(57)【要約】  （ａ）植物に有害な生物に対する活性を有する１種以上のアントラキノン誘導体を含む調製物と（ｂ）リグニンと、を含む製剤が提供される。また、本製剤を得るための方法、ならびに植物病原体感染、真菌感染及び／又は細菌感染、及び／又は植物に有害な生物の寄生、及び／又は種子の発芽、及び／又は植物の成長を調節するための、本製剤の使用方法も提供される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）植物に有害な生物に対する活性を有する１種以上のアントラキノン誘導体を含む調製物と、（ｂ）リグニンと、を含む製剤。
【請求項２】
植物に有害な生物に対する活性を有する１種以上のアントラキノン誘導体を含む前記調製物が、タデ科、クロウメモドキ科、マメ科、ツルボラン科、およびアカネ科植物に由来する抽出物である、請求項１に記載の製剤。
【請求項３】
植物に有害な生物に対する活性を有する１種以上のアントラキノン誘導体を含む前記調製物が、オオイタドリに由来する抽出物である、請求項１に記載の製剤。
【請求項４】
前記アントラキノン誘導体が、構造
【化１】
2014504641.tif 000008
を有し、式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８は、水素、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、ハロゲン、カルボキシル、アルキル、アルキオキシル（alkyoxyl）、アルケニル、アルケニルオキシル（alkenyloxyl）、アルキニル、アルキニルオキシル（alkynyloxyl）、ヘテロ環、芳香環、もしくはアリール基、または糖である、請求項１に記載の製剤。
【請求項５】
前記アントラキノン誘導体は、フィスシオン、エモジン、クリソファノール、ベンチロキノン（ventiloquinone）、エモジングリコシド、クリソファノールグリコシド、フィスシオングリコシド、3,4-ジヒドロキシ-1-メトキシアントラキノン-2-カルボキシアルデヒド、およびダムナカンタールからなる群から選ばれる、請求項１に記載の製剤。
【請求項６】
前記リグニンは、アルカリリグニン、リグノスルホネート、オキシリグニン；クロロリグニン；プロトリグニン；リグニンの煮汁、またはそれらの塩もしくは誘導体である、請求項１に記載の製剤。
【請求項７】
前記リグニンは、リグノスルホネートまたはその塩である、請求項１に記載の製剤。
【請求項８】
前記リグノスルホネートは、リグノスルホネートのナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、またはアンモニウム塩である、請求項７に記載の製剤。
【請求項９】
（ａ）植物に有害な生物に対する活性を有する１以上のアントラキノン誘導体を含む調製物と、（ｂ）リグニンとが、重量比で約1:10〜約10:1である、請求項１に記載の製剤。
【請求項１０】
前記製剤は、水性製剤である、請求項１に記載の製剤。
【請求項１１】
前記製剤は、分散性顆粒または水溶性粉末の形態である、請求項１に記載の製剤。
【請求項１２】
（ａ）植物に有害な生物に対する活性を有する１種以上のアントラキノン誘導体を含む調製物と（ｂ）リグニン、および任意に（ｃ）水と混合することを含む、請求項１に記載の製剤を生成する方法。
【請求項１３】
約１部の（ａ）植物に有害な生物に対する活性を有する１つ以上のアントラキノン誘導体を含む調製物を、（ｂ）約１〜約９部のリグニンと混合して、乾燥製剤を得る、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
（ａ）植物に有害な生物に対する活性を有する１種以上のアントラキノン誘導体を含む調製物と、（ｂ）リグニンと、を含む水性製剤を生成するための方法であって、請求項９に記載の方法に従って得られた約１部の乾燥製剤を、約100〜約2500部の水と混合することを含む、方法。
【請求項１５】
（１）植物病原体感染、真菌感染及／又は細菌感染、及び／又は植物に有害な生物の寄生を調節する工程；及／又は（２）種子発芽を調節する工程；及び／又は（３）植物病原体感染、真菌感染及び／又は細菌感染、及び／又は植物に有害な生物の寄生を調節する工程、及び／又種子発芽を調節する、及び／又は前記植物の成長を調節するために、前記植物及び／又は種子を、有効な量の前記製剤で処理する工程を含む、植物の成長を調節する方法。
【請求項１６】
植物病原体感染、真菌感染及び／又は細菌感染及び／又は植物に有害な生物の寄生を調節する、及び／又は種子発芽を調節する、及び／又は前記植物の成長を調節するために、請求項１に記載の製剤を調製するための、（ａ）植物に有害な生物に対する活性を有する１種以上のアントラキノン誘導体を含む調製物及び（ｂ）リグニンの使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本明細書では、アントラキノン誘導体及びリグニンを含有する製剤、特に植物調製物が開示される。
【背景技術】
【０００２】
植物病原体集団の合成殺真菌剤に対する抵抗性が急速に拡大し、そして環境汚染に対する人類の認識の高まりによって、植物病害を抑制する代替手段が不可欠となっている。最も有効な手段は、誘導植物抵抗性（van Loon et al.,1998）及び／又は全身獲得抵抗性（Durant et al.,2004）によって、植物防御機構を増強することである。
誘導抵抗性は、適切に刺激されたときに、植物が発達させる強化された防御能の状態である（Kucら,2000）。誘導植物抵抗性は、化学物質、非病原体、病原体の無毒形態によって引き起こされ得る。
【０００３】
[オオイタドリ抽出物]
マロンバイオ  イノベーションズ（Marrone Bio Innovations,Inc.）によりミスラナ（Milsana、登録商標）及びレガリア（Regalia、登録商標）として販売されているオオイタドリ(gaint knotweed(Reynoutria sachalinensis))抽出物は、主に、真菌に対して有毒なフェノール化合物の植物中での蓄積を誘導することによって、ウリ科植物及び他の作物のうどん粉病及び他の植物病害の抑制を提供する（Daayf et al.,1995; Wurms et al.,1999;Schimitt, 2002）。処方されたオオイタドリ抽出物は、コムギうどん粉病菌を含む植物病原体及び種々の作物における抵抗性を誘導する際にも優れた有効性を示した（Vechet al.,2009）。ISR作用機序に加えて、処方されたオオイタドリ抽出物は、コムギうどん粉病菌（ブルメリア・グラミニス・f.sp・トリティシ（Blumeria graminis f.sp.tritici）;Randoux et al.,2008）に対する直接的な静真菌効果を有することも最近示された。これらの抽出物は、フィスシオン及びエモジン等の種々のアントラキノン誘導体を含有することが認められた。
【０００４】
[リグニン]
リグニンは、高等植物の木質組織の主要な構成要素である。加工されたリグニンは、木材のパルプ化反応の副産物として得られる。リグニン生成物は、例えば、リグニンスルホネート、アルカリリグニン、及びオキシリグニンを含み、これらは、亜硫酸塩、硫酸塩、及びアルカリ廃液から得られる（Snook,1982,Handbook for Pulp & Paper Technologists, TAPPI,Atlanta）。
【０００５】
リグニンは、多様な商業的用途を有するとされている。例えば、アルカリ可溶性リグニンは、分散剤として使用されてきた。米国特許第3,726,850号は、有機的に結合された硫黄を実質的に含まない、オゾン処理されたアルカリ可溶性のリグニン生成物の、粘土用、染料用、農薬用、カーボンブラック用、及び他の材料用の分散材としての使用を開示する。米国特許第4,666,522号は、ろうのエマルジョン、油のエマルジョン、脂肪のエマルジョン、アスファルトのエマルジョン、及びそれらの混合物のエマルジョンを調製するための、リグノスルホネート生成物の使用を開示する。リグニンアセテートは、水性の印刷用インク組成物バインダーとして作用する等の用途に有用であることが報告された（例えば、米国特許第4,612,051号を参照）。
【０００６】
米国特許第5,668,183号は、脂溶性物質を分散させるためのリグニンスルホネート生成物の使用を開示する。さらに、リグニン−農薬複合体の結合が開示されている（例えば、米国特許第3,813,236号、米国特第3,929,453号（再発行特許第29,238号として再発行）、米国特許第4,381,194号、米国特許出願公開第20110015237号、米国特許出願公開第2010136132号、米国特許出願公開第20100278890号、米国特許出願公開第20080113920号、米国特許出願公開第2006247130号、米国特許第7,867,507号、国際公開第2003/005816号、米国特許第5,994,266号を参照）。
【発明の概要】
【０００７】
提供される製剤は、（ａ）植物害虫に対する活性を有する１種以上のアントラキノン誘導体を含む調製物と、（ｂ）リグニンと、を含む。本製剤は、乾燥製剤又は水性製剤のいずれであってもよい。特に、この調製物はイタドリ抽出物であってもよく、このリグニンは、リグニンスルホネート、特に、リグニンスルホネート塩であってもよい。
【０００８】
さらに、製剤を得るための方法であって、（ａ）植物に有害な生物に対する活性を有する１種以上のアントラキノン誘導体を含む調製物と、（ｂ）リグニンとを混合することを含む、方法が提供される。特に乾燥製剤を得るための方法が提供される。本方法は、乾燥製剤と水とを混合する工程をさらに含んでもよい。
【０００９】
さらに、これらの製剤を使用して、（１）植物病原体感染、真菌感染及び／又は細菌感染、及び／又は植物に有害な生物の寄生を調節する；及び／又は（２）種子発芽を調節する；及び／又は（３）植物及び／又は種子を、有効な量の製剤で処理し、植物病原体感染、真菌感染及び／又は細菌感染、及び／又は植物に有害な生物の寄生を調節し、及び／又は種子発芽を調節するか、及び／又は植物の生長を調節する、方法が提供される。任意に、種子コーティング剤が含まれてもよい。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
数値の範囲が提供されている場合、その範囲の上限と下限の間の各々の介在する値（文脈から明らかにそうでないと示されない限り、下限の10分の１の位までの値）、及び任意の他の記述された範囲又はその記述された範囲内の介在する値は、本発明に包含されるものとする。これらのより小さい範囲の上限及び下限は、上記より小さい範囲内に独立に含まれ得ることも本発明に包含される。しかし、これは、記述された範囲内の任意の特に除外される限度次第である。ここで、上記記述された範囲は、これらの限度の一方又は両方を含み、その含まれた限度のいずれかを除外する範囲もまた本発明に含まれる。
【００１１】
別途定義しない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者に一般に理解されているものと同じ意味を有する。本明細書に記載されているものと同様又は同等の任意の方法及び材料を、本発明の実施又は試験において用いることができるが、好ましい方法及び材料がここに記載されている。
【００１２】
本明細書及び添付の請求項において使用されるように、単数形の「１つの（a）」、「及び（and）」及び「上記（the）」は、文脈から明らかにそうでないことが示されない限り、複数の指示対象を含むことに留意しなければならない。例えば、「真菌（a fungus）」は、「複数の真菌（fungi）」をも包含する。
【００１３】
本明細書で定義されるように、「調節する（modulate）」という用語は、植物病原体感染、細菌感染もしくは真菌感染、植物に有害な生物の寄生の数量、又は植物病原菌感染もしくは真菌感染もしくは植物に有害な生物の寄生の蔓延速度を変化させることを意味するために用いられる。この「調節する」という用語は、成長量を変化させること、及び好ましくは、植物の種子の成長量又は成長速度もしくは発芽量を増加させることを意味するためにも用いられる。
【００１４】
[アントラキノン誘導体]
アントラキノン誘導体は、フィスシオン、エモジン、クリソファノール、ベンチロキノン（ventiloquinone）、エモジングリコシド、クリソファノールグリコシド、フィスシオングリコシド、3,4-ジヒドロキシ-1-メトキシアントラキノン-2-カルボキシアルデヒド、及びダムナカンタールを含むが、これらに限定されない。これらの誘導体は、以下の類似構造を共有する。
【００１５】
【化１】
2014504641.tif 000002
【００１６】
式中、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、及びR8は、水素、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、ハロゲン、カルボキシル、アルキル、アルキルオキシ、アルケニル、アルケニルオキシ、アルキニル、アルキニルオキシ、ヘテロ環、芳香族、又はアリール基、又はグルコース等の糖である。
【００１７】
特別な実施形態において、本発明は、アントラキノン誘導体を対象としており、上記アントラキノン誘導体は、タデ科植物、クロウメモドキ科植物、マメ科植物、ツルボラン科植物、及びアカネ科植物に由来する抽出物を含むが、これらに限定されない科の植物に由来する抽出物に含有される。これらの化合物は、葉、茎、樹皮、根、及び果実等の植物の任意の部分から単離されるか、又は入手することができる。植物材料は、乾燥していない生の状態でも、乾燥状態でもよいが、乾燥した植物材料であることが好ましい。有機栽培でリストされる生化学的な生物農薬として分類されるためには、抽出及び精製において使用される溶媒及びプロセスが、ナショナル・オーガニック・プログラム(National Organic Program(NOP))の要求を満たさなければならない(www.ams.usda.gov/AMSv1.0/nop)。
【００１８】
より特別な実施形態では、上記植物抽出物は、タデ科の一種に由来する。本明細書で定義されるように、「に由来する」は、特定の源から直接に単離されるか、もしくは入手されること、又は単離された物質もしくは微生物を同定する特徴を有している、特定の源に代わる源から単離されたか、又は入手されたことを意味する。特定の実施形態では、上記の組み合わせにおける抽出物は、フィスシオン等の少なくとも１種のアントラキノン誘導体を含有し、及び、任意にエモジンを含有する。
【００１９】
タデ科のメンバーには、アセトセラ（Acetosella）、アンティゴノン（Antigonon）、アリストカプサ（Aristocapsa）、ビルデルディキア（Bilderdykia）、ブルンニキア（Brunnichia）、セントロステギア（Centrostegia）、コリザンテ（Chorizanthe）、ココロバ（Coccoloba）、ココロビス（Coccolobis）、ココロボ（Coccolobo）、コルクルム（Corculum）、デデクケラ（Dedeckera）、デロピルム（Delopyrum）、デントセラス（Dentoceras）、ドデカエマ（Dodecahema）、エメクス（Emex）、
【００２０】
エリオゴヌム（Eriogonum）、ファフォピルム（Fafopyrum）、ファゴピルム（Fagopyrum）、ファロピア（Fallopia）、ギルマニア（Gilmania）、ゴオドマニア（Goodmania）、ハルフォルディア（Harfordia）、ホルリステリア（Hollisteria）、コエニギア（Koenigia）、ラスタリアエア（Lastarriaea）、ムクロネア（Mucronea）、ムエレンベキア（Muehlenbeckia）、ネマカウリス（Nemacaulis）、オキシリア（Oxyria）、オキシテカ（Oxytheca）、ペルスカリオア（Perscarioa）、ペルシカリア（Persicaria）、プレウロプテルス（Pleuropterus）、
【００２１】
ポドプテルス（Podopterus）、ポリゴネラ（Polygonella）、ポリゴヌム（Polygonum）、プテロステギア（Pterostegia）、ダイオウ（Rheum）、ルメクス（Rumex）、ルプレクティア（Ruprechtia）、ステノゴヌム（Stenogonum）、システノテカ（Systenotheca）、ティサネラ（Thysanella）、トヴァラ（Tovara）、トラカウロン（Tracaulon）、トリプラリス（Triplaris）が含まれるが、これらに限定されない。さらにより特別な実施形態では、抽出物は、イタドリ（別称、ファロピア）属の種又はダイオウ属の種に由来していてもよい。最も特別な実施形態では、抽出物は、オオイタドリに由来する。
【００２２】
アントラキノン誘導体は、任意の無機溶媒又は有機溶媒によって植物材料から抽出することができる。これらのうちのいくつかは、ナショナル・オーガニック・プログラム（National Organic Programs、www.ams.usda.gov/AMSv1.0/nop）によってその使用が許されている。
例えば、これらの材料を粉砕し、次いで塩基性の溶液で抽出した後、酸性の溶液で酸性化して、最後に、酢酸エチル、ブタノール等の有機溶媒によって抽出することができる；又は、粉砕された材料を、エタノールもしくは酢酸エチル等の有機溶媒で直接抽出することができる；又は、任意の他の方法及びそれらの組み合わせを使用して、アントラキノン誘導体を植物材料から抽出することができる。次いで、上記抽出溶液を、真空下で、適切な温度、例えば、20〜100°Ｃ、好ましくは30〜70°Ｃで濃縮又は乾燥させる。
【００２３】
[リグニン]
本明細書で使用される「リグニン（lignin）」という用語は、木本植物、樹木、及び農作物中に発見される複雑な高分子性化合物を意味する。リグニンは、典型的には、製紙産業の副産物（co-product）として生成され、化学的なパルプ化プロセスによって樹木から分離される。しかしながら、任意の植物源（例えば、硬木リグニン、軟木リグニン、草皮本リグニン、藁リグニン、及び竹リグニン）、堅果源（例えば、ピーカン殻、クルミ殻、ピーナッツ殻等を微粉末として）、種子源（例えば、綿実殻を微粉末として）等を使用して、本明細書で開示される組成物及び方法において使用するのに適したリグニンを得ることができる。
【００２４】
植物、樹木、及び／又は農作物から入手され得るリグニンの例としては、クラフトリグニン（硫酸リグニン）、リグニンのナトリウム塩又はカリウム塩、又はソーダリグニン等のアルカリリグニン；リグニンスルホネート（亜硫酸リグニン）；オキシリグニン；クロロリグニン；プロトリグニン；パルプ化プロセスから直接得られるリグニンの煮汁；液体中のそれらの塩又は塩の形態；それらの誘導体；及びそれらの組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。リグニンは、クラフトパルプ化プロセスから得ることができ、一般に水溶性ではない。リグニンのナトリウム塩又はカリウム塩は一般に水溶性であり、液体の形態であることもできる。
【００２５】
好適な実施形態では、使用されるリグニンは、リグニンスルホネートであり、リグノスルホネート（lignosulfonate）、複数のリグノスルホネート（lignosulfonates）、複数のリグノスルホネート（lignosulphonates）、リグノスルフェート（lignosulfate）、リグニンスルホン酸（ligninsulfonic acid）、リグノスルホン酸（lignosulfonic acid）、リグノ硫酸（lignosulphuric acid）、又はLST 7と呼ばれることがある。
【００２６】
リグニンスルホネートは、水溶性のアニオン性ポリマーとして理解されており、これは、亜硫酸パルプ化プロセスにおいて、副産物として形成され得る。リグニンスルホネートは、一般に、分子量の分布幅が広く、典型的には、約500〜約150,000の範囲である。リグニンスルホネートは、スルホネート基の対カチオンとして、異なる金属イオン又はアンモニウムイオンを含んでもよい。例えば、銅、亜鉛、カルシウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、アルミニウムのイオン等を含んでもよい。特別な実施形態では、リグニンスルホネートは、カルシウムリグニン抽出液からの回収後に得られる液体の塩であってもよい。
【００２７】
[製剤]
製剤は、固体であってもよく、又は液体であってもよい。アントラキノン誘導体を含有する調製物は、例えば、オオイタドリに由来する抽出物であってもよく、乳剤（EC）、濃縮懸濁液（SC）、マイクロエマルジョン（ME）、ナノエマルジョン（NE）、可溶性液体（SL）、水中エマルジョン（EW）、すぐに使用できる（RTU）及びマイクロカプセル化製剤、又はナノカプセル化製剤の形態であってもよい。粉末製剤及び顆粒製剤には、水溶性粉末（WSP）、水分散性顆粒（WDG）、及び水分散性錠剤（WGT）が含まれるが、これらに限定されない。好適な実施形態では、リグニンは水溶性粉末又は液体形態のリグニンスルホネート塩であってもよい。
【００２８】
特別な実施形態では、本明細書に記載される製剤中のアントラキノン誘導体を含有する調製物の％濃度は、約0.01〜95％(v/v)の範囲にある。この濃度は、好ましくは約0.01%〜約10％(v/v)であり、最も好ましくは約0.5%〜約1%v/vである。本明細書に記載される製剤中のリグニンの％濃度は、10％〜約40％v/vの範囲にある。
【００２９】
より特別な実施形態では、（ａ）植物に有害な生物に対する活性を有する１種以上のアントラキノン誘導体を含む調製物と、（ｂ）リグニンとの比は、重量で約1:10〜約10:1である。さらにより特別な実施形態では、（ａ）植物有害な生物に対する活性を有する１種以上のアントラキノン誘導体を含む調製物と、（ｂ）リグニンとの比は、重量で約1:１〜約1:4である。特に、液体製剤は、１:４の比で（ａ）植物に有害な生物に対する活性を有する１種以上のアントラキノン誘導体を含む調製物と、（ｂ）リグニンと、を含有する。あるいは、固体製剤は、１:１の比で（ａ）植物に有害な生物に対する活性を有する１種以上のアントラキノン誘導体を含む調製物と、（ｂ）リグニンと、を含有する。
【００３０】
製剤は、水性製剤であってもよい。製剤は、約100〜約2500倍に希釈されてもよい。より特別な実施形態では、製剤は、約100〜約200倍に希釈されてもよい。
製剤は、安息香酸ナトリウム、ソルベート、又はパラベン等の抗微生物剤を、約0.1〜5容量％の範囲でさらに含んでもよい。
【００３１】
製剤を適用する好適な方法は、担体の有無に関わらず、葉面散布（散布、噴霧、散粉、分散、又は注ぎかけ）である。適用の回数及び適用の比率は、一般に７〜14日間隔で、病原体による寄生のリスクに依存する。製剤は、有効成分を含有する液体製剤に種子を含浸させるか、又はそれらを固体製剤でコーティングするかのいずれかによって、種子に適用してもよい。他の例では、さらなる種類の適用も可能である。これらは、土壌浸水、細流かんがいによる適用、又は種子、もしくは植物茎、もしくは芽、もしくは果実の選択的処理を含む。
【００３２】
[種子コーティング剤]
上記の製剤は、種子コーティング剤との組み合わせで使用することもできる。かかる種子コーティング剤には、エチレングリコール、ポリエチレングリコール、キトサン、カルボキシメチルキトサン、ピートモス、樹脂、及びろう、又はシングルサイト、マルチサイト、もしくは未知の作用様式のいずれかを有する、化学的殺真菌剤又は殺菌剤が含まれるが、これらに限定されない。
【００３３】
[植物成長促進剤]
上記の製剤は、合成又は有機肥料（例えば、顆粒形態又は液体形態のリン酸２アンモニウム）、コンポストティー（compost tea）、海藻抽出物、移植植物の発根ホルモン処理に使用されるIAA（インドール酢酸）等の植物成長ホルモンとの組み合わせで、又はIBA（インドールブチル酸）及びNAA（ナフタレン酢酸）等の植物成長調整剤との組み合わせのいずれかで、ならびにバチルス属細、シュードモナス、根粒菌、トリコデルマ等の成長促進微生物と組み合わせて使用することができる。
【００３４】
[抗植物病原体剤]
上記の製剤は、植物抽出物、バイオ農薬、無機の作物保護剤（例えば、銅）等の他の抗植物病原体剤、界面活性剤（例えば、ラムノリピド；Gandhi et al., 2007）、また殺有害微生物特性を有するパラフィン油及びティーツリー油等の天然油、又はシングルサイト、マルチサイト、もしくは未知の作用様式のいずれかを有する化学的殺真菌剤もしくは殺細菌剤等との組み合わせで使用することもできる。本明細書で定義されるとおり、「抗植物病原体剤」は、植物病原体、特に、植物において土壌伝染病をもたらす病原体の成長を調節するか、又は植物病原体による植物感染を防ぐ薬剤である。植物病原体は、真菌、細菌、放線菌、又はウイルスを含むが、これらに限定されない。
【００３５】
上記のとおり、抗植物病原体剤はシングルサイト抗真菌剤であってもよく、それらは、ベンズイミダゾール、脱メチル化阻害剤（DMI）（例えば、イミダゾール、ピペラジン、ピリミジン、トリアゾール）、モルホリン、ヒドロキシピリミジン、アニリノピリミジン、ホスホロチオラート、キノン外部阻害剤、キノリン、ジカルボキシイミド、カルボキシイミド、フェニルアミド、アニリノピリミジン、フェニルピロール、芳香族炭化水素、桂皮酸、ヒドロキシアニリド、抗生物質、ポリオキシン、アシルアミン、フタルイミド、ベンゼノイド（キシリルアラニン）を含むが、これらに限定されない。
【００３６】
より特別な実施形態では、抗真菌剤は、イミダゾール、ピペラジン、ピリミジン、及びトリアゾール（例えば、ビテルタノール、ミクロブタニル、ペンコナゾール、プロピコナゾール、トリアジメホン、ブロムコナゾール、シプロコナゾール、ジニコナゾール、フェンブコナゾール、ヘキサコナゾール、テブコナゾール、テトラコナゾール）からなる群から選択される脱メチル化阻害剤である。最も特別な実施形態では、抗真菌剤は、ミクロブタニルである。
【００３７】
さらに別の特別な実施形態では、抗真菌剤は、キノン外部阻害剤（例えば、ストロビルリン）である。ストロビルリンは、アゾキシストロビン、クレソキシム−メチル、又はトリフロキシストロビンを含み得るが、こられに限定されない。さらに別の特別な実施形態では、抗真菌薬は、キノン、例えば、キノキシフェン（5,7-ジクロロ-4-キノリル4-フルオロフェニルエーテル）である。
【００３８】
なおもさらなる実施形態では、殺真菌剤は、クロロニトリル、キノキサリン、スルファミド、ホスホネート、ホスファイト、ジチオカルバメート、クロロアルキチオ、フェニルピリジン−アミン、シアノ−アセトアミドオキシムからなる群から選択される、マルチサイトの非無機性化学的殺真菌剤である。
なおもさらなる実施形態において、抗植物病原菌剤は、ストレプトマイシン、テトラシクリン、オキシテトラシクリン、銅、カスガマイシンであってもよい。
【００３９】
[実施例]
以下の実施例は、本発明のさらなる例示である。成分及び指定の材料は、典型的なものとして提示されるものであり、前述の開示を考慮して本発明の範囲内で、種々の修飾が可能である。
本明細書において詳述される前記組成物は、リグニンスルホネートを使用していないタデの組成物より良好に植物の真菌感染又は細菌感染を防ぐ。
【００４０】
[実施例１．製剤の調製]
この実施例は、殺真菌剤散布液原液の調製を例示する。以下の材料のブレンドを調製した：５部のタデの乾燥エタノール抽出物を、20部の乾燥リグニンスルホン酸ナトリウムと混合し、反転シリンダーミキサー内で５分間以上ブレンドした。ブレンドされた乾燥混合物を、75部の脱イオン水と混合し、均一になるまでそっと攪拌した。
【００４１】
[実施例２．キュウリうどん粉病の制御における水溶性粉末製剤（WSP）の有効性]
キュウリ品種「SMR 58」を、本葉１〜２葉期まで温室で成長させ、試験に使用するために準備した。１処理あたり、４本の植物を用い、各処理では、植物あたり3mLの製剤を散布した。植物を放置して乾燥させた後、スファエロテカフリジネア（Sphaerotheca fuliginea）の分生子懸濁液を3.5ｘ105胞子／mLで接種した。植物あたり2mLの分生子懸濁液を散布した。処理は完全乱塊法（randomized complete block design）で配置し、処理された植物を25〜30°Ｃの温室で培養した。接種の７日後に病害の重症度を評価した。ANOVA（分散分析）でデータを分析し、テューキー検定（Tukey test）を用いて、p=0.05レベルで平均を分類した。表１に結果を示す。
【００４２】
【表１】
2014504641.tif 000003
【００４３】
リグニン調製物を含む新たに処方されたオオイタドリは、キュウリうどん粉病の制御において、水処理対照と比較して有意な有効性を示したが（p=0.0003）、ブランク製剤は有効性を示さなかった。リグニン調製物は、１％安息香酸ナトリウム（抗菌剤）を含んでいた。
【００４４】
[実施例３．キュウリうどん粉病の制御におけるオオイタドリ抽出物＋リグニン新製剤WSP及びオオイタドリ抽出物５％ME（マイクロエマルジョン）の有効性の比較]
上述のとおりに植物を成長させた。１処理あたり４本を使用し、各処理は植物あたり３mLの製剤を散布した。植物を放置して乾燥させた後、分生子懸濁液を2.3ｘ105胞子／mLで接種した。植物あたり２mLの分生子懸濁液を散布し、25〜30°Ｃの温室で培養した。
接種の８日後に病害の重症度を評価した。ANOVAでデータを分析し、テューキー検定を用いて、p=0.05レベルで平均を分類した。以下の表２に示すように、この製剤は、現在の５％ME製剤より良好な有効性を示した。
【００４５】
【表２】
2014504641.tif 000004
【００４６】
[実施例４.キュウリうどん粉病の制御におけるオオイタドリ抽出物＋リグニン新製剤WSP及び水分散性顆粒（WDG）の有効性]
水溶性粉末（WSP）及び水分散性顆粒（WDG）を処方するために、異なる抽出ロットから得た５バッチの植物抽出物を使用した。上述のとおり試験植物を成長させた。１処理あたり４本を使用し、各処理は植物あたり３mLの製剤を散布した。植物を放置して乾燥させた後、分生子懸濁液を2.9ｘ105胞子／mLで接種した。植物あたり２mLの分生子懸濁液を散布し、25〜30℃の温室で培養した。接種の10日後に病害の重症度を評価した。ANOVAでデータを分析し、テューキー検定を用いて、p=0.05レベルで平均を分類された。表３に試験結果を示す。
【００４７】
【表３】
2014504641.tif 000005
【００４８】
WSP及びWDGとしてリグニン調製物を含む新たに処方されたオオイタドリ抽出物は全て、キュウリうどん粉病の制において、水処理対照と比較して、有意な有効性を示した（p<0.0001）。
【００４９】
[実施例５．キュウリうどん粉病の制における異なる比率のオオイタドリ抽出物＋リグニン新製剤WSP及び新製剤WDGラベル比率の有効性]
３つの比率のWSPとしての処方されたオオイタドリ抽出物を、現処方のオオイタドリ抽出物20％MEと同比率で比較し、WDGとしてのより低いラベル比率（label ratio）の抽出物についても、キュウリうどん粉病を抑制する際のそれらの有効性を評価した。試験手順は、実施例II〜IVに記載した。１処理あたり４本を使用し、各処理は植物あたり３mLの製剤を適用した。処理後乾燥した植物に3.6ｘ105胞子／mLの分生子懸濁液を植物あたり２mL接種した。接種した植物を25〜30°Ｃの温室で培養した。接種の７日後に病害の重症度を評価した。実施例II〜IVで述べたようにデータを分析した。表４に試験結果を示す。
【００５０】
【表４】
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【００５１】
WSPとして処方されたオオイタドリ抽出物は、現在の処方製品であるオオイタドリ抽出物20％MEと比較して、より良好であるか、又は変動のより少ない同等の有効性を示した。WDGとして処方された抽出物もまた、水処理対象(water check)より、有意に良好な病害制御を示した。
【００５２】
[実施例VI.トマト植物上のフィトフトラカプシシ（Phytophthora capsici）の制御におけるオオイタドリ抽出物＋リグニン新製剤WSP及びWDGの有効性]
オオイタドリ抽出物は、WSP及びWDGとして処方した。トマトの疫病菌葉枯れ病の制御において両方の製剤の有効性を評価した。品種「Roma」を本葉２葉期まで温室に成長させた。フィトフトラカプシシの単離株をリママメ培地（150gのリママメを500mLの水中にて、121°Ｃで0.5時間オートクレーブし、２枚重ねのチーズクロスでろ過して、種皮を除去した。20ｇの寒天をろ液に加えて、容量を1000mLとした。培地を121°Ｃで15分間オートクレーブした）上で７日間培養し、滅菌水で胞子嚢を洗い落とした。胞子嚢懸濁液を室温（約25°Ｃ）で１〜２時間培養し、遊走子を放出させた。懸濁液を1.0ｘ105胞子／mLに調整した。
【００５３】
１処理あたり３本の単一植物を使用した。各処理において、植物あたり３mLの製剤を携帯用散布機で適用した。培養のための容器内で散布処理した製剤を乾燥させた後、10mLの胞子懸濁液を全ての植物に均一に施用した。高い湿度を維持するために容器を密閉し、植物を25°Ｃで３日間、暗所で培養した。接種の７日後に病害を評価した。表５に結果を示す。
【００５４】
表５に示すように、リグニン調製物を含む処方されたオオイタドリ抽出物は、疫病菌胴枯れ病の制御において、現在の20％ME製剤と比べて、同等の効果を示し、水処理対照と比べて病害の重症度を低下させた。意外にも、オオイタドリの乾燥植物抽出物、及びスルホン酸化された木材パルプ（リグニンスルホネートとしても公知）の乾燥抽出物の混合物は、物理的及び化学的に安定した粉末を形成し、水と様々な比率で容易に混合して、散布可能な溶液をつくり、成長している植物に施用したときに真菌感染を予防することが見出された。
【００５５】
【表５】
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【００５６】
本発明は、特別な実施形態を参照して記載されているが、様々な均等物、変形及び修飾を用いることができ、かつそれらも依然として本発明の範囲内にあることが明白であるから、その詳細は、限定的なものと解釈すべきではない。
様々な参考文献が本明細書全体を通して引用されており、その各々は、その全体が参照により本明細書に援用される。
【００５７】
[引用文献]
Daayf, F., A. Schmitt, et al. (1995). "The effects of plant extracts of Reynoutria sachalinensis on powdery mildew development and leaf physiology of long English cucumber." Plant Disease 79: 577-580.
Durrant, W. E. and X. Dong (2004). "Systemic acquired resistance." Annual Review of Phytopathology 42: 185-209.
【００５８】
Kuc, J., (2000). Development and future direction of induced systemic resistance in plants, Crop Protection 19: 859-861.
Schmitt, A. (2002). "Induced responses by plant extracts from Reynoutria sachalinensis: a case study." Bull. IOBC/WPRS 25: 83-89.
van Loon, L.E., Bakker, P. A. H. M. and Pieterse, S C. M. J. (1998) "Systemic resistance induced by Rhizosphere bacteria", Annu. Rev. Phytopathol. 36:453−83.
【００５９】
Vechet, L., L. Burketova, et al. (2009). "A comparative study of the efficiency of several sources of induced resistance to powdery mildew (Blumeria graminis f. sp. tritici) in wheat under field conditions." Crop Protection 28: 151-154.
Wurms, K., C. Labbe, et al. (1999). "Effects of Milsana and Benzothiadiazole on the ultrastructure of powdery mildew haustoria in cucumber." Phytopathology 89: 728-736.
【国際調査報告】
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