(57)【要約】  本発明は、特にＥＰＯ抵抗性血液透析患者における貧血を処置する方法であって、高カットオフ透析膜による血液透析を含み、血液透析膜が、デキストランふるい係数基準では９０ｋＤから２００ｋＤの水中でのカットオフ分子量と、デキストランふるい係数基準では１０ｋＤから２０ｋＤの水中での保持分子量と、９０ｋＤから１７０ｋＤのΔＭＷとを有することを特徴とする方法に関する。本発明はさらに、血液透析患者、特にＥＰＯ抵抗性血液透析患者における貧血を処置するための高カットオフ血液透析膜に関する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
血液透析患者における貧血を処置する方法であって、患者から連続流で血液を採取およびバイパスして、血液透析膜の一方の面に接触させること、これと同時に、透析液を連続流で血液透析膜の反対面から血液と接触している血液透析膜側に送ること（透析液の流れは、血流方向に対して向流である。）、および血液を患者に戻すことを含み、血液透析膜が、デキストランふるい係数基準では９０ｋＤから２００ｋＤの間の水中でのカットオフ分子量と、デキストランふるい係数基準では１０ｋＤから２０ｋＤの間の水中での保持分子量と、９０ｋＤから１７０ｋＤの間のΔＭＷとを有することを特徴とする、方法。
【請求項２】
血液透析患者に対して体重１ｋｇにつき１週間あたりに投与されるＥＰＯ用量（ＩＵ単位）が、目標ヘモグロビン値を維持するための標準的な血液透析処置コースに必要とされるＥＰＯ用量と比較して少なくとも１０％減少される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
血液透析患者の血液が、少なくとも１００ｎｇ／ｍｌのフェリチン濃度を有する、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
血液透析処置が、２時間から６時間の期間にわたって１週間あたり２回から４回実施される、請求項１から３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
１週間あたり３回の血液透析処置のうちの１回が、請求項１に記載の膜を用いて２時間から６時間の期間にわたって実施されるのに対して、１週間あたり３回の血液透析処置のうちの２回が、標準的なハイフラックス血液透析膜を用いて実施される、請求項１から３のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
血液透析膜が、最大４５ｋＤの分子量を有する物質を全血中での測定では０．１から１．０の間のふるい係数で通過させる、請求項１から５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
血液透析患者が、ＥＰＯ低反応性を患っている、請求項１から６のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
血液透析患者における貧血を処置するための透析膜であって、少なくとも１つの疎水性ポリマーと少なくとも１つの親水性ポリマーとを含み、デキストランふるい係数基準では９０ｋＤから２００ｋＤの間の水中でのカットオフ分子量と、デキストランふるい係数基準では１０ｋＤから２０ｋＤの間の水中での保持分子量と、９０ｋＤから１７０ｋＤの間のΔＭＷとを有する、透析膜。
【請求項９】
最大４５ｋＤａの分子量を有する分子を全血の存在下では０．１から１．０のふるい係数で通過させる、血液透析患者における貧血を処置するための請求項８に記載の透析膜。
【請求項１０】
患者の血液が、少なくとも１００ｎｇ／ｍｌのフェリチン濃度を有する、血液透析患者における貧血を処置するための請求項８または９に記載の透析膜。
【請求項１１】
７ｎｍ超の平均孔径を有する、血液透析患者における貧血を処置するための請求項８から１０のいずれかに記載の透析膜。
【請求項１２】
血液透析処置が、２時間から６時間の期間にわたって１週間あたり２回から４回実施される、血液透析患者における貧血を処置するための請求項８から１１のいずれかに記載の透析膜。
【請求項１３】
１週間あたり３回の血液透析処置のうちの１回が、２時間から６時間の期間にわたって実施されるのに対して、１週間あたり３回の血液透析処置のうちの２回が、標準的なハイフラックス血液透析膜を用いて実施される、血液透析患者における貧血を処置するための請求項８から１１のいずれかに記載の透析膜。
【請求項１４】
血液透析患者が、ＥＰＯ低反応性を患っている、前記血液透析患者における貧血を処置するための請求項８から１３のいずれかに記載の透析膜。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、血液透析患者、特にＥＰＯ抵抗性血液透析患者における貧血を処置するための高カットオフ血液透析膜に関する。本開示はさらに、血液透析患者、特にＥＰＯ抵抗性透析患者における貧血を処置する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
貧血は、血液透析患者の間の主要な合併症の１つであることが公知である。この理由は、透析フィルタによる失血または血液ライン内の血液滞留が原因の鉄欠乏、感染症、およびエリスロポエチン刺激剤（ＥＳＡ）に対する反応性の低下であると考えられている（Ｋａｉｎｚ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）；Ｎｅｐｈｒｏｌ．Ｄｉａｌ．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  ２５（１１），３７０１−６；Ｅｐｕｂ  ２０１０  Ｍａｙ  ２６）。貧血は、血中の赤血球（ＲＢＣ）数の減少および／またはヘモグロビン（Ｈｂ）量の減少を特徴とする。ＷＨＯは、貧血を、Ｈｂレベルが成人男性については１３．０ｇ／ｄｌ未満であり、閉経前の女性については１２ｇ／ｄｌ未満であることと定義した（Ｗｏｒｌｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｏｒｇａｎ  Ｔｅｃｈ  Ｒｅｐ  Ｓｅｒ．（１９６８）４０５，５−３７：Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  ａｎａｅｍｉａｓ．Ｒｅｐｏｒｔ  ｏｆ  ａ  ＷＨＯ  ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ｇｒｏｕｐ）。従って、貧血の重症度は、Ｈｂ濃度を測定することによって評価される。一般に、慢性血液透析患者の貧血は、他の疾患の貧血と形態学的に区別不可能である。この特徴としては低増殖性である（即ち、不十分なエリスロポエチン刺激と一致して、赤血球産生活性が低い。）。増殖活性は、網状赤血球絶対数、網状赤血球指数および網状赤血球産生指数を決定することによって評価される。正常な網状赤血球絶対数は、細胞４０，０００個から５０，０００個／全血μＬの範囲である。ヘモグロビンおよび赤血球は、通常、肺から組織に酸素を運ぶ。従って、ヘモグロビンおよび赤血球の減少は、体の組織および器官における酸素不足を引き起こす。血液透析患者の臨床的帰結は、深刻であり得る。多くの血液透析患者は冠状動脈硬化症を既に患っていることに加えて、冠状動脈血管拡張能力の低下、心筋酸素消費量の変化および尿毒症性心筋内線維症により虚血症状を示す。このような場合において、貧血は、心筋における有効酸素をさらに減少させることにより患者の状態を悪化させる。従って、貧血は、重度の心臓疾患を発症する主要なリスクである。
【０００３】
この数年間の組換えヒトエリスロポエチン（ｒＨｕＥｐｏ）の存在および簡便な製造は、貧血を患っている血液透析患者の状況を大幅に改善するのに役立っている。ＥＰＯで処置される患者は、一般に、エネルギーおよび食欲の増大を経験する；患者は輸血をほとんど必要とせず、心筋機能の改善を経験することが多い。一方、末期腎疾患患者の９０％超は、目標ヘモグロビン値を達成および維持するのに外因性エリスロポエチンまたは輸血を必要とする（Ｋｉｌｐａｔｒｉｃｋ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）；Ｃｌｉｎ．Ｊ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．３（１０７７−１０８３））。Ｋａｉｎｚら（２０１０）は、エリスロポエチン刺激剤（ＥＳＡ）による処置に対してよく反応し、少ない週用量しか必要としない患者が、最低の死亡リスクも示すことを明らかにした。
【０００４】
「ＥＳＡ」という用語は、エリスロポエチン受容体に対する直接的または間接的な作用により、赤血球産生を増大させるすべての薬剤に適用される。現在入手可能なＥＳＡとしては、エポエチンアルファ、例えばＥｐｒｅｘ（登録商標）など、エポエチンベータ、例えばＮｅｏＲｅｃｏｒｍｏｎ（登録商標）など、メトキシポリエチレングリコール−エポエチンベータ（例えば、Ｍｉｒｃｅｒａ（登録商標））およびダルベポエチンアルファ、例えばＡｒａｎｅｓｐ（登録商標）などが挙げられる。エポエチンアルファおよびエポエチンベータは内因性分子に酷似するように設計されたので、類似の薬物動態を有する。エポエチンアルファおよびエポエチンベータは合成型のエリスロポエチンであり、組換えＤＮＡ技術を使用して細胞培養で製造される。これらは、長期の半減期を有する合成型のエリスロポエチンであり「長時間作用性」であると考えられるダルベポエチンアルファと比較して、「短時間作用性」であると考えられる。誤解を避けるために、「ＥＳＡ」および「ＥＰＯ」という表現は、本開示の目的のために互いに交換可能である。両表現は、赤血球産生を促進する上記物質を指す。１日の投与量は、各ＥＳＡによって変化し得る。１日規定量（ＤＤＤ）の基本定義は、使用薬物についての成人における主要効能に必要な１日あたりの推定平均維持量である。１日規定量は測定単位であり、１日推奨量または１日処方量を必ずしも反映していない。個々の患者および患者群の用量はＤＤＤと異なることが多く、個々の特徴（例えば、年齢および体重）および薬物動態の考慮に必ず基づくものでなければならないことに留意するべきである。ＤＤＤインデックスは、例えば、ＷＨＯ医薬品統計法共同研究センター（ＷＨＯ  Ｃｏｌｌａｂｏｒａｔｉｎｇ  Ｃｅｎｔｒｅ  ｆｏｒ  Ｄｒｕｇ  Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ  Ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ）から検索できる。
【０００５】
組換えヒトエリスロポエチンを臨床診療に使用することに基づくこれらの大幅な改善にもかかわらず、この治療法に対する抵抗性は珍しいことではない。患者の約５％から１０％は、ＥＰＯ抵抗性であると考えられる。加えて、この感受性集団で定期的に起こる種々の急性事象の過程において、多くの患者は、ヘマトクリットの急速であり、また有意な低下に苦しんでいる。ヘマトクリットは、ヘモグロビン濃度、白血球数および血小板数と共に、患者の全血球計算結果に不可欠な部分とみなされ得る。このような反応性の低下は、「ＥＰＯ低反応性」と称されることもある。ＥＰＯ抵抗性は、ＮＫＦ  ＫＤＯＱＩのガイドラインによって、ヘモグロビン濃度の増加を達成するのに平均用量よりも多くのＥＳＡを必要とすること、または体重１ｋｇにつき１週間あたり５００ＩＵ超のエポエチンと同等のＥＳＡ（約３４０００ＩＵ／週）を投与したにもかかわらず、Ｈｂレベルを目標の１１ｇ／ｄｌ超に増加させることができなかったことと定義されている。Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｂｅｓｔ  Ｐｒａｃｔｉｃｅｓ  Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ（Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ  １４：Ｎｅｐｈｒｏｌ．Ｄｉａｌ．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．（１９９９）１４（ｓｕｐｐｌ  ５）：２４）によれば、ＥＰＯ抵抗性の定義は、体重１ｋｇにつき１週間あたり３００ＩＵ超（約２００００ＩＵ／週）のＥＰＯを皮下投与したが、目標Ｈｂ濃度を達成できなかったこと、または目標を維持するのにこのような投与量が継続的に必要であることのいずれかである。
【０００６】
血液透析患者に投与されるＥＰＯの通常量は、体重１ｋｇにつき１週間あたり５０ＩＵから１５０ＩＵ（「国際単位」）の範囲内である。この用量は、通常、体重１ｋｇにつき週３回あたり２００ＩＵ（約１３６００ＩＵ）を超えるべきではない。
【０００７】
ＮＫＦ  ＫＤＯＱＩ（「Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｏｕｔｃｏｍｅｓ  Ｑｕａｌｉｔｙ  Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ」）およびＥｕｒｏｐｅａｎ  Ｂｅｓｔ  Ｐｒａｃｔｉｃｅｓ  Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓは両方とも、一定の目標ヘモグロビン（Ｈｂ）レベルを達成するためにＥＰＯを提供することを推奨している。欧州および米国の両方では現在のところ、１１ｇ／ｄｌから１２ｇ／ｄｌが好ましいＨｂレベルであると考えられている。一般に、初回ＥＰＯ用量およびＥＰＯ用量の調整は、患者のＨｂレベル、目標Ｈｂレベル、観察されたＨｂレベルの増加速度および臨床状況によって決定されるべきである。
【０００８】
本出願において使用される「ＥＰＯ抵抗性」または「低反応性」という表現は、患者が、体重１ｋｇにつき１週間あたり３００ＩＵ超（約２００００ＩＵ／週）のエポエチンまたは１．５ｍｇ／ｋｇ（約１００ｍｇ／週）のダルベポエチンアルファを投与されたが、目標ヘモグロビン（Ｈｂ）濃度を達成できないか、または目標を維持するのにこのような高用量を継続的に必要とする状態を指す。ヘモグロビン目標レベルは、好ましくは、９．０ｇ／ｄＬから１２．０ｇ／ｄＬの範囲内である。
【０００９】
ＥＰＯの投与経路は、慢性腎臓疾患の病期、処置状況、有効性の検討および使用されるＥＰＯのクラスによって決定されるべきである。血液透析に依存している患者については、皮下投与または静脈内（ＩＶ）投与が可能である。
【００１０】
しかしながら、高用量の外因性ＥＰＯを与えることに関係するリスクもある。ＥＰＯの使用は、血液透析患者における高血圧、内皮機能障害ならびに血栓準備状態および炎症状態に関連している（Ａｇａｒｗａｌ（２００６），Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．６９，Ｓ９−Ｓ１２）。加えて、エリスロポエチン療法は、特により高用量の場合には高コストにつながる。
【００１１】
ＥＰＯ低反応性または抵抗性の最も一般的な原因は、絶対的または機能的な鉄欠乏である。従って、各患者が鉄欠乏を患っているかを最初に検討することが重要である。血清フェリチンレベルは、貯蔵鉄の血液マーカーである。赤血球産生のための鉄の適度を反映する試験としては、ＴＳＡＴ（「トランスフェリン飽和度」、即ち、血清鉄と総鉄結合能との比に１００を乗じたもの）、ＭＣＶ（「平均細胞容積」）および関連指数、低色素赤血球パーセンテージ（ＰＨＲＣ）ならびに網状赤血球内Ｈｂ含量（ＣＨｒ）が挙げられる。ＴＳＡＴは少なくとも２０％であるべきであり、フェリチン濃度は少なくとも１００ｎｇ／血液ｍｌに達するべきである。
【００１２】
鉄欠乏がない場合、一般には、以下の状態が共同してまたは個別にＥＰＯ療法反応性の低下を引き起こしていると考えられる：慢性失血、副甲状腺機能亢進症、アルミニウム毒性、異常ヘモグロビン症、葉酸欠乏症またはビタミンＢ１２欠乏症、多発性骨髄腫、溶血、薬物摂取、不適切な透析（低ＫＴ／Ｖ）または感染症／炎症、例えばアクセス感染症、術後炎症など。多数のサイトカインが、赤血球前駆体の早熟に影響を与えることができることが公知である（Ｋｒａｎｔｚ（１９９４）：Ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｔｈｅ  ａｎｅｍｉａ  ｏｆ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｄｉｓｅａｓｅｓ．Ａｍ  Ｊ  Ｍｅｄ  Ｓｃｉ  ３０７：３５３−３５９）。重要な役割は、例えば、ＩＬ−６に起因する。赤血球産生は、骨髄で起こる。赤血球前駆体を網状赤血球に、続いて成熟赤血球に変換する過程は、幾つかのサイトカインＩＬ−３、ＩＬ−１２、ＩＧＦ−１および顆粒球単球コロニー刺激成長因子を含むのに対して、ＩＬ−１、ＩＬ−６、ＴＮＦアルファおよびＩＮＦガンマなどの因子はこの過程を遮断できる。従って、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）の血漿濃度を使用して臨床評価され得る慢性炎症状態において、赤血球産生の阻害は貧血につながり、ＥＰＯ療法の成功を妨げ得る（Ｌｏｐｅｚ−Ｇｏｍｅｚ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）：Ｆａｃｔｏｒｓ  ｔｈａｔ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ  ｔｈｅ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｔｏ  ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｏｎ  ｈｅｍｏｄｉａｌｙｓｉｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｒｅｌａｔｉｏｎ  ｔｏ  ｍｏｒｔａｌｉｔｙ．Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．７４（ｓｕｐｐｌ  １１１）：Ｓ７５−Ｓ８１）。実際、急性感染症もしくは慢性感染症、炎症疾患または悪性腫瘍を有する患者はかなりのＥＰＯ処置抵抗性を示すことが非常に多く、これは、非常に高用量のＥＰＯを用いてさえも克服できないことが多い（Ｍａｃｄｏｕｇａｌｌ（１９９５）：Ｐｏｏｒ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｔｏ  ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ：ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｏｎ  ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ．Ｎｅｐｈｒｏｌ  Ｄｉａｌ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  １０，６０７−６１４）。感染症および多くの炎症状態は、絶対的および機能的な鉄欠乏後のＥＳＡ低反応性の最も重要な原因に相当し得ると考えられた（Ｋａｎａｂｙ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）：Ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｓｉｓ  Ｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ  Ａｇｅｎｔ−Ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  Ａｎｅｍｉａ  ｉｎ  Ｄｉａｌｙｓｉｓ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ：Ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  Ｃａｕｓｅｓ  ａｎｄ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ．Ｂｌｏｏｄ  Ｐｕｒｉｆ  ２９，１−１２）。これは、感染発生率の上昇、尿毒症環境、炎症促進性サイトカインレベルの上昇、または動脈硬化の頻発を含む多くの根本的要因によるものである（Ｍａｌｙｓｚｋｏ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）：Ｈｅｐｃｉｄｉｎ  ｉｎ  Ａｎｅｍｉａ  ａｎｄ  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｃｈｒｏｎｉｃ  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｄｉｓｅａｓｅ．Ｋｉｄｎｅｙ  Ｂｌｏｏｄ  Ｐｒｅｓｓ  Ｒｅｓ  ３０，１５−３０）。Ｍａｌｙｓｚｋｏらは、例えば、炎症に直接的または間接的に関与する因子の腎クリアランス低下により、腎機���の悪化が全体的な炎症反応を促進し得ると述べている。一般に、慢性炎症疾患では、鉄代謝も乱れている。
【００１３】
根本的原因をシプロフロキサシンなどの抗生物質で処置することによって、またはステロイドを投与することによって、このようなＥＰＯ反応不良を管理することが提案されたが（Ｍａｃｄｏｕｇａｌｌ（１９９５））、成功は非常に限られていた。
【００１４】
ハイフラックス透析による適切な透析によって、慢性腎不全を有する患者における一般的な貧血に対処しようとする試みがなされた（Ｌｏｃａｔｅｌｌｉ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）：Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｈｉｇｈ−ｆｌｕｘ  ｄｉａｌｙｓｉｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  ａｎａｅｍｉａ  ｏｆ  ｈｅｍｏｄｉａｌｙｓｉｓ  ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｎｅｐｈｒｏｌ  Ｄｉａｌ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  １５，１３９９−１４０９）。しかしながら、ハイフラックス生体適合膜を用いて３カ月間処置された患者の間では、標準的な膜を用いて処置された患者と比較して、ヘモグロビンレベルの増加についての差は検出できず、この期間を通して、鉄およびＥＰＯ治療効果についての有意な変化はなかった。従って、少数の一部の限定的な臨床試験では、ＰＭＭＡ膜を含むＦｉｌｔｒｙｚｅｒ（登録商標）ＢＫ−Ｆ透析器を使用して、一定の肯定的な効果が報告されたが、Ｌｏｃａｔｅｌｌｉらのより大規模の試験では、この利点は示され得なかった。むしろ、小規模の臨床試験で達成された肯定的な効果は、他の要因に起因することが示された。
【００１５】
Ｌｏｃａｔｅｌｌｉらによって使用されたＦｉｌｔｒｙｚｅｒ（登録商標）ＢＫ−Ｆ  ＰＭＭＡ膜は「タンパク質漏出」膜と称されることが多く、この種類の膜の一例である（Ｗａｒｄ（２００５），Ｊ  Ａｍ  Ｓｏｃ  Ｎｅｐｈｒｏｌ  １６，２４２１−２４３０）。これらの膜が提供する低分子量タンパク質および小タンパク質結合溶質のクリアランスは、標準的なハイフラックス透析膜よりもいくらか大きい。しかしながら、これらは、本発明において以下に言及する高カットオフ膜と同じ開放性および性能には達しない。より高分子量の分子は、正規の透析よりもむしろこの膜への吸着によって除去されるように思われる。
【００１６】
従って、本出願において使用される「タンパク質漏出」膜という表現は、ハイフラックス膜と一般に称される膜であって、平均的なハイフラックス膜よりもいくらか広い孔構造を有する膜を指す。選択されたタンパク質のふるい係数、タンパク質損失量などは、本発明の高カットオフ膜の比較可能な値よりも低い。
【００１７】
ＷＯ２００４／０５６４６０には、従来の透析膜よりも有効に敗血症関連の循環炎症メディエータを排除するのに透析で使用され得るある種の高カットオフ膜が開示されている。これらの高カットオフ膜は、従来の膜型よりも大きい平均孔径を膜の選択層上に有し、これに関連して、より大きい分子のふるい係数がより高い。
【００１８】
膜の平均孔径は、膜表面上の孔のメジアン径または平均径を示す。これは半径または直径と称してもよい。これはまた、膜が阻止できるか、または通過させることができる粒径を説明するものである。膜孔はやや不均一な傾向があり、このような形状および容積についての仮定は、主に数学的なモデリングおよび解釈のためのものである。しかしながら、平均孔径により、膜が一定の状況でどのように振る舞うかを正確に説明し、定量分析できる。
【００１９】
「カットオフ分子量」または「ＭＷＣＯ」または「名目上のカットオフ分子量」という表現は、膜の保持能力を説明するのに一般的に使用される規格であり、膜が、０．１のふるい係数に対応する９０％の阻止率（図２を参照のこと）を有する溶質分子量を指す。または、ＭＷＣＯは、膜が分子の１０％を通過させる溶質（例えば、デキストランまたはタンパク質など）分子量と説明され得る。曲線の形状は、例えば、孔径分布に依存するので、膜の外形の物理的形態に関係する。
【００２０】
本明細書において使用される「阻止分子量」または「ＭＷＲＯ」または「名目上の阻止分子量」という表現は、膜が、０．９のふるい係数に対応する１０％の阻止率（図２を参照のこと）を有する（換言すれば、溶質の９０％を通過させる）溶質分子量を指す。
【００２１】
本出願人は今回、高カットオフ膜を使用して、慢性血液透析患者、特にＥＰＯ抵抗性透析患者における貧血を有効に処置できることを見出した。高カットオフ膜の高透過性は、サイトカインおよび他の炎症促進性溶質のクリアランスを増加させ、これにより炎症状態を低減することを可能にする。
【００２２】
特に、ＥＰＯ反応不良であり、慢性炎症の兆候を有し、絶対的鉄欠乏ではない血液透析患者において、高カットオフ膜の使用がＥＰＯ反応性の改善、またこれ故に貧血の有効な処置につながることが見出された。ＥＰＯ低反応性に関係する慢性炎症の前記兆候としては、限定されないが、１０ｍｇ／ｌから５０ｍｇ／ｌの間のＣＰＲ値、特に１０ｍｇ／ｌから３５ｍｇ／ｌの間のＣＰＲ値が挙げられる。しかしながら、１０ｍｇ／ｌから２０ｍｇ／ｌのＣＰＲ値は、通常、慢性炎症の十分な指標である。
【００２３】
本明細書において使用される「ＥＰＯ反応性」という表現は、患者の体重１ｋｇあたりのＥＰＯ週用量をＨｂ（ヘモグロビン）値で割ったものと定義される。ヘモグロビン（Ｈｂ）についての通常の臨床検査において、Ｈｂ値は、通常、総ヘモグロビンとして測定され、結果は全血１リットル（ｌ）あたりのヘモグロビン量（グラム（ｇ）単位）として表される。
【００２４】
本発明の文脈において、「貧血性血液透析患者」または「血液透析患者における貧血」についての各記述は、特に指示がない場合、標準用量のＥＰＯで処置される通常の血液透析患者、およびＥＰＯ抵抗性を有する患者を含む。
【００２５】
または加えて、高カットオフ膜を用いて貧血性血液透析患者を処置する効果は、ヘプシジン濃度を測定することによって証明され得る。ヘプシジンは鉄の全身アベイラビリティの調節因子であり、血中の巨大タンパク質アルファ−２−マクログロブリンに特異的に結合する２．８ｋＤの小タンパク質である。ヘプシジンの産生は、貧血、低酸素または炎症に応じて調節される。この結合は、貧血および炎症の重要なメディエータとして示唆された役割を裏付けている（Ｙｏｕｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（２００９），Ｃｌｉｎ  Ｊ  Ａｍ  Ｓｏｃ  Ｎｅｐｈｒｏｌ  ４，１３８４−１３８７）。従って、ヘプシジンは、ＥＰＯ反応性および／または慢性炎症を決定するためのマーカーとして使用され得る。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２６】
【特許文献１】国際公開第２００４／０５６４６０号
【非特許文献】
【００２７】
【非特許文献１】Ｋａｉｎｚ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）；Ｎｅｐｈｒｏｌ．Ｄｉａｌ．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  ２５（１１），３７０１−６；Ｅｐｕｂ  ２０１０  Ｍａｙ  ２６
【非特許文献２】Ｗｏｒｌｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｏｒｇａｎ  Ｔｅｃｈ  Ｒｅｐ  Ｓｅｒ．（１９６８）４０５，５−３７：Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  ａｎａｅｍｉａｓ．Ｒｅｐｏｒｔ  ｏｆ  ａ  ＷＨＯ  ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ｇｒｏｕｐ．
【非特許文献３】Ｋｉｌｐａｔｒｉｃｋ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）；Ｃｌｉｎ．Ｊ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．３（１０７７−１０８３）
【非特許文献４】Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｂｅｓｔ  Ｐｒａｃｔｉｃｅｓ  Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ（Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ  １４：Ｎｅｐｈｒｏｌ．Ｄｉａｌ．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．（１９９９）１４（ｓｕｐｐｌ  ５）：２４）
【非特許文献５】Ａｇａｒｗａｌ（２００６），Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．６９，Ｓ９−Ｓ１２
【非特許文献６】Ｋｒａｎｔｚ（１９９４）：Ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｔｈｅ  ａｎｅｍｉａ  ｏｆ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｄｉｓｅａｓｅｓ．Ａｍ  Ｊ  Ｍｅｄ  Ｓｃｉ  ３０７：３５３−３５９
【非特許文献７】Ｌｏｐｅｚ−Ｇｏｍｅｚ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）：Ｆａｃｔｏｒｓ  ｔｈａｔ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ  ｔｈｅ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｔｏ  ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｏｎ  ｈｅｍｏｄｉａｌｙｓｉｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｒｅｌａｔｉｏｎ  ｔｏ  ｍｏｒｔａｌｉｔｙ．Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．７４（ｓｕｐｐｌ  １１１）：Ｓ７５−Ｓ８１
【非特許文献８】Ｍａｃｄｏｕｇａｌｌ（１９９５）：Ｐｏｏｒ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｔｏ  ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ：ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｏｎ  ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ．Ｎｅｐｈｒｏｌ  Ｄｉａｌ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  １０，６０７−６１４
【非特許文献９】Ｋａｎａｂｙ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）：Ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｓｉｓ  Ｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ  Ａｇｅｎｔ−Ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  Ａｎｅｍｉａ  ｉｎ  Ｄｉａｌｙｓｉｓ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ：Ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  Ｃａｕｓｅｓ  ａｎｄ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ．Ｂｌｏｏｄ  Ｐｕｒｉｆ  ２９，１−１２
【非特許文献１０】Ｍａｌｙｓｚｋｏ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）：Ｈｅｐｃｉｄｉｎ  ｉｎ  Ａｎｅｍｉａ  ａｎｄ  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｃｈｒｏｎｉｃ  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｄｉｓｅａｓｅ．Ｋｉｄｎｅｙ  Ｂｌｏｏｄ  Ｐｒｅｓｓ  Ｒｅｓ  ３０，１５−３０
【非特許文献１１】Ｌｏｃａｔｅｌｌｉ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）：Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｈｉｇｈ−ｆｌｕｘ  ｄｉａｌｙｓｉｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  ａｎａｅｍｉａ  ｏｆ  ｈｅｍｏｄｉａｌｙｓｉｓ  ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｎｅｐｈｒｏｌ  Ｄｉａｌ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  １５，１３９９−１４０９
【非特許文献１２】Ｗａｒｄ（２００５），Ｊ  Ａｍ  Ｓｏｃ  Ｎｅｐｈｒｏｌ  １６，２４２１−２４３０
【非特許文献１３】Ｙｏｕｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（２００９），Ｃｌｉｎ  Ｊ  Ａｍ  Ｓｏｃ  Ｎｅｐｈｒｏｌ  ４，１３８４−１３８７
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２８】
本発明の目的は、血液透析患者、特にＥＰＯ抵抗性血液透析患者における貧血を処置する方法であって、患者から血液を連続流で採取およびバイパスして、血液透析膜の一方の面に接触させること、これと同時に、透析液を連続流で血液透析膜の反対面から血液と接触している血液透析膜側に送ること（透析液の流れは、血流方向に対して向流である。）、および血液を患者に戻すことを含み、血液透析膜が、少なくとも１つの疎水性ポリマーと少なくとも１つの親水性ポリマーとを含むこと、および最大４５ｋＤの分子量を有する物質を全血中での測定では０．１から１．０の間のふるい係数で通過させることを特徴とする方法を提供することである。
【００２９】
本発明のさらなる目的は、貧血を患っている血液透析患者、特にＥＰＯ抵抗性血液透析患者に対して体重１ｋｇにつき１週間あたり３回投与されるＥＰＯ用量（ＩＵ単位）を減少させるための方法であって、減少率が、１０％超、好ましくは２０％超の範囲、より好ましくは３０％超の範囲内にあり、患者から血液を連続流で採取およびバイパスして、血液透析膜の一方の面に接触させること、これと同時に、透析液を連続流で血液透析膜の反対面から血液と接触している血液透析膜側に送ること（透析液の流れは、血流方向に対して向流である。）、および血液を患者に戻すことを含み、血液透析膜が、少なくとも１つの疎水性ポリマーと少なくとも１つの親水性ポリマーとを含むこと、および最大４５ｋＤの分子量を有する物質を全血中での測定では０．１から１．０の間のふるい係数で通過させることを特徴とする方法を提供することである。
【００３０】
本発明の別の態様は、血液透析患者、特にＥＰＯ抵抗性血液透析患者における貧血を処置するための透析膜であって、少なくとも１つの疎水性ポリマーと少なくとも１つの親水性ポリマーとを含み、最大４５ｋＤａの分子量を有する分子を全血の存在下では０．１から１．０のふるい係数で通過させる透析膜を提供することである。
【００３１】
本発明の態様はまた、血液透析患者、特にＥＰＯ抵抗性血液透析患者における貧血を処置するための透析膜であって、少なくとも１つの疎水性ポリマーと少なくとも１つの親水性ポリマーとを含み、デキストランふるい係数基準では９０ｋＤから２００ｋＤの間の水中でのカットオフ分子量を有する透析膜を提供することである。
【００３２】
本発明の一実施形態において、血液透析処置は、それぞれ、本発明の膜を用いて２時間から６時間の期間にわたって１週間あたり２回から４回実施される（図３Ａ）。換言すれば、標準的な血液透析フィルタは、本発明の膜を有するフィルタと完全に交換される。従って、貧血を患っている血液透析患者、特にＥＰＯ抵抗性患者は、このような本発明の血液透析フィルタのみを用いて一定期間にわたって処置される。本発明の一実施形態において、処置は、慢性炎症および／もしくはＥＰＯ抵抗性の兆候がもはや診断されず、ならびに／または目標ヘモグロビンレベルに達するまで継続し得る。本発明の別の実施形態において、記載される処置計画は、４週間から１２週間の期間にわたって適用され得る。本発明のさらに別の実施形態において、処置は、ＥＰＯ抵抗性を発症する傾向があり、および／または特に１０ｍｇ／ｌから５０ｍｇ／ｌのＣＲＰ値、より具体的には１０ｍｇ／ｌから２０ｍｇ／ｌのＣＲＰ値の慢性炎症を患っている血液透析患者に対して継続的に使用され得る。
【００３３】
本発明の別の実施形態において、１週間あたり３回の血液透析処置のうちの１回は、本発明の膜を用いて２時間から６時間の期間にわたって実施されるのに対して、１週間あたり３回の血液透析処置のうちの２回は、標準的なハイフラックス血液透析膜の使用を含む（図３Ｂ）。前記処置は、本発明の血液透析フィルタを使用することに加えて標準的な透析が推奨される場合に使用され得る。本発明の一実施形態において、処置は、慢性炎症および／もしくはＥＰＯ抵抗性の兆候がもはや診断されなくなるまで、またはＨｂ目標値に達するまで継続し得る。本発明の別の実施形態において、記載される処置計画は、４週間から１２週間の期間にわたって適用され得る。本発明のさらに別の実施形態において、処置は、ＥＰＯ抵抗性を発症する傾向があり、および／または特に１０ｍｇ／ｌから５０ｍｇ／ｌのＣＲＰ値、より具体的には１０ｍｇ／ｌから２０ｍｇ／ｌのＣＲＰ値の慢性炎症を患っている血液透析患者に対して継続的に使用され得る。
【００３４】
本発明のさらなる実施形態において、２時間から６時間の期間にわたる血液透析処置は、本発明の膜を用いて１回の透析処置おきに実施されるのに対して、他の血液透析処置は、標準的なハイフラックス血液透析膜の使用を含む（図３Ｃ）。前記処置は、本発明の血液透析フィルタを使用することに加えて標準的な透析が推奨される場合に使用され得る。本発明の一実施形態において、処置は、慢性炎症および／もしくはＥＰＯ抵抗性の兆候がもはや診断されなくなるまで、またはＨｂ目標値に達するまで継続し得る。本発明の別の実施形態において、記載される処置計画は、４週間から１２週間の期間にわたって適用され得る。本発明のさらに別の実施形態において、処置は、ＥＰＯ抵抗性を発症する傾向があり、および／または特に１０ｍｇ／ｌから５０ｍｇ／ｌのＣＲＰ値、より具体的には１０ｍｇ／ｌから２０ｍｇ／ｌのＣＲＰ値の慢性炎症を患っている血液透析患者に対して継続的に使用され得る。
【００３５】
本発明のさらに別の実施形態において、本発明の処置は、貧血性血液透析患者、特に、適切な鉄状態を有する貧血性ＥＰＯ抵抗性血液透析患者（即ち、絶対的鉄欠乏ではない患者）に適用される。適切な鉄状態は、少なくとも２０％のトランスフェリン飽和度および少なくとも１００ｎｇ／ｍｌのフェリチン濃度を特徴とする。
【００３６】
本発明の別の実施形態において、処置は、貧血性血液透析患者、特に、慢性炎症の兆候を有する貧血性ＥＰＯ抵抗性血液透析患者に適用される。本発明の文脈において、慢性炎症は、１０ｍｇ／ｌ超のＣＲＰ値によって示される。本発明のさらに別の実施形態において、本発明の文脈では、慢性炎症は、１０ｍｇ／ｌから５０ｍｇ／ｌのＣＲＰ値、特に１０ｍｇ／ｌから２０ｍｇ／ｌのＣＲＰ値によって示される。
【００３７】
本発明の文脈における「高カットオフ膜」という表現は、最大４５ｋＤの分子量を有する物質が、ＥＮ１２８３による血中での測定では０．１から１．０の間のふるい係数で膜を通過することを許容する膜を指す。
【００３８】
本発明の文脈における「高カットオフ膜」という表現はさらに、以下の方程式［１］に従って決定した場合に、実施例３に従って決定したデキストランふるい係数基準では選択層上の平均孔径が７ｎｍ超、一般には８ｎｍから１２ｎｍの間であることによって定義される膜を指す。高カットオフ膜の平均孔径は、最大７ｎｍ、一般には５ｎｍから７ｎｍの間の平均孔径を有するいわゆるタンパク質漏出膜を含む従来のハイフラックス膜の平均孔径よりも大きい。
【００３９】
本発明の文脈における「高カットオフ膜」という表現はさらに、実施例３に従って決定した場合に、デキストランふるい係数基準では９０ｋＤから２００ｋＤの間の水中でのカットオフ分子量を有する膜を指す。
【００４０】
本発明の一実施形態において、本発明の処置に使用される高カットオフ透析膜は、デキストランふるい係数基準では１２０ｋＤから１８０ｋＤの間の水中でのカットオフ分子量を有する。
【００４１】
本発明の別の実施形態において、高カットオフ透析膜は、Ａｉｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．：「Ａ  ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ  ｃｕｒｖｅｓ  ｉｎｔｏ  ｐｏｒｅ  ｓｉｚｅ  ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ｓｉｅｖｉｎｇ  ｍｅｍｂｒａｎｅｓ」Ｊ．Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ｓｃｉ．５４（１９９０）３３９−３５４の方程式［１］に従って決定した場合に、選択層上の平均孔径が８ｎｍから１２ｎｍの間であることを特徴とする。
【００４２】
α＝０．３３（ＭＭ）０．４６  ［１］
方程式［１］において、αは、孔の直径が決定され得る半径（Å単位）を表す。ＭＭは、デキストランの分子量またはモル質量（ｇ／ｍｏｌ単位）を表す。一定の分子サイズの種々のデキストランについてのふるい係数を測定すること（例えば、実施例４を参照のこと）は、例えば、膜の孔径分布によって例示される膜の物理特性を説明することになり、前記物理特性を説明するのに使用され得る。従って、実験的に得られ得る膜のデキストランふるいプロファイルに基づいて、膜のふるい特性または保持特性、名目上のカットオフ分子量、平均孔径および平均孔径分布に関して、異なる膜を比較することが可能である（図５および図６）。
【００４３】
本発明のさらに別の実施形態において、高カットオフ透析膜は、血漿中でのアルブミンふるい係数が０．０５から０．２５であること、および血漿中でのミオグロビンふるい係数が０．８５から１．０であることを特徴とする。特に指示がない場合、選択されたタンパク質、例えばアルブミンまたはミオグロビンなどのふるい係数は、ＥＮ１２８３（これは、参照により本明細書に組み込まれる。）に従って血漿または全血中で決定される。
【００４４】
本発明のさらに別の実施形態において、高カットオフ透析膜は、κ−ＦＬＣクリアランス（ｍｌ／分）が３５から４０であること、およびκ−ＦＬＣクリアランス（ｍｌ／分）が３０から３５であることを特徴とする。
【００４５】
本発明のさらに別の実施形態において、本発明の処置に使用される高カットオフ透析膜は、名目上のカットオフ分子量（ＭＷＣＯ）が９０ｋＤから２００ｋＤであることを特徴とする（図２および図５）。
【００４６】
本発明のさらに別の実施形態において、高カットオフ透析膜は、阻止分子量（ＭＷＲＯ）が１０ｋＤから２０ｋＤであることを特徴とする（図２および図５）。
【００４７】
本発明のさらに別の実施形態において、高カットオフ透析膜は、図２に定義されるＭＷＣＯとＭＷＲＯとの間のΔ分子量（ΔＭＷ）が多くとも１７０ｋＤであることを特徴とする（図５も参照のこと）。Δ阻止率は常に０．８であるので、ΔＭＷは、膜の保持（または、ふるい）曲線の傾きおよび選択性の指標である。本発明の一実施形態において、ΔＭＷは、９０ｋＤから１７０ｋＤの間である。本発明の別の実施形態において、ΔＭＷは、１００ｋＤから１７０ｋＤの間である。本発明のさらに別の実施形態において、ΔＭＷは、１２０ｋＤから１６０ｋＤの間である。
【図面の簡単な説明】
【００４８】
【図１】図１は、ＥＰＯ抵抗性血液透析患者における貧血を処置する方法の原理を概略的に示す。高カットオフ膜による血液透析処置は、慢性炎症状態をもたらすか、または慢性炎症状態の一因となるより高分子量の物質を患者の血液から減少させるか、または除去する。貧血およびＥＰＯ低反応性は、このような慢性炎症の臨床症状である。この結果として、慢性炎症につながる因子の制御は、ＥＰＯ反応性を改善する。従って、これは、ＥＰＯ抵抗性患者の貧血状態の改善につながるであろう。
【図２】図２は、一般に、「カットオフ分子量」（ＭＷＣＯ）および「阻止分子量」（ＭＷＲＯ）という表現の意味を示す。ＭＷＣＯは、膜が９０％超の阻止率を有する溶質分子量を指す。ＭＷＲＯは、膜が１０％の阻止率を有する溶質分子量を指す。図２の例示的な曲線において、ＭＷＣＯは約５２ｋＤであり、ＭＷＲＯは約８．３ｋＤであろう。Δ阻止率の値は常に０．８である。Δ分子量の値は、膜の選択性の尺度である。
【図３】図３は、本発明の処置の３つの異なるスキームを示す。「ＨＤ」は、Ｐｏｌｙｆｌｕｘ（登録商標）Ｐ１７０Ｈ膜（Ｇａｍｂｒｏ  Ｌｕｎｄｉａ  ＡＢ）などの従来のハイフラックス血液透析膜の使用を含む標準的な透析処置を指す。図３Ａは、ＥＰＯ抵抗性血液透析患者に適用するすべての透析処置に高カットオフ膜を一般に使用する処置であって、１週間あたり２回から４回の血液透析処置を一般に含む処置を指す。図３Ｂは、１週間あたり３回の血液透析処置のうちの１回に高カットオフ膜の使用を含むスキームを指す。図３Ｃは、１回の血液透析処置おきに高カットオフ膜の使用を含むスキームを指す。
【図４】図４Ａは、標準的なハイフラックス透析膜および高カットオフ透析膜のふるい係数を例示的に示す。示されるふるい係数は、臨床試験から算出した。従って、このデータは、全血中で決定した場合のある種のタンパク質のふるい係数を指す。透析は、Ｍｏｒｇｅｒａ  ｅｔ  ａｌ．（２００３）：Ｉｎｔｅｒｍｉｔｔｅｎｔ  ｈｉｇｈ  ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ  ｈｅｍｏｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｓｅｐｔｉｃ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ａｃｕｔｅ  ｒｅｎａｌ  ｆａｉｌｕｒｅ．Ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．２９，１９８９−１９９５に記載されている方法に従って実施した。ＨＣＯ  １１００（登録商標）透析器（Ｇａｍｂｒｏ  Ｌｕｎｄｉａ  ＡＢ）は、高カットオフ透析膜の一例である。使用した従来のハイフラックス透析器は、Ｐｏｌｙｆｌｕｘ（登録商標）１７０Ｈ（Ｇａｍｂｒｏ  Ｌｕｎｄｉａ  ＡＢ）である。図４Ｂ、図４Ｃおよび図４ＤはＨＣＯ  １１００（登録商標）透析器の構造細部を示すものであり、管腔表面（図４Ｂ）、膜断面の拡大図（図４Ｃ）および膜の選択層の拡大図（図４Ｄ）を示している。従来のハイフラックス膜よりも著しく大きい孔径を有するので、この膜は、中分子量の範囲にある物質について、有意に高い透過性を有する。加えて、この膜の特異的構造および狭い孔径分布により、６０ｋＤａ超の分子量を有するより大きいタンパク質、例えば凝固因子および免疫グロブリンが、基本的には確実に保持される。
【図５】図５は、２つの高カットオフ膜（ＨＣＯ  １１００（登録商標）、Ｔｈｅｒａｌｉｔｅ（登録商標））および２つの標準的なハイフラックス膜（Ｐｏｌｙｆｌｕｘ（登録商標）Ｒｅｖａｃｌｅａｒ、Ｐｏｌｙｆｌｕｘ（登録商標）Ｐ１７０Ｈ）（これらはすべてＧａｍｂｒｏ  Ｌｕｎｄｉａ  ＡＢのものである。）、ならびにＴｏｒａｙのＦｉｌｔｒｙｚｅｒ（登録商標）ＢＫ−Ｆ（これは一般に「タンパク質漏出」と称される。）のデキストランふるい曲線を示す。ふるい曲線は、実施例３に記載される方法に従って決定した。この図は、平均孔径の増加により、高カットオフ膜が、ＭＷＣＯおよびＭＷＲＯに関してハイフラックス膜（「タンパク質漏出」膜など）と有意に異なることを示す。点々のあるバーは、本発明においてそれぞれハイフラックス膜および高カットオフ膜を規定するＭＷＣＯおよびＭＷＲＯを示す。横線は、それぞれ０．１および０．９のふるい係数を示す。
【図６】図６は、２つの高カットオフ膜（ＨＣＯ  １１００（登録商標）、Ｔｈｅｒａｌｉｔｅ（登録商標））および２つの標準的なハイフラックス膜（Ｐｏｌｙｆｌｕｘ（登録商標）Ｒｅｖａｃｌｅａｒ、Ｐｏｌｙｆｌｕｘ（登録商標）Ｐ１７０Ｈ）（これらはすべてＧａｍｂｒｏ  Ｌｕｎｄｉａ  ＡＢのものである。）、ならびにＴｏｒａｙのＦｉｌｔｒｙｚｅｒ（登録商標）ＢＫ−Ｆ（これは一般に「タンパク質漏出」と称される。）の孔径分布（半径）（ｎｍ単位）をデキストランふるい係数（図５を参照のこと）から決定した場合のものを示す。３．５ｎｍ（半径）における縦線は、ハイフラックス膜および高カットオフ膜の平均孔径の間に引くことができる線を表す。
【図７Ａ】図７は、患者の値を比較する試験中のヘプシジン濃度の推移について得られた最初の結果を示すものであり、２つの患者群を比較している（実施例５）。一方の群では、処置は高カットオフ型透析器を含む（図７Ａ、Ｔｈｅｒａｌｉｔｅ群）。ヘプシジン濃度は、市販されている試験キット「Ｈｅｐｃｉｄｉｎ  Ｅｌｉｓａ  Ｅ９１９７９Ｈｕ」（ＵＳＣＮ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｉｎｃ）を用いて測定した。時間点は、処置開始前（Ｔ０）、処置１週間後（Ｔ１）および処置４週間後（Ｔ４）に得られた値を指す。
【図７Ｂ】図７は、患者の値を比較する試験中のヘプシジン濃度の推移について得られた最初の結果を示すものであり、２つの患者群を比較している（実施例５）。別の群では、標準的な透析器を使用した（図７Ｂ、対照群）。ヘプシジン濃度は、市販されている試験キット「Ｈｅｐｃｉｄｉｎ  Ｅｌｉｓａ  Ｅ９１９７９Ｈｕ」（ＵＳＣＮ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｉｎｃ）を用いて測定した。時間点は、処置開始前（Ｔ０）、処置１週間後（Ｔ１）および処置４週間後（Ｔ４）に得られた値を指す。
【発明を実施するための形態】
【００４９】
本発明は、血液透析患者、特にＥＰＯ抵抗性血液透析患者における貧血を処置する方法であって、患者から血液を連続流で採取およびバイパスして、血液透析膜の一方の面に接触させること、これと同時に、透析液を連続流で血液透析膜の反対面から血液と接触している血液透析膜側に送ること（透析液の流れは、血流方向に対して向流である。）、および血液を患者に戻すことを含み、血液透析膜が、最大４５ｋＤａの分子量を有する分子を全血の存在下では０．１から１．０のふるい係数で通過させることを特徴とする方法を対象とする。
【００５０】
図４から分かるように、高カットオフ透析膜は、最大７０ｋＤの分子、例えば一定の限られた範囲内では、６８ｋＤの分子量を有するアルブミンを全血中で限定的に通過させる。図４は、本発明のハイフラックス膜が、最大約２５ｋＤの分子のみを全血中で通過させることを実証している。
【００５１】
水中において、高カットオフ透析膜のカットオフ分子量（ＭＷＣＯ）は９０ｋＤから２００ｋＤの範囲内であり、一般には水中で３０ｋＤａから６０ｋＤａの範囲内にある（実施例３）従来のハイフラックス膜（いわゆるタンパク質漏出膜も含む。）のＭＷＣＯよりも大幅に大きい（図４および図５を参照のこと）。
【００５２】
本発明の高カットオフ膜のより高い透過性は、サイトカインおよび他の炎症促進性溶質のクリアランスを増加させ、炎症状態を軽減する。貧血、ＥＰＯ療法への反応不良、慢性炎症の兆候を有し、絶対的鉄欠乏がない血液透析患者において、これはＥＰＯ反応性の改善につながる。
【００５３】
従って、上記方法はまた、貧血を患っている血液透析患者、特に、ＥＰＯ抵抗性も患っている患者に対して体重１ｋｇにつき１週間あたり３回投与されるＥＰＯ用量（ＩＵ単位）を減少させる可能性を提供する。本発明の処置は、上で論じたＥＰＯ低反応性に特に関連する貧血状態に関係する分子を減少させ、または前記分子を除去するように設計される。本処置に基づいて患者の状態を改善することにより、患者に投与しなければならないＥＰＯ用量を減少させることが可能になる。減少率は、少なくとも、目標ヘモグロビン値を維持するのに必要とされるＥＰＯ用量と比較して１０％超の範囲内にある。本発明の目的は、２０％超、好ましくは３０％超の減少率を達成することである。
【００５４】
一般に、本発明の処置は、貧血性血液透析患者、特に、適切な鉄状態を有する貧血性ＥＰＯ抵抗性血液透析患者（即ち、絶対的鉄欠乏ではない患者）に適用される。適切な鉄状態は、少なくとも２０％のトランスフェリン飽和度および少なくとも１００ｎｇ／ｍｌのフェリチン濃度を特徴とする。絶対的鉄欠乏の血液透析患者は、彼または彼女の鉄状態についてまずは処置されるべきであり、彼または彼女のＥＰＯ反応性をモニタリングするべきである。鉄状態が良好であるにもかかわらずＥＰＯ低反応性が改善しない場合、これは、ＥＰＯ低反応性が、今回提案する高カットオフ透析膜による処置により処置され得る他の問題に関係していることの指標であるので、本処置が指示される。
【００５５】
従って、本発明の一態様は、慢性炎症の兆候を有し、絶対的鉄欠乏ではない血液透析患者、特に、ＥＰＯ低反応性を示す血液透析患者に処置を適用することである。本発明の文脈において、慢性炎症は、１０ｇ／ｍｌ超のＣＲＰ値によって示される。本発明のさらに別の実施形態において、本発明の文脈では、慢性炎症は、１０ｍｇ／ｌから５０ｍｇ／ｌのＣＲＰ値、特に１０ｍｇ／ｌから２０ｍｇ／ｌのＣＲＰ値によって示される。
【００５６】
一般に、本処置は、慢性炎症の兆候を有するＥＰＯ抵抗性血液透析患者を対象とする。本発明の文脈において、慢性炎症は、１０ｇ／ｍｌ超のＣＲＰ値によって示される。ＣＲＰ値は、一般に、１０ｍｇ／ｌから２０ｍｇ／ｌの範囲内にある。しかしながら、最大５０ｍｇ／ｌのＣＲＰ値が存在し得る。
【００５７】
本発明の透析は、患者の血液を本発明の高カットオフ膜透析器に送ることよって行われる。透析器の透析液側は、透析液を提供する。ＥＰＯ低反応性に関係する血中の水溶性タンパク質結合分子は、膜を通って反対側の透析液に輸送される。浄化された血液が患者に戻る。
【００５８】
高カットオフ膜による透析を含む種々の処置計画が、貧血性血液透析患者、特に貧血性ＥＰＯ抵抗性血液透析患者に対して想定され得る。本発明に従って適用され得る例示的な処置計画は、以下の通りである。
【００５９】
本発明の一実施形態において、血液透析処置は、本発明の膜を用いて２時間から６時間の期間にわたって１週間あたり２回から４回実施される（図３Ａ）。換言すれば、標準的な血液透析フィルタは、本発明の膜を有するフィルタと完全に交換される。従って、ＥＰＯ抵抗性を患っている血液透析患者は、このような本発明の血液透析フィルタのみを用いて一定期間にわたって処置される。本発明の一実施形態において、処置は、慢性炎症および／もしくはＥＰＯ抵抗性の兆候がもはや診断されず、ならびに／または目標Ｈｂ値に達するまで継続し得る。本発明の別の実施形態において、記載される処置計画は、４週間から１２週間の期間にわたって適用され得る。このような処置計画において、尿素などの小分子が血液から十分に除去されることをモニタリングすることが重要である。
【００６０】
本発明の別の実施形態において、血液透析処置計画は、２００ｍｌ／分のＱＢおよび５００ｍｌ／分のＱＤ（ＵＦ＝０ｍｌ／分）で少なくとも１７０ｍｌ／分の尿素クリアランスを有する高カットオフ膜を用いて実施される。本発明のさらに別の実施形態において、本発明の透析処置は、＞１．２のＫｔ／Ｖを確保しなければならない。
【００６１】
本発明のさらに別の実施形態において、患者のアルブミン総損失量は制限されるべきであり、１週間あたり約４０ｇを超えるべきではない。
【００６２】
本発明の別の実施形態において、１週間あたり３回の血液透析処置のうちの１回は、本発明の膜を用いて２時間から６時間の期間にわたって実施されるのに対して、１週間あたり３回の血液透析処置のうちの２回は、標準的な血液透析膜の使用を含む（図３Ｂ）。前記処置は、本発明の血液透析フィルタを使用することに加えて標準的な透析が推奨される場合に使用され得る。本発明の一実施形態において、処置は、慢性炎症および／もしくはＥＰＯ抵抗性の兆候がもはや診断されず、ならびに／または目標Ｈｂ値に達するまで継続し得る。本発明の別の実施形態において、記載される処置計画は、４週間から１２週間の期間にわたって適用され得る。本発明のさらに別の実施形態において、処置は、ＥＰＯ抵抗性を発症する傾向があり、および／または特に１０ｍｇ／ｌから２０ｍｇ／ｌのＣＲＰ値の慢性炎症を患っている血液透析患者に対して継続的に使用され得る。
【００６３】
本発明のさらなる実施形態において、２時間から６時間の期間にわたる血液透析処置は、本発明の膜を用いて１回の透析処置おきに実施されるのに対して、他の血液透析処置は、標準的な血液透析膜の使用を含む（図３Ｃ）。前記処置は、本発明の血液透析フィルタを使用することに加えて標準的な透析が推奨される場合に使用され得る。本発明の一実施形態において、処置は、慢性炎症および／もしくはＥＰＯ抵抗性の兆候がもはや診断されず、ならびに／または目標Ｈｂ値に達するまで継続し得る。本発明の別の実施形態において、記載される処置計画は、４週間から１２週間の期間にわたって適用され得る。本発明のさらに別の実施形態において、処置は、ＥＰＯ抵抗性を発症する傾向があり、および／または特に１０ｍｇ／ｌから２０ｍｇ／ｌのＣＲＰ値の慢性炎症を患っている血液透析患者に対して継続的に使用され得る。
【００６４】
患者の具体的な状態に応じて、このような処置計画または所定手順が単独でまたは動的に適用され得る（即ち、一定期間の間にこれらを入れ替えてもよいし、続いて使用してもよい。）。
【００６５】
本発明の処置を実施するのに使用され得る透析装置は、限外ろ過量を正確に制御およびモニタリングできる標準的な透析装置である。このような装置の例は、Ｇａｍｂｒｏ  Ｌｕｎｄｉａ  ＡＢのＡＫ９６（商標）、ＡＫ２００（商標）ＳおよびＡＫ２００（商標）ＵＬＴＲＡ  Ｓ、ＰｒｉｓｍａｆｌｅＸ  ｅＸｅｅｄ（商標）またはＡｒｔｉｓ（商標）透析装置である。しかしながら、ＵＦ制御を有する任意の他の透析装置もまた、処置に使用され得る。
【００６６】
本発明の処置を実施するためのパラメータは、標準的な透析処置パラメータおよび高カットオフ膜の規格に調整され得る。本処置に使用される典型的な流量は変化し得る。１００ｍｌ／分から５００ｍｌ／分、好ましくは２５０ｍｌ／分から４００ｍｌ／分のＱＢ（血流）および１００ｍｌ／分から１０００ｍｌ／分、好ましくは３００ｍｌ／分から５００ｍｌ／分のＱＤ（透析液流量）の流量を使用することが有利である。
【００６７】
典型的には、本発明の高カットオフ膜は、インビトロにおいてｍｍＨｇ／ｍ２あたり＞４０ｍｌ／時の水透過性を有する。
【００６８】
これらは、一般に、３００ｍｌ／分から４００ｍｌ／分（ＵＦ＝０ｍｌ／分）の血流量での従来の血液透析では少なくとも８０ｍｌ／分のβ２−ミクログロブリンクリアランス、ＱＢ＝２００ｍｌ／分およびＱＤ＝５００ｍｌ／分（ＵＦ＝０ｍｌ／分）では５０ｍｌ／分から１５０ｍｌ／分の間のミオグロビンクリアランス、ならびにＱＢ＝２００ｍｌ／分およびＱＤ＝５００ｍｌ／分（ＵＦ＝０ｍｌ／分）では少なくとも１５０ｍｌ／分、一般には１５０ｍｌ／分から２５０ｍｌ／分の間の尿素クリアランスを有する。
【００６９】
６０ｇ／ｌのタンパク質レベル（３７℃）および２０ｇ／ｌから３０ｇ／ｌのアルブミンレベルを有するウシ血漿で処置４時間後に測定した場合、ＱＢ＝２００ｍｌ／分およびＱＤ＝５００ｍｌ／分（ＵＦ＝０ｍｌ／分）でのインビトロにおけるアルブミン損失量（ＨＤ）は、多くとも７ｇ／時である（±２０％）。同時に、ＱＢ＝２５０ｍｌ／分およびＱＤ＝５００ｍｌ／分（ＵＦ＝０）でのアルブミンクリアランスは、０．５ｍｌ／分から４ｍｌ／分の間である。インビボにおけるアルブミン損失量は、ＱＢ＝２００ｍｌ／分およびＱＤ＝５００ｍｌ／分での透析１時間あたり０．５ｇから２ｇの間である。
【００７０】
血液から除去される必要があるタンパク質などの溶質の膜通過は、ふるい係数Ｓによって説明される。ふるい係数Ｓは、Ｓ＝（２ＣＦ）／（ＣＢｉｎ＋ＣＢｏｕｔ）（式中、ＣＦはろ液中の溶質濃度であり、ＣＢｉｎは試験中の装置の血液流入側の溶質濃度であり、ＣＢｏｕｔは試験中の装置の血液流出側の溶質濃度である。）に従って計算される。Ｓ＝１のふるい係数は無制限の輸送を示し、Ｓ＝０では輸送が全くない。所定の膜に対して、各溶質は、この特異的なふるい係数を有する。典型的には、分子量の増加に対してふるい係数をプロットして、ふるい係数曲線を示す。従って、例えば、０．９のふるい係数は、溶質の９０％が膜を通過できることを示す。これは、各溶質の保持率が１０％であることに対応する。さらに、膜のふるい係数またはふるい曲線により、０．１のふるい係数に対応する膜の名目上のカットオフを決定することが可能になる。
【００７１】
本発明に従って有利に使用され得る高カットオフ膜は、例えば、デキストランで測定した場合の水中での特異的なふるい曲線によっても説明され得る。ふるい曲線により、水中でのＭＷＣＯおよびＭＷＲＯを決定することが可能になる。両値は、阻止点からカットオフ点までのΔＭＷを決定するのに役立ち得る（図２を参照のこと）。加えて、ふるい曲線は、例えば、選択層上の膜の孔径もしくは孔径分布の平均（ａｖｅｒａｇｅ）または平均値（ｍｅａｎ）を決定する根拠として役立つ。膜のふるい特性と孔構造との間には、事実上の数学的相関関係がある。平均孔径または孔径分布は、Ａｉｍａｒ  ｅｔ  ａｌ（１９９０）に従ってデキストランふるい曲線から決定され得る。デキストランふるい曲線は実施例３に記載されるように決定され得、孔径分布および平均孔径はこれから決定され得る（図５および図６）。
【００７２】
従って、本発明に従って好ましく使用される高カットオフ透析膜は、水中での名目上のカットオフ分子量（ＭＷＣＯ）が９０ｋＤから２００ｋＤであることを特徴とする（図２および図５）。
【００７３】
高カットオフ透析膜はさらに、名目上の阻止分子量（ＭＷＲＯ）が１０ｋＤから２０ｋＤであることを特徴とする（図２および図５）。
【００７４】
従って、本発明のさらなる実施形態において、高カットオフ透析膜は、図２に定義されるＭＷＣＯとＭＷＲＯとの間のΔ分子量（ΔＭＷ）が多くとも１７０ｋＤであることを特徴とする。Δ阻止率は常に０．８であるので、ΔＭＷは、膜の保持（または、ふるい）曲線の傾きおよび選択性の指標である。本発明の一実施形態において、ΔＭＷは、９０から１７０の間である。本発明の別の実施形態において、ΔＭＷは、１００ｋＤから１７０ｋＤの間である。
【００７５】
本発明のさらに別の実施形態において、高カットオフ透析膜は、実施例３に従って決定した場合のデキストランふるい曲線に基づいて、選択層上の平均孔径半径が４ｎｍ超であることを特徴とする。本発明の一実施形態において、前記平均孔径半径は、約４ｎｍから１２ｎｍの間である。別の実施形態において、前記平均孔径半径は、６ｎｍから１１ｎｍの間である。本発明のさらに別の実施形態において、平均孔径半径は、７ｎｍから１２ｎｍの間である。
【００７６】
本発明の一実施形態において、本発明の高カットオフ膜のふるい係数は、ＥＮ１２８３に従って血漿中で測定した場合に、β２−ミクログロブリンについては０．９から１．０、ミオグロビンについては０．８から１．０、およびアルブミンについては０．０１から０．２５、好ましくは０．０５から０．２の範囲内である。表Ｉは、標準的なハイフラックス膜と比較して、高カットオフ膜の例示的な値を示す。
【００７７】
【表１】
2014521391.tif 000003
【００７８】
本発明の一実施形態において、膜は、ＷＯ２００４／０５６４６０に開示されている種類の選択透過性膜である。このような膜は、好ましくは、全血の存在下では最大４５ｋＤａの分子量を有する分子を０．１から１．０の間のふるい係数で通過させる。デキストランで測定した場合の水中でのカットオフ分子量は、最大２００ｋＤの値に達し得る。本発明の一実施形態において、膜は、選択透過性の非対称中空糸膜の形態を取る。これは、好ましくは、少なくとも１つの疎水性ポリマーと、少なくとも１つの親水性ポリマーとを含む。好ましくは、ポリマーは、表面上のドメインとして存在する。
【００７９】
一実施形態において、膜は、遊離軽鎖（ＦＬＣ）を通過させる。即ち、κまたはλ遊離軽鎖は、膜を通過する。より小さい孔径を有するハイフラックス膜（場合により、「タンパク質漏出膜」とも称される。）は、一部の遊離軽鎖を除去することが観察された。しかしながら、これは、透析膜へのＦＬＣの結合に主に起因すると思われる。ＦＬＣは、中分子量タンパク質のマーカーとして使用され得る。遊離軽鎖の排除は本発明の主な目的ではないが、これらの減少は膜機能性の指標として使用され得る。
【００８０】
本発明の別の態様によれば、血液透析患者におけるＥＰＯ低反応性を処置するための透析装置であって、本発明の高カットオフ透析膜を含む透析装置が提供される。
【００８１】
本発明のさらなる態様において、高カットオフ透析膜が、３０から４５のκ−ＦＬＣクリアランス（ｍｌ／分）および２８から４０のλ−ＦＬＣクリアランス（ｍｌ／分）を有する透析システムが提供される。クリアランスは、インビトロにおいて、３７℃で６０ｇ／ｌのタンパク質レベルを有するウシ血漿中、ＱＢ＝２５０ｍｌ／分、ＱＤ＝５００ｍｌ／分、ＵＦ＝０ｍｌ／分（±２０％）で決定される。ヒトκの血漿レベル＝５００ｍｇ／ｌおよびヒトλの血漿レベル＝２５０ｍｇ／ｌ。
【００８２】
本発明の一態様において、高カットオフ透析膜は、少なくとも１つの親水性ポリマーと、少なくとも１つの疎水性ポリマーとを含む。一実施形態において、少なくとも１つの親水性ポリマーおよび少なくとも１つの疎水性ポリマーは、透析膜の表面上のドメインとして透析膜に存在する。
【００８３】
疎水性ポリマーは、ポリアリールエーテルスルホン（ＰＡＥＳ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、ポリスルホン（ＰＳＵ）、ポリメチルメタクリレート（ＰＭＭＡ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリアクリロニトリル（ＰＡＮ）、ポリアミド（ＰＡ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）またはこれらの組み合わせからなる群より選択され得る。本発明の一実施形態において、疎水性ポリマーは、ポリアリールエーテルスルホン（ＰＡＥＳ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、ポリスルホン（ＰＳＵ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリアクリロニトリル（ＰＡＮ）、ポリアミド（ＰＡ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）またはこれらの組み合わせからなる群より選択される。
【００８４】
親水性ポリマーは、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）およびポリプロピレンオキシドとポリエチレンオキシドとの共重合体（ＰＰＯ−ＰＥＯ）からなる群より選択され得る。本発明の一実施形態において、親水性ポリマーは、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）およびポリビニルアルコール（ＰＶＡ）からなる群より選択され得る。
【００８５】
本発明の一実施形態において、高カットオフ透析膜は、中空糸の最内層内に存在する分離層を有する非対称構造を有する中空糸である。本発明の一実施形態において、高カットオフ透析膜は、分離層が０．５μｍ未満の厚さを有する少なくとも３層の非対称構造を有する。一実施形態において、分離層は、Ａｉｍａｒ  ｅｔ  ａｌ（１９９０）に従って決定した場合に、デキストランふるい係数基準では、７ｎｍ超、一般には８ｎｍから１２ｎｍの間の平均孔径を有する孔チャネルを含有する。平均孔径（直径）は、一般に、この種類の膜では７ｎｍ超である（図６）。中空糸膜内の次の層は、スポンジ構造の形態を有し、前記第１層のための支持体として機能する第２層である。好ましい実施形態において、第２層は、約１μｍから１５μｍの厚さを有する。第３層は、フィンガー構造の形態を有する。これは、一方では枠組みのように機械的安定性を提供し、他方では、空隙量が多いので分子の膜輸送に対して非常に低い抵抗を提供する。輸送過程において、空隙は水で充填され、水は、より少ない空隙量を有するスポンジ充填構造を有するマトリックスよりも低い拡散抵抗および対流抵抗をもたらす。従って、第３層は、機械的安定性を膜に提供し、好ましい実施形態では２０μｍから６０μｍの厚さを有する。
【００８６】
一実施形態において、高カットオフ透析膜はまた、中空糸膜の外表面である第４層を含む。この実施形態において、外表面は０．５μｍから３μｍの範囲内の孔の開口部を有し、前記孔の数は、孔１０．０００個／ｍｍ２から孔１５０．０００個／ｍｍ２、好ましくは孔２０．０００個／ｍｍ２から孔１００．０００個／ｍｍ２の範囲内である。この第４層は、好ましくは、１μｍから１０μｍの厚さを有する。
【００８７】
高カットオフ透析膜の製造は、ポリマーまたはポリマー混合物を溶媒に溶解してポリマー溶液を形成する位相反転過程に従う。この溶液を脱気およびろ過し、この後に高温に維持する。
【００８８】
続いて、ポリマー溶液を、紡糸ノズル（中空糸の場合）またはスリットノズル（フラットフィルムの場合）によってポリマー用の非溶媒を含有する液槽中に押し出す。非溶媒が溶媒に置き換わるので、ポリマーは反転した固相に沈殿する。
【００８９】
中空糸膜を調製するためには、好ましくは、ポリマー溶液を、２つの同心開口部を有するノズルの外輪スリットによって押し出す。同時に、中心流体を、ノズルの内側開口部によって押し出す。紡糸ノズルの出口において、中心流体はポリマー溶液と接触し、この時点で沈殿が開始する。沈殿過程は、ポリマー溶液からの溶媒と中心流体の非溶媒との交換である。
【００９０】
この交換によって、ポリマー溶液は、相を流体から固相に反転させる。固相において、孔構造（即ち、非対称性および孔径分布）が、溶媒／非溶媒の交換動態によって作られる。この過程は、ポリマー溶液の粘度に影響を及ぼす一定温度で機能する。紡糸ノズルの温度ならびにポリマー溶液および中心流体の温度は、３０℃から８０℃である。粘度は、溶媒と非溶媒との交換による孔形成過程の動態を決定する。続いて、好ましくは、膜を洗浄および乾燥する。
【００９１】
沈殿条件、例えば温度および速度の選択によって、一定量の親水性末端基が孔の表面に位置して親水性ドメインを作るように、疎水性ポリマーおよび親水性ポリマーを「凍結」する。疎水性ポリマーは、他のドメインを構築する。所定量の親水性ドメインが孔の表面領域にあることが、タンパク質の吸着を防ぐのに必要とされる。親水性ドメインのサイズは、好ましくは、２０ｎｍから５０ｎｍの範囲内にあるべきである。膜表面からアルブミンをはじくためには、親水性ドメインが互いに一定距離の範囲内にあることも必要である。膜表面からアルブミンをはじくことによって、アルブミンが疎水性ポリマーと直接接触すること、およびこの結果としてのアルブミンの吸収が回避される。
【００９２】
膜を調製するのに使用されるポリマー溶液は、好ましくは、１０重量％から２０重量％の疎水性ポリマーと、２重量％から１１重量％の親水性ポリマーとを含む。中心流体は、一般には、４５重量％から６０重量％の沈殿媒体（水、グリセロールおよび他のアルコールから選択される。）と、４０重量％から５５重量％の溶媒とを含む。換言すれば、中心流体は、いかなる親水性ポリマーも含まない。
【００９３】
一実施形態において、外側スリット開口部を通って流出するポリマー溶液を、沈殿繊維の外側において、多湿蒸気／空気の混合物に曝露する。好ましくは、多湿蒸気／空気の混合物は、少なくとも１５℃、より好ましくは少なくとも３０℃であり、また７５℃以下、より好ましくは６０℃以下の温度を有する。
【００９４】
好ましくは、多湿蒸気／空気の混合物の相対湿度は、６０％から１００％の間である。さらに、外側スリット開口部を通して出てくるポリマー溶液周囲の外気中の多湿蒸気は、好ましくは、溶媒を含む。多湿蒸気／空気の混合物中の溶媒含量は、好ましくは、含水量に対して０．５重量％から５重量％である。温度制御された蒸気雰囲気中の溶媒の効果は、繊維の沈殿速度を制御することである。より少ない溶媒を用いる場合、外表面はより密な表面になり、より多い溶媒を使用する場合、外表面はより開放的な構造を有する。沈殿膜周囲の温度制御された蒸気雰囲気中の溶媒量を制御することによって、膜の外表面上の孔の量およびサイズを制御する。即ち、孔の開口部のサイズは０．５μｍから３μｍの範囲内であり、前記孔の数は孔１０，０００個から孔１５０，０００個／ｍｍ２の範囲内である。高カットオフ透析膜の第４層は、好ましくは、この方法によって調製される。
【００９５】
押し出し前に、適切な添加物をポリマー溶液に追加し得る。添加物を使用して、適切な孔構造を形成し、膜の透過性、透水率および拡散透過率ならびにふるい特性を最適化する。好ましい実施形態において、ポリマー溶液は、０．５重量％から７．５重量％の適切な添加物（好ましくは、水、グリセロールおよび他のアルコールを含む群から選択される。）を含有する。
【００９６】
溶媒は、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ブチロラクトンおよび前記溶媒の混合物を含む群から選択され得る。
【００９７】
本発明に従っても有効に使用され得る膜、およびこれらを調製するための方法は、ＥＰ２２５３３６７Ａ１（この内容は、参照により本明細書に明確に含められる。）に記載されている。
【００９８】
本明細書において使用される「ふるい係数（Ｓ）」という用語は、特定分子量の分子を排除し、または通過させる膜の物理的特性を指す。全血、血漿または水中でのふるい係数は、標準規格ＥＮ１２８３，１９９６に従って決定され得る。
【００９９】
簡潔に言えば、膜のふるい係数は、タンパク質溶液（ウシもしくはヒトの血漿）を既定条件（ＱＢ、ＴＭＰおよびろ過量）下で膜束に通してポンピングし、供給液中、保持液中およびろ液中のタンパク質濃度を決定することによって決定される。ろ液中のタンパク質濃度がゼロである場合、０％のふるい係数が得られる。ろ液中のタンパク質濃度が供給液中および保持液中のタンパク質濃度と等しい場合、１００％のふるい係数が得られる。
【０１００】
適切な膜を製造するための方法は、例えば、ＷＯ２００４／０５６４６０（これは、参照により本明細書に組み込まれる。）に開示されている。本発明に従って使用され得る適切な高カットオフ膜は、「ＨＣＯ  １１００（登録商標）」または「Ｔｈｅｒａｌｉｔｅ（登録商標）」の商品名でＧａｍｂｒｏ  Ｌｕｎｄｉａ  ＡＢから入手可能である。例えば、ＨＣＯ  １１００（登録商標）透析器は、ポリエーテルスルホンおよびポリビニルピロリドン系の蒸気滅菌膜であって、５０μｍの壁厚および２１５μｍの内径を有する蒸気滅菌膜を含む。ＨＣＯ  １１００（登録商標）（ＱＤ＝５００ｍｌ／分）のインビボにおけるアルブミン損失量（ＨＤ）は、透析１時間あたり約１．５ｇである。
【０１０１】
本発明の範囲および精神から逸脱せずに、本明細書において開示される本発明に対して種々の置換および修正が行われ得ることは、当業者には容易に明らかである。
【０１０２】
本発明についての理解をさらに促すために、好ましい実施形態の非限定的な実施例によって本発明を説明する。
【実施例】
【０１０３】
［実施例１］
膜の調製
疎水性ポリマー成分および親水性ポリマー成分（２１重量％）を溶解させたＮ−メチル−ピロリドンからなるポリマー溶液、ならびにＮ−メチル−ピロリドンおよび水の混合物であるセンター溶液という２つの溶液を膜形成に使用する。ポリマー溶液は、膜構築成分としてポリエーテルスルホン（ＰＥＳ  １４．０重量％）およびポリビニルピロリドン（ＰＶＰ  ７．０重量％）を含有する。この溶液は、ＮＭＰ（７７．０重量％）および水（２．０重量％）をさらに含有する。センター溶液は、水（５３．０重量％）およびＮＭＰ（４７．０重量％）を含有する。
【０１０４】
膜形成過程において、ポリマー溶液およびセンター溶液をスピナレットまたはジェットに接触させると、膜が沈殿する。規定の一定温度（５８℃）を使用して、この過程を支援する。沈殿した中空糸は、蒸気で満たされた加湿シャフト（相対湿度１００％、５４℃）を通って洗浄槽（２０℃、約４重量％ＮＭＰ）に入る。２個の別の水槽（７０℃から９０℃）において、膜を向流（２５０ｌ／時）でさらに洗浄する。
【０１０５】
膜の乾燥はオンラインで実施し、残った水は除去する。
【０１０６】
［実施例２］
ハンドバンドルおよびミニモジュールの調製
紡糸過程後の膜束の調製が、以下の性能試験のための繊維束を調製するのに必要である。最初の段階工程は、繊維束を規定の長さ２３ｃｍに切断することである。次の段階工程は、繊維端を溶融させることからなる。光学制御により、すべての繊維が確実に十分溶融する。次いで、繊維束の端部をポッティングキャップに移す。ポッティングキャップを機械的に固定し、ポッティングチューブにポッティングキャップを被せる。次いで、ポリウレタンを用いて繊維をポッティングする。ポリウレタンが硬化した後、ポッティングした膜束を規定の長さに切断し、乾燥貯蔵してから、様々な性能試験に使用する。
【０１０７】
ミニモジュール［＝ハウジング内の繊維束］を同様に調製する。ミニモジュールは繊維を確実に保護するものであり、蒸気滅菌に使用する。ミニモジュールの製造は、以下の具体的な工程を含む：
（Ａ）方程式（１）
Ａ＝π×ｄｉ×ｌ×ｎ［ｃｍ２］（１）
（式中、ｄｉは繊維の内径［ｃｍ］であり、ｎは繊維の量を表し、ｌは有効繊維長［ｃｍ］を表す。）に従って、３６０ｃｍ２の有効表面Ａについて、必要な繊維数を計算する。
（Ｂ）繊維束を規定の長さ２０ｃｍに切断する。
（Ｃ）溶融過程の前に、繊維束をハウジング内に移す。
（Ｄ）ポッティング過程の前に、ミニモジュールを真空乾燥オーブン中に一晩入れる。
【０１０８】
［実施例３］
デキストランふるい係数
デキストランふるい係数は、以下の方法に従って決定する。ふるい係数（ＳＣ）は、以下の方程式：
【０１０９】
【数１】
2014521391.tif 000004
（式中、ＣＦはろ液中の溶質濃度であり、ＣＢｉｎは試験中の装置の血液流入側（供給）の溶質濃度であり、ＣＢｏｕｔは試験中の装置の血液流出側（保持）の溶質濃度である。）に従って計算する。所定の装置のふるい係数の決定は、以下のスキームＩに従う：
【０１１０】
【化１】
2014521391.tif 000005
【０１１１】
ＧＰＣ（ゲル浸透クロマトグラフィー）は、サイズに基づいて検体を分離するサイズ排除クロマトグラフィーの一種である。この技術は、ポリマーの分析に使用されることが多い。保持時間に対する分子量の較正は、多数のデキストラン標準分子を用いて行う。クロマトグラムの分析は、ＧＰＣソフトウェア、例えばＰｏｌｙｍｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｌｔｄ．のＰＬ  Ｃａｌｉｂｅｒ（商標）ＧＰＣ／ＳＥＣソフトウェア（バージョン４．０４）またはＰｏｌｙｍｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｌｔｄ．のＣｉｒｒｕｓ（商標）ＧＰＣソフトウェア（バージョン３．２）を用いて行う。
【０１１２】
ＧＰＣは、Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡの分析用ＮａＣｌ（ＣＡＳ番号７６４７−１４−５）、Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡの分析用ＮａＨ２ＰＯ４＊２Ｈ２Ｏ（ＣＡＳ番号１３４７２−３５−０）およびＭｅｒｃｋ  ＫＧａＡのｃ（ＮａＯＨ）１ｍｏｌ／ｌ（１Ｎ）ＴｉｔｒｉＰＵＲ（登録商標）（商品番号１０９１３７）を含む溶離液（移動相）：０．０２Ｍ  ＮａＨ２ＰＯ４＊２Ｈ２Ｏ＋０．２Ｍ  ＮａＣｌ（ｐＨ７．０）＋１Ｎ  ＮａＯＨを用いて実施する。使用したカラムは、ＴＳＫｇｅｌ（登録商標）サイズ排除（ＰＷ型）ＨＰＬＣガードカラム（Ｓｕｐｅｌｃｏ、製品番号８０８０３３）である。
【０１１３】
所定の膜のふるい係数を決定するのに使用したデキストラン試験材は、（１）ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属種由来の３１３８８デキストラン−ＭＷ約６．０００（Ｓｉｇｍａ）；（２）ロイコノストック・メゼンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）由来のＤ９２６０デキストラン−ＭＷ約９．５００（Ｓｉｇｍａ）；（３）ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属種由来の３１３８７デキストラン−ＭＷ約１５．０００から２５．０００（Ｓｉｇｍａ）；（４）ロイコノストック・メゼンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）由来のＤ４６２６デキストラン−ＭＷ約１５．０００から３０．０００（Ｓｉｇｍａ）；（５）ロイコノストック・メゼンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）由来のＤ１６６２デキストラン−ＭＷ約３５．０００から４５．０００（Ｓｉｇｍａ）；（６）ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属種由来の３１３８９デキストラン−ＭＷ約４０．０００（Ｓｉｇｍａ）；（７）ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属種由来の３１３９０デキストラン−ＭＷ約７０．０００（Ｓｉｇｍａ）；（８）ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属種由来の０９１８４デキストラン−Ｍｗ約１００．０００（Ｆｌｕｋａ）；（９）ロイコノストック・メゼンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）由来のＤ４８７６デキストラン−平均ＭＷ１５０．０００（Ｓｉｇｍａ）；（１０）ロイコノストック・メゼンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）由来の３１３９８デキストラン−ＭＷ約２００．０００（Ｓｉｇｍａ）；（１１）ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属種由来の３１３９２デキストラン−ＭＷ約５００．０００（Ｓｉｇｍａ）；（１２）ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属種由来の９５７７１デキストラン−ＭＷ約２．０００．０００（Ｓｉｇｍａ）である。
【０１１４】
標準として使用したデキストランは、以下のものである：（１）ロイコノストック・メゼンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）由来の３１４１６デキストラン−ＧＰＣ用の分析標準、ＭＷ１．０００（Ｆｌｕｋａ、ＥＣ番号：２３２−６７７−５）；（２）ロイコノストック・メゼンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）由来の３１４１７デキストラン−ＧＰＣ用の分析標準、ＭＷ５．０００（Ｆｌｕｋａ）；（３）ロイコノストック・メゼンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）由来の３１４１８デキストラン−ＧＰＣ用の分析標準、ＭＷ１２．０００（Ｆｌｕｋａ）；（４）ロイコノストック・メゼンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）由来の３１４１９デキストラン−ＧＰＣ用の分析標準、ＭＷ２５．０００（Ｆｌｕｋａ）；（５）ロイコノストック・メゼンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）由来の３１４２０デキストラン−ＧＰＣ用の分析標準、ＭＷ５０．０００（Ｆｌｕｋａ）；（６）ロイコノストック・メゼンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）由来の３１４２１デキストラン−ＧＰＣ用の分析標準、ＭＷ８０．０００（Ｆｌｕｋａ）；（７）ロイコノストック・メゼンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）由来の３１４２２デキストラン−ＧＰＣ用の分析標準、ＭＷ１５０．０００（Ｆｌｕｋａ）；（８）ロイコノストック・メゼンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）由来の３１４２３デキストラン−ＧＰＣ用の分析標準、ＭＷ２７０．０００（Ｆｌｕｋａ）；（９）ロイコノストック・メゼンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）由来の３１４２４デキストラン−ＧＰＣ用の分析標準、ＭＷ４１０．０００（Ｆｌｕｋａ）；（１０）ロイコノストック・メゼンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）由来の３１４２５デキストラン−ＧＰＣ用の分析標準、ＭＷ６７０．０００（Ｆｌｕｋａ）；（１１）ＧＰＣ用のＤＸＴ１３００Ｋデキストラン標準、ＭＷ１．３６０．０００。
【０１１５】
ＨＰＬＣについては、ＲＩＤ（屈折率検出器）を備えるＨＰ１０９０  ＡまたはＡｇｉｌｅｎｔ  １２００装置、例えばＡｇｉｌｅｎｔ  ＨＰ  Ｇ１３６２Ａ  ＲＩＤ検出器を使用する。ＨＰＬＣのパラメータは、流量１ｍｌ／分および注入量１５０μｌに設定する。
【０１１６】
すべての試料（供給液、保持液およびろ液）は、膜フィルタ（例えば、Ｗｈａｔｍａｎのｃｅｌｌｕｌｏｓｅ  ａｃｅｔａｔｅ  ｃｉｒｃｌｅ  ＯＥ  ６７、孔径０．４５μｍ、厚さ１１５μｍ、バブルポイント［ｂａｒ］４）に通してろ過する。デキストラン濃度は、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  ｗａｔｅｒ  ｓｙｓｔｅｍから得られる水に０．１％のデキストラン試験材を溶解させたものとするべきである。Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  ｗａｔｅｒ  ｓｙｓｔｅｍから得られる水にデキストラン標準を溶解させて、０．１％の濃度にする。すべての試料は、同じ日に測定するべきである。
【０１１７】
ＨＰＬＣの結果を分析し、所定の分子量についてふるい係数を決定する。これらの値は、試験した膜の孔径分布および平均孔径を計算するのに使用できる。得られたふるい曲線は、ＭＷＣＯおよびＭＷＲＯに関して分析できる（図５も参照のこと）。
【０１１８】
［実施例４］
炎症およびＥＰＯ抵抗性のマーカーの除去
一般的な慢性血液透析患者１３人を試験に動員した（Ｈｕｔｃｈｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．１９（２００８）：Ｈｉｇｈ  ｃｕｔ−ｏｆｆ  ｈｅｍｏｄｉａｌｙｓｉｓ  ｌｏｗｅｒｓ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｓｔａｔｕｓ  ｉｎ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｄｉａｌｙｓｉｓ  ｐａｔｉｅｎｔｓ）。患者は、Ｇａｍｂｒｏ  ＨＣＯ  １１００（商標）を使用する２週間の処置を受け、この後に標準的なハイフラックス透析器（Ｇａｍｂｒｏ  Ｐｏｌｙｆｌｕｘ  １７０Ｈ）を使用する２週間のウォッシュイン期を設けた。中分子量タンパク質のマーカーとして、κおよびλ血清遊離軽鎖（それぞれ２２．５ｋＤａおよび４５ｋＤａ）を各透析セッションの前後に測定した。炎症促進性サイトカインは、２５−Ｐｌｅｘ  ＡＢ  Ｂｅａｄ  Ｋｉｔ（ＢｉｏＳｏｕｒｃｅ（商標））を使用して測定した。
【０１１９】
細胞輸送および細胞活性化に関連する表面マーカーの発現によって決定した場合の単球活性化状態は、フローサイトメトリーによって評価した。高カットオフ透析に関連する臨床的な有害事象はなかった。
【０１２０】
２週間の処置期間後、透析前の血清遊離κおよびλは両方とも、それぞれ有意に１５％（０から２８）および１９％（３から２４）減少した（両方ともＰ＜０．０１）。ＩＬ−１ｂ、ＩＬ−６およびＴＮＦ−アルファなどの炎症促進性サイトカインの血清レベルは、各血液透析セッション中にほとんど有意に増加しなかった（すべてＰ＜０．０５）。単球細胞表面タンパク質ＣＣＲ２、ＣＸ３ＣＲ１、ＣＤ１１ｂおよびＣＤ１６３の発現はすべて、ダウンレギュレーションした（すべてＰ＜０．０１）。血清アルブミンは、平均３ｇ／ｌ（０から８の範囲）減少した（Ｐ＜０．０１）。
【０１２１】
［実施例５］
高カットオフ透析器を含む処置後のＥＳＡ反応性の改善
Ｔｈｅｒａｌｉｔｅ（登録商標）透析器または対照ハイフラックス透析器（Ｐｏｌｙｆｌｕｘ（登録商標）Ｒｅｖａｃｌｅａｒ）を使用して、慢性炎症を有する血液透析患者２４人を高カットオフ血液透析で処置する前向き無作為化比較非盲検並行試験を実施する（「ＣＩＥＰＯ」）。試験の詳細は、ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖ  Ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｒ  ＮＣＴ０１５２６７９８を使用してｈｔｔｐ：／／ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌ．ｇｏｖ／で再見できる。試験群の患者は、高カットオフＴｈｅｒａｌｉｔｅ（登録商標）透析器を用いて１２週間にわたって１回の透析処置おきに処置する（Ｔｈｅｒａｌｉｔｅ（登録商標）による処置が全体で１８回、通常のハイフラックス透析器による処置は全体が１８回）。対照群の患者は、すべての処置において従来のハイフラックス透析器を用いて処置する。試験期間後の１２週間の経過観察期間では、すべての患者は、従来のハイフラックス透析器を用いて処置する。
【０１２２】
最初の２週間は３回連続処置の初回に、またこの後は４週間ごとに、ヘプシジン、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、インターロイキン６（ＩＬ−６）、ＩＬ−１０、遊離軽鎖（ＦＬＣ）、尿素、アルブミンおよび所定の血液値について、血液透析前の血液試料を分析する。最初の２週間における血液透析前の試料に加えて、ヘプシジンおよびＩＬ−６、ＩＬ−１０およびＦＬＣについては、透析後の血液試料を分析する。所定の血液値は、試験および経過観察期間中に２週間ごとに測定する。ＩＬ−６、ＩＬ−１０、ＦＬＣ、ＣＲＰおよびヘプシジンは、市販されているＥＬＩＳＡ試験キットを用いて測定する。血清および血漿は、標準的な実験法に従って調製する。前者は、ＩＬ−６、ＩＬ−１０およびＦＬＣの測定に使用する。後者は、ヘプシジンおよびＣＲＰの検出に使用する。ＦＬＣ値の測定は、比濁計を用いて実施する。所定の血液値は、通常の臨床検査を使用して測定する。
【０１２３】
Ｔｈｅｒａｌｉｔｅ（登録商標）透析器を使用することの一目的はまた、患者の炎症レベルを減少させることである。Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）は、透析患者の炎症レベルを説明するのに最も広く使用されているパラメータであり、本試験では、試験期間中に、Ｔｈｅｒａｌｉｔｅ（登録商標）透析器が炎症状態に及ぼす効果を測定するのに使用する。
【０１２４】
ヘプシジンは、炎症による貧血の重要なメディエータとしての役割を果たすと考えられている。しかしながら、低分子量（２．８ｋＤａ）であるので、本試験におけるクリアランスは、通常のハイフラックス膜およびＴｈｅｒａｌｉｔｅ（登録商標）膜の間で大きく違わないはずである。従って、Ｔｈｅｒａｌｉｔｅ処置が慢性炎症を改善する場合、ヘプシジン濃度は減少するはずである。本試験では、ヘプシジンは、市販されているＥＬＩＳＡ試験キット「Ｈｅｐｃｉｄｉｎ  Ｅｌｉｓａ  Ｅ９１９７９Ｈｕ」（ＵＳＣＮ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｉｎｃ）を用いて測定した。これまでに含まれていた患者（ｎ＝１１）について、最初の３時点のヘプシジン濃度を評価したところ、試験群ではヘプシジンの全体的な減少傾向を示すのに対して（患者６人のうちの５人）、対照群では患者５人のうちの４人について、ヘプシジン濃度の増加傾向が検出された（図７Ａおよび図７Ｂ）。図７Ａおよび図７Ｂにおいて、Ｔ０は、処置開始前の各患者の値を指す。Ｔ１はちょうど処置１週間後に得られた値を指し、Ｔ４は処置５週間後の値を指す。興味深いことに、最初の１週間後の値Ｔ１はヘプシジンの典型的な増加を反映しているが、これは、透析処置の開始による慢性炎症の発症を反映していると考えられる。対照群では１人の患者を除いて、ヘプシジンの値は、予想通り増加傾向を示している。試験計画に従ってＴｈｅｒａｌｉｔｅ（登録商標）透析器を用いて処置している群では１人の患者を除いて、ヘプシジン濃度の減少を見ることができる。
【０１２５】
κおよびλＦＬＣ（それぞれＭＷ２３ｋＤａおよび４５ｋＤａ）は十分に説明されている毒性の中分子であり、分子量の範囲が１２ｋＤａから４５ｋＤａに及ぶが、ハイフラックス血液透析とは対照的にＴｈｅｒａｌｉｔｅ（登録商標）によって血液から極めて排除しやすいものであると予想された。
【０１２６】
炎症促進性サイトカインＩＬ−６（２２ｋＤａから２７ｋＤａ）のレベルは、ＩＬ−１、ＴＮＦ−アルファおよびＣＲＰと同様に、ＣＫＤ患者で上昇している。主な原因は、非生体適合膜および非滅菌透析液の使用であると思われる。サイトカイン誘発炎症はＨＤ患者における骨髄の赤血球産生を抑制すると記載されており、貧血の原因であると考察されている（Ｋａｎｂａｙ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｌｏｏｄ  Ｐｕｒｉｆ  ２０１０）。ＩＬ−６は、炎症中のヘプシジン産生の上昇に対して直接的な影響を有する（Ｋｏｔａｎｋｏ  ａｎｄ  Ｌｅｖｉｎ  Ｓｅｍｉｎａｒｓ  ｉｎ  Ｄｉａｌｙｓｉｓ  ２００６）。
【０１２７】
ＩＬ−１０（１８ｋＤａ）は、ＥＳＲＤ患者における炎症反応の抑制において、抗炎症サイトカインとして重要な役割を果たしていると思われる。ＩＬ−１０の分泌は、炎症促進性因子の放出に対して数時間の潜時を伴って起こり、一定時間後に炎症反応を確実にダウンレギュレーションする。ＩＬ−１０の産生は、腎代替療法中に、非生体適合反応を媒介する内毒素および活性化補体断片により刺激される（Ｓｔｅｎｖｉｋｅｌ  ｅｔ  ａｌ．ＫＩ  ２００５）。
【０１２８】
試験および経過観察期間中のＥＳＡ反応性の改善レベルを規定するために、体重１ｋｇあたりのＥＳＡ週用量をヘモグロビン（ｇ／ｄＬ）で割ることにより、ＥＰＯ抵抗性指数を計算した。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【国際調査報告】
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