(57)【要約】本発明の実施形態は、脂肪沈着物を処置するための方法及び組成物を含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者の患部へボツリヌス組成物を投与し、それによって脂肪沈着物を処置することを含む、脂肪沈着物を処置するための方法。
【請求項２】
前記患者が女性である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ボツリヌス組成物がＡ型ボツリヌスを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記Ａ型ボツリヌスを、約２００〜約３００単位の量で投与する、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記ボツリヌス毒素を、約２〜約６カ月ごとに再投与する、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記投与が局所投与を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記ボツリヌス組成物がＡ型ボツリヌスを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記投与が注射による投与を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記ボツリヌス組成物がＡ型ボツリヌスを含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記Ａ型ボツリヌスが、９００ｋＤａのＡ型複合体を含む、請求項９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本特許出願は、米国特許法第１１９条（ｅ）に基づき、２０１１年７月２０日出願の米国仮特許出願第６１／５０９，７００号の優先権を主張し、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本発明は、ボツリヌス毒素を用いて脂肪沈着物を処置するための方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
肥満は、米国で蔓延しており、成人人口の６０％が体重過多又は肥満であると報告されている（Ｋｈａｉｔａｎ，２００５）。この健康問題は、先進国のみならず、発展途上国でも発生している（Ｐｒｅｎｔｉｃｅ，２００６）。肥満の負荷によって、更なる健康上の問題を引き起こしかねないだけではなく、また、心理的障害への困惑、差別及びうつ病をも引き起こす可能性がある（Ｖｉｌｌａｒｅａｌ，２００５）。脂肪組織の全体的なレベルを低減することを目的として、リパーゼ阻害剤及び食欲抑制剤などの多数の処置法が存在する。更に、肥満手術又はＬＡＰＢＡＮＤ（登録商標）を含む外科的処置が存在し、それにより体脂肪レベルの合計が低減するようになり、食物摂取を減少させることができる。
【０００４】
近年では、ボツリヌス毒素Ａは、皮下脂肪細胞への脂肪の蓄積を低下させることが提唱されている（Ｌｉｍ，２００６）。これが生じるメカニズムは未知であるが、この毒素による副交感神経のシグナル伝達及び様々な脂肪膜構造の崩壊が推測され得る。脂肪分布は、自律制御の下での神経シグナル伝達により調節されると考えられる。更に、副交感神経シグナル伝達は、肥満に深く関与していることが示されている。Ｂａｌｂｏら（２０００）は、迷走神経切除した肥満ラットにおいて、脂肪蓄積が減少したことを報告した。脂肪パッド特有の迷走神経切除は、脂肪組織中のグルコース及び遊離脂肪酸のインスリン依存性取り込みを減少させることが示されている（Ｋｒｅｉｅｒ，２００２）。内臓脂肪症は、高い交感神経のトーン及び高い副交感神経のトーンの両方に関連していることが示されている（Ｌｉｎｄｍａｒｋ，２００５）。
【０００５】
ボツリヌス神経毒の臨床効果
随意運動神経
ボツリヌス毒素の最初に挙げられる用途であり、依然として主な用途は、筋繊維を用いた運動神経の伝達の阻害である。ＢＴを、標的筋肉内に注入する。ボツリヌス毒素を、次に、神経伝達物質アセチルコリンエステラーゼ（ＡＣｈＥ）の放出を減少又は停止させる運動ニューロンへ吸収させ、それによって筋肉の不全麻痺又は完全麻痺を引き起こす。Ｓｃｏｔｔは、斜視の特定の症状（目を細める、寄り目）のためのボツリヌス毒素の局所的な筋肉注射の概念を導入した。後に、ボツリヌス毒素は、チック、痙攣、拘縮、筋痙攣及び震えなどの運動障害のために特に有用であることが見出された。より最近では、顔の筋肉内へのボツリヌス毒素の注射により、老化に関連するしわ及び輪郭線を改善することが見出されている。ボツリヌス毒素注射のもう１つの最近の用途は、頭痛及び顎関節症候群などの症状における、筋肉の緊張を伴う疼痛を減少させることである。
【０００６】
自律神経運動ニューロン
自律神経系は、副交感神経系と交感神経系とに分かれている。副交感神経ニューロンは、神経伝達物質としてアセチルコリンを使用しており、ボツリヌス毒素を用いて阻害され得る。交感神経系は、発汗の唯一の例外を含む神経伝達物質として、ノルアドレナリンを使用し、この神経伝達物質は、ボツリヌス毒素によって阻害されない。副交感神経系のエフェクターニューロンは、平滑筋の収縮を刺激および制御する。ボツリヌス毒素の注射は、下部食道括約筋、食道、胃壁、及び幽門括約筋、オッディ括約筋、肛門括約筋及び膀胱の平滑筋における緊張を低減するために使用されている。
【０００７】
自律神経分泌ニューロン
自律神経系のニューロンは、平滑筋の神経支配に加えて、全身にわたり様々な腺の分泌などの他の多種多様な機能を制御又は調節する。ボツリヌス毒素注射は、酸の産生を含む胃の分泌物、鼻及び他の呼吸分泌物、並びに涙を減少させるために使用されている。
【０００８】
神経ペプチド
自律神経及び感覚神経の多くは、限局的なシナプスの部位で放出される神経伝達物質に加えて、軸索の長さの一部又は全部に沿って、神経ペプチドを放出することができる。これらのペプチドは、炎症、アレルギー反応及び疼痛の伝達物質として皮膚において、最も顕著である。例えば、皮膚の小さな領域における負傷により、周辺領域における反射的血管拡張が引き起こされる。これらの反応は、神経的に伝達され、神経ペプチドの放出に依存する。皮膚の神経性血管拡張は、ボツリヌス毒素によって阻害されるが、疼痛及び腫れなどの他の現象が阻害されているかどうかは、いまだに不明である。
【０００９】
Ａ型ボツリヌス毒素の作用メカニズムは、アセチルコリンの放出に直接影響を与え、従って、注射された筋肉の部位において、迷走神経緊張をもたらす可能性がある。さらに、Ａ〜Ｇの７つの血清型のボツリヌス毒素メカニズムに関する研究は、他の脂肪細胞の脂肪構造のうち脂質二重層及び脂質ラフトでの破壊におけるそれらが関与することを報告している。ｐＨの変化、脂質ラフトの破壊及び脂質二重層におけるイオンチャンネルの形成は、ボツリヌス毒素についてのメカニズムとして、すべて公開されている（Ｍｏｎｔｅｃｕｃｃｏ，１９８９；Ｐｅｔｒｏ，２００６；Ｋａｍｔａ，１９９４；Ｏｂｌａｔｔ−Ｍｏｎｔａｌ，１９９５）。脂肪細胞は、遊離脂肪酸及びリン脂質などの様々な種類の構造体から構成されている。この毒素が注射部位の脂肪組織を破壊することを証明することができるが、しかし、これらのメカニズムは現在知られていない。
【００１０】
最近、Ｂａｇｈｅｒｉら（２０１０）は、生理食塩水及び２つの異なる投与量のＡ型毒素を、ウサギの腹部に９回皮下注射することにより、ボツリヌス毒素の脂肪分解効果を調べた。このグループは、摘出した腹部脂肪組織を検査して、プラセボに対する処置群における定量的及び定性的な変化を報告した。腹部皮下脂肪組織の変化において、脂肪層の薄膜化、脂肪球状サイズの減少、脂肪球の断片化及び粉砕、並びに、脂肪細胞内の脂肪球の消失を観察した（Ｂａｇｈｅｒｉ、２０１０）。脂肪細胞容積は、プラセボのウサギの腹部と比較して、６５％及び７７％減少した。脂肪細胞表面もまた有意に減少した。
【００１１】
嫌気性グラム陽性細菌であるクロストリジウムボツリナムは、強力なポリペプチド神経毒であるボツリヌス毒素を産生し、このことによりボツリヌス中毒として知られているヒト及び動物における神経麻痺性疾患を引き起こす。クロストリジウムボツリナムの胞子は土壌中に見いだされ、零細缶詰工場の不適切に滅菌され、密封された食品容器中で生育することができ、これはボツリヌス中毒例の多くの原因となっている。ボツリヌス中毒の影響は、概して、クロストリジウムボツリナムの培養物又は胞子に感染した食品を食べた後、１８〜３６時間後に現れる。ボツリヌス毒素は、腸の粘膜を介して明らかに衰えることなく通過することができ、末梢運動ニューロンを攻撃する。ボツリヌス毒素中毒の症状は、歩行、嚥下、話すことの困難となり、呼吸筋の麻痺及び死へ進行する可能性がある。
【００１２】
Ａ型ボツリヌス毒素は、人類に知られている、最も致死性の天然の生物学的物質である。約５０ピコグラムのＡ型ボツリヌス毒素（商品名ＢＯＴＯＸ（登録商標）の下、カリフォルニア州、アーバインのＡｌｌｅｒｇａｎ社から入手可能）は、マウスにおいてＬＤ５０である。それぞれ１８〜２０グラムの重量である、メスのスイスウェブスターマウスへ腹腔内注射におけるＬＤ５０としてボツリヌス毒素の１単位（Ｕ）が定義される。７つの免疫学的に異なるボツリヌス神経毒が特徴付けられており、これらは、それぞれ、ボツリヌス神経毒血清型Ａ、Ｂ、Ｃ１、Ｄ、Ｅ、Ｆ及びＧであり、それぞれの型に特異的な抗体による中和により区別される。ボツリヌス毒素の異なる血清型は、それらが影響する動物種、並びに、それらが引き起こす麻痺の重症度及び持続時間が異なる。明らかに高い親和性で、コリン作動性の運動ニューロンに結合するボツリヌス毒素は、ニューロン内に移行し、アセチルコリンの放出を阻害する。
【００１３】
ボツリヌス毒素は、活動過多な骨格筋により特徴付けられる神経筋疾患の処置のために、臨床現場で使用されている。Ａ型ボツリヌス毒素は、眼瞼痙攣、斜視、片側顔面痙攣、頸部ジストニア及び偏頭痛の処置について、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）により承認されている。Ｂ型ボツリヌス毒素も、頸部ジストニアの処置について、ＦＤＡにより承認されている。周辺筋肉内のＡ型ボツリヌス毒素の臨床効果は、通常、注射後１週間以内に認められる。Ａ型ボツリヌス毒素の単回筋肉注射による症候緩和の典型的な期間は、平均約３ヶ月である。
【００１４】
Ａ型ボツリヌス毒素は、以下に挙げるような臨床の状況で使用されたことが報告されている。
【００１５】
頸部ジストニアの治療の場合、筋肉内注射（複数の筋肉）当たり、ＢＯＴＯＸ（登録商標）約７５〜１２５Ｕ
【００１６】
眉間のしわ（眉しわ）の治療の場合、筋肉注射当たりＢＯＴＯＸ（登録商標）５〜１０Ｕ（５Ｕは、鼻根筋に筋肉内注射し、１０Ｕは各しわの眉筋に筋肉内注射）
【００１７】
恥骨直腸筋の括約筋内注射による便秘の治療の場合、ＢＯＴＯＸ（登録商標）３０〜８０Ｕ
【００１８】
上眼瞼の横方向の瞼板前部の眼輪筋及び下眼瞼の横方向の瞼板前部の眼輪筋に注射することによる、眼瞼痙攣の治療の場合、筋肉内注射した筋肉当たりＢＯＴＯＸ（登録商標）約１〜５Ｕ
【００１９】
斜視の治療の場合、外眼筋に、ＢＯＴＯＸ（登録商標）約１〜５Ｕを筋肉内注射。この注射の量は、注射される筋肉の大きさ及び所望する筋肉麻痺の程度の両方（即ち、所望の視度調整の量）に基づいて変動する。
【００２０】
脳卒中後の上肢痙縮の治療の場合、以下のように５つの異なる上肢屈筋に筋肉内注射
（ａ）深指屈筋：７．５Ｕ〜３０Ｕ
（ｂ）浅指屈筋（ｆｌｅｘｏｒ  ｄｉｇｉｔｏｒｕｍ  ｓｕｂｌｉｍｕｓ）：７．５Ｕ〜３０Ｕ
（ｃ）尺側手根屈筋：１０Ｕ〜４０Ｕ
（ｄ）橈側手根屈筋：１５Ｕ〜６０Ｕ
（ｅ）上腕二頭筋：５０Ｕ〜２００Ｕ
【００２１】
各治療セッションでの筋肉内注射により、患者が、上肢屈筋に９０Ｕ〜３６０ＵのＢＯＴＯＸ（登録商標）を受け取るように、上記５つの筋肉のそれぞれが同一の治療セッションで注射が行われる。
【００２２】
偏頭痛の治療において、頭蓋周囲（対称的に眉間、前頭及び側頭筋）への２５ＵのＢＯＴＯＸ（登録商標）の注射は、２５Ｕの注射後３ヶ月間にわたり、ビヒクルと比較して、偏頭痛の頻度、最大重症度、関連する嘔吐及び急な薬剤使用の尺度の減少により測定される予防的治療として、大きな利点を示している。
【００２３】
更に、筋肉内ボツリヌス毒素は、結果は印象的ではなかったことが報告されているものの、パーキンソン病患者の振戦の治療に使用されている。Ｍａｒｊａｍａ−Ｊｙｏｎｓ，Ｊ．ら，Ｔｒｅｍｏｒ−Ｐｒｅｄｏｍｉｎａｎｔ  Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ，Ｄｒｕｇｓ  ＆  Ａｇｉｎｇ  １６（４）；２７３〜２７８：２０００。
【００２４】
また、ボツリヌス毒素は、末梢部位における薬理作用を有することに加えて、中枢神経系における阻害作用を有し得る。Ｗｅｉｇａｎｄらの、Ｎａｕｎｙｎ−Ｓｃｈｍｉｅｄｅｂｅｒｇのアーチによる作用  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９７４；２８１，４７〜５６は、ボツリヌス毒素が、逆行性輸送により脊髄領域に上昇し得ることを示した。このように、末梢部位へ注射されたボツリヌス毒素は、例えば、筋肉内、脊髄に逆輸送され得る。
【００２５】
米国特許第５，９８９，５４５号は、改質されたクロストリジウム神経毒素又はそれらの断片、好ましくは、特定の標的部位へ化学的に結合した又は組換え的に融合したボツリヌス毒素を、脊髄へこの薬剤の投与することにより、疼痛を治療するために使用することができることを開示している。
【００２６】
鼻漏、多汗症及び、自律神経系（米国特許第５，７６６，６０５号）により媒介される他の障害、緊張性頭痛（米国特許第６，４５８，３６５号）、偏頭痛（米国特許第５，７１４，４６８号）、術後の疼痛及び内臓痛（米国特許第６，４６４，９８６号）、脊髄内毒素投与による疼痛処置（米国特許第６，１１３，９１５号）、頭蓋内毒素投与（米国特許第６，３０６，４０３号）によるパーキンソン病及び運動障害成分を有する他の疾患、発毛及び毛の保持（米国特許第６，２９９，８９３号）、乾癬及び皮膚炎（米国特許第５，６７０，４８４号）、損傷した筋肉（米国特許第６，４２３，３１９号）、様々なガン（米国特許第６，１３９，８４５号）、膵臓疾患（米国特許第６，１４３，３０６号）、平滑筋障害（米国特許第５，４３７，２９１号、上部及び下部の食道、幽門と、肛門括約筋へのボツリヌス毒素の注入を含む）、前立腺疾患（米国特許第６，３６５，１６４号）、炎症、関節炎及び痛風（米国特許第６，０６３，７６８号）、若年性脳性麻痺（米国特許第６，３９５，２７７号）、内耳障害（米国特許第６，２６５，３７９号）、甲状腺疾患（６，３５８，５１３号）、副甲状腺疾患（米国特許第６，３２８，９７７号）の処置のための、ボツリヌス毒素が提案されている。更に、徐放性毒素インプラントも知られている（例えば、米国特許第６，３０６，４２３号及び米国特許第６，３１２，７０８号を参照）。
【発明の概要】
【００２７】
本発明の実施形態は、患者の患部にボツリヌス組成物を投与することを含む、脂肪沈着物を処置するための方法を含む。実施形態において、患者は女性である。実施形態において、ボツリヌス菌は、５０〜３００単位の量で投与されるＡ型ボツリヌス菌である。
【００２８】
本発明の実施形態は、例えば、セルライト、脂肪腫などの脂肪沈着物などを処置するための、ボツリヌス毒素及び類似の物質を含む、方法及び組成物を利用する。特定の実施形態において、投与法は、例えば静脈内などの全身投与法、又は、例えば、注射、インプラント、局所製剤などを介した局所投与法であり得る。
【００２９】
一態様において、本発明は、それを必要とする患者の皮膚又は皮膚下に、有効量のボツリヌス毒素組成物を投与することを含む、脂肪沈着物を処置する方法を含む。特定の実施形態において、例えば、ボツリヌス毒素組成物は、リン脂質ミセル、及び／又は一種以上の一次安定化剤、及び／又は１つ以上の皮膚浸透促進剤中にカプセル化されたボツリヌス毒素を含む。代替の実施形態において、ボツリヌス毒素Ａの注射を、皮膚内の複数の部位で行い、隣接する注射部位は、約０．１〜１０ｃｍ、又は約０．５〜約５ｃｍ、又は約１．５〜約３ｃｍで区切られている。この毒素は、ボツリヌス毒素Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ又はＧのいずれであってもよい。投与される量は、製造仕様、毒素のクラス及び投与様式に依存して、０．１〜１０００Ｕ、適切には約１〜約４０Ｕ、しばしば約５〜約１０Ｕで変化し得る。従って、１ＵのＢＯＴＯＸは、２〜４単位のＤｙｓｐｏｒｔ及び約２０〜４０単位のＭｙｏｂｌｏｃに等しい。注射間の間隔は、約１ｍｍ〜約１０ｃｍ、又は約５ｍｍ〜約５ｃｍ、又は約１ｃｍ〜約３ｃｍで変化し得る。従って、例えば、ボツリヌスＡを、適切には、約０．５〜約１０ｃｍ、好ましくは約２．５ｃｍの間隔で、約０．１〜約１０Ｕで皮内注射により投与することができる。ボツリヌスＢを、１．５ｃｍ間隔で、１〜５００Ｕの範囲、好ましくは１００Ｕで投与することができる。
【００３０】
以下の定義を本明細書において適用する。
【００３１】
「約」は、およそ又はほぼとの意味を表し、本明細書に記載の数値又は範囲の文脈において、記載又は請求された数値又は範囲の±.１０％を意味する。
【００３２】
「疾苦」は、疾患、障害、問題及び／又は個体における美容的に望ましくない状態又は条件を含む。
【００３３】
「緩和」は、脂肪沈着に関連する症状の発生の減少を意味する。従って、緩和は、脂肪沈着に関連した症状の多少の減少、顕著な減少、ほぼ完全な減少及び完全な減少を含む。緩和効果は、ボツリヌス毒素の投与後１〜７日間、患者に臨床的に表れない場合がある。
【００３４】
「ボツリヌス毒素」は、純粋な毒素（即ち、約１５０ｋＤａ重量の分子）、又は複合体（即ち、神経分子及び１つ以上の関連する非毒性分子を含む、約３００〜約９００ｋＤａ重量の複合体）のいずれかとしての、ボツリヌス神経毒素を意味し、細胞傷害性ボツリヌス毒素Ｃ２及びＣ３などの神経毒ではないボツリヌス毒素を除外するが、組み換えによって作られたボツリヌス毒素、ハイブリッドボツリヌス毒素、改質されたボツリヌス毒素と、キメラボツリヌス毒素を含む。
【００３５】
神経毒に用いられる「有効量」は、被験者に所望の変化を与えるのに一般的に十分な神経毒の量を意味する。一部の実施形態において、神経毒を、約０．０１Ｕ／ｋｇ〜約３５Ｕ／ｋｇの量で投与することができ、治療される疼痛を、約１ヶ月〜約２７ヶ月（例えば約１ヶ月〜約６ヶ月など）で、緩和することができる。
【００３６】
「改善された患者の機能」は、疼痛の減少、床中で過ごす時間の短縮、肌の滑らかさの改善、皮膚の凹凸の減少、歩行の増加、より健康的な態度、より多様なライフスタイル及び／又は正常な筋緊張で可能になった治癒などの要因によって測定される改善を意味する。改善された患者の機能は、改善された生活の質（ＱＯＬ）と同義である。ＱＯＬは、例えば、知られているＳＦ−１２又はＳＦ−３６健康調査スコアリング手順などを用いて評価することができる。ＳＦ−３６は、身体機能、物理的な問題に起因する役割の制限、社会的機能、身体の疼痛、一般的な精神的健康、感情的な問題に起因する役割の制限、活力及び一般的な健康の認識という８つのドメインにおいて、患者の身体的及び精神的健康を評価する。得られたスコアを、様々な一般的な患者集団のために利用可能な公開された値と比較することができる。
【００３７】
「局所投与」又は「局所的に投与すること」は、患者の皮膚又は皮下位置又はその近くへの薬剤の投与（即ち、皮下、筋肉内、真皮下又は経皮経路による）を意味する。局所的投与の適切な方法は、例えば、注射、局所塗布、インプラントなどを含むことができる。
【００３８】
「処置（治療）」は、例えば、肌の輪郭の凹凸、テクスチャ又は組織分布などの、肌の凹凸などの、脂肪沈着に関連する少なくとも１つの症状の一時的又は永続的な緩和（又は除去）を意味する。
【００３９】
本発明により企図される医薬組成物は、局所的又は局部的な作用に適した医薬組成物を含む。
【００４０】
本明細書で使用される用語「局所的」は、局所作用を発揮するため、適切な医薬担体に組み込まれ、脂肪の沈着物の部位に適用される本明細書に記載のような組成物の使用に関する。従って、このような局所的組成物は、化合物が処置される皮膚表面に直接接触することにより外部から塗布される医薬形態のものを含む。この目的のための従来の医薬形態は、軟膏剤、リニメント剤、クリーム、シャンプー、ローション、ペースト、ゼリー、スプレー、エアロゾルなどを含み、処置される体の部位に依存して、パッチで又は含浸包帯で用いることができる。用語「軟膏」は、例えば、ワセリン、ラノリン、ポリエチレングリコール及びこれらの混合物などの油性、水溶性及びエマルジョンタイプの基剤を有する、製剤（クリーム）を包含する。
【００４１】
組成物を、持続期間の間、定期的又は非定期的に、単回又は繰り返し、適用することができる。特定の実施形態において、本発明の組成物を、例えば、太もも、臀部、足などの処置される体の部分へ局所的に塗布することができる。特定の実施形態において、本発明の組成物を、例えば、静脈内投与などにより全身的に投与することができる。
【００４２】
身体への局所使用のために、薬理学的に許容される緩衝液及び塩の添加により、生理学的に許容される浸透圧を呈する、水溶液、クリーム、軟膏及び油の形態で組成物を製剤化することができる。このような製剤は、ディスペンサーに応じて、塩化ベンザルコニウム、クロルヘキシジン、クロロブタノール、パラヒドロキシ安息香酸、並びに硝酸塩、塩化物及びホウ酸塩などのフェニル水銀塩などの防腐剤、又は酸化防止剤、並びにＥＤＴＡ、ソルビトール、ホウ酸などの添加剤を含む。更に、特に水溶液は、例えばメチルセルロースなどの多糖類、例えばヒアルロン酸及びコンドロイチン硫酸などのムコ多糖類、又は、例えばポリビニルアルコールなどの多価アルコールなどの増粘剤を含み得る。様々な徐放性ゲル及びマトリクスを、例えば、ｉｎ−ｓｉｔｕでゲルを形成する物質ベースの可溶性及び不溶性眼球インサートと同様に用いてもよい。使用される実際の製剤及び化合物に応じて、様々な量の薬剤及び異なる投与レジメンを用いることができる。
【００４３】
ボツリヌス毒素は、Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型、Ｆ型及びＧ型ボツリヌス毒素から成る群から選択することができる。
【００４４】
本発明に従って使用するためのボツリヌス毒素を、真空圧力下又は安定な液体として、凍結乾燥させ、真空乾燥させた形態でコンテナに貯蔵することができる。凍結乾燥する前に、ボツリヌス毒素を、アルブミンンなどの薬学的に許容される賦形剤、安定剤及び／又は担体と組み合わせることができる。患者に投与されるボツリヌス毒素を含む溶液又は組成物を作成する生理食塩水又は水を用いて、凍結乾燥させた物質を再構成することができる。
【００４５】
例示的な市販のボツリヌス毒素含有組成物は、使用前に、０．９％塩化ナトリウムを用いて再構成した凍結乾燥粉末としてバイアル中１００単位でのカリフォルニア州アーバインのＡｌｌｅｒｇａｎ，  Ｉｎｃ．から入手可能なＢＯＴＯＸ（登録商標）（ヒト血清アルブミン及び塩化ナトリウムとのＡ型ボツリヌス毒素神経毒複合体）、それぞれの例において本明細書に記載のＢＯＴＯＸ（登録商標）の約３〜約４倍の量で、用いることができる、ＤＹＳＰＯＲＴ（登録商標）（使用する前に０．９％の塩化ナトリウムを用いて再構成した粉末としてのヒト血清アルブミン及びラクトースとのＡ型ボツリヌス毒素ヘマグルチニン複合体。イギリス、Ｉｐｓｅｎ  Ｌｉｍｉｔｅｄ，  Ｂｅｒｋｓｈｉｒｅから入手可能）及び、当該技術分野で知られている、それぞれの例において本明細書に記載のＢＯＴＯＸ（登録商標）の約３０倍〜約５０倍の量で用いることができる、ＭＹＯＢＬＯＣ（登録商標）（カリフォルニア州、サウスサンフランシスコ、Ｓｏｌｓｔｉｃｅ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅｓから入手可能な、約ｐＨ５．６で、Ｂ型ボツリヌス毒素、ヒト血清アルブミン、コハク酸ナトリウム及び塩化ナトリウムを含む注射剤）を含むが、それらに限定されない。ＸＥＯＭＩＮ（登録商標）（ドイツ、ポツダム、Ｍｅｒｚ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓから入手可能な１５０ｋＤａのＡ型ボツリヌス毒素製剤）は、それぞれの例において本明細書に記載のＢＯＴＯＸ（登録商標）の約１〜約２倍の量で用いることができる、別の有用な神経毒である。
【００４６】
追加の実施形態において、約１０Ｕ以上約４００Ｕ以下のＢＯＴＯＸ（登録商標）、約３０Ｕ以上約１６００Ｕ以下のＤＹＳＰＯＲＴ（登録商標）、及び約２５０Ｕ以上約２００００Ｕ以下のＭＹＯＢＬＯＣ（登録商標）を本特許の処置セッションにつき、部位ごとに投与する。
【００４７】
更に別の実施形態において、約２０Ｕ以上約３００Ｕ以下のＢＯＴＯＸ（登録商標）、約６０Ｕ以上約１２００Ｕ以下のＤＹＳＰＯＲＴ（登録商標）、及び、約１０００Ｕ以上約１５０００Ｕ以下のＭＹＯＢＬＯＣ（登録商標）を、特許処置セッションにつき、部位ごとに投与する。
【００４８】
組成物は、例えば、活性成分としてのＡ型などのボツリヌス毒素の単一の型のみを含み得るが、他の処置用組成物は、ボツリヌス毒素の二種以上を含み得る。例えば、患者へ投与される組成物は、Ａ型ボツリヌス毒素及びＢ型ボツリヌス毒素を含み得る。２つの異なる神経毒を含む単一の組成物の投与は、単一の神経毒が患者に投与される場合よりも、神経毒のそれぞれの有効濃度がより低くなるようにすることができるが、それでも所望の処置効果を達成することができる。患者へ投与される組成物は、神経毒と組み合わせて、例えば、タンパク質受容体又はイオンチャンネルモジュレータなどの他の医薬活性成分も含有し得る。
【００４９】
特定の実施形態において、本発明の組成物は、再標的化したエンドペプチダーゼ、目的の細胞中に存在する非クロストリジウム毒素受容体について選択的な結合活性を示す標的ドメインで、クロストリジウム毒素の天然に存在する結合ドメインを置き換えることにより派生した分子を含み得る。結合ドメインへのそのような改質は、標的細胞上に存在する非クロストリジウム毒素受容体へ選択的に結合することができる分子をもたらす。再標的化したエンドペプチダーゼは、標的受容体へ結合し、細胞質内に移行し、目的の神経標的細胞又は非神経標的細胞のＳＮＡＲＥ複合体上のそのタンパク質効果を発揮することができる。
【００５０】
本発明の特定の実施形態は、投与用のインプラントを利用することができる。本明細書に開示される方法の実施に有用なインプラントを、塩化メチレン中に溶解した適切なポリマー溶液中へ、所望の量の安定化ボツリヌス毒素（非再構成ＢＯＴＯＸ（登録商標）など）又は再標的化したエンドペプチダーゼを混合することにより、調製してもよい。この溶液を、室温で調製することができる。溶液を、次にペトリ皿に移し、塩化メチレンを真空デシケータ中で蒸発させる。適切な量の所望の神経毒内蔵型インプラントを、所望のインプラントのサイズ、従って、取り込まれた薬物の量に応じて、金型内で、５秒間８０００ｐｓｉで、又は１７秒間３０００ｐｓｉで圧縮し、神経毒をカプセル化するインプラントディスクを形成する。例えば、Ｆｕｎｇ  Ｌ．Ｋ．ら，Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  Ｃａｒｍｕｓｔｉｎｅ  ４−Ｈｙｄｒｏｐｅｒｏｘｙｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ  ａｎｄ  Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ  Ｆｒｏｍ  ａ  Ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｉｍｐｌａｎｔ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｍｏｎｋｅｙ  Ｂｒａｉｎ，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ５８；６７２〜６８４：１９９８を参照。
【００５１】
更に、一部の実施形態において、症状又は障害を有する患者を処置する際に、典型的に行われるように、症状の重症度の評価に応じて、それぞれの場合において、医師は投薬量を変更することができる。更に、一部の実施形態において、症状の重症度及び患者の全体的な健康に応じて、処置を、少なくとももう一回、場合によっては数回、繰り返さなければならない場合がある。例えば、患者がボツリヌス毒素の全投与について物理的に適しているとみなされていない場合、又は全投与が任意の理由で望ましくない場合、複数の機会におけるより少ない投与量が有効であると証明され得る。
【００５２】
当然ながら、通常の技術を有する医療者は、最適な臨床結果を達成するために、適切な投与量及び投与頻度を決定することができる。つまり、医学分野における当業者は、例えば、効果的にこの障害を処置するために、適切な時間で、適切な量の、Ａ型ボツリヌス毒素などの毒素を投与することができるであろう。投与する神経毒の投与量は、目の障害の重症度を含む様々な要因に依存する。本発明に従って用いられる毒素の投与量は、本明細書に記載の本発明に従って使用される、ＢＯＴＯＸ（登録商標）の投与量に相当し得る。本発明の様々な方法において、約０．０１Ｕ／ｋｇ（患者の体重１キログラム当たりのボツリヌス毒素のＵ）〜約１５Ｕ／ｋｇのＢＯＴＯＸ（登録商標）を投与することができる。一部の実施形態において、約０．１Ｕ／ｋｇ〜約２０Ｕ／ｋｇのＢＯＴＯＸ（登録商標）を投与することができる。約０．１Ｕ／ｋｇ〜約３０Ｕ／ｋｇのＢＯＴＯＸ（登録商標）の使用は、開示された本発明に従って実施される方法の範囲内である。一実施形態において、約０．１Ｕ／ｋｇ〜約１５０Ｕ／ｋｇの、例えば、Ａ型のボツリヌス毒素を投与することができる。
【００５３】
重要なことに、本発明の範囲内の方法により、患者の機能を改善することができる。
【００５４】
ボツリヌス毒素組成物を、例えば、患部当たり１０〜１０００Ｕのボツリヌス毒素投与量で、又は、患部当たり２０〜８００Ｕのボツリヌス毒素投与量で、又は、患部当たり５０〜５００Ｕのボツリヌス毒素投与量で、又は、患部当たり１００〜４００Ｕのボツリヌス毒素投与量で、又は患部当たり２００〜３００Ｕのボツリヌス毒素投与量で投与することができる。
【００５５】
一部の実施形態において、患部は複数の毒素投与部位を含むことができる。
【００５６】
一部の実施形態において、例えば、投与部位当たり０．０１〜２０Ｕのボツリヌス毒素の投与量で、又は、投与部位当たり０．０５〜１５Ｕのボツリヌス毒素の投与量で、又は、投与部位当たり０．１〜１０Ｕのボツリヌス毒素の投与量で、又は、投与部位当たり１〜５Ｕのボツリヌス毒素の投与量で、又はそれらの範囲内の量などで、ボツリヌス毒素組成物を投与することができる。特定の実施形態において、例えば、１日〜８週間の期間、投与を継続することができる。実施形態において、１〜２週間の間、１日当たり、投与部位当たり、０．１〜１０Ｕのボツリヌス毒素の投与量で、ボツリヌス毒素組成物を投与する。別の実施形態において、２〜１０日間の期間、１〜５Ｕの投与量で、ボツリヌス毒素組成物を投与する。更に別の実施形態において、ボツリヌス毒素組成物を、５〜７日間の期間、１日当たり、患部当たり、２〜３Ｕのボツリヌス毒素の投与量で投与する。
【００５７】
この組成物に含まれるのに適した活性成分としては、Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型、Ｆ型及びＧ型のボツリヌス毒素が挙げられる。他の活性成分としては、アンドロゲン、アンドロステンジオール及びアンドロイソキサゾール（アナポリック障害のため）、テストテロン（性腺機能低下症、筋肉疲労、男性のインポテンツ、女性の閉経後の症状）、ジヒドロテストテロン（性腺機能低下症、筋肉疲労）、デヒドロエピアンドロステロン（筋肉疲労、脂肪減少、フィットネス）、エストロゲン（閉経後の症状、避妊）、１７βエストラジオール、エストラジオール−３，７−ジアセテート、エストラジオール−３−アセテート、エストラジオール−１７−アセテート、エストラジオール−３，１７−バレレート、エストラジオール−１７−バレレート、エチニルエストラジオール、エストロン、プロゲステロン（子宮内膜症の予防、子宮内膜癌の予防、習慣流産の制御、発情の抑制または同期、髪の成長の促進）、プロゲステロン（ｐｒｅｇ‐４−エン−３，２０−ジオン）、ノルエチンドロン、ノルゲストリエノン、ノルゲスタジエノン、ノルゲストレル、ノルゲスチメート、プロゲストーゲン酸、ジヒドロプロゲステロール、ノマゲステロールを含み得るが、それらに限定されない。同様に、エストラジオールを、例えば、ピバレート、プロピオネート、シピオン、ベンゾエートなど既知の形態又は新たに開発された任意の形態で、更に使用することができる。
【００５８】
また、本発明の組成物は、インスリン、インスリン様成長因子、ワクチン、グルコガン様ペプチド（ＧＬＰ）、インスリン様成長因子（ＩＧＦ）、ヘパリン、ヒルゲン、ヒルロス（ｈｉｒｕｌｏｓ）、フリジン（ｈｕｒｉｄｉｎｅ）、流行性耳下腺炎、麻疹及び風疹ワクチン、腸チフスワクチン、Ａ型肝炎ワクチン、Ｂ型肝炎ワクチン、単純ヘルペスウイルス、細菌トキソイド、コレラ毒素Ｂサブユニット、インフルエンザワクチンウイルス、百日咳菌（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）、ワクシニアウイルス、アデノウイルス、カナリア痘、ポリオワクチンウイルス、熱帯熱マラリア原虫、無菌化ウシ型結核菌（ＢＣＧ）、肺炎桿菌、ＨＩＶエンベロープ糖タンパク質、ウシソマトトロピン、エストロゲン、アンドロゲン、インスリン成長因子、インターロイキン−Ｉ、インターロイキンＩＩ及びサイトカイン、ＮＳＡＩＤ、麻薬及び様々な他のペプチド、遺伝物質及び小分子などの小分子薬物も含み得る。
【００５９】
他の活性成分は、様々な種類の抗酸化物質を含むことができる。組成物中に含むことができるフリーラジカル捕捉剤のいくつかの例は、ビタミンＡ、Ｃ及びＥ、ミネラルの亜鉛及びセレン、リコピン、アミノ酸Ｎ−アセチル−システイン、並びに、ブドウの皮、ビルベリー及び緑茶の植物エキスを含むがそれらに限定されない。
【００６０】
特定の実施形態において、本発明の組成物は、治癒を促進する薬剤を含むことができる。例えば、ニトログリセリン及びグリセリンモノニトラートなどの血管拡張剤を、リン脂質ミセル中に封入し、次に、ローション又はクリーム製剤中でコラーゲン及び／又はエラスチンと混合し、皮膚へ塗布することができる。説明に限定されるものではないが、組成物中の血管拡張薬の処方は、例えば、皮膚パッチを介した投与と比較して、浸透速度を向上させると考えられている。過酸化水素及び／又はペルフルオロカーボンの封入により更に、酸素化及び治癒を高めることができる。
【００６１】
組成物は、単一の活性成分又は、同一の組成物中の複数の活性成分を含むことができる。活性成分の様々な組み合わせが、この組成物中に含まれてもよいことが意図されている。
【００６２】
皮膚による活性成分の吸収を促進する皮膚浸透促進剤もまた、この組成物中に含まれてもよい。特に、１つ以上の皮膚浸透促進剤は、患者の皮膚を介するボツリヌス毒素の浸透を促進するために使用してもよい。皮膚浸透促進剤の例は、短鎖アルコール、長鎖アルコール又はポリアルコールなどのアルコール、尿素などのアミン及びアミド、アミノ酸又はそれらのエステル、アミド、ＡＺＯＮＥ（登録商標）、ＡＺＯＮＥ（登録商標）の誘導体、ピロリドン又はピロリドンの誘導体、テルペン及びテルペンの誘導体、脂肪酸及びそれらのエステル、大環状化合物、界面活性剤又は、デシルメチルスルホキシドなどのスルホキシドを含むがそれらに限定されない。リポソーム、トランスファーソーム、レシチン小胞、エトソーム、水、並びに、アニオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤及び非イオン性界面活性剤などの界面活性剤、ポリオール、並びに精油もまた、皮膚浸透促進剤として機能することができる。
【００６３】
本発明の実施形態は、リン脂質ミセルを含むことができる。特定の実施形態において、リン脂質ミセルは、例えば、スフィンゴシン及びセレブロシドなどを含み得る。一部の実施形態において、主な安定剤は、例えば、エラスチン及びコラーゲンなどを含み得る。一部の実施形態において、１つ以上の皮膚浸透促進剤は、例えば、ｄ−リモネン、アラントイン、フルボ酸、ミルラ、ハイドロキノングライクイン、キラヤサポナリア（ＱＴＳ）、ａｃａｎｔｈｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｓｑｕａｒｒｏｓｕｍ（ＡＴＳ）の、単独又はそれらの組み合わせなどを含む群から選択することができる。
【００６４】
実施形態において、ボツリヌス毒素組成物は、
約１〜４０ｗ／ｗ％のコラーゲンと、
約１〜４０ｗ／ｗ％のエラスチンと、
約０．１〜１５ｗ／ｗ％のスフィンゴシンリン脂質と、
約０．１〜１５ｗ／ｗ％のセレブロシドリン脂質と、を含む。
【００６５】
また、本組成物は、組成物が皮膚を浸透することにより下の筋肉を経皮的に除神経する形態で、局所投与のために使用することができる。
【００６６】
本組成物は、真皮層を介した活性成分の浸透を高めるために、ｄ−リモネンを含み得る。リモネンは、０．３０％で有効な皮膚浸透促進剤であり、Ａ型ボツリヌス毒素の皮膚透過性を約４倍高めることが見出されている。
【００６７】
また、キラヤサポナリア（ＱＴＳ）及びＡｃａｎｔｈｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｓｑｕａｒｒｕｓｏｍ（ＡＴＳ）総サポニンは、本組成物中に含まれてもよい２つの天然の皮膚浸透促進剤である。これらは皮膚浸透促進剤として適度な活性を示す。
【００６８】
また、アラントインが本組成物中に含まれてもよい。アラントインは、皮膚保護剤及び軽度の中性皮膚浸透促進剤として機能する。
【００６９】
また、フルボ酸も、皮膚浸透促進剤として本組成物中に含まれてもよい。フルボ酸は、皮膚経路を通じて、薬物の体内の吸収を促進する低分子量の酸化防止剤である
【００７０】
また、ミルラも、皮膚浸透促進剤として本組成物中に含まれてもよい。ミルラは、アラビア潅木及びソマリア潅木から抽出されたゴム樹脂である。
【００７１】
エルドパク又はハイドロキノングライクインもまた、皮膚浸透促進剤として含まれ得る。
【００７２】
エラスチン並びに、スフィンゴシン及びセレブロシドの混合物と組み合わせた組成物中のコラーゲンの使用は、変性も断片化も解毒もすることなく、複合体の完全性を維持する。従って、ボツリヌス毒素を安定化させることができ、安定化させた毒素を、ボツリヌス毒素の筋肉内注射により得られた結果と同様の結果を達成するために、正常に経皮的に送達することができる。しわを減らすための、主に目の周り及び額の領域を対象とするボツリヌス毒素の注射とは対照的に、製剤を、顔、首、腋窩及び手の全体へ塗布することができる。
【００７３】
本組成物は、ミクロスフィアを含むことができる。本組成物は、水及び通常化粧品において用いられる他の添加剤を含む化粧品組成物である。例えば、それは、増粘剤、防腐剤、乳化剤、香料、染料又は着色剤、植物油又は鉱物油、防腐剤、酸性化剤又はアルカリ化剤、ビタミン、抗ＵＶ剤、界面活性剤、溶媒、ｐＨ安定化剤、及び皮膚上で有効であることが知られている他の活性成分を含み得る。また、本組成物は、例えば、スキンファンデーションなどのメイクアップ製剤中に含まれてもよい。
【００７４】
局所投与に適しているクリーム、ローション、スプレー、マスク、ゲルなどの他の形式に本組成物を製剤化するために、追加の成分が含まれてもよい。クリーム又は溶液として製剤化する場合、本組成物が投与領域から滴下しないようにするために、本組成物は、十分に濃縮した量で活性成分を含む必要がある。
【００７５】
本組成物はまた、ボツリヌス毒素などの活性成分が、皮膚を介してパッチから渡すことができるように、接着的に皮膚へ固定されているパッチ上に提供されてもよい。
【００７６】
局所適用のために安定化されたボツリヌス毒素組成物を調製するための好ましい方法を以下に示す。簡潔には、等量のコラーゲン及びエラスチンを生理食塩水中に溶解する。別のフラスコで、等量のスフィンゴシン及びセレブロシドをアルコール中に溶解する。次にアルコールを除去する。Ａ型ボツリヌス毒素を、生理食塩水中に溶解し、次にフラスコへ加え、リン脂質ミセルコーティングを用いてボツリヌス毒素タンパク質を被覆するために、フラスコを撹拌する。この溶液を、次に、コラーゲン及びエラスチンの溶液へ加える。この方法を、他の種類のボツリヌス毒素を含む組成物を調製するために使用することができる。
【００７７】
製造プロセスの様々な段階で皮膚浸透促進剤を添加することができる。例えば、ミセル組成物を、ミセル組成物をコラーゲン及びエラスチン混合物へ加えるのと同時に、それらを安定化した組成物へ加えることができる。好ましくは、医薬品又は化粧品へ安定化された組成物の製剤化の間に、この皮膚浸透促進剤を導入する。
【００７８】
任意のこのような組み合わせに含まれる特徴が、文脈、本明細書及び当業者の知識から相互に矛盾せず、明らかであることを条件として、本発明に記載の任意の特性又は特性の組み合わせは、本明細書の範囲内に含まれる。
【００７９】
当然ながら、通常の技術を有する医療者は、最適の臨床結果を達成するために、適切な投与量及び投与頻度を決定することができる。つまり、医学の当業者は、効果的に脂肪沈着物を処置するために、適切な時間で、適当な量の、例えばＡ型ボツリヌス毒素などのボツリヌス毒素を投与することができるであろう。投与される神経毒の投与量は、脂肪沈着の重症度を含む様々な要因に依存する。本発明はまた、哺乳動物における脂肪沈着物を処置するための組成物も提供する。
【００８０】
Ａ型ボツリヌス毒素は、最大１２ヶ月効力を有することができ（Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊ．Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ６（Ｓｕｐｐ４）：Ｓ１１１〜Ｓ１１５０：１９９９）、いくつかの状況において、最大２７ヶ月効力を有することができることが知られている。Ｔｈｅ  Ｌａｒｙｎｇｏｓｃｏｐｅ  １０９：１３４４〜１３４６：１９９９。しかしながら、Ａ型ボツリヌス毒素の筋肉注射の通常の持続時間は、典型的には、約３〜４ヶ月である。
【実施例】
【００８１】
実施例１
ボツリヌス毒素組成物の調製
ボツリヌス毒素（ＢＯＴＯＸ（登録商標））バイアルを、滅菌生理食塩水（０．９％）を用いて再構成する。ボツリヌス毒素を溶解するために、バイアルを静かに振盪する。再構成したバイアルを冷凍保存し、再構成の１時間以内に利用した。
【００８２】
５０ｍＬの容量の丸底フラスコ中で、１０ｍｇの可溶性コラーゲン及び１０ｍｇのエラスチンを組み合わせる。この混合物を、連続的に攪拌して、１０ｍＬの滅菌生理食塩水（０．９％）中に可溶化する。別の５０ｍＬの丸底フラスコ中で、５ｍｇのスフィンゴシン及び５ｍｇのセレブロシドを組み合わせる。この混合物を、１ｍＬの純エタノール中に溶解する。フラスコ壁上のスフィンゴシン及びセレブロシドの均一なコーティングを得るために、回転真空蒸発により、アルコールを完全に除去する。このフラスコへ、６ｍＬの（０．９％）生理食塩水中の８００単位のボツリヌス毒素溶液を加える。フラスコを撹拌し、次に、スフィンゴシン及びセレブロシドミセルコーティングを用いてボツリヌス毒素を均一にコートするために、室温で５分間、継続的に攪拌する。このコーティングされ、保存されたミセルボツリヌス毒素溶液を、次に、コラーゲン及び架橋された低分子量のエラスチンの混合物を含有するフラスコに加える。この溶液を約５分間攪拌し、次に、褐色ガラスバイアル中において室温で維持した。
【００８３】
実施例２
ボツリヌス毒素クリーム製剤
実施例１の安定化ボツリヌス毒素組成物を、以下に概説するように局所投与のためのクリームに製剤化する。クリームの総量（４００ｍＬ）。
【００８４】
相Ａ：脱イオン水７４．７％  テトラナトリウム  ＥＤＴＡ０．５〜０．７％  メチルパラベン０．２％  プロピレングリコール３．０％〜４．０％  グリセリン３．０％〜４．０％
【００８５】
相Ｂ：セチルアルコール（Ａｄｏ１  ５２  ＮＥ）２．０％  セテアリルアルコール２．０％  ステアリン酸グリセリル２．０％  ＰＥＧ−１００ステアリン酸塩１〜２％  スタリン酸（Ｅｍｅｒｓｏｌ  １３２）４．５％  パルミチン酸ソルビタン０．５〜０．７％  ポリソルベート−８５  １．０％  ポリソルベート６０  ０．５〜１％  ラノリンアルコール（Ｒｉｔａｃｈｏｌ）１．０％  ホホバオイル０．５〜１％  ラノリン１〜２％  酢酸トロフェロール０．５〜１％  ジメチコン２００  ０．７〜１．０％  ＢＨＡ０．１％  プロピルパラベン０．１％  ジアゾリジニル尿素０．２％
【００８６】
相Ｃ：香料（ライラック、ジャスミン）必要に応じて  アロエベラ（粉末）１．５％〜２．０％  ＣｏＱ−１０  ０．５％  レチノールＡ  ０．０３〜０．０５％  ヒアルロン酸（純）１．０〜１．５％  タルカムパウダー（Ｔｉ０２）１．０〜１．５％
【００８７】
相Ｄ：ｄ−リモネン０．７％  アラントイン０．５％  フルボ酸０．５％  キラヤサポナリア（ＱＴＳ）０．３％  Ａｃａｎｔｈｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｓｑｕａｉｍｓｏｍ（ＡＴＳ）０．３％  ミルラ抽出物０．２％  ハイドロキノングライクイン４．０％
【００８８】
相Ｅ：コラーゲンマトリクス８００単位中の安定化したボツリヌス毒素。
【００８９】
手順：相Ａ及び相Ｂを別々に攪拌しながら７５℃まで加熱する。相Ａを相Ｂに加え、７５℃で３０分混合する。２０〜２２℃に冷却し、次に、相Ｃ、相Ｄ及び相Ｅを加え、均質な一相になるまで連続して攪拌する。
【００９０】
実施例３
ボツリヌス毒素ミセル溶液の調製
ボツリヌス毒素Ａ（ＢＯＴＯＸ（登録商標）、Ａｌｌｅｒｇａｎ）を、凍結乾燥物として得、滅菌生理食塩水（０．９％）中で再構成させる。バイアルを、ボツリヌス毒素（ＢＯＴＯＸ（登録商標））を溶解するために振盪する。再構成したバイアルを冷蔵保存し、再構成の１時間以内に以下に説明するように利用した。
【００９１】
５０ｍＬ容量の丸底フラスコ中で、１０ｍｇの可溶性コラーゲン、１０ｍｇのエラスチンを秤量する。この混合物を、１０ｍＬの滅菌生理食塩水（０．９％）に可溶化する。この混合物を連続して撹拌する。
【００９２】
別の５０ｍＬの丸底フラスコ中で、５ｍｇのホヅファチジルコリン及び５ｍｇのコレステロールを秤量する。この混合物を、約１ｍＬの７０％エタノール中に溶解する。この溶液に、１０ｍｇのドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）及び１０ｍｇのジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を加え、均一で均質な溶液を作るために可溶化する。このフラスコに、５ｍＬの（０．９％）生理食塩水中の１０００単位のボツリヌス毒素（ＢＯＴＯＸ（登録商標））を加える。フラスコを撹拌し、次に、室温で、５分間連続的に攪拌する。コラーゲン及びエラスチンの溶液を、この溶液に加える。溶液を約５分間ゆっくりと攪拌し、次に、褐色ガラスバイアル中において室温で維持する。
【００９３】
局所クリームの調製
局所用基剤組成物を、以下のように調製する。
【００９４】
局所用基剤成分の組成：
グリセリン（保湿剤）４．００ｇ
アルミニウムジルコニウム複合体又はアルミニウム１０．０ｇ
クロロハイドレート（ゲル化剤）
ヘキサメチレンテトラミン（皮膚浸透促進剤８．００及びコーティング剤及びゲル形成化合物）
ラウリル硫酸ナトリウム０．１０ｇ
ＤＭＳＯ０．１０  変性アルコール５．００ｇ
ＤＭＤＭヒダントイン（防腐剤）０．２０ｇ
ベビーパウダー（香料）０．１０ｇ
カーボポール９４０ポリマー又はヒドロキシプロピルセルロース５．００ｇ
【００９５】
この基剤組成物に、得られたクリームの１ｍＬ当たり、２単位のＡ型ボツリヌス毒素の濃度を得るために、部分的に上記のように調製した安定化したボツリヌス毒素組成物を加える。均質な組成物を得るために、得られたクリームを約３０〜４５分間ゆっくりと攪拌する。このように調製したクリームを、次に、将来の使用のために、室温又は室温未満で保存する。
【００９６】
実施例４
セルライトを処置するための注射投与
２００〜３００単位を、肥満の個体の皮下脂肪に注射した。
【００９７】
２０年以上にわたって肥満であることが報告された４２歳の女性患者が、重度の無気力及び抑うつを訴える。当該患者は、以前はできていた活動ができなくなり、体重を減らすために、多くの薬及び処置法を試みてきた。患者は、大臀筋の下のセルライトについて医師に訴えており、医師が臀部のしわを測定する。腰周りは、６０インチと測定した。患者は、１００単位当たり４ｍＬの希釈（拡散を増加）を用いたＡ型ボツリヌス毒素で処置される。患者に以下の注射が行なわれる。
【００９８】
臀部のしわを、臀部の真下から、４×６平方の格子に分割する。
【００９９】
片脚につき、２４の注射部位に注射部位当たり約５単位、合計１２０単位投与し、両足で合計２４０単位のＡ型ボツリヌス神経毒素を投与する。Ａ型ボツリヌス神経毒素は、皮下脂肪組織を標的としている。当該患者は、４週間後に再診し、セルライトの外観の減少を報告している。当該患者は結果に興味をそそられ、３ヶ月の期間で再処置を求めた。
【０１００】
全体的に、肥満の成人の皮下脂肪組織へＡ型ボツリヌス神経毒素を標的とすることにより、この新規の注射手法は、注射された脂肪組織及び隣接する脂肪組織の脂肪を分解させる効果を与える。再処置により、この肥満は薄くなり続け、皮下脂肪及び脂肪細胞／脂肪細胞中の脂肪球が粉砕される。
【０１０１】
実施例５
脂肪腫の処置のための局所投与
５０〜１００Ｕを、局所的に脂肪腫の脂肪組織へ投与した。
【０１０２】
５８歳の女性患者は、鎖骨及び首の間の空間に、かなり大きな脂肪腫が再発したため、医師を受診する。外科的切除は患者にとって不快であり、永続的ではなかったので、当該患者は、別の選択肢に興味がある。医師は、Ａ型ボツリヌス神経毒クリームを用いて脂肪腫を処置する。これは、初回の処置であるため、５０Ｕを、脂肪腫に直接、１回の投与で使用する。患者を４週間後に検査し、脂肪腫の大きさの有意な減少が認められる。医師は、３ヶ月後に、更に５０Ｕを用いてこの患者を再処置することを決定する。
【国際調査報告】
2014520892.tif 000002
2014520892.tif 000003
2014520892.tif 000004