(57)【要約】本発明は、Ｒ１及びＲ２が本明細書で定義されている、式（Ｉ）の化合物を提供する。本発明はまた、式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物及び組合せ、並びに、タンキラーゼ阻害剤としての、また、癌を含むが、これに限定されないＷｎｔシグナル伝達並びにタンキラーゼ１及び２シグナル伝達関連障害の治療におけるそのような化合物の使用を提供する。
2014520860.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式（Ｉ）
【化２４】
2014520860.tif 000050
［式中、
Ｒ１は、水素又はＣ１〜４ハロアルキル、又はヒドロキシ、シアノ、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、Ｃ３〜５シクロアルキル、場合によって置換されたフェニル及び場合によって置換された５〜６員ヘテロアリールからなる群から選択される１つの置換基で場合によって置換されたＣ１〜４アルキルであり、
前記フェニル及び５〜６員ヘテロアリールは、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜３アルキル、Ｃ１〜３アルコキシ及びシアノからなる群からそれぞれ独立に選択される１つ又は２つの置換基でそれぞれ場合によって置換されており、
Ｒ２は、Ｒ３−Ｃ１〜２アルキレン−Ｃ（Ｏ）−、Ｒ３−Ｃ１〜２アルキレン−Ｓ（Ｏ）２−又はＲ３−Ｃ１〜２アルキレン−ＣＯＯ−であり、
Ｒ３は、場合によって置換されたフェニル、場合によって置換された６員ヘテロアリール又は場合によって置換されたインドリルであり、
前記フェニル、ヘテロアリール及びインドリルは、ハロ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、ＣＯＯＲａ、ＮＲａＲｂ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒａ及びＣ（Ｏ）ＮＲａＲｂからなる群からそれぞれ独立に選択される１つ〜３つの置換基でそれぞれ場合によって置換されており、
Ｒａは、Ｈ又はＣ１〜６アルキルであり、
Ｒｂは、Ｈ又はＣ１〜６アルキルである］による化合物、又は医薬的に許容されるその塩。
【請求項２】
Ｒ１が、場合によって置換されたＣ１〜４アルキルである、請求項２に記載の化合物、又は医薬的に許容されるその塩。
【請求項３】
Ｒ１が置換メチル若しくは置換エチルである、請求項１若しくは２に記載の化合物、又は医薬的に許容されるその塩。
【請求項４】
Ｒ１が、場合によって置換された５員ヘテロアリールにより置換されたメチルである、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物、又は医薬的に許容されるその塩。
【請求項５】
Ｒ１が、場合によって置換されたフェニルにより置換されたエチルである、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物、又は医薬的に許容されるその塩。
【請求項６】
Ｒ２が、Ｒ３−エチレン−Ｃ（Ｏ）−、Ｒ３−メチレン−Ｓ（Ｏ）２−又はＲ３−Ｃ１〜２メチレン−ＣＯＯ−である、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物、又は医薬的に許容されるその塩。
【請求項７】
Ｒ２がＲ３−Ｃ１〜２アルキレン−Ｃ（Ｏ）−である、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物、又は医薬的に許容されるその塩。
【請求項８】
Ｒ３が、場合によって置換されたフェニル、場合によって置換されたピリジニル若しくは場合によって置換されたインドリルである、請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物、又は医薬的に許容されるその塩。
【請求項９】
場合によって置換されたフェニル、場合によって置換されたピリジニル若しくは場合によって置換されたインドリルが、ハロ及びヒドロキシからなる群からそれぞれ独立に選択される１〜３つの置換基でそれぞれ場合によって置換されている、請求項８に記載の化合物、又は医薬的に許容されるその塩。
【請求項１０】
Ｎ−（（４−オキソ−４，５，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−３−フェニル−Ｎ−（チオフェン−２−イルメチル）プロパンアミド；
３−（４−フルオロ−フェニル）−Ｎ−（４−オキソ−３，５，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イルメチル）−Ｎ−チオフェン−２−イルメチル−プロピオンアミド；
３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−Ｎ−（４−オキソ−３，５，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イルメチル）−Ｎ−チオフェン−２−イルメチル−プロピオンアミド；
３−（２−フルオロ−フェニル）−Ｎ−（４−オキソ−３，５，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イルメチル）−Ｎ−チオフェン−２−イルメチル−プロピオンアミド；
３−（３−フルオロフェニル）−Ｎ−（（４−オキソ−４，５，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−Ｎ−（チオフェン−２−イルメチル）プロパンアミド；
３−（２−ヒドロキシ−フェニル）−Ｎ−（４−オキソ−３，５，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イルメチル）−Ｎ−チオフェン−２−イルメチル−プロピオンアミド；
３−（３−ヒドロキシ−フェニル）−Ｎ−（４−オキソ−３，５，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イルメチル）−Ｎ−チオフェン−２−イルメチル−プロピオンアミド；
３−（４−ヒドロキシ−フェニル）−Ｎ−（４−オキソ−３，５，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イルメチル）−Ｎ−チオフェン−２−イルメチル−プロピオンアミド；
Ｎ−（（４−オキソ−４，５，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−１−フェニル−Ｎ−（チオフェン−２−イルメチル）メタンスルホンアミド；
２−フェニル−エタンスルホン酸（４−オキソ−３，５，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イルメチル）−チオフェン−２−イルメチル−アミド；
Ｎ−（（４−オキソ−４，５，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−３−（ピリジン−４−イル）−Ｎ−（チオフェン−２−イルメチル）プロパンアミド；
Ｎ−（（４−オキソ−４，５，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−３−（ピリジン−４−イル）−Ｎ−（チオフェン−２−イルメチル）プロパンアミド；
Ｎ−シクロペンチルメチル−Ｎ−（４−オキソ−３，５，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イルメチル）−３−フェニル−プロピオンアミド；
シクロペンチルメチル−Ｎ−（４−オキソ−３，５，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イルメチル）−３−フェニル−プロピオンアミド；
Ｎ−（２−フルオロベンジル）−Ｎ−（（４−オキソ−４，５，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−３−フェニルプロパンアミド；
Ｎ−エチル−Ｎ−（（４−オキソ−４，５，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−３−フェニルプロパンアミド；
Ｎ−イソプロピル−Ｎ−（（４−オキソ−４，５，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−３−フェニルプロパンアミド；
Ｎ−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−Ｎ−（（４−オキソ−４，５，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−３−フェニルプロパンアミド；
Ｎ−（（４−オキソ−４，５，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−３−フェニル−Ｎ−（チオフェン−３−イルメチル）プロパンアミド；
Ｎ−（（４−オキソ−４，５，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−３−フェニル−Ｎ−（チアゾール−２−イルメチル）プロパンアミド；
Ｎ−（オキサゾール−２−イルメチル）−Ｎ−（（４−オキソ−４，５，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−３−フェニルプロパンアミド；
Ｎ−（（５−クロロチオフェン−２−イル）メチル）−Ｎ−（（４−オキソ−４，５，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−３−フェニルプロパンアミド；
Ｎ−（（４−オキソ−４，５，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−３−フェニル−Ｎ−（チアゾール−５−イルメチル）プロパンアミド；
Ｎ−（２−ヒドロキシ−エチル）−Ｎ−（４−オキソ−３，５，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イルメチル）−３−フェニル−プロピオンアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（（４−オキソ−４，５，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−１−フェニル−Ｎ−（１−フェニルエチル）メタンスルホンアミド；若しくは
（Ｒ）−Ｎ−（（４−オキソ−４，５，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−１−フェニル−Ｎ−（１−フェニルエチル）メタンスルホンアミド
である、請求項１に記載の化合物、又は医薬的に許容されるその塩。
【請求項１１】
請求項１から１０のいずれか一項に記載の化合物又は医薬的に許容されるその塩及び医薬的に許容される添加剤若しくは担体を含む医薬組成物。
【請求項１２】
治療上有効量の請求項１から１０のいずれか一項に記載の化合物、又は医薬的に許容されるその塩をそれを必要とする被験体へ投与するステップを含む、癌の治療の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、新規な４−オキソ−３，５，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジニル化合物、それらを含む医薬組成物、並びにタンキラーゼ阻害剤としての、また、癌を含むが、これに限定されないＷｎｔシグナル伝達並びにタンキラーゼ１及び２シグナル伝達関連障害の治療におけるそのような化合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
進化的に保存されたカノニカルＷｎｔ／βカテニンシグナル伝達カスケードは、後生動物の発生の多くの側面を制御する。該経路の状況依存的な活性化は、胚細胞の運命決定、幹細胞の調節及び組織の恒常性に関与する（Clevers H.、Cell、2006年、127巻、469〜80頁）。
【０００３】
Ｗｎｔ／βカテニン経路の重要な特徴は、βカテニン分解複合体による下流エフェクターβカテニンの制御されたタンパク質分解である。βカテニン分解複合体の主要な構成要素は、大腸腺腫性ポリポーシス（ＡＰＣ）、アキシン及びＧＳＫ３α／βである。Ｗｎｔ経路の活性化が存在しない場合、細胞質ゾルβカテニンが構成的にリン酸化され、分解の標的となる。Ｗｎｔ刺激により、βカテニン分解複合体が解離し、これが核βカテニンの蓄積及びＷｎｔ経路応答性遺伝子の転写をもたらす。
【０００４】
βカテニン分解複合体の構成要素に影響を及ぼし、ひいてはβカテニンの安定化をもたらすＷｎｔタンパク質の過剰発現又は突然変異によって媒介された、該経路の不適切な活性化は、多くの癌において観測された。特に、癌抑制ＡＰＣの短縮型突然変異が直腸結腸癌における最も一般的な遺伝子変異である（Miyaki M.ら、Cancer Res、1994年、54巻、3011〜20頁、Miyoshi Y.ら、Hum Mol Genet、1992年、1巻、229〜33頁及びPowell S. M.ら、Nature、1992年、359巻、235〜7頁）。さらに、アキシン１及びアキシン２突然変異がそれぞれ肝細胞癌及び直腸結腸癌を有する患者において確認された（Taniguchi K.ら、Oncogene、2002年、21巻、4863〜71頁、Liu W.ら、Nat Genet、2000年、146〜7頁、Lammi L.ら、Am J Hum Genet、2004年、74巻、1043〜50頁）。これらの体細胞突然変異は、βカテニンのＷｎｔ非依存性安定化及びβカテニン媒介性転写の構成的活性化をもたらす。
【０００５】
脱調節Ｗｎｔ経路の活性は、結腸直腸、黒色腫、乳、肝、肺及び胃癌を含む多くの他の癌にも関連付けられた（Polakis P.、Curr Opin Genet Dev、2007年、17巻、45〜51頁及びBarker N.ら、Nat Rev Drug Discov、2006年、5巻、997〜1014頁）。異常なＷｎｔシグナル伝達に関連する他の障害は、骨粗鬆症、変形性関節炎、多発性嚢胞腎疾患、肺線維症、糖尿病、統合失調症、血管疾患、心疾患、非発癌性増殖性疾患及びアルツハイマー病などの神経変性疾患などである。
【０００６】
多タンパク質βカテニン分解複合体の効率的なアセンブリは、その主要な構成要素の定常状態レベルに依存する。アキシンは、βカテニン分解複合体の効率の調節における濃度制限因子であることが報告され（Salic A.ら、Mol Cell、2000年、5巻、523〜32頁及びLee E.ら、PLoS Biol、2003年、1巻、E10頁）、アキシンの発現の増大は、短縮型ＡＰＣを発現する細胞系におけるβカテニンの分解を促進し得る（Behrens J.ら、Science、1998年、280巻、596〜9頁、Kishida M.ら、Oncogene、1999年、18巻、979〜85頁及びHart M. J.ら、Curr Biol、1998年、8巻、573〜81頁）。したがって、適切なＷｎｔ経路シグナル伝達を保証するためにアキシンタンパク質レベルを厳密に調節する必要があることは、あり得ることである。
【０００７】
ＷＯ２００９／０５９９９４及びHuangら（Huang S. M.ら、Nature、2009年、461巻、614〜620頁）に説明されているように、ポリＡＤＰリボースポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）酵素タンキラーゼ１及びタンキラーゼ２の阻害によりアキシンを安定化させることによってβカテニンの分解を促進することができることが最近見いだされた。いずれのタンキラーゼのアイソフォームも、アキシンの高度に保存されたドメインと相互作用し、ユビキチン−プロテアソーム経路を介してその分解を刺激する。それによってβカテニンの分解を促進するアキシンタンパク質を安定化するこの以前には未知であったメカニズムは、Ｗｎｔシグナル伝達関連障害を治療するために活用することができる。アキシンタンパク質は、髄鞘再生のための脳希突起神経膠細胞前駆細胞分化（Fancy S.ら、Nature Neuro Sci、2011年、14巻、1009〜1017頁）及び肺線維症時の上皮間葉転換（Ulsamer A.ら、J Bio Chem、2012年、287巻、5164〜5172頁）を含む多様な生理的過程の必須の調節因子である。したがって、アキシンタンパク質を安定化することにより、タンキラーゼ阻害剤は、脳損傷後の髄鞘再生及び肺線維症に対する療法として用いることができる可能性がある。
【０００８】
タンキラーゼは、二本鎖テロメア反復結合タンパク質であるＴＲＦ１（Smith S.ら、Science、1998年、282、1484〜1487頁）、紡錘体形成における必須タンパク質であるＮｕＭＡ（Chang W.ら、Biochem J、2005年、391巻、177〜184頁）、インスリンに反応したグルコース取込みに関与する膜内在性タンパク質であるＩＲＡＰ（Chi N. W.ら、J Biol Chem、2000年、275巻、38437〜38444頁）及びアポトーシス促進タンパク質であるＭｃｌ−１（Bae J.ら、J Biol Chem、2003年、278巻、5195〜5204頁）を含むいくつかの結合タンパク質パートナーを有する。
【０００９】
その様々な相互作用タンパク質により、タンキラーゼタンパク質は、種々の生物学的機能に関連付けられた。タンキラーゼは、ＴＲＦ１をポリＡＤＰ−リボシル化し、それをテロメアから遊離させ、テロメラーゼへのテロメアのアクセスを促進する。このように、タンキラーゼは、テロメラーゼによるテロメアの伸長の正の調節因子として作用する。これは、タンキラーゼの長期過剰発現がテロメアの伸長をもたらすという知見により裏付けられている（Cook B. D.ら、Mol Cell Biol、2002年、22巻、332〜242頁）。テロメラーゼによるテロメアの維持は、癌細胞の無制限増殖に帰せられた（Hahn W. C.ら、Nat Med、1999年、5巻、1164〜1169頁）。テロメラーゼに対するテロメアのアクセスしやすさを抑制することによって、タンキラーゼを癌療法の標的とし得る。タンキラーゼ阻害は、白血病、リンパ腫、多発性骨髄腫、肺及び乳癌を含む広範囲に及ぶ癌を有する患者を治療するための有効な癌療法として用いることができると思われる。
【００１０】
タンキラーゼはまた、１）有糸分裂時にＮｕＭＡをポリＡＤＰ−リボシル化し、紡錘体極においてその機能を調節する（Chang W.ら、Biochem J、2005年、391巻、177〜184頁）ことによって、２）紡錘体の形成及び構造を調節する（Chang P.ら、Nature、2004年、432巻、645〜649頁）ことによって、且つ３）テロメアにおける姉妹染色分体の分割を維持する（Dynek J.ら、Science、2004年、304巻、97〜100頁）ことによって細胞有糸分裂における役割を果たす。タンキラーゼの阻害は、細胞の有糸分裂停止又は老化をもたらし、したがって、癌などの異常な有糸分裂を有する疾患を治療するために利用することができると思われる。例としては、乳腺、肺、卵巣、白血病、リンパ腫及び黒色腫などがある。さらに、タンキラーゼ１は、過剰中心体を有する癌細胞が多極性有糸分裂を抑制し、双極性有糸分裂を可能にするために用いる機構である、中心体クラスタリングに必要な遺伝子として同定された（Kwon M.ら、Genes Dev、2008年、22巻、2189〜2203頁）。したがって、タンキラーゼの阻害は、固形及び血液癌の両方を含む、例として、乳腺、膀胱、肺、大腸（colon）及び白血病を含む、中心体増幅を有する癌を治療するために利用することができると思われる。
【００１１】
さらに、タンキラーゼの細胞局在化の１つは、タンキラーゼがＩＲＡＰと会合している場合にグルコース輸送体ＧＬＵＴ４小胞と共局在化するゴルジ装置におけるものであり、タンキラーゼは、脂肪細胞におけるＧＬＵＴ４輸送の調節に関与する（Chi N. W.ら、J Biol Chem、2000年、275巻、38437〜38444頁）。タンキラーゼ欠乏マウスは、脂肪酸酸化とインスリン刺激性グルコース利用の両方の増加による脂肪過多症の低減及びエネルギー消費の増大を示す（Yeh T.ら、Diabetes、2009年）。これは、哺乳動物におけるエネルギー恒常性へのタンキラーゼの関与を裏付けるものであり、タンキラーゼの阻害を肥満などの代謝性疾患を治療するのに利用することができる。
【００１２】
タンキラーゼは、単純疱疹ウイルス（ＨＳＶ）により標的にされ、過剰リン酸化、核輸送及びプロテアソーム分解によりＨＳＶにより調節される宿主タンパク質であると報告された（Li Z.ら、J of Virol、2012年、86巻、492〜503頁）。より重要なことに、効率的なＨＳＶウイルス複製にはタンキラーゼタンパク質の酵素活性を必要とする。阻害剤ＸＡＶ９３９によるタンキラーゼ活性の阻害（ＷＯ２００９／０５９９９４、Huang S. M.ら、Nature、2009年、461巻、614〜620頁）は、ＨＳＶウイルスタンパク質の発現を抑制し、ウイルスの増殖を低下させた。したがって、タンキラーゼの阻害をＨＳＶ感染の治療を含むが、これに限定されない抗ウイルス療法として利用することができる。
【００１３】
したがって、タンキラーゼ（ＴＮＫＳ）及び／又はＷｎｔシグナル伝達を阻害する化合物は、そのような阻害によって媒介される疾患の治療に有用であり得る。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１４】
発明の要旨
本発明は、式（Ｉ）
【化１】
2014520860.tif 000003
［式中、Ｒ１及びＲ２は、本明細書で定義する］の化合物を提供する。本発明はまた、式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物及び組合せ（併用（combination））並びにタンキラーゼ阻害剤としての、また癌を含むが、これに限定されないＷｎｔシグナル伝達並びにタンキラーゼ１及び２シグナル伝達関連疾患の治療におけるそのような化合物の使用を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
発明の詳細な説明
本発明は、式（Ｉ）
【化２】
2014520860.tif 000004
［式中、
Ｒ１は、水素又はＣ１〜４ハロアルキル、又はヒドロキシ、シアノ、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、Ｃ３〜５シクロアルキル、場合によって置換されたフェニル及び場合によって置換された５〜６員ヘテロアリールからなる群から選択される１つの置換基で場合によって置換されたＣ１〜４アルキルであり、
前記フェニル及び５〜６員ヘテロアリールは、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜３アルキル、Ｃ１〜３アルコキシ及びシアノからなる群からそれぞれ独立に選択される１つ又は２つの置換基でそれぞれ場合によって置換されており、
Ｒ２は、Ｒ３−Ｃ１〜２アルキレン−Ｃ（Ｏ）−、Ｒ３−Ｃ１〜２アルキレン−Ｓ（Ｏ）２−又はＲ３−Ｃ１〜２アルキレン−ＣＯＯ−であり、
Ｒ３は、場合によって置換されたフェニル、場合によって置換された６員ヘテロアリール又は場合によって置換されたインドリルであり、
前記フェニル、ヘテロアリール及びインドリルは、ハロ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、ＣＯＯＲａ、ＮＲａＲｂ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒａ及びＣ（Ｏ）ＮＲａＲｂからなる群からそれぞれ独立に選択される１つ〜３つの置換基でそれぞれ場合によって置換されており、
Ｒａは、Ｈ又はＣ１〜６アルキルであり、
Ｒｂは、Ｈ又はＣ１〜６アルキルである］の化合物を提供する。
【００１６】
本明細書で用いている「アルキル」という用語は、最大６個の炭素原子を有する完全に飽和した分枝又は非分枝炭化水素部分を意味する。アルキル基は、定義される１つ又は複数の置換基で場合によって置換されていてもよい。別段の記載がない限り、アルキルは、１〜６個、１〜４個又は１〜３個の炭素原子を有する炭化水素部分を意味する。アルキルの代表的な例は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル及びｎ−ヘキシルを含むが、これに限定されない。
【００１７】
本明細書で用いている「アルキレン」という用語は、１〜２個の炭素原子を有する上文で定義した二価アルキル基を意味する。アルキレンの代表的な例としては、メチレン及びエチレンが挙げられる。
【００１８】
本明細書で用いている「アルコキシ」という用語は、アルキルが本明細書において上記で定義されているアルキル−Ｏ−を意味する。一般的に、アルコキシ基は、１〜６個又は１〜３個の炭素原子を有する。アルコキシの代表的な例は、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、２−プロポキシ、ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシを含むが、これに限定されない。
【００１９】
本明細書で用いている「Ｃ３〜５シクロアルキル」という用語は、３〜５個の炭素原子の飽和単環式炭化水素基を意味する。シクロアルキル基の代表的な例は、シクロプロピル、シクロブチル及びシクロペンチルである。
【００２０】
本明細書で用いている「ハロ」という用語は、フッ素、臭素、塩素又はヨウ素、特に、フッ素又は塩素を意味する。ハロゲンにより置換されたアルキル（ハロアルキル）などの、ハロゲン置換基及び部分は、モノ、ポリ又はペルハロゲン化され得る。
【００２１】
本明細書で用いている「ハロアルキル」という用語は、本明細書で定義した１つ又は複数のハロ基により置換されている、本明細書で定義したアルキルを意味する。ハロアルキルは、モノハロアルキル、ジハロアルキル又はペルハロアルキルを含むポリハロアルキルであり得る。モノハロアルキルは、アルキル基内に１つのヨード、ブロモ、クロロ又はフルオロを有し得る。ジハロアルキル及びポリハロアルキル基は、アルキル内に２つ以上の同じハロ原子又は異なるハロ基の組合せを有し得る。一般的に、ポリハロアルキルは、最大１２、又は１０、又は８、又は６、又は４、又は３、又は２ハロ基を含む。ハロアルキルの非限定的な例は、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、クロロメチル、ジクロロメチル、トリクロロメチル、ペンタフルオロエチル、ヘプタフルオロプロピル、ジフルオロクロロメチル、ジクロロフルオロメチル、ジフルオロエチル、ジフルオロプロピル、ジクロロエチル及びジクロロプロピルを含む。ペルハロアルキルは、すべての水素原子がハロ原子で置換されたアルキルを意味する。
【００２２】
本明細書で用いている「ヘテロ原子」という用語は、窒素（Ｎ）、酸素（Ｏ）又は硫黄（Ｓ）原子、特に窒素又は酸素を意味する。
【００２３】
本明細書で用いている「ヘテロアリール」という用語は、１〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員単環式環系（monocyclic ring system）を意味する。１個超のヘテロ原子を含むヘテロアリール基は、異なるヘテロ原子を含み得る。ヘテロアリール基は、本明細書で定義した１つ又は複数の置換基で場合によって置換されていてもよい。代表的なヘテロアリール基は、２−又は３−チエニル、２−又は３−フリル、２−又は３−ピロリル、２−、４−又は５−イミダゾリル、３−、４−又は５−ピラゾリル、２−、４−又は５−チアゾリル、３−、４−又は５−イソチアゾリル、２−、４−又は５−オキサゾリル、３−、４−又は５−イソオキサゾリル、３−又は５−１，２，４−トリアゾリル、４−又は５−１，２，３−トリアゾリル、フラザニル、チアジアゾリル、テトラゾリル、２，３−又は４−ピリジル、３−又は４−ピリダジニル、３−、４−又は５−ピラジニル、２−ピラジニル及び２−、４−又は５−ピリミジニルを含む。
【００２４】
アルキル、ヘテロアリール又はフェニルなどの任意の基又は部分を、「からなる群からそれぞれ独立に選択される１つ、１つ若しくは２つ、又は１つから３つの置換基で場合によって置換されている」と本明細書で定義する場合、基又は部分が非置換であるか、或いは１つ、１つ若しくは２つ、又は１つから３つの置換基で置換されていて、各置換基が置換基の列挙された群から独立に選択されると理解される。
【００２５】
当業者は、式（Ｉ）による化合物の医薬的に許容される塩を含む塩を調製することができることを十分に理解する。これらの塩は、化合物の最終的な単離及び精製時にｉｎ  ｓｉｔｕで、又はその遊離酸若しくは遊離塩基の形の精製化合物を適切な塩基若しくは酸とそれぞれ別個に反応させることにより調製することができる。
【００２６】
医薬的に許容される酸付加塩は、無機酸及び有機酸を用いて生成させることができ、例えば、酢酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、臭素酸／臭化水素酸塩、重炭酸塩／炭酸塩、重硫酸塩／硫酸塩、カンファースルホン酸塩、塩素酸塩／塩化水素酸塩、クロルテオフィリン酸塩、クエン酸塩、エタンジスルホン酸塩、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、馬尿酸塩、ヨウ化水素酸／ヨウ素酸塩、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、メチル硫酸塩、ナフトエ酸塩、ナプシル酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オクタデカン酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、リン酸／リン酸水素／リン酸二水素塩、ポリガラクツロン酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、スルホサリチル酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩及びトリフルオロ酢酸塩などである。
【００２７】
塩を得ることができる無機酸は、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などを含む。
【００２８】
塩を得ることができる有機酸は、例えば、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、スルホサリチル酸などを含む。医薬的に許容される塩基付加塩は、無機及び有機塩基を用いて生成させることができる。
【００２９】
塩を得ることができる無機塩基は、例えば、アンモニウム塩及び周期表のＩ〜ＸＩＩ列の金属を含む。ある特定の実施形態において、塩は、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、銀、亜鉛及び銅から得られ、特に適切な塩は、アンモニウム、カリウム、ナトリウム、カルシウム及びマグネシウム塩を含む。
【００３０】
塩を得ることができる有機塩基は、例えば、第一級、第二級及び第三級アミン、天然に存在する置換アミンを含む置換アミン、環状アミン、塩基性イオン交換樹脂などを含む。ある特定の有機アミンは、イソプロピルアミン、ベンザチン、コリネート、ジエタノールアミン、ジエチルアミン、リシン、メグルミン、ピペラジン及びトロメタミンを含む。
【００３１】
本発明の医薬的に許容される塩は、慣用の化学的方法により塩基性又は酸性部分から合成することができる。一般的に、そのような塩は、これらの化合物の遊離酸形を化学量論量の適切な塩基（Ｎａ、Ｃａ、Ｍｇ若しくはＫ水酸化物、炭酸塩、重炭酸塩など）と反応させることにより、又はこれらの化合物の遊離塩基形を化学量論量の適切な酸と反応させることにより調製することができる。そのような反応は、一般的に水中又は有機溶媒中又は２つの混合物中で行わせる。一般的に、実施可能な場合、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール又はアセトニトリルのような非水媒体の使用が望ましい。さらなる適切な塩の一覧は、例えば、「Remington’s Pharmaceutical Sciences」、第20版、Mack Publishing Company、Easton、Pa. (1985年)並びにStahl及びWermuth (Wiley-VCH、Weinheim、Germany、2002年)による「Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use」に見いだすことができる。
【００３２】
式（Ｉ）の化合物の医薬的に許容される溶媒和物を含む溶媒和物も調製することができる。「溶媒和物」は、溶質と溶媒により形成される可変化学量論の複合体を意味する。本発明の目的のためのそのような溶媒は、溶質の生物学的活性を妨げ得ない。適切な溶媒の例は、水、ＭｅＯＨ、ＥｔＯＨ及びＡｃＯＨを含むが、これらに限定されない。水が溶媒分子である溶媒和物は、一般的に水和物と呼ばれる。水和物は、化学量論量の水を含む組成物並びに可変量の水を含む組成物を含む。
【００３３】
本明細書で用いている「医薬的に許容される」という用語は、医薬的使用に適する化合物を意味する。薬剤（medicine）に使用するのに適する本発明の化合物の塩及び溶媒和物（例えば、水和物及び塩の水和物）は、対イオン又は結合溶媒が医薬的に許容されるものである。しかし、医薬的に許容されない対イオン又は結合溶媒を有する塩及び溶媒和物は、例えば、本発明の他の化合物並びにそれらの医薬的に許容される塩及び溶媒和物の調製における中間体としての使用については、本発明の範囲内にある。
【００３４】
その塩及び溶媒和物を含む、式（Ｉ）の化合物は、結晶形、非結晶形又はそれらの混合物の形で存在し得る。化合物又はそれらの塩若しくは溶媒和物は、多形性、すなわち、異なる結晶形で存在する能力も示し得る。これらの異なる結晶形は、一般的に「多形体」として公知である。多形体は、同じ化学組成を有するが、充填、幾何学的配置及び結晶性固体状態の他の記述的特性が異なっている。したがって、多形体は、形状、密度、硬度、変形能、安定性及び溶解特性などの異なる物理的特性を有し得る。多形体は、一般的に異なる融点、ＩＲスペクトル及びＸ線粉末回折パターンを示すものであり、それらのすべてを同定のために用いることができる。当業者は、例えば、式（Ｉ）の化合物を結晶化／再結晶化する際に用いる条件を変更又は調整することによって異なる多形体を生成させることができることを十分に理解する。
【００３５】
本発明はまた、式（Ｉ）の化合物の様々な異性体を含む。「異性体」は、同じ組成及び分子量を有するが、物理的及び／又は化学的特性が異なっている化合物を意味する。構成の差異は、構造（幾何異性体）又は偏光面を回転させる能力（立体異性体）にあり得る。立体異性体に関しては、式（Ｉ）の化合物は、１つ又は複数の不斉炭素原子を有する可能性があり、ラセミ体、ラセミ混合物として及び個別の鏡像異性体又はジアステレオ異性体として存在する可能性がある。それらの混合物を含む、そのようなすべての異性体形態は、本発明の範囲内に含まれる。化合物が二重結合を含む場合、置換基は、Ｅ又はＺ配置であり得る。化合物が二置換シクロアルキルを含む場合、シクロアルキル置換基は、シス又はトランス配置を有し得る。すべての互変異性体も含まれることが意図される。
【００３６】
式（Ｉ）の化合物の不斉原子（例えば、炭素など）はいずれも、ラセミ又は鏡像異性体的に富化された、例えば、（Ｒ）−、（Ｓ）−又は（Ｒ，Ｓ）−配置で存在し得る。ある特定の実施形態において、各不斉原子は、（Ｒ）−又は（Ｓ）−配置において少なくとも５０％の鏡像体過剰率、少なくとも６０％の鏡像体過剰率、少なくとも７０％の鏡像体過剰率、少なくとも８０％の鏡像体過剰率、少なくとも９０％の鏡像体過剰率、少なくとも９５％の鏡像体過剰率又は少なくとも９９％の鏡像体過剰率を有する。不飽和二重結合を有する原子における置換基は、可能な場合、シス−（Ｚ）又はトランス−（Ｅ）体で存在し得る。
【００３７】
したがって、本明細書で用いている式（Ｉ）の化合物は、可能な異性体、回転異性体、アトロプ異性体、互変異性体又はそれらの混合物の１つの形態で、例えば、実質的に純粋な幾何（シス又はトランス）異性体、ジアステレオ異性体、光学異性体（対掌体）、ラセミ体又はそれらの混合物として存在し得る。
【００３８】
異性体の得られる混合物はいずれも、成分の物理化学的差に基づいて、例えば、クロマトグラフィー及び／又は分別晶出により、純粋又は実質的に純粋な幾何又は光学異性体、ジアステレオ異性体、ラセミ体に分離することができる。
【００３９】
最終生成物又は中間体の得られるラセミ体はいずれも、公知の方法により、例えば、光学的に活性な酸又は塩基を用いて得られたそのジアステレオ異性体塩の分離により光学的対掌体に分割し、光学的に活性な酸性又は塩基性化合物を遊離させることができる。特に、塩基性部分は、例えば、光学的に活性な酸、例えば、酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、ジアセチル酒石酸、ジ−Ｏ，Ｏ’−ｐ−トルオイル酒石酸、マンデル酸、リンゴ酸又はカンファー−１０−スルホン酸を用いて生成させた塩の分別晶出によって本発明の化合物をそれらの光学的対掌体に分割するためにこのように用いることができる。ラセミ生成物もキラルクロマトグラフィー、例えば、キラル吸着剤を用いた高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により分割することができる。
【００４０】
本発明は、式（Ｉ）の化合物の非標識体並びに同位体標識体を含む。同位体標識化合物は、１つ又は複数の原子が選択される原子質量又は質量数を有する原子により置換されていることを除いて、本明細書に示した式により表現される構造を有する。本発明の化合物に組み込むことができる同位体の例は、それぞれ２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｆ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、３６Ｃｌ、１２５Ｉなどの水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素及び塩素の同位体を含む。本発明は、本明細書で定義する様々な同位体標識化合物、例えば、３Ｈ及び１４Ｃなどの放射性同位体がその中に又は２Ｈ及び１３Ｃなどの非放射性同位体がその中に存在するものを含む。そのような同位体標識化合物は、代謝研究（１４Ｃを用いる）、反応速度論研究（例えば、２Ｈ又は３Ｈを用いる）、薬物若しくは基質組織分布アッセイを含む陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）若しくは単光子放射コンピュータ断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）などの検出若しくは撮像技術、又は患者の放射線治療に有用である。特に、１８Ｆ又は標識化合物はＰＥＴ又はＳＰＥＣＴ研究のために特に望ましい可能性がある。式（Ｉ）の同位体標識化合物は、一般的に、当業者に公知の従来の技術により、又は以前に用いられた非標識試薬の代わりに適切な同位体標識試薬を用いて添付の実施例及び調製の項で述べるものと同様の方法により調製することができる。
【００４１】
さらに、より重い同位体、特に重水素（すなわち、２Ｈ又はＤ）による置換は、より大きい代謝安定性に起因するある特定の治療上の利点、例えば、ｉｎ  ｖｉｖｏ半減期の延長又は必要用量の低減又は治療指数の改善をもたらし得る。この状況における重水素は、式（Ｉ）の化合物の置換基とみなされることが理解される。そのようなより重い同位体、特に重水素の濃度は、同位体濃縮係数により定義することができる。「同位体濃縮係数」という用語は、本明細書で用いる場合、同位体の存在率と指定の同位体の自然存在率との間の比を意味する。本発明の化合物における置換基が重水素を意味する場合、そのような化合物は、少なくとも３５００（各指定の重水素原子における５２．５％の重水素組込み）、少なくとも４０００（６０％の重水素組込み）、少なくとも４５００（６７．５％の重水素の組込み）、少なくとも５０００（７５％の重水素の組込み）、少なくとも５５００（８２．５％の重水素の組込み）、少なくとも６０００（９０％の重水素の組込み）、少なくとも６３３３．３（９５％の重水素の組込み）、少なくとも６４６６．７（９７％の重水素の組込み）、少なくとも６６００（９９％の重水素の組込み）又は少なくとも６６３３．３（９９．５％の重水素の組込み）の各指定の重水素原子についての同位体濃縮係数を有する。
【００４２】
代表的な実施形態
本発明の様々な実施形態を本明細書で述べる。各実施形態について明記する特徴を他の明記する特徴と組み合わせて、さらなる実施形態を得ることができることは、認識されよう。
【００４３】
本発明の１つの実施形態において、Ｒ１は、場合によって置換されたＣ１〜４アルキルである。
【００４４】
他の実施形態において、Ｒ１は、置換メチル又は置換エチルである。
【００４５】
他の実施形態において、Ｒ１は、場合によって置換された５員ヘテロアリールで置換されたＣ１〜４アルキル、特にメチルである。特に、Ｒ１は、式（Ｉ）で述べたように、それぞれが１つ又は２つの置換基で場合によって置換されている、１つの２−若しくは３−チエニル、２−、４−若しくは５−イミダゾリル、２−、４−若しくは５−チアゾリル、又は２−、４−若しくは５−オキサゾリルで置換されたＣ１〜４アルキル、特にメチルである。より詳細には、Ｒ１は、１つのハロ基で場合によって置換された１つの２−若しくは３−チエニル、２−、４−若しくは５−イミダゾリル、２−、４−若しくは５−チアゾリル、又は２−、４−若しくは５−オキサゾリルにより置換されたＣ１〜４アルキル、特にメチルである。
【００４６】
他の実施形態において、Ｒ１は、シクロペンチルなどのＣ３〜５シクロアルキルにより置換されたＣ１〜４アルキルである。特に、Ｒ１は、シクロペンチルなどのＣ３〜５シクロアルキルにより置換されたメチルである。
【００４７】
他の実施形態において、Ｒ１は、場合によって置換されたフェニルにより置換されたＣ１〜４アルキル、特に、メチル又はエチルである。特に、Ｒ１は、フェニルにより置換されたＣ１〜４アルキル、特に、メチル又はエチルであり、前記フェニル環は、１つのハロ基で場合によって置換されている。他の実施形態において、Ｒ１は、場合によって置換されたフェニルにより場合によって置換されたエチルである。
【００４８】
本発明の他の実施形態において、Ｒ２は、Ｒ３−Ｃ１〜２アルキレン−Ｃ（Ｏ）−である。適切には、Ｒ２は、Ｒ３−Ｃ１〜２アルキレン−Ｃ（Ｏ）−であり、Ｒ３は、場合によって置換されたフェニル、場合によって置換されたピリジニル又は場合によって置換されたインドリルである。より適切には、Ｒ２は、Ｒ３−Ｃ１〜２アルキレン−Ｃ（Ｏ）−であり、Ｒ３は、場合によって置換されたフェニル、場合によって置換されたピリジニル又は場合によって置換されたインドリルであり、前記フェニル、ピリジニル及びインドリルは、ハロ及びヒドロキシからなる群からそれぞれ独立に選択される１〜３つの置換基でそれぞれ場合によって置換されている。
【００４９】
本発明の他の実施形態において、Ｒ２は、Ｒ３−Ｃ１〜２アルキレン−Ｓ（Ｏ）２−であり、Ｒ３は、フェニルである。
【００５０】
本発明の他の実施形態において、Ｒ２は、Ｒ３−エチレン−Ｃ（Ｏ）−、Ｒ３−メチレン−Ｓ（Ｏ）２−又はＲ３−Ｃ１〜２メチレン−ＣＯＯ−である。
【００５１】
本発明の他の実施形態において、Ｒａは、Ｈ又はＣ１〜３アルキルであり、Ｒｂは、Ｈ又はＣ１〜３アルキルである。他の実施形態において、Ｒａ及びＲｂは、両方ともＨである。
【００５２】
実施形態の列挙
実施形態１．  以下の式（Ｉ）
【化３】
2014520860.tif 000005
［式中、
Ｒ１は、水素又はＣ１〜４ハロアルキル、又はヒドロキシ、シアノ、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、Ｃ３〜５シクロアルキル、場合によって置換されたフェニル及び場合によって置換された５〜６員ヘテロアリールからなる群から選択される１つの置換基で場合によって置換されたＣ１〜４アルキルであり、
前記フェニル及び５〜６員ヘテロアリールは、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜３アルキル、Ｃ１〜３アルコキシ及びシアノからなる群からそれぞれ独立に選択される１つ又は２つの置換基でそれぞれ場合によって置換されており、
Ｒ２は、Ｒ３−Ｃ１〜２アルキレン−Ｃ（Ｏ）−、Ｒ３−Ｃ１〜２アルキレン−Ｓ（Ｏ）２−又はＲ３−Ｃ１〜２アルキレン−ＣＯＯ−であり、
Ｒ３は、場合によって置換されたフェニル、場合によって置換された６員ヘテロアリール又は場合によって置換されたインドリルであり、
前記フェニル、ヘテロアリール及びインドリルは、ハロ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、ＣＯＯＲａ、ＮＲａＲｂ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒａ及びＣ（Ｏ）ＮＲａＲｂからなる群からそれぞれ独立に選択される１つ〜３つの置換基でそれぞれ場合によって置換されており、
Ｒａは、Ｈ又はＣ１〜６アルキルであり、
Ｒｂは、Ｈ又はＣ１〜６アルキルである］による化合物、又は医薬的に許容されるその塩。
実施形態２．  Ｒ１が、場合によって置換されたＣ１〜４アルキルである、実施形態２に記載の化合物、又は医薬的に許容されるその塩。
実施形態３．  Ｒ１が置換メチル若しくは置換エチルである、実施形態１若しくは２に記載の化合物、又は医薬的に許容されるその塩。
実施形態４．  Ｒ１が、場合によって置換された５員ヘテロアリールにより置換されたメチルである、実施形態１から３のいずれか一つに記載の化合物、又は医薬的に許容されるその塩。
実施形態５．  Ｒ１が、場合によって置換されたフェニルにより置換されたエチルである、実施形態１から３のいずれか一つに記載の化合物、又は医薬的に許容されるその塩。
実施形態６．  Ｒ２が、Ｒ３−エチレン−Ｃ（Ｏ）−、Ｒ３−メチレン−Ｓ（Ｏ）２−又はＲ３−Ｃ１〜２メチレン−ＣＯＯ−である、実施形態１から５のいずれか一つに記載の化合物、又は医薬的に許容されるその塩。
実施形態７．  Ｒ２がＲ３−Ｃ１〜２アルキレン−Ｃ（Ｏ）−である、実施形態１から５のいずれか一つに記載の化合物、又は医薬的に許容されるその塩。
実施形態８．  Ｒ３が、場合によって置換されたフェニル、場合によって置換されたピリジニル若しくは場合によって置換されたインドリルである、実施形態１から７のいずれか一つに記載の化合物、又は医薬的に許容されるその塩。
実施形態９．  場合によって置換されたフェニル、場合によって置換されたピリジニル若しくは場合によって置換されたインドリルが、ハロ及びヒドロキシからなる群からそれぞれ独立に選択される１〜３つの置換基でそれぞれ場合によって置換されている、実施形態８に記載の化合物、又は医薬的に許容されるその塩。
【００５３】
一般的合成手順
本発明の化合物は、標準的化学を含む様々な方法により調製することができる。実例となる一般的な合成方法を下文に示し、調製された本発明の特定の化合物を実施例で示す。
【００５４】
式（Ｉ）の化合物は、以下の合成スキームにより一部分示すような有機合成の技術分野で公知の方法により調製することができる。下記のスキームにおいて、一般的原理又は化学に従って必要な場合、感受性又は反応性基の保護基が用いられることは、十分に理解される。保護基は、有機合成の標準的方法により取り扱われる（T. W. Greene及びP. G. M. Wuts、「Protective Groups in Organic Synthesis」、第3版、Wiley、New York、1999年）。これらの基は、当業者に容易に明らかである方法を用いて化合物の合成の好都合な段階で除去される。選択方法並びに反応条件及びそれらの遂行の順序は、式（Ｉ）の化合物の調製と調和するものとする。
【００５５】
当業者は、式（Ｉ）の化合物に立体中心が存在するかどうかを認識する。したがって、本発明は、両方の可能な立体異性体を含み、ラセミ化合物だけでなく、個別の鏡像異性体も含む。化合物を単一鏡像異性体として望む場合、立体特異的合成又は最終生成物若しくは任意の好都合な中間体の分割により得ることができる。最終生成物、中間体又は出発物質の分割は、当技術分野で公知の適切な方法により達成することができる。例えば、E. L. Eliel、S. H. Wilen及びL. N. Manderによる「Stereochemistry of Organic Compounds」（Wiley-interscience、1994年）を参照のこと。
【００５６】
本明細書で述べる化合物は、市販の出発物質から調製或いは公知の有機、無機及び／又は酵素法を用いて合成することができる。
【００５７】
スキーム１
【化４】
2014520860.tif 000006
【００５８】
置換２−アミノメチル−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オンは、炭酸メチル中でのカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（ＫＯｔＢｕ）によるテトラヒドロピラン−４−オンの処理から始まる方法を含む様々な方法により調製することができる。ピリミジノン環の形成は、エタノールなどの適切な溶媒中でのナトリウムエトキシドなどのアルコキシド塩基などの塩基性条件下での２−アミノ−アセトアミジンなどの適切なアミジンとの反応により達成される。Ｃｂｚ保護基の水素化分解により第一級アミンが生じ、これを、還元的アミノ化、アルキル化、アシル化及び／又はスルホニル化によりさらにうまく変換することができる。
【００５９】
スキーム２
【化５】
2014520860.tif 000007
【００６０】
置換２−アミノメチル−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オンは、様々な方法により調製することができる。２−クロロメチル−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オンは、メタノールなどの適切な溶媒中でトリエチルアミンなどの塩基の存在下で中間体１を２−クロロアセトアミジンと反応させることにより調製される。Ｂｏｃ保護アミン誘導体による塩化物の置換は、ＴＨＦ又はＤＭＦ中で水素化ナトリウム（ＮａＨ）などの強塩基を用いて達成される。適切な溶媒中でのＴＦＡ又はＨＣｌなどの酸性条件下でのＢｏｃ基の除去により、第二級アミンが生じ、これを、還元的アミノ化、アルキル化、アシル化又はスルホニル化によりさらにうまく変換することができる。
【００６１】
組成物
他の態様において、本発明は、式（Ｉ）の化合物又はその医薬的に許容される塩及び医薬的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。医薬組成物は、経口投与、非経口投与及び直腸投与などの特定の投与経路用に処方することができる。さらに、本発明の医薬組成物は、固体形態（制限なしにカプセル剤、錠剤、丸剤、顆粒剤、散剤若しくは坐剤を含む）に又は液体形態（制限なしに水剤、懸濁剤若しくは乳剤を含む）に調合することができる。医薬組成物は、滅菌などの慣用の製薬工程にかけることができ、且つ／又は慣用の不活性希釈剤、滑沢剤若しくは緩衝化剤並びに保存剤、安定化剤、湿潤剤、乳化剤及び緩衝剤などのアジュバントを含んでいてよい。
【００６２】
一般的に、該医薬組成物は、有効成分並びに以下のものを含む錠剤又はゼラチンカプセル剤である。
ａ）希釈剤、例えば、ラクトース、デキストロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロース及び／又はグリシン；
ｂ）滑沢剤、例えば、シリカ、タルカム、ステアリン酸、そのマグネシウム若しくはカルシウム塩及び／又はポリエチレングリコール；また錠剤用に
ｃ）結合剤、例えば、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、デンプンペースト、ゼラチン、トラガント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム及び／又はポリビニルピロリドン；所望の場合
ｄ）崩壊剤、例えば、デンプン、寒天、アルギン酸若しくはそのナトリウム塩、又は発泡混合物；及び／又は
ｅ）吸収剤、着色剤、着香料及び甘味料。
【００６３】
錠剤は、当技術分野で公知の方法によりフィルムコーティング又は腸溶コーティングを施すことができる。
【００６４】
経口投与用の適切な組成物は、錠剤、トローチ剤、水性若しくは油性懸濁剤、分散性散剤若しくは顆粒剤、乳剤、硬若しくは軟カプセル剤、又はシロップ剤若しくはエリキシル剤の形態の有効量の式（Ｉ）の化合物又はその医薬的に許容される塩を含む。経口用に意図された組成物は、医薬組成物の製造の技術分野で公知の任意の方法により調製され、薬学的に洗練され、味の良い製剤になるようにするために甘味料、着香料、着色剤及び保存剤からなる群から選択される１つ又は複数の作用剤を含み得る。錠剤は、錠剤の製造に適する医薬的に許容される非毒性添加剤と混合された有効成分を含み得る。これらの添加剤は、例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウム又はリン酸ナトリウムなどの不活性希釈剤、造粒及び崩壊剤、例えば、トウモロコシデンプン又はアルギン酸、結合剤、例えば、デンプン、ゼラチン又はアラビアゴム並びに滑沢剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸又はタルクである。錠剤は、被覆されていないか、又は消化管における崩壊及び吸収を遅らせ、それにより、より長期にわたり持続する作用をもたらすために公知の技術により被覆されている。例えば、モノステアリン酸グリセリル又はジステアリン酸グリセリルなどの遅延材（time delay material）を用いることができる。経口用製剤は、有効成分が不活性固体希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム又はカオリンと混合されている硬ゼラチンカプセル剤として、或いは有効成分が水又は油媒体、例えば、落花生油、流動パラフィン若しくはオリーブ油と混合されている軟ゼラチンカプセル剤として提供することができる。
【００６５】
ある特定の注射用組成物は、水性の等張性溶液又は懸濁液であり、坐剤は、脂肪性乳濁液又は懸濁液から有利に調製される。前記組成物は、滅菌することができ、且つ／又は保存、安定化、湿潤若しくは乳化剤、溶解促進剤、浸透圧を調整するための塩及び／若しくは緩衝剤などのアジュバントを含んでいてもよい。さらに、それらは、他の治療上有用な物質も含んでいてもよい。前記組成物は、それぞれ、慣用の混合、造粒又はコーティング法により調製され、約０．１〜７５％又は１〜５０％の有効成分を含む。
【００６６】
本発明はさらに、水がある特定の化合物の分解を促進する可能性があるので、本発明の化合物を有効成分として含む無水医薬組成物及び剤形（dosage form）を提供する。
【００６７】
本発明の無水医薬組成物及び剤形は、無水又は低水分含有成分及び低水分又は低湿度条件を用いて調製することができる。無水医薬組成物は、その無水性が維持されるように調製し、保存することができる。したがって、無水組成物は、適切な製剤キット（formulary kits）に含めることができるように水への曝露を防ぐことが公知の材料を用いて包装される。適切な包装の例は、密封フォイル、プラスチック、単位用量容器（例えば、バイアル）、ブリスターパック及びストリップパックを含むが、これらに限定されない。
【００６８】
本発明はさらに、有効成分としての本発明の化合物が分解する速度を低下させる１つ又は複数の作用剤を含む医薬組成物及び剤形を提供する。本明細書で「安定化剤」と呼ぶ、そのような作用剤は、アスコルビン酸などの抗酸化剤、ｐＨ緩衝剤又は塩緩衝剤などを含むが、これらに限定されない。
【００６９】
本発明の医薬組成物又は組合せは、約５０〜７０ｋｇの被験体に対する約１〜１０００ｍｇの有効成分（単数又は複数）、又は約１〜５００ｍｇ又は約１〜２５０ｍｇ又は約１〜１５０ｍｇ又は約０．５〜１００ｍｇ又は約１〜５０ｍｇの有効成分の単位投薬量（unit dosage）であり得る。化合物、医薬組成物又はその組合せの治療上有効な投薬量は、被験体の種、体重、年齢及び個々の状態、治療される障害若しくは疾患又はそれらの重症度に依存する。通常の技量の医師、臨床医又は獣医は、障害又は疾患を予防、治療又はその進行を抑制するのに必要な有効成分のそれぞれの有効量を容易に決定することができる。
【００７０】
使用の方法
式（Ｉ）の化合物は、タンキラーゼ阻害剤であり、したがって、Ｗｎｔシグナル伝達関連障害並びにタンキラーゼ１及び２（ＴＮＫＳ／ＴＮＫＳ２）シグナル伝達関連障害を含む、タンキラーゼにより媒介される疾患の治療に有用であり得る。
【００７１】
Ｗｎｔシグナル伝達関連障害は、Ｗｎｔシグナル伝達に関連する癌（例えば、直腸結腸癌、悪性髄芽腫及び他の原発性ＣＮＳ悪性神経外胚葉腫瘍、横紋筋肉腫、肺癌、特に小細胞肺癌、食道、胃、膵臓及び胆管系の癌を含むが、これらに限定されない腸由来腫瘍、前立腺及び膀胱癌並びに肝臓癌）；増殖性皮膚障害（例えば、乾癬、皮膚炎）などの他の非発癌性増殖性疾患；骨粗鬆症；変形性関節症；線維症；統合失調症；血管疾患；心疾患；アルツハイマー病などの神経変性疾患；脳及び／又は脊髄損傷後の再ミエリン化を含む再ミエリン化；並びに肺線維症を含むが、これらに限定されない異常なＷｎｔシグナル伝達に関連する疾患及び状態を含む。Ｗｎｔシグナル伝達の異常な上方制御は、癌、変形性関節症及び多発性嚢胞腎疾患に関連するが、Ｗｎｔシグナル伝達の異常な下方制御は、骨粗鬆症、肥満及び神経変性疾患に関連付けられている。
【００７２】
タンキラーゼシグナル伝達関連障害は、癌（例えば、白血病、リンパ腫、黒色腫、多発性骨髄腫、肺、卵巣及び乳癌）、代謝性疾患及びウイルス感染（例えば、単純疱疹ウイルス感染）を含むが、これらに限定されない、異常なタンキラーゼ１及び２シグナル伝達に関連する疾患及び状態を含む。
【００７３】
本発明の化合物の「治療上有効量」という用語は、被験体の生物学的又は医学的反応、例えば、酵素若しくはタンパク質活性の低下若しくは阻害を引き起こす、又は症状を改善する、状態を軽減する、疾患の進行を遅くする若しくは遅延させる、又は疾患を予防する等の式（Ｉ）の化合物の量を意味する。１つの非限定的な実施形態において、「治療上有効量」という用語は、被験体に投与した場合に、（１）（ｉ）タンキラーゼにより媒介される、若しくは（ｉｉ）タンキラーゼ活性に関連する、若しくは（ｉｉｉ）タンキラーゼの活性（正常若しくは異常）によって特徴付けられる状態若しくは障害若しくは疾患を少なくとも部分的に軽減し、抑制し、予防し、且つ／又は改善する、或いは（２）タンキラーゼの活性を低下若しくは阻害する又は（３）タンキラーゼの発現を低下若しくは抑制するのに有効である式（Ｉ）の化合物の量を意味する。他の非限定的な実施形態において、「治療上有効量」という用語は、細胞、若しくは組織、若しくは非細胞性生体物質、若しくは培地に投与した場合に、タンキラーゼの活性を少なくとも部分的に低下若しくは阻害する、又はタンキラーゼの発現を少なくとも部分的に低下若しくは抑制するのに有効である式（Ｉ）の化合物の量を意味する。
【００７４】
本明細書で用いている「被験体」という用語は、動物を意味する。一般的に、動物は、哺乳動物である。被験体は、例えば、霊長類（例えば、ヒト、男性又は女性）、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、マウス、魚、鳥なども意味する。ある特定の実施形態において、被験体は、霊長類である。さらに他の実施形態において、被験体は、ヒトである。
【００７５】
本明細書で用いている「阻害する」、「阻害」又は「阻害すること」という用語は、所定の状態、症状若しくは障害若しくは疾患の低減若しくは抑制、又は生物学的活性若しくは過程のベースライン活性の有意な低下を意味する。
【００７６】
本明細書で用いている任意の疾患又は障害についての「治療する」、「治療すること」又は「治療」という用語は、１つの実施形態において、疾患又は障害を改善すること（すなわち、疾患又はその臨床症状の少なくとも１つの発現を遅くすること若しくは停止させること若しくは低減すること）を意味する。他の実施形態において、「治療する」、「治療すること」又は「治療」は、患者が認識し得ないものを含む少なくとも１つの身体的パラメーターを軽減又は改善することを意味する。さらに他の実施形態において、「治療する」、「治療すること」又は「治療」は、身体的に（例えば、認識できる症状の安定化）、生理学的に（例えば、身体的パラメーターの安定化）又は両面で疾患又は障害を調節することを意味する。さらに他の実施形態において、「治療する」、「治療すること」又は「治療」は、疾患又は障害の発症又は発現又は進行を予防又は遅延させることを意味する。
【００７７】
本明細書で用いる場合、被験体がそのような治療により生物学的に、医学的に又は生活の質の面で恩恵を受ける場合、そのような被験体は、治療「を必要とする」。
【００７８】
したがって、さらなる実施形態として、本発明は、療法における式（Ｉ）の化合物又はその医薬的に許容される塩の使用を提供する。さらなる実施形態において、療法は、タンキラーゼの阻害により治療することができる疾患から選択される。１つの実施形態において、疾患は、Ｗｎｔシグナル伝達に関連する障害である。他の実施形態において、疾患は、タンキラーゼシグナル伝達に関連する障害である。他の実施形態において、疾患は、癌、特に、白血病、黒色腫、多発性骨髄腫、リンパ腫、肺癌、食道癌、胃癌、膵臓癌、胆管系癌、卵巣癌、乳癌、前立腺癌、膀胱癌、結腸癌及び肝臓癌からなる群から選択される癌である。他の実施形態において、疾患は、癌、特に、白血病、肺癌、膵臓癌、乳癌及び結腸癌からなる群から選択される癌である。他の実施形態において、疾患は、結腸、膵臓及び乳腺からなる群から選択される癌である。
【００７９】
他の実施形態において、本発明は、タンキラーゼ阻害によって媒介される疾患の治療用の医薬の製造における、式（Ｉ）の化合物又はその医薬的に許容される塩の使用を提供する。１つの実施形態において、疾患は、Ｗｎｔシグナル伝達に関連する障害である。他の実施形態において、疾患は、タンキラーゼシグナル伝達に関連する障害である。他の実施形態において、疾患は、癌、特に、白血病、黒色腫、多発性骨髄腫、リンパ腫、肺癌、食道癌、胃癌、膵臓癌、胆管系癌、卵巣癌、乳癌、前立腺癌、膀胱癌、結腸癌及び肝臓癌からなる群から選択される癌である。他の実施形態において、疾患は、癌、特に、白血病、肺癌、膵臓癌、乳癌及び結腸癌からなる群から選択される癌である。他の実施形態において、疾患は、結腸、膵臓及び乳腺（breast）からなる群から選択される癌である。
【００８０】
他の実施形態において、本発明は、治療上有効量の式（Ｉ）の化合物又はその医薬的に許容される塩をそれを必要とする被験体に投与するステップを含む、タンキラーゼの阻害によって媒介される疾患の治療の方法を提供する。１つの実施形態において、疾患は、Ｗｎｔシグナル伝達に関連する障害である。他の実施形態において、疾患は、タンキラーゼシグナル伝達に関連する障害である。さらなる実施形態において、疾患は、癌、特に、白血病、黒色腫、多発性骨髄腫、リンパ腫、肺癌、食道癌、胃癌、膵臓癌、胆管系癌、卵巣癌、乳癌、前立腺癌、膀胱癌、結腸癌及び肝臓癌からなる群から選択される癌である。他の実施形態において、疾患は、癌、特に、白血病、肺癌、膵臓癌、乳癌及び結腸癌からなる群から選択される癌である。他の実施形態において、疾患は、結腸、膵臓及び乳腺からなる群から選択される癌である。
【００８１】
併用（組合せ（combination））
本発明の化合物は、１つ又は複数の他の治療薬（単数又は複数）と同時に、又はその前若しくは後に投与することができる。本発明の化合物は、他の薬剤と同じ若しくは異なる投与経路により別個に、又は同じ医薬組成物で一緒に投与することができる。
【００８２】
１つの実施形態において、本発明は、療法における同時、個別又は逐次使用のための複合製剤（combined preparation）としての式（Ｉ）の化合物及び少なくとも１つの他の治療薬を含む製品を提供する。１つの実施形態において、療法は、ＴＮＫＳ阻害によって媒介される疾患又は状態の治療である。複合製剤として提供される製品は、同じ医薬組成物に一緒に式（Ｉ）の化合物及び他の治療薬（単数又は複数）を含む組成物、又は別個の形、例えば、キットの形で式（Ｉ）の化合物及び他の治療薬（単数又は複数）を含む。
【００８３】
１つの実施形態において、本発明は、式（Ｉ）の化合物及び他の治療薬（単数又は複数）を含む医薬組成物を提供する。場合によって、医薬組成物は、上述のような医薬的に許容される添加剤を含んでいてもよい。
【００８４】
１つの実施形態において、本発明は、２つ以上の別個の医薬組成物を含み、その少なくとも１つが式（Ｉ）の化合物を含む、キットを提供する。１つの実施形態において、該キットは、容器、分割されたビン又は分割されたフォイルパケットなどの前記組成物を別個に保持するための手段を含む。そのようなキットの例は、錠剤、カプセル剤などの包装のために一般的に用いられるブリスターパックである。
【００８５】
本発明のキットは、例えば、経口及び非経口用の異なる剤形を投与するために、別個の組成物を異なる投与間隔（dosage interval）で投与するために、又は別個の組成物について互いの用量を調節する（titrate）ために用いることができる。服薬遵守を支援するために、本発明のキットは、一般的に投与指示書を含む。
【００８６】
本発明の併用療法において、本発明の化合物及び他の治療薬は、同じ又は異なる製造業者により製造され、且つ／又は製剤化され得る。さらに、本発明の化合物及び他の治療薬は、（ｉ）医師への併用製品の引き渡しの前に（例えば、本発明の化合物及び他の治療薬を含むキットの場合）、（ｉｉ）投与直前に医師自身により（又は医師の指導のもとで）、（ｉｉｉ）例えば、本発明の化合物及び他の治療薬の逐次投与時に患者自身で、併用療法に一緒に組み入れることができる。
【００８７】
したがって、本発明は、医薬が他の治療薬とともに投与するために調製されている場合に、タンキラーゼ阻害によって媒介される疾患又は状態の治療のための式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。本発明はまた、医薬を式（Ｉ）の化合物とともに投与する場合に、タンキラーゼ阻害によって媒介される疾患又は状態の治療のための他の治療薬の使用を提供する。
【００８８】
本発明はまた、式（Ｉ）の化合物が他の治療薬とともに投与するために調製されている場合のタンキラーゼ阻害によって媒介される疾患又は状態の治療の方法に使用するための式（Ｉ）の化合物を提供する。本発明はまた、他の治療薬が式（Ｉ）の化合物とともに投与するために調製されている場合のタンキラーゼ阻害によって媒介される疾患又は状態の治療の方法に使用するための他の治療薬を提供する。本発明はまた、式（Ｉ）の化合物を他の治療薬とともに投与する場合のタンキラーゼ阻害によって媒介される疾患又は状態の治療の方法に使用するための式（Ｉ）の化合物を提供する。本発明はまた、他の治療薬を式（Ｉ）の化合物とともに投与する場合に、タンキラーゼ阻害によって媒介される疾患又は状態の治療の方法に使用するための他の治療薬を提供する。
【００８９】
本発明はまた、患者が以前に（例えば、２４時間以内に）他の治療薬による治療を受けた場合のタンキラーゼ阻害によって媒介される疾患又は状態の治療のための式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。本発明はまた、患者が以前に（例えば、２４時間以内に）式（Ｉ）の化合物による治療を受けた場合のタンキラーゼ阻害によって媒介される疾患又は状態の治療のための他の治療薬の使用を提供する。
【００９０】
１つの実施形態において、他の治療薬は、ヘッジホッグアンタゴニスト、ＰＩ３Ｋ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、ＩＡＰ（アポトーシスタンパク質の阻害剤）阻害剤、アルキル化剤、代謝拮抗薬、微小管阻害剤、テロメラーゼ阻害剤、ＰＡＲＰ阻害剤及びＲＡＦ阻害剤の群から選択されるが、これらに限定されない。
【００９１】
ヘッジホッグアンタゴニストの例は、２−クロロ−Ｎ−［４−クロロ−３−（２−ピリジニル）フェニル］−４−（メチルスルホニル）ベンズアミド（ＧＤＣ−０４４９としても公知、ＰＣＴ公開番号ＷＯ０６／０２８９５８に記載）及びエリスモデギブ（Erismodegib）（ＬＤＥ２２５としても公知）である。
【００９２】
ＰＩ３Ｋ阻害剤のいくつかの例は、４−［２−（１Ｈ−インダゾール−４−イル）−６−［［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］メチル］チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−イル］モルホリン（ＧＤＣ０９４１としても公知、ＰＣＴ公開番号ＷＯ０９／０３６０８２及びＷＯ０９／０５５７３０に記載）及び２−メチル−２−［４−［３−メチル−２−オキソ−８−（キノリン−３−イル）−２，３−ジヒドロイミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル］フェニル］プロピオニトリル（ＢＥＺ２３５又はＮＶＰ−ＢＥＺ２３５としても公知、ＰＣＴ公開番号ＷＯ０６／１２２８０６に記載）を含む。
【００９３】
マイトジェン活性化プロテインキナーゼキナーゼ（ＭＥＫ）阻害剤の例は、ＸＬ−５１８（Ｃａｓ  Ｎｏ．１０２９８７２−２９−４、ＡＣＣ  Ｃｏｒｐ．から入手可能）である。
【００９４】
チロシンキナーゼ阻害剤のいくつかの例は、エルロチニブ塩酸塩（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅにより商標Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標）のもとに販売）、リニファニブ（Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素、ＡＢＴ８６９としても公知、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈから入手可能）、スニチニブマレート（Ｐｆｉｚｅｒにより商品名Ｓｕｔｅｎｔ（登録商標）のもとに販売）、ボスチニブ（４−［（２，４−ジクロロ−５−メトキシフェニル）アミノ］−６−メトキシ−７−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）プロポキシ］キノリン−３−カルボニトリル、ＳＫＩ−６０６としても公知、米国特許第６，７８０，９９６号に記載）、ダサチニブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂにより商品名Ｓｐｒｙｃｅｌ（登録商標）のもとに販売）、パゾパニブ（Ａｒｍａｌａ（商標）としても公知、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅにより商品名Ｖｏｔｒｉｅｎｔ（登録商標）のもとに販売）並びにイマチニブ及びイマチニブメシレート（Ｎｏｖａｒｔｉｓにより商品名Ｇｉｌｖｅｃ（登録商標）及びＧｌｅｅｖｅｃ（登録商標）のもとに販売）を含む。
【００９５】
ＩＡＰ（アポトーシスタンパク質の阻害剤）阻害剤の例は、（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２−オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＣＬ１６１としても公知、ＰＣＴ公開番号ＷＯ２００８／０１６８９３に記載）である。アルキル化剤のいくつかの例は、テモゾロミド（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ／Ｍｅｒｃｋにより商品名Ｔｅｍｏｄａｒ（登録商標）及びＴｅｍｏｄａｌ（登録商標）のもとに販売）、ダクチノマイシン（アクチノマイシン−Ｄとしても公知、商品名Ｃｏｓｍｅｇｅｎ（登録商標）のもとに販売）、メルファラン（Ｌ−ＰＡＭ、Ｌ−サルコリシン及びフェニルアラニンマスタードとしても公知、商品名Ａｌｋｅｒａｎ（登録商標）のもとに販売）、アルトレタミン（ヘキサメチルメラミン（ＨＭＭ）としても公知、商品名Ｈｅｘａｌｅｎ（登録商標）のもとに販売）、カルムスチン（商品名ＢｉＣＮＵ（登録商標）のもとに販売）、ベンダムスチン（商品名Ｔｒｅａｎｄａ（登録商標）のもとに販売）、ブスルファン（商品名Ｂｕｓｕｌｆｅｘ（登録商標）及びＭｙｌｅｒａｎ（登録商標）のもとに販売）、カルボプラチン（商品名Ｐａｒａｐｌａｔｉｎ（登録商標）のもとに販売）、ロムスチン（ＣＣＮＵとしても公知、商品名ＣｅｅＮＵ（登録商標）のもとに販売）、シスプラチン（ＣＤＤＰとしても公知、商品名Ｐｌａｔｉｎｏｌ（登録商標）及びＰｌａｔｉｎｏｌ（登録商標）−ＡＱのもとに販売）、クロラムブシル（商品名Ｌｅｕｋｅｒａｎ（登録商標）のもとに販売）、シクロホスファミド（商品名Ｃｙｔｏｘａｎ（登録商標）及びＮｅｏｓａｒ（登録商標）のもとに販売）、デカルバジン（ＤＴＩＣ、ＤＩＣ及びイミダゾールカルボキサミドとしても公知、商品名ＤＴＩＣ−Ｄｏｍｅ（登録商標）のもとに販売）、アルトレタミン（ヘキサメチルメラミン（ＨＭＭ）としても公知、商品名Ｈｅｘａｌｅｎ（登録商標）のもとに販売）、イフォスファミド（商品名Ｉｆｅｘ（登録商標）のもとに販売）、プロカルバジン（商品名Ｍａｔｕｌａｎｅ（登録商標）のもとに販売）、メクロレタミン（窒素マスタード、ムスチン及びメクロロエタミン塩酸塩としても公知、商品名Ｍｕｓｔａｒｇｅｎ（登録商標）のもとに販売）、ストレプトゾシン（商品名Ｚａｎｏｓａｒ（登録商標）のもとに販売）、チオテパ（チオホスホアミド及びＴＥＳＰＡ及びＴＳＰＡとしても公知、商品名Ｔｈｉｏｐｌｅｘ（登録商標）のもとに販売）を含む。
【００９６】
代謝拮抗薬のいくつかの例は、クラリビン（２−クロロデオキシアデノシン、商品名ｌｅｕｓｔａｔｉｎ（登録商標）のもとに販売）、５−フルオロウラシル（商品名Ａｄｒｕｃｉｌ（登録商標）のもとに販売）、６−チオグアニン（商品名Ｐｕｒｉｎｅｔｈｏｌ（登録商標）のもとに販売）、ペメトレキセド（商品名Ａｌｉｍｔａ（登録商標）のもとに販売）、シタラビン（アラビノシルシトシン（Ａｒａ−Ｃ）としても公知、商品名Ｃｙｔｏｓａｒ−Ｕ（登録商標）のもとに販売）、シタラビンリポソーム（リポソームＡｒａ−Ｃとしても公知、商品名ＤｅｐｏＣｙｔ（商標）のもとに販売）、デシタビン（商品名Ｄａｃｏｇｅｎ（登録商標）のもとに販売）、ヒドロキシ尿素（商品名Ｈｙｄｒｅａ（登録商標）、Ｄｒｏｘｉａ（商標）及びＭｙｌｏｃｅｌ（商標）のもとに販売）、フルダラビン（商品名Ｆｌｕｄａｒａ（登録商標）のもとに販売）、フロクスウリジン（商品名ＦＵＤＲ（登録商標）のもとに販売）、クラドリビン（２−クロロデオキシアデノシン（２−ＣｄＡ）としても公知、商品名Ｌｅｕｓｔａｔｉｎ（商標）のもとに販売）、メトトレキセート（アメトプテリン、メトトレキセートナトリウム（ＭＴＸ）としても公知、商品名Ｒｈｅｕｍａｔｒｅｘ（登録商標）及びＴｒｅｘａｌｌ（商標）のもとに販売）及びペントスタチン（商品名Ｎｉｐｅｎｔ（登録商標）のもとに販売）を含む。
【００９７】
微小管阻害剤のいくつかの例は、ビノレルビン（商品名Ｎａｖｅｌｂｉｎｅ（登録商標）のもとに販売）、ビンデシン（商品名Ｅｌｄｉｓｉｎｅ（登録商標）のもとに販売）、エストラムスチン（商品名Ｅｍｃｙｔ（登録商標）のもとに販売）、ビンクリスチン（Ｏｎｃｏｖｉｎ（登録商標））、トリクラベンダゾール（Ｅｇａｔｅｎ（登録商標））、セクニダゾール、キンファミド、ポドフィロトキシン、メベンダゾール、グリセオフルビン、フルベンダゾール、エリブリン、コルヒチン、シクロベンダゾール、カルバジタキセル、アルベンダゾール及びビノレルビンである。
【００９８】
テロメラーゼ阻害剤の例は、イメテルスタットである。
【００９９】
ＰＡＲＰ阻害剤のいくつかの例は、オラパリブ（Ａｓｔｒａｚｅｎｅｃａ製）、イニパリブ（ＢＳＩ−２０１としても公知）、ＡＧＯ１４６９９（Ｐｆｉｚｅｒ）、ベリパリブ（ＡＢＴ−８８８としても公知、Ｅｎｚｏ製）及びＭＫ４８２７（Ｍｅｒｃｋ）を含む。
【０１００】
ＲＡＦ阻害剤のいくつかの例は、２−クロロ−５−［２−フェニル−５−（４−ピリジニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］フェノール（Ｌ−７７９４５０としても公知）、３−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［３−［（４−ヒドロキシベンゾイル）アミノ］−４−メチルフェニル］−ベンズアミド（ＺＭ−３３６３７２としても公知）及びソラフェニブ（ＢａｙｅｒによりＮｅｘａｖａｒ（登録商標）として市販）を含む。
【０１０１】
中間体及び実施例
以下の実施例は、実例となるものを意図しているにすぎず、決して限定的なものではない。
【０１０２】
用いる略語は、当技術分野で慣用されているもの又は下記のものである。
ＡｃＯＨ    酢酸
ＢＯＣ      第三級ブチルカルボキシ
Ｃ          セルシウス
ｄ          二重線
ｄｄ        二重線の二重線
ＤＣＭ      ジクロロメタン
ＤＩＥＡ    ジエチルイソプロピルアミン
ＤＭＥ      １，４−ジメトキシエタン
ＤＭＦ      Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ    ジメチルスルホキシド
ＥｔＯＡｃ  酢酸エチル
ＥｔＯＨ    エタノール
ＥＤＣＬ    １−エチル−３−（３’−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
ｇ          グラム
ｈ          時間（単数又は複数）
ＨＢＴＵ    １−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−ベンゾトリアゾリウムヘキサフルオロホスフェート（１−）３−オキシド
ＨＯＢｔ    １−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール
ＨＰＬＣ    高圧液体クロマトグラフィー
ＩＲ        赤外分光法
ｋｇ        キログラム
Ｌ          リットル
ＬＣＭＳ    液体クロマトグラフィー及び質量分析
ＭＴＢＥ    メチル第三級ブチルエーテル
ＭｅＯＨ    メタノール
ＭＳ        質量分析
ＭＷ        マイクロ波
ｍ          多重線
ｍｉｎ      分
ｍＬ        ミリリットル（単数又は複数）
ｍ／ｚ      質量電荷比
ｎｍ        ナノメートル
ｎＭ        ナノモル
ＮＭＲ      核磁気共鳴
Ｐｄ／Ｃ    パラジウム上炭素
ｒａｃ      ラセミ体
ｓ          一重線
ＳｉＣＮＢＨ３
ｔ          三重線
ＴＥＡ      トリエチルアミン
ＴＬＣ      薄層クロマトグラフィー
ＴＦＡ      トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ      テトラヒドロフラン
【０１０３】
中間体１：  ４−オキソ−テトラヒドロ−ピラン−３−カルボン酸メチルエステル
【化６】
2014520860.tif 000008
テトラヒドロ−ピラン−４−オン（１．３ｋｇ、１２．９８ｍｏｌ）及びカルボン酸ジメチルエステル（１１．６９ｋｇ、１２９．８ｍｏｌ）の溶液に固体カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１．８９ｋｇ、１６．０８ｍｏｌ）を窒素保護下で−１０℃で２時間にわたり少しずつ加えた。懸濁液を室温で添加後１０時間撹拌した。ＬＣＭＳ（２１５ｎｍ）によりテトラヒドロ−ピラン−４−オンが完全に消費されたことが示された。反応物をＨＣｌ（２Ｎ）によりｐＨ６〜７に酸性化し、次いで、相を分離した。有機相を水（３Ｌ×２）で洗浄し、合わせた水相をＭＴＢＥ（２．５Ｌ×２）で抽出した。合わせた有機相を減圧下で２５℃で濃縮して、大部分のＭＴＢＥを除去した。残留物をオイルポンプ（約２００Ｐａ）により７４℃で留出させて、表題化合物を無色油（５４５ｇ、２６．３％）として得た。ＣＨＮ分析：計算（結果）、Ｃ５３．１６（５３．１０）、Ｈ６．３７（６．２４５）、Ｎ０．００（０．００）。
【０１０４】
中間体２：  ２−アミノ−２−イミノエチルカルバミン酸ベンジル塩酸塩
【化７】
2014520860.tif 000009
メタノール中シアノメチルカルバミン酸ベンジル（６５．４ｇ、３４４ｍｍｏｌ）の溶液にナトリウムメトキシド（７．８６ｍＬ、３４．４ｍｍｏｌ、メタノール中２５％）を加えた。混合物を周囲温度で２４時間撹拌した。次いで、塩化アンモニウム（１８．４ｇ、３４４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を周囲温度でさらに２４時間撹拌し、減圧下で濃縮した。得られた物質をヘキサン／酢酸エチル（１：１）（２４０ｍＬ）及びエーテル（５０ｍＬ）に加え、周囲温度で１．５時間撹拌し、次いで、ろ過して、表題化合物を浅色（pale colored）の固体（７８．８ｇ、収率９４％）として得た。
【数１】
2014520860.tif 000010
【０１０５】
中間体３：  （４−オキソ−４，５，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチルカルバミン酸ベンジル
【化８】
2014520860.tif 000011
無水エタノール中４−オキソテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−カルボン酸メチル（５１．１ｇ、３２３ｍｍｏｌ）及び２−アミノ−２−イミノエチルカルバミン酸ベンジル塩酸塩（７８．８ｇ、３２３ｍｍｏｌ）の溶液にナトリウムエトキシド（１２２ｍＬ、３２３ｍｍｏｌ、エタノール中２１％）を加えた。混合物を機械的に撹拌し、２４時間加熱還流し、周囲温度に冷却し、ろ過して、表題化合物（５５．６ｇ、収率５５％）を得た。
【数２】
2014520860.tif 000012
【０１０６】
代替手順
メタノール（６７．５ｍＬ）中２−アミノ−２−イミノエチルカルバミン酸ベンジル（１．７７ｇ、８．５４ｍｍｏｌ）に４−オキソテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−カルボン酸メチル（１．３５ｇ、８．５４ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（３．５４ｇ、２５．６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１５時間撹拌した。溶液をろ過し、真空下で濃縮した。１００ｇ  Ｉｓｃｏカラムでジクロロメタン中０％〜１０％メタノールを用いて２０カラム容積で精製を遂行して、表題化合物（１．６３ｇ、収率５９％）を得た。Ｃ１６Ｈ１７Ｎ３Ｏ４について計算した正確な質量３１５．３、実測値３１６．２（ＥＳＩ、Ｍ＋Ｈ）；
【数３】
2014520860.tif 000013
【０１０７】
中間体４：  ２−（アミノメチル）−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４（５Ｈ）−オン
【化９】
2014520860.tif 000014
メタノール（４Ｌ）中（４−オキソ−４，５，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチルカルバミン酸ベンジル（５５．５ｇ、１７６ｍｍｏｌ）の溶液を窒素下で数回脱気し、次いで、パラジウム上炭素（１．８７ｇ、１．７６ｍｍｏｌ、炭素上１０％）を窒素雰囲気下で徐々に加えた。ＴＬＣにより出発物質の完全な消費が示されるまで、混合物を周囲温度で水素バルーン下で撹拌した。セライトのパッドによりろ過し、溶媒の蒸発により、表題化合物（３２ｇ、収率＞９９％）を得た。
【数４】
2014520860.tif 000015
【０１０８】
代替手順
メタノール（７０ｍＬ）中（４−オキソ−４，５，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチルカルバミン酸ベンジル（１．６３ｇ、５１．７ｍｍｏｌ）に１０％水酸化パラジウム（７２６ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１気圧のＨ２下で４時間撹拌した。溶液をセライトによりろ過し、真空下で濃縮して、２−（アミノメチル）−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４（５Ｈ）−オン（７０７ｍｇ、収率７５％）を得た。
【数５】
2014520860.tif 000016
【０１０９】
中間体５：  ２−クロロ−アセトアミジン
【化１０】
2014520860.tif 000017
ナトリウム（１８．３ｇ、０．７９５ｍｏｌ）を２ＬのＭｅＯＨに２５℃で完全に溶解し、１時間撹拌した。次いで、溶液にクロロ−アセトニトリル（６００ｇ、７．９５ｍｏｌ）をＮ２の保護下で１滴ずつ１時間で加えた。約２０℃でさらに１時間撹拌した後、ＮＨ４Ｃｌ（５１４ｇ、８．７３ｍｏｌ）を４５分にわたって少しずつ加え（溶液が黄色に、次に赤色になり、次に黒色の液体が得られた）、反応混合物を１５〜２０℃で１６時間撹拌した。ろ過後、ろ液を濃縮して残留物を得た。これをＭＴＢＥ（１Ｌ×２）とともに摩砕して、表題化合物を黒色固体（９８８ｇ、９６％）として得た。
【０１１０】
中間体６：  ２−クロロメチル−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン
【化１１】
2014520860.tif 000018
ＭｅＯＨ（３５６０ｍＬ）中粗４−オキソ−テトラヒドロ−ピラン−３−カルボン酸メチルエステル（１７８０ｇ、１１ｍｏｌ）及びＮＥｔ３（８３０ｇ、８．２ｍｏｌ）の混合物をＮ２下で０℃に冷却した。８９０ｍＬのＭｅＯＨ中２−クロロ−アセトアミド（５６７ｇ、４．４ｍｏｌ）の溶液を５０分にわたり１滴ずつ加えた。反応混合物を０℃で３０分間、次いで約２０℃で１６時間撹拌した。２１５ｎｍでのＬＣＭＳ及びＴＬＣ（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１０：１）分析で４−オキソ−テトラヒドロ−ピラン−３−カルボン酸メチルエステルの大部分が消費されたことが示された。次いで、混合物をろ過し、濃縮して、黒色油を得た。これをその後シリカゲル上フラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、ＤＣＭで溶出して、黄色固体／油混合物を得た。これをさらにＭＴＢＥ（約１２００ｍＬ）及びＨ２Ｏ：ＣＨ３ＣＮ：ＥＡ＝１：１：２（約６００ｍＬ）とともに摩砕して、表題化合物を白色固体（３１８ｇ）を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ２０１．２（Ｍ＋Ｈ）、ＣＨＮ分析：計算（結果）  Ｃ４７．８９（４７．９５）、Ｈ４．５２（４．４０１）、Ｎ１３．９６（１３．７６）。
【０１１１】
中間体７：  ２−｛［（チオフェン−２−イルメチル）アミノ］−メチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン
【化１２】
2014520860.tif 000019
エタノール（１ｍＬ）中チオフェン−２−カルバルデヒド（０．０２１ｍＬ、０．２２ｍｍｏｌ）、２−（アミノメチル）−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４（５Ｈ）−オン（４０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）及びシリア結合（siliabond）シアノ水素化ホウ素（２４０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ、１ｍｍｏｌ／ｇ）の混合物を周囲温度で１０分間撹拌した。次いで、酢酸（０．０１３ｍＬ、０．２２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を周囲温度でさらに５分間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン、１０：９０〜１００：０、メタノール：ジクロロメタン、１：９９〜１０：９０）により精製して、表題化合物（３０ｍｇ、収率４９％）を得た。ｍ／ｚ  ２７８．１（Ｍ＋１）、保持時間＝０．８９分。
【０１１２】
代替手順
塩化メチレン（５ｍＬ）中２−（アミノメチル）−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４（５Ｈ）−オン（１００ｍｇ、０．５５２ｍｍｏｌ）にチオフェン−２−カルバルデヒド（６２ｍｇ、０．５５２ｍｍｏｌ）、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（３５１ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）及び酢酸滴を加えた。溶液を４時間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、粗生成物をＩｓｃｏ  １２ｇカラム上に加えた。１５カラム容積にわたり塩化メチレン中０％〜１０％メタノールによる溶出により、表題化合物（９５ｍｇ、収率６１％）を得た。Ｃ１３Ｈ１５Ｎ３Ｏ２Ｓについて計算した正確な質量２７７．３、実測値２７８．２（ＥＳＩ、Ｍ＋Ｈ）；
【数６】
2014520860.tif 000020
【０１１３】
実施例１：  Ｎ−（（４−オキソ−４，５，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−３−フェニル−Ｎ−（チオフェン−２−イルメチル）プロパンアミド
【化１３】
2014520860.tif 000021
塩化メチレン（３ｍＬ）中Ｎ−（（４−オキソ−４，５，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−３−フェニル−Ｎ−（チオフェン−２−イルメチル）プロパンアミド（９５ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）の溶液にトリエチルアミン（１４３μＬ、１．０２８ｍｍｏｌ）及び塩化３−フェニルプロパノイル（５８ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）を加え、溶液を４時間撹拌した。精製を、１２カラム容積にわたる塩化メチレン中１％〜１０％メタノールを用いてＩｓｃｏ  １２ｇカラムで遂行した。得られた部分精製生成物をＤＭＳＯに溶解し、Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８−５μｍ（１９×１００ｍｍ）カラムで精製した。移動相は、水中１０％〜９０％アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）であり、表題化合物（３９ｍｇ、収率２８％）が得られた。Ｃ２２Ｈ２３Ｎ３Ｏ３Ｓについて計算した正確な質量４０９．５、実測値４１０．６（ＥＳＩ、Ｍ＋Ｈ）；
【数７】
2014520860.tif 000022
【０１１４】
表１における化合物は、実施例１の調製で述べたものと同様の方法により調製した。当業者によって十分に理解されているように、これらの類似の実施例は、合成法の変形形態を含み得る。
【化１４】
2014520860.tif 000023
【０１１５】
【表１】
2014520860.tif 000024
2014520860.tif 000025
2014520860.tif 000026
2014520860.tif 000027
【０１１６】
実施例１３：  Ｎ−シクロペンチルメチル−Ｎ−（４−オキソ−３，５，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イルメチル）−３−フェニル−プロピオンアミド
【化１５】
2014520860.tif 000028
【０１１７】
ステップ１．  中間体８：  ２−［（シクロペンチルメチル−アミノ）−メチル］−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ（yrano）［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン
【化１６】
2014520860.tif 000029
酢酸（０．１５０ｍＬ、２．６５ｍｍｏｌ）及びＤＭＦ（１ｍＬ）中シクロペンタンカルバルデヒド（０．０４７ｍＬ、０．４４ｍｍｏｌ）、２−（アミノメチル）−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４（５Ｈ）−オン（８０ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）及びシリア結合（siliabond）シアノ水素化ホウ素（４８６ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ、１ｍｍｏｌ／ｇ）の混合物を１５０℃で５分間マイクロ波処理した。ろ過の後、溶媒を減圧下で蒸発し、残留物をＨＰＬＣにより精製して、表題化合物（３５ｍｇ、収率３０％）を得た。
【数８】
2014520860.tif 000030
【０１１８】
ステップ２．  ジクロロメタン（１ｍＬ）中２−［（シクロペンチルメチル−アミノ）−メチル］−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ（yrano）［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン（３５ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）の溶液に０℃で塩化３−フェニルプロパノイル（２０μＬ、０．１３ｍｍｏｌ）を、次いで、トリエチルアミン（５６μＬ、０．４０ｍｍｏｌ）を加えた。次いで、混合物を徐々に周囲温度に到達させ、２４時間撹拌した。混合物を真空中で濃縮し、ＨＰＬＣにより精製して、表題化合物を得た。
【０１１９】
表２における化合物は、実施例１３の調製で述べたものと同様の方法により調製した。当業者によって十分に理解されているように、これらの類似の実施例は、合成法の変形形態を含み得る。
【化１７】
2014520860.tif 000031
【０１２０】
【表２】
2014520860.tif 000032
2014520860.tif 000033
2014520860.tif 000034
2014520860.tif 000035
【０１２１】
中間体９：  ２−（（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）エチルアミノ）メチル）−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４（５Ｈ）−オン
【化１８】
2014520860.tif 000036
ＤＭＦ（１ｍＬ）中２−（アミノメチル）−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４（５Ｈ）−オン（５０ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）及び２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）アセトアルデヒド（５３ｕＬ、０．２８ｍｍｏｌ）の混合物にシリア結合シアノ水素化ホウ素（３００ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ、１ｍｍｏｌ／ｇ）及び酢酸（０．１５８ｍＬ、２．８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物をマイクロ波により１５０℃で５分間加熱し、真空中で濃縮し、得られた物質をＨＰＬＣにより精製して、表題化合物（１０ｍｇ、収率１１％）を得た。
【数９】
2014520860.tif 000037
【０１２２】
実施例２３：  Ｎ−（２−ヒドロキシ−エチル）−Ｎ−（４−オキソ−３，５，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イルメチル）−３−フェニル−プロピオンアミド
【０１２３】
【化１９】
2014520860.tif 000038
ジクロロメタン（０．１ｍＬ）中２−（（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）エチルアミノ）メチル）−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４（５Ｈ）−オン（１０ｍｇ、０．０２９ｍｍｏｌ）の溶液に０℃で塩化３−フェニルプロパノイル（４．４μＬ、０．０２９ｍｍｏｌ）を、次いで、トリエチルアミン（１２μＬ、０．０８８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を０℃から周囲温度で２４時間撹拌した。フッ化テトラ−Ｎ−ブチルアンモニウム（２９μＬ、０．０２９ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中１Ｍ）を加え、反応物を周囲温度で１時間撹拌した。混合物を真空中で濃縮し、次いで、分取薄層クロマトグラフィーにより精製して、表題化合物（２．３ｍｇ、収率２２％）を得た。
【数１０】
2014520860.tif 000039
【０１２４】
実施例２４：  （Ｓ）−Ｎ−（（４−オキソ−４，５，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−１−フェニル−Ｎ−（１−フェニルエチル）メタンスルホンアミド
【化２０】
2014520860.tif 000040
塩化メチレン（２ｍＬ）中（Ｓ）−２−（（１−フェニルエチルアミノ）メチル）−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４（５Ｈ）−オン（２５ｍｇ、０．０８８ｍｍｏｌ）及びＤＩＥＡ（９２μＬ、０．５２７ｍｍｏｌ）に塩化フェニルメタンスルホニル（５０ｍｇ、０．２６３ｍｍｏｌ）を加え、反応溶液を３時間撹拌した。メタノール（４ｍＬ）中７Ｎアンモニアにより反応を停止させ、さらに３時間撹拌した。反応物を塩化メチレン（２０ｍＬ）で希釈し、シリカゲル（２５ｍｇ）上に吸収させた。精製を、１２カラム容積にわたる塩化メチレン中１％〜１６％メタノールを用いてＢｉｏｔａｇｅ  ＳＮＡＰ−１０ｇカラムで遂行した。得られた部分精製生成物をＤＭＳＯに溶解し、Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８−５μｍ（１９×１００ｍｍ）カラムで精製した。移動相は、水中１０％〜６５％アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）であった。凍結乾燥により、表題化合物（１０．５ｍｇ、収率２７％）を得た。Ｃ２３Ｈ２５Ｎ３Ｏ４Ｓについて計算した正確な質量４３９．５、実測値４４０．３（ＥＳＩ、Ｍ＋Ｈ）；
【数１１】
2014520860.tif 000041
【０１２５】
実施例２５：  （Ｒ）−Ｎ−（（４−オキソ−４，５，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−１−フェニル−Ｎ−（１−フェニルエチル）メタンスルホンアミド
【化２１】
2014520860.tif 000042
実施例２４で述べた一般的方法に従って、表題化合物を（Ｒ）−２−（（１−フェニルエチルアミノ）メチル）−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４（５Ｈ）−オン（２５ｍｇ、０．０８８ｍｍｏｌ）から調製した（２６ｍｇ、収率６７％）。Ｃ２３Ｈ２５Ｎ３Ｏ４Ｓについて計算した正確な質量４３９．５、実測値４４０．３（ＥＳＩ、Ｍ＋Ｈ）；
【数１２】
2014520860.tif 000043
【０１２６】
中間体１０：  ２−（（（１Ｈ−ピロール−２−イル）メチルアミノ）メチル）−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４（５Ｈ）−オン
【化２２】
2014520860.tif 000044
中間体７の代替手順の一般的方法に従って、表題化合物を１Ｈ−ピロロ−２−カルバルデヒド（１１０ｍｇ、１．１５９ｍｍｏｌ）から調製した（７７ｍｇ、収率２６％）。Ｃ１３Ｈ１６Ｎ４Ｏ２について計算した正確な質量２６０．３、実測値２６１．２（ＥＳＩ、Ｍ＋Ｈ）。
【０１２７】
実施例２６：  Ｎ−（（１Ｈ−ピロール−２−イル）メチル）−３−（２−フルオロフェニル）−Ｎ−（（４−オキソ−４，５，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）プロパンアミド
【化２３】
2014520860.tif 000045
実施例１で述べた一般的方法に従って、表題化合物を２−（（（１Ｈ−ピロール−２−イル）メチルアミノ）メチル）−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４（５Ｈ）−オン（４０ｍｇ、０．１５４ｍｍｏｌ）から調製した（６ｍｇ、収率９％）。Ｃ２２Ｈ２３ＦＮ４Ｏ３について計算した正確な質量４１０．５、実測値４１１．２（ＥＳＩ、Ｍ＋Ｈ）；
【数１３】
2014520860.tif 000046
【０１２８】
生物学的アッセイ及びデータ
ＴＮＫＳ酵素活性の化合物による阻害を測定するための生化学的アッセイ
ヒトタンキラーゼ１のＰＡＲＰ触媒ドメインであるＴＮＫＳ１ＰをＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｇａｔｅｗａｙ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙを用いてｐＤＯＮＲ２２１ベクターにクローニングした。次いで、このエントリークローンをデスティネーションベクターｐＤＥＳＴ２０にサブクローニングして、Ｎ末端グルタチオンＳ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）タグ融合タンパク質を得た。次いで、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎバキュロウイルス発現システム（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ−Ｂａｃ−ｔｏ−Ｂａｃ（登録商標）  Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍ、Ｖｅｒｓｉｏｎ  Ｄ）を用いてＧＳＴ−ＴＮＫＳ１ＰをＳｆ２１細胞において発現させた。タンパク質をＧＳＴｒａｐカラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）により精製した。Ｎ末端ＧＳＴタグタンキラーゼ２タンパク質ＰＡＲＰドメインであるＴＮＫＳ２Ｐを同様な方法でクローニングし、発現させ、精製した。ヒトＰＡＲＰ１（カタログ番号４６６８−１００−０１）及び活性化ＤＮＡ（カタログ番号４６７１−０９６−０６）は、Ｔｒｅｖｉｇｅｎ，Ｉｎｃ．から購入した。ＰＡＲＰ２（カタログ番号ＡＬＸ−２０１−０６４−Ｃ０２０）は、Ａｌｅｘｉｓ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌから購入した。
【０１２９】
ＴＮＫＳ１／２又はＰＡＲＰ１／２酵素のオートパーシレーション（autoparsylation）活性は、リードアウトとしてのニコチンアミドの液体クロマトグラフィー−質量分析（ＬＣ／ＭＳ）により測定した。ＴＮＫＳ及びＰＡＲＰオートパーシレーションを阻害する化合物の活性は、ＩＣ５０の測定により評価した。化合物スクリーニングアッセイにおいて、反応は、０．００８６〜１８．７５μＭの濃度範囲を有する８ポイント連続希釈の５μＬの化合物、１×アッセイ緩衝液中２０ｎＭの精製酵素及び２５０μＭのβ−ＮＡＤ＋から構成されている。室温で６０分間のインキュベーションの後に、１０μＬの５×クエンチング溶液（水中２０％ギ酸及び５００ｎＭ［ｄ４］−ニコチンアミド）の添加により反応を停止させた。バックグラウンド対照ウエルについては、β−ＮＡＤ＋の添加の前に１ウエル当たり１０μＬの５×クエンチング溶液を加えた。阻害％は、（対照−試料）／（対照−バックグラウンド）＊１００として計算した。「対照」は、化合物を含まない８ウエルの平均値であり、「バックグラウンド」は、反応の開始前に測定した５×クエンチング溶液と混合した８ウエルの平均である。
【０１３０】
実施例１〜２６を上述の１つ又は複数の酵素アッセイにおいて試験し、その結果を表３に示す。
【０１３１】
【表３】
2014520860.tif 000047
【０１３２】
Ｗｎｔシグナル伝達活性の化合物による阻害を測定するための細胞リポーター遺伝子アッセイ
ＨＥＫ２９３細胞におけるＷｎｔ応答性Ｓｕｐｅｒ−ＴＯｐＦｌａｓｈ（ＳＴＦ）ルシフェラーゼリポーター遺伝子アッセイを用いて、Ｗｎｔ配位子誘導性シグナル伝達を阻害する化合物の活性を測定した。アッセイの１日目に、細胞を、３８４ウエルプレートの１ウエル当たり８０００個の密度で５％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）を含む２５μＬの培地で平板培養した。２日目に、マウスＬ細胞から産生された２０μＬのＷｎｔ３Ａ条件培地（ＣＭ）を細胞に加えてＷｎｔシグナル伝達を誘導した後、５μＬの化合物を１０ポイント連続希釈で各ウエルに加えた。３日目にＢｒｉｇｈｔ−Ｇｌｏ（商標）ルシフェラーゼアッセイシステムにより製造業者のプロトコール（Ｐｒｏｎｅｇａ、Ｅ２６２０）に従ってルシフェラーゼ活性を測定した。阻害％を（最大Ｗｎｔ誘導性シグナル伝達−試料）／（最大Ｗｎｔ誘導性シグナル伝達−バックグラウンド）＊１００として計算した。「最大Ｗｎｔ誘導性シグナル伝達」は、化合物を含まない２０％Ｗｎｔ３Ａ  ＣＭにより誘導されたＳＴＦシグナルレベルであり、「バックグラウンド」は、Ｗｎｔ３Ａ  ＣＭ又は化合物を添加しない場合のＳＴＦシグナルレベルである。
【０１３３】
アキシン２タンパク質の安定化に対する化合物の効果を測定するための細胞ＥＬＩＳＡアッセイ
結腸直腸細胞株ＳＷ４８０におけるサンドイッチ酵素結合イムノソルベント（ＥＬＩＳＡ）アッセイにより、アキシン２タンパク質を安定化する化合物の活性を測定した。９６ウエルプレートにおいて１ウエル当たり３０，０００個のＳＷ４８０細胞を播種し、化合物処理の前に一夜インキュベートした。次いで、細胞を１０μＭから始まる６ポイント希釈の化合物で２４時間処理した。次いで、細胞を１００μＬの冷リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で洗浄し、プロテアーゼ阻害剤（Ｒｏｃｈｅ、１１８３６１７０）及びホスファターゼ阻害剤（Ｓｉｇｍａ、Ｐ２８５０、Ｐ５７２６）を添加した１２５μＬの冷１×溶解緩衝液（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、９８０３）で溶解した。ＥＬＩＳＡアッセイのために、抗アキシン−２捕捉抗体（Ｓｔｒａｔｅｇｉｃ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）抗体を炭酸コーティング緩衝液、ｐＨ９．２（Ｓｉｇｍａ、Ｃ３０４１−５０ＣＡＰ）で１μｇ／ｍｌの濃度（１：１０００）に希釈した。次いで、１ウエル当たり１００μの希釈抗アキシン−２捕捉抗体を用いて４℃で一夜９６ウエルＥＬＩＳＡプレート（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎ  Ｃｏｒｐ．、ＭｉｃｒｏＬｉｔｅ  １平底プレート＃７５７１）をコーティングした。次いで、プレートを３００μｌ／ウエルの洗浄溶液ＰＢＳＴ２０（ＰＢＳ＋０．０５％Ｔｗｅｅｎ）で３回洗浄し、緩やかに振とうしながら３００μｌ／ウエルの１％ＢＳＡ／ＰＢＳ（ＢＳＡ、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｐｒｏｂｕｍｉｎ  ＃８２−０４５−１）で室温で１．５時間ブロッキングした。ブロッキングの後、プレートを３００μｌ／ウエルの洗浄溶液で３回洗浄した。次いで、１００μＬの調製済みＳＷ４８０細胞溶解物を各ウエルに加え、緩やかに振とうしながら室温で２時間インキュベートした。洗浄後、１００μＬのビオチニル化抗アキシン２抗体（ＣＳＴ、２１５１）を各ウエルに加え、室温で２時間インキュベートした。次いで、１％ＢＳＡ／ＰＢＳで１：２００に希釈した１００μＬのストレプトアビジン−ＨＲＰ（Ｒ＆Ｄ  ｓｙｓｔｅｍｓ、ＤＹ９９８）を各ウエルに加え、暗所でＲ／Ｔで３０分間インキュベートした。シグナルは、Ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ（Ｐｉｅｒｃｅ  ＳｕｐｅｒＳｉｇｎａｌ  ＥＬＩＳＡ  Ｆｅｍｔｏ  ＃３７０４）により検出し、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｗａｌｌａｃ  １４２０プレートリーダーで測定した。
【０１３４】
癌細胞の増殖の化合物による阻害を測定するための細胞増殖アッセイ
非小細胞肺癌（non-small lung cancer）ＡＢＣ−１細胞を９６ウエルプレートで１ウエル当たり５０００個の細胞で平板培養し、最高濃度として１０μＭから始まる化合物の８連続希釈物で処理した。３日間の化合物処理の後にＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏアッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｇ７５７０）を用いて生存細胞を測定した。アッセイは、製造業者のプロトコールに従って実施した。増殖曲線のプロット及びＩＣ５０値の計算にＥｘｃｅｌ  ＸＬｆｉｔ  ４を用いた。化合物処理後の増殖％を（処理試料／（ＤＭＳＯ対照）＊１００として計算した。ＩＣ５０値は、細胞の増殖が５０％阻害される化合物の濃度である。
【０１３５】
実施例１〜２６を１つ又は複数の上述の細胞アッセイで試験し、その結果を表４に示す。
【０１３６】
【表４】
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【国際調査報告】
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