(57)【要約】本発明は、他の疾患または病状に関連するバイオマーカーのスクリーニングにおいて有用である。疾患および病状は、神経疾患、自己免疫疾患、および癌のほか、抗体または他の特徴的なタンパク質などのバイオマーカーまたは疾患または疾患の進行に関連したバイオマーカーを有する他の疾患および病状にも及ぶ。適切な実験条件の下で、本明細書に列強された処理にしたがって、本発明の大型リガンドライブラリーを体液で直接利用し、より少ない支持構成要素（例えば、約１００，０００以下）を使用する必要なしに、あるいは体液をスクリーニングする前にペプトイドまたはリガンドをマイクロアレイに移す必要なしに、マーカーをスクリーニングできる。さらに、特定細胞表面マーカーに特に関連する細胞ベース受容体に関するスクリーニングにも、リガンドライブラリーを使用してもよい。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
バイオマーカーに関して複合体液をスクリーニングする方法であって、
（ａ）支持体を複数含み、かつ少なくとも１つのリガンドが該支持体に結合しているランダムリガンドライブラリーを提供すること；
（ｂ）前記リガンド結合部位を有する対照複合体液にランダムリガンドライブラリーを曝すこと；
（ｃ）精製リガンドライブラリーを形成するために、結合したリガンド結合部位を有する支持体すべてを取り除くこと；
（ｄ）バイオマーカーを有する非対照複合体液に対して精製リガンドライブラリーをスクリーニングすること；
（ｅ）結合したバイオマーカーを有するリガンドの検出を可能にするために、検出試薬またはシステムにステップ（ｄ）で作られた溶液を曝すこと、および必要に応じて
（ｆ）バイオマーカーに結合したリガンドを同定することを含む、方法。
【請求項２】
前記ランダムリガンドライブラリーがステップ（ｂ）の前に前処理される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記リガンドがペプチド、炭水化物、核酸オリゴマー、ペプトイド、α置換ペプトイド、または小分子から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記複合体液が動物に由来する、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記複合体液が血清または血漿を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
血清または血漿が希釈される、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記血清が約５００μｇ／ｍＬ〜約１μｇ／ｍＬの濃度範囲に希釈される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記精製リガンドライブラリーが１回のスクリーニングあたり約０．２〜２．０グラムを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記疾患関連バイオマーカーがタンパク質または細胞表面受容体から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記疾患関連バイオマーカーが抗体から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記検出試薬が標識二次抗体から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記ランダムリガンドライブラリーが約５００，０００〜約１５０，０００，０００の支持体および約５００，０００〜約１５０，０００，０００のリガンドを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記支持体とランダムリガンドの間にＰＥＧリンカーが存在する、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記ＰＥＧリンカーが１０モノマー単位未満である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記支持体がビーズまたは樹脂である、請求項２に記載の方法。
【請求項１６】
前記ビーズがｔｅｎｔａｇｅｌビーズである、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記ｔｅｎｔａｇｅｌビーズが約５〜約１，０００ミクロンである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
リガンドを有するｔｅｎｔａｇｅｌビーズが、膨張ステップにビーズを曝すことを含む処理ステップで前処理される、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記疾患が心臓血管疾患、自己免疫疾患、癌、または神経疾患から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項２０】
前記疾患または病状が炎症性疾患、代謝性疾患または異常、または感染症から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項２１】
前記バイオマーカーが化学的毒素または環境汚染物質に関連している、請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
疾病関連バイオマーカーに関して複合体液をスクリーニングする方法であって、  
（ａ）支持体を複数含み、かつリガンドが該支持体に結合している大型のランダムリガンドライブラリーを提供すること；
（ｂ）リガンド結合部位を有する健康な正常対照複合体液にランダムリガンドライブラリーを曝すこと；
（ｃ）精製リガンドライブラリーを形成するために、結合したリガンド結合部位を有する支持体すべてを取り除くこと；
（ｄ）疾病関連バイオマーカーを有する非対照複合体液に精製リガンドライブラリーを曝すこと；
（ｅ）結合した疾病関連バイオマーカーを有するリガンドを検出すること；および
（ｆ）結合した疾病関連バイオマーカーを有するリガンドを同定すること；および、必要に応じて
（ｇ）疾病関連バイオマーカーを精製および／または特徴付けすることを含む、方法。
【請求項２３】
疾病関連バイオマーカーに関して高親和性リガンドをスクリーニングする方法であって、
（ａ）支持体を複数含み、かつリガンドが該支持体に結合している大型のランダムリガンドライブラリーを提供すること；
（ｂ）リガンド結合部位を有する健康な正常対照複合体液にランダムリガンドライブラリーを曝すこと；
（ｃ）精製リガンドライブラリーを形成するために、結合したリガンド結合部位を有する支持体を取り除くこと；
（ｄ）疾病関連バイオマーカーを有する非対照複合体液に精製リガンドライブラリーを曝すこと；
（ｅ）結合した疾病関連バイオマーカーを有するリガンドを検出することを含む、方法。
【請求項２４】
前記大型のランダムリガンドライブラリーが、結合したリガンドを有する約１５０，０００〜約１５０，０００，０００の支持体を含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記複合体液が約１，０００μｇ／ｍＬ〜約１μｇ／ｍＬの濃度範囲に希釈される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
バイオマーカーに結合した異なる検出されたリガンドの数が約５〜約１００に及ぶ、請求項２３に記載の方法。
【請求項２７】
疾病関連バイオマーカーに関して高親和性リガンドを同定する方法であって、
（ａ）ビーズを複数含み、かつリガンドが該ビーズに結合している大型のランダムリガンドライブラリーを提供すること；
（ｂ）リガンド結合部位を有する正常対照複合体液にランダムリガンドライブラリーを曝すこと；
（ｃ）精製リガンドライブラリーを形成するために、結合したリガンド結合部位を有するビーズを取り除くこと；
（ｄ）疾病関連バイオマーカーを有する非対照複合体液に精製リガンドライブラリーを曝すこと；
（ｅ）結合した疾病関連バイオマーカーを有するリガンドを検出すること；および  
（ｆ）結合した疾病関連バイオマーカーを有するリガンドを同定することを含む、方法。
【請求項２８】
複合体液をスクリーニングするためのランダムリガンドライブラリーであって、
支持体上に下記の式１で表される化合物を含む、ランダムリガンドライブラリー。
【化１】
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式中、
Ｒ１は電子が豊富なアミノ酸側鎖Ｙから選択され；
Ｒ２はＨから選択され；
Ｒ３〜Ｒ６は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＳＣＨ３、−Ｃ０−Ｃ６アルキルＣ２−Ｃ６アルケニル、−Ｃ０−Ｃ６アルキルＣ２−Ｃ６アルキニル、−Ｃ１−Ｃ６  ＣＯＯＨ、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＯＨ、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＮ（Ｒ）２、−Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルアリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＮＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルシクロアミドからなる群から選択され；
アリール及びヘテロアリール基は、互いに独立して、−ＯＨ、Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ、−ＯＣＨ３、−ＳＯ２ＮＨ２、または−Ｏ−ＣＨ２−Ｏ−で置換されてもよい。
【請求項２９】
請求項２８に記載の、複合体液をスクリーニングするためのランダムリガンドライブラリーであって、
下記の（Ａ）〜（Ｅ）の群から選択される反応物の使用を含む処理によって生成された、下記の式１で表される化合物を支持体上に含むランダムリガンドライブラリー。
（Ａ）フルフリルアミン；３，４−ジメトキシエタノールアミン；ベンジルアミン；Ｎ−（２−アミノエチル）アセトアミド；Ｎ−（３−アミノプロピル）−２−ピロリジノン；エタノールアミン；グリシン；ジアミノブタン；アリルキルアミン；ピペロニルアミン；メチルベンジルアミン；イソブチルアミン；４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド、またはシクロヘキシルアミン；または
（Ｂ）メトキシエチルアミン；ピペロニルアミン；シクロヘキシルアミン；ジアミノブタン；メチルベンジルアミン；イソブチルアミン；フルフリルアミンまたは４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド；または
（Ｃ）フルフリルアミン、エタノールアミン；グリシン；ジアミノブタン；アリルアミン；ピペロニルアミン；メチルベンジルアミン；イソブチルアミンまたは４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド；または
（Ｄ）フルフリルアミン、Ｎ−（２−アミノエチル）アセトアミド；Ｎ−（３−アミノエチル）−２−ピロリジノン；エタノールアミン；グリシン；ジアミノブタン；アリルアミン；ピペロニルアミン；メチルベンジルアミン；イソブチルアミン；４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド；または
（Ｅ）システイン、グリシン、アリルアミン、エタノールアミン、イソブチルアミン、メチルベンジルアミン、ピペロニルアミン、メチオニン、シクロヘキシルアミン、３，４−ジメトキシフェネチルアミン、ベンジルアミン、Ｎ−（２−アミノエチル）アセトアミド、Ｎ−（３−アミノプロピル）−２−ピロリドン、４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド、およびフルフリルアミン。
【化１】
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式中、
Ｒ１は、−（Ｃ１−Ｃ６）ＳＣＨ３からなる群から選択され；
Ｒ２はＨから選択され；
Ｒ３およびＲ５は、互いに独立して、Ｈ、−Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＳＣＨ３、−Ｃ０−Ｃ６アルキルＣ２−Ｃ６アルケニル、−Ｃ０−Ｃ６アルキルＣ２−Ｃ６アルキニル、−Ｃ１−Ｃ６ＣＯＯＨ、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＯＨ、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＮ（Ｒ）２、−Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルアリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＮＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルシクロアミドからなる群から選択され、ここで、アリールまたはヘテロアリール基のいずれも、独立して、−ＯＨ、Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ、−ＯＣＨ３、−ＳＯ２ＮＨ２、または−Ｏ−ＣＨ２−Ｏ−で置換されてもよく；
Ｒ４は、フルフリルまたは−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）ＮＲ７Ｒ８を含む群から選択され、
Ｒ６は、Ｈ、１−イル−アリル、１−イル−２−ヒドロキシエチル、イソブチル、１−イル−ｎ−ブチルアミン、メチルベンジル、ピペロニル、シロヘキシル、１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル、ベンジル、１−イル−２−（アセトアミド）エチル、１−イル−３−２−ピロリジノン、１−イル−２−（４−ベンゼンスルホンアミド）エチル、またはフルフリルからなる群から選択され；
ｎは、３〜１１である。
【請求項３０】
約２００，０００〜約１５０，０００，０００の異なるリガンドを含む、請求項２９に記載のリガンドライブラリー。
【請求項３１】
前記支持体がビーズまたは樹脂から選択される、請求項３０に記載のリガンドライブラリー。
【請求項３２】
前記ビーズまたは樹脂が１０モノマー単位未満のＰＥＧリンカーを含む、請求項３１に記載のリガンドライブラリー。
【請求項３３】
下記の式Ｘで表される化合物。
【化２】
2014515739.tif 000044
式中、
Ｒ１は電子が豊富なアミノ酸側鎖Ｙから選択され；
Ｒ２はＨから選択され； 
Ｒ３〜Ｒ６は、互いに独立して、Ｈ、−Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＳＣＨ３、−Ｃ０−Ｃ６アルキルＣ２−Ｃ６アルケニル、−Ｃ０−Ｃ６アルキルＣ２−Ｃ６アルキニル、−Ｃ１−Ｃ６ＣＯＯＨ、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＯＨ、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＮ（Ｒ）２、−Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルアリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＮＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルシクロアミドからなる群から選択され、ここで、アリールまたはヘテロアリール基のいずれも、独立して、−ＯＨ、Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ、−ＯＣＨ３、−ＳＯ２ＮＨ２、または−Ｏ−ＣＨ２−Ｏ−で置換されてもよく；
ｎは、３〜１０である。
【請求項３４】
Ｒ４が−ｎ−ブチルアミンから選択される、請求項３３に記載の化合物。
【請求項３５】
Ｒ１が−ＣＨ２ＣＨ２ＳＣＨ３または−ＣＨ２ＳＨから選択される、請求項３４に記載の化合物。
【請求項３６】
下記の式Ｉａで表される化合物、並びにその薬学的に許容される塩。
【化３】
2014515739.tif 000045
式中、
（ａ）Ｒ９はｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｂ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２，２−ジメチルエチル（イソブチル）；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｃ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｄ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｅ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｆ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソプロピル；Ｒ１２はイソプロピル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである；
（ｇ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｈ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｉ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｊ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｋ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０はイソブチル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｌ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｍ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はフルフリルであり、およびＲ１６はフルフリルである；
（ｎ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はフルフリル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はフルフリルである；
（ｏ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−２−メトキシエチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｐ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｑ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｒ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｓ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−メトキシエチルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｔ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はイソブチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｕ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２はイソブチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｖ）Ｒ９はイソブチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｗ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０はイソブチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５は１−イル−２−メトキシエチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｘ）Ｒ９はフルフリル；Ｒ１０はフルフリル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｙ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｚ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ａａ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである；
（ｂｂ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はイソブチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｃｃ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｄｄ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｅｅ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｆｆ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｇｇ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｈｈ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｉｉ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はフルフリル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はフルフリル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｊｊ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−メトキシエチルであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｋｋ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｌｌ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｍｍ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｎｎ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｏｏ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はピペロニル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｐｐ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はメチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｑｑ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はフルフリル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はイソブチル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｒｒ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２はイソブチル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである；あるいは
（ｓｓ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６はピペロニルである。
【請求項３７】
下記の式ＩＩで表される化合物、並びにその薬学的に許容される塩。
【化４】
2014515739.tif 000046
式中、
（ａ）Ｒ９はｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｂ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２，２−ジメチルエチル（イソブチル）；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｃ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｄ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｅ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｆ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソプロピル；Ｒ１２はイソプロピル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである；
（ｇ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｈ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｉ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｊ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｋ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０はイソブチル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｌ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｍ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はフルフリルであり、およびＲ１６はフルフリルである；
（ｎ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はフルフリル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はフルフリルである；
（ｏ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−２−メトキシエチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｐ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｑ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｒ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｓ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−メトキシエチルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｔ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はイソブチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｕ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２はイソブチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｖ）Ｒ９はイソブチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｗ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０はイソブチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５は１−イル−２−メトキシエチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｘ）Ｒ９はフルフリル；Ｒ１０はフルフリル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｙ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｚ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ａａ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである；
（ｂｂ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はイソブチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｃｃ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｄｄ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｅｅ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｆｆ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｇｇ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｈｈ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｉｉ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はフルフリル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はフルフリル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｊｊ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−メトキシエチルであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｋｋ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｌｌ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｍｍ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｎｎ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｏｏ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はピペロニル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｐｐ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はメチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｑｑ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はフルフリル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はイソブチル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｒｒ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２はイソブチル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである；あるいは
（ｓｓ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６はピペロニルである。
【請求項３８】
式ＩＩの前記化合物のＲ９〜Ｒ１６が下記の群から選択される、請求項３５に記載の化合物、並びにその薬学的に許容される塩。
式中、
（ａ）Ｒ９はｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｂ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２，２−ジメチルエチル（イソブチル）；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｃ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｄ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｅ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はピペロニルである；あるいは
（ｆ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソプロピル；Ｒ１２はイソプロピル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである。
【請求項３９】
アルツハイマー病を罹患している患者またはアルツハイマー病が疑われる患者の複合体液中の疾患関連バイオマーカーの存在をスクリーニングするスクリーニングキットであって、請求項３７に記載の少なくとも１つのペプトイドと、検出プラットフォームとを含む、スクリーニングキット。
【請求項４０】
前記キットがビーズベースプラットフォームまたはマイクロアレイプラットフォームまたはＥＬＩＳＡプラットフォームを含む、請求項３９に記載のスクリーニングキット。
【請求項４１】
前記ビーズベースプラットフォームがＴｅｎｔａＧｅｌプラットフォームまたはＬｕｍｉｎｅｘプラットフォームから選択される、請求項４０に記載のスクリーニングキット。
【請求項４２】
前記スクリーニング溶液中のペプトイドの濃度範囲が０．１ｍＭ〜約２０ｍＭに及ぶ、請求項４０に記載のスクリーニングキット。
【請求項４３】
前記複合体液が複合体液／希釈液で約１：１００〜約１：５０，０００の範囲に希釈される、請求項４０に記載のスクリーニングキット。
【請求項４４】
前記複合体液が希釈液で約１０〜約２００μｇ／ｍＬの濃度範囲に希釈される、請求項４１に記載のスクリーニングキット。
【請求項４５】
前記ＴｅｎｔａＧｅｌビーズが約１０μｍ〜５０μｍのミクロン直径範囲を有する、請求項４４に記載のスクリーニングキット。
【請求項４６】
前記ＴｅｎｔａＧｅｌビーズが、ペプトイドに結合したＰＥＧリンカーを有する、請求項４５に記載のスクリーニングキット。
【請求項４７】
請求項３７に記載の少なくとも１つのペプトイドとともに複合体液を含む複合体液中のアルツハイマー病に関連したバイオマーカーの有無をスクリーニングし、および複合体液中のバイオマーカーの結合の有無を検出する方法。
【請求項４８】
下記の式ＩＩａで表される化合物、並びにその薬学的に許容される塩。
【化５】
2014515739.tif 000047
式中、
（ｍ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｎ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はイソブチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｏ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はイソブチル；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｐ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｑ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｒ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｓ）Ｒ９はフルフリル；Ｒ１０はフルフリル；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｔ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｕ）Ｒ９はイソブチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｖ）Ｒ９はイソブチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｗ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はイソブチルである；あるいは
（ｌ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである。
【請求項４９】
下記の式ＩＩで表される化合物、並びにその薬学的に許容される塩。
【化４】
2014515739.tif 000048
式中、
（ｍ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｎ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はイソブチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｏ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はイソブチル；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｐ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｑ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｒ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｓ）Ｒ９はフルフリル；Ｒ１０はフルフリル；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｔ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｕ）Ｒ９はイソブチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｖ）Ｒ９はイソブチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｗ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はイソブチルである；あるいは
（ｘ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである。
【請求項５０】
下記の式ＩＩＩａで表される化合物、並びにその薬学的に許容される塩。
【化６】
2014515739.tif 000049
式中、
（ａ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｂ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−アリル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｃ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｄ）Ｒ９はイソブチル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−アリル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−アリルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｅ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はイソブチル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｆ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−ヒドロキシエチルである；
（ｇ）Ｒ９は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｈ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｉ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−アリル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｊ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｋ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｌ）Ｒ９は１−イル−アリル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｍ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；あるいは
（ｎ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−２−ヒドロキシエチルである。
【請求項５１】
下記の式ＩＩで表される化合物、並びにその薬学的に許容される塩。
【化４】
2014515739.tif 000050
式中、
（ａ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｂ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−アリル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｃ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｄ）Ｒ９はイソブチル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−アリル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−アリルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｅ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はイソブチル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｆ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−ヒドロキシエチルである；
（ｇ）Ｒ９は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｈ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｉ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−アリル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｊ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｋ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｌ）Ｒ９は１−イル−アリル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｍ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；あるいは
（ｎ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−２−ヒドロキシエチルである。
【請求項５２】
請求項３７に記載の少なくとも１つのペプトイドを含む膵臓癌であるか、膵臓癌が疑われる患者複合体液中の疾患関連バイオマーカーの存在をスクリーニングするスクリーニングキット、および検出プラットフォーム。
【請求項５３】
前記キットがビーズベースプラットフォームまたはマイクロアレイプラットフォームまたはＥＬＩＳＡプラットフォームを含む、請求項５２に記載のスクリーニングキット。
【請求項５４】
前記ビーズベースプラットフォームがＴｅｎｔａＧｅｌプラットフォームまたはＬｕｍｉｎｅｘプラットフォームから選択される、請求項５３に記載のスクリーニングキット。
【請求項５５】
前記スクリーニング溶液中のペプトイドの濃度範囲が０．１ｍＭ〜約２０ｍＭに及ぶ、請求項５３に記載のスクリーニングキット。
【請求項５６】
前記複合体液が複合体液／希釈液で約１：１００〜約１：５０，０００の範囲に希釈される、請求項５３に記載のスクリーニングキット。
【請求項５７】
前記複合体液が希釈液で約１０〜約２００μｇ／ｍＬの濃度範囲に希釈される、請求項５４に記載のスクリーニングキット。
【請求項５８】
前記ＴｅｎｔａＧｅｌビーズが約１０μｍ〜５０μｍのミクロン直径範囲を有する、請求項５４に記載のスクリーニングキット。
【請求項５９】
前記ＴｅｎｔａＧｅｌビーズが、ペプトイドに結合したＰＥＧリンカーを有する、請求項５４に記載のスクリーニングキット。
【請求項６０】
請求項４９または５１に記載の少なくとも１つのペプトイドとともに複合体液を含む複合体液中の膵臓癌に関連したバイオマーカーの有無をスクリーニングし、および複合体液中のバイオマーカーの結合の有無を検出する方法。
【請求項６１】
下記の式ＩＩＩａで表される化合物、並びにその薬学的に許容される塩。
【化６】
2014515739.tif 000051
式中、
（ａ）Ｒ９は１−イル−アリル；Ｒ１０は１−イル−３Ｎ−（２−ピロリジノン）プロピル；Ｒ１１は酢酸；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−アリルである；
（ｂ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル；Ｒ１３はベンジル；Ｒ１４はピペロニル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである；
（ｃ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−アリル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はベンジル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｄ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はベンジルである；
（ｅ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３はベンジル；Ｒ１４は１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｆ）Ｒ９は１−イル−アリル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｇ）Ｒ９は１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル；Ｒ１０はイソブチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｈ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；あるいは
（ｉ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はベンジル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである。
【請求項６２】
以下の式の化合物：
【化４】
2014515739.tif 000052
式中、式ＩＩの化合物中のＲ９〜Ｒ１６は以下から選択される。すなわち、
（ａ）Ｒ９は１−イル−アリル；Ｒ１０は１−イル−３Ｎ−（２−ピロリジノン）プロピル；Ｒ１１は酢酸；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−アリルである；
（ｂ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル；Ｒ１３はベンジル；Ｒ１４はピペロニル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである；
（ｃ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−アリル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はベンジル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｄ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はベンジルである；
（ｅ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３はベンジル；Ｒ１４は１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｆ）Ｒ９は１−イル−アリル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｇ）Ｒ９は１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル；Ｒ１０はイソブチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｈ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｉ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はベンジル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
並びにその薬学的に許容される塩。
【請求項６３】
請求項３７に記載の少なくとも１つのペプトイドを含むＳＬＥ（狼瘡）であるか、ＳＬＥが疑われる患者複合体液中の疾患関連バイオマーカーの存在をスクリーニングするスクリーニングキット、および検出プラットフォーム。
【請求項６４】
前記キットがビーズベースプラットフォームまたはマイクロアレイプラットフォームまたはＥＬＩＳＡプラットフォームを含む、請求項６３に記載のスクリーニングキット。
【請求項６５】
前記ビーズベースプラットフォームがＴｅｎｔａＧｅｌプラットフォームまたはＬｕｍｉｎｅｘプラットフォームから選択される、請求項６４に記載のスクリーニングキット。
【請求項６６】
前記スクリーニング溶液中のペプトイドの濃度範囲が０．１ｍＭ〜約２０ｍＭに及ぶ、請求項６４に記載のスクリーニングキット。
【請求項６７】
前記複合体液が複合体液／希釈液で約１：１００〜約１：５０，０００の範囲に希釈される、請求項６４に記載のスクリーニングキット。
【請求項６８】
前記複合体液が希釈液で約１０〜約２００μｇ／ｍＬの濃度範囲に希釈される、請求項６５に記載のスクリーニングキット。
【請求項６９】
前記ＴｅｎｔａＧｅｌビーズが約１０μｍ〜５０μｍのミクロン直径範囲を有する、請求項６８に記載のスクリーニングキット。
【請求項７０】
前記ＴｅｎｔａＧｅｌビーズが、ペプトイドに結合したＰＥＧリンカーを有する、請求項６８に記載のスクリーニングキット。
【請求項７１】
請求項３７に記載の少なくとも１つのペプトイドとともに複合体液を含む複合体液中のＳＬＥ（狼瘡）に関連したバイオマーカーの有無をスクリーニングし、および複合体液中のバイオマーカーの結合の有無を検出する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本出願の請求項は、それぞれ２０１１年３月２４日、２０１１年５月３１日、および２０１２年１月６日に出願された米国仮特許出願特許第６１／４６７，２５６号、第６１／４９１，７１７号、および第６１／５８３，８８１号の優先権を主張するものであり、それらの全体を参照により本明細書に援用する。
【０００２】
（技術分野）
本発明は、新規なスクリーニング方法論、並びにそれによって得られる診断用および治療用の製品に関する。より詳しくは、疾病関連バイオマーカーに関して生体試料をスクリーニングするために、小分子、ペプチド、ペプトイド、および／または他のオリゴマーの豊富な組み合わせを含む、新規かつ大きなビーズベースライブラリーを使用する。本発明によって、多くの疾病での疾病関連抗体を見つけ出し、そして抗体特異的分子をさらに見つけ出すために、血漿、血清、または他の体液の迅速かつ直接的なスクリーニングを可能にする。このスクリーニングは、上記疾病に関する診断ツールまたは治療法としての機能を果たすことができる。そのような抗体特異的分子を含む診断キットは、自己免疫疾患、中枢神経系障害、および癌などの抗体または免疫原性成分を有するほぼすべての病状に対して、調製することができる。そのようなキットは、ほぼすべての公知の支持システムがペプチドまたは他のリガンド結合部位などの抗体特異的分子を支持または結合できるという条件で、そのようシステムから作ることができる。同様に、ＥＬＩＳＡまたは他の既知検出手段を含むあらゆる既知検出法を使用して、推定ヒットを見つけ出す初期スクリーニングに引き続いて、および／または、診断分析でそのような推定ヒットを用いた診断スクリーニングの後に、抗体を検出できる。疾病関連マーカーを発現している細胞と、そのようなマーカーを発現していない正常細胞とを区別するために、細胞表面上のタンパク質および／または他の生体分子を含む他のバイオマーカーに関してスクリーニングするためにも、そのような方法を使用することができる。
【背景技術】
【０００３】
米国特許公報第２００７／０００３９５４号は、小分子マイクロアレイを用いたタンパク質および抗体プロファイリングを開示する。本出願はリガンドを開示する。当該リガンドは、合成分子の配列にリガンドが配置されるリガンド結合部位に結合し、バイオマーカーおよび分子指紋に関するスクリーニングに使用される。本明細書で述べられる具体的な配列としては、例えば、上記配列に結合した７６８０種類の化合物を有するペプチドマイクロアレイが挙げられる。その開示では、体液をスクリーニングするために、マイクロアレイ上にアドレス指定可能な場所を持つマイクロアレイに後で移されるペプチドを作る初期手段としてビーズベースライブラリーを利用した。スクリーニングすることにより、複合生体混合物中の特定タンパク質に関する配列上に、特有のバターンまたは分子指紋を生じる。参照により援用される米国特許出願第２０１０／０３０３８０５号は、中枢神経系障害に関連するバイオマーカーに関する体液のスクリーニングで有用な特定のペプチドおよび診断用配列を開示している。本明細書で配列を形成するために利用される本明細書で開示される特定モノマーは、ライブラリーがより多くのビーズ／ペプチドまたはビーズ／リガンド、例えば１００，０００〜１５０，０００，０００に拡張されるという条件で、本発明の新規なスクリーニング法で利用される場合もある。
【０００４】
本発明では、有意に大きなビーズベースライブラリー（抗体バイオマーカーに関するマイクロアレイベーススクリーニングまたは細胞に関するビーズベーススクリーニングと比べて）は、正しい条件の下で、疾病関連バイオマーカーのほかそのようなリガンド結合部位に結合するリガンドの有意に大きなプールを見つけ出すために、複合生体試料の直接的スクリーニングに使用できることが分かった。当該有意に大きなプールとしては、診断ツールのほかに可能性がある治療法としての機能を果たす有意に改善された数の高親和性リガンドが挙げられる。当該手法によって、まずマイクロアレイまたは同様のアドレス指定可能な支持システムを作る必要がなくなるため、特定の複合体液に関するスクリーニング速度の有意な改善も可能になる。スクリーニングが行われると、スクリーニングで発見されたヒットを含む診断用配列を含むマイクロアレイまたは他のシステムを製造でき、本発明の範囲内に含まれる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は、リガンドの大きなランダムビーズベースライブラリーを含む組成物または複数の「組成物」に関する。対象疾患または病状に関してスクリーニングするために、いずれかの「組成物」を形成するライブラリーまたは複数のライブラリーを選択し、各ライブラリーを使用して異なる疾患または病状のスクリーニングを行ってもよい。あるいは、同じライブラリーを複数の病態または病状のスクリーニングに使用してもよい。用語「ランダム」には、オリゴマー鎖に特定のモノマーを形成する一置換アミン上の豊富な組み合わせの側鎖を有するライブラリーが含まれる。アミン出発物質上のＲ基のこのような組み合わせは、官能性／溶解性などの特定モノマーの化学的および／または物理的特徴の一部が対象オリゴマーの望ましい特徴または特性の一部であっても、「ランダム」である。血漿ベーススクリーニングまたは血清スクリーニングでは、例えば、ビーズに結合した特定のリガンドが、溶液中で、抗体などのリガンド結合部位との相互作用を促進する溶解特性を有することが望まれる。さらに、オリゴマーの大きさも、対象部分が例えば抗体またはタンパク質である場合にリガンド結合部位に結合できるリガンドのライブラリーを形成する時に考慮される特徴である。ビーズベースライブラリーはビーズまたは同様の支持構造（すなわち、高分子樹脂）を含み、当該ビーズまたは同様の支持構造は、小分子、ペプチド、ペプトイド、多糖、または核酸または修飾された核酸部分を含む他のオリゴマーベース化合物からなる群から選択される当該ビーズまたは同様の支持構造に（またはそのような樹脂上のリンカーに）結合したリガンドを有する。好適な実施形態では、ビーズベースライブラリーはペプチドを含む。該ペプチドは、オリゴマーを形成するために共有結合したモノマー５〜１５個のモノマー単位を有するオリゴマーである。オリゴマーは、支持体に、またはオリゴマーを支持体に結合させるリンカーに結合したオリゴマーの末端に結合した追加部分を有してもよい。オリゴマーペプトイドは、例えば、サブモノマー合成法と組み合わされた典型的な固体ペプチド合成を用いて作成され、合成で利用される一置換アミンまたはグリシンα炭素置換基に応じてアミド窒素またはα炭素上の置換基が幅広い部分から選択される一置換アミドを有するグリシンまたは炭素置換グリシン様部分を含む。一般的に、ペプチドライブラリーは、例えばＫｏｄａｄｅｋおよびＲｅｄｄｙ、Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  Ｓｅｐ．６，２００５，ｖｏｌｕｍｅ  １０２，  Ｎｏ．３６で述べられたように、あるいは本明細書で述べられたように調製してもよい。上記で参照されるように、一般的に一置換アミンプールは幅広いモノマーから選択される。ライブラリーの大きさは、ビーズあたり２００，０００〜１５０，０００，０００の異なるリガンドを有する約２００，０００〜１５０，０００，０００のビーズに及ぶことができる。あるいは、ビーズまたは支持体の大きさに応じて、各支持体またはビーズはビーズ／支持体あたり１つ以上のリガンドを有してもよく、リガンドは同じリガンドでも異なるリガンドでもよい。
【０００６】
ライブラリーを構成するリガンドを有するビーズ／支持体は本発明のプロセスでさらに必要とされる。本発明は、少なくとも１つのビーズベースライブラリーで生体対照試料および生体罹患試料をスクリーニングして、当該スクリーニングを用いて疾病関連バイオマーカーを見つけ出すステップを含む、疾病関連バイオマーカーに関して体液をスクリーニングするためのプロセスを含む。本発明は、疾病関連バイオマーカーの存在に関して複合生体試料をスクリーニングするプロセスを含み、バイオマーカーは、試料を少なくとも１つのリガンドが疾病関連バイオマーカーに検出可能に結合する複数のリガンド担持支持体に曝すことを含む。本発明はさらに、（１）非特定リガンドヒットを特定および除去するために、対照試料をランダムなリガンドライブラリーに曝すステップと、（２）罹患試料中の疾病関連バイオマーカーに結合するリガンドを特定するために、罹患試料を残りのリガンドライブラリーに曝すステップとを含む、疾病関連バイオマーカーに関して複合生体試料をスクリーニングする方法を含む。特に、本発明は疾病関連バイオマーカーに関して生体試料をスクリーニングするプロセスを含み、これには（１）リガンド担持ビーズ（ＬＢＢ）ライブラリーを、処理済みＬＬＢを形成するのに適した溶剤で前処理すること；（２）処理済みＬＬＢに、対照試料リガンド結合部位を有する正常対照（ＮＣ）生体試料を曝すこと；（３）対照試料からの処理済みＬＬＢをＤｙｎａｂｅａｄスクリーニング（鉄標識抗ＩｇＧ抗体）に曝し、ヒットを取り除くこと；（４）残りのＬＢＢライブラリーを洗浄し、量子ドット標識二次抗ＩｇＧ抗体を用いてライブラリーを、残りの対照試料リガンド結合部位を有するＮＣ生体試料に曝し、ヒットを取り除くこと；（５）残りのＬＢＢライブラリーを洗浄し、当該ライブラリーを、疾患を有する患者からの生体試料に曝すこと；（６）罹患試料からの処理済みＬＢＢをＤｙｎａｂｅａｄスクリーニングに曝し、ヒットを取り除くこと；（７）残りのＬＢＢを洗浄し、当該ライブラリーを、疾病を有する患者からの生体試料に曝すこと；（８）量子ドット標識二次抗ＩｇＧ抗体を洗浄したＬＢＢに添加し、ステップ（６）からＤｙｎａｂｅａｄを洗浄した後、ＬＢＢ上のリガンドに結合した疾病関連リガンド結合部を特定し、ステップ（６）からのＤｙｎａｂｅａｄヒットを用いてステップ（８）を繰り返し、Ｄｙｎａｂｅａｄ  Ｑｄｏｔヒットを特定することを含む。好適な実施形態では、ＬＢＢの調製でＴｅｎｔａｇｅｌビーズ（組み込みＰＥＧリンカーを有する）が利用される。異なるリンカーおよび／またはオプションのリンカーを有する代替ビーズおよび／または粒子も、代替検出手段と一緒に利用してもよい。ビーズは、例えばＬｕｍｉｎｅｘビーズから選択してもよい。好適なプロセスでは、Ｑｄｏｔヒットを確認する初期検証ステップを除き、Ｄｙｎａｂｅａｄステップを利用しない。
【０００７】
上記で特定されたステップごとに分離されたヒットのいずかまたはすべてを、さらに特徴付け、化学的に特定し、同じ部分またはその修正版として合成してもよい。特に、好適な特徴付けは、ステップ（８）上でＬＢＢ上のリガンドを取得し、バイオマーカーまたは疾病関連リガンド結合部位に結合した特定オリゴマーまたはリガンドの配列決定を行うことに関する。好適な実施形態では、リガンドはペプトイドであり、該ペプトイドを配列決定することで、推定診断用プローブの同一性を同定および／または確認または再確認する。この推定診断用プローブは、診断キットに、あるいは特定疾患または病状に応じた治療薬またはワクチン候補物質のための基準として、さらに利用できる、好適な実施形態では、リガンドヒットの配列決定および同定を行い、その後に、支持ベースの合成法を用いてさらに大規模な再合成または合成を行って、同定／配列決定済みリガンドを生成する。この場合、好適な合成リガンドとしては、例えば、樹脂／ビーズまたは支持体（または支持体上のリンカー）に結合される機能的リガンドとしてのシステインアミノ酸が挙げられ、当該アミノ酸は、例えば、ブロモ酢酸および特定配列リガンド（ペプトイドまたはα置換ペプトイド）用に選択したＲ基を含む置換アミンを含むサブモノマーでさらに処理される。システイン残基または他の類似アミノ酸残基はスルフヒドリル基をもたらし、これがスライドガラスまたは支持体上で求電子基と反応できる。別の方法では、初期ライブラリー形成において、そしてリンカーを含まないＴｅｎｔａｇｅｌビーズまたは樹脂上で、ペプトイドオリゴマーの合成後のビーズまたは樹脂からの開裂を可能にする最初のモノマーとしてメチオニンが使用される。樹脂またはビーズから開裂される時に、メチオニンはオリゴマーの一部を形成する。他方で、リンク樹脂は、正しい条件の下で、オリゴマー中の他のアミド結合も開裂させることなく、リンカーおよび樹脂からの分子の開裂を促進する開裂リンカーを有する。
【０００８】
本発明は、生体試料スクリーニング法で特定されたリガンド（またはその修飾版）を用いた診断キットも含む。特定スクリーニングの能力によって、そのような診断キットでさらに利用される多数の実際のヒットを迅速に同定する。この場合の用語「迅速な」は、複合体液を分析する前に、本プロセスによってマイクロアレイの複雑で不必要なステップを回避し、そのため、時間の有意な節約になることを意味する。さらに、本方法によって、マイクロアレイ上の少数に限られる代わりに、どの時点においても複合体液に対してさらに多くの分子をスクリーニングすることが可能になる。多数のヒットを見つけ出すことに加えて、発見したリガンドには、ビーズまたは粒子ベースの技術を用いて複合体液を直接的にスクリーニングまたは分析しなかった以前のスクリーニング法を用いて見つけ出した物に比べて有意に多数の高親和性結合体を含む。疾病または病状Ａに関するスクリーニングを行うための第１ペプトイド、および疾病または病状Ｂに関するスクリーニングを行うための少なくとも１つの追加ペプトイドを含む多重疾患プラットフォームに、そのようなリガンドを利用してもよい。
【０００９】
本発明の方法を用いて対象生物中の疾患関連抗体またはバイオマーカーの存在に関してスクリーニングできる疾患の範囲には、ほぼすべての疾患、およびすべての進行段階の疾患を含む。本発明は、ヒトおよび動物の疾患の診断および進行において有用である。スクリーニング中に発見および同定されたリガンドを含む診断キットは、ポイント・オブ・ケア診断スクリーニング用のビーズベース診断キットを含むことができ、および／またはより複合診断システムおよび／またはマイクロアレイなどのより複雑な支持システムに基づいた多重システムを含むことができる。さらに、初期スクリーニングで見つけ出されたペプトイド、α置換ペプトイド、またはリガンドで構成される診断配列を、特定の患者集団または亜集団における患者層別化および／または疾患進行を同定する、または同定で支援するために、臨床試験で使用してもよい。本明細書の一次および／または二次または三次スクリーニングから得られたそのようなデータによって、医薬品開発、並びに初期段階の疾患を含む疾患の段階または特定の段階のために特別に設計される医薬品を用いた亜集団および個人の患者ケアを加速できると想定される。同様に、バイオマーカープロファイル基づいて初期段階の疾患進行および／または疾患進行のすべての段階を同定するために、本明細書で発見されたリガンドによって得られた診断キットを使用してもよい。個人患者または患者グループに対して最も適切な医療を処方することにおいて医師を支援するために、そのような情報を使用できる。
【００１０】
本発明の他の特徴および利点は、以下の詳細説明の例および図から明らかになる。しかしながら、本発明の精神および範囲の中でのさまざまな変更および修正は本詳細説明から当業者にとって明らかになるため、本発明の好適な実施形態を示す詳細説明および具体例は図の手段のみで示されることを理解する必要がある。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
以下の図は本明細書の一部である。
【００１２】
【図１】図１は、アルツハイマー病の血清試料のスクリーニングに使用されるＴｅｎｔａｇｅｌビーズ（ＫＮ１Ｂ）ライブラリーの調製に関する基本的化学模式図を示す。Ａは、反応物質としてアミノ基を有するポリスチレンビーズから始まることを示す（ビーズと末端アミノ基の間にＰＥＧまたは同等物または代替リンカーを形成してもよい）。Ｂは、メチオニンとしてビーズ上の開始アミノ酸を示し、これはその後、Ｂで示される化合物を形成するために反応させられる。Ｃは、化合物のオリゴマーライブラリーを形成するために利用されるサブモノマー（単量体アミンおよびハロ酢酸）を示す。
【図２】図２は、アルツハイマー病の血清試料のスクリーニングに同様に使用されるＴｅｎｔａｇｅｌビーズ（ＪＣ３Ｂ）ライブラリーの調製に関する基本的化学模式図を示す。Ａは、反応物質としてアミノ基を有するポリスチレンビーズから始まることを示す（ビーズと末端アミノ基の間にＰＥＧまたは同等物または代替リンカーを形成してもよい）。Ｂは、メチオニンとしてビーズ上の開始アミノ酸を示し、これはその後、Ｂで示される化合物を形成するために反応させられる。Ｃは、化合物のオリゴマーライブラリーを形成するために利用されるサブモノマー（単量体アミンおよびハロ酢酸）を示す。ＪＣ３Ｂは、膵臓癌血清のスクリーニングにも使用された（データは示されず）。
【図３】図３は、アルツハイマー病の血清試料のスクリーニングに使用されるＴｅｎｔａｇｅｌビーズ（ＪＣ４Ｂ）ライブラリーの調製に関する基本的化学模式図を示す。Ａは、反応物質としてアミノ基を有するポリスチレンビーズから始まることを示す（ビーズと末端アミノ基の間にＰＥＧまたは同等物または代替リンカーを形成してもよい）。Ｂは、メチオニンとしてビーズ上の開始アミノ酸を示し、これはその後、Ｂで示される化合物を形成するために反応させられる。Ｃは、化合物のオリゴマーライブラリーを形成するために利用されるサブモノマー（単量体アミンおよびハロ酢酸）を示す。
【図４】図４は、アルツハイマー病の血清試料のスクリーニングに使用されるＴｅｎｔａｇｅｌビーズ（ＪＣ５Ｂ）ライブラリーの調製に関する基本的化学模式図を示す。Ａは、反応物質としてアミノ基を有するポリスチレンビーズから始まることを示す（ビーズと末端アミノ基の間にＰＥＧまたは同等物または代替リンカーを形成してもよい）。Ｂは、メチオニンとしてビーズ上の開始アミノ酸を示し、これはその後、Ｂで示される化合物を形成するために反応させられる。Ｃは、化合物のオリゴマーライブラリーを形成するために利用されるサブモノマー（単量体アミンおよびハロ酢酸）を示す。ＪＣ５Ｂモノマーは、イソブチルアミン、２−メトキシエチルアミン、ジアミノブタン、フルフリルアミン、シクロヘキシルアミン、Ｒ−メチルベンジルアミン、ピペロニルアミン、および４−（アミノエチル）ベンゼンスルホンアミドを含んだ。
【図５】図５は、血清試料のスクリーニングに使用されるＴｅｎｔａｇｅｌビーズ（ＪＣ７Ｂ）ライブラリーの調製に関する基本的化学模式図を示す。Ａは、反応物質としてアミノ基を有するポリスチレンビーズから始まることを示す（ビーズと末端アミノ基の間にＰＥＧまたは同等物または代替リンカーを形成してもよい）。Ｂは、メチオニンとしてビーズ上の開始アミノ酸を示し、これはその後、Ｂで示される化合物を形成するために反応させられる。Ｃは、化合物のオリゴマーライブラリーを形成するために利用されるサブモノマー（単量体アミンおよびハロ酢酸）を示す。
【図６】図６は、ペプトイドリガンドのビーズベースライブラリーを用いて複合生体試料をスクリーニングする本発明のプロセスを模式的に示す。
【図７】図７は、アルツハイマー病正常対照血清試料およびアルツハイマー病罹患血清試料に対してスクリーニングするために調製されたペプトイドライブラリー（ＪＣ３Ｂ）でのＱＤｏｔ添加後の正常対照（ＮＣ）Ｄｙｎａｂｅａｄヒットを示す。ヒットは取り出され、残りのリガンド結合ビーズは疾患ベーススクリーニングで使用された。
【図８】図８は、ＮＣヒットを取り除いた後のアルツハイマー病患者血液試料からの罹患血清のＴｅｎｔａｇｅｌスクリーニングを示す。ヒットは赤色で示され、ビーズにＰＥＧリンカーを通じて結合されたペプトイドに結合される血清中の疾病関連バイオマーカー（抗体）に結合したＱＤｏｔ二次抗体である。
【図９】図９は、ＳＤＳ洗浄およびＱＤＯＴ添加後の正常対照試料（ＮＣ  ０３００９３）を使用する再現性試験を示す。矢印は、配列に対してどのＮＣペプトイドヒットを摘出したかを示す。
【図１０】図１０は、ＳＤＳ洗浄およびＱＤＯＴ添加後の正常対照試料（ＮＣ  ０５００４７）を使用する再現性試験を示す。
【図１１】図１１は、ＳＤＳ洗浄およびＱＤＯＴ添加後の罹患試料を使用する再現性試験を示す。
【図１２Ａ】図１２は、ＪＣ３Ｂライブラリーによるアルツハイマー病スクリーニングから選択された推定ヒットのペプトイド配列を示す。Ｃ末端は紙面の右側で、Ｎ末端が左側である。
【図１２Ｂ】図１２は、ＪＣ３Ｂライブラリーによるアルツハイマー病スクリーニングから選択された推定ヒットのペプトイド配列を示す。Ｃ末端は紙面の右側で、Ｎ末端が左側である。
【図１３Ａ】図１３は、ＪＣ３Ｂライブラリーによるアルツハイマー病スクリーニングからの好適な高親和性ヒットの化学構造を示す。本例では、示された構造はシステイン残基を有し、予備スクリーニングで初期ヒットの構造を決定した後に再合成された。ＪＣ３Ｂライブラリーは類似物のペプトイドを含んだが、Ｃ末端にメチオニン残基を有し、システイン残基を有さなかった。
【図１３Ｂ】図１３は、ＪＣ３Ｂライブラリーによるアルツハイマー病スクリーニングからの好適な高親和性ヒットの化学構造を示す。本例では、示された構造はシステイン残基を有し、予備スクリーニングで初期ヒットの構造を決定した後に再合成された。ＪＣ３Ｂライブラリーは類似物のペプトイドを含んだが、Ｃ末端にメチオニン残基を有し、システイン残基を有さなかった。
【図１４】図１４は、溶液中の高親和性リガンド（ＡＤＴＧ１）とマイクロアレイ支持体上のＡＤＴＧ−１〜ＡＤＴＧ−４２の競合実験を示す。競合実験によって、溶液中のＡＤＴＧ１は、マイクロアレイ上のペプトイドＡＤＴＧ−１、ＡＤＴＧ−１４、ＡＤＴＧ−２４、ＡＤＴＧ−２５、ＡＤＴＧ−３１、ＡＤＴＧ−３５、およびＡＤＴＧ−４０に結合したであろう同じ抗体に結合したことが分かる。４組のペプトイドを見つけるためにペプトイドの各々に対して同様の実験を行った。これらのペプトイドは４つの異なるアルツハイマー病自己抗体に結合した（データは示さず）。
【図１５Ａ】図１５は、４群の異なるペプトイドを示し、アルツハイマー病スクリーニングでこれらのペプトイドは異なる自己抗体に結合する。図の各群は上に高親和性結合体を記載している。
【図１５Ｂ】図１５は、４群の異なるペプトイドを示し、アルツハイマー病スクリーニングでこれらのペプトイドは異なる自己抗体に結合する。図の各群は上に高親和性結合体を記載している。
【図１６Ａ】図１６ＡはＰ１ａａｇ１（ＪＣ３Ｂ−１）ペプトイドを用いる患者の集団に対するＡＤ試験データ（盲検）を示す。各ペプトイドは、マイクロアレイ上にある。
【図１６Ｂ】図１６ＢはＰ１ａａｇ２（ＪＣ３Ｂ−２１）ペプトイドを用いるＡＤ患者の同じ集団に対する試験データ（盲検）を示す。各ペプトイドは、マイクロアレイ上にある。
【図１７Ａ】図１７ＡはＰ１ａａｇ３（ＪＣ３Ｂ−７）ペプトイドを用いる患者の集団に対するＡＤ試験データ（盲検）を示す。各ペプトイドは、マイクロアレイ上にある。
【図１７Ｂ】図１７ＢはＰ１ａａｇ４（ＪＣ３Ｂ−５）を用いるＡＤ患者の同じ集団に対する試験データ（盲検）を示す。各ペプトイドは、マイクロアレイ上にある。
【図１８Ａ】図１８ＡはＰ１ａａｇ５（ＪＣ３Ｂ−Ｒ８）ペプトイドを用いる患者の集団に対するＡＤ試験データ（盲検）を示す。各ペプトイドは、マイクロアレイ上にある。
【図１８Ｂ】図１８ＢはＰ１ａａｇ６（ＪＣ３Ｂ−Ｒ１２）を用いるＡＤ患者の同じ集団に対する試験データ（盲検）を示す。各ペプトイドは、マイクロアレイ上にある。
【図１９Ａ】図１９Ａは、Ｐ１ａａｇ１〜６を用いて行われた試験に対して患者の同じ集団でのＡＤＰ２のマイクロアレイデータを示す。データは、同じ患者集団での以前同定したＡＤＰ２で達成した結果と新たに同定したＰ１ａａｇ４で達成した結果との明確な相関関係を示す。
【図１９Ｂ】図１９Ｂは、同じ一連の患者にＰ１ａａｇ４を用いた比較データを示す。データは、同じ患者集団での以前同定したＡＤＰ２で達成した結果と新たに同定したＰ１ａａｇ４で達成した結果との明確な相関関係を示す。
【図２０Ａ】図２０Ａは、Ｐ１ａａｇ１〜６を用いて行われた試験に対して患者の同じ集団でのＡＤＰ３のマイクロアレイデータを示す。データは、同じ患者集団での以前同定したＡＤＰ３で達成した結果と新たに同定したＰ１ａａｇ２で達成した結果との明確な相関関係を示す。
【図２０Ｂ】図２０Ｂは、同じ一連の患者にＰ１ａａｇ２を用いた比較データを示す。データは、同じ患者集団での以前同定したＡＤＰ３で達成した結果と新たに同定したＰ１ａａｇ２で達成した結果との明確な相関関係を示す。
【図２１】図２１は、４０μｇ／ｍＬでの罹患ＡＤ血清と正常対照（保存）の比較における、ＴｅｎｔａＧｅｌビーズ上のＰ１ａａｇ５（推定ヒット５またはＪＣ３Ｂ−Ｒ８）の検証を示す。
【図２２】Ａは、ＱＤｏｔ６５５およびＪＣ５Ｂライブラリーを用いた膵臓癌スクリーニングにおけるペプトイドヒットを示す。ＢおよびＣは、ＱＤｏｔ６５５を用いたヒットの再確認を示す（矢印はヒットを指し示す）。
【図２３】図２３は、膵臓ペプトイドヒットの検証を示し、ＱＤｏｔ６５５を用いた罹患血清添加および検出と、正常血清添加とを比較する。
【図２４】図２４は、ＡＤマーカーとＰＣマーカーを混ぜ合わせることによるヒット検証を示す。データから、膵臓癌血清（血清１）ではＰＣマーカーを検出した一方、ＡＤペプトイドビーズ上に検出可能な抗体がないことが分かる。
【図２５】図２５は、ＪＣ３Ｂライブラリーからの膵臓癌スクリーニングヒット配列を示す。
【図２６】図２６は、ＪＣ５Ｂライブラリーからの膵臓癌スクリーニングヒット配列を示す。
【図２７】図２７Ａ、Ｂ、およびＣは、ＳＬＥ（狼瘡）スクリーニングの結果を示す。Ａは正常対照であり、ＢおよびＣは２つの異なる群１および２からのＳＬＥ血清である。矢印はヒットを指し示す。
【図２８】図２８は、ＫＮ１ＢライブラリーからのＳＬＥヒットを示す。Ｃ末端は、表の右側である。
【図２９】図２９は、ペプトイドＫＮ１Ｂ−２０に対するヒット検証を示す。群１は、約０．３７４ｍｇ／ｍＬの濃度での保存罹患血清である（左の写真）（ヒットは、ビーズ上の赤色の色合いで示される）。非罹患保存血清（中央の写真）は、約０．３７８ｍｇ／ｍＬの濃度で提供され、一番右の写真は無血清対照を示す。
【図３０】図３０は、フルオレセインタグを用いたペプトイドの異なる濃度での２つの異なる結合法を用いた、ＥＬＩＳＡプレートに対するＳＬＥ（狼瘡）ペプトイドのうちの１つの結合／検出を示す。
【図３１】図３１は、さまざまな濃度の溶液中でのプレート結合型ＫＮ１Ｂ−２０−ビオチン−フルオレセインと遊離ＫＮ１Ｂ−２０−ビオチンの競合分析を示す。遊離ＫＮ１Ｂ−２０−ビオチンの濃度が結合型対遊離型の等モル濃度から増加するにつれて、信号の低下が生じる。
【図３２】図３２は、さまざまな濃度のペプトイドを有するＥＬＩＳＡプレートを示し、そして罹患血清（ＡＤ）（Ｐ列１）と正常対照血清（列３）の違いを明確に示す［１：２００の各ウェルを倍にして１：４００、１：８００、１：１，６００、１：３，２００、１：６，４００、１：１２，８００とした］。矢印は、１ＸＴＢＳＴバッファーでの１：８００希釈を指し示す。ウェルのペプトイド濃度は１０ｍＭである。図３２は、罹患血清と対照血清を区別するＴｅｎｔａＧｅｌビーズプラットフォームの検証も示す。
【図３３】図３３は、１０ｍＭ  ＡＤＰ３を含み、ＡＤ血清および対照血清のさまざまな希釈物でのＥＬＩＳＡプレートを示す。矢印は、１：８００希釈物を指し示す。
【図３４】図３４は、１０ｍＭ  ＳＬＥ−ＫＮ１Ｂ−２０を含み、ＡＤ血清および対照血清のさまざまな希釈度物でのＥＬＩＳＡプレートを示す。矢印は、１：８００希釈物を指し示す。
【図３５】図３５は、さまざまな血清希釈物で結合バッファー溶液に調製された１０ｍＭ  ＡＤＰ３を用いたＡＤ血清ＥＬＩＳＡグラフを示す。１：２００〜約１：１０，０００の希釈範囲にわたって、正常血清と罹患血清の分離が起こった。開始希釈物は１：２００だった（群１ＡＤ血清０．３９４ｍｇ／ｍＬおよび非罹患血清０．３８６ｍｇ／ｍＬ）。
【図３６】図３６は、さまざまな血清希釈物で結合バッファー溶液に調製された１０ｍＭ  ＫＮ１Ｂ−２０を用いたＳＬＥ血清ＥＬＩＳＡグラフを示す。１：２００〜約１：１０，０００の希釈範囲にわたって、正常血清と罹患血清の分離が起こった。開始希釈物は１：２００だった（群１ＳＬＥ血清０．３７５ｍｇ／ｍＬおよび非罹患血清０．３９６ｍｇ／ｍＬ）。
【図３７】図３７は、さまざまな血清希釈物でＤＭＳＯ溶液に調製された１０ｍＭ  ＫＮ１Ｂ−２０を用いたＳＬＥ血清ＥＬＩＳＡグラフを示す。１：２００〜約１：１０，０００の希釈範囲にわたって、正常血清と罹患血清の分離が起こった。開始希釈物は１：２００だった（群１ＳＬＥ血清０．３６７ｍｇ／ｍＬおよび非罹患血清０．３２２ｍｇ／ｍＬ）。
【図３８】図３８は、Ｔｅｎｔａｇｅｌビーズヒット検証のためのＦＡＣＳプラットフォームを示す。
【図３９】図３９は、さまざまな濃度（１００μｇ／ｍＬ〜１，０００μｇ／ｍＬ）の血清で、そして抗ＤＮＰ標識二次抗体による治療に反応した、アセチル基を有するビーズと２，５−ジニトロフェニル基（ＤＮＰ）を有するビーズの分離度を示す。平均蛍光強度（ＭＦＩ）分離は、血清１，０００μｇ／ｍＬの高希釈物で最大だった。
【図４０】図４０は、１，０００μｇ／ｍＬの血清濃度で遊離型エタノールアミン−ＤＮＰと抗ＤＮＰ抗体に対するＤＮＰ（プレート上）の結合との直接的な競合があることを示す。
【図４１Ａ】図４１は、保存正常対照血清と保存ＡＤ血清からのＡＤＰ３結合抗抗体を示す。データは、２つの異なる二次抗体（ヤギ抗ヒトＤｙｌｉｇｈｔ６４９およびヤギ抗ヒトＡｌｅｘａ６４７）を用いて２０〜１４０μｇ／ｍＬの濃度範囲の血清で良好な分離を示す。
【図４１Ｂ】図４１は、保存正常対照血清と保存ＡＤ血清からのＡＤＰ３結合抗抗体を示す。データは、２つの異なる二次抗体（ヤギ抗ヒトＤｙｌｉｇｈｔ６４９およびヤギ抗ヒトＡｌｅｘａ６４７）を用いて２０〜１４０μｇ／ｍＬの濃度範囲の血清で良好な分離を示す。
【図４２】図４２は、さまざまな血清濃度範囲でのバックグラウンド減算後の正常対照血清およびＡＤ血清からのＡＤＰ３結合自己抗体を示す。２０μｇ／ｍＬ未満ないし１２０μｇ／ｍＬ以上の大部分の血清濃度で、有意な程度の分離がある。
【図４３Ａ】図４３は、ＳＬＥ（狼瘡）再合成ペプトイドリガンドヒットの構造を示す。
【図４３Ｂ】図４３は、ＳＬＥ（狼瘡）再合成ペプトイドリガンドヒットの構造を示す。
【図４４】図４４は、ＳＬＥ（狼瘡）再合成ペプトイドリガンドヒットの構造を示す。
【図４５】図４５は、１０μｍ  Ｔｅｎｔａｇｅｌビーズ上でのＡＤＰ３の調製、および示されたラクトンの質量分析測定値と一緒にＣＮＢｒを用いた開裂を示す。
【図４６】図４６は、さまざまな濃度での正常対照血清およびアルツハイマー病血清からのＡＤＰ３結合自己抗体を示す。１Ｘ  ＴＢＳＴで３時間、ビーズを事前ブロックし、ヤギ抗ヒトＡｌｅｘａ６４７二次抗体を用いて検出した。
【図４７】図４７は、さまざまな血清濃度での正常対照血清およびアルツハイマー病血清からのＡＤＰ３結合自己抗体を示し、ＤＮＰ値も示す。
【図４８】図４８は、大腸菌溶解物およびリシンなどの事前ブロック条件を用いた正常対照血清およびアルツハイマー病血清からのＡＤＰ３結合抗体を示す。
【図４９】図４９は、大腸菌溶解物およびリシンなどの事前ブロック条件を用いた正常対照血清およびアルツハイマー病血清からのＡＤＰ３結合抗体を示す。
【図５０】図５０は、マイクロアレイに使用されるペプトイドとＥＬＩＳＡプレートに置かれるペプトイドの調製および違いの簡単な模式図を示す。ペプトイドマイクロアレイが作られる方法に関する模式図：個々のビーズはマイクロタイタープレートのウェルに分けられ、濃縮原液を作るために、ペプトイドはビーズから開裂される。これで各ウェルは１種類のペプトイドを含むことになることに注意する。その後、化学的に修飾されたガラス製顕微鏡スライドに、表面に共有結合するような方法で数千のペプトイドをスポットで入れる。１つの合成ライブラリーから高い再現性で数千のスライドを作ることができる。表面にＰＥＧ鎖がないが、ＥＬＩＳＡプレート上のペプトイドの密度がマイクロアレイ上と異なってもよいことを除き、ＥＬＩＳＡの製造も同様である。
【図５１】図５１は、疾患関連抗体−ペプトイド複合体を検出する二次抗体に結合された西洋ワサビペルオキシダーゼを用いた、１：８００の血清希釈物で正常対照血清と罹患血清との間に明確な違いがあるＥＬＩＳＡ実験を示す。無色の基質を添加し、結合ＨＲＰ酵素と反応する時に色を変える（青色）。
【図５２Ａ】図５２は、疾患血清（Ａ）対正常血清（Ｂ）の、さまざまな血清希釈物でのＥＬＩＳＡ試験のさまざまなＡＤペプトイドを比較する滴定データを示す。正常血清には信号の強度がないが、濃度が１：１２，８００〜１：２００に上昇するにつれて、ＡＤペプトイドに明確な違いが現れ、そのすべてに強度がある。
【図５２Ｂ】図５２は、疾患血清（Ａ）対正常血清（Ｂ）の、さまざまな血清希釈物でのＥＬＩＳＡ試験のさまざまなＡＤペプトイドを比較する滴定データを示す。正常血清には信号の強度がないが、濃度が１：１２，８００〜１：２００に上昇するにつれて、ＡＤペプトイドに明確な違いが現れ、そのすべてに強度がある。
【図５３】図５３は、アルツハイマー病（あるいは同疾患ではない）の様々な段階におけるＡＤ患者の非盲検試料セットの臨床診断と、同じ患者血清試料（盲検）から得られ、かつ疾患関連抗体を検出するためにＡＤＰ３ペプトイドに対してスクリーニングされたデータとの、相関関係を検証する図を示す。示された結果は、Ｍａｙｏ  Ｃｌｉｎｉｃ  Ｊａｃｋｓｏｎｖｉｌｌｅからの血漿試料の盲検からのものである。ＵＮＤ＝未決定。プロットは、１つの血清濃度（１：８００）希釈物を取り入れることから得られる。１を超える測定値は陽性と見なし、１〜０．７の測定値は未決定と見なし、０．７未満の測定値は陰性と見なした。
【図５４】図５４は、さまざまな段階のアルツハイマー病（あるいは同疾患ではない）でのＡＤ患者の非盲検試料セットの臨床診断と、同じ患者血清試料（盲検）から得られ、かつ疾患関連抗体を検出するために本発明のさまざまなＡＤペプトイド（プロットは９種のペプトイドの結果の平均値である）に対してスクリーニングされたデータとの相関関係を検証する図を示す。示された結果は、Ｍａｙｏ  Ｃｌｉｎｉｃ  Ｊａｃｋｓｏｎｖｉｌｌｅからの血漿試料の盲検からのものである。ＵＮＤ＝未決定。プロットは、１つの血清濃度（１：８００）希釈物を取り入れることから得られる。１を超える測定値は陽性と見なし、１〜０．７の測定値は未決定と見なし、０．７未満の測定値は陰性と見なした。
【図５５】図５５は、さまざまな段階のアルツハイマー病（あるいは同疾患ではない）でのＡＤ患者の非盲検試料セットの臨床診断と、同じ患者血清試料（盲検）から得られ、かつ疾患関連抗体を検出するために本発明のさまざまなＡＤペプトイドに対してスクリーニングされたデータとの相関関係を検証する図を示す。示された結果は、Ｍａｙｏ  Ｃｌｉｎｉｃ  Ｊａｃｋｓｏｎｖｉｌｌｅからの血漿試料の盲検からのものである。ＵＮＤ＝未決定。プロットは、１つの血清濃度（１：８００）希釈物を取り入れることから得られる。１を超える測定値は陽性と見なし、１〜０．７の測定値は未決定と見なし、０．７未満の測定値は陰性と見なした。データは、ＭＣＩ／鬱病試料に標識が付けられ、レビー小体型認知症試料も印が付けられる他の認知症に関する効果も示す。データからは、少なくとも３人のＭＣＩ患者が、本発明のＡＤ選択的ペプトイドによって捕らえられる抗体のうちの１つ以上の検出可能量の血清試料を持ちことが分かる。
【図５６Ａ】図５６Ａ〜Ｄは、複数のＡＤペプトイドを用いたＯｐｋｏ  Ｈｅａｌｔｈペプトイド診断分析と、混ぜ合わさなかった時にこの情報が示された後の臨床診断との不一致を有する患者からの試料の小集団に関するデータを示す。図５６Ａは、臨床的に病気に罹っているが、ＯｐｋｏペプトイドＰｌａａｇ４が１．０未満（１箇所ではＵＮＤ；滴定ＡＤ陽性）であった患者に対して示されるペプトイドＡＤＰ３およびその他に関するデータを示す。他のすべてのＯｐｋｏペプトイドはＡＤに対して陽性（すなわち、１．０超）であった。
【図５６Ｂ】図５６Ｂから、正常（非認知症）示唆前ＡＤと現在診断されている患者の疾患関連抗体に対してＯｐｋｏペプトイドは陽性であったことが分かる。
【図５６Ｃ】図５６Ｃから、Ｏｐｋｏ  ＡＤペプトイドが、患者が認知症の他のいくつかの形態を有することを示唆するＡＤと臨床的に診断されている患者のいずれの希釈点においても１超の強度を示したことが分かる。
【図５６Ｄ】図５６Ｄから、臨床的に陽性のＡＤ患者では、疾患関連抗体に対して複数のＯｐｋｏ  ＡＤペプトイドが陽性ではないが、２種類のペプトイド（Ｐ１ａａ６およびＰ１ａａｇ４）は陽性であり、それ故に１箇所ではＵＮＤであり、滴定後でもＵＮＤであったことが分かる。
【図５７】図５７は、ＡＤＰ３が配置されたマイクロアレイを用いて以前のＡＤ試料から作成されたクラスタ図を示す。マイクロアレイデータおよびＥＬＩＳＡプラットフォームを用いて作成されたデータでの罹患と対照との間には明確な相関関係がある。図５７から、アルツハイマー病に関連し、パーキンソン病または狼瘡（ＳＬＥ）に関連しない疾患関連抗体にＡＤＰ３ペプトイドが選ばれることが分かる。
【図５８】図５８は、合計１０６種の試験された血清試料を用いたＥＬＩＳＡ分析の要約を示す。
【図５９Ａ】図５９は、Ｐ１ａａｇ７〜９の化学構造を示す。
【図５９Ｂ】図５９は、Ｐ１ａａｇ７〜９の化学構造を示す。
【図５９Ｃ】図５９は、Ｐ１ａａｇ７〜９の化学構造を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明は、診断的および治療的な発見において有意な進歩を意味する。特に、本発明は、複合生体試料のスクリーニングに対する以前の手法を上回るスクリーニング法を発見した。特に、疾患関連バイオマーカーを発見し、そのようなバイオマーカー用の高親和性リガンドを含む診断キットを作る改良された方法が必要である。本発明は、そのようなバイオマーカーに関してスクリーニングし、そのようなバイオマーカーを検出するためのリガンドを用いて疾患および疾患進行を診断する方法に関する。
【００１４】
本発明は、ペプトイド、ペプチド、オリゴマー、小分子、および天然または合成によって作られたあらゆる分子から選択される化合物の粒子ベースライブラリーを含み、ビーズまたは小粒子などの支持システムに置くことができる組成物を含む。次に、この「ライブラリー」は、正しい条件の下で、かつ非選択的なリガンドの除去を可能にするために対照血漿または血清に曝した後で、疾患関連バイオマーカーあるいは抗体またはタンパク質等の他の標的バイオマーカーあるいは細胞表面タンパク質タンパク質等の他のマーカーの有無に関して「スクリーニング」される血漿または血清等の複合体液に対して、前処理および暴露がなされる。特定の疾患を患っているか、患っていない患者から、血液試料または他の体液試料が採取され、スクリーニングによって生じる結果を対照の健康な患者または他の疾患患者から得られた結果と比較する。
【００１５】
一次スクリーニングによって、抗体などの特定疾患関連バイオマーカーのための多数の高親和性リガンドが得られる。本発明は、そのような病状に対する診断環境で有用な、および／または、例えば、体または体内組織の特定領域にあるそのような疾患関連抗体を標的にできる治療用ワクチンまたは医薬品として、それ自体でリガンドとして有用な高親和性リガンドを作成するプロセスをさらに含む。そのような医薬品を、自己抗体を除去および／または分解する限局性免疫反応を生じる、あるいは生じる可能性がある化学療法剤または他の薬物などの他の部分に結合できる。
【００１６】
アルツハイマー病（ＡＤ）は、５３０万人もの数のアメリカ人に影響を及ぼす進行性かつ致命的な脳疾患である。ＡＤは脳細胞を破壊して、記憶、思考、および行動に問題を引き起こす。これらの症状は時間とともに悪化し、最終的に疾患は致命的である。現在、米国における６番目の死因であり、すべての認知症症例の５０〜７０％を占める認知症の最もよく見られる病型である。残念ながら、症状の治療法は存在するが、治す方法はない。
【００１７】
アルツハイマー病の診断は、いくつかの種類の評価を必要とし、完了に数日〜数週間を要する場合がある実験的プロセスである。評価には、詳細病歴を聴取し、身体検査を行うことを含む。さらに、他の考え得る条件を除外するように、血液、尿、およびＣＳＦ検査を含む標準的な検査室検査が主に設計される。記憶、問題解決、注意、視覚−動作調整および抽象的思考を評価するさまざまなツールを用いた神経心理検査も行われる。鬱病に関する検査も含める必要がある。最終的に、症状の原因として脳内の脳腫瘍または血栓を除外するために、脳撮像スキャンを推奨する。要するに現状では、死後に脳組織を検査することでのみアルツハイマー病の確定診断を行うことができ、アルツハイマー病を正確に診断する単独の検査はない。
【００１８】
パーキンソン病（ＰＤ）は、動作技能、会話、および他の機能を多くの場合に損なうもう１つの脳（中枢神経系）の変性疾患である。動作に影響を及ぼすが（動作症状）、他の典型的な症状としては、気分、行動、思考、および感覚の障害（非動作症状）が挙げられる。患者の個別の症状は全く似ていない場合があり、疾患の進行も明らかに個別である。ＰＤの症状は、黒質（逐語的に「黒色物質」）の緻密部領域における色素沈着したドーパミン分泌（ドーパミン作動性）細胞の損失（特発性または遺伝的、毒性または外傷性）に起因する。これらの神経細胞は線条体に突き出し、その損失が、動作、本質的には直接経路の抑制および間接経路の励起を調節する脳幹神経節内での神経回路の活動における変化に至る。
【００１９】
多少違った課題の場合、ＰＤの診断は同様のものを示す。運動障害を患う患者を評価する神経学的診察を行う場合、医師は病歴を聴取し、身体検査を行う必要がある。さらに、患者の動作、調整、およびバランスの様子を観察することを含む神経系の徹底的な評価を行うための神経学的診察を行う。パーキンソン病のみの典型的な症状を持つ患者の血液の検査室検査では、めったに異常を発見しない。脳波図（ＥＥＧ）は脳の電気的活動のいくつかの状況を記録するが、ＰＤのスポッティングでは効果がない。脳のＭＲＩおよびＣＡＴスキャンによって優れた精緻な写真を作成するが、ＰＤに関連した変化は微小で、これらのスキャンでは明らかにされないため、この精査の下でもＰＤ患者の脳は正常であるように見える。具体的な答えを与える確定診断検査を持たない医師は、ＰＤの診断を判断に基づく必要がある。
【００２０】
したがって、初期段階と後期段階の両方の症例において（ｉ）正確かつ客観的で、（ｉｉ）簡単かつ再現性が高く、および（ｉｉｉ）有益なこれらの疾患および他の神経疾患の両方のための診断手順がなおも必要である。
【００２１】
本発明に従って、神経変性疾患を示す抗体を結合するペプトイド、およびペプチドを貼り付けている支持体に抗体含有試料を接触させることを含む抗体含有試料中の抗体を検出する方法を含む組成物を提供する。リガンドライブラリーには式Ｉの化合物が含まれ、式中、アミン側鎖またはα炭素上のＲ基は、独立して、水素；アルキル；アリル；メチル；エチル；ｎ−プロピル；イソプロピル；ｎ−ブチル；イソブチル；ｎ−ブチルアミン；ｓｅｃ−ブチル；ｔｅｒｔ−ブチル；ペンチル；ヘキシル；イソペンチル；アリール；ヘテロアリール；フラニル；インドリル；チオフェニル；チアゾリル；イミダゾリル；イソオキサゾイル；オキサゾイル；ピペロニル；ピラゾイル；ピロリル；ピラジニル；ビリジル；ピリミジル；ピリミジニル；プリニル；シンノリニル；ベンゾフラニル；ベンゾチエニル；ベンゾトリアゾリル；ベンゾオキサゾリル；キノリン；イソオキサゾリル；イソキノリンシクロアルキル；アルケニル；シクルアルケニル；フェニル；ピリジル；メトキシエチル；（Ｒ）−メチルベンジル；Ｃ０−６アルキルアリール；Ｃ０−６アルキルヘテロアリール；ＯＨ、ＳＨ、ハロゲン、ＯＲ１５、ＣＯＯＲ１５、ＮＲ１５（ここで、Ｒ１５はＨまたはＣ１−６アルキルまたはＣ１−６アルキニルからなる群から選択される）、またはＲ１６（ここで、Ｒ１６はＨまたはＣ１−６アルキニルからなる群から選択される）から選択される群で置換されたＣ１−６アルキル；ＯＣ１−６アルキル；Ｃ２−６アルケニル；Ｃ２−６アルキニル；Ｃ２−６アルケニル；およびＣ２−６アルキニルからなる群から選択され、下記の表１および２に記載の１つ以上の化学基を含む。
【００２２】
アルツハイマー病をスクリーニングする目的のための本発明の好適なリガンドライブラリーは、支持体に式１の化合物を含む複合体液をスクリーニングするためのランダムなリガンドライブラリーを含む。
【００２３】
【化１】
2014515739.tif 000003
【００２４】
式中、
Ｒ１は電子が豊富なアミノ酸鎖Ｙから選択され；
Ｒ２はＨから選択され；
および、Ｒ３〜Ｒ６は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＳＣＨ３、−Ｃ０−Ｃ６アルキルＣ２−Ｃ６アルケニル、−Ｃ０−Ｃ６アルキルＣ２−Ｃ６アルキニル、−Ｃ１−Ｃ６ＣＯＯＨ、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＯＨ、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＮ（Ｒ）２、−Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルアリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＮＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルシクロアミドからなる群から選択され、ここで、アリールまたはヘテロアリール基のいずれも、独立して、−ＯＨ、Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ、−ＯＣＨ３、−ＳＯ２ＮＨ２、または−Ｏ−ＣＨ２−Ｏ−で置換されてもよい。
【００２５】
アルツハイマー病のスクリーニングに適した他のペプトイドライブラリーとしては、以下を含むライブラリーが挙げられる。すなわち、
支持体上にある式１の化合物を含む複合体液をスクリーニングするためのランダムリガンドライブラリーであり、
【００２６】
【化１】
2014515739.tif 000004
【００２７】
式中、化合物は以下からなる群から選択される反応物の使用を含むプロセスで生成される。すなわち、
（Ａ）フルフリルアミン；３，４−ジメトキシエタノールアミン；ベンジルアミン；Ｎ−（２−アミノエチル）アセトアミド；Ｎ−（３−アミノプロピル）−２−ピロリジノン；エタノールアミン；グリシン；ジアミノブタン；アリルアミン；ピペロニルアミン；メチルベンジルアミン；イソブチルアミン；４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド、またはシクロヘキシルアミン；または
（Ｂ）メトキシエチルアミン；ピペロニルアミン；シクロヘキシルアミン；ジアミノブタン；メチルベンジルアミン；イソブチルアミン；フルフリルアミンまたは４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド；または
（Ｃ）フルフリルアミン、エタノールアミン；グリシン；ジアミノブタン；アリルアミン；ピペロニルアミン；メチルベンジルアミン；イソブチルアミンまたは４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド；または
（Ｄ）フルフリルアミン、Ｎ−（２−アミノエチル）アセトアミド；Ｎ−（３−アミノエチル）−２−ピロリジノン；エタノールアミン；グリシン；ジアミノブタン；アリルアミン；ピペロニルアミン；メチルベンジルアミン；イソブチルアミン；４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド；または
（Ｅ）システイン、グリシン、アリルアミン、エタノールアミン、イソブチルアミン、メチルベンジルアミン、ピペロニルアミン、メチオニン、シクロヘキシルアミン、３，４−ジメトキシフェネチルアミン、ベンジルアミン、Ｎ−（２−アミノエチル）アセトアミド、Ｎ−（３−アミノプロピル）−２−ピロリドン、４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド、およびフルフリルアミン；および
式中、
Ｒ１は、−（Ｃ１−Ｃ６）ＳＣＨ３からなる群から選択され； 
Ｒ２はＨから選択され；
Ｒ３およびＲ５は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＳＣＨ３、−Ｃ０−Ｃ６アルキルＣ２−Ｃ６アルケニル、−Ｃ０−Ｃ６アルキルＣ２−Ｃ６アルキニル、−Ｃ１−Ｃ６ＣＯＯＨ、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＯＨ、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＮ（Ｒ）２、−Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルアリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＮＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルシクロアミドからなる群から選択され、ここで、アリールまたはヘテロアリール基のいずれも、独立して、−ＯＨ、Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ、−ＯＣＨ３、−ＳＯ２ＮＨ２、または−Ｏ−ＣＨ２−Ｏ−で置換されてもよく；
Ｒ４は、フルフリルまたは−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）ＮＲ７Ｒ８からなる群から選択され、
Ｒ６は、Ｈ、１−イル−アリル、１−イル−２−ヒドロキシエチル、イソブチル、１−イル−ｎ−ブチルアミン、メチルベンジル、ピペロニル、シロヘキシル、１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル、ベンジル、１−イル−２−（アセトアミド）エチル、１−イル−３−２−ピロリジノン、１−イル−２−（４−ベンゼンスルホンアミド）エチル、またはフルフリル、および
ｎは、３〜１１である。
【００２８】
より好適な実施形態では、そのようなライブラリーおよび／または化合物は、以下から選択される。すなわち、
式Ｉａを有する化合物
【００２９】
【化３】
2014515739.tif 000005
【００３０】
式中、化合物は式Ｉａの化合物からなる群から選択され、ここで、
（ａ）Ｒ９はｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｂ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２，２−ジメチルエチル（イソブチル）；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｃ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｄ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｅ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｆ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソプロピル；Ｒ１２はイソプロピル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである；
（ｇ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｈ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｉ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｊ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｋ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０はイソブチル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｌ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｍ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はフルフリルであり、およびＲ１６はフルフリルである；
（ｎ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はフルフリル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はフルフリルである；
（ｏ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−２−メトキシエチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｐ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｑ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｒ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｓ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−メトキシエチルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｔ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はイソブチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｕ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２はイソブチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｖ）Ｒ９はイソブチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｗ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０はイソブチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５は１−イル−２−メトキシエチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｘ）Ｒ９はフルフリル；Ｒ１０はフルフリル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｙ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｚ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ａａ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである；
（ｂｂ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はイソブチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｃｃ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｄｄ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｅｅ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｆｆ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｇｇ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｈｈ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｉｉ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はフルフリル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はフルフリル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｊｊ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−メトキシエチルであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｋｋ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｌｌ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｍｍ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｎｎ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｏｏ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はピペロニル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｐｐ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はメチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｑｑ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はフルフリル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はイソブチル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｒｒ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２はイソブチル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである；
（ｓｓ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６はピペロニルである； 
並びにその薬学的に許容される塩。
【００３１】
より好適な実施形態では、キットおよび／または診断薬、および／または機器を用いて、アルツハイマー病患者またはアルツハイマー病が疑われる患者での疾患関連バイオマーカーをスクリーニングするために、以下の化合物が好適である。すなわち、
以下の式の化合物：
【００３２】
【化４】
2014515739.tif 000006
【００３３】
式中、化合物は式ＩＩの化合物からなる群から選択され、ここで、
（ａ）Ｒ９はｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｂ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２，２−ジメチルエチル（イソブチル）；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｃ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｄ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｅ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｆ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソプロピル；Ｒ１２はイソプロピル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである；
（ｇ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｈ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｉ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｊ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｋ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０はイソブチル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｌ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｍ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はフルフリルであり、およびＲ１６はフルフリルである；
（ｎ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はフルフリル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はフルフリルである；
（ｏ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−２−メトキシエチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｐ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｑ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｒ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｓ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−メトキシエチルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｔ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はイソブチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｕ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２はイソブチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｖ）Ｒ９はイソブチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｗ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０はイソブチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５は１−イル−２−メトキシエチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｘ）Ｒ９はフルフリル；Ｒ１０はフルフリル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｙ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｚ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ａａ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである；
（ｂｂ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はイソブチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｃｃ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｄｄ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｅｅ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｆｆ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｇｇ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｈｈ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｉｉ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はフルフリル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はフルフリル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｊｊ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−メトキシエチルであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｋｋ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｌｌ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｍｍ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｎｎ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｏｏ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はピペロニル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｐｐ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はメチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｑｑ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はフルフリル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はイソブチル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｒｒ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２はイソブチル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである；
（ｓｓ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６はピペロニルである；  
並びにその薬学的に許容される塩。
【００３４】
より好適な実施形態では、以下の化合物が、アルツハイマー病スクリーニングおよび／または検出のためのペプトイドリガンドとして選択される。すなわち、
本明細書の請求項３５に従う化合物であり、式ＩＩの前記化合物は、Ｒ９〜Ｒ１６を有する群から選択される。式中、
（ａ）Ｒ９はｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｂ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２，２−ジメチルエチル（イソブチル）；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｃ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｄ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｅ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｆ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソプロピル；Ｒ１２はイソプロピル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである
並びにその薬学的に許容される塩。
【００３５】
自己免疫疾患
【００３６】
本発明は、自己免疫性Ｔ細胞および／またはさまざまな自己免疫疾患病態または病状からの抗体を結合できる分子の同定も行う。例はＥＡＥ、ＭＳの動物モデルに関するものであるが、本発明はさまざまな自己免疫疾患との関連で有用であり、その一部を以下で述べる。特定の態様において、病態としては、疾患が挙げられるが、これに限定するものではない。すなわち、急性散在性脳髄炎（ＡＤＥＭ）、急性出血性白質脳炎、アジソン病、無ガンマグロブリン血症、アレルギー性喘息、アレルギー性鼻炎、円形脱毛症、アミロイドーシス、強直性脊椎炎、抗ＧＢＭ／抗ＴＢＭ腎炎、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性再生不良性貧血、自己免疫性自律神経障害、自己免疫性肝炎、自己免疫性脂質異常症、自己免疫性免疫不全、自己免疫性内耳疾患（ＡＩＥＤ）、自己免疫性心筋炎、自己免疫性膵炎、自己免疫性網膜症、自己免疫性血小板減少性紫斑病（ＡＴＰ）、自己免疫性甲状腺疾患、軸索およびニューロン神経障害、バロ病、ベーチェット病、水疱性類天疱瘡、心筋症、キャッスルマン病、セリアック病（非熱帯性）、シャーガス病、慢性疲労症候群、慢性炎症性脱髄性多発神経炎（ＣＩＤＰ）、慢性再発性多発性骨髄炎（ＣＲＭＯ）、チャーグストラウス症候群、瘢痕性類天疱瘡／良性粘膜類天疱瘡、クローン病、コーガン症候群、寒冷凝集素症、先天性心ブロック、コクサッキー心筋炎、ＣＲＥＳＴ病、本態性混合型クリオグロブリン血症、脱髄性ニューロパチー、皮膚筋炎、デビック病（視神経脊髄炎）、円板状ループス、ドレスラー症候群、子宮内膜症、好酸球性筋膜炎、結節性紅斑、実験的アレルギー性脳脊髄炎、エバンス症候群、線維筋痛、線維化性肺胞炎、巨細胞性動脈炎（側頭動脈炎）、糸球体腎炎、グッドパスチャー症候群、グレーブス病、ギランバレー症候群、橋本脳炎、橋本甲状腺炎、溶血性貧血、ヘノッホ・シェーンライン紫斑病、妊娠性疱疹、低ガンマグロブリン血症、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、ＩｇＡ腎症、免疫調節リポタンパク質、封入体筋炎、インシュリン依存性糖尿病（一型）、間質性膀胱炎、若年性関節炎、若年性糖尿病、川崎症候群、ランバート・イートン症候群、白血球破砕性血管炎、扁平苔癬、硬化性苔癬、木質性結膜炎、線状ＩｇＡ病（ＬＡＤ）、全身性紅斑性狼瘡（ＳＬＥ）、ライム病、メニエール病、顕微鏡的多発性血管炎、混合性結合組織病（ＭＣＴＤ）、モーレン潰瘍、ムッハ・ハーバーマン病、多発硬化症、重症筋無力症、筋炎、睡眠発作、視神経脊髄炎（デビック病）、好中球減少症、眼部瘢痕性類天疱瘡、視神経炎、回帰性リウマチ、ＰＡＮＤＡＳ（連鎖球菌に関連する小児自己免疫性神経精神疾患）、傍腫瘍性樟脳変性症、発作性夜間ヘモグロビン尿症（ＰＮＨ）、パリー・ロンベルグ症候群、パーソネージ・ターナー症候群、扁平部炎（周辺部ブドウ膜炎）、天疱瘡、末梢神経障害、動脈周囲脳脊髄炎、悪性貧血、ＰＯＥＭＳ症候群、結節性多発動脈炎、多線性自己免疫症候群Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩ型、リウマチ性多発性筋痛、多発性筋炎、心筋梗塞後症候群、心膜切開後症候群、プロゲステロン皮膚炎、原発性胆汁性肝硬変、原発性硬化性胆管炎、乾癬、乾癬性関節炎、特発性肺線維症、壊疽性膿皮症、赤芽球癆、レイノー現象、反射性交感神経性ジストロフィー、ライター症候群、再発性多発性軟骨炎、むずむず脚症候群、後腹膜線維化症、リウマチ熱、リウマチ性関節炎、サルコイドーシス、シュミット症候群、強膜炎、強皮症、シェーグレン症候群、精子および精巣自己免疫、スティッフパーソン症候群、亜急性細菌性心内膜炎（ＳＢＥ）、交感性眼炎、高安動脈炎、側頭動脈炎／巨細胞性動脈炎、血小板減少性紫斑病（ＴＰＰ）、トローザ・ハント症候群、横断性脊髄炎、潰瘍性大腸炎、分類不能型結合組織病（ＵＣＴＤ）、ブドウ膜炎、血管炎、小水疱水疱性皮膚病、白斑またはウェグナー肉芽腫症または、慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、拡張型心筋症、心筋炎、多線性自己免疫症候群１型（ＡＰＳ−１）、嚢胞性線維症性血管炎、後天性副甲状腺機能低下症、冠動脈疾患、落葉状天疱瘡、尋常性天疱瘡、ラスムッセン脳炎、自己免疫性胃炎、インスリン低血糖症候群（平田病）、Ｂ型インシュリン抵抗症候群、アカントーシス、狼瘡（ＳＬＥ）、悪性貧血、治療抵抗性ライム病関節炎、多発ニューロパシー、脱髄疾患、アトピー性皮膚炎、自己免疫性甲状腺機能低下症、白斑、甲状腺関連眼病、自己免疫性セリアック病、ＡＣＴＨ欠乏症、皮膚筋炎、シェーグレン症候群、全身性硬化症、全身性進行性硬化症、限局性強皮症、原発性抗リン脂質抗体症候群、慢性特発性じんましん、結合組織症候群、壊死性半月体形成性糸球体腎炎（ＮＣＧＮ）、全身性血管炎、レイノー症候群、慢性肝疾患、内臓リーシュマニア症、自己免疫性Ｃ１抑制欠乏症、膜性増殖性糸球体腎炎（ＭＰＧＮ）、凝固時間延長、免疫不全、アテローム性動脈硬化症、神経細胞傷害、腫瘍随伴性天疱瘡、腫瘍随伴性スティフマン症候群、腫瘍随伴性脳脊髄炎、亜急性自律性ニューロパシー、癌関連網膜症、腫瘍随伴性眼球クローヌスミオクローヌス運動失調、下位運動ニューロン症候群、およびランバート・イートン筋無力症候群。
【００３７】
狼瘡関連抗体をスクリーニングする目的のための本発明のペプトイドライブラリーは上記で規定するライブラリーを含み、および支持体上にある式Ｉの化合物を含む複合体液をスクリーニングするためのランダムリガンドライブラリーをさらに含む、
【００３８】
【化１】
2014515739.tif 000007
【００３９】
式中、
Ｒ１は電子が豊富なアミノ酸鎖Ｙから選択され；
Ｒ２はＨから選択され；
および、Ｒ３〜Ｒ６は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＳＣＨ３、−Ｃ０−Ｃ６アルキルＣ２−Ｃ６アルケニル、−Ｃ０−Ｃ６アルキルＣ２−Ｃ６アルキニル、−Ｃ１−Ｃ６ＣＯＯＨ、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＯＨ、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＮ（Ｒ）２、−Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルアリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＮＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルシクロアミドからなる群から選択され、ここで、アリールまたはヘテロアリール基のいずれも、独立して、−ＯＨ、Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ、−ＯＣＨ３、−ＳＯ２ＮＨ２、または−Ｏ−ＣＨ２−Ｏ−で置換されてもよい。
【００４０】
ＳＬＥ（狼瘡）のスクリーニングに適した他のペプトイドライブラリーとしては、以下を含むライブラリーが挙げられる。すなわち、
支持体上にある式１の化合物を含む複合体液をスクリーニングするためのランダムリガンドライブラリー、
【００４１】
【化１】
2014515739.tif 000008
【００４２】
式中、化合物は以下からなる群から選択される反応物の使用を含むプロセスで生成される。すなわち、
（Ａ）フルフリルアミン；３，４−ジメトキシエタノールアミン；ベンジルアミン；Ｎ−（２−アミノエチル）アセトアミド；Ｎ−（３−アミノプロピル）−２−ピロリジノン；エタノールアミン；グリシン；ジアミノブタン；アリルキルアミン；ピペロニルアミン；メチルベンジルアミン；イソブチルアミン；４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド、またはシクロヘキシルアミン；または
（Ｂ）メトキシエチルアミン；ピペロニルアミン；シクロヘキシルアミン；ジアミノブタン；メチルベンジルアミン；イソブチルアミン；フルフリルアミンまたは４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド；または
（Ｃ）フルフリルアミン、エタノールアミン；グリシン；ジアミノブタン；アリルアミン；ピペロニルアミン；メチルベンジルアミン；イソブチルアミンまたは４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド；または
（Ｄ）フルフリルアミン、Ｎ−（２−アミノエチル）アセトアミド；Ｎ−（３−アミノエチル）−２−ピロリジノン；エタノールアミン；グリシン；ジアミノブタン；アリルアミン；ピペロニルアミン；メチルベンジルアミン；イソブチルアミン；４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド；または
（Ｅ）システイン、グリシン、アリルアミン、エタノールアミン、イソブチルアミン、メチルベンジルアミン、ピペロニルアミン、メチオニン、シクロヘキシルアミン、３，４−ジメトキシフェネチルアミン、ベンジルアミン、Ｎ−（２−アミノエチル）アセトアミド、Ｎ−（３−アミノプロピル）−２−ピロリドン、４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド、およびフルフリルアミン；および
式中、
Ｒ１は、−（Ｃ１−Ｃ６）ＳＣＨ３からなる群から選択され； 
Ｒ２はＨから選択され；
Ｒ３およびＲ５は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＳＣＨ３、−Ｃ０−Ｃ６アルキルＣ２−Ｃ６アルケニル、−Ｃ０−Ｃ６アルキルＣ２−Ｃ６アルキニル、−Ｃ１−Ｃ６ＣＯＯＨ、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＯＨ、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＮ（Ｒ）２、−Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルアリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＮＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルシクロアミドからなる群から選択され、ここで、アリールまたはヘテロアリール基のいずれも、独立して、−ＯＨ、Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ、−ＯＣＨ３、−ＳＯ２ＮＨ２、または−Ｏ−ＣＨ２−Ｏ−で置換されてもよく；
Ｒ４は、フルフリルまたは−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）ＮＲ７Ｒ８からなる群から選択され、  
Ｒ６は、Ｈ、１−イル−アリル、１−イル−２−ヒドロキシエチル、イソブチル、１−イル−ｎ−ブチルアミン、メチルベンジル、ピペロニル、シロヘキシル、１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル、ベンジル、１−イル−２−（アセトアミド）エチル、１−イル−３−２−ピロリジノン、１−イル−２−（４−ベンゼンスルホンアミド）エチル、またはフルフリルからなる群から選択され、および
ｎは、３〜１１である。
【００４３】
初期スクリーニング目的の好適な実施形態は以下を含む。すなわち、
以下の式の化合物：
【００４４】
【化６】
2014515739.tif 000009
【００４５】
式中、式ＩＩＩａの化合物中のＲ９〜Ｒ１６は以下から選択される。すなわち、
（ａ）Ｒ９は１−イル−アリル；Ｒ１０は１−イル−３Ｎ−（２−ピロリジノン）プロピル；Ｒ１１は酢酸；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−アリルである；
（ｂ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル；Ｒ１３はベンジル；Ｒ１４はピペロニル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである；
（ｃ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−アリル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はベンジル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｄ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はベンジルである；
（ｅ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３はベンジル；Ｒ１４は１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｆ）Ｒ９は１−イル−アリル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｇ）Ｒ９は１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル；Ｒ１０はイソブチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｈ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｉ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はベンジル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
並びにその薬学的に許容される塩。
【００４６】
キットおよび／または他の診断法の目的のための好適な実施形態としては、以下のものが挙げられる。すなわち、
以下の式の化合物：
【００４７】
【化４】
2014515739.tif 000010
【００４８】
式中、式ＩＩの化合物中のＲ９〜Ｒ１６は以下から選択される。すなわち、
（ａ）Ｒ９は１−イル−アリル；Ｒ１０は１−イル−３Ｎ−（２−ピロリジノン）プロピル；Ｒ１１は酢酸；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−アリルである；
（ｂ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル；Ｒ１３はベンジル；Ｒ１４はピペロニル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである；
（ｃ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−アリル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はベンジル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｄ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はベンジルである；
（ｅ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３はベンジル；Ｒ１４は１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｆ）Ｒ９は１−イル−アリル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｇ）Ｒ９は１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル；Ｒ１０はイソブチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｈ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｉ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はベンジル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
並びにその薬学的に許容される塩。
【００４９】
癌
【００５０】
本発明は、癌または前癌性病状に関連したバイオマーカーの有無の同定および／または特徴付けにおいても有用である。これらの癌は、以下からなる群から選択される。
【００５１】
急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、副腎皮質癌、ＡＩＤＳ関連癌、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、肛門癌、虫垂癌、星状細胞種、小児小脳または脳癌、基底細胞癌、胆管癌、肝外癌、膀胱癌、骨肉腫、骨肉腫／悪性線維性組織球腫、脳幹神経膠腫、脳腫瘍、脳腫瘍、小脳星状細胞腫、脳腫瘍脳星状細胞種／悪性神経膠腫、脳腫瘍上衣腫、脳腫瘍髄芽腫、脳腫瘍テント上原始神経外胚葉腫瘍、脳腫瘍、視覚伝導路および視床下部膠腫、乳癌、気管支腺腫／カルチノイド、バーキット腫、カルチノイド腫瘍、小児カルチノイド腫瘍、消化管癌、原因不明癌、中枢神経系リンパ腫、原発性癌、小脳星状細胞種、小児脳星状細胞腫／悪性神経膠腫、小児癌、子宮頸癌、小児慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性骨髄増殖性疾患、大腸癌、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫、線維形成小円形細胞腫瘍、子宮内膜癌、上衣腫、食道癌、ユーイング肉腫ファミリー腫瘍、頭蓋外胚細胞腫瘍、小児性腺外胚細胞腫瘍、肝外胆管癌、眼癌、眼内黒色腫、眼癌、網膜芽細胞種、胆嚢癌、胃（腹）癌、消化管カルチノイド腫瘍、消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、胚細胞腫瘍：頭蓋外、性線外、または卵巣、妊娠性絨毛性腫瘍、脳幹の神経膠腫、神経膠腫、小児大脳星細胞腫、神経膠腫、小児視経路および視床下部、胃カルチノイド、ヘアリー細胞白血病、頭頸部癌、心臓癌、肝細胞（肝臓）癌、ホジキンリンパ腫、下咽頭癌、視床下部および視経路膠腫、小児眼内黒色腫、島細胞癌（膵臓内分泌）、カポジ肉腫、腎臓癌（腎細胞癌）、咽頭癌、白血病、白血病急性リンパ芽球性（急性リンパ球白血病とも呼ばれる）、白血病急性骨髄性（急性骨髄性白血病とも呼ばれる）、白血病慢性リンパ球性（慢性リンパ球性白血病とも呼ばれる）、白血病慢性骨髄性（慢性骨髄性白血病とも呼ばれる）、毛様細胞白血病、口唇および口腔内のリンパ腫、肝臓癌（原発性）、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、リンパ腫、リンパ腫、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、バーキットリンパ腫、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫（ホジキンリンパ腫を除くすべてのリンパ腫の旧分類）、原発性中枢神経系リンパ腫、マーカスホイットル致死症（Ｍａｒｃｕｓ  Ｗｈｉｔｔｌｅ，  Ｄｅａｄｌｙ  Ｄｉｓｅａｓｅ）、ヴァルデンストロームマクログロブリン血症（Ｍａｃｒｏｇｌｏｂｕｌｉｎｅｍｉａ，  Ｗａｌｄｅｎｓｔｒoｍ）、骨の悪性線維性組織球腫／骨肉腫、小児髄芽腫、黒色腫、眼内（眼）黒色腫、メルケル細胞癌、成人悪性中皮腫、小児中皮腫、原因不明の転移性頸部扁平上皮癌、口腔癌、多発性内分泌腫瘍症候群、小児多発性骨髄腫／形質細胞腫、菌状息肉腫、骨髄異形成症候群、骨髄異形成／骨髄増殖性疾患、骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、成人急性、小児急性骨髄性白血病多発性骨髄腫、多発性（骨髄の癌）、慢性骨髄増殖性疾患、鼻腔および副鼻腔癌、鼻咽頭癌、神経芽細胞腫、非ホジキンリンパ腫、非小細胞肺癌、口腔癌、口腔咽頭癌、骨肉腫／骨の悪性線維性組織球腫、卵巣癌、上皮性卵巣癌（表面上皮間質腫瘍）、卵巣胚細胞腫瘍、卵巣低悪性度腫瘍、膵臓癌、膵島細胞癌、副鼻腔および鼻腔癌、副甲状腺癌、陰茎癌、咽頭癌、褐色細胞腫、松果体星細胞腫、松果体胚細胞腫、松果体芽細胞腫およびテント上原始神経外胚葉腫瘍、小児下垂体腺腫、形質細胞腫／多発性骨髄腫、胸膜肺芽腫、原発性中枢神経系リンパ腫、前立腺癌、直腸癌、腎細胞癌（腎臓癌）、腎盂尿管癌、移行上皮癌、網膜芽細胞腫、小児横紋筋肉腫、唾液腺癌、ユーイング肉腫ファミリー腫瘍、カポジ肉腫、軟部組織の肉腫、子宮肉腫、セザリー症候群、皮膚癌（非黒色腫）、皮膚癌（黒色腫）、メルケル細胞皮膚癌、小細胞肺癌、小腸癌、軟部組織の肉腫、扁平上皮癌−皮膚癌（非黒色腫）を参照、原発不明の頸部扁平上皮癌、胃癌、小児性テント上原始神経外胚葉腫瘍、Ｔ細胞リンパ腫、皮膚−菌状息肉腫およびセザリー症候群を参照、睾丸癌、咽喉癌、胸腺腫、小児胸腺腫および胸腺癌、甲状腺癌、小児性甲状腺癌、腎盂および尿管移行上皮癌、絨毛性腫瘍、妊娠性の原発部位不明癌、成人性の原発部位不明癌、小児尿管および腎盂移行上皮癌、尿道癌、子宮癌、子宮内膜、子宮肉腫、膣癌、小児視経路および小児視床下部膠腫、外陰癌、ヴァルデンストレームマクログロブリン血症、小児腎芽細胞腫（腎臓癌）。
【００５２】
前述のライブラリーに加えて、膵臓癌をスクリーニングする目的のための本発明のペプトイドライブラリーは、支持体上にある式Ｉの化合物を含む複合体液をスクリーニングするためのランダムリガンドライブラリーを含む。
【００５３】
【化１】
2014515739.tif 000011
【００５４】
式中、
Ｒ１は電子が豊富なアミノ酸側鎖Ｙから選択され；
Ｒ２はＨから選択され；
および、Ｒ３〜Ｒ６は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＳＣＨ３、−Ｃ０−Ｃ６アルキルＣ２−Ｃ６アルケニル、−Ｃ０−Ｃ６アルキルＣ２−Ｃ６アルキニル、−Ｃ１−Ｃ６ＣＯＯＨ、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＯＨ、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＮ（Ｒ）２、−Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルアリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＮＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルシクロアミドからなる群から選択され、ここで、アリールまたはヘテロアリール基のいずれも、独立して、−ＯＨ、Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ、−ＯＣＨ３、−ＳＯ２ＮＨ２、または−Ｏ−ＣＨ２−Ｏ−で置換されてもよい。
【００５５】
癌のスクリーニングに適した他のペプトイドライブラリーとしては、以下を含むライブラリーが挙げられる。すなわち、
支持体上にある式１の化合物を含む複合体液をスクリーニングするためのランダムリガンドライブラリー、
【００５６】
【化１】
2014515739.tif 000012
【００５７】
式中、化合物は以下からなる群から選択される反応物の使用を含むプロセスで生成される。すなわち、
（Ａ）フルフリルアミン；３，４−ジメトキシエタノールアミン；ベンジルアミン；Ｎ−（２−アミノエチル）アセトアミド；Ｎ−（３−アミノプロピル）−２−ピロリジノン；エタノールアミン；グリシン；ジアミノブタン；アリルキルアミン；ピペロニルアミン；メチルベンジルアミン；イソブチルアミン；４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド、またはシクロヘキシルアミン；または
（Ｂ）メトキシエチルアミン；ピペロニルアミン；シクロヘキシルアミン；ジアミノブタン；メチルベンジルアミン；イソブチルアミン；フルフリルアミンまたは４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド；または
（Ｃ）フルフリルアミン、エタノールアミン；グリシン；ジアミノブタン；アリルアミン；ピペロニルアミン；メチルベンジルアミン；イソブチルアミンまたは４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド；または
（Ｄ）フルフリルアミン、Ｎ−（２−アミノエチル）アセトアミド；Ｎ−（３−アミノエチル）−２−ピロリジノン；エタノールアミン；グリシン；ジアミノブタン；アリルアミン；ピペロニルアミン；メチルベンジルアミン；イソブチルアミン；４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド；または
（Ｅ）システイン、グリシン、アリルアミン、エタノールアミン、イソブチルアミン、メチルベンジルアミン、ピペロニルアミン、メチオニン、シクロヘキシルアミン、３，４−ジメトキシフェネチルアミン、ベンジルアミン、Ｎ−（２−アミノエチル）アセトアミド、Ｎ−（３−アミノプロピル）−２−ピロリドン、４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド、およびフルフリルアミン；および
式中、
Ｒ１は、−（Ｃ１−Ｃ６）ＳＣＨ３からなる群から選択され；  
Ｒ２はＨから選択され；
Ｒ３およびＲ５は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＳＣＨ３、−Ｃ０−Ｃ６アルキルＣ２−Ｃ６アルケニル、−Ｃ０−Ｃ６アルキルＣ２−Ｃ６アルキニル、−Ｃ１−Ｃ６ＣＯＯＨ、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＯＨ、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＮ（Ｒ）２、−Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルアリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＮＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルシクロアミドからなる群から選択され、ここで、アリールまたはヘテロアリール基のいずれも、独立して、−ＯＨ、Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ、−ＯＣＨ３、−ＳＯ２ＮＨ２、または−Ｏ−ＣＨ２−Ｏ−で置換されてもよく；
Ｒ４は、フルフリルまたは−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）ＮＲ７Ｒ８からなる群から選択され、  
Ｒ６は、Ｈ、１−イル−アリル、１−イル−２−ヒドロキシエチル、イソブチル、１−イル−ｎ−ブチルアミン、メチルベンジル、ピペロニル、シロヘキシル、１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル、ベンジル、１−イル−２−（アセトアミド）エチル、１−イル−３−２−ピロリジノン、１−イル−２−（４−ベンゼンスルホンアミド）エチル、またはフルフリルから選択され、および
ｎは、３〜１１である。
【００５８】
予備スクリーニングの目的のための好適な実施形態としては、以下を含む上記ペプトイドが挙げられる。すなわち、
以下の式の化合物：
【００５９】
【化５】
2014515739.tif 000013
【００６０】
式中、化合物は式ＩＩａの化合物からなる群から選択され、ここで、
（ａ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｂ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はイソブチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｃ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はイソブチル；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｄ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｅ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｆ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｇ）Ｒ９はフルフリル；Ｒ１０はフルフリル；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｈ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｉ）Ｒ９はイソブチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｊ）Ｒ９はイソブチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｋ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｌ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
並びにその薬学的に許容される塩。
【００６１】
キットで膵臓癌をスクリーニングする目的のための好適な実施形態としては、以下を含む。すなわち、
以下の式の化合物：
【００６２】
【化４】
2014515739.tif 000014
【００６３】
式中、化合物は式ＩＩの化合物からなる群から選択され、ここで、
（ａ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｂ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はイソブチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｃ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はイソブチル；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｄ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｅ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｆ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｇ）Ｒ９はフルフリル；Ｒ１０はフルフリル；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｈ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｉ）Ｒ９はイソブチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｊ）Ｒ９はイソブチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｋ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｌ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
並びにその薬学的に許容される塩。
【００６４】
膵臓癌自己抗体検出のための予備スクリーニング目的での別の実施形態としては、以下が挙げられる。すなわち、
以下の式の化合物：
【００６５】
【化６】
2014515739.tif 000015
【００６６】
式中、前記化合物は、以下のＲ９〜Ｒ１６を有する化合物からなる群から選択され、
（ａ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｂ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−アリル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｃ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｄ）Ｒ９はイソブチル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−アリル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−アリルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｅ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はイソブチル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｆ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−ヒドロキシエチルである；
（ｇ）Ｒ９は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｈ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｉ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−アリル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｊ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｋ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｌ）Ｒ９は１−イル−アリル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｍ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｎ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−２−ヒドロキシエチルである；
並びにその薬学的に許容される塩。
【００６７】
キットおよび診断法の目的のための好適な実施形態としては、以下のものが挙げられる。すなわち、
以下の式の化合物：
【００６８】
【化４】
2014515739.tif 000016
【００６９】
式中、前記化合物は、以下のＲ９〜Ｒ１６を有する化合物からなる群から選択され、
（ａ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｂ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−アリル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｃ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｄ）Ｒ９はイソブチル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−アリル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−アリルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｅ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はイソブチル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｆ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−ヒドロキシエチルである；
（ｇ）Ｒ９は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｈ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｉ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−アリル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｊ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｋ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｌ）Ｒ９は１−イル−アリル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｍ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｎ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−２−ヒドロキシエチルである；
並びにその薬学的に許容される塩。
【００７０】
本発明は、他の疾患または病状に関連するバイオマーカーのスクリーニングにおいても有用である。前記疾患および病状は、神経疾患、自己免疫疾患、および上記癌のほか、抗体または他の特徴的なタンパク質などのバイオマーカーまたは疾患または疾患の進行に関連したバイオマーカーを有する他の疾患および病状にも及ぶ。これらの疾患および病状としては、炎症性疾患、感染症、心臓血管疾患、および代謝性疾患が具体的に挙げられる。具体的な感染症としては、ＡＩＤＳ、炭疽病、ボツリヌス中毒症、ブルセラ症、軟性下疳、クラミジア感染症、コレラ、コクシジオイデス症、クリプトスポリジウム症、シクロスポラ症、ジフテリア、エーリキア症、アルボウイルス脳炎、腸管出血性大腸菌、ランブル鞭毛虫症、淋病、デング熱、インフルエンザ菌、ハンセン病（癩病）、ハンタウイルス肺症候群、溶血性尿毒症症候群、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス、レジオネラ症、リステリア症、ライム病、マラリア、はしか、髄膜炎菌性疾患、おたふく風邪、百日咳（百日咳）、ペスト、麻痺性灰白髄炎、オウム病、Ｑ熱、狂犬病、ロッキー山発疹熱、風疹、先天性風疹症候群（ＳＡＲＳ）、細菌性赤痢、天然痘、連鎖球菌感染症（侵襲性群Ａ）、連鎖球菌毒素性ショック症候群、連鎖球菌性肺炎、梅毒、破傷風、毒素性ショック症候群、旋毛虫病、結核、野兎病、腸チフス、バンコマイシン中間耐性黄色ブドウ球菌、水痘、黄熱病、変異型クロイツフェルト・ヤコブ病（ｖＣＪＤ）、エボラ出血熱、エキノコックス症、ヘンドラウイルス感染症、ヒトサル痘、Ａ型インフルエンザ、Ｈ５Ｎ１、ラッサ熱、マールブルグ出血熱、ニパウイルス、オニョンニョン熱、リフトバレー熱、ベネズエラウマ脳炎、および西ナイルウイルスが挙げられる。
【００７１】
適切な実験条件の下で、本発明の大型リガンドライブラリーを体液で直接利用し、より少ない支持構成要素（例えば、約１００，０００以下）を使用する必要なしに、あるいは体液をスクリーニングする前に前記ペプトイドまたはリガンドをマイクロアレイに移す必要なしに、前記マーカーをスクリーニングできる。さらに、特定細胞表面マーカーに特に関連する細胞ベース受容体に関するスクリーニングにも、リガンドライブラリーを使用してもよい。以前の方法と違い、本発明はより多くのビーズ／樹脂を含めることを可能にし、したがって、複合生体試料を直接スクリーニングするために、リガンド結合剤スクリーニングまたは細胞受容体スクリーニングのいずれでも、より大きなライブラリーを含めることができる。したがって、本発明は、時点１で患者の生体試料をスクリーニングするステップを含む疾患進行を監視し、いずれかの時点で前記患者の疾患関連バイオマーカーの有無を追跡および／または監視するために、時点２またはその後のいずれの使用時点でも前記患者の生体試料をスクリーニングする方法、または、本発明の迅速なスクリーニング法から得られる少なくとも１つのリガンドを有するキットまたは機器または装置も含む。
【００７２】
リガンド
【００７３】
マイクロアレイシステムに対する前述の通り、ランダムビーズまたは樹脂ベースライブラリーを構築するために、ほぼすべての分子または化合物を使用してもよい。これらの「分子」または「化合物」には、天然物または人工化合物または合成的に誘導された分子を含んでもよい。前記分子の源は、生物系からのほか、非生物学的に誘導された源であってもよい。本発明で請求される条件の下で、大型ビーズライブラリーを用いた初期スクリーニング目的に好適なリガンドは、一部分においてサブモノマーから作られ、そのサブモノマーは公知の単量体アミンおよび公知の酢酸ハロゲン化物または置換酢酸ハロゲン化物から選択される。例えば、表１には、選択することができる一置換アミン上のさまざまなＲ基を示す。
【００７４】
【表１Ａ】
2014515739.tif 000017
【００７５】
【表１Ｂ】
2014515739.tif 000018
【００７６】
【表１Ｃ】
2014515739.tif 000019
【００７７】
【表１Ｄ】
2014515739.tif 000020
【００７８】
【表１Ｅ】
2014515739.tif 000021
【００７９】
【表１Ｆ】
2014515739.tif 000022
【００８０】
【表１Ｇ】
2014515739.tif 000023
【００８１】
【表２Ａ】
2014515739.tif 000024
【００８２】
【表２Ｂ】
2014515739.tif 000025
【００８３】
【表２Ｃ】
2014515739.tif 000026
【００８４】
【表２Ｄ】
2014515739.tif 000027
【００８５】
【表２Ｅ】
2014515739.tif 000028
【００８６】
【表２Ｆ】
2014515739.tif 000029
【００８７】
【表２Ｇ】
2014515739.tif 000030
【００８８】
【表２Ｈ】
2014515739.tif 000031
【００８９】
【表２Ｉ】
2014515739.tif 000032
【００９０】
【表２Ｊ】
2014515739.tif 000033
【００９１】
【表２Ｋ】
2014515739.tif 000034
【００９２】
【表２Ｌ】
2014515739.tif 000035
【００９３】
【表２Ｍ】
2014515739.tif 000036
【００９４】
【表２Ｎ】
2014515739.tif 000037
【００９５】
ＡＤスクリーニング、膵臓癌スクリーニング、および狼瘡スクリーニング（事前および／または診断）の目的に好適なモノマーおよび／またはサブモノマーは、システイン、グリシン、メチオニン、アリルアミン、エタノールアミン、イソブチルアミン、ジアミノブタン、メチルベンジルアミン（ラセミ化合物または鏡像異性体）、ピペロニルアミン、シクロヘキシルアミン、３，４−ジメトキシフェネチルアミン、ベンジルアミン、Ｎ−（２−アミノエチル）アセトアミド、Ｎ−（３−アミノプロピル）−２−ピロリジノン、４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド、またはフルフリルアミンからなる群から選択される。
【００９６】
酢酸ハロゲン化物および／またはＲ置換酢酸ハロゲン化物（Ｒが任意のアミノ酸側鎖から、または一置換アミン上に基または変数を含む任意の他の群から選択される）も、サブモノマーとして利用される。あるいは、モノマーを形成するために、任意のアミンと任意の酢酸ハロゲン化物の組み合わせを反応させてもよい。その後、上記組み合わせは、本発明のオリゴマーを形成するために、成長するペプトイド鎖上で別の反応性モノマーと反応させられる。
【００９７】
ペプトイドの組み合わせライブラリーは、以下のように作成できる：
【００９８】
支持体に、あるいは支持体、樹脂、またはビーズ上のリンカーに付着したシステインまたはメチオニン単量体アミノ酸を有するペプトイドを、支持体または支持体上のリンカーに保護アミノ酸をまず添加することで作成できる。上記アミノ酸（あるいは、オリゴマーで機能的目的または他の目的、または上記オリゴマーを有する診断法を果たすことができるように求められる任意のアミノ酸）の添加後、標準ペプチド化学を用いて、あるいはブロモ酢酸（またはα置換ブロモ酢酸または同様の反応物）のサブモノマーとアミンがＲ基で置換される一置換アミンを用いて、残りのモノマーを添加できる。上記Ｒ基は、例えば、米国特許第２０１０／０３０３８０５号または第２０１０／０３０３８３５号で述べられたもの、および／またはＺｕｃｋｅｒｍａｎｎおよびさまざまなＫｏｄａｄｅｋ出版物で述べられたものを含む任意で公知のペプトイド置換基から選択してもよい。好適なアミンは、１〜２ＭＭビーズまたは樹脂ライブラリーを構築するために特定の単量体アミンが各ライブラリーに追加される本明細書で列挙されたライブラリーから選択されるものである。
【００９９】
各ペプトイドを作成するプロセスでは一般的に、（１）支持体（支持体上のオプションのリンカーを含む）上のアミノ酸反応物の調製；（２）ハロゲン化誘導体を形成するための、上記支持体上のアミノ酸部分の反応物とブロモ酢酸またはクロロ酢酸などのハロゲン化アシルとの反応、（３）アミドを形成するためのハロゲン化誘導体と一置換アミンの反応、（４）ペプトイドからステップ（２）および（３）の繰り返しを伴う。メチオニン含有ペプトイドは、一般的に大型ライブラリーで作成される。システイン含有ペプトイドは、大規模な量の高親和性ペプトイドが必要な時に、そして大型ビーズまたは樹脂ライブラリーの初期スクリーニングの後に一般的に作成される。血清などの複合体液を初期スクリーニングするために使用される大型ビーズライブラリーでは、マイクロアレイスクリーニングに一般的に必要な長いＰＥＧリンカーの必要はなく、あるいはその要件はない。ＰＥＧリンカーは、約１０モノマー未満の短いリンカーであることを条件に、ビーズまたは樹脂上にあってもよい。約５０ミクロン未満（例えば、１０ミクロン）のビーズまたはＴｅｎｔａｇｅｌビーズを含む診断キットでは、短いＰＥＧリンカー（例えば、２〜１０のＰＥＧモノマー）または長いＰＥＧオリゴマーの両方を使用するのに便利であり、利用できる。
【０１００】
オリゴマー構築プロセスの各ステップを行うために使用される条件では、ＤＭＦまたは酢酸ニトリルまたはジクロロメタンなどの溶剤を利用する。開裂目的にはトリフルオロ酢酸が利用され、ピペリジンまたは他の好適なベースは、ブロモ誘導体とアミンの反応でのベースとして使用される。アミノ酸反応物の調製では、さまざまな保護基が利用される。好適な実施形態では、ペプトイドのＣ末端にあるシステイン残基に隣接した鎖での最初のアミンサブモノマーとして、ジアミノブタンが利用される。プロセスの最初のステップでは、選択したビーズまたは樹脂（グラムまたはミリグラム単位の量）が、ＤＭＦなどの好適な溶剤で膨張させられる。ビーズが、上記ビーズ上の反応性アミンの保護基で「保護」される場合、ビーズを脱保護するために、ＤＭＦによるその後の洗浄でピペリジンなどの塩基溶液が繰り返し添加される。一旦、ビーズを脱保護すると、あるいはＴｅｎｔａｇｅｌビーズなどのビーズを最初に利用する場合、ＤＭＦなどの適切な溶剤中で、システインまたはメチオニン（窒素上のＦｍｏｃまたは他の適切な保護基で保護され、および硫黄上のＴｒｔ（トリフェニルメチル）で保護され、各ビーズと反応させるために十分なモル量で）などの適切なアミノ酸と反応させてもよい。ビーカー（または試験管またはフラスコ）に入ったビーズ溶液に保護アミノ酸と一緒にＨＢＴＵ（テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）（カップリング試薬）および４−メチルモルフォリン（塩基）を添加し、樹脂に（または樹脂上のリンカーに）Ｆｍｏｃ／Ｔｒｔ保護アミノ酸を形成するために室温で撹拌する。その後、ＤＭＦなどの溶剤中でビーズを数回洗浄する。その後、加熱下（撹拌しながらマイクロ波をかける）、適切な溶剤中で、別の保護アミノ酸などの別の反応物とのアミノ酸上のアミンの反応を可能にする適切な試薬、またはブロモ酢酸などのサブモノマーおよびＤＩＣ（３−イソプロピルカルボジイミド）などの活性化剤を用いてＦｍｏｃ基を脱保護する。その後、結果として得られたビーズを数回洗浄し、次に、過熱下、適切な溶剤柱で望ましい単量体アミン（わずかなモルで過剰な量で）で処理する。結果として得られたビーズを数回洗浄し、その後、オリゴマーおよびオリゴマーを構築するために、ブロモ酢酸および最適なアミンで繰り返し処理する。トリフルオロ酢酸を用いて、ビーズからペプトイドを開裂させてもよい。好適な実施形態を含むペプトイド、例えば１−イル−ｎ−ブチルアミンを有するモノマーに隣接するシステインを有するペプトイドのための別のプロセスまたは他の適切なプロセスは、第二アミノ酸がリシンであるサブモノマー処理で構築されたモノマーのいずれかを添加することをさらに含むプロセスにより、Ｃ末端に２つのアミノ酸を有するペプトイドを構築することを含む。これには、反応物の反応後に、ペプトイド鎖上の炭素またはペプトイド鎖上の窒素のいずれか、または両方にＲ基が見つかるα置換ペプトイドを作成するために、一般的なアミノ酸側鎖から炭素置換基を選択してもよいα置換ブロモ酢酸サブモノマーを作成するために、任意のモノマーまたはサブモノマーの選択を含む。
【０１０１】
小分子の組み合わせライブラリーを、当該技術分野で公知の方法を用いて商業的に入手しても、あるいは作成してもよい。例えば、Ｅｉｃｈｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９５；  Ｃｈｏ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９９；  ＬｅＰｌａｅ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００２；  Ｏｓｔｅｒｇａａｒｄ  ａｎｄ  Ｈｏｌｍ，  １９９７；  Ｙａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９９）を参照。さらに、米国特許第６，３４４，３３４、およびＧａｌｌｏｐ等（１９９４年）、Ｇｏｒｄｏｎ等（１９９４年）、ＴｈｏｍｐｓｏｎおよびＥｌｌｍａｎ（１９９６年）による出版物も、上記分子およびライブラリーの情報源である。
【０１０２】
ペプチドの組み合わせライブラリーを、当該技術分野で公知の方法を用いて商業的に入手しても、あるいは作成してもよい。例えば、次の参考文献を参照：Ｓｔｅｗａｒｔ  ａｎｄ  Ｙｏｕｎｇ  （１９８４）；  Ｔａｍ  ｅｔ  ａｌ．  （１９８３）；  Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ  （１９８６）；  ａｎｄ  Ｂａｒａｎｙ  ａｎｄ  Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ  （１９７９）。これらの各々は、引用により援用される。
【０１０３】
ＲＮＡまちはＤＮＡを含む核酸の組み合わせライブラリーを、当該技術分野で公知の方法を用いて商業的に入手しても、あるいは作成してもよい。オリゴ糖の組み合わせライブラリーを、当該技術分野で公知の方法を用いて商業的に入手しても、あるいは作成してもよい。
【０１０４】
それぞれの場合において、複合体液中のバイオマーカーに関してスクリーニングするために、本明細書に記載の条件の下で、使用できるスクリーニングライブラリーを形成する樹脂またはビーズを支持するために、「リガンド」またはランダムリガンドを追加してもよい。好適なリガンドはペプトイドリガンドである。
【０１０５】
そのようなライブラリーの構築および／または使用に加えて、任意のそのようなリガンドを特徴付ける、精製する、および／または合成または再合成する必要がある、あるいはそうすることを求められる場合がある。そのような方法は当該技術分野で公知であり、クロマトグラフ的手段によるＨＰＬＣなどの精製方法または化学的手段による精製方法；質量分析またはＮＭＲまたはこれら方法のいずれかの組み合わせなどの特徴付け方法のありとあらゆるものを含む。当該方法は、例えば米国特許公報第２００７／０００３９５４号でさらに述べられており、引用により援用される。そのような場合、そのような精製リガンドのいずれも化合物またはほぼ精製された化合物と呼んでもよい。
【０１０６】
本発明の初期スクリーニング法において、上記支持体に操作上結合されたオリゴマーを有する支持手段としてビーズおよび／または樹脂が利用される。上記初期スクリーニングによる「ヒット」または「推定ヒット」を有する診断キットまたは他のキットにおいて、マイクロアレイまたは他のいかなる公知の診断プラットフォームを含むほぼすべての支持体に支持システムを拡大することができる。これらの場合、そのようなリガンドに付着したリガンド結合部位を有するリガンドの検出を可能にするために、推定ヒットのあるそのようなキットまたは他の支持システムが検出器または検出手段も有する、あるいは有するように構成されることが必要である。好適な検出方法としては、例えばＥＬＩＳＡ、または標識化二次抗体の使用を伴う他の方法が挙げられる。
【０１０７】
支持体は、適切な材料から作ることができる。そのような支持体を作るために利用される材料としては、例えばガラス、プラスチック、セラミック、または高分子樹脂またはビーズが挙げられる。支持体は、ニッケル、真鍮、鉄、または他の金属または金属の混合物などの材料も含んでもよい。また支持体を、リガンドまたはリガンド上の活性基と結合する、接続する、あるいは反応するリンカーおよび／または他の手段を有するように調節してもよい。そのような基は、米国特許公報第２００７／０００３９５４号でも述べられている。本発明では、リガンドまたはリンカーに、そしてその後、上記支持体に結合した個別のリガンドを有する樹脂またはビーズの数は、１００，０００超ないし約１５０，０００，０００の範囲に及ぶ。本発明の初期スクリーニング法で利用される好適な数は、１００万〜２００万のリガンド／樹脂の範囲に及ぶ。
【０１０８】
本発明の大型リガンドスクリーニング法には、ＴｅｎｔａＧｅｌ（登録商標）樹脂が最も好適である。これらの樹脂は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧまたはＰＯＥ）がグラフトされた低架橋ポリスチレンマトリックスからなるグラフト共重合体である。ＴｅｎｔａＧｅｌ樹脂は市販されている（Ｒａｐｐ  Ｐｏｌｙｍｅｒｅ  ＧｍｂＨ）。ＰＥＧは疎水性と親水性の特性を持つ「カメレオン型」高分子であるため、グラフト共重合体は修正された化学的性質を示す。製造者によれば、原理上は修飾されたポリスチレンマトリックス上にＰＥＧを導入する方法が２つある。最も簡単な固定化手法は、古典的エーテル合成に従って、クロロメチル化ポリスチレンに、その末端の水酸基の１つを通じてＰＥＧを結合させること、または固体支持体上に結合させるために他の二官能性ＰＥＧを使用することである。製造者によると、マトリックス上に段階的にＰＥＧを構築するアニオン性グラフト共重合を用いて、最高２０キロダルトンまで集合する分子のＰＥＧ鎖が、官能化架橋ポリスチレン上に固定されたことが分かった。約２０００〜３０００ダルトンのＰＥＧ鎖があるグラフト共重合体は、運動速度、移動度、膨張、および樹脂容量の点で最適であることが証明された。重合技術で１０エチレンオキサイド単位を超える単分散ＰＥＧを入手する手法がないため、樹脂に１０エチレンオキサイド単位を超える単分散ＰＥＧ鎖を導入する、あるいはポリスチレン骨格への直接重合により単分散ＰＥＧを入手する方法は理論上ない（単分散は、分子量分布のないＰＥＧと定義される）。これらのグラフト共重合体は圧力に安定しており、バッチ処理のほか、連続流条件下でも使用することができる。共重合体は約５０〜７０％のＰＥＧ（ｗ／ｗ）を含む。これらの高分子の特性は、ポリスチレンマトリックスと比べてＰＥＧの特性によって強く支配される。
【０１０９】
「ワン・ビーズ・ワン・コンパウンド」手法による化学的ライブラリーまたはペプチドライブラリーを設定する場合、一定量の樹脂のほか単一ビーズの容量の範囲内で利用できるビーズの数を知ることが不可欠である。表２に一部の粒径を要約し、それらを単一ビーズの対応する容量に関連付ける。計算は、０．２５〜０．３ｍｍｏｌ／ｇの範囲内であるＴｅｎｔａＧｅｌビーズの標準的充填に基づく。解析評価のため、ビーズ上に配列するために少なくとも５ｐｍｏｌの樹脂結合ペプチドが必要である。経済的に取り扱うことができるライブラリーに対する最適な樹脂量を推定するために、ビーズサイズとビーズ容量を考慮する必要がある。拡散処理および運動速度の均一性に関して、または単一ビーズ分析および単一ビーズ定量のためにも、すべてのビーズが非常に狭い粒度分布を示す。
【０１１０】
【表３】
2014515739.tif 000038
【０１１１】
その用途によって決まる適合特性を示すいくつかの種類のＴｅｎｔａｌＧｅｌ樹脂がある：
【０１１２】
ＴｅｎｔａｌＧｅｌ  Ｓ樹脂：
【０１１３】
ＰＥＧスペーサーが、アルキル結合によってポリスチレン骨格に付着する。この結合は酸または塩基に反応しない。この種類の樹脂は、ペプチド合成、固相有機合成、またはコンビナトリアル・ケミストリーに使用される標準タイプの樹脂である。
【０１１４】
ＴｅｎｔａｌＧｅｌ  ＰＡＰ樹脂：
【０１１５】
ＰＥＧが、ベンジルエーテル結合によってポリスチレン骨格に付着する。このベンジルエーテル結合は、１００％ＴＦＡまたはＴＦＡ／ＴＭＳＢｒの混合物のような厳しい酸条件に反応する。
【０１１６】
免疫性付与手法のため、またはＰＥＧ修飾誘導体（ＰＥＧが付着した生成物）の合成に、これらの特別に適合された樹脂が使用される。固相条件を適用することで可溶性ＰＥＧ修飾化合物を得るために（例えば、ＰＥＧ修飾ペプチド）、厳しい酸条件下で、固体支持体から合成化合物と一緒にＰＥＧスペーサーは開裂される。
【０１１７】
ＴｅｎｔａｌＧｅｌ  Ｎ樹脂：
【０１１８】
ＰＥＧスペーサーが、ベンジルエーテル結合によってポリスチレン骨格に付着する。小規模および大規模オリゴヌクレオチド合成のためのオリゴヌクレオチド化学で、これらの適合樹脂が使用される。ＣＰＧガラスとの比べると、容量は１０倍増加する。
【０１１９】
ＴｅｎｔａｌＧｅｌ樹脂はポリスチレンとポリエチレングリコールから構成される共重合体であるため、両方の基本高分子の化学特性および物理化学特性を考慮する必要がある。
【０１２０】
ＰＥＧ自体は吸湿性高分子である。ＰＥＧエステルはあまり安定していなく、簡単に加水分解されることが文献から公知である。保管条件および保管時間に応じて、過酸化物またはエステルを形成するポリエーテル鎖に沿ってＰＥＧ自体が酸化される可能性がある。その結果として、酸処理または塩基による処理によって、少量の「ＰＥＧ結合」を生じる形成したＰＥＧ−エステルを加水分解する。この結合は、ＰＥＧ信号および最終生成物中の不純物としてＭＳまたはＮＭＲによって見つけることができる。この化学的挙動は、すべてのＰＥＧ高分子およびＰＥＧベース高分子に忠実である。
【０１２１】
【表４】
2014515739.tif 000039
【０１２２】
ビーズライブラリーあたり１つのリガンドライブラリーを構築するために、ＴｅｎｔａｌＧｅｌビーズに加えて、他の樹脂および／または粒子を利用してもよい。例えば、軽度に架橋したポリスチレン樹脂またはポリアミド樹脂を利用してもよい。樹脂ビーズに基質を結合させる基が固相合成の不可欠な部分になり得る。リンカーは専用保護基であり、大抵の場合に、合成の最後に再現するためだけに、リンカーは官能基を結び付ける。リンカーは、付着した化合物の修飾または延長に使用される化学的性質の影響を受けてはならない。そして最終的に、開裂ステップが容易に、高い収量で進む必要がある。最良のリンカーによって、定量的収量での結合および開裂が可能でなければならない。
【０１２３】
特定の形態では、支持体がビーズ、プレート、ディップスティック、フィルター、膜、ピンまたはウェルであってもよい。試料は血液、血清、唾液、またはＣＳＦであってもよい。検出は、ＲＩＡ、ＦＩＡ、ＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロット、フローサイトメトリー、ＦＲＥＴ、または表面プラズモン共鳴を含んでもよい。
【０１２４】
カルボン酸リンカー
【０１２５】
ペプチド合成に使用される最初の結合基は、固相合成の父の名前を有する。メリフィールド（Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ）樹脂は、クロロメチル基で官能化された架橋ポリスチレンである。カルボン酸セシウム塩のＤＭＦ溶液を用いた塩化物の求核置換によって、カルボニル基が付着する。通常、カルボン酸を再生する開裂はフッ化水素によって行われる。
【０１２６】
カルボン酸に使用される第二分類のリンカーは、Ｗａｎｇリンカーである。一般的に当該リンカーは、架橋ポリスチレン、ＴｅｎｔａｌＧｅｌおよびポリアクリルアミドに付着してＷａｎｇ樹脂を形成する。これはＦｍｏｃ保護法を用いたカルボン酸ペプチドの合成用に設計され、活性化ベンジルアルコール設計のため、ＴＦＡによってカルボン酸生成物を開裂することができる。Ｗａｎｇ樹脂のさらに酸に不安定な形態が開発されている。ＳＡＳＲＩＮ樹脂はＷａｎｇリンカーと同じ構造を有するが、メトキシ基を添加することで、酸触媒開裂中に形成されるカルボニウムイオンを安定させる。
【０１２７】
カルボキサミドリンカー
【０１２８】
固相での第１カルボキサミドの作成には、一般的にリンクリンカーが好適である。本発明では、本発明の一次スクリーニングからのヒットまたは推定ヒットを製造または再合成する時に、当該リンカーが利用される。そのような場合、システインがリンクリンカーと反応させられる最初のモノマーであり、その後、プロセスにはオリゴマーを構築するための次のモノマー添加、またはオリゴマーを構築するための次のサブモノマー化学を伴う。リンクリンカーにおける高い酸感度は、２つの追加電子供与メトキシ基の結果である。第１カルボキサミドの作成において、カルボン酸として、ＴＦＡによって樹脂から合成修飾が開裂された後、リンカーに開始材料が付着する。
【０１２９】
【化７】
2014515739.tif 000040
ＴＦＡ触媒開裂後にカルボキサミドを生成するためのリンク樹脂の使用。
【０１３０】
アルコールリンカー
【０１３１】
テトラヒドロピラニル（ＴＨＰ）保護基に基づくヒドロキシルリンカーが、ＴｈｏｍｐｓｏｎおよびＥｌｌｍａｎｎによって開発されている。すべての種類のアルコールがジヒドロピランに容易に加わり、結果として得られるＴＨＰ保護基は強塩基に対して安定しているが、酸で容易に開裂される。当該リンカーは、メリフィールド樹脂に付着する。トリチル基は、多くのヘテロ原子に対して優れた、酸に不安定な保護基である。βメルカプトケトンのライブラリーの合成で、別のアルコールにトリチル基が使用されてきた。
【０１３２】
カルバメートおよびアミンリンカー
【０１３３】
トリパノソーマ寄生虫感染症の抑制剤の研究で調製される５７６種のポリアミンの組み合わせライブラリーの合成に、カルバメートリンカーが使われてきた。２つのリンカーを調査した。１つは安息香酸ヒドロキシメチルに基づき（１）、他の１つは、電子供与基を追加した（２）。前者が強酸条件で開裂できる一方で、後者はＴＦＡにより開裂が可能であった。
【０１３４】
【化８】
2014515739.tif 000041
【０１３５】
現在では、第３級アミンの作成に非常に有用なリンカーが開発されている。（第３級アミンは一般に薬物分子に使用される。）第１級アミンおよび第２級アミンは、マイケル付加によってリンカーに導入される。樹脂結合第４級アンモニウムイオンを得るために、アミンをアルキル化してもよい。弱塩基条件では、ホフマン脱離によって高純度の第３級アミンが得られる。
【０１３６】
トレースレスリンカー
【０１３７】
場合によっては、カルボン酸などのある形態で開始物質を取り込み、例えばカルボキサミドなどの別の形態で開裂させる。標的化合物が放出された官能（ｒｅｌｅａｓｅｄ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ）を必要とする場合、これは全く問題ない。（ペプチドは、カルボン酸またはカルボキサミドを常に含む。）しかし、低分子量非ペプチドの組み合わせライブラリーにおいて目的とする増加に、新種のリンカーの必要性が生じた。これらのリンカーは、開裂後に非特異的官能（ｎｏｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ）を示す。最終化合物が固相に対する結合部位の痕跡を示さないため、トレースレスリンカーと呼ばれる。
【０１３８】
試料
【０１３９】
上述のように、本発明のプロセスにおける分析のために調製される複合体液としては、細胞（Ｔ細胞または他の免疫エフェクター細胞を含む非接着性細胞）上に発現されたマーカーを含む潜在的バイオマーカーのホスト、微生物、タンパク質、ペプチド、脂質、多糖、小分子、有機分子、無機分子、生体分子、およびそのような複雑な環境で検出可能または反応可能な部分が挙げられる、あるいは挙げられる可能性がある。好適な実施形態では、そのようなマーカーは抗体であり、特に疾患または病状の結果として作成される抗体である。好適な実施形態では、患者または動物または生物から得られた血清、血漿、唾液、または他の液などの体液または試料がそのようなマーカーの入手源である。そのような試料を初期スクリーニングに、または予測ヒットまたはそのようなバイオマーカーに対する親和性を有するリガンドを用いたその後のスクリーニングに曝すために、各試料、組織、あるいは生物由来または環境由来の試料を前処理、処理、希釈、または取り扱う。バックグラウンドレベルまたはノイズと、リガンド結合部位とのリガンドの結合に関連した信号との間の十分な区別を行う、または可能にするために、本明細書で列挙された方法に従って試料を希釈する。
【０１４０】
リガンド／支持体を上記試料に曝すために必要な時間および／または条件は、特定の試料および他の要因に左右される。ここでは、請求項に係る発明のプロセスに好適な条件をさらに述べる。ほぼすべての場合、体液の大型リガンドライブラリーおよび／またはそのようなライブラリー由来のリガンドまたはキットに曝した後、洗浄または溶出ステップおよび他の調整手段を利用する。ＨＥＰＥＳバッファー、トリスバッファー、またはトリス緩衝生理食塩水などの緩衝液を含む水溶液を利用する。支持システムをエネルギー吸収材料で処理して、支持体表面からの「錯体」の脱着またはイオン化を促進してもよい。支持体からリガンド−リガンド結合部錯体を分離または除去するために、化学的手段も利用される。
【０１４１】
支持体上のリガンド−リガンド結合部位複合体を検出するための検出方法としては、測光手段および非測光手段が挙げられる。そのような方法は、上記プロセスが吸光度、蛍光、屈折率、偏光、または光散乱を検出および測定する方法を含むようにすることを含む。これらには、そのようなパラメータを測定する直接的および／または間接的手段を含む。蛍光を伴う方法としては、ＥＬＩＳＡまたはサンドイッチ分析などの免疫学的方法での蛍光標識を含む。屈折率を伴う方法としては、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）、格子結合法（例えば、センサー均一格子カプラー、波長検出光センサー（ＷＩＯＳ）、およびチャープ格子カプラー）、共振ミラー、および干渉法が挙げられる。偏光を伴う方法としては、偏光解析法が挙げられる。光散乱法も使用してもよい。標識化および／または分離および／または検出のための他の手段としては、磁気的手段も含むことができる。磁気共鳴映像法、気相イオン分光分析、ＭＲＩをすべて使用してもよい。
【０１４２】
作成されたデータの解析には、対照または基準に対する検出されたバイオマーカーによる信号の定量を一般的に必要とする。適切な手段でデータを解析できる。データを作成および解析するために、コンピュータおよびコンピュータプログラムを利用してもよい。ビーズおよび／または他の支持体を、同定目的のためにコンピュータコード化またはコード化してもよい。データ解析には、分析または検出方法の特定条件下での信号強度の解析を含む。リガンド、リガンド結合部位、または基準部分および／または二次検出部分を、検出可能部分で標識化または放射性標識化してもよい。当業者によって、疾患関連バイオマーカーを有する体液試料と、そのようなマーカーを含まないその対照または健康な患者の試料との違いおよび／または区別を評価できる。当業者によって、本明細書で述べられる方法に従って、構成する対照試料中にある、または発見される可能性がある擬陽性または他のヒットの存在を測定することもでき、および／またはそのような「ヒット」を取り除くことができ、そして当業者によって、本明細書で述べられる方法に従って、疾患または病状を有する患者試料中の疾患関連バイオマーカーを測定または発見するプロセスを続けることができる。いかなる場合でも、そのようなヒットの「検出」は、本明細書で述べられるものなどのリガンドライブラリー中のリガンドに対する疾患関連バイオマーカーまたは他のマーカーなどのリガンド結合部位を検出するための手段によって達成される。
【０１４３】
本明細書で列挙された疾患および／または病状に関連したバイオマーカーは、評価される特定の患者または動物または他の生物の疾患および／または病状の特定の段階に応じて変化する。ほとんどの場合、推定ヒットであり、かつ本明細書で列挙される化合物であるリガンドは、まず免疫反応および／または抗体または免疫細胞の形成を開始する天然抗原によく似ることが期待される。本発明と、クレームされ、かつ本明細書に詳述されるスクリーニングプロセスとは、抗原に対する反応で生成される特定の抗原または抗体のいずれの知識も必要としない。しかし、リガンドは、本明細書で列記されたスクリーニングおよび診断法で便利であることに加えて、ワクチンまたは医薬品候補として、それ自体で有用な場合がある。したがって、本発明は化合物および医薬品を含む。
【０１４４】
ペプトイドスクリーニング：
【０１４５】
ワン・ビーズ・ワン・コンパウンド（ＯＢＯＣ）組み合わせペプトイドライブラリーをスクリーニングするために、数万〜数百万のペプトイド支持ビーズを調製し、その後、複合生体試料に混ぜる。最初の複合生体試料は好適には対照試料であり、そしてその後、対照ヒットを「除去」したリガンドライブラリーで処理された次の複合生体試料は、罹患複合生体試料に対して処理および／またはスクリーニングされる。その後、少なくとも１つの疾患関連バイオマーカーと相互作用するリガンド／ビーズを、検出、同定、および単離および／または特徴付けする。好適な実施形態では、（１）ビーズ調製、（２）複合体液のスクリーニング、および（３）ヒットの検出を含むＴｅｎｔａｌｇｅｌスクリーニングプロトコルが使用される。
【０１４６】
ペプチドスクリーニング：
【０１４７】
ワン・ビーズ・ワン・コンパウンド（ＯＢＯＣ）組み合わせペプチドライブラリーをスクリーニングするために、数万〜数百万のペプチド支持ビーズを調製し、その後、本明細書に記載のプロセス後に複合生体試料に混ぜる。その後、疾患関連バイオマーカーと相互作用するビーズを、化合物構造決定のために同定および単離する。例えば、赤色蛍光染料によって標識化された、プローブタンパク質としてストレプトアビジン（ＳＡ）を用い、および非蛍光ビーズから蛍光を分離するためにＣＯＰＡＳ  ＢＩＯ−ＢＥＡＤフローソーターを用いたＯＢＯＣペプチドライブラリースクリーニングを行ってもよい。次の参考文献を参照：Ｍａｒａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．Ｃｏｍｂ．Ｃｈｅｍ．，  ２００９，  １１  （１），  ｐｐ  １４６?１５０。使用できる赤色染料はＡＴＴＯ５９０およびＴｅｘａｓ  Ｒｅｄである。ＳＡ−赤色蛍光染料複合体と一緒に上記ライブラリーをインキュベートした後、ペプチド−ＳＡ相互作用によって生じた陽性ビーズが得られる。上記ビーズを、マトリックス支援レーザー脱離イオン化飛行時間型質量分析（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ）で分析する。したがって、ペプチドライブラリーは、ペプトイドに、本明細書に記載のプロセスに類似した方法で使用してもよく、ここで、開始化合物ライブラリーからリガンド／ビーズヒットを除去するために初期対照体液試料を使用し、その後、罹患複合体液試料中のヒットをスクリーニングするためにライブラリーの残りのメンバーを使用する。これらのヒットは、その後、診断キットで進められる推定ヒットである。
【０１４８】
同様にして、本明細書に記載のプロセスを用いて、ビーズまたは支持体上でリガンドをスクリーニングしてもよい。これらのリガンドとしては、ペプトイドまたはペプチドに加えて、ライブラリーに組み込むことができ、本明細書に記載の条件下で複合体液のスクリーニングに使用される核酸オリゴマー、多糖、小分子、および／またはその組み合わせが挙げられる。
【０１４９】
キットおよび診断ツール
【０１５０】
本明細書に記載の化合物または組成物のいずれも、臨床環境または実験室環境のいずれかで診断キットにさらに利用してもよい。これらのキットは、簡単なポイント・オブ・ケア診断分析から複雑で多重化された機器またはプローブまでに及ぶことができる。中核となる支持体／リガンドシステムを取り囲む支持システムおよび「パッケージング」を、推定ヒットおよび／またはそのような適切なプラットフォームに再合成および設置されるヒットを含むように設計される現在市販されているキットから選択できる。あるいは、新たに設計された診断キットでそれらを使用できる。キットには一般的に、キットがそのために設計された特定の疾患または病状をスクリーニングおよび／または診断するキットを使用するためのすべての適切な試薬および取扱説明書が同封されている。そのようなキットまたは方法は、本明細書で列記されたスクリーニング法に従って同定された少なくとも１つの推定ヒットまたはリガンドを含む。当該リガンドまたは複数のリガンドを、本発明の化合物を含む同じリガンドまたはリガンドの混合物から選択してもよい。上記リガンドは、ある特定の病状あるいは疾患または病状の群または組に関して、疾患関連バイオマーカーに対するその親和性に基づいて選択してもよい。好適なリガンドはペプトイドリガンドである。上記キットは、特定の疾患または病状を診断する医師向けの説明書、および特定のキット、および疾患または病状に関するラベルも含む。したがって、本発明は、本明細書に記載され、および／または本明細書に列挙された特定の方法に従うことが公知であるライブラリーのいずれか１つを用いて初期スクリーニングから見つかった推定ペプトイドまたはリガンドなどのキットの必須構成要素のすべてを含むキットの組み合わせ、およびラベル付け説明書を含む。熟練オペレーターの監督下の臨床環境および実験室環境で、本明細書で開示される特定のプロセスおよび方法および材料も利用してもよいことも想定される。キットおよび／または機器または設備は、疾患関連抗体および／または細胞に対して特異的なペプトイドなどのリガンドを含む。「キット」は、一式の診断キットおよび／またはスクリーニングキットを含んでもよく、あるいは「キット」は、診断用ペプトイド、そのようなペプトイドを通じて発見および特徴付けされた抗体、または自己抗体との相互作用および自己抗体からの発見の結果として精製および／または特徴付けされた天然抗原を含む、あるいはそれから構成されるコンポーネントまたはサブコンポーネントを含んでもよい。そのような抗体および精製された抗原は、本発明の一部を成す。
【０１５１】
診断法
【０１５２】
本発明のリガンドライブラリーを利用して、疾病関連バイオマーカーに結合するリガンドを発見および測定する。その後、病態または病状を評価、スクリーニング、または診断するために、一般的に上記のキットおよび／または方法でそのようなリガンドを利用する。これらの診断法は一般的に、抗体および／または他の生体マーカーを含む疾病関連バイオマーカーのスクリーニングおよび発見を伴う。上述のように、血液試料からそのような抗体を取り出す、または取り除くために、適切なカラム上の本発明のリガンドを用いて、これらの抗体をさらに同定し、特徴付けることができる。同様に、そのような抗体に関連した天然抗原を探る、および発見するために、抗体を使用できる。したがって、本発明には、抗体と、そのような抗体に関連し、本発明の方法を用いて発見、単離、および特徴付けられた精製抗原の両方を含む。
【０１５３】
まず、病態または病状をスクリーニングおよび／または診断するためのキットおよび／または他の手段を、患者試料に対して評価する必要がある。これらの患者試料は、正常対照試料から、または患者がその疾患または症状を有する、または有することが疑われると確認された患者試料から得てもよい。患者は、疾患関連バイオマーカーの「存在」を越える疾患に関連した他の症状を示してもよい。患者は疾患の早期であってもよく、疾患または症状を全く示していなくてもよく、あるいは特定疾患の末期であってもよい。どのような臨床状況でも、適切な指針および管理下で、患者試料および臨床試料を盲検方式で提供し、その後、本発明の化合物を用いて評価してもよい。その後、特定の患者または患者群についての統計的に有意な結果、または公知または根本的なデータとの相関関係を見つけ出すか、見つけ出さないかにかかわらず、非盲検後にスクリーニングの結果として作成されたデータを評価してもよい。本発明は、（１）本発明の少なくとも１つの化合物で患者からの生体試料をスクリーニングすること、（２）本発明の上記少なくとも１つの化合物を用いて同じ条件下で、対照生体試料をスクリーニングすること、および（３）疾病関連バイオマーカーの有無を測定するために、正常対照データと患者データを比較することを含む疾患または症状の存在をスクリーニングする方法を含む。疾病Ｘを有する、あるいは有すると疑われる患者の群または患者の試料を、本発明の少なくとも１つの化合物を有するキットまたは診断プローブに対してスクリーニングしてもよく、そして、病態または症状またはその欠如を確認または検証するために、各患者に関して作成されたデータを、ケースバイケースで利用してもよい。患者の症状を評価し、治療選択を行う医師に指針を提供するために、その特定の患者について知られている全情報と組み合わせて、本明細書で作成されるそのようなデータを使用してもよい。そのようなスクリーニングの結果として作成された「情報」を、薬物治療を受けている個々の患者を評価するために、臨床試験環境で使用してもよい。したがって、本発明は、本明細書に記載の方法に従って行われるスクリーニングの使用を含む臨床試験の進行を評価する方法を含む。好適な実施形態では、本発明は、疾患関連バイオマーカーを検出するための本明細書の請求項に係るスクリーニングまたは化合物の使用を含む、早期病態をスクリーニングまたは診断する方法に関する。本発明は、疾患の急速な進行前にそのようなバイオマーカーの検出がよく見られる早期癌治療介入の状況で特に有用である。別の状況では、心臓血管疾患および／または代謝性疾患のほか、神経疾患での早期治療によって、命を救い、早期医療介入または処置を行わない場合のそのような疾患のさらなる進行を防止する、あるいは防止に役立つことが期待される。
【０１５４】
本発明は、対照溶液または標準溶液と疾患関連バイオマーカーを含む複合体液との差の分解能または効率を上げる方法も含む。例えば、方法は、バッファーおよび／または大腸菌（Ｅ  ｃｏｌｉ）溶解物および／またはリシンの調整剤で、システム／血清を事前調整または前処理または事前ブロックすることを含む。
【０１５５】
さらに別の実施形態では、（ａ）被験者からの抗体含有試料を、本明細書で列挙された式のペプトイドを含むペプトイドをそれに付着した１つ以上の支持体に接触させること、（ｂ）上記ペプトイドに結合した抗体を検出すること、および（ｃ）ステップ（ｂ）の結果に基づく処置決定を行うことを含む、疾患を有することが疑われる被験者を処置する方法が提供される。上記方法は、被検者からの上記試料を得ることをさらに含んでもよい。また、前記方法は、上記ペプトイドに結合している抗体が、対照非罹患患者で見られるものよりも多い場合に、上記試料を入手した被験者に関して疾病の診断を行うことをさらに含んでもよい。また、前記方法は、上記被検者に対する処置決定を行うことをさらに含んでもよい。上記試料を、本明細書で列挙された式の、１を超える数のペプトイドに接触させてもよい。複数の病態または症状を診断する目的で、上記試料を多重プラットフォームに接触させてもよい。上記支持体がビーズ、プレート、ディップスティック、フィルター、膜、ピンまたはその他であってもよい。試料は血液、血清、唾液、またはＣＳＦであってもよい。検出は、ＲＩＡ、ＦＩＡ、ＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロット、フローサイトメトリー、ＦＲＥＴ、または表面プラズモン共鳴を含んでもよい。
【０１５６】
さらに別の実施形態は、疾患を示す体液から単離された抗体組成物に関する。特定の実施形態では、上記抗体を有する試料を、疾患を示す、あるいは関連する抗体を特異的に結合するペプトイド組成物に接触させることで、上記抗体が単離される。上記抗体を、他の非抗体および非Ｄ特異成分から除去、単離、または精製できる。その後、上記抗体を洗浄する、および／またはペプトイド捕捉剤から切り離すことができる。
【０１５７】
特定の実施形態では、本明細書に記載の処理で発見されたペプトイドから作られたペプトイド配列が、大腸菌溶解物などの細菌溶解物で補完されている生体試料とハイブリダイズさせる。生体試料としては、対照試料、および中枢神経系障害に関するマーカーを有する試料が上げられる。例えば、マイクロアレイスライドをハイブリダイゼーションチャンバーで覆い、約１５分間、１ＸＴＢＳＴ（５０ｍＭトリス、ｐＨ８．０、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．１％  Ｔｗｅｅｎ２０）で平衡化する。その後、少なくとも、高くとも、あるいはおよそ０．５、１、１．５、２ｍｇ／ｍＬの溶解物濃度の細菌溶解物でスライドをブロックする。溶解物を取り除き、優しく振りながら細菌溶解物中で約１ｍＬの生体試料（すべての範囲および値を含む５、１０、１５、２０、または２５ｇ／ｍＬのおおよそのタンパク質濃度を有する）とともにスライドをインキュベートする。その後、マイクロアレイを１ＸＴＢＳＴで洗浄し、標識抗ＩｇＧ抗体（例えば、１：４００希釈物）とハイブリダイズさせる。その後、適切なバッファーでスライドを洗浄する。遠心分離機を用いてスライドを乾燥させ（例えば、１５００ｒｐｍで５分間回転）、例えば１００％出力で６３５−ｎｍレーザーおよび６００または６５０の光電子増倍管ゲインを用いたマイクロアレイスキャナーでスキャンする。したがって、本発明は、対照血漿試料および大腸菌溶解物を含む罹患試料を処理すること、および前記試料をペプトイドまたはリガンドアレイに接触させることを含む診断分析でのバックグラウンド抗血清ノイズを低減する方法にも関する。このプロセスを使用して、対照試料を罹患試料と比較する状況で血清中の抗体を検出および識別することに使用されるアレイの処理を支援できると考えられる。
【０１５８】
本明細書に記載の方法または組成物を、本明細書に記載の他の方法または組成物に対して実施できると考えられる。
【０１５９】
請求項および／または明細書で用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」と併せて使用される場合の単語「１（ａ、ａｎ）」の使用は「１（ｏｎｅ）」を意味するが、「１つ以上（ｏｎｅ  ｏｒ  ｍｏｒｅ）」、「少なくとも１つ（ａｔ  ｌｅａｓｔ  ｏｎｅ）」、および「１つまたは１つ超（ｏｎｅ  ｏｒ  ｍｏｒｅ  ｔｈａｎ  ｏｎｅ）」とも一致する。
【０１６０】
本明細書に記載の実施形態を、本発明の方法または組成物に対して実施できる、また逆もまた同様と考えられる。さらに、本発明の組成物およびキットを使用して、本発明の方法を達成できる。
【０１６１】
本発明を通して、用語「約（ａｂｏｕｔ）」は、値が装置、値を測定するために採用されている方法、または治験被験者の間に存在する変動量に対する固有の差異の誤差を含むことを示すために使用される。
【０１６２】
ワクチンおよび医薬品
【０１６３】
当然のことながら、本明細書で列挙されたプロセスを通じて発見された推定ヒットまたはペプトイドは、治療用医薬品またはワクチン候補でもあってよい。したがって、本発明は、本明細書に記載の方法に従ったスクリーニングの使用を含む医薬品候補またはワクチンを発見するプロセスに関する。
【０１６４】
実施例１  ライブラリー調製
【０１６５】
ペプトイド合成（システイン−ペプトイドまたはメチオニン−ペプトイド）のプロトコル
【０１６６】
以下の例では、本発明のペプトイドライブラリーの調製方法を示す。本実施例で利用される材料としては、反応フラスコまたはビーカー、プラスチックチューブ、針付き３ｍＬシリンジ１０〜１５本、Ｌａｔｅｘ手袋、１５ｍＬポリプロピレン製試験管および溶剤安全チップ付きマイクロピペット（１０００μＬ）１０〜１５本、ガラスピペット、および樹脂ビーズが挙げられる。使用する化学薬品および／または試薬としては、Ｎ，Ｎジメチルホルムアミド、ブロモ酢酸（ＢＭＡ）、無水ジメチルホルムアミド、ピペリジン、アセトニトリル、３−ジイソプロピルホルボジイミド（ＤＩＣ）、トリフルオロ酢酸、５（６）−カルボキシフルオレセイン、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、および４−メチルモルホリン（ＮＭＭ）が挙げられる。各ライブラリーの調製で利用されるさまざまなアミンのほか、ＨＢＴＵ（テトラメチルウロニウムヘキサフルオロフォスフェート）およびトリエチルシランも使用した。
【０１６７】
ペプトイド調製
【０１６８】
以下の式を用いて、処理に使用される各アミンの濃度を計算する。すなわち、
Ｖ＝ＦＷ／ｄ／１０００ｘ２Ｍｘ５ｍｌ
【０１６９】
手順：
【０１７０】
ステップ１
【０１７１】
樹脂ビーズの膨張
（ａ）樹脂ビーズ２５０ｍｇをきれいな乾燥した反応フラスコに入れ、１時間以内の期間にわたり膨張させたままにしたビーズに、ＤＭＦ水和物５ｍＬを添加した。その後、真空下で複数回（２回または３回）、ＤＭＦでビーズを洗浄した。
【０１７２】
ステップ２
【０１７３】
「脱保護ビーズ」（例えば、Ｔｅｎｔａ−Ｇｅｌ）を使用した場合は、ステップ（ｂ）、（ｃ）、および（ｄ）を省略した。
【０１７４】
以下の処理で、溶剤として無水ＤＭＦを用いたピペリジンの２０％溶液（塩基性）を使用した。
【０１７５】
「保護ビーズ」を使用する場合、ステップ（ｂ）、（ｃ）、および（ｄ）を含む以下の処理を２回行った。
（ｂ）２０％ピペリジン溶液２．５ｍＬを保護ビーズに添加した。
（ｃ）ピペリジンの添加後、２５℃で２００ｒｐｍに設定した振とう器／インキュベーターの上に反応フラスコを２０分間置いた。
（ｄ）その後、ＤＭＦ５ｍＬを用いたＤＭＦ水和物で反応フラスコを８〜１０回洗浄した。
【０１７６】
以下の溶液も調製した。
１．４６８ｍｇのＦｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨの無水ＤＭＦ溶液（量２ｍＬ）（溶液Ａ）。
２．１６１．６ｍｇのＮＭＭのＤＭＦ水和物溶液２ｍＬ。
３．３０３．２ｍｇのＨＢＴＵをＮＭＭバイアルに添加した（溶液Ｂ）。
【０１７７】
ＨＢＴＵ／ＮＭＭおよびＦｍｏｃ−Ｃｙｓの添加
【０１７８】
溶液Ａおよび溶液Ｂのそれぞれ１ｍＬをビーズ−（ＨＢＴＵ／ＮＭＭ）およびＦｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ）に添加した、そして１時間振とうする。
【０１７９】
ＤＭＦ中で、ビーズを５〜１０回洗浄した。
【０１８０】
１時間振とうしたビーズに溶液Ａおよび溶液Ｂの残りの溶液１ｍＬを添加し、ＤＭＦ中で５〜１０回再び洗浄した。
【０１８１】
以下の溶液も調製した。
２０％ピペリジン（無水ＤＭＦ溶液で）
２Ｍ  ブロモ酢酸
５０％ＤＩＣ／Ａ．ＤＭＦ
各アミンの２Ｍ溶液
【０１８２】
以下のステップ（ａ）、（ｂ）、および（ｃ）を２回行った。
（ａ）２０％ピペリジン溶液２．５ｍＬを添加した；（ｂ）２００ｒｐｍ、２５℃で、反応フラスコを振とうした、その後（ｃ）ＤＭＦでビーズを８〜１０回洗浄した。
【０１８３】
２Ｍブロモ酢酸溶液１０ｍＬを調製した。
【０１８４】
５０％の３．２Ｍ  ＤＩＣ／無水ＤＭＦ溶液（ｖ／ｖ）１０ｍＬも調製した。
【０１８５】
各ライブラリー用に各アミンの２Ｍアミン溶液を調製した。
【０１８６】
ペプトイド合成のため、２Ｍ原液１ｍＬを毎回使用し、ペプトイド鎖にアミンを追加した。
【０１８７】
ステップ３
【０１８８】
ブロモ酢酸１ｍＬを反応容器に加えた；
（ｂ）その後、５０％ＤＩＣ／ＤＭＦ溶液１ｍＬを添加し、得られた溶液に、（ｃ）１５秒間、１０％の出力でマイクロ波をかけた。
【０１８９】
マイクロ波のセットの間で、フラスコを左右に回転さらながら、ステップ（ｃ）を２回行った。
【０１９０】
マイクロ波をかけるステップの後、毎回、白色沈殿物が形成された。その後、ＤＭＦで、ビーズを８〜１０回洗浄した。
【０１９１】
ステップ４
【０１９２】
その順序で最初のアミンを１ｍＬ、前のステップからのブロモ中間体を含む反応フラスコに添加し、反応容器を振とうすることで、ビーズにアミンを均等に分布させた。その後、１５秒間、１０％の出力でマイクロ波を２回使用して、反応を開始させた。その後、ＤＭＦで、反応したビーズを８〜１０回洗浄した。
【０１９３】
目標とするペプトイドを作るため、すべてのアミンが追加されるまでステップ３および４を繰り返した。
【０１９４】
ステップ５
【０１９５】
その後、３回、ジクロロメタン（ＤＣＭ）でビーズを洗浄し、乾燥させた。
【０１９６】
ステップ６
【０１９７】
その後、９５％ＴＦＡ溶液（５ｍＬ）を用いて、ビーズからペプトイドを開裂させた。次に、残留ペプトイドを除去するために溶剤（ＣＨ３ＣＮおよび水）で洗浄したビーズから、ペプトイドを集めた。アルゴンガスを使用して残留ＴＦＡの除去を行った。その後、必要に応じてペプトイドを凍結乾燥、特徴付け、および精製した。
【０１９８】
上記反応条件は、特定のビーズ組成物に対して必要な量に応じた必要性を基準として変更される場合がある。
【０１９９】
図１〜５は、一般的に、ＡＤ診断、膵臓癌診断、および狼瘡のために本発明のライブラリーを調製する方法を説明する。一般的に、アミン部分を有するビーズは、標準的ペプチド化学を用いた一連のステップを通じてアミノ酸残基に結合し、その後、ハロゲン化物基を有する活性カルボニル部分と反応し、次に、Ｒ基を有する単量体アミンと反応した。１００万〜２００万の異なるリガンドを有する大型ペプトイドライブラリーを作成するために、図に示した通りに、サイクルのステップ２および３を繰り返した。Ｔｅｎｔａｇｅｌ樹脂またはビーズ上に調製された初期スクリーニングライブラリーは、一般的に鎖中の最初のモノマーとしてメチオニンアミノ酸を有した。本発明はそのようなアミノ酸を使用して、開裂可能なリンカーを持たないビーズまたは樹脂からの開裂を促進する。ペプトイドを含むシステインを構築するために使用されるリンク樹脂は、第１のアミノ酸としてメチオニンを必要としない、あるいはその使用が求められないリンカーを有する。一般的に、初期スクリーニングによって推定ヒットを見つけた後、ペプトイドを含むシステインを再合成した。システインの硫黄基によって、例えば、診断プラットフォーム基質上の別の反応部分とのペプトイド鎖の反応を可能にする。再合成されたペプトイドも、アミノ酸アミンの後の鎖上の第１の側鎖として１−イル−ｎ−ブチルアミン部分を含んだ。ペプトイドを表示させ、水溶液にペプトイドを溶解させるために当該基が必要であると考えている。
【０２００】
実施例２  一般的スクリーニング方法
【０２０１】
最適なペプトイドに付着した１６０ミクロンＴｅｎｔａｇｅｌビーズをＤＭＦ中で一晩膨張させた。その後、反応容器内で、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ水で、激しく振とうしてビーズを１０回洗浄した。毎回、新しいＭｉｌｌｉｐｏｒｅ水を添加し、１０回目の洗浄で、１５０〜２００ｒｐｍで、ビーズを一晩振とうしたままにした。翌日、１Ｘ  ＴＢＳＴを用いて同じ方法でビーズを洗浄し、１５０〜２００ｒｐｍで、少なくとも３時間、振とうしたままにした。
【０２０２】
その後、ビーズをチューブ１本あたり約０．５グラム、１Ｘ  ＴＢＳＴ溶液で、１５ｍＬコニカルチューブに均等に分けた。ＴＢＳＴを取り除き、希釈正常ヒト血清４ｍＬを各チューブに添加した。１Ｘ  ＴＢＳＴ中に作った血清原液を超微量滴下し、希望濃度の２０μｇ／ｍＬを入手した。その後、血清とビーズを含むチューブを、暗所にて４℃で一晩、タンブラーにかけた。その後、チューブから血清をピペットで取り出し、４ｍＬの１Ｘ  ＴＢＳＴと入れ替えた。その後、ビーズを再び浮遊させるためにチューブをゆっくりとひっくり返し、落ち着くまでそのままにした。合計３回のＴＢＳＴ洗浄を行うために、ＴＢＳＴの除去／添加をさらに２回行った。
【０２０３】
その後、１Ｘ  ＴＢＳＴの１ｍＬあたりヤギ抗ヒトＩｇＧ  Ｑｄｏｔ  ６５５を５μＬ調製することで、二次抗体溶液を調製した。ビーズから最後のＴＢＳＴ溶液を取り除くと、Ｑｄｏｔ溶液４ｍＬを添加し、暗所にて、２時間、４℃でビーズをタンブラーにかけた。その後、ビーズが落ち着くまでそのままにし、そしてＱｄｏｔ溶液を取り除いた。その後、４ｍＬの１Ｘ  ＴＢＳＴで、ビーズを３回洗浄した。その後、ＤＡＰＩフィルターを含むＵＶ顕微鏡下で確認しながら空のシャーレにビ―ズを注いだ。赤色に染められたすべてのビーズを取り除いた。
【０２０４】
初回スクリーニングの完了後、１５ｍＬのコニカルチューブにビーズを注ぎ戻し、次の血清試料添加までの少なくとも４時間、４℃でタンブラーにかけた。その後、１Ｘ  ＴＢＳＴとは対照的に、血清をＰＢＳ開始ブロックに希釈した場合を除き、正常血清添加と同じ方法で罹患血清をビーズに添加した。しかし、超微量滴下で正確な濃度を得るために、１Ｘ  ＴＢＳＴで元の原液を調製した。血清添加および二次抗体添加は、正常血清と同じである。
【０２０５】
罹患「ヒット」を取り除くと、１．５ｍＬエッペンドルフチューブに貯め、９５℃で２５〜３０分間、１％のＳＤＳ中で加熱した。その後、チューブからＳＤＳを取り除き、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ水で置き換えた。その後、４℃で１５分間、ビーズをタンブラーにかけた。その後、水を新しい水と交換し、さらに１５分間、ビーズをタンブラーにかけた。その後、水を取り除き、５０／５０のアセトニトリル／水の溶液と置き換え、さらに１５分間、タンブラーにかけたままにした。その後、ビーズを９６ウェルプレートの各ウェルに分け、乾燥させた。
【０２０６】
臭化シアン２０〜３０ｍｇ、アセトニトリル５００μＬ、氷酢酸４００μＬ、およびＭｉｌｌｉｐｏｒｅ水１００μＬの溶液を作成し、ヒットビーズを含む各ウェルに前記溶液２０μＬを添加した。プレートを覆い、１００ｒｐｍで１６時間、振とうしたままにした。その後、カバーを取り除き、ウェルから開裂溶液を蒸発させた。その後、ＭＳＭＳプレートにヒットをスポットで滴下し、４８００  ＭＡＬＤＩ／ＴＯＦ／ＴＯＦ分析装置を用いて配列を決定した。
【０２０７】
図６は、本明細書で開示され、本明細書に係るスクリーニング方法の概略的な模式図を示す。
【０２０８】
実施例３  アルツハイマー病スクリーニング
【０２０９】
Ｔｅｎｔａｇｅｌ磁気スクリーニング
【０２１０】
１６０ミクロンＴｅｎｔａｇｅｌビーズ（ＪＣ３Ｂライブラリー）５００ｍｇを１５ｍＬコニカルチューブに入れた。ＤＭＦ５ｍＬをチューブに添加し、ビーズを膨張させるために、一晩、静置したままにした。翌日、チューブからＤＭＦをピペットで取り出し、５ｍＬの１Ｘ  ＴＢＳＴと入れ替えた。チューブを逆さまにして混ぜ合わせ、ビーズが底に落ち着くまでそのままにし、そして１Ｘ  ＴＢＳＴを取り除いた。５ｍＬの１Ｘ  ＴＢＳＴを添加／除去することをさらに５回行った。
【０２１１】
ＰＢＳ開始ブロック４ｍＬをチューブに添加し、４つの別個のＡＤ試料それぞれ７μＬを同じチューブに添加することで、正常ＡＤ血清試料を調製した。洗浄したビーズに血清を添加し、暗所にて４℃で一晩、ビーズおよび血清をタンブラーにかけたままにした。翌朝、ビーズをタンブラーから取り出し、チューブから血清をピペットで取り出す前に、そのまま静置した。４ｍＬの１Ｘ  ＴＢＳＴをチューブに添加し、チューブを逆さまにして混ぜ合わせた。その後、チューブからＴＢＳＴをピペットで取り出し、４ｍＬの新しい１Ｘ  ＴＢＳＴと入れ替え、再び取り除いた。
【０２１２】
その後、５０μＬのよく混ぜたヤギ抗ヒトＩｇＧ  ＤＹＮＡビーズを４ｍＬの１Ｘ  ＴＢＳＴに添加することで、ＤＹＮＡ−ビーズ溶液を調製した。その後、洗浄したビーズに混合物を添加した。その後、暗所にて、４℃で２時間、ビーズをタンブラーにかけたままにした。
【０２１３】
ビーズを洗浄せずに、ＤＹＮＡビーズスクリーニングを行った。チューブをマグネットホルダーに入れ、１Ｘ  ＴＢＳＴを縁まで満たした。２分間、磁石とチューブをゆっくりと掻き混ぜ、マグネットホルダーの中でビーズをそのまま静置した。マグネットによって側面に付いたヒットビーズに触れないように、底に落ち着いたＴＢＳＴおよびフリーのビーズを慎重に取り除き、１Ｘ  ＴＢＳＴと置き換えた。チューブの側面に付いたビーズが見えなくなるまで、２、３回、処理を繰り返した。その後、ヒットビーズを１本のチューブに混ぜ合わせた。
【０２１４】
残りの非ヒットビーズを１．５ｍＬチューブに分け、逆さまにし、パルス遠心分離処理を素早く行った。上澄みを取り除き、新しい１Ｘ  ＴＢＳＴと置き換えた。ビーズ／ＴＢＳＴ溶液にＤＹＮＡビーズがこれ以上見えなくなるまで、この処理を６〜８回繰り返した。同じ方法でヒットビーズを洗浄した。
【０２１５】
ビーズを混ぜ合わせて１５ｍＬチューブに戻し、上記と同じ方法でビーズに正常血清を添加し、暗所にて４℃で一晩、タンブラーにかけたままにした。さらに、各４つの正常ＡＤ試料を３ｍＬ、ＰＢＳ開始ブロック１ｍＬに添加し、この溶液をＤＹＮＡビーズ「ヒット」ビーズチューブに添加した。翌日、正常血清を添加するとともに、同じ方法でビーズを洗浄した。
【０２１６】
２０μＬのヤギ抗ヒトＩｇＧ  Ｑｕａｎｔｕｍ  Ｄｏｔ  ６５５を４ｍＬの１Ｘ  ＴＢＳＴで希釈し（「ヒット」チューブに対しては、１ｍＬの１Ｘ  ＴＢＳＴで２０μＬのＱｄｏｔ）、そしてビーズに添加した。暗所にて、４℃で２時間、溶液をタンブラーにかけた。ヒットチューブと非ヒットチューブ両方を１Ｘ  ＴＢＳＴで４回洗浄し、ＵＶ顕微鏡下で真っ赤なビーズをスクリーニングした。４ｍＬの１Ｘ  ＴＢＳＴ中で、１時間、残りのビーズをタンブラーにかけ、そして正常血清と同じ方法で疾患ＡＤ血清を添加した。上記と同じ方法で磁気スクリーニングおよびＱｄｏｔ添加を行った。その後、ＭＡＬＤＩ  ＴＯＦ／ＴＯＦ質量分析器でヒットの配列を決定した。
【０２１７】
図７は、ペプトイドライブラリー（ＪＣ３Ｂ）からのビーズとともに一晩インキュベートした保存正常対照血清試料を示す。非特異的ビーズヒットを取り除くために、ＤＹＮＡビーズで標識化されたヤギ抗ヒトＩｇＧを用いた初期二次抗体ＤＹＮＡビーズスクリーニングを行った。その後、異なる二次抗体を用いて非特異的ヒットを再確認した。この場合、Ｑｕａｎｔｕｍ  Ｄｏｔ  ６５５（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で標識化されたヤギ抗ヒトＩｇＧを、ＤＡＰＩフィルターを含むＵＶ顕微鏡で検出した。赤色ビーズは、再確認されたヒットを示す；青色ビーズは、再確認しなかったビーズを示す。再確認済みビーズの割合は引き続き低く、そのため、ＤＹＮＡビーズスクリーニングは結局のところ中止した。
【０２１８】
図８は、ＡＤ患者からの血清とともにインキュベートされたペプトイドライブラリーを示す。その後、二次検出抗体（Ｑｕａｎｔｕｍ  ｄｏｔ  ６５５（Ｉｎｔｒｏｇｅｎ）で標識化されたヤギ抗ヒトＩｇＧ）とともにライブラリーをインキュベートした。ＤＡＰＩフィルターを含むＵＶ顕微鏡下でヒットビーズを検出し、赤色のビーズを、今後のスクリーニングのために配列が決定されるヒットとして取り出した。
【０２１９】
図９、１０、および１１は、疾患ヒットをペプトイドライブラリーから単離した後、残留抗体からヒットを取り払うために１％ＳＤＳ洗浄を行ったことを示す。次に、個別の罹患試料とともに、その後、ヤギ抗ヒトＩｇＧ  Ｑｕａｎｔｕｍ  ｄｏｔ  ６５５とともにビーズをインキュベートした。その後、ビーズをＵＶ顕微鏡下で可視化することで、ヒットが個別の試料で再確認されるかを確認した。一貫して再確認されたヒットを選んで配列決定をおこなった。
【０２２０】
図１２は、ＪＣ３Ｂライブラリーのアルツハイマー病スクリーニングで選択されたヒットのすべての配列を示す。
【０２２１】
図１３は、アルツハイマー病スクリーニングで選択された推定ヒットの化学構造を示す。
【０２２２】
図１４は、溶液中のペプトイドＡＤＴＧ１とマイクロアレイ上のＡＤＴＧ−１〜４２として指定されたペプトイドとの間の競合実験を示す。上記データから、ペプトイドＡＤＴＧ１、１４、２４、２５、３１、３５、および４０が同じ自己抗体に結合していることが分かる。配列上のペプトイドのそれぞれに対して同じ実験を行い、このプロセスによって、アルツハイマー病抗原に対する７つの異なる自己抗体にペプトイドが結合していることが分かった。
【０２２３】
図１５は、これらペプトイドのうちの４１種類の配列を示し、一番上から順番で、活性が高い物から活性が低い物へと指定され、リガンドがＡＤに対する４つの異なる抗体バイオマーカーに結合していることが分かった競合実験の結果に基づく４つの異なる群で表される。マイクロアレイスクリーニングではＡＤＰ１〜３が先に見つかり（データは示さないが、米国特許公報第２０１０／０３０３８０５号で先に述べられている）、ＡＤに対する２つの異なる抗体バイオマーカーに結合していることが発見された。ＡＤＰ１およびＡＤＰ３は同じ抗体に結合していることが分かったが、ＡＤＰ２は別の抗体に結合した。本発明の新しいスクリーニング方法で発見された新しいリガンドも（図１５の他のすべてのリガンドおよび図１３で示された通り）、群で異なる抗体に結合した。２つの新しい抗体バイオマーカーが発見され、新しいリガンドの一部は、ＡＤＰ１およびＡＤＰ３が結合する同じ抗体のいずれかに、またはＡＤＰ２が結合する抗体に結合した。
【０２２４】
ＡＤデータ解析：１回の測定によるマイクロアレイデータ
【０２２５】
マイクロアレイを、引用により援用される米国特許公報第２０１０／０３０３８０５号で述べられように、調製した。マイクロアレイスライドをハイブリダイゼーションチャンバーで覆い、１５分間、１ＸＴＢＳＴ（５０ｍＭトリス、ｐＨ８．０、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．１％  Ｔｗｅｅｎ２０）で平衡化する。その後、１時間、４℃にてブロッキングバッファー１ｍＬでスライドをブロックする。ブロッキングバッファーを取り除き、１６時間、４℃で優しく振とうさせながら血清（２０ｍｇ／ｍＬ）１ｍＬとともにスライドをインキュベートする。別の方法では、１時間、４℃にて大腸菌溶解物（１．５ｍｇ／ｍＬ）１ｍＬでスライドをブロックする。大腸菌溶解物を取り除き、１８時間、４℃で優しく振とうさせながら血清（１５ｍｇ／ｍＬ）の大腸菌溶解物（１．５ｍｇ／ｍＬ）溶液１ｍＬとともにスライドをインキュベートする。その後、マイクロアレイを１ＸＴＢＳＴで３回洗浄し、２時間、４℃にてオービタルシェーカーでＡｌｅｘａ−６４７標識抗ＩｇＧ抗体（５ｍｇ／ｍＬ）とハイブリダイズさせる。マイクロアレイスライドから容器カセットを取り除き、１ＸＴＢＳＴで洗浄し（１５分ｘ３回）、続いて０．１ＸＴＢＳＴで洗浄した（１０分ｘ１回）。その後、遠心分離機（１５００ｒｐｍで５分）を用いてスライドを乾燥させ、１００％出力で６３５−ｎｍレーザーおよび６００または６５０の光電子増倍管ゲインを用いたマイクロアレイスキャナー（Ｇｅｎｅ  Ｐｉｘ  Ａｕｔｏｌｏａｄｅｒ  ４２００）でスキャンした。Ｇｅｎｅ  Ｐｉｘ  Ｐｒｏ  ６．０ソフトウェアおよびＧｅｎｅｓｐｒｉｎｇソフトウェアで、すべてのスキャン画像を解析した。
【０２２６】
新しいペプトイドまたはリガンドはマイクロアレイ上に構築され、盲検にて、上記の方法に従って患者試料に対してスクリーニングした。図１６〜２０は、これらのスクリーニング分析の結果を示す。３４人の患者のプールから血清試料を入手した。図１６〜１８に示されるように、各試料はその強度または欠如を生じた。新しいペプトイドのうちの２つ（Ｐ１ａａｇ４およびＰ１ａａｇ２）を、同じ患者プールで公知のペプトイドＡＤＰ３およびＡＤＰ２に対して比較した。これらの結果から、新しいペプトイドと、ＡＤ関連抗体の存在と臨床症状または疾患の存在との間の直接的相関関係を示した非盲検で検証されている以前のペプトイドとの間の直接的相関関係が分かる。
【０２２７】
図１６Ａは、マイクロアレイ上のペプトイドＰ１ａａｇ１でスクリーニングされた３４人の被験者からの一群の血清試料（２０μｇ／ｍＬ）に関するデータを示す。図１６Ｂは、マイクロアレイ上のペプトイドＰ１ａａｇ２でスクリーニングされた３４人の被験者からの一群の血清試料に関するデータを示す。  
【０２２８】
図１７Ａは、マイクロアレイ上のペプトイドＰ１ａａｇ３でスクリーニングされた３４人の被験者からの一群の血清試料に関するデータを示す。図１７Ｂは、マイクロアレイ上のペプトイドＰ４ａａｇ１でスクリーニングされた３４人の被験者からの一群の血清試料に関するデータを示す。
【０２２９】
図１８Ａは、マイクロアレイ上のペプトイドＰ１ａａｇ５でスクリーニングされた３４人の被験者からの一群の血清試料に関するデータを示す。図１８Ｂは、マイクロアレイ上のペプトイドＰ１ａａｇ６でスクリーニングされた３４人の被験者からの一群の血清試料に関するデータを示す。
【０２３０】
また、これらのペプトイドの各々を図１３に示す。Ｐ１ａａｇ１はＪＣ３Ｂ−１；Ｐ１ａａｇ２はＪＣ３Ｂ−２１；Ｐ１ａａｇ３はＪＣ３Ｂ−７；Ｐ１ａａｇ４はＪＣ３Ｂ−５；Ｐ１ａａｇ５はＪＣ３Ｂ−Ｒ８、およびＰ１ａａｇ６はＪＣ３Ｂ−Ｒ１２である。
【０２３１】
図１９Ａは、ＡＤＰ２マイクロアレイデータを示す。図１９Ｂは、同じ患者プールからの患者血清を用いたＰ１ａａｇ４マイクロアレイデータを示す。ＡＤＰ２による左のデータセットとＰ１ａａｇ４による右のデータセットとの間には、少なくとも９０％の相関関係がある。
【０２３２】
図２０Ａは、ＡＤＰ３マイクロアレイデータを示す。図２０Ｂは、同じ患者プールでの患者血清試料を用いたＰ１ａａｇ２マイクロアレイデータを示す。ＡＤＰ３による左のデータセットとＰ１ａａｇ２による右のデータセットとの間には、少なくとも９０％の相関関係がある。
【０２３３】
図２１は、アルツハイマー病に関するｔｅｎｔａｇｅｌベーススクリーニングにおけるペプトイド（ＪＣ３Ｂ−Ｒ８）の使用の検証を示す。１４０ミクロン（μｍ）ビーズを使用し、血清濃度は４０μｇ／ｍＬだった。罹患ビーズと非罹患（正常対照）ビーズとの間には、明らかな違いがあった。
【０２３４】
図５０は、マイクロアレイに使用されるペプトイドとＥＬＩＳＡプレートに置かれるペプトイドとの調製および違いの簡単な模式図を示す。ペプトイドマイクロアレイが作られる方法に関する模式図：個々のビーズはマイクロタイタープレートのウェルに分けられ、濃縮原液を作るために、ビーズからペプトイドを開裂させる。これで各ウェルは１種類のペプトイドを含むことになることに注意する。その後、化学的に修飾されたガラス製顕微鏡スライドに、表面に共有結合するような方法で数千のペプトイドをスポットで入れる。１つの合成ライブラリーから高い再現性で数千のスライドを作ることができる。表面にＰＥＧ鎖がないが、ＥＬＩＳＡプレート上のペプトイドの密度がマイクロアレイ上と異なってもよいことを除き、ＥＬＩＳＡの製造も同様である。
【０２３５】
図５１は、疾患関連抗体−ペプトイド複合体を検出する二次抗体に結合された西洋ワサビペルオキシダーゼを用いた、１：８００の血清希釈物で正常対照血清と罹患血清との間に明確な違いがあるＥＬＩＳＡ実験を示す。無色の基質を添加し、結合ＨＲＰ酵素と反応する時に色を変える（青色）。
【０２３６】
図５２は、疾患血清（Ａ）および正常血清（Ｂ）のさまざまな血清希釈物でのＥＬＩＳＡ試験のさまざまなＡＤペプトイドを比較する滴定データを示す。正常血清には信号の強度がないが、濃度が１：１２，８００〜１：２００に上昇するにつれて、ＡＤペプトイドに明確な違いが現れ、そのすべてに強度がある。
【０２３７】
図５３は、さまざまな段階のアルツハイマー病（あるいは同疾患ではない）でのＡＤ患者の非盲検試料セットの臨床診断と、同じ患者血清試料（盲検）から得られ、かつ疾患関連抗体を検出するためにＡＤＰ３ペプトイドに対してスクリーニングされたデータとの相関関係を検証する図を示す。  示された結果は、Ｍａｙｏ  Ｃｌｉｎｉｃ  Ｊａｃｋｓｏｎｖｉｌｌｅからの血漿試料の盲検からのものである。ＵＮＤ＝未決定。プロットは、１つの血清濃度（１：８００）希釈物を取り入れることから得られる。１を超える測定値は陽性と見なし、１〜０．７の測定値は未決定と見なし、０．７未満の測定値は陰性と見なした。
【０２３８】
図５４は、さまざまな段階のアルツハイマー病（あるいは同疾患ではない）でのＡＤ患者の非盲検試料セットの臨床診断と、同じ患者血清試料（盲検）から得られ、かつ疾患関連抗体を検出するために本発明のさまざまなＡＤペプトイド（プロットは９種類のペプトイドの結果の平均値である）に対してスクリーニングされたデータとの相関関係を検証する図を示す。示された結果は、Ｍａｙｏ  Ｃｌｉｎｉｃ  Ｊａｃｋｓｏｎｖｉｌｌｅからの血漿試料の盲検からのものである。ＵＮＤ＝未決定。プロットは、１つの血清濃度（１：８００）希釈物を取り入れることから得られる。１を超える測定値は陽性と見なし、１〜０．７の測定値は未決定と見なし、０．７未満の測定値は陰性と見なした。
【０２３９】
図５５は、さまざまな段階のアルツハイマー病（あるいは同疾患ではない）でのＡＤ患者の非盲検試料セットの臨床診断と、同じ患者血清試料（盲検）から得られ、かつ疾患関連抗体を検出するために本発明のさまざまなＡＤペプトイドに対してスクリーニングされたデータとの相関関係を検証する図を示す。示された結果は、Ｍａｙｏ  Ｃｌｉｎｉｃ  Ｊａｃｋｓｏｎｖｉｌｌｅからの血漿試料の盲検からのものである。ＵＮＤ＝未決定。プロットは、１つの血清濃度（１：８００）希釈物を取り入れることから得られる。１を超える測定値は陽性と見なし、１〜０．７の測定値は未決定と見なし、０．７未満の測定値は陰性と見なした。データは、ＭＣＩ／鬱病試料に標識が付けられ、レビー小体型認知症試料も印が付けられる他の認知症に関する効果も示す。データからは、少なくとも３人のＭＣＩ患者が、本発明のＡＤ選択的ペプトイドによって捕らえられる抗体のうちの１つ以上の検出可能量の血清試料を持ちことが分かる。
【０２４０】
図５６Ａ〜Ｄは、複数のＡＤペプトイドを用いたＯｐｋｏ  Ｈｅａｌｔｈペプトイド診断分析と、非盲検時にこの情報が示された後の臨床診断との不一致を有する患者からの試料の小集団に関するデータを示す。図５６Ａは、臨床的に病気に罹っているが、ＯｐｋｏペプトイドＰｌａａｇ４が１．０未満（１箇所ではＵＮＤ；滴定ＡＤ陽性）であった患者に対して示されるペプトイドＡＤＰ３およびその他に関するデータを示す。他のすべてのＯｐｋｏペプトイドはＡＤに対して陽性（すなわち、１．０超）であった。図５６Ｂから、正常（非認知症）示唆前ＡＤと現在診断されている患者の疾患関連抗体に対してＯｐｋｏペプトイドは陽性であったことが分かる。図５６Ｃから、Ｏｐｋｏ  ＡＤペプトイドが、患者が認知症の他のいくつかの形態を有することを示唆するＡＤと臨床的に診断されている患者のいずれの希釈点においても１超の強度を示さなかったことが分かる。図５６Ｄから、臨床的に陽性のＡＤ患者では、疾患関連抗体に対して複数のＯｐｋｏ  ＡＤペプトイドが陽性ではないが、２種類のペプトイド（Ｐ１ａａ６およびＰ１ａａｇ４）は陽性であり、それ故に１箇所ではＵＮＤであり、滴定後でもＵＮＤであったことが分かる。
【０２４１】
図５７は、ＡＤＰ３が配置されたマイクロアレイを用いて以前のＡＤ試料から作成されたクラスタ図を示す。マイクロアレイデータおよびＥＬＩＳＡプラットフォームを用いて作成されたデータでの罹患と対照との間には明確な相関関係がある。図５７から、アルツハイマー病に関連し、パーキンソン病または狼瘡（ＳＬＥ）に関連しない疾患関連抗体にＡＤＰ３ペプトイドが選ばれることが分かる。
【０２４２】
図５８は、合計１０６種の試験された血清試料を用いたＥＬＩＳＡ分析の要約を示す。このデータでは、シングルポイントデータから９個の試料を呼び出すことができなかった（臨床的に、４個がＡＤ、５個が正常）。滴定曲線の観察によって、９個のうちの３個を臨床データに一致するものとして割り当てた。６個は不明なままである（さまざまなペプトイドのうちで不一致）。
【０２４３】
図５９は、Ｐ１ａａｇ７〜９の化学構造を示す。
【０２４４】
アルツハイマー病に関連した疾患関連抗体を検出するＯｐｋｏ診断法に関する上図で示されたデータによって、本明細書で開示および列挙された方法が、アルツハイマー病の発症を確認および／または予測するための強力なツールであることを確認し、および／または神経疾患または神経障害が軽度認識機能障害のような他のいくつかの神経障害であることを確認する。データは、疾患関連抗体を検出する特定のペプトイドおよび方法を請求および開示する先願特許を明確に裏付けている。本明細書では、新しく新規で高速なスクリーニングプロセスを通じて発見された完全に新規のペプトイドを、マイクロアレイを含む複数のプラットフォームで、およびさまざまな段階のアルツハイマー病症状を持つ患者の臨床データに対するＥＬＩＳＡで検証し、盲検後に実際の臨床データと有意に相関関係があった。
【０２４５】
実施例４  膵臓癌スクリーニング
【０２４６】
膵臓癌患者からの血清のスクリーニングを行うために、血清ペプトイドライブラリーを作成した。２つのライブラリー（ＪＣ３ＢおよびＪＣ５Ｂ）を合成した。膵臓癌バイオマーカーに対するスクリーニングで合計２６件のヒットが得られた。ＪＣ３Ｂライブラリーは、ジアミノブタン；Ｒ−メチルベンジルアミン；イソブチルアミン；シクロヘキシルアミン；ピペロニルアミン；４−（アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド；フルフリルアミンおよび２−メトキシエチルアミンから選択されるアミノを含んだ。ＪＣ５Ｂライブラリーを、イソブチルアミン；２−メトキシエチルアミン；ジアミノブタン；フルフリルアミン；シクロヘキシルアミン；Ｒ−メチルベンジルアミン；ピペロニルアミン；４−（アミノエチル）ベンゼンスルホンアミドから選択されるアミノから構築した。スクリーニングには、各膵臓癌血清および対照血清の保存した６個の試料を使用した。ＪＣ３Ｂ条件：各罹患血清試料５μＬのＰＢＳブロッキングバッファー溶液４ｍＬを使用し、および各正常血清試料５μＬの１Ｘ  ＴＢＳＴ溶液４ｍＬを使用した。ＪＣ５Ｂ条件：罹患血清１０μｇ／ＬのＰＢＳブロッキングバッファー溶液４ｍＬを使用し、および正常血清１５０μｇ／Ｌの１Ｘ  ＴＢＳＴ溶液４ｍＬを使用した。Ｄｎａｙビーズスクリーニング：ヤギ抗ヒトＩｇＧ  ＤＹＮＡビーズ５０μＬを１ｍＬの１Ｘ  ＴＢＳＴに添加した。非特異的ヒットを取り除くために、ＤＹＮＡビーズスクリーニングを行った。Ｑｕａｎｔｕｍ  ｄｏｔスクリーニング：ヤギ抗ヒトＩｇＧ  Ｑｕａｎｔｕｍ  Ｄｏｔ  ６５５を１Ｘ  ＴＢＳＴに１０μＬ／１ｍＬの量で添加した；ヒットを取り除くためにＵＶ顕微鏡を用いてスクリーニングした。ヒット検証：ＪＣ３Ｂ：ヒットをスクリーニングするために、２μＬの各対照ＰＣ試料を１ｍＬの１Ｘ  ＴＢＳＴに添加した；赤色（非特異的）ビーズを取り除き；ヒットをスクリーニングするために、２μＬの各罹患ＰＣ試料を１ｍＬのブロッキングバッファーに添加した；赤色ビーズ（実際のヒット）を取り除き、および配列決定のために開裂させた。ＤＹＮＡビーズヒットおよびＱ  ｄｏｔヒットの両方にこれを行った。１２件のヒットを再確認した。ＪＣ５Ｂ：ヒットに対して、５０μｇ／ｍＬの保存罹患試料を１ｍＬのブロッキングバッファーに添加した；ヒットに対して、１５μｇ／ｍＬの保存対照試料を１Ｘ  ＴＢＳＴに添加した；赤色ビーズ（実際のヒット）を取り除き、および配列決定のために開裂させた；ＤＹＮＡビーズヒットおよびＱ  ｄｏｔヒットの両方にこれを行った。１４件のヒットを再確認した。
【０２４７】
図２２（左の写真）では、膵臓癌患者からの血清とともにペプトイドライブラリーをインキュベートした。その後、二次検出抗体（Ｑｕａｎｔｕｍ  ｄｏｔ  ６５５（Ｉｎｔｒｏｇｅｎ）で標識化されたヤギ抗ヒトＩｇＧ）とともにライブラリーをインキュベートした。ＤＡＰＩフィルターを含むＵＶ顕微鏡下でヒットビーズを検出し、赤色のビーズを、今後のスクリーニングのために配列が決定されるヒットとして取り出した。
【０２４８】
（右の写真）：膵臓癌疾患ヒットをペプトイドライブラリーから単離した後、残留抗体からヒットを取り払うために１％ＳＤＳ洗浄を行った。次に、膵臓癌患者からの個別の血清試料とともに、その後、ヤギ抗ヒトＩｇＧ  Ｑｕａｎｔｕｍ  Ｇｏｔ  ６５５とともにビーズをインキュベートした。その後、ビーズをＵＶ顕微鏡下で可視化することで、ヒットが個別の試料で再確認されるかを確認した。一貫して再確認されたヒットを選んで配列決定を行った。
【０２４９】
図２３：（左）ヒット検証写真は、Ｔｅｎｔａｇｅｌスクリーニングの有効性を示す。膵臓癌疾患ヒットをペプトイドライブラリーから単離した後、残留抗体からヒットを取り払うために１％ＳＤＳ洗浄を行った。次に、膵臓癌患者からの個別の血清試料とともに、その後、ヤギ抗ヒトＩｇＧ  Ｑｕａｎｔｕｍ  Ｇｏｔ  ６５５とともにビーズをインキュベートした。その後、ビーズをＵＶ顕微鏡下で可視化することで、ヒットが個別の試料で再確認されるかを確認した。一貫して再確認されたヒットを選んで配列決定を行った。
【０２５０】
（右）さらにＳＤＳ洗浄を行い、次に対照血清とともに、その後、ヤギ抗ヒトＩｇＧ  Ｑｕａｎｔｕｍ  Ｇｏｔ  ６５５とともにビーズをインキュベートした。その後、ビーズをＵＶ顕微鏡下で可視化することで、ヒットが個別の試料で再確認されるかを確認した。一貫して再確認されたヒットを選んで配列決定を行った。
【０２５１】
図２４は、混合による膵臓癌スクリーニングでのヒット検証を示す。データから、マーカーは特定疾患に対して特異的であることが分かる（ＰＣ対ＡＤ）。
【０２５２】
図２５は、ＪＣ３Ｂライブラリーからの膵臓癌リガンド（推定ヒット）を示す。
【０２５３】
図２６は、ＪＣ５Ｂライブラリーからの膵臓癌リガンド（推定ヒット）を示す。
【０２５４】
実施例５  狼瘡スクリーニング
【０２５５】
図２７は、正常対照に対するＳＬＥライブラリースクリーニングでのＳＬＥヒットを示す。ＫＮ１Ｂライブラリーを使用し、この特定スクリーニングで有用なことが分かった。ライブラリーおよび血清試料を除き、膵臓癌スクリーニングおよびＡＤスクリーニングに対して、上記のように狼瘡スクリーニングで全く同じプロトコルを使用した。
【０２５６】
図２８は、推定ＳＬＥヒットを示す。
【０２５７】
図２９は、ヒット検証研究を示す。
【０２５８】
診断キットおよび方法
【０２５９】
図３０は、２つの異なる結合法を用いた、ＥＬＩＳＡプレートに対するＳＬＥ（狼瘡）ペプトイドのうちの１つの結合を示す。最初のケースでは、ストレプトアビジン処理プレートを通じてＥＬＩＳＡプレートに「結合」する（これは非共有結合）「部分」としてビオチンを使用する。ペプトイドはフルオレセインタグを有する。２番目のケースでは、ペプトイド上のシステインはマレイミド処理ＥＬＩＳＡプレートに共有結合する。両方のケースにおいて、約３ｍＭ超のｍＭ濃度で有意なフルオレセイン信号が見られることがデータから分かる。
【０２６０】
図３１は、さまざまな濃度の溶液中のプレートに結合した遊離ＫＮ１Ｂ−２０−ビオチン−フルオレセインとＫＮ１Ｂ−２０−ビオチンの競合分析を示す。遊離ＫＮ１Ｂ−２０−ビオチンの濃度が結合型対遊離型の等モル濃度から増加するにつれて、信号の低下が生じる。
【０２６１】
図３２は、１０ｍＭでペプトイドを有するＥＬＩＳＡプレートを示し、そしてさまざまな血清希釈での罹患血清（列１）（ＡＤ）と正常対照血清（列３）の違いを明確に示す［１：２００を倍にして１：４００、１：８００、１：１，６００、１：３，２００、１：６，４００、１：１２，８００とした］。ＡＤペプトイドＡＤＰ３を有するペプトイドウェルは、１０ｍＭのペプトイド濃度を有する。同様に図３２は、１４０ミクロンビーズ上に４０μｇ／ｍＬの希釈血清濃度のＴｅｎｔａｇｅｌプラットフォームに対して罹患試料と正常対照試料の間の明確な違いを示す。
【０２６２】
図３３は、さまざまな濃度でペプトイドを有するＥＬＩＳＡプレートを示し、そしてさまざまな希釈での罹患血清（ＡＤ）と正常対照血清の違いを明確に示す［１：２００を１：１２，８００とした］。矢印は、１：８００血清希釈物での１０ｍＭ  ＡＤＰ３のデータを示す。
【０２６３】
図３４は、１０ｍＭでペプトイドを有するＥＬＩＳＡプレートを示し、そしてさまざまな血清希釈物［１：２００〜１：１２，８００］での罹患血清（ＳＬＥ）と正常対照血清の違いを明確に示す。ＳＬＥ−ＫＮ１Ｂ−２０（１０ｍＭ）を用いた罹患血清と対照との間の明確な違いがデータから分かる。総タンパク量を説明することを条件に、あらゆるスクリーニング方法で血漿も利用してもよい。
【０２６４】
図３５は、さまざまな血清希釈物で結合バッファー溶液に調製された１０ｍＭ  ＡＤＰ３を用いたＡＤ血清ＥＬＩＳＡグラフを示す。１：２００〜約１：１０，０００の希釈範囲にわたって、正常血清と罹患血清の分離が起こった。開始希釈物は１：２００だった（群１ＡＤ血清０．３９４ｍｇ／ｍＬおよび非罹患血清０．３８６ｍｇ／ｍＬ）。
【０２６５】
図３６は、さまざまな血清希釈物で結合バッファー溶液に調製された１０ｍＭ  ＫＮ１Ｂ−２０を用いたＳＬＥ血清ＥＬＩＳＡグラフを示す。１：２００〜約１：１０，０００の希釈範囲にわたって、正常血清と罹患血清の分離が起こった。開始希釈物は１：２００だった（群１ＳＬＥ血清０．３７５ｍｇ／ｍＬおよび非罹患血清０．３９６ｍｇ／ｍＬ）。
【０２６６】
図３７は、さまざまな血清希釈物でＤＭＳＯ溶液に調製された１０ｍＭ  ＫＮ１Ｂ−２０を用いたＳＬＥ血清ＥＬＩＳＡグラフを示す。１：２００〜約１：１０，０００の希釈範囲にわたって、正常血清と罹患血清の分離が起こった。開始希釈物は１：２００だった（群１ＳＬＥ血清０．３６７ｍｇ／ｍＬおよび非罹患血清０．３２２ｍｇ／ｍＬ）。
【０２６７】
図３８は、Ｔｅｎｔａｇｅｌビーズヒット検証のためのＦＡＣＳプラットフォームを示す。
【０２６８】
図３９は、さまざまな濃度（１００μｇ／ｍＬ〜１，０００μｇ／ｍＬ）の血清で、そして抗ＤＮＰ標識二次抗体による治療に反応した、アセチル基を有するビーズと２，５−ジニトロフェニル基（ＤＮＰ）を有するビーズの分離度を示す。平均蛍光強度（ＭＦＩ）分離は、血清１，０００μｇ／ｍＬの高希釈物で最大だった。
【０２６９】
図４０は、１，０００μｇ／ｍＬの血清濃度で遊離型エタノールアミン−ＤＮＰと抗ＤＮＰ抗体に対するＤＮＰ（プレート上）の結合との直接的な競合があることを示す。
【０２７０】
図４１は、保存正常対照血清と保存ＡＤ血清からのＡＤＰ３結合抗抗体を示す。データは、２つの異なる二次抗体（ヤギ抗ヒトＤｙｌｉｇｈｔ６４９およびヤギ抗ヒトＡｌｅｘａ６４７）を用いて２０〜１４０μｇ／ｍＬの濃度範囲の血清で良好な分離を示す。
【０２７１】
図４２は、さまざまな血清濃度範囲でのバックグラウンド減算後の正常対照血清およびＡＤ血清からのＡＤＰ３結合自己抗体を示す。２０μｇ／ｍＬ未満ないし１２０μｇ／ｍＬ以上の大部分の血清濃度で、有意な程度の分離がある。
【０２７２】
図４３および４４は、ＳＬＥ（狼瘡）再合成ペプトイドリガンドヒットの構造を示す
【０２７３】
図４５は、１０μｍ  Ｔｅｎｔａｇｅｌビーズ上でのＡＤＰ３の調製、および示されたラクトンの質量分析測定値と一緒にＣＮＢｒを用いた開裂を示す。
【０２７４】
図４６は、さまざまな濃度での正常対照血清およびアルツハイマー病血清からのＡＤＰ３結合自己抗体を示す。１Ｘ  ＴＢＳＴで３時間、ビーズを事前ブロックし、ヤギ抗ヒトＡｌｅｘａ６４７二次抗体を用いて検出した。
【０２７５】
図４７は、さまざまな血清濃度での正常対照血清およびアルツハイマー病血清からのＡＤＰ３結合自己抗体を示し、ＤＮＰ値も示す。
【０２７６】
図４８および４９は、大腸菌溶解物およびリシンなどの事前ブロック条件を用いた正常対照血清およびアルツハイマー病血清からのＡＤＰ３結合自己抗体を示す。
【０２７７】
ＥＬＩＳＡプロトコル
【０２７８】
Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから９６ウェルマレイミド活性化プレートを入手し、Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒのプレート洗浄機を用いて４００μＬ／ウェルの洗浄バッファー（０．１Ｍリン酸ナトリウム、０．１５Ｍ塩化ナトリウム、０．０５％  Ｔｗｅｅｎ  ２０，ｐＨ７．２）で３回洗浄した。ＰＢＳ結合バッファー（０．１０Ｍリン酸ナトリウム、０．１５Ｍ塩化ナトリウム、１０ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ７．２）で、目的のペプトイドを１０ｍＭに希釈し、このペプトイド溶液２００μＬを適当なウェルに加えた。その後、５００ｒｐｍで振とうしながら、室温で暗所にて２時間、プレートをインキュベートしたままにした。その後、プレート洗浄機を用いてウェルからペプトイド溶液を吸い取り、４００μＬ／ウェルの洗浄バッファーで３回再洗浄した。Ｌ−システイン  ＨＣＬ：結合バッファーでＨ２０（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を１０μＬ／ｍＬに希釈し、２００μＬ／ウェルで添加した。その後、５００ｒｐｍで振とうしながら、室温で暗所にて１時間、プレートをインキュベートし、３回洗浄した。ＳｔａｒｔｉｎｇＢｌｏｃｋ（商標）（ＰＢＳ）ブロッキングバッファー（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）２００μＬをウェルに添加し、５００ｒｐｍで振とうしながら、４℃で暗所にて１時間、プレートをインキュベートした。プレート洗浄機を用いてプレートを３回洗浄し、１：２００から希薄になる方向に結合バッファーで連続的に希釈することで血清試料を調製した。試料濃度が同様になるように、ｎａｎｏ−ｄｒｏｐ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いて１：２００濃度の試料原液を用いた。次の希釈物を調製する前に、各希釈試料をボルテックスにかけた。血清（罹患と正常の両方）の適切な希釈物２００μＬのほか、対照として血清を含まない結合バッファーもプレートに添加した。５００ｒｐｍで振とうしながら、室温で暗所にて２時間、血清をインキュベートしたままにした。プレートを再洗浄し、ヤギ抗ヒトＩｇＧ  ＨＲＰ（Ｍｉｌｉｐｏｒｅ）の１：３０，０００希釈物の結合バッファー溶液２００μＬを適切なウェルに添加し、暗所にて５００ｒｐｍで振とうしながら３０分間、室温でインキュベートした。プレートを３回洗浄し、ＴＭＢ（３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジン）溶液１００μＬを各ウェルに添加し、暗所の作業台上で３０分間、発色させた。反応を停止させるために２Ｍ硫酸停止液１００μＬを添加し、プレートリーダーを用いて４５０の吸光度で読み取った。
【０２７９】
したがって、いずれの場合にも、各疾患またはすべての疾患に関して、そのようなマーカーに結合した疾患関連バイオマーカーおよびリガンドを迅速に発見するために、本発明のプロセスを利用してもよい。その後、これらのリガンド（リガンドからなるこの大きなプール）を診断および／または治療目的に使用できる。診断プラットフォームとしては、マイクロアレイ、ビーズベース方法、およびＥＬＩＳＡシステムが挙げられる。上記で利用される条件は、本発明の重要な一面を含む。これらの条件には、血清の希釈範囲のほか、ビーズまたはウェルでの特定ペプトイドの濃度、および検出方法も含む。ビーズ上にペプトイドを有するビーズの数は、特定の試験キットまたはスクリーニングキットに応じて異なる場合がある。これらの数は、ビーズ／リガンドが本明細書で列挙された初期スクリーニングプロトコルおよび方法で使用されるかどうか、および／または高親和性リガンドの発見に基づく試験キットで使用されるかに応じても異なる場合がある。
【０２８０】
本発明の広範囲に及ぶ発明概念から逸脱せずに、上述の実施形態に対して変更を行うことができることは、当業者に高く評価されるであろう。そのため、当然のことながら、本発明は開示された特定の実施形態に限定されないが、添付した特許請求の範囲に定められる本発明の精神および範囲内にある修正を対象とすることを意図としている。
【図１】
2014515739.tif 000053
【図２】
2014515739.tif 000054
【図３】
2014515739.tif 000055
【図４】
2014515739.tif 000056
【図５】
2014515739.tif 000057
【図６】
2014515739.tif 000058
【図７】
2014515739.tif 000059
【図８】
2014515739.tif 000060
【図９】
2014515739.tif 000061
【図１０】
2014515739.tif 000062
【図１１】
2014515739.tif 000063
【図１２Ａ】
2014515739.tif 000064
【図１２Ｂ】
2014515739.tif 000065
【図１３Ａ】
2014515739.tif 000066
【図１３Ｂ】
2014515739.tif 000067
【図１４】
2014515739.tif 000068
【図１５Ａ】
2014515739.tif 000069
【図１５Ｂ】
2014515739.tif 000070
【図１６Ａ】
2014515739.tif 000071
【図１６Ｂ】
2014515739.tif 000072
【図１７Ａ】
2014515739.tif 000073
【図１７Ｂ】
2014515739.tif 000074
【図１８Ａ】
2014515739.tif 000075
【図１８Ｂ】
2014515739.tif 000076
【図１９Ａ】
2014515739.tif 000077
【図１９Ｂ】
2014515739.tif 000078
【図２０Ａ】
2014515739.tif 000079
【図２０Ｂ】
2014515739.tif 000080
【図２１】
2014515739.tif 000081
【図２２】
2014515739.tif 000082
【図２３】
2014515739.tif 000083
【図２４】
2014515739.tif 000084
【図２５】
2014515739.tif 000085
【図２６】
2014515739.tif 000086
【図２７】
2014515739.tif 000087
【図２８】
2014515739.tif 000088
【図２９】
2014515739.tif 000089
【図３０】
2014515739.tif 000090
【図３１】
2014515739.tif 000091
【図３２】
2014515739.tif 000092
【図３３】
2014515739.tif 000093
【図３４】
2014515739.tif 000094
【図３５】
2014515739.tif 000095
【図３６】
2014515739.tif 000096
【図３７】
2014515739.tif 000097
【図３８】
2014515739.tif 000098
【図３９】
2014515739.tif 000099
【図４０】
2014515739.tif 000100
【図４１Ａ】
2014515739.tif 000101
【図４１Ｂ】
2014515739.tif 000102
【図４２】
2014515739.tif 000103
【図４３Ａ】
2014515739.tif 000104
【図４３Ｂ】
2014515739.tif 000105
【図４４】
2014515739.tif 000106
【図４５】
2014515739.tif 000107
【図４６】
2014515739.tif 000108
【図４７】
2014515739.tif 000109
【図４８】
2014515739.tif 000110
【図４９】
2014515739.tif 000111
【図５０】
2014515739.tif 000112
【図５１】
2014515739.tif 000113
【図５２Ａ】
2014515739.tif 000114
【図５２Ｂ】
2014515739.tif 000115
【図５３】
2014515739.tif 000116
【図５４】
2014515739.tif 000117
【図５５】
2014515739.tif 000118
【図５６Ａ】
2014515739.tif 000119
【図５６Ｂ】
2014515739.tif 000120
【図５６Ｃ】
2014515739.tif 000121
【図５６Ｄ】
2014515739.tif 000122
【図５７】
2014515739.tif 000123
【図５８】
2014515739.tif 000124
【図５９Ａ】
2014515739.tif 000125
【図５９Ｂ】
2014515739.tif 000126
【図５９Ｃ】
2014515739.tif 000127
【手続補正書】
【提出日】平成25年11月20日(2013.11.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
複合体液をスクリーニングするためのランダムリガンドライブラリーであって、
支持体上に下記の式１で化合物を含む、ランダムリガンドライブラリー。
【化１】
2014515739.tif 000128
式中、
Ｒ１は電子が豊富なアミノ酸側鎖Ｙから選択され；
Ｒ２はＨから選択され；
Ｒ３〜Ｒ６は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＳＣＨ３、−Ｃ０−Ｃ６アルキルＣ２−Ｃ６アルケニル、−Ｃ０−Ｃ６アルキルＣ２−Ｃ６アルキニル、−Ｃ１−Ｃ６  ＣＯＯＨ、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＯＨ、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＮ（Ｒ）２、−Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルアリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＮＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルシクロアミドからなる群から選択され；
アリール及びヘテロアリール基は、互いに独立して、−ＯＨ、Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ、−ＯＣＨ３、−ＳＯ２ＮＨ２、または−Ｏ−ＣＨ２−Ｏ−で置換されてもよい。
【請求項２】
請求項１に記載の、複合体液をスクリーニングするためのランダムリガンドライブラリーであって、
下記の（Ａ）〜（Ｅ）の群から選択される反応物の使用を含む処理によって生成された、下記の式１で表される化合物を支持体上に含むランダムリガンドライブラリー。
（Ａ）フルフリルアミン；３，４−ジメトキシエタノールアミン；ベンジルアミン；Ｎ−（２−アミノエチル）アセトアミド；Ｎ−（３−アミノプロピル）−２−ピロリジノン；エタノールアミン；グリシン；ジアミノブタン；アリルキルアミン；ピペロニルアミン；メチルベンジルアミン；イソブチルアミン；４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド、またはシクロヘキシルアミン；または
（Ｂ）メトキシエチルアミン；ピペロニルアミン；シクロヘキシルアミン；ジアミノブタン；メチルベンジルアミン；イソブチルアミン；フルフリルアミンまたは４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド；または
（Ｃ）フルフリルアミン、エタノールアミン；グリシン；ジアミノブタン；アリルアミン；ピペロニルアミン；メチルベンジルアミン；イソブチルアミンまたは４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド；または
（Ｄ）フルフリルアミン、Ｎ−（２−アミノエチル）アセトアミド；Ｎ−（３−アミノエチル）−２−ピロリジノン；エタノールアミン；グリシン；ジアミノブタン；アリルアミン；ピペロニルアミン；メチルベンジルアミン；イソブチルアミン；４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド；または
（Ｅ）システイン、グリシン、アリルアミン、エタノールアミン、イソブチルアミン、メチルベンジルアミン、ピペロニルアミン、メチオニン、シクロヘキシルアミン、３，４−ジメトキシフェネチルアミン、ベンジルアミン、Ｎ−（２−アミノエチル）アセトアミド、Ｎ−（３−アミノプロピル）−２−ピロリドン、４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホンアミド、およびフルフリルアミン。
【化１】
2014515739.tif 000129
式中、
Ｒ１は、−（Ｃ１−Ｃ６）ＳＣＨ３からなる群から選択され；
Ｒ２はＨから選択され；
Ｒ３およびＲ５は、互いに独立して、Ｈ、−Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＳＣＨ３、−Ｃ０−Ｃ６アルキルＣ２−Ｃ６アルケニル、−Ｃ０−Ｃ６アルキルＣ２−Ｃ６アルキニル、−Ｃ１−Ｃ６ＣＯＯＨ、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＯＨ、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＮ（Ｒ）２、−Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルアリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＮＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルシクロアミドからなる群から選択され、ここで、アリールまたはヘテロアリール基のいずれも、独立して、−ＯＨ、Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ、−ＯＣＨ３、−ＳＯ２ＮＨ２、または−Ｏ−ＣＨ２−Ｏ−で置換されてもよく；
Ｒ４は、フルフリルまたは−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）ＮＲ７Ｒ８を含む群から選択され、
Ｒ６は、Ｈ、１−イル−アリル、１−イル−２−ヒドロキシエチル、イソブチル、１−イル−ｎ−ブチルアミン、メチルベンジル、ピペロニル、シロヘキシル、１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル、ベンジル、１−イル−２−（アセトアミド）エチル、１−イル−３−２−ピロリジノン、１−イル−２−（４−ベンゼンスルホンアミド）エチル、またはフルフリルからなる群から選択され；
ｎは、３〜１１である。
【請求項３】
約２００，０００〜約１５０，０００，０００の異なるリガンドを含む、請求項２に記載のリガンドライブラリー。
【請求項４】
前記支持体がビーズまたは樹脂から選択される、請求項３に記載のリガンドライブラリー。
【請求項５】
前記ビーズまたは樹脂が１０モノマー単位未満のＰＥＧリンカーを含む、請求項４に記載のリガンドライブラリー。
【請求項６】
下記の式Ｘで表される化合物。
【化２】
2014515739.tif 000130
式中、
Ｒ１は電子が豊富なアミノ酸側鎖Ｙから選択され；
Ｒ２はＨから選択され；
Ｒ３〜Ｒ６は、互いに独立して、Ｈ、−Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＳＣＨ３、−Ｃ０−Ｃ６アルキルＣ２−Ｃ６アルケニル、−Ｃ０−Ｃ６アルキルＣ２−Ｃ６アルキニル、−Ｃ１−Ｃ６ＣＯＯＨ、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＯＨ、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＮ（Ｒ）２、−Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルアリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキルＮＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキルシクロアミドからなる群から選択され、ここで、アリールまたはヘテロアリール基のいずれも、独立して、−ＯＨ、Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ、−ＯＣＨ３、−ＳＯ２ＮＨ２、または−Ｏ−ＣＨ２−Ｏ−で置換されてもよく；
ｎは、３〜１０である。
【請求項７】
Ｒ４が−ｎ−ブチルアミンから選択される、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ１が−ＣＨ２ＣＨ２ＳＣＨ３または−ＣＨ２ＳＨから選択される、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
下記の式Ｉａで表される化合物、並びにその薬学的に許容される塩。
【化３】
2014515739.tif 000131
式中、
（ａ）Ｒ９はｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｂ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２，２−ジメチルエチル（イソブチル）；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｃ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｄ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｅ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｆ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソプロピル；Ｒ１２はイソプロピル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである；
（ｇ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｈ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｉ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｊ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｋ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０はイソブチル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｌ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｍ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はフルフリルであり、およびＲ１６はフルフリルである；
（ｎ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はフルフリル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はフルフリルである；
（ｏ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−２−メトキシエチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｐ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｑ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｒ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｓ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−メトキシエチルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｔ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はイソブチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｕ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２はイソブチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｖ）Ｒ９はイソブチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｗ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０はイソブチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５は１−イル−２−メトキシエチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｘ）Ｒ９はフルフリル；Ｒ１０はフルフリル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｙ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｚ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ａａ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである；
（ｂｂ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はイソブチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｃｃ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｄｄ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｅｅ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｆｆ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｇｇ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｈｈ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｉｉ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はフルフリル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はフルフリル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｊｊ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−メトキシエチルであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｋｋ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｌｌ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｍｍ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｎｎ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｏｏ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はピペロニル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｐｐ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はメチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｑｑ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はフルフリル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はイソブチル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｒｒ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２はイソブチル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである；あるいは
（ｓｓ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６はピペロニルである。
【請求項１０】
下記の式ＩＩで表される化合物、並びにその薬学的に許容される塩。
【化４】
2014515739.tif 000132
式中、
（ａ）Ｒ９はｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｂ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２，２−ジメチルエチル（イソブチル）；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｃ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｄ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｅ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｆ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソプロピル；Ｒ１２はイソプロピル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである；
（ｇ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｈ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｉ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｊ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｋ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０はイソブチル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｌ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｍ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はフルフリルであり、およびＲ１６はフルフリルである；
（ｎ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はフルフリル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はフルフリルである；
（ｏ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−２−メトキシエチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｐ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｑ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｒ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｓ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−メトキシエチルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｔ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はイソブチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｕ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２はイソブチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｖ）Ｒ９はイソブチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｗ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０はイソブチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５は１−イル−２−メトキシエチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｘ）Ｒ９はフルフリル；Ｒ１０はフルフリル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｙ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｚ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ａａ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである；
（ｂｂ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はイソブチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｃｃ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｄｄ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｅｅ）Ｒ９は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｆｆ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｇｇ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｈｈ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｉｉ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はフルフリル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はフルフリル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｊｊ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−メトキシエチルであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｋｋ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｌｌ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｍｍ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｎｎ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｏｏ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はピペロニル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｐｐ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はメチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｑｑ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はフルフリル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はイソブチル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｒｒ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２はイソブチル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである；あるいは
（ｓｓ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６はピペロニルである。
【請求項１１】
式ＩＩの前記化合物のＲ９〜Ｒ１６が下記の群から選択される、請求項１０に記載の化合物、並びにその薬学的に許容される塩。
（ａ）Ｒ９はｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｂ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２，２−ジメチルエチル（イソブチル）；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｃ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；
（ｄ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｅ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はピペロニルである；あるいは
（ｆ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はイソプロピル；Ｒ１２はイソプロピル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである。
【請求項１２】
下記の式ＩＩａで表される化合物、並びにその薬学的に許容される塩。
【化５】
2014515739.tif 000133
式中、
（ｍ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｎ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はイソブチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｏ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はイソブチル；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｐ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｑ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｒ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｓ）Ｒ９はフルフリル；Ｒ１０はフルフリル；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｔ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｕ）Ｒ９はイソブチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｖ）Ｒ９はイソブチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｗ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はイソブチルである；あるいは
（ｘ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである。
【請求項１３】
下記の式ＩＩで表される化合物、並びにその薬学的に許容される塩。
【化４】
2014515739.tif 000134
式中、
（ｍ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はシクロヘキシル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｎ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はイソブチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｏ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はイソブチル；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである；
（ｐ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｑ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｒ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｓ）Ｒ９はフルフリル；Ｒ１０はフルフリル；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｔ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−２−メトキシエチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｕ）Ｒ９はイソブチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｖ）Ｒ９はイソブチル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はシクロヘキシル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｗ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はイソブチルである；あるいは
（ｘ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−メトキシエチルである。
【請求項１４】
下記の式ＩＩＩａで表される化合物、並びにその薬学的に許容される塩。
【化６】
2014515739.tif 000135
式中、
（ａ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｂ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−アリル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｃ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｄ）Ｒ９はイソブチル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−アリル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−アリルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｅ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はイソブチル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｆ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−ヒドロキシエチルである；
（ｇ）Ｒ９は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｈ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｉ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−アリル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｊ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｋ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｌ）Ｒ９は１−イル−アリル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｍ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；あるいは
（ｎ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−２−ヒドロキシエチルである。
【請求項１５】
下記の式ＩＩで表される化合物、並びにその薬学的に許容される塩。
【化４】
2014515739.tif 000136
式中、
（ａ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｂ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−アリル；Ｒ１４はイソブチル；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｃ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｄ）Ｒ９はイソブチル；Ｒ１０はシクロヘキシル；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−アリル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−アリルであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｅ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はイソブチル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｆ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−ヒドロキシエチルである；
（ｇ）Ｒ９は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はシクロヘキシル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｈ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｉ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−アリル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はピペロニル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｊ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｋ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２はメチルベンジル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はイソブチルである；
（ｌ）Ｒ９は１−イル−アリル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はピペロニルである；
（ｍ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１１はイソブチル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１４は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はシクロヘキシルである；あるいは
（ｎ）Ｒ９は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１０は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−２−ヒドロキシエチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−２−ヒドロキシエチルである。
【請求項１６】
下記の式ＩＩＩａで表される化合物、並びにその薬学的に許容される塩。
【化６】
2014515739.tif 000137
式中、
（ａ）Ｒ９は１−イル−アリル；Ｒ１０は１−イル−３Ｎ−（２−ピロリジノン）プロピル；Ｒ１１は酢酸；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−アリルである；
（ｂ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル；Ｒ１３はベンジル；Ｒ１４はピペロニル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである；
（ｃ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−アリル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はベンジル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｄ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はベンジルである；
（ｅ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３はベンジル；Ｒ１４は１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｆ）Ｒ９は１−イル−アリル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｇ）Ｒ９は１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル；Ｒ１０はイソブチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｈ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；あるいは
（ｉ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はベンジル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである。
【請求項１７】
下記の式ＩＩで表される化合物、並びにその薬学的に許容される塩。
【化４】
2014515739.tif 000138
式中、
（ａ）Ｒ９は１−イル−アリル；Ｒ１０は１−イル−３Ｎ−（２−ピロリジノン）プロピル；Ｒ１１は酢酸；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３はベンジル；Ｒ１４は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１５はイソブチルであり、およびＲ１６は１−イル−アリルである；
（ｂ）Ｒ９はシクロヘキシル；Ｒ１０は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル；Ｒ１３はベンジル；Ｒ１４はピペロニル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチルである；
（ｃ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−アリル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はベンジル；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｄ）Ｒ９は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１０は１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はメチルベンジルであり、およびＲ１６はベンジルである；
（ｅ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はピペロニル；Ｒ１１は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１２はシクロヘキシル；Ｒ１３はベンジル；Ｒ１４は１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；
（ｆ）Ｒ９は１−イル−アリル；Ｒ１０はメチルベンジル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はピペロニル；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｇ）Ｒ９は１−イル−２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル；Ｒ１０はイソブチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はピペロニルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである；
（ｈ）Ｒ９はメチルベンジル；Ｒ１０は１−イル−２−（４（ベンゼンスルホンアミド）エチル；Ｒ１１はメチルベンジル；Ｒ１２は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１３はメチルベンジル；Ｒ１４はメチルベンジル；Ｒ１５は１−イル−ｎ−ブチルアミンであり、およびＲ１６はメチルベンジルである；あるいは
（ｉ）Ｒ９はピペロニル；Ｒ１０はベンジル；Ｒ１１はピペロニル；Ｒ１２はベンジル；Ｒ１３は１−イル−ｎ−ブチルアミン；Ｒ１４はベンジル；Ｒ１５はシクロヘキシルであり、およびＲ１６は１−イル−ｎ−ブチルアミンである。
【国際調査報告】
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