(57)【要約】本発明は、糖アルコールに基づく新規の化学物質を提供する。これらの新規の化学物質は、生体適合性および生分解性である。その分子は、単一および純粋な形態で作製することができる。これらの分子の分子量は、小さなもの（＜１０００Ｄａ）から大きなもの（１０００〜１２０，０００Ｄａ）までの範囲にわたる。上記糖アルコールベースの分子は、架橋化合物のため、例えば、抗体薬物コンジュゲートの調製のための、または治療用タンパク質、ペプチド、ｓｉＲＮＡ、および化学療法薬のデリバリーを促進するための官能基を分子全体にわたり有することができる。糖アルコール分子を介して調製される新規コンジュゲート物質もまた提供される。糖アルコールベースの分子およびコンジュゲートを合成する方法もまた本発明の範囲内である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｍ１−（Ｌ−Ｂ）ｕ  式（Ｉ）、および
Ｂ−（Ｌ−Ｍ１）ｕ  式（ＩＩ）
からなる群から選択される構造式を有するコンジュゲートであって、
該式中、
各Ｍ１は、独立して、タンパク質、酵素、抗体、抗体フラグメント、ポリペプチド、オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド類似体、および多糖からなる群から選択され、
各Ｂは、１〜約２０００個の糖アルコールモノマーを含む改変された糖アルコールポリマーであり、
各モノマーは、３〜約１４の−ＯＲ１基を有し、
各Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択され、
各Ｌは、独立して、結合および構造−Ｖ１−Ｒ２−Ｖ２−からなる群から選択され、
各Ｖ１およびＶ２は、独立して、ディールス‐アルダー付加物、１，３−双極性付加物、
【化１６２】
2014521319.tif 000165
からなる群から選択され、
各Ｇ１は、独立して、Ｎ、Ｒ３、Ｏ、およびＳからなる群から選択され、
各Ｇ２は、独立して、ＯおよびＳからなる群から選択され、
各Ｇ３は、独立して、Ｓ、Ｏ、ＮＲ３、およびＳＯ２からなる群から選択され、
各Ｇ４は、独立して、ＯおよびＮＲ３からなる群から選択され、
各Ｒ２は、独立して、結合、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−ＣＨ２−、必要に応じて置換されているアリシクリル、ヘテロアリシクリル、アリール、ペプチド、およびペプチド模倣オリゴマーからなる群から選択され、
各Ｒ３は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜３、アリシクリル、およびヘテロアリシクリルからなる群から選択され、Ｒ３における任意の環は必要に応じて置換されており、
各Ｒ４は、独立して、Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
ｕは、１〜約２０の整数である、
コンジュゲート。
【請求項２】
構造式：
（Ｍ２−Ｌ）ｑ−Ｂ  式（ＩＩＩ）を有するコンジュゲートであって、
該式中、
各Ｍ２は、独立して、代謝物、蛍光化合物、化学発光化合物、質量タグ、発色団、ビオチン、毒素、薬物、化学療法剤、細胞毒性剤、免疫抑制剤、診断剤、放射リガンド、および低分子からなる群から選択され、
各Ｂは、１〜約２０００個の糖アルコールモノマーを含む改変された糖アルコールポリマーであり、
各モノマーは、３〜約１４の−ＯＲ１基を有し、
各Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択され、
各Ｌは、独立して、結合および構造−Ｖ１−Ｒ２−Ｖ２−からなる群から選択され、
各Ｖ１およびＶ２は、独立して、ディールス‐アルダー付加物、１，３−双極子付加物、
【化１６３】
2014521319.tif 000166
からなる群から選択され、
各Ｇ１は、独立して、ＮＲ３、Ｏ、およびＳからなる群から選択され、
各Ｇ２は、独立して、ＯまたはＳからなる群から選択され、
各Ｇ３は、独立して、Ｓ、Ｏ、ＮＲ３、およびＳＯ２からなる群から選択され、
各Ｇ４は、独立して、ＯまたはＮＲ３からなる群から選択され、
各Ｒ２は、独立して、結合、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−ＣＨ２−、必要に応じて置換されているアリシクリル、ヘテロアリシクリル、アリール、ペプチド、およびペプチド模倣オリゴマーからなる群から選択され、
各Ｒ３は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜３、アリシクリル、およびヘテロアリシクリルからなる群から選択され、Ｒ３における任意の環は必要に応じて置換されており、
各Ｒ４は、独立して、Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
ｑは、１〜約１００の整数である、
コンジュゲート。
【請求項３】
（Ｍ１）ｑ−Ｌ−（Ｂ−（Ｌ−Ｍ２）ｋ）ｕ  式（ＩＶ）、
（Ｍ１−Ｌ）ｑ−（Ｂ−（Ｌ−Ｍ２）ｋ）ｕ  式（Ｖ）、および
Ｍ１−（Ｌ−Ｂ−（Ｌ−Ｍ２）ｋ）ｕ  式（ＶＩ）
からなる群から選択される構造式を有するコンジュゲートであって、
該式中、
各Ｍ１は、独立して、タンパク質、酵素、抗体、抗体フラグメント、ポリペプチド、アビジン、ストレプトアビジン、オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド類似体、および多糖からなる群から選択され、
各Ｍ２は、独立して、代謝物、蛍光化合物、化学発光化合物、質量タグ、発色団、ビオチン、毒素、薬物、化学療法剤、細胞毒性剤、免疫抑制剤、診断剤、放射リガンド、および低分子からなる群から選択され、
各Ｂは、１〜約２０００個の糖アルコールモノマーを含む改変された糖アルコールポリマーであり、
各モノマーは、３〜約１４の−ＯＲ１基を有し、
各Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択され、
各Ｌは、独立して、結合および構造−Ｖ１−Ｒ２−Ｖ２−からなる群から選択され、
各Ｖ１およびＶ２は、独立して、ディールス‐アルダー付加物、１，３−双極子付加物、
【化１６４】
2014521319.tif 000167
からなる群から選択され、
各Ｇ１は、独立して、ＮＲ３、Ｏ、およびＳからなる群から選択され、
各Ｇ２は、独立して、ＯおよびＳからなる群から選択され、
各Ｇ３は、独立して、Ｓ、Ｏ、ＮＲ３、およびＳＯ２からなる群から選択され、
各Ｇ４は、独立して、ＯおよびＮＲ３からなる群から選択され、
各Ｒ２は、独立して、結合、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−ＣＨ２−、必要に応じて置換されているアリシクリル、ヘテロアリシクリル、アリール、ペプチド、およびペプチド模倣オリゴマーからなる群から選択され、
各Ｒ３は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜３、アリシクリル、およびヘテロアリシクリルからなる群から選択され、Ｒ３における任意の環は必要に応じて置換されており、
各Ｒ４は、独立して、Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
ｕは、１〜約１００の整数であり、
ｑは、１〜約１００の整数であり、
ｋは、０または１〜約２０の整数である、
コンジュゲート。
【請求項４】
請求項１および２に記載のコンジュゲートであって、
Ｂが、約４〜約２０００個の糖アルコールモノマーを含む
コンジュゲート。
【請求項５】
請求項１および３に記載のコンジュゲートであって、
ｕが、１〜約２０の整数である
コンジュゲート。
【請求項６】
請求項３に記載のコンジュゲートであって、
Ｍ１が、抗体および抗体フラグメントからなる群から選択され、
Ｍ２が化学療法薬であり、
ｑが１であり、
ｕが１〜約２０の整数であり、
ｋが１〜約１０の整数である、
コンジュゲート。
【請求項７】
請求項６に記載のコンジュゲートであって、
ｋが１であり、ｕが１〜約８から選択される整数である
コンジュゲート。
【請求項８】
前記糖アルコールモノマーがエーテル結合で一緒に結合している、請求項１、２、３、４、５、または６に記載のコンジュゲート。
【請求項９】
請求項２、３、４、５、６、７、または８のいずれかに記載のコンジュゲートであって、
Ｍ２が化学療法剤である
コンジュゲート。
【請求項１０】
請求項９に記載のコンジュゲートであって、
Ｍ２が、抗がん療法において使用される化学療法剤である
コンジュゲート。
【請求項１１】
請求項１０に記載のコンジュゲートであって、
Ｍ２が、副腎皮質抑制剤、代謝拮抗剤、アルキル化剤、アルキルスルホネート、抗生剤、抗有糸分裂剤、アントラサイクリン、抗脈管形成剤、カンプトテシン、ＣＯＸ−２阻害剤、ＣＰＴ−１１、ドキソルビシン、ドキソルビシン類似体、酵素阻害剤、エンドスタチン、エピポドフィロトキシン、エチレンイミン誘導体、葉酸類似体、ゲムシタビン、ＨＤＡＣ阻害剤、熱ショックタンパク質（ＨＳＰ）９０阻害剤、ホルモンアンタゴニスト、メトトレキセート、メチルヒドラジン誘導体、ｍＴＯＲ阻害剤、ニトロソウレア、ナイトロジェンマスタード、ピリミジン類似体、プリン類似体、白金配位錯体、置換尿素、ＳＮ−３８、タキソール、トリアゼン、タキサン、チロシンキナーゼ阻害剤、プロテオソーム阻害剤、プロアポトーシス剤、ビンカアルカロイド、パクリタキセル、メイタンシン、カリケマイシン、およびドラスタチンからなる群から選択される
コンジュゲート。
【請求項１２】
請求項１、３、４、５、６、７、または８のいずれかに記載のコンジュゲートであって、
Ｍ１が抗体である
コンジュゲート。
【請求項１３】
前記抗体が完全ヒト抗体である、請求項１２に記載のコンジュゲート。
【請求項１４】
前記抗体が、腫瘍関連抗原、膵がんに関連する抗原、悪性疾患に関連する抗原、自己免疫疾患に関連する抗原、免疫機能不全疾患に関連する抗原、白血病に関連する抗原、神経疾患に関連する抗原、膜貫通アクチベータに対する抗原、およびＣＡＭＬ−相互作用因子に対する抗原からなる群から選択される抗原に対して特異的である、請求項１３のいずれかに記載のコンジュゲート。
【請求項１５】
前記抗体が、ＣＡ１２５、ＣＡ１５−３、ＣＡ１９−９、Ｌ６、Ｌｅｗｉｓ  Ｙ、Ｌｅｗｉｓ  Ｘ、アルファフェトプロテイン、ＣＡ  ２４２、胎盤アルカリホスファターゼ、前立腺特異抗原、前立腺酸ホスファターゼ、上皮成長因子、ＭＡＧＥ−１、ＭＡＧＥ−２、ＭＡＧＥ−３、ＭＡＧＥ−４、抗トランスフェリン受容体、ｐ９７、ＭＵＣ１−ＫＬＨ、ＣＥＡ、ｇｐ１００、ＭＡＲＴ１、ＩＬ−２受容体、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ２５、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４６、ＣＤ５２、ＣＤ５４、ＣＤ６６ａ−ｄ、ＣＤ６７、ＣＤ７４、ＣＤ７９ａ、ＣＤ８０、ＣＤ１２６、ＣＤ１３８、ＣＤ１５４、Ｂ７、ＭＵＣ１、ＬＡＬＩ、ＨＭ１．２４、ＨＬＡ−ＤＲ、テネイシン、ＶＥＧＦ、ＰＩＧＦ、ＥＤ−Ｂフィブロネクチン、がん遺伝子、がん遺伝子生成物、壊死抗原、Ｔ１０１、ＴＡＧ、ＩＬ−６、ＭＩＦ、ＴＲＡＩＬ−Ｒ１（ＤＲ４）、ＴＲＡＩＬ−Ｒ２（ＤＲ５）、ヒト絨毛性ゴナドトロピン、ムチン、Ｐ２１、ＭＰＧ、およびＮｅｕがん遺伝子生成物からなる群から選択される抗原に対して特異的である、請求項１４のいずれかに記載のコンジュゲート。
【請求項１６】
請求項２、３、４、５、６、７、または８に記載のコンジュゲートであって、
少なくとも１つのＭ２が、放射性同位元素を含む
コンジュゲート。
【請求項１７】
請求項１、３、４、５、６、７、または８に記載のコンジュゲートであって、
少なくとも１つのＭ１が治療用タンパク質またはポリペプチドである
コンジュゲート。
【請求項１８】
前記治療用タンパク質のアミノ酸配列が、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、インターフェロン、インターフェロンアルファ−２ａ、インターフェロンアルファ−２ｂ、インターロイキン、インターロイキン−２、エリスロポエチン、成長ホルモン、ヒト成長ホルモン、アポミオグロビン、アスパラギナーゼ、レプチン、血清タンパク質、ヒト絨毛性ゴナドトロピン、インスリン、ろ胞刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、尿酸オキシダーゼ、アデノシンデアミナーゼ、抗体融合タンパク質、およびＶＩＩ因子からなる群から選択される野生型治療用タンパク質に対して少なくとも８０％の配列相同性を含有する、請求項１７に記載のコンジュゲート。
【請求項１９】
前記治療用タンパク質のアミノ酸配列が、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、インターフェロン、インターフェロンアルファ−２ａ、インターフェロンアルファ−２ｂ、インターロイキン、インターロイキン−２、エリスロポエチン、成長ホルモン、ヒト成長ホルモン、アポミオグロビン、アスパラギナーゼ、レプチン、血清タンパク質、ヒト絨毛性ゴナドトロピン、インスリン、ろ胞刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、尿酸オキシダーゼ、アデノシンデアミナーゼ、抗体融合タンパク質、およびＶＩＩ因子からなる群から選択される野生型治療用タンパク質に対して少なくとも９０％の配列相同性を含有する、請求項１７に記載のコンジュゲート。
【請求項２０】
請求項１、３、４、５、６、７、または８に記載のコンジュゲートであって、
少なくとも１つのＭ１が、オリゴヌクレオチドおよびｓｉＲＮＡからなる群から選択される
コンジュゲート。
【請求項２１】
Ｓ−（Ｌ−Ｂ−（Ｌ−Ｍ１）ｋ）ｕ  式（ＶＩＩ）、
Ｓ−（Ｌ−Ｂ−Ｌ−（Ｍ１）ｋ）ｕ  式（ＶＩＩＩ）、
Ｓ−（Ｌ−Ｂ−（Ｌ−Ｍ２）ｋ）ｕ  式（ＩＸ）、および
Ｓ−（Ｌ−Ｂ−Ｌ−（Ｍ２）ｋ）ｕ  式（Ｘ）
からなる群から選択される構造式を有するコンジュゲートであって、
該式中、
Ｓは、固体支持体を含み、
各Ｍ１は、独立して、タンパク質、酵素、抗体、抗体フラグメント、ポリペプチド、アビジン、ストレプトアビジン、オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド類似体、多糖からなる群から選択され、
各Ｍ２は、独立して、代謝物、蛍光化合物、化学発光化合物、質量タグ、発色団、ビオチン、毒素、薬物、化学療法剤、細胞毒性剤、免疫抑制剤、診断剤、放射リガンド、低分子からなる群から選択され、
各Ｂは、１〜約２０００個の糖アルコールモノマー含む改変された糖アルコールポリマーであり、
各モノマーは、３〜約１４の−ＯＲ１基を有し、
各Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択され、
各Ｌは、独立して、結合および構造−Ｖ１−Ｒ２−Ｖ２−からなる群から選択され、
各Ｖ１およびＶ２は、独立して、ディールス‐アルダー付加物、１，３−双極子付加物、
【化１６５】
2014521319.tif 000168
からなる群から選択され、
各Ｇ１は、独立して、ＮＲ３、Ｏ、およびＳからなる群から選択され、
各Ｇ２は、独立して、ＯおよびＳからなる群から選択され、
各Ｇ３は、独立してＳ、Ｏ、ＮＲ３、およびＳＯ２からなる群から選択され、
各Ｇ４は、独立して、ＯおよびＮＲ３からなる群から選択され、
各Ｒ２は、独立して、結合、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−ＣＨ２−、必要に応じて置換されているアリシクリル、ヘテロアリシクリル、アリール、ペプチド、およびペプチド模倣オリゴマーからなる群から選択され、
各Ｒ３は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜３、アリシクリル、およびヘテロアリシクリルからなる群から選択され、Ｒ３における任意の環は必要に応じて置換されており、
各Ｒ４は、独立して、Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
ｕは、１〜約５００の整数であり、
ｋは、０または１〜約２０の整数である、
コンジュゲート。
【請求項２２】
請求項２１に記載のコンジュゲートであって、
Ｂが３〜約１０００個の糖アルコール単位を含む
コンジュゲート。
【請求項２３】
請求項２１に記載のコンジュゲートであって、
Ｓが、ポリスチレン支持体、ポリアミド支持体、ポリエチレングリコール支持体、ポリアクリル支持体、ポリアクリル／ベータ−アラニンコポリマー支持体、ポリアクリルアミド／ポリスチレンコポリマー支持体、ポリアクリルアミド／ポリエチレングリコールコポリマー支持体、ポリエチレングリコール／ポリスチレンコポリマー支持体、調節された細孔ガラス、アガロース、デキストランゲル、多糖ベースのポリマー、ポリマーミクロスフェア、ラテックスミクロスフェア、ポリスチレンからなるポリマー粒子、スチレン、ポリ（メチルメタクリレート）、ポリビニルトルエン、ポリ（２−ヒドロキシエチルメタクリレート）のコポリマーからなるポリマー粒子、ポリ（２−ヒドロキシエチルメタクリレート）、ポリ（エチレングリコールジメタクリレート／２−ヒドロキシエチルメタクリレート）、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）のコポリマー、無機構築物、金属、半導体、超常磁性複合材、生分解性構築物、合成デンドリマー、デンドロン、量子ドット、色素コーティングされた粒子、および磁気コーティングされた粒子からなる群から選択される
コンジュゲート。
【請求項２４】
請求項２３に記載のコンジュゲートであって、
Ｓがアガロースビーズである
コンジュゲート。
【請求項２５】
請求項２３に記載のコンジュゲートであって、
Ｓが磁気コーティングされた粒子である
コンジュゲート。
【請求項２６】
請求項１、２、３、４、５、６、または２１のいずれかに記載のコンジュゲートであって、
各Ｂが、１〜約２０００個の糖アルコールモノマーＢ１を含む、改変された糖アルコールポリマーであり、
各糖アルコールモノマーが、１つのモノマー単位のＸ、ＹまたはＺ部分と、別のモノマー単位のＸ、ＹまたはＺとの間の反応により形成される連結基Ｗを介して、１つまたは複数の糖アルコールモノマーと結合しており、
各Ｂ１が、独立して、式ＸＩの化学構造：
【化１６６】
2014521319.tif 000169
であって、該式中、ｎおよびｐのそれぞれは、独立して、０および１〜約１２から選択される整数から選択され、ｎ＋ｐは、１〜１２の間であり、
ｒは０または１であり、
【化１６７】
2014521319.tif 000170
で表される各結合は、単結合または二重結合であり、
Ｑは、＝Ｏ、＝Ｎ−Ｏ−Ｌ−Ｍ１、＝Ｎ−Ｏ−Ｌ−Ｍ２、＝Ｎ−Ｏ−Ｌ−Ｓ、−ＮＨ−Ｏ−Ｌ−Ｓ、−ＮＨ−Ｏ−Ｌ−Ｍ１、および−ＮＨ−Ｏ−Ｌ−Ｍ２からなる群から選択され、
Ｘ、ＹおよびＺのそれぞれは、Ｍ１、Ｍ２またはＳと結合している場合、リンカーＶであり、
Ｘ、ＹおよびＺのそれぞれは、ＳともＭ１、Ｍ２とも結合していない場合、−ＯＨ、−Ｊ、−Ｒ５Ｊ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｊ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｊ、
−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｊ、−ＯＲ５、−ＯＲ６、−ＯＲ７、−Ｏ−メシル、−Ｏ−トシル、
−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｏ−メシル、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｏ−トシル、−ＳＨ、−Ｓ−Ｓ−ｔブチル、
−ＳＲ７、−ＳＲ５、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｊ、−ＮＨ２、−ＮＨＲ５、−Ｎ（Ｒ５）Ｒ５、−ＮＨＲ７、−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、
−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ５、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、−Ｎ＝Ｃ＝Ｓ、−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、−Ｃ≡Ｃ−Ｒ５、
−Ｎ＝Ｎ＋＝Ｎ−、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、
−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）、−ＮＨ−ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ２、
−ＮＨ−Ｃ（＝Ｓ）−ＮＨ−ＮＨ２、−トルエンスルホニルヒドラジド、−Ｒ５−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ２＋）−ＮＨ２、
ベンゾフェノン、アリールジアゾニウム、ジアゾアルカン、ジアゾアセチル、アントラキノン、ジアジリン、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、ジエン、ジエノフィル、１，３−双極子、親双極子、アルケン、ケテン、オレフィン、アリル型水素を有するアルケン、ジカルボニル基、エポキシド、オキシラン、オルガノシラン、ホスホニウム基、エステル、無水物、カーボネート基、グリオキサール、−Ｃ（＝ＮＨ２）−Ｏ−Ｒ５、ヒドロキシメチルホスフィン誘導体、エチルビニル、マレイミド、ビニルスルホン、アリルスルホン、チオエステル、シスプラチン誘導体、アジリジン、アクリロイル基からなる群から独立して選択される官能基であり、
各Ｒ５は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アリシクリル、ヘテロアリシクリル、ベンジルまたはアリールからなる群から選択され、Ｒ５における任意の環は必要に応じて置換されており、
各Ｒ６は、独立して、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルから選択され、
各Ｒ７は、独立して、トリチル、ＭＭＴ、およびＤＭＴからなる群から選択され、
各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルからなる群から選択され、
各Ｊは、独立して、Ｃｌ、ＢｒおよびＩからなる群から選択され、
Ｌ１、Ｌ２、およびＬ３のそれぞれは、独立して、結合または−Ｒ９−Ｖ−Ｒ２−＊であって、
該式中、「＊」は、Ｘ、Ｙ、Ｓ、Ｍ１もしくはＭ２、またはＺにそれぞれ結合しているＬ１、Ｌ２、およびＬ３の部分を表しており、
各ＷおよびＶは、独立して、ディールス‐アルダー付加物、１，３−双極子付加物、
【化１６８】
2014521319.tif 000171
からなる群から選択され、
各Ｇ１は、独立して、ＮＲ３、Ｏ、およびＳから選択され、
各Ｇ２は、独立して、ＯまたはＳであり、
各Ｇ３は、独立して、Ｓ、Ｏ、ＮＲ３、およびＳＯ２から選択され、
各Ｇ４は、独立して、ＯまたはＮＲ３であり、
各Ｒ２は、独立して、結合、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−ＣＨ２−、必要に応じて置換されているアリシクリル、ヘテロアリシクリル、アリール、ペプチド、およびペプチド模倣オリゴマーから選択され、
各Ｒ３は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜３、必要に応じて置換されているアリシクリル、および必要に応じて置換されているヘテロアリシクリルから選択され、
各Ｒ４は、独立して、Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
各Ｒ９は、結合または−ＣＨ２−であり、
少なくとも、該Ｂ１単位の１つにおいて、各−Ｌ３−Ｚ部分は−ＯＲ１であり、各Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択される化学構造を有する、コンジュゲート。
【請求項２７】
請求項２６に記載のコンジュゲートであって、
Ｂが式ＸＩＩの化学構造：
【化１６９】
2014521319.tif 000172
であって、該式中、
【化１７０】
2014521319.tif 000173
は、Ｍ１、Ｍ２またはＳへの結合を表し、
Ｌ４のそれぞれは、Ｍ１、Ｍ２またはＳと結合している場合、リンカーＶであり、
ｋが０である場合、
【化１７１】
2014521319.tif 000174
はＹを表し、ｋが、１〜約２０から選択される整数である場合、
【化１７２】
2014521319.tif 000175
は、Ｍ１、Ｍ２またはＳへの結合を表す化学構造を有する、コンジュゲート。
【請求項２８】
請求項２６に記載のコンジュゲートであって、
Ｂが、化学構造式ＸＩＩＩ：
＊１−Ｌ４−（Ｂ１−Ｗ）ｓ−Ｂ１−Ｌ４−＊２  （ＸＩＩＩ）
であって、該式中、
「＊１」は、Ｓ、Ｍ１またはＭ２に結合している該Ｌ４の部分を表し、
Ｌ４のそれぞれは、Ｍ１、Ｍ２またはＳと結合している場合、リンカーＶであり、
ｓは、０または１〜約５００から独立して選択される整数であり、
ｋが０である場合、Ｌ４−＊２はＹを表し、
ｋが１〜約２０から選択される整数である場合、「＊２」は、Ｍ１、Ｍ２、またはＳに結合している該Ｌ４の部分を表し、
各Ｂ１は、独立して、化学構造式ＸＩＶ：
【化１７３】
2014521319.tif 000176
を有し、
【化１７４】
2014521319.tif 000177
は、Ｌ１への結合を表し、
【化１７５】
2014521319.tif 000178
は、Ｌ２への結合を表す化学構造式ＸＩＩＩを有する、コンジュゲート。
【請求項２９】
３つ以上の単量体糖アルコール単位Ｂ１を含む直鎖状、分枝または大環状マルチマーの糖アルコールを有する化合物であって、
各単量体糖アルコール単位が、１つのモノマー単位のＸ、ＹまたはＺ部分と、別のモノマー単位のＸ、ＹまたはＺとの間の反応により形成される連結基Ｗを介して、１つまたは複数の他のモノマー単位と結合しており、
各Ｂ１が、化学構造式ＸＶ：
【化１７６】
2014521319.tif 000179
であって、該式中、各Ｂ１について、独立して、
ｎおよびｐのそれぞれは、独立して、０および１〜約１２から選択される整数から選択され、
ｎ＋ｐは１〜１２の間であり、
ｒは０または１であり、
Ｘ、ＹおよびＺのそれぞれは、独立して、−ＯＨ、−Ｊ、−Ｒ５Ｊ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｊ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｊ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｊ、−ＯＲ５、−ＯＲ６、−ＯＲ７、−Ｏ−メシル、−Ｏ−トシル、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｏ−メシル、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｏ−トシル、−ＳＨ、−Ｓ−Ｓ−ｔブチル、−ＳＲ７、−ＳＲ５、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｊ、−ＮＨ２、−ＮＨＲ５、−Ｎ（Ｒ５）Ｒ５、−ＮＨＲ７、−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ５、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、−Ｎ＝Ｃ＝Ｓ、−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、−Ｃ≡Ｃ−Ｒ５、−Ｎ＝Ｎ＋＝Ｎ−、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）、−ＮＨ−ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｓ）−ＮＨ−ＮＨ２、−トルエンスルホニルヒドラジド、−Ｒ５−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ２＋）−ＮＨ２、ベンゾフェノン、アリールジアゾニウム、ジアゾアルカン、ジアゾアセチル、アントラキノン、ジアジリン、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、ジエン、ジエノフィル、１，３−双極子、親双極子、アルケン、ケテン、オレフィン、アリル型水素を有するアルケン、ジカルボニル基、エポキシド、オキシラン、オルガノシラン、ホスホニウム基、エステル、無水物、カーボネート基、グリオキサール、−Ｃ（＝ＮＨ２）−Ｏ−Ｒ５、ヒドロキシメチルホスフィン誘導体、エチルビニル、マレイミド、ビニルスルホン、アリルスルホン、チオエステル、シスプラチン誘導体、アジリジン、アクリロイル基から選択され、
各Ｒ５は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アリシクリル、ヘテロアリシクリル、ベンジルまたはアリールから選択され、Ｒ５における任意の環が必要に応じて置換されており、
各Ｒ６は、独立して、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルから選択され、
各Ｒ７は、独立して、トリチル、ＭＭＴ、およびＤＭＴから選択され、
各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択され、
各Ｊは、独立して、Ｃｌ、ＢｒおよびＩから選択され、
Ｌ１、Ｌ２、およびＬ３のそれぞれは、独立して、結合または−Ｒ９−Ｖ−Ｒ２−＊であり、該式中、「＊」は、Ｘ、Ｙ、またはＺにそれぞれ結合しているＬ１、Ｌ２、およびＬ３の部分を表わしており、
各ＶおよびＷは、独立して、ディールス‐アルダー付加物、１，３−双極子付加物、−Ｃ（＝Ｇ２）−Ｇ１−、−Ｇ１−Ｃ（＝Ｇ２）−、−Ｇ３−、−Ｇ１−Ｃ（＝Ｇ２）−Ｇ１−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｓ−（ＣＨ２）２−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｓ（＝Ｏ）２−（ＣＨ２）２−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｎ（Ｒ３）−、−Ｎ（Ｒ３）−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｎ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝Ｎ−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、
−ＣＨ２−ＮＨ−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ３）−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｎ（Ｒ３）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ２ＳＨ）−、
−Ｎ＝ＣＨ−、−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＣＨ＝Ｎ−Ｇ４−、
−ＣＨ２−ＮＨ−Ｇ４−、−Ｇ４−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｇ４−Ｎ＝ＣＨ−、−Ｃ（＝ＮＨ２＋）−ＮＨ−、
−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ２＋）−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（Ｏ−）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｐ（＝Ｏ）（Ｏ−）−Ｏ−、
−ＣＨ２−ＣＨ（ＮＨ２）−ＣＨ２−Ｓ−、−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ（ＮＨ２）−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（Ｏ−）−Ｏ−、
−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（Ｓ−）−Ｏ−、および−Ｏ−Ｐ（＝Ｓ）（Ｓ−）−Ｏ−、
【化１７７】
2014521319.tif 000180
からなる群から選択され、
各Ｇ１は、独立して、ＮＨ、Ｏ、およびＳから選択され、
各Ｇ２は、独立して、ＯまたはＳであり、
各Ｇ３は、独立して、Ｓ、Ｏ、ＮＲ３、およびＳＯ２から選択され、
各Ｇ４は、独立して、ＯまたはＮＲ３であり、
各Ｒ２は、独立して、結合、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−ＣＨ２−、必要に応じて置換されているアリシクリル、ヘテロアリシクリル、アリール、ペプチド、およびペプチド模倣オリゴマーから選択され、
各Ｒ３は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜３、アリシクリル、ヘテロアリシクリルから選択され、Ｒ３における任意の環は必要に応じて置換されており、
各Ｒ４は、独立して、Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
各Ｒ９は、結合または−ＣＨ２−であり、
少なくとも、該Ｂ１単位の１つにおいて、各−Ｌ３−Ｚ部分は、−ＯＲ１であり、各Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択され、少なくとも該Ｂ１単位の１つにおいて、ｎ＋ｐ＋ｒは１を超える化学構造式ＸＶ
を有する化合物。
【請求項３０】
分子量が約５ｋＤａ〜約５００ｋＤａである、請求項２９に記載の化合物。
【請求項３１】
分子量が約１０ｋＤａ〜約１００ｋＤａである、請求項２９に記載の化合物。
【請求項３２】
分子量が約１０ｋＤａ〜約６０ｋＤａである、請求項２９に記載の化合物。
【請求項３３】
９０％を超える純度を有する、請求項２９に記載の化合物。
【請求項３４】
９５％を超える純度を有する、請求項２９に記載の化合物。
【請求項３５】
分子量が約１０ｋＤａ〜約６０ｋＤａであり、９５％を超える純度を有する、請求項２９に記載の化合物。
【請求項３６】
請求項２９に記載の化合物であって、
Ｗが、−Ｓ−、−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｐ（＝Ｓ）２Ｏ−、および−Ｐ（＝Ｓ）（＝Ｏ）Ｏ−からなる群から選択される
化合物。
【請求項３７】
請求項２９に記載の化合物であって、
Ｗが、−Ｓ−、−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｐ（＝Ｓ）２Ｏ−、および−Ｐ（＝Ｓ）（＝Ｏ）Ｏ−からなる群から選択される
化合物。
【請求項３８】
請求項２９に記載の化合物であって、
Ｗが−Ｏ−である
化合物。
【請求項３９】
請求項２９に記載の化合物であって、
Ｘ、Ｙ、またはＺのうちの少なくとも１つが、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｎ＝Ｃ＝Ｓ、−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、−Ｃ≡Ｃ−Ｒ５、−Ｎ＝Ｎ＋＝Ｎ−、−ＳＲ５、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｊ、ジエン、ジエノフィル、ケトン、アルデヒド、１，３−双極子、親双極子、アルケン、ケテン、オレフィン、アリル型水素を有するアルケン、トリフルオロメチルフェニルジアジリン、Ｎ−ヒドロキシルスクシンイミジルエステル（Ｎ−ｈｙｄｒｏｘｙｌｓｕｃｃｉｍｉｄｙｌ  ｅｓｔｅｒ）、およびマレイミドから選択され、
各Ｒ５が、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アリシクリル、ヘテロアリシクリル、ベンジルおよびアリールから選択され、Ｒ５における任意の環が必要に応じて置換されており、
各Ｒ８が、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択され、
各Ｊが、独立して、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩから選択される
化合物。
【請求項４０】
請求項２９に記載の化合物であって、
Ｌ１、Ｌ２のそれぞれが−ＣＨ２−であり、各Ｌ３が結合であり、各Ｚが−ＯＲ１であり、
Ｒ１が、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択される
化合物。
【請求項４１】
請求項２９のいずれかに記載の化合物であって、
各Ｘが−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）であり、
少なくとも１つのＹが、−Ｎ＝Ｎ＋＝Ｎ−、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｃ≡Ｃ−Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−マレイミド、
【化１７８】
2014521319.tif 000181
であり、
各Ｒ８が、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択される
化合物。
【請求項４２】
請求項４１に記載の化合物であって、
該化合物の各−Ｌ３−Ｚ部分が−ＯＲ１であり、
Ｒ１が、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択される
化合物。
【請求項４３】
請求項４２に記載の化合物であって、
各Ｌ１およびＬ２が−ＣＨ２−（ＸＶＩＩＩ）である
化合物。
【請求項４４】
請求項４３に記載の化合物であって、
各ｒが０である
化合物。
【請求項４５】
請求項２９に記載の化合物であって、
少なくとも１つのＸおよび少なくとも１つのＹが、同じであり、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−マレイミド、−Ｎ＝Ｎ＋＝Ｎ−、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｃ≡Ｃ−Ｃ１〜Ｃ４アルキル、
【化１７９】
2014521319.tif 000182
から選択される
化合物。
【請求項４６】
請求項４５に記載の化合物であって、
各−Ｌ３−Ｚが−ＯＨである
化合物。
【請求項４７】
請求項４６に記載の化合物であって、
各Ｌ１およびＬ２が−ＣＨ２−である
化合物。
【請求項４８】
請求項４７に記載の化合物であって、
各ｒが０である
化合物。
【請求項４９】
請求項２９に記載の化合物であって、
少なくとも１つのＸ、および少なくとも１つのＹが、独立して、−ＯＨ、−ＯＣ１〜Ｃ８アルキル、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−マレイミド、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｂｒ、
【化１８０】
2014521319.tif 000183
および
−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ３から選択され、ＸおよびＹが異なる
化合物。
【請求項５０】
請求項４９に記載の化合物であって、
各−Ｌ３−Ｚが−ＯＨである
化合物。
【請求項５１】
請求項５０に記載の化合物であって、
各Ｌ１、Ｌ２が−ＣＨ２−である
化合物。
【請求項５２】
請求項５１に記載の化合物であって、
各ｒが０である
化合物。
【請求項５３】
請求項２９に記載の化合物であって、
少なくとも１つのＸ、Ｙ、またはＺがビニルスルホン基であるか、または式：
【化１８１】
2014521319.tif 000184
を有し、
該式中、Ｒ１０は電子求引基であり、Ｒ１１は必要に応じて置換されているアリールである
化合物。
【請求項５４】
請求項２９に記載の化合物であって、
前記マルチマーが直鎖状であり、以下の構造ＸＶＩ
【化１８２】
2014521319.tif 000185
を有し、
該構造中、ｖは２〜約２０００の整数である
化合物。
【請求項５５】
請求項５４に記載の化合物であって、
該化合物の各−Ｌ３−Ｚ部分が−ＯＲ１であり、以下の構造ＸＸＩ
【化１８３】
2014521319.tif 000186
を有し、
該構造中、
Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択される
化合物。
【請求項５６】
請求項５５に記載の化合物であって、
各ｒが０であり、以下の構造ＸＶＩＩ
【化１８４】
2014521319.tif 000187
を有し、
該構造中、Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択される
化合物。
【請求項５７】
請求項５６に記載の化合物であって、
以下の構造ＸＶＩＩＩ
【化１８５】
2014521319.tif 000188
を有し、
該構造中、Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択される
化合物。
【請求項５８】
請求項５７のいずれかに記載の化合物であって、
Ｗが、−Ｓ−、−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｐ（＝Ｓ）２Ｏ−、および−Ｐ（＝Ｓ）（＝Ｏ）Ｏ−からなる群から選択される
化合物。
【請求項５９】
請求項５７に記載の化合物であって、
Ｗが、−Ｓ−、−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｐ（＝Ｓ）２Ｏ−、および−Ｐ（＝Ｓ）（＝Ｏ）Ｏ−からなる群から選択される
化合物。
【請求項６０】
請求項５７に記載の化合物であって、
Ｗが−Ｏ−である
化合物。
【請求項６１】
請求項５７に記載の化合物であって、
ＸおよびＹが同じではない
化合物。
【請求項６２】
請求項２９に記載の化合物であって、
前記マルチマーが、構造式ＸＩＸ
【化１８６】
2014521319.tif 000189
を有する環式であり、
該式中、ｔは３〜約２０００の整数であり、
各ｎは、独立して、２〜約１２から選択され、
各ｐは、独立して、１〜約１２から選択される
化合物。
【請求項６３】
請求項２９に記載の化合物であって、
前記マルチマーが、構造式ＸＸ：
【化１８７】
2014521319.tif 000190
を有する分枝した大きい糖アルコール化合物であり、
該式中、各ｎおよびｐは、０〜１２から独立して選択される整数であり、ｎ＋ｐは２〜１２の間にあり、
各ｎは、１〜１２から独立して選択される整数であり、
各ｖは、０〜２０００から独立して選択される整数である
化合物。
【請求項６４】
化学構造式ＸＸＩ：
【化１８８】
2014521319.tif 000191
を有する、単量体糖アルコールであって、
該式中、ｎおよびｐのそれぞれは、独立して、０および１〜約１２から選択される整数から選択され、ｎ＋ｐは２〜１２の間にあり、
ｒは０または１であり、
Ｘ１のそれぞれは、独立して、−ＯＨ、−Ｊ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｊ、−ＯＲ５、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ３、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ５、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、−Ｃ≡Ｃ−Ｒ５、−Ｎ＝Ｎ＋＝Ｎ−、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ２、フェノール基、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、ジエン、ジエノフィル、１，３−双極子、親双極子、アルケン、ケテン、オレフィン、アリル型水素を有するアルケン、必要に応じて置換されているＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、イミドエステル、マレイミドから選択され、
Ｙ１のそれぞれは、独立して、−Ｓ−Ｓ−ｔブチル、−ＳＲ７、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−Ｓ−ＳＲ８、−ＮＨＲ７、−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、必要に応じて置換されているＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、イミドエステル、マレイミドから選択され、
各Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択され、
各Ｒ５は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アリシクリル、ヘテロアリシクリル、ベンジルまたはアリールから選択され、Ｒ５における任意の環は必要に応じて置換されており、
各Ｒ７は、独立して、トリチル、ＭＭＴ、およびＤＭＴから選択され、
各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択され、
各Ｊは、独立して、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩから選択され、
Ｌ４およびＬ５は、独立して、結合、−ＣＨ２−＊、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｃ１〜８アルキル−＊、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ１〜８アルキル−＊、−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｃ１〜８アルキル−＊から選択され、
「＊」は、Ｘ１またはＹ１と結合しているＬ４およびＬ５の部分を表す
単量体糖アルコール。
【請求項６５】
請求項６４に記載の単量体糖アルコール化合物であって、
Ｘ１が−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨであり、ｒが０であり、Ｙ１が、独立して、−ＮＨ−Ｒ７、−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−Ｓ−Ｓ−Ｒ７、−Ｓ−Ｓ−ｔブチル、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、および−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）から選択され、
各Ｒ８が、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択され、
各Ｒ７が、独立して、トリチル、ＭＭＴ、およびＤＭＴから選択され、
ｒが１である場合、Ｙ１はＯＲ１であり、
各Ｒ１が、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択される
単量体糖アルコール化合物。
【請求項６６】
請求項６４に記載の単量体糖アルコール化合物であって、
Ｘ１がホスホルアミダイトであり、
ｒが０である場合、Ｙ１は、独立して、−Ｓ−Ｓ−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）−ＯＲ７、Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−ＴＦＡ、−ＮＨ−Ｒ７から選択され、
各Ｒ７が、独立して、トリチル、ＭＭＴ、およびＤＭＴから選択され、
各Ｒ８が、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択される
単量体糖アルコール化合物。
【請求項６７】
請求項６４に記載の単量体糖アルコール化合物であって、
Ｘ１およびＹ１が同じではない、
単量体糖アルコール化合物。
【請求項６８】
請求項６７に記載の単量体糖アルコール化合物であって、
Ｘ１およびＹ１のうちの少なくとも１つが、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、必要に応じて置換されているＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル基、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、マレイミド基からなる群から選択され、
各Ｒ８が、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択される
単量体糖アルコール化合物。
【請求項６９】
請求項６４に記載の単量体糖アルコール化合物であって、
式（ＸＸＩＩ）の構造
【化１８９】
2014521319.tif 000192
を有し、
該式中、
ｎは、約２〜約８から選択される整数であり、
Ｘ２は、
【化１９０】
2014521319.tif 000193
からなる群から選択される化学基または光架橋基であり、
Ｙ２は、
【化１９１】
2014521319.tif 000194
からなる群から選択される化学基または光架橋基であり、
Ｗ１は、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、および、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−からなる群から選択される独立したリンカーであり、
Ｊ１のそれぞれは、独立して、Ｃｌ、ＢｒおよびＩから選択され、
Ｗ２のそれぞれは、独立して、
【化１９２】
2014521319.tif 000195
からなる群から選択され、
Ｗ３のそれぞれは、独立して、
【化１９３】
2014521319.tif 000196
からなる群から選択される
単量体糖アルコール化合物。
【請求項７０】
【化１９４】
2014521319.tif 000197
からなる群から選択される化学式を有する、請求項６９に記載の化合物。
【請求項７１】
【化１９５】
2014521319.tif 000198
からなる群から選択される化学式を有する、請求項６９に記載の化合物。
【請求項７２】
【化１９６】
2014521319.tif 000199
からなる群から選択される化学式を有する、請求項６９に記載の化合物。
【請求項７３】
【化１９７】
2014521319.tif 000200
からなる群から選択される化学式を有する、請求項６９に記載の化合物。
【請求項７４】
【化１９８】
2014521319.tif 000201
からなる群から選択される化学式を有する、請求項６９に記載の化合物。
【請求項７５】
【化１９９】
2014521319.tif 000202
からなる群から選択される化学式を有する、請求項６９に記載の化合物。
【請求項７６】
化学構造式ＸＸＩＩＩ：
【化２００】
2014521319.tif 000203
を有する二量体糖アルコールであって、
該式中、ｎ１、ｎ２、ｐ１、およびｐ２のそれぞれは、独立して、０および１〜約１２から選択される整数から選択され、ｎ１＋ｐ１は１〜１２の間にあり、ｎ２＋ｐ２は２〜１２の間にあり、
ｒは０または１であり、
Ｗ３は、−Ｓ−、−Ｏ−、−ＮＨ−、−ＮＣ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２、−Ｐ（＝Ｓ）２Ｏ−、および−Ｐ（＝Ｓ）（＝Ｏ）Ｏ−からなる群から選択され、
Ｘ３のそれぞれは、独立して、−ＯＨ、−Ｊ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｊ、−ＯＲ５、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ３、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ５、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、−Ｃ≡Ｃ−Ｒ５、−Ｎ＝Ｎ＋＝Ｎ−、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ２、フェノール基、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、ジエン、ジエノフィル、１，３−双極子、親双極子、アルケン、ケテン、オレフィン、アリル型水素を有するアルケン、必要に応じて置換されているＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、およびイミドエステル、マレイミド、ならびにホスホルアミダイトから選択され、
Ｙ３のそれぞれは、独立して、−Ｓ−Ｓ−ｔブチル、−ＳＲ７、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨＲ７、−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、Ｏ−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、必要に応じて置換されているＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、イミドエステル、およびマレイミドからなる群から選択され、
各Ｒ６は、独立して、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択され、
各Ｒ７は、独立して、トリチル、ＭＭＴ、およびＤＭＴからなる群から選択され、
各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルからなる群から選択され、
各Ｊは、独立して、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩからなる群から選択され、
Ｌ４およびＬ５は、独立して、結合、−ＣＨ２−＊、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｃ１〜８アルキル−＊、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ１〜８アルキル−＊、−ＣＨ２−およびＣ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｃ１〜８アルキル−＊からなる群から選択され、
「＊」は、Ｘ３またはＹ３に結合しているＬ４およびＬ５の部分を表す
二量体糖アルコール。
【請求項７７】
請求項７６に記載の二量体糖アルコール化合物であって、
Ｗ３が−Ｓ−、−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｐ（＝Ｓ）２Ｏ−、および−Ｐ（＝Ｓ）（＝Ｏ）Ｏ−からなる群から選択される
二量体糖アルコール化合物。
【請求項７８】
請求項７６に記載の二量体糖アルコール化合物であって、
Ｗ３が−Ｏ−である
二量体糖アルコール化合物。
【請求項７９】
請求項７６、７７、または７８のいずれかに記載の二量体糖アルコール化合物であって、
Ｘ３が−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨであり、ｒが０であり、Ｙ３が、独立して、−ＮＨ−Ｒ７、−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−Ｓ−Ｓ−Ｒ７、−Ｓ−Ｓ−ｔブチル、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、および−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）からなる群から選択され、
各Ｒ８が、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択され、
各Ｒ７が、独立して、トリチル、ＭＭＴ、およびＤＭＴからなる群から選択され、
ｒが１である場合、ＹがＯＲ１であり、
Ｒ１が、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択される
二量体糖アルコール化合物。
【請求項８０】
請求項７６、７７、または７８に記載の二量体糖アルコール化合物であって、
Ｘ３が、ホスホルアミダイトであり、ｒが０である場合、Ｙ３が、独立して、−Ｓ−Ｓ−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）−ＯＲ７、Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−ＴＦＡ、−ＮＨ−Ｒ７からなる群から選択され、
各Ｒ７が、独立して、トリチル、ＭＭＴ、およびＤＭＴから選択され、
各Ｒ８が、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択される
二量体糖アルコール化合物。
【請求項８１】
請求項７６、７７、または７８のいずれかに記載の二量体糖アルコール化合物であって、
Ｘ３およびＹ３が同じではない
二量体糖アルコール化合物。
【請求項８２】
請求項７６、７７、または７８のいずれかに記載の二量体糖アルコール化合物であって、
Ｘ３およびＹ３が、独立して、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、必要に応じて置換されているＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル基、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、およびマレイミド基からなる群から選択され、
各Ｒ８が、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルからなる群から選択される
二量体糖アルコール化合物。
【請求項８３】
請求項７６、７７、または７８のいずれかに記載の二量体糖アルコール化合物であって、
Ｘ３がアミノオキシ基であり、Ｙ３が、マレイミド基、スルフヒドリル基、ジスルフィド基、ハロアセチル基、アジド基、およびアルキン基からなる群から選択される
二量体糖アルコール化合物。
【請求項８４】
請求項７６、７７、または７８のいずれかに記載の二量体糖アルコール化合物であって、
Ｘ３が必要に応じて置換されているＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステルであり、Ｙ３が、マレイミド基、スルフヒドリル基、ジスルフィド基、ハロアセチル基、アジド基、およびアルキン基からなる群から選択される
二量体糖アルコール化合物。
【請求項８５】
化学式
【化２０１】
2014521319.tif 000204
を有する糖アルコール由来化合物であって、
該式中、
ｎは、２〜約８の整数であり、
ｍは、１〜約８の整数であり、
ｐは、１〜約２０００の整数であり、
Ｘ１のそれぞれは、
【化２０２】
2014521319.tif 000205
からなる群から選択され、
各Ｙ１は、
【化２０３】
2014521319.tif 000206
からなる群から選択され、
各Ｗ１は、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−および−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−からなる群から選択され、
各Ｊ１は、Ｃｌ、ＢｒまたはＩからなる群から選択され、
Ｒ１８は、水素、Ｃ１〜８アルキル、アリシクリル、ヘテロアリシクリル、ベンジルおよびアリールからなる群から選択され、Ｒ１８における任意の環は、必要に応じて置換されており、
各Ｗ２は、独立して、
【化２０４】
2014521319.tif 000207
からなる群から選択され、
Ｗ３のそれぞれは、独立して、
【化２０５】
2014521319.tif 000208
からなる群から選択される
糖アルコール由来化合物。
【請求項８６】
【化２０６】
2014521319.tif 000209
からなる群から選択される化学式を有する、請求項８５に記載の化合物。
【請求項８７】
【化２０７】
2014521319.tif 000210
からなる群から選択される化学式を有する、請求項８５に記載の化合物。
【請求項８８】
【化２０８】
2014521319.tif 000211
からなる群から選択される化学式を有する、請求項８５に記載の化合物。
【請求項８９】
【化２０９】
2014521319.tif 000212
からなる群から選択される化学式を有する、請求項８５に記載の化合物。
【請求項９０】
【化２１０】
2014521319.tif 000213
からなる群から選択される化学式を有する、請求項８５に記載の化合物。
【請求項９１】
【化２１１】
2014521319.tif 000214
からなる群から選択される化学式を有する、請求項８５に記載の化合物。
【請求項９２】
請求項８５に記載の化合物であって、
ｐが１〜約１０００の整数である
化合物。
【請求項９３】
請求項８５に記載の糖アルコール由来化合物であって、
ｐが１〜約５００の整数である
糖アルコール由来化合物。
【請求項９４】
分子量が約５ＫＤａ〜約５００ＫＤａであり、純度が約９０％である、請求項８５に記載の化合物。
【請求項９５】
分子量が約１０ＫＤａ〜約１００ＫＤａであり、純度が約９０％である、請求項８５に記載の化合物。
【請求項９６】
分子量が約１０ＫＤａ〜約６０ＫＤａであり、純度が約９０％である、請求項８５に記載の化合物。
【請求項９７】
分子量が約５ＫＤａ〜約５００ＫＤａである、請求項８５に記載の化合物。
【請求項９８】
分子量が約１０ＫＤａ〜約１００ＫＤａである、請求項８５に記載の化合物。
【請求項９９】
分子量が約１０ＫＤａ〜約６０ＫＤａである、請求項８５に記載の化合物。
【請求項１００】
純度が約９０％である、請求項８５に記載の化合物。
【請求項１０１】
純度が約９５％である、請求項８５に記載の化合物。
【請求項１０２】
純度が約９７％である、請求項８５に記載の化合物。
【請求項１０３】
分子量が約１０ＫＤａ〜約６０ＫＤａの間であり、純度が約９０％である、請求項８５に記載の化合物。
【請求項１０４】
化学式
【化２１２】
2014521319.tif 000215
を有する糖アルコール由来化合物であって、
該式中、
ｎは、２〜約８の整数であり、
Ｘ２は、
【化２１３】
2014521319.tif 000216
からなる群から選択される化学基または光架橋基であり、
Ｙ２は、
【化２１４】
2014521319.tif 000217
からなる群から選択される化学基または光架橋基であり、
Ｗ１は、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、および、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−からなる群から選択される、独立したリンカーであり、
各Ｊ１は、独立して、Ｃｌ、ＢｒおよびＩから選択され、
各Ｗ２は、独立して、
【化２１５】
2014521319.tif 000218
からなる群から選択され、
各Ｗ３は、独立して、
【化２１６】
2014521319.tif 000219
からなる群から選択される
糖アルコール由来化合物。
【請求項１０５】
【化２１７】
2014521319.tif 000220
からなる群から選択される化学式を有する、請求項１０４に記載の化合物。
【請求項１０６】
【化２１８】
2014521319.tif 000221
からなる群から選択される化学式を有する、請求項１０４に記載の化合物。
【請求項１０７】
【化２１９】
2014521319.tif 000222
からなる群から選択される化学式を有する、請求項１０４に記載の化合物。
【請求項１０８】
【化２２０】
2014521319.tif 000223
からなる群から選択される化学式を有する、請求項１０４に記載の化合物。
【請求項１０９】
【化２２１】
2014521319.tif 000224
からなる群から選択される化学式を有する、請求項１０４に記載の化合物。
【請求項１１０】
【化２２２】
2014521319.tif 000225
からなる群から選択される化学式を有する、請求項１０４に記載の化合物。
【請求項１１１】
分子量が約５ＫＤａ〜約５００ＫＤａである、請求項１０４に記載の化合物。
【請求項１１２】
分子量が約１０ＫＤａ〜約１００ＫＤａである、請求項１０４に記載の化合物。
【請求項１１３】
分子量が約１０ＫＤａ〜約６０ＫＤａである、請求項１０４に記載の化合物。
【請求項１１４】
純度が約９０％である、請求項１０４に記載の化合物。
【請求項１１５】
純度が約９５％である、請求項１０４に記載の化合物。
【請求項１１６】
純度が約９７％である、請求項１０４に記載の化合物。
【請求項１１７】
分子量が約１０ＫＤａ〜約６０ＫＤａであり、純度が約９０％である、請求項１０４に記載の化合物。
【請求項１１８】
化学式
【化２２３】
2014521319.tif 000226
を有する糖アルコール由来化合物であって、
該式中、
ｎは、２〜約８から選択される整数であり、
ｍは、１〜約８から選択される整数であり、
ｐは、２〜約２０００から選択される整数であり、
各Ｗは、独立して、−Ｓ−、−ＮＨ−、−Ｏ−、−ＮＣ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｐ（＝Ｏ）２Ｏ−、−Ｐ（＝Ｓ）２Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−および−Ｐ（＝Ｓ）（＝Ｏ）Ｏ−から選択され、
Ｘ３およびＹ３のそれぞれは、独立して、
【化２２４】
2014521319.tif 000227
ジエン、ジエノフィル、１，３−双極子、親双極子、アルケン、ケテン、オレフィン、アリル型水素を有するアルケン、ベンゾフェノン、アリールジアゾニウム、ビニルスルホンおよびアリルスルホンからなる群から選択される化学基または光架橋基であり、
Ｌ１およびＬ２は、独立して、結合、−ＣＨ２−＊から選択され、
「＊」は、Ｘ３またはＹ３に結合しているＬ１およびＬ２の部分を表し、
Ｒ１８は、水素、Ｃ１〜８アルキル；アリシクリル、ヘテロアリシクリル、ベンジルまたはアリールであり、Ｒ１８における任意の環は、必要に応じて置換されており、
Ｗ１のそれぞれは、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−からなる群から選択される独立したリンカーであり、
Ｊ１のそれぞれは、独立して、Ｃｌ、ＢｒおよびＩから選択され、
Ｗ２のそれぞれは、独立して、
【化２２５】
2014521319.tif 000228
からなる群から選択され、
Ｗ３のそれぞれは、独立して、
【化２２６】
2014521319.tif 000229
からなる群から選択される
糖アルコール由来化合物。
【請求項１１９】
請求項１１８に記載の化合物であって、
ｐが、約２〜約１０００から選択される整数である
化合物。
【請求項１２０】
請求項１１８に記載の化合物であって、
ｐが、１〜約１０００から選択される整数である
化合物。
【請求項１２１】
請求項１１８に記載の糖アルコール由来化合物であって、
ｐが１〜約５００から選択される整数である
糖アルコール由来化合物。
【請求項１２２】
分子量が約５ＫＤａ〜約５００ＫＤａである、請求項１１８に記載の化合物。
【請求項１２３】
分子量が約１０ＫＤａ〜約１００ＫＤａである、請求項１１８に記載の化合物。
【請求項１２４】
分子量が約１０ＫＤａ〜約６０ＫＤａである、請求項１０４に記載の化合物。
【請求項１２５】
純度が約９０％である、請求項１１８に記載の化合物。
【請求項１２６】
純度が約９５％である、請求項１１８に記載の化合物。
【請求項１２７】
純度が約９７％である、請求項１１８に記載の化合物。
【請求項１２８】
分子量が約１０ＫＤａ〜約６０ＫＤａであり、純度が約９０％である、請求項１１８に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規の糖アルコールベースの架橋試薬、高分子、治療コンジュゲート、および合成法に関する。さらに具体的には、本発明は、標識、コンジュゲーション、改変、分子固定化、治療剤または診断剤のため、およびドラッグデリバリーにおいて使用することができる新規の化学物質（ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｅｎｔｉｔｙ）に関する。さらに、本発明は、新規糖アルコールベースの架橋試薬および高分子を介して調製される新規のコンジュゲートに関する。
【背景技術】
【０００２】
バイオコンジュゲーション技術は、薬物物質、検出試薬の調製、および製剤化ストラテジーのためバイオテクノロジーおよび医薬品業界において採用されてきた（非特許文献１；非特許文献２）。バイオコンジュゲーションは、生体分子のコンジュゲーション、標識、改変、または固定化を含めた、２つ以上の生体分子を一緒に結合する化学的プロセスである。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】Ｇｒｅｇ  Ｔ．  Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ「Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ」、２００８年、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｉｎｃ．
【非特許文献２】Ｃｈｒｉｓｔｏｆ  Ｍ．  Ｎｉｅｍｅｙｅｒ「Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ：  Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ」、２００４年、Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｉｎｃ．
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明は、糖アルコール（ＳＡ）をベースとする新規のクラスの分子、コンジュゲートの調製におけるこれらの適用、およびこれらＳＡベースの分子を合成するための方法を提供する。本発明は、一部には、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）よりも良い親水性および高い流体力学的容積を有するＳＡをベースとする。本発明はまた、一部には、誘導体化および改変することによって、ＳＡ架橋試薬を生成するための様々な官能基および活性化基の組込みを可能とするＳＡをベースとする。本発明はまた、一部には、他の様々なＳＡとさらに反応することによって、単一のおよび純粋な大きな分子量（ＭＷ）の化合物（ＳＡ高分子）、例えば、直鎖状ＳＡ高分子および複雑な二次元または三次元構造物を含めた、例えば、分枝、環式、および超分枝ＳＡ高分子を調製することができるＳＡをベースとする。
【０００５】
既存の化合物と比較して、本発明のＳＡ高分子化合物の利点には、例えば、（ｉ）コンジュゲーション後の生体分子特性をモジュレートするために使用することができるＳＡから与えられる超親水性；（ｉｉ）多目的な官能基を有する架橋試薬を作製する能力；（ｉｉｉ）単一および純粋なより大きいＭＷの化合物が入手可能なこと；（ｉｖ）多価コンジュゲーション部位により、薬物分子のより高い充填が可能となる；（ｖ）水力学的半径の向上；（ｖｉ）生分解性（ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｉｌｉｔｙ）および生体適合性；ならびに（ｖｉｉ）天然の、安価な出発材料が含まれる。
【０００６】
一態様では、本発明は、以下からなる群から選択される化学構造を有するコンジュゲートに一般的に関する：
Ｍ１−（Ｌ−Ｂ）ｕ  式（Ｉ）、および
Ｂ−（Ｌ−Ｍ１）ｕ  式（ＩＩ）
（式中、
各Ｍ１は、独立して、タンパク質、酵素、抗体、抗体フラグメント、ポリペプチド、オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド類似体、多糖からなる群から選択され、
各Ｂは、１〜約２０００個の糖アルコールモノマーを含む改変された糖アルコールポリマーであり、
各モノマーは、３〜約１４の−ＯＲ１基を有し、
Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニル（ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｔｈｉｏｆｕｒａｎｙ）からなる群から選択され、
各Ｌは、独立して、結合および構造−Ｖ１−Ｒ２−Ｖ２−からなる群から選択され、
Ｖ１およびＶ２は、独立して、ディールス‐アルダー（Ｄｉｅｌｓ−Ａｌｄｅｒ）付加物、１，３−双極子付加物、
【化１】
2014521319.tif 000002
からなる群から選択され、
各Ｇ１は、独立して、ＮＲ３、Ｏ、およびＳから選択され、
各Ｇ２は、独立して、ＯまたはＳであり、
各Ｇ３は、独立してＳ、Ｏ、ＮＲ３、およびＳＯ２から選択され、
各Ｇ４は、独立して、ＯまたはＮＲ３であり、
各Ｒ２は、独立して、結合、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−ＣＨ２−、必要に応じて置換されているアリシクリル、ヘテロアリシクリル、アリール、ペプチド、およびペプチド模倣オリゴマーから選択され、
各Ｒ３は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜３、必要に応じて置換されているアリシクリル、および必要に応じて置換されているヘテロアリシクリルから選択され、
各Ｒ８は、独立して、Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
ｕは、１〜約２０の整数である）。
【０００７】
別の態様では、本発明は、化学構造式（ＩＩＩ）を有するコンジュゲートに一般的に関する：
（Ｍ２−Ｌ）ｑ−Ｂ（ＩＩＩ）
（式中、
各Ｍ２は、独立して、代謝物、蛍光化合物、化学発光化合物、質量タグ、発色団、ビオチン、毒素、薬物、化学療法剤、細胞毒性剤、免疫抑制剤、診断剤、放射リガンド、および低分子からなる群から選択され、
各Ｂは、１〜約２０００個の糖アルコールモノマーを含む改変された糖アルコールポリマーであり、
各モノマーは、３〜約１４の−ＯＲ１基を有し、
Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択され、
各Ｌは、独立して、結合および構造−Ｖ１−Ｒ２−Ｖ１−からなる群から選択され、
Ｖ１およびＶ２は、独立して、ディールス‐アルダー付加物、１，３−双極子付加物、
【化２】
2014521319.tif 000003
からなる群から選択され、
各Ｇ１は、独立して、ＮＲ３、Ｏ、およびＳから選択され、
各Ｇ２は、独立して、ＯまたはＳであり、
各Ｇ３は、独立してＳ、Ｏ、ＮＲ３、およびＳＯ２から選択され、
各Ｇ４は、独立して、ＯまたはＮＲ３であり、
各Ｒ２は、独立して、結合、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−ＣＨ２−、必要に応じて置換されているアリシクリル、ヘテロアリシクリル、アリール、ペプチド、およびペプチド模倣オリゴマーから選択され、
各Ｒ３は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜３、必要に応じて置換されているアリシクリル、および必要に応じて置換されているヘテロアリシクリルから選択され、
各Ｒ８は、独立して、Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
ｑは、１〜約１００の整数である）。
【０００８】
さらに別の態様では、本発明は、以下からなる群から選択される化学構造を有するコンジュゲートに一般的に関する：
（Ｍ１）ｑ−Ｌ−（Ｂ−（Ｌ−Ｍ２）ｋ）ｕ（ＩＶ）、および
（Ｍ１−Ｌ）ｑ−（Ｂ−（Ｌ−Ｍ２）ｋ）ｕ（Ｖ）、および
Ｍ１−（Ｌ−Ｂ−（Ｌ−Ｍ２）ｋ）ｕ（ＶＩ）
（式中、
各Ｍ１は、独立して、タンパク質、酵素、抗体、抗体フラグメント、ポリペプチド、アビジン、ストレプトアビジン、オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド類似体、多糖からなる群から選択され、
各Ｍ２は、独立して、代謝物、蛍光化合物、化学発光化合物、質量タグ、発色団、ビオチン、毒素、薬物、化学療法剤、細胞毒性剤、免疫抑制剤、診断剤、放射リガンド、低分子および別の生物活性分子からなる群から選択され、
各Ｂは、１〜約２０００個の糖アルコールモノマーを含む改変された糖アルコールポリマーであり、
各モノマーは、３〜約１４の−ＯＲ１基を有し、
Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択され、
各Ｌは、独立して、結合および構造−Ｖ１−Ｒ２−Ｖ２−からなる群から選択され、
Ｖ１およびＶ２は、独立して、ディールス‐アルダー付加物、１，３−双極子付加物、
【化３】
2014521319.tif 000004
からなる群から選択され、
各Ｇ１は、独立して、ＮＨ、Ｏ、およびＳから選択され、
各Ｇ２は、独立して、ＯまたはＳであり、
各Ｇ３は、独立して、Ｓ、Ｏ、ＮＲ３、およびＳＯ２から選択され、
各Ｇ４は、独立して、ＯまたはＮＲ３であり、
各Ｒ２は、独立して、結合、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−ＣＨ２−、必要に応じて置換されているアリシクリル、ヘテロアリシクリル、アリール、ペプチド、およびペプチド模倣オリゴマーから選択され、
各Ｒ３は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜３、必要に応じて置換されているアリシクリル、および必要に応じて置換されているヘテロアリシクリルから選択され、
各Ｒ８は、独立して、Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
ｕは、１〜約１００の整数であり、
ｑは、１〜約１００の整数であり、
ｋは、０または１〜約２０の整数である）。
【０００９】
さらに別の態様では、本発明は、以下からなる群から選択される化学構造を有するコンジュゲートに一般的に関する：
Ｓ−（Ｌ−Ｂ−（Ｌ−Ｍ１）ｋ）ｕ（ＶＩＩ）
Ｓ−（Ｌ−Ｂ−Ｌ−（Ｍ１）ｋ）ｕ（ＶＩＩＩ）
Ｓ−（Ｌ−Ｂ−（Ｌ−Ｍ２）ｋ）ｕ（ＩＸ）
Ｓ−（Ｌ−Ｂ−Ｌ−（Ｍ２）ｋ）ｕ（Ｘ）
（式中、
Ｓは、固体支持体を含み、
各Ｍ１は、独立して、タンパク質、酵素、抗体、抗体フラグメント、ポリペプチド、アビジン、ストレプトアビジン、オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド類似体、多糖からなる群から選択され、
各Ｍ２は、独立して、代謝物、蛍光化合物、化学発光化合物、質量タグ、発色団、ビオチン、毒素、薬物、化学療法剤、細胞毒性剤、免疫抑制剤、診断剤、放射リガンド、低分子および別の生物活性分子からなる群から選択され、
各Ｂは、１〜約２０００個の糖アルコールモノマーを含む改変された糖アルコールポリマーであり、
各糖アルコールモノマーは、３〜約１４の−ＯＲ１基を有し、
Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択され、
各Ｌは、独立して、結合および−Ｖ１−Ｒ２−Ｖ２−からなる群から選択され、
Ｖ１およびＶ２は、独立して、ディールス‐アルダー付加物、１，３−双極子付加物、
【化４】
2014521319.tif 000005
からなる群から選択され、
各Ｇ１は、独立して、ＮＨ、Ｏ、およびＳから選択され、
各Ｇ２は、独立して、ＯまたはＳであり、
各Ｇ３は、独立してＳ、Ｏ、ＮＲ３、およびＳＯ２から選択され、
各Ｇ４は、独立して、ＯまたはＮＲ３であり、
各Ｒ２は、独立して、結合、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−ＣＨ２−、必要に応じて置換されているアリシクリル、ヘテロアリシクリル、アリール、ペプチド、およびペプチド模倣オリゴマーから選択され、
各Ｒ３は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜３、必要に応じて置換されているアリシクリル、および必要に応じて置換されているヘテロアリシクリルから選択され、
各Ｒ８は、独立して、Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
ｕは、１〜約５００の整数であり、
ｋは、０または１〜約２０の整数である）。
【００１０】
さらに別の態様では、本発明は、３つ以上の単量体糖アルコール単位Ｂ１を含む直鎖状、分枝または大環状マルチマーの糖アルコールを有する化合物であって、
各単量体糖アルコール単位が、１つのモノマー単位のＸ、ＹまたはＺ部分と、別のモノマー単位のＸ、ＹまたはＺとの間の反応により形成される連結基Ｗを介して、１つまたは複数の他のモノマー単位と結合しており、
各Ｂ１が、化学構造式ＸＶ：
【化５】
2014521319.tif 000006
（式中、各Ｂ１について、独立して、
ｎおよびｐのそれぞれは、独立して、０および１〜約１２から選択される整数から選択され、ｎ＋ｐは１〜１２の間であり、
ｒは０または１であり、
Ｘ、ＹおよびＺのそれぞれは、独立して、−ＯＨ、−Ｊ、−Ｒ５Ｊ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｊ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｊ、
−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｊ、−ＯＲ５、−ＯＲ６、−ＯＲ７、−Ｏ−メシル、−Ｏ−トシル、
−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｏ−メシル、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｏ−トシル、−ＳＨ、−Ｓ−Ｓ−ｔブチル、
−ＳＲ７、−ＳＲ５、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｊ、−ＮＨ２、−ＮＨＲ５、−Ｎ（Ｒ５）Ｒ５、−ＮＨＲ７、−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、
−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ５、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、−Ｎ＝Ｃ＝Ｓ、−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、−Ｃ≡Ｃ−Ｒ５、
−Ｎ＝Ｎ＋＝Ｎ−、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、
−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）、−ＮＨ−ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ２、
−ＮＨ−Ｃ（＝Ｓ）−ＮＨ−ＮＨ２、−トルエンスルホニルヒドラジド、−Ｒ５−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ２＋）−ＮＨ２、ベンゾフェノン、アリールジアゾニウム、ジアゾアルカン、ジアゾアセチル、アントラキノン、ジアジリン、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、ジエン、ジエノフィル、１，３−双極子、親双極子、アルケン、ケテン、オレフィン、アリル型水素を有するアルケン、ジカルボニル基、エポキシド、オキシラン、オルガノシラン、ホスホニウム基、エステル、無水物、カーボネート基、グリオキサール、−Ｃ（＝ＮＨ２）−Ｏ−Ｒ５、ヒドロキシメチルホスフィン誘導体、エチルビニル、マレイミド、ビニルスルホン、アリルスルホン、チオエステル、シスプラチン誘導体、アジリジン、アクリロイル基から選択され、
各Ｒ５は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アリシクリル、ヘテロアリシクリル、ベンジルまたはアリールから選択され、Ｒ５における任意の環が必要に応じて置換されており、
各Ｒ６は、独立して、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルから選択され、
各Ｒ７は、独立して、トリチル、ＭＭＴ、およびＤＭＴから選択され、
各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択され、
各Ｊは、独立して、Ｃｌ、ＢｒおよびＩから選択され、
Ｌ１、Ｌ２、およびＬ３のそれぞれは、独立して、結合または−Ｒ９−Ｖ−Ｒ２−＊（式中、「＊」は、Ｘ、Ｙ、Ｓ、Ｍ１もしくはＭ２またはＺにそれぞれ結合しているＬ１、Ｌ２、およびＬ３の部分を表す）であり
各ＶおよびＷは、独立して、ディールス‐アルダー付加物、１，３−双極子付加物、
【化６】
2014521319.tif 000007
からなる群から選択され、
各Ｇ１は、独立して、ＮＨ、Ｏ、およびＳから選択され、
各Ｇ２は、独立して、ＯまたはＳであり、
各Ｇ３は、独立して、Ｓ、Ｏ、ＮＲ３、およびＳＯ２から選択され、
各Ｇ４は、独立して、ＯまたはＮＲ３であり、
各Ｒ２は、独立して、結合、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−ＣＨ２−、必要に応じて置換されているアリシクリル、ヘテロアリシクリル、アリール、ペプチド、およびペプチド模倣オリゴマーから選択され、
各Ｒ３は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜３、必要に応じて置換されているアリシクリル、および必要に応じて置換されているヘテロアリシクリルから選択され、
各Ｒ８は、独立して、Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
各Ｒ９は、結合または−ＣＨ２−であり、
少なくとも、Ｂ１単位の１つにおいて、各−Ｌ３−Ｚ部分は、−ＯＲ１であり、各Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択され、
少なくともＢ１単位の１つにおいて、ｎ＋ｐ＋ｒは１を超える）
を有する化合物に一般的に関する。
【００１１】
さらに別の態様では、本発明は、化学構造式ＸＸＶＩ：
【化７】
2014521319.tif 000008
（式中、ｎおよびｐのそれぞれは、独立して、０および１〜約１２から選択される整数から選択され、ｎ＋ｐは２〜１２の間にあり、
ｒは０または１であり、
Ｘ１のそれぞれは、独立して、−ＯＨ、−Ｊ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｊ、−ＯＲ５、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ３、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ５、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、−Ｃ≡Ｃ−Ｒ５、−Ｎ＝Ｎ＋＝Ｎ−、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ２、フェノール基、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、ジエン、ジエノフィル、１，３−双極子、親双極子、アルケン、ケテン、オレフィン、アリル型水素を有するアルケン、必要に応じて置換されているＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、イミドエステル、マレイミド、ホスホルアミダイトから選択され、
Ｙ４のそれぞれは、独立して、−Ｓ−Ｓ−ｔブチル、−ＳＲ７、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−Ｓ−ＳＲ８、−ＮＨＲ７、−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、必要に応じて置換されているＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、イミドエステル、マレイミドから選択され、
各Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択され、
各Ｒ６は、独立して、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニルおよびテトラヒドロチオフラニルから選択され、
各Ｒ７は、独立して、トリチル、ＭＭＴ、およびＤＭＴから選択され、
各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択され、
各Ｊは、独立して、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩから選択され、
Ｌ４およびＬ５は、独立して、結合、−ＣＨ２−＊、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｃ１〜８アルキル−＊、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ１〜８アルキル−＊、−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｃ１〜８アルキル−＊から選択され、
「＊」は、Ｘ１またはＹ１と結合しているＬ４およびＬ５の部分を表す）
を有する、単量体糖アルコールに一般的に関する。
【００１２】
さらに別の態様では、本発明は、化学構造式ＸＸＶＩＩＩ：
【化８】
2014521319.tif 000009
（式中、ｎ１、ｎ２、ｐ１、およびｐ２のそれぞれは、独立して、０および１〜約１２から選択される整数から選択され、ｎ１＋ｐ２は１〜１２の間にあり、ｎ２＋ｐ２は２〜１２の間にあり、
ｒは０または１であり、
Ｗ３は、−Ｓ−、−Ｏ−、−ＮＨ−、−ＮＣ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２、−Ｐ（＝Ｓ）２Ｏ−、および−Ｐ（＝Ｓ）（＝Ｏ）Ｏ−から選択され、
Ｘ３のそれぞれは、独立して、−ＯＨ、−Ｊ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｊ、−ＯＲ５、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ３、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ５、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、−Ｃ≡Ｃ−Ｒ５、−Ｎ＝Ｎ＋＝Ｎ−、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ２、フェノール基、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、ジエン、ジエノフィル、１，３−双極子、親双極子、アルケン、ケテン、オレフィン、アリル型水素を有するアルケン、必要に応じて置換されているＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、イミドエステル、マレイミド、ホスホルアミダイトから選択され、
Ｙ３のそれぞれは、独立して、−Ｓ−Ｓ−ｔブチル、−ＳＲ７、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨＲ７、−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、必要に応じて置換されているＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、イミドエステル、マレイミドから選択され、
各Ｒ６は、独立して、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルから選択され、
各Ｒ７は、独立して、トリチル、ＭＭＴ、およびＤＭＴから選択され、
各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択され、
各Ｊは、独立して、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩから選択され、
Ｌ４およびＬ５は、独立して、結合、−ＣＨ２−＊、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｃ１〜８アルキル−＊、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ１〜８アルキル−＊、−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｃ１〜８アルキル−＊から選択され、
「＊」は、Ｘ３またはＹ３に結合しているＬ４およびＬ５の部分を表す）を有する、二量体糖アルコールに一般的に関する。
【００１３】
別の態様では、本発明は、構造
【化９】
2014521319.tif 000010
（式中、
ｎは、２〜約８の整数であり、
ｍは、１〜約８の整数であり、
ｐは、約１〜約２０００の整数であり、
Ｘ１のそれぞれは、
【化１０】
2014521319.tif 000011
からなる群から選択され、
各Ｙ１は、
【化１１】
2014521319.tif 000012
からなる群から選択され、
Ｗ１のそれぞれは、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−からなる群から選択され、
Ｊ１のそれぞれは、Ｃｌ、ＢｒおよびＩからなる群から選択され、
Ｒ１８は、水素、Ｃ１〜８アルキル、アリシクリル、ヘテロアリシクリル、ベンジルまたはアリールからなる群から選択され、Ｒ１８における任意の環は、必要に応じて置換されており、
Ｗ２のそれぞれは、独立して、
【化１２】
2014521319.tif 000013
からなる群から選択され、
Ｗ３のそれぞれは、独立して、
【化１３】
2014521319.tif 000014
からなる群から選択される）
を有する化合物に一般的に関する。
【００１４】
一態様では、本発明は、構造
【化１４】
2014521319.tif 000015
（式中、
ｎは、約２〜約８から選択される整数であり、
Ｘ１は、
【化１５】
2014521319.tif 000016
からなる群から選択される化学基または光架橋基であり、
Ｙ１は、
【化１６】
2014521319.tif 000017
からなる群から選択される化学基または光架橋基であり、
Ｗ１は、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、および、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−からなる群から選択される、独立したリンカーであり、
Ｊ１のそれぞれは、独立して、Ｃｌ、ＢｒおよびＩから選択され、
Ｗ２のそれぞれは、独立して、
【化１７】
2014521319.tif 000018
からなる群から選択され、
Ｗ３のそれぞれは、独立して、
【化１８】
2014521319.tif 000019
からなる群から選択される）を有する糖アルコール由来の化合物に一般的に関する。
【００１５】
さらに別の態様では、本発明は、構造
【化１９】
2014521319.tif 000020
（式中、
ｎは、２〜約８から選択される整数であり、
ｍは、１〜約８から選択される整数であり、
ｐは、２〜約２０００から選択される整数であり、
各Ｗは、独立して、−Ｓ−、−ＮＨ−、−Ｏ−、−ＮＣ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｐ（＝Ｏ）２Ｏ−、−Ｐ（＝Ｓ）２Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−および−Ｐ（＝Ｓ）（＝Ｏ）Ｏ−から選択され、
Ｘ３およびＹ３のそれぞれは、独立して、
【化２０】
2014521319.tif 000021
ジエン、ジエノフィル、１，３−双極子、親双極子、アルケン、ケテン、オレフィン、アリル型水素を有するアルケン、ベンゾフェノン、アリールジアゾニウム、ビニルスルホンおよびアリルスルホンからなる群から選択される化学基または光架橋基であり、
Ｌ１およびＬ２は、独立して、結合、−ＣＨ２−＊から選択され、
「＊」は、Ｘ３またはＹ３に結合しているＬ１およびＬ２の部分を表し、
Ｒ１８は、水素、Ｃ１〜８アルキル；アリシクリル、ヘテロアリシクリル、ベンジルまたはアリールであり、Ｒ１８における任意の環は、必要に応じて置換されており、
Ｗ１のそれぞれは、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−からなる群から選択される独立したリンカーであり、
Ｊ１のそれぞれは、独立して、Ｃｌ、ＢｒおよびＩから選択され、
Ｗ２のそれぞれは、独立して、
【化２１】
2014521319.tif 000022
からなる群から選択され、
Ｗ３のそれぞれは、独立して、
【化２２】
2014521319.tif 000023
からなる群から選択される）を有する化合物に一般的に関する。
【００１６】
さらに、本発明は、ＳＡ架橋試薬およびＳＡ高分子を合成するための方法を提供する。
本発明の上記の態様および実施形態は、以下の図、詳細な記載、および特許請求の範囲を参照することによって、より完全に理解することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】図１は、糖アルコールベースのリンカーおよびポリエチレングリコールベースのリンカーの化学構造、ＭＷ、およびログ（Ｌｏｇ）Ｐ値を図示している。
【００１８】
【図２】図２は、単官能性、ホモ二官能性、およびヘテロ二官能性のＳＡ架橋試薬を合成するための一般的方法を図示している。
【００１９】
【図３】図３は、追加のリンカー（ｅｘｔｒａ  ｌｉｎｋｅｒ）を有する、単官能性、ホモ二官能性、およびヘテロ二官能性のＳＡ架橋試薬を合成するための一般的方法を図示している。
【００２０】
【図４】図４は、有用な架橋試薬の例を図示している。
【００２１】
【図５】図５は、固相ペプチドおよびオリゴ合成に対して有用なＳＡ試薬の例を図示している。
【００２２】
【図６】図６は、ジ−、テトラ−、およびより大きいＭＷのＳＡ分子を合成する方法を図示している。
【００２３】
【図７】図７は、Ｄ−マンニトールをベースとする直鎖状ＳＡ高分子のＭＷを図示している。
【００２４】
【図８】図８は、ＳＡ高分子の側鎖に架橋基を組み込むための一般的方法を図示している。
【００２５】
【図９】図９は、固相により合成した２つの直鎖状ＳＡ高分子の例を図示している。
【００２６】
【図１０】図１０は、超分枝ＳＡ高分子のいくつかの異なる構成（ｃｏｎｆｉｇｕｒａｔｉｏｎ）の例を図示している。
【００２７】
【図１１】図１１は、Ｄ−マンニトールをベースとするＳＡ高分子の例を図示している。
【００２８】
【図１２】図１２は、分枝ＳＡ高分子を合成する一般的方法を図示している。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
定義
「コンジュゲーション」または「バイオコンジュゲーション」という用語は、本明細書で使用する場合、２つ以上の分子を一緒に結合することによって、新規分子を作る化学的プロセスを指す。上記分子のうちの１つは、好ましくは生体分子である。したがって、「バイオコンジュゲーション」または「コンジュゲーション」は、共有結合改変、標識、コンジュゲーション、または固定化を介して分子の特性を変更することを含む、任意の化学的プロセスを指す。コンジュゲーション反応には、例えば、予備活性化したカルボキシレートを介するアミド結合の形成、例えば、アミンによるＮＨＳエステルの形成；マレイミドまたはハロゲン化アルキルとスルフヒドリルとの反応を介したチオエーテルの形成；ケトンまたはアルデヒドとヒドラジンとの反応を介したヒドラゾンの形成；ケトンまたはアルデヒドとアミノオキシとの反応を介したオキシムの形成；ケトンまたはアルデヒドとセミカルバジドとの反応を介したセミカルバゾンの形成；ならびにアルデヒドおよびアミンを結合体化するための還元的アミノ化が含まれる。他のあまり一般的ではないコンジュゲーション反応には、クリック化学反応（Ｃｕ（Ｉ）で促進されるアジド−アルキン［３＋２］付加環化）、ディールス‐アルダー反応、およびアジドが関与する光化学反応が含まれる。
【００３０】
「コンジュゲート」という用語は、本明細書で使用する場合、２つ以上の分子の「コンジュゲーション」反応により生成された生成物を指す。結合体化することができる分子の例には、低分子、抗体およびこれらのフラグメント、タンパク質（可溶性タンパク質および膜タンパク質）、酵素、核酸およびこれらの類似体、ペプチドおよびペプチド模倣物、蛍光化合物、化学発光化合物、放射性化合物、同位体含有化合物、ビオチンおよびアビジン／ストレプトアビジン、毒素、薬物、固体支持媒体、ならびに他の生物活性分子が含まれる。コンジュゲートの例には、抗体薬物コンジュゲート、タンパク質薬物コンジュゲート、ペプチド薬物コンジュゲート、オリゴ薬物コンジュゲート、ペプチドオリゴコンジュゲート、タンパク質オリゴコンジュゲート、抗体酵素コンジュゲート、抗体タンパク質コンジュゲート、タンパク質タンパク質コンジュゲート、タンパク質ペプチドコンジュゲート、タンパク質オリゴコンジュゲート、蛍光化合物、固定化タンパク質、固定化ペプチド、固定化酵素、および固定化オリゴが含まれる。
【００３１】
「糖アルコール」（ＳＡ）または「糖アルコール類」（ＳＡｓ）という用語は、本明細書で使用する場合、一般式ＯＨ−ＣＨ２−（ＣＨＯＨ）ｎ−（Ｃ（Ｏ））ｒ−（ＣＨＯＨ）ｐ−ＣＨ２−ＯＨ（式中、ｒは０または１であり、ｎおよびｐは、０〜約１２の範囲であり、ｎとｐを合わせた値が１を超える）を有する糖アルコールまたはケト糖を指す。ｎが０である場合、ＳＡは、そのカルボニル基（アルデヒドまたはケトン）が一級または二級ＯＨ基へと還元されている、水素化形態の炭水化物を指す。幾つかの場合では、ＳＡは、ポリオール、多価アルコール、またはポリアルコールを指す。糖アルコールは、一般式ＨＯ−ＣＨ２−（ＣＨＯＨ）ｎ−ＣＨ２−ＯＨを有する。天然糖アルコールの例は、グリコール（２炭素）、グリセロール（３炭素）、エリスリトール（４炭素）、トレイトール（４炭素）、アラビトール（５炭素）、キシリトール（５炭素）、リビトール（５炭素）、マンニトール（６炭素）、ソルビトール（６炭素）、ズルシトール（６炭素）、およびイジトール（６炭素）である。糖アルコールは合成であってもよい。ｒが１である場合、糖アルコールは、ケト糖またはケトースを指す。天然ケトースの例は、ジヒドロキシアセトン（３炭素）、エリトルロース（４炭素）、リブロース（５炭素）、キシルロース（５炭素）、フルクトース（６炭素）、プシコース（６炭素）、ソルボース（６炭素）、タガトース（６炭素）、セドヘプツロース（７炭素）である。
【００３２】
「糖アルコール単位（単数または複数）」（ＳＡ単位（単数または複数））という用語は、本明細書で使用する場合、「未改変の」または「改変された」モノ糖アルコールを指す。「未改変の」ＳＡ単位は、一般式−ＣＨ２−（ＣＨＯＨ）ｎ−（Ｃ（Ｏ））ｒ−（ＣＨＯＨ）ｐ−ＣＨ２−（式中、ｒは０または１であり、ｎおよびｐは、０〜約１２の範囲であり、ｎとｐを合わせた値が１を超える）を有する。「改変された」ＳＡ単位とは、そのＯＨ基のうちの１つまたは複数が、別の官能基での置換により化学的に改変されているＳＡ単位を指す。「改変された」ＳＡ単位とは、その−ＣＨ２ＯＨ基のうちの１つまたは両方が酸化され、次いで他の官能基でさらに改変されているＳＡ単位も指す。「改変された」ＳＡ単位とは、１つまたは複数のＯＨ基における水素原子が化学的保護基、脱離基、または他の官能基により置き換えられているＳＡ単位も指す。ＯＨ保護基の例には、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルシリル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルが含まれる。
【００３３】
「モノマー」という用語は、化学的に他の分子と結合してポリマーを形成することができる分子を指す。「モノマーの」という用語は、本明細書で使用する場合、「未改変の」または「改変された」モノ糖アルコールを指す。
【００３４】
「ダイマーの」という用語は、本明細書で使用する場合、互いに化学的に結合している２つの単量体糖アルコールからなる化学物質を指す。
【００３５】
「トリマーの」という用語は、本明細書で使用する場合、３つの単量体糖アルコールからなる化学物質を指す。
【００３６】
「テトラマーの」という用語は、本明細書で使用する場合、４つの単量体糖アルコールからなる化学物質を指す。
【００３７】
「生体適合性」という用語は、本明細書で使用する場合、例えば、生細胞、組織、または生体系において毒性も、傷害性も免疫学的応答も生成しないことにより、生物学的に適合性となるという特性を化合物が保有することを指す。「生体適合性」という用語は、本明細書で使用する場合、特定の適用において適当な宿主の応答を開始させるバイオマテリアルの能力を指す。別の意味では、「生体適合性」という用語は、生物学的系に対して毒性作用も傷害性作用も有さない品質を意味する。医学的療法の場合、「生体適合性」とは、バイオマテリアルが、その特定の状況において最も適当で有利な細胞応答または組織応答を生成し、その療法の臨床的に関連する性能を最適化することから、その療法のレシピエントまたは受益者において任意の所望しない局所的または全身的作用を引き起すことなくその所望の機能を実施する能力を指す。
【００３８】
「生分解性」という用語は、本明細書で使用する場合、１つまたは複数のインビボの生物学過程を介して、例えば代謝経路を介して、化合物の分解を可能にする特性をその化合物が保有することを指す。本明細書で使用する場合、「生分解性」化合物とは、細胞に取り込まれた場合、リソソーム経路または他の生化学的機構または加水分解により、細胞に対する重大な毒性作用を起こすことなく、細胞が再利用または破棄できる成分へと分解され得るものである。
【００３９】
「架橋する」、「架橋」、「架橋した」という用語、およびその文法的派生語は、共有結合または分子間もしくは分子と固体支持体との間の結合を指す。
【００４０】
「架橋基」、「官能基」、「活性化した基」、および「化学的反応性基」という用語は、本明細書で使用する場合、他の分子上の求電子基または求核基と容易に反応することによって、共有結合を介して新規分子を形成するための、分子の明確な、確定可能な部分または単位を指す。架橋基には、例えば、ＯＨ、保護されたＯＨ、カルボン酸、保護されたカルボキシル基、アミン、保護されたアミン、チオール、保護されたチオール、ジスルフィド、アルキル基、ベンゾフェノン、アントラキノン、ジアゾ基、アジド基、アシルアジド、アルキン、ジアゾニウム基、ジアジリン（ｄｉａｚｉｒｅｎｅｓ）、ジエン、ジエノフィル、１，３−双極子、親双極子、アルケン、ケテン、オレフィン、アリル型水素を有するアルケン、ジカルボニル基、エポキシド、オキシラン、オルガノシラン、イソチオシアネート、イソシアネート、ホスホニウム基、トシレート、メシレート、アシルアジド、エステル（例えば、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステルおよび１−ベンゾトリアゾリル（ｂｅｎｚｏｔｒｉａｚｏｌｙｌｙ）エステル）、スルホニルクロリド、無水物、テトラヒドロピラニル基、テトラヒドロフラニル基、テトラヒドロチオフラニル基、カーボネート基（例えば、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルカーボネートおよび１−ベンゾトリアゾリルカーボネート）、アルデヒド、ケトン、アリールケトン、グリオキサール、イミドエステル、無水物、フルオロフェニルエステル、ヒドロキシメチルホスフィン誘導体、ハロアセチル基、エチルビニル、ハロゲン化アリール、ハロゲン化トリチル、ハロゲン化アルキル、ハロゲン化アシル、ハロゲン化シリル、マレイミド、ビニルスルホン、チオエステル、シスプラチン誘導体、フルオロベンゼン誘導体、アジリジン、アクリロイル基、アミノオキシ、保護されたアミノオキシ、セミカルバジド、チオセミカルバジド、ヒドラジン、グアニジニル、ホスホルアミダイト、および糖基（ｓｕｇａｒ  ｇｒｏｕｐｓ）が含まれる。典型的な技術からのこのような基の広範な記載は、以下の参考文献：Ｇｒｅｇ  Ｔ．  Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ「Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ」、２００８年、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，  Ｉｎｃ．に見出すことができる。
【００４１】
「架橋試薬」という用語は、本明細書で使用する場合、架橋基を含み、別の分子と架橋することが可能な分子を指す。
【００４２】
「脱離基」という用語は、本明細書で使用する場合、別の化学的部分で置換することができる化学的部分を指す。脱離基の例には、ハロゲン化物（例えば、塩化物、臭化物、ヨウ化物）、メタンスルホニル（メシル）、ｐ−トルエンスルホニル（トシル）、トリフルオロメチルスルホニル（ｔｒｉｆｌｕｒｏｍｅｔｈｙｌ  ｓｕｌｆｏｎｙｌ）（トリフレート）、およびトリフルオロメチルスルホネートが含まれる。典型的な技術からの脱離基の広範な記載は、Ｊｅｒｒｙ  Ｍａｒｃｈ、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ、第４版、  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９９２年、３５２〜３５７頁において見出すことができる。
【００４３】
「保護基」（ＰＧ）という用語は、本明細書で使用する場合、他の化学的操作／転換中、反応から官能基を遮断する分子の基または化学的部分を指す。保護基は、これらの化学的操作／転換には不活性であるが、さらなる反応に対して元の官能基を解放するように、特定の化学的、酵素的、または光化学的手段により除去または切断することができる。多種多様な保護基が利用可能であり、当技術分野で公知である。典型的な技術からの保護基の広範な記載は、Ｔｈｅｏｄｏｒａ  Ｗ．  Ｇｒｅｅｎ  ａｎｄ  Ｐｅｔｅｒ  Ｇ．  Ｍ．  Ｗｕｔｓ、  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第２版、Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９９１年において見出すことができる。
【００４４】
「ＯＨ保護基」という用語は、本明細書で使用する場合、他の化学的操作／転換中、反応からＯＨ基を遮断する分子の基または化学的部分を指す。化学的部分の例には、これらに限定されないが、アルキル、アリール、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、アルキルシリル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルが挙げられる。
【００４５】
「リンカー」または「結合（ｌｉｎｋａｇｅ）」または「連結基」という用語は、本明細書で使用する場合、化学反応の結果として通常形成され、典型的には共有結合（複数可）を有する基または結合を指す。リンカーは、追加のスペーサー（複数可）、例えば、エチレングリコール、メチレン、ペプチド、またはペプチド模倣オリゴマーを含有し得る。リンカーには、例えば、置換または非置換のヘテロアリシクリルＣ１〜Ｃ１２アルキル、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−ＣＨ２−、置換または非置換のアリシクリル、ヘテロアリシクリル、アリール、ペプチド、およびペプチド模倣オリゴマーが含まれる。上記リンカーは、連結基、例えばアシルベースの連結基（例えば、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−および−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−）を含んでもよい。例示的な連結基には、これらに限定されないが、ディールス‐アルダー付加物、１，３−双極子付加物、
【化２３】
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（式中、各Ｇ１は、独立して、ＮＲ３、Ｏ、およびＳから選択され、各Ｇ２は、独立して、ＯまたはＳであり、各Ｇ３は、独立して、Ｓ、Ｏ、ＮＲ３、およびＳＯ２から選択され、各Ｇ４は、独立して、ＯまたはＮＲ３であり、各Ｒ３は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜３、必要に応じて置換されているアリシクリル、および必要に応じて置換されているヘテロアリシクリルから選択され、各Ｒ８は、独立して、Ｃ１〜Ｃ８アルキルである）から独立して選択される各ＶおよびＷが挙げられる。
【００４６】
「アルキル」という用語は、本明細書で使用する場合、例えば、１〜２０個の炭素原子、多くの場合１〜約１２個、１〜６個、または１〜４個の炭素原子を有する分枝、非分枝、または環式の炭化水素を指す。例として、これらに限定されないが、メチル、エチル、１−プロピル、２−プロピル、１−ブチル、２−メチル−１−プロピル、２−ブチル、２−メチル−２−プロピル（ｔ−ブチル）、１−ペンチル、２−ペンチル、３−ペンチル、２−メチル−２−ブチル、３−メチル−２−ブチル、３−メチル−１−ブチル、２−メチル−１−ブチル、１−ヘキシル、２−ヘキシル、３−ヘキシル、２−メチル−２−ペンチル、３−メチル−２−ペンチル、４−メチル−２−ペンチル、３−メチル−３−ペンチル、２−メチル−３−ペンチル、２，３−ジメチル−２−ブチル、３，３−ジメチル−２−ブチル、ヘキシル、オクチル、デシル、ドデシルなどが挙げられる。上記アルキルは、非置換であっても置換であってもよい。上記アルキルはまた、必要に応じて部分的にまたは完全に不飽和であってよい。よって、アルキル基の列挙には、アルケニル基とアルキニル基の両方が含まれる。
【００４７】
「ＳＡ分子」という用語は、本明細書で使用する場合、ＳＡ単位を含む分子を指す。ＳＡ分子は、ＳＡ架橋試薬、ＳＡ高分子、直鎖状ＳＡ高分子、分枝ＳＡ高分子、および超分枝ＳＡ高分子のうちのいずれかを指す。
【００４８】
「ＳＡ高分子」という用語は、本明細書で使用する場合、糖アルコールから誘導体化された大きな分子量の化合物を指す。典型的には、ＳＡ高分子の長さは、少なくとも２ＳＡ単位である。ＳＡ高分子の好ましい大きさは、およそ１０００Ｄａ〜およそ１２０，０００Ｄａの範囲である。
【００４９】
「分枝している」という用語は、本明細書で使用する場合、置換基、例えば糖アルコール上の水素原子が、糖アルコールの別の共有結合した鎖により、または別のタイプの鎖により置き換えられていることを指す。
【００５０】
「大環状分子」または「大環状」という用語は、本明細書で使用する場合、環式高分子または分子の高分子環式部分を指す。典型的には、大環状分子は、７員以上の環を含む。
【００５１】
「ペプチド」または「ポリペプチド」という用語は、本明細書で使用する場合、ペプチド結合で一緒に結合されているアミノ酸残基のポリマーを指す。典型的には、ペプチドの長さは、少なくとも２アミノ酸である。ペプチド結合は、あるアミノ酸のカルボキシル基と、別のアミノ酸のアミノ基との間のアミド結合として生化学において一般的に公知である。ペプチドの好ましい大きさは、約２〜約４０のアミノ酸の範囲である。ペプチドという用語はまた、１つまたは複数のアミノ酸残基が、相当する天然に存在するアミノ酸の人工の化学的類似体であるアミノ酸ポリマーにも適用し得る。１つまたは複数のアミノ酸残基が、いずれの天然に存在するアミノ酸にも対応していない「非天然」アミノ酸であるアミノ酸ポリマーもまた、「ペプチド」という用語の中に包含される。
【００５２】
「タンパク質」という用語は、本明細書で使用する場合、ペプチド結合で一緒に結合しているアミノ酸残基のポリマーを指す。この用語は、任意の大きさ、構造、または機能のタンパク質およびポリペプチドを含むことを意図する。しかし、タンパク質は典型的には、少なくとも１０アミノ酸長である。タンパク質は、天然に存在するもの、組換え型のもの、合成のもの、またはこれらの任意の組合せであってよい。タンパク質はまた、天然に存在するタンパク質のフラグメントであってよい。タンパク質は単一分子であってもよいし、または多分子複合体であってもよい。タンパク質という用語はまた、１つまたは複数のアミノ酸残基が、相当する天然に存在するアミノ酸の人工の化学的類似体であるアミノ酸ポリマーにも適用し得る。１つまたは複数のアミノ酸残基が、いずれの天然に存在するアミノ酸にも対応していない「非天然」アミノ酸であるアミノ酸ポリマーもまた、「タンパク質」という用語の使用に包含される。
【００５３】
「タンパク質フラグメント」という用語は、本明細書で使用する場合、別のタンパク質の一部であるペプチドを指す。例えば、タンパク質フラグメントは、完全長タンパク質を消化することによって得られるポリペプチドであってよい。タンパク質フラグメントは典型的には、少なくとも２つのアミノ酸を含む。
【００５４】
「治療剤」という用語は、本明細書で使用する場合、疾患の治療に有用な化合物、または分子を指す。治療剤には、例えば、抗体フラグメント、薬物、毒素、ヌクレアーゼ、ホルモン、免疫調節物質、プロアポトーシス剤、抗脈管形成剤、ホウ素化合物、光活性剤、色素およびラジオアイソトープ、タンパク質、ならびにタンパク質、オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド類似体、多糖、代謝物、酵素、ポリペプチド、および毒素を含む構築物が含まれる。治療剤には、生理活性剤および生理活性構築物のプロドラッグが含まれる。
【００５５】
「治療用部分」という用語は、本明細書で使用する場合、「治療剤」由来の機能的部分を指す。
【００５６】
「診断剤」という用語は、本明細書で使用する場合、病理プロセスの局在性を明らかにする、正確に指摘する、そして定義するために、単独でまたは別の薬剤と組み合わせて使用することができる化合物または分子を指す。診断剤には、例えば、放射性物質、蛍光色素、化学発光化合物、質量タグ、発色団、ビオチン、毒素、タンパク質、酵素、抗体、抗体フラグメント、ポリペプチド、アビジン、ストレプトアビジン、オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド類似体、多糖、代謝物、薬物、化学療法剤、細胞毒性剤、免疫抑制剤、および放射リガンドが含まれる。
【００５７】
「診断用部分」という用語は、本明細書で使用する場合、「診断剤」由来の機能的部分を指す。
【００５８】
「生物学的に機能的な部分」という用語は、本明細書で使用する場合、いくつかの種類の生物学的な機能を引き出すことができる、または生物学的系と相互作用することによっていくつかの種類の生物学的機能を引き出すことができる部分を指す。「生物学的に機能的な部分」はまた、いくつかの生物学的な機能を検出することまたは診断することを補助することができる部分を指す。生物学的に機能的な部分の例には、治療用部分および診断用部分が含まれる。
【００５９】
「抗体」という用語は、本明細書で使用する場合、全長免疫グロブリン分子または免疫グロブリン分子の免疫的活性部分、例えば抗体フラグメントを指す。「抗体」は、最も広範な意味で使用され、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多特異性抗体（ｍｕｌｔｉｓｐｅｃｉｆｉｃ  ａｎｔｉｂｏｄｙ）（例えば、二重特異性抗体）、および抗体フラグメントを含む。本明細書中に開示されている免疫グロブリンは、任意のタイプ、例えば、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＡ、または任意のサブクラスの免疫グロブリン、例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ３、ＩｇＡ１、およびＩｇＡ２であり得る。抗体は、ネズミ、ヒト、ヒト化、キメラ、ウサギ、ニワトリ、または他の種由来のものであってよい。
【００６０】
「抗体フラグメント」という用語は、本明細書で使用する場合、抗体の一部、例えばＦ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’、Ｆａｂ、Ｆｖ、ｓＦｖ、ダイアボディ、線状抗体、Ｆａｂ発現ライブラリーにより生成されたフラグメント、抗−イディオタイプ（抗−Ｉｄ）抗体、相補性決定領域（ＣＤＲ）、細胞外ドメイン（ＥＤＣ）、およびがん細胞抗原に免疫特異的に結合している上記のうちのいずれかのエピトープ−結合フラグメント、ウイルス抗原または微生物抗原、単鎖抗体分子、および抗体フラグメントから形成される多特異性抗体を指す。構造に関わらず、抗体フラグメントは、全長抗体により認識された同じ抗原に結合する。「抗体フラグメント」という用語には、抗体の可変領域からなる単離されたフラグメント、例えば、軽いおよび重い可変領域がペプチドリンカー（ｓｃＦｖタンパク質）で結合している、重鎖および軽鎖ならびに組換え型単鎖ポリペプチド分子の可変領域からなる「Ｆｖ」フラグメントも含まれる。
【００６１】
「核酸」、「オリゴヌクレオチド」、「オリゴ」、または「ポリヌクレオチド」という用語は、本明細書で使用する場合、ヌクレオチドのポリマーを指す。上記ポリマーは、制限なしで、天然ヌクレオシド（すなわち、アデノシン、チミジン、グアノシン、シチジン、ウリジン、デオキシアデノシン、デオキシチミジン、デオキシグアノシン、およびデオキシシチジン）、ヌクレオシド類似体（例えば、２−アミノアデノシン、２−チオチミジン、イノシン、ピロロ−ピリミジン、３−メチルアデノシン、５−メチルシチジン、Ｃ５−ブロモウリジン、Ｃ５−フルオロウリジン、Ｃ５−ヨードウリジン、Ｃ５−プロピニル−ウリジン、Ｃ５−プロピニル−シチジン、Ｃ５−メチルシチジン、７−デアザアデノシン、７−デアザグアノシン、８−オキソアデノシン、８−オキソグアノシン、Ｏ（６）−メチルグアニン、および２−チオシチジン）、化学的に改変された塩基、生物学的に改変された塩基（例えば、メチル化塩基）、挿入された塩基、改変された糖（例えば、２’−フルオロリボース、リボース、２’−デオキシリボース、アラビノース、およびヘキソース）、または改変されたリン酸基（例えば、ホスホロチオエートおよび５’−Ｎ−ホスホルアミダイト結合）を挙げることができる。核酸およびオリゴヌクレオチドはまた、改変された骨格を有する塩基の他のポリマー、例えばロックド核酸（ＬＮＡ）、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、またはトレオース核酸（ＴＮＡ）を含み得る。
【００６２】
「低分子干渉ＲＮＡ」または「ｓｉＲＮＡ」という用語は、本明細書で使用する場合、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）経路を誘発する小さな阻害性の二本鎖ＲＮＡ分子を指す。ｓｉＲＮＡは、一般的に、約１８〜約３０の塩基対を有し、アンチセンス鎖においてこれらの標的ｍＲＮＡに対して変動する度合の相補性を示す。すべてではないが、いくつかのｓｉＲＮＡは、センス鎖および／またはアンチセンス鎖の５’または３’末端に不対の突出した（ｏｖｅｒｈａｎｇｉｎｇ）塩基を有する。「ｓｉＲＮＡ」という用語は、２つの別の鎖の二本鎖、ならびに二重鎖領域を含むヘアピン構造を形成することができる単一鎖を含む。
【００６３】
「ポリグリセロール」という用語は、本明細書で使用する場合、重合したグリセロールを指す。グリセロールは、構造ＯＨ−ＣＨ２−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−ＯＨを有する。ポリグリセロールは、２つ以上のグリセロール単位を含有する。ポリグリセロールは、より高い温度または塩基条件下でグリセロールの一般的重合により調製される。
【００６４】
「疎水性部分」という用語は、本明細書で使用する場合、水に対して親和性がほとんどない無極性分子または基を指す。疎水性分子または分子の一部分は、これらの周囲の水の強い水素結合のネットワークを壊すことができないため、水性の環境において他の疎水性基と一緒に密集する傾向があるものである。疎水性部分の例には、アルカン、芳香族基、コレステロール、脂質、リン脂質、および脂肪酸が挙げられる。
【００６５】
「脂肪族基」という用語は、本明細書で使用する場合、非環式または環式の、非芳香族化合物を指す。脂肪族基の例には、これらに限定されないが、直鎖状または分枝アルキル鎖、脂肪酸鎖（例えば、オレイン酸）、および長鎖アルキルチオール（例えば、ヘキサンチオール）が挙げられる。
【００６６】
「固体支持体」という用語は、本明細書で使用する場合、有機化学、例えばオリゴおよびペプチド合成において慣例的に使用される支持体を指す。「固体支持体」という用語は、本明細書で使用する場合、生化学および生物学において、例えば、バイオポリマーの固定化および精製のために使用されてきた支持体も指す。固体支持体の例には、ポリスチレン支持体、ポリアミド支持体、ポリエチレングリコール支持体、ポリアクリル支持体、複合材支持体およびこれらのポリマー、例えばポリアクリル／ベータ−アラニンコポリマー支持体、ポリアクリルアミド／ポリスチレンコポリマー支持体、ポリアクリルアミド／ポリエチレングリコールコポリマー支持体、ポリエチレングリコール（ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏ）／ポリスチレンコポリマー支持体、調節された細孔ガラス、アガロース、デキストランゲル、および多糖ベースのポリマーが含まれる。幾つかの場合では、「固体支持体」という用語はまた、生物学的アッセイ、例えば、またはポリマーミクロスフェアにおいて使用されてきた粒子も指す。このような支持体の例には、ラテックスミクロスフェア、ポリスチレンからなるまたはスチレン、ポリ（メチルメタクリレート）、ポリビニルトルエン、ポリ（ｐｏｌｕ）（２−ヒドロキシエチルメタクリレート）のコポリマーからなるポリマー粒子、ならびにコポリマーであるポリ（エチレングリコールジメタクリレート／２−ヒドロキシエチルメタクリレート（２−ｈｙｄｒｏｘｙｅｔｈｙｌｍｅｔａｃｒｌａｔｅ））およびポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸（ｐｏｌｙｃｏｌｉｃ  ａｃｉｄ））が挙げられる。「固体支持体」はまた、無機構築物、金属および半導体、超常磁性複合材、生分解性構築物、ならびに合成デンドリマーおよびデンドロン、例えば、量子ドット、色素コードされた粒子、および磁気コードされた粒子も含むこともできる。
【００６７】
「ＭＷ」という用語は、本明細書で使用する場合、分子量を指す。
【００６８】
「低分子」という用語は、本明細書で使用する場合、８００Ｄａ未満である低分子量の有機化合物を指す。低分子の例は、例えば、ビオチン、蛍光標識化合物、糖、糖アルコール、代謝物、薬物、殺虫剤、アミノ酸、ヌクレオチド、化学発光（ｃｈｅｍｉｌｌｕｍｉｎｅｎｔ）化合物、架橋試薬である。
【００６９】
「単一ＭＷ」または「単分散の」という用語は、本明細書で使用する場合、同じ大きさおよび分子量を有する１つの化合物または化合物の集合を指す。天然のポリマー、例えば、タンパク質、ペプチド、およびＤＮＡは、典型的には単分散である。ＳＡ高分子は、標準的な有機合成技術を介して、純粋なキラルな出発材料から単一ＭＷ化合物として合成および精製される。ＳＡ高分子は、同じＭＷを有するが、互いに立体異性体または局所性異性体である化合物の混合物を含有してもよい。これらの異性体は、合成中に生成され、正しい条件または精製方法を選ぶことによって最小限に抑えることができる。
【００７０】
「多分散」または「多分散性」という用語は、本明細書で使用する場合、異なる大きさ、形状、または分子量を有するポリマー化合物の集合を指す。例えば、ポリマーは普通、特定の範囲にわたる分子質量の分布を有する。多分散指数（ＰＤＩ）、または異質性指数は、所与のポリマーにおける分子質量の分布を測定する。この指数は、式：ＰＤＩ＝Ｍｗ／Ｍｎ（式中、Ｍｗは、重量平均分子量およびＭｎは数平均分子量）に基づき計算される。使用する合成法に応じて、ペプチドおよびオリゴ以外の、合成ポリマーの大部分は多分散している。ペプチドおよびオリゴは、純粋な出発材料を使用して標準的な有機合成技術に基づき合成され、これを一般的に精製することにより、単分散が得られる。
【００７１】
架橋試薬およびコンジュゲーション化学反応はバイオコンジュゲーション技術の２つの主要な部分である。バイオコンジュゲーション反応のための架橋試薬を選ぶ際にいくつかの要素を考慮する必要がある：（ｉ）リンカー末端における反応性基；（ｉｉ）スペーサーの長さ；および（ｉｉｉ）スペーサーの物理的特性、例えば、疎水性または親水性であるか、コンジュゲーション後、切断可能であるかまたは生分解性があるか。
【００７２】
リンカー末端における典型的な反応性基は、予備活性化したカルボキシレート、例えば、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）エステル；チオール反応基、例えば、マレイミド／ハロゲン化アルキル；およびケトンまたはアルデヒド反応基、例えば、ヒドラジン／セミカルバジド／アミノオキシである。他の末端基は、アジド／アルキンおよびジエン／ジエノフィルである。生体分子、例えば、抗体およびタンパク質は普通、架橋試薬の末端基と相互作用することができるいくつかの同じまたは同様の官能基を有する。生体分子標識の位置および程度は普通、コンジュゲーション後変化する。コンジュゲートの異質性は、薬物Ｒ＆Ｄにおいて大きな関心事である。単一のおよび純粋なヘテロ二官能性架橋試薬および部位特異的標識を使用して、複雑さを低減することができる。例えば、スルフヒドリルは、反応特異性を有し、インビトロのシステイン変異誘発を介する導入が容易なことから一般的な官能基である。スルフヒドリルはまた、特定の抗体改変およびコンジュゲーションにおいて特別な役割を果たす。標的とすることができる他の官能基には、後導入されるアルデヒド、ヒドラジン、およびアジド官能基が含まれる。
【００７３】
生体分子を結合体化するための以前の技術は、古典的スペーサー、例えば、疎水性アルキル鎖、ペプチド、およびエチレングリコールに依存している。多くの重要なコンジュゲーション反応は、極めて疎水性の化合物、例えば、疎水性薬物、毒素、ビオチン、または蛍光化合物を水溶性の生体分子、例えば、抗体、タンパク質、または酵素に結合することを含む。ほとんどの場合、上記反応は、水性緩衝液中で実施される。親水性リンカーの存在は、コンジュゲーション反応に有利に働き、最終生成物の安定性を保つ。
【００７４】
親水性リンカーは、様々な分子の特性をモジュレートするために生化学者らによって採用されてきた。このようなリンカーは、異なるモチーフで利用可能であり、ドラッグデリバリーの薬剤、疎水性分子に対する水性溶解度増強剤、コンジュゲーションにおけるテザー（ｔｅｔｈｅｒ）またはスペーサー、ナノテクノロジーにおける封入分子として、および化粧品調合物において使用されてきた。ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）は、最も一般的に使用されている親水性リンカーの一つであり、市販されている。より小さいＭＷのヘテロ二官能性ＰＥＧ化合物は、疎水性化合物を結合させるために最も頻繁に使用されている化合物である。
【００７５】
大きいＭＷポリマーは、タンパク質、ペプチド、オリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、および他の治療用バイオポリマーを結合体化するために使用されてきた。大きいＭＷポリマーを治療用バイオポリマーに結合体化することによって、結合体化されている物質を循環で安定化し、これらの免疫原性を低減し、抗体認識を低下させ、体内滞留時間を増大させることができる。ポリマーコンジュゲーションの他の利点には、器官の性質（ｄｉｓｐｏｓｉｔｉｏｎ）の改変、エンドサイトーシスによる薬物浸透、および新規薬物標的の可能性が含まれる（Ｆ．Ｍ．  Ｖｅｒｏｎｅｓｅ、Ｍ．  Ｍｏｒｐｕｒｇｏ「Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」ＩＬ  Ｆａｒｍａｃｏ、１９９９年、５４巻、４９７〜５１６頁）。タンパク質およびペプチドを結合体化する場合、改変により、タンパク質およびペプチドはインビボのタンパク質分解からも保護される。
【００７６】
大きいＭＷの多分散ＰＥＧリンカーは、これらの親水性および生体適合性による、治療用タンパク質、抗体、および小さな毒素を改変するために使用されてきた（Ｖｅｒｏｎｅｓｅ  Ｍ．  Ｆ．「ＰＥＧｙｌａｔｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｉｎ  ｄｒｕｇｓ：  ｂａｓｉｃ  ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ．」２００９年、Ｂｉｒｋｈａｅｕｓｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ）。ＦＤＡにより承認されたＰＥＧ化タンパク質またはオリゴヌクレオチドの例は、ペガデマーゼ（ｐｅｇａｄａｍａｓｅ）（Ａｄａｇｅｎ（登録商標））、ペグフィルグラスチム（Ｎｅｕｌａｓｔａ（登録商標））、ペグアスパルガーゼ（Ｏｎｃａｓｐａｒ（登録商標））、およびＰＥＧ−ＥＯ（Ｍｉｒｅｒａ（登録商標））である。
【００７７】
しかし、ＰＥＧベースのリンカーはいくつかの弱点を有する。（ｉ）重合化学反応の性質により、大きいＭＷ（Ｍｗ）ＰＥＧ分子は多分散性である。Ｍｗ／Ｍｎ（数平均）値は、Ｍｗが２〜１０ＫＤａの範囲のポリマーではおよそ１．０１であるが、より大きいＭＷのポリマーでは１．２の値まで到達する。生体分子を標識するために多分散ＰＥＧ分子を使用すると、生物学的特性において微細な差を有する多分散コンジュゲートが生成する。この結果はまた、コンジュゲートの分析を複雑にする。単分散の、大きいＭｗ分子が望ましいが、ＰＥＧを合成および精製するための現在の技術では、商業的な単分散ＰＥＧ産物は、難しすぎ、高価すぎる。単一の純粋なＰＥＧを作製するためのより良いプロセスを開発するため、Ｑｕａｎｔａ  Ｂｉｏｄｅｓｉｇｎ  Ｌｉｍｉｔｅｄ  Ｃｏｍｐａｎｙの科学者により努力がなされた（ＵＳ２０１０／０００９９０２Ａ１、２０１０年）。これまでの単一の最も大きいＭＷの市販のＰＥＧは、１６００〜１７００Ｄａの範囲である（３６エチレングリコールモノマー）。このプロセスでは、上記モノマー（１つの繰り返し単位：４４Ｄａ）の小さなＭＷの増分に起因して、２０００Ｄａより大きな単一の純粋なＭＷのＰＥＧをもたらす可能性は低い。（ｉｉ）ＰＥＧは生分解性ではない。大きいＭｗのＰＥＧの使用および任意のＭｗのＰＥＧの長期投与は、ヒトに対して長期的影響を及ぼす可能性があり、安全性が不確かである。（ｉｉｉ）小さなＭＷ薬物を結合体化するために利用可能な官能基が限られており、これにより薬物充填が低くなる。直鎖状ＰＥＧ１つ当たり、１つまたは２つのＯＨ基しか薬物結合に利用可能ではない。したがって、現時点において、ＰＥＧ化された小さなＭＷ薬物は市販されていない。さらにいくつかのＯＨ基を保持する分枝ＰＥＧおよびデンドリマー構造が導入されている。（ｉｖ）ＰＥＧリンカーが親水性であるにもかかわらず、ＰＥＧリンカーを介する特定のコンジュゲートは依然として、生物学的用途に対して十分な溶解度が欠乏している。より良い親水性のリンカーを開発する必要がある。
【００７８】
糖分子は、これらの水素結合能力により（ドナーおよびアクセプター）、おそらく今日までに最も親水性の天然化合物である。多糖は、治療的対象のタンパク質に結合して、血液中の保持時間の増大、免疫原性の低減、および所望する生物活性の最小の損失をもたらす（Ｉｍｐｅｒｉａｌｉ，  Ｂ、  Ｏ’Ｃｏｎｎｏｒ  ＳＥ、Ｃｕｒｒ．  Ｏｐｉｎ．  Ｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｌ．１９９９年、３巻、６４３〜６４９頁；Ｓｉｎｃｌａｉｒ  ＡＭ、Ｅｌｌｉｏｔｔ  Ｓ．、Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｓｃｉ．２００５年、９４巻、１６２６〜１６３５頁；Ｆｅｒｎａｎｄｅｓ  ＡＩ、Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ  Ｇ．  Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．２００１年、２１７巻、２１５〜２２４頁）。多糖誘導体、例えば、ヒドロキシエチルデンプン（Ｍ．  Ｏｒｌａｎｄｏ、Ｊｕｓｔｕｓ−Ｌｉｅｂｉｇ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔａｔ  Ｇｉｅｓｓｓｅｎ、２００３年、１９１頁）およびポリ（シアル酸）をタンパク質コンジュゲーションに対して使用してきた（Ｃｏｎｓｔａｎｔｉｎｏｕ，  Ａ．ら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．２００８年、１９巻、６４３〜６５０頁；Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ  Ｇ．  Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．２００５年、３００巻、１２５〜１３０頁）。糖化学の複雑さおよび困難さにより、このような研究に使用された多糖は、多分散する傾向があり、ＰＥＧの場合のように、構造が可変である。さらに、堅い構造を有する多糖は、免疫原性への傾向が大きくなり得る。
【００７９】
糖アルコールは、ポリオールとしても公知であるが、カルボニル基（アルデヒドまたはケトン）が一級または二級ＯＨ基へと還元されている、水素化形態の炭水化物である。糖アルコールは、食物に天然に存在し、植物生成物、例えば、果実および液果類から作られる。糖アルコールは、多くの場合、甘味剤の成分として、ハイドロゲルなどのポリマーを作製するために、使用されている。
【００８０】
簡単な官能化した小さいＭＷの単量体糖アルコールのいくつかの構造が報告された。表１は、文献において公開されたコンジュゲーションに対して使用することができる、大部分の官能化単量体糖アルコールを列挙している（化合物がより多くのＣＡＳ番号または参照を有する場合でも、ここには１つしか列挙していない）。データは、式Ｘ−ＣＨ２−（ＣＨ２ＯＲ）ｎ−ＣＨ２−Ｙ（式中、ｎは２〜１２であり、Ｒは、Ｈ、Ｍｅ、または他の任意の保護基とすることができ、ＸおよびＹは、いずれのものでもよい）を広く検索することによって得られた。ＮＨ２、ＣＯＯＨ、ＳＨ、ＯＨ、Ｂｒ、またはＮＯ２のみを含有する化合物は、これらの化合物がコンジュゲーションに使用可能となる前にさらなる活性化が必要とされることから、表から排除した。単量体糖アルコールに対して、任意の種類の官能基を含有する化合物を全部でおよそ６０個見出した。このような化合物を合成する目的は、主に以下のカテゴリーに分類される：１）重合のための開始剤または出発材料として。例えば、ヒドロキシル基を含有する、ポリヒドロキシル化ナイロン６もしくは他のポリマーを作製すること；２）低分子薬物のための出発材料として。ほとんどの場合にはその薬物の一部となり、糖アルコールとの類似点は少なくなる；または３）官能基変換のための純粋な、合成法の開発として。稀なケースとして、官能基は、精製ハンドル（ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｈａｎｄｌｅ）として使用される（項目２０、ヒドラジド）。より一般的なケースとして、官能化した同位体コードされたマンニトール（項目１４）は、タンパク質フットプリント法に使用される。別のケースとして、蛍光アッセイ目的のため、２−アミノピリジルを糖分子（Ｇａｌｂ１−４Ｆｕｃ）に結合させるためのスペーサーとしてＤ−マンニトールが使用される（Ｎｉｓｈｉｙａｍａ  Ｋ．  ら、Ｃｈｅｍ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｂｕｌｌ．２０１０年、５８巻、４９５〜５００頁）。本発明者らの知っている限りでは、これら低分子官能化ＳＡ化合物の中で、２つ以上の治療用薬物、例えば、毒素、タンパク質、抗体、ｓｉＲＮＡなどを一緒に結合させるためのスペーサーとして使用されたものはない。これら化合物のすべてが極めてシンプルで、極めて効率的ではない；特に、効率的なヘテロ二官能性架橋剤が文献で報告されていないという事実から、報告されたＳＡ化合物は、有用性が限られている。
【００８１】
【表１】
2014521319.tif 000025
【００８２】
合成による大きいＭＷＳＡ分子は文献では稀である。マンニトールダイマーが液晶として使用するために合成された（Ａｋｉｙａｍａ，  Ｈ．  ら、Ｊｏｕｒｎａｌｓ  ｏｆ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２００９年、１９巻、５９５６〜５９６３頁）。ジソルビチル−アミンの新規誘導体が報告された（Ｐｏｌ．２０１０年、ＰＬ２０６４２０  Ｂ１  ２０１００８３１）。しかし、これらのいずれも、如何なる有用な架橋剤の基を保有していない。他方では、ＳＡポリマーのいくつかが天然に生成されている。例えば、細菌細胞壁に関連するテイコ酸は、ホスホジエステル結合により相互接続されたＤ−リビトール残基を主に含有する。これらの位置のため、Ｆｅｋｅｔｅ、Ａｎｉｋｏらは、新規ワクチンを開発する目的でＤ−リビトール（ｒｉｂｉｔｌ）−１−ホスフェートのオクタ−およびドデカマーを合成した（Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、２００６年、３４１巻（１２号）、２０３７〜２０４８頁）。上記ポリマーは、ケトハンドルを介してワクチンキャリアである、ウシ血清アルブミンとカップリングさせ、単一成分の実験用ワクチンとして使用する。どの文献の中でも、このようなオリゴマーを、他の治療用薬物の薬物動態学的なおよび薬力学的特性をモジュレートするため、またはインビボでのドラッグデリバリーのためのキャリアとして使用することができることは示唆されていない。
【００８３】
他のあまり関連のない糖アルコール構造は、これらの大部分はポリマーであるが、ＷＯ２０１００１４６７８、ＰＬ２０６４２０、ＷＯ２０１０／１３４４７６、ＷＯ２０１０１３４４７６、ＪＰ２００９２４９５００、ＦＲ２９０６２４５、ＷＯ２００９０５３５９６、ＦＲ２９０６２４５、ＷＯ２００４０２５２９７、ＷＯ２００１００５２２４、ＦＲ２７０１９４９、ＷＯ９４２１５９５、ＥＰ５３６９３９、ＵＳ４１７２０９４、ＥＰ６７５１０１Ａ１、ポリグリセロールＵＳ２５２０６７０、ポリヒドロキシ化合物ＵＳ２５２０６７１、および多価アルコールＵＳ２５３２０３６においても見出すことができる。
【００８４】
したがって、バイオテクノロジーおよび医薬分野において、親水性の架橋試薬、単一の大きいＭＷの化合物、および高充填量のキャリアに対する重要な必要性が存在する。親水性糖アルコールを骨格として使用して異なるクラスの薬物を結合するための架橋試薬を作り上げるという計画、単一ＭＷのＳＡ高分子を使用して治療用タンパク質を部位特異的に標識するという計画、およびこのような実施を可能にすることで、医薬品業界全体に革命を起こすことができる。
【００８５】
本発明は、
Ｍ１−（Ｌ−Ｂ）ｕ  式（Ｉ）、および
Ｂ−（Ｌ−Ｍ１）ｕ  式（ＩＩ）
（式中、
各Ｍ１は、独立して、タンパク質、酵素、抗体、抗体フラグメント、ポリペプチド、オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド類似体、および多糖からなる群から選択され、
各Ｂは、１〜約２０００個の糖アルコールモノマーを含む改変された糖アルコールポリマーであり、
各モノマーは、３〜約１４の−ＯＲ１基を有し、
各Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択され、
各Ｌは、独立して、結合および構造−Ｖ１−Ｒ２−Ｖ２−からなる群から選択され、
各Ｖ１およびＶ２は、独立して、ディールス‐アルダー付加物、１，３−双極子付加物、
【化２４】
2014521319.tif 000026
からなる群から選択され、
各Ｇ１は、独立して、ＮＲ３、Ｏ、およびＳからなる群から選択され、
各Ｇ２は、独立して、ＯおよびＳからなる群から選択され、
各Ｇ３は、独立してＳ、Ｏ、ＮＲ３、およびＳＯ２からなる群から選択され、
各Ｇ４は、独立して、ＯおよびＮＲ３からなる群から選択され、
各Ｒ２は、独立して、結合、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−ＣＨ２−、必要に応じて置換されているアリシクリル、ヘテロアリシクリル、アリール、ペプチド、およびペプチド模倣オリゴマーからなる群から選択され、
各Ｒ３は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜３、アリシクリル、およびヘテロアリシクリルからなる群から選択され、Ｒ３における任意の環は必要に応じて置換されており、
各Ｒ４は、独立して、Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
ｕは、１〜約２０の整数である）
からなる群から選択される構造式を有するコンジュゲートを提供する。
【００８６】
本発明はまた、構造式
（Ｍ２−Ｌ）ｑ−Ｂ  式（ＩＩＩ）
を有するコンジュゲートを提供する
（式中、
各Ｍ２は、独立して、代謝物、蛍光化合物、化学発光化合物、質量タグ、発色団、ビオチン、毒素、薬物、化学療法剤、細胞毒性剤、免疫抑制剤、診断剤、放射リガンド、および低分子からなる群から選択され、
各Ｂは、１〜約２０００個の糖アルコールモノマー含む改変された糖アルコールポリマーであり、
各モノマーは、３〜約１４の−ＯＲ１基を有し、
各Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択され、
各Ｌは、独立して、結合および構造−Ｖ１−Ｒ２−Ｖ２−からなる群から選択され、
各Ｖ１およびＶ２は、独立して、ディールス‐アルダー付加物、１，３−双極子付加物、
【化２５】
2014521319.tif 000027
からなる群から選択され、
各Ｇ１は、独立して、ＮＲ３、Ｏ、およびＳからなる群から選択され、
各Ｇ２は、独立して、ＯまたはＳからなる群から選択され、
各Ｇ３は、独立して、Ｓ、Ｏ、ＮＲ３、およびＳＯ２からなる群から選択され、
各Ｇ４は、独立して、ＯまたはＮＲ３からなる群から選択され、
各Ｒ２は、独立して、結合、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−ＣＨ２−、必要に応じて置換されているアリシクリル、ヘテロアリシクリル、アリール、ペプチド、およびペプチド模倣オリゴマーからなる群から選択され、
各Ｒ３は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜３、アリシクリル、およびヘテロアリシクリルからなる群から選択され、Ｒ３における任意の環は必要に応じて置換されており、
各Ｒ４は、独立して、Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
ｑは、１〜約１００の整数である）。
【００８７】
本発明はまた、
（Ｍ１）ｑ−Ｌ−（Ｂ−（Ｌ−Ｍ２）ｋ）ｕ  式（ＩＶ）
（Ｍ１−Ｌ）ｑ−（Ｂ−（Ｌ−Ｍ２）ｋ）ｕ  式（Ｖ）、および
Ｍ１−（Ｌ−Ｂ−（Ｌ−Ｍ２）ｋ）ｕ  式（ＶＩ）
からなる群から選択される構造式を有するコンジュゲートを提供する
（式中、
各Ｍ１は、独立して、タンパク質、酵素、抗体、抗体フラグメント、ポリペプチド、アビジン、ストレプトアビジン、オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド類似体、および多糖からなる群から選択され、
各Ｍ２は、独立して、代謝物、蛍光化合物、化学発光化合物、質量タグ、発色団、ビオチン、毒素、薬物、化学療法剤、細胞毒性剤、免疫抑制剤、診断剤、放射リガンド、および低分子からなる群から選択され、
各Ｂは、１〜約２０００個の糖アルコールモノマーを含む改変された糖アルコールポリマーであり、
各モノマーは、３〜約１４の−ＯＲ１基を有し、
各Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択され、
各Ｌは、独立して、結合および構造−Ｖ１−Ｒ２−Ｖ２−からなる群から選択され、
各Ｖ１およびＶ２は、独立して、ディールス‐アルダー付加物、１，３−双極子付加物、
【化２６】
2014521319.tif 000028
からなる群から選択され、
各Ｇ１は、独立して、ＮＲ３、Ｏ、およびＳからなる群から選択され、
各Ｇ２は、独立して、ＯおよびＳからなる群から選択され、
各Ｇ３は、独立して、Ｓ、Ｏ、ＮＲ３、およびＳＯ２からなる群から選択され、
各Ｇ４は、独立して、ＯおよびＮＲ３からなる群から選択され、
各Ｒ２は、独立して、結合、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−ＣＨ２−、必要に応じて置換されているアリシクリル、ヘテロアリシクリル、アリール、ペプチド、およびペプチド模倣オリゴマーからなる群から選択され、
各Ｒ３は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜３、アリシクリル、およびヘテロアリシクリルからなる群から選択され、Ｒ３における任意の環は必要に応じて置換されており、
各Ｒ４は、独立して、Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
ｕは、１〜約１００の整数であり、
ｑは、１〜約１００の整数であり、
ｋは、０または１〜約２０の整数である）。
【００８８】
好ましくは、Ｂは、４〜約２０００個の糖アルコールモノマーを含む。
【００８９】
好ましくは、ｕは、１〜約１０の整数である。
【００９０】
必要に応じて、Ｍ１は、抗体および抗体フラグメントからなる群から選択され、Ｍ２は化学療法薬であり、ｑは１であり、ｕは１〜約２０の整数であり、ｋは１〜約１０の整数である。より好ましくは、本実施形態ではｋは１であり、ｕは１〜約８から選択される整数である。
【００９１】
糖アルコールモノマーは、エーテル結合で一緒に結合していてもよい。
【００９２】
一態様では、Ｍ２は化学療法剤であってよい。本態様では、Ｍ２は、抗がん療法に使用される化学療法剤である。最も好ましくは、Ｍ２は、副腎皮質抑制剤、代謝拮抗剤、アルキル化剤、アルキルスルホネート、抗生剤、抗有糸分裂剤、アントラサイクリン、抗脈管形成剤、カンプトテシン、ＣＯＸ−２阻害剤、ＣＰＴ−１１、ドキソルビシン、ドキソルビシン類似体、酵素阻害剤、エンドスタチン、エピポドフィロトキシン、エチレンイミン誘導体、葉酸類似体、ゲムシタビン、ＨＤＡＣ阻害剤、熱ショックタンパク質（ＨＳＰ）９０阻害剤、ホルモンアンタゴニスト、メトトレキセート、メチルヒドラジン誘導体、ｍＴＯＲ阻害剤、ニトロソウレア、ナイトロジェンマスタード、ピリミジン類似体、プリン類似体、白金配位錯体、置換尿素、ＳＮ−３８、タキソール、トリアゼン、タキサン、チロシンキナーゼ阻害剤、プロテオソーム阻害剤、プロアポトーシス剤、ビンカアルカロイド、パクリタキセル、メイタンシン、カリケマイシン、およびドラスタチンからなる群から選択されてよい。
【００９３】
Ｍ１は抗体であってよい。より好ましくは、Ｍ１は完全ヒト抗体である。
【００９４】
必要に応じて、Ｍ１は、腫瘍関連抗原、膵がんに関連する抗原、悪性疾患に関連する抗原、自己免疫疾患に関連する抗原、免疫機能不全疾患に関連する抗原、白血病に関連する抗原、神経疾患に関連する抗原、膜貫通アクチベータに対する抗原、およびＣＡＭＬ−相互作用因子に対する抗原からなる群から選択される抗原に対して特異的な抗体であってよい。
【００９５】
Ｍ１はまた、ＣＡ１２５、ＣＡ１５−３、ＣＡ１９−９、Ｌ６、Ｌｅｗｉｓ  Ｙ、Ｌｅｗｉｓ  Ｘ、アルファフェトプロテイン、ＣＡ  ２４２、胎盤アルカリホスファターゼ、前立腺特異抗原、前立腺酸ホスファターゼ、上皮成長因子、ＭＡＧＥ−１、ＭＡＧＥ−２、ＭＡＧＥ−３、ＭＡＧＥ−４、抗トランスフェリン受容体、ｐ９７、ＭＵＣ１−ＫＬＨ、ＣＥＡ、ｇｐ１００、ＭＡＲＴ１、ＩＬ−２受容体、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ２５、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４６、ＣＤ５２、ＣＤ５４、ＣＤ６６ａ−ｄ、ＣＤ６７、ＣＤ７４、ＣＤ７９ａ、ＣＤ８０、ＣＤ１２６、ＣＤ１３８、ＣＤ１５４、Ｂ７、ＭＵＣ１、ＬＡＬＩ、ＨＭ１．２４、ＨＬＡ−ＤＲ、テネイシン、ＶＥＧＦ、ＰＩＧＦ、ＥＤ−Ｂフィブロネクチン、がん遺伝子、がん遺伝子生成物、壊死抗原、Ｔ１０１、ＴＡＧ、ＩＬ−６、ＭＩＦ、ＴＲＡＩＬ−Ｒ１（ＤＲ４）、ＴＲＡＩＬ−Ｒ２（ＤＲ５）、ヒト絨毛性ゴナドトロピン、ムチン、Ｐ２１、ＭＰＧ、およびＮｅｕがん遺伝子生成物からなる群から選択される抗原に対して特異的な抗体であってよい。
【００９６】
少なくとも１つのＭ２は、放射性同位元素を含んでもよい。
【００９７】
少なくとも１つのＭ１は、治療用タンパク質またはポリペプチドであってよい。好ましくは、治療用タンパク質のアミノ酸配列は、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、インターフェロン、インターフェロンアルファ−２ａ、インターフェロンアルファ−２ｂ、インターロイキン、インターロイキン−２、エリスロポエチン、成長ホルモン、ヒト成長ホルモン、アポミオグロビン、アスパラギナーゼ、レプチン、血清タンパク質、ヒト絨毛性ゴナドトロピン、インスリン、ろ胞刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、尿酸オキシダーゼ、アデノシンデアミナーゼ、抗体融合タンパク質、およびＶＩＩ因子からなる群から選択される野生型治療用タンパク質に対して少なくとも８０％の配列相同性を含有する。より好ましくは、治療用タンパク質のアミノ酸配列は、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、インターフェロン、インターフェロンアルファ−２ａ、インターフェロンアルファ−２ｂ、インターロイキン、インターロイキン−２、エリスロポエチン、成長ホルモン、ヒト成長ホルモン、アポミオグロビン、アスパラギナーゼ、レプチン、血清タンパク質、ヒト絨毛性ゴナドトロピン、インスリン、ろ胞刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、尿酸オキシダーゼ、アデノシンデアミナーゼ、抗体融合タンパク質、およびＶＩＩ因子からなる群から選択される野生型治療用タンパク質に対して少なくとも９０％の配列相同性を含有する。
【００９８】
少なくとも１つのＭ１は、オリゴヌクレオチドおよびｓｉＲＮＡからなる群から選択されてもよい。
【００９９】
本発明はまた、
Ｓ−（Ｌ−Ｂ−（Ｌ−Ｍ１）ｋ）ｕ  式（ＶＩＩ）、
Ｓ−（Ｌ−Ｂ−Ｌ−（Ｍ１）ｋ）ｕ  式（ＶＩＩＩ）、
Ｓ−（Ｌ−Ｂ−（Ｌ−Ｍ２）ｋ）ｕ  式（ＩＸ）および
Ｓ−（Ｌ−Ｂ−Ｌ−（Ｍ２）ｋ）ｕ  式（Ｘ）
からなる群から選択される構造式を有するコンジュゲートを提供する
（式中、
Ｓは、固体支持体を含み、
各Ｍ１は、独立して、タンパク質、酵素、抗体、抗体フラグメント、ポリペプチド、アビジン、ストレプトアビジン、オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド類似体、多糖からなる群から選択され、
各Ｍ２は、独立して、代謝物、蛍光化合物、化学発光化合物、質量タグ、発色団、ビオチン、毒素、薬物、化学療法剤、細胞毒性剤、免疫抑制剤、診断剤、放射リガンド、低分子からなる群から選択され、
各Ｂは、１〜約２０００個の糖アルコールモノマーを含む改変された糖アルコールポリマーであり、
各モノマーは、３〜約１４の−ＯＲ１基を有し、
各Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択され、
各Ｌは、独立して、結合および構造−Ｖ１−Ｒ２−Ｖ２−からなる群から選択され、
各Ｖ１およびＶ２は、独立して、ディールス‐アルダー付加物、１，３−双極子付加物、
【化２７】
2014521319.tif 000029
からなる群から選択され、
各Ｇ１は、独立して、ＮＲ３、Ｏ、およびＳからなる群から選択され、
各Ｇ２は、独立して、ＯおよびＳからなる群から選択され、
各Ｇ３は、独立して、Ｓ、Ｏ、ＮＲ３、およびＳＯ２からなる群から選択され、
各Ｇ４は、独立して、ＯおよびＮＲ３からなる群から選択され、
各Ｒ２は、独立して、結合、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−ＣＨ２−、必要に応じて置換されているアリシクリル、ヘテロアリシクリル、アリール、ペプチド、およびペプチド模倣オリゴマーからなる群から選択され、
各Ｒ３は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜３、アリシクリル、およびヘテロアリシクリルからなる群から選択され、Ｒ３における任意の環は必要に応じて置換されており、
各Ｒ４は、独立して、Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
ｕは、１〜約５００の整数であり、
ｋは、０または１〜約２０の整数である）。
【０１００】
本実施形態では、Ｂは、３〜約１０００の糖アルコール単位であってよい。
【０１０１】
本実施形態では、Ｓは、ポリスチレン支持体、ポリアミド支持体、ポリエチレングリコール支持体、ポリアクリル支持体、ポリアクリル／ベータ−アラニンコポリマー支持体、ポリアクリルアミド／ポリスチレンコポリマー支持体、ポリアクリルアミド／ポリエチレングリコールコポリマー支持体、ポリエチレングリコール／ポリスチレンコポリマー支持体、調節された細孔ガラス、アガロース、デキストランゲル、多糖ベースのポリマー、ポリマーミクロスフェア、ラテックスミクロスフェア、ポリスチレンからなるポリマー粒子、スチレン、ポリ（メチルメタクリレート）、ポリビニルトルエン、ポリ（２−ヒドロキシエチルメタクリレート）のコポリマーからなるポリマー粒子、ポリ（２−ヒドロキシエチルメタクリレート）、ポリ（エチレングリコールジメタクリレート／２−ヒドロキシエチルメタクリレート）、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）のコポリマー、無機構築物、金属、半導体、超常磁性複合材、生分解性構築物、合成デンドリマー、デンドロン、量子ドット、色素コーティングされた粒子、および磁気コーティングされた粒子からなる群から選択されてもよい。必要に応じて、Ｓはアガロースビーズである。代わりに、Ｓは、磁気コーティングされた粒子であってよい。
上記の実施形態のすべてにおいて、Ｂは、１〜約２０００個の糖アルコールモノマーＢ１を含む改変された糖アルコールポリマーであってよく、各糖アルコールモノマーは、１つのモノマー単位のＸ、ＹまたはＺ部分と、別のモノマー単位のＸ、ＹまたはＺとの間の反応により形成される連結基Ｗを介して、１つまたは複数の糖アルコールモノマーと結合しており、
各Ｂ１は、独立して、式ＸＩの化学構造を有する
【化２８】
2014521319.tif 000030
（式中、ｎおよびｐのそれぞれは、独立して、０および１〜約１２から選択される整数から選択され、ｎ＋ｐは１〜１２の間であり、
ｒは０または１であり、
【化２９】
2014521319.tif 000031
で表される各結合は、単結合または二重結合であり、
Ｑは、＝Ｏ、＝Ｎ−Ｏ−Ｌ−Ｍ１、＝Ｎ−Ｏ−Ｌ−Ｍ２、＝Ｎ−Ｏ−Ｌ−Ｓ、−ＮＨ−Ｏ−Ｌ−Ｓ、−ＮＨ−Ｏ−Ｌ−Ｍ１、および−ＮＨ−Ｏ−Ｌ−Ｍ２からなる群から選択され、
Ｘ、ＹおよびＺのそれぞれは、Ｍ１、Ｍ２またはＳと結合している場合、リンカーＶであり、
Ｘ、ＹおよびＺのそれぞれは、ＳともＭ１、Ｍ２とも結合していない場合、−ＯＨ、−Ｊ、−Ｒ５Ｊ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｊ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｊ、
−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｊ、−ＯＲ５、−ＯＲ６、−ＯＲ７、−Ｏ−メシル、−Ｏ−トシル、
−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｏ−メシル、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｏ−トシル、−ＳＨ、−Ｓ−Ｓ−ｔブチル、
−ＳＲ７、−ＳＲ５、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｊ、−ＮＨ２、−ＮＨＲ５、−Ｎ（Ｒ５）Ｒ５、−ＮＨＲ７、−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、
−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ５、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、−Ｎ＝Ｃ＝Ｓ、−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、−Ｃ≡Ｃ−Ｒ５、
−Ｎ＝Ｎ＋＝Ｎ−、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、
−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）、−ＮＨ−ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ２、
−ＮＨ−Ｃ（＝Ｓ）−ＮＨ−ＮＨ２、−トルエンスルホニルヒドラジド、−Ｒ５−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ２＋）−ＮＨ２、
ベンゾフェノン、アリールジアゾニウム、ジアゾアルカン、ジアゾアセチル、アントラキノン、ジアジリン、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、ジエン、ジエノフィル、１，３−双極子、親双極子、アルケン、ケテン、オレフィン、アリル型水素を有するアルケン、ジカルボニル基、エポキシド、オキシラン、オルガノシラン、ホスホニウム基、エステル、無水物、カーボネート基、グリオキサール、−Ｃ（＝ＮＨ２）−Ｏ−Ｒ５、ヒドロキシメチルホスフィン誘導体、エチルビニル、マレイミド、ビニルスルホン、アリルスルホン、チオエステル、シスプラチン誘導体、アジリジン、アクリロイル基からなる群から独立して選択される官能基であり、
各Ｒ５は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アリシクリル、ヘテロアリシクリル、ベンジルまたはアリールからなる群から選択され、Ｒ５における任意の環は必要に応じて置換されており、
各Ｒ６は、独立して、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルから選択され、
各Ｒ７は、独立して、トリチル、ＭＭＴ、およびＤＭＴからなる群から選択され、
各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルからなる群から選択され、
各Ｊは、独立して、Ｃｌ、ＢｒおよびＩからなる群から選択され、
Ｌ１、Ｌ２、およびＬ３のそれぞれは、独立して、結合または−Ｒ９−Ｖ−Ｒ２−＊
（式中、「＊」は、Ｘ、Ｙ、Ｓ、Ｍ１もしくはＭ２、またはＺにそれぞれ結合しているＬ１、Ｌ２、およびＬ３の部分を表す）であり、
各ＷおよびＶは、独立して、ディールス‐アルダー付加物、１，３−双極子付加物、
【化３０】
2014521319.tif 000032
からなる群から選択され、
各Ｇ１は、独立して、ＮＲ３、Ｏ、およびＳから選択され、
各Ｇ２は、独立して、ＯまたはＳであり、
各Ｇ３は、独立して、Ｓ、Ｏ、ＮＲ３、およびＳＯ２から選択され、
各Ｇ４は、独立して、ＯまたはＮＲ３であり、
各Ｒ２は、独立して、結合、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−ＣＨ２−、必要に応じて置換されているアリシクリル、ヘテロアリシクリル、アリール、ペプチド、およびペプチド模倣オリゴマーから選択され、
各Ｒ３は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜３、必要に応じて置換されているアリシクリル、および必要に応じて置換されているヘテロアリシクリルから選択され、
各Ｒ４は、独立して、Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
各Ｒ９は、結合または−ＣＨ２−であり、
少なくとも、Ｂ１単位の１つにおいて、各−Ｌ３−Ｚ部分は−ＯＲ１であり、各Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択される）。
【０１０２】
必要に応じて、Ｂは式ＸＩＩの化学構造：
【化３１】
2014521319.tif 000033
（式中、
【化３２】
2014521319.tif 000034
は、Ｍ１、Ｍ２またはＳへの結合を表し、
Ｌ４のそれぞれは、Ｍ１、Ｍ２またはＳと結合している場合、リンカーＶであり、
ｋが０である場合、
【化３３】
2014521319.tif 000035
はＹを表し、ｋが、１〜約２０から選択される整数である場合、
【化３４】
2014521319.tif 000036
は、Ｍ１、Ｍ２またはＳへの結合を表す）を有する。
【０１０３】
代わりに、Ｂは、化学構造式ＸＩＩＩ：
＊１−Ｌ４−（Ｂ１−Ｗ）ｓ−Ｂ１−Ｌ４−＊２  （ＸＩＩＩ）
（式中、
「＊１」は、Ｓ、Ｍ１またはＭ２に結合している前記Ｌ４の部分を表し、
Ｌ４のそれぞれは、Ｍ１、Ｍ２またはＳと結合している場合、リンカーＶであり、
ｓは、０または１〜約５００から独立して選択される整数であり、
ｋが０である場合、Ｌ４−＊２はＹを表し、
ｋが１〜約２０から選択される整数である場合、「＊２」は、Ｍ１、Ｍ２、またはＳに結合している前記Ｌ４の部分を表し、
各Ｂ１は、独立して、化学構造式ＸＩＶ：
【化３５】
2014521319.tif 000037
を有し、
【化３６】
2014521319.tif 000038
は、Ｌ１への結合を表し、
【化３７】
2014521319.tif 000039
は、Ｌ２への結合を表す）を有してもよい。
【０１０４】
別の態様では、本発明はまた、３つ以上の単量体糖アルコール単位Ｂ１を含む直鎖状、分枝または大環状マルチマーの糖アルコールを有する化合物であって、
各単量体糖アルコール単位が、１つのモノマー単位のＸ、ＹまたはＺ部分と、別のモノマー単位のＸ、ＹまたはＺとの間の反応により形成される連結基Ｗを介して、１つまたは複数の他のモノマー単位と結合しており、
各Ｂ１が、化学構造式ＸＶ：
【化３８】
2014521319.tif 000040
（式中、各Ｂ１について、独立して、
ｎおよびｐのそれぞれは、独立して、０および１〜約１２から選択される整数から選択され、
ｎ＋ｐは１〜１２の間であり、
ｒは０または１であり、
Ｘ、ＹおよびＺのそれぞれは、独立して、−ＯＨ、−Ｊ、−Ｒ５Ｊ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｊ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｊ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｊ、−ＯＲ５、−ＯＲ６、−ＯＲ７、−Ｏ−メシル、−Ｏ−トシル、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｏ−メシル、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｏ−トシル、−ＳＨ、−Ｓ−Ｓ−ｔブチル、−ＳＲ７、−ＳＲ５、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｊ、−ＮＨ２、−ＮＨＲ５、−Ｎ（Ｒ５）Ｒ５、−ＮＨＲ７、−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ５、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、−Ｎ＝Ｃ＝Ｓ、−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、−Ｃ≡Ｃ−Ｒ５、−Ｎ＝Ｎ＋＝Ｎ−、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）、−ＮＨ−ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｓ）−ＮＨ−ＮＨ２、−トルエンスルホニルヒドラジド、−Ｒ５−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ２＋）−ＮＨ２、ベンゾフェノン、アリールジアゾニウム、ジアゾアルカン、ジアゾアセチル、アントラキノン、ジアジリン、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、ジエン、ジエノフィル、１，３−双極子、親双極子、アルケン、ケテン、オレフィン、アリル型水素を有するアルケン、ジカルボニル基、エポキシド、オキシラン、オルガノシラン、ホスホニウム基、エステル、無水物、カーボネート基、グリオキサール、−Ｃ（＝ＮＨ２）−Ｏ−Ｒ５、ヒドロキシメチルホスフィン誘導体、エチルビニル、マレイミド、ビニルスルホン、アリルスルホン、チオエステル、シスプラチン誘導体、アジリジン、アクリロイル基から選択され、
各Ｒ５は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アリシクリル、ヘテロアリシクリル、ベンジルまたはアリールから選択され、Ｒ５における任意の環が必要に応じて置換されており、
各Ｒ６は、独立して、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルから選択され、
各Ｒ７は、独立して、トリチル、ＭＭＴ、およびＤＭＴから選択され、
各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択され、
各Ｊは、独立して、Ｃｌ、ＢｒおよびＩから選択され、
Ｌ１、Ｌ２、およびＬ３のそれぞれは、独立して、結合または−Ｒ９−Ｖ−Ｒ２−＊（式中、「＊」は、Ｘ、Ｙ、またはＺにそれぞれ結合しているＬ１、Ｌ２、およびＬ３の部分を表す）であり、
各ＶおよびＷは、独立して、ディールス‐アルダー付加物、１，３−双極子付加物、
【化３９】
2014521319.tif 000041
からなる群から選択され、
各Ｇ１は、独立して、ＮＨ、Ｏ、およびＳから選択され、
各Ｇ２は、独立して、ＯまたはＳであり、
各Ｇ３は、独立して、Ｓ、Ｏ、ＮＲ３、およびＳＯ２から選択され、
各Ｇ４は、独立して、ＯまたはＮＲ３であり、
各Ｒ２は、独立して、結合、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−ＣＨ２−、必要に応じて置換されているアリシクリル、ヘテロアリシクリル、アリール、ペプチド、およびペプチド模倣オリゴマーから選択され、
各Ｒ３は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜３、アリシクリル、ヘテロアリシクリルから選択され、Ｒ３における任意の環は必要に応じて置換されており、
各Ｒ４は、独立して、Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
各Ｒ９は、結合または−ＣＨ２−であり、
少なくとも、前記Ｂ１単位の１つにおいて、各−Ｌ３−Ｚ部分は、−ＯＲ１であり、各Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択され、少なくとも前記Ｂ１単位の１つにおいて、ｎ＋ｐ＋ｒは１を超える）
を有する化合物を提供する。
【０１０５】
好ましくは、上記化合物は、約５ｋＤａ〜約５００ｋＤａの分子量を有する。さらに好ましくは、上記化合物は、約１０ｋＤａ〜約１００ｋＤａの分子量を有する。最も好ましくは、上記化合物は、約１０ｋＤａ〜約６０ｋＤａの分子量を有する。
【０１０６】
好ましくは、上記化合物は、９０％を超える純度を有する。より好ましくは、上記化合物は、９５％を超える純度を有する。
【０１０７】
最も好ましくは、上記化合物は、約１０ｋＤａ〜約６０ｋＤａの分子量を有し、該化合物は、９５％を超える純度を有する。
【０１０８】
上記化合物は、−Ｓ−、−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｐ（＝Ｓ）２Ｏ−、および−Ｐ（＝Ｓ）（＝Ｏ）Ｏ−からなる群から選択されるＷを有してもよい。
【０１０９】
必要に応じて、上記化合物は、−Ｓ−、−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｐ（＝Ｓ）２Ｏ−、および−Ｐ（＝Ｓ）（＝Ｏ）Ｏ−からなる群から選択されるＷを有する。より好ましくは、Ｗは−Ｏ−である。
【０１１０】
好ましくは、上記化合物のＸ、Ｙ、またはＺのうちの少なくとも１つは、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｎ＝Ｃ＝Ｓ、−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、−Ｃ≡Ｃ−Ｒ５、−Ｎ＝Ｎ＋＝Ｎ−、−ＳＲ５、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｊ、ジエン、ジエノフィル、ケトン、アルデヒド、１，３−双極子、親双極子、アルケン、ケテン、オレフィン、アリル型水素を有するアルケン、トリフルオロメチルフェニルジアジリン、Ｎ−ヒドロキシルスクシンイミジルエステル（Ｎ−ｈｙｄｒｏｘｙｌｓｕｃｃｉｍｉｄｙｌ  ｅｓｔｅｒ）、およびマレイミドから選択されてもよく、
各Ｒ５は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アリシクリル、ヘテロアリシクリル、ベンジルおよびアリールから選択されてもよく、Ｒ５における任意の環が必要に応じて置換されており、
各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択されてもよく、各Ｊは、独立して、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩから選択される。
【０１１１】
必要に応じて、上記化合物に関して、Ｌ１、Ｌ２のそれぞれは−ＣＨ２−であってよく、各Ｌ３は結合であってよく、各Ｚは、−ＯＲ１（式中、Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択される）であってよい。
必要に応じて、上記化合物に関して、各Ｘは−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）であってよく、少なくとも１つのＹは、−Ｎ＝Ｎ＋＝Ｎ−、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｃ≡Ｃ−Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−マレイミド、
【化４０】
2014521319.tif 000042
であってよく、
各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択される。
【０１１２】
必要に応じて、上記化合物の各−Ｌ３−Ｚ部分は−ＯＲ１であってよく、
Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択されてもよい。
【０１１３】
必要に応じて、上記化合物に関して、各Ｌ１およびＬ２は−ＣＨ２−であってよい。
【０１１４】
上記化合物に関して、各ｒは０であってよい。
【０１１５】
上記化合物は、少なくとも１つのＸおよび少なくとも１つのＹを有していてもよくこれらは、同じであり、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル（Ｎ−ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｍｉｄｙｌ）、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−マレイミド、−Ｎ＝Ｎ＋＝Ｎ−、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｃ≡Ｃ−Ｃ１〜Ｃ４アルキル、
【化４１】
2014521319.tif 000043
から選択されてもよい。
【０１１６】
上記化合物はまた、各−Ｌ３−Ｚを−ＯＨとしてもよい。
【０１１７】
上記化合物はまた、各Ｌ１およびＬ２を−ＣＨ２−としてもよい。
【０１１８】
上記化合物はまた、各ｒを０としてもよい。
【０１１９】
上記化合物は、−ＯＨ、−ＯＣ１〜Ｃ８アルキル、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｍｉｄｅ）、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−マレイミド、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｂｒ、
【化４２】
2014521319.tif 000044
および−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ３から独立して選択される少なくとも１つのＸおよび少なくとも１つのＹを有していてもよく、ＸおよびＹは異なる。好ましくは、各−Ｌ３−Ｚは−ＯＨである。より好ましくは、各−Ｌ３−Ｚは−ＯＨであってよく、各Ｌ１、Ｌ２は−ＣＨ２−であってよい。最も好ましくは、各−Ｌ３−Ｚは−ＯＨであり、各Ｌ１、Ｌ２は−ＣＨ２−であってよく、各ｒは０である。
【０１２０】
上記化合物は少なくとも１つのＸ、ＹまたはＺを有していてもよく、少なくとも１つのＸ、ＹまたはＺはビニルスルホン基であってよいか、または式：
【化４３】
2014521319.tif 000045
（式中、Ｒ１０は電子求引基であり、Ｒ１１は必要に応じて置換されているアリールである）を有する。
【０１２１】
必要に応じて、上記化合物のマルチマーは直鎖状であってよく、以下の構造ＸＶＩ
【化４４】
2014521319.tif 000046
（式中、ｖは、２〜約２０００の整数である）を有する。より好ましくは、上記化合物の各−Ｌ３−Ｚ部分は−ＯＲ１であり、以下の構造ＸＸＩ
【化４５】
2014521319.tif 000047
（式中、
Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択される）を有する。さらにより好ましくは、各ｒは０であり、マルチマーは、以下の構造ＸＶＩＩ
【化４６】
2014521319.tif 000048
（式中、Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択される）を有する。さらにより好ましくは、上記化合物は、以下の構造ＸＶＩＩＩ
【化４７】
2014521319.tif 000049
（式中、Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択される）を有する。さらにより好ましくは、Ｗは、−Ｓ−、−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｐ（＝Ｓ）２Ｏ−、および−Ｐ（＝Ｓ）（＝Ｏ）Ｏ−からなる群から選択される。
必要に応じて、Ｗは、−Ｓ−、−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｐ（＝Ｓ）２Ｏ−、および−Ｐ（＝Ｓ）（＝Ｏ）Ｏ−からなる群から選択されてもよい。好ましくは、Ｗは−Ｏ−である。必要に応じて、ＸおよびＹは同じではない。
【０１２２】
必要に応じて、上記化合物は、構造式ＸＩＸ
【化４８】
2014521319.tif 000050
（式中、ｔは、３〜約２０００の整数であり、各ｎは、独立して、２〜約１２から選択されてもよく、各ｐは、独立して、１〜約１２から選択されてもよい）を有する、環式であるマルチマーであってよい。
【０１２３】
必要に応じて、上記化合物は、構造式ＸＸ：
【化４９】
2014521319.tif 000051
（式中、各ｎおよびｐは、独立して、０〜１２から選択される整数であり、ｎ＋ｐは２〜１２の間にあり、
各ｎは、独立して、１〜１２から選択される整数であり、
各ｖは、独立して、０〜２０００から選択される整数である）を有する、分枝した大きい（ｍａｃｒｏ）糖アルコール化合物であるマルチマーであってよい。
【０１２４】
本発明はまた、化学構造式ＸＸＩ：
【化５０】
2014521319.tif 000052
（式中、ｎおよびｐのそれぞれは、独立して、０および１〜約１２から選択される整数から選択されてもよく、ｎ＋ｐは２〜１２の間にあり、
ｒは０または１であり、
Ｘ１のそれぞれは、独立して、−ＯＨ、−Ｊ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｊ、−ＯＲ５、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ３、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ５、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、−Ｃ≡Ｃ−Ｒ５、−Ｎ＝Ｎ＋＝Ｎ−、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ２、フェノール基、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、ジエン、ジエノフィル、１，３−双極子、親双極子、アルケン、ケテン、オレフィン、アリル型水素を有するアルケン、必要に応じて置換されているＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、イミドエステル、マレイミドから選択されてもよく、
Ｙ１のそれぞれは、独立して、−Ｓ−Ｓ−ｔブチル、−ＳＲ７、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−Ｓ−ＳＲ８、−ＮＨＲ７、−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、必要に応じて置換されているＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、イミドエステル、マレイミドから選択されてもよく、
各Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択されてもよく、
各Ｒ５は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アリシクリル、ヘテロアリシクリル、ベンジルまたはアリールから選択されてもよく、Ｒ５における任意の環は必要に応じて置換されており、
各Ｒ７は、独立して、トリチル、ＭＭＴ、およびＤＭＴから選択されてもよく、
各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択されてもよく、
各Ｊは、独立して、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩから選択されてもよく、
Ｌ４およびＬ５は、独立して、結合、−ＣＨ２−＊、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｃ１〜８アルキル−＊、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ１〜８アルキル−＊、−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｃ１〜８アルキル−＊から選択されてもよく、
「＊」は、Ｘ１またはＹ１と結合しているＬ４およびＬ５の部分を表す）
を有する、単量体糖アルコールを提供する。
【０１２５】
必要に応じて、上記単量体糖アルコールは、
Ｘ１を−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨとしてもよく、ｒは０であり、Ｙ１は、独立して、−ＮＨ−Ｒ７、−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−Ｓ−Ｓ−Ｒ７、−Ｓ−Ｓ−ｔブチル、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、および−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）から選択されるものとし、
各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択され、
各Ｒ７は、独立して、トリチル、ＭＭＴ、およびＤＭＴから選択され、
ｒが１である場合、Ｙ１はＯＲ１であり、
各Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択される。
【０１２６】
必要に応じて、上記単量体糖アルコールは、
【０１２７】
Ｘ１をホスホルアミダイトとしてもよく、
ｒが０である場合、Ｙ１は、独立して、−Ｓ−Ｓ−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）−ＯＲ７、Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−ＴＦＡ、−ＮＨ−Ｒ７から選択されるものとし、
各Ｒ７は、独立して、トリチル、ＭＭＴ、およびＤＭＴから選択され、
各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択される。
【０１２８】
上記単量体糖アルコールは、Ｘ１およびＹ１を同じものとしなくてもよい。より好ましくは、Ｘ１およびＹ１のうちの少なくとも１つは、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、必要に応じて置換されているＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル基、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、マレイミド基からなる群から選択され、各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択される。
【０１２９】
上記単量体糖アルコールは、式（ＸＸＩＩ）
【化５１】
2014521319.tif 000053
（式中、ｎは、約２〜約８から選択される整数であり、
Ｘ２は、
【化５２】
2014521319.tif 000054
からなる群から選択される化学基または光架橋基であり、
Ｙ２は、
【化５３】
2014521319.tif 000055
からなる群から選択される化学基または光架橋基であり、
Ｗ１は、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、および−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−からなる群から選択される独立したリンカーであり、
Ｊ１のそれぞれは、独立して、Ｃｌ、ＢｒおよびＩから選択され、
Ｗ２のそれぞれは、独立して、
【化５４】
2014521319.tif 000056
からなる群から選択され、
Ｗ３のそれぞれは、独立して、
【化５５】
2014521319.tif 000057
からなる群から選択される）の構造を有してもよい。
【０１３０】
好ましくは、上記単量体糖アルコールは、
【化５６】
2014521319.tif 000058
からなる群から選択される化学式の構造を有していてもよい。
【０１３１】
より好ましくは、上記単量体糖アルコールは、
【化５７】
2014521319.tif 000059
からなる群から選択される化学式の構造を有する。
【０１３２】
代わりに、上記単量体糖アルコールは、
【化５８】
2014521319.tif 000060
からなる群から選択される化学式を有する。
【０１３３】
代わりに、上記単量体糖アルコールは、
【化５９】
2014521319.tif 000061
からなる群から選択される化学式を有する。
【０１３４】
最も好ましくは、上記単量体糖アルコールは、
【化６０】
2014521319.tif 000062
からなる群から選択される化学式を有する。
【０１３５】
最も好ましくは、上記単量体糖アルコールは、
【化６１】
2014521319.tif 000063
からなる群から選択される化学式を有する。
【０１３６】
本発明はまた、化学構造式ＸＸＩＩＩ：
【化６２】
2014521319.tif 000064
（式中、ｎ１、ｎ２、ｐ１、およびｐ２のそれぞれは、独立して、０および１〜約１２から選択される整数から選択され、ｎ１＋ｐ１は１〜１２の間にあり、ｎ２＋ｐ２は２〜１２の間にあり、
ｒは０または１であり、
Ｗ３は、−Ｓ−、−Ｏ−、−ＮＨ−、−ＮＣ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２、−Ｐ（＝Ｓ）２Ｏ−、および−Ｐ（＝Ｓ）（＝Ｏ）Ｏ−からなる群から選択され、
Ｘ３のそれぞれは、独立して、−ＯＨ、−Ｊ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｊ、−ＯＲ５、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ３、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ５、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、−Ｃ≡Ｃ−Ｒ５、−Ｎ＝Ｎ＋＝Ｎ−、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ２、フェノール基、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、ジエン、ジエノフィル、１，３−双極子、親双極子、アルケン、ケテン、オレフィン、アリル型水素を有するアルケン、必要に応じて置換されているＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、およびイミドエステル、マレイミド、ならびにホスホルアミダイトから選択され、
Ｙ３のそれぞれは、独立して、−Ｓ−Ｓ−ｔブチル、−ＳＲ７、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨＲ７、−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、Ｏ−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、必要に応じて置換されているＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、イミドエステル、およびマレイミドからなる群から選択され、
各Ｒ６は、独立して、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択され、
各Ｒ７は、独立して、トリチル、ＭＭＴ、およびＤＭＴからなる群から選択され、
各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルからなる群から選択され、
各Ｊは、独立して、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩからなる群から選択され、
Ｌ４およびＬ５は、独立して、結合、−ＣＨ２−＊、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｃ１〜８アルキル−＊、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ１〜８アルキル−＊、−ＣＨ２−およびＣ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｃ１〜８アルキル−＊からなる群から選択され、
「＊」は、Ｘ３またはＹ３に結合しているＬ４およびＬ５の部分を表す）を有する、二量体糖アルコールを提供する。
【０１３７】
好ましくは、上記二量体糖アルコール化合物は、−Ｓ−、−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｐ（＝Ｓ）２Ｏ−、および−Ｐ（＝Ｓ）（＝Ｏ）Ｏ−からなる群から選択されるＷ３を有する。
【０１３８】
上記二量体糖アルコール化合物は、−Ｏ−であるＷ３を有してもよい。
上記二量体糖アルコール化合物は、Ｘ３を−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨとしてもよく、ｒは０であり、Ｙ３は、独立して、−ＮＨ−Ｒ７、−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−Ｓ−Ｓ−Ｒ７、−Ｓ−Ｓ−ｔブチル、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、および−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）からなる群から選択されるものとし、
各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択され、
各Ｒ７は、独立して、トリチル、ＭＭＴ、およびＤＭＴからなる群から選択され、
ｒが１である場合、ＹはＯＲ１であり、
Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択される。
【０１３９】
上記二量体糖アルコール化合物は、Ｘ３を、ホスホルアミダイトとしてもよく、ｒが０である場合、Ｙ３は、独立して、−Ｓ−Ｓ−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）−ＯＲ７、Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−ＴＦＡ、−ＮＨ−Ｒ７からなる群から選択されるものとし、
各Ｒ７は、独立して、トリチル、ＭＭＴ、およびＤＭＴから選択され、
各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択される。
【０１４０】
上記二量体糖アルコール化合物は、Ｘ３およびＹ３を同じとしなくてもよい。
【０１４１】
上記二量体糖アルコール化合物は、Ｘ３およびＹ３を、独立して、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、必要に応じて置換されているＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル基、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、およびマレイミド基からなる群から選択されるものとし、
各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルからなる群から選択される。
【０１４２】
上記二量体糖アルコール化合物は、Ｘ３をアミノオキシ基としてもよく、Ｙ３は、マレイミド基、スルフヒドリル基、ジスルフィド基、ハロアセチル基、アジド基、およびアルキン基からなる群から選択されるものとしてもよい。
【０１４３】
上記二量体糖アルコール化合物は、Ｘ３を必要に応じて置換されているＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステルとしてもよく、Ｙ３は、マレイミド基、スルフヒドリル基、ジスルフィド基、ハロアセチル基、アジド基、およびアルキン基からなる群から選択されるものとしてもよい。
【０１４４】
本発明はまた、化学式
【化６３】
2014521319.tif 000065
（式中、
ｎは、２〜約８の整数であり、
ｍは、１〜約８の整数であり、
ｐは、１〜約２０００の整数であり、
Ｘ１のそれぞれは、
【化６４】
2014521319.tif 000066
からなる群から選択され、
各Ｙ１は、
【化６５】
2014521319.tif 000067
からなる群から選択され、
各Ｗ１は、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−および−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−からなる群から選択され、
各Ｊ１は、Ｃｌ、ＢｒまたはＩからなる群から選択され、
Ｒ１８は、水素、Ｃ１〜８アルキル、アリシクリル、ヘテロアリシクリル、ベンジルおよびアリールからなる群から選択され、Ｒ１８における任意の環は、必要に応じて置換されており、
各Ｗ２は、独立して、
【化６６】
2014521319.tif 000068
からなる群から選択され、
Ｗ３のそれぞれは、独立して、
【化６７】
2014521319.tif 000069
からなる群から選択される）
を有する第１の糖アルコール由来の化合物の実施形態を提供する。
【０１４５】
好ましくは、上記第１の糖アルコール由来の化合物は、
【化６８】
2014521319.tif 000070
からなる群から選択される化学式を有する。
【０１４６】
より好ましくは、上記第１の糖アルコール由来の化合物は、
【化６９】
2014521319.tif 000071
からなる群から選択される化学式を有する。
【０１４７】
最も好ましくは、上記第１の糖アルコール由来の化合物は、
【化７０】
2014521319.tif 000072
からなる群から選択される化学式を有する。
【０１４８】
代わりに、上記第１の糖アルコール由来の化合物は、
【化７１】
2014521319.tif 000073
からなる群から選択される化学式を有する。
【０１４９】
代わりに、上記第１の糖アルコール由来の化合物は、
【化７２】
2014521319.tif 000074
からなる群から選択される化学式を有する。
【０１５０】
代わりに、上記第１の糖アルコール由来の化合物は、
【化７３】
2014521319.tif 000075
からなる群から選択される化学式を有する。
【０１５１】
好ましくは、上記第１の糖アルコール由来の化合物は、１〜約１０００の整数であるｐを有する。
【０１５２】
好ましくは、化合物の実施形態は、ｐが１〜約５００の整数である、糖アルコール由来の化合物であってよい。
【０１５３】
必要に応じて、上記第１の糖アルコール由来の化合物の分子量は、約５ＫＤａ〜約５００ＫＤａであってよい。好ましくは、上記化合物の分子量は、約１０ＫＤａ〜約１００ＫＤａである。より好ましくは、上記化合物の分子量は、約１０ＫＤａ〜約６０ＫＤａである。
【０１５４】
必要に応じて、上記第１の糖アルコール由来の化合物は約９０％の純度である。好ましくは、上記化合物は約９５％の純度である。より好ましくは、上記化合物は約９７％の純度である。
【０１５５】
上記第１の糖アルコール由来の化合物の分子量は、約５ＫＤａ〜約５００ＫＤａであってよく、該化合物は約９０％の純度であってよい。より好ましくは、化合物の上記分子量は約１０ＫＤａ〜約１００ＫＤａであってよく、該化合物は約９０％の純度であってよい。最も好ましくは、上記化合物の分子量は約１０ＫＤａ〜約６０ＫＤａであってよく、該化合物は約９０％の純度であってよい。
【０１５６】
本発明はまた、化学式
【化７４】
2014521319.tif 000076
（式中、
ｎは、２〜約８の整数であり、
Ｘ２は、
【化７５】
2014521319.tif 000077
からなる群から選択される化学基または光架橋基であり、
Ｙ２は、
【化７６】
2014521319.tif 000078
からなる群から選択される化学基または光架橋基であり、
Ｗ１は、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、および、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−からなる群から選択される、独立したリンカーであり、
各Ｊ１は、独立して、Ｃｌ、ＢｒおよびＩから選択され、
各Ｗ２は、独立して、
【化７７】
2014521319.tif 000079
からなる群から選択され、
各Ｗ３は、独立して、
【化７８】
2014521319.tif 000080
からなる群から選択される）を有する第２の糖アルコール由来の化合物を提供する。
【０１５７】
好ましくは、上記第２の糖アルコール由来の化合物は、
【化７９】
2014521319.tif 000081
からなる群から選択される化学式を有する。
【０１５８】
好ましくは、上記第２の糖アルコール由来の化合物は、
【化８０】
2014521319.tif 000082
からなる群から選択される化学式を有する。
【０１５９】
好ましくは、上記第２の糖アルコール由来の化合物は、
【化８１】
2014521319.tif 000083
からなる群から選択される化学式を有する。
【０１６０】
好ましくは、上記第２の糖アルコール由来の化合物は、
【化８２】
2014521319.tif 000084
からなる群から選択される化学式を有する。
【０１６１】
好ましくは、上記第２の糖アルコール由来の化合物は、
【化８３】
2014521319.tif 000085
からなる群から選択される化学式を有する。
【０１６２】
好ましくは、上記第２の糖アルコール由来の化合物は、
【化８４】
2014521319.tif 000086
からなる群から選択される化学式を有する。
【０１６３】
必要に応じて、上記第２の糖アルコール由来の化合物の分子量は、約５ＫＤａ〜約５００ＫＤａであってよい。好ましくは、上記化合物の分子量は、約１０ＫＤａ〜約１００ＫＤａである。より好ましくは、上記化合物の分子量は、約１０ＫＤａ〜約６０ＫＤａである。
【０１６４】
必要に応じて、上記第２の糖アルコール由来の化合物は約９０％の純度である。好ましくは、上記化合物は約９５％の純度である。より好ましくは、上記化合物は約９７％の純度である。
【０１６５】
好ましくは、上記第２の糖アルコール由来の化合物の分子量は、約５ＫＤａ〜約５００ＫＤａであってよく、該化合物は約９０％の純度であってよい。より好ましくは、上記化合物の分子量は約１０ＫＤａ〜約１００ＫＤａであってよく、該化合物は約９０％の純度であってよい。最も好ましくは、上記化合物の分子量は約１０ＫＤａ〜約６０ＫＤａであってよく、該化合物は約９０％の純度である。
【０１６６】
本発明はまた、化学式
【化８５】
2014521319.tif 000087
（式中、
ｎは、２〜約８から選択される整数であり、
ｍは、１〜約８から選択される整数であり、
ｐは、２〜約２０００から選択される整数であり、
各Ｗは、独立して、−Ｓ−、−ＮＨ−、−Ｏ−、−ＮＣ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｐ（＝Ｏ）２Ｏ−、−Ｐ（＝Ｓ）２Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−および−Ｐ（＝Ｓ）（＝Ｏ）Ｏ−から選択され、
Ｘ３およびＹ３のそれぞれは、独立して、
【化８６】
2014521319.tif 000088
ジエン、ジエノフィル、１，３−双極子、親双極子、アルケン、ケテン、オレフィン、アリル型水素を有するアルケン、ベンゾフェノン、アリールジアゾニウム、ビニルスルホンおよびアリルスルホンからなる群から選択される化学基または光架橋基であり、
Ｌ１およびＬ２は、独立して、結合、−ＣＨ２−＊から選択され、
「＊」は、Ｘ３またはＹ３に結合しているＬ１およびＬ２の部分を表し、
Ｒ１８は、水素、Ｃ１〜８アルキル；アリシクリル、ヘテロアリシクリル、ベンジルまたはアリールであり、Ｒ１８における任意の環は、必要に応じて置換されており、
Ｗ１のそれぞれは、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−からなる群から選択される独立したリンカーであり、
Ｊ１のそれぞれは、独立して、Ｃｌ、ＢｒおよびＩから選択され、
Ｗ２のそれぞれは、独立して、
【化８７】
2014521319.tif 000089
からなる群から選択され、
Ｗ３のそれぞれは、独立して、
【化８８】
2014521319.tif 000090
からなる群から選択される）を有する、第３の糖アルコール由来の化合物を提供する。
【０１６７】
好ましくは、上記第３の糖アルコール由来の化合物の実施形態は、約２〜約１０００から選択される整数であるｐを有する。より好ましくは、ｐは、１〜約１０００から選択される整数である。最も好ましくは、ｐは、１〜約５００から選択される整数である。
【０１６８】
好ましくは、上記第３の糖アルコール由来の化合物は、約５ＫＤａ〜約５００ＫＤａの分子量を有する。より好ましくは、上記化合物の分子量は、約１０ＫＤａ〜約１００ＫＤａである。最も好ましくは、上記化合物の分子量は、約１０ＫＤａ〜約６０ＫＤａである。
【０１６９】
好ましくは、上記第３の糖アルコール由来の化合物は約９０％の純度である。より好ましくは、上記化合物は約９５％の純度である。最も好ましくは、上記化合物は約９７％の純度である。
【０１７０】
好ましくは、上記第３の糖アルコール由来の化合物の分子量は、約５ＫＤａ〜約５００ＫＤａであってよく、該化合物は約９０％の純度であってよい。より好ましくは、化合物の分子量は約１０ＫＤａ〜約１００ＫＤａであってよく、該化合物は約９０％の純度であってよい。最も好ましくは、上記化合物の分子量は約１０ＫＤａ〜約６０ＫＤａであってよく、該化合物は約９０％の純度であってよい。
【０１７１】
本発明は、生体分子の標識化および結合体化に対して、およびドラッグデリバリーに対して適切である、ＳＡ架橋試薬およびＳＡ高分子を含めた、一連の新規の化学物質を構築するための骨格として、糖アルコール（ＳＡ）分子が使用される方法および組成物を提供する。これらの新規分子は、既存の系よりも重大な利点を有する。（ｉ）水素結合により親水性が付与されている超親水性。上記ＳＡは、上記分子全体にわたり利用可能な水素結合ドナーおよびアクセプターを有し、これによって、該分子が水のネットワークとより類似したものになっている。図１に示されているように、ＳＡは、比較できるＰＥＧリンカー（ＬｏｇＰ＝−２．１１７）よりも親水性がずっと高い（より低いＬｏｇＰ値、ＬｏｇＰ＝−３．９９５）。（ｉｉ）単一のおよび純粋な大きいＭＷのＳＡ高分子は、容易に合成することができる。同じ原子長に対して、ＳＡは、上記ＰＥＧリンカーと比較してより大きなＭＷを有する（図１）。同様の長さのＳＡ高分子のＭＷはおよそ４５％大きい。大きいＭＷの生物学的コンジュゲートを単一化合物として作製した場合、分子および合成の経済性または効率が有利となり得る。（ｉｉｉ）ＳＡ高分子における複数のアクセス可能な官能基。ドラッグデリバリー分野では、可変のＭＷの化合物を有するポリマー、例えばポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）が普通使用され、このポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）は多くのＦＤＡが承認した治療用デバイスに広く使用されている。しかし、ＰＬＧＡが生体分子を標識または結合体化するために使用される場合、官能基は末端のみに限られ、該分子の充填が非常に低いことになる。これはまたＰＥＧにも当てはまる。ＳＡ高分子は、該分子全体にわたり官能基を有し、容易にアクセス可能である。上記ＳＡ高分子の構造に応じて、薬物の高密度３Ｄネットワークを達成することができる。（ｉｖ）生分解性および生体適合性。ＳＡ高分子は、天然の糖アルコールをベースとするものであり、インビボで容易に分解することができる。標識が、エステル結合を使用してＯＨ基を介して行われる場合、水の存在下でこれを分解できる（加水分解する）。この特性により、ＳＡ架橋試薬およびＳＡ高分子は、低分子薬物のデリバリー、ならびに大きな分子の医薬品（例えば、生物製剤）に対する重要な候補となる。
【０１７２】
本発明は、対象となる分子を標識、結合体化、および固定化するために使用することができる様々な官能基を有する新規のＳＡ架橋試薬の集合を提供する。一態様では、本発明は一般的に、１つまたは複数の単量体糖アルコール単位Ｂ１（改変されたＳＡ単位）を含む、単量体の、直鎖状、分枝、または大環状のマルチマー糖アルコール部分に関する。前駆体化合物が２つ以上の単量体糖アルコール単位を含む場合、各単量体糖アルコール単位は、連結基Ｗ（式中、Ｗは、あるモノマー単位のＸおよびＹ部分と、他の任意のモノマー単位のＸおよびＹとの間の反応により形成される）を介して、１つまたは別の単量体糖アルコール単位と結合している。各Ｂ１は、化学構造式ＸＶ：
【化８９】
2014521319.tif 000091
（式中、各Ｂ１について、独立して：
ｎおよびｐのそれぞれは、独立して、０および約１〜約１２から選択される整数から選択され、ｎ＋ｐは、１〜１２の間であり、
ｒは０または１であり、
Ｘ、Ｙ、およびＺのそれぞれは官能基であり、
Ｌ１、Ｌ２、およびＬ３のそれぞれは結合またはリンカーである）
を有する。
特定の実施形態では、−ＯＨ、−Ｊ、−Ｒ５Ｊ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｊ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｊ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｊ、−ＯＲ５、−ＯＲ６、−ＯＲ７、−Ｏ−メシル、−Ｏ−トシル、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｏ−メシル、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｏ−トシル、−ＳＨ、−Ｓ−Ｓ−ｔブチル、−ＳＲ７、−ＳＲ５、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｊ、−ＮＨ２、−ＮＨＲ５、−Ｎ（Ｒ５）Ｒ５、−ＮＨＲ７、−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ５、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、−Ｎ＝Ｃ＝Ｓ、−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、−Ｃ≡Ｃ−Ｒ５、−Ｎ＝Ｎ＋＝Ｎ−、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）、−ＮＨ−ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｓ）−ＮＨ−ＮＨ２、−トルエンスルホニルヒドラジド、−Ｒ５−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ２＋）−ＮＨ２、ベンゾフェノン、アリールジアゾニウム、ジアゾアルカン、ジアゾアセチル、アントラキノン、ジアジリン、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、ジエン、ジエノフィル、１，３−双極子、親双極子、アルケン、ケテン、オレフィン、アリル型水素を有するアルケン、ジカルボニル基、エポキシド、オキシラン、オルガノシラン、ホスホニウム基、エステル、無水物、カーボネート基、グリオキサール、−Ｃ（＝ＮＨ２）−Ｏ−Ｒ５、ヒドロキシメチルホスフィン誘導体、エチルビニル、マレイミド、ビニルスルホン、アリルスルホン、チオエステル、シスプラチン誘導体、アジリジン、アクリロイル基のそれぞれ、各Ｒ５は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アリシクリル、ヘテロアリシクリル、ベンジルまたはアリールから選択され、Ｒ５における任意の環は必要に応じて置換されており、
各Ｒ６は、独立して、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルから選択され、
各Ｒ７は、独立して、トリチル、ＭＭＴ、およびＤＭＴから選択され、
各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択され、
各Ｊは、独立して、Ｃｌ、ＢｒおよびＩから選択される。
Ｌ１、Ｌ２、およびＬ３のそれぞれは、独立して、結合または−Ｒ９−Ｖ−Ｒ２−＊である。
【０１７３】
一部の実施形態では、上記リンカーは、−Ｒ６−Ｖ−Ｒ２−＊であり、「＊」は、Ｘ、Ｙ、またはＺに結合しているリンカーの部分を表し、Ｖは連結基である。
【０１７４】
一部の実施形態では、各ＶおよびＷは、独立して、ディールス‐アルダー付加物、１，３−双極子付加物、
【化９０】
2014521319.tif 000092
から選択される。
【０１７５】
各Ｇ１は、独立して、ＮＲ７、Ｏ、またはＳから選択され、各Ｇ２は、独立して、ＯまたはＳであり、各Ｇ３は、独立して、Ｓ、Ｏ、ＮＲ３、またはＳＯ２から選択され、各Ｇ４は、独立して、ＯまたはＮＲ３であり、各Ｒ３は、独立して、結合、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−ＣＨ２−、必要に応じて置換されているアリシクリル、ヘテロアリシクリル、アリール、ペプチド、およびペプチド模倣オリゴマーから選択され、各Ｒ９は結合または−ＣＨ２−であり、各Ｒ３は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜３、必要に応じて置換されているアリシクリル、および必要に応じて置換されているヘテロアリシクリルから選択され、各Ｒ８は、独立して、Ｃ１〜Ｃ８アルキルである。
【０１７６】
いくつかの好ましい実施形態では、連結基Ｗは、−Ｓ−、−Ｏ−、−ＮＨ−、−ＮＣ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｐ（＝Ｓ）２Ｏ−、または−Ｐ（＝Ｓ）（＝Ｏ）Ｏ−から選択される。
【０１７７】
特定のより好ましい実施形態では、Ｗは、−Ｓ−、−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｐ（＝Ｓ）２Ｏ−、または−Ｐ（＝Ｓ）（＝Ｏ）Ｏ−から選択される。特定のさらにより好ましい実施形態では、Ｗは−Ｏ−である。
【０１７８】
一部の実施形態では、「改変された」ＳＡ単位は、そのＯＨ基のうちの１つまたは複数が、別の官能基での置換により化学的に改変されたＳＡ単位を指す。この場合、ＯＨ置換されているＸに接続しているＬ１は−ＣＨ２−であり、ＯＨ置換されているＹに接続しているＬ２は−ＣＨ２−であり、ＯＨ置換されているＺに接続している任意のＬ３は結合である。一部の実施形態では、「改変された」ＳＡ単位は、その−ＣＨ２ＯＨ基のうちの１つのまたは両方が酸化して、普通アルデヒドまたはカルボン酸となり、次いで他の官能基でさらに改変されているＳＡ単位を指す。この場合、Ｌ１およびＬ２は結合である。一部の実施形態では、「改変された」ＳＡ単位はまた、１つまたは複数のＯＨ基における水素原子が化学的保護基、脱離基、または他の官能基で置き換えられているＳＡ単位を指す。この場合、Ｌ１およびＬ２のそれぞれは−ＣＨ２−であり、Ｌ３は結合である。好ましくは、各−Ｌ３−Ｚは−ＯＲ１である（各Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択される）。以下は、ＳＡのＢ１単位の様々な単純化された構造のリストである。
【化９１】
2014521319.tif 000093
【０１７９】
特定の実施形態では、官能基Ｘ、Ｙ、およびＺはアミン反応性基である。アミンに対する一次カップリング反応は、アシル化またはアルキル化を介する。好ましいアミン活性基には、例えば、カルボン酸、ケテン、イソチオシアネート、イソシアネート、アシルアジド、ハロゲン化アシル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）エステル、スルホニルクロリド、カルボニル基、例えばアルデヒド、ケトン、およびグリオキサール、エポキシドまたはオキシラン、カーボネート基、ハロゲン化アリール、例えば、フルオロベンゼン誘導体、ハロゲン化アルキル、イミドエステル、またはイミデート官能基、無水物、フルオロフェニルエステル、およびヒドロキシメチルホスフィン誘導体が挙げられる。ある特定の例では、ＸまたはＹはアルギニン反応性基である。アルギニン側鎖上のグアニジニル基は、１，２−ジカルボニル試薬、例えば、グリオキサールのジケトン基を使用して、特異的に標的にすることができる。
【０１８０】
特定の実施形態では、官能基Ｘ、Ｙ、およびＺはチオール反応性基である。チオールに対する一次カップリング反応は、アルキル化またはジスルフィド交換を介する。好ましいチオール反応性基には、例えば、チオール、ハロアセチルおよびハロゲン化アルキル、マレイミド、アジリジン、アクリロイル誘導体、アリール化剤、例えば、環にハロゲンまたはスルホネート基のいずれかを保有するベンゼン誘導体、チオール−ジスルフィド交換試薬、例えば、ピリジルジチオールおよびチオールニトロ安息香酸、ビニルスルホン、システイン誘導体、チオエステル、およびシスプラチン誘導体が挙げられる。
【０１８１】
特定の実施形態では、官能基Ｘ、Ｙ、およびＺはカルボン酸反応性基である。好ましいカルボン酸反応性基には、例えば、ＯＨ、アミン、チオール、ジアゾメタンおよびジアゾアセテート誘導体、およびアシルイミダゾール脱離基が挙げられる。
【０１８２】
特定の実施形態では、官能基Ｘ、Ｙ、およびＺはＯＨ反応性基である。好ましいヒドロキシル反応性基には、例えば、エポキシドまたはオキシラン、ハロゲン化アルキル、カルボン酸およびその活性エステル、イソシアネート、イソチオシアネート、ホスホニウム中間体、トシレートまたはメシレート、スルホニルクロリド、無水物、アシルアジド、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフラニル、エチルビニル、ハロゲン化トリチル、フルオロベンゼン誘導体、シリル−ハロゲン化物、およびケテンが挙げられる。
【０１８３】
いくつかの好ましい実施形態では、官能基Ｘ、Ｙ、およびＺは、アルデヒドまたはケトン基と反応してオキシム結合を形成することが可能なアミノオキシ基である。別の実施形態では、官能基Ｘ、Ｙ、およびＺは、アルデヒドまたはケトン基と反応して、ヒドラジン結合を形成することが可能なヒドラジンである。別の実施形態では、官能基Ｘ、Ｙ、およびＺは、アルデヒドまたはケトン基と反応して、セミまたはチオセミカルバゾン結合を形成することが可能なセミまたはチオセミカルバジドである。別の実施形態では、ＸまたはＹは、アミン官能基であり得る。アミン基は、シッフ塩基形成を介してアルデヒドと反応することができ、形成された炭素アミン二重結合は、さらに還元することによって、安定した第二または第三アミン結合にすることができる。アミン基はまた、ホルムアルデヒドの存在下、活性水素含有化合物と反応することもできる（マンニッヒ反応）。
【０１８４】
一部の実施形態では、官能基Ｘ、Ｙ、およびＺは、特定の生体分子に存在する特定の反応性（または置き換え可能な）水素と反応することができる。例えば、Ｘ、Ｙ、またはＺは、芳香族環の活性水素部位と反応して共有結合のジアゾ結合を生成するジアゾニウム基であってよい。
【０１８５】
一部の好ましい実施形態では、官能基Ｘ、Ｙ、およびＺは、紫外光への曝露により、対象となる分子とカップリングするように誘導できる光反応性基である。好ましい光反応性基には、例えば、ジアジリン基が含まれる。ジアジリン基より好ましいのは、３−トリフルオロメチル−３−アリールジアジリン（ａｒｙａｌｄｉａｚｉｒｉｎｅ）である。他の好ましい光反応性基は、アリールアジド、ハロゲン化アリールアジド、ベンゾフェノン、アントラキノン、ジアゾ類、例えば、ジアゾトリフルオロプロピオネートおよびジアゾピルベート、ならびにソラレン誘導体である。
【０１８６】
一部の好ましい実施形態では、官能基Ｘ、Ｙ、およびＺは、ディールス‐アルダー反応を介して分子を結合することが可能なジエン、ジエノフィル基、またはアルケンである。好ましくは、Ｘ、Ｙ、またはＺは、［３＋２］付加環化を介して分子を結合することが可能なアジド官能基またはアルキンであってよい。別の実施形態では、Ｘ、Ｙ、またはＺは、アリル型水素（エン）または複数の結合（エノフィル）を有するアルケンであってよい。別の実施形態ではＸ、Ｙ、またはＺは、１，３−双極子または親双極子（アルケンを置換する）であってよい。
【０１８７】
一部の好ましい実施形態では、Ｘは保護されたアミンであり、Ｙは、各−Ｌ３−Ｚが−ＯＲ１である酸である。ＳＡ架橋試薬は、固相合成ストラテジーを介して任意の分子（例えば、ペプチドおよび核酸オリゴマー）に組み込むことができる。例えば、Ｘは、フルオレニルメチルオキシカルボニル（ｆｌｕｏｒｅｎｙｍｅｔｈｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）（Ｆｍｏｃ）で保護されたアミンであり得る。別の例では、Ｘは、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）で保護されたアミンであり得る。別の例では、Ｘは、トリフェニルメチルクロリド（ｃｈｌｒｏｒｉｄｅ）（トリチル）、ジメトキシトリチル（ＤＭＴ）、またはモノメトキシトリチル（ＭＭＴ）で保護されたアミンであり得、これによって、固相合成を介してＳＡ架橋試薬をオリゴマーに組み込むことができる。
【０１８８】
一部の好ましい実施形態では、Ｘは保護されたチオール（例えば、トリチルまたはｔ−ブチルチオールで保護された）であり、Ｙは、各−Ｌ３−Ｚが−ＯＲ３（式中、Ｒ３は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜３、必要に応じて置換されているアリシクリル、および必要に応じて置換されているヘテロアリシクリルから選択される）である酸である。
【０１８９】
一部の好ましい実施形態では、Ｘは、保護されたアミン（例えば、トリチル、ＤＭＴ、またはＭＭＴで保護された）であり、Ｙは、各−Ｌ３−Ｚが−ＯＲ３であるホスホルアミダイトである。
【０１９０】
一部の実施形態では、ＸおよびＹ基は同じであり、各−Ｌ３−Ｚは−ＯＲ１であり、よってホモ二官能性ＳＡ官能性試薬である。ホモ二官能性ＳＡ官能性試薬の例には、ホモ二官能性ＮＨＳエステル、ホモ二官能性イミドエステル、ホモ二官能性ジチオピリジル基含有架橋試薬、ホモ二官能性マレイミド基含有架橋試薬、ホモ二官能性ハロゲン化アルキル含有架橋試薬、ホモ二官能性光反応性架橋試薬、ホモ二官能性アルデヒドまたはケトン、ホモ二官能性エポキシド、ホモ二官能性ヒドラジド、ホモ二官能性アミノオキシ、およびホモ二官能性ジアゾニウムが含まれる。
【０１９１】
一部の実施形態では、ＸおよびＹ基は異なり、各−Ｌ３−Ｚは−ＯＲ１であり、よってヘテロ二官能性ＳＡ架橋試薬である。特定の好ましい実施形態では、Ｘはアミン反応性基であり、Ｙはスルフヒドリル反応性基である。特定の好ましい実施形態では、Ｘはカルボニル反応性（アルデヒド／ケト）、例えば、アミノオキシ、ヒドラジン、セミカルバジド、またはチオセミカルバジドであり、Ｙはスルフヒドリル反応性基である。特定の好ましい実施形態では、Ｘはアミン反応性基であり、Ｙは光反応性基である。特定の好ましい実施形態では、Ｘはスルフヒドリル反応性基であり、Ｙは光反応性基である。特定の好ましい実施形態では、Ｘはカルボニル反応性基であり、Ｙは光反応性基である。特定の実施形態では、Ｘはカルボキシレート反応性基であり、Ｙは光反応性基である。特定の実施形態では、Ｘはケトンまたはアルデヒドであり、Ｙは光反応性基である。
【０１９２】
さらに、ＳＡ架橋試薬は、コンジュゲートに対してインビボでの系統的な薬物放出を可能にする切断可能な結合を組み込むことができる。例えば、アミノオキシ官能基を架橋試薬の末端に導入し、切断可能なオキシムリンカーを使用することによって、架橋されている分子を放出することができる。別の例では、ジスルフィド結合を組み込み、これによって、還元性の環境内での分子の放出を可能にすることもできる。さらに、ＳＡ架橋試薬は、インビボで酵素学的に切断し得る別の結合を介して２つ以上のＳＡを結合することができる。
【０１９３】
さらに、骨格に２つ以上のＯＨ基（二級ＯＨ基）を有するＳＡ架橋試薬は、これら自体が切断可能な結合物となり得る。例えば、２つ以上のＯＨ基を有するＳＡ骨格は、過ヨウ素酸酸化で切断することによって、新規アルデヒド官能基を生成し得る。
【０１９４】
さらに、ＳＡ架橋試薬は、骨格に還元糖単位を組み込んでもよい。ＳＡ１またはＳＡ２のうちの少なくとも１つにおいて、ｒは１である。例えば、還元糖単位のうちの１つが還元形態のフルクトースである場合、三官能性基、Ｘ、Ｙ、およびケトンを含有するＳＡ架橋試薬を想定することができる。一部の実施形態では、Ｘは保護されたアミンであってよく、Ｙは酸であってよい。この構成は、固相合成を介してケトン官能基をペプチドまたはオリゴに導入するのに有用である。このケトンハンドルは、他の分子のコンジュゲーションのために便利に使用することができる。
【０１９５】
単量体ＳＡ架橋試薬および直鎖状ＳＡ架橋試薬
【０１９６】
一態様では、本発明は、１つのＳＡ単位を含む単官能性、ホモ二官能性、およびヘテロ二官能性架橋試薬を提供する。この化合物は、化学構造式ＸＸＶＩ：
【化９２】
2014521319.tif 000094
を有する。
【０１９７】
ｎおよびｐのそれぞれは、独立して、０および１〜約１２から選択される整数から選択され、ｎ＋ｐは２〜１２の間であり、ｒは０または１であり、Ｌ３およびＬ４は、独立して、結合、−ＣＨ２−＊、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｃ１〜８アルキル−＊、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ１〜８アルキル−＊、−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｃ１〜８アルキル−＊から選択され、「＊」は、Ｘ１またはＹ４に結合しているＬ３およびＬ４の部分を表す。各Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択される。
【０１９８】
特定の実施形態では、Ｘ１のそれぞれは、独立して、−ＯＨ、−Ｊ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｊ、−ＯＲ５、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ３、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ５、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、−Ｃ≡Ｃ−Ｒ５、−Ｎ＝Ｎ＋＝Ｎ−、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ２、フェノール基、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、ジエン、ジエノフィル、１，３−双極子、親双極子、アルケン、ケテン、オレフィン、アリル型水素を有するアルケン、必要に応じて置換されているＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、イミドエステル、マレイミド、ホスホルアミダイトから選択され、各Ｒ５は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アリシクリル、ヘテロアリシクリル、ベンジルまたはアリールから選択され、Ｒ５における任意の環は必要に応じて置換されており、各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、または２，４−ジニトロフェニルから選択され、各Ｊは、独立して、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩから選択される。
【０１９９】
一部の好ましい実施形態では、Ｘ１は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨであり、ｒは０であり、Ｙ１はＸ１は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨであり、ｒは０であり、Ｙ１は、独立して、−ＮＨ−Ｒ７、−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−Ｓ−Ｓ−Ｒ７、−Ｓ−Ｓ−ｔブチル、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、および−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）から選択され、各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択され、各Ｒ７は、独立して、トリチル、ＭＭＴ、およびＤＭＴから選択され、ｒが１である場合、Ｙ１はＯＲ１（式中、各Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択される）である。
【０２００】
一部の好ましい実施形態では、Ｘ１はホスホルアミダイトであり、ｒが０である場合、Ｙ１は、独立して、−Ｓ−Ｓ−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）−ＯＲ７、Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−ＴＦＡ、または−ＮＨ−Ｒ７（式中、各Ｒ７は、独立して、トリチル、ＭＭＴ、またはＤＭＴから選択され、各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、または２，４−ジニトロフェニルから選択される）から選択される。
【０２０１】
一部の好ましい実施形態では、Ｘ１およびＹ１は同じではない。
【０２０２】
一部の好ましい実施形態では、各Ｘ１およびＹ４のうちの１つは、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、必要に応じて置換されているＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル基、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、またはマレイミド基であり、各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、または２，４−ジニトロフェニルから選択される。
【０２０３】
一部のより好ましい実施形態では、上記単量体糖アルコールは、以下の構造：
【化９３】
2014521319.tif 000095
を有する。
式中、ｎは、約２〜約８から選択される整数であり、
Ｘ２のそれぞれは、
【化９４】
2014521319.tif 000096
からなる群から選択される化学基または光架橋基であり、
Ｙ２のそれぞれは、
【化９５】
2014521319.tif 000097
からなる群から選択される化学基または光架橋基であり、
Ｗ１のそれぞれは、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、および−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−からなる群から選択される独立したリンカーであり、
Ｊ１のそれぞれは、独立して、Ｃｌ、ＢｒまたはＩから選択され、
Ｗ２のそれぞれは、独立して、
【化９６】
2014521319.tif 000098
からなる群から選択され、
Ｗ３のそれぞれは、独立して、
【化９７】
2014521319.tif 000099
からなる群から選択される。
【０２０４】
一部の好ましい実施形態では、上記単量体糖アルコール化合物は、以下の化学構造：
【化９８】
2014521319.tif 000100
を有する単官能化した糖アルコール架橋試薬である。
【０２０５】
一部の好ましい実施形態では、上記単量体糖アルコール化合物は、以下の化学構造
【化９９】
2014521319.tif 000101
を有するホモ二官能性架橋試薬である。
【０２０６】
一部の好ましい実施形態では、上記単量体糖アルコール化合物は、以下の化学構造：
【化１００】
2014521319.tif 000102
を有するヘテロ二官能性アミノオキシ架橋試薬である。
【０２０７】
一部の好ましい実施形態では、上記単量体糖アルコール化合物は、以下の化学構造
【化１０１】
2014521319.tif 000103
を有するヘテロ二官能性Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル架橋試薬である。
【０２０８】
一部の好ましい実施形態では、上記単量体糖アルコール化合物は、以下の化学構造
【化１０２】
2014521319.tif 000104
を有する光架橋試薬である。
【０２０９】
一部の好ましい実施形態では、上記単量体糖アルコール化合物は、以下の化学構造
【化１０３】
2014521319.tif 000105
を有するヘテロ二官能性架橋試薬である。
【０２１０】
一態様では、本発明は、化学構造式Ｖ：
【化１０４】
2014521319.tif 000106
を有する二量体糖アルコールを提供する。
式中、ｎ１、ｎ２、ｐ１、およびｐ２のそれぞれは、独立して、０および１〜約１２から選択される整数から選択され、ｎ１＋ｐ２は１〜１２の間にあり、ｎ２＋ｐ２は２〜１２の間にあり、
ｒは０または１であり、
Ｗ３は、−Ｓ−、−Ｏ−、−ＮＨ−、−ＮＣ１〜Ｃ６アルキル−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｐ（＝Ｓ）２Ｏ−、または−Ｐ（＝Ｓ）（＝Ｏ）Ｏ−から選択され、
Ｘ３のそれぞれは、独立して、−ＯＨ、−Ｊ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｊ、−ＯＲ５、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ３、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ５、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、−Ｃ≡Ｃ−Ｒ５、−Ｎ＝Ｎ＋＝Ｎ−、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ２、フェノール基、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、ジエン、ジエノフィル、１，３−双極子、親双極子、アルケン、ケテン、オレフィン、アリル型水素を有するアルケン、必要に応じて置換されているＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、イミドエステル、マレイミド、ホスホルアミダイトから選択され、
Ｙ３のそれぞれは、独立して、−Ｓ−Ｓ−ｔブチル、−ＳＲ７、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨＲ７、−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、必要に応じて置換されているＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、イミドエステル、マレイミドから選択され、
各Ｒ６は、独立して、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルから選択され、
各Ｒ７は、独立して、トリチル、ＭＭＴ、およびＤＭＴから選択され、
各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択され、
各Ｊは、独立して、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩから選択され、
Ｌ４およびＬ５は、独立して、結合、−ＣＨ２−＊、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｃ１〜８アルキル−＊、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ１〜８アルキル−＊、−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｃ１〜８アルキル−＊から選択され、
「＊」は、Ｘ３またはＹ３に結合しているＬ４およびＬ５の部分を表す。
【０２１１】
一部の実施形態では、Ｗは、−Ｓ−、−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｐ（＝Ｓ）２Ｏ−、または−Ｐ（＝Ｓ）（＝Ｏ）Ｏ−からなる群から選択される。より好ましくは、Ｗは−Ｏ−である。
【０２１２】
一部の実施形態では、Ｘ３が−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨである場合；ｒは０であり、Ｙ３は、独立して、−ＮＨ−Ｒ７、−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−Ｓ−Ｓ−Ｒ７、−Ｓ−Ｓ−ｔブチル、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、および−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）から選択され、各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択され、各Ｒ７は、独立して、トリチル、ＭＭＴ、およびＤＭＴから選択され、ｒが１である場合、ＹはＯＲ１であり、Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択される。
【０２１３】
一部の実施形態では、Ｘ３がホスホルアミダイトである場合；ｒが０である場合、Ｙ３は、独立して、−Ｓ−Ｓ−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）−ＯＲ７、Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−ＴＦＡ、−ＮＨ−Ｒ７から選択され、各Ｒ７は、独立して、トリチル、ＭＭＴ、およびＤＭＴから選択され、各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択される。
【０２１４】
一部の好ましい実施形態では、各Ｘ３およびＹ３のうちの少なくとも１つは、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、必要に応じて置換されているＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル基、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、またはマレイミド基であり、各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択される。
【０２１５】
一部のより好ましい実施形態では、Ｘ３はアミノオキシ基であり、Ｙ３は、マレイミド基、スルフヒドリル基、ジスルフィド基、ハロアセチル基、アジド基、およびアルキン基からなる群から選択される。一部の実施形態では、Ｘ３は、必要に応じて置換されているＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステルであり、Ｙ３は、マレイミド基、スルフヒドリル基、ジスルフィド基、ハロアセチル基、アジド基、およびアルキン基からなる群から選択される。
【０２１６】
別の態様では、上記糖アルコールは、以下の構造
【化１０５】
2014521319.tif 000107
（式中、ｖは２〜２０００から選択される整数である）を有する、直鎖状トリマーまたはより大きいオリゴマーである。
【０２１７】
一部の好ましい実施形態では、化合物は−ＯＲ１であり、以下の構造ＸＸＩ
【化１０６】
2014521319.tif 000108
（式中、Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択される）を有する。
【０２１８】
各ｒが０である一部のより好ましい実施形態では、および以下の構造を有する：
【化１０７】
2014521319.tif 000109
【０２１９】
別の態様では、上記糖アルコール由来の化合物は、構造
【化１０８】
2014521319.tif 000110
（式中、
ｎは、２〜約８から選択される整数であり、
ｍは、１〜約８から選択される整数であり、
ｐは、約１〜約２０００から選択される整数であり、
Ｘ１のそれぞれは、
【化１０９】
2014521319.tif 000111
からなる群から選択される化学基または光架橋基であり、
各Ｙ１は、
【化１１０】
2014521319.tif 000112
からなる群から選択される化学基または光架橋基であり、
Ｗ１のそれぞれは、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−および−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−からなる群から選択される独立したリンカーであり、
Ｊ１のそれぞれは、独立して、Ｃｌ、ＢｒまたはＩから選択され、
Ｒ１８は、水素、Ｃ１〜８アルキル、アリシクリル、ヘテロアリシクリル、ベンジル、またはアリールであり、Ｒ１８における任意の環は必要に応じて置換されており、
Ｗ２のそれぞれは、独立して、
【化１１１】
2014521319.tif 000113
からなる群から選択され、
Ｗ３のそれぞれは、独立して、
【化１１２】
2014521319.tif 000114
からなる群から選択される）を有する。
【０２２０】
一部の実施形態では、上記ＯＨ基のうちの１つのみが架橋基で改変され、上記直鎖状糖アルコール由来の化合物は、以下の化学構造：
【化１１３】
2014521319.tif 000115
【化１１４】
2014521319.tif 000116
を有する。
【０２２１】
一部の実施形態では、上記一級ＯＨ基のうちの２つが、同じ架橋基、すなわち以下の化学構造：
【化１１５】
2014521319.tif 000117
を有するホモ二官能性架橋剤で改変されている。
一部の実施形態では、上記一級ＯＨ基のうちの２つが、異なる架橋基、すなわち以下の化学構造：
【化１１６】
2014521319.tif 000118
を有するアミノオキシヘテロ二官能性架橋剤で改変されている。
一部の実施形態では、上記一級ＯＨ基のうちの２つが、異なる架橋基、すなわち以下の化学構造：
【化１１７】
2014521319.tif 000119
を有する活性エステルヘテロ二官能性架橋剤で改変されている。
【０２２２】
一部の実施形態では、上記直鎖状ＳＡ分子は、以下の化学構造：
【化１１８】
2014521319.tif 000120
【化１１９】
2014521319.tif 000121
を有する光架橋試薬である。
【０２２３】
一部の実施形態では、上記直鎖状ＳＡ分子は、以下の化学構造：
【化１２０】
2014521319.tif 000122
を有する。
【０２２４】
直鎖状ＳＡ架橋試薬を合成する方法
本発明は、ＳＡ架橋試薬を合成するための方法、例えば、単分散の、所定の大きいＭＷのＳＡ高分子を合成するための方法を提供する。図２は、単官能性、ホモ二官能性、およびヘテロ二官能性のＳＡ架橋試薬を合成するための一般的なアプローチの実施形態を図示している。この方法は以下からなる：（ｉ）糖アルコールを提供するステップ；（ｉｉ）このＳＡを、２つの末端の一級ＯＨ基を選択的に保護することができる試薬と合わせることによって中間体（Ｉ１）を形成するステップ；（ｉｉｉ）このＳＡを、二級ＯＨと反応する試薬と合わせることによって中間体（Ｉ２）を形成するステップ；（ｉｖ）このＳＡを、一級ＯＨ基のうちの１つを選択的に脱保護する試薬と合わせることによって中間体（Ｉ３）を生成するステップ；および（ｖ）ＯＨ基以外の異なる官能基Ｘを導入する試薬と反応させるステップ（Ｉ４）。
【０２２５】
１つのアプローチにおいて、Ｉ４を完全に脱保護することによって、一置換ＳＡ架橋試薬（Ｐ３）を得ることができる。一置換ＳＡ架橋試薬Ｐ３のさらなるアルキル化により、単一の活性官能基を有するＳＡ架橋試薬（Ｐ４）、すなわちアルキル化一置換ＳＡ架橋試薬を生成する。アルキル化はまた、二級ＯＨ基をアルキル基で遮断することによって、初期に達成することもできる。
【０２２６】
１つのアプローチにおいて、Ｉ４を、一級ＯＨ基を選択的に脱保護する試薬と合わせることによって、Ｉ５を生成することができ、Ｉ５を、非ヒドロキシル官能基Ｙを導入する試薬とさらに反応させることができる。Ｉ６の二級ＯＨ基の脱保護により、ヘテロ二官能性ＳＡ架橋試薬、Ｐ１が生成する。二級ＯＨ基のアルキル化は、Ｐ２、すなわちアルキル化ヘテロ二官能性ＳＡ架橋試薬をもたらす。アルキル化はまた、二級ＯＨ基をアルキル基で遮断することによって、初期に達成することもできる。別のアプローチにおいて、一級ＯＨ基の直接的アルキル化、続いて二級ＯＨ基の脱保護により、モノアルキル化単官能性ＳＡ架橋試薬（Ｐ５）が生成する。
【０２２７】
１つのアプローチにおいて、Ｉ２は、両方の一級ＯＨ基を脱保護する試薬と合わせることによってＩ８を生成することができ、このＩ８を試薬とさらに反応させることによって、両末端に官能基を導入することができる。Ｉ９の二級ＯＨ基の脱保護により、ホモ二官能性ＳＡ架橋試薬（Ｐ６）が生成する。二級ＯＨ基のアルキル化は、Ｐ７、すなわちアルキル化ホモ二官能性ＳＡ架橋試薬をもたらす。アルキル化はまた、二級ＯＨ基をアルキル基で遮断することによって、初期に達成することもできる。
【０２２８】
一部の実施形態では、ＸまたはＹ官能基は、追加のリンカー（Ｌ１およびＬ２）を介してＳＡ骨格に結合することができる。図３は、追加のリンカーを有する単官能性、ホモ二官能性、およびヘテロ二官能性ＳＡ架橋試薬を合成するための一般的アプローチの実施形態を図示している。この方法は、以下からなる：（ｉ）一方の末端に官能基Ｘを有し、他方の末端に保護された一級ＯＨ基を有する糖アルコール中間体（Ｉ４）を提供するステップ、および（ｉｉ）このＳＡをＸと反応する試薬と合わせることによって、追加のリンカー（Ｌ２）を有する中間体（Ｉ１０）を形成するステップ。一部の実施形態では上記リンカーは安定したリンカーである。一部の実施形態では、上記リンカーは切断可能なリンカーである。一部の実施形態では、上記リンカーは可逆リンカー（ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  ｌｉｎｋｅｒ）である。
【０２２９】
１つのアプローチにおいて、Ｉ１０を完全に脱保護することによって、追加のリンカーを有するモノヒドロキシルＳＡ架橋試薬（Ｐ８）を得ることができる。さらなるアルキル化により、単一の活性官能基を含有するＳＡ架橋試薬（Ｐ９）を得る。アルキル化はまた、二級ＯＨ基をアルキル基で遮断することによって、初期に達成することもできる。
【０２３０】
１つのアプローチにおいて、Ｉ１０を、一級ＯＨ基を選択的に脱保護する試薬と合わせることによって、Ｉ１１を生成することができ、このＩ１１を、ＯＨ基ではない別の官能基Ｘを導入する試薬とさらに反応させることができる。Ｉ１２の二級ＯＨ基の脱保護により、追加のリンカーを有するヘテロ二官能性ＳＡ架橋試薬（Ｐ１３）を生成する。二級ＯＨ基のアルキル化は、Ｐ１４、すなわち追加のリンカーを有するアルキル化ヘテロ二官能性ＳＡ架橋試薬をもたらす。アルキル化はまた、二級ＯＨ基をアルキル基で遮断することによって、初期に達成することもできる。別のケースでは、一級ＯＨ基の直接的アルキル化、これに続く二級ＯＨ基の脱保護により、追加のリンカーを有する、モノアルキル化一置換ＳＡ架橋試薬（Ｐ１０）を生成する。
【０２３１】
別のアプローチでは、Ｉ１２は、試薬とさらに反応させることによって、官能基を有する第２のリンカー（Ｉ１４）を生成することができる。二級ＯＨ基の脱保護により、２つの追加のリンカーを有するヘテロ二官能性ＳＡ架橋試薬（Ｐ１１）を生成する。二級ＯＨ基のアルキル化は、Ｐ１２、すなわち２つの追加のリンカーを有するアルキル化ヘテロ二官能性ＳＡ架橋試薬をもたらす。アルキル化はまた、二級ＯＨ基をアルキル基で遮断することによって、初期に達成することもできる。
【０２３２】
１つのアプローチにおいて、ホモ二官能性ＳＡ架橋試薬Ｉ９を、両方の末端でリンカーを生成する試薬（Ｉ１５）と反応させることができる。Ｉ１５の二級ＯＨ基を脱保護することによって、２つの追加のリンカーを有するホモ二官能性ＳＡ架橋試薬（Ｐ１５）を生成する。二級ＯＨ基のアルキル化は、Ｐ１６、すなわち２つの追加のリンカーを有するアルキル化ホモ二官能性ＳＡ架橋試薬をもたらす。アルキル化はまた、二級ＯＨ基をアルキル基で遮断することによって、初期に達成することもできる。
【０２３３】
本明細書中に記載されている方法は、ＯＨ基に対する一般的な保護および脱保護メカニズムを利用する。オルトゴナルなＯＨ保護基（ＰＧ１、ＰＧ２、ＰＧ３）は、様々な保護基から選択することができる（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ、ＴＷ；Ｗｕｔｓ、ＰＧＭ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  ｏｒｇａｎｉｃ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第３版、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  Ｉｎｃ．  １９９９年において開示されている通り）。実際のところ、実際の還元に関わる技術および実験は、すべての古典的な有機合成方法を含み、本明細書の開示を考慮して当業者により容易に実行することができる。図４および５は、本明細書中に開示されている方法および代表的な実施例を使用して作製することができるＳＡ架橋試薬の多くの例を提供している。
【０２３４】
図２および３の中のこのようなストラテジーを可能にするためには、一級ＯＨおよび二級ＯＨ基に対して、正しい保護基を選択しなければならない。保護基（ＰＧ１およびＰＧ２）は、脱保護条件においてオルトゴナルである必要がある。単官能性およびホモ二官能性架橋試薬を合成することは、多くの場合ヘテロ二官能性架橋試薬を合成するよりも容易である。ＯＨ基のうちの１つしか一度に架橋基で置き換えることができないので、ヘテロ二官能性架橋剤に対して、ＰＧ１は選択的に切断可能でなければならない。
【０２３５】
単一のＯＨ反応性ＳＡ分子を得るための例として異なる保護基が調査されてきた。１）一級ＯＨ基のｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）エーテル保護は形成するのが容易であり、ヨウ素希釈溶液を使用して、一級ＯＨ基のうちの１つを選択的に脱保護することができる。一級ＯＨを選択的に保護するために、より束縛されたシリル化試薬であるｔ−ブチル−ジフェニルシリルクロリド（ＴＢＤＰＳＣｌ）もまた調査された。その反応はＴＢＤＭＳ保護よりずっと正当であった。ＴＢＤＭＳとは異なり、３つの保護基が付加されたという徴候が認められなかった。２）安息香酸塩エステルは、塩基に敏感であり、ＴＢＤＭＳ除去条件にオルトゴナルである。３）ベンジルエーテルは酸および塩基に対して安定しており、水素化を使用してこれを除去する。４）ＴＨＰエーテル保護：３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピランは、一級および二級ＯＨ基を保護して、テトラヒドロピラニルエーテルを得るために有用なストラテジーとして公知である。ＴＨＰエーテルは、塩基性媒体中および酸化および還元条件下で安定しているが、酸加水分解で容易に除去することができる。ＴＨＰ保護は、以下の触媒のいずれかを使用することによって達成することができる：テトラフルオロホウ酸（ｔｅｔｒａｆｕｌｏｒｏｂｏｒａｔｅ）亜鉛（Ｒａｎｕ，  Ｂ．  Ｃ．ら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ、１９９９年、４０巻、１９８５〜１９８８頁）、ピリジニウムｐ−トルエンスルホネート（ｐ−ｔｏｌｅｕｅｎｓｕｌｐｈｏｎａｔｅ）（Ｍｉｙａｓｈｉｔａ，  Ｍ．ら、Ｊ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．、１９７７年、４２巻、３７７２〜３７７４頁）、ビス（トリメチルシリル）スルフェート（Ｍｏｒｉｚａｗａ，  Ｙ．ら、Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、１９８１年、８９９〜９０１頁）、またはアンバーリストＨ−１５（Ｂｏｎｇｉｎｉ，  Ａ．ら、Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、１９７９年、６１８〜６２０頁）。
【０２３６】
ＯＨ基から架橋基を導入するための一般的スキームおよび方法は以下の通りである。他のＯＨ基を一つずつ遊離させることによって、複数の架橋基を逐次的に導入することができる。両方のＰＧ１基を脱保護した場合に、ホモ二官能性架橋剤が合成される。
【０２３７】
スキーム１：ＯＨ基を−ＯＮＨ２へと変換する
【化１２１】
2014521319.tif 000123
【０２３８】
上記ＳＡの単一の遊離ＯＨ基を、塩化メタンスルホニルに最初に反応させ、メシル化ＯＨ（ＯＭｓ）に変換することができる。アルコールメシレート基（ＯＭｅｓ）は、極めて良好な脱離基であり、様々な求核試薬（例えばＮ３およびＣＮなど）を容易に攻撃し、これを置き換えることができる。アルコールメシレートでのｔｅｒｔ−ブチルＮ−ヒドロキシカルバメート（ＢｏｃＮ−ＯＨ）のＯ−アルキル化、これに続く酸性のＮ−脱保護は、相当するアミノオキシ末端化ＳＡをもたらす（Ａｌｂｒｅｃｈｔ，  Ｓ．ら、Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、２００６年、１０巻、１６３５〜１６３８頁）。代わりに、上記ＳＡアルコールメシレートは、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド保護されたヒドロキサム酸と反応させることによって、塩基性条件下で（ヒドラジン）脱保護される化合物を作ることができる。
【０２３９】
スキーム２：ＯＨ基をアジドおよびアミンへと変換する。
【化１２２】
2014521319.tif 000124
【０２４０】
アジドは、相当するメシレートの求核置換または改変Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ条件を介して高収率で調製することができる（トリフェニルホスフィン、アゾジカルボン酸ジエチル：ＤＥＡＤ；ジフェニルホスホリルアジド：ＤＰＰＡ）（Ｊａｃｋｓｏｎ，  Ｍ．  Ｄ．ら、Ｊ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．、２００２年、６７巻、２９３４〜２９４１頁）。上記アジドは、異なる還元試薬、例えばＺｎを使用してアミンへとさらに還元することができる。
【０２４１】
スキーム３：ＯＨ基をＣＮ、ＣＯＯＨ、またはＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）エステルへと変換する。
【化１２３】
2014521319.tif 000125
【０２４２】
ＯＨは、文献からの手順（Ｇｏｌｌｎｅｒ，  Ａ．；Ｍｕｌｚｅｒ、Ｊ．  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｌｅｔｔｅｒｓ、２００８年、１０巻、４７０１〜４７０４頁）に従い、またはメシル化アルコール中間体を介して、ＣＮ基に直接変換することができる。酸または塩基によるＣＮ基の加水分解後（Ｂｅｒｎａｒｄｅｓ，  Ｇ．  Ｊ．  Ｌ．ら、ＣｈｅｍＢｉｏＣｈｅｍ、２０１１年、１２巻、１３８３〜１３８６頁）、カルボン酸を容易に得ることができる。さらにジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）およびＮ−ヒドロキシスクシンイミドを使用してカルボン酸を活性化することによって、ＮＨＳエステルを形成することができる。
【０２４３】
スキーム４：カルボン酸をヒドラジドへと変換する。
【化１２４】
2014521319.tif 000126
【０２４４】
カルボン酸基は、中間体Ｎ−アシルベンゾトリアゾールのヒドラジン分解を介して、１つのポット内でヒドラジドへと便利に変換することができる（Ｋａｔｒｉｔｚｋｙ，  Ａ．  Ｒ．  ＡＲＫＩＶＯＣ２００１  （ｉｘ）、１９〜２３頁、ｉｓｓｕｅ  ｉｎ  ｈｏｎｏｒ  ｏｆ  ａｃａｄｅｍｉｃｉａｎ  Ｍｉｃｈａｅｌ  Ｇ．  Ｖｏｒｏｎｋｏｖ）。
【０２４５】
スキーム５：ＣＮ基をイミドエステルへと変換する。
【化１２５】
2014521319.tif 000127
【０２４６】
イミドエステルは、バイオポリマー中のアミノ基に対して高度に特異的な試薬である。イミドエステルは、文献の手順に従いニトリルから容易に調製することができる（ＭｃＥｌｖａｉｎ，  Ｓ．  Ｍ．；Ｓｃｈｒｏｅｄｅｒ，  Ｊ．  Ｐ．  Ｊ．  Ａｍｅｒ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｃｏ．１９４９年、７１巻、４０頁；Ｄａｖｉｅｓ，  Ｇ．  Ｅ．；Ｓｔａｒｋ，  Ｇ．  Ｒ．  Ｐｒｏｃｅｅｄ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、１９７０年、６６巻、６５１〜６５６頁）。
【０２４７】
スキーム６：ＯＨ基をアルキンへと変換する。
【化１２６】
2014521319.tif 000128
【０２４８】
スキーム７：カルボン酸基またはアミン基を介してトリフルオロメチルフェニルジアジリンを導入する。
【化１２７】
2014521319.tif 000129
【０２４９】
スキーム８：ＯＨ基を遊離ＳＨおよび保護されたチオールへと変換する。
【化１２８】
2014521319.tif 000130
【０２５０】
ＯＨは、２，４−ビス（４−メトキシフェニル）−１，３，２，４−ジチアジホスフェタン２，４−ジスルフィド（Ｌａｗｅｓｓｏｎ試薬、ＬＲ）を使用して、１つのポット内で遊離チオールへと変換することができる（Ｎｉｓｈｉｏ，  Ｔ．  Ｊ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ、１９９３年、１１１３〜１１１７頁）。上記遊離チオールは、ＭｅＯＨ中２，２’−ジチオジピリジンとさらに反応させることによって、ジスルフィド保護された生成物を得ることができる（Ｊｏｎｅｓ，  Ｌ．  Ｒ．  ら、  Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．２００６年、１２８巻、６５２６〜６５２７頁）。他のジスルフィド試薬、例えば、Ｅｌｌｍａｎ試薬（５，５’−ジチオビス−（２−ニトロ安息香）酸、またはＤＴＮＢ）を同様の様式で導入することができる。
【０２５１】
スキーム９：カルボン酸基またはアミン基を介してマレイミド基を導入する。
【化１２９】
2014521319.tif 000131
【０２５２】
ＳＡ高分子
一態様では、本発明は、生体分子の改変、生物製剤の製剤化、およびドラッグデリバリーのために使用することができる新規のＳＡ高分子の集合体を提供する。さらに、複雑な三次元構造は、テザーされた分子の必要条件に応じて、単一の純粋なＳＡ高分子、例えば、直鎖状、環式、分枝、およびデンドリマーのＳＡ高分子などを作製するために、容易に系に組み入れることができる。これらの特徴は、製剤および最終コンジュゲートの物理的特性のモジュレーションを可能にする。さらに、この系を使用することによって、強力な抗腫瘍薬物を腫瘍組織に輸送して、望ましくない副作用および投薬回数を低減することができる。
【０２５３】
ＳＡ高分子は、（ｉ）ＳＡ骨格のＯＨ基を介して、ＳＡを直鎖状に結合するステップ、（ｉｉ）ＳＡ単位を末端で環化するステップ（ｉｉｉ）該ＳＡ単位を一緒に非対称性に分枝形成するステップ、（ｉｖ）ＳＡを対称性に分枝形成するステップ、または（ｖ）ＳＡを反復的に分枝形成することによって、複雑な三次元構造を構築するステップにより、ＳＡ骨格から作製することができる。すべてのケースにおいて、大きいＭＷ（＞１０００Ｄａ）の架橋試薬またはキャリア分子を作製することができる。
【０２５４】
直鎖状ＳＡ高分子
直鎖状ＳＡ高分子を合成する方法
図６は、複数のＳＡ単位を含有するＳＡビルディングブロックを合成するための一般的アプローチの実施形態を図示している。この方法は、以下からなる：（ｉ）遊離一級ＯＨを有する第１のＳＡ単位を提供するステップ、（ｉｉ）該一級ＯＨ基を良好な脱離基で置換するステップ、（ｉｉｉ）該第１のＳＡ単位の該一級ＯＨの保護基（ＰＧ１）にオルトゴナルな、他の一級ＯＨの保護基（ＰＧ３）を有する遊離一級ＯＨを有する第２のＳＡ単位を提供するステップ、（ｉｖ）該第１のＳＡ単位を、該第２のＳＡ単位と、これら２つの単位の縮合を可能にする条件下で合わせるステップ、および（ｖ）該一級ＯＨ基のうちの１つを脱保護することによって、より大きいＭＷのＳＡ分子を構築するために利用することができるジＳＡビルディングブロック（２つのＳＡ単位）を得るステップ。より高いオーダーのＳＡビルディングブロック（より大きい数のＳＡ単位）をｒ−ＳＡビルディングブロック（式中、ｒは１個の分子中のＳＡ単位の数を表す）を使用して、反復ステップ（ｉ）〜（ｖ）に従い構築することができる。
【０２５５】
より大きいＭＷの直鎖状ＳＡ分子は、ＳＡ分子における第二級アルコール基の異質性に応じて、段階的もしくは集中的方法、または段階的プラス集中的方法により構築することができる。例えば、各ＳＡ単位上で異なる数および異なる種類（異なる立体構造）の二級ＯＨ基を含有するテトラＳＡビルディングブロックは、４つの異なるモノＳＡ単位を段階的にカップリングすることによって構築することができる。各ＳＡ単位に異なる数および異なる種類の二級ＯＨ基を有するテトラＳＡビルディングブロックはまた、２つの単位をまず段階的にカップリングし、次いでジＳＡビルディングブロックのうちの２つを一緒に収束することによって構築することもできる。各ＳＡ単位に同数および同種類の二級ＯＨ基を有するテトラＳＡ単位は、２つのジＳＡビルディングブロック（例えば、Ｉ２０プラスＩ１９）をカップリングすることによって構築することができる。ほとんどの場合には、小さいＭＷのＳＡビルディングブロックは、普通段階的に構築され、大きいＭＷのＳＡは、収束により組み立てられる。テトラＳＡビルディングブロックの収束的合成のための一般的方法の実施形態が図６に示されている。
【０２５６】
図７は、ビルディングブロックとしてテトラ−Ｄ−マンニトールを使用する反復カップリングにより合成することができる直鎖状ＳＡ高分子の計算したＭＷを示す。５回目の反復後、２０ＫＤａより上の単一および純粋なＳＡ高分子を、安価な出発材料から容易に合成することができる。
【０２５７】
１つのアプローチにおいて、架橋基ＸおよびＹを末端に含有するＳＡ高分子を、ＳＡ架橋試薬と同様の様式で合成することができる（図２および図３に方法が示されている）。例えば、テトラＳＡ分子Ｉ２２およびＩ２３は、官能基Ｘを導入する試薬と最初に反応させることができる。次いで、第２の一級ＯＨ基を脱保護した後、第２の官能基、Ｙを導入することができる。二級ＯＨ基の脱保護により、テトラＳＡ架橋試薬が生成する。
【０２５８】
官能基ＸおよびＹは、末端の一級ＯＨ基または側鎖の二級ＯＨ基のいずれかに組み込んでもよい。図８は、ＸおよびＹ基をＳＡ高分子に組み込むための一般的アプローチの実施形態を図示している。二級ＯＨ基にすでに配置されているＸまたはＹ基を有するモノＳＡビルディングブロックを、ＳＡ高分子（Ｉ２７）とカップリングする。ｎが１と等しく、モノＳＡビルディングブロックが１回しかカップリングされない場合、１つのＸ基が導入される。ｎが１を超えるか、または１つのＸ基のモノＳＡビルディングブロックが数回カップリングしている場合、複数のＸ基を導入することができる。ＸおよびＹ基の数ならびに該ＸおよびＹ基の位置は、上記モノＳＡビルディングブロックおよびカップリングの配列に基づき、容易に調整することができる。
【０２５９】
表２は、上記方法に基づき合成することができる単一ＭＷのＳＡ高分子の例の分子量分布を列挙している。４種類のみの糖アルコールモノマー（ここで、ｎは２、３、４、または５である）を使用することによって、同じ糖アルコールモノマーを９回反復後、得た化合物のＭＷは、４００〜４００，０００Ｄａの範囲である。他のモノマー、ダイマー、トリマー、テトラマー、またはより高次のＳＡ分子と混合および反応させることによって、ＭＷ範囲を微調整することもできる。例えば、トレイトールのテトラマー（ｎ＝２）を、マンニトールのテトラマー（ｎ＝４）と混合した場合、１１０９のＭＷが得られる。キシリトールのテトラマー（ｎ＝３）をマンニトールのテトラマー（ｎ＝４）と混合した場合、１２３０のＭＷが得られる。これらの分子のすべては、単一の反応部位を保持する化学的に純粋な出発材料を用いて作製され、１つのカップリング生成物のみを得ることができる。これが、単一の純粋なＳＡ分子を得る鍵となる。
【０２６０】
表２：化学的方法により合成することができる単一ＭＷのＳＡ高分子のＭＷ分布。
【表２】
2014521319.tif 000132
【０２６１】
スキーム１０：
【化１３０】
2014521319.tif 000133
【０２６２】
スキーム１０は、より大きいＭＷの糖アルコールを合成するための一般的ストラテジーを示している。マンニトールの一級ＯＨ基のうちの１つをＴＢＤＭＳエーテルとして保護し、二級ＯＨ基をベンジルエーテルとして保護する。残りのＯＨ基を、ピリジン中トリフルオロメタンスルホン酸無水物と反応させることによって活性化する。Ｏ−メシル化などの別の温和な脱離ストラテジーも使用することができる。良好な脱離基を保有するこの予備活性化したマンニトールは、ＮａＨ、ＬｉＨＭＤＳ、またはカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドなどの塩基の存在下、単一の遊離ＯＨ基を保有する別のマンニトールとカップリングすることができる。ダイマー化のために安息香酸塩エステルを出発材料（化合物Ｉ３−ａ）として使用する当初のストラテジーは、同様の条件下で不成功であった。明らかに、Ｉ３−ａの安息香酸塩エステルは、ダイマー形成がほとんどまたはまったくない状態で、反応中に分子内異性化が起こった。Ｉ３−ａは、Ｒｆ値が０．４３である（ＴＬＣ、２５：７５ＥｔＯＡｃ：ヘキサン；ＨＰＬＣ、１１．０１４分間、方法Ｂを使用）のに対して、異性化した生成物は、Ｒｆ値が０．５５である（ＨＰＬＣ：１１．１８２分）（［Ｍ＋Ｈ］についての予測ｍ／ｚ＝７１３．３、実測ｍ／ｚ＝７１３．６；［Ｍ＋Ｎａ］についての予測ｍ／ｚ＝７３５．３、実測ｍ／ｚ＝７３５．６；［２Ｍ＋Ｎａ］についての予測ｍ／ｚ＝１４４７．６、実測ｍ／ｚ＝１４４８．２）。対照的に、上記ベンジルエーテル保護は、トレイトールを例として使用したダイマー化反応条件下での別の作業中は極めて安定しており、水素化中に容易に除去された。上記ストラテジーは、安息香酸エステル保護の代わりにベンジルエーテル保護を使用している。上記ストラテジーの唯一の弱点は、ＴＢＤＭＳの選択的ヨウ素脱保護に対する収率は、以前の実験に基づくとあまり高くないことであり（約５０％）、これは複数の合成の全体的な効率に影響を及ぼすことになる。
【０２６３】
スキーム１１：
【化１３１】
2014521319.tif 000134
【０２６４】
スキーム１１は、ＤＭＴＣ（ジメチルチオカルバメート）などの第３の保護基を使用する別のストラテジーの概要を述べている。ＤＭＴＣは、金属水素化物、酸、塩基、および熱を含めた広範囲な試薬および条件で安定している。これは、ＮａＩＯ４またはＨ２Ｏ２および他の一般的なアルコール保護基により容易に除去される（Ｂａｒｍａ，  Ｄ．  Ｋ．ら、Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｌｅｔｔｅｒｓ、２００３年、５巻、４７５５〜４７５７頁）。この特性は、合成の効率を大いに増大させる。
【０２６５】
直鎖状ＳＡ高分子もまた、固相アプローチを使用して、モノＳＡ単位またはｒ−ＳＡ単位（複数のＳＡ単位）を１つずつカップリングすることによって合成することができる。例えば、一方の末端でＦｍｏｃ−保護されたアミンを含有し、別の末端でカルボン酸を含有するＳＡ単位を最初に合成し、次いで直鎖状ＳＡ高分子をペプチド合成と同様のＦｍｏｃ固相ストラテジーに従い容易に合成することができる。別の例では、一方の末端でＤＭＴ−保護されたアミンを含有し、別の末端でホスホルアミダイトを含有するＳＡ単位を最初に合成し、次いで標準的オリゴヌクレオチド合成ストラテジーに従い、直鎖状ＳＡ高分子を組み立てることができる。図９は、固相ストラテジーで合成したこのような直鎖状ＳＡ高分子の２つの例を提供している。
【０２６６】
環式、分枝、超分枝マクロＳＡ分子
別の態様では、本発明は一般的に、３つ以上の単量体ＳＡ単位、Ｂ１（式ＩＩＩ）を含む大環状ＳＡ分子である前駆体化合物であって、各単量体ＳＡ単位は、該ＳＡ単位のＸおよびＹ部分を介して一つずつ直鎖状に接続し、次いで第１のＳＡ単位のＸ基と、最終ＳＡ単位のＹ基の反応を介して環化している前駆体化合物に関する。特定の実施形態では、上記大環状ＳＡ分子の上記ＳＡ単位は、上記第１のＳＡ単位のＸ基と、上記最終ＳＡ単位のＺ基の反応を介して環化している。特定の実施形態では、上記大環状ＳＡ分子の上記ＳＡ単位は、任意のＳＡのＺ基を介して、環化形態以外の任意の状態（ｏｒｄｅｒ）で接続している。
【０２６７】
上記前駆体化合物は、３つ以上の単量体糖アルコール単位Ｂ１を含む分枝ＳＡ高分子であってよく、各単量体糖アルコール単位は、連結基Ｗを介して１つのまたは別の単量体糖アルコール単位と結合しており、この連結基のうちの少なくとも１つは、あるモノマー単位のＸ、Ｙ、またはＺ部分と、別のモノマー単位のＺとの間の反応により形成される。
【０２６８】
上記前駆体化合物は、６つ以上の単量体糖アルコール単位Ｂ１を含む三次元超分枝ＳＡ高分子であってよく、このコア部はＳＡ単位であり、いくつかのＳＡ単位はそのコア構造から分枝している。上記超分枝ＳＡ高分子は、大部分が明確なＭＷを有する、単分散した、三次元分子である。特徴的な上記超分枝ＳＡ高分子は、三次元において複数の分枝している分子である。上記超分枝ＳＡ高分子の大きさがナノまたはマイクロスケールに接近している場合、ミクロスフェアを得ることができる。
【０２６９】
特定の実施形態では、ＳＡ高分子（環式、分枝、および超分枝）中のＯＨ基は未改変であり、上記ＯＨ基を介して、対象となる分子を直接結合するために使用することができる。一部の実施形態では、上記ＯＨ基の１つまたは複数をＸ、Ｙ、またはＺ架橋基と置き換えてもよい。対象となる分子をＸ、Ｙ、またはＺ架橋基と反応させることによって、結合体化することができる。
【０２７０】
図１０は、超分枝ＳＡ高分子の数種の構成を列挙している。一部の実施形態では、超分枝ＳＡ高分子は、上記コア部がＳＡ単位であり、他の複数のＳＡ（ｍＳＡ）ビルディングブロックが該コア部ＳＡ単位におけるＯＨ基のすべてに結合している樹状構成を有する。一部の実施形態では、超分枝ＳＡ高分子は、上記ＳＡ高分子が、樹状ＳＡ高分子の分枝を介して継続して増大するデンドリマー様構成を有する。別の実施形態では、超分枝ＳＡ高分子は、上記コア部がグリセロール単位であるピラミッド様構成を有する。分枝はまた、図１０の数種の構成において示されているように、環式ＳＡ高分子の側鎖に生じる可能性もある。図１１は、Ｄ−マンニトールをベースとするいくつかの実際の分枝分子の例を示している（例えば、対称性、非対称性、直鎖状、および環式）。
【０２７１】
デンドリマーなどの超分枝分子は、理想的なドラッグデリバリービヒクルの特性を有することが見出され、薬物、遺伝子、およびワクチンの有望なキャリアとして広く調査されてきた（Ｐａｔｒｉ，  Ａ．  Ｋ．ら、Ｃｕｒｒ．  Ｏｐｉｎ．  Ｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｌ．２００２年、６巻、４６６〜４７１頁；Ｑｉｕａｎｄ，  Ｌ．  Ｙ．およびＢａｅ，  Ｙ．  Ｈ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｒｅｓ．、２００６年、２３巻、１〜３０頁；Ａｌ−Ｊａｍａｌ．  Ｋ．  Ｔ．ら、Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｓｃｉ．２００５年、９４巻、１０２〜１１３頁）。デンドリマーの合成は最初に１９８５年に報告された（Ｔｏｍｏｌｉａ，  Ｄ．  Ａ．ら、  Ｐｏｌｙｍ．  Ｊ．  （Ｔｏｋｙｏ）、１９８５年、１７巻、１１７〜１３２頁；Ｎｅｗｋｏｍｅ，  Ｇ．  Ｒ．ら、Ｊ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．１９８５年、５０巻、２００３〜２００４頁）。デンドリマー合成の詳細は、広く概説されてきた（Ｂａｉ，  Ｓ．ら、Ｃｒｉｔ．  Ｒｅｖ．  Ｔｈｅｒ．  Ｄｒｕｇ  Ｃａｒｒｉｅｒ  Ｓｙｓｔ．２００６年、２３巻、４３７〜４９５頁）。
【０２７２】
分枝ＳＡ高分子を合成する方法
分枝ＳＡ高分子は、単量体ＳＡ単位（二級ＯＨ基）の側鎖に直鎖状ＳＡ高分子を組み込むことによって合成することができる。図１２は、分枝ＳＡ高分子を合成するための一般的アプローチの実施形態を図示している。この方法は以下からなる：（ｉ）一級ＯＨ基をＰＧ１で保護しながら、遊離二級ＯＨ基を有する第１のＳＡ単位を提供するステップ、（ｉｉ）該二級ＯＨ基を良好な脱離基で置換するステップ、（ｉｉｉ）該二級のＯＨ基をＰＧ２で保護し、該第１のＳＡ単位の該一級ＯＨの保護基（ＰＧ１）にオルトゴナルなＰＧ３で他の一級ＯＨを保護しながら、遊離一級ＯＨを有する第２の直鎖状ＳＡ高分子ビルディングブロックを提供するステップ、（ｉｖ）該第１のＳＡ単位を、該第２の直鎖状ＳＡ高分子と、これら２つの単位の縮合が可能となる条件下で合わせるステップ、および（ｖ）該一級ＯＨ基のうちの１つまたは２つを脱保護することによって、さらなる分枝のための部位を得るステップ。上記高分子は普通非対称性である（例えば、Ｐ１９）。グリコールを上記コア部ＳＡ単位として使用した場合、上記高分子は対称性である（例えば、Ｐ２０）。
【０２７３】
小さいＭＷのＳＡホモ二官能性およびヘテロ二官能性架橋試薬を使用することによって、異なる有機分子または生体分子を一緒に架橋することができる。他の架橋試薬を用いて作られた同様のコンジュゲートは、生物医学の研究における研究ツールとして、診断用試薬として、および新規医薬品薬物として多くの用途を見出している。大きいＭＷのＳＡ架橋試薬は、治療剤を改変するため、およびドラッグデリバリー用キャリアとして使用することができる。例えば、大きいＭＷのＳＡ高分子を使用することによって、ＭＷが３０ＫＤａ未満の、薬学的対象のタンパク質、例えば、酵素、サイトカイン、ホルモン、およびモノクローナル抗体フラグメントを結合体化することができる。さらに、ＳＡ高分子を使用することによって、ペプチド、核酸およびこれらの類似体、ならびにｓｉＲＮＡを結合体化することができる。このような大きいＭＷのＳＡ高分子をこれらの分子に結合体化する利点には、（ｉ）コンジュゲート分子の流体力学的容積の増加、これらの腎排泄の低減、および上記タンパク質を安定化するためのタンパク質のインビボ半減期の延長、（ｉｉ）ペプチドのアミノ酸を分解から保護すること、（ｉｉｉ）酵素分解に敏感な重要部位のマスキング、（ｉｖ）凝集の低減、および（ｖ）バイオアベイラビリティーの増大が挙げられる。
【０２７４】
さらに、ＳＡ高分子は、インビボで代謝することができ、これによって、薬物放出についての新規メカニズムが生成し得る。
【０２７５】
さらに、ＳＡ高分子を使用することによって、薬物または低分子を、ＳＡ高分子の末端ばかりではなく、該ＳＡ高分子全体にわたり充填することができる。例えば、酸基を含有する分子を骨格のＯＨ基にカップリングし、組織に送達される低分子の量を増加させることができる。
【０２７６】
ＳＡ架橋試薬およびＳＡ高分子を介する部位特異的標識
部位特異的な標識は、様々なストラテジーを介して達成することができる：（ｉ）対象となるタンパク質中の末端アミノ酸、（ｉｉ）標識部位としての不対のシステインの挿入、（ｉｉｉ）表面の最も反応性のある基、例えばアミン、フェノール性ヒドロキシル、およびチオールを予測することによる構造ベースのアプローチ、（ｉｖ）該タンパク質上のグリコシル化部分の酸化または酵素反応、これに続くテザリング、（ｖ）非天然アミノ酸を該タンパク質の配列へと挿入することによって、特異的な部位での標識を可能にする、および（ｖｉｉ）単一反応性Ｃｙｓ基を導入するためのシステイン変異誘発。
【０２７７】
対象となる分子の部位特異的標識のためにＳＡ架橋試薬を使用することができる。例えば、ＳＡ分子は、還元的アミノ化を介してタンパク質、抗体、および酵素のＮ−末端のみを標識することができる。一部の実施形態では、上記ＸまたはＹ基はアルデヒド官能基である。例えば、このストラテジーは、部位特異的ＰＥＧ化のために使用された（Ｌｅｅ，  Ｄ．ら、Ｊ．  Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｒｅｓ．２００８年、２８巻、１０１〜１１２頁）。この化学反応で作製されたコンジュゲートの例がＮｅｕｌａｓｔａ（登録商標（ＰＥＧ−フィルグラスチム））である（Ｋｉｎｓｔｌｅｒ  ＯＢ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｒｅｓ．１９９６年、１３巻、９９６〜１００２頁）。
【０２７８】
一部の実施形態では、チオール特異的ＳＡ架橋試薬またはＳＡ高分子を、上記タンパク質中のＣｙｓの部位特異的標識のために使用し、これにより、単一反応性ＣｙｓをＣｙｓ変異誘発により得ることができる。ＳＡ架橋試薬またはＳＡ高分子は、エーテル置換（例えばヨードアセトアミド（ｉｏｄｏａｃｅｔｉａｍｉｄｅ）誘導体）または付加反応（例えば、ビニルスルホン、ビニルピリジン、またはマレイミド末端基）を介して、チオール交換反応またはアルキル化反応を行なうことができる。
【０２７９】
一部の実施形態では、ＸまたはＹは、式
【化１３２】
2014521319.tif 000135
（式中、Ｒ１１は、必要に応じて置換されているアリールであり、Ｒ１０は電子求引基（例えば、カルボニル）、α，β−不飽和二重結合、またはスルホン酸として脱離を受けやすい、α，β’スルホニル基である）を有するコンジュゲーション部分である。この化合物を使用することによって、以下の２つのステップを介して、部位特異的な方式により、ジスルフィド結合を有する任意のタンパク質または抗体を標識することができる：（ｉ）温和にジスルフィドを還元することによって、遊離チオールを生じさせるステップ、および（ｉｉ）逐次的な相互作用的ビス−アルキル化による両チオールのコンジュゲーションによって、３つの炭素橋を生成し、これにＳＡ分子を共有結合により結合するステップ（Ｓｈａｕｎａｋ  Ｓ．ら、Ｎａｔ．  Ｃｈｅｍ．  Ｂｉｏ．２００６年、３１２〜３１３頁；  Ｂａｌａｎ  Ｓ．ら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．２００７年、１８巻、６１〜７６頁；Ｂｒｏｃｃｈｉｎｉ，  Ｓ．ら、Ｎａｔ．  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ．２００６年、１巻、２２４１〜２２５２頁）。
【０２８０】
一部の実施形態では、様々な酵素による方法を使用することによって、ＳＡ高分子を使用して部位特異的な方式で治療的な対象の分子を標識することができる。上記酵素、例えば、糖転移酵素およびトランスグルタミナーゼは、精選された単一またはいくつかのアミノ酸残基のみを認識し、特異的に改変する。
【０２８１】
一部の実施形態では、ＸまたはＹは、上記ＳＡ高分子に直接または他のスペーサーを介して結合しているシアル酸基である。部位特異的標識は、上記タンパク質中のセリンおよびトレオニン残基における酵素によるＧａｌＮＡｃグリコシル化を介し、続いてＳＡに結合しているシアル酸を、以前に導入されたＧａｌＮＡｃ残基に酵素により転移することによって達成することができる。ＧｌｙｃｏＰＥＧ化は、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）（Ｄｅｆｒｅｅｓ、Ｓ．、米国特許出願公開第２００７０２５４８３６Ａ１号）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）（ＤｅＦｒｅｅｓ，  Ｓ．ら、Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ、２００６年、１６巻、８３３〜８４３頁）、インターフェロンアルファ−２ｂ（ＩＦＮα−２ｂ）（ＤｅＦｒｅｅｓ，  Ｓ．  ら、Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ、２００６年、１６巻、８３３〜８４３頁）、ろ胞刺激ホルモン（ＤｅＦｒｅｅｓ，  Ｓ．ら、米国特許出願公開第２００８００１５１４２号）、エリスロポエチン（ＤｅＦｒｅｅｓ，  Ｓ．ら、米国特許出願公開第２００６０２８７２２４Ａ１号）、およびＶＩＩ因子（Ｋｌａｕｓｅｎ  ＮＫら、米国特許出願公開第２００８００３９３７３Ａ１号）の改変に成功裏に適用された。
【０２８２】
一部の実施形態では、ＸまたはＹは、ＳＡ高分子に直接または別のスペーサー／リンカーを介してのいずれかで結合しているアミン官能基である。単一のアミンＳＡ高分子のコンジュゲーション反応は、トランスグルタミナーゼを介して達成され、この場合、該ＳＡ高分子のアミノ基は、ドナーとして作用し、上記タンパク質またはペプチド中のグルタミンはアクセプターとして作用する。このプロセスは、ＰＥＧを顆粒球−コロニー刺激因子（ＢＫ００２６）（Ｔｏｎｏｎ  Ｇ．２００８年、ＷＯ２００８／０１７６０３）、インターロイキン−２（Ｓａｔｏ  Ｈ．  Ａｄｖ．  Ｄｒｕｇ．  Ｄｅｌｉｖ．  Ｒｅｖ．２００２年、５４巻、４８７〜５０４頁）、成長ホルモン（Ｚｕｎｄｅｌ  Ｍ．２００６年、ＷＯ２００６／０８４８８８）、およびエリスロポエチン（Ｐｏｏｌ  ＣＴ、２００４年、ＷＯ２００４／１０８６６７）に結合体化するために使用されてきた。
【０２８３】
ＳＡ架橋したコンジュゲート
本明細書のＳＡ高分子を、１つの分子を別の分子に結合体化および結合させるために使用することによって、新規の均一または不均一な化学物質を生成することができる。ここで、Ｘ、Ｙ、Ｚ、またはケトン基のうちのいずれかを、対象となる他の分子の１つまたはいくつかの架橋基と反応させることによって、コンジュゲートを形成することができる。
【０２８４】
一態様では、本発明は、以下からなる群から選択される化学構造を有するコンジュゲートに一般的に関する：
Ｍ１−（Ｌ−Ｂ）ｕ  式（Ｉ）、および
Ｂ−（Ｌ−Ｍ１）ｕ  式（ＩＩ）
（式中、
各Ｍ１は、独立して、タンパク質、酵素、抗体、抗体フラグメント、ポリペプチド、オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド類似体、多糖からなる群から選択され、
各Ｂは、１〜約２０００個の糖アルコールモノマーを含む改変された糖アルコールポリマーであり、
各モノマーは、３〜約１４の−ＯＲ１基を有し、
Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択され、
各Ｌは、独立して、結合および構造−Ｖ１−Ｒ２−Ｖ２−からなる群から選択され、
Ｖ１およびＶ２は、独立して、ディールス‐アルダー付加物、１，３−双極子付加物、
【化１３３】
2014521319.tif 000136
からなる群から選択され、
各Ｇ１は、独立して、ＮＲ３、Ｏ、およびＳから選択され、
各Ｇ２は、独立して、ＯまたはＳであり、
各Ｇ３は、独立して、Ｓ、Ｏ、ＮＲ３、およびＳＯ２から選択され、
各Ｇ４は、独立して、ＯまたはＮＲ３であり、
各Ｒ２は、独立して、結合、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−ＣＨ２−、必要に応じて置換されているアリシクリル、ヘテロアリシクリル、アリール、ペプチド、およびペプチド模倣オリゴマーから選択され、
各Ｒ３は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜３、必要に応じて置換されているアリシクリル、および必要に応じて置換されているヘテロアリシクリルから選択され、
各Ｒ４は、独立して、Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
ｕは、１〜約２０の整数である）。
【０２８５】
他の態様では、本発明は、化学構造式（ＩＩＩ）を有するコンジュゲートに一般的に関する：
（Ｍ２−Ｌ）ｑ−Ｂ  （ＩＩＩ）
（式中、
各Ｍ２は、独立して、代謝物、蛍光化合物、化学発光化合物、質量タグ、発色団、ビオチン、毒素、薬物、化学療法剤、細胞毒性剤、免疫抑制剤、診断剤、放射リガンド、および低分子からなる群から選択され、
各Ｂは、１〜約２０００個の糖アルコールモノマー含む改変された糖アルコールポリマーであり、
各モノマーは、３〜約１４の−ＯＲ１基を有し、
Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択され、
各Ｌは、独立して、結合および構造−Ｖ１−Ｒ２−Ｖ１−からなる群から選択され、
Ｖ１およびＶ２は、独立して、ディールス‐アルダー付加物、１，３−双極子付加物、
【化１３４】
2014521319.tif 000137
からなる群から選択され、
各Ｇ１は、独立して、ＮＲ３、Ｏ、およびＳから選択され、
各Ｇ２は、独立して、ＯまたはＳであり、
各Ｇ３は、独立して、Ｓ、Ｏ、ＮＲ３、およびＳＯ２から選択され、
各Ｇ４は、独立して、ＯまたはＮＲ３であり、
各Ｒ２は、独立して、結合、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−ＣＨ２−、必要に応じて置換されているアリシクリル、ヘテロアリシクリル、アリール、ペプチド、およびペプチド模倣オリゴマーから選択され、
各Ｒ３は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜３、必要に応じて置換されているアリシクリル、および必要に応じて置換されているヘテロアリシクリルから選択され、
各Ｒ４は、独立して、Ｃ１〜Ｃ８アルキルである）。
【０２８６】
別の態様では、本発明は、以下からなる群から選択される化学構造を有するコンジュゲートに一般的に関する：
（Ｍ１）ｑ−Ｌ−（Ｂ−（Ｌ−Ｍ２）ｋ）ｕ  （ＩＶ）、および
（Ｍ１−Ｌ）ｑ−（Ｂ−（Ｌ−Ｍ２）ｋ）ｕ  （Ｖ）、および
Ｍ１−（Ｌ−Ｂ−（Ｌ−Ｍ２）ｋ）ｕ  （ＶＩ）
（式中、
各Ｍ１は、独立して、タンパク質、酵素、抗体、抗体フラグメント、ポリペプチド、アビジン、ストレプトアビジン、オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド類似体、多糖からなる群から選択され、
各Ｍ２は、独立して、代謝物、蛍光化合物、化学発光化合物、質量タグ、発色団、ビオチン、毒素、薬物、化学療法剤、細胞毒性剤、免疫抑制剤、診断剤、放射リガンド、低分子および別の生物活性分子からなる群から選択され、
各Ｂは、１〜約２０００個の糖アルコールモノマーを含む改変された糖アルコールポリマーであり、
各モノマーは、３〜約１４の−ＯＲ１基を有し、
Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択され、
各Ｌは、独立して、結合および構造−Ｖ１−Ｒ２−Ｖ２−からなる群から選択され、
Ｖ１およびＶ２は、独立して、ディールス‐アルダー付加物、１，３−双極子付加物、
【化１３５】
2014521319.tif 000138
からなる群から選択され、
各Ｇ１は、独立して、ＮＨ、Ｏ、およびＳから選択され、
各Ｇ２は、独立して、ＯまたはＳであり、
各Ｇ３は、独立して、Ｓ、Ｏ、ＮＲ３、およびＳＯ２から選択され、
各Ｇ４は、独立して、ＯまたはＮＲ３であり、
各Ｒ２は、独立して、結合、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−ＣＨ２−、必要に応じて置換されているアリシクリル、ヘテロアリシクリル、アリール、ペプチド、およびペプチド模倣オリゴマーから選択され、
各Ｒ３は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜３、必要に応じて置換されているアリシクリル、および必要に応じて置換されているヘテロアリシクリルから選択され、
各Ｒ４は、独立して、Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
ｕは、１〜約１００の整数であり、
ｑは、１〜約１００の整数であり、
ｋは、０または１〜約２０の整数である）。
【０２８７】
一部の実施形態では、ｑは、１〜約１０の整数であり、Ｂは、３〜約２０００個の糖アルコールモノマーを含む。一部の実施形態では、ｕは１〜約１０の整数であり、Ｂは、３〜約２０００個の糖アルコールモノマーを含む。
【０２８８】
一部の実施形態では、Ｍ１は、抗体および抗体フラグメントからなる群から選択され、Ｍ２は化学療法薬であり、ｑは１であり、ｕは１〜約２０の整数であり、ｑは１〜約１０の整数である。
【０２８９】
別の態様では、本発明は、以下からなる群から選択される化学構造（ｃｈｅｍｉｃａｌ）を有するコンジュゲートに関する：
Ｓ−（Ｌ−Ｂ−（Ｌ−Ｍ１）ｋ）ｕ  （ＶＩＩ）
Ｓ−（Ｌ−Ｂ−Ｌ−（Ｍ１）ｋ）ｕ  （ＶＩＩＩ）
Ｓ−（Ｌ−Ｂ−（Ｌ−Ｍ２）ｋ）ｕ  （ＩＸ）
Ｓ−（Ｌ−Ｂ−Ｌ−（Ｍ２）ｋ）ｕ  （Ｘ）
（式中、
Ｓは、固体支持体を含み、
各Ｍ１は、独立して、タンパク質、酵素、抗体、抗体フラグメント、ポリペプチド、アビジン、ストレプトアビジン、オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド類似体、多糖からなる群から選択され、
各Ｍ２は、独立して、代謝物、蛍光化合物、化学発光化合物、質量タグ、発色団、ビオチン、毒素、薬物、化学療法剤、細胞毒性剤、免疫抑制剤、診断剤、放射リガンド、低分子および別の生物活性分子からなる群から選択され、
各Ｂは、１〜約２０００個の糖アルコールモノマーを含む改変された糖アルコールポリマーであり、
各糖アルコールモノマーは、３〜約１４の−ＯＲ１基を有し、
Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択され、
各Ｌは、独立して、結合および−Ｖ１−Ｒ２−Ｖ２−からなる群から選択され、
Ｖ１およびＶ２は、独立して、ディールス‐アルダー付加物、１，３−双極子付加物、
【化１３６】
2014521319.tif 000139
からなる群から選択され、
各Ｇ１は、独立して、ＮＨ、Ｏ、およびＳから選択され、
各Ｇ２は、独立して、ＯまたはＳであり、
各Ｇ３は、独立して、Ｓ、Ｏ、ＮＲ３、およびＳＯ２から選択され、
各Ｇ４は、独立して、ＯまたはＮＲ３であり、
各Ｒ２は、独立して、結合、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−ＣＨ２−、必要に応じて置換されているアリシクリル、ヘテロアリシクリル、アリール、ペプチド、およびペプチド模倣オリゴマーから選択され、
各Ｒ３は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜３、必要に応じて置換されているアリシクリル、および必要に応じて置換されているヘテロアリシクリルから選択され、
各Ｒ４は、独立して、Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
ｕは、１〜約５００の整数であり、
ｋは、０または１〜約２０の整数である）。
【０２９０】
固体支持体には、例えば、アガロースビーズ、デキストラン、シリカゲルベースのポリマー、ポリスチレン、ＰＬＧＡ、ＰＭＭＡ、およびコロイド状金が挙げられる。Ｓは微小粒子であってよい。上記粒子の化学組成物は、ポリマーまたはコポリマー、無機構築物、金属および半導体、超常磁性複合材、生分解性構築物、または合成デンドリマーおよびデンドロンであってよい。Ｓは、バッキーボール、フラーレン（ｆｕｌｌｅｒｎｅｓ）、または炭素ナノチューブであってよい。Ｓはまた、量子ドット、色素コード化粒子、または磁気コード化粒子であってよい。
【０２９１】
一部の実施形態では、各Ｂは、１〜約２０００個の糖アルコールモノマーを含む、改変された糖アルコールポリマーであり、各糖アルコールモノマーは、１つのモノマー単位のＸ、ＹまたはＺ部分と、別のモノマー単位のＸ、ＹまたはＺとの間の反応により形成される連結基Ｗを介して、１つまたは複数の糖アルコールモノマーと結合しており、
各Ｂ１は、独立して、化学構造式ＸＩ：
【化１３７】
2014521319.tif 000140
（式中、ｎおよびｐのそれぞれは、独立して、０および１〜約１２から選択される整数から選択され、ｎ＋ｐは、１〜１２の間であり、
ｒは０または１であり、
【化１３８】
2014521319.tif 000141
で表される各結合は、単結合または二重結合であり、
Ｑは、＝Ｏ、＝Ｎ−Ｏ−Ｌ−Ｍ１、＝Ｎ−Ｏ−Ｌ−Ｍ２、＝Ｎ−Ｏ−Ｌ−Ｓ、−ＮＨ−Ｏ−Ｌ−Ｓ、−ＮＨ−Ｏ−Ｌ−Ｍ１、および−ＮＨ−Ｏ−Ｌ−Ｍ２から選択され、
Ｘ、ＹおよびＺのそれぞれは、Ｍ１、Ｍ２またはＳと結合している場合、リンカーＶであり、
Ｘ、ＹおよびＺのそれぞれは、ＳともＭ１、Ｍ２とも結合していない場合、−ＯＨ、−Ｊ、−Ｒ５Ｊ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｊ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｊ、
−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｊ、−ＯＲ５、−ＯＲ６、−ＯＲ７、−Ｏ−メシル、−Ｏ−トシル、
−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｏ−メシル、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−Ｏ−トシル、−ＳＨ、−Ｓ−Ｓ−ｔブチル、
−ＳＲ７、−ＳＲ５、−Ｓ−Ｓ−Ｒ８、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｊ、−ＮＨ２、−ＮＨＲ５、−Ｎ（Ｒ５）Ｒ５、−ＮＨＲ７、−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、
−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ５、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、−Ｎ＝Ｃ＝Ｓ、−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、−Ｃ≡Ｃ−Ｒ５、
−Ｎ＝Ｎ＋＝Ｎ−、−Ｏ−ＮＨ２、−Ｏ−ＮＨ−Ｆｍｏｃ、−Ｏ−ＮＨ−Ｂｏｃ、−Ｏ−Ｎ−（Ｂｏｃ）２、
−Ｏ−Ｎ（−フタルイミジル）、−ＮＨ−ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ２、
−ＮＨ−Ｃ（＝Ｓ）−ＮＨ−ＮＨ２、−トルエンスルホニルヒドラジド、−Ｒ５−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ２＋）−ＮＨ２、ベンゾフェノン、アリールジアゾニウム、ジアゾアルカン、ジアゾアセチル、アントラキノン、ジアジリン、必要に応じて置換されているトリフルオロメチルフェニルジアジリン、ジエン、ジエノフィル、１，３−双極子、親双極子、アルケン、ケテン、オレフィン、アリル型水素を有するアルケン、ジカルボニル基、エポキシド、オキシラン、オルガノシラン、ホスホニウム基、エステル、無水物、カーボネート基、グリオキサール、−Ｃ（＝ＮＨ２）−Ｏ−Ｒ５、ヒドロキシメチルホスフィン誘導体、エチルビニル、マレイミド、ビニルスルホン、アリルスルホン、チオエステル、シスプラチン誘導体、アジリジン、アクリロイル基から独立して選択される官能基であり、
各Ｒ５は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アリシクリル、ヘテロアリシクリル、ベンジルまたはアリールから選択され、Ｒ５における任意の環は必要に応じて置換されており、
各Ｒ６は、独立して、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルから選択され、
各Ｒ７は、独立して、トリチル、ＭＭＴ、およびＤＭＴから選択され、
各Ｒ８は、独立して、２−ピリジル、４−ピリジル、５−ニトロ−２−ピリジル、５−ニトロ−４−ピリジル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３−カルボキシ−４−ニトロフェニル、および２，４−ジニトロフェニルから選択され、
各Ｊは、独立して、Ｃｌ、ＢｒおよびＩから選択され、
Ｌ１、Ｌ２、およびＬ３のそれぞれは、独立して、結合または−Ｒ９−Ｖ−Ｒ２−＊
（式中、「＊」は、Ｘ、Ｙ、Ｓ、Ｍ１もしくはＭ２、またはＺにそれぞれ結合しているＬ１、Ｌ２、およびＬ３の部分を表す）であり、
各ＷおよびＶは、独立して、ディールス‐アルダー付加物、１，３−双極子付加物、
【化１３９】
2014521319.tif 000142
からなる群から選択され、
各Ｇ１は、独立して、ＮＲ３、Ｏ、およびＳから選択され、
各Ｇ２は、独立して、ＯまたはＳであり、
各Ｇ３は、独立して、Ｓ、Ｏ、ＮＲ３、およびＳＯ２から選択され、
各Ｇ４は、独立して、ＯまたはＮＲ３であり、
各Ｒ２は、独立して、結合、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜１０−ＣＨ２−、必要に応じて置換されているアリシクリル、ヘテロアリシクリル、アリール、ペプチド、およびペプチド模倣オリゴマーから選択され、
各Ｒ３は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１〜３、必要に応じて置換されているアリシクリル、および必要に応じて置換されているヘテロアリシクリルから選択され、
各Ｒ４は、独立して、Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
各Ｒ９は、結合または−ＣＨ２−であり、
少なくとも、Ｂ１単位の１つにおいて、各−Ｌ３−Ｚ部分は−ＯＲ１であり、各Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンゾイル、アセチル、ベンジル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルシリル、環式オルトエステル、アクチニド、アセテート、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロチオフラニルからなる群から選択される）を有する。
【０２９２】
一部の好ましい実施形態では、Ｂは化学構造式ＸＩＩ：
【化１４０】
2014521319.tif 000143
（式中、
【化１４１】
2014521319.tif 000144
は、Ｍ１、Ｍ２またはＳへの結合を表し、
Ｌ４のそれぞれは、Ｍ１、Ｍ２またはＳと結合している場合、リンカーＶであり、
ｋが０である場合、
【化１４２】
2014521319.tif 000145
はＹを表し、ｋが、１〜約２０から選択される整数である場合、
【化１４３】
2014521319.tif 000146
は、Ｍ１、Ｍ２またはＳへの結合を表す）を有する。
【０２９３】
別の好ましい実施形態では、Ｂは、化学構造式ＸＩＩＩ：
＊１−Ｌ４−（Ｂ１−Ｗ）ｓ−Ｂ１−Ｌ４−＊２  （ＸＩＩＩ）
（式中、
「＊１」は、Ｓ、Ｍ１またはＭ２に結合している前記Ｌ４の部分を表し、
Ｌ４のそれぞれは、Ｍ１、Ｍ２またはＳと結合している場合、リンカーＶであり、
ｓは、０または１〜約５００から独立して選択される整数であり、
ｋが０である場合、Ｌ４−＊２はＹを表し、
ｋが１〜約２０から選択される整数である場合、「＊２」は、Ｍ１、Ｍ２、またはＳに結合している前記Ｌ４の部分を表し、
各Ｂ１は、独立して、化学構造式ＸＩＶ：
【化１４４】
2014521319.tif 000147
を有し、
【化１４５】
2014521319.tif 000148
は、Ｌ１への結合を表し、
【化１４６】
2014521319.tif 000149
は、Ｌ２への結合を表す）を有する。
【０２９４】
一部の実施形態では、ｑおよびｋのそれぞれが１であり、ｕが１よりも大きい場合、上記コンジュゲートは、式Ｍ１−Ｌ−（Ｂ−Ｌ−Ｍ２）ｕまたはＭ１−（Ｌ−Ｂ−Ｌ−Ｍ２）ｕを有する。一部の好ましい実施形態では、Ｂは、ＭＷ＜１０００を有する糖アルコール修飾物質、例えば、糖アルコール部分Ｂを介していくつかの細胞毒性薬に結合している抗体、または糖アルコール架橋試薬を介して蛍光標識されたタンパク質または酵素である。
【０２９５】
一部の実施形態では、ｋが０であり、ｑが１である場合、上記コンジュゲートは、式Ｍ１−Ｌ−Ｂｕを有する。Ｍ１は、異なる数の修飾物質Ｂで簡単に標識され、これを、対象となる他の分子とさらに反応させることによって、コンジュゲート、Ｍ１−（Ｌ−Ｂ−Ｌ−Ｍ２）ｕを形成することができる。特定の好ましい実施形態では、Ｂは、ＭＷ＜１０００を有する糖アルコール修飾物質である。
【０２９６】
一部の実施形態では、ｋが０であり、ｕが１であり、ｑが１より大きい場合、上記コンジュゲートは式（Ｍ１）ｑ−Ｌ−Ｂ、Ｂ−（Ｌ−Ｍ１）ｕまたは（Ｍ２−Ｌ）ｑ−Ｂを有する。一部の好ましい実施形態では、Ｂは、ＭＷ＞１０００Ｄａを有するＳＡ高分子（例えば、薬物キャリア）である。ポリマーミクロスフェア、ポリマーミセル、可溶性ポリマー、およびＰＥＧ化が、薬物安定性および標的特異性を強化し、ならびに毒性を低減させるのに効果的であることが示されている。ＳＡ高分子を使用することによって、有用な基または物質（ｅｎｔｉｔｙ）を薬学的に充填し、次いで薬物をインビボで送達することができる。
【０２９７】
一部の実施形態では、ｋが０であり、ｕが１であり、ｑが１である場合、上記コンジュゲートは式Ｍ１−ＢまたはＭ２−Ｂを有する。好ましい実施形態では、ＢはＭＷ＞１００００Ｄａを有するＳＡ高分子であり、Ｂは、様々な大きなＭＷ生体分子、例えば、タンパク質、ｓｉＲＮＡ、オリゴ、ペプチド、およびポリペプチドを保有することができる。
【０２９８】
特定の実施形態ではＭ２は生体分子、代謝物、蛍光化合物、ビオチン、毒素、薬物、化学療法剤、診断剤、または他の生物活性分子である。
【０２９９】
特定の実施形態では、Ｍ１またはＭ２は、１つまたは複数の放射性同位元素または同位元素を含んでもよい。
【０３００】
特定の実施形態では、Ｍ２は代謝物である。代謝物は、代謝中間体および代謝生成物である。代謝物の例には、アルカロイド、グリコシド、脂質、フラボノイド、非リボソームペプチド、フェナジン、フェノール、ポリケチド、テルペン、およびテトラピロールが含まれる。代謝物はまた特定化された酵素の系を介して生存する生体により改変される、薬物のフラグメントまたは薬物であってよい。
【０３０１】
特定の実施形態では、上記コンジュゲートは抗体薬物コンジュゲートである。Ｍ１は抗体または抗体フラグメントであり、Ｍ２は化学療法薬である。１〜８個の薬物分子を単一の抗体に接続させることができる。
【０３０２】
一部の好ましい実施形態では、Ｍ１およびＭ２は治療剤、例えば、薬物、毒素、サイトカイン、ホルモン、ホルモンアンタゴニスト、酵素、酵素阻害剤、阻害性オリゴヌクレオチド（例えば、ＲＮＡｉ、ｓｉＲＮＡ）、免疫調節物質（例えば、サイトカイン、リンフォカイン、ケモカイン、増殖因子、または腫瘍壊死因子）、放射性核種、抗脈管形成剤、プロアポトーシス剤、抗体、放射標識された抗体、または光活性治療剤である。
【０３０３】
特定の実施形態では、上記治療剤は化学療法薬である。化学療法薬の例には、副腎皮質抑制剤、代謝拮抗剤、アルキル化剤、アルキルスルホネート、抗生剤、抗有糸分裂剤、アントラサイクリン、抗脈管形成剤、カンプトテシン、ＣＯＸ−２阻害剤、ＣＰＴ−１１、ドキソルビシン、ドキソルビシン類似体、酵素阻害剤、エンドスタチン、エピポドフィロトキシン、エチレンイミン誘導体、葉酸類似体、ゲムシタビン、ＨＤＡＣ阻害剤、熱ショックタンパク質（ＨＳＰ）９０阻害剤、ホルモンアンタゴニスト、メトトレキセート、メチルヒドラジン誘導体、ｍＴＯＲ阻害剤、ニトロソウレア、ナイトロジェンマスタード、ピリミジン類似体、プリン類似体、白金配位錯体、置換尿素、ＳＮ−３８、タキソール、トリアゼン、タキサン、チロシンキナーゼ阻害剤、プロテオソーム阻害剤、プロアポトーシス剤、およびビンカアルカロイドが挙げられる。適切な化学療法剤は、文献に記載されている（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１９版、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．１９９５年；Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、第７版、  ＭｃＭｉｌｌａｎ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．１９８５年）。
【０３０４】
特定の実施形態では、上記治療剤は細胞毒性剤または免疫抑制剤、例えば、抗チューブリン剤、アウリスタチン、ＤＮＡ小溝結合剤、ＤＮＡ複製阻害剤、アルキル化剤、アントラサイクリン、抗生剤、抗葉酸剤、代謝拮抗剤、化学療法感作剤（ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  ｓｅｎｓｉｔｉｚｅｒ）、シクロオキシゲナーゼ阻害剤、デュオカルマイシン、エトポシド、フッ化ピリミジン、イオノフォア、レキシトロプシン、リポキシゲナーゼ阻害剤、ニトロソウレア、プラチノール、予備形成化合物（ｐｒｅ−ｆｏｒｍｉｎｇ  ｃｏｍｐｏｕｎｄ）、プリン代謝拮抗剤、ピューロマイシン、放射線感作剤（ｒａｄｉａｔｉｏｎ  ｓｅｎｓｉｔｉｚｅｒ）、ステロイド、タキサン、トポイソメラーゼ阻害剤、ビンカアルカロイドなどである。
【０３０５】
個々の細胞毒性剤として、例えば、アウリスタチン（例えば、ＭＭＡＥ、ＭＭＡＦ）、アザチオプリン、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、ブスルファン、カリケマイシン、カペシタビン、カルボプラチン、カルムスチン、クロラムブシル、シスプラチン、クラドリビン、コラスパーゼ、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン（ｄａｕｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ドセタキセル、ドキソルビシン、デュオカルマイシン、エピルビシン、エトポシド、エトポシドホスフェート、フルダラビン、フルオロウラシル、フォテムスチン、ガンシクロビル（ｇａｎｉｃｌｏｖｉｒ）、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、イダルビシン、イホスファミド、イリノテカン、ロムスチン、メルファラン、メルカプトプリン、メトトレキセート、マイトマイシン、ミトキサントロン、オキサリプラチン、パクリタキセル、プレメトレキセド、プロカルバジン、ラルチトレキセド、テモゾロミド、テミポシド、チオグアニン、チオテパ、トポテカン、バルガンシクロビル、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビン（ｖｉｎｏｒｅｂｉｎｅ）、およびメイタンシン（例えば、ＤＭ１、ＤＭ４）が挙げられる。抗体と結合体化し、現在治験中の薬物は、アウリスタチン、メイタンシン、カリケマイシン、およびデュオカルマイシンである（Ａｌｌｅｙ，  ＳＣら、Ｃｕｒｒｅｎｔ  ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｂｉｏｌｏｇｙ、２０１０年、１４巻、５２９〜５３７頁）。
【０３０６】
特定の実施形態では、上記細胞毒性剤は、ドラスタチン（例えば、アウリスタチンＥ、ＡＦＰ、ＭＭＡＦ、ＭＭＡＥ）またはその誘導体である。特定の実施形態では、上記細胞毒性剤は従来の化学療法剤、例えば、ドキソルビシン、パクリタキセル、メルファラン、ビンカアルカロイド、メトトレキセート、マイトマイシンＣ、またはエトポシドである。さらに、強力な薬剤として、ＣＣ−１０６５類似体、カリケマイシン、メイタンシン（またはＤＭ−１）、ドラスタチン１０の類似体、リゾキシン、およびパリトキシンが挙げられる。
【０３０７】
特定の実施形態では、上記免疫抑制剤は、例えば、アリールカルボン酸誘導体、アザチオプリン、シクロスポリン、シクロオキシゲナーゼ阻害剤、シクロホスファミド、エタネルセプト、ガンシクロビル、グルココルチコイドまたはグルココルチコイド類似体、ロイコトリエン受容体アンタゴニスト、５−リポキシゲナーゼ阻害剤、ミコフェノール酸モフェチルまたはメトトレキセート、ニコチン酸誘導体、オキシカム誘導体、ピラゾール−含有誘導体、ラパマイシン、またはタクロリムスであってよい。
【０３０８】
一部の好ましい実施形態では、上記治療剤は、リシン、アブリン、アルファ毒素、サポリン、リボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）、ＤＮａｓｅ  Ｉ、ブドウ球菌エンテロトキシン−Ａ、ヨウシュヤマゴボウ抗ウイルス性タンパク質、ゲロニン、ジフテリア毒素、緑膿菌外毒素、および緑膿菌内毒素からなる群から選択される毒素である。
【０３０９】
一部の好ましい実施形態では、上記治療剤は、サイトカイン、幹細胞増殖因子、リンホトキシン、造血因子、コロニー刺激因子（ＣＳＦ）、インターフェロン（ＩＦＮ）、エリスロポエチン、トロンボポエチン、およびこれらの組合せからなる群から選択される免疫調節物質である。
【０３１０】
Ｍは、疾患状態または状態と関連する標的抗原に特異的に結合することが可能な任意の抗体またはフラグメントであってよい。ほとんどあらゆる疾患関連の抗原に対する抗体配列または抗体分泌ハイブリドーマを、ＡＴＣＣ（米国培養細胞系統保存機関）、ＮＣＢＩ、およびＵＳＰＴＯデータベースから得ることができる。有用なポリクローナル抗体は、免疫された動物の血清由来の抗体分子の不均一な集団である。有用なモノクローナル抗体は、標的抗原のある特定の抗原決定基に対する抗体の均一な集団である。標的抗原に対するポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体を当技術分野で公知のいずれの技法を使用して調製することができる。
【０３１１】
適切な抗体には、モノクローナル抗体、例えば、キメラ、ヒト化、またはヒト抗体、またはその抗原結合フラグメントが挙げられる。一実施形態では、上記抗体フラグメントは、例えば、ＡＣ１０、ＢＲ９６、１Ｆ６もしくは２Ｆ２、または増殖阻害性抗体である。
【０３１２】
個々の治療用抗体には、例えば、アレムツズマブ（Ｃａｍｐａｔｈ；Ｌｅｕｋｏｓｉｔｅ、ＭＡ）、Ａｌｌｏｍｕｎｅ（ＢｉｏＴｒａｎｓｐｌａｎｔ）、ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ；Ｇｅｎｅｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．、ＣＡ）、ＣＥＡｃｉｄｅ（Ｉｍｍｕｎｏｍｅｄｉｃｓ、ＮＪ）、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ；Ｉｍｃｌｏｎｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｉｎｃ．、ＮＹ）、エプラツズマブ（ｅｐｒａｔｕｚａｍａｂ）（Ｉｍｍｕｎｏｍｅｄｉｃｓ，Ｉｎｃ．、ＮＪおよびＡｍｇｅｎ、ＣＡ）、ＬｙｍｐｈｏＣｉｄｅ（Ｉｍｍｕｎｏｍｅｄｉｃｓ，Ｉｎｃ．、ＮＪ）、Ｏｎｃｏｌｙｍ（Ｔｅｃｈｎｉｃｌｏｎｅ，Ｉｎｃ．、ＣＡ）、ＯＶＡＲＥ（ＡｌｔａＲｅｘ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、ＭＡ）、Ｐａｎｏｒｅｘ（Ｇｌａｘｏ  Ｗｅｌｌｃｏｍｅ、ＮＣ）、リツキシマブ（Ｒｉｔｕｘａｎ；Ｇｅｎｅｔｅｃｈ）、Ｓｍａｒｔ  ＭＩ９５（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｅｓｉｇｎ  Ｌａｂｓ，Ｉｎｃ．、ＣＡ）、Ｓｍａｒｔ  ＩＤ１０（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｅｓｉｇｎ  Ｌａｂｓ，Ｉｎｃ．、ＣＡ）、トラスツズマブ（Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ；Ｇｅｎｅｔｅｃｈ）、およびＶｉｔａｘｉｎ（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ，Ｉｎｃ．、ＭＤ）が挙げられる。
【０３１３】
特定の実施形態では、上記抗体には、例えば、以下の抗原に対する抗体が挙げられる：腫瘍関連抗原；膵臓がん、悪性疾患、自己免疫疾患、免疫機能不全疾患、白血病、または神経疾患に関連する抗原；および膜貫通アクチベータおよびＣＡＭＬ−相互作用因子に対する抗原（ＴＡＣＩ、Ｙｕら、Ｎａｔ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０００年、１巻、２５２〜２５６頁）。抗原の例には以下が挙げられる：ＣＡ１２５、ＣＡ１５−３、ＣＡ１９−９、Ｌ６、Ｌｅｗｉｓ  Ｙ、Ｌｅｗｉｓ  Ｘ、アルファフェトプロテイン、ＣＡ  ２４２、胎盤アルカリホスファターゼ、前立腺特異抗原、前立腺酸ホスファターゼ、上皮成長因子、ＭＡＧＥ−１、ＭＡＧＥ−２、ＭＡＧＥ−３、ＭＡＧＥ−４、抗トランスフェリン受容体、ｐ９７、ＭＵＣ１−ＫＬＨ、ＣＥＡ、ｇｐ１００、ＭＡＲＴ１、ＩＬ−２受容体、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ２５、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４６、ＣＤ５２、ＣＤ５４、ＣＤ６６ａ−ｄ、ＣＤ６７、ＣＤ７４、ＣＤ７９ａ、ＣＤ８０、ＣＤ１２６、ＣＤ１３８、ＣＤ１５４、Ｂ７、ＭＵＣ１、ＬＡＬＩ、ＨＭ１．２４、ＨＬＡ−ＤＲ、テネイシン、ＶＥＧＦ、ＰＩＧＦ、ＥＤ−Ｂフィブロネクチン、がん遺伝子、がん遺伝子生成物、壊死抗原、Ｔ１０１、ＴＡＧ、ＩＬ−６、ＭＩＦ、ＴＲＡＩＬ−Ｒ１（ＤＲ８）、ＴＲＡＩＬ−Ｒ２（ＤＲ５）、ヒト絨毛性ゴナドトロピン、ムチン、Ｐ２１、ＭＰＧ、およびＮｅｕがん遺伝子生成物。
【０３１４】
上記抗体はまた、多特異性抗体、例えば二重特異性抗体であることもできる。二重特異性抗体を作製するための方法は、当技術分野で公知である。一部の実施形態では、上記抗体フラグメントは、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、またはＦ（ａｂ’）２である。他の有用な抗体は、抗体の重鎖および軽鎖ダイマー、一本鎖抗体、ミニボディ、ダイアボディ、トリアボディ（ｔｒｉａｂｏｄｙ）、テトラボディ（ｔｅｔｒａｂｏｄｙ）、ｄｓＦｖ、ｓｃ−Ｆｖ−Ｆｃ、（ｓＦｖ）２、Ｆａｂ発現ライブラリーにより生成されるフラグメント、抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体、または抗体フラグメントからの多特異性抗体である。
【０３１５】
特定の実施形態では、上記抗体およびタンパク質は、罹患した組織を処置するのに有用な１つまたは複数の放射性同位元素を含み得る。適切な治療用放射性核種には、これらに限らないが、ヨウ素−１３１、ヨウ素−１２５、ビスマス−２１２、ビスマス（ｂｉｍｕｔｈ）−２１３、ルテチウム−１７７、イットリウム−９０、イットリウム−８８、テクネチウム−９９ｍ、銅−６２、銅−６７、レニウム−１８８、レニウム−１８６、ガリウム（ｇａｌｉｕｍ）−６６、ガリウム−６７、インジウム−１１１、インジウム−１１４ｍ、インジウム−１１５、ホウ素−１０、アスタチン−２１１、リン−３２、リン−３３、スカンジウム−４７、銀−１１１、プラセオジム（ｐｒａｓｅｏｄｙｍｉｎｕｍ）−１４２、サマリウム−１５３、テルビウム−１６１、ジスプロシウム−１６６、ホルミウム−１６６、レニウム−１８６、レニウム−１８８、レニウム−１８９、鉛−２１２、鉛−２１１、ラジウム−２２３、アクチニウム−２２５、鉄−５９、セレン−７５、ヒ素−７７、ストロンチウム−８９、モリブデン−９９、ロジウム−１０５、パラジウム−１０９、プラセオジム−１４３、プロメチウム−１４９、エルビウム−１６９、イリジウム−１９４、金−１９８、および金−１９９が挙げられる。
【０３１６】
追加的な、有力な治療用ラジオアイソトープには、炭素−１１、窒素−１３、酸素−１５、臭素−７５、臭素−７６、金−１９８、アクチニウム−２２４、ヨウ素−１２６、ヨウ素−１３３、臭素−７７、インジウム−１１３、ルテニウム−９５、ルテニウム−９７、ルテニウム−１０３、ルテニウム−１０５、水銀−１０７、水銀−２０３、テルリウム−１２１ｍ、テルリウム−１２２ｍ、テルリウム−１２５ｍ、テルリウム−１６５、テルリウム−１６７、テルリウム−１６８、白金−１９７、パラジウム−１０９、ロジウム−１０５、プラセオジム−１４２、プラセオジム−１４３、テルビウム−１６１、ホルミウム（ｈｏｌｍｉｎｕｍ）−１６６、金−１９９、コバルト−５７、コバルト−５８、クロム−５１、鉄−５９、セレン−７５、タリウム−２０１、アクチニウム−２２５、イッテルビウム−１６９などが挙げられる。
【０３１７】
治療用試薬は、ＳＨ基または表面アミンの部分的な還元を介して抗体に結合することができる。上記治療用試薬はまた、利用可能な場合には、炭水化物側鎖に結合してもよい。
【０３１８】
特定の実施形態では、上記治療剤は、同じ治療剤または異なる治療剤の組合せの１つまたは複数のコピーを含むことができる。
【０３１９】
特定の実施形態では、Ｍ２は診断剤である。診断剤の例には、蛍光プローブ、化学発光化合物、ラジオリガンド、質量分析タグ、発色団、およびＵＶ−活性化合物が挙げられる。
【０３２０】
特定の実施形態ではＭ２は蛍光化合物である。蛍光化合物の例には、フルオレセイン、ローダミン、クマリン、緑色蛍光タンパク質、ＢＯＤＩＰＹ、Ｔｅｘａｓ  Ｒｅｄ、Ｃａｓｃａｄｅ  Ｂｌｕｅ、Ｌｕｃｉｆｅｒ  ｙｅｌｌｏｗ誘導体、フィコビリタンパク質シアニン色素、ランタニドキレート、および量子ドットが挙げられる。様々な蛍光化合物が市販されている（例えば、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ＰｒｏｂｅｓおよびＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ製）。
【０３２１】
Ｍ１またはＭ２がＢに結合している位置は、単一部位または複数部位であってよい。Ｍ１またはＭ２は、エステル結合または他の架橋基を介してＢに結合することができる。
【０３２２】
好ましい実施形態では、Ｍ１は、治療用タンパク質またはポリペプチドである。ＳＡ高分子は、単一の特定の部位または複数の部位において上記タンパク質またはペプチドに結合体化してもよい。上記治療用タンパク質は、サイトカイン、ホルモン、造血（ｈｅｍａｐｏｉｅｔｉｃ）タンパク質、血液タンパク質、酵素、またはペプチドであってよい。
【０３２３】
特定の実施形態では、Ｍ１は、Ｇ−ＣＳＦ、そのフラグメント、または改変された誘導体である。Ｇ−ＣＳＦは、好中球顆粒球前駆細胞および成熟好中球の増殖、生存、および分化を刺激する、１７４−アミノ−酸のグリコシル化サイトカインである（Ｈｉｌｌ  ＣＰら、Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．１９９３年、９０巻、５１６７〜５１７１頁）。Ｇ−ＣＳＦは、血液から急速に排除される。単一のＳＡ高分子を使用するＧ−ＣＳＦの改変は、その物質を安定化させるのを助けることができる。ＰＥＧ化Ｇ−ＣＳＦは、商標名Ｎｅｕｌａｓｔａの下で市販されている（Ｋｉｎｓｔｌｅｒ  Ｏ．Ｂ．ら、Ｐｈａｒｍ  Ｒｅｓ  １９９６年、１３巻、９９６〜１００２頁）。
【０３２４】
特定の実施形態では、上記治療用タンパク質は、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＦＮα−２ａ、ＩＦＮα−２ｂ、ＩＬ−２（Ｗａｌｄｍａｎｎ  ＴＡ、Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｏｌ．２００６年、６巻、５９５〜６０１頁）、エリスロポエチン（ＥＰＯ、Ｍａｃｄｏｕｇａｌｌ  ＩＣ、Ｃｕｒｒ  Ｈｅｍａｔｏｌ  Ｒｅｐ、２００５年、４巻、４３６〜４４０頁）、成長ホルモン（ＧＨ；Ｚｕｎｄｅｌ  Ｍ、Ｐｅｓｃｈｋｅ  Ｂ、２００６年、ＷＯ２００６／０８４８８８）、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ；  Ｌｉ  ＣＨ，  Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ、１９８２年、４６巻、３１〜４１頁）、またはアポミオグロビン（ａｐｏＭｂ；  Ｅｖａｎｓ  ＳＶら、Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．１９９０年、２１３巻、８８５〜８９７頁）である。治療用タンパク質およびペプチドの他の例には、アスパラギナーゼ、インターフェロン（例えば、ＩＦＮ−α、−β、−γ）、インターロイキン類、レプチン、血清タンパク質（例えば、ＶＩＩ因子、ＶＩｌａ因子、ＶＩＩＩ因子、ＩＸ因子、およびＸ因子）、ヒト絨毛性ゴナドトロピン（ＨＣＧ）、インスリン、ろ胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、黄体形成ホルモン（ＬＨ）、尿酸オキシダーゼ（ウリカーゼ）、アデノシンデアミナーゼ（ＡＤＡ）、および抗体融合タンパク質（例えば、腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）／Ｆｃドメイン融合タンパク質）が挙げられる。
【０３２５】
他の有用なタンパク質には、身体のある特定の組織または領域に選択的に局在化するタンパク質が含まれる。このようなタンパク質の例には、トランスフェリン、ＨＳ糖タンパク質、凝固因子、血清タンパク質、Ｏ型糖タンパク質、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｍ−ＣＳＦ、ＥＰＯなどが挙げられる。
【０３２６】
一部の好ましい実施形態では、Ｍ１は、治療用タンパク質またはペプチドの誘導体であり、例えば、上記タンパク質および化学的に改変されたタンパク質（例えば、グリコシル化、アシル化、アミノ酸置換）のフラグメントである。一部の好ましい実施形態では、Ｍは組換えタンパク質である。
【０３２７】
特定の実施形態では、Ｍ１は、オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド類似体、または低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）である。オリゴヌクレオチド類似体の例には、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、ロックド核酸（ＬＮＡ）、トレオース核酸（ＴＮＡ）、およびアルファＰＮＡが挙げられる。
【０３２８】
特定の実施形態では、上記治療剤には、同じ治療剤または異なる治療剤の組合せの１つまたは複数のコピーが含まれてもよい。
【実施例】
【０３２９】
以下の実施例は、その様々な実施形態およびその同等の形態における本発明の実施に適用することができる重要な追加的情報、例証、およびガイダンスを含有する。本発明の実施は、以下の実施例からより完全に理解されることになり、これらの実施例は、例示的目的のみのためにここに提示されるもので、決して限定として解釈されてはならない。
【０３３０】
装置類：１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを５００ＭＨｚ（Ｂｒｕｋａｒ）で記録し、それを、残留ＣＨＣｌ３（δ７．２５）およびＤＭＳＯ−ｄ６（δ２．４９）と比較して、δスケールで、百万分率（ｐｐｍ）で報告する。別途述べられていない限り、すべてのＮＭＲ実験は室温（ＲＴ）で実施した。ＨＰＬＣは、自動試料インジェクターおよびダイオードアレイ検出器を備えたＡｇｉｌｅｎｔ  １１００ＨＰＬＣ系で実施した。分析用ＨＰＬＣを、ＸＴｅｒｒａ（商標）Ｃ１８カラム（Ｗａｔｅｒｓ、２．５μｍ、３．０×３０ｍｍ）で実施した。使用したＨＰＬＣ法（方法Ａ）は、流速０．６ｍＬ／分でのＡＢ溶媒（５％Ｂから９５％Ｂまでを１０分間）の直線勾配であった。極めて疎水性の化合物の場合、Ｎｏｖａ−ＰａｃｋＣ１８カラム（Ｗａｔｅｒｓ、５μｍ、３．９×１５０ｍｍ）を、流速１．０ｍＬ／分で、直線ＡＢ勾配（１０％Ｂから９５％Ｂまでを１０分間、次いで９５％Ｂでもう５分間保持）で使用した（方法Ｂ）。溶媒Ａは０．１％水性ＴＦＡであり、溶媒Ｂはアセトニトリル中０．１％ＴＦＡであった。ＵＶ検出器を２１０ｎｍおよび２５４ｎｍに設定した。大部分の質量スペクトルをＱｕａｄｒｕｐｏｌｅ  ＭＤＳ  Ｓｃｉｅｘ  Ｑ−ＴＲＡＰに収集した。典型的な実験では、粗または精製された試料を、０．１％ギ酸を含有するメタノールに溶解または希釈し、エレクトロスプレーインレットに直接注入した。一部の大きな分子量の化合物に対しては、質量スペクトルは、ＴＯＦ／ＴＯＦ光学部品を備えた４７００  Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃアナライザー（ＡＢＳｃｉｅｘ、Ｆｒａｍｉｎｇｈａｍ）に収集した。典型的な実験では、５μＬの試料溶液を水中の５μＬの１ｍｇ／ｍＬジヒドロキシ安息香酸溶液と混合し、次いでこの混合物１μＬをＭＡＬＤＩプレートにスポットし、空気乾燥させた。この試料を共結晶化するか、またはマトリクスを有する液滴乾燥物を形成した。レーザー励起の際に、このマトリクスはレーザーエネルギーを吸収し、そのエネルギーを上記試料に移動させ、そのイオン化および蒸発を促進させる。
【０３３１】
溶媒および試薬：すべての感湿反応は、不活性な、窒素の乾燥雰囲気内で実施した。試薬グレードの溶媒をクロマトグラフィーおよび抽出に使用した。Ｄ−グルカミン、Ｄ−グルコサミン酸（Ｄ−ｇｌｕｃｏｓａｍｉｃ  ａｃｉｄ）、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド、およびピリジニウムｐ−トルエンスルホネートをＴＣＩ  Ａｍｅｒｉｃａから購入した。アセトンシアノヒドリン、１０％パラジウム炭素、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン、無水酢酸、ギ酸、無水ジクロロメタン、および無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドをＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈから購入した。Ｎ−（９−フルオレニルメトキシカルボニルオキシ）スクシンイミド（「Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ」）をＣｈｅｍ−Ｉｍｐｅｘ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌから購入した；トリエチルアミンをＭａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔから購入した；ピリジンをＥＭＤから購入した；ＡＣＳグレード溶媒をＥＭＤ、ＢＤＨ、Ｍａｃｒｏｎ、またはＭａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔから購入した。他のすべての化学薬品および試薬は、Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒから購入し、そのまま使用した。
【０３３２】
クロマトグラフィー：薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）分析をＥＭＤ  ＴＬＣシリカゲル６０  Ｆ２５４（０．２５ｍｍの厚さ）を使用して実施した。プレートは、最初にＵＶ照明で視覚化し、続いて化学溶液での炭化により視覚化した。異なる炭化溶液を使用した：１）ＰＭＡ（エタノール中３％リンモリブデン酸ｗ／ｖ）；２）ＣＡＭ（モリブデン酸セリウムアンモニウム、１０％水性硫酸中２．５％モリブデン酸アンモニウム、１％硫酸セリウム）；３）エタノール中５％ニンヒドリン；および４）水中２％  ＫＭｎＯ４。充填済みカラム（ｐｒｅ−ｐａｃｋｅｄ  ｃｏｌｕｍｎ）を使用して、フラッシュクロマトグラフィーをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎで実施した。溶媒組成物は、体積／体積（ｖ／ｖ）ベースであった。
実施例１〜６：糖アルコール中の第一級および第二級アルコール基に対する選択的保護および脱保護のストラテジー。
【０３３３】
（実施例１）
安息香酸エステルおよびＴＢＤＭＳ保護ストラテジーを使用した単一の遊離ＯＨ  ＳＡ分子の合成
【０３３４】
【化１４７】
2014521319.tif 000150
【０３３５】
化合物Ｉ１−ａ：文献からの同様の手順に基づき化合物Ｉ１−ａを合成した（Ｃｈｅｍ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｂｕｌｌ．２０１０年、５８巻、４９５頁）。４．５５ｇ（２５．０ｍｍｏｌ、１当量）のＤ−マンニトールおよび５．５６ｇ（８１．６ｍｍｏｌ、３．３当量）のイミダゾールを２０ｍＬのＤＭＦに部分的に溶解し、−７℃に冷却した。別のフラスコ中で、７．５２ｇ（５０．２ｍｍｏｌ、２当量）のｔ−ブチル−ジメチルシリルクロリドを１０ｍＬのＤＭＦに溶解した。次いでこの溶液を、−７℃で２０分間にわたりＤ−マンニトール懸濁液にゆっくりと加え、この反応物を室温まで温めた。ＤＭＦを減圧下で除去することによって、油を得た。次いでこの油を９０ｍＬの酢酸エチルに溶解した。粘着性の固体が形成した。上記固体から酢酸エチルをデカントで除き、１２ｍＬの水に完全に溶解した。この水相を２５ｍＬの酢酸エチルで抽出し、その酢酸エチル抽出物を合わせた。次いで上記抽出物を１０ｍＬの水で３回洗浄し、続いて１５ｍＬのブラインで洗浄した。有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。生成した材料をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することによって、２．１０ｇの所望の生成物を得た（Ｒｆ＝０．２０、ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝２５：７５、２％  ＫＭｎＯ４による炭化）。ＭＡＬＤＩ：正確な質量：４１０．２５、得た質量：４３３．４４［Ｍ＋Ｎａ］＋。１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  ４．３２（ｄ，  Ｊ＝５．７Ｈｚ，  ２Ｈ），  ４．０２（ｄ，  Ｊ＝７．１Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．７６（ｄｄ，  Ｊ＝１０．４，  ３．０Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．５７−３．４８（ｍ，  ４Ｈ），  ３．４３（ｄｔｄ，  Ｊ＝８．７，  ５．９，  ３．０Ｈｚ，  ２Ｈ），  ０．８３（ｓ，  １８Ｈ），  ０．００（ｓ，  １２Ｈ）。より高度に置換された副生成物もまた存在した（質量スペクトルで確認）：５．０５ｇのトリ−ＴＢＤＭＳ保護（３９％収率）（Ｒｆ＝０．５３）およびテトラ−ＴＢＤＭＳ置換（Ｒｆ＝０．７１）。
【０３３６】
化合物Ｉ２−ａ：０．９７４６ｇ（２．３７４ｍｍｏｌ、１当量）のＩ１−ａを４．６ｍＬ（５７ｍｍｏｌ）のピリジンに溶解し、０℃に冷却した。次に、１．５０ｍＬ（１２．２ｍｍｏｌ、５．１当量）の塩化ベンゾイルを滴下添加した。この反応物を室温まで温め、終夜撹拌した。ピリジンの大部分を減圧下で蒸発により除去し、生成した残渣を１５ｍＬの酢酸エチルに溶解した。次いで酢酸エチルを５ｍＬの１Ｎ  ＨＣｌ（水性）で洗浄し、続いて５ｍＬの飽和ＮａＨＣＯ３（水性）で洗浄した。酢酸エチルを無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することによって、１．５９ｇの所望の生成物を得た（８０％収率）。質量スペクトル分析（エレクトロスプレー）：正確な質量：８２６．３６、得た質量：８２７．７［Ｍ＋Ｈ］＋；８４９．７［Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０３３７】
化合物Ｉ３−ａ：０．１０６０ｇの元素のヨウ素を１０ｍＬのメタノールに溶解することによって、およそ１重量％の溶液を作った。次に、０．８００ｇ（０．９６７ｍｍｏｌ、１当量）のＩ２−ａを７．５ｍＬのＩ２／ＭｅＯＨ溶液に室温で溶解した。追加の１．０ｍＬのＴＨＦを加えることによって、均一溶液を得た。その反応をＴＬＣでモニターした。すべてのヨウ素色が消費されるまで３％Ｎａ２Ｓ２Ｏ３（水性）を滴下添加することによって、９時間後、反応をクエンチした。ＭｅＯＨおよびＴＨＦを減圧下で除去し、残渣を、６ｍＬの酢酸エチルおよび２ｍＬの水に溶解した。相を分離し、有機相を２ｍＬの水で２回、続いて２ｍＬのブラインで洗浄した。酢酸エチルを減圧下で蒸発により除去した。生成した材料をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することによって、０．２３３８ｇの所望の生成物を得た（０．３２８ｍｍｏｌ、３４％収率、Ｒｆ＝０．５７、２５：７５ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）。質量スペクトル分析（エレクトロスプレー）：正確な質量：７１２．２７、得た質量：７１３．６［Ｍ＋Ｈ］＋；７３５．３［Ｍ＋Ｎａ］＋。全部で０．２６８１ｇ（０．３２４ｍｍｏｌ、３４％収率）の出発材料を回収した。全部で０．１０４５ｇ（０．１７５ｍｍｏｌ、１８％）のテトラベンゾイルジオール（Ｉ８−ａ）を得た（Ｒｆ＝０．２０、質量スペクトルで確認）。質量スペクトル分析（エレクトロスプレー）：正確な質量：５９８．１８、得た質量：５９９．５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３３８】
化合物Ｉ８−ａ：２％ヨウ素のメタノール（３０ｍＬ）中溶液を、粗製Ｉ２−ａ（５．５０ｇ、６．７ｍｍｏｌ）の１５ｍＬのＴＨＦ中溶液に加えた。この反応混合物を室温で終夜撹拌した。茶色の色が消えるまで３％水性チオ硫酸ナトリウムを添加することにより、反応をクエンチした。懸濁液を真空中で濃縮した。残渣を水（約６０ｍＬ）に溶解し、６０ｍＬのジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することによって、３．８４ｇの所望の生成物を得た（９６％）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝１：１、Ｒｆ＝０．５）。質量スペクトル分析（エレクトロスプレー）：正確な質量：５９８．２、得た質量：６２１［Ｍ＋Ｎａ］＋および１２１９［２Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０３３９】
化合物Ｉ３−ａ（Ｉ８−ａからＩ３−ａへと変換）：ｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（２５６ｍｇ、１．０当量）の無水ジクロロメタン（５ｍＬ）中溶液を、シリンジポンプを介して、２．５ｍＬ／時間の速度で、化合物ｋ（１．０ｇ、１．７ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（１１６ｍｇ、１当量）の無水ＤＭＦ（１０ｍＬ）中撹拌溶液に、窒素下室温で滴下添加した。次いでこの反応物を追加の１時間の間撹拌した。次に、この反応物を氷浴内に置き、７０ｍＬの水を少量ずつ加えながらクエンチした。この混合物を４０ｍＬのジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機層を２０ｍＬの水で３回洗浄し、続いて２０ｍＬのブラインで２回洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで終夜乾燥させ、濾過し、真空中４０℃で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することによって、所望の生成物を得た（５８４ｍｇ、４８％）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝２：３、２５４ｎｍ  ＵＶ）：Ｒｆ＝０．８３。質量スペクトル分析（エレクトロスプレー）：正確な質量：７１２．２７、得た質量：５９２［Ｍ−ＯＢｚ］＋、７１３［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，  クロロホルム−ｄ）：  δ  ８．０７−７．９９（ｍ，  ４Ｈ），  ８．００（ｄｄ，  Ｊ  ＝８．２，  １．４Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．９２（ｄｄ，  Ｊ＝８．４，  １．３Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．６４−７．３２（ｍ，  １２Ｈ），  ６．１６（ｄｄ，  Ｊ＝６．９，  ２．５Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．０８（ｄｄ，  Ｊ＝８．２，  ２．６Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．５６（ｄｔ，  Ｊ＝７．０，  ４．６Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．３５（ｄｔ，  Ｊ＝８．１，  ３．３Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．０４−３．９４（ｍ，  ２Ｈ），  ３．８９（ｄｄ，  Ｊ＝１１．３，  ４．８Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．７９（ｄｄ，  Ｊ＝１３．３，  ３．８Ｈｚ，  １Ｈ），  ２．５０（ｓ，  １Ｈ），  ０．８１（ｓ，  ９Ｈ），  −０．０２（ｓ，  ３Ｈ），  −０．０６（ｓ，  ３Ｈ）。
【０３４０】
（実施例２）
酢酸エステルおよびＴＢＤＭＳ保護ストラテジーを使用した単一の遊離ＯＨ  ＳＡ分子の合成
【０３４１】
【化１４８】
2014521319.tif 000151
【０３４２】
化合物Ｉ２−ｂ：無水酢酸（７ｍＬ、５．１当量）を、シリンジを介して、化合物Ｉ１−ａ（４．３ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）のピリジン（１０ｍＬ）中撹拌溶液に０℃で滴下添加した。この反応物を終夜室温まで温めた。水を少量ずつ添加（合計約２０ｍＬ）して反応をクエンチすることによって、二相性の液体を生成した。この液体を４０ｍＬの酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を１５ｍＬの０．１Ｎ  ＨＣｌで３回洗浄し、続いて２０ｍＬのブラインで洗浄し、次いで硫酸ナトリウムで終夜乾燥させた。乾燥した有機層を濾過し、真空中で濃縮して、ＴＬＣプレート上で２５４ｎｍのＵＶ吸収が観察されなくなって、残留するピリジンの除去が示唆されるまでこれを続けることによって、生成物を得た（５．９ｇ、９７％）。これをさらなる精製なしで使用した。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝１：３、２％  ＫＭｎＯ４による炭化）：Ｒｆ＝０．６５。
【０３４３】
化合物Ｉ３−ｂ：化合物Ｉ２−ｂ（４．９ｇ、８．７ｍｍｏｌ）を、５分間の音波処理によりメタノール（１８ｍＬ）に懸濁させた。２％（ｗ／ｖ）ヨウ素のメタノール（１７ｍＬ）中溶液を加え、この反応物を室温で終夜撹拌した。３％水性のチオ硫酸ナトリウムを茶色の色が消えるまで少量ずつ添加（合計約１５ｍＬ）することにより反応をクエンチした。懸濁液を真空中で濃縮することによって、大部分のＭｅＯＨを除去し、１５ｍＬの水の添加により希釈し、次いで３０ｍＬのジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機層を２０ｍＬのブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することによって、所望の生成物を得た（７２０ｍｇ、１８％）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝１：１、２％  ＫＭｎＯ４による炭化）：Ｒｆ＝０．５７。質量スペクトル分析（エレクトロスプレー）：正確な質量：４６４．２１、得た質量：３３３［Ｍ−ＯＴＢＤＭＳ］＋；４０５［Ｍ−ＯＡｃ］＋、４６５［Ｍ＋Ｈ］＋、４８３［Ｍ＋Ｈ３Ｏ］＋、９５１［２Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０３４４】
（実施例３）
ＴＨＰ（テトラヒドロピラニル）およびＴＢＤＭＳ保護ストラテジー。
【０３４５】
【化１４９】
2014521319.tif 000152
【０３４６】
化合物Ｉ４−ａ：Ｉ３−ａを出発材料として使用して、一級ヒドロキシル基のＴＨＰ保護についての３つの異なる方法を調査した。方法Ａ：ＨＰＬＣバイアル内で、２９．２ｍｇのＩ３−ａ（４１μｍｏｌ）を１００μＬのＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、続いて４．１７μＬの３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピランおよび２０μＬのＣＨ２Ｃｌ２中０．１ｍｇ／μＬビーズを添加した。この混合物を室温で２時間撹拌した。ＴＬＣは一部の出発材料が残留していることを示し（出発材料についてＲｆ＝０．２８）、Ｒｆ＝０．５９を有する新規スポットが観察された。追加の出発材料（４．１７μＬ）を加えた。３０分後、反応が完了し、ＵＶにより単一スポットが検出された（それは、恐らく生成物である）。この混合物を、ガラスウールを介して、濾過することによって、粗生成物を得た。方法Ｂ：ＨＰＬＣバイアル内で、１４．７ｍｇのＩ３−ａ（２０μｍｏｌ）を１００μＬのＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、続いて１．９２μＬの３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピランおよび１．１μＬのＣＨ２Ｃｌ２中５０ｍＭビス（トリメチルシリル）サルフェートを添加した。この混合物を０℃で２時間撹拌した。ＴＬＣは、一部の出発材料が残留していることを示し（Ｒｆ＝０．２８）、Ｒｆ＝０．５９を有する新規スポットが観察された。追加の出発材料（１．９２μＬ）を加えた。３０分後、およそ５０％の出発材料がその溶液に残留した。方法Ｃ：ＨＰＬＣバイアル内で、２１．４ｍｇのＩ３−ａ（３０μｍｏｌ）を１００μＬのＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、続いて３．８２μＬの３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（１．５当量）および１０μＬのＣＨ２Ｃｌ２中７６ｍｇ／ｍＬのｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウム（ｐｙｒｉｄｉｎｉｕｍ  ｐ−ｔｏｌｅｎｅｓｕｌｆｏｎａｔｅ）（ＰＰＴＳ）を添加した。この混合物を室温で２時間撹拌した。ＴＬＣは、一部の出発材料が残留していることを示し（Ｒｆ＝０．２８）、Ｒｆ＝０．５９を有する新規スポットが観察された。追加の出発材料（３．８２μＬ）を加えた。３０分後反応が完了した。１５０μＬのエチルエーテル（ＰＰＴＳが白色沈殿物を形成）をそのバイアルに加え、１００μＬの４Ｍ  ＮａＣｌをそれに加えた。この混合物をＣＨ２Ｃｌ２で２回抽出した。有機層を合わせることによって、粗生成物を得た。質量スペクトル分析（エレクトロスプレー）：Ｉ４−ａについての正確な質量：７９６．３３、および観察された質量：７９７．８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３４７】
（実施例４）
ＴＢＤＰＳＣｌストラテジーを使用したＳＡの単一の一級アルコールの選択的保護
【０３４８】
【化１５０】
2014521319.tif 000153
【０３４９】
化合物Ｉ３４−ａ：０．５３ｇ（６．４ｍｍｏｌ）のＤ−マンニトールおよび０．５４ｇ（７．９ｍｍｏｌ）のイミダゾールを１６ｍＬのＤＭＦに加熱により溶解し、次いで−７℃に冷却した。第２のフラスコ内で、１．６５ｍＬ（６．４ｍｍｏｌ）のｔ−ブチル−ジフェニルシリルクロリドを１０ｍＬのＤＭＦに溶解した。次いでこの溶液を−７℃で２０分間にわたりマンニトール溶液に加え、追加の５分間撹拌した。ＤＭＦを減圧下で除去することによって、油を得た。次いでこれを５０ｍＬの酢酸エチルに溶解した。白色の固体（イミダゾール塩酸塩）が沈殿し、これを濾過で除去した。酢酸エチル抽出物を１０ｍＬの水で２回洗浄し、続いて１０ｍＬのブラインで洗浄した。有機相を減圧下で濃縮し、２．４ｇの油を得た。ＴＬＣによる分析は、主な生成物は１つの部分が保護されたもの（ｍｏｎｏ−ｐｒｏｔｅｃｔｅｄ）（Ｉ３４−ａ）を示した。質量スペクトル分析（ＭＡＬＤＩ）：正確な質量：４２０．２０、観察された質量：４４３．３９［Ｍ＋Ｎａ］＋（Ｒｆ＝０．２１、２５：７５ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）であり、副スポットは２つの部分が保護された（ｄｉ−ｐｒｏｔｅｃｔｅｄ）物質に一致する（Ｒｆ＝０．９３）。質量スペクトル分析（ＭＡＬＤＩ）：正確な質量：６５８．３１、観察された質量：６８０．７［Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０３５０】
（実施例５）
ＯＨのベンジル保護。
【０３５１】
【化１５１】
2014521319.tif 000154
【０３５２】
化合物Ｉ５−ｄ：２ｍＬのＤＭＦに溶解した１．０６０７ｇ（６．５４ｍｍｏｌ、１．０当量）の２，３−Ｏ−イソプロピリジン−Ｄ−トレイトール（ＴＣＩ  Ａｍｅｒｉｃａ）溶液を、０℃で、０．２９５９ｇのＮａＨ（７．４０ｍｍｏｌ、１．１３当量）懸濁液に、４ｍＬのＤＭＦ中６０重量％油中分散液として加えた。その添加は１０分間にわたり生じ、続いて追加の反応を３０分間行った。この溶液に、０．７８０ｍＬ（６．５６ｍｍｏｌ、１．０当量）の臭化ベンジルをゆっくりと加え、生成した混合物を０℃で２０分間撹拌した。ＴＬＣ分析（シリカ上４０：６０酢酸エチル：ヘキサン、ＣＡＭ染色）は、出発材料の消費およびＲｆ＝０．２８を有する生成物を示した。ＤＭＦの大部分を減圧下で蒸発により除去した。生成した油を５ｍＬの水に溶解し、１５ｍＬの酢酸エチルで３回抽出した。有機抽出物を合わせ、５ｍＬのブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。次いで生成した残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することによって、０．９９７ｇ（３．９５ｍｍｏｌ、６０．４％収率）の所望の生成物を得た。質量スペクトル分析（ＭＡＬＤＩ）：正確な質量：２５２．１４Ｄａ、観察された質量：２７５．９５［Ｍ＋Ｎａ］＋。ＨＰＬＣは、精製された生成物に対して４．３８７分で１つのピークを示した（方法Ａ）。
【０３５３】
【化１５２】
2014521319.tif 000155
【０３５４】
（実施例６）
単官能性ＳＡ架橋試薬ｐ３−４ｆの合成。
【０３５５】
化合物Ｉ３７−ｂ：シリンジを介して、アゾジカルボン酸ジイソプロピル（ＤＩＡＤ）（１７８μＬ、０．９０６ｍｍｏｌ、１．２当量）を、化合物Ｉ３−ｂ（３５０ｍｇ、０．７５３ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（２３８ｍｇ、０．９０６ｍｍｏｌ、１．２当量）の乾燥テトラヒドロフラン（２１ｍＬ）中溶液に窒素下、０℃で滴下添加した。暗所において、０℃でおよそ１時間の撹拌後、シリンジを介して、ジフェニルホスホリルアジド（１９６μＬ、０．９０６ｍｍｏｌ、１．２当量）を滴下添加した。この反応物を室温まで温め、暗所で３日間撹拌した。この反応混合物を真空中で濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することによって、所望の生成物を得た（０．２９４ｇ、８０％収率）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝１：３、ＰＭＡによる炭化）：Ｒｆ＝０．５２。質量スペクトル分析（エレクトロスプレー）：正確な質量：４８９．２１、観察された質量：４９０［Ｍ＋Ｈ］＋；５１２［Ｍ＋Ｎａ］＋；１００１［２Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０３５６】
化合物Ｉ３８−ｂ：トリフェニルホスフィン（４７０ｍｇ、１．８０ｍｍｏｌ、３当量）および脱イオン水（１００μＬ）を、化合物Ｉ３７−ｂ（２９４ｍｇ、０．６００ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）中溶液に加えた。この反応物を室温で終夜撹拌し、次いでこの混合物を真空中で濃縮した。トルエン（約５ｍＬ）を加え、この混合物を再び真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することによって、生成物を得た（９１ｍｇ、３３％）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝３：１、ニンヒドリンによる炭化）：Ｒｆ＝０．１７。質量スペクトル分析（エレクトロスプレー）：正確な質量：４６３．２２、得た質量：４６４［Ｍ＋Ｈ］＋；４８６［Ｍ＋Ｎａ］＋；９４９［２Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０３５７】
化合物Ｉ５−ｂｂ：メタノール溶液中の２％ヨウ素を使用してＩ２−ａをＩ８−ａに変換するものと同様のプロトコルに従い、Ｉ３８−ｂのＴＢＤＭＳを脱保護する。粗生成物は、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製するか、または十分に純粋な場合（＞９０％）には次の反応に直接使用することができる。
【０３５８】
トリフルオロメチル安息香酸のＮＨＳエステル：２０ｍｇ（０．０８６９ｍｍｏｌｅ）の４−（１−アジ−２，２，２−トリフルオロメチル）安息香酸、２１．６ｍｇ（０．１０５２ｍｍｏｌｅ）のＤＣＣ、１１ｍｇ（０．０９５６ｍｍｏｌｅ）のＮ−ヒドロキシスクシンイミド、および４３５μＬのジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を１．５ｍＬの超遠心分離管に加えた。この混合物を３０秒間ボルテックスし、次いで室温で揺動させた（ｎｕｔａｔｅｄ）。ＨＰＬＣは１時間以内で反応の完了を示した（出発材料：ｔＲ＝３．７３分間；ＮＨＳエステル：ｔＲ＝３．９９分間）。粗製の反応混合物を、精製なしに次のステップで直接使用した。ＨＰＬＣ条件：Ｘｔｅｒｒａ（商標）ＲＰ１８カラム、５μｍ、４．６×２５０ｍｍ；緩衝液Ａ：水中０．１％ＴＦＡ；緩衝液Ｂ：アセトニトリル中０．１％ＴＦＡ；均一濃度の（ｉｓｏｃｒａｔｉｃ）６０％Ｂで溶出。
【０３５９】
化合物ｐ３−４ｊ：水中のＫ２ＣＯ３溶液（約１Ｍ）を化合物Ｉ５−ｂｂを含有するフラスコに加えた。上記化合物が完全に溶解していない場合、少量のＭｅＯＨを加えることができる。反応の進行をＴＬＣでモニターした（ＰＭＡによる炭化）。反応は通常１時間以内で終わり、化合物ｐ３−４ｊが得られる。これを、ワークアップおよび精製なしに次の反応に直接使用する。
【０３６０】
化合物ｐ３−４ｆ：トリフルオロメチル安息香酸のＮＨＳエステルの反応混合物を濾過し、化合物ｐ３−４ｊを含有するＫ２ＣＯ３溶液（約１：１のモル比）に直接加えた。溶液のｐＨをチェックした。この反応についての最適なｐＨは、ｐＨ８．０〜９．０の間である。反応の進行をＴＬＣまたはＨＰＬＣでモニターした。アミドカップリングは通常１〜４時間以内で完了する。反応後、溶液をＣ１８カラムに通すことによって、脱塩するか（十分に純粋な場合）、または水／アセトニトリル勾配系を使用する分取ＨＰＬＣ精製に直接かけた。収集した画分を合わせ、凍結乾燥させることによって、生成物を得た。この粗生成物はシリカゲルクロマトグラフィーで精製することもできる（普通は９０％よりも上の収率、ＨＰＬＣが利用された場合、その回収率はより低い）。生成物の本質（ｉｄｅｎｔｉｔｙ）を質量分析法でチェックし、その構造を１ＨＮＭＲで確認した。
【０３６１】
（実施例７）
単官能性ＳＡ架橋試薬ｐ３−４ｂの合成。
【０３６２】
化合物ｐ３−４ｂ：化合物ｐ３−４ｂを、化合物ｐ３−４ｆと同様のプロトコルに従い調製した。最初に、トリフルオロメチル安息香酸と同様のプロトコルに従いＮＨＳエステルを合成した。ＤＣＭ中の３−マレイミドプロピオン酸（化合物Ｉ４−ｂａに対して１．１当量）、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ、１．１当量）、およびＮ−ヒドロキシスクシンイミド（１．１当量）をフラスコに加えた。反応のスケールが数グラムより上である場合、氷／水を使用することができる。反応物を数時間撹拌後、白色の固体が沈殿した。濾過後、有機溶媒を低圧下で蒸発させることによって、油を得た。化合物ｐ３−４ｆと同じプロトコルに従い、この油を、ｐ３−４ｊを含有するＫ２ＣＯ３溶液に直接加えた。生成物をＨＰＬＣまたはシリカゲルクロマトグラフィーで精製した（普通、９０％より上の収率、ＨＰＬＣを利用した場合、その回収率はより低い）。生成物の本質を質量分析法でチェックし、その構造を１ＨＮＭＲで確認した。
【０３６３】
（実施例８）
単官能性ＳＡ架橋試薬ｐ３−４ｅの合成
【０３６４】
ジチオジピリジンプロピオン酸：Ｎ２でパージしたメタノール中２，２−ジチオジピリジン（約１Ｍ溶液）を、撹拌棒を備えたオーブン乾燥させた三口フラスコに、Ｎ２下、室温で加えた。この混合物に３−メルカプトプロピオン酸を滴下添加した。溶液は黄色になり、それを２〜４時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することによって、所望の生成物を得た（普通、定量的収率）。生成物の本質を質量分析法でチェックし、その構造を１ＨＮＭＲで確認した。
【０３６５】
ジチオピリジンプロピオン酸のＮＨＳエステル：トリフルオロメチル安息香酸と同様のプロトコルに従い、およびジクロロメタンを溶媒として使用して、ＮＨＳエステルを合成した。反応の進行をＨＰＬＣまたはＴＬＣでモニターした。反応後、固形の沈殿物を濾過し、溶媒を真空中で除去した。残渣油を次の反応に直接使用した。
【０３６６】
化合物ｐ３−４ｅ：ｐ３−４ｆについて記載されているように、ジチオジピリジンプロピオン酸のＮＨＳエステルおよびｐ３−４ｊを出発材料として使用して該化合物を合成した。生成物の本質を質量分析法でチェックし、その構造を１ＨＮＭＲで確認した。
【０３６７】
（実施例９）
単官能性ＳＡ架橋試薬ｐ３−４ａの合成
【０３６８】
【化１５３】
2014521319.tif 000156
【０３６９】
化合物Ｉ３６−ｂ：シリンジを介してアゾジカルボン酸ジイソプロピル（２９μＬ）を、化合物Ｉ３−ａ（７０ｍｇ、０．０９８ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド（２５ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、１．５当量）、およびトリフェニルホスフィン（３９ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、１．５当量）のＴＨＦ（ＡＣＳグレード、１ｍＬ）中溶液に氷浴内で滴下添加した。この反応物を終夜室温まで温めた。出発材料はほとんど消費された。この混合物を真空中で濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することによって、所望の生成物を得た（７１ｍｇ、８４％）。ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚは、［Ｍ−ＯＢｚ］＋および［Ｍ＋Ｈ］＋と一致した（それぞれ７３６および８５８）。
【０３７０】
化合物Ｉ３６−ｂｂ：化合物Ｉ３６−ｂ（７０ｍｇ、０．０８２ｍｍｏｌ）をボルテックスによって、５００μＬのヒドラジン：ピリジン：酢酸（１：３２：１６、体積／体積）溶液と混合した。およそ１０分後、反応を１０ｍＬの水でクエンチし、これにより、当初白色の混濁物がもたらされたが、次にすべての混濁物は溶解した。この反応物を３ｍＬのジクロロメタンで３回抽出した。合わせた粗製の有機相を質量スペクトル（ｍａｓｓ  ｓｐｅｃ）（エレクトロスプレー）で分析した：正確な質量：７２７．２８、観察された質量：６０６［Ｍ−ＯＢｚ］＋；７２８［Ｍ＋Ｈ］＋；１４５６［２Ｍ＋Ｈ］＋。ｔｅｒｔ−ブチルＮ−ヒドロキシカルバメート（ＢｏｃＮ−ＯＨ）を使用する代替法でも、極めて小規模の試験を行い、質量スペクトルで確認されたような所望の生成物をもたらした。
【０３７１】
化合物Ｉ５−ａａ：メタノール溶液中の２％ヨウ素を使用して、Ｉ２−ａからＩ８−ａへの変換について記載されているように、化合物Ｉ５−ａａを調製した。粗生成物は、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製するか、または十分に純粋な場合（＞９０％）には次の反応に直接使用することができる。
【０３７２】
化合物ｐ３−４ａ：化合物Ｉ５−ａａ（約５０ｍｇ）を１０ｍＬ反応バイアルに加え、続いてＭｅＯＨ溶液中１％ＮａＯＨを加えた。この反応混合物を室温で撹拌し、反応の進行をＴＬＣでチェックした（ＵＶおよびＰＭＡ炭化）。完了後、ＭｅＯＨを真空中で除去した。ＤＣＭを残渣固体に加えた。数分間混合後、ＤＣＭ層を真空中で乾燥させることによって、生成物を得た。ＤＣＭ層がいくらかの安息香酸を含有した場合、残渣を再び水に溶解し、希ＨＣｌを使用してｐＨ２〜３に酸性化した。水溶液をＤＣＭで抽出することによって、残留する安息香酸を除去した。希ＮａＯＨを使用して水溶液をｐＨ８〜１０に調節した。水溶液をＤＣＭで３回抽出した。ＤＣＭ層を合わせ、乾燥させることによって、生成物を得た。生成物の本質を質量スペクトルでチェックし、その構造を１Ｈ−ＮＭＲで確認した。
【０３７３】
化合物Ｉ５−ｂ：ヨウ素のメタノール（４ｍＬ）中２％溶液を、化合物Ｉ４−ｂａ（２５２ｍｇ、０．５１５ｍｍｏｌ）のメタノール（２ｍＬ）中溶液に加えた。この反応物を室温で終夜撹拌した。３％水性チオ硫酸ナトリウムを茶色の色が消えるまで滴下添加することによって、反応をクエンチした。この混合物を真空中で濃縮し、水（約２０ｍＬ）に溶解し、２０ｍＬのジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで終夜乾燥させ、濾過し、濃縮し、真空下で乾燥させることによって、生成物を得た（１７６ｍｇ、９１％）。これをさらなる精製なしで次の反応に使用した。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝３：２、ＰＭＡによる炭化）：Ｒｆ＝０．４７。ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚは、［Ｍ＋Ｈ］＋、３７６；［Ｍ＋Ｎａ］＋、３９８；および［２Ｍ＋Ｎａ］＋、７７３と一致した。
【０３７４】
（実施例１０）
ホモ二官能性ＳＡ架橋試薬ｐ６−４ａａの合成。
【０３７５】
【化１５４】
2014521319.tif 000157
【０３７６】
化合物Ｉ９−ａ：シリンジを介して、ＤＩＡＤ（４９μＬ、３．０当量）のＴＨＦ（０．１ｍＬ）中溶液を、氷浴内、窒素下で、化合物ｋ（４９．５ｍｇ、０．０８３ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド（４０．５ｍｇ、３．０当量）、およびトリフェニルホスフィン（６５ｍｇ、３．０当量）のＴＨＦ（０．８ｍＬ）中溶液にゆっくりと加えた。溶液は急速に明るいオレンジ色に変わった。およそ３０分後、この反応混合物を室温まで温めておくと、オレンジ色が消えた。反応物を終夜撹拌した。揮発物を真空中で除去し、残渣をシリカゲルカラムで精製することによって、許容される純度（約８５％）で生成物を得た（３１ｍｇ、４２％）。ＨＰＬＣ（ＴＦＡ０５法、２２０ｎｍでのＵＶ吸光度により検出）保持時間＝９．２０分。質量スペクトル分析（エレクトロスプレー）：正確な質量：８８８．２２Ｄａ、得た質量：７６６［Ｍ−ＯＢｚ］＋；９１１［Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０３７７】
化合物ｐ６−４ａａ：フタルイミド保護基およびＢｚ基を除去し、実施例９に記載のプロトコルに従い生成物を精製することによって、化合物ｐ６−４ａａを得た。
【０３７８】
（実施例１１）
ホモ二官能性ＳＡ架橋試薬ｐ６−４ｂｂの合成
【０３７９】
【化１５５】
2014521319.tif 000158
【０３８０】
化合物Ｉ９−ｂｂ：実施例６のモノアジド化合物３７−ｂについて記載されているものと同じプロトコルに従い、ジアジド化合物Ｉ９−ｂｂを保護されたジ−ヒドロキシルマンニトール（Ｉ８−ｂ）から変換した。この化合物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。生成物の本質を質量スペクトルでチェックし、その構造を１Ｈ−ＮＭＲで確認した。純度を、炭化（ＰＭＡ）を用いてＴＬＣでチェックした。
【０３８１】
化合物Ｉ９−ｂｃ：実施例６のモノアミン化合物３８−ｂについて記載されているものと同じプロトコルに従い、ジアミン化合物Ｉ９−ｂｃをジアジド化合物Ｉ９−ｂｂから変換した。この化合物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。生成物の本質を質量スペクトルでチェックし、その構造を１Ｈ−ＮＭＲで確認した。純度を、炭化（ＰＭＡ）を用いてＴＬＣでチェックした。
【０３８２】
化合物ｐ６−４ｊ：実施例６のＩ５−ｂｂからの化合物ｐ３−４ｊについて記載されているものと同じプロトコルに従い、ジアミン化合物Ｉ９−ｂｃのアセテート基の脱保護を実施した。脱保護完了後、この混合物を直接使用して次のステップを実行した。
【０３８３】
化合物ｐ６−４ｂｂ：実施例７の単官能性マレイミド化合物ｐ３−４ｂについて記載されているものと同じプロトコルに従い、ホモ二官能性マレイミド化合物ｐ６−４ｂｂをｐ６−４ｊから合成した。この化合物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。生成物の本質を質量スペクトルでチェックし、その構造を１Ｈ−ＮＭＲで確認した。純度をＴＬＣまたはＨＰＬＣでチェックした。
【０３８４】
（実施例１２）
ＳＡ架橋試薬ｐ６−４ｆｆの合成
【０３８５】
化合物ｐ６−４ｆｆ：実施例６の単官能性マレイミド化合物ｐ３−４ｆについて記載されているものと同じプロトコルに従い、ホモ二官能性マレイミド化合物ｐ６−４ｆｆをｐ６−４ｊから合成した。この化合物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。生成物の本質を質量スペクトルでチェックし、その構造を１Ｈ−ＮＭＲで確認した。純度をＴＬＣまたはＨＰＬＣでチェックした。
【０３８６】
（実施例１３）
ＳＡ架橋試薬ｐ６−４４４の合成
【０３８７】
化合物ｐ６−４ｅｅ：実施例８の単官能性マレイミド化合物ｐ３−４ｅについて記載されているものと同じプロトコルに従い、ホモ二官能性マレイミド化合物ｐ６−４ｅｅをｐ６−４ｊから合成した。この化合物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。生成物の本質を質量スペクトルでチェックし、その構造を１Ｈ−ＮＭＲで確認した。純度をＴＬＣまたはＨＰＬＣでチェックした。
【０３８８】
（実施例１４）
ヘテロ二官能性トレイトール（ｔｈｒｉｅｔｏｌ）架橋試薬ｐ２−２ａｂの合成
【０３８９】
【化１５６】
2014521319.tif 000159
【０３９０】
化合物Ｉ４−ｄａ：シリンジを介して、塩化メタンスルホニル（７５μＬ）を、化合物Ｉ３−ｄ（１９５ｍｇ、０．７７３ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（３００μＬ、２．８当量）のジクロロメタン（２ｍＬ）中撹拌溶液に氷浴内で滴下添加した。この反応物を氷浴内で１時間撹拌し、次いで２Ｍの水性ＮＨ４Ｃｌ（約２ｍＬ）でクエンチした。有機相を分離し、２Ｍの水性ＮＨ４Ｃｌ（約２ｍＬ）で再び洗浄した。合わせた水層を３ｍＬのジクロロメタンで３回逆抽出した。合わせた有機相を２ｍＬのブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮することによって、さらなる精製なしで粗生成物を得た（定量的収率と想定される）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝２：３、２５４ｎｍＵＶまたはＰＭＡ炭化で視覚化）：Ｒｆ＝０．４６。
【０３９１】
化合物Ｉ４−ｄｂ：シリンジを介して、窒素下、氷浴内で、化合物Ｉ４−ｄａ（２５５ｍｇ、０．７７３ｍｍｏｌ）のジエチルエーテル（１ｍＬ）中溶液を、ＤＢＵ（１７５μＬ、化合物Ｉ４−ｄａに対して１．５当量）およびＮ−Ｂｏｃ−ヒドロキシルアミン（１４５ｍｇ、１．４当量）のジエチルエーテル（１ｍＬ）中撹拌溶液に加えた。この反応混合物を室温で３日間撹拌した。ゆっくりとした変換が観察されたが、この反応プロファイルは正当だった。エーテルを蒸発させ、この反応混合物をアセトニトリル（２ｍＬ）に再溶解し、終夜加熱還流した。より迅速な変換が観察されたが、反応プロファイルはかなりより複雑になった。この反応混合物を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィーを介して精製することによって、生成物を得た（４８ｍｇ、２つのステップにわたり１７％）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝２：３、２５４ｎｍＵＶまたはＣＡＭ炭化で視覚化）：Ｒｆ＝０．７５。質量スペクトル分析（エレクトロスプレー）：正確な質量：３６７．２０Ｄａ、観察された質量：３６８［Ｍ＋Ｈ］＋；３９０［Ｍ＋Ｎａ］＋；７５７［２Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０３９２】
化合物Ｉ５−ｄａ：撹拌棒を備えた１０ｍＬナシ型フラスコに１００ｍｇの１０％パラジウム炭素を充填し、次いで窒素で２回パージした。化合物Ｉ４−ｄｂ（４０ｍｇ、０．１０９ｍｍｏｌ）および１，４−シクロヘキサジエン（２００μＬ、およそ２０当量）の１：１ＴＨＦ／ＭｅＯＨ（１ｍＬ）中溶液を、シリンジを介して加えた。この混合物を室温で撹拌した。ゆっくりとした変換が観察され、追加の、過剰な１，４−シクロヘキサジエンを周期的に加えた。１日撹拌後、反応は完了しなかった。したがって、ギ酸（５０μＬ）を代替の水素転移試薬として使用した。２日間の撹拌後、反応は完了した。セライトパッドを介してこの混合物を慎重に濾過し、濃縮することによって、生成物を得た（２５ｍｇ、８３％）。これを、次のステップにさらなる精製なしで使用した。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝２：３、ＣＡＭ炭化により視覚化）：Ｒｆ＝０．２２。質量スペクトル分析（エレクトロスプレー）：正確な質量：２７７．１５Ｄａ、観察された質量：２７８［Ｍ＋Ｈ］＋；３００［Ｍ＋Ｎａ］＋；５５５［２Ｍ＋Ｈ］＋；５７７［２Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０３９３】
化合物Ｉ６−ｄａ：実施例６の化合物Ｉ３７−ｂについて記載されているものと同じプロトコルに従い、Ｉ５−ｄａ中の一級ＯＨ基をアジドに変換した。その化合物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。生成物の本質を質量スペクトルでチェックし、その構造を１Ｈ−ＮＭＲで確認した。純度を、炭化（ＰＭＡ）を用いてＴＬＣでチェックした。
【０３９４】
化合物Ｉ６−ｄｂ：実施例６の化合物Ｉ３８−ｂについて記載されているものと同じプロトコルに従い、Ｉ６−ｄａ中のアジド基をアミンに還元した。その化合物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。生成物の本質を質量スペクトルでチェックし、その構造を１Ｈ−ＮＭＲで確認した。純度を、炭化（ＰＭＡ）を用いてＴＬＣでチェックした。
【０３９５】
化合物ｐ１−２ａｊ：文献の手順に従い、アセトニド（イソプロピリデンケタール）保護基およびＢｏｃを同時に脱保護した（Ｌｅｂｌａｎｃ，  Ｙ．  ら、Ｊ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．１９８６年、５１巻、７８９頁）。トリフルオロ酢酸（０．２Ｍ）を、０℃で、化合物Ｉ６−ｄｂの４：１ＴＨＦ／水中撹拌溶液に加えた。生成した溶液を室温まで温め、終夜放置した。濃水酸化アンモニウムの添加により反応物を中和し、減圧下でＴＨＦを除去することによって、生成物を得た。
【０３９６】
化合物ｐ１−２ａｂ：実施例７の化合物ｐ３−４ｂについて記載されているものと同じプロトコルに従い、ｐ１−２ａｊのアミン基を３−マレイミドプロピオン酸のＮＨＳエステルにカップリングした。その化合物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。生成物の本質を質量スペクトルでチェックし、その構造を１Ｈ−ＮＭＲで確認した。純度を、ＴＬＣまたはＨＰＬＣでチェックした。
【０３９７】
【化１５７】
2014521319.tif 000160
【０３９８】
（実施例１５）
ヘテロ二官能性トレイトール架橋試薬ｐ２−２ａｂの合成。
【０３９９】
化合物Ｉ５−ｂ：ヨウ素のメタノール（４ｍＬ）中２％溶液を、化合物Ｉ３７−ｂ（２５２ｍｇ、０．５１５ｍｍｏｌ）のメタノール（２ｍＬ）中溶液に加えた。この反応物を室温で終夜撹拌した。３％水性チオ硫酸ナトリウムを茶色の色が消えるまで滴下添加することによって、反応をクエンチした。この混合物を真空中で濃縮し、水（約２０ｍＬ）に溶解し、２０ｍＬのジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで終夜乾燥させ、濾過し、濃縮し、真空下で乾燥させることによって、生成物を得た（１７６ｍｇ、９１％）。これをさらなる精製なしで次の反応に使用した。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝３：２、ＰＭＡによる炭化）：Ｒｆ＝０．４７。質量スペクトル分析（エレクトロスプレー）：正確な質量：３７５．１３Ｄａ、得た質量：３７６［Ｍ＋Ｈ］＋；３９８［Ｍ＋Ｎａ］＋；７７３［２Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０４００】
化合物Ｉ５−ｂｂおよびＩ５−ｂｃ：実施例１１の化合物Ｉ４−ｄｂについて記載されているものと同じプロトコルに従い、Ｉ５−ｂのＯＨ基をＢＯＣ保護したアミノオキシに変換した。その化合物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。生成物の本質を質量スペクトルでチェックし、その構造を１Ｈ−ＮＭＲで確認した。純度を、ＴＬＣまたはＨＰＬＣでチェックした。
【０４０１】
化合物ｐ１−４ａｊ：実施例６の化合物ｐ３−４ｊについて記載されているプロトコルに従い、Ｉ５−ｂｃのアセテートをＫ２ＣＯ３溶液中で脱保護した。脱保護後、溶液を中和し、ＤＣＭで抽出した。ＤＣＭ層を真空中で蒸発させ、シリカゲルクロマトグラフィーで精製することによって、化合物ｏ１−ａを得た。化合物ｐ１−２ａｊについて記載されているプロトコルに従いｏ１−ａのＢｏｃを脱保護した。溶媒の蒸発後、純粋な生成物を得た。生成物の本質を質量スペクトルでチェックし、その構造を１Ｈ−ＮＭＲで確認した。純度を、ＴＬＣまたはＨＰＬＣでチェックした。
【０４０２】
（実施例１６）
Ｂｒ−置換ＳＡの合成。
【０４０３】
【化１５８】
2014521319.tif 000161
【０４０４】
化合物１４−ａｄ：四臭化炭素（３００ｍｇ、「約６％までの水を含有し得る」およそ１．０５当量）の１ｍＬのジクロロメタン中溶液を、化合物Ｉ３−ａ（５０５ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３ｍＬ）中溶液に、氷浴内で加えた。トリフェニルホスフィン（２７５ｍｇ、１．２５当量）の１ｍＬのジクロロメタン中溶液を加えた。この反応物を氷浴内でおよそ２時間撹拌し、次いで室温まで温め、終夜撹拌した。ＴＬＣは、微量の出発材料が残留することを示したが、その反応プロファイルはむしろ正当でなかった（ｄｉｒｔｙ）。この反応混合物を真空中で濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することによって、生成物を得た（２０９ｍｇ、３７％）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝１：１、ＵＶ２５４ｎｍで視覚化）：Ｒｆ＝０．８２。このＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚは、以下と一致した：［Ｍ−ＯＢｚ］＋、５３９、５４１；［Ｍ−Ｂｒ］＋、５８１；［Ｍ−ＯＨ］＋、６４３、６４５；［Ｍ＋Ｈ］＋、６６１、６６３；［Ｍ＋Ｎａ］＋、６８３および６８５；および［２Ｍ＋Ｎａ］＋、１３４４、１３４６、および１３４８。
【０４０５】
（実施例１７）
ＯＨ基のアルキル化。
【０４０６】
【化１５９】
2014521319.tif 000162
【０４０７】
化合物Ｏ１−ａ：ヨウ化メチル（１．３ｍＬ）を、出発材料、Ｉ１−ｂ（１００ｍｇ）、酸化銀（Ｉ）（１．９７ｇ）、および粉砕した４Ａ  ＭＳ（５００ｍｇ）のジエチルエーテル（５ｍＬ）中撹拌混合物に加えた。この反応物を８時間加熱還流させ、次いで室温に冷却し、２日間撹拌した。ＴＬＣは変換の完了を示し、ＥＳＩ−ＭＳデータは、所期の生成物：４６７［Ｍ＋Ｈ］＋、４８９［Ｍ＋Ｎａ］＋、９５６［２Ｍ＋Ｎａ］＋の形成を示唆した。注意：この反応の中で、出発材料はマンニトールのシリル化反応の副生成物であった（スキーム１２）。Ｉ１−ｂは、同じ質量スペクトルデータを有するが、ＴＢＤＭＳのうちの１つがマンニトールの二級ＯＨ基にカップリングしているためＲｆ値がより低いので、Ｉ１−ａの局所性異性体である。
【０４０８】
（実施例１８）
トレイトールの二量体化および四量体化。
【０４０９】
【化１６０】
2014521319.tif 000163
【０４１０】
化合物Ｉ１７−ａ：０．１２２３ｇ（０．４８５ｍｍｏｌ、１当量）のＩ３−ｄを、２．１ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２に、０．０７５ｍＬ（０．５３８ｍｍｏｌ、１．１１当量）のトリエチルアミンと共に溶解し、−７８℃に冷却した。次に、０．０８０ｍＬ（０．４７５ｍｍｏｌ、０．９８当量）のトリフルオロメタンスルホン酸無水物を加え、この混合物を−７８℃で３０分間撹拌した。次いで使用前に７分間の期間０℃に温めた。別の反応フラスコ内に、０．０３３８ｇ（０．８４５ｍｍｏｌ、１．７当量）のＮａＨを油中６０重量％の分散液として、０℃で、３ｍＬのＤＭＦに懸濁させた。次に、２ｍＬのＤＭＦに溶解した０．１２８８ｇ（０．５１０ｍｍｏｌ、１．０５当量）のＩ３−ｄを、その懸濁液に加えた。生成した混合物を０℃で２０分間撹拌した。この期間の終わりに、「トリフレート（ｔｒｉｆｌａｔｅ）」溶液を「アルコキシド」混合物にゆっくりと加え、その反応物を室温に温めた。０．２００ｍＬの水の添加によりこの反応をクエンチした。大部分のＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２を減圧下で蒸発により除去した。生成した油を５ｍＬの水に溶解し、１５ｍＬの酢酸エチルで３回抽出した。有機抽出物を合わせ、５ｍＬのブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣のＨＰＬＣ分析は、４．４９６および８．２６２分で、ほとんど等しい面積の２つのピークを示した。ＴＬＣ分析（シリカ上２５：７５酢酸エチル：ヘキサン、ＣＡＭ染色）は、Ｒｆ＝０．３０を有する生成物およびＲｆ＝０．１５を有する少量の出発材料を示した。生成した残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することによって、０．０５６４ｇの所望の生成物を得た（０．１１６ｍｍｏｌ、２３．９％収率）。質量スペクトル（ターボスプレー）：期待ｍ／ｚ４８７．３［Ｍ＋Ｈ］、実測ｍ／ｚ４８７．５；期待ｍ／ｚ５０９．３［Ｍ＋Ｎａ］、実測ｍ／ｚ５０９．５；および期待ｍ／ｚ９９５．６［２Ｍ＋Ｎａ］、実測ｍ／ｚ９９５．６。精製後、ＨＰＬＣ分析は、８．１５５分において単一のピークを示した。
【０４１１】
別の実験において、ＤＭＦの代わりにＴＨＦ溶媒を使用した。より低い収率１３％を得た。
【０４１２】
化合物Ｉ１８−ａ：０．０５０ｇ（０．１２ｍｍｏｌ、１当量）のＩ１７−ａを２ｍＬのメタノールおよび２ｍＬのＴＨＦに溶解した。その溶液を窒素で１５分間パージすることによって、溶解した気体を除去し、続いて０．１０５ｇのＰｄ／Ｃ１０％重量／重量を添加した。この系を密閉し、窒素ガスでパージした。次に、０．１００ｍＬ（１．０６ｍｍｏｌ、８．８当量）の１，４−シクロヘキサジエンを室温で加えた。この混合物を撹拌し、反応の進行をＴＬＣでモニターした。１時間後、追加の０．１００ｍＬ（１．０６ｍｍｏｌ、８．８当量）の１，４−シクロヘキサジエンを加えた。２時間後、追加の０．１００ｍＬ（１．０６ｍｍｏｌ、８．８当量）の１，４−シクロヘキサジエンを加えた。３時間後、追加の０．４００ｍＬ（４．２４ｍｍｏｌ、３５．３当量）の１，４−シクロヘキサジエンを加え、反応物を終夜撹拌した。ＴＬＣは、出発材料の消費およびＲｆ＝０．３０を有する生成物の存在を示した（シリカ上４０：６０酢酸エチル：ヘキサン）。この反応混合物を、セライト５４５パッドを通して濾過することによって、Ｐｄ／Ｃを除去し、続いて、１ｍＬのＭｅＯＨおよび０．７５ｍＬの水を添加することによって、該セライトを通る生成物の移動を促進させた。減圧下での蒸発によりＴＨＦおよびＭｅＯＨを除去し、凍結乾燥により水を除去した。全部で０．０３６５ｇ（０．０９２ｍｍｏｌ、８９％収率）の材料を得た。質量スペクトル（ターボスプレー）：期待ｍ／ｚ３９７．２［Ｍ＋Ｈ］、実測ｍ／ｚ３９７．５；期待ｍ／ｚ４１９．２［Ｍ＋Ｎａ］、実測ｍ／ｚ４１９．５；および期待ｍ／ｚ８１５．４［２Ｍ＋Ｎａ］、実測ｍ／ｚ８１５．８。両方のベンジル保護基が除去されている物質に一致するシグナルもまた存在した：期待ｍ／ｚ３０７．２［Ｍ＋Ｈ］、実測ｍ／ｚ３０７．４；期待ｍ／ｚ４１９．２［Ｍ＋Ｈ］、実測ｍ／ｚ４１９．５。ＨＰＬＣは、５．６２７分において主な生成物ピークを示した。この材料はさらなる精製なしで次のステップで使用した。
【０４１３】
化合物Ｉ２１−ａ：ダイマーＩ１７−８からの化合物Ｉ１７−ａについて記載されているものと同じプロトコルに従いテトラマーを調製した。その化合物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。生成物の本質を質量スペクトルでチェックし、その構造を１Ｈ−ＮＭＲで確認した。純度を、ＴＬＣまたはＨＰＬＣでチェックした。
【０４１４】
（実施例１９）
単一ＭＷのＳＡ高分子（＞２０ＫＤａ）架橋試薬の合成
【化１６１】
2014521319.tif 000164
【０４１５】
化合物Ｉ３−ｅ：Ｉ８−ｄからの化合物Ｉ５−ｄ（実施例５）について記載されているものと同じプロトコルに従い調製したＩ２−ｂのベンジル化により化合物Ｉ３−ｅを調製した。その化合物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。生成物の本質を質量スペクトルでチェックし、その構造を１Ｈ−ＮＭＲで確認した。純度を、ＴＬＣまたはＨＰＬＣでチェックした。
【０４１６】
化合物ｐ３＿４ａ−１２８：Ｉ１７−ａと同様のプロトコルに従いダイマーＩ１７−４ａを調製した。Ｉ３−ｅをトリフルオロメタンスルホン酸無水物と最初に反応させることによってトリフレートを形成した。他の良好な脱離基、例えば、メシレートもここで使用することができる。次に、塩基、例えば、ＮａＨ、リチウムビス（トリメチルシリル）アミド、またはカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドの存在下、ＴＨＦの存在下で、トリフレートを別のＩ３−ｅと反応させた。幾つかの場合では、ＤＭＦを使用することもできる。カップリング後、生成物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、ＨＰＬＣおよび質量スペクトルで分析した。ＭｅＯＨ中１％Ｉ２を使用して、Ｉ３−ａと同じプロトコルに従い、ダイマーＩ１７−４のＴＢＤＭＳ基のうちの１つを脱保護した。生成したダイマーを、トリフルオロメタンスルホン酸無水物で活性化し、塩基の存在下で、別のダイマーと反応させることによって、テトラマーＩ１７−４ｂを形成した。ＴＢＤＭＳ基のうちの１つをヨウ素脱保護した後、生成した材料が、自己カップリングおよびヨウ素脱保護のサイクルを５回繰り返すことによって、１２８のＳＡ単位を有する、１つの部位が保護された（ｍｏｎｏ−ｐｒｏｔｅｃｔｅｄ）糖アルコール（Ｉ３−ｅｂ）を得た。実施例１１のＩ４−ｄｂに記載されているものと同じプロトコルに従い、Ｉ３−ｅｂの一級ＯＨをアミノオキシに変換した。最終生成物を最初に脱ベンジル化し、次いでヨウ素を使用してＴＢＤＭＳ基を除去し、最後に、本特許において先に記述された手順に従いＴＦＡがＢｏｃを除去した。最終結果は、アミノオキシが２０ＫＤａのＳＡ化合物全体にわたって誘導体化され、該アミノオキシを介するコンジュゲーションが利用可能となった。
【０４１７】
（実施例２０）
アミド結合により結合しているより大きいＭＷのＳＡを合成するための他のモノマーの調製
【０４１８】
Ｄ−グルカミンのＦｍｏｃ保護：Ｄ−グルカミン（１．０２ｇ、５．５２ｍｍｏｌ）、Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ（１．９９ｇ、１．０５当量）、および炭酸カリウム（０．７８ｇ、１当量）をＤＭＦ（４０ｍＬ）に懸濁させた。水（４０ｍＬ）を少量ずつ加えると、熱を生成した。この反応混合物は短時間で澄明になり、次いで沈殿物の形成が開始された。終夜撹拌後、この反応混合物を７５０ｍＬの水に注ぎ入れた。沈殿物を吸引濾過で収集し、凍結乾燥により乾燥させることによって、黄色の固体を得た（１．７５ｇ）。ＨＰＬＣピーク面積によると、このうちのおよそ４０％が所望の物質であった。ＨＰＬＣ（ＴＦＡ０５法、２２０ｎｍのＵＶ吸光度により検出）保持時間＝５．１０分。ＵＶスペクトルはＦｍｏｃ部分に特徴的なものであった。ＨＰＬＣから収集したＥＳＩ−ＭＳの画分：ｍ／ｚは、［Ｍ＋Ｈ］＋、４０４；［Ｍ＋Ｎａ］＋、４２６と一致した。
【０４１９】
Ｄ−グルコサミン酸のＦｍｏｃ保護：水（５ｍＬ）を、Ｄ−グルコサミン酸（１０１．３ｍｇ、０．５１９ｍｍｏｌ）、Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ（１９２ｍｇ、１．１当量）、および炭酸水素カリウム（１４４ｍｇ、２当量）のＤＭＦ（５ｍＬ）中撹拌懸濁液に加えた。熱が生成した。音波処理およびさらなるＤＭＦ（１ｍＬ）の添加後、この混合物は短時間で澄明になり、その後白色の濁りが形成された。この反応物を室温で４時間撹拌した。０．５Ｎ  ＨＣｌの添加によりこの混合物をｐＨ８に調節し、次いで真空中で濃縮した。残渣を水（約４０ｍＬ）に溶解し、１５ｍＬの酢酸エチルで３回抽出した。０．５Ｎ  ＨＣｌの添加により、水層をｐＨ２．５に調節し、３０ｍＬの酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮することによって、所望の生成物を得た（１０５ｍｇ、４８％）。ＨＰＬＣ（ＴＦＡ０５法、２２０ｎｍのＵＶ吸光度により検出）保持時間＝５．０６分。ＵＶスペクトルは、Ｆｍｏｃ部分に特徴的なものであった。ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚは、［Ｍ−ＯＨ］＋、４００；［Ｍ＋Ｈ］＋、４１８；［Ｍ＋Ｎａ］＋、４４０に一致した。
【０４２０】
上記のＦｍｏｃ保護した糖アルコールのアミノ酸の遊離ＯＨ基を、酢酸エステルまたはｔブチルエステルとして保護する。最終モノマーを使用し、標準的Ｆｍｏｃペプチド固相合成ストラテジーを使用して、アミド結合により結合しているＳＡ高分子を組み立てる。
【０４２１】
コンジュゲーションの例：
【０４２２】
実施例２１〜２６は、糖アルコール架橋剤を使用して他の分子を結合体化するまたは改変するための一般的な方法およびプロトコルを図示している。他の架橋剤を超える糖アルコール架橋剤の利点は、これらの実施例において明らかである。これは、糖アルコール架橋剤が非常に親水性であるため、上記反応に対して必要とされる有機溶媒が少なくてすむか、またはまったく要らないからである。特に抗体薬物コンジュゲートの場合、糖アルコール結合は、薬物の疎水性を大いに低下させ、改変後、水性緩衝液においてこれを抗体と反応させることを容易にする。凝集が少なく、より安定した抗体薬物コンジュゲートを予測することもできる。
【０４２３】
（実施例２１）
抗体薬物コンジュゲートの合成。
【０４２４】
抗体を毒素に結合体化するための標準的方法は、マレイミド−ＮＨＳ架橋剤を介する（抗体薬物コンジュゲート領域において最も公開されている方法による）。抗体のヒンジ領域内のジスルフィド結合は、選択的に還元させることによって、スルフヒドリル基を含有する半抗体を生成することができる。次いでこれをマレイミド改変した毒素と反応させる。抗体はまた、表面アミンでチオール化することによって、スルフヒドリル基を生成することができ、次いでこれをマレイミド改変された毒素と反応させることができる。２番目に一般的な方法は、ＮＨＳエステルカップリングが関与する。例えば、毒素が遊離酸を有する場合、ＮＨＳエステル活性化法（単純化されたプロセス）を介して、これを抗体の表面アミンにカップリングすることができる。
【０４２５】
ＣＤ３３抗体−ドキソルビシン：市販のＣＤ３３抗体およびドキソルビシンを使用することによって、マンニトールベースの架橋試薬を使用して抗体薬物コンジュゲートを合成することについての実現可能性を実証する。方法ａでは、上記抗体をヒンジ領域で還元することによって、２つの半抗体分子を生成し、マレイミドマンニトールアミノオキシ架橋試薬を介して、これらをマレイミド活性化ドキソルビシンと反応させる。方法ｂでは、ドキソルビシンをカルボン酸マンニトールアミノオキシと反応させ、次いでＥＤＣを介して抗体の表面アミンと反応させる。コンジュゲーション後、この反応混合物を透析または脱塩することによって、結合体化していない薬物を除去する。分取疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ）精製を介して、結合体化していない（遊離の）抗体を除去する。抗体に充填された薬物分子の数（抗体−薬物比）を、ＨＩＣカラムを使用するＨＰＬＣ分析で求める。マトリクス支援レーザー脱離／イオン化（ＭＡＬＤＩ）またはエレクトロスプレー質量分析法で抗体−薬物のＭＷを分析する。標識の正確な位置を抗体のトリプシン消化で求め、ＬＣ／ＭＳ−ＭＳ／ＭＳで分析する。凝集のパーセンテージをゲル濾過クロマトグラフィーで求める。
【０４２６】
（実施例２２）
単一の純粋なＳＡ高分子およびタンパク質コンジュゲートの合成。
【０４２７】
この実施例は、ヒト顆粒球−コロニー刺激因子（ｒｈＧ−ＣＳＦ）のテトラマンニトール標識を図示している。組換えｒｈＧ−ＣＳＦを文献に従い調製する（Ｓｏｕｚａ，  ＬＭら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、１９８６年、２３２巻、６１〜６５頁）。末端アミンを介して単一標識化ｒｈＧ−ＣＳＦを調製するための典型的なプロトコルが図示されている。ｒｈＧ−ＣＳＦのリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．５）中溶液（５ｍｇ／ｍＬ）を、４℃でマンニトールカルボキシメチル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル（ｍａｎｎｉｔｏｌ  ｃａｒｂｏｘｙｍｅｔｈｙｌ−Ｎ−ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｙ  ｅｓｔｅｒ）（１８当量）を含有するバイアルに加える。ＳＡ分子を溶解した後、この反応物を２２℃で１時間撹拌する。ヒドロキシルアミン（２Ｍ、ｐＨ７．３）をこの反応混合物に加えることによって、ｒｈＧ−ＣＳＦの任意の不安定なＳＡ標識部位を切断する。１時間後、この反応混合物を１ｍＭ  ＨＣｌで希釈し、１Ｍ  ＨＣｌでｐＨを３．５に調節する。ｒｈＧ−ＣＳＦ−ＳＡを陽イオン交換クロマトグラフィーで精製する。ＳＡ標識部位をエンドプロテイナーゼペプチドマッピングにより求める。インタクトなｒｈＧ−ＣＳＦ−ＳＡのＭＷをＭＡＬＤＩで求める。
【０４２８】
（実施例２３）
ＳＡ高分子に高充填された治療剤の合成。
【０４２９】
ドキソルビシンは、アミノオキシ含有ＳＡ高分子と容易に反応するケトン基を有する。複数のコピーのアミノオキシを含有するＳＡ高分子は、ドキソルビシンと反応することによって、高充填された薬物を生成する。二級ＯＨ基の代わりにアミノオキシを含有するテトラマンニトールは、ドキソルビシンと反応し、高充填された治療剤を生成する。
【０４３０】
（実施例２４）
単一の純粋なＳＡ高分子とオリゴのコンジュゲートの合成。
【０４３１】
ＳＡ高分子（＞２０ＫＤａ）は、以下の手順を使用して、オリゴに容易に結合することができる。５’または３’末端改変されたアミンオリゴを、リン酸ナトリウム緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ８．０〜９．０）に１０〜２０ｍＭの濃度で溶解する。単一のＮＨＳエステルを保持するＳＡ高分子をそのオリゴ溶液に直接加えると、１〜２ｍＭの範囲のＳＡ高分子の最終濃度となる。バイアルを、３７℃で数時間の間振盪機内に置く。反応の進行は、サイズ排除ＨＰＬＣ、陰イオン交換、または逆相Ｃ１８クロマトグラフィーによりチェックすることができる。上記オリゴの大きさに応じて、この反応混合物を、ゲル濾過（Ｓｕｐｅｒｄｅｘ（商標）２００）または限外濾過法を使用して脱塩することによって、未反応のオリゴを除去することができる。上記オリゴおよびＳＡのＭＷが極めて近接している場合、上記オリゴとＳＡを１：１比で一緒に混合し、生成物を陰イオン交換クロマトグラフィーで精製するべきである。５’または３’チオール改変されたオリゴもまた、標準的なプロトコルに従い、末端に単一のマレイミド基を保持するＳＡ高分子（＞２０ＫＤａ）に結合体化する。生成物の本質をＭＡＬＤＩ−ＭＳでチェックする。ゲル電気泳動を使用することによって、その反応物を分析する。糖アルコールはＵＶ吸光度を有さないので、特別な検出器、例えば、パルス化電気化学的検出器（ＰＡＤ）、屈折率検出器、または光散乱検出器が必要とされることもあることに注意されたい。他の方法は、ＴＬＣにおいて試料をスポットすることおよびＣＡＭまたはＰＭＡ試薬によって炭化することである。
【０４３２】
（実施例２５）
単一の純粋なＳＡ高分子とペプチドのコンジュゲートの合成。
【０４３３】
ＳＡ高分子（＞２０ＫＤａ）は、以下の手順を使用してチオールペプチドに容易に結合することができる。単一のマレイミド基を保持するＳＡ高分子を、リン酸ナトリウム緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ６．０）中の５〜１０当量のチオールペプチドと混合し、室温で混合する。反応の進行をサイズ排除ＨＰＬＣ、陰イオン交換、陽イオン交換、または逆相Ｃ１８クロマトグラフィーでチェックする。上記オリゴの大きさに応じて、この反応混合物を、ゲル濾過（Ｓｕｐｅｒｄｅｘ（商標）２００）または限外濾過法を使用して脱塩することによって、未反応のペプチドを除去する。上記オリゴおよびＳＡのＭＷが極めて近接している場合、上記ペプチドとＳＡを１：１比で一緒に混合し、生成物を陰イオンまたは陽イオン交換クロマトグラフィーで精製するべきである。他のペプチド、例えば、ケトペプチドも合成し、アミノオキシ基を保持するＳＡ高分子（＞２０ＫＤａ）と酸性条件（普通ＭｅＯＨ中酢酸）下で反応させることによって、ＳＡ−ペプチドコンジュゲートを得る。
【０４３４】
（実施例２６）
糖アルコールヘテロ二官能性架橋剤を使用したＨＲＰ−オリゴの合成
【０４３５】
５’または３’改変されたアミンオリゴを、一方の末端にＮＨＳ−エステルを有し、他方の末端に２−ピリジルジチオールを有する、リン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ＞８．０）中糖アルコール（ＭＷ＜５００Ｄａ）と最初に反応させる。この反応は、典型的に３７℃で４時間実施する。反応したオリゴをＳｅｐｈｅｄｅｘ（商標）Ｇ２５カラムで脱塩し、凍結乾燥する。次いで乾燥したオリゴをリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ＞８．０）に溶解し、ＤＴＴを用いて、３７℃で３０分間還元する。還元されたオリゴを脱塩し、ＨＲＰ−保持マレイミド基に直接加える。ＨＲＰをＮＨＳ−マレイミド糖アルコール架橋剤（ＭＷ＜５００Ｄａ）または他の任意のＮＨＳ−マレイミド架橋剤と反応させることによって、マレイミド−ＨＲＰを調製する。上記オリゴとＨＲＰのコンジュゲーション反応を室温で進行させ、その進行をゲル濾過（または陰イオン交換）クロマトグラフィーでモニターする。ＨＲＰ−オリゴコンジュゲートをゲル濾過または陰イオン交換クロマトグラフィーで精製することによって、単一の、オリゴ標識ＨＲＰ含有糖アルコールスペーサーを得る。
【０４３６】
参照による組込み
本明細書で言及された刊行物および特許文献のそれぞれの全体の開示は、それぞれ個々の刊行物または特許文献が個々に表示されているかのように、これと同程度まで、すべての目的のために、参照によりその全体が組み込まれている。
【０４３７】
同等物
本発明は、その趣旨または本質的な特性から逸脱することなく、他の特定の形態で実施形態化されてもよい。したがって、前述の実施形態は、本明細書中に記載されている本発明を限定するものではなく、むしろすべての点において例示的であると見なされる。したがって本発明の範囲は、前述の記載よりも添付の特許請求の範囲により示され、該特許請求の範囲と同等の意味および範囲に入るすべての変更が本明細書に包含されることを意図する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【国際調査報告】
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