびｃが、同一であるか、または異なり、１〜５の整数である、以下の構造を有する類似体９：
【化１３】
2014520105.tif 000016
さらに、基礎単位のアルキル鎖部分（例えば、−Ｃ−Ｃ−Ｃ−）は、そのような置換が、ＸがＯまたはＮであるＯ−Ｃ−Ｘ基を形成しないならば、１つ以上の非隣接炭素原子が酸素原子と置換される、Ｃ−Ｏ−ＣまたはＣ−Ｃ−Ｏ−Ｃ−Ｃ等のアルコキシ断片を含むと理解されてもよい。
【００９９】
いくつかの実施形態では、基礎単位は、構造１０を伴うアミドアミン基礎単位、
【化１４】
2014520105.tif 000017
構造１１を伴うエーテルヒドロキシアミン基礎単位、
【化１５】
2014520105.tif 000018
または構造１２を伴うプロピレンイミン基礎単位である。
【化１６】
2014520105.tif 000019
【０１００】
本発明の好ましい態様では、基礎単位は、リシン１、グリシル−リシン２、またはリシン類似体５から選択され、
【化１７】
2014520105.tif 000020
式中、ａは、０〜２の整数であり、またはアルキル結合は、Ｃ−Ｏ−Ｃであり、ｂおよびｃが、同一であるか、または異なり、１〜２の整数であり、特に、基礎単位は、リシンである。
【０１０１】
いくつかの実施形態では、核は、モノアミン化合物、ジアミン化合物、トリアミン化合物、テトラアミン化合物、またはペンタアミン化合物であり、アミン基のうちの１つ以上は、それに付着した基礎単位を含む、樹状突起を有する。特定の実施形態では、基礎単位の分子量は、１１０Ｄａ〜１ＫＤａである。
【０１０２】
好適な核は、ベンズヒドリルアミン（ＢＨＡ）、リシンのベンズヒドリルアミド（ＢＨＡＬｙｓ）またはリシン類似体、あるいは以下を含む。
【化１８】
2014520105.tif 000021
式中、ａは、１〜９、好ましくは、１〜５の整数である。
【化１９】
2014520105.tif 000022
式中、同一であり得るか、または異なり得る、ａ、ｂ、およびｃは、１〜５の整数であり、ｄは、０〜１００、好ましくは、１〜３０の整数である。
【化２０】
2014520105.tif 000023
式中、ａおよびｂは、同一であり得るか、または異なり得て、０〜５の整数である。
【化２１】
2014520105.tif 000024
式中、同一であり得るか、または異なり得る、ａおよびｃは、１〜６の整数であり、ｃは、０〜６の整数である。
【化２２】
2014520105.tif 000025
式中、同一であり得るか、または異なり得る、ａおよびｄは、１〜６の整数であり、同一であり得るか、または異なり得る、ｂおよびｃは、０〜６の整数である。
【化２３】
2014520105.tif 000026
式中、ａおよびｂは、同一であるか、または異なり、１〜５、特に、１〜３、さらに特に、１の整数である。
以下から選択されるトリアミン化合物であって、
【化２４】
2014520105.tif 000027
式中、同一であり得るか、または異なり得る、ａ、ｂ、およびｃは、１〜６の整数である。
【化２５】
2014520105.tif 000028
式中、同一であり得るか、または異なり得る、ａ、ｂ、およびｃは、０〜６の整数である。
【化２６】
2014520105.tif 000029
【化２７】
2014520105.tif 000030
【化２８】
2014520105.tif 000031
式中、同一であり得るか、または異なり得る、ａ、ｂ、およびｃは、０〜６の整数である。
【化２９】
2014520105.tif 000032
式中、同一であり得るか、または異なり得る、ａ、ｂ、およびｃは、０〜６の整数であり、同一であり得るか、または異なり得る、ｄ、ｅ、およびｆは、１〜６の整数である。
【化３０】
2014520105.tif 000033
式中、同一であり得るか、または異なり得る、ａ、ｂ、およびｃは、１〜６の整数である。
【化３１】
2014520105.tif 000034
式中、同一であり得るか、または異なり得る、ａ、ｂ、およびｃは、１〜５の整数であり、ｄは、１〜１００、好ましくは、１〜３０の整数であり、ｅは、０〜５の整数であり、ｆおよびｇは、同一であるか、または異なり、１〜５の整数である。
または、以下から選択されるテトラアミン化合物であって、
【化３２】
2014520105.tif 000035
【化３３】
2014520105.tif 000036
式中、同一であり得るか、または異なり得る、ａ、ｂ、ｃ、およびｄは、０〜６の整数である。
【化３４】
2014520105.tif 000037
式中、同一であり得るか、または異なり得る、ａ、ｂ、ｃ、およびｄは、１〜６の整数である。
【化３５】
2014520105.tif 000038
式中、同一であり得るか、または異なり得る、ａ、ｂ、ｃ、およびｄは、０〜６の整数であり、同一であり得るか、または異なり得る、ｅ、ｆ、ｇ、およびｈは、１〜６の整数である。
さらに、基礎単位のアルキル鎖部分（例えば、−Ｃ−Ｃ−Ｃ−）は、そのような置換が、ＸがＯまたはＮであるＯ−Ｃ−Ｘ基を形成しないならば、１つ以上の非隣接炭素原子が酸素原子と置換される、Ｃ−Ｏ−ＣまたはＣ−Ｃ−Ｏ−Ｃ−Ｃ等のアルコキシ断片を含むと理解されてもよい。
【０１０３】
いくつかの実施形態では、核は、少なくとも２つのアミノ官能基を有し、そのうちの１つは、直接、またはスペーサ基を通してのいずれかで標的部分に付着している。核の残りの官能基のうちの少なくとも１つは、ＷＯ  ２００８／０１７１２５で説明されるように付着した樹状突起を有する。
【０１０４】
標的作用物質は、何らかの選択性で生体標的細胞、臓器、または組織に結合し、それにより、高分子を体内の特定の標的に方向付けることを支援し、その標的細胞、臓器、または組織でその蓄積を可能にする、作用物質である。標的基は、加えて、高分子が受容体媒介エンドサイトーシスによって細胞または組織に活発に取り込まれるための機構を提供してもよい。
【０１０５】
特定の実施例は、レクチンおよび抗体、ならびに細胞表面受容体のための他のリガンド（小分子を含む）を含む。相互作用が、共有、イオン、および水素結合、ファン・デル・ワールス力を含む、任意の種類の結合または関連を通して起こってもよい。
【０１０６】
好適な標的基は、細胞表面受容体、例えば、葉酸受容体、アドレナリン受容体、成長ホルモン受容体、黄体形成ホルモン受容体、エストロゲン受容体、上皮成長因子受容体、維芽細胞成長因子受容体（例えば、ＦＧＦＲ２）、ＩＬ−２受容体、ＣＦＴＲ、および血管上皮成長因子（ＶＥＧＦ）受容体に結合するものを含む。
【０１０７】
いくつかの実施形態では、標的作用物質は、黄体化ホルモン放出ホルモン受容体に結合する、黄体化ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）またはその誘導体である。ＬＨＲＨは、ｐｙｒｏＧｌｕ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−ＮＨ２という配列を有する。ＬＨＲＨの好適な誘導体は、残基４〜７のうちの１つ、特に残基６（Ｇｌｙ）が、別のアミノ酸によって置換されるものを含む。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸残基は、好適には、核と、またはスペーサと結合を形成することが可能である、側鎖を有するものである。いくつかの実施形態では、誘導体は、ＬＨＲＨ  Ｇｌｙ６Ｌｙｓ、ＬＨＲＨ  Ｇｌｙ６Ａｓｐ、またはＬＨＲＨ  Ｇｌｙ６Ｇｌｕ、特にＬＨＲＨ  Ｇｌｙ６Ｌｙｓである。他の実施形態では、誘導体は、ＬＨＲＨ  Ｇｌｙ６Ｔｒｐ（デスロレリン）である。この受容体はしばしば、癌細胞で、特に、乳、前立腺、卵巣、または子宮内膜癌で見出されるか、または過剰発現される。
【０１０８】
いくつかの実施形態では、標的作用物質は、正常組織のリンパ系ではなく腫瘍のリンパ系を標的にするペプチドである、ＬＹＰ−１である。ＬＹＰ−１は、Ｈ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−ＯＨという配列を有し、ペプチドが、２つのシステイン残基の硫黄原子間のジスルフィド結合により環状形態である、ペプチドである。
【０１０９】
いくつかの実施形態では、標的作用物質は、ＲＧＤペプチドであってもよい。ＲＧＤペプチドは、−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−という配列を含有するペプチドである。この配列は、細胞外基質タンパク質の中の主要インテグリン認識部位である。
【０１１０】
受容体または細胞因子と相互作用することが知られているｓｃＦｖｓおよび二重特異性抗体等の抗体および抗体断片は、ＣＤ２０、ＣＤ５２、ＭＵＣ１、テネイシン、ＣＤ４４、ＴＮＦ−Ｒ、特に、ＣＤ３０、ＨＥＲ２、ＶＥＧＦ、ＥＧＦ、ＥＦＧＲ、およびＴＮＦ−αを含む。
【０１１１】
いくつかの実施形態では、標的作用物質は、葉酸であってもよい。葉酸は、ヌクレオチド塩基に不可欠であり、したがって、増殖細胞中で大量に必要とされるビタミンである。癌細胞では、この葉酸の増加した要求が、細胞膜を横断する葉酸の輸送に関与する、葉酸受容体の過剰発現に頻繁に反映される。対照的に、正常細胞の中への葉酸の取り込みは、葉酸受容体よりもむしろ還元葉酸担体によって促進される。葉酸受容体は、卵巣、脳、腎臓、乳房、骨髄性細胞、および肺の悪性腫瘍を含む、多くのヒト癌で上方調節され、細胞表面上の葉酸受容体密度は、癌が発達するにつれて増加すると考えられる。
【０１１２】
エストロゲンもまた、エストロゲン受容体を発現する細胞を標的にするために使用されてもよい。
【０１１３】
標的作用物質は、直接、または好ましくはスペーサを通して、デンドリマー核に結合されてもよい。スペーサ基は、核の官能基および標的作用物質上の官能基の両方に結合することが可能な任意の二価基であってもよい。スペーサ基のサイズは、好ましくは、任意の立体的な込み合いを防止するのに十分である。好適なスペーサ基の実施例は、アルキレン鎖、および１つ以上の炭素原子が−Ｏ−、−Ｓ−、またはＮＨから選択されるヘテロ原子によって置換される、アルキレン鎖を含む。アルキレン鎖は、核官能基および標的作用物質の両方に付着するために好適な官能基で終端する。例示的なスペーサ基は、Ｘ−（ＣＨ２）ｐ−Ｙ、Ｘ−（ＣＨ２Ｏ）ｐ−ＣＨ２−Ｙ、Ｘ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐ−ＣＨ２ＣＨ２−Ｙ、およびＸ−（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｙを含み、式中、ＸおよびＹは、それぞれ、核および標的作用物質と結合するための官能基、またはそれと結合した官能基であり、ｐは、１〜１００、特に、１〜５０または１〜２５の整数である。
【０１１４】
いくつかの実施形態では、標的基は、第３の官能基として表面アミノ基に結合されてもよい。いくつかの実施形態では、１〜３２個の標的基が表面に結合され、特に、１〜１０個が結合され、さらに特に、１〜４個が結合される。
【０１１５】
いくつかの実施形態では、標的作用物質およびスペーサ基は、反応を促進するように変性される。例えば、スペーサ基は、アジド官能基を含んでもよく、標的作用物質は、アルキン基を含んでもよく、またはスペーサ基は、アルキンで変性され、標的作用物質は、アジドで変性され、２つの基は、クリック反応を使用して抱合される。
【０１１６】
いくつかの実施形態では、樹状突起を持たない核の官能基は、随意に、上記で説明されるスペーサ基を通して、ビオチンに結合されてもよく、高分子は、アビジン抗体またはアビジン・ビオチン・抗体複合体と反応させられてもよい。各アビジン複合体は、最大４個の高分子・ビオチン抱合体、または高分子・ビオチン抱合体および抗体・ビオチン抱合体の組み合わせに結合してもよい。
【０１１７】
特定の実施形態では、核は、ＢＨＡまたはＢＨＡＬｙｓまたはＮＥＯＥＯＥＮ［ＳｕＮ（ＰＮ）２］である。
【０１１８】
いくつかの実施形態では、デンドリマーは、核に付着した１〜５個の樹状突起、特に、２〜４個の樹状突起、さらに特に、２〜３個の樹状突起を有する。
【０１１９】
いくつかの実施形態では、デンドリマーは、１〜８世代の基礎単位、特に、２〜７世代、３〜６世代、さらに特に、４〜６世代を有する。
【０１２０】
本発明の高分子は、１０００ｎｍ以下、例えば、５〜１０００ｎｍの間、特に、５〜５００ｎｍ、さらに特に、５〜５０ｎｍ、特に５〜２０ｎｍの間等の５〜４００ｎｍの粒径を有する、ナノ粒子であってもよい。特定の実施形態では、組成物は、５〜２０ｎｍの間の平均サイズを伴う高分子を含有する。いくつかの実施形態では、高分子は、少なくとも３０ｋＤａ、例えば、４０〜１５０ｋＤａまたは４０〜３００ｋＤａの分子量を有する。
【０１２１】
いくつかの実施形態では、本発明の高分子は、腫瘍および炎症組織において増進した透過性および保持効果（ＥＰＲ効果）を利用するために好適である、粒径を有する。腫瘍に形成される血管は、迅速に形成され、不良に整合した欠陥内皮細胞、平滑筋層の欠如、および／またはより広い管腔を伴う神経支配により、異常である。これは、通常は血管系から退出せず、高分子が腫瘍組織中に集まることを可能にするであろうサイズの粒子に対して、腫瘍血管を透過性にする。さらに、腫瘍組織は、効果的なリンパ排液が欠けており、したがって、いったん高分子が腫瘍組織に侵入すると、そこで保持される。類似蓄積および保持が、炎症部位で見出される。
【０１２２】
本発明の高分子は、１つの高分子につき２、４、８、１６、３２、６４、または１２０個の残基、特に、１６、３２、または６４個の残基の医薬活性剤の負荷を有してもよい。
【０１２３】
デンドリマーを作製する方法が、当技術分野で公知である。例えば、高分子のデンドリマーは、分散方法または収束方法、あるいはそれらの組み合わせによって作製されてもよい。
【０１２４】
分散方法では、各世代の基礎単位が、核または以前の世代に連続的に追加される。表面世代は、表面アミノ基の一方または両方を保護させている。アミノ基のうちの１つが保護される場合、遊離アミノ基が、リンカー、リンカー・医薬活性剤、または薬物動態変性剤のうちの１つと反応させられる。両方のアミノ酸が保護される場合、それらは、異なる保護基で保護され、それらの一方は、他方を除去することなく除去されてもよい。アミノ保護基のうちの１つが除去され、リンカー、リンカー・医薬活性剤、または薬物動態変性剤のうちの１つと反応させられる。いったん最初の末端基がデンドリマーに付着すると、他方のアミノ保護基が除去され、第１および第２の末端基の他方が追加される。これらの基は、当技術分野で公知であるようなアミド形成によって表面アミノ基に付着させられる。
【０１２５】
収束方法では、各世代の基礎単位が、樹状突起を形成するように前の世代の上に構築される。第１および第２の末端基は、核への樹状突起の付着前または後に、上記で説明されるように表面アミノ基に付着させられてもよい。
【０１２６】
混合アプローチでは、各世代の基礎単位が、核または前の世代の基礎単位に追加される。しかしながら、最近の世代がデンドリマーに追加される前に、表面アミノ基は、末端基、例えば、第１および第２の末端基、第１および第３の末端基、または第２および第３の末端基で官能化される。次いで、官能化された最終世代が、基礎単位の表面下層に追加され、樹状突起が核に付着させられる。
【０１２７】
医薬活性剤は、当技術分野で公知であるようなエステル形成によって、リンカーのカルボン酸のうちの１つと反応させられる。例えば、酸塩化物等の活性化カルボン酸が形成され、無水物が使用され、医薬活性剤のヒドロキシ基と反応させられる。医薬活性剤が１つよりも多くのヒドロキシ基を有する場合、さらなるヒドロキシ基が保護されてもよい。
【０１２８】
標的作用物質が核に付着している場合、核上の官能基は、デンドリマーの形成中に保護され、次いで、脱保護され、標的作用物質、スペーサ基、または標的作用物質・スペーサ基と反応させられてもよい。代替として、核は、デンドリマーの形成前に、スペーサ基または標的作用物質・スペーサ基と反応させられてもよい。
【０１２９】
好適な保護基、それらの導入および除去のための方法は、Ｇｒｅｅｎｅ  ＆  Ｗｕｔｓ，  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  １９９９で説明されている。
【０１３０】
高分子を含む組成物
本発明の高分子が整った化学物質として投与され得る可能性がある場合、特定の実施形態では、高分子は、医薬組成物として提示される。
【０１３１】
本発明は、１つ以上の薬学的に容認可能な担体、随意に、任意の他の治療成分、安定剤、または同等物とともに、本発明の１つ以上の高分子またはその薬学的に容認可能な塩を含む、獣医用途および人間医療用途の両方のための医薬製剤または組成物を提供する。担体（複数可）は、製剤の他の成分と適合し、その受容者にとって過度に有害ではないという意味で、薬学的に容認可能でなければならない。本発明の組成物はまた、ポリマー賦形剤／添加物または担体、例えば、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、およびヒドロキシプロピルメチルセルロース等の誘導体化セルロース、フィコール（ポリマー糖）、ヒドロキシエチルスターチ（ＨＥＳ）、デキストレート（例えば、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンおよびスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン等のシクロデキストリン）、ポリエチレングリコール、およびペクチンを含んでもよい。本組成物はさらに、希釈剤、緩衝剤、結合剤、崩壊剤、増粘剤、潤滑剤、防腐剤（酸化防止剤を含む）、着香料、矯味剤、無機塩（例えば、塩化ナトリウム）、抗菌剤（例えば、塩化ベンザルコニウム）、甘味料、静電気防止剤、ソルビタンエステル、脂質（例えば、レシチンおよび他のホスファチジルコリン等のリン脂質、ホスファチジルエタノールアミン、脂肪酸および脂肪酸エステル、ステロイド（例えば、コレステロール）、およびキレート剤（例えば、ＥＤＴＡ、亜鉛、および他のそのような好適なカチオン）を含んでもよい。本発明による組成物で使用するために好適な他の医薬賦形剤および／または添加物は、“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ＆Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ”，１９．ｓｕｐ．ｔｈ  ｅｄ．，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｌｉａｍｓ，（１９９５）、および“Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ”，５２．ｓｕｐ．ｎｄ  ｅｄ．，Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｅｃｏｎｏｍｉｃｓ，Ｍｏｎｔｖａｌｅ，Ｎ．Ｊ．（１９９８）、および“Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ”，Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄ．，Ｅｄ．Ａ．Ｈ．Ｋｉｂｂｅ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ，２０００に記載されている。
【０１３２】
高分子はまた、ヒト血清アルブミン等の適切なアルブミンタンパク質の存在下で製剤化されてもよい。アルブミンは、体中に栄養素を運搬し、高分子に結合し、それをその作用部位に運搬してもよい。
【０１３３】
本発明の高分子は、経口、直腸、局所、経鼻、エアロゾルによる肺への吸入、点眼、または非経口（腹腔内、血管内、皮下、または筋肉内注射を含む）投与に好適なものを含む、組成物で製剤化されてもよい。本組成物は、単位用量形態で利便的に提示されてもよく、製薬学の分野で周知である方法のうちのいずれかによって調製されてもよい。全ての方法は、１つ以上の副成分を構成する担体と高分子を関連させるステップを含む。一般に、本組成物は、溶液または懸濁液を形成するように、液体担体と高分子を関連させ、または代替として、固体、随意に、粒状製品を形成するために好適な製剤構成要素と高分子を関連させ、次いで、保証されている場合、製品を所望の送達形態に成形することによって、調製される。本発明の固体製剤は、粒子であるとき、典型的には、約１ナノメートルから約５００ミクロンに及ぶサイズを伴う粒子を含むであろう。一般に、静脈内投与用の固体製剤について、粒子は、典型的には、直径が約１ｎｍから約１０ミクロンに及ぶであろう。本組成物は、１０００ｎｍ以下、例えば、５〜１０００ｎｍの間、特に、５〜５００ｎｍ、さらに特に、５〜５０ｎｍ、特に５〜２０ｎｍの間等の５〜４００ｎｍの粒径を有するナノ粒子である、本発明の高分子を含有してもよい。特定の実施形態では、本組成物は、５〜２０ｎｍの間の平均サイズを伴う高分子を含有する。いくつかの実施形態では、高分子は、１．０１〜１．８の間、特に、１．０１〜１．５の間、さらに特に、１．０１〜１．２の間のＰＤＩを伴って、組成物中で多分散である。特定の実施形態では、高分子は、組成物中で単分散である。注射前に水性媒体中で再構成される、滅菌凍結乾燥組成物が、特に好ましい。
【０１３４】
経口投与に好適な本発明の組成物は、それぞれ、粉末または顆粒として所定量の活性剤を含有する、カプセル、カシェ剤、錠剤、トローチ剤、および同等物等の離散単位、あるいはシロップ、エリキシル剤、乳剤、頓服水剤、および同等物等の水溶液または非水溶液中の懸濁液として提示されてもよい。
【０１３５】
錠剤は、随意に、１つ以上の副成分を伴って、圧縮または成形によって作製されてもよい。圧縮錠剤は、好適な機械で圧縮することによって調製されてもよく、活性化合物は、随意に、結合剤、崩壊剤、潤滑剤、不活性希釈剤、表面活性剤、または分散剤と混合される、粉末または顆粒等の自由流動形態である。好適な担体で構成された成形錠剤は、好適な機械で成形することによって作製されてもよい。
【０１３６】
シロップは、任意の副成分（複数可）も添加され得る、糖、例えば、蔗糖の濃縮水溶液に活性化合物を添加することによって作製されてもよい。そのような副成分は、香味料、好適な防腐剤、糖の結晶化を遅らせる作用物質、および多価アルコール等の任意の他の成分の溶解度を増加させる作用物質、例えば、グリセロールまたはソルビトールを含んでもよい。
【０１３７】
非経口投与に好適な製剤は、利便的に、受容者の血液と等張性であるように製剤化することができる、高分子の滅菌水性調合液を含む。
【０１３８】
鼻腔用スプレー製剤は、防腐剤および等張剤を伴う活性剤の精製水溶液を含む。そのような製剤は、好ましくは、鼻粘膜と適合するｐＨおよび等張状態に調整される。
【０１３９】
直腸投与用の製剤は、ココアバター、または硬化脂肪、または硬化脂肪カルボン酸等の好適な担体を伴う坐薬として提示されてもよい。
【０１４０】
点眼製剤は、ｐＨおよび等張因子が、好ましくは、眼のそれらの因子と合致するように調整されることを除いて、鼻腔用スプレーと類似の方法によって調製される。
【０１４１】
局所製剤は、鉱油、石油、ポリヒドロキシアルコール、または局所製剤に使用される他の基剤等の１つ以上の媒体中に溶解または懸濁された活性化合物を含む。上述のような他の副成分の添加が望ましくあり得る。
【０１４２】
吸引によるエアロゾルとしての投与に好適である、医薬製剤も提供される。これらの製剤は、所望の高分子またはその塩の溶液または懸濁液を含む。所望の製剤は、小型チャンバの中に配置され、噴霧されてもよい。噴霧は、圧縮空気によって、あるいは高分子またはその塩を含む複数の液滴または固体粒子を形成する超音波エネルギーによって、達成されてもよい。
【０１４３】
しばしば、薬剤は、併用療法において、特に、化学療法中に、他の薬剤とともに同時投与される。したがって、本発明の高分子は、併用療法として投与されてもよい。例えば、医薬活性剤がドセタキセルであるとき、高分子は、ドキソルビシン、シクロホスファミド、またはカペシタビンとともに投与されてもよい。高分子は、他の化学療法薬とともに投与することができるだけでなく、コルチコステロイド、抗ヒスタミン剤、鎮痛薬、および回復を補助するか、または血液毒性から保護する薬剤、例えば、サイトカイン等の他の薬物と組み合わせて投与されてもよい。
【０１４４】
特に腫瘍薬を用いた、いくつかの実施形態では、本組成物は、化学療法計画の一部として非経口注入のために製剤化される。これらの実施形態では、本組成物は、可溶化賦形剤、特に、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒおよびポリソルベート８０等の可溶化賦形剤を実質的に含まないか、または完全に含まない。特定の実施形態では、医薬活性剤は、ドセタキセルまたはパクリタキセルから選択され、製剤は、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒおよびポリソルベート８０等の可溶化賦形剤を実質的に含まないか、または完全に含まない。可溶化賦形剤を除去することによって、デンドリマーの組成物は、生命を脅かすアナフィラキシーおよび／または重度の体液貯留を含む、急性または遅延過敏性等の副作用を引き起こす可能性が低い。
【０１４５】
いくつかの実施形態では、高分子は、軟膏、ローション、または経皮的パッチの中等の経皮的送達、あるいは極微針技術の使用のために製剤化される。高い薬剤負荷および水溶解度は、少量が、パッチおよび極微針技術が治療的有効量を提供するために十分な薬剤を運搬することを可能にする。そのような製剤は、テストステロンの送達に特に好適である。
【０１４６】
本発明の高分子はまた、医薬活性剤および／または徐放製剤の制御された放出を提供するために使用されてもよい。
【０１４７】
徐放製剤では、製剤成分は、数日、数週間、または数ヶ月等の長期間にわたって、製剤から高分子を放出するように選択される。この種類の製剤は、経皮的パッチ、または皮下に堆積させられ得る埋込型デバイスの中、あるいは静脈内、皮下、筋肉内、硬膜外内、または頭蓋内で注射によるものを含む。
【０１４８】
制御放出製剤では、二酸リンカーは、所与の時間窓内で、その医薬活性剤の大部分を放出するように選択される。例えば、高分子の大部分が標的臓器、組織、または腫瘍内で蓄積するためにかかる時間が分かっているとき、リンカーは、蓄積する時間が経過した後に、その医薬活性剤の大部分を放出するように選択されてもよい。これは、その作用が必要とされる場所において所与の時点で、高い薬剤負荷が送達されることを可能にすることができる。代替として、リンカーは、長期間にわたって治療レベルで医薬活性剤を放出するように選択される。
【０１４９】
いくつかの実施形態では、製剤は、複数の制御放出特性を有してもよい。例えば、製剤は、高速放出薬剤の最初の噴出を可能にし、その後に、長期間にわたって、低いが一定の治療レベルでより低速の放出が続く、薬剤が異なるリンカーを通して付着している、高分子を含む。
【０１５０】
いくつかの実施形態では、製剤は、徐放および制御放出特性の両方を有してもよい。例えば、製剤成分は、長期間にわたって高分子を放出するように選択されてもよく、リンカーは、一定の低い治療レベルの医薬活性剤を送達するように構成される。
【０１５１】
いくつかの実施形態では、医薬活性剤は、異なるリンカーを通して同一の分子に付着している。他の実施形態では、各薬剤・リンカーの組み合わせは、同一の製剤中の異なる高分子に付着している。
【０１５２】
使用の方法
本発明の高分子は、治療または予防するために未変性医薬活性剤を使用することができる、任意の疾患、障害、または症状を治療または予防するために使用されてもよい。
【０１５３】
医薬活性剤が腫瘍薬である、いくつかの実施形態では、本高分子は、癌を治療または予防する、あるいは腫瘍の成長を抑制する方法で使用される。特定の実施形態では、薬剤は、ドセタキセル、カンプトテシン、トポテカン、イリノテカン、およびゲムシタビンから選択され、特に、ドセタキセルである。
【０１５４】
いくつかの実施形態では、癌は、白血病またはリンパ腫等の血液感染性癌である。他の実施形態では、癌は、固形腫瘍である。固形腫瘍は、原発または転移性腫瘍であってもよい。例示的な固形腫瘍は、乳房、肺の腫瘍、特に、非小細胞肺癌、結腸、胃、腎臓、脳、頭部および頸部の腫瘍、特に、頭部および頸部の扁平上皮癌、甲状腺、卵巣、精巣、肝臓の腫瘍、黒色種、前立腺の腫瘍、特に、アンドロゲン非依存性（ホルモン抵抗性）前立腺癌、神経芽細胞腫、および胃食道接合部の腺癌を含む胃腺癌を含む。
【０１５５】
腫瘍薬は、しばしば、血液毒性、神経毒性、心臓毒性、肝毒性、腎毒性、耳毒性、および脳毒性等の標的外毒性による、有意な副作用を有する。例えば、ドセタキセル等のタキサンは、感染症、好中球減少症、貧血、発熱性好中球減少症、過敏性、血小板減少症、骨髄毒性、骨髄抑制、神経障害、味覚障害、呼吸困難、便秘、食欲不振、爪の障害、体液貯留、無力症、疼痛、吐き気、下痢、嘔吐、疲労、非特異的神経認知問題、目まい、脳症、粘膜炎、脱毛症、皮膚反応、および筋肉痛といった、悪影響を引き起こし得る。
【０１５６】
さらに、腫瘍薬を製剤化するために必要とされる可溶化賦形剤は、アナフィラキシー、体液貯留、および過敏性を引き起こし得る。それぞれ独自の副作用を有する、コルチコステロイド、抗ヒスタミン剤、サイトカイン、および／または鎮痛薬を用いた前投薬もまた、必要とされてもよい。本発明の高分子は、高薬剤負荷の制御された放出を有し、特定の組織を受動的に標的にし、溶解度を向上させてもよく、腫瘍薬と関連付けられる副作用の低減、可溶化賦形剤を伴わない薬剤の製剤化、および低減した前投薬を伴わない、または伴う投与を可能にする。
【０１５７】
本発明の別の態様では、本発明の高分子の有効量を対象に投与することを含む、腫瘍薬の副作用または腫瘍薬の製剤に関係する副作用を低減する方法が提供され、腫瘍薬は、第１の末端基の医薬活性剤である。
【０１５８】
本発明のさらに別の態様では、本発明の高分子の有効量を対象に投与することを含む、化学療法中に過敏性を低減する方法が提供される。
【０１５９】
癌治療のための治療計画は、しばしば、腫瘍薬が２〜４週間ごとに１回投与される、周期的療法を伴う。しばしば、薬剤は、３〜２４時間にわたって注入によって投与される。場合によっては、薬剤の副作用、または過敏性の危険、特に、薬剤の製剤によるアナフィラキシーを低減させるために、前投薬が必要とされ、その投与は、腫瘍薬を用いた治療の最大６時間前に必要とされてもよい。そのような複合治療計画は、時間がかかり、患者に数時間から２日間病院にとどまるように要求する。重度の副作用はまた、使用される腫瘍薬の用量および／または投与することができる治療の周期の数も制限し得、したがって、場合によっては治療の有効性が減少させられる。
【０１６０】
本発明では、腫瘍薬を含む高分子は、薬剤が腫瘍部位で受動的に蓄積するか、または適切な標的作用物質によって腫瘍部位に方向付けられるにつれて、薬剤と関連付けられる副作用を低減させ、デンドリマーからの薬剤の放出が制御される。
【０１６１】
水溶液中の高分子の溶解度は、有害な可溶化賦形剤を伴わずにそれらが製剤化されることを可能にし、それにより、製剤の副作用を低減させ、場合によっては、前投薬の必要性を排除する。
【０１６２】
さらに、本発明の高分子は、長期注入によって投与される必要がない。いくつかの実施形態では、それらは、例えば、２．５時間、２時間、１．５時間、１時間、または３０分を含む、３時間未満で、高速注入によって投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本高分子または高分子の製剤は、例えば、５秒から５分で、ボーラスとして投与されてもよい。
【０１６３】
本発明の高分子はまた、単独で投与される医薬活性剤と比較して、医薬活性剤の用量が増加させられることを可能にしてもよい。本発明の別の態様では、本発明の高分子を投与することを含む、医薬活性剤の用量を増加させる方法が提供され、第１の末端基は、医薬活性剤である。特定の実施形態では、最大耐量は、単独で投与されるときの医薬活性剤と比較して、少なくとも２倍増加させられる。
【０１６４】
これらの態様の特定の実施形態では、投与で使用される高分子の製剤は、ポリエトキシル化ヒマシ油（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬ）およびポリソルベート８０等の可溶化賦形剤を実質的に含まない。
【０１６５】
医薬活性剤がテストステロンまたはジヒドロテストステロンである、いくつかの実施形態では、本高分子は、低テストステロンレベルと関連付けられる疾患または障害を治療または予防する方法で使用される。
【０１６６】
低テストステロンレベルは、いくつかの状態に起因し得る。例えば、テストステロンを産生する臓器（精巣、卵巣）が、十分なテストステロンを産生しない（原発性性腺機能低下症）、脳下垂体およびそれがテストステロン産生を調節する能力が、適正に機能していない（二次性性腺機能低下症）、または視床下部が、ホルモン産生を正しく調節していない場合がある（三次性性腺機能低下症）。
【０１６７】
原発性性腺機能低下症の一般的な原因は、停留睾丸、陰嚢の負傷、癌治療、加齢、ムンプス精巣炎、染色体異常、早発卵巣不全または両方の卵巣の除去等の卵巣の状態を含む。二次性および三次性性腺機能低下症の原因は、腫瘍または付近の腫瘍の治療による脳下垂体の損傷、カルマン症候群等における視床下部奇形、脳下垂体または視床下部への血流低下、ＨＩＶ／ＡＩＤＳによって引き起こされる炎症、結核または類肉腫による炎症、および体作りでのアナボリックステロイドの違法使用を含む。
【０１６８】
また、肥満が、主に脂肪細胞で起こるプロセスである、テストステロンからエストロゲンへの変換を有意に増進するため、肥満も、低テストステロンレベルの原因であり得ることに留意されたい。
【０１６９】
低テストステロンの症状は、気分の変化（うつ、疲労、怒り）、体毛の減少、骨ミネラル密度の減少（骨粗鬆症の危険の増加）、除脂肪体重および筋力の減少、性欲の減少および勃起機能不全、腹部脂肪の増加、男性における痕跡的な乳房の発達、および精液中の少ない精子または無精子を含む。
【０１７０】
「有効量」とは、少なくとも部分的に所望の応答を獲得するために、あるいは、治療されている特定の状態の発病または進行である、発病を遅延させる、または進行を阻害する、または完全に止めるために必要な量を意味する。量は、治療されている疾患、治療される個人の健康および身体状態、治療される個人の分類群、所望される保護の程度、組成物の製剤、医学的状況の評価、および他の関連因子に応じて変化する。量は、日常的な試験を通して判定することができる比較的広い範囲に入るであろうと期待される。人間の患者に関する有効量は、例えば、用量につき１ｋｇの体重あたり約０．１ｎｇから１ｋｇの体重あたり１ｇの範囲内にあってもよい。特定の実施形態では、用量は、用量につき１ｋｇの体重あたり１ｍｇから１ｇの範囲内等の、用量につき１ｋｇの体重あたり１μｇから１ｇの範囲内である。一実施形態では、用量は、用量につき１ｋｇの体重あたり１ｍｇから５００ｍｇの範囲内である。別の実施形態では、用量は、用量につき１ｋｇの体重あたり１ｍｇから２５０ｍｇの範囲内である。さらに別の実施形態では、用量は、用量につき１ｋｇの体重あたり最大５０ｍｇ等の、用量につき１ｋｇの体重あたり１ｍｇから１００ｍｇの範囲内である。さらに別の実施形態では、用量は、用量につき１ｋｇの体重あたり１μｇから１ｍｇの範囲内である。用法用量は、最適な治療応答を提供するように調整されてもよい。例えば、いくつかの分割用量が、毎日、毎週、毎月、または他の好適な時間間隔で投与されてもよく、あるいは用量は、状況の緊急要件によって指示されるように比例的に低減させられてもよい。
【０１７１】
いくつかの実施形態では、本高分子は、静脈内に、動脈内に、肺内に、経口で、吸引によって、膀胱内に、筋肉内に、気管内に、皮下に、眼球内に、髄腔内に、または経皮的に投与される。
【０１７２】
いくつかの実施形態では、本高分子は、ボーラスとして、または高速注入によって、特に、ボーラスとして投与される。
【０１７３】
本発明の別の態様では、癌の成長を治療または抑制する、腫瘍薬または腫瘍薬の製剤の毒性を低減させる、腫瘍薬または腫瘍薬の製剤と関連付けられる副作用を低減させる、あるいは腫瘍薬を用いた治療時に過敏性を低減させるための薬剤の製造で、本発明の高分子の使用が提供され、第１の末端基の医薬活性剤は、腫瘍薬である。
【０１７４】
本発明のさらに別の態様では、低テストステロンレベルに関係する疾患または障害を治療または予防するための薬剤の製造で、本発明の高分子の使用が提供され、第１の末端基の医薬活性剤は、テストステロンである。
【０１７５】
ここで、本発明のいくつかの特定の態様を例証する、以下の実施例を参照して、本発明を説明する。しかしながら、本発明の以下の説明の特殊性が、本発明の前述の説明の一般性に優先するものではないことを理解されたい。
略称：
【表１】
2014520105.tif 000039
【実施例】
【０１７６】
以下の実施例で表されるデンドリマーは、最外世代のデンドリマーの中の核および基礎単位の参照を含む。第１から表面下の世代は描写されていない。デンドリマーＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２は、末端基に結合するために利用可能である６４個の表面アミノ基である、式ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］２［Ｌｙｓ］４［Ｌｙｓ］８［Ｌｙｓ］１６［Ｌｙｓ］３２を有する５世代デンドリマーを表す。
【０１７７】
デンドリマー足場ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−ＰＥＧ５７０］３２、ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２、ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−ｔ−ＰＥＧ２３００］３２、ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−４−ＨＳＢＡ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２、ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＧＩＬＧＶＰ−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２、およびＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＧＩＬＧＶＰ−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−ｔ−ＰＥＧ２３００］３２の調製は、Ｋａｍｉｎｓｋａｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｃｏｎｔｒｏｌ．Ｒｅｌｅａｓｅ（２０１１）ｄｏｉ  １０．１０１６／ｊ．ｊｃｏｎｒｅｌ．２０１１．０２．００５で見出すことができる。デンドリマー足場４−アジドベンズアミド−ＰＥＧ１２−ＮＥＯＥＯＥＮ［Ｓｕ（ＮＰＮ）２］［Ｌｙｓ］１６［ＮＨ２．ＴＦＡ］３２の調製は、ＷＯ０８／０１７１２２で見出すことができる。
【０１７８】
一般的手順
一般的手順Ａ。薬剤Ａへのリンカーの設置
０℃で溶媒ＤＭＦまたはアセトニトリル（１〜５ｍＬ）中のカルボン酸リンカー（０．２〜０．５ｍｍｏｌ）の磁気的に撹拌した溶液に、ＥＤＣまたはＤＣＣのいずれかである結合剤（１．２当量）を添加した。混合物を５分間撹拌させ、次いで、薬剤（０．４〜１当量）およびＤＭＡＰ（０．４〜１当量）の混合物を含有する、溶媒の溶液（１ｍＬ）を液滴で添加した。混合物を０℃で１時間保ち、次いで、周囲温度まで温めさせた。次いで、揮発物を真空で除去し、所望の生成物をもたらすように、残留物を分取ＨＰＬＣ（ＢＥＨ  ３００  Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８、５μＭ、３０×１５０ｍｍ、４０〜８０％ＡＣＮ／水（５〜４０分）、緩衝剤なし）によって精製した。
【０１７９】
一般的手順Ｂ。薬剤Ｂへのリンカーの設置
ＤＭＦ（３〜５ｍＬ）中の薬剤（０．３〜１．０ｍｍｏｌ）および無水物（２当量）の磁気的に撹拌した溶液に、ＤＩＰＥＡ（３当量）を添加した。混合物を周囲温度で一晩撹拌した。次いで、揮発物を真空で除去し、残留物を分取ＨＰＬＣ（ＢＥＨ  ３００  Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８、５μＭ、３０×１５０ｍｍ、４０〜７０％ＡＣＮ／水（５〜４０分）、緩衝剤なし、ＲＴ＝３４分）によって精製した。適切な留分を真空で濃縮し、所望の標的を提供した。
【０１８０】
一般的手順Ｃ。薬剤・リンカーを用いたデンドリマーの負荷
室温でＤＭＦ中のＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２（０．５〜１．０μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１つのアミンにつき１．２当量）の磁気的に撹拌した混合物に、リンカー・薬剤（１つのアミン基につき１．２当量）およびＰｙＢＯＰ（１つのアミン基につき１．２当量）を添加した。室温で１．５時間後、揮発物を除去し、残留物をＳＥＣ（ｓｅｐｈａｄｅｘ、ＬＨ２０、ＭｅＯＨ）によって精製した。所望の材料を提供するように、ＨＰＬＣによって判断されるような適切な留分を組み合わせて濃縮した。
【０１８１】
一般的手順Ｄ。クリック反応
１：１Ｈ２Ｏ／ｔ−ＢｕＯＨ（約０．５ｍＬ）中の磁気的に撹拌した溶液デンドリマー（０．５〜１．０ｍｍｏｌ）に、アルキン試薬（２当量）、アスコルビン酸ナトリウム溶液（２当量）、およびＣｕＳＯ４溶液（２０ｍｏｌ％）を添加した。溶液を８０℃で加熱し、ＨＰＬＣによって監視した。反応を完了に推進するように、アスコルビン酸ナトリウムおよびＣｕＳＯ４の両方の追加の投入を必要に応じて添加した。反応が完了したと判断された後、反応物を真空で濃縮し、次いで、精製した。
【０１８２】
実施例１
（ａ）４−Ａｂａ−ＤＴＸの調製：
【化３６】
2014520105.tif 000040
ＤＴＸ（２００ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）およびリンカーとして４−アセチル酪酸（４２ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ａを使用して調製した。分取ＨＰＬＣ（ＲＴ＝３２分）が、白色固体として７３ｍｇ（３２％）の生成物を提供した。ＬＣＭＳ（Ｃ８、勾配：４０〜９０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、９０％ＡＣＮ（７〜９分）、９０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、０．１％ＴＦＡ）Ｒｔ（分）＝７．６０。ＥＳＩ（＋ｖｅ）が［Ｍ＋Ｈ］＋＝９２０を観察した。Ｃ４９Ｈ６１ＮＯ１６＝９１９．４０Ｄａを計算した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：１．０９（ｓ，３Ｈ）、１．１３（ｓ，３Ｈ）、１．３８（ｓ，９Ｈ）、１．６６（ｓ，３Ｈ）、１．７４−１．９７（ｍ，７Ｈ）、２．１０（ｓ，３Ｈ）、２．１２−２．３６（ｍ，１Ｈ）、２．２９−２．５８（ｍ，８Ｈ）、３．８３（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）、４．１４−４．２６（ｍ，３Ｈ）、４．９５−５．０５（ｍ，２Ｈ）、５．１８−５．３５（ｍ，３Ｈ）、５．６１（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ）、６．０５（ｍ，１Ｈ）、７．１７−７．２０（ｍ，１Ｈ）、７．２３−７．４５（ｍ，４Ｈ）、７．５２−７．６２（ｍ，２Ｈ）、７．６３−７．７２（ｍ，１Ｈ）、８．１０（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）。
【０１８３】
（ｂ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−４−ＨＳＢＡ−４Ａｂａ−ＤＴＸ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２の調製
【化３７】
2014520105.tif 000041
上記の手順Ｃを使用して調製した。乾燥ＭｅＯＨ（１ｍＬ）中の４−Ａｂａ−ＤＴＸ（１５ｍｇ、１６．３μｍｏｌ）の磁気的に撹拌した溶液に、ＴＦＡ（５０μＬ）およびＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−４−ＨＳＢＡ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２（２０ｍｇ、０．４３μｍｏｌ）を添加した。混合物を周囲温度で一晩撹拌させ、次いで、精製のためにｓｅｐｈａｄｅｘカラム（ＬＨ２０、ＭｅＯＨ）に直接添加した。白色固体として２５ｍｇ（７８％）の所望の物質を提供するように、ＨＰＬＣによって判断されるような適切な留分を組み合わせて濃縮した。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：４０〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜９分）、８０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、１０ｍＭギ酸アンモニウム）Ｒｔ（分）＝６．７７。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：０．６−２．２（ｍ，８１２Ｈ）、２．２−２．５（ｍ，１１５Ｈ）、２．９−３．２（ｍ，７８Ｈ）、３．２６（ｓ，７９Ｈ）、３．３−３．８（ｍ，２８２４Ｈ）、５．１−５．３（ｍ，３１Ｈ）、５．５−５．６（ｍ，１０Ｈ）、５．９−６．１（ｍ，９Ｈ）、６．９−８．２（ｍ，３２９Ｈ）。抱合体の理論的分子量：７８．６ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、９ＤＴＸ／デンドリマーを示す。実際の分子量は、約５６．４ｋＤａ（１３重量％ＤＴＸ）である。
【０１８４】
実施例２
（ａ）ＰＳＳＰ−ＤＴＸの調製：
【化３８】
2014520105.tif 000042
この実施例（Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ）では、ジスルフィド結合の周囲の立体障害の程度を増加または減少させることによって、ドセタキセルの放出速度を増加または減少させることができると想定することができる（Ｗｏｒｒｅｌｌ  Ｎ．Ｒ．，Ｃｕｍｂｅｒ  Ａ．Ｊ．，Ｐａｒｎｅｌｌ  Ｇ．Ｄ．，Ｍｉｒｚａ  Ａ．，Ｆｏｒｒｅｓｔｅｒ  Ｊ．Ａ．，Ｒｏｓｓ  Ｗ．Ｃ．Ｊ．：Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｌｉｎｋａｇｅ  ｖａｒｉａｔｉｏｎ  ｏｎ  ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ  ｏｆ  ｒｉｃｉｎ−Ａ−ｃｈａｉｎａｎｔｉｂｏｄｙ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ  ｉｎ  ｎｏｒｍａｌ  ｒａｔｓ．Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  １，１７９，１９８６）。これは、置換基、とりわけαおよび／またはβのジスルフィド結合への追加を通して達成することができる。この種類の調節方略は、しばしば、プロドラッグ設計方略で使用され、周知のソープ・インゴールドまたはｇｅｍ−ジメチル効果を活用する。（Ｔｈｅ  ｇｅｍ−Ｄｉｍｅｔｈｙｌ  Ｅｆｆｅｃｔ  Ｒｅｖｉｓｉｔｅｄ  Ｓｔｅｖｅｎ  Ｍ．Ｂａｃｈｒａｃｈ，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００８，７３，２４６６−２４６８）。
【０１８５】
ＤＴＸ（５００ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）およびリンカーとして３，３’−ジチオプロパン酸（１３０ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ａを使用して調製した。分取ＨＰＬＣ（ＲＴ＝３２分）が、白色固体として１７９ｍｇ（２９％）の生成物を提供した。ＬＣＭＳ（Ｃ８、勾配：４０〜９０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、９０％ＡＣＮ（７〜９分）、９０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、０．１％ＴＦＡ）Ｒｆ（分）＝７．５７。ＥＳＩ（＋ｖｅ）が［Ｍ＋Ｈ］＋＝１０００を観察した。Ｃ４９Ｈ６１ＮＯ１７Ｓ２＝９９９．３４Ｄａを計算した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：１．１３（ｓ，３Ｈ）、１．１７（ｓ，３Ｈ）、１．４３（ｓ，９Ｈ）、１．７０（ｓ，３Ｈ）、１．７２−１．９９（ｍ，６Ｈ）、２．１３−２．３２（ｍ，１Ｈ）、２．３７−２．５５（ｍ，４Ｈ）、２．６６−２．７６（ｍ，２Ｈ）、２．７６−３．０２（ｍ，６Ｈ）、３．８７（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）、４．１８−４．３１（ｍ，３Ｈ）、５．００−５．０６（ｍ，３Ｈ）、５．２４−５．４２（ｍ，３Ｈ）、５．６４（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ）、６．１０（ｍ，１Ｈ）、７．２３−７．３３（ｍ，１Ｈ）、７．３６−７．４８（ｍ，４Ｈ）、７．５３−７．６５（ｍ，２Ｈ）、７．６６−７．７６（ｍ，１Ｈ）、８．１３（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）。
【０１８６】
（ｂ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＰＳＳＰ−ＤＴＸ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２の調製
【化３９】
2014520105.tif 000043
Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２（３４ｍｇ、０．７８μｍｏｌ）およびＰＳＳＰ−ＤＴＸ（３０ｍｇ、３０μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｃを使用して調製した。ＳＥＣによる精製が、白色固体として５０ｍｇ（８９％）の所望の物質を提供した。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：４０〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜９分）、８０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、１０ｍＭギ酸アンモニウム）Ｒｆ（分）＝７．９６分。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：０．７−２．０（ｍ，１０４１Ｈ）、２．０−２．２（ｍ，１５Ｈ）、２．２−２．５（ｍ，１１９Ｈ）、２．５−２．７（ｍ，３１Ｈ）、２．７−３．０（ｍ，１１９Ｈ）、３．０−３．２（ｍ，６８Ｈ）、３．２６（ｓ，１３２Ｈ）、３．３−３．８（ｍ，２８０６Ｈ）、３．９−４．３（ｍ，７６Ｈ）、５．１−５．３（ｍ，５５Ｈ）、５．５−５．６（ｍ，１７Ｈ）、５．９−６．１（ｍ，１７Ｈ）、７．１−８．１（ｍ，２４３Ｈ）。抱合体の理論的分子量：７４．９ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、１７ＤＴＸ／デンドリマーを示す。実際の分子量は、約５６．１ｋＤａ（２４重量％ＤＴＸ）である。
【０１８７】
実施例３
（ａ）ＤＧＡ−ＤＴＸの調製：
【化４０】
2014520105.tif 000044
ＤＴＸ（３００ｍｇ、３７１μｍｏｌ）およびリンカーとしてジグリコール酸無水物（８６ｍｇ、７４２μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｂを使用して調製した。分取ＨＰＬＣ（ＲＴ＝３４分）が、白色固体として８５ｍｇ（２５％）のＤＧＡ−ＤＴＸを提供した。ＬＣＭＳ（Ｃ８、勾配：４０〜９０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、９０％ＡＣＮ（７〜９分）、９０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、０．１％ギ酸）Ｒｔ（分）＝５．９０。ＥＳＩ（＋ｖｅ）が［Ｍ＋Ｈ］＋＝９２４．１０を観察した。Ｃ４７Ｈ５７ＮＯ１８＝９２３．３６Ｄａを計算した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：１．１１（ｓ，３Ｈ）、１．２１（ｓ，３Ｈ）、１．３３（ｓ，９Ｈ）、１．５８−２．６６（ｍ，７Ｈ）、１．７３（ｓ，３Ｈ）、１．９３（ｓ，３Ｈ）、２．６７−３．６７（ｂｒ  ｓ，５Ｈ）、３．７３−３．９７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、４．０２−４．６８（ｍ，７Ｈ）、４．９６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）、５．２４（ｓ，１Ｈ）、５．３５−５．５５（ｍ，１Ｈ）、５．５０（ｓ，１Ｈ）、５．６６（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，１Ｈ）、５．９５−６．３０（ｍ，１Ｈ）、７．２４−７．６８（ｍ，７Ｈ）、８．０８（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）。
【０１８８】
（ｂ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＤＧＡ−ＤＴＸ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２の調製
【化４１】
2014520105.tif 000045
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２（３６ｍｇ、０．８４μｍｏｌ）およびＤＧＡ−ＤＴＸ（３０ｍｇ、３３μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｃを使用して調製した。ＳＥＣによる精製が、白色固体として４５ｍｇ（７９％）の所望の物質を提供した。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：４０〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜９分）、８０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、１０ｍＭギ酸アンモニウム）Ｒｔ（分）＝７．６９。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：１．０−２．１（ｍ，８３３Ｈ）、２．３−２．６（ｍ，１２５Ｈ）、３．０−３．３（ｍ，６８Ｈ）、３．５−４．０（ｍ，２８０３Ｈ）、４．０−４．７（ｍ，２１４Ｈ）、５．０−５．１（ｍ，２３Ｈ）、５．３−５．５（ｍ，５４Ｈ）、５．６−５．８（ｍ，１９Ｈ）、６．０−６．３（ｍ，１８Ｈ）、７．２−７．８（ｍ，２０３Ｈ）、８．１−８．２（ｍ，４６Ｈ）。抱合体の理論的分子量：７２．４ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、１８ＤＴＸ／デンドリマーを示す。実際の分子量は、約５５．７ｋＤａ（２６重量％ＤＴＸ）である。
【０１８９】
実施例４
（ａ）Ｃｐ−ＤＴＸの調製：
【化４２】
2014520105.tif 000046
ＤＴＸ（５００ｍｇ、６１９μｍｏｌ）およびリンカーとして３−オキソ−１−シクロペンタンカルボン酸（７９ｍｇ、６１９μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ａを使用して調製した。分取ＨＰＬＣ（ＲＴ＝３３．５分）が、白色固体としてＣｐ−ＤＴＸ（４０１ｍｇ、７１％）を提供した。ＬＣＭＳ（Ｃ８、勾配：４０〜９０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、９０％ＡＣＮ（７〜９分）、９０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、０．１％ギ酸）Ｒｔ（分）＝６．６１。ＥＳＩ（＋ｖｅ）が［Ｍ＋Ｈ］＋＝９１８．５４を観察した。Ｃ４９Ｈ５９ＮＯ１６＝９１７．３８Ｄａを計算した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：１．１３（ｓ，３Ｈ）、１．２４（ｓ，３Ｈ）、１．３３（ｓ，９Ｈ）、１．７６（ｓ，３Ｈ）、１．７７−２．０１（ｍ，３Ｈ）、１．９５（ｓ，３Ｈ）、２．１１−２．４９（ｍ，６Ｈ）、２．４６（ｓ，３Ｈ）、２．６０（ｄｄｄ，Ｊ＝１６．２，９．９および６．９Ｈｚ，１Ｈ）、３．１０−３．２４（ｍ，１Ｈ）、３．９４（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ）、４．２０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）、４．２７（ｄｄ，Ｊ＝１１．１および６．６Ｈｚ，１Ｈ）、４．３３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）、４．９７（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．２１（ｓ，１Ｈ）、５．３３（ｄ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，１Ｈ）、５．４２（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、５．４８−５．５８（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，１Ｈ）、５．６９（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ）、６．２７（ｔ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．２５−７．４５（ｍ，５Ｈ）、７．４７−７．５３（ｍ，２Ｈ）、７．５７−７．６４（ｍ，１Ｈ）、８．０９−８．１４（ｍ，２Ｈ）。
【０１９０】
（ｂ）４−ＨＳＢＡ−Ｃｐ−ＤＴＸの調製：
【化４３】
2014520105.tif 000047
ＴＦＡ／ＭｅＯＨ（５容量／容量％、１ｍＬ）中のＤＴＸ−Ｃｐ（３０ｍｇ、３２．７μｍｏｌ）の溶液を、４−ヒドラジノスルホニル安息香酸（６ｍｇ、２７．８μｍｏｌ）に添加した。混合物を３８℃で１．５時間反応させ、その後、溶媒を真空で蒸発させた。得られた白色半固体を、次のステップで直接使用した。
【０１９１】
（ｃ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−４−ＨＳＢＡ−Ｃｐ−ＤＴＸ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２の調製
【化４４】
2014520105.tif 000048
方法Ａ：乾燥ＭｅＯＨ（１ｍＬ）中のＣｐ−ＤＴＸ（７．５ｍｇ、８．１５μｍｏｌ）の磁気的に撹拌した溶液に、ＴＦＡ（５０μＬ）を添加した。この溶液を、ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−４−ＨＳＢＡ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２（１０ｍｇ、０．２１５μｍｏｌ）に添加した。混合物を周囲温度で一晩反応させ、次いで、精製のためにｓｅｐｈａｄｅｘカラム（ＬＨ２０、ＭｅＯＨ）に直接添加した。白色固体として１８ｍｇ（７０％）の所望の物質を提供するように、水から、ＨＰＬＣによって判断されるような適切な留分を組み合わせ、濃縮し、凍結乾燥した。
【０１９２】
方法Ｂ：４−ＨＳＢＡ−Ｃｐ−ＤＴＸ（３１ｍｇ、２７．８μｍｏｌ）およびＰｙＢＯＰ（１４．５ｍｇ、２７．８μｍｏｌ）に、ＤＭＦ（１ｍＬ）中のＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２（３１．５ｍｇ、０．７μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１５μＬ、８９．０μｍｏｌ）の溶液を添加した。結果として生じた混合物を周囲温度で一晩撹拌し、その後、溶媒を真空で蒸発させた。残りの黄色油を、精製のためにｓｅｐｈａｄｅｘカラム（ＬＨ２０、ＭｅＯＨ）に添加した。白色固体として３４ｍｇ（２つのステップにわたって８１％）の所望の物質を提供するように、水から、ＨＰＬＣによって判断されるような適切な留分を組み合わせ、濃縮し、凍結乾燥した。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：４０〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜９分）、８０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、１０ｍＭギ酸アンモニウム）Ｒｔ（分）＝７．６５。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：１．１２（ｓ，４４Ｈ）、１．１６（ｓ，４４Ｈ）、１．２１−２．２９（ｍ，６８８Ｈ）、２．３２−２．５３（ｍ，１１３Ｈ）、２．８０−３．２５（ｍ，６４Ｈ）、３．３５（ｓ，８５Ｈ）、３．３６−３．９０（ｍ，２８１５Ｈ）、４．１７−４．２８（ｍ，７７Ｈ）、４．４５−４．６５（ｍ，５０Ｈ）、４．９７−５．０４（ｍ，２３Ｈ）、５．２２−５．４４（ｍ，４０Ｈ）、５．６３（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１６Ｈ）、６．００−６．２０（ｍ，１５Ｈ）、７．２−８．２５（ｍ，３０８Ｈ）。抱合体の理論的分子量：７８．８ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、それぞれの場合において１５ＤＴＸ／デンドリマーを示す。実際の分子量は、約６０．０ｋＤａ（２０重量％ＤＴＸ）である。
【０１９３】
実施例５
（ａ）Ｇｌｕ−ＤＴＸの調製：
【化４５】
2014520105.tif 000049
ＤＭＦ（３．７ｍＬ）中のＤＴＸ（３００ｍｇ、３７１μｍｏｌ）およびリンカーとしてグルタル酸無水物（８５ｍｇ、７４２μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｂを使用して調製した。分取ＨＰＬＣ（Ｒｔ＝３３分）が、白色固体として１０６ｍｇ（３１％）のＧｌｕ−ＤＴＸを提供した。ＬＣＭＳ（Ｃ８、勾配：４０〜９０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、９０％ＡＣＮ（７〜９分）、９０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、０．１％ギ酸）Ｒｔ（分）＝６．１２。ＥＳＩ（＋ｖｅ）が［Ｍ＋Ｈ］＋＝９２２．１３を観察した。Ｃ４８Ｈ５９ＮＯ１７＝９２１．３８Ｄａを計算した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：１．１１（ｓ，３Ｈ）、１．２２（ｓ，３Ｈ）、１．３３（ｓ，９Ｈ）、１．７４（ｓ，３Ｈ）、１．７９−２．６５（ｍ，１４Ｈ）、１．９３（ｓ，３Ｈ）、３．９１（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ）、４．１９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）、４．２６（ｄｄ，Ｊ＝１１．１および６．９Ｈｚ，１Ｈ）、４．３１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）、４．９６（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、５．２３（ｓ，１Ｈ）、５．３８（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、５．３５−５．６５（ｂｒ  ｄ，１Ｈ）、５．６７（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ）、６．１０−６．３０（ｓ，１Ｈ）、７．２６−７．３４（ｍ，３Ｈ）、７．３４−７．４３（ｍ，２Ｈ）、７．４６−７．５５（ｍ，２Ｈ）、７．５７−７．６５（ｍ，１Ｈ）、８．１０（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ）。
【０１９４】
（ｂ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−Ｇｌｕ−ＤＴＸ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２の調製
【化４６】
2014520105.tif 000050
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２（５０ｍｇ、１．１μｍｏｌ）およびＧｌｕ−ＤＴＸ（３９ｍｇ、４２．３μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｃを使用して調製した。ｓｅｐｈａｄｅｘカラム（ＬＨ２０、ＭｅＯＨ）による精製が、白色固体として４９．５ｍｇ（７８％）の所望の物質を提供した。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：４０〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜９分）、８０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、１０ｍＭギ酸アンモニウム）Ｒｔ（分）＝７．７８。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：１．００−２．１０（ｍ，１０３７Ｈ）、２．１０−２．７４（ｍ，２９６Ｈ）、３．０５−３．２７（ｂｒ  ｓ，８８Ｈ）、３．３５（ｓ，９６Ｈ）、３．３６−３．７８（ｍ，２８００Ｈ）、３．８０−３．９３（ｍ，４２Ｈ）、４．０１−４．４７（ｍ，１２５Ｈ）、４．４７−４．６０（ｂｒ  ｓ，２３Ｈ）、４．９２−５．０８（ｂｒ  ｓ，３０Ｈ）、５．１８−５．４５（ｍ，７０Ｈ）、５．５４−５．７４（ｂｒ  ｓ，２２Ｈ）、６．００−６．２３（ｂｒ  ｓ，２０Ｈ）、７．１５−７．７５（ｍ，４１４Ｈ）、８．０５−８．２０（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，４９Ｈ）。抱合体の理論的分子量：７２．６ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、２０ＤＴＸ／デンドリマーを示す。実際の分子量は、約５７．５ｋＤａ（２８重量％ＤＴＸ）である。
【０１９５】
実施例６
（ａ）ＭＩＤＡ−ＤＴＸの調製：
【化４７】
2014520105.tif 000051
ＤＴＸ（１００ｍｇ、１２４μｍｏｌ）およびリンカーとしてメチルイミノ二酢酸（９１ｍｇ、６２０μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ａを使用して調製した。分取ＨＰＬＣ（ＲＴ＝２２．５分）が、白色固体として２９ｍｇ（２５％）の生成物を提供した。ＬＣＭＳ（Ｃ８、勾配：４０〜９０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、９０％ＡＣＮ（７〜９分）、９０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、０．１％ギ酸）Ｒｔ（分）＝４．６２。ＥＳＩ（＋ｖｅ）が［Ｍ＋Ｈ］＋＝９３７．３４を観察した。Ｃ４８Ｈ６０Ｎ２Ｏ１７＝９３６．３９Ｄａを計算した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：１．１３（ｓ，３Ｈ）、１．１７（ｓ，３Ｈ）、１．４０（ｓ，９Ｈ）、１．７０（ｓ，３Ｈ）、１．８４（ｄｄｄ，Ｊ＝１４．１，１１．４および１．８Ｈｚ，１Ｈ）、１．９３（ｓ，３Ｈ）、２．０４（ｄｄ，Ｊ＝１５．０および８．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．３０（ｄｄ，Ｊ＝１５．０および８．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．４３（ｓ，３Ｈ）、２．４６（ｄｄｄ，Ｊ＝１４．１，９．５および６．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．６１（ｓ，３Ｈ）、３．４９（ｓ，２Ｈ）、３．８１−３．９４（ｍ，３Ｈ）、４．２１（ｓ，２Ｈ）、４．２４（ｄｄ，Ｊ＝１１．４および６．６Ｈｚ，１Ｈ）、５．０１（ｄｄ，Ｊ＝９．５および１．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．２９（ｓ，１Ｈ）、５．４３（ｓ，２Ｈ）、５．６５（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ）、６．１６（ｔ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．２１−７．３４（ｍ，１Ｈ）、７．３５−７．５０（ｍ，４Ｈ）、７．５１−７．７９（ｍ，３Ｈ）、８．１３（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）。
【０１９６】
（ｂ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＭＩＤＡ−ＤＴＸ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２の調製
【化４８】
2014520105.tif 000052
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２（３１．５ｍｇ、０．７μｍｏｌ）およびＭＩＤＡ−ＤＴＸ（２６ｍｇ、２７．８μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｃを使用して調製した。ＳＥＣによる精製が、白色固体として４１．６ｍｇ（９３％）の所望の生成物を提供した。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：４０〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜９分）、８０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、１０ｍＭギ酸アンモニウム）Ｒｔ（分）＝７．７８。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：１．００−２．１０（ｍ，１１８６Ｈ）、２．１２−２．６８（ｍ，２８３Ｈ）、３．０６−３．２７（ｍ，７７Ｈ）、３．３５（ｓ，１０１Ｈ）、３．３６−３．９６（ｍ，２８４２Ｈ）、４．０７−４．６１（ｍ，１４３Ｈ）、４．９３−５．１０（ｂｒ  ｓ，３１Ｈ）、５．１９−５．４８（ｍ，７７Ｈ）、５．５５−５．７５（ｍ，２７Ｈ）、５．９７−６．２９（ｍ，２７Ｈ）、７．１０−７．８４（ｍ，２５８Ｈ）、８．０３−８．２３（ｍ，６０Ｈ）。抱合体の理論的分子量：７３．１ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、２７ＤＴＸ／デンドリマーを示す。実際の分子量は、約６４．２ｋＤａ（３４重量％ＤＴＸ）である。
【０１９７】
実施例７
（ａ）ｏ−ＰＤＡ−ＤＴＸの調製：
【化４９】
2014520105.tif 000053
ＤＴＸ（３００ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）およびリンカーとしてｏ−フェニレンジオキシ二酢酸（４１９ｍｇ、１．８５ｍｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ａを使用して調製した。分取ＨＰＬＣ（ＲＴ＝２６分）が、白色固体として２１ｍｇ（１１％）の生成物を提供した。ＬＣＭＳ（Ｃ８、勾配：４０〜９０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、９０％ＡＣＮ（７〜９分）、９０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、０．１％ギ酸）Ｒｔ（分）＝７．２７。ＥＳＩ（＋ｖｅ）が［Ｍ＋Ｈ］＋＝１０１６．２９を観察した。Ｃ５３Ｈ６１ＮＯ１９＝１０１５．３８Ｄａを計算した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：１．１３（ｓ，３Ｈ）、１．１７（ｓ，３Ｈ）、１．４０（ｓ，９Ｈ）、１．６９（ｓ，３Ｈ）、１．８２（ｄｄｄ，Ｊ＝１３．５，１１．４および２．１Ｈｚ，１Ｈ）、１．８９（ｓ，３Ｈ）、１．９４−２．０７（ｍ，１Ｈ）、２．００−２．３３（ｍ，１Ｈ）、２．４０（ｓ，３Ｈ）、２．４５（ｄｄｄ，Ｊ＝１５．９，９．６および６．６Ｈｚ，１Ｈ）、３．８７（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）、４．１８−４．２７（ｍ，３Ｈ）、４．６８（ｓ，２Ｈ）、４．８７（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．００（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．２７（ｓ，１Ｈ）、５．３６−５．４３（ｍ，２Ｈ）、５．６４（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）、６．１３（ｔ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．８６−６．９８（ｍ，４Ｈ）、７．２３−７．３２（ｍ，１Ｈ）、７．３５−７．４３（ｍ，４Ｈ）、７．５２−７．６０（ｍ，２Ｈ）、７．６２−７．７０（ｍ，１Ｈ）、８．０７−８．１５（ｍ，２Ｈ）。
【０１９８】
（ｂ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ｏ−ＰＤＡ−ＤＴＸ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２の調製
【化５０】
2014520105.tif 000054
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２（２２．５ｍｇ、０．５μｍｏｌ）およびｏ−ＰＤＡ−ＤＴＸ（２１ｍｇ、２０．７μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｃを使用して調製した。ＳＥＣ（ｓｅｐｈａｄｅｘ、ＬＨ２０、ＭｅＯＨ）による精製が、わずかにベージュ色の半固体として３０ｍｇ（９５％）の所望の生成物を提供した。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：４０〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜９分）、８０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、１０ｍＭギ酸アンモニウム）Ｒｔ（分）＝９．８０。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：０．９５−２．１２（ｍ，１０５８Ｈ）、２．１２−２．６６（ｍ，２０５Ｈ）、２．８９−３．２９（ｍ，１２５Ｈ）、３．３５（ｓ，８５Ｈ）、３．３６−３．９３（ｍ，２８２２Ｈ）、３．９８−４．７５（ｍ，２１２Ｈ）、４．８３−５．０８（ｍ，８９Ｈ）、５．１８−５．３４（ｍ，１７Ｈ）、５．３４−５．５４（ｍ，３８Ｈ）、５．５４−５．７９（ｍ，２２Ｈ）、６．０１−６．２６（ｍ，２２Ｈ）、６．６８−７．１３（ｍ，９８Ｈ）、７．１３−７．７８（ｍ，２１４Ｈ）、８．０２−８．２２（ｍ，５０Ｈ）。抱合体の理論的分子量：７５．６ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、２２ＤＴＸ／デンドリマーを示す。実際の分子量は、約６３．２ｋＤａ（２８重量％ＤＴＸ）である。
【０１９９】
実施例８
（ａ）手順Ａを介したＴＤＡ−ＤＴＸの調製：
【化５１】
2014520105.tif 000055
ＤＴＸ（５００ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）およびリンカーとして２，２’−チオ二酢酸（３７０ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ａを使用して調製した。分取ＨＰＬＣ（ＲＴ＝３３分）が、白色固体として２４０ｍｇ（４１％）の生成物を提供した。ＬＣＭＳ（Ｃ８、勾配：４０〜９０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、９０％ＡＣＮ（７〜９分）、９０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、０．１％ＴＦＡ）Ｒｔ（分）＝１０．６０。ＥＳＩ（＋ｖｅ）が［Ｍ＋Ｈ］＋＝９４０を観察した。Ｃ４７Ｈ５７ＮＯ１７Ｓ＝９３９．３３Ｄａを計算した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：１．１５（ｓ，３Ｈ）、１．１９（ｓ，３Ｈ）、１．４３（ｓ，９Ｈ）、１．７２（ｓ，３Ｈ）、１．７８−２．０５（ｍ，２Ｈ）、１．９３（ｓ，３Ｈ）、２．１６−２．５７（ｍ，２Ｈ）、２．４３（ｓ，３Ｈ）、３．３６−３．６３（ｍ，２Ｈ）、３．８９（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）、４．１８−４．３４（ｍ，３Ｈ）、５．０３（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）、５．２８−５．４４（ｍ，３Ｈ）、５．６６（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ）、６．１１（ｍ，１Ｈ）、７．２４−７．３５（ｍ，１Ｈ）、７．３８−７．５０（ｍ，４Ｈ）、７．５２−７．６５（ｍ，２Ｈ）、７．６６−７．７６（ｍ，１Ｈ）、８．１４（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）。
【０２００】
（ｂ）手順Ｂを介したＴＤＡ−ＤＴＸの調製：
ＤＴＸ（４００ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）およびリンカーとしてチオ二酢酸無水物（６６ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｂを使用して調製した。混合物を室温で一晩撹拌し、次いで、粗残留物を生じるように減圧下で溶媒を除去した。残留物をＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）中で再溶解させ、ＰＢＳ緩衝剤（ｐＨ４．０に調整された）で洗浄した。白色固体として４４５ｍｇ（９５％）の所望の生成物を生じるように、分離有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。ＬＣＭＳ（Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ８カラム（３．０×１００ｍｍ）、３．５ミクロン、２１４、２４３ｎｍ、０．４ｍＬ／分、勾配：４０〜９０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、９０％ＡＣＮ（７〜９分）、９０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、０．１％ＴＦＡ）Ｒｔ（分）＝１０．６０。ＥＳＩ（＋ｖｅ）が［Ｍ＋Ｈ］＋＝９４０を観察した。Ｃ４７Ｈ５７ＮＯ１７Ｓ＝９３９．３３Ｄａを計算した。
【０２０１】
（ｃ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＴＤＡ−ＤＴＸ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２の調製
【化５２】
2014520105.tif 000056
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２（４６ｍｇ、１．０８μｍｏｌ）およびＴＤＡ−ＤＴＸ（４４ｍｇ、４７μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｃを使用して調製した。ＳＥＣ（ｓｅｐｈａｄｅｘ、ＬＨ２０、ＭｅＯＨ）による精製が、白色固体として６５ｍｇ（８７％）の所望の物質を提供した。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：４０〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜９分）、８０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、１０ｍＭギ酸アンモニウム）Ｒｔ（分）＝９．６８。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：０．７８−２．０２（ｍ，８０９Ｈ）、２．２７−２．５８（ｍ，１１４Ｈ）、３．０３−３．２４（ｍ，４３Ｈ）、３．３４（ｓ，７３Ｈ）、３．３７−３．９６（ｍ，２８００Ｈ）、４．０１−４．３９（ｍ，２７Ｈ）、５．２０−５．４８（ｍ，７５Ｈ）、５．５４−５．７４（ｍ，２３Ｈ）、５．９８−６．２５（ｍ，２０Ｈ）、７．１２−７．８４（ｍ，２０２Ｈ）、８．０１−８．２２（ｍ，４６Ｈ）。抱合体の理論的分子量：６８．９ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、２３ＤＴＸ／デンドリマーを示す。実際の分子量は、約６０．６ｋＤａ（３１重量％ＤＴＸ）である。動的光散乱を使用した粒度測定は、８．９〜１０．１ｎｍの濃度依存性平均の範囲を示す。
【０２０２】
実施例９
（ａ）ＰＤＴ−ＤＴＸの調製：
【化５３】
2014520105.tif 000057
ＤＴＸ（２５０ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）およびリンカーとして３，４−プロピレンジオキシチオフェン−２，５−ジカルボン酸（ＰＤＴ、７５ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ａを使用して調製した。分取ＨＰＬＣ（ＲＴ＝２８分）による精製が、白色固体として３０ｍｇ（９％）の生成物を提供した。ＬＣＭＳ（Ｃ８、勾配：４０〜９０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、９０％ＡＣＮ（７〜９分）、９０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、０．１％ＴＦＡ）Ｒｔ（分）＝７．２４。ＥＳＩ（＋ｖｅ）が［Ｍ＋Ｈ］＋＝１０３４を観察した。Ｃ５２Ｈ５９ＮＯ１９Ｓ＝１０３３．３４Ｄａを計算した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：１．１４（ｓ，３Ｈ）、１．１８（ｓ，３Ｈ）、１．４５（ｓ，９Ｈ）、１．７１（ｓ，３Ｈ）、１．７８−１．９１（ｍ，２Ｈ）、１．９４（ｓ，３Ｈ）、２．０９−２．２７（ｍ，１Ｈ）、２．２９−２．５８（ｍ，３Ｈ）、２．４１（ｓ，３Ｈ）、３．８８（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）、４．２０−４．３０（ｍ，３Ｈ）、４．３１−４．４３（ｍ，４Ｈ）、４．９４−５．１６（ｍ，１Ｈ）、５．３０（ｓ，１Ｈ）、５．３６−５．４２（ｍ，２Ｈ）、５．６５（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）、６．０２−６．２２（ｍ，１Ｈ）、７．２３−７．３４（ｍ，１Ｈ）、７．３６−７．５３（ｍ，４Ｈ）、７．５６−７．６５（ｍ，２Ｈ）、７．６６−７．７７（ｍ，１Ｈ）、８．１１（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）。
【０２０３】
（ｂ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＰＤＴ−ＤＴＸ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２の調製
【化５４】
2014520105.tif 000058
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２（２９ｍｇ、０．６７μｍｏｌ）およびＰＤＴ−ＤＴＸ（３０ｍｇ、２９μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｃを使用して調製した。ＳＥＣ（ｓｅｐｈａｄｅｘ、Ｈ２０、ＭｅＯＨ）による精製が、白色固体として４２ｍｇ（８８％）の所望の物質を提供した。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：４０〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜９分）、８０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、１０ｍＭギ酸アンモニウム）Ｒｔ（分）＝９．０３。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：０．７６−２．１０（ｍ，９７４Ｈ）、２．２３−２．６６（ｍ，２１０Ｈ）、３．０８−３．３０（ｍ，７４Ｈ）、３．４０−３．９８（ｍ，２８０４Ｈ）、４．０２−４．７６（ｍ，２４９Ｈ）、４．９６−５．１２（ｍ，３３Ｈ）、５．２２−５．３４（ｍ，２５Ｈ）、５．３６−５．５２（ｍ，４７Ｈ）、５．５６−５．８０（ｍ，２７Ｈ）、５．８８−６．３０（ｍ，２４Ｈ）、７．０８−７．９４（ｍ，２１３Ｈ）、７．９９−８．３１（ｍ，５０Ｈ）。抱合体の理論的分子量：７１．９ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、２６ＤＴＸ／デンドリマーを示す。実際の分子量は、約６６．３ｋＤａ（３２重量％ＤＴＸ）である。
【０２０４】
実施例１０
（ａ）ＰＥＧ２−ＤＴＸの調製：
【化５５】
2014520105.tif 000059
ＤＴＸ（２００ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）および３，６，９−トリオキサウンデカン二酸（２２０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ａを使用して調製した。分取ＨＰＬＣ（ＲＴ＝３０．５分）が、白色固体として７０ｍｇ（２８％）の生成物を提供した。ＬＣＭＳ（Ｃ８、勾配：４０〜９０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、９０％ＡＣＮ（７〜９分）、９０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、０．１％ギ酸）Ｒｔ（分）＝６．４８。ＥＳＩ（＋ｖｅ）が［Ｍ＋Ｈ］＋＝１０１２．１５を観察した。Ｃ５１Ｈ６５ＮＯ２０＝１０１１．４１Ｄａを計算した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：１．１３（ｓ，３Ｈ）、１．１７（ｓ，３Ｈ）、１．４０（ｓ，９Ｈ）、１．７０（ｓ，３Ｈ）、１．８３（ｄｄｄ，Ｊ＝１３．８，１１．１および２．１Ｈｚ，１Ｈ）、１．９３（ｓ，３Ｈ）、１．９２−２．１２（ｍ，１Ｈ）、２．１７−２．３８（ｍ，１Ｈ）、２．４２（ｓ，３Ｈ）、２．４６（ｄｄｄ，Ｊ＝１４．７，９．９および６．６Ｈｚ，１Ｈ）、３．５６−３．８２（ｍ，８Ｈ）、３．８８（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．０６（ｓ，２Ｈ）、４．１６−４．３９（ｍ，５Ｈ）、５．０１（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．２９（ｓ，１Ｈ）、５．３８（ｓ，２Ｈ）、５．６５（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．１３（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．２２−７．３３（ｍ，１Ｈ）、７．３５−７．４７（ｍ，４Ｈ）、７．５１−７．６２（ｍ，２Ｈ）、７．６２−７．７２（ｍ，１Ｈ）、８．１３（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）。
【０２０５】
（ｂ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＰＥＧ２−ＤＴＸ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２の調製
【化５６】
2014520105.tif 000060
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２（５５．８ｍｇ、１．２４μｍｏｌ）およびＰＥＧ２−ＤＴＸ（５０ｍｇ、４９．５μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｃを使用して調製した。ＳＥＣ（ｓｅｐｈａｄｅｘ、ＬＨ２０、ＭｅＯＨ）による精製が、白色固体として７９ｍｇ（＞９０％）の所望の生成物を提供した。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：４０〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜９分）、８０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、１０ｍＭギ酸アンモニウム）Ｒｆ（分）＝８．６５。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：０．９１−２．１４（ｍ，９６８Ｈ）、２．１４−２．６４（ｍ，１８５Ｈ）、２．８８−３．２９（ｍ，１０９Ｈ）、３．３５（ｓ，８９Ｈ）、３．３６−３．９５（ｍ，３０１６Ｈ）、３．９５−４．６５（ｍ，２５１Ｈ）、５．００（ｂｒ  ｓ，３２Ｈ）、５．２０−５．４９（ｍ，７２Ｈ）、５．５５−５．７５（ｍ，２５Ｈ）、６．１３（ｂｒ  ｓ，２５Ｈ）、７．１２−７．８１（ｍ，２１３Ｈ）、８．１３（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，５０Ｈ）。抱合体の理論的分子量：７５．５ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、２４ＤＴＸ／デンドリマーを示す。実際の分子量は、約６３．２ｋＤａ（３１重量％ＤＴＸ）である。
【０２０６】
実施例１１
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−Ｌｙｓ（α−Ａｃ）（ε−ＤＧＡ−ＤＴＸ）］３２［ε−Ｌｙｓ（ＰＥＧ５７０）２］３２の調製
（ａ）ＨＯ−Ｌｙｓ（ＮＨ２．ＴＦＡ）２の調製
【化５７】
2014520105.tif 000061
ＣＨ２Ｃｌ２（２１ｍＬ）中のＬ−リシン（５００ｍｇ、３．４２ｍｍｏｌ）の磁気的に撹拌した懸濁液に、ＣＨ２Ｃｌ２中のＴＦＡの溶液（２１ｍＬ、１：１容量／容量）を添加した。混合物を周囲温度で４時間撹拌し、次いで、真空で濃縮した。残留物を水（３０ｍＬ）中で溶解させ、真空で濃縮した。この手順をもう一度繰り返した。次いで、残りの油を水から凍結乾燥させ、次のステップで直接使用される黄色がかかった油として１．３３ｇの所望の生成物を提供した。
【０２０７】
（ｂ）ＨＯ−Ｌｙｓ（ＰＥＧ５７０）２の調製
【化５８】
2014520105.tif 000062
ＤＭＦ（５ｍＬ）中のＰＥＧ５７０−ＮＨＳ（１．０６ｇ、１．５５ｍｍｏｌ）の磁気的に撹拌した溶液に、ＤＩＰＥＡ（８０６μＬ、４．６４ｍｍｏｌ）を添加し、続いて、ＤＭＦ（４ｍＬ）中のＨＯ−Ｌｙｓ（ＮＨ２．ＴＦＡ）２（３００ｍｇ）の溶液を添加した。結果として生じた混合物を周囲温度で一晩撹拌した。次いで、揮発物を真空で除去し、残留物を分取ＨＰＬＣ（ＢＥＨ  ３００  Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８、５μＭ、３０×１５０ｍｍ、勾配：５％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜５分）、５〜６０％ＡＣＮ（５〜３５分）、６０〜８０％ＡＣＮ（３５〜４０分）、８０％ＡＣＮ（４０〜４５分）、８０〜５％ＡＣＮ（４５〜５０分）、５％ＡＣＮ（５０〜６０分）、緩衝剤なし、Ｒｔ＝２９．３分）によって精製した。適切な留分を真空で濃縮し、水中で凍結乾燥させ、白色半固体として４８１ｍｇ（２つのステップにわたって４８％）の所望の生成物を提供した。ＨＰＬＣ（Ｃ１８、勾配：５〜６０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜１０分）、６０％ＡＣＮ（１０〜１１分）、６０〜５％ＡＣＮ（１１〜１３分）、５％ＡＣＮ（１３〜１５分）、１０ｍＭギ酸アンモニウム）Ｒｔ（分）＝８．６８。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：１．３３−１．６２（ｍ，４Ｈ）、１．６２−１．９５（ｍ，２Ｈ）、２．４３（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）、２．５２（ｄｔ，Ｊ＝６．２および３．６Ｈｚ，２Ｈ）、３．１６−３．２４（ｍ，２Ｈ）、３．３６（ｓ，６Ｈ）、３．３６−３．９０（ｍ，９５Ｈ）、４．３９（ｄｄ，Ｊ＝８．７および５．１Ｈｚ，１Ｈ）。
【０２０８】
（ｃ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］１６［Ｌｙｓ（α−Ｂｏｃ）（ε−ＮＨ２）３２の調製
ＤＭＦ（３．４ｍＬ）中のＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］１６［Ｌｙｓ（α−Ｂｏｃ）（ε−Ｆｍｏｃ）］３２（５００ｍｇ、２６．９μｍｏｌ）の磁気的に撹拌した懸濁液に、ピペリジン（８４９μＬ、ＤＭＦ中で２０％容量／容量）を添加した。混合物を周囲温度で一晩撹拌し、ジエチルエーテル（６５ｍＬ）に注いだ。形成した白色沈殿物を濾過して取り除き、ジエチルエーテル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過ケーキをバイアルに移し、３日間空気乾燥させ、白色固体として２８１ｍｇ（９１％）の生成物を提供した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：１．００−２．１０（ｍ，６８０Ｈ）、２．６５−２．８８（ｂｒ  ｓ，４８Ｈ）、２．９１−２．９８（ｍ，１１Ｈ）、２．９９−３．２８（ｍ，７８Ｈ）、３．８１−４．２１（ｍ，３３Ｈ）、４．２１−４．５５（ｍ，３２Ｈ）、６．２１（ｓ，１Ｈ）、７．２０−７．４１（ｍ，１０Ｈ）。
【０２０９】
（ｄ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−Ｂｏｃ］３２［ε−Ｌｙｓ（ＰＥＧ５７０）２］３２の調製
ＤＭＦおよびＤＭＳＯ（３ｍＬ、５：１容量／容量）中のＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］１６［Ｌｙｓ（α−Ｂｏｃ）（ε−ＮＨ２）］３２（４９ｍｇ、４．３３μｍｏｌ）の磁気的に撹拌した溶液に、ＤＩＰＥＡ（９６μＬ、５５４．２μｍｏｌ）を添加した。結果として生じた溶液を、ＤＭＦ（５．５ｍＬ）中のＨＯ−Ｌｙｓ（ＰＥＧ５７０）２（２２３ｍｇ、１７３．３μｍｏｌ）およびＰｙＢＯＰ（９０ｍｇ、１７３．３μｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を周囲温度で一晩撹拌した。次いで、揮発物を真空で除去し、残留物を限外濾過（Ｐａｌｌ  Ｍｉｎｉｍａｔｅ（商標）Ｔａｎｇｅｎｔｉａｌ  Ｆｌｏｗ  Ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ  Ｃａｐｓｕｌｅｓ、Ｏｍｅｇａ（商標）１０Ｋ  Ｍｅｍｂｒａｎｅ、水）によって精製した。残りの水溶液を凍結乾燥させ、黄色がかかった油として１２０ｍｇ（５３％）の所望の生成物を提供した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：１．１８−１．９８（ｍ，８６３Ｈ）、２．３８−２．６３（ｍ，１２３Ｈ）、３．０４−３．３０（ｍ，１９４Ｈ）、３．３６（ｓ，１７２Ｈ）、３．３８−３．９１（ｍ，２８１６Ｈ）、３．９３−４．１８（ｂｒ  ｓ，３５Ｈ）、４．１８−４．４７（ｍ，６３Ｈ）、４．４７−４．６０（ｍ，１２Ｈ）、６．１８（ｓ，１Ｈ）、７．１９−７．４３（ｍ，１０Ｈ）。
【０２１０】
（ｅ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−Ｌｙｓ（ＰＥＧ５７０）２］３２の調製
ＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）中のＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−Ｂｏｃ］３２［ε−Ｌｙｓ（ＰＥＧ５７０）２］３２（１２０ｍｇ、２．３μｍｏｌ）の磁気的に撹拌した溶液に、ＣＨ２Ｃｌ２中のＴＦＡの溶液（２ｍＬ、１：１容量／容量）を添加した。混合物を周囲温度で３．５時間撹拌し、その後、溶媒を真空で蒸発させた。残りの油を水（５ｍＬ）中で溶解させ、結果として生じた溶液を真空で濃縮した。この手順をもう一度繰り返し、残った油を水に取り込み、ＳＥＣ（ＰＤ−１０脱塩カラム、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、１７−０８５１−０１、ｓｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−２５媒体）によって精製した。黄色がかかった油として９３ｍｇ（７７％）の所望の物質を提供するように、収集された留分を組み合わせ、水から凍結乾燥させた。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：１．１８−２．０１（ｍ，５５６Ｈ）、２．３８−２．６５（ｍ，１１８Ｈ）、３．０２−３．３０（ｍ，１８１Ｈ）、３．３６（ｓ，１７８Ｈ）、３．３８−３．９４（ｍ，２８１６Ｈ）、４．０９−４．５５（ｍ，６３Ｈ）、６．１３−６．２２（ｍ，１Ｈ）、７．１９−７．４５（ｍ，１０Ｈ）。
【０２１１】
（ｆ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−Ｌｙｓ（α−Ａｃ）（ε−Ｂｏｃ）］３２［ε−Ｌｙｓ（ＰＥＧ５７０）２］３２の調製
ＤＭＦ（３．６ｍＬ）中のＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−Ｌｙｓ（ＰＥＧ５７０）２］３２（９３ｍｇ、１．８μｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（４０μＬ、２３０．４μｍｏｌ）を添加した。結果として生じた溶液を、第２のフラスコに含有された固体ＨＯ−Ｌｙｓ（α−Ａｃ）（ε−Ｂｏｃ）（２１ｍｇ、７２μｍｏｌ）およびＰｙＢＯＰ（３７ｍｇ、７２μｍｏｌ）に添加した。混合物を周囲温度で一晩撹拌した。次いで、揮発物を真空で除去し、残留物をＳＥＣ（ｓｅｐｈａｄｅｘ、ＬＨ２０、ＭｅＯＨ）によって精製した。ＨＰＬＣによって判断されるような適切な留分を組み合わせて濃縮した。したがって、わずかに黄色がかかった半固体として９７ｍｇ（９４％）の所望の生成物をもたらすように、得られた黄色がかかった油を水から凍結乾燥させた。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：１．１０−２．１５（ｍ，１１３９Ｈ）、２．３６−２．６３（ｍ，１２０Ｈ）、２．９３−３．３０（ｍ，２５１Ｈ）、３．３６（ｓ，１９５Ｈ）、３．３７−３．９１（ｍ，２８１６Ｈ）、４．１６−４．５１（ｂｒ  ｓ，１２２Ｈ）、６．１５−６．２１（ｍ，１Ｈ）、７．１８−７．４３（ｍ，１０Ｈ）。
【０２１２】
（ｇ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−Ｌｙｓ（α−Ａｃ）（ε−ＮＨ２．ＴＦＡ）］３２［ε−Ｌｙｓ（ＰＥＧ５７０）２］３２の調製
ＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中のＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−Ｌｙｓ（α−Ａｃ）（ε−Ｂｏｃ）］３２［ε−Ｌｙｓ（ＰＥＧ５７０）２］３２（９７ｍｇ、１．６９μｍｏｌ）の磁気的に撹拌した溶液に、ＣＨ２Ｃｌ２中のＴＦＡの溶液（２ｍＬ、１：１ｖ／ｖ）を添加した。混合物を周囲温度で一晩撹拌し、次いで、溶媒を真空で蒸発させた。残りの油を水（４ｍＬ）中で溶解させ、結果として生じた溶液を真空で濃縮した。この手順をもう一度繰り返し、残った油を水に取り込み、ＳＥＣ（ＰＤ−１０脱塩カラム、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、１７−０８５１−０１、ｓｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−２５媒体）によって精製した。黄色がかかった油として１０４ｍｇ（＞９０％）の所望の物質を提供するように、収集された留分を組み合わせ、水から凍結乾燥させた。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：１．１３−２．２０（ｍ，８４３Ｈ）、２．３７−２．６５（ｍ，１２２Ｈ）、２．８９−３．０６（ｍ，７０Ｈ）、３．０６−３．３０（ｍ，１８０Ｈ）、３．３６（ｓ，１８２Ｈ）、３．３９−３．９２（ｍ，２８１６Ｈ）、４．０８−４．４７（ｂｒ  ｓ，１２６Ｈ）、６．１３−６．２０（ｍ，１Ｈ）、７．２０−７．４５（ｍ，１０Ｈ）。
【０２１３】
（ｈ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−Ｌｙｓ（α−Ａｃ）（ε−ＤＧＡ−ＤＴＸ）］３２［ε−Ｌｙｓ（ＰＥＧ５７０）２］３２の調製
【化５９】
2014520105.tif 000063
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−Ｌｙｓ（α−Ａｃ）（ε−ＮＨ２．ＴＦＡ）］３２［ε−Ｌｙｓ（ＰＥＧ５７０）２］３２（４９ｍｇ、０．８５μｍｏｌ）およびＤＧＡ−ＤＴＸ（３１ｍｇ、３４μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｃを使用して調製した。ＳＥＣ（ｓｅｐｈａｄｅｘ、ＬＨ２０、ＭｅＯＨ）による精製が、白色固体として５７ｍｇ（８０％）の所望の生成物を提供した。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：４０〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜９分）、８０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、１０ｍＭギ酸アンモニウム）Ｒｔ（分）＝８．８５。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：０．７９−２．７３（ｍ，１６９８Ｈ）、３．０６−３．２９（ｍ，１７９Ｈ）、３．３５（ｓ，１８４Ｈ）、３．３６−３．９２（ｍ，２８４８Ｈ）、３．９５−４．６０（ｍ，３３２Ｈ）、５．０１（ｂｒ  ｓ，３２Ｈ）、５．２０−５．５２（ｍ，７７Ｈ）、５．６４（ｂｒ  ｓ，３０Ｈ）、６．１３（ｂｒ  ｓ，２７Ｈ）、７．１４−７．３４（ｍ，３９Ｈ）、７．３４−７．５２（ｍ，１０４Ｈ）、７．５２−７．７６（ｍ，８７Ｈ）、８．０２−８．２４（ｍ，５７Ｈ）。抱合体の理論的分子量：８３．３ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、２７ＤＴＸ／デンドリマーを示す。実際の分子量は、約７８．８ｋＤａ（２８重量％ＤＴＸ）である。
【０２１４】
実施例１２
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−Ｇｌｕ−ＰＴＸ］３２［ε−ＰＥＧ２３００］３２の調製  ＰＴＸ＝パクリタキセル
【化６０】
2014520105.tif 000064
【化６１】
2014520105.tif 000065
Ｇｌｕ−ＰＴＸ（３００ｍｇ、３７１μｍｏｌ）およびＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］１６［Ｌｙｓ（α−ＮＨ２．ＴＦＡ）（ε−ＰＥＧ２３００）］３２（２２．０ｍｇ、０．２６μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｃを使用して調製した。分取ＨＰＬＣ（Ｒｔ＝２８分）による精製が、１２ｍｇ（４１％）の所望のデンドリマーを提供した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ０．７８−２．８０（ｍ，１７８５Ｈ）、２．９６−３．２３（ｍ，１２０Ｈ）、３．３５−３．４５（ｍ，５６７Ｈ）、３．４６−３．９４（ｍ，５６１０Ｈ）、４．０４−４．４７（ｍ，１６７Ｈ）、４．４８−４．６５（ｍ，８８Ｈ）、５．５０（ｍ，２９Ｈ）、５．６４（ｍ，２４Ｈ）、５．８５（ｍ，２７Ｈ）、６．１０（ｍ，２６Ｈ）、６．４６（ｍ，２０Ｈ）、７．２６（ｍ，６６Ｈ）、７．３６−８．００（ｍ，４０７Ｈ）、８．１２（ｓ，５３Ｈ）。抱合体の理論的分子量：１１２．４ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、２５ＰＴＸ／デンドリマーを示す。実際の分子量は、約１０５ｋＤａ（２０重量％ＰＴＸ）である。
【０２１５】
実施例１３
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−Ｇｌｕ−ＧＥＭ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２の調製  ＧＥＭ＝ゲムシタビン
（ａ）Ｎ，Ｏ−ｄｉ−ＢＯＣ−ＧＥＭ−Ｇｌｕの調製
【化６２】
2014520105.tif 000066
０℃でＤＭＦ（２ｍＬ）中のＮ，Ｏ−ｄｉＢｏｃゲムシタビン（Ｇｕｏ，Ｚ．；Ｇａｌｌｏ，Ｊ．Ｍ．Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ２’，２’Ｄｉｆｌｕｏｒｏｄｅｏｘｙｃｙｔｉｄｉｎｅ  Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ，１９９９，６４，８３１９−８３２２）（２００ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）の撹拌した混合物に、ＤＩＰＥＡ（０．４ｍＬ、２．１５ｍｍｏｌ）およびグルタル酸無水物（１００ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を１時間にわたって周囲温度まで温めさせ、次いで、さらに３時間撹拌した。次いで、ＤＭＦを真空で除去し、残留物を酢酸エチル（２０ｍＬ）に取り込んだ。次いで、この混合物をＮａＨＣＯ３（１０％、２×１０ｍＬ）、水（２×２０ｍＬ）、および食塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。次いで、有機相を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。次いで、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィ（ＤＣＭ／メタノール）によって精製し、白色固体として１３０ｍｇ（５４％）の所望の生成物を提供した。ＬＣＭＳ（Ｃ１８、勾配：２０〜６０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、６０％ＡＣＮ（７〜９分）、６０〜２０％ＡＣＮ（９〜１１分）、２０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、０．１％ＴＦＡ、Ｒｔ（分）＝１０．８分。ＥＳＩ（＋ｖｅ）が［Ｍ＋Ｈ］＋＝５７８を観察した。Ｃ２４Ｈ３２Ｎ３Ｆ２Ｏ１１＝５７６．２０Ｄａを計算した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１．５１（ｓ，１８Ｈ）、２．０１−１．８８（ｍ，２Ｈ）、２．５５−２．４（ｍ，２Ｈ）、２．７５−２．６４（ｍ，２Ｈ）、４．４６−４．３８（ｍ，３Ｈ）、５．１５−５．１０（ｍ，１Ｈ）、６．４６−６．３０（ｍ，１Ｈ）、７．３６−７．５０（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．６−７．７９（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）。
【０２１６】
（ｂ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−Ｇｌｕ−ＧＥＭ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２の調製
【化６３】
2014520105.tif 000067
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］１６［Ｌｙｓ（α−ＮＨ２．ＴＦＡ）（ε−ＰＥＧ）１１００］３２（４０ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｏ−ｄｉ−Ｂｏｃ−ＧＥＭ−Ｇｌｕ（２８ｍｇ、４９μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｃを使用して調製した。ＳＥＣ（ＰＤ−１０脱塩カラム、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、１７−０８５１−０１、ｓｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−２５媒体）による精製が、２０ｍｇの物質を提供した。固体をＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１、２ｍＬｓ）に取り込み、室温で３時間撹拌した。揮発物で真空で除去し、残留物を水に取り込んで凍結乾燥させ、１８ｍｇ（４７％）の白色粉末を提供した。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：４０〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜９分）、８０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、０．１％ＴＦＡ）、Ｒｔ（分）＝６．０６。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ０．８９−２．１（ｍ，４５６Ｈ）、２．１−２．７（ｍ，１８５Ｈ）、２．９−３．２（ｍ，９０Ｈ）、３．２−３．３（ｍ，１９１Ｈ）、３．４４−４．１２（ｍ，２６５０Ｈ）、４．１４−４．７０（ｍ，１６０Ｈ）、５．８−６．０（ｍ，２８Ｈ）、６．２−６．４（ｍ，２８Ｈ）、７．０５−７．１５（ｓ，１１Ｈ）、７．５−７．７（ｍ，２４Ｈ）。抱合体の理論的分子量：５９．２ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、２６ＧＥＭ／デンドリマーを示す。実際の分子量は、約５２．３ｋＤａ（１５重量％ＧＥＭ）である。
【０２１７】
実施例１４
（ａ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＧＧＧ−Ｂｏｃ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２の調製
【化６４】
2014520105.tif 000068
室温でＤＭＦ（１ｍＬ）中のＢｏｃ−ＧＧＧ−ＯＨ（２８ｍｇ、９３．２μｍｏｌ）およびＰｙＢＯＰ（４８ｍｇ、９３．２μｍｏｌ）の磁気的に撹拌した溶液に、ＤＭＦ（２．６ｍＬ）中のＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２（１００ｍｇ、２．３３μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（５１μＬ、２９８．２４μｍｏｌ）の溶液を添加した。混合物を室温で１８時間撹拌し、次いで、減圧下で濃縮した。残留物をＭｅＯＨ（１ｍＬ）中で溶解させ、ＳＥＣ（Ｓｅｐｈａｄｅｘ、ＬＨ−２０、ＭｅＯＨ）によって精製した。透明な無色の油として９８ｍｇの生成物を提供するように、ＨＰＬＣによって判断されるような適切な留分を組み合わせて濃縮した。無色の樹脂として９８ｍｇ（８７％）の生成物をもたらすように、後者をＭＱ水中で溶解させ、凍結乾燥させた。ＬＣＭＳ（Ｃ８、勾配：５〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜１２分）、８０〜５％ＡＣＮ（１２〜１３分）、５％ＡＣＮ（１３〜１５分）、０．１％ＴＦＡ）Ｒｔ（分）＝８．６３。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：１．１５−２．０１（ｍ，６９３Ｈ）、２．４６（ｂｒ  ｓ，５７Ｈ）、３．１８（ｂｒ  ｓ，１０１Ｈ）、３．３５（ｓ，５３Ｈ）、３．３６（ｓ，８４Ｈ）、３．３８−４．０４（ｍ，２９９０Ｈ）、４．３０（ｂｒ  ｓ，６３Ｈ）、６．１７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、７．２９（ｂｒ  ｓ，９Ｈ）。１Ｈ  ＮＭＲは、約３２Ｂｏｃ−ＧＧＧ／デンドリマーを示す。分子量は、約４８．５ｋＤａである。
【０２１８】
（ｂ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＧＧＧ−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２の調製
【化６５】
2014520105.tif 000069
室温でＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中のＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＧＧＧ−Ｂｏｃ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２（９８ｍｇ、２．０２μｍｏｌ）の磁気的に撹拌した混合物に、ＣＨ２Ｃｌ２中のＴＦＡの溶液（１：１、２ｍＬ）を添加した。室温で１８時間後、揮発物を除去した。結果として生じた残留物をＭＱ水（１５ｍＬ）で溶解させて濃縮した。この手順をもう一度繰り返した。次いで、残留物をＭＱ水（１２．５ｍＬ）で溶解させ、ＳＥＣ（ＰＤ−１０、ＭＱ水）によって精製した。透明な無色の油として９２ｍｇ（９４％）の所望の物質を提供するように、適切な留分を組み合わせて凍結乾燥させた。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：５〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜１２分）、８０〜５％ＡＣＮ（１２〜１３分）、５％ＡＣＮ（１３〜１５分）、０．１％ＴＦＡ）Ｒｔ（分）＝７．９４。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：１．１９−２．０５（ｍ，３５１Ｈ）、２．４７（ｂｒ  ｓ，５８Ｈ）、３．１８（ｂｒ  ｓ，１０５Ｈ）、３．３６（ｓ，８９Ｈ）、３．３８−４．１５（ｍ，２９９０Ｈ）、４．３１（ｂｒ  ｓ，７２Ｈ）、６．１７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、７．３０（ｂｒ  ｓ，９Ｈ）。１Ｈ  ＮＭＲは、約３２ＧＧＧ−ＮＨ２．ＴＦＡ／デンドリマーを示す。分子量は、約４８．６ｋＤａである。
【０２１９】
（ｃ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＧＧＧ−Ｇｌｕ−ＤＴＸ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２の調製
【化６６】
2014520105.tif 000070
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＧＧＧ−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２（７５ｍｇ、１．５３μｍｏｌ）およびＧｌｕ−ＤＴＸ（５６ｍｇ、６１．２μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｃを使用して調製した。ＳＥＣ（Ｓｅｐｈａｄｅｘ、ＬＨ−２０、ＭｅＯＨ）による精製が、白色固体として９６ｍｇ（９２％）の生成物を提供した。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：５〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜１２分）、８０〜５％ＡＣＮ（１２〜１３分）、５％ＡＣＮ（１３〜１５分）、０．１％ＴＦＡ）Ｒｔ（分）＝１０．０８。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：０．７５−２．０２（ｍ，９８５Ｈ）、２．０２−２．６４（ｍ，３０９Ｈ）、２．９２−３．１７（ｍ，５３Ｈ）、３．２５（ｓ，８９Ｈ）、３．２６−４．００（ｍ，３０７０Ｈ）、４．００−４．４０（ｍ，１７４Ｈ）、４．８２−５．００（ｍ，４４Ｈ）、５．０４−５．３９（ｍ，８７Ｈ）、５．５４（ｂｒ  ｓ，２７Ｈ）、６．０１（ｂｒ  ｓ，２２Ｈ）、７．０３−７．６７（ｍ，２２７Ｈ）、７．９２−８．１０（ｍ，４９Ｈ）。抱合体の理論的分子量：７３．９ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、３２ＧＧＧおよび２６ＤＴＸ／デンドリマーを示す。実際の分子量は、約６８．５ｋＤａ（３１重量％ＤＴＸ）である。
【０２２０】
実施例１５
（ａ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＧＦＬＧ−Ｂｏｃ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２の調製
【化６７】
2014520105.tif 000071
室温でＤＭＦ（１ｍＬ）中のＢｏｃ−ＧＬＦＧ−ＯＨ（３２ｍｇ、６５．２μｍｏｌ）およびＰｙＢＯＰ（３４ｍｇ、６５．２μｍｏｌ）の磁気的に撹拌した溶液に、ＤＭＦ（１．５ｍＬ）中のＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２（７０ｍｇ、１．６３μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（３６μＬ、２０８．６４μｍｏｌ）の溶液を添加した。混合物を室温で１８時間撹拌し、次いで、減圧下で濃縮した。残留物をＭｅＯＨ（１ｍＬ）中で溶解させ、ＳＥＣ（Ｓｅｐｈａｄｅｘ、ＬＨ−２０、ＭｅＯＨ）によって精製した。透明な無色の油として７７ｍｇ（８８％）の生成物を提供するように、ＨＰＬＣによって判断されるような適切な留分を組み合わせて濃縮した。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：５〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜１２分）、８０〜５％ＡＣＮ（１２〜１３分）、５％ＡＣＮ（１３〜１５分）、０．１％ＴＦＡ）Ｒｔ（分）＝９．１４。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：０．６３−１．０６（ｍ，２１１Ｈ）、１．０６−２．１１（ｍ，７８９Ｈ）、２．３２−２．６２（ｍ，６１Ｈ）、２．８８−３．２８（ｍ，１４８Ｈ）、３．３６（ｓ，９５Ｈ）、３．３７−４．００（ｍ，２９２０Ｈ）、４．１７−４．６９（ｍ，１３２Ｈ）、７．２３（ｂｒ  ｓ，１４０Ｈ）。１Ｈ  ＮＭＲは、約３０Ｂｏｃ−ＧＬＦＧ／デンドリマーを示す。分子量は、約５３．８ｋＤａである。
【０２２１】
（ｂ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＧＦＬＧ−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２の調製
【化６８】
2014520105.tif 000072
室温でＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中のＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＧＦＬＧ−Ｂｏｃ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２（７７ｍｇ、１．４３μｍｏｌ）の磁気的に撹拌した混合物に、ＣＨ２Ｃｌ２中のＴＦＡの溶液（１：１、２ｍＬ）を添加した。室温で３時間後、揮発物を除去した。結果として生じた残留物をＭＱ水（１５ｍＬ）中で溶解させて濃縮した。この手順をもう一度繰り返した。次いで、黄色がかかった樹脂として７６ｍｇ（９９％）の所望の物質を提供するように、残留物をＭＱ水（１５ｍＬ）中で溶解させ、凍結乾燥させた。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：５〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜１２分）、８０〜５％ＡＣＮ（１２〜１３分）、５％ＡＣＮ（１３〜１５分）、０．１％ＴＦＡ）Ｒｔ（分）＝８．０８。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：０．７５−１．０４（ｍ，１９７Ｈ）、１．１０−２．０９（ｍ，４８０Ｈ）、２．４５（ｍ，５６Ｈ）、２．８８−３．２９（ｍ，１４６）、３．３５（ｓ，９０Ｈ）、３．３７−４．０５（ｍ，２９２０Ｈ）、４．１７−４．６９（ｍ，１３３Ｈ）、７．６６（ｓ，１５９Ｈ）。抱合体の理論的分子量：６８．９ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、約３０ＧＦＬＧ−ＮＨ２．ＴＦＡ／デンドリマーを示す。分子量は、約５４．１ｋＤａである。
【０２２２】
（ｃ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＧＦＬＧ−Ｇｌｕ−ＤＴＸ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２の調製
【化６９】
2014520105.tif 000073
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＧＦＬＧ−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２（６１ｍｇ、１．１３μｍｏｌ）およびＧｌｕ−ＤＴＸ（４２ｍｇ、４５．６０μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｃを使用して調製した。ＳＥＣ（Ｓｅｐｈａｄｅｘ、ＬＨ−２０、ＭｅＯＨ）による精製が、白色固体として６８ｍｇ（８５％）の生成物を提供した。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：５〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜１２分）、８０〜５％ＡＣＮ（１２〜１３分）、５％（ＡＣＮ１３〜１５分）、０．１％ＴＦＡ）Ｒｔ（分）＝１０．１６。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：０．８５（ｓ，１７３Ｈ）、０．９９−２．１３（ｍ，１１５３Ｈ）、２．１５−２．６２（ｍ，３１２Ｈ）、２．９１−３．２７（ｍ，１２８Ｈ）、３．３５（ｓ，９３）、３．３６−４．００（ｍ，２９７０Ｈ）、４．０５−４．６８（ｍ，２３７Ｈ）、４．９４−５．０７（ｍ，３２Ｈ）、５．１５−５．４７（ｍ，７６Ｈ）、５．５２−５．７６（ｍ，２４Ｈ）、５．９７−６．２６（ｓ，２１Ｈ）、６．９９−７．７７（ｍ，３８０Ｈ）、７．９８−８．２４（ｍ，４８Ｈ）。抱合体の理論的分子量：８０．４ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、３０ＧＦＬＧおよび２２ＤＴＸ／デンドリマーを示す。実際の分子量は、約７０．６ｋＤａ（２５重量％ＤＴＸ）である。
【０２２３】
実施例１６
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＧＩＬＧＶＰ−Ｇｌｕ−ＤＴＸ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２の調製
【化７０】
2014520105.tif 000074
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［ε−ＧＩＬＧＶＰ−ＮＨ．ＴＦＡ］３２［α−ＰＥＧ１１００］３２（５２ｍｇ、０．８６μｍｏｌ）およびＧｌｕ−ＤＴＸ（３４ｍｇ、３６μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｃを使用して調製した。ＳＥＣ（ｓｅｐｈａｄｅｘ、ＬＨ２０、ＭｅＯＨ）による精製が、吸湿性の無色固体として５９ｍｇ（８０％）の所望の物質を提供した。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：５〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜１２分）、８０〜５％ＡＣＮ（１２〜１３分）、５％ＡＣＮ（１３〜１５分）、０．１％ＴＦＡ緩衝剤）Ｒｔ（分）＝１０．４５。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：０．８４−１．９１（ｍ，１８０８Ｈ）、２．４１（ｓ，２８７Ｈ）、３．１２−３．２０（ｍ，１０６Ｈ）、３．３５（ｂｄ，１６６Ｈ）、３．３７−３．９０（ｍ，２８００Ｈ）、４．１０−４．４０（ｂｍ，１９４Ｈ）、４．５３（ｓ，８８Ｈ）、４．９８−５．０３（ｍ，３５Ｈ）、５．２４−５．４０（ｍ，８０Ｈ）、５．６０−５．６８（ｍ，２６Ｈ）、６．０８−６．１６（ｍ，２１Ｈ）、７．２５−７．８８（ｍ，２８８Ｈ）、８．０８−８．１６（ｍ，８６Ｈ）。抱合体の理論的分子量：８５．６ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、３０ＤＴＸ／デンドリマーを示す。実際の分子量は、約８３．２ｋＤａ（２９重量％ＤＴＸ）である。
【０２２４】
実施例１７
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＧＩＬＧＶＰ−Ｇｌｕ−ＤＴＸ］３２［ε−ｔ−ＰＥＧ２３００］３２の調製
【化７１】
2014520105.tif 000075
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＧＩＬＧＶＰ−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−ｔ−ＰＥＧ２３００］３２（５９ｍｇ、０．５７μｍｏｌ）およびＧｌｕ−ＤＴＸ（２３ｍｇ、２５μｍｏｌ）およびＰｙＢＯＰ（１３ｍｇ、２５μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｃを使用して調製した。ＳＥＣ（ｓｅｐｈａｄｅｘ、ＬＨ２０、ＭｅＯＨ）による精製が、吸湿性の無色固体として６５ｍｇ（８９％）の所望の物質を提供した。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：５〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜１２分）、８０〜５％ＡＣＮ（１２〜１３分）、５％ＡＣＮ（１３〜１５分）、０．１％ＴＦＡ緩衝剤）Ｒｔ（分）＝９．２２。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：０．８６−２．５０（ｍ，２６２２Ｈ）、３．１２−３．２０（ｍ，８０Ｈ）、３．３５−３．８８（ｍ，５５４０Ｈ）、４．１８−４．３０（ｂｍ，２６３Ｈ）、４．５０−４．５８（ｍ，１４９Ｈ）、４．９６−５．０４（ｍ，４２Ｈ）、５．２４−５．３８（ｍ，７７Ｈ）、５．６２−５．６８（ｍ，２９Ｈ）、６．０８−６．１４（ｍ，２８Ｈ）、７．２５−７．７０（ｍ，２３４Ｈ）、８．１０−８．１５（ｍ，６３Ｈ）。抱合体の理論的分子量：１２７．３ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、２７ＤＴＸ／デンドリマーを示す。実際の分子量は、約１２３．７ｋＤａ（１８重量％ＤＴＸ）である。
【０２２５】
実施例１８
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＰＥＧ１１００］３２［ε−ＴＤＡ−ＤＴＸ］３２の調製
【化７２】
2014520105.tif 000076
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［ε−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［α−ＰＥＧ１１００］３２（５７．５ｍｇ、１．３４μｍｏｌ）およびＴＤＡ−ＤＴＸ（５２．３ｍｇ、５６μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｃを使用して調製した。ＳＥＣ（ｓｅｐｈａｄｅｘ、ＬＨ２０、ＭｅＯＨ）による精製が、吸湿性の無色固体として７０ｍｇ（９２％）の所望の物質を提供した。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：５〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜１２分）、８０〜５％ＡＣＮ（１２〜１３分）、５％ＡＣＮ（１３〜１５分）、０．１％ＴＦＡ緩衝剤）Ｒｔ（分）＝９．８９。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：１．０６−１．９５（ｍ，７８４Ｈ）、２．３６−２．５５（ｍ，１６８Ｈ）、３．０４−３．２３（ｍ，４８Ｈ）、３．３３（ｓ，８４Ｈ）、３．３５−３．８９（ｍ，２８００Ｈ）、４．１３−４．４０（ｍ，１１８Ｈ）、５．２３−５．４０（ｍ，７２Ｈ）、５．５９−５．６６（ｍ，２４Ｈ）、６．０６−６．１６（ｍ，２３Ｈ）、７．２５−７．６５（ｍ，２３４Ｈ）、８．１０−８．１２（ｍ，５２Ｈ）。抱合体の理論的分子量：６８．９ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、２７ＤＴＸ／デンドリマーを示す。実際の分子量は、約６４．４ｋＤａ（３４重量％ＤＴＸ）である。
【０２２６】
実施例１９
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＴＤＡ−ＤＴＸ］３２［ε−ＰｏｌｙＰＥＧ２０００］３２の調製
【化７３】
2014520105.tif 000077
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−ＰＥＧ２０００］３２（８８．６ｍｇ、１．２μｍｏｌ）およびＴＤＡ−ＤＴＸ（４９．３ｍｇ、５２μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｃを使用して調製した。ＳＥＣ（ｓｅｐｈａｄｅｘ、ＬＨ２０、ＭｅＯＨ）による精製が、吸湿性の無色固体として９５ｍｇ（８０％）の所望の物質を提供した。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：４５〜８５％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８５％ＡＣＮ（７〜１２分）、８５〜４５％ＡＣＮ（１２〜１３分）、４５％ＡＣＮ（１３〜１５分）、０．１％ＴＦＡ緩衝剤）Ｒｆ（分）＝６．２９分。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：０．８２−１．９６（ｍ，２０７６Ｈ）、２．３６−２．５４（ｍ，３１４Ｈ）、３．１０−３．２４（ｍ，１２５Ｈ）、３．３５−３．８９（ｍ，６３００Ｈ）、４．９６−５．０４（ｍ，３５Ｈ）、５．２５−５．４５（ｍ，７９Ｈ）、５．６０−５．７０（ｍ，２９Ｈ）、６．０６−６．１８（ｍ，２４Ｈ）、７．２０−７．７５（ｍ，２６９Ｈ）、８．０６−８．１６（ｍ，５２Ｈ）。抱合体の理論的分子量：１０１．１ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、２７ＤＴＸ／デンドリマーを示す。実際の分子量は、約９５．５ｋＤａ（２３重量％ＤＴＸ）である。動的光散乱を使用した粒度測定は、１０．９〜１５．５ｎｍの濃度依存性平均の範囲を示す。
【０２２７】
実施例２０
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＤＧＡ−テストステロン］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２の調製
（ａ）ＤＧＡ−テストステロンの調製
【化７４】
2014520105.tif 000078
テストステロン（２５６ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）、溶媒としてピリジン（１０ｍＬ）、およびリンカーとしてジグリコール酸無水物（１．０２ｇ、８．８ｍｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｂを使用して調製した。オフホワイトの吸湿性固体として２４１ｍｇ（６７％収率）の所望の化合物をもたらす、予備ＨＰＬＣ（ＢＥＨ  ３００  Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８、５μＭ、３０×１５０ｍｍ、４０〜９０％ＡＣＮ／水、緩衝剤なし、ＲＴ＝６２分）による精製。ＬＣＭＳ（Ｃ８、勾配：４０〜９０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、９０％ＡＣＮ（７〜９分）、９０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、０．１％ＴＦＡ）Ｒｔ（分）＝５．６１。ＥＳＩ（−ｖｅ）が［Ｍ−Ｈ］−＝４０３．２９を観察した。Ｃ２３Ｈ３１Ｏ６＝４０３．２１Ｄａを計算した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）０．８８（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３）、０．９３−１．２３（ｍ，３Ｈ）、１．２４（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３）、１．２５−２．５８（ｂｒ  ｍ，１６Ｈ）、４．１８（ｓ，２Ｈ，ＣＨ２）、４．２３（ｓ，２Ｈ，ＣＨ２）、４．７０（ｍ，１Ｈ，ＣＨ）、５．７１（ｓ，１Ｈ，ＣＨ）。
【０２２８】
（ｂ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＤＧＡ−テストステロン］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２の調製
【化７５】
2014520105.tif 000079
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２（α−ＮＨ２．ＴＦＡ）３２（ε−ＰＥＧ１１００）３２（３０ｍｇ、０．７５μｍｏｌ）およびＤＧＡ−テストステロン（１９ｍｇ、４７μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｃを使用して調製した。ＳＥＣ（ＬＨ２０、溶離液：メタノール）による精製が、オフホワイトの固体として１５ｍｇ（３９％）を提供した。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：３０〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜９分）、８０〜３０％ＡＣＮ（９〜１１分）、３０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、１０ｍＭギ酸アンモニウム）Ｒｔ（分）＝９．４１。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）０．７９（ｓ，８０Ｈ，ＣＨ３）、０．８１−２．４２（ｂｒ  ｍ，１１０１Ｈ）、３．０８（ｍ，１１６Ｈ，ＣＨ２）、３．２６（ｓ，９８Ｈ，ＣＨ２）、３．３７−３．８１（ｍ，２８００Ｈ，ＣＨ２）、３．９５−４．４７（ｍ，１７３Ｈ，ＣＨ）、４．６１（ｍ，２９Ｈ，ＣＨ）、５．６２（ｓ，２９Ｈ，ＣＨ）、６．０８（ｍ，１Ｈ，ＣＨ）、７．１７（ｍ，１０Ｈ，ＡｒＨ）。抱合体の理論的分子量：５２．４ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、２９テストステロン／デンドリマーを示す。実際の分子量は、約５１．２ｋＤａ（１６重量％テストステロン）である。
【０２２９】
実施例２１
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−ＤＧＡ−テストステロン］３２［ε−ＰＥＧ５７０］３２の調製
【化７６】
2014520105.tif 000080
ＤＭＦ（２ｍＬ）中のＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２（α−ＮＨ２．ＴＦＡ）３２（ε−ＰＥＧ５７０）３２（４０ｍｇ、１．３３μｍｏｌ）およびＤＧＡ−テストステロン（４３ｍｇ、１０６μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｃを使用して調製した。ＳＥＣ（ＬＨ２０、溶離液：メタノール）による精製が、白色吸湿性固体として２２．１ｍｇ（４０％収率）を提供した。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：３０〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜９分）、８０〜３０％ＡＣＮ（９〜１１分）、３０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、１０ｍＭギ酸アンモニウム）Ｒｔ（分）＝９．９９。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）０．８９（ｓ，９６Ｈ，ＣＨ３）、０．９０−２．６３（ｂｒ  ｍ，１２１４Ｈ）、３．３６（ｍ，１２５Ｈ，ＣＨ２）、３．３６（ｓ，１００Ｈ，ＣＨ３）、３．４５−３．９７（ｍ，１４７２Ｈ，ＣＨ２）、４．０５−４．６２（ｍ，２１８Ｈ）、４．７１（ｍ，３７Ｈ，ＣＨ）、５．７２（ｓ，３１Ｈ，ＣＨ）、６．１８（ｍ，１Ｈ，ＣＨ）、７．１７（ｍ，１０Ｈ，ＡｒＨ）。抱合体の理論的分子量：４２．５ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、３１テストステロン／デンドリマーを示す。実際の分子量は、約４２．１ｋＤａ（２１重量％テストステロン）である。
【０２３０】
実施例２２
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−Ｇｌｕ−テストステロン］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２の調製
（ａ）Ｇｌｕ−テストステロンの調製
【化７７】
2014520105.tif 000081
テストステロン（１００ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）、溶媒としてピリジン（６ｍＬ）、およびリンカーとしてグルタル酸無水物（３９６ｍｇ、３．５ｍｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｂを使用して調製した。オフホワイトの吸湿性固体として８６ｍｇ（８６％）の所望の化合物をもたらす、予備ＨＰＬＣ（ＢＥＨ  ３００  Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８、５μＭ、３０×１５０ｍｍ、４０〜９０％ＡＣＮ／水、緩衝剤なし、ＲＴ＝６２分）による精製。ＬＣＭＳ（Ｃ８、勾配：４０〜９０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、９０％ＡＣＮ（７〜９分）、９０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、０．１％ＴＦＡ）Ｒｔ（分）＝６．４０。ＥＳＩ（＋ｖｅ）が［Ｍ＋Ｈ］＋＝４０３．２９を観察した。Ｃ２４Ｈ３５Ｏ５＝４０３．２５Ｄａを計算した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）０．８９（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３）、０．９３−１．２３（ｍ，３Ｈ）、１．２４（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３）、１．３６−２．５７（ｂｒ  ｍ，２２Ｈ）、４．６２（ｍ，１Ｈ，ＣＨ）、５．７１（ｓ，１Ｈ，ＣＨ）。
【０２３１】
（ｂ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−Ｇｌｕ−テストステロン］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２の調製
【化７８】
2014520105.tif 000082
ＤＭＦ（２ｍＬ）中のＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２（α−ＮＨ２．ＴＦＡ）３２（ε−ＰＥＧ１１００）３２（３０ｍｇ、０．７５μｍｏｌ）およびＧｌｕ−テストステロン（１９ｍｇ、４７μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｃを使用して調製した。ＳＥＣ（ＬＨ２０、溶離液：メタノール）による精製が、オフホワイトの固体として１８．１ｍｇ（４７％）の所望の生成物を提供した。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：４０〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜９分）、８０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、１０ｍＭギ酸アンモニウム）Ｒｔ（分）＝７．２２。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）０．８８（ｓ，８７Ｈ，ＣＨ３）、０．８９−２．６１（ｂｒ  ｍ，１２２５Ｈ）、３．１７（ｍ，１１０Ｈ，ＣＨ２）、３．３６（ｓ，１０１Ｈ，ＣＨ３）、３．４６−３．９８（ｍ-，２８００Ｈ，ＣＨ２）、４．３４（ｍ，５９Ｈ，ＣＨ）、４．６１（ｍ，３０Ｈ，ＣＨ）、５．７２（ｓ，２９Ｈ，ＣＨ）、６．１８（ｍ，１Ｈ，ＣＨ）、７．２８（ｍ，１２Ｈ，ＡｒＨ）。抱合体の理論的分子量：５２．３ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、２９テストステロン／デンドリマーを示す。実際の分子量は、約５１．１ｋＤａ（１６重量％テストステロン）である。
【０２３２】
実施例２３
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−Ｇｌｕ−テストステロン］３２［ε−ＰＥＧ５７０］３２の調製
【化７９】
2014520105.tif 000083
ＤＭＦ（２ｍＬ）中のＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２（α−ＮＨ２．ＴＦＡ）３２（ε−ＰＥＧ５７０）３２（３０ｍｇ、１μｍｏｌ）および実施例２２（ａ）、Ｇｌｕ−テストステロン（２６ｍｇ、６４μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｃを使用して調製した。ＳＥＣ（ＬＨ２０、溶離液：メタノール）による精製が、白色固体生成物として１９．８ｍｇ（４７％収率）の所望の生成物を提供した。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：４０〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜９分）、８０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、１０ｍＭギ酸アンモニウム）Ｒｔ（分）＝８．９３。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：０．８８（ｓ，９６Ｈ，ＣＨ３）、０．８９−２．５９（ｂｒ  ｍ，１４２３Ｈ）、３．１６（ｍ，１２７Ｈ，ＣＨ２）、３．２６（ｍ，１３５Ｈ，ＣＨ３）、３．６５−３．９２（ｍ，１４７２Ｈ，ＣＨ２）、４．２４（ｍ，６６Ｈ，ＣＨ）、４．５２（ｍ，３９Ｈ，ＣＨ）、５．６２（ｓ，３２Ｈ，ＣＨ）、６．０９（ｍ，１Ｈ，ＣＨ）、７．１９（ｍ，１０Ｈ，ＡｒＨ）。抱合体の理論的分子量：４２．５ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、３２テストステロン／デンドリマーを示す。実際の分子量は、約４２．５ｋＤａ（２１重量％テストステロン）である。
【０２３３】
実施例２４
ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−Ｇｌｕ−ＳＢ］３２［ε−ＰＥＧ１１００］３２の調製  ＳＢ＝サルブタモール
（ａ）Ｇｌｕ−ＳＢの調製
【化８０】
2014520105.tif 000084
ＳＢ（１００ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）およびリンカーとしてグルタル酸無水物（６２ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｂを使用して調製する。分取ＨＰＬＣ（ＢＥＨ  ３００  Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８、５μＭ、３０×１５０ｍｍ、勾配：５％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜５分）、５〜６０％ＡＣＮ（５〜４０分）、６０％ＡＣＮ（４０〜４５分）、６０〜５％ＡＣＮ（４５〜５０分）、５％ＡＣＮ（５０〜６０分）、０．１％ＴＦＡ、Ｒｔ＝２７分）が、白色固体として５０ｍｇ（３４％）の所望の生成物を提供した。ＨＰＬＣ（Ｃ１８、勾配：５〜６０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜１０分）、６０％ＡＣＮ（１０〜１１分）、６０〜５％ＡＣＮ（１１〜１３分）、５％ＡＣＮ（１３〜１５分）、１０ｍＭギ酸アンモニウム）Ｒｔ（分）＝６．６７。ＥＳＩ（＋ｖｅ）が［Ｍ＋Ｈ］＋＝３５４を観察した。Ｃ１８Ｈ２７ＮＯ６＝３５３．１８Ｄａを計算した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：１．４１（ｓ，９Ｈ）、１．９２（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）、２．３７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）、２．４５（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）、３．０１−３．１８（ｍ，２Ｈ）、５．１８（ｓ，２Ｈ）、６．８７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．２７（ｄｄ，Ｊ＝８．４および２．１Ｈｚ，１Ｈ）、７．３６（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）。
【０２３４】
（ｂ）ＢＨＡＬｙｓ［Ｌｙｓ］３２［α−Ｇｌｕ−ＳＢ］３２［ε−ＰＥＧ５７０］３２の調製
【化８１】
2014520105.tif 000085
ＢＨＡ［Ｌｙｓ］３２［α−ＮＨ２．ＴＦＡ］３２［ε−ＰＥＧ５７０］３２（２６ｍｇ、０．８６μｍｏｌ）およびＧｌｕ−ＳＢ（１７ｍｇ、４８．２μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｃを使用して調製した。ＳＥＣ（ｓｅｐｈａｄｅｘ、ＬＨ２０、ＭｅＯＨ）による精製が、白色固体として２５ｍｇ（７６％）の所望の物質を提供した。ＨＰＬＣ（Ｃ８、勾配：４０〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜９分）、８０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、１０ｍＭギ酸アンモニウム）Ｒｔ（分）＝５．８１。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：１．０３−２．０２（ｍ，７３８Ｈ）、２．２５−２．５８（ｍ，１８０Ｈ）、２．９７−３．２９（ｍ，１６７Ｈ）、３．４０−３．９４（ｍ，１４６９Ｈ）、４．１２−４．５０（ｍ，７４Ｈ）、５．０４（ｓ，５５Ｈ）、６．９０（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２７Ｈ）、７．２８（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２７Ｈ）、７．３６（ｍ，２７Ｈ）。抱合体の理論的分子量：３７．８ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、２７サルブタモール／デンドリマーを示す。実際の分子量は、約３６．１ｋＤａ（１８重量％サルブタモール）である。
【０２３５】
標的構築物
実施例２５
４−アジドベンズアミド−ＰＥＧ１２−ＮＥＯＥＯＥＮ［ＳｕＮ（ＰＮ）２］［Ｌｙｓ］１６［Ｌｙｓ（α−ＰＳＳＰ−ＤＴＸ）（ε−ＰＥＧ１１００）］３２の調製
（ａ）４−アジドベンズアミド−ＰＥＧ１２−ＮＥＯＥＯＥＮ［ＳｕＮ（ＰＮ）２］［Ｌｙｓ］１６［Ｌｙｓ（α−ＮＨＢＯＣ）（ε−ＰＥＧ１１００）］３２の調製
無水ＤＭＦ（２．５ｍＬ）中のＬ−リシン−（α−ＮＨＢＯＣ）（ε−ＰＥＧ１１００）（６１４ｍｇ、４５６μｍｏｌ）の磁気的に撹拌した溶液に、ＰｙＢＯＰ（２４６ｍｇ、４７３μｍｏｌ）を添加し、続いて、無水ＤＭＦ（２．５ｍＬ）中の４−アジドベンズアミド−ＰＥＧ１２−ＮＥＯＥＯＥＮ［ＳｕＮ（ＰＮ）２］［Ｌｙｓ］１６［ＮＨ２．ＴＦＡ］３２（９１ｍｇ、１０．６μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２３５μＬ、１．３５ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。室温で１６時間後、反応物を真空で濃縮し、４３３ｍｇ（８６％）のオフホワイトの粘着性固体として標的化合物を提供するように、残留物を限外濾過（ＰＡＬＬ  Ｍｉｎｉｍａｔｅ  Ｃａｒｔｒｉｄｇｅ  １０ｋＤａ膜）によって精製した。ＬＣＭＳ（Ｃ８  Ｗａｔｅｒｓ  Ｘ−Ｂｒｉｄｇｅ、勾配：４０〜９０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、９０％ＡＣＮ（７〜９分）、９０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、０．１％ギ酸）Ｒｔ（分）＝５．１７。
【０２３６】
（ｂ）４−アジドベンズアミド−ＰＥＧ１２−ＮＥＯＥＯＥＮ［ＳｕＮ（ＰＮ）２］［Ｌｙｓ］１６［Ｌｙｓ（α−ＮＨ２．ＴＦＡ）（ε−ＰＥＧ１１００）］３２の調製
ＴＦＡ／ＤＣＭ（５ｍＬ／７ｍＬ）中の４−アジドベンズアミド−ＰＥＧ１２−ＮＥＯＥＯＥＮ［ＳｕＮ（ＰＮ）２］［Ｌｙｓ］１６［Ｌｙｓ（α−ＮＨＢＯＣ）（ε−ＰＥＧ１１００）］３２（４３１ｍｇ、９．１０μｍｏｌ）の溶液を、４時間撹拌して放置した。この時間後、反応混合物を濃縮し、４３５ｍｇ（１００％）の淡黄色の油として標的化合物を提供するように、結果として生じた残留物を水（２×１０ｍＬ）と共沸混合した。ＬＣＭＳ（Ｃ１８  Ｗａｔｅｒｓ  Ｘ−Ｂｒｉｄｇｅ、勾配：５〜６０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜１０分）、６０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１０〜１４分）、６０〜５％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１４〜１６分）、０．１％ＴＦＡ）Ｒｔ＝１０．６５。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ（ｐｐｍ）：１．２１−２．０４（ｍ，３７６Ｈ）、２．５１−２．５６（ｍ，７１Ｈ）、３．１２−３．３０（ｍ，１１５Ｈ）、３．４０（ｓ，９６Ｈ）、３．４５−３．９０（ｍ，３０７７Ｈ）、３．９１−４．４２（ｍ，６２Ｈ）、７．２５（ｄ，Ｊ  ８．７Ｈｚ，２Ｈ）、７．８８（ｄ，Ｊ  ８．７Ｈｚ，２Ｈ）。
【０２３７】
（ｃ）４−アジドベンズアミド−ＰＥＧ１２−ＮＥＯＥＯＥＮ［ＳｕＮ（ＰＮ）２］［Ｌｙｓ］１６［Ｌｙｓ（α−ＰＳＳＰ−ＤＴＸ）（ε−ＰＥＧ１１００）］３２の調製
４−アジドベンズアミド−ＰＥＧ１２−ＮＥＯＥＯＥＮ［ＳｕＮ（ＰＮ）２］［Ｌｙｓ］１６［Ｌｙｓ（α−ＮＨ２．ＴＦＡ）（ε−ＰＥＧ１１００）］３２（１０４ｍｇ、２．１８μｍｏｌ）およびＤＴＸ−ＰＳＳＰ（９４ｍｇ、９４．０μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｃを使用して、構築物を調製した。ＳＥＣによる精製が、淡黄色の粘性油として１３３ｍｇ（９７％）の所望の物質を提供した。ＬＣＭＳ（Ｃ１８  Ｗａｔｅｒｓ  Ｘ−Ｂｒｉｄｇｅ、勾配：５〜６０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜１０分）、６０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１０〜１１分）、６０〜５％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１１〜１３分）、０．１％ギ酸）Ｒｔ（分）＝７．５９。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：０．８８−２．０５（ｍ，１０８０Ｈ）、２．１６−２．５６（ｍ，２１２Ｈ）、２．６０−３．２６（ｍ，３６３Ｈ）、３．３５−３．４１（ｍ，１２９Ｈ）、３．５０−３．９４（ｍ，３１１０Ｈ）、４．００−４．６０（１３４Ｈ）、４．９３−５．１０（ｍ，２８Ｈ）、５．２０−５．４６（ｍ，７３Ｈ）、５．５４−５．８０（ｍ，２４Ｈ）、５．９５−６．３０（ｍ，２３Ｈ）、７．１４−７．９１（ｍ，２６８Ｈ）。抱合体の理論的分子量：７５．７ｋＤａ。１Ｈ  ＮＭＲは、２６ＤＴＸ／デンドリマーを示し、したがって、実際の分子量は、約６９．８ｋＤａ（３７重量％ＤＴＸ）である。
【０２３８】
実施例２６
ビオチン−トリアゾロベンズアミド−ＰＥＧ１２−ＮＥＯＥＯＥＮ［ＳｕＮ（ＰＮ）２］［Ｌｙｓ］１６［Ｌｙｓ（α−ＰＳＳＰ−ＤＴＸ）（ε−ＰＥＧ１１００）］３２の調製
４−アジドベンズアミド−ＰＥＧ１２−ＮＥＯＥＯＥＮ［ＳｕＮ（ＰＮ）２］［Ｌｙｓ］１６［Ｌｙｓ（α−ＰＳＳＰ−ＤＴＸ）（ε−ＰＥＧ１１００）］３２（４２．５ｍｇ、６７４ｎｍｏｌ）およびビオチン−アルキン（０．４ｍｇ、１．３５μｍｏｌ）を使用した、上記の手順Ｄを使用して、構築物を調製した。ＳＥＣによる精製が、３９ｍｇ（９１％）のオフホワイトの固体として標的化合物を提供した。ＬＣＭＳ（Ｃ１８  Ｗａｔｅｒｓ  Ｘ−Ｂｒｉｄｇｅ、勾配：５〜６０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜１０分）、６０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１０〜１１分）、６０〜５％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１１〜１３分）、０．１％ギ酸）Ｒｔ（分）＝７．０４。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ（ｐｐｍ）：０．９２−２．０２（ｍ，９８２Ｈ）、２．１０−３．２５（ｍ，１０２７Ｈ）、３．３５−３．４２（ｍ，１２８Ｈ）、３．４９−３．９８（ｍ，３１８０Ｈ）、４．０７−４．６９（ｍ，１３１Ｈ）、４．９６−５．１１（ｍ，２７Ｈ）、５．１５−５．５０（ｍ，７２Ｈ）、５．５５−５．８０（ｍ，２４Ｈ）、５．９８−６．２３（ｍ，２３Ｈ）、７．１４−８．２５（ｍ，２７７Ｈ）、８．５４−８．５６（ｍ，１Ｈ）。
【０２３９】
実施例２７
ＬｙＰ−１−トリアゾロベンズアミド−ＰＥＧ１２−ＮＥＯＥＯＥＮ［ＳｕＮ（ＰＮ）２］［Ｌｙｓ］１６［Ｌｙｓ（α−ＰＳＳＰ−ＤＴＸ）（ε−ＰＥＧ１１００）］３２の調製
ＬｙＰ−１（ＡｕｓＰｅｐ  Ｐｔｙ  Ｌｔｄによって供給された）。
４−アジドベンズアミド−ＰＥＧ１２−ＮＥＯＥＯＥＮ［ＳｕＮ（ＰＮ）２］［Ｌｙｓ］１６［Ｌｙｓ（α−ＰＳＳＰ−ＤＴＸ）（ε−ＰＥＧ１１００）］３２（４４．２ｍｇ、７０１ｎｍｏｌ）ＬｙＰ−アルキン（Ｈ２Ｏ、１．０５μｍｏｌ中の１８５μＬの１０ｍｇ／ｍＬ溶液）を使用した、上記の手順Ｄを使用して構築物を調製した。ＳＥＣによる精製が、約６０：４０のＬｙＰ−トリアゾロベンズアミド−ＰＥＧ１２−ＮＥＯＥＯＥＮ［ＳｕＮ（ＰＮ）２］［Ｌｙｓ］１６［Ｌｙｓ（α−ＰＳＳＰ−ＤＴＸ）（ε−ＰＥＧ１１００）］３２／４−アジドベンズアミド−ＰＥＧ１２−ＮＥＯＥＯＥＮ［ＳｕＮ（ＰＮ）２］［Ｌｙｓ］１６［Ｌｙｓ（α−ＰＳＳＰ−ＤＴＸ）（ε−ＰＥＧ１１００）］３２の混合物として、４６ｍｇ（１０２％）の明るいピンク色の粘着性固体を提供した。ＬＣＭＳ（Ｃ８  Ｗａｔｅｒｓ  Ｘ−Ｂｒｉｄｇｅ、勾配：４０〜９０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、９０％ＡＣＮ（７〜９分）、９０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、０．１％ギ酸）Ｒｔ（分）＝６．０７（ＬｙＰ−デンドリマー抱合体）、７．１０（アジド−デンドリマー出発物質）。
【０２４０】
実施例２８
デスロレリン−トリアゾロベンズアミド−ＰＥＧ１２−ＮＥＯＥＯＥＮ［ＳｕＮ（ＰＮ）２］［Ｌｙｓ］１６［Ｌｙｓ（α−ＰＳＳＰ−ＤＴＸ）（ε−ＰＥＧ１１００）］３２の調製
４−アジドベンズアミド−ＰＥＧ１２−ＮＥＯＥＯＥＮ［ＳｕＮ（ＰＮ）２］［Ｌｙｓ］１６［Ｌｙｓ（α−ＰＳＳＰ−ＤＴＸ）（ε−ＰＥＧ１１００）］３２（４１．７ｍｇ、６６２ｎｍｏｌ）およびデスロレリン−アルキン（Ｈ２Ｏ、９９３ｎｍｏｌ中の１３０μＬの１０ｍｇ／ｍＬ溶液）を使用した、上記の手順Ｄを使用して、構築物を調製した。ＳＥＣによる精製が、約７０：３０のデスロレリン−トリアゾロベンズアミド−ＰＥＧ１２−ＮＥＯＥＯＥＮ［ＳｕＮ（ＰＮ）２］［Ｌｙｓ］１６［Ｌｙｓ（α−ＰＳＳＰ−ＤＴＸ）（ε−ＰＥＧ１１００）］３２／４−アジドベンズアミド−ＰＥＧ１２−ＮＥＯＥＯＥＮ［ＳｕＮ（ＰＮ）２］［Ｌｙｓ］１６［Ｌｙｓ（α−ＰＳＳＰ−ＤＴＸ）（ε−ＰＥＧ１１００）］３２の混合物として、４３ｍｇ（１００％）の淡黄色の粘着性固体を提供した。ＬＣＭＳ（Ｃ８  Ｗａｔｅｒｓ  Ｘ−Ｂｒｉｄｇｅ、勾配：４０〜９０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、９０％ＡＣＮ（７〜９分）、９０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、０．１％ギ酸）Ｒｔ（分）＝６．４２（デスロレリン−デンドリマー抱合体）、７．１１（アジド−デンドリマー出発物質）。
【０２４１】
実施例２９
接合単位としてストレプトアビジンを使用した抗体−デンドリマー抱合の調製
リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ、２ｍＬ）中のＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）７５０ストレプトアビジン（Ａｖ）（０．１μｇ／ｍＬ）の溶液に、Ａｂｃａｍ＃ａｂ２４２９３  抗ＥＧＦＲ抗体ビオチン（Ａｂ）（３０μＬの１０μｇ／ｍＬ原液）を添加した。この反応溶液に、ＰＢＳ（５μＬの１．０μｇ／ｍＬ原液）中のビオチン−トリアゾロベンズアミド−ＰＥＧ１２−ＮＥＯＥＯＥＮ［ＳｕＮ（ＰＮ）２］［Ｌｙｓ］１６［Ｌｙｓ（α−ＰＳＳＰ−ＤＴＸ）（ε−ＰＥＧ１１００）］３２（ＤＴＸ−Ｄ）の溶液を添加した。混合物を１０秒間撹拌して放置し、ＡｂおよびＤＴＸ−ＤをＡｖ溶液に添加する上記の手順を、合計８回繰り返した。最終的に、５０μｇ／ｍＬのビオチン（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ、＃Ｂ４５０１−１Ｇ）を使用して、反応物を急冷し、５分間インキュベートした後、１ｍＬのサンプルを、５０μＬのプロテインＧアガロースを用いて沈殿させた。２６０ｋＤａで出現する抱合体に割り当てられた新しい帯域とともにＳＤＳ−ＰＡＧＥを使用して、成功した抱合の確認が実証され、ＨＰＬＣ（カラム：Ｘ  Ｂｒｉｄｇｅ  Ｃ８、３．５μｍ ３．０×１００ｍｍ、検出波長＝２４３ｎｍ、１０μＬ注射、および実行勾配：５〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ、１５分Ｒｔ（分）＝１．４０ビオチン、５．８３（標的Ａｂ−ＤＴＸ−Ｄ抱合体）、７．２４（未反応Ａｂ）、９．８４（未反応ＤＴＸ−Ｄ）であった。
【０２４２】
実施例３０
アジド接合単位を用いて活性化された抗体の調製
結合緩衝剤（０．１Ｍ酢酸ナトリウム＋０．１５Ｍ  ＮａＣｌ、ｐＨ５．５）の溶液を調製し、以降の反応のための原液を構成するために使用した。固体メタ過ヨウ素酸ナトリウム（２．１ｍｇ）を結合緩衝剤（０．５ｍＬ）中で溶解させ、次いで、同様に結合緩衝剤（０．５ｍＬ）中で希釈されたＨｅｒ２  ｍＡｂ＊（２５μｇ）の溶液に添加した。反応混合物を暗所にて室温（ＲＴ）で４５分間インキュベートした。未反応物質を遠心濾過ユニットによって除去した（ＭＷカットオフ５０ｋＤａ）。酸化ｍＡｂ溶液（０．３ｍＬ）の一部分に、接合単位（ＪＵ）（ＮＨ２−Ｏ−Ｃ４Ｈ８−ＮＨ−（ＰＥＧ）１２−Ｎ３＊＊、０．２ｍＬ、ＰＢＳ中の１ｍｇ／ｍＬ）を含有するアジドの原液を添加し、その後にアニリン（５μＬ）が続いた。反応混合物を混合し、室温で２４時間放置した。この時間後、ｍＡｂ−ＪＵ抱合体を遠心濾過ユニットによって未反応物質から分離した。
＊＊同様に、例えば、ＮＨ２−Ｏ−Ｃ４Ｈ８−ＮＨ−（ＰＥＧ）１２−ベンジルアジド、ＮＨ２−Ｏ−Ｃ４Ｈ８−ＮＨ−（ＰＥＧ）１２−ＤＢＣＯ、およびＮＨ２−Ｏ−Ｃ４Ｈ８−ＮＨ−（ＰＥＧ）１２−マレイミドといった、他の接合単位も、抗体上に設置することができる。
＊この実施例では、Ｈｅｒ２  ｍＡｂが利用されるが、同様に、他の抗体も利用することができる。他の活性化化学反応の利用に加えて、例えば、抗体内のジアチン基の部分的還元、それに続いて、接合単位を含有するマレイミドを用いた捕捉を利用する。
【０２４３】
実施例３１
薬剤負荷デンドリマーとの活性抗体の抱合
上記の実施例３０からのアジド活性ｍＡｂ−ＪＵの溶液に、ＤＢＣＯ等の反応性アルキンで好適に官能化された薬剤負荷デンドリマーの溶液を添加した。ＨＰＬＣを使用して、反応を完了について監視することができ、標準プロトコルを使用したＳＥＣクロマトグラフィまたは分取ＨＰＬＣのいずれかによって、所望の生成物を単離することができた。
＊＊同様に、他のデンドリマー活性化単位も、デンドリマーの中の独特の付着点、例えば、アジドおよびマレイミド上に設置することもできる。
【０２４４】
実施例３２
薬剤負荷デンドリマーについての水溶性研究：
プロトコル：３０ｍｇのデンドリマー（水から凍結乾燥させられた）に、１００μＬの脱イオン水を添加した。１０分間混合した後、完全溶解が得られるまで、１０分間のボルテックスおよびインキュベーションとともに、追加の等分量の水（添加につき１０〜３０μＬ）を添加した。この量は、デンドリマーの水溶性として表１で表される。薬剤負荷％／１００を乗算することによって、等価薬剤溶解度が判定され、デンドリマーについての等価薬剤溶解度として表１（列３）で表される。最終的に、デンドリマーについての等価薬剤溶解度を薬剤の溶解度で除算することによって、倍増が得られ、表２（列４）で表される。
【表２】
2014520105.tif 000086
＊薬剤＝ドセタキセル。水中のドセタキセルの溶解度は５μｇ／ｍＬである。
＊＊薬剤＝テストステロン：水中のテストステロンの溶解度は２４μｇ／ｍＬである。
【０２４５】
実施例３３
デンドリマーについての血漿安定性研究：
プロトコル：０．５ｍＬのマウス血漿に、０．１ｍＬのデンドリマー溶液（２ｍｇ／ｍＬ、生理食塩水中の薬剤当量）を添加した。混合物をボルテックスし（３０秒）、次いで、３７℃でインキュベートした。種々の時点（０．５、２．５、４．５、２２時間）で、０．１ｍＬ等分量を除去し、０．２ｍＬのＡＣＮに添加した。結果として生じた混合物をボルテックスし（３０秒）、遠心分離し（１０分、４℃）、濾過し、ＨＰＬＣ（Ｃ８、３．９×１５０ｍｍ、５μｍ、波長＝２４３ｎｍ、１０μＬ注射、勾配：４０〜８０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（１〜７分）、８０％ＡＣＮ（７〜９分）、８０〜４０％ＡＣＮ（９〜１１分）、４０％ＡＣＮ（１１〜１５分）、１０ｍＭギ酸アンモニウム、ｐＨ７．４０）によって分析し、標準（２ｍｇ／／ｍＬ）に対して比較したとき、サンプル中の遊離ドセタキセルの濃度を提供した。
【表３】
2014520105.tif 000087
【０２４６】
実施例３４
細胞成長阻害研究  ＳＲＢ検定
７２時間後の種々の癌細胞株に対してスルホローダミンＢ（ＳＲＢ）検定［Ｖｏｉｇｔ  Ｗ．“Ｓｕｌｆｏｒｈｏｄａｍｉｎｅ  Ｂ  ａｓｓａｙ  ａｎｄ  ｃｈｅｍｏｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ”Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．２００５，１１０，３９−４８．］を使用して、細胞成長阻害を判定し、各実験を２通りに実行した。ＧＩ５０は、ＮＣＩ標準プロトコル通りに、全細胞成長を５０％阻害するために必要とされる濃度である。
全ての溶液を生理食塩水中で調製した（エタノール中で作製されたドセタキセルを除く）。全ての溶液を−２０℃で貯蔵した。全ての値は、等価薬剤負荷に基づいた。表４に示される結果は、ナノモル範囲で２通りに実行された実験の平均である。
【表４】
2014520105.tif 000088
【０２４７】
実施例３５
ＭＴＴ検定を使用した半数阻害濃度（ＩＣ５０）
ＭＴＴ検定［Ｗｉｌｓｏｎ，Ａｎｎｅ  Ｐ．（２０００）．“Ｃｈａｐｔｅｒ  ７：Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ  ａｎｄ  ｖｉａｂｉｌｉｔｙ”．Ｉｎ  Ｍａｓｔｅｒｓ，Ｊｏｈｎ  Ｒ．Ｗ．．Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ．Ｖｏｌ．１（３ｒｄ  ｅｄ．）．Ｏｘｆｏｒｄ：Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ］を使用したＩＣ５０を、７２時間後の種々の癌細胞に対して判定した。結果は表５に示される。
【表５】
2014520105.tif 000089
【０２４８】
実施例３６
最大耐量（ＭＴＤ）研究
雌Ｂａｌｂ／ｃマウスのグループに、デンドリマー（０．１ｍｌ／１０ｇ体重）またはドセタキセル（０．０５ｍｌ／１０ｇ体重）の静脈注射を３週間にわたって毎週１回（第１、８、および１５日）投与した。マウスを毎日計量し、毒性の兆候について観察した。最終薬剤用量に続いて、動物を最大１０日間監視した。倫理的終点（≧２０％体重減少、不良な全般健康）を超える任意のマウスを即時に犠牲にし、観察に注目した。表６に示される結果は、デンドリマーに抱合された薬剤が耐量を増加させることを実証する。ドセタキセル単独と比較して、薬剤デンドリマー構築物を使用すると、ドセタキセルの用量の２倍以上を安全に投与することができた。
【表６】
2014520105.tif 000090
【０２４９】
実施例３７
異種移植ＭＤＡ−ＭＢ−２３１有効性研究
雌Ｂａｌｂ／ｃヌードマウス（７週齢）に、ＰＢＳ：Ｍａｔｒｉｇｅｌ（１：１）中の３．５×１０６ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を脇腹で皮下接種した。１３日後、類似サイズの腫瘍（約１１０ｍｍ３）がある５０匹のマウスを５つのグループに無作為化した。各治療グループに、食塩水、ドセタキセル（１５ｍｇ／ｋｇ）、実施例３（ｂ）（２０ｍｇ／ｋｇ）、実施例８（ｃ）（３２ｍｇ／ｋｇ）といった用量のうちの１つを投与した。０．０５ｍＬ／１０ｇ体重で与えられたドセタキセルを除いて、全ての治療を、０．１ｍＬ／１０ｇ体重で３週間にわたって毎週１回（第１、８、および１５日）静脈内に投与した。実験は、第１２０日に、または倫理的終点に達した場合はより早く終了した。表７に示される結果は、デンドリマー構築物が、腫瘍成長をより長く抑制するのにより効果的であったことを示す。
【表７】
2014520105.tif 000091
＊＊倫理的終点に達したためデータなし。ｎ＝投薬グループあたりの動物の数
【０２５０】
実施例３８
異種移植ＭＤＡ−ＭＢ−２３１毒性研究
合計２０匹の雌Ｂａｌｂ／ｃヌードマウス（７週齢）を、上記で概説されるように皮下腫瘍を伴って調製した。２０匹のマウスを４匹のマウスの５グループに無作為化した（平均腫瘍体積約９０ｍｍ３）。基準血球数の監視において、動物の眼から採血し、次いで、その日（第１日）の後になって薬剤負荷を介した。薬剤負荷は、ドセタキセル（１５ｍｇ／ｋｇ）、実施例３（ｂ）（２０ｍｇ／ｋｇ）、実施例８（ｃ）（３２ｍｇ／ｋｇ）、実施例４（ｂ）（２０ｍｇ／ｋｇ）といった、以前に判定されたＭＴＤ用量で、第１、８、および１５日に行った。第２の眼の採血を第１１日に行った（表８Ａ−Ｃ）。最終薬剤用量後のある日（第１６日）にマウスを屠殺した。第１６日の組織の組織学重量が表９に示される。
【表８Ａ】
2014520105.tif 000092
【表８Ｂ】
2014520105.tif 000093
【表８Ｃ】
2014520105.tif 000094
【表９】
2014520105.tif 000095
【０２５１】
実施例３９
薬物動態分析
ラットへの静脈内投与後のトリチウムで標識されたドセタキセルおよび実験８（ｃ）からの構築物（トリチウムで標識されたドセタキセルを使用して調製された）の血漿中半減期を判定した（Ｋａｍｉｎｓｋａｓ，Ｌ．Ｍ．，Ｂｏｙｄ，Ｂ．Ｊ．，Ｋａｒｅｌｌａｓ，Ｐ．，Ｋｒｉｐｐｎｅｒ，Ｇ．Ｙ．，Ｌｅｓｓｅｎｅ，Ｒ．，Ｋｅｌｌｙ，Ｂ  ａｎｄ  Ｐｏｒｔｅｒ，Ｃ．Ｊ．Ｈ．“Ｔｈｅ  Ｉｍｐａｃｔ  ｏｆ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｗｅｉｇｈｔ  ａｎｄ  ＰＥＧ  Ｃｈａｉｎ  Ｌｅｎｇｔｈ  ｏｎ  ｔｈｅ  Ｓｙｓｔｅｍｉｃ  Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ  ｏｆ  ＰＥＧｙｌａｔｅｄ  Ｐｏｌｙ−Ｌ−Ｌｙｓｉｎｅ  Ｄｅｎｄｒｉｍｅｒｓ”Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｈａｒｍ．２００８，５，４４９−４６３）。結果は、ドセタキセルが、予想通りに＜１時間の半減期で血漿から取り除かれた一方で、実施例８（ｃ）の構築物は、約３０時間の半減期とともに低減した血漿クリアランスを表したことを示した。
【配列表】
2014520105000001.xml
【手続補正書】
【提出日】平成25年4月2日(2013.4.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｉ）核と、少なくとも１世代の基礎単位とを含む、デンドリマーであって、最外世代の基礎単位は、表面アミノ基を有し、少なくとも２つの異なる末端基が、前記デンドリマーの前記表面アミノ基に共有結合している、デンドリマーと、
ｉｉ）ヒドロキシル基を含む医薬活性剤の残基である、第１の末端基と、
ｉｉｉ）薬物動態変性剤である、第２の末端基と、
を含む高分子であって、前記第１の末端基は、二酸リンカーであって、１つ以上の酸素、硫黄、または窒素原子、あるいはその骨格の中にアリール、シクロアルキル、複素環、またはヘテロアリール基を有する、二酸リンカーであって、前記医薬活性剤の前記ヒドロキシル基とのエステル結合、および前記表面アミノ基とのアミド結合を形成する、二酸リンカー、またはその薬学的に容認可能な塩を通して、前記デンドリマーの前記表面アミノ基に共有結合している、
高分子。
【請求項２】
前記薬物動態変性剤は、ポリエチレングリコールである、請求項１に記載の高分子。
【請求項３】
前記ポリエチレングリコールは、２２０〜１１００Ｄａの範囲内の分子量を有する、請求項２に記載の高分子。
【請求項４】
前記ポリエチレングリコールは、１０００〜２５００Ｄａの範囲内の分子量を有する、請求項２に記載の高分子。
【請求項５】
前記ポリエチレングリコールは、１０００〜５５００の分子量を有する、請求項２に記載の高分子。
【請求項６】
前記二酸リンカーは、以下の式を有し、
【化１】
2014520105.tif 000098
式中、Ｘは、−（ＣＨ２）ｓ−Ａ−（ＣＨ２）ｔ−およびＱから選択され、
Ａは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ１−、−Ｎ＋（Ｒ１）２−、−Ｓ−Ｓ−、−［ＯＣＨ２ＣＨ２］ｒ−Ｏ−、−Ｙ−、および−Ｏ−Ｙ−Ｏ−から選択され、
Ｑは、Ｙまたは−Ｚ＝Ｎ−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）ｗ−Ｙ−から選択され、
Ｙは、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、およびヘテロアリールから選択され、
Ｚは、−（ＣＨ２）ｘ−Ｃ（ＣＨ３）＝、−（ＣＨ２）ｘＣＨ＝、シクロアルキル、およびヘテロシクロアルキルから選択され、
Ｒ１は、水素およびＣ１−Ｃ４アルキルから選択され、
ｓおよびｔは、独立して１および２から選択され、
ｒは、１、２、および３から選択され、
ｗは、０、１、および２から選択され、
ｘは、１、２、３、および４から選択される、
請求項１〜５のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項７】
前記二酸リンカーは、以下の式を有し、
【化２】
2014520105.tif 000099
式中、Ｘは、−Ｃ１−Ｃ１０アルキレン−、−（ＣＨ２）ｓ−Ａ−（ＣＨ２）ｔ−、およびＱから選択され、
−Ｃ（Ｏ）−Ｊ−は、アミノ酸残基または２〜１０個のアミノ酸残基のペプチドであり、−Ｃ（Ｏ）−は、前記アミノ酸またはペプチドのカルボキシ末端に由来し、
Ａは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ１−、−Ｎ＋（Ｒ１）２−、−Ｓ−Ｓ−、−［ＯＣＨ２ＣＨ２］ｒ−Ｏ−、−Ｙ−、および−Ｏ−Ｙ−Ｏ−から選択され、
Ｑは、Ｙまたは−Ｚ＝Ｎ−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）ｗ−Ｙ−から選択され、
Ｙは、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、およびヘテロアリールから選択され、
Ｚは、−（ＣＨ２）ｘ−Ｃ（ＣＨ３）＝、−（ＣＨ２）ｘＣＨ＝、シクロアルキル、およびヘテロシクロアルキルから選択され、
Ｒ１は、水素およびＣ１−Ｃ４アルキルから選択され、
ｓおよびｔは、独立して１および２から選択され、
ｒは、１、２、および３から選択され、
ｗは、０、１、および２から選択され、
ｘは、１、２、３、および４から選択される、
請求項１〜５のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項８】
Ｘは、−ＣＨ２−Ａ−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−Ａ−ＣＨ２ＣＨ２−、またはヘテロアリールである、請求項６に記載の高分子。
【請求項９】
Ｘは、−Ｃ１−６アルキレン、−ＣＨ２−Ａ−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−Ａ−ＣＨ２ＣＨ２−、またはヘテロアリールである、請求項７に記載の高分子。
【請求項１０】
−Ｃ（Ｏ）−Ｊ−は、アミノ酸残基または２〜６個のアミノ酸残基のペプチドであり、−Ｃ（Ｏ）−は、前記アミノ酸またはペプチドの前記カルボキシ末端に由来する、請求項７または請求項９に記載の高分子。
【請求項１１】
−Ｃ（Ｏ）−Ｊ−は、−ＧＧＧ−、−ＧＦＬＧ−、および−ＧＩＬＧＶＰ−から選択される、請求項７、９、または１０のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項１２】
Ａは、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＮＨ−、−Ｎ（ＣＨ３）−、−Ｎ＋（ＣＨ３）２−、−Ｏ−１，２−フェニル−Ｏ−、−Ｏ−１，３−フェニル−Ｏ−、−Ｏ−１，４−フェニル−Ｏ−、−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ−、−［ＯＣＨ２ＣＨ２］２−Ｏ−、および−［ＯＣＨ２ＣＨ２］３−Ｏ−から選択される、請求項６〜１１のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項１３】
Ｙは、ヘテロアリールまたはアリールである、請求項６〜１２のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項１４】
Ｚは、−（ＣＨ２）ｘＣ（ＣＨ３）＝、−（ＣＨ２）ｘＣＨ＝、およびシクロアルキルである、請求項６〜１３のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項１５】
Ｒ１は、水素、メチル、またはエチルである、請求項６〜１４のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項１６】
前記デンドリマーは、１〜８世代の基礎単位を有する、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項１７】
前記デンドリマーは、２〜６世代の基礎単位を有する、請求項１６に記載の高分子。
【請求項１８】
前記デンドリマーは、リシンまたはリシン類似体の基礎単位を含む、デンドリマーである、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項１９】
前記第１の末端基および前記第２の末端基は、１：１比で存在する、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項２０】
前記高分子は、封鎖基、医薬品、または標的基である、第３の末端基を含む、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項２１】
前記封鎖基は、アシル基である、請求項２０に記載の高分子。
【請求項２２】
前記第１の末端基、第２の末端基、および第３の末端基の比は、１：２：１である、請求項２０または２１に記載の高分子。
【請求項２３】
前記末端基の少なくとも５０％は、前記第１または第２の末端基のうちの１つを含む、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項２４】
前記デンドリマーの前記核上の官能基に付着した標的基をさらに含む、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項２５】
前記標的作用物質は、黄体化ホルモン放出ホルモン、黄体化ホルモン放出ホルモン類似体、ＬＹＰ−１、および抗体または抗体断片から選択される、請求項２４に記載の高分子。
【請求項２６】
前記高分子は、１０００ｎｍ未満の粒径を有する、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項２７】
前記粒径は、５〜４００ｎｍの間である、請求項２６に記載の高分子。
【請求項２８】
前記高分子は、少なくとも３０ｋＤａの分子量を有する、請求項１〜２７のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項２９】
前記医薬活性剤は、水溶液中で難溶性または不溶性である、請求項１に記載の高分子。
【請求項３０】
前記医薬活性剤は、腫瘍薬である、請求項１〜２９のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項３１】
前記腫瘍薬は、ドセタキセル、パクリタキセル、カバジタキセル、カンプトテシン、イリノテカン、トポテカン、またはゲムシタビンである、請求項３０に記載の高分子。
【請求項３２】
前記医薬活性剤は、テストステロンである、請求項１〜２９のいずれか一項に記載の高分子。
【請求項３３】
請求項１〜３２のいずれか一項に記載の高分子と、薬学的に容認可能な担体とを含む、医薬組成物。
【請求項３４】
前記組成物は、ポリエトキシル化ヒマシ油およびポリソルベート８０を実質的に含まない、請求項３３に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
前記高分子は、徐放製剤として製剤化される、請求項３３または請求項３４に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
前記二酸リンカーは、前記医薬活性剤の制御された放出を達成するように選択される、請求項３３〜３５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
前記高分子は、５分から６０分の間に前記医薬活性剤の５０％以上を放出するように製剤化される、請求項３３または請求項３４に記載の医薬組成物。
【請求項３８】
前記高分子は、２時間から４８時間の間に前記医薬活性剤の５０％以上を放出するように製剤化される、請求項３３または請求項３４に記載の医薬組成物。
【請求項３９】
前記高分子は、５日から３０日の間に前記医薬活性剤の５０％以上を放出するように製剤化される、請求項３３または請求項３４に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
前記組成物は、経皮的送達のために製剤化される、請求項３３〜３９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項４１】
医薬活性剤が腫瘍薬である、請求項１〜３１のいずれか一項に記載の高分子の有効量、または請求項３２〜４０のいずれか一項に記載の医薬組成物を投与することを含む、癌の成長を治療または抑制する方法。
【請求項４２】
前記癌は、原発腫瘍である、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記原発腫瘍は、前立腺、精巣、肺、腎臓、結腸、膵臓、骨、脾臓、肝臓、脳、頭部および／または頸部、乳房、消化管、皮膚、または卵巣の腫瘍である、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記癌は、転移性腫瘍である、請求項４１に記載の方法。
【請求項４５】
前記転移性腫瘍は、前立腺、精巣、肺、腎臓、結腸、膵臓、骨、脾臓、肝臓、脳、頭部および／または頸部、乳房、消化管、皮膚、または卵巣の腫瘍である、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記腫瘍薬が第１の末端基の前記医薬活性剤である、請求項１〜３１のいずれか一項に記載の高分子、または請求項３３〜４０に記載の医薬組成物を投与することを含む、腫瘍薬または腫瘍薬の製剤の毒性を低減させる方法。
【請求項４７】
低減させられる前記毒性は、血液毒性、神経毒性、胃腸毒性、心臓毒性、肝毒性、腎毒性、耳毒性、または脳毒性である、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記腫瘍薬が前記第１の末端基の前記医薬活性剤である、請求項１〜３１のいずれか一項に記載の高分子、または請求項３３〜４０に記載の医薬組成物を投与することを含む、腫瘍薬または腫瘍薬の製剤と関連付けられる副作用を低減させる方法。
【請求項４９】
低減させられる前記副作用は、好中球減少症、白血球減少症、血小板減少症、骨髄毒性、骨髄抑制、神経障害、疲労、非特異的神経認知問題、目まい、脳症、貧血、味覚障害、呼吸困難、便秘、食欲不振、爪の障害、体液貯留、無力症、疼痛、吐き気、嘔吐粘膜炎、脱毛症、皮膚反応、筋肉痛、過敏性、およびアナフィラキシーから選択される、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記医薬活性剤が前記腫瘍薬である、請求項３２〜３５に記載の医薬組成物を投与することを含む、腫瘍薬を用いた治療時に対象における過敏性を低減させる方法。
【請求項５１】
投与される前記医薬組成物は、可溶化賦形剤を実質的に含まない、請求項４１〜５０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５２】
前記可溶化賦形剤は、ポリエトキシル化ヒマシ油およびポリソルベート界面活性剤から選択される、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
前記ポリソルベート界面活性剤は、ポリソルベート８０である、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
治療計画は、コルチコステロイドおよび／または抗ヒスタミン剤を用いた前投薬の低減した量を含むか、あるいはコルチコステロイドおよび／または抗ヒスタミン剤を用いた前投薬ステップを含まない、請求項４１〜５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５５】
前記高分子は、高速注入によって、またはボーラスとして投与される、請求項４１〜５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５６】
前記医薬活性剤がテストステロンである、請求項１〜２８および３２のいずれか一項に記載の高分子、または請求項３３〜４０に記載の医薬組成物を投与することを含む、低テストステロンレベルに関係する疾患または障害を治療または予防する方法。
【請求項５７】
前記高分子は、経皮的に投与される、請求項５６に記載の方法。
【国際調査報告】
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