(57)【要約】本発明は、ジャスモナート化合物ファミリーのうちの少なくとも一つのジャスモナート化合物を、担体と組み合わせて含む薬学的製剤、例えば包接化合物、特にナノカプセル化システムまたはマイクロカプセル化システムを形成することができるものに関する。本発明は、概して、ジャスモナート化合物を含む包接複合体に関する。2014506588.tif 000003
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
これらの要素の代謝および分解による主要な化合物分子として、酸化、還元、水酸化物の水素化、水酸化過程により、アリルアルコールにおける、ケトンカルボニルにおける、プロスタグランジンに類似したこれらの化合物の切断を担うPGDHなどの酵素作用により、メチラートの形成により得られる、ジャスモナートファミリーの任意の要素から生じる任意の分子に由来する、単一のものまたは構成された誘導体を有し、単一であり得るか、または分子の分解から生じる他の要素と共に構成され得る、薬学的製剤。
【請求項２】
担体が、マイクロメートルまたはナノメートルサイズの一つの要素または複数の要素である、請求項1記載の薬学的製剤。
【請求項３】
ジャスモナートファミリーの要素の代謝、異化過程の構成された誘導体が、メチル酸、ジャスモン酸、7-イソ-ジャスモン酸、9,10-ジヒドロジャスモン酸、2,3-ジヒドロジャスモン酸、3,4-ジヒドロジャスモン酸、3,7-ジヒドロジャスモン酸、4,5-ジヒドロジャスモン酸、ジヒドロ-7-イソジャスモン酸、ククルビン酸ラクトン、6-エピ-ククルビン酸、12-ジヒドロジャスモン酸、12-ジヒドロジャスモン酸ラクトン、11-ヒドロジャスモン酸、8-ヒドロジャスモン酸、ホモジャスモン酸、ジホモジャスモン酸、11-ヒドロキシ-ジホモジャスモン酸、8-ヒドロキシ-ジホモジャスモン酸、ツベロン酸、ツベロン酸-O-グルコピラノシド、5,6-ジヒドロジャスモン酸、6,7-ジヒドロジャスモン酸、7,8-ジヒドロジャスモン酸、シス-ジャスモニック、ジヒドロジャスモニック、メチルヒドロジャスモニック、より小さなスケールでアルキルエステルでアミノ酸と組み合わされたジャスモン酸から選択される、請求項1記載の薬学的製剤。
【請求項４】
ジャスモナートファミリーの要素の代謝から生じる化合物が、生理学的代謝の任意の他の要素と組み合わされる、請求項1記載の薬学的製剤。
【請求項５】
担体が、グルコース、およびフルクトース、ラクトースなどのその誘導体との、またシクロデキストリンのような包接形態下のような任意の組み合わせ、α、β、およびγ-シクロデキストリン、デンドリマー、ナノスフェア、ナノワイヤー、ナノチューブ、ナノフィラメント、ナノ導体、リポソーム、ナノロボット、生物学的作用物質、タンパク質、ポリマー、ならびに、ナノまたはマイクロ運搬の任意の他の作用物質から選択される、請求項1記載の薬学的製剤。
【請求項６】
輸送体が、純粋であるかまたは他の要素と共に構成されていてもよく、また天然のシクロデキストリンとは異なる形態およびサイズであってもよい、人工的に修飾されたシクロデキストリンである、請求項1記載の薬学的製剤。
【請求項７】
少なくとも別の化学療法剤、鎮痛剤、抗炎症剤、抗生物質、抗真菌剤、防腐剤、瘢痕形成薬、キレート剤、インターフェロンおよび他の細胞シグナル伝達物質、コルチコステロイド、植物療法剤、生理活性要素、酵素、補酵素など、植物または動物油、ホルモン、タンパク質、脂質、基層およびまたは動物胚要素、いくつかの供給源由来の毒物全体、およびまたは分画された形における、少数元素、ビタミン、アミノ酸、生物学的または血漿誘導体、特定の細胞誘導体、修飾された抗体およびまたはモノクローナル抗体、ならびに免疫系および体液系の細胞の範囲のすべてを含む、請求項1記載の薬学的製剤。
【請求項８】
疾患の予防および処置、ならびに化粧品および他の治療形態の生産の過程における、請求項1〜7のいずれか一項記載の薬学的製剤の使用。
【請求項９】
癌の予防および処置のための薬物の製造における、請求項1〜8のいずれか一項記載の薬学的製剤の使用。
【請求項１０】
請求項1〜9のいずれか一項記載の薬学的製剤、ならびに、薬学的に許容される賦形剤、食物、製造品、獣医学の、農学の、および産業のを含む、薬物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、ジャスモナートファミリーの任意の要素の代謝の誘導体の少なくとも一つを含む薬学的製剤に言及し、かつそれは、単一のもの、修飾されたもの、混合物、天然およびまたは合成であってもよく、そのような化合物は、担体と組み合わされ得るかまたは運ばれてもよく、例えば、包接化合物、特にナノまたはマイクロカプセル化システムを形成することができるものである。本発明は、概して、ジャスモナートファミリーの要素の代謝に由来する化合物を含む包接複合体に言及する。
【背景技術】
【０００２】
ジャスモナート化合物ファミリー（本明細書においてジャスモナート化合物とも呼ばれる）は、シクロペンタノン型の構造により特徴づけられる。これは、植物の成長および発生を制御するのを助ける植物ホルモンのグループである。特定のジャスモナート化合物は、ジャスモン酸およびそのエステル、例えばメチルジャスモナート（MeJA）である。次の文書、特許CA 2630666（特許文献1）が、ジャスモナート化合物の例である。
【０００３】
哺乳動物において見出される、プロスタグランジンと呼ばれるホルモンと同じように、ジャスモナートは、シクロペンタノンに由来し、生合成され、また同様に脂肪酸に由来する。プロスタグランジンは、同様にシクロペンタノン環の含有を経て、リノレン酸からエイコサノイドまで生合成される。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】CA 2630666
【発明の概要】
【０００５】
本文脈において、ジャスモナートの代謝について言及し、そこではいくつかの化合物がその過程に含まれ、およびそれらの各々は、特有な機能、または、すでに先行特許の対象である、ジャスモナートファミリーに属するいくつかの要素の公知の効果と協力し合う機能を呈し得る。ジャスモナートファミリーの代謝から生じるそのような分子を、その作用に相乗効果があるように人工的に修飾することができ、再び単離してもよいしまたは単離しなくてもよい。例を引用すると、アミンもしくはアミド分子または任意の他の物質の置換または含有は、そのような分子の特定の効果を増大させることができ、シクロペンタノン環におけるシクロペンタノン環の変換も同様である。そのような改変は、含有、置換、結合、増加、還元、または任意の他の成分を用いた任意の他の化学的過程を含む。
【０００６】
本明細書において見られるようなナノまたはマイクロ担体は、例えばシクロデキストリン（CD）、天然のα、β、およびγ-CDとして公知なものだが、本明細書においては特に修飾されたシクロデキストリンおよびまたシクロデキストリン化合物などの、包接化合物を形成する作用物質を含む。本発明は、述べられたシクロデキストリンの他にも、包接過程を形成することができる任意のシステムを包含する。これらの用語において、本発明者らは、担体能力を有するいくつかの分子、一般的にマイクロまたはナノ粒子を有する粒子または凝集体を定義することができ、その中で、本発明者らは、いくつかのポリマーまたは代替ポリマー、コポリマー、リポソーム、デンドリマー、金属ナノスフェア、混合ポリマー、バイオポリマー、炭素構造輸送体、シリカ構造輸送体、シリコン構造輸送体、注射可能なナノ担体マイクロ粒子またはナノ粒子を引用することができ、これらのすべては、その単一形態で担体であることができ、および、それらの中で組み合わせるかまたは単一形態もしくは混合物から修飾する、すなわち、電気的に、磁気的に、化学的に、放射活性的に、物理的に、熱的に、またはロボット制御で修飾することができる。
【０００７】
本発明の包接化合物は、所望の標的における蓄積を得るために、特定の受容体で、または膜透過性によって孔により細胞に挿入され、従って保持効果を実現し、かつ標的療法として作用し、そのようなナノ担体またはマイクロ担体は、ナノ担体と組み合わされた時に運ばれる分子の認識および標的組織への内部移行についてのその能力をさらに強化することができる、抗体、いくつかの結合ペプチド、生物学的要素、真菌、ウイルスおよび細菌誘導体、ならびにタンパク質誘導体、生物学的供給源から取得された脂質、または核酸に会合させることができる。本発明に従う他の担体は、例えば、ナノおよびマイクロ懸濁液、ナノチューブ、ナノバーおよびナノフィラメント、ナノワイヤー、カチオン性SLN（固体脂質ナノ粒子の担体）、NPゼラチン（ナノ粒子）、輸送体、PLGA（ポリ乳酸、ポリグリコール酸）、NPコポリマー、PLGAナノスフェア、NPヒドロゲル構造輸送体、CPP（細胞貫通ペプチド）、PN構造輸送体、免疫ミセルとして公知であるミセルポリマー、機能化NP、結晶ナノ構造輸送体などの、細胞外手段において活性化刺激に付加されるナノ担体も、含むことができる。
【０００８】
本発明は、新生物組織の低酸素のための状態阻害薬物（酸素欠損）などの、包接複合体、すなわち包接化合物におけるジャスモナートファミリーの要素の代謝に由来する化合物により提供される、強化された抗癌効果に関係する。理論に縛られること無く、ジャスモナート化合物およびその代謝の要素は、多くの主要な生化学的経路においてその効果を発揮することが信じられており、その中にはDNA合成における干渉、例えば、低酸素において、より良好に働く嫌気的解糖などの無酸素状態での、転写、翻訳、遺伝子制御、およびエネルギー産生における効果などがあり、それらは、低酸素状態の癌細胞において制御されかつ周知である経路である。より詳細には、本発明の効果は、アポトーシス促進タンパク質の切断を触媒するカスパーゼ（アポトーシスおよびシステインペプチダーゼ）に対するものであると考えられる。本発明において述べられる包接複合体が、例えば、抗アポトーシスメンバーのファミリー（Bcl-2、Bcl-xL）に対して排他的にその活性を発揮するBcl-2ファミリーのメンバーであるBH-3と共に細胞制御要素として、任意の状況または任意の方法に関与する時、本発明による任意の作用は、BakおよびBaxがミトコンドリアの外膜に移行することを増加させる（その全過程が、公知の機能不全の過程において作用し得、かつ新生物細胞のミトコンドリア膜に特徴的であり得る）本発明の組成物が、チトクロームcおよびSmac DIABLOなどのアポトーシス促進タンパク質、ならびにアポトーシスタンパク質の阻害物質（IAP）に対するアンタゴニストの放出を引き起こすことを可能にする。
【０００９】
概して、包接現象は、下記に呈示されるような、例証となる反応形成例により特徴づけられ得る。
【００１０】
分子ホストから作られる包接複合体と呼ばれるものは、新たな化合物を形成する。
【００１１】
本発明に従う、これらの調合法で生じる化合物は、特定の標的細胞に対して作用するための、ジャスモナートファミリーの要素の分解および生理学的代謝のメンバーならびにその可能性のある誘導体を提供するのに効率的なシステムである。これらの標的細胞は、典型的に癌細胞と特徴づけられ得るが、炎症性過程またはウイルス、細菌、真菌疾患、瘢痕化、および麻酔薬により影響を受けた他の細胞または標的に対して使用することができる。
【００１２】
本発明の包接複合体の作用は、ジャスモナートファミリーの構成要素の分解または代謝過程から生じるこれらの化合物およびその誘導体の毒性の有意な低下を呈し、その分子構造の化学的安定化を促進し、分解、例えば加水分解および酸化を回避する、効率的な性能を示している。
【００１３】
発明の基礎
ジャスモナートファミリー化合物の代謝の分解から生じるいくつかの分子は、シクロペンタノン環により特徴づけられる。ジャスモナートは、ストレスの状況において植物より産生される植物ホルモンとして公知である。ジャスモナートは、シクロペンタノン類として認定され、また公知の強力なインビトロの抗体であり、かつ、ジャスモナートファミリー化合物のリストも引用されている特許文書、US 6469061において述べられているように、インビボで細胞腫瘍を減少させるための効率的な作用物質として報告されている。
【００１４】
しかし本発明は、分解または代謝から生じる化合物が、それ自体で、現在までジャスモナートファミリー要素がもっているとされている効果を発揮し得るという事実に言及する。すなわち、マイクロまたはナノ担体化合物の生理学的分解において、所望の効果に到達するであろう要素は、ジャスモナート要素の切断から生じる一つまたは複数の副産物である。このように、これらの物質のナノ担体は、構成され得るかまたはジャスモナートファミリー要素の代謝的分解からも形成される運命である他の物質が、その効果がもはや有効でないかまたは毒性でさえある時に投与される必要があることを回避するであろう。活性化されて期待された効果をもたらすこれらの運ばれる分子は、所望の標的に直接誘導され得る。
【００１５】
従って、ジャスモナートの代謝から生じる活性化合物を、包接化合物中にそれらを含んで保護することは、そのような成分が、明確な代謝により、所望の標的に到達する前に特定の分解を受け得ることを回避する明らかな道筋であった。そしてまた、それが必要な標的に運ばれるように、その一部である活性部分は、その機能不全のために、ジャスモナートファミリー要素の構造内に見出される。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【発明を実施するための形態】
【００１７】
発明の詳細の説明
本発明に適した、ジャスモナートファミリーであると命名される化合物、ジャスモナートファミリーの要素の代謝、異化の過程に由来する化合物の決定された群は、メチル酸、ジャスモン酸、7-イソ-ジャスモン酸、9,10-ジヒドロジャスモン酸、2,3-ジヒドロジャスモン酸、3,4-ジヒドロジャスモン酸、3,7-ジヒドロジャスモン酸、4,5-ジヒドロジャスモン酸、ジヒドロ-7-イソジャスモン酸、ククルビン酸ラクトン、6-エピ-ククルビン酸、12-ジヒドロジャスモン酸、12-ジヒドロジャスモン酸ラクトン、11-ヒドロジャスモン酸、8-ヒドロジャスモン酸、ホモジャスモン酸、ジホモジャスモン酸、11-ヒドロキシ-ジホモジャスモン酸、8-ヒドロキシ-ジホモジャスモン酸、ツベロン酸、ツベロン酸-O-グルコピラノシド、5,6-ジヒドロジャスモン酸、6,7-ジヒドロジャスモン酸、7,8-ジヒドロジャスモン酸、シス-ジャスモニック、ジヒドロジャスモニック、メチルヒドロジャスモニック、より小さなスケールでアルキルエステルでアミノ酸と組み合わされたジャスモン酸から選択される。
【００１８】
これらの要素の代謝および分解による主要な化合物分子として、酸化、還元、水酸化物の水素化、水酸化の過程により、アリルアルコールにおける、ケトンカルボニルにおける、プロスタグランジンに類似したこれらの化合物の切断を担うPGDHなどの酵素作用により、メチラートの形成により得られる、ジャスモナートファミリーの任意の要素から生じる任意の分子に由来する、単一のものまたは混合物を有し、単一形態であり得るか、または分子の分解から生じる他の要素と共に混合物形態であり得る。ジャスモナートファミリー分子の分解から形成されるこれらの作用物質は、期待される標的箇所において誘導体のいくつかの特定の作用を可能にするために、単離されて、本特許において述べられる賦形剤で運ばれ得る。ジャスモナートファミリー分子全体が使用される代わりに、その分解および結果として生じる新たな活性副産物の産生から形成されるその活性誘導体のみが、形成された副分子の単一の単離された作用により、または、代謝および生理学的異化の他の要素への会合により、使用される。
【００１９】
分解により形成される分子のファミリーはまた、すべての公知の過程により、例えば、エステルアミド鎖、および無機物または生物学的性質の任意の他の物質との会合により、プロドラッグとして調製され得る化合物も含む。プロドラッグと命名されるものは、本文脈において、酸化／還元などの加水分解反応、または異化もしくは代謝的有機反応、時にはブロッキング分子に供され、動物の身体の化学的環境内で代謝される構造、および残存する要素の代謝または異化作用で、薬剤として作用する、他の化合物を産生し得る構造に関する。
【００２０】
具体的には、本発明は、包接複合体を用いて、本発明の最終産物において有用な抗癌性能を得ることを目指す。それはまた、神経学的活性、修復活性、および、美容活性を有し、ウイルス、細菌、真菌、自己免疫疾患、抗加齢、瘢痕化、抗炎症、鎮痛においても使用され得る。ジャスモナートファミリーのメンバー、およびその誘導体は、典型的に、溶解性が低く非常に油性であり（従って、塞栓の危険性のために、患者に静脈内注射することは非常に危険である）、運ばれる際には、すべてのタイプの使用法、例えば、経口、皮内、経皮、外科的、局所を介して、表皮および粘液、皮膚付加物において、内視鏡手順、ならびに、口内での使用、腹腔鏡手順、非経口栄養、手順内で、腰椎穿刺、美容的手順、皮膚のサブプロセス、経皮穿刺、脊髄または他の手順、筋肉内、吸入、目、歯、例えば内因性投与、舌下、皮下、直腸使用または任意の他の粘液を介する使用における投与が可能である、より良好な薬物動態を呈する可溶性作用物質になる。本発明についての使用は、健康、食物補給剤、獣医学、農業、産業、および化粧品の領域を含む。
【００２１】
本発明はまた、ジャスモナートシクロペンタノン環における改変、シクロペンタノンにおいてそれを増加もしくは置換、変換する改変、または、その効果を害せずに改善することさえ可能な他の要素をその構造に付加する改変を有する化合物も含む。ジャスモナートファミリーの要素およびその化合物は、ナノまたはマイクロ担体内に含まれる新たな化合物の作製のために使用することさえできる。
【００２２】
すべての別個の輸送構造に適用可能であるマイクロおよびナノ担体という用語、例えば、ナノスフェア、ナノ形態のカプセル、またはマイクロカプセルは、本発明において概説されるジャスモナートファミリーの要素の分解および代謝に由来する分子を輸送することができる。ナノスフェアは、ポリマーマトリクス内に活性成分が均一に分散されるかまたは溶解できるシステムとして公知であり、得られたシステムは、ホストと運ばれる分子との間に差異は観察されず、単一である。
【００２３】
ナノカプセルは、化合物の二つの段階を同定することができるシステムである。ナノカプセルにおいては、二つの部分、ホストとゲストとの間の差異を、例えば、固体および液体段階として区別することができる。これらの場合に、物質は、ポリマーマトリクス、一般的には核単離膜と共に含まれる。
【００２４】
シクロデキストリン（CD）は、包接化合物の例となる担体である。それらは、1,4-COC鎖により結合したグルコースのDL(+)単位によって形成される環状オリゴ糖であるとして公知である。CDは、CGTアーゼ、グルコトランスフェラーゼでのアミドの酵素分解により得られる。天然のCDは、グルコース単位の数によって定義され、α、β、およびγ-CDは、それぞれ6、7、および8個のグルコース単位を有する。
【００２５】
構造的観点から、CDは、円錐形状の分子である。CDの分子構造中には、疎水性領域および親水性領域の二つがある。CDの腔内では、疎水性の特徴が優勢である。この原理が、包接化合物形成現象と呼ばれる。熱力学用語において、エネルギーシステムを低くする自発的形成の法則は、起こる確度がより高い。包接化合物の形成は、それが疎水性効果を有する分子間でエネルギーのより低い状態であるため、起きる。それに加えて、CDの腔の外側の親水性部分は、形成された包接化合物の安定性に貢献する。
【００２６】
ナノ担体として作用し、その内部において物質、例えば医療用薬物を輸送することができる、要素および分子、天然、合成、半合成の混和物である他のシクロデキストリンが存在する。本発明は、ジャスモナートの切断に由来する化合物および誘導化合物をカプセル化することができる任意のマイクロまたはナノ粒子を含む。
【００２７】
それにより、特定の特性、例えば、磁気特性、電気、化学特性、感光性特性、形態学的特性、生体適合性のようなある特性の受容特性、非拒絶特性、生理学的特性、身体応答誘発特性、保護特性、歯科使用特性、有機特性、生体運動失調（随意筋の運動を強調させる能力の欠如）の使用効果、運動失調の処置のためのすべてのタイプの特性、放射特性、マイクロまたはナノホストから制御される遠隔誘導特性、蛍光特性、熱特性を提供する要素とジャスモナートファミリーとの会合：有機成分、脂質成分、金属成分、炭素成分、情報成分、細菌、ウイルス、真菌、体液、リンパおよび血液要素、化学療法において使用される化学要素、特に亜鉛、銅、セレンなどの金属、またはこれらの代替物の任意の混和物と会合したかまたはそれにより修飾された、ジャスモナートファミリーの要素の分解または代謝に由来する化合物の発明もまた含まれる。
【００２８】
本発明のために有用であるマイクロまたはナノ包接支持構造物を形成することができる分子の具体例は、ブロックコポリマー、例えば、Pluronic、相対的に親水性のポリマー、ならびに、PEO-PPO-PEOおよびオクタンスズ触媒の存在下でε-カプロラクトン環における断裂から得られるポリ-ε-カプロラクトンである。
【００２９】
本発明はまた、正常または癌組織における低酸素状態阻害薬物などの他の薬物と相互作用する、ジャスモナートファミリーの要素の代謝に由来する化合物、基本的な生化学的経路（DNA合成、転写、翻訳、遺伝子制御およびエネルギー産生）、最初に無酸素の状態で発生し、低酸素においてより良好に働く嫌気性グリコールシステムであり、低酸素癌細胞で上方制御されている経路においてその効果を発揮する分子と相互作用する、ジャスモナートファミリーの要素の代謝に由来する化合物を含む、マイクロおよびナノ粒子に言及する。
【実施例】
【００３０】
以下の分析を、GC/MS（ガスクロマトグラフィー／質量分析法）で行い、分析的挙動の比較のために、ジャスモナートファミリーに含まれる要素の可能性のある切断、およびまた、そのような要素の、デンドリマーおよびCDなどのいくつかのナノ担体中への包接を示した。使用したデンドリマーは、PAMAM（ポリアミドアミン）であった。シクロデキストリンは、β-シクロデキストリンを使用した。
【００３１】
包接複合体の調製を、Rajewski RA, Stella VJ. pharmaceutical application of cyclodextrins. 2. In delivering the in vivo drug. J. Pharm Sci 1996; 85 (11):1142-69に従って行った。包接化合物、すなわちジャスモナートを伴うナノ／マイクロ担体は、0から様々な濃度の一種または複数種のジャスモナート化合物を、同等のモル比までのホスト分子と混合することにより、調製することができる。調製過程はまた、ジャスモナートファミリーの要素の代謝から生じる化合物を、水溶液または他の溶液中で、許容される薬学的塩と混合する段階を含む。得られる溶液を、溶媒中の成分が完全に溶解するまで撹拌する。混合時間は、混合物が熱力学的平衡に到達するまでの数時間である。
【００３２】
図1は、デンドリマー、天然シクロデキストリン、金ナノスフェアにより運ばれる、メチルジャスモナートの代謝の誘導体のうちの一つのナノカプセル化の分析結果を示し、図2は、両方ともメチルジャスモナートを有するβ-CDについての結果を示す。
【００３３】
実験データを、温度50℃、注入温度250℃、線形制御法の流れ、50,0 mL/分の総流量、1,70 mL/分のカラム流量のカラムを有するGCで取得し、β-CD内へのメチルジャスモナートの取り込みに関するパーセンテージは98〜99％であり、PAMAMデンドリマーについては約95％であった。
【００３４】
ピーク1およびピーク2を比較すると、ピーク2はメチルジャスモナート単独であり、およびピーク1は形成された化合物の包接体であり、両方の場合において、ピーク1は明らかに異なっており、分子会合を証明する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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