(57)【要約】  本発明は、１８Ｆ同位体が、ホラートまたはその誘導体のグルタマート部分に共有結合によって連結している補欠分子族を介して、より具体的には、好ましくはピラノシドまたはフラノシドをベースとする環式単糖またはオリゴ糖などの糖基を有する補欠分子族を介して連結している新たな１８Ｆ−ホラート放射性医薬品、その調製方法、さらに、癌ならびに炎症性および自己免疫疾患を診断およびモニタリングならびに治療する際のその使用を対象とする。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物：
【化１】
2014531411.tif 000020
［式中、
Ｚは、プテロアートまたはその誘導体であり、
Ｙ１、Ｙ２は互いに独立に、Ｏ、ＮまたはＳであり、
ｍは、１、２または３であり、
Ｑ１、Ｑ２は互いに独立に、Ｈ、保護基または下式の基であり：
−Ｌ−Ａ−Ｌ’−１８Ｆ
ここで、
Ｌ、Ｌ’は互いに独立に、連結基、例えば、共有結合か、あるいは非置換かまたは少なくとも１個のＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＯ２Ｈ、ＮＯ２によって置換されていて、非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−、−Ｓ−Ｒ’−、−ＳＯ３Ｒ’−または５員もしくは６員の複素環（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルであり、
Ａは、糖基であり、
ただし、Ｑ１およびＱ２のうちの少なくとも１個は、式−Ｌ−Ａ−Ｌ’−１８Ｆの基であることを条件とする］。
【請求項２】
式Ｉａ、Ｉｂ、Ｉｃを有する、請求項１に記載の化合物：
【化２】
2014531411.tif 000021
［式中、
Ｚは、プテロアートまたはその誘導体であり、
Ｙ１、Ｙ２は互いに独立に、Ｏ、ＮまたはＳであり、
ｍは、１、２または３であり、
Ｌ１、Ｌ１’、Ｌ２、Ｌ２’は互いに独立に、連結基、例えば、共有結合か、あるいは非置換かまたは少なくとも１個のＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＯ２Ｈ、ＮＯ２によって置換されていて、非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−、−Ｓ−Ｒ’−、−ＳＯ３Ｒ’−または５員もしくは６員の複素環（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜５０）アルキルであり、
Ａ１、Ａ２は互いに独立に、糖基であり、
Ｂ１、Ｂ２は互いに独立に、Ｈまたは保護基である］。
【請求項３】
式ＩＩを有する、請求項１に記載の化合物：
【化３】
2014531411.tif 000022
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は互いに独立に、Ｃ、ＮまたはＯ、好ましくはＮまたはＯであり、
Ｒ１、Ｒ２は互いに独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯＯＲ５、−ＮＨＲ５、−ＣＯＮＨＲ５、−ＣＯＮＨＲ５（ここで、Ｒ５は、Ｈ、ハロ、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、−ＣＯＯＲ’または−ＮＨＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルである）を表す）であり、
Ｒ３、Ｒ４は互いに独立に、Ｈ、ニトロソ、Ｃ（１〜１２）アルキル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’またはハロ置換−ＣＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）であり、
Ｙ１、Ｙ２は互いに独立に、Ｏ、ＮまたはＳであり、
ｍは、１、２または３であり、
ｒは、１〜７の値を有し、
ｐは、０または１であり、
Ｑ１、Ｑ２は互いに独立に、Ｈ、保護基または下式の基であり：
−Ｌ−Ａ−Ｌ’−１８Ｆ
ここで、
Ｌ、Ｌ’は互いに独立に、連結基、例えば、共有結合か、あるいは非置換かまたは少なくとも１個のＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＯ２Ｈ、ＮＯ２によって置換されていて、非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−、−Ｓ−Ｒ’−、−ＳＯ３Ｒ’−または５員もしくは６員の複素環（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜５０）アルキルであり、
Ａは、糖基であり、
ただし、Ｑ１およびＱ２のうちの少なくとも１個は、式−Ｌ−Ａ−Ｌ’−１８Ｆの基であることを条件とする］。
【請求項４】
式ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩｃを有する、請求項１〜３のいずれか一つに記載の化合物：
【化４】
2014531411.tif 000023
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は互いに独立に、Ｃ、ＮまたはＯ、好ましくはＮまたはＯであり、
Ｒ１、Ｒ２は互いに独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯＯＲ５、−ＮＨＲ５、−ＣＯＮＨＲ５、−ＣＯＮＨＲ５（ここで、Ｒ５は、Ｈ、ハロ、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、−ＣＯＯＲ’または−ＮＨＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルである）を表す）であり、
Ｒ３、Ｒ４は互いに独立に、Ｈ、ニトロソ、Ｃ（１〜１２）アルキル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’またはハロ置換−ＣＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）であり、
Ｙ１、Ｙ２は互いに独立に、Ｏ、ＮまたはＳであり、
ｍは、１、２または３であり、
ｒは、１〜７の値を有し、
ｐは、０または１であり、
Ｌ１、Ｌ１’、Ｌ２、Ｌ２’は互いに独立に、連結基、例えば、共有結合か、あるいは非置換かまたは少なくとも１個のＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＯ２Ｈ、ＮＯ２によって置換されていて、非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−、−Ｓ−Ｒ’−、−ＳＯ３Ｒ’−または５員もしくは６員の複素環（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜５０）アルキルであり、
Ａ１、Ａ２は互いに独立に、糖基であり、
Ｂ１、Ｂ２は互いに独立に、Ｈまたは保護基である］。
【請求項５】
糖基が、好ましくはアロース、アルトロース、グルコース、マンノース、グロース、イドース、ガラクトースおよびタロースから選択されるピラノシド、または好ましくはリボース、アラビノース、キシロースおよびリキソースから選択されるフラノシドをベースとする環式単糖または環式オリゴ糖である、請求項１〜４のいずれか一つに記載の化合物。
【請求項６】
糖基が、グルコースおよびガラクトースから選択される環式単糖である、請求項１〜５のいずれか一つに記載の化合物。
【請求項７】
式ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＩＩｃを有する、請求項１〜６のいずれか一つに記載の化合物：
【化５】
2014531411.tif 000024
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は互いに独立に、Ｃ、ＮまたはＯ、好ましくはＮまたはＯであり、
Ｒ１、Ｒ２は互いに独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯＯＲ５、−ＮＨＲ５、−ＣＯＮＨＲ５、−ＣＯＮＨＲ５（ここで、Ｒ５はＨ、ハロ、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、−ＣＯＯＲ’または−ＮＨＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルである）を表す）であり、
Ｒ３、Ｒ４は互いに独立に、Ｈ、ニトロソ、Ｃ（１〜１２）アルキル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’またはハロ置換−ＣＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）であり、
Ｙ１、Ｙ２は互いに独立に、Ｏ、ＮまたはＳであり、
ｍは、１、２または３であり、
ｒは、１〜７の値を有し、
ｐは、０または１であり、
Ｌ１、Ｌ１’、Ｌ２、Ｌ２’は互いに独立に、連結基、例えば、共有結合か、あるいは非置換かまたは少なくとも１個のＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＯ２Ｈ、ＮＯ２によって置換されていて、非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−、−Ｓ−Ｒ’−、−ＳＯ３Ｒ’−または５員もしくは６員の複素環（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルであり、
Ｂ１、Ｂ２は互いに独立に、Ｈまたは保護基であり、
Ｒ６、Ｒ９は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルであり、
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１０、Ｒ１１は互いに独立に、Ｈ、−ＯＨまたは−ＯＣ（１〜８）アルキルである］。
【請求項８】
Ｌ１およびＬ２が互いに独立に、非置換かまたはＨａｌ、ＯＨ、ＮＨＲ’、ＣＯ２Ｒ’から選択される少なくとも１個の基によって置換されていて、非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’または５員もしくは６員の複素環、好ましくは５員のアザ複素環（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜２４）アルキルである、請求項２〜７のいずれか一つに記載の化合物。
【請求項９】
Ｌ１およびＬ２が、互いに独立に、式（ａ）、（ｂ）、（ｃ）または（ｄ）の基である、請求項２〜８のいずれか一つに記載の化合物：
【化６】
2014531411.tif 000025
［式中、
Ｒ”は、Ｈであるか、あるいは非置換かまたは少なくとも１個のＣＮ、ＨａｌもしくはＮＯ２によって置換されている直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルであり、
Ｓｐは、スペーサー（Ｙ１および／またはＹ２に連結）、例えば、非置換であるかまたは−ＣＨ２−基のうちの少なくとも１個が、−ＯＨ、−ＮＨＲ’もしくは−ＣＯＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）で置換されている直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルであり、
ｑは、０、１、２、３または４である］。
【請求項１０】
Ｌ１’およびＬ２’が、好ましくは共有結合であるか、あるいは非置換かまたはＨａｌ、ＯＨ、ＮＨＲ’、ＣＯ２Ｒ’から選択される少なくとも１個の基によって置換されていて、非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜２４）アルキル、より好ましくはＣ（１〜１２）アルキル、最も好ましくはＣ（１〜６）アルキルである、請求項２〜９のいずれか一つに記載の化合物。
【請求項１１】
Ｙ１および／またはＹ２がＮであり、Ｂ２がカルボキサミド保護基である、請求項１〜１０のいずれか一つに記載の化合物。
【請求項１２】
式ＩＶａ、ＩＶｂ、ＩＶｃ、ＩＶｄを有する、請求項１〜１１のいずれか一つに記載の化合物：
【化７】
2014531411.tif 000026
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は互いに独立に、Ｃ、ＮまたはＯ、好ましくはＮまたはＯであり、
Ｒ１、Ｒ２は互いに独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯＯＲ５、−ＮＨＲ５、−ＣＯＮＨＲ５（ここで、Ｒ５は、Ｈ、ハロ、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、−ＣＯＯＲ’または−ＮＨＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルである）を表す）であり、
Ｒ３、Ｒ４は互いに独立に、Ｈ、ニトロソ、Ｃ（１〜１２）アルキル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’またはハロ置換−ＣＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）であり、
ｍは、１、２または３であり、
ｒは、１〜７の値を有し、
ｐは、０または１であり、
Ｙ１は、Ｏ、ＮまたはＳであり、
Ｂ１は、Ｈまたは保護基であり、
Ｒ”は、非置換かまたは少なくとも１個のＣＮ、ＨａｌまたはＮＯ２によって置換されている直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルであり、
Ｌ２’は、共有結合であるか、あるいは非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜６）アルキルであり、
Ｓｐは、スペーサー、例えば、非置換であるか、または−ＣＨ２−基のうちの少なくとも１個が、−ＯＨ、−ＮＨＲ’もしくは−ＣＯＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）で置換されている直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルであり、
ｑは、０、１、２、３または４であり、
Ｒ６は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルであり、
Ｒ７、Ｒ８は互いに独立に、Ｈ、−ＯＨまたは−ＯＣ（１〜８）アルキルである］。
【請求項１３】
式Ｖａ、Ｖｂ、Ｖｃ、Ｖｄを有する、請求項１〜１２のいずれか一つに記載の化合物：
【化８】
2014531411.tif 000027
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は互いに独立に、Ｃ、ＮまたはＯ、好ましくはＮまたはＯであり、
Ｒ１、Ｒ２は互いに独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯＯＲ５、−ＮＨＲ５、−ＣＯＮＨＲ５（ここで、Ｒ５は、Ｈ、ハロ、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、−ＣＯＯＲ’または−ＮＨＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルである）を表す）であり、
Ｒ３、Ｒ４は互いに独立に、Ｈ、ニトロソ、Ｃ（１〜１２）アルキル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’またはハロ置換−ＣＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）であり、
ｍは、１、２または３であり、
ｒは、１〜７の値を有し、
ｐは、０または１であり、
Ｙ２は、Ｏ、ＮまたはＳであり、
Ｂ２は、Ｈまたは保護基であり、
Ｒ”は、Ｈであるか、あるいは非置換かまたは少なくとも１個のＣＮ、ＨａｌまたはＮＯ２によって置換されている直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルであり、
Ｓｐは、スペーサー、例えば、非置換であるかまたは−ＣＨ２−基のうちの少なくとも１個が、−ＯＨ、−ＮＨＲ’もしくは−ＣＯＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）で置換されている直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルであり、
Ｌ１’は、共有結合であるか、あるいは非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜６）アルキルであり、
ｑは、０、１、２、３または４であり、
Ｒ９は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルであり、
Ｒ１０、Ｒ１１は互いに独立に、Ｈ、−ＯＨまたは−ＯＣ（１〜８）アルキルである］。
【請求項１４】
式ＶＩａ、ＶＩｂ、ＶＩｃ、Ｖｉｄを有する、請求項１〜１３のいずれか一つに記載の化合物：
【化９】
2014531411.tif 000028
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は互いに独立に、Ｃ、ＮまたはＯ、好ましくはＮまたはＯであり、
Ｒ１、Ｒ２は互いに独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯＯＲ５、−ＮＨＲ５、−ＣＯＮＨＲ５（ここで、Ｒ５は、Ｈ、ハロ、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、−ＣＯＯＲ’または−ＮＨＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルである）を表す）であり、
Ｒ３、Ｒ４は互いに独立に、Ｈ、ニトロソ、Ｃ（１〜１２）アルキル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’またはハロ置換−ＣＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）であり、
ｍは、１、２または３であり、
ｒは、１〜７の値を有し、
ｐは、０または１であり、
Ｒ”は、Ｈであるか、あるいは非置換かまたは少なくとも１個のＣＮ、ＨａｌもしくはＮＯ２によって置換されている直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルであり、
Ｓｐは、スペーサー、例えば、非置換であるかまたは−ＣＨ２−基のうちの少なくとも１個が、−ＯＨ、−ＮＨＲ’もしくは−ＣＯＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）で置換されている直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルであり、
Ｌ１’、Ｌ２’は互いに独立に、共有結合か、あるいは非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜６）アルキルであり、
ｑは、０、１、２、３または４であり、
Ｒ６、Ｒ９は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルであり、
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１０、Ｒ１１は互いに独立に、Ｈ、−ＯＨまたは−ＯＣ（１〜８）アルキルである］。
【請求項１５】
ｍが２である、請求項１〜１４のいずれか一つに記載の化合物。
【請求項１６】
ｑが０である、請求項９〜１５のいずれか一つに記載の化合物。
【請求項１７】
式ＶＩＩａ、ＶＩＩｂ、ＶＩＩｃ、ＶＩＩｄを有する、請求項１〜１６のいずれか一つに記載の化合物：
【化１０】
2014531411.tif 000029
［式中、
Ｙ３、Ｙ４は互いに独立に、Ｈ、ハロ、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、−ＣＯＯＲ’および−ＮＨＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルである）から選択され、
Ｙ５は、Ｈ、ニトロソ、Ｃ（１〜１２）アルキル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’およびハロ置換−ＣＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜１２）アルキルである）から選択され、
ｍは、１、２または３であり、
Ｙ１は、Ｏ、ＮまたはＳであり、
Ｂ１は、Ｈまたは保護基であり、
Ｓｐは、スペーサー、例えば  非置換であるかまたは−ＣＨ２−基のうちの少なくとも１個が、−ＯＨ、−ＮＨＲ’もしくは−ＣＯＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）で置換されている直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルであり、
Ｌ２’は、共有結合であるか、あるいは非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜６）アルキルであり、
ｑは、０、１、２、３または４であり、
Ｒ６は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルであり、
Ｒ７、Ｒ８は互いに独立に、Ｈ、−ＯＨまたは−ＯＣ（１〜８）アルキルである］。
【請求項１８】
式ＶＩＩＩａ、ＶＩＩＩｂ、ＶＩＩＩｃ、ＶＩＩＩｄを有する、請求項１〜１７のいずれか一つに記載の化合物：
【化１１】
2014531411.tif 000030
［式中、
Ｙ３、Ｙ４は互いに独立に、Ｈ、ハロ、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、−ＣＯＯＲ’および−ＮＨＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルである）から選択され、
Ｙ５は、Ｈ、ニトロソ、Ｃ（１〜１２）アルキル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’およびハロ置換−ＣＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜１２）アルキルである）から選択され、
ｍは、１、２または３であり、
Ｙ２は、Ｏ、ＮまたはＳであり、
Ｂ２は、Ｈまたは保護基であり、
Ｓｐは、スペーサー、例えば、非置換であるか、または−ＣＨ２−基のうちの少なくとも１個が、−ＯＨ、−ＮＨＲ’もしくは−ＣＯＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）で置換されている直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルであり、
Ｌ１’は、共有結合であるか、あるいは非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜６）アルキルであり、
ｑは、０、１、２、３または４であり、
Ｒ９は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルであり、
Ｒ１０、Ｒ１１は互いに独立に、Ｈ、−ＯＨまたは−ＯＣ（１〜８）アルキルである］。
【請求項１９】
式ＩＸａ、ＩＸｂ、ＩＸｃ、ＩＸｄを有する、請求項１〜１８のいずれか一つに記載の化合物：
【化１２】
2014531411.tif 000031
［式中、
Ｙ３、Ｙ４は互いに独立に、Ｈ、ハロ、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、−ＣＯＯＲ’および−ＮＨＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルである）から選択され、
Ｙ５は、Ｈ、ニトロソ、Ｃ（１〜１２）アルキル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’およびハロ置換−ＣＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜１２）アルキルである）から選択され、
ｍは、１、２または３であり、
Ｓｐは互いに独立に、スペーサー、例えば、非置換であるかまたは−ＣＨ２−基のうちの少なくとも１個が、−ＯＨ、−ＮＨＲ’もしくは−ＣＯＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）で置換されている直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルであり、
Ｌ１’、Ｌ２’は互いに独立に、共有結合であるか、あるいは非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜６）アルキルであり、
ｑは、０、１、２、３または４であり、
Ｒ６、Ｒ９は互いに独立に、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルであり、
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１０、Ｒ１１は互いに独立に、Ｈ、−ＯＨまたは−ＯＣ（１〜８）アルキルである］。
【請求項２０】
少なくとも１種の、請求項１〜１９のいずれか一つに記載の化合物を含む、医薬組成物。
【請求項２１】
ホラート受容体を発現している細胞または細胞集団をｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏで診断イメージングするための、請求項１〜１９のいずれか一つに記載の化合物の使用または請求項２０に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
診断イメージングを必要とする対象に、簡便かつ有効に投与するための、請求項１〜１９のいずれか一つに記載の化合物の使用または請求項２０に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
ホラート受容体を発現している細胞または細胞集団を診断イメージングする方法であって、少なくとも１種の、請求項１〜１９のいずれか一つに記載の化合物を診断イメージング量で投与するステップと、前記細胞または細胞集団の診断イメージを得るステップとを含む方法。
【請求項２４】
診断イメージングを、ホラート受容体を発現している細胞または細胞集団でｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏで行う、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
組織試料においてホラート受容体を発現している細胞をｉｎ  ｖｉｔｒｏで検出する方法であって、前記組織試料を、結合を生じさせるために有効な量の請求項１〜１９のいずれか一つに記載の化合物と十分な時間および条件で接触させるステップと、ＰＥＴイメージングによってそのような結合を検出するステップとを包含する方法。
【請求項２６】
対象を診断イメージングおよび／またはモニタリングする方法であって、（ｉ）少なくとも１種の、請求項１〜１９のいずれか一つに記載の化合物を診断イメージング量で投与するステップと、（ｉｉ）前記少なくとも１種の化合物からのシグナルを検出することによって、ＰＥＴを使用する診断イメージングを行うステップとを含む方法。
【請求項２７】
対象において癌療法をモニタリングする方法であって、（ｉ）それを必要とする対象に、少なくとも１種の、請求項１〜１９のいずれか一つに記載の化合物を診断イメージング量で、選択された治療活性な化合物と組み合わせて投与するステップと、（ｉｉ）癌療法の経過に従うように、前記少なくとも１種の化合物からのシグナルを検出することによって、ＰＥＴを使用する診断イメージングを行うステップとを含む方法。
【請求項２８】
任意の他の癌診断方法または癌療法と組み合わせて使用される、請求項２６または２７に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、１８Ｆ同位体が、ホラートまたはその誘導体のグルタマート部分に共有結合によって連結している補欠分子族を介して、より具体的には、環式単糖およびオリゴ糖などの糖基を含む補欠分子族を介して連結している新たな１８Ｆ−ホラート放射性医薬品、その調製方法、さらに、癌ならびに炎症性および自己免疫疾患を診断およびモニタリングならびに治療する際のその使用を対象とする。
【背景技術】
【０００２】
診断薬または治療薬などのエフェクター部分を送達するための細胞特異的標的化は、広く研究されている分野であり、非侵襲性の診断用および／または治療用医学的用途の開発をもたらしている。とりわけ電磁放射線をγ線または光子もしくは粒子放出放射線として放出する放射性材料を利用する核医学手順および治療の分野では、他の組織、例えば健康な組織における放射線傷害のリスクを伴うことなく、特異的な組織を可視化して、疾患を推定し、かつ／または治療的処置の効果をモニタリングするための高いシグナル強度か、または適切な線量の電離放射線を特異的疾患部位に送達するための高い放射線量かのいずれかを達成するために、これらの放射性材料を標的化細胞または組織に選択的局在化することが必要である。したがって、個々の生物学的ビヒクルによって特異的に標的化され得る受容体、抗原、ハプテンなどの細胞特異的構造、とりわけ、腫瘍（すなわち癌）または炎症性および自己免疫疾患の場合に存在する構造を決定および推定することは、重大な関心事である。
【０００３】
ホラート受容体（ＦＲ）は、これらの構造のうちの１種と同定されている。ＦＲは、高親和性（ＫＤ＜１０−９Ｍ）膜結合タンパク質である。正常な組織および臓器では、ＦＲ発現は、いくつかの臓器（例えば、腎臓、肺、脈絡叢、および胎盤）のみに高度に限られ、それらの臓器では、ホラート受容体は、上皮細胞の管腔側に広く存在し、したがって、循環中のホラートを供給されない。ＦＲαは多くの場合に、上皮性腫瘍（例えば、卵巣、子宮頸部、子宮内膜、乳房、結腸直腸、腎臓、肺、鼻咽頭の上皮性腫瘍細胞）などの幅広い様々な特異的細胞種では過剰発現される一方で、ＦＲβは多くの場合に、白血病細胞で過剰発現される（急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）のうちの約７０％は、ＦＲβ陽性である）。したがって両方とも、選択的腫瘍標的化のための価値ある腫瘍マーカーとして使用することができる（ＥｌｎａｋａｔおよびＲａｔｎａｍ、Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．２００４；５６：１０６７〜８４頁（非特許文献１））。加えて、ＦＲβアイソフォームが、活性化（ただし、休止していない）マクロファージで見出されている。活性化マクロファージは、例えば、関節リウマチ、乾癬、クローン病、潰瘍性大腸炎、全身性エリテマトーデス、アテローム硬化症、糖尿病、変形性関節症、糸球体腎炎、感染などの炎症性病理に関係している。
【０００４】
文献によって、炎症部位を検出／位置特定するための、ホラートをベースとするイメージング薬、さらに、これらの疾患のホラート受容体標的化治療のいくつかの前臨床研究が報告されている。最近では、ＦｏｌａｔｅＳｃａｎを使用する、関節リウマチを有する患者におけるイメージング研究の結果を報告する臨床試験が公開された（Ｔｕｒｋら、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ａｎｄ  Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ  ２００２、４５、１９４７〜１９５５頁（非特許文献２）；Ｐａｕｌｏｓら、Ａｄｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．２００４、５６、１２０５〜１２１７頁（非特許文献３）；Ｃｈｅｎら、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ＆  Ｔｈｅｒａｐｙ  ２００５、７、３１０〜３１７頁（非特許文献４）；Ｈａｔｔｏｒｉら、Ｂｉｏｌ．＆  Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．２００６、２９、１５１６〜１５２０頁（非特許文献５）；Ｃｈａｎｄｒａｓｅｋａら、Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｍａｔ．Ｒｅｓ．Ｐａｒｔ  Ａ  ２００７、８２、９２〜１０３頁（非特許文献６）；Ｖａｒｇｈｅｓｅら、Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ  ２００７、４、６７９〜６８５頁（非特許文献７）；Ｌｏｗら、Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ａｎｄ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ｆｏｌｉｃ−ａｃｉｄ−ｂａｓｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｆｏｒ  ｉｍａｇｉｎｇ  ａｎｄ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  ｃａｎｃｅｒ  ａｎｄ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｄｉｓｅａｓｅｓ  ２００８、４１、１２０〜１２９頁（非特許文献８）；Ｍａｔｔｅｓｏｎら、Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ  ２００９、２７、２５３〜２５９頁（非特許文献９））。
【０００５】
したがって、ベンゾイルアミノ部分を介してグルタマートに共役しているプテリジン骨格をベースとする葉酸およびその誘導体は、治療薬および／または診断薬を、ホラート受容体を有する細胞集団に送達して、正常な細胞に対してそのような細胞において治療薬および／または診断薬の選択的濃縮を達成するための標的作用物質として過去１５年間にわたって集中して研究されている。
【０００６】
様々な葉酸誘導体およびコンジュゲートが知られており、（前）臨床で評価されており、それらには、ホラート放射性医薬品（ＬｅａｍｏｎおよびＬｏｗ、Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．Ｔｏｄａｙ  ２００１；６：４４〜５１頁（非特許文献１０）；米国特許第４，２７６，２８０号（特許文献１））、フッ素化ホラート化学療法薬（米国特許第４，６２８，０９０号（特許文献２））、化学療法薬とのホラートコンジュゲート（ＬｅａｍｏｎおよびＲｅｄｄｙ、Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．２００４；５６：１１２７〜４１頁（非特許文献１１）；Ｌｅａｍｏｎら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．２００５；１６：８０３〜１１頁（非特許文献１２））、タンパク質およびタンパク質毒素とのホラートコンジュゲート（Ｗａｒｄら、Ｊ．Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔ．２０００；８：１１９〜２３頁（非特許文献１３）；Ｌｅａｍｏｎら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９９３；２６８：２４８４７〜５４頁（非特許文献１４）；ＬｅａｍｏｎおよびＬｏｗ，Ｊ．Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔ．１９９４；２：１０１〜１２頁（非特許文献１５））、アンチセンスオリゴヌクレオチド（ｏｌｉｃｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ）とのホラートコンジュゲート（Ｌｉら、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１９９８；１５：１５４０〜４５頁（非特許文献１６）；ＺｈａｏおよびＬｅｅ、Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．２００４；５６：１１９３〜２０４頁（非特許文献１７））、リポソームとのホラートコンジュゲート（ＬｅｅおよびＬｏｗ、Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ−Ｂｉｏｍｅｍｂｒ．１９９５；１２３３：１３４〜４４頁（非特許文献１８）；Ｇａｂｉｚｏｎら、Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．２００４；５６：１１７７〜９２頁（非特許文献１９））、ハプテン分子とのホラートコンジュゲート（Ｐａｕｌｏｓら、Ａｄｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．２００４；５６：１２０５〜１７頁（非特許文献３））；ＭＲＩコントラスト剤とのホラートコンジュゲート（Ｋｏｎｄａら、Ｍａｇｎ．Ｒｅｓｏｎ．Ｍａｔ．Ｐｈｙｓ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．２００１；１２：１０４〜１３頁（非特許文献２０））などが包含される。
【０００７】
ホラート放射性医薬品はとりわけ、癌ならびに炎症性および自己免疫疾患治療の有効性の診断および評価の改善に非常に有用であり得る。これは、治療応答の推定および／または予測と、その結果として、放射線の線量測定の改善とを包含し得る。放射性イメージングに適した典型的な可視化技法は、当技術分野で知られており、陽電子放射型断層撮影法（ＰＥＴ）、プレーナーまたは単一光子放出型コンピュータ断層撮影（ＳＰＥＣＴ）イメージング、γカメラ、シンチレーションなどが包含される。
【０００８】
選択された標的部位をイメージングし、マッピングし、かつその活性を測定するために、ＰＥＴおよびＳＰＥＣＴは両方とも、放射性トレーサーを使用する。ＰＥＴがいまだに、近接するサイクロトロンを必要とする陽電子放出性核種を使用する一方で、ＳＰＥＣＴは、発生器システムによって利用可能な単一光子放出性核種を使用し、そのことによって、その使用はより簡単になり得ている。しかしながらＳＰＥＣＴは、ＰＥＴよりも低い感度を示し、僅かな手法の他には、定量化方法を欠いている。ＰＥＴの場合には、陽電子消滅は、十分に開発された定量化方法のベースとなる２つの５１１ｋｅＶのγ線をもたらす。したがって、ＰＥＴは、脳および他の臓器における局部取り込みおよびリガンドまたは代謝基質の親和性を推定するための最も高性能な機能的イメージング技術の１種であり、したがって、代謝活性に基づくイメージング手段をもたらしている。これは例えば、陽電子放出性同位体を対象に投与することによって達成され、これが放射性崩壊を受けるときに、陽電子／電子消滅から生じるγ線をＰＥＴスキャナーによって検出する。
【０００９】
ＰＥＴのために有用な適切な同位体を選択する際に考慮する必要のある因子には、患者に投与する前に、場合によって薬学的に許容可能な担体中で診断組成物を調製することを可能にする陽電子放出性同位体の十分な半減期と、ＰＥＴスキャンによる体外測定を可能にする十分な活性を得るための十分な残存半減期とが包含される。さらに、不必要な放射線への患者の曝露を制限するために、適切な同位体は、十分に短い半減期を有するべきである。典型的には、ＰＥＴに適した放射性医薬品は、ガリウムまたは銅などの金属同位体をベースとし得る。しかしながら、これら２種は、金属を捕捉するためのキレーターを必要とし、このことは、立体化学的特性および化学的特性に影響を有し得る。別法では、放射性医薬品は、軽微な構造的改変をもたらす共有結合によって連結された同位体をベースとし得る。共有結合によって付着させるために使用され、ＰＥＴスキャニングに適し得るであろう放射性核種は典型的には、１１Ｃ（約２０分）、１３Ｎ（約１０分）、１５Ｏ（約２分）、１８Ｆ（約１１０分）などの短い半減期を有する同位体である。
【００１０】
今日までに、キレートをベースとするホラート放射性医薬品がいくつか合成されており、ホラート受容体陽性腫瘍をイメージングするための診断薬として成功裏に評価されている（例えば、ＳＰＥＣＴのためには１１１Ｉｎ、９９ｍＴｃ、および６７Ｇａを含むか（Ｌｅａｍｏｎら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ  Ｃｈｅｍ  ２００２、１３（６）：１２００頁（非特許文献２１）；Ｓｉｅｇｅｌら、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．２００３、４４：７００頁（非特許文献２２）；Ｍｕｅｌｌｅｒら、Ｊ．Ｏｒｇａｎｏｍｅｔ．Ｃｈｅｍ．２００４、６８９：４７１２頁（非特許文献２３）；Ｍｕｅｌｌｅｒら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ  Ｃｈｅｍ  ２００８、１７（３）：７９７頁（非特許文献２４）；Ｍｕｅｌｌｅｒら、Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ  ２０１１、３８（５）：７１５頁（非特許文献２５））、またはＰＥＴのためには６８Ｇａを含む（Ｍａｔｈｉａｓら、Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．２００３、３０（７）：７２５頁（非特許文献２６）；Ｆａｎｉら、Ｅｕｒ  Ｊ  Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ  Ｍｏｌ  Ｉｍａｇｉｎｇ  ２０１１、３８（１）：１０８頁（非特許文献２７））。
【００１１】
加えて、共有結合によって連結している同位体を有するホラート放射性医薬品、とりわけ、その優れたイメージング特性、１８Ｆの長い半減期（約１１０分）を理由として、かつ高分解能ＰＥＴで鮮鋭なイメージを可能にする最も低い陽電子エネルギーを有する陽電子を放出することによって、１８Ｆは崩壊することを理由として、１８Ｆ標識ホラート放射性医薬品の重要性が高まっている。さらに、（６８Ｇａなどの他の同位体と比較して）長い１８Ｆの半減期は、より複雑な合成および放射化学施設を備えていないＰＥＴセンターへのサテライト配給も可能にする。
【００１２】
今日までに、文献中の報告には、ホラート分子に直接か、または補欠分子族を介して連結している１８Ｆ同位体を有する１８Ｆ標識葉酸誘導体が包含される（ＷＯ２００６／０７１７５４（特許文献３）、ＷＯ２００８／０９８１１２（特許文献４）、ＷＯ２００８／１２５６１３（特許文献５）、ＷＯ２００８／１２５６１５（特許文献６）、ＷＯ２００８／１２５６１７（特許文献７）、Ｂｅｔｔｉｏら、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．、２００６、４７（７）、１１５３頁（非特許文献２８）；Ｒｏｓｓら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．、２００８、１９、２４０２頁（非特許文献２９）、Ｒｏｓｓら、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．、２０１０、５１（１１）、１７５６頁（非特許文献３０））。
【００１３】
いまだに、多くの方法がなお、低い放射化学的収率をもたらす時間のかかる放射性合成または分子イメージング目的には不都合な薬物動態などを包含する欠点を被っている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１４】
【特許文献１】米国特許第４，２７６，２８０号
【特許文献２】米国特許第４，６２８，０９０号
【特許文献３】ＷＯ２００６／０７１７５４
【特許文献４】ＷＯ２００８／０９８１１２
【特許文献５】ＷＯ２００８／１２５６１３
【特許文献６】ＷＯ２００８／１２５６１５
【特許文献７】ＷＯ２００８／１２５６１７
【非特許文献】
【００１５】
【非特許文献１】ＥｌｎａｋａｔおよびＲａｔｎａｍ、Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．２００４５６：１０６７〜８４頁
【非特許文献２】Ｔｕｒｋら、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ａｎｄ  Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ  ２００２、４５、１９４７〜１９５５頁
【非特許文献３】Ｐａｕｌｏｓら、Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．２００４、５６、１２０５〜１２１７頁
【非特許文献４】Ｃｈｅｎら、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ＆  Ｔｈｅｒａｐｙ  ２００５、７、３１０〜３１７頁
【非特許文献５】Ｈａｔｔｏｒｉら、Ｂｉｏｌ．＆  Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．２００６、２９、１５１６〜１５２０頁
【非特許文献６】Ｃｈａｎｄｒａｓｅｋａら、Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｍａｔ．Ｒｅｓ．Ｐａｒｔ  Ａ  ２００７、８２、９２〜１０３頁
【非特許文献７】Ｖａｒｇｈｅｓｅら、Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ  ２００７、４、６７９〜６８５頁
【非特許文献８】Ｌｏｗら、Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ａｎｄ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ｆｏｌｉｃ−ａｃｉｄ−ｂａｓｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｆｏｒ  ｉｍａｇｉｎｇ  ａｎｄ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  ｃａｎｃｅｒ  ａｎｄ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｄｉｓｅａｓｅｓ  ２００８、４１、１２０〜１２９頁
【非特許文献９】Ｍａｔｔｅｓｏｎら、Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ  ２００９、２７、２５３〜２５９頁
【非特許文献１０】ＬｅａｍｏｎおよびＬｏｗ、Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．Ｔｏｄａｙ  ２００１６：４４〜５１頁
【非特許文献１１】ＬｅａｍｏｎおよびＲｅｄｄｙ、Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．２００４５６：１１２７〜４１頁
【非特許文献１２】Ｌｅａｍｏｎら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．２００５１６：８０３〜１１頁
【非特許文献１３】Ｗａｒｄら、Ｊ．Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔ．２０００８：１１９〜２３頁
【非特許文献１４】Ｌｅａｍｏｎら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９９３２６８：２４８４７〜５４頁
【非特許文献１５】ＬｅａｍｏｎおよびＬｏｗ，Ｊ．Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔ．１９９４２：１０１〜１２頁
【非特許文献１６】Ｌｉら、  Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１９９８１５：１５４０〜４５頁
【非特許文献１７】ＺｈａｏおよびＬｅｅ、Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．２００４５６：１１９３〜２０４頁
【非特許文献１８】ＬｅｅおよびＬｏｗ、Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ−Ｂｉｏｍｅｍｂｒ．１９９５１２３３：１３４〜４４頁
【非特許文献１９】Ｇａｂｉｚｏｎら、Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．２００４５６：１１７７〜９２頁
【非特許文献２０】Ｋｏｎｄａら、Ｍａｇｎ．Ｒｅｓｏｎ．Ｍａｔ．Ｐｈｙｓ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．２００１１２：１０４〜１３頁
【非特許文献２１】Ｌｅａｍｏｎら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ  Ｃｈｅｍ  ２００２、１３（６）：１２００頁
【非特許文献２２】Ｓｉｅｇｅｌら、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．２００３、４４：７００頁
【非特許文献２３】Ｍｕｅｌｌｅｒら、Ｊ．Ｏｒｇａｎｏｍｅｔ．Ｃｈｅｍ．２００４、６８９：４７１２頁
【非特許文献２４】Ｍｕｅｌｌｅｒら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ  Ｃｈｅｍ  ２００８、１７（３）：７９７頁
【非特許文献２５】Ｍｕｅｌｌｅｒら、Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ  ２０１１、３８  （５）：７１５頁
【非特許文献２６】Ｍａｔｈｉａｓら、Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．２００３、３０（７）：７２５頁
【非特許文献２７】Ｆａｎｉら、Ｅｕｒ  Ｊ  Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ  Ｍｏｌ  Ｉｍａｇｉｎｇ  ２０１１、３８（１）：１０８頁
【非特許文献２８】Ｂｅｔｔｉｏら、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．、２００６、４７（７）、１１５３頁
【非特許文献２９】Ｒｏｓｓら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．、２００８、１９、２４０２頁
【非特許文献３０】Ｒｏｓｓら、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．、２０１０、５１（１１）、１７５６頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１６】
したがって、癌ならびに炎症性および自己免疫疾患の診断および治療を改善するために、腫瘍の代謝イメージングに適した特異的な放射性医薬品がなお必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
出願人らは、新たな１８Ｆ標識ホラート放射性医薬品を生産するための効率的かつ多角的な方法を見出し、その際、１８Ｆ同位体を、補欠分子族を介して、より具体的には、好ましくはピラノシドまたはフラノシドをベースとする環式単糖またはオリゴ糖などの糖基を有する補欠分子族を介して導入する。この基のうちの優れたメンバーは例えば、ヒトにおいて局部グルコース代謝率をｉｎ  ｖｉｖｏで評定するために世界で最も幅広く使用されているＰＥＴトレーサーのうちの１種である２−１８Ｆフルオロ−２−デオキシ−Ｄ−グルコース（１８Ｆ−ＦＤＧ）である。ＰＥＴで承認されている診断用使用には、心筋生存率の測定、ならびに癌、てんかん、およびアルツハイマー病の検出のためのその使用が包含される。しかしながら、１８Ｆ標識化合物を放射性合成するために、構成単位または補欠分子族として１８Ｆ−ＦＤＧを使用する例は、非常に僅かしかない。
【００１８】
出願人らは、新たな本発明の化合物が、低いリガンド濃度での標識効率の改善、より良好な生体内分布、標的組織取り込みの増加、ならびに非標的化組織および臓器からのより良好なクリアランスなどのいくつかの利点（例えば、その化学的および／または物理的特性によって、具体的にはその親水特性などによって）を示すことによって、既知のコンジュゲートの欠点を克服し、目下の必要性を適え得ることを見出した。
【００１９】
さらに、新たな本発明の化合物は、ヒトにおける臨床用途のための期待に応える良好な収率で得ることができる。加えて、新たな放射性合成は、ＧＭＰガイドラインの要件に適う迅速かつ簡便な標識手順を可能にする自動合成モジュールに適用可能である。先行するｉｎ−ｖｉｔｒｏおよびｉｎ−ｖｉｖｏ研究によって、ＦＲ陽性腫瘍のための強力な診断薬としてのそれらの適切性が示唆された。
【００２０】
本発明は、第１の態様では、ホラートと、ホラートのα−カルボン酸基もしくはγ−カルボン酸基のいずれか、またはα−カルボン酸基およびγ−カルボン酸基の両方に連結している１８Ｆ置換糖基とを含む新たな１８Ｆ−ホラートコンジュゲートを、より具体的には式Ｉの化合物を対象とする：
【００２１】
【化１】
2014531411.tif 000002
［式中、
Ｚは、プテロアートまたはその誘導体であり、
Ｙ１、Ｙ２は互いに独立に、Ｏ、Ｎ、またはＳであり、
ｍは、１、２、または３であり、
Ｑ１、Ｑ２は互いに独立に、Ｈ、保護基、または式−Ｌ−Ａ−Ｌ’−１８Ｆの基であり、ここで、
Ｌ、Ｌ’は互いに独立に、共有結合か、あるいは非置換か、または少なくとも１個のＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＯ２Ｈ、ＮＯ２によって置換されていて、非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−、−Ｓ−Ｒ’−、−ＳＯ３Ｒ’−、または５員もしくは６員の複素環（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルなどの連結基であり、
Ａは、糖基であるが、ただし、
Ｑ１およびＱ２のうちの少なくとも１個が、式−Ｌ−Ａ−Ｌ’−１８Ｆの基であることを条件とする］。
【００２２】
より具体的には、本発明は、式ＩＩを有する化合物を対象とする
【００２３】
【化２】
2014531411.tif 000003
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は互いに独立に、Ｃ、Ｎ、またはＯ、好ましくはＮまたはＯであり、
Ｒ１、Ｒ２は互いに独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯＯＲ５、−ＮＨＲ５、−ＣＯＮＨＲ５、−ＣＯＮＨＲ５（ここで、Ｒ５は、Ｈ、ハロ、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、または−ＮＨＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルである）を表す）であり、
Ｒ３、Ｒ４は互いに独立に、Ｈ、ニトロソ、Ｃ（１〜１２）アルキル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、またはハロ置換−ＣＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）であり、
Ｙ１、Ｙ２は互いに独立に、Ｏ、Ｎ、またはＳであり、
ｍは、１、２、または３であり、
ｒは、１〜７の値を有し、
ｐは、０または１であり、
Ｑ１、Ｑ２は互いに独立に、Ｈ、保護基、または下式の基であり：
−Ｌ−Ａ−Ｌ’−１８Ｆ
ここで、
Ｌ、Ｌ’は互いに独立に、共有結合か、あるいは非置換か、または少なくとも１個のＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＯ２Ｈ、ＮＯ２によって置換されていて、非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−、−Ｓ−Ｒ’−、−ＳＯ３Ｒ’−、または５員もしくは６員の複素環（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜５０）アルキルなどの連結基であり、
Ａは、糖基であるが、ただし、
Ｑ１およびＱ２のうちの少なくとも１個は、式−Ｌ−Ａ−Ｌ’−１８Ｆの基であることを条件とする］。
【００２４】
具体的な実施形態では、糖基は、好ましくはアロース、アルトロース、グルコース、マンノース、グロース、イドース、ガラクトース、およびタロースから選択されるピラノシド、または好ましくはリボース、アラビノース、キシロース、およびリキソースから選択されるフラノシド、好ましくはグルコースおよびガラクトースをベースとする環式単糖または環式オリゴ糖である。
【００２５】
したがって、具体的な実施形態では、本発明は、式ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＩＩｃを有する化合物を対象とする
【００２６】
【化３】
2014531411.tif 000004
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は互いに独立に、Ｃ、Ｎ、またはＯ、好ましくはＮまたはＯであり、
Ｒ１、Ｒ２は互いに独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯＯＲ５、−ＮＨＲ５、−ＣＯＮＨＲ５、−ＣＯＮＨＲ５（ここで、Ｒ５は、Ｈ、ハロ、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、または−ＮＨＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルである）を表す）であり、
Ｒ３、Ｒ４は互いに独立に、Ｈ、ニトロソ、Ｃ（１〜１２）アルキル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、またはハロ置換−ＣＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）であり、
Ｙ１、Ｙ２は互いに独立に、Ｏ、Ｎ、またはＳであり、
ｍは、１、２、または３であり、
ｒは、１〜７の値を有し、
ｐは、０または１であり、
Ｌ１、Ｌ１’、Ｌ２、Ｌ２’は互いに独立に、共有結合か、あるいは非置換か、または少なくとも１個のＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＯ２Ｈ、ＮＯ２によって置換されていて、非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−、−Ｓ−Ｒ’−、−ＳＯ３Ｒ’−、または５員もしくは６員の複素環（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルなどの連結基であり、
Ｂ１、Ｂ２は互いに独立に、Ｈまたは保護基であり、
Ｒ６、Ｒ９は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルであり、
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１０、Ｒ１１は互いに独立に、Ｈ、−ＯＨ、または−ＯＣ（１〜８）アルキルである］。
【００２７】
具体的な実施形態では、本発明の化合物は、位置異性的に純粋な形態である。したがって、一部の実施形態では、本発明の化合物は、α−カルボン酸基のみに連結している１８Ｆ置換糖基を含み、他の実施形態では、本発明の化合物は、ホラートのγ−カルボン酸基のみに連結している１８Ｆ置換糖基を含む。
【００２８】
さらなる態様では、本発明は、本発明の化合物（位置異性的に純粋な形態においてか、または位置異性体の混合物として）を合成する方法を提供する。
【００２９】
まださらなる態様では、本発明は、診断イメージング量と、場合により治療有効量の選択された治療薬と、薬学的に許容可能なそのための担体とを含む医薬組成物を提供する。
【００３０】
さらなる態様では、本発明は、診断イメージングまたは放射線治療法のモニタリングを必要とする対象に簡便かつ有効に投与するための本発明の化合物および／または医薬組成物の使用を提供する。本発明の方法の対象は好ましくは、動物またはヒトなどの哺乳動物、好ましくはヒトである。
【００３１】
さらなる態様では、本発明は、放射性核種イオンそれ自体以外の本発明の化合物を調製するために必要な成分の全てを含有する単一もしくは複数バイアルキットを提供する。
【００３２】
本発明の他の特徴および利点は、以下のその詳細な説明および特許請求の範囲から明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１Ａ】γ−ホラートアルキン前駆体の合成スキーム。
【図１Ｂ】α−ホラートアルキン前駆体の合成スキーム。
【図２Ａ】［１８Ｆ］−または［１９Ｆ］−グルコースホラート化合物のγ−位置異性体の合成スキーム。
【図２Ｂ】［１８Ｆ］−または［１９Ｆ］−グルコースホラート化合物のα−位置異性体の合成スキーム。
【図３】２種の位置異性体α−グルコースホラートおよびγ−グルコースホラートならびに葉酸の置換曲線（四角はγ−［１８Ｆ］−グルコースホラートを表し、菱形はα−［１８Ｆ］−グルコースホラートを表し、三角は葉酸を表す）。
【図４Ａ】注射後６０分目でのα−［１８Ｆ］−グルコースホラートとγ−［１８Ｆ］−グルコースホラートとの生体内分布データの比較。
【図４Ｂ】注射後９０分目でのα−［１８Ｆ］−グルコースホラートとγ−［１８Ｆ］−グルコースホラートとの生体内分布データの比較。
【図５】注射後７５〜１０５分時点での（ａ）：腫瘍、（ｂ）：肝臓、（ｃ）：胆嚢、（ｄ）：腎臓、（ｅ）：腸／糞便でのα−［１８Ｆ］−グルコースホラートおよびγ−［１８Ｆ］−グルコースホラートの最大強度ＰＥＴイメージ。
【発明を実施するための形態】
【００３４】
本発明は、第１の態様では、１８Ｆ置換糖基がホラートのα−カルボン酸基もしくはγ−カルボン酸基のいずれか、またはホラートのα−カルボン酸基およびγ−カルボン酸基の両方に連結している、プテロアートまたはホラート（またはその誘導体）と、１８Ｆ置換糖基（本明細書において下記では、本発明の化合物とも称される）とを含む新たな１８Ｆ−ホラートコンジュゲートを対象とし、より具体的には、式Ｉの化合物を対象とする
【００３５】
【化４】
2014531411.tif 000005
［式中、
Ｚは、プテロアートまたはその誘導体であり、
Ｙ１、Ｙ２は互いに独立に、Ｏ、Ｎ、またはＳであり、
ｍは、１、２、または３であり、
Ｑ１、Ｑ２は互いに独立に、Ｈ、保護基、または下式の基であり：
−Ｌ−Ａ−Ｌ’−１８Ｆ
ここで、
Ｌ、Ｌ’は互いに独立に、共有結合か、あるいは非置換か、または少なくとも１個のＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨＲ’、ＣＯＯＲ’、ＮＯ２によって置換されていて、非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−、−Ｓ−Ｒ’−、−ＳＯ３Ｒ’−、または５員もしくは６員の複素環（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜５０）アルキルなどの連結基であり、
Ａは、糖基であるが、ただし、
Ｑ１およびＱ２のうちの少なくとも１個は、式−Ｌ−Ａ−Ｌ’−１８Ｆの基であることを条件とする］。
【００３６】
より具体的には、式Ｉの化合物は、式Ｉａ、Ｉｂ、Ｉｃを有する化合物によって表され得る
【００３７】
【化５】
2014531411.tif 000006
［式中、
Ｚは、プテロアートまたはその誘導体であり、
Ｙ１、Ｙ２は互いに独立に、Ｏ、Ｎ、またはＳであり、
ｍは、１、２、または３であり、
Ｌ１、Ｌ１’、Ｌ２、Ｌ２’は互いに独立に、共有結合か、あるいは非置換か、または少なくとも１個のＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨＲ’、ＣＯＯＲ’、ＮＯ２によって置換されていて、非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−、−Ｓ−Ｒ’−、−ＳＯ３Ｒ’−、または５員もしくは６員の複素環（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜５０）アルキルなどの連結基であり、
Ａ１、Ａ２は互いに独立に、糖基であり、
Ｂ１、Ｂ２は互いに独立に、Ｈまたは保護基である］。
【００３８】
別段に規定されていない限り、本明細書において下記で示されている定義は全て、本明細書（全ての構造式を含めて）を通じて当てはまる。
【００３９】
用語「ホラート」は本明細書において使用する場合、ペプチド結合を介してグルタミン酸（またはその誘導体）にカップリングしているプテロアート基をベースとする化合物を指す。したがって、用語「プテロアート」は本明細書において使用する場合、アミノベンゾイル部分に連結している縮合ピリミジン複素環を表す。本明細書において使用する場合、「縮合ピリミジン複素環」には、さらなる５員または６員の複素環と縮合して、プテリジン（すなわち縮合６−６複素環）またはピロロピリミジン二環（すなわち縮合６−５複素環）が生じているピリミジンが包含される。縮合ピリミジン複素環の誘導体には、インドールおよびイソインドール、キノリンおよびイソキノリンなどの炭素環式誘導体が包含される。本明細書において使用する場合、「アミノベンゾイル部分に連結している縮合ピリミジン複素環」には、三縮合環系も包含され、すなわちその場合、アミノベンゾイル部分のアミノ基が、縮合ピリミジン複素環と共にさらなる縮合環を形成していて、縮合６−６−６、６−６−５、６−５−６、または６−５−５複素環を生じている。本明細書において使用する場合のホラートの好ましい代表は、ホラート骨格、すなわち、プテロイル−グルタミン酸、個々には、Ｎ−［４−［［（２−アミノ−１，４−ジヒドロ−４−オキソ−６−プテリジニル）メチル］アミノ］ベンゾイル］−Ｌ−（またはＤ−）グルタミン酸およびその誘導体をベースとする。したがって、プテロアート構造はホラート構造の前駆体であるので、プテロアートの好ましい代表は、類似の誘導体を、テトラヒドロプテリン、ジヒドロホラート、テトラヒドロホラート、ならびにそれらのデアザ類似体およびジデアザ類似体などの場合によって置換されている葉酸、ホリン酸、プテロポリグルタミン酸、５，１０−メテニル−５，６，７，８−テトラヒドロホラート、およびホラート受容体結合性プテリジンを包含するホラート構造で典型的に知られているものとして包含する。葉酸、５−メチル−（６Ｓ）−テトラヒドロ葉酸、および５−ホルミル−（６Ｓ）−テトラヒドロ葉酸は、本発明の化合物のために使用される好ましいベース構造である。用語「デアザ」および「ジデアザ」類似体は、炭素原子が天然に存在する葉酸構造中の１個または２個の窒素原子で置換されている当分野で認められている類似体を指す。例えば、デアザ類似体には、１−デアザ、３−デアザ、５−デアザ、８−デアザ、および１０−デアザ類似体が包含される。ジデアザ類似体には、例えば、１，５−ジデアザ、５，１０−ジデアザ、８，１０−ジデアザ、および５，８−ジデアザ類似体が包含される。好ましいデアザ類似体化合物には、Ｎ−［４−［２−［（６Ｒ）−２−アミノ−１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−４−オキソピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−６−イル］エチル］ベンゾイル］−Ｌ−グルタミン酸（ロメトレキソール）およびＮ−［４−［１−［（２，４−ジアミノ−６−プテリジニル）メチル］プロピル］ベンゾイル］−Ｌ−グルタミン酸（エダトレキサート）が包含される。
【００４０】
用語「糖基」は、環状単糖および環状糖単位（複数可）をベースとする環状オリゴ糖の両方を包含する。用語「糖単位」は、本明細書において使用する場合、直鎖（単／オリゴ）糖の細胞内環状ヘミアセタールまたはヘミケタール形態を指す環状糖単位を指す。単糖は、１個の糖単位を含む一方で、オリゴ糖は、糖単位からなる鎖を指し、好ましくは２〜２０の糖単位、好ましくは２〜１０の糖単位、より好ましくは単糖、二糖、および三糖を含む。オリゴ糖は、直鎖または分枝であってよく、オリゴ糖内の糖単位は互いに、α（１−２）、（１−４）、もしくは（１−６）、またはβ（１−２）、（１−４）、もしくは（１−６）結合によって連結している。好ましくは選択されるオリゴ糖は、直鎖であり、より好ましくは、オリゴ糖は直鎖であり、オリゴ糖内の糖単位は、α（１−４）またはβ（１−４）結合によって連結している。最も好ましい実施形態では、オリゴ糖は直鎖であり、オリゴ糖内の糖単位はα（１−４）結合によって連結している。
【００４１】
したがって、具体的な実施形態では、Ａ（またはＡ１およびＡ２）は、１〜１０個、好ましくは１〜６個、より好ましくは１、２、または３個の糖単位を含む。
【００４２】
好ましくは糖単位は、ピラノシドまたはフラノシド、およびそれらの天然および合成誘導体、好ましくはアロース、アルトロース、グルコース、マンノース、グロース、イドース、ガラクトース、タロース、およびフコースから選択されるピラノシド、またはリボース、アラビノース、キシロース、およびリキソースから選択されるフラノシドである。誘導体という用語は、任意の化学的または酵素的に修飾された単糖単位を指し、好ましくは水素原子、ハロゲン原子、アミノ基、またはチオール基などによる１個または複数のヒドロキシル基の酸化、脱酸素化、置き換え、さらにヒドロキシ基またはアミノ基のアルキル化、アシル化、硫酸化、またはリン酸化によって得られるものが包含される。本発明の好ましい糖単位には、例えば、グルコースおよびガラクトースが包含される。
【００４３】
したがって、具体的な一実施形態では、糖基Ａ（またはＡ１、Ａ２）は、リボース、アラビノース、キシロース、リキソース、アロース、アルトロース、グルコース、マンノース、グロース、イドース、ガラクトース、タロース、フコース、好ましくはグルコースおよびガラクトースから選択される単糖である。
【００４４】
他の具体的な実施形態では、糖基Ａ（またはＡ１、Ａ２）は、同じか、または異なり、それぞれリボース、アラビノース、キシロース、リキソース、アロース、アルトロース、グルコース、マンノース、グロース、イドース、ガラクトース、タロース、フコース、好ましくはグルコースおよびガラクトースからなる群から選択される少なくとも２、好ましくは２〜２０の糖単位を含むオリゴ糖である。
【００４５】
より具体的な実施形態では、オリゴ糖は、（ａ）二糖、例えばラクトース、マルトース、イソマルトース、セロビオース、ゲンチオビオース、メリビオース、プリメベロース、ルチノース；（ｂ）二糖同族体、例えば、マルトトリオース、イソマルトトリオース、マルトテトラオース、イソマルトテトラオース、マルトペンタオース、マルトヘキサオース、マルトヘプタオース、ラクトトリオース、ラクトテトラオース；（ｃ）ウロン酸、例えば、グルクロン酸、ガラクツロン酸；（ｄ）分枝オリゴ糖、例えば、パノース、イソパノース；（ｅ）アミノ単糖、例えば、ガラクトサミン、グルコサミン、マンノサミン、フコサミン、キノボサミン、ノイラミン酸、ムラミン酸、ラクトースジアミン、アコサミン、バシロサミン、ダウノサミン、デソサミン、ホロサミン、ガロサミン、カノサミン、カンソサミン、ミカミノース、ミコサミン、ペロサミン、プノイモサミン、プルプロサミン、ロドサミン；（ｆ）修飾糖、例えば、アベクオース、アミセトース、アルカノース、アスカリロース、ボイビノース、カコトリオース、カルコース、クラジノース、コリトース、シマロース、２−デオキシリボース、２−デオキシグルコース、ジギノース、ジギタロース、ジギトキソース、エバロース、エベルニトロース、ハマメロース、マンニノトリオース、メリビオース、ミカロース、ミシノース、ニゲロース、ノビオース、オレアンドロース、パラトース、ロジノース、ルチノース、サルメントース、セドヘプツロース、ソラトリオース、ソホロース、ストレプトース、ツラノース、チベロースであってよい。
【００４６】
より好ましい実施形態では、糖基Ａ（またはＡ１、Ａ２）は、単糖またはオリゴ糖であり、したがって、グルコース、ガラクトース、グルコサミン、ガラクトサミン、グルクロン酸、グルコン酸、ガラクツロン酸、ラクトース、ラクトテトラオース、マルトース、マルトトリオース、マルトテトラオース、イソマルトース、イソマルトトリオース、イソマルトテトラオース、およびノイラミン酸からなる群から選択される１つまたは複数の（同じか、または異なる）糖単位（複数可）を含む。
【００４７】
糖基Ａ、またはＡ１およびＡ２は、共有結合を介して直接か、または本明細書において定義するとおりのリンカーＬ’（またはＬ１’およびＬ２’）を介して、少なくとも１個の糖単位に連結していてよい少なくとも１個の１８Ｆ原子で置換されている。オリゴ糖の場合には、１８Ｆ原子は、オリゴ糖内の糖単位のうちの任意の糖単位に、好ましくはＡ、またはＡ１およびＡ２中の末端糖単位に連結していてよい。末端糖単位は、連結していないか（単糖の場合）、または１個の隣接する糖単位のみ（オリゴ糖の場合）に連結している糖単位を指す。本発明の化合物の鏡像異性体、ジアステレオ異性体、回転異性体、互変異性体、位置異性体（ｒｅｇｉｏｓｉｏｍｅｒ）、およびラセミ化合物を包含する全ての異性体が、本発明の一部であると企図されていることは理解される。本発明は、光学的に純粋な形態およびラセミ混合物を包含する混合物での立体異性体を包含する。従来の技法を使用して、光学的に純粋か、または光学的に濃縮された出発物質を反応させるか、または式Ｉの化合物の異性体を分離するかのいずれかによって、異性体を調製することができる。このことは特に、糖基もしくは天然Ｌ型または非天然Ｄ型で存在し得る式Ｉの化合物（および後続の式）中に存在するアミノ酸基、すなわち、グルタミン酸ポーション（またはその誘導体）を指す、基Ａ（またはＡ１、Ａ２）に当てはまる。本発明は、純粋な形態の位置異性体、すなわち、同じ実験式を有するが、基Ｑ１およびＱ２の付着が異なる、より具体的には、１８Ｆ置換糖基がホラートのα−カルボン酸基のみに（すなわちα−位置異性体）、またはホラートのγ−カルボン酸基のみに（すなわち、γ−位置異性体）連結している本発明の化合物も包含する。時には、一方の特異的付着部位（αまたはγ）のみが、したがって、２種の位置異性体を純粋な形態で生産することが好ましいことがあるが、本発明は、両方の位置異性体の混合物、さらに、両方の部位が１８Ｆ置換糖基で置換されている本発明の化合物も包含する。
【００４８】
より具体的には、本発明は、式ＩＩの化合物を対象とする
【００４９】
【化６】
2014531411.tif 000007
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は互いに独立に、Ｃ、Ｎ、またはＯ、好ましくはＮまたはＯであり、
Ｒ１、Ｒ２は互いに独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯＯＲ５、−ＮＨＲ５、−ＣＯＮＨＲ５、−ＣＯＮＨＲ５（ここで、Ｒ５は、Ｈ、ハロ、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、または−ＮＨＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルである）を表す）であり、
Ｒ３、Ｒ４は互いに独立に、Ｈ、ニトロソ、Ｃ（１〜１２）アルキル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、またはハロ置換−ＣＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）であり、
Ｙ１、Ｙ２は互いに独立に、Ｏ、Ｎ、またはＳであり、
ｍは、１、２、または３であり、
ｒは、１〜７の値を有し、
ｐは、０または１であり、
Ｑ１、Ｑ２は互いに独立に、Ｈ、保護基、または下式の基であり：
−Ｌ−Ａ−Ｌ’−１８Ｆ
ここで、
Ｌ、Ｌ’は互いに独立に、共有結合か、あるいは非置換か、または少なくとも１個のＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨＲ’、ＣＯＯＲ’、ＮＯ２によって置換されていて、非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−、−Ｓ−Ｒ’−、−ＳＯ３Ｒ’−、または５員もしくは６員の複素環（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜５０）アルキルなどの連結基であり、
Ａは、糖基であるが、ただし、
Ｑ１およびＱ２のうちの少なくとも１個は、式−Ｌ−Ａ−Ｌ’−１８Ｆの基であることを条件とする］。
【００５０】
式Ｉの化合物について上記で概説したとおり、式ＩＩの化合物を、式ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩｃを有する化合物によって表すことができる
【００５１】
【化７】
2014531411.tif 000008
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は互いに独立に、Ｃ、Ｎ、またはＯ、好ましくはＮまたはＯであり、
Ｒ１、Ｒ２は互いに独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯＯＲ５、−ＮＨＲ５、−ＣＯＮＨＲ５、−ＣＯＮＨＲ５（ここで、Ｒ５は、Ｈ、ハロ、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、または−ＮＨＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルである）を表す）であり、
Ｒ３、Ｒ４は互いに独立に、Ｈ、ニトロソ、Ｃ（１〜１２）アルキル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、またはハロ置換−ＣＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）であり、
Ｙ１、Ｙ２は互いに独立に、Ｏ、Ｎ、またはＳであり、
ｍは、１、２、または３であり、
ｒは、１〜７の値を有し、
ｐは、０または１であり、
Ｌ１、Ｌ１’、Ｌ２、Ｌ２’は互いに独立に、共有結合か、あるいは非置換か、または少なくとも１個のＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨＲ’、ＣＯＯＲ’、ＮＯ２によって置換されていて、非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−、−Ｓ−Ｒ’−、−ＳＯ３Ｒ’−、または５員もしくは６員の複素環（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜５０）アルキルなどの連結基であり、
Ａ１、Ａ２は互いに独立に、糖基であり、
Ｂ１、Ｂ２は互いに独立に、Ｈまたは保護基である］。
【００５２】
略語「Ｎ」および「Ｃ」は、全ての可能な飽和度を表しており、すなわち、Ｎは−ＮＨ−および−Ｎ＝結合を包含し、Ｃは−ＣＨ２−および−ＣＨ＝結合を包含すると理解される。
【００５３】
さらに、（Ｈ）ｑは、示されている環上の全ての水素置換基（すなわちＸ３、Ｃ６、Ｃ７、およびＸ４上）を表すと理解される。例えば、完全に飽和している５，８−ジデアザ類似体（Ｘ３＝Ｘ４＝Ｃ）ではｑ＝７であり、Ｘ３＝Ｘ４＝Ｎを有する完全に不飽和の類似体では、ｑ＝１である。
【００５４】
用語「アルキル」は、単独で、または組み合わせて使用されている場合、示されている数の炭素原子を含有する直鎖または分枝アルキル基を指す。したがって、用語「Ｃ（１〜１２）アルキル」は、その炭素鎖が直鎖または分枝であり、１〜１２個の炭素原子を含む炭化水素ラジカルを指す。好ましいアルキル基には、その炭素鎖が直鎖または分枝であり、１〜８個の炭素原子を含む炭化水素ラジカルを指すＣ（１〜８）アルキル基（例えば、基Ｓｐ）、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、第三級ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、２，３−ジメチルブタン、ネオヘキシル、ヘプチル、オクチルが包含される。より好ましいアルキル基は、１〜６個のＣ原子、より好ましくは１〜４個の炭素原子を含有するＣ（１〜６）アルキル基である。
【００５５】
用語「アルケニル」は、単独で、または他の基と組み合わされて、１個または複数の炭素−炭素二重結合を有する、本明細書において上記で定義したとおりの直鎖または分枝アルキル基を指す。したがって、用語「Ｃ（２〜１２）アルケニル」は、その炭素鎖が直鎖または分枝であり、１〜１２個の炭素原子および１個または複数の炭素−炭素二重結合を含む炭化水素ラジカルを指す。好ましいアルケニル基には、メチレン、エチレン、プロピレン、イソプロピレン、ブチレン、ｔ−ブチレン、ｓｅｃ−ブチレン、イソブチレン、アミレン、イソアミレン、ペンチレン、イソペンチレン、ヘキシレンなどのＣ（２〜８）アルケニル基が包含される。好ましいアルケニル基は、２〜６個、より好ましくは２〜４個の炭素原子を含有する。
【００５６】
用語「アルキニル」は、本明細書において使用する場合、１個または複数の炭素−炭素三重結合を有する、本明細書において上記で定義したとおりの直鎖または分枝アルキル基を指す。好ましいアルキニル基は、２〜６個、より好ましくは２〜４個の炭素原子を含有する。
【００５７】
用語「ハロゲン」は、本明細書において使用する場合、任意の第７族元素を指し、これには、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨードが包含される。
【００５８】
用語「ハロ置換されている」は、本明細書において使用する場合、少なくとも１個の水素の代わりにハロゲン部分を有するアルキル基を指す。
【００５９】
好ましい実施形態では、Ｒ１およびＲ２は互いに独立に、Ｈ、Ｃ（１〜１２）アルキル、−ＯＲ５、−ＮＨＲ５、より好ましくは−ＯＲ５、−ＮＨＲ５（ここで、Ｒ５は、Ｈ、ハロ、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、または−ＮＨＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルである）である）であってよく；かつ／またはＲ３は、Ｈ、Ｃ（１〜１２）アルキル、または−ＣＯ−Ｃ（１〜８）アルキルであり；かつ／またはＲ４は、Ｈ、ニトロソ、−Ｏ−Ｃ（１〜８）アルキル、または−ＣＯ−Ｃ（１〜８）アルキルである。
【００６０】
当技術分野で知られていて、記載されているカップリング化学を使用して、１８Ｆ同位体を、糖基に、ホラート化合物に、本発明の化合物の連結基Ｌ（またはＬ１、Ｌ２）およびＬ’（またはＬ１’、Ｌ２’）を介してコンジュゲートさせることができる。そのような手順は、当業者の平均的な技能の範囲内であり、先行技術で利用可能な常套的な実験および標準的な合成ストラテジーの最適化しか必要としない。典型的なカップリングストラテジーには、アミン、アルコール、もしくはチオール官能基と、アルデヒド、カルボン酸、もしくは活性化カルボン酸官能基との間での反応、またはクリック反応などの付加環化反応が包含される。当業者であれば、どの所望の官能基が、選択されたリンカーＬ（またはＬ１、Ｌ２）およびＬ’（またはＬ１’、Ｌ２’）の末端基として存在すべきかが分かるであろう。好ましいカップリングストラテジーには例えば、例えばＥＤＣ、ＤＣＣ、ｐｙＢＯＰ、もしくは他のカルボキシラートを活性化させる作用物質を使用して、アミンをカルボン酸と反応させて、アミド結合を形成する標準的なペプチドカップリング化学、または付加環化反応、例えば、アジド基をアルキンと反応させて、アザ複素環を形成するクリック化学をベースとするカップリングが包含される。
【００６１】
基Ｌ１、Ｌ１’、Ｌ２、およびＬ２’は互いに独立に、共有結合か、あるいは非置換か、またはＨａｌ、ＯＨ、ＮＨＲ’、ＣＯ２Ｒ’から選択される少なくとも１個の基によって置換されていて、非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’、または５員もしくは６員の複素環（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜５０）アルキルである。表現「非置換か、またはＨａｌ、ＯＨ、ＮＨＲ’、ＣＯ２Ｒ’から選択される少なくとも１個の基によって置換されていて、非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜５０）アルキル」は、オリゴ／ポリエーテル、オリゴ／ポリペプチド、オリゴ／ポリアミド、オリゴ／ポリアミン、オリゴ／ポリエステル、オリゴ／多糖などの親水性オリゴ／ポリマー基、ポリオール、多重荷電種、またはそれらの任意の他の組合せなどの連結基も包含する。
【００６２】
一実施形態では、そのような親水性オリゴ／ポリマー基には、オリゴ／ポリアルキレンオキシドなどのオリゴ／ポリエーテル、より具体的にはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）ならびに、ポリメチルエチレングリコール、ポリヒドロキシプロピレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリメチルプロピレングリコール、およびポリヒドロキシプロピレンオキシドなどの関連ホモポリマー、または典型的には２〜２５個、好ましくは２〜１０個のオキシアルキレン基を有するポリエテチレン（ｐｏｌｙｅｔｈｅｔｙｌｅｎｅ）／ポリプロピレングリコールなどの、小さなアルコキシモノマーからなるヘテロポリマーが包含される。
【００６３】
他の実施形態では、そのような親水性オリゴ／ポリマー基には、親水性ペプチド配列などのオリゴ／ポリペプチド、またはポリアミノ酸およびその誘導体、例えば、ポリグルタミン酸、ポリリシン、ポリアスパラギン酸、ポリアスパルトアミドが包含され、ここで、各ペプチド配列またはポリアミノ酸は典型的には、２〜１２個、好ましくは２〜６個のアミノ酸残基を有する。
【００６４】
好ましくは、Ｌ１およびＬ２は、非置換か、またはＯＨ、ＮＨＲ’、ＣＯ２Ｒ’から選択される少なくとも１個の基によって置換されていて、非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、５員または６員の複素環、好ましくはトリアゾールまたはテトラゾールなどの５員のアザ複素環（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜２４）、より好ましくはＣ（１〜１２）、最も好ましくはＣ（１〜６）アルキル、あるいは上記で定義したとおりの親水性オリゴ／ポリマー基である。
【００６５】
基Ｌ１’およびＬ２’は好ましくは共有結合か、あるいは非置換か、またはＨａｌ、ＯＨ、ＮＨＲ’、ＣＯ２Ｒ’から選択される少なくとも１個の基によって置換されていて、非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜２４）アルキル、より好ましくはＣ（１〜１２）アルキル、最も好ましくはＣ（１〜６）アルキルである。
【００６６】
より好ましくは、Ｌ１’およびＬ２’は共有結合か、あるいは非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜１２）アルキル、より好ましくはＣ（１〜６）アルキルである。
【００６７】
基ｍは、１、２、または３、好ましくは２である。
【００６８】
具体的な実施形態では、Ｙ１および／またはＹ２は好ましくはＮであり、Ｂ２はカルボキサミド保護基である。
【００６９】
用語「保護基」（または末端基）は、本明細書において使用する場合、Ｙ１および／またはＹ２に適した保護基を指す。これらの保護基は、官能基（典型的には、アミノまたはカルボキサミド、カルボキシルまたはチオカルボニル官能基）の性質に左右され、したがって、様々であり得る。アミノ官能基に適した保護基には、例えば、ｔ−ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、メトキシ−またはエトキシカルボニル、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル、アセチルまたはトリフルオロアセチル、ベンジルまたは２，４，６−トリメトキシベンジル、フタロリル基、およびトリチルまたはトシル保護基が包含される。アミド官能基に適した保護基には、例えば、ｐ−メトキシフェニル、３，４−ジメトキシベンジル、ベンジル、０−ニトロベンジル、ジ−（ｐ−メトキシフェニル）メチル、トリフェニルメチル、（ｐ−メトキシフェニル）ジフェニルメチル、ジフェニル−４−ピリジルメチル、ｍ−２−（ピコリル）−Ｎ’−オキシド、５−ジベンゾスベリル、トリメチルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリルなどが包含される。カルボキシル官能基に適した保護基には、例えば、シリル基、およびアルキル、アリール、またはアリールアルキルエステル、より具体的には、メチルおよびｔ−ブチルなどのアルキルエステル；メトキシメチルなどのアルコキシアルキル；メチル、チオメチルなどのアルキルチオアルキルエステル；２，２，２−トリクロロエチルなどのハロアルキルエステル、およびベンジル、ｐ−メトキシベンジル，ｐ−ニトロベンジル、ジフェニルメチルなどのアラルキルエステルが包含される。ヒドロキシ官能基に適した保護基には、例えば、アルキルエステル、ｔ−ブチル、ベンジル、またはトリチル基が包含され、メチルエーテル、置換メチルエーテル（例えば、ＭＯＭ（メトキシメチルエーテル）、ＭＴＭ（メチルチオメチルエーテル）、ＢＯＭ（ベンジルオキシメチルエーテル）、ＰＭＢＭ、またはＭＰＭ（ｐ−メトキシベンジルオキシメチルエーテル））、置換エチルエーテル、置換ベンジルエーテル、シリルエーテル（例えば、ＴＭＳ（トリメチルシリルエーテル）、ＴＥＳ（トリエチルシリルエーテル）、ＴＩＰＳ（トリイソプロピルシリルエーテル）、ＴＢＤＭＳ（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルエーテル）、トリベンジルシリルエーテル、ＴＢＤＰＳ（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルエーテル））が包含される。本発明は、これらの保護基に限定されることを意図したものではなく；むしろ、様々な追加の同等の保護基を容易に同定し、本発明において利用することができる。上記の保護基およびさらなる保護基、さらに、それらを導入および除去するための技法は、その内容全体が参照によって本明細書に援用される「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄ．Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．およびＷｕｔｓ，Ｐ．Ｇ．編、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：１９９９に記載されている。
【００７０】
より具体的な実施形態では、本発明は、式ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＩＩｃの化合物を対象とする：
【００７１】
【化８】
2014531411.tif 000009
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は互いに独立に、Ｃ、Ｎ、またはＯ、好ましくはＮまたはＯであり、
Ｒ１、Ｒ２は互いに独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯＯＲ５、−ＮＨＲ５、−ＣＯＮＨＲ５、−ＣＯＮＨＲ５（ここで、Ｒ５はＨ、ハロ、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、または−ＮＨＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルである）を表す）であり、
Ｒ３、Ｒ４は互いに独立に、Ｈ、ニトロソ、Ｃ（１〜１２）アルキル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、またはハロ置換の−ＣＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）であり、
Ｙ１、Ｙ２は互いに独立に、Ｏ、Ｎ、またはＳであり、
ｍは１、２、または３であり、
ｒは、１〜７の値を有し、
ｐは、０または１であり、
Ｌ１、Ｌ１’、Ｌ２、Ｌ２’は互いに独立に、共有結合か、あるいは非置換か、または少なくとも１個のＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨＲ’、ＣＯＯＲ’、ＮＯ２によって置換されている直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルなどの連結基であり、非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−、−Ｓ−Ｒ’−、−ＳＯ３Ｒ’−、または５員もしくは６員の複素環（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）によって置き換えられていてよく、
Ｂ１、Ｂ２は互いに独立に、Ｈまたは保護基であり、
Ｒ６、Ｒ９は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルであり、
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１０、Ｒ１１は互いに独立に、Ｈ、−ＯＨ、または−ＯＣ（１〜８）アルキルである］。
【００７２】
用語「複素環」（または「複素環式環」）は、本明細書において使用する場合、飽和、不飽和、または芳香族のいずれかであり、窒素、酸素、および硫黄から独立に選択される１〜３個のヘテロ原子を含有し、その窒素および硫黄ヘテロ原子が場合によって酸化されていてよく、窒素ヘテロ原子が場合によって四級化されていてよい任意の４〜７員の複素環式環を意味する。複素環には、これらに限られないが、モルホリニル、ピロリジノニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ヒダントイニル、バレロラクタミル、オキシラニル、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロピリジニル、テトラヒドロプリミジニル、テトラヒドロチオフェニル、テトラヒドロチオピラニル、テトラヒドロピリミジニル、テトラヒドロチオフェニル、テトラヒドロチオピラニルなどが包含され得る。本発明において使用するために好ましい複素環（ｈｅｔｅｒｏｃｙｌｃｅｓ）は、１〜３個の窒素原子を含有するアザ複素環、好ましくは５員のアザ複素環である。用語「アザ複素環」は、Ｌ１、Ｌ１’およびＬ２、Ｌ２’に関連して、好ましくはＬ１およびＬ２に関連して使用する場合、少なくとも１個の窒素原子を環中に包含し、非置換か、または置換されていてよい複素環式基を指す。アザ複素環式基は、当技術分野で認められるとおり、例えばＣ（１〜６）アルキルによって置換されていてもよい。本化合物において使用するためには、５員のアザ複素環式基が好ましく、例えばトリアゾリルまたはテトラゾリル基、より好ましくは次の構造の基である
【００７３】
【化９】
2014531411.tif 000010
［式中、
点線は、隣接する基への連結部位を表し、Ｒ”は、Ｈか、あるいは非置換か、または少なくとも１個のＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２によって置換されている直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルである］。
【００７４】
したがって、好ましい実施形態では、Ｌ１、Ｌ１’、Ｌ２、およびＬ２’、好ましくはＬ１およびＬ２は互いに独立に、式（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、または（ｄ）の基である
【００７５】
【化１０】
2014531411.tif 000011
［式中、
Ｒ”は、Ｈか、あるいは非置換か、または少なくとも１個のＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２によって置換されている直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルであり、
Ｓｐは、非置換であるか、または−ＣＨ２−基のうちの少なくとも１個が、−ＯＨ、−ＮＨＲ’、もしくは−ＣＯＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）で置換されている直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルなどのスペーサー（Ｙ１および／またはＹ２に連結）であり、
ｑは、０、１、２、３、または４である］。
【００７６】
好ましい実施形態では、Ｓｐは、非置換であるか、または−ＣＨ２−基のうちの少なくとも１個が、−ＯＨ、ＮＨＲ’、もしくはＣＯＯＲ’（ここで、Ｒ’は上記で定義したとおりである）で置換されている直鎖または分枝Ｃ（１〜６）アルキルである。
【００７７】
したがって、一部の実施形態では、本発明は、式ＩＶａ、ＩＶｂ、ＩＶｃ、ＩＶｄを有する式Ｉの化合物を提供する：
【００７８】
【化１１】
2014531411.tif 000012
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は互いに独立に、Ｃ、Ｎ、またはＯ、好ましくはＮまたはＯであり、
Ｒ１、Ｒ２は互いに独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯＯＲ５、−ＮＨＲ５、−ＣＯＮＨＲ５（ここで、Ｒ５は、Ｈ、ハロ、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、または−ＮＨＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルである）を表す）であり、
Ｒ３、Ｒ４は互いに独立に、Ｈ、ニトロソ、Ｃ（１〜１２）アルキル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、またはハロ置換−ＣＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）であり、
ｍは、１、２、または３であり、
ｒは、１〜７の値を有し、
ｐは、０または１であり、
Ｙ１は、Ｏ、Ｎ、またはＳであり、
Ｂ１は、Ｈまたは保護基であり、
Ｒ”は、Ｈか、あるいは非置換か、または少なくとも１個のＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２によって置換されている直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルであり、
Ｓｐは、非置換であるか、または−ＣＨ２−基のうちの少なくとも１個が、−ＯＨ、−ＮＨＲ’、もしくは−ＣＯＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）で置換されている直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルなどのスペーサーであり、
Ｌ２’は、共有結合か、あるいは非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜６）アルキルであり、
ｑは、０、１、２、３、または４であり、
Ｒ６は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルであり、
Ｒ７、Ｒ８は互いに独立に、Ｈ、−ＯＨ、または−ＯＣ（１〜８）アルキルである］。
【００７９】
他の実施形態では、本発明は、式Ｖａ、Ｖｂ、Ｖｃ、Ｖｄを有する式Ｉの化合物を提供する
【００８０】
【化１２】
2014531411.tif 000013
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は互いに独立に、Ｃ、Ｎ、またはＯ、好ましくはＮまたはＯであり、
Ｒ１、Ｒ２は互いに独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯＯＲ５、−ＮＨＲ５、−ＣＯＮＨＲ５（ここで、Ｒ５は、Ｈ、ハロ、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、または−ＮＨＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルである）を表す）であり、
Ｒ３、Ｒ４は互いに独立に、Ｈ、ニトロソ、Ｃ（１〜１２）アルキル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、またはハロ置換−ＣＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）であり、
ｍは、１、２、または３であり、
ｒは、１〜７の値を有し、
ｐは、０または１であり、
Ｙ２は、Ｏ、Ｎ、またはＳであり、
Ｂ２は、Ｈまたは保護基であり、
Ｒ”は、Ｈか、あるいは非置換か、または少なくとも１個のＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２によって置換されている直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルであり、
Ｓｐは、非置換であるか、または−ＣＨ２−基のうちの少なくとも１個が、−ＯＨ、−ＮＨＲ’、もしくは−ＣＯＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）で置換されている直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルなどのスペーサーであり、
Ｌ１’は、共有結合か、あるいは非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜６）アルキルであり、
ｑは、０、１、２、３、または４であり、
Ｒ９は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルであり、
Ｒ１０、Ｒ１１は互いに独立に、Ｈ、−ＯＨ、または−ＯＣ（１〜８）アルキルである］。
【００８１】
まだ他の実施形態では、本発明は、式ＶＩａ、ＶＩｂ、ＶＩｃ、ＶＩｄを有する式Ｉの化合物を提供する：
【００８２】
【化１３】
2014531411.tif 000014
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は互いに独立に、Ｃ、Ｎ、またはＯ、好ましくはＮまたはＯであり、
Ｒ１、Ｒ２は互いに独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯＯＲ５、−ＮＨＲ５、−ＣＯＮＨＲ５（ここで、Ｒ５は、Ｈ、ハロ、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、または−ＮＨＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルである）を表す）であり、
Ｒ３、Ｒ４は互いに独立に、Ｈ、ニトロソ、Ｃ（１〜１２）アルキル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、またはハロ置換−ＣＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）であり、
ｍは、１、２、または３であり、
ｒは、１〜７の値を有し、
ｐは、０または１であり、
Ｒ”は、Ｈか、あるいは非置換か、または少なくとも１個のＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２によって置換されている直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルであり、
Ｓｐは、非置換であるか、または−ＣＨ２−基のうちの少なくとも１個が、−ＯＨ、−ＮＨＲ’、もしくは−ＣＯＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）で置換されている直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルなどのスペーサーであり、
Ｌ１’、Ｌ２’は互いに独立に、共有結合か、あるいは非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜６）アルキルであり、
ｑは、０、１、２、３、または４であり、
Ｒ６、Ｒ９は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルであり、
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１０、Ｒ１１は互いに独立に、Ｈ、−ＯＨ、または−ＯＣ（１〜８）アルキルである］。
【００８３】
本発明の化合物の具体的な一実施形態には例えば、
（ａ）Ｘ１〜Ｘ５がＮであり、Ｒ１がＮＹ３Ｙ４であり、Ｒ２がＯであり、Ｒ４がＹ５であり、ｐが０または１であり、ｑが１または３であるか、あるいは
（ｂ）Ｘ１〜Ｘ５がＮであり、Ｒ１がＮＹ３Ｙ４であり、Ｒ２がＮＨ２であり、Ｒ４がＹ５であり、ｐが０であり、ｑが１である
化合物が包含される。
【００８４】
したがって、具体的な実施形態では、本発明の化合物は、式ＶＩＩａ、ＶＩＩｂ、ＶＩＩｃ、ＶＩＩｄの化合物を包含する
【００８５】
【化１４】
2014531411.tif 000015
［式中、
Ｙ３、Ｙ４は互いに独立に、Ｈ、ハロ、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、および−ＮＨＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルである）から選択され、
Ｙ５は、Ｈ、ニトロソ、Ｃ（１〜１２）アルキル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、およびハロ置換−ＣＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜１２）アルキルである）から選択され、
ｍは、１、２、または３であり、
Ｙ１は、Ｏ、Ｎ、またはＳであり、
Ｂ１は、Ｈまたは保護基であり、
Ｓｐは、非置換であるか、または−ＣＨ２−基のうちの少なくとも１個が、−ＯＨ、−ＮＨＲ’、もしくは−ＣＯＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）で置換されている直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルなどのスペーサーであり、
Ｌ２’は、共有結合か、あるいは非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜６）アルキルであり、
ｑは、０、１、２、３、または４であり、
Ｒ６、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルであり、
Ｒ７、Ｒ８は互いに独立に、Ｈ、−ＯＨ、または−ＯＣ（１〜８）アルキルである］。
【００８６】
他の具体的な実施形態では、本発明の化合物は、式ＶＩＩＩａ、ＶＩＩＩｂ、ＶＩＩＩｃ、ＶＩＩＩｄの化合物を包含する：
【００８７】
【化１５】
2014531411.tif 000016
［式中、
Ｙ３、Ｙ４は互いに独立に、Ｈ、ハロ、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、および−ＮＨＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルである）から選択され、
Ｙ５は、Ｈ、ニトロソ、Ｃ（１〜１２）アルキル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、およびハロ置換−ＣＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜１２）アルキルである）から選択され、
ｍは、１、２、または３であり、
Ｙ２は、Ｏ、Ｎ、またはＳであり、
Ｂ２は、Ｈまたは保護基であり、
Ｓｐは、非置換であるか、または−ＣＨ２−基のうちの少なくとも１個が、−ＯＨ、−ＮＨＲ’、もしくは−ＣＯＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）で置換されている直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルなどのスペーサーであり、
Ｌ２’は、共有結合か、あるいは非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜６）アルキルであり、
ｑは、０、１、２、３、または４であり、
Ｒ９は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルであり、
Ｒ１０、Ｒ１１は互いに独立に、Ｈ、−ＯＨ、または−ＯＣ（１〜８）アルキルである］。
【００８８】
他の具体的な実施形態では、本発明の化合物は、式ＩＸａ、ＩＸｂ、ＩＸｃ、ＩＸｄの化合物を包含する
【００８９】
【化１６】
2014531411.tif 000017
［式中、
Ｙ３、Ｙ４は互いに独立に、Ｈ、ハロ、Ｃ（１〜１２）アルキル、Ｃ（２〜１２）アルケニル、Ｃ（２〜１２）アルキニル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、および−ＮＨＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルである）から選択され、
Ｙ５は、Ｈ、ニトロソ、Ｃ（１〜１２）アルキル、−ＯＲ’、−ＣＯＲ’、およびハロ置換−ＣＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜１２）アルキルである）から選択され、
ｍは、１、２、または３であり、
Ｓｐは互いに独立に、非置換であるか、または−ＣＨ２−基のうちの少なくとも１個が、−ＯＨ、−ＮＨＲ’、もしくは−ＣＯＯＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）で置換されている直鎖または分枝Ｃ（１〜８）アルキルなどのスペーサーであり、
Ｌ１’、Ｌ２’は互いに独立に、共有結合か、あるいは非隣接のＣＨ２基のうちの１個または複数が独立に、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’（ここで、Ｒ’は、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルを表す）から選択される基によって置き換えられていてよい直鎖または分枝Ｃ（１〜６）アルキルであり、
ｑは、０、１、２、３、または４であり、
Ｒ６、Ｒ９は互いに独立に、ＨまたはＣ（１〜８）アルキルであり、
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１０、Ｒ１１は互いに独立に、Ｈ、−ＯＨ、または−ＯＣ（１〜８）アルキルである］。
【００９０】
さらなる態様では、本発明は、本発明の化合物を合成する方法も提供する。合成は好ましくは、モジュラー式手法（適切に誘導体化された官能基、すなわち、ホラート基、糖基など）に基づき、エステル化、アミド化（ａｍｄｉａｔｉｏｎ）、およびクリック反応（上記も参照）を包含する当技術分野で知られている様々な標準的なカップリング化学に基づく。後者の反応は、特に有用であることが証明されており、熱条件下または触媒の存在下、付加環化でアジドおよびアルキン基をカップリングさせて、選択された最終化合物を得ることに基づく（ＫｏｌｂおよびＳｈａｒｐｌｅｓｓ、Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｏｄａｙ  ２００３、８、１１２８頁；Ｋｏｌｂら、Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２００１、４０、２００４；  Ｒｏｓｔｏｖｔｓｅｖ，Ｖ．Ｖ．ら、Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２００２、４１、２５９６頁；米国特許出願公開第２００５／０２２２２４２７号；ＷＯ０６／１１６６２９）。これらの反応は、Ｈｕｉｓｇｅｎ１，３−双極性付加環化（熱条件）およびクリック反応（触媒条件）として知られており、当技術分野において記載されている（ＫｏｌｂおよびＳｈａｒｐｌｅｓｓ、Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｏｄａｙ  ２００３、８、１１２８頁；Ｋｏｌｂら、Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２００１、４０、２００４；Ｒｏｓｔｏｖｔｓｅｖら、Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．  Ｅｄ．２００２、４１、２５９６頁（非特許文献２４）；米国特許出願公開第２００５／０２２２２４２７号；ＷＯ０６／１１６６２９）。
【００９１】
より具体的には、５員の複素環がトリアゾールである本発明の化合物は、アジドＲａ−Ｎ３をアルキンＲｂ−Ｃ≡Ｃ−Ｒｃと付加環化させることによって得られてもよく、５員の複素環がテトラゾールである式Ｉの化合物は、アジドＲａ−Ｎ３をシアニドＲｂ−Ｃ≡Ｎと付加環化させることによって得られる。全ての可能な組合せが本明細書においては企図されており、すなわち、Ｒａは、ホラート誘導体であり、Ｒｂは糖基（またはその前駆体）であり、さらに、Ｒｂはホラート誘導体であり、Ｒａは糖基（またはその前駆体）である。したがって、反応のモジュラー式かつ可変的性質によって、幅広い様々なリンカーを利用して、放射性同位体を葉酸にカップリングさせることができる。
【００９２】
糖基は、ホラート基にカップリングする前に、またはホラート基にカップリングした後に、１８Ｆ同位体で置換されてよいことも理解される。
【００９３】
２個のカップリング基（すなわち、アルキン基またはアジド基）のうちの１個を、直接、またはリンカーを介して、ホラート上のα−カルボン酸に特異的に連結して（γ−カルボン酸の適切な保護下で）、α−位置異性体を純粋な形態で得ることができることも理解される。別法では、２個のカップリング基（すなわち、アルキン基またはアジド基）のうちの１個を、直接、またはリンカーを介して、ホラート上のγ−カルボン酸に特異的に連結して（α−カルボン酸の適切な保護下で）、γ−位置異性体を純粋な形態で得ることができる。
【００９４】
様々なカップリングステップに適した条件を選択し、適切な保護基ＰＧ（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ  ＆  Ｗｕｔｓ編、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第２版、１９９１、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ、ＮＹ．を参照されたい）および脱離基ＬＧ（例えば、ハロゲン、トシラート、メシラート、トリフラート、カルボナート基）を選択して所望のα−またはγ−位置異性体を得ることは当業者には明白であろう。
【００９５】
さらなる態様では、本発明は、診断イメージング量または治療有効量の少なくとも１種の本発明の化合物と、薬学的に許容可能なそのための担体とを含む医薬組成物を提供する。本明細書において使用する場合、適切な適用量で存在する薬学的に許容可能な担体には、生理学的に許容できる溶媒、分散媒体、抗菌剤および抗真菌剤、等張化剤などが包含される。そのような媒体および作用物質の使用は、当技術分野でよく知られている。
【００９６】
さらなる態様では、本発明は、診断イメージングを必要とする対象に簡便かつ有効に投与するための（本発明の化合物および医薬組成物を包含する）本発明のホラート放射性医薬品の使用を提供する。
【００９７】
したがって、本発明は、ホラート受容体を発現している細胞または細胞集団を診断イメージングする方法を提供し、前記方法は、少なくとも１種の本発明のホラート放射性医薬品を診断イメージング量で投与するステップと、前記細胞または細胞集団の診断イメージを得るステップとを含む。
【００９８】
そのようなイメージングを、ホラート受容体を発現する細胞または細胞集団上、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏで行うことができる。
【００９９】
したがって、本発明は、組織試料においてホラート受容体を発現している細胞をｉｎ  ｖｉｔｒｏで検出する方法を提供し、その方法は、前記組織試料を、結合を生じさせるために有効な量の少なくとも１種の本発明のホラート放射性医薬品と十分な時間および条件で接触させるステップと、ＰＥＴイメージングによってそのような結合を検出するステップとを包含する。
【０１００】
さらなる態様では、本発明は、癌ならびに炎症性および自己免疫疾患の診断イメージングおよび／または治療のモニタリングを必要とする対象に、簡便かつ有効に投与するための本発明のホラート放射性医薬品の使用を提供する。
【０１０１】
したがって、本発明は、同時に診断および治療するための方法を提供し、この方法は、それを必要とする対象に少なくとも１種の本発明のホラート放射性医薬品を診断有効量で、選択された治療活性な化合物と組み合わせて投与するステップと、治療経過に従うように前記組織の診断イメージを得るステップとを含む。
【０１０２】
本発明の方法の対象は好ましくは、動物またはヒトなどの哺乳動物、好ましくはヒトである。
【０１０３】
投薬量、すなわち、少なくとも１種の本発明のホラート放射性医薬品の診断有効量は、診断の形態などの所望の効果の性質に、診断計装に、製剤の適用形態に、かつ受容者の年齢、体重、栄養、および状態、もしあるならば併用療法の種類に左右される。
【０１０４】
しかしながら、理解されるとおり、かつ過度の実験を伴うことなく、当業者であれば決定することができるとおり、最も好ましい投薬量を個々の対象に合わせることができる。これは典型的には、標準的な用量を調節することを伴い、例えば、患者が少ない体重を有する場合には、用量を減らすことを伴う。
【０１０５】
放射性トレーサーを投与してから数分以内から２〜４時間までに、ＰＥＴスキャナーでのイメージング手順を実施する。スケジュールは、イメージング標的および放射性トレーサーの動態、さらに、所望の情報に左右される。
【０１０６】
本発明のホラート放射性医薬品の好ましい投与経路は、静脈内注射によるものである。
【０１０７】
注射に適した形態には、上述の本発明のホラート放射性医薬品の滅菌水性液剤または分散剤が包含される。典型的には、放射性医薬品を、生理学的緩衝液中で製剤化する。
【０１０８】
これらに限られないが、抗菌剤または抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサールなどを加えることを包含する任意の当分野で認められている技法によって、ホラート放射性医薬品を減菌することができる。好ましくは、投与の前に、それらを滅菌濾過して、追加の滅菌薬の必要性を排除する。
【０１０９】
注射される液剤では、好ましい単位投薬量は、約０．０１ｍＬ〜約１０ｍＬである。静脈内投与の後に、所望の場合には、放射標識された試薬を対象に投与して十分な量の投与用量を選択された標的化領域に蓄積させてから数分以内から２〜４時間まで、臓器または腫瘍のイメージングをｉｎ  ｖｉｖｏで行うことができる。
【０１１０】
本発明のホラート放射性医薬品は、対象から採取された組織生検においてホラート受容体を発現している細胞をｉｎ  ｖｉｔｒｏで検出するために使用することもできる。したがって、さらなる実施形態では、本発明は、組織試料においてホラート受容体を発現している細胞、例えば、腫瘍細胞をｉｎ  ｖｉｔｒｏで検出するための方法を提供し、この方法は、前記組織試料を、結合を生じさせるために有効な量の本発明のホラート放射性医薬品と十分な時間および条件で接触させるステップと、イメージング技法によってそのような結合を検出するステップとを包含する。
【０１１１】
当業者に知られている手順によって、例えば、組織生検または体液を収集することによって、気管または肺試料などを吸引することによって、試料を収集することができる。
【０１１２】
検査される組織試料には、腫瘍細胞、上皮細胞、腎臓、胃腸、または肝胆道系などの、ホラート受容体を発現している体組織または体液（例えば、血液細胞）の個々の細胞、細胞群、または細胞培養物を含有すると疑われる、アテローム斑を包含する任意の動脈および血管組織が包含される。
【０１１３】
組織は、対象の内部にあってよいか、または対象から生体採取もしくは除去されていてよい。組織は、身体臓器の全体または任意の部分であってもよい。組織が、切除と本発明の方法との間に何ら保存ステップを伴うことなく、対象から最近除去されたということにおいて、組織は「新鮮」であってよい。本発明の方法を適用する前に、組織（試料）を、これらに限られないが、凍結、急速凍結、パラフィン包埋、および組織固定を包含するそのような標準的な組織調製技法によって保存しておいてもよい。例えば、ミクロトームを用いて、試料を薄片にして、顕微鏡検査および観察を容易にすることができる。本発明のホラート放射性医薬品のうちの１種と共にインキュベーションする前または後のいずれかに、適切な固定剤を用いて、試料を固定して、試料組織の組織学的品質を改善することもできる。
【０１１４】
本発明のホラート放射性医薬品が細胞上のホラート受容体に結合するために十分な時間および条件には、標準的な組織培養条件が包含され、すなわち、生理学的培地中で、試料をｉｎ  ｖｉｔｒｏで培養し、本発明の化合物または組成物のうちの１種と共にインキュベートすることができる。そのような条件は、当業者によく知られている。別法では、試料を固定し、次いで、等張性または生理学的緩衝液中、本発明のホラート放射性医薬品と共にインキュベートすることができる。
【０１１５】
全ての用途で、本発明の化合物を、使用される現場で、またはその付近で調製することが簡便である。
【０１１６】
本明細書において開示および請求されている化合物および／または方法は全て、本開示を考慮すれば過度の実験を伴うことなく、製造および実行することができる。本発明の範囲から逸脱しなければ、変形形態も本発明に該当し得ることは、当業者には明らかであろう。本明細書において提示されている例は、実例を意図したものであって、網羅的なものではない；したがって、説明されている例は、本発明を制限するものとしては決して考察されるべきではない。
【実施例】
【０１１７】
材料および方法
赤外スペクトルを、Ｊａｓｃｏ  ＦＴ／ＩＲ−６２００  ＡＴＲ−ＩＲで記録した。核磁気共鳴スペクトルを、内標準として対応する溶媒シグナルを用いるＢｒｕｋｅｒ  ４００ＭＨｚまたは５００ＭＨｚ分光計で記録した。化学シフトは、テトラメチルシラン（０．００ｐｐｍ）に対して百万分率（ｐｐｍ）で報告する。結合定数、Ｊの値は、ヘルツ（Ｈｚ）で示されている；１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを記載する実験セクションで、次の略語を使用する：一重項（ｓ）、二重項（ｄ）、三重項（ｔ）、多重項（ｍ）、二重二重項（ｄｄ）。複雑な多重項の化学シフトは、その存在範囲として示されている。低分解能質量スペクトル（ＬＲ−ＭＳ）は、Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  Ｑｕａｔｔｒｏ  ｍｉｃｒｏ（商標）  ＡＰＩ  ＬＣ−ＥＳＩで、かつ高分解能質量スペクトル（ＨＲ−ＭＳ）はＢｒｕｋｅｒ  ＦＴＭＳ  ４．７  Ｔ  ＢｉｏＡＰＥＸＩＩ（ＥＳＩ）で記録した。
【０１１８】
薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ、ＥＭ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ０．２５ｍｍ厚のプレコーティングされたシリカゲル６０  Ｆ−２５４ガラス担持プレートで行われた）またはＨＰＬＣによって、反応をモニタリングした。Ｌ−７４００チューナブル吸収検出器を備えたＭｅｒｃｋ−Ｈｉｔａｃｈｉ  Ｌ−７０００システムで、ＨＰＬＣを行った。次の溶媒系（１ｍｌ／分）：５０ｍＭのＮＨ４ＨＣＯ３溶液（溶媒Ａ）、アセトニトリル（溶媒Ｂ）；０〜４分は１００％のＡ；４〜５分で１００→９３％のＡ；５〜１５分は９３％のＡ；１５〜２５分で９３→３０％のＡ；２５〜３０分は３０％のＡを使用するＧｅｍｉｎｉカラム（Ｃ１８、５μｍ、４．６×２５０ｍｍ、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ）で、分析ＨＰＬＣを行い；次のとおりの溶媒系および勾配：５０ｍＭのＮＨ４ＨＣＯ３溶液（溶媒Ａ）、メタノール（溶媒Ｂ）；０〜３分は１００％のＡ；３〜２８分で１００→４０％のＡ；２８〜３０分で４０→３０％のＡ；３０〜３５分は３０％のＡを用いるＧｅｍｉｎｉカラム（Ｃ１８、５μｍ、１０×２５０ｍｍ、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ）、３ｍＬ／分で、半分取ＨＰＬＣを行った。
【０１１９】
Ｌ−２４５０ダイオードアレー検出器およびＢｅｒｔｈｏｌｄラジオディテクタを備えたＭｅｒｃｋ−Ｈｉｔａｃｈｉ  Ｌ−２１３０システムで、分析ＨＰＬＣのための上述のカラムおよび勾配を使用して、分析放射性ＨＰＬＣを行った。
【０１２０】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ安定性研究では、Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｃ１８カラム（２．１×５０ｍｍ、１．７μｍ）および付属のＢｅｒｔｈｏｌｄコインシデンス検出器（ＦｌｏｗＳｔａｒ  ＬＢ５１３）を備えたＷａｔｅｒｓ製の超高性能液体クロマトグラフィー（ＵＰＬＣ（商標））システムを、次の勾配システムで使用した：５０ｍＭのＮＨ４ＨＣＯ３溶液（溶媒Ａ）、アセトニトリル（溶媒Ｂ）、０．５ｍｌ／分；０〜０．５分は１００％のＡ；０．５〜３．５分で１００→３０％；３．５〜３．９分は３０％のＡ。
【０１２１】
Ｍｅｒｃｋ−Ｈｉｔａｃｈｉ  Ｌ−６２００Ａインテリジェントポンプ（ｉｎｔｅｌｌｉｇｅｎｔ  ｐｕｍｐ）、Ｋｎａｕｅｒ可変波長紫外線検出器、およびＥｂｅｒｌｉｎｅ  ＲＭ−１４ラジオディテクタを備えたＨＰＬＣシステムで、Ｇｅｍｉｎｉカラム（Ｃ１８、５μｍ、２５０×１０ｍｍ、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ）と、３ｍｌ／分の流速でｐＨ７．０に調節された５０ｍＭのＮａＨ２ＰＯ４／Ｎａ２ＨＰＯ４緩衝液および５％のエタノールからなる定組成溶媒システムとを使用して、［１８Ｆ］グルコース葉酸の半分取放射性ＨＰＬＣ精製を実施した。
【０１２２】
別段に規定しない限り、全ての薬品を供給されたままで使用した。
【０１２３】
担体無添加［１８Ｆ］フルオリドの生産
濃縮［１８Ｏ］水の照射によって、サイクロン１８／９サイクロトロン（ＩＢＡ）で１８Ｏ（ｐ，ｎ）１８Ｆ核反応を介して、ｎ．ｃ．ａ．（ｎｏ−ｃａｒｒｉｅｒ−ａｄｄｅｄ：担体無添加）［１８Ｆ］フルオリドを生産した。［１８Ｆ］フルオリドをアニオン交換カートリッジ（ＱＭＡ  Ｌｉｇｈｔ；Ｗａｔｅｒｓ；０．５ＭのＫ２ＣＯ３溶液およびＨ２Ｏで予め調整）に固定し、Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ  Ｋ２２２（５ｍｇ）およびＫ２ＣＯ３（１ｍｇ）のアセトニトリル（１．４ｍＬ）および水（０．６ｍＬ）中の溶液で１０ｍＬ密閉反応容器に溶離した。１１０℃、真空下で、窒素流を用いてアセトニトリルを共沸蒸留することによって、フルオリドを乾燥させた。共沸乾燥プロセスを各回アセトニトリル１ｍＬで３回繰り返した。
例１
【０１２４】
γ−ホラートアルキン前駆体の合成（図１Ａによる）
（ａ）（Ｓ）−メチル２−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−アミノ）−５−メトキシ−５−オキソペンタナンアミド（ｏｘｏｐｅｎｔａｎａｎａｍｉｄｏ））ペンタ−４−イノアートの合成（ステップａ）
市販のＢｏｃＧｌｕＯＭｅ（４０２ｍｇ、１．５４ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（４ｍＬ）に溶かし、Ｅｔ３Ｎ（４２８μＬ、２当量）を加えた。ＨＢＴＵ（７００ｍｇ、１．８５ｍｍｏｌ）を０℃で加え、混合物を３０分間撹拌した。活性化された酸の溶液を、Ｅｔ３Ｎ（８５６μＬ、４当量）を含有するＨ−Ｐｒａ−ＯＭｅ・ＨＣｌ（２０５ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（４ｍＬ）中の溶液に０℃で移した。混合物を０℃で１時間撹拌し、室温に加温し、一晩撹拌した。生成物をクエン酸（１Ｍ）および酢酸エチルで抽出した。有機相をブラインですすぎ、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（５０：１）を用いるシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製を達成して、生成物を白色の固体（４６７ｍｇ、８２％）として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ／ｐｐｍ  ８．４０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）、７．２７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ）、４．４５（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）、４．００（ｍ，１Ｈ）、３．６８（ｓ，３Ｈ）、３．６６（ｓ，３Ｈ）、２．９２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝２．５Ｈｚ）、２．６２（ｍ，２Ｈ）、２．２６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、２．０４〜１．７１（ｍ，２Ｈ）、１．４２（ｓ，９Ｈ）；１３Ｃ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ／ｐｐｍ  １７３．８、１７２．４、１７１．８、１５６．４、８０．９、７９．１、７４．１、５３．９、５３．０、５２．６、５１．９、３２．２、２９．１、２７．５、２１．９；ＨＲ−ＭＳ（ＥＳ＋）計算値Ｃ１７Ｈ２７Ｎ２Ｏ７：３７１．１８１３；実測値：３７１．１８１６
【０１２５】
（ｂ）（Ｓ）−メチル２−（（Ｓ）−４−アミノ−５−メトキシ−５−オキソペンタナンアミド）ペンタ−４−イノアートの合成（ステップｂ）
（Ｓ）−メチル２−（（Ｓ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−アミノ）−５−メトキシ−５−オキソペンタナンアミド）ペンタ−４−イノアート（４６０ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（４．５ｍＬ）に溶かし、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ；０．５ｍＬ）を加えた。混合物を室温で５時間放置し、次いで、減圧下で濃縮して、アミンのＴＦＡ塩を黄色のオイル（３３２ｍｇ、定量）として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ／ｐｐｍ  ８．５６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）、８．４８（ｂｓ，１Ｈ）、４．４６（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）、４．１０（ｂｓ，１Ｈ）、３．７９（ｓ，３Ｈ）、３．６８（ｓ，３Ｈ）、２．９５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝２．６Ｈｚ）、２．６４（ｍ，２Ｈ）、２．３８（ｍ，２Ｈ）、２．０４（ｍ，２Ｈ）；１３Ｃ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ／ｐｐｍ  １７１．９、１７１．７、１７０．６、８１．０、７４．３、５３．８、５３．０、５２．５、５２．０、３１．１、２６．８、２１．９；ＨＲ−ＭＳ（ＥＳ＋）計算値Ｃ１２Ｈ１９Ｎ２Ｏ５：２７１．１２８８；実測値：２７１．１２９８
【０１２６】
（ｃ）γ−ホラートアルキンの合成（ステップｃおよびｄ）
Ｎ２−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチレン−１０−ホルミルプテロイン酸（ｆｏｒｍｙｌｐｔｅｏｒｉｃ  ａｃｉｄ）（２４６ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（２ｍＬ）に懸濁させ、Ｅｔ３Ｎ（１６５μＬ、２当量）を加えた。ＨＢＴＵ（３１４ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）を０℃で加え、透明なオレンジ色の溶液が現れるまで、懸濁液を５分間撹拌した。生じた溶液を０℃で、Ｅｔ３Ｎ（１６５μＬ、２当量）を含有する（Ｓ）−メチル２−（（Ｓ）−４−アミノ−５−メトキシ−５−オキソペンタナンアミド）ペンタ−４−イノアート（ＴＦＡ塩；１６０ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（３ｍＬ）中の溶液に加えた。透明な黄色の溶液を０℃で４時間撹拌し、次いで室温に加温し、２時間撹拌した。揮発性成分を減圧下で除去し、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（１０：１）を用いるシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製して、保護されたγ−ホラートアルキンを黄色の固体（２３８ｍｇ、６２％）として得た。
ＬＲ−ＭＳ（ＥＳ＋）計算値Ｃ３０Ｈ３３Ｎ９Ｏ８：６４７．２５；実測値：６４７．８３
【０１２７】
ＮＭＲおよびＨＰＬＣによって、生成物の部分的な脱保護が示されたので、化合物をすぐに脱保護して、γ−ホラートアルキン前駆体（下記参照）を得た。
【０１２８】
保護されたγ−ホラートアルキン（２０３ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）を１ＭのＮａＯＨ（６ｍＬ）に溶かし、室温で一晩撹拌した。水溶液を少量の酢酸エチル（３×１ｍｌ）で抽出し、その後、２ＭのＨＣｌで、ｐＨを８に調節した。溶液を２つのポーションに分け、２つの逆相カートリッジ（Ｓｅｐ−Ｐａｋ  Ｃ１８、１２ｃｃ、２ｇ；Ｗａｔｅｒｓ；ＭｅＯＨおよびＨ２Ｏで予め調整）によって、精製を達成した。カートリッジを初めにＨ２Ｏ３ｍｌで洗浄し、次いで、生成物をＨ２Ｏ１２ｍｌで溶離した。両方の生成物画分を合わせ、凍結乾燥させた後に、γ−ホラートアルキンを黄色の粉末（１２１ｍｇ、６３％、ＨＰＬＣによる純度＞９５％）として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ／ＮａＯＤ）  δ／ｐｐｍ  ８．６２（ｓ，１Ｈ）、７．６９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ）、６．８６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ）、４．６３（ｓ，２Ｈ）、４．３７（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝４．５Ｈｚ）、４．２４（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．７Ｈｚ）、２．５６（ｍ，２Ｈ）、２．４４（ｍ，２Ｈ）、２．２９（ｍ，１Ｈ）、２．０７（ｍ，１Ｈ）；ＨＲ−ＭＳ（ＥＳ＋）計算値Ｃ２４Ｈ２５Ｎ８Ｏ７：５３７．１８４１；実測値：５３７．１８３４
例２
【０１２９】
γ−［１９Ｆ］−グルコースホラート基準の合成（図２Ａによる）
２−デオキシ−２−フルオログルコピラノシルアジドの合成を、文献手順（例えば、ＭａｓｃｈａｕｅｒおよびＰｒａｎｔｅ、Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．２００９）による手順に従って調製した。
【０１３０】
γ−ホラートアルキン（１０ｍｇ、１９μｍｏｌ）をｔｅｒｔ−ＢｕＯＨ／Ｈ２Ｏ（１：１、１ｍＬ）にエッペンドルフ管内で溶かし、２−デオキシ−２−フルオログルコピラノシルアジド（１１．６ｍｇ、５６μｍｏｌ）、０．１ＭのＣｕ（ＯＡｃ）２溶液（０．１当量、１９μＬ）、および０．１Ｍのアスコルビン酸ナトリウム溶液（０．２当量、３８μＬ）を加えた。完全に変換するまで（ＨＰＬＣを介して分析）、溶液を室温、５００ｒｐｍで１時間振盪した。生成物を単離するために、混合物を半分取ＨＰＬＣに掛けた。所望の画分を収集し、凍結乾燥させて、生成物を黄色の粉末（７．２ｍｇ、５２％、ＨＰＬＣによる純度＞９８％）として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ／ＮａＯＤ）  δ／ｐｐｍ  ８．７４（ｓ，１Ｈ）、７．９８（ｓ，１Ｈ）、７．６１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ）、６．７６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ）、５．８９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１＝２．６Ｈｚ，Ｊ２＝９．０Ｈｚ）、４．９１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．０Ｈｚ）、４．６１（ｓ，２Ｈ）、４．４４（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝４．７Ｈｚ）、４．３５（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝４．３Ｈｚ）、４．０２〜３．８６（ｍ，２Ｈ）、３．７９〜３．６２（ｍ，２Ｈ）、３．２０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１＝４．７Ｈｚ，Ｊ２＝１４．８Ｈｚ）、３．０４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１＝８．４Ｈｚ，Ｊ２＝１４．８Ｈｚ）、２．３７（ｍ，２Ｈ）、２．１７（ｍ，１Ｈ）、２．０１（ｍ，１Ｈ）；ＨＲ−ＭＳ（ＥＳ＋）計算値Ｃ３０Ｈ３５ＦＮ１１Ｏ１１：７４４．２４９６；実測値：７４４．２５０８
例３
【０１３１】
γ−［１８Ｆ］−グルコースホラートの合成（図２Ａによる）
１８Ｆ−置換グルコースをクリック反応を介してホラートにカップリングするために使用される３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−トリフルオロメタンスルホニル−β−Ｄ−マンノピラノシルアジド前駆体を、文献手順（例えばＭａｓｃｈａｕｅｒおよびＰｒａｎｔｅ、Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．２００９、７５３頁；Ｔａｋａｔａｎｉら、Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．２００３、１０７３頁）に従って得た。
【０１３２】
（ｂ）２−［１８Ｆ］フルオログルコピラノシルアジドの放射性合成
無水１８Ｆ−フルオリド−クリプタート複合体に、無水アセトニトリル０．３０ｍＬ中の前駆体、３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−トリフルオロメタンスルホニル−β−Ｄ−マンノピラノシルアジド（３．０ｍｇ、６．５μｍｏｌ）を加えた。混合物を８０℃で５分間撹拌して、放射性ＵＰＬＣ分析によると最大７５％の１８Ｆ導入を得た。５分間冷却し、水８ｍＬを加えた後に、混合物を逆相カートリッジ（Ｓｅｐ−Ｐａｋ  Ｃ１８  Ｐｌｕｓ；Ｗａｔｅｒｓ；ＭｅＯＨおよびＨ２Ｏで前処理）に通した。カートリッジを水５ｍＬで洗浄した。１８Ｆ標識された保護中間体、３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−２−［１８Ｆ］フルオログルコピラノシルアジドをアセトニトリル２．０ｍＬで別の１０ｍＬ密閉反応容器に溶離し、減圧および窒素流下、８０℃で乾燥させた。加水分解のために、６０ｍＭの水酸化ナトリウム溶液０．２５ｍｌを加え、混合物を６５℃に５分間加熱して、脱アセチル化を完了した。冷却後に、混合物を６０ｍＭの塩化水素溶液０．２５ｍＬで中和し、さらに精製することなく、クリック反応のためにそのまま使用した。
【０１３３】
（ｃ）γ−ホラートアルキン前駆体へのカップリング
ステップ（ｂ）で得られた脱保護された２−デオキシ−２−［１８Ｆ］フルオログルコピラノシルアジドを、γ−ホラートアルキンを含有する他の反応容器に移し、続いて、エタノール０．３ｍＬ、０．１ＭのＣｕ（ＯＡｃ）２溶液１０μＬおよび０．１Ｍのアスコルビン酸ナトリウム溶液２０μＬを加えた。反応混合物を５０℃で１５分間撹拌した。０．１５Ｍのリン酸塩緩衝液３ｍＬを加えた後に、混合物を半分取放射性ＨＰＬＣシステムに掛けた。生成物画分γ−［１８Ｆ］−グルコースホラートを滅菌フィルターに通し、発熱物質不含の滅菌バイアルに、さらなる製剤を伴うことなく収集した。単離された生成物の全減衰補正収率は、３時間の全合成時間の後に２５％に達し、その際、放射化学的純度は常に、９５％超であった。γ−［１８Ｆ］−グルコースホラートの特異活性は、１２０ＧＢｑ／μｍｏｌまでであった。
例４
【０１３４】
α−ホラートアルキン前駆体の合成（図１Ｂによる）
（ａ）（Ｓ）−メチル２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−アミノ）−５−メトキシ−５−オキソペンタンアミド）ペンタ−４−イノアートの合成
例１と同様に、ＢｏｃＧｌｕＯＭｅ−ＯＨ・ＤＣＨを出発物質として使用して、アルキンを調製した。ステップａの生成物は、透明なオイル（３２６ｍｇ、８０％）として生じた。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ／ｐｐｍ  ８．３４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）、６．９７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、４．４６（ｍ，１Ｈ）、４．０５（ｍ，１Ｈ）、３．６８（ｓ，３Ｈ）、３．６２（ｓ，３Ｈ）、２．９４（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝２．６Ｈｚ）、２．６６（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ１＝２．６Ｈｚ，Ｊ２＝６．８Ｈｚ）、２．３８（ｍ，２Ｈ）、２．００〜１．７１（ｍ，２Ｈ）、１．４２（ｓ，９Ｈ）；１３Ｃ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ／ｐｐｍ  １７３．８、１７２．７、１７１．６、１５６．１、８０．７、７９．１、７４．４、５４．１、５３．１、５２．３、５１．８、３０．７、２９．１、２８．２、２１．８；ＨＲ−ＭＳ（ＥＳ＋）計算値Ｃ１７Ｈ２６Ｎ２ＮａＯ７：３９３．１６３２；実測値：３９３．１６４１
【０１３５】
（ｂ）（Ｓ）−メチル２−（（Ｓ）−２−アミノ−５−メトキシ−５−オキソペンタンアミド）ペンタ−４−イノアートの合成（ステップｂ）
（Ｓ）−メチル２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−アミノ）−５−メトキシ−５−オキソペンタンアミド）ペンタ−４−イノアート（２７０ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（４．５ｍＬ）に溶かし、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ；０．５ｍＬ）を加えた。混合物を室温で５時間放置し、次いで、減圧下で濃縮して、アミンのＴＦＡ塩を黄色のオイル（１９８ｍｇ、定量）として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ／ｐｐｍ  ９．１２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）、８．２８（ｂｓ，２Ｈ）、４．５４（ｍ，１Ｈ）、３．９９（ｍ，１Ｈ）、３．７０（ｓ，３Ｈ）、３．６５（ｓ，３Ｈ）、３．０４（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝２．７Ｈｚ）、２．７２（ｍ，２Ｈ）、２．４９（ｍ，２Ｈ）、２．０５（ｍ，２Ｈ）；１３Ｃ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ／ｐｐｍ  １７３．２、１７１．１、１６９．４、８０．５、７４．８、５３．３、５２．５、５２．２、５２．１、２９．４、２７．２、２１．６；ＨＲ−ＭＳ（ＥＳ＋）計算値Ｃ１２Ｈ１９Ｎ２Ｏ５：２７１．１２８８；実測値：２７１．１２９１
【０１３６】
（ｃ）α−ホラートアルキンの合成
Ｎ２−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチレン−１０−ホルミルプテロイン酸（２４６ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（２ｍＬ）中に懸濁させ、Ｅｔ３Ｎ（１６５μＬ、２当量）を加えた。ＨＢＴＵ（３１４ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）を０℃で加え、透明なオレンジ色の溶液が現れるまで、懸濁液を５分間撹拌した。生じた溶液を０℃で、Ｅｔ３Ｎ（１６５μＬ、２当量）を含有する例１（ｂ）に従って得られた（Ｓ）−メチル２−（（Ｓ）−２−アミノ−５−メトキシ−５−オキソペンタンアミド）ペンタ−４−イノアート（ＴＦＡ塩；１６０ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（３ｍＬ）中の溶液に加えた。
【０１３７】
透明な黄色の溶液を０℃で４時間撹拌し、次いで、室温に加温し、一晩撹拌した。揮発性成分を減圧下で除去し、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（１０：１）を用いるシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製して、保護されたα−ホラートアルキンを黄色の固体として得た。
ＬＲ−ＭＳ  ［Ｍ＋Ｈ］＋：６４８．１２。
【０１３８】
ＮＭＲおよびＨＰＬＣによって、生成物の部分的な脱保護が示されたので、下記の手順を使用して、化合物をすぐに脱保護して、α−ホラートアルキンを得た。
【０１３９】
保護されたα−ホラートアルキンを１ＭのＮａＯＨ（６ｍＬ）に溶かし、室温で一晩撹拌した。水溶液を少量の酢酸エチル（３×１ｍＬ）で抽出し、その後、２ＭのＨＣｌ（３０μＬ）を用いて、ｐＨを８に調節した。溶液を５０ｍＭのＮＨ４ＨＣＯ３溶液（５ｍｌ）で希釈し、分取ＨＰＬＣに掛けた。所望の画分を収集し、凍結乾燥させて、生成物α−ホラートアルキンを黄色の粉末（８４ｍｇ、２ステップで２６％、ＨＰＬＣによる純度＞９８％）として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ／ＮａＯＤ）  δ／ｐｐｍ  ８．５８（ｓ，１Ｈ）、７．６７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ）、６．８１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝９．８Ｈｚ）、４．５８（ｓ，２Ｈ）、４．４６（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝４．８Ｈｚ）、４．３１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．９Ｈｚ）、２．６８（ｍ，２Ｈ）、２．３３（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ）、２．１６（ｍ，１Ｈ）、２．０５（ｍ，１Ｈ）；ＨＲ−ＭＳ（ＥＳ＋）計算値Ｃ２４Ｈ２４Ｎ８ＮａＯ７：５５９．１６６０；実測値：５５９．１６５９。
例５
【０１４０】
α−［１９Ｆ］−グルコースホラート基準の合成（図２Ｂによる）
２−デオキシ−２−フルオログルコピラノシルアジドの合成を、文献手順（例えば、ＭａｓｃｈａｕｅｒおよびＰｒａｎｔｅ、Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．２００９）による手順に従って調製した。α−ホラートアルキン（１０ｍｇ、１９μｍｏｌ）をｔｅｒｔ−ＢｕＯＨ／Ｈ２Ｏ（１：１、１ｍＬ）にエッペンドルフ管内で溶かし、２−デオキシ−２−フルオログルコピラノシルアジド（１１．６ｍｇ、５６μｍｏｌ）、０．１ＭのＣｕ（ＯＡｃ）２溶液（０．１当量、１９μＬ）、および０．１Ｍのアスコルビン酸ナトリウム溶液（０．２当量、３８μＬ）を加えた。完全に変換するまで（ＨＰＬＣを介して分析）、溶液を室温および５００ｒｐｍで１時間振盪した。生成物を単離するために、混合物を半分取ＨＰＬＣに掛けた。所望の画分を収集し、凍結乾燥させて、生成物を黄色の粉末（７．２ｍｇ、５２％、ＨＰＬＣによる純度＞９８％）として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ／ＮａＯＤ）  δ／ｐｐｍ  ８．７４（ｓ，１Ｈ）、７．９８（ｓ，１Ｈ）、７．６１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ）、６．７６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ）、５．８９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１＝２．６Ｈｚ，Ｊ２＝９．０Ｈｚ）、４．９１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．０Ｈｚ）、４．６１（ｓ，２Ｈ）、４．４４（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝４．７Ｈｚ）、４．３５（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝４．３Ｈｚ）、４．０２〜３．８６（ｍ，２Ｈ）、３．７９〜３．６２（ｍ，２Ｈ）、３．２０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１＝４．７Ｈｚ，Ｊ２＝１４．８Ｈｚ）、３．０４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１＝８．４Ｈｚ，Ｊ２＝１４．８Ｈｚ）、２．３７（ｍ，２Ｈ）、２．１７（ｍ，１Ｈ）、２．０１（ｍ，１Ｈ）；ＨＲ−ＭＳ（ＥＳ＋）計算値Ｃ３０Ｈ３５ＦＮ１１Ｏ１１：７４４．２４９６；実測値：７４４．２５０８
例６
【０１４１】
α−［１８Ｆ］−グルコースホラートの合成（図２Ｂによる）
γ−位置異性体の放射性合成と同じ方法で、α−［１８Ｆ］−グルコースホラートの放射性合成を行った。
【０１４２】
単離された生成物の全減衰補正収率は、３時間の全合成時間の後に３〜１０％であり、その際、放射化学的純度は常に、９５％超であった。［１８Ｆ］−グルコースα−ホラートの特異活性は、１１０±３０ＧＢｑ／μｍｏｌまでであった。
例７
【０１４３】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ結合親和性アッセイ
ホラート受容体が過剰発現されているヒト子宮頸癌に由来するＫＢ細胞を用いて、結合親和性アッセイを行った。細胞を単層として、７５ｃｍ２フラスコ内、３７℃、加湿雰囲気（７．５％のＣＯ２）下で培養した。熱不活化ウシ胎児血清（１０％）、Ｌ−グルタミン、ペニシリン（１００ＩＵ／ｍＬ）、およびストレプトマイシン（１００ｍｇ／ｍＬ）を補足されている特別なホラート欠乏ＲＰＭＩ  １６４０培地（ＦＦＲＰＭＩ  １６４０；Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）中で、細胞を維持した。ウシ胎児血清が、培地中の唯一のホラート供給源であったが、これは、ヒトにおける生理的血清濃度の下端である約３ｎｍｏｌ／ｍＬの最終ホラート濃度をもたらすと報告されている。
【０１４４】
純粋なＦＦＲＰＭＩ  １６４０培地（添加剤なし、氷冷）中の細胞懸濁液を１．５ｍＬバイアル（２４０μＬ中に７０００細胞）に加えた。３Ｈ−葉酸（０．８２ｎＭ）と共に、非放射性基準化合物グルコースホラート３の濃度を高めながら（５．０×１０−７から５．０×１０−１２Ｍへ）、４℃で３０分間、三重反復で細胞をインキュベートした。非特異的結合を過剰な葉酸（１０−３Ｍ）の存在下で決定した。インキュベーションの後に、懸濁液を３５００ｒｐｍおよび４℃で５分間遠心分離し、上清を除去した。１ＮのＮａＯＨ０．５ｍＬを加えることによって、細胞ペレットを再懸濁させ、同時に溶解させた。溶解させた細胞をボルテックスミキサー内で撹拌し、シンチレーションカクテル（Ｕｌｔｉｍａ  Ｇｏｌｄ；Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）４ｍＬを含有するシンチレーション管に移した。βカウンター（ＬＳ６５００；Ｂｅｃｋｍａｎ）を使用して、放射能を測定し、置換曲線からＧｒａｐｈ  Ｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ４．０ソフトウェアを使用して、５０％阻害濃度を決定した。
【０１４５】
３つの独立した実験から、グルコースホラートでの平均５０％阻害濃度（ＩＣ５０値）を得たが、これは、０．８±０．２ｎＭ（Ｋｉ＝０．４±０．１ｎＭ）の値を示す葉酸と比較して、γ−位置異性体では１．６±０．１ｎＭ（Ｋｉ＝０．８±０．１ｎＭ）、およびα−位置異性体では１．４±０．２ｎＭ（Ｋｉ＝０．７±０．２ｎＭ）であることが見出された。１つの実験の置換曲線を図３に示す（四角はγ−グルコースホラートを示し、菱形はα−グルコースホラートを示し、三角は葉酸を示す）。
例８
【０１４６】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ安定性研究
γ−［１８Ｆ］−グルコースホラートの安定性をヒト血漿中で、３７℃での様々なインキュベーション時間（０〜１２０分）で調査した。インキュベーションの後に、血漿タンパク質を氷冷メタノールで沈殿させ、１３５００ｒｐｍおよび２０℃で１０分間遠心分離した。ＰＢＳ対照を同じ体積のメタノールで希釈した。分析放射性ＵＰＬＣによって、上清およびＰＢＳ対照を分析した。［１８Ｆ］−グルコースホラートの位置異性体は両方とも１２０分まで、何らの崩壊生成物もヒト血漿中で示さなかった。
例９
【０１４７】
分布係数の決定
振盪フラスコ法によって、分布係数（ｌｏｇＤ７．４）を決定した。簡略には、γ−［１８Ｆ］−グルコースホラートをリン酸塩緩衝液（５００μＬ、ｐＨ７．４）およびｎ−オクタノール（５００ｍＬ）の混合物中に２０℃で溶かした。試料をオーバーヘッドシェーカー中で１５分間平衡させた。遠心分離（３分、５０００ｒｐｍ）によって、２相を分離し、５０μＬアリコットを各層から採取し、γカウンター内で放射能をカウントした。分配係数をＰＢＳ相中の放射能（ｃｐｍ）に対するオクタノール相中での放射能（ｃｐｍ）の比として表すが、これは、８回の測定の平均±標準偏差を表している。
【０１４８】
［１８Ｆ］−グルコースホラートの両方の位置異性体のｌｏｇＤ７．４値は、γ−位置異性体では−４．２１±０．１４であり、α−位置異性体では−４．２０±０．０６（化合物の親水性の上昇を示している）であることが見出された。
例１０
【０１４９】
生体内分布研究
雌のＣＤ−１ヌードマウスをＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ（ドイツ）から購入し、ホラート欠乏げっ歯類食餌で保持して、ヒト血清レベルに匹敵するレベルまで、その血清ホラート濃度を低下させた。３〜４日の順応期間の後に、ＫＢ腫瘍細胞懸濁液（５×１０６細胞）０．１ｍＬを、各マウスの両腋窩に皮下接種した。動物実験を接種から１２日後に行った。動物にγ−［１８Ｆ］−グルコースホラート約５ＭＢｑ（注射１回につき最大１００μＬ体積）を外側尾静脈を介して注射した。放射性トレーサーの１０分前に静脈内注射されるＰＢＳに溶かした過剰の葉酸（１００μｇ／１００μｌ）を用いて、遮断研究（ｎ＝２）を行った。放射性トレーサーを注射した後の３つの異なる時点（３０分、６０分、９０分）で、動物をと殺した。臓器および組織を切開し、γカウンター（Ｗｉｚａｒｄ、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）で測定した。導入された放射能を、組織１グラム当たりの注射用量百分率（％ＩＤ）として表した。生体内分布データを表１にまとめた。様々な時点で得られた生体内分布データを［１８Ｆ］−グルコースホラートのγ−位置異性体については表１に、α−位置異性体については表２にまとめている。遮断群（表内の最後の欄）では、各動物は、放射性トレーサー注射をする１０分前に、ＰＢＳ中１００μｇ／１００μＬの葉酸を投与された。図４Ａは、注射後６０分目でのγ−位置異性体とα−位置異性体との生体内分布における比較を種々の組織について示している（縞のカラム：γ−位置異性体、中空のカラム：γ−位置異性体遮断群、中実のカラム：α−位置異性体、点付きのカラム：α−位置異性体遮断群）。図４Ｂは、注射後９０分目でのγ−位置異性体とα−位置異性体との生体内分布における比較を種々の組織について示している（点付きの灰色のカラム：γ−位置異性体、中実の黒色のカラム：α−位置異性体）。
【０１５０】
【表１】
2014531411.tif 000018
【０１５１】
【表２】
2014531411.tif 000019
例１１
【０１５２】
ＰＥＴイメージング研究
０．９ｍｍ未満の超高分解能をもたらすＥｘｐｌｏｒｅ  ＶＩＳＴＡ  ＰＥＴ／ＣＴ断層Ｘ線撮影器（ＧＥ）を用いて、ＰＥＴ実験を行った。
【０１５３】
動物を軽く拘束し、１０〜１４ＭＢｑのγ−［１８Ｆ］−グルコースホラート（注射１回当たり１００〜１５０μＬ）を外側尾静脈を介して注射した。遮断研究のために、動物は、放射性トレーサー注射をする１０分前に、ＰＢＳに溶かした過剰の葉酸（１００μｇ／１００μＬ）を静脈内注射を介して投与された。動物に、空気／酸素混合物中のイソフルランで麻酔をかけた。注射後７５〜１０５分目にＰＥＴスキャンを得た。Ａｍｉｒａ（Ｖｅｒｓｉｏｎ  ４）後処理ソフトウェアを用いて、ＰＥＴおよびＣＴを合わせたデータを分析した。
【０１５４】
［１８Ｆ］−グルコースホラートのγ−およびα−位置異性体を使用するＰＥＴ研究によって、両方の肩で、ＫＢ腫瘍異種移植片の優れたイメージが得られた。さらに、取り込みは高度に特異的であり、天然葉酸によって遮断された。図５Ａ、Ｂは、注射後７５〜１０５分時点での両方の異性体のＰＥＴイメージを示している。図５Ｂは、遮断群のＰＥＴイメージである。記号は次の臓器／組織を示している：（ａ）：腫瘍、（ｂ）：肝臓、（ｃ）：胆嚢、（ｄ）：腎臓、（ｅ）：腸／糞便。
【図１Ａ】
2014531411.tif 000032
【図１Ｂ】
2014531411.tif 000033
【図２Ａ】
2014531411.tif 000034
【図２Ｂ】
2014531411.tif 000035
【図３】
2014531411.tif 000036
【図４Ａ】
2014531411.tif 000037
【図４Ｂ】
2014531411.tif 000038
【図５】
2014531411.tif 000039
【国際調査報告】
2014531411.tif 000040
2014531411.tif 000041