(57)【要約】  本開示は、ＴＲＰＡ１イオンチャネルおよび／またはＴＲＰＡ１に関連する医学的状態、例えば、疼痛または喘息を阻害するための新規な化合物および医薬組成物を記載する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2014521724.tif 000030
の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
塩酸塩型の請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
式（Ｉａ）
【化２】
2014521724.tif 000031
の化合物、または式（Ｉａ）の化合物の薬学的に許容される塩を含有する医薬組成物。
【請求項４】
式（Ｉａ）の化合物の薬学的に許容される塩を含有する、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
式（Ｉａ）の化合物の塩酸塩を含有する、請求項３に記載の組成物。
【請求項６】
薬学的に許容される担体をさらに含有する、請求項３に記載の組成物。
【請求項７】
前記担体が、スルホブチルエーテルβ−シクロデキストリン化合物を含有する、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
経口投与のために処方される、請求項６に記載の組成物。
【請求項９】
動物またはヒトにおける疼痛の処置もしくは改善、または鎮痛を提供するための医薬の製造における、式（Ｉａ）
【化３】
2014521724.tif 000032
の化合物、またはその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項１０】
式（Ｉａ）の前記化合物が塩酸塩型である、請求項９に記載の使用。
【請求項１１】
前記疼痛が急性疼痛である、請求項９または１０に記載の使用。
【請求項１２】
前記疼痛が慢性疼痛である、請求項９または１０に記載の使用。
【請求項１３】
前記疼痛が術後疼痛である、請求項９または１０に記載の使用。
【請求項１４】
前記疼痛が炎症性疼痛である、請求項９〜１３のいずれかに記載の使用。
【請求項１５】
前記化合物または組成物が経口投与される、請求項９に記載の使用。
【請求項１６】
動物またはヒトにおける喘息の処置もしくは改善のための医薬の製造における、式（Ｉａ）の化合物
【化４】
2014521724.tif 000033
、またはその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項１７】
式（Ｉａ）の前記化合物が塩酸塩型である、請求項１６に記載の使用。
【請求項１８】
ヒトにおいて喘息を処置または改善することを含む、請求項１６に記載の使用。
【請求項１９】
前記化合物または組成物が経口投与される、請求項１６に記載の使用。
【請求項２０】
前記組成物が吸入による経口送達のために処方される、請求項１６に記載の使用。
【請求項２１】
疼痛の処置もしくは改善または鎮痛を提供するための、式（Ｉａ）
【化５】
2014521724.tif 000034
の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２２】
前記疼痛が、急性疼痛、慢性疼痛、術後疼痛または炎症性疼痛である、請求項２１に記載の化合物。
【請求項２３】
喘息の処置または改善のための、式（Ｉａ）
【化６】
2014521724.tif 000035
の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２４】
ヒトにおいて喘息を処置または改善することを含む、請求項２３に記載の化合物。
【請求項２５】
医薬としての使用のための、式（Ｉａ）
【化７】
2014521724.tif 000036
の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２６】
塩酸塩型の請求項２１、２２、２３、２４または２５に記載の化合物。
【請求項２７】
式（Ｉａ）の化合物を製造する方法であって、
ａ）（Ｓ）−２−メチルピロリジンと５−ブロモ−２−クロロピリミジンとを反応させて中間化合物０３を形成する工程と、
ｂ）該化合物０３中間体と化合物０５（６−ブロモ−２−アミノピリジン）とを、１つ以上の反応によってカップリングさせて、中間化合物０６を形成する工程と、
ｃ）化合物０６と化合物０７とを、カップリング反応において反応させて、式（Ｉ）の化合物を形成する工程と、
を含む、方法。
【請求項２８】
式（Ｉａ）の生成物であって、
ａ）（Ｓ）−２−メチルピロリジンと５−ブロモ−２−クロロピリミジンとを反応させて中間化合物０３を形成する工程と、
ｂ）該化合物０３中間体と化合物０５（６−ブロモ−２−アミノピリジン）とを、１つ以上の反応によってカップリングさせて、中間化合物０６を形成する工程と、
ｃ）化合物０６と化合物０７とを、カップリング反応において反応させて、式（Ｉ）の化合物を形成する工程と、
を含むプロセスによって得られる生成物。
【請求項２９】
ＴＲＰＡ１を阻害または拮抗するための方法であって、式（Ｉａ）の化合物を含有する組成物とＴＲＰＡ１イオンチャネルとを接触させることを含む、方法。
【請求項３０】
ＴＲＰＡ１イオンチャネルインヒビター化合物を特定するための方法であって、
（ａ）ＴＲＰＡ１に対して試験した場合、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、および（ＩＶ）の化合物からなる群より選択される参照剤についての標準のＩＣ５０値を得ることと、
（ｂ）ＴＲＰＡ１に対して試験した場合、試験化合物についてのＩＣ５０値を得ることと、
（ｃ）標準のＩＣ５０値に対してＩＣ５０値を比較することと、
を含み、
標準のＩＣ５０値以下のＩＣ５０値を有する試験化合物を、ＴＲＰＡ１イオンチャネルインヒビター化合物として特定する、方法。
【請求項３１】
ＴＲＰＡ１がｈＴＲＰＡ１である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記参照剤が、ＴＲＰＡ１に特異的なイオン流入を阻害すると評価される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
前記参照剤が、ＴＲＰＡ１に特異的なイオン電流を阻害すると評価される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３４】
式（Ｉ）の前記化合物が、式（Ｉａ）
【化８】
2014521724.tif 000037
の立体異性体である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３５】
式（Ｉａ）の生成物であって、
【化９】
2014521724.tif 000038
ａ）（Ｓ）−２−メチルピロリジンと５−ブロモ−２−クロロピリミジンとを反応させて中間化合物０３を形成する工程と、
ｂ）該化合物０３中間体と化合物０５（６−ブロモ−２−アミノピリジン）とを、１つ以上の反応によってカップリングさせて、中間化合物０６を形成する工程と、
ｃ）化合物０６と化合物０７とを、カップリング反応において反応させて、式（Ｉ）の化合物を形成する工程と、
を含むプロセスによって得られる生成物。
【請求項３６】
式（Ｉｂ）の生成物であって、
【化１０】
2014521724.tif 000039
ａ）（Ｒ）−２−メチルピロリジンと５−ブロモ−２−クロロピリミジンとを反応させて中間化合物０３を形成する工程と、
ｂ）該化合物０３中間体と化合物０５（６−ブロモ−２−アミノピリジン）とを、１つ以上の反応によってカップリングさせて、中間化合物０６を形成する工程と、
ｃ）化合物０６と化合物０７とを、カップリング反応において反応させて、式（Ｉｂ）の化合物を形成する工程と、
を含むプロセスによって得られる生成物。
【請求項３７】
ＴＲＰＡ１を阻害または拮抗するための方法であって、式（Ｉ）
【化１１】
2014521724.tif 000040
の化合物を含有する組成物と、ＴＲＰＡ１イオンチャネルとを接触させることを含む、方法。
【請求項３８】
式（Ｉ）の前記化合物が、式（Ｉａ）
【化１２】
2014521724.tif 000041
の立体異性体である、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
疼痛の処置もしくは改善、または鎮痛を提供するための、式（Ｉｂ）
【化１３】
2014521724.tif 000042
の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４０】
喘息の処置もしくは改善のための、式（Ｉｂ）
【化１４】
2014521724.tif 000043
の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４１】
塩酸塩型である、請求項３９または４０に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
優先権
本願は、２０１１年８月９日出願の米国特許仮出願番号６１／５２１，７０５に対する優先権を主張し、同出願の全体が参照によって本明細書に援用される。
【０００２】
技術分野
本開示は、例えば、一過性受容器電位Ａ１イオンチャネル（ＴＲＰＡ１）を阻害することによって、疼痛を処置するための化合物および方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
ＴＲＰＡ１は、ヒトにおける疼痛感覚に関連する非選択性陽イオンチャネルである。ＴＲＰＡ１は、感覚神経で見出され、疼痛に対する炎症に関連するシグナル伝達受容器として機能する。ＴＲＰＡ１の活性化は、侵害受容ニューロンの発火を誘導し、脊髄における中枢性感作を引き起こすことによって疼痛を生じ得る。また、ＴＲＰＡ１刺激は、感覚ニューロンの発火を増大し得、これが、炎症促進性のニューロペプチド、例えば、ＮＫ−Ａ、サブスタンスＰおよびＣＧＲＰ（血管拡張を誘発し、免疫細胞の補充を補助する）を放出させ得る。炎症時に生成される種々の内因性の反応性化合物（リポソーム過酸化の間に放出される４−ヒドロキシノネナール；ＣＯＸ酵素によって合成されるシクロペンタンプロスタグランジン類；酸化的ストレスによって生成される過酸化水素など）が、ＴＲＰＡ１を活性化する。また、ＴＲＰＡ１は、種々の刺激、例としては、天然の生成物（例えば、アリルイソチオシアネート、またはＡＩＴＣ）、環境的刺激因子（例えば、アクロレイン）、両親媒性分子（例えば、トリニトロフェノールおよびクロルプロマジン）および薬剤によっても活性化され得る。また、ＴＲＰＡ１の活性化は、ＴＲＰＡ１を冷感に対して感作する。さらに、ＴＲＰＡ１における機能獲得変異は、家族性偶発性疼痛症候群を生じ、この病態に罹患している患者は、冷感によって誘発され得る偶発性疼痛を有する（Ｋｒｅｍｅｙｅｒら、Ｎｅｕｒｏｎ．２０１０  Ｊｕｎ  １０；６６（５）：６７１−８０）。従って、ＴＲＰＡ１は、神経損傷、冷感異痛および炎症性疼痛に関連する疼痛を含む疼痛に役割を果たすと考えられる。
【０００４】
ＴＲＰＡ１インヒビター化合物は、疼痛を処置するために用いられ得る。ＴＲＰＡ１イオンチャネルを阻害する化合物は、ＴＲＰＡ１イオンチャネルの阻害によって改善か、排除、または予防される状態（例えば、疼痛を生じる医学的状態）を処置するのに例えば有用であり得る。ＴＲＰＡ１の阻害（例えば、遺伝子除去および化学的拮抗による）は、マウスおよびラットにおいて疼痛行動を軽減させることが示されている。機能的なＴＲＰＡ１を欠いているノックアウトマウスは、ＴＲＰＡ１活性化因子（ＡＩＴＣ、ホルマリン、アクロレイン、４−ヒドロキシノネナールなど）に対する侵害刺激反応が低下しており、さらに、炎症伝達物質ブラジキニンに対する応答における熱的および機械的な過敏性が大きく低下している（例えば、Ｋｗａｎ，Ｋ．Ｙ．ら、Ｎｅｕｒｏｎ  ２００６，５０，２７７−２８９；Ｂａｕｔｉｓｔａ，Ｄ．Ｍ．ら、Ｃｅｌｌ  ２００６，１２４，１２６９−１２８２）。動物の疼痛モデルにおいて、遺伝子特異的なアンチセンスオリゴヌクレオチドによるＴＲＰＡ１発現の下方制御は、炎症および神経損傷によって誘発される冷感痛覚過敏症を妨げて、逆転させた（例えば、Ｏｂａｔａ，Ｋ．ら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ  ２００５，１１５，２３９３−２４０１；Ｊｏｒｄｔ，Ｓ．Ｅ．ら、Ｎａｔｕｒｅ  ２００４，４２７，２６０−２６５；Ｋａｔｓｕｒａ，Ｈ．ら、Ｅｘｐｌｏｒａｔｏｒｙ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ２００６，２００，１１２−１２３）。また、ＴＲＰＡ１インヒビター化合物は、種々のげっ歯類疼痛モデルにおいても有効である。ＴＲＰＡ１インヒビターは、（ナイーブな動物における正常な冷感を変更することなく）完全フロイントアジュバントによって誘発される炎症後の機械的な過敏性および冷感異痛を低減し、ラットのモノヨード酢酸変形性関節症モデルにおいて機能を改善することが示された。（ｄｅｌ  Ｃａｍｉｎｏ，Ｄ．ら、（２０１０）を参照のこと。ＴＲＰＡ１は、冷感過敏性に寄与する。Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  ３０，１５１６５−１５１７４；およびＣｈｅｎ，Ｊ．ら、（２０１１）。ＴＲＰＡ１チャネルの選択的遮断は、侵害性冷感の変更または体温の調節なしに病理学的疼痛を軽減する。Ｐａｉｎ  １５２，１１６５−７２）。ＴＲＰＡ１インヒビター化合物は、ＡＩＴＣ（マスタードオイル）、ホルマリン、桂皮アルデヒド、アクロレインおよび他のＴＲＰＡ１活性化因子を注射されたげっ歯類での疼痛行動の軽減を示した。（Ｊｏｒｄｔ，Ｓ．Ｅ．ら、Ｎａｔｕｒｅ  ２００４，４２７，２６０−２６５；Ｃｈｅｎ，Ｊ．ら、（２０１１）を参照のこと。ＴＲＰＡ１チャネルの選択的な遮断は、侵害性冷感の変更も体温調節もなしに病理学的疼痛を軽減する。Ｐａｉｎ  １５２，１１６５−７２）。
【０００５】
近年、ＴＲＰＡ１阻害性化合物は、ＰＣＴ特許出願ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０６９１４６（２０１０年７月１日に国際公開第２０１０／０７５３５３Ａ１号として公開）に以下の化合物１として開示されている。
【化１】
2014521724.tif 000002
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】ＰＣＴ国際公開第２０１０／０７５３５３Ａ１号公報
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｋｒｅｍｅｙｅｒら、Ｎｅｕｒｏｎ．２０１０  Ｊｕｎ  １０；６６（５）：６７１−８０
【非特許文献２】Ｋｗａｎ，Ｋ．Ｙ．ら、Ｎｅｕｒｏｎ  ２００６，５０，２７７−２８９
【非特許文献３】Ｂａｕｔｉｓｔａ，Ｄ．Ｍ．ら、Ｃｅｌｌ  ２００６，１２４，１２６９−１２８２
【非特許文献４】Ｏｂａｔａ，Ｋ．ら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ  ２００５，１１５，２３９３−２４０１
【非特許文献５】Ｊｏｒｄｔ，Ｓ．Ｅ．ら、Ｎａｔｕｒｅ  ２００４，４２７，２６０−２６５
【非特許文献６】Ｋａｔｓｕｒａ，Ｈ．ら、Ｅｘｐｌｏｒａｔｏｒｙ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ２００６，２００，１１２−１２３
【非特許文献７】ｄｅｌ  Ｃａｍｉｎｏ，Ｄ．ら、（２０１０）ＴＲＰＡ１は、冷感過敏性に寄与する、Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  ３０，１５１６５−１５１７４
【非特許文献８】Ｊｏｒｄｔ，Ｓ．Ｅ．ら、Ｎａｔｕｒｅ  ２００４，４２７，２６０−２６５
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
しかし、ＴＲＰＡ１イオンチャネルを阻害する医薬組成物の必要性を含め、疼痛に関与するイオンチャネルを安全に調節する（例えば、阻害する）化合物を特定する必要性が残っている。具体的には、肝毒性の血清バイオマーカーなしにＴＲＰＡ１を阻害する化合物を特定する必要性がある。このような化合物は、例えば、試験手段および治療剤として（例えば、疼痛の処置のために）としてのいずれにも有用である。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
発明の要旨
式（Ｉ）の化合物は、ヒトおよび動物のＴＲＰＡ１チャネルの新規なアンタゴニストである。
【化２】
2014521724.tif 000003
【００１０】
式（Ｉａ）の化合物は、実施例１に記載されるように、図１Ａの合成によって合成され得る、式（Ｉ）の第一の立体異性体、および薬学的に許容される塩（例えば、実施例２に記載の塩酸塩）である。
【化３】
2014521724.tif 000004
【００１１】
式（Ｉａ）の化合物は、インビトロおよびインビボの試験の両方におけるヒトＴＲＰＡ１チャネルの新規な低分子アンタゴニストである。また、式（Ｉａ）の化合物は、ＴＲＰＡ１の選択性が高いインビトロのインヒビターでもある。例えば、式（Ｉａ）の化合物は、ラット、イヌおよびヒトのＴＲＰＡ１において、ＴＲＰＡ１を通じた内向き流を遮断する（実施例３）。ヒトＴＲＰＡ１（ｈＴＲＰＡ１）に対する式（ＩＩａ）の化合物のアンタゴニスト効果は、全細胞パッチコンフィギュレーション（ｗｈｏｌｅ  ｃｅｌｌ  ｐａｔｃｈ  ｃｏｎｆｉｇｕｒａｔｉｏｎ）で測定した（実施例３）。さらに、式（Ｉａ）の化合物は、公知のＴＲＰチャネルおよび電位依存性イオンチャネルと比較して、ＴＲＰＡ１について選択性が高い（実施例３）。式（Ｉａ）の化合物は、ＴＲＰＡ１を阻害する化合物を特定するためのアッセイで用いられ得る。また、式（Ｉ）の化合物は、ＴＲＰＡ１イオンチャネルを調整する方法でも用いられ得、この方法は、細胞と、式Ｉの構造を有する化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）、またはその薬学的に許容される塩とを接触させる工程を含む。
【００１２】
式（Ｉａ）の化合物は、ホルマリン注射によるＴＲＰＡ１チャネルの直接活性化によって誘発される疼痛（実施例５）、慢性の完全フロイントアジュバント誘発性炎症後の冷感異痛（実施例６）、および後足の足底表面の切開を含有するげっ歯類の外科手術モデル（実施例７）を含有する、疼痛の複数のインビボのラットモデルにおいて活性な薬学的化合物である。
【００１３】
式（Ｉｂ）の化合物は、実施例１ｃによって合成され得る、式（Ｉ）の第二の立体異性体、および薬学的に許容される塩である。
【化４】
2014521724.tif 000005
【００１４】
式（Ｉｂ）の化合物は、式（Ｉ）の第二の立体異性体であり、かつインビトロの試験におけるヒトＴＲＰＡ１チャネルの新規な低分子アンタゴニストである。式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）を含有する医薬組成物は、疼痛の処置のための投与のために有用である。他の医薬組成物としては、式（Ｉａ）および／または式（Ｉｂ）の化合物を含有する式（Ｉ）の化合物が挙げられる。式（Ｉ）の化合物（例えば、（例えば、式（Ｉａ）および／または式（Ｉｂ）の化合物）を含有する医薬組成物は、疼痛を処置するための医薬組成物の製造に有用である。
【００１５】
また、式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）および／または式（Ｉｂ））は、呼吸状態、好ましくはＴＲＰＡ１インヒビターに応答する状態を処置するための医薬組成物の製造にも有用である。
【００１６】
医薬組成物は式（Ｉ）の化合物（（例えば、式（Ｉａ））医薬組成物、ならびにその薬学的に許容される塩および処方物（例えば、シクロデキストリンと組み合わせた、式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ））を含有する医薬組成物）、例えば、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンまたはＣａｐｔｉｓｏｌ（登録商標）の商品名で市販されているスルホブチルエーテルβ−シクロデキストリン化合物））を含有し、炎症性疼痛および術後疼痛を含む疼痛の処置に有用である。さらに、式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ））を含有する医薬組成物は、式（Ｉ）（例えば、式（Ｉａ））の薬学的に許容される塩を、シクロデキストリンを含まないその製剤に含んでもよい。
式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ））およびその薬学的に許容される塩は、試験手段として、例えば、ＴＲＰＡ１イオンチャネルの調整を含むアッセイにおいても有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１Ａ】図１Ａは、実施例１Ａに記載の式（Ｉａ）の化合物を合成するための例示的な反応スキームである。
【図１Ｂ】図１Ｂは、実施例１Ｂに記載の、重水素化された化合物（１２）、式（Ｉａ）の化合物の重水素化されたアナログを合成するための反応スキームである。
【図２】図２は、実施例５に記載のホルマリン注射を行う前にげっ歯類に種々の濃度（３、１０、３０、および５０ｍｇ／ｋｇ）で式（Ｉａ）の化合物を含有する医薬組成物を投与することの効果を示す棒グラフである。図２は、種々の量の式（Ｉａ）の化合物を含有する種々の医薬組成物、腹腔内（ｉ．ｐ．）投与されるビヒクル、および式（ＩＩ）の比較化合物についてのげっ歯類のホルマリン注射の疼痛モデルにおいて測定された疼痛持続期間（２分間の観察期間にわたる秒数の数（ｎ））を示す。
【図３】図３は、実施例６に記載される完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）げっ歯類モデルにおける漸増濃度の式（Ｉａ）の化合物による医薬組成物のｉ．ｐ．投与後に観察された脚引っ込め潜時（Ｐａｗ  Ｗｉｔｈｄｒａｗａｌ  Ｌａｔｅｎｃｙ）（ＰＷＬ）のスコアの増大を示す線グラフである。図３は、式（Ｉａ）の化合物の濃度の関数としてのＰＷＬスコアの変化、ならびにビヒクル単独および式（ＩＩ）の比較化合物を含有する比較の医薬組成物の投与の際に観察されたＰＷＬスコアを示す。
【図４】図４は、実施例７に記載のげっ歯類切開性疼痛モデルにおける種々の濃度の式（Ｉａ）の化合物を含有する医薬組成物のｉ．ｐ．投与後に観察された防御（ｇｕａｒｄｉｎｇ）スコアの減少を示す線グラフである。図４は、式（Ｉａ）の化合物が投与された濃度の関数としての防御スコアにおける変化、ならびにビヒクル単独および式（ＩＩＩ）の比較化合物もしくはケトプロフェンを含有する比較の医薬組成物の投与の際に観察された防御スコアを示す。
【図５Ａ】図５Ａは、式（Ｉａ）の化合物を経口投与された雌性イヌで測定した肝毒性の血清化学バイオマーカーの測定に関するデータの棒グラフである。この図は、Ｘ軸にそって、投与された式（Ｉ）の化合物の用量である。
【図５Ｂ】図５Ｂは、式（ＩＩＩ）の比較化合物を経口投与された雄性イヌおよび雌性イヌで測定した肝毒性の血清化学バイオマーカーの測定に関するデータの棒グラフである。
【図６】図６は、７日連続して、５０ｍｇ／ｋｇ／日での７日のｉ．ｐ．の反復投与スクリーニング毒性試験で、式（Ｉａ）の化合物または式（ＩＩＩ）の比較化合物を投与するためのラットの血清における肝毒性バイオマーカーの効果を示しているデータの棒グラフである。
【図７】図７は、式（Ｉｂ）の化合物を特定する特徴的なＮＭＲスペクトルである。
【図８】図８は、アレルギーの喘息モデルで式（Ｉａ）の化合物の評価について実験プロトコールでの工程を示しているフローチャートである。
【図９Ａ】図９Ａは、肺抵抗に対する式（Ｉａ）の化合物の種々の用量の効果を示しているデータの線グラフである。
【図９Ｂ】図９Ｂは、肺抵抗の後期応答の間の式（Ｉａ）の化合物の種々の用量の効果の定量化を示しているデータの棒グラフである。
【図１０】図１０は、気道の過敏反応に対する式（Ｉａ）の化合物の種々の用量の効果を示しているデータの棒グラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ））およびその薬学的に許容される塩は、医薬組成物でのＴＲＰＡ１イオンチャネルの阻害、および試験手段に有用である。
【化５】
2014521724.tif 000006
【００１９】
式（Ｉ）の化合物およびその塩の合成
式（Ｉａ）の化合物は、実施例１Ａに記載されるように、図１Ａに示される多段階合成プロセスによって作製され得る式（Ｉ）の立体異性体である。
【化６】
2014521724.tif 000007
【００２０】
要するに、図１Ａを参照して、式（Ｉａ）の化合物は、（１）（Ｓ）−２−メチルピロリジン０２と、５−ブロモ−２−クロロピリミジン０１とを反応させて、中間化合物０３を形成することと、（２）化合物０３中間体と、化合物０５（６−ブロモ−２−アミノピリジン）とを、１つ以上の反応によってカップリングさせて、中間化合物０６を形成することと、（３）化合物０６と化合物０７とをカップリング反応で反応させて、式（Ｉａ）の化合物を形成することとによって生成され得る。化合物０３中間体と化合物０５とのカップリングは、図１Ａに示され、実施例１Ａに記載されるように、中間化合物０４を介して行われてもよいが、他の合成スキームも式（Ｉａ）の化合物の調製に適切である。実施例１Ａおよび図１Ａに記載のように、中間化合物０６は、化合物０３とビス（ピナコラト）ジボロンおよび他の材料とを反応させて、中間化合物０４を形成すること、続いて、中間化合物０４と６−ブロモ−２−アミノピリジン（化合物０５）とを反応させて、中間化合物０６を形成することによって、形成され得る。各々の反応工程は、図１Ａに示される生成物を得るために適切な反応条件で適切な試薬を用いて行われ得る。
【００２１】
必要に応じて、式（Ｉａ）の化合物を合成するためのプロセスは、さらに、その後の反応を行う前に、中間化合物０３および化合物０６を単離するための工程を含み得る。さらに、式（Ｉａ）の化合物は、必要に応じて薬学的に許容される塩に変換されてもよい。図１Ａでは、式（Ｉ）の化合物の、式（Ｉａ）の化合物の薬学的に許容されるＨＣｌ塩への変換は、実施例２によって示される。
【００２２】
式（Ｉｂ）の化合物は、式Ｉの第二の立体異性体である。
【化７】
2014521724.tif 000008
【００２３】
式（Ｉｂ）の化合物は、式（Ｉａ）の化合物を作製するために上記されたのと同様の手順を用いて、式（Ｉａ）の化合物の合成における出発材料としての（Ｓ）−２−メチルピロリジンの使用を（Ｒ）−２−メチルピロリジンで置き換えることによって（すなわち、図１Ａの化合物０２の（Ｒ）−２−メチルピロリジンでの置換）、合成され得る。また、式（Ｉ）のラセミ化合物は、例えば、図１Ａの反応スキームにおいて化合物０２の代わりにラセミ体の２−メチルピロリジンを用いることによって、または式（Ｉａ）の化合物と式（Ｉｂ）の化合物とを合わせることによって調製され得る。式（Ｉｂ）を上回って、式（Ｉａ）の化合物が９５％を超える鏡像異性過剰である式（Ｉ）の組成物を、十分な鏡像異性純度（すなわち、９５％を超える）を有する（Ｓ）−２−メチルピロリジン出発材料を選択することによって作製してもよい。同様に、式（Ｉａ）を上回って、式（Ｉｂ）の化合物が９５％を超える鏡像異性過剰である式（Ｉ）の組成物を、十分な鏡像異性純度（すなわち、９５％を超える）を有する（Ｒ）−２−メチルピロリジン出発材料を選択することによって作製してもよい。式（Ｉａ）および式（Ｉｂ）の両方の立体異性体の所望の量を有する式（Ｉ）の組成物は、各々が、２−メチルピロリジン出発材料を用いて、対応する立体化学によって作製された、所定の量の９５％を超える鏡像異性体純度を有する式（Ｉａ）の組成物と、９５％を超える鏡像異性体純度を有する式（Ｉｂ）の組成物とを合わせることによって作製できる。０〜１００の値の「鏡像異性体過剰」という用語は、ゼロはラセミ体であり、１００は、純粋な単一の鏡像異性体である。かつて９８％光学的に純粋と呼ばれた化合物は、今では、より正確に９６％ｅｅ．と記載される。換言すれば、９０％ｅ．ｅ．とは、該当の材料中のある鏡像異性体の９５％の存在と、他の鏡像異性体の５％の存在を反映する。式（Ｉ）の化合物は、薬学的に許容される塩として得てもよい。
【００２４】
式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ））の「薬学的に許容される塩」という用語は、無機の酸および有機の酸を含有する薬学的に許容される非毒性の酸から調製される塩を指す。式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ））の１つの特に好ましい塩型は、実施例２に開示される塩酸塩である。一般には、式（Ｉ）の薬学的に許容される塩（例えば、式（Ｉａ））は、その化合物の安定性もしくは毒性学的な特性を改善し、溶解度、保湿性を増大もしくは減少するため、その化合物の薬物動態的な能力（例えば、ＣｍａｘまたはＡＵＣ測定値）を改善するため、あるいは医薬組成物の貯蔵特性を改善するため（例えば、吸湿性を減少するため）に調製され得る。
【００２５】
式（Ｉａ）の化合物によるＴＲＰＡ１の阻害
式（Ｉａ）の化合物は、インビトロの試験によって示されるとおり、ＴＲＰＡ１チャネルの新規な低分子アンタゴニストである。式（Ｉａ）の化合物は、ラット、イヌおよびヒトにおいてＴＲＰＡ１を通じた内向き流を、約１００ナノモルのＩＣ５０で遮断する（表１、実施例３によって得られるデータ）。全細胞パッチコンフィギュレーションにおけるｈＴＲＰＡ１に対する式（Ｉａ）の化合物のアンタゴニスト効果を、実施例３の方法によって評価した。
【表１】
2014521724.tif 000009
【００２６】
式（Ｉａ）の化合物は、ＴＲＰチャネルおよび電位依存性イオンチャネルと比較して、ｈＴＲＰＡ１に関して選択性が高い。例えば、ほとんどのイオンチャネルファミリーに相当する８つの異なるチャネルに対して試験した場合（表２、実施例３）、試験したチャネルのうちで、生理学的に関連する濃度（例えば、１、３．２、１０、または３２マイクロモル）で式（Ｉａ）の化合物によって再現可能にブロックまたはアゴナイズされたものはなかった。用いた最高濃度（３２マイクロモル）は、ほとんど効果が無かったので、ほとんどのこれらのチャネルに関する式（Ｉａ）の化合物の実際のＩＣ５０は決定できない。しかし、式（Ｉａ）の化合物は、他の試験した全てのチャネルよりもＴＲＰＡ１のブロックに関して少なくとも１００倍選択性がある（表２、実施例３）。
【表２】
2014521724.tif 000010
【００２７】
式（Ｉａ）の化合物は、インビボの試験によって示されるとおり、ヒトＴＲＰＡ１チャネルの新規な低分子アンタゴニストである。例えば、式（Ｉａ）の化合物は、ホルマリン注射でＴＲＰＡ１チャネルによって誘発されるインビボの疼痛のげっ歯類モデルで活性化された。
【００２８】
式（Ｉａ）の化合物のインビボ活性を、式（ＩＩ）、式（ＩＩＩ）、および式（ＩＶ）の比較化合物の活性に対して比較してもよい。
【化８】
2014521724.tif 000011
【化９】
2014521724.tif 000012
【化１０】
2014521724.tif 000013
【００２９】
式（ＩＩ）の化合物は、公知のＴＲＰＡ１インヒビター（例えば、米国特許第７，６７１，０６１号）であり、従って、正のコントロールとして用いられた。式（ＩＩ）の化合物、ならびにこの化合物を作製および用いる方法は、米国特許第７，６７１，０６１号においてＴＲＰＡ１インヒビター化合物２００として開示される（２００６年、１２月２２日出願、２０１０年３月２日発行）。
【化１１】
2014521724.tif 000014
【００３０】
表３ａ、３ｂおよび３ｃ、ならびに図２に示されるデータは、実施例５により種々の用量でホルマリン誘発性の疼痛持続期間にげっ歯類に対して式（Ｉａ）の化合物を含有する医薬組成物を投与することによって得た。具体的には、表３ａ、３ｂおよび３ｃ、ならびに図２のデータは、種々の濃度の式（Ｉａ）の化合物を含有する組成物、言及した量の比較化合物を含有する比較の組成物（例えば、表３ａの式（ＩＩ）の比較化合物の１５０ｍｇ／ｋｇ）およびビヒクルを含有するコントロール組成物（例えば、式（Ｉａ）の化合物も比較化合物もない）の腹腔内（ｉ．ｐ．）投与によって得た。表３ａ、３ｂおよび３ｃならびに図２に示されるように、式（Ｉａ）、（ＩＩ）、および（ＩＩＩ）の化合物で処置した動物は、ビヒクルで処置した動物よりも疼痛行動を示す期間が短かった。このデータによって式（Ｉａ）の化合物は、ホルマリンでのＴＲＰＡ１活性によって生じる疼痛に対して鎮痛効果を有することが示される。
【表３】
2014521724.tif 000015
【表４】
2014521724.tif 000016
【表５】
2014521724.tif 000017
【００３１】
また、式（Ｉａ）の化合物は、実施例６に記載されるように、慢性の完全フロイントアジュバント誘発性の炎症後の冷感異痛によって誘発されるインビボの疼痛のげっ歯類モデルでも活性である。表４および図３に示されるデータは、実施例６に記載される完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）げっ歯類モデルにおいて漸増濃度の式（Ｉａ）の化合物を用いた医薬組成物のｉ．ｐ．投与後に観察された脚引っ込め潜時（Ｐａｗ  Ｗｉｔｈｄｒａｗａｌ  Ｌａｔｅｎｃｙ）（ＰＷＬ）スコアの増大を示す。このデータは、式（Ｉａ）の化合物の濃度の関数としてのＰＷＬスコアの変化、ならびに式（ＩＩ）の比較化合物を含有する組成物およびスルホブチルエーテルβ−シクロデキストリン化合物（ＣｙＤｅｘ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ，Ｌｅｎｅｘａ，ＫＳから商品名Ｃａｐｔｉｓｏｌ（登録商標）で市販）を含有するビヒクルを含有するコントロールの投与の際に観察されるＰＷＬスコアの変化を測定することによって得た。このデータによって、式（Ｉａ）の化合物が冷感異痛に対して鎮痛効果を有することが示される。
【表６】
2014521724.tif 000018
【００３２】
また、式（Ｉａ）の化合物は、実施例７に記載のような、後足の足底表面の切開によって誘発されるインビボの疼痛のげっ歯類モデル（すなわち、「Ｂｒｅｎｎａｎ  Ｓｕｒｇｉｃａｌ  Ｍｏｄｅｌ」）でも活性である。図４は、式（Ｉａ）の化合物の投与濃度の関数としての防御スコア、ならびにビヒクル単独および式（ＩＩＩ）の比較化合物を含有する比較の医薬組成物またはケトプロフェンの投与の際に観察された防御スコアにおける変化を示す。図４および実施例７を参照、腹腔内に送達された式（Ｉａ）の化合物の６０ｍｇ／ｋｇ（術前および術直後の３０ｍｇ／ｋｇの２用量）は、ケトプロフェン（腹腔内に２ｍｇ／ｋｇの２用量）よりも、術後最大４時間までの間、実施例７に記載されるげっ歯類切開性疼痛モデルにおいて自発性疼痛を低下する。腹腔内に送達された式（Ｉａ）の化合物の三十（３０）ｍｇ／ｋｇ（術前および術直後の１５ｍｇ／ｋｇの２用量）は、術後最大２時間まで自発性疼痛を低下する（図４）。
【００３３】
式（ＩＩＩ）の比較のＴＲＰＡ１インヒビターをまた、実施例７のＢｒｅｎｎａｎげっ歯類モデルでも試験した（図４）。式（ＩＩＩ）の比較化合物、ならびにこの化合物を作製および用いる方法は、ＰＣＴ特許出願であるＰＣＴ／ＵＳ  ２００９／０６９１４６（２０１０年７月１日に国際公開第２０１０／０７５３５３Ａ１号として公開）においてＴＲＰＡ１インヒビター化合物１として開示される。
【化１２】
2014521724.tif 000019
【００３４】
式（ＩＶ）
【化１３】
2014521724.tif 000020
の比較化合物のインビトロＴＲＰＡ１活性を測定した。
【００３５】
式（ＩＶ）の比較化合物の化学構造を、核磁気共鳴ＮＭＲを用いて特定した。ＮＭＲサンプルは、５０μＬのＮＭＲ溶媒中に約１．８５ｍｇの式（Ｉａ）の代謝物を溶解することによって調製した。このサンプルを槽内で１分間超音波処理して、適切な溶解を確立して、その後にこれをＮＭＲ管中にピペッティングした。この管をプラスチックボールでシールして、実験前に室温で保管した。ＮＭＲ実験は、１．７ｎＭのＣｒｙｏ−ＴＣＩプローブを装備した６００ＭＨｚ  Ｂｒｕｎｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ＩＩＩ  ＮＭＲ分光計で行った。このサンプルを、ＳａｍｐｌｅＪｅｔアクセサリーを用いて磁石に挿入した。この分子についての完全な結合性を得るために、標準の１Ｈ−ＮＭＲスペクトル、多重編集の１Ｈ−１３Ｃ  ｇＨＳＱＣスペクトル、および１Ｈ−１３ｇＨＭＢＣスペクトルを記録した（図７）。式（ＩＶ）の比較化合物は、９．８μＭのＴｒｐＡ１  ＩＣ５０、およびＴｒｐＶ３＞１０μＭ、ｈＥＲＧ＞２０μＭ、ＮａＶ１．２＞２０μＭ（表５）によって特徴づけられるインビトロ選択性を有する。このデータは、実施例３の手順と同じ手順を用いて収集した。
【表７】
2014521724.tif 000021
【００３６】
本明細書に開示される化合物（例えば、式（Ｉ）または式（Ｉａ）の化合物）は、ＴＲＰＡ１を阻害する化合物を特定するためのアッセイで用いられ得る。例えば、ＴＲＰＡ１インヒビターを特定する方法は、試験化合物とＴＲＰＡ１イオンチャネルとを接触させる工程と、試験化合物によってＴＲＰＡ１イオンチャネルの阻害を測定する工程（例えば、試験化合物について最初のＩＣ５０値を作成する工程）と、試験化合物によるＴＲＰＡ１イオンチャネル阻害の測定を、式（Ｉ）の化合物との接触後、第二のＴＲＰＡ１イオンチャネルの第二の測定と比較する工程（例えば、式（Ｉ）または式（Ｉａ）の化合物についての第二のＩＣ５０を測定する工程）と、この試験化合物が、ＴＲＰＡ１イオンチャネル阻害の第一および第二の測定の比較によって、ＴＲＰＡ１インヒビターであるか否かを決定する工程と、を含んでもよい。式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ））（または式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）もしくは（ＩＶ）の化合物）によるＴＲＰＡ１イオンチャネル阻害は、試験化合物に対する比較因子として用いられ得る。ＴＲＰＡ１イオンチャネル阻害の測定は、実施例３のアッセイを含む任意の適切なアッセイによって行われてもよい（例えば、パッチクランププロトコール）。一実施形態では、ＴＲＰＡ１イオンチャネルインヒビター化合物を特定するための方法は、細胞ベースのアッセイにおけるＴＲＰＡ１タンパク質を、試験薬剤と接触させてＴＲＰＡ１インヒビターとしての潜在的な活性について試験することと、この試験薬剤がＴＲＰＡ１タンパク質の活性を増大させるか、または減少させるかを決定することと、ＴＲＰＡ１タンパク質の活性を減少する薬剤を選択することと、ＴＲＰＡ１タンパク質の活性を減少するこの薬剤のＴＲＰＡ１阻害の程度を決定するここと、参照薬剤によって観察されるＴＲＰＡ１阻害の程度に対してＴＲＰＡ１タンパク質の活性を低下させるこの薬剤のＴＲＰＡ１阻害の程度を、すなわち、参照薬剤によるＴＲＰＡ１阻害の程度に関するこの薬剤のＴＲＰＡ１阻害の程度の低下を比較し、それによってこの薬剤が、ＴＲＰＡ１インヒビターであると特定することと、を含む。この参照薬剤は、（例えば）、式（Ｉａ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、または（ＩＶ）の化合物であってもよい。
【００３７】
式（Ｉｂ）の化合物は、式（Ｉ）の第二の立体異性体である。
【化１４】
2014521724.tif 000022
【００３８】
（Ｉｂ）の化合物は、実施例１ｃによって、および薬学的に許容される塩として合成され得る。式（Ｉｂ）の化合物は、インビトロ試験におけるヒトＴＲＰＡ１チャネルの新規な低分子アンタゴニストである。下に示される式（Ｉｂ）の化合物の、インビトロのＴＲＰＡ１活性を測定したところ、下の表６に示されるように５０〜１００ｎＭというｈＴＲＰＡ１に対するＩＣ５０を有していた。
【００３９】
【表８】
2014521724.tif 000023
さらに、１％のＲＳＡ（ラット血清アルブミン）で測定したｈＴｒｐＡ１のＩＣ５０は、式（Ｉａ）の化合物についての５．３μＭと比較して、式（Ｉｂ）の化合物については１５．２μＭであった。
【００４０】
式（Ｉ）の化合物を含有する医薬組成物
式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）またはその薬学的に許容される塩を、医薬組成物の製造に用いてもよい。医薬組成物は、式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）、またはその薬学的に許容される塩を合わせることによって形成され得る。この医薬組成物は、薬物送達の所望の方法に従って、レシピエント対象（例えば、ヒト）に対する送達に適切な薬学的に許容される担体で処方されてもよい。医薬組成物、特に、経口送達のために処方される組成物は、好ましくは、式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）、または式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）の塩を、意図する目的（例えば、疼痛またはＴＲＰＡ１イオンチャネルの阻害もしくは拮抗に応答する他の状態の処置または予防）を達成するために十分な量で、および１つ以上の追加の担体、例えば、可溶化剤（例えば、シクロデキストリンおよび／またはシクロデキストリン誘導体）、緩衝化剤、防腐剤など（例えば、実施例１０を参照のこと）を含有する。この医薬組成物中での式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）の量および濃度、ならびに対象に投与される医薬組成物の量は、臨床的に関連する要因、例えば、対象の医学的に関連する特徴（例えば、年齢、体重、性別、他の医学的状態など）、医薬組成物中の化合物の溶解度、その化合物の力価および活性、ならびにその医薬組成物の投与方式に基づいて選択され得る。例えば、医薬組成物は、臨床的に耐容性を示すの量のヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン中に溶解される式（Ｉ）の化合物（例えば、実施例１０に示される式（Ｉａ））の経口送達のために処方され得る。
【００４１】
医薬組成物は、本発明の化合物の有効な投薬量を患者に提供するための投与の適切な経路に処方され得る。例えば、経口投与が使用されてもよい（例えば、嚥下または吸入されてもよい）。剤形としては、錠剤、トローチ、散剤、懸濁剤、液剤、カプセル、パッチなどが挙げられる。式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）を含有する組成物の最も適切な処方物は、任意の所定の場合には、処置されている状態の重篤度に依存し得る。この組成物は、好都合には、単位剤形で与えられて、薬学の当該分野で周知の任意の方法によって調製されてもよい。式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）はまた、制御された放出手段および／または送達デバイスによって投与されてもよい。
【００４２】
薬学的調製物は、ＴＲＰＡ１イオンチャネルを阻害する化合物の投与によって緩和されるか、取り除かれるか、予防されるか、そうでなければ処置される状態を処置するために選択された標準的な手順に従って調製されてもよい（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ  ａｎｄ  Ｇｏｏｄｍａｎ，ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ「Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ」、Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ（その内容は、ヒト治療のために種々の治療剤を投与するための方法の一般的説明のために、参照によって本明細書に援用される）を参照のこと）。例えば、医薬組成物は、経口投与のような所望の投与経路のために処方され得る。具体的には、式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）を含有する医薬は、慢性疼痛または急性疼痛のような、医学的状態の治療処置のために経口投与用に処方され得る。
【００４３】
経口投与型の組成物の調製において、任意の通常の薬学的媒体が、例えば、水、グリコール、オイル、アルコール、香味剤、防腐剤、着色剤などのような担体として（経口の液状製剤（例えば、懸濁剤、液剤およびエリキシル）、またはエアロゾルの場合には）使用されても、あるいは、デンプン、糖、微結晶性セルロース、希釈剤、顆粒剤、潤滑剤、結合剤、崩壊剤などのような担体が、経口の固形製剤、例えば、粉末、カプセルおよび錠剤などの場合には、液状製剤よりも好ましい固形の経口製剤とともに用いられてもよい。担体の例は、シクロデキストリン、例えば、商品名Ｃａｐｔｉｓｏｌ（登録商標）（ＣｙＤｅｘ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ，Ｌｅｎｅｘａ，ＫＳ）として入手可能なスルホブチルエーテルβ−シクロデキストリン化合物である。固体の経口製剤の例は、式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物を含有する錠剤またはカプセルである。必要に応じて、錠剤は、標準的な水性または非水性の技術によってコーティングされてもよい。
【００４４】
１つ以上の式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）を含有する医薬組成物は、例えば、細菌保持フィルターを通した濾過によって、または滅菌固体組成物の形態で滅菌剤を組み込むことによって滅菌されてもよく、これは、使用の直前に滅菌水または他の無菌の注射用媒体中に溶解されるかまたは分散され得る。
【００４５】
本明細書に記載される式（Ｉ）の化合物は、吸入によって投与されてもよい。式（Ｉ）の化合物を含有する医薬組成物は、１マイクロモル以下というＩＣ５０を有するＴＲＰＡ１媒介性電流を阻害する薬剤を含有する肺送達または鼻送達のためのエアロゾル医薬組成物を含有する定量のエアロゾルディスペンサー中で提供されてもよい。これは、例えば、定量噴霧式吸入器であっても、ドライパウダー吸入器であっても、またはエアジェットネブライザーであってもよい。
【００４６】
式（Ｉ）の化合物を含有する医薬組成物はまた、使用のための組成物を調製するため、および吸入によって患者に投与することを補助するために、固体または液体の薬学的に許容される非毒性の担体、希釈剤およびアジュバント、例としては、適切なサーファクタントとともに混合されてもよい。このような薬学的な担体は、滅菌の液体、例えば、水およびオイル、例としては、石油、動物、植物または合成に由来するものであってもよい。水が好ましい担体である。生理食塩水溶液もまた、液体担体として使用されてもよい。例えば、式（Ｉ）の化合物の適切な投与量を、生理食塩水溶液中で所望の濃度で溶解して、吸入経路による投与に適切な医薬組成物を形成してもよい。サーファクタント、例えば、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル  ポリオキシエチレンソルビタン酸エステル、またはグリセリルエステルが、例えば、使用されてもよい。他の適切な薬学的な担体は、Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎによる、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓに記載されている。約４．５〜５．５の範囲のｐＨが好ましい。ｐＨは、従来の薬学的に許容される緩衝液で調節されてもよい。
【００４７】
式（Ｉ）の化合物を含有する吸入式の医薬組成物は、吸入経路のための薬学的な送達系によって患者に投与されてもよい。薬学的な送達系は、気管気管支樹の粘膜内層に対するイミダゾールの局所投与による呼吸器治療に適切な系である。例えば、本発明は、容器からイミダゾリンを発射するための圧縮ガスの力に依存するシステムを利用してもよい。Ｓｃｉａｒｒａら、Ｔｈｅｏｒｙ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，１９７６：２７０−２９５（参照によって本明細書に依拠し、援用される）を参照のこと。エアロゾルまたは加圧パッケージを、この目的のために使用してもうよい。
【００４８】
式（Ｉ）の化合物を含有する医薬組成物はまた、ガス中で実質的に均一な大きさの極めて微細な液体粒子を生成する装置である、ネブライザーで行ってもよい。好ましくは、イミダゾリンを含有する液体は、霧状の形態で直径が約５ｍｍ以下の液滴として分散される。この小さい液滴は、ネブライザーの外側チューブを通じた空気または酸素の流れによって運搬され得る。得られた霧（ミスト）は、患者の呼吸器官に浸透する。
【００４９】
式（Ｉ）の化合物を含有している粉末組成物（潤滑剤、担体、または噴霧剤は有無がある）を、治療の必要な患者に投与してもよい。この実施形態は、吸入によって粉末の医薬組成物を投与するための従来のデバイスで行ってもよい。
【００５０】
式（Ｉ）の化合物を含有する組成物の投与
式（Ｉ）の化合物を含有する医薬組成物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）またはその薬学的に許容される塩は、対象（例えば、ヒトおよび動物）におけるＴＲＰＡ１イオンチャネルの阻害に応答する医学的状態を処置または改善するために用いられ得る。例えば、式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）を含有する医薬組成物、またはその薬学的に許容される塩は、周術期の鎮痛剤として、例えば、軽度から中度の急性の術後疼痛の管理において、および中度から重度の急性疼痛の管理において、オピオイド鎮痛薬に対する補助剤として有用である。例えば、式（Ｉａ）の化合物は、疼痛の処置のための医薬の製造に用いられ得る。必要に応じて、この医薬はまた、オピオイド、非ステロイド性抗炎症剤、カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）−アンタゴニストおよびステロイドからなる群より選択される第二の化合物と組み合わせた用途に関しても挙げられ、また指定され得る。
【００５１】
式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）はまた、オピオイド鎮痛薬の投与と組み合わせて用いられてもよい。例えば、式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）、またはその薬学的に許容される塩を含有する医薬組成物は、オピオイド鎮痛薬と組み合わせて与えられる周術期の鎮痛剤として、例えば、軽度から中度の急性の術後疼痛の管理において、および中度から重度の急性疼痛の管理において、オピオイド鎮痛薬に対する補助剤として有用である。
【００５２】
式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）の治療上有効な用量を含有する医薬組成物は、式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）を含有する医薬組成物の１つ以上の別の投与を含む臨床上安全かつ有効な方式で疼痛の処置のために患者に投与され得る。例えば、医薬組成物は、対象に投与される場合、投与の３日後、約２５０ｍｇ／ｄＬ未満（例えば、約２００ｍｇ／ｄＬ、１５０ｍｇ／ｄＬ、１００ｍｇ／ｄＬまたは５０ｍｇ／ｄＬ）というアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）および／または吸引アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）レベルを生じる。
【００５３】
単一の剤形を生成するために担体材料と組み合わされ得る活性成分の量は、処置されている宿主、特定の投与方式に依存して変化する。単一剤形を生成するための担体材料と組み合され得る活性成分の量は一般には、治療効果を生じる化合物の量である。一般には、１００パーセントのうち、この量は、活性成分の約１パーセント〜約５０パーセントにおよぶ。一実施形態では、この量は、１．６％（重量対重量）である。別の実施形態では、この量は４０％（重量対体積）である。医薬組成物は、例えば、１〜５０％の式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）を薬学的に許容される担体と組み合わせて含んでもよい。
【００５４】
式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）またはその薬学的に許容される塩を含有する医薬組成物を用いて、疼痛を処置または改善してもよい。対象（例えば、ヒトおよび動物）におけるＴＲＰＡ１イオンチャネルの阻害に応答する医学的状態を処置する方法は、式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）またはその薬学的に許容される塩の治療上有効な量の投与を含み得る。疼痛は慢性であっても急性であってもよい。処置の方法は、その必要な対象に対して、式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）またはその薬学的に許容される塩の治療上有効な量を、処置の経過にまたがって１つ以上の用量で投与することを含み得る。式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）の治療上有効な量を含有する医薬組成物は、疼痛の処置のために患者に、臨床上安全かつ有効な方式で投与されてもよく、この投与には、１つ以上の式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）を含有する医薬組成物の１つ以上の別々の投与を含有する。例えば、医薬組成物は、対象に投与される場合、投与の３日後に約２５０ｍｇ／ｄＬ未満（例えば、約２００ｍｇ／ｄＬ，１５０ｍｇ／ｄＬ，１００ｍｇ／ｄＬまたは５０ｍｇ／ｄＬ）というＡＬＴおよび／またはＡＳＴレベルを生じる。
【００５５】
さらなる態様によれば、本発明は、式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）、またはその薬学的に許容される塩を、疼痛の処置もしくは改善、または鎮痛を提供するために提供する。
【００５６】
さらなる態様によれば、本発明は、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容される塩を医薬として提供する。
【００５７】
一実施例では、式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）は、被験者に経口投与され得る。式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）の一日総投与量は、１日に１〜４回（例えば、ＱＤ、ＢＩＤ、ＴＩＤ、またはＱＩＤ）対象に経口投与される、式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）の約０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜約１００ｍｇ／ｋｇ／日（例えば、０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜約５０ｍｇ／ｋｇ／日）であってもよい。ヒトに投与される一日総用量は、また約１ｍｇ／ｋｇ／日〜約２５ｍｇ／ｋｇ／日、または約３ｍｇ／ｋｇ／日〜約１０ｍｇ／ｋｇ／日であってもよい。投与される用量あたりの量または投与される総量は、疼痛の性質および重篤度、患者の年齢および総合的な健康状態、ならびにその化合物に対する患者の耐性のような要因に依存する。
【００５８】
式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）を含有する薬品は、適切な処方プロセス、例えば、湿式造粒法（Ｒｅｍｍｉｎｇｔｏｎ  ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ｓｃｉｅｎｃｅｓを参照のこと）によって調製され得る。医薬組成物は、嚥下を容易にするための形状の単位用量（例えば、０または００サイズのカプセル）であってもよい。単位用量は、サイズ「００」のカプセル（例えば、１００〜８００ｍｇ）または同等のサイズの錠剤の中に１００〜１６００ｍｇにおよぶ医薬組成物の量を有してもよい。５００ｍｇの活性／単位用量が達成されるならば、その技術の発達は、最高の達成可能な用量を目標とする。個々の単位剤形は、例えば、経口投与用に処方された、２００ｍｇ、４００ｍｇ、８００ｍｇ、１２００ｍｇまたは１６００ｍｇの式（Ｉ）の化合物を含んでもよい。
【００５９】
例えば、式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）またはその薬学的に許容される塩の治療上有効な量を含有する医薬組成物は、対象において疼痛を処置するために１日以上の処置経過にまたがって１日あたり複数回（例えば、ＢＩＤ）、その必要な対象に投与（例えば、経口的に）されてもよい。
【００６０】
式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物、式（Ｉｂ）の化合物および／または式（Ｉａ）および（Ｉｂ）の化合物の組み合わせ）を含有する医薬組成物は、閉塞性疾患、例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、喘息（例えば、低温誘導性喘息、運動誘発性喘息、アレルギー誘発性喘息および職業性喘息）および咳のような呼吸器の状態の処置のための投与のために有用である。
【００６１】
動物またはヒトでの喘息を処置または改善するための方法であって、動物またはヒトに対して、式（Ｉａ）の化合物、またはその薬学的に許容される塩の治療上有効な量を含有する医薬組成物を、吸入によって投与することを含む、方法。この方法の一実施例では、式（Ｉａ）の化合物は、塩酸塩型である。喘息は、アレルギー性喘息であってもよい。この医薬組成物は、エアロゾルとして投与されてもよい。医薬組成物は、医療用ネブライザーを用いて投与される。式（Ｉａ）の化合物は、塩酸塩型で投与され得る。この医薬組成物は、約０．５〜２５ｍｇ／ｋｇの用量で投与されてもよい。
【実施例】
【００６２】
下の特定の実施例によって、式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）およびその薬学的に許容される塩の合成を例示する。さらに、この開示は、本開示に基づいて当業者によって理解される式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）生成するための本明細書に記載の種々の方法を包含する。
実施例１Ａ：式（Ｉａ）の化合物の合成
【化１５】
2014521724.tif 000024
【００６３】
（Ｓ）−２−メチルピロリジン（化合物０２）（４４．２ｍＬ，４６５ｍｍｏｌ）を充填した乾燥１Ｌ丸底フラスコを０℃まで冷却した。化合物０１（６０ｇ、３１０ｍｍｏｌ）を、２分間にわたって冷却したアミン化合物０２に添加した（過度の発熱を観察）。添加の完了後、反応物を室温まで温めて、撹拌を１時間続けた。その後液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣＭＳ）および超高性能液体クロマトグラフィー（ＵＰＬＣ）を行った。
【００６４】
得られたオレンジの固体を（９：１のＤＣＭ：ＭｅＯＨ，２００ｍＬ）に溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム１５０ｍＬおよび水（３×１００ｍＬ）で洗浄した。この合わせた水層を（９：１のＤＣＭ：ＭｅＯＨ）を用いて戻し抽出した。この合わせた有機層を、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、シリカ上で濃縮した。このカラムを、４００ｇのシリカカラムを用い、（Ｈｅｘ：ＥｔＯＡｃ）溶媒系（０％の４ＣＶ；０〜３０％の６ＣＶ；３０％の６ＣＶ）を用いて精製した。この生成物は、２０〜３０％のＥｔＯＡｃで溶出した。生成物を含有する画分を、合わせて、真空下で乾燥し、得られた透明な油状物をヘキサンで処理して、撹拌し、次いでエバポレートした。微細な結晶形成が観察された。０℃で微細な結晶形成を可能にさせて、化合物０３の白色結晶固体を支援した。
【００６５】
工程１の化合物０３について、実施例１：単離収率：白色結晶固体として６７．２ｇ（８９％）。（ｍ／ｚ  Ｍ＋＝２４１）；１Ｈ  ＮＭＲ（３００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ９．０１（ｓ，１Ｈ）、８．４２（ｓ，２Ｈ）、４．２０−４．０６（ｍ，１Ｈ）、３．５６−３．３４（ｍ，２Ｈ）、２．１２−１．８１（ｍ，３Ｈ）、１．６８（ｓ，１Ｈ）、１．１６（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）。
【化１６】
2014521724.tif 000025
【００６６】
２Ｌの三つ首丸底フラスコに、化合物０３（４５ｇ、１８６ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラト）ジボロン（６５．２ｇ、２５７ｍｍｏｌ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウムクロライド（１３．０５ｇ、１８．５９ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（３６．５ｇ、３７２ｍｍｏｌ）を充填し、無水１，４−ジオキサン（容積：９２９ｍＬ）中に懸濁した。このフラスコを、窒素でフラッシュして、固体を還流冷却器に入れて、９０℃に一晩加熱した。
【００６７】
１，４−ジオキサンを、真空中で除去した。この粗材料を、ＤＣＭ（２００ｍＬ）に溶解し、水（３×１００ｍＬ）で洗浄した。合わせた水層を、ＥｔＯＡｃで戻し抽出した。この合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、シリカ上で濃縮した。材料を２つのバッチに分けて、２００ｇのシリカカラムを用い、Ｈｅｘ：ＥｔＯＡｃ溶媒系（０％のＣＶ；３％の８ＣＶ；５〜２０％の１０ＣＶ；２０−５０％の５ＣＶ）を用いてカラム精製した。出発材料を３％のＥｔＯＡｃで溶出し、一方、所望の生成物は、５〜４０％のＥｔＯＡｃで溶出した。生成物を含有する画分を合わせて、溶媒を真空中で除いて、化合物０４を得た。
【００６８】
工程２の化合物０４について、実施例１：単離収率：オフホワイトの固体として２３．０ｇ（４２％）。［（ｍ／ｚ＝Ｍ＋＝２８９．２０（ｍ／ｚ２０７．１２で観察したボロン酸））；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ８．４５（ｓ，２Ｈ）、４．３１−４．１７（ｍ，１Ｈ）、３．６２−３．３８（ｍ，２Ｈ）、２．１２−１．８１（ｍ，３Ｈ）、１．７３−１．６１（ｍ，１Ｈ）、１．２７（ｓ，１２Ｈ）、１．１７（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）。
【化１７】
2014521724.tif 000026
【００６９】
１Ｌの丸底フラスコに化合物０５（１５．１４ｇ、８７ｍｍｏｌ）、化合物０４（２３．００ｇ、８０ｍｍｏｌ）を充填し、窒素でパージし、続いてＰｄ（ＰＰｈ３）４（９．１９ｇ、７．９５ｍｍｏｌ）を添加した。この固体を無水１，４−ジオキサン（３９８ｍｌ）と２Ｍ炭酸ナトリウム水溶液（１１９ｍＬ、２３９ｍｍｏｌ）との混合物中に懸濁した。反応物を９５℃まで１３時間加熱した。
【００７０】
２Ｌの丸底フラスコへの液相の移動によって、塩から有機物を分離した。塩を、１，４−ジオキサンでリンスして、以前に分離した１，４−ジオキサン溶液と合わせた。１，４−ジオキサンを減圧下で除去した。黄色い粗残渣を、ＤＣＭ中に溶解して、水（３×１００ｍＬ）、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、次いでシリカ上に濃縮した。そのカラムを、２００ｇのシリカカラムを用い、ＤＣＭ：ＥｔＯＡｃ溶媒系（０％の２０ＣＶ；２０％の１０ＣＶ；５０〜８０％の１０ＣＶ；８０％の５ＣＶ）を用いて精製した。所望の生成物は、５０〜８０％のＥｔＯＡｃで溶出した。生成物を含有する画分を濃縮して化合物０６を単離した。
【００７１】
工程３における化合物０６について、実施例１：単離収率：淡黄色固体として１３．７ｇ（６７％）。（ｍ／ｚ＝Ｍ＋＝２５５．１５）；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ８．８８（ｓ，２Ｈ）、７．４０（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）、６．９５（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ）、６．３５（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）、５．９６（ｓ，２Ｈ）、４．３１−４．１９（ｍ，１Ｈ）、３．６６−３．４１（ｍ，２Ｈ）、２．１３−１．８４（ｍ，３Ｈ）、１．７５−１．６５（ｍ，１Ｈ）、１．２２（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）。
【化１８】
2014521724.tif 000027
【００７２】
乾燥した２００ｍＬ丸底フラスコに、化合物０７（１２．１７ｇ、５１．１ｍｍｏｌ）、化合物０６（１３．７ｇ、５３．７ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（１９．５９ｇ、１０２ｍｍｏｌ）を充填し、窒素でフラッシュし、続いて無水ピリジン（１２８ｍｌ）を添加した（発熱は観察されず）。懸濁物を室温で１時間撹拌した。
【００７３】
反応混合物を、１００ｍＬの水で希釈した。オフホワイトの沈殿物を観察した。その懸濁物を、スターラーバーを入れた５００ｍＬのフラスコに移して、撹拌しながら１５０ｍＬの０．１ＭのＨＣｌで希釈した。この沈殿物は、淡い赤色に変わり、非晶質の固体を形成する。水性製剤を、ＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。有機層は、０．１ＭのＨＣｌ（３×５０ｍＬ）、水、ブラインを用いて洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、次いでシリカ上で濃縮した。そのカラムをＤＣＭ：ＭｅＯＨ溶媒系（０％の５ＣＶ；０〜３％の１０ＣＶ；３〜４％の４ＣＶ；４％の１０ＣＶ）を用いて精製した。この生成物を、３〜４％のＭｅＯＨで溶出した。適切な画分をプールして、溶媒を真空中で除去し、高真空下において、式（Ｉａ）の化合物を得た。
【００７４】
工程４における式（Ｉａ）の化合物について、実施例１：単離収率：オフホワイトの固体として２０．７ｇ（８５％）。式（Ｉ）の化合物（ｍ／ｚ＝Ｍ＋＝４７５）、１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ１０．９５（ｓ，１Ｈ）、９．０１（ｓ，２Ｈ）、８．０９（ｓ，１Ｈ）、７．８２（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ）、７．６１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）、５．３２（ｓ，２Ｈ）、４．３３−４．２３（ｍ，１Ｈ）、３．７１−３．４９（ｍ，２Ｈ）、３．４７（ｓ，３Ｈ）、３．２０（ｓ，２Ｈ）、２．１８−１．８４（ｍ，３Ｈ）、１．７０（ｍ，１Ｈ）、１．２４（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）。
【００７５】
実施例１Ｂ：式（Ｉａ）の重水素化化合物の合成
重水素化化合物（１２）を、図１Ｂの示されるように調製した。化合物１０は、以下の手順に従って、市販の出発材料化合物０８から調製した。
【００７６】
テオフィリン−ｄ６（０．４８０ｇ、２．５８ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（０．３９２ｇ、２．８４ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１２．８９ｍＬ）中に懸濁し、続いてエチル２−クロロアセテート（０．２７５ｍＬ，２．５８ｍｍｏｌ）を添加し、９０℃まで１時間加熱した。この反応混合物を、室温まで冷却し、室温で１５ｍＬの撹拌水溶液中に希釈した。この水溶液に、１０ｍＬの水の中の水酸化リチウム（０．１２３ｇ、５．１６ｍｍｏｌ）を添加して、室温で１時間撹拌を続けた。その溶液をｐＨ４まで５ＭのＨＣｌ水溶液を用いて滴定した。得られた白色固体を、真空濾過を介して収集して、化合物１０（０．５１０ｇ、８１％）ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）を得た：２４４．１１。
【００７７】
重水素化された化合物１２を、化合物０６（０．１５０ｇ、０．６０９ｍｍｏｌ）、および化合物１０（０．１６３ｇ、０．６４０ｍｍｏｌ）を用いて式（Ｉａ）と同じ方式で合成した。得られた粗固体を、真空濾過を介して収集した。シリカゲルクロマトグラフィーによってカラム精製して、重水素化された化合物１２を得た（０．１３５ｇ、４６％）ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：４８１．２５．１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ１０．９５（ｓ，１Ｈ）、９．０１（ｓ，２Ｈ）、８．０８（ｓ，１Ｈ）、７．８２（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，２Ｈ）、７．６１（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．７６（ｓ，１Ｈ）、５．３２（ｓ，２Ｈ）、４．２９（ｓ，１Ｈ）、３．６９−３．５６（ｍ，１Ｈ）、３．５３（ｓ，１Ｈ）、２．１３−１．８５（ｍ，３Ｈ）、１．７１（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ）、１．２４（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）。
【００７８】
化合物１２に加えて、本明細書に記載される化合物はまた、式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）の同位体を含んでもよい。例えば、式（Ｉ）の同位体（例えば、式（Ｉａ）の化合物）は、式（Ｉ）の化合物（例えば、式（Ｉａ）の化合物）を構成する原子のうち１つ以上で原子の同位体の置換によって形成された分子として形成されてもよい。例えば、式（Ｉ）の同位体は、放射性同位体で放射性標識されてもよい。式（Ｉ）の同位体（例えば、式（Ｉａ）の化合物）としては、重水素（２Ｈ）、もしくはトリチウム（３Ｈ）による式（Ｉ）（例えば、式（Ｉａ）の化合物）中の水素の置換、または炭素−１３（１３Ｃ）もしくは炭素−１４（１４Ｃ）での式（Ｉ）（例えば、式（Ｉａ）の化合物）中の１つ以上の炭素原子の置換によって形成される化合物が挙げられる。式（Ｉ）（例えば、式（Ｉａ）の化合物）の好ましい同位体は、ヒトまたは動物においてＴＲＰＡ１を阻害する。本明細書に開示される化合物の全ての同位体変動は、放射性であってもなくても、本発明の範囲内に包含されるものとする。例えば、重水素化された化合物または１３Ｃを含有する化合物は、本発明の範囲内に包含されるものとする。
【００７９】
実施例１Ｃ：式（Ｉｂ）の化合物（式（Ｉａ）の鏡像異性体）の合成
【化１９】
2014521724.tif 000028
【００８０】
式（Ｉｂ）の化合物（式Ｉａの鏡像異性体）は、上記と同一の手順を用いて合成され、１つの違いは、（Ｓ）−２−メチルピロリジン（図１Ａの化合物０２）の代わりに工程１で出発材料としての（Ｒ）−２−メチルピロリジンの使用である。最終工程での収率は、白色粉末として９２％である。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．９５（ｓ，１Ｈ）、９．０１（ｓ，２Ｈ）、８．０９（ｓ，１Ｈ）、７．８２（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，２Ｈ）、７．６１（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．３２（ｓ，２Ｈ）、４．４７−４．１３（ｍ，１Ｈ）、３．７２−３．５８（ｍ，２Ｈ）、３．２７（ｓ，３Ｈ）、３．２０（ｓ，３Ｈ）、２．１７−１．８６（ｍ，３Ｈ）、１．７１（ｓ，１Ｈ）、１．２４（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）。ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ＝Ｍ＋Ｈ＝４７６）。
【００８１】
１％のＲＳＡで測定したｈＴｒｐＡ１のＩＣ５０は、式（Ｉａ）の化合物についての５．３μＭと比較して式（Ｉｂ）について１５．２ｕＭであった。
【００８２】
実施例２：式（Ｉａ）の化合物のＨＣｌ塩の形成
ＥｔＯＨに含有される１ＭのＨＣｌ：５００ｍＬフラスコに、スターラーバー、および１８５ｍＬの２００プルーフのＥｔＯＨを０℃で入れた。次いで、塩化アセチル（１４．２０ｍＬ，２００ｍｍｏｌ）を添加して、０℃で５分間撹拌し、次いで室温で１０分間撹拌した。
【００８３】
ＨＣｌ塩沈殿物：１Ｌの丸底フラスコに、乾燥した式（Ｉ）の化合物（２０．５ｇ、４３．１ｍｍｏｌ）を充填し、２００ｍＬの１ＭのＨＣｌが含有されるＥｔＯＨ（作製して間もない）を添加して、室温で１時間撹拌した。その懸濁物は、ほぼ均一な透明な黄色から白色固体懸濁物に淡黄色の溶媒中でなった。１時間後、固体をＥｔＯＨの補助によって真空濾過を介して収集し、次いでＥｔＯＨ（３×１００ｍＬ）でリンスして、高真空に一晩おいた。１８時間後、高真空から材料を取り出して、アンバージャーに移した。
【００８４】
実施例２に関しては、ＨＣｌ塩の単離収率は、オフホワイトの固体として２２．６ｇ（＞１００％）であった。（Ｉ）塩（ｍ／ｚ＝Ｍ＋＝４７５）、１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ１０．９５（ｓ，１Ｈ）、９．０１（ｓ，２Ｈ）、８．０９（ｓ，１Ｈ）、７．８２（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ）、７．６１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）、５．３２（ｓ，２Ｈ）、４．３３−４．２３（ｍ，１Ｈ）、３．７１−３．４９（ｍ，２Ｈ）、３．４７（ｓ，３Ｈ）、３．２０（ｓ，２Ｈ）、２．１８−１．８４（ｍ，３Ｈ）、１．７０（ｍ，１Ｈ）、１．２４（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）。元素分析：Ｃ，５０．５４（ｃａｌ．５３．９６）；Ｈ，５．３４（ｃａｌ．５．１２）；ＣＩ，６．３４（ｃａｌ．６．９２）；Ｎ，２２．６９（ｃａｌ．２４．６２）；Ｏ，９．３８。
【００８５】
実施例３：ＴＲＰＡ１のインビトロ阻害を測定する
式（Ｉａ）の化合物のＴＲＰＡ１のインビトロ阻害を、参照によって本明細書に援用され、かつ下に記載されるｄｅｌ  Ｃａｍｉｎｏら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，３０（４５）：１５１６５〜１５１７４に概説される手順を用いて試験した。ＴＲＰＡ１阻害およびＴＲＰＡ１阻害の選択性についてのデータを、式（Ｉａ）の化合物についてこの方法によって得て、これを表１および表２に示す。全ての電流は、全細胞コンフィギュレーションで、ＥＰＣ−９およびＥＰＣ−１０増幅器ならびにＰａｔｃｈｍａｓｔｅｒソフトウェア（ＨＥＫＡ）を用いて記録した。パッチピペットは、１．５〜３ＭΩの抵抗を有し、直列抵抗の６０〜７５％が代償された。標準的なピペット溶液は、１４０ｍＭのＣｓＡｓｐ、１０ｍＭのＥＧＴＡ、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、２．２７ｍＭのＭｇＣｌ２、１．９１ｍＭのＣａＣｌ２、４ｍＭのＭｇＡＴＰ、および０．１−０．３ｍＭのＮａ２ＧＴＰからなり、ｐＨはＣｓＯＨを用いて７．２に調節された。さらに、１４５ｍＭのＣｓＣｌ、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１０ｍＭのＥＧＴＡおよび１ｍＭのＭｇＣｌ２を含有する溶液（ＣｓＯＨでｐＨ７．２に調節した）を用いてもよい。標準的なバス溶液は、１５０ｍＭのＮａＣｌ、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１０ｍＭのグルコース、４．５ｍＭのＫＣｌ、１ｍＭのＥＧＴＡ、３ｍＭのＭｇＣｌ２を含み、ｐＨは、ＮａＯＨで７．４に調節した。ある場合には、２ｍＭのＣａＣｌ２をＥＧＴＡの代わりに添加して、ＭｇＣｌ２の濃度は、１ｍＭに下げた。
【００８６】
データは、−６０ｍＶでの連続記録によって、または４秒ごとに０ｍＶの保持電位から電圧傾斜を加えることによって収集した。連続記録を４００Ｈｚで収集して、提示のために１０Ｈｚで、オフラインで、デジタルフィルターした。電圧傾斜を、４００ｍｓの経過にまたがって−１００ｍＶ〜１００ｍＶ加え、データを１０ｋＨｚで収集して、２．９ｋＨｚでフィルターした。内向き流および外向き流を、それぞれ−８０ｍＶおよび８０ｍＶの傾斜から分析した。液間電位差補正は用いなかった。
【００８７】
溶液は、自重送りの連続局所かん流システムを用いて切り替えた。急速な温度変化を達成するために、２つの温度制御およびかん流システムを同時に使用した。２２℃以上の温度については、Ｗａｒｎｅｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓバイポーラ温度制御装置（ＴＣ−３４４Ｂ）およびインラインヒーター（ＳＨＭ−８）を用いた。２２℃未満の温度に関しては、Ｗａｒｎｅｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ温度制御装置（ＣＬ−１００）および熱冷却モジュール（ＴＣＭ−１）を用いた。温度は、ｔｈｅｒｍｉｓｔｏｒ（Ｗａｒｎｅｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，ＴＡ−２９）を用いて確認し、記録された細胞の温度は、報告された温度の＋／−２℃内であると見積もられる。
【００８８】
化合物のＩＣ５０は、５マイクロモルおよび５００ナノモルで各々の化合物について試験することによって見積もった。５マイクロモルの化合物がブロックを示さなかった場合、ＩＣ５０は、１０マイクロモルを超えると見積もった。５マイクロモルの化合物が５０％以下のブロックを示した場合、ＩＣ５０は大まかには５〜１０マイクロモルという範囲内であろうと見積もられた。５００ナノモル〜５マイクロモルの化合物についてのＩＣ５０が同様に見積もられた。５００ナノモルで５０％以上ブロックする化合物を、複数の濃度で再試験して、各々のブロック％は、５〜６ポイントの濃度／応答実験を用いてＩＣ５０を正確に決定する標準的な式にあてはまる。
【００８９】
実施例４：ＴＲＰＡ１インヒビター化合物のインビボ有効性の評価
式（Ｉａ）の化合物を、インビボの活性について評価した。一部の実施例では、式（ＩＩ）または式（ＩＩＩ）の比較のＴＲＰＡ１インヒビター化合物も、下の実施例に記載のとおり評価した。
【００９０】
式（ＩＩ）の比較化合物、ならびにこの化合物を作成および用いる方法は、米国特許第７，６７１，０６１号（２００６年、１２月２２日出願、２０１０年３月２日に発行）のＴＲＰＡ１インヒビター化合物２００として開示されており、その全体が参照によって本明細書に援用される。
【００９１】
式（ＩＩＩ）の比較化合物、ならびにこの化合物を作成および用いる方法は、ＰＣＴ特許出願ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０６９１４６（２０１０年７月１日に国際公開第２０１０／０７５３５３Ａ１号として公開）において、式（Ｉ）のＴＲＰＡ１インヒビター化合物として開示されており、その全体が参照によって本明細書に援用される。
【００９２】
（ａ）式（Ｉａ）の化合物、および（ｂ）式（ＩＩＩ）の比較化合物の力価および薬物動態（ＰＫ）特性を評価した。バイオアベイラビリティを同様に測定した。薬物動態学的試験を行って、静脈内（ＩＶ）および経口（ＰＯ）投与の両方の後に薬物についての血漿薬物濃度対時間のプロットを得た。絶対的バイオアベイラビリティは、用量補正した非静脈内の曲線下面積（ＡＵＣ）を静脈内のＡＵＣで割っている。経口投与（ＰＯ）によって投与された薬物に関する循環中のＦを算出する式は下に示す。
【００９３】
このバイオアベイラビリティは、下に示す式を用いて算出した。
％Ｆ＝ＰＯのＡＵＣ×ＩＶの用量／ＩＶのＡＵＣ×ＰＯの用量
【００９４】
ヒト血漿タンパク質結合
緩衝液中の化合物の量（遊離画分）および血漿画分と会合した化合物の量を、平衡透析によって決定する。結合した化合物の量は、パーセンテージとして表される。（Ｂａｎｋｅｒら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（２００３）  ９２（５）：９６７−７４）。
【００９５】
表６では、「Ａ」は、２５ナノモル未満というＩＣ５０を示し、「Ｂ」は、２５ナノモルから５０ナノモル未満までというＩＣ５０を示し、「Ｃ」は、５０ナノモルから１００ナノモル未満までというＩＣ５０を示し、「Ｄ」は、１００ナノモル以上というＩＣ５０を示す。
【００９６】
式（ＩＩＩ）の化合物は、インビトロでさらに強力であったが、式（Ｉａ）の化合物は、式（ＩＩＩ）の化合物を上回って有利なインビボの特性を有する。式（Ｉａ）の化合物よりも式（ＩＩＩ）の化合物についてより大きいタンパク質結合が観察された。式（Ｉａ）の化合物についてのＩＣ５０は、ｈＴＲＰＡ１に対して試験した場合、５０〜１００ナノモルであった。式（Ｉａ）の化合物は、９９％未満のタンパク質結合であって、給餌ラットのバイオアベイラビリティは、５０％を超えた。式（ＩＩＩ）の化合物についてのＩＣ５０は、ｈＴＲＰＡ１に対して試験した場合、０〜２５ナノモルであった。式（ＩＩＩ）の化合物は、９９％を超えるタンパク質結合であって、給餌ラットのバイオアベイラビリティは、１〜２５％であった。
【表９】
2014521724.tif 000029
【００９７】
さらに、上の表６に示されるとおり、式（Ｉａ）の化合物は、式（ＩＩＩ）の化合物よりも給餌／絶食の影響が少ないことが示される。ヒトで給餌／絶食効果の低下した化合物は、患者のコンプライアンスを向上させ得る。さらに、式（Ｉａ）の化合物は、式（ＩＩＩ）の化合物よりもタンパク質結合が少ない。結果として、より多くの化合物が、投与の際に標的組織に送達されるように利用可能である。
【００９８】
実施例５：インビボのげっ歯類モデルにおけるホルマリン誘発性の疼痛行動
式（Ｉａ）の化合物並びに式（ＩＩ）および式（ＩＩＩ）の比較化合物を、Ｄｕｂｕｉｓｓｏｎら、Ｐａｉｎ  １９７７  Ｄｅｃ；４（２）：１６１−７４（その全体が参照によって本明細書に援用される）によって報告されるホルマリン誘発性の疼痛試験で試験した。Ｄｕｂｕｉｓｓｏｎら、（１９７７）は、ラットおよびネコで疼痛および鎮痛を評価するための方法を記載している。要するに、希ホルマリン（５０μＬの３％ホルマリン）を後ろ足の足底表面に注射する。その動物を、観察場所（標準的なＰｌｅｘｉｇｌａｓｓラットケージ）に迅速に戻して、このポイントで、訓練を受けた観察者が、５分間にわたって、疼痛行動（尻込む、なめる、注射された足／脚を噛む）を示している時間と動物の経過を記録する。特定の試験において疼痛行動をカウントすることを担当する個人は、処置群について盲検である。
【００９９】
ラットを、化合物（Ｉａ）のＨＣｌ塩を、種々の用量（３、１０、３０、および５０ｍｇ／ｋｇ，ＩＰ）で用いて、またはビヒクル（ＩＰ）を用いて処置した。ビヒクルの動物は、平均で約８８．６秒という疼痛行動（例えば、尻込む、足を拳げるおよびなめる）を示した。結果を図２および表３ａに示す。式（Ｉａ）で処理した動物は、５．９〜８５．８秒の範囲の疼痛行動を呈することがわかった。結果を、図２および表３ａに示す。ホルマリン誘発性応答に対する式（ＩＩ）の影響の結果を、表３ａおよび３ｃに示す。式（ＩＩＩ）で処置した動物は、ビヒクルでの７７．２秒と比較して４４．３秒という疼痛行動を呈した。結果を表３ｂに示す。
【０１００】
実施例６：完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）炎症性インビボげっ歯類モデル
式（Ｉａ）の化合物、式（ＩＩ）の比較化合物、およびケトプロフェンを、その全体が参照によって本明細書に援用される、ｄｅｌ  Ｃａｍｉｎｏら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，３０（４５）：１５１６５〜１５１７４に報告されるＣＦＡ誘発性の疼痛試験方法によって試験した。
【０１０１】
要約すると、左の後足に０．１ｍＬの完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）を投与することによって、後足を冷温に感作させる（異痛症）。２〜３日後、動物がそのＣＦＡ注射された足を挙げている時間を、その未注射の正常な右後足に比較して記録する。動物を冷たいプレート（１℃）の表面において、動物がそのプレートから足を引っ込めるか持ち上げることで不快感を示したらオペレーターが直ちに試験を停止する（足引っ込め潜時（ｐａｗ  ｗｉｔｈｄｒａｗａｌ  ｌａｔｅｎｃｙ）、すなわちＰＷＬ）。組織の損傷を回避するために、最大カットオフ時間は５分である。異痛症の動物（ＣＦＡ注射した後足について１５０秒未満の最初の３つの疼痛行動に対する平均ＰＷＬ：正常な足とＣＦＡ注射足との間で５０％以上の相違）が、この試験に含まれ、引き続き処置群にまたがって無作為化される。翌日、動物を盲検条件のもとで投与する。１〜２時間の予備処理時間の後、投与後のＰＷＬを再度読み取る。薬物処理の有効性は、薬物処理動物におけるＰＷＬと、ビヒクルを投与された動物のＰＷＬとを比較することによって評価される。
【０１０２】
実施例７：外科的切開疼痛行動のインビボげっ歯類モデル（図４）
式（Ｉａ）の化合物、式（ＩＩＩ）の比較化合物、およびケトプロフェンを、その全体が参照によって本明細書に援用される、Ｂｒｅｎｎａｎら、Ｐａｉｎ，１９９６  Ｍａｒ；６４（３）：４９３〜５０１に報告される切開性疼痛試験によって試験した。要するに、麻酔下のラットでは、皮膚および下層の筋肉を通じた１ｃｍの切開を、片側の後足底に作製する。切開を縫合閉鎖し、動物をその飼育ケージ中で意識を覚醒させた後に、特別なメッシュのラックに入れた。盲検の観察者が主観的に評価して、１時間にわたって５分ごとに各々の動物の疼痛スコアを記録する。疼痛スコアを、０のスコア＝注射された足を、ラック上に平坦に保持し、荷重させる（＝注射していない足）、１＝注射した足はラックからわずかに上げられるが、ある程度の荷重がされている、２＝注射された足は平らであるが、荷重はなく、またはかかとはラックから高く上げられ、つま先のみが接している、として割り当てる。各時間の終わりには、疼痛スコアを加算して、最終スコアを記録する（最大スコア＝３９）。典型的な試験では、薬物処置の有効性は、ビヒクルを受けた動物の累積防御スコアに対して、外科的損傷の１〜２および３〜４時間後に累積防御スコアを比較することによって決定する。
【０１０３】
腹腔内に送達された六十（６０）ｍｇ／ｋｇ（術前および術直後の３０ｍｇ／ｋｇの２用量）は、ケトプロフェン（腹腔内に２ｍｇ／ｋｇの２用量）と等しく、術後最大４時間の間、自発性疼痛を低下した。三十（３０）ｍｇ／ｋｇの腹腔内の式（Ｉａ）の化合物（手術の前および直後の１５ｍｇ／ｋｇの２用量）は、術後最大２時間まで自発性疼痛を低下しただけであった。
【０１０４】
実施例８：式（Ｉ）の化合物および式（ＩＩＩ）の比較化合物の肝毒性血清バイオマーカー試験
式（Ｉａ）の化合物は、肝毒性または胆管損傷の血清化学バイオマーカーを介して測定した、安全性の評価のためのビヒクルとして３０％のスルホブチルエーテルβ−シクロデキストリンを用いて、５、１５または５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで雌イヌに対して経口投与し、図５Ａは、各用量レベルでイヌにおけるアラニンアミノトランスフェラーゼ［ＡＬＴ］、アスパルテートアミノトランスフェラーゼ［ＡＳＴ］、アルカリホスファターゼ［ＡＬＰ］およびγ−グルタミルトランスフェラーゼ［ＧＧＴ］の測定を示している（各々のバーは、この試験における１匹のイヌからの測定値を意味する）。図５Ａのデータは、式（Ｉａ）の化合物が、５０ｍｇ／ｋｇＰＯ（経口）で投与した場合、肝毒性の血清バイオマーカーも、急性期の応答も上昇しなかったことを示す。
【０１０５】
これに対し、図５Ｂのデータは、式（ＩＩＩ）の比較化合物が、肝毒性の血清バイオマーカーを上昇させたことを示す。例えば、ＡＬＴレベルは、５０ｍｇ／ｋｇの単回ＰＯ投与後、雄イヌでは最大約６０倍まで、および雌のビーグル犬では最大約１３０倍まで上昇した。
【０１０６】
実施例９：げっ歯類反復投与毒性試験、腹腔内（ｉ．ｐ．）
式（Ｉａ）の化合物は、雌性ラットにおける７日反復投与スクリーニング毒性試験で評価した。全身的な暴露を最大化するために、ラットに、式（Ｉａ）の化合物を、ｉ．ｐ．（腹腔内）５０ｍｇ／ｋｇ／日で７日連続して投与し、図６に示される結果を得た。臨床化学パラメーターを、３日目および８日目に評価した。組織病理学を、肝臓、腎臓、脾臓および肺を含む選択臓器で行った。式（Ｉａ）の化合物の５０ｍｇ／ｋｇ（ＩＰ）用量での投与後、有害な臨床兆候も、体重の変化も、臨床化学パラメーターの変化も記録されなかった。式（Ｉａ）の化合物の投与後に、肝臓、腎臓、脾臓または肺における組織病理学的知見は観察されなかった。
【０１０７】
病理学者の報告によれば、式（Ｉａ）の化合物に関連する有害な影響は、試験３日目および８日目に回収された肝臓の部分でも、または試験８日目に回収された膵臓、腎臓および肺の部分でも確認されなかった。
【０１０８】
これに対し、式（ＩＩＩ）の化合物についての図６のデータでは、式（ＩＩＩ）の比較化合物は、７日連続して、５０ｍｇ／ｋｇ／日の７日反復投与後に式（Ｉａ）と比較して肝毒性の血清バイオマーカーの上昇が示された。
【０１０９】
実施例１０：式（Ｉａ）の化合物を含有する医薬組成物
薬学的に許容される処方物の成分は、式（Ｉａ）の化合物を活性成分として、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰＢＣＤ）を可溶化剤および安定化剤として、ならびにＨＣｌをｐＨ調節因子として含んでもよい。処方された投与溶液は、１０ｍｇ／ｍＬの式（Ｉａ）の化合物および２５％（ｗ／ｖ）のＨＰＢＣＤ（０．１Ｎの塩酸（ＨＣｌ）、ｐＨ２．０に溶解）を含んでもよい。この処方物は、臨床部位での投与の前に再構成用の凍結乾燥剤形に変換されてもよい。
【０１１０】
式（Ｉａ）の化合物を含有する製剤は、式（Ｉａ）の化合物を、薬物（ｄｒｕｇ  ｓｕｂｓｔａｎｃｅ）（ＤＳ）として２５％（ｗ／ｖ）のＨＰＢＣＤ中に、０．１ＭのＨＣｌ溶液中でｐＨ２（±０．５）という最終標的で溶解することによって調製され得る。この配合された溶液は、その後の凍結乾燥のためにバイアルに充填されてもよい。
【０１１１】
式（Ｉ）の化合物を含有する医薬組成物は、必要に応じてナノ懸濁物、共結晶、噴霧乾燥分散剤および熱溶解押出として形成され得る。これらの技術は、それらの利用に基づいて選択されて、ＢＣＳ薬物クラスＩＩの薬物化合物について成功を示し得る。選択された薬物送達技術の実現性評価は、実施例２の式（Ｉａ）の化合物のＨＣｌ塩型を用いて行われ得る。
【０１１２】
医薬組成物は、サイズ「００」のカプセルまたは等価な錠剤のサイズ中で、２００〜５００ｍｇにおよぶ単位用量であってもよい。５００ｍｇの活性／単位用量が達成されれば、その技術の開発は、獲得可能な最高の用量を目的とされる。
【０１１３】
好ましくは、式（Ｉａ）の化合物を含有する医薬組成物は、術後疼痛を軽減させる（例えば、プラシーボと比較して術後疼痛の管理を、術後最初の２４時間内のオピエート使用で、約５０〜１００％の軽減を達成する）ように処方され得る。式（Ｉａ）の化合物を含有する医薬組成物は、経口投与された鎮痛剤としての使用、および／または炎症によって生じる疼痛の処置のため（例えば、急性疼痛をブロックするため、または損傷部位での炎症を予防または低減し、中枢感作を妨げるため）の処方される組成物における使用を含む、疼痛の処置のための使用について指定され得る。一実施形態では、式（Ｉａ）の化合物を含有する医薬組成物は、適切な期間（例えば、７〜１４日）ＢＩＤ投与されてもよく、投与の約３０分以内に鎮痛効果を提供する。好ましくは、式（Ｉａ）の化合物を含有する医薬組成物は、呼吸の抑制および／または薬物誘発性のＣＮＳの影響なしに、疼痛スコアの臨床的に測定可能な減少を提供し得る。
【０１１４】
実施例１１：単一の漸増用量の第１Ａ相試験
式（Ｉａ）の化合物の６つの漸増用量の、無作為化二重盲検プラシーボコントロールクロスオーバー単一用量の安全性、耐容性、および薬物動態の試験を、健常男性ボランティアの２つのコホートで行った。全部で１８例の好適な健常男性ボランティアを、交互のパネルデザインを利用して採用した。９例の対象の第一のコホート（コホート１）を、引き続き、６つの投薬期間のうち３つに登録した（投与レベル１、３および５）。９例の対象の残りのコホート（コホート２）を、他の３つの投薬期間に登録した（投与レベル２、４および６）。各々の投薬期間内に、対象は、式（Ｉ）の化合物（ｎ＝６）またはプラシーボ（ｎ＝３）に対して２：１に無作為に割り当てた。各々の対象は、１用量のプラシーボ、および２つの異なる用量の式（Ｉ）の化合物を、全ての３つの投薬期間において、それらの参加の過程にまたがって投与された。対象は、可能性のある３つの順序のうちの１つに均等に無作為化された、すなわち、１）プラシーボ、活性、活性、２）活性、プラシーボ、活性、および３）活性、活性、プラシーボ。
【０１１５】
単一の漸増用量の第１Ａ相試験は、式（Ｉａ）の化合物に起因した安全性のシグナルなしで首尾よく完了した。
【０１１６】
実施例１２：アレルギーの喘息モデルにおける式（Ｉａ）の化合物の有効性の評価
材料および方法
動物の準備：化合物を、その全体が参照によって本明細書に援用される、Ａｂｒａｈａｍ  ＷＭ，Ａｓｔｈｍａ  ＆  Ｒｈｉｎｉｔｉｓ，２０００：１２０５〜１２２７に報告される実験的喘息のヒツジモデルで試験した。全ての動物は、Ａｓｃａｒｉｓ  ｓｕｕｍ抗原による吸入チャレンジに対する早期および後期の両方の気道応答を有することが示された。
【０１１７】
気道構造の測定：非鎮静状態のヒツジを、頭部を固定して腹臥位でカート中に拘束した。２％のリドカイン溶液を用いた鼻腔の局所麻酔後、バルーンカテーテルを片側の鼻孔を通して食道下部まで進めた。そのヒツジに、もう一方の鼻孔を通してカフ付きの気管内チューブを挿管した。胸腔内圧を食道バルーンカテーテルで見積もった。気管の側圧を、気管内チューブを通して進行して、その先端に対して遠位に配置した横穴付きカテーテル（内径、２．５ｍｍ）で測定した。肺内外圧差（気管圧と胸腔内圧との間の差）を、差圧変換器カテーテルシステムで測定した。肺抵抗（ＲＬ）の測定のために、気管内チューブの近位端を、呼吸気流計に接続した。気流および肺圧差のシグナルを、肺内外圧差、気道容積（デジタル積分によって得た）および気流からＲＬのオンライン算出のためにコンピューターに送った。５〜１０回の呼吸の分析をＬ×ｃｍ  Ｈ２０／Ｌ／ＳにおけるＲＬの決定のために用いた。
【０１１８】
エアロゾル送達システム：Ａｓｃａｒｉｓ  ｓｕｕｍ抽出物のエアロゾル（リン酸緩衝化生理食塩水で２０：１に希釈；８２，０００ＰＮＵ／ｍｌ）を、使い捨ての医療用ネブライザー（ＲａｉｎｄｒｏｐＲ，Ｐｕｒｉｔａｎ  Ｂｅｎｎｅｔｔ）を用いて作成した。このネブライザーからの出力を、プラスチックｔ−ピースに向け、その１つを、Ｈａｒｖａｒｄ人工呼吸器の吸気口に接続した。エアロゾル送達をさらによく制御するために、電磁弁および圧縮空気源（２０  ｐｓｉ）からなる薬量計を、１秒間のＨａｒｖａｒｄ人工呼吸器システムの吸入周期の初期に活性化した。エアロゾルを５００ｍｌの一回呼吸量および１分間に２０呼吸の速度で送達した。カルバコールエアロゾルをまた、上記のネブライザーシシテムで生成した。
【０１１９】
肺抵抗応答のデータ：式（Ｉａ）の化合物についての肺抵抗データを、図８に示されるフローチャートによって収集した。エアロゾルカルバコールに対するベースライン濃度応答曲線は、薬物／ビヒクルでの処置の開始の１〜３日前に得た。図８を参照、ヒツジ（ｎ＝３／群）に、４日連続して、３、５、または１０ｍｇ／ｋｇ経口（ＰＯ）の式（Ｉａ）の化合物または５ｍＬ／ｋｇ（ＰＯ）のビヒクルを毎日投与した。ヒツジを、翌朝の投与の前は毎晩絶食させた。投与の連続４日目であるチャレンジの日に、ヒツジを、抗原チャレンジの２時間前に、経口的に式（Ｉａ）の化合物またはビヒクルで処置した。肺抵抗（ＲＬ）のベースライン値は、処置の３０分内に得て、次に抗原チャレンジの３０分前に再測定した。ＲＬの測定は、ヒツジをＡｓｃａｒｉｓ  ｓｕｕｍ抗原でチャレンジした直後、チャレンジ後の１〜６時間は毎時間、そしてチャレンジ後６１／２〜８時間は３０分ごとに行った。チャレンジ後２４時間の濃度応答曲線の決定を行った。
【０１２０】
図９Ａは、時間（時間）の関数として肺抵抗（ＲＬ）の測定から算出したデータを示す。図９Ｂは、図９Ａにみられる式（Ｉａ）の化合物に対する後期応答の定量を示す。図９Ａを参照、Ａｓｃａｒｉｓ  ｓｕｕｍ抗原投与直後に肺抵抗はピークになり、次に、ＲＬは４時間まで低下した。ベースラインおよびビヒクルの両方での抗原チャレンジ４時間後に開始して、ＲＬの後期の増大が観察された。同様の効果がまた、式（Ｉａ）の化合物の３ｍｇ／ｋｇの用量でも見られた。しかし、５および１０ｍｇ／ｋｇの用量は、時間経過における後期の肺抵抗の低下で有効であった。式（Ｉａ）の化合物の５ｍｇ／ｋｇの用量では、５ｍｇ／ｋｇの投薬量は、約４５％の阻害を示したが、１０ｍｇ／ｋｇの用量では、阻害％は、約７５％と定量された（図９Ｂ）。
【０１２１】
気道反応性亢進（ＰＣ４００）データ：ＲＬの測定は、緩衝液の吸入の直後、およびカルバコール溶液の漸増濃度（０．２５％，０．５％、１．０％、２．０％および４．０％（ｗ／ｖ））の１０呼吸毎の投与の直後に繰り返した。気道反応性を評価するために、緩衝後値（すなわちＰＣ４００）を超えてＲＬ４００％を増大した呼吸単位（ｂｒｅａｔｈ  ｕｎｉｔｓ）（ＢＵ）の累積カルバコール用量を、用量反応曲線から算出した（図１０）。１呼吸単位は、１％（ｗ／ｖ）のカルバコール溶液の１呼吸と規定される。図１０を参照、式（Ｉａ）の化合物の５ｍｇ／ｋｇおよび１０ｍｇ／ｋｇの用量は、ベースラインの１００％増大を示し、このことは、ＲＬが抗原チャレンジの前のレベルまで戻ったことを示している。
【０１２２】
参照による援用
本明細書で言及される全ての刊行物および特許は、あたかも個々の刊行物または特許が、参照によって詳細にかつ個々に援用されると示されるかのように、その全体が参照によって援用される。
【０１２３】
同等物
当業者は、本明細書に記載の本発明の特定の実施形態の多くの同等物を認識するか、単なる慣用的な実験を用いて確認できる。このような同等物は、以下の特許請求の範囲に包含されるものとする。
【図７】
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【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６】
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【図８】
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【図９Ａ】
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【図９Ｂ】
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【図１０】
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【国際調査報告】
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