(57)【要約】  ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）を調製するための方法。本方法は、式Ｉで表される化合物を式IIで表される化合物とカップリングさせ、その後部分的に水素化して、式IIIで表される化合物を得ることを含む。式IIIで表される化合物は、ＤＨＡ前駆体として作用し、したがって加水分解されてＤＨＡを得ることができる。式Ｉ及び式IIで表される新規出発原料、並びにこれらを調製するための合成経路も提供する。
2014516340.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ若しくはII：
【化１】
2014516340.tif 000087
で表される化合物、又はその薬学的に許容される塩若しくは立体異性体。
【請求項２】
ＤＨＡを合成するための出発原料としての請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項３】
ＤＨＡ前駆体としての式III：
【化２】
2014516340.tif 000088
III
で表される化合物の使用。
【請求項４】
式Ｉ
【化３】
2014516340.tif 000089
Ｉ
で表される化合物を調製するための方法であって、
（ａ）プロパルギルアルコールを、式IV：
【化４】
2014516340.tif 000090
IV
で表される化合物に変換するステップと、
（ｂ）前記式IVで表される化合物を、式Ｖ：
【化５】
2014516340.tif 000091
Ｖ
で表される化合物に変換するステップと、
（ｃ）プロパルギルアルコールを、式VIａ：
【化６】
2014516340.tif 000092
で表される化合物に変換するステップと、
（ｄ）前記式VIで表される化合物を、式VIIａ：
【化７】
2014516340.tif 000093
で表される化合物に変換するステップと、
（ｅ）前記式VIIで表される化合物を、前記式Ｖで表される化合物とカップリングさせて、式VIIIａ：
【化８】
2014516340.tif 000094
で表される化合物を得るステップと、
（ｆ）前記式VIIIで表される化合物を、式IX：
【化９】
2014516340.tif 000095
IX
で表される化合物に変換するステップと、
（ｇ）前記式IXで表される化合物を、前記式Ｉで表される化合物に変換するステップと
を含む、方法。
【請求項５】
ステップ（ａ）が、強塩基及び極性非プロトン性溶媒の存在下でプロパルギルアルコールをハロゲン化エチルと反応させて、式IVで表される化合物を得ることを含む、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
ハロゲン化エチルがヨウ化エチルであり、強塩基がｎ−ＢｕＬｉであり、極性非プロトン性溶媒がＴＨＦ中のＨＭＰＡである、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
ステップ（ａ）が、−７８℃〜室温の間の温度で実施される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
ステップ（ｂ）が、式IVで表される化合物を４−トルエンスルホニルクロリド（ＴｓＣｌ）及び無機強塩基と反応させて、式Ｖで表される化合物を得ることを含む、請求項４に記載の方法。
【請求項９】
無機強塩基が水酸化カリウム（ＫＯＨ）である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
ステップ（ｃ）が、プロパルギルアルコールをアルコール保護剤又はアルコール保護基と反応させて、式VIａで表される化合物を得ることを含む、請求項４に記載の方法。
【請求項１１】
アルコール保護剤又はアルコール保護基がジヒドロピラン（ＤＨＰ）であり、ＤＨＰ保護反応により、式VI：
【化１０】
2014516340.tif 000096
VI
で表される化合物にしたがったテトラヒドロピラニルエーテルが生成される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
ステップ（ｄ）が、触媒の存在下で、式VIａで表されるマグネシウムアセチリド化合物をハロゲン化プロパルギルと反応させて、式VIIａで表される化合物を得ることを含む、請求項４に記載の方法。
【請求項１３】
ハロゲン化プロパルギルが臭化プロパルギルであり、触媒がＣｕＣｌである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
ステップ（ｅ）のカップリング反応が、極性非プロトン性溶媒の存在下で行われることによって、式VIIIａで表される化合物が得られる、請求項４に記載の方法。
【請求項１５】
極性非プロトン性溶媒がジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
ステップ（ｆ）が、ｐ−ＴＳＡ／メタノールの存在下で、式VIIIａで表される化合物を脱保護することを含む、請求項４に記載の方法。
【請求項１７】
脱保護が、約６０℃の温度で実施される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
ステップ（ｇ）が、式IXで表される化合物をピリジン中でハロゲン化トシルと反応させて、式Ｉで表される化合物を得ることを含む、請求項４に記載の方法。
【請求項１９】
ハロゲン化トシルが塩化トシルである、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
式II：
【化１１】
2014516340.tif 000097
II
で表される化合物を調製するための方法であって、
（ａ）２−ブチン−１，４−ジオールを、式Ｘ：
【化１２】
2014516340.tif 000098
Ｘ
で表される化合物に変換するステップと、
（ｂ）前記式Ｘで表される化合物を、式XI：
【化１３】
2014516340.tif 000099
XI
で表される化合物に変換するステップと、
（ｃ）前記式XIで表される化合物を、式XII：
【化１４】
2014516340.tif 000100
XII
で表される化合物に変換するステップと、
（ｄ）前記式XIIで表される化合物を、式XIII：
【化１５】
2014516340.tif 000101
XIII
で表される化合物に変換するステップと、
（ｅ）前記式XIIIで表される化合物を、前記式IIで表される化合物に変換するステップと
を含む、方法。
【請求項２１】
ステップ（ａ）が、２−ブチン−１，４−ジオールを有機溶媒中で塩化トシル及びピリジンと反応させて、式Ｘで表される化合物を得ることを含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
有機溶媒がジクロロメタンである、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
ステップ（ｂ）が、式Ｘで表される化合物をトリメチルシリルアセチレンと反応させて、式XIで表される化合物を生成することを含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２４】
ステップ（ｃ）が、式XIで表される化合物をトシル化して、式XIIで表される化合物を生成することを含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２５】
トシル化反応が、式XIで表される化合物をｐ−トルエンスルホン酸と反応させることによって実施される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
ステップ（ｄ）が、式XIIで表される化合物をメチル−４−ペンチノエートと反応させて、式XIIIで表される化合物を生成することを含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２７】
ステップ（ｅ）が、式XIIIで表される化合物を、溶媒中でテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオリド（ＴＢＡＦ）を用いて脱保護して、式IIで表される化合物を生成することを含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２８】
溶媒がジクロロメタンである、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
ＤＨＡ：
【化１６】
2014516340.tif 000102
を調製する方法であって、
（ａ）式Ｉ：
【化１７】
2014516340.tif 000103
Ｉ
で表される化合物を、式II：
【化１８】
2014516340.tif 000104
II
で表される化合物とカップリングさせて、式III：
【化１９】
2014516340.tif 000105
III
で表される化合物を得るステップと、
（ｂ）前記式IIIで表される化合物を部分的に水素化して、式XIV：
【化２０】
2014516340.tif 000106
XIV
で表される化合物を生成するステップと、
（ｃ）前記式XIVで表される化合物を加水分解して、ＤＨＡを生成するステップと
を含む、方法。
【請求項３０】
ステップ（ａ）が、極性非プロトン性溶媒中で、ＣｕＩ、ＮａＩ、及びＫ２ＣＯ３の存在下で行われる、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
極性非プロトン性溶媒がジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
ステップ（ｂ）がリンドラー触媒の存在下で行われる、請求項２９に記載の方法。
【請求項３３】
ＤＨＡ：
【化２１】
2014516340.tif 000107
を調製する方法であって、
（ａ）式III：
【化２２】
2014516340.tif 000108
III
で表される化合物を部分的に水素化して、式XIV：
【化２３】
2014516340.tif 000109
XIV
で表される化合物を生成するステップと、
（ｂ）前記式XIVで表される化合物を加水分解して、ＤＨＡを生成するステップと
を含む、方法。
【請求項３４】
ステップ（ａ）が、リンドラー触媒の存在下で行われる、請求項３３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、合成化学の分野に関する。具体的には、本発明は、ＤＨＡの化学合成に関し、より具体的には、工業規模でＤＨＡを化学合成するための出発原料、前駆体、及び方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ, docosahexaenoic acid）は、２２炭素直鎖中に鎖末端カルボン酸基及び６個のｃｉｓ二重結合を含有するω−３不飽和脂肪酸である。脂肪酸の命名法において、その慣用名はセルボン酸であり、その系統名は、ａｌｌ−ｃｉｓ−ドコサ−４，７，１０，１３，１６，１９−ヘキサ−エン酸であり、その省略名は２２：６ｗ３である。その化学構造は、以下のように表すことができる：
【０００３】
【化１】
2014516340.tif 000003
【０００４】
これは、必須前駆体リノレン酸（ＬＮＡ, linolenic acid、１８：３ｗ３）から得られる。ＤＨＡは、ヒトにおいて弱いと推定されている代謝カスケードである、連続的な不飽和化及び伸長の後のＬＮＡの主たる最終生成物である［Burdge GC, Jones AE, Wootton SA (2002) Eicosapentaenoic and docosapentaenoic acids are the principal products of alphalinolenic acid metabolism in young men. Br J Nutr 88:355-363；Brenna JT, Salem N Jr, Sinclair AJ, Cunnane SC (2009) Alphalinolenic acid supplementation and conversion to n-3 long-chain polyunsaturated fatty acids in humans. Prostaglandins Leukot Essent Fatty Acids 80:85-91］。
【０００５】
ＤＨＡは、脳機能の成長、機能発達及び健康維持に必須であり、乳児期から老年期まで一生を通じて必要とされる［Horrocks, L. A. and Y. K. Yeo. Pharmacol. Res. 40(3):211-225 (1999)］。ＤＨＡは、脳、網膜及び精子の膜リン脂質中で主にエステル化されていることが観察されている［Salem N Jr, Litman B, Kim HY, Gawrisch K (2001) Mechanisms of action of docosahexaenoic acid in the nervous system. Lipids 3:945-959］。
【０００６】
ＤＨＡは、生理的効果、例えば、血中脂質低下、抗凝固効果、制癌効果及び視覚機能の改善などがあると考えられている。ＤＨＡは、ヒト結腸癌細胞の増殖を阻害することが見出された［Kato T, Hancock RL, Mohammadpour H, McGregor B, Manalo P, Khaiboullina S, Hall MR, Pardini L, Pardini RS (2002). "Influence of omega-3 fatty acids on the growth of human colon carcinoma in nude mice". Cancer Lett. 187 (1-2): 169-77］。食事性ＤＨＡは、ヒトにおける血中トリグリセリドのレベルを低減することによって心疾患のリスクを低減し得る。さらに、ＤＨＡが欠乏すると、胎児アルコール症候群、注意欠陥多動性障害、嚢胞性線維症、フェニルケトン尿症、単極性うつ病、攻撃的敵意及び副腎白質萎縮症を伴う。対照的に、ＤＨＡの摂取量を増やすと、炎症性障害（例えば、関節リウマチ）、II型糖尿病、高血圧症、アテローム性動脈硬化症、うつ病、心筋梗塞、血栓症、いくつかのがんにおいて、及びアルツハイマー病などの変性障害の発症の予防にとって有益となり、又はプラス効果が備わることが示されている（米国特許第７，５５０，２８６Ｂ２号明細書）。
【０００７】
サケ、マグロ及びサバなどの魚は、この長鎖脂肪酸を高濃度に自然に含有しているので、ＤＨＡの主要源として使用されている。より具体的には、イワシ又はマグロに由来する油の約２０％は、ＤＨＡで構成されている（米国特許第７，２５９，００６Ｂ２号明細書）。
【０００８】
医薬中に又は栄養補助食品として使用されるＤＨＡのほとんどは、ＤＨＡ含有魚油から分離及び精製される。しかし、ＤＨＡの構造と同様の構造を有する様々な他のポリ不飽和脂肪酸が魚油中に含まれており、したがって、分離及び精製は困難である。例えば、ＤＨＡを調製する間に、イコサペンタエン酸の含量が低いＤＨＡ含有脂肪及び油を使用することが好適である。しかし、供給源が魚油である場合、イコサペンタエン酸のみを効率的に除去することは非常に困難である。
【０００９】
さらに、アラキドン酸（ＡＲＡ, arachidonic acid）又はイコサペンタエン酸（ＥＰＡ, icosapentaenoic acid）などのポリ不飽和脂肪酸が存在するために（米国特許第７，５１４，２４４Ｂ２号明細書）、ＤＨＡは酸化されやすい。ＤＨＡ（一般に、脂肪酸）が酸化されると、がん及び他の変性疾患の発生に役割を果たし得るフリーラジカルが生じることが知られている。
【００１０】
食品分野において魚由来ＤＨＡ含有脂肪及び油を使用する観点からの別の主要な問題は、魚の臭いを除去するためにかなりの作業を必要とすることである。また、菜食主義者は、魚油に由来するＤＨＡを含有するいずれの食品／薬物も容認しない可能性が高く、したがってＤＨＡ源として代替の栄養補助食品に依存しなければならない。
【００１１】
魚油からＤＨＡを得ることにおけるこれらの問題を克服するための既存方法の１つは、Bulletin of the Japanese Society of Scientific Fisheries, 44(8) 927 (1978)においてTeshimaらによって開示されている。この文献で、彼らは、イカ肝油をエタノール性水酸化カリウムで鹸化し、エーテルで脂肪酸を抽出し、メチル化することによって、ＥＰＡ及びＤＨＡを単離する方法を記載している。Silica Gel 60でのカラムクロマトグラフィーによって、粗脂肪酸メチルエステルが精製され、次いで、硝酸銀とシリカゲルの混合物でのカラムクロマトグラフィーによって、ＥＰＡがＤＨＡから分離される。しかし、この方法には、最終生成物中に微量の銀が残ることが多いという問題があり、これは、人が消費するための食物又は医薬において極めて望ましくない。さらに、カラムクロマトグラフィーを行うのに非常に多量の溶媒が必要であり、これはひいてはコストを増大させる。
【００１２】
ＤＨＡの別の公知の源は、ＤＨＡを産生する能力を有する微生物の培養細胞中に蓄積される脂質である。利用される特定の微生物、例えば、スキゾキトリウム（Schizochytrium）種（米国特許第５，３４０，７４２号明細書；同第６，５８２，９４１号明細書）；ウルケニア（Ulkenia）（米国特許第６，５０９，１７８号明細書）；シュードモナス（Pseudomonas）種ＹＳ−１８０（米国特許第６，２０７，４４１号明細書）；トラウストキトリウム（Thraustochytrium）属株ＬＦＦ１（米国特許出願第２００４／０１６１８３１Ａ１号明細書）；クリプテコジニウム・コーニイ（Crypthecodinium cohnii）［米国特許出願第２００４／００７２３３０Ａ１号明細書；de Swaaf, M. E. et al. Biotechnol Bioeng. 81(6):666-72 (2003)及びAppl Microbiol Biotechnol. 61(1):40-3 (2003)］；エミリアニア（Emiliania）種（日本特許公報（公開）第５−３０８９７８号（１９９３））；及びジャポノキトリウム（Japonochytrium）種（ＡＴＣＣ＃２８２０７；日本特許公報（公開）第１９９５８８／１９８９号）］に基づいて、多数の異なるプロセスが存在する。
【００１３】
さらに、以下の微生物も、ＤＨＡを産生する能力を有することが公知である：ビブリオ・マリヌス（Vibrio marinus）（深海から単離される細菌；ＡＴＣＣ＃１５３８１）；微細藻類シクロテラ・クリプティカ（Cyclotella cryptica）及びイソクリシス・ガルバナ（Isochrysis galbana）；並びにトラウストキトリウム・アウレウム（Thraustochytrium aureum）などの有鞭毛真菌［ＡＴＣＣ＃３４３０４；Kendrick, Lipids, 27:15 (1992)］、並びにＡＴＣＣ＃２８２１１、ＡＴＣＣ＃２０８９０、及びＡＴＣＣ＃２０８９１と指定されたトラウストキトリウム種。
【００１４】
しかし、上述した微生物のいずれを使用しても、ＤＨＡの収率が低いこと、十分な量のＤＨＡを得るのに長い培養期間が要求されること、又は生産のために特定の培地若しくは培養条件が要求されることなど、いくつかの問題が存在する。
【００１５】
エミリアニア種などの藻類が生産に利用される場合、高収率のＤＨＡを達成し得るが、培養ステップは、培養するのに光を必要とするために複雑である。したがって、このようなプロセスは、工業生産に適していない（米国特許第７，５１４，２４４Ｂ２号明細書）。
【００１６】
例えば、DHASCO（商標）（Martek Biosciences Corporation社、Columbia、Md.）を生産するためのＣ．コーニイ（C. cohnii）の発酵、DHAGold（Martek Biosciences Corporation社）として以前に公知の油を生産するためのスキゾキトリウム種の発酵、及びDHActive（商標）（Nutrinova社、Frankfurt、ドイツ）を生産するためのウルケニア種の発酵による、ＤＨＡを商業生産するための発酵プロセスも存在する。これらは成功しているにもかかわらず、発酵は、微生物自体の天然の能力を利用するので、これらの方法のそれぞれは、油の収率を実質的に改善することができない、又は生産される油組成物の特性を制御することができないという問題を抱えている（米国特許出願第２００９／０３１１３８０Ａ１号明細書）。
【００１７】
Kyleらは、米国特許第５，３９７，５９１号明細書において、発酵槽中で渦鞭毛藻類を培養し、渦鞭毛藻類に高比率のＤＨＡを有する単細胞油を産生することを誘導し、その油を回収してＤＨＡを得る方法を開示している。好ましくは、回収される油は、少なくとも約２０重量％のＤＨＡ、より好ましくは約３５重量％を超えるＤＨＡを含有する。しかし、回収される産物は、純粋なＤＨＡではなく、他の油中のＤＨＡの混合物であり、これは、分離することが困難である。
【００１８】
ＤＨＡの最も直接的で完全な源である別の源は、ある特定の海洋哺乳動物、特にタテゴトアザラシの脂身中に見出されている。アザラシの脂身に由来するＤＨＡの顕著な利点の１つは、魚油に由来するＤＨＡの吸収と比較して、ヒトの体によってこれがより速くより完全に吸収されることである。これは、魚油中に見られるものとわずかに異なる、アザラシ油中のＤＨＡの分子立体配置に一部分において起因する。しかし、ヒトに栄養補助食品として投与するのに十分なグレードのアザラシ油を生産することにおいて課題が存在する。アザラシ油は、他の健康食品油と同様に、自然過程での酸化を受けやすい。酸化の一次及び二次産物は、油中に容認できない香味及び匂いを生じさせ、油の消化率を損ない、体の細胞を損傷又は破壊し得るフリーラジカルを生成する場合がある（米国特許第７，１７９，４９１Ｂ１号明細書）。
【００１９】
これらの脂肪酸の主要源は、海洋動物の脂肪及び油、魚油（サバ油、メンハーデン油、サケ油、カラフトシシャモ油、マグロ油、イワシ油又はタラ油など）、スキゾキトリウム種などの海洋藻類、人乳、並びに亜麻仁油などの植物油中にあり、前述の考察で特定した理由の１又は２以上に起因してこれらからＤＨＡを得ることができないので、純粋で安定なＤＨＡを得ることがこれまで非常に困難であった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２０】
【特許文献１】米国特許第７，５５０，２８６Ｂ２号明細書
【特許文献２】米国特許第７，２５９，００６Ｂ２号明細書
【特許文献３】米国特許第７，５１４，２４４Ｂ２号明細書
【特許文献４】米国特許第５，３４０，７４２号明細書
【特許文献５】米国特許第６，５８２，９４１号明細書
【特許文献６】米国特許第６，５０９，１７８号明細書
【特許文献７】米国特許第６，２０７，４４１号明細書
【特許文献８】米国特許出願第２００４／０１６１８３１Ａ１号明細書
【特許文献９】米国特許出願第２００４／００７２３３０Ａ１号明細書
【特許文献１０】日本特許公報（公開）第５−３０８９７８号（１９９３）
【特許文献１１】日本特許公報（公開）第１９９５８８／１９８９号
【特許文献１２】米国特許第７，５１４，２４４Ｂ２号明細書
【特許文献１３】米国特許出願第２００９／０３１１３８０Ａ１号明細書
【特許文献１４】米国特許第５，３９７，５９１号明細書
【特許文献１５】米国特許第７，１７９，４９１Ｂ１号明細書
【非特許文献】
【００２１】
【非特許文献１】Burdge GC, Jones AE, Wootton SA (2002) Eicosapentaenoic and docosapentaenoic acids are the principal products of alphalinolenic acid metabolism in young men. Br J Nutr 88:355-363
【非特許文献２】Brenna JT, Salem N Jr, Sinclair AJ, Cunnane SC (2009) Alphalinolenic acid supplementation and conversion to n-3 long-chain polyunsaturated fatty acids in humans. Prostaglandins Leukot Essent Fatty Acids 80:85-91
【非特許文献３】Horrocks, L. A. and Y. K. Yeo. Pharmacol. Res. 40(3):211-225 (1999)
【非特許文献４】Salem N Jr, Litman B, Kim HY, Gawrisch K (2001) Mechanisms of action of docosahexaenoic acid in the nervous system. Lipids 3:945-959
【非特許文献５】Kato T, Hancock RL, Mohammadpour H, McGregor B, Manalo P, Khaiboullina S, Hall MR, Pardini L, Pardini RS (2002). "Influence of omega-3 fatty acids on the growth of human colon carcinoma in nude mice". Cancer Lett. 187 (1-2): 169-77
【非特許文献６】Teshima et al., Bulletin of the Japanese Society of Scientific Fisheries, 44(8) 927 (1978)
【非特許文献７】de Swaaf, M. E. et al. Biotechnol Bioeng. 81(6):666-72 (2003)
【非特許文献８】de Swaaf, M. E. et al. Appl Microbiol Biotechnol. 61(1):40-3 (2003)
【非特許文献９】Kendrick, Lipids, 27:15 (1992)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２２】
したがって、ＤＨＡを得るための新規方法を提供することが本発明の目的である。
【００２３】
本発明の特定の実施形態では、非常に純粋で、金属不純物及び／又は他の不純物が混入しておらず、貯蔵に対して安定であるＤＨＡを調製するための方法を提供することも一目的である。
【００２４】
ある特定の好適な実施形態では、ＤＨＡ合成のための容易で、低コスト及び／又は効率的な工業規模の生産方法を提供することも一目的である。
【課題を解決するための手段】
【００２５】
本発明の一態様では、式Ｉ：
【００２６】
【化２】
2014516340.tif 000004
Ｉ
【００２７】
で表される化合物を提供する。
【００２８】
本発明の別の態様では、ＤＨＡ合成のための出発原料としての、式Ｉで表される化合物の使用を提供する。
【００２９】
本発明の別の態様では、式II：
【００３０】
【化３】
2014516340.tif 000005
II
【００３１】
で表される化合物を提供する。
【００３２】
この実施形態の別の態様では、ＤＨＡ合成のための出発原料としての、式IIで表される化合物の使用を提供する。
【００３３】
本発明のさらに別の態様では、ＤＨＡ合成のための前駆体としての、式III：
【００３４】
【化４】
2014516340.tif 000006
III
【００３５】
で表される化合物の使用を提供する。
【００３６】
別の態様では、式Ｉ：
【００３７】
【化５】
2014516340.tif 000007
Ｉ
【００３８】
で表される化合物を調製するための方法であって、
（ｉ）強塩基（限定されるものではないが、ｎ−ＢｕＬｉ又はセカンダリー−ＢｕＬｉなど）及び極性非プロトン性溶媒（限定されるものではないが、ＨＭＰＡ、ＴＨＦ、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ, methyl tert-butyl ether）、又はこれらの組合せなど）の存在下で、プロパルギルアルコールをハロゲン化エチル（限定されるものではないが、ヨウ化エチルなど）と反応させて、式IV：
【００３９】
【化６】
2014516340.tif 000008
IV
【００４０】
で表される化合物を得るステップと、
（ii）式IVで表される化合物を、４−トルエンスルホニルクロリド（ＴｓＣｌ）及び無機強塩基（限定されるものではないが、水酸化カリウム（ＫＯＨ）、水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）、又は水酸化リチウム（ＬｉＯＨ）など）と反応させて、式Ｖ
【００４１】
【化７】
2014516340.tif 000009
Ｖ
【００４２】
で表される化合物を得るステップと、
（iii）プロパルギルアルコールを、アルコール保護基（限定されるものではないが、ＤＨＰ、トリメチルシリル（ＴＭＳ, trimethylsilyl）、又はターシャリーブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ, tertiary butyl dimethyl silyl）など）と反応させて、式VIａ：
【００４３】
【化８】
2014516340.tif 000010
【００４４】
で表される化合物を得るステップと、
（iv）触媒量のＣｕＣｌの存在下で、式VIａで表される化合物をハロゲン化プロパルギルと反応させて、式VIIａ：
【００４５】
【化９】
2014516340.tif 000011
【００４６】
で表される化合物を得るステップと、
（ｖ）極性非プロトン性溶媒（限定されるものではないが、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ, dimethylformamide）、ＴＨＦ、又はＭＴＢＥなど）の存在下で、式Ｖ及び式VIIａで表される化合物を反応させて、式VIIIａ：
【００４７】
【化１０】
2014516340.tif 000012
【００４８】
で表される化合物を得るステップと、
（vi）次いで、式VIIIａで表される化合物の保護基を除去して、式IX：
【００４９】
【化１１】
2014516340.tif 000013
IX
【００５０】
で表される化合物を得るステップと、
（vii）ピリジンの存在下で、式IXで表される化合物を、ハロゲン化トシル（限定されるものではないが、塩化トシルなど）と反応させて、式Ｉで表される化合物を得るステップと
を含む、方法を提供する。
【００５１】
決して限定的であるとみなされるべきでない、上述した方法のある特定の好適な実施形態では、第１のバッチのプロパルギルアルコールを、ＴＨＦ中でｎ−ＢｕＬｉ、ＨＭＰＡの存在下、−７８℃〜室温の温度で、ヨウ化エチルと最初に反応させて、式IVで表される化合物を得る。次いで、式IVで表される化合物をＴｓＣｌ及びＫＯＨと反応させて、式Ｖで表される化合物を、約３３〜４０％の範囲内のおおよそであるが限定されない収率で得る。並列の反応スキームにおいて、第２のバッチのプロパルギルアルコールのＤＨＰ保護を実施して、式VI：
【００５２】
【化１２】
2014516340.tif 000014
VI
【００５３】
で表されるマグネシウムアセチリド化合物を調製する。式VIで表される化合物のマグネシウムアセチリドを、ＣｕＣｌの存在下で臭化プロパルギルと反応させて、式VII
【００５４】
【化１３】
2014516340.tif 000015
VII
【００５５】
で表される化合物を、約６５〜７５％の範囲のおおよそであるが限定されない収率で得る。次ステップにおいて、ＤＭＦの存在下で、式Ｖ及びVIIで表される化合物をカップリングして、式VIII
【００５６】
【化１４】
2014516340.tif 000016
VIII
【００５７】
で表される化合物を得る。
【００５８】
次いで式VIIIで表される化合物を、限定されない実施形態において、ＴＳＡ／メタノールの存在下、６０℃の温度で脱保護して、式IXで表される化合物を、５０％のおおよそであるが限定されない収率で得る。最後に、式IXで表される化合物を、ピリジンの存在下で塩化トシルと反応させて、式Ｉで表される所望の化合物を得ることができる。本実施形態による式Ｉで表される化合物のおおよそであるが限定されない収率は、この最終的なステップに関して約６０〜６５％の範囲である。
【００５９】
別の態様では、本発明は、式II：
【００６０】
【化１５】
2014516340.tif 000017
II
【００６１】
で表される化合物を調製するための方法であって、
（ｉ）有機溶媒（例えば、ジクロロメタンなど）中で、２−ブチン−１，４−ジオールを塩化トシル及びピリジンと反応させて、式Ｘ：
【００６２】
【化１６】
2014516340.tif 000018
Ｘ
【００６３】
で表される化合物を得るステップと、
（ii）次いで、式Ｘで表される化合物をトリメチルシリルアセチレンと反応させて、式XI
【００６４】
【化１７】
2014516340.tif 000019
XI
【００６５】
で表される化合物を得るステップと、
（iii）次いで、式XIで表される化合物をトシル化して（例えば、ｐ−トルエンスルホン酸と反応させることによって）、式XII
【００６６】
【化１８】
2014516340.tif 000020
XII
【００６７】
で表される化合物を得るステップと、
（iv）次いで、式XIIで表される化合物をメチル−４−ペンチノエートと反応させて、式XIII：
【００６８】
【化１９】
2014516340.tif 000021
XIII
【００６９】
で表される化合物を得るステップと、
（ｖ）次いで、式XIIIで表される化合物を脱保護して（例えば、限定されるものではないが、ジクロロメタンなどの溶媒中でテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオリド（ＴＢＡＦ, tetra-n-butylammonium fluoride）と反応させて）、式Ｉで表される所望の化合物を得るステップと
を含む、方法を提供する。
【００７０】
決して限定的であるとみなされるべきでない、上述した方法のある特定の好適な実施形態では、ジクロロメタン中で、２−ブチン−１，４−ジオールを塩化トシル及びピリジンと反応させて、式Ｘで表される化合物を、約４５〜５０％の範囲のおおよそであるが限定されない収率で得る。次いで、式Ｘで表される化合物をトリメチルシリルアセチレンと反応させて、式XIで表される化合物を約６０〜６５％の範囲のおおよその収率で得る。次ステップにおいて、式XIで表される化合物をトシル化して、式XIIで表される化合物を約６５〜７５％の範囲のおおよその収率で得る。次いで、式XIIで表される化合物を、メチル−４−ペンチノエートと反応させて、式XIIIで表される化合物を、ある特定の実施形態では、約４５％の範囲のおおよその収率で得る。次いで、式XIIIで表される化合物を、ＴＢＡＦ／ジクロロメタンで脱保護して、式IIで表される化合物を得る。
【００７１】
さらに別の態様では、本発明は、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）：
【００７２】
【化２０】
2014516340.tif 000022
ＤＨＡ
【００７３】
を調製するための方法であって、
（ｉ）式Ｉ
【００７４】
【化２１】
2014516340.tif 000023
Ｉ
【００７５】
で表される化合物を、式II
【００７６】
【化２２】
2014516340.tif 000024
II
【００７７】
で表される化合物と、ＣｕＩ、ＮａＩ及びＫ２ＣＯ３の存在下、極性非プロトン性溶媒（限定されるものではないが、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）など）中で反応させて、式III：
【００７８】
【化２３】
2014516340.tif 000025
III
【００７９】
で表される化合物を得るステップと、
（ii）触媒（限定されるものではないが、リンドラー触媒など）の存在下で、式IIIで表される化合物を部分的に水素化して、式XIV：
【００８０】
【化２４】
2014516340.tif 000026
XIV
【００８１】
で表されるエステルを生成するステップと、
（iii）式XIVで表されるエステルを加水分解して、ＤＨＡを生成するステップと
を含む、方法を提供する。
【００８２】
決して限定的であるとみなされるべきでない、上述した方法のある特定の好適な実施形態では、式Ｉで表される化合物を、ＤＭＦ中で、ＣｕＩ、ＮａＩ及びＫ２ＣＯ３の存在下で、式IIで表される化合物とカップリングさせて、式IIIで表される化合物を約３０〜４０％の範囲のおおよその収率で得ることができる。リンドラー触媒の存在下で、式IIIで表される化合物を部分的に水素化して、式XIVで表されるエステルを得、式XIVで表されるエステルを加水分解してＤＨＡを得る。
【００８３】
さらに別の態様では、本発明は、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）：
【００８４】
【化２５】
2014516340.tif 000027
ＤＨＡ
【００８５】
を調製するためのさらなる方法であって、
（ｉ）式III
【００８６】
【化２６】
2014516340.tif 000028
III
【００８７】
で表される化合物を、触媒（リンドラー触媒などであるが、それに限定されない）の存在下で部分的に水素化して、式XIV
【００８８】
【化２７】
2014516340.tif 000029
XIV
【００８９】
で表されるエステルを生成するステップと、
（ii）式XIVで表されるエステルを加水分解して、ＤＨＡを生成するステップと
を含む、方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００９０】
本発明のこれら及び他の特徴は、添付の図面を参照した以下の記述からより明らかとなる。
【図１】化合物ＰＨＲ−１０１の１Ｈ  ＮＭＲを示す図である。
【図２】化合物ＰＨＲ−１０２の１Ｈ  ＮＭＲを示す図である。
【図３】化合物ＰＨＲ−２０１の１Ｈ  ＮＭＲを示す図である。
【図４】化合物ＰＨＲ−１０６の１Ｈ  ＮＭＲを示す図である。
【図５】化合物ＰＨＲ−１０７の１Ｈ  ＮＭＲを示す図である。
【図６】化合物ＰＨＲ−１０８の１Ｈ  ＮＭＲを示す図である。
【図７】化合物ＰＨＲ−１０９の１Ｈ  ＮＭＲを示す図である。
【図８】化合物ＰＨＲ−１０３の１Ｈ  ＮＭＲを示す図である。
【図９】化合物ＰＨＲ−１０４の１Ｈ  ＮＭＲを示す図である。
【図１０】化合物ＰＨＲ−１１０の１Ｈ  ＮＭＲを示す図である。
【図１１】化合物ＰＨＲ−１１１の１Ｈ  ＮＭＲを示す図である。
【図１２】化合物ＰＨＲ−１１２の１Ｈ  ＮＭＲを示す図である。
【図１３】化合物ＰＨＲ−１１４の１Ｈ  ＮＭＲを示す図である。
【図１４】化合物ＰＨＲ−１１５の１Ｈ  ＮＭＲを示す図である。
【図１５】化合物ＰＨＲ−１１６（ＤＨＡ）の１Ｈ  ＮＭＲを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００９１】
本発明は、ＤＨＡを調製するための新規合成経路を提供する。この合成経路のある特定の好適な実施形態によって得られる利点のいくつかには、非常に純粋なＤＨＡを調製する能力、プロセスコストの低減、試薬が豊富及び／又は安価であること、並びに下流処理に関する要求事項がわずかである又はまったくないことが含まれる。さらに、本発明のこれらの好適な実施形態によって調製されるＤＨＡが高純度であるので、ある特定の用途において使用されるＤＨＡ製品の量を低下させることが可能となり得、これは、コストをさらに低減する効果を有する。さらに、新規の中間化合物が提供され、これらは、本明細書に記載の合成法において使用することができる。
【００９２】
下記の本発明の実施形態それぞれは、個々に、又は上記に開示したのとは異なる１若しくは２以上の様式で組み合わせて、ＤＨＡを生産するためのプロセスを改善するのに利用することができることは、当業者には明らかである。当業者は、下記の本発明の異なる態様及び実施形態で使用される反応条件を考慮して、適当な温度を選択することもできる。
【００９３】
本明細書で参照される特許及び科学文献は、当業者が利用可能な知識を確定するものである。別段の定義のない限り、本明細書で使用されるすべての技術的及び科学的用語は、本発明が関係する分野における当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書で引用される発行済み特許、出願及び参考文献は、それぞれが具体的且つ個々に参照によって組み込まれている場合と同じ程度に、参照により本明細書に組み込まれている。
【００９４】
本明細書に記載のものと同様又は均等な方法及び材料を、本発明を実施又は試験するのに使用することができるが、好適な方法及び材料が本明細書に記載されている。矛盾する場合では、本開示が、定義を含めて統制する。さらに、材料、方法及び実施例は、例示的なものであるにすぎず、限定的であることは決して意図されていないことが理解されるべきである。
【００９５】
用語「約」は、近似的に、〜の領域内で、おおよそ、又はぐらいを意味するのに本明細書で使用される。用語「約」が数値範囲とともに使用される場合、これは、示された数値の上下に境界を延ばすことによってその範囲を改変する。用語「含む（comprises）」は、「含む（includes）が、限定されるものではない」を意味するのに本明細書で使用される。
【００９６】
本発明の一態様の限定されない実施形態では、スキームＩによって示されるＤＨＡの逆合成を提供する。式Ｉ及び式IIで表される化合物を、ＤＭＦ中で、ＣｕＩ、ＮａＩ及びＫ２ＣＯ３の存在下でカップリングする。式IIIで表される得られた化合物を、リンドラー触媒を使用することによって部分的に水素化し、その後、式XIVのエステルを加水分解して、最終生成物としてＤＨＡを得る。
【００９７】
本発明の別の態様の限定されない実施形態では、式Ｉで表される化合物を調製する方法を提供する。本方法の合成経路は、スキームIIに記載されており、以下の２つの限定されないステップで行われる。
（ｉ）式Ｖで表される化合物の調製：式IVで表される化合物を、−７８℃〜室温で、ＴＨＦ中でｎ−ＢｕＬｉ、ＨＭＰＡを使用することにより、プロパルギルアルコールをヨウ化エチルでアルキル化することによって得る。式IVで表される化合物を、ＴＨＦ溶媒中で、ＴｓＣｌ及びＫＯＨを使用することによるトシル化反応に進めて、式Ｖで表される化合物を得る。式Ｖで表される粗化合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、式Ｖで表される純粋な化合物を３３〜４０％の収率で最後に得る。
（ii）式Ｉで表される化合物の調製：式Ｉで表される化合物の調製は、ＤＨＰ保護、グリニャール反応、カップリング反応、脱保護及びトシル化を含む５つのステップを伴う。プロパルギルアルコールをＤＨＰで保護して、式VIで表される定量的収率の化合物を得る。式VIで表される化合物のマグネシウムアセチリドを、ＣｕＣｌの存在下で臭化プロパルギルと反応させて、式VIIで表される化合物を６５〜７５％の収率で得る。ＤＭＦ中で、式VIIで表される化合物を、式Ｖで表される化合物とカップリングさせて、式VIIIで表される化合物を得る。式VIIIで表される粗化合物を、ｐ−ＴＳＡ／メタノール中で、６０℃で３時間脱保護にかけて、式IXで表される化合物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー後に５０％の収率で得る。最後に、溶媒としてのピリジン中で塩化トシルを使用することにより、式IXで表される化合物をトシル化して、式Ｉで表される化合物を６０〜６５％の収率で得る。
【００９８】
式Ｖで表される化合物を調製するための方法も提供する。本方法の限定されない実施形態に伴う反応スキームは、以下の通りである。
【００９９】
【化２８】
2014516340.tif 000030
【０１００】
限定的であることを決して望むことなく、本方法に使用することができる原料を、以下の通り表１に例示する。
【０１０１】
【表１】
2014516340.tif 000031
【０１０２】
式Ｖで表される化合物の調製の例：この例示的な限定されない方法では、窒素注入口及び塩化カルシウムガードチューブを備えた清潔で乾燥した２０Ｌの反応器内にＴＨＦを仕込む。透明なＴＨＦ溶液が得られるまで、プロパルギルアルコールを反応器内に仕込む。ＨＭＰＡ（９．３Ｌ）を室温（２５〜２７℃）で反応混合物に添加する。ドライアイス／アセトン浴を使用して、反応混合物を−７８℃に冷却する。温度を−６５℃以下（−７５〜−６５℃）に維持して、３時間にわたって、ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中２．５Ｍ）を反応混合物に添加する。反応混合物を−７５℃で１時間維持する。次いで、桃色の反応混合物がオフホワイト色に変化するまで、内部温度を−７５〜−６５℃に維持して、１時間にわたってヨウ化エチルを徐々に添加する。反応混合物を室温（２５〜２７℃）にし、１８時間撹拌する。
【０１０３】
小アリコートを水でクエンチし、エーテルで抽出し、分析用シリカゲルＴＬＣプレート上にスポットし（ヘキサン中２０％の酢酸エチル）、ＫＭｎＯ４溶液及びアニスアルデヒド染色剤を使用してスポットを視覚化することによって、反応進行をモニターする。反応が完了した後、氷／水浴を使用して反応混合物を０℃に冷却し、次いで氷冷した３ＮのＨＣｌ（２０Ｌ）を用いて、１時間にわたってクエンチする。有機層（ＴＨＦ及びヘキサン）を分離し、水層をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）（２×１０Ｌ；ロットＩ及びII）で抽出する。合わせた有機層を１ＮのＨＣｌ（１×１０Ｌ）で洗浄し、その後飽和塩化ナトリウム溶液（１×１０Ｌ）で洗浄する。有機相を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、６０℃以下の大気圧下で、１０Ｌの体積まで蒸発させる。式IVで表される化合物に富むＴＨＦ層を淡黄色溶液として得、トシル化反応にさらに利用する。
【０１０４】
式IVで表される化合物に富むＴＨＦ層を、サーモポケット、機械撹拌機及び窒素雰囲気を備えた清潔で乾燥した２０Ｌの丸底フラスコ（ＲＢＦ, round bottomed flask）中に仕込む。塩化トシル（３．４Ｋｇ）を２５〜３０℃で反応混合物に添加する。反応混合物を−５〜０℃に冷却する。反応混合物を０℃以下に維持して３時間にわたって、ＫＯＨ（１．５Ｋｇ）を２０回に分けて反応混合物に添加する。添加している間、反応温度を−５℃〜＋５℃の間に維持する。反応温度（０〜５℃）を１時間維持する。反応系の小アリコートを希ＨＣｌでクエンチし、エーテルで抽出し、分析用シリカゲルＴＬＣプレート上にスポットし（ヘキサン中２０％の酢酸エチル）、アニスアルデヒド染色剤を使用してスポットを視覚化することによって、反応進行をモニターする。
【０１０５】
反応が完了した後、０〜１０℃で３ＮのＨＣｌ（ロット−II）を徐々に添加することによって、反応混合物をクエンチする。有機層を分離し、水層をＭＴＢＥ（ロット−III）で抽出する。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ（２×３Ｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させる。有機層を６０℃で、真空下で蒸留して、式Ｖで表される粗化合物である褐色油状物を得る。次いで粗製物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、式Ｖで表される純粋な化合物１．３５Ｋｇを得る。
【０１０６】
式VIで表される化合物を調製するための方法も提供する。本方法の限定されない実施形態に伴う反応スキームは、以下の通りである。
【０１０７】
【化２９】
2014516340.tif 000032
【０１０８】
限定的であることを決して望むことなく、本方法に使用することができる原料を、以下の通り表２に例示する。
【０１０９】
【表２】
2014516340.tif 000033
【０１１０】
式VIで表される化合物の調製の例：この例示的な限定されない方法では、機械撹拌機を備えた清潔で乾燥した２０Ｌの多口丸底フラスコ内にジクロロメタン（ロット−Ｉ）を仕込む。プロパルギルアルコール（１Ｋｇ）を反応器内に仕込む。ＰＴＳＡ（３４．４ｇ）を反応器内に１ロットで仕込む。反応混合物を氷／水浴を使用して０℃に冷やす。次いで３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（１．６７Ｌ）をジクロロメタン（ＤＣＭ）（ロット−II）で希釈し、次いで反応温度を０〜５℃に維持して１．５時間にわたって反応混合物に添加する。反応混合物を０〜５℃で３時間撹拌したままにする。小アリコートを採取し、分析用シリカゲルＴＬＣプレート上にスポットすることによって、反応進行をモニターする。
【０１１１】
反応が完了した後、過剰の固体ＮａＨＣＯ３を添加することによって、反応系をクエンチし（塩基性化し）、３０分間撹拌する。水（１Ｌ、１倍量）を反応系中に添加し、１５分間撹拌する。層を分離し、有機層を１０％のＮａＨＣＯ３（５００ｍＬ、０．５倍量）で洗浄する。有機層を飽和ＮａＣｌ溶液（５００ｍＬ、０．５倍量）で最後に洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させる。有機層を減圧下で蒸発させて、式VIで表される粗化合物を得る。
【０１１２】
式VIIで表される化合物を調製するための方法も提供する。本方法の限定されない実施形態に伴う反応スキームは、以下の通りである。
【０１１３】
【化３０】
2014516340.tif 000034
【０１１４】
限定的であることを決して望むことなく、本方法に使用することができる原料を、以下の通り表３に例示する。
【０１１５】
【表３】
2014516340.tif 000035
【０１１６】
式VIIで表される化合物の調製の例：この例示的な限定されない方法では、機械撹拌機、アルゴン入口、還流冷却器、及び温度計の鞘を備えた２０Ｌの多口丸底フラスコ内にエチルマグネシウムブロミド（３．９２Ｌ、１ＭのＴＨＦ溶液）を仕込む。ＴＨＦ中に溶解した式VIで表される化合物（５００ｇ）を、反応温度を４０℃以下に維持しながら１時間にわたって滴下漏斗を使用して反応混合物中に仕込む。
【０１１７】
水浴を使用して反応系を徐々に加温することによって、穏やかな還流（６５〜７０℃）を３０分間維持する。次いで、式VIで表される化合物を添加した後、反応系を黒色から褐色に変えさせる。水浴を氷浴に置きかえ、反応混合物を１０℃に冷却する。塩化銅（Ｉ）（３．５３ｇ）を、アルゴン雰囲気下で、１ロットで反応混合物中に仕込み、反応混合物を１０℃で１５分間撹拌する。次いで臭化プロパルギル（４３９ｍＬ）を、滴下漏斗を使用して３０分にわたって反応系中に仕込む。反応系を還流温度（６５〜７０℃）に５時間加温し、５時間の最後に加熱を止める。反応系を室温で７時間撹拌する。小アリコートを採取し、分析用シリカゲルＴＬＣプレート上にスポットし（ヘキサン中、１０％の酢酸エチル）、アニスアルデヒド溶液を使用してスポットを視覚化することによって、反応進行をモニターする。
【０１１８】
反応混合物をＭＴＢＥで希釈する。飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液を添加し、反応系を１５分間撹拌する。２つの層を分離する。次いで、有機層を水（３×１Ｌ）、ブライン溶液（１Ｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させる。有機層を減圧下で濃縮して、式VIIで表される粗化合物６４０ｇを得る。粗製物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製する。
【０１１９】
式VIIIで表される化合物を調製する方法も提供する。本方法の限定されない実施形態に伴う反応スキームは、以下の通りである。
【０１２０】
【化３１】
2014516340.tif 000036
【０１２１】
限定的であることを決して望むことなく、本方法に使用することができる原料を、以下の通り表４に例示する。
【０１２２】
【表４】
2014516340.tif 000037
【０１２３】
式VIIIで表される化合物の調製の例：この例示的な限定されない方法では、機械撹拌機、アルゴンバブラー、及び１Ｌの滴下漏斗を備えた２０Ｌの多口フラスコ内にＤＭＦ（３Ｌ、６倍量）を仕込み、溶媒を１５分間脱気する。次いで、ＣｕＩ、ヨウ化ナトリウム及びヨウ化カリウムを反応器内に仕込む。反応系が黄色に変わるまで、反応系を３０〜３５℃に加温する。氷／水浴を使用して反応系を０℃に冷やす。式VIIで表される化合物を、５分にわたって反応系に添加する。脱気条件を維持して、反応混合物を０〜５℃で１５分間撹拌する。滴下漏斗を使用して、式Ｖで表される化合物を、３０分にわたって反応系中に添加し、脱気をさらに３０分間継続する。反応フラスコ内で不活性雰囲気を維持するようにアルゴン流量をわずかに低減し、撹拌を１８時間継続する。小アリコートを採取し、水及びＭＴＢＥでクエンチし、分析用シリカゲルＴＬＣプレート上に有機層をスポットすることによって、反応進行をモニターする。
【０１２４】
反応系にＭＴＢＥ（ロットＩ）、水を添加し、１５分間撹拌する。反応混合物をCelite（商標）パッドで濾過し、ＭＴＢＥ（ロット−II）で洗浄する。濾液の層を分離し、水層をＭＴＢＥ（ロット−III）で抽出する。合わせた有機層を水（３×３Ｌ；固形沈殿物がまったく観察されなくなるまで）及び飽和ＮａＣｌ（１×２Ｌ）で洗浄する。有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮して、式VIIIで表される粗化合物を得る。
【０１２５】
式IXで表される化合物を調製する方法も提供する。本方法の限定されない実施形態に伴う反応スキームは、以下の通りである。
【０１２６】
【化３２】
2014516340.tif 000038
【０１２７】
限定的であることを決して望むことなく、本方法に使用することができる原料を、以下の通り表５に例示する。
【０１２８】
【表５】
2014516340.tif 000039
【０１２９】
式IXで表される化合物の調製の例：この例示的な限定されない方法では、磁気撹拌機、還流冷却器、サーモポケット及び加熱設備を備えた２Ｌの多口ＲＢＦ内にメタノール（９００ｍＬ）を入れる。式VIIIで表される化合物（１８０ｇ）及びＰＴＳＡ（１．４ｇ）を、２５〜３０℃で反応混合物に添加する。油浴を使用して反応温度を徐々に上昇させて、穏やかな還流（６５〜７０℃）を維持する。還流条件を不活性雰囲気下で３時間維持する。分析用シリカゲルＴＬＣプレート上にスポットし、ＫＭｎＯ４及びアニスアルデヒド染色剤を使用してスポットを視覚化することによって、反応進行をモニターする。反応混合物を室温に冷却し、６０〜７０℃で、真空下で濃縮する。シリカゲル（６０〜１２０メッシュ）を使用してカラムクロマトグラフィーによって最終生成物を精製して、式IXで表される純粋な化合物５８ｇを得る。
【０１３０】
式Ｉで表される化合物を、式IXで表される化合物から調製する方法も提供する。本方法の限定されない実施形態に伴う反応スキームは、以下の通りである。
【０１３１】
【化３３】
2014516340.tif 000040
【０１３２】
限定的であることを決して望むことなく、本方法に使用することができる原料を、以下の通り表６に例示する。
【０１３３】
【表６】
2014516340.tif 000041
【０１３４】
式Ｉで表される化合物の調製の例：この例示的な限定されない方法では、Ｎ２入口、滴下漏斗、及び磁気撹拌機を備えた１Ｌの多口ＲＢＦ内にピリジンを仕込む。反応混合物を−５〜０℃に冷却する。ジクロロメタン（ロット−Ｉ）中の式IXで表される化合物を、暗褐色溶液が観察されるまで、−５〜０℃で１５分にわたって反応混合物に徐々に添加する。反応混合物を−５℃で１０分間撹拌する。ジクロロメタン（ロット−II）中の塩化トシルを、−５〜０℃で３０分にわたって反応混合物に添加する。塩化トシルの添加は、反応温度を５℃以下に維持するように制御する。反応混合物を同じ温度で１時間撹拌する。分析用シリカゲルＴＬＣプレート上にスポットし（ヘキサン中２０％の酢酸エチル）、ＫＭｎＯ４及びアニスアルデヒド染色剤を使用してスポットを視覚化することによるＴＬＣ分析によって、反応をモニターする。
【０１３５】
反応混合物を３Ｎの塩酸（３５０ｍＬ）でクエンチする。クエンチのプロセスの間に、褐色不溶性粒子が形成される。反応混合物をＭＴＢＥ（ロット−Ｉ）で希釈し、２５〜３０℃で５分間撹拌する。２つの層を分離し、水層をＭＴＢＥ（ロット−II）で抽出する。合わせた有機層を１Ｎの塩酸（２×５倍量）で洗浄する。有機層を飽和ＮａＣｌ溶液（１０倍量）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、４５℃で、減圧下で蒸発させる。最終生成物である式Ｉで表される化合物を暗褐色液体として得る。
【０１３６】
本発明の別の態様の限定されない実施形態では、式IIで表される化合物を調製する方法を提供する。合成経路を、スキームIIIに記載し、限定的であることを決して望むことなく、トシル化、カップリング反応、トシル化、カップリング反応及びシリル脱保護を含む５段階で行う。
【０１３７】
式IIで表される化合物の調製の例：この例示的な限定されない方法では、２−ブチン−１，４−ジオールをジクロロメタン中の塩化トシル及びピリジンでトシル化して、式Ｘで表される化合物を４５〜５０％の収率で得る。式Ｘで表される粗化合物をトリメチルシリルアセチレンと反応させて、式XIで表される化合物を６０〜６５％の収率で得る。ピリジン中で、式XIで表される化合物をトシル化して、式XIIで表される化合物を６５〜７５％の収率で得る。次いで、トシル化された化合物をメチル−４−ペンチノエートで処理して、式XIIIで表される化合物を４５％の収率で得る。ＴＢＡＦ／ジクロロメタンを使用して式XIIIで表される化合物を脱保護して、式IIで表される化合物を６５％の収率で得る。
【０１３８】
式Ｘで表される化合物を調製する方法も提供する。本方法の限定されない実施形態に伴う反応スキームは、以下の通りである。
【０１３９】
【化３４】
2014516340.tif 000042
【０１４０】
限定的であることを決して望むことなく、本方法に使用することができる原料を、以下の通り表７に例示する。
【０１４１】
【表７】
2014516340.tif 000043
【０１４２】
式Ｘで表される化合物の調製の例：この例示的な限定されない方法では、ジクロロメタン（２５Ｌ、ロット−Ｉ）及び２−ブチン１，４−ジオール（１Ｋｇ）を反応器内に仕込む。反応混合物を０℃に冷却する。ピリジンを、−５〜０℃で１０分にわたって反応混合物に添加する。ジクロロメタン（ロット−II）中の塩化トシルを、−５〜０℃で３時間にわたって反応混合物に添加する。反応混合物を同じ温度で４時間撹拌し、次いで３Ｎの塩酸でクエンチする。クエンチングは、１０℃以下で行う。２つの層を分離し、有機層を１Ｎの塩酸で洗浄する。
【０１４３】
合わせた有機層をブライン溶液（５Ｌ）で洗浄する。有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、４５℃で、減圧下で蒸発させる。得られた暗褐色液体をメタノール（３Ｌ）中に入れる。白色固体がメタノール溶液から析出するまで、反応混合物を０〜５℃に冷却する。懸濁した固体を濾過する。化合物に富む濾液を５０℃で、減圧下で蒸発させて、式Ｘで表される化合物を得る。
【０１４４】
式XIで表される化合物を調製する方法も提供する。本方法の限定されない実施形態に伴う反応スキームは、以下の通りである。
【０１４５】
【化３５】
2014516340.tif 000044
【０１４６】
限定的であることを決して望むことなく、本方法に使用することができる原料を、以下の通り表８に例示する。
【０１４７】
【表８】
2014516340.tif 000045
【０１４８】
式XIで表される化合物の調製の例：この例示的な限定されない方法では、機械撹拌機、アルゴンバブラー、１Ｌの滴下漏斗を備えた２０Ｌの多口フラスコ内にＤＭＦ（ロット−Ｉ）を仕込み、溶媒を１５分間脱気する。ＣｕＩ、ヨウ化ナトリウム及びヨウ化カリウムを反応器内に仕込む。氷／水浴を使用して反応系を０℃に冷やす。トリメチルシリルアセチレンを３０分にわたって反応系に添加する。脱気条件を維持して、反応混合物を０〜５℃で３０分間撹拌する。滴下漏斗を使用して、式Ｘで表される化合物を、３０分にわたって反応系中に添加し、脱気をさらに３０分間継続する。反応フラスコ内で不活性雰囲気を維持するようにアルゴン流量をわずかに低減し、撹拌を１８時間継続する。
【０１４９】
反応系にＭＴＢＥ（ロット−Ｉ）及び水（ロット−Ｉ）を添加し、１５分間撹拌する。反応混合物をCelite（商標）パッドで濾過し、ＭＴＢＥ（ロット−II）で洗浄する。濾液の層を分離し、水層をＭＴＢＥ（ロット−III）で抽出する。合わせた有機層を水（３×１．８Ｌ；固形沈殿物がまったく観察されなくなるまで）、次いで飽和ＮａＣｌ（１×１．８Ｌ）で洗浄する。有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、ロータリーエバポレーターで濃縮して、式XIで表される粗化合物、すなわちＰＨＲ−１１０を得る。粗製物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって最後に精製する。
【０１５０】
式XIIで表される化合物を調製する方法も提供する。本方法の限定されない実施形態に伴う反応スキームは、以下の通りである。
【０１５１】
【化３６】
2014516340.tif 000046
【０１５２】
限定的であることを決して望むことなく、本方法に使用することができる原料を、以下の通り表９に例示する。
【０１５３】
【表９】
2014516340.tif 000047
【０１５４】
式XIIで表される化合物の調製の例：この例示的な限定されない方法では、Ｎ２入口、滴下漏斗、及び磁気撹拌機を備えた１Ｌの多口ＲＢＦ内にピリジンを仕込む。反応混合物を−５℃に冷却する。ジクロロメタン（ロット−Ｉ）中の式XIで表される化合物（４０ｇ）を、暗褐色溶液が観察されるまで、−５〜０℃で１５分にわたって反応混合物に徐々に添加する。反応混合物を−５℃で１０分間撹拌する。ジクロロメタン（ロット−II）中に溶解した塩化トシルを、−５〜０℃で３０分にわたって反応混合物に添加する。次いで、反応混合物を同じ温度で１時間撹拌する。
【０１５５】
次いで、反応混合物を、１０℃以下で、３Ｎの塩酸でクエンチする。反応混合物をＭＴＢＥ（ロット−Ｉ）で希釈し、暗褐色透明溶液が観察されるまで、室温で５分間撹拌する。得られる２つの層を分離する。水層をやはりＭＴＢＥ（ロット−II）で抽出する。合わせた有機層を１Ｎの塩酸（２×６倍量）で洗浄し、この有機層をブライン溶液（６倍量）で洗浄する。有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、４５℃で、減圧下で蒸発させて、式XIIで表される化合物である暗褐色液体を得る。
【０１５６】
式XIIIで表される化合物を調製する方法も提供する。本方法の限定されない実施形態に伴う反応スキームは、以下の通りである。
【０１５７】
【化３７】
2014516340.tif 000048
【０１５８】
限定的であることを決して望むことなく、本方法に使用することができる原料を、以下の通り表１０に例示する。
【０１５９】
【表１０】
2014516340.tif 000049
【０１６０】
式XIIIで表される化合物の調製の例：この例示的な限定されない方法では、機械撹拌機、アルゴンバブラー、及び２５０ｍＬの滴下漏斗を備えた５００ｍＬの多口フラスコ内にＤＭＦ（１００ｍＬ、５倍量）を仕込み、溶媒を１５分間脱気する。ＣｕＩ、ヨウ化ナトリウム及びヨウ化カリウムをフラスコ内に仕込む。反応系を３０〜３５℃に加温し、次いで氷／水浴を使用して０℃に冷やす。メチル−４−ペンチノエートを５分にわたって反応系に添加する。脱気条件を維持して、反応混合物を０〜５℃で１５分間撹拌する。滴下漏斗を使用して、式XIIで表される化合物を、１０分にわたって反応系に添加し、脱気をさらに３０分間継続する。反応フラスコ内で不活性雰囲気を維持するようにアルゴン流量をわずかに低減し、撹拌を１８時間継続する。
【０１６１】
反応系にＭＴＢＥ（ロットＩ）及び水（ロットＩ）を添加し、１５分間撹拌する。反応混合物をCelite（商標）ベッドで濾過し、ＭＴＢＥ（ロット−II）で洗浄する。濾液の層を分離し、有機層を水（ロット−II及びIII）で洗浄する。有機層をブラインで最後に洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させる。有機層を減圧下で濃縮して、式XIIIで表される粗化合物を得る。
【０１６２】
式IIで表される化合物を調製する方法も提供する。本方法の限定されない実施形態に伴う反応スキームは、以下の通りである。
【０１６３】
【化３８】
2014516340.tif 000050
【０１６４】
限定的であることを決して望むことなく、本方法に使用することができる原料を、以下の通り表１１に例示する。
【０１６５】
【表１１】
2014516340.tif 000051
【０１６６】
式IIで表される化合物の調製の例：この例示的な限定されない方法では、ジクロロメタン（４８０ｍＬ）及び式XIIIで表される化合物（１６ｇ）を１Ｌの丸底フラスコ内に仕込む。塩氷／水浴を使用して反応混合物を０℃以下（−５〜０℃）に冷却する。次いで、反応温度を０℃付近に維持して、ＴＢＡＦ（９．６９ｇ）を、３０分にわたって１０ロットで反応混合物に添加する。反応混合物を−５〜０℃で１時間撹拌し、次いでこれを氷冷水でクエンチする。得られる２つの層を分離する。有機層を水、次いで飽和塩化ナトリウムで洗浄する。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で蒸発させて、黒色液体として式IIで表される化合物を得る。粗製物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって最後に精製する。
【０１６７】
本発明の別の態様の限定されない実施形態では、式Ｉ及びIIで表される化合物を使用してＤＨＡを調製する方法を提供する。合成経路をスキームIVに記載し、限定的であることを決して望むことなく、本方法に使用される原料を、以下の通り表１２に例示する。
【０１６８】
【表１２】
2014516340.tif 000052
【０１６９】
ＤＨＡの調製の例：この例示的な限定されない方法では、式Ｉ及びIIで表される化合物を、ＤＭＦ中で、ＣｕＩ、ＮａＩ及びＫ２ＣＯ３の存在下でカップリングして、式IIIで表される化合物を３０〜４０％の収率で得る。リンドラー触媒を使用して式IIIで表される化合物を部分的に水素化して、式XIVで表されるエステルを得る。式XIVで表されるエステルを加水分解して、ＤＨＡを得る。
【０１７０】
本発明を以下の実施例でさらに例示する。
【０１７１】
［実施例］
（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）−ドコサ−４，７，１０，１３，１６，１９−ヘキサエン酸（ＤＨＡ）の調製。
要約：
【０１７２】
【化３９】
2014516340.tif 000053
【０１７３】
重要な出発原料のＰＨＲ−１０９（ＫＳＭ１）及びＰＨＲ−１１２（ＫＳＭ２）はともに、それぞれプロパルギルアルコール及び２−ブチン−１，４−ジオールからマルチグラムスケールで、研究所で調製した。ＤＭＦ中のＣｕＩ、ＮａＩ及びＫ２ＣＯ３の存在下でＫＳＭ１及びＫＳＭ２の両方をカップリング反応させて、ＰＨＲ−１１４を３０〜４０％の収率で得た。リンドラー触媒を使用することによってＰＨＲ−１１４を部分的に水素化し、その後エステルを加水分解して、ＤＨＡの合成を完了した。
【０１７４】
【化４０】
2014516340.tif 000054
【０１７５】
ＰＨＲ−１０２の調製：−７８℃〜室温で、ＴＨＦ中のｎ−ＢｕＬｉ、ＨＭＰＡを使用することによって、ヨウ化エチルを用いてプロパルギルアルコールをアルキル化してＰＨＲ−１０１を得た。ＴＨＦ溶媒中の得られたＰＨＲ−１０１をＴｓＣｌ及びＫＯＨを使用することによるトシル化反応に進めて、ＰＨＲ−１０２を得た。粗ＰＨＲ−１０２をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、純粋なＰＨＲ−１０２を３３〜４０％の収率で得た。
【０１７６】
ＰＨＲ−１０９の調製：ＰＨＲ−１０９の調製は、５つのステップ、すなわち、ＤＨＰ保護、グリニャール反応、カップリング反応、脱保護、及びトシル化を伴った。プロパルギルアルコールのＤＨＰ保護により、定量的収率のＰＨＲ−２０１を得た。ＰＨＲ−２０１のマグネシウムアセチリドをＣｕＣｌの存在下で臭化プロパルギルと反応させて、ＰＨＲ−１０６を６５〜７５％の収率で得た。ＤＭＦ中でＰＨＲ−１０６をＰＨＲ−１０２とカップリングさせてＰＨＲ−１０７を得、粗製物をｐ−ＴＳＡ／メタノール中で、６０℃で３時間脱保護にかけて、シリカゲルカラムクロマトグラフィー後にＰＨＲ−１０８を５０％の収率で得た。ピリジン中で塩化トシルを使用することによってＰＨＲ−１０８をトシル化して、ＰＨＲ−１０９を６０〜６５％の収率で得た。
【０１７７】
プロパルギルアルコールからのＰＨＲ−１０９の調製についての全収率は、約２０％であった。
【０１７８】
【化４１】
2014516340.tif 000055
【０１７９】
ＰＨＲ−１１２の調製は、５つの段階、すなわち、トシル化、カップリング反応、トシル化、カップリング反応及びシリル脱保護を伴った。ジクロロメタン中で塩化トシル、ピリジンを用いて２−ブチン−１，４−ジオールをトシル化して、ＰＨＲ−１０３を４５〜５０％の収率で得た。粗ＰＨＲ−１０３をトリメチルシリルアセチレンとの反応にかけて、ＰＨＲ−１０４を６０〜６５％の収率で得た。ピリジン中でＰＨＲ−１０４をトシル化して、ＰＨＲ−１１０を６５〜７５％の収率で得た。次いでトシル化された化合物をメチル−４−ペンチノエートで処理して、ＰＨＲ−１１１を４５％の収率で得た。ＴＢＡＦ／ジクロロメタンを使用してＰＨＲ−１１１を脱保護することによって、ＰＨＲ−１１２を６５％の収率で得た。
【０１８０】
２−ブチン−１，４−ジオールからのＰＨＲ−１１２の調製についての全収率は、約６〜７％であった。
【０１８１】
【化４２】
2014516340.tif 000056
【０１８２】
ＤＭＦ中、ＣｕＩ、ＮａＩ及びＫ２ＣＯ３の存在下で、ＫＳＭ１及びＫＳＭ２の両方をカップリング反応させて、ＰＨＲ−１１４を３０〜４０％の収率で得た。リンドラー触媒を使用してＰＨＲ−１１４を部分的に水素化し、その後エステルを加水分解して、ＤＨＡの合成を完了した。
【０１８３】
最適化した最終手順：
ＰＨＲ−１０９（ＫＳＭ１）：ＰＨＲ−１０２の調製：
段階−Ｉ：ペンタ−２−イン−１−オールの調製
【０１８４】
【化４３】
2014516340.tif 000057
【０１８５】
バッチ番号＃ＰＡＡ−Ｐ−１０−０４０−ＰＨＲ−１０１−０３
原料：
【０１８６】
【表１３】
2014516340.tif 000058
【０１８７】
プロセスの詳細：
ステップ−Ｉ：
１．清潔で乾燥した１００Ｌの反応器内にＴＨＦを仕込んだ。
２．反応器内にプロパルギルアルコール（１Ｋｇ）を仕込んだ。
観察結果：透明なＴＨＦ溶液
３．室温（２５〜３０℃）で１０分にわたって、ＨＭＰＡ（９．３Ｌ）を反応混合物に添加した。
４．ドライアイス／アセトン浴を使用して反応混合物を−７８℃に冷却した。
５．温度を−６５℃以下（−７５〜−６５℃）に維持して、ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中２．５Ｍ）を、３時間にわたって反応混合物に添加した。
注意：反応は、窒素雰囲気下であるべきである。
観察結果：ｎ−ブチルリチウムを添加し終えたとき、濁った濃い懸濁液が観察され、桃色から赤色が識別された。
６．反応混合物を−７５℃で１時間維持した。
７．維持した後、内部温度を−７５〜−６５℃に維持して、１時間にわたってヨウ化エチルを徐々に添加した。
観察結果：添加中に、桃色の反応混合物は、オフホワイト色に変化した。
８．反応混合物を室温（２５〜３０℃）にして、１８時間撹拌した。
注意：ＴＬＣ分析（ヘキサン中２０％の酢酸エチル）、並びにＫＭｎＯ４溶液及びアニスアルデヒド染色剤を使用したスポットの視覚化によって、反応進行をモニターした。Ｒｆ＝０．２（ＰＨＲ−１０１）。
９．反応が完了した後、反応混合物を、氷／水浴を使用して０℃に冷却し、氷冷３ＮのＨＣｌ（２０Ｌ）を用いて１時間にわたってクエンチした。
１０．有機層（ＴＨＦ及びヘキサン）を分離し、水層をＭＴＢＥ（２×１０Ｌ；ロットＩ及びII）で抽出した。
１１．合わせた有機層を１ＮのＨＣｌ（１×１０Ｌ）で洗浄し、その後飽和塩化ナトリウム溶液（１×１０Ｌ）で洗浄した。
１２．有機相を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、６０℃以下の大気圧下で蒸発させて１０Ｌの体積にした。
１３．ＰＨＲ−１０１に富むＴＨＦ層を淡黄色溶液として得、これをトシル化反応にさらに利用した。
【０１８８】
【表１４】
2014516340.tif 000059
【０１８９】
１Ｈ  ＮＭＲデータ：（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ，ｐｐｍ）：４．２２（ｓ，−ＯＣＨ２−，２Ｈ）、２．２１（ｑ，−ＣＨ２ＣＨ３，２Ｈ）、１．８５（ｔ，−ＣＨ２ＣＨ３，３Ｈ）。
ステップ−II
１４．ＰＨＲ−１０１に富むＴＨＦ層を清潔で乾燥した５０Ｌの反応器内に仕込んだ。
１５．塩化トシル（３．４Ｋｇ）を、２５〜３０℃で１０分にわたって反応混合物に添加した。
１６．反応混合物を−５〜０℃に冷却する。
１７．反応混合物を−５〜０℃に維持して３時間にわたって、ＫＯＨ（１．５Ｋｇ）を２０回に分けて反応混合物に添加した。
注意：添加中、反応温度は、−５℃〜０℃の間に維持されるべきである。
１８．反応温度（−５〜０℃）を１時間維持する。
注意：ＴＬＣ分析（ヘキサン中２０％の酢酸エチル）、及びアニスアルデヒド染色剤を使用したスポットの視覚化によって、反応進行をモニターした。Ｒｆ＝０．２（ＰＨＲ−１０１）、０．３（ＰＨＲ−１０２）。
１９．反応が完了した後、０〜１０℃で３ＮのＨＣｌ（ロット−II）を徐々に添加することによって、反応混合物をクエンチした。
２０．有機層を分離し、水層をＭＴＢＥ（ロット−III）で抽出した。
２１．合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ溶液（２×３Ｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させた。
２２．有機層を６０℃で、真空下で蒸留した。
観察結果：粗ＰＨＲ−１０２は褐色油状物であった。
２３．６０〜１２０メッシュのシリカを使用してシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって粗製物を精製し、ヘキサン中５０％の酢酸エチルで化合物を溶出した。
結果
生成物の重量              ：１．３５Ｋｇ
収率                      ：３３％
記述                      ：褐色油状物
１Ｈ  ＮＭＲ              ：構造に適合
１Ｈ  ＮＭＲデータ：（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ，ｐｐｍ）：７．８１（ｄ，ＡｒＣＨ，２Ｈ）、７．３８（ｄ，ＡｒＣＨ，２Ｈ）、４．７１（ｓ，−ＯＣＨ２−，２Ｈ）、２．４５（ｓ，ＡｒＣＨ３，３Ｈ）、２．０８（ｑ，−ＣＨ２ＣＨ３，２Ｈ）、１．０２（ｔ，−ＣＨ２ＣＨ３，３Ｈ）（図１及び２）。
【０１９０】
段階−Ｉ：２−（プロパ−２−イニルオキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピランの調製：
【０１９１】
【化４４】
2014516340.tif 000060
【０１９２】
バッチ番号＃ＰＡＡ−Ｐ−１０−０２７−ＰＨＲ−２０１−３２
原料：
【０１９３】
【表１５】
2014516340.tif 000061
【０１９４】
プロセスの詳細：
１．機械撹拌機を備えた清潔で乾燥した２０Ｌの４口丸底フラスコ内に、ジクロロメタン（ロット−Ｉ）を仕込んだ。
２．反応器内にプロパルギルアルコール（１Ｋｇ）を仕込んだ。
３．反応器内にＰＴＳＡ（３４．４ｇ）を１ロットで仕込んだ。
４．反応混合物を−５〜０℃に冷却した。
５．３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（１．６７Ｌ）をＤＣＭ（ロット−II）で希釈し、次いで、反応温度を０〜５℃に維持して１．５時間にわたって反応混合物に添加した。
６．反応混合物を０〜５℃で３時間撹拌したままにした。
注意：ＴＬＣ分析（ヘキサン中１０％の酢酸エチル、及びアニスアルデヒド溶液を使用したスポットの視覚化）によって、反応進行をモニターした。Ｒｆ＝０．６（ＰＨＲ−２０１）及び０．２（プロパルギルアルコール）。
７．反応が完了した後、過剰の固体ＮａＨＣＯ３を添加することによって、反応混合物をクエンチし（塩基性化し）、３０分間撹拌した。
８．水（１Ｌ、１倍量）を反応系中に添加し、１５分間撹拌した。
９．層を分離し、有機層を１０％のＮａＨＣＯ３（５００ｍＬ、０．５倍量）で洗浄した。
１０．有機層を飽和ＮａＣｌ溶液（５００ｍＬ、０．５倍量）で最後に洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させた。
１１．有機層を減圧下で蒸発させて、粗ＰＨＲ−２０１を得た。
結果
生成物の重量              ：２．５Ｋｇ
収率                      ：１００％
記述                      ：褐色から黒色の液体
１Ｈ  ＮＭＲ              ：構造に適合
１Ｈ  ＮＭＲデータ：（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ，ｐｐｍ）：４．８１（ｔ，−ＯＣＨＯ−，１Ｈ）、４．３５〜４．０（ｄｄ，−ＯＣＨ２−，２Ｈ）、３．９〜３．８（ｍ，−ＯＣＨＡＣＨＢＣＨ２−，１Ｈ）、３．５７〜３．５（ｍ，−ＯＣＨＡＣＨＢＣＨ２−，１Ｈ）、２．４０（ｓ，−ＣＨ，１Ｈ）、１．９〜１．７（ｍ，−ＣＨ２−，２Ｈ）、１．７〜１．５（ｍ，２ｘ−ＣＨ２−，４Ｈ）（図３）。
【０１９５】
段階−II：２−（ヘキサ−２，５−ジイニルオキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピランの調製
【０１９６】
【化４５】
2014516340.tif 000062
【０１９７】
バッチ番号＃ＰＡＡ−Ｐ−１０−０２７−ＰＨＲ−１０６−３１
原料：
【０１９８】
【表１６】
2014516340.tif 000063
【０１９９】
プロセスの詳細：
１．機械撹拌機、アルゴン入口、還流冷却器、及び温度計の鞘を備えた２０Ｌの多口丸底フラスコ内にエチルマグネシウムブロミド（３．９２Ｌ、１ＭのＴＨＦ溶液）を仕込んだ。
２．ＴＨＦ中のＰＨＲ−２０１（５００ｇ）を、反応温度を４０℃以下に維持して１時間にわたって反応混合物に添加した。
３．水浴を使用して反応混合物を徐々に加温することによって、穏やかな還流（６５〜７０℃）を３０分間維持した。
注意：ＰＨＲ−２０１を添加した後、反応混合物は黒色から褐色に変わった。
４．反応混合物を１０℃に冷却した。
５．塩化銅（Ｉ）（３．５３ｇ）を、アルゴン雰囲気下で、１ロットで反応混合物中に仕込み、反応混合物を１０℃で１５分間撹拌した。
注意：ＣｕＣｌを添加した後、反応混合物は灰色に変わった。
６．臭化プロパルギル（４３９ｍＬ）を、３０分にわたって反応混合物に添加した。
７．反応混合物を５時間還流した（６５〜７０℃）。
注意：反応混合物は粘性となり、色が黄色に、次いで橙色に変化した。長時間で、反応系は褐色になった。
８．反応混合物を室温で７時間撹拌した。
注意：ＴＬＣ分析（ヘキサン中１０％の酢酸エチル、及びアニスアルデヒド溶液を使用したスポットの視覚化）によって、反応進行をモニターした。Ｒｆ＝０．５（ＰＨＲ−１０６）及び０．６（ＰＨＲ−２０１）。
９．反応混合物をＭＴＢＥで希釈した。
１０．飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液を添加し、反応系を１５分間撹拌した。
１１．２つの層を分離した。
観察結果：水層は色が青色であった。
１２．次いで、有機層を水（３×１Ｌ）、ブライン溶液（１Ｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させた。
１３．有機層を減圧下で濃縮して、粗ＰＨＲ−１０６を得た。
観察結果：粗製物６４０ｇを得た。
１４．粗製物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製した。
結果
生成物の重量              ：４４８ｇ
収率                      ：７０％
記述                      ：褐色から黒色の液体
１Ｈ  ＮＭＲ              ：構造に適合
１Ｈ  ＮＭＲデータ：（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ，ｐｐｍ）：４．８０（ｔ，−ＯＣＨＯ−，１Ｈ）、４．３５〜４．１９（ｄｄ，−ＯＣＨ２−，２Ｈ）、３．８５〜３．８（ｍ，−ＯＣＨＡＣＨＢＣＨ２−，１Ｈ）、３．５９〜３．５（ｍ，−ＯＣＨＡＣＨＢＣＨ２−，１Ｈ）、３．２１（ｓ，−ＣＨ２−，２Ｈ）、２．０８（ｓ，−ＣＨ，１Ｈ）、１．９〜１．６５（ｍ，−ＣＨ２−，２Ｈ）、１．６５〜１．３５（ｍ，２ｘ−ＣＨ２−，４Ｈ）（図４）。
【０２００】
段階−III：２−（ウンデカ−２，５，８−トリイニルオキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピランの調製
【０２０１】
【化４６】
2014516340.tif 000064
【０２０２】
バッチ番号＃ＰＡＡ−Ｐ−１０−０４０−ＰＨＲ−１０７−１０
原料：
【０２０３】
【表１７】
2014516340.tif 000065
【０２０４】
プロセスの詳細：
１．機械撹拌機、アルゴンバブラー及び１Ｌの滴下漏斗を備えた２０Ｌの多口フラスコ内にＤＭＦ（３Ｌ、６倍量）を仕込み、溶媒を１５分間脱気した。
２．ＣｕＩ、ヨウ化ナトリウム及びヨウ化カリウムを反応器内に仕込んだ。
注意：反応系は、熱を発生するとともに黄色に変わった（反応系を３０〜３５℃に加温した）。
３．反応混合物を０℃に冷却した。
４．ＰＨＲ−１０６を、５分にわたって反応混合物に添加した。
５．脱気条件を維持して、反応混合物を０〜５℃で１５分間撹拌した。
６．ＰＨＲ−１０２を、３０分にわたって反応混合物中に添加し、脱気をさらに３０分間継続した。
７．反応フラスコ内で不活性雰囲気を維持するようにアルゴン流量をわずかに低減し、撹拌を１８時間継続した。
注意：ＴＬＣ分析（ヘキサン中５％の酢酸エチル（２回実行）、及びアニスアルデヒド溶液を使用したスポットの視覚化）によって、反応進行をモニターした。Ｒｆ＝０．４５（ＰＨＲ−１０６）及び０．５（ＰＨＲ−１０７）。
８．ＭＴＢＥ（ロットＩ）及び水を反応混合物に添加し、１５分間撹拌した。
９．反応混合物をCelite（商標）パッドで濾過し、ＭＴＢＥ（ロット−II）で洗浄した。
１０．濾液の層を分離し、水層をＭＴＢＥ（ロット−III）で抽出した。
１１．合わせた有機層を水（３×３Ｌ；固形沈殿物がまったく観察されなくなるまで）及び飽和ＮａＣｌ（１×２Ｌ）で洗浄した。
１２．有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮して、粗ＰＨＲ−１０７を得た。
結果
生成物の重量              ：粗製物５８０ｇ
収率                      ：８５％
記述                      ：褐色から黒色の液体
１Ｈ  ＮＭＲ              ：構造に適合
１Ｈ  ＮＭＲデータ：（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ，ｐｐｍ）：４．８０（ｔ，−ＯＣＨＯ−，１Ｈ）、４．３２〜４．１７（ｄｄ，−ＯＣＨ２−，２Ｈ）、３．８５〜３．８（ｍ，−ＯＣＨＡＣＨＢＣＨ２−，１Ｈ）、３．５５〜３．５０（ｍ，−ＯＣＨＡＣＨＢＣＨ２−，１Ｈ）、３．２０（ｓ，−ＣＨ２−，１Ｈ）、３．１２（ｓ，−ＣＨ２−，２Ｈ）、２．１９（ｑ，−ＣＨ２ＣＨ３，２Ｈ）、１．９〜１．６５（ｍ，−ＣＨ２−，２Ｈ）、１．６５〜１．４５（ｍ，２ｘ−ＣＨ２−，４Ｈ）、１．１５（ｔ，−ＣＨ２ＣＨ３，３Ｈ）（図５）。
注意：粗製物を次の脱保護反応に進め、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを使用してアルコール段階（ＰＨＲ−１０８）で化合物を精製した。
【０２０５】
段階−IV：ウンデカ−２，５，８−トリイン−１−オールの調製
【０２０６】
【化４７】
2014516340.tif 000066
【０２０７】
バッチ番号＃ＰＡＡ−Ｐ−１０−０４０−ＰＨＲ−１０８−０８
原料：
【０２０８】
【表１８】
2014516340.tif 000067
【０２０９】
詳細な手順：
１．機械撹拌機、還流冷却器、サーモポケット及び加熱設備を備えた２Ｌの４口ＲＢＦ内にメタノール（９００ｍＬ）を入れた。
２．ＰＨＲ−１０７（１８０ｇ）及びＰＴＳＡ（１．４ｇ）を、２５〜３０℃で反応混合物に添加した。
３．反応温度を穏やかな還流（６５〜７０℃）まで上昇させ、３時間維持した。
注意：ＴＬＣ分析（ヘキサン中２０％の酢酸エチル）、及びＫＭｎＯ４及びアニスアルデヒド染色剤を使用したスポットの視覚化によって、反応進行をモニターした。Ｒｆ＝０．８（ＰＨＲ−１０７）、０．３５（ＰＨＲ−１０８）。
４．反応混合物を室温に冷却し、溶媒を５０〜５５℃で、真空下で蒸発させた。
観察結果：粗製物は褐色液体であった。
５．シリカゲル（６０〜１２０メッシュ）を使用してカラムクロマトグラフィーによって生成物を精製して、純粋なＰＨＲ−１０８  ５８ｇを得た。
結果
生成物の重量          ：５８ｇ
収率                  ：５０％（２つの段階について、ＰＨＲ−１０６から）
記述                  ：淡黄色液体
１Ｈ  ＮＭＲ          ：構造に適合。
１Ｈ  ＮＭＲデータ：（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ，ｐｐｍ）：４．２５（ｓ，−ＯＣＨ２−，２Ｈ）、３．２（ｓ，−ＣＨ２−，２Ｈ）、３．１（ｓ，−ＣＨ２−，２Ｈ）、２．１５（ｑ，−ＣＨ２ＣＨ３，２Ｈ）、１．７〜１．４５（ｂｍ，−ＯＨ，１Ｈ）、１．１５（ｔ，−ＣＨ２ＣＨ３，３Ｈ）（図６）。
【０２１０】
段階−Ｖ：ウンデカ−２，５，８−トリイニル４−メチルベンゼンスルホネートの調製：
【０２１１】
【化４８】
2014516340.tif 000068
【０２１２】
バッチ番号＃ＰＡＡ−Ｐ−１０−０４０−ＰＨＲ−１０９−１１
原料：
【０２１３】
【表１９】
2014516340.tif 000069
【０２１４】
プロセスの詳細：
１．Ｎ２入口、滴下漏斗及び磁気撹拌機を備えた１Ｌの多口ＲＢＦ内にピリジンを仕込んだ。
２．反応混合物を−５〜０℃に冷却した。
３．ジクロロメタン（ロット−Ｉ）中のＰＨＲ−１０８を、−５〜０℃で１５分にわたって反応混合物に徐々に添加した。
観察結果：暗褐色の溶液が観察された。
４．反応混合物を−５℃で１０分間撹拌した。
５．ジクロロメタン（ロット−II）中の塩化トシルを、−５〜０℃で３０分にわたって反応混合物に添加した。
観察結果：反応は、本質的に発熱性であることが判明した。
注意：塩化トシルの添加は、反応温度を５℃以下に維持するように制御した。
６．反応混合物を同じ温度で１時間撹拌した。
７．反応をＴＬＣ分析によってモニターした。
注意：ＴＬＣ分析：ヘキサン中２０％の酢酸エチル、並びにＫＭｎＯ４及びアニスアルデヒド染色剤を使用したスポットの視覚化。Ｒｆ＝０．４（ＰＨＲ−１０９）、０．３５（ＰＨＲ−１０８）。
８．反応混合物を３Ｎの塩酸（３５０ｍＬ）でクエンチした。
観察結果：クエンチは発熱性であった。ＨＣｌの添加は、温度を１０℃以下に保持するように制御しなければならない。クエンチのプロセス中、褐色不溶性粒子が形成した。
９．反応混合物をＭＴＢＥ（ロット−Ｉ）で希釈し、２５〜３０℃で５分間撹拌した。
１０．２つの層を分離し、水層をＭＴＢＥ（ロット−II）で抽出した。
１１．合わせた有機層を１Ｎの塩酸（２×５倍量）で洗浄した。
１２．有機層を飽和ＮａＣｌ溶液（１０倍量）で洗浄した。
１３．有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、４５℃で、減圧下で蒸発させた。
観察結果：ＰＨＲ−１０９を暗褐色液体として得た。
結果
生成物の重量              ：３２ｇ
収率                      ：６５％
記述                      ：褐色から黒色の液体
１Ｈ  ＮＭＲ              ：構造に適合
１Ｈ  ＮＭＲデータ：（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ，ｐｐｍ）：７．８０（ｄ，ＡｒＣＨ，２Ｈ）、７．３５（ｄ，ＡｒＣＨ，２Ｈ）、４．６９（ｓ，−ＯＣＨ２−，２Ｈ）、３．１５〜３．０９（ｓ，−ＣＨ２−，２Ｈ）、３．０９〜３．０２（ｓ，−ＣＨ２−，２Ｈ）、２．１７（ｑ，−ＣＨ２ＣＨ３，２Ｈ）、１．１２（ｔ，−ＣＨ２ＣＨ３，３Ｈ）（図７）。
【０２１５】
ＰＨＲ−１１２（ＫＳＭ２）：メチルウンデカ−４，７，１０−トリイノエートの調製
【０２１６】
【化４９】
2014516340.tif 000070
【０２１７】
段階−Ｉ：４−ヒドロキシブタ−２−イニル４−メチルベンゼンスルホネートの調製
【０２１８】
【化５０】
2014516340.tif 000071
【０２１９】
バッチ番号＃ＰＡＡ−Ｐ−１０−０３７−ＰＨＲ−１０３−１２
原料：
【０２２０】
【表２０】
2014516340.tif 000072
【０２２１】
プロセスの詳細：
１．ジクロロメタン（２５Ｌ、ロット−Ｉ）を１００Ｌの反応器内に仕込んだ。
２．２−ブチン１，４−ジオール（１Ｋｇ）を反応器内に仕込んだ。
観察結果：２−ブチン−１，４−ジオールは、ジクロロメタン中で部分的に可溶性であった。
３．反応混合物を０℃に冷却した。
４．ピリジンを、−５〜０℃で１０分にわたって反応混合物に添加した。
観察結果：透明溶液。
５．ジクロロメタン（ロット−II）中の塩化トシルを、−５〜０℃で３時間にわたって反応混合物に添加した。
観察結果：発熱反応が観察され、塩化トシルを徐々に添加することによって温度を制御した。
６．反応混合物を同じ温度で４時間撹拌した。
注意：分析用シリカゲルＴＬＣプレート上にスポットし（ヘキサン中５０％の酢酸エチル）、ＫＭｎＯ４及びアニスアルデヒド染色剤を使用してスポットを視覚化することによって、反応進行をモニターした。Ｒｆ＝０．３（ＰＨＲ−１０３）、０．１（２−ブチン−１，４−ジオール）、０．４（ジトシル化された化合物）。
７．反応混合物を３Ｎの塩酸でクエンチした。
注意：クエンチは、１０℃以下で行った。
８．２つの層を分離した。
９．有機層を１Ｎの塩酸で洗浄した。
１０．合わせた有機層をブライン溶液（５Ｌ）で洗浄した。
１１．有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、４５℃で、減圧下で蒸発させた。
観察結果：暗褐色液体を得た。
１２．上記暗褐色液体をメタノール（３Ｌ）中に入れた。
１３．反応混合物を０〜５℃に冷却した。
観察結果：白色固体がメタノール溶液から析出し、この固体は、もっぱらジトシル化合物であることが判明した。
１４．懸濁した固体を濾過した。
１５．濾液を４５℃で、減圧下で蒸発させて、ＰＨＲ−１０３を得た。
観察結果：褐色油状物
結果
生成物の重量              ：１．４Ｋｇ
収率                      ：５０％
記述                      ：褐色油状物
１Ｈ  ＮＭＲスペクトル    ：構造に適合。
１Ｈ  ＮＭＲデータ：（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ，ｐｐｍ）：７．８２（ｄ，ＡｒＣＨ，２Ｈ）、７．３４（ｄ，ＡｒＣＨ，２Ｈ）、４．７５（ｓ，−ＯＣＨ２−，２Ｈ）、４．１５（ｓ，−ＯＣＨ２−，２Ｈ）、２．４５（ｓ，ＡｒＣＨ３，３Ｈ）（図８）。
【０２２２】
段階−II：６−（トリメチルシリル）ヘキサ−２，５−ジイン−１−オール：
【０２２３】
【化５１】
2014516340.tif 000073
【０２２４】
バッチ番号＃ＰＡＡ−Ｐ−１０−０３７−ＰＨＲ−１０４−２１
原料：
【０２２５】
【表２１】
2014516340.tif 000074
【０２２６】
プロセスの詳細：
１．機械撹拌機、アルゴンバブラー、１Ｌの滴下漏斗を備えた１０Ｌの４口フラスコ内にＤＭＦ（ロット−Ｉ）を仕込み、溶媒を１５分間脱気した。
２．ＣｕＩ、ヨウ化ナトリウム及びヨウ化カリウムを反応器内に仕込んだ。
注意：反応混合物は、熱を発生するとともに黄色に変わった（反応系を３０〜３５℃に加温した）。
３．反応混合物を０℃に冷却した。
４．トリメチルシリルアセチレンを３０分にわたって反応混合物に添加した。
５．脱気条件を維持して、反応混合物を０〜５℃で３０分間撹拌した。
６．ＰＨＲ−１０３を、３０分にわたって反応混合物中に添加し、脱気をさらに３０分間継続した。
７．反応フラスコ内で不活性雰囲気を維持するようにアルゴン流量をわずかに低減し、撹拌を１８時間継続した。
注意：ＴＬＣ分析（ヘキサン中２０％の酢酸エチル、及びアニスアルデヒド溶液を使用したスポットの視覚化）によって、反応進行をモニターした。Ｒｆ＝０．３３（ＰＨＲ−１０４）。
８．ＭＴＢＥ（ロット−Ｉ）及び水（ロット−Ｉ）を反応混合物に添加し、１５分間撹拌した。
９．反応混合物をCelite（商標）パッドで濾過し、ＭＴＢＥ（ロット−II）で洗浄した。
１０．濾液の層を分離し、水層をＭＴＢＥ（ロット−III）で抽出した。
１１．合わせた有機層を水（３×１．８Ｌ；固形沈殿物がまったく観察されなくなるまで）及び飽和ＮａＣｌ（１×１．８Ｌ）で洗浄した。
１２．有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、ロータリーエバポレーターで濃縮して、粗ＰＨＲ−１１０を得た。
１３．６０〜１２０メッシュのシリカを使用してシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって粗製物を精製し、ヘキサン中５％の酢酸エチルで化合物を溶出した。
結果
生成物の重量              ：粗製物１７１ｇ
収率                      ：５５％
記述                      ：褐色から黒色の液体
１Ｈ  ＮＭＲ              ：構造に適合
１Ｈ  ＮＭＲデータ：（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ，ｐｐｍ）：４．２６（ｓ，−ＯＣＨ２−，２Ｈ）、３．２７（ｓ，−ＣＨ２−，２Ｈ）、０．１８（ｓ，３ｘ−ＣＨ３，９Ｈ）（図９）。
【０２２７】
段階−III：６−（トリメチルシリル）ヘキサ−２，５−ジイニル４−メチルベンゼンスルホネートの調製：
【０２２８】
【化５２】
2014516340.tif 000075
【０２２９】
バッチ番号＃ＰＡＡ−Ｐ−１０−０３７−ＰＨＲ−１１０−１９
原料：
【０２３０】
【表２２】
2014516340.tif 000076
【０２３１】
プロセスの詳細：
１．Ｎ２入口、滴下漏斗及び磁気撹拌機を備えた１Ｌの４口ＲＢＦ内にピリジンを仕込んだ。
２．反応混合物を−５℃に冷却した。
３．ジクロロメタン（ロット−Ｉ）中のＰＨＲ−１０４（４０ｇ）を、−５〜０℃で１５分にわたって反応混合物に徐々に添加した。
観察結果：暗褐色溶液が観察された。
４．反応混合物を−５℃で１０分間撹拌した。
５．ジクロロメタン（ロット−II）中の塩化トシル（９２ｇ）を、−５〜０℃で３０分にわたって反応混合物に添加した。
観察結果：反応は発熱性であり、反応の温度を塩化トシルの添加速度によって維持した。
６．反応混合物を同じ温度で１時間撹拌した。
注意：ＴＬＣ分析（ヘキサン中２０％の酢酸エチル、及びアニスアルデヒド溶液を使用したスポットの視覚化）によって、反応進行をモニターした。Ｒｆ＝０．４（ＰＨＲ−１１０）、０．３３（ＰＨＲ−１０４）。
７．反応混合物を３Ｎの塩酸でクエンチした。
注意：クエンチは１０℃以下で行った。
８．反応混合物をＭＴＢＥ（ロット−Ｉ）で希釈し、室温で５分間撹拌した。
観察結果：暗褐色透明溶液が観察された。
９．２つの層を分離した。
１０．水層を再びＭＴＢＥ（ロット−II）で抽出した。
１１．合わせた有機層を１Ｎの塩酸（２×６倍量）で洗浄した。
１２．有機層をブライン溶液（６倍量）で洗浄した。
１３．有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、４５℃で、減圧下で蒸発させた。
観察結果：暗褐色液体を得た。
結果
生成物の重量              ：６０ｇ
収率の％                  ：７８％
記述                      ：褐色油状物
１Ｈ  ＮＭＲスペクトル    ：構造に適合。
１Ｈ  ＮＭＲデータ：（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ，ｐｐｍ）：７．８１（ｄ，ＡｒＣＨ，２Ｈ）、７．３５（ｄ，ＡｒＣＨ，２Ｈ）、４．７０（ｓ，−ＯＣＨ２−，２Ｈ）、３．１２（ｓ，−ＣＨ２−，２Ｈ）、２．４５（ｓ，ＡｒＣＨ３，３Ｈ）、０．１６（ｓ，３ｘ−ＣＨ３，９Ｈ）（図１０）。
【０２３２】
段階−III：メチル１１−（トリメチルシリル）ウンデカ−４，７，１０−トリイノエートの調製：
【０２３３】
【化５３】
2014516340.tif 000077
【０２３４】
バッチ番号＃ＰＡＡ−Ｐ−１０−０３７−ＰＨＲ−１１１−０２０
原料：
【０２３５】
【表２３】
2014516340.tif 000078
【０２３６】
プロセスの詳細：
１．機械撹拌機、アルゴンバブラー、及び２５０ｍＬの滴下漏斗を備えた５００ｍＬの４口フラスコ内にＤＭＦ（１００ｍＬ、５倍量）を仕込み、溶媒を１５分間脱気した。
２．ＣｕＩ、ヨウ化ナトリウム及びヨウ化カリウムをフラスコ内に仕込んだ。
注意：反応系は、熱を発生するとともに黄色に変わった（反応系を３０〜３５℃に加温した）。
３．反応系を、氷／水浴を使用して０℃に冷やした。
４．メチル−４−ペンチノエートを５分にわたって反応系に添加した。
５．脱気条件を維持して、反応混合物を０〜５℃で１５分間撹拌した。
６．滴下漏斗を使用して、ＰＨＲ−１１０を１０分にわたって反応系中に添加し、脱気をさらに３０分間継続した。
７．反応フラスコ内で不活性雰囲気を維持するようにアルゴン流量をわずかに低減し、撹拌を１８時間継続した。
注意：ＴＬＣ分析（ヘキサン中２０％の酢酸エチル、及びアニスアルデヒド溶液を使用したスポットの視覚化）によって、反応進行をモニターした。Ｒｆ＝０．５（ＰＨＲ−１１０）及び０．５５（ＰＨＲ−１１１）。
８．反応系にＭＴＢＥ（ロットＩ）及び水（ロットＩ）を添加し、１５分間撹拌した。
９．反応混合物をCelite（商標）ベッドで濾過し、ＭＴＢＥ（ロット−II）で洗浄した。
１０．濾液層を分離し、有機層を水（ロット−II及びIII）で洗浄した。
１１．有機層をブラインで最後に洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させた。
１２．有機層を減圧下で濃縮して、粗ＰＨＲ−１１１を得た。
結果：
生成物の重量              ：粗製物２１ｇ
収率                      ：４５％
記述                      ：褐色から黒色の液体
１Ｈ  ＮＭＲ              ：構造に適合
１Ｈ  ＮＭＲデータ：（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ，ｐｐｍ）：３．６９（ｓ，−ＯＣＨ３，３Ｈ）、３．１９（ｓ，−ＣＨ２−，２Ｈ）、３．１２（ｓ，−ＣＨ２−，２Ｈ）、２．５５〜２．２５（ｍ，２ｘ−ＣＨ２−，４Ｈ）、０．１８（ｓ，３ｘ−ＣＨ３，９Ｈ）（図１１）。
【０２３７】
段階−Ｖ：メチルウンデカ−４，７，１０−トリイノエートの調製：
【０２３８】
【化５４】
2014516340.tif 000079
【０２３９】
バッチ番号＃ＰＡＡ−Ｐ−１０−０３７−ＰＨＲ−１１２−２２
原料：
【０２４０】
【表２４】
2014516340.tif 000080
【０２４１】
プロセスの詳細：
１．ジクロロメタン（４８０ｍＬ）及びＰＨＲ−１１１（１６ｇ）を１Ｌの４口丸底フラスコ内に仕込んだ。
２．反応混合物を０℃以下（−５〜０℃）に冷却した。
３．反応温度を−５〜０℃に維持して、ＴＢＡＦ（９．６９ｇ）を、３０分にわたって１０ロットで反応混合物に添加した。
４．反応混合物を−５〜０℃で１時間撹拌した。
注意：ＴＬＣ分析（ヘキサン中１０％の酢酸エチル、及びアニスアルデヒド溶液を使用したスポットの視覚化）によって、反応進行をモニターした。Ｒｆ＝０．３５（ＰＨＲ−１１２）、０．４（ＰＨＲ−１１１）。
５．反応混合物を氷冷水でクエンチした。
６．２つの層を分離した。
７．有機層を水、次いで飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄した。
８．有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で蒸発させて、黒色液体としてＰＨＲ−１１２を得た。
９．６０〜１２０メッシュのシリカを使用してシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって粗製物を精製し、ヘキサン中３％の酢酸エチルで生成物を溶出した。
結果
生成物の重量              ：粗製物８ｇ
収率                      ：６９％
記述                      ：褐色から黒色の液体
１Ｈ  ＮＭＲ              ：構造に適合
１Ｈ  ＮＭＲデータ：（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ，ｐｐｍ）：３．７２（ｓ，−ＯＣＨ３，３Ｈ）、３．１８（ｓ，−ＣＨ２−，２Ｈ）、３．１２（ｓ，−ＣＨ２−，２Ｈ）、２．５５〜２．４２（ｍ，２ｘ−ＣＨ２−，４Ｈ）、２．０５（ｓ，１Ｈ）（図１２）。
【０２４２】
ＫＳＭ１とＫＳＭ２のカップリング：
メチルドコサ−４，７，１０，１３，１６，１９−ヘキサイノエート（ＰＨＲ−１１４）の調製
【０２４３】
【化５５】
2014516340.tif 000081
【０２４４】
バッチ番号＃ＰＡＡ−Ｐ−１０−０３７−ＰＨＲ−１１４−２３
原料：
【０２４５】
【表２５】
2014516340.tif 000082
【０２４６】
プロセスの詳細：
ＰＨＲ−１１１について展開したのと同じプロトコール下で反応を実施した。
注意：ＴＬＣ分析（ヘキサン中１０％の酢酸エチル、及びアニスアルデヒド溶液を使用したスポットの視覚化）によって、反応進行をモニターした。Ｒｆ＝０．３８（ＰＨＲ−１１４）、０．４５（ＰＨＲ−１１２）。
結果
生成物の重量              ：６ｇ。
収率                      ：３３％
記述                      ：黄色から褐色の固体
１Ｈ  ＮＭＲ              ：構造に適合
１Ｈ  ＮＭＲデータ：（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ，ｐｐｍ）：３．７０（ｓ，−ＯＣＨ３，３Ｈ）、３．１８〜３．１（ｍ，５ｘ−ＣＨ２−，１０Ｈ）、２．５５〜２．４２（ｍ，２ｘ−ＣＨ２−，４Ｈ）、２．１５（ｑ，−ＣＨ２ＣＨ３，２Ｈ）、１．１３（ｔ，−ＣＨ２ＣＨ３，２Ｈ）（図１３）。
【０２４７】
（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）−メチルドコサ−４，７，１０，１３，１６，１９−ヘキサエノエート（ＰＨＲ−１１５）の調製
【０２４８】
【化５６】
2014516340.tif 000083
【０２４９】
バッチ番号ＰＡＡ−Ｐ−１０−０３７−ＰＨＲ−１１５−４４：
原料：
【０２５０】
【表２６】
2014516340.tif 000084
【０２５１】
プロセスの詳細：
１．エタノール（４１．２ｍＬ）及びＰＨＲ−１１４（５００ｍｇ）を、１００ｍＬの多口丸底フラスコ内に仕込んだ。
２．次いで、リンドラー触媒（５００ｍｇ、１００％ｗ／ｗ）を、室温で反応フラスコ内に仕込んだ。
３．キノリン（５０μＬ、０．１倍量）を、マイクロシリンジを使用して反応混合物中に仕込んだ。
４．水素バルーンを使用して水素ガスで反応フラスコを繰り返し（３回）パージし、反応混合物を室温で撹拌した。
５．ＴＬＣ（２×ヘキサン中５％の酢酸エチル、Ｒｆ＝０．５５、アニスアルデヒド染色剤）によって反応をモニターした。
６．出発原料がほとんど消費されたとき、水素雰囲気を除去することによって反応を停止した。
７．反応混合物をCelite（商標）に通過させ、触媒をエタノール（２×１０倍量）で洗浄した。
８．エタノールをロータリーエバポレーターで除去して、粗生成物（５３０ｍｇ）を得た。
９．移動相としてヘキサン中５％の酢酸エチルを使用してカラムクロマトグラフィーを行って、純粋なＰＨＲ−１１５を得た（１２０ｍｇ、２３％の収率）。
結果
生成物の重量              ：１２０ｍｇ
収率                      ：２３％
記述                      ：該当せず
１Ｈ  ＮＭＲ              ：構造に適合
１Ｈ  ＮＭＲデータ：（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ，ｐｐｍ）：５．４〜５．３（ｍ，１２Ｈ）、３．６５（ｓ，−ＯＣＨ３，３Ｈ）、２．９〜２．８（ｍ，５ｘ−ＣＨ２−，１０Ｈ）、２．４１〜２．３５（ｍ，２ｘ−ＣＨ２−，４Ｈ）、２．１２〜２．０（ｍ，−ＣＨ２ＣＨ３，２Ｈ）、０．９５（ｔ，−ＣＨ２ＣＨ３，３Ｈ）（図１４）。
【０２５２】
（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）−ドコサ−４，７，１０，１３，１６，１９−ヘキサエン酸（ＤＨＡ）の調製
【０２５３】
【化５７】
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【０２５４】
バッチ番号＃ＰＡＡ−Ｐ−１０−３７−ＰＨＲ−１１６−４８
原料：
【０２５５】
【表２７】
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【０２５６】
プロセスの詳細：
１．ＴＨＦ：Ｈ２Ｏ（３：１の混合物）及びＰＨＲ−１１５（１４０ｍｇ）を、５０ｍＬの多口丸底フラスコ内に仕込んだ。
２．反応混合物の温度を０℃に冷却し、水酸化リチウム（５６ｍｇ）を添加し、室温で１２時間撹拌した。
３．ＴＬＣ（ヘキサン中２０％の酢酸エチル、Ｒｆ＝０．１、アニスアルデヒド染色剤）によって反応をモニターした。
４．反応物を０℃に冷却し、クエン酸水溶液で徐々にクエンチし（ｐＨが約４になるまで；５ｍＬ）、ジエチルエーテル（２×４倍量）で抽出した。
５．エーテル層を水（１×３倍量）、ブライン溶液（１×３倍量）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させた。
６．エーテル層をロータリーエバポレーターで除去して、粗生成物（１００ｍｇ）を得た。
結果
生成物の重量              ：１００ｍｇ。
収率                      ：７４．６％
記述                      ：該当せず
１Ｈ  ＮＭＲ              ：構造に適合
１Ｈ  ＮＭＲデータ：（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ，ｐｐｍ）：５．５〜５．２（ｍ，１２Ｈ）、２．９〜２．７（ｍ，５ｘ−ＣＨ２−，１０Ｈ）、２．４５〜２．３（ｍ，２ｘ−ＣＨ２−，４Ｈ）、２．１〜１．９（ｍ，−ＣＨ２ＣＨ３，２Ｈ）、０．９５（ｔ，−ＣＨ２ＣＨ３，３Ｈ）（図１５）。
【０２５７】
１又は２以上の現在好適な実施形態を例として記載してきた。特許請求の範囲で定義される本発明の範囲から逸脱することなく、いくつかの変更及び改変を行うことができることは、当業者に明らかである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【国際調査報告】
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