(57)【要約】  本発明は、皮膚外用剤の総重量に対して０．０５〜１．００重量％のElaeis・guineensis属アブラヤシ花粉抽出物を含む、皮膚美白のための皮膚外用剤に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
総重量の０．０５〜１．００重量％のElaeis・guineensis属アブラヤシ花粉抽出物を含む、皮膚美白のための皮膚外用剤。
【請求項２】
前記花粉抽出物が、５０％プロピレングリコール水溶液に溶解している乾燥アブラヤシ花粉抽出物である、請求項１に記載の皮膚外用剤。
【請求項３】
前記花粉抽出物が、５０％プロピレングリコール水溶液に溶解している生のアブラヤシ花粉抽出物である、請求項１に記載の皮膚外用剤。
【請求項４】
前記花粉抽出物が、メタノールに溶解している生のアブラヤシ花粉抽出物である、請求項１に記載の皮膚外用剤。
【請求項５】
前記花粉抽出物が、メタノールに溶解している乾燥アブラヤシ花粉抽出物である、請求項１に記載の皮膚外用剤。
【請求項６】
前記皮膚外用剤が、黒斑点、そばかす、年齢による染み、目の下のくま、高色素沈着、変色及びこれらのいかなる組合せからなる群から選択される皮膚状態を治療するために局所的に適用される、請求項１に記載の皮膚外用剤。
【請求項７】
前記皮膚外用剤が、クリーム、ローション、ファンデーション、軟膏、ジェル、フォーム及びサンスクリーンからなる群から選択される化粧品形態である、請求項１に記載の皮膚外用剤。
【請求項８】
前記皮膚外用剤は、メラニン生成を抑制しうる、請求項１に記載の皮膚外用剤。
【請求項９】
Elaeis・guineensis属アブラヤシ花粉抽出物の美白剤の製造への使用。
【請求項１０】
総重量に対して０．０５〜１．００重量％の量でElaeis・guineensis属アブラヤシ花粉抽出物を含む、美白剤。
【請求項１１】
請求項１に記載の皮膚外用剤を含む、美白化粧品。
【請求項１２】
皮膚外用剤の総重量に対して０．０５〜１．００重量％のElaeis・guineensis属アブラヤシ花粉抽出物を含む前記皮膚外用剤を局所的に適用することを含む、美白の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は花粉抽出物を含む皮膚外用剤に関する。より詳細には、本発明は、皮膚美白のための、Elaeis・guineensis属アブラヤシ花粉抽出物を含む皮膚外用剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、皮膚のメラニン量を減らして皮膚を白くする化粧品組成物が開発されてきた。当該開発では、メラニン生合成に関与するチロシナーゼ活性を抑制する美白剤の開発に重点的に取り組んできた。
【０００３】
天然物質から美白有効成分を見出す研究が行われてきた。当該成分のうち植物抽出物の多くでメラニン生成を抑制することが見出された。
【０００４】
特許文献１は、花粉、蜂花粉及び当該抽出物からなる群から選択される有効成分を含む皮膚美白剤を開示する。開示された薬剤はメラニン生成抑制作用を呈示しうる。
【０００５】
特許文献２は、Typhae花粉抽出物を含む組成物をもたらす。当該組成物はチロシナーゼ活性とメラニン生成を抑制することが記載される。抗酸化作用、皮膚のしわ改善作用及び炎症緩和作用もあると記載される。
【０００６】
花粉は、炭水化物、タンパク質、アミノ酸、脂質、ビタミン、ミネラル及び極微量の微量元素等の栄養化合物を含有することが知られている。さらに、花粉は相当量のポリフェノール性物質、主としてフラボノイドも含有する。
【０００７】
植物由来の天然ポリフェノールには抗酸化特性があることが知られる。最近、当該ポリフェノール化合物の化粧品への適用が増えている。植物単離フラボノール等のフェノール類はまた、遊離３−ヒドロキシル基によるジフェノラーゼ抑制活性を呈する。
【０００８】
当該組成物の美白効果にもかかわらず、国際市場では依然として皮膚美白剤に対する需要があり、代替品が継続して探索されている。肌の浅黒い人々はより明るい肌色を欲する。例えば、アジア人女性の多くは肌の色つやがより美しくなることを熱望する。
【０００９】
したがって、当該状況に対応した植物由来の美白剤の新規資源を見出すことが望まれる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】ＪＰ２００９−１７９６０５
【特許文献２】ＫＲ２００７０１０９４２６
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
Elaeis・guineensis属アブラヤシ花粉抽出物を含む皮膚美白の皮膚外用剤により、上記及び他の問題が解決され、当該技術分野が進歩する。本発明の皮膚外用剤の利点は、他の有用な用途同様、皮膚外用剤を化粧品でチロシナーゼ抑制剤として用いてよい点である。本発明の第２の利点は、Elaeis・guineensis属アブラヤシ花粉抽出物のラジカル捕捉活性が良好でメラニン生成抑制作用に優れるため、皮膚美白に効果がある点である。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明の１態様では、皮膚美白の皮膚外用剤は、皮膚外用剤の総重量に対して０．０５〜１．００重量％のElaeis・guineensis属アブラヤシ花粉抽出物を含む。
【００１３】
本発明のある態様では、Elaeis・guineensis属アブラヤシ花粉抽出物は生アブラヤシ花粉エタノール抽出物である。その他の態様では、Elaeis・guineensis属アブラヤシ花粉抽出物は乾燥アブラヤシ花粉エタノール抽出物、生アブラヤシ花粉メタノール抽出物又は乾燥アブラヤシ花粉メタノール抽出物である。
【００１４】
本発明のある態様では、皮膚外用剤は黒斑点、そばかす、年齢による染み、目の下のくま、高色素沈着、変色及びこれらのいかなる組合せからなる群から選択される皮膚状態を治療するために局所適用される。
【００１５】
本発明のある態様では、皮膚外用剤の形態は、クリーム、ローション、ファンデーション、軟膏、ジェル、フォーム及びサンスクリーンからなる群から選択される化粧品である。
【００１６】
本発明の上記及び他の利点や特徴を以下の詳細な説明に記載し、以下の図面に示す。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】ボランティアが、本発明の花粉抽出物（５０％プロピレングリコール中０．２５％ｗ／ｖの量）を１２週間毎日使用した場合の美白効果を示すグラフである。
【図２】メラニンが減少する指数を示すグラフである。
【図３】皮膚の保湿と施術群との関係を示すグラフである。
【図４】皮膚の耐疲労性と施術群との関係を示すグラフである。
【図５】皮膚硬さと施術群との関係を示すグラフである。
【図６】皮膚の弾力性と施術群との関係を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
本発明では、花粉抽出物について長期かつ広範な研究を行った結果、Elaeis・guineensis属アブラヤシ花粉抽出物が化粧品産業で広範囲に適用しうる潜在性を呈示することを見出した。当該知見に関して継続的に研究した結果、アブラヤシ花粉抽出物が優れたメラニン生成抑制作用を示すことが見出された。当該発見に基づき本発明は完成した。
【００１９】
本発明は、Elaeis・guineensis属アブラヤシ花粉抽出物を、皮膚美白に効果的な量を含む皮膚外用剤を提供する。好ましくは、皮膚外用剤は、皮膚外用剤の全重量に対して約０．０５〜約１．００重量％の範囲の量のアブラヤシ花粉抽出物を含む。
【００２０】
本明細書で用いる「皮膚」との語は、好ましくは顔と首の表面を指す。しかしながら、「皮膚」との語はまた、これに限定されず、手、肘、上腕部、身体前面、身体背面、臀部、太もも、膝、脚及び足を含む、人体の他の部分を含んでよい。
【００２１】
本発明の皮膚外用剤に用いられるアブラヤシ花粉抽出物は、皮膚外用剤に用いると、皮膚外用剤の物理的性質によらず、優れたメラニン生成抑制作用を示すことが見出された。また、臨床試験からアブラヤシ花粉抽出物には皮膚美白効果があり、皮膚に副作用なく安全に用いられることが見出された。
【００２２】
本発明の皮膚外用剤に用いられるアブラヤシ花粉抽出物は、Elaeis・guineensis属アブラヤシの生の花粉抽出物又は乾燥花粉抽出物から調製される。生又は乾燥アブラヤシ花粉抽出物をエタノール又は５０％プロピレングリコール水溶液と混合して生アブラヤシ花粉エタノール抽出物又は乾燥アブラヤシ花粉エタノール抽出物を得るか、あるいは、これらをメタノールと混合し、生アブラヤシ花粉メタノール抽出物又は乾燥アブラヤシ花粉メタノール抽出物を得てもよい。本発明の皮膚外用剤には好ましくは、生又は乾燥アブラヤシ花粉エタノール抽出物が用いられる。より好ましくは、乾燥アブラヤシ花粉エタノール抽出物が用いられる。好ましくは、乾燥アブラヤシ花粉エタノール抽出物は、５０％プロピレングリコール水溶液に乾燥アブラヤシ花粉抽出物を混合し溶解して調製される。
【００２３】
本発明の皮膚外用剤は種々の基材を用いて調製しうる。用いうる基材としては、クリーム、ローション、ファンデーション、ジェル、フォーム及びサンスクリーン等からなる群から選択される化粧品があげられる。基材は液体、固体、クリーム及びペーストを含むあらゆる適切な形態でよい。
【００２４】
本発明の皮膚外用剤は、皮膚に局所的に適用される。皮膚の局所への適用回数は個人のニーズにより多様であってよい。皮膚外用剤は黒斑点、そばかす、年齢による染み、目の下のくま、高色素沈着、変色及びこれらのいかなる組合せからなる群から選択される状態の皮膚に局所的に適用されうる。
【００２５】
以下の実施例はさらに詳細に本発明を説明するが、本発明の範囲は限定されない。
【実施例１】
【００２６】
原理：本発明で用いられるアブラヤシ花粉抽出物を皮膚炎症発症の可能性を予測する炎症アッセイ法で評価する。用いる方法は、タンパク質試剤と接触するコラーゲン、ケラチン及び着色剤の膜上に試験試料を塗布することによる。刺激性物質が膜と接触すると、刺激性物質は膜を変化又は変性させて沈殿を誘発するが、沈殿の程度は試料の刺激能の程度に応じて異なる。当該沈殿は、演算処理の実行により結果が得られる適切なコンピュータプログラムに接続された分光光度計で診断される不透明部として検知される。
【００２７】
手法：生及び乾燥アブラヤシ花粉（エタノール及びメタノール）抽出物並びにアブラヤシ花粉抽出物入り化粧用基材クリームを、各々５０μＬ、７５μＬ、１００μＬ及び１２５μＬの４用量で試験した。以下の２つの化合物に基づいてアッセイを行った。
（１）  ケラチン、コラーゲン及び反応性着色剤を含む半透膜、及び
（２）  反応溶液：タンパク質の高分子マトリックス（グロブリン）及び糖タンパク質。
【００２８】
各量の試料を２５°Ｃで２４時間試薬溶液に浸漬した膜に曝して配置すると、製品は膜を通過し、試薬溶液のタンパク質マトリックスと接した。皮膚刺激性が既知である４種の測定物質の標準曲線を作成した。試料の光学密度測定値と標準曲線から得た測定値とを比較してHIE（Human Irritancy Equivalent、ヒト刺激当量）を算出しえた。当該数値から試料の刺激性を表１に記載の等級で分類した。データ分析及びHIEはコンピュータプログラムで決定した。各キットに２つの品質管理溶液をもたらすことで検査のアッセイ性能の精度が確実になった。結果の少なくとも１つはインターンプロトコルに記載の仕様と一致する。コンピュータプログラムで計算を行い、対照群が正しいかどうか、アッセイが有効か又は適格か否かを示す。HIEの最大適格スコア（ＭＱＳ）を皮膚の刺激性分類を予測する値として選択した。
【００２９】
【表１】
2014520883.tif 000002
【００３０】
結果：皮膚炎症アッセイの結果は、生アブラヤシ花粉のエタノール及びメタノール抽出物は各々HIEスコア１．３７と１．５７の刺激性に分類されることを示す。一方、乾燥アブラヤシ花粉のエタノール及びメタノール抽出物は各々HIEスコア１．２３と２．０２の刺激性に分類される。しかしながら、化粧用のクリーム基材製剤に含まれたアブラヤシ花粉エタノール抽出物（０．５〜１．０％ｗ／ｖの量）は各々HIEスコア０．０９と０．０８の非刺激性に分類される。
【００３１】
【表２】
2014520883.tif 000003
【００３２】
【表３】
2014520883.tif 000004
【００３３】
【表４】
2014520883.tif 000005
【実施例２】
【００３４】
抗チロシナーゼ活性のインビトロ評価
原理：マッシュルームから得たチロシナーゼ酵素を用いて抗チロシナーゼ活性を測定した。酵素の基質はＬ−チロシンで反応には共存基質Ｌ−ドーパ存在を要した。ドーパクロムを４７５ｎｍで検出した後、チロシナーゼ活性を定量した。
【００３５】
プロトコル：アブラヤシ花粉エタノール抽出物を用いて抗チロシナーゼ活性評価を行った。
【００３６】
結果：チロシナーゼ抑制比率を表５に示す。
【００３７】
【表５】
2014520883.tif 000006
【実施例３】
【００３８】
【表６】
2014520883.tif 000007
【００３９】
原理：本クリームは皮膚の色を明るくするために顔又は身体の皮膚に毎日塗布しうる。
【００４０】
プロトコル：本実施例ではアブラヤシ花粉エタノール抽出物を用いた。アブラヤシ花粉エタノール抽出物は、５０％プロピレングリコール水溶液に乾燥アブラヤシ花粉抽出物を溶解して調製した。Ａ相は水溶性成分を包含し、Ｂ相は油溶性成分を包含する（表６参照）。両相が溶解するまで８０°Ｃに加熱した。Ｂ相をＡ相に移し、１０，０００ｒｐｍの速度で５〜１０分間、均質に混合した。その後当該乳濁液を４５°Ｃに冷却し、アブラヤシ花粉エタノール抽出物を加えた。
【００４１】
【表７】
2014520883.tif 000008
【００４２】
原理：本ジェルは皮膚の色を明るくするため、顔又は身体の皮膚に毎日塗布しうる。
【００４３】
プロトコル：本実施例では、アブラヤシ花粉エタノール抽出物を用いた。アブラヤシ花粉エタノール抽出物は、５０％プロピレングリコール水溶液に乾燥アブラヤシ花粉抽出物を溶解して調製した。Ａ相は水溶性成分を包含する（表７参照）。ｐＨ５の脱イオン化溶液及びultrez 20を、混合物が均質になるまで撹拌しながら６０°Ｃに加熱した。その後、Phenonipとグリセリンを当該均質溶液に加えた。その後、当該溶液を４５°Ｃに冷却し、トリエタノールアミン及びアブラヤシ花粉エタノール抽出物を加えた。
【実施例４】
【００４４】
ボランティアによるアブラヤシ花粉抽出物のインビボ評価
原理：皮膚が正常で健康な２０人の健康なボランティア（男性１０人及び女性１０人、平均年齢２０〜４０歳）が３か月参加した効能調査の評価を行った。１０人の２群に分けた。
【００４５】
皮膚メラニン：メラニン初期値は、試験試料塗布前にメグザメーター（Mexameter）MX16を用いて、各被験者の左右上腕双方から採取した。
【００４６】
プロトコル：Ａ群の各被験者は、化粧用クリームに含まれた０．２５％ｗ／ｖの乾燥アブラヤシ花粉エタノール抽出物を含む試験試料を片方の上腕に１日２度用いた。また、Ｂ群の各被験者は、乾燥アブラヤシ花粉エタノール抽出物を含まない化粧用クリームを主として含む対照群を片方の上腕に１日２度用いた。各塗布箇所のメラニン含有量を４週毎に評価し、メラニン初期値に対するメラニン含有量の減少率（美白化％）として計算した。
【００４７】
結果：表８に示すように、皮膚メラニンの測定値は減少する。結果を３回反復の平均±標準誤差で示す。
【００４８】
【表８】
2014520883.tif 000009
【００４９】
試料データは正規分布をしており、結果の有意差を決定するため２群のｔ検定を用いた。測定値Ｒ１、Ｒ２及びＲ３を初期測定値Ｒ０と比較した。各々対照群と比較すると、乾燥アブラヤシ花粉エタノール抽出物を含むクリームを塗布すると、皮膚の美白は有意であった。ｐ値が０．０５未満（０．００）でありＡ群の結果は非常に有意である。一方、ｐ値が０．０５を超える（０．２１３）ためＢ群の結果は有意でないとみなす。
【００５０】
図１に示すように、得られた各メラニン値について両群の美白率を計算した。アブラヤシ花粉抽出物の塗布では対照群と比較して美白が有意であった。美白率値は４週から１２週まで徐々に増加した。アブラヤシ花粉抽出物を含む製剤で治療した志願者の平均最大美白は１２週で３１．６３％を示した。これは各々８．７８％及び２．８７％である８週及び４週と比較して急速な増加である。メラニン指数は図２に示すとおりである。
【００５１】
皮膚水和（湿度）：皮膚湿度はコルネオメーター（Corneometer）825（Courage&Khazaka、ドイツ）で測定される。
【００５２】
プロトコル：被験者を制御温度及び相対湿度の閉鎖室内に３０分間滞在させた後検査した。種々の前腕内側のポイントの各実験領域上で５種の測定を行った。
【００５３】
結果：表９に示すように皮膚湿度の測定値は増加する。結果は３回反復の平均±標準誤差で示す。
【００５４】
【表９】
2014520883.tif 000010
【００５５】
Ａ群及びＢ群の皮膚湿度のデータを平均±標準誤差で示した。試料データは正規分布であり結果の有意差を決定するために２群のｔ検定を用いた。測定値Ｒ１、Ｒ２及びＲ３を初期測定値Ｒ０と比較した。分析によりＡ群のｐ値が０．０００に等しいことが示された。ｐ値が０．０５未満なので結果は非常に有意とみなす。一方、ｐ値が０．０５０と０．０５未満ではなくＢ群の結果は有意でないとみなす。図３のグラフは、皮膚湿度と治療群との関係を示す。
【００５６】
生物力学の皮膚特性：Muggli,R. (2005), Int. J. of Cosmetic Science, 27, 243‐249に記載された方法で測定される生物力学の皮膚特性は弾力性、硬さ及び耐疲労性である。当該皮膚パラメーターをキュートメーター（Cutometer）MPA580（Courage&Khazaka，ドイツ）の非侵襲性吸引及び伸長法で評価する。
【００５７】
プロトコル：２ｍｍのプローブを時間−負荷モードで（１０回繰り返しを１モードとして）用い、４５０ｍｂａｒ（４．５×１０４Ｐａ）の一定の陰圧を４秒間加えた後２秒間の緩和時間をおく。種々の前腕内側のポイントの各実験領域上で各測定を３回繰り返して行なう（Yilmaz, E. Borchert, H. H., 2006, Int. J. of Cosmetic Science, 307, 232-238）。
【００５８】
結果：表１０に示すように、皮膚耐疲労性の測定値は減少する。結果を３回反復の平均±標準誤差で示す。
【００５９】
【表１０】
2014520883.tif 000011
【００６０】
Ａ群及びＢ群の皮膚耐疲労性のデータを平均±標準誤差で示した。試料データは正規分布であり結果の有意差を決定するために２群のｔ検定を用いた。測定値Ｒ１、Ｒ２及びＲ３を初期測定値Ｒ０と比較した。その分析でＡ群のｐ値が０．０２５を示した。ｐ値が０．０５未満なので結果は非常に有意とみなす。一方、ｐ値が０．３５３と０．０５を超えるのでＢ群の結果は有意でないとみなす。図４のグラフは、皮膚耐疲労性と治療群との関係を示す。
【００６１】
結果：表１１に示すように皮膚硬さの測定値は増加する。結果は３回反復の平均±標準誤差で示す。
【００６２】
【表１１】
2014520883.tif 000012
【００６３】
Ａ群及びＢ群の皮膚硬さのデータを平均±標準誤差で示す。試料データは正規分布をしており、結果の有意差を決定するために２群のｔ検定を用いた。測定値Ｒ１、Ｒ２及びＲ３を初期測定値Ｒ０と比較した。その分析ではＡ群のｐ値が０．０１０を示した。ｐ値が０．０５未満なので結果は非常に有意とみなす。一方、ｐ値が０．０５を超える０．０６３なので、Ｂ群の結果は有意でないとみなす。図５のグラフは皮膚硬さと治療群との関係を示す。
【００６４】
結果：表１２に示すように皮膚弾力性の測定値は増加する。結果を３回反復の平均±標準誤差で示す。
【００６５】
【表１２】
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【００６６】
Ａ群及びＢ群の皮膚弾力性のデータを平均±標準誤差で示した。試料データは正規分布をしており、結果の有意差を決定するために２群のｔ検定を用いた。
測定値Ｒ１、Ｒ２及びＲ３を初期測定値Ｒ０と比較した。その分析でＡ群のｐ値が０．０００を示した。ｐ値が０．０５未満なので結果は非常に有意とみなす。一方、ｐ値が０．０５を超える０．３１６なのでＢ群の結果は有意でないとみなす。図６のグラフは皮膚の弾力性と治療群との関係を示す。
【００６７】
上記は、発明者が発明とみなす事項の記載であり、他者は上記開示に基づき本発明を含む代替システムを設計でき、かつ設計するであろうと考えられる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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