(57)【要約】  本発明は、次の式（Ｉ）Ｘ１（Ｘ２）−Ｘ３−Ｘ４、又はその塩若しくはその溶媒和物のペプチドに関し、Ｘ１は２以上のＮＨ官能基を含むアミノ酸であり、Ｘ２、Ｘ３、及びＸ４は互いに独立したアミノ酸残基であり、塩又は溶媒和物は、好ましくは生理学的に許容される塩又は溶媒和物である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の式（Ｉ）：
Ｘ１（Ｘ２）−Ｘ３−Ｘ４  （Ｉ）
のペプチド、又はその塩若しくはその溶媒和物であって、式中、
Ｘ１は２以上のＮＨ官能基を含むアミノ酸であり、
Ｘ２、Ｘ３、及びＸ４は、互いに独立したアミノ酸残基であり、前記塩又は溶媒和物は、好ましくは生理学的に許容される塩又は溶媒和物である、ペプチド、又はその塩若しくはその溶媒和物。
【請求項２】
請求項１に記載のペプチドであって、
前記Ｘ１はＡｒｇ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、３，６‐ジアミノヘキサン酸（Ｂｌｙ）、Ｎ５‐アミノカルボニルオルニチン（Ｃｉｔ）、２，４‐ジアミノブタン酸（Ｄａｂ）、２，３‐ジアミノプロパン酸、（Ｄｐｒ）、２，７‐ジアミノスベリン酸（Ｄｓｕ）、ホモアルギニン（Ｈａｒ）、ホモヒスチジン（Ｈｈｓ）、５‐ヒドロキシリジン（Ｈｙｌ）、オルニチン（Ｏｒｎ）、ピロリジン（Ｐｙｌ）、及びそれらの誘導体からなる群より選択されるアミノ酸残基であり、
及び／又は、好ましくは、
前記Ｘ２及びＸ４は、互いに独立して、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、２‐アミノアジピン酸（Ａａｄ）、アルファ‐アスパラギン（Ａａｎ）、２‐アミノカプリン酸（Ａｃａ）、アルファ‐グルタミン（Ａｇｎ）、２‐アミノピメリン酸（Ａｐｍ）、ガンマ‐アミノ‐β‐ヒドロキシベンゼンペンタン酸（Ａｐｐ）、２‐アミノスベリン酸（Ａｓｕ）、ベータ‐アスパラギン酸（Ｂａｓ）、Ｎ５−アミノカルボニルオルニチン（Ｃｉｔ）、ジアミノピメリン酸（Ｄｐｍ）、２，７‐ジアミノスベリン酸（Ｄｓｕ）、ガンマ−グルタミン酸（Ｇｇｕ）、ガンマ−カルボキシグルタミン酸（Ｇｌａ）、及びそれらの誘導体からなる群より選択されるアミノ酸残基であり、
及び／又は、好ましくは、
前記Ｘ３はＡｌａ、Ｃｙｓ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｖａｌ、Ｓｃｙ、２−アミノブタン酸（Ａｂｕ）、２−アミノヘプタン酸（Ａｈｅ）、アルファ−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、２−カルボキシアゼチジン（Ａｚｅ）、ベータ−アラニン（Ｂａｌ）、４−アミノ−３−ヒドロキシブタン酸（Ｂｕｘ）、ガンマ−アミノ−ベータ−ヒドロキシシクロヘキサンペンタン酸（Ｃａｐ）、３−シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、３−スルホアラニン（Ｃｙａ）、Ｓ−エチルチオシステイン（Ｅｄｃ）、ピログルタミン酸（Ｇｌｐ）、ホモシステイン（Ｈｃｙ）、ホモフェニルアラニン（Ｈｐｈ）、ホモセリン（Ｈｓｅ）、４−ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）、３−ヒドロキシプロリン（３Ｈｙｐ）、アルファ−アミノ−２−インダン酢酸（Ｉｇｌ）、イソバリン（Ｉｖａ）３−ヒドロキシ−４−メチルプロリン（Ｍｈｐ）、３−ナフチルアラニン（Ｎａｌ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、Ｎ−ベンジルグリシン（Ｎｐｈｅ）、ノルチロシン（Ｎｔｙ）、ノルバリン（Ｎｖａ）、２−カルボキシオクタヒドロインドール（Ｏｉｃ）、ペニシラミン（Ｐｅｎ）、２−フェニルグリシン（Ｐｈｇ）、２−カルボキシピペリジン（Ｐｉｐ）、ホスホ−Ｌ−セリン（ｐＳｅｒ）、ホスホ−Ｌ−トレオニン（ｐＴｈｒ）、ホスホ−Ｌ−チロシン（ｐＴｙｒ）、サルコシン（Ｓａｒ）、１−アミノ−１−カルボキシシクロペンタン（Ｓｐｑ）、スタチン（４−アミノ−３−ヒドロキシ−６−メチルヘプタン酸）（Ｓｔａ）、３−チエニルアラニン（Ｔｈｉ）、３−カルボキシイソキノリン（Ｔｉｃ）、３−メチルバリン（Ｔｌｅ）、エプシロン−Ｎ−トリメチルリジン（Ｔｍｌ）、３−チアゾリルアラニン（Ｔｚａ）、アルファ−アミノ−２，４−ジオキソピリミジンプロパン酸（Ｗｉｌ）、及びそれらの誘導体からなる群より選択されるアミノ酸残基である、ペプチド。
【請求項３】
請求項１又は２に記載のペプチドであって、前記Ｘ１及びＸ２はアミド結合を介して互いに結合しており、好ましくは、前記アミド結合はＸ１アミノ酸残基のＮ部分及びＸ２アミノ酸残基のカルボニル部分により形成される、ペプチド。
【請求項４】
請求項１〜３のうちいずれか一項に記載のペプチドであって、前記ペプチドは式（ＩＩ）：
Ｘ１（Ｒ１−Ｘ２−Ｒ２）−Ｘ３−Ｘ４  （ＩＩ）
を有し、
式中、Ｒ１はＨ又は生理学的に許容されるＮ末端保護基であり、Ｒ１は、好ましくは、Ｈ、アルキル、ホルミル、アシル、アルコキシカルボニル、又はそれらの誘導体であり、より好ましくは、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、ホルミル、（Ｃ１−Ｃ３）アシル、（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシカルボニル、又はそれらの誘導体であり、より好ましくは、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、又はそれらの誘導体であり、さらにより好ましくは、Ｒ１はＨであり、
及び／又は、好ましくは、
Ｒ２はＯＨ又は生理学的に許容されるＣ末端保護基であり、Ｒ２は、好ましくは、ＯＨ、アルキル、アルコキシ、ＮＨ２、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、チオール、チオエーテル、又はそれらの誘導体であり、より好ましくは、ＯＨ、（Ｃ１−Ｃ３)アルコキシ、ＮＨ２、（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノ、チオール、（Ｃ１−Ｃ３）チオエーテル、又はそれらの誘導体であり、より好ましくは、ＯＨ、（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシ、ＮＨ２、ジ（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノ、又はそれらの誘導体であり、より好ましくは、ＯＨ、ＮＨ２、又はそれらの誘導体であり、より好ましくは、ＯＨ、又はＮＨ２であり、さらにより好ましくは、Ｒ２はＮＨ２であり、
及び／又は、好ましくは、
Ｘ4における前記ペプチドのＣ末端カルボキシル基はアミドに官能基化され、好ましくはＸ４−ＮＨ２に官能基化される、ペプチド。
【請求項５】
請求項１〜４のうちいずれか一項に記載のペプチドであって、
前記Ｘ１はＡｒｇ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、及びそれらの誘導体からなる群より選択されるアミノ酸残基であり、好ましくは、前記Ｘ１はＬｙｓ又はその誘導体であり、
及び／又は、好ましくは、
前記Ｘ２は、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、及びそれらの誘導体からなる群より選択されるアミノ酸残基であり、好ましくは、前記Ｘ２はＡｓｐ又はその誘導体であり、
及び／又は、好ましくは、
前記Ｘ３は、Ａｌａ、Ｃｙｓ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｖａｌ、Ｓｃｙ、及びそれらの誘導体からなる群、好ましくは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｍｅｔ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、及びそれらの誘導体からなる群より選択されるアミノ酸残基であり、さらにより好ましくは、前記Ｘ３はＡｌａ又はその誘導体であり、
及び／又は、好ましくは、
前記Ｘ４は、Ａｌａ、Ｃｙｓ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｖａｌ、Ｓｃｙ、及びそれらの誘導体からなる群、好ましくは、Ａｓｐ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくは、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくは、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、及びそれらの誘導体からなる群より選択されるアミノ酸残基であり、さらにより好ましくは、前記Ｘ４はＧｌｕ又はその誘導体である、ペプチド。
【請求項６】
請求項１〜５のうちいずれか一項に記載のペプチドであって、前記ペプチドは式（ＩＩＩ）：
Ｌｙｓ（Ｈ−Ａｓｐ−Ｒ２）‐Ａｌａ−Ｇｌｕ  （ＩＩＩ）
を有し、
式中、Ｒ２はＯＨ又はＮＨ２であり、好ましくはＮＨ２であり、
Ｇｌｕにおける前記ペプチドのＣ末端カルボキシル基は、好ましくはアミドＧｌｕ−ＮＲ３Ｒ４に官能基化され、
該Ｒ３及びＲ４は、互いに独立して、Ｈ又はアルキルであり、好ましくはＨ又は（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり、さらにより好ましくは、Ｒ３及びＲ４はＨであり、
及び／又は、好ましくは、
Ｌｙｓにおける前記ペプチドのＮ末端アミノ基は、好ましくはＮＲ５Ｒ６であり、
該Ｒ5及びＲ6は、互いに独立して、Ｈ又はアルキルであり、好ましくはＨ又は（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり、さらにより好ましくは、Ｒ5及びＲ6はＨである、ペプチド。
【請求項７】
薬剤として、好ましくは抗炎症薬として、より好ましくは、上皮組織の炎症、アレルギー、アレルギー反応、発疹、及び／又は関節リウマチを治療及び／又は予防するための、より好ましくは、表皮の炎症、アレルギー、及び／又はアレルギー反応を治療及び／又は予防するための、より好ましくは皮膚炎を治療及び／又は予防するための、さらにより好ましくはアトピー性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、乾癬、ツタウルシ皮膚炎、ヘルペス性湿疹、禿瘡、おむつかぶれ、又は疥癬を治療及び／又は予防するための、請求項１〜６のうちいずれか一項に記載のペプチド。
【請求項８】
請求項１〜６のうちいずれか一項に記載のペプチドを含む化粧品組成物。
【請求項９】
請求項８に記載の化粧品組成物であって、前記組成物は０．００５〜２０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは０．０１〜１０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは０．０５〜５ｍｇ／ｍｌ、より好ましくは０．１〜２ｍｇ／ｍｌ、さらにより好ましくは０．２〜１ｍｇ／ｍｌの濃度で前記ペプチドを含む、化粧品組成物。
【請求項１０】
請求項１〜７のうちいずれか一項に記載のペプチドを含む医薬組成物。
【請求項１１】
請求項１０に記載の医薬組成物であって、前記組成物は、０．０１〜１００ｍｇ／ｍｌ、好ましくは０．０５〜５０ｍｇ／ｍｌ、より好ましくは０．１〜１０ｍｇ／ｍｌ、より好ましくは０．２〜５ｍｇ／ｍｌ、さらにより好ましくは０．５〜２ｍｇ／ｍｌの濃度で前記ペプチドを含む、医薬組成物。
【請求項１２】
請求項８〜１１のうちいずれか一項に記載の組成物であって、前記組成物は１以上の化粧品に、及び／又は医薬的に許容される担体又は賦形剤をさらに含む、組成物。
【請求項１３】
請求項１〜７のうちいずれか一項に記載のペプチド、又は請求項８〜１２のうちいずれか一項に記載の組成物であって、前記ペプチド又は組成物は、表皮に、好ましくは顔の皮膚及び／又は頭皮に、さらにより好ましくは顔の皮膚に適用するための洗浄剤及び／又は製剤中に含有され、
前記洗浄剤は好ましくは、石鹸及び／又はローション、より好ましくは顔用ローション及び／又はシャンプーであり、
前記表皮に適用するための製剤は、好ましくは液体若しくは半固形の溶液、ローション、クリーム、ジェル、又は軟膏である、ペプチド又は組成物。
【請求項１４】
請求項１３に記載のペプチド又は組成物であって、前記表皮に適用するための洗浄剤及び／又は製剤は、エアゾール中に含まれる、及び／又はエアゾールとして適用される、ペプチド又は組成物。
【請求項１５】
非治療的スキンケアのための、好ましくは乾燥皮膚状態、好ましくは乾燥した顔の皮膚及び／又は乾燥頭皮、さらにより好ましくは乾燥した顔の皮膚を治療及び／又は予防するための、請求項１〜６のうちいずれか一項に記載のペプチド、又は請求項８〜１４のうちいずれか一項に記載の組成物の使用。
【請求項１６】
請求項１５に記載の使用であって、前記ペプチド又は組成物は、健康で正常な皮膚常在微生物叢の生育を刺激するために、好ましくはブドウ球菌属に属する健康で正常な皮膚常在微生物叢の生育を刺激するために、より好ましくは表皮ブドウ球菌の生育を刺激するために、さらにより好ましくは、一過性の病原性微生物、特に黄色ブドウ球菌の生育を刺激することなく、表皮ブドウ球菌の生育を刺激するために使用される、使用。
【請求項１７】
請求項１５又は１６に記載の使用であって、前記ペプチド又は組成物は、一過性の病原性皮膚微生物叢の生育を阻害するために、好ましくはブドウ球菌属に属する一過性の病原性皮膚微生物叢の生育を阻害するために、より好ましくは、黄色ブドウ球菌の生育を阻害するために、さらにより好ましくは、有益な微生物、特に表皮ブドウ球菌の生育を阻害することなく、黄色ブドウ球菌の生育を阻害するために使用される、使用。
【請求項１８】
請求項１〜６のうちいずれか一項に記載のペプチドを産生するための微生物の使用であって、前記微生物は、好ましくは原核微生物、より好ましくは１以上の細菌株、より好ましくは１以上の乳酸菌、より好ましくは１以上のラクトバチルス属の細菌であり、
より好ましくは、前記細菌はラクトバチルス種である、Ｌ．ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ、Ｌ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ、Ｌ．ｒｅｕｔｅｒｉ、Ｌ．ｃａｓｅｉ、Ｌ．ｐａｒａｃａｓｅｉ、Ｌ．ｂｒｅｖｉｓ、Ｌ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ、Ｌ．ｂｕｃｈｎｅｒｉ、Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ、好ましくはＬ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ  ｓｓｐ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ、及びそれらの２以上の組み合わせからなる群より選択され、
より好ましくは、前記ラクトバチルス種は、Ｌ．ｂｒｅｖｉｓ、好ましくはＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１７２４７、ＤＳＭ１７２５０を有するＬ．ｂｒｅｖｉｓ、及びそれらの変異体又はそれらの誘導体、Ｌ．ｐａｒａｃａｓｅｉ、好ましくはＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１７２４８を有するＬ．ｐａｒａｃａｓｅｉ、及びその変異体又はその誘導体、Ｌ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ、好ましくはＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１７２４９を有するＬ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ、及びその変異体又はその誘導体、Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ  ｓｓｐ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ、好ましくはＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１８００６を有するＬ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ  ｓｓｐ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ、及びその変異体又はその誘導体、Ｌ．ｂｕｃｈｎｅｒｉ、好ましくはＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１８００７を有するＬ．ｂｕｃｈｎｅｒｉ、及びその変異体又はその誘導体、並びにそれらの２以上の組み合わせからなる群より選択され、
より好ましくは、前記ラクトバチルス種はＬ．ｂｒｅｖｉｓであり、より好ましくはＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１７２４７、ＤＳＭ１７２５０を有するＬ．ｂｒｅｖｉｓ、及びそれらの変異体又はそれらの誘導体からなる群より選択され、
さらにより好ましくは、前記ラクトバチルス種はＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１７２５０を有するＬ．ｂｒｅｖｉｓ、及び／又はその変異体又はその誘導体である、使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はペプチド、ペプチドを含む組成物、及びそれらのスキンケアにおける各非治療的使用に関する。さらに、本発明は、特に上皮組織の炎症の治療及び予防に使用するための抗炎症薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒトの皮膚には、皮膚表面の比較的安定な構成において主に共生生物として生存する多種多様の微生物が生着している。この正常な皮膚細菌叢は「皮膚常在菌叢」と称され、艶やかで十分に潤った皮膚の健康な外観をサポートしている。正常な皮膚細菌叢は、表皮内部の潤いを保つために天然バリアを形成することに加えて、病原性を有する可能性のある微生物の侵入から皮膚を保護する。
【０００３】
健康な皮膚の常在微生物叢を構成する微生物の中において、多くの場合、それらの９０パーセント超は、表皮ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）(コアグラーゼ陰性)、ミクロコッカス属菌（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐｅｃ．）、ジフテロイド（Ｄｉｐｈｔｅｒｏｉｄ）、及びプロピオニバクテリウム属菌（ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉａ）である。皮膚細菌叢の典型的な不均衡は、例えば黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）が皮膚微生物叢において生着するときに観察され、その結果、皮膚はますます乾燥しやすくなる。この状態では、表皮はひび割れを示し、かつ炎症の結果として赤い部分を示す傾向にある。病原性微生物の定着の危険性は、皮膚表面における小さな病変又はその他の損傷の場合、特に、頻繁な洗浄、メイクアップ、ＵＶ光の結果として、又は抗生物質により正常な皮膚細菌叢が減少するときに、大幅に増加する。
【０００４】
したがって、皮膚微生物叢は、美容関連、つまり皮膚のｐＨ値、バリア機能、及び皮膚の脂質含量である、皮膚のいくつかの要因に影響を及ぼす。この点において、表皮ブドウ球菌は、病原菌が効果的に生育することが不可能なｐＨ値までｐＨを低下させることで、病原性微生物と戦い皮膚を手助けする。一方で、皮膚の水分バリア機能及び脂質含量は、角質層のセラミド含有量に依存する。セラミド含有量の低下は乾燥及びひび割れした皮膚状態をもたらす。この点において、このような皮膚状態を有するアトピー性皮膚炎患者において行われた研究から、黄色ブドウ球菌はこれらの状況下では、皮膚微生物叢で優位を占めている可能性が明らかとなった。特に、皮膚の正常共生生物とは対照的に、この病原菌は非常に高いセラミダーゼ活性を示すことが分かった。このような状況下において、湿潤性及び脂質の減少は表皮の炎症の発生につながる。
【０００５】
国際公開第２００６／１３６４２０Ａ２号は、微生物、特にラクトバチルス属に属する微生物に関連し、それらは皮膚の常在微生物叢の1以上の微生物の生育を刺激することが可能であり、一過性の病原性微生物叢の微生物の生育を刺激しない。また、それは、このような微生物を化粧品組成物及び医薬組成物において、特に皮膚炎の治療のために使用することにも関する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】国際公開第２００６／１３６４２０号
【特許文献２】国際公開第２００５／０４８９６８号
【特許文献３】国際公開第２０００／４３４１７号
【特許文献４】米国特許第６，６２０，４１９号明細書
【特許文献５】米国特許第６，４９２，３２６号明細書
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｒｏｌｌａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｆｏｏｄ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．７０（２００１），３０３−３０７
【非特許文献２】Ｍａｔｓｕｑｕｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｄｉａｇｎ．Ｌａｂ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１０（２００３），２５９−２６６
【非特許文献３】Ｓｔｅｎｔｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．６６（２０００），４２７２−４２７８
【非特許文献４】Ｖａｒｍａｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ  １８２（２０００），１４６−１５４
【非特許文献５】Ｓｃｈｒａｄｅｒ，Ｇｒｕｎｄｌａｇｅｎ  ｕｎｄ  Ｒｅｚｅｐｔｕｒｅｎ  ｄｅｒ  Ｋｏｓｍｅｔｉｋａ，Ｈｕｔｈｉｇ  Ｂｕｃｈ  Ｖｅｒｌａｇ，Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ，２ｎｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，１９８９，３ｒｄ  ｐａｒｔ
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
しかしながら、特別な配慮及び処理を必要とする細胞培養（それ故化合物又は組成物の応用に関して限定されている）に依存しない化合物又は組成物が依然として必要とされている。特に、費用効率の高い方法で容易に製造可能である化合物又は組成物に対する必要性が存在している。さらに、より費用効率の高い化粧品製剤を提供する観点からだけでなく、化粧品及び医薬品の両方の分野における新たな応用に関連して新しい視点を開くためにも、その有益な効果に対して少ない有効量を示す化合物又は組成物に対する必要性が存在する。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は下記の式（Ｉ）：
【００１０】
Ｘ１（Ｘ２）‐Ｘ３‐Ｘ４  （Ｉ）
【００１１】
のペプチド、又はその塩若しくはその溶媒和物に関し、式中、Ｘ１は２以上のＮＨ官能基を含むアミノ酸であり、Ｘ２、Ｘ３、及びＸ４は、互いに独立したアミノ酸残基であり、塩又は溶媒和物は、好ましくは生理学的に許容される塩又は溶媒和物である。
【００１２】
さらに、本発明は、薬剤として、及び好ましくは抗炎症薬としての本発明のペプチドに関する。さらに、本発明は、対象における炎症誘発性の状態又は疾患を治療する方法にも同様に関連し、前記方法は前述の状態又は疾患に苦しむ対象に、本発明のペプチドの治療的に有効な量を投与することを含む。治療される状態又は疾患は、好ましくは上皮組織の炎症、アレルギー、アレルギー反応、発疹、及び／又は関節リウマチであり、より好ましくは、表皮の炎症、アレルギー、及び／又はアレルギー反応であり、より好ましくは皮膚炎であり、さらにより好ましくはアトピー性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、乾癬、ツタウルシ皮膚炎、ヘルペス性湿疹、禿瘡、おむつかぶれ、又は疥癬である。これに加えて、本発明はまた、対象における炎症誘発性の状態又は疾患を予防する方法に関し、前記方法は外見上健康な対象に、本発明のペプチドの予防的に有効な量を投与することを含む。対象における炎症誘発性の状態又は疾患を予防する方法は、好ましくは上皮組織の炎症、アレルギー、アレルギー反応、発疹、及び／又は関節リウマチ、より好ましくは、表皮の炎症、アレルギー、及び／又はアレルギー反応、より好ましくは皮膚炎、さらにより好ましくはアトピー性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、乾癬、ツタウルシ皮膚炎、ヘルペス性湿疹、禿瘡、おむつかぶれ、又は疥癬の予防を含む。
【００１３】
これらに加えて、本発明は化粧品組成物及び医薬組成物の両方に関連し、前記組成物は本発明のペプチドをそれぞれ含む。
【００１４】
また、本発明は、非治療的なスキンケア、好ましくは乾燥皮膚状態を治療及び／又は予防するための、本発明のペプチド又は本発明の組成物の使用に関する。これに加えて、本発明は、非治療的なスキンケア、好ましくは乾燥皮膚状態、好ましくは乾燥した顔の皮膚及び／又は乾燥頭皮、さらにより好ましくは乾燥した顔の皮膚を治療及び／又は予防するための、本発明のペプチド又は本発明の組成物の使用方法に同様に関連し、前記方法は対象に本発明のペプチドの化粧品学的に有効な量を投与することを含む。
【００１５】
さらに、本発明は、好ましくは、健康で正常な皮膚常在微生物叢の生育を刺激するための、好ましくはブドウ球菌属（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｇｅｎｕｓ）に属する健康で正常な皮膚常在微生物叢の生育を刺激するための、本発明のペプチド又は組成物の使用に関する。これに加えて、本発明は、健康で正常な皮膚常在微生物叢の生育を刺激するための、好ましくはブドウ球菌属に属する健康で正常な皮膚常在微生物叢の生育を刺激するための、より好ましくは表皮ブドウ球菌の生育を刺激するための、さらにより好ましくは、病原性微生物、特に黄色ブドウ球菌の生育を刺激することなく表皮ブドウ球菌の生育を刺激するための、本発明のペプチド又は組成物の使用方法に同様に関連し、前記方法は対象に本発明のペプチドの有効量を投与することを含む。
【００１６】
さらに、本発明は好ましくは、一過性の病原性皮膚微生物叢の生育を阻害するための、好ましくはブドウ球菌属に属する一過性の病原性皮膚微生物叢の生育を阻害するための、本発明のペプチド又は組成物の使用にさらに関する。これに加えて、本発明は、一過性の病原性皮膚微生物叢の生育を阻害するための、好ましくはブドウ球菌属に属する一過性の病原性皮膚微生物叢の生育を阻害するための、より好ましくは黄色ブドウ球菌の生育を阻害するための、さらにより好ましくは、有益な微生物、特に表面ブドウ球菌の生育を阻害することなく黄色ブドウ球菌の生育を阻害するための、本発明のペプチド又は組成物の使用方法に同様に関連し、前記方法は対象に本発明のペプチドの有効量を投与することを含み、前記有効量は化粧品学的に有効な量、予防的に有効な量、又は治療的に有効な量のいずれかであり得る。
【００１７】
また、本発明は本発明のペプチドを産生するための微生物の使用に関連し、微生物は好ましくは原核微生物、より好ましくは１以上の細菌株、より好ましくは１以上の乳酸菌、及びより好ましくは１以上のラクトバチルス属の細菌である。これに加えて、本発明は、特に本発明のペプチド又はその前駆体を微生物から単離することで本発明のペプチドを産生するための、微生物の使用方法に同様に関連し、微生物は好ましくは原核微生物、より好ましくは１以上の細菌株、より好ましくは１以上の乳酸菌、より好ましくは１以上のラクトバチルス属の細菌である。より好ましくは、細菌はラクトバチルス種である、Ｌ．ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ、Ｌ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ、Ｌ．ｒｅｕｔｅｒｉ、Ｌ．ｃａｓｅｉ、Ｌ．ｐａｒａｃａｓｅｉ、Ｌ．ｂｒｅｖｉｓ、Ｌ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ、Ｌ．ｂｕｃｈｎｅｒｉ、Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ、好ましくはＬ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ  ｓｓｐ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ、及びそれらの２以上の組み合わせからなる群より選択され、より好ましくは、ラクトバチルス種は、Ｌ．ｂｒｅｖｉｓ、好ましくはＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１７２４７、ＤＳＭ１７２５０を有するＬ．ｂｒｅｖｉｓ、及びその変異体又はその誘導体、Ｌ．ｐａｒａｃａｓｅｉ、好ましくはＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１７２４８を有するＬ．ｐａｒａｃａｓｅｉ、及びその変異体又はその誘導体、Ｌ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ、好ましくはＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１７２４９を有するＬ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ、及びその変異体又はその誘導体、Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ  ｓｓｐ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ、好ましくはＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１８００６を有するＬ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ  ｓｓｐ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ、及びその変異体又はその誘導体、Ｌ．ｂｕｃｈｎｅｒｉ、好ましくはＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１８００７を有するＬ．ｂｕｃｈｎｅｒｉ、及びその変異体又はその誘導体、並びにそれらの２以上の組み合わせからなる群より選択され、より好ましくは、ラクトバチルス種はＬ．ｂｒｅｖｉｓであり、より好ましくはＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１７２４７、ＤＳＭ１７２５０を有するＬ．ｂｒｅｖｉｓ、及びその変異体又はその誘導体からなる群より選択され、さらにより好ましくは、ラクトバチルス種はＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１７２５０を有するＬ．ｂｒｅｖｉｓ、及び／又はその変異体又はその誘導体である。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１ａ】図１ａは実施例１のｉｎ  ｖｉｔｒｏホール／ウェルプレートアッセイの結果を示しており、テトラペプチドＨ−Ｌｙｓ（Ｈ−Ａｓｐ−ＮＨ２）−Ａｌａ−Ｇｌｕ−ＮＨ２で処理した表皮ブドウ球菌の生育刺激を、ウェル周りの黒い環の形成から観察することができる。
【図１ｂ】図１ｂは実施例１のｉｎ  ｖｉｔｒｏホール／ウェルプレートアッセイの結果を示しており、テトラペプチドＨ−Ｌｙｓ（Ｈ−Ａｓｐ−ＮＨ２）−Ａｌａ−Ｇｌｕ−ＮＨ２で処理した表皮ブドウ球菌の生育刺激を、ウェル周りの黒い環の形成から観察することができる。
【図１ｃ】図１ｃは水を含む実施例１の対照アッセイの結果を示している。
【図２ａ】図２ａは実施例２のバイオアッセイの結果を示しており、テトラペプチドＨ−Ｌｙｓ（Ｈ−Ａｓｐ−ＮＨ２）−Ａｌａ−Ｇｌｕ−ＮＨ２で処理した表皮ブドウ球菌の生育刺激を表している。ｙ軸は各試料に対して測定された光学密度ＯＤ６００ｎｍを表しており、ｘ軸はインキュベーション時間を時間で表している。ラインＡは未処理の試料（対照）の結果を示しており、ラインＢは０．２ｍｇ／ｍｌの本発明のテトラペプチドで処理した試料の結果を示しており、ラインＣは１ｍｇ／ｍｌの本発明のテトラペプチドで処理した試料の結果を示している。
【図２ｂ】図２ｂは実施例２のバイオアッセイの結果を示しており、４個のアミノ酸混合物が表皮ブドウ球菌の生育に与える影響を表している。ｙ軸は各試料に対して測定された光学密度ＯＤ６００ｎｍを表しており、ｘ軸はインキュベーション時間を時間で表している。ラインＡは未処理の試料（対照）の結果を示しており、ラインＢは、試料中において１ｍｇ／ｍｌの総濃度の均等量のアラニン、グルタミン、リジン、及びアスパラギンの混合物（「アミノ酸混合物」）で処理した試料の結果を示している。
【図３】図３は実施例３のバイオアッセイの結果を示しており、テトラペプチドＨ−Ｌｙｓ（Ｈ−Ａｓｐ−ＮＨ２）−Ａｌａ−Ｇｌｕ−ＮＨ２で処理した黄色ブドウ球菌の生育阻害を表している。ｙ軸は各試料に対して測定された光学密度ＯＤ６００ｎｍを表しており、ｘ軸はインキュベーション時間を時間で表している。ラインＡは未処理の試料（対照）の結果を示しており、ラインＢは１ｍｇ／ｍｌの本発明のテトラペプチドで処理した試料の結果を示している。
【図４】図４は実施例４のバイオアッセイの結果を示しており、２４時間の前処理及び２４時間の処理の後のＮＨＥＫからのＩＬ−１アルファの分泌を示している。１．は陰性対照であり、２．及び３．はそれぞれラクトバチルスＤＳＭ１７２５０及びＬＰＳの炎症誘発作用を示しており、４．はラクトバチルスＤＳＭ１７２５０の予防的抗炎症作用であり、５．はラクトバチルスＤＳＭ１７２５０の保護的抗炎症作用である。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
こうして、特に化粧品スキンケアに関連し、かつ非病理学的及び病理学的な皮膚状態の治療及び／又は予防に関連した、化粧品及び医薬品の応用の両方における使用のために、容易に利用可能な単純化合物が提供され得ることが、驚くべきこととして発見された。さらに、単純化合物は、薬剤として、特に抗炎症薬としての使用のために提供され得ることが全く驚くべきこととして見出された。
【００２０】
したがって、第１の態様では、本発明は下記の式（Ｉ）：
【００２１】
Ｘ１（Ｘ２）‐Ｘ３‐Ｘ４  （Ｉ）
【００２２】
のペプチド、又はその塩若しくはその溶媒和物に関し、式中、
Ｘ１は２以上のＮＨ官能基を含むアミノ酸残基であり、
Ｘ２、Ｘ３、及びＸ４は互いに独立したアミノ酸残基であり、
塩又は溶媒和物は好ましくは生理学的に許容される塩又は溶媒和物である。
【００２３】
本明細書及び以下の特許請求の範囲にわたって、文脈上他の意味に解すべき場合を除いて、用語「含む（ｃｏｍｐｅｉｓｅ）」、並びに「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」及び「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などの変形は、記載の整数、工程、若しくは構成要素、又は整数、工程、若しくは構成要素の群を含むことを示唆するが、あらゆるその他の整数、工程、若しくは構成要素、又は整数、工程、若しくは構成要素の群の排除を示唆するものではないことを理解されるであろう。
【００２４】
本明細書及び添付の特許請求の範囲において使用されるとき、単数形「ａ」「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈上他の明確な指示がない場合を除いて、複数の指示対象を含むことに留意すべきである。したがって、例えば、「試薬」の参照は1以上のこのような異なる試薬を含み、かつ「方法」の参照は、本明細書に記載の方法に対して修正又は置換することが可能である当業者に周知の均等な工程及び方法を参照することを含む。
【００２５】
本発明によれば、式（Ｉ）のペプチドはトリペプチド配列Ｘ１−Ｘ３−Ｘ４を含み、式中、Ｘ１はＮ末端を構成し、かつＸ４はＣ末端を構成する。さらに、ペプチドはアミノ酸残基Ｘ１の側鎖と共有結合するアミノ酸残基Ｘ２を含む。原理上は、Ｘ２がＸ１のＮ末端と共有結合しない限り、Ｘ１とＸ２との間に形成される共有結合に関連して、本発明において特に限定されない。それ故、式Ｉのペプチドは、例えば、Ｘ２がＮ末端のＮ末端基と共有結合し得るＸ２−Ｘ１−Ｘ３−Ｘ４の配列のテトラペプチド又はテトラペプチドのモチーフを含まない。
【００２６】
本発明の意義の範囲内において、用語「アミノ酸」及び「アミノ酸残基」は、特に制限されるものではなく、一般に、互いにペプチド結合を形成できるように、１以上のアミノ部分及び１以上のカルボキシル部分を含む任意の想定可能な化合物を指す。特に、本明細書で使用するとき、用語「アミノ酸」及び「アミノ酸残基」は、Ｄ配置、Ｌ配置、ａｌｌｏ配置、又は光学活性を有する場合は他の立体異性配置の全ての天然に存在するアミノ酸、並びにあらゆる周知又は想定可能な非天然、合成、及び修飾されたアミノ酸を包含かつ網羅する。本発明の好ましい実施形態によれば、光学活性のアミノ酸及びアミノ酸残基は、好ましくはラセミ混合物を含めてＤ配置及び／又はＬ配置であり、より好ましくは、光学活性のアミノ酸及びアミノ酸残基はＬ配置である。
【００２７】
Ｘ１のアミノ酸がアルファ−アミノ酸である本発明の好ましい実施形態によれば、Ｎ末端はそれに応じてそのアルファ−アミノ基によって構成される。Ｘ１のアミノ酸がアルファ−アミノ酸ではなく、Ｘ１が２以上のアミノ基を含む、本発明の別の好ましい実施形態によれば、２以上のアミノ基のどれがＮ末端を構成するかに関しては一般に限定されず、そして構成されたＮ末端はＸ２と共有結合しない。前記別の好ましい実施形態の特定の実施形態によれば、Ｘ１は１以上の側鎖をさらに含み、第２及び／又はさらなるアミノ基が前記１以上の側鎖と共有結合し、好ましくは、Ｎ末端は側鎖に存在するアミノ基ではない。
【００２８】
こうして、４番目のアミノ酸がＮ末端のアミノ酸にそれのＮ末端基以外で共有結合している３個のアミノ酸残基の配列を含む、式（Ｉ）のペプチドは、化粧品及び医薬品の両方の応用において有利に使用され得るペプチドを提供することが、全く驚くべきこととして発見された。特に、以下の例示的な本発明の実施例において示されるように、このようなペプチドは皮膚における美容的処置及び医薬的治療の両方のために有利に使用できることが、全く予期せず発見された。さらに、本発明のペプチドは驚いたことに抗炎症活性を示し、そのため、本発明のペプチドは、特に炎症状態、それに加えて様々な炎症関連状態及び疾患の予防及び／又は治療における薬剤として、様々な応用の可能性に対して有利であることが証明されている。したがって、例えば、国際公開第２００５／０４８９６８Ａ１号、同第００／４３４１７Ａ１号、米国特許第６，６２０，４１９Ｂ１号、及び同第６，４９２，３２６Ｂ１号において開示されているように、様々な小さなペプチド配列は、大部分の化粧品応用において特定の利益があるとして周知であるが、本発明のペプチドにおける特定の結合パターンは、非治療的な化粧品応用だけでなく、多くの状態及び疾患を効果的に予防及び／又は治療するための薬剤として、高度に有利な使用及び可能性において前例のない活性をもたらすことが、全く予期されず驚くべきこととして発見された。
【００２９】
本発明の好ましい実施形態によれば、用語「アミノ酸」は、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、３，６‐ジアミノヘキサン酸（Ｂｌｙ）、Ｎ５‐アミノカルボニルオルニチン（Ｃｉｔ）、２，４‐ジアミノブタン酸（Ｄａｂ）、２，３‐ジアミノプロパン酸（Ｄｐｒ）、２，７‐ジアミノスベリン酸（Ｄｓｕ）、ホモアルギニン（Ｈａｒ）、ホモヒスチジン（Ｈｈｓ）、５‐ヒドロキシリジン（Ｈｙｌ）、オルニチン（Ｏｒｎ）、ピロリジン（Ｐｙｌ）、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、２‐アミノアジピン酸（Ａａｄ）、α‐アスパラギン（Ａａｎ）、２‐アミノカプリン酸（Ａｃａ）、アルファ‐グルタミン（Ａｇｎ）、２‐アミノピメリン酸（Ａｐｍ）、ガンマ‐アミノ‐ベータ‐ヒドロキシベンゼンペンタン酸（Ａｐｐ）、２‐アミノスベリン酸（Ａｓｕ）、ベータ‐アスパラギン酸（Ｂａｓ）、ジアミノピメリン酸（Ｄｐｍ）、ガンマ−グルタミン酸（Ｇｇｕ）、ガンマ−カルボキシグルタミン酸（Ｇｌａ）、Ａｌａ、Ｃｙｓ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｖａｌ、Ｓｃｙ、２−アミノブタン酸（Ａｂｕ）、２−アミノヘプタン酸（Ａｈｅ）、アルファ−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、２−カルボキシアゼチジン（Ａｚｅ）、ベータ−アラニン（Ｂａｌ）、４−アミノ−３−ヒドロキシブタン酸（Ｂｕｘ）、ガンマ−アミノ−ベータ−ヒドロキシシクロヘキサンペンタン酸（Ｃａｐ）、３−シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、３−スルホアラニン（Ｃｙａ）、Ｓ−エチルチオシステイン（Ｅｄｃ）、ピログルタミン酸（Ｇｌｐ）、ホモシステイン（Ｈｃｙ）、ホモフェニルアラニン（Ｈｐｈ）、ホモセリン（Ｈｓｅ）、４−ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）、３−ヒドロキシプロリン（３Ｈｙｐ）、アルファ−アミノ−２−インダン酢酸（Ｉｇｌ）、イソバリン（Ｉｖａ）、３−ヒドロキシ−４−メチルプロリン（Ｍｈｐ）、３−ナフチルアラニン（Ｎａｌ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、Ｎ−ベンジルグリシン（Ｎｐｈｅ）、ノルチロシン（Ｎｔｙ）、ノルバリン（Ｎｖａ）、２−カルボキシオクタヒドロインドール（Ｏｉｃ）、ペニシラミン（Ｐｅｎ）、２−フェニルグリシン（Ｐｈｇ）、２−カルボキシピペリジン（Ｐｉｐ）、ホスホ−Ｌ−セリン（ｐＳｅｒ）、ホスホ−Ｌ−トレオニン（ｐＴｈｒ）、ホスホ−Ｌ−チロシン（ｐＴｙｒ）、サルコシン（Ｓａｒ）、１−アミノ−１−カルボキシシクロペンタン（Ｓｐｇ）、スタチン（４−アミノ−３−ヒドロキシ−６−メチルヘプタン酸）（Ｓｔａ）、３−チエニルアラニン（Ｔｈｉ）、３−カルボキシイソキノリン（Ｔｉｃ）、３−メチルバリン（Ｔｌｅ）、エプシロン−Ｎ−トリメチルリジン（Ｔｍｌ）、３−チアゾリルアラニン（Ｔｚａ）、アルファ−アミノ−２，４−ジオキソピリミジンプロパン酸（Ｗｉｌ）、及びそれらの誘導体からなる群より選択される１以上のアミノ酸を指す。
【００３０】
本発明の意義の範囲内において、任意のアミノ酸の「誘導体」又はその「誘導体化」は、誘導体が非誘導体化アミノ酸残基と同様のペプチド結合を形成可能である限り、それのあらゆる想定可能な化学修飾を指す。好ましい実施形態によれば、用語「誘導体」は、非誘導体化アミノ酸と同様の炭素鎖を有する化学修飾されたアミノ酸残基を指し、非誘導体化アミノ酸に存在するアミノ官能基及びカルボニル官能基は、誘導体化残基の炭素鎖の同一の場所で見られる。
【００３１】
アミノ酸誘導体に存在し得る化学修飾の種類に関して、これらは好ましくはＣ−Ｈ及び／若しくはＮ‐Ｈ部分の水素の置換、並びに／又は末端のオキソ、‐ＯＨ、及び／若しくは−ＯＲ部分の置換に関連し、これらの１以上が非誘導体化アミノ酸残基に存在している。特に、非誘導体化アミノ酸のＣ−Ｈ部分における１以上の水素原子が化学的に修飾されているアミノ酸残基の好ましい誘導体によれば、１以上の水素原子は、互いに独立して、ハロゲン、ＯＨ、アルキル、アルコキシ、ＮＨ２、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、チオール、チオエーテル、ホルミル、アシル、アルコキシカルボニル、又はそれらの誘導体、より好ましくは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシ、ＮＨ２、（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノ、チオール、（Ｃ１−Ｃ３）チオエーテル、ホルミル、（Ｃ１−Ｃ３）アシル、（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシカルボニル、又はそれらの誘導体と置換されることが好ましい。さらに、非誘導体化アミノ酸のＮ−Ｈ部分における１以上の水素原子が化学的に修飾されているアミノ酸残基の好ましい誘導体によれば、１以上の水素原子は、互いに独立して、ハロゲン、アルキル、ホルミル、アシル、アルコキシカルボニル、又はそれらの誘導体、より好ましくは、Ｆ、（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、ホルミル、（Ｃ１−Ｃ３）アシル、（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシカルボニル、又はそれらの誘導体と置換されることが好ましい。さらに、非誘導体化アミノ酸の１以上の−ＯＨ、及び／又は−ＯＲ部分が化学的に修飾されているアミノ酸残基の好ましい誘導体によれば、これらは、互いに独立して、ハロゲン、ＯＨ、アルキル、アルコキシ、ＮＨ２、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、チオール、チオエーテル、ホルミル、アシル、アルコキシカルボニル、又はそれらの誘導体、より好ましくは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシ、ＮＨ２、（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノ、チオール、（Ｃ１−Ｃ３）チオエーテル、ホルミル、（Ｃ１−Ｃ３）アシル、（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシカルボニル、又はそれらの誘導体で修飾されることが好ましい。さらに、非誘導体化アミノ酸の１以上の末端オキソ配位子が化学的に修飾されているアミノ酸残基の好ましい誘導体によれば、末端のオキソは、末端のチオ、アセタール、チオアセタール、ヘミアセタール、又はそれらの誘導体に化学修飾されることが好ましい。
【００３２】
本発明によれば、ペプチドは、例えば中性若しくは双性イオン化合物の形態、又は塩若しくは溶媒和物の形態などのあらゆる想定可能な形態であってもよく、ペプチドが存在し得る塩又は溶媒和物の種類に関して特に限定されない。本発明の好ましい意義の範囲内において、表現「塩」は、本発明のペプチドのカルボキシル基の塩、またアミノ基の酸付加塩の両方を意味するものと理解される。カルボキシル基の塩は、好ましくは、例えば、ナトリウム、カルシウム、アンモニウム、鉄、及び亜鉛塩などの無機塩、及び／又は例えば、トリエタノールアミン、アルギニン、リジン、ピペリジン等のアミンなどの有機塩基を含む塩を包含する。さらに、本発明の塩としては、例えば、塩酸、又は硫酸などの鉱酸を含む塩、並びに例えば酢酸、及びシュウ酸などの有機酸を含む塩、などの酸付加塩が挙げられる。一方で、表現「溶媒和物」は、本発明のペプチド（その塩を含む）を含む溶媒和物を形成し得る限り、あらゆる想定可能な極性又は非極性の溶媒和物を指す。好ましい実施形態によれば、溶媒和物は、水、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド、メタノール、プロピレンカーボネート、アンモニア、エタノール、及びアセトン、並びにそれらの２以上の混合物からなる群より選択され、より好ましくは、水、ジメチルスルホキシド、プロピレンカーボネート、エタノール、及びそれらの２以上の混合物からなる群より選択される。
【００３３】
しかしながら、特に好ましくは、ペプチドが塩又は溶媒和物の形態である本発明の実施形態において、前記塩又は溶媒和物は、特にそれの全身及び／又は局所適用に関して、さらにより好ましくはそれの局所適用に関して、生理学的に許容されるものである。
【００３４】
本発明の好ましい実施形態によれば、Ｘ１は、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｂｌｙ、Ｃｉｔ、Ｄａｂ、Ｄｐｒ、Ｄｓｕ、Ｈａｒ、Ｈｈｓ、Ｈｙｌ、Ｏｒｎ、Ｐｙｌ、及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくは、Ｄｐｒ、Ｄａｂ、Ｏｒｎ、Ｌｙｓ、Ｄｓｕ、及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくは、Ｄｐｒ、Ｄａｂ、Ｏｒｎ、Ｌｙｓ、及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくは、Ｏｒｎ、Ｌｙｓ、及びそれらの誘導体からなる群より選択されるアミノ酸残基であり、さらにより好ましくは、Ｘ１はＬｙｓ又はその誘導体である。
【００３５】
Ｘ１における前述の好ましいアミノ酸残基に代えて、又は加えて、好ましくはＸ１における前述の好ましいアミノ酸残基に加えて、本発明によれば、さらに好ましくは、Ｘ２は、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａａｄ、Ａａｎ、Ａｃａ、Ａｇｎ、Ａｐｍ、Ａｐｐ、Ａｓｕ、Ｂａｓ、Ｃｉｔ、Ｄｐｍ、Ｄｓｕ、Ｇｇｕ、Ｇｌａ、及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくはＡｓｐ、Ｇｌｕ、Ａａｄ、Ａｐｍ、及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくはＡｓｐ、Ｇｌｕ、及びそれらの誘導体からなる群より選択されるアミノ酸残基であり、さらにより好ましくは、Ｘ２はＡｓｐ又はその誘導体である。
【００３６】
したがって、本発明によれば、式ＩのフラグメントＸ１（Ｘ２）−は、Ａｒｇ（Ａｓｎ）−、Ｈｉｓ（Ａｓｎ）−、Ｌｙｓ（Ａｓｎ）−、Ｂｌｙ（Ａｓｎ）−、Ｃｉｔ（Ａｓｎ）−、Ｄａｂ（Ａｓｎ）−、Ｄｐｒ（Ａｓｎ）−、Ｄｓｕ（Ａｓｎ）−、Ｈａｒ（Ａｓｎ）−、Ｈｈｓ（Ａｓｎ）−、Ｈｙｌ（Ａｓｎ）−、Ｏｒｎ（Ａｓｎ）−、Ｐｙｌ（Ａｓｎ）−、Ａｒｇ（Ａｓｐ）−、Ｈｉｓ（Ａｓｐ）−、Ｌｙｓ（Ａｓｐ）−、Ｂｌｙ（Ａｓｐ）−、Ｃｉｔ（Ａｓｐ）−、Ｄａｂ（Ａｓｐ）−、Ｄｐｒ（Ａｓｐ）−、Ｄｓｕ（Ａｓｐ）−、Ｈａｒ（Ａｓｐ）−、Ｈｈｓ（Ａｓｐ）−、Ｈｙｌ（Ａｓｐ）−、Ｏｒｎ（Ａｓｐ）−、Ｐｙｌ（Ａｓｐ）−、Ａｒｇ（Ｇｌｎ）−、Ｈｉｓ（Ｇｌｎ）−、Ｌｙｓ（Ｇｌｎ）−、Ｂｌｙ（Ｇｌｎ）−、Ｃｉｔ（Ｇｌｎ）−、Ｄａｂ（Ｇｌｎ）−、Ｄｐｒ（Ｇｌｎ）−、Ｄｓｕ（Ｇｌｎ）−、Ｈａｒ（Ｇｌｎ）−、Ｈｈｓ（Ｇｌｎ）−、Ｈｙｌ（Ｇｌｎ）−、Ｏｒｎ（Ｇｌｎ）−、Ｐｙｌ（Ｇｌｎ）−、Ａｒｇ（Ｇｌｕ）−、Ｈｉｓ（Ｇｌｕ）−、Ｌｙｓ（Ｇｌｕ）−、Ｂｌｙ（Ｇｌｕ）−、Ｃｉｔ（Ｇｌｕ）−、Ｄａｂ（Ｇｌｕ）−、Ｄｐｒ（Ｇｌｕ）−、Ｄｓｕ（Ｇｌｕ）−、Ｈａｒ（Ｇｌｕ）−、Ｈｈｓ（Ｇｌｕ）−、Ｈｙｌ（Ｇｌｕ）−、Ｏｒｎ（Ｇｌｕ）−、Ｐｙｌ（Ｇｌｕ）−、Ａｒｇ（Ａａｄ）−、Ｈｉｓ（Ａａｄ）−、Ｌｙｓ（Ａａｄ）−、Ｂｌｙ（Ａａｄ）−、Ｃｉｔ（Ａａｄ）−、Ｄａｂ（Ａａｄ）−、Ｄｐｒ（Ａａｄ）−、Ｄｓｕ（Ａａｄ）−、Ｈａｒ（Ａａｄ）−、Ｈｈｓ（Ａａｄ）−、Ｈｙｌ（Ａａｄ）−、Ｏｒｎ（Ａａｄ）−、Ｐｙｌ（Ａａｄ）−、Ａｒｇ（Ａａｎ）−、Ｈｉｓ（Ａａｎ）−、Ｌｙｓ（Ａａｎ）−、Ｂｌｙ（Ａａｎ）−、Ｃｉｔ（Ａａｎ）−、Ｄａｂ（Ａａｎ）−、Ｄｐｒ（Ａａｎ）−、Ｄｓｕ（Ａａｎ）−、Ｈａｒ（Ａａｎ）−、Ｈｈｓ（Ａａｎ）−、Ｈｙｌ（Ａａｎ）−、Ｏｒｎ（Ａａｎ）−、Ｐｙｌ（Ａａｎ）−、Ａｒｇ（Ａｃａ）−、Ｈｉｓ（Ａｃａ）−、Ｌｙｓ（Ａｃａ）−、Ｂｌｙ（Ａｃａ）−、Ｃｉｔ（Ａｃａ）−、Ｄａｂ（Ａｃａ）−、Ｄｐｒ（Ａｃａ）−、Ｄｓｕ（Ａｃａ）−、Ｈａｒ（Ａｃａ）−、Ｈｈｓ（Ａｃａ）−、Ｈｙｌ（Ａｃａ）−、Ｏｒｎ（Ａｃａ）−、Ｐｙｌ（Ａｃａ）−、Ａｒｇ（Ａｇｎ）−、Ｈｉｓ（Ａｇｎ）−、Ｌｙｓ（Ａｇｎ）−、Ｂｌｙ（Ａｇｎ）−、Ｃｉｔ（Ａｇｎ）−、Ｄａｂ（Ａｇｎ）−、Ｄｐｒ（Ａｇｎ）−、Ｄｓｕ（Ａｇｎ）−、Ｈａｒ（Ａｇｎ）−、Ｈｈｓ（Ａｇｎ）−、Ｈｙｌ（Ａｇｎ）−、Ｏｒｎ（Ａｇｎ）−、Ｐｙｌ（Ａｇｎ）−、Ａｒｇ（Ａｐｍ）−、Ｈｉｓ（Ａｐｍ）−、Ｌｙｓ（Ａｐｍ）−、Ｂｌｙ（Ａｐｍ）−、Ｃｉｔ（Ａｐｍ）−、Ｄａｂ（Ａｐｍ）−、Ｄｐｒ（Ａｐｍ）−、Ｄｓｕ（Ａｐｍ）−、Ｈａｒ（Ａｐｍ）−、Ｈｈｓ（Ａｐｍ）−、Ｈｙｌ（Ａｐｍ）−、Ｏｒｎ（Ａｐｍ）−、Ｐｙｌ（Ａｐｍ）−、Ａｒｇ（Ａｐｐ）−、Ｈｉｓ（Ａｐｐ）−、Ｌｙｓ（Ａｐｐ）−、Ｂｌｙ（Ａｐｐ）−、Ｃｉｔ（Ａｐｐ）−、Ｄａｂ（Ａｐｐ）−、Ｄｐｒ（Ａｐｐ）−、Ｄｓｕ（Ａｐｐ）−、Ｈａｒ（Ａｐｐ）−、Ｈｈｓ（Ａｐｐ）−、Ｈｙｌ（Ａｐｐ）−、Ｏｒｎ（Ａｐｐ）−、Ｐｙｌ（Ａｐｐ）−、Ａｒｇ（Ａｓｕ）−、Ｈｉｓ（Ａｓｕ）−、Ｌｙｓ（Ａｓｕ）−、Ｂｌｙ（Ａｓｕ）−、Ｃｉｔ（Ａｓｕ）−、Ｄａｂ（Ａｓｕ）−、Ｄｐｒ（Ａｓｕ）−、Ｄｓｕ（Ａｓｕ）−、Ｈａｒ（Ａｓｕ）−、Ｈｈｓ（Ａｓｕ）−、Ｈｙｌ（Ａｓｕ）−、Ｏｒｎ（Ａｓｕ）−、Ｐｙｌ（Ａｓｕ）−、Ａｒｇ（Ｂａｓ）−、Ｈｉｓ（Ｂａｓ）−、Ｌｙｓ（Ｂａｓ）−、Ｂｌｙ（Ｂａｓ）−、Ｃｉｔ（Ｂａｓ）−、Ｄａｂ（Ｂａｓ）−、Ｄｐｒ（Ｂａｓ）−、Ｄｓｕ（Ｂａｓ）−、Ｈａｒ（Ｂａｓ）−、Ｈｈｓ（Ｂａｓ）−、Ｈｙｌ（Ｂａｓ）−、Ｏｒｎ（Ｂａｓ）−、Ｐｙｌ（Ｂａｓ）−、Ａｒｇ（Ｃｉｔ）−、Ｈｉｓ（Ｃｉｔ）−、Ｌｙｓ（Ｃｉｔ）−、Ｂｌｙ（Ｃｉｔ）−、Ｃｉｔ（Ｃｉｔ）−、Ｄａｂ（Ｃｉｔ）−、Ｄｐｒ（Ｃｉｔ）−、Ｄｓｕ（Ｃｉｔ）−、Ｈａｒ（Ｃｉｔ）−、Ｈｈｓ（Ｃｉｔ）−、Ｈｙｌ（Ｃｉｔ）−、Ｏｒｎ（Ｃｉｔ）−、Ｐｙｌ（Ｃｉｔ）−、Ａｒｇ（Ｄｐｍ）−、Ｈｉｓ（Ｄｐｍ）−、Ｌｙｓ（Ｄｐｍ）−、Ｂｌｙ（Ｄｐｍ）−、Ｃｉｔ（Ｄｐｍ）−、Ｄａｂ（Ｄｐｍ）−、Ｄｐｒ（Ｄｐｍ）−、Ｄｓｕ（Ｄｐｍ）−、Ｈａｒ（Ｄｐｍ）−、Ｈｈｓ（Ｄｐｍ）−、Ｈｙｌ（Ｄｐｍ）−、Ｏｒｎ（Ｄｐｍ）−、Ｐｙｌ（Ｄｐｍ）−、Ａｒｇ（Ｄｓｕ）−、Ｈｉｓ（Ｄｓｕ）−、Ｌｙｓ（Ｄｓｕ）−、Ｂｌｙ（Ｄｓｕ）−、Ｃｉｔ（Ｄｓｕ）−、Ｄａｂ（Ｄｓｕ）−、Ｄｐｒ（Ｄｓｕ）−、Ｄｓｕ（Ｄｓｕ）−、Ｈａｒ（Ｄｓｕ）−、Ｈｈｓ（Ｄｓｕ）−、Ｈｙｌ（Ｄｓｕ）−、Ｏｒｎ（Ｄｓｕ）−、Ｐｙｌ（Ｄｓｕ）−、Ａｒｇ（Ｇｇｕ）−、Ｈｉｓ（Ｇｇｕ）−、Ｌｙｓ（Ｇｇｕ）−、Ｂｌｙ（Ｇｇｕ）−、Ｃｉｔ（Ｇｇｕ）−、Ｄａｂ（Ｇｇｕ）−、Ｄｐｒ（Ｇｇｕ）−、Ｄｓｕ（Ｇｇｕ）−、Ｈａｒ（Ｇｇｕ）−、Ｈｈｓ（Ｇｇｕ）−、Ｈｙｌ（Ｇｇｕ）−、Ｏｒｎ（Ｇｇｕ）−、Ｐｙｌ（Ｇｇｕ）−、Ａｒｇ（Ｇｌａ）−、Ｈｉｓ（Ｇｌａ）−、Ｌｙｓ（Ｇｌａ）−、Ｂｌｙ（Ｇｌａ）−、Ｃｉｔ（Ｇｌａ）−、Ｄａｂ（Ｇｌａ）−、Ｄｐｒ（Ｇｌａ）−、Ｄｓｕ（Ｇｌａ）−、Ｈａｒ（Ｇｌａ）−、Ｈｈｓ（Ｇｌａ）−、Ｈｙｌ（Ｇｌａ）−、Ｏｒｎ（Ｇｌａ）−、Ｐｙｌ（Ｇｌａ）−、及びそれらの誘導体からなる群より選択される、２個のアミノ酸残基の組み合わせであるであることが好ましい。
【００３７】
より好ましくは、式ＩのフラグメントＸ１（Ｘ２)−は、Ｌｙｓ（Ａｓｐ）−、Ｄａｂ（Ａｓｐ）−、Ｄｐｒ（Ａｓｐ）−、Ｄｓｕ（Ａｓｐ）−、Ｏｒｎ（Ａｓｐ）−、Ｌｙｓ（Ｇｌｕ）−、Ｄａｂ（Ｇｌｕ）−、Ｄｐｒ（Ｇｌｕ）−、Ｄｓｕ（Ｇｌｕ）−、Ｏｒｎ（Ｇｌｕ）−、Ｌｙｓ（Ａａｄ）−、Ｄａｂ（Ａａｄ）−、Ｄｐｒ（Ａａｄ）−、Ｄｓｕ（Ａａｄ）−、Ｏｒｎ（Ａａｄ）−、Ｌｙｓ（Ａｐｍ）−、Ｄａｂ（Ａｐｍ）−、Ｄｐｒ（Ａｐｍ）−、Ｄｓｕ（Ａｐｍ）−、Ｏｒｎ（Ａｐｍ）−、及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくは、Ｌｙｓ（Ａｓｐ）−、Ｄａｂ（Ａｓｐ）−、Ｄｐｒ（Ａｓｐ）−、Ｏｒｎ（Ａｓｐ）−、Ｌｙｓ（Ｇｌｕ）−、Ｄａｂ（Ｇｌｕ）−、Ｄｐｒ（Ｇｌｕ）−、Ｏｒｎ（Ｇｌｕ）−、Ｌｙｓ（Ａａｄ）−、Ｄａｂ（Ａａｄ）−、Ｄｐｒ（Ａａｄ）−、Ｏｒｎ（Ａａｄ）−、Ｌｙｓ（Ａｐｍ）−、Ｄａｂ（Ａｐｍ）−、Ｄｐｒ（Ａｐｍ）−、Ｏｒｎ（Ａｐｍ）−、及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくは、Ｌｙｓ（Ａｓｐ）−、Ｏｒｎ（Ａｓｐ）−、Ｌｙｓ（Ｇｌｕ）−、Ｏｒｎ（Ｇｌｕ）−、Ｌｙｓ（Ａａｄ）−、Ｏｒｎ（Ａａｄ）−、Ｌｙｓ（Ａｐｍ）−、Ｏｒｎ（Ａｐｍ）−、及びそれらの誘導体からなる群、さらにより好ましくは、Ｌｙｓ（Ａｓｐ）−、Ｏｒｎ（Ａｓｐ）−、Ｌｙｓ（Ｇｌｕ）−、Ｏｒｎ（Ｇｌｕ）−、及びそれらの誘導体からなる群より選択される２個のアミノ酸残基の組み合わせである。
【００３８】
Ｘ１及び／又はＸ２における前述の好ましいアミノ酸残基に代えて、又は加えて、好ましくは、Ｘ１及び／又はＸ２における前述の好ましいアミノ酸残基に加えて、本発明によれば、さらに好ましくは、Ｘ３はＡｌａ、Ｃｙｓ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｖａｌ、Ｓｃｙ、Ａｂｕ、Ａｈｅ、Ａｉｂ、Ａｚｅ、Ｂａｌ、Ｂｕｘ、Ｃａｐ、Ｃｈａ、Ｃｙａ、Ｅｄｃ、Ｇｌｐ、Ｈｃｙ、Ｈｐｈ、Ｈｓｅ、Ｈｙｐ、３Ｈｙｐ、Ｉｇｌ、Ｉｖａ、Ｍｈｐ、Ｎａｌ、Ｎｌｅ、Ｎｐｈｅ、Ｎｔｙ、Ｎｖａ、Ｏｉｃ、Ｐｅｎ、Ｐｈｇ、Ｐｉｐ、ｐＳｅｒ、ｐＴｈｒ、ｐＴｙｒ、Ｓａｒ、Ｓｐｇ、Ｓｔａ、Ｔｈｉ、Ｔｉｃ、Ｔｌｅ、Ｔｍｌ、Ｔｚａ、Ｗｉｌ、及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくは、Ａｌａ、Ａｉｂ、Ａｂｕ、Ｎｖａ、Ｎｌｅ、Ａｈｅ、及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくは、Ａｌａ、Ａｉｂ、Ａｂｕ、Ｎｖａ、及びそれらの誘導体からなる群より選択されるアミノ酸残基であり、さらにより好ましくは、Ｘ３は、Ａｌａ又はその誘導体である。
【００３９】
Ｘ１及び／又はＸ２における前述の好ましいアミノ酸残基に代えて、又は加えて、好ましくは、Ｘ１及び／又はＸ２における前述の好ましいアミノ酸残基に加えて、本発明によれば、さらに好ましくは、Ｘ４は、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａａｄ、Ａａｎ、Ａｃａ、Ａｇｎ、Ａｐｍ、Ａｐｐ、Ａｓｕ、Ｂａｓ、Ｃｉｔ、Ｄｐｍ、Ｄｓｕ、Ｇｇｕ、Ｇｌａ、及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくは、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａａｄ、Ａｐｍ、及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくは、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａａｄ、及びそれらの誘導体からなる群より選択されるアミノ酸残基であり、さらにより好ましくは、Ｘ４はＧｌｕ又はその誘導体である。
【００４０】
したがって、本発明の好ましい実施形態によれば、Ｘ１は、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｂｌｙ、Ｃｉｔ、Ｄａｂ、Ｄｐｒ、Ｄｓｕ、Ｈａｒ、Ｈｈｓ、Ｈｙｌ、Ｏｒｎ、Ｐｙｌ、及びそれらの誘導体からなる群より選択されるアミノ酸残基であり、
及び／又は、好ましくは、
Ｘ２及びＸ４は、互いに独立して、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａａｄ、Ａａｎ、Ａｃａ、Ａｇｎ、Ａｐｍ、Ａｐｐ、Ａｓｕ、Ｂａｓ、Ｃｉｔ、Ｄｐｍ、Ｄｓｕ、Ｇｇｕ、Ｇｌａ、及びそれらの誘導体からなる群より選択されるアミノ酸残基であり、
及び／又は、好ましくは、
Ｘ３は、Ａｌａ、Ｃｙｓ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｖａｌ、Ｓｃｙ、Ａｂｕ、Ａｈｅ、Ａｉｂ、Ａｚｅ、Ｂａｌ、Ｂｕｘ、Ｃａｐ、Ｃｈａ、Ｃｙａ、Ｅｄｃ、Ｇｌｐ、Ｈｃｙ、Ｈｐｈ、Ｈｓｅ、Ｈｙｐ、３Ｈｙｐ、Ｉｇｌ、Ｉｖａ、Ｍｈｐ、Ｎａｌ、Ｎｌｅ、Ｎｐｈｅ、Ｎｔｙ、Ｎｖａ、Ｏｉｃ、Ｐｅｎ、Ｐｈｇ、Ｐｉｐ、ｐＳｅｒ、ｐＴｈｒ、ｐＴｙｒ、Ｓａｒ、Ｓｐｇ、Ｓｔａ、Ｔｈｉ、Ｔｉｃ、Ｔｌｅ、Ｔｍｌ、Ｔｚａ、Ｗｉｌ、及びそれらの誘導体からなる群より選択されるアミノ酸残基である。
【００４１】
Ｘ１に存在するＮ末端のＮ末端基がＸ２との共有結合に関与しない限り、上記で述べたように、Ｘ１とＸ２との間に形成される共有結合に関しては特に限定されない。したがって、前記の限定は別として、Ｘ１及びＸ２は、１以上の共有結合を介して互いに結合することができる。用語「共有結合」は、単結合、二重結合、及び三重結合を含み、本発明によれば、好ましくは用語「共有結合」は単結合又は二重結合を指し、さらにより好ましくは、単一の共有結合を指す。さらにＸ１とＸ２との間で形成される1以上の共有結合に関して、Ｘ１のＮ末端のＮ末端基に含まれる特定の窒素原子を含まない限り、前記１以上の共有結合に関与するＸ１及びＸ２に含まれる原子の種類について特に限定されない。したがって、例としては、１以上の共有結合はＣ−Ｃ、Ｃ−Ｎ、Ｃ−Ｏ、及びＣ−Ｓ結合を含み、Ｘ１とＸ２との間に形成される１以上の共有結合は、好ましくは１以上のＣ−Ｃ、Ｃ−Ｎ、又はＣ−Ｏ結合、より好ましくはＣ−Ｃ、又はＣ−Ｎ結合であり、１以上の共有結合は、好ましくは１以上のＣ−Ｎ結合を含む。
【００４２】
本発明のさらなる好ましい実施形態によれば、Ｘ１及びＸ２は、１以上のＣ−Ｎ結合、より好ましくは、１つのＣ−Ｎ結合により共有結合しており、さらにより好ましくは、Ｃ−Ｎ結合のＣ原子は、Ｘ２アミノ酸残基に属するＣ原子であり、Ｎ原子はＸ１の１以上のＮＨ官能基に属しており、それはＸ１のＮ末端のＮ末端基のＮ原子ではない。本発明の特に好ましい実施形態によれば、Ｘ１及びＸ２は、１以上のアミド結合、好ましくは、１つのアミド結合により共有結合しており、さらにより好ましくは、Ｃ（Ｏ）−Ｎ結合のＣ原子は、Ｘ２のカルボニル基に属するＣ原子であり、Ｎ原子はＸ１の１以上のＮＨ官能基に属しており、それはＸ１のＮ末端のＮ末端基のＮ原子ではない。
【００４３】
したがって、本発明の好ましい実施形態では、本発明のペプチドのＸ１及びＸ２は、アミド結合を介して互いに結合しており、アミド結合は、好ましくはＸ１アミノ酸残基のＮ部分及びＸ２アミノ酸残基のカルボニル部分によって形成される。
【００４４】
さらに好ましい本発明の実施形態によれば、Ｘ２は、その（すなわちアミノ酸残基Ｘ１の）Ｎ末端アミノ基又はＣ末端カルボキシル基若しくはカルボニル基それぞれのどれも介さずに、Ｘ１に共有結合する。したがって、Ｘ１及びＸ２がＸ１アミノ酸残基のＮ部分及びＸ２アミノ酸残基のカルボニル部分によって形成されるアミド結合によって結合する好ましい実施形態によれば、さらに好ましくは、Ｘ２アミノ酸部分のカルボニル部分はそのＣ末端基のカルボニル部分ではない。さらに、Ｘ２のアミノ酸がα−アミノ酸であるその好ましい実施形態によれば、Ｃ末端はそれに応じてそのα−カルボキシル基又はα−カルボニル基によって構成される。Ｘ２のアミノ酸がα−アミノ酸ではなく、Ｘ２は２以上のカルボキシル基及び／又はカルボニル基を含む、本発明の別の好ましい実施形態によれば、２以上のカルボキシル基及び／又はカルボニル基のどれがＣ末端を構成するかに関しては一般に限定されず、そして本発明の好ましい実施形態によれば、構成されたＣ末端はＸ１と故共有結合しない。Ｘ２が１以上の側鎖をさらに含み、第２及び／又はさらなるカルボキシル基及び／又はカルボニル基が前記１以上の側鎖と共有結合する、前記の別の好ましい実施形態の特定の実施形態によれば、Ｃ末端は側鎖に存在するカルボキシル基又はカルボニル基ではない。
【００４５】
したがって、さらなる好ましい実施形態によれば、本発明は式（ＩＩ）を有するペプチドに関する。
【００４６】
Ｘ１（Ｒ１−Ｘ２−Ｒ２）−Ｘ３−Ｘ４      （ＩＩ）
【００４７】
式中、Ｘ２は、その（すなわちアミノ酸残基Ｘ１の）Ｎ末端アミノ基又はＣ末端カルボキシル基若しくはカルボニル基それぞれのどれも介さずに、Ｘ１と共有結合し、Ｒ１及びＲ２はそれぞれＮ末端基及びＣ末端基の任意の誘導体化を表している。
【００４８】
原理上、Ｒ１及びＲ２は、アミノ酸残基Ｘ２のＮ末端及びＣ末端に存在し得る任意の適当な基を表しており、好ましくは、Ｒ１はＨ又は生理学的に許容されるＮ末端保護基であり、かつＲ２はＯＨ又は生理学的に許容されるＣ末端保護基である。特に、さらなる好ましい実施形態によれば、Ｒ１は、Ｈ、アルキル、ホルミル、アシル、アルコキシカルボニル、及びそれらの誘導体からなる群より選択され、より好ましくは、Ｒ１は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、ホルミル、（Ｃ１−Ｃ３）アシル、（Ｃ１−Ｃ）アルコキシカルボニル又はそれらの誘導体であり、より好ましくは、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、又はそれらの誘導体であり、さらにより好ましくは、Ｒ１はＨである。
【００４９】
さらに、本発明のペプチドが式ＩＩを有する本発明の好ましい実施形態によれば、さらに好ましくは、Ｒ２は、ＯＨ、アルキル、アルコキシ、ＮＨ２、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、チオール、チオエーテル、及びそれらの誘導体からなる群より選択され、より好ましくは、Ｒ２は、ＯＨ、（Ｃ１−Ｃ３)アルコキシ、ＮＨ２、（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノ、チオール、（Ｃ１−Ｃ３）チオエーテル、又はそれらの誘導体、より好ましくは、ＯＨ、（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシ、ＮＨ２、（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノ、又はそれらの誘導体、より好ましくは、ＯＨ，ＮＨ２又はそれらの誘導体、より好ましくは、ＯＨ、又はＮＨ２であり、さらにより好ましくは、Ｒ２はＮＨ２である。
【００５０】
Ｘ２の前述のＮ末端の任意の誘導体化及びＣ末端の好ましい置換それぞれに代えて、又は加えて、及び好ましくは加えて、Ｘ１のＮ末端のＮ末端基も誘導体化することが可能である。原理上、Ｘ１のＮ末端基はあらゆる想定可能な態様で任意に誘導体化され得、好ましくは、任意に誘導体化されるＮ末端基は生理学的に許容されるＮ末端保護基を含む。特に、さらなる好ましい実施形態によれば、Ｎ末端アミノ基は誘導体化されず、すなわち、ＮＨ２であり、又はＮ末端アミノ基の１個若しくは互いに独立して両方の水素は、アルキル、ホルミル、アシル、アルコキシカルボニル、又はそれらの誘導体によって、より好ましくは、（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、ホルミル、（Ｃ１−Ｃ３）アシル、（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシカルボニル、又はそれらの誘導体によって、さらにより好ましくは、（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、又はその誘導体によって置換される。しかしながら、本発明の特定の好ましい実施形態によれば、Ｘ１のＮ末端は誘導体化されない、すなわちＮＨ２である。
【００５１】
さらに、Ｘ２の前述のＮ末端の任意の誘導体化及びＣ末端の好ましい置換それぞれに代えて、又は加えて、及び好ましくは加えて、Ｘ４のＣ末端のＣ末端基も誘導体化することが可能である。原理上、Ｘ４のＣ末端基は、あらゆる想定可能な態様で任意に誘導体化され得、好ましくは、任意に誘導体化されるＣ末端基は生理学的に許容されるＣ末端保護基を含む。特に、さらなる好ましい実施形態によれば、Ｃ末端カルボキシル基は誘導体化されず、すなわち、Ｃ（Ｏ）−ＯＨ、又はＣ末端カルボキシル基のヒドロキシル部分は、アルキル、アルコキシ、ＮＨ２、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、チオール、チオエーテル、又はそれらの誘導体で、より好ましくは、（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシ、ＮＨ２、（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノ、チオール、（Ｃ１−Ｃ３）チオエーテル、又はそれらの誘導体で、より好ましくは、（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシ、ＮＨ２、（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノ、ジ（Ｃ１‐Ｃ３）アルキルアミノ、又はそれらの誘導体で置換される。さらにより好ましくは、Ｘ４のＣ末端カルボキシル基のヒドロキシル部分は、ＮＨ２又はその誘導体で、より好ましくはＮＨ２で置換される。
【００５２】
したがって、さらに好ましい本発明の実施形態によれば、ペプチドは式（ＩＩ）を有する。
【００５３】
Ｘ１（Ｒ１−Ｘ２−Ｒ２）−Ｘ３−Ｘ４  （ＩＩ）
【００５４】
式中、Ｒ１はＨ又は生理学的に許容されるＮ末端保護基であり、Ｒ１は、好ましくはＨ、アルキル、ホルミル、アシル、アルコキシカルボニル、又はそれらの誘導体、より好ましくは、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、ホルミル、（Ｃ１−Ｃ３）アシル、（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシカルボニル、又はそれらの誘導体、より好ましくは、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、又はそれらの誘導体であり、さらにより好ましくは、Ｒ１はＨであり、
及び／又は、好ましくは、
Ｒ２はＨ、又は生理学的に許容されるＣ末端保護基であり、Ｒ２は、好ましくはＯＨ、アルキル、アルコキシ、ＮＨ２、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、チオール、チオエーテル、又はそれらの誘導体、より好ましくは、ＯＨ、（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシ、ＮＨ２、（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノ、チオール、（Ｃ１−Ｃ３）チオエーテル、又はそれらの誘導体、より好ましくは、ＯＨ、（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシ、ＮＨ２、（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノ、又はそれらの誘導体、より好ましくは、ＯＨ、ＮＨ２、又はそれらの誘導体、より好ましくはＯＨ、又はＮＨ２であり、さらにより好ましくは、Ｒ２はＮＨ２であり、
及び／又は、好ましくは、
Ｘ４におけるペプチドのＣ末端カルボキシル基は、アミド、好ましくはＸ４−ＮＨ２に官能基化される。
【００５５】
本発明によれば、本発明のペプチドのアミノ酸残基Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、及びＸ４は、タンパク質中に天然に存在するアミノ酸及びその誘導体からなる群、特に遺伝暗号によりコードされるタンパク新生のアミノ酸より選択されることがさらに好ましい。特に、本発明のペプチドにおけるアミノ酸残基Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、及びＸ４は、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｌａ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｌｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｇｌｕ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｖａｌ、Ｓｃｙ、及びそれらの誘導体からなる群より選択されることが好ましい。
【００５６】
アミノ酸残基がタンパク新生のアミノ酸及びその誘導体からなる群より選択される本発明の好ましい実施形態によれば、Ｘ１は、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、及びそれらの誘導体からなる群より選択されるアミノ酸残基であり、さらにより好ましくは、Ｘ１はＬｙｓ又はその誘導体である。Ｘ１における前述の好ましいアミノ酸残基に代えて、又は加えて、かつ好ましくはＸ１における前述の好ましいアミノ酸残基に加えて、本発明によれば、さらに好ましくは、Ｘ２は、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、及びそれらの誘導体からなる群より選択され、さらにより好ましくは、Ｘ２はＡｓｐ又はその誘導体である。
【００５７】
Ｘ１及び／又はＸ２における前述の好ましいアミノ酸残基に代えて、又は加えて、かつ好ましくは、Ｘ１及び／又はＸ２における前述の好ましいアミノ酸残基に加えて、本発明によれば、さらに好ましくは、Ｘ３は、Ａｌａ、Ｃｙｓ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｖａｌ、Ｓｃｙ、及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｍｅｔ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、及びそれらの誘導体からなる群より選択されるアミノ酸残基であり、さらにより好ましくは、Ｘ３はＡｌａ又はその誘導体である。
【００５８】
Ｘ１及び／又はＸ２における前述の好ましいアミノ酸残基に代えて、又は加えて、かつ好ましくは、Ｘ１及び／又はＸ２における前述の好ましいアミノ酸残基に加えて、本発明によれば、さらに好ましくは、Ｘ４は、Ａｌａ、Ｃｙｓ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｖａｌ、Ｓｃｙ、及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくは、Ａｓｐ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくは、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくは、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、及びそれらの誘導体からなる群より選択されるアミノ酸残基であり、さらにより好ましくは、Ｘ４はＧｌｕ又はその誘導体である。
【００５９】
したがって、本発明のペプチドの好ましい実施形態によれば、Ｘ１は、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、及びそれらの誘導体からなる群より選択されるアミノ酸残基であり、好ましくは、Ｘ１はＬｙｓ又はその誘導体であり、
及び／又は、好ましくは、
Ｘ２は、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、及びそれらの誘導体からなる群より選択されるアミノ酸残基であり、好ましくは、Ｘ２はＡｓｐ又はその誘導体であり、
及び／又は、好ましくは、
Ｘ３は、Ａｌａ、Ｃｙｓ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｖａｌ、Ｓｃｙ、及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｍｅｔ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、及びそれらの誘導体からなる群より選択されるアミノ酸残基であり、さらにより好ましくは、Ｘ３はＡｌａ又はその誘導体であり、
及び／又は、好ましくは、
Ｘ４は、Ａｌａ、Ｃｙｓ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｖａｌ、Ｓｃｙ、及びそれらの誘導体からなる群、好ましくは、Ａｓｐ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくは、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、及びそれらの誘導体からなる群、より好ましくは、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、及びそれらの誘導体からなる群より選択されるアミノ酸残基であり、さらにより好ましくは、Ｘ４はＧｌｕ又はその誘導体である。
【００６０】
本発明のペプチドのアミノ酸残基Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、及びＸ４が、タンパク質中に天然に存在するアミノ酸、及びその誘導体からなる群、特にタンパク新生のアミノ酸、及びその誘導体から選択される、本発明の好ましい実施形態に関して、前記タンパク質はまた、タンパク質がより大きなタンパク質若しくはタンパク質フラグメント、又はそれらの誘導体において、配列モチーフとして含まれる実施形態も含む。したがって、前記好ましい実施形態によれば、本発明のペプチドは、Ｘ１のＮ末端及び／又はＸ４のＣ末端を介して、１以上のさらなるタンパク新生アミノ酸、及び／又は１以上のペプチド又はペプチド部分と結合することができる。一般に、本発明の前記好ましい実施形態によれば、本発明のペプチドが結合し得るさらなるタンパク新生アミノ酸の数に関して、及びＣ及び／又はＮ末端ペプチド結合を介してさらに結合し得るペプチド又はペプチド部分の種類及びサイズに関して、特に限定されない。したがって、例としては、本発明のペプチドはより大きなポリペプチド又はタンパク質と結合し、又はそれらに含まれ得るため、得られるポリペプチド又はタンパク質は５〜２００の範囲のアミノ酸残基を含み得る。前記実施形態によれば、本発明のペプチドが結合するより大きなポリペプチド又はタンパク質は、５〜１００アミノ酸残基、より好ましくは５〜５０アミノ酸残基、より好ましくは５〜２０アミノ酸残基、より好ましくは５〜１０アミノ酸残基、さらにより好ましくは５〜７アミノ酸残基を含むことが好ましい。
【００６１】
あるいは、本発明のペプチドにおけるアミノ酸残基Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、及びＸ４がタンパク質中に天然に存在するアミノ酸及びその誘導体からなる群、特にタンパク新生のアミノ酸及びその誘導体から選択される、本発明の好ましい実施形態によれば、本発明のペプチドはより大きなポリペプチド又はタンパク質中に配列モチーフとしてさらに含まれていないテトラペプチドであり、Ｘ１及びＸ２におけるテトラペプチドのＣ末端基及びＮ末端基は、Ｃ末端及びＮ末端の誘導体化に関連するあらゆる前述の実施形態及び好ましい実施形態に従って、非誘導体化又は誘導体化されてもよい。
【００６２】
本発明の特定の好ましい実施形態によれば、Ｘ１はＬｙｓ又はその誘導体であり、Ｘ２はＡｓｐ又はその誘導体であり、Ｘ３はＡｌａ又はその誘導体であり、Ｘ４はＧｌｕ又はその誘導体であり、より好ましくは、Ｘ１はＬｙｓであり、Ｘ２はＡｓｐであり、Ｘ３はＡｌａであり、Ｘ４はＧｌｕである。前記実施形態によれば、さらに好ましくは、Ａｓｐ及びＬｙｓはイソペプチド結合の形態においてそれらの各側鎖を介して結合し、Ａｓｐのベータ−カルボキシル部分は、その凝縮を介してＬｙｓのε−アミノ部分とペプチド結合を形成する。さらに、前記の好ましい実施形態によれば、ＡｓｐのＣ末端カルボキシル基は誘導体化されないか又はアミド化されることがさらに好ましく、Ｃ末端は好ましくはアミド化され、さらにより好ましくは、Ｃ末端カルボキシル基の−ＯＨ部分はＮＨ２で置換される。
【００６３】
したがって、本発明の特定の好ましい実施形態によれば、ペプチドは以下の式（ＩＩＩ）を有する。
【００６４】
Ｌｙｓ（Ｈ−Ａｓｐ−Ｒ２）−Ａｌａ−Ｇｌｕ  （ＩＩＩ）
【００６５】
式中、Ｒ２はＯＨ又はＮＨ２であり、好ましくはＮＨ２である。
【００６６】
アミノ酸残基がタンパク質中に天然に存在するアミノ酸及びその誘導体からなる群より選択される、本発明の好ましい実施形態に関して前述したように、式ＩＩＩの特に好ましいアミノ酸配列モチーフはまた、前述の実施形態及び好ましい実施形態に関連して記載した通り、ＬｙｓのＮ末端及び／又はＧｌｕのＣ末端を介して、１以上のさらなるタンパク質新生アミノ酸及び／又は１以上のペプチド又はペプチド部分と結合することができる。
【００６７】
しかしながら、本発明によれば、式ＩＩＩのペプチドは、より大きなポリペプチド又はタンパク質中に配列モチーフとしてさらに含まれないテトラペプチドであり、さらに、Ｇｌｕ及びＬｙｓにおけるテトラペプチドのＣ末端基及びＮ末端基は、Ｃ末端及びＮ末端の誘導体化に関するあらゆる前述の実施形態及び好ましい実施形態に従って、非誘導体化又は誘導体化され得ることが好ましい。特に、ＬｙｓのＮ末端アミノ基は、必要に応じて生理学的に許容されるＮ末端保護基を含むように誘導体化することができ、好ましくは、Ｎ末端ＮＨ２基の１個、又は互いに独立して両方の水素は、アルキル、ホルミル、アシル、アルコキシカルボニル、又はそれらの誘導体で、より好ましくは、（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、ホルミル、（Ｃ１−Ｃ３）アシル、（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシカルボニル、又はそれらの誘導体で、さらにより好ましくは、（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、又はその誘導体で置換される。より具体的には、ＬｙｓのペプチドのＮ末端アミノ基は、好ましくはＮＲ５Ｒ６であり、Ｒ５及びＲ６は互いに独立して、Ｈ又はアルキル、好ましくはＨ又は（Ｃ１−Ｃ３）アルキルである。しかしながら、本発明の特定の好ましい実施形態によれば、ＬｙｓのＮ末端は誘導体化されない。さらに、ＧｌｕのＣ末端カルボキシル基は、生理学的に許容されるＣ末端保護基を含むように必要に応じて誘導体化することが可能であり、好ましくは、Ｃ末端カルボキシル基のヒドロキシル部分は、アルキル、アルコキシ、ＮＨ２、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、チオール、チオエーテル、又はそれらの誘導体で、より好ましくは、（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシ、ＮＨ２、（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノ、チオール、（Ｃ１−Ｃ３）チオエーテル、又はそれらの誘導体で、より好ましくは、（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシ、ＮＨ２、（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノ、又はその誘導体で置換され、さらにより好ましくは、Ｘ４のＣ末端カルボキシル基のヒドロキシル部分は、ＮＨ２、又はその誘導体で置換される。より具体的には、Ｇｌｕは好ましくはアミドＧｌｕ−ＮＲ３Ｒ４に官能基化され、Ｒ３及びＲ４は、互いに独立して、Ｈ又はアルキル、好ましくはＨ又は（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり、さらにより好ましくは、Ｒ３及びＲ４はＨである。
【００６８】
したがって、本発明のさらなる好ましい実施形態によれば、本発明のペプチドは式（ＩＩＩ）を有する。
【００６９】
Ｌｙｓ（Ｈ−Ａｓｐ−Ｒ２）−Ａｌａ−Ｇｌｕ  （ＩＩＩ）
【００７０】
式中、Ｒ２はＯＨ又はＮＨ２であり、好ましくはＮＨ２であり、
ＧｌｕにおけるペプチドのＣ末端カルボキシル基は、好ましくはアミドＧｌｕ−ＮＲ３Ｒ４に官能基化され、
Ｒ３及びＲ４は、互いに独立して、Ｈ又はアルキル、好ましくはＨ又は（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり、さらにより好ましくは、Ｒ３及びＲ４はＨであり、
及び／又は、好ましくは、
ＬｙｓにおけるペプチドのＮ末端アミノ基は、好ましくはＮＲ５Ｒ６であり、
Ｒ5及びＲ6は、互いに独立して、Ｈ又はアルキル、好ましくはＨ又は（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり、さらにより好ましくは、Ｒ5及びＲ6はＨである。
【００７１】
特に、その特定の好ましい実施形態によれば、ペプチドは式ＩＶを有する。
【００７２】
Ｈ−Ｌｙｓ（Ｈ−Ａｓｐ−ＮＨ２）−Ａｌａ−Ｇｌｕ−ＮＨ２  （ＩＶ）
【００７３】
したがって、本発明によれば、下記の化学構造（Ｖ）を有するテトラペプチドが特に好ましい。
【００７４】
【化１】
2014506570.tif 000002
（Ｖ）
【００７５】
一般に、本発明のペプチドは、化学合成などの当技術分野で周知の任意の方法を用いて、あらゆる想定可能な手段により得ることが可能であり、前記合成は、組換え株又は培養を用いて、バイオテクノロジー手法に部分的又は全体的に依存してもよい。特に、本発明のペプチドの小さいサイズは、費用効率の高い工業用合成法を使用することが可能なため、特に有益である。本発明のペプチドが実証した高活性により、費用効率の高い方法にて、多数の化粧品又は（皮膚）医薬品における商業的利用が可能となる。しかしながら、ペプチドはまた、求められる配列又は少なくともその断片を産生するために、遺伝子工学により修飾された又は修飾されていない１以上の細菌株の発酵から得ることも可能である。
【００７６】
これらの製造方法に加えて、ペプチドは、それらの構造においてペプチドの配列を含むように適合された、動物又は植物、好ましくは植物由来のタンパク質の抽出から得ることも可能であり、その後、所望のペプチド断片を遊離する、酵素的又は酵素的ではない制御加水分解が続く。本発明を実施するために、問題のタンパク質を最初に抽出し、次いでそれらを加水分解すること、又は粗抽出物に対して加水分解を最初に行い、ペプチド断片を精製することが可能であるが、必ずしも必要ではない。しかしながら、時間的に酵素加水分解反応を停止し、例えば放射能トレース、特異抗体を用いた免疫蛍光又は免疫沈降などの適した分析法により問題のペプチドの存在を決定することを確保することで、問題のペプチド断片をタンパク質から抽出することなく、加水分解物を使用することも可能である。
【００７７】
本発明の好ましい実施形態によれば、本発明のペプチドは微生物、好ましくは原核生物、特には１以上の細菌株から得られる。本発明によれば、特に好ましくは、本発明のペプチドを産生するために使用される微生物は、乳酸菌群に属する微生物である。用語「乳酸菌群に属する微生物」は、細菌に属する、特にグラム陽性発酵性真正細菌に属する、より具体的には乳酸菌を含む乳酸菌科（ｌａｃｔｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ）ファミリーに属する微生物を包含する。乳酸菌は、分類学的観点から、レンサ球菌属（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ロイコノストック属（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）、ペディオコッカス属（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ）、ラクトコッカス属（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ）、及びラクトバチルス属（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）の下位分類に分けられる。本発明の微生物は、好ましくはラクトバチルス種である。乳酸菌群の仲間は通常、ポルフィリン及びシトクロムを欠き、電子伝達リン酸化を行わないため、エネルギーは基質レベルのリン酸化によってのみ得られる。すなわち、乳酸菌では、ＡＴＰは炭水化物の発酵によって合成される。乳酸菌はすべて嫌気的に生育するが、多くの嫌気性菌とは異なり、ほとんどの乳酸菌は酸素に対して感受性でないため、無酸素状態のみならず酸素の存在下でも生育することができる。したがって、本発明において好適に使用される細菌は、好ましくは酸素耐性嫌気性乳酸菌であり、好ましくはラクトバチルス属に属する。
【００７８】
本発明によれば、使用される微生物は、プロバイオティックラクトバチルス種であることがさらに好ましい。用語「プロバイオティック」は、本発明との関連において、微生物を皮膚に局所適用した場合、その微生物が健康に有益な影響を及ぼすことを意味する。好ましくは、「プロバイオティック」微生物は、生きた微生物であって、皮膚に局所適用したときに、この組織の健康に有益である。
【００７９】
好ましい実施形態では、本発明のタンパク質の産生において使用される微生物は、ラクトバチルス種のＬ．ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ、Ｌ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ、Ｌ．ｒｅｕｔｅｒｉ、Ｌ．ｃａｓｅｉ、Ｌ．ｐａｒａｃａｓｅｉ、Ｌ．ｂｒｅｖｉｓ、Ｌ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ、Ｌ．ｂｕｃｈｎｅｒｉ、Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉからなる群より選択される種に属している。しかしながら、ラクトバチルス種はこれらに限定されない。
【００８０】
本発明の特定の好ましい実施形態によれば、使用される微生物は、Ｌ．ｂｒｅｖｉｓ、Ｌ．ｐａｒａｃａｓｅｉ、Ｌ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ、Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ  ｓｓｐ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ、Ｌ．ｂｕｃｈｎｅｒｉ及びそれらの２以上の組み合わせからなるラクトバチルス種の群から選択される。特に、ラクトバチルス種の群は、好ましくはＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１７２４７及び／又はＤＳＭ１７２５０を有するＬ．ｂｒｅｖｉｓ、ＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１７２４８を有するＬ．ｐａｒａｃａｓｅｉ、ＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１７２４９を有するＬ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ、ＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１８００６を有するＬ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ  ｓｓｐ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ、ＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１８００７を有するＬ．ｂｕｃｈｎｅｒｉ（それらの変異体又は誘導体を含む）からなる。さらにより好ましくは、ラクトバチルス種はＬ．ｂｒｅｖｉｓであり、より好ましくはＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１７２４７、ＤＳＭ１７２５０を有するＬ．ｂｒｅｖｉｓ、及びその変異体又はその誘導体からなる群より選択され、さらにより好ましくは、ラクトバチルス種はＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１７２５０を有するＬ．ｂｒｅｖｉｓ、及びその変異体又はその誘導体である。前記寄託は、特許手続き上の微生物の寄託の国際的承認に関するブダペスト条約の条項に従って、Ｄｅｕｔｓｃｈｅ  Ｓａｍｍｌｕｎｇ  ｆｕｒ  Ｍｉｋｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｅｎ  ｕｎｄ  Ｚｅｌｌｋｕｌｔｕｒｅｎ（ＤＳＭＺ）にて行われた。さらに、本発明の意義の範囲内において、上述の寄託ラクトバチルス株の変異体又は誘導体は、本発明のペプチドの産生において使用されるそれらの可能性を保持した、あらゆる想定可能な変異体又は誘導体を指す。
【００８１】
したがって、本発明は、前述の実施形態及び好ましい実施形態に従う本発明のペプチドを産生するための微生物の使用にさらに関し、微生物は、好ましくは原核微生物であり、より好ましくは１以上の細菌株であり、より好ましくは１以上の乳酸菌であり、より好ましくは１以上のラクトバチルス属の細菌であり、
より好ましくは、細菌は、ラクトバチルス種のＬ．ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ、Ｌ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ、Ｌ．ｒｅｕｔｅｒｉ、Ｌ．ｃａｓｅｉ、Ｌ．ｐａｒａｃａｓｅｉ、Ｌ．ｂｒｅｖｉｓ、Ｌ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ、Ｌ．ｂｕｃｈｎｅｒｉ、Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ、好ましくはＬ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ  ｓｓｐ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ、及びそれらの２以上の組み合わせからなる群より選択され、
より好ましくは、ラクトバチルス種は、Ｌ．ｂｒｅｖｉｓ、好ましくはＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１７２４７、ＤＳＭ１７２５０を有するＬ．ｂｒｅｖｉｓ、及びその変異体又はその誘導体、Ｌ．ｐａｒａｃａｓｅｉ、好ましくはＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１７２４８を有するＬ．ｐａｒａｃａｓｅｉ、及びその変異体又はその誘導体、Ｌ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ、好ましくはＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１７２４９を有するＬ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ、及びその変異体又はその誘導体、Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ  ｓｓｐ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ、好ましくはＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１８００６を有するＬ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ  ｓｓｐ．ｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ、及びその変異体又はその誘導体、Ｌ．ｂｕｃｈｎｅｒｉ、好ましくはＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１８００７を有するＬ．ｂｕｃｈｎｅｒｉ、及びその変異体又はその誘導体、並びにそれらの２以上の組み合わせからなる群より選択され、
より好ましくは、ラクトバチルス種はＬ．ｂｒｅｖｉｓであり、より好ましくは、ＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１７２４７、ＤＳＭ１７２５０を有するＬ．ｂｒｅｖｉｓ、及びその変異体又はその誘導体からなる群より選択され、
さらにより好ましくは、ラクトバチルス種はＤＳＭＺ受託番号ＤＳＭ１７２５０を有するＬ．ｂｒｅｖｉｓ、及び／又はその変異体又はその誘導体である。
【００８２】
一般に、本発明のペプチドを産生するための微生物における本発明の使用に関連して、特に化粧品及び医薬品の応用における本発明のペプチドの使用に関連する、本明細書に記載の効果を得るために本発明のペプチドが使用され得る形態で、ペプチド又はその前駆体が得られる限り、本発明のペプチドを微生物から得る方法に関して特に限定されない。特に、本発明のペプチドを産生するための微生物の使用は、好ましくは当業者に周知の任意の適した手段による、微生物からのペプチドの効果的な単離を含む。
【００８３】
好ましい実施形態によれば、微生物の溶菌液を最初に得て、その後、本発明のペプチドは後の工程において溶菌液から得られる。本発明の意義の範囲内において、用語「溶菌液」は、微生物から適切に破壊又は抽出された、本発明に従って使用され得る１以上の微生物の細胞の水媒体中の溶液又は懸濁液を指す。しかしながら、この用語は決して限定的に解釈されるべきではない。特に、本発明のペプチド又は１以上の適当なその前駆体に加えて、細胞溶解液は、例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡ、その他のタンパク質及びペプチド、炭水化物、脂質などのような巨大分子、及び／又は、アミノ酸、糖、脂肪酸などのような極小分子、又はその一部分を通常さらに含む。それに加えて、前記溶菌液は、平滑構造又は粒状構造をとり得る細胞片を通常含む。
【００８４】
微生物の細胞溶解液を調製する方法は、当技術分野で知られており、例えば、フレンチプレス、ガラスビーズ若しくは鉄製ビーズを用いた細胞破砕ミル、又は酵素による細胞溶解などを用いる。さらに、細胞の溶解は、細胞を切断／破壊するための、当技術分野で知られている様々な方法に関わる。細胞を溶解する方法は本発明にとって重要ではないため、本発明において好適に使用される微生物細胞の溶解を達成できるあらゆる方法を用いることが可能である。したがって、例としては、細胞の切断／破壊は、酵素的、化学的、又は物理的に行うことが可能である。酵素及び酵素混合物の限定的でない例としては、プロテイナーゼＫのようなプロテアーゼ、リパーゼ、又はグリコシダーゼがある；化合物の限定的でない例は、イオノフォア、ドデシル硫酸ナトリウムのような界面活性剤、酸、又は塩基である；さらに物理的手段の限定的でない例には、フレンチプレス処理のような高圧、浸透圧、高温、又は低温といった温度がある。さらに、タンパク質分解酵素以外の酵素、酸、塩基などの適当な組み合わせを用いた方法も利用可能である。例えば、本発明において好適に使用される微生物細胞は、凍結及び融解、より好ましくは、−７０℃以下の温度での凍結、及び少なくとも３０℃の温度での融解によって溶解し、特に凍結は、−７５℃以下の温度が好ましく、融解は少なくとも３５℃の温度が好ましく、より好ましくは−８０℃以下の凍結温度、及び少なくとも３７℃の融解温度である。また好ましくは、前記の凍結／融解を少なくとも１回以上、より好ましくは２回以上、さらにより好ましく３回以上繰り返し、特に好ましくは手順を４回以上、そしてさらにより好ましくは５回以上繰り返す。
【００８５】
好ましくは、記載の溶菌液に使用される水媒体は、水、生理食塩水、又はバッファー溶液である。細菌細胞溶解液の利点は、必要とされる技術設備が少ないので、費用効率よく容易に作製及び保存できることである。
【００８６】
本発明によれば、溶菌液は、上述の溶菌液に由来する分子の分画調製物でもある。こうした画分は、当業者に周知の方法、例えば、クロマトグラフィー（例としてアフィニティクロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー、及びカラム又はバッチ法での他のクロマトグラフィー材料によるクロマトグラフィーなどを含む）、他の分画法、例を挙げると、濾過法、例えば限外濾過、透析、遠心分離におけるサイズ排除による透析及び濃縮、密度勾配若しくはステップマトリックスによる遠心分離、沈澱、例えばアフィニティ沈澱、塩入法若しくは塩析法（硫安沈澱）、アルコール沈澱、又は他の、上記の溶菌液の成分を分離できるタンパク質化学的、分子生物学的、生化学的、免疫学的、化学的若しくは物理学的方法によって得ることが可能である。
【００８７】
本発明のタンパク質はまた、本発明において使用される微生物、好ましくは本明細書に記載のラクトバチルス種の濾液から好適に産生され得る。本発明の意義の範囲内において、用語「濾液」は、当業者に周知の任意の適当な液体、培地、又はバッファー中で、本発明において使用される微生物培養物の遠心分離操作の上清として得られた、本発明において使用される微生物の無細胞溶液又は懸濁液を意味する。しかしながら、この用語は決して限定的に解釈されるべきでない。特に、濾液は、例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡ、タンパク質、ペプチド、炭水化物、脂質などのような巨大分子、及び／又は、アミノ酸、糖、脂肪酸などのような極小分子、又はその一部分を通常さらに包含する。微生物の濾液を調製する方法は当技術分野で知られている。さらに、「濾液」は、当技術分野で周知の様々な方法に関わる。正確な方法は重要ではなく、本発明のペプチドの産生において使用される微生物の細胞の濾液を得ることができる任意の方法を用いることが可能である。
【００８８】
さらに、本発明によれば、本発明において使用される微生物の細胞の任意の部分もまた、本発明のペプチドを産生するために使用することができ、好ましくは膜画分は膜調製物から得られることで使用される。微生物、特にラクトバチルス属に属する微生物の膜調製物は、当技術分野で周知の方法、例えば、Ｒｏｌｌａｎら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｆｏｏｄ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．７０（２００１）、３０３−３０７、Ｍａｔｓｕｑｕｃｈｉら、Ｃｌｉｎ．Ｄｉａｇｎ．Ｌａｂ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１０（２００３）、２５９−２６６、Ｓｔｅｎｔｚら、Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．６６（２０００）、４２７２−４２７８、又はＶａｒｍａｎｅｎら、Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ  １８２（２０００）、１４６−１５４に記載の方法を用いることによって得ることが可能である。あるいはまた、全細胞調製物も使用され得る。
【００８９】
本発明はまた、薬剤として使用するための本発明のペプチドを提供する。
【００９０】
本明細書で使用するとき、用語「薬剤」は、本発明のペプチド、又はそれを含む組成物の製剤を指し、前記ペプチドは医薬活性化合物である。ペプチドは液体、乾燥、ガス状、又はゲルの形態で製剤化され得る。ペプチドが乾燥形態で製剤化される場合、好ましくは凍結乾燥形態が想定される。液体製剤が想定される場合、ペプチドは、ペプチドの他に医薬的に許容される液体担体として適当な溶媒を含む医薬組成物の成分であることが好ましい。ガス状形態では、ペプチドはエアゾール中に含まれてもよい。
【００９１】
用語「医薬的に許容される担体」は、ペプチドと共に投与される希釈剤、補助剤、賦形剤、又はビヒクルを指す。こうした担体は医薬的に許容されている、すなわち、用いられる投与量及び濃度でレシピエントに対して毒性がない。これは、好ましくは、等張性、低張性、又は弱い高張性であり、ショ糖溶液によって与えられるように、相対的に低いイオン強度を有する。このような医薬担体は、水及び油のような無菌の液体とすることができるが、これには、石油、動物、植物、又は合成起源のもの、例えば、ピーナッツ油、大豆油、鉱油、ゴマ油などが含まれる。塩類溶液、及びデキストロース水溶液、及びグリセロール溶液も、液体担体として使用することが可能である。適当な医薬賦形剤には、デンプン、ブドウ糖、ショ糖、ゼラチン、麦芽、米、小麦粉、白亜、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、タルク、ナトリウムイオン、脱脂粉乳、グリセロール、プロピレン、グリコール、水、エタノールなどがある。組成物は、必要ならば、少量の湿潤剤若しくは乳化剤、又はｐＨ緩衝剤も含有することができる。このような組成物は、例えば、溶液、懸濁液、乳濁液、粉末、徐放性製剤などの形態をとることが可能である。適当な医薬担体の例は、Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎによる、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」に記載されている。医薬担体として機能し得る物質の他の例には、ブドウ糖及びショ糖などの糖類；コーンスターチ及びジャガイモデンプンなどのデンプン；セルロース、並びにカルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、及び酢酸セルロースなどのその誘導体；粉末トラガカント；麦芽；ゼラチン；タルク；ステアリン酸；ステアリン酸マグネシウム；硫酸カルシウム；炭酸カルシウム；ピーナッツ油、綿実油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油、及びカカオ脂などの植物油；プロピレングリコール、グリセリン、ソルビトール、マンニトール（ｍａｎｉｔｏｌ）、及びポリエチレングリコールなどのポリオール類；寒天；アルギン酸；パイロジェンフリー水；等張食塩水；クランベリー抽出物、及びリン酸バッファー溶液；脱脂粉乳；並びに医薬製剤に使用される、他の毒性のない適合物質、例えば、ビタミンＣ、エストロゲン、及びエキナシアがある。湿潤剤及び滑沢剤、例えばラウリル硫酸ナトリウム、並びに着色剤、香料、潤滑剤、賦形剤、打錠剤、安定剤、抗酸化剤、及び防腐剤も入れることが可能である。活性成分をカプセル化された形態で、例えば、セルロースカプセル化として、ゼラチン中で、ポリアミド、ニオソーム、ワックスマトリックスと共に、シクロデキストリンと共に、又はリポソームでカプセル化して、投与することも有利である。好ましい医薬的に許容される担体はまた、固体担体として、ラクトース、白土、ショ糖、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アカシア、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸など、かつ液体担体として、リン酸緩衝生理食塩水、シロップ、油、水、乳濁液、様々な種類の湿潤剤などである。担体は、他の成分、特に本発明のペプチドの生物学的特性に影響を及ぼすものであってはならず、対象に投与する際に生体適合性、特に毒性がなく、及び／��は非免疫原性でなければならないため、担体は医薬的に許容されるものでなければならない。
【００９２】
さらに、医薬組成物は、安定剤、徐放剤、さらなる薬剤などの追加の成分を含み得る。好ましい安定剤はタンパク質安定剤（例えばヒト血清アルブミン（ＨＳＡ））、又は非タンパク質安定剤である。徐放剤は、当技術分野において周知であり、好ましくは、モノステアリン酸グリセリン、若しくはジステアリン酸グリセリルの単独又はワックスと共に含む。また、さらなる成分は、防腐剤、香料、消泡剤、色素、顔料、増粘剤、界面活性物質、乳化剤、皮膚軟化薬、表面処理剤、脂肪、油、ワックス、又は他の皮膚用製剤の慣用成分、例えば、アルコール、ポリオール、ポリマー、気泡安定剤、溶解促進剤、電解質、有機酸、有機溶媒、若しくはシリコーン誘導体を包含する。
【００９３】
本発明の薬剤は、皮膚軟化薬を包含してもよい。乾燥を防止、又は軽減するために有効な量の皮膚軟化薬を使用することができる。有用な皮膚軟化薬には下記があるが、それらに限定されるものではない：炭化水素油及びワックス；シリコーン油；トリグリセリドエステル；アセトグリセリドエステル；エトキシル化グリセリド；アルキルエステル；アルケニルエステル；脂肪酸；脂肪アルコール；脂肪アルコールエーテル；エーテルエステル；ラノリン及び誘導体；多価アルコール（ポリオール）及びポリエーテル誘導体；多価アルコール（ポリオール）エステル；ワックスエステル；蜜蝋誘導体；植物蝋；リン脂質；ステロール；並びにアミド。このように、例えば、典型的な皮膚軟化薬としては、鉱油、特に５０〜５００ＳＵＳ（セーボルト秒）の範囲の粘性を有する鉱油、ラノリン油、ミンク油、ココナッツ油、カカオバター、オリーブ油、アーモンド油、マカダミアナッツ油、アロエ抽出物、ホホバ油、紅花油、コーン油、液状ラノリン、綿実油、ピーナッツ油、ピュアセリンオイル（ｐｕｒｃｅｌｌｉｎ  ｏｉｌ）、ペルヒドロスクアレン（スクアレン）、ヒマシ油、ポリブテン、無臭ミネラルスピリット、甘扁桃油、アボカド油、カロフィラム油、リシン油、ビタミンＥ酢酸エステル、オリーブ油、ミネラルスピリット、セテアリルアルコール（主としてセチル及びステアリルアルコールからなる脂肪アルコール混合物）、リノレニルアルコール、オレイルアルコール、オクチルドデカノール、小麦胚芽油のような穀物胚芽の油、オクタン酸セテアリル（セテアリルアルコールと２−エチルヘキサン酸のエステル）、パルミチン酸セチル、アジピン酸ジイソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、パルミチン酸オクチル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸ブチル、ステアリン酸グリセリル、ステアリン酸ヘキサデシル、ステアリン酸イソセチル、ステアリン酸オクチル、ヒドロキシステアリン酸オクチル、ステアリン酸プロピレングリコール、ステアリン酸ブチル、オレイン酸デシル、オレイン酸グリセリル、アセチルグリセリド、（Ｃ１２−Ｃ１５）アルコールのオクタン酸及び安息香酸エステル、アルコール及びポリアルコールのオクタン酸及びデカン酸エステル、例えば、グリコール及びグリセロールのエステル、並びにアルコール及びポリアルコールのリシノール酸エステル、例えば、アジピン酸イソプロピル、ラウリン酸ヘキシル、ドデカン酸オクチル、ジメチコンコポリオール、ジメチコノール、ラノリン、ラノリンアルコール、ラノリンワックス、水添ラノリン、ヒドロキシル化ラノリン、アセチル化ラノリン、ペトロラタム、ラノリン脂肪酸イソプロピル、ミリスチン酸セチル、ミリスチン酸グリセリル、ミリスチン酸ミリスチル、乳酸ミリスチル、セチルアルコール、イソステアリルアルコール、ステアリルアルコール、及びラノリン脂肪酸イソセチルなどが挙げられる。
【００９４】
さらに、本発明の薬剤は乳化剤を包含してもよい。好ましくは組成物の成分の均一な混合をもたらすために有効な量の乳化剤（すなわち乳化作用のある物質）が使用される。有用な乳化剤には、（ｉ）陰イオン性、例えば、脂肪酸石鹸、例としてはステアリン酸カリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸アンモニウム、及びステアリン酸トリエタノールアミン；脂肪酸石鹸を含むポリオール脂肪酸モノエステル、例えば、カリウム若しくはナトリウム塩のいずれかを含有するモノステアリン酸グリセロール；硫酸エステル（ナトリウム塩）、例えば、ラウリル５硫酸ナトリウム、及びセチル硫酸ナトリウム；並びに硫酸エステルを含有するポリオール脂肪酸モノエステル、例えば、ラウリル硫酸ナトリウムを含有するモノステアリン酸グリセリル；（ｉｉ）陽イオン性クロリド、例えば、Ｎ（ステアロイルコラミノホルミルメチル）ピリジウムクロリド；Ｎ−ソヤ−Ｎ−エチルモルホリニウムエトサルフェート；アルキルジメチルベンジルアンモニウムクロリド；ジイソブチルフェノキシエトキシエチルジメチルベンジルアンモニウムクロリド；及びセチルピリジウムクロリド；並びに（ｉｉｉ）非イオン性、例えば、ポリオキシエチレン脂肪アルコールエーテル、例えば、モノステアレート；ポリオキシエチレンラウリルアルコール；ポリオキシプロピレン脂肪アルコールエーテル、例えば、プロポキシル化オレイルアルコール；ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、例えば、ステアリン酸ポリオキシエチレン；ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、例えば、モノステアリン酸ポリオキシエチレンソルビタン；ソルビタン脂肪酸エステル、例えば、ソルビタン；ポリオキシエチレングリコール脂肪酸エステル、例えば、モノステアリン酸ポリオキシエチレングリコール；並びにポリオール脂肪酸エステル、例えば、モノステアリン酸グリセリル、及びモノステアリン酸プロピレングリコール；並びにエトキシル化ラノリン誘導体、例えば、エトキシル化ラノリン、エトキシル化ラノリンアルコール及びエトキシル化コレステロールがある。乳化剤の選択は、典型的には、Ｓｃｈｒａｄｅｒ、Ｇｒｕｎｄｌａｇｅｎ  ｕｎｄ  Ｒｅｚｅｐｔｕｒｅｎ  ｄｅｒ  Ｋｏｓｍｅｔｉｋａ、Ｈｕｔｈｉｇ  Ｂｕｃｈ  Ｖｅｒｌａｇ、Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ、第２版、１９８９、第３部に記載されている。
【００９５】
本発明の薬剤はまた、界面活性剤を包含することができる。適当な界面活性剤としては、例えば、一般に洗浄剤、乳化剤、増泡剤、ハイドロトロープ、可溶化剤、懸濁化剤及び非界面活性剤（液体中での固体の分散を促進する）として分類される界面活性剤を含み得る。界面活性剤は通常、両性、陰イオン性、陽イオン性、及び非イオン性界面活性剤に分類される。両性界面活性剤には、アシルアミノ酸及び誘導体、並びにＮ−アルキルアミノ酸がある。陰イオン性界面活性剤には：アシルアミノ酸及び塩、例えば、アシルグルタミン酸塩、アシルペプチド、アシルサルコシン酸塩、及びアシルタウリン塩；カルボン酸及び塩、例えば、アルカン酸、カルボン酸エステル、及びカルボン酸エーテル；スルホン酸及び塩、例えば、アシルイセチオン酸塩、アルキルアリールスルホン酸塩、アルキルスルホン酸塩、及びスルホコハク酸塩；硫酸エステル、例えば、アルキルエーテル硫酸塩及びアルキル硫酸塩が含まれる。陽イオン性界面活性剤には：アルキルアミン、アルキルイミダゾリン、エトキシル化アミン、及び４級アンモニウム化合物（例えば、アルキルベンジルジメチルアンモニウム塩、アルキルベタイン、複素環式アンモニウム塩、及びテトラアルキルアンモニウム塩）が含まれる。さらに、非イオン性界面活性剤には：アルコール、例えば８〜１８炭素原子を含む一級アルコール；アルカノールアミド、例えば、アルカノールアミン誘導アミド及びエトキシル化アミド；アミンオキシド；エステル、例えば、エトキシル化カルボン酸、エトキシル化グリセリド、グリコールエステル及び誘導体、モノグリセリド、ポリグリセリルエステル、多価アルコールエステル及びエーテル、ソルビタン／ソルビトールエステル、並びにリン酸のトリエステル；並びにエーテル、例えば、エトキシル化アルコール、エトキシル化ラノリン、エトキシル化ポリシロキサン、及びプロポキシル化ポリオキシエチレンエーテルが含まれる。
【００９６】
さらに、本発明の薬剤は皮膜形成剤も含むことができる。本発明に従って使用される適当な皮膜形成剤は、組成物を滑らかで均一に保つものであって、限定されるものではないが下記を含む：アクリルアミド／アクリル酸ナトリウムコポリマー；アクリル酸アンモニウムコポリマー；バルサムペル；セルロースガム；エチレン／無水マレイン酸コポリマー；ヒドロキシエチルセルロース；ヒドロキシプロピルセルロース；ポリアクリルアミド；ポリエチレン；ポリビニルアルコール；ｐｖｍ／ＭＡコポリマー（ポリビニルメチルエーテル／無水マレイン酸）；ＰＶＰ（ポリビニルピロリドン)；無水マレイン酸コポリマー、例えば、Ｇｕｌｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙから入手可能なＰＡ−１８；ＰＶＰ／ヘキサデセンコポリマー、例えば、ＧＡＦ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから入手可能なＧａｎｅｘ  Ｖ−２１６；アクリル／アクリル酸コポリマー；など。一般に皮膜形成剤は、組成物全体の約０．１重量％〜約１０重量％の量を使用することができるが、約１重量％〜約８重量％が好ましく、約０．１重量％〜約５重量％が最も好ましい。保湿剤も有効な量を使用することができ、これには、果糖；ブドウ糖；グルタミン酸；グリセリン；ハチミツ；マルチトール；メチルグルセス−１０；メチルグルセス−２０；プロピレングリコール；乳酸ナトリウム；ショ糖；などが含まれる。
【００９７】
もちろん、本発明の薬剤は防腐剤を含むこともできる。本発明のある組成物の防腐剤は、限定されるものではないが下記を含む：ブチルパラベン；エチルパラベン；イミダゾリジニル尿素；メチルパラベン；Ｏ−フェニルフェノール；プロピルパラベン；クオタニウム−１４；クオタニウム−１５；デヒドロ酢酸ナトリウム；ジンクピリチオン；など。防腐剤は、微生物の生育を防止又は遅延させるのに有効な量が用いられる。一般に、防腐剤は、組成物全体の約０．１重量％〜約１重量％の量を使用することができるが、約０．１重量％〜約０．８重量％が好ましく、約０．１重量％〜約０．５重量％がもっとも好ましい。
【００９８】
本発明の薬剤はまた、香料を含んでもよい。本発明の組成物に望ましい芳香及び色を与えるのに有効な量の、当業者に周知の香料（芳香化合物）及び着色料（着色剤）を使用することが可能である。
【００９９】
さらに、本発明の薬剤は、ワックスも含み得る。本発明に有用な適当なワックスとしては：動物ワックス、例えば、蜜蝋、鯨蝋、又は羊毛ワックス（ラノリン）；植物ワックス、例えば、カルナウバ又はカンデリラ；ミネラルワックス、例えば、モンタンワックス又はオゾケライト；並びに石油ワックス、例えば、パラフィンワックス及びマイクロクリスタリンワックス（高分子量石油ワックス）が挙げられる。動物ワックス、植物ワックス及び一部のミネラルワックスは、高分子量脂肪アルコールと高分子量脂肪酸との一級エステルである。例えば、トリコンタノールのヘキサデカン酸エステルは、蜜蝋の主成分であると一般に報告されている。本発明の他の適当なワックスとしては、ポリエチレンポリオキシエチレン、並びに一酸化炭素及び水素から誘導される炭化水素ワックスなどの合成ワックスが挙げられる。また、代表的なワックスとしては：セロシン（ｃｅｒｏｓｉｎ）；セチルエステル；水添ホホバ油；水添ホホバワックス；水添米ぬかワックス；木蝋；ホホババター；ホホバ油；ホホバワックス；ムンク（ｍｕｎｋ）ワックス；モンタン酸ワックス；オウリキュリー（ｏｕｒｉｃｕｒｙ）ワックス；米ぬかワックス；シェラックワックス；硫化ホホバ油；合成蜜蝋；合成ホホバ油；トリヒドロキシステアリン；セチルアルコール；ステアリルアルコール；カカオバター；ラノリンの脂肪酸；２５℃で固体である、モノ−、ジ−、及び２５トリグリセリド、例えば、トリベヘン酸グリセリル（ベヘン酸及びグリセリンのトリエステル）、及びＣ１９−３６酸トリグリセリド（Ｃ１９−３６カルボン酸及びグリセリンのトリエステル混合物）、それぞれＣｒｏｄａ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．から商標名Ｓｙｎｃｒｏｗａｘ  ＨＲＣ及びＳｙｎｃｒｏｗａｘ  ＨＧＬ−Ｃとして発売されている；２５℃で固体である脂肪酸エステル；シリコーンワックス、例えば、メチルオクタデカンオキシポリシロキサン及びポリ（ジメチルシロキシ）ステアロキシシロキサン；ステアリル・モノ−及びジ−エタノールアミド；ロジン及びその誘導体、例えば、グリコール及びグリセロールのアビエチン酸エステル；２５℃で固体の水添油；並びにスクログリセリドがある。水性の系において有効な量を使用することができる増粘剤（粘度調整剤）には：アルギン；カルボマー、例えば、カルボマー９３４、９３４Ｐ、９４０、及び９４１；セルロースガム；セテアリルアルコール；コカミドＤＥＡ；デキストリン；ゼラチン；ヒドロキシエチルセルロース；ヒドロキシプロピルセルロース；ヒドロキシプロピルメチルセルロース；ケイ酸マグネシウムアルミニウム；ミリスチルアルコール； エンバク粉；オレアミドＤＥＡ；オレイルアルコール；ＰＥＧ−７Ｍ；ＰＥＧ−１４Ｍ；ＰＥＧ−９ＯＭ；ステアラミドＤＥＡ；ステアラミドＭＥＡ；ステアリルアルコール；トラガカントゴム；小麦デンプン；キサンタンガム；などが含まれ、上記の増粘剤のリストにおいて、ＤＥＡはジエタノールアミンであり、ＭＥＡはモノエタノールアミンである。非水系において有効な量を使用することができる増粘剤（粘度調整剤）には、ステアリン酸アルミニウム；蜜蝋；カンデリラワックス；カルナウバ；セレシン；セテアリルアル��ール；セチルアルコール；コレステロール；含水ケイ酸；水添ヒマシ油；水添綿実油；水添ダイズ油；水添牛脂脂肪酸グリセリド；水添植物油；ヒドロキシプロピルセルロース；ラノリンアルコール；ミリスチルアルコール；オクチルドデシルステアロイル硫酸；オレイルアルコール；オゾケライト；マイクロクリスタリンワックス；パラフィン；テトラオクタン酸ペンタエリスリチル；ポリアクリルアミド；ポリブテン；ポリエチレン；ジカプリル酸プロピレングリコール；ジペラルゴン酸プロピレングリコール；ステアラルコニウムヘクトライト；ステアリルアルコール；ステアリン酸ステアリル；合成蜜蝋；トリヒドロキシステアリン；トリリノレイン；トリステアリン；ステアリン酸亜鉛；などがある。製剤中における慣例の天然及び合成の増粘剤又はゲル生成剤は、架橋されたポリアクリル酸及びその誘導体、多糖類、例えばキサンタンガム又はアルギン酸塩、カルボキシメチルセルロース又はヒドロキシカルボキシメチルセルロース、親水コロイド、例えばアラビアゴム又はモンモリロナイト鉱物、例えば、ベントナイト又は脂肪アルコール、ポリビニルアルコール、及びポリビニルピロリドンである。
【０１００】
本発明の薬剤に、目的とする用途に有効な量を添加又は使用することが可能な他の成分としては：性能又は消費者アピールを高めるための生物学的添加物、例えば、アミノ酸、タンパク質、バニラ、アロエ抽出物、バイオフラボノイドなど；緩衝剤、キレート剤、例えば、ＥＤＴＡ；乳化安定剤；ｐＨ調整剤； 乳白剤；並びに噴射剤、例えば、ブタン、二酸化炭素、エタン、ヒドロクロロフルオロカーボン２２及び１４２ｂ、ヒドロフルオロカーボン１５２ａ、イソブタン、イソペンタン、窒素、亜酸化窒素、ペンタン、プロパンなどが挙げられる。
【０１０１】
さらに、本発明の薬剤は、その作用を補い、又は強めるために、抗酸化性、フリーラジカルスカベンジャー、皮膚湿潤若しくは保湿、抗紅斑、抗炎症、又は抗アレルギー作用を有する化合物も含むことが可能である。特に、このような化合物は、ビタミン類、植物抽出物、アルファ−及びベータ−ヒドロキシ酸、セラミド、抗炎症性、抗菌性又はＵＶフィルタリング物質、並びにそれらの誘導及びそれらの混合物からなる群から選択することができる。有利なことに、本発明の調製物は、ＵＶ−Ｂ及び／又はＵＶ−Ａ領域の紫外線を吸収する物質も含み得る。脂質相は、鉱油、ミネラルワックス、分岐及び／又は非分岐の炭化水素及び炭化水素ワックス、飽和及び／又は不飽和のトリグリセリド、分岐及び／又は非分岐Ｃ８−Ｃ２４アルカンカルボン酸の物質群から有利に選択される；これらは、合成、半合成、又は天然の油、例えば、オリーブ油、パーム油、アーモンド油又は混合物；油、脂又はワックス、飽和及び／又は不飽和、分岐及び／又は非分岐Ｃ３−Ｃ３０アルカンカルボン酸と、飽和及び／又は不飽和、分岐及び／又は非分岐Ｃ３−Ｃ３０アルコールのエステル、芳香族カルボン酸と飽和及び／又は不飽和、分岐及び／又は非分岐Ｃ３−Ｃ３０アルコールからのエステル、例えば、ミリスチン酸イソプロピル、ステアリン酸イソプロピル、ステアリン酸ヘキシルデシル、オレイン酸オレイル；並びにまた、こうしたエステルの、合成、半合成、及び天然の混合物、例えば、ホホバ油、アルキル安息香酸エステル若しくはシリコーン油、例えば、シクロメチコン、ジメチルポリシロキサン、ジエチルポリシロキサン、オクタメチルシクロ−テトラシロキサン、及びそれらの混合物、又はジアルキルエーテルから選択することが可能である。
【０１０２】
薬剤は所望の投与方法に応じて製剤化することが可能である。これらの手順は、所望の調製に適するように、成分を混合、造粒、及び圧縮、又は溶解させることを含み得る。当然のことながら、医薬的に許容される担体の形態及び特徴は、担体と併用される活性成分の量、投与経路、及びその他の周知の変数によって決定される。詳細は当技術分野において周知であり、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、ペンシルベニア州イーストン所在、を参照のこと。
【０１０３】
本発明の薬剤は、中性型又は塩型として製剤化することが可能である。医薬的に許容される塩としては、塩酸、リン酸、酢酸、シュウ酸、酒石酸などから誘導されるような、陰イオンと共に形成される塩、及び、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、水酸化第二鉄、イソプロピルアミン、トリエチルアミン、２−エチルアミノエタノール、ヒスチジン、プロカインなどから誘導されるような、陽イオンと共に形成される塩が挙げられる。局所適用に適した形態は、例えば、ペースト、軟膏、ローション、クリーム、ジェル又は経皮パッチを含む。適当なペーストは、例えば、石油、白色軟パラフィン、黄色ワセリン、及びグリセロールを含む。適当な軟膏は、例えばグリセロール、鉱油、液体油、石油、白色ワセリン、黄色ワセリン、プロピレングリコール、アルコール、トリグリセリド、セチルエステルのような脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン化合物、白蝋及び黄色蜜蝋のようなワックス、セチルアルコール、ステアリルアルコール及びセチルステアリルアルコールのような脂肪酸アルコール、ステアリン酸のような脂肪酸、ステアリン酸セチル、ラノリン、水酸化マグネシウム、カオリン、並びに水のうち1以上の担体中に懸濁又は溶解した活性成分としてのペプチドを含む。あるいは、薬剤は、担体中に懸濁又は溶解した活性成分を含むローション又はクリームとして製剤化することもできる。このような担体には、パラフィンのような鉱油、ヒマシ油、ヒマ種子油、及び水添ヒマシ油のような植物油、モノステアリン酸ソルビタン、ポリソルベート、セチルエステルのような脂肪酸エステル、ワックス、セチルアルコール、ステアリルアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコールのような脂肪酸アルコール、アルコール、トリグリセリド、並びに水のうちの1以上が含まれるが、それらに限定されない。あるいは、薬剤はまた、担体中に懸濁又は溶解した活性成分を含む適当なジェルとしても製剤化され得る。このような担体には、水、グリセロール、プロピレングリコール、流動パラフィン、ポリエチレン、脂肪油、セルロース誘導体、ベントナイト、及びコロイド状二酸化ケイ素のうちの1以上が含まれるが、それらに限定されない。
【０１０４】
薬剤の製剤化は、好ましくは、薬剤の品質、医薬的安全性、及び有効性を確保するために、ＧＭＰ標準条件の下に行われることを理解されたい。医薬的に許容される成分に対するさらなる基準は、規制機関、又はその他の一般に認可されている薬局方により承認された規則に基づいてもよい。
【０１０５】
本明細書において参照される薬剤は、好ましくは局所的に投与される。しかしながら、全身投与も可能であり。全身投与では、薬剤は、筋肉内、皮下、又は静脈内に適用することが可能である。しかしながら、他の投与経路も可能である。
【０１０６】
薬剤は、好ましくは本発明のペプチドの治療的に有効な量を必要とする対象に提供するものとする。治療的又は予防的に有効な量は、それを必要とする対象において、本明細書で参照される疾患又は状態に付随する症状を予防、改善、又は治療する、ペプチドの量を指す。化合物の治療的又は予防的な効果及び毒性は、細胞培養又は実験動物における標準的な薬学的手順、例えばＥＤ５０（集団の５０％において治療的に有効な用量）及びＬＤ５０（集団の５０％における致死用量）により決定できる。治療効果と毒性作用との間の用量比は治療指数であり、比率ＬＤ５０／ＥＤ５０として表すことができる。治療的又は予防的に有効な量は、薬剤を一度に、すなわち単回ボーラスで、又は繰り返し投与することで提供され得る。投与は、好ましくは週１回、より好ましくは、週２回、３回、４回、５回、又は６回行われるが、もっとも好ましくは毎日、さらにより好ましくは１日２回又はより頻回に行われる。
【０１０７】
本明細書において参照される薬剤の投与量計画は、主治医及び臨床学的ファクターによって決定することができる。医学分野でよく知られているように、個人に対する投与量は、患者の身体の大きさ、体表面積、年齢、投与される特定の化合物、性別、投与の時間及び経路、全身状態、並びに同時に投与される他の薬物などの、多くの要因に左右される。推奨投与量は、考慮されるレシピエントに応じて投与量調整を予測するために、処方者又は使用者の説明書に示されるものとする。
【０１０８】
好ましくは、薬剤は、そのまま、又は補助剤と組み合わせて投与される。補助剤は、クロロキン、プロトン性極性化合物、例えば、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、グリセロール、エタノール、１−メチルＬ−２−ピロリドン、若しくはそれらの誘導体、又は非プロトン性極性化合物、例えば、ジメチルスルホキシド(ＤＳＭＯ)、ジエチルスルホキシド、ジ−ｎ−プロピルスルホキシド、ジメチルスルホン、スルホラン、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、テトラメチル尿素、アセトニトリル、若しくはそれらの誘導体からなる群より選択され得る。これらの化合物は、ｐＨ限界を考慮した条件で加えられる。
【０１０９】
特に、本発明は本発明のペプチド及び好ましくは１以上の医薬的に許容される担体又は賦形剤を含む、医薬組成物を提供する。好ましくは、前記組成物は、０．０１〜１００ｍｇ／ｍｌ、好ましくは０．０５〜５０ｍｇ／ｍｌ、より好ましくは０．１〜１０ｍｇ／ｍｌ、より好ましくは０．２〜５ｍｇ／ｍｌ、及びさらにより好ましくは０．５〜２ｍｇ／ｍｌの濃度でペプチドを含む。
【０１１０】
本発明のペプチドは、炎症誘発性物質、好ましくは炎症誘発性サイトカイン、より好ましくはインターロイキン−１（ＩＬ−１）、さらにより好ましくはインターロイキン−１アルファ（ＩＬ１−アルファ）の分泌を効果的に阻害することが、本発明の基礎をなす研究において発見された。好ましくは、このような炎症誘発性物質の分泌は、上皮細胞、特に、皮膚の角化細胞において阻害される。
【０１１１】
したがって、本発明のペプチド又は医薬組成物は、好ましくは、上皮組織の炎症、アレルギー、アレルギー反応、発疹、及び／又は関節リウマチの治療及び／又は予防、より好ましくは、表皮の炎症、アレルギー、及び／又はアレルギー反応の治療及び／又は予防、より好ましくは皮膚炎の治療及び／又は予防、さらにより好ましくはアトピー性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、乾癬、ツタウルシ皮膚炎、ヘルペス性湿疹、禿瘡、おむつかぶれ、又は疥癬の治療及び／又は予防のために、薬剤として使用される。
【０１１２】
前述の疾患及び疾病は当業者に周知であり、それらに付随する症状及び臨床的パラメータは、Ｓｔｅｄｍａｎ又はＰｓｃｈｙｒｅｍｂｌなどの医学の標準的なテキストブックに記載されている。
【０１１３】
本明細書で使用するとき、用語「治療」は、薬剤によって治療される対象の統計的に有意な部分において、上記に参照される疾患又は疾病に付随する症状及び／又は臨床的パラメータを改善すること、かつ症状又は臨床的パラメータの向上も統計的に有意であるために明らかとなる程度を指す。好ましくは、この用語は、前述の疾患又は疾病に関して治療される対象における健康の全体的な回復も包含する。統計的に有意な部分の治療が成功し得るか、又は症状若しくは臨床的パラメータの改善が統計的に有意であるかどうかをどのように決定するかは、概念的には、例えばスチューデントのｔ検定などの標準統計を利用することにより、さらなる手間をかけることなく当業者によって決定され得る。
【０１１４】
本明細書で使用するとき、用語「予防」は、予防される対象の統計的に有意な部分に対して、予防的な時間範囲内で、前述の疾患又は疾病に関連して健康を維持することを指す。本明細書において参照される疾患又は疾病に関連して健康を維持することは、予防的な時間範囲内で、疾患又は疾病に付随する症状、及び／又は疾患又は疾病を表す臨床的パラメータの変化の有無において、対象を観察することで評価することができる。部分が統計的に有意であるかどうかは、本明細書の他の場所で規定されているように決定され得る。本明細書で使用するとき、好ましい予防的な時間範囲は、最大６週間、最大５週間、最大４週間、最大３週間、最大２週間、最大１週間、最大２日、又は少なくとも１日である。
【０１１５】
本明細書において参照される対象は、動物、好ましくは哺乳類、より好ましくはヒト、飼育動物、例えばウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、若しくはヤギ、又はペット、例えば猫若しくは犬を指す。最も好ましくは、対象はヒトである。
【０１１６】
本発明はまた、上記に続き、対象における炎症誘発性の状態又は疾患を治療するための方法を熟慮し、前記方法は前述の状態又は疾患に苦しむ対象に本発明のペプチドの治療的に有効な量を投与することを含む。
【０１１７】
さらに、本発明によって熟慮されることは、対象における炎症誘発性の状態又は疾患を予防するための方法であり、前記方法は外見上健康な対象に、本発明のペプチドの予防的に有効な量を投与することを含む。
【０１１８】
上述のこれらの方法の好ましい実施形態では、炎症誘発性の状態又は疾患は、上皮組織の炎症、アレルギー、アレルギー反応、発疹、及び／又は関節リウマチ、より好ましくは、表皮の炎症、アレルギー、及び／又はアレルギー反応の治療及び／又は予防、好ましくは皮膚炎の治療及び／又は予防、さらにより好ましくはアトピー性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、乾癬、ツタウルシ皮膚炎、ヘルペス性湿疹、禿瘡、おむつかぶれ、又は疥癬の治療及び／又は予防のためである。
【０１１９】
さらに方法はヒトの治療及び獣医学的用途の両方に適用できることが理解されるであろう。
【０１２０】
さらに、本発明は、医薬的に許容される形態で本発明のペプチドを製剤化する工程を含む、薬剤の製造方法を熟慮する。
【０１２１】
どのようにペプチドが医薬的に許容される形態に製剤化されるかに関する詳細は、本明細書の他の場所に詳細に記載されている。
【０１２２】
本発明のペプチドは皮膚の微生物叢の一部である微生物の生育に影響を及ぼし得ることが、本発明に基づいてさらに発見された。具体的には、皮膚に存在し得る正常で健康な微生物の生育が刺激される一方で、病原性細菌の生育が特異的に阻害されることが分かった。本発明のペプチドのこの効果は、微生物叢の細菌に対して直接影響し、前記微生物叢を内部に有する対象の皮膚によって仲介されるあらゆる影響から独立したものである。したがって、微生物叢に直接影響を及ぼすことで、本発明のペプチドは、病原性細菌を犠牲にして微生物叢中のプロバイオティック細菌を増加させるため、プロバイオティック効果を引き起こす。結果として、対象の全体的な健全及び健康は、本質的にプロバイオティックの皮膚微生物叢の生成によって向上し得る。
【０１２３】
こうして、本発明のペプチドはまた、一過性の病原性皮膚微生物叢の生育を阻害するため、好ましくはブドウ球菌属に属する一過性の病原性皮膚微生物叢の生育を阻害するため、好ましくは黄色ブドウ球菌の生育を阻害するために使用される。さらに、本発明のペプチドは、健康で正常な皮膚の常在微生物叢の生育を刺激するため、好ましくはブドウ球菌属に属する健康で正常な皮膚の常在微生物叢の生育を刺激するため、好ましくは表皮ブドウ球菌の生育を刺激するために使用される。
【０１２４】
本明細書で使用するとき、用語「一過性の病原性皮膚微生物叢」は、皮膚の表面に一過的に存在する微生物を指す。微生物自体は対象において発病過程を引き起こし、又は本明細書の他の場所で参照されるプロバイオティック微生物叢の微生物などの有益な微生物を破壊するため、皮膚上での前記微生物の存在は対象にとって有害であるはずである。好ましくは、微生物は細菌である。より好ましくは、前記細菌はブドウ球菌であり、さらにより好ましくは黄色ブドウ球菌である。
【０１２５】
本明細書で使用するとき、用語「健康で正常な皮膚の常在微生物叢」は、対象の皮膚の表面に生息し、かつ対象に対して有害ではない微生物を指す。好ましくは、微生物は対象を病原性微生物から保護し、又は対象の健全及び健康を積極的に改善するプロバイオティック微生物である。好ましくは、微生物は細菌である。より好ましくは、前記細菌はブドウ球菌であり、さらにより好ましくは表皮ブドウ球菌である。
【０１２６】
本明細書で使用するとき、用語「生育を阻害する」は、細菌の生育率の減少を指す。好ましくは、生育は統計的に有意に阻害される。本発明によって想定される生育率の減少は、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、又は少なくとも９０％の減少であることが好ましい。細菌の生育率は、概念的には、当技術分野において周知の方法を使用して当業者によって、さらなる手間をかけることなく決定することができる。
【０１２７】
用語「生育を刺激する」は、生育率の増加を指す。好ましくは、前記増加は統計的に有意である。好ましくは、生育の刺激は、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、又は少なくとも１００％の生育率で増加することを特徴とする。
【０１２８】
ペプチドは前述の使用に従って、病原性皮膚微生物叢を含む、又はこのような微生物叢を含むことが疑われる対象の皮膚に投与される。病原性微生物叢の生育を阻害するために効果的な、又は健康で正常な常在微生物叢の生育を刺激するペプチドの投与量は、本明細書の他の場所に記載されている通りに決定することが可能である。好ましくは、ペプチドは週１回、より好ましくは、週２回、３回、４回、５回、又は６回投与されるが、最も好ましくは毎日、さらにより好ましくは１日２回又はより頻回に投与される。特に、皮膚常在菌叢の妨害が、例えば洗浄により発生した後は、毎回投与することが好ましいであろう。しかしながら、治療の進行中は、はるかに長い時間間隔で投与することが可能であり、必要な場合はるかに短い時間間隔、例えば１日に数回投与してもよい。好ましい場合では、免疫反応は本明細書に記載の方法、及び当業者に周知のさらなる方法を用いて監視され、投与量は、例えば時間、量、及び／又は組成物において最適化される。進歩は定期的な評価によって監視することができる。また、医薬組成物は併用療法アプローチ、すなわちその他の薬剤又は薬物、例えば皮膚を病原性微生物から保護するための他の薬物との併用投与において使用されることが想定される。
【０１２９】
前記に加えて、本発明は本発明のペプチドを含む化粧品組成物にさらに関する。特に、本発明のこれらの実施形態によれば、化粧品組成物は非治療的使用のために提供され、好ましくは、化粧品組成物は対象に美容目的で投与される。
【０１３０】
本発明で使用するとき、用語「化粧品組成物」は、上述の本発明の少なくとも１つのテトラペプチドを含む１以上の組成物に関する。本明細書の以下に記載の本発明の組成物は、あらゆる組み合わせで、本発明のペプチドに１以上のさらなる成分を含むことが想定される。好ましくは、本発明の化粧品組成物は、健康で正常な皮膚の常在微生物叢の生育を刺激するために、及び／又は皮膚を病原性微生物から保護するために、好ましくは一過性の病原性皮膚微生物叢の生育を阻害するために適した少なくとも１つのさらなる成分を含むことができる。特定の好ましい実施形態によれば、用語「皮膚を病原性微生物から保護するために適した成分」は、皮膚のｐＨを下げる、及び／又は低いｐＨレベルを維持する化合物又は組成物及び／又はその組み合わせを指し、用語「皮膚の低いｐＨレベル」は、好ましくはｐＨ６〜７の間のｐＨレベルを指す。
【０１３１】
一般に、本発明の化粧品組成物中に含まれ得る本発明のペプチドの量に関しては特に限定されない。したがって、例としては、化粧品組成物は、０．００５〜２０ｍｇ／ｍｌの範囲の濃度で本発明のペプチドを含むことができ、好ましい実施形態によれば、その含有量は０．０１〜１０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは０．０５〜５ｍｇ／ｍｌ、より好ましくは０．１〜２ｍｇ／ｍｌ、さらにより好ましくは０．２〜１ｍｇ／ｍｌの範囲である。本発明の意義の範囲内において、ｍｇ／ｍｌで与えられる濃度は、組成物中の本発明の組成物の含有量を示しており、ペプチドがより大きなポリペプチド又はタンパク質中に含まれる好ましい実施形態によれば、含有量はそこに含まれる本発明のペプチドの重量に基づいており、ペプチドが含まれるポリペプチド又はタンパク質の重量に基づくものではない。
【０１３２】
さらに、本発明は化粧品組成物を調製するために、上記のペプチドを使用することに関する。特に、本発明は、１以上の化粧品に許容される担体又は賦形剤を用いて上記のテトラペプチドを製剤化する工程を含む、化粧品組成物の製造方法を提供する。
【０１３３】
したがって、本発明はまた、１以上の化粧品及び／又は医薬的に許容される担体又は賦形剤をさらに含む化粧品組成物に関する。
【０１３４】
一般に、本発明の化粧品組成物はそれらの化粧品用途に適した任意のさらなる成分を含むことができる。特に、前記組成物は、本発明の薬剤及び医薬組成物の実施形態及び好ましい実施形態に関連して前記に記載されているように、１以上の前記に記載の医薬的に許容される担体、安定剤、徐放剤、皮膚軟化薬、乳化剤、界面活性剤、皮膜形成剤、防腐剤、香料、ワックス、並びに性能又は消費者アピールを高めるための生物学的添加物、緩衝剤、キレート剤、例えば、ＥＤＴＡ、乳化安定剤、ｐＨ調整剤、乳白剤、及び噴射剤を含むその他の成分を包含することができる。
【０１３５】
それに加えて、本発明の化粧品組成物はまた、このような調製物において慣例的に使用されるさらなる補助物質、例えば、消泡剤、色素、顔料、増粘剤、界面活性物質、表面処理剤、脂肪、油、及び化粧品又は皮膚用製剤の他の慣用成分、例えば、アルコール、ポリオール、ポリマー、気泡安定剤、溶解促進剤、電解質、有機酸、有機溶媒、又はシリコーン誘導体のうちの１以上を含むことができる。特に好ましい実施形態によれば、前記組成物は、乳濁液、例えば、水中油型若しくは油中水型の乳濁液の形態、軟膏の形態、又はマイクロカプセル及び／又はリポソームの形態である。
【０１３６】
一般に、化粧品組成物及び医薬組成物は、それらの各用途に適した任意の形態で提供することができる。したがって、例としては、組成物は固体、液体、又はガス状の形態であってもよく、とりわけ、粉末、溶液、エアゾール、懸濁液、乳濁液、液体、エリキシル剤、抽出物、チンキ剤、又は流体抽出物の形態であり得る。好ましい実施形態によれば、本発明の組成物は局所投与に適した形態である。局所適用に適した形態としては、ペースト、軟膏、ローション、クリーム、ジェル、又は経皮パッチが挙げられる。
【０１３７】
好ましくは、本発明の組成物は化粧品に許容される担体又は賦形剤をさらに含む化粧品組成物である。より好ましくは、前記化粧品組成物は、ペースト、軟膏、ローション、クリーム、又はジェルである。特に、本発明の化粧品組成物は、本発明のペプチドと合わせて本発明の組成物及びさらなる化粧品に許容される担体を含む。
【０１３８】
本発明の意義の範囲内において、用語「化粧品に許容される担体」は任意の適したビヒクルであり、それは本発明の組成物を安全かつ効果的な方法で皮膚に適用するために使用され得る。このようなビヒクルは、乳濁液、例えば、水中油型若しくは油中水型の乳濁液、軟膏、又はマイクロカプセルなどの材料を含めることができ、また、活性成分をカプセル化された形で、例えば、セルロースカプセル化として、ゼラチン中で、ポリアミド、ニオソーム、ワックスマトリックスと共に、シクロデキストリンと共に、又はリポソームでカプセル化して、投与することも有利である。本明細書で使用するとき、用語「安全かつ効果的な量」は、好ましくは皮膚の常在微生物叢の少なくとも１つの微生物の生育を刺激するための十分な量を意味する。
【０１３９】
本発明によれば、担体として適当なペーストは、担体中に懸濁した本発明のペプチドを含む。このような担体としては、限定されるものではないが、石油、白色軟パラフィン、黄色ワセリン、及びグリセロールが挙げられる。
【０１４０】
化粧品組成物は、担体中に懸濁又は溶解した活性成分を含む、適当な軟膏として製剤化することも可能である。このような担体としては、限定されるものではないが、グリセロール、鉱油、液体油、石油、白色ワセリン、黄色ワセリン、プロピレングリコール、アルコール、トリグリセリド、セチルエステルのような脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン化合物、白蝋及び黄色蜜蝋のようなワックス、セチルアルコール、ステアリルアルコール、及びセチルステアリルアルコールのような脂肪酸アルコール、ステアリン酸のような脂肪酸、ステアリン酸セチル、ラノリン、水酸化マグネシウム、カオリン、並びに水のうちの1以上が挙げられる。あるいは、化粧品組成物は、担体中に懸濁又は溶解した活性成分を含む適当なローション又はクリームとして製剤化することも可能である。このような担体には、限定されるものではないが、パラフィンのような鉱油、ヒマシ油、ヒマ種子油、及び水添ヒマシ油のような植物油、モノステアリン酸ソルビタン、ポリソルベート、セチルエステルのような脂肪酸エステル、ワックス、セチルアルコール、ステアリルアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコールのような脂肪酸アルコール、アルコール、トリグリセリド、並びに水のうちの1以上が挙げられる。あるいは、化粧品組成物は、担体中に懸濁又は溶解した活性成分を含む適当なジェルとして製剤化することもできる。このような担体には、限定されるものではないが、水、グリセロール、プロピレングリコール、流動パラフィン、ポリエチレン、脂肪油、セルロース誘導体、ベントナイト、及びコロイド状二酸化ケイ素のうちの1以上が挙げられる。
【０１４１】
好ましい実施形態によれば、化粧品組成物は皮膚軟化薬をさらに含む。乾燥を防止、又は軽減するために有効な量の皮膚軟化薬を使用することができる。より好ましくは、本発明の化粧品組成物において使用される皮膚軟化薬としては、炭化水素油及びワックス；シリコーン油；トリグリセリドエステル；アセトグリセリドエステル；エトキシル化グリセリド；アルキルエステル；アルケニルエステル；脂肪酸；脂肪アルコール；脂肪アルコールエーテル；エーテルエステル；ラノリン及び誘導体；多価アルコール（ポリオール）及びポリエーテル誘導体；多価アルコール（ポリオール）エステル；ワックスエステル；蜜蝋誘導体；植物蝋；リン脂質；ステロール；並びにアミドのうちの１以上が挙げられる。
【０１４２】
このように、好ましい皮膚軟化薬としては、鉱油、特に５０〜５００ＳＵＳ（セーボルト秒）の範囲の粘性を有する鉱油、ラノリン油、ミンク油、ココナッツ油、カカオバター、オリーブ油、アーモンド油、マカダミアナッツ油、アロエ抽出物、ホホバ油、紅花油、コーン油、液状ラノリン、綿実油、ピーナッツ油、ピュアセリンオイル、ペルヒドロスクアレン（スクアレン）、ヒマシ油、ポリブテン、無臭ミネラルスピリット、甘扁桃油、アボカド油、カロフィラム油、リシン油、ビタミンＥ酢酸エステル、オリーブ油、ミネラルスピリット、セテアリルアルコール（主としてセチル及びステアリルアルコールからなる脂肪アルコール混合物）、リノレニルアルコール、オレイルアルコール、オクチルドデカノール、小麦胚芽油のような穀物胚芽の油、オクタン酸セテアリル（セテアリルアルコールと２−エチルヘキサン酸のエステル）、パルミチン酸セチル、アジピン酸ジイソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、パルミチン酸オクチル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸ブチル、ステアリン酸グリセリル、ステアリン酸ヘキサデシル、ステアリン酸イソセチル、ステアリン酸オクチル、ヒドロキシステアリン酸オクチル、ステアリン酸プロピレングリコール、ステアリン酸ブチル、オレイン酸デシル、オレイン酸グリセリル、アセチルグリセリド、(Ｃ１２〜Ｃ１５)アルコールのオクタン酸及び安息香酸エステル、アルコール及びポリアルコールのオクタン酸及びデカン酸エステル、例えば、グリコール及びグリセロールのエステル、並びにアルコール及びポリアルコールのリシノール酸エステル、例えば、アジピン酸イソプロピル、ラウリン酸ヘキシル、ドデカン酸オクチル、ジメチコンコポリオール、ジメチコノール、ラノリン、ラノリンアルコール、ラノリンワックス、水添ラノリン、ヒドロキシル化ラノリン、アセチル化ラノリン、ペトロラタム、ラノリン脂肪酸イソプロピル、ミリスチン酸セチル、ミリスチン酸グリセリル、ミリスチン酸ミリスチル、乳酸ミリスチル、セチルアルコール、イソステアリルアルコール、ステアリルアルコール、及びラノリン脂肪酸イソセチルなどが挙げられる。
【０１４３】
さらなる好ましい実施形態によれば、本発明の化粧品組成物は１以上の乳化剤を包む。特に、好ましくは組成物の成分の均一な混合をもたらすために有効な量の乳化剤（すなわち乳化作用のある物質）が使用される。好ましい乳化剤としては、（ｉ）陰イオン性、例えば、脂肪酸石鹸、例としてはステアリン酸カリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸アンモニウム、及びステアリン酸トリエタノールアミン；脂肪酸石鹸を含むポリオール脂肪酸モノエステル、例えば、カリウム又はナトリウム塩のいずれかを含有するモノステアリン酸グリセロール；硫酸エステル（ナトリウム塩）、例えば、ラウリル５硫酸ナトリウム、及びセチル硫酸ナトリウム；並びに硫酸エステルを含有するポリオール脂肪酸モノエステル、例えば、ラウリル硫酸ナトリウムを含有するモノステアリン酸グリセリル；（ｉｉ）陽イオン性、例えば、Ｎ（ステアロイルコラミノホルミルメチル）ピリジウムクロリド；Ｎ−ソヤ−Ｎ−エチルモルホリニウムエトサルフェート；アルキルジメチルベンジルアンモニウムクロリド；ジイソブチルフェノキシエトキシエチルジメチルベンジルアンモニウムクロリド；及びセチルピリジウムクロリド；並びに（ｉｉｉ）非イオン性、例えば、ポリオキシエチレン脂肪アルコールエーテル、例えば、モノステアレート；ポリオキシエチレンラウリルアルコール；ポリオキシプロピレン脂肪アルコールエーテル、例えば、プロポキシル化オレイルアルコール；ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、例えば、ステアリン酸ポリオキシエチレン；ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、例えば、モノステアリン酸ポリオキシエチレンソルビタン；ソルビタン脂肪酸エステル、例えば、ソルビタン；ポリオキシエチレングリコール脂肪酸エステル、例えば、モノステアリン酸ポリオキシエチレングリコール；並びにポリオール脂肪酸エステル、例えば、モノステアリン酸グリセリル、及びモノステアリン酸プロピレングリコール；並びにエトキシル化ラノリン誘導体、例えば、エトキシル化ラノリン、エトキシル化ラノリンアルコール、及びエトキシル化コレステロールのうちの1以上が挙げられる。乳化剤の選択は、典型的には、Ｓｃｈｒａｄｅｒ、Ｇｒｕｎｄｌａｇｅｎ  ｕｎｄ  Ｒｅｚｅｐｔｕｒｅｎ  ｄｅｒ  Ｋｏｓｍｅｔｉｋａ、Ｈｕｔｈｉｇ  Ｂｕｃｈ  Ｖｅｒｌａｇ、Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ、第２版、１９８９、第３部に記載されている。
【０１４４】
本発明のさらなる好ましい実施形態によれば、化粧品組成物は界面活性剤を含む。適当な界面活性剤としては、例えば、一般に洗浄剤、乳化剤、増泡剤、ハイドロトロープ、可溶化剤、懸濁化剤、及び非界面活性剤（液体中で固体の分散を促進する）として分類される界面活性剤を含む。
【０１４５】
一般に、界面活性剤は通常、両性、陰イオン性、陽イオン性、及び非イオン性界面活性剤として分類され、前記界面活性剤の種類の１以上が本発明の化粧品組成物に使用されることが好ましい。特に、好ましい両性界面活性剤には、１以上のアシルアミノ酸及び誘導体、並びにＮ−アルキルアミノ酸がある。さらに、好ましい陰イオン性界面活性剤としては、１以上の下記のものが挙げられる：アシルアミノ酸及び塩、例えば、アシルグルタミン酸塩、アシルペプチド、アシルサルコシン酸塩、及びアシルタウリン塩；カルボン酸及び塩、例えば、アルカン酸、カルボン酸エステル、及びカルボン酸エーテル；スルホン酸及び塩、例えば、アシルイセチオン酸塩、アルキルアリールスルホン酸塩、アルキルスルホン酸塩、及びスルホコハク酸塩；硫酸エステル、例えば、アルキルエーテル硫酸塩及びアルキル硫酸塩。さらに、好ましい陽イオン性界面活性剤としては１以上の下記のものが挙げられる：アルキルアミン、アルキルイミダゾリン、エトキシル化アミン、及び４級アンモニウム化合物（例えば、アルキルベンジルジメチルアンモニウム塩、アルキルベタイン、複素環式アンモニウム塩、及びテトラアルキルアンモニウム塩）。これらに加えて、好ましい非イオン性界面活性剤としては１以上の下記のものが挙げられる：アルコール、例えば８〜１８炭素原子を含む一級アルコール；アルカノールアミド、例えば、アルカノールアミン誘導アミド及びエトキシル化アミド；アミンオキシド；エステル、例えば、エトキシル化カルボン酸、エトキシル化グリセリド、グリコールエステル及び誘導体、モノグリセリド、ポリグリセリルエステル、多価アルコールエステル及びエーテル、ソルビタン／ソルビトールエステル、並びにリン酸のトリエステル；並びにエーテル、例えば、エトキシル化アルコール、エトキシル化ラノリン、エトキシル化ポリシロキサン、及びプロポキシル化ポリオキシエチレンエーテル。
【０１４６】
さらに、本発明によれば化粧品組成物は皮膜形成剤を含むことが好ましい。一般に、本発明に従って使用される皮膜形成剤は、好ましは組成物を滑らかで均一に保つものである。本発明によれば、好ましい皮膜形成剤としては１以上の下記のものが挙げられる：アクリルアミド／アクリル酸ナトリウムコポリマー；アクリル酸アンモニウムコポリマー；バルサムペル；セルロースガム；エチレン／無水マレイン酸コポリマー；ヒドロキシエチルセルロース；ヒドロキシプロピルセルロース；ポリアクリルアミド；ポリエチレン；ポリビニルアルコール；ｐｖｍ／ＭＡコポリマー（ポリビニルメチルエーテル／無水マレイン酸）；ＰＶＰ（ポリビニルピロリドン)；無水マレイン酸コポリマー、例えば、Ｇｕｌｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙから入手可能なＰＡ−１８；ＰＶＰ／ヘキサデセンコポリマー、例えば、ＧＡＦ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから入手可能なＧａｎｅｘ  Ｖ−２１６；及びアクリル／アクリル酸コポリマー。
【０１４７】
一般に、皮膜形成剤は任意の適した量で使用することができる。例としては、本発明の化粧品組成物において、皮膜形成剤は組成物全体の０．１重量％〜１０重量％の範囲の量で使用することができ、好ましくは１重量％〜８重量％、より好ましくは０．１重量％〜５重量％の範囲の量がそこに含まれる。さらなる好ましい実施形態によれば、１以上の保湿剤が本発明の化粧品組成物に含まれ、前記保湿剤は、好ましくは果糖；ブドウ糖；グルタミン酸；グリセリン；ハチミツ；マルチトール；メチルグルセス−１０；メチルグルセス−２０；プロピレングリコール；乳酸ナトリウム；ショ糖；及びそれらの混合物からなる群より選択される。
【０１４８】
本発明によれば、化粧品組成物は１以上の防腐剤を含むことがさらに好ましい。より好ましくは、１以上の防腐剤には、ブチルパラベン；エチルパラベン；イミダゾリジニル尿素；メチルパラベン；Ｏ−フェニルフェノール；プロピルパラベン；クオタニウム−１４；クオタニウム−１５；デヒドロ酢酸ナトリウム；及びジンクピリチオンのうち1以上が含まれる。
【０１４９】
一般に、防腐剤は、微生物の生育を防止又は遅延させるのに有効な任意の量を使用することができる。好ましくは、防腐剤は、組成物全体の０．１重量％〜１重量％、より好ましくは０．１重量％〜０．８重量％、さらにより好ましくは０．１重量％〜０．５重量％の範囲の量で使用される。
【０１５０】
本発明の化粧品組成物はまた、香料をさらに含んでもよい。本発明の組成物に望ましい芳香及び色を与えるのに有効な量の、当業者に周知の香料（芳香化合物）及び着色料（着色剤）を使用することが可能である。
【０１５１】
さらに好ましい本発明の実施形態によれば、化粧品組成物は１以上のワックスを含む。好ましいワックスには１以上の下記のものがある：動物ワックス、例えば、蜜蝋及び好ましくはそれに含まれるトリコンタノールのヘキサデカン酸エステル、鯨蝋、又は羊毛ワックス（ラノリン）；植物ワックス、例えば、カルナウバ又はカンデリラ；ミネラルワックス、例えば、モンタンワックス又はオゾケライト；並びに石油ワックス、例えば、パラフィンワックス、及びマイクロクリスタリンワックス（高分子量石油ワックス）。これらに代えて又は加えて、１以上の合成ワックスを化粧品組成物において使用することができ、前記１以上の合成ワックスとしては、好ましくはポリエチレン、ポリオキシエチレン、並びに一酸化炭素及び水素から誘導された炭化水素ワックス、並びにそれらの２以上の組み合わせが挙げられる。
【０１５２】
特に、本発明の化粧品組成物において使用可能な好ましいワックスとしては、セロシン；セチルエステル；水添ホホバ油；水添ホホバワックス；水添米ぬかワックス；木蝋；ホホババター；ホホバ油；ホホバワックス；ムンクワックス；モンタン酸ワックス；オウリキュリーワックス；米ぬかワックス；シェラックワックス；硫化ホホバ油；合成蜜蝋；合成ホホバ油；トリヒドロキシステアリン；セチルアルコール；ステアリルアルコール；カカオバター；ラノリンの脂肪酸；２５℃で固体である、モノ−、ジ−、及びトリグリセリド、例えば、トリベヘン酸グリセリル（ベヘン酸及びグリセリンのトリエステル）、及びＣ１９−３６酸トリグリセリド（Ｃ１９−３６カルボン酸及びグリセリンのトリエステル混合物）、それぞれＣｒｏｄａ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．から商標名Ｓｙｎｃｒｏｗａｘ  ＨＲＣ及びＳｙｎｃｒｏｗａｘ  ＨＧＬ−Ｃとして発売されている；２５℃で固体である脂肪酸エステル；シリコーンワックス、例えば、メチルオクタデカンオキシポリシロキサン及びポリ（ジメチルシロキシ）ステアロキシシロキサン；ステアリル・モノ−及びジ−エタノールアミド；ロジン及びその誘導体、例えば、グリコール及びグリセロールのアビエチン酸エステル；２５℃で固体の水添油；並びにスクログリセリド、のうちの１以上が挙げられる。
【０１５３】
さらに、本発明の好ましい化粧品組成物は、１以上の増粘剤（粘度調整剤）を含む。溶液の形態で本発明の化粧品組成物において使用される好ましい増粘剤には、アルギン；カルボマー、例えば、カルボマー９３４、９３４Ｐ、９４０、及び９４１；セルロースガム；セテアリルアルコール；コカミドＤＥＡ；デキストリン；ゼラチン；ヒドロキシエチルセルロース；ヒドロキシプロピルセルロース；ヒドロキシプロピルメチルセルロース；ケイ酸マグネシウムアルミニウム；ミリスチルアルコール； エンバク粉；オレアミドＤＥＡ；オレイルアルコール；ＰＥＧ−７Ｍ；ＰＥＧ−１４Ｍ；ＰＥＧ−９ＯＭ；ステアラミドＤＥＡ；ステアラミドＭＥＡ；ステアリルアルコール；トラガカントゴム；小麦デンプン；キサンタンガムのうち１以上を含み、ＤＥＡは、ジエタノールアミンであり、ＭＥＡは、モノエタノールアミンである。これと代えて、又は加えて、非水系の形態で本発明の化粧品組成物において使用される増粘剤には、好ましくは、ステアリン酸アルミニウム；蜜蝋；カンデリラワックス；カルナウバ；セレシン；セテアリルアルコール；セチルアルコール；コレステロール； 含水ケイ酸；水添ヒマシ油；水添綿実油；水添ダイズ油；水添牛脂脂肪酸グリセリド；水添植物油；ヒドロキシプロピルセルロース；ラノリンアルコール；ミリスチルアルコール；オクチルドデシルステアロイル硫酸；オレイルアルコール；オゾケライト；マイクロクリスタリンワックス；パラフィン；テトラオクタン酸ペンタエリスリチル；ポリアクリルアミド；ポリブテン；ポリエチレン；ジカプリル酸プロピレングリコール；ジペラルゴン酸プロピレングリコール；ステアラルコニウムヘクトライト；ステアリルアルコール；ステアリン酸ステアリル；合成蜜蝋；トリヒドロキシステアリン；トリリノレイン；トリステアリン；ステアリン酸亜鉛などのうちの１以上が含まれる。さらに、本発明によれば、製剤中に慣例の天然及び合成の増粘剤又はゲル生成剤を含む化粧品組成物が好ましく、増粘剤又はゲル生成剤は、好ましくは、架橋されたポリアクリル酸及びその誘導体、多糖類、例えばキサンタンガム又はアルギン酸塩、カルボキシメチルセルロース又はヒドロキシカルボキシメチルセルロース、親水コロイド、例えばアラビアゴム又はモンモリロナイト鉱物、例えば、ベントナイト又は脂肪アルコール、ポリビニルアルコール、及びポリビニルピロリドン、並びにそれらの２以上の組み合わせのうちの１以上を含む。
【０１５４】
本発明の化粧品組成物に好適に含まれるその他の成分としては、性能又は消費者アピールを高めるための生物学的添加物、例えば、アミノ酸、タンパク質、バニラ、アロエ抽出物、バイオフラボノイドなど；緩衝剤、キレート剤、例えば、ＥＤＴＡ；乳化安定剤；ｐＨ調整剤； 乳白剤；並びに噴射剤、例えば、ブタン、二酸化炭素、エタン、ヒドロクロロフルオロカーボン２２及び１４２ｂ、ヒドロフルオロカーボン１５２ａ、イソブタン、イソペンタン、窒素、亜酸化窒素、ペンタン、プロパンのうちの１以上が挙げられる。
【０１５５】
これらに代えて、又は加えて、本発明の化粧品組成物は、非治療的手段によりその美容作用を補い、又は強めるために、抗酸化性、フリーラジカルスカベンジャー、皮膚湿潤若しくは保湿、抗紅斑、抗炎症、及び／又は抗アレルギー作用を有する１以上の化合物をさらに含むことが好ましい。その好ましい実施形態によれば、前記化合物には、ビタミン類、植物抽出物、アルファ−及びベータ−ヒドロキシ酸、セラミド、抗炎症性、抗菌性、又はＵＶフィルタリング物質、並びにそれらの誘導体及びそれらの混合物のうちの１以上が含まれる。さらに、本発明の化粧品組成物は、ＵＶ−Ｂ及び／又はＵＶ−Ａ領域の紫外線を吸収する１以上の物質をさらに含むことが好ましい。化粧品組成物が１以上の前述の化合物をさらに含む本発明のある実施形態では、脂質相を含む組成物がさらに好ましく、前記脂質相は、好ましくは鉱油、ミネラルワックス、分岐及び／又は非分岐炭化水素及び炭化水素ワックス、飽和及び／又は不飽和、分岐及び／又は非分岐Ｃ８−Ｃ２４アルカンカルボン酸のトリグリセリド、並びにそれらの２以上の組み合わせからなる物質より選択される１以上の物質を含み、油は合成、半合成、及び天然の油を含む。より具体的には、前記実施形態の化粧品組成物の脂質相は、オリーブ油、パーム油、アーモンド油；油、脂又はワックス、飽和及び／又は不飽和、分岐及び／又は非分岐Ｃ３−Ｃ３０アルカンカルボン酸と飽和及び／又は不飽和、分岐及び／又は非分岐Ｃ３−Ｃ３０アルコールのエステル、芳香族カルボン酸と飽和及び／又不飽和、分岐及び／又は非分岐Ｃ３−Ｃ３０アルコールからのエステル、例えば、ミリスチン酸イソプロピル、ステアリン酸イソプロピル、ステアリン酸ヘキシルデシル、オレイン酸オレイル；並びにまた、こうしたエステルの、合成、半合成、及び天然の混合物、例えば、ホホバ油、アルキル安息香酸エステル、又はシリコーン油、例えば、シクロメチコン、ジメチルポリシロキサン、ジエチルポリシロキサン、オクタメチルシクロ−テトラシロキサン、及びそれらの混合物、又はジアルキルエーテルからなる群より選択される１以上の成分を含むことが好ましい。
【０１５６】
一般に、本発明の化粧品組成物は、消費者の使用に対して有益かつ効果的な任意の適した形態で製剤化し、及び提供することが可能である。この点において、特に非治療的な化粧品応用における本発明のペプチド及びそれを含む組成物の有利な効果を考慮すると、好ましくは、本発明のペプチド及びそれを含む化粧品組成物は、皮膚の洗浄用、例えば、固形石鹸、化粧石鹸、含核石鹸、透明石鹸、高級石鹸、脱臭石鹸、クリーム石鹸、ベビーソープ、皮膚保護石鹸、研磨剤、合成洗剤、液状石鹸、練り石鹸、軟石鹸、洗浄ペースト、液体洗浄、シャワー及び浴用化粧品、例えば、洗浄ローション、シャワー剤、シャワージェル、泡風呂入浴剤、クリーム泡風呂入浴剤、オイルバス、浴用エキス、スクラブ剤、ｉｎ−ｓｉｔｕ製品、シェービングフォーム、シェービングローション、シェービングクリームなどの組成物として製剤化されるか、又は組成物中に含まれる。さらに、本発明のペプチド及びそれを含む化粧品組成物は、皮膚用化粧品に適しており、これは例えば、Ｗ／Ｏ又はＯ／Ｗスキンクリーム及びボディクリーム、デイクリーム及びナイトクリーム、光防護組成物、アフターサン製品、ハンドケア製品、フェイスクリーム、多重エマルション、ジュレ、マイクロエマルション、リポソーム製剤、ニオソーム製剤、しわ防止クリーム、フェイスオイル、リポジェル、スポーツジェル、保湿クリーム、美白クリーム、ビタミンクリーム、スキンローション、ケアローション、アンプル剤、アフターシェーブローション、ひげそり用ローション、保湿ローション、日焼けローション、セルライトクリーム、脱色組成物、マッサージ剤、ボディーパウダー、フェーストニック、デオドラント化粧品、制汗剤、毛穴パック、にきび抑制組成物、防虫剤などである。
【０１５７】
したがって、本発明の好ましい実施形態によれば、本発明のペプチド又はそれを含む本発明の化粧品組成物及び／又は医薬組成物は、表皮に、好ましくは顔の皮膚及び／又は頭皮に、さらにより好ましくは顔の皮膚に適用するための、洗浄剤及び／又は製剤中に含まれ、
洗浄剤は好ましくは、石鹸及び／又はローション、より好ましくは顔用ローション及び／又はシャンプーであり、
表皮に適用するための製剤は、好ましくは液体又は半固形の溶液、ローション、クリーム、ジェル、又は軟膏である。
【０１５８】
ペプチド又はそれを含む組成物が局所適用向きである本発明の好ましい実施形態によれば、ペプチド又は組成物は、適当なペースト、軟膏、ローション、クリーム、ジェル、又は経皮パッチとして製剤化されることが好ましい。しかしながら、使用分野によって、適用方法は、スプレー（ポンプスプレー又はエアロゾル）、フォーム、ジェルスプレー、ムース、懸濁液、又は粉末の形態をとることが好ましい。前述の製剤及び適用方法によれば、化粧品組成物及び医薬組成物は、特にエアゾールを含む適用方法に関連して、前述の種類の製剤のために適当な噴射剤を含むことがそれ故好ましい。一般に、任意の想定される噴射剤を前記の特定の化粧品組成物及び医薬組成物に含むことができ、本発明によれば、噴射剤の使用には、プロパン、ブタン、ペンタン、及びそれらの混合物のうちの１以上を含むことが好ましい。
【０１５９】
したがって、本発明のペプチド又はそれを含む本発明の化粧品組成物及び／又は医薬組成物のある実施形態によれば、さらに好ましくは、表皮に適用するための洗浄剤及び／又は製剤は、エアゾール中に含まれ、及び／又はエアゾールとして適用される。
【０１６０】
本発明はさらに、非治療的スキンケアのために本発明のペプチドを使用することに関する。特に、本発明は、乾燥皮膚状態の治療及び／又は予防のために、本発明のペプチド又はそれを含む組成物を使用することにさらに関する。本発明の意義の範囲内において、用語「乾燥皮膚状態」は一般に、表皮の水分含量を増加又は維持することが、本発明のペプチド又は組成物を適用する対象の表皮の美容的外観、及び／又は健全に有益である、表皮のあらゆる状態を指す。特に、この用語は、治療作用を必要とする皮膚の病的状態を指すものではない。
【０１６１】
一方で、用語「皮膚」は、当業者に知られているように、一般に身体の外側を覆うものを指す。好ましくは、この用語は、表皮、真皮、及び皮下脂肪組織の３層に関する。表皮は、皮膚の最も外側の層である。表皮は、一般的に、身体表面を覆って、水を通さない保護被覆を形成し、下部に基底膜を有する重層扁平上皮からなる。表皮には普通、血管はなく、真皮からの拡散によって養分が与えられる。表皮を形成する細胞の主要タイプはケラチノサイトであり、メラノサイト及びランゲルハンス細胞も存在する。表皮は、いくつかの層に分けられ、細胞はいちばん内側の層で有糸分裂によって生成される。細胞は、分化するにつれて形態及び構成を変えながら層を上方に移行し、ケラチンで満たされるようになる。細胞は最終的に、角質層と呼ばれる最上層に到達し、脱落又は落屑を生じる。表皮の最外層は、２５〜３０層の死細胞からなる。従来から、表皮は、（表層から深部へ）５つの副層又は階層に分けられている：角質層、透明層、顆粒層、有棘層、及び胚芽層又は基底層。典型的には、表皮と真皮との間の境界は不規則で、一連の乳頭又は指状突起からなるが、これらは皮膚の薄いところでもっとも小さく、手掌及び足底の皮膚ではもっとも長い。典型的には、手掌及び足底の乳頭は、表皮の上昇に関連し、突起部を形成する。皮下脂肪組織は、皮膚の最下層である。この層の特徴は、結合組織、血管、及び脂肪細胞からなることである。通常、この層は、皮膚を下部にある組織に結合し、身体を寒さから防護し、エネルギーを脂肪の形で貯える。一般に、皮膚はより深部の組織への物理的、化学的、及び細菌による作用に対する保護バリアを形成する。このことは、例えば口腔又は膣部位に属する組織、すなわち粘膜が皮膚に属さないことを意味する。好ましい実施形態では、用語「皮膚」は、身体を覆う最も外側の層、すなわち表皮に関する。より好ましい実施形態では、用語「皮膚」は、表皮の角質層に関する。さらにより好ましい実施形態では、用語「皮膚」は、表皮のうち最も外側の２５〜３０層の死細胞の層に関する。最も好ましい実施形態では、用語「皮膚」は、表皮のうち最も外側の１０層の死細胞の層に関する。
【０１６２】
原理上、本発明によれば、本発明のペプチド又はそれを含む組成物を使用したスキンケアを受け得る皮膚の領域に関して特に限定されない。しかしながら、好ましくは、本発明のペプチド及び組成物は、乾燥皮膚状態になりやすい皮膚領域のスキンケアのために好適に使用される。より好ましくは、皮膚のこれらの領域における、乾燥のしやすさ、及び／又は環境及び季節変動要因、及び／又は頻繁な洗浄を含む一般衛生の結果として、容易に乾燥し得る皮膚のこれらの領域がスキンケアの対象である。したがって、本発明の好ましい実施形態によれば、本発明のペプチド又は組成物は、手、顔の皮膚、及び／又は頭皮、より好ましくは手及び／又は顔の皮膚、さらにより好ましくは顔の皮膚のスキンケアのために使用される。好ましい本発明のある実施形態によれば、本発明のペプチド又は組成物は特に、手及び／又は口唇のスキンケアのため、より好ましくは口唇のスキンケアのために使用される。
【０１６３】
したがって、本発明は、乾燥皮膚状態、好ましくは乾燥した顔の皮膚及び／又は乾燥頭皮、さらにより好ましくは乾燥した顔の皮膚の、非治療的スキンケアのために、好ましくは治療及び／又は予防するために、本発明のペプチド又はそれを含む本発明の組成物を使用することにさらに関する。
【０１６４】
本発明のさらなる実施形態によれば、本発明のペプチド又はそれを含む組成物は、皮膚に存在する健康で正常な常在微生物叢、好ましくは顔の皮膚及び／又は頭皮に存在する健康で正常な常在微生物叢、より好ましくは顔の皮膚に存在する健康で正常な常在微生物叢を、改善及び維持するために使用される。特に、前記実施形態及び好ましい実施形態によれば、本発明のペプチド及び組成物は、通常皮膚に生息する健康な微生物叢の生育を刺激するために使用される。一般に、本発明の前記実施形態及び好ましい実施形態に関して、健康で正常な皮膚常在微生物叢全体が改善又は維持される限り、本発明のタンパク質又はそれを含む組成物によって刺激され得る健康で正常な皮膚常在微生物叢の特定の構成成分に関して、特に限定されない。その好ましい実施形態によれば、生育が刺激される健康で正常な皮膚常在微生物叢の構成成分は、ブドウ球菌属に属する健康で正常な皮膚常在微生物叢を含み、より好ましくは表皮ブドウ球菌の生育が刺激される。
【０１６５】
概して、多数の異なる微生物が皮膚に存在する。いくつかは皮膚の正常（常在）細菌叢に属し、いくつかは無害の共生生物であり、いくつかは病原菌である可能性がある。
【０１６６】
具体的には、皮膚上の生物は２つのカテゴリーに分類することが可能である。
【０１６７】
１．常在性生物：常在性生物は、皮膚の表面上、角質層上、表皮の外層内部、並びに皮膚及び毛包の深い割れ目の中に定着した、永続的に皮膚に生息するものである。このような皮膚常在微生物叢の微生物は、皮膚組織に侵入することも、皮膚組織を損傷することもなく、皮膚上で生育し増殖することができる。皮膚の深い領域ではこれらの生物は洗浄によって容易には除去されない。常在性微生物は無害の共生生物である。
【０１６８】
２.一過性生物：一過性生物は、皮膚に付着しているがそこでは増殖しない微生物、又は皮膚で増殖し短期間存続する汚染菌である。これらは、健康な皮膚（その微小環境は常在微生物叢によってほぼ決まっている）に永続的に定着することは不可能である。一過性生物は病原性を有する可能性がある。
【０１６９】
このように、用語「皮膚常在微生物叢」は、通常、健康な皮膚に、好ましくはヒトの皮膚で見つけられる微生物であり、かつ皮膚で見つけられる微生物の大部分を構成する微生物に関する。特に、用語「皮膚常在微生物叢」は、皮膚の表面上、角質層上、表皮の外層内部、並びに皮膚及び毛包の深い割れ目の中に永続的に生息する微生物に関する。このような微生物は、皮膚組織に侵入することなく、それを損傷することもなしに、皮膚上で生育し増殖することができるという特徴を有する。これらの微生物の一つの特徴は、皮膚の比較的深い領域では、微生物は洗浄によって容易に除去されないことである。皮膚常在微生物叢の微生物は無害の共生生物である。
【０１７０】
より具体的には、用語「皮膚常在微生物叢」は、好ましくは、皮膚、好ましくはヒトの皮膚上で見つけることができる好気性及び嫌気性微生物叢に関する。より好ましくは、前記用語は、表皮ブドウ球菌（コアグラーゼ陰性）、ミクロコッカス属菌、ジフテロイド、及びプロピオニバクテリウム属菌を含む微生物叢に関する。典型的には、好気性の皮膚常在微生物叢の約９０％は、表皮ブドウ球菌で占められている。残りの約１０％は主に、ミクロコッカス属菌（８０％ミクロコッカス・ルテウス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｌｕｔｅｕｓ））、及びジフテロイド（１３％）からなる。用語「ジフテロイド」は、コリネバクテリウム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属に属する広範な細菌を指す。便宜上、皮膚ジフテロイドは次の４群に分類される：親油性又は非親油性ジフテロイド；嫌気性ジフテロイド；ポルフィリン産生ジフテロイド。嫌気性の皮膚微生物叢のうち大多数の代表的な菌（９０％）は、プロピオニバクテリウム属菌である；特にＰｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｃｎｅｓ、Ｐ．ｇｒａｎｕｌｏｓｕｍ、及びＰ．ａｖｉｄｕｍを皮膚から分離することが可能である。嫌気性細菌叢は、皮膚常在菌叢全体の約４％を占める。
【０１７１】
より好ましくは、微生物叢の微生物の９０％より多くが、表皮ブドウ球菌、ミクロコッカス属菌、ジフテロイド、及びプロピオニバクテリウム属菌に属する。さらにより好ましくは、健康な皮膚常在微生物叢は、その主成分が表皮ブドウ球菌であるという特徴を有する。
【０１７２】
皮膚常在微生物叢の微生物の生育に関わる用語「刺激」は、１以上のこれらの微生物の生育が、本発明のペプチド又は組成物と接触したときに増加することを意味する。生育の増加は、好ましくは増殖、すなわち単位時間当たりの細胞分裂の増加を意味する。あるいは、用語「刺激」は、個々の細胞の大きさの増加も指す。細菌細胞の大きさは、ＳＹＢＲ  Ｇｒｅｅｎ  Ｉ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ、ＵＳＡ）色素で染色後、フローサイトメトリー（例えば、Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ  ＦＡＣＳｏｒｔ  ｆｌｏｗ  ｃｙｔｏｍｅｔｅｒ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）によって評価することが可能である。細菌細胞の大きさは、Ｓｉｄｅ−Ａｎｇｌｅ  Ｌｉｇｈｔ  Ｓｃａｔｔｅｒ（ＳＳＣ）法で評価される。このように、本発明の意義の範囲内において、生育の増加は、好ましくは単位時間当たりのバイオマス生産量の増加を意味する。
【０１７３】
皮膚常在微生物叢の微生物の生育の刺激は、当技術分野で周知のあらゆる適した手段によって決定することができ、刺激は好ましくは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで、より好ましくは、本発明のペプチド又は組成物を皮膚常在微生物叢の１以上の微生物と接触させて、皮膚常在微生物叢のそうした微生物の生育を測定するアッセイで観察される。生育は、様々な時間間隔のインキュベーションの後に、細胞／コロニー数を計数することによって測定することができ、それを、本発明の微生物を含有しない対照と比較することによって、生育増加が存在するかどうかを決定することができる。生育の測定は、細胞数および／またはコロニー数を測定する利用可能な手段及び方法、例を挙げると、適当な色素による染色及び／又は光学的手段、例えば、デンシトメトリー及び顕微鏡下での細胞／コロニー数の計数によって実施することができる。
【０１７４】
好ましくは、皮膚常在微生物叢の微生物の生育刺激は、ｉｎ  ｓｉｔｕ皮膚アッセイを用いて観察することができる。例として、ｉｎ  ｓｉｔｕ皮膚アッセイは下記の工程を含むことが考えられる：皮膚常在微生物叢の少なくとも1つの微生物を培養し、被験個体の皮膚の一定領域にそれを均一に薄く塗る；この皮膚常在微生物叢の微生物を塗布した領域中の一定の領域に本発明ペプチド又は組成物の一定量を塗布する；皮膚常在微生物叢の微生物の生育を可能にするのに十分な期間、皮膚をインキュベートする；皮膚の上層を、それに含まれる微生物を含めて、適当な生育培地を含有する寒天プレートに移す；この寒天プレートを一定期間、皮膚常在微生物叢の微生物の生育を可能にする条件下でインキュベートする；本発明のペプチド又は組成物を塗布した領域の周囲の皮膚常在微生物叢の微生物の生育を測定し、それを本発明のペプチドを塗布していない対照の微生物の生育と比較する。
【０１７５】
上記アッセイに使用する皮膚の領域は、個体、好ましくはヒト個体の皮膚の任意の適当な領域とすることができる。好ましい実施形態では、それは、ヒト個体の前腕皮膚の領域である。試験に使用される皮膚の領域の広さは、好ましくは、１〜４０ｃｍ２、より好ましくは５〜２０ｃｍ２、さらにより好ましくは５〜１０ｃｍ２の範囲である。
【０１７６】
ｉｎ  ｓｉｔｕ皮膚アッセイを実施する例示的モードによれば、皮膚常在微生物叢の微生物を、その領域に均一に、好ましくは約１０２ｃｆｕ／ｃｍ２−１０３ｃｆｕ／ｃｍ２の密度で分布する。皮膚に塗り広げた微生物を自然乾燥させ、本発明のペプチド又は組成物の一定量をその領域内に正確に塗布する。これは、当業者に周知の手段によって達成することが可能である。
【０１７７】
その後の皮膚のインキュベーションは、好ましくは例えば２時間の間、室温で行われる。皮膚に含まれる微生物を含めた皮膚の上層の移動は、例えば粘着テープ片を用いて行うことができる。皮膚の上層を移した寒天プレートを、テストすべき皮膚常在微生物叢又は微生物の生育を可能にする温度でインキュベートし、このプレートは前記微生物の生育を維持することが知られている生育培地を含有する。インキュベーションは、一般的には約２４時間行う。微生物の生育は当業者に周知の方法によって検出することができる。好ましくは、デンシトメトリーによって、又は本発明のペプチド又は組成物の一定量を塗布したポイントの近傍に形成されたコロニーを計数することによって測定される。細菌細胞の大きさは、ＳＹＢＲ  Ｇｒｅｅｎ  Ｉ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ、ＵＳＡ）色素で染色後、フローサイトメトリー（例えば、Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ  ＦＡＣＳｏｒｔ  ｆｌｏｗ  ｃｙｔｏｍｅｔｅｒ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）によって評価することが可能である。細菌細胞の大きさは、Ｓｉｄｅ−Ａｎｇｌｅ  Ｌｉｇｈｔ  Ｓｃａｔｔｅｒ（ＳＳＣ）法で評価される。
【０１７８】
本発明によれば、発明のペプチド又はそれを含む組成物が、ｉｎ  ｖｉｔｒｏホールプレートアッセイにおいて、本発明のペプチド又はそれを含む組成物を加えなかった対照と比較して、少なくとも５％、好ましくは少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、又は７０％、より好ましくは少なくとも７５％、より好ましくは少なくとも８０％、さらにより好ましくは少なくとも８５％の、皮膚常在微生物叢の少なくとも１つの微生物の生育の増加をもたらすならば、好ましくは、発明のペプチド又はそれを含む組成物は、皮膚常在微生物叢の1以上の微生物の生育を刺激すると見なされる。より好ましくは、本発明のペプチド又はそれを含む組成物が、ｉｎ  ｓｉｔｕ皮膚アッセイにおいて、少なくとも５％、好ましくは少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、又は７０％、より好ましくは少なくとも７５％、さらにより好ましくは少なくとも８０％、さらに最も好ましくは少なくとも８５％の、皮膚常在微生物叢の少なくとも１つの微生物の生育の増加をもたらすならば、本発明のペプチド又はそれを含む組成物は、皮膚常在微生物叢の１以上の微生物の生育を刺激すると見なされる。
【０１７９】
本発明の好ましい実施形態によれば、表皮ブドウ球菌の生育の刺激に加えて、本発明のペプチド又は組成物は、ミクロコッカス属菌、好ましくはミクロコッカス・ルテウスの生育も刺激する。さらに好ましい実施形態では、ジフテロイド、好ましくはコリネバクテリウム属に属する細菌の生育も生育する。特定の好ましい実施形態では、本発明のペプチドは、皮膚常在微生物叢の微生物の大多数、好ましくは健康で正常な皮膚常在微生物叢の集団の６０％以上、より好ましくは７０％以上、より好ましくは８０％以上、より好ましくは９０％以上、さらにより好ましくは９５％以上の生育を刺激する。
【０１８０】
さらに、健康で正常な皮膚常在微生物叢の生育を刺激するための本発明のペプチド又は組成物の使用に関する、本発明の実施形態及び好ましい実施形態によれば、さらに好ましくは、前記使用により一過性の病原性微生物の生育をさらに刺激しない。一般に、健康で正常な皮膚常在微生物叢全体が改善又は維持される限り、本発明のペプチド又は組成物の使用によって生育がさらに刺激されない、一過性の病原性微生物の特定の種類について、特に限定されない。しかしながら、生育がさらに刺激されない一過性の病原性微生物は黄色ブドウ球菌を含むことが好ましい。本発明の意義の範囲内において、本発明のペプチド又は組成物を含まない対照サンプルと比較したとき、その生育の刺激が検出されない場合、微生物の生育は、本発明のペプチド又は組成物によって刺激されていない。
【０１８１】
したがって、本発明は、健康で正常な皮膚常在微生物叢の生育を刺激するための、好ましくはブドウ球菌属に属する健康で正常な皮膚常在微生物叢の生育を刺激するための、より好ましくは表皮ブドウ球菌の生育を刺激するための、さらにより好ましくは、一過性の病原性微生物、特に黄色ブドウ球菌の生育を刺激することなく、表皮ブドウ球菌の生育を刺激するための、本発明のペプチド又はそれを含む本発明の組成物の使用にさらに関連する。
【０１８２】
本発明のまたさらなる実施形態によれば、本発明のペプチド又はそれを含む組成物は、一過性の病原性皮膚微生物叢の生育を阻害するために使用される。
【０１８３】
本発明の意義の範囲内において、本発明のペプチド又はそれを含む組成物が、一過性の病原性皮膚微生物叢の微生物と接触したときに、そのような微生物の生育の減少をもたらすならば、本発明のペプチド又はそれを含む組成物は、一過性の病原性皮膚微生物叢の微生物の生育を阻害すると見なされる。用語「一過性の病原性皮膚微生物叢の微生物の生育を阻害する」は、好ましくは、本発明のペプチド又は組成物が、少なくとも１つ、好ましくは２以上、好ましくは３以上、より好ましくは６以上、特に好ましくは任意の数の一過性の病原性細菌叢の微生物の生育を減少させることを意味する。さらなる好ましい実施形態では、本発明のペプチド又は組成物は、一過性の病原性皮膚微生物叢の大多数の代表的な菌、すなわち黄色ブドウ球菌の生育を阻害する。さらなる好ましい実施形態では、本発明のペプチドは、黄色ブドウ球菌の生育を特異的に阻害する。「特異的に」は、好ましくは、本発明のペプチドは黄色ブドウ球菌の生育を阻害するが、その他の微生物、特に皮膚常在微生物叢に属するこれらの微生物の生育を、著しく阻害しない、又は僅かな程度にのみ阻害することを意味する。より好ましくは、用語「特異的に」は、ブドウ球菌の阻害の程度が、他の微生物、特に皮膚常在微生物叢の微生物の阻害の程度よりもはるかに高いことを意味する。特に好ましくは、用語「特異的に」は、当業者に周知の適当な生育アッセイにおいて、本発明のペプチド又は組成物の存在下での黄色ブドウ球菌の増殖が、本発明のペプチド又は組成物の存在下での、別の微生物、特に皮膚常在微生物叢の別の微生物の増殖の、せいぜい５０％であることを意味する。好ましくは、黄色ブドウ球菌の増殖は、本発明のペプチド又は組成物の存在下で、別の微生物、特に皮膚常在微生物叢の別の微生物の増殖の、４０％以下、３０％以下、２０％以下、１０％以下、より好ましくは５％以下、そして最も好ましくは１％以下である。好ましい実施形態では、本発明のペプチド又は組成物は、黄色ブドウ球菌の生育を阻害するが、ミクロコッカス・ルテウス及び／又は大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）の生育を阻害しない。特に好ましい実施形態によれば、グリセロールを含有する培養条件を用いる場合に、黄色ブドウ球菌の特異的阻害を検出することが可能である。
【０１８４】
さらに、生育の減少は、好ましくは、増殖の減少、すなわち単位時間当たりの細胞分裂の減少を意味する。あるいは、用語「阻害する」は、好ましくは個々の細胞サイズの減少を指す。細菌細胞の大きさは、ＳＹＢＲ  Ｇｒｅｅｎ  Ｉ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ、ＵＳＡ）色素で染色後、フローサイトメトリー（例えば、Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ  ＦＡＣＳｏｒｔ  ｆｌｏｗ  ｃｙｔｏｍｅｔｅｒ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）によって評価することが可能である。細菌細胞の大きさは、Ｓｉｄｅ−Ａｎｇｌｅ  Ｌｉｇｈｔ  Ｓｃａｔｔｅｒ（ＳＳＣ）法で評価される。したがって、生育の減少は、単位時間当たりのバイオマス生産量の減少を意味する。
【０１８５】
一過性の病原性皮膚微生物叢の微生物の生育の刺激は、当技術分野で周知の任意の適した手段により決定することが可能であり、刺激は、好ましくはｉｎ  ｖｉｔｒｏで、より好ましくは本発明のペプチド又は組成物を一過性の病原性皮膚微生物叢の１以上の微生物と接触させて、一過性の病原性皮膚微生物叢のこれらの微生物の生育を測定するアッセイで観察される。
生育は、様々な時間間隔のインキュベーションの後に、細胞／コロニー数を計数することによって測定可能であり、それを、本発明のペプチド又は組成物を含有しない対照と比較することによって、生育の増加又は減少が存在するかどうかを決定することができる。より好ましくは、一過性の病原性皮膚微生物叢の微生物の生育阻害は、「ｉｎ  ｖｉｔｒｏ液体アッセイ」で測定することが可能である。例としては、このようなアッセイは下記の実施例２及び３に記載されている。
【０１８６】
さらにより好ましくは、一過性の病原性皮膚微生物叢の微生物の生育阻害は、「ｉｎ  ｓｉｔｕ皮膚アッセイ」でも観察することができる。特に、前記アッセイは、皮膚常在微生物叢の微生物の生育の刺激を監視することに関する前記に記載の「ｉｎ  ｓｉｔｕ皮膚アッセイ」に相当するが、これは皮膚の上層を移した寒天プレートを、テストすべき一過性の病原性皮膚微生物叢又は微生物の生育を可能にする温度でインキュベートし、このプレートは前記微生物の生育を維持することが知られている生育培地を含有することが異なる。
【０１８７】
本発明によれば、発明のペプチド又はそれを含む組成物が、「ｉｎ  ｖｉｔｒｏホールプレートアッセイ」において、本発明のペプチド又はそれを含む組成物を加えなかった対照と比較して、少なくとも５％、好ましくは少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、又は７０％、８０％、より好ましくは少なくとも９０％、より好ましくは少なくとも９５％、さらにより好ましくは少なくとも９９％の、一過性の病原性微生物叢の少なくとも１つの微生物の生育の減少をもたらすならば、発明のペプチド又はそれを含む組成物は、好ましくは一過性の病原性微生物叢の1以上の微生物の生育を阻害すると見なされる。より好ましくは、発明のペプチド又はそれを含む組成物が、「ｉｎ  ｖｉｔｒｏ液体アッセイ」において、対照と比較して、少なくとも５％、好ましくは少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、又は７０％、８０％、より好ましくは少なくとも９０％、より好ましくは少なくとも９５％、さらにより好ましくは少なくとも９９％の、一過性の病原性微生物叢の少なくとも１つの微生物の生育の減少をもたらすならば、発明のペプチド又はそれを含む組成物は、一過性の病原性微生物叢の1以上の微生物の生育を阻害すると見なされる。さらにより好ましくは、本発明のペプチド又は組成物が、ｉｎ  ｓｉｔｕ皮膚アッセイにおいて、少なくとも５％、好ましくは少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、又は７０％、８０％、より好ましくは少なくとも９０％、より好ましくは少なくとも９５％、さらにより好ましくは少なくとも９９％の、一過性の病原性皮膚微生物叢の少なくとも１つの微生物の生育の減少をもたらすならば、本発明のペプチド又は組成物は、一過性の病原性皮膚微生物叢の１以上の微生物の生育を阻害すると見なされる。
【０１８８】
さらに、一過性の病原性皮膚微生物叢の生育を阻害するための本発明のペプチド又は組成物を使用に関する、本発明の実施形態及び好ましい実施形態によれば、さらに好ましくは、前記使用はまた、有益な、特に皮膚に有益な微生物の生育を阻害せず、特に健康で正常な皮膚常在微生物叢の生育を阻害しない。一般に、本発明のペプチド又は組成物の使用により生育が同様に阻害されない有益な微生物の特定の種類に関しては、特に限定されない。
【０１８９】
有益な微生物、特に皮膚常在微生物叢の微生物の生育に関連する用語「阻害しない」は、好ましくは皮膚常在微生物叢に属する前記有益な微生物のうち、少なくとも１つ、好ましくは２以上、好ましくは３以上、より好ましくは６以上、特に好ましくは任意の数の微生物の生育が、本発明のペプチド又は組成物と接触したときに変化しないことを意味する。生育が変化しないことは、好ましくは、増殖、すなわち単位時間当たりの細胞分裂が不変であることを意味する。本発明のペプチド又は組成物が、皮膚常在微生物叢の微生物と接触したときに、そのような微生物の生育低下をもたらさないならば、本発明のペプチド又は組成物は、皮膚常在微生物叢の微生物の生育を変化させないと見なされる。生育阻害、又は阻害の欠如は、本発明のペプチド又は組成物が一過性の病原性皮膚微生物叢の少なくとも１つの微生物の生育を阻害する性質に関連した上記に記載のｉｎ  ｖｉｔｒｏ又はｉｎ  ｓｉｔｕで、テストすることができる。最も好ましくは、阻害、又は阻害の欠如を判断するテストは、本明細書において説明されるように、好ましくは皮膚常在微生物叢の微生物を用いて、「ｉｎ  ｖｉｔｒｏホールプレートアッセイ」及び／又は「ｉｎ  ｖｉｔｒｏ液体アッセイ」及び／又は「ｉｎ  ｓｉｔｕ皮膚アッセイ」を実施することにより行われる。
【０１９０】
あるいは、好ましくは皮膚常在微生物叢に属する有益な微生物の生育が、本発明のペプチド又は組成物と接触したときに、減少しない、又はわずかしか減少しないならば、本発明のペプチド又は組成物は、そのような有益な微生物の生育を変化させないと見なされる。「わずかに減少する」は、好ましくは、生育の減少が、対照と比較して５％以下、より好ましくは、対照と比較して２％以下であることを意味する。用語「減少しない」は、本発明のペプチド又は組成物が存在しない対照と比較したときに、本発明のペプチド又は組成物と接触した皮膚常在微生物叢の微生物の生育に、統計的に関連性のある相違が認められないことを意味する。好ましい実施形態において、用語「減少しない」は、あるペプチドが実際には皮膚常在微生物叢の微生物の生育の増加をもたらす場合、すなわちこれらの微生物の生育を刺激する場合も包含する。
【０１９１】
特定の好ましい実施形態によれば、生育がさらに阻害されない有益な微生物は、健康で正常な皮膚常在微生物叢を構成する１以上の微生物を含み、前記１以上の微生物は好ましくは表皮ブドウ球菌を含む。
【０１９２】
したがって、本発明は、一過性の病原性皮膚微生物叢の生育を阻害するための、好ましくはブドウ球菌属に属する一過性の病原性皮膚微生物叢の生育を阻害するための、より好ましくは、特に黄色ブドウ球菌の生育を阻害するための、さらにより好ましくは、有益な微生物、特に表皮ブドウ球菌の生育を阻害することなく、黄色ブドウ球菌の生育を阻害するための、本発明のペプチド又はそれを含む本発明の組成物の使用にさらに関する。
【０１９３】
本明細書の以下に記載の通り、本発明を図面及び実施例により例示する。
【実施例１】
【０１９４】
ｉｎ−ｖｉｔｒｏホールプレートアッセイにおいて、寒天プレート上で表皮ブドウ球菌の生育を刺激することができる、テトラペプチドＨ−Ｌｙｓ（Ｈ−Ａｓｐ−ＮＨ２）−Ａｌａ−Ｇｌｕ−ＮＨ２を見出した。上記効果を調べるため、アッセイにおいて褐色領域として観察されるテルル酸カリウムを生育指標として用いて、表皮ブドウ球菌の生育刺激アッセイを行った。１：２００（約１×１０７ｃｆｕ／ｍｌの細菌を含む）の表皮ブドウ球菌の対数期培養物を、本実験において作業用培養物として使用した。
【０１９５】
作業用培養物を亜テルル酸塩−ＴＳＡ上に塗抹し、その後、寒天に５ｍｍの直径の穴をそれぞれ開けて試験ウェルを形成した。その後、１ｍｇ／ｍｌの濃度のテトラペプチドを含む４０μｌの溶液を第１及び第２ウェルに添加し、同量の水を対照として第３ウェルに添加した。その後、ペトリ皿を３５℃で２４時間インキュベートした。
【０１９６】
アッセイの結果を図１及び２に表す。それはテトラペプチドで処理した表皮ブドウ球菌培養物（図１ａ及び１ｂ）、及び水を用いた対照アッセイ（図１ｃ）をそれぞれ示している。特に、本発明のテトラペプチドを含むアッセイから明らかなように、表皮ブドウ球菌の生育は明らかに刺激されている。
【実施例２】
【０１９７】
各２００μｌの容積のウェルを有するマイクロタイタープレートを、表皮ブドウ球菌ｉｎ  ｖｉｔｒｏ液体アッセイに使用した。上記効果を調べるため、表皮ブドウ球菌の２４時間細胞培養物を１：２００に希釈して、ＳＣＤ−ブイヨン（１：２）中で、０．０６の光学密度ＯＤ６００ｎｍを得た。本実施例において使用される試料には、１ｍｇ／ｍｌ及び０．２ｍｇ／ｍｌの各濃度の本発明のテトラペプチドＨ−Ｌｙｓ（Ｈ−Ａｓｐ−ＮＨ２）−Ａｌａ−Ｇｌｕ−ＮＨ２がさらに含まれた。対照アッセイとして、表皮ブドウ球菌の他に、１ｍｇ／ｍｌのアラニン、グルタミン、リジン、及びアスパラギンを均等に含有する混合物を含む試料、及び追加の成分を含まない試料をそれぞれ使用した。全試料のｐＨは６．５であった。
【０１９８】
バイオアッセイの結果を図２ａ及び２ｂに示す。特に、図２ａから分かるように、本発明のテトラペプチドを含む試料（ラインＢ及びＣを参照のこと）は、添加物を含まない対照試料（ラインＡを参照のこと）と比較して、表皮ブドウ球菌の生育を明らかに刺激しており、刺激は０．２ｍｇ／ｍｌの濃度（ラインＢを参照のこと）ですでに明らかである。特に、４個のアミノ酸混合物を含む表皮ブドウ球菌の試料（ラインＢを参照のこと）に対する図２ｂに示される結果から分かるように、該試料からは、本発明のテトラペプチドの構成アミノ酸残基と同様の効果は観察され得ず、前記試料は添加物を含まない対照試料（ラインＡを参照のこと）と同程度の表皮ブドウ球菌集団の進行を示している。
【実施例３】
【０１９９】
黄色ブドウ球菌のｉｎ  ｖｉｔｒｏ液体アッセイを、各２００μｌの容積のウェルを有するマイクロタイタープレート上で実施した。上記効果を調べるため、黄色ブドウ球菌の２４時間細胞培養物を１：５００に希釈して、ＳＣＤ−ブイヨン（１：２）中で、０．０５の光学密度ＯＤ６００ｎｍを得た。本実施例において使用される試料の１つには、１ｍｇ／ｍｌの濃度の本発明のテトラペプチドＨ−Ｌｙｓ（Ｈ−Ａｓｐ−ＮＨ２）−Ａｌａ−Ｇｌｕ−ＮＨ２がさらに含まれた。試料のｐＨは６．５であった。
【０２００】
実施例３のバイオアッセイの結果を図３に示す。黄色ブドウ球菌の生育は、添加物を含まない対照試料（ラインＡを参照のこと）と比較して、本発明のテトラペプチドを含む試料（ラインＢを参照のこと）において明らかに阻害された。
【実施例４】
【０２０１】
正常ヒト表皮角化細胞（ＮＨＥＫ）の単層培養物を４８時間培養した。この４８時間は、本発明のペプチドを産生するラクトバチルスＤＳＭ１７２５０（２００μｇ／ｍｌ）を用いた、又は用いない、２４時間の前処理に続いて２４時間の処理から構成された。
【０２０２】
インキュベーションの最後に、本発明のペプチドを産生するラクトバチルスの炎症性サイトカインＩＬ−１αの分泌に対する効果を、市販のＥＬＩＳＡキットを用いて定量することにより評価した。
【０２０３】
異なる培養条件を表１にまとめる。
【０２０４】
【表１】
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表１：培養プロトコル及び特性評価；ＬＰＳ：リポ多糖類
【０２０５】
バイオアッセイにおけるＩＬ−１αの測定の結果を図４に示す。未処理のケラチノサイトは炎症性ＩＬ−１αを分泌せず（１、陰性対照）、一方で、ＬＰＳで処理したケラチノサイトは大量のＩＬ−１αを分泌する（３、陽性対照）ことが結果から結論付けられる。
【０２０６】
ラクトバチルスＤＳＭ１７２５０で前処理した細胞はＩＬ−１αを分泌しない。したがって、ラクトバチルスは炎症誘発作用を有さないことが結論付けられる（２）。
【０２０７】
ラクトバチルスＤＳＭ１７２５０で前処理したものはＬＰＳで処理した後に、ＩＬ−１αの産生を劇的に減少する（４）。したがって、ラクトバチルスＤＳＭ１７２５０の予防的抗炎症作用が結論付けられる。
【０２０８】
ラクトバチルスで処理する前に、前処理としてラクトバチルスＤＳＭ１７２５０をＬＰＳに添加することにより、ＬＰＳの炎症作用が減少する。したがって、ラクトバチルスによる保護的抗炎症作用も結論付けられる（５）。
【図１ａ】
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【図１ｂ】
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【図１ｃ】
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【図２ａ】
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【図２ｂ】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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