(57)【要約】  本発明は一般に、特定のプロバイオティクスの向上した活性に関する。増大した効率は、プロバイオティクスに特異的なエネルギー源を間接的に供給する特定の基質成分の使用によって得られる。これらの基質成分は、１，２−プロパンジオール生成を刺激するように特異的に設計されている。基質は、ラムノース、フコース、高い割合のラムノースを有するペクチン、及び高い割合のフコースを有するフコイダンとして例示される。
2014513058.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
個体の胃腸管中のｐｄｕ−オペロンを有するプロバイオティクス菌の活性を向上させるための方法であって、物質を該個体に投与することを含み、該物質が該個体の胃腸管中で１，２−プロパンジオールに代謝される能力を有する、上記方法。
【請求項２】
前記物質が（ａ）ラムノース、（ｂ）フコース、（ｃ）高い割合のラムノースを有するペクチン、（ｄ）ペクチンと組み合わせたラムノース、（ｅ）ペクチンと組み合わせたフコース、（ｆ）高い割合のフコースを有するフコイダン、又は（ｇ）ラムノース、フコース及びペクチンの組合せを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
物質を、ｐｄｕオペロンを有する細菌と同時に投与する、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
ｐｄｕ−オペロンを有する細菌がラクトバチルス・ロイテリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｌｕｓ  ｒｅｕｔｅｒｉ）を含む、請求項１から３までのいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
物質を、０．２５〜２５ｇ、好ましくは１〜２ｇの１日量で個体に投与する、請求項１から４までのいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
ガラクトオリゴ糖又はガラクトースを含む他の糖を同時に投与することをさらに含む、請求項１から５までのいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
個体の胃腸管中のｐｄｕ−オペロンを有するプロバイオティクス菌の活性の向上又は増殖の増大において使用するための物質であって、該個体の胃腸管中で１，２−プロパンジオールに代謝される能力を有するデオキシ糖を含む、上記物質。
【請求項８】
（ａ）ラムノース、（ｂ）フコース、（ｃ）高い割合のラムノースを有するペクチン、（ｄ）ペクチンと組み合わせたラムノース、（ｅ）ペクチンと組み合わせたフコース、（ｆ）高い割合のフコースを有するフコイダン、又は（ｇ）ラムノース、フコース及びペクチンの組合せを含む、請求項７に記載の物質。
【請求項９】
ｐｄｕ−オペロンを有する細菌がラクトバチルス・ロイテリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｌｕｓ  ｒｅｕｔｅｒｉ）である、請求項７又は８に記載の物質。
【請求項１０】
０．２５〜２５ｇ、好ましくは１〜２ｇの１日量で個体に投与される、請求項７から９までのいずれか一項に記載の物質。
【請求項１１】
ガラクトオリゴ糖又はガラクトースを含む他の糖と組み合わせて使用するための、請求項７から１０までのいずれか一項に記載の物質。
【請求項１２】
ｐｄｕ−オペロンを有する細菌及びデオキシ糖を含む物質を含む組成物であって、該デオキシ糖が個体の胃腸管中で１，２−プロパンジオールに代謝される能力を有する、上記組成物。
【請求項１３】
（ａ）ラムノース、（ｂ）フコース、（ｃ）高い割合のラムノースを有するペクチン、（ｄ）ペクチンと組み合わせたラムノース、（ｅ）ペクチンと組み合わせたフコース、（ｆ）高い割合のフコースを有するフコイダン、又は（ｇ）ラムノース、フコース及びペクチンの組合せ、
と一緒にｐｄｕ−オペロンを有する細菌を含む、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
ガラクトオリゴ糖又はガラクトースを含む他の糖をさらに含む、請求項１２又は１３に記載の組成物。
【請求項１５】
ｐｄｕ−オペロンを有する細菌がラクトバチルス・ロイテリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｌｕｓ  ｒｅｕｔｅｒｉ）である、請求項１２から１４までのいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１６】
物質が、例えば０．２５〜２５ｇ、好ましくは１〜２ｇの１日量をもたらす量で存在する、請求項１２から１５までのいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１７】
個体の胃腸管中のｐｄｕ−オペロンを有するプロバイオティクス菌の活性の向上又は増殖の増大において使用するための、請求項１２から１６までのいずれか一項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は一般に、哺乳動物における特定のプロバイオティクスの活性の向上に関する。さらに本発明は、基質成分及び特定のプロバイオティクスを含む調製物に関するものであり、基質成分は前記プロバイオティクスの効率を向上させるように特異的に設計されている。基質成分を選択して、大部分のラクトバチルス・ロイテリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｅｕｔｅｒｉ）株が、エネルギー源として及び／又は外部電子受容体として独自に利用することができる１，２−プロパンジオールを生成する。
【背景技術】
【０００２】
国際連合食糧農業機関は、プロバイオティクスを「適量で投与すると宿主に健康上の利点を与える生きた微生物」と定義している。現在、プロバイオティクスとしていくつもの異なる細菌、例えばラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）及びビフィドバクテリウム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）株などの乳酸菌が使用されている。
【０００３】
プロバイオティクスの有効性は株特異的であり、それぞれの株は異なる機構によって宿主の健康に寄与することができる。様々なプロバイオティクスが、病原体の増殖を阻止又は阻害すること、病原体による病原性因子の生成を抑制すること、炎症促進又は抗炎症的に免疫応答を調節すること、及びいくつもの他の方法で宿主に影響を与えることができる。
【０００４】
プレバイオティクスは、「宿主の健康状態を改善することができる結腸中の１つ、又は限られた数の細菌の増殖及び／又は活性を選択的に刺激することにより、宿主に有益に影響を与える消化されない食品成分」と定義される。プレバイオティクスの標的は通常ビフィドバクテリウム及びラクトバチルスであるが、プレバイオティクスはしばしば選択的ではなく、したがって、有益な属又はプロバイオティクス株のみの刺激は、実施するのが困難であり得る。特定のプロバイオティクスに選択的であるプレバイオティクスを発見することは難しいので、本発明者らは、エネルギー収率を増大するエネルギー源及び／又は外部電子受容体を特定のプロバイオティクスに間接的に供給する特異的基質成分（ＳＳＣ）の使用法を発見している。
【０００５】
ラクトバチルス・ロイテリはヘテロ型発酵乳酸菌であり、ヒト及び他の動物の胃腸管において頻繁に見られる。ラクトバチルス・ロイテリはヒト胃腸管の固有生物であると考えられ、例えば胃体、胃洞、十二指腸、及び回腸の粘膜上に存在する。例えば、米国特許第５，４３９，６７８号、同第５，４５８，８７５号、同第５，５３４，２５３号、同第５，８３７，２３８号、及び同第５，８４９，２８９号を参照。ラクトバチルス・ロイテリ細胞がグリセロールの存在下において嫌気性条件下で増殖するとき、それらはロイテリン（β−ヒドロキシプロピオンアルデヒド）として知られる抗菌性物質を生成する。ロイテリンを生成する能力はプロパンジオール利用（ｐｄｕ）オペロンによるものである。ｐｄｕオペロンは、１，２−プロパンジオール（ＰＤ）での増殖も可能にする代謝機構である。このｐｄｕオペロンは、細菌のヒトでのコロニー形成及び全能力を利用する時の、ラクトバチルス・ロイテリの非常に重要な特徴である。この機構は他のラクトバチルス間では稀であり、したがってｐｄｕ−機構を有していない細菌は１，２−ＰＤで増殖することができず、それらは電子受容体として１，２−ＰＤを使用することもできない。
【０００６】
様々なラクトバチルス・ロイテリ株が、腸にコロニー形成する、下痢治療薬として作用する、胃腸管運動を調節する、細菌病原体の阻害剤として機能する、胃腸管粘膜を免疫学的に調節する、胃中で抗炎症剤として機能するなどの能力を有する。
【０００７】
特許出願ＷＯ２００９／１５１３９１では、ラクトバチルス・ロイテリのｐｄｕ機構は、細菌を凍結乾燥する前に１，２−ＰＤ又はグリセロールで刺激される。この製造設計では、ラクトバチルス・ロイテリの凍結乾燥されたｐｄｕ機構は、ロイテリンを生成及び保存する能力で刺激される。
【０００８】
Ｅｍｍａ  Ａｒｓｋｏｌｄ  ら、「解糖系の二経路を含有するラクトバチルス・ロイテリＡＴＣＣ５５７３０においてホスホケトラーゼ経路は優位を占める（Ｐｈｏｓｐｈｏｋｅｔｏｌａｓｅ  Ｐａｔｈｗａｙ  Ｄｏｍｉｎａｔｅｓ  ｉｎ  Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｅｕｔｅｒｉ  ＡＴＣＣ５５７３０  Ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  Ｄｕａｌ  Ｐａｔｈｗａｙｓ  ｆｏｒ  Ｇｌｙｃｏｌｙｓｉｓ）」（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ、２００８年１月、２０６〜２１２頁）は、グルコースでのラクトバチルス・ロイテリの増殖能は、外部電子受容体としてフルクトースを加えることにより、改善することができることを記載する。しかしながら、この論文中では、ｐｄｕ−機構を有する細菌によってのみ利用可能である１，２−ＰＤを、特定のプロバイオティクスに間接的に供給するそれらの能力に基づいた、特定のＳＳＣの選択法は全く教示されていない。
【０００９】
プロバイオティクス菌の経口投与に関する一般的な問題は、それらがその効果を発揮する胃腸管部位における、プロバイオティクス菌の不十分な量及び／又は活性である。これは結果として、プロバイオティクス菌の用量を増大せざるを得ない及び／又はより頻繁な投与が必要とされることになる可能性があり、活性の消失をもたらす可能性もある。これは不必要なコスト、望ましくない摂取頻度及び／又は健康上の利点の減少につながる。本発明では、例えばラクトバチルス・ロイテリの局所量及び／又は代謝活性を増大させ、例えばプロバイオティクスの用量を減らす可能性をもたらし、さらに部位特異的な健康上の利点が考えられる。
【００１０】
１，２−プロパンジオール（１，２−ＰＤ）は、他の共存する微生物により局所で生成され得るエネルギー源であり、おそらく特定のプロバイオティクス種、例えばラクトバチルス・ロイテリにより他の糖と組み合わせて利用される。本発明の発明者らは、驚くべきことに、非常に選択的なＳＳＣを経口投与することにより、これらの共存する細菌を刺激して１，２−ＰＤを生成し、それによってラクトバチルス・ロイテリなどの１，２−ＰＤを利用する生物の活性を間接的に向上させることが可能であることを発見している。
【００１１】
ペクチンは植物細胞壁由来の多糖である。ホモガラクツロナン（ＨＧ）、キシロガラクツロナン（ＸＧＡ）、アピオガラクツロナン、ラムノガラクツロナンＩ（ＲＧＩ）、及びラムノガラクツロナンＩＩ（ＲＧＩＩ）を含めた、様々なペクチン性多糖を細胞壁において検出することができる。ＨＧ、ＸＧＡ、ＲＧＩ及びＲＧＩＩの間の割合は様々であるが、典型的にはＨＧがペクチンの約６５％を構成する最も多量の多糖であり、一方ＲＧＩは２０％〜３５％を構成する。ＸＧＡ及びＲＧＩＩは微量成分であり、それぞれが１０％未満を構成する。異なるペクチン性多糖は別個の分子ではないが共有結合しているドメイン（複数）である。Ｌ−ラムノースはペクチン構造体ＲＧＩ及びＲＧＩＩ中の一成分として見られる。Ｌ−フコースもＲＧＩＩ構造体中の一成分として見られる。Ｌ−ラムノース又はＬ−フコースを転換することができるＧＩ管中に見られる細菌は、例えば大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）を含めたバクテロイデス属（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）及びエンテロバクター属（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａ）に属する。
【００１２】
ペクチンはヒト体内での消化に耐性があるが、糖に分解され、次いで小腸及び結腸中で細菌により、例えば１，２−プロパンジオールにさらに代謝される。ペクチンは小腸中及び結腸中で細菌増殖を刺激する。下痢の治療薬として使用されるペクチンは改善された腸環境と関係があり、抗癌性を有することも知られている。修飾型シトラスペクチン（ＭＣＰ）は低複合性分子に分解されているシトラスペクチンであり、細胞の成長及び増殖をサポートするために使用される。
【００１３】
フコイダンは、モズク、コンブ、リム、モウイ、ヒバマタ、ワカメ及びヒジキなどの様々な種の褐藻及び褐海藻において主に見られる硫酸化多糖体であり、フコイダンの変異型も、ナマコを含めた動物種において発見されている。ガラクトオリゴ糖（ＧＯＳ）は一般に、末端グルコース単位との連続トランスガラクトシル化反応によって生じる一連のガラクトース単位を含み、プレバイオティクスとして分類される。
【００１４】
Ｌｙｎｃｈ  ＭＢ  ら、「ブタにおける栄養素消化率、窒素利用性、腸内マイクロフローラ及び揮発性脂肪酸濃度に対する食用ラミナリア由来ラミナリン及びフコイダンの影響（Ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｄｉｅｔａｒｙ  Ｌａｍｉｎａｒｉａ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｌａｍｉｎａｒｉｎ  ａｎｄ  ｆｕｃｏｉｄａｎ  ｏｎ  ｎｕｔｒｉｅｎｔ  ｄｉｇｅｓｔａｂｌｉｌｉｔｙ、ｎｉｔｒｏｇｅｎ  ｕｔｉｌｉｓａｔｉｏｎ、ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｍｉｃｒｏｆｌｏｒａ  ａｎｄ  ｖｏｌａｔｉｌｅ  ｆａｔｔｙ  ａｃｉｄ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｐｉｇｓ）」（Ｊ  Ｓｃｉ  Ｆｏｏｄ  Ａｇｒｉｃ．２０１０年２月；９０（３）：４３０〜７）は、フコイダンを含有する食物を与えたブタは、非フコイダン食と比較して、近位結腸及び遠位結腸中に多量のラクトバチルス亜種を有することを発見している。したがって、フコイダンは、ブタにおける腸管の健康を改善するための食用手段となり得ることが示唆される。フコイダン食が原因の大便中の多量のラクトバチルス集団もＪ．Ｖ．Ｏ’Ｄｏｈｅｒｔｙ  らによって発見されている。「行動及び選択した大便の微小生物集団に対する小児ブタ用食用ラミナリン及びフコイダン食の影響（Ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｄｉｅｔａｒｙ  ｌａｍｉｎａｒｉｎ  ａｎｄ  ｆｕｃｏｉｄａｎ  ｄｉｅｔ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｗｅａｎｌｉｎｇ  ｐｉｇｌｅｔ  ｏｎ  ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  ａｎｄ  ｓｅｌｅｃｔｅｄ  ｆａｅｃａｌ  ｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ）」（Ｌｉｖｅｓｔｏｃｋ  ｓｃｉｅｎｃｅ  ２０１０年９月）。
【００１５】
しかしながら、例えば、Ｌ−ラムノース及び／又はＬ−フコースの量に基づき、ペクチン及びフコイダン、又はそれらの分画を選択して、細菌発酵により１，２−ＰＤを生成すること、及び高いデオキシ糖含有量、特に高いＬ−ラムノース及び／又はＬ−フコース含有量を有するような組成物を使用して多量の１，２−ＰＤをもたらし、それによって、大部分の他の微生物がｐｄｕ機構の欠如のため利用することができないエネルギー源及び／又は外部電子受容体を特定の微小生物、例えばラクトバチルス・ロイテリに間接的に供給することは、以前には知られていなかった。
【００１６】
特許出願ＷＯ２０１０／１１７２７４は、Ｃ５及び／又はＣ６短鎖脂肪酸（ＳＣＦＡ）の検出可能な増大を誘導することができる炭水化物に関する。ＳＣＦＡは、治療対象の胃腸管の健康状態に対してプラスの影響がある。使用する炭水化物はペクチンを含む。微量のラムノースを含み得るペクチンを選択する場合でさえ、ｐｄｕ機構を有するプロバイオティクスに特異的エネルギー源及び／又は外部電子受容体を間接的に供給し、それによってそれらの活性を向上させるための、Ｌ−ラムノース又はＬ−フコースが多量の特異的ペクチンの選択法及び使用法を開示していない。
【００１７】
米国特許第７，１０１，５６５号は、プレバイオティクスとプロバイオティクスを含む組成物に関する。プレバイオティクスは、ペクチン又はペクチン性多糖を含み得る。しかしながら、ｐｄｕ機構を有するプロバイオティクスに有益な、胃腸管中で多量の１，２−ＰＤをもたらす、特定のペクチンの選択法、又はペクチン及びＬ−ラムノース又はＬ−フコースとの組み合わせの使用法は、この発明中では開示されていない。
【００１８】
米国特許第５，９０２，５７８号中では、ロタウイルスなどの感染因子と関係がある下痢、又はラクトバチルスの使用による抗生物質療法と関係がある下痢の予防法に関する発明が開示されている。しかしながらこの発明中では、より良い効率に関してラクトバチルスは追加的ＳＳＣと関係がない。
【００１９】
プロバイオティクス、例えばラクトバチルス・ロイテリと一緒にＳＳＣを投与して、特有エネルギー源及び／又は外部電子受容体をこのようなプロバイオティクスに間接的に供給することによる、特定のプロバイオティクスの健康増進効果の向上法を、これまでに開示した人はいない。多量のＬ−ラムノース及び／又はＬ−フコースを有するＳＳＣの経口投与は１，２−プロパンジオールの供給を確実にし、したがって特定のプレバイオティクスにエネルギー源及び／又は外部電子受容体を間接的に供給する。これは局所で健康増進微生物、例えばラクトバチルス・ロイテリの量を増大させ、より良い効率をもたらし、部位特異的効果を実現する。
【００２０】
例えばプロバイオティクスと一緒にペクチンを使用することは以前から知られていたが、特異的エネルギー源及び／又は特異的外部電子受容体を特定のプロバイオティクスに間接的に供給するための、１，２−ＰＤを形成するそれらの能力に基づくＳＳＣの選択法は、以前には知られていなかった。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００２１】
本発明は、特定のプロバイオティクスの活性を向上させる方法、並びに基質成分及び場合によってはプロバイオティクスを含む製品の製造及び使用を開示する。本発明の製品を使用して、例えば哺乳動物においてラクトバチルス・ロイテリの活性を向上させることが可能である。この製品は宿主健康状態の改善に使用することができる。使用するプロバイオティクス株に応じて、製品を使用し、例えば胃腸管の健康状態を改善する、免疫関連の健康状態を改善する、下痢及び便秘を治療及び／又は予防する、便粘度を正常化する、胃腸管運動を改善する、感染性疾患を治療及び／又は予防する、炎症及び抗病原性効果を調節することができる。
【００２２】
プロバイオティクスの高い効率は、共存する微小生物を刺激して１，２−プロパンジオール（１，２−ＰＤ）を生成することにより得ることができる。共存する微小生物は、本明細書中に記載するように特定の特異的基質成分（ＳＳＣ）で刺激する。ＳＳＣは胃腸管中での１，２−ＰＤの存在を確実にし、１，２−ＰＤを特定の有益生物に間接的に供給する。
【００２３】
エネルギー源として及び／又は外部電子受容体のいずれかとして１，２−ＰＤを利用する能力はｐｄｕ−機構を有する細菌に特有であり、したがってＳＳＣの投与は特定のプロバイオティクスの活性のみを向上させる。
【００２４】
同時投与するプロバイオティクスの活性を向上させるために、プロバイオティクスと一緒にＳＳＣを投与することができる。ＳＳＣを単独で投与して、例えば以前に投与したプロバイオティクスの活性を増大させることも可能である。
【００２５】
単独で投与又はＳＳＣにより生成される１，２−ＰＤは、ガラクトオリゴ糖（ＧＯＳ）又は他のガラクトース含有糖とさらに組み合わせて、微生物にさらにより良いエネルギー源を与えることができる。
【００２６】
ヘテロ型発酵乳酸菌は、ホスホケトラーゼ経路（ＰＫＰ）を使用して、乳酸、エタノール及び二酸化炭素を生成する。ＰＫＰはエムデン−マイヤーホフ経路（ＥＭＰ）と比較して乏しいエネルギー収率を有する。この欠点は外部電子受容体を加えることにより相殺することができる。
【００２７】
本発明者らは、驚くべきことに、胃腸管中での１，２−プロパンジオールの存在を確実にすることによって、プロバイオティクスには同時に適切な外部電子受容体が供給され、したがってプロバイオティクスの活性が向上することを発見している。
【００２８】
本発明のＳＳＣは、ラクトバチルス・ロイテリなどのヘテロ型発酵乳酸菌の増殖を選択的に増大させる。それらは活性の向上を可能にするのに適した電子受容体を細菌に与えるからである。
【００２９】
ラクトバチルス・ロイテリは特定の環境中での増殖に適した電子受容体に依存し、本発明者らは、驚くべきことに、１，２−プロパンジオールは適切な電子受容体として働き、ＳＳＣの投与により供給することができることを発見している。
【００３０】
本発明の一態様によれば、個体の胃腸管中のｐｄｕ−オペロンを有するプロバイオティクス菌の活性を向上させるための方法であって、物質を前記個体に投与することを含み、物質が前記個体の胃腸管中で１，２−プロパンジオールに代謝される能力を有する方法が提供される。
【００３１】
方法の一実施形態では、物質はデオキシ糖を含み、それは前記個体の胃腸管中で１，２−プロパンジオールに代謝される能力を有する。一実施形態では、デオキシ糖はラムノース又はフコースである。
【００３２】
方法の一実施形態では、物質は（ａ）ラムノース、（ｂ）フコース、（ｃ）高い割合のラムノースを有するペクチン、（ｄ）ペクチンと組み合わせたラムノース、（ｅ）ペクチンと組み合わせたフコース、（ｆ）高い割合のフコースを有するフコイダン、又は（ｇ）ラムノース、フコース及びペクチンの組合せを含む。
【００３３】
本発明の一実施形態では、高い割合のラムノースを有するペクチンは、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４又は１５％のラムノースなどの、５〜１５％のラムノースを含むものとして定義する。本発明の一実施形態では、高い割合のフコースを有するフコイダンは、１５％を超えるフコースを含むものとして定義する。
【００３４】
方法の一実施形態では、物質はｐｄｕオペロンを有する細菌と同時に投与する。
【００３５】
本発明の好ましい実施形態では、物質は個体に経口投与する。
【００３６】
方法の別の好ましい実施形態では、ｐｄｕ−オペロンを有する細菌はラクトバチルス・ロイテリを含む。
【００３７】
方法の一実施形態では、物質は０．２５〜２５ｇ、好ましくは１〜２ｇの１日量で個体に投与する。
【００３８】
本発明の一実施形態では、方法は、ガラクトオリゴ糖又はガラクトースを含む他の糖を同時に投与することをさらに含む。
【００３９】
本発明の第二の態様によれば、個体の胃腸管中のｐｄｕ−オペロンを有するプロバイオティクス菌の活性の向上又は増殖の増大において使用するための物質であって、前記個体の胃腸管中で１，２−プロパンジオールに代謝される能力を有するデオキシ糖を含む物質が提供される。
【００４０】
一実施形態では、デオキシ糖はラムノース又はフコースである。
【００４１】
本発明の一実施形態では、物質は（ａ）ラムノース、（ｂ）フコース、（ｃ）高い割合のラムノースを有するペクチン、（ｄ）ペクチンと組み合わせたラムノース、（ｅ）ペクチンと組み合わせたフコース、（ｆ）高い割合のフコースを有するフコイダン、又は（ｇ）ラムノース、フコース及びペクチンの組合せを含む。
【００４２】
本発明の一実施形態では、高い割合のラムノースを有するペクチンは、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４又は１５％のラムノースなどの、５〜１５％のラムノースを含むものとして定義する。本発明の一実施形態では、高い割合のフコースを有するフコイダンは、１５％を超えるフコースを含むものとして定義する。
【００４３】
物質に関する好ましい一実施形態では、ｐｄｕ−オペロンを有する細菌はラクトバチルス・ロイテリである。
【００４４】
本発明の一実施形態では、物質は０．２５〜２５ｇ、好ましくは１〜２ｇの１日量で個体に投与する。
【００４５】
本発明の一実施形態では、物質は、ガラクトオリゴ糖又はガラクトースを含む他の糖と組み合わせて使用するためのものである。
【００４６】
本発明の第三の態様によれば、（ｉ）ｐｄｕ−オペロンを有する細菌及び（ｉｉ）デオキシ糖を含む物質を含む組成物であって、デオキシ糖が個体の胃腸管中で１，２−プロパンジオールに代謝される能力を有する組成物が提供される。
【００４７】
一実施形態では、組成物は、（ａ）ラムノース、（ｂ）フコース、（ｃ）高い割合のラムノースを有するペクチン、（ｄ）ペクチンと組み合わせたラムノース、（ｅ）ペクチンと組み合わせたフコース、（ｆ）高い割合のフコースを有するフコイダン、又は（ｇ）ラムノース、フコース及びペクチンの組合せと組み合わせてｐｄｕ−オペロンを有する細菌を含む。
【００４８】
本発明の一実施形態では、高い割合のラムノースを有するペクチンは、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４又は１５％のラムノースなどの、５〜１５％のラムノースを含むものとして定義する。本発明の一実施形態では、高い割合のフコースを有するフコイダンは、１５％を超えるフコースを含むものとして定義する。
【００４９】
別の実施形態では、組成物は、ガラクトオリゴ糖又はガラクトースを含む他の糖をさらに含む。
【００５０】
組成物に関する一実施形態では、ｐｄｕ−オペロンを有する細菌はラクトバチルス・ロイテリである。
【００５１】
組成物の一実施形態では、物質は０．２５〜２５ｇ、好ましくは１〜２ｇの１日量をもたらす量などの量で存在する。
【００５２】
本発明の別の実施形態によれば、前に記載した組成物は、個体の胃腸管中のｐｄｕ−オペロンを有するプロバイオティクス菌の活性の向上又は増殖の増大において使用するためのものである。
【図面の簡単な説明】
【００５３】
【図１】１，２−ＰＤ、ガラクトース及びこれらの組合せを加えた（グルコース及びクエン酸塩を含まない）修飾型ＭＲＳにおけるラクトバチルス・ロイテリＤＳＭ１７９３８の増殖を示すグラフ図である。
【発明を実施するための形態】
【００５４】
特定のプロバイオティクス、特に例えばラクトバチルス・ロイテリのプロパンジオール利用（ｐｄｕ）機構は、エネルギー源としての１，２−プロパンジオール（１，２−ＰＤ）での増殖を可能にし、外部電子受容体として１，２−ＰＤを使用する能力を可能にする。
【００５５】
本発明の発明者らは、驚くべきことに、特定の特異的基質成分（ＳＳＣ）を使用して、エネルギー源として又は外部電子受容体として利用することができる１，２−ＰＤを、特異的なプロバイオティクス生物に間接的に供給することにより、特定のプロバイオティクスの活性を向上させる方法を発見している。
【００５６】
ＳＳＣは１つの物質である。本発明の一実施形態によれば、この物質は基質である。一実施形態では、この物質は一成分のみからなる。別の実施形態では、この物質は２つ以上の成分を含む。
【００５７】
これらの注意深く選択したＳＳＣの経口投与は共存する微生物を刺激して１，２−ＰＤを生成し、それによって、例えばラクトバチルス・ロイテリなどのｐｄｕ−機構を有する特定の微生物のエネルギー源として又は外部電子受容体として働くことができる１，２−ＰＤが局所で生成される。ＳＳＣは単独で又はプロバイオティクスと一緒に投与することができる。
【００５８】
図１において見ることができるように、１，２−ＰＤの存在は特定の微生物に関する増殖状態を改善し、さらに本発明者らは、これはガラクトオリゴ糖（ＧＯＳ）又はガラクトースの存在下においてさらに向上し得ることを発見している。
【００５９】
本発明のＳＳＣは、エネルギー源として又は外部電子受容体として使用することができる１，２−ＰＤを特異的プロバイオティクスに間接的に供給する、それらの能力に関して選択する。本発明の発明者らは、多量のＬ−ラムノース又はＬ−フコースを含むＳＳＣは、特定のプロバイオティクスの活性を向上させるために使用するとき最も有効であることを発見している。したがって、本発明中で使用するＳＳＣは、Ｌ−ラムノース及びＬ−フコースの量に関して注意深く選択する。
【００６０】
ラムノガラクツロナンＩ及びＩＩなどのペクチン、好ましくは高い割合のＬ−ラムノースを含むペクチンの特定の分画を、ＳＳＣとして使用することができる。これらの好ましいペクチン分画は、５〜１５％のラムノースを含むことが好ましい。これらのペクチン分画は、分解すると、非分画ペクチンより多量のラムノースをもたらし、これらは本明細書中ではペクチン、通常ペクチン、又は正常ペクチンと呼ぶことができる。特定の１日量、例えば２ｇのこのような好ましいペクチン分画は、同じ１日量（２ｇ）の正常ペクチンと比較して、多量の１，２−ＰＤをしたがって生成する。特定の微小生物、例えばラクトバチルス・ロイテリに有利な同じ方法で間接的にＬ−ラムノース又はＬ−フコースと一緒に投与する場合、通常ペクチンを使用することもできる。この組合せは、ペクチン分解の結果として、１，２−ＰＤ以外に、他の基質、例えばガラクトース、アラビノース及びガラクツロン酸も特定のプロバイオティクスに供給する。本発明の発明者らは、図１中に見られるように、特定のペクチン成分、例えばガラクトース、アラビノース及びガラクツロン酸と組み合わせた１，２−ＰＤは、特定のプロバイオティクス、例えばラクトバチルス・ロイテリに関する１，２−ＰＤの利用を向上させる、相乗効果をもたらすことを示している。
【００６１】
フコイダン、好ましくは多量のＬ−フコースを含むフコイダンの特定の分画を、本発明においてＳＳＣとして使用することができ、これらのフコイダン分画は１５％を超えるフコースを含むことが好ましい。これらのフコイダン分画は、分解すると通常フコイダンより多量のフコースをもたらし、したがってより多量の１，２−ＰＤを生成する。
【００６２】
Ｌ−ラムノース又はＬ−フコース単独を、本発明のＳＳＣとして単独で使用することもできる。
【００６３】
他のＳＳＣ、例えばガム及び他の多糖は、それらがＬ−ラムノース、Ｌ−フコースなどを含有する場合、本発明に従い使用することができる。ガムにはカラヤガム及びアラビアガムがあるが、これらだけには限られない。さらに、ヒト母乳由来のいくつかのヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）を本発明中でＳＳＣとして使用することができる。
【００６４】
単独又はプロバイオティクス、例えばラクトバチルス・ロイテリと一緒のいずれかの本発明のＳＳＣの投与は、特定のプロバイオティクスに関するエネルギー源の供給を確実にし、及び／又はエネルギー収率を増大させる外部電子受容体の存在を確実にし、したがって前記プロバイオティクスの局所活性及び効率を向上させる。
【００６５】
他の実施形態において、及びこの効果をサポートするために、ＧＯＳ又はガラクトースを加えて、１，２−ＰＤを利用するラクトバチルス・ロイテリの能力を増大させることがさらに可能である。
【００６６】
目的とする適応症に応じて、腸にコロニー形成する、下痢治療薬として作用する、胃腸管運動を調節する、細菌病原体の阻害剤として機能する、胃腸管粘膜を免疫学的に調節する、胃中で抗炎症剤として機能するなどの異なる能力を有する、いくつかのラクトバチルス・ロイテリ株を、本明細書の本発明において使用することができる。
【００６７】
ペクチン、Ｌ−ラムノース及びＬ−フコースはヒト体内での消化に耐性があるが、糖に分解され、次いでヒト体内に見られヒトＧＩ管の特定の部位、例えば胃体、胃洞、十二指腸、及び小腸の粘膜上で利用できる共存する微小生物により、例えば１，２−プロパンジオールにさらに代謝される。したがって本明細書の本発明は、ヒトＧＩ管中で部位特異的な効果を助長することもできる。例えば、プロバイオティクスとして選択したラクトバチルス・ロイテリ株を使用することによって、回腸におけるこの株の抗炎症効果を向上させることが可能である。
【００６８】
例えば非常に乱れたマイクロフローラを有し、ＳＳＣを１，２−ＰＤに転換することができ通常見られる共存する微小生物の欠如があるヒトにおいて、ラクトバチルス・ロイテリの特定株と共に、本発明中で記載する特定のＳＳＣの系を使用するとき、このような共存する微小生物、例えばラクトバチルス・ラムノサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）をレシピエントに活発に供給し、投与するＳＳＣの有効性を確実にすることも、本明細書の本発明の別の可能性である。
【００６９】
本発明のＳＳＣを、単独で又は特定のプロバイオティクスと組み合わせて含む製品は、錠剤、カプセル、粉末サシェなどとして製剤化することが好ましい。製品は食品サプリメント、医薬品などであってよい。このような製品は、プロバイオティクス供給の量は特定株の望ましい効果をもたらすのに十分な量でなければならず、ＳＳＣによる向上効果も現在考えられている。このようなレベルは、１日当たり１０Ｅ＋４ＣＦＵ〜１０Ｅ＋１１ＣＦＵだけには限られないが典型的にはこの範囲であり、１０Ｅ＋６ＣＦＵ〜１０Ｅ＋９ＣＦＵのラクトバチルス・ロイテリの範囲にあることが好ましい。
【００７０】
ＳＳＣの量は、多量のＬ−ラムノース及び／又はＬ−フコースを有するペクチンを使用するとき、１日当たり０．２５〜２５グラム（ｇ）の範囲でなければならない。別のＬ−ラムノース及び／又はＬ−フコースと正常ペクチンの組合せを使用するとき、ＳＳＣの合計量は１日当たり０．２５〜２５ｇの範囲でなければならない。いずれの場合も、０．２５〜２５ｇの１日量は、例えば０．２５、０．５、１、１．５、２、５、１０、１５、２０又は２５グラム、好ましくは１〜２グラム、１、１．２５、１．５、１．７５又は２グラムなどであってよい。正常ペクチンと、Ｌ−ラムノース又はＬ−フコース、又はそれらの組合せのいずれか１つの間の比は、９５：５〜０：１００、ただし好ましくは８０：２０〜２０：８０、及びさらにより好ましくは７０：３０の範囲にしたほうがよい。
【００７１】
本明細書の本発明を使用する際の別の選択肢は、治療コストを低減するための一種のシャトルプログラム中のＳＳＣのみ供給する最初の供給の後に、一回又は複数回、ＳＳＣとプロバイオティクスを一緒に交互に供給することである。
【００７２】
使用するプロバイオティクスがｐｄｕ−機構を有することは、本発明に必要不可欠である。エネルギー源として及び／又は外部電子受容体として１，２−ＰＤを使用する能力は、必要不可欠だからである。したがって本発明の別の実施形態では、プロバイオティクス株の生成中に、向上した効率のためプロバイオティクスのｐｄｕ機構を１，２−ＰＤで刺激する。これは、細菌培養時の発酵ステップの開始時に、１，２−ＰＤ又はグリセロール及びおそらくコバルト又はビタミンＢ−１２を加えることによって行う（ビタミンＢ−１２とコバルトはロイテリンを生成するのに重要であるため）。この製造設計により、次のステップで使用する凍結乾燥細菌を、ｐｄｕ−機構をより迅速に活性化するよう適切に調製する。ｐｄｕ機構のこの向上した効率は、本発明の投与するＳＳＣの効率をしたがって向上させる。投与するＳＳＣの効率を向上させる別の方法は、それらをＧＯＳ又はガラクトースと組合せることであり、本発明者は、１，２−ＰＤとガラクトースの組合せには、ラクトバチルス・ロイテリの増殖に対する予想外の利点があることを示している。
【００７３】
当業者は多数の改変及び変更を容易に考えつくので、本発明を、示され、記載された構成そのものだけに限定することを希望するものではなく、したがって、全ての適当な改変及び均等もまた、添付の特許請求の範囲によって規定される本発明の範囲に含まれる。
【実施例】
【００７４】
（例１．ラクトバチルス・ロイテリ並びにペクチン、ラムノース及びガラクトオリゴ糖の組成物を含有するサシェの製造。）
組成物は以下のもので構成される：
ラクトバチルス・ロイテリＤＳＭ１７９３８：１０Ｅ＋８ＣＦＵ／サシェ
ペクチン（ＧＥＮＵ（登録商標）ペクチン（シトラス）型ＵＳＰ／２００、ＣＰ  Ｋｅｌｃｏ  Ｆｒａｎｃｅ  ＳＡＲＬ、フランス）：８４０ｍｇ／サシェ
Ｌ−ラムノース：（ラムノース一水和物Ｌ−（＋）、Ｋａｄｅｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ  ＧｍｂＨ、ハンブルグ、ドイツ）３６０ｍｇ／サシェ
ＧＯＳ１５（ＶＩＶＩＮＡＬ（登録商標）、ＦｒｉｅｓｌａｎｄＣａｍｐｉｎａ  Ｄｏｍｏ、オランダ）８００ｍｇ／サシェ
【００７５】
組成物は周囲温度で、ＬＡＦベンチ（Ｈｅｔｏ−Ｈｏｌｔｅｎ  Ａ／Ｓ、デンマークのＨｏｌｔｅｎ  Ｌａｍｉｎａｉｒ  Ｍｏｄｅｌ  Ｓ−２０１０  １．２）において、乾燥剤と共に（１０ｃｍ×１２ｃｍ、包装材料ＰＥＴ１２／ＰＥ／ＡＬＵ１２／ＰＥ／ＰＥ＋乾燥剤／ＡｌｃａｎのＰＥを使用）、当技術分野で知られているアルミホイルバッグに充填する。それぞれのバッグに、ラクトバチルス・ロイテリ、ペクチン、Ｌ−ラムノース及びガラクトオリゴ糖を含む２ｇの粉末を、Ｄｅｎｖｅｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  ＧｍｂＨ、ドイツのバランスＸＰ−６００を使用して加える。次いで充填したアルミホイルバッグを、Ｋｅｔｔｅｎｂａｕｍ  Ｆｏｌｉｅｎｓｃｈｗｅｉｓｓｔｅｃｈｎｉｋ  ＧｍｂＨ  ＆  Ｃｏ．ＫＧ、ドイツのフィルムシーリングデバイスモデルＦ４６０／２を用いてヒートシールする。
【００７６】
（例２．ラクトバチルス・ロイテリ及びラムノースの組成物を含有するサシェの製造。）
組成物は以下のもので構成される：
２ｇのＬ−ラムノース：（ラムノース一水和物Ｌ−（＋）、Ｋａｄｅｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ  ＧｍｂＨ、ハンブルグ、ドイツ）、サシェ当たり１０Ｅ＋８ＣＦＵのラクトバチルス・ロイテリＤＳＭ１７９３８を含有する
組成物は例１中と同様にアルミホイルバッグに充填する。
【００７７】
（例３．ラクトバチルス・ロイテリ、並びにガラクトオリゴ糖及びラムノースの組成物を含有するサシェの製造。）
組成物は以下のもので構成される：
１ｇのＧＯＳ１５（ＶＩＶＩＮＡＬ（登録商標）、ＦｒｉｅｓｌａｎｄＣａｍｐｉｎａ  Ｄｏｍｏ、オランダ）及び１ｇのＬ−ラムノース（ラムノース一水和物Ｌ−（＋）、Ｋａｄｅｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ  ＧｍｂＨ、ハンブルグ、ドイツ）、サシェ当たり１０Ｅ＋８ＣＦＵのラクトバチルス・ロイテリＤＳＭ１７９３８を含有する
組成物は例１中と同様にアルミホイルバッグに充填する。
【００７８】
（例４．初回刺激を受けたラクトバチルス・ロイテリ株の製造）
この実施例は、活性化ｐｄｕ−機構を有するラクトバチルス・ロイテリの凍結乾燥粉末の製造法を記載する。したがって例１〜３のサシェの製造時に、初回刺激を受けたラクトバチルス・ロイテリ株を使用することができる。
発酵培地の組成
デキストロース一水和物６０ｇ／ｌ
酵母エキスＫＡＶ２０ｇ／ｌ
（ブタ由来の）ペプトンタイプＰＳ２０ｇ／ｌ
クエン酸水素２アンモニウム５ｇ／ｌ
酢酸ナトリウム（×３Ｈ２Ｏ）４．７ｇ／ｌ
リン酸水素２カリウム２ｇ／ｌ
Ｔｗｅｅｎ８０  ０．５ｇ／ｌ
シリビオン（消泡剤）０．１４ｇ／ｌ
硫酸マグネシウム０．１０ｇ／ｌ
硫酸マンガン０．０３ｇ／ｌ
硫酸亜鉛七水和物０．０１ｇ／ｌ
水、十分量
遠心分離培地
（ブタ由来の）ペプトンＯ−２４Ｏｒｔｈａｎａ
凍結保護物質
（ウシ由来の）ラクトース３３％
（ウシ由来の）ゼラチン加水分解物２２％
グルタミン酸ナトリウム２２％
マルトデキストリン１１％
アスコルビン酸１１％
【００７９】
凍結乾燥ラクトバチルス・ロイテリ粉末の生成ステップ
１．２０ｍｌの発酵培地に、作業用細胞塊バイアルから０．６ｍｌの凍結乾燥ラクトバチルス・ロイテリ粉末を接種する。攪拌又はｐＨ制御なし、即ち静的状態で、１８〜２０時間３７℃において容器内で発酵を実施する。
２．２つの１リットルフラスコの発酵培地に、培地１リットル当たり（ステップ１からの）９ｍｌの細胞スラリーを接種する。攪拌又はｐＨ制御なし、即ち静的状態で、２０〜２２時間３７℃において発酵を実施する。
３．ステップ番号２からの２つの１リットル細胞スラリーを、６００リットルの発酵培地を含有する６００リットル容器に接種するため使用する。攪拌及びｐＨ制御しながら、１３時間３７℃において発酵を実施する。発酵開始時にｐＨは６．５である。ｐＨ制御は、ｐＨが５．４未満に低下したときに、２０％水酸化ナトリウム溶液を使用して開始する。ｐＨ制御はｐＨ５．５に設定する。
４．第四及び最終発酵ステップは、ステップ番号３からの接種と共に１５，０００リットル容器において実施する。攪拌及びｐＨ制御しながら、９〜１２時間３７℃において発酵を実施する。発酵開始時にｐＨは６．５である。ｐＨ制御は、ｐＨが５．４未満に低下したときに、２０％水酸化ナトリウム溶液を使用して開始する。ｐＨ制御はｐＨ５．５に設定する。発酵の最終期、培養物が静止期に到達する直前に、１００ｍＭのグリセロールを加える。発酵は培養物が静止期に到達したときに終了し、これは水酸化ナトリウム溶液の添加量の減少によって見ることができる。約９３０リットルの水酸化ナトリウム溶液を、発酵中に１０，２００リットルの培地及び６００リットルの接種原に加える。
【００８０】
最終発酵（ステップ４）からの細胞スラリーを、Ａｌｆａ  Ｌａｖａｌの連続遠心分離機において１０℃で２回分離する。第一回目の遠心分離によって、細胞スラリーの体積は約１１，７３０リットルから１２００リットルに減少する。この体積を３０００リットル容器において１２００リットルのペプトン（ペプトン０−２４、Ｏｒｔｈａｎａ）溶液で洗浄し、凍結保護物質との混合前に再度分離する（以下参照）。ペプトンを用いた洗浄ステップを実施して、凍結乾燥プロセス中の任意の凝固点降下を回避する。
【００８１】
第二回目の遠心分離によって、細胞スラリーの体積は４９５リットルに減少する。この体積を１５６ｋｇの凍結保護物質溶液と混合して約６５０リットルの細胞スラリーにする。
【００８２】
細胞スラリーは１０００リットル容器にポンプで送る。次いで容器を凍結乾燥プラントに移動する。
【００８３】
凍結乾燥プラントにおいて、正確に２リットルの細胞スラリーを凍結乾燥機中の各プレートに注ぐ。凍結乾燥機の最大容量は６００リットルであり、全ての過剰な細胞スラリー体積を除去する。
【００８４】
ラクトバチルス・ロイテリの細胞スラリーは１８％の乾物含量を有し、４〜５日凍結乾燥させる。
【００８５】
凍結乾燥プロセス中、プロセス中の圧力は０．１７６ｍｂａｒと０．４２ｍｂａｒの間である。圧力が０．４２ｍｂａｒに到達したとき、真空ポンプ作業を開始する。ＰＲＴ（圧力試験）を使用して、いつプロセスが終了するかを決定する。１２０秒後にＰＲＴ又は圧力の増大が０．０２ｍｂａｒ未満である場合、プロセスを停止する。
【００８６】
（例５．１，２−ＰＤとガラクトースの組合せはラクトバチルス・ロイテリの活性を向上させる相乗効果をもたらす）
ラクトバチルス・ロイテリＤＳＭ１７９３８を、１，２−ＰＤ（０．３％）、ガラクトース（０．３％）又はこの２つの組合せを加えた（グルコース及びクエン酸塩を含まない）修飾型ＭＲＳブロスにおいて増殖させた。細菌は３７℃において２４時間増殖させた。図１中に見られるように、１，２−ＰＤとガラクトースの両方の存在下で増殖したラクトバチルス・ロイテリは、別の物質における増殖より有意に高い増殖を驚くことに示した。
【００８７】
（例６．供給するシャトルプログラムの例）
本出願中に記載するＳＳＣによって誘導したラクトバチルス・ロイテリの向上した活性のため、シャトルプログラムにおいて、例１のサシェ（サシェＡ）と、ラクトバチルス・ロイテリを取り除いたが他は例１に従い製造したサシェ（サシェＢ）を交換することは可能である。このシャトルプログラムがラクトバチルス・ロイテリの効率を低下させることはなく、治療コストを低減することができる。
【００８８】
サシェＡを第１日にレシピエントに投与し、第２日及び第３日に、レシピエントにサシェＢを与える。この投与スキームは、治療期間全体を通じて繰り返す。
【００８９】
（例７．ヒトにおけるｉｎ  ｖｉｖｏでの腸内コロニー形成）
ラクトバチルス・ロイテリ単独による腸内コロニー形成と、ＳＳＣと一緒に投与した同じラクトバチルス・ロイテリによる腸内コロニー形成の間の比較を、臨床試験で行う。１２人の健常ボランティアを、各グループ中６参加者の２つのグループ（Ａ及びＢ）に分ける。グループＡには、ラクトバチルス・ロイテリ、並びにペクチンの形のＳＳＣ、ラムノース及びガラクトオリゴ糖の組成物を含有する例１の粉末サシェを与える。グループＢには、前述のＳＳＣを含まない同じラクトバチルス・ロイテリ株を与える。両グループに、６０日間１日当たり１０Ｅ＋８ＣＦＵのラクトバチルス・ロイテリを与える。単独又はＳＳＣと一緒に与えた株による腸内コロニー形成の定量評価は、試験の開始時、並びに治療期の第３０日後及び第６０日後に、大便サンプル検査によって行う。大便中のラクトバチルス・ロイテリを数え、グループＡとＢの大便中の量を比較する。
【００９０】
表１中に見られるように、大便中のラクトバチルス・ロイテリ量の有意な増大が、ラクトバチルス・ロイテリを単独で投与した患者と比較して、ラクトバチルス・ロイテリをＳＳＣと一緒に投与した患者において見られる。値は大便１グラム当たりの平均ｌｏｇ１０ＣＦＵ±ＳＥＭとして与える。
【表１】
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【図１】
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【国際調査報告】
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