(57)【要約】Ｓ．ａｕｒｅｕｓ抗原をＴＬＲアゴニスト（好ましくは、ＴＬＲ７アゴニスト）および不溶性金属塩（好ましくは、アルミニウム塩）の混合物でアジュバント添加することによって、Ｓ．ａｕｒｅｕｓワクチンの効能を増強させることができる。ＴＬＲアゴニストは典型的には、金属塩に吸着されている。Ｓ．ａｕｒｅｕｓ抗原も、金属塩に吸着されていてよい。本発明では、本発明の免疫原性組成物を調製するためのプロセスおよびその免疫原性組成物を投与することによって被験体において免疫応答を上昇させる方法が提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）ＴＬＲアゴニスト（ｉｉ）不溶性金属塩および（ｉｉｉ）２種またはそれより多いＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原を含む、免疫原性組成物。
【請求項２】
（ｉ）ＴＬＲ７アゴニスト（ｉｉ）不溶性金属塩および（ｉｉｉ）少なくとも１種のＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原を含む、免疫原性組成物。
【請求項３】
（ｉ）ＴＬＲアゴニスト（ｉｉ）アルミニウム塩である不溶性金属塩および（ｉｉｉ）少なくとも１種のＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原を含む、免疫原性組成物。
【請求項４】
（ｉ）ＴＬＲアゴニスト（ｉｉ）不溶性金属塩ならびに（ｉｉｉ）Ｓ．ａｕｒｅｕｓ  ＥｓｘＡ抗原およびＳ．ａｕｒｅｕｓ  ＥｓｘＢ抗原を含む融合タンパク質を含む、免疫原性組成物。
【請求項５】
（ｉ）ＴＬＲアゴニスト（ｉｉ）不溶性金属塩および（ｉｉｉ）非毒性Ｓ．ａｕｒｅｕｓ溶血素変異体を含む、免疫原性組成物。
【請求項６】
（ｉ）ＴＬＲアゴニスト（ｉｉ）不溶性金属塩（ｉｉｉ）緩衝液および（ｉｖ）少なくとも１種のＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原を含む、免疫原性組成物。
【請求項７】
（ｉ）ＴＬＲアゴニスト（ｉｉ）不溶性金属塩および（ｉｉｉ）少なくとも１種のＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原を含み、６から８のｐＨを有する、免疫原性組成物。
【請求項８】
前記ＴＬＲアゴニストがヒトＴＬＲ７のアゴニストである、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項９】
前記ＴＬＲアゴニストが、不溶性金属塩に吸着することを可能にする少なくとも１個の吸着部分を含む、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項１０】
前記吸着部分がホスフェートまたはホスホネートである、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
前記ＴＬＲアゴニストが、明細書で定義されているとおりの式（Ｃ）、（Ｄ）、（Ｅ）、（Ｆ）、（Ｇ）、（Ｈ）、（Ｉ）、（ＩＩ）、（Ｊ）または（Ｋ）を有するか、または好ましくは式（Ｋ’）を有する、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項１２】
前記ＴＬＲアゴニストが、国際公開第２０１２／０３１１４０号で定義されているとおりの化合物１から１０２のうちの１種または薬学的に許容されるその塩である、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項１３】
前記ＴＬＲアゴニストが化合物Ｋ２である、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項１４】
前記不溶性金属塩がアルミニウム塩である、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項１５】
前記アルミニウム塩が水酸化アルミニウムである、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
１０〜５００μｇ／ｍｌのＡｌ＋＋＋濃度を有する、請求項１４または請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
前記ＴＬＲアゴニストのうちの＞８０％が、前記不溶性金属塩に吸着されている、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項１８】
ヒスチジン緩衝液を含む、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項１９】
６．１から７．９のｐＨを有する、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項２０】
（ｉ）例えば配列番号３１を含むＥｓｘＡ抗原およびＥｓｘＢ抗原の両方を含む単一ポリペプチド；（ｉｉ）例えば配列番号６を含むＳｔａ００６抗原；（ｉｉｉ）例えば配列番号３３を含むＳｔａ０１１抗原；および（ｉｖ）例えば配列番号１３を含む溶血素のＨ３５Ｌ変異体形態の４種全てを含む、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項２１】
・水酸化アルミニウムアジュバント；
・式（Ｋ）のＴＬＲ７アゴニスト；
・配列番号６か、または５つまでの単一アミノ変化だけ配列番号６とは異なるが、配列番号６からなるポリペプチドに結合する抗体を誘発し得ることを条件とする修飾されたアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド；
・配列番号１３か、または５つまでの単一アミノ変化だけ配列番号１３とは異なるが、配列番号１３からなるポリペプチドに結合する抗体を誘発し得ることを条件とする修飾されたアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド；
・配列番号３１か、または５つまでの単一アミノ変化だけ配列番号３１とは異なるが、配列番号３１からなるポリペプチドに結合する抗体を誘発し得ることを条件とする修飾されたアミノ酸配列を含む第３のポリペプチド；
・配列番号３３か、または５つまでの単一アミノ変化だけ配列番号３３とは異なるが、配列番号３３からなるポリペプチドに結合する抗体を誘発し得ることを条件とする修飾されたアミノ酸配列を含む第４のポリペプチドを含み、
前記ＴＬＲ７アゴニストおよび／または前記ポリペプチドのうちの少なくとも１種が前記水酸化アルミニウムアジュバントに吸着されている、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項２２】
アミノ酸配列の配列番号７を有する第１のポリペプチド、アミノ酸配列の配列番号２７を有する第２のポリペプチド、アミノ酸配列の配列番号３２を有する第３のポリペプチドおよびアミノ酸配列の配列番号８を有する第４のポリペプチドを含む、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２３】
アミノ酸配列の配列番号４４を有する第１のポリペプチド、アミノ酸配列の配列番号２７を有する第２のポリペプチド、アミノ酸配列の配列番号４５を有する第３のポリペプチドおよびアミノ酸配列の配列番号４６を有する第４のポリペプチドを含む、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２４】
式（Ｋ）の前記ＴＬＲ７アゴニストが、以下：  
【化２１】
2014525429.tif 000028
の化合物または薬学的に許容されるその塩である、請求項２１または請求項２２または請求項２３に記載の組成物。
【請求項２５】
３ｄ−ＭＰＬおよびアルミニウム塩を含む、請求項１から１９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２６】
ＣｌｆＡ抗原、ＩｓｄＡ抗原、ＩｓｄＢ抗原、ＩｓｄＣ抗原および／またはＩｓｄＨ抗原を含む、請求項２５に記載の組成物。
【請求項２７】
被験体において免疫応答を上昇させる方法であって、前記被験体に、前記請求項のいずれかに記載の組成物を投与するステップを含む、方法。
【請求項２８】
前記請求項のいずれかに記載の免疫原性組成物を調製するためのプロセスであって、ＴＬＲアゴニスト、不溶性金属塩およびＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原（複数可）を混合するステップを含む、プロセス。
【請求項２９】
免疫原性組成物を調製するためのプロセスであって、（ｉ）Ｓ．ａｕｒｅｕｓ抗原と、ＴＬＲアゴニストおよび不溶性金属塩を含む混合物とを組み合わせるステップ；（ｉｉ）不溶性金属塩と、ＴＬＲアゴニストおよびＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原を含む混合物とを組み合わせるステップ；または（ｉｉｉ）ＴＬＲアゴニストと、不溶性金属塩およびＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原を含む混合物とを組み合わせるステップのうちの１ステップを含む、プロセス。
【請求項３０】
請求項１から２６のいずれか一項に記載の組成物を調製するための、請求項２８または請求項２９に記載のプロセス。
【請求項３１】
（ａ）不溶性金属塩に吸着されている第１のＴＬＲアゴニストを含むアジュバント複合体；（ｂ）不溶性金属塩に吸着されている第２のＴＬＲアゴニストを含むアジュバント複合体；および（ｃ）少なくとも１種のＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原を含む、組成物。
【請求項３２】
免疫原性組成物を調製するためのプロセスであって、（ｉ）ＴＬＲアゴニストおよび可溶性アルミニウム塩の水性混合物を調製し、次いで、非アルミニウム塩を前記水性混合物に加えて、前記ＴＬＲアゴニストが吸着している沈殿アルミニウム塩を形成するステップと；（ｉｉ）Ｓ．ａｕｒｅｕｓ抗原を、ステップ（ｉ）において形成された前記沈澱塩およびその吸着しているアゴニストと混合するステップとを含む、プロセス。
【請求項３３】
免疫原性組成物を調製するためのプロセスであって、（ｉ）ＴＬＲアゴニストおよび可溶性アルミニウム塩の水性混合物を、（ｉｉ）Ｓ．ａｕｒｅｕｓ免疫原の緩衝水性混合物と混合するステップを含み、ここで、前記混合ステップによって、前記ＴＬＲアゴニストおよび前記免疫原が吸着しているアルミニウム塩を沈殿させる、プロセス。
【請求項３４】
滅菌免疫原性組成物を調製するためのプロセスであって、（ｉ）Ｓ．ａｕｒｅｕｓ免疫原を、（ｉｉ）ＴＬＲアゴニストおよび不溶性金属塩の滅菌複合体と組み合わせるステップを含む、プロセス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この出願は、米国仮出願第６１／５３０，１６２号（２０１１年９月１日出願）および同第６１／６０７，９９９号（２０１２年３月７日出願）の利益を主張する。これら両方の全内容は、全ての目的のために参考として本明細書に援用される。
【０００２】
技術分野
本発明は、その免疫原性を増大させるために、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ由来の抗原をアジュバント添加する分野にある。
【背景技術】
【０００３】
参考文献１（特許文献１）は、Ｓ．ａｕｒｅｕｓに対する有効なワクチンを調製するための様々な免疫原および組合せを開示している。特許文献１中の表２は、これらの免疫原および組合せが、水酸化アルミニウムで、またはＭＦ５９水中油型乳剤でアジュバント添加された（ａｄｊｕｖａｎｔｅｄ）ことを示している。実験セクションにおいて、水酸化アルミニウムを使用する吸着研究の詳細が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】国際公開第２０１０／１１９３４３号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の目的は、Ｓ．ａｕｒｅｕｓに対して防御するためのさらなるアジュバント添加された免疫原性組成物を提供すること、詳細には、水酸化アルミニウムでアジュバント添加されたものよりも優れた組成物を提供することである。アジュバント効果の改善は、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ感染のより高いリスクを有する個体、例えば外科手術が準備されている個体、免疫無防備状態の個体または高齢者において迅速かつ強力な免疫応答を達成するために特に有用である。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ抗原をＴＬＲアゴニスト（好ましくは、下記で同定されている化合物「Ｋ２」などのＴＬＲ７アゴニスト）および不溶性金属塩（好ましくは、水酸化アルミニウムなどのアルミニウム塩）の混合物でアジュバント添加することによって、Ｓ．ａｕｒｅｕｓワクチンの効能を増大させることができることを発見した。ＴＬＲアゴニストは典型的には、参考文献２に開示されているとおり、金属塩に吸着されている。Ｓ．ａｕｒｅｕｓ抗原も、金属塩に吸着されていてよい。
【０００７】
第１の態様では、本発明は、（ｉ）ＴＬＲアゴニスト（ｉｉ）不溶性金属塩および（ｉｉｉ）２種またはそれより多いＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原を含む免疫原性組成物を提供する。
【０００８】
第２の態様では、本発明は、（ｉ）ＴＬＲ７アゴニスト（ｉｉ）不溶性金属塩および（ｉｉｉ）少なくとも１種のＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原を含む免疫原性組成物を提供する。
【０００９】
第３の態様では、本発明は、（ｉ）ＴＬＲアゴニスト（ｉｉ）不溶性アルミニウム塩および（ｉｉｉ）少なくとも１種のＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原を含む免疫原性組成物を提供する。
【００１０】
第４の態様では、本発明は、（ｉ）ＴＬＲアゴニスト（ｉｉ）不溶性金属塩ならびに（ｉｉｉ）ＥｓｘＡ抗原およびＥｓｘＢ抗原を含む融合タンパク質を含む免疫原性組成物を提供する。
【００１１】
第５の態様では、本発明は、（ｉ）ＴＬＲアゴニスト（ｉｉ）不溶性金属塩および（ｉｉｉ）変異体Ｓ．ａｕｒｅｕｓ溶血素を含む免疫原性組成物を提供する。
【００１２】
第６の態様では、本発明は、（ｉ）ＴＬＲアゴニスト（ｉｉ）不溶性金属塩（ｉｉｉ）緩衝液および（ｉｖ）少なくとも１種のＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原を含む免疫原性組成物を提供する。
【００１３】
第７の態様では、本発明は、６から８のｐＨを有する、（ｉ）ＴＬＲアゴニスト（ｉｉ）不溶性金属塩および（ｉｉｉ）少なくとも１種のＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原を含む免疫原性組成物を提供する。
【００１４】
第８の態様では、本発明は、免疫原性組成物を調製するためのプロセスを提供し、そのプロセスは、ＴＬＲアゴニスト、不溶性金属塩およびＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原（複数可）を混合して、上記で定義されたとおりの免疫原性組成物を得ることを含む。
【００１５】
第９の態様では、本発明は、免疫原性組成物を調製するためのプロセスを提供し、そのプロセスは、（ｉ）Ｓ．ａｕｒｅｕｓ抗原と、ＴＬＲアゴニストおよび不溶性金属塩を含む混合物とを組み合わせるステップ；（ｉｉ）不溶性金属塩と、ＴＬＲアゴニストおよびＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原を含む混合物とを組み合わせるステップ；または（ｉｉｉ）ＴＬＲアゴニストと、不溶性金属塩およびＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原を含む混合物とを組み合わせるステップのうちの１ステップを含む。
【００１６】
第１０の態様では、本発明は、（ａ）不溶性金属塩に吸着されている第１のＴＬＲアゴニストを含むアジュバント複合体；（ｂ）不溶性金属塩に吸着されている第２のＴＬＲアゴニストを含むアジュバント複合体；および（ｃ）少なくとも１種のＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原を含む組成物を提供する。抗原（複数可）は、金属塩（複数可）に吸着されていてよい。
【００１７】
第１１の態様では、本発明は、免疫原性組成物を調製するためのプロセスを提供し、そのプロセスは、（ｉ）ＴＬＲアゴニストおよび可溶性アルミニウム塩の水性混合物を調製し、次いで、非アルミニウム塩を、その水性混合物に加えて、ＴＬＲアゴニストが吸着している沈殿アルミニウム塩を形成させるステップと；（ｉｉ）Ｓ．ａｕｒｅｕｓ抗原を、その沈澱塩およびその吸着しているアゴニストと混合するステップとを含む。ＴＬＲアゴニストは好ましくは、本明細書において様々に記載されているＴＬＲアゴニストである。
【００１８】
第１２の態様では、本発明は、免疫原性組成物を調製するためのプロセスを提供し、そのプロセスは、（ｉ）ＴＬＲアゴニストおよび可溶性アルミニウム塩の水性混合物を（ｉｉ）Ｓ．ａｕｒｅｕｓ免疫原の緩衝水性混合物と混合するステップを含み、ここで、その混合ステップは、ＴＬＲアゴニストおよび免疫原が吸着しているアルミニウム塩の沈殿をもたらす。本発明はまた、このプロセスによって得られたか、または得ることができる免疫原性組成物を提供する。
【００１９】
第１３の態様では、本発明は、滅菌免疫原性組成物を調製するためのプロセスを提供し、そのプロセスは、（ｉ）Ｓ．ａｕｒｅｕｓ免疫原を（ｉｉ）ＴＬＲアゴニストおよび不溶性金属塩の滅菌複合体と組み合わせるステップを含む。滅菌複合体は、（ａ）ＴＬＲアゴニストが不溶性金属塩に吸着して複合体を形成するように、ＴＬＲアゴニストおよび不溶性金属塩を混合するステップと；（ｂ）その複合体を滅菌するステップとを含むプロセスによって調製することができる。滅菌は、オートクレービング（または類似の手順［３］）によって好都合に達成することができる。代わりとして、滅菌複合体を、（ａ）ＴＬＲアゴニストの溶液または懸濁液を滅菌し、（ｂ）その滅菌された溶液または懸濁液を滅菌不溶性金属塩と組み合わせることによってか；または（ａ）不溶性金属塩を滅菌し、（ｂ）その滅菌された不溶性金属塩を、ＴＬＲアゴニストの滅菌溶液または懸濁液と組み合わせることによってか；または（ａ）ＴＬＲアゴニストの滅菌溶液または懸濁液を（ｂ）滅菌不溶性金属塩と組み合わせることによって調製することができる。ＴＬＲアゴニスト溶液／懸濁液の滅菌は、滅菌濾過によって好都合に達成することができ、この物質を濃縮形態で調製することができる。不溶性金属塩の滅菌は、オートクレービングによって好都合に達成することができる。滅菌不溶性金属塩は典型的には、水性懸濁液である。
【００２０】
一実施形態では、本発明は、以下：
・水酸化アルミニウムアジュバント；
・化合物Ｋ２などの式（Ｋ）のＴＬＲ７アゴニスト；
・配列番号６か、または５つまでの単一アミノ変化だけ配列番号６とは異なるが、配列番号６からなるポリペプチドに結合する抗体を誘発し得ることを条件とする修飾されたアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド；
・配列番号１３か、または５つまでの単一アミノ変化だけ配列番号１３とは異なるが、配列番号１３からなるポリペプチドに結合する抗体を誘発し得ることを条件とする修飾されたアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド；
・配列番号３１か、または５つまでの単一アミノ変化だけ配列番号３１とは異なるが、配列番号３１からなるポリペプチドに結合する抗体を誘発し得ることを条件とする修飾されたアミノ酸配列を含む第３のポリペプチド；
・配列番号３３か、または５つまでの単一アミノ変化だけ配列番号３３とは異なるが、配列番号３３からなるポリペプチドに結合する抗体を誘発し得ることを条件とする修飾されたアミノ酸配列を含む第４のポリペプチド
を含む免疫原性組成物を提供し、ここで、
ＴＬＲ７アゴニストおよび／または前記ポリペプチドのうちの少なくとも１種は、水酸化アルミニウムアジュバントに吸着している。
【００２１】
例えば、以下でより詳細に説明されているとおり：第１のポリペプチドは配列番号４１を含んでよく；第２のポリペプチドは配列番号１３を含んでよく；第３のポリペプチドは配列番号４７を含んでよく；第４のポリペプチドは配列番号４３を含んでよい。したがって、組成物は、配列番号４４、２７、４５および４６を有する４種のポリペプチドの混合物を使用することができる。
【００２２】
ＴＬＲアゴニスト
本発明の組成物は、ＴＬＲアゴニスト、即ち、Ｔｏｌｌ様受容体をアゴナイズし得る化合物を含む。最も好ましくは、ＴＬＲアゴニストは、ヒトＴＬＲのアゴニストである。ＴＬＲアゴニストは、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９またはＴＬＲ１１のいずれかを活性化することができる；好ましくはこれは、ヒトＴＬＲ７を活性化することができる。
【００２３】
任意の特定のＴｏｌｌ様受容体に対する化合物のアゴニスト活性は、標準的なアッセイによって決定することができる。ＩｍｇｅｎｅｘおよびＩｎｖｉｖｏｇｅｎなどの会社が、ＴＬＲ活性化経路を測定するための、ヒトＴＬＲ遺伝子およびＮＦκＢならびに適切なレポーター遺伝子で安定的に共トランスフェクトされている（ｃｏ−ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ）細胞系を供給している。それらは、感度、幅広い作動範囲動力学に関して設計されており、ハイスループットスクリーニングのために使用することができる。１種または２種の特異的なＴＬＲの構成発現が、そのような細胞系において典型的である。参考文献４も参照されたい。多くのＴＬＲアゴニストが、当技術分野で公知であり、例えば参考文献５には、ＴＬＲ２アゴニストである特定のリポペプチド分子が記載されており、参考文献６から９にはそれぞれ、ＴＬＲ７の複数のクラスの小分子アゴニストが記載されており、参考文献１０および１１には、疾患を処置するためのＴＬＲ７およびＴＬＲ８アゴニストが記載されている。
【００２４】
本発明で使用されるＴＬＲアゴニストは理想的には、少なくとも１個の吸着部分を包含する。ＴＬＲアゴニスト中にそのような部分が包含されていることによって、それらは不溶性金属塩に吸着することができ（例えば、リガンド交換または任意の他の適切な機構によって）、その免疫学的挙動が改善される（参考文献２を参照されたい）。リン含有吸着部分は特に有用であるので、吸着部分は、ホスフェート、ホスホネート、ホスフィネート、ホスホニト（ｐｈｏｓｐｈｏｎｉｔｅ）、ホスフィニト（ｐｈｏｓｐｈｉｎｉｔｅ）などを含み得る。
【００２５】
好ましくは、ＴＬＲアゴニストは、少なくとも１個のホスホネート基を包含する。
【００２６】
したがって、好ましい実施形態では、本発明の組成物は、ホスホネート基を含むＴＬＲ７アゴニストを含む。このホスホネート基によって、アゴニストは、アルミニウム塩などの不溶性金属塩に吸着することが可能になる。
【００２７】
本発明で有用なＴＬＲアゴニストには、単一の吸着部分が含まれ得るか、または１個より多い、例えば２から１５個の吸着部分が含まれ得る。典型的には、化合物は、１、２または３個の吸着部分を含む。
【００２８】
本発明で有用なリン含有ＴＬＲアゴニストは、式（Ａ１）によって表され得る：
【００２９】
【化１】
2014525429.tif 000002
【００３０】
［式中、
ＲＸおよびＲＹは独立に、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され；
Ｘは、共有結合、ＯおよびＮＨから選択され；
Ｙは、共有結合、Ｏ、Ｃ（Ｏ）、ＳおよびＮＨから選択され；
Ｌは、例えば、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立に選択される１から４個の置換基でそれぞれ置換されていてもよいＣ１〜Ｃ６アルキレン、Ｃ１〜Ｃ６アルケニレン、アリーレン、ヘテロアリーレン、Ｃ１〜Ｃ６アルキレンオキシおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択されるリンカーであり；
ｐはそれぞれ独立に、１、２、３、４、５および６から選択され；
ｑは、１、２、３および４から選択され；
ｎは、１、２および３から選択され；かつ
Ａは、ＴＬＲアゴニスト部分である］。
【００３１】
一実施形態では、式（Ａ１）によるＴＬＲアゴニストは、次のとおりである：ＲＸおよびＲＹはＨであり；ＸはＯであり；Ｌは、１から２個のハロゲン原子でそれぞれ置換されていてもよいＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；ｐは１、２および３から選択され；ｑは１および２から選択され；かつｎは１である。したがって、これらの実施形態では、吸着部分は、ホスフェート基を含む。
【００３２】
他の実施形態では、式（Ａ１）によるＴＬＲアゴニストは、次のとおりである：ＲＸおよびＲＹはＨであり；Ｘは共有結合であり；Ｌは、１から２個のハロゲン原子でそれぞれ置換されていてもよいＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；ｐは１、２または３から選択され；ｑは１または２から選択され；かつｎは１である。したがって、これらの実施形態では、吸着部分は、ホスホネート基を含む。
【００３３】
式（Ａ１）のための有用な「Ａ」部分には、これらに限られないが、本明細書で定義されているか、または参考文献４〜１１および３４〜５２に開示されているとおりの次の化合物のいずれかのラジカルが含まれる：
【００３４】
【化２】
2014525429.tif 000003
【００３５】
一部の実施形態では、ＴＬＲアゴニスト部分「Ａ」は、１０００Ｄａ未満の分子量を有する。一部の実施形態では、式（Ａ１）のＴＬＲアゴニストは、１０００Ｄａ未満の分子量を有する。
【００３６】
好ましいＴＬＲアゴニストは、水溶性である。したがってこれらは、水性緩衝液中で水と、ｐＨ７、２５℃および１気圧で混合した場合に、均一な溶液を形成して、少なくとも５０μｇ／ｍｌの濃度を有する溶液をもたらし得る。したがって「水溶性」という用語は、これらの条件下でほんの僅かに可溶性である物質を排除するものである。
【００３７】
有用なＴＬＲアゴニストには、下記でより詳細に記載されているとおりの式（Ｃ）、（Ｄ）、（Ｅ）、（Ｆ）、（Ｇ）、（Ｈ）、（Ｉ）、（ＩＩ）、（Ｊ）または（Ｋ）を有するものが含まれる。他の有用なＴＬＲアゴニストは、参考文献２（その５１〜７５頁を参照されたい）で定義されているとおりの化合物１から１０２である。好ましいＴＬＲ７アゴニストは、「Ｋ２」などの式（Ｋ）を有する。これらは、Ｋ２の塩、例えばアルギニン塩として使用することができる。
【００３８】
好ましいＴＬＲ４アゴニストは、モノホスホリル脂質Ａ（ＭＰＬ）の類似体である。例えば、有用なＴＬＲ４アゴニストは、３ｄ−ＭＰＬ（即ち、３−Ｏ−脱アシル化モノホスホリル脂質Ａ；３−脱−Ｏ−アシル化モノホスホリル脂質Ａまたは３−Ｏ−デスアシル−４’−モノホスホリル脂質Ａとしても公知）である。この名称は、モノホスホリル脂質Ａ中の還元末端グルコサミンの３位が脱アシル化されていることを示している。これは、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｍｉｎｎｅｓｏｔａのヘプトース欠損変異体から調製され、脂質Ａと化学的には類似しているが、酸不安定性ホスホリル基および塩基不安定性アシル基を欠いている。これは、単球／マクロファージ系列の細胞を活性化し、ＩＬ−１、ＩＬ−１２、ＴＮＦ−αおよびＧＭ−ＣＳＦを含むサイトカインの放出を刺激する。３ｄ−ＭＰＬの調製は、参考文献１２に元々記載されており、その生成物は、Ｃｏｒｉｘａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎによって製造および販売されている。これは、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅによって使用されているＡＳ０４アジュバント中に存在する。さらなる詳細は、参考文献１３から１６において見出すことができる。しかしながら、一部の実施形態では、本発明は、リン酸アルミニウムおよび３ｄＭＰＬの組合せを使用しない。
【００３９】
典型的な組成物は、３ｄ−ＭＰＬを２５μｇ／ｍｌから２００μｇ／ｍｌ、例えば、５０〜１５０μｇ／ｍｌ、７５〜１２５μｇ／ｍｌ、９０〜１１０μｇ／ｍｌの範囲、または約１００μｇ／ｍｌの濃度で含む。通常、１用量当たり３ｄ−ＭＰＬ２５〜７５μｇ、例えば１用量当たり３ｄ−ＭＰＬ４５〜５５μｇまたは約５０μｇを投与する。
【００４０】
３ｄ−ＭＰＬは、そのアシル化によって異なる（例えば、長さが異なってよい３、４、５または６本のアシル鎖を有する）関連分子の混合物の形態を取ってよい。２種のグルコサミン（２−デオキシ−２−アミノ−グルコースとしても公知）単糖は、それらの２位炭素（即ち２位および２’位）でＮ−アシル化されており、３’位にもＯ−アシル化が存在する。炭素２に結合している基は、式−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ２−ＣＲ１Ｒ１’を有する。炭素２’に結合している基は、式−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ２−ＣＲ２Ｒ２’を有する。炭素３’に結合している基は、式−Ｏ−ＣＯ−ＣＨ２−ＣＲ３Ｒ３’を有する。代表的な構造は下式である：
【００４１】
【化３】
2014525429.tif 000004
【００４２】
基Ｒ１、Ｒ２およびＲ３はそれぞれ独立に、−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨ３である。ｎの値は好ましくは、８から１６、より好ましくは９から１２であり、最も好ましくは１０である。
【００４３】
基Ｒ１’、Ｒ２’およびＲ３’はそれぞれ独立に：（ａ）−Ｈ；（ｂ）−ＯＨ；または（ｃ）−Ｏ−ＣＯ−Ｒ４（ここで、Ｒ４は−Ｈまたは−（ＣＨ２）ｍ−ＣＨ３のいずれかであり、ｍの値は好ましくは、８から１６であり、より好ましくは１０、１２または１４である）であってよい。２位では、ｍは好ましくは１４である。２’位では、ｍは好ましくは１０である。３’位では、ｍは好ましくは１２である。したがって基Ｒ１’、Ｒ２’およびＲ３’は好ましくは、ドデカン酸、テトラデカン酸またはヘキサデカン酸からの−Ｏ−アシル基である。
【００４４】
Ｒ１’、Ｒ２’およびＲ３’の全てが−Ｈである場合、３ｄ−ＭＰＬは３本のアシル鎖のみを有する（２、２’および３’位のそれぞれに１個）。Ｒ１’、Ｒ２’およびＲ３’のうちの２個のみが−Ｈである場合、３ｄ−ＭＰＬは４本のアシル鎖を有し得る。Ｒ１’、Ｒ２’およびＲ３’のうちの１個のみが−Ｈである場合、３ｄ−ＭＰＬは５本のアシル鎖を有し得る。Ｒ１’、Ｒ２’およびＲ３’のいずれも−Ｈではない場合、３ｄ−ＭＰＬは６本のアシル鎖を有し得る。本発明で使用される３ｄ−ＭＰＬは、３から６本のアシル鎖を有するこれらの形態の混合物であってよいが、６本のアシル鎖を有する３ｄ−ＭＰＬを混合物中に含むこと、特に、アシル鎖６本の形態が、全３ｄ−ＭＰＬのうちの少なくとも１０重量％、例えば≧２０重量％、≧３０重量％、≧４０重量％、≧５０重量％以上を構成していることを確実にすることが好ましい。アシル鎖６本を有する３ｄ−ＭＰＬは、最もアジュバント活性な形態であることが発見されている。
【００４５】
したがって、本発明で使用するために最も好ましい３ｄ−ＭＰＬの形態は、以下である：
【００４６】
【化４】
2014525429.tif 000005
【００４７】
３ｄ−ＭＰＬを混合物の形態で使用する場合、本発明の組成物中における３ｄ−ＭＰＬの量または濃度に関する言及は、混合物の中での組み合わせた３ｄ−ＭＰＬ種をいう。
【００４８】
水性条件下で、３ｄ−ＭＰＬは、種々のサイズ、例えば、直径＜１５０ｎｍまたは＞５００ｎｍを有するミセル凝集体または粒子を形成し得る。これらのいずれか、または両方を本発明で使用することができ、常套的なアッセイによって、より良好な粒子を選択することができる。その優れた活性によって［１７］、より小さい粒子（例えば、３ｄ−ＭＰＬの透明水性懸濁液が得るのに十分小さい）が本発明による使用では好ましい。好ましい粒子は、１５０ｎｍ未満、より好ましくは１２０ｎｍ未満の平均直径を有し、１００ｎｍ未満の平均直径を有してもよい。しかしながら多くの場合に、平均直径が５０ｎｍ未満であることはない。３ｄ−ＭＰＬがリン酸アルミニウムに吸着されている場合には、３Ｄ−ＭＰＬ粒径を直接測定することはできないが、吸着が生じる前に、粒径を測定することはできる。平均粒子直径を明らかにする動的光散乱法の常套的な技法によって、粒子直径を推定することができる。粒子がｘｎｍの直径を有すると述べられている場合、一般に、この平均のまわりに粒子の分布が存在するが、粒子のうち、数で少なくとも５０％（例えば、≧６０％、≧７０％、≧８０％、≧９０％以上）はｘ±２５％の範囲内の直径を有する。
【００４９】
本発明の組成物は、１種超のＴＬＲアゴニストを含むことができる。これら２種のアゴニストは、相互に異なり、それらは、同じＴＬＲまたは異なるＴＬＲをターゲットとすることができる。両方のアゴニストが金属塩に吸着されていてよい。
【００５０】
不溶性金属塩
ＴＬＲアゴニストは、不溶性金属塩に吸着して、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ抗原をアジュバント添加するための吸着複合体を形成し得る。例えばこれらは、不溶性カルシウム塩（例えばリン酸カルシウム）に、または好ましくは、不溶性アルミニウム塩に吸着させることができる。そのようなアルミニウム塩は、ワクチン中で使用されてきた長い歴史を有する。
【００５１】
有用なアルミニウム塩には、これらに限られないが、水酸化アルミニウムおよびリン酸アルミニウムアジュバントが含まれる。そのような塩は、例えば参考文献１８の第８および９章ならびに参考文献１９の第４章）に記載されている。ヒドロキシドイオンを含むアルミニウム塩が、本発明で使用するための好ましい不溶性金属塩である。それというのも、これらのヒドロキシドイオンは、容易にリガンド交換し得るためである。したがって、ＴＬＲアゴニストを吸着させるのに好ましい塩は、水酸化アルミニウムおよび／またはヒドロキシリン酸アルミニウムである。これらは、リン含有基（例えばホスフェート、ホスホネート）と容易にリガンド交換して、安定的な吸着をもたらし得る表面ヒドロキシル部分を有する。
【００５２】
「水酸化アルミニウム」として一般に公知のアジュバントは典型的には、通常は少なくとも部分的に結晶質であるオキシ水酸化アルミニウム塩である。式ＡｌＯ（ＯＨ）によって表すことができるオキシ水酸化アルミニウムは、赤外（ＩＲ）分光法によって、詳細には１０７０ｃｍ−１での吸着バンドおよび３０９０〜３１００ｃｍ−１での強いショルダーの存在によって、水酸化アルミニウムＡｌ（ＯＨ）３などの他のアルミニウム化合物から識別することができる（参考文献１８の第９章）。水酸化アルミニウムアジュバントの結晶化度は、回折バンドの半値幅（ｔｈｅ  ｗｉｄｔｈ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ  ｂａｎｄ  ａｔ  ｈａｌｆ  ｈｅｉｇｈｔ）（ＷＨＨ）に反映され、その際、結晶性が乏しい粒子は、結晶子のより小さなサイズのため、より大きな線の広がりを示す。ＷＨＨが大きくなるほど、表面積は大きくなり、かつより高いＷＨＨ値を有するアジュバントが、抗原吸着についてより高い能力を有することが分かっている。繊維状形態（例えば透過電子顕微鏡写真において見られるとおりの）が、例えば直径約２ｎｍを有する針様粒子を伴う水酸化アルミニウムアジュバントでは典型的である。水酸化アルミニウムアジュバントのｐＩは典型的には、約１１であり、即ちそのアジュバント自体が、生理学的ｐＨで正の表面電荷を有する。ｐＨ７．４でＡｌ＋＋＋１ｍｇ当たりタンパク質１．８〜２．６ｍｇの吸着能が、水酸化アルミニウムアジュバントでは報告されている。
【００５３】
「リン酸アルミニウム」として一般に公知のアジュバントは典型的には、ヒドロキシリン酸アルミニウムであり、多くの場合に少量の硫酸塩も含む（即ち、ヒドロキシリン酸硫酸アルミニウム）。それらは沈殿によって得ることができ、沈殿の間の反応条件および濃度が、その塩中のヒドロキシルに対するホスフェートの置換の程度に影響する。ヒドロキシリン酸塩は一般に、０．３から１．２のＰＯ４／Ａｌモル比を有する。ヒドロキシリン酸塩は、ヒドロキシル基の存在によって厳密なＡｌＰＯ４からは区別することができる。例えば３１６４ｃｍ−１でのＩＲスペクトルバンド（例えば、２００℃に加熱した場合）が、構造的ヒドロキシルの存在を示す（参考文献１８の第９章）。
【００５４】
リン酸アルミニウムアジュバントのＰＯ４／Ａｌ３＋モル比は一般に、０．３から１．２、好ましくは０．８から１．２、より好ましくは０．９５±０．１である。そのリン酸アルミニウムは一般に、特にヒドロキシリン酸塩では非晶質である。典型的なアジュバントは、０．８４から０．９２のＰＯ４／Ａｌモル比を有する非晶質のヒドロキシリン酸アルミニウムであり、０．６ｍｇＡｌ３＋／ｍｌで含まれる。そのリン酸アルミニウムは一般に、粒子状である（例えば、透過電子顕微鏡写真で見られるとおりプレート様の形態であり、主要な粒子は５０ｎｍの範囲である）。その粒子の典型的な直径は、任意の抗原の吸着後に、０．５〜２０μｍの範囲（例えば、約５〜１０μｍ）である。ｐＨ７．４でＡｌ＋＋＋１ｍｇ当たりタンパク質０．７〜１．５ｍｇの吸着能が、リン酸アルミニウムアジュバントで報告されている。
【００５５】
リン酸アルミニウムのゼロ電荷点（ＰＺＣ）は、ヒドロキシルに対するホスフェートの置換の度合いに逆に関連し、この置換度は、沈殿によって塩を調製するために使用される反応条件および反応物の濃度に応じて変えることができる。他にも、溶液中の遊離ホスフェートイオンの濃度を変化させることによって（より多くのホスフェート＝より酸性のＰＺＣ）、またはヒスチジン緩衝液などの緩衝液を添加する（ＰＺＣをより塩基性にする）ことによって、ＰＺＣを変える。本発明によって使用されるリン酸アルミニウムは一般に、４．０から７．０、より好ましくは、５．０から６．５、例えば約５．７のＰＺＣを有するであろう。
【００５６】
溶液において、リン酸アルミニウムおよび水酸化アルミニウムアジュバントの両方ともが、直径１〜１０μｍの安定的な多孔性凝集体を形成する傾向がある［２０］。
【００５７】
金属塩に吸着されている本発明のＴＬＲアゴニストを含む組成物はまた、緩衝液（例えばリン酸塩またはヒスチジンまたはトリス緩衝液）を含むことができる。しかしながら、そのような組成物がリン酸塩緩衝液を含む場合、緩衝液中のホスフェートイオンの濃度は、５０ｍＭ未満、例えば＜４０ｍＭ、＜３０ｍＭ、＜２０ｍＭ、＜１０ｍＭもしくは＜５ｍＭまたは１〜１５ｍＭであるべきことが好ましい。例えば、１〜５０ｍＭ、５〜２５ｍＭまたは約１０ｍＭのヒスチジン緩衝液が好ましい。
【００５８】
本発明で有用な吸着性金属塩の不溶性によって、吸着されている免疫増強物質を含有する組成物は総じて、濁った外観をもつ懸濁液である。この外観は、混入している細菌増殖を遮蔽してしまうので、本発明の組成物は、チオメルサールまたは２−フェノキシエタノールなどの防腐剤を含み得る。組成物は実質的に水銀物質を含まない（例えば、＜１０μｇ／ｍｌ）、例えば、チオメルサールを含まないことが好ましい。水銀を含有しないワクチンが、より好ましい。
【００５９】
組成物は、オキシ水酸化アルミニウムおよびヒドロキシリン酸アルミニウムの両方の混合物を含むことができ、かつＴＬＲアゴニストは、これらの塩の一方または両方に吸着されていてよい。
【００６０】
患者に投与するための組成物中でのＡｌ＋＋＋の濃度は好ましくは、１０ｍｇ／ｍｌ未満、例えば≦５ｍｇ／ｍｌ、≦４ｍｇ／ｍｌ、≦３ｍｇ／ｍｌ、≦２ｍｇ／ｍｌ、≦１ｍｇ／ｍｌなどである。本発明の組成物中のＡｌ＋＋＋の好ましい範囲は、０．３から１ｍｇ／ｍｌまたは０．３〜０．５ｍｇ／ｍｌである。最大０．８５ｍｇ／用量が好ましい。ＴＬＲアゴニストの包含によって、アルミニウム塩のアジュバント効果を改善することができるので、本発明は有利には、１用量当たりより少ない量のＡｌ＋＋＋を可能にし、したがって本発明の組成物は有用には、１単位用量当たりＡｌ＋＋＋１０から２５０μｇを包含すればよい。現行の小児用ワクチンは典型的には、少なくともＡｌ＋＋＋３００μｇを含む。濃度については、本発明の組成物は、１０〜５００μｇ／ｍｌ、例えば１０〜３００μｇ／ｍｌ、１０〜２００μｇ／ｍｌまたは１０〜１００μｇ／ｍｌのＡｌ＋＋＋濃度を有し得る。
【００６１】
一般に、組成物がＴＬＲアゴニストおよびアルミニウム塩の両方を含む場合、アゴニストとＡｌ＋＋＋との重量比は、５：１未満、例えば４：１未満、３：１未満、２：１未満または１：１未満である。したがって例えば、０．５ｍｇ／ｍｌのＡｌ＋＋＋濃度では、ＴＬＲアゴニストの最大濃度は、１．５ｍｇ／ｍｌであろう。しかし、より高いか、またはより低いレベルを使用することができる。
【００６２】
組成物がＴＬＲアゴニストおよび不溶性金属塩を含む場合、組成物中のアゴニストのうちの少なくとも５０％（質量で）、例えば≧６０％、≧７０％、≧８０％、≧８５％、≧９０％、≧９２％、≧９４％、≧９５％、≧９６％、≧９７％、≧９８％、≧９９％またはさらに１００％が、金属塩に吸着されていることが好ましい。
【００６３】
Ｓ．ａｕｒｅｕｓ抗原
本発明の組成物は、少なくとも１種のＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原または少なくとも２種のＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原を含む。したがって、組成物は、１、２、３、４、５種またはそれより多いＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原を含んでよく；典型的には、１０種超の異なるＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原を含むことはない。
【００６４】
糖抗原およびポリペプチド抗原の両方がＳ．ａｕｒｅｕｓについて公知である（例えば公知の糖抗原には、ポリ−Ｎ−アセチルグルコサミン（ＰＮＡＧ）であるＳ．ａｕｒｅｕｓの菌体外多糖と、５型、８型または３３６型に由来し得るＳ．ａｕｒｅｕｓの莢膜糖とが含まれる）。好ましい組成物では、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ抗原（複数可）は、ポリペプチド抗原（複数可）である；一部の実施形態では、組成物は、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ糖抗原を含まない。
【００６５】
本発明で使用するための好ましいＳ．ａｕｒｅｕｓポリペプチド抗原は、ＥｓｘＡ、ＥｓｘＢ、Ｓｔａ００６、Ｓｔａ０１１および／またはＨｌａである。これら５種の抗原は、参考文献１において詳細に検討されている。特に有用な本発明の組成物は、これらの抗原の５種全てを含む（好ましくは、Ｈｌａの非毒性変異体形態と共に）。
【００６６】
ＮＣＴＣ８３２５株における「ＥｓｘＡ」抗原は、アミノ酸配列の配列番号１（ＧＩ：８８１９４０６３）を有する。本発明で使用されるＥｓｘＡ抗原は、配列番号１を認識する抗体（例えばヒトに投与された場合）を誘発することができ、かつ／または（ａ）配列番号１に対して５０％以上の同一性（例えば６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％以上）を有し；かつ／または（ｂ）配列番号１のうちの少なくとも「ｎ」連続アミノ酸の断片を含み、ここで「ｎ」は７以上（例えば８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２５、３０、３５、４０、５０、６０、７０、８０、９０以上）であるアミノ酸配列を含んでよい。これらのＥｓｘＡポリペプチドは配列番号１の改変体を含む。（ｂ）の好ましい断片は配列番号１からのエピトープを含む。他の好ましい断片は、配列番号１のＣ末端から１個または複数のアミノ酸（例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５個以上）および／またはＮ末端から１個または複数のアミノ酸（例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５個以上）を欠失しているが、配列番号１の少なくとも１個のエピトープは保持している。
【００６７】
ＮＣＴＣ８３２５株における「ＥｓｘＢ」抗原は、アミノ酸配列の配列番号２（ＧＩ：８８１９４０７０）を有する。本発明で使用されるＥｓｘＢは、配列番号２を認識する抗体（例えばヒトに投与された場合）を誘発することができ、かつ／または（ａ）配列番号２に対して５０％以上の同一性（例えば６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％以上）を有し；かつ／または（ｂ）配列番号２のうちの少なくとも「ｎ」連続アミノ酸の断片を含み、ここで「ｎ」は７以上（例えば８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２５、３０、３５、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００以上）であるアミノ酸配列を含んでよい。これらのＥｓｘＢポリペプチドは配列番号２の改変体を含む。（ｂ）の好ましい断片は配列番号２からのエピトープを含む。他の好ましい断片は、配列番号２のＣ末端から１個または複数のアミノ酸（例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５個以上）および／またはＮ末端から１個または複数のアミノ酸（例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５個以上）を欠失しているが、配列番号２の少なくとも１個のエピトープは保持している。有用なＥｓｘＢ抗原は、配列番号２の内部システイン残基を欠失しており、例えば、３０位の残基Ｘが存在しないか、または（還元条件下で）遊離チオール基を含まないアミノ酸残基（例えば、システインを除いた任意の天然アミノ酸）である配列番号４２を含む。
【００６８】
「Ｓｔａ００６」抗原は、「フェリクローム結合性タンパク質」と注釈され、文献［２１］では「ＦｈｕＤ２」とも称されている。ＮＣＴＣ８３２５株において、Ｓｔａ００６はアミノ酸配列の配列番号３（ＧＩ：８８１９６１９９）を有する。本発明で使用されるＳｔａ００６は、配列番号３を認識する抗体（例えばヒトに投与された場合）を誘発することができ、かつ／または（ａ）配列番号３に対して５０％以上の同一性（例えば６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％以上）を有し；かつ／または（ｂ）配列番号３のうちの少なくとも「ｎ」連続アミノ酸の断片を含み、ここで「ｎ」は７以上（例えば８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２５、３０、３５、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０以上）であるアミノ酸配列を含んでよい。これらのＳｔａ００６ポリペプチドは配列番号３の改変体を含む。（ｂ）の好ましい断片は配列番号３からのエピトープを含む。他の好ましい断片は、配列番号３のＣ末端から１個または複数のアミノ酸（例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５個以上）および／またはＮ末端から１個または複数のアミノ酸（例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５個以上）を欠失しているが、配列番号３の少なくとも１個のエピトープは保持している。配列番号３の最初の１７Ｎ末端アミノ酸は有用に排除することができる（配列番号６が得られる）。Ｓｔａ００６の変異体形態が、参考文献２２に報告されている。有用なＳｔａ００６抗原は、配列番号３のシステイン残基を欠失しており、例えば配列番号４１を含み、（還元条件下で）遊離チオール基を有するいずれのアミノ酸残基も含まず、例えば、これはシステインを含まない。Ｓｔａ００６抗原は、例えばアシル化Ｎ末端システインで脂質付加されていてよい。有用なＳｔａ００６配列の１つは、Ｎ末端にＭｅｔ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−配列を有する配列番号７であり；配列番号４４は別のそのような配列であるが、これは、配列番号７には存在するシステインを欠失している。
【００６９】
「Ｓｔａ０１１」抗原は、ＮＣＴＣ８３２５株においてアミノ酸配列の配列番号４（ＧＩ：８８１９３８７２）を有する。本発明で使用されるＳｔａ０１１抗原は、配列番号４を認識する抗体（例えばヒトに投与された場合）を誘発することができ、かつ／または（ａ）配列番号４に対して５０％以上の同一性（例えば６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％以上）を有し；かつ／または（ｂ）配列番号４のうちの少なくとも「ｎ」連続アミノ酸の断片を含み、ここで「ｎ」は７以上（例えば８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２５、３０、３５、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０以上）であるアミノ酸配列を含んでよい。これらのＳｔａ０１１ポリペプチドは配列番号４の改変体を含む。（ｂ）の好ましい断片は配列番号４からのエピトープを含む。他の好ましい断片は、配列番号４のＣ末端から１個または複数のアミノ酸（例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５個以上）および／またはＮ末端から１個または複数のアミノ酸（例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５個以上）を欠失しているが、配列番号４の少なくとも１個のエピトープは保持している。配列番号４の最初の２３Ｎ末端アミノ酸は有用に排除することができる（配列番号３３が得られる）。有用なＳｔａ０１１抗原は、配列番号４のシステイン残基を欠失しており、例えば配列番号４３を含み、（還元条件下で）遊離チオール基を有するいずれのアミノ酸残基も包含せず、例えば、これはシステインを含まない。Ｓｔａ０１１抗原は、例えばアシル化Ｎ末端システインで脂質付加されていてよい。有用なＳｔａ０１１配列の１つは、Ｎ末端メチオニンを有する配列番号８であり；配列番号４６は別のそのような配列であるが、これは、配列番号８には存在するシステインを欠失している。Ｓｔａ０１１抗原として、またはＳｔａ０１１抗原を調製するために使用することができる配列番号４の改変体形態には、これらに限られないが、様々なＩｌｅ／Ｖａｌ／Ｌｅｕ置換を伴う配列番号９、１０および１１が含まれる（加えて、これらの配列のＣｙｓ不含改変体も、本発明で使用することができる）。Ｓｔａ０１１は、モノマーまたはオリゴマーとして存在してよく、ここで、Ｃａ＋＋イオンがオリゴマー化を助力する。本発明は、Ｓｔａ０１１のモノマーおよび／またはオリゴマーを使用することができる。
【００７０】
「Ｈｌａ」抗原は、「アルファ毒素」または単に「溶血素」としても公知の「アルファ溶血素前駆体」である。ＮＣＴＣ８３２５株において、Ｈｌａはアミノ酸配列の配列番号５（ＧＩ：８８１９４８６５）を有する。Ｈｌａは、Ｓ．ａｕｒｅｕｓの大半の株によって産生され、膜孔形成活性および溶血活性を有する重要なビルレンス決定因子である。抗Ｈｌａ抗体は、動物モデルにおいて毒素の有害な作用を中和することができ、かつＨｌａは、肺炎に対する防御のために特に有用である。
【００７１】
有用なＨｌａ抗原は、配列番号５を認識する抗体（例えばヒトに投与された場合）を誘発することができ、かつ／または（ａ）配列番号５に対して５０％以上の同一性（例えば６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％以上）を有し；かつ／または（ｂ）配列番号５のうちの少なくとも「ｎ」連続アミノ酸の断片を含み、ここで「ｎ」は７以上（例えば８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２５、３０、３５、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０以上）であるアミノ酸配列を含んでよい。これらのＨｌａ抗原は配列番号５の改変体を含む。（ｂ）の好ましい断片は配列番号５からのエピトープを含む。他の好ましい断片は、配列番号５のＣ末端から１個または複数のアミノ酸（例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５個以上）および／またはＮ末端から１個または複数のアミノ酸（例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５個以上）を欠失しているが、配列番号５の少なくとも１個のエピトープは保持している。配列番号５の最初の２６Ｎ末端アミノ酸を有用に排除することができる（例えば、配列番号１２を得るために）。Ｃ末端での短縮も使用して、例えば、５０アミノ酸（配列番号５の残基２７〜７６）のみを残すことができる［２３］。
【００７２】
化学的不活性化（例えば、ホルムアルデヒド、グルタルアルデヒドまたは他の架橋試薬を使用すること）によって、Ｈｌａ毒性を本発明の組成物において回避することができる。しかしながら代わりに、その毒性活性を除去しているが、その免疫原性は維持しているＨｌａの変異体形態を使用することが好ましい。そのような解毒変異体は当技術分野で既に公知である。好ましいＨｌａ抗原は、成熟抗原の残基３５である配列番号５の残基６１（即ち、最初の２６Ｎ末端アミノ酸を排除した後の配列番号１２の残基３５に等しい）に突然変異を有する変異体Ｓ．ａｕｒｅｕｓ溶血素である。したがって残基６１はヒスチジンでなくてもよく、代わりに、例えばＩｌｅ、Ｖａｌまたは好ましくはＬｅｕであってよい。この位置では、Ｈｉｓ−Ａｒｇ突然変異も使用することができる。例えば、配列番号１３は、成熟変異体Ｈｌａ−Ｈ３５Ｌ配列（即ち、Ｈ３５Ｌ突然変異を伴う配列番号１２）であり、有用なＨｌａ抗原は配列番号１３を含む。他の有用な突然変異は、長いループを短い配列に置き換えており、例えば配列番号５の残基１３６〜１７４にある３９マーをＰＳＧＳなどのテトラマーに置き換えており（配列番号１４）、配列番号１５（Ｈ３５Ｌ突然変異も含む）および配列番号１６（Ｈ３５Ｌ突然変異を含まない）においても同様である。他の有用な突然変異は、残基Ｙ１０１を例えばロイシンに置き換えている（配列番号１７）。他の有用な突然変異は、残基Ｄ１５２を例えばロイシンに置き換えている（配列番号１８）。他の有用な変異体は残基Ｈ３５およびＹ１０１を例えばロイシンに置き換えている（配列番号１９）。他の有用な変異体は残基Ｈ３５およびＤ１５２を例えばロイシンに置き換えている（配列番号２０）。
【００７３】
さらなる有用なＨｌａ抗原は、参考文献２４および２５に開示されている。
【００７４】
配列番号２１、２２および２３は、配列番号５の３つの有用な断片である（それぞれ「Ｈｌａ２７−７６」、「Ｈｌａ２７−８９」および「Ｈｌａ２７−７９」）。配列番号２４、２５および２６は、配列番号１３からの対応する断片である。
【００７５】
有用なＨｌａ配列の１つは配列番号２７である。これはＮ末端Ｍｅｔを、次いで発現ベクターからのＡｌａ−Ｓｅｒジペプチドを、次いで配列番号１３（ＮＣＴＣ８３２５株からの）を有する。
【００７６】
組成物がＥｓｘＡおよびＥｓｘＢ抗原の両方を含む場合、これらは単一のポリペプチドとして（即ち、融合ポリペプチドとして）存在してよい。したがって、単一のポリペプチドが、配列番号１および配列番号２の両方を認識する抗体を誘発し得る（例えば、ヒトに投与した場合に）。この単一のポリペプチドは：（ｉ）ＥｓｘＡについて上記で定義されたとおり、配列番号１に対して５０％以上の同一性（例えば６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％以上）を有し、かつ／または配列番号１のうちの少なくとも「ｎ」連続アミノ酸の断片を含む第１のポリペプチド配列と；（ｉｉ）ＥｓｘＢについて上記で定義されたとおり、配列番号２に対して５０％以上の同一性（例えば６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％以上）を有し、かつ／または配列番号２のうちの少なくとも「ｎ」連続アミノ酸の断片を含む第２のポリペプチド配列とを含んでよい。第１および第２のポリペプチド配列は、Ｎ末端からＣ末端へいずれの順序であってもよい。配列番号２８（「ＥｓｘＡＢ」）および２９（「ＥｓｘＢＡ」）は、そのようなポリペプチドの例であり、両方ともヘキサペプチドリンカーＡＳＧＧＧＳを有する（配列番号３０）。別の「ＥｓｘＡＢ」ハイブリッドは、Ｎ末端メチオニンを備えていてよい配列番号３１を含む（例えば配列番号３２）。ＥｓｘＡＢの有用な改変体は、ＥｓｘＢの内部システイン残基を欠失しており、例えば、１３２位の残基Ｘが存在しないか、または（還元条件下で）遊離チオール基を含まないアミノ酸残基（例えば、システインを除いた任意の天然アミノ酸）である配列番号４７を含む。したがって、本発明で使用するための好ましいＥｓｘＡＢ抗原はアミノ酸配列の配列番号４５を有する。
【００７７】
したがって有用なポリペプチドは、（ａ）配列番号３１に対して８０％以上の同一性（例えば、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％以上）を有し；かつ／または（ｂ）配列番号３１のアミノ酸１〜９６からの少なくとも「ｎ」連続アミノ酸の断片および配列番号３１のアミノ酸１０３〜２０５からの少なくとも「ｎ」連続アミノ酸の断片の両方を含み、ここで、「ｎ」は７以上（例えば、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２５、３０、３５、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０以上）であるアミノ酸配列を含む。これらのポリペプチド（例えば、配列番号３２）は、配列番号１を含む野生型ブドウ球菌タンパク質および配列番号２を含む野生型ブドウ球菌タンパク質の両方を認識する抗体を誘発し得る（例えば、ヒトに投与した場合に）。したがって、免疫応答は、抗原ｅｓｘＡおよびｅｓｘＢの両方を認識するであろう。好ましい（ｂ）の断片は、配列番号１からのエピトープおよび配列番号２からのエピトープを提供する。
【００７８】
したがって、好ましい本発明の組成物は、（ｉ）例えば配列番号３１を含む、ＥｓｘＡ抗原およびＥｓｘＢ抗原の両方を含む単一ポリペプチド；（ｉｉ）例えば配列番号６を含むＳｔａ００６抗原；（ｉｉｉ）例えば配列番号３３を含むＳｔａ０１１抗原；ならびに（ｉｖ）例えば配列番号１３を含むＨｌａのＨ３５Ｌ変異体形態の４種全てを含む。式（Ｋ）のＴＬＲ７アゴニストを使用する場合に、この組成物は特に有用である。
【００７９】
配列番号３１、６、３３および１３は、組合せにおいて有用なアミノ酸配列であるが、本発明はこれらの正確な配列に限定されない。したがって、これらの配列のうちの１、２、３または４つ全てが独立に、５つまでの単一アミノ変化（即ち、１、２、３、４または５つの単一アミノ酸置換、欠失および／または挿入）によって修飾されていてよいが、ただし、修飾された配列が、未修飾の配列からなるポリペプチドになお結合する抗体を誘発し得ることを条件とする。
【００８０】
有用な本発明の組成物の１つは、（ｉ）アミノ酸配列の配列番号３２を有する第１のポリペプチド；（ｉｉ）アミノ酸配列の配列番号７を有する第２のポリペプチド；（ｉｉｉ）アミノ酸配列の配列番号８を有する第３のポリペプチド；および（ｉｖ）アミノ酸配列の配列番号２７を有する第４のポリペプチドの４種全てを含む。この組成物も、式（Ｋ）のＴＬＲ７アゴニストを使用する場合には、特に有用である。一部の実施形態では、組成物は、１種または複数のさらなるポリペプチドを含んでよく；他の実施形態では、組成物中のポリペプチドは専ら、これら４種の規定のポリペプチドである。配列番号３２、７、８および２７は、組合せにおいて有用なアミノ酸配列であるが、本発明はこれらの正確な配列に限定されない。したがって、これら４つの配列のうちの１、２、３または４つ全てが独立に、１、２、３、４または５つまでの単一アミノ変化（即ち、１、２、３、４または５つの単一アミノ酸置換、欠失および／または挿入）によって修飾されていてよいが、ただし、修飾された配列は、未修飾の配列からなるポリペプチドになお結合する抗体を誘発し得ることを条件とする。したがって好ましい実施形態では、組成物は、１つの単一アミノ酸置換、欠失および／または挿入によって独立に修飾されている配列番号３２、７、８および２７のうちの１、２、３または４つ全てを含むこれら４種の規定のポリペプチドを含む。
【００８１】
例えば、野生型Ｓｔａ００６、Ｓｔａ０１１およびＥｓｘＡＢポリペプチド配列（例えば配列番号６、３１および３３）はそれぞれ、ポリペプチド間ジスルフィド架橋をもたらして、ホモダイマーおよびヘテロダイマーの両方を形成し得る単一のシステイン残基を含む。そのような連結ポリペプチドは望ましくないので、それらの天然システイン残基を除去するようにＳｔａ００６、Ｓｔａ０１１およびＥｓｘＢ配列を修飾して、それらが、（還元条件下で）遊離チオール基を含有しないようにすることができる。野生型システインを欠失させることができるか、または異なるアミノ酸で置換することができる。
【００８２】
したがって：Ｓｔａ００６抗原は配列番号４１を含んでよく；Ｓｔａ０１１抗原は配列番号４３を含んでよく；ＥｓｘＢ抗原は配列番号４２を含んでよい（例えば、配列番号４７を含むＥｓｘＡＢハイブリッドとして）。そのような配列の例には、これらに限られないが、配列番号４４、４６および４５が含まれる。これらの配列を単独で対応する野生型配列の代わりとして、または組み合わせて使用することができる。したがって特に有用な本発明の組成物は、（ｉ）アミノ酸配列の配列番号４５を有する第１のポリペプチド；（ｉｉ）アミノ酸配列の配列番号４４を有する第２のポリペプチド；（ｉｉｉ）アミノ酸配列の配列番号４６を有する第３のポリペプチド；および（ｉｖ）アミノ酸配列の配列番号２７を有する第４のポリペプチドの４種全てを含む。一部の実施形態では、組成物は、１種または複数のさらなるポリペプチドを含んでよく；他の実施形態では、組成物中のポリペプチドは専ら、これら４種の規定のポリペプチドである。式Ｋ２などの式（Ｋ）のＴＬＲ７アゴニストを、例えば上記で検討されたとおりの水酸化アルミニウムアジュバントへのアゴニストおよび／またはポリペプチドの吸着と共に使用する場合に、このポリペプチドの組合せは特に有用である。
【００８３】
特に、吸着されるＴＬＲアゴニスト（例えば、アルミニウム塩に吸着される）として３ｄ−ＭＰＬを使用する場合、本発明の他の組成物は、ＣｌｆＡ抗原、ＩｓｄＡ抗原、ＩｓｄＢ抗原、ＩｓｄＣ抗原および／またはＩｓｄＨ抗原を含んでよい。
【００８４】
ＮＣＴＣ８３２５株における「ＣｌｆＡ」抗原または「クランピング因子Ａ」は、アミノ酸配列の配列番号３４（ＧＩ：８８１９４５７２）を有する。本発明で使用されるＣｌｆＡ抗原は、配列番号３４を認識する抗体（例えばヒトに投与された場合）を誘発することができ、かつ／または（ａ）配列番号３４に対して５０％以上の同一性（例えば６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％以上）を有し；かつ／または（ｂ）配列番号３４のうちの少なくとも「ｎ」連続アミノ酸の断片を含み、ここで「ｎ」は７以上（例えば８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２５、３０、３５、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０以上）であるアミノ酸配列を含んでよい。これらのＣｌｆＡ抗原は配列番号３４の改変体を含む。（ｂ）の好ましい断片は配列番号３４からのエピトープを含む。他の好ましい断片は、配列番号３４のＣ末端から１個または複数のアミノ酸（例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５個以上）および／またはＮ末端から１個または複数のアミノ酸（例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５個以上）を欠失しているが、配列番号３４の少なくとも１個のエピトープは保持している。配列番号３４の最後の３６８Ｃ末端アミノ酸を有用に排除することができる。配列番号３４の最初の３９Ｎ末端アミノ酸を有用に排除することができる。配列番号４０は、配列番号３４のＣ末端に向かって長い反復領域を排除している配列番号３４の有用な断片である（「ＣｌｆＡ４０−５５９」）。本発明で使用されるＣｌｆＡ抗原は、フィブリノゲンに対するその親和性を低減または除去するように、例えば参考文献２６のＹ４７４突然変異、参考文献２７のＤ３２１突然変異など、野生型配列から有用に修飾されていてよい。
【００８５】
ＮＣＴＣ８３２５株における「ＩｓｄＡ」抗原は、アミノ酸配列の配列番号３５（ＧＩ：８８１９４８２９）を有する。抗ＩｓｄＡ抗体は、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ膿瘍形成および致命的攻撃（ｃｈａｌｌｅｎｇｅ）に対してマウスを防御し得る［２８］。本発明で使用されるＩｓｄＡ抗原は、配列番号３５を認識する抗体（例えばヒトに投与された場合）を誘発することができ、かつ／または（ａ）配列番号３５に対して５０％以上の同一性（例えば６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％以上）を有し；かつ／または（ｂ）配列番号３５のうちの少なくとも「ｎ」連続アミノ酸の断片を含み、ここで「ｎ」は７以上（例えば８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２５、３０、３５、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０以上）であるアミノ酸配列を含んでよい。これらのＩｓｄＡ抗原は配列番号３５の改変体を含む。（ｂ）の好ましい断片は配列番号３５からのエピトープを含む。他の好ましい断片は、配列番号３５のＣ末端から１個または複数のアミノ酸（例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５個以上）および／またはＮ末端から１個または複数のアミノ酸（例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５個以上）を欠失しているが、配列番号３５の少なくとも１個のエピトープは保持している。配列番号３５の最後の３８Ｃ末端アミノ酸を有用に排除することができる。配列番号３５の最初の４６Ｎ末端アミノ酸を有用に排除することができる。配列番号３５のＣ末端３８マーを除外するための短縮化（ＬＰＫＴＧモチーフで開始）も有用である。配列番号３６は、天然タンパク質のヘム結合部位を含み、かつ抗原の最も露出したドメインを包含する配列番号３５の有用な断片である（配列番号３５のアミノ酸４０〜１８４；「ＩｓｄＡ４０−１８４」）。これは、ヒトタンパク質との抗原類似性も低減させる。他の有用な断片は、参考文献２９および３０に開示されている。
【００８６】
ＮＣＴＣ８３２５株における「ＩｓｄＢ」抗原は、アミノ酸配列の配列番号３７（ＧＩ：８８１９４８２８）を有する。抗ＩｓｄＢ抗体は、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ膿瘍形成および致命的攻撃に対してマウスを防御し得る［２８］。本発明で使用されるＩｓｄＢ抗原は、配列番号３７を認識する抗体（例えばヒトに投与された場合）を誘発することができ、かつ／または（ａ）配列番号３７に対して５０％以上の同一性（例えば６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％以上）を有し；かつ／または（ｂ）配列番号３７のうちの少なくとも「ｎ」連続アミノ酸の断片を含み、ここで「ｎ」は７以上（例えば８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２５、３０、３５、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０以上）であるアミノ酸配列を含んでよい。これらのＩｓｄＢ抗原は配列番号３７の改変体を含む。（ｂ）の好ましい断片は配列番号３７からのエピトープを含む。他の好ましい断片は、配列番号３７のＣ末端から１個または複数のアミノ酸（例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５個以上）および／またはＮ末端から１個または複数のアミノ酸（例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５個以上）を欠失しているが、配列番号３７の少なくとも１個のエピトープは保持している。配列番号３７の最後の３６Ｃ末端アミノ酸を有用に排除することができる。配列番号３７の最初の４０Ｎ末端アミノ酸を有用に排除することができる。ＩｓｄＢの有用な断片は、参考文献３０および３１に開示されていて、例えば配列番号３７の３７内部アミノ酸を欠失している。
【００８７】
ＮＣＴＣ８３２５株における「ＩｓｄＣ」抗原は、アミノ酸配列の配列番号３８（ＧＩ：８８１９４８３０）を有する。本発明で使用されるＩｓｄＣ抗原は、配列番号３８を認識する抗体（例えばヒトに投与された場合）を誘発することができ、かつ／または（ａ）配列番号３８に対して５０％以上の同一性（例えば６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％以上）を有し；かつ／または（ｂ）配列番号３８のうちの少なくとも「ｎ」連続アミノ酸からなる断片を含み、ここで「ｎ」は７以上（例えば８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２５、３０、３５、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００以上）であるアミノ酸配列を含んでよい。これらのＩｓｄＣ抗原は配列番号３８の改変体を含む。（ｂ）の好ましい断片は配列番号３８からのエピトープを含む。他の好ましい断片は、配列番号３８のＣ末端から１個または複数のアミノ酸（例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５個以上）および／またはＮ末端から１個または複数のアミノ酸（例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５個以上）を欠失しているが、配列番号３８の少なくとも１個のエピトープは保持している。配列番号３８の最後の３９Ｃ末端アミノ酸を有用に排除することができる。配列番号３８の最初の２８Ｎ末端アミノ酸を有用に排除することができる。
【００８８】
ＮＣＴＣ８３２５株における「ＨａｒＡ」としても公知の「ＩｓｄＨ」抗原は、アミノ酸配列の配列番号３９（ＧＩ：８８１９５５４２）を有する。本発明で使用されるＩｓｄＨ抗原は、配列番号３９を認識する抗体（例えばヒトに投与された場合）を誘発することができ、かつ／または（ａ）配列番号３９に対して５０％以上の同一性（例えば６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％以上）を有し；かつ／または（ｂ）配列番号３９のうちの少なくとも「ｎ」連続アミノ酸からなる断片を含み、ここで「ｎ」は７以上（例えば８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２５、３０、３５、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０以上）であるアミノ酸配列を含んでよい。これらのｉｓｄＨ抗原は配列番号３９の改変体を含む。（ｂ）の好ましい断片は配列番号３９からのエピトープを含む。他の好ましい断片は、配列番号３９のＣ末端から１個または複数のアミノ酸（例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５個以上）および／またはＮ末端から１個または複数のアミノ酸（例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５個以上）を欠失しているが、配列番号３９の少なくとも１個のエピトープは保持している。配列番号３９の最後の３５Ｃ末端アミノ酸を有用に排除することができる。配列番号３９の最初の４０Ｎ末端アミノ酸を有用に排除することができる。
【００８９】
ＩｓｄＡ、ＩｓｄＢ、ＩｓｄＣおよび／またはＩｓｄＨを使用する場合、ＩｓｄＡ、ＩｓｄＢ、ＩｓｄＣおよび／またはＩｓｄＨのうちの１種超からのエピトープを含む融合ポリペプチドを使用することが役立ち得る。例えば、参考文献３２には、ＩｓｄＢおよびＩｓｄＨの両方からのエピトープを有用に含むポリペプチドが開示されている。同様に、参考文献３３には、ＩｓｄＡおよびＩｓｄＢの両方からのエピトープを有用に含むポリペプチドが、他にもＩｓｄＡ、ＩｓｄＢおよびＩｓｄＨからのエピトープを含む一部のポリペプチドが開示されている。これらの融合ポリペプチドを製造する場合、各ポリペプチドからのＮＥＡＴドメインを含むことが役立ち得る［３３］。
【００９０】
一部の実施形態では、本発明の組成物は、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ抗原の他にも、異なる生体からの（例えば、ウイルスからか、または他の細菌からの）抗原を含む。
【００９１】
一部の実施形態では、本発明は、ＩｓｄＡ抗原、ＩｓｄＢ抗原、ＣｌｆＡ抗原、ＣｌｆＢ抗原、ＳｄｒＤ抗原、Ｓｐａ抗原、ＥｓｘＡ抗原、ＥｓｘＢ抗原、Ｓｔａ００６抗原、溶血素およびＳｔａ０１１抗原の組合せを含む組成物は含まない。
【００９２】
式（Ｃ）、（Ｄ）、（Ｅ）および（Ｈ）−ＴＬＲ７アゴニスト
ＴＬＲアゴニストは、式（Ｃ）、（Ｄ）、（Ｅ）および（Ｈ）：
【００９３】
【化５】
2014525429.tif 000006
【００９４】
のいずれかによる化合物であってよく、式中、
（ａ）Ｐ３は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＣＦ３および−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐＯｓ−および−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；かつＰ４は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ１〜Ｃ６アルキルアリールおよび−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択されるが；但し、Ｐ３およびＰ４のうちの少なくとも１個は、−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）であることを条件とし、
（ｂ）Ｐ５は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；Ｐ６は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（Ｃ１〜Ｃ４アルキルおよびＯＨから選択される１から３個の置換基でそれぞれ置換されていてもよい）および−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；かつＰ７は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐＯｓ−、−ＮＨＣ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択されるが；但し、Ｐ５、Ｐ６およびＰ７のうちの少なくとも１個は−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）であることを条件とし；
（ｃ）Ｐ８は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、−ＮＨＣ１〜Ｃ６アルキル（それぞれＯＨで置換されていてもよい）および−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；かつＰ９およびＰ１０はそれぞれ独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、−ＮＨＣ１〜Ｃ６アルキル（それぞれＯＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルで置換されていてもよい）および−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択されるが；但し、Ｐ８、Ｐ９またはＰ１０のうちの少なくとも１個は−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）であることを条件とし；
（ｄ）Ｐ１６および各Ｐ１８はそれぞれ独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；Ｐ１７は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアリール、Ｃ１〜Ｃ６アルキルヘテロアリール、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアリール−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）および−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）（Ｃ１〜Ｃ６アルキルまたはヘテロシクリルから選択される１から２個の置換基でそれぞれ置換されていてもよい）から選択されるが、但し、Ｐ１６、Ｐ１７またはＰ１８のうちの少なくとも１個は、−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）部分を含有することを条件とし；
ＲＸおよびＲＹは独立に、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され；
ＲＣ、ＲＤおよびＲＨはそれぞれ独立に、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され；
ＸＣはＣＨおよびＮから選択され；
ＲＥは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ハロゲンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；
ＸＥは、共有結合、ＣＲＥ２ＲＥ３およびＮＲＥ４から選択され；
ＲＥ２、ＲＥ３およびＲＥ４は独立に、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され；
ＸＨ１−ＸＨ２は、−ＣＲＨ２ＲＨ３−、−ＣＲＨ２ＲＨ３−ＣＲＨ２ＲＨ３−、−Ｃ（Ｏ）ＣＲＨ２ＲＨ３−、−Ｃ（Ｏ）ＣＲＨ２ＲＨ３−、−ＣＲＨ２ＲＨ３Ｃ（Ｏ）−、−ＮＲＨ４Ｃ（Ｏ）−、Ｃ（Ｏ）ＮＲＨ４−、ＣＲＨ２ＲＨ３Ｓ（Ｏ）２および−ＣＲＨ２＝ＣＲＨ２−から選択され；
ＲＨ２、ＲＨ３およびＲＨ４はそれぞれ独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよびＰ１８から選択され；
ＸＨ３は、ＮおよびＣＮから選択され；
Ｘは、共有結合、ＯおよびＮＨから選択され；
Ｙは、共有結合、Ｏ、Ｃ（Ｏ）、ＳおよびＮＨから選択され；
Ｌは、共有結合、Ｃ１〜Ｃ６アルキレン、Ｃ１〜Ｃ６アルケニレン、アリーレン、ヘテロアリーレン、Ｃ１〜Ｃ６アルキレンオキシおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−（それぞれ、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立に選択される１〜４個の置換基で置換されていてもよい）から選択され；
ｍは、０または１から選択され；
ｐはそれぞれ独立に、１、２、３、４、５および６から選択され；
ｑは、１、２、３および４から選択され；かつ
ｓは、０および１から選択される。
【００９５】
式（Ｇ）−ＴＬＲ８アゴニスト
ＴＬＲアゴニストは、本発明は、式（Ｇ）：
【００９６】
【化６】
2014525429.tif 000007
【００９７】
による化合物であってもよく、式中、
Ｐ１１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ＮＲＶＲＷおよび−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；
Ｐ１２は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＶＲＷによって置換されていてもよいアリールおよび−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；
Ｐ１３、Ｐ１４およびＰ１５は独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシおよび−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択されるが；
但し、Ｐ１１、Ｐ１２、Ｐ１３、Ｐ１４またはＰ１５のうちの少なくとも１個は、−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）であることを条件とし；
ＲｖおよびＲｗは独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルから選択されるか、または結合している窒素原子と一緒に４員から７員の複素環式環を形成しており；
ＸＧは、Ｃ、ＣＨおよびＮから選択され；
【００９８】
【化７】
2014525429.tif 000008
【００９９】
は、任意選択の二重結合を表し、ここで、
【０１００】
【化８】
2014525429.tif 000009
【０１０１】
が二重結合である場合、ＸＧはＣであり；かつ
ＲＧは、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され；
Ｘは、共有結合、ＯおよびＮＨから選択され；
Ｙは、共有結合、Ｏ、Ｃ（Ｏ）、ＳおよびＮＨから選択され；
Ｌは、共有結合、Ｃ１〜Ｃ６アルキレン、Ｃ１〜Ｃ６アルケニレン、アリーレン、ヘテロアリーレン、Ｃ１〜Ｃ６アルキレンオキシおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−（それぞれ、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立に選択される１〜４個の置換基で置換されていてもよい）から選択され；
ｐはそれぞれ独立に、１、２、３、４、５および６から選択され、かつ
ｑは、１、２、３および４から選択される。
【０１０２】
式（Ｉ）および（ＩＩ）−ＴＬＲ７アゴニスト［７］
ＴＬＲアゴニストは、式（Ｉ）または式（ＩＩ）：
【０１０３】
【化９】
2014525429.tif 000010
【０１０４】
による化合物であってよく、式中、
Ｚは、−ＮＨ２または−ＯＨであり；
Ｘ１は、アルキレン、置換アルキレン、アルケニレン、置換アルケニレン、アルキニレン、置換アルキニレン、カルボシクリレン（ｃａｒｂｏｃｙｃｌｙｌｅｎｅ）、置換カルボシクリレン、ヘテロシクリレンまたは置換ヘテロシクリレンであり；
Ｌ１は、共有結合、アリーレン、置換アリーレン、ヘテロシクリレン、置換ヘテロシクリレン、カルボシクリレン、置換カルボシクリレン、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、Ｓ（Ｏ）２、−ＮＲ５−または−Ｏ−であり、
Ｘ２は、共有結合、アルキレンまたは置換アルキレンであり；
Ｌ２は、ＮＲ５−、−Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、Ｓ（Ｏ）２または共有結合であり；
Ｒ３は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、置換ヘテロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、アリール、置換アリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキルまたは置換ヘテロシクリルアルキルであり；
Ｙ１およびＹ２はそれぞれ独立に、共有結合、−Ｏ−または−ＮＲ５−であるか；または−Ｙ１−Ｒ１および−Ｙ２−Ｒ２はそれぞれ独立に、−Ｏ−Ｎ＝Ｃ（Ｒ６Ｒ７）であり；
Ｒ１およびＲ２はそれぞれ独立に、Ｈ、アルキル、置換アルキル、カルボシクリル、置換カルボシクリル、ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロシクリルアルキル、置換ヘテロシクリルアルキル、−アルキレン−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ５、−（置換アルキレン）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ５、−アルキレン−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５、−（置換アルキレン）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５、−アルキレン−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ５または−（置換アルキレン）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ５であり、
Ｒ４は、Ｈ、ハロゲン、−ＯＨ、−Ｏ−アルキル、−Ｏ−アルキレン−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ５、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ５、−ＳＨまたは−ＮＨ（Ｒ５）であり；
Ｒ５、Ｒ６およびＲ７はそれぞれ独立に、Ｈ、アルキル、置換アルキル、カルボシクリル、置換カルボシクリル、ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロシクリルアルキルまたは置換ヘテロシクリルアルキルである。
【０１０５】
式（Ｊ）−ＴＬＲ２アゴニスト［３４］
ＴＬＲアゴニストは、式（Ｊ）：
【０１０６】
【化１０】
2014525429.tif 000011
【０１０７】
による化合物であってよく、式中、
Ｒ１は、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ７〜Ｃ１８アルキルまたは−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は、Ｃ７〜Ｃ１８アルキルであり；
Ｒ３は、Ｃ７〜Ｃ１８アルキルであり；
Ｌ１は、−ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）−、−ＣＨ２Ｏ−、−ＣＨ２ＮＲ７Ｃ（Ｏ）−または−ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）ＮＲ７−であり；
Ｌ２は、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｏ−、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）−または−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ７−であり；
Ｒ４は、−Ｌ３Ｒ５または−Ｌ４Ｒ５であり；
Ｒ５は、−Ｎ（Ｒ７）２、−ＯＲ７、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ７、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）Ｌ３Ｒ８、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）Ｌ４Ｒ８、−ＯＬ３Ｒ６、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｌ３Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｌ４Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ７、−ＯＳ（Ｏ）２ＯＲ７、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ６アリール、Ｃ１０アリール、Ｃ１４アリール、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１から３個のヘテロ原子を含有する５環員から１４環員のヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルまたはＯ、ＳおよびＮから選択される１から３個のヘテロ原子を含有する５環員から６環員のヘテロシクロアルキルであり、ここで、Ｒ５の前記アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルおよびヘテロシクロアルキルはそれぞれ非置換であるか、またはＲ５の前記アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルおよびヘテロシクロアルキルはそれぞれ、−ＯＲ９、−ＯＬ３Ｒ６、−ＯＬ４Ｒ６、−ＯＲ７および−Ｃ（Ｏ）ＯＲ７から独立に選択される１から３個の置換基で置換されており；
Ｌ３は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキレンであり、ここで、Ｌ３の前記Ｃ１〜Ｃ１０アルキレンは非置換であるか、またはＬ３の前記Ｃ１〜Ｃ１０アルキレンは、１から４個のＲ６基で置換されているか、またはＬ３の前記Ｃ１〜Ｃ１０アルキレンは同じ炭素原子上で、結合している炭素原子と共にＣ３〜Ｃ８シクロアルキルを一緒に形成している２個のＣ１〜Ｃ６アルキル基で置換されており；
Ｌ４は、−（（ＣＲ７Ｒ７）ｐＯ）ｑ（ＣＲ１０Ｒ１０）ｐ−または−（ＣＲ１１Ｒ１１）（（ＣＲ７Ｒ７）ｐＯ）ｑ（ＣＲ１０Ｒ１０）ｐ−であり、ここで、Ｒ１１はそれぞれ、結合している炭素原子と共にＣ３〜Ｃ８シクロアルキルを一緒に形成しているＣ１〜Ｃ６アルキル基であり；
Ｒ６はそれぞれ独立に、ハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、１〜２個のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜Ｃ６アルキル、−ＯＲ７、−Ｎ（Ｒ７）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ７）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７）２、Ｃ６アリール、Ｃ１０アリールおよびＣ１４アリールから選択され；
Ｒ７はそれぞれ独立に、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され；
Ｒ８は、−ＳＲ７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７）２ならびにＯおよびＮから選択される１から３個のヘテロ原子を含有する５環員から６環員のヘテロシクロアルキルから選択され；
Ｒ９は、フェニルであり；
Ｒ１０はそれぞれ独立に、Ｈおよびハロから選択され；
ｐはそれぞれ独立に、１、２、３、４、５および６から選択され、かつ
ｑは、１、２、３または４である。
【０１０８】
好ましくはＲ５は、Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７）２、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）Ｌ３−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７）２、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）Ｌ４−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７）２、−ＯＬ３−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｌ３−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７）２または−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｌ４−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７）２である。
【０１０９】
（Ｊ）の一部の実施形態では、Ｒ１はＨである。（Ｊ）の他の実施形態では、Ｒ１は−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１５アルキルである。
【０１１０】
（Ｊ）の一部の実施形態では：（ｉ）Ｌ１は、−ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）−であり、かつＬ２は、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｏ−、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）−または−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ７−であるか；または（ｉｉ）Ｌ１は−ＣＨ２Ｏ−であり、かつＬ２は、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｏ−、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）−または−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ７−であるか；または（ｉｉｉ）Ｌ１は−ＣＨ２ＮＲ７Ｃ（Ｏ）−であり、かつＬ２は、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｏ−、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）−または−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ７−であるか；または（ｉｖ）Ｌ１は−ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）ＮＲ７−であり、かつＬ２は、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｏ−、ＮＲ７Ｃ（Ｏ）−または−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ７−である。
【０１１１】
（Ｊ）の一部の実施形態では：（ｉ）Ｌ１は−ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）−であり、かつＬ２は−ＯＣ（Ｏ）−であるか；または（ｉｉ）Ｌ１は−ＣＨ２Ｏ−であり、かつＬ２は−Ｏ−であるか；または（ｉｉｉ）Ｌ１は−ＣＨ２Ｏ−であり、かつＬ２は−ＮＨＣ（Ｏ）−であるか；または（ｉｖ）Ｌ１は−ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−であり、かつＬ２は−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−である。
【０１１２】
（Ｊ）の一部の実施形態では、（ｉ）Ｒ２は−Ｃ１１アルキルであり、かつＲ３は−Ｃ１１アルキルであるか；または（ｉｉ）Ｒ２は−Ｃ１６アルキルであり、かつＲ３は−Ｃ１６アルキルであるか；または（ｉｉｉ）Ｒ２は−Ｃ１６アルキルであり、かつＲ３は−Ｃ１１アルキルであるか；または（ｉｖ）Ｒ２は−Ｃ１２アルキルであり、かつＲ３は−Ｃ１２アルキルであるか；または（ｖ）Ｒ２は−Ｃ７アルキルであり、かつＲ３は−Ｃ７アルキルであるか；または（ｖｉ）Ｒ２は−Ｃ９アルキルであり、かつＲ３は−Ｃ９アルキルであるか；または（ｖｉｉ）Ｒ２は−Ｃ８アルキルであり、かつＲ３は−Ｃ８アルキルであるか；または（ｖｉｉｉ）Ｒ２は−Ｃ１３アルキルであり、かつＲ３は−Ｃ１３アルキルであるか；または（ｉｘ）Ｒ２は−Ｃ１２アルキルであり、かつＲ３は−Ｃ１１アルキルであるか；または（ｘ）Ｒ２は−Ｃ１２アルキルであり、かつＲ３は−Ｃ１２アルキルであるか；または（ｘｉ）Ｒ２は−Ｃ１０アルキルであり、かつＲ３は−Ｃ１０アルキルであるか；または（ｘｉｉ）Ｒ２は−Ｃ１５アルキルであり、かつＲ３は−Ｃ１５アルキルである。
【０１１３】
（Ｊ）の一部の実施形態では、Ｒ２は−Ｃ１１アルキルであり、かつＲ３は−Ｃ１１アルキルである。
【０１１４】
（Ｊ）の一部の実施形態では、Ｌ３はＣ１〜Ｃ１０アルキレンであり、ここで、Ｌ３の前記Ｃ１〜Ｃ１０アルキレンは非置換であるか、または１から４個のＲ６基で置換されている。
【０１１５】
（Ｊ）の一部の実施形態では：Ｌ４は−（（ＣＲ７Ｒ７）ｐＯ）ｑ（ＣＲ１０Ｒ１０）ｐ−であり；Ｒ１０はそれぞれ独立にＨおよびＦから選択され；かつｐはそれぞれ独立に、２、３および４から選択される。
【０１１６】
（Ｊ）の一部の実施形態では、Ｒ６はそれぞれ独立に、メチル、エチル、ｉ−プロピル、ｉ−ブチル、−ＣＨ２ＯＨ、−ＯＨ、−Ｆ、−ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２およびフェニルから選択される。
【０１１７】
（Ｊ）の一部の実施形態では、Ｒ７はそれぞれ独立に、Ｈ、メチルおよびエチルから選択される。
【０１１８】
式（Ｋ）［３５］
ＴＬＲアゴニストは、式（Ｋ）：
【０１１９】
【化１１】
2014525429.tif 000012
【０１２０】
による化合物であってよく、式中、
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｒ５）２ＯＨ、−Ｌ１Ｒ５、−Ｌ１Ｒ６、−Ｌ２Ｒ５、−Ｌ２Ｒ６、−ＯＬ２Ｒ５または−ＯＬ２Ｒ６であり；
Ｌ１は、−Ｃ（Ｏ）−または−Ｏ−であり；
Ｌ２は、Ｃ１〜Ｃ６アルキレン、Ｃ２〜Ｃ６アルケニレン、アリーレン、ヘテロアリーレンまたは−（（ＣＲ４Ｒ４）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−であり、ここで、Ｌ２の前記Ｃ１〜Ｃ６アルキレンおよびＣ２〜Ｃ６アルケニレンは、１から４個のフルオロ基で置換されていてもよく；
Ｌ３はそれぞれ独立に、Ｃ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＲ４Ｒ４）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され、ここで、Ｌ３の前記Ｃ１〜Ｃ６アルキレンは、１から４個のフルオロ基で置換されていてもよく；
Ｌ４は、アリーレンまたはヘテロアリーレンであり；
Ｒ２は、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ３は、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−Ｌ３Ｒ５、−Ｌ１Ｒ５、−Ｌ３Ｒ７、−Ｌ３Ｌ４Ｌ３Ｒ７、−Ｌ３Ｌ４Ｒ５、−Ｌ３Ｌ４Ｌ３Ｒ５、−ＯＬ３Ｒ５、−ＯＬ３Ｒ７、−ＯＬ３Ｌ４Ｒ７、−ＯＬ３Ｌ４Ｌ３Ｒ７、−ＯＲ８、−ＯＬ３Ｌ４Ｒ５、−ＯＬ３Ｌ４Ｌ３Ｒ５および−Ｃ（Ｒ５）２ＯＨから選択され；
Ｒ４はそれぞれ独立に、Ｈおよびフルオロから選択され；
Ｒ５は、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ９）２であり、
Ｒ６は、−ＣＦ２Ｐ（Ｏ）（ＯＲ９）２または−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０であり；
Ｒ７は、−ＣＦ２Ｐ（Ｏ）（ＯＲ９）２または−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０であり；
Ｒ８は、ＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり；
Ｒ９はそれぞれ独立に、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され；
Ｒ１０は、ＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり；
ｐはそれぞれ独立に、１、２、３、４、５および６から選択され、かつ
ｑは、１、２、３または４である。
【０１２１】
式（Ｋ）の化合物は好ましくは、式（Ｋ’）：
【０１２２】
【化１２】
2014525429.tif 000013
【０１２３】
の化合物であり、式中、
Ｐ１は、Ｈ、ＣＯＯＨで置換されていてもよいＣ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；
Ｐ２は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシおよび−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択されるが；
ただし、Ｐ１およびＰ２のうちの少なくとも１個が−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）であることを条件とし；
ＲＢは、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され；
ＲＸおよびＲＹは独立に、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され；
Ｘは、共有結合、ＯおよびＮＨから選択され；
Ｙは、共有結合、Ｏ、Ｃ（Ｏ）、ＳおよびＮＨから選択され；
Ｌは、共有結合、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立に選択される１から４個の置換基でそれぞれ置換されていてもよいＣ１〜Ｃ６アルキレン、Ｃ１〜Ｃ６アルケニレン、アリーレン、ヘテロアリーレン、Ｃ１〜Ｃ６アルキレンオキシおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；
ｐはそれぞれ独立に、１、２、３、４、５および６から選択され；かつ
ｑは、１、２、３および４から選択される］。
【０１２４】
式（Ｋ’）の一部の実施形態では：Ｐ１は、ＣＯＯＨで置換されていてもよいＣ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；Ｐ２は、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシおよび−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；ＲＢはＣ１〜Ｃ６アルキルであり；Ｘは共有結合であり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立に選択される１から４個の置換基でそれぞれ置換されていてもよいＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；ｐはそれぞれ独立に、１、２および３から選択され；ｑは、１および２から選択される。
【０１２５】
式（Ｆ）−ＴＬＲ７アゴニスト［８］
ＴＬＲアゴニストは、式（Ｆ）：  
【０１２６】
【化１３】
2014525429.tif 000014
【０１２７】
による化合物であってよく、式中、
Ｘ３は、Ｎであり；
Ｘ４は、ＮまたはＣＲ３であり、
Ｘ５は、−ＣＲ４＝ＣＲ５−であり；
Ｒ１およびＲ２はＨであり；
Ｒ３は、Ｈであり；
Ｒ４およびＲ５はそれぞれ独立に、Ｈ、ハロゲン、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ７、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１２）、−Ｎ（Ｒ１１Ｒ１２）、−Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＨＮ（Ｒ９）２、−ＳＲ７、−（ＣＨ２）ｎＯＲ７、−（ＣＨ２）ｎＲ７、−ＬＲ８、−ＬＲ１０、−ＯＬＲ８、−ＯＬＲ１０、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルおよびＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキルから選択され、ここで、Ｒ４およびＲ５の前記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルおよびＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル基はそれぞれ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｒ７、−ＯＲ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−Ｎ（Ｒ９）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ９）２および−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）２Ｒ８から独立に選択される１から３個の置換基で置換されていてもよいか；
または、Ｒ３およびＲ４またはＲ４およびＲ５またはＲ５およびＲ６は、隣接する環原子上に存在する場合、場合によって一緒に連結して、５員〜６員の環を形成することができ、その際、前記５員〜６員の環は、Ｒ７で置換されていてもよく；
Ｌはそれぞれ独立に、結合、−（Ｏ（ＣＨ２）ｍ）ｔ−、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニレンおよびＣ２〜Ｃ６アルキニレンから選択され、ここで、Ｌの前記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニレンおよびＣ２〜Ｃ６アルキニレンはそれぞれ、ハロゲン、−Ｒ８、−ＯＲ８、−Ｎ（Ｒ９）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２および−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２から独立に選択される１から４個の置換基で置換されていてもよく；
Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシおよびＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキルから選択され、ここで、Ｒ７の前記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシおよびＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル基はそれぞれ、１から３個のＲ１３基で置換されていてもよく、Ｒ１３はそれぞれ独立に、ハロゲン、
【０１２８】
【化１４】
2014525429.tif 000015
【０１２９】
から選択され；
Ｒ８はそれぞれ独立に、Ｈ、−ＣＨ（Ｒ１０）２、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキルおよびＣ１〜Ｃ６ハロアルコキシから選択され、ここで、Ｒ８の前記Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキルおよびＣ１〜Ｃ６ハロアルコキシ基はそれぞれ、−ＣＮ、Ｒ１１、−ＯＲ１１、−ＳＲ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｒ１２、−Ｎ（Ｒ９）２、−ＯＲ９、−ＯＲ１０、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１ＯＨ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１１Ｒ１２、−ＮＲ１１Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１１）２および−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１１）２から独立に選択される１から３個の置換基で置換されていてもよく；
Ｒ９はそれぞれ独立に、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキルおよびＣ３〜Ｃ６シクロアルキルから選択されるか、またはＲ９はそれぞれ独立に、結合しているＮと一緒にＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキルを形成しているＣ１〜Ｃ６アルキルであり、ここで、前記Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル環は場合によって、Ｎ、ＯおよびＳから選択される追加のヘテロ原子を含有してもよく、Ｒ９の前記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルまたはＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル基はそれぞれ、−ＣＮ、Ｒ１１、−ＯＲ１１、−ＳＲ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、ＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、−ＮＲ１１Ｒ１２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１ＯＨ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１１Ｒ１２、−ＮＲ１１Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１１）２および−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１１）２から独立に選択される１から３個の置換基で置換されていてもよく；
Ｒ１０はそれぞれ独立に、アリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキルおよびヘテロアリールから選択され、ここで、前記アリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキルおよびヘテロアリール基は、ハロゲン、−Ｒ８、−ＯＲ８、−ＬＲ９、−ＬＯＲ９、−Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＮＲ９ＣＯ２Ｒ８、−ＣＯ２Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ８および−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２から選択される１から３個の置換基で置換されていてもよく；
Ｒ１１およびＲ１２は独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルおよびＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキルから選択され、ここで、Ｒ１１およびＲ１２の前記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルおよびＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル基はそれぞれ、ハロゲン、−ＣＮ、Ｒ８、−ＯＲ８、Ｃ（Ｏ）Ｒ８、ＯＣ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキルおよびＣ１〜Ｃ６ハロアルコキシから独立に選択される１から３個の置換基で置換されていてもよいか；
または、Ｒ１１およびＲ１２はそれぞれ独立に、結合しているＮ原子と一緒になって、置換されていてもよく、Ｎ、ＯおよびＳから選択される追加のヘテロ原子を含有してもよいＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル環を形成しているＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
環Ａは、アリールまたはヘテロアリールであり、ここで、環Ａの前記アリールおよびヘテロアリール基は、１から３個のＲＡ基で置換されていてもよく、ここで、ＲＡはそれぞれ独立に、
【０１３０】
【化１５】
2014525429.tif 000016
【０１３１】
から選択されるか、または環Ａ上の２個の隣接するＲＡ置換基は、環員として２個までのヘテロ原子を含有する５員〜６員の環を形成しており；
ｎは、出現する毎に独立に、０、１、２、３、４、５、６、７または８であり；
ｍはそれぞれ独立に、１、２、３、４、５および６から選択され、かつ
ｔは、１、２、３、４、５、６、７または８である。
【０１３２】
式（Ｃ）、（Ｄ）、（Ｅ）、（Ｇ）および（Ｈ）
前記で検討されているとおり、ＴＬＲアゴニストは、式（Ｃ）、（Ｄ）、（Ｅ）、（Ｇ）または（Ｈ）であり得る。
【０１３３】
式（Ｃ）、（Ｄ）、（Ｅ）および（Ｈ）の「親」化合物は、有用なＴＬＲ７アゴニストであるが（参考文献６〜９および３６〜５２を参照されたい）、好ましくは本明細書では、リン含有部分の付着によって修飾されている。
【０１３４】
式（Ｃ）、（Ｄ）および（Ｅ）の一部の実施形態では、化合物は、下記に示されている式（Ｃ’）、（Ｄ’）および（Ｅ’）による構造を有する：
【０１３５】
【化１６】
2014525429.tif 000017
【０１３６】
式（Ｃ）、（Ｄ）、（Ｅ）および（Ｈ）の本発明の実施形態はまた、式（Ｃ’）、（Ｄ’）、（Ｅ’）および（Ｈ’）にも当てはまる。
【０１３７】
式（Ｃ）、（Ｄ）、（Ｅ）および（Ｈ）の一部の実施形態では：ＸはＯであり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立に選択される１から４個の置換基でそれぞれ置換されていてもよいＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；ｐはそれぞれ独立に、１、２および３から選択され；かつｑは、１および２から選択される。
【０１３８】
式（Ｃ）の他の実施形態では：Ｐ３は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＣＦ３および−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐＯｓ−および−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；Ｐ４は、−Ｃ１〜Ｃ６アルキルアリールおよび−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；ＸｃはＣＨであり；Ｘは共有結合であり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立に選択される１から４個の置換基でそれぞれ置換されていてもよいＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；ｐはそれぞれ独立に１、２および３から選択され；ｑは、１または２である。
【０１３９】
式（Ｃ）、（Ｄ）、（Ｅ）および（Ｈ）の他の実施形態では：Ｘは共有結合であり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立に選択される１から４個の置換基でそれぞれ置換されていてもよいＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；ｐはそれぞれ独立に、１、２および３から選択され；かつｑは、１および２から選択される。
【０１４０】
式（Ｃ）の他の実施形態では：Ｐ３は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＣＦ３および−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐＯｓ−および−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；Ｐ４は、−Ｃ１〜Ｃ６アルキルアリールおよび−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；ＸｃはＮであり；Ｘは共有結合であり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立に選択される１から４個の置換基でそれぞれ置換されていてもよいＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；ｐはそれぞれ独立に１、２および３から選択され；ｑは、１および２から選択される。
【０１４１】
式（Ｄ）の他の実施形態では：Ｐ５は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択される。
【０１４２】
式（Ｄ）の他の実施形態では：ＸはＯであり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立に選択される１から４個の置換基でそれぞれ置換されていてもよいＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；ｐはそれぞれ独立に１、２および３から選択され；ｑは、１および２から選択される。
【０１４３】
式（Ｄ）の他の実施形態では：Ｘは共有結合であり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立に選択される１から４個の置換基でそれぞれ置換されていてもよいＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；ｐはそれぞれ独立に１、２および３から選択され；ｑは、１および２から選択される。
【０１４４】
式（Ｅ）の他の実施形態では：ＸはＯであり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立に選択される１から４個の置換基でそれぞれ置換されていてもよいＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；ｐはそれぞれ独立に、１、２および３から選択され；かつｑは、１および２から選択される。
【０１４５】
式（Ｅ）の他の実施形態では：Ｘは共有結合であり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立に選択される１から４個の置換基でそれぞれ置換されていてもよいＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；ｐはそれぞれ独立に、１、２および３から選択され；かつｑは、１および２から選択される。
【０１４６】
式（Ｅ）の他の実施形態では：ＸＥはＣＨ２であり、Ｐ８は、−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）で置換されていてもよいＣ１〜Ｃ６アルコキシである。
【０１４７】
式（Ｅ）の他の実施形態では：Ｐ９は、ＯＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルで置換されていてもよい−ＮＨＣ１〜Ｃ６アルキルならびに−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）である。
【０１４８】
一部の実施形態では、式（Ｃ）の化合物は、Ｐ４が−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）である化合物ではない。
【０１４９】
一部の実施形態では、式（Ｃ）の化合物では、Ｐ４は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ１〜Ｃ６アルキルアリールから選択される。
【０１５０】
式（Ｈ）の一部の実施形態では：ＸＨ１−ＸＨ２はＣＲＨ２ＲＨ３であり、ＲＨ２およびＲＨ３はＨであり、ＸＨ３はＮであり、Ｘは共有結合であり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立に選択される１から４個の置換基でそれぞれ置換されていてもよいＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；ｐはそれぞれ独立に１、２および３から選択され；かつｑは、１および２から選択される。
【０１５１】
式（Ｈ）の一部の実施形態では：ＸＨ１−ＸＨ２はＣＲＨ２ＲＨ３であり、ＲＨ２およびＲＨ３はＨであり、ＸＨ３はＮであり、ＸはＯであり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立に選択される１から４個の置換基でそれぞれ置換されていてもよいＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；ｐはそれぞれ独立に１、２および３から選択され；かつｑは、１および２から選択される。
【０１５２】
式（Ｇ）の「親」化合物は、有用なＴＬＲ８アゴニストであるが（参考文献１０および１１を参照されたい）、好ましくは本明細書では、吸着を可能にするためにリン含有部分の付着によって修飾されている。式（Ｇ）の一部の実施形態では、化合物は、式（Ｇ’）による構造を有する；
【０１５３】
【化１７】
2014525429.tif 000018
【０１５４】
式（Ｇ）または（Ｇ’）の一部の実施形態では：ＸＧはＣであり、
【０１５５】
【化１８】
2014525429.tif 000019
【０１５６】
は二重結合を表している。
【０１５７】
式（Ｇ）または（Ｇ’）の一部の実施形態では：Ｘは共有結合であり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立に選択される１から４個の置換基でそれぞれ置換されていてもよいＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；ｐはそれぞれ独立に１、２および３から選択され；ｑは、１および２から選択される。
【０１５８】
式（Ｇ）または（Ｇ’）の一部の実施形態では：ＸはＯであり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立に選択される１から４個の置換基でそれぞれ置換されていてもよいＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；ｐはそれぞれ独立に１、２および３から選択され；かつｑは、１および２から選択される。
【０１５９】
医薬組成物および製品
本発明は、種々の免疫原性組成物を提供する。これらは、理想的にはヒトでの使用に適した医薬組成物である。医薬組成物は通常、ＴＬＲアゴニスト、不溶性金属塩および／または免疫原に加えて成分を含み、例えばそれらは典型的には、１種または複数の医薬担体（複数可）および／または賦形剤（複数可）を含む。そのような成分についての徹底的な検討は、参考文献５３において入手することができる。
【０１６０】
医薬組成物は好ましくは、特に投与の時点では水性形態であるが、それらはまた、非水性液体形態で、または乾燥形態で、例えばゼラチンカプセル剤として、または凍結乾燥物（ｌｙｏｐｈｉｌｉｓａｔｅ）などとして提供することができる。
【０１６１】
医薬組成物は、チオメルサールまたは２−フェノキシエタノールなどの１種または複数の防腐剤を含み得る。水銀を含有しない組成物が好ましく、防腐剤を含まないワクチンを調製することができる。
【０１６２】
医薬組成物は、例えば張度を制御するために、ナトリウム塩などの生理学的塩を含んでもよい。塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）が典型的であり、これは、１から２０ｍｇ／ｍｌ、例えば１０±２ｍｇ／ｍｌまたは９ｍｇ／ｍｌで存在し得る。存在し得る他の塩には、塩化カリウム、二水素リン酸カリウム、リン酸二ナトリウム脱水物（ｄｉｓｏｄｉｕｍ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  ｄｅｈｙｄｒａｔｅ）、塩化マグネシウム、塩化カルシウムなどが含まれる。
【０１６３】
医薬組成物は、２００ｍＯｓｍ／ｋｇから４００ｍＯｓｍ／ｋｇ、例えば２４０〜３６０ｍＯｓｍ／ｋｇまたは２９０〜３１０ｍＯｓｍ／ｋｇの重量オスモル濃度を有してよい。
【０１６４】
医薬組成物は、化合物（不溶性金属塩を用いるか、または用いずに）を淡水（ｐｌａｉｎ  ｗａｔｅｒ）（例えば注射用水）中に含み得るが、通常は１種または複数の緩衝液を含む。典型的な緩衝液には：リン酸塩緩衝液（第１５の態様を除く）；トリス緩衝液；ホウ酸塩緩衝液；コハク酸塩緩衝液；ヒスチジン緩衝液（特に水酸化アルミニウムアジュバントとともに）；またはクエン酸塩緩衝液が含まれる。緩衝塩（ｂｕｆｆｅｒ  ｓａｌｔ）は典型的には、５〜２０ｍＭの範囲で含まれる。リン酸塩緩衝液を使用する場合には、ホスフェートイオンの濃度は一部の実施形態では、＜５０ｍＭ（上記参照）、例えば＜１０ｍＭであるべきである。
【０１６５】
医薬組成物は典型的には、５．０から９．５、例えば６．０から８．０のｐＨを有する。
【０１６６】
医薬組成物は好ましくは、滅菌されている。
【０１６７】
医薬組成物は好ましくは、非発熱性であり、例えば１用量あたり＜１ＥＵ（内毒素単位、標準測定）、好ましくは１用量あたり＜０．１ＥＵを含有する。
【０１６８】
医薬組成物は好ましくは、グルテンを含まない。
【０１６９】
医薬組成物は、動物（特にヒト）患者に投与するのに適しており、したがって、ヒトおよび獣医学使用の両方を含む。それらは、患者において免疫応答を上昇させる方法において使用することができ、その方法は、組成物を患者に投与するステップを含む。被験体が病原体に曝露される前に、かつ／または被験体が病原体に曝露された後に、組成物を投与し得る。
【０１７０】
医薬組成物は、単位用量形態で調製することができる。一部の実施形態では、単位用量は、０．１〜１．０ｍｌ、例えば約０．５ｍｌの体積を有し得る。
【０１７１】
本発明はまた、本発明の医薬組成物を含有する、例えば単位用量を含有する送達デバイス（例えばシリンジ、ネブライザー、噴霧器、吸入器、皮膚パッチなど）を提供する。このデバイスは、組成物を脊椎動物被験体に投与するために使用することができる。
【０１７２】
本発明はまた、本発明の医薬組成物を含有する、例えば単位用量を含有する滅菌容器（例えばバイアル）を提供する。
【０１７３】
本発明はまた、本発明の医薬組成物の単位用量を提供する。
【０１７４】
本発明はまた、本発明の医薬組成物を含有する気密密閉容器を提供する。適切な容器には例えば、バイアルが含まれる。
【０１７５】
本発明はまた、第１および第２のキット成分を含むキットを提供し、ここで：（ｉ）第１のキット成分は、不溶性金属塩および少なくとも１種のＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原を含み；かつ（ｉｉ）第２のキット成分は、ＴＬＲアゴニストを含む。第２の成分は理想的には、不溶性金属塩を含まず、かつ／またはＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原を含まない。第１および第２の成分を組み合わせて、被験体に投与するのに適した組成物を提供することができる。
【０１７６】
本発明はまた、第１および第２のキット成分を含むキットを提供し、ここで：（ｉ）第１のキット成分は、不溶性金属塩およびＴＬＲアゴニストを含み；かつ（ｉｉ）第２のキット成分は、少なくとも１種のＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原を含む。第２の成分は理想的には、不溶性金属塩および／またはＴＬＲアゴニストを含まない。一部の実施形態では、第２の成分は、凍結乾燥されている。第１および第２の成分を組み合わせて、被験体に投与するのに適した医薬組成物を提供することができる。
【０１７７】
本発明はまた、第１および第２のキット成分を含むキットを提供し、ここで：（ｉ）第１のキット成分は、少なくとも１種のＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原およびＴＬＲアゴニストを含み；かつ（ｉｉ）第２のキット成分は、不溶性金属塩を含む。第２の成分は理想的には、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ抗原および／またはＴＬＲアゴニストを含まない。第１および第２の成分を組み合わせて、被験体に投与するのに適した医薬組成物を提供することができる。
【０１７８】
一部の実施形態では、これらのキットは２つのバイアルを含む。他の実施形態では、それらは、１つの既に充填されているシリンジと、１つのバイアルとを含み、注射前にシリンジの内容物がバイアルの内容物と混合される。バイアルの内容物が凍結乾燥されている場合には、シリンジ／バイアルの構成（ａｒｒａｎｇｅｍｅｎｔ）が有用である。しかし通常は、第１および第２のキット成分は両方とも、水性液体の形態である。
【０１７９】
本発明の医薬組成物は、様々な形態で調製し得る。例えば組成物は、液体溶液または懸濁液のいずれかとしての注射剤として調製し得る。注射の前に液体ビヒクル中に溶解または懸濁させるのに適した固体形態もまた、調製することができる（例えば、凍結乾燥組成物または噴霧凍結乾燥組成物）。組成物を、局所投与のために、例えば軟膏剤、クリーム剤または散剤として調製し得る。組成物を、経口投与のために、例えば錠剤またはカプセル剤として、噴霧剤として、またはシロップ剤（場合によって風味をつけて）として調製し得る。組成物を、例えば微細散剤または噴霧剤を使用する吸入器による肺投与のために調製し得る。組成物を、坐剤または膣坐剤として調製し得る。組成物を、鼻、耳または眼投与のために、例えば噴霧剤または滴剤として調製し得る。組成物は、患者に投与する直前に組み合わされた組成物を再構成するように設計されているキットの形態であってよい。そのようなキットは、液体の形態の１種または複数の抗原および１種または複数の凍結乾燥抗原を含み得る。筋肉内投与用の注射剤が典型的である。
【０１８０】
組成物は、有効量のＴＬＲアゴニスト、即ち、単一用量で、または一連のものの一部として個体に投与した場合に、同時投与されたＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原に対して免疫応答を増強するのに有効である量を含む。この量は、処置される個体の健康および身体的状態、年齢、処置される固体の分類群（例えば、非ヒト霊長類、霊長類など）、個体の免疫系が抗体を合成する能力、所望の防御程度、ワクチンの処方、医学的状況の処置医師による評価ならびに他の関連要因に応じて変動してよい。量には、常套的な試験を介して決定することができる比較的幅広い範囲が該当する。１〜１０００μｇ／用量の量、例えば１用量当たり５〜１００μｇまたは１用量当たり１０〜１００μｇ、理想的には１用量当たり≦３００μｇ、例えば１用量当たり約５μｇ、１０μｇ、２０μｇ、２５μｇ、５０μｇまたは１００μｇを使用することができる。したがって、本発明の組成物中のＴＬＲアゴニストの濃度は、２〜２０００μｇ／ｍｌ、例えば１０〜２００μｇ／ｍｌ、または約１０、２０、４０、５０、１００もしくは２００μｇ／ｍｌ、理想的には≦６００μｇ／ｍｌであってよい。
【０１８１】
処置方法および免疫原性組成物の投与方法
本発明は、被験体において免疫応答を上昇させる方法を提供し、その方法は、被験体に、本発明の組成物を投与するステップを含む。
【０１８２】
本発明はまた、被験体において免疫応答を上昇させる方法で使用するための本発明の組成物を提供する。
【０１８３】
本発明はまた、被験体において免疫応答を上昇させるための医薬品を製造する際のＴＬＲアゴニスト、不溶性金属塩およびＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原（複数可）の使用を提供する。
【０１８４】
本発明はまた、被験体において免疫応答を上昇させるための医薬品（例えばワクチン）を製造する際の（ｉ）本明細書で定義されているとおりのＴＬＲアゴニストおよび（ｉｉ）不溶性金属塩および（ｉｉｉ）１種またはそれより多いＳ．ａｕｒｅｕｓ抗原の使用を提供する。
【０１８５】
本発明は、ヒトまたは非ヒト動物（特に哺乳動物）被験体において免疫応答を上昇させるために適している。本発明によって調製された組成物は、小児および成人の両方を処置するために使用することができる。
【０１８６】
これらの方法および使用によって刺激される免疫応答には一般に、抗体応答、好ましくは防御抗体応答が含まれる。この免疫応答はまた、細胞性応答も含み得る。免疫化の後に抗体応答および細胞性免疫応答を評価する方法は、当技術分野では周知である。
【０１８７】
処置は、単一用量スケジュールまたは複数用量スケジュールによってよい。複数用量を、一次免疫化スケジュールおよび／または追加免疫化スケジュールで使用することができる。免疫学的にナイーブな患者では、１用量超（典型的には２用量）の投与が特に有用である。複数用量を典型的には、少なくとも１週間空けて（例えば約２週間、約３週間、約４週間、約６週間、約８週間、約１０週間、約１２週間など）投与する。
【０１８８】
化学基
他に具体的に定義されていない限り、本明細書で検討されている化学基は、本明細書で使用される場合は次の意味を有する：
「アルキル」という用語には、下記を含む飽和炭化水素残基が含まれる：
１０個までの原子（Ｃ１〜Ｃ１０）または６個までの原子（Ｃ１〜Ｃ６）または４個までの原子（Ｃ１〜Ｃ４）の直鎖基。そのようなアルキル基の例には、これらに限られないが、Ｃ１−メチル、Ｃ２−エチル、Ｃ３−プロピルおよびＣ４−ｎ−ブチルが含まれる。
【０１８９】
３から１０個の原子（Ｃ３〜Ｃ１０）または７個までの原子（Ｃ３〜Ｃ７）または４個までの原子（Ｃ３〜Ｃ４）の分岐基。そのようなアルキル基の例には、これらに限られないが、Ｃ３−イソ−プロピル、Ｃ４−ｓｅｃ−ブチル、Ｃ４−イソ−ブチル、Ｃ４−ｔｅｒｔ−ブチルおよびＣ５−ネオ−ペンチルが含まれる。
【０１９０】
「アルキレン」という用語は、アルキル基に由来する二価の炭化水素ラジカルを指し、かつ上記の定義に従って解釈されることとする。
【０１９１】
「アルケニル」という用語には、下記を含むモノ不飽和炭化水素残基が含まれる：
２から６個の原子（Ｃ２〜Ｃ６）の直鎖基。そのようなアルケニル基の例には、これらに限られないが、Ｃ２−ビニル、Ｃ３−１−プロペニル、Ｃ３−アリル、Ｃ４−２−ブテニルが含まれる。
【０１９２】
３から８個の原子（Ｃ３〜Ｃ８）の分岐基。そのようなアルケニル基の例には、これらに限られないが、Ｃ４−２−メチル−２−プロペニルおよびＣ６−２，３−ジメチル−２−ブテニルが含まれる。
【０１９３】
アルケニレンという用語は、アルケニル基に由来する二価炭化水素ラジカルを指し、上記の定義に従って解釈されることとする。
【０１９４】
「アルコキシ」という用語には、下記を含むＯ−連結炭化水素残基が含まれる：
１から６個の原子（Ｃ１〜Ｃ６）または１から４個の原子（Ｃ１〜Ｃ４）の直鎖基。そのようなアルコキシ基の例には、これらに限られないが、Ｃ１−メトキシ、Ｃ２−エトキシ、Ｃ３−ｎ−プロポキシおよびＣ４−ｎ−ブトキシが含まれる。
【０１９５】
３から６個の原子（Ｃ３〜Ｃ６）または３から４個の原子（Ｃ３〜Ｃ４）の分岐基。そのようなアルコキシ基の例には、これらに限られないが、Ｃ３−イソ−プロポキシおよびＣ４−ｓｅｃ−ブトキシおよびｔｅｒｔ−ブトキシが含まれる。
【０１９６】
ハロは、Ｃｌ、Ｆ、ＢｒおよびＩから選択される。ハロは好ましくは、Ｆである。
【０１９７】
「アリール」という用語には、６または１０個の炭素原子を含有する単一または縮合芳香環系が含まれ；ここで、別段に述べられていない限り、生じた各アリールは、上記で定義されたとおり、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ、ＯＨ、ハロ、ＣＮ、ＣＯＯＲ１４、ＣＦ３およびＮＲ１４Ｒ１５から独立に選択される５個までの置換基で置換されていてもよい。典型的には、アリールは場合によって、１、２または３個の置換基で置換されていてもよい。場合による置換基は上述されたものから選択される。適切なアリール基の例には、フェニルおよびナフチル（それぞれ上述のとおり置換されていてもよい）が含まれる。アリーレンは、アリール基に由来する二価のラジカルを指し、上記の定義に従って解釈されることとする。
【０１９８】
「ヘテロアリール」という用語には、１または２個のＮ原子および場合によってＮＲ１４原子または１個のＮＲ１４原子およびＳもしくはＯ原子または１個のＳ原子または１個のＯ原子を含有する５、６、９または１０員の単環式または二環式芳香環が含まれ；ここで、別段に述べられていない限り、前記ヘテロアリールは、下記で定義されているとおり、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ、ＯＨ、ハロ、ＣＮ、ＣＯＯＲ１４、ＣＦ３およびＮＲ１４Ｒ１５から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよい。適切なヘテロアリール基の例には、チエニル、フラニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾイル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、テトラゾリル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、インドリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾトリアゾリル、キノリニルおよびイソキノリニル（場合によって、上述のとおり置換されている）が含まれる。ヘテロアリーレンは、ヘテロアリールに由来する二価のラジカルを指し、上記の定義に従って解釈されることとする。
【０１９９】
「ヘテロシクリル」という用語は、Ｃ連結またはＮ連結している３員から１０員の非芳香族単環式または二環式環であり、ここで、前記ヘテロシクロアルキル環は可能な場合には、Ｎ、ＮＲ１４、Ｓ（Ｏ）ｑおよびＯから独立に選択される１、２または３個のヘテロ原子を含有し；かつ前記ヘテロシクロアルキル環は場合によって可能な場合には、１または２つの二重結合を含有し、かつ炭素上で、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ、ＯＨ、ＣＮ、ＣＦ３、ハロ、ＣＯＯＲ１４、ＮＲ１４Ｒ１５およびアリールから独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい。
【０２００】
上記の定義において、Ｒ１４およびＲ１５は、Ｈおよび（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルから独立に選択される。
【０２０１】
構造式が、例えば式（Ｃ）の場合には基Ｐ３についてのように、特定されていないか、または「浮動性」結合によって分子の核に付着している置換基と共に定義されている場合、この定義は、浮動性結合が位置している環上のいずれかの原子に、その原子で許容される原子価に応じて特定されていない置換基が付着している場合を含む。
【０２０２】
互変異性体形態で（即ちケトまたはエノール形態で）存在し得る本発明の化合物、例えば式（Ｃ）または（Ｈ）の化合物の場合には、特定の化合物についての言及は場合によって、そのような互変異性体形態の全てを含む。
【０２０３】
一般
「含むこと」という用語は、「含むこと」および「からなること」を包含し、例えば、Ｘを「含む」組成物は、Ｘから専らなることも、または追加の何か、例えば、Ｘ＋Ｙを含むこともある。
【０２０４】
「実質的に」という語句は、「完全に」を排除するものではない。例えば、Ｙを「実質的に含まない」組成物は、Ｙを完全に含まないこともある。必要に応じて、「実質的に」という言葉は、本発明の定義から省かれていることもある。
【０２０５】
数値ｘに関連して、「約」という用語は、任意選択であり、例えば、ｘ±１０％を意味する。
【０２０６】
特に述べられていない限り、２つ以上の成分を混合するステップを含むプロセスは、特定の順序での混合を何ら必要としない。したがって成分を、任意の順序で混合することができる。３つの成分が存在する場合は、２つの成分を互いに組み合わせることができ、次いで、その組合せを、第３の成分などと組み合わせ得る。
【０２０７】
動物（特にウシ）材料を、細胞培養において使用する場合、それらを、伝染性海綿状脳症（ＴＳＥ）がない、特にウシ海綿状脳症（ＢＳＥ）がない供給源から得るべきである。総じて、動物由来材料が完全に存在しない中で、細胞を培養することが好ましい。
【０２０８】
化合物を組成物の一部として身体に投与する場合、代替法では、その化合物を、適切なプロドラッグに置き換え得る。
【０２０９】
本発明で使用されるリン（ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｕｓ）含有基は、周囲環境のｐＨ、例えばそれらが溶解している溶媒のｐＨに応じていくつかのプロトン化および脱プロトン化形態で存在することがある。したがって、特定の形態を例示することはできるが、別段に述べられていない限り、これらの例示は、単なる代表であり、具体的なプロトン化または脱プロトン化形態に限定するものではないことが意図されている。例えばホスフェート基の場合には、これは−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２として例示されるが、定義には、酸性条件下で存在し得るプロトン化形態−［ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ２）（ＯＨ）］＋および−［ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ２）２］２＋ならびに塩基性条件下で存在し得る脱プロトン化形態−［ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）（Ｏ）］−および［ＯＰ（Ｏ）（Ｏ）２］２−が含まれる。
【０２１０】
本明細書に開示されている化合物は、薬学的に許容される塩として存在してよい。したがって、化合物は、その薬学的に許容される塩、即ち生理学的または毒物学的に耐容される塩（適切には、薬学的に許容される塩基付加塩および薬学的に許容される酸付加塩が含まれる）の形態で使用され得る。
【図面の簡単な説明】
【０２１１】
【図１−１】図１は、（Ａ）Ｈｌａ−Ｈ３５Ｌ（Ｂ）ＥｓｘＡＢ（Ｃ）Ｓｔａ００６（Ｄ）Ｓｔａ０１１に対する、３回の筋肉内注射後のＩｇＧ力価を示している。各パネルには、左から右へ：Ａｌ−Ｈアジュバントのみ；Ａｌ−Ｈ／Ｋ２のみ；Ｃｏｍｂｏ−１＋Ａｌ−Ｈ；Ｃｏｍｂｏ−１＋Ａｌ−Ｈ／Ｋ２の４つの群が存在する。＊＊は、Ｃｏｍｂｏ−１＋Ａｌ−Ｈに対する統計的に有意な差違（ｐ＜０．０５）を示している。
【図１−２】図１は、（Ａ）Ｈｌａ−Ｈ３５Ｌ（Ｂ）ＥｓｘＡＢ（Ｃ）Ｓｔａ００６（Ｄ）Ｓｔａ０１１に対する、３回の筋肉内注射後のＩｇＧ力価を示している。各パネルには、左から右へ：Ａｌ−Ｈアジュバントのみ；Ａｌ−Ｈ／Ｋ２のみ；Ｃｏｍｂｏ−１＋Ａｌ−Ｈ；Ｃｏｍｂｏ−１＋Ａｌ−Ｈ／Ｋ２の４つの群が存在する。＊＊は、Ｃｏｍｂｏ−１＋Ａｌ−Ｈに対する統計的に有意な差違（ｐ＜０．０５）を示している。
【図２】図２は、免疫化マウスにおける（Ａ）インターフェロン−γおよび（Ｂ）ＩＬ−４／ＩＬ−１３応答を示している。Ｘ軸上の群ＡからＩに：（Ａ）生理食塩水；（Ｂ）Ａｌ−Ｈのみ；（Ｃ）Ａｌ−Ｈ／Ｋ２のみ；（Ｄ）アジュバント添加されていない抗原；（Ｅ）Ａｌ−Ｈでアジュバント添加された抗原；（Ｆ）１μｇのＫ２でＡｌ−Ｈ／Ｋ２でアジュバント添加された抗原；（Ｇ）（Ｆ）と同じだが、ただし５μｇのＫ２を含むもの；（Ｈ）（Ｆ）と同じだが、ただし２５μｇのＫ２を含むもの；（Ｉ）（Ｆ）と同じだが、ただし５０μｇのＫ２を含むものを与えた。
【図３】図３は、膿瘍モデルにおける腎臓でのＣＦＵ（ｌｏｇ）を示している。
【図４】図４から７は、Ｂａｌｂ／Ｃマウスにおける抗体力価を示している。左から右へ：４つの陰性対照（生理食塩水および／または緩衝液のみ）；アジュバント添加されていないＣｏｍｂｏ−１抗原（２回用量後および３回用量後）；Ａｌ−Ｈアジュバントを含むＣｏｍｂｏ−１（２回用量および３回用量）；およびＡｌ−Ｈ／Ｋ２を含むＣｏｍｂｏ−１（２回用量および３回用量）の１０群である。図４は、抗ＨＬＡ応答を示している；図５は抗ＥｓｘＡＢ応答を示している；図６は抗Ｓｔａ００６応答を示している；図７は抗Ｓｔａ０１１応答を示している。星印は、マン−ホイットニー検定による統計的有意性を示している（「＊＊」、ｐ＜０．０１）。
【図５】図４から７は、Ｂａｌｂ／Ｃマウスにおける抗体力価を示している。左から右へ：４つの陰性対照（生理食塩水および／または緩衝液のみ）；アジュバント添加されていないＣｏｍｂｏ−１抗原（２回用量後および３回用量後）；Ａｌ−Ｈアジュバントを含むＣｏｍｂｏ−１（２回用量および３回用量）；およびＡｌ−Ｈ／Ｋ２を含むＣｏｍｂｏ−１（２回用量および３回用量）の１０群である。図４は、抗ＨＬＡ応答を示している；図５は抗ＥｓｘＡＢ応答を示している；図６は抗Ｓｔａ００６応答を示している；図７は抗Ｓｔａ０１１応答を示している。星印は、マン−ホイットニー検定による統計的有意性を示している（「＊＊」、ｐ＜０．０１）。
【図６】図４から７は、Ｂａｌｂ／Ｃマウスにおける抗体力価を示している。左から右へ：４つの陰性対照（生理食塩水および／または緩衝液のみ）；アジュバント添加されていないＣｏｍｂｏ−１抗原（２回用量後および３回用量後）；Ａｌ−Ｈアジュバントを含むＣｏｍｂｏ−１（２回用量および３回用量）；およびＡｌ−Ｈ／Ｋ２を含むＣｏｍｂｏ−１（２回用量および３回用量）の１０群である。図４は、抗ＨＬＡ応答を示している；図５は抗ＥｓｘＡＢ応答を示している；図６は抗Ｓｔａ００６応答を示している；図７は抗Ｓｔａ０１１応答を示している。星印は、マン−ホイットニー検定による統計的有意性を示している（「＊＊」、ｐ＜０．０１）。
【図７】図４から７は、Ｂａｌｂ／Ｃマウスにおける抗体力価を示している。左から右へ：４つの陰性対照（生理食塩水および／または緩衝液のみ）；アジュバント添加されていないＣｏｍｂｏ−１抗原（２回用量後および３回用量後）；Ａｌ−Ｈアジュバントを含むＣｏｍｂｏ−１（２回用量および３回用量）；およびＡｌ−Ｈ／Ｋ２を含むＣｏｍｂｏ−１（２回用量および３回用量）の１０群である。図４は、抗ＨＬＡ応答を示している；図５は抗ＥｓｘＡＢ応答を示している；図６は抗Ｓｔａ００６応答を示している；図７は抗Ｓｔａ０１１応答を示している。星印は、マン−ホイットニー検定による統計的有意性を示している（「＊＊」、ｐ＜０．０１）。
【図８】図８から１２は、様々なアジュバントを含むＣｏｍｂｏ−１で免疫化した後のマウスにおける生存％を示している。
【図９】図８から１２は、様々なアジュバントを含むＣｏｍｂｏ−１で免疫化した後のマウスにおける生存％を示している。
【図１０】図８から１２は、様々なアジュバントを含むＣｏｍｂｏ−１で免疫化した後のマウスにおける生存％を示している。
【図１１】図８から１２は、様々なアジュバントを含むＣｏｍｂｏ−１で免疫化した後のマウスにおける生存％を示している。
【図１２】図８から１２は、様々なアジュバントを含むＣｏｍｂｏ−１で免疫化した後のマウスにおける生存％を示している。
【図１３】図１３は、Ａｌ−Ｈ（１３Ａおよび１３Ｂ）またはＡｌ−Ｈ／Ｋ２（１３Ｃおよび１３Ｄ）でアジュバント添加されたＣｏｍｂｏ−１で免疫化されたマウスにおける膿瘍（１３Ａおよび１３Ｃ）または皮膚壊死（１３Ｂおよび１３Ｄ）の面積（ｍｍ２）を示している。各群において、四角はＣｏｍｂｏ−１についてのデータを示し、円はアジュバントのみについてのデータを示している。＊はアジュバントを受けたマウスと抗原＋アジュバントを受けたマウスとの間での統計的に有意な差違を示している。ｘ軸は、株ＵＳＡ３００に感染後の日数を示している。
【図１４】図１４は、（Ａ）Ｎｅｗｍａｎ（Ｂ）ＭＷ２または（Ｃ）ＬＡＣで攻撃されたマウスにおける生存率（％）を示している。それぞれの場合において、対の左側の柱は、抗原を含まない陰性対照であり、右側の柱は、（ｉ）アジュバントなし（ｉｉ）Ａｌ−Ｈ（ｉｉｉ）ＭＦ５９または（ｉｖ）Ａｌ−Ｈ／Ｋ２を含むＣｏｍｂｏ−１についてのものである。
【図１５】図１５は、Ａｌ−Ｈ／Ｋ２を含むＣｙｓ（＋）およびＣｙｓ（−）処方物のＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析を示している。レーン１は、分子量マーカーを有する。レーン２〜５はＣｙｓ（＋）抗原のＨｌａ−Ｈ３５Ｌ、ＥｓｘＡＢ、Ｓｔａ００６およびＳｔａ０１１（順番に）であり；レーン８〜１１はＣｙｓ（−）抗原である。レーン６は脱着されたＣｙｓ（＋）抗原を示し、レーン１２はＣｙｓ（−）についての同じものを示している。レーン７および１３はＴＣＡ処理された上清を示している。
【発明を実施するための形態】
【０２１２】
ワクチン調製および投与
参考文献３５および５４は、上記で検討されたとおりの式（Ｋ）を有するＴＬＲ７アゴニストを開示している。これらの化合物のうちの１種である３−（５−アミノ−２−（２−メチル−４−（２−（２−（２−ホスホノエトキシ）エトキシ）エトキシ）フェネチル）ベンゾ［ｆ］−［１，７］ナフチリジン−８−イル）プロパン酸を、本明細書において下記では化合物「Ｋ２」と称する：
【０２１３】
【化１９】
2014525429.tif 000020
【０２１４】
化合物Ｋ２を水に４ｍｇ／ｍｌで加え、次いで、１ＭのＮａＯＨを加えて、室温で１５分間撹拌しながら、完全な溶解を確実にする。この物質を、水酸化アルミニウムアジュバント（Ａｌ−Ｈ；２ｍｇ／ｍｌ）の懸濁液に加えて、所望の最終濃度を得る。この混合物を周囲温度で２時間振盪して、完全な吸着を確実にし、次いで、ヒスチジン緩衝液成分を加える（１０ｍＭのヒスチジン緩衝液、ｐＨ６．５）。
【０２１５】
化合物を、アルギニン塩一水和物（化合物９８ｍｇを０．１Ｍのアルギニン１．７ｍｌと共に、８０／２０のメタノール／水中で混合して、５７ｍｇ／ｍＬ溶液を得、続いて、エタノール７ｍｌを加えて、塩を沈殿させることによって得られる）として使用することもでき、この場合、Ａｌ−Ｈと混合する前に溶解させるために、ＮａＯＨが必要ないことが分かっている。
【０２１６】
４種の異なる混合物を調製して、最終Ｋ２濃度１０、５０、２５０または５００μｇ／ｍｌを得たが（１００μｌ投薬体積において１、５、２５または５０μｇのＫ２の用量が得られるように）；Ａｌ−Ｈ濃度は常に２ｍｇ／ｍｌである。全ての強度において、化合物Ｋ２のうちの＞９５％が、Ａｌ−Ｈに吸着されている。吸着されたアジュバントを本明細書において下記では、「Ａｌ−Ｈ／Ｋ２」と称する。
【０２１７】
参考文献１による「Ｃｏｍｂｏ−１」ワクチンは、アミノ酸配列の配列番号７、８、２７および３２を有する４種のポリペプチド（ＥｓｘＡＢ、Ｓｔａ００６、Ｓｔａ０１１およびＨｌａ−Ｈ３５Ｌ）の混合物を含む。これら４種のポリペプチドをＡｌ−Ｈ／Ｋ２と順次混合して、各ポリペプチドの１μｇまたは１０μｇの最終用量を得る（１０μｇ／ｍＬまたは１００μｇ／ｍＬ）。ポリペプチドを加える順序はほとんど影響しない。生じた混合物中において、Ｋ２化合物および４種のポリペプチドは全て、水酸化アルミニウムアジュバントに安定的に吸着されていて、吸着度（全ての場合に＞８０％）は、Ａｌ−Ｈ／Ｋ２を含む場合とＡｌ−Ｈのみを含む場合とで本質的に同じである。全ての組成物について、質量オスモル濃度は２６０〜２８５ｍＯｓｍ／ｋｇであり、ｐＨは６．６〜６．９であった（ｐＨおよび質量オスモル濃度は、１０μｇポリペプチド混合物の方が僅かに高い）。化合物Ｋ２は、吸着しているポリペプチドの存在下において＞９５％吸着したままである。
【０２１８】
４種のアジュバント強度および２種の抗原強度で、８種の異なる処方物を調製した。
【０２１９】
雌のＢａｌｂ／ｃマウス（１群当たり１６匹）を０、１４および２８日目に同じ処方物で３回、筋肉内で免疫化した。各免疫化の前および再び３９日目に血清を採集して、抗原特異的抗体力価を分析した。４０日目に、１群当たり４匹のマウスをと殺して、抗原特異的Ｔ細胞応答を分析した（脾臓細胞を４種の抗原で単独で、または組み合わせて刺激し、サイトカイン産生をＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞で測定した；抗原特異的Ｔ細胞増殖をＣｌｉｃｋ−ｉＴ  ＥｄＵアッセイによって評価した）。各群の残りのマウス１２匹を、１００μｇで腹腔内投与されるＮｅｗｍａｎ株Ｓ．ａｕｒｅｕｓ２〜３×１０８ＣＦＵで攻撃した。この敗血症モデルにおける攻撃に対してマウスを防御するワクチンの効能を、２週後（５４日目）の生存マウスのパーセンテージとして評価した。
【０２２０】
結果
図１は、それぞれＡｌ−Ｈ／Ｋ２（Ｋ２  ２５μｇ）を含む１０μｇでポリペプチドを３回投与した後３９日目での個々のポリペプチドに対するＩｇＧ力価を示している。４種のポリペプチド全てについて、Ａｌ−Ｈ／Ｋ２を使用して得られた力価は、Ａｌ−Ｈのみを使用して得られた力価よりも高かった（＊＊、ｐ＜０．０５）。
【０２２１】
１／１０の抗原を含む組成物でも匹敵する結果が得られたが、より低い抗体力価およびより弱いＴ細胞応答を伴った。１、５または５０μｇのＫ２を使用した場合、同様の結果が見られた。
【０２２２】
リコール特異的（ｒｅｃａｌｌ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ）Ｔ細胞応答に関して、アジュバント添加されていない抗原での、またはＡｌ−Ｈのみでアジュバント添加された抗原での免疫化と比較して、Ａｌ−Ｈ／Ｋ２の使用は、ＴＮＦ−α、ＩＬ−２およびＩＦＮ−γを産生するより抗原特異的なＣＤ４＋Ｔ細胞をもたらした。図２は、インターフェロン−γおよびＩＬ−４／ＩＬ−１３応答を示している。アジュバント添加されていないＣｏｍｂｏ−１と比較して、Ａｌ−Ｈを使用した場合、ＩＬ−４およびＩＬ−１３を産生する抗原特異的ＣＤ４＋Ｔ細胞のパーセンテージは、より高かった（統計的に有意ではないが）が、Ａｌ−Ｈ／Ｋ２の組合せを使用しての免疫化は、最も低い用量を除いて全ての用量でこの効果を低減し、このことは、Ａｌ−ＨのＴｈ２極性化効果（Ｔｈ２−ｐｏｌａｒｉｚｉｎｇ  ｅｆｆｅｃｔ）が、ＴＬＲ７アゴニストのＴｈ１極性化効果によって平衡化されたことを示している。
【０２２３】
Ｂａｌｂ−ｃマウスで筋肉内免疫化を使用する敗血症モデルにおける、Ｃｏｍｂｏ−１（各ポリペプチド１０μｇ）を用いる２つのプールされた実験からの防御データは以下のとおりであったが、これは、１５日後に生存している動物の割合（図１０）およびメジアン生存期間（日）を示している：
【０２２４】
【表１】
2014525429.tif 000021
【０２２５】
したがって、Ａｌ−Ｈ／Ｋ２の組合せを使用すると、ＡＬ−Ｈのみよりも、生存がより良好であった。全ての場合において、統計的有意性を伴って（ｐ＝０．００３またはさらに良好）、Ｋ２（１〜５０μｇ）の添加は、２１％から６７〜８７％へと生存を改善した。
【０２２６】
まとめると、Ａｌ−Ｈ／Ｋ２アジュバントの組合せは、４種の抗原全てに対するＩｇＧ力価を増大させ、サイトカイン産生ＣＤ４  Ｔ細胞の頻度を上昇させ；Ａｌ−ＨのみのＴｈ２バイアスを平衡させ（より高いＩＦＮγ、より低いＩＬ−４／ＩＬ−１３）、かつＡｌ−Ｈのみでのアジュバント添加と比較して、生存を上昇させた。
【０２２７】
Ｃｏｍｂｏ−１（各抗原１０μｇ）およびＫ２  ５０μｇを使用し、Ｎｅｗｍａｎ株による致命的攻撃を伴うＢａｌｂ／Ｃマウスでの同様の実験（１群当たり＞３２匹）において、生存は次のとおりであった（図８）：
【０２２８】
【表２】
2014525429.tif 000022
【０２２９】
Ａｌ−Ｈ／Ｋ２群における生存率は、他の全ての群に対して統計的に優れていた（ｐ＜０．０００１）。
【０２３０】
Ｃｏｍｂｏ−１（各抗原１０μｇ）およびＫ２  ５０μｇでの筋肉内免疫化を使用し、Ｎｅｗｍａｎ株による攻撃を伴うＣＤ１マウスでの敗血症モデル（１群当たり１２〜４４匹）において、１５日後の生存は次のとおりであった（図９の左から右への群ＡからＨも参照されたい）：
【０２３１】
【表３】
2014525429.tif 000023
【０２３２】
攻撃株としてＵＳＡ３００（ＬＡＣ）を使用した場合の結果は次のとおりであった（図１１）：
【０２３３】
【表４】
2014525429.tif 000024
【０２３４】
攻撃株としてＵＳＡ４００（ＭＷ２）を使用した場合の結果は次のとおりであった（図１２）：
【０２３５】
【表５】
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【０２３６】
したがって総じて、生存率は、３種の攻撃株について次のとおりであった：
【０２３７】
【表６】
2014525429.tif 000026
【０２３８】
図３は、ＣＤ１マウスを使用し、同じ６種の処置（ＡからＦ）を伴う膿瘍モデルからの結果を示している。群Ｆにおいて、最良の結果が見られた。
【０２３９】
図４から７は、Ｃｏｍｂｏ−１中の４種の別々の抗原それぞれに対するＢａｌｂ／Ｃマウスにおける抗体力価を示している。全ての場合において、Ａｌ−Ｈのみの場合と比較して、Ｋ２の添加は応答を改善した。
【０２４０】
Ａｌ−Ｈ／Ｋ２の組合せを使用すると、免疫応答の規模および動態が改善された。「Ｃｏｍｂｏ−１」中の４種の抗原全てについて、この組合せを含むと、Ａｌ−Ｈのみを含む場合よりも、最終力価が高かった。さらに、Ａｌ−Ｈ／Ｋ２を含むと、ピーク力価が２回の免疫化の後に達成されたが、他の試験アジュバントでは、ピークに達するまで３回の用量を必要とした。これらの結果は、Ｂａｌｂ／ＣおよびＣＤ１マウスの両方において見られた。
【０２４１】
敗血症モデルにおいて防御を測定すると、動態の改善も見られた。Ｃｏｍｂｏ−１をＡｌ−Ｈ／Ｋ２アジュバントと共に受容したマウスは、単回の免疫化の後に＞９５％防御された。
【０２４２】
Ａｌ−Ｈ／Ｋ２混合物によって、ワクチンによって誘発されるＴ細胞の平衡も変化した。Ａｌ−Ｈのみによっては、混合Ｔｈ１／Ｔｈ２  ＣＤ４＋Ｔ細胞応答が誘発されたが、Ｋ２の添加によっては、ＩＦＮ−γ応答を含めて混合Ｔｈ１／Ｔｈ１７応答へと応答がシフトした。さらに、アジュバント添加されていないワクチンと比較すると、Ａｌ−Ｈのみを使用しても、サイトカインおよび増殖応答は増大しなかったが、Ａｌ−Ｈ／Ｋ２を使用することによって、これらの応答の両方が増大した。
【０２４３】
図１３は、皮膚感染モデルにおいて、株ＵＳＡ３００に感染した後の膿瘍の発生を示している。マウスを、Ａｌ−Ｈを含み、Ｋ２（５０μｇ）を含むか、または含まないＣｏｍｂｏ−１混合物（各抗原１０μｇ）で筋肉内で免疫化した。図１３に示されているとおり、Ａｌ−Ｈ（図１３Ａおよび１３Ｂ）およびＡｌ−Ｈ／Ｋ２（１３Ｃおよび１３Ｄ）の両方で、対照（●）に対して、Ｃｏｍｂｏ−１（■）は膿瘍面積（１３Ａおよび１３Ｃ）および皮膚壊死面積（１３Ｂおよび１３Ｄ）を有意に縮小した。Ａｌ−Ｈ（図１３Ａ）よりも、Ａｌ−Ｈ／Ｋ２（図１３Ｂ）と共にＣｏｍｂｏ−１で免疫化されたマウスにおいて、膿瘍は小さかった。
【０２４４】
図１４は、（ｉ）アジュバントなし（ｉｉ）Ａｌ−Ｈ（ｉｉｉ）ＭＦ５９または（ｉｖ）Ａｌ−Ｈ／Ｋ２を含むＣｏｍｂｏ−１で０日目および１４日目に免疫化されたＣＤ１マウスの生存データを示している。これらのマウスを、（Ａ）Ｎｅｗｍａｎ（Ｂ）ＭＷ２または（Ｃ）ＬＡＣ株で２４日目に腹腔内で攻撃した。各株について、Ａｌ−Ｈ／Ｋ２を使用すると、最も高い生存率が見られ（各場合において８０％超）、各株について、Ｋ２をＡｌ−Ｈに添加すると、生存率の統計的に有意な改善が得られた。
【０２４５】
したがって、Ａｌ−Ｈ／Ｋ２の使用は、Ａｌ−Ｈのみに対して、Ｃｏｍｂｏ−１の挙動を有意に改善する。
【０２４６】
システイン除去
「Ｃｏｍｂｏ−１」ワクチン中のＳｔａ００６、Ｓｔａ０１１およびＥｓｘＡＢ抗原のアミノ酸配列を、それらのシステイン残基を除去するように修飾して、ホモダイマーおよびヘテロダイマーの形成を回避し、それによって、抗原処方物の一貫性を改善した。したがって、配列番号７、８および３２を、配列番号４４、４５および４６に変換した。これらのＣｙｓを含まないポリペプチドを、ＨｌａＨ３５Ｌ（配列番号２７）と組み合わせて、「Ｃｏｍｂｏ−１」の「Ｃｙｓ（−）」バージョンを製造した。ＣＤ１マウスにおいてＡｌ−Ｈ／Ｋ２を使用して、Ｃｙｓ（−）Ｃｏｍｂｏ−１処方物の免疫原性を評価した。アジュバント添加されたＣｙｓ（−）の組合せは、免疫原性であり、かつマウスにおいて良好な抗体およびＴ細胞応答を誘発した。
【０２４７】
Ｃｙｓ（＋）およびＣｙｓ（−）組合せのＡｌ−Ｈ／Ｋ２への吸着を比較した。１０ｍＭのヒスチジン緩衝液（ｐＨ６．５）中の２ｍｇ／ｍｌのＡｌ−Ｈおよび０．５ｍｇ／ｍｌのＫ２を組み合わせ、次いで、抗原をそれぞれ１００μｇ／ｍｌで加え、吸着させるために室温で１５分間放置した。４℃で一晩保存した後に、吸着についてこれら２種の抗原処方物を評価し、また、比較のために抗原を脱着するよう処理をした。
【０２４８】
ＳＤＳ−ＰＡＧＥを、抗原吸着を評価するために使用した。図１５は、遊離したＣｙｓ（＋）抗原をレーン２〜５に、かつ遊離したＣｙｓ（−）抗原をレーン８〜１１に示している。高分子量ダイマーは、Ｃｙｓ（＋）抗原では視認できるが、Ｃｙｓ（−）抗原には存在しない。レーン７および１３は、遠心分離後にＴＣＡ処理された上清を示しており、視認可能なバンドの欠如によって、タンパク質が完全に吸着されていることが確認される。レーン６および１２は、脱着緩衝液で処理した後の処方物を示しており、抗原が、分解することなく無損傷で抽出され得ることが確認される。
【０２４９】
本発明は単なる例で説明されており、本発明の範囲および意図の範囲内で変更され得ることは理解されるはずである。
【０２５０】
【化２０】
2014525429.tif 000027
【図１Ａ】
2014525429.tif 000029
【図１Ｂ】
2014525429.tif 000030
【図１Ｃ】
2014525429.tif 000031
【図１Ｄ】
2014525429.tif 000032
【図２Ａ】
2014525429.tif 000033
【図２Ｂ】
2014525429.tif 000034
【図３】
2014525429.tif 000035
【図４】
2014525429.tif 000036
【図５】
2014525429.tif 000037
【図６】
2014525429.tif 000038
【図７】
2014525429.tif 000039
【図８】
2014525429.tif 000040
【図９】
2014525429.tif 000041
【図１０】
2014525429.tif 000042
【図１１】
2014525429.tif 000043
【図１２】
2014525429.tif 000044
【図１３Ａ】
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【図１３Ｂ】
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【図１３Ｃ】
2014525429.tif 000047
【図１３Ｄ】
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【図１４Ａ】
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【図１４Ｂ】
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【図１４Ｃ】
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【図１５】
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【手続補正書】
【提出日】平成26年5月1日(2014.5.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
2014525429000001.app
【国際調査報告】
2014525429.tif 000053
2014525429.tif 000054
2014525429.tif 000055