(57)【要約】本発明は、一般式（Ｉ）［式中、６，７−メチレン基はα位またはβ位であり得る］で示される１８−メチル−６，７−メチレン−１７−プレグナ−４−エン−２１，１７β−カルボラクトン、該式（Ｉ）で示される異性体の少なくとも１種を含む医薬製剤、および子宮内膜症の治療におけるその使用に関する。2014532685.tif 000013
2014532685.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2014532685.tif 000012
（式中、６,７−メチレン基は、α位またはβ位であり得る）
で示される１８−メチル−６,７−メチレン−３−オキソ−１７−プレグナ−４−エン−２１,１７β−カルボラクトン。
【請求項２】
１８−メチル−６β,７β−メチレン−３−オキソ−１７−プレグナ−４−エン−２１,１７β−カルボラクトンである、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
子宮内膜症治療用の１８−メチル−６,７−メチレン−３−オキソ−１７−プレグナ−４−エン−２１,１７β−カルボラクトン。
【請求項４】
子宮内膜症治療用の１８−メチル−６β,７β−メチレン−３−オキソ−１７−プレグナ−４−エン−２１,１７β−カルボラクトン。
【請求項５】
少なくとも１種の請求項１または２記載の化合物および少なくとも１種の医薬上無害な担体を含有する医薬製剤。
【請求項６】
医薬上無害の担体中に少なくとも１種の請求項１または２記載の化合物と、選択的エストロゲン受容体調節薬（ＳＥＲＭ）、エストロゲン受容体（ＥＲ）アンタゴニスト、アロマターゼ阻害薬、１７β−ＨＳＤ１阻害薬、ステロイドスルファターゼ（ＳＴＳ）阻害薬、ＧｎＲＨアゴニストおよびアンタゴニスト、キスペプチン受容体（ＫＩＳＳＲ）アンタゴニスト、選択的アンドロゲン受容体調節薬（ＳＡＲＭ）、５α−レダクターゼ阻害薬、選択的プロゲステロン受容体調節薬（ＳＰＲＭ）、ゲスターゲン、抗ゲスターゲン、経口避妊薬、マイトジェン活性化タンパク質（ＭＡＰ）キナーゼの阻害薬およびＭＡＰキナーゼキナーゼ（Ｍｋｋ３／６、Ｍｅｋ１／２、Ｅｒｋ１／２）の阻害薬、プロテインキナーゼＢ（ＰＫＢα／β／γ；Ａｋｔ１／２／３）の阻害薬、ホスホイノシチド−３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）の阻害薬、サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ１／２）の阻害薬、低酸素誘導シグナル経路の阻害薬（ＨＩＦ１α阻害薬、プロリルヒドロキシラーゼの活性化薬）、ヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）阻害薬、プロスタグランジンＦ受容体（ＦＰ）（ＰＴＧＦＲ）アンタゴニストまたは非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）からなる群から選択される少なくとも１種の他の活性医薬成分とを含有する、請求項５記載の医薬製剤。
【請求項７】
請求項１または２記載の化合物と、ＥＲアンタゴニスト、アロマターゼ阻害薬、キナーゼ阻害薬またはＮＳＡＩＤからなる群から選択される少なくとも１種の他の活性医薬成分とを含有する、請求項６記載の医薬製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特許請求の範囲において特徴付けられるもの、すなわち、１８−メチル−６,７−メチレン−３−オキソ−１７−プレグナ−４−エン−２１,１７β−カルボラクトン（式Ｉ）（ここで、ステロイド骨格の６,７位にあるメチレン基は、α位またはβ位であり得る）、明示された異性体の少なくとも１種を含有する医薬製剤、および子宮内膜症の治療におけるその使用に関する。
【化１】
2014532685.tif 000003
【０００２】
本発明が解決しようとする課題は、現在入手可能な治療薬よりも優れた作用／副作用プロファイルを示す、子宮内膜症治療用の新規化合物を提供することである。特に、本発明の化合物によって、子宮内膜症の永久的治療または長期的治療が可能となる。
【０００３】
さらにまた、当該新規治療方法によって、子宮内膜症にゲスターゲンを使用する場合に生じるような副作用、例えば出血障害が、回避される。
【背景技術】
【０００４】
子宮内膜症の臨床像は、包括的に研究され、記載されているが、その発症メカニズムは、まだ、完全には、分かっていない。子宮内膜症とは、子宮の内腔領域の局在以外で内膜組織が増殖することである。これらのいわゆる子宮内膜症病変には、子宮の筋肉領域に生じるもの（内性子宮内膜症、子宮腺筋症）、または腹腔の様々な部位、例えば、靱帯に生じるもの、ダグラス窩壁側腹膜に生じるもの（腹膜子宮内膜症）、腸壁に生じるもの、卵巣に生じるもの（いわゆる、子宮内膜腫）または直腸膣瘻が生じるもの（直腸膣瘻、しばしば、深部浸潤性子宮内膜症）があり、当該病変は、それらの原発組織の性質を保持している。
【０００５】
子宮内膜症は、その様々な症状の全てにおいて、ホルモン依存性であり、本質的に炎症の特徴を示す。子宮内膜症は、出産年齢の女性の１０〜２０％が罹患している。当該疾患は、閉経後の女性においては例外的なケースとして生じるだけである。子宮内膜症の中核症状は、慢性下腹部痛、月経困難症、性交疼痛症、排尿障害、出血障害および不妊症である。当該症状は、ほとんど、併発する。当該病変は、卵管を経由し、いわゆる逆行性月経を介して腹膜腔に侵入し、次いで、そこに植え付けられると考えられる。
【０００６】
診断された子宮内膜症の治療のための現行の治療方法は非常に制限されている。
【０００７】
かくして、子宮内膜症は、顕微鏡下での子宮内膜症病変除去手術によって治療され得る。子宮内膜症病変は、熱（電気灼熱術）または切除術（摘出術）によって外科的に除去される。さらに、存在する接着部分を分離し、子宮内膜嚢胞を除去し、患者が子供を産むことを望む場合には、色素通水法によって卵管の疎通性を検査することができる。しかしながら、このような手術の後の再発率は、非常に高い（２５〜３０％）。子宮摘出術、すなわち子宮全摘は、これらの特に難治性のケースにおける最終的な治療選択肢である。
【０００８】
特に重篤な疾患においては、両方の卵巣および卵管の除去（両側卵管卵巣摘出術、付属器摘出術）だけしか症状からの決定的な解放をもたらすことができない場合がある。
【０００９】
子宮筋層における子宮内膜症（子宮腺筋症）に起因する月経痛および長期の出血または激しい出血もまた、子宮摘出術で良好に治療され得る。
【００１０】
しかしながら、これらの手術は、関連する問題を抱える不妊症および早発閉経を引き起こすので、利益は、不利益を考慮して慎重に検討される必要がある。
【００１１】
侵襲的な外科治療に加えて、薬物療法を検討することもできる。これは、しばしば、十分に手術できない可能性がある広い領域が侵されている場合に検討されるが、軽度から中等度までの疾患の場合にも適用され得る。非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）による純粋な疼痛治療と同様に、基本的に４つの物質群が考えられる：
（ａ）混合経口避妊薬（ＯＣ、エストロゲンおよびゲスターゲンからなる）
（ｂ）ゲスターゲン
（ｃ）ＧｎＲＨアナログ（ＧｎＲＨ＝ゴナドトロピン放出ホルモン）および
（ｄ）ダナゾール（登録商標）
【００１２】
混合経口避妊薬（ａ）は、月経周期を調節し、月経の強さを軽減する。これは、子宮内膜症患者におけるそれらの有効性の説明となると推定される。しかしながら、一方では疼痛症状の再発率は非常に高いと考えられており、他方では新しい研究によってこれらのホルモン活性物質の長年にわたる使用が深部浸潤性子宮内膜症（非特許文献１）、特に痛いタイプの子宮内膜症の割合の増大と関連していることが示される。
【００１３】
ＯＣの使用は、また、特許文献にも記載されている。かくして、特許文献１には、微粒子化ドロスピレノンが子宮内膜症の治療に適していることが記載されている。該特許文献の段落［００４５］には、ドロスピレノンと低含有量のエストロゲンを含む組成物またはエストロゲンを含まないものでさえ、子宮内膜症の治療にとりわけ適していることが記載されている。これは、ドロスピレノンのゲスターゲン性特性によって説明される。特許文献１には、ドロスピレノン０.５〜１０ｍｇが有効であることが記載されている。この特許文献には、ドロスピレノンによる子宮内膜症の治療期間について何ら記載されていない。
【００１４】
子宮内膜症治療用医薬の製造のためのミネラルコルチコイド受容体アンタゴニストが特許文献２に記載されている。純粋な抗ミネラルコルチコイド作用を有する化合物の使用に加えて、さらに、プロゲステロン受容体、エストロゲン受容体、グルココルチコイド受容体および／またはアンドロゲン受容体に対する作用を発揮する化合物も提案されている。特に、特許文献２に記載されている化合物であるスピロノラクトンおよび上記ドロスピレノンはまたゲスターゲン性作用を有する。
【００１５】
特許文献２において純粋なＭＲアンタゴニストとして記載されている化合物エプレレノンは、比較的弱いインビトロ活性を示す（表１を参照）。インビトロトランス活性化アッセイにおいて、エプレレノンと比べて少なくとも１０倍低いＩＣ50を有するＭＲアンタゴニストが好ましい。
【００１６】
ドロスピレノン［００１３］に加えて、他のゲスターゲン（ｂ）もまた子宮内膜症の治療において記載されている。これは、一方では卵巣機能の抑制に基づき、他方では子宮内膜の最終分化、最終的に組織壊死に至る脱落膜化をもたらすことに基づく。
【００１７】
ゲスターゲンの作用下では、身体は妊娠が始まったと「思い」、これにより、ホルモン状態の変更が引き起こされる。もはや排卵は起こらず、子宮内膜が消失する。原則として、次いで、子宮内膜症の症状は、６〜８週間以内に弱まる。
【００１８】
デポ−ＭＰＡ（酢酸メドロキシプロゲステロン）およびビサーネ（著作権）（ジェエノゲスト）は、子宮内膜症治療に対して認可されている。ＭＰＡの場合、該化合物の抗エストロゲン作用のために、６ヶ月の使用期間の後に骨量が減少するおそれがある。したがって、２年よりも長く使用してはいけない（非特許文献２）。ゲスターゲンによる治療の間に、さらにまた、一般的な副作用は、出血プロファイル、破綻出血および乳房圧痛の不規則さである（非特許文献３）。
【００１９】
一般的に、ホルモンサイクルに加えて、ゲスターゲンは、また、ゲスターゲンの一般的な副作用としての出血障害で出血プロファイルに影響を与える。これは、また、他のホルモン受容体に対して活性を有し、同時にゲスターゲン性活性を有する物質、例えばスピロノラクトンに適用する。子宮内膜の脱落膜化の間に異常な血管新生（新しい血管形成、子宮内膜において循環的に起こる過程）を介して、血管壁は脆弱になり、月経出血とは独立して、いわゆる破綻出血が生じ、ゲスターゲンによる慢性的な治療の特徴を示す（非特許文献４）。
【００２０】
子宮内膜症患者は、しばしば、いわゆる相対的プロゲステロン抵抗性も有する（非特許文献５）。プロゲステロンシグナル伝達は、子宮内膜症病変内で阻害され、変換を完了し、子宮内膜の剥離がプロゲステロン耐性によって阻止されると考えられる。病変の持続および疾患の慢性経過は、かくして、促進され得る。疾患の永久的治療のために、作用がプロゲステロンシグナル伝達に依存しない治療方法が必要とされる。
【００２１】
ゴナドトロピンゴナドトロピン放出ホルモンアナログ（ＧｎＲＨ）（ｃ）は、現在、子宮内膜症の全ての段階に対して承認された治療薬の代表例である。ＧｎＲＨアナログは、脳下垂体を完全に遮断する。月経周期はもはや生じない。したがって、これらの物質は、女性の身体を一時的に閉経期にシフトし、その結果、子宮内膜症組織もまた、出血しない。当該組織は、発育不全となる。
【００２２】
しかしながら、この治療方法は、副作用のプロファイルのために、短期間（六か月まで）の使用にのみ適している。かくしてＧｎＲＨ−アゴニストは、閉経後の症状、例えば、ホットフラッシュ（８０〜９０）、睡眠障害（６０〜９０％）、膣の乾燥（３０％）、頭痛（２０〜３０％）、気分変動（１０％）、および骨粗鬆症のリスクの増大に関連する骨密度の低下を誘発する。
【００２３】
上記の副作用は別として、治療が終われば、２〜３か月以内に正常な周期が再開する。その後、６０％を超える罹患女性において、子宮内膜症の症状が戻るので、反復治療周期を検討しなければならない。
【００２４】
ＧｎＲＨアナログは、若干優れている副作用プロファイルのために、１９７０年代に確立されたゲスターゲン性アンドロゲンであるダナゾール（登録商標）による標準的な治療に取って代わったにもかかわらず、上記の不利益のために、今までのところ、子宮内膜症の治療における広い応用が見出されていない。
【００２５】
ダナゾール（登録商標）（ｄ）は、子宮内膜症の最初の「古典的な」治療剤であり、１９７０年代までは代表的なものであった。長期使用において、ダナゾール（登録商標）は、男性性ホルモンテストステロンと同様に、女性の男性化を引き起こす。さらなる副作用は、ざ瘡、アンドロゲン過剰症、多毛症および声の高さの（不可逆的）変化のようなアンドロゲンの既知の作用である。
【００２６】
ダナゾール（登録商標）は、ＧｎＲＨアゴニストと同様に、卵巣を刺激するホルモンの生産の原因となる脳下垂体に対して作用する。結果として、卵巣でのエストロゲンの生産が止められる。
【００２７】
したがって、子宮内膜症の非侵襲的治療を可能にし、従来技術の不利益を有さない、代替製剤が緊急に必要とされている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２８】
【特許文献１】欧州特許出願公開第１２５７２８０号明細書
【特許文献２】国際公開第２００８／１０７３７３号
【非特許文献】
【００２９】
【非特許文献１】Chapron et al. Hum Reprod. 2011 Aug; 26(8):2028-35
【非特許文献２】Physician Information for depo-subQ provera 104; Subcutaneous depot medroxyprogesterone acetate versus leuprolide acetate in the treatment of endometriosis-associated pain; P.G.Crosignani et al., Human Reproduction Vol. 2 1, No. 1 pp. 248-256, 2006
【非特許文献３】Brown et al., Cochrane Database Syst Rev. 2012 Mar 14; 3:CD002122.; McCormack Drugs. 2010 Nov 12; 70(16):2073-88
【非特許文献４】Lockwood , Menopause. 2011 Apr; 18(4):408-11
【非特許文献５】Al-Sabbagh et al., Mol Cell Endocrinol. 2012 Jul 25; 358(2):208-15
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００３０】
したがって、本発明が解決しようとする一の課題は、従来技術の不利益を解消する、特に、ゲスターゲンに起因する副作用（例えば、出血障害）またはエストロゲン欠乏に起因する作用（例えば、骨量減少および鬱状態）を回避する新規物質を提供することである。すなわち、本発明が解決しようとする課題は、非ゲスターゲン性物質を提供することである。
【００３１】
本発明が解決しようとするもう１つの課題は、改善された副作用プロファイルを有する慢性治療用物質を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００３２】
式Ｉ：
【化２】
2014532685.tif 000004
で示される化合物が上記の課題を解決し、子宮内膜症の治療に非常に適していることが判明した。６β,７β−メチレン異性体が特に好ましい。この２種類の異性体は、２０１１年１１月４日に出願されたＷＯ２０１２／０５９５９４（図４および５）にて初めて記載されたものであり、本願は、その優先権を主張している。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】図１は、試験物質６による処理後の異種移植子宮内膜症も出るにおける病変のサイズを示す図である。
【図２】図２は、試験物質６による処理後の子宮内膜症同系マウスモデルにおける病変のサイズを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００３４】
したがって、本発明は、式Ｉで示される化合物、式Ｉで示される少なくとも１種類の異性体を含有する医薬製剤、および子宮内膜症の治療におけるその使用に関する。
【００３５】
驚くべきことに、実施例５の表１の＃１（ミネラルコルチコイドおよびプロゲステロン受容体に対するインビトロトランス活性化データ、ゲスターゲン性インビボ作用）に詳しく記載されている６β,７β異性体および実施例５の表１の＃１Ａに詳しく記載されている６α,７α異性体であるこれらの化合物は、例えばMuhnら（Muhn et al., Contraception 1994, 51:99-110）またはKuhnzら（Kuhnz et al., Contraception 1995, 51(2):131-139）によって開示されているような構造上非常に類似する化合物がゲスターゲン性特性を有する（実施例５の表１の＃２および＃３を参照）にもかかわらず、関連動物モデルにおいてゲスターゲン性効果を全く示さない。特に、実施例５の表１の＃１および＃２の数値と＃３および＃４の数値を比べると分かるように、驚くべきことに、当業者に周知のステロイド骨格の１８位にさらにメチル基を挿入した場合のゲスターゲン性インビボ活性の増大は見られなかった。
【００３６】
上記の化合物、特に６β,７β異性体は、今まで利用できた治療よりも優れた作用／副作用プロファイルを示し、したがって、優れた子宮内膜症治療剤である。
【００３７】
さらにまた、本発明の化合物は、公知のミネラルコルチコイド受容体アンタゴニスト（エプレレノン、スピロノラクトン、ドロスピレノン）よりも高い効力およびゲスターゲン性作用がないことを特徴とする。
【００３８】
インビトロトランス活性化アッセイにおいてエプレレノンよりも１０倍低いＩＣ50を有する化合物は、本発明という意味で強力なミネラルコルチコイド受容体アンタゴニストと定義される。
【００３９】
顕著なゲスターゲン性活性を有しないミネラルコルチコイド受容体アンタゴニストは、インビトロプロゲステロン受容体トランス活性化アッセイおよび／またはインビボアッセイ（妊娠の維持のためのゲスターゲン感受性アッセイ）において、全く作用を示さない物質である。
【００４０】
本発明に従って使用可能な化合物は、下記のように製造される。スキーム１による当該新規１８−メチル−６,７−メチレン−３−オキソ−１７−プレグナ−４−エン−２１,１７β−カルボラクトンの合成経路は、例えば、エンジオン２（Kerb, Ger. Offen. (1970), DE 1921396, CAS [31320-40-8]）から出発する。
【００４１】
【化３】
2014532685.tif 000005
【００４２】
公知の方法によって、例えば、Ｒ＝メチルの場合には２,２−ジメトキシプロパンおよびｐ−トルエン硫酸ピリジニウムを用いて、エンジオン２の異性化エステル化によってジエノールエーテル３が製造され、次いで、例えばSturtz（Sturz Synthesis 1980, 289）の方法または別の公知の方法（Bittler Angew. i.e. 21 1982, 696; Laurent J. Steroid Biochem. 19 1983, 771）によって、スピロラクトン４を得る。３,５−ジエノールエーテル４の臭素化および続く臭化水素の開裂（J. Fried, J.A. Edwards, Organic Reactions in Steroid Chemistry, von Nostrand Reinhold Company 1972, S. 265-374）によって、６,７二重結合が導入される。
【００４３】
ジエノールエーテル臭素化は、例えばJ.A. Zdericら（J.A. Zderic, Humberto Carpio, A. Bowers and Carl Djerassi in Steroids 1, 233 (1963)）の詳述と同様に行うことができる。ジメチルホルムアミドのような非プロトン性溶媒中にて、塩基性試薬、例えば臭化リチウムまたは炭酸リチウムと一緒に６−ブロモ化合物を５０〜１２０℃の温度で加熱することによって、またはコリジンまたはルチジンのような溶媒中にて６−ブロモ化合物を加熱することによって、臭化水素が開裂されて化合物５となる（Strike in FR 1529949 (1968), CAS[23675-27-6]）。次いで、これを、例えばジメチルスルホキソニウムメチリド［例えば、独国特許出願公開第１１８３５００号明細書、独国特許出願公開第２９２２５００号明細書、欧州特許出願公開第００１９６９０号明細書、米国特許第４,２９１,０２９号明細書；E. J. Corey and M. Chaykovsky、J. Am. Chem. Soc. 84, 867 (1962)を参照］を用いて、公知の方法による６,７二重結合のシクロプロパン化によって、本発明の式Ｉで示される化合物、すなわち、式６および７で示される立体異性体に変換する。６,７−α−立体異性体と６,７−β−立体異性体の混合物は、例えば、クロマトグラフィーによって、個々の異性体に分離される。
【００４４】
１種または複数の当該活性物質を通常の賦形剤と混合することができる。当該ミネラルコルチコイド受容体アンタゴニストは、当業者に自体公知の方法で製剤化される。
【００４５】
治療上有効量は、体重、投与経路、個体反応、製剤の種類および投与の時点または間隔に依存する。体重７０ｋｇの女性の典型的な投与量の範囲は、１〜１００ｍｇ／日、好ましくは５〜２０ｍｇ／日である。１０ｍｇ／日の投与量が特に好ましい。
【００４６】
本発明は、また、少なくとも１種の本発明の化合物を含有している医薬品であって少なくとも１種以上の他の活性物質を含有していてもよい医薬品、および子宮内膜症治療のためのその使用に関する。適切な併用活性物質として、例えば、好ましくは、以下のものが挙げられる：選択的エストロゲン受容体調節薬（ＳＥＲＭ）、エストロゲン受容体（ＥＲ）アンタゴニスト、アロマターゼ阻害薬、１７β−ＨＳＤ１阻害薬、ステロイドスルファターゼ（ＳＴＳ）阻害薬、適切なＧｎＲＨアゴニスト（特に、スーパーアゴニスト）およびアンタゴニスト、キスペプチン受容体（ＫＩＳＳＲ）アンタゴニスト、選択的アンドロゲン受容体調節薬（ＳＡＲＭ）、５α−レダクターゼ阻害薬、選択的プロゲステロン受容体調節薬（ＳＰＲＭ）、ゲスターゲン、抗ゲスターゲン、経口避妊薬、マイトジェン活性化タンパク質（ＭＡＰ）キナーゼの阻害薬およびＭＡＰキナーゼキナーゼ（Ｍｋｋ３／６、Ｍｅｋ１／２、Ｅｒｋ１／２）の阻害薬、プロテインキナーゼＢ（ＰＫＢα／β／γ；Ａｋｔ１／２／３）の阻害薬、ホスホイノシチド−３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）の阻害薬、サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ１／２）の阻害薬、低酸素誘導シグナル経路の阻害薬（ＨＩＦ１α阻害薬、プロリルヒドロキシラーゼの活性化薬）、ヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）阻害薬、プロスタグランジンＦ受容体（ＦＰ）（ＰＴＧＦＲ）アンタゴニストまたは非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）。
【００４７】
本発明の化合物は、全身作用および／または局所作用を有し得る。この目的のために、それらは、適切な経路、例えば、経口経路、非経口経路、肺経路、鼻経路、舌下経路、舌経路、頬側経路、直腸経路、皮膚経路、経皮経路、結膜経路、局所経路によって、またはインプラントとして、投与され得る。
【００４８】
これらの投与経路については、本発明で使用される化合物は、適切な投与剤形に変換することができる。
【００４９】
式Ｉで示される本発明の化合物に加えてさらなる活性物質が存在する場合、これらは、一般的な投与剤形に製剤化され得るか、または、併用剤として投与されてもよい。
【００５０】
経口投与には、本発明の化合物を結晶形および／または非晶形および／または溶解形で含有する投与剤形、例えば、先行技術に準じて機能し、本発明で使用される化合物を、迅速に、および／または、修飾された様式で放出する、錠剤（非コーティング錠またはコーティング錠、例えば、本発明で使用される化合物の放出を制御する腸溶性コーティング剤または遅延溶解性もしくは不溶性コーティング剤で被覆されている錠剤）、口腔中で迅速に崩壊する錠剤もしくはフィルム剤／オブラート剤、フィルム剤／凍結乾燥剤、カプセル剤（例えば、ハードまたはソフトゼラチンカプセル）、糖衣丸剤、顆粒剤、ペレット剤、散剤、乳剤、懸濁剤、エアゾル剤または液剤が適している。
【００５１】
非経口投与は、吸収工程を回避して（例えば、静脈内経路、動脈内経路、心臓内経路、脊髄内経路または腰椎内経路によって）、または吸収工程を含めて（例えば、筋肉内経路、皮下経路、皮内経路、経皮経路または腹腔内経路によって）行われうる。特に、非経口投与の投与剤形としては、液剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥剤または滅菌散剤の剤形の注射用および点滴用製剤が適している。
【００５２】
他の投与経路には、例えば、吸入用医薬形態（特に、粉末吸入器、ネブライザー）、点鼻薬、鼻用液剤もしくはスプレー剤、舌用、舌下用もしくは頬側用の錠剤、フィルム剤／オブラート剤もしくはカプセル剤、坐剤、膣用カプセル剤、水性懸濁剤（ローション、振盪混合物）、親油性懸濁剤、軟膏剤、クリーム剤、経皮治療システム（例えば、パッチ剤）、ミルク剤、ペースト剤、フォーム剤、散布用散剤、インプラントが適している。
【００５３】
経口投与または非経口投与が好ましく、特に経口投与および静脈内投与が好ましい。
【００５４】
本発明で使用される化合物は、上記した投与剤形に変換され得る。これは、不活性かつ非毒性の医薬的に適している賦形剤と混合することにより、自体公知の方法で行われうる。これらの賦形剤としては、特に、担体（例えば、微結晶セルロース、ラクトース、マンニトール）、溶媒（例、液体ポリエチレングリコール）、乳化剤および分散剤または湿潤剤（例えば、ドデシル硫酸ナトリウム、ポリオキシソルビタンオレエート）、結合剤（例えば、ポリビニルピロリドン）、合成および天然ポリマー（例えば、アルブミン）、安定化剤（例えば、酸化防止剤、例えば、アスコルビン酸）、着色剤（例、無機色素、例えば酸化鉄）ならびに矯味および／または矯臭剤が挙げられる。
【００５５】
それにもかかわらず、必要に応じて、特に体重、投与経路、活性物質に対する個体反応、製剤の種類および投与の時点または間隔に依存して、該用量は上記の量から逸脱してもよい。したがって、上記の最小量より少なくても十分な場合があってもよく、一方上記の上限を超えなければならない場合もある。多量に投与する場合、これらの量を１日で複数の個々の用量に分割することが望ましいこともある。
【００５６】
子宮内膜症動物モデル（実施例４のマウス）において見出されるように、本発明の化合物が上記の範囲の投与量で使用された場合、子宮内膜病変のサイズの減少がインビボで観察され得る。
【００５７】
驚くべきことに、本発明の化合物は、ＭＲに対するインビトロ効力が高いにもかかわらず、ゲスターゲン性効果を全く示さない（実施例５の表１を参照）。
【実施例】
【００５８】
下記の実施例によって本発明を説明するが、これらの実施例は本発明を何ら制限するものではない。
【００５９】
実施例１  １８−メチル−３−オキソ−１７−プレグナ−４,６−ジエン−２１,１７β−カルボラクトン
ａ）３−メトキシ−１８−メチル−アンドロスタ−３,５−ジエン−１７−オン
【化４】
2014532685.tif 000006
トシル酸ピリジニウム３.９ｇを１８−メチル−アンドロスタ−４,６−ジエン−３,１７−ジオン（Kerb, Ger. Offen. (1970), DE 1921396, CAS[31320-40-8]）２７ｇの２,２−ジメトキシプロパン５４０ｍｌ中溶液に添加した。次いで、浴温１００℃で８時間撹拌した。室温に冷却した後、ピリジン５.３ｍｌを添加し、真空下にて蒸発乾固させた。該残留物をメタノール８０ｍｌで沈殿させ、吸引濾過した。３−メトキシ−１８−メチル−アンドロスタ−３,５−ジエン−１７−オン２４.８ｇを無色の固体として得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ＝５.２９−５.２２（ｍ，１Ｈ）、５.１４（ｓ，１Ｈ）、３.５８（ｓ，３Ｈ）、２.４３（ｄｄ，１Ｈ）、２.３６−２.２０（ｍ，２Ｈ）、２.１６−２.０３（ｍ，３Ｈ）、１.９９−１.５７（ｍ，８Ｈ）、１.４９−１.０４（ｍ，７Ｈ）、１.００（ｓ，３Ｈ）、０.８０（ｔ，３Ｈ）［ｐｐｍ］。
【００６０】
ｂ）３−メトキシ−１８−メチル−１７−プレグナ−３,５−ジエン−２１,１７β−カルボラクトン
【化５】
2014532685.tif 000007
テトラヒドロフラン５９ｍｌに溶解したアリル−テトラメチルホスホロジアミデート３６.５ｇを−５５℃の１.６Ｍブチルリチウム溶液（ヘキサン中）２２６ｍｌに滴下した。−５５℃で１時間撹拌した後、−２０℃に加熱し、Ｎ,Ｎ,Ｎ,Ｎ−テトラメチルエタンジアミン４６ｍｌを添加し、室温に加温した。３−メトキシ−１８−メチル−アンドロスタ−３,５−ジエン−１７−オン１８.９ｇのテトラヒドロフラン２１３ｍｌ中溶液を添加し、８０℃でさらに５時間撹拌した。次いで、塩化アンモニウム飽和溶液を添加し、水中に注ぎ、酢酸エチルで３回抽出し、水および塩化ナトリウム溶液で中性になるまで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下にて４０℃で蒸発させた。３−メトキシ−１８−メチル−１７−プレグナ−３,５−ジエン−２１,１７β−カルボラクトン２２.３ｇを得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）：δ＝５.２６−５.２０（ｍ，１Ｈ）、５.１３（ｓ，１Ｈ）、３.５８（ｓ，３Ｈ）、２.５４−２.２５（ｍ，５Ｈ）、２.１９（ｄｔ，１Ｈ）、２.１０（ｄｄ，１Ｈ）、１.９７−１.７７（ｍ，５Ｈ）、１.７３−１.５１（ｍ，６Ｈ）、１.４２（ｑｄ，１Ｈ）、１.３４−１.１２（ｍ，４Ｈ）、０.９８（ｓ，３Ｈ）、０.９７（ｔ，３Ｈ）［ｐｐｍ］。
【００６１】
ｃ）１８−メチル−３−オキソ−１７−プレグナ−４,６−ジエン−２１,１７β−カルボラクトン
【化６】
2014532685.tif 000008
０℃の３−メトキシ−１８−メチル−１７−プレグナ−３,５−ジエン−２１,１７β−カルボラクトン２２ｇのジメチルホルムアミド２２０ｍｌ中懸濁液に、１０％酢酸ナトリウム溶液２２ｍｌ、次いで、１,３−ジブロモ−５,５−ジメチルヒダトイン８.８４ｇを数回に分けて滴下し、０℃（氷浴）で０.５時間撹拌し、臭化リチウム８.２５ｇおよび炭酸リチウム７.２４ｇを添加し、浴温８０℃で５時間撹拌した。次いで、撹拌しながら氷水／食塩に添加し、沈殿物を濾過し、水で洗浄し、ヘキサン／酢酸エチルを用いてシリカゲルクロマトグラフィー処理した。１８−メチル−３−オキソ−１７−プレグナ−４,６−ジエン−２１,１７β−カルボラクトン１０.７ｇを得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）：δ＝６.１７−６.１２（ｍ，１Ｈ）、６.１２−６.０７（ｍ，１Ｈ）、５.６９（ｓ，１Ｈ）、２.６６−２.３２（ｍ，７Ｈ）、２.０７−１.７９（ｍ，５Ｈ）、１.７８−１.５０（ｍ，６Ｈ）、１.４６−１.３６（ｍ，１Ｈ）、１.３２−１.１７（ｍ，３Ｈ）、１.１３（ｓ，３Ｈ）、１.０１（ｔ，３Ｈ）［ｐｐｍ］。
【００６２】
実施例２  １８−メチル−６β,７β−メチレン−３−オキソ−１７−プレグナ−４−エン−２１,１７β−カルボラクトン（６）
【化７】
2014532685.tif 000009
トリメチルスルホキソニウムヨージド５０ｇの水素化ナトリウム（油中５５％）９.７３ｇを含むジメチルスルホキシド７５０ｍｌ中懸濁液をアルゴン下にて室温で２時間溶解し、１８−メチル−３−オキソ−１７−プレグナ−４,６−ジエン−２１,１７β−カルボラクトン（実施例１の記載に従って製造した）２４.７ｇを添加し、室温でさらに２４時間撹拌した。次いで、撹拌しながら、氷水／食塩１５リットルに添加し、沈殿物を濾過し、水で洗浄し、真空下にて６０℃で乾燥させた。粗生成物２２.４ｇを得た。ヘキサン／酢酸エチルを用いてシリカゲルクロマトグラフィー処理して、フラクションＩＩとして、１８−メチル−６β,７β−メチレン−３−オキソ−１７−プレグナ−４−エン−２１,１７β−カルボラクトン７.５ｇを得た。２１０〜２１１℃、[α]D  −１５１.９°±０.０５°（クロロホルム、ｃ＝１０ｍｇ／ｍｌ）
1Ｈ−ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）：δ＝６.０２（ｓ，１Ｈ）、２.６２−２.４４（ｍ，３Ｈ）、２.４３−２.３６（ｍ，３Ｈ）、１.９８−１.８１（ｍ，６Ｈ）、１.７５−１.６５（ｍ，２Ｈ）、１.６５−１.４２（ｍ，８Ｈ）、１.２８−１.１１（ｍ，４Ｈ）、１.０９（ｓ，３Ｈ）、１.０８−１.０１（ｍ，２Ｈ）、０.９６（ｔ，３Ｈ）、０.８０（ｑ，１Ｈ）［ｐｐｍ］。
【００６３】
実施例３  １８−メチル−６α,７α−メチレン−３−オキソ−１７−プレグナ−４−エン−２１,１７β−カルボラクトン（７）
【化８】
2014532685.tif 000010
実施例２の方法に従って、クロマトグラフィー処理後、フラクションＩとして、１８−メチル−６α,７α−メチレン−３−オキソ−１７−プレグナ−４−エン−２１,１７β−カルボラクトン２.９ｇを融点２３０〜２３１℃の固体として得た。[α]D＝１０２.６°±−０.１１°（クロロホルム、ｃ＝１０ｍｇ／ｍｌ）。
1Ｈ−ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）：δ＝５.９５（ｓ，１Ｈ）、２.５８−２.４４（ｍ，３Ｈ）、２.４３−２.３４（ｍ，３Ｈ）、２.２１−２.１５（ｍ，２Ｈ）、１.９８−１.８６（ｍ，５Ｈ）、１.８１−１.７４（ｍ，２Ｈ）、１.６５−１.４８（ｍ，６Ｈ）、１.３４−１.２６（ｍ，２Ｈ）、１.１７−１.０７（ｍ，２Ｈ）、１.１４（ｓ，３Ｈ）、０.９８（ｔ，３Ｈ）、０.８９−０.８４（ｍ，１Ｈ）、０.７７−０.７１（ｍ，１Ｈ）、０.４７（q、１Ｈ）［ｐｐｍ］。
【００６４】
実施例４  インビボ子宮内膜症モデル
霊長類の子宮内膜を有する異種移植子宮内膜症モデル：
子宮内膜症病変の増殖に対する本発明の化合物の効果を調べるために、アカゲザルの子宮内膜を移植した免疫不全ＳＣＩＤマウスにおいて異種移植子宮内膜症モデルを使用した。
霊長類の子宮内膜に最適なホルモン環境を作るために、卵巣摘出ＳＣＩＤマウスにホルモン補充としてエストラジオールおよびプロゲステロンのカプセル剤を投与した。ドナーのサルをエストラジオールおよびプロゲステロンで７日間処理した。次いで、該動物の子宮内膜を掻爬し、２×２×４ｍｍの小片に切り分けた。上記のマウスの腹腔に子宮内膜を開腹手術によって移植するか、または皮下に埋め込んだ。エストラジオールおよびプロゲステロン処理により１４日間病変を増大させた後、１４日間のエストラジオール処理（一月経周期に相当）を行った。該処理は、本発明の化合物０.３、１.０および３.０ｍｇ／ｋｇを２８日間毎日皮下投与することにより開始し、エストラジオール補充を続けた。当該処理期間の後、該動物に最後の開腹手術を行い、動物１匹当たりの病変の重さを測定した。正の対照としてスピロノラクトン１０ｍｇ／ｋｇ（ビヒクル：安息香酸ベンジル／ヒマシ油）を使用した。本発明の化合物６は、１.０および３.０ｍｇ／ｋｇ／日で、ビヒクル（Ａ）または最小用量グループ（Ｂ＝０.３ｍｇ／ｋｇ）と比べて病変の増大に対して有意な効果を示した。測定の結果を図１／２に示す。
【００６５】
同系マウス子宮内膜症モデル：
マウスにおける子宮内膜症の同系誘導は、子宮内膜症治療用物質の効力を試験するために一般的に使用される動物モデルである。同株のドナーマウスからのマウス子宮断片をレシピエントマウスの腹腔に移植することによって、子宮内膜症を実験的に誘発させる。ｂａｌｂ／ｃ株の雌性動物を使用した。膣スミアによってマウスのサイクルを測定した。発情期のドナー動物だけを使用した。ドナー動物を屠殺し、子宮角を取り出し、次いで、縦方向に切開した。パンチを使用して、子宮から２ｍｍの生検組織を打ち抜き、次いで、レシピエント動物に縫合した。該レシピエント動物を麻酔処理し、開腹手術を行った。該手術の間に、ドナーマウスからの子宮パンチサンプル６個をレシピエントマウスの壁側腹膜上に縫合した。この手術の翌日に、試験物質により４週治療を開始した（ビヒクル：Ｔｗｅｅｎ８０／Ｃａｐｔｅｘ  ２００Ｐ）。２８日後、該動物に最後の開腹手術を行い、病変のサイズを測定した。大きくなった病変を写真によって記録し、ＡｘｉｏＶｉｓｉｏｎソフトウエアを使用して面積を測定した。１つの処理グループにつき動物１４匹を使用した。
この場合、試験物質６を３種類の投与スキームで試験し、病変のサイズをビヒクル処理グループ（グループＡ）と比べて評価した。下記の投与量を試験した：３、１０および３０ｍｇ／ｋｇ／日（グループＢ、Ｃ、Ｄ）。図２／２は、動物１匹当たりの病変の平均サイズ（ｍｍ2）（ｙ軸）を示した。
【００６６】
実施例５  ＭＲおよびＰＲに対するインビトロ／インビボ作用
表１は、物質のゲスターゲン性についてのインビボデータを示す。インビボでのゲスターゲン性は、２種類のアッセイによって測定することができる：１つは、ラットにおける妊娠維持試験であり、もう１つは、ウサギにおけるＭｃＰｈａｉｌ試験（子宮内膜変換）である。本発明の化合物６および７の入手可能なデータが（表１の＃１および＃１Ａ）示され、比較のためにスピロノラクトンのデータを示す。アッセイ間の同等性を確保するために、ゲスターゲンであるドロスピレノンおよびレボノルゲストレルが示され、そのデータは、両アッセイから分かる。さらにまた、１８−メチル基のゲスターゲン性効力二対する効果を説明するために、レボノルゲストレルと共にノルエチステロンが示される。
【００６７】
【表１】
2014532685.tif 000011
６  Muhn et al., Contraception 1994, 51: 99-110
７  Kuhnz et al., Contraception 1995, 51(2): 131-139
１４  Phillips et al., Contraception 1987, 36(2): 181-192
【００６８】
インビトロトランス活性化データ（ＩＣ50値）およびゲスターゲン性インビボ活性は、下記のとおりに測定した。
【００６９】
１．他のステロイドホルモン受容体に対する阻害性ＭＲ活性およびＭＲ選択性を測定するための細胞インビトロ試験
ヒトのミネラルコルチコイド受容体（ＭＲ）のアンタゴニストを同定するため、および本明細書に記載の化合物の効力を定量化するために、組換え細胞株を使用する。該細胞は、ハムスターの卵巣上皮細胞に由来した（チャイニーズハムスター卵巣、ＣＨＯ  Ｋ１、ＡＴＣＣ：  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、ＶＡ  ２０１０８、ＵＳＡ）。
このＣＨＯ  Ｋ１細胞株において、ヒトステロイドホルモン受容体のリガンド結合ドメインが酵母転写因子ＧＡＬ４のＤＮＡ結合ドメインと融合されている確立したキメラシステムを使用する。得られたＧＡＬ４ステロイドホルモン受容体キメラは、ＣＨＯ細胞中にレポーター構築物を同時導入され、安定に発現される。
【００７０】
クローニング：
ＧＡＬ４ステロイドホルモン受容体キメラを作成するために、ベクターｐＦＣ２−ｄｂｄ（Stratagene社から）からのＧＡＬ４−ＤＮＡ結合ドメイン（アミノ酸１−１４７）をミネラルコルチコイド受容体（ＭＲ、アミノ酸７３４−９８５）およびプロゲステロン受容体（ＰＲ、アミノ酸６８０−９３３）のＰＣＲ増幅結合ドメインと一緒にベクターｐＩＲＥＳ２（Clontech社から）にクローン化する。チミジンキナーゼプロモーターの上流に５コピーのＧＡＬ４結合部位を含有するレポーター構築物は、それぞれの特異的なアゴニストアルドステロン（ＭＲ）およびプロゲステロン（ＰＲ）によるＧＡＬ４ステロイドホルモン受容体キメラの活性化および結合後にホタルルシフェラーゼ（Photinus pyralis）を発現させる。
【００７１】
試験手順：
試験前日に、９６ウェル（または３８４ウェルまたは１５３６ウェル）マイクロタイタープレートの培地（Ｏｐｔｉｍｅｍ、２.５％ＦＣＳ、２ｍＭグルタミン、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ）中にＭＲ細胞およびＰＲ細胞を蒔き、セルインキュベーター（空気湿度９６％、５％ｖ／ｖＣＯ2、３７℃）中に保持する。試験当日に、上記培地に試験物質を溶かし、細胞を加える。試験物質の添加から約１０〜３０分後、ステロイドホルモン受容体のそれぞれの特異的なアゴニストを添加する。さらに５〜６時間インキュベートした後、ルシフェラーゼ活性をビデオカメラで測定する。測定した比較的明るいユニットが物質濃度の関数としてＳ字型の刺激曲線を生じる。コンピュータープログラムＧｒａｐｈＰａｄ  ＰＲＩＳＭ（version ３.０２）を用いて、ＩＣ50値を算出する。
【００７２】
２．インビボゲスターゲン性活性試験：ラットにおける妊娠維持
妊娠維持試験は、子宮内膜のゲスターゲンに対する応答を非常に高感度に調べるモデルである。妊娠は、有効なゲスターゲンの存在下でのみ継続される。妊娠ラットを卵巣切除し、試験物質または正の対照で７日間処理する。処理が終わった後に、試験物質のゲスターゲン性作用、すなわち妊娠維持作用の指標として、胎仔の生存数および死亡数を測定する。
【００７３】
３．インビボゲスターゲン性活性試験：ウサギにおけるＭｃＰｈａｉｌアッセイ
雌性ウサギを卵巣切除する。卵巣切除から７日後、該動物にエストラジオールを６日間投与する。該動物を試験物質で５日間処理し、次いで、子宮を取り出し、組織学的に調製する。ゲスターゲン性作用の指標として、子宮内膜の分泌転換を評価する（分泌転換の発現がある閾値量）。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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