(57)【要約】本発明は、カチオンと結合した少なくとも１つのハイポチオカイヤナイト（ＯＳＣＮ−）塩を含む固体組成物に関し、当該固体組成物は非晶質粉末および／または結晶性粉末の形態である。本発明は、上記固体組成物の製造方法およびそれらの使用方法にも関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
非晶質粉末および／または結晶性粉末の形態である、カチオンと結合した少なくとも１つのＯＳＣＮ−  ハイポチオカイヤナイト塩を含む固体組成物。
【請求項２】
前記固体組成物中のカチオンに結合したＯＳＣＮ−  ハイポチオカイヤナイト塩が０．０１重量％〜２０重量％で含まれる、請求項１に記載の固体組成物。
【請求項３】
カチオンと結合したＯＳＣＮ−  ハイポチオカイヤナイト塩が０．０１重量％〜１０重量％で含まれる、請求項１に記載の固体組成物。
【請求項４】
０．０１重量％〜４０重量％のＳＣＮ−  チオシアン酸イオンも含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の固体組成物。
【請求項５】
０．０１重量％〜２０重量％のグルコン酸も含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の固体組成物。
【請求項６】
１０重量％〜９９．９９９重量％の（アルカリカチオンと結合された）リン酸塩または炭酸塩も含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の固体組成物。
【請求項７】
前記カチオンが、ナトリウム、カリウム、カルシウムおよび／またはマグネシウムを含む群から選択される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の固体組成物。
【請求項８】
オシド型、ポリオシド型またはポリオール型賦形剤も含む、請求項１〜７のいずれか１項に記載の固体組成物。
【請求項９】
前記オシド型、ポリオシド型またはポリオール型賦形剤の少なくとも２つの組み合わせを含む、請求項８に記載の固体組成物。
【請求項１０】
グルコースを含む、請求項８および９に記載の固体組成物。
【請求項１１】
ラクトースを含む、請求項８および９に記載の固体組成物。
【請求項１２】
トレハロースを含む、請求項８および９に記載の固体組成物。
【請求項１３】
マンニトールを含む、請求項８および９に記載の固体組成物。
【請求項１４】
以下の段階を含む、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の固体組成物の製造プロセス：
ａ）少なくともＯＳＣＮ−  ハイポチオカイヤナイトイオンを含有する水溶液を調製する工程、
ｂ）前記水溶液に、水の共沸混合物から得たアルコールまたは有機溶媒の少なくとも１つを１０％〜９９．９％で添加する工程、
ｃ）溶液に、オシド型、ポリオシド型またはポリオール型の賦形剤を添加する工程、
ｄ）固体組成物を得るために、１ｍｂａｒ〜８０ｂａｒ、−１００℃〜＋５０℃で、前記アルコールまたは前記有機溶媒を除去する工程。
【請求項１５】
前記有機溶媒が、水の共沸混合物およびそれらの混合物から選択される、請求項１４に記載の製造プロセス。
【請求項１６】
前記アルコールが、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ｔｅｒｔ−ブタノール、またはそれらの混合物から選択される、請求項１４に記載の製造プロセス。
【請求項１７】
これらのアルコールの少なくとも２つが、前記水溶液に添加される、請求項１６に記載の製造プロセス。
【請求項１８】
アルコールまたは有機溶媒の割合が、ＯＳＣＮ−を含有する前記水溶液に関して１％〜９９％で変動してよい、請求項１４に記載の製造プロセス。
【請求項１９】
前記アルコールが１重量％〜９９重量％のエタノールである、請求項１４に記載の製造プロセス。
【請求項２０】
前記賦形剤が前記オシド型、ポリオシド型またはポリオール型の少なくとも２つの賦形剤の混合物である、請求項１４に記載の製造プロセス。
【請求項２１】
前記賦形剤が、マンニトール、トレハロース、ラクトース、グリセロール、ＰＥＧおよび／またはそれらの混合物からなる群から選択される、請求項１４に記載の製造プロセス。
【請求項２２】
前記温度範囲が、−１００℃〜０℃である、請求項１４に記載の製造プロセス。
【請求項２３】
前記アルコールまたは有機溶媒が同時に除去される、請求項１４に記載の製造プロセス。
【請求項２４】
前記アルコールまたは有機溶媒が連続的に除去される、請求項１４に記載の製造プロセス。
【請求項２５】
前記アルコールまたは有機溶媒が、共沸混合物の形態で、減圧下蒸発して除去される、請求項１４に記載の製造プロセス。
【請求項２６】
前記アルコールまたは有機溶媒が低温および減圧下での昇華により除去される、請求項１４に記載の製造プロセス。
【請求項２７】
前記アルコールまたは有機溶媒が、超臨界または臨界未満で、流体の使用により前記溶媒の排除により除去される、請求項１４に記載の製造プロセス。
【請求項２８】
超臨界型における前記流体がＣＯ２である、請求項２７に記載の製造プロセス。
【請求項２９】
段階ａ）が、ペルオキシダーゼ、擬ハロゲン、および／またはハロゲンならびに酸素ドナーと接触して置換する工程により、前記ＯＳＣＮ−  ハイポチオカイヤナイトイオンを含有する水溶液を調製する工程を含む、請求項１４〜２８のいずれか１項に記載の製造プロセス。
【請求項３０】
空中浮遊感染、下気道の感染、および／または上気道の感染の治療において使用するため、単独または他の抗感染薬、抗菌剤、抗ウイルス剤、抗生物質、抗真菌剤もしくは防腐剤との組み合わせである、請求項１〜１３のいずれか１項記載の固体組成物。
【請求項３１】
嚢胞性線維症およびＣＯＰＤ（慢性閉塞性肺疾患）を併発した肺の感染の治療において使用するための請求項３０に記載の固体組成物。
【請求項３２】
粘液線毛クリアランスを改善するために化合物として使用するため、単独または他の化合物との組み合わせである、請求項３０に記載の固体組成物。
【請求項３３】
胃感染、切断部の感染、粘膜および／または皮膚を含む群から選択される感染の治療において使用するため、単独または他の抗感染薬、抗菌薬、抗ウィルス剤、抗生物質製剤、抗真菌剤または防腐剤との組み合わせである、請求項１〜１３のいずれか１項記載の固体組成物。
【請求項３４】
細菌および／または酵母および／またはカビおよび／またはウイルスおよび／または寄生生物および／または原生動物を原因とする感染の治療において使用するため、単独または他の抗感染薬、抗菌薬、抗ウィルス剤、抗生物質製剤、抗真菌剤または防腐剤との組み合わせである、請求項１〜１３のいずれか１項記載の固体組成物。
【請求項３５】
プリオンの治療において使用するため、単独または他の抗感染薬、抗菌薬、抗ウィルス剤、抗生物質製剤、抗真菌剤または防腐剤との組み合わせである、請求項１〜１３のいずれか１項記載の固体組成物。
【請求項３６】
インフルエンザウイルス型のウイルスによって生じるウイルス感染症の治療または予防において使用するため、単独または他の試薬との組み合わせである、請求項１〜１３のいずれか１項記載の固体組成物。
【請求項３７】
抗菌活性を有するタンパク質またはペプチドと組み合わせて使用するための請求項１〜１３のいずれか１項記載の固体組成物。
【請求項３８】
抗菌活性を有するタンパク質またはペプチドが、ラクトフェリン、ラクトフェリシンおよび／またはリゾチームから選択される、請求項３７に記載の固体組成物。
【請求項３９】
吸入、経口、局所施用もしくは注射による投与を目的とされる抗菌剤、抗ウイルス剤または抗寄生虫剤として使用するための請求項１〜１３のいずれか１項記載の固体組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明の目的は、カチオンと結合した少なくとも１つのＯＳＣＮ−  ハイポチオカイヤナイト塩（ヒポチオシアン酸塩、Ｈｙｐｏｔｈｉｏｃｙａｎｉｔｅ  Ｓａｌｔ）を含む固体組成物であり、そのような固体組成物は、非晶質粉末および／または結晶性粉末の形態である。本発明は、当該固体組成物の製造プロセスおよびその使用にも関する。
【背景技術】
【０００２】
食品および医薬品産業は、殺菌性イオンとしてハイポチオカイヤナイトに強い興味を示している。
【０００３】
ハイポチオカイヤナイトイオンおよび／またはハイポハライトは、以下の式に係るラクトペルオキシダーゼシステムにより溶液中で、特にインビボで発生する。
【０００４】
【化１】
2014528440.tif 000002
【０００５】
ハイポチオカイヤナイトイオンの薬理学的特性は、すなわち殺生物特性および特に殺菌特性と知られているが、半減期が２４時間未満である化学種の不安定性に起因して、使用は繊細、複雑かつ限られており、その長時間の貯蔵は不可能である（非特許文献１）。
【０００６】
この不安定性に起因して、ラクトペルオキシダーゼシステムは、例えば、反応成分を溶液中に配置することにより、反応を起こして、インシチュでＯＳＣＮ−イオンを発生することができる粉末形態でしばしば最初に完全に運ばれた。当該使用において、酸素供給源は、過酸化水素、過炭酸ナトリウムであり得、グルコース／グルコースオキシダーゼシステムにより、インシチュで発生される。
【０００７】
ラクトペルオキシダーゼシステムは、例えば、Ｂｉｏｔｅｎｅ（登録商標）の商品名でＬａｃｌｅｄｅ  ｃｏｍｐａｎｙから市販されている練り歯磨きなどの化粧品に用いられる。さらに最近、ヒトの健康において、ラクトペルオキシダーゼシステムの使用に関する特許出願が見られる。例えば、特許文献１は、膣内障害の治療におけるこれらの化合物の使用方法を言及する。肺の問題を治療する方法および組成物も、かつて言及されている（特許文献２および特許文献３）。ペルオキシダーゼと組み合わせたまたはペルオキシダーゼを組み合わせない、ヨウ素での擬ハロゲン化チオシアン酸による可能な置換での変形も提案されている（特許文献４）。開示されている全ての出願は、完全系の投与によるインシチュでの生成および／またはインシチュで存在する内因性成分の一つの使用を伴うシステムの一部を開示した。
【０００８】
段階は、大量の溶液に、ＯＳＣＮ−および／またはＯＩ−の製造をもたらす凝固剤の使用（特許文献５）を通して酵素前駆体の分離を伴うＯＳＣＮ−および／またはＯＩ−製剤の製造を可能とする、プロセスを提案することにより明らかとされている。実際、特許文献６は、ＯＳＣＮ−またはＯＩ−を含む溶液を必要に応じて、即座に製造することのできる物質を記載する。
【０００９】
非特許文献２は、ラクトペルオキシダーゼにより触媒されたチオシアネートとＨ２Ｏ２由来のハイポチオカイヤナイトイオンを含む溶液の調製を示す。本発明の目的は、ハイポチオカイヤナイトイオンを含有する本発明の組成物は固体であるという従来技術と異なる。実際、本発明が解決しようとする課題は、長期間にわたって貯蔵され得るハイポチオカイヤナイト塩を含む組成物の調製として考えられうる。従来技術の文献に、ハイポチオカイヤナイト塩を含む固体組成物を言及しているものはない。特許文献７（ＡＳＨＢＹ  ＭＩＣＨＡＥＬ）は、液体である組成物中のチオシアネートおよび次亜塩素酸からハイポチオカイヤナイトイオンの調製を提案する。特許文献８（ＡＬＡＸＩＡ）は、噴霧器、ネブライザーまたはエアロゾルによって投与されたハイポチオカイヤナイトイオンおよびラクトフェリンを含む組成物を開示している。しかしながら、長期間保存され得るハイポチオカイヤナイト塩を含む固体組成物はない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】国際公開第２００８／０４５６９６号
【特許文献２】米国特許出願公開第２００４／０１５６９１７号明細書
【特許文献３】国際公開第２００７／１３４１８０号
【特許文献４】米国特許出願公開第２００９／０２４６１４６号明細書
【特許文献５】米国特許出願公開第２００２／０９７０７６号明細書
【特許文献６】国際公開第２０１０／０８６５３０号
【特許文献７】米国特許出願公開第２００６／０１８８１７（Ａ１）号明細書
【特許文献８】国際公開第２０１０／０８６５３０（Ａ１）号
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】“Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  Ｄｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｈｕｍａｎ  Ｄｅｆｅｎｓｅ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｈｙｐｏｔｈｉｏｃｙａｎｉｔｅ  Ｎｅａｒ  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｐＨ”、Ｊｏｚｓｅｆ  Ｋａｌｍａｒ、Ｋｅｌｅｍｕ  Ｌ．  Ｗｏｌｄｅｇｉｏｒｇｉｓ、Ｂｅｒｎａｄｅｔｔ  Ｂｉｒｉ、Ｍｉｃｈａｅｌ  Ｔｈｏｍａｓ  Ａｓｈｂｙ、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、２０１１年、１３３巻、４９号、ｐ１９９１１−１９９２１
【非特許文献２】ＰＯＬＬＯＣＫ  Ｊ  Ｒら：“ｌａｃｔｏｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ−ｃａｔａｌｙｚｅｄ  ｏｘｉｄａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ  ｉｏｎ：  ａ  ｃａｒｂｏｎ−１３  ｎｕｃｌｅａｒ  ｍａｇｎｅｔｉｃ  ｒｅｓｏｎａｎｃｅ  ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｏｘｉｄａｔｉｏｎ  ｐｒｏｄｕｃｔｓ”、ＢＩＯＣＨＥＭＩＣＡ  ＥＴ  ＢＩＯＰＨＹＳＩＣＡＬ  ＡＣＴＡ．  ＰＲＯＴＥＩＮ  ＳＴＲＵＣＴＵＲＥ  ＡＮＤ  ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＥＮＺＹＭＯＬＯＧＹ、ＥＬＳＥＶＩＥＲ、１１５９巻、３号、１９９２年、１０月２０日、ｐ２７９−２８５、（ＸＰ０２３４６９６５９、ＳＳＮ：０１６７−４８３８）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
したがって、この活性薬剤を使用することの大きな問題の１つは、その不安定性であり、結果として、それを、薬事規制の即時製造の要求に応じて、長期間にわたって保存することが不可能となる。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明は、非晶質粉末および／または結晶性粉末の形態のカチオンと結合した少なくとも１つのＯＳＣＮ−  ハイポチオカイヤナイト塩を含む固体組成物に関する。
【００１４】
本発明は、以下の段階を含むプロセスを含む、当該固体組成物の製造プロセスに関する：
ａ）少なくともＯＳＣＮ−  ハイポチオカイヤナイトイオンを含有する水溶液を調製する工程
ｂ）上記水溶液に、水の共沸混合物から得たアルコールまたは有機溶媒の少なくとも１つを１０％〜９９．９％で添加する工程、
ｃ）溶液に、オシド型、ポリオシド型またはポリオール型の賦形剤を添加する工程、
ｄ）固体組成物を得るために、１ｍｂａｒ〜８０ｂａｒの圧力、−１００℃〜＋５０℃の温度で、上記アルコールまたは有機溶媒を除去する工程。
【００１５】
本発明は、空中浮遊感染、下気道の感染、および／または上気道の感染の治療のために、上記固体組成物単独または上記固体組成物を他の殺菌剤、抗菌剤、抗ウイルス剤、防腐剤、もしくは抗生物質製剤と組み合わせにおいて使用することも目的とする。
【００１６】
本発明の別の目的は、胃感染、切断部の感染、粘膜感染および／または皮膚感染を含む群から選択される感染を治療するため、上記固体組成物単独または上記固体組成物を他の殺菌剤、抗菌剤、抗ウィルス剤、抗真菌剤、防腐剤または抗生物質製剤と組み合わせにおいて使用することである。
【００１７】
本発明は、細菌、酵母、カビ、ウイルス、プリオン、寄生生物、原虫性種を治療するため、上記固体組成物単独または上記固体組成物と他の抗菌剤、抗ウィルス剤、抗寄生虫剤、殺真菌剤、防腐剤または抗生物質製剤とを組み合わせにおいて使用することにも関する。
【００１８】
加えて、本発明は、インフルエンザ型ウイルス感染症を治療するため、上記固体組成物単独または上記固体組成物を他の製剤と組み合わせにおいて使用することにも関する。
【００１９】
本発明の別の目的は、粘液線毛クリアランスを改善するための成分として、上記固体組成物単独または上記固体組成物を他の化合物と組み合わせて使用することに関する。
【００２０】
本発明の他の目的および利益は、本願の記載および実施形態の実施例を読むことで明らかとなるだろう。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１Ａ】ラクトースを添加し蒸発をする前の２つの異なる緩衝液（炭酸塩緩衝液またはリン酸塩緩衝液）の得られた全体の濾液のＲＭＮ１３Ｃスペクトル（実施例７）を示す図である。図１Ａは、完全スペクトルを表す。
【図１Ｂ】ラクトースを添加し蒸発をする前の２つの異なる緩衝液（炭酸塩緩衝液またはリン酸塩緩衝液）の得られた全体の濾液のＲＭＮ１３Ｃスペクトル（実施例７）を示す図である。図１Ｂは、ハイポチオカイヤナイトシグナルを含有する範囲の拡大図である。
【図２】固体組成物番号１のＲＭＮ１３Ｃスペクトル（実施例１１）を示す図である。
【図３Ａ】固体組成物番号２のＲＭＮ１３Ｃスペクトル（実施例１２）を示す図である。図３Ａは、完全スペクトルを表す。
【図３Ｂ】固体組成物番号２のＲＭＮ１３Ｃスペクトル（実施例１２）を示す図である。図３Ｂは、ハイポチオカイヤナイトシグナルを含有する範囲の拡大図である。
【図４】ハイポチオカイヤナイトを含有する固体組成物番号２の安定性の測定図である。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
本発明は、固体形態中、カチオンと結合した少なくともハイポチオカイヤナイト塩ＯＳＣＮ−であって、非晶質粉末および／または結晶性粉末の形態である固体組成物を含む組成物を得ることを可能とする。
【００２３】
本発明は、カチオンと結合した少なくともハイポチオカイヤナイト塩  ＯＳＣＮ−を非晶質粉末および／または結晶性粉末の形態で０．０１重量％〜２０重量％、好ましくは０．０１重量％〜１０重量％含有することを特徴とする固体組成物にも関する。
【００２４】
実施形態の方法において、本発明に係る固体組成物は、チオシアン酸イオン塩（ＳＣＮ−）も０．０１重量％〜４０重量％、好ましくは０．０１重量％〜１０重量％で含有することも特徴とする。
【００２５】
実施形態の別の方法において、本発明に係る固体組成物は、グルコン酸も０．０１重量％〜２０重量％含む。
【００２６】
実施形態のさらなる方法において、本発明に係る固体組成物は、アルカリカチオンと結合したリン酸塩または炭酸塩も１０重量％〜９９．９９９重量％含む。
【００２７】
実施形態の好ましい方法において、本発明に係るカチオンは、ナトリウムおよびカリウムのようなアルカリカチオンから選択され、またはカルシウムおよび／またはマグネシウムから構成される群から選択される。
【００２８】
実施形態の別の方法において、本発明に係る固体組成物は、オシド型、ポリオシド型またはポリオール型の賦形剤を含み、好ましくは、固体組成物は、オシド型、ポリオシド型またはポリオール型の賦形剤の少なくとも２つの組み合わせを含む。
【００２９】
上記賦形剤は、例えば、グルコース、ラクトース、トレハロース、マンニトールおよび／またはそれらの混合物から有利に選択される。
【００３０】
実施形態の方法において、固体組成物は、マンニトールを１重量％〜５０重量％で含有する。
【００３１】
実施形態の別の方法において、本発明に係る固体組成物は、トレハロースを１重量％〜４５重量％で含有することを特徴とする。
【００３２】
実施形態の特別な方法において、本発明に係る固体組成物は、ラクトースを１重量％〜６０重量％で含有する。
【００３３】
本発明に係る固体組成物において、ハイポチオカイヤナイトイオン  ＯＳＣＮ−  は、最低で２月、最大で６月の期間にわたり安定である。
【００３４】
好ましくは、ハイポチオカイヤナイトイオン  ＯＳＣＮ−は、最低で２月、最大で４月の期間にわたり安定である。
【００３５】
本発明に係る固体組成物は、好ましくは＋２０℃〜−８０℃の温度で、酸素、湿気および光から保護され続ける。
【００３６】
本発明に係る固体組成物の重要な利点は、今、患者に投与されるであろう使用の準備の整った再構築された溶液中にＯＳＣＮ−  ハイポチオカイヤナイトの濃度を増加しうる事実に存在する。したがって、その固体組成物は、より多くのＯＳＣＮ−  ハイポチオカイヤナイト投与量を含むことができ、患者により少ない量の製剤を注射することが可能であり、より迅速に、より有利にかつ患者への痛みをより少なくすることができる。
【００３７】
加えて、本発明は、使用の準備の整った溶液に関し、本発明に係る固体組成物を含み、生理的濃度で許容できる環境に可溶性があることを特徴とする。例えば、固体組成物は、水性アルコール溶媒から、もしくはヒドロキシル官能基（機能）を有する化合物から、または当該分野における専門家に知られている他の生理的に許容できる溶媒から選択される許容できる有機溶媒中に溶解されるだろう。好ましくは、水性アルコール溶媒は、０．０１重量％〜１００重量％の上記溶媒を表すアルコールを含む。
【００３８】
本発明は、以下の段階を含む上記固体組成物の製造プロセスにも関する：
ａ）少なくとも、ＯＳＣＮ−  ハイポチオカイヤナイトイオンを含有する水溶液を調製する工程、
ｂ）上記水溶液に、水の共沸混合物から得たアルコールまたは有機溶媒の少なくとも１つを１０％〜９９．９％で添加する工程、
ｃ）溶液に、オシド型、ポリオシド型またはポリオール型の賦形剤を添加する工程、
ｄ）固体組成物を得るために、１ｍｂａｒ〜８０ｂａｒの圧力および−１００℃〜＋５０℃の温度で、上記アルコールまたは上記有機溶媒を除去する工程。
【００３９】
実施形態の方法において、本発明に係るプロセスは、有機溶媒が古典的に記載されている水の共沸混合物とそれらの組み合わせから選択されることを特徴とする。
【００４０】
共沸混合物（ａｚｅｏｔｒｏｐｅ）または共沸混合物（ａｚｅｏｔｒｏｐｉｃ  ｍｉｘｔｕｒｅ）は固定温度で沸騰し、固定組成物を維持する液体混合物である。共沸混合物（ａｚｅｏｔｒｏｐｉｃ  ｍｉｘｔｕｒｅ）は、与えられた組成物に存在する混合物、バランスのとれた液相と同じ組成を有する気相である。
【００４１】
実施形態の方法において、本発明に係るプロセスは、上記アルコールが、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ｔｅｒｔ−ブタノールまたはそれらの混合物から選択されることを特徴とする。
【００４２】
実施形態の方法において、本発明に係るプロセスは、上記アルコールの少なくとも２つの組み合わせが水溶液に添加されることを特徴とする。
【００４３】
実施形態の特別な方法において、アルコールまたは有機溶媒の割合は、ＯＳＣＮ−を含有する水溶液に関して１％〜９９％で変動してよい。
【００４４】
実施形態の好ましい方法において、本発明に係るプロセスは、アルコールが１重量％〜９９重量％のエタノールであることを特徴とする。
【００４５】
実施形態の方法において、賦形剤は、オシド型、ポリオシド型またはポリオール型である。好ましくは、賦形剤は、マンニトール、トレハロース、ラクトース、ＰＥＧのグリセロール（ポリエチレングリコール）および／またはそれらの混合物の群から選択される。
【００４６】
実施形態の特別な方法において、本発明に係るプロセスは、ポリオール型の賦形剤が１０重量％〜５０重量％のグリセロールであることを特徴とする。
【００４７】
実施形態の別の方法において、本発明に係るプロセスは、ポリオール型の賦形剤が１０〜５０重量％のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）であることを特徴とする。
【００４８】
実施形態の方法において、本発明に係るプロセスは、ポリオール型の賦形剤が１重量％〜５０重量％のマンニトールであることを特徴とする。
【００４９】
実施形態の方法において、本発明に係るプロセスは、ポリオール型の賦形剤が１重量％〜４５重量％のトレハロースであることを特徴とする。
【００５０】
実施形態の別の方法において、本発明に係るプロセスは、ポリオシド型賦形剤が１重量％〜６０重量％のラクトースであることを特徴とする。
【００５１】
実施形態の方法において、本発明に係るプロセスは、段階ｄ）での温度は０℃〜−１００℃であることを特徴とする。好ましくは、温度は−１０℃〜８０℃に設定される。別の好ましい実施形態の方法において、温度は−２０℃に設定される。実施形態の特別な方法において、温度は−８０℃に設定される。
【００５２】
実施形態の方法において、本発明に係るプロセスは、溶媒は同時に除去されることを特徴とする。
【００５３】
実施形態の別の方法において、本発明に係るプロセスは、アルコールまたは有機溶媒が連続的に除去されることを特徴とする。
【００５４】
本発明の実施形態の方法において、水は初めに除去される。
【００５５】
実施形態の別の方法において、上記アルコールまたは有機溶媒は、共沸混合物の形態で、減圧下での蒸発により除去される。好ましくは、蒸発は２０〜４５℃の温度で達成される。
【００５６】
実施形態の方法において、本発明に係るプロセスは、蒸発が、常温で達成されることを特徴とする。
【００５７】
実施形態の特別な方法において、本発明に係るプロセスは、蒸発が、低温、例えば−８０℃未満で行われることを特徴とする。好ましくは、蒸発は減圧下で達成される。
【００５８】
実施形態の別の方法において、上記アルコールまたは有機溶媒は、低温および減圧下で昇華により除去される。
【００５９】
実施形態の方法において、本発明に係るプロセスは、上記アルコールまたは有機溶媒が凍結乾燥により除去されることを特徴とする。
【００６０】
実施形態の特別な方法において、上記アルコールまたは有機溶媒は、逆溶媒として用いられる超臨界状態または臨界未満状態で流体を使用した排除により除去される。本発明に係る実施形態の方法において、例えば、ＣＯ２の超臨界型を用いる。
【００６１】
実施形態の方法において、本発明に係るプロセスは、溶媒が超臨界状態または臨界未満状態を得ることを可能とする圧力／温度の組み合わせで除去されることを特徴とする。
【００６２】
実施形態の方法において、本発明に係るプロセスは、超臨界流体または臨界未満流体がＧＡＳ（気体逆溶媒）として用いられることを特徴とする。
【００６３】
実施形態の別の方法において、本発明に係るプロセスは、超臨界流体または臨界未満流体がＳＡＳ（超臨界逆溶媒）として用いられることを特徴とする。
【００６４】
実施形態の特別な方法において、本発明に係るプロセスは、超臨界流体または臨界未満流体がＳＥＤＳ（超臨界流体による溶液増大分散法（Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｅｎｈａｎｃｅｄ  Ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ））として用いられることを特徴とする。
【００６５】
実施形態の方法において、本発明に係るプロセスは、上記アルコールまたは有機溶媒が４℃〜５０℃の温度で除去されることを特徴とする。
【００６６】
実施形態の方法において、段階ａ）は、ペルオキシダーゼ、ハロゲンおよび／もしくは擬ハロゲン、ならびに／または酸素供給体と接触したＯＳＣＮ−  ハイポチオカイヤナイトイオンを含有する水溶液の調製を含む。
【００６７】
本実施形態の方法において、ペルオキシダーゼはラクトペルオキシダーゼであり、擬ハロゲンはチオシアネートイオン（ＳＮＣ−）である。本実施形態の方法において、過酸化水素はグルコース／グルコースオキシダーゼ対によりインシチュで発生されている。
【００６８】
実施形態の方法において、酸素供給は過酸化水素または過炭酸ナトリウムから構成される群から選択される。
【００６９】
実施形態の方法において、水溶液は、緩衝され、ｐＨは［６；１１］の範囲に含まれる。本実施形態の方法において、水溶液は、リン酸塩緩衝液によって緩衝され、濃度は５０ｍＭ〜２００ｍＭに含まれる。
【００７０】
実施形態の別の方法において、水溶液は、実施形態の別の方法において、炭酸塩緩衝液によって緩衝され、濃度は５０ｍＭ〜１Ｍに含まれる。
【００７１】
本発明において、水溶液は、以下の連続的な酵素反応において酵素による生成により得られる。
【００７２】
【化２】
2014528440.tif 000003
式中、ＧＯＤはグルコースオキシダーゼ、Ｈ２Ｏ２は過酸化水素、ＬＰはラクトペルオキシダーゼ、ＳＣＮ−はチオシアネートイオンおよびＯＳＣＮ−はハイポチオカイヤナイトイオンである。
【００７３】
実施形態の方法において、プロセスは、工程ａ）およびｂ）の間に、切断閾値が、酵素を保持することを可能とする３０ｋＤａ以下である膜を用いた濾過段階も含む。
【００７４】
実施形態の方法において、膜は切断閾値が１０ｋＤａである膜である。好ましくは、膜は５ｋＤａの切断閾値である。
【００７５】
実施形態の方法において、本発明に係るプロセスは、利用できる水溶液が、炭水化物（グルコース、グルコン酸、炭酸塩またはそれらの混合物など）も含有することが（段階ｂ）で利用できることを特徴とする。
【００７６】
実施形態の方法において、本発明に係るプロセスは、利用できる水溶液は、チオシアネートイオンをも含有することを特徴とする。
【００７７】
実施形態の方法において、本発明に係るプロセスは、利用できる水溶液が緩衝されていることを特徴とする。好ましくは、処理する水溶液のｐＨは［６；１１］の範囲に含まれる。
【００７８】
実施形態の好ましい方法において、利用できる水溶液は、５０ｍＭ〜２００ｍＭのリン酸塩緩衝液により緩衝化される。好ましくは、利用できる水溶液は５０ｍＭ〜１Ｍに炭酸塩緩衝液により緩衝化される。実施形態の方法において、本発明に係るプロセスは、ＯＳＣＮ−イオンが０℃〜４０℃の温度で得られることを特徴とする。
【００７９】
実施形態の方法において、本発明に係るプロセスは、上記水溶液のＯＳＣＮ−  イオンが電解により得られることを特徴とする。
【００８０】
実施形態の方法において、上記水溶液のＯＳＣＮ−イオンが化学合成により得られる。
【００８１】
実施形態の方法において、本発明に係るプロセスは、段階ｄ）で得られる固体形態における組成物が粉末であることを特徴とする。
【００８２】
実施形態の方法において、得られる粉末は無定形である。
【００８３】
実施形態の方法において、得られる粉末は部分的に結晶性である。
【００８４】
実施形態の方法において、得られる粉末は、結晶性である。
【００８５】
（パンフレット  Ｐ１７  １行目・・・「ａｓ  ｐｒｅｓｅｒｖｅｒ」）
本発明は、空中浮遊感染、下気道の感染、および／または上気道の感染を含む感染の治療のために、本発明に係る固体組成物単独または固体組成物を他の殺菌剤、抗菌剤、抗ウイルス剤、防腐剤、抗生物質製剤または保存剤と組み合わせての使用にも関する。
【００８６】
特に、本発明は、他の抗感染薬、抗菌薬、抗ウィルス剤、抗真菌剤または抗生物質製剤と単独または組み合わせて、または嚢胞性線維症、ＣＯＰＤ（慢性閉塞性肺疾患）および気道のいかなる病理学と合併した感染を治療するための防腐剤としての上記固体組成物の使用にも関する。好ましくは、本発明に係る固体組成物は、単独または化合物として他の活性薬剤と組み合わせて用いて、粘液線毛クリアランスを改善する。粘液線毛クリアランスは、よく調整された水およびイオンの上皮輸送アセンブリ、ヌシン（ｎｕｃｉｎ）分泌液、線毛機能および咳から構成される気道の生来の重要な防衛機構である。粘液線毛クリアランスの不足は閉塞をもたらし、慢性細菌感染症にかかりやすくする。
【００８７】
本発明は、胃感染、切断部の感染、粘膜および／または皮膚を排他的でない感染の治療において使用するために、本発明の上記固体組成物単独または固体組成物を他の抗感染薬、抗菌薬、抗ウィルス剤、抗生物質製剤、抗真菌剤もしくは防腐剤と組み合わせての使用に関する。
【００８８】
本発明の別の目的は、細菌および／または酵母および／またはカビおよび／またはウイルスおよび／またはプリオンおよび／または寄生生物および／または原生動物を原因とする感染の処理のため、固体組成物単独または他の抗感染薬、抗菌薬、抗ウィルス剤、抗生物質製剤、抗真菌剤または防腐剤との組み合わせの使用にある。特に、インフルエンザ    ウイルスのようなウイルスを原因とするウイルス感染症の治療である。加えて、本発明に係る固体組成物はインフルエンザウイルスの処置のため、単独または組み合わせて有益に用いられる。固体組成物またはその再構成溶液は、特に敏感な領域への治療（例えば、敏感な領域の蒸発または塗布）として用いられる。
【００８９】
固体組成物は、抗菌活性を有するタンパク質またはペプチドと有利に結合される。本発明に係る固体組成物と結合する抗菌活性を有する注目のタンパク質またはペプチドは、例えば、ラクトフェリン、ラクトフェリシンおよび／またはリゾチームから選択される。
【００９０】
本発明は、許容できる生理的環境において上記粉末の直接使用または後の再溶解のため、上記固体組成物の粉末単独または固体粉末組成物を他の抗感染薬、抗菌薬、抗ウィルス剤、抗生物質製剤、抗真菌剤または防腐剤と組み合わせての使用にも関する。
【００９１】
本発明の別の目的は、治療ならびに／または医療用材料および医療装置の消毒、衛生化のため、固体組成物単独または固体組成物と他の抗感染薬、抗菌薬、抗ウィルス剤、抗生物質製剤、抗真菌剤もしくは防腐剤との組み合わせにおける使用にも関する。
【００９２】
本発明に係る固体組成物単独、または固体組成物と他の抗感染薬、抗菌薬、抗ウィルス剤、抗生物質製剤、抗真菌剤もしくは防腐剤との組み合わせは、吸引するため、経口、局所的にまたは注射により投与することを目的とする。
【００９３】
本発明は、空気除染（受動的）、自然除染（能動的）および環境浄化による空気処理のため、本発明に係る固体組成物単独または固体組成物と他の抗感染薬、抗菌薬、抗ウィルス剤、抗生物質製剤、抗真菌剤もしくは防腐剤との組み合わせにおける使用にも関する。
【００９４】
本発明は、食事または飲料水、レクリエーション水およびその後の殺菌剤用途に用いられる水の処理のため、本発明の固体組成物単独、または固体組成物と他の抗感染薬、抗菌薬、抗ウィルス剤、抗生物質製剤、抗真菌剤もしくは防腐剤との組み合わせにおける使用にも関する。
【００９５】
本発明は、化粧品の安定化および／または保存用の上記固体組成物単独または固体組成物と他の抗感染薬、抗菌薬、抗ウィルス剤、抗生物質製剤、抗真菌剤もしくは防腐剤との組み合わせにおける使用にも関する。
【００９６】
本発明は、材料ならびに装置の処理および／または衛生化のための、上記固体組成物単独または固体組成物と他の抗感染薬、抗菌薬、抗ウィルス剤、抗生物質製剤、抗真菌剤もしくは防腐剤との組み合わせにおける使用にも関する。
【００９７】
本発明は、包装の処理のため、固体組成物単独または固体組成物と他の抗感染薬、抗菌薬、抗ウィルス剤、抗生物質製剤、抗真菌剤もしくは防腐剤との組み合わせての使用にも関する。
【００９８】
本発明の別の目的は、テキスタイルの処理のため、上記固体組成物単独または固体組成物と他の抗感染薬、抗菌薬、抗ウィルス剤、抗生物質製剤、抗真菌剤もしくは防腐剤との組み合わせての使用に関する。
【００９９】
本発明は、植物の処理のため、固体組成物単独または固体組成物と他の抗感染薬、抗菌薬、抗ウィルス剤、抗生物質製剤、抗真菌剤もしくは防腐剤との組み合わせての使用にも関する。
【０１００】
本発明は、土壌の処理のため、固体組成物単独または固体組成物と他の抗感染薬、抗菌薬、抗ウィルス剤、抗生物質製剤、抗真菌剤もしくは防腐剤との組み合わせての使用にも関する。
【０１０１】
本発明は、洗浄剤または消毒剤と一緒に使用するため、固体組成物単独または固体組成物と他の抗感染薬、抗菌薬、抗ウィルス剤、抗生物質製剤、抗真菌剤もしくは防腐剤との組み合わせての使用にも関する。
【０１０２】
本発明の別の目的は、細菌、酵母、カビ、ウイルス、寄生生物、原生動物の除去のため、固体組成物単独または固体組成物と他の抗感染薬、抗菌薬、抗ウィルス剤、抗生物質製剤、抗真菌剤もしくは防腐剤との組み合わせての使用に関する。
【０１０３】
本発明に係る固体組成物は、好ましくは、抗菌剤、抗ウイルス剤または抗寄生虫剤に使用され、吸入、経口、局所施用または注射による投与を目的とする。
【０１０４】
本発明に係る固体組成物は、徐放剤形成の入念に作り上げることに適してもいる。
【０１０５】
実施形態の方法において、上述の徐放性固体組成物は、粘膜および／または皮膚ならびに呼吸器、口内、胃、腸内、膣内感染、切断部およびやけどの感染、非限定的な使用において選択される感染の治療のため、他の抗菌剤と組み合わせて好ましくは封入される。
【０１０６】
実施形態の別の方法において、上記徐放性固体組成物は好ましくは、感染または粘膜の影響、皮膚および表在性の体の成長の限定を意図しない形態において選択される感染の治療のため、他の抗ウィルス剤、ならびに／または抗真菌剤および／もしくは抗寄生生物剤と組み合わせて封入される。
【０１０７】
本発明は、以下の実施例により詳細に記載されている。本発明の他の態様および利点は、自然に、図示的におよび限定を意図しないように考えられなければならない実施例を読むとき明らかとなるだろう。
【実施例】
【０１０８】
実施例１：２連続の酵素反応でのＯＳＣＮ−酵素生産物
以下の２連続の酵素反応に基づく酵素生産物
【０１０９】
【化３】
2014528440.tif 000004
式中、ＧＯＤ：グルコースオキシダーゼ；Ｈ２Ｏ２：過酸化水素；ＬＰ：ラクトペルオキシダーゼ；ＳＣＮ−：チオシアネート；ＯＳＣＮ−：ハイポチオカイヤナイトイオン
【０１１０】
０．４ｇのＤ−グルコース、０．０４ｇのＧＯＤ、０．１２ｇのＬＰを含有する、水（１００ｍｌ）、５０ｍＭの炭酸塩緩衝液の溶液に、１ｍＬのナトリウムチオシアネート溶液（ＮａＳＣＮ）（２Ｍ）を添加する。当該溶液を２００ｒｐｍで１０分間常温で撹拌する。
当該溶液のｐＨは９．２である。
【０１１１】
反応後、上記溶液を１０ｋＤａ超濾過膜でろ過する。以下を含有する溶液が得られる。
【０１１２】
【化４】
2014528440.tif 000005
【０１１３】
得られたＯＳＣＮ−濃度は１３４０μＭである。
【０１１４】
実施例２：水性アルコール溶液中のＯＳＣＮ−
５２０μＭの濃度のＯＳＣＮ−を含む実施例１において得られる希薄溶液に、２０重量％の無水エタノールを添加する。その後温度を−３０℃に低下させる。当該溶液を凝固させる。５１０μＭのＯＳＣＮ−イオン濃度を１月後に測定し、２月後に４９５μＭを測定する。観測される差異は測定方法（分光測光）の正確さに起因する。
【０１１５】
実施例３：水性アルコール溶液中のＯＳＣＮ−
４５０μＭの濃度のＯＳＣＮ−を含む実施例１において得られる希薄溶液に、２０重量％の無水エタノールを添加する。温度を−３０℃に低下させる。当該溶液を凝固させる。４７０μＭのＯＳＣＮ−イオン濃度を１月後に測定し、２月後に４４０μＭを測定する。観測される差異は測定方法（分光測光）の正確さに起因する。
【０１１６】
実施例４：水性アルコール溶液中のＯＳＣＮ−
５１０μＭの濃度のＯＳＣＮ−を含む実施例１において得られる希薄溶液に、５０重量％の無水エタノールを添加する。温度を−３０℃に低下させる。当該溶液を凝固させる。５３０μＭのＯＳＣＮ−イオン濃度を１月後に測定し、２月後に４９０μＭを測定する。観測される差異は測定方法（分光測光）の正確さに起因する。
【０１１７】
実施例５：水性アルコール溶液中のＯＳＣＮ−
５１０μＭの濃度のＯＳＣＮ−を含む実施例４において用いられる溶液と同じ溶液を−８０℃の温度で保存する。当該溶液を凝固させる。４８０μＭのＯＳＣＮ−イオン濃度を１月後に測定し、２月後に５００μＭを測定する。観測される差異は測定方法（分光測光）の正確さに起因する。
【０１１８】
実施例６：水性アルコール溶液中のＯＳＣＮ−
５１０μＭの濃度のＯＳＣＮ−を含む実施例４において用いられる溶液と同じ溶液を−８０℃の温度で保存する。当該溶液を凝固させる。５２０μＭのＯＳＣＮ−イオン濃度を１月後に測定し、２月後に４９０μＭを測定する。観測される差異は測定方法（分光測光）の正確さに起因する。
【０１１９】
実施例２〜７で観測された結果を表１にまとめる。
【０１２０】
【表１】
2014528440.tif 000006
【０１２１】
実施例７：２つの異なる緩衝液（炭酸塩ｐＨ９．２およびリン酸塩ｐＨ７．４）で得られる２つのＯＳＣＮ−  溶液のＲＭＮ（図１Ａおよび１Ｂ）
リン酸塩緩衝液（１００ｍＭ、ｐＨ８）、または炭酸塩（１００ｍＭ、ｐＨ９．２）を含む実施例１の溶液を得た。０．５ｍＬのろ過溶液に、０．５ｍＬのＤ２Ｏおよび２０μＬの［２−１３Ｃ］−Ｇｌｙを添加し、外部標準として用いる。
【０１２２】
図１Ａおよび図１Ｂは、ラクトースの添加および乾燥蒸発の前に２つの異なる緩衝液条件（炭酸塩、ｐＨ９．２およびリン酸塩、ｐＨ７．４）で記録されたＯＳＣＮ−を含有する粗濾液の１３Ｃ  ＲＭＮスペクトルを示す。各サンプルを０．５ｍＬの濾液、０．２ｍＬのＤ２Ｏおよび２０μＬの［２−１３Ｃ］−Ｇｌｙ（０．１Ｍ）から調製する。ＮａＳ１３ＣＮ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を基質として用いている。両方の場合において、サンプルを合成後１５分以内に分析した。スペクトルを外部標準として用いられる［２−１３Ｃ］−Ｇｌｙに基づき校正する（炭酸塩緩衝液中の２つのシグナルの分離がｐＨ効果に起因する）。当該スペクトルを２５０００Ｈｚのスペクトルウィンドウを有するＢｒｕｋｅｒ  ＡＭ−５００ＷＢ型装置により３時間記録している。
【０１２３】
実施例８：凍結乾燥により得られる固体ＯＳＣＮ−ナトリウム塩
４５０μＭのＯＳＣＮ−を含む実施例１において得られる希薄溶液に、２０重量％の無水エタノールを添加する。その後、温度を−３０℃に低下させる。実施例３の凍結した水性アルコール溶液を１〜１０ｍｂａｒの圧力で、２４時間凍結乾燥する。収率０．１％または０．４μｇのＮａＯＳＣＮ塩を得る。
【０１２４】
実施例９：溶媒の蒸発により得た固体ＯＳＣＮ−  ナトリウム塩
実施例１において得られる溶液（［ＯＳＣＮ−］＝６１７μｍｏｌ／Ｌ）を無水エタノール（ＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ  ９：１）で希釈する。その後、溶媒が完全に蒸発されるまで、ロータリーエバポレーター（浴温度４０℃）を用いて、減圧下、共沸混合物の形態で、当該溶媒を蒸発させる。得られた生成物は白色粉末である。
【０１２５】
ＯＳＣＮ−の内容物をＴＮＢ比色試験（Ｅｌｌｍａｎ試薬）で確認する。
【０１２６】
２０μｇのＯＳＣＮ−を得、収率は２１％である。
【０１２７】
実施例１０：溶媒の蒸発により得た固体ＯＳＣＮ−ナトリウム塩
実施例１において得られる溶液（［ＯＳＣＮ−］＝１３４０μｍｏｌ／Ｌ）を無水エタノール（ＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ  ９：１）で希釈する。その後、溶媒が完全に蒸発されるまで、ロータリーエバポレーター（浴温度４０℃）を用いて、減圧下共沸混合物の形態で、当該溶媒を蒸発する。得られた生成物は白色粉末である。
【０１２８】
ＯＳＣＮ−の内容物をＴＮＢ比色試験（Ｅｌｌｍａｎ試薬）で確認する。
【０１２９】
１００μｇのＯＳＣＮ−を得、収率は５１１％である。
【０１３０】
実施例１１：炭酸塩を含有する固体組成物から再構築されたＯＳＣＮ−溶液のＲＭＮ（図２）
ハイポチオカイヤナイトを実施例１に係るグルコースオキシダーゼ／ラクトペルオキシダーゼシステムにより発生させた（［ＯＳＣＮ−］＝１２４０μｍｏｌ／Ｌ）。超濾過後、Ｎａ２ＣＯ３（１ｍｍｏｌ、０．１０６ｇ）を５ｍＬの濾液に添加する。完全に溶解させた後、溶液を９５ｍＬのエタノールで希釈し、減圧（３０ｍｂａｒ）下３０℃で蒸発させる。０．６ｍＬのＤ２Ｏで溶解されている白色粉末を得、外部標準として２０μＬの［２−１３Ｃ］−Ｇｌｙを用いた。
【０１３１】
図２は、ＯＳＣＮ−を含有する固体組成物１の１３Ｃ  ＲＭＮスペクトルを示す。当該サンプルを０．１ｇの固体濾液組成物、０．５ｍＬのＤ２Ｏおよび２０μＬの［２−１３Ｃ］−Ｇｌｙ（０．１Ｍ）で調製した。ＮａＳ１３ＣＮ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を基質として用いた。両方の場合に、当該サンプルを合成後１５分以内に分析した。スペクトルを外部標準として用いられ、［２−１３Ｃ］−Ｇｌｙに基づき校正する（炭酸塩緩衝液中の２つのシグナルの分離がｐＨ効果に起因する）。当該スペクトルを２５０００Ｈｚのスペクトルウィンドウを有するＢｒｕｋｅｒ  ＡＭ−５００ＷＢ型装置により３時間記録している。化学シフト：（ａ）１６２．１ｐｐｍ＝ＣＯ３２−；（ｂ）１３４．７ｐｐｍ＝ＳＣＮ−；（ｃ）１２９．８ｐｐｍ＝ＯＣＮ−；（ｄ）１２８．６ｐｐｍ＝ＯＳＣＮ−；（ｅ）グルコースおよびグルコン酸のシグナル；（ｆ）４２．７および４７．５ｐｐｍ＝［２−１３Ｃ］−グリシン（炭酸塩緩衝液中の２つのシグナルの分離がｐＨ効果に起因する）。
【０１３２】
実施例１２：ラクトース賦形剤を含有する固体組成物から再構築されたＯＳＣＮ−溶液のＲＭＮ（図３Ａおよび図３Ｂ）
【０１３３】
ハイポチオカイヤナイトを実施例１に係るグルコースオキシダーゼ／ラクトペルオキシダーゼシステムにより発生させた（［ＯＳＣＮ−］＝１５４０μｍｏｌ／Ｌ）。超濾過後、Ｎａ２ＣＯ３（１ｍｍｏｌ、０．１０６ｇ）およびラクトース（０．５ｍｍｏｌ、０．１７１ｇ）を１０ｍＬの濾液に添加する。完全に溶解させた後、溶液を１９０ｍＬのエタノールで希釈し、減圧（４０ｍｂａｒ）下２５℃で蒸発させる。０．６ｍＬのＤ２Ｏおよび、外部標準として２０μＬの［２−１３Ｃ］−Ｇｌｙに溶解されている白色固体を得る。
【０１３４】
図３Ａおよび３ＢはＯＳＣＮ−を含有する固体組成物番号２の１３Ｃ  ＲＭＮスペクトルを示す。当該サンプルを０．１ｇの固体濾液組成物、０．５ｍＬのＤ２Ｏおよび２０μＬの［２−１３Ｃ］−Ｇｌｙ（０．１Ｍ）で調製した。ＮａＳ１３ＣＮ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を基質として用いた。両方の場合に、当該サンプルを合成後１５分以内に分析した。スペクトルを外部標準として用いられる［２−１３Ｃ］−Ｇｌｙに基づき校正する（炭酸塩緩衝液中の２つのシグナルの分離がｐＨ効果に起因する）。当該スペクトルを２５０００Ｈｚのスペクトルウィンドウを有するＢｒｕｋｅｒ  ＡＭ−５００ＷＢ型装置により３時間記録している。化学シフト：（ａ）１６２．１ｐｐｍ＝ＣＯ３２−、（ｂ）１３４．７ｐｐｍ＝ＳＣＮ−、（ｃ）１２９．８ｐｐｍ＝ＯＣＮ−、（ｄ）１２８．６ｐｐｍ＝ＯＳＣＮ−、（ｅ）ラクトース、グルコースおよびグルコン酸のシグナル、（ｆ）４２．７および４７．５ｐｐｍ＝［２−１３Ｃ］−Ｇｌｙ（炭酸塩緩衝液中の２つのシグナルの分離がｐＨ効果に起因する）。
【０１３５】
実施例１３：逆溶媒としてＣＯ２を用いて得られる固体ＯＳＣＮ−ナトリウム塩
【０１３６】
実施例１において得られる溶液（［ＯＳＣＮ−］＝１６１０μｍｏｌ／Ｌ）を１ｍｍｏｌ  のラクトースを含有する無水エタノール（ＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ  ９：１）で希釈する。その後、溶媒をキャピラリーを用いて７３ｂａｒの圧力下３５℃の温度で反応容器に導入する。当該溶媒を、並流で撹拌させる超臨界相に噴出形態で分散させる。沈殿は減圧の後沈殿セルに白色粉末の形態で生成物を得ることを可能とする。
【０１３７】
ＯＳＣＮ−の内容物をＴＮＢ比色試験（Ｅｌｌｍａｎ試薬）で確認する。
【０１３８】
９２μｇのＯＳＣＮ−を得、収率は３９％である。
【０１３９】
実施例１４：ハイポチオカイヤナイトを含有する固体組成物番号２の安定性
本発明の固体組成物の安定性を研究するため、ストックを調製した」。ハイポチオカイヤナイトをこれまでに記載された手順に係るラクトペルオキシダーゼシステムにより溶液中に発生させた。１０ｍＬの濾液に、Ｎａ２ＣＯ３（１ｍｍｏｌ；０．１０６ｇ）およびラクトース（２ｍｍｏｌ；０．７ｇ）を添加する。完全に溶解させた後、溶液をエタノール（１９０ｍＬ）で希釈し、減圧（４０ｍｂａｒ）下２５℃で蒸発乾燥させる。３つのロットを同じ手順で調製した。得られた粉末を集め、０．１ｇを密閉プラスチックフラスコ内に調整した。
【０１４０】
サンプルを−１８℃で保存し、ＯＳＣＮ−の量を、異なる期間、固体組成物を保存した後に測定した（０、４２、６６、１３８、２３４、７４４時間）。ＴＮＢ方法によりハイポチオカイヤナイトの量の測定を以下の通り行った：ＯＳＣＮ−の濃度を１ｍＬの純水で希釈後のサンプルで、以前述べたＴＮＢ溶液の４１２ｎｍでの吸収の消失により測定した。上記測定を繰り返した。得られた結果は、本発明の固体組成物が時間がたっても安定であることを示す。安定性は４２時間または７４４時間に０時間と実質的に同一である。
【０１４１】
【表２】
2014528440.tif 000007
【図１Ａ】
2014528440.tif 000008
【図１Ｂ】
2014528440.tif 000009
【図２】
2014528440.tif 000010
【図３Ａ】
2014528440.tif 000011
【図３Ｂ】
2014528440.tif 000012
【図４】
2014528440.tif 000013
【国際調査報告】
2014528440.tif 000014
2014528440.tif 000015
2014528440.tif 000016
2014528440.tif 000017
2014528440.tif 000018
2014528440.tif 000019