(57)【要約】  本発明は、多価不飽和脂肪酸、乳化剤、水、金属キレート剤、および酸化防止剤を含む安定した水中油型乳剤、および安定した水中油型乳剤を調製するための方法に関する。この安定した水中油型乳剤は、約４℃の温度で少なくとも５か月間は、合体、凝集、オストワルド熟成、およびクリーム分離が実質的に起こらない。
2014516249.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）多価不飽和脂肪酸を含む油；
ｂ）乳化剤；
ｃ）水；
ｄ）金属キレート剤；および
ｅ）酸化防止剤；
を含む水中油型乳剤であって、
前記金属キレート剤が前記乳剤の約３重量％〜約２０重量％の量だけ存在し、かつ前記酸化防止剤が前記乳剤の約２重量％〜約２０重量％の量だけ存在する、水中油型乳剤。
【請求項２】
金属キレート剤と酸化防止剤との比率が約１：３〜約３：１である、請求項１に記載の乳剤。
【請求項３】
前記金属キレート剤が、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、クエン酸、シトレート、酒石酸、アスコルビン酸、リン酸、ポリフェノール、ピロホスフェート、ヘキサメタホスフェート、ホエー、カゼインおよびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項１に記載の乳剤。
【請求項４】
前記酸化防止剤が、ビタミンＣ、ビタミンＥ（トコフェロール）、ポリフェノール、フェノール誘導体、カルノシン酸、リポ酸、タウリン、芳香族カルボン酸、芳香族カルボン酸の塩、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項１に記載の乳剤。
【請求項５】
前記乳剤が、前記乳剤の約２重量％〜約６重量％のアスコルビン酸ナトリウムおよび前記乳剤の約０．０５重量％〜約０．５重量％のトコフェロールを含む、請求項１に記載の乳剤。
【請求項６】
前記多価不飽和脂肪酸が、α−リノレン酸、ω−３エイコサペンタエン酸、ω−３ドコサペンタエン酸、ω−３ドコサヘキサエン酸、γ−リノレン酸、リノール酸、アラキドン酸、ω−６ドコサペンタエン酸、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項１に記載の乳剤。
【請求項７】
前記多価不飽和脂肪酸が前記乳剤の約５重量％〜約４０重量％の濃度で存在する、請求項１に記載の乳剤。
【請求項８】
前記多価不飽和脂肪酸の濃度が乳剤１グラム当たり約５０ｍｇ〜約８０ｍｇである、請求項１に記載の乳剤。
【請求項９】
前記水が前記乳剤の約２０重量％〜約７５重量％の濃度で存在する、請求項１に記載の乳剤。
【請求項１０】
前記乳化剤が、アカシアゴム、変性アカシアゴム、レシチン、寒天、ガッチ・ゴム、変性ガッチ・ゴム、ペクチン、カラギナン、キサンタンガム、変性食物デンプン、変性アルギナート、ポリオキシエチレンソルビタン、脂肪アルコール、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項１に記載の乳剤。
【請求項１１】
前記乳化剤が前記乳剤の約５重量％〜約４０重量％の濃度で存在する、請求項１に記載の乳剤。
【請求項１２】
前記乳剤の平均粒径が約２０ｎｍ〜約１．５μｍである、請求項１に記載の乳剤。
【請求項１３】
前記乳剤の粘度が２５℃において１／ｓで約２００〜約１４００ｍＰａｓである、請求項１に記載の乳剤。
【請求項１４】
前記乳剤の粘度が２５℃において１／ｓで約７００〜約１５００ｍＰａｓである、請求項１３に記載の乳剤。
【請求項１５】
前記乳剤のｐＨが約２〜約７である、請求項１に記載の乳剤。
【請求項１６】
味覚マスキング剤をさらに含む、請求項１に記載の乳剤。
【請求項１７】
抗微生物剤、防腐剤、香味剤、調味料、甘味料、着色剤、増量剤、水分散性または油分散性の生理活性剤、または濃縮精油からなる群から選択される賦形剤をさらに含む、請求項１に記載の乳剤。
【請求項１８】
請求項１〜１７のいずれか一項に記載の乳剤を含む飲料。
【請求項１９】
ａ）水と乳化剤とを混ぜ合わせて水性混合物を生じさせるステップと；
ｂ）混合しながら前記水性混合物に多価不飽和脂肪酸を加えて水中油型乳剤を生じさせるステップと；
ｃ）前記水中油型乳剤に金属キレート剤および酸化防止剤を加えるステップと
を含む、水中油型乳剤の製造方法であって、
前記金属キレート剤が前記乳剤の約３重量％〜約２０重量％の量だけ存在し、かつ前記酸化防止剤が前記乳剤の約２重量％〜約２０重量％の量だけ存在する、水中油型乳剤の製造方法。
【請求項２０】
金属キレート剤と酸化防止剤との比率が約１：３〜約３：１である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記金属キレート剤が、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、クエン酸、酒石酸、アスコルビン酸、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２２】
前記酸化防止剤が、ビタミンＣ、ビタミンＥ（トコフェロール）、ポリフェノール、フェノール誘導体、カルノシン酸、リポ酸、タウリン、芳香族カルボン酸、芳香族カルボン酸の塩、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２３】
前記乳剤が、前記乳剤の約２重量％〜約６重量％のアスコルビン酸ナトリウムおよび前記乳剤の約０．０５重量％〜約０．５重量％のトコフェロールを含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２４】
前記多価不飽和脂肪酸が、α−リノレン酸、ω−３エイコサペンタエン酸、ω−３ドコサペンタエン酸、ω−３ドコサヘキサエン酸、γ−リノレン酸、リノール酸、アラキドン酸、ω−６ドコサペンタエン酸、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２５】
前記多価不飽和脂肪酸が前記乳剤の約５重量％〜約４０重量％の濃度で存在する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２６】
前記多価不飽和脂肪酸の濃度が乳剤１グラム当たり約５０ｍｇ〜約８０ｍｇである、請求項１９に記載の方法。
【請求項２７】
前記水が前記乳剤の約２０重量％〜約７５重量％の濃度で存在する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２８】
前記乳化剤が、アカシアゴム、変性アカシアゴム、レシチン、寒天、ガッチ・ゴム、変性ガッチ・ゴム、ペクチン、カラギナン、キサンタンガム、変性食物デンプン、変性アルギナート、ポリオキシエチレンソルビタン、脂肪アルコール、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２９】
前記乳化剤が前記乳剤の約５重量％〜約４０重量％の濃度で存在する、請求項１９に記載の方法。
【請求項３０】
前記乳剤の平均粒径が約２０ｎｍ〜約１．５μｍである、請求項１９に記載の方法。
【請求項３１】
前記乳剤の粘度が２５℃において１／ｓで約２００〜約１４００ｍＰａｓである、請求項１９に記載の方法。
【請求項３２】
前記乳剤の粘度が２５℃において１／ｓで約７００〜約１５００ｍＰａｓである、請求項３１に記載の乳剤。
【請求項３３】
前記乳剤のｐＨが約３〜約５である、請求項１９に記載の方法。
【請求項３４】
前記乳剤が味覚マスキング剤をさらに含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項３５】
前記乳剤が、抗微生物剤、香味剤、調味料、甘味料、着色剤、増量剤、水分散性または油分散性生理活性剤、または濃縮精油からなる群から選択される賦形剤をさらに含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項３６】
請求項１９〜３５のいずれか一項に記載の方法によって製造される水中油型乳剤。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
［発明の背景］
［発明の分野］
[0001]本発明は、多価不飽和脂肪酸を含む安定した水中油型乳剤、および安定した水中油型乳剤を調製するための方法に関する。
【０００２】
［背景］
[0002]多価不飽和脂肪酸（「ＰＵＦＡ」。長鎖ＰＵＦＡ「ＬＣ−ＰＵＦＡ」も含む）は、他の利点もあるが、中でも認知機能を向上させ、心臓血管の健康を維持することが明らかになっている。特に、オメガ−３ＰＵＦＡは、動脈硬化および冠状動脈性心疾患を防ぐための、炎症状態を軽減するための、さらに腫瘍細胞の増殖を遅らせるための重要な食事成分であり、オメガ−６ＰＵＦＡは、構造脂質として、また前駆体（例えば、プロスタグランジンおよびロイコトリエンの前駆体）として有用である。ＰＵＦＡは健康的な食事にとって重要な要素であるが、ＰＵＦＡは人の生体内では合成されないため、それらの化合物は摂取しなければならない。例えば、多くの植物および動物（例えば、魚、クルミ、コケモモ、麻、藻類、ならびに、亜麻、チーア、シソおよびスベリヒユなどいろいろな植物の種子及び／または葉の）油は、ＰＵＦＡが豊富である。また多くの人々は、健康補助食品及び／またはＰＵＦＡ強化食品によってＰＵＦＡを摂取することを望む。その結果、ＰＵＦＡを含んでいる製品の消費者需要は最近増大しており、いまや多岐にわたる製品がＰＵＦＡを含んでいる。
【０００３】
[0003]水中油型乳剤は、ＰＵＦＡ用の媒体として（食料品製造用の前駆体としても、また特に配合飲料の成分としても）使用されてきた。しかし、乳剤中に存在するＰＵＦＡは、（例えば、酸化及び／または光分解によって）不安定になり劣化しうるので、乳剤中のＰＵＦＡの物理的安定性および化学的安定性を維持することは極めて重要である。
【０００４】
［発明の概要］
[0004]必要とされるのは、中に含まれている多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）の物理的劣化および酸化分解に対して耐性のある安定した水中油型乳剤である。
【０００５】
[0005]本発明は、ａ）多価不飽和脂肪酸を含む油；ｂ）乳化剤；ｃ）水；ｄ）金属キレート剤；およびｅ）酸化防止剤を含む水中油型乳剤であって、金属キレート剤が、乳剤の約０．０２重量％〜約２０重量％の量だけ存在し、かつ酸化防止剤が乳剤の約２重量％〜約２０重量％の量だけ存在する、水中油型乳剤に関する。
【０００６】
[0006]実施形態によっては、金属キレート剤と酸化防止剤との比率は、約１：３〜約３：１である。
【０００７】
[0007]実施形態によっては、金属キレート剤は、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、クエン酸、シトレート、酒石酸、アスコルビン酸、リン酸、ポリフェノール、ピロホスフェート、ヘキサメタホスフェート、タンパク質（ホエーおよびカゼインなど）、およびそれらの組合せからなる群から選択される。
【０００８】
[0008]実施形態によっては、酸化防止剤は、ビタミンＣ、ビタミンＥ（トコフェロール）、ポリフェノール、フェノール誘導体、カルノシン酸、リポ酸、タウリン、芳香族カルボン酸、芳香族カルボン酸の塩、およびそれらの組合せからなる群から選択される。
【０００９】
[0009]実施形態によっては、乳剤は、乳剤の約２重量％〜約６重量％のアスコルビン酸ナトリウムおよび乳剤の約０．０５重量％〜約０．５重量％のトコフェロールを含む。
【００１０】
[0010]実施形態によっては、ＰＵＦＡは、α−リノレン酸、共役リノール酸、ω−３エイコサペンタエン酸（エイコサペンタエン酸）、ω−３ドコサペンタエン酸、ω−３ドコサヘキサエン酸、γ−リノレン酸、リノール酸、アラキドン酸、ω−６ドコサペンタエン酸、およびそれらの組合せから選択される。
【００１１】
[0011]実施形態によっては、ＰＵＦＡは、乳剤の約５重量％〜約４０重量％の濃度で存在する。
【００１２】
[0012]実施形態によっては、ＰＵＦＡの濃度は、乳剤１グラム当たり約５０ｍｇ〜約８０ｍｇである。
【００１３】
[0013]実施形態によっては、水は、乳剤の約２０重量％〜約７５重量％の濃度である。
【００１４】
[0014]実施形態によっては、乳化剤は、アカシアゴム、変性アカシアゴム（ｍｏｄｉｆｉｅｄ  ｇｕｍ  ａｃａｃｉａ）（ＭＧＡ）、レシチン、寒天、ガッチ・ゴム、変性ガッチ・ゴム、ペクチン、カラギナン、キサンタンガム、化工デンプン（特に変性食物デンプン）、変性アルギネート、ポリオキシエチレンソルビタン、ポリオキシエチレンソルビタンエステル、糖エステル、脂肪アルコール、天然植物製品（例えば、キラヤ）、およびそれらの組合せからなる群から選択される。
【００１５】
[0015]実施形態によっては、乳化剤は、乳剤の約５重量％〜約４０重量％の濃度で存在する。
【００１６】
[0016]実施形態によっては、乳剤は、平均粒径が約２０ｎｍ〜約１．５μｍである。
【００１７】
[0017]実施形態によっては、乳剤は、粘度が１／ｓで約２００〜約１４００ｍＰａｓである。
【００１８】
[0018]実施形態によっては、乳剤は、ｐＨが約２〜約７、好ましくは３．８〜４．２である。
【００１９】
[0019]実施形態によっては、乳剤は、味覚マスキング剤（ｔａｓｔｅ−ｍａｓｋｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）をさらに含む。
【００２０】
[0020]実施形態によっては、乳剤、抗微生物剤、防腐剤、香味剤（ｆｌａｖｏｒａｎｔ）、調味料、甘味料、着色剤、増量剤、水分散性または油分散性生理活性剤、または濃縮精油（ｆｏｌｄｅｄ  ｏｉｌ）からなる群から選択される賦形剤をさらに含む。
【００２１】
[0021]本発明はまた、本発明の乳剤を含む飲料に関する。
【００２２】
[0022]本発明はまた、ａ）水と乳化剤とを混ぜ合わせて水性混合物を生じさせるステップと；ｂ）混合しながら水性混合物に多価不飽和脂肪酸を加えて、水中油型乳剤を生じさせるステップと；ｃ）水中油型乳剤に金属キレート剤および酸化防止剤を加えるステップとを含む、水中油型乳剤の製造方法であって、金属キレート剤が乳剤の約０．０２重量％〜約２０重量％の量だけ存在し、酸化防止剤が乳剤の約２重量％〜約２０重量％の量だけ存在する、水中油型乳剤の製造方法に関する。
【００２３】
[0023]本発明はまた、上述の方法で製造された水中油型乳剤に関する。
【００２４】
[0024]本発明のさらなる実施形態、特徴、および利点、ならびに本発明の様々な実施形態の構成および操作を、添付図面を参照しながら以下に詳しく説明する。
【００２５】
[0024]本明細書に組み込まれていて、本明細書の一部をなす添付図面は、本発明の１つまたは複数の実施形態を例示しており、さらに本説明と一緒になって本発明の原理を説明し、当業者が本発明を実施して利用することができるようにするのに役立つものである。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
[0026]
【図１】本発明の冷蔵乳剤を製造できる１つの方法の例である処理の略図を示す。
【００２７】
「発明の詳細な説明］
[0027]本明細書は、本発明の特徴を含んでいる１つまたは複数の実施形態を開示する。開示されている実施形態は、単に本発明を例示しているだけである。本発明の範囲は、開示されている実施形態に限定されるわけではない。本発明は添付の請求項によって定義される。
【００２８】
[0028]本開示全体を通じて、特に記載のない限り、百分率、比率、含有率（ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）などの表現はすべて「重量による」ものである。本明細書で使用される「重量（による）」は、「質量（による）」という用語と同義であり、本明細書で定義されている比率または百分率が、容量でも他の尺度でもなく重量に従って定義されていることを示す。
【００２９】
[0029]本明細書で使用される「均一性」は、中央値からの絶対偏差に関係するものである。
【００３０】
[0030]特に記載がないかまたは文脈から明らかな場合、本明細書で使用される「以下」または「約〜未満」という用語は、０％または最新の手段でも検出できない量を含む百分率を表す。
【００３１】
[0031]本明細書で使用される「組成物」および「混合物」は同義的に使用され、２種類以上の材料、物質、賦形剤、部分などの組合せを表す。
【００３２】
[0032]本明細書で使用される「均質」は、実質的に均一な分布を有する混合物、組成物、および特に（例えば、連続水性相中の油粒子を含む）乳剤を描写する言葉である。均質性は、均一性と同義であり、試料内の均一性、バッチ間の均一性、及び／または実験間の均一性を表すことができる。例えば、試料内の均一性は、乳剤、混合物、または組成物の最初の一部を分析し、それを同じ乳剤、混合物、または組成物の別の一部と比較することにより、判定できる。実質的に均質な混合物の組成の一般的な逸脱（例えば、賦形剤、粒径などの重量百分率の変化）は、約１０％以下、約５％以下、約３％以下、約２％以下、約１％以下、または実験誤差内である。
【００３３】
[0033]本発明の水中油型乳剤は、連続水性液相と不連続油相との不混和性混合物を含む。本明細書で使用される「連続水性液相」とは、乳剤において不連続油相がその中に分散している部分を指す。したがって「不連続油相」は、連続水性液相内に分散した（また連続水性液相とは不混和性の）複数の不連続要素を表す。
【００３４】
[0034]不連続油相は粒子の形で存在する。本明細書で使用される「粒子」は、連続液相内に分散している、乳剤の油相を指す。本明細書で使用される「微粒子」は、複数の別個の粒子を含む乳剤の油相を指す。本明細書で使用される「粒径」という用語は、粒子の容積測定に基づいた、粒子のおおよその球形形状に基づく粒子の直径である粒子直径を指す。球形粒子に加えて、本発明の水中油型乳剤は、半球形、楕円形及び／または円柱状の粒子も含みうるが、これらに制限されない。
【００３５】
[0035]本明細書で使用される「乳剤安定性」とは、乳剤の物理的性質および化学的性質の変化に乳剤が抵抗する能力を表す。そのような変化の例には、乳剤配合物の物理的不安定化（経時的なクリーム分離、凝集、合体、部分合体、相反転およびオストワルド熟成など）および化学変化があり、それらにより、ＰＵＦＡを（例えば）酸化から保護し安定化させる乳剤の能力に教える。物理的不安定性の変化は、乳剤の１つまたは複数の物理的性質の変化に示され、それには、例えば、ｐＨ、粘度、粒径及び／または分布の変化、沈殿特性変化または脱乳化（ｄｅ−ｅｍｕｌｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ）などを挙げることができる。化学安定性の変化としては、官能検査特性の変化などを挙げることができる。
【００３６】
[0036]ＰＵＦＡ含有乳剤では、冷蔵条件下での保存可能期間が少なくとも５か月、好ましくは６か月となるようにするために、物理的安定性および酸化安定性の両方が重要である。本発明の水中油型乳剤は、保存可能期間が長く、少なくとも５か月間、好ましくは６か月間である。本明細書で使用される「保存可能期間」とは、実施形態の乳剤を使用に適した状態で、特に民生用として適した状態で保管できる期間を指す。本発明の水中油型乳剤は、物理安定性をもたらすだけでなく、ＰＵＦＡを（例えば）酸化から保護し安定化させる。
【００３７】
[0037]本発明の乳剤は動態学的に安定している。すなわち、乳剤の崩壊はゆっくりであり、乳剤は、製品の所期の耐用期間を超える期間にわたってその初期状態を維持することができる。初期状態は、不安定化度（ｄｅｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ）を測定するのに用いられるパラメータによって定義できる。
【００３８】
[0038]物理的不安定化のメカニズムとしては、合体、部分的合体、相反転、凝集、オストワルド熟成、およびクリーム分離がある。本明細書で使用される「合体」とは、組成の似ている２つ以上の粒子が互いに接触して単一のより大きな粒子を形成する過程を指す。本明細書で使用される「凝集」とは、２つ以上の粒子が互いに結びつき（ただし、個々の一体性は維持する）、このようにして重力分離の速度を速くする過程を指す。本明細書で使用される「オストワルド熟成」とは、より小さい粒子が消滅して大きな粒子が成長する過程を指す。本明細書で使用される「クリーム分離」とは、乳剤中の周囲の液体より低い密度を有する粒子が、離ればなれのまま、液体中で上方に移動する過程を指す。クリーム分離した乳剤は、クリーム中の粒子が接近するため合体する可能性が増大する。好ましくは、乳剤の物理劣化および酸化は、配合、処理および保存条件によって制御できる。
【００３９】
[0039]ゼータ電位は１つのパラメータであり、このパラメータにより乳剤の物理安定性を測定できる。ほとんどの乳剤の滴は電荷を持つ。不連続油相粒子を取り囲む連続液相は２つの部分として存在する。すなわち、イオンが粒子に強く結合している内側領域（シュテルン層）とイオンがあまりしっかり結合していない外側（拡散）領域である。本明細書で使用される「ゼータ電位」は、内側層（シュテルン層）と外側分散領域との間の電位差を指す。ゼータ電位は、ｐＨ、イオン濃度、および水濃度によって変化しうる。負または正のゼータ電位が大きいことは、粒子が互いに反発しやすくなり、それゆえに合体する可能性が少なくなることを意味する。
【００４０】
[0040]乳剤のｐＨの経時的変化は、乳剤安定性の尺度である。好ましい実施形態では、乳剤配合物は十分に緩衝化されている。そのような緩衝化により、処理または製造と使用における変化（その成分および他の因子の変化）に乳剤配合物が耐える能力が向上する。
【００４１】
[0041]本発明の安定した水中油型乳剤は、ａ）多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）を含む油；ｂ）乳化剤；ｃ）水；ｄ）金属キレート剤；およびｅ）酸化防止剤を含み、金属キレート剤が乳剤の約３重量％〜約２０重量％の量だけ存在し、かつ酸化防止剤が乳剤の約２重量％〜約２０重量％の量だけ存在する。
【００４２】
[0042]本発明の水中油型乳剤は特に有利であるが、それは乳剤が長期間にわたって安定しているからである。実施形態によっては、水中油型乳剤は、約３か月、約４か月、約５か月、約６か月、約９か月、または約１年の間、約４℃の温度で、合体、凝集、オストワルド熟成、及び／またはクリーム分離が実質的に起こらない。
【００４３】
[0043]本明細書で使用される「ｄ（０．１）」の「Ｄ１０」値は、油相の粒径を表し、具体的には、油相の測定可能なすべての粒子の約１０％がＤ１０値以下の直径を有し、測定可能な粒子の約９０％がＤ１０値より大きい直径を有する場合の直径を表す。
【００４４】
[0044]本明細書で使用される「Ｄ５０」または「ｄ（０．５）」値は油相の粒径を表し、具体的には、油相粒子の測定可能な粒子の５０％が大きい相当直径を有し、かつ粒子のもう５０％が小さい相当直径を有する場合の直径を表す。したがって、Ｄ５０は一般に中央粒径を表す。
【００４５】
[0045]本明細書で使用される「Ｄ９０」または「ｄ（０．９）」値は、油相の粒径を表し、具体的には、油相の測定可能なすべての粒子の約９０％がＤ９０値以下の直径を有し、測定可能な粒子の約１０％がＤ９０値より大きい直径を有する場合の直径を表す。
【００４６】
[0046]本明細書で使用される「Ｄ１００」または「ｄ（１．０００）」値は、油相の粒径を表し、具体的には、油相の測定可能なすべての粒子の１００％がＤ１００値以下の直径を有し、測定可能な粒子の０％がＤ１００値より大きい直径を有する場合の直径を表す。
【００４７】
[0047]実施形態によっては、約４℃で６か月以上の期間保存された本発明の水中油型乳剤は、実質的な粒径の変化がない。好ましくは本発明の水中油型乳剤は、約４℃以下（ただし、凍らない）で保存された場合にも実質的な粒径の変化がない。本明細書で使用される「実質的な粒径の変化」とは、Ｄ１０、Ｄ５０及び／またはＤ９０のいずれかが約１０％以上、例えば約２０％以上、約２５％以上、約３０％以上、または約４０％以上増大することを表す。実施形態によっては、本発明の水中油型乳剤は、実質的な粒径の変化がない状態で９か月以上、または１年以上の期間保存できる。
【００４８】
[0048]どんな特定の理論にも縛られることはないが、キレート剤および酸化防止剤の両方の濃度が高いと、乳剤のゼータ電位が上昇し、その結果、ゼータ電位の高い安定した乳剤、実質的に合体、凝集、オストワルド熟成、およびクリーム分離の生じない乳剤、および実質的な粒径の変化のない乳剤が生じる、と考えられる。特に、アスコルビン酸ナトリウムが存在すると、ゼータ電位の高い乳剤を得るのに有利である。
【００４９】
[0049]実施形態によっては、本発明の水中油型乳剤は防腐剤をさらに含む。本発明に用いるのに適した防腐剤としては、ビタミンＣ、トコフェロール、アスコルビン酸またはそれらの塩（例えば、ソルビン酸カリウム）があるが、これらに限定されない。実施形態によっては、防腐剤は、約７％未満、約６％未満、約５％未満、約４％未満、約３％未満、約２％未満、または約１％未満の量だけ存在する。
【００５０】
[0050]本発明の水中油型乳剤は１種または複数種の金属キレート剤を含む。本明細書で使用される「金属キレート剤」とは、金属イオンに結合して金属／キレート錯体を形成する化合物を指す。本発明に用いるのに適した金属キレート剤としては、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）およびその塩、クエン酸、酒石酸、ポリリン酸塩（例えば、ヘキサメタリン酸ナトリウム、酸性ピロリン酸ナトリウム、一ナトリウム二ナトリウムホスフェートなど）、ヘキサメタリン酸塩、それらのエステルまたは塩、亜硫酸塩およびその塩（例えば、亜硫酸ナトリウム、亜硫酸カリウムなど）、重亜硫酸塩およびその塩（例えば、重亜硫酸ナトリウムなど）、システイン塩酸塩、金属キレート化特性を有するアミノ酸、金属キレート化特性を有するタンパク質およびそれらの組合せがあるが、これらに限定されない。１つの実施形態では、金属キレータ（金属キレート剤）はヘキサメタリン酸ナトリウムである。
【００５１】
[0051]金属キレート剤（１種または複数種）は、本発明の水中油型乳剤中に、乳剤の約０．０２重量％〜約２０重量％、約０．０５重量％〜約２０重量％、約０．１０重量％〜約２０重量％、約０．５０重量％〜約２０重量％、約１．０重量％〜約２０重量％、約２重量％〜約２０重量％、約３重量％〜約２０重量％、約５重量％〜約２０重量％、約４重量％〜約１８重量％、約５重量％〜約１５重量％、約６重量％〜約１２重量％、約７重量％〜約１０重量％、または約８重量％〜約９重量％の濃度で存在してよい。
【００５２】
[0052]本発明の水中油型乳剤は、１種または複数種の酸化防止剤をさらに含む。本明細書で使用される「酸化防止剤」という用語は、別の化学種（ビタミン、顔料および脂質など）の酸化を遅くするかまたは防ぐ化合物を指す。本発明に用いるのに適した酸化防止剤としては、ビタミンＣ（アスコルビン酸パルミテートなどの脂溶性形態を含む）、ビタミンＥ（トコフェロール）、ポリフェノール、フェノール誘導体（例えば、ブチル化ヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニソール、ｔｅｒｔ−ブチルヒドロキノンなど）、カルノシン酸（ｃａｒｎｏｓｉｃ  ａｃｉｄ）、リポ酸、タウリン、芳香族カルボン酸（例えば、ケイ皮酸、安息香酸、アスコルビン酸など）、芳香族カルボン酸の塩（例えば、アスコルビン酸ナトリウム、アスコルビン酸カリウム、およびアスコルビン酸カルシウム）、酸化防止剤特性を有するアミノ酸、酸化防止剤特性を有するタンパク質、およびそれらの組合せがあるが、これらに限定されない。
【００５３】
[0053]酸化防止剤として用いるのに好適なポリフェノールは様々な食物の中に見いだされ、それらから抽出できるか、または合成が可能である。そうした様々な食物としては、植物（例えば、ローズマリー、クミン、ブドウ種、マツ樹皮、オートムギ、オランダガラシ、メボウキ、ショウガ、アカツメクサなどの抽出物）、茶葉（例えば、緑茶、マテ茶（シマハンウ（ｃｈｉｍａｒｒａｏ）またはシマロン（ｃｉｍａｒｒｏｎ）としても知られている）など）、果物（例えば、ザクロ、リンゴ、ホワイトチェリー（ｗｈｉｔｅ  ｃｈｅｒｒｙ）、プラム、クコ、ブルーベリー、トマト、パパイア、ブドウなど）、野菜（例えば、アルファルファなど）、およびココアがある。例示的なポリフェノールとしては、天然抽出物および合成化合物の両方がある。またポリフェノールとしては、フラボン（例えば、アピゲニン、ルテオリン、タンジェリチン（ｔａｎｇｅｒｉｔｉｎ）、クリシン、バイカレイン、スクテラレイン（ｓｃｕｔｅｌｌａｒｅｉｎ）、ワゴニン（ｗｏｇｏｎｉｎ）、ジオスミン、フラボキサートなど）、フラボノール（例えば、３−ヒドロキシフラボン、アザレアチン、フィセチン、ガランギン、ゴシペチン、ケンペリド、デンフェロール（ｄａｅｍｐｆｅｒｏｌ）、イソラムネチン、モリン、ミリセチン、ナツダイダイン、パキポドール、クエルセチン、イソクエルセチン、クエルシトリン、ラムナジン、ラムネチンなど）、フラバノール（例えば、（＋）−カテキン、（−）−エピカテキン、（−）−没食子酸エピカテキン、（−）−エピガロカテキン、および没食子酸エピガロカテキン）、フラボン（例えば、アピゲニン、ルテオリン、タンジェリチン、クリシン、バイカレイン、スクテラレイン、ワゴニン、ジオスミン、フラボキサートなど）、フラバノン、イソフラボン、タンニン、スチルベン誘導体、（例えば、レスベラトロルなど）、アントシアニン、アントシアニジン、プロアントシアニジン、没食子酸、クルクミン、およびそれらの組合せもあるが、これらに限定されない。
【００５４】
[0054]酸化防止剤は、本発明の水中油型乳剤中に、乳剤の約２重量％〜約２０重量％、約３重量％〜約１８重量％、約４重量％〜約１５重量％、約５重量％〜約１２重量％、約６重量％〜約１０重量％、または約７重量％〜約９重量％の濃度で存在する。実施形態によっては、酸化防止剤は、乳剤の約１０重量％以下、または約５重量％以下の量だけ存在する。
【００５５】
[0055]実施形態によっては、酸化防止剤は、乳剤の約２重量％〜約６重量％のアスコルビン酸塩（好ましくはアスコルビン酸ナトリウム）またはアスコルビン酸、および乳剤の約０．０５重量％〜約０．５重量％のトコフェロールを含む。アスコルビン酸塩（アスコルビン酸）は、酸素と反応して食物から酸素を取り除くことにより脂質酸化を遅らせるのを助ける。アスコルビン酸はまた、酸化トコフェロールを再生して還元状態にし、結果としてトコフェロールが遊離基捕捉剤として引き続き働くことができるようにするのにも役立つ。したがって、アスコルビン酸とトコフェロールを組み合わせると特に有利であり、そのような組合せにより、トコフェロールの遊離基補足剤としての能力を向上させる点で相乗効果が得られる。
【００５６】
[0056]実施形態によっては、金属キレート剤と酸化防止剤との比率は、約１０：１〜約１：１０、約５：１〜約１：５、約３：１〜約１：３、約２：１〜約１：２、または約１：１である。
【００５７】
[0057]本発明の水中油型乳剤により、ＰＵＦＡ油の安全かつ効果的な投与が行える。本明細書で使用される「ＰＵＦＡ」（「ＰＵＦＡ」）は、１６個以上の炭素原子（例えば、１６、１８、２０または２２個の炭素原子（それぞれ「Ｃ１６」、「Ｃ１８」、「Ｃ２０」または「Ｃ２２」））を含む主鎖と主鎖中の２つ以上の炭素−炭素二重結合とを有する脂肪酸を指す。本明細書で使用される「長鎖ＰＵＦＡ」（「ＬＣ−ＰＵＦＡ」）は、１８個以上の炭素原子を含む主鎖と主鎖中の２つ以上の炭素−炭素二重結合とを有する脂肪酸、例えば、Ｃ１８：３ｎ−３（アルファ−リノレン酸またはＡＬＡ）を指す。メチレンが介在したＰＵＦＡに関してＣＡ：Ｂｎ−Ｘという表記を用いる場合、「ＣＡ」は炭素の数（例えばＣ１８、Ｃ２０またはＣ２２）であり、Ｂは二重結合の数であり、Ｘは脂肪酸鎖のメチル末端から数えた場合の最初の二重結合の位置である。
【００５８】
[0058]本明細書で使用される「ＰＵＦＡ」という用語は、その遊離酸形態ならびのその塩とエステルを包含する。本明細書で使用される「エステル」という用語は、ＰＵＦＡ分子のカルボン酸基中の水素を別の置換基で置き換えたものを指す。典型的なエステルは当業者に知られており、その解説は、Ｈｉｇｕｃｈｉ，Ｔ．ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ  ａｓ  Ｎｏｖｅｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｖｏｌ．１４，Ａ．Ｃ．Ｓ．Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ，Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，Ｅｄ．Ｅｄｗａｒｄ  Ｂ．Ｒｏｃｈｅ，Ａｍｅｒ．Ｐｈａｒｍａ．Ａｓｓｏｃ，Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ（１９８７），およびＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ＭｃＯｍｉｅ  ｅｄ．，Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９７３）（これらの各々についてその全体を本明細書に援用する）に示されている。一般的なエステルとしては、メチル、エチル、トリクロロエチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ベンジル、ニトロベンジル、メトキシベンジルおよびベンズヒドリルのものがある。ＰＵＦＡの他のエステルについては、米国特許出願公開第２０１０／０１３０６０８Ａ１号明細書（その全体を本明細書に援用する）に記載されている。
【００５９】
[0059]本発明で用いるＰＵＦＡとしては、オメガ−３、オメガ−６、およびオメガ−９の脂肪酸、およびそれらから誘導されるオキシリピンがある。本発明で用いる例示的なオメガ−３ＰＵＦＡとしては、α−リノレン酸（Ｃ１８：３ｎ−３）、Ｃ１８：４ｎ−４、ω−３エイコサペンタエン酸（２０：５ｎ−３）（エイコサペンタエン酸）、ω−３ドコサペンタエン酸（ドコサペンタエン酸）、ω−３ドコサヘキサエン酸（２２：６ｎ−３）、ドコサテトラエン酸（２２：４ｎ−６）、およびそれらの組合せがあるが、これらに限定されない。本発明で用いる例示的なオメガ−６ＰＵＦＡとしては、γ−リノレン酸、リノール酸、共役リノール酸、アラキドン酸（２０：４ｎ−６）、ω−６ドコサペンタエン酸、およびそれらの組合せがあるが、これらに限定されない。実施形態によっては、本発明で用いるＰＵＦＡ油はすべてｃｉｓ形である。
【００６０】
[0060]実施形態によっては、ＰＵＦＡはＤＨＡを含む。「ＤＨＡ」は、ドコサヘキサエン酸（その化学名である（ａｌｌ−Ｚ）−４，７，１０，１３，１６，１９−ドコサヘキサエン酸としても知られている）ならびにその任意の塩または誘導体を表す。したがって、「ＤＨＡ」という用語は、ＤＨＡエチルエステル（ＤＨＡ−ＥＥ）ならびにＤＢＡ遊離脂肪酸、リン脂質、他のエステル、モノグリセリド、ジグリセリド、およびトリグリセリド（ＤＨＡを含んでいるもの）を包含する。ＤＨＡはω−３多価不飽和脂肪酸である。
【００６１】
[0061]「ＤＨＡ−エチルエステル」という用語の中の「エステル」という用語は、ＤＨＡ分子におけるカルボン酸基中の水素のエチル基による置換を表す。実施形態によっては、エステル置換基は、ＤＨＡが精製されたものかまたは半精製のものである場合、ＤＨＡ遊離酸分子に付加されてもよい。あるいはまた、ＤＨＡエステルは、トリグリセリドからエステルに変換されると、形成される。
【００６２】
[0062]実施形態によっては、動態学的に安定した乳剤を作るために用いられるＰＵＦＡ油は、１種または複数種の特定脂肪酸を実質的に含まない。例えば、ＤＨＡ−ＥＥを含むＰＵＦＡ油は、実質的にエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）を含まないものでありうる。ＥＰＡは、エイコサペンタエン酸（化学名である（ａｌｌ−Ｚ）−５，８，１１，１４，１７−エイコサペンタエン酸として知られている）ならびのその任意の塩または誘導体を表す。したがって、「ＥＰＡ」という用語は、遊離酸ＥＰＡ、ならびにＥＰＡアルキルエステルおよびＥＰＡ含有トリグリセリドを包含する。ＥＰＡは、ω−３多価不飽和脂肪酸である。特に記載のない限り、「実質的にＥＰＡを含まない」動態学的に安定した乳剤を作るのに用いられる油とは、ＥＰＡが油の全脂肪酸含有量の約３重量％未満の油を指す。実施形態によっては、動態学的に安定した乳剤を作るのに用いられる油は、油の全脂肪酸含有量の約２重量％未満のＥＰＡ、油の全脂肪酸含有量の約１重量％未満のＥＰＡ、油の全脂肪酸含有量の約０．５重量％未満のＥＰＡ、油の全脂肪酸含有量の約０．２重量％未満のＥＰＡ、または油の全脂肪酸含有量の約０．０１重量％未満のＥＰＡを含む。実施形態によっては、油は、検出可能な量のＥＰＡを含まない。
【００６３】
[0063]「実質的にＥＰＡを含まない」乳剤とは、ＥＰＡが乳剤の全脂肪酸含有量の約３重量％未満である乳剤を指す。実施形態によっては、乳剤は、乳剤の全脂肪酸含有量の約２重量％未満のＥＰＡ、乳剤の全脂肪酸含有量の約１重量％未満のＥＰＡ、乳剤の全脂肪酸含有量の約０．５重量％未満のＥＰＡ、乳剤の全脂肪酸含有量の約０．２重量％未満のＥＰＡ、または乳剤の全脂肪酸含有量の約０．０１重量％未満のＥＰＡを含む。実施形態によっては、乳剤は、検出可能な量のＥＰＡを含まない。
【００６４】
[0064]実施形態によっては、ＤＨＡを含むか、あるいは特にＤＨＡ−ＥＥを含む油または乳剤は、実質的にドコサペンタエン酸２２：５ｎ−６（ＤＰＡｎ６）を含まない。「ＤＰＡｎ６」という用語は、化学名（ａｌｌ−Ｚ）−４，７，１０，１３，１６−ドコサペンタエン酸として知られているオメガ６ドコサペンタエン酸、ならびにそれらの任意の塩またはエステルを表す。したがって、ＤＰＡｎ６という用語は、遊離酸のＤＰＡｎ６、ならびにＤＰＡｎ６のエチルエステルおよびＤＰＡｎ６含有トリグリセリドを包含する。ＤＰＡｎ６はＤＨＡの精製時に除去できる。あるいは、ＤＨＡは、ＤＰＡｎ６を産生しないかまたはＤＰＡｎ６をほとんど産生しない生物から得ることができる。
【００６５】
[0065]本明細書で使用される「実質的にＤＰＡｎ６を含まない」油とは、含まれるドコサペンタエン酸２２：５ｎ−６（ＤＰＡｎ６）が油の全脂肪酸含有量の約２重量％未満である乳剤を作るのに用いられる油を指す。実施形態によっては、油は、油の全脂肪酸含有量の約１重量％未満のＤＰＡｎ６を含む。実施形態によっては、油は、油の全脂肪酸含有量の約０．５重量％未満のＤＰＡｎ６を含む。実施形態によっては、油は、検出可能な量のＤＰＡｎ６を一切含まない。
【００６６】
[0066]本明細書で使用される「実質的にＤＰＡｎ６を含まない」乳剤とは、含まれるドコサペンタエン酸２２：５ｎ−６（ＤＰＡｎ６）が乳剤の全脂肪酸含有量の約２重量％未満である乳剤を指す。実施形態によっては、乳剤は、乳剤の全脂肪酸含有量の約１重量％未満のＤＰＡｎ６を含む。実施形態によっては、油は、乳剤の全脂肪酸含有量の約０．５重量％未満のＤＰＡｎ６を含む。実施形態によっては、乳剤は、検出可能な量のＤＰＡｎ６を一切含まない。
【００６７】
[0067]ＤＨＡを含むか、あるいは特にＤＨＡ−ＥＥを含む油または乳剤は、実質的にアラキドン酸（ＡＲＡ）を含まないものであってよい。ＡＲＡは、化合物である（ａｌｌ−Ｚ）５，８，１１，１４−エイコサテトラエン酸（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ）−イコサ−５，８，１１，１４−テトラエン酸とも呼ばれる）ならびのその任意の塩または誘導体を表す。したがって、「ＡＲＡ」という用語は、遊離酸のＡＲＡならびにＡＲＡのアルキルエステルおよびＡＲＡ含有トリグリセリドを包含する。ＡＲＡはω−６多価不飽和脂肪酸である。本明細書で使用される「実質的にＡＲＡを含まない」乳剤を作るのに用いる油とは、中に含まれるＡＲＡが油の全脂肪酸含有量の約３重量％未満である油を指す。実施形態によっては、油は、油の全脂肪酸含有量の約２重量％未満のＡＲＡ、油の全脂肪酸含有量の約１重量％未満のＡＲＡ、油の全脂肪酸含有量の約０．５重量％未満のＡＲＡ、油の全脂肪酸含有量の約０．２重量％未満のＡＲＡ、または油の全脂肪酸含有量の約０．０１重量％未満のＡＲＡを含む。実施形態によっては、油は検出可能な量のＡＲＡを含まない。本明細書で使用される「実質的にＡＲＡを含まない」乳剤とは、中に含まれるＡＲＡが乳剤の全脂肪酸含有量の約３重量％未満である乳剤を指す。実施形態によっては、乳剤は、乳剤の全脂肪酸含有量の約２重量％未満のＡＲＡ、乳剤の全脂肪酸含有量の約１重量％未満のＡＲＡ、乳剤の全脂肪酸含有量の約０．５重量％未満のＡＲＡ、乳剤の全脂肪酸含有量の約０．２重量％未満のＡＲＡ、または乳剤の全脂肪酸含有量の約０．０１重量％未満のＡＲＡを含む。実施形態によっては、乳剤は、検出可能な量のＡＲＡを含まない。
【００６８】
[0068]ＰＵＦＡは、液体（例えば、油）、固体（例えば、粉末）、またはそれらの組合せとして本発明の乳剤に加えることができる。
【００６９】
[0069]本発明で用いるＰＵＦＡは、乳剤中に分散させることのできる少なくとも１種のＰＵＦＡを含む任意のＰＵＦＡ源から分離できる。本発明で用いるＰＵＦＡは、例えば、微生物源、植物源、種子源、動物源、魚類源、またはそれらの組合せからのものであってよい。本発明に用いるのに適したＰＵＦＡおよびＰＵＦＡ源には、米国特許出願公開第２００９／００２３８０８号明細書（その全体を本明細書に援用する）に記載されているものが含まれる。例えば、本発明で用いるＰＵＦＡは、油性微生物（ｏｌｅａｇｉｎｏｕｓ  ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ）からのものであってよい。本発明で用いるＰＵＦＡ及び／またはＰＵＦＡ含有油は合成することもできる。
【００７０】
[0070]実施形態によっては、粗製のＰＵＦＡ含有油（例えば、魚類源、植物源、種子源及び／または微生物源からのもの）を（リン脂質および遊離脂肪酸を除去するために）精製し、（色素地を除去するために）漂白し、酵素処理し、かつ／または（飽和脂肪を除去するために）ウィンターライズ（ｗｉｎｔｅｒｉｚｅｄ）する。
【００７１】
[0071]本発明に用いるのに適した市販のＰＵＦＡとしては、Ｍａｒｔｅｋ  ＤＨＡ（商標）−Ｓ  Ｏｉｌ（Ｍａｒｔｅｋ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｃｏｒｐ．，Ｃｏｌｕｍｂｉａ，Ｍｄ．）、Ｒｏｓｅｍａｒｙ−Ｆｒｅｅ  Ｍａｒｔｅｋ  ＤＨＡ（商標）−Ｓ  Ｏｉｌ（Ｍａｒｔｅｋ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｃｏｒｐ．，Ｃｏｌｕｍｂｉａ，Ｍｄ．）、Ｍｉｃｒｏａｌｇａｅ  ＤＨＡ（商標）  Ｏｉｌ（Ｍａｒｔｅｋ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｃｏｒｐ．，Ｃｏｌｕｍｂｉａ，Ｍｄ．）、ＯＭＥＧＡＰＵＲＥ（登録商標）油（Ｏｍｅｇａ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｃｏｒｐ．，Ｈｏｕｓｔｏｎ，Ｔｅｘ．）、Ｍａｒｉｎｏｌ（登録商標）Ｏｉｌｓ（Ｌｉｐｉｄ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，Ｗｏｒｍｅｒｖｅｅｒ，ＮＬ）、ＭＥＧ−３油および粉末（Ｏｃｅａｎ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ  Ｃｏｒｐ．，Ｄａｒｔｍｏｕｔｈ，ＣＡ）、Ｅｖｏｇｅｌ（Ｓｙｍｒｉｓｅ  ＡＧ，Ｈｏｌｚｍｉｎｄｅｎ，ＤＥ）、Ｍａｒｉｎｅ  Ｏｉｌ（Ａｒｉｓｔａ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，Ｗｉｌｔｏｎ，Ｃｏｎｎ．）、およびＯＭＥＧＡＳＯＵＲＥ（登録商標）油（Ｓｏｕｒｃｅ  Ｆｏｏｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．，Ｒａｌｅｉｇｈ，Ｎ．Ｃ．）があるが、これらに限定されない。
【００７２】
[0072]実施形態によっては、ＰＵＦＡ油は、本発明の水中油型乳剤中に、乳剤の約５重量％〜約４０重量％、約１０重量％〜約３０重量％、約１２重量％〜約２５重量％、約１５重量％〜約２０重量％、約１２重量％、約１５重量％、約１８重量％、または約２０重量％の濃度で存在する。
【００７３】
[0073]実施形態によっては、ＰＵＦＡ油は、本発明の水中油型乳剤の不連続油相中に、不連続油相の約５０重量％〜約９９重量％、約６０重量％〜約９９重量％、約７０重量％〜約９９重量％、約８０重量％〜約９９重量％、約９０重量％〜約９９重量％、または約９５重量％〜約９９重量％の濃度で存在する。
【００７４】
実施形態によっては、ＰＵＦＡは、水中油型乳剤中に、乳剤１グラム当たり約５０ｍｇ〜約８０ｍｇ、乳剤１グラム当たり約６０ｍｇ〜約７５ｍｇ、または乳剤１グラム当たり約６５ｍｇ〜約７０ｍｇの量だけ存在する。
【００７５】
[0075]本発明の水中油型乳剤の連続水性液相は、ＰＵＦＡ油および乳化剤と相溶性のある水性液を含む。連続水性液相に用いるのに適した水性液としては、水、炭酸水、シロップ、ダイエット飲料、炭酸清涼飲料、果汁（白ブドウ、コンコード黒ブドウ（ｃｏｎｃｏｒｄ  ｄａｒｋ  ｇｒａｐｅ）、混合ベリー（ｍｉｘｅｄ  ｂｅｒｒｙ）、熱帯ブレンド（ｔｒｏｐｉｃａｌ  ｂｌｅｎｄｓ）、オレンジ／パイナップル／マンゴー、イチゴ／バナナ、ザクロ／ブルーベリー、白ブドウ／ラズベリーを含むが、これらに限定されない）、野菜ジュース、アイソトニック飲料、非アイソトニック飲料、果汁を含んでいる清涼飲料、コーヒー、茶、乳製品（例えば、ミルク、クリームなど）、大豆製品（例えば、豆乳（ｍｉｌｋ））など、およびそれらの組合せがあるが、これらに限定されない。
【００７６】
[0076]実施形態によっては、水性液成分（例えば、水）は、乳剤の約２０重量％〜約７５重量％、約２０重量％〜約６０重量％、約２５重量％〜約６５重量％、約２５重量％〜約６０重量％、約２５重量％〜約５０重量％、約２５重量％〜約４５重量％、約２８重量％〜約３５重量％、約３５重量％〜約５０重量％、約４０重量％〜約５０重量％、約４０重量％〜約４５重量％、約２８重量％、約３０重量％、約３５重量％、約４０重量％、または約４５重量％の濃度で存在する。
【００７７】
[0077]実施形態によっては、連続水性液相（すなわち、水性液とそれに可溶性の任意の賦形剤）は、水中油型乳剤の約５５重量％〜約９５重量％、約６０重量％〜約９５重量％、約７０重量％〜約９０重量％、約８０重量％〜約９０重量％、約８０重量％〜約９０重量％、約８０重量％、約８５重量％、または約９０重量％を構成する。実施形態によっては、不連続油相は、本発明の水中油型乳剤中に、乳剤の約５重量％〜約４５重量％、約５重量％〜約４０重量％、約１０重量％〜約３０重量％、約１０重量％〜約２０重量％、約１５重量％〜約３０重量％、約１５重量％〜約２５重量％、約１５重量％、または約２０重量％の濃度で存在する。
【００７８】
[0078]本明細書で使用される「乳化剤」とは、不連続油相が連続水性液相内で実質的に分散したままになるように、水中油型乳剤の安定性を促進する物質を指す。一般に、乳化剤は、少なくとも連続水性液相または不連続油相中に少なくとも部分的に可溶性である。実施形態によっては、乳化剤は連続水性液相および不連続油相の両方に部分的に可溶性である。
【００７９】
[0079]本発明の乳剤に用いるのに適した乳化剤としては、乳剤中に存在するＬＣ−ＰＵＦＡとの相溶性のある任意の乳化剤があり、それには、天然乳化剤、変性乳化剤（ｍｏｄｉｆｉｅｄ  ｅｍｕｌｓｉｆｉｅｒ）、および合成乳化剤、ならびにそれらの組合せが含まれる。変性乳化剤としては、化学処理、酵素処理、及び／または物理処理によって変性させた天然乳化剤がある。本発明に用いるのに特に適した乳化剤としては、アカシアゴム、変性アカシアゴム（例えば、ＴＩＣ  Ｇｕｍｓ，Ｗｈｉｔｅ  Ｍａｒｓｈ，Ｍｄ．のＴＩＣＡＭＵＬＳＩＯＮ（登録商標））、レシチン、寒天、ガッチ・ゴム、変性ガッチ・ゴム、ペクチン、カラギナン、キサンタンガム、化工デンプン、特に変性食物デンプン（例えば、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｓｔａｒｃｈ  ＆  Ｃｈｅｍｉｃａｌ，Ｂｒｉｄｇｅｗａｔｅｒ，Ｎ．Ｊ．から入手できるもの）（例えば、変性コーンスターチ）、変性アルギナート（例えば、アルギン酸プロピレングリコールなどのアルギン酸エステル）、ポリオキシエチレンソルビタン、ポリオキシエチレンソルビタンエステル（例えば、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０など）、糖エステル（例えば、スクロースモノステアレート（ｓｕｃｒｏｓｅ  ｍｏｎｏｓｔｅａｒａｔｅ）など）、およびそれらの組合せ、脂肪アルコール（例えば、セトステアリルアルコール、セテアリルアルコール、セチルステアリルアルコール（ｃｅｔｙｌｓｔｅａｒｙｌ  ａｌｃｏｈｏｌ）など）、モノグリセリド及び／またはジグリセリド、タンパク質ならびにそれらの組合せがあるが、これらに限定されない。実施形態によっては、乳化剤は、高分子親水コロイド、特に植物源に由来するものあってよい。植物源に由来する高分子親水コロイドの例としては、植物デンプン、アラビアゴム（アカシアゴム）およびリグノスルホネート（特に食品用リグノスルホネート）がある。実施形態によっては、乳化剤は、変性アカシアゴムまたは化工デンプン（アセチル化デンプンまたはオクテニルコハク酸デンプンなど）であってよい。市販のオクテニルコハク酸デンプンの例としては、Ｃａｒｇｉｌｌ  ＥｍｕｌＴｒｕ（商標）１２６７４（ワキシートウモロコシ（ｗａｘｙ  ｍａｉｚｅ）デンプンに由来する）がある。実施形態によっては、乳化剤はＨＬＢ値がない。「ＨＬＢ」値は、化合物がどの程度親水性または親油性であるかを示す「親水性親油性バランス」値を表す。実施形態によっては、乳化剤はＨＬＢ値が１０未満である。実施形態によっては、水中油型乳剤はポリグリセロール脂肪酸エステルを含まない。実施形態によっては、乳化剤は天然物（植物から抽出した天然物（例えば、キラヤ、つまりＮａｔｉｏｎａｌ  Ｓｔａｒｃｈ  Ｆｏｏｄ  Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎによって販売されているＱ−Ｎａｔｕｒａｌｅ（商標）で、キラヤの木に由来するもの）など）、および上に挙げたような乳化剤の組合せであってよい。
【００８０】
[0080]実施形態によっては、本発明の水中油型乳剤中に存在する乳化剤の総濃度は、乳剤の約１０重量％〜約２５重量％、約１０重量％〜約３０重量％、約１２重量％〜約２０重量％、約１４重量％〜約１８重量％、約１４重量％、約１５重量％、約１６重量％、または約２０重量％または約２５重量％である。実施形態によっては、乳化剤は、乳剤の約１０重量％未満の量だけ存在する（例えば、乳化剤がレシチンである場合）。
【００８１】
[0081]経時的に乳剤の粒径分布が変化したかどうかを評価することは、乳剤の安定性を示す優れた尺度となる。乳剤の粒径分布の経時的変化がなければ、あるいは変化が小さければ、乳剤が安定しているということである。本明細書で使用される粒径「分布」とは、本発明の所与の乳剤、ロット及び／またはバッチにおける、あるサイズ（すなわち、直径）またはサイズ範囲を有する粒子の数または濃度（例えば、百分率）を表す。粒径および粒径分布は、例えば、Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ  Ｈｙｄｒｏ  ２０００Ｓ（Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｌｔｄ．，Ｗｏｒｃｅｓｔｅｒｓｈｉｒｅ，ＵＫ）による低角レーザー光散乱（ＬＡＬＬＳ）を用いて測定できる。粒径および粒径分布はまた、例えば、顕微鏡写真、ビデオ顕微鏡法、ビデオ強化型顕微鏡法（ｖｉｄｅｏ−ｅｎｈａｎｃｅｄ  ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ）、コルターカウンティング（Ｃｏｕｌｔｅｒ  ｃｏｕｎｔｉｎｇ）、示差走査熱分析、比濁法、動的及び／または静的光散乱、低強度超音波、核磁気共鳴、または当業者に知られている他の任意の粒径測定技術によって測定することもできる。
【００８２】
[0082]実施形態によっては、不連続油相粒子は、平均（中央）粒径が、約２０ｎｍ〜約１．５μｍ、約５０ｎｍ〜約１μｍ、約１００ｎｍ〜約１．５μｍ、約１００ｎｍ〜約１μｍ、約１５０ｎｍ〜約７００ｎｍ、または約２００ｎｍ〜約５００ｎｍである。
【００８３】
[0083]実施形態によっては、不連続油相粒子は、Ｄ９０が、約１０μｍ以下、約５μｍ以下、約２μｍ以下、または約１μｍ以下である。
【００８４】
[0084]実施形態によっては、不連続油相粒子は、Ｄ１０が、約５０ｎｍ以下、約６０ｎｍ以下、約７０ｎｍ以下、約８０ｎｍ以下、約９０ｎｍ以下、約１００ｎｍ以下、約２００ｎｍ以下、約２５０ｎｍ以下、約３００ｎｍ以下、約４００ｎｍ以下、または約５００ｎｍ以下である。
【００８５】
[0085]混合物中の粒径分布は、Ｄ１０：Ｄ５０の比率、Ｄ１０：Ｄ９０の比率、およびＤ５０：Ｄ９０の比率でも定義できる。実施形態によっては、本発明の水中油型乳剤の粒径分布は、乳剤のＤ１０：Ｄ５０の比率が約１：１０以下、約１：８以下、約１：６以下、約１：５以下、または約１：３以下となる。実施形態によっては、混合物（つまり乳剤）中の粒径分布は、直径が約０．１μｍから約０．３６μｍの間にある粒子の範囲によって定義することもできる。実施形態によっては、直径が約０．０２μｍ〜約０．３６μｍの範囲内にある粒子の百分率は、粒子の約９５％より大きいか、約９６％より大きいか、約９７％より大きいか、約９８％より大きいか、約９９％より大きいか、または１００％である。
【００８６】
[0086]実施形態によっては、少なくとも９０％の粒子が０．０２から０．３６ミクロンの間の粒径を有するのが好ましい。
【００８７】
[0087]実施形態によっては、乳剤の粘度は、１／ｓで約１００ｍＰａｓ〜約２５００ｍＰａｓ、１／ｓで約１００ｍＰａｓ〜約２０００ｍＰａｓ、１／ｓで約１００ｍＰａｓ〜約１４００ｍＰａｓ、１／ｓで約２００ｍＰａｓ〜約１４００ｍＰａｓ、１／ｓで約５００ｍＰａｓ〜約１４００ｍＰａｓ、１／ｓで約７００ｍＰａｓ〜約１４００ｍＰａｓ、１／ｓで約１０００ｍＰａｓ〜約１４００ｍＰａｓ、１／ｓで約２００ｍＰａｓ〜約７００ｍＰａｓ、１／ｓで約３００ｍＰａｓ〜約６００ｍＰａｓ、または１／ｓで約４００ｍＰａｓ〜約５００ｍＰａｓである。粘度は当業者に知られている任意の方法で測定できる。特に記載のない限り、本明細書に示されている粘度値は２５℃で得られたものである。
【００８８】
[0088]実施形態によっては、本発明の水中油型乳剤は酸性であり、実施形態によっては中性または塩基性のｐＨであってよい。硫酸カリウムを防腐剤として使用する場合、水中油型乳剤は酸性であるのが好ましい。水中油型乳剤のｐＨは、適切な量の酸及び／または塩基を加えることにより制御できる。本発明に用いるのに適した酸および塩基としては、酢酸、クエン酸、塩酸、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウムなどがあるが、これらに限定されない。どんな特定の理論にも縛られることはないが、酸性ｐＨにより、保管時に水中油型乳剤は安定化されうる。実施形態によっては、無水クエン酸は、乳剤の３重量％〜８重量％の量だけ存在する。
【００８９】
[0089]実施形態によっては、本発明の水中油型乳剤は、ｐＨが、約７以下、約６以下、約５以下、または約４以下である。実施形態によっては、水中油型乳剤は、ｐＨが、約２〜約７、約２．５〜約６、約３〜約５、約３．５〜約５、または約４〜約４．５または約４である。
【００９０】
[0090]実施形態によっては、本発明の水中油型乳剤に含まれるＰＵＦＡは、消費者には味及び／または匂いでは実質的に感知できない。したがって、本発明の乳剤は、望ましくないどんな香り及び／または味もない状態で、消費者が摂取できる。実施形態によっては、乳剤は、本発明の水中油型乳剤からの、または本発明の水中油型乳剤を用いて調製された製品からの香気及び／または味をマスキングするのに適した味覚マスキング剤をさらに含む。本発明に用いるのに適した味覚マスキング剤の例として、Ｍａｒｔｅｋ  Ｍａｓｋｅｒ（Ｍａｒｔｅｋ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｃｏｒｐ．，Ｃｏｌｕｍｂｉａ，’Ｍｄ．）（Ｆｉｒｍｅｎｉｃｈ（Ｇｅｎｅｖａ，Ｓｗｉｔｚｅｌａｎｄ）提供のもので、Ｆｉｒｍｅｎｉｃｈ  Ｍａｓｋｅｒとしても知られる）（これはバニラ風味のタイプである）、Ｇｉｖａｕｄａｎ（Ｖｅｒｎｉｅｒ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ），Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｌａｖｏｒｓ  ａｎｄ  Ｆｒａｇｒａｎｃｅｓ  （Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ＮＹ），Ｓｅｎｓｉｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，ＷＩ），およびＯｇａｗａ  Ｆｌａｖｏｒｓ  ａｎｄ  Ｆｒａｇｒａｎｃｅｓ  （Ｔｏｋｙｏ，  Ｊａｐａｎ）、およびこれらの組合せがあるが、それらに限定されない。実施形態によっては、味覚マスキング剤は、乳剤の５重量％未満、２重量％未満、または１重量％未満の量だけ存在する。
【００９１】
[0091]ＰＵＦＡに加えて、本発明の水中油型乳剤は１種または複数種の賦形剤を含むことができる。本明細書で使用される「賦形剤」とは、ＰＵＦＡと組み合わせて水中油型乳剤を生じさせるのに役立つ物質を指す。本発明に用いるのに適した賦形剤は、最新の米国薬局方およびヨーロッパ薬局方の要件、ならびに医薬品添加物、食品添加物、および化粧品添加物に関する他の様々な法令および規格をすべて満たすものである。一般には、本発明に用いるのに適した賦形剤は、人が摂取しても安全であると米国食品医薬品局によって見なされているものである。本明細書で使用される「摂取しても安全」とは、信頼できる判断に従った場合に、妥当な便益／リスク比に見合う、過剰の毒性、刺激、アレルギー反応、または他の起こりうる合併症のない、ヒトおよび動物の組織と接するのに適している賦形剤、化合物、物質、及び／または組成物を描写する言葉である。さらに、当業者は、Ｔｈｅ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，５ｔｈ  Ｅｄ．，（Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ  ａｎｄ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｉｓｔｓ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，Ｌｏｎｄｏｎ，ＵＫ  ａｎｄ  Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，ＤＣ（２００６））（その全体を本明細書に援用する）に挙げられているものを含め、薬学的に許容される賦形剤を本発明に使用できることを理解するであろう。
【００９２】
[0092]実施形態によっては、本発明の水中油型乳剤は、プロピレングリコール、ソルビン酸カリウム、または安息香酸ナトリウムなどの抗微生物剤をさらに含む。そのような抗微生物剤は、食物及び／または飲料の組成物における最大許容量までの量を組成物に含めることができる。例えば、本発明の組成物は、乳剤の約０．０５〜約０．１重量％の間の量だけ抗微生物剤を含むことができる。
【００９３】
[0093]実施形態によっては、水中油型乳剤は香味剤をさらに含み、その香味剤は合成香味剤、天然香味剤、果物の香味剤、または植物の香味剤、またはそれらの組合せであってよい。本発明に用いるのに適した香味剤としては、イチゴ、ブドウ、ラズベリー、サクランボ、アーモンド、かんきつ類果実、オレンジ、タンジェリン、レモン、ライム、レモンライム、バニラ、バニラクリーム、ココア、チョコレート、コーヒー、コラ、茶、ハッカ、スペアミント、ウインターグリーン、メントール、カンゾウ、バタースコッチおよびそれらの組合せがあるが、これらに限定されない。
【００９４】
[0094]実施形態によっては、水中油型乳剤は、調味料をさらに含むが、それは、本明細書で使用される場合、もっと風味の良い製品を得るためまたは投与時に口あたりをもっとよくするために加えられる賦形剤を指す。本発明に用いるのに適した調味料の非限定的な例としては、リボチドおよびグルタミン酸モノナトリウムがある。
【００９５】
[0095]実施形態によっては、水中油型乳剤は、天然または人工甘味料をさらに含む。好適な甘味料としては、スクロース、乳糖、フルクトース、アセスルファーム塩（例えば、アセスルファームカリウムなど）、アリターム、アスパルテーム、ブライゼン（ｂｒａｚｚｅｉｎ）、クルクリン、シクラミン酸およびその塩（例えば、シクラミン酸ナトリウム）、ジヒドロカルコン、グリチルリジンおよびその塩、モグロサイド（ｍｏｇｒｏｓｉｄｅ）、マビンリン（ｍａｂｉｎｌｉｎ）、モナチン（ｍｏｎａｔｉｎ）およびその塩、モネリン、ネオテーム（ｎｅｏｔａｍｅ）、サッカリンおよびその塩（例えば、サッカリンナトリウム）、シアメノシド、ステビア、ステビオシド、スクラロース、タウマチン、およびそれらの組合せがあるが、これらに限定されない。
【００９６】
[0096]実施形態によっては、甘味料は、本発明の水中油型乳剤中に、乳剤の約０．０１重量％〜約２０重量％、約０．０１重量％〜約１重量％、約０．０２重量％〜約１５重量％、約０．０５重量％〜約１０重量％、約５重量％〜約２０重量％、約０．１重量％〜約５重量％、約０．５重量％〜約４重量％、約１重量％〜約３重量％、約０．０１重量％、約０．０５重量％、約０．１重量％、約１重量％、約５重量％、または約１０重量％の濃度で存在する。
【００９７】
[0097]実施形態によっては、水中油型乳剤は「糖を含まない」（すなわち、実質的に、口腔内で容易に糖に変換されうる糖及び／または複合糖質及び／または多糖類を含まない。
【００９８】
[0098]実施形態によっては、水中油型乳剤は着色剤をさらに含む。「着色剤」とは、色または外見をよくしかつ／または変更するために水中油型乳剤に加えることのできる物質（例えば、アントシアニンおよびオリゴマープロシアニジンなど）を指す。着色剤はまた、標識（ｃｏｄｅ）または識別するもの（すなわち、濃度、目的用途などを示すためのもの）として、水中油型乳剤に加えることもできる。ＦＤＡによって「一般に安全と見なされている（ｇｅｎｅｒａｌｌｙ  ｒｅｇａｒｄｅｄ  ａｓ  ｓａｆｅ）」（ＧＲＡＳ）ことが知られており、それゆえに製菓業（ｃｏｎｆｅｃｔｉｏｎａｒｙ  ｔｒａｄｅ）で一般に使用されるか、またはそうでなければ医薬品及び／または栄養補助食品配合物用としてＦＤＡによって承認されている、任意のタイプの着色剤（すなわち、食品・医薬品・化粧品用染料（Ｆ．Ｄ．＆Ｃ．ｄｙｅｓ）などの「自然色」及び／または「人工色」）を本発明で使用できる。
【００９９】
[0099]実施形態によっては、不連続油相は、テルペン（例えば、リモネン、ピネンなど）、香味油、植物油、精油など、およびそれらの組合せから選択される物質をさらに含む。本発明に用いるのに適した精油としては、かんきつ油（例えば、レモン、オレンジ、ライム、グレープフルーツ、マンダリンミカン、ダイダイといったものの油など）、葉油（例えば、油またはミント、ペパーミントなど）、スパイス油（例えば、ベルガモット、ローズマリーといったものの油）、種子油（例えば、亜麻仁油、クランベリー種子油など）、果皮油、およびそれらの組合せがあるが、これらに限定されない。
【０１００】
[00100]実施形態によっては、本発明の水中油型乳剤は増量剤をさらに含む。本発明に用いるのに適した増量剤としては、臭素化油（例えば、臭素化植物油）、エステルゴムおよび他のウッドロジン、ショ糖二酢酸六イソラク酸（ｓｕｃｒｏｓｅ  ｄｉａｃｅｔａｔｅ  ｈｅｘａ−ｉｓｏｂｕｒｔｙｕｒａｔｅ）（ＳＡＩＢ）、精製ゴムダンマー、ガヌアバワックス（ｇａｎｕａｂａ  ｗａｘ）、ベンジルベンゾエートポリグリセリルエステル（ｂｅｎｚｙｌ  ｂｅｎｚｏａｔｅ  ｐｏｌｙｇｌｙｃｅｒｙｌ  ｅｓｔｅｒ）、グリセリルトリベンゾエート、およびそれらの組合せがあるが、これらに限定されない。
【０１０１】
[00101]実施形態によっては、増量剤は、連続水性液相の約１重量％〜約３０重量％、約２重量％〜約２５重量％、または約３重量％〜約２０重量％の濃度で連続水性液相中に存在する。
【０１０２】
[00102]実施形態によっては、本発明の水中油型乳剤は、水分散性または油分散性の生理活性物質（ｂｉｏａｃｔｉｖｅ）をさらに含む。本明細書で使用される「水分散性生理活性物質」とは、水（または水性液）に分散しかつ溶ける物質を指し、「油分散性生理活性物質」とは、油に分散しかつ溶ける物質を指す。本発明に用いるのに適した水分散性及び／または油分散性生理活性物質としては、酵素（例えば、パパイン）、カロチノイド（例えば、β−カロチン、リコピン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン、ルテインなど、およびそれらの酸化体）、テルペン及び／またはテルペノイド（例えば、ユーカリプトール、樟脳、メントール、シトラールなど）、精油（例えば、オイゲノール、ギンゲロール、アベナコシド（ａｖｅｎａｃｏｓｉｄｅ）など）、フェノール酸（例えば、没食子酸、ロスマリン酸など）、フラボノイド（例えば、ナリンギン、ケルセチン、カテキン、アントシアニン、クマリンなど）、フィトエストロゲン、プロアントシアニジン、クルクミノイド、ビタミン（例えば、ビタミンＥ、ビタミンＫなど）、およびそれらの組合せがあるが、これらに限定されない。実施形態によっては、水分散性生理活性物質は、水中油型乳剤中に、乳剤の約０重量％〜約２０重量％、約０．５重量％〜約１５重量％、または約１重量％〜約１０重量％の濃度で存在する。
【０１０３】
[00103]実施形態によっては、本発明の水中油型乳剤は、濃縮精油をさらに含む。本発明に用いるのに適した濃縮精製油としては、ベルガモット（ベルガプテンを含まないベルガモット油を含む）、グレープフルーツ（高アルデヒドのグレープフルーツ油およびぶどう果汁の抽出物を含む）、レモン、ライム、マンダリンミカン、オレンジ（およびオレンジジュース抽出物）、タンジェリンなどの、３回蒸留、４回蒸留、５回蒸留、６回蒸留、８回蒸留、１０回蒸留、１５回蒸留、および２０回蒸留した油、およびそれらの組合せがあるが、これらに限定されない。本発明に用いるのに適した濃縮精油には、洗浄された、蒸留された、常温圧搾された、テルペンを含まない、及び／またはセスキテルペンを含まない、上記の例示的濃縮精油の変形形態も含まれる。
【０１０４】
[00104]実施形態によっては、濃縮精油は、本発明の水中油型乳剤中に、乳剤の約０．１重量％〜約１０重量％、約０．２重量％〜約５重量％、約０．３重量％〜約１重量％、約０．５重量％〜約５重量％、または約１重量％〜約３重量％の濃度で存在する。
【０１０５】
[00105]実施形態によっては、本発明の水中油型乳剤はモノグリセリド及び／またはジグリセリドを含む。実施形態によっては、本発明の水中油型乳剤は、モノグリセリド及び／またはジグリセリドを実質的に含まない。「モノグリセリド及び／またはジグリセリドを実質的に含まない」本発明の水中油型乳剤は、例えば、乳剤の約１０重量％以下、約５重量％以下、約１重量％以下、約０．５重量％以下、約０．１重量％以下、約０．０５重量％以下の濃度、あるいは検出できない濃度のモノグリセリド及び／またはジグリセリドを含みうる。
【０１０６】
[00106]本発明の水中油型乳剤は、成分または機能性成分として、例えば、食品、飲料、ハーブ組成物、健康補助食品、栄養製品、医薬組成物（特に、経口的に、または腸への直接注入により投与されるもの）及び／または栄養補助食品組成物において使用できる。本発明の水中油型乳剤は、その製品を使用（例えば、摂取）した場合に消費者に健康効果をもたらすのに適した濃度でそのような組成物に存在しうる。
【０１０７】
[00107]したがって、実施形態によっては、本発明の方法は、ＰＵＦＡ（特にＤＨＡ、とりわけＤＨＡ−ＥＥ（エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）を実質的に含んでいないもの）であって、ＤＨＡが非藻類源（例えば、魚）に由来するもの）を含んでいる動態学的に安定した本発明の乳剤を、それを必要とする対象者に、それを含んでいる製品または組成物の形などで、毎日投与することを含む。
【０１０８】
[00108]「対象者」という用語は、ヒトまたは霊長類（類人猿、サル、オランウータン、ヒヒ、テナガザル、およびチンパンジーなど）などの哺乳類を指す。「対象者」という用語はまた、愛玩用動物（例えば、犬および猫）；動物園の動物；ウマ科の動物（例えば、ウマ）；食用動物（例えば、雌牛、豚、および羊）；および疾患モデル動物（例えば、ウサギ、マウス、およびラット）を指すこともある。対象者は人間でも人間でなくてもよい。対象者はどんな年齢でもよい。例えば、実施形態によっては、対象者は、人間の幼児（すなわち、出生後〜約１歳）；人間の子ども（すなわち、約１歳から１２歳の間の人間）；思春期の人間（すなわち、約１２歳から１８歳の間の人間）；または大人の人間（すなわち、約１８歳よりも年を取った人間）である。実施形態によっては、対象者は大人（男性か女性のいずれか）である。
【０１０９】
[00109]本明細書で使用される「治療する」および「治療」という用語は、治療処置および予防対策または予防手段の両方を表し、その目的は、望ましくない生理的な状態または病気を防ぐかまたは、または落ち着かせる（弱める）か、あるいは有益なまたは望ましい臨床結果を得ることである。「治療」という用語はまた、上記の状態または病気に関連した症状の軽減も指す。
【０１１０】
[00110]実施形態によっては、本発明の乳剤によって提供されるＰＵＦＡを含んでいる調製物を、連続的に投与する。「投与」に関連して本明細書で使用される「連続的」または「継続的」という用語は、投与頻度が少なくとも１日１回であることを意味する。ただし、投与頻度は、１日１回より多くてもよく、さらに、本明細書に明記した投与量レベルが達成される限り、もっと「連続的」または「継続的」（例えば、１日に２回、さらには３回または４回）でもよいことに注意されたい。
【０１１１】
[00111]実施形態によっては、水中油型本発明の乳剤は、現地の配合業者、瓶詰め業者、流通業者、薬局、または分配及び／または使用する時点での他の関係者が希釈するのに適した濃縮物として提供される。濃縮水中油型乳剤は、使用する前に輸送し、かつ／または保存しなければならない製品に特に適している。
【０１１２】
[00112]本明細書で使用される「濃縮物」とは、低濃度の乳化剤およびＰＵＦＡを有する最終的な水中油型乳剤を生じさせるために希釈するのに適した水中油型乳剤を指す。例えば、濃縮物は、希釈して飲料を形成させることができる飲料の乳剤濃縮物を含みうる。特に、乳剤濃縮物は、さらに均質化を行わなくても、連続水性液相に容易に分散する。乳剤濃縮物を形成させるなら、消費者が摂取する最終的な乳剤形態に加える前に、保存および輸送用として安定したコンパクトな形態でＬＣ−ＰＵＦＡを保存することが可能になる。さらに、乳剤濃縮物の均質化は、消費者が消費する最終的な乳剤形態の均質化よりも小規模に実施できる。したがって、装置コストの低減が実現される。
【０１１３】
[00113]実施形態によっては、本発明の濃縮物は、固体または半固体に加えることができる。例えば、乳剤濃縮物は、固体または半固体の食品または飲料に添加でき、そうした食品または飲料としては、マヨネーズ、ホイップ済みクリーム、アイスクリーム、ヨーグルト、スムージー、ソース、果実濃縮物、果物のピューレ、ベビーフードなど、スペシャルティコーヒー（フラッペなど）、および茶（特にアイススペシャルティコーヒーおよびミルクを含んだ茶またはミルク製品（チャイティー（ｃｈａｉ  ｔｅａ）、タイアイスティー（チャーイェン（ｃｈａ−ｙｅｎ）など）といったもの、およびそれらの組合せがあるが、それらに限定されない。
【０１１４】
[00114]実施形態によっては、「キャリオーバー」添加剤（ソルビン酸カリウムなど）は、最終製品内に、「非官能性」と見なされるレベルで存在してもよい。例えば、８オンスの飲料で３２ｍｇのＤＨＡを提供する場合、キャリースルーレベル（ｃａｒｒｙ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｌｅｖｅｌ）である約１〜３ｐｐｍのソルビン酸カリウムは、「非官能性」と見なされる。食品の場合、キャリオーバー添加剤とは、所与の製品中に存在する物質であって、製品の製造に使用されてもその最終製品では技術的機能に役立たない１種または複数種の成分中にその添加剤が含まれていたという理由だけで存在している物質のことである。
【０１１５】
乳剤の調製方法
[00115]本発明の水中油型乳剤は、水性液相と不連続油相を混ぜて水中油型乳剤を生じさせるのに適した任意の方法で調製できる。実施形態によっては、乳化剤および水性相物質をゆっくり混ぜて安定した分散液を生じさせ、その後、酸化防止剤、任意選択の防腐剤、任意選択のｐＨ調整剤などを加える。次いで、油相の物質（例えば、ＰＵＦＡ、任意選択の味覚マスキング剤、酸化防止剤、任意選択の防腐剤など）をゆっくり加えながら、この均質な水性相混合物を激しく混合して、水中油型乳剤を生じさせる。あるいはまた、水性液、乳化剤、および油相成分を同時に混ぜ合わせて水中油型乳剤を形成させることもできる。
【０１１６】
[00116]金属キレート剤は、水中油型乳剤が形成される前、形成される間、及び／または形成された後に加えることができる。複数種の金属キレート剤を使用する場合、金属キレート剤は同時にすべてを加える必要はない。いろいろな金属キレート剤を別々の時間に加えることができる。例えば、あるものは水中油型乳剤を形成させる前に加えることができ、あるものは水中油型乳剤を形成させた後に加えることができる。
【０１１７】
[00117]順次に成分を加えることを含む方法では、水性液、乳化剤、および１種または複数種の任意選択の賦形剤を含む、実質的に均質な水性相組成物（例えば、分散液）を調製し、それと並行して油相成分（例えば、ＰＵＦＡおよび１種または複数種の任意選択の賦形剤）を混ぜ合わせて実質的に均質な油相混合物を生じさせる。次いで激しく混合しながら、混ぜ合わせた油相成分をゆっくり水性相組成物に加えて水中油型乳剤を生じさせる。
【０１１８】
[00118]実施形態によっては、乳化剤は、乳化を行う前に水性相と油相の両方に加える。
【０１１９】
[00119]実施形態によっては、水性液の一部、乳化剤、および不連続油相を含む乳剤濃縮物を調製し、次いで水溶液の残りの部分を乳剤濃縮物に加えて乳剤を形成させる。
【０１２０】
[00120]実施形態によっては、本発明の乳剤の製造方法は、
ａ）水と乳化剤とを混ぜ合わせて水性混合物を生じさせるステップと；
ｂ）混合しながら水性混合物にＰＵＦＡを加えて水中油型乳剤を生じさせるステップと；
ｃ）水中油型乳剤に１種または複数種の金属キレート剤および１種または複数種の酸化防止剤を加えるステップとを含み、
金属キレート剤は乳剤の約０．０２重量％〜約２０重量％の量だけ存在し、かつ酸化防止剤は乳剤の約２重量％〜約２０重量％の量だけ存在する。
【０１２１】
[00121]実施形態によっては、最初に形成させた水中油型乳剤は、ホモジナイザーに水中油型乳剤を１回以上（例えば、１回、２回、３回、または４回以上）通して均質化して、最終的な水中油型乳剤を形成させる。例えば、乳剤は、１００００ｐｓｉ（全体）／５００ｐｓｉ（第２段階）の圧力でホモジナイザーを５回通過させることができる。別の例では、均質化圧力は、２回の通過で、５０００ｐｓｉ（全体）／７５０ｐｓｉ（第２段階）にすることができる。通過させるときの圧力および通過回数は、ホモジナイザーの規模およびタイプ、ならびに所望の最終粒径によって決まる。
【０１２２】
[00122]実施形態によっては、高粘度の調製物または物質には、特に調製物を加熱および冷却するために、スクレープドサーフェイス熱交換器（ＳＳＨＥ）使用し、また所望される場合には、例えば、ソルビン酸カリウムを含む製品には低温殺菌のために使用する。実施形態によっては、ホモジナイザーをスクレープドサーフェイス交換器に接続する。
【０１２３】
[00123]実施形態によっては、混合は窒素雰囲気（ｎｉｔｒｏｇｅｎ  ｂｌａｎｋｅｔｉｎｇ）下で行う。
【０１２４】
[00124]実施形態によっては、例えば、製造の規模を拡大する場合、乳化剤の量を減らして過剰の泡形成または他の望ましくない特性を避けるのが望ましいであろう。例えば、２０％の変性アカシアゴムを含んでいた乳剤は、１５％の変性アカシアゴムを含むように変更されるであろう。また、乳剤を製造する場合、液体の乳化剤、例えば、液体変性アカシアゴム、特に粘度が２５℃において１／ｓで７０００ｍＰａｓ以下である液体変性アカシアゴムを使用するのが望ましいであろう。
【０１２５】
[00125]図１は、本発明の乳剤を製造するための１つの方法を例示する工程図である。図１に示すように、変性アカシアゴムを、インライン（Ｉｎ−ｌｉｎｅ）Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎミキサー中で、ソルビン酸カリウム、アスコルビン酸ナトリウムおよび水中に８５％のクエン酸を含むものと混合して、水溶性成分を分散させた。混合は、変性アカシアゴムを分散させるのに十分な速度であるべきである。窒素雰囲気下において少なくとも４時間（または一晩）、成分が水中で水和するようにさせる。水和させた後、窒素雰囲気下でゆっくり混合しながら、クエン酸を加えてｐＨを３．８〜３．９に調節する。トコフェロール（Ｍａｒｔｅｋ  Ｍａｓｋｅｒ（商標））および他の油溶性成分を加え、窒素雰囲気および高剪断条件下で５分間、２６５０ｒｐｍで混合する。その後ＤＨＡ  Ｓ油を加え、調製物を窒素雰囲気において２６５０ｒｐｍで５分間混合した。次いでｐＨをｐＨ４．０に調節し、第１段階の圧力を３３０バール、第２段階の圧力を５０バールにして２回通して調製物を均質化した。容器に入れる前に、乳剤を４℃で窒素雰囲気下において保存した。その後、乳剤をエポキシ−フェノールのライナーの付いたアルミニウム瓶に窒素フラッシュ包装（ｎｉｔｒｏｇｅｎ  ｆｌａｓｈ  ｐａｃｋａｇｅｄ）した。
【０１２６】
[00126]本発明を一般的に述べてきたが、本明細書に記載の実施例を参照することにより、更なる理解を得ることができる。これらの実施例は、単なる説明の目的のために示すのであり、限定することを意図するものではない。
【０１２７】
［実施例］
［実施例１］
[00127]本発明の水中油型乳剤を以下のようにして調製した。水の量を量って混合タンクに加えた。あらかじめ計量したソルビン酸カリウム、アスコルビン酸ナトリウム、および配合物中に約７０％のクエン酸を、混合しながら加えた。変性アカシアゴムを間断なく混合タンクに加えた。その後、変性アカシアゴムが完全に分散して塊が見えなくなるまで、成分を高剪断ミキサー内において２６５０ｒｐｍで混合した。次いでミキサーの速度を低速（１００ｒｐｍ）に設定し、少なくとも４時間混合した。次いで残りの量のクエン酸を加えた。インライン高剪断ミキサーを用いて、あらかじめ計量したｔｏｃｏｂｌｅｎｄ  Ｌ７０、ＭａｒｔｅｋＭａｓｋｅｒ、およびローズマリー抽出物を別々にゴム溶液にゆっくり加えた。最後に、油がゴム溶液に十分混ざるまで、混合しながらＤＨＡ  Ｓ油を加えた（約２分間）。次いで、窒素雰囲気下において約２６５０ｒｐｍで乳剤を約５分間混合した。方法全体を窒素雰囲気下で行った。
【０１２８】
[00128]次いで容器に入れる前に、粗い乳剤を３３０バール（第一段階）／５０バール（第２段階）の圧力で２回均質化した。均質化後の乳剤の出口温度は約２４℃であった。水を用いてホモジナイザーの出口の乳剤を冷却した。その後乳剤を瓶に詰め、窒素で洗浄し、冷蔵した。
【０１２９】
【表１】
2014516249.tif 000003
【０１３０】
[00129]乳剤の粘度は、１ｒｐｍおよび２ｒｐｍでは、７００から１２００ｍＰａｓの間であった。乳剤の粘度は、Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＤＶＩＩ＋粘度計（Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｉｎｃ．，Ｍｉｄｄｌｅｂｏｒｏ，ＭＡ）を使用し、同心円筒を有する小さなサンプルアダプタ−（ｓａｍｐｌｅ  ａｄａｐｔｅｒ）およびＳＣ４−１８のスピンドルを用いて測定した。測定は２５℃で行った。
【０１３１】
[00130]乳剤のｐＨは、３．８から４．２の間であった。乳剤のｐＨは、Ｏｒｉｏｎ  ２  Ｓｔａｒ  ｂｅｎｃｈ  ｔｏｐ  ｐＨ  ｍｅｔｅｒ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｉｎｃ．，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）を用いて測定した。
【０１３２】
[00131]粒径分布は０．１３から０．２５μｍの間であった。粒径分布は、Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ  ｈｙｄｒｏ２０００Ｓ（Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｉｎｃ．，Ｗｅｓｔｂｏｒｏｕｇｈ，ＭＡ）を用いて測定した。
【０１３３】
［実施例２］
９種類の乳剤配合物を以下のように製造した。
【０１３４】
【表２】
2014516249.tif 000004
【０１３５】
【表３】
2014516249.tif 000005
【０１３６】
［実施例３  官能検査の比較］
[00132]乳剤配合物５（ＥＭ−５）および乳剤配合物７（ＥＭ−７）（以下に示すように、実施例２におけるようにして作り、冷蔵状態（４℃〜８℃の間）で５または６か月間保存したもの）を用いて官能検査の比較を行った。乳剤配合物５は、約４．６４％のクエン酸を含んでいた。クエン酸の％は、変性アカシアゴムのロットに応じて４〜６％の範囲である。この２種類の乳剤は、Ｗｅｌｃｈの赤ブドウジュースおよびＴｒｏｐｉｃａｎａのオレンジジュースで官能検査を行った。乳剤を３４ｍｇ／１回分でジュースに添加し、２００°Ｆで１５秒間低温殺菌し、１８７°ＦでＨＤＰＥ瓶にホット充填（ｈｏｔ  ｆｉｌｌｅｄ）した。瓶にキャップをし、逆さにし、氷水で冷却する前に１分間放置した。ジュースは、１５日後の試飲（ｓｅｎｓｏｒｙ  ｔａｓｔｉｎｇ）まで冷蔵保存した。対照は、ＤＨＡ  Ｓ油の代わりにカノーラ油を用いた乳剤配合物５使用して作った、カノーラ油乳剤であった。官能試験は、０〜６の７ポイントスケール（７  ｐｏｉｎｔ  ｓｃａｌｅ）（０は差がないこと、６は非常に大きな差があることを示す）を用いて実施した。
【０１３７】
【表４】
2014516249.tif 000006
【０１３８】
[00133]表４に示すように、配合物ＥＭ−７より多くの量のアスコルビン酸ナトリウムおよびクエン酸を含み、配合物ＥＭ−７より少ない量のＴｏｃｏｂｌｅｎｄ（商標）Ｌ７０を含んでいる配合物ＥＭ−５は、ブドウジュースおよびオレンジジュースのいずれかと混ぜ合わせた場合は５か月目に、ブドウジュースと混ぜ合わせた場合は６か月目に、好ましい官能特性を有していた。配合物ＥＭ−５よりも多くの量のＴｏｃｏｂｌｅｎｄ（商標）Ｌ７０を含み、配合物ＥＭ−５よりも少ない量のアスコルビン酸ナトリウムおよびクエン酸を含んでいる配合物ＥＭ−７は、オレンジジュースの場合に５か月目に好ましい官能特性を有していた。
【０１３９】
［結論］
[00134]本明細書に記載した様々な実施形態または選択可能な要素はすべて、任意の変形形態およびすべての変形形態と組み合わせることができる。本発明を、その一部の実施態様を参照しながら具体的に示し説明してきたが、それらは単に例として示したのであって、限定するものではないこと、また本発明の精神および範囲から逸脱することなく、形態および詳細の種々の変更をそれに対して行いうることは当業者なら理解するであろう。したがって、本発明の幅と範囲は、上述の例示的実施形態のいずれによっても限定されるものではなく、以下の請求項およびそれらに相当するものにしたがってのみ定義されるべきである。
【０１４０】
[00135]本明細書に引用した文献はすべて、定期刊行物の記事および要約、公開されたかまたは対応する米国特許出願または外国特許出願、発行済みまたは外国の特許、または他の任意の文献を含め、それぞれその全体を（引用文献に示されているすべてのデータ、表、図、および本文を含め）本明細書に援用する。
【図１】
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【国際調査報告】
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