(57)【要約】  本発明は、固相抽出（ＳＰＥ）精製ステップを含む、18Ｆ−標識三環式インドール化合物を製造する方法を提供する。本方法は、自動放射性合成で本放射性フッ素化方法を実施するのに特に適している。放射性フッ素化方法に加えて、本発明は、本方法を自動放射性合成で実施するように設計されたカセットを提供する。【選択図】    なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式Ｉの放射性フッ素化された化合物を得るための方法であって、
（ｉ）下記式Ｉａの前駆体化合物を準備し、
（ｉｉ）前記式Ｉａの前駆体化合物を適切な［１８Ｆ］−フッ化物源と反応させ、
（ｉｉｉ）ステップ（ｉｉ）で得られた反応混合物を精製する
ことを含み、前記精製ステップが、
（ａ）１以上の固相抽出（ＳＰＥ）カートリッジを準備し、ここで吸着物質は１０〜１２０μｍの直径及び結合された炭化水素を有する粒子を含み、
（ｂ）前記１以上のＳＰＥカートリッジをコンディショニングし、
（ｃ）前記１以上のコンディショニングされたＳＰＥカートリッジに反応混合物をロードし、
（ｄ）前記混合物をロードした前記１以上のＳＰＥカートリッジを、１００：０〜０：１００の範囲の比で水：水混和性有機溶媒を含む第１の溶媒系を使用して洗浄し、
（ｅ）前記洗浄ステップに続いて前記１以上のＳＰＥカートリッジを、７０：３０〜０：１００の範囲の比で水：水混和性有機溶媒を含む第２の溶媒系を使用して溶出する
ことを含む方法。
【化１】
2014506874.tif 000023
式中、
Ｒ1は水素、ハロ又はＣ1-3アルコキシであり、
Ｒ2及びＲ3は独立してメチル、エチル又はベンジルであるか、又は結合している窒素と共にピロリジニル、ピペリジニル、アゼパニル、又はモルホリニル環を形成し、
Ｙ1はＣＨ2、ＣＨ2−ＣＨ2、ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2、又はＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2であり、
ｎは１、２又は３である。
【化２】
2014506874.tif 000024
式中、Ｒ1a-3a、Ｙ1a及びｍはそれぞれ式ＩのＲ1-3、Ｙ1及びｎについて定義された通りであり、各々それと同一であり、ＬＧはスルホネート脱離基である。
【請求項２】
Ｒ1及びＲ1aが各々Ｃ1-3アルコキシである、請求項１記載の方法。
【請求項３】
Ｒ1及びＲ1aが各々メトキシである、請求項２記載の方法。
【請求項４】
Ｒ2、Ｒ3、Ｒ2a及びＲ3aが各々メチル又はエチルである、請求項１乃至請求項３のいずれか１項記載の方法。
【請求項５】
Ｒ2、Ｒ3、Ｒ2a及びＲ3aが各々エチルである、請求項４記載の方法。
【請求項６】
Ｙ1及びＹ1aが各々ＣＨ2−ＣＨ2である、請求項１乃至請求項５のいずれか１項記載の方法。
【請求項７】
ｎ及びｍが各々２である、請求項１乃至請求項６のいずれか１項記載の方法。
【請求項８】
ＬＧがトシレート、トリフレート及びメシレートから選択される、請求項１乃至請求項７のいずれか１項記載の方法。
【請求項９】
ＬＧがメシレートである、請求項８記載の方法。
【請求項１０】
式Ｉの前記放射性フッ素化された化合物が
【化３】
2014506874.tif 000025
であり、式Ｉａの前記前駆体化合物が
【化４】
2014506874.tif 000026
である、請求項１乃至請求項９のいずれか１項記載の方法。
式中、ＯＭｓはメシレートである。
【請求項１１】
ステップ（ｉｉｉ）で使用する前記１以上のＳＰＥカートリッジが９００ｍｇ〜２．０ｇの吸着物質を含む、請求項１乃至請求項１０のいずれか１項記載の方法。
【請求項１２】
前記１以上のＳＰＥカートリッジが１．５〜２．０ｇの吸着物質を含む、請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
ステップ（ｉｉ）で使用する前記ＳＰＥカートリッジの吸着物質が３５〜６０μｍの直径分布を有する粒子を含む、請求項１乃至請求項１２のいずれか１項記載の方法。
【請求項１４】
ステップ（ｉｉ）で使用する前記ＳＰＥカートリッジの前記吸着物質の前記結合した炭化水素が１８又は３０の炭素鎖長を有する、請求項１乃至請求項１３のいずれか１項記載の方法。
【請求項１５】
前記方法のステップ（ｉｉ）で使用する前記第１及び第２の水混和性有機溶媒系の前記水混和性有機溶媒がエタノール（ＥｔＯＨ）及びアセトニトリル（ＭｅＣＮ）から選択される、請求項１乃至請求項１４のいずれか１項記載の方法。
【請求項１６】
前記水混和性有機溶媒がＥｔＯＨである、請求項１５記載の方法。
【請求項１７】
前記第１の溶媒系が、各々６５：３５〜６０：４０の比の水：ＥｔＯＨを有する水性ＥｔＯＨの１以上のアリコート、及び水の１以上のアリコートを含む、請求項１６記載の方法。
【請求項１８】
前記第２の溶媒系が、各々６０：４０〜０：１００の比の水：ＥｔＯＨを有する水性ＥｔＯＨの１以上のアリコートを含む、請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
前記第１の溶媒系が２７ｍＬの４０％ＥｔＯＨの第１のアリコート、１０ｍＬの３５％ＥｔＯＨの第２のアリコート、及び５ｍＬの水の第３のアリコートからなり、前記第２の溶媒系が３ｍＬの５０％ＥｔＯＨの第１のアリコート、３ｍＬの６５％ＥｔＯＨの第２のアリコート及び３ｍＬの１００％ＥｔＯＨの第３のアリコートからなる、請求項１７又は請求項１８記載の方法。
【請求項２０】
前記第１の溶媒系が２２ｍＬの４０％ＥｔＯＨの第１のアリコート及び１０ｍＬの３５％ＥｔＯＨの第２のアリコートからなり、前記第２の溶媒系が３．５ｍＬの５５％ＥｔＯＨの第１のアリコート、３．５ｍＬの水の第２のアリコートからなる、請求項１７又は請求項１８記載の方法。
【請求項２１】
自動化された、請求項１乃至請求項２０のいずれか１項記載の方法。
【請求項２２】
（ｉ）請求項１乃至請求項１０のいずれか１項記載の方法で定義された式Ｉａの前駆体化合物を含有する容器、
（ｉｉ）容器を適切な［18Ｆ］−フッ化物源で溶出する手段、及び
（ｉｉｉ）請求項１、請求項１１乃至１４のいずれか１項記載の方法で定義された１以上のＳＰＥカートリッジ
を含む、請求項２１記載の方法を実施するためのカセット。
【請求項２３】
さらに、
（ｉｖ）過剰の［18Ｆ］−フッ化物を除去するためのイオン交換カートリッジ
を含む、請求項２２記載のカセット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、放射化学、特に放射性フッ素化された化合物の製造方法に関する。本発明の方法は、固相抽出（ＳＰＥ）による精製を含む放射性フッ素化方法を提供する。
【背景技術】
【０００２】
放射性フッ素化された三環式インドール化合物は国際公開第２０１０／１０９００７号から公知である。これらの化合物は、高い親和性で末梢ベンゾジアゼピン受容体（ＰＢＲ）に結合するインビボイメージング剤として有用である。これらの化合物はまた、投与後脳内への良好な取込を示し、またＰＢＲに対する良好な選択的結合をもたらす。
【０００３】
異常なＰＢＲ発現は、種々の疾病状態、特に神経炎症を含む疾病状態の特徴であることが知られている。ＰＢＲ選択的リガンドである（Ｒ）−［11Ｃ］ＰＫ１１１９５は中枢神経系（ＣＮＳ）炎症の一般的な指標を提供する。しかし、（Ｒ）−［11Ｃ］ＰＫ１１１９５は、高いタンパク質結合性、及び低特異的〜非特異的な結合性を有することが知られている。また、その放射性標識された代謝産物の役割は知られておらず、結合の定量化には複雑なモデリングが必要である。従って、国際公開第２０１０／１０９００７号に開示されているタイプの放射性フッ素化された三環式インドール化合物が、種々の疾病状態の診断及びモニタリングに有用な改良されたＰＢＲ選択的インビボイメージング剤を提供するために考察される。
【０００４】
国際公開第２０１０／１０９００７号の実験例に、放射性標識三環式インドール化合物の製造が記載されており、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いる化合物の精製が含まれている。ＨＰＬＣはカラム、高圧ポンプ、及び比較的に複雑なシステムである紫外検出器を必要とする。
【０００５】
現在、特に［18Ｆ］−放射性トレーサーは、殆どの場合、自動放射性合成装置、例えばＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｔｄ．のＴｒａｃｅｒｌａｂ（商標）及びＦＡＳＴｌａｂ（商標）によって便利に製造されている。ＦＡＳＴｌａｂ（商標）のような合成器の場合、放射化学が実行される単回使用の使い捨てカセットが装置内に嵌め込まれる。カセットは通常流体通路、反応容器、及び試薬バイアル及び放射性合成後のクリーンアップステップのための固相抽出（ＳＰＥ）カートリッジを受け入れるための口を含んでいる。国際公開第２０１０／１０９００７号には、そこに教示されている放射性標識三環式インドール化合物を得るのに好ましい方法は、精製が好ましくは固相抽出（ＳＰＥ）によって行われる自動放射性合成を使用することを開示している。しかし、具体的な方法は記載されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】米国特許出願公開第２０１１／０７０１６１号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
精製を含めて全てのステップが自動放射性合成によって行われるように設計された、18Ｆ−標識三環式インドール化合物を製造するための最適化された方法があれば望ましいであろう。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、精製がＨＰＬＣではなく固相抽出（ＳＰＥ）により行われる18Ｆ−標識三環式インドール化合物を製造する方法を提供する。この方法は、自動放射性合成と共に使用するのに適したカセットで放射性フッ素化方法を実施するのに特に適している。放射性フッ素化方法に加えて、本発明は、自動放射性合成で本方法を実施するように設計されたカセットを提供する。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】図１は、行われた実験の詳細、例えば、初期活性、合成（ＵＥＯＳ）収率の未補正値、放射能濃度（ＲＡＣ）、放射化学濃度（ＲＣＰ）、及びＳＰＥプロセスで分離された各化合物（いずれもＳ−エナンチオマー化合物）の量を提供する。９５％を超えるＲＣＰ値が常に達成された。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
１つの実施形態において、本発明は、次式Ｉの放射性フッ素化された化合物を得る方法に関する。
【００１１】
【化１】
2014506874.tif 000002
式中、
Ｒ1は、水素、ハロ又はＣ1-3アルコキシであり、
Ｒ2及びＲ3は、独立してメチル、エチル又はベンジルであるか、又はこれらが結合している窒素と共にピロリジニル、ピペリジニル、アゼパニル、又はモルホリニル環を形成し、
Ｙ1は、ＣＨ2、ＣＨ2−ＣＨ2、ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2、又はＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2であり、
ｎは、１、２又は３である。
【００１２】
前記方法は、
（ｉ）下記式Ｉａの前駆体化合物を準備し、
（ｉｉ）前記式Ｉａの前駆体化合物を適切な［18Ｆ］−フッ化物源と反応させ、
（ｉｉｉ）ステップ（ｉｉ）で得られた反応混合物を精製する
ことを含む。
【００１３】
【化２】
2014506874.tif 000003
式中、Ｒ1a-3a、Ｙ1a及びｍはそれぞれ式ＩのＲ1-3、Ｙ1及びｎについて定義した通りであり、各々式ＩのＲ1-3、Ｙ1及びｎと同一であり、ＬＧは式−Ｏ−ＳＯ2−Ｒ4aを有するスルホネート脱離基であり、ここでＲ4aはハロゲン、直鎖若しくは枝分れ鎖Ｃ1-10アルキル、直鎖若しくは枝分れ鎖Ｃ1-10ハロアルキル、及びＣ6-10アリールである。
前記精製ステップは、
（ａ）１以上の固相抽出（ＳＰＥ）カートリッジを準備し、ここで吸着物質は１０〜１２０μｍの直径及び結合した炭化水素を有する粒子を含み、
（ｂ）前記１以上のＳＰＥカートリッジをコンディショニングし、
（ｃ）前記１以上のコンディショニングされたＳＰＥカートリッジに反応混合物をロードし、
（ｄ）前記混合物がロードされた前記１以上のＳＰＥカートリッジを、水：水混和性有機溶媒の比が１００：０〜０：１００の範囲である第１の溶媒系を用いて洗浄し、
（ｅ）前記洗浄ステップ後、前記１以上のＳＰＥカートリッジを、水：水混和性有機溶媒の比が７０：３０〜０：１００の範囲である第２の溶媒系を用いて溶出する
ことを含む。
【００１４】
用語「ハロゲン」又は「ハロ」は、フッ素、塩素、臭素又はヨウ素から選択される置換基を意味する。
【００１５】
特に断らない限り、用語「アルコキシ」は、エーテル結合を含むアルキル基を意味する。用語「アルキル」は、一般式ＣxＨ2x+1を有する直鎖又は枝分れ鎖基、例えばメチル、エチル、及びプロピルを意味する。用語「エーテル結合」は基−Ｃ−Ｏ−Ｃ−をいう。適切なアルキルオキシ基の例には、メトキシ、エトキシ、エトキシエチル、及びプロポキシがある。
【００１６】
用語「メチル」は、ｘが１である上記定義の式ＣxＨ2x+1のアルキル基をいう。
【００１７】
用語「エチル」は、ｘが２である上記定義の式ＣxＨ2x+1のアルキル基をいう。
【００１８】
用語「ベンジル」は、一価の芳香族基Ｃ6Ｈ5ＣＨ2−をいう。
【００１９】
「芳香族」基は、π電子の数が（４ｚ＋２）に等しい共役炭化水素基であり、ここでｚは正の整数又はゼロである（Ｈｕｃｋｅｌ則）。この規則は、ｓｐ2−混成炭素原子のみからなる炭化水素化合物に当てはまる。
【００２０】
用語「ピロリジニル」は、分子式Ｃ4Ｈ8Ｎを有する、４つの炭素原子と１つの窒素原子を含有する五員脂肪族複素環をいう。
【００２１】
「脂肪族」基は、非環式又は環式であって、芳香族でない。
【００２２】
用語「ピペリジニル」は、分子式Ｃ5Ｈ10Ｎを有する、５つの炭素原子と１つの窒素原子を含有する六員の脂肪族複素環をいう。
【００２３】
用語「アゼパニル」は、分子式Ｃ6Ｈ12Ｎを有する、５つの炭素原子と１つの窒素原子を含有する七員の脂肪族複素環をいう。
【００２４】
用語「モルホリニル」は、分子式Ｃ4Ｈ8ＮＯを有する、４つの炭素原子、１つの窒素原子及び１つの酸素原子を含有する六員の脂肪族複素環をいう。
【００２５】
「前駆体化合物」は、放射性標識された化合物の非放射活性の誘導体であって、都合のよい化学的形態の検出可能な標識との化学反応が、位置特異的に起こり、最小数のステップ（理想的には単一のステップ）で行うことができ、しかも有意な程度の精製を（理想的にはさらなる精製を全く）必要とすることなく、所望のインビボイメージング剤が得られるように設計されている。かかる前駆体化合物は合成品であり、良好な化学的純度で好都合に得ることができる。
【００２６】
用語「脱離基」は、一般に、親核性置換に適した部分をいい、不均一結合開裂において電子対と共に脱離する分子の断片である。本発明においては、前駆体化合物と［18Ｆ］−フッ化物の反応の結果、前駆体化合物のスルホネート脱離基の親核性置換が起こる。
【００２７】
用語「［18Ｆ］−フッ化物」は、陰イオン18Ｆ-を指す。
【００２８】
用語「固相抽出」（ＳＰＥ）は、液体（移動相といわれる）に溶解又は懸濁した溶質の、混合物を目的とする成分と目的としない成分に分離するために試料を通過させる固体（固定相又は吸着物質といわれる）に対する親和性を利用する化学的分離技術をいう。結果として、試料中の目的とする対象分析物又は目的としない不純物のいずれかが吸着物質上に保持される。吸着物質を通過する部分は、目的とする分析物又は目的としない不純物を含有するか否かに応じて回収又は処分される。吸着物質上に保持された部分が目的とする分析物を含んでいる場合は、吸着物質を適当な溶出液で濯ぐ追加のステップで回収のために分析物を吸着物質から取り出すことができる。吸着物質は通例、細長いカートリッジ本体内の２つの多孔質媒体層の間に詰められて「固相抽出（ＳＰＥ）カートリッジ」を形成しており、ここで１以上のＳＰＥカートリッジは自動放射性合成と共に使用するのに適したカセット内に含まれ得る。典型的なＳＰＥカートリッジは医療用プラスチック、例えばポリプロピレンから作成され、ルアーチップを備えた注射筒を含んでおり、フリットが吸着物質を注射筒内に保持している。
【００２９】
「吸着物質」は、特異的な官能基が結合されている、通例シリカ系の粒子を含む。本発明の場合、吸着物質は、１０〜１２０μｍの直径を有する粒子を含むのが適切である。吸着物質粒子に結合される官能基は可変の長さの炭化水素鎖である。ＳＰＥカートリッジ吸着物質として典型的な炭化水素鎖の長さはＣ２、Ｃ８、Ｃ１８及びＣ３０である。
【００３０】
用語「コンディショニング」は、試料（この場合反応混合物）をロードする前にＳＰＥ吸着物質を溶媒で濯ぐステップをいう。本発明の場合、コンディショニングステップは通例、水混和性の有機溶媒、次に水又は水性緩衝液の適用を含む。
【００３１】
用語「反応混合物」は、式Ｉａの前駆体化合物と適切な［１８Ｆ］−フッ化物源との反応の粗生成物をいう。例えば、反応混合物は、１以上のコンディショニングされたＳＰＥカートリッジにロードする前にＨＰＬＣのような何らかの精製ステップに付されることはない。従って、精製ステップは、反応混合物に対する全体の精製プロセスである。
【００３２】
コンディショニングされたＳＰＥカートリッジに反応混合物をロードするという場合の用語「ロードする」とは、単に、反応混合物をカートリッジに、又は１より多くのカートリッジの場合は連続したカートリッジの最初のものに適用することをいう。
【００３３】
用語「精製する」とは、所望の化学化合物を不必要な化学化合物と共に含む混合物から所望の化学化合物を分離するプロセスを意味する。本発明において、用語精製するとは、特に、上記定義のＳＰＥにより精製することをいい、ＨＰＬＣは特に除かれる。精製する目的は、できるだけ多くの不必要な化学化合物とできるだけ少ない所望の化学化合物を除去して、できるだけ高い割合の精製された生成物を含む化学組成で所望の化学化合物を得ることである。特に本発明の場合、精製された生成物は、式Ｉａ：式Ｉの化合物の比が２０：８０〜０：１００の範囲であるのが適切である。実際には、０：１００の比は達成できないであろうから、およそ１０：９０〜１：９９の比が目標とされ、５：９５〜１：９９の範囲の比が好ましい。最も好ましくは、式Ｉａの前駆体化合物に加えて他の不純物が除去される。式Ｉの放射性フッ素化された化合物は陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）トレーサーとしてインビボでの使用が意図されているので、哺乳類の身体に毒性の影響を有し得るあらゆる不純物を除去する必要がある。また、式Ｉの放射性フッ素化された化合物がその生物学的標的に最も有効に結合するためには、同じ生物学的標的に対して結合親和性を有するあらゆる不純物をできるだけ多く除去するのが望ましい。精製ステップの結果、できるだけ大きな式Ｉの放射性フッ素化された化合物の保持率が得られるべきであり、適切には≧７５％、好ましくは≧９０％、最も好ましくは≧９５％である。
【００３４】
用語「洗浄する」とは、反応混合物から不必要な不純物、すなわち本発明の場合反応混合物中の式Ｉの放射性フッ素化された化合物以外のあらゆる化学化合物を除去するように適合されたＳＰＥ手順のステップをいう。特に、式Ｉａの未反応化合物を全て除去することが望まれる。
【００３５】
用語「溶媒系」は、特定の濃度の単一アリコートの溶媒、又は異なる濃度を有する複数アリコートの溶媒のいずれかをいう。前記第１の溶媒系は、水混和性有機溶媒の濃度が各々の次のアリコートで低下する複数アリコートの溶媒を含むのが適切である。前記第２の溶媒系は、水混和性溶媒の濃度が第１の溶媒系に使用されるアリコートのいずれよりも高い１以上のアリコートを含むのが適切である。本発明の場合アリコートの容量は、適切には１〜５０ｍＬ、通例５〜３０ｍＬであることができる。
【００３６】
用語「水混和性有機溶媒」とは、室温、大気圧において水と共に均質な溶液を容易に形成する水以外の溶媒をいう。適切な水混和性有機溶媒の例には、エタノール、メタノール、イソプロパノール、アセトニトリル、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド及びギ酸がある。例えば、溶媒系は、３５％水性エタノールの１以上のアリコート、また４０％水性エタノールの１以上のアリコート及び５５％水性エタノールの１以上のアリコートからなることができよう。
【００３７】
用語「溶出する」とは、ＳＰＥカートリッジから対象の化合物（式Ｉの放射性フッ素化された化合物）を取り出すが、洗浄ステップで除去されない不純物は残すように設計されたＳＰＥ手順のステップをいう。
【００３８】
式ＩのＲ1はＣ1-3アルコキシが好ましく、メトキシが最も好ましい。
【００３９】
式ＩのＲ2及びＲ3はいずれもメチル又はいずれもエチルであるのが好ましく、いずれもエチルであるのが最も好ましい。
【００４０】
式ＩのＹ1はＣＨ2−ＣＨ2であるのが好ましい。
【００４１】
式Ｉで、ｎは２であるのが好ましい。
【００４２】
式ＩａのＲ1aはＣ1-3アルコキシであるのが好ましく、メトキシが最も好ましい。
【００４３】
式ＩａのＲ2a及びＲ3aはいずれもメチル又はいずれもエチルであるのが好ましく、いずれもエチルであるのが最も好ましい。
【００４４】
式ＩａのＹ1aはＣＨ2−ＣＨ2であるのが好ましい。
【００４５】
式Ｉａで、ｍは２であるのが好ましい。
【００４６】
式ＩａのＬＧは、トルエンスルホン酸（トシレート）、ニトロベンゼンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸（トリフレート）、フルオロスルホン酸、メタンスルホン酸（メシレート）及びペルフルオロアルキルスルホン酸から選択されるのが好ましい。最も好ましい実施形態において、ＬＧはトシレート、トリフレート又はメシレートであり、メシレートが殊に好ましい。
【００４７】
式Ｉの殊に好ましい放射性フッ素化された化合物において、
Ｒ1はＣ1-3アルコキシであり、好ましくはメトキシであり、
Ｒ2及びＲ3はいずれもメチル又はいずれもエチルであり、好ましくはいずれもエチルであり、
Ｙ1はＣＨ2−ＣＨ2であり、
ｎは２である。
【００４８】
式Ｉａの殊に好ましい前駆体化合物において、
Ｒ1aはＣ1-3アルコキシであり、好ましくはメトキシであり、
Ｒ2a及びＲ3aはいずれもメチル又はいずれもエチルであり、好ましくはいずれもエチルであり、
Ｙ1aはＣＨ2−ＣＨ2であり、
ｍは２であり、
ＬＧはトルエンスルホン酸（トシレート）、ニトロベンゼンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸（トリフレート）、フルオロスルホン酸、メタンスルホン酸（メシレート）及びペルフルオロアルキルスルホン酸から選択され、好ましくはトシレート、トリフレート又はメシレートであり、最も好ましくはメシレートである。
【００４９】
前記式Ｉの放射性フッ素化された化合物は好ましくは次式化合物１であり、
【００５０】
【化３】
2014506874.tif 000004
前記式Ｉａの前駆体化合物は好ましくは次式化合物１ａである。
【００５１】
【化４】
2014506874.tif 000005
式中、ＯＭｓはメシレートである。
【００５２】
式Ｉ及び式Ｉａの化合物はキラル中心を有しており、上にはそのラセミ体として示してある。特に好ましい実施形態において、式Ｉ及び式Ｉａの化合物は鏡像異性的に純粋な形態で提供され、好ましくはＳ−エナンチオマーである。化合物ＩのＳ−エナンチオマーは次式の通りであり、
【００５３】
【化５】
2014506874.tif 000006
化合物ＩａのＳ−エナンチオマーは次式の通りである。
【００５４】
【化６】
2014506874.tif 000007
前記１以上のＳＰＥカートリッジの吸着物質の好ましい粒子直径分布は３５〜１２０μｍ、より好ましくは３５〜６０μｍ、殊に好ましくは３５〜５５μｍである。好ましくは、このサイズ分布内で、１以上のＳＰＥカートリッジの吸着物質は３５〜４０μｍの直径を有する粒子を少なくとも幾らか含み、より好ましい吸着物質は３５〜４０μｍの直径を有する粒子をより大きな割合で含む。さらに、前記吸着物質の結合した炭化水素はＣ１８又はＣ３０の鎖長を有するのが好ましい。また、精製ステップのステップ（ｉｉｉ）で使用される前記１以上のＳＰＥカートリッジは３００ｍｇ〜３．０ｇの吸着物質、最も好ましくは１．５〜２．０ｇの吸着物質を含むのが好ましい。この量の吸着物質は一般に１〜３のＳＰＥカートリッジ、通例２つのＳＰＥカートリッジとして提供することができる。例えば、特に好ましい実施形態において、各々９００ｍｇの吸着物質を有する２つのＳＰＥカートリッジが提供される。本発明の方法の精製ステップで使用するのに適した市販のＳＰＥカートリッジの非限定例には、例えば、Ｗａｔｅｒｓ  ｔＣ１８  Ｓｅｐ  Ｐａｋ  Ｐｌｕｓ  ９００ｍｇ、Ｗａｔｅｒｓ  Ｃ１８  Ｓｅｐ  Ｐａｋ  Ｐｌｕｓ  ３６０ｍｇ、Ｖａｒｉａｎ  Ｂｏｎｄ  Ｅｌｕｔｅ  ５００ｍｇ、Ｍａｃｈｅｒｅｙ  Ｎａｇｅｌ  Ｃ１８  ｅｃ  ５３０ｍｇ、Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ  Ｃ３０  ９５０ｍｇがある。これら市販のＳＰＥカートリッジの中で好ましいのはＷａｔｅｒｓ  ｔＣ１８  Ｓｅｐ  Ｐａｋ  Ｐｌｕｓ  ９００ｍｇ、Ｖａｒｉａｎ  Ｂｏｎｄ  Ｅｌｕｔｅ  ５００ｍｇ及びＰｒｉｎｃｅｔｏｎ  Ｃ３０  ９５０ｍｇであり、Ｗａｔｅｒｓ  ｔＣ１８  Ｓｅｐ  Ｐａｋ  Ｐｌｕｓ  ９００ｍｇが最も好ましい。
【００５５】
前段落に記載したＳＰＥカートリッジの好ましい実施形態は、本発明の方法が化合物１ａの放射性フッ素化により化合物１を得ることに関する場合、特に好ましい。
【００５６】
好ましくは、本発明の方法の精製ステップにおいて、前記第１及び第２の水混和性有機溶媒系の前記水混和性有機溶媒はエタノール（ＥｔＯＨ）、アセトニトリル（ＭｅＣＮ）、メタノール及びイソプロパノールから選択される。好ましくは、第１の溶媒系は６５：３５〜６０：４０の水：水混和性有機溶媒の比を有し、すなわち３５〜４０％の水性水混和性有機溶媒を有する１以上のアリコートを含み、第１の溶媒系で使用される各々次のアリコートはより低い濃度の水混和性有機溶媒を有し、例えば第１のアリコートが４０％の水性水混和性有機溶媒で、次の第２のアリコートが３５％の水性水混和性有機溶媒である。好ましくは、前記第１のアリコートの容量は前記第２のアリコートより大きく、例えば前記第１のアリコートが２０〜３０ｍＬで、前記第２のアリコートが５〜１５ｍＬである。好ましくは、前記第２の溶媒系は各々が６０：４０〜０：１００の比で水：水混和性有機溶媒を有する、すなわち４０〜１００％の水性水混和性有機溶媒を有する水性水混和性有機溶媒の１以上のアリコートを含む。最も好ましくは、前記第２の溶媒系は１以上のアリコートを含み、水混和性有機溶媒の濃度は第１の溶媒系内のいずれのアリコートより高い。例えば、前記第２の溶媒系は好ましくは５０〜８０％、最も好ましくは５０〜７０％、最も好ましくは５０〜６０％の範囲の濃度の水混和性有機溶媒を有する１以上のアリコートを含む。前記第１及び第２の溶媒系はまた最終アリコートとして水のアリコートも含み得る。前記第１及び第２の水混和性有機溶媒系の最も好ましい水混和性有機溶媒はＥｔＯＨである。最も好ましくは、ＥｔＯＨが前記水混和性有機溶媒である場合、前記第１の溶媒系において第１のアリコートは４０％水性水混和性有機溶媒であり、第２のアリコートは３５％水性水混和性有機溶媒であり、場合によりその次の第３のアリコートが水であり、前記第２の溶媒系において第１のアリコートは５０〜６０％水性ＥｔＯＨであり、場合によりその後の前記第１のアリコートより高いＥｔＯＨ濃度を有するアリコートが続く。
【００５７】
本発明の方法の精製ステップで使用するのに特に好ましい溶媒系の非限定例を下記表に示す（％値は水中の水混和性有機溶媒％であり、前記有機溶媒は好ましくはＥｔＯＨである）。
【００５８】
【表１】
2014506874.tif 000008
溶媒系に関する、上の段落に記載した好ましい実施形態は、本発明の方法が化合物１ａの放射性フッ素化により化合物１、特にそのＳ−エナンチオマーを得ることに関する場合特に好ましい。
【００５９】
本発明の方法は、主として、反応混合物からできるだけ多くの式Ｉａの未反応前駆体化合物を除去することを目的とする。好ましい実施形態において、本発明の方法は付加的な不純物も除去する。特に、本発明の方法が化合物１ａの放射性フッ素化により化合物１を得ることに関する場合、本発明の方法で９０〜９８％の前駆体化合物及び８５〜９０％のヒドロキシ不純物が除去され、痕跡量のみのビニル不純物が残ることが実験例によって示された。ヒドロキシ及びビニル不純物はそれぞれ次式の通りである。
【００６０】
【化７】
2014506874.tif 000009
さらに注目に値する不純物はアセチル不純物であり、これは次式の構造を有する。
【００６１】
【化８】
2014506874.tif 000010
式Ｉａの前駆体化合物の製造に適した方法は国際公開第２０１０／１０９００７号に詳細に記載されている。例えば、ＬＧがメシレートである前駆体化合物は市販の出発材料から次のスキーム１に示す一般的な方法に従って製造することができる。
【００６２】
【化９】
2014506874.tif 000011
上記スキーム１及び下記スキーム１ａにおいて、可変基Ｒ1a-3a及びＹ1aは式Ｉａに関して本明細書で適切にかつ好ましく提供されている通りである。スキーム１中のＲ5aはＣＨ2ＣＨ2ＯＢｎを表し、Ｂｎはベンジルであり、Ｅｔはエチルであり、ＯＴｓはトシレート脱離基を表し、ＩＰＡはイソプロピルアルコールを意味し、ＯＭｓはメシレート脱離基を表す。
【００６３】
また、式Ｉａの前駆体化合物のＲ1aが環の頂上位置にある場合、下記スキームＩａに示す一般的な合成経路を使用することができる。
【００６４】
【化１０】
2014506874.tif 000012
スキーム１ａにおいて、Ｂｎはベンジルであり、ＴＨＦはテトラヒドロフランであり、ＫＨＭＤＳはカリウムメチルメチルジシラザンであり、ｅｑは当量を意味し、ＥｔＡｃは酢酸エチルである。得られるヒドロキシル化合物は、例えばメタンスルホネート脱離基の付加のためのメタンスルホニルクロリドとの反応によって式Ｉａの前駆体化合物に容易に変換することができる。
【００６５】
［18Ｆ］−フッ化物は通常核反応18Ｏ（ｐ，ｎ）18Ｆにより水溶液として得られる。フッ化物の反応性を増大し、かつ水の存在の結果得られるヒドロキシル化された副生成物を回避するために、通例反応の前に［18Ｆ］−フッ化物から水を除去し、フッ素化反応を無水の反応溶媒（Ａｉｇｂｉｒｈｉｏら  １９９５  Ｊ  Ｆｌｕｏｒ  Ｃｈｅｍ；７０：２７９−８７）を用いて行う。［18Ｆ］−フッ化物からの水の除去は「裸の」［18Ｆ］−フッ化物を作成することといわれる。放射性フッ素化反応のための［18Ｆ］−フッ化物の反応性を改良するために使用されるさらなるステップは、水の除去前に陽イオン性対イオンを加えることである。適切には、対イオンは、［18Ｆ］−フッ化物の溶解性を維持するのに充分な無水反応溶媒内への溶解性を保有するべきである。従って、通例使用される対イオンには、ルビジウム又はセシウムのような大きいが軟らかい金属イオン、Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ（商標）のようなクリプタンドと錯体を形成したカリウム、又はテトラアルキルアンモニウム塩があり、Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ（商標）のようなクリプタンドと錯体を形成したカリウム、又はテトラアルキルアンモニウム塩が好ましい。これらのステップによって反応性にされた［18Ｆ］−フッ化物は本発明において「適切な［１８Ｆ］−フッ化物源」を意味するものである。
【００６６】
特に［18Ｆ］−放射性トレーサーは今や自動放射性合成装置で好都合に製造されることが多い。Ｔｒａｃｅｒｌａｂ（商標）及びＦＡＳＴｌａｂ（商標）（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｔｄ）を始めとするかかる装置の幾つかの市販の例がある。かかる装置は一般に、放射性合成を実行するために装置に嵌め込まれて放射化学が行われる、多くの場合使い捨ての「カセット」を含む。カセットは通常流体通路、反応容器、及び試薬バイアル並びに放射性合成後のクリーンアップステップで使用される固相抽出カートリッジを受容するための口を含んでいる。従って、好ましい実施形態において、本発明の方法は自動化される。
【００６７】
さらに、さらなる局面において、本発明は、自動化された合成装置で本発明の方法を実施するためのカセットを提供し、ここで前記カセットは、
（ｉ）本発明の方法に対して本明細書で定義された式Ｉａの前駆体化合物を含有する容器、
（ｉｉ）適切な［１８Ｆ］−フッ化物源で容器を溶出するための手段、及び
（ｉｉｉ）本発明の方法に対して本明細書で定義された１以上のＳＰＥカートリッジ
を含む。
【００６８】
本発明の方法に関して本明細書に記載した式Ｉａの前駆体化合物、［18Ｆ］−フッ化物及びＳＰＥカートリッジの適切な、好ましい、最も好ましい、殊に好ましい、最も殊に好ましい実施形態の全ては本発明のカセットにも適用される。
【００６９】
本発明のカセットは、さらに、
（ｉｖ）過剰の［18Ｆ］−フッ化物の除去のためのイオン交換カートリッジ
を含み得る。
【実施例】
【００７０】
ここで、以下の非限定実施例によって本発明を例証する。
実施例の簡単な説明
実施例１は、ＳＰＥスクリーニング実験のための添加物入り試料(spｉked sample)の製造について記載する。
実施例２は、ＳＰＥスクリーニング実験について記載する。
実施例３は、ＳＰＥ精製実験のための崩壊したＦＡＳＴＬａｂ粗製試料の調製について記載する。
実施例４は、粗製物１のＳＰＥ精製について記載する。
実施例５は、粗製物２のＳＰＥ精製について記載する。
実施例６は、粗製物３のＳＰＥ精製について記載する。
実施例７は、粗製物４及び５のＳＰＥ精製について記載する。
実施例８は、粗製物６のＳＰＥ精製について記載する。
実施例９は、ＦＡＳＴｌａｂカセットでのＳＰＥ精製を含めて、実施した幾つかのＦＡＳＴｌａｂ実験について記載する。
【００７１】
実施例で使用する略語のリスト
ａｑ          水性
ＤＡＤ        ダイオードアレイ検出器
ＥＳＩ        エレクトロスプレイイオン化
ＥｔＯＨ      エタノール
ＨＰＬＣ      高速液体クロマトグラフィー
ＬＣ−ＭＳ    液体  クロマトグラフィー質量分析
ＭｅＣＮ      アセトニトリル
ＭＳ          質量分析
ＳＰＥ        固相抽出
ＵＶ          紫外
実施例１
ＳＰＥスクリーニング実験用の添加物入り試料の調製
非放射活性の化合物１及び化合物１ａを、それぞれ国際公開第２０１０／１０９００７号の実施例２及び１に記載されている方法に従って調製した。
【００７２】
各々の添加物入り試料を調製するために、１ｍｇの化合物１ａを秤量し、１ｍＬのＭｅＣＮに溶解した。次に、１００μｌの化合物１のストック溶液（１ｍｇ／ｍＬ、５０：５０のＨ2Ｏ：ＭｅＣＮ中）を加えた。その後、下記実施例２に記載する実験に使用する前に、試料を１ｍＬの水で希釈した。
【００７３】
実施例２
ＳＰＥスクリーニング実験
〜２５μｇの化合物１（式Ｉの化合物）及び１ｍｇの化合物１ａ（式Ｉａの化合物）を含有する試料を調製した。
【００７４】
５０％ａｑＭｅＣＮ中の２ｍＬの試料を各実験に使用した。試料の適用前に、３ｍＬのＥｔＯＨを用いてカートリッジを活性化し、１０ｍＬの水を用いて平衡化し、真空にして乾燥した。洗浄ステップに続いて、カートリッジを真空にすることで乾燥した後、３ｍＬのＥｔＯＨを用いて溶出し、再び真空にして乾燥した。
【００７５】
様々な画分の分析を、２３０ｎｍ、２７０ｎｍでのＵＶ検出、ＤＡＤ検出及びＭＳ検出によるＡｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ，ＯＳＬＣ０１６を備えたＨＰＬＣで行った。使用したカラムはＺｏｒｂａｘ  Ｓｔａｂｌｅ  Ｂｏｎｄ  Ｃ１８  １．８μｍ  ４．６×５０ｍｍであり、移動相はＡ：水中０．１％ＨＣＯＯＨ、Ｂ：８０％ＭｅＣＮ中０．１％ＨＣＯＯＨであった。流量は１ｍＬ／ｍｉｎであり、カラムオーブンは４０℃に設定した。次の勾配を使用した。
【００７６】
【表２】
2014506874.tif 000013
化合物１について作成した標準曲線に基づいて化合物１及び化合物１ａの量を見積もった。
【００７７】
分析はまた、ＥＳＩ＋イオン化モードのＡｇｉｌｅｎｔ単一ＴＯＦ（ＬＣ−ＵＶ／ＭＳ）及び７０Ｖのフラグメンター電圧を用いたＬＣ−ＭＳでも行った。検出は２３０ｎｍ、２７０ｎｍでのＵＶ、ＤＡＤ検出及びＭＳ検出でも行った。カラムはＺｏｒｂａｘ  Ｓｔａｂｌｅ  Ｂｏｎｄ  Ｃ１８  １．８μｍ  ４．６×５０ｍｍであり、移動相は水中０．１％ＨＣＯＯＨ、Ｂ：８０％ＭｅＣＮ中０．１％ＨＣＯＯＨであった。流量は１．５ｍＬ／ｍｉｎであり、カラムオーブンは４０℃に設定した。次の勾配を使用した。
【００７８】
【表３】
2014506874.tif 000014
下記表に、行った実験及び得られた結果を要約して示す。
【００７９】
【表４】
2014506874.tif 000015
実施例３
ＳＰＥ精製実験用のＦＡＳＴＬａｂ粗製試料の調製
各々のＦＡＳＴＬａｂ粗製試料の調製のために、一般に、ＦＡＳＴＬａｂカセットを、溶出液バイアル、ＱＭＡカートリッジ（予めコンディショニングした、Ｗａｔｅｒｓ）、前駆体バイアル及びＭｅＣＮバイアルと共に組み立てた。ＦＡＳＴＬａｂ試料を調製するために、ＦＡＳＴＬａｂプロセスを標識ステップまで行った後、粗製物（ほぼ１．３ｍＬのＭｅＣＮ）を分析まで貯蔵するためにバイアルに移した。非放射活性試験のため、フッ化物なしで標識ステップを行った。ここで、各試料に関するさらなる詳細を提供するする。
【００８０】
粗製物１
ＧＥ  ＰＥＴｒａｃｅサイクロトロンから得られた１２０．６ＭＢｑの［18Ｆ］フッ化物を水で１．５ｍＬにし、ＦＡＳＴＬａｂ合成器（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に導入し、ＱＭＡカートリッジ上にトラップした。８２５μＬ溶出溶液（ＭｅＣＮ／水（８０／２０、ｖ／ｖ）中のＫＨＣＯ3＋ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ）を使用して、［18Ｆ］フッ化物をＱＭＡカートリッジから反応容器に溶出した。次に、反応容器中の物質を１２０℃で１０分乾燥した後、１．６ｍＬのＭｅＣＮに溶解した４．０ｍｇの化合物１ａを反応容器に移した。標識化を１００℃で１５分行った。標識化後反応容器の中身（１．３ｍＬのＭｅＣＮ中）をバイアルに移し、室温で１日崩壊させた後、分析するまで冷凍室に貯蔵した。
【００８１】
５００μＬのＭｅＣＮ中の５００μＬの崩壊した粗製物に４０μＬの１．１ｍｇ／ｍＬの化合物１を添加した後、１ｍＬの水で希釈した。このうち２ｍＬを、実施例４に記載する実験に用いた。
【００８２】
粗製物２及び３
粗製物１について記載したプロセスを実施した。但し、（ｉ）18Ｆ−フッ化物をＱＭＡカートリッジ上にトラップする代わりに１．５ｍＬの水をＱＭＡカートリッジに通し、（ｉｉ）８２５μＬの溶出溶液ではなく１２００μＬの溶出溶液を使用し、（ｉｉｉ）乾燥は１００℃で２０分とし、（ｉｖ）標識反応ステップのために１．６ｍＬのＭｅＣＮ中の３．２ｍｇの化合物１ａを反応容器に移した。
【００８３】
２つの実験用に試料を調製した。各試料に対して、５００μＬの粗製物（ＭｅＣＮ中）に２０μＬの化合物１溶液（５０：５０Ｈ2Ｏ：ＭｅＣＮ中１．２４ｍｇ／ｍＬ）を添加した後、１ｍＬの水で希釈した。各々の溶液２ｍＬを、実施例５及び６に記載する実験のためにＳＰＥカラムにロードした。
【００８４】
粗製物４
粗製物２及び３の調製について記載したプロセスを実施した。但し、１．６ｍＬのＭｅＣＮ中の３．１ｍｇの化合物１ａを標識反応ステップに使用した。
【００８５】
５００μＬの粗製物（ＭｅＣＮ中）に２０μＬの化合物１溶液（５０：５０Ｈ2Ｏ：ＭｅＣＮ中１．２４ｍｇ／ｍＬ）を添加した後、１ｍＬの水で希釈した。この溶液２ｍＬを、実施例７に記載する実験のためにＳＰＥカラムにロードした。
【００８６】
粗製物５
粗製物２及び３の調製について記載したプロセスを実施した。但し、１．６ｍＬのＭｅＣＮ中の４．８ｍｇの化合物１ａを標識反応ステップに使用した。
【００８７】
５００μＬの粗製物（ＭｅＣＮ中）に２０μＬの化合物１溶液（５０：５０Ｈ2Ｏ：ＭｅＣＮ中１．２４ｍｇ／ｍＬ）を添加した後１ｍＬの水で希釈した。この溶液２ｍＬを実施例７に記載する実験のためにＳＰＥカラムにロードした。
【００８８】
粗製物６
粗製物２及び３の調製について記載したプロセスを実施した。但し、１．６ｍＬのＭｅＣＮ中３．５ｍｇの化合物１ａを標識反応ステップに使用した。
【００８９】
５００μＬの粗製物（ＭｅＣＮ中）に２０μＬの化合物１溶液（５０：５０Ｈ2Ｏ：ＭｅＣＮ中１．２４ｍｇ／ｍＬ）を添加した後１ｍＬの水で希釈した。この溶液２ｍＬを実施例８に記載する実験のためにＳＰＥカラムにロードした。
【００９０】
下記表に、この実施例に従って調製し、実施例４〜８でＳＰＥカートリッジに適用されるＦＡＳＴＬａｂ粗製試料中の主要な成分の量（μｇ）を詳細に示す。
【００９１】
【表５】
2014506874.tif 000016
実施例４
粗製物１のＳＰＥ精製
２×９００ｍｇ  Ｗａｔｅｒｓ  ｔＣ１８  ＳＰＥカートリッジを連続して使用した。カートリッジを３ｍＬのＥｔＯＨで活性化し、１０ｍＬの水で平衡化し、真空にして乾燥した。次に、２ｍＬの粗製物１（実施例３に記載したように調製）をカートリッジに適用した。カートリッジをまず２７ｍＬの４０％ａｑＥｔＯＨで、次に１０ｍＬの３５％ａｑＥｔＯＨで、次いで５ｍＬの水で洗浄した。その後カートリッジを真空にして乾燥した後、３ｍＬのＥｔＯＨを用いて溶出し、さらに乾燥ステップに付した。
【００９２】
様々な画分の分析を、上記実施例２に記載したようにＨＰＬＣで行った。
【００９３】
下記表に、各々のステップでカートリッジから得られた各々の成分の量をμｇで詳細に示す。
【００９４】
【表６】
2014506874.tif 000017
ほぼ８０％の化合物１ａ及び３０％のヒドロキシが２７ｍＬの４０％ａｑＥｔＯＨでの洗浄中に除去される。他の２０％の化合物１ａ及び３０％のヒドロキシが３５％ＥｔＯＨ（合計１０ｍＬ）での洗浄中に除去される。小量のみの化合物１ａ及びヒドロキシが５ｍＬの水による洗浄中に除去される。溶出液にはヒドロキシ／化合物１ａ／化合物１／ビニルが１８／３／３６／４３の比で残る。予想通り、ビニルは化合物１より遅く溶出するので除去されない。
【００９５】
実施例５
粗製物２のＳＰＥ精製
実施例４に記載した方法を２ｍＬの粗製物２（実施例３に記載したように調製）に対して用いた。但し、溶出は３ｍＬの５０％ａｑＥｔＯＨ、３ｍＬの６０％ａｑＥｔＯＨ、３ｍＬの７０％ａｑＥｔＯＨ及び３ｍＬの８０％ａｑＥｔＯＨを用いて行った。
【００９６】
下記表に、各々のステップでカートリッジから得られた各々の成分の量をμｇで詳細に示す。
【００９７】
【表７】
2014506874.tif 000018
化合物１は主として３ｍＬの６０％ａｑＥｔＯＨで溶出したが、幾らかの化合物１は３ｍＬの５０％ａｑＥｔＯＨ及び３ｍＬの７０％ａｑＥｔＯＨでも観察された。８５％のビニルが３ｍＬの７０％ａｑＥｔＯＨで、最後の１５％が３ｍＬの８０％ａｑＥｔＯＨで溶出した。溶出前かつ５ｍＬの水での洗浄の後の５０％ａｑＥｔＯＨによる洗浄がヒドロキシの除去に効果的であることが示された。
【００９８】
実施例６
粗製物３のＳＰＥ精製
実施例５に記載した方法を使用して２ｍＬの粗製物３（実施例３に記載したように調製）を精製した。但し、３ｍＬの５０％ａｑＥｔＯＨステップを、３ｍＬの４０％ａｑＥｔＯＨステップ、それに続く３ｍＬの６５％ａｑＥｔＯＨ及び３ｍＬの１００％ＥｔＯＨに変えた。
【００９９】
下記表に、各々のステップ後にカートリッジから得られた各々の成分の量をμｇで詳細に示す。
【０１００】
【表８】
2014506874.tif 000019
ヒドロキシの除去は実施例５に記載した方法と比較して減少するが、化合物１の損失は少ないのが観察された。化合物１は主として３ｍＬの６５％ａｑＥｔＯＨ洗浄で溶出した。
【０１０１】
実施例７
粗製物４及び５のＳＰＥ精製
粗製物４及び５を、実施例４に記載した方法を用いて精製した。但し、３ｍＬのＥｔＯＨステップを、３ｍＬの５０％ａｑＥｔＯＨ、次いで３ｍＬの６５％ＥｔＯＨ、次に３ｍＬの１００％ＥｔＯＨに換え、これらの各ステップに続いて真空の適用により乾燥した。
【０１０２】
下記表に、粗製物４に関して各々のステップ後カートリッジから得られた各々の成分の量をμｇで詳細に示す。
【０１０３】
【表９】
2014506874.tif 000020
下記表に、粗製物５に関して各々のステップ後カートリッジから得られた各々の成分の量をμｇで詳細に示す。
【０１０４】
【表１０】
2014506874.tif 000021
粗製物４と粗製物５に対する実験は類似の傾向を示した。２７ｍＬの４０％ａｑＥｔＯＨによる洗浄後、ほぼ６０〜７０％の化合物１ａがほぼ１０％のヒドロキシ不純物と共に除去された。３５％ａｑＥｔＯＨによる１０ｍＬの洗浄で化合物１ａの残りの殆どが除去された。粗製物５（注入した試料中の化合物１ａの総量は１．７ｍｇ）では合計９０％が除去され、粗製物４（注入した試料中の化合物１ａの総量は０．９ｍｇ）では９８％が除去された。この洗浄後合計４０〜５０％のヒドロキシが除去された。５ｍＬの水により、ヒドロキシ及び化合物１ａの両方がさらに洗い流された。３ｍＬの５０％ａｑＥｔＯＨによる洗浄で、別の３５％のヒドロキシ及び小量の化合物１ａが除去された。３ｍＬの６５％ａｑＥｔＯＨは、５０／５０の化合物１／ヒドロキシ並びに微量の化合物１ａ及びビニルを含有していた。これは、ほぼ８５〜９０％のヒドロキシがこの手順中に除去されたことを意味する。ビニル不純物は主としてカートリッジにトラップされ、１００％のＥｔＯＨで溶出される。
【０１０５】
粗製物５は粗製物４と比べて殆ど二倍のμｇの化合物１ａを含有するが、結果は同等である。この方法では、両方の粗製物中のほぼ全ての化合物１ａを除去することができた。
【０１０６】
実施例８
粗製物６のＳＰＥ精製
注入された試料に生成物が添加されてないときの溶出液の組成を検討するために実験を行った。ＳＰＥ精製は、粗製物６（実施例３に記載したように調製）に対して、粗製物４及び５の精製について実施例７に記載した方法で実施した。
【０１０７】
下記表に、各々のステップ後カートリッジから得られた各々の成分の量をμｇで詳細に示す。
【０１０８】
【表１１】
2014506874.tif 000022
表は、溶出液の組成（見積もられた量に基づく［μｇ］）がヒドロキシル／前駆体／生成物／ビニル＝９０／６／４／０であることを示している。表に挙げた比は２３０ｎｍのピークの下の面積に基づいている。標準曲線に含まれる最も低い値は０．１１５μｇであった。
【０１０９】
実施例９
ＦＡＳＴｌａｂ試験
化合物１のＳ−エナンチオマーの幾つかのバッチを生産するためにＦＡＳＴｌａｂプロセスを実施した。ＧＥ  ＰＥＴｒａｃｅサイクロトロンで（Ｈ218Ｏから）得られた８０ＧＢｑまでの［18Ｆ］フッ化物をＦＡＳＴＬａｂ合成器（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に導入し、ＱＭＡカートリッジ上にトラップした。ほぼ４７５μｌの溶出溶液（ＫＨＣＯ３＋ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ、ＭｅＣＮ／水（８０／２０ｖ／ｖ中）を使用して、［18Ｆ］フッ化物をＱＭＡカートリッジから反応容器中に溶出した。次に、反応容器中の物質を１２０℃で９分間乾燥した後、１．６ｍＬのＭｅＣＮに溶解した４．０ｍｇの化合物１ａを反応容器に移した。標識化は１００℃で６分間行った。
【０１１０】
各々の場合に、標識化の後、反応混合物を、ＦＡＳＴｌａｂカセット上でその場でコンディショニングされた連続する２つの９００ｍｇのＷａｔｅｒｓ  ｔＣ１８  ＳＰＥカートリッジの第１のものに適用し、２２ｍＬの４０％ＥｔＯＨ、続いて１０ｍＬの３５％ＥｔＯＨからなる第１の溶媒系と、３．５ｍＬの５５％ＥｔＯＨ及び３．５ｍＬの水からなる第２の溶媒系とを用いてＳＰＥ精製プロセスを実施した。
【０１１１】
図１は、実施した試験の詳細、例えば初期活性、合成の未補正（ＵＥＯＳ）収率、放射能濃度（ＲＡＣ）、放射化学濃度（ＲＣＰ）、並びにＳＰＥプロセスで分離された各々の化合物（全てＳ−エナンチオマー化合物）の量を提供する。９５％を超えるＲＣＰ値が常に達成された。
【図１】
2014506874.tif 000027
【国際調査報告】
2014506874.tif 000028
2014506874.tif 000029