(57)【要約】  本発明は、脊髄性筋萎縮症などの運動ニューロン疾患または尿素サイクル異常症などの代謝性疾患を治療するためのフェニル酪酸塩の直腸投与、関連する方法および組成物に関する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
直腸投与される、運動ニューロン疾患または代謝性疾患を治療するための許容可能な４−フェニル酪酸塩。
【請求項２】
前記治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩を、１〜６００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲の用量で投与する、請求項１に記載の運動ニューロン疾患または代謝性疾患を治療するための許容可能な４−フェニル酪酸塩。
【請求項３】
前記治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩が、１日に１〜１０回投与される、請求項１または２に記載の運動ニューロン疾患または代謝性疾患を治療するための許容可能な４−フェニル酪酸塩。
【請求項４】
前記治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩が、運動ニューロン疾患または代謝性疾患に罹患している小児に投与される、請求項１〜３のいずれか１項に記載の運動ニューロン疾患または代謝性疾患を治療するための許容可能な４−フェニル酪酸塩。
【請求項５】
前記治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩が、運動ニューロン疾患または代謝性疾患に罹患している０〜５歳児に投与される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の運動ニューロン疾患または代謝性疾患を治療するための許容可能な４−フェニル酪酸塩。
【請求項６】
前記治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩が、運動ニューロン疾患または代謝性疾患に罹患している乳児に投与する、請求項１〜５のいずれか１項に記載の運動ニューロン疾患または代謝性疾患を治療されるための許容可能な４−フェニル酪酸塩。
【請求項７】
前記運動ニューロン疾患が、脊髄性筋萎縮症、筋萎縮性側索硬化症、虚血、サラセミア、嚢胞性線維症、およびハンチントン病を含む群から選択され、好ましくは、前記運動ニューロン疾患が脊髄性筋萎縮症である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の運動ニューロン疾患または代謝性疾患を治療するための許容可能な４−フェニル酪酸塩。
【請求項８】
前記代謝性疾患が、尿素サイクル異常症およびメープルシロップ尿症を含む群から選択される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の運動ニューロン疾患または代謝性疾患を治療するための許容可能な４−フェニル酪酸塩。
【請求項９】
治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩を含む直腸剤形。
【請求項１０】
前記治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩が、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、またはカルシウム塩を含む群から選択される、請求項９に記載の直腸剤形。
【請求項１１】
前記塩がナトリウム塩である、請求項９または１０に記載の直腸剤形。
【請求項１２】
前記直腸剤形が、座薬、直腸カプセル、浣腸、直腸ゲル、直腸フォーム、または直腸軟膏を含む群から選択される、請求項９〜１１のいずれか１項に記載の直腸剤形。
【請求項１３】
１〜８００ｍｇの治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩を含む請求項９〜１２のいずれか１項に記載の直腸剤形。
【請求項１４】
少なくとも１つの粘性剤、および好ましくは水である溶媒を含む、請求項９〜１３のいずれか１項に記載の剤形。
【請求項１５】
前記粘性剤が、ＰＶＰ  Ｋ  ９０などのポリビニルピロリドン、ＨＰＣ  Ｈ、ＨＰＣ  ＨＦ、ＨＥＣ  ２５０  ＨＸ、およびＨＥＣ  ２５０Ｍなどのセルロース誘導体、Ｓａｔｉａｘａｎｅ  ＣＸ９３０といったキサンタンガムなどのガム、Ｃａｒｂｏｐｏｌ  ９７１Ｐなどのカーボポール誘導体である、請求項１４に記載の直腸剤形。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、脊髄性筋萎縮症などの運動ニューロン疾患、尿素サイクル異常症などの代謝性疾患、または癌の治療のための直腸製剤中の治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩を含む組成物に関する。本発明はさらに、脊髄性筋萎縮症などの運動ニューロン疾患、尿素サイクル異常症などの代謝性疾患、または癌の治療方法であって、治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩を直腸投与することを含む方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ）とは、遺伝性のまれな（６０００人〜１００００人に１人）疾患であり、運動ニューロンの退化の進行、ならびに筋力低下および萎縮を特徴とする。認知に影響しないものの、自発運動、身体姿勢、呼吸、および嚥下がしだいにできなくなる。ＳＭＡは、遺伝子によって遺伝する、２歳未満で死亡する小児の最大の遺伝性疾患である。
【０００３】
１歳前の小児の脊髄性筋萎縮症は、以下の４つの型がある。
‐Ｉ型脊髄性筋萎縮症は、ウェルドニッヒ・ホフマン病とも呼ばれ、誕生時、または生後数か月以内に発症する重篤な障害の形態である。概して、発症した乳児は、呼吸および嚥下することが困難であり、支持なしに座ることが困難である。
‐ＩＩ型脊髄性筋萎縮症は、生後６か月〜１２か月の小児に発生する筋力低下に特徴がある。ＩＩ型の小児は、支持なしに座ることができるが、介助なしの起立または歩行ができない。
‐Ｘ連鎖性小児性脊髄性筋萎縮症は、Ｉ型と非常に類似した特徴を有しているが、Ｉ型と異なり、この小児は、運動の障害となる関節変形を有した状態で誕生する。
‐乳児期に発症するＩＸ型の脊髄性筋萎縮症は、遠位型脊髄性筋萎縮症Ｉ型と呼ばれる。この障害の形態は、手および脚、および徐々に四肢に広がる筋力低下の進行を特徴とする。
【０００４】
ＳＭＡの他の３つの型は、ＩＩＩ型（またはクーゲルベルク・ヴェランダー病または若年型）、ＩＶ型、およびＦｉｎｋｅｌ型があり、早期小児期および成人期に発症する可能性がある。この後者の２つの型は、通常３０歳以降に発症する。
【０００５】
ＳＭＡは、常染色体劣性遺伝状態であり、主に、第５染色体上に存在するＳｕｒｖｉｖａｌ  Ｍｏｔｏｒ  Ｎｅｕｒｏｎ（ＳＭＮ１）遺伝子の変異により引き起こされる。ＳＭＡを発症している患者の約９５％が、ＳＭＮ１遺伝子の両コピー中のエクソン７と呼ばれる部位が欠損している変異を有する。この遺伝子は、体内中、特に脊髄に高レベルで見られるＳＭＮタンパク質をコードする。このタンパク質は、運動ニューロンと呼ばれる特殊な神経細胞を維持するために重要なものであり、脊髄および脊髄に結合した脳の一部に配置されている。ＳＭＮタンパク質が存在しない場合、運動ニューロンの死滅が誘導され、ＳＭＡの症状が引き起こされる。
【０００６】
また、ＳＭＡタンパク質は、ＳＭＮ１遺伝子の「バックアップ」コピーであるＳＭＮ２遺伝子により産生され得る。しかしながら、ＳＭＮ２遺伝子は、多くの場合不完全にコードされ、ＳＭＮタンパク質の機能的形態ではなく、低レベルの完全長および機能が低レベルであるＳＭＮタンパク質のみを産生する。すべての患者は、細胞中に少なくとも１つ、一般的には２〜４つのＳＭＮ２遺伝子のコピーを細胞中に有しており、患者により重要なばらつきがある。したがって、ＳＭＮ２遺伝子のコピーの数により、ＳＭＡを発症した患者は、なんらかの重篤な症状を有し得る。
【０００７】
現在のＳＭＡの治療研究は、主に、運動ニューロンの保護または遺伝療法を目的としている。これらは有望な結果が得られているが、患者が有効な治療を利用することができる前に、開発に相対的に長い研究の努力が必要とされる。
【０００８】
ＳＭＡの治療の別の治療上の戦略は、ＳＭＮタンパク質のアップレギュレーションにつながる、残存するＳＭＮ２遺伝子の転写を増幅させることを目的とする。ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）の阻害剤を使用して、遺伝子の転写を増幅させることができる。実際に、ＤＮＡの転写は、その構造、特にヒストンのアセチル化により決定される。ヒストンデアセチラーゼによるヒストンの脱アセチル化は、遺伝子の発現抑制を意味する。したがって、この酵素を阻害することは、脱アセチル化を回避することであり、この遺伝子の転写を増幅させることにより、対応するタンパク質を産生させる。
【０００９】
バルプロ酸、ヒドロキシ尿素、および４−フェニル酪酸ナトリウム（フェニル酪酸塩）などのＨＤＡＣ阻害剤として一部の小分子が試験されている。これらの化合物は、他の効能が既に知られている。例として、バルプロ酸は経口または注射可能な形態において癲癇の治療に使用され、ヒドロキシ尿素は、経口形態で白血病の治療において効能を示し、フェニル酪酸塩は、経口形態、錠剤もしくは粉体において、尿素サイクル異常症の治療に使用される。
【００１０】
バルプロ酸およびヒドロキシ尿素は、効力の観点から重要な結果を得られたようではない  （Ｗｅｉｈｌ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，  ２００６，  ６７（３），  ５００−５０１；  Ｌｉａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｎｅｕｒｏｌ．  Ｓｃｉ．，  ２００８，  ２６８（１−２），  ８７−９４）。
【００１１】
第１の予備的な非盲検試験は、ＳＭＡの治療における経口形態で投与したフェニル酪酸塩の効力を示唆した（国際公開第２００５／０７２７２０号，  Ｍｅｒｃｕｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｅｕｒｏｍｕｓｃｕｌａｒ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ，  ２００４，  １４，  １３０−１３５）。この試験に、粉体または錠剤中に経口用のフェニル酪酸塩で治療した１０人のＩＩ型ＳＭＡ患者が参加した。この用量は、５００ｍｇ／ｋｇ／日であり、（７日投与後７日投与しないといった）断続的なスケジュールを使用して５回の用量に分割した。この効力を、９週間測定した。モータースケール上のスコアが顕著に増加したことが見いだされ、副作用は記録されなかった。
【００１２】
しかしながら、１３週間のランダム化二重盲検、プラセボ対照試験により、先の知見が裏付けられなかった（Ｍｅｒｃｕｒｉ  ｅｔ  ａｌ，  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，  ２００７，  ６８，  ５１−５５）。この試験には、１０７人のＳＭＡ患者が関与し、この用量は、（７日投与後７日投与しないといった）断続的なレジメンにおいて、５００ｍｇ／ｋｇ／日のフェニル酪酸塩またはプラセボであった。フェニル酪酸塩が耐性を示すにも関わらず、この試験は、これらの状態に有効であることを示すものではなかった。
【００１３】
また、現在の経口製剤中のフェニル酪酸塩の不快な味または臭いが患者の服薬率に大きく影響し、臨床試験が著しく困難となっており、一層重要なことに、（最小値４５０ｇ／ｋｇ／日）の用量が必要とされる。
【００１４】
最後に、ＳＭＡの治療法は現在までに利用可能なものがない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
したがって、本発明の目的は、ｉｎ  ｖｉｖｏで良好な効力を有し、嚥下することが困難である小児および患者に適した剤形で投与するＳＭＡの治療方法を提供することである。また、尿素サイクル異常症などの運動ニューロン疾患に罹患している患者の同様の問題を、本発明で治療する。
【００１６】
臨床試験は、経口経路により投与したフェニル酪酸塩による効力を以前に示さなかったが、本出願人は、驚くべきことに、フェニル酪酸塩の直腸投与が、効力の観点から良好な結果を、ＳＭＡに罹患している患者に与え、これら患者がこの剤形を許容できることを見出した。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
本発明の１つの目的は、（例えば、脊髄性筋萎縮症などの）運動ニューロン疾患、または（例えば、尿素サイクル異常症などの）代謝性疾患または癌を治療する方法であって、この方法は、治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩を直腸投与することを含む。
【００１８】
本発明の１つの実施形態において、治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩は、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、またはカルシウム塩を含む群から選択される。
【００１９】
本発明の１つの実施形態において、この塩はナトリウム塩である。
【００２０】
本発明の１つの実施形態において、直腸投与は、座薬、直腸カプセル、浣腸、直腸ゲル、直腸フォーム、または直腸軟膏を含む群から選択される直腸剤形を使用することにより達成される。
【００２１】
本発明の１つの実施形態において、治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩が、１〜６００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲内の用量で投与される。
【００２２】
本発明の１つの実施形態において、治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩が、１日に１〜１０回投与される。
【００２３】
本発明の１つの実施形態において、治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩が、例えば、脊髄性筋萎縮症などの運動ニューロン疾患、（例えば、尿素サイクル異常症などの）代謝性疾患、または癌に罹患している小児に投与される。
【００２４】
本発明の１つの実施形態において、治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩が、例えば、脊髄性筋萎縮症などの運動ニューロン疾患、（例えば、尿素サイクル異常症などの）代謝性疾患、または癌に罹患している０〜５歳児に投与される。
【００２５】
本発明の１つの実施形態において、治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩が、例えば、脊髄性筋萎縮症などの運動ニューロン疾患、例えば、尿素サイクル異常症などの代謝性疾患、または癌に罹患している乳児に投与される。
【００２６】
本発明の１つの実施形態において、運動ニューロン疾患は、脊髄性筋萎縮症、筋萎縮性側索硬化症、虚血、サラセミア、嚢胞性線維症、およびハンチントン病を含む群から選択される。
【００２７】
本発明の１つの実施形態において、代謝性疾患は、尿素サイクル異常症およびメープルシロップ尿症を含む群から選択される。
【００２８】
また、本発明は、脊髄性筋萎縮症などの運動ニューロン疾患、尿素サイクル異常症、または癌を治療するための許容可能な４−フェニル酪酸塩に関し、この許容可能な４−フェニル酪酸塩は直腸投与される。
【００２９】
本発明の１つの実施形態において、治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩が、１〜６００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲で投与される。本発明の別の実施形態において、治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩が、１日に１〜１０回投与される。
【００３０】
本発明の１つの実施形態において、治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩が、脊髄性筋萎縮症などの運動ニューロン疾患、尿素サイクル異常症、または癌に罹患している小児に投与される。本発明の別の実施形態において、治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩が、脊髄性筋萎縮症などの運動ニューロン疾患、尿素サイクル異常症、または癌に罹患している０〜５歳児に投与される。本発明の別の実施形態において、治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩が、脊髄性筋萎縮症などの運動ニューロン疾患、尿素サイクル異常症、または癌に罹患している乳児に投与される。
【００３１】
本発明の１つの実施形態において、運動ニューロン疾患は、脊髄性筋萎縮症、筋萎縮性側索硬化症、虚血、サラセミア、嚢胞性線維症、およびハンチントン病を含む群から選択され、好ましくはこの運動ニューロン疾患は脊髄性筋萎縮症である。
【００３２】
本発明の１つの実施形態において、代謝性疾患は、尿素サイクル異常症およびメープルシロップ尿症を含む群から選択される。
【００３３】
本発明の別の目的は、直腸投与のための治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩を含む直腸剤形である。
【００３４】
本発明の１つの実施形態において、治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩は、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、またはカルシウム塩を含む群から選択され、好ましくはナトリウム塩である。
【００３５】
本発明の１つの実施形態において、直腸投与用の形態は、座薬、直腸カプセル、浣腸、直腸ゲル、直腸フォーム、または直腸軟膏を含む群から選択される。
【００３６】
本発明の１つの実施形態において、この直腸剤形は、１〜８００ｍｇの治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩を含む。
【００３７】
本発明の１つの実施形態において、この直腸剤形は、少なくとも１つの粘性剤と、好ましくは水である溶媒とを含む。
【００３８】
別の実施形態において、この粘性剤は、例えば、ＰＶＰ  Ｋ  ９０などのポリビニルピロリドン、ＨＰＣ  Ｈ、ＨＰＣ  ＨＦ、ＨＥＣ  ２５０  ＨＸ、およびＨＥＣ  ２５０Ｍなどのセルロース誘導体、Ｓａｔｉａｘａｎｅ  ＣＸ９３０といったキサンタンガムなどのガム、Ｃａｒｂｏｐｏｌ  ９７１Ｐなどのカーボポール誘導体である。
【図面の簡単な説明】
【００３９】
【図１】経口、ＩＶ、または直腸経路を介して投与した治療動物中で測定した４―フェニル酪酸塩の血漿濃度である。
【００４０】
定義
本発明では、用語は以下の意味を有する。
【００４１】
「カプセル」は、多様な形状および容量の硬いまたは軟形状のシェルを有する固体の製剤を意味し、通常、単一容量の活性基剤を含む。
【００４２】
「直腸カプセル」は、潤滑させるコーティングを有し得る固体の単一用量の軟形状のカプセルを意味する。好ましくは、直腸カプセルは細長い形状および同様の外観で存在してもよい。
【００４３】
「座薬」は、圧縮または成形または当業者に公知の他のいずれかの技術により調製される、固体の単一用量の製剤を意味し、水に可溶または分散可能であり、体温で溶解し得る適切な基剤中に分散または溶解した１つ以上の活性基剤および任意に賦形剤を含む。
【００４４】
「治療上有効量」は、本疾患または条件の１つ以上の症状の進行、悪化、もしくは劣化、本疾患または症状の軽減、または本疾患の治癒を遅くさせるまたは停止させるために必要かつ十分な治療薬の量を意味する。
【００４５】
「薬学的に許容可能な賦形剤」は、動物、好ましくはヒトに投与する際に、逆反応、アレルギー反応、または他の目的と異なる反応を産生しない賦形剤である。この賦形剤は、ありとあらゆる溶媒、分散媒体、コーティング剤、抗菌剤、および抗真菌剤、等張剤、ならびに吸収遅延剤などを含む。ヒトへの投与では、製剤は、生物学的な標準であるＦＤＡ局により要求される一般的な安全度および純度、ならびに任意に無菌性および発熱性に合致している。
【００４６】
「約」は、数字の前に使用される場合、当該数字の値の±１０％を意味する。
【００４７】
本発明は、対象における運動ニューロン疾患、代謝性疾患、または癌の治療方法であって、治療的に許容可能な量の治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩を、その必要がある対象に直腸投与することを含む方法に関する。
【００４８】
本発明者は、フェニル酪酸塩を直腸投与することにより、血清中に高濃度のフェニル酪酸塩を与え、フェニル酪酸塩およびフェニル酢酸塩がより長く存在するようになることを発見した。
【００４９】
運動ニューロン疾患の例は、限定するものではないが、脊髄性筋萎縮症、筋萎縮性側索硬化症、虚血、サラセミア症、嚢胞性線維症、およびハンチントン病を含む。
【００５０】
代謝性疾患の例は、限定するものではないが、尿素サイクル異常症（ＵＣＤ）およびメープルシロップ尿症（ＭＳＵＤ）を含む。例えばＭＳＵＤは、古典的な新生児の重篤な形態、中等度の形態、間欠的な形態、サイアミン反応（ｔｈｉａｍｉｎｅ−ｒｅｓｐｏｎｓｉｂｅ）形態、またはラクトースアシドーシスを備えたＥ３欠損形態が挙げられる。
【００５１】
また、本発明は、ヒストンデアセチラーゼ関連疾患を治療する方法であって、治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩の治療有効量を、その必要のある対象に直腸投与することを含む方法に関し、この対象は好ましくは小児である。
【００５２】
ヒストン関連疾患の例は、限定するものではないが、脊髄性筋萎縮症、筋萎縮性側索硬化症、虚血、サラセミア、嚢胞性線維症、およびハンチントン病を含む。
【００５３】
本発明の１つの実施形態によれば、本発明は、治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩の治療有効量を、その必要のある対象に直腸投与することを含むＳＭＡの治療方法に関する。
【００５４】
驚くべきことに、本出願人は、フェニル酪酸塩の直腸投与が、ＳＭＡなどの運動ニューロン疾患、尿素サイクル異常症などの代謝性疾患、または癌の治療に有効であることを見出し、患者の状態の悪化を停止させるだけでなく、さらに驚くべきことに、患者の状態を改善させることを見出した。このことは、Ｍｅｒｃｕｒｉらにより開示された臨床試験により報告されている、経口経路によりフェニル酪酸塩を投与する場合（Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，  ２００７，  ６８，  ５１−５５）には見られなかった。
【００５５】
理論に拘束されることを望むのではないが、直腸投与は、胃を通過することによりフェニル酪酸塩が分解することはなく、したがって、生体利用度（ｂｉｏｄｉｓｐｏｎｉｂｉｌｉｔｙ）が改善する。また、一般的な循環、すなわち全身の送達の際に活性薬剤の主要製剤を直接遊離させることにより、第１の肝臓経路を回避してもよい。このことは、フェニル酪酸塩の場合、経口摂取後、短い半減期（０．７７時間）に対応して、肝臓および腎臓で急速に代謝されるため（Ｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，  ２００１，  ４７，  ３８５−３９０；  Ｋａｓｕｍｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．  Ｄｉｓｐｏ．，  ２００４，  ３２，  １０−１９）、一層興味深い（Ｐｉｓｃｉｔｅｌｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｃｌｉｎ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，  １９９５，  ３５，  ３６８−３７３）。また、直腸経路は、肛門管から吸収した薬剤が直接全身を循環するため、興味深い。直腸形態は、嚥下（ｄｅｇｌｕｔｉｔｉｏｎ）または嚥下（ｓｗａｌｌｏｗｉｎｇ）が困難である患者と同様に、乳児および小児に特に良好に適合する利点を有している。さらなる利点として、現在経口的に投与される治療が断念されている多くの場合の原因である不快な味および臭いに直結した問題を解消することが挙げられる。
【００５６】
したがって、直腸製剤は、フェニル酪酸塩の不快な味および臭いを解消する複数の利点を有しており、その利用を簡易化させ、肝臓での代謝を遅らせることができる。
【００５７】
第１の実施形態によれば、直腸投与は、治療上有効可能な４−フェニル酪酸塩を含む直腸投与用の剤形により達成される。
【００５８】
また、本発明は、直腸投与用の剤形中の治療的に許容可能なフェニル酪酸塩を含む組成物に関する。
【００５９】
１つの実施形態によれば、治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩は、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、アミノ酸に適した塩、またはアンモニウム塩を含む群から選択される。特定の塩の例は、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、またはカルシウム塩を含む群から選択される。好ましい実施形態によれば、治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩は、４−フェニル酪酸ナトリウムである。
【００６０】
一実施形態によれば、直腸剤形は、座薬、直腸カプセル、直腸クリーム、直腸エマルジョン、直腸溶液、直腸懸濁液、直腸タンポン、停留浣腸、直腸ゲル、直腸フォーム、または直腸軟膏を含む群から選択される。
【００６１】
一実施形態によれば、直腸剤形は座薬ではない。
【００６２】
一実施形態によれば、座薬は、フェニル酪酸塩および脂肪基剤または水に可溶な基剤を含む。一実施形態によれば、脂肪基剤は、Ｗｉｔｅｐｓｏｌ  Ｈ１２  またはＷｉｔｅｐｓｏｌ  Ｈ１５などの硬い脂肪、ココアバター、ラウリン油（ｌａｕｒｉｆ  ｏｉｌ）、カカオ脂、モノ−、ジ−、トリ−グリセリド、脂肪酸、グリセロール−ゼラチン基剤、ハードバター、エスタリウム（ｅｓｔａｒｉｎｕｍ）、ｓｕｐｐｏｃｉｒｅ、マクロゴール、またはアガーサップ（ａｇｒａｓｕｐ）を含む群から選択される。一実施形態によれば、水に可溶な基剤は、ｍｙｒｊ  ５１、ＰＥＧａ、またはＴｗｅｅｎ  ６１もしくはＴｗｅｅｎ  ６０などのポリソルベートを含む群から選択される。
【００６３】
一実施形態によれば、直腸カプセルは、フェニル酪酸塩および中空のシェルを含む。１つの実施形態において、フェニル酪酸塩は、粉体、溶液、または懸濁液として直腸カプセル中に存在する。フェニル酪酸塩溶液または懸濁液の場合、この溶液または懸濁液のｐＨは、１〜７の範囲であってもよく、好ましくは２〜６、より好ましくは３〜５の範囲であってもよい。１つの実施形態によれば、直腸カプセルのサイズは、０００〜５番、好ましくは０〜４番、より好ましくは１〜３番の範囲であってもよい。１つの実施形態において、中空のシェルは、硬いまたは軟らかくてもよい。１つの実施形態において、中空のシェルは、硬いまたは軟形状のゼラチン、グリセロール、ソルビトール、プルラン（ｐｕｌｌｕｌａｎｅ）および／またはセルロースを含む群から選択される物質から作製される。本発明の１つの実施形態において、直腸カプセルを、トリグルセルド、グリセリン、またはポリグリセリンなどの潤滑剤でコーティングする。別の実施形態により、直腸カプセルは、さらに、希釈剤（ｄｉｌｕａｎｔ）、不透明な充填剤、抗菌性保存剤、甘味料、着色料、安定剤、生体適合可能なポリマー、油、界面活性剤、分散剤、または水吸収剤などの薬学的に許容可能な賦形剤をさらに含む。この賦形剤の選択および濃度の最適化は、当業者の能力の範囲内である。
【００６４】
一実施形態によれば、浣腸は、水性溶液中にフェニル酪酸塩を含む。
【００６５】
１つの実施形態によれば、浣腸は、溶液または懸濁液である。１つの実施形態によれば、浣腸は、停留浣腸である。
【００６６】
好ましい実施形態によれば、直腸剤形は、直腸カプセルである。
【００６７】
１つの実施形態によれば、この直腸用量は、従来の賦形剤およびキャリアーをさらに含む。賦形剤およびキャリアーの例は、限定するものではないが、粘着防止剤、粘性剤、溶媒、アジュバント、潤滑剤、安定化剤、ｐＨ緩衝剤、崩壊剤、湿潤剤、保存剤などを含む。
【００６８】
１つの実施形態によれば、直腸剤形は粘性剤を含む。粘性剤の例は、限定するものではないが、ＰＶＰ  Ｋ  ９などのポリビニルピロリドン、ＨＰＣ  Ｈ、ＨＰＣ  ＨＦ、ＨＥＣ  ２５０  ＨＸおよびＨＥＣ  ２５０  Ｍなどのセルロース誘導体、ｌｕｔｒｏｌ  Ｆ６８、ルビジェル  アドバンスド（Ｌｕｄｖｉｇｅｌ  ａｄｖａｎｃｅｄ）、グアルガム、キサンタンガムなどのガム、Ｃａｒｂｏｐｏｌ  ９７１Ｐなどのカーボポール誘導体、シリカ誘導体などを含む。
【００６９】
本発明の１つの実施形態において、直腸剤形は、直腸剤形の総重量に基づき、約０．０１〜５０重量％、好ましくは約０．０１〜約１０ｗ／ｗ％、より好ましくは、約０．４〜５．５ｗ／ｗ％の範囲内の量の粘性剤を含む。１つの実施形態において、直腸剤形は、約０．５〜約１ｗ／ｗ％、好ましくは、約０．８〜約０．９５ｗ／ｗ％、より好ましくは、約０．８８ｗ／ｗ％を含む。別の実施形態において、この直腸剤形は、約１．５〜約４ｗ／ｗ、好ましくは、約２〜２．５ｗ／ｗ％、より好ましくは、約２．１９ｗ／ｗ％の範囲の量の粘性剤を含む。別の実施形態において、直腸剤形は、約４〜約５．５ｗ／ｗ、好ましくは約４．５または約５．４ｗ／ｗ％の範囲内、好ましくは約５％または約５．２５ｗ／ｗ％の粘性剤を含む。別の実施形態において、直腸剤形は、約０．４〜約１ｗ／ｗ％、好ましくは約０．４５〜約０．７ｗ／ｗ％の範囲、より好ましくは約０．４７ｗ／ｗ％、または約５ｗ／ｗ％、または約０．６７ｗ／ｗ％の量の粘性剤を含む。別の実施形態において、直腸剤形は、約１．５〜５ｗ／ｗ％、好ましくは、約２〜約４ｗ／ｗ％、より好ましくは約４ｗ／ｗ％の範囲の量の粘性剤を含む。
【００７０】
１つの実施形態によれば、直腸剤形はある溶媒を含む。溶媒の例は、限定するものではないが、精製水およびＵＨＱ水（ＵＨＱは、Ｕｌｔｒａ−Ｈｉｇｈ  Ｑｕａｌｉｔｙを表す）などの水を含む。
【００７１】
本発明の１つの実施形態において、直腸剤形は、直腸剤形の総重量に基づき、約３０〜約９９重量％、好ましくは、約３５〜約９５重量％、より好ましくは、約４０〜約９０重量％の範囲の量の溶媒を含む。本発明の１つの実施形態において、直腸剤形は、約８０〜約８５ｗ／ｗ％、好ましくは、約８２〜約８３ｗ／ｗ％、より好ましくは、約８２．２５ｗ／ｗ％の範囲の量の溶媒を含む。本発明の別の実施形態において、直腸剤形は、約８２．５〜約８７．５ｗ／ｗ％、好ましくは、約８５〜約８６ｗ／ｗ％、より好ましくは約８５．３１ｗ／ｗ％の範囲の量の溶媒を含む。本発明の別の実施形態において、直腸剤形は、約８５〜約８８ｗ／ｗ％、好ましくは、約８６〜約８７ｗ／ｗ％の範囲の、より好ましくは、約８６．６３ｗ／ｗ％の量の溶媒を含む。本発明の別の実施形態において、直腸剤形は、約４０〜約５５ｗ／ｗ％、好ましくは、約４５〜約５０ｗ／ｗ％、より好ましくは、約４５ｗ／ｗ％または約４９．５ｗ／ｗ％の範囲の量の溶媒を含む。本発明の別の実施形態において、直腸剤形は、約５５〜７５ｗ／ｗ％、好ましくは、約６０〜約７０ｗ／ｗ％、より好ましくは、約６６ｗ／ｗ％または約６６．２ｗ／ｗ％の範囲の量の溶媒を含む。
【００７２】
一実施形態によれば、直腸剤形は、１ｍｇ〜８００ｍｇ、好ましくは１００〜６００ｍｇ、より好ましくは、２５０〜５００ｍｇのフェニル酪酸塩を含む。１つの実施形態において、直腸剤形は、約３３３．３３ｍｇのフェニル酪酸塩を含む。別の実施形態において、直腸剤形は約５００ｍｇのフェニル酪酸塩を含む。別の実施形態において、直腸剤形は、直腸剤形の総重量に基づき、約１〜約８０ｗ／ｗ％、好ましくは約５〜７５ｗ／ｗ％の範囲のフェニル酪酸塩を含む。別の実施形態において、直腸剤形のフェニル酪酸塩の量は、約１０〜約１５ｗ／ｗ％、好ましくは、約１２．５ｗ／ｗ％の範囲である。本発明の別の実施形態において、直腸剤形は、約４０〜約５５ｗ／ｗ％、好ましくは、約４５〜約５０ｗ／ｗ％、より好ましくは約４５ｗ／ｗ％または約４９．５ｗ／ｗ％または約４９．５ｗ／ｗ％の範囲の量のフェニル酪酸塩を含む。本発明の別の実施形態において、直腸剤形は、約５０〜約７５ｗ／ｗ％、好ましくは、約６０〜約７０ｗ／ｗ％、より好ましくは約６６ｗ／ｗ％または約６６．２ｗ／ｗ％の範囲の量のフェニル酪酸塩を含む。
【００７３】
１つの実施形態によれば、直腸剤形は、約１：１〜約１：５０、好ましくは約１：２〜約１：２５、より好ましくは約１：５〜約１：１０、さらにより好ましくは約１：７の範囲のフェニル酪酸塩：賦形剤／キャリアーの重量比で、フェニル酪酸塩、賦形剤またはキャリアーを含む。別の実施形態において、直腸剤形は、約１：０．１〜約１：１０、好ましくは約１：０．５〜約１：３、より好ましくは約１：１〜約１：２の範囲のフェニル酪酸塩：賦形剤／キャリアーの重量比で、フェニル酪酸塩、賦形剤またはキャリアーを含む。
【００７４】
本発明の１つの実施形態によれば、直腸剤形のｐＨは、約１〜約１２、好ましくは約５〜１０、より好ましくは約７〜約９．５の範囲である。１つの実施形態において、直腸剤形のｐＨは、約７〜約８．５、好ましくは約７．５〜約８、より好ましくは約７．７９の範囲である。別の実施形態において、直腸剤形のｐＨは、約８．５〜約９．５、より好ましくは約９〜９．２５、より好ましくは約９．１４または９．１９の範囲である。
【００７５】
本発明の１つの実施形態によれば、直腸剤形の密度は、約０．５〜１．５ｇ／ｍｌ、好ましくは約１〜約１．２ｇ／ｍｌ、より好ましくは約１．０５〜約１．１ｇ／ｍｌ、の範囲である。１つの実施形態において、直腸剤形の密度は約１．０７ｇ／ｍｌである。別の実施形態において、直腸剤形の密度は約１．０８ｇ／ｍｌである。別の実施形態において、直腸剤形の密度は約１．０９ｇ／ｍｌである。直腸剤形の密度を、ブルックフィールド装置で測定してもよい。
【００７６】
本発明の１つの実施形態によれば、直腸剤形の粘度は、約１〜約１０００００ｃＰ、好ましくは、約１０〜約５００００ｃＰ、より好ましくは約２０〜約１２０００ｃＰの範囲である。本発明の１つの実施形態において、直腸剤形の粘度は、約２０〜２５ｃＰ、好ましくは約２１〜２２ｃＰ、の範囲であり、より好ましくは約２１．４ｃＰである。別の実施形態において、直腸剤形の粘度は、約１０００ｃＰ〜約３０００ｃＰ、好ましくは約１５００〜約２０００ｃＰの範囲であり、より好ましくは約１８３６ｃＰである。別の実施形態において、直腸剤形の粘度は、約１００００ｃＰ〜約１２０００ｃＰ、好ましくは約１１０００ｃＰ〜約１１８００ｃＰの範囲であり、より好ましくは約１１７００ｃＰである。本発明の別の実施形態において、直腸剤形の粘度は、約５００〜５０００ｃＰ、好ましくは、約１０００ｃＰ〜約３５００ｃＰｎｏ範囲であり、より好ましくは１３８０ｃＰ、約１５００ｃＰ、約２０１０ｃＰ、または約３１００ｃＰｄｅａｒｕ．直腸剤形の粘度を、ブルックフィールド装置で測定してもよい。
【００７７】
１つの実施形態によれば、１〜６００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは、１００〜５００ｍｇ／ｋｇ／日の用量で投与する。１つの実施形態において、投与量は約５００ｍｇ／ｋｇ／日である。
【００７８】
１つの実施形態によれば、フェニル酪酸塩の直腸投与を数日にわたり実施する。一実施形態によれば、直腸投与を、１日に１〜１０回、好ましくは１日に２〜８回、より好ましくは１日に１日に５回実施する。１つの実施形態において、投与あたりの用量は、１〜６００ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは、約１０〜５００ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは約５０〜２００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲、さらにより好ましくは約１００ｍｇ／ｋｇ体重である。
【００７９】
１つの実施形態において、投与用量は、１回の用量を約１００ｍｇ／ｋｇ体重で５回投与した合計約５００ｍｇ／ｋｇ体重である。
【００８０】
当業者は、患者の条件に用量を適合させる方法について理解しているであろう。
【００８１】
用量は、患者の体重ｋｇおよび１日当たりの用量を計算する。
【００８２】
１つの実施形態によれば、直腸剤形を、少なくとも１週間、好ましくは少なくとも２週間、より好ましくは少なくとも４週間以上投与する。別の実施形態によれば、この直腸剤形を慢性的に投与する、すなわち限定しない期間投与する。
【００８３】
別の実施形態によれば、フェニル酪酸塩を、投与して患者中でのこの薬物のレベルを高く維持する。当業者は、この目的を達成するため、この期間にわたる直腸用量の分配方法について理解しているであろう。
【００８４】
１つの実施形態によれば、治療的に許容可能な４−フェニル酪酸塩を、ＳＭＡなどの運動ニューロン疾患、尿素サイクル異常症などの代謝性疾患、または癌に罹患している患者に直腸投与する。一実施形態によれば、ＳＭＡなどの運動ニューロン疾患、尿素サイクル異常症などの代謝性疾患、または癌に罹患している患者はヒトである。別の実施形態によれば、患者は小児であり、好ましくは０〜５歳児である。好ましい実施形態によれば、患者は乳児であり、好ましくは、生後０〜１８か月の間、より好ましくは生後０〜１２か月の間の乳児である。別の実施形態によれば、患者は５歳から１０歳である。別の実施形態によれば、患者は、１０〜１８歳である。別の実施形態によれば、患者は成人である。
【００８５】
また、本発明は、運動ニューロン疾患、代謝性疾患、または癌を治療するための本明細書に上述した許容可能な４−フェニル酪酸塩に関し、この許容可能な４−フェニル酪酸塩は直腸投与される。
【００８６】
また、本発明は、運動ニューロン疾患、代謝性疾患、または癌を治療するための本明細書に上述した許容可能な４−フェニル酪酸塩を含む組成物に関し、この組成物は直腸投与される。
【００８７】
また、本発明は、本明細書中に上述した許容可能な４−フェニル酪酸塩および少なくとも１つの薬学的に許容可能な賦形剤を含む薬学的組成物に関し、この薬学的組成物は直腸投与に適している。
【００８８】
また、本発明は、本明細書中に上述した許容可能な４−フェニル酪酸塩を含む薬物に関し、この薬剤は直腸投与に適している。
【実施例】
【００８９】
本発明を以下の実施例によりさらに例示するが、この実施例は本発明の範囲を限定するよう構成されているものではない。
【００９０】
実施例１  本発明の直腸剤形およびその調製
前臨床研究用の製剤（製剤Ｉ、ＩＩ、およびＩＩＩ）
【００９１】
製剤Ｉ
【表１】
2014517057.tif 000003
【００９２】
製剤ＩＩ
【表２】
2014517057.tif 000004
【００９３】
製剤ＩＩＩ
【表３】
2014517057.tif 000005
【００９４】
製剤Ｉ〜ＩＩＩの製剤の調製
【表４】
2014517057.tif 000006
小児製剤（製剤ＩＶ〜ＸＩ）
【００９５】
製剤ＩＶ
【表５】
2014517057.tif 000007
【００９６】
製剤Ｖ
【表６】
2014517057.tif 000008
【００９７】
製剤ＶＩ
【表７】
2014517057.tif 000009
【００９８】
製剤ＶＩＩ
【表８】
2014517057.tif 000010
【００９９】
製剤ＶＩＩＩ
【表９】
2014517057.tif 000011
【０１００】
製剤ＩＸ
【表１０】
2014517057.tif 000012
【０１０１】
【表１１】
2014517057.tif 000013
【０１０２】
製剤ＸＩ
【表１２】
2014517057.tif 000014
【０１０３】
製剤ＩＶ〜ＸＩの調製
【表１３】
2014517057.tif 000015
【０１０４】
本発明の製剤の調製工程
解膠プロペラ（ｄｅｆｌｏｃｃｕｌａｔｉｎｇ  ｐｒｏｐｅｌｌｅｒ）を備えた撹拌シャフトで、２５０ｍｌのガラスのビーカー中の精製水に粘着防止剤を溶解させる。急速に可溶化させるために、撹拌速度を最大限にし、撹拌中に誘導され得る気泡を除去してから５分後に速度を低下させる。活性成分を添加する前に得られた各溶液のｐＨを測定して、ゲル化した溶液の特性に関する効力を観察した。
【０１０５】
溶液の一部を収集し、磁性攪拌機および磁性プレートを使用してゆっくりと撹拌した。この画分に、所望の最終容量設定を得るために必要とされる量の活性成分の撹拌を徐々に激しくした。溶液を、５〜１０分間置き、ｐＨを測定した。
【０１０６】
各溶液の密度を風袋（ｔａｒｉｎｇ）、濾過、および１ｍＬのシリンジを重量測定することにより測定した。
【０１０７】
実施例２  直腸カプセルの溶解
サイズ３のゲラチンカプセルに、マニュアル通りの充填剤を備えた４−フェニル酪酸ナトリウムを充填した。この溶解速度を、ｐＨおよび温度の異なる条件で測定した。
【０１０８】
実施例３  薬物動態評価
１．マウスモデル上の薬物動態評価
これらのｉｎ  ｖｉｖｏおよび分析部で、オスのＳＤラットに経口、静脈内、または直腸経路による４−フェニル酪酸ナトリウム塩を単一投与した後、血漿濃度および薬物動態（ＰＨ）パラメータのレベルを評価した。
【０１０９】
物質および方法
動物の特徴、収容、および扱い
３１匹の生後６週間のオスのＳＤラットを使用した。これらのラットは、フランスのＥｌｅｖａｇｅ  Ｊａｎｖｉｅｒから供給された。ラットの到着後に、この動物に番号をランダムにつけ、耳タグにより同定した。動物の健康状態は観察により変動した。動物を、留め金を備えたステンレススチールワイヤのふたを備えたｍａｋｒｏｌｏｎケージ内に収容した。わらくずは  Ｕ．Ａ．Ｒ．  （Ｅｐｉｎａｙ  ｓｕｒ  Ｏｒｇｅ，  Ｆｒａｎｃｅ）により供給され、少なくとも７２時間ごとに新しいものと取り換えた。温度および湿度を一定に管理した（Ｏｃｅａｓｏｆｔ（登録商標）記録）この動物の部屋の条件を、２２℃±２℃、および１２時間／１２時間の明暗サイクルに保った。この動物は、Ｕ．Ａ．Ｒ．  （Ｅｐｉｎａｙ  ｓｕｒ  Ｏｒｇｅ，  Ｆｒａｎｃｅ）により供給されたペレット（ＡＯ４Ｃ）を与えた。このペレットおよび水道水を自由に与えた。投与前には一晩動物を絶食させた。
【０１１０】
治療
静脈内投与（ＩＶ）では、動物は、１００ｍｇ／ｋｇ体重の４−フェニル酪酸塩（１００ｍｇ／ｍｌのＵＨＱ水あたり１ｍｌ／ｋｇ体重に対応する）を与えられた。
【０１１１】
経口投与（ＰＯ）では、動物は、（最終溶液は１００ｍｇ／ｍｌの濃度であるＵＨＱ水中に粉砕しかつ溶解させた５ｍｇ／ｋｇ体重錠に対応する）５００ｍｇ／ｋｇ体重の４−フェニル酪酸塩を与えられた。
【０１１２】
直腸投与では、動物は、３．７ｍｇ／ｋｇ体重の実施例１に記載した製剤Ｉ、ＩＩ、またはＩＩＩ、または静脈内投与用の３ｍｌの製剤に対応する５００ｍｇ／ｋｇ体重の４−フェニル酪酸塩を与えられた。
【０１１３】
製剤は、投与中磁性下で撹拌し続けた。
【０１１４】
サンプリング
【表１４】
2014517057.tif 000016
【０１１５】
血液サンプリング
血液サンプリング中、動物を麻酔システム（Ｅｑｕｉｐｅｍｅｎｔ  Ｖｅｔｅｒｉｎａｉｒｅ  Ｍｉｎｅｒｖｅ）を使用したＩｓｏｆｌｕｒａｎｅ（商標）で麻酔投与した。眼窩後洞内の血液を、毛細管チューブを使用して収集した。時点当たり０．３〜０．４ｍｌの血液を収集した。抗凝固剤としてヘパリンリチウムを使用した。
【０１１６】
血液サンプルを＋４℃（０および９度の間）、２５００ｒｐｍで遠心し、血漿を除去し、標識したポリプロピレンチューブに配置した。個々の血漿サンプルを、分析まで凍結（−２０℃±５℃）で保存した。
【０１１７】
分析方法
４−フェニル酢酸ナトリウム塩およびフェニル酢酸塩（フェニル酪酸塩の代謝物）をＵＨＱ水で希釈して、１、５、１０、２５、５０、１００、１０００、および２０００ｎｇ／ｍＬのラットの血漿のない較正標準とする最終濃度の希釈溶液を得た。
【０１１８】
タンパク質の沈殿により抽出を実施した。較正標準およびＳ０で、３００μｌのアセトニトリルを、１００μｌの血漿サンプルに添加した。この混合物を＋４℃（０および９度の間）、３５００ｒｐｍで５分間遠心し、上清を除去し、標識化したポリプロピレンバイアルまたはプレートに置いた。ＬＣ−ＭＳ／ＭＳシステム（タンデム質量分析に連結した液体クロマトフィー用のＬＣ−ＭＳ／ＭＳ標準）内に注入するまで、抽出物を０℃〜９℃で保存した。
【０１１９】
潜在的な標準偏差（ｓｉｇｎａｌ  ｄｅｖｉａｔｉｏｎ）を平均値化するために、事前事後のサンプルの較正曲線を作成した。両方の較正曲線の平均値により、濃度を計算した。
【０１２０】
較正曲線を検証するために以下の、（１）−３０．０％と＋３０．０％との間の公称値からの偏差、（２）−３０．０％および＋３０．０％の間の範囲ではない場合の較正曲線を除外するといった基準を使用した。
【０１２１】
濃度の決定
Ａｎａｌｙｓｔ（登録商標）１．５．１による自動的な統合後、サンプルの濃度を計算した。これは、血漿をμｇ／ｍＬで表示した。
【０１２２】
この基質の血漿濃度平均値を、個々の濃度を使用して計算し、対応する標準偏差および変動係数（ＣＶ（％）＝ＳＤ／濃度平均値×１００）で表した。
【０１２３】
薬物動態分析
ＫＩＮＥＴＩＣＡ（登録商標）（バージョン４．３−Ｔｈｅｒｍｏ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ−Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ−ＵＳＡ）を使用して、薬物動態分析を実施した。独立したモデル（非競合的な分析物）を使用した。
【０１２４】
結果
治療した動物中で測定した４−フェニル酪酸塩の血漿濃度を図１に示す。図１に示すように、直腸投与してから１時間後に測定した４−フェニル酪酸塩の血漿濃度は、静脈投与した後のサンプルよりも約５〜１０倍高く、４−フェニル酪酸塩を経口投与した後のサンプルよりも約２〜３倍高かった。
【０１２５】
同一の結果が、フェニル酢酸の血漿濃度でも得られた。
【０１２６】
この直腸製剤（Ｉ、ＩＩ、またはＩＩＩ）による４−フェニル酢酸の血漿濃度にも著しく差異が見られなかったことが見いだされた。
【０１２７】
２．若年期のミニブタモデルの薬物動態評価
本研究の目的は、若年期のミニブタ（生後１３週間、総容量を１日当たり５つの用量に分割した）内の目的とするヒトの経路によりフェニル酪酸ナトリウム（ＮａＰＢ）を繰り返し投与することによる毒性を試験することである。ミニブタは、ヒトの内の１つの皮膚とブタの皮膚の特性の間に類似性があるため、局所耐性の研究用の対象モデルとした。
【０１２８】
物質および材料
フェニル酪酸ナトリウム（ＮａＰＢ）を、直腸投与経路を使用して若年性のミニブタで、１３週繰り返して服用させる研究を行った。１グループを、薬学的用量ＮａＰＢを、経口で治療した。比較として、ＮａＰＢを（総容量を１日当たり５回に分割して）１グループ経口投与した。
【０１２９】
本研究は、医薬品安全保証評価、毒物動態（ＴＫ）の決定、および４週間の回復期間を含む。
【０１３０】
最も早い服用を、生後７日で開始した。経管栄養（１日５回、３時間おき）および直腸投与（１日５回、３時間おき）を１３週間実施した。２８日の回復期間を実施した。
【０１３１】
このコブタを以下の表に示すように５つのグループ（１グループあたり２頭の雌豚）に分割した。
【表１５】
2014517057.tif 000017
【０１３２】
この回収した動物を服用後さらに２８日収容した。本研究の間、このミニブタを週に二回体重を計測した。増殖測定を週に２回実施した。眼検査（Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ）および心電図検査を最終治療日に行った。臨床病理学として、血液学および血液化学分析を、剖検前にすべてのブタで実施した。測定したパラメータは、標準となるガイドラインと一致した。毒物動態では、単一の血液サンプル（性別／時点当たり１動物、４つの時点）を、服用第１日目の各ブタの大静脈洞（ｐｒｅｃａｖａｌ  ｓｉｎｕｓ）から採取した。さらに、（４匹の動物／性別／時点）服用最終日の第４の時点で全てのブタから血液サンプルを採取した。
【０１３３】
結果
ＮａＰＢを直腸投与していても毒性は観察されなかった。
【０１３４】
動物の性別による差異は記録されなかった。
【０１３５】
直腸投与したＮａＰＢの薬物動態特性が、経口投与と比較して増加していることが見いだされた。確かに、直腸投与してから２時間後のフェニル酪酸塩およびフェニル酢酸塩（フェニル酪酸塩の代謝物）の血液濃度が、同一量のＮａＰＢを経口投与した後測定した濃度よりも約１・５倍高い濃度であった。
【０１３６】
実施例４  有効性
治療の有効性を、ＳＭＡのマウスモデルで評価した。１つの試験は、血液、筋肉、肝臓、濃、または脊髄などの異なる組織中のＳＭＮタンパク質の用量である。
【０１３７】
また、生活機能、特に呼吸および心拍数に関するフェニル酢酸の有効性と同様に、体重、温度、一般的な態様、活力性、寿命などのパラメータを評価する。
【０１３８】
また、運動評価を試験して治療の有効性を決定した。歩行距離（ｔｒａｖｅｌｅｄ  ｄｉｓｔａｎｃｅ）、方向、速度、回転数および直線の経路の数を測定して感覚運動の発達を評価した。
【０１３９】
本発明の直腸剤形を与えられたマウスが、治療していないマウスと比較して寿命が延びたとの結果を示した。
【０１４０】
実施例５  フェーズ１の臨床試験
薬物動態研究とクロスオーバーするフェーズ１を、健康な成人の志願者にＮａＰＢを経口的および直腸的に投与して、局所的な安全性および２つの異なる投与経路を介して提供される薬物産物の薬物動態プロファイルを評価した。
【０１４１】
フェーズ１のプロトコルの概要を以下の表に示す。
【表１６】
2014517057.tif 000018
2014517057.tif 000019
【図１】
2014517057.tif 000020
【国際調査報告】
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