(57)【要約】  本明細書に記載される組成物および方法は、ＤＨＦＲの阻害剤として作用する化合物の設計、合成、および検査を開示する。これらの組成物の基礎骨格は、２，４−ジアミノピリミジン環を、別の置換されたアリール、ビシクロ、またはヘテロアリール環へのプロパルギルリンカーとともに含む。これらのＤＨＦＲ阻害剤は、炭疽菌およびメチシリン耐性黄色ブドウ球菌等の細菌、カンジダグラブラタ、カンジダアルビカンス、およびクリプトコックスネオフォルマンス等の真菌、ならびにクリプトスポリジウムホミニスおよびトキソプラズマ原虫等の原虫からのＤＨＦＲ酵素を含む、多くの異なる病原性生物に対して強力であり、選択的である。これらの化合物および他の同様の化合物はまた、哺乳動物酵素に対して強力であり、抗癌治薬として有用であり得る。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｖの化合物であって、
【化１】
2014532729.tif 000059
式中、Ｒが、Ｈ、Ｃ１−Ｃ５アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシ、およびヒドロキシからなる群から選択され、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４が、独立して、水素、およびＣ１−Ｃ５アルキル、シクロアルキル、アルコキシアルキル、アルコキシアルコキシアルキル、アリールアルキル、アルキルカルボニル、シクロアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アルコキシアルキルカルボニル、アルコキシアルコキシアルキルカルボニル、アリールカルボニル、ピリジニルカルボニル、アリールオキシアルキル、ハロアルキルカルボニル、およびシアノアルキルカルボニルからなる群から選択され、
ＡおよびＢが、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシからなる群から選択され、前記フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」が、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、
ＶおよびＷのうちの１つが、メトキシ基であり、もう一つが、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシからなる群から選択され、前記フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで１回以上、任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される低級が、好ましくは、Ｃ１−Ｃ６であり、
Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つが、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシからなる群から選択され、前記フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基がそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで１回以上、任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される低級が、好ましくは、Ｃ１−Ｃ６であり、
Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つが、ピペリジン、ペルヒドロピリミジン、モルホリン、ピリジン、ピリミジン、インドール、イソインドール、キノリン、イソキノリン、オキサゾール、チアゾール、イミダゾール、およびそれらの誘導体からなる群から選択される置換基であり、前記ピペリジン、ペルヒドロピリミジン、モルホリン、ピリジン、ピリミジン、インドール、イソインドール、キノリン、イソキノリン、オキサゾール、チアゾール、イミダゾール、またはそれらの誘導体はそれ自体、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、またはアリールオキシアルコキシで１回以上、任意に置換されてもよく、前記フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、またはアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで１回以上、任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される低級が、好ましくは、Ｃ１−Ｃ６である、前記化合物、
ならびにその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｒが、メチルまたはエチルであり、ＡおよびＢのうちの１つが、水素であり、ＡおよびＢのうちのもう一つが、水素またはＣ１−Ｃ６アルキルであり、ＶおよびＷのうちの１つが、メトキシであり、ＶおよびＷのうちのもう一つが、水素である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つが、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシからなる群から選択され、前記フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基がそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで１回以上、任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される低級が、好ましくは、Ｃ１−Ｃ６であり、
Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つが、式ＶＩＡおよび式ＶＩＢからなる群から選択され、
【化２】
2014532729.tif 000060
式中、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちの少なくとも１つがＮであり、ＮではないＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちのいずれかがＣＲｘであり、ＮではないＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のそれぞれについては、Ｒｘが独立して、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、前記フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基がそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで１回以上、任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される低級が、好ましくは、Ｃ１−Ｃ６であり、
Ｒ３７が、Ｏ、ＮＨ、またはＮＣＨ３であり、
Ｒ３８が、ＮまたはＣＨであり、Ｒ３８がＣＨであるとき、Ｒ３７が、ＮＨまたはＮＣＨ３であり、
Ｒ３９およびＲ４０が独立して、水素またはＣＨ３である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの１つが式ＶＩＡであり、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちの少なくとも１つがＮであり、ＮではないＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちのいずれかがＣＨである、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちの少なくとも２つがＮである、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの１つが式ＶＩＢであり、式中、Ｒ３８がＮであり、Ｒ３７がＯであり、Ｒ３９およびＲ４０が同一物であり、かつ水素またはＣＨ３のいずれかである、請求項３に記載の化合物。
【請求項７】
Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの１つが式ＶＩＢであり、式中、Ｒ３８がＮであり、Ｒ３７が、ＮＨまたはＮＣＨ３であり、Ｒ３９およびＲ４０が水素である、請求項３に記載の化合物。
【請求項８】
Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つが、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシからなる群から選択され、前記フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基がそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される低級が、好ましくは、Ｃ１−Ｃ６であり、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つが、式ＶＩＣ、式ＶＩＤ、および式ＶＩＥからなる群から選択され、
【化３】
2014532729.tif 000061
式中、Ｒ４１およびＲ４２のうちの１つがＮであり、もう一つがＣＨであり、Ｒ４３が、ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり、Ｒ４４、Ｒ４５、およびＲ４６のうちの１つがＮであり、Ｒ４４、Ｒ４５、およびＲ４６のうちの２つ目が、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、またはＮ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）であり、Ｒ４４、Ｒ４５、およびＲ４６のうちの３つ目がＣＨであり、複素環式基上の任意のメチン炭素が、前記複素環式基と式Ｖの化合物との付着点として機能し得る、前記請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
１つ以上の薬学的に許容される希釈剤、賦形剤、または担体と組み合わせた、請求項１に記載の化合物を含む、薬学的組成物。
【請求項１０】
１つ以上の薬学的に許容される希釈剤、賦形剤、または担体と組み合わせた、請求項３に記載の化合物を含む、薬学的組成物。
【請求項１１】
１つ以上の薬学的に許容される希釈剤、賦形剤、または担体と組み合わせた、請求項８に記載の化合物を含む、薬学的組成物。
【請求項１２】
薬学的に有効な量の請求項１に記載の化合物を、それを必要とする個体に投与することを含む、ジヒドロ葉酸還元酵素の阻害方法。
【請求項１３】
薬学的に有効な量の請求項３に記載の化合物を、それを必要とする個体に投与することを含む、ジヒドロ葉酸還元酵素の阻害方法。
【請求項１４】
薬学的に有効な量の請求項８に記載の化合物を、それを必要とする個体に投与することを含む、ジヒドロ葉酸還元酵素の阻害方法。
【請求項１５】
細菌感染症、真菌感染症、または原虫感染症に罹患している個体の治療方法であって、薬学的に許容される量の請求項１に記載の化合物を、前記個体に投与することを含む、前記方法。
【請求項１６】
細菌感染症、真菌感染症、または原虫感染症に罹患している個体の治療方法であって、薬学的に許容される量の請求項３に記載の化合物を、前記個体に投与することを含む、前記方法。
【請求項１７】
細菌感染症、真菌感染症、または原虫感染症に罹患している個体の治療方法であって、薬学的に許容される量の請求項８に記載の化合物を前記個体に投与することを含む、前記方法。
【請求項１８】
前記還元酵素が、哺乳動物酵素である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１９】
前記化合物が、癌を治療するのに十分な用量で投与される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
スルファ化合物をさらに含む、請求項９に記載の薬学的組成物。
【請求項２１】
スルファ化合物を投与することをさらに含む、請求項１２に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
連邦支援の研究に関する声明
本発明は、国立衛生研究所によって授与された助成金番号ＧＭ０６７５４２、ＡＩ０７３３７５、およびＡＩ０１６５１４３の下、政府支援によりなされた。本政府は、本発明に一定の権利を有する。
【０００２】
これは、ジヒドロ葉酸還元酵素（ＤＨＦＲ）を阻害する化合物、ならびに病原性感染症および新生組織形成を治療するための化合物の使用方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
炭疽菌（B. anthracis）およびセレウス菌（B. cereus）を含むバシラス種は、著しい健康障害を示す。炭疽菌は、急性で多くの場合致命的疾病である炭疽病に関与する高病原性グラム陽性菌である。国立アレルギー感染病研究所によって病原体のＡ型として分類される。炭疽菌感染症に対する現行の治療薬には、費用、耐性、および子供における禁忌を含む、深刻な限界がある。炭疽菌およびセレウス菌は、実際には近縁種であり、生化学的および遺伝学的証拠は、それらが、単一種であると見なされるべきであると示唆している。セレウス菌への曝露は、通常食品汚染として、眼内炎、菌血症、敗血症、心内膜炎、肺炎、および髄膜炎を含む多くの感染症を引き起こし、これらの幾つかは、致命的となる。
【０００４】
クリプトスポリジウムおよびトキソプラズマは、世界的規模で集団における重症疾患を引き起こすアピコンプレキサン類寄生原虫である。クリプトスポリジウムホミニス（C. hominis）に起因するクリプトスポリジウム症は、消耗性疾患を特徴とし、大発生が他の健常な集団において生じたこともあるが、ほとんどの場合、免疫力が低下した患者、高齢者、および託児所の子供に影響を及ぼす。クリプトスポリジウム症に対する効果的な治療法は、見つけ出すのが困難である。現時点では、クリプトスポリジウム属に対する単一の認可された治療剤、ニタゾキサニドがあるが、この薬物の適用は、免疫力のある患者に限られており、１２歳未満の子供には、効果が研究されていない。トキソプラズマ原虫（T. gondii）として先天的に感染した場合、トキソプラズマ症は、新生児死亡を引き起こす場合があり、汚染された肉または水の摂取を通して感染した場合、免疫力が低下した患者において発熱および咽喉炎、または脳の炎症を引き起こす場合がある。これらの寄生原虫はともに、Ｂ分類の生体防御剤（biodefense agents）として分類されている。
【０００５】
全身性真菌感染症は、世界的規模の死因および重症疾患を著しく増加する。カンジダ菌種感染による死亡率は、１９８３年から１９８６年の間で３８％、１９９７年から２００１年の間で４９％であった。免疫力が低下した患者数の増加により、これらの感染症の発生率は、上昇している。１９８０年代まで、カンジダアルビカンス（Candida albicans）は、全身性カンジダ感染症の主な原因であり、アゾール誘導体およびアンホテリシンＢを含む従来の治療薬で治療され得た。しかしながら、変動する疫学は、カンジダアルビカンス感染症が、依然として、大多数（約５０％）を表すが、その他のカンジダ種、主に、カンジダグラブラタ（C. glabrata）が、現在、かなりの数（約２０％）の血流感染症を引き起こすことを述べる。
【０００６】
黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）は、血流、皮膚および軟組織、人口呼吸器関連肺炎およびカテーテルと関連して最も頻繁に起こる、院内感染の主な原因である通性嫌気性グラム陽性球菌性細菌である。メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）に起因する増加する感染症の頻度は、特に懸念される。ＨＡ−ＭＲＳＡとは遺伝子型で区別可能な地域感染型のＭＲＳＡ（ＣＡ−ＭＲＳＡ）はまた、現在、従来の危険因子のない患者の間で確定される危険な兆候になっている。黄色ブドウ球菌に加えて、グラム陽性細菌の化膿連鎖球菌（Streptococcus pyogenes）は、複雑な皮膚および皮膚構造感染症（ＳＳＴＩ）の主な原因である。黄色ブドウ球菌と化膿連鎖球菌によって生じた感染病を確実に区別することは、臨床所見における重複のため困難である。
【０００７】
ジヒドロ葉酸還元酵素（ＤＨＦＲ）は、数十年間、細菌および原虫感染症の治療を標的とする有効な薬物である。ＤＨＦＲは、必須酵素であり、葉酸生合成経路において重要な役割を担う。アピコンプレキサン類原虫において、チミジル酸生成酵素（ＤＨＦＲ−ＴＳ）を用いた二官能性タンパク質として生じると、ＤＨＦＲは、補助因子ＮＡＤＰＨを利用して、ジヒドロ葉酸からテトラヒドロ葉酸への還元を触媒し、それによって、デオキシチミジン一リン酸（ｄＴＭＰ）の単一のデノボ合成での重要な反応を行う。ＤＨＦＲがすべての細胞への必須酵素であるため、病原性生物を標的とする阻害剤は、ヒト酵素を阻害することから生じる合併症を回避するために、選択的かつ強力でなければならない。クリプトスポリジウムＤＨＦＲに対する効力および選択性の両方を達成することの難しさは、ＮｅｌｓｏｎおよびＲｏｓｏｗｓｋｙらの研究によって強調され（Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ（２００１）Ｄｅｃ；４５（１２）：３２９３−３０３）、この中で、彼らは、９６種の構造的に異なるＤＨＦＲ阻害剤を試験し、クリプトスポリジウムホミニスＤＨＦＲに対して強力かつ選択的である化合物を特定することはできなかった。ＤＨＦＲは、進化を通じて広く保存されている。しかしながら、幾つかの残基の違いが、異なる種の活性部位に認められ、可能性のある病原型の酵素に対する選択性を達成する。
【０００８】
ＤＨＦＲ阻害剤のピリメタミン（即ち、５−（４−クロロフェニル）−６−エチルピリミジン−２，４−ジアミン）を有効に使用して、トキソプラズマ症、ならびに別のアピコンプレキサン類寄生生物の（例えば、熱帯熱マラリア原虫に対する）変形体によって生じるマラリアを治療する。しかしながら、多くの患者は、ピリメタミンに対して激しい反応があり、その有効性を制限する。
【０００９】
トリメトプリム（即ち、５−（３，４，５−トリメトキシベンジル）ピリミジン−２，４−ジアミン）は、１９６０年代以来、抗菌剤として診療において有効に使用されている。例えば、それは、大腸菌および連鎖球菌属に対して使用されている。それは、比較的低い分子量（ＭＷ＝２９０ダルトン）を含む卓越した薬物様特性を有する。しかしながら、トリメトプリムはまた、大腸菌等の病原性生物由来のＤＨＦＲ種の小さいサブセットのみに対して高親和性を示す。このことは、その幅広い適用を制限する。さらに、トリメトプリムは、クリプトスポリジウム（ＣｈＤＨＦＲ）およびトキソプラズマ原虫（ＴｇＤＨＦＲ）由来のＤＨＦＲに対して緩やかなインビトロでの効力のみを示す。トリメトプリムは、２つのアピコンプレキサン類原虫であるクリプトスポリジウムおよびトキソプラズマ由来のＤＨＦＲに対してあまり強力ではない。
【００１０】
アンホテリシンＢおよびアゾール誘導体は、カンジダアルビカンス感染症を治療するために従来使用されている。しかしながら、その他のカンジダ種、主として、カンジダグラブラタは、アゾール化合物、特に、一般に使用される薬剤、フルコナゾールに対してより低い感受性を有する。カンジダグラブラタを治療するための治療濃度域は、カンジダグラブラタ株が、しばしば、アンホテリシンＢに対しても耐性を示すため、さらに狭い。
【００１１】
バンコマイシンは、病院内でのＭＲＳＡ感染症に対する好ましい治療であるが、バンコマイシン媒介性黄色ブドウ球菌分離株（ＶＩＳＡ）およびバンコマイシン耐性黄色ブドウ球菌（ＶＲＳＡ）株が、２００２年以降、米国内で報告されている。さらに、新しいＣＡ−ＭＲＳＡ株を含む多くの黄色ブドウ球菌株は、トリメトプリム−スルファメトキサゾール（ＴＭＰ−ＳＭＺ）に対して感受性を示す。ブドウ球菌の間でＴＭＰ−ＳＭＺへの耐性は、１９８０年代初め以来、オーストラリアおよび米国において観察されている。株の収集からの調査は、ＭＲＳＡ分離株のうちの２８％がＴＭＰ耐性であり、３５％がＳＭＺ耐性であることを示す。同様に、黄色ブドウ球菌および化膿連鎖球菌の両方に対して有効であり得る薬剤スペクトルは、耐性によって制限される、つまり、化膿連鎖球菌は、マクロライドに対して耐性であり得、黄色ブドウ球菌は、しばしば、ベータラクタム抗生物質に対して耐性である。ＭＲＳＡおよび化膿連鎖球菌に対して活性のある治療薬が、ＳＳＴＩを治療するために理想的な薬剤であろう。したがって、両方の生物を標的とする効果的な抗菌剤の開発が、最優先である。
【００１２】
薬物開発中、リード最適化プロセス中、効力の増加が、分子量の増加と相関することが、多くの場合、理解される。しかしながら、さらなる分子量は、しばしば、それがリード最適化プロセスの薬物様特性に支障を来たすとき、易罹病性を表す。分子量の増加と親和性の増加との間の必要な妥協は、リガンド効率の概念とともに定量的に試験され得る。リガンド効率は、非水素原子当たりの全体的結合エネルギーとして定義され、より高いリガンド効率は、優れた化合物であると定義される。興味深いことに、メトトレキサート（即ち、（Ｓ）−２−（４−（（（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル）メチルアミノ）ベンズアミド）グルタール酸またはＭＴＸ）は、トリメトプリムよりもはるかに強力な化合物（ＣｈＤＨＦＲおよびＴｇＤＨＦＲに対するＩＣ５０値はそれぞれ、２３ｎＭおよび１４ｎＭである）であるが、それは、トリメトプリムと同じリガンド効率を有し、このことは、効力の増加が、より最適な薬理作用団の成分の位置決めよりもむしろ分子量の増加に大いに依存していることを意味する。
【００１３】
したがって、必要とされるものは、様々な病原性感染症の治療に対して特異的かつ有効である比較的低い分子量を含有する薬学的組成物である。
【発明の概要】
【００１４】
化合物、組成物、化合物を作製するプロセス、ならびに本明細書に記載される化合物および組成物を用いて、細菌、真菌、および原虫感染症に罹患している個体の治療方法が、提供される。また、本明細書に記載される化合物によって、癌または腫瘍性疾患に罹患している個体の治療方法も提供される。
【００１５】
ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン環系等の様々なピリミジン系は、ジヒドロ葉酸還元酵素（ＤＨＦＲ）酵素活性の阻害にそれらが関与するため、研究されている。クリプトスポリジウムホミニスおよびトキソプラズマ原虫からのＤＨＦＲ酵素の構造は、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（２００７）５０：９４０−９５０（参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）の論文中に記載されている。
【００１６】
本明細書に開示される化合物は、新しい種類のＤＨＦＲ阻害剤として機能するピリミジン誘導体である。これらの化合物は、炭疽菌、黄色ブドウ球菌、化膿連鎖球菌、クリプトスポリジウムホミニス、カンジダアルビカンス、およびカンジダグラブラタ等の細菌、真菌、および原虫動物由来のＤＨＦＲの阻害剤として試験されており、これらの結果は、これらの化合物がこれらの種類の病原性生物の阻害ならびに細菌、真菌、および原虫感染症の治療に対して強力および選択的であることを示す。
【００１７】
さらに、構造−活性の関係は、炭疽菌酵素のホモロジーモデルに基づいた多くのＤＨＦＲ阻害剤のために開発されている。簡潔に言えば、炭疽菌およびセレウス菌ＤＨＦＲに対して以前に試験された最も強力である化合物は、置換フェニル環に結合しているアルキルリンカーによって環付加した２，４−ジアミノピリミジン環であった。しかしながら、本発明の化合物は、より一般的かつより強力な阻害剤である。例えば、臨床上用いられるトリメトプリム（メチレンリンカーを有する）は、十分に深い置換フェニル環を疎水性ポケットに収容するように思われず、このことは効力の減少を説明し得る。
【００１８】
重要なことには、本明細書に提供される化合物は、生物（バラシスサブティリス、セレウス菌、黄色ブドウ球菌、化膿連鎖球菌、カンジダアルビカンス、カンジダグラブラタ、およびクリプトコックスネオフォルマンス）の培養物を用いた、インビトロで、有効な抗真菌剤および抗菌剤である。本明細書に記載される抗病原性阻害剤の大部分は哺乳類細胞に対して非毒性であるが、新しく開発された阻害剤のうちの少なくとも１つが哺乳動物細胞の毒性を示し、したがって、抗癌剤として有用である。
【００１９】
本明細書に記載される組成物および方法のプロパルギル系ＤＨＦＲ阻害剤は、例えば、約５００ダルトン以下、幾つかの実施形態において、約４００ダルトン以下の低分子量を有する、良好な薬剤候補であり、そのため、追加された官能基に対して十分な容量がある。本明細書に提供される化合物の改変は、合成するのに比較的容易であり、費用を最小限に抑えることができ、化合物は、多様性の増加のための集中的なライブラリーに対して出発点を有し得る。炭疽菌の阻害剤として、本明細書に記載される化合物は、副作用の減少の機会を与える。黄色ブドウ球菌および化膿連鎖球菌の阻害剤として、これらの化合物は、両方の生物に対して活性のある切実に求められている代替物を提供する。抗真菌性阻害剤として、本明細書に記載される化合物は、幾つかの真菌性種由来の強力かつ選択的にＤＨＦＲを阻害し、これは、正確な真菌感染症を診断することなく、投与され得る広域スペクトル阻害剤を開発する機会を与える。抗原虫阻害剤として、本明細書に提供される化合物は、（例えば、クリプトスポリジウムに対して）最高である、および／または（例えば、トキソプラズマに対して）より副作用の少ない機会を提供し得る。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
詳細な説明は、図面を考慮して、より十分に理解されるであろう。
【図１】ＣｈＤＨＦＲとＴｇＤＨＦＲ（ＰＤＢコード：それぞれ、ＡＡＢ００１６３およびＸＰ６６５８６６）との間のアミノ酸配列アラインメントを示し、矢印は、活性部位でのアミノ酸を表す。
【図２】ＣｈＤＨＦＲの活性部位でのメトトレキサート（ＭＴＸ）を示す分子モデルである。
【図３】図３Ａでは、ＣｈＤＨＦＲの活性部位でモデル化されたトリメトプリム（ＴＭＰ）、そして、図３Ｂでは、ＣｈＤＨＦＲの活性部位でモデル化された５−［３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−１−エン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミンを示す分子モデルである。
【図４】図４Ａでは、ＣｈＤＨＦＲに結合し、そして、図４Ｂでは、ＴｇＤＨＦＲに結合する（Ｒ）−６−メチル−５−［３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ブタ−１−エン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミンを示す分子モデルである。
【図５】頂点位が図５Ａでは「上方」を示し、図５Ｂでは「下方」を示す「中央」疎水性ポケットを占有するアザ架橋された二環式環を示す分子モデルである。
【図６】ＢａＤＨＦＲ（青色）の活性部位でのオキサ二環式環系のモデルを示す。３−炭素架橋からのエンド型置換基およびエキソ型置換基はともに、「上方」ポケット内に容易に収容される。
【図７】ＢａＤＨＦＲの活性部位でのカルバ架橋された二環式系のモデルを示す。
【図８】活性部位（図８Ａ：ＣｈＤＨＦＲ（緑色）および図８Ｂ  ｈＤＨＦＲ（青色）（ＰＤＢコード：それぞれ、１ＳＥＪおよび１ＫＭＶ））での共結晶リガンドを有する同じ写真から見られる分子モデルであり、これらは、活性部位の開口部で実質的な差を示す。ＰＥＫＮループ残基が、ｈＤＨＦＲにおいて標識化され、Ａｓｎ６４は、ループの底面を示す。
【図９】それらのコンピュータ的に好ましいドッキング配向においてＣｈＤＨＦＲにドッキングされる、本明細書では、化合物Ｘとしても称されるＵＣＰ１１１Ａ（ピンク色）（９Ａ）、ＵＣＰ１１１Ｄ（黄色）（９Ｂ）、およびＵＣＰ１１１Ｆ（白色）（９Ｃ）の分子モデルである。ＣｈＤＨＦＲは、親油性（赤色）から中性（緑色）から親水性（青色）に移動する親油性によってマッピングされた表面として示される。
【図１０】最も広い開口を有するｈＤＨＦＲのアンサンブルメンバーにドッキングされる、ＵＣＰ１１１Ａ（化合物Ｘ）（ピンク色）、ＵＣＰ１１１Ｄ系列（黄色）、ならびにＵＣＰ１１１Ｆ系列（ＵＣＰ１１１ＦおよびＵＣＰ１１１Ｆ２Ｍｅ  白色、ＵＣＰ１１１Ｆ２６Ｍｅ  青色）を示す分子モデルである。ｈＤＨＦＲ表面は、親油性（赤色）から中性（緑色）から親水性（青色）に移動する親油性に基づいて色付けされる。
【図１１】ＮＡＤＰＨおよび化合物１１に結合するＣｇＤＨＦＲの構造を示す分子モデルである。図１１Ａは、ＣｇＤＨＦＲ（ＮＡＤＰＨおよび結晶化されたリガンドを赤色で示す）の全体構造を示し、図１１Ｂでは、ＣａＤＨＦＲ（青緑色）と重ね合わされたＣｇＤＨＦＲ（紫色）を示す。ＣｇＤＨＦＲの挿入および活性部位に近接するループを示す。
【図１２】化合物１１とＣｇＤＨＦＲとの相互作用を示すモデルであり（図１２Ａ）、図１２Ｂは、ＣｇＤＨＦＲ（紫色）およびｈＤＨＦＲ（鮭肉色）の比較を示す（活性部位でのｈＤＨＦＲの重要な残基のみを明確さのために示す）。
【図１３】化合物１１が結合している活性部位でのＣｇＤＨＦＲを示す表面である。この表面は、親油性（赤色）から中性（緑色）から親水性（青色）に延在する勾配を用いて色付けされる。この写真は、図１１Ａにおいて示されるものと同一である。アリール環の５’位付近の残基が標識化される。
【図１４】ビフェニルプロパルギル結合された抗葉酸化合物ならびにＳａＤＨＦＲおよびＮＡＤＰＨを用いたその化合物の複合体の分子モデルを示す。
【図１５】ＮＡＤＰＨ（赤紫色）および（１６Ａ）化合物１４２（紫色）、（１６Ｂ）化合物１４８（緑色）、ならびに（１６Ｃ）化合物１４８（青色）および１４０（緑色）の重ね合わせに結合する黄色ブドウ球菌ＤＨＦＲの構造を示す分子モデルである。
【図１６】化合物１３９およびＮＡＤＰＨに結合するＣｇＤＨＦＲの結晶構造である。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
化合物、当該化合物を含有する組成物、ならびに抗菌剤、抗真菌剤、および抗癌剤として当該化合物および組成物の使用方法が、提供される。本明細書に記載される化合物は、任意に置換されたアリールまたはヘテロアリール環へのプロパルギルリンカーを有する２，４−ジアミノピリミジン環を含む。これらの化合物は、新しい種類のＤＨＦＲ阻害剤として機能するピリミジン誘導体である。
【００２２】
本明細書に提供される組成物は、ＤＨＦＲ阻害剤としての機能を果たし、複数の種由来のＤＨＦＲに対して良好な有効性を示す、新規の比較的低分子量の化合物である。酵素の構造は、さらなる誘導体化合物の設計を誘導するであろう。これらの化合物は、分子量の限界を超えることなく、さらなる選択性官能基の組み込みを可能にする。
【００２３】
その分子機構の一部としてＤＨＦＲは、ジヒドロ葉酸塩をテトラヒドロ葉酸塩に還元する。したがって、ＤＨＦＲの阻害は、テトラヒドロ葉酸塩の細胞を奪い、これがないと、この細胞は、５，１０−メチレンテトラヒドロ葉酸塩を生成することができない。５，１０−メチレンテトラヒドロ葉酸塩は、細胞成長に不可欠である。したがって、本明細書に記載される化合物およびその薬学的に許容される塩によるＤＨＦＲの阻害は、ＤＮＡ合成の阻害をもたらし、細胞死に至る。したがって、本明細書に提供される化合物は、抗癌剤または抗腫瘍剤として有用である。
【００２４】
上述の分子機構に加えて、本明細書に記載されるピリミジン誘導体化合物はまた、チミジル酸生成酵素（thymidylate synthase、ＴＳ）阻害剤として機能する。ＤＨＦＲとともにＴＳは、デオキシチミジル酸塩（ｄＴＭＰ）のデオキシウリジル酸塩（ｄＵＭＰ）からの合成に関与するシステムの一部を形成する。ＴＳは、ｄＵＭＰからのｄＴＭＰの単一のデノボ合成に触媒作用を及ぼす。したがって、ＴＳの阻害は、ＤＮＡの基本的成分であるチミジンの細胞を奪う。したがって、この阻害は、本明細書に記載される化合物が、細菌感染症に関与する細菌、菌類、および原虫等の多くの生物のいずれかを標的とするために有用であることを意味する。さらに、この阻害はまた、様々な癌を標的とするために、代替の分子機構も提供する。
【００２５】
本明細書に記載される組成物および方法の一実施形態は、式Ｉの化合物に関し、式Ｉは、
【００２６】
【化１】
2014532729.tif 000002
【００２７】
であり、
式中、Ｒは、Ｈ、Ｃ１−５アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、およびヒドロキシからなる群から選択され、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、それぞれ独立して、水素、およびＣ１−５アルキル、シクロアルキル（例えばシクロヘキシル）、アルコキシアルキル（例えば−−Ｃ３Ｈ６ＯＣ２Ｈ５）、アルコキシアルコキシアルキル（例えば−−Ｃ２Ｈ４ＯＣ２Ｈ４ＯＣ２Ｈ５）、アリールアルキル（例えばフェニルメチルまたは２−ピリジルメチル）、アルキルカルボニル、［例えば−−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ３、−−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ（ＣＨ３）２、−−（Ｃ＝Ｏ）Ｃ１１Ｈ２３］、シクロアルキルカルボニル（例えばシクロヘキシルカルボニル）、アルコキシカルボニル［例えば−−（Ｃ＝Ｏ）ＯＣ２Ｈ５］、アルコキシアルキルカルボニル［例えば−−（Ｃ＝Ｏ）Ｃ２Ｈ４ＯＣ２Ｈ５］、アルコキシアルコキシアルキルカルボニル［例えば−−（Ｃ＝Ｏ）Ｃ２Ｈ４ＯＣ２Ｈ４ＯＣ２Ｈ５］、アリールカルボニル（例えばベンゾイル）、ピリジニルカルボニル（例えば３−ピリジニルカルボニル）、アリールオキシアルキル［例えば−−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２ＯＣ６Ｈ５］、ハロアルキルカルボニル［例えば−−Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）２Ｆ］、およびシアノアルキルカルボニル［例えば−Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）３ＣＮ］からなる群から選択され、
ＡおよびＢは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシからなる群から選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、
ＡおよびＢは、それらが結合されている炭素と一緒になって、３から７員の環を形成することができ、当該環員は、アルキレン、アルケニレン、およびアルキニレンからなる群から選択され、当該アルキレン基、アルケニレン基、およびアルキニレン基のいずれかは、任意に、Ｏ、Ｎ、Ｓ、およびＳｅからなる群から選択される１個以上のヘテロ原子によって遮断されてもよい。本実施形態の一変形例において、このアルキレンまたはアルケニレンは、Ｃ１−５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシのうちの１つ以上で任意に置換されてもよく、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、
Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシからなる群から選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで１回以上、任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される低級は、好ましくは、Ｃ１−Ｃ６である。
【００２８】
一実施形態において、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺのうちの少なくとも１つが、アルコキシ基である。本実施形態の一変形例において、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺのうちの少なくとも１つが、メトキシ基である。本実施形態のさらなる一変形例において、Ｗ、Ｘ、およびＹのうちの少なくとも１つが、メトキシ基である。
【００２９】
代替の一実施形態において、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺのうちの少なくとも２つが、アルコキシ基である。本実施形態の一変形例において、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺのうちの少なくとも１つが、メトキシ基である。本実施形態のさらなる一変形例において、Ｗ、Ｘ、およびＹのうちの少なくとも１つが、メトキシ基である。
【００３０】
さらなる実施形態において、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺのうちの少なくとも３つが、水素以外の置換基で置換され、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺのうちの少なくとも１つが、アルコキシ基である。本実施形態の一変形例において、このアルコキシ基は、メトキシ基である。
【００３１】
さらなる実施形態において、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺのうちの少なくとも１つが、水素でもハロゲンでもない。本実施形態の一変形例において、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺのうちの少なくとも１つが、水素でも、フルオロでも、クロロでもない。
【００３２】
一実施形態において、ＡおよびＢのうちの少なくとも１つが、Ｃ１−５アルキルではなく、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺのうちの少なくとも１つが、水素でもハロゲンでもない。本実施形態の一変形例において、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺのうちの少なくとも１つが、水素でも、フルオロでも、クロロでもない。本実施形態の一変形例において、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺのいずれもが、フルオロでもクロロでもない。
【００３３】
一実施形態において、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺのうちの少なくとも１つが、水素、フルオロ、クロロ、トリフルオロメチル、メチルスルホニルではなく、４−クロロフェニルオキシの置換基でもない。本実施形態の一変形例において、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺのうちの少なくとも１つが、水素、フルオロ、クロロ、トリフルオロメチル、メチルスルホニルではなく、４−クロロフェニルオキシの置換基でもないか、またはカルボニルを含有する置換基である。
【００３４】
一実施形態において、Ａおよび／またはＢは、水素、メチル、またはエチル基である。
【００３５】
代替の一実施形態において、本明細書に記載される組成物および方法の化合物は、式ＩＡに包含され、
【００３６】
【化２】
2014532729.tif 000003
【００３７】
式中、Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ａ、およびＢは、それらが式Ｉ中の置換基である場合、上記のように定義され、
Ｅは、式Ｉ中にあるように、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺによって置換されるフェニル基であり得るか、あるいは、Ｅは、それぞれ、式ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、およびＩＩＩＣに示されるように、アザビシクロ、オキサビシクロ、またはカルバ架橋された置換基であり得る。
【００３８】
【化３】
2014532729.tif 000004
【００３９】
式中、ａは、１または２であり、
式ＩＡに示されるように、プロパルギルリンカーは、式ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、およびＩＩＩＣのそれぞれにおいて、橋頭炭素で連結され、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、およびＲ１６は、水素、Ｃ１−３アルキル、−−Ｃ（Ｏ）Ｃ１−３アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシからなる群から選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで１回以上、任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１ーＣ６を意味し、
Ｌは、任意におよび独立して、水素、Ｃ１−３アルキル、−−Ｃ（Ｏ）Ｃ１−３アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシからなる群から選択される、１〜４個の置換基で置換される、Ｃ１−２アルキレンまたはＣ１−２アルケニレン基であり、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで１回以上、任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６を意味し、
上記式ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、およびＩＩＩＣ中の点線は、一重または二重結合を表す。
【００４０】
代替の実施形態において、本明細書に記載される組成物および方法の化合物は、式ＩＩの化合物に包含され、
【００４１】
【化４】
2014532729.tif 000005
【００４２】
式中、Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ａ、およびＢは、それらが式Ｉ中の置換基である場合、上記のように定義され、
Ｇは、式ＩＶＡ、式ＩＶＢ、式ＩＶＣ、式ＩＶＤ、式ＩＶＥ、および式ＩＶＦからなる群から選択され、
【００４３】
【化５】
2014532729.tif 000006
【００４４】
式中、Ｒ２０、Ｒ２３、Ｒ２４、およびＲ２９は、ＣＨ、ＣＨ２、Ｏ、Ｎ、およびＮＨからなる群から選択され、そのため、これらの置換基のそれぞれの原子価は、中性であり（即ち、これらの置換基は、正の電荷も負の電荷も持たない）、
Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ２５、Ｒ２７、Ｒ２８、Ｒ３０、およびＲ３１は、水素、Ｃ１−５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシからなる群から選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味する。
【００４５】
代替の一実施形態において、本明細書に記載される組成物および方法の化合物は、式Ｖの化合物に包含され、
【００４６】
【化６】
2014532729.tif 000007
【００４７】
式中、Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ａ、Ｂ、Ｖ、およびＷは、式Ｉについて上記のように定義され、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つは、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つは、複素環式置換基であり、少なくとも１個のヘテロ原子はＮであり、当該複素環式置換基はそれ自体、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシで１回以上、任意に独立して置換されてもよく、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味する。
【００４８】
幾つかの実施形態において、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つは、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つは、ピペリジン、ペルヒドロピリミジン、モルホリン、ピリジン、ピリミジン、インドール、イソインドール、キノリン、イソキノリン、オキサゾール、チアゾール、イミダゾール、およびそれらの誘導体からなる群から選択される置換基であり、当該ピペリジン、ペルヒドロピリミジン、モルホリン、ピリジン、ピリミジン、インドール、イソインドール、キノリン、イソキノリン、オキサゾール、チアゾール、イミダゾール、またはそれらの誘導体はそれ自体、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシで１回以上、任意に置換されてもよく、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、またはアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味する。
【００４９】
幾つかの実施形態において、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つは、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つは、式ＶＩＡおよび式ＶＩＢからなる群から選択され、
【００５０】
【化７】
2014532729.tif 000008
【００５１】
式中、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちの少なくとも１つがＮであり、ＮではないＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちのいずれかがＣＲｘであり、ＮではないＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のそれぞれについては、Ｒｘが独立して、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで１回以上、任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される低級は、好ましくは、Ｃ１−Ｃ６であり、
Ｒ３７が、Ｏ、ＮＨ、またはＮＣＨ３であり、
Ｒ３８が、ＮまたはＣＨであり、Ｒ３８がＣＨであるとき、Ｒ３７が、ＮＨまたはＮＣＨ３であり、Ｒ３９およびＲ４０が独立して、水素またはＣＨ３である。
【００５２】
さらなる実施形態において、ＮではないＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちのいずれかはのうちのいずれかは、ＣＨである。
【００５３】
さらなる実施形態において、Ｒは、ＣＨ３またはＣＨ２ＣＨ３であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、水素であり、ＡおよびＢのうちの１つが水素であり、ＡおよびＢのうちのもう１つがＣＨ３であり、ＶおよびＷは、それぞれ独立して、水素またはＣ１−Ｃ５アルコキシである。
【００５４】
さらなる実施形態において、ＶおよびＷのうちの１つがメトキシであり、もう１つが水素である。本実施形態の一変形例において、Ｖはメトキシであり、Ｗは水素である。
【００５５】
さらなる実施形態において、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちの少なくとも２つがＮであり、残りがＣＨである。
【００５６】
さらなる実施形態において、Ｒ３７がＯであり、Ｒ３９およびＲ４０が同一物であり、かつ水素またはＣＨ３である。
【００５７】
さらなる実施形態において、Ｒ３７が、ＮＨまたはＮＣＨ３であり、Ｒ３９およびＲ４０が水素である。
【００５８】
他の実施形態において、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つが、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基がそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つが、式ＶＩＣ、式ＶＩＤ、および式ＶＩＥからなる群から選択され、
【００５９】
【化８】
2014532729.tif 000009
【００６０】
式中、Ｒ４１およびＲ４２のうちの１つがＮであり、もう１つがＣＨであり、Ｒ４３が、ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり、Ｒ４４、Ｒ４５、およびＲ４６のうちの１つがＮであり、Ｒ４４、Ｒ４５、およびＲ４６のうちの２つ目が、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、またはＮ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）であり、Ｒ４４、Ｒ４５、およびＲ４６のうちの３つ目がＣＨであり、複素環式基上の任意のメチン炭素が、複素環式基と式Ｖの化合物との付着点として機能し得る。
【００６１】
式Ｉの化合物を生成するための一般的な反応スキームを、以下のスキームＩに示す。
【００６２】
【化９】
2014532729.tif 000010
【００６３】
スキームＩでは、保護基が、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺによって表される置換基に応じて使用されることが必要であり得ることを認識されるべきである。さらに、Ａおよび／またはＢを、上記のスキームＩ（式Ｉに示される）に加えて、炭素−炭素三重結合に隣接されるメチレン官能基の置換基と置き換え得ることを認識されるべきである。
【００６４】
式Ｉの化合物を生成するために使用され得る別の可能な反応スキームを、以下のスキームＩＩに示す。
【００６５】
【化１０】
2014532729.tif 000011
【００６６】
適切な保護基および脱保護基が、スキームＩＩにおいて、Ａ、Ｂ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺによって表される様々な置換基に応じて使用されることが必要であり得ることを理解されるべきである。同様に、適切な保護基および脱保護基が、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４によって表されるピリミジニル誘導体の２および４位で窒素に存在し得る様々な置換基に応じて使用されることが必要であり得ることを認識されるべきである。また、上記のスキームにおいて、置換基ＡおよびＢを含有する炭素が、キラルであり得、（そして、１つの鏡像体が、別の異性体を上回る大きな過剰率で存在し得る）ことも認識されるべきである。したがって、スキームＩＩでは、任意の鏡像体過剰率は、スキームＩＩに従って、ピリミジニルプロパルギルアリール化合物（例えば、式Ｉに示されるような）を生成するとき、維持されよう。代替として、置換基ＡおよびＢを、合成プロセス中、組み込むことができる。例えば、スキームＩＩでは、置換基ＡおよびＢを、工程ａ）およびｂ）を行った後に加えてもよいが、工程ｃ）を行う前に、加えてもよい。
【００６７】
一部の化合物は、参照文献Ｐｅｌｐｈｒｅｙ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２００７，５０，ｐｐ．９４０−９５０）（すべての目的のために、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に示される方法によって作製することができる
【００６８】
さらに、上記の反応スキームＩおよびＩＩは、式ＩＡの化合物、例えば、式ＩＡ中のＥが式ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、またはＩＩＩＣのうちのいずれかである化合物のうちのいずれかを作製するために容易に改変することができることを認識されるべきである。
【００６９】
より大きなレベルの効力が、現在、作製されている化合物によって依然として調べられている空間の領域をうまく活用することによって達成され得ると考えられる。ＢａＤＨＦＲに結合する代表的な阻害剤の分析は、細菌酵素に対して効力の増加をもたらし得る５つの異なるライブラリートポロジーを示唆している。これらの５つのライブラリーは、２つが中央の疎水性ポケット中の平面的な芳香族環を保護し、３つが同じ一般的領域に非芳香族の架橋された二環式骨格を示す、２つの主要なスーパーファミリーに大きく分類することができる。以下に列挙された化合物を参照のこと。
【００７０】
【化１１】
2014532729.tif 000012
【００７１】
上記のファミリーは、ＤＨＦＲ阻害剤ライブラリーの一般的なトポロジーを示す。ライブラリー成分を示す上記のものでは、アリールは、ベンゼノイドまたは非ベンゼノイドの芳香族の様々な基を表し、ＧＤは、保存コア領域に添付される置換基の様々な群を表す。
【００７２】
アザ架橋されたライブラリー
一実施形態において、骨格は、アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン環に基づいている。ＢａＤＨＦＲの活性部位への親アザ架橋された類似体のドッキングは、頂点位から保護されている官能基が、酵素に結合している回転異性体状態に応じて、「上方」または「下方」のポケットのいずれかを占有するのに適していることを示唆している（図５を参照のこと）。いずれにしても、この官能基が１つのポケットに置かれると、反対側のポケットは、二環式系のエンド置換基から保護する官能基から直接接近可能である。多くの異なる回転異性体は、Ｉｌｅ５１との立体の衝突を避けるために置換されていない２つの炭素橋のうちの１つを維持することは、良好な一致をもたらすことが探求され、見出されている。我々の第一世代のアザ架橋設計は、２つの異性体の骨格が起源であり、それぞれ、プロパルギルリンカーに近位であるか、または遠位である架橋窒素およびエンド型ヒドロキシ基の多様性のある２つの点を含む。
【００７３】
アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン骨格（式ＩＩＩＡを参照のこと）へのディールスアルダーのアプローチは、ピロール核の大きな共鳴安定化による、競合する求電子置換、または一般的に低い反応性の問題に直面し得る。しかしながら、ジメチルアセチレンジカルボキシレートおよびトシルアセチレン等のアセチレンジエノファイルが、非置換および２，５−二置換ピロールの両方に有効に加えることが示されている。一置換ピロールは、位置制御の問題を有し得る。これらの骨格は、この種の化合物への調製経路が、一般的興味にもかかわらず、縮合環系においてほとんど存在しない場合、本出願における骨格を越える有用性を有し得る（スキーム５を参照のこと）。
【００７４】
【化１２】
2014532729.tif 000013
【００７５】
保護されたピロール−２−エタノール２７は、関連のない研究のために以前に調製されている。トシルアセチレンとのディールスアルダー付加環化は、単純な電子条件に基づいて位置異性体２８を得ることが期待される。親系の公知の先例に続いて、非置換オレフィンおよびトシル部分は、連続して還元されて、アルケン２９を得る。一般的な中間体２９は、以下に概説されるように、位置異性体アルコール３０ａおよび３０ｂに処理される。アルデヒド３１ａおよび３１ｂへの保護基の調節および酸化、続いて、認証および包括的脱保護により、一般的な骨格３２ａおよび３２ｂを得る。橋頭置換基のない２９に関連した親アザ二環式系では、オレフィンへの付加（エポキシ化、ジヒドロキシル化）が、エキソ面から排他的に生じることが知られている。しかしながら、橋頭基での置換の存在は、オレフィン周辺にさらなる立体的障害を与え、エンドモードの攻撃への選択性を交換し得る。内因性の面制御に基づいて中間体２９からの代替経路を、スキーム６に示す。
【００７６】
【化１３】
2014532729.tif 000014
【００７７】
オレフィンにおけるエキソ指向の攻撃が好ましい場合、側鎖エタノールは、大量の基がオレフィンの遠位炭素に加えられるように、制御素子として作用しなければならない。したがって、ヒドロホウ素化、続いて、中間体オルガンボランの酸化は、３３を送達することが期待され、これにより、アルコール３０ｂを容易に還元することができる。同様に、エポキシ化により、３４を得るはずであり、大量の水素化ドナーを有する還元的開口部は、最小のヒンダード末端で生じて、３５を得るはずである。高度に関連した化合物において、エキソヒドロキシル基は、誘導されたトリフラートを通してエンドアルコールに容易に変換することができることが知られている。同様のプロトコルにより、３０ｂを得る。
【００７８】
代替のエンドモードが支配する場合、エポキシ化により、３６を得るはずであり、エポキシドの還元的開口部は、橋頭基によって制御されて、３０ａを得る。対照の同様の元素を用いて、その他の異性体が、利用可能であり得る。エンド面における水銀化、続いて、水銀イオン３７の最小のヒンダード側で水の攻撃により、３８を得た。得られた有機水銀化合物の還元およびトリフラートによる反転により、代替の異性体３０ｂを得た。
【００７９】
本出願に開示されるすべて３つの二環式骨格への合成アプローチは、鍵となる付加環化反応を用いて、架橋された化合物を組み立てる。素晴らしい先例が、同様の付加環化反応プロセスにおいてフランおよびシクロヘキサジエンの幅広い利用のために存在するが、ピロールを用いた付加環化反応が、より高感度のプロセスであることは公知である。すべての出発骨格へのアクセスが得られたことを確認するために、既知の中間体から鍵となるアザ架橋された化合物への代替経路が、非付加環化経路を通して調製され得る（スキーム７を参照のこと）。
【００８０】
【化１４】
2014532729.tif 000015
【００８１】
エンドアルコール３９および４０が知られており、両方ともに、短い配列を通して、およびラセミおよびエナンチオマー純粋形態において調製され得る。ラセミ化合物は、単一の鏡像体として特定の化合物を調製するために使用され得る。初めに、シリルエーテルとして遊離ヒドロキシル基を保護し、続いて、橋頭エステルをその対応するアルデヒド４１および４２に半還元する。骨格の調製物への鍵は、アルデヒドを認証する能力である。次いで、鎖延長は、公知のメトキシにＷｉｔｔｉｇ試薬を使用することによって行われ、これは、単純な酸加水分解時、アルデヒド４３および４４を生成する。一旦アルデヒドを入手すると、末端アセチレンに対する第２の認証が、大平ベストマンプロトコルを用いて行われ、酸性条件下で、ＢＯＣおよびＴＢＳ基の最終的な同時に起こる脱保護は、ライブラリー構築体に対して２つの鍵となる骨格４５および４６を得る。
【００８２】
これらの架橋された骨格の調製が幾つかの工程を必要とするが、合成の最後の最後まで多様化が導入されない、つまり、形質転換または精製が平行して行われる必要がほとんどない。ライブラリーの平行合成とは、ライブラリー化合物が、３つの工程において、骨格から生成することができることを意味する（スキーム８を参照のこと）。
【００８３】
【化１５】
2014532729.tif 000016
【００８４】
骨格４５および４６はともに、多様化のために２つの部位を含有する。架橋窒素は、固相カップリング試薬を用いた初期のアシル化が、並行に行われて、アミド４７を得るように、エンドアルコールよりもはるかに速く反応することが期待される。直接アルキル化等のアルコールにおける第２の多様化を達成して、化合物４８を含有するエーテル、エステル、または他の酸素の様々な配列を形成することができる。ライブラリー構築の最終段階は、ヨードピリミジンを用いた標準的な園頭カップリングを伴って、最終的なライブラリー４９を得る。
【００８５】
オキサ架橋されたライブラリー
別の魅力的な骨格は、オキサビシクロ［３．２．１］オクタン骨格に基づく（式ＩＩＩＢを参照のこと）。この骨格は、前述のアザ二環式系とはほんのわずかに異なっているように思われる。しかしながら、橋の大きさの変化は、二環式骨格の結合モードを変えるように思われる。より大きく、より柔軟性のある３−炭素橋は、置換を変えながら、「上方」ポケットにおいて残基と接触させる良好なファンデルワールス力を形成する（図５を参照のこと）。２−炭素橋は、非置換であり、アルケン酸化状態にある場合、それらが、Ｉｌｅ５１との潜在的な立体相互作用を制限するという点において、うまくドッキングする化合物を提供する。
【００８６】
様々な方法は、これらの種類の環系の調製のために存在する。非置換、２−一置換および２，５−二置換フランは、テトラブロモシクロプロペン（ＴＢＣＰ）と環状縮合反応させて、高度に官能化されたビシクロ［３．２．１］オクタジエンコアを得ることが示されている。このコンパクト系の周辺に、高度の官能基は、３−炭素橋の上に基の簡単かつ立体選択的導入を可能にする。手法はまた、これらの種類の誘導体のエナンチオピュアなバージョンを調製するために開発されている。これらの骨格については、ＴＢＣＰ反応が、保護された３−フリルエタノール、事前に調製された化合物とともに使用することができる（スキーム９を参照のこと）。
【００８７】
【化１６】
2014532729.tif 000017
【００８８】
ＴＢＣＰおよび５１の環状縮合により、銀の媒介による加水分解を通してジブロモエノン中間体に変換される２つの位置異性体のテトラブロミド５２を得る。以前に、推定されるアリル型カチオン中間体における水のような少量の求核試薬の攻撃により、一般的に、単純なクロマトグラフィーによって分離することができる位置異性体のケトンの混合物（メチルが橋頭である場合、約２：１、それが橋頭でフェニルである場合、約５：１）を得ることが示されている。ケトン５３および５４はともに、同じ程度で調製することができることが期待される。また、親誘導体は、標準的な条件下で、ラジカル脱臭素化によって容易に得ることができることも知られている。ジブロモエノンは、並行の誘導体化に対してかなりの数の選択肢を得る。例えば、エノン５５および５６を生成することができる。アザ架橋された系と同様に、これらの２つの位置異性体の中間体から鍵となる出発骨格への変換が続く（スキーム１０を参照のこと）。
【００８９】
【化１７】
2014532729.tif 000018
【００９０】
シリル基の除去、酸化、およびアルキン形成は、アセチレン５７および５８を生じる（スキーム１０を参照のこと）。この系列では、有機銅酸化物を用いて、多様化工程を可能にすることができる。末端酸性アセチレンが前述の工程（複数可）において使用される試薬に適合しない場合、ＴＭＳを加えて、この酸性水素を保護することができる。代替として、非保護アルキンを保護する必要がない場合、ＴＭＳの取り込みは、除外される。ＢａＤＨＦＲの活性部位でのこれらの化合物のモデル化は、３炭素橋が、高度に柔軟性があり、エンドおよびエキソ置換基の両方が、酵素との好ましい接触を提供する可能性が高いことを示した。異性体はともに、調べることができる（スキーム１１を参照のこと）。
【００９１】
【化１８】
2014532729.tif 000019
【００９２】
エノンのβ位への銅酸化物試薬の付加は、５９への付加が通常、より接触可能なエキソ面上に好適であるように、局所的な立体環境によって制御される一方、６０では、エンドモードが観察されるべきであるように、付加が橋頭置換基からの干渉によって誘導される。ケトンの還元的アミノ化を通して第２の並行の多様化工程は、同じ要因によって制御されて、中間体６３および６４を得、多様化は、３炭素橋の反対側の面上に位置付けられる。類似体への最終的な変換は、アセチレンを非ブロック化し、続いて、標準的な園頭カップリングを行い、６５および６６によって例示されるリード系列を得ることによって達成することができる。
【００９３】
カルバ架橋されたライブラリー
一実施形態において、ビシクロ［２．２．２］オクタンを生成することができる。この比較的剛性かつコンパクトな二環式系は、前述の二環式骨格よりも高度な内部対称性を有する。モデリング研究は、１つの橋が非置換の状態であり得るが、残りの２つの橋は、様々なパターンにおいて置換することができることを示唆している（図７）。
【００９４】
３つの関連した骨格は、既知の経路の若干の修正によって利用可能である一般的なケト誘導体から調製することができる（スキーム１２を参照のこと）。
【００９５】
【化１９】
2014532729.tif 000020
【００９６】
６７のビニル硫酸塩は、分子内のディールスアルダー反応においてケテン等価物としての機能を果たし得る。熱付加環化により、６８を得、これを２つの工程のホウ素化／酸化の順序によって、ケトン６９に変換することができる。ラセミ二環式ケトン７１は、７０からの類似の経路によって調製することができ、シクロヘキサジエンエタノールのスルホン化によって利用可能である。また、７２のＴＭＳ基を用いることによって、このラセミ調製物を、鏡像異性体経路に延在し、６７の関連したメチル基によって発揮されるジアステレオ制御を模倣することが可能であることも証明され得る。エナンチオピュアなα−シリルアルコールの調製は、対応するアシルシランのＣＢＳ還元によって達成され得る。ラセミおよび恐らくはキラルビルディングブロック７１への経路を用いて、３つの相補的骨格は、この一般的な中間体から調製される（スキーム１３を参照のこと）。
【００９７】
【化２０】
2014532729.tif 000021
【００９８】
７４の酸化により、ケトアルデヒド７５得、これを、より反応性のあるアルデヒドと大平ベストマン試薬との反応によって、７６に変換して、骨格７６を得ることができる。７６等の二環式ケトンの還元は、オレフィン橋を有する最小のヒンダード面からの還元剤アプローチとして高レベルのジアステレオ選択性で生じることが知られている。したがって、第２の骨格７７は、大量の水素化物源を用いた還元時に、形成されるはずである。代替として、７８の直接還元は、ビス保護された系８０に変換されるであろう類似の立体制御によりジオール７９を得るはずである。橋頭エタノール基によって制御された位置選択的なヒドロホウ素化／酸化の順序により、ケトン８１を得るはずである。骨格８４は、７６と類似した順序によって生成される。これらの３つの鍵となる骨格は、かなり簡単な多様化手順を用いて、新しい阻害剤の小さな集中的なライブラリーの生成を可能にする（スキーム１４を参照のこと）。
【００９９】
【化２１】
2014532729.tif 000022
【０１００】
これらの骨格の多様化は、ヒドロキシル基およびケト基の直交性を用いることによって達成することができる。ケト基の多様化は、様々なヒドラジン、スルホニルヒドラジン、およびアシルヒドラジンとの縮合によって生じ、樹脂の捕獲を用いて、過剰な試薬を除去する。標準的なアシル化手順を用いて、アルコール官能基を合成する。ジアミノピリミジンへの最終的な付着は、類似体ファミリー８８〜９０への経路を完成する。
【０１０１】
【化２２】
2014532729.tif 000023
【０１０２】
市販の３，５−ジブロモアニソールから容易に調製されるアセトフェノン誘導体９１を、ピリジン−４−ボロン酸とクロスカップリングして、９２を得た。アセチル基の認証は、メトキシメチルホスホニウムクロリドで初期処理して、エノールエーテルを得ることによって達成され、これを、親ビフェニル系列におけるプロトン条件の使用よりも優れていることが証明された軽度の加水分解条件（Ｈｇ（ＯＡｃ）２／ＫＩ）下で、アルデヒドに使用した。最も可能性が高いのは、ベンジル位のエノール化、続いて、酸化および開裂による反応を含む、プロセスによって、アルデヒド９３が、多少不安定であり、大気中の酸素への曝露時に、９２に戻って低下する場合、反応物から空気を厳密に除外することは、きわめて重要であった。大平ベストマン試薬によるアルデヒド９３の処理は、アルキン９４を直接生成して、これを、ヨード−ピリミジン９５ａ／ｂとの園頭カップリングに使用して、良好な全収率で、所望の阻害剤９６および９７を得た（スキーム１５）。
【０１０３】
アリールブロミドのアミノ化を含むこの経路の改変を用いて、中央の芳香環に飽和複素環を導入し得た（スキーム１６）。３つの異なる飽和複素環９８〜１００を、ブロモアセトフェノン９１とのＢｕｃｈｗａｌｄカップリングによって中央の芳香環に添付して、良好な収率で、モルホリンおよびピペラジン誘導体１０１〜１０３を得た。前述のように、アセチル基の認証を進めて、最終的に末端アセチレン１０７〜１０９を送達した。さらなるＮ−メチルピペラジンユニット１１０は、脱保護およびホルムアルデヒドによる還元的アミノ化によって、１０９から調製した。対応するヨードピリミジン９５ａ／ｂによる４つのアルキンの最終的な園頭カップリングにより、モルホリン阻害剤１１１〜１１４およびＮ−メチルピペラジン類似体１１６を得た。非置換ピペラジン変異体１１７は、ＢＯＣ保護基の開裂によって調製した。小パネルの複素環類似体を用いて、鍵となる物理的および生物学的特性における置換の効果が評価され得た。
【０１０４】
スキーム１６は、モルホリンおよびピペラジン系ビフェニル阻害剤に対する合成経路を示す。
【０１０５】
【化２３】
2014532729.tif 000024
【０１０６】
一実施形態において、本明細書に記載される組成物および方法の化合物は、以下の表１に示されるような、化合物を含む。一実施形態において、本明細書に記載される組成物および方法の化合物は、表１の化合物１４７〜１５９に示されるような、第三世代プロパラジル類似体の化合物を含む。
【０１０７】
【表１−１】
2014532729.tif 000025
【０１０８】
【表１−２】
2014532729.tif 000026
【０１０９】
上に列挙される化合物のための合成および実験データが、本明細書に提供される。
【０１１０】
他の実施形態において、本明細書に記載される組成物および方法は、原虫活性を有する化合物に関する。クリプトスポリジウムホミニスからのＤＨＦＲ酵素の構造に基づいて、ＤＨＦＲ酵素の強力かつ有効な阻害剤の発見をもたらす新規の骨格が開発された。構造に基づいた薬物設計アプローチの初期の開発は、２．７Åの分解能に対するＣｈＤＨＦＲの結晶構造の決定から開始した。ＣｈＤＨＦＲの構造に基づいて、２，４−ジアミノピリミジン環とアリール環との間のプロパルギルリンカーによって画定される、良好な薬物様特性および合成可能性を維持したリード系列の化合物が開発された。３８ｎＭの阻害定数（ＩＣ５０）および３４２Ｄａの分子量を有する高度に有効なリガンドの一実施形態が、化合物Ｘ（本明細書では、ＵＰＣ１１１Ａとも称される）である。
【０１１１】
【化２４】
2014532729.tif 000027
【０１１２】
その後、第１の系列の化合物で観察されるように、寄生性酵素に対して、高いレベルの効力を維持しただけでなく、非常に高いレベルの選択性も示した、構造分析に刺激を受けた第二世代プロパルギル類似体が開発された。
【０１１３】
ＣｈＤＨＦＲおよびヒトＤＨＦＲ（ｈＤＨＦＲ）構造体の検査は、活性部位が、高度に相同であり、存在する残基差が同じ化学特性を維持することを示した。２つの酵素間の著しい差は、活性部位への開口部に位置する。ｈＤＨＦＲでは、活性部位へのアクセスは、とりわけ、ＣｈＤＨＦＲには存在しない４つの残基ループ（Ｐｒｏ６１、Ｇｌｕ６２、Ｌｙｓ６３、Ａｓｎ６４、またはＰＥＫＮループ）によって効果的に制限される（図８を参照のこと）。２つの酵素間の構造差を活用することによって、ＣｈＤＨＦＲに対する選択性を有するリガンドが設計された。
【０１１４】
第一世代プロパルギル阻害剤により初期構造分析は、リード化合物Ｘが上記の構造上の違いを活用するように思われなかったことを示した。実際、化合物Ｘは、ヒト酵素を上回る寄生性酵素に対してわずか８倍の選好性を示した（表４を参照のこと）。ＣｈＤＨＦＲおよびｈＤＨＦＲの構造の試験は、２つのビフェニル系列の誘導体をもたらし、第２のアリール環は、近位アリール環の５’または４’位に設置された。
【０１１５】
ＣｈＤＨＦＲおよびｈＤＨＦＲにおけるリード化合物のドッキングされた複合体の検査は、化合物Ｘの芳香族コアでの３’または４’位から突出する官能基が、ｈＤＨＦＲにおけるＰＥＫＮループによって満たされた空間領域と相互作用するように正確に平衡を保ち得ることを示唆した。初期リード化合物の３’または４’位への立体置換を付加するための全ストラテジーをスキーム１７に示す。これらの位置で立体置換を予測することによって、ループ領域との相互作用を特異的に安定させる、または不安定にさせる可能性があった。したがって、特定の立体相互作用がヒト酵素への結合を不安定にさせ、原虫形態に対して高度の効力を維持する一方、活性部位での残基の柔軟性の度合いを精査することが見出された。新しく設計された類似体は、３つの部分を維持した：１つ目は、Ｐｈｅ３６、Ｌｅｕ３３、およびＬｅｕ２５と相互作用することが予測されるピリミジンのＣ６でのメチル；２つ目は、残基Ｔｈｒ５８およびＩｌｅ６２と好ましく相互作用することが予測されるプロパルギルメチル；そして、３つ目は、活性部位で、Ｌｅｕ２５の主鎖および側鎖の両方と相互作用することが予測される３’メトキシ基。
【０１１６】
【化２５】
2014532729.tif 000028
【０１１７】
ビフェニル系列のコンピュータ分析は、８つの新しい化合物の合成をもたらし、これらのすべてが改善された効力および選択性を示す（表３を参照のこと）。ラセミ５’−ビフェニル類似体は、最も強力であり、選択的なラセミ化合物であり、単一のＲ鏡像体は、全体的に、最も効力があり、選択的な化合物である。さらに、初期リード化合物にさらなる要素を合わせることにより、高度選択的な化合物を発生した。
【０１１８】
一実施形態において、本明細書の組成物および方法は、抗菌活性を有する化合物に関する。メタビフェニル系列の本明細書に記載される第二世代プロパルギル類似体は、重要な病原体からの拡大した酵素セットに対して活性を示す。この種類は、高分解能の構造分析によって刺激を受け、この系列の化合物は、野生型ＭＲＳＡ  ＤＨＦＲ、およびＴＭＰに無感覚を導入することで知られている臨界耐性突然変異体Ｆ９８Ｙの強力な阻害を示す。例えば、表１の化合物１４０は、野生型ＳａＤＨＦＲに対して４２ｎＭ、そして、化膿連鎖球菌に対して１９０ｎＭのＩＣ５０値を有する。化合物Ｙは、中度の抗菌活性を示す（黄色ブドウ球菌に対して５．８μｇ／ｍＬそして、化膿連鎖球菌に対して０．１μｇ／ｍＬのＭＩＣ値）。さらに、ＭＣＦ−１０細胞に対して哺乳動物の細胞毒性は、ＭＲＳＡおよび化膿連鎖球菌に対して、それぞれ、８倍、および４８４倍の選択性を示す。
【０１１９】
芳香族コア領域に立体バルクを導入するための直接的方法が、第二世代ＤＨＦＲ阻害剤の合成に必要であった。立体バルクがさらなる芳香環の形態で導入され得るビアリール型の骨格が利用された。ビアリール骨格は、広範囲の潜在的な阻害剤の調製のために鈴木クロスカップリングによって提供される柔軟性および多用途性が提供される。
【０１２０】
第２のアリール環の設置および置換パターンの両方を変化させる類似体ファミリーが、実質的には作製され、Ｓｙｂｙｌ環境において、プログラムのＳｕｒｆｌｅｘ（Ｔｒｉｐｏｓ，Ｉｎｃ）を使用して、ＣｈＤＨＦＲおよびｈＤＨＦＲの両方にドッキングされた。Ｓｕｒｆｌｅｘ−Ｄｏｃｋの柔軟性は、小分子断片を用いて活性部位をプローブすることによって作製された、活性部位を示すｐｒｏｔｏｍｏｌにリガンドをドッキングする。リガンドは、断片化され、疎水性、極性、反発、エントロピー、および溶媒和の用語を含む、経験的スコア関数に基づいてｐｒｏｔｏｍｏｌに構築される。タンパク質の柔軟性を調べるために、受容体構造のアンサンブルは、分子動力学の時間的経過にわたって最小化された立体配座のスナップショットに基づいて作製され、スコアは、アンサンブルを通して平均化された。ドッキングスコアは、主として、受容体へのリガンドの浸透を概算する関連した「クラッシュ値」とともに戻される。０により近い「クラッシュ値」が好ましい。
【０１２１】
これらのコンピュータによる方法を用いて、一連の８つの潜在的阻害剤が評価された。潜在的阻害剤のうちの４つは、５’系列の阻害剤であり、４つは、４’系列であった（図１０を参照のこと）。それぞれの系列は、第２のアリール環のオルト位で立体バルクを増加させることを組み込まれた誘導体から成った。コンピュータ分析は、第２のアリール環の立体体積がＣｈＤＨＦＲにおいて微小変化を伴って増加する場合、これらの阻害剤についてのｈＤＨＦＲに対するクラッシュ値が、次第に負になることを予測した。例えば、非置換アリール環を有する化合物は、ＣｈＤＨＦＲにおいては、−１．３１、そして、ｈＤＨＦＲにおいては、−２．７９のクラッシュ値を得た。両方のオルト位においてイソプロピル基を有する類似の化合物は、ＣｈＤＨＦＲおよびｈＤＨＦＲにおいて、それぞれ、−４．０８および−１２．７６のクラッシュ値を得た。
【０１２２】
第二世代阻害剤におけるビアリール系骨格の選択は、立体的に必要なビフェニルを組み立てるのに、鈴木カップリングの信頼性によって部分的に決定された。５’結合ビフェニル類似体は、市販の３，５−ジブロモアニソール４の選択的官能基化によってアクセスされた（スキーム１８を参照のこと）。
【０１２３】
【化２６】
2014532729.tif 000029
【０１２４】
金属ハロゲン交換、続いて、Ν，Ν−ジメチルアセトアミドの付加により、アセトフェノン誘導体５を得、これを４つのアリールボリン酸誘導体６ａ〜ｄとクロスカップリングさせて、対応するビフェニル誘導体７ａ〜ｄを得た。ジ−イソプロピルボロン酸６ｄは、以前は知られていなかったが、ジアゾ化、ヨード化、およびリチオ化／ボロン化によるボロン酸への最終的な変換によって、２，６−ジイソプロピルアニリンから容易に調製された。メトキシ置換リンイリドとの縮合によってアセチル部分の認証および得られたエノールエーテルの加水分解により、非常に良好な収率で、アルデヒド８ａ〜ｄを得た。大平ベストマン試薬との縮合により、対応する末端アセチレン９ａ〜ｄを得、これらをヨードピリミジン１１との最終的な園頭カップリングによって阻害剤１０ａ〜ｄに変換した。
【０１２５】
４’結合ビフェニル類似体は、市販の安息香酸誘導体１２から同様の経路を通してアクセスされた。酸から塩化アシルへの変換およびＯｉｌｍａｎ試薬による粗材料の処理により、卓越した収率のアセトフェノン１３を得た。アセチル基は、阻害剤系列に到達するために、前に概説されるように、一連の同一の反応を通して認証された。ビフェニル官能基は、５′結合系列により、鈴木カップリングを介して導入された。
【０１２６】
その後、有意な活性を有する第三世代プロパルギル結合阻害剤が開発された。潜在的な改変のための化合物Ｙの領域は、ＳａＤＨＦＲ：ＮＡＤＰＨ：化合物Ｙの共結晶構造の分析を通して決定された。例えば、Ｃ６置換基とピリミジン環とＶａｌ３１およびＬｅｕ２８との間の疎水性接触、ならびにＢ環置換基とＳｅｒ４９またはＮＡＤＰＨのリボースとの潜在的な相互作用が、最適化され得ることが決定された。立体効果、例えば、プロパルギルメチル基によって生じる込み合い、ならびに親和性、および溶解度の効果もまた、考慮された。
【０１２７】
ビフェニルよりもむしろ、第三世代の化合物は、複素環式類似体である。フェニル環の代わりに、複素環式環に加えて、複素環式類似体は、４つの方法のうちの少なくとも１つにおいて、化合物Ｙとは異なる。幾つかの実施形態において、Ｃ６メチルは、エチルまで延長される。幾つかの実施形態において、プロパルギルメチルが、水素と置き換えられた。幾つかの実施形態において、Ｂ環置換基は、３’位から２’位に移動された。幾つかの実施形態において、Ｃ環メチル基は、除去された。
【０１２８】
ビフェニル構造の遠位環を、窒素含有複素環、つまり、モルホリン、ピペリジン、またはピリジン誘導体によって置き換えた、３種類の類似体が、設計された。これらの類似体が、合成され、溶解度、ならびに、酵素および細胞成長阻害について評価された。ピリジル置換は、この系列における抗葉酸剤のうちのいずれかに対して、最適であることが証明され、最も強力な抗真菌活性レベル（１μｇ／ｍＬ未満）を示した。
【０１２９】
図１５Ａ〜Ｃは、ＮＡＤＰＨ（赤紫色）および（１６Ａ）化合物１４２（紫色）、（１６Ｂ）化合物１４８（緑色）、ならびに（１６Ｃ）化合物１４８（青色）および１３９（緑色）の重ね合わせに結合する黄色ブドウ球菌ＤＨＦＲの構造を示す分子モデルである。
【０１３０】
図１６は、化合物１３９（棒形態）およびＮＡＤＰＨに結合するＣｇＤＨＦＲ（表面レンダリング）の結晶構造である。ビフェニル環は、大部分は、活性部位の開口部に曝露され、そのため、溶媒である。この遠位環中のヘテロ原子の存在は、化合物の疎水性を低下させ、化合物の溶解度を著しく増加させる（表２を参照のこと）。
【０１３１】
【表２】
2014532729.tif 000030
【０１３２】
第三世代プロパルギル類似体を開発するためのストラテジーをスキーム１９に示す。
【０１３３】
【化２７】
2014532729.tif 000031
【０１３４】
モジュール型合成アプローチは、３つの可変断片から阻害剤を効率的に組み立てるために、２つの汎用パラジウム触媒クロスカップリング反応に依存するこれらのプロパルギル結合抗葉酸剤１１２に対して開発された（化合物１１３〜１１５）。３つのドメインのそれぞれは、構造分析を通して特定された鍵となる領域内の多様化のために１つ以上の部位を含む。合成は、芳香環上にさらなる可変の置換を含む容易にアクセスされた３−ブロモベンズアルデヒド（非置換プロパルギル）または３−ブロモアセトフェノン１１４（プロパルギル位でメチル）で開始する。アリールボロン酸およびヘテロアリールボロン１１５による臭化物の鈴木クロスカップリングは、Ｃ環領域内に高レベルの多様化を導入するための直接的かつ便利な方法を提供する。つり下げ型プロパルギル基へのアルデヒド／アセチル官能基のその後の延長は、Ｃ６位で可変基を有するヨードピリミジン１１３に、最終的な園頭カップリングを先行する。このストラテジーは、広範囲の官能基に耐性があり、評価のための幾つかの新しい類似体の調製を可能にする。
【０１３５】
別の実施形態において、本明細書に記載される組成物および方法は、抗真菌活性を有する化合物に関する。一連のリード化合物は、寄生性原虫、クリプトスポリジウムホミニス（ＣｈＤＨＦＲ）由来のＤＨＦＲの構造を分析することによって調製され、ピリミジン環と置換アリール環との間のプロパルギル系リンカーを特徴とする。プロパルギルリンカーは、トリメトプリムと比較して、ピリミジン環とアリール環との間の距離を延在し、アリール環が、ＤＨＦＲ酵素の疎水性ポケット内において、より最適に適合するのを可能にする。
【０１３６】
カンジダグラブラタＤＨＦＲ（ＣｇＤＨＦＲ）の構造が、まだ判定されていないとはいえ、カンジダアルビカンス（ＣａＤＨＦＲ）およびＣｈＤＨＦＲの構造に基づいて、ＣｇＤＨＦＲの相同性モデルの比較は、プロパルギル結合阻害剤もまた、潜在的な抗真菌性リード化合物として機能し得ることを示唆した。実際には、ＣｇＤＨＦＲの相同モデルでは、アリール環によって占められる疎水性ポケットは、ピリミジン環からさらに２Åを置き換え、延長した化合物がＣｈＤＨＦＲよりもＣｇＤＨＦＲにおいてさらにより有効であり得ることを示唆している。
【０１３７】
構造の分析は、リガンドと酵素との間の相互作用の詳細を示し、また、活性部位に近いループ内の残基によって側面に位置する疎水性領域も示し、さらなる結合相互作用は、増加した阻害剤の潜在性および選択性のために利用することができる。ＣｇＤＨＦＲを発現させ、精製した後、２つの異なる骨格に基づいて１１のプロパルギル結合化合物に対する阻害定数（ＩＣ５０）が、酵素アッセイにおいて測定された（表３）。多くの化合物は、１００ｎＭ未満のＩＣ５０値を有するＣｇＤＨＦＲの非常に強力な阻害剤であり、４つの阻害剤（化合物５、６、９、１１）は、２５ｎＭ以下のＩＣ５０値を有する。さらに、プロパルギル化合物がヒトＤＨＦＲでアッセイされた場合、１５６倍の選択性の比率（表３）が観察された。
【０１３８】
【表３】
2014532729.tif 000032
【０１３９】
次いで、化合物は、カンジダグラブラタに対する抗真菌性アッセイにおける抗真菌剤として試験された。幾つかの化合物、具体的には、表３の化合物５および６は、抗真菌性特性を示した。
【０１４０】
上記の構造情報を用いて、第二世代ＣｇＤＨＦＲ阻害剤は、カンジダグラブラタ酵素に関して、サブナノモルの効力および非常に高いレベルの選択性をもたらすように設計された。第二世代ＣｇＤＨＦＲ阻害剤はまた、臨床上用いられる抗真菌剤の濃度に反映する濃度で培地内のカンジダグラブラタを殺すことが見出された。
【０１４１】
前述の第三世代の複素環式類似体はまた、抗真菌剤として試験された。化合物は、ＣｇＤＨＦＲおよびヒトＤＨＦＲ（ｈＤＨＦＲ）を阻害する能力およびカンジダグラブラタの成長を阻害する能力について評価された。これらの化合物は、第二世代ビフェニル系列と比較して、やや弱い酵素阻害を示すが、著しく増強された溶解度を示し、カンジダグラブラタの成長を潜在的に阻害する一方、非常に高い選択性の値を示す。幾つかの誘導体は、臨床上用いられる抗真菌剤に相当する効力を有することが見出された。
【０１４２】
薬学的組成物
１つ以上の薬学的に許容される希釈剤、賦形剤、担体、または送達系と組み合わせて上記に開示される化合物を含有する薬学的組成物が、提供される。化合物のうちの１つ以上は、既知の技術を用いて、薬学的に許容される担体等の生理学的に許容される製剤中に調製され得る。例えば、化合物は、薬学的に許容される賦形剤と組み合わせて、治療用組成物を形成する。
【０１４３】
別の実施形態において、本明細書に提供される組成物は、治療用薬学的組成物を形成するためにスルファ化合物と一緒に、またはそれに加えて投与されてもよい。当技術分野において、スルファ化合物が病原性細菌に対して高い活性を示すことが認識されている。スルファ化合物およびスルファ化合物が作製されるプロセスの非限定例は、米国特許第３，０９１，６１０号（すべての目的のために、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に提供される。
【０１４４】
本明細書に提供される組成物は、固体、液体、またはエアロゾルの形態で投与してもよい。固体組成物の例には、丸薬、クリーム、およびインプラント可能な投薬単位が含まれる。丸薬は経口的に投与してもよい。治療用クリームは、局所的に投与してもよい。インプラント可能な投薬単位は、局所的に投与してもよく、または治療組成物の全身放出のために、例えば、皮下にインプラントしてもよい。液体組成物の例には、筋肉内、皮下、静脈内、動脈内注入に適応可能な製剤、ならびに局所および眼内投与のための製剤が含まれる。エアロゾル製剤の例には、肺への投与のための吸入器製剤が含まれる。
【０１４５】
組成物は、標準的な投与経路によって投与してもよい。一般に、組成物は、局所、経口、経直腸、経鼻、または非経口（例えば、静脈内、皮下、もしくは筋肉内）経路で投与してもよい。さらに、組成物は、持続放出マトリックス、例えば、生分解性ポリマーに組み入れてもよく、そのポリマーは、到達が所望される場所付近にインプラントされる。本方法は、単回投薬の投与、予め決定された時間間隔での反復投薬の投与、および予め決定された期間の持続投与を含む。
【０１４６】
本明細書で使用される、持続放出マトリックスは、材料、通常は、酵素もしくは酸／塩基加水分解、または溶解によって生分解可能であるポリマーより作製されるマトリックスである。一旦、身体に挿入されると、マトリックスは、酵素および体液によって作用される。持続放出マトリックスは、望ましくは、生体適合性材料、例えば、リポソーム、ポリラクチド（ポリ乳酸）、ポリグリコリド（グリコール酸のポリマー）、ポリラクチド−コ−グリコリド（乳酸およびグリコール酸のコポリマー）、ポリ酸無水物、ポリ（オルト）エステル、ポリペプチド、ヒアルロン酸、コラーゲン、コンドロイチン硫酸、カルボン酸、脂肪酸、リン脂質、多糖、核酸、ポリアミノ酸、フェニルアラニン、チロシン、イソロイシン等のアミノ酸、ポリヌクレオチド、ポリビニルプロピレン、ポリビニルピロリドン、およびシリコーンから選択される。好適な生分解性マトリックスは、ポリラクチド、ポリグリコリド、またはポリラクチド−コ−グリコリド（乳酸およびグリコール酸のコポリマー）のいずれかのうちの１つのマトリックスである。
【０１４７】
具体的には、上述の成分に加えて、本発明の製剤は、該当する製剤の種類を考慮する当技術分野で慣行的な他の薬剤を含むことができることを理解すべきである。
【０１４８】
組成物の投薬量は、感染症または癌の進行、使用される特定の組成物、患者の体重および状態等の他の臨床学的因子、ならびに投与経路に依存するであろう。
【０１４９】
治療方法
本明細書に記載される化合物を用いた、細菌、真菌、および原虫感染症の治療方法が提供される。本方法に従って、治療的に有効な濃度の化合物を含有する上述の薬学的組成物のうちの１つ以上は、治療を必要とする個体に投与される。
【０１５０】
本明細書に記載されるＤＨＦＲ阻害化合物は、炭疽菌およびメチシリン耐性黄色ブドウ球菌等の細菌、カンジダグラブラタ、カンジダアルビカンス、およびクリプトコックスネオフォルマンス等の真菌、ならびにクリプトスポリジウムホミニスおよびトキソプラズマ原虫等の原虫からのＤＨＦＲ酵素を含むが、これらに限定されない、多くの異なる病原性生物に対して強力かつ選択的である。これらの化合物および他の同様の化合物はまた、哺乳動物酵素に対して強力であり、抗癌治療薬として有用であり得る。つまり、本発明の化合物は、哺乳動物酵素に対してインビトロで強力な活性を有することが示され、本発明の化合物の幾つかは、哺乳動物細胞株に対して活性を有することが示される。具体的には、阻害化合物５−［３−（３−メトキシ−２’６’−ジイソプロピルビフェニル−４−イル）ブタ−１−エン−１−イル］−６−メチルピリミジン−２，４−ジアミンは、哺乳動物細胞の毒性を示すことが示され、抗癌治療薬として有用であり得る。
【０１５１】
細菌、真菌、および原虫症、または癌に罹患している患者の治療は、患者に、本明細書に記載されるように、記載される化合物のうちの１つ以上を含有する薬学的に許容される組成物を、有効な投薬量で投与することによって達成することができる。有効な結果は、単回投与で得られ得る。最適かつ持続的な効果を達成するために、複数回投与が、必要である場合がある。化合物は、上述のように当業者に知られている製剤および方法を用いて、実質的に精製された組成物として提供され得るか、または薬学的に許容される製剤に入れられ得るか、あるいは持続放出のために送達され得る。これらの製剤は、標準的な経路で投与することができる。一般に、組成物は、上述の様々な経路（例えば、静脈、経皮、腹腔内、髄腔内、皮下、または筋肉内で）投与してもよい。
【０１５２】
本明細書に提供される薬学的組成物のうちの１つ以上の有効な投薬量は、治療されるべき病態または状態、動物もしくはヒトの体重および状態等の他の臨床学的因子、ならびに投与経路に依存するであろう。特定の動物またはヒトにおける化合物の半減期に応じて、１日当たり数回から１ヶ月に１回もしくはそれより少なく投与され得る。本明細書に記載される方法は、同時に、または長期間にわたって与えられる、単回および複数回投与を企図する。
【０１５３】
本明細書に提供される方法は、ヒト、哺乳動物および家畜への両方の使用のための適用を有することが理解されよう。また、本明細書で使用される「個体」という用語は、本明細書に記載される化合物を用いた治療を必要とする動物、ヒト、哺乳動物、または患者を指すことも理解されよう。
【０１５４】
細菌感染症の治療のための一実施形態において、薬学的に許容される量の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩が、個体に投与され、式Ｉは、
【０１５５】
【化２８】
2014532729.tif 000033
【０１５６】
であり、
式中、Ｒは、Ｈ、Ｃ１−５アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、およびヒドロキシからなる群から選択され、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−５アルキル、シクロアルキル、アルコキシアルキル、アリールアルキル、アルキルカルボニル、シクロアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アルコキシアルキルカルボニル、アルコキシアルコキシアルキルカルボニル、アリールカルボニル、ピリジニルカルボニル、アリールオキシアルキル、ハロアルキルカルボニル、およびシアノアルキルカルボニルからなる群から選択され、
ＡおよびＢは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシからなる群から選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、
ＡおよびＢは、それらが結合されている炭素と一緒になって、３から７員の環を形成することができ、当該環員は、アルキレン、アルケニレン、およびアルキニレンからなる群から選択され、アルキレン基、アルケニレン基、およびアルキニレン基のうちのいずれかは、任意に、Ｏ、Ｎ、Ｓ、およびＳｅからなる群から選択される１個以上のヘテロ原子によって遮断されてもよく、当該アルキレンまたはアルケニレンは、Ｃ１−５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシのうちの１つ以上と任意に置換されてもよく、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシ置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルと任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、
Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシからなる群から選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシ置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルと任意に置換されてもよく、
上記の基のいずれかとともに使用される低級は、好ましくは、Ｃ１−Ｃ６である。
【０１５７】
一実施形態において、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺのうちの少なくとも１つが、メトキシ基である。別の実施形態において、Ｗ、Ｘ、およびＹのすべてが、メトキシ基である。別の実施形態において、ＶおよびＹのうちの少なくとも１つが、メトキシ基である。別の実施形態において、ＶおよびＹはともに、メトキシ基である。別の実施形態において、ＡおよびＢのうちの少なくとも１つは、Ｃ１−５アルキルではない。
【０１５８】
真菌感染症の治療のための一実施形態において、薬学的に許容される量の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩が、個体に投与され、式Ｉは、
【０１５９】
【化２９】
2014532729.tif 000034
【０１６０】
であり、
式中、Ｒは、Ｈ、Ｃ１−５アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、およびヒドロキシからなる群から選択され、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−５アルキル、シクロアルキル、アルコキシアルキル、アリールアルキル、アルキルカルボニル、シクロアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アルコキシアルキルカルボニル、アルコキシアルコキシアルキルカルボニル、アリールカルボニル、ピリジニルカルボニル、アリールオキシアルキル、ハロアルキルカルボニル、およびシアノアルキルカルボニルからなる群から選択され、
ＡおよびＢは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシからなる群から選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、
ＡおよびＢは、それらが結合されている炭素と一緒になって、３から７員の環を形成することができ、当該環員は、アルキレン、アルケニレン、およびアルキニレンからなる群から選択され、アルキレン基、アルケニレン基、およびアルキニレン基のうちのいずれかは、任意に、Ｏ、Ｎ、Ｓ、およびＳｅからなる群から選択される１個以上のヘテロ原子によって遮断されてもよく、当該アルキレンまたはアルケニレンは、Ｃ１−５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシのうちの１つ以上と任意に置換されてもよく、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシ置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルと任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、
Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシからなる群から選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシ置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルと任意に置換されてもよく、
上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、好ましくは、Ｃ１−Ｃ６である。
【０１６１】
一実施形態において、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺのうちの少なくとも１つが、メトキシ基である。別の実施形態において、Ｗ、Ｘ、およびＹのすべてが、メトキシ基である。別の実施形態において、ＶおよびＹのうちの少なくとも１つが、メトキシ基である。別の実施形態において、ＶおよびＹはともに、メトキシ基である。別の実施形態において、ＡおよびＢのうちの少なくとも１つは、Ｃ１−５アルキルではない。２８．
【０１６２】
原虫感染症の治療のための一実施形態において、薬学的に許容される量の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩が、個体に投与され、式Ｉは、
【０１６３】
【化３０】
2014532729.tif 000035
【０１６４】
であり、
式中、Ｒは、Ｈ、Ｃ１−５アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、およびヒドロキシからなる群から選択され、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−５アルキル、シクロアルキル、アルコキシアルキル、アリールアルキル、アルキルカルボニル、シクロアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アルコキシアルキルカルボニル、アルコキシアルコキシアルキルカルボニル、アリールカルボニル、ピリジニルカルボニル、アリールオキシアルキル、ハロアルキルカルボニル、およびシアノアルキルカルボニルからなる群から選択され、
ＡおよびＢは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシからなる群から選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、
ＡおよびＢは、それらが結合されている炭素と一緒になって、３から７員の環を形成することができ、当該環員は、アルキレン、アルケニレン、およびアルキニレンからなる群から選択され、アルキレン基、アルケニレン基、およびアルキニレン基のうちのいずれかは、任意に、Ｏ、Ｎ、Ｓ、およびＳｅからなる群から選択される１個以上のヘテロ原子によって遮断されてもよく、当該アルキレンまたはアルケニレンは、Ｃ１−５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシのうちの１つ以上と任意に置換されてもよく、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシ置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルと任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、
Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシからなる群から選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシ置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルと任意に置換されてもよく、
上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、好ましくは、Ｃ１−Ｃ６である。
【０１６５】
一実施形態において、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺのうちの少なくとも１つが、メトキシ基である。別の実施形態において、Ｗ、Ｘ、およびＹのすべてが、メトキシ基である。別の実施形態において、ＶおよびＹのうちの少なくとも１つが、メトキシ基である。別の実施形態において、ＶおよびＹはともに、メトキシ基である。別の実施形態において、ＡおよびＢのうちの少なくとも１つは、Ｃ１−５アルキルではない。
【０１６６】
原虫感染症の治療のための一実施形態において、薬学的に許容される量の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩が、個体に投与され、式Ｉは、上述の通りである。
【０１６７】
癌の治療のための一実施形態において、薬学的に許容される量の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩が、個体に投与され、式Ｉは、
【０１６８】
【化３１】
2014532729.tif 000036
【０１６９】
であり、
式中、Ｒは、Ｈ、Ｃ１−５アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、およびヒドロキシからなる群から選択され、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、それぞれ独立して、水素、およびＣ１−５アルキル、シクロアルキル、アルコキシアルキル、アリールアルキル、アルキルカルボニル、シクロアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アルコキシアルキルカルボニル、アルコキシアルコキシアルキルカルボニル、アリールカルボニル、ピリジニルカルボニル、アリールオキシアルキル、ハロアルキルカルボニル、およびシアノアルキルカルボニルからなる群から選択され、
ＡおよびＢは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシからなる群から選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、
ＡおよびＢは、それらが結合されている炭素と一緒になって、３から７員の環を形成することができ、当該環員は、アルキレン、アルケニレン、およびアルキニレンからなる群から選択され、アルキレン基、アルケニレン基、およびアルキニレン基のうちのいずれかは、任意に、Ｏ、Ｎ、Ｓ、およびＳｅからなる群から選択される１個以上のヘテロ原子によって遮断されてもよく、当該アルキレンまたはアルケニレンは、Ｃ１−５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシのうちの１つ以上と任意に置換されてもよく、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシ置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルと任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、
Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシからなる群から選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシ置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルと任意に置換されてもよく、
上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、好ましくは、Ｃ１−Ｃ６である。
【０１７０】
一実施形態において、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺのうちの少なくとも１つが、メトキシ基である。別の実施形態において、Ｗ、Ｘ、およびＹのすべてが、メトキシ基である。別の実施形態において、ＶおよびＹのうちの少なくとも１つが、メトキシ基である。別の実施形態において、ＶおよびＹはともに、メトキシ基である。別の実施形態において、ＡおよびＢのうちの少なくとも１つは、Ｃ１−５アルキルではない。
【０１７１】
組成物および方法は、以下の限定されない実施例によってさらに例示されるが、これらは決して、その範囲に限定を課すものと解釈されるべきではない。それどころか、本発明の説明を読んだ後、本発明の精神および／または添付の特許請求の範囲から逸脱することなく、当業者に示唆し得る様々なその他の実施形態、その変形例、および等価物をなし得ることが明確に理解されるべきである。
【０１７２】
細菌感染症の治療のための一実施形態において、薬学的に許容される量の式Ｖの化合物またはその薬学的に許容される塩が、個体に投与され、式Ｖは、
【０１７３】
【化３２】
2014532729.tif 000037
【０１７４】
であり、
式中、Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ａ、Ｂ、Ｖ、およびＷは、式Ｉについて上記のように定義され、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つは、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つは、複素環式置換基であり、少なくとも１個のヘテロ原子はＮであり、当該複素環式置換基はそれ自体、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシで１回以上、任意に独立して置換されてもよく、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味する。
【０１７５】
幾つかの実施形態において、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つは、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つは、ピペリジン、ペルヒドロピリミジン、モルホリン、ピリジン、ピリミジン、インドール、イソインドール、キノリン、イソキノリン、オキサゾール、チアゾール、イミダゾール、およびそれらの誘導体からなる群から選択される置換基であり、当該ピペリジン、ペルヒドロピリミジン、モルホリン、ピリジン、ピリミジン、インドール、イソインドール、キノリン、イソキノリン、オキサゾール、チアゾール、イミダゾール、またはそれらの誘導体はそれ自体、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシで１回以上、任意に置換されてもよく、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、またはアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味する。
【０１７６】
幾つかの実施形態において、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つは、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つは、式ＶＩＡおよび式ＶＩＢからなる群から選択され、
【０１７７】
【化３３】
2014532729.tif 000038
【０１７８】
式中、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちの少なくとも１つがＮであり、ＮではないＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちのいずれかがＣＲｘであり、ＮではないＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のそれぞれについては、Ｒｘが独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基がそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで１回以上、任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される低級が、好ましくは、Ｃ１〜Ｃ６であり、
Ｒ３７が、Ｏ、ＮＨ、またはＮＣＨ３であり、
Ｒ３８が、ＮまたはＣＨであり、Ｒ３８がＣＨであるとき、Ｒ３７が、ＮＨまたはＮＣＨ３であり、Ｒ３９およびＲ４０が独立して、水素またはＣＨ３である。
【０１７９】
さらなる実施形態において、ＮではないＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちのいずれかはのうちのいずれかは、ＣＨである。
【０１８０】
さらなる実施形態において、Ｒは、ＣＨ３またはＣＨ２ＣＨ３であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、水素であり、ＡおよびＢのうちの１つが、水素であり、ＡおよびＢのうちのもう１つが、ＣＨ３であり、ＶおよびＷは、それぞれ独立して、水素またはＣ１−Ｃ５アルコキシである。
【０１８１】
さらなる実施形態において、ＶおよびＷのうちの１つが、メトキシであり、もう１つが、水素である。本実施形態の一変形例において、Ｖはメトキシであり、Ｗは水素である。
【０１８２】
さらなる実施形態において、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちの少なくとも２つが、Ｎであり、残りがＣＨである。
【０１８３】
さらなる実施形態において、Ｒ３７がＯであり、Ｒ３９およびＲ４０が同一物であり、かつ水素またはＣＨ３である。
【０１８４】
さらなる実施形態において、Ｒ３７が、ＮＨまたはＮＣＨ３であり、Ｒ３９およびＲ４０が水素である。
【０１８５】
他の実施形態において、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つが、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基がそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つが、式ＶＩＣ、式ＶＩＤ、および式ＶＩＥからなる群から選択され、
【０１８６】
【化３４】
2014532729.tif 000039
【０１８７】
式中、Ｒ４１およびＲ４２のうちの１つがＮであり、もう１つがＣＨであり、Ｒ４３が、ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり、Ｒ４４、Ｒ４５、およびＲ４６のうちの１つがＮであり、Ｒ４４、Ｒ４５、およびＲ４６のうちの２つ目が、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、またはＮ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）であり、Ｒ４４、Ｒ４５、およびＲ４６のうちの３つ目がＣＨであり、複素環式基上の任意のメチン炭素が、複素環式基と式Ｖの化合物との付着点として機能し得る。
【０１８８】
真菌感染症の治療のための一実施形態において、薬学的に許容される量の式Ｖの化合物またはその薬学的に許容される塩が、個体に投与され、式Ｖは、
【０１８９】
【化３５】
2014532729.tif 000040
【０１９０】
であり、
式中、Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ａ、Ｂ、Ｖ、およびＷは、式Ｉについて上記のように定義され、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つは、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つは、複素環式置換基であり、少なくとも１個のヘテロ原子はＮであり、当該複素環式置換基はそれ自体、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシで１回以上、任意に独立して置換されてもよく、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味する。
【０１９１】
幾つかの実施形態において、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つは、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つは、ピペリジン、ペルヒドロピリミジン、モルホリン、ピリジン、ピリミジン、インドール、イソインドール、キノリン、イソキノリン、オキサゾール、チアゾール、イミダゾール、およびそれらの誘導体からなる群から選択される置換基であり、当該ピペリジン、ペルヒドロピリミジン、モルホリン、ピリジン、ピリミジン、インドール、イソインドール、キノリン、イソキノリン、オキサゾール、チアゾール、イミダゾール、またはそれらの誘導体はそれ自体、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシで１回以上、任意に置換されてもよく、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、またはアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味する。
【０１９２】
幾つかの実施形態において、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つは、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つは、式ＶＩＡおよび式ＶＩＢからなる群から選択され、
【０１９３】
【化３６】
2014532729.tif 000041
【０１９４】
式中、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちの少なくとも１つがＮであり、ＮではないＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちのいずれかがＣＲｘであり、ＮではないＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のそれぞれについては、Ｒｘが独立して、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで１回以上、任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される低級は、好ましくは、Ｃ１−Ｃ６であり、
Ｒ３７が、Ｏ、ＮＨ、またはＮＣＨ３であり、
Ｒ３８が、ＮまたはＣＨであり、Ｒ３８がＣＨであるとき、Ｒ３７が、ＮＨまたはＮＣＨ３であり、Ｒ３９およびＲ４０が独立して、水素またはＣＨ３である。
【０１９５】
さらなる実施形態において、ＮではないＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちのいずれかはのうちのいずれかは、ＣＨである。
【０１９６】
さらなる実施形態において、Ｒは、ＣＨ３またはＣＨ２ＣＨ３であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、水素であり、ＡおよびＢのうちの１つが水素であり、ＡおよびＢのうちのもう１つがＣＨ３であり、ＶおよびＷは、それぞれ独立して、水素またはＣ１−Ｃ５アルコキシである。
【０１９７】
さらなる実施形態において、ＶおよびＷのうちの１つが、メトキシであり、もう１つが、水素である。本実施形態の一変形例において、Ｖはメトキシであり、Ｗは水素である。
【０１９８】
さらなる実施形態において、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちの少なくとも２つが、Ｎであり、残りがＣＨである。
【０１９９】
さらなる実施形態において、Ｒ３７がＯであり、Ｒ３９およびＲ４０が同一物であり、かつ水素またはＣＨ３である。
【０２００】
さらなる実施形態において、Ｒ３７が、ＮＨまたはＮＣＨ３であり、Ｒ３９およびＲ４０が水素である。
【０２０１】
他の実施形態において、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つが、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基がそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つが、式ＶＩＣ、式ＶＩＤ、および式ＶＩＥからなる群から選択され、
【０２０２】
【化３７】
2014532729.tif 000042
【０２０３】
式中、Ｒ４１およびＲ４２のうちの１つがＮであり、もう１つがＣＨであり、Ｒ４３が、ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり、Ｒ４４、Ｒ４５、およびＲ４６のうちの１つがＮであり、Ｒ４４、Ｒ４５、およびＲ４６のうちの２つ目が、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、またはＮ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）であり、Ｒ４４、Ｒ４５、およびＲ４６のうちの３つ目がＣＨであり、複素環式基上の任意のメチン炭素が、複素環式基と式Ｖの化合物との付着点として機能し得る。
【０２０４】
原虫感染症の治療のための一実施形態において、薬学的に許容される量の式Ｖの化合物またはその薬学的に許容される塩が、個体に投与され、式Ｖは、
【０２０５】
【化３８】
2014532729.tif 000043
【０２０６】
であり、
式中、Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ａ、Ｂ、Ｖ、およびＷは、式Ｉについて上記のように定義され、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つは、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つは、複素環式置換基であり、少なくとも１個のヘテロ原子はＮであり、当該複素環式置換基はそれ自体、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシで１回以上、任意に独立して置換されてもよく、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味する。
【０２０７】
幾つかの実施形態において、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つは、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つは、ピペリジン、ペルヒドロピリミジン、モルホリン、ピリジン、ピリミジン、インドール、イソインドール、キノリン、イソキノリン、オキサゾール、チアゾール、イミダゾール、およびそれらの誘導体からなる群から選択される置換基であり、当該ピペリジン、ペルヒドロピリミジン、モルホリン、ピリジン、ピリミジン、インドール、イソインドール、キノリン、イソキノリン、オキサゾール、チアゾール、イミダゾール、またはそれらの誘導体はそれ自体、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシで１回以上、任意に置換されてもよく、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、またはアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味する。
【０２０８】
幾つかの実施形態において、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つは、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つは、式ＶＩＡおよび式ＶＩＢからなる群から選択され、
【０２０９】
【化３９】
2014532729.tif 000044
【０２１０】
式中、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちの少なくとも１つがＮであり、ＮではないＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちのいずれかがＣＲｘであり、ＮではないＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のそれぞれについては、Ｒｘが独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基がそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで１回以上、任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される低級が、好ましくは、Ｃ１−Ｃ６であり、
Ｒ３７が、Ｏ、ＮＨ、またはＮＣＨ３であり、
Ｒ３８が、ＮまたはＣＨであり、Ｒ３８がＣＨであるとき、Ｒ３７が、ＮＨまたはＮＣＨ３であり、Ｒ３９およびＲ４０が独立して、水素またはＣＨ３である。
【０２１１】
さらなる実施形態において、ＮではないＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちのいずれかはのうちのいずれかは、ＣＨである。
【０２１２】
さらなる実施形態において、Ｒは、ＣＨ３またはＣＨ２ＣＨ３であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、水素であり、ＡおよびＢのうちの１つが水素であり、ＡおよびＢのうちのもう１つがＣＨ３であり、ＶおよびＷは、それぞれ独立して、水素またはＣ１−Ｃ５アルコキシである。
【０２１３】
さらなる実施形態において、ＶおよびＷのうちの１つが、メトキシであり、もう１つが、水素である。本実施形態の一変形例において、Ｖはメトキシであり、Ｗは水素である。
【０２１４】
さらなる実施形態において、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちの少なくとも２つが、Ｎであり、残りがＣＨである。
【０２１５】
さらなる実施形態において、Ｒ３７がＯであり、Ｒ３９およびＲ４０が同一物であり、かつ水素またはＣＨ３である。
【０２１６】
さらなる実施形態において、Ｒ３７が、ＮＨまたはＮＣＨ３であり、Ｒ３９およびＲ４０が水素である。
【０２１７】
他の実施形態において、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つが、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基がそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つが、式ＶＩＣ、式ＶＩＤ、および式ＶＩＥからなる群から選択され、
【０２１８】
【化４０】
2014532729.tif 000045
【０２１９】
式中、Ｒ４１およびＲ４２のうちの１つがＮであり、もう１つがＣＨであり、Ｒ４３が、ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり、Ｒ４４、Ｒ４５、およびＲ４６のうちの１つがＮであり、Ｒ４４、Ｒ４５、およびＲ４６のうちの２つ目が、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、またはＮ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）であり、Ｒ４４、Ｒ４５、およびＲ４６のうちの３つ目がＣＨであり、複素環式基上の任意のメチン炭素が、複素環式基と式Ｖの化合物との付着点として機能し得る。
【０２２０】
癌の治療のための一実施形態において、薬学的に許容される量の式Ｖの化合物またはその薬学的に許容される塩が、個体に投与され、式Ｖは、
【０２２１】
【化４１】
2014532729.tif 000046
【０２２２】
であり、
式中、Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ａ、Ｂ、Ｖ、およびＷは、式Ｉについて上記のように定義され、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つは、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つは、複素環式置換基であり、少なくとも１個のヘテロ原子はＮであり、当該複素環式置換基はそれ自体、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシで１回以上、任意に独立して置換されてもよく、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味する。
【０２２３】
幾つかの実施形態において、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つは、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つは、ピペリジン、ペルヒドロピリミジン、モルホリン、ピリジン、ピリミジン、インドール、イソインドール、キノリン、イソキノリン、オキサゾール、チアゾール、イミダゾール、およびそれらの誘導体からなる群から選択される置換基であり、当該ピペリジン、ペルヒドロピリミジン、モルホリン、ピリジン、ピリミジン、インドール、イソインドール、キノリン、イソキノリン、オキサゾール、チアゾール、イミダゾール、またはそれらの誘導体はそれ自体、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシで１回以上、任意に置換されてもよく、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、またはアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味する。
【０２２４】
幾つかの実施形態において、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つは、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つは、式ＶＩＡおよび式ＶＩＢからなる群から選択され、
【０２２５】
【化４２】
2014532729.tif 000047
【０２２６】
式中、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちの少なくとも１つがＮであり、ＮではないＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちのいずれかがＣＲｘであり、ＮではないＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のそれぞれについては、Ｒｘが独立して、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで１回以上、任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される低級は、好ましくは、Ｃ１−Ｃ６であり、
Ｒ３７が、Ｏ、ＮＨ、またはＮＣＨ３であり、
Ｒ３８が、ＮまたはＣＨであり、Ｒ３８がＣＨであるとき、Ｒ３７が、ＮＨまたはＮＣＨ３であり、Ｒ３９およびＲ４０が独立して、水素またはＣＨ３である。
【０２２７】
さらなる実施形態において、ＮではないＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちのいずれかはのうちのいずれかは、ＣＨである。
【０２２８】
さらなる実施形態において、Ｒは、ＣＨ３またはＣＨ２ＣＨ３であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、水素であり、ＡおよびＢのうちの１つは水素であり、ＡおよびＢのうちのもう１つはＣＨ３であり、ＶおよびＷは、それぞれ独立して、水素またはＣ１−Ｃ５アルコキシである。
【０２２９】
さらなる実施形態において、ＶおよびＷのうちの１つが、メトキシであり、もう１つが、水素である。本実施形態の一変形例において、Ｖはメトキシであり、Ｗは水素である。
【０２３０】
さらなる実施形態において、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちの少なくとも２つが、Ｎであり、残りがＣＨである。
【０２３１】
さらなる実施形態において、Ｒ３７がＯであり、Ｒ３８およびＲ４０が同一物であり、かつ水素またはＣＨ３である。
【０２３２】
さらなる実施形態において、Ｒ３７が、ＮＨまたはＮＣＨ３であり、Ｒ３９およびＲ４０が水素である。
【０２３３】
他の実施形態において、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つが、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、当該フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基がそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つが、式ＶＩＣ、式ＶＩＤ、および式ＶＩＥからなる群から選択され、
【０２３４】
【化４３】
2014532729.tif 000048
【０２３５】
式中、Ｒ４１およびＲ４２のうちの１つがＮであり、もう１つがＣＨであり、Ｒ４３が、ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり、Ｒ４４、Ｒ４５、およびＲ４６のうちの１つがＮであり、Ｒ４４、Ｒ４５、およびＲ４６のうちの２つ目が、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、またはＮ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）であり、Ｒ４４、Ｒ４５、およびＲ４６のうちの３つ目がＣＨであり、複素環式基上の任意のメチン炭素が、複素環式基と式Ｖの化合物との付着点として機能し得る。
【実施例】
【０２３６】
実施例１
酵素発現、精製、およびアッセイ
ＣｈＤＨＦＲ：ＣｈＤＨＦＲ−ＴＳは、大腸菌で発現され、メトトレキサートアガロースカラム（Ｓｉｇｍａ）を用いて精製された。
【０２３７】
ｈＤＨＦＲ：ｈＤＨＦＲに対する遺伝子は、ＡＴＣＣから得られたｃＤＮＡからのＰＣＲを用いて増幅された。この遺伝子は、親和性クロマトグラフィーのために、Ｃ末端ヒスチジンタグ付きのｐＥＴ４１ベクターに挿入された。配列決定することによって、得られた構築体が確認された。ｈＤＨＦＲタンパク質は、大腸菌中で発現させ、ニッケル親和性カラムを用いて精製された。
【０２３８】
ＴｇＤＨＦＲ：トキソプラズマ原虫ＤＨＦＲ−ＴＳからクローン化されたＤＨＦＲは、比較的に低いタンパク質濃度（＞１ｍｇ／ｍＬ）で再折り畳みされた後に、不溶性であると決定された。他のＤＨＦＲタンパク質に存在しない非構造化ループ領域（残基４３〜７０）の存在は、タンパク質を不溶性の状態にすることが予測された。これらの残基を除去し、幾つかの他種のＤＨＦＲの特徴を示す５つの残基ループ領域を残した。この非構造化ループ領域の除去により、１８ｍｇ／ｍＬを超える濃度で、天然ゲル電気泳動による単一種で、かつトキソプラズマ原虫ＤＨＦＲ−ＴＳと等しい活性レベルを有し、再折り畳みされた後に、他のＤＨＦＲタンパク質の特徴を示す、ＴｇＤＨＦＲの可溶性の調製物を得た。
【０２３９】
ＣｇＤＨＦＲ：ＣｇＤＨＦＲをコードする遺伝子は、ＡＴＣＣから得られるカンジダグラブラタゲノムＤＮＡからＰＣＲによって増幅された。この遺伝子は、ニッケル親和性クロマトグラフィーのために、Ｃ末端ヒスチジンタグを含むｐＥＴ４１ベクターに挿入された。大腸菌細胞は、形質転換され、配列決定することによって、得られたプラスミドが確認された。このタンパク質は、大腸菌ＢＬ２１（ＤＥ３）細胞中で発現させ、イソプロピルβ−Ｄ−チオガラクトシドを誘導した。増殖後、細胞を、ＢｕｇＢｕｓｔｅｒ（Ｎｏｖａｇｅｎ）で溶解し、遠心分離され、上清をＮｉ−ＮＴＡカラム上に装填した。このカラムを２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ８．０）／０．４Ｍ  ＮａＣｌで洗浄し、このタンパク質を、２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ８．０）、０．３Ｍ  ＮａＣｌ、２０％  グリセロール、０．１ｍＭ  ＥＤＴＡ、２ｍＭ  ＤＴＴ、２５０ｍＭ  イミダゾールの勾配を用いて溶出した。ＣｇＤＨＦＲを含有する画分を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって特定し、２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  ｐＨ８．０、２０％  グリセロール、０．１ｍＭ  ＥＤＴＡ、および２ｍＭ  ＤＴＴを含有する緩衝液を混合し、ＰＤ−１０カラムを用いて脱塩した。このタンパク質を、１３ｍｇ／ｍＬになるように濃縮した。
【０２４０】
酵素活性アッセイは、５０ｍＭ  トリス（ヒドロキシメチル）メチル−２−アミノエタンスルホン酸  ｐＨ７．０、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、７５μΜ  ２−メルカプトエタノール、１ｍｇ／ｍＬウシ血清アルブミン、１ｍＭジヒドロ葉酸（Ｅｐｒｏｖａ）、および１００μΜ  ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸塩（ＮＡＤＰＨ）（Ｓｉｇｍａ）を含有する溶液中で、３４０ｎｍの紫外線吸光度の変化をモニタリングし、酵素の濃度を制限することによって、２５℃で行った。ジヒドロ葉酸を加えて、反応を開始する前に、酵素および阻害剤を、５分間インキュベートした。少なくとも４回、酵素アッセイを行った。ＩＣ５０値およびそれらの標準偏差は、阻害剤の濃度がほぼＩＣ５０濃度に変化する場合に計算された。標準偏差は、報告された値の１０％以内である。
【０２４１】
抗真菌アッセイは、５０％  グリセロール中の懸濁液として、カンジダグラブラタを用いて、−７８℃で行った。感受性試験については、保存培養の筋を、ＳＤＡ寒天上に作製し、３０℃で４８時間増殖させた。試験生物のある純粋なコロニーを、プレートから回収し、適切な培地中に懸濁し、５ｍＬの振とうフラスコ培養物において増殖させた。振とうフラスコ培養物の試料を、培地中で１×１０５細胞／ｍＬに希釈し、ＤＭＳＯ（１μＬ）中に分注された試験化合物を含む９６ウェル試験プレート（１ウェル当たり１００μＬ）に加えた。アンホテリシンおよびケトコナゾールを対照として使用した。株特異性のある倍増時間から決定されたインキュベーション期間後、Ａｌａｍａｒ  Ｂｌｕｅ（１０μＬ）を加え、インキュベートし、それぞれのウェルを染料還元のために採点した。ＭＩＣ値は、ピンク色のレゾルフィン（λｍａｘ  ６００  ｎｍ）に対してＡｌａｍａｒ  Ｂｌｕｅの青色レザズリン（λｍａｘ５７０ｎｍ）成分の１％未満の還元が観察されるように、増殖を阻害する試験化合物の最低濃度であると見なされた。
【０２４２】
リガンド効率の計算
リガンド効率は、非水素原子当たりの結合エネルギー（¢Ｇ／Ｎ非水素原子）、ここで、ΔＧ）−ＲＴ  ｌｎ  Ｋｄとして表されるが、ＩＣ５０値は、Ｋｄ．９に対して置換され得る。したがって、リガンド効率は、¢Ｇの割合）（１．９９ｃａｌ  Ｋ−１ｍｏｌ−１）（３００Ｋ）（ｌｎ  ＩＣ５０）（０．００１ｋｃａｌ／ｃａｌ）および非水素原子数を用いて計算された。
【０２４３】
計算モデリング
すべてのリガンドは、Ｓｙｂｙｌ（Ｔｒｉｐｏｓ，Ｉｎｃ．）で作製され、正しい幾何学に対して確認された。これらは、２，４−ジアミノピリミジン環のＮ１で選択的にプロトン化された。形式電荷は、自動的に計算された。
【０２４４】
受容体の集合体を用いて、タンパク質の柔軟性をモデル化した。受容体は、水素を加え、水を除去し、形式電荷を計算することによって調製された。アンサンブルセットは、ＳｙｂｙｌのＡｍｂｅｒ  Ｆｏｒｃｅ  Ｆｉｅｌｄを用いて３００Ｋで起動する１００００ｆｓの分子動力学にわたって５００ｆｓの立体配座のスナップショットを取ることによって作製された。次いで、すべての構造は、高エネルギーの立体構造は、生物活性のものである可能性がないという仮説の下で、それらの局所エネルギーを最小の１０００反復エネルギー変化の勾配にした。可動性は、共結晶化されたリガンド周辺の特定の半径の球内に含まれるすべての原子によって画定されるように、特定の活性部位に対して制限された。ＣｈＤＨＦＲについては、構造体１ＳＥＪは、活性部位を画定するリガンドの三環式コア周辺に６Åの球とともに使用された。１ＫＭＶが、ｈＤＨＦＲ構造体として使用された。Ａｓｐ２１およびＬｙｓ６２の分解されない側鎖は、Ｌｏｖｅｌｌ辞書からの最も一般的な側鎖度を用いて構成された。１ＫＭＶの動作は、リガンド周辺の６Åの球、およびＰＥＫＮループ領域の残基５９〜６８に限定された。保存された酸性残基（Ｇｌｕ３０）は、必須のＮ１Ｈの水素結合の接触を維持するために、ＭＤを通じて固定した状態を保った。接触が時間的経過にわたって維持される場合、保存された酸性残基は、ＣｈＤＨＦＲについては、固定した状態を保つことは必要ではなかった。
【０２４５】
ドッキングは、Ｓｙｂｙｌ７．３によって実施されるように、Ｓｕｒｆｌｅｘ−Ｄｏｃｋを用いて行われた。活性部位における２，４−ジアミノピリミジン部分の保存された配向性のため、リガンドの正しい配置が決定され得た。報告されたスコアは、保存された酸性残基の水素結合の距離内に含まれるＮ１Ｈと、単環の平面配向を保つための、４．３Åの保存されたＴｈｒ酸素内に含まれるＣ２  ＮＨ２とによって決定されるように、この保存された配向性のあるトップスコアリングのポーズである。スコアは、アンサンブルを通して平均化された。
【０２４６】
実施例２
化学的性質、モデリング、および生物学的評価
クリプトスポリジウムホミニスおよびトキソプラズマ原虫由来の構造分析
異なるリガンドを有するＣｈＤＨＦＲの結晶構造は、今まで、既に報告されているが、ＴｇＤＨＦＲの実験的に決定された構造体はない。ＴｇＤＨＦＲの相同モデルは、Ｍｕｓ筋肉（ＰＤＢ  ＩＤ：１Ｕ７０１４）から近縁の構造体に基づいて作製された。ＴｇＤＨＦＲモデルは、最小化され、Ｒａｍａｃｈａｎｄｒａｎ分析は、範囲外である主鎖幾何学が、ループ領域内の６つの残基のみの領域を可能にするように、良好な形態の保存を示した。このモデルは、決定されたＩＣ５０値を有する１１個の阻害剤を活性部位にドッキングさせ、測定された阻害定数を有する５０．２％の相関を達成することによってさらに検証された。
【０２４７】
ＣｈＤＨＦＲの結晶構造およびＴｇＤＨＦＲの相同モデルの重ね合わせは、２つの酵素が、全体的な折り畳みならびに多くの活性部位の残基の同一性および配置の両方において、非常に類似していることを示す。メトトレキサートのプテリジン環系を取り囲んで、両部位にモデル化された強力な阻害剤は、２つの種間で保存される残基である、つまり、アスパラギン酸残基（Ｃｈのアミノ酸３２およびＴｇのアミノ酸３１）は、プロトン化したＮ１との静電相互作用、ならびにファンデルワールス相互作用を形成するＴｈｒ（Ｃｈのアミノ酸１３４およびＴｇのアミノ酸１７２）、Ｖａｌ（Ｃｈのアミノ酸９およびＴｇのアミノ酸８）、およびＰｈｅ（Ｃｈのアミノ酸３６およびＴｇのアミノ酸３５）位のアミノ基との水素結合を形成する。プテリジンとパラアミノ安息香酸（ｐＡＢＡ）との間のリンカーは、１つの保存されたＴｈｒ（Ｃｈのアミノ酸５８およびＴｇのアミノ酸８３）および１つの非保存残基：ＣｈのＣｙｓ１１３およびＴｇのＶａｌ１５１によって取り囲まれる。ｐＡＢＡ環は、ＣｈのＩｌｅ６２（ＴｇのＭｅｔ８７）、ＣｈのＬｅｕ６７（ＴｇのＬｅｕ９４）、およびＣｈのＬｅｕ３３（ＴｇのＰｈｅ３２）からなるあまりよく保存されていない疎水性ポケット内で結合される。
【０２４８】
両種において、ＴＭＰのモデルは、活性部位でのプロトン化されたＮ１と、ピリミジン環のＣ２位でのアミノ基および保存されたＡｓｐとの間の静電および水素結合相互作用を示す。活性部位での２，４−ジアミノピリミジンと酸性残基との間のこの相互作用は、多くの種のＤＨＦＲにわたって保存される。しかしながら、ＴＭＰのリンカー領域は、短すぎて、ＭＴＸのｐＡＢＡ環によって通常占められる疎水性ポケットにトリメトキシフェニル環を十分に延長することができないと思われ、場合により、これらの種に対してＴＭＰのより低いインビトロ効力を説明する。これらの構造分析に基づいて、２つの芳香環間のリンカーの長さを延長することによって標的生物の両方に対してＴＭＰの効力を増加させる比較的単純なストラテジーが出現した。
【０２４９】
実施例３
延長したＴＭＰ類似体の設計および合成
ＴＭＰのジアミノピリミジン環とフェニル環との間の距離を延長することが、ＣｈＤＨＦＲおよびＴｇＤＨＦＲに対してより大きな有効性を有し得るという仮説を試験するために、ＴＭＰにおいて見出された単一のメチレン架橋の代わりに、２つの炭素リンカーの使用が調査された。幾つかの５−エチニルピリミジン誘導体と非ベンジル部分との合成が既に報告されており、これらの化合物は、トキソプラズマ原虫および２種の真菌性ＤＨＦＲを阻害するようであった。飽和した脂肪族、シスおよびトランス−オレフィン、またはアセチレンリンカーを含有するＴＭＰ誘導体は、それが実験データから判定されたため、ＣｈＤＨＦＲの結晶構造にドッキングされ、選択された。固定されたオレフィンリンカーおよびアセチレンリンカーを有するＴＭＰ類似体が、ジアミノピリミジンを適切な配向にドッキングさせるのを可能にするが、これらのリンカーは、トリメトキシフェニル環が生体関連した疎水性ポケットを塞ぐのを防いだ。しかしながら、飽和したエチレン架橋によって許容された高度の柔軟性は、両方の環がそれらのそれぞれのポケットを塞ぐのを可能にするように思われた。本明細書に記載される組成物および方法のすべての一連のＴＭＰ類似体の調製を偶然に可能にするエチレンリンカーを有するピリミジニル化合物への直接かつ高収量の合成経路が、開発された。
【０２５０】
市販のジアミノピリミジン４は、Ｃ５位で直接ヨウ素化され得、５−ヨードピリミジン−２，４−ジアミンを得た。トラン誘導体５−［（３，４，５−トリメトキシフェニル）エチニル］ピリミジン−２，４−ジアミンへの直接変換は、対応するアルデヒドのコーリーフックス延長によって調製された、トリメトキシフェニルアセチレンによるパラジウム触媒された園頭カップリング反応を通して達成された。次に、５−［（３，４，５−トリメトキシフェニル）エチニル］ピリミジン−２，４−ジアミンの接触水素化を使用して、完全飽和した類似体（即ち、５−［２−（３，４，５−トリメトキシフェニル）エチル］ピリミジン−２，４−ジアミン）を調製した。興味深いことに、標準的な水素化条件下で、第２の還元が極めてゆっくりであることが見出され、Ｚ−オレフィンリンカーが、特定され、精製され得た。より熱力学的に安定なＥ異性体への平衡は、ヨードとの処理によって達成され、２つの炭素橋系列全体への容易なアクセスを可能にした。標準的な酵素阻害アッセイにおけるこれらの延長したＴＭＰの試験は、類似体が不活性であることを示した。エチニルリンカーまたはＥもしくはＺエテニル基を含む類似体は、ドッキング研究から不良な活性を示すことが予測されたが、正反対のものが、完全飽和した誘導体に対して予測された。しかしながら、完全飽和したエチレンリンカーは、あまり良好な活性を示さなかった。
【０２５１】
実施例４
プロパルギル結合系列の設計および合成
エチニルリンカー、ＥもしくはＺエテニル基リンカー、またはエチレンリンカーを含む活性化合物を得ることができなかったことは、エントロピー効果および立体配座効果の混合により、推定された。エチレンリンカーを含む化合物は、両方の芳香環がそれらのそれぞれの結合ポケットを占有することを可能にする立体配座を容易に導入することができるが、高度に柔軟なリンカー周辺の有機体によって誘導される有意なエントロピーペナルティで導入する（ＴＭＰにおいて２つの回転可能な結合から３つに増加する）。この系列におけるその他の３つの化合物（即ち、エチニルリンカーおよびＥもしくはＺエテニル基）は、より低い内部エントロピーを有するが、結合に対して生産力がある立体配座に到達することはできない。この系列の再設計は、限定された多くの回転可能な結合であるが、適切な結合ポケットを見出す２つの芳香環に対してより自由な類似体を指した。ＴＭＰとして同じ数の自由度を維持するが、２つの環がその他から独立するより構造的な空間を探求することができるため、３炭素プロパルギル連結の使用は、潜在的な設計のように思われた。２つの交互のプロパルギル結合構造体のドッキングは、トリメトキシフェニル基をアルキン炭素よりむしろメチレン炭素に付着することが好ましいことが示された。合成のために使用された認証されたアルキン誘導体（５−エチニル−１，２，３−トリメトキシベンゼン）は、市販の酸性（３，４，５−トリメトキシフェニル）酢酸から３つの工程において調製された。（３，４，５−トリメトキシフェニル）酢酸のアルコールへの還元、続いて、デスマーチン酸化により、末端アセチレン５−エチニル−１，２，３−トリメトキシベンゼンを直接送達する大平ベストマン試薬と縮合された対応するアルデヒドを得た。このアルキンは、ピリミジニル誘導体との園頭カップリング反応に関わって、本明細書に記載される組成物および方法の化合物を得た。５−［３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−１−エン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミンが、１００μΜよりもよいＩＣ５０値を有するＣｈＤＨＦＲ、また１００μΜよりもよいＩＣ５０値を有するＴｇＤＨＦＲを阻害したことが見出された。フェニル環の延長は、予測されたように、疎水性ポケット、具体的には、Ｉｌｅ６２およびＬｅｕ６７との相互作用を増加させると思われた。しかしながら、このフェニルの延長はまた、Ｌｅｕ２５、Ｌｅｕ３３、およびＰｈｅ３６との親油性相互作用の欠落を生じ、ピリミジン環のＣ６位付近でポケットを形成した。この領域は、通常、ＭＴＸ等の強力な阻害剤において第２の環縮合によって占有される。ドッキングされたＴＭＰおよび５−［３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−１−エン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミンのさらなる分析はまた、結合部位内のＣｙｓ１１３付近の第２の空きスペースを示した。
【０２５２】
Ｆｌｏ９８を用いたドッキング手順については、両方のタンパク質の活性部位は、共結晶化されたリガンド周辺の１１Åの球内に含まれる原子を有するすべての残基として画定された。Ｓｕｒｆｌｅｘ−Ｄｏｃｋ内の自動ｐｒｏｔｏｍｏｌマッピングプロトコルは、活性部位全体を探求し、ドッキングの目的のために使用された。共結晶化されたＮＡＤＰＨは、活性部位の画定に含まれた。類似体のライブラリーは、前に論じられるように、Ｆｌｏ９８を用いて、また、Ｓｙｂｙｌ分子としてＳｕｒｆｌｅｘ−Ｄｏｃｋを用いてドッキングされた。２，４−ジアミノピリミジンのプロトン化したＮ１と、Ａｓｐ３２との間で保存された水素結合相互作用によって画定される、正しい配向性のために、すべてのドッキングの結果が、確認された。得られた立体配座エネルギーはまた、立体上の衝突および非現実的な幾何学に対しても確認された。
【０２５３】
実施例５
化合物の分析および特性
ＨＰＬＣ
試料（１４％  ＣＨＣｌ３中０．１ｍｇ／ｍＬ、１０ｍＭ  Ｎａ２ＨＰＯ４、ｐＨ６）を、Ｃｈｒｏｍ  Ｔｅｃｈ  Ｃｈｉｒａｌ−ＡＧＰカラム（４．０ｍｍ×１００ｍｍ）およびＰＤＡ検出器付きのＢｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ  Ｓｙｓｔｅｍ  Ｇｏｌｄ  ＨＰＬＣを用いて、均一濃度（４％  ＣＨ３ＣＮ、１０ｍＭ  Ｎａ２ＨＰＯ４  ｐＨ６、１．５ｍＬ／分）で分析した。
【０２５４】
Ｓｙｂｙｌ環境内のＦｌｏ９８およびＳｕｒｆｌｅｘ−Ｄｏｃｋの組み合わせを用いて、５−［３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−１−エン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミン上のピリミジン環およびプロパルギル位置の６位のメチル置換基に対するドッキングスコアを評価した。Ｆｌｏ９８は、柔軟性のある標的に最良のドッキングポーズに対してモンテカルロサーチを行い、関連したエネルギースコアを有するタンパク質：リガンドの複合体のアンサンブルを保存する。Ｓｕｒｆｌｅｘ−Ｄｏｃｋは、結合部位にドッキングしないが、むしろ、小分子断片を用いて活性部位をプローブすることによって作製されるｐｒｏｔｏｍｏｌ標的を使用する。次いで、リガンドは、断片化され、疎水性、極性、反発、エントロピー、および溶媒和の用語を含む、経験的スコア関数に基づいてｐｒｏｔｏｍｏｌに構築される。
【０２５５】
２つの著名なポケット内において、メチル基を有する５−［３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−１−エン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミンのドッキングスコアは、非置換化合物５−［３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−１−エン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミンのものよりも大きかった。Ｓｕｒｆｌｅｘ−Ｄｏｃｋは、ラセミ化合物を評価することができないため、プロパルギル位でメチルを有する化合物のＲおよびＳ鏡像体の両方が評価された。両方とも、視覚分析時に同様に実行可能であるように思われ、隣接する残基との同じ相互作用の多くを有した。すべての複合体は、結合部位内に「正しい」２，４−ジアミノピリミジン位置付けを示し、Ｖａｌ９、Ｖａｌ１０、Ａｓｐ３２、およびＴｈｒ１３４に水素結合した。
【０２５６】
プロパルギル骨格は、これらのポケット内で置換基を置き換えること、ならびに立体配座分布内の合成の影響に対してＴＭＰよりも優れているように思われたが、一方、プロパルギル系列におけるＣ６置換とアリール環との間の相互作用は、有意でないことがコンュータ的に示された。広範な阻害剤のＣ６で置換基を組み込むために、園頭カップリング反応の過去の成功を拡大させることが可能であることが証明された。アセチレン誘導体５−エチニル−１，２，３−トリメトキシベンゼンと、既知のヨードピリミジン誘導体５−ヨード−６−メチルピリミジン−２，４−ジアミン（アミノ化およびヨード化によって市販の２−アミノ−４−クロロ−６−メチルピリミジンから調製された）とのクロスカップリングにより、Ｃ６−メチル誘導体（即ち、６−メチル−５−［３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−１−エン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミン）を得た。ドッキングした化合物およびドッキングスコアの両方の視覚分析によって予測されるように、この化合物は、それぞれ、ＣｈＤＨＦＲおよびＴｇＤＨＦＲに対して１００μΜよりもよいＩＣ５０値を有し、両方の酵素に対して良好であることを示した。
【０２５７】
ＣｈＤＨＦＲにおいて、残基Ｃｙｓ１１３に近い第２の空ポケットはまた、ＴＭＰのメチレン橋上の置換基を使用することによって探求された。Ｃ７−メチルＴＭＰ（ｒａｃ）は、３４０μΜのＩＣ５０値を有し、Ｃ７−エチルＴＭＰ（ｒａｃ）は、４μΜのＩＣ５０値を有し、ＴＭＰを上回る改善を示した。置換基がＣｙｓ１１３とのより高い親和性相互作用を潜在的に形成するため、プロパルギルを延長した骨格の改変は、このポケットを活用するためのより良好な経路であるように思われた。また、プロパルギル位での３つの異なる置換基（メチル、ヒドロキシル、およびメトキシ）が、調べられた。これらの誘導体に対する新しい末端アセチレンが、直接的様式において、ラセミ化合物として調製された。市販のトリメトキシアセトフェノンは、Ｗｉｔｔｉｇ縮合および得られたエノールエーテルの加水分解を通して対応するアルデヒドに認証された。
【０２５８】
改変されたコーリーフックス承認により、幾つかのヨードピリミジン誘導体（５−ヨードピリミジン−２，４−ジアミンおよび５−ヨード−６−メチルピリミジン−２，４−ジアミン等）と結合されたラセミアセチレンが提供され、対応する類似体を得た。ヒドロキシ置換基またはメトキシ置換基の取り付けは、対応するアルデヒド（即ち、３，４，５−トリメトキシベンズアルデヒド）から、直接的様式において達成することができた。これは、アセチリドの付加を通してプロパルギルアルコールに変換され、次いで、標準的な園頭カップリングにより、高収率で、類似体３−（２，４−ジアミノピリミジン−５−イル）−１−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−２−エン−１−オールおよび３−（２，４−ジアミノ−６−メチルピリミジン−５−イル）−１−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−２−エン−１−オールを得た。代替として、このアルコールは、標準的な条件下で、対応するメチルエーテル（即ち、１，２，３−トリメトキシ−５−（１−メトキシプロプ−２−エン−１−イル）ベンゼン）に変換され、類似した様式においてクロスカップリングされて、ピリミジン５−［３−メトキシ−３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−１−エン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミンおよび５−［３−メトキシ−３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−１−エン−１−イル］−６−メチルピリミジン−２，４−ジアミンを送達することができる。また、ドッキングした複合体から予測されるように、メチル置換プロパルギル化合物、６−メチル−５−［３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ブタ−１−エン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミンは、それぞれ、ＣｈＤＨＦＲおよびＴｇＤＨＦＲに対して、１００μΜよりもよいＩＣ５０値を有し、非常に良好な効力を示した。ヒドロキシおよびメトキシ置換プロパルギル化合物はまた、１００μΜよりもよいＩＣ５０値を示した。ＣｈＤＨＦＲおよびＴｇＤＨＦＲ阻害アッセイにおいて二重にメチル化した誘導体６−メチル−５−［３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ブタ−１−エン−１−イル］ピリミジン−２，４−ジアミンの鏡像体の両方が調べられた。２つの鏡像体類似体の合成を達成するために、Ｅｖａｎｓオキサゾリジノンで媒介された非対称アルキル化が行われた（スキーム２０を参照のこと）。酸由来の混合無水物への２つの異なるリチオオキサゾリジノンの付加により、イミド２９および３０をもたらし、これをアルキル化して、公平に高度なジアステレオ選択性を有する３１および３２得ることができた。鏡像体のうちの１つがもう１つよりも活性であるかどうかを決定するために、立体中心で、個々の異性体を試験することは論理的であった。
【０２５９】
【化４４】
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【０２６０】
小ジアステレオマー化合物は、精製時に完全に除去することができず、次の工程で使用された。ＤＩＢＡＬ−Ｈによるイミドの部分的還元により、アルデヒド３３および３４を得、これらをラセミ合成において記載されるように、直ちに認証して、末端アルキン３５および３６を得た。ヨードピリミジン誘導体５−ヨード−６−メチルピリミジン−２，４−ジアミンを用いたクロスカップリングにより、キラル固定相カラムを用いたＨＰＬＣ分析によって判定されるように、それぞれ、９０および９５％の鏡像体過剰率の２つの鏡像体３７および３８を得た。２つの鏡像体はともに、１００μΜを下回るＩＣ５０値を有する原虫酵素に対して親和性を示した。
【０２６１】
本明細書に記載される組成物および方法の化合物は、改善された効力、およびリガンド有効性の改善を示した。上記の化合物に対する最適なＩＣ５０値は、１３ｎＭであり、本明細書に記載される組成物および方法のすべての化合物は、１００μΜより良いＩＣ５０値を得た。
【０２６２】
一般的な合成
１Ｈおよび１３Ｃスペクトルは、それぞれ、Ｖａｒｉａｎ  Ｉｎｏｖａ５００分光計において、５００および１２５ＭＨｚで記録された。すべての融点は、修正しない。高分解能質量分光分析が、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ実験室によって、Ｋｒａｔｏｓ  ＭＳ−５０分光計において行われた。元素分析は、Ａｔｌａｎｔｉｃ  Ｍｉｃｒｏｌａｂｓ，Ｉｎｃによって提供された。別様に明記されない限り、すべての試薬を、商業的供給源から直接使用した。
【０２６３】
園頭カップリングの一般的な手順
密閉管に、ヨードピリミジン（１．０ｍｍｏｌ）を加えた。ＤＭＦ（５．０ｍＬ）を加え、すべての固体が溶解するまで、この混合物を撹拌した。Ｐｄ−（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（４９．０ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）を加え、続いて、ＣｕＩ（１３．３ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（５．０ｍＬ）、およびアリールアセチレン（２．０ｍｍｏｌ）を加えた。この管を密閉し、１００℃の油浴中に入れた。この反応物を、１００℃で２時間撹拌し、室温まで冷却した。溶媒を除去し、残渣を、ＣＨＣｌ３中の２％  ＭｅＯＨを溶出液として用いるフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、３０ｇ）によって精製して、結合生成物を得た。分析試料を、ＭｅＣＮからの再結晶によって調製した。
【０２６４】
２，４−ジアミノ−５−ヨードピリミジン  火力乾燥した１００ｍＬの丸底フラスコに、ＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中の２，４−ジアミノピリミジン（１．０ｇ、９．０８ｍｍｏｌ）を加え、続いて、ＩＣｌ（３０ｍＬ、２９．０６ｍｍｏｌ）を滴加した。この溶液を、２５℃で１５時間撹拌し、次いで、減圧下で溶媒を除去した。得られた粘性油を、Ｅｔ２Ｏ（４０ｍＬ）中で４５分間撹拌した。得られた固体を濾過し、Ｅｔ２Ｏ（３×１０ｍＬ）で洗浄して、黄色固体としてＨＣｌ塩（３．１４ｇ）を得た。粗塩を、１．０Ｎ  ＮａＯＨ（１００ｍＬ）中で懸濁し、２５℃で２時間撹拌した。固体を濾過し、水（２×１０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させて、茶色の粉末として２，４−ジアミノ−５−ヨードピリミジン（１．７１ｇ、８０％）を得た。分析試料を、ＭｅＣＮからの再結晶によって調製して、無色の結晶として２，４−ジアミノ−５−ヨードピリミジンを得た：Ｒｆ＝０．２５（９：１、ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ）；融点＝２１２〜２１４℃；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．９２（ｓ，１Ｈ），６．４０（ｓ，２Ｈ），６．１０（ｓ，２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１６２．８，１６２．７，１６２．０，６１．２；ＨＲＥＩ［Ｍ＋］２３５．９５５９（Ｃ４Ｈ５ＩＮ４の計算値：２３５．９５５９）；分析  （Ｃ４Ｈ５ＩＮ４）Ｃ，Ｈ，Ｎ。
【０２６５】
５−エチニル−１，２，３−トリメトキシベンゼン  火力乾燥した５０ｍＬの丸底フラスコに、ＣＢｒ４（２．５４ｇ、７．６５ｍｍｏｌ）を加えた。ＤＣＭ（２０ｍＬ）を加え、溶液を０℃まで冷却した。Ｐｈ３Ｐ（４．０１ｇ、１５．３０ｍｍｏｌ）を加え、この溶液を０℃で１５分間撹拌した。ＤＣＭ（６．０ｍＬ）中の３，４，５−トリメトキシベンズアルデヒド（１．０ｇ、５．１０ｍｍｏｌ）を滴加した。この溶液を、０℃で５分間撹拌した。減圧下で溶媒を除去し、得られた油を、シリカプラグを通して濾過し、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（９：１、５００ｍＬ；４：１、５００ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機物を濃縮して、粗ジブロモオレフィン（２．３１ｇ、１２８％）を得、これをＴＨＦ（６０ｍＬ）中に溶解し、−７８°Ｃまで冷却した。ｎ−ＢｕＬｉ（１３．１ｍＬ、１９．６８ｍｍｏｌ、１．５Ｍ）を滴加し、この溶液を−７８℃で３０分間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ（１０ｍＬ）を加え、この溶液を室温まで加温した。層を分離し、有機物を食塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣を、ヘキサン中の１０％  ＥｔＯＡｃを溶出液として用いて、フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、８０ｇ）によって精製して、無色油として５−エチニル−１，２，３−トリメトキシベンゼン（０．７７０ｇ、７９％）を得た：Ｒｆ＝０．３０（４：１、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ６．７１（ｓ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），３．８３（ｓ，６Ｈ），３．０３（ｓ，１Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１５３．１，１１７．１，１０９．４，１０３．３，８３．８，７６．４，６１．０，５６．２，５６．１；ＨＲＦＡＢ［Ｍ＋Ｌｉ］１９９．０９５２（Ｃ１１Ｈ１２Ｏ３Ｌｉの計算値：１９９．０９４６）。
【０２６６】
２，４−ジアミノ−５−（２−（３，４，５−トリメトキシフェニル）エチニル）ピリミジン  一般的な手順により、２，４−ジアミノ−５−ヨードピリミジン（２３６ｍｇ）を、５−エチニル−１，２，３−トリメトキシベンゼン（３８４ｍｇ）と反応させて、白色粉末として２，４−ジアミノ−５−（２−（３，４，５−トリメトキシフェニル）エチニル）ピリミジン（２７０ｍｇ、９０％）を得た：Ｒｆ＝０．２８（９：１、ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ）；融点＝２０２〜２０４℃；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．９４（ｓ，１Ｈ），６．９０（ｓ，２Ｈ），６．３７（ｓ，２Ｈ），３．７９（ｓ，６Ｈ），３．６７（ｓ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１６３．４，１６２．２，１５９．４，１５９．２，１５２．８，１３７．６，１１８．６，１０８．３，１０８．２，９４．７，８９．８，８３．４，６０．２，６０．１，５６．０，５５．９；分析値（Ｃ１５Ｈ１６Ｎ４Ｏ３）Ｃ，Ｈ，Ｎ。
【０２６７】
（Ｚ）−２，４−ジアミノ−５−（３，４，５−トリメトキシスチリル）ピリミジン  （３００ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）を、１００ｍＬの振とうフラスコ中に入れた。ＥｔＯＨ（３０ｍＬ）を加え、すべての固体が溶解するまで、この混合物をかき混ぜた。５％  Ｐｄ／Ｃ（５０ｍｇ）を加え、この懸濁液を、水素化装置中に入れた。４５ｐｓｉのＨ２で５時間、この反応を実行した。この混合物を、セライトを通して濾過し、ＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ）で洗浄した。溶媒を除去し、残渣を、ＣＨＣｌ３中の５％  ＭｅＯＨを溶出液として用いて、フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、３０ｇ）によって精製して、白色粉末として（Ｚ）−２，４−ジアミノ−５−（３，４，５−トリメトキシスチリル）ピリミジン（１００ｍｇ、３３％、８１％  ｂｏｒｓｍ）を得、これをＭｅＣＮから再結晶した：Ｒｆ＝０．３３（９：１、ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ）；融点＝１７５〜１７７℃；１Ｈ  ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）δ７．６９（ｓ，１Ｈ），６．６３（ｓ，２Ｈ），６．４７（ｄ，Ｊ）１１．９Ｈｚ，１Ｈ），６．２７（ｄ，Ｊ）１１．９Ｈｚ，１Ｈ），５．６６（ｓ，２Ｈ），５．４９（ｓ，２Ｈ），３．６８（ｓ，３Ｈ），３．６７（ｓ，６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ１６３．５，１６３．３，１５６．２，１５４．３，１３８．６，１３４．０，１３３．０，１２２．６，１０７．３，１０６．４，６１．１，５６．４；ＨＲＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］３０３．１４４６（Ｃ１５Ｈ１９Ｎ４Ｏ３の計算値：３０３．１４５７）。
【０２６８】
（Ｅ）−２，４−ジアミノ−５−（３，４，５−トリメトキシスチリル）ピリミジン  （４５．０ｍｇ、０．１４９ｍｍｏｌ）を、乾燥ＴＨＦ（１．５ｍＬ）中に懸濁した。１２（４．０ｍｇ、０．０１４９ｍｍｏｌ）を加え、反応物を２３℃で３０分間撹拌し、この後、すべての材料は溶解した。赤色の溶液をＴＨＦ（５．０ｍＬ）で希釈し、飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３（１．０ｍＬ）を加えた。層を分離し、有機層を水（５．０ｍＬ）および食塩水（５．０ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させた。溶媒を除去し、残渣を、ＣＨＣｌ３中の５％  ＭｅＯＨを溶出液として用いて、フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、５．０ｇ）によって精製して、黄色粉末として（Ｅ）−２，４−ジアミノ−５−（３，４，５−トリメトキシスチリル）ピリミジン（３６ｍｇ、８０％）を得、これをＭｅＣＮから再結晶した：Ｒｆ＝０．２８（９：１、ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ）；融点＝１８２〜１８４℃；１Ｈ  ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）δ８．０９（ｓ，１Ｈ），７．０７（ｄ，Ｊ）１５．９Ｈｚ，１Ｈ），６．８５（ｓ，２Ｈ），６．８２（ｄ，Ｊ）１５．９Ｈｚ，１Ｈ），５．９４（ｓ，２Ｈ），５．５１（ｓ，２Ｈ），３．８３（ｓ，６Ｈ），３．７１（ｓ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１６１．６，１６１．３，１５４．７，１５３．４，１３８．０，１３２．９，１２９．１，１１９．８，１０７．０，１０３．４，６０．９，５６．１；ＨＲＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］３０３．１４４６（Ｃ１５Ｈ１９Ｎ４Ｏ３の計算値：３０３．１４５７）。
【０２６９】
２，４−ジアミノ−５−（３，４，５−トリメトキシフェネチル）ピリミジン  （１００ｍｇ、０．３３３ｍｍｏｌ）を、１００ｍＬの振とうフラスコ中に入れた。ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）を加え、固体が溶解するまで、この混合物をかき混ぜた。１０％  Ｐｄ／Ｃ（１００ｍｇ）を加え、この懸濁液を、水素化装置中に入れた。５０ｐｓｉのＨ２で１０時間、この反応を実行した。固体残渣を、セライトを通して濾過し、メタノール（１０ｍＬ）で洗浄した。溶媒を除去し、残渣を、ＣＨＣｌ３中の１０％  ＭｅＯＨを溶出液として用いて、フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、１０ｇ）によって精製して、白色粉末として２，４−ジアミノ−５−（３，４，５−トリメトキシフェネチル）ピリミジン（８８．０ｍｇ、８７％）を得た：Ｒｆ＝０．０６（９：１、ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ）；融点＝１５５〜１５７℃；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．４６（ｓ，１Ｈ），６．５６（ｓ，２Ｈ），６．２２（ｓ，２Ｈ），５．６５（ｓ，２Ｈ），３．７４（ｓ，６Ｈ），３．６１（ｓ，３Ｈ），２．６５−２．６２（ｍ，２Ｈ），２．５２−２．４９（ｍ，２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１６２．３，１６２．０，１５５．０，１５２．６，１３７．５，１３５．５，１０５．８，１０５．８，６０．０，５５．６，３５．０，２９．１；分析値（Ｃ１５Ｈ２０Ｎ４Ｏ３）Ｃ，Ｈ，Ｎ。
【０２７０】
１，２，３−トリメトキシ−５−（プロプ−２−エニル）ベンゼン  火力乾燥した１Ｌのフラスコに、ＬｉＡｌＨ４（３．８５ｇ、１０１．４ｍｍｏｌ）を加えた。Ｅｔ２Ｏ（２５０ｍＬ）を加え、懸濁液を０℃まで冷却した。Ｅｔ２Ｏ（５０ｍＬ）中のトリメトキシフェニル酢酸（１５．３ｇ、６７．６ｍｍｏｌ）を滴加し、反応物を０℃で１時間撹拌した。水（５０ｍＬ）を加え、この溶液を室温まで加温した。この固体を濾過し、Ｅｔ２Ｏ（３×２５ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機物を食塩水（２５ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、粗アルコール（１３．４ｇ、９３％）を得た。粗アルコール（１３．３ｇ、６２．７ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（１２５ｍＬ）中に溶解した。デスマーチンペリオジナン（３９．８ｇ、９４．０ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温で１時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３：飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３（１：１、ｖ：ｖ、２０ｍＬ）を加え、反応物を３０分間撹拌した。有機層を食塩水（２５ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、アルデヒド１２（１３．１ｇ、９６％）を得た。スペクトルは、文献値と一致した。
【０２７１】
大平ベストマン試薬（１５．１ｇ、７８．６ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（２６０ｍＬ）中に溶解し、この反応物を０℃まで冷却した。１２（１１．０ｇ、５２．３ｍｍｏｌ）を加え、続いて、Ｋ２ＣＯ３（１５．９ｇ、１１５．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を０℃で１時間撹拌し、室温まで加温し、固体を濾過した。有機物を濃縮し、残渣を、ヘキサン中の１０％  ＥｔＯＡｃを溶出液として用いて、フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、５００ｇ）によって精製して、無色油として１，２，３−トリメトキシ−５−（プロプ−２−エニル）ベンゼン（５．６１ｇ、５２％）を得た：Ｒｆ＝０．２０（１０％  ＥｔＯＡｃ）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ６．５８（ｓ，２Ｈ），３．８６（ｓ，６Ｈ），３．８３（ｓ，３Ｈ），３．５５（ｓ，２Ｈ），２．２２（ｓ，１Ｈ）；１３Ｃ（ＣＤＣｌ３）δ１５３．２８，１３６．７５，１３１．７０，１０４．８９，８１．８７，７０．６９，６０．８０，５６．０６，２４．９９；ＨＲＥＩ［Ｍ＋］２０６．０９４３（Ｃ１２Ｈ１４Ｏ３の計算値：２０６．０９４３）。
【０２７２】
２，４−ジアミノ−５−（３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−１−エニル）ピリミジン  一般的な手順により、２，４−ジアミノ−５−ヨードピリミジン（２３６ｍｇ）を、１，２，３−トリメトキシ−５−（プロプ−２−エニル）ベンゼン（４１２ｍｇ）と反応させて、白色粉末として２，４−ジアミノ−５−（３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−１−エニル）ピリミジン（２５１ｍｇ、８０％）を得た：Ｒｆ＝０．２３（９：１、ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ）；融点＝１９０℃超で分解；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８４（ｓ，１Ｈ），６．７１（ｓ，２Ｈ），６．２６（ｓ，２Ｈ），３．８０（ｓ，２Ｈ），３．７７（ｓ，６Ｈ），３．６３（ｓ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１６３．８，１６２．２，１５８．７  １５２．８，１３６．０，１３２．８，１０５．２，９３．１，９０．１  ７６．５，６０．１，５５．８，２５．６；分析値（Ｃ１６Ｈ１８Ｎ４Ｏ３）Ｃ，Ｈ，Ｎ。
【０２７３】
２，４−ジアミノ−５−ヨード−６−メチルピリミジン  １００ｍＬの鋼製圧力容器に、２−アミノ−４−クロロ−６−メチルピリミジン（４．００ｇ、２８．００ｍｍｏｌ）を加えた。ＭｅＯＨ（４０ｍＬ）中のＮＨ３の飽和溶液を加え、この容器を密閉した。圧力容器を１６０℃の油浴中に入れ、１５時間加熱した。この容器を０℃まで冷却し、開口し、溶媒を除去して、ＨＣｌ塩として粗ジアミノピリミジン（４．４ｇ）を得た。粗塩をＭｅＯＨ（８２．５ｍＬ）中に溶解し、ＩＣｌ（８２．５ｍＬ）を５０分間にわたって滴加した。反応物を２５℃で１４時間撹拌し、溶媒を除去した。この粘性油を、Ｅｔ２Ｏ（３００ｍＬ）中で３０分間撹拌した。得られた固体を濾過し、Ｅｔ２Ｏ（３×２０ｍＬ）で洗浄して、黄色固体として粗ヨード化ピリミジン（１０．１ｇ）を得た。固体を、１．０Ｎ  ＮａＯＨ（３００ｍＬ）中に懸濁し、２５℃で２時間撹拌した。固体を濾過し、水（２×２０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させて、白色粉末として２，４−ジアミノ−５−ヨード−６−メチルピリミジン（５．６ｇ、８０％）を得た。分析試料を、ＭｅＣＮからの再結晶によって調製して、無色の結晶として２，４−ジアミノ−５−ヨード−６−メチルピリミジンを得た：Ｒｆ＝０．２５（９：１、ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ）；融点＝１５４〜１５６℃；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ６．３８（ｓ，２Ｈ），６．０９（ｓ，２Ｈ），２．２４（ｓ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１６６．７，１６３．０，１６２．３，６３．８，２８．４；ＨＲＥＩ［Ｍ＋］２４９．９７１５（Ｃ５Ｈ７ＩＮ４の計算値：２４９．９７１５）；分析値（Ｃ５Ｈ７ＩＮ４）Ｃ，Ｈ，Ｎ。
【０２７４】
２，４−ジアミノ−５−（３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−１−エニル）−６−メチルピリミジン  一般的な手順により、２，４−ジアミノ−５−ヨード−６−メチルピリミジン（２５０ｍｇ）を、１，２，３−トリメトキシ−５−（プロプ−２−エニル）ベンゼン（４１２ｍｇ）と反応させて、白色粉末として２，４−ジアミノ−５−（３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−１−エニル）−６−メチルピリミジン（２８０ｍｇ、８５％）を得た：Ｒｆ＝０．３１（９：１，ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ）；融点＝１６４〜１６６℃；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ６．７２（ｓ，２Ｈ），６．４２（ｓ，２Ｈ），３．８５（ｓ，２Ｈ），３．７６（ｓ，６Ｈ），３．６３（ｓ，３Ｈ），２．２４（ｓ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１６５．０，１６４．３，１５９．７，１５２．８，１３５．９，１３２．８，１０５．０，９６．３，８９．３，７５．８，６０．０，５５．８，２５．７，２１．７；ＨＲＦＡＢ［Ｍ＋Ｌｉ］３３５．１６７９（Ｃ１７Ｈ２０Ｎ４Ｏ３Ｌｉの計算値：３３５．１６９５）。
【０２７５】
５−（ブタ−３−エン−２−イル）−１，２，３−トリメトキシベンゼン  火力乾燥した２５０ｍＬの丸底フラスコに、メトキシメチルトリフェニルホスホニウムブロミド（１０．２８ｇ、３０．０ｍｍｏｌ）を加えた。ＴＨＦ（１００ｍＬ）を加え、この溶液を０℃まで冷却した。ｎ−ＢｕＬｉ（１４．０ｍＬ、３０．０ｍｍｏｌ、２．２Ｍ）を滴加し、この溶液を０℃で３０分間撹拌した。ＴＨＦ（２５ｍＬ）中の３，４，５−トリメトキシアセトフェノン（５．２６ｇ、２５．０ｍｍｏｌを滴加した。この反応物を０℃で３０分間撹拌し、次いで、水（３０ｍＬ）を加えた。層を分離し、水層をＥｔ２Ｏ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を、食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣を、ヘキサン中の５％  ＥｔＯＡｃを溶出液として用いて、フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、５０ｇ）によって精製して、エノールエーテル（４．３５ｇ、７３％）を得た。エノールエーテル（４．３５ｇ、１８．２６ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（３７．０ｍＬ）中に溶解した。濃縮したＨＣｌ（３．０ｍＬ）を加え、この溶液を加熱還流した。この溶液を還流で３時間撹拌し、室温まで冷却した。水（１０ｍＬ）を加え、この有機層を飽和ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）および食塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣を、ヘキサン中の２０％  ＥｔＯＡｃを溶出液として用いて、フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、５０ｇ）によって精製して、２−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロパナール（３．８２ｇ、９３％）を得た。スペクトルは、文献値と一致した。ＣＢｒ４（８．４７ｇ、２５．５５ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（１５０ｍＬ）中に溶解し、０℃まで冷却した。Ｐｈ３Ｐ（１３．４ｇ、５１．０９ｍｍｏｌ）を加え、この溶液を０℃で５分間撹拌した。ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の  ２−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロパナール（３．８２ｇ、１７．０３ｍｍｏｌ）を滴加した。この反応物を０℃で３０分間撹拌し、次いで、氷冷却したＥｔ２Ｏ（５００ｍＬ）に注ぎ入れた。この固体を、セライトを通して濾過し、Ｅｔ２Ｏ（３×５０ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機層を濃縮した。残渣を、シリカプラグを通して濾過し、ヘキサン（１００ｍＬ）で洗浄し、続いて、ヘキサン中１０％  ＥｔＯＡｃ（５×１００ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機層を濃縮して、中間体の二臭化物（４．８６ｇ、７５％）を得、これを次の反応に直接使用した。Ｍｇ（０．６２１ｇ、２５．５７ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（２．０ｍＬ）中に懸濁した。１，２−ジブロモエタン（０．４４２ｍＬ、５．１２ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を２５℃で３０分間撹拌した。ＴＨＦ（１１．０ｍＬ）中の二臭化物（４．８６ｇ、１２．７９ｍｍｏｌ）を滴加し、この溶液を加熱還流し、１時間撹拌した。この溶液を室温まで冷却し、溶媒を除去した。残渣を、ヘキサン中の１０％  ＥｔＯＡｃを溶出液として用いて、フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、１５０ｇ）によって精製して、無色油として５−（ブタ−３−エン−２−イル）−１，２，３−トリメトキシベンゼン（１．９７ｇ、７０％）を得た：Ｒｆ＝０．２９（４：１、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ６．６２（ｓ，２Ｈ），３．８８（ｓ，６Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），３．７４−３．６９（ｍ，１Ｈ），２．２９（ｄ，Ｊ）２．７Ｈｚ，１Ｈ），１．５２（ｄ，Ｊ）７．１Ｈｚ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１５３．４，１３８．５，１３６．９，１０４．０，１０４．０，８７．２，７０．５，６１．０，５６．３，３２．１，２４．５；ＨＲＦＡＢ［Ｍ＋Ｌｉ］２２７．１２４３（Ｃ１３Ｈ１６Ｏ３Ｌｉの計算値：２２７．１２５９）。
【０２７６】
２，４−ジアミノ−５−（３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ブタ−１−エニル）ピリミジン  一般的な手順により、２，４−ジアミノ−５−ヨードピリミジン（２３６ｍｇ）を、５−（ブタ−３−エン−２−イル）−１，２，３−トリメトキシベンゼン（４４０ｍｇ）と反応させて、黄色粉末として２，４−ジアミノ−５−（３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ブタ−１−エニル）ピリミジン（２９５ｍｇ、９０％）を得た：Ｒｆ＝０．２９（９：１、ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ）；融点＝２２０〜２２２℃；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８５（ｓ，１Ｈ），６．７５（ｓ，２Ｈ），６．２８（ｓ，２Ｈ），３．９９（ｑ，Ｊ）６．８Ｈｚ，１Ｈ），３．７８（ｓ，６Ｈ），３．６３（ｓ，３Ｈ），１．５０（ｄ，Ｊ）７．１Ｈｚ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１６３．７，１５２．８，１３９．３，１３６．０，１０４．２，１０４．１，９７．９，７６．２，６０．０，６０．０，５５．９，５５．８，３２．３，２４．３；分析値（Ｃ１７Ｈ２０Ｎ４Ｏ３）Ｃ，Ｈ，Ｎ。
【０２７７】
２，４−ジアミノ−５−（３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ブタ−１−エニル）−６−メチルピリミジン  一般的な手順により、２，４−ジアミノ−５−ヨード−６−メチルピリミジン（２５０ｍｇ）を、５−（ブタ−３−エン−２−イル）−１，２，３−トリメトキシベンゼン（４４０ｍｇ）と反応させて、白色粉末として２，４−ジアミノ−５−（３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ブタ−１−エニル）−６−メチルピリミジン（２９４ｍｇ、８６％）を得た：Ｒｆ＝０．２９（９：１，ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ）；融点＝１９１〜１９３℃；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ６．７６（ｓ，２Ｈ），６．１９（ｓ，２Ｈ），４．０２（ｑ，Ｊ）７．１Ｈｚ，１Ｈ），３．７７（ｓ，６Ｈ），３．６３（ｓ，３Ｈ），２．２１（ｓ，３Ｈ），１．５１（ｄ，Ｊ）７．１Ｈｚ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１６７．０，１６４．１，１６１．０，１５２．８，１３９．４，１３６．０，１０４．０，１００．８，８８．６，７６．４，６０．０，５５．８，３２．５，２４．６，２２．５；分析値（Ｃ１８Ｈ２２Ｎ４０３）Ｃ，Ｈ，Ｎ。
【０２７８】
１−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−２−エン−１−オール  火力乾燥した２５０ｍＬの丸底フラスコに、３，４，５−トリメトキシベンズアルデヒド（３．９２ｇ、２０．０ｍｍｏｌ）を加えた。ＴＨＦ（４０ｍＬ）を加え、この溶液を０℃まで冷却した。エチニルマグネシウムブロミド（４８．０ｍＬ、２４．０ｍｍｏｌ、０．５Ｍ）を滴加した。この溶液を、０℃で３０分間撹拌し、２５℃まで加温し、３０分間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ（５．０ｍＬ）を加え、層を分離した。
【０２７９】
水層をＥｔ２Ｏ（３×５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を、食塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣を、ヘキサン中の２０％  ＥｔＯＡｃを溶出液として用いて、フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、１００ｇ）によって精製して、黄色油として１−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−２−エン−１−オール（４．２２ｇ、９５％）を得た：Ｒｆ＝０．２５（１：１、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ６．７７（ｓ，２Ｈ），５．３９（ｄｄ，Ｊ）５．５，２．０Ｈｚ，１Ｈ），３．８６（ｓ，６Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），２．７６（ｄ，Ｊ）５．９Ｈｚ，１Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１５３．４，１３８．１，１３５．９，１０３．７，８３．６，７４．９，６４．５，６１．０，５６．２；ＨＲＦＡＢ［Ｍ＋Ｌｉ］２２９．１０５４（Ｃ１２Ｈ１４Ｏ４−Ｌｉの計算値：２２９．１０５２）。
【０２８０】
３−（２，４−ジアミノピリミジン−５−イル）−１−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−プロプ−２−エン−１−オール  一般的な手順により、２，４−ジアミノ−５−ヨードピリミジン（２３６ｍｇ）を、１−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−２−エン−１−オール（４４４ｍｇ）と反応させて、黄色粉末として３−（２，４−ジアミノピリミジン−５−イル）−１−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−プロプ−２−エン−１−オール（２５７ｍｇ、７８％）を得た：Ｒｆ＝０．１２（９：１、ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ）；融点＝２０３〜２０５℃；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８４（ｓ，１Ｈ），６．８３（ｓ，２Ｈ），６．３４（ｓ，２Ｈ），６．０１（ｄ，Ｊ）５．６Ｈｚ，１Ｈ），５．５０（ｄ，Ｊ）５．４Ｈｚ，１Ｈ），３．７８（ｓ，６Ｈ），３．６５（ｓ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１６３．８，１６２．３，１５８．２，１５２．７，１３８．３，１３６．７，１０９．３，１０３．６，９６．３，７９．３，６３．４，６０．０，５５．８；分析値（Ｃ１６Ｈ１８Ｎ４Ｏ４）Ｃ，Ｈ，Ｎ。
【０２８１】
３−（２，４−ジアミノ−６−メチルピリミジン−５−イル）−１−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−２−エン−１−オール  一般的な手順により、２，４−ジアミノ−５−ヨード−６−メチルピリミジン（２５０ｍｇ）を、１−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−２−エン−１−オール（４４４ｍｇ）と反応させて、黄色粉末として３−（２，４−ジアミノ−６−メチルピリミジン−５−イル）−１−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−２−エン−１−オール（２７５ｍｇ、８０％）を得た：Ｒｆ＝０．１２（９：１、ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ）；融点＝１７４〜１７６℃；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ６．８５（ｓ，２Ｈ），６．２７（ｓ，２Ｈ），５．９８（ｄ，Ｊ）５．６Ｈｚ，１Ｈ），５．５３（ｄ，Ｊ）５．４Ｈｚ，１Ｈ），３．７８（ｓ，６Ｈ），３．６５（ｓ，３Ｈ），２．１９（ｓ，３Ｈ），１．５１（ｄ，Ｊ）７．１Ｈｚ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１６７．１，１６４．３，１６１．２，１５２．７，１３８．３，１３６．７，１０３．７，９９．１，８７．９，７９．５，６３．６，６０．０，５５．８，２２．５；ＨＲＦＡＢ［Ｍ＋Ｌｉ］３５１．１６３８（Ｃ１７Ｈ２０Ｎ４Ｏ４Ｌｉの計算値：３５１．１６４５）。
【０２８２】
１，２，３−トリメトキシ−５−（１−メトキシプロプ−２−エニル）ベンゼン  火力乾燥した１００ｍＬの丸底フラスコに、ペンタン（３×１５ｍＬ）で予め洗浄し、乾燥させたＮａＨ（０．２４０ｍｇ、６．０ｍｍｏｌ）を加えた。ＴＨＦ（４８ｍＬ）を加え、懸濁液を０℃まで冷却した。ＴＨＦ（２．０ｍＬ）中の１−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−２−エン−１−オール（１．１１ｇ、５．０ｍｍｏｌ）を滴加し、この反応物を０℃で２５分間撹拌した。Ｍｅ２ＳＯ４（０．５７１ｍＬ、６．０ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を０℃で２０分間撹拌した。水（１０ｍＬ）を加え、層を分離した。水層をＥｔ２Ｏ（２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を、食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣を、ヘキサン中の１０％  ＥｔＯＡｃを溶出液として用いて、フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、２０ｇ）によって精製して、無色油として１，２，３−トリメトキシ−５−（１−メトキシプロプ−２−エニル）ベンゼン（１．０６ｇ、９０％）を得た：Ｒｆ＝０．１８（４：１、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ６．７５（ｓ，２Ｈ），５．０１（ｄ，Ｊ）２．２Ｈｚ，１Ｈ），３．８８（ｓ，６Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），３．４５（ｓ，３Ｈ），２．６８（ｄ，Ｊ）２．２Ｈｚ，１Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１５３．４，１３８．２，１３３．７，１０４．４，８１．３，７６．０，７３．１，６１．０，５６．３，５６．２；ＨＲＦＡＢ［Ｍ＋Ｌｉ］２４３．１２０８（Ｃ１３Ｈ１６Ｏ４Ｌｉの計算値：２４３．１２０９）。
【０２８３】
２，４−ジアミノ−５−（３−メトキシ−３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−１−エニル）ピリミジン  一般的な手順により、２，４−ジアミノ−５−ヨードピリミジン（２３６ｍｇ）を、１，２，３−トリメトキシ−５−（１−メトキシプロプ−２−エニル）ベンゼン（４７３ｍｇ）と反応させて、橙色粉末として２，４−ジアミノ−５−（３−メトキシ−３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−１−エニル）ピリミジン（３１０ｍｇ、９０％）を得た：Ｒｆ＝０．３１（９：１、ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ）；融点＝１８４〜１８６℃；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．９１（ｓ，１Ｈ），６．８２（ｓ，２Ｈ），６．４０（ｓ，２Ｈ），５．３０（ｓ，１Ｈ），３．７９（ｓ，６Ｈ），３．６６（ｓ，３Ｈ），３．３５（ｓ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１６３．８，１６２．３，１５９．７，１５２．８，１３７．２，１３４．８，１０４．６，９２．６，８９．１，８１．９，７３．０，６０．０，５５．９，５５．４；分析値（Ｃ１７Ｈ２０Ｎ４Ｏ４）Ｃ，Ｈ，Ｎ。
【０２８４】
２，４−ジアミノ−５−（３−メトキシ−３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−１−エニル）−６−メチルピリミジン  一般的な手順により、２，４−ジアミノ−５−ヨード−６−メチルピリミジン（２５０ｍｇ）を、１，２，３−トリメトキシ−５−（１−メトキシプロプ−２−エニル）ベンゼン（４７３ｍｇ）と反応させて、黄色粉末として２，４−ジアミノ−５−（３−メトキシ−３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロプ−１−エニル）−６−メチルピリミジン（３３５ｍｇ、９３％）を得た：Ｒｆ＝０．２９（９：１、ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ）；融点＝１２７〜１２９℃；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ６．８４（ｓ，２Ｈ），６．３７（ｓ，２Ｈ），５．３４（ｓ，１Ｈ），３．７８（ｓ，６Ｈ），３．６６（ｓ，３Ｈ），３．３５（ｓ，３Ｈ），２．２３（ｓ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１６７．６，１６４．３，１６１．１，１５２．８，１３７．２，１３４．８，１０４．６，９５．７，８７．５，８１．８，７３．１，６０．０，５５．８，５５．３，２２．４；ＨＲＦＡＢ［Ｍ＋Ｌｉ］３５９．１７０１（Ｃ１８Ｈ２２Ｎ４Ｏ４Ｌｉの計算値：３５９．１７１９）。（Ｒ）−４−イソプロピル−３−（２−（３，４，５−トリメトキシフェニル）アセチル）オキサゾリジン−２−オン  火力乾燥した１００ｍＬの丸底フラスコに、３，４，５−トリメトキシフェニル酢酸（２．１０ｇ、９．２９ｍｍｏｌ）を加えた。ＴＨＦ（２５ｍＬ）を加え、続いて、Ｅｔ３Ｎ（１．４２ｍＬ、１０．２２ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液を、−７８℃まで冷却した。塩化ピバロイル（１．２６ｍＬ、１０．２２ｍｍｏｌ）を滴加し、この溶液を０℃まで加温し、１時間撹拌した。別々の火力乾燥した５０ｍＬの丸底フラスコに、（Ｒ）−４−イソプロピルオキサゾリジン−２−オン（１．０ｇ）を加えた。ＴＨＦ（２０ｍＬ）を加え、この溶液を−７８℃まで冷却した。ｎ−ＢｕＬｉ（６．８３ｍＬ、９．２９ｍｍｏｌ、１．３６Ｍ）を滴加し、この溶液を−７８℃で１５分間撹拌し、次いで、２５℃まで加温し、１５分間撹拌した。有機リチウム溶液を、−７８℃で、カニューレを介して混合した無水物の溶液に移した。この反応物を、−７８℃で１５分間撹拌し、０℃まで加温し、１時間撹拌した。水（１０ｍＬ）を加え、水層をＥｔＯＡｃ（２×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を、食塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣を、ヘキサン中の２５％  ＥｔＯＡｃを溶出液として用いて、フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、３０ｇ）によって精製して、無色油としてトリメトキシフェニル）アセチル）オキサゾリジン−２−オン（２．３０ｇ、８８％）を得た：Ｒｆ＝０．２８（１：１、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ６．５５（ｓ，２Ｈ），４．４４−４．４１（ｍ，１Ｈ），４．２９−４．２４（ｍ，２Ｈ），４．１９（ｄｄ，Ｊ）９．０，３．０Ｈｚ，１Ｈ），４．１２−４．０７（ｍ，１Ｈ），３．８２（ｓ，６Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），２．３６−２．３０（ｍ，１Ｈ），０．８７（ｄ，Ｊ）６．８Ｈｚ，３Ｈ），０．７８（ｄ，Ｊ）７．１Ｈｚ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（��ＤＣｌ３）δ１７１．２，１５４．１，１５３．２，１２９．４，１０６．７，６３．４，６０．９，５８．６，５６．２，４１．６，２８．４，１８．０，１４．７，１４．３；ＨＲＦＡＢ［Ｍ＋Ｌｉ］３４４．１６８６（Ｃ１７Ｈ２３ＮＯ６Ｌｉの計算値：３４４．１６８６）。
【０２８５】
（Ｓ）−４−イソプロピル−３−（２−（３，４，５−トリメトキシフェニル）アセチル）オキサゾリジン−２−オン  （Ｓ）−４−イソプロピル−３−（２−（３，４，５−トリメトキシフェニル）アセチル）オキサゾリジン−２−オンを、（Ｓ）−４−イソプロピルオキサゾリジン−２−オンを用いて、トリメトキシフェニル）アセチル）オキサゾリジン−２−オンとして同様の様式で合成した。残渣を、ヘキサン中の２５％  ＥｔＯＡｃを溶出液として用いて、フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、３０ｇ）によって精製して、無色油として（Ｓ）−４−イソプロピル−３−（２−（３，４，５−トリメトキシフェニル）アセチル）オキサゾリジン−２−オン（２．３０ｇ、８８％）を得た：Ｒｆ＝０．２８（１：１、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ６．５４（ｓ，２Ｈ），４．４４−４．４１（ｍ，１Ｈ），４．２９−４．２４（ｍ，２Ｈ），４．１９（ｄｄ，Ｊ）９．０，３．０Ｈｚ，１Ｈ），４．１２−４．０７（ｍ，１Ｈ），３．８２（ｓ，６Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），２．３６−２．３０（ｍ，１Ｈ），０．８７（ｄ，Ｊ）６．８Ｈｚ，３Ｈ），０．７８（ｄ，Ｊ）７．１Ｈｚ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１７１．２，１５４．１，１５３．２，１２９．４，１０６．７，６３．４，６０．９，５８．６，５６．２，４１．６，２８．４，１８．０，１４．６，１４．３；ＨＲＦＡＢ［Ｍ＋Ｌｉ］３４４．１７００（Ｃ１７Ｈ２３ＮＯ６Ｌｉの計算値：３４４．１６８６）。
【０２８６】
（Ｒ）−３−（（Ｒ）−２−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロパノイル）−４−イソプロピルオキサゾリジン−２−オン）  火力乾燥した２００ｍＬの丸底フラスコに、トリメトキシフェニル）アセチル）オキサゾリジン−２−オン（２．７７ｇ、８．２１ｍｍｏｌ）を加えた。ＴＨＦ（８５ｍＬ）を加え、この溶液を−７８℃まで冷却した。ＬＨＭＤＳ（１２．５ｍＬ、１２．３２ｍｍｏｌ、１．０Ｍ）を滴加し、この反応物を−７８℃で１時間撹拌した。ＭｅＩ（１．５４ｍＬ、２４．６３ｍｍｏｌ）を加え、この溶液を−７８℃で１時間撹拌した。次いで、この溶液を、０℃まで１時間加温し、飽和  ＮＨ４Ｃｌ（１０ｍＬ）で反応停止を行った。水層を、ＥｔＯＡｃ（２×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を、食塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣を、ヘキサン中の２５％  ＥｔＯＡｃを溶出液として用いて、フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、２５ｇ）によって精製して、無色油として（Ｒ）−３−（（Ｒ）−２−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロパノイル）−４−イソプロピルオキサゾリジン−２−オン）（２．４４ｇ、８５％、９５：１  ｄ．ｒ）を得た：Ｒｆ＝０．３７（１：１、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ６．５６（ｓ，２Ｈ），５．０７（ｑ，Ｊ）７．１Ｈｚ，１Ｈ），４．１４−４．１３（ｍ，２Ｈ），３．８１（ｓ，６Ｈ），３．７７（ｓ，３Ｈ），２．４２−２．３６（ｍ，１Ｈ），２．１２（ｓ，１Ｈ），１．４７（ｄ，Ｊ）７．１Ｈｚ，３Ｈ），０．８８（ｔ，Ｊ）７．１Ｈｚ，６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１７４．６，１５３．１，１３５．８，１０５．２，６３．１，６０．８，５９．１，５６．１，４２．８，２８．６，１９．７，１８．０，１４．７；ＨＲＦＡＢ［Ｍ＋Ｌｉ］３５８．１８５２（Ｃ１８Ｈ２５ＮＯ６Ｌｉの計算値：３５８．１８４２）。
【０２８７】
（Ｓ）−３−（（Ｓ）−２−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロパノイル）−４−イソプロピルオキサゾリジン−２−オン  （Ｓ）−３−（（Ｓ）−２−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロパノイル）−４−イソプロピルオキサゾリジン−２−オンを、３１と同様の様式で調製した。残渣を、ヘキサン中の２５％  ＥｔＯＡｃを溶出液として用いて、フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、２５ｇ）によって精製して、無色油として（Ｓ）−３−（（Ｓ）−２−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロパノイル）−４−イソプロピルオキサゾリジン−２−オン（２．０８ｇ、８７％、９５：１  ｄ．ｒ）を得た：Ｒｆ＝０．３７（１：１、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ６．５８（ｓ，２Ｈ），５．０９（ｑ，Ｊ）７．１Ｈｚ，１Ｈ），４．１７−４．１５（ｍ，２Ｈ），３．８３（ｓ，６Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），２．４５−２．３９（ｍ，１Ｈ），２．１５（ｓ，１Ｈ），１．４９（ｄ，Ｊ）７．１Ｈｚ，３Ｈ），０．９０（ｔ，Ｊ）７．１Ｈｚ，６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１７４．７，１５３．２，１３５．９，１０５．３，６３．２，６０．９，５９．２，５６．２，４２．９，２８．６，１９．８，１８．１，１４．８；ＨＲＦＡＢ［Ｍ＋Ｌｉ］３５８．１８５６（Ｃ１８Ｈ２５ＮＯ６Ｌｉの計算値：３５８．１８４２）。
【０２８８】
ＲおよびＳ１，２，３−トリメトキシ−５−（１−メチルプロプ−２−エン−１−イル）ベンゼンの合成のための一般的手順  火力乾燥した２００ｍＬの丸底フラスコに、所望のオキサゾリジノン（１．０当量）を加えた。ＤＣＭ（０．１Ｍ）を加え、この溶液を−７８℃まで冷却した。ＤＩＢＡＬ−Ｈ（２．０当量）を滴加し、この反応物を−７８℃で２時間撹拌した。飽和ＮＨ４−Ｃｌ（２０ｍＬ）を加え、この溶液を室温まで加温した。この固体を濾過し、ＤＣＭ（３×５ｍＬ）で洗浄した。水層を、ＥｔＯＡｃ（３×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を、食塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。粗材料のＮＭＲ測定を用い、このスペクトルは、ラセミアルデヒド（１８）に対するものと一致した。この粗材料を、さらに精製することなく使用した。ＣＢｒ４（１．５当量）を、ＤＣＭ（０．１Ｍ）中に溶解し、０℃まで冷却した。Ｐｈ３Ｐ（３．０当量）を加え、この溶液を０℃で５分間撹拌した。ＤＣＭ（５．０ｍＬ）中の粗アルデヒド（１．０当量）を滴加した。この反応物を０℃で３０分間撹拌し、次いで、氷冷却したＥｔ２Ｏ（２００ｍＬ）に注ぎ入れた。反応物を、シリカゲルを通して濾過し、ヘキサン（１００ｍＬ）で洗浄し、続いて、ヘキサン（３００ｍＬ）中の２５％  ＥｔＯＡｃで洗浄した。有機物を合わせて、減圧下で濃縮した。粗材料を、さらに精製することなく、次の工程で使用した。Ｍｇ（２．０当量）を、ＴＨＦ（１．０ｍＬ）中に懸濁した。ジブロモエタン（０．４当量）を加え、この懸濁液を２５℃で３０分間撹拌した。ＴＨＦ（６．０ｍＬ）中の粗二臭化物（１．０当量）を滴加し、この反応物を３０分間加熱還流した。この溶液を室温まで冷却し、溶媒を除去した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィーによって精製して、それぞれのエナンチオリッチなアセチレンを得た。ＮＭＲスペクトルを用い、このスペクトルは、ラセミアセチレン（１９）に対するものと一致した。
【０２８９】
２，４−ジアミノ−５−（（Ｒ）−３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ブタ−１−エニル）−６−メチルピリミジン  （Ｒ）−３−（（Ｒ）−２−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロパノイル）−４−イソプロピルオキサゾリジン−２−オン）（２．４４ｇ、６．９４ｍｍｏｌ）を、一般的な手順に供し、Ｒ−１，２，３−トリメトキシ−５−（１−メチルプロプ−２−エン−１−イル）ベンゼン（４６０ｍｇ、３０％）を得た。一般的な園頭カップリング手順により、２，４−ジアミノ−５−ヨード−６−メチルピリミジン（２５０ｍｇ）を、Ｒ−１，２，３−トリメトキシ−５−（１−メチルプロプ−２−エン−１−イル）ベンゼン（２９０ｍｇ）と反応させて、茶色粉末として２，４−ジアミノ−５−（（Ｒ）−３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ブタ−１−エニル）−６−メチルピリミジン（２８０ｍｇ、８２％、９０％  鏡像体過剰率）を得た：Ｒｆ＝０．２９（９：１、ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ６．７６（ｓ，２Ｈ），６．１９（ｓ，２Ｈ），４．０２（ｑ，Ｊ）７．１Ｈｚ，１Ｈ），３．７７（ｓ，６Ｈ），３．６３（ｓ，３Ｈ），２．２１（ｓ，３Ｈ），１．５１（ｄ，Ｊ）７．１Ｈｚ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１６６．９，１６４．１，１６０．９，１５２．８，１３９．４，１３５．９，１０４．０，１００．７，８８．６，７６．４，６０．０，５５．８，３２．５，２４．７，２２．５；ＨＲＦＡＢ［Ｍ＋Ｌｉ］３４９．１８５１（Ｃ１８Ｈ２２Ｎ４Ｏ３Ｌｉの計算値：３４９．１８５１）。
【０２９０】
２，４−ジアミノ−５−（（Ｓ）−３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ブタ−１−エニル）−６−メチルピリミジン（３８）  （Ｓ）−３−（（Ｓ）−２−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロパノイル）−４−イソプロピルオキサゾリジン−２−オン（１．６６ｇ、４．７２ｍｍｏｌ）を、一般的手順に供して、Ｓ−１，２，３−トリメトキシ−５−（１−メチルプロプ−２−エン−１−イル）ベンゼン（３１２ｍｇ、３０％）を得た。一般的な園頭カップリング手順により、２，４−ジアミノ−５−ヨード−６−メチルピリミジン（２５０ｍｇ）を、Ｓ−１，２，３−トリメトキシ−５−（１−メチルプロプ−２−エン−１−イル）ベンゼン（２９０ｍｇ）と反応させて、黄色粉末として３８（３０８ｍｇ、９０％、９５％  鏡像体過剰率）を得た：Ｒｆ＝０．２９（９：１、ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ６．７６（ｓ，２Ｈ），６．１９（ｓ，２Ｈ），４．０２（ｑ，Ｊ）７．１Ｈｚ，１Ｈ），３．７７（ｓ，６Ｈ），３．６３（ｓ，３Ｈ），２．２１（ｓ，３Ｈ），１．５１（ｄ，Ｊ）７．１Ｈｚ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１６７．０，１６４．１，１６１．０，１５２．８，１３９．４，１３６．０，１０４．０，１００．８，８８．６，７６．４，６０．０，５５．８，３２．５，２４．６，２２．５；ＨＲＦＡＢ［Ｍ＋Ｌｉ］３４９．１８５１（Ｃ１８Ｈ２２Ｎ４Ｏ３Ｌｉの計算値：３４９．１８５１）。
【０２９１】
実施例６
化学およびモデリング
ＣｈＤＨＦＲおよびｈＤＨＦＲの構造分析
ＣｈＤＨＦＲ−ＴＳの構造に基づいて、２，４−ジアミノピリミジン環とアリール環との間のプロパルギルリンカーによって画定された新規の系列のＤＨＦＲ阻害剤が開発された。これらの試みを通して、３８ｎＭの阻害定数（ＩＣ５０）および３４２Ｄａの分子量を有する高効率リガンド（化合物Ｘ）が特定された。その後、寄生性酵素に対して、高いレベルの効力を維持しただけでなく、非常に高いレベルの選択性も示した、構造分析に刺激を受けた一連の第二世代プロパルギル類似体が開発され、分析された。高いレベルの活性および選択性を示すプロパルギル結合阻害剤の第三世代の複素環式類似体もまた、開発され、分析された。ビフェニル化合物とＣｈＤＨＦＲとの相互作用の分析
【０２９２】
５’および４’系列の両方のビフェニル化合物のドッキングされた立体配座は、ＵＣＰ１１１Ａを上回るリガンドと受容体との間の親油性接触の実質的な増加を示した。これらの結果は、両方のファミリーにおける非置換およびメチル置換類似体は、初期リードＵＣＰ１１１Ａよりもさらに効力があり、イソプロピル置換基を有するビフェニル類似体よりもさらに強力であることを示した。
【０２９３】
ＣｈＤＨＦＲにドッキングされた化合物のコンピュータ分析は、４’置換化合物とは対照的に、５’置換化合物に対して明らかな選好性を説明する。第１のビフェニル環上の３’−ＯＭｅの好ましい位置付けは、Ｌｅｕ２５、Ｇｌｎ２４、Ｇｌｙ２３、およびＳｅｒ６１によって形成されたポケットに開口する活性部位において上方に向き、Ｌｅｕ２５の主鎖ＮＨを用いて、水素結合する機会を有する。また、Ｌｅｕ２５およびＧｌｎ２４のアルキル部分との親油性相互作用もある。好ましい配向性において、３’−ＯＭｅを有し、第２のフェニル環は、５’系列において開口部において下方に突出するか、または最小のＣｈＤＨＦＲ接触を伴って、４’系列において活性部位から直接突出するかのいずれかである。図９に示されるように、活性部位の開口部での領域は、親油性であり、５’系列において第２のフェニルと幾つかの接触を有し得るが、４’系列において第２のフェニル環との唯一限定された接触を有し得る。
【０２９４】
興味深いことに、ＵＣＰ１１１Ｄ鏡像体のドッキング分析は、ＣｈＤＨＦＲアッセイの結果に対して逆の傾向を示した。プロパルギル置換領域周辺の空間は、大部分は、Ｉｌｅ６２によって決定付けられ、アンサンブルを超える立体配座空間をあまり検証しないが、活性部位の背後に向かって回転する余地がある。結晶化された位置付けにおいて、イソメチル基は、活性部位に突出され、残基上に単一の親油性ポケットを形成する。この場合は、イソ−メチル上の１つの領域に誘導し、そのため、間違った立体化学を表す、プロパルギル−メチルに対する唯一の空間がある。Ｉｌｅ６２を、活性部位の背後に向かって回転した場合、上方または下方のいずれかの立体配座にドッキングされたプロパルギルメチルに対して十分な余地がある。この理論を試験するために、ポケットに対して後ろに突出する角度のＬｏｖｅｌｌ辞書を用いて、Ｉｌｅ６２を変化させた。この単一構造体は、ドッキングのために使用され、プロパルギル中心でＲ配置が好ましいことを示した。
【０２９５】
ビフェニル化合物とｈＤＨＦＲとの相互作用の分析
ビフェニル化合物は、幾つかの点で比較測定によって画定される、活性部位での「最も広い」開口部を有するアンサンブルメンバーを用いて、ヒトＤＨＦＲにドッキングさせた。このアンサンブルメンバーは、結晶構造よりも０．２５Å広く平均化した。大量の置換に対する最も利用可能な空間および選択性を達成するための最も困難な症例を示すために、この構造体が、選択された。また、それはこの領域の潜在的な柔軟性を調べる機会も示した。
【０２９６】
明らかな傾向は、ｈＤＨＦＲにおいて、５’および４’系列に対するドッキングおよびアッセイ結果の両方に見られた。図１０に見られるように、ｈＤＨＦＲにおける活性部位の開口部は、実質的には、ＣｈＤＨＦＲよりも狭く、親油性が少ない。ＰＥＫＮループは、円盤形の受容体から垂直に突出し、このループより下に割れ目を形成する。この領域は、４’置換ファミリーと比較して、５’置換ファミリーに容易に接近可能である。ＵＣＰ１１１Ｄは、ＵＣＰ１１１Ａよりもポケット内でさらに上方に位置した第１のフェニルを有する配向性を好み、当量の親油性接触を提供する。第２のフェニル環の置換は、環下で、さらに親油性の割れ目まで下がって選好性を変えて、親油性接触の大幅な増加をもたらす。この割れ目は、メチル置換のための締まりばめであるが、親油性の接触の増加により平衡を保つ。これらの配向性はまた、理想的な「上方の」位置において、３’−ＯＭｅを保存し、ＵＣＰ１１１Ａ  ３’−ＯＭｅで作られる接触を模倣する。
【０２９７】
４’系列は、異なる結合様式を表す。適切に配向されるリガンドのピリミジンおよびプロパルギル領域のために、ビフェニル部分は、ＣｈＤＨＦＲと同様に、ポケットから外へ直接突出させる必要がある。しかしながら、この領域は、ＰＥＫＮループと反対側の受容体壁との間のｈＤＨＦＲにおいて障害を来たす。図１０中の配向は、コンピュータ的に好ましいポーズであるが、実質的に立体障害を表す。ジメチル置換類似体（青色で示される）は、立体干渉を制限するために、３’−ＯＭｅが下方を指す配向を好む。この配向はまた、より少ない接触で、ポケット内の上方のさらに遠くの配向において、プロパルギルメチルを設置する。４’系列の多くの配向が調べられたが、３’−ＯＭｅおよびプロパルギルメチルの配向を保存しつつ、ＰＥＫＮループより下に割れ目を利用することができるものは見出されなかった。ＰＥＫＮ環の真下に立体バルクの５’系列の増加を提供することができるｈＤＨＦＲの柔軟性は、４’系列が突出し得る、または少なくとも、高親和性のために必要とされる立体配座を提供し得るような方法ではない領域に延長しない可能性が高い。
【０２９８】
ｈＤＨＦＲにおいて、活性部位の開口部で柔軟性のある空間をプローブすることによって、ＵＣＰ１１１Ｄｘ系列において、具体的には、ＰＥＫＮループ周辺およびそれより下の領域で、メチル置換を構成するのに明らかに十分な柔軟性があることは証拠となる。しかしながら、このループがＵＣＰ１１１Ｄ２６Ｉｐｒのジイソプロピル基のバルクを提供するのに十分移動することができない場合、この柔軟性は制限される。この制限された柔軟性は、将来、ｈＤＨＦＲ設計スキームを構成するために重要であることが予想される。
【０２９９】
プロパルギル結合類似体の複素環式類似体とＳａＤＨＦＲ：ＮＡＤＰＨとの相互作用の分析
黄色ブドウ球菌ＤＨＦＲ：ＮＡＤＰＨ：１４２および黄色ブドウ球菌ＤＨＦＲ：ＮＡＤＰＨ：１４０の構造体の比較は、両方の阻害剤に存在する３つのアリール環の配向の微小の変化を示す。しかしながら、黄色ブドウ球菌ＤＨＦＲに対して化合物１４２に対する効力の１８倍の改善を説明する大きな違いは、化合物１４２における２’−メトキシ置換基と、Ｓｅｒ４９のヒドロキシル基との間の水素結合（３．５Å）の存在、化合物１４０における３’−メトキシで除外される相互作用である。
【０３００】
黄色ブドウ球菌ＤＨＦＲ：ＮＡＤＰＨ：１４８および黄色ブドウ球菌ＤＨＦＲ：ＮＡＤＰＨ：１４０の構造体の比較（図１５Ｃ）は、親ビフェニル類似体と比較して、ピリジル系列の疎水性領域の劇的な再配向を示す。実際には、ピリジン１４８の異なる鏡像体は、１４０で観察される鏡像体と比較して、選択的に結晶化する。この新しい配置は、π−π積み重ねおよび隣接したアリール環と相互作用するＩｌｅ５０の立体配座の変化を維持するために、ＮＡＤＰＨのニコチンアミド環に対する立体配座の変化を余儀なくさせる。活性部位の開口部でピリジル窒素の安定した溶媒化は、化合物１４０と比較して、化合物１４８の再配向を引き起こす。この再配向の１つの結果が、Ｂ環およびＣ環と活性部位の残基との間の接触の減少であり、酵素阻害のわずかな減衰に反映する。
【０３０１】
実施例７
ＣｈＤＨＦＲおよびｈＤＨＦＲの生物学的評価
化合物は、ＣｈＤＨＦＲ−ＴＳおよびｈＤＨＦＲを用いて、分光学的酵素アッセイにおいて評価された。阻害定数（ＩＣ５０）が測定された（表４を参照のこと）。リード化合物Ｘは、３８ｎＭの阻害定数および適度な選択性（８倍）を有する。ビフェニル化合物のすべてが、初期リード化合物Ｘよりも強力であり、病原性酵素に対してさらに選択性を示す。最も強力なラセミ化合物、Ｄ（ｒａｃ）、５’−ビフェニル誘導体はまた、最も選択的なラセミ化合物である（９４４倍）。この５’−ビフェニル類似体の単一のＲ鏡像体は、クリプトスポリジウムＤＨＦＲ酵素に対して、試験したすべての公知の化合物のうちで最も強力（１．１ｎＭ）であり、最も選択的（１２７３倍）である。表４中の化合物の略語は、以下の化合物を指す。
【０３０２】
１１１Ａ：化合物Ｘ、Ｄ（ｒａｃ）：５−［３−（５−メトキシ−ビフェニル−３−イル）ブタ−１−エン−１−イル］−６−メチルピリミジン−２，４−ジアミンのラセミ形態、Ｄ６Ｍ：５−［３−（５−メトキシ−６’−メチルビフェニル−３−イル）ブタ−１−エン−１−イル］−６−メチルピリミジン−２，４−ジアミン、Ｄ２６Ｍ：５−［３−（５−メトキシ−２’６’−ジメチルビフェニル−３−イル）ブタ−１−エン−１−イル］−６−メチルピリミジン−２，４−ジアミン、Ｄ２６Ｉ：５−［３−（５−メトキシ−２’６’−ジイソプロピルビフェニル−３−イル）ブタ−１−エン−１−イル］−６−メチルピリミジン−２，４−ジアミン、Ｆ：５−［３−（３−メトキシ−ビフェニル−４−イル）ブタ−１−エン−１−イル］−６−メチルピリミジン−２，４−ジアミン、Ｆ２Ｍ：５−［３−（３−メトキシ−２’−メチルビフェニル−４−イル）ブタ−１−エン−１−イル］−６−メチルピリミジン−２，４−ジアミン、Ｆ２６Ｍ：５−［３−（３−メトキシ−２’６’−ジメチルビフェニル−４−イル）ブタ−１−エン−１−イル］−６−メチルピリミジン−２，４−ジアミン、Ｆ２６Ｉ：５−［３−（３−メトキシ−２’６’−ジイソプロピルビフェニル−４−イル）ブタ−１−エン−１−イル］−６−メチルピリミジン−２，４−ジアミン、Ｄ（Ｒ）：ＤのＲ−鏡像体、およびＤ（Ｓ）：ＤのＳ鏡像体。
【０３０３】
【表４】
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【０３０４】
第三世代類似体のプロパルギル結合阻害剤の複素環式類似体は、酵素阻害アッセイにおいて評価され、黄色ブドウ球菌および化膿連鎖球菌の阻害について評価され、哺乳動物細胞の毒性について評価された。表５および６は、ビフェニル類似体およびＴＭＰと比較して、これらの複素環式プロパルギル結合阻害剤の生物学的活性を要約する。
【０３０５】
【表５−１】
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【０３０６】
【表５−２】
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【０３０７】
【表６】
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【０３０８】
酵素阻害アッセイ
酵素阻害アッセイは、３４０ｎｍの吸光度でＤＨＦＲ酵素によるＮＡＤＰＨ酸化の速度をモニタリングすることによって行われた。アッセイは、ＮＡＤＰＨの飽和濃度の存在下で行われ、ジヒドロ葉酸によって開始された。すべてのアッセイは、２０ｍＭ  ＴＥＳ  ｐＨ７．０、５０ｍＭ  ＫＣｌ、１０ｍＭ  ２−メルカプトエタノール、０．５ｍＭ  ＥＤＴＡ、および１ｍｇ／ｍＬ  ＢＳＡを含有する緩衝液中、２５℃で完了した。阻害は、ＩＣ５０値に近い阻害剤濃度で少なくとも３回測定され、平均ＩＣ５０値は、標準偏差とともに報告される。
【０３０９】
抗菌性活性の評価
ＣＬＳＩ標準法に基づいた微量液体希釈法を用いて、および比色レポーターＡｌａｍａｒ  Ｂｌｕｅを使用して、黄色ブドウ球菌１３７０９および化膿連鎖球菌について、最小阻害剤濃度（ＭＩＣ）が、評価された。感受性試験のために、１０μＬのグリセロール原液を、２％  ｗ／ｖグルコースを補充した１０ｍＬの化学的に定義されたＩｓｏｓｅｎｓｉｔｅｓｔ培養液（Ｏｘｏｉｄ）の振とうフラスコ培養物中に懸濁した。振とうフラスコ培養物の試料を、培地中で１×１０６細胞／ｍＬに希釈し、ＤＭＳＯ（２μＬ）中に分注された試験化合物を含む９６ウェル試験プレート（１ウェル当たり１００μＬ）に加えた。株特異性の倍加時間から決定されたインキュベーション期間（３０℃）後、０．０３％  ｗ／ｖ  レザズリンの水溶液（１０μＬ）を加え、プレートをインキュベートし、それぞれのウェルを染料還元に対して採点した。ＭＩＣ値は、レゾルフィン（λｍａｘ  ６００ｎｍ）に対してレザズリン（λｍａｘ  ５７０ｎｍ）の１％未満の還元が観察されるように、増殖を阻害する試験化合物の最低濃度であると見なされた。
【０３１０】
哺乳動物細胞の毒性の評価
付着細胞株を、２ｍＭ  グルタミン、そして、１．５ｇ／Ｌ  重炭酸ナトリウム、０．１ｍＭ  非必須アミノ酸、１ｍＭ  ピルビン酸ナトリウム、および１０％  ウシ胎仔血清を含有するように調整されたイーグル平衡塩溶液（ＨｙＣｌｏｎｅ，Ｌｏｇａｎ，ＵＴ，ＵＳＡ）とともに、イーグル最小必須培地（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ，ＵＳＡ）中で維持した。これらのアッセイに使用されたウシ胎仔血清は、ロット全体で一致した。すべての培養物を、３７℃で加湿した５％  ＣＯ２雰囲気下で維持し、週に２回新鮮な培地を得て、トリプシン処理および毎週１：５の比率での再懸濁によって継代培養した。毒性アッセイは、１０〜２０代継代で行われた。標的化合物の毒性は、この細胞を用いて試験化合物を４時間インキュベートし、細胞を洗浄し、最後に、Ａｌａｍａｒ  Ｂｌｕｅを用いて細胞を処理することによって測定された。１２〜２４時間後、還元された染料の蛍光発光が測定された。試験化合物の濃度の関数として蛍光強度は、フェルミ方程式にフィットさせ、非線形最小二乗回帰分析を用いて、ＩＣ５０値を推定した。
【０３１１】
抗菌活性のためのピリジル置換基を有する抗葉酸剤の評価
標的とされた病原体に対するプロパルギル結合抗葉酸剤におけるこれらの新しい阻害剤の評価は、この系列が非常に強力な抗菌剤を含むことを示す。具体的には、ピリジルを含有する化合物は、ＭＲＳＡおよび化膿連鎖球菌の両方に対して０．１μｇ／ｍＬを下回るＭＩＣ値を有し、幾つかの化合物は、ＴＭＰと比較した場合、優れた活性を有する。
【０３１２】
抗葉酸剤の複素環式系列は、２つの哺乳動物細胞株、ＭＣＦ−１０およびＨｅｐＧ２に対して評価された場合、強力な抗菌剤であるだけでなく、最小の細胞毒性を有する。注目すべきは、複素環式系列の増加した抗菌活性は、これらの誘導体においてより低いレベルの酵素（表５）にもかかわらず、哺乳動物細胞の毒性に関連していない。軽減した細胞毒性の起源は、明らかではないが、ある魅力的な可能性は、化合物がリソソーム内に隔離されることである。２より大きいｃｌｏｇＰ値を有する弱塩基性化合物は、リソソームの酸性環境下で、イオントラッピングに供されることが示されている。ピリジルを含有する類似体が、ビフェニル系列と比較して、さらなる塩基性窒素を有する場合、それらは、リソソーム内に蓄積するためにより大きな傾向を有し得、そのため、細胞質の哺乳動物ＤＨＦＲの阻害を最小限に抑える。実際には、Ｃ環位でビフェニルを有する化合物は、３２〜６７μΜのＩＣ５０値を有するより大きな細胞毒性度を示す。興味深いことに、抗葉酸剤のリソソームの金属イオン封鎖は、癌化学療法において耐性機構として既に報告されている。
【０３１３】
ＭＲＳＡの臨床分離株に対するプロファイル
ＭＲＳＡが、世界的に、異なる表現型を有する多量の株に進化する場合、様々な臨床的に関連する分離株に対して有望な化合物の効果を評価することは重要である。黄色ブドウ球菌に対して最強の抗菌活性を有する６つのプロパルギル結合抗葉酸剤（１３９、１４０、１４１、１４７、１４８、１５２、１５３、１５６〜１５９）が、９つの臨床分離株に対するさらなる評価のために選択された（表７）。これらの分離株のうち、１つの株がＴＭＰ−ＳＭＺ耐性であり、２つの株がＵＳＡ３００  ＣＡ−ＭＲＳＡを表し、３つの株がＵＳＡ  １００  ＨＡ−ＭＲＳＡを表し、１つの株がＨＡ−ＭＲＳＡであり、２つの株がバンコマイシン中間黄色ブドウ球菌（ＶＩＳＡ；Ｍｕ３およびＭｕ５０）である。プロパルギル結合化合物の抗菌作用が、バンコマイシンおよびＴＭＰ：ＳＭＺ対照の作用と比較された。すべての９つの株において、プロパルギル結合抗葉酸剤の抗菌活性は、バンコマイシンの活性を上回った。８つの株において、１つのＵＳＡ１００ＨＡ−ＭＲＳＡ株を除いて、プロパルギル結合抗葉酸剤の抗菌活性はまた、ＴＭＰ：ＳＭＺのものを上回った。
【０３１４】
また、第三世代類似体のプロパルギル結合阻害剤の複素環式類似体は、ＣｇＤＨＦＲおよびｈＤＨＦＲを阻害するそれらの能力ならびにカンジダグラブラタの増殖を阻害するそれらの能力についても評価された。表７は、ビフェニル阻害剤と比較した、これらの複素環式プロパルギル結合阻害剤の生物学的活性を要約する。
【０３１５】
【表７】
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【０３１６】
概して、芳香族または脂環式のいずれかの複素環への１３９におけるフェニル環の変換は、３〜２０倍範囲の喪失の酵素阻害の減衰をもたらす。３つのうち、モルホリン類似体が、最大の酵素阻害能力を維持しているが、一方、ピペラジン類似体は、最大の喪失を被っている。Ｃ６置換（表７中のＲ）は、酵素能力に最小限の影響を与えるように思われる。
【０３１７】
フェニル環上の疎水性置換基が、効力を大いに増加させることが、前に示されているが、モルホリンおよびピペラジン系上の類似の置換がさらなる変動を示す。化合物１４０のメチル置換基を模倣するモルホリンにおけるメチル置換基の含有は、わずかに効力を低下させ、恐らくは、ｓｐ３ハイブリダイズされた中心でこれらのメチル基の位置決めに反映する。代替として、４−メチルピペラジン置換基は、酵素阻害を約５倍増加させた。ピリジン化合物は、ヒト同族体を上回る病原体酵素に対して、約１５倍で、最も選択的である。２〜２０倍のより適度な比率を有するが、モルホリン類似体およびピペラジン類似体はともに、依然として、真菌性酵素に対して選好性を示す。
【０３１８】
細胞成長阻害アッセイの結果は、ピリジン誘導体１４７および１４８が、臨床上用いられる抗真菌剤に相当する範囲（１．４〜１．５μｇ／ｍＬ）の効力を示すことを示す。ピリジン誘導体が、直接比較器、化合物１３９よりも弱い酵素阻害剤であるが、それらは、１０倍のより良好な抗真菌活性を示す。実際には、ピリジン化合物によって示される活性レベルは、ビフェニル１４０および１４１に相当し、これらはサブナノモル酵素能力を有する。これは、この種類の化合物の抗真菌活性が酵素能力を超える化合物特性の調節によってさらに最適化され得ることを示唆している。これは、これらの複素環の酵素親和性の改善が、最終的には、優れた活性を有する抗真菌活性を生成し得ることをさらに示唆している。
【０３１９】
ピリジン類似体よりもＤＨＦＲに対してより大きな効力を示すモルホリン誘導体およびピペラジン誘導体は、抗真菌アッセイにおいて比較する際に不十分に行われた（ＭＩＣ＞１２μｇ／ｍＬ）。生物に対する活性の減衰は、増加する溶解度に反映する場合があり、透過性の減少をもたらす恐れがある。概して、これらの結果は、阻害剤のこれらの特性の最適バランスに対する必要性を示唆している。
【０３２０】
幾つかの代表的な化合物はまた、チミジンが欠失した培地において評価された。高レベルのチミジンは、抗葉酸剤の正確な感受性試験に干渉することが示されている。これを補うために、抗葉酸剤は、低いチミジン濃度を有する制御された最小培地において、しばしば評価される。カンジダグラブラタに対して抗葉酸剤の活性への研究が少ないため、チミジンが欠失した培地において有望な化合物を評価した。３つの代表的な複素環式類似体（１４８、１５２、および１５６）は、２％  グルコースで補充されたＩｓｏＳｅｎｓｉｔｅｓｔ培地において評価された（表８）。さらに、これらの化合物はまた、ＭＣＦ−１０およびＨｅｐＧ２細胞株を用いて哺乳動物細胞の毒性について評価された。細胞選択性は、ＭＩＣ値（μｇ／ｍＬ）で割ったＭＣＦ−１０ヒト細胞株に対するＩＣ５０値として報告される（表８）。
【０３２１】
【表８】
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【０３２２】
これらの結果は、ヒト血液および組織内に見出されるものに相当するチミジンレベルの存在下で、新規の抗葉酸剤が、１μｇ／ｍＬ未満のＭＩＣ値を示すピリジン誘導体を有するカンジダグラブラタの非常に強力な阻害剤であることを示す。さらに、適度なレベルの酵素選択性にもかかわらず、化合物が細胞の段階で１００〜３００倍の選択性レベルを示す。これらの化合物で観察された刺激的な活性に基づいて、結晶構造は、阻害剤とＣｇＤＨＦＲとの相互作用をより良好に特徴付けることが決定された。
【０３２３】
実施例８
化学およびモデリング−ＣｇＤＨＦＲの骨格Ｂ
ＣｇＤＨＦＲは、１．５ｍＭ  ＮＡＤＰＨおよび１ｍＭ  化合物１１を用いて、４℃で２時間インキュベートした。好適な結晶（それぞれの側面０．２ｍｍ）は、懸滴蒸気拡散法を用いて、ならびに等体積のタンパク質：リガンドと０．１Ｍ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ８．５）、３０％  ＰＥＧ４０００、および０．２Ｍ  ＭｇＣｌ２とを混合することによって増殖させた。瞬間冷却する前に、結晶を、結晶混合物および１５％  グリセロールを含有する溶液に移した。すべての回折データは、１００Ｋで測定された。初期データセットは、Ｏｘｆｏｒｄ  Ｅｘｃａｌｉｂｕｒ回折計を用いて測定され、ＣｒｙｓＡｌｉｓソフトウェアを用いて処理された。高分解能データセットは、ＡＤＳＣ  ＣＣＤ検出器を用いてＢｒｏｏｋｈａｖｅｎ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  ＬａｂｏｒａｔｏｒｙにてビームラインＸ２５Ａで測定され、ＨＫＬ２０００を用いて処理された。データ処理および精密化の統計値が、表９に報告される。
【０３２４】
【表９】
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【０３２５】
ＣｇＤＨＦＲの構造体を、プログラム、Ｐｈａｓｅｒ、調査プローブとしてカンジダアルビカンスＤＨＦＲ（ＰＤＢ  ＩＤ：１Ｍ７９）のモデルを用いて、分子置換によって分解し、このデータは、Ｏｘｆｏｒｄシステム上で得た。分子置換溶液を、高分解能データ用の初期位相情報として使用した。電子密度マップを検査し、Ｃｏｏｔを用いてモデルを構築した。ＣＣＰ４パッケージのＲｅｆｍａｃ５を用いて、モデルを精密化した。Ｃｏｏｔ内の官能基を用いて、水分子を自動的に加えた。モデルは、Ｒａｍａｃｈａｎｄｒａｎプロットを用いて良好な一致を示す（好ましい領域内で９７．３％残基、許容可能な領域内で２．５％、および許容されない領域内で０．２％（１残基）。Ｐｙｍｏｌを用いて、図を調製した。
【０３２６】
１．６Åまで延長した回折振幅を用いて、化合物１１およびＮＡＤＰＨと複合したＣｇＤＨＦＲの結晶構造は、上述のように決定された。結晶は、正方空間群Ｐ４１に属し、非対称ユニットにおいて、２つの分子がある。２１７残基のＣｇＤＨＦＲタンパク質の全体構造は、１０本のストランドβシートおよび５つの隣接したアルファらせんからなった（図１１ａ）。精製のために使用された８残基のヒスチジンタグは、結晶充填相互作用の一部を形成し、秩序のある電子密度を示した。
【０３２７】
ＣｇＤＨＦＲおよびＣａＤＨＦＲは、８５％の配列相同性を共有し、ＣａＤＨＦＲ  Ｃα原子上に１．６２Åのｒｍｓ偏差で重ね合わせられ得る（図１１ｂ）。ＣａＤＨＦＲへの高い配列相同性にもかかわらず、２本のストランドを中央ベータシートに加える２５残基の挿入（ＣｇＤＨＦＲにおいて残基１７７〜２０２）を含む、幾つかの重要な違いがある。また、ＣｇＤＨＦＲは、阻害剤のピリミジン環と相互作用するメチオニン（Ｍｅｔ３３）を有し、ＣａＤＨＦＲは、この位置（Ｉｌｅ３３）においてイソロイシンを有する、活性部位での２つの構造上の違いもある。ＣｇＤＨＦＲにおいて残基６１〜６６を含有するループは、ＣａＤＨＦＲにおいて同じループ（残基６１〜６６を有する）よりも活性部位に２．４Å近くなるように置かれる。
【０３２８】
初期リード化合物１１は、ピリミジン環とＧｌｕ３２、Ｔｈｒ１４０、Ｔｙｒ１２０、ならびにＩｌｅ９およびＩｌｅ１２１の主鎖カルボニル酸素原子との間の水素結合を有する活性部位に結合する（図１２ａ）。Ｃ６エチル基は、Ｍｅｔ３３およびＰｈｅ３６と制限されたファンデルワールス相互作用を形成する。アセチレン性リンカーは、ＮＡＤＰＨのニコチンアミド環、Ｌｅｕ２５、および１２１とファンデルワールス相互作用を形成する。２’，５’−ＯＭｅフェニル環は、Ｉｌｅ６２、Ｌｅｕ６９、Ｐｈｅ６６、Ｐｒｏ６３、およびＴｈｒ５８からなる疎水性ポケット内に適合する。
【０３２９】
ＣｇＤＨＦＲの折り畳み全体は、ヒトＤＨＦＲの折り畳みと類似しているが、活性部位で幾つかの構造上の違いがある（図１２ｂ）。ピリミジン環のＣ６付近のＭｅｔ３３（ｈ：Ｐｈｅ３１）、アリール環付近のＰｈｅ６６（ｈ：Ａｓｎ６４）、ピリミジン環付近のＩｌｅ１２１（ｈ：Ｖａｌ１１５）、および活性部位の開口部でさらに離れているＡｒｇ３７（ｈ：Ｇｌｎ３５）の４つの残基の違いがある。後半の２つの残基の違いは、活性部位のコアからさらに遠くにある。重要なことには、残基Ｔｈｒ５８−Ｐｈｅ６６を含むＣｇＤＨＦＲループは、ｈＤＨＦＲにおいてＴｈｒ５６−Ａｓｎ６４を含む同じループと比較して、活性部位から１．２Å離して置かれる。このループ内の残基は、リガンドのジメトキシフェニル環と鍵となる相互作用を形成する。化合物１１の適度な選択性（１５６倍）は、ジメトキシフェニル環とＭｅｔ３３（ｈＤＨＦＲにおいてＰｈｅ３１）、またはジメトキシフェニル環とＳｅｒ５９−Ｐｒｏ６１を含むループとの間の相互作用から潜在的に生じ、ＣｇＤＨＦＲにおいてよりもｈＤＨＦＲにおいて活性部位により近く、幾つかの反発するファンデルワールス相互作用を示す場合がある。
【０３３０】
プロパルギル結合阻害剤の複素環式類似体
結晶化および構造決定
懸滴蒸気拡散法を用いて、黄色ブドウ球菌ＤＨＦＲを、１４０、１４２、および１４８で共結晶化した。タンパク質（１２ｍｇ／ｍＬ）を、リガンド（１ｍＭ）およびＮＡＤＰＨ（２ｍＭ）で、氷上で２時間インキュベートした。等体積のタンパク質：リガンド：ＮＡＤＰＨの複合体を、１５％  ＰＥＧ１０，０００、１５０ｍＭ  酢酸ナトリウム、１００ｍＭ  ＭＥＳ  ｐＨ６．５、および５％  ブチルラクトン（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）からなる最適化された結晶化溶液と混合した。すべての結晶成長は、同じ手順に従い、一般的には、５〜７日以内に結晶を得た。結晶は、１５％  グリセロールを含有する抗凍結バッファー液中でインキュベートし、次いで、液体窒素で瞬間冷却した。高分解能データセットが、Ｂｒｏｏｋｈａｖｅｎ  ＮＳＬＳにてビームラインＸ２５で回収された。
【０３３１】
データを指標化し、ＨＫＬ２０００を用いてスケール化した。すべての複合体に対する結晶構造は、葉酸塩に結合する黄色ブドウ球菌ＤＨＦＲのモデルを用いて解明された。ＳａＤＨＦＲ：ＮＡＤＰＨ：１４０の複合体およびモデルに対する回折データは、同じ六方晶系空間群（Ｐ６１２２）および単位格子の寸法を共有し、したがって、フーリエ法を用いて、これらのデータに対する位相問題を解決した。ＳａＤＨＦＲ：ＮＡＤＰＨ：１４２およびＳａＤＨＦＲ：ＮＡＤＰＨ：１４８の結晶は、空間群Ｐ６１に属し、非対称ユニットにおいて、２つの分子がある。したがって、これらの構造体は、Ｐｈａｓｅｒを用いて、分子置換によって決定した。プログラムＣＯＯＴおよびＲｅｆｍａｃ５を用いて、許容されるＲｆａｃｔｏｒおよびＲｆｒｅｅが達成されるまで、構造体を構築および精密化した。ＰｒｏｃｈｅｃｋおよびＲａｍａｃｈａｎｄｒａｎプロットを用いて、構造形状を評価した。溶媒は、ＮＡＤＰＨならびに化合物１４０および１４２に結合される黄色ブドウ球菌ＤＨＦＲの結晶構造に対する最終モデルには含まれなかった。
【０３３２】
化合物１４８および１５３とＣｇＤＨＦＲの相互作用を解明するために、２つの新しい第３の結晶構造を決定した。懸滴蒸気拡散法を用いて、酵素、ＮＡＤＰＨ、および１４８または１５３のいずれかの阻害剤によって結晶を成長させた。得られた結晶は、空間群Ｐ４１に属し、それぞれ、２．６および２．３Åの分解能への回折振幅を示す。構造体は、プローブ分子３ＣＳＥ７を用いた分子置換法により決定された。電子密度は、リガンドに対して明らかであり、それぞれ、２５．８および２６．５のＲｆｒｅｅ値に対するすべての座標の置換および精密化を可能にする（表１０）。
【０３３３】
【表１０】
2014532729.tif 000057
【０３３４】
実施例９
化学およびモデリング−ＣｇＤＨＦＲの骨格Ａ
骨格Ｂからの化合物（表３）で観察された相互作用に加えて、骨格Ａの誘導体はまた、強力な阻害およびより大きな抗真菌活性を示した。具体的には、ＣｇＤＨＦＲ構造におけるドッキング化合物６は、プロパルギルメチル基と、Ｉｌｅ１２１、Ｔｈｒ５８、およびＩｌｅ６２からなるポケットとの潜在的な相互作用を示した。トリメトキシフェニル基は、Ｓｅｒ６１およびＬｅｕ２５と相互作用する３’−メトキシ基、タンパク質とほとんど相互作用しない４’−メトキシ基、ならびにＩｌｅ６２、Ｐｒｏ６３、Ｍｅｔ３３、および末端にＰｈｅ６６と相互作用する５’−メトキシ基を表す。
【０３３５】
実施例１０
第二世代ＣｇＤＨＦＲ阻害剤の化学およびモデリング
ピリミジン環のＣ６位で小さいアルキル基、化合物６のプロパルギルメチル基、およびフェニル環上の３’−メトキシ基を含む第一世代阻害剤の幾つかの部分は、ＣｇＤＨＦＲとの好ましいファンデルワールス相互作用を得た。しかしながら、化合物１１および６によって使用されるものと比較して、さらなる相互作用が、リガンド結合ポケットにおいて利用可能であった。化合物１１および６のメトキシ基と比較して、アリール環上の５’位でより大きな親油性部分は、Ｉｌｅ６２、Ｐｒｏ６３、Ｍｅｔ３３、およびＰｈｅ６６から利用可能な疎水性相互作用のより良好に利用することができることが疑われた（図１３）。ＣｇＤＨＦＲに対して効力を増加するように設計されたこの位でより大量の疎水性基はまた、ｈＤＨＦＲに対して効力を減少する（および選択性を増加する）ことが予測された。ｈＤＨＦＲにおいて残基５６〜６４を含むループは、活性部位により近く、モデリングは、第二世代阻害剤の５’位で立体バルクを提供するために再位置付けする必要があり得ることを示唆している。
【０３３６】
したがって、ＣｇＤＨＦＲの構造体および化合物１１および６の特徴を用いて、第二世代阻害剤は、有意により強力かつ選択的であるように設計された。第二世代誘導体の系列には、ピリミジンのＣ６位でメチル基、プロパルギルメチル基、およびアリール環上の３’メトキシ基を維持しつつ、アリール環のメタ（５’）位でフェニル環が含まれる（表３中の骨格を参照のこと）。酵素との予測された新しい相互作用に加えて、ビフェニル化合物の設計は、合成のための簡易経路を表す。元のプロパルギル設計は、ヨード化ピリミジンをアセチレンパートナーと結合するために鍵となる園頭カップリングをうまく利用する。ビフェニル化合物の合成は、第２のアリール環を設置するために鈴木カップリングを含むようにこのモジュール設計を拡大する。第２のアリール環上の置換基は、ループ領域に向かってバルクを突出させ、効力および選択性の両方を増加させるように想定され、したがって、第２の環上のメタ（化合物１２）位およびパラ（化合物１３）位でメチル基を有するビフェニル誘導体が、合成され、分析された（表１０を参照のこと）。
【０３３７】
実施例１１
ＣｇＤＨＦＲおよびｈＤＨＦＲの生物学的評価
第二世代化合物を、ＣｇＤＨＦＲおよびヒトＤＨＦＲを用いた酵素アッセイ、ならびに抗真菌アッセイにおいて試験した。ＤＨＦＲに対してサブナノモル範囲内のＩＣ５０値を有する化合物が極めて強力であることが見出されただけでなく、それらはまた、真菌酵素に対しても強力な選択性（２，３５０倍）を示した（表１１を参照のこと）。意義深いことには、これらの第二世代化合物はまた、臨床上用いられる治療薬に相当する阻害レベルを有するインビトロでの優れた抗真菌活性も示した。
【０３３８】
【表１１】
2014532729.tif 000058
【０３３９】
複数のＭａｒｋｕｓｈメンバーおよび条件が上記に開示されていることを理解すべきである。あらゆる条件が上記に列挙されるあらゆる他の条件と組み合わされて、一種の本明細書に記載される組成物および方法を得ることができることが企図され、したがって、本明細書に記載される組成物および方法の範囲内である。代替として、本明細書に記載される組成物および方法の種のうちのいずれかに開示される任意の化合物を放棄するために、上記の列挙されたＭａｒｋｕｓｈ群のうちのいずれかの任意のメンバーを放棄して、属を形成することができる。
【０３４０】
上述のすべての科学論文、刊行物、要約、特許、および特許公開は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【０３４１】
本発明が、開示される実施形態を参照して具体的詳細に記載されているが、多くの変更および修正は、本発明の精神および範囲内で達成され得ることが理解されよう。
【図１】
2014532729.tif 000062
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【配列表】
2014532729000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成26年7月16日(2014.7.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｖの化合物であって、
【化１】
2014532729.tif 000078
式中、Ｒが、Ｈ、Ｃ１−Ｃ５アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシ、およびヒドロキシからなる群から選択され、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４が、独立して、水素、およびＣ１−Ｃ５アルキル、シクロアルキル、アルコキシアルキル、アルコキシアルコキシアルキル、アリールアルキル、アルキルカルボニル、シクロアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アルコキシアルキルカルボニル、アルコキシアルコキシアルキルカルボニル、アリールカルボニル、ピリジニルカルボニル、アリールオキシアルキル、ハロアルキルカルボニル、およびシアノアルキルカルボニルからなる群から選択され、
ＡおよびＢが、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシからなる群から選択され、前記フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される「低級」が、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味し、
ＶおよびＷのうちの１つが、メトキシ基であり、もう一つが、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシからなる群から選択され、前記フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで１回以上、任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される低級が、好ましくは、Ｃ１−Ｃ６であり、
Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つが、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシからなる群から選択され、前記フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基がそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで１回以上、任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される低級が、好ましくは、Ｃ１−Ｃ６であり、
（ａ）Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つが、ピペリジン、ペルヒドロピリミジン、モルホリン、ピリジン、ピリミジン、インドール、イソインドール、キノリン、イソキノリン、オキサゾール、チアゾール、イミダゾール、およびそれらの誘導体からなる群から選択される置換基であり、前記ピペリジン、ペルヒドロピリミジン、モルホリン、ピリジン、ピリミジン、インドール、イソインドール、キノリン、イソキノリン、オキサゾール、チアゾール、イミダゾール、またはそれらの誘導体はそれ自体、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、またはアリールオキシアルコキシで１回以上、任意に置換されてもよく、前記フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、またはアリールオキシアルコキシの置換基はそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで１回以上、任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される低級が、好ましくは、Ｃ１−Ｃ６であるか、（ｂ）Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つが、式ＶＩＡおよび式ＶＩＢからなる群から選択され、
【化２】
2014532729.tif 000079
式中、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちの少なくとも１つがＮであり、ＮではないＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちのいずれかがＣＲｘであり、ＮではないＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のそれぞれについては、Ｒｘが独立して、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、前記フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基がそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで１回以上、任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される低級が、好ましくは、Ｃ１−Ｃ６であり、
Ｒ３７が、Ｏ、ＮＨ、またはＮＣＨ３であり、
Ｒ３８が、ＮまたはＣＨであり、Ｒ３８がＣＨであるとき、Ｒ３７が、ＮＨまたはＮＣＨ３であり、
Ｒ３９およびＲ４０が独立して、水素またはＣＨ３である、前記化合物、
ならびにその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｒが、メチルまたはエチルであり、ＡおよびＢのうちの１つが、水素であり、ＡおよびＢのうちのもう一つが、水素またはＣ１−Ｃ６アルキルであり、ＶおよびＷのうちの１つが、メトキシであり、ＶおよびＷのうちのもう一つが、水素である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つが、式ＶＩＡおよび式ＶＩＢからなる群から選択され、
【化３】
2014532729.tif 000080
式中、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちの少なくとも１つがＮであり、ＮではないＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちのいずれかがＣＲｘであり、ＮではないＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のそれぞれについては、Ｒｘが独立して、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシから選択され、前記フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基がそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで１回以上、任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される低級が、好ましくは、Ｃ１−Ｃ６であり、
Ｒ３７が、Ｏ、ＮＨ、またはＮＣＨ３であり、
Ｒ３８が、ＮまたはＣＨであり、Ｒ３８がＣＨであるとき、Ｒ３７が、ＮＨまたはＮＣＨ３であり、
Ｒ３９およびＲ４０が独立して、水素またはＣＨ３である、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの１つが式ＶＩＡであり、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちの少なくとも１つがＮであり、ＮではないＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちのいずれかがＣＨである、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちの少なくとも２つがＮである、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの１つが式ＶＩＢであり、式中、Ｒ３８がＮであり、Ｒ３７がＯであり、Ｒ３９およびＲ４０が同一物であり、かつ水素またはＣＨ３のいずれかである、請求項３に記載の化合物。
【請求項７】
Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの１つが式ＶＩＢであり、式中、Ｒ３８がＮであり、Ｒ３７が、ＮＨまたはＮＣＨ３であり、Ｒ３９およびＲ４０が水素である、請求項３に記載の化合物。
【請求項８】
Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つが、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、低級アルコキシアルキル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ジアルキルシリルオキシ、フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシからなる群から選択され、前記フェニル、フェノキシ、アリールアルコキシ、およびアリールオキシアルコキシの置換基がそれら自体、ハロゲン、低級ハロアルキル、低級アルキル、低級アルコキシ、または低級アルキルスルホニルで任意に独立して置換されてもよく、上記の基のいずれかとともに使用される低級が、好ましくは、Ｃ１−Ｃ６であり、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つが、式ＶＩＣ、式ＶＩＤ、および式ＶＩＥからなる群から選択され、
【化４】
2014532729.tif 000081
式中、Ｒ４１およびＲ４２のうちの１つがＮであり、もう一つがＣＨであり、Ｒ４３が、ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり、Ｒ４４、Ｒ４５、およびＲ４６のうちの１つがＮであり、Ｒ４４、Ｒ４５、およびＲ４６のうちの２つ目が、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、またはＮ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）であり、Ｒ４４、Ｒ４５、およびＲ４６のうちの３つ目がＣＨであり、複素環式基上の任意のメチン炭素が、前記複素環式基と式Ｖの化合物との付着点として機能し得る、前記請求項１または２に記載の化合物。
【請求項９】
Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つが、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、およびＣ１−Ｃ６アルコキシからなる群から選択され、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つが、ピペリジン、ペルヒドロピリミジン、モルホリン、ピリジン、およびピリミジンからなる群から選択される置換基であり、前記ピペリジン、ペルヒドロピリミジン、モルホリン、ピリジン、またはピリミジンはそれ自体、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、またはＣ１−Ｃ６アルコキシで１回以上、任意に置換されてもよい、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項１０】
ＪおよびＭが、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、およびＣ１−Ｃ６アルコキシからなる群から選択され、Ｌが、ピペリジン、ペルヒドロピリミジン、モルホリン、ピリジン、およびピリミジンからなる群から選択される置換基であり、前記ピペリジン、ペルヒドロピリミジン、モルホリン、ピリジン、またはピリミジンはそれ自体、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、またはＣ１−Ｃ６アルコキシで１回以上、任意に置換されてもよい、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つが、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、およびＣ１−Ｃ６アルコキシからなる群から選択され、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つが、式ＶＩＡであり、式中、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちの少なくとも１つがＮであり、ＮではないＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、およびＲ３６のうちのいずれかがＣＲｘであり、それぞれのＲｘが独立して、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、およびＣ１−Ｃ６アルコキシから選択される、請求項３に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの２つが、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、およびＣ１−Ｃ６アルコキシからなる群から選択され、Ｊ、Ｌ、およびＭのうちの残りの１つが、式ＶＩＢであり、式中、Ｒ３８が、Ｎであり、Ｒ３７が、Ｏ、ＮＨ、またはＮＣＨ３であり、Ｒ３９およびＲ４０が、同じであって、水素またはＣＨ３のいずれかである、請求項３に記載の化合物。
【請求項１３】
１つ以上の薬学的に許容される希釈剤、賦形剤、または担体と組み合わせた、請求項１乃至１２のいずれか１項に記載の化合物を含む、薬学的組成物。
【請求項１４】
それを必要とする個体での、ジヒドロ葉酸還元酵素の阻害に使用するための、請求項１３に記載の薬学的組成物。
【請求項１５】
細菌感染症、真菌感染症、または原虫感染症に罹患している個体の治療に使用するための、請求項１３に記載の薬学的組成物。
【請求項１６】
前記還元酵素が、哺乳動物酵素である、請求項１４に記載の薬学的組成物。
【請求項１７】
前記組成物が、癌を治療するのに十分な用量で使用される、請求項１６に記載の薬学的組成物。
【請求項１８】
スルファ化合物をさらに含む、請求項１３に記載の薬学的組成物。
【請求項１９】
それを必要とする個体での、ジヒドロ葉酸還元酵素の阻害に使用するための、請求項１８に記載の薬学的組成物。
【国際調査報告】
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2014532729.tif 000083
2014532729.tif 000084