(57)【要約】  本発明は、活性成分のナノスケール粒子を製造する方法に関し、更に詳しくは、ＨＬＢ値が８以上であり、融点又はガラス転移温度が８０℃以下である界面活性剤と活性成分とを均一に混合し、この混合物をローラーミルを用いて粉砕して、活性成分をナノ粒子粉末として製造する方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（１）ＨＬＢ値が８以上であり、融点又はガラス転移温度が８０℃以下である界面活性剤と活性成分を均一に混合する工程と、
（２）前記工程（１）で得られた混合物を、ローラーミルを用いて粉砕する工程と、を含む活性成分のナノ粒子粉末の製造方法。
【請求項２】
前記工程（１）で得られた混合物が、生体適合性高分子を更に含むことを特徴とする請求項１に記載の活性成分のナノ粒子粉末の製造方法。
【請求項３】
前記工程（１）で得られた混合物が、糖類又は塩類を更に含むことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項４】
活性成分が、生理活性有機化合物、有機金属化合物、天然抽出物、ペプチド、蛋白質及び多糖類よりなる群から選択された一つ以上であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項５】
界面活性剤が、リン脂質、塩化ベンザルコニウム、グリセリン脂肪酸エステル、セトマクロゴール、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ステアリン酸ポリオキシエチレン、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ソルビタンエステル、ポリオキシエチレンキャスター油誘導体、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、蔗糖脂肪酸エステル、ＰＥＧ−コレステロール、ＰＥＧ−ビタミンＥ及びこれらの混合物よりなる群から選択されることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項６】
生体適合性高分子が、ゼラチン、カゼイン、デキストラン、アラビアゴム、トラガカントゴム、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、非晶質セルロース、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポロキサマー、オイドラギット（登録商標）、リゾチーム、アルブミン及びこれらの混合物よりなる群から選択されることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項７】
糖類が、ブドウ糖、ラクトース、マンニトール、スクロース、キシリトール、キトサン、澱粉、繊維質又はこれらの混合物であることを特徴とする請求項３に記載の方法。
【請求項８】
塩類が、塩化ナトリウム、塩化カルシウム、炭酸カルシウム又はこれらの混合物であることを特徴とする請求項３に記載の方法。
【請求項９】
前記工程（２）の粉砕が２０回以上連続して遂行されることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
ローラーミルのローラーの温度が、４０℃以下であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、活性成分のナノスケール粒子を製造する方法に関し、更に詳しくは、ＨＬＢ値が８以上であり、融点又はガラス転移温度が８０℃以下である界面活性剤と活性成分とを均一に混合し、この混合物をローラーミルを用いて粉砕して、活性成分をナノ粒子粉末として製造する方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
一定サイズの微細粒子の効果的、かつ迅速な製造技術に対する要望が、常に、多様な産業分野で求められている。このような一定サイズの微細粒子は多くの長所を有するものであり、その中でも、特に、流動性が良く、粒子相互作用において偏差がほとんどないということが産業上の利用に非常に有用である。例えば、医薬産業において、治療剤の粒径は溶解速度、生物学的利用能、剤形などに大いに影響を与え、治療剤粒子間の相互作用において偏差が小さいほど、治療剤の全体的な安定性が良くなる。
【０００３】
医薬品において、治療剤の粒径をナノスケールにすれば、下記のような長所が得られる。まず、第一に、経口投与時に腸内での吸収率の小さな薬物において、粒径の小さいものが粒径の大きいものより多く吸収されるので、治療剤の生物学的利用効率を増加できる。さらに、例えば、経口投与だけが可能な薬物を吸入法で投与できるように、治療剤形の形態を多様にできる。徐放性薬物の剤形において、治療剤の放出速度は非常に重要な要素である。治療剤の粒径をナノスケールにすれば、その粒径が相対的により均一になるにつれて、治療剤の放出速度が予測可能になり、より効果的な治療剤の製造が可能になる。
【０００４】
前記のように、均一なナノ粒子の様々な長所を得るために、活性成分をナノ粒子として製造するための多様な試みが行われてきた。その目的のために、従来、比較的大きい粒子を相対的に小さくするための破砕（crushing）、粉砕(grinding)、製粉(milling)などの機械的な方法が採用された。最近では、製薬産業において、エアージェット粉砕機を用いて大量の薬剤を製薬学的利用に適した大きさの範囲に粉砕する方法が一般に使われている。しかし、特許文献１及び非特許文献１によると、このような従来の機械的方法は、可能な最少粒径が数十マイクロメーターと限界があると一般に認識されている。
【０００５】
Vandym N. Mocahlinらは非特許文献２で、ボールミルを用いてフェノフィブラートと塩化ナトリウム（重量比１：７）を混合すること、及びアトライタミルを用いて混合物を乾式粉砕することを含む方法でナノスケールのフェノフィブラートを得たと報告した。ここで、塩化ナトリウムは非常に硬い物質であり、ボールミルで粉砕されると、粉砕媒体として作用すると同時に、粉砕されたフェノフィブラートの再凝集を防ぐ。
【０００６】
一方、Keiji Yamamotoらは、非特許文献３でロッドミル（Rod mill）を用いて、薬物をシクロデキストリンと共に粉砕することによって、薬物のナノ粒子を製造できることを主張した。この方法で用いられるシクロデキストリンの量は、モル比で活性成分の約２倍、即ち、重量比で約４倍であること、及び用いられるシクロデキストリンの全てを水和する湿度が必要であり、その湿度が高すぎても低すぎても不都合であると主張した。
【０００７】
また、Takashi Hirokawa らは、特許文献２で塩化ナトリウムとポリオール化合物を活性成分と混合し、粉砕媒体なしに、湿式粉砕工程を遂行することによって、ナノスケールの活性成分を得る工程を開示している。しかし、これらの工程では過剰の塩化ナトリウムを使用するので、得られたナノ粒子を医薬品として使用するためには塩化ナトリウムとポリオール化合物を除去する工程が本質的に必要である。
【０００８】
特許文献３では、難水溶性薬物を２．５倍又はそれ以上の低分子量の糖類又は糖アルコールと混合し、次いで混合物を乾式粉砕することによって難水溶性薬物の微細粒子を製造する方法を開示している。しかし、この方法では、多量の糖を使用するため、実際の薬品に適用するためには、粉砕混合物を水に分散して、分散した混合物をろ過して、ろ過した混合物を乾燥することが必要であるという問題がある。
【０００９】
特許文献４には、界面活性剤の存在下で難水溶性薬物を湿式製粉（wet milling)して、数百ナノメートルサイズの難水溶性薬物の粒子を製造する方法が開示されている。この技術は、薬物を従来の粉砕方法を用いて粒径１００マイクロメーター又はそれ以下の薬物を製造した後に、適用されなければならない。この方法の場合、目的サイズ内の粒子を製造するのにかかる時間は、使用される機械的装置によって決まる。例えば、ボールミルを使用すると、５日又はそれ以上の時間が必要とされるが、高せん断力媒体ミルを使用すると、１日以内に所望サイズの粒子を製造できる。しかし、この方法で得られたナノ粒子は液相であることから、粉末形態に製造するためには、スプレードライ又は凍結乾燥の工程を遂行しなければならない。しかし、乾燥工程の間に粒子の凝集が生じるので、得られた粉末を液体内に再分散したときに、実質的にナノメートルスケールの粒子の分散を得ることが難しくなる。このような問題を解決するために、特許文献５は、凍結乾燥時に用いられる凝集防止剤を開示している。さらに、特許文献６は、スプレードライ時の安定剤、界面活性剤、及び凝集防止剤を開示している。さらに、特許文献７は、界面安定剤としてリゾチーム（lysozyme）を用いていくつかの難水溶性薬物に対する湿式粉砕法の適用を開示している。しかし、この場合、界面安定剤が蛋白質であることから乾燥に多くの制約があり、従って、液相形態の製造だけが開示されている。
【００１０】
特許文献８では、ピストンギャップホモジナイゼーションを用いてナノ粒子を製造する方法を開示している。しかし、ピストンギャップホモジナイゼーションを利用するためには、ジェットミル又はハンマーミルを用い、粒子を一定のサイズに粉砕する前処理工程が必要である。その上、この工程は高粘度の溶液には使用できないので、活性成分の濃度が低い状態でこの工程を行わなければならない。
【００１１】
他の従来方法としては、活性成分を含有している溶液の環境を変えて、溶質の沈澱又は結晶化を引き起こすことにより、活性成分の微細粒子を提供する再結晶技術がある。この再結晶方法は２つの異なった方法で実施できる：その一つは、治療剤を適当な溶媒に溶かし、温度を低くして治療剤の溶解度を変化させて粒子を析出する方式であり、もう一つは、治療剤が溶けている溶媒に貧溶媒（antisolvent）を添加して溶媒の溶解力を低くすることによって粒子を析出する方式である。しかし、このような再結晶方法の多くは、通常、ヒトに有害な有機溶媒の使用を必要とし、析出した粒子をろ過した後の乾燥工程中に、湿潤状態で粒子の凝集又は凝固を引き起こす。その結果、最終粒子はサイズが均一にならない。
【００１２】
特許文献９は、高分子を有機溶媒に溶かし、ここに蛋白質性薬物を溶かすか、分散させた後、超低温で急速に冷却して固化し、得られた物質を凍結乾燥して微粉末を製造する方法を開示している。しかし、この場合、蛋白質性薬物が有機溶媒との接触によって変性する恐れがあり、そして工程は急速冷却及び凍結乾燥の工程を必要としているので、経済的ではない。
【００１３】
さらに、乳化を用いて粒径を小さくする技術がある。この乳化方法は一般に化粧品分野で使われる方法であり、難水溶性物質を、熱を加えて融解するか、有機溶媒に溶解した後、融解又は溶解した物質を界面活性剤が溶けている水溶液に添加しながら、高速で攪拌するか又は超音波を用いて、分散させることによって微細粒子を提供する。しかし、この場合は、微細粒子を粉末形態で提供するために水を除去する工程が必要であって、この水を除去する過程で様々な制約を伴う。さらに、有機溶媒を用いて難水溶性物質を溶かす場合、ヒトに有害な有機溶媒の残存に対する恐れが常にある。
【００１４】
特許文献１０は、活性成分を有機溶媒に溶かし、得られた溶液を界面活性剤が溶けている水溶液に噴射することによって、微粒子を製造する方法を開示している。この方法は、有機溶媒を使用するだけでなく、製造された粒子は水相に存在するので、粉末形態で粒子を提供するためには、溶媒として使われた水分を乾燥する工程を必要とする。しかし、乾燥工程の間に粒子の凝集が発生するので、粒子をナノスケールサイズの粒径に再分散させるのが難しい。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１５】
【特許文献１】米国特許第５，５３４，２７０号
【特許文献２】国際公開第２００８／１２６７９７号
【特許文献３】米国特許第５，２０２，１２９号
【特許文献４】米国特許第５，１４５，６８４号
【特許文献５】米国特許第５，３０２，４０１号
【特許文献６】米国特許第６，５９２，９０３Ｂ２号
【特許文献７】米国特許出願公開第２００３／０１８５８６９Ａ１号
【特許文献８】米国特許出願公開第２００２／０１６８４０２Ａ１号
【特許文献９】米国特許出願公開第２００３／０１０４０６８Ａ１号
【特許文献１０】米国特許出願公開第２００４／００６７２５１Ａ１号
【非特許文献】
【００１６】
【非特許文献１】Lachman, et al., The Theory and Practice of Industrial Pharmacy, Chapter 2, "Milling", p.45, (1986)
【非特許文献２】Vandym N. Mocahlin et al., Pharmaceutical Research, Vol. 26, No. 6, 1365-1370. June 2009
【非特許文献３】Chem, Pharm, Bull. 55(3)359-363 (2007)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１７】
本発明は、前述した先行技術の問題点を解決するためのものである。とりわけ、本発明は、従来の乾式粉砕方法でマイクロメータスケールより小さいサイズを有する粒子を製造することが難しかった限界を克服でき、そして、従来の湿式粉砕方法で多量の水を使用することで、粉砕工程後の水分除去工程で粒子が成長しそのサイズが大きくなるような問題を解決できる。その上、本発明は、比較的低い水溶性を有する活性成分についてもナノ粒子を簡単に優れた効率で製造できる方法を提供する。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
本発明によれば、（１）ＨＬＢ値が８以上であり、融点又はガラス転移温度が８０℃以下である界面活性剤と活性成分を均一に混合する工程と、（２）前記工程（１）で得られた混合物をローラーミルを用いて、粉砕する工程と、を含む活性成分のナノ粒子粉末製造方法が提供される。
【００１９】
前記工程（１）で得られた混合物は、必要に応じて、生体適合性高分子を更に含んでもよい。
【００２０】
また、前記工程（１）で得られた混合物は、必要に応じて、糖類又は塩類を更に含んでもよい。
【００２１】
本発明の一実施態様によると、本発明の活性成分であるナノ粒子粉末製造方法は、例えば、好ましくは、下記工程を通して行われる：
１）活性成分、ＨＬＢ値が８以上であり、融点又はガラス転移温度が８０℃以下である界面活性剤、任意に生体適合性高分子、及び任意に糖類又は塩類を均一に混合する工程、及び
２）前記工程（１）で得られた混合物をローラーミルを用いて、連続的にミルする工程。
【００２２】
本発明の他の実施態様によれば、本発明の活性成分のナノ粒子粉末製造方法は、例えば、好ましくは、下記工程を通して行われる：
１）活性成分、ＨＬＢ値が８以上であり、融点又はガラス転移温度が８０℃以下である界面活性剤、及び任意に生体適合性高分子を混合する工程、
２）前記工程（１）で得られた混合物に、任意に糖類又は塩類を加え、均一に混合する工程、及び
３）前記工程（２）で得られた混合物をローラーミルを用いて、連続的にミルする工程。
【発明の効果】
【００２３】
本発明によると、従来の乾式粉砕工程でマイクロメータスケール又はそれ以下のサイズを有する粒子を製造することが難しかった限界を克服できる。その上、従来の湿式粉砕方法で多量の水を使用することで、粉砕工程後の水分除去工程で粒子が成長しそのサイズが大きくなる問題を解決することができる。更に、比較的低い水溶性を有する活性成分に対してさえもナノ粒子を簡単に優れた効率で製造できる。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
本発明のナノ粒子の製造方法において、活性成分は、例えば、医薬品、機能性食品、化粧品などにおいて生理活性を示す物質である。好ましくは、活性成分は、生理学的に活性な有機化合物、有機金属化合物、天然抽出物、ペプチド、蛋白質及び多糖類よりなる群から選択される一つ又はそれ以上のものである。固相又は液相などの室温での性状及び中性又はイオン性等の電気的形態に対する特別な制限はない。
【００２５】
本明細書で用いられる、用語「ナノ粒子」とは、その９０％又はそれ以上が５μｍ又はそれ以下、好ましくは２μｍ又はそれ以下、より好ましくは１μｍ又はそれ以下、一層好ましくは０．５μｍ又はそれ以下の平均粒径を有する粒子を意味する。
【００２６】
本発明のナノ粒子製造方法は、ＨＬＢ値が８以上であり、融点又はガラス転移温度が８０℃以下である界面活性剤を必須的に使用する。必須界面活性剤のＨＬＢ値が８未満のとき、優れた水分散を有するナノ粒子を製造することができなく、その融点又はガラス転移温度が８０℃を超えると、活性成分の粉砕が十分にできなくなる。本発明では、前記した条件を満たす界面活性剤を必須的に使用することによって、活性成分及び任意に生体適合性高分子との均一した混合を達成でき、その結果、より均一な粒度分布のナノ粒子を得ることができる。
【００２７】
本発明において、必須界面活性剤の具体的な例は、ＨＬＢ値が８以上であり、融点又はガラス転移温度が８０℃以下のものであり、リン脂質、塩化ベンザルコニウム、グリセリン脂肪酸エステル、セトマクロゴール、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ステアリン酸ポリオキシエチレン、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ソルビタンエステル、ポリオキシエチレンキャスター油誘導体、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、蔗糖脂肪酸エステル、ＰＥＧ−コレステロール、ＰＥＧ−ビタミンＥ及びこれらの混合物が挙げられるが、これらに制限されない。本発明では、前記した必須界面活性剤の以外の界面活性剤を補助界面活性剤として使用することができる。
【００２８】
本発明において、有用な生体適合性高分子は医薬品、食品及び化粧品に使用されるものであってよく、イオン性、非イオン性等の電気的形態に制限がない。その融点は４０℃以上のものが、製造された粉末で薬物の粒子安定性を長時間保持するのに好ましく、そのガラス転移温度は２００℃以下のものが、低い粉砕エネルギーで熱に敏感な物質を粉砕するのに適している。本発明において、生体適合性高分子の例には、ゼラチン、カゼイン、デキストラン、アラビアゴム、トラガカントゴム、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、非晶質セルロース、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポロキサマー、オイドラギット（登録商標）、リゾチーム、アルブミンなどが挙げられるが、これに限定されない。これらは、単独で、又は混合物の形態で、必須界面活性剤と混合して使用可能である。
【００２９】
本発明において、使用可能な糖類は、単糖類化合物、二糖類化合物、多糖類化合物及び糖アルコールを含み、特に、ブドウ糖、ラクトース、マンニトール、スクロース、キシリトール、キトサン、澱粉、繊維質などを含む概念である。さらに、使用可能な塩類は、塩化ナトリウム、塩化カルシウム、炭酸カルシウムなどを含む概念である。
【００３０】
本発明の一実施態様によれば、必須界面活性剤は、活性成分１重量部当たり０．０１〜１重量部、好ましくは０．０１〜０．８重量部、より好ましくは０．０１〜０．６重量部、より一層好ましくは０．０１〜０．５重量部が使われる。必須界面活性剤の量が活性成分と比べて少なすぎると、粉砕が十分に遂行できなく、粉砕された活性成分の粒子凝集を防ぐことができない問題があり、その量が多すぎると、製造されたナノ粒子粉末を用いて生産される最終医薬品の形態に問題がある。必要に応じて、他の種類の補助界面活性剤を更に使用してもよく、このとき、補助界面活性剤は活性成分１重量部当たり０〜１重量部が添加されてもよい。
【００３１】
本発明の一実施態様によれば、生体適合性高分子は活性成分１重量部当たり、例えば、０．０１〜５重量部、好ましくは０．０１〜２重量部、より好ましくは０．０１〜１重量部が使われる。生体適合性高分子の量が活性成分と比べて少なすぎると、その使用効果を十分に得られなく、その量が多すぎると、製造されたナノ粒子粉末を用いて生産される最終医薬品の形態及び服用便宜性に問題がある。
【００３２】
本発明の一実施態様によれば、糖類又は塩類は、活性成分１重量部当たり、例えば、０〜５重量部、好ましくは０〜４重量部、より好ましくは０〜３重量部、より一層好ましくは０〜２重量部が使われる。糖類又は塩類の量が活性成分と比べて少なすぎると、その使用効果を十分に得られなく、その量が多すぎると、製造されたナノ粒子粉末を用いて生産される最終医薬品の形態及び服用便宜性に問題がある。糖類又は塩類は、粉末の形態に又は水溶液の形態で添加されてもよく、水溶液の形態に添加される時には、結果混合物内の水分含量が５％以下にすることが好ましい。
【００３３】
前記したような活性成分、ＨＬＢ値が８以上であり、融点又はガラス転移温度が８０℃以下である界面活性剤、任意に生体適合性高分子、及び任意に糖類又は塩類を含む混合物は、水分を含有しないことが好ましいが、少量の水分（例えば、混合物の全１００重量％に対して５重量％以下）を、初期混合及び初期粉砕をよくするために添加してもよく、このような少量の水分が添加されても、本発明の目的の達成には問題がない。
【００３４】
前記したように、製造された活性成分、ＨＬＢ値が８以上であり、融点又はガラス転移温度が８０℃以下である界面活性剤、任意に生体適合性高分子、及び任意に糖類又は塩類を含む混合物は、ローラーミルを用いた連続的又は繰り返しの粉砕過程（好ましくは、２０回以上連続して粉砕）を経る。この粉砕過程は、混合物構成成分がよく混合された状態で、ローラーミルによる圧着で凝集させ、せん断力により粉砕する。この時、好ましくは、糖類又は塩等の存在下で活性成分の繰り返しの粉砕がより容易になり、活性成分のナノ粒子をより効率的に製造することができる。
【００３５】
粉砕工程は、一般に９０℃又はそれ以下、好ましくは６０℃又はそれ以下、より好ましくは４０℃又はそれ以下、さらにより好ましくは３０℃又はそれ以下で行われる。低温で粉砕工程を遂行することによって、熱による活性成分の変性を防ぐことができ、結晶状粒子の結晶性を保持でき、そして生成された粒子の再凝集も効果的に防ぐことができる。
【実施例】
【００３６】
以下の実施例によって本発明を詳細に説明するが、これらによって本発明の範囲が限定されるものではない。
【００３７】
実施例１〜９
モデル医薬品としてイトラコナゾール１重量部に対して、必須界面活性剤として非イオン性ＰＥＧ−エステル界面活性剤であるＧｅｌｕｃｉｒｅ（登録商標）５０／１３（Stearoyl polyoxyl-32 glycerides、融点：５０℃、ＨＬＢ値：１３）０．５重量部、生体適合性高分子としてポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）ｋ３０  ０．５重量部、及び糖類としてマンニトール２重量部を均一に混合した。混合物内の水分含量の結果、粒度に対する影響を調べるために、総混合粉末の１又は５重量％に該当する脱イオン水を、一部実施例の混合物に添加した後、再び均一に混合した。製造された混合物に対して、実施例によりローラー温度が２０℃、３０℃又は４０℃に固定されたローラーミルを用いて、３０回連続して粉砕工程を遂行して、活性成分含有粒子の粉末を製造した。製造された粉末を、イトラコナゾールに基づいて１ｍｇ／ｍＬの濃度で脱イオン水に添加した後、２５分間撹拌し、その後１分間超音波処理し、完全に分散した後、ＨＯＲＩＢＡ−ＬＡ９５０で粒度を測定した。各実施例のローラー温度、添加水分量及び測定された粒度（Mean Size：平均粒径、Median Size：粒度中間値（５０％）粒径）を下記表１に示した。
【００３８】
【表１】
2014534171.tif 000002
【００３９】
表１の測定結果から、中間粒径（Median Size）は、温度及び水分の含量に関係なく、ほとんど一定していることが分かる。平均粒径（Mean Size）の場合、ローラー温度２０℃では、中間粒径と相当な差を示しており、ローラー温度３０℃及び４０℃ではその差が大きく縮小していることが分かる。しかし、超音波処理時間を３分にした後、粒度を測定した結果、全ての実験温度領域で平均粒径が中間粒径と似ていた。これは、ローラー温度２０℃で製造した粉末の粉砕が不十分であったのではなく、ローラー温度３０℃及び４０℃で製造した粉末に比べて、水分散が遅れていたことを意味する。即ち、４０℃以下のローラーミル条件（即ち、ローラー温度）では、全体的に均一に粉砕されたナノ粒子が製造されていたことが分かる。
【００４０】
実施例１０
マンニトールを用いないことを除いては、実施例１と同様の方法で、イトラコナゾール含有ナノ粒子を製造しており、その粒度を実施例１と同様の方法で測定した。測定された平均粒径は０．４３４μｍであり、中間粒径は０．３７９μｍであった。
【００４１】
実施例１１〜１４
イトラコナゾール１重量部と必須界面活性剤であるＧｅｌｕｃｉｒｅ（登録商標）５０／１３  １重量部を均一に混合した。総混合粉末の１又は５重量％に該当する脱イオン水を、一部実施例の混合物に更に添加した後、再び均一に混合した。製造された混合物に対して、実施例によりローラー温度が２０℃又は４０℃に固定されたローラーミルを用いて、３０回連続して粉砕工程を遂行して、活性成分含有粒子の粉末を製造した。製造された粉末をイトラコナゾールに基づいて１ｍｇ／ｍＬの濃度で脱イオン水に添加した後、２５分間撹拌し、その後１分間超音波処理し、完全に分散した後、ＨＯＲＩＢＡ−ＬＡ９５０で粒度を測定した。各実施例のローラー温度、添加水分量及び測定された粒度（平均粒径、中間粒径）を下記表２に示した。
【００４２】
【表２】
2014534171.tif 000003
【００４３】
実施例１５
イトラコナゾール１重量部、必須界面活性剤としてステアリン酸ポリオキシエチレン（polyoxyethylene stearate、融点：３７．２℃、ＨＬＢ値：１６．９）１重量部及びマンニトール２重量部を均一に混合した。製造された混合物に対して、ローラー温度が２５℃に固定されたローラーミルを用いて、３０回連続して粉砕工程を遂行して、活性成分含有粒子の粉末を製造した。製造された粉末をイトラコナゾールに基づいて１ｍｇ／ｍＬの濃度で脱イオン水に添加した後、２５分間撹拌し、その後１分間超音波処理し、完全に分散した後、ＨＯＲＩＢＡ−ＬＡ９５０で粒度を測定した。測定された平均粒径は０．３７８μｍであり、中間粒径は０．３２７μｍであった。
【００４４】
実施例１６
活性成分としてコエンザイムＱ１０２ｇ、必須界面活性剤として蔗糖脂肪酸エステル（融点：５５℃、ＨＬＢ値：１６）１．８ｇ、補助界面活性剤としてＳＬＳ（sodium lauryl sulfate）０．２ｇ及び糖類としてスクロース６ｇを室温で、家庭用ミキサー機を用いて十分に混合した後、この混合粉末を、ロールミルを用いて、室温で粉砕工程を２０回遂行して、コエンザイムＱ１０含有粒子粉末９．２ｇを得た。この粉末をコエンザイムＱ１０に基づいて１ｍｇ／ｍＬの濃度で脱イオン水に入れ、室温で３０分間撹拌した後、ＨＯＲＩＢＡ−ＬＡ９５０で粒度を分析し、下記結果を得た（単位：μｍ）。
【００４５】
2014534171.tif 000004
【００４６】
実施例１７
活性成分としてタルニフルネート（Talniflunate）５ｇ、必須界面活性剤としてステアリン酸ポリオキシエチレン（polyoxyethylene stearate、融点：３７．２℃、ＨＬＢ値：１６．９）１ｇ、生体適合性高分子としてポロキサマー（１８８）１．５ｇ、糖類としてラクトース９ｇ、及び蒸留水０．５ｍＬを家庭用ミキサーで均一に混合した後、この混合物を、ロールミルを用いて、室温で粉砕工程を３０回遂行した後、減圧乾燥して、タルニフルネート含有粒子粉末１５ｇを得た。この粉末を室温で１０分間撹拌し、３分間超音波処理をした後、ＨＯＲＩＢＡ−ＬＡ９５０で粒度を分析し、以下の結果を得た（単位：μｍ）。
【００４７】
2014534171.tif 000005
【００４８】
比較例１〜４
イトラコナゾール１重量部及び生体適合性高分子としてポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）ｋ３０  １重量部を、一部比較例の場合、マンニトール２重量部と共に混合し、実施例１と同様の方法で活性成分含有粒子を製造した。製造された粒子の粒度を実施例１と同様の方法で測定した。各比較例のローラー温度、添加水分量、マンニトール量及び測定された粒度（平均粒径、中間粒径）を下記表３に示した。
【００４９】
【表３】
2014534171.tif 000006
【００５０】
前記表３から分かるように、本発明の必須界面活性剤を用いず、生体適合性高分子のみを、又は生体適合性高分子と糖類のみを用いて粒子を製造した場合、粉砕されない粒子が多量に残存した。
【００５１】
比較例５
イトラコナゾール１重量部及びマンニトール２重量部を均一に混合した後、脱イオン水を総混合物に対して５％（ｗ／ｗ）添加し、再び均一に混合した。この混合物を４０℃のローラー条件下で３０回連続粉砕して、活性成分含有粒子の粉末を製造した。製造された粉末をイトラコナゾールに基づいて１ｍｇ／ｍＬの濃度で脱イオン水に添加した後、２５分間撹拌し、その後１分間超音波処理し、完全に分散した後、ＨＯＲＩＢＡ−ＬＡ９５０で粒度を測定した。測定された平均粒径は１６５．７８５μｍであり、中間粒径は７０．８５６μｍであるところ、ナノ粒子水準への粉砕が全く行われていなかったことが分かる。
【００５２】
比較例６
イトラコナゾール１重量部及び界面活性剤としてＳＬＳ（sodium lauryl sulfate、融点：２０６℃）１重量部を均一に混合した。この混合物を２０℃のローラー条件下で３０回連続粉砕して、活性成分含有粒子の粉末を製造した。製造された粉末をイトラコナゾールに基づいて１ｍｇ／ｍＬの濃度で脱イオン水に添加した後、２５分間撹拌し、その後１分間超音波処理し、完全に分散した後、ＨＯＲＩＢＡ−ＬＡ９５０で粒度を測定した。測定された平均粒径は２．３８８μｍであり、中間粒径は０．４５９μｍであるところ、粉砕されない大きな粒子がかなり存在していることが分かる。
【００５３】
比較例７
イトラコナゾール１重量部、ＳＬＳ  １重量部及びマンニトール２重量部を均一に混合し、実施例１５と同様の方法及び条件下で粉砕し、粒度を測定した。測定された平均粒径は２．６９９μｍであり、中間粒径は０．３４５μｍであるところ、粉砕されない大きな粒子がかなり存在していることが分かる。
【００５４】
比較例８
界面活性剤として、Ｇｅｌｕｃｉｒｅ（登録商標）５０／１３の代りにＳＬＳを使用したことを除いては、実施例４と同様の方法でイトラコナゾール含有粒子を製造し、その粒度を実施例４の同様の方法で測定した。測定された平均粒径は１３．８５９μｍであり、中間粒径は４．７１６μｍであるところ、実施例４に比べて全体的に粒度が大きく、粉砕されない大きい粒子がかなり存在していることが分かる。
【国際調査報告】
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