(57)【要約】本開示は、細菌性膣炎に罹患する、および／またはそれを診断された個人の治療に向けての治療アプローチとしての膣内適用を含む、多様な目的に有用なメトロニダゾールの粘膜接着性水系ゲル製剤を提供する。一態様において、本開示は、特にＢＶを治療するために女性に局所的に、特に膣内に適用され得る、新規の「高用量」粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを提供する。本明細書に記載される高用量ＭＴＺゲルを調製するために有用な新規の溶媒系も提供される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＢＶに罹患する、および／またはＢＶと診断された対象を治療する方法であって、１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマーと、約１重量％〜約２重量％のメトロニダゾール（ＭＴＺ）と、水とを含む粘膜接着性水系ゲルを前記対象に膣内適用することを含み、単一適用において適用される前記粘膜接着性水系ゲルの量は、約６０ｍｇ〜約１００ｍｇのＭＴＺを含有する、方法。
【請求項２】
ヒト死体の皮膚を用いて行われたインビトロフランツセル皮膚透過実験において、角質層および受容液内で測定された前記粘膜接着性水系ゲルからのＭＴＺのレベルが、濃度について正規化されるとき、ＭＥＴＲＯＧＥＬ  ＶＡＧＩＮＡＬ（登録商標）から測定された前記ＭＴＺレベルより、それぞれ少なくとも約２５〜５５倍高く、少なくとも約１〜２０倍低い、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記粘膜接着性水系ゲルが、制御されたせん断速度法、Ｂｏｈｌｉｎ  ＣＶＯ１００レオメータ、および表１１の前記レオメータ設定を使用して２５℃で測定された約２００，０００ｍＰａ〜約４００，０００ｍＰａの範囲の粘度を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記粘膜接着性水系ゲルが、ＭＧ３３ＰＢのものの約±１０％内の範囲の粘膜接着の程度を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記粘膜接着性水系ゲルが、約３０重量％〜約６０重量％の水を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記粘膜接着性水系ゲルが、デキストリン、シクロデキストリン、ナイアシン、およびナイアシンアミド、ならびに随意に界面活性剤も実質的に含まない、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記粘膜接着性水系ゲルが、少なくとも６ヶ月の期間、２５℃で安定している、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記粘膜接着性水系ゲルが、約１重量％〜約３重量％の総粘膜接着性ゲル化ポリマー、および約４０〜４５重量％の前記ＭＴＺの溶媒系を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記溶媒系が、２５℃で少なくとも約２０ｍｇ／ｇの飽和ＭＴＺ溶解度を有する１つ以上の溶媒を含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記溶媒系が、２５℃で少なくとも約５０ｍｇ／ｇの飽和ＭＴＺ溶解度を有する１つ以上の溶媒、および随意に２５℃で約２０ｍｇ／ｇ〜約２５ｍｇ／ｇの範囲の飽和ＭＴＺ溶解度を有する１つ以上の溶媒を含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記溶媒系が、１つ以上の低級芳香族アルコール、ならびに随意に１つ以上の低級脂肪族ジオールおよび／または約２００〜約４００の範囲の分子量を有する１つ以上のポリオキシアルキレン（「低級ポリオキシアルキレン」）を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記溶媒系が、１つ以上の低級芳香族アルコール、１つ以上の低級脂肪族ジオール、および／または１つ以上の低級ポリオキシアルキレンを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記溶媒系が、１つ以上の低級芳香族アルコール、１つ以上の低級脂肪族ジオール、および１つ以上の低級ポリオキシアルキレンを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記１つ以上の低級芳香族アルコールが、ベンジルアルコール、２−メチルベンジルアルコール、フェノキシエタノール、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
前記１つ以上の低級アルキレンジオールが、エタン−１，２−ジオール（エチレングリコール）、プロパン−１，２−ジオール（プロピレングリコール）、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１６】
前記１つ以上の低級ポリオキシアルキレンが、ポリオキシエチレン（ポリエチレングリコール）、ポリオキシプロピレン（ポリプロピレングリコール）、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１７】
１つ以上の低級脂肪族ジオール、および前記１つ以上の低級ポリオキシアルキレンが、約１：１〜約１：２の範囲の総低級脂肪族ジオール：総低級ポリオキシアルキレン重量比で前記溶媒系に含まれる、請求項１１に記載の方法。
【請求項１８】
前記溶媒系が、約３．５重量％〜約５重量％の総低級芳香族アルコール、および約９５重量％〜約９５．５重量％の前記１つ以上の低級アルキレンジオールと前記１つ以上の低級ポリオキシアルキレンとの混合物を含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１９】
総低級アルキレンジオール：総低級ポリオキシアルキレンの前記重量比が、約１：１〜約１：１．６７の範囲である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記溶媒系が、ベンジルアルコール、プロパン−１，２−ジオール、およびＰＥＧ  ４００からなる、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記溶媒系が、約３．５重量％〜約５重量％のベンジルアルコール、および約９５重量％〜約９６．５重量％のプロパン−１，２−ジオールとＰＥＧ  ４００との混合物からなり、前記プロパン−１，２−ジオール：ＰＥＧ  ４００の前記重量比が、約１：１〜約１：１．６７の範囲である、請求項１１に記載の方法。
【請求項２２】
前記粘膜接着性水系ゲルが、１つ以上の保存剤をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２３】
前記１つ以上の保存剤が、４−ヒドロキシ安息香酸のエステルである、請求項１に記載の方法。
【請求項２４】
前記１つ以上の保存剤が、メチル４−ヒドロキシベンゾエート、プロピル４−ヒドロキシベンゾエート、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記粘膜接着性水系ゲルが、約ｐＨ３．０〜約ｐＨ５．０の範囲のｐＨを有する、請求項１に記載の方法。
【請求項２６】
前記粘膜接着性水系ゲルが、約ｐＨ４．０のｐＨを有する、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマーが、ヒドロキシエチルセルロース、カルボマー、ポリカルボフィル、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項２８】
単一適用で適用される前記量の粘膜接着性水系ゲルが、約６５ｍｇのＭＴＺを含有する、請求項１に記載の方法。
【請求項２９】
前記粘膜接着性水系ゲルが、約１重量％〜約１．５重量％のＭＴＺを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３０】
前記粘膜接着性水系ゲルが、１日１回、１〜５日の期間適用される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記粘膜接着性水系ゲルが、１日１回、１日の期間適用される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】
前記粘膜接着性水系ゲルが、１日１回、５日の期間適用される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３３】
前記粘膜接着性水系ゲルが、約１．３重量％のＭＴＺを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３４】
前記粘膜接着性水性ゲルが、１日１回、１〜５日の期間適用される、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記粘膜接着性水系ゲルが、１日１回、１日の期間適用される、請求項３３に記載の方法。
【請求項３６】
前記粘膜接着性水性ゲルが、１日１回、５日の期間適用される、請求項３３に記載の方法。
【請求項３７】
前記粘膜接着性水系ゲルが、約１．３重量％のＭＴＺ、約２重量％のポリカルボフィルＡＡ−１、約２重量％のベンジルアルコール、約１５重量％のプロパン−１，２−ジオール、約２５重量％のＰＥＧ４００、約０．０２重量％のメチル４−ヒドロキシベンゾエート、および約０．０８重量％のプロピル４−ヒドロキシベンゾエートを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３８】
前記粘膜接着性水系ゲルが、１日１回、１〜５日の期間適用される、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記粘膜接着性水系ゲルが、１日１回、１日の期間適用される、請求項３７に記載の方法。
【請求項４０】
前記粘膜接着性水系ゲルが、１日１回、５日の期間適用される、請求項３７に記載の方法。
【請求項４１】
単一適用で適用される前記量の粘膜接着性水系ゲルが、約６５ｍｇのＭＴＺを含有する、請求項３７に記載の方法。
【請求項４２】
ＢＶに罹患する、および／またはそれを診断された対象を治療する方法であって、臨床的治癒を達成するために十分な適用回数、ある量の水系ゲルを前記対象に膣内適用することを含み、前記水系ゲルが、１つ以上の粘膜接着性ポリマー、約１．３重量％のＭＴＺ、および水を含み、
（ａ）ヒト死体の皮膚を用いて行われたインビトロフランツセル皮膚透過実験において、角質層および受容液内で測定された前記粘膜接着性水系ゲルからのＭＴＺのレベルが、濃度について正規化されるとき、ＭＥＴＲＯＧＥＬ  ＶＡＧＩＮＡＬ（登録商標）から測定された前記ＭＴＺレベルより、それぞれ少なくとも約２５〜５５倍高く、少なくとも約１〜２０倍低い、
（ｂ）制御されたせん断速度法、Ｂｏｈｌｉｎ  ＣＶＯ１００レオメータ、および表１１の前記レオメータ設定を使用して２５℃で測定された約２００，０００ｍＰａ〜約４００，０００ｍＰａの範囲の粘度、
（ｃ）ＭＧ３３ＰＢのものの約±１０％内の範囲の粘膜接着の程度、
（ｄ）約３０重量％〜約６０重量％の水を含む、
（ｅ）デキストリン、シクロデキストリン、ナイアシン、およびナイシンアミド、ならびに随意に界面活性剤も実質的に含まない、
（ｆ）２５℃で少なくとも６ヶ月の期間安定している、
（ｇ）約１重量％〜約３重量％の総粘膜接着性ポリマー、および約４０重量％〜４５重量％の前記ＭＴＺの溶媒系を含む、
の群から選択される１つ以上の特徴または特性を有する、方法。
【請求項４３】
ある量の前記水系ゲルが、治療的治癒を達成するために十分な適用回数適用される、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
約１重量％〜約２重量％のＭＴＺ、約１重量％〜約３重量％の１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマー、約３０重量％〜約６０重量％の前記ＭＴＺの溶媒系、および水を含む、粘膜接着性水系ゲルであって、ヒト死体の皮膚を用いて行われたインビトロフランツセル皮膚透過実験において、角質層および受容液内で測定された前記粘膜接着性水系ゲルからのＭＴＺの前記レベルが、濃度について正規化されるとき、ＭＥＴＲＯＧＥＬ  ＶＡＧＩＮＡＬ（登録商標）から測定される前記ＭＴＺレベルより、それぞれ少なくとも約２５〜５５倍高く、少なくとも約１〜２０倍低い、粘膜接着性水系ゲル。
【請求項４５】
約１重量％〜約２重量％のＭＴＺ、約１重量％〜約３重量％の１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマー、約３０重量％〜約６０重量％の前記ＭＴＺの溶媒系、および水を含み、前記制御されたせん断速度法、Ｂｏｈｌｉｎ  ＣＶＯ１００レオメータ、および表１１の前記レオメータ設定を使用して、２５℃で測定された約２００，０００ｍＰａ〜約４００，０００ｍＰａの範囲の粘度を有する、粘膜接着性水系ゲル。
【請求項４６】
約１重量％〜約２重量％のＭＴＺ、約１重量％〜約３重量％の１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマー、約３０重量％〜約６０重量％の前記ＭＴＺの溶媒系、および水を含み、ＭＧ３３ＰＢのものの約±１０％内の範囲の粘膜接着の程度を有する、粘膜接着性水系ゲル。
【請求項４７】
約１重量％〜約２重量％のＭＴＺ、約１重量％〜約３重量％の１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマー、約３０重量％〜約６０重量％の前記ＭＴＺの溶媒系、および３０重量％〜約６０重量％の水を含む、粘膜接着性水系ゲル。
【請求項４８】
約１重量％〜約２重量％のＭＴＺ、約１重量％〜約３重量％の１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマー、約３０重量％〜約６０重量％の前記ＭＴＺの溶媒系、および水を含み、デキストリン、シクロデキストリン、ナイアシン、およびナイアシンアミドを実質的に含まない、粘膜接着性水系ゲル。
【請求項４９】
約１重量％〜約２重量％のＭＴＺ、約１重量％〜約３重量％の１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマー、約３０重量％〜約６０重量％の前記ＭＴＺの溶媒系、および水を含み、約２５℃で少なくとも６ヶ月の期間安定している、粘膜接着性水系ゲル。
【請求項５０】
前記粘膜接着性水系ゲルが、約１重量％〜約３重量％の総粘膜接着性ゲル化ポリマー、および約４０重量％〜４５重量％の前記ＭＴＺの溶媒系を含む、請求項４４に記載のゲル。
【請求項５１】
前記溶媒系が、２５℃で少なくとも約２０ｍｇ／ｇの飽和ＭＴＺ溶解度を有する１つ以上の溶媒を含む、請求項５０に記載のゲル。
【請求項５２】
前記溶媒系が、２５℃で少なくとも約５０ｍｇ／ｇの飽和ＭＴＺ溶解度を有する１つ以上の溶媒、および随意に、２５℃で約２０ｍｇ／ｇ〜約２５ｍｇ／ｇの範囲内の飽和ＭＴＺ溶解度を有する１つ以上の溶媒を含む、請求項５１に記載のゲル。
【請求項５３】
前記溶媒系が、１つ以上の低級芳香族アルコール、および随意に１つ以上の低級脂肪族ジオール、および／または約２００〜約４００の範囲の分子量を有する１つ以上のポリオキシアルキレン（「低級ポリオキシアルキレン」）を含む、請求項５２に記載のゲル。
【請求項５４】
前記溶媒系が、１つ以上の低級芳香族アルコール、１つ以上の低級脂肪族ジオール、および／または１つ以上の低級ポリオキシアルキレンを含む、請求項５３に記載のゲル。
【請求項５５】
前記溶媒系が、１つ以上の低級芳香族アルコール、１つ以上の低級脂肪族ジオール、および１つ以上の低級ポリオキシアルキレンを含む、請求項５４に記載のゲル。
【請求項５６】
前記１つ以上の低級芳香族アルコールが、ベンジルアルコール、２−メチルベンジルアルコール、フェノキシエタノール、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項５３に記載のゲル。
【請求項５７】
前記１つ以上の低級アルキレンジオールが、エタン−１，２−ジオール（エチレングリコール）、プロパン−１，２−ジオール（プロピレングリコール）、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項５３に記載のゲル。
【請求項５８】
前記１つ以上の低級ポリオキシアルキレンが、ポリオキシエチレン（ポリエチレングリコール）、ポリオキシプロピレン（ポリプロピレングリコール）、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項５３に記載のゲル。
【請求項５９】
１つ以上の低級脂肪族ジオールおよび前記１つ以上の低級ポリオキシアルキレンが、約１：１〜約１：２の範囲の総低級脂肪族ジオール：総ポリオキシアルキレン重量比で記溶媒系に含まれる、請求項５３に記載のゲル。
【請求項６０】
前記溶媒系が、約３．５重量％〜約５重量％の総低級芳香族アルコール、および約９５重量％〜約９５．５重量％の前記１つ以上の低級アルキレンジオールと前記１つ以上の低級ポリオキシアルキレンとの混合物を含む、請求項５３に記載のゲル。
【請求項６１】
総低級アルキレンジオール：総低級ポリオキシアルキレンの前記重量比が、約１：１．６７である、請求項６０に記載のゲル。
【請求項６２】
前記溶媒系が、ベンジルアルコール、プロパン−１，２−ジオール、およびＰＥＧ  ４００からなる、請求項５３に記載のゲル。
【請求項６３】
前記溶媒系が、約３．５重量％〜約５重量％のベンジルアルコール、および約９５重量％〜約９６．５重量％のプロパン−１，２−ジオールとＰＥＧ  ４００との混合物からなり、前記プロパン−１，２−ジオール：ＰＥＧ  ４００の前記重量比が、約１：１．６７〜約１：１の範囲である、請求項５３に記載のゲル。
【請求項６４】
前記粘膜接着性水系ゲルが、１つ以上の保存剤をさらに含む、請求項４４に記載のゲル。
【請求項６５】
前記１つ以上の保存剤が、４−ヒドロキシ安息香酸（パラベン）のエステルである、請求項６４に記載のゲル。
【請求項６６】
前記１つ以上の保存剤が、メチル４−ヒドロキシベンゾエート（メチルパラベン）、プロピル４−ヒドロキシベンゾエート（プロピルパラベン）、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項６５に記載のゲル。
【請求項６７】
前記粘膜接着性水系ゲルが、約ｐＨ３．０〜約ｐＨ５．０の範囲内のｐＨを有する、請求項４４に記載のゲル。
【請求項６８】
前記粘膜接着性水系ゲルが、約ｐＨ４．０のｐＨを有する、請求項６７に記載のゲル。
【請求項６９】
前記１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマーが、ヒドロキシエチルセルロース、カルボマー、ポリカルボフィル、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項４４に記載のゲル。
【請求項７０】
前記粘膜接着性水系ゲルが、約１．３重量％のＭＴＺ、約２重量％のポリカルボフィルＡＡ−１、約２重量％のベンジルアルコール、約１５重量％のプロパン−１，２−ジオール、約２５重量％のＰＥＧ４００、約０．０２重量％のメチル４−ヒドロキシベンゾエート、および約０．０８重量％のプロピル４−ヒドロキシベンゾエートを含む、請求項４４に記載のゲル。
【請求項７１】
約１．３重量％のＭＴＺ、約１重量％〜約３重量％の１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマー、および約４０重量％〜約４５重量％の前記ＭＴＺの溶媒系を含む、粘膜接着性水性ゲルであって、前記溶媒系が、ベンジルアルコール、プロパン−１，２−ジオール、およびＰＥＧ４００を含み、前記粘膜接着性水性ゲルが、約２５℃〜約４０℃の範囲内の温度で保存されるとき、１８ヶ月の期間の間安定している、粘膜接着性水性ゲル。
【請求項７２】
前記１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマーが、架橋アクリル酸ポリマーおよびセルロースポリマーからなる群から選択される、請求項７１に記載のゲル。
【請求項７３】
前記架橋アクリル酸ポリマーが、カルボマーおよびポリカルボフィルからなる群から選択される、請求項７２に記載のゲル。
【請求項７４】
前記セルロースポリマーが、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、およびヒドロキシプロピルメチルセルロースからなる群から選択される、請求項７２に記載のゲル。
【請求項７５】
約２重量％の総粘膜接着性ゲル化ポリマーを含む、請求項７１に記載のゲル。
【請求項７６】
膣内適用に適した高用量の粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの単位用量形態であって、膣内適用に適した容器に充填された約６５ｍｇ〜約１００ｍｇのＭＴＺを含有する、請求項４５によるゲルをある量含む、単位用量形態。
【請求項７７】
約６５ｍｇのＭＴＺを含有する、前記ゲルをある量含む、請求項７６に記載の単位用量形態。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１１年６月２８日に提出された米国仮特許出願第６１／５０２，２８５号、および２０１１年７月１４日に提出された米国仮特許出願第６１／５０８，０５８号の利益を主張し、それらの内容は、参照することによりそれら全体が本明細書に組み込まれる。本出願は、２０１１年６月２８日に提出された米国仮特許出願第６１／５０２，２８８号、および２０１１年７月１４日に提出された米国仮特許出願第６１／５０８，０５４号にも関し、それらの内容は、参照することによりそれら全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本開示は、メトロニダゾールの水系ゲル製剤、および例えば、細菌性膣炎を治療するためのそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
細菌性膣炎（以下「ＢＶ」）は、出産年齢の女性において認められる膣炎の最も一般的な原因であり、全膣感染症の４０〜５０％をもたらすことが報告されている（非特許文献１）。ＢＶは、厄介な症状をもたらす可能性があり、時としてＨＩＶ等の後天性性感染症のリスクを高め得る。ＢＶは、ガルドネレラバジナリス（Ｇａｒｄｎｅｒｅｌｌａ  ｖａｇｉｎａｌｉｓ）、バクテロイデス属（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｓｐｐ）（一部は現在プレボテラ属（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ  ｓｐｐ）として分類される）、嫌気性グラム陽性球菌、モビルンカス属（Ｍｏｂｉｌｕｎｃｕｓ  ｓｐｐ）およびマイコプラズマホミニス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｈｏｍｉｎｉｓ）を含む、正常な膣内微生物叢の一部として認められる場合が多い細菌種の異常増殖（１００×〜１０００×）を特徴とする相乗的多菌性細菌感染を代表すると考えられる。この増加に伴って、他の膣内細菌叢の増殖を規制すると考えられる、正常に存在する乳酸菌種（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）が顕著に減少する。さらに、健常な女性の膣内細菌叢の大半を占める乳酸菌の過酸化水素産生菌は、ＢＶのある女性において、非過酸化水素産生菌により置き換えられる（非特許文献２）。一般的に、ＢＶのある女性の膣内微生物叢では、健常な女性と比較して、質的な差異よりも量的な差異が大きく、ＢＶの臨床的兆候および症状の一部が、１つ以上の天然に存在する微生物種の量的差異に関し得ることを示す、と研究は示している（非特許文献３）。膣内生態系における種の均衡の初期崩壊、および段階的変化に関与する要因は、十分に理解されておらず、感染の正確な位置が未知であるため、適切な治療を開発するための取り組みを困難にする。
【０００４】
１９６３年７月１８日にＦＤＡにより承認されたメトロニダゾール、およびクリンダマイシンは、ＢＶに罹患する、および／またはそれを診断された女性を治療するために処方される、最も古く最も一般的に使用される抗生物質の２つである（（ＣＤＣ  ２００６  ＳＴＤ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ＭＭＷＲ  ２００６；５５（Ｎｏ．ＲＲ−７））。
【０００５】
メトロニダゾールは、経口錠剤およびカプセル、注射液、０．７５重量％局所ローション、クリーム、およびゲル、１．０重量％局所ゲル、ならびに０．７５重量％膣内ゲルとして多数のソースから入手可能である。局所クリーム、ローション、およびゲルは、一般に酒さの治療に適応され、膣内ゲル、例えば、Ｍｅｄｉｃｉｓ社から商品名ＭＥＴＲＯＧＥＬ  ＶＡＧＩＮＡＬ（登録商標）の下で販売される０．７５重量％メトロニダゾール膣内ゲルがＢＶの治療に適応される。
【０００６】
それらの一般的な使用に関わらず、ＭＥＴＲＯＧＥＬ  ＶＡＧＩＮＡＬ（登録商標）等の０．７５重量％膣内メトロニダゾールゲルによる治療は理想的ではない。有効であるには、ゲルは、１日１回または２回、５日の期間ゲルを適用されなければならない。
【０００７】
さらに、ＢＶの再発は、経口または膣内に関わらず、治療の３ヶ月以内の女性の約３０％において共通に観察される。再発の理由は依然として不明である。例えば、非特許文献４、非特許文献５を参照されたい。二重盲検プラセボ対照交差試験において、０．７５％メトロニダゾールゲルによる膣内治療が、治療後１ヶ月で約１５％の再発率をもたらしたことが示された。非特許文献６を参照されたい。一般にイースト菌感染症として知られる外陰膣カンジダ症もＢＶの治療後の女性の約１０％において観察される。
ＢＶは、出産年齢の女性において現在最も有病率の高い形態の膣感染症であるという事実を考慮して、現在使用可能なＢＶ治療の短所の１つ以上を解決する新たな治療法が現実的かつ即時的に必要である。例えば、単一適用で効果的な治療を提供する、ならびに／または現在使用可能な０．７５重量％膣内メトロニダゾールゲルより効果的な治療を提供し、良好な治療経過後のＢＶの再発率を低減する、および／もしくは良好なＢＶ治療経過後の外陰膣カンジダ症の発症を低減する、使用可能な膣内治療を有することが望ましい。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Ｓｏｂｅｌ，１９９７，「Ｒｅｖｉｅｗ  Ａｒｔｉｃｌｅ：Ｖａｇｉｎｉｔｉｓ，」Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３３７：１８９６−１９０３
【非特許文献２】Ａｍｓｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９８３，Ａｍ  Ｊ．Ｍｅｄ  ７４：１４、Ｓｏｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ，１９９０，Ｉｎｆｅｃｔ  Ｍｅｄ  Ｍａｙ：２４
【非特許文献３】Ｍａｓｆａｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９８６，Ｇｅｎｉｔｏｕｒｉｎ  Ｍｅｄ  ６２：２５６
【非特許文献４】Ｌａｒｓｓｏｎ，１９９２，Ｉｎｔ  Ｊ  Ｓｔｄ  Ａｉｄｓ  ３：２３９−２４７
【非特許文献５】Ｗｉｌｓｏｎ，２００４，Ｓｅｘ  Ｔｒａｎｓｍ  Ｉｎｆｅｃｔ  ８０：８−１１
【非特許文献６】Ｈｉｌｌｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊｕｎ  １９９３，「Ｅｆｆｉｃａｃｙ  ｏｆ  Ｉｎｔｒａｖａｇｉｎａｌ  ０．７５％  Ｍｅｔｒｏｎｉｄａｚｏｌｅ  Ｇｅｌ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｂａｃｔｅｒｉａｌ  Ｖａｇｉｎｏｓｉｓ，」Ｏｂｓｔｅｔ  Ｇｙｎｅｃｏｌ  ８１（６）：９６３−９６７
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
細菌性膣炎（「ＢＶ」）を治療するために現在用いられるものより高い濃度で、粘膜接着性水系ゲル媒体中のメトロニダゾール（「ＭＴＺ」）を製剤することは、意外にもＭＥＴＲＯＧＥＬ  ＶＡＧＩＮＡＬ（登録商標）等の現在の膣内ＢＶ治療の短所のいくつかを克服する治療をもたらすことが発見された。例えば、以下で詳述されるように、約１〜２重量％（「重量％」）のＭＴＺを含む「高用量」粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、意外にも予想されるＭＴＺの局所濃度より著しく高い濃度を送達し、著しく高い局所濃度のＭＴＺは、ヒト死体皮膚を用いて行ったインビトロ皮膚透過実験において、ＭＥＴＲＯＧＥＬ  ＶＡＧＩＮＡＬ（登録商標）に類似する０．７５重量％ＭＴＺゲルにより送達される。ＢＶに罹患する、および／またはそれを診断する女性を治療するために使用されるとき、１．３重量％ＭＴＺを含む高用量粘膜接着性水系ゲルの一実施形態は、ＭＥＴＲＯＧＥＬ  ＶＡＧＩＮＡＬ（登録商標）と比較して、優れた結果をもたらした。例えば、１日１回、３日間適用されるとき、本開示の１．３重量％高用量ＭＴＺゲルにより達成された有用性は、現在使用可能なＦＤＡ認可の０．７５重量％ＭＴＺゲルにより、それらの標準的な５日間の治療レジメンに従って治療された女性において達成されるものとほぼ同一であった。非常に意外なことに、本開示の高用量１．３重量％ＭＴＺゲルの単一適用は、１日１回、５日の期間適用される０．７５重量％ＭＴＺゲルの経過と同様に効果的であることが認められた。はるかに少ない総ＭＴＺへの曝露でＢＶの有効な治療を提供し、有害かつさらに危険な副作用のリスクを低減するため、この発見は重要である。
【００１０】
いかなる動作理論にも拘束されないが、例示の１．３重量％ＭＴＺ水系ゲルの驚くべき有用性は、本明細書に記載される新規の粘膜接着性水系ゲルにより局所的に放出される、上述の予想外に高濃度のＭＴＺに一部起因し得ると考えられる。
【００１１】
驚くべきことに、１．３重量％ＭＴＺ高用量ゲルが、ＢＶに罹患する、および／またはそれを診断された女性の膣に１日１回、５日の期間適用されるとき、例えば、治癒率の増加、症状の解消までの時間の増加、症状の再発までの時間の増加、および／または再発率の減少のいずれか１つにより決定されるように、ＭＥＴＲＯＧＥＬ  ＶＡＧＩＮＡＬ（登録商標）と比較して、その有用性が劇的に増加することも発見された。したがって、驚くべきことに、高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルが、ＢＶに罹患する、および／またはそれを診断された女性の膣に１日１回、５日の期間適用されるとき、現在使用可能なＦＤＡ認可の０．７５％メトロニダゾールゲルにより標準的な５日間の治療レジメンに従って治療された女性と比較して、達成される有用性がはるかに優れ、ＢＶ再発率が顕著に減少したことが発見された。
【００１２】
さらに、本明細書に記載される高用量１．３重量％ＭＴＺ製剤で５日間治療されたＢＶに罹患する、および／またはそれを診断された女性は、別の予想外かつ顕著な結果を呈し、治療後の外陰膣カンジダ症の発症は事実上なかった。出願人の知る限り、この結果は前例がない。
【００１３】
したがって、一態様において、本開示は、特にＢＶを治療するために女性に局所的に、特に膣内に適用され得る、新規の「高用量」粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを提供する。高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、一般に約１重量％〜約２重量％のＭＴＺ、いくつかの特定の実施形態では、約１．０重量％、約１．１重量％、約１．２重量％、約１．３重量％、約１．４重量％、約１．５重量％、約１．６重量％、約１．７重量％、約１．８重量％、約１．９重量％、または約２．０重量％のＭＴＺ、ならびに１つ以上のゲル化ポリマーおよび／または薬剤を含む。ＭＴＺは、遊離塩基または塩、例えば製薬上許容される酸で形成される塩の形態でゲル中に含まれ得る。
【００１４】
このゲルは、典型的に、制御されたせん断速度ランプ法、Ｂｏｈｌｉｎ  ＣＶＯ１００レオメータ、および下記表１１の前記レオメータ設定を使用して、２５℃で約２００，０００〜約４００，０００ｍＰａ、例えば、２５℃で約２５０，０００〜約３５０，０００ｍＰａの範囲の粘度を生じるために十分なゲル化ポリマー（複数可）の総量を含む。使用される特定のゲル化ポリマー（複数可）およびゲル化状態に応じて、この範囲内の粘度を有する水系ゲルは、一般に、約０．５重量％〜約５重量％の範囲のゲル化ポリマー（複数可）の総量をゲル中に含むことにより達成される。いくつかの特定の実施形態において、本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、約１重量％〜約３重量％の総ゲル化ポリマー（複数可）、およびいくつかの特定の実施形態では、約２重量％の総ゲル化ポリマー（複数可）を含む。
【００１５】
熟練者であれば、異なるゲル化ポリマーが異なる程度の粘膜接着を呈することを理解するであろう。ＢＶを治療する膣内適用のために設計されたゲルの場合、ゲル化ポリマーは粘膜接着性であり得る。選択された特定の粘膜接着性ゲル化ポリマー（複数可）は、成功のために重要ではなく、水性溶液中でゲルを形成することができる任意の粘膜接着性ポリマーの中から選択され得る。例示の適切な粘膜接着性ゲル化ポリマーは、詳細な説明のセクションでさらに詳述される。これらの粘膜接着性ゲル化ポリマーの全ては、単独または組み合わせで使用され得る。
【００１６】
一般に、粘膜接着性ゲル化ポリマーは、上記の範囲内の粘度を有する水系ゲルを生成するために使用されるとき、同一のアッセイ条件下で例示の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルＭＧ３３ＰＢを用いて観察されたものの約±１０％以内の程度の粘膜接着を呈するゲルを生じるように選択されるべきである。特定の例示の実施形態において、粘膜接着性ポリマー（複数可）は、ヒドロキシアルキルセルロース、カルボマー、ポリカルボフィル、およびそれらの混合物からなる群から選択される。別の特定の例示の実施形態において、粘膜接着性ポリマー（複数可）はポリカルボフィルである。
【００１７】
熟練者であれば、多くの実施形態において、１つ以上のゲル化ポリマーが粘膜接着特性を有するが、必ずしもそうである必要はないことを理解するであろう。粘膜接着特性を有しないか、または不十分な程度の粘膜接着を生じる水性溶液中でゲルを形成することができるポリマーは、ゲル形成するか否かに関わらず、粘膜接着剤と併用して、本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを生じることができる。
【００１８】
高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、ＭＴＺの溶媒系も含む。ＭＴＺは、ヒトに使用するためにＦＤＡ認可された賦形剤とともに局所および膣内投与に有用なゲルを製剤しようとするときに、溶解度の問題を提示することがよく知られている。０．７５重量％または１．０重量％を超える濃度で水溶液にＭＴＺを溶解することを試みた例もある。例えば、米国特許第６，８８１，７２６号は、水性溶液中のＭＴＺの溶解度を強化するためのシクロデキストリンおよびβ−シクロデキストリンの使用を説明する。米国特許第７，３４８，３１７号は、水性溶液中のＭＴＺの溶解度を強化するためのナイアシンおよびナイアシンアミドの追加使用を説明する。さらに他の例では、界面活性剤を使用して水性溶液中のＭＴＺの濃度を増加させようとした。これらの溶媒系のいずれかを使用して、本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの所望の濃度にＭＴＺを溶解することができる。
【００１９】
溶解促進剤を使用できるが、驚くべきことに、ＭＴＺは、上記のもの等の溶解促進化合物を使用する必要なく、約１重量％〜約２重量％ＭＴＺを含有する高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを産生するために十分な濃度で溶解され得ることが発見された。シクロデキストリンおよびβ−シクロデキストリンが、多くの場合、複合体を形成することにより化合物の水溶性を増強し、化合物が製剤中に均一に溶解されない複合製剤をもたらし、ナイアシンおよびナイシンアミド等の薬剤は、それ自体がある濃度で望ましくない薬理学的特性を有し、界面活性剤等の薬剤がゲルを多相化することができるため、これは有利である。
【００２０】
したがって、本明細書に記載される高用量ＭＴＺゲルを調製するために有用な新規の溶媒系も提供される。新規の溶媒系は、均質な高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを生じ、すなわち、ＭＴＺはゲルに溶解され、約２５℃〜約４０℃の範囲内の温度で保管されるとき、長期間、例えば６ヶ月以上の間保存可能である。実際に、１．３重量％ＭＴＺを含む高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの特定の例示の実施形態は、約２５℃〜約４０℃の温度で保管されるとき、少なくとも１８ヶ月間安定していることがわかった。
【００２１】
新規の溶媒系は、一般に、所望の濃度のＭＴＺを含有するゲルを生じるために十分な飽和ＭＴＺ溶解度を２５℃で集合的に有する１つ以上の溶媒を利用する。一般に、かかる溶媒は、それぞれ２５℃で少なくとも約１０ｍｇ／ｇの飽和ＭＴＺ溶解度を有するが、熟練者であれば、明らかに高い飽和ＭＴＺ溶解度を有する溶媒が選択されるとき、新規の溶媒系はより低い飽和ＭＴＺ溶解度を持つ溶媒を含み得ることを理解するであろう。新規の溶媒系の成分として使用され得る、適切な飽和ＭＴＺ溶媒を有する溶媒の非限定的一覧は、実施例のセクションで提供される。
【００２２】
ある溶媒のクラスは、２５℃で少なくとも約２０ｍｇ／ｇの飽和ＭＴＺ溶解度を有することが発見された。例えば、あるアルコール、例えば、エタノール等の低級脂肪族アルコールおよびベンジルアルコール等の低級芳香族アルコール、例えば、低級脂肪族ジオール（例えば、エチレングリコールおよびプロピレングリコール等の低級脂肪族グリコールを含む）等のあるジオール、ならびに例えば、約２００〜約６００の範囲の分子量を有するポリオキシアルキレン（「低級ポリオキシアルキレン」）（例えば、ＰＥＧ４００を含む）等のあるポリエーテルは、２５℃でこの範囲の飽和ＭＴＺ溶解度を有することが発見された。実際に、ある低級芳香族アルコールは、２５℃で著しく高い飽和ＭＴＺ溶解度、例えば、少なくとも約５０ｍｇ／ｇを有する。特定の実施例として、ベンジルアルコールは、２５℃で約７２ｍｇ／ｇの飽和ＭＴＺ溶解度を有する。これらの溶媒のすべて、および２５℃で少なくとも約２０ｍｇ／ｇの飽和ＭＴＺ溶解度を有する他のものは、新規の溶媒系中単独で、および様々な組み合わせで使用して、本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルにＭＴＺを溶解することができる。
【００２３】
いくつかの実施形態において、新規の溶媒系は、２５℃で少なくとも約５０ｍｇ／ｇの飽和ＭＴＺ溶解度を有する少なくとも１つの溶媒、および随意に２５℃で少なくとも約２０ｍｇ／ｇの飽和ＭＴＺ溶解度を有する１つ以上の溶媒を含む。いくつかの実施形態において、新規の溶媒系は、２５℃で少なくとも約５０ｍｇ／ｇの飽和ＭＴＺ溶解度を有する少なくとも１つの溶媒、および２５℃で少なくとも約２０ｍｇ／ｇの飽和ＭＴＺ溶解度を集合的に有する１つ以上の溶媒を含む。いくつかの特定の実施形態において、溶媒のそれぞれは、２５℃で少なくとも約２０ｍｇ／ｇの飽和ＭＴＺ溶解度を有する。
【００２４】
いくつかの特定の実施形態において、新規の溶媒系は、２５℃で少なくとも約５０ｍｇ／ｇの飽和ＭＴＺ溶解度を有する、約１重量％〜約５重量％の少なくとも１つの溶媒を含み、残りの約９５重量％〜約９９重量％は、２５℃で少なくとも約２０ｍｇ／ｍＬの飽和ＭＴＺ溶解度を集合的に有する１つ以上の溶媒で構成される。いくつかの特定の実施形態において、溶媒系は、約１．０重量％、約１．５重量％、約２．０重量％、約２．５重量％、約３．０重量％、約３．５重量％、約４．０重量％、約４．５重量％、または約５．０重量％（またはこれらの値のいずれかにより囲まれる任意の範囲）の２５℃で少なくとも約５０ｍｇ／ｍＬの飽和ＭＴＺ溶解度を有する少なくとも１つの溶媒を含み、残りは２５℃で少なくとも約２０ｍｇ／ｍＬの飽和ＭＴＺ溶解度を集合的に有する１つ以上の溶媒からなる。
【００２５】
１つ以上の低級芳香族アルコール、１つ以上の低級脂肪族ジオール、および１つ以上の低級ポリオキシアルキレンを利用する三元溶媒系が良好な結果をもたらすことが発見された。したがって、いくつかの特定の実施形態において、本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、１つ以上の低級芳香族アルコール、１つ以上の低級脂肪族ジオール、および１つ以上の低級ポリオキシアルキレンを含む、ＭＴＺの新規の溶媒系を利用する。
【００２６】
いくつかの特定の実施形態において、本明細書に記載される溶媒系は、シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、ナイアシン、ナイアシンアミド、および／または界面活性剤等の水性溶液中のＭＴＺの溶解度を増強することが知られている他の薬剤を含まないか、または実質的に含まない。いくつかの特定の実施形態において、溶媒系は、１つ以上の低級芳香族アルコール、１つ以上の低級アルキレンジオール、および１つ以上のポリオキシアルキレンのみで構成され、任意の他の追加薬剤または溶媒を含まない三元溶媒系である。
【００２７】
１つ以上の低級芳香族アルコールは、フェノール、一次、二次、または三次アルコールであり得、したがって芳香族基に加えて脂肪族またはヘテロ脂肪族基を含んでよい。１つ以上の低級脂肪族ジオールおよび低級ポリオキシアルキレンは、飽和または不飽和であり得、一次、二次、および／または三次アルコール基を含み得る。本明細書に記載される新規の溶媒系および高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルのこの特定の実施形態に有用な例示の低級芳香族アルコール、低級脂肪族でジオール、および低級ポリオキシアルキレンは、詳細な説明のセクションでさらに詳述される。いくつかの特定の実施形態において、１つ以上の低級芳香族アルコールは、ベンジルアルコールであり、１つ以上の低級脂肪族ジオールは、プロパン−１，２−ジオール（プロピレングリコール）であり、１つ以上の低級ポリオキシアルキレンは、約４００のＭＷを有するポリエチレングリコールである（ＰＥＧ４００）。
【００２８】
いくつかの特定の実施形態において、溶媒系は、約３．５重量％〜約５重量％の総低級芳香族アルコール（複数可）、および約９５重量％〜約９６．５重量％の総低級脂肪族ジオール（複数可）、約９５重量％〜約９６．５重量％の総低級ポリオキシアルキレン（複数可）、または約９５％〜約９６．５重量％の総低級脂肪族ジオール（複数可）および総低級ポリオキシアルキレン（複数可）の混合物を含む。混合物が使用されるとき、総低級脂肪族ジオール（複数可）：総低級ポリオキシアルキレン（複数可）の重量比は、典型的に、約１：１〜約１：２の範囲であってよく、いくつかの特定の実施形態では約１：１．６７である。
【００２９】
溶媒系は、一般に、約３０重量％〜約６０重量％の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルからなる。使用される正確な量は、ゲルに含まれるＭＴＺの所望の量に少なくとも一部依存する。いくつかの特定の実施形態において、溶媒系は、約４０〜４５重量％の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを表す。
【００３０】
溶媒系の構成成分の量はまた、高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルに対して説明され得る。いくつかの特定の実施形態において、高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、約１．５重量％〜約２重量％の総低級芳香族アルコール（複数可）（例えば、ベンジルアルコール）、約１５重量％〜約２５重量％の総低級脂肪族ジオール（複数可）（例えば、プロパン−１，２−ジオール）および／または約１５％〜約２５重量％の総低級ポリオキシアルキレン（複数可）（例えば、ＰＥＧ  ４００）を含む。いくつかの特定の実施形態において、高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、約１．５重量％〜約２重量％の総低級芳香族アルコール（複数可）（例えば、ベンジルアルコール）、約１５重量％の総低級脂肪族ジオール（複数可）（例えば、プロパン−１，２−ジオール）および／または約２５重量％の総低級ポリオキシアルキレン（複数可）（例えば、ＰＥＧ  ４００）を含む。他の特定の実施形態は、本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルと併せてＭＴＺを溶解するために有用な追加の溶媒および薬剤であるとして、詳細な説明のセクションに記載される。
【００３１】
本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルのｐＨは、一般に、意図される適用領域のｐＨに一致すべきであり、例えば、膣内適用を意図するとき、健常な膣のｐＨに一致すべきである。任意の特定の理論に拘束されるものではないが、健常な膣のｐＨに一致させることは、有益な乳酸菌が増殖するのを可能にすると考えられる。したがって、膣内適用が意図されるゲルの場合、ｐＨは一般に、約ｐＨ３〜約ｐＨ５の範囲内、例えば、約ｐＨ４のｐＨであるべきである。ｐＨは、当該技術分野においてよく知られているように、酸、塩基、および緩衝液を用いて調整および／または維持され得る。例えば、ゲルのｐＨは、適切な正常性およびｐＨを有する緩衝液をゲルの水相として利用することにより調整および／または維持されてよい。あるいは、水相のｐＨは、ゲル化剤を添加する前に、酸または塩基で調整されてよい。ゲル化の後、ｐＨは、酸または塩基でさらに調整されてよい。この後者の方法は、得られるゲルの所望のｐＨ範囲外で最も効率的にゲル化するゲル化剤を利用してゲルを調製するために有利であり得る。例えば、カルボマーゲルは、中性ｐＨの周辺で最も効率的にゲル化する。膣内適用に適した高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、ゲル化するためにゲル化溶液のｐＨをほぼ中性に調整し、次に酸を用いて、得られるゲルのｐＨを約ｐＨ３〜約ｐＨ５の範囲内に調整することにより得られてよい。しかしながら、膣内適用の所望の範囲内のｐＨを有する、あるｐＨ感受性粘膜接着性ゲル化ポリマー、例えば、カルボマーおよびポリカルボフィルポリマー等を利用する高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを、緩衝液またはｐＨ調整を用いずに得られることが発見された。
【００３２】
本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、当該技術分野においてよく知られているように、他の追加の構成成分、例えば、１つ以上の保存剤を含むこともできる。保存剤（複数可）は、使用されるとき、一般にわずか約１重量％または２重量％の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを含む必要がある。保存剤（複数可）の選択肢は重要でない。適切な有用な保存剤は、詳細な説明のセクションでさらに詳述される。いくつかの特定の実施形態において、１つ以上の保存剤（複数可）は、パラベンとしても知られる、４−ヒドロキシ安息香酸のエステルである。好適なパラベンは、４−ヒドロキシ安息香酸の低級アルキルエステル、例えば、メチル４−ヒドロキシベンゾエート（メチルパラベン）、エチル４−ヒドロキシベンゾエート（エチルパラベン）、およびプロピル４−ヒドロキシ−ベンゾエート（プロピルパラベン）を含む。
【００３３】
熟練者であれば、本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルにＭＴＺを溶解するために使用される溶媒は、保存特性を有してもよいことを理解するであろう。特定の例として、ベンジルアルコールは、よく知られた保存特性を有する。新規溶媒系中で溶媒として使用されるとき、この保存特性を使用して利益を享受することができる。実際に、保存特性を持つ溶媒を含むゲルは、必ずしも追加の保存剤を含む必要はない。溶媒系の保存特性を利用するゲルは、溶媒が経時的に分解または酸化し得る場合、ゲルが所望の期間後に有効な保存特性を有する未分解または未酸化溶媒の量を保持するように、分解および／または酸化を考慮に入れる過剰量を含む。例えば、ベンジルアルコールは、ベンズアルデヒドに酸化することが知られ、保存特性を有しない。ＭＴＺ溶媒および保存剤の両方としてベンジルアルコールを用いる、本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの実施形態において、ある量のベンジルアルコールの量がゲルに含まれるべきであり、ＭＴＺを溶解することに加えて、ゲルの予想される保存寿命の期間に保存効果をもたらす。ベンジルアルコールまたは保存剤として一部使用されている溶媒系において用いられる他の溶媒の過剰量は、所望の保管条件下で、特定の溶媒の分解および／または酸化特性ならびに動態に基づいて決定され得る。
【００３４】
保存特性を有する溶媒を含む高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの実施形態は、１つ以上の追加の保存剤、ならびに／または分解および／もしくは酸化から溶媒を保護するように設計された保存剤を含んでもよい。例えば、ベンジルアルコールの場合において、本明細書に記載される高用量ゲルは、ベンジルアルコールを酸化から一部保護する抗酸化特性を有する１つ以上の追加の保存剤を含んでよい。特定の実施形態において、ベンジルアルコールまたは酸化する他の溶媒を含む高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、追加の保存剤として１つ以上のパラベンを含む。いくつかの特定の実施形態において、高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、約０．１重量％の総パラベン、いくつかの特定の実施形態では、約０．０２重量％のメチルパラベン、および約０．０８重量％のプロピルパラベンを含む。
【００３５】
高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、純水の形態または水性緩衝液の形態のいずれかで水も含む。典型的に、ゲルに含まれる水の量は、約７０重量％未満、より典型的に約６０重量％未満、およびいくつかの特定の実施形態において、約４５％〜約５５重量％の範囲内である。
【００３６】
上記のように、本明細書に記載される新規の溶媒系で調製される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルのいくつかの実施形態は、ヒト死体の皮膚（およびシリコーン膜）を用いてフランツセル中で行われたインビトロ皮膚透過実験において、予想外に高いＭＴＺの局所濃度、および従来の０．７５重量％ＭＴＺゲルより著しく高いＭＴＺの局所濃度を送達する。実際に、実施例のセクションでさらに詳述されるように、事実上すべての試験した高用量ＭＴＺ水系ゲルは、角質層に対して濃度について正規化されたとき、従来の０．７５重量％ＭＴＺゲルの約２５〜約５５倍の範囲でより多くのＭＴＺを局所的に送達した。本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルにより送達されるより高い局所ＭＴＺ濃度に関わらず、ヒト死体の皮膚を用いてフランツセル中で行われたインビトロ皮膚透過実験において、従来の０．７５重量％ＭＴＺゲルと比較して、受容液中に著しく少ないＭＴＺが観察された。詳細な説明のセクションでさらに詳述されるように、試験された事実上すべての高用量ＭＴＺゲルは、この実験において、濃度について正規化されたとき、従来の０．７５重量％ＭＴＺゲルの約１〜約２０倍の範囲でより少ないＭＴＺを受容液中に産生した。
【００３７】
いかなる理論にも拘束されないが、これらの特性は、高い局所濃度のＭＴＺが送達されることを可能にし、潜在的に有用性を増加させる一方で、同時にある局所適用では、全身曝露を低減し、それにより望ましくない副作用を低減するため、治療適用に有意義かつ重要であると考えられる。したがって、いくつかの実施形態において、高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの様々な構成成分は、ヒト死体の皮膚またはシリコーン膜を用いて行われたインビトロフランツセル皮膚透過実験において測定されるＭＴＺの表面レベルが、濃度について正規化されるとき、ＭＥＴＲＯＧＥＬ  ＶＡＧＩＮＡＬ（登録商標）等の従来の０．７５重量％ＭＴＺゲルを用いて測定されたレベルより少なくとも約２５倍高く、いくつかの特定の実施形態において、約５５倍高い。いくつかの実施形態において、高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの様々な構成成分は、ヒト死体の皮膚を用いて行われたインビトロフランツセル皮膚透過実験において受容液中で測定されるＭＴＺのレベルが、濃度について正規化されるとき、ＭＥＴＲＯＧＥＬ  ＶＡＧＩＮＡＬ（登録商標）等の従来の０．７５重量％ＭＴＺゲルを用いて測定されたレベルより少なくとも約１倍低く、いくつかの特定の実施形態において、約２０倍低い、高用量ゲルを産生するように選択される。特定のインビトロフランツセル実験は、実施例６に記載される比較研究に使用され得る。
【００３８】
本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、ＭＴＺの局所治療が望ましい任意の目的で使用され得る。それらの粘膜接着の程度に起因して、それらはＢＶに罹患する、および／またはそれを診断された女性を治療するために特別に有用である。
【００３９】
したがって、別の態様において、本開示は、本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを使用して、ＢＶに罹患する、および／またはそれを診断された女性を治療する方法を提供する。本方法は、一般に、治療効果を提供するために十分な量の本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを、ＢＶに罹患する、および／またはそれを診断された女性に膣内適用することを伴う。診断の臨床基準ならびに治療効果を確立するための基準は、詳細な説明のセクションにおいてさらに詳述される。いくつかの特定の実施形態において、単一適用で適用される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの量は、約６０ｍｇ〜約１００ｍｇのＭＴＺを含有する。他の特定の実施形態において、単一適用で適用される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの量は、約６０ｍｇ〜約９０ｍｇのＭＴＺ、さらに他の特定の実施形態において、約６０ｍｇ〜約８０ｍｇのＭＴＺ、さらに他の特定の実施形態において、約６０ｍｇ〜約７０ｍｇのＭＴＺを含有する。さらに他の特定の実施形態において、単一適用で適用される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの量は、約６５ｍｇのＭＴＺを含有する。
【００４０】
適用の頻度および期間は異なり得、所望の転帰に依存し得る。一般に、ゲルは、１日１回、１、２、３、４、または５日の期間適用される。重要な治療効果は、約６５ｍｇのＭＴＺを含有する高用量の粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの単一適用で達成されることがわかった。したがって、いくつかの実施形態において、高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、単一適用として適用される。約６５ｍｇＭＴＺを含有する高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを１日１回、５日の期間適用することは、ＦＤＡ認可の０．７５重量％ＭＴＺゲルによる同様の治療経過より低いＢＶ再発率をもたらし、事実上、治療後に外陰膣カンジダ症が発生しなかったこともわかった。したがって、いくつかの実施形態において、高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、１日１回、５日の期間適用される。
【００４１】
使用するために、高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、所望の適用モードに便利な任意の形態で被包され得る。膣内適用に有用な特定の実施形態において、高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、特定の例として、事前に充填された単一用量シリンジ型アプリケータ等の単一用量形態で被包されてよい。
【００４２】
ＢＶに罹患する、および／またはそれを診断された女性を治療するために使用されるとき、本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、例えば、（１）治療効果を達成するために、１日１回または１日２回、５日の期間投与することを必要とする、０．７５重量％ＭＴＺゲル、例えばＭＥＴＲＯＧＥＬ  ＶＡＧＩＮＡＬ（登録商標）による既存の治療法とは異なる、単一適用に続くＢＶの効果的な治療、ならびに（２）治癒率の増加、症状の解消までにかかる時間の減少、症状の再発までにかかる時間の増加、および／または外陰膣カンジダ症の発症率の低下のいずれか１つにより決定される、１日１回５日間の適用に続くＭＥＴＲＯＧＥＬ  ＶＡＧＩＮＡＬ（登録商標）と比較した有用性の増加を含む、多数の驚くべき利点を提供する。
【００４３】
上記要約は、本明細書に開示される様々な発明のすべての実施形態またはすべての実装を説明するものではないことを理解されたい。詳細な説明および実施例のセクションは、具体的な実施形態をさらに例示する。本明細書に記載される様々な実施形態は、それぞれ特定の組み合わせが明示的に開示されるかのように、組み合わせで開示されるものとする。実施例は、単なる代表例であり、排他的として、または本明細書に開示される様々な発明の範囲を限定するものとして解釈されてはならない。
【図面の簡単な説明】
【００４４】
【図１】例示の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルＭＧ３２ＰＢおよびＭＧ３３ＰＢのブタ胃粘膜に対する粘膜接着特性を示すグラフを提供する。データは、時間を関数として胃粘膜中に残留するＭＴＺのパーセンテージを示す。この実験の場合、最初の５分間、１５秒毎にデータを取った。
【図２】例示の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルＭＧ３２ＰＢおよびＭＧ３３ＰＢのブタ胃粘膜に対する粘膜接着特性を示すグラフを提供する。データは、時間を関数として胃粘膜中に残留するＭＴＺのパーセンテージを示す。この実験の場合、最初の１５分間、１分毎にデータを取った。
【図３Ａ】ヒト死体の皮膚を用いて行われたインビトロフランツセル皮膚透過実験において、様々な例示の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの様々な皮膚層から回収された１４Ｃ標識ＭＴＺの平均量（μｇ；±標準誤差）を示すグラフを提供する。
【図３Ｂ】ヒト死体の皮膚を用いて行われたインビトロフランツセル皮膚透過実験において、様々な例示の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの様々な皮膚層から回収された１４Ｃ標識ＭＴＺの平均量（μｇ；±標準誤差）を示すグラフを提供する。
【図４Ａ】適用された総１４Ｃ標識ＭＴＺの平均パーセンテージ（±標準誤差）としてそれぞれ表される、図３Ａおよび３Ｂの回収データを示すグラフを提供する。
【図４Ｂ】適用された総１４Ｃ標識ＭＴＺの平均パーセンテージ（±標準誤差）としてそれぞれ表される、図３Ａおよび３Ｂの回収データを示すグラフを提供する。
【図５Ａ】それぞれ図３Ａおよび３Ｂの回収データの異なるビューを示すグラフを提供する。
【図５Ｂ】それぞれ図３Ａおよび３Ｂの回収データの異なるビューを示すグラフを提供する。
【図６Ａ】それぞれ図４Ａおよび４Ｂの回収データの異なるビューを示すグラフを提供する。
【図６Ｂ】それぞれ図４Ａおよび４Ｂの回収データの異なるビューを示すグラフを提供する。
【図７】ブタ膣組織を用いて行われたインビトロフランツセル実験において適用２４時間後の例示の高用量ＭＴＺ粘膜接着性水系ゲルおよび対照ゲルから得た表面および膣組織内で回収されたＭＴＺの平均量（μｇ）を示すグラフを提供する。データは平均±標準誤差（ｎ＝５）である。
【図８】図７のフランツセル実験においてブタ膣組織（μｇ／ｃｍ２膣組織）を透過したＭＴＺの平均量を示すグラフを提供する。データは平均±標準誤差（ｎ＝５）である。
【図９】異なる例示の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルによる２４時間の治療に続いて、ガルドネレラバジナリスに感染した上皮膜試料から放出されたＡＴＰを比較するグラフを提供する（活性ゲルの場合ｎ＝３、プラセボゲルおよび対照の場合ｎ＝２）。
【図１０】４、８、および２４時間の異なる投与時間で例示の高用量ＭＴＺゲルＭＧ３３ＰＢにより治療した後、ガルドネレラバジナリスに感染した上皮膜試料から放出されたＡＴＰを比較するグラフを提供する（ＭＧ３３ＰＢの場合ｎ＝３、プラセボゲルおよび対照の場合ｎ＝２）。
【図１１】異なる例示の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルによる２時間の治療に続いて、ガルドネレラバジナリスに感染した上皮膜試料から放出されたＡＴＰを比較するグラフを提供する（活性ゲルの場合ｎ＝６、プラセボゲルおよび対照の場合ｎ＝３）。
【図１２】例示の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルＭＧ３３ＰＢおよび異なる量のベンジルアルコールを含有する様々なプラセボ版のガルドネレラバジナリスの増殖に対する阻害の領域を示すグラフを提供する。
【発明を実施するための形態】
【００４５】
本明細書に開示される様々な発明のより完全な理解、およびそれに付随する利点の多くは、以下の詳細な説明により提供される。
６．１．定義
【００４６】
ここで明細書全体および添付の請求項において使用されるとき、以下の用語および表現は、以下の意味を有するものとする。
【００４７】
不定冠詞「ａ」および「ａｎ」、ならびに定冠詞「ｔｈｅ」は、それらが使用される文脈がそれ以外を明示しない限り、単数および複数の両方を含むものとする。
【００４８】
「少なくとも１つ」および「１つ以上」は同義的に使用され、その項目が列挙される要素の１つまたは複数を含み得ることを意味する。
【００４９】
別段の指示がない限り、本明細書および請求項において使用される、成分の量、比率、および数値的特性、反応条件等を表すすべての数値は、「約」という用語によりいかなる場合も修正され得ると考えられることを理解されたい。
６．２．特定の例示的実施形態の詳細な説明
【００５０】
要約に記載されるように、本開示は、特に様々な微生物感染を治療するためのＭＴＺの局所送達に有用な、特定の実施形態において、細菌性膣炎（「ＢＶ」）に罹患する、またはそれを診断された女性の治療に対する治療的アプローチとしての膣内適用に有用な、高用量粘膜接着性メトロニダゾール（ＭＴＺ）水系ゲルを特に提供する。高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、一般にＭＴＺおよび１つ以上のゲル化ポリマーを含み、特定の実施形態において、１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマーを含む。
【００５１】
２−（２−メチル−５−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）エタノールとしても知られるＭＴＺは、フゾバクテリウム属およびバクテロイデス属（例えば、Ｂ．ｆｒａｇｉｌｉｓ、Ｂ．ｄｉｓｔａｓｏｎｉｓ、Ｂ．ｏｖａｔｕｓ、Ｂ．ｔｈｅｔａｉｏａｏｍｉｃｒｏｎ、およびＢ．ｖｕｌｇａｔｅｓ）を含む嫌気性グラム陰性桿菌、クロストリジウム属および真正細菌の感受性系統を含む嫌気性グラム陽性桿菌、ならびにペプトストレプトコッカス属を含む嫌気性グラム陽性球菌に対する活性を有するよく知られた抗菌剤である。
【００５２】
ＭＴＺは、遊離塩基の形態で、または製薬的に許容される酸で形成された塩として、本明細書に記載される高用量ゲルに含まれ得る。製薬的に許容される塩を形成するために適した無機酸は、限定ではなく例として、ハロゲン化水素酸（例えば、塩化水素酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸等）、硫酸、硝酸、リン酸等を含む。製薬的に許容される塩を形成するために適した有機酸には、限定ではなく例として、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、ヘキサン酸、シクロペンタンプロピオン酸、グリコール酸、シュウ酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、パルミチン酸、安息香酸、３−（４−ヒドロキシベンゾイル）安息香酸、経皮酸、マンデル酸、アルキルスルホン酸（例えば、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、１，２−エタン−ジスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸等）、アリールスルホン酸（例えば、ベンゼンスルホン酸、４−クロロベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、４−トルエンスルホン酸、カンファースルホン酸等）、４−メチルビシクロ［２．２．２］−オクト−２−エン−１−カルボン酸、グルコヘプトン酸、３−フェニルプロピオン酸、トリメチル酢酸、第三ブチル酢酸、ラウリル硫酸、グルコン酸、グルタミン酸、ヒドロキシナフトエ酸、サリチル酸、ステアリン酸、ムコン酸が挙げられる。
【００５３】
ＭＴＺは、市販されているか、またはよく知られている方法により合成され得る。
【００５４】
本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、一般に約１重量％〜約２重量％の範囲の量のＭＴＺを含む。特定の実施形態において、本明細書に記載されるゲルは、約１．０重量％、約１．１重量％、約１．２重量％、約１．３重量％、約１．４重量％、約１．５重量％、約１．６重量％、約１．７重量％、約１．８重量％、約１．９重量％、または約２．０重量％のＭＴＺを含む。
【００５５】
高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、１つ以上のゲル化ポリマー、および特定の実施形態において、それらの粘膜接着性およびゲル状特性をゲルに付与する、１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマーも含む。本明細書に記載される粘膜接着性水系ゲル中で使用するために適した水性溶液中で粘膜接着性ゲルを形成する多様なポリマーは、当該技術分野において既知であり、限定ではなく例として、多糖親水コロイド（例えば、粘液、キサンタンガムおよびトラガカント等のガム、ならびにグルカンを含む）、セルロースおよび修飾セルロース（例えば、アルキルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロース、カルボキシセルロース、およびカルボキシセルロースナトリウムを含む）、ポロキソマー（ポリオキシエチレンおよびポリオキシプロピレンのコポリマー、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（登録商標）としても知られる）、カルボマー（アクリル酸の架橋ポリマー）、ポリカルボフィル（ジビニルグリコールで架橋されたポリアクリル酸のポリマー）、ｖｅｅｇｕｍ（ケイ酸アルミニウムマグネシウム）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ゼラチン、アルギニン酸ナトリウム、およびポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）を含む。例示の適切な粘液は、例えば、Ｍａｌｖｉｙａ  ｅｔ  ａｌ，２０１１，「Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｍｕｃｉｌａｇｅｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ−Ａ  Ｒｅｖｉｅｗ，」Ａｄｖａｎ  Ｂｉｏｌ  Ｒｅｓ  ５（１）：１−７、およびそこで引用される参考文献において認めることができ、それらの開示は、参照することにより本明細書に組み込まれる。
【００５６】
いくつかの特定の実施形態において、ゲル化ポリマー（複数可）は、例えば、カルボマーもしくはポリカルボフィル、および／またはセルロースポリマー等のアクリル酸の架橋ポリマーである。適切なセルロースポリマーには、これらに限定されないが、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース（ＮＥＣまたはＨＨＸ）、ヒドロキシルプロピルセルロース（ＨＰＣ）、およびヒドロキシルプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）が挙げられる。適切なカルボマーには、これらに限定されないが、Ｌｕｂｒｉｚｏｌ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ（Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ，Ｏｈｉｏ）により商品名ＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）で販売される様々なポリマー、例えば、ＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）ホモポリマー（アリルスクロースまたはアリルペンタエリスリトールで架橋されたアクリル酸のポリマー）、例えば、ＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）７１Ｇ  ＮＦ、ＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）９７１Ｐ  ＮＦ、ＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）９７４Ｐ  ＮＦ、ＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）９８０  ＮＦ、およびＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）９８１  ＮＦ；ＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）コポリマー（アリルペンタエリスリトールで架橋されたアクリル酸およびＣ１０〜Ｃ３０アルキルアクリレートのポリマー）、例えばＰＥＭＵＬＥＮ（商標）ＴＲ−１ＮＦおよびＰＥＭＵＬＥＮ（商標）ＴＲ−２  ＮＦ；ＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）インターポリマー（ポリエチレングリコールおよび長鎖アルキル酸エステルのブロックコポリマーを含有するカルボマーホモポリマーまたはコポリマー）、例えばＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）ＥＴＤ  ２０２０  ＮＦおよびＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）Ｕｌｔｒｅｚ  １０  ＮＦ；「従来の」カルボマー、例えばカルボマー９３４（ＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）９３４  ＮＦ）、カルボマー９３４Ｐ（ＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）９３４Ｐ  ＮＦ）、カルボマー９４０（ＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）９４０  ＮＦ）、カルボマー９４１（ＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）９４１  ＮＦ）、およびカルボマー１３４２（ＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）１３４２Ｐ  ＮＦ）、ならびにポリカルボフィル（ＮＯＶＥＯＮ（登録商標）ＡＡ−１  ＵＳＰ）が挙げられる。
【００５７】
これらおよび／または他の粘膜接着性ゲル化ポリマーのいずれかは、本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲル中、単独で、または組み合わせで使用され得る。
【００５８】
１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマーは、典型的に、得られる高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルが２５℃で約２００，０００〜４００，０００ｍＰａの範囲内、いくつかの特定の実施形態において、２５℃で約２５０，０００〜３５０，０００ｍＰａの範囲内の粘度を有するような量で使用され、この粘度は制御されたせん断速度ランプ法、Ｂｏｈｌｉｎ  ＣＶＯ１００レオメータ、および表１１に記載されるレオメータ設定を使用して測定される（以下、実施例５）。使用される特定のゲル化ポリマー（複数可）およびゲル化条件に応じて、この範囲内の粘度を有する水系ゲルは、一般に約０．５重量％〜約５重量％の範囲のゲル化ポリマー（複数可）の総量をゲルに含めることにより達成される。いくつかの特定の実施形態において、本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、約１重量％〜約３重量％の総ゲル化ポリマー（複数可）を含み、いくつかの特定の実施形態において、約２重量％の総ゲル化ポリマー（複数可）を含む。
【００５９】
膣内適用に指定されるゲルは、理想的に、適用時にゲルが漏出するのを防ぐ粘膜接着の程度を呈する必要がある。上述の範囲内の粘度を有するセルロースおよび／またはアクリル酸粘膜接着性ゲル化ポリマーを利用するゲルは、適切な程度の粘膜接着を有する必要がある。異なるゲル化ポリマーは、異なる粘膜接着の程度を呈する。例示のゲルＭＧ３３ＰＢのものの約±１０％の範囲内の粘膜接着の程度を有する高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを産生するゲル化ポリマー（実施例２および表５に記載される）は、適切に使用され得る。特定の例示の実施形態において、粘膜接着性ポリマー（複数可）は、ヒドロキシアルキルセルロース、カルボマー、ポリカルボフィル、およびそれらの混合物からなる群から選択される。別の特定の例示の実施形態において、粘膜接着性ポリマー（複数可）は、ポリカルボフィル、例えばＬｕｂｒｉｚｏｌ，Ｉｎｃ．により商品名ＮＯＶＥＯＮ（登録商標）ＡＡ−１ポリカルボフィルで販売されるポリカルボフィルである。
【００６０】
カルボマー９３４、ヒドロキシエチルセルロース、またはポリカルボフィルを粘膜接着性ゲル化ポリマーとして利用するために適切な粘度、粘膜接着、および他の望ましい特性を有する高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、実施例２に提供される。
【００６１】
要約に記載されるように、ＭＴＺの溶解度は、水系ゲル等の水性製剤中でＭＴＺを製剤しようとするときに問題を提示する。本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの特定の実施形態は、約２５℃〜約４０℃の範囲の温度で保管されるときに、長期間、例えば少なくとも約６ヶ月安定している２重量％以上の高い濃度でＭＴＺを含有する均質なゲルを産生することが発見された新規の溶媒系を利用する。驚くべきことに、かかる高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、シクロデキストリン、βシクロデキストリン、ナイアシン、ナイアシンアミド、および／または界面活性剤等の水溶液中のＭＴＺの溶解度を増強するために一般に使用される薬剤を用いずに調製することができる。
【００６２】
本明細書で使用されるとき、「安定した」とは、ゲルが以下の特性：（１）約２５℃の温度で少なくとも６週間の期間保管されたとき、少なくとも約９５％のＭＴＺ純度、（２）約２５℃の温度で少なくとも６週間の期間保管されたとき、４０×の拡大での顕微鏡目視検査時に、基準値と比較して、結晶および／または粒子の形成に顕著な増加がない（例えば、わずか約２倍〜３倍の増加）、（３）約２５℃の温度で約６週間の期間保管されたとき、基準値または約２〜８℃の範囲内の温度で保管された対照試料と比較して、２５℃で測定されるわずか約±５０％の粘度の変化を呈することを意味する。さらに、安定したゲルは、以下の追加の特性：（４）基準値または約２〜８℃の範囲内の温度で保管された対照試料と比較して、約２５℃の温度で６週間の期間保管されたとき、約±０．３ｐＨ単位未満のｐＨの変化、（５）基準値または約２〜８℃の範囲内の温度で保管された対照試料と比較して、約２５℃の温度で少なくとも６週間の期間保管されたとき、わずか約±２０％の保存剤の有用性の変化を呈することが望ましいが必須ではない。高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの安定性を測定するために適したアッセイは、実施例４および５に提供される。典型的に、新規の溶媒系の特定の構成成分および量は、本明細書に定義されるように安定した高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを産生するように選択される。特定量のＭＴＺを有する安定した高用量ＭＴＺ水系ゲルを調製するために有用な溶媒系を選択するためのガイダンスは、実施例のセクションに開示される様々な例示の高用量ゲルにより提供される。
【００６３】
いくつかの特定の実施形態において、新規の溶媒系の構成成分および量は、約４０℃の温度で約６週間の期間保管されたとき、上述のＭＴＺ純度、均質性、および粘度特性、ならびに随意に上述のｐＨおよび保存効力特性を有する安定した高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを産生するように選択される。他の特定の実施形態において、新規溶媒系の構成成分および量は、約２５〜４０℃の範囲内の温度で、特定の実施形態では約２５℃もしくは約４０℃の温度で６ヶ月の期間、またはそれ以上、例えば１８ヶ月もの長期にわたって保管されたとき、上述のＭＴＺ純度、均質性、および粘度特性、ならびに随意に上述のｐＨおよび保存効力特性を有する安定した高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを産生するように選択される。さらに他の特定の実施形態において、新規の溶媒系の構成成分および量は、約２５〜４０℃の範囲内の温度で、特定の実施形態では約２５℃もしくは約４０℃の温度で６ヶ月の期間、またはそれ以上、例えば約１８ヶ月もの長期にわたって保管されたとき、上述のＭＴＺ純度、均質性、粘度、ｐＨ、および随意に上述の保存効力特性を有する安定した高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを産生するように選択される。
【００６４】
様々な新規溶媒系は、上記の要約セクションに記載される。いくつかの特定の実施形態において、新規の溶媒系は、１つ以上の低級芳香族アルコール、１つ以上の低級脂肪族ジオール、および／または約２００〜約６００（「低級ポリオキシアルキレン」）の範囲内のＭＷを有する１つ以上のポリオキシアルキレンを含む、三元系である。
【００６５】
本明細書で使用されるとき、「低級アルコール」は、１〜１５個の炭素原子を有する飽和および不飽和の非芳香族および芳香族アルコールを含み、随意に１つ以上のヘテロ原子、例えば、１つ以上の酸素原子を炭素原子（複数可）の代わりに含み得る。低級非芳香族アルコールは、直鎖、分枝、または環状の一次、二次、または三次低級脂肪族アルコールおよび低級ヘテロ脂肪族アルコールを含み得る。低級脂肪族アルコールの例には、これらに限定されないが、メタノール、エタノール、プロパン−１−オル、プロパン−２−オル、ブタン−１−オル、ブタン−２−オル、２−メチルプロパン−１−オル、２−メチルプロパン−２−オル、ペンタン−１−オル、ペンタル−２−オル、ペンタン−３−オル、３−メチルブタン−１−オル、ヘキサン−１−オル、ヘキサン−２−オル、ヘキサン−３−オル、およびシクロヘキサノールが挙げられる。低級ヘテロ脂肪族アルコールの例には、これらに限定されないが、アルキレングリコールモノアルキルエーテル、例えば、エチレングリコールモノアルキルエーテル、プロピレングリコールモノアルキルエーテル、およびテトラグリコールが挙げられる。いくつかの特定の実施形態において、低級非芳香族アルコール、例えば低級脂肪族および低級ヘテロ脂肪族アルコールは、任意のヘテロ原子を含む１〜８個の非水素原子を含有する。
【００６６】
低級芳香族アルコールは、脂肪族アルコールまたはヘテロ脂肪族アルコール等の非芳香族アルコール上の芳香族（例えば、フェニル、ナフチル等）ペンダント基により寄与され得る、芳香族特性を有する低級アルコールを含む。したがって、アルコール基は、フェノール、一次、二次、または三次であってよい。低級芳香族アルコールの例には、これらに限定されないが、フェノール、ベンジル、アルコール、２−メチルベンジルアルコール、およびフェノキシエタノールが挙げられる。
【００６７】
本明細書で使用されるとき、「低級脂肪族ジオール」は、２〜１０個の炭素原子を含有する飽和または不飽和の直鎖、分枝、または環状脂肪族ジオールを含む。アルコール基は、独立して、互いに一次、二次、または三次であってよい。いくつかの特定の実施形態において、低級脂肪族ジオールは、飽和または不飽和の直鎖または分枝ジオールであり、本明細書では「低級アルキレンジオール」と称される（「低級グリコール」とも称される）。いくつかの特定の実施形態において、低級アルキレンジオールは、飽和直鎖または分枝ジオールであり、本明細書では「低級アルキルジオール」と称される。いくつかの特定の実施形態において、低級アルキルジオールは、直鎖ジオールであり、本明細書では「低級ｎ−アルキルジオール」と称される。本明細書に記載される溶媒系およびゲルにおいて有用低級脂肪族ジオールの特定例には、これらに限定されないが、エタン−１，２−ジオール（エチレングリコール）、プロパン−１，２−ジオール（プロピレングリコール）、プロパン−１，３−ジオール、ブタン−１，２−ジオール、ブタン−１，３−ジオール、ブタン−２，３−ジオール、ブタン−１，４−ジオール、ペンタン−１，５−ジオール、ペンタン−１，２−ジオール、２−メチル−２，４−ペンタンジオール等が挙げられる。
【００６８】
本明細書で使用されるとき、「低級ポリオキシアルキレン」は、低級脂肪族ジオールから形成され、約２００〜約６００の範囲内の分子量を有するポリマーを含む。本明細書に記載される溶媒系およびゲルにおいて有用な低級ポリオキシアルキレンの特定例には、これらに限定されないが、ポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ  ２００、ＰＥＧ  ４００、およびＰＥＧ  ６００）、ポリプロピレングリコール（例えば、ＰＰＧ−９）、およびジプロピレングリコールが挙げられる。
【００６９】
新規の三元溶媒系は、一般に、約３．５重量％〜約５重量％の総低級芳香族アルコール（複数可）および約９５重量％〜約９６．５重量％の総低級脂肪族ジオールおよびポリオキシアルキレンの混合物を含み、総低級脂肪族ジオール：総ポリオキシアルキレンの重量比は、約１：１〜約１：２であり、いくつかの特定の実施形態では、約１：１．６７である。
【００７０】
溶媒系は、追加の薬剤および溶媒、例えば、水溶液中のＭＴＺの溶解度を増強する追加の薬剤または溶媒、例えば、シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、ナイアシン、および／またはナイアシンアミドを含み得る。しかしながら、均質であり良好な保存安定特性を有する、高用量ＭＴＺ水系ゲルが、そのような追加の溶解剤を含まない溶媒系を使用して調製され得、特定の実施形態では、低級芳香族アルコール、低級脂肪族ジオール、および低級ポリオキシアルキレンのみを含むことを発見した。したがって、いくつかの特定の実施形態において、溶媒系および得られるゲルは、水溶液中のＭＴＺの溶解度を増強する薬剤、例えば、シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、ナイアシン、および／またはナイアシンアミド等を実質的に含まない。他の特定の実施形態において、溶媒系は、１つ以上の低級芳香族アルコール、１つ以上の低級脂肪族ジオール、および１つ以上の低級ポリオキシアルキレンからなる三元系である。
【００７１】
溶媒系は、一般に、約３０重量％〜約６０重量％の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲル、ある実施形態において、約４０重量％〜約５０重量％のゲル、およびいくつかの特定の実施形態では、約４０重量％〜約４５重量％のゲルを表すが、ゲルはそれよりも多量または少量の総溶媒を含んでよい。
【００７２】
特定の有用な三元溶媒系は、１つ以上の低級芳香族アルコールとしてベンジルアルコール、１つ以上の低級脂肪族ジオールとしてプロパン−１，２−ジオール（プロピレングリコール）、および１つ以上の低級ポリオキシアルキレンとして４００のＭＷ（ＰＥＧ  ４００）を有するポリエチレングリコールを含む。
【００７３】
いくつかの特定の実施形態において、本明細書に記載される高用量粘膜接着性水系ゲル中でＭＴＺを溶解するために有用な溶媒系は、得られる高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルに対して、（ａ）ポリエチレングリコール等のポリオキシアルキレン、例えばＰＥＧ  ４００を、約１０重量％〜約５０重量％、例えば、約２０重量％〜約４０重量％、もしくは約２０重量％〜約３０重量％、特定の実施形態では、約２５重量％の濃度で含み、（ｂ）フェノキシエタノールもしくはベンジルアルコール等の低級芳香族アルコール、特定の実施形態では、ベンジルアルコールを、約１．３重量％〜約２．５重量％、もしくは約１．５重量％〜２．０重量％、特定の実施形態では、約２．０重量％の濃度で含み、および／または（ｃ）低級脂肪族ジオール、例えばプロパン−１，２−ジオールを、約３重量％超〜約２０重量％、例えば約１５重量％〜２０重量％、および特定の実施形態では、約１５重量％の濃度で含む。
【００７４】
さらに他の特定の実施形態において、溶媒系は、（ａ）ＰＥＧ  ４００、（ｂ）ＰＥＧ  ４００および低級芳香族アルコール、例えば、ベンジルアルコール、（ｃ）ＰＥＧ  ４００、低級芳香族アルコール、例えば、ベンジルアルコールおよびプロパン−１，２−ジオール、（ｄ）低級芳香族アルコール、例えばベンジルアルコール、ならびに／または（ｅ）プロパン−１，２−ジオールを含む。
【００７５】
さらに他の特定の実施形態において、溶媒系は、得られる高用量ＭＴＺ粘膜接着性水系ゲルに対して、（ａ）約２５重量％のＰＥＧ  ４００、（ｂ）約２５重量％のＰＥＧ  ４００および約２重量％のベンジルアルコール、または（ｃ）約２５重量％のＰＥＧ  ４００、約２重量％のベンジルアルコール、および約１５重量％のプロパン−１，２−ジオールを含む。
【００７６】
膣内適用のために設計されたゲルの場合、膣領域内の標的部位で刺激を生じないベンジルアルコールの濃度を使用することが好ましい。したがって、溶媒系がベンジルアルコールを含むいくつかの特定の実施形態において、ゲルに含まれるベンジルアルコールの量は、約１．３重量％〜約２．５重量％、例えば約１．５重量％〜約２重量％の範囲であり、特定の実施形態では約２重量％である。
【００７７】
さらに他の特定の実施形態において、本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、プロパン−１，２−ジオールを少なくとも約３重量％〜約２０重量％、例えば約１５重量％〜約２０重量％、特定の実施形態では約１５重量％含む。さらに他の特定の実施形態において、ゲルは、約１．３重量％のＭＴＺおよび約２５重量％のＰＥＧ  ４００を含む。さらに他の特定の実施形態において、ゲルは約１．３重量％のＭＴＺ、約２５重量％のＰＥＧ  ４００、および約２重量％のベンジルアルコールを含む。さらに他の特定の実施形態において、ゲルは約１．３重量％のＭＴＺ、約２５重量％のＰＥＧ  ４００、約２重量％のベンジルアルコール、および約１５重量％のプロピレングリコールを含む。
【００７８】
さらに他の特定の実施形態において、本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを作製するために有用な溶媒系は、ゲルに対して、（ａ）約１０重量％〜約５０重量％、例えば、約２０重量％〜約４０重量％、または約２０重量％〜約３０重量％、特定の実施形態では、約２５重量％の濃度のＰＥＧ  ４００、（ｂ）約１．３重量％〜約２．５重量％、例えば約１．５重量％〜約２重量％、特定の実施形態では、約２重量％のベンジルアルコール、（ｃ）少なくとも約３重量％〜約２０重量％、例えば約１５重量％〜約２０重量％、特定の実施形態では、約１５重量％の濃度のプロパン−１，２−ジオール、（ｄ）約２５重量％のＰＥＧ  ４００、（ｅ）約２５重量％のＰＥＧ  ４００および約２重量％のベンジルアルコール、ならびに（ｆ）約２５重量％のＰＥＧ  ４００、約２重量％のベンジルアルコール、および約１５重量％のプロピレングリコールのいずれか１つを含む。
【００７９】
本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルのｐＨは、一般に、意図される適用領域のｐＨに一致する必要があり、例えば、膣内適用を目的とするときは健常な膣のｐＨに一致する必要がある。したがって、膣内適用を目的とするゲルの場合、ｐＨは、一般に約ｐＨ３〜約ｐＨ５の範囲内、例えば約ｐＨ４のｐＨである必要がある。ｐＨは、当該技術分野においてよく知られ、要約のセクションで論じられるように、酸、塩基緩衝液、および他のｐＨ調製剤を用いて調整および／または維持され得る。
【００８０】
本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、当該技術分野においてよく知られるように、他の追加の構成成分、例えば１つ以上の保存剤を含むこともできる。使用されるとき、保存剤（複数可）は、一般に、わずか約１重量％または２重量％の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを含み、典型的に約０．２５重量％〜約１．０重量％の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを含む。保存剤（複数可）の選択肢は重要でない。医薬製剤に使用するために適した多数の保存剤は、当業者によく知られている。これらの保存剤のいずれか、およびいくつかの特定の実施形態では、抗菌特性を有するものを、単独または組み合わせで、本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲル中で使用することができる。いくつかの特定の実施形態において、１つ以上の保存剤は、パラベンとしても知られる４−ヒドロキシ安息香酸のエステルである。適切なパラベンには、４−ヒドロキシ安息香酸の低級アルキルエステル、例えばメチル４−ヒドロキシベンゾエート（メチルパラベン）、エチル４−ヒドロキシベンゾエート（エチルパラベン）、およびプロピル４−ヒドロキシ−ベンゾエート（プロピルパラベン）が挙げられる。
【００８１】
熟練者であれば、本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルにＭＴＺを溶解するために使用される溶媒が、保存特性を有してもよいことを理解するであろう。例えば、ベンジルアルコールは、よく知られた保存特性を有する。新規の溶媒系中の溶媒として使用されるとき、保存特性は有利に使用され得る。実際に、保存特性を持つ溶媒を含むゲルは、追加の保存剤を含む必要がない。溶媒系に含まれる溶媒の保存特性を利用するゲルは、溶媒が経時的に分解および／または酸化し得る例において、ゲルが有効なＭＴＺ溶解特性に加えて、所望の期間後に有効な保存特性を有するある量の未分化および／または未酸化溶媒を保持するように、分解および／または酸化を考慮するある量の過剰を含むべきである。例えば、ベンジルアルコールは、保存特性を有しないベンズアルデヒドに酸化することが知られている。ベンジルアルコールをＭＴＺ溶媒として、および保存剤として用いる、本明細書に記載される高用量ＭＴＺゲルの実施形態において、ある量のベンジルアルコールは、ＭＴＺを溶解するだけでなく、ゲルの予想される貯蔵期間に対する保存効果をもたらすゲルに含まれる必要がある。ベンジルアルコール、または溶媒系中で一部保存剤として用いられる他の溶媒の過剰量は、所望の保管条件下で、特定溶媒の分解および／または酸化特性、ならびに動態に基づいて決定され得る。
【００８２】
保存特性を有する溶媒を含む高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの実施形態は、１つ以上の追加の保存剤、ならびに／または分解および／もしくは酸化から溶媒を保護するように設計された保存剤を含んでもよい。例えば、ベンジルアルコールの場合、本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、一部ベンジルアルコールを酸化から保護するように、抗酸化特性を有する１つ以上の追加の保存剤を含んでよい。特定の実施形態において、ベンジルアルコールを含む高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、１つ以上のパラベンを追加の保存剤として含む。いくつかの特定の実施形態において、高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、約０．１重量％の総パラベン、ならびにいくつかの特定の実施形態では、約０．０２重量％のメチルパラベンおよび約０．０８重量％のプロピルパラベンを含む。
【００８３】
高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、純水の形態または水性緩衝液の形態のいずれかで水を含んでもよい。典型的に、ゲルに含まれる水の量は、約７０重量％未満、より典型的には約６０重量％未満、およびいくつかの特定の実施形態では、約４５重量％〜約５５重量％の範囲である。
【００８４】
特定の例示的高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、
（ａ）少なくとも１．３重量％のＭＴＺ、約１．２重量％〜約２重量％のＭＴＺ、約３重量％〜約１．５重量％のＭＴＺ、または約１．３重量％のＭＴＺと、
（ｂ）１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマーと、
を含む。
【００８５】
別の特定の例示的高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、
（ａ）約１．２重量％〜約２重量％のＭＴＺ、例えば約１．３重量％〜約１．５重量％のＭＴＺ、および特定の実施形態では、約１．３重量％のＭＴＺと、
（ｂ）１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマーと、
（ｉ）約２５重量％のＰＥＧ  ４００、および／または
（ｉｉ）約２重量％のベンジルアルコール、および／または
（ｉｉｉ）約１５重量％のプロパン−１，２−ジオール
を含む。
【００８６】
別の特定の例示的高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、
（ａ）約１．３重量％のＭＴＺおよび２５重量％のＰＥＧ  ４００、
（ｂ）（ａ）約１．３重量％のＭＴＺ、約２５重量％のＰＥＧ  ４００、約２重量％のベンジルアルコール、または
（ｃ）約１．３重量％のＭＴＺ、約２５重量％のＰＥＧ  ４００、約２重量％のベンジルアルコール、および約１５重量％のプロパン−１，２−ジオール
を含む。
６．３．ゲルを作製する方法
【００８７】
本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、一般に、ゲルの水溶性成分を水または緩衝液に溶解して水溶液を産生し、ＭＴＺ溶媒系の成分を混合してＭＴＺ溶媒系中に所望の量のＭＴＺを溶解してＭＴＺ溶液を産生し、必要量の水溶液およびＭＴＺ溶液を一緒に混合し、所望の量のゲル化剤を混合液に添加することにより調製され得る。使用されるゲル化ポリマーに応じて、ゲル化ポリマー（複数可）に添加する前に、酸および／または塩基によりＭＴＺ溶液のｐＨを特定の範囲内に調整し、次に得られるゲルのｐＨを酸または塩基により所望の特定の範囲内に調整することが望ましい場合がある。高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを作製するための特定の方法は、実施例２に提供される。
６．４．使用
【００８８】
本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを使用して、かかる投与が有利となる任意の文脈において、ＭＴＺを局所投与することができる。以下でさらに記載される特定の実施形態において、ゲルは、ＢＶに罹患する、またはそれを診断された女性を治療するために、有利に膣内使用され得る。
【００８９】
本明細書で使用されるように、ある女性がＢＶに関連すると認められる症状、状態、または提示の１つ以上を経験する場合、その女性はＢＶに「罹患する」またはそれを診断されたと言われる。ＢＶのある個人は、典型的に、特に不快な「魚臭い」オフホワイトの薄い均質な膣分泌物を呈し、炎症反応がない。個人は、乳酸菌属（特に過酸化水素を生成する形態）のまん延および濃度の減少、ならびに付随するガルドネレラバジナリス（Ｇａｒｄｎｅｒｅｌｌａ  ｖａｇｉｎａｌｉｓ）、モビルンカス（Ｍｏｂｉｌｕｎｃｕｓ  ｓｐｐ）、（バクテロイド属、プレボテラ属、およびポルフィロモナス属の）嫌気性グラム陽性桿菌、ペプトストレプトコッカス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐｐ）、およびマイコプラズマホミニス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｈｏｍｉｎｉｓ）の増加も呈する。素因は、非白色種、妊娠前、ＩＵＤの使用、性行為、新たな性交渉の相手、および最近の抗生物質の使用である。ＢＶは同時トリコモナス症とも関連付けられる。
【００９０】
ＢＶの臨床診断を確立するための基準は、特に、１９９８年７月付の「Ｇｕｉｄａｎｃｅ  ｆｏｒ  Ｉｎｄｕｓｔｒｙ：Ｂａｃｔｅｒｉａｌ  Ｖａｇｉｎｏｓｉｓ−Ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ」という表題のＦＤＡガイダンスの草案に提供され、参照することによりその全体が本明細書に組み込まれる（以下「ＦＤＡガイダンス」と称する）。ＦＤＡガイダンスのとおり、ＢＶの臨床診断は、以下の観察を含む。
１．外陰および膣の掻痒および炎症をわずかに伴うか、または伴わないオフホワイト（乳白色または灰色）の薄い均質な分泌物
２．生理食塩水「ウェットマウント」の顕微鏡審査時の総上皮細胞の２０％以上における「糸玉状細胞」の存在
３．ｐＨ４．５超の膣分泌物、および
４．１０％  ＫＯＨを滴下添加したときの膣分泌の魚臭（すなわち、「臭気試験」陽性）。
【００９１】
これらの観察は、「アムセル基準」と一般に称され、４つの基準をすべて呈する女性は、本明細書において「アムセル陽性」と称される。
【００９２】
ＢＶであると考えられる膣炎を経験する女性は、典型的に、４以上のグラム染色スライドヌージェントスコアも有する。ヌージェントスコアは、１０００倍の拡大で油浸下でのスライド審査から計算される以下の３つの細菌形態型の重量合計に基づく。
・乳酸菌：大グラム陽性桿菌
・ガルドネレラ／バクテロイド属：小グラム不定性球桿菌／小グラム陰性桿菌
・モビルンカス属：薄い湾曲したグラム不定性桿菌
【００９３】
ヌージェント基準に準拠するＢＶの基準は、総スコア７以上であり、スコア４〜６は中間であるとみなし、スコア０〜３は正常であるとみなす。３以上のスコアは、ＦＤＡにより異常であるとみなされる。
【００９４】
形態型は、油浸された領域当たりに見られる平均数として採点される（最小１０〜２０領域が審査されるべきである）。次に各形態型は、以下のように数値得点が付与される。０＝形態型は見られない、１＋＝１領域当たり１未満の形態型、２＋＝１領域当たり１〜４形態型、３＋＝１領域当たり５〜３０形態型、および４＋＝１領域当たり３０を超える形態型。総ヌージェントスコアは、個別の形態型のスコアを合計することにより計算される。ヌージェント採点システムに関するさらなる情報は、Ｎｕｇｅｎｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，″Ｒｅｌｉａｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｎｇ  Ｂａｃｔｅｒｉａｌ  Ｖａｇｉｎｏｓｉｓ  ｉｓ  Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｂｙ  ａ  Ｓｔａｎｄａｒｄｉｚｅｄ  Ｍｅｔｈｏｄ  ｏｆ  Ｇｒａｍ  Ｓｔａｉｎ  Ｉｎｔｅｒｐｒｅｔａｔｉｏｎ，″Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｍｉｃｒｂｉｏｌ  ２９（２）：２９７−３０１を参照されたい。４を超えるヌージェントスコアを持つ女性は、本明細書において「ヌージェント陽性」称される。
【００９５】
いくつかの実施形態において、上記アムセル基準の少なくとも３つを呈する個人は、ＢＶに罹患している、および／またはそれを診断されたと考慮される。いくつかの実施形態において、ヌージェント陽性の個人は、ＢＶに罹患している、および／またはそれを診断されたと考慮される。特定の実施形態において、ＢＶに罹患している、および／またはそれを診断された個人は、アムセル陽性である。さらに他の特定の実施形態において、ＢＶに罹患している、およびそれを診断された個人は、アムセル陽性およびヌージェント陽性の両方である。
【００９６】
好ましくは、ＢＶに罹患している、および／またはそれを診断された個人は、クラミジア、トリコモナス、淋病、およびカンジダを含むが、これらに限定されない他の膣感染を有しない。好ましくは、ＢＶに罹患している、および／またはそれを診断された個人は、クラミジア、トリコモナス、淋病、およびカンジダを含むが、これらに限定されない他の膣感染を治療されていない。一実施形態において、ＢＶに罹患している、および／またはそれを診断された個人は、フルコナゾールで治療されている。
【００９７】
この方法は、一般に、ＢＶに罹患している、および／またはそれを診断された女性に、本明細書に記載されるある量の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを、治療的利益を提供するために十分な適用回数で膣内適用することを伴う。本明細書で使用されるとき、「治療的利益」は、例えば、アムセル基準もしくはヌージェントスコアの１つ以上を含む、ＢＶの症状の１つ以上、および／またはＢＶの臨床兆候の１つ以上が軽減、消滅、根絶、または改善されることを指す。治療計画は、根底にあるＢＶ状態を治癒することなく、対象に治療利益を提供することができる。
【００９８】
本明細書で使用されるとき、ＢＶの症状または兆候は、治療後の程度が減少する、または正常とみなされるレベルに近付く場合に軽減される。例えば、アムセル基準は、膣分泌物が正常に戻る場合、ウェットマウントにおける糸玉状細胞の数が膣上皮細胞の約２０％未満である、例えば、約１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１０％、５％未満、もしくはさらにそれ以下である場合、膣分泌物のｐＨが治療前の約ｐＨ４．７〜約ｐＨ５．３から治療後約ｐＨ４．０〜約ｐＨ４．５の範囲内、例えば、ｐＨ４．３、ｐＨ４．２、ｐＨ４．１、もしくはｐＨ４．０に低減する場合、および／または臭気試験が大量のアミンもしくは「魚臭」を生じない場合に改善される。ＢＶの症状は、症状がよく知られた検出手段（例えば、実施例のセクションに提供される様々な検出手段およびＦＤＡガイダンスに開示されるもの）を使用してもはや検出されない場合に排除または根絶されたと考えられる。
【００９９】
本明細書で使用されるとき、「治療上有効な量」は、治療利益を提供する高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルによる治療計画を指す。
【０１００】
いくつかの実施形態において、ある量の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、少なくとも１つのアムセル基準、好ましくは少なくとも２もしくは３、および最も好ましくは４つのアムセル基準すべてにおいて改善を示す、ならびに／または４未満のヌージェントスコアをもたらすために十分な適用回数で適用される。
【０１０１】
いくつかの特定の実施形態において、ある量の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、臨床治癒をもたらすために十分な適用回数で適用される。本明細書で使用されるとき、「臨床治癒」は、４つのアムセル基準すべてが以下に記載されるように中和される場合に達成される。
１．ＢＶの本来の分泌特性が生理周期に応じて外観および一貫性が変動する正常な生理学的分泌に戻った。
２．生理食塩水ウェットマウントが糸玉状細胞に対して陰性である。
３．膣分泌物のｐＨが４．７ｐＨ未満であり、典型的に、ｐＨ４．０〜ｐＨ６．０を測定するｐＨ紙を使用して測定される。
４．臭気試験は任意のアミン（「魚」）臭に対して陰性である。
【０１０２】
いくつかの特定の実施形態において、ある量の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、細菌学的治癒をもたらすために十分な適用回数で適用される。本明細書で使用されるとき、「細菌学的治癒」は、４未満のヌージェントスコア、例えば、ヌージェントスコア１、２、もしくは３、または０〜３の範囲内のヌージェントスコアが得られるときに達成される。
【０１０３】
さらに他の特定の実施形態において、本明細書に記載されるある量の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、治療的治癒をもたらすために十分な適用回数で適用される。本明細書で使用されるとき、「治療的治癒」は、臨床的治癒および細菌学的治癒の両方が得られるときに達成される。
【０１０４】
さらに他の特定の実施形態において、ある量の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、医師が追加の治療が必要ないと判断するために十分な適用回数で適用される。さらに別の特定の実施形態において、本明細書に記載されるある量の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、ＦＤＡガイダンスに定義される任意の治癒レベルを達成するために十分な適用回数で適用される。
【０１０５】
いくつかの特定の実施形態において、単一適用で適用される量の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、約６０ｍｇ〜約１００ｍｇＭＴＺを含有する。いくつかの特定の実施形態において、単一適用で適用される量の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、約６０ｍｇ〜約８０ｍｇ、または約６０ｍｇ〜約７０ｍｇのＭＴＺを含有する。いくつかの特定の実施形態において、ある量の単一適用で適用される高用量ＭＴＺ水系ゲルは、約６５ｍｇのＭＴＺを含有する。
【０１０６】
適用の頻度および期間は異なり得、所望の転帰に依存し得る。一般に、ゲルは１日１回、１、２、３、４、または５日の期間適用される。約６５ｍｇのＭＴＺを含有する高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの単一適用により、著しい治療利益が達成されることがわかった。したがって、いくつかの実施形態において、ゲルは単一適用で、すなわち高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの追加適用なしに適用される。１日１回、５日の期間適用される、約６５ｍｇのＭＴＺを含有する高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの適用が、ＦＤＡ認可された０．７５重量％メトロニダゾールゲルによる同様の治療経過よりも低いＢＶ再発率をもたらし、治療後の外陰膣カンジダ症の発生も事実上なかったこともわかった。したがって、いくつかの実施形態において、ゲルは１日１回、５日の期間適用される。
【０１０７】
本明細書で使用するとき、用語「再発」は、本明細書に記載される高用量ＭＴＺゲルによる治療後に、本明細書において定義されるＢＶの症状の少なくとも１つが再出現し、治療の終了後に対象が少なくとも２回目のＢＶを診断されることを意味する。
【０１０８】
「再発率の減少」は、ＭＥＴＲＯＧＥＬ  ＶＡＧＩＮＡＬ（登録商標）などの従来の０．７５重量％  ＭＴＺゲルで観察される病歴的再発までの時間と比較して、本明細書に記載される高用量ＭＴＺゲルによる治療の終了後のＢＶ症状の再発までの時間の増加を意味する。特定の実施形態において、再発率の減少は、ＢＶの症状が、治療の終了後少なくとも約１９日、例えば、２０日、２１日、２２日、２３日、２４日、２５日、２６日、２７日、２８日、２９日、またはそれ以上の期間認められないことを意味する。治療の終了後少なくとも２９日、例えば、３０日、３５日、４０日、４５日、５０日、３ヶ月、６ヶ月、９ヶ月、１年、またはそれ以上の期間ＢＶの症状が再発しないことは、治療終了後の対象において再発がないことを示唆する。
【０１０９】
「再発率の減少」は、研究集団に対して定義することもできる。例えば、治療後２０日以上でＢＶの症状を経験する女性の人数を統計的に有意に減少させる、本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルによる治療計画は、従来の０．７５重量％  ＭＴＺゲル（例えば、ＭＥＴＲＯＧＥＬ  ＶＡＧＩＮＡＬ（登録商標）等による治療後２０日以上でＢＶの症状を報告した人数と比較して、ＢＶの再発率が減少したとみなされる。
【０１１０】
使用するために、高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、所望の適用形態に好都合な任意の形態でパッケージ化され得る。膣内適用に有用な特定の実施形態において、高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルは、特定の例として、事前に充填された用量シリンジ型アプリケータとして、単位用量形態でパッケージ化される。
６．５．追加の非限定的態様
【０１１１】
高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの構成成分、ならびにそれらをＢＶに罹患する、および／またはそれを診断された女性を治療するために使用する方法の追加の非限定的態様が以下に提供される。
６．５．１．方法
【０１１２】
Ｍ１．ＢＶに罹患する、および／またはそれを診断された対象を治療する方法であって、１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマー、約１重量％〜約２重量％のメトロニダゾール（ＭＴＺ）、および水を含む粘膜接着性水系ゲルを対象に膣内適用することを含み、単一適用において適用されるある量の粘膜接着性水系ゲルが、約６０ｍｇ〜約１００ｍｇのＭＴＺを含有する、方法。
【０１１３】
Ｍ２．ヒト死体の皮膚を用いて行われたインビトロフランツセル皮膚透過実験において、角質層および受容液内で測定された粘膜接着性水系ゲルからのＭＴＺのレベルが、濃度について正規化されるとき、ＭＥＴＲＯＧＥＬ  ＶＡＧＩＮＡＬ（登録商標）から測定されるＭＴＺレベルより、それぞれ少なくとも約２５〜５５倍高く、少なくとも約１〜２０倍低い、態様Ｍ１に記載の方法。
【０１１４】
Ｍ３．粘膜接着性水系ゲルが、制御されたせん断速度法、Ｂｏｈｌｉｎ  ＣＶＯ１００レオメータ、および表１１のレオメータ設定を使用して２５℃で測定された約２００，０００ｍＰａ〜約４００，０００ｍＰａの範囲の粘度を有する、態様Ｍ１に記載の方法。
【０１１５】
Ｍ４．ＭＧ３３ＰＢのものの約±１０％内の範囲の粘膜接着の程度を有する、態様Ｍ１に記載の方法。
【０１１６】
Ｍ５．粘膜接着性水系ゲルが、約３０重量％〜約６０重量％の水を含む、態様Ｍ１に記載の方法。
【０１１７】
Ｍ６．粘膜接着性水系ゲルが、デキストリン、シクロデキストリン、ナイアシン、およびナイアシンアミドを実質的に含まない、態様Ｍ１に記載の方法。
【０１１８】
Ｍ７．粘膜接着性水系ゲルが、少なくとも６ヶ月の期間、２５℃で安定している、態様Ｍ１に記載の方法。
【０１１９】
Ｍ８．粘膜接着性水系ゲルが、約１重量％〜約３重量％の総粘膜接着性ゲルポリマー、および約４０〜４５重量％のＭＴＺの溶媒系を含む、態様Ｍ１〜Ｍ７のいずれか１項に記載の方法。
【０１２０】
Ｍ９．溶媒系が、２５℃で少なくとも約２０ｍｇ／ｇの飽和ＭＴＺ溶解度を有する１つ以上の溶媒を含む、態様Ｍ８に記載の方法。
【０１２１】
Ｍ１０．溶媒系が、２５℃で少なくとも約５０ｍｇ／ｇの飽和ＭＴＺ溶解度を有する１つ以上の溶媒、および随意に２５℃で約２０ｍｇ／ｇ〜約２５ｍｇ／ｇの範囲内の飽和ＭＴＺ溶解度を有する１つ以上の溶媒を含む、態様Ｍ９に記載の方法。
【０１２２】
Ｍ１１．溶媒系が、１つ以上の低級芳香族アルコール、および随意に１つ以上の低級脂肪族ジオール、ならびに／または約２００〜約４００の範囲の分子量を有する１つ以上のポリオキシアルキレン（「低級ポリオキシアルキレン」）を含む、態様Ｍ１０に記載の方法。
【０１２３】
Ｍ１２．溶媒系が、１つ以上の低級芳香族アルコール、１つ以上の低級脂肪族ジオール、および／または１つ以上の低級ポリオキシアルキレンを含む、態様Ｍ１１に記載の方法。
【０１２４】
Ｍ１３．溶媒系が、１つ以上の低級芳香族アルコール、１つ以上の低級脂肪族ジオール、および１つ以上の低級ポリオキシアルキレンを含む、態様Ｍ１２に記載の方法。
【０１２５】
Ｍ１４．１つ以上の低級芳香族アルコールが、ベンジルアルコール、フェノキシエタノール、およびそれらの混合物からなる群から選択される、態様Ｍ１１〜Ｍ１３のいずれか１項に記載の方法。
【０１２６】
Ｍ１５．１つ以上の低級アルキレンジオールが、エタン−１，２−ジオール（エチレングリコール）、プロパン−１，２−ジオール（プロピレングリコール）、およびそれらの混合物からなる群から選択される、態様Ｍ１１〜Ｍ１４のいずれか１項に記載の方法。
【０１２７】
Ｍ１６．１つ以上の低級ポリオキシアルキレンが、ポリオキシエチレン（ポリエチレングリコール）、ポリオキシプロピレン（ポリプロピレングリコール）、およびそれらの混合物からなる群から選択される、態様Ｍ１１〜Ｍ１５のいずれか１項に記載の方法。
【０１２８】
Ｍ１７．１つ以上の低級脂肪族ジオール、および１つ以上の低級ポリオキシアルキレンが、約１：１〜約１：２の範囲の総低級脂肪族ジオール：総低級ポリオキシアルキレン重量比で前記溶媒系に含まれる、態様Ｍ１１〜Ｍ１６のいずれか１項に記載の方法。
【０１２９】
Ｍ１８．溶媒系が、約３．５重量％〜約５重量％の総低級芳香族アルコール、および約９５重量％〜約９５．５重量％の１つ以上の低級アルキレンジオールと１つ以上の低級ポリオキシアルキレンとの混合物を含む、態様Ｍ１３〜Ｍ１７のいずれか１項に記載の方法。
【０１３０】
Ｍ１９．総低級アルキレンジオール：総低級ポリオキシアルキレンの重量比が、約１：１〜約１：１．６７の範囲である、態様Ｍ１８に記載の方法。
【０１３１】
Ｍ２０．溶媒系が、ベンジルアルコール、プロパン−１，２−ジオール、およびＰＥＧ  ４００からなる、態様Ｍ８〜Ｍ１９のいずれか１項に記載の方法。
【０１３２】
Ｍ２１．溶媒系が、約３．５重量％〜約５重量％のベンジルアルコール、および約９５重量％〜約９６．５重量％のプロパン−１，２−ジオールとＰＥＧ  ４００との混合物からなり、プロパン−１，２−ジオール：ＰＥＧ  ４００の重量比が、約１：１〜約１：１．６７の範囲である、態様Ｍ８〜Ｍ２０のいずれか１項に記載の方法。
【０１３３】
Ｍ２２．粘膜接着性水系ゲルが、１つ以上の保存剤をさらに含む、態様Ｍ１〜Ｍ２１のいずれか１項に記載の方法。
【０１３４】
Ｍ２３．１つ以上の保存剤が、４−ヒドロキシ安息香酸のエステル（パラベン）である、態様Ｍ１〜Ｍ２２のいずれか１項に記載の方法。
【０１３５】
Ｍ２４．１つ以上の保存剤が、メチル４−ヒドロキシベンゾエート（メチルパラベン）、プロピル４−ヒドロキシベンゾエート（プロピルパラベン）、およびそれらの混合物からなる群から選択される、態様Ｍ２３に記載の方法。
【０１３６】
Ｍ２５．粘膜接着性水系ゲルが、約ｐＨ３．０〜約ｐＨ５．０の範囲のｐＨを有する、態様Ｍ１〜Ｍ２３のいずれか１項に記載の方法。
【０１３７】
Ｍ２６．粘膜接着性水系ゲルが、約ｐＨ４．０のｐＨを有する、態様Ｍ２５に記載の方法。
【０１３８】
Ｍ２７．１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマーが、ヒドロキシエチルセルロース、カルボマー、ポリカルボフィル、およびそれらの混合物からなる群から選択される、態様Ｍ１〜Ｍ２６のいずれか１項に記載の方法。
【０１３９】
Ｍ２８．単一適用で適用される前記量の粘膜接着性水系ゲルが、約６５ｍｇのＭＴＺを含有する、態様Ｍ１〜Ｍ２７のいずれか１項に記載の方法。
【０１４０】
Ｍ２９．粘膜接着性水系ゲルが、約１重量％〜約１．５重量％のＭＴＺを含む、態様Ｍ１〜Ｍ２８のいずれか１項に記載の方法。
【０１４１】
Ｍ３０．粘膜接着性水系ゲルが、１日１回、１〜５日の期間適用される、態様Ｍ２９に記載の方法。
【０１４２】
Ｍ３１．粘膜接着性水系ゲルが、１日１回、１日の期間適用される、態様Ｍ２９に記載の方法。
【０１４３】
Ｍ３２．粘膜接着性水系ゲルが、１日１回、５日の期間適用される、態様Ｍ２９に記載の方法。
【０１４４】
Ｍ３３．粘膜接着性水系ゲルが、約１．３重量％のＭＴＺを含む、態様Ｍ１〜Ｍ２８のいずれか１項に記載の方法。
【０１４５】
Ｍ３４．粘膜接着性水性ゲルが、１日１回、１〜５日の期間適用される、態様Ｍ３３に記載の方法。
【０１４６】
Ｍ３５．粘膜接着性水系ゲルが、１日１回、１日の期間適用される、態様Ｍ３３に記載の方法。
【０１４７】
Ｍ３６．粘膜接着性水性ゲルが、１日１回、５日の期間適用される、態様Ｍ３３に記載の方法。
【０１４８】
Ｍ３７．粘膜接着性水系ゲルが、約１．３重量％のＭＴＺ、約２重量％のポリカルボフィルＡＡ−１、約２重量％のベンジルアルコール、約１５重量％のプロパン−１，２−ジオール、約２５重量％のＰＥＧ４００、約０．０２重量％のメチル４−ヒドロキシベンゾエート、および約０．０８重量％のプロピル４−ヒドロキシベンゾエートを含む、態様Ｍ１〜Ｍ７のいずれか１項に記載の方法。
【０１４９】
Ｍ３８．粘膜接着性水系ゲルが、１日１回、１〜５日の期間適用される、態様Ｍ３７に記載の方法。
【０１５０】
Ｍ３９．粘膜接着性水系ゲルが、１日１回、１日の期間適用される、態様Ｍ３７に記載の方法。
【０１５１】
Ｍ４０．粘膜接着性水系ゲルが、１日１回、５日の期間適用される、態様Ｍ３７に記載の方法。
【０１５２】
Ｍ４１．単一適用で適用される量の粘膜接着性水系ゲルが、約６５ｍｇのＭＴＺを含有する、態様Ｍ３７〜Ｍ４０のいずれか１項に記載の方法。
【０１５３】
Ｍ４２．ＢＶに罹患する、および／またはそれを診断された対象を治療する方法であって、臨床的治癒を達成するために十分な適用回数で、ある量の水系ゲルを対象に膣内適用することを含み、水系ゲルが、１つ以上の粘膜接着性ポリマー、約１．３重量％のＭＴＺ、および水を含み、
（ａ）ヒト死体の皮膚を用いて行われたインビトロフランツセル皮膚透過実験において、角質層および受容液内で測定された粘膜接着性水系ゲルからのＭＴＺのレベルが、濃度について正規化されるとき、ＭＥＴＲＯＧＥＬ  ＶＡＧＩＮＡＬ（登録商標）から測定されるＭＴＺレベルより、それぞれ少なくとも約２５〜５５倍高く、少なくとも約１〜２０倍低い、
（ｂ）制御されたせん断速度法、Ｂｏｈｌｉｎ  ＣＶＯ１００レオメータ、および表１１のレオメータ設定を使用して、２５℃で測定された約２００，０００ｍＰａ〜約４００，０００ｍＰａの範囲の粘度、
（ｃ）ＭＧ３３ＰＢのものの約±１０％内の範囲の粘膜接着の程度、
（ｄ）約３０重量％〜約６０重量％の水を含む、
（ｅ）デキストリン、シクロデキストリン、ナイアシン、およびナイシンアミドを実質的に含まない、
（ｆ）２５℃で少なくとも６ヶ月の期間安定している、
（ｇ）約１重量％〜約３重量％の総粘膜接着性ポリマー、および約４０重量％〜４５重量％のＭＴＺの溶媒系を含む、
の群から選択される１つ以上の特徴または特性を有する、方法。
【０１５４】
Ｍ４３．ある量の水系ゲルが、治療的治癒を達成するために十分な適用回数適用される、態様Ｍ４２に記載の方法。
【０１５５】
Ｍ４４．ＢＶに罹患する、および／またはそれを診断された女性を治療する方法であって、約１．３重量％のＭＴＺ、約１重量％〜約２重量％の１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマー、約４０重量％〜約５０重量％のＭＴＺの溶媒系、および約５０重量％〜約５５重量％の水を含む粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの単一適用を女性に膣内適用することを含み、溶媒系が、２５℃で少なくとも約５０ｍｇ／ｇの飽和ＭＴＺ溶解度を有する約３重量％〜約５重量％の１つ以上の溶媒、および２５℃で約２０ｍｇ／ｇ〜約２５ｍｇ／ｇの範囲内の飽和ＭＴＺ溶解度を集合的に有する、約９５重量％〜約９７重量％の１つ以上の溶媒を含み、適用される粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの量が、約６０ｍｇ〜約１００ｍｇのＭＴＺを含有する、方法。
【０１５６】
Ｍ４５．適用される量の粘膜接着性水系ゲルが、約６５ｍｇのＭＴＺを含有する、態様Ｍ４４に記載の方法。
【０１５７】
Ｍ４６．２５℃で少なくとも５０ｍｇ／ｇの飽和ＭＴＺ溶解度を有する１つ以上の溶媒が、ベンジルアルコールである、態様Ｍ４３〜Ｍ４５のいずれか１項に記載の方法。
【０１５８】
Ｍ４７．２５℃で約２０ｍｇ／ｇ〜約２５ｍｇ／ｇの範囲内の飽和ＭＴＺ溶解度を集合的に有する、１つ以上の溶媒がそれぞれ、低級脂肪族ジオールおよび低級ポリオキシアルキレンからなる群から選択される、態様Ｍ４３〜Ｍ４６のいずれか１項に記載の方法。
【０１５９】
Ｍ４８．溶媒系が、約３重量％〜約５重量％のベンジルアルコール、および約９５重量％〜約９７重量％の低級脂肪族ジオールと低級ポリオキシアルキレンとの混合物を含む、低級脂肪族ジオール：低級ポリオキシアルキレンの重量比が、約１：１〜約１：２である、態様Ｍ４３〜Ｍ４７のいずれか１項に記載の方法。
【０１６０】
Ｍ４９．低級脂肪族ジオール：低級ポリオキシアルキレンの重量比が、約１：１．６７である、態様Ｍ４８に記載の方法。
【０１６１】
Ｍ５０．低級脂肪族ジオールがプロパン−１，２−ジオールであり、低級ポリオキシアルキレンがＰＥＧ  ４００である、態様Ｍ４８〜Ｍ４９のいずれか１項に記載の方法。
【０１６２】
Ｍ５１．１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマーがそれぞれ、架橋アクリル酸ポリマーおよびセルロースポリマーからなる群から選択される、態様Ｍ４３〜Ｍ５０のいずれか１項に記載の方法。
【０１６３】
Ｍ５２．１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマーがそれぞれ、カルボマーおよびポリカルボフィルからなる群から選択される、態様Ｍ４３〜Ｍ５１のいずれか１項に記載の方法。
【０１６４】
Ｍ５３．１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマーがポリカルボフィルである、態様Ｍ４３〜Ｍ５２のいずれか１項に記載の方法。
【０１６５】
Ｍ５４．粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルが、約１．３重量％のＭＴＺ、約２重量％のポリカルボフィルＡＡ−１、約２重量％のベンジルアルコール、約１５重量％のプロパン−１，２−ジオール、約２５重量％のＰＥＧ４００、約０．１重量％の１つ以上の保存剤、および約５４．６重量％の水を含む、態様Ｍ４３〜Ｍ５３のいずれか１項に記載の方法。
【０１６６】
Ｍ５５．１つ以上の保存剤がそれぞれパラベンである、態様Ｍ５４に記載の方法。
【０１６７】
Ｍ５６．１つ以上の保存剤が、メチルパラベンおよびプロピルパラベンである、態様Ｍ５５に記載の方法。
【０１６８】
Ｍ５７．粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルが、約１．３重量％のＭＴＺ、約２重量％のポリカルボフィルＡＡ−１、約２重量％のベンジルアルコール、約１５重量％のプロパン−１，２−ジオール、約２５重量％のＰＥＧ４００、約０．０８重量％のメチルパラベン、約０．０２重量％のプロピルパラベン、および約５４．６重量％の水を含む、態様Ｍ４３〜Ｍ５６のいずれか１項に記載の方法。
【０１６９】
Ｍ５８．ＢＶに罹患する、および／またはそれを診断された対象を、そのために適した組成物の単一適用により治療する方法であって、１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマー、水、および約１．３重量％のＭＴＺを含む粘膜接着性水系ゲルを対象に膣内適用することを含み、単一適用で適用される前記量の粘膜接着性水系ゲルが、約６５ｍｇのＭＴＺを含有し、その単一適用が、さらなる治療または適用の完全または実質的な非存在下で、ＢＶを治療または治癒するために十分である、方法。
【０１７０】
Ｍ５９．ＢＶに罹患する、および／またはそれを診断された対象を治療する方法であって、粘膜接着性水性ＭＴＺゲルの単一投与を対象に膣内適用することを含み、粘膜接着性水系ＭＴＺゲルが、１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマー、約１．３重量％のＭＴＺ、および水を含み、単一投与で適用される粘膜接着性水系ゲルの量が、約６５ｍｇのＭＴＺを含有する、方法。
【０１７１】
Ｍ６０．ＢＶに罹患する、および／またはそれを診断された対象を治療する方法であって、粘膜接着性水性ＭＴＺゲルを対象に膣内適用することを含み、（ｉ）粘膜接着性水性ＭＴＺゲルが、１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマー、約１．３重量％のＭＴＺ、および水を含み、（ｉｉ）適用される粘膜接着性水性ＭＴＺゲルの量が、約６５ｍｇのＭＴＺを含有し、（ｉｉｉ）粘膜接着性水性ＭＴＺゲルが、さらなる適用なしに単回適用される、方法。
【０１７２】
Ｍ６１．ＢＶに罹患する、および／またはそれを診断された対象を治療する方法であって、粘膜接着性水性ＭＴＺゲルを対象に膣内適用することを含み、（ｉ）粘膜接着性水性ＭＴＺゲルが、１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマー、約１．３重量％のＭＴＺ、および水を含み、（ｉｉ）単一適用で適用される粘膜接着性水系ゲルの量が、約６５ｍｇのＭＴＺを含有し、（ｉｉｉ）粘膜接着性水性ＭＴＺゲルが、１日１回、１日の期間適用される、方法。
【０１７３】
Ｍ６２．ＢＶに罹患する、および／またはそれを診断された対象を治療する方法であって、粘膜接着性水性ＭＴＺゲルを対象に１日１回、５日の期間膣内適用することを含み、（ｉ）粘膜接着性水性ＭＴＺゲルが、１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマー、約１．３重量％のＭＴＺ、および水を含み、（ｉｉ）単一適用で適用される粘膜接着性水性ＭＴＺゲルの量が、約６５ｍｇのＭＴＺを含有する、方法。
【０１７４】
Ｍ６３．ＢＶに罹患する、および／またはそれを診断された対象を治療する方法であって、ＢＶを治癒するために十分な量の粘膜接着性水性ＭＴＺゲルの単一適用を対象に膣内適用することを含み、粘膜接着性水性ＭＴＺゲルが、１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマー、約１．３重量％のＭＴＺ、および水を含む、方法。
【０１７５】
Ｍ６４．粘膜接着性水性ＭＴＺゲルが、以下の態様Ｃ１〜３２のいずれか１つに記載のゲルである、態様Ｍ５８〜Ｍ６３のいずれか１項に記載の方法。
６．５．２．組成物
【０１７６】
Ｃ１．約１重量％〜約２重量％のＭＴＺ、約１重量％〜約３重量％の１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマー、約３０重量％〜約６０重量％のＭＴＺの溶媒系、および水を含み、ヒト死体の皮膚を用いて行われたインビトロフランツセル皮膚透過実験において、角質層および受容液内で測定された粘膜接着性水系ゲルからのＭＴＺのレベルが、濃度について正規化されるとき、ＭＥＴＲＯＧＥＬ  ＶＡＧＩＮＡＬ（登録商標）から測定されるＭＴＺレベルより、それぞれ少なくとも約２５〜５５倍高く、少なくとも約１〜２０倍低い、粘膜接着性水系ゲル。
【０１７７】
Ｃ２．約１重量％〜約２重量％のＭＴＺ、約１重量％〜約３重量％の１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマー、約３０重量％〜約６０重量％のＭＴＺの溶媒系、および水を含み、制御されたせん断速度法、Ｂｏｈｌｉｎ  ＣＶＯ１００レオメータ、および表１１の前記レオメータ設定を使用して２５℃で測定された約２００，０００ｍＰａ〜約４００，０００ｍＰａの範囲の粘度を有する、粘膜接着性水系ゲル。
【０１７８】
Ｃ３．約１重量％〜約２重量％のＭＴＺ、約１重量％〜約３重量％の１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマー、約３０重量％〜約６０重量％のＭＴＺの溶媒系、および水を含み、ＭＧ３３ＰＢのものの約±１０％内の範囲の粘膜接着の程度を有する、粘膜接着性水系ゲル。
【０１７９】
Ｃ４．約１重量％〜約２重量％のＭＴＺ、約１重量％〜約３重量％の１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマー、約３０重量％〜約６０重量％のＭＴＺの溶媒系、および約３０重量％〜約６０重量％の水を含む、粘膜接着性水系ゲル。
【０１８０】
Ｃ５．約１重量％〜約２重量％のＭＴＺ、約１重量％〜約３重量％の１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマー、約３０重量％〜約６０重量％のＭＴＺの溶媒系、および水を含み、デキストリン、シクロデキストリン、ナイアシン、およびナイアシンアミド、ならびに随意に界面活性剤も実質的に含まない、粘膜接着性水系ゲル。
【０１８１】
Ｃ６．約１重量％〜約２重量％のＭＴＺ、約１重量％〜約３重量％の１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマー、約３０重量％〜約６０重量％のＭＴＺの溶媒系、および水を含み、少なくとも６ヶ月の期間、２５℃で安定している、粘膜接着性水系ゲル。
【０１８２】
Ｃ７．粘膜接着性水系ゲルが、約１重量％〜約３重量％の総粘膜接着性ゲルポリマー、および約４０〜４５重量％のＭＴＺの溶媒系を含む、態様Ｃ１〜Ｃ６のいずれか１項に記載のゲル。
【０１８３】
Ｃ８．溶媒系が、２５℃で少なくとも約２０ｍｇ／ｇの飽和ＭＴＺ溶解度を有する１つ以上の溶媒を含む、態様Ｃ７に記載のゲル。
【０１８４】
Ｃ９．溶媒系が、２５℃で少なくとも約５０ｍｇ／ｇの飽和ＭＴＺ溶解度を有する１つ以上の溶媒、および／または随意に２５℃で約２０ｍｇ／ｇ〜約２５ｍｇ／ｇの範囲内の飽和ＭＴＺ溶解度を有する１つ以上の溶媒を含む、態様Ｃ８に記載のゲル。
【０１８５】
Ｃ１０．溶媒系が、１つ以上の低級芳香族アルコール、および随意に１つ以上の低級脂肪族ジオール、ならびに／または約２００〜約４００の範囲の分子量を有する１つ以上のポリオキシアルキレン（「低級ポリオキシアルキレン」）を含む、態様Ｃ９に記載のゲル。
【０１８６】
Ｃ１１．溶媒系が、１つ以上の低級芳香族アルコール、１つ以上の低級脂肪族ジオール、および／または１つ以上の低級ポリオキシアルキレンを含む、態様Ｃ１０に記載のゲル。
【０１８７】
Ｃ１２．溶媒系が、１つ以上の低級芳香族アルコール、１つ以上の低級脂肪族ジオール、および１つ以上の低級ポリオキシアルキレンを含む、態様Ｃ１１に記載のゲル。
【０１８８】
Ｃ１３．１つ以上の低級芳香族アルコールが、ベンジルアルコール、フェノキシエタノール、およびそれらの混合物からなる群から選択される、態様Ｃ１０〜Ｃ１２のいずれか１項に記載のゲル。
【０１８９】
Ｃ１４．１つ以上の低級アルキレンジオールが、エタン−１，２−ジオール（エチレングリコール）、プロパン−１，２−ジオール（プロピレングリコール）、およびそれらの混合物からなる群から選択される、態様Ｃ１０〜Ｃ１３のいずれか１項に記載のゲル。
【０１９０】
Ｃ１５．１つ以上の低級ポリオキシアルキレンが、ポリオキシエチレン（ポリエチレングリコール）、ポリオキシプロピレン（ポリプロピレングリコール）、およびそれらの混合物からなる群から選択される、態様Ｃ１０〜Ｃ１４のいずれか１項に記載のゲル。
【０１９１】
Ｃ１６．１つ以上の低級脂肪族ジオール、および１つ以上の低級ポリオキシアルキレンが、約１：１〜約１：２の範囲の総低級脂肪族ジオール：総低級ポリオキシアルキレン重量比で溶媒系に含まれる、態様Ｃ１０〜Ｃ１５のいずれか１項に記載のゲル。
【０１９２】
Ｃ１７．溶媒系が、約３．５重量％〜約５重量％の総低級芳香族アルコール、および約９５重量％〜約９５．５重量％の１つ以上の低級アルキレンジオールと１つ以上の低級ポリオキシアルキレンとの混合物を含む、態様Ｃ１０〜Ｃ１６のいずれか１項に記載のゲル。
【０１９３】
Ｃ１８．総低級アルキレンジオール：総低級ポリオキシアルキレンの重量比が、約１：１．６７である、態様Ｃ１７に記載のゲル。
【０１９４】
Ｃ１９．溶媒系が、ベンジルアルコール、プロパン−１，２−ジオール、およびＰＥＧ  ４００からなる、態様Ｃ１０〜Ｃ１８のいずれか１項に記載のゲル。
【０１９５】
Ｃ２０．溶媒系が、約３．５重量％〜約５重量％のベンジルアルコール、および約９５重量％〜約９６．５重量％のプロパン−１，２−ジオールとＰＥＧ  ４００との混合物からなり、プロパン−１，２−ジオール：ＰＥＧ  ４００の重量比が、約１：１〜約１：１．６７の範囲である、態様Ｃ１０〜Ｃ１９のいずれか１項に記載のゲル。
【０１９６】
Ｃ２１．１つ以上の保存剤をさらに含む、態様Ｃ１〜Ｃ２０のいずれか１項に記載のゲル。
【０１９７】
Ｃ２２．１つ以上の保存剤が、４−ヒドロキシ安息香酸のエステル（パラベン）である、態様Ｃ１〜Ｃ２１のいずれか１項に記載のゲル。
【０１９８】
Ｃ２３．１つ以上の保存剤が、メチル４−ヒドロキシベンゾエート（メチルパラベン）、プロピル４−ヒドロキシベンゾエート（プロピルパラベン）、およびそれらの混合物からなる群から選択される、態様Ｃ２２に記載のゲル。
【０１９９】
Ｃ２４．約ｐＨ３．０〜約ｐＨ５．０の範囲のｐＨを有する、態様Ｃ１〜Ｃ２３のいずれか１項に記載のゲル。
【０２００】
Ｃ２５．約ｐＨ４．０のｐＨを有する、態様Ｃ２４に記載のゲル。
【０２０１】
Ｃ２６．１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマーが、ヒドロキシエチルセルロース、カルボマー、ポリカルボフィル、およびそれらの混合物からなる群から選択される、態様Ｃ１〜Ｃ２５のいずれか１項に記載のゲル。
【０２０２】
Ｃ２７．粘膜接着性水系ゲルが、約１．３重量％のＭＴＺ、約２重量％のポリカルボフィルＡＡ−１、約２重量％のベンジルアルコール、約１５重量％のプロパン−１，２−ジオール、約２５重量％のＰＥＧ４００、約０．０２重量％のメチル４−ヒドロキシベンゾエート、および約０．０８重量％のプロピル４−ヒドロキシベンゾエートを含む、態様Ｃ１〜Ｃ６のいずれか１項に記載のゲル。
【０２０３】
Ｃ２８．約１．３重量％のＭＴＺ、約１重量％〜約３重量％の１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマー、および約４０重量％〜約４５重量％のＭＴＺの溶媒系を含み、溶媒系が、ベンジルアルコール、プロパン−１，２−ジオール、およびＰＥＧ４００を含み、前記粘膜接着性水系ゲルが、約２５℃〜約４０℃の範囲内の温度で保管されるとき、１８ヶ月の期間の間安定している、粘膜接着性水系ゲル。
【０２０４】
Ｃ２９．１つ以上の粘膜接着性ゲル化ポリマーが、架橋アクリル酸ポリマーおよびセルロースポリマーからなる群から選択される、態様Ｃ２８に記載のゲル。
【０２０５】
Ｃ３０．架橋アクリル酸ポリマーが、カルボマーおよびポリカルボフィルからなる群から選択される、態様Ｃ２９に記載のゲル。
【０２０６】
Ｃ３１．セルロースポリマーが、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、およびヒドロキシプロピルメチルセルロースからなる群から選択される、態様Ｃ２９〜Ｃ３０のいずれか１項に記載のゲル。
【０２０７】
Ｃ３２．約２重量％の総粘膜接着性ゲル化ポリマーを含む、態様Ｃ２９〜Ｃ３１のいずれか１項に記載のゲル。
６．５．３．使用
【０２０８】
Ｕ１．ＢＶに罹患する、および／またはそれを診断された女性の治療のための態様Ｃ１〜Ｃ３２のいずれか１項に記載の粘膜接着性水系ゲルの使用。
【０２０９】
Ｕ２．粘膜接着性水系ゲルが、細菌学的治癒、臨床的治癒、または治療的治癒をもたらすために十分な適用回数で膣内適用される、態様Ｕ１の使用。
【０２１０】
Ｕ３．単一適用で適用される粘膜接着性水系ゲルの量が、約６０ｍｇ〜約１００ｍｇのＭＴＺを含有する、態様Ｕ１〜Ｕ２のいずれかに１項に記載の使用。
【０２１１】
Ｕ４．単一適用で適用される粘膜接着性水系ゲルの量が、約６５ｍｇのＭＴＺを含有する、態様Ｕ１〜Ｕ３のいずれかに１項に記載の使用。
【０２１２】
Ｕ５．粘膜接着性水系ゲルが、１日１回、１〜５日の期間膣内適用される、態様Ｕ１〜Ｕ４のいずれかに１項に記載の使用。
【０２１３】
Ｕ６．粘膜接着性水系ゲルが、１日１回、１日の期間膣内適用される、態様Ｕ１〜Ｕ５のいずれかに１項に記載の使用。
【０２１４】
Ｕ７．粘膜接着性水系ゲルが、１日１回、５日の期間適用される、態様Ｕ１〜Ｕ５のいずれかに１項に記載の使用。
６．５．４．単位用量形態
【０２１５】
Ｄ１．膣内適用に適した容器に被包された約６５ｍｇ〜約１００ｍｇのＭＴＺを含有する態様Ｃ１〜Ｃ３２のいずれか１項に記載のゲルをある量含む、膣内適用に適した高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの単位用量形態。
【０２１６】
Ｄ２．約６５ｍｇのＭＴＺを含有するゲルをある量含む、態様Ｄ１の単位用量形態。
【０２１７】
別段の定義がない限り、本明細書で使用されるすべての技術的用語および科学的用語は、本明細書に記載される様々な発明が属する当該技術分野において通常の技術を有する者により共通して理解されるものと同一の意味を有する。本明細書に記載されるものに類似するか、または相当する方法および材料は、開示される発明の実施または試験において使用され得るが、適切な方法および材料が以下に記載される。本明細書で述べられるすべての出版物、特許出願、特許、および他の参考文献は、参照することによりそれら全体が組み込まれる。対立する場合は、定義を含む本明細書を優先する。加えて、材料、方法、および実施例は、単なる例示であり、限定するものではない。
【実施例】
【０２１８】
７．実施例
ここでは概して本開示の発明について説明したが、実例として提供される以下の実施例を参照することによってより容易に理解され、本明細書に記載される発明の範囲を限定するものではない。
実施例１：溶媒系に有用な例示の溶媒
【０２１９】
２５℃での多様な溶媒中のＭＴＺの溶解度は、本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルに必要な濃度でＭＴＺを溶解するために有用な溶媒を識別するように決定した。多数の溶媒の２５℃での飽和ＭＴＺ溶解度を以下の表１に示す。所望の濃度のＭＴＺを有する高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを調製するために有用な溶媒系は、これらの飽和溶解度を指針として使用して考案され得る。本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを調製するためのこれら（および他の）溶媒とともに使用に適する追加の溶媒は、それらの飽和ＭＴＺ溶解度に基づいて容易に識別され得る。高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを調製するために適した水相と混合された多数の溶媒系中の２５℃での飽和ＭＴＺ溶解度を以下の表２に示す。
【表１】
2014518272.tif 000002
【表２】
2014518272.tif 000003
実施例２：例示の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲル
【０２２０】
異なる量のＭＴＺを含有し、多様な異なる溶媒系を利用する多数の例示の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルを調製し、以下の実施例に記載されるように、様々な異なる均質性試験、レオロジー試験、安定性試験、生物学的試験、および臨床試験に供した。すべてのゲルは、以下に記載される同様のプロセスを使用して調製した。
【０２２１】
ゲルの調製  必要な量の保存剤（複数可）、例えばメチルパラベンおよびプロピルパラベンを計量してＤｕｒａｎ（登録商標）ボトルに入れた後、水相（リン酸緩衝液または脱イオン化水）を入れた。含有物を完全に混合して保存剤を溶解した。残りの溶媒（例えば、ベンジルアルコール、エタノール、プロピレングリコール、およびＰＥＧ  ４００）を計量して別個のＤｕｒａｎ（登録商標）ボトルに入れ、完全に混合した後、必要な量のメトロニダゾールを入れた。次にＤｕｒａｎ（登録商標）ボトルを５５℃の水浴に入れ、メトロニダゾールが溶解するまで連続して攪拌した。Ｄｕｒａｎ（登録商標）ボトルを水浴から除去し、室温に置いて、溶液が室温に平衡するまで混合を続けた。次に保存溶液を常に攪拌しながらＭＴＺ溶液に添加した。必要量のゲル化剤を計量して計量ボートに入れ、上記溶液を常に攪拌しながら添加して、ゲル化剤が完全に水和するまで攪拌した。均質性を保証するために含有物を完全に混合するよう注意した。
【０２２２】
ｐＨ感受性またはｐＨ依存性ゲル化ポリマーを利用するゲルの場合、ＭＴＺ溶液のｐＨは、ゲル化ポリマーを添加する前にゲル化するための最適範囲内の値に調整され得、ゲルのｐＨはその後必要に応じて調整した。
【０２２３】
プラセボゲルの調製  本明細書で論じられるいくつかの実験において、プラセボゲルは、比較対象または対照として使用される。ブラセボゲルは、上述のとおり調製した。プラセボの場合、ＭＴＺを省略し、活性ゲルに使用される水相に応じて、等重量％の水または緩衝液で置き換えた。
【０２２４】
リン酸緩衝液ｐＨ４の調製  リン酸水素二ナトリウム二水和物（３．９ｇ）を計量して５００ｍＬのＤｕｒａｎ（登録商標）ボトルに入れ、４５０ｍＬの脱イオン化水を添加する。溶液を完全に混合して緩衝液塩を溶解する。ｏ−リン酸を使用して溶液のｐＨをｐＨ４に調整し、脱イオン化水で５００ｍＬの容量フラスコ中の容量にした。
【０２２５】
１．５重量％ＭＴＺ、２．０重量％、１．３重量％、および１．１８重量％ＭＴＺを含有する様々な例示のゲルの組成は、それぞれ以下の表３、４、５、および６に示される。
【０２２６】
表３に列挙される製剤ＭＧ０３、ＭＧ０４、ＭＧ０８、およびＭＧ０９は、透明な高粘度の薄黄色ゲルを形成したが、ＭＧ２６は乳白色のゲルを形成した。ゲルを形成するためのカルボマー、ポリカルボフィルＡＡ−１、およびカルボマー９７４Ｐの理想のｐＨは中性である。膣内適用のためのゲルの所望のｐＨは、約ｐＨ４であるため、多量のこれらのゲル化剤をＨＥＣと比較して使用した。ＭＧ０３は、β−ヒドロキシプロピルシクロデキストリンを溶解剤として含有した。
【表３】
2014518272.tif 000004
【表４】
2014518272.tif 000005
【表５】
2014518272.tif 000006
【表６】
2014518272.tif 000007
実施例３：例示のゲルの粘膜接着特性
【０２２７】
２つの例示の高用量粘膜接着性ＭＴＺゲル（ＭＧ３２ＰＢおよびＭＧ３３ＰＢ）の粘膜接着特性を２つの異なる方法、単離したブタ胃粘膜への接着、およびムチンを含む場合と含まない場合のレオロジー測定を使用して試験した。その方法および結果を以下に記載する。
ａ．単離したブタ胃粘膜を使用する粘膜接着
【０２２８】
方法  実験のために、新鮮なブタ胃粘膜の小片（１５×１０ｃｍ）を、１０°の角度で傾斜に載置し、蠕動ポンプを用いてｐＨ４の緩衝液で１０分間洗浄した。小アリコート（５０μＬ）の試験ゲルを粘膜上に傾斜の上に広げ、１０分間放置した。次にポンプのスイッチを入れ、ｔ＝１、２、３、４、５、１０、および１５分後に回収された緩衝液を各時点で個別のバイアルに入れた。任意の試験ゲルを含まないブランク試料も、任意の背景または干渉について分析した。０．４５μｍのＰＶＤＦシリンジフィルタを通して試料を濾過し、ＨＰＬＣにより分析した。粘膜からのＭＴＺの喪失率を各試験ゲルについて時間に対してプロットし、得られたデータを比較して各試験ゲルの相対粘膜接着を決定した。１５秒間隔の試料採取時点で５分間、第２の実験も行った。
【０２２９】
結果  データを図１および２に示す。結果は、各時点で粘膜上に残存するメトロニダゾールの量により決定されるように、ＭＧ３２ＰＢがＭＧ３３ＰＢよりわずかに良好な粘膜接着を有することを示す。
ｂ．レオロジー測定
【０２３０】
方法  ムチンを計量してガラスバイアル瓶に入れ、続いて調査対象のゲルを入れた。磁気フォロワを試料中に置き、すべてのムチンが水和されるまで混合した。試験ゲルのレオロジーパラメータを、振動実験を使用してムチンを含む場合と含まない場合とを分析した（Ｂｏｈｌｉｎ  ＣＶＯレオメータ）。ムチンを含まない対応するプラセボゲルを使用する増幅掃引、続いて周波数掃引を最初に行い、線形粘弾性領域を決定した。ゲルの周波数掃引を決定するために使用されるパラメータは、表７に示される。
【表７】
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【０２３１】
試験ゲル（約１ｇ）を平行プレートに適合されたレオメータの底プレート上に置いた。事前に決定された間隙に試料を捕捉するように、下プレートを上昇させた。次に試料を、５〜２０Ｈｚまで０．１５Ｈｚ増分で一連の正弦波振動に供した。適用されるトルク（４Ｐａ）は、最高周波数および最低周波数の両方について、線形粘弾性領域内にあることが事前に決定された。各ゲルを３回試験した。各実行の最後に、Ｂｏｈｌｉｎコンピュータソフトウェア（バージョン６．５０．５．７）を使用して、貯蔵弾性率Ｇ′を決定した。各パラメータについて得られたデータを周波数の関数としてプロットし、Ｇ′の平均値を固定周波数１０Ｈｚで計算した。ムチンを含む活性ゲルの平均Ｇ′値を使用して、ムチンを含まない活性ゲルの平均Ｇ′値と比較して、ムチンを含む場合と含まない場合のΔＧ′とムチンのＧ′のログ比を計算した。
【０２３２】
結果  ポリマーでもあるムチンの添加は、ΔＧ′により決定されるように、試験ゲルの弾性率を増加させた（表８）。より高いログＧ′比の値は、より多くのムチンとの相互作用に相関し、したがってより良好な粘膜接着に相関すると想定される。しかしながら、この増加は、ゲルの調製に使用されるゲル化ポリマーとムチンとの間の内因性相互作用に依存し得る。ムチンを含む場合と含まない場合の試験ゲルのログＧ′の比であるログＧ′比は、製剤の粘弾性性質の増加に関する洞察を与える。
【表８】
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実施例４：例示のゲルの短期間保存安定性
【０２３３】
例示の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの様々な異なる実施形態を、２５℃および４５℃での短期間（４週間）保存安定性について試験した。ゲルを密閉したアンバーバイアル瓶に入れ、Ｖｉｎｄｏｎ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ安定性キャビネット内で保管した。試験したパラメータは、均質性（結晶および／または粒子の存在について目視および顕微鏡観察）、ＭＴＺ安定性、保存効力、粘度、およびｐＨを含む。この安定性は、ｔ＝０、２、および４週間の時点で２５±２℃、６０±５％  ＲＨおよび４０±２℃、７５±５％  ＲＨで試験した。ＭＴＺを含まないプラセボゲルも同一期間保管し、物理的および化学的安定性を評価した。
【０２３４】
ＭＴＺ安定性を評価するために、ＭＴＺをゲルから抽出し、ＨＰＬＣ法１により分析した（以下表９中のパラメータ）。抽出のために、約０．５ｇゲルを５０ｍＬ容量フラスコに入れた。約３０ｍＬのＨＰＬＣ移動相６５：３５メタノール／６０ｍＭリン酸緩衝液（以下のように調製）を添加し、ゲルが溶液中に分散したことが認められるまで混合液を渦流させた。溶液をＨＰＬＣ移動相で容量にした。ＨＰＬＣ分析の場合、０．４５μｍ  ＰＴＦＥシリンジフィルタを通してアリコートを濾過し、最初の２ｍＬを破棄した。残留した濾過物をＨＰＬＣ法１により分析した。
【表９】
2014518272.tif 000010
【０２３５】
移動相を調製するために、１．５ｇの一塩基性リン酸ナトリウムおよび１．３ｇの二塩基性リン酸ナトリウムを計量してＤｕｒａｎ（登録商標）ボトルに入れ、３５０ｍＬの脱イオン化水に溶解した。溶液を完全に混合し、６５０ｍＬのメタノールを添加して、得られた溶液を磁気攪拌機で完全に混合し、０．２２μｍフィルタを通して濾過した。
【０２３６】
ＨＰＬＣ分析の場合、ＭＴＺピーク（２５４ｎｍ検出で約３．３１２分の保持時間）を統合し、対照試料と比較した。保存後に残留するＭＴＺの量を、ｔ＝０での理論的濃度（ＴＣ）のパーセンテージとして定量した。測定された濃度（ＭＣ）は、既知の濃度のＭＴＺストック溶液で得られた較正曲線を使用して決定した（１ｍｇ／ｍＬストックの連続希釈法により調製）。
【０２３７】
光学顕微鏡を使用して、ゲルの物理的安定性を評価した（Ｌｅｉｃａ  ＤＭＥ  ＳＯＰ  ３０９１）。試験ゲルを対応するプラセボ対照と比較して、粒子の存在を評価した。
【０２３８】
結果  ゲルから回収されたＭＴＺのパーセンテージを以下の表１０に示す。ＭＴＺは、試験したすべての濃度、すべてのゲル中で安定していた。４週間後の２５℃の試料からのＭＧ３７ＰＢ、ＭＧ４２ＰＢ、およびＭＧ４３ＰＢにおいて、低い回収率が認められた。しかしながら、４０℃で保管された同一のゲルからの回収率は１００％であり、２５℃の試料についての潜在的な抽出／計量誤差を示唆した。すべての試料のピーク純度％は１００％であった。
【表１０】
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実施例５：例示のゲルの長期保存安定性
【０２３９】
２５℃および４０℃での長期安定性について、例示の高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの様々な異なる実施形態を試験した。
【０２４０】
この研究では、２０ｇの各試験ゲルを密閉したバイアル瓶中、２５±２℃／６０±５％  ＲＨおよび４０±２℃／７５±５％  ＲＨで保存した。実時間試料または加速時間試料のいずれかが失敗した場合の分析のために、バックアップ試料も−２０℃、２〜８℃、および３０℃／６５％  ＲＨで保存した。ＭＴＺを含まない対応するプラセボゲルは、試験ゲルと一緒に保存した。
【０２４１】
１、２、３、６、１２、および１８ヶ月後にゲルを貯蔵キャビネットから除去し、以下に記載されるように、顕微鏡分析および粘度分析を使用して、物理的および化学的安定性を試験した。
【０２４２】
顕微鏡分析  光学顕微鏡（Ｌｅｉｃａ（登録商標）ＤＭＥ）下でゲルを見た。少量のゲル試料を、ミクロスパチュラを使用して顕微鏡スライドの上に置いた。顕微鏡スライドをカバーガラスで被覆し、４０×対物レンズを使用してゲルを見た。結晶の存在について、活性ゲルをプラセボゲルと比較した。
【０２４３】
結晶が認められた場合、較正されたグラチクル（Ｏｌｙｍｐｕｓ（登録商標）対物ミクロメーター０．０１ｍｍ）上のスケールを使用して、粒径を測定した。カメラ（Ｎｉｋｏｎ  Ｃｏｏｌ  Ｐｉｘ（登録商標）４５００デジタルカメラ）が顕微鏡のリレーレンズに取り付けられるように顕微鏡をセットアップし、４０×対物レンズを試料が見える場所に設定した。カメラ設定：画像サイズ：１２８０×９６０画素、画質：微細。クリアで明瞭なビューが得られたら写真を撮った（４００倍拡大）。
【０２４４】
粘度分析  ゲルのレオロジーを各時点（ｔ＝０、１、２、３、６、１２、および１８ヶ月）で測定した。せん断速度は切断された円錐の直径全体で一定であるため、流れ曲線測定のための円錐およびプレート測定システムが好ましい。したがって、制御されたせん断速度ランプ法を用いた。せん断速度０．１６ｓ−１での流れ曲線上の地点を使用して、各ゲルを比較し、粘度を決定した。使用したレオメータ設定を以下の表１１に示す。
【表１１】
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【０２４５】
ゲルは、ＭＴＺ含有量、ベンジルアルコール含有量、パラベン含有量、保存効力、およびｐＨについても試験した。１８ヶ月の試料を例外として、ＭＴＺ含有量は、短期間安定性試料について上述されるように評価した。１８ヶ月試料の場合、ＭＴＺ含有量は以下に記載されるように評価した。
【０２４６】
抽出のために、０．５ｇ±２０ｍｇのゲルを計量して２５ｍＬ容量フラスコに入れ、約２０ｍＬの試料希釈液で希釈した（３：７メタノール／１０ｍＭ  ＫＨ２ＰＯ４）。ゲルが溶液中に分散するまで混合液を渦流させた（約５分）。溶液を試料希釈液で容量にし、約１分間渦流混合した。約１４ｍＬの試料を３５００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、得られた上澄みを、０．４５μｍ  ＰＴＦＥシリンジフィルタを通して濾過し、最初の２ｍＬを破棄した。残留する濾過物をＨＰＬＣ法２により分析した（パラメータを以下の表１２に示す）。ＭＴＺに加えて、ベンジルアルコール、メチルパラベン、およびプロピルパラベンの回収も決定した。
【表１２】
2014518272.tif 000013
【０２４７】
保存効力試験は、欧州および米国薬局方仕様に準拠する方法で行った。接種した試料をｔ＝０時間、２４時間、４８時間、７日、１４日、２１日、および２８日に試験した。
【０２４８】
ＭＧ３３ＰＢに対応するが、減少量の保存剤を含むゲルを、保存効力について試験した。以下の表１３の試験ゲルは、実施例２に記載のとおり調製した。
【表１３】
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【０２４９】
ゲルＭＧ３３（７５％）およびＭＧ３３（９０％）のプラセボも調製した。
【０２５０】
ｐＨ試験をｔ＝０、１、２、３、６、１２、および１８ヶ月で行った。
【０２５１】
結果  表１４は、ゲルからのＭＴＺの回収率を示す。２５℃および４０℃で６ヶ月間保管されたゲルからのＭＴＺの回収率は、ｔ＝０データに相当する。すべてのゲルのピーク純度％は１００％であることがわかり、ＭＴＺが試験したすべてのゲルにおいて安定していることを示す。２５℃および４０℃で１８ヶ月間保管されたＭＧ３３ＰＢおよびＭＧ３２ＰＢからのＭＴＺの回収率は、ｔ＝０データに相当する。
【表１４】
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【０２５２】
メトロニダゾールゲル製剤の物理的安定性。２５℃および４０℃で保管されたゲルを、６ヶ月後に任意の粒子または結晶の存在について視覚的および顕微鏡的に評価した。ゲルは物理的に安定していることが認められたが、４０℃で６ヶ月貯蔵した後のすべての活性ゲルにおいて、極薄黄色から薄黄色への色のわずかな変化があった。これは、対応するプラセボ製剤では見られなかった（表１７）。ｐＨのわずかな差異が貯蔵中に認められた。しかしながら、活性ゲルにおいてｐＨの大きな移行は認められず、ゲルは６ヶ月後も安定していることを示す（表１５）。
【０２５３】
流れ曲線を使用してゲルの粘度を測定した。ゲルの粘度を比較した流れ曲線のポイントは、せん断速度で０．１６ｓ−１である（表１１）。読み取り（ｎ＝２）をｔ＝０で行った後、曲線を試験し、比較するポイントを選択した。すべてのゲルは、擬塑性動作またはせん断菲薄化を呈し、すなわち、せん断速度が増加するにつれて粘度が減少した。せん断速度が増加するにつれて、各ゲルの粘度間に顕著な差異がなくなるように、ゲルの瞬間粘度が徐々に互いに類似していった。流れ曲線のすべてが異なるゲル間の比較のために、曲線上のポイントを選択した。０．１６ｓ−１より上および下の２つの最も近いせん断速度の補間を使用して、粘度を計算した。２５℃で６ヶ月保管された後のすべてのゲル、および２５℃で最長１８ヶ月保管されたＭＧ３３ＰＢは、粘度にわずかな変動性を示し、概して１８ヶ月までの各時点の間で一定であることが認められた（表１６）。４０℃の保管で粘度の低下が認められたが、これは活性ゲルよりもプラセボゲルに対してより顕著であった。
【０２５４】
２〜８℃で６ヶ月保管されたバックアップ活性ゲルも、対応する最適ゲルと同一の条件下で保管されたプラセボゲルと同様に、結晶形成について検査した。ゲルＭＧ３２ＰＢおよびＭＧ３３ＰＢにおいて大きな結晶が認められた。大きなシート状の結晶もゲルＭＧ３３ＰＢおよびＭＧ３６ＰＢにおいて形成した。単一の小さな結晶がゲルＭＧ３４ＰＢおよびＭＧ３７ＰＢにおいて形成した。これらのデータは、２〜８℃での保管が高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルには推奨されないことを示す。結晶形成が２５℃または４０℃で認められなかったため、これらの温度での保管はより適切である。
【０２５５】
２５℃および４０℃で６ヶ月間保管されたプラセボおよび試験製剤の物理的外観の観察を以下の表１７に示す。
【表１５】
2014518272.tif 000016
【表１６】
2014518272.tif 000017
【表１７−１】
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【表１７−２】
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【０２５６】
４０℃で１２ヶ月間保管されたＭＧ３３ＰＢのＰＥＴ試験結果  保存効力試験（ＰＥＴ）の結果を表１８および表１９にまとめる。４０℃で１２ヶ月間保管されたゲルＭＧ３３ＰＢは、欧州薬局方６．３により特定されるように、試験したすべての有機体に対して必要とされるログ減少に一致する。
【表１８】
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【表１９】
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【０２５７】
有効な分析法２を使用して１２ヶ月保管し、室温でさらに６ヶ月保管された１８ヶ月試料の分析  ２５℃で１２ヶ月間保管された試料を、さらに６ヶ月間周囲温度で保管された、２５℃および４０℃での１８ヶ月保管試料は、ＭＴＺおよび保存剤含有量の仕様基準に適合する（表２０および表２１）。
【表２０】
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【表２１】
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【０２５８】
ＭＧ３３ＰＢに対する７５および９０％ｗ／ｗ保存剤組成物の効果  減少量の保存剤、ＭＧ３３（７５％）およびＭＧ３３（９０％）を含有する例示のゲルＭＧ３３ＰＢの変異型を用いて実行したＰＥＴ試験の結果を表２２および表２３にまとめる。ＭＧ３３（７５％）およびＭＧ３３（９０％）は、欧州薬局方６．３により特定されるように、試験したすべての有機体に対して必要とされるログ減少に適合する。
【表２２】
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【表２３】
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実施例６：例示のゲルの局所送達および皮膚透過特性
【０２５９】
いくつかの例示の高度に粘膜接着性のＭＴＺ水系ゲルのインビトロ皮膚透過特性を、インフォームドコンセントのより得られたヒト腹部形成皮膚の全層を用いて、フランツセル中で試験した。この研究のために、すべての皮下脂肪をメスで除去し、皮膚を供与コンパートメントと受容コンパートメントとの間に載置した。
【０２６０】
この実験のために、１４Ｃ放射線標識されたＭＴＺゲルを、以下の表２４に列挙される成分の量で、実施例２に記載されるように調製した。表２４において、すべての量はｍｇであり、１４Ｃ標識されたＭＴＺは例外としてμＬである。
【表２４】
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【０２６１】
１４Ｃ放射線標識されたＭＴＺ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）は、９９．２％の放射線化学純度を持つ５７ｍＣｉ／ｍｍｏｌの比放射能を有した。１４Ｃ標識されたＭＴＺストック溶液は、３．５ｍＬの水を３７ＭＢｑの１４Ｃ標識されたＭＴＺに添加し、１４Ｃ標識されたＭＴＺが溶解されるまで渦流混合することにより調製した。
【０２６２】
対照として、ＦＤＡ認可された０．７５重量％のＭＴＺゲル（例えば、ＭＥＴＲＯＧＥＬ  ＶＡＧＩＮＡＬ（登録商標）に対応する１０ｇの０．７５重量％１４Ｃ標識されたＭＴＺゲルを以下のように調製した。
【０２６３】
パラベン相：メチルパラベン（８．０３ｍｇ）、プロピルパラベン（２．０５ｍｇ）、およびプロピレングリコール（３０３．２８ｍｇ）を計量して２８ｍＬガラスバイアル瓶に入れ、溶解するまで攪拌した。次にバイアル瓶を５５℃で平衡し、水（３．５ｇ）を攪拌しながら添加した。ＭＴＺ（７５ｍｇ）を添加し、すべての薬物が溶解するまで攪拌を続けた。次に１４Ｃ標識されたＭＴＺストック溶液（４６５μＬ）を攪拌しながら添加した。
【０２６４】
カルボマー相：二ナトリウムＥＤＴＡ（５．０３ｍｇ）を計量し、精製水（５．６９８ｇ）を添加した２８ｍＬガラスバイアル瓶に入れた。磁気フリアを使用して、すべての二ナトリウムＥＤＴＡが完全に溶解するまで製剤を攪拌した。カルボマー９７４Ｐ（２００．８９ｍｇ）を添加し、製剤を一晩攪拌してポリマーを水和させた。
【０２６５】
複合：パラベン相をカルボマー相に攪拌しながら添加した。水（２００ｍｇ）を使用して、パラベン相をカルボマー相に流し入れた。ゲルを一晩放置して室温に冷ました。
【０２６６】
この実験のために、全厚のヒト皮膚をフランツセル中に、受容液としてのｐＨ４リン酸緩衝液（ｐＨ４）とともに載置して沈降条件を保証した。１０ｍｇ／ｃｍ２に相当する有限量の試験ゲルを膜に適用し、１４Ｃ標識されたＭＴＺの拡散を経時的に決定した。
【０２６７】
容積式ピペットを使用して、試験ゲル（７μＬ）を膜の表面に適用した。多数のゲルを試験したため、研究をいくつかの別個の実験に分割した。２つの皮膚供与体をすべての実験にわたってランダムに割り当て、各ゲルが両方の皮膚供与体上で試験されるようにした（ｎ＝６セル／ゲル）。
【０２６８】
フランツセルの受容コンパートメントを受容液で満たし、３７℃で維持された水浴中でセルを固定した。受容チャンバの含有物を小さな磁気フォロワにより連続的に攪拌した。ｔ＝１、２、３、４、６、８、および２４時間で、受容液の試料を受容コンパートメントから採取し、新鮮な受容媒質と置き換え、シンチレーション計数により分析した。
【０２６９】
実験の最後に、質量平衡を行い、供与チャンバ、表面残渣、角質層（ＳＣ）、残留上皮、真皮、および受容チャンバを分析した。この方法は、テープ剥離によるＳＣの除去、ならびに標準的な手順を使用して残留上皮層および真皮の処理を伴った。この方法については、以下に簡潔に記載する。
【０２７０】
非吸収製剤：各フランツセル供与チャンバの表面を、時計回りに５回および反時計回りに５回、綿棒でやさしく拭いた。この手順は、（事前に受容液に浸した）濡れた綿棒と乾燥した綿棒を交互に使用して、４回繰り返した。分析前に綿棒をシンチレーションカクテルに追加した。２枚のテープ片を皮膚から除去し、非吸収製剤としてみなし、総表面活性に含めた。テープ片を１ｍＬの水を添加したシンチレーションバイアル瓶に入れた。これらを７２時間浸漬して、製剤を溶解し、水に分散させた。液体シンチレーション（ＬＳＣ）による分析の前に、シンチレーションカクテル（４ｍＬ）をバイアル瓶に添加した。各フランツセル受容チャンバの表面を、時計回りに５回および反時計回りに５回、綿棒でやさしく拭いた。この手順は、（事前に受容液に浸した）濡れた綿棒と乾燥した綿棒を交互に使用して、２回繰り返した。分析前に綿棒をシンチレーションカクテルに追加した。
【０２７１】
角質層（ＳＣ）：スコッチ接着テープを使用して、慎重に皮膚を１０回テープ剥離することにより、ＳＣを除去した。最初の５枚のテープ片を１つのシンチレーションバイアル瓶に一緒に入れ、次の５枚を第２のバイアル瓶に一緒に入れた。１ｍＬの水を各バイアル瓶に入れ、これらを７２時間浸漬して、製剤を溶解し、水に分散させた。ＬＳＣによる分析の前に、シンチレーションカクテル（４ｍＬ）をバイアル瓶に添加した。
【０２７２】
上皮：（テープ剥離後の）上皮の残留断片をメスで真皮から慎重に除去した。この上皮を、２ｍＬのＳｏｌｕｅｎｅ  ３５０を含有するガラスバイアル瓶に入れ、ＬＳＣによる分析前に５０℃で７２時間培養した。
【０２７３】
真皮：残留する真皮層を、２ｍＬのＳｏｌｕｅｎｅ  ３５０を含有するガラスバイアル瓶に入れ、ＬＳＣによる分析前に５０℃で７２時間培養した。
【０２７４】
結果  試験した各ゲルについて、様々な皮膚層から回収した１４Ｃ標識されたＭＴＺの量を以下の表２５に示す。これらは図３Ａにおいて図式化される。適用される用量のパーセンテージとして表される同一のデータを以下の表２６に示し、図４Ａに図式化する。
【０２７５】
追加の図式は図５Ａおよび６Ａにおいて提供される。
【０２７６】
試験した製剤のいずれについても、供与チャンバ、受容チャンバ、上皮、および真皮内で検出されたＭＴＺの量に統計的差異はなかった（ｐ＞０．０５）。しかしながら、高用量ＭＴＺゲルを用いた場合、０．７５重量％Ｍｅｔｒｏｇｅｌ（登録商標）と比較して、受容液および角質層内で検出された量の有意な差異が認められた。Ｍｅｔｒｏｇｅｌ（登録商標）（４．８３±０．９７μｇ）の適用後に受容液中で認められたＭＴＺのレベルは、ＭＧ３７ＰＢ（３．６２±２．０２μｇ）を可能な例外として、新たなＰＢ製剤（ＭＧ３３ＰＢから最小０．３１±０．２７μｇ、ＭＧ３６ＰＢから最大１．１７±０．２５μｇ）より４〜１６倍高かった（濃度について正規化された場合、２〜９倍；ｐ＜０．０５）。しかしながら、例示の試験ゲルの適用後の角質層中の１４Ｃ標識されたＭＴＺのレベル（ＭＧ３６ＰＢから最小１７．８０±３．４５μｇ、ＭＧ３５ＰＢから最大３３．１５±１９．８６μｇ）は、Ｍｅｔｒｏｇｅｌ（登録商標）（０．３７±０．７４μｇ）について得られたものより５０〜９０倍高かった（濃度に対して正規化された場合、２９〜５３倍）。この差は、皮膚表面から回収された非吸収の放射線標識されたＭＴＺの量に反映され、Ｍｅｔｒｏｇｅｌ（登録商標）製剤（４５．０３±１．２０μｇ）から回収された薬物の量は、初期濃度の差に関わらず、例示の試験ゲルに相当した（ＭＧ３３ＰＢから最小５５．６９±５．４２μｇ、ＭＧ３４ＰＢから最大６５．２３±３．２９μｇ）。
【０２７７】
１．５重量％ＭＴＺを含有する例示のゲルを用いて、同様の実験を行ったところ、同様の結果が得られた（図３Ｂ、４Ｂ、５Ｂ、および６Ｂに提供される）。
【０２７８】
したがって、従来の０．７５重量％ＭＴＺと比較して、本明細書に記載される高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルにより、大量のＭＴＺが皮膚の表層に保持される一方で、受容液中ではより低いレベルを生じ、皮膚に局所適用された場合に予想される低い全身レベルに対応する。
【表２５】
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【表２６】
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実施例７：ブタ膣組織を用いた透過研究
【０２７９】
例示の試験ゲルＭＧ３３ＰＢおよび実施例６に記載されるものに類似する０．７５重量％ＭＴＺ対照ゲルを用いた透過研究は、過剰な筋肉が除去されたブタ膣組織を使用して、フランツセル内で行った。Ｓｏｌｕｅｎｅを使用して、ＭＴＺを組織から抽出した。この実験において、ゲルは１４Ｃ標識されたＭＴＺを含まなかった。ＭＴＺ回収量は、ＨＰＬＣを介して測定した。試験ゲルまたは対照ゲルの適用後２４時間の膣組織の表面および膣組織内から回収されたＭＴＺの平均量を以下の表２７に示す。以下のデータにおいて、ｎ＝５であり、試験ゲル実験および対照実験のそれぞれから１つの異常値を排除した。
【表２７】
2014518272.tif 000029
【０２８０】
データは、図７において図式化される。実験の経過を通して時間の関数として膣組織を透過したＭＴＺの累積量は、図８に示される。図８において、データは、膣組織（μｇ／ｃｍ２）の単位面積当たりの透過したＭＴＺの平均（±標準誤差）量（μｇ）として表される。試験バッチおよび対照バッチのいずれもＮ＝５である。
【０２８１】
この実験において、試験ゲルおよび対照ゲルの両方に適用されたＭＴＺの総量の約３０％のみが回収された。
【０２８２】
ＭＴＺの総量の約３０％のみが、本実験の試験治療群および対照治療群から回収された。
実施例８：１．３重量％ＭＴＺを含有する例示の高用量粘膜水系ゲルは、驚くほど有効であり、細菌性膣炎と診断された女性を治療するために臨床的に使用されるとき、ＦＤＡ認可の０．７５重量％ＭＴＺゲルよりはるかに有効である
【０２８３】
導入  １．３重量％ＭＴＺ、製剤ＭＧ３３ＰＢを含有する高用量粘膜接着性ＭＴＺ水系ゲルの特定実施形態の臨床評価を行い、その安全性および有効性を評価した。この研究において、ＭＧ３３ＰＢを０．７５重量％  ＭＥＴＲＯＧＥＬ  ＶＡＧＩＮＡＬ（登録商標）（「ＭＧＶ」）に対して評価し、異なる試験群を使用して、１、３、および５日の有効性を決定した。
【０２８４】
一般的方法  ＢＶの治療のためのＭＧＶ（ＱＤ×５日間連続）と比較したＭＧ３３ＰＢ（ＱＤ×１日、ＱＤ×３日間連続、およびＱＤ×５日間連続）の多施設、無作為の検査官盲検、投与量決定有効性および安全性研究を、ＦＤＡガイダンスに従って行った（１９９８年７月付のＦＤＡガイダンス草案、表題「Ｇｕｉｄａｎｃｅ  ｆｏｒ  Ｉｎｄｕｓｔｒｙ：Ｂａｃｔｅｒｉａｌ  Ｖａｇｉｎｏｓｉｓ−Ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ」）。対象を３つの時点：スクリーニング／ベースライン訪問時、治療後の電話、および研究終了［ＥＯＳ］／治癒試験［ＴＯＣ］訪問時に評価した。対象は最長３０日間参加した。研究設計を表２８に概略的に表す。
【表２８】
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【０２８５】
研究集団  以下に列挙される包含基準のすべてを満たす参加者が、研究に参加することを許された。以下に列挙される除外基準のいずれか１つを満たす者は、研究への参加を認められなかった。
包含基準
１．書面でのインフォームドコンセントを自発的に与えることができる。
２．少なくとも１８歳の女性。
３．良好な一般健康である。スクリーニング訪問時に病歴により確認されるように、研究参加を妨げ得ると検査官が判断する既知の病歴がない。
４．外来患者として研究に自発的に参加することができ、必要時に研究センターを訪問する、併用薬および他の治療制限を含むすべての研究要件を遵守する。
５．妊娠の可能性のある女性の場合、研究治療の開始前に尿による妊娠検査の結果が陰性である。
６．以下の基準のすべてを有することで定義される、ＢＶの臨床診断を有する。
１．オフホワイト（乳白色または灰色）の薄い均質な分泌物
２．生理食塩水ウェットマウントの顕微鏡試験において、総上皮細胞の２０％を超える糸玉状細胞の存在
３．４．７を超える膣液のｐＨ
４．１０％  ＫＯＨ臭気テスト陽性
７．研究の最初の７日間は性交渉を控えることに同意する。最初の７日が経過した後、性交渉を行うときは非潤滑コンドームを使用することに同意する。
８．治療期間中および治療後１日はアルコール接種を控えることを受諾する。
９．研究期間の間、膣内製品の使用を避けることに同意する（例えば、ビデ、女性用臭スプレー、殺精子剤、潤滑コンドーム、タンポン、およびペッサリー）。
除外基準
１．妊娠中、授乳中、または研究期間中に妊娠する予定である。
２．診断時に生理中であるか、または研究の治療期間中に生理の開始が予想される。
３．訪問の９０日以内に臨床的に重要な医療事象を経験する（例えば、脳卒中、心筋梗塞等）。
４．外陰膣炎の既知もしくは疑わしい他の感染原因がある（例えば、カンジダ症、膣トリコモナス、クラミジアトラコマチス、淋菌、または活性単純ヘルペス）、または検査官の判断で、臨床反応の解釈を混同させる任意の他の膣もしくは外陰状態を有する（クラミジアトラコマチスと淋菌の試験結果は、無作為化の時点で入手可能でない）。
５．４未満のグラム染色スライドニュージェントスコアを有する（結果は、無作為化の時点で入手可能でないが、研究後の分析集団を決定するために利用される）。
６．無作為化の１４日以内に抗真菌治療または抗菌治療（全身性または膣内）を受けた。抗ウイルス治療（非膣内）は容認される。
７．無作為化の１４日以内にジスルフィラムを接種した。
８．経口もしくは局所投与、またはパラベンの任意の形態で投与されたメトロニダゾールに対して事前に過敏反応を示す。
９．一次または二次免疫不全を有する。
１０．研究期間中に子宮頸部上皮内腫瘍（ＣＩＮ）または子宮頸癌の治療中である、または治療を受ける予定である。
１１．クマジン（ワファリン）による抗凝固療法を使用している。
１２．全身性コルチコステロイドまたは全身性抗生物質を使用している。
１３．以前にこの研究に登録したことがある。
１４．最近３０日以内に別の臨床治験に参加した、または実験薬物またはデバイスを摂取した。
１５．プロトコルの要件を遵守しない、または遵守することができない。
【０２８６】
治療群  すべてのスクリーニング／ベースライン評価およびアセスメントが完了した後、対象に研究薬物の適用について適切な技法を指示し、非盲検薬物投薬コーディネータが、以下の治療群の１つに１：１：１：１の比で無作為に割り当てた。
・ＭＧＶ：ＱＤ×５日間連続
・ＭＧ３３ＰＢ：ＱＤ×１日
・ＭＧ３３ＰＢ：ＱＤ×３日間連続、および
・ＭＧ３３ＰＢ：ＱＤ×５日間連続
【０２８７】
各対象は１キットの研究薬物を受けた。各キットは以下のいずれかを含む。
・１本７０ｇの管で適切な数のアプリケータで供給される研究薬物、ＭＧ３３ＰＢ、または
・１本７０ｇの管で５つのアプリケータで供給される比較薬物、ＭＧＶ。
【０２８８】
様々なサブグループ集団の転帰を評価した（以下でさらに詳述される）。「包括解析」（ＩＴＴ）集団は、研究に無作為化されたすべての対象を含む。「修正包括解析」（ＭＩＴＴ）集団は、任意の研究薬物を受けたすべての無作為化されたすべての対象を含み、少なくとも１つの治療後ベースライン訪問／アセスメントを受け、淋菌およびクラミジアトラコマチスの陰性試験を受け、訪問１において４以上のグラム染色スライドヌージェントスコアを有した。主要有効性データを欠如する対象は、主要有効性エンドポイントの失敗例としてカウントし、ＭＩＴＴ集団に含めた。「パープロトコル」（ＰＰ）集団は、以下の基準を満たすＭＩＴＴ集団の対象を含んだ。
・すべての包含基準および除外基準を満たし、プロトコル違反がない。
・無作為化の日、または無作為化の日から２日以内に研究薬物を開始する。
・研究薬物に準拠する。
・研究期間（無作為化からＴＯＣ訪問まで）の間に抗菌薬を使用しない（許容されるパープロトコル以外）。
・研究の期間中に追加の膣内製品を使用しない。
・ＴＯＣグラム染色ヌージェントスコア結果は、治療の初日に対して、２０日〜３１日の間に得た。
・研究訪問の終了が２１日目以前であった対象は、その対象が別の特定原因のない細菌性膣炎（すなわち、トリコモナス、クラミジア、淋病）の臨床的失敗であったことをデータが示した場合、ＰＰ集団に含めた。
【０２８９】
「安全性」集団は、任意の量の研究薬物を適用したすべての無作為化対象を含んだ。
【０２９０】
盲検  研究薬物および比較薬物は異なる治療計画を使用して投与されたため、検査官盲検研究設計を利用した。治療の割り当ては、治療割り当ておよび投薬を行った各施設にの検査官および研究コーディネータ、ならびに独立した投薬コーディネータには知らされなかった。
【０２９１】
制限された薬物療法／治療．研究結果に影響を及ぼす可能性がある以下の薬物、調製物、および治療は、本研究中は禁止された。
１．治療期間中および治療後１日のアルコール摂取
２．治療期間中および治療後１日のジスルフィラム
３．研究期間中の膣内製品（例えば、ビデ、女性用消臭スプレー、殺精子剤、潤滑コンドーム、タンポン、およびペッサリー）
４．併発状態（例えば、カンジダ）を治療するための経口抗真菌療法（例えば、経口フルコナゾール）を例外とする、研究期間中の全身性または膣内抗菌療法。抗ウイルス療法（非膣内）が許容された。
５．ＣＩＮまたは子宮頸癌の治療
６．クマジンまたはワルファリン
７．全身性コルチコステロイド
【０２９２】
有効性および安全性変数  有効性分析は、ＰＰおよびＭＩＴＴ集団の両方で行った。
【０２９３】
主要有効性変数を訪問２（ＥＯＳ／ＴＯＣ）で評価し、治療治癒の証拠とする。治療的に治癒したと考えられる対象は、ＥＯＳ／ＴＯＣにおいて臨床的治癒および細菌学的治癒の両方を達成していなければならない。
【０２９４】
臨床的治癒は、ベースライン訪問から得た臨床的所見の解決として定義され、さらに以下のように定義される。
１．オフホワイト（乳白色または灰色）の薄い均質な分泌物の不在
２．１０％  ＫＯＨ臭気テスト陰性
３．生理食塩水ウェットマウント中の糸玉状細胞の不在
４．膣液ｐＨ４．７未満
【０２９５】
加えて、対象は、研究期間中に任意の抗菌薬（許容されるパープロトコル以外）を受けていてはならず、検査官はＥＯＳ時に、「あなたの意見では、この時点で患者はＢＶ感染の追加の治療を必要としますか」という質問に「いいえ」と答えていなければならない。
【０２９６】
細菌学的治癒は、ヌージェントスコア４未満として定義される。
【０２９７】
この研究のキーとなる二次有効性変数は以下のとおりである。
・ＴＯＣ／ＥＯＳ訪問時に臨床的治癒を有する対象の割合
・ＴＯＣ／ＥＯＳ訪問時に細菌学的治癒を有する対象の割合
・無作為化から対象の日記が症状の解消を示す日までの時間間隔（日数）として定義される、症状（異常な分泌物および臭気）の解消にかかる時間
・掻痒、刺激、および炎症を含む骨盤試験結果
・対象の質問票および日記データ
【０２９８】
スケジュールされていない中間訪問で臨床的失敗として分類された対象は、それらの臨床的および細菌学的結果および治療アセスメントをＥＯＳ／ＴＯＣ訪問に進めた。
【０２９９】
安全性分析を安全性集団に行い、膣炎の履歴および以前の治療、骨盤試験、併用薬モニタリング、およびＡＥ／ＳＡＥモニタリングの評価を含めた。
【０３００】
統計学的方法および分析
【０３０１】
分析の研究手段  様々な研究集団は上に定義される。ＩＴＴ集団を使用して、対象の性質、人口学的および基本的特性、病歴、および以前の薬／併用薬をまとめた。ＭＩＴＴ集団は、対症的有効性分析に使用した。ＰＰ集団は、一次分析に使用した。安全性集団は、研究薬物の曝露およびすべての安全性分析に使用した。対象は治療されたとして分析した。
【０３０２】
一次および二次終点の統計的分析  集団変数の場合、データは、正確な９５％信頼区間（ＣＩ）とともに治療群別にまとめた。研究中（すなわち、スクリーニング／無作為化の日から最終訪問の日までの任意の時点）に他の抗菌薬を受けた対象、すなわち許容されるパープロトコル以外のものは失敗としてカウントした。
【０３０３】
症状解消までにかかる時間のカプラン−マイヤー生存曲線をすべての治療群についてプロットした。
【０３０４】
治療群を比較するために正式な統計学的試験は行わなかった。治療計画の最終選択は、治癒率、結果の一貫性、安全性、および利便性情報に基づいた。
【０３０５】
安全性分析  安全性データは、各治療群について、研究の停止をもたらすすべての治療中に発生した有害事象（ＴＥＡＥ）、任意の重篤な有害事象（ＡＥ）、ＴＥＡＥ、重篤なＴＥＡＥ、およびＡＥに関連する治療の評価（数および％）で構成された。
【０３０６】
検査官は、ＡＥの重篤度を説明するために、以下の用語：軽度、中度、または重度を選択する。検査官は、各ＡＥと研究薬物との関係は、関連しない、恐らく関連しない、恐らく関連する、または関連するとして評価した。注記：治療に関連するＡＥは、恐らく関連する、または関連すると分類されるものを含む。
【０３０７】
治療中に発生した有害事象（ＴＥＡＥ）は、研究薬物の開始時もしくは開始後、および研究薬物の最後の投与から３０日未満後に発症時間を有するか、または研究薬物開始の時点で継続していて、治療中もしくは研究薬物の最後の投与から３０日の期間中に重篤度が増した、もしくは研究薬物と関係が近くなった有害事象として定義される。
【０３０８】
ＴＥＡＥは、少なくとも１つの事象の全体発生率、器官別大分類（ＳＯＣ）別発生率、ならびにＳＯＣおよび好ましい期間別発生率によりまとめた。ＴＥＡＥは、重篤度および研究生成物との関係別にもまとめた。また以下の治療中に発生した有害事象は、以下のようにまとめた：重篤なＴＥＡＥ、治療関連のＴＥＡＥ、重篤なＴＥＡＥおよび研究の中断に至るＴＥＡＥ。
【０３０９】
安全性および有効性の臨床的評価の結果
【０３１０】
対象の処理  研究対象の処理を以下の表２９に示す。合計２５５名の対象を４つの研究治療に無作為に割り当て、１名（ＭＧＶ群）を除く全員に投与し、安全性集団に含めた。対象２３４名（９１．８％）が研究を完了した。早期に中断した２１名（８．２％）の対象中、９名（３．５％）はフォローアップできず、５名（２．０％）が淋菌および／またはクラミジアトラコマチススクリーニング試験結果が陽性であった。
【０３１１】
ＩＴＴ集団は対象２５５名（１００．０％）、ＭＩＴＴ集団は対象２２８名（８９．４％）、およびＰＰ集団は対象１８９名（７４．１％）であった。２７名（１０．６％）の対象がＭＩＴＴ集団から除外され、大半の２３名（９０．０％）はベースラインヌージェントスコアに起因した。６６名（２５．９％）の対象がＰＰ集団から除外され、３０名（１１．８％）の対象において発生した最も共通する理由は、研究薬物の初回投与から２０〜３１日以内にヌージェントスコアが行われなかったことであった。対象集団のまとめを以下の表３０に示す。
【０３１２】
人口統計  ベースラインにおいて、研究に登録した対象の平均年齢は３５．１（±９．９３）歳であった。対象は、３５歳未満の群（５１．４％）と３５歳以上（４８．６％）の群とに均等に分割し、治療群全体で年齢範囲別に均衡させた。人口統計のまとめを以下の表３１に示す。
【表２９】
2014518272.tif 000031
【表３０】
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【表３１】
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【０３１３】
細菌性膣炎の病歴および以前の細菌性膣炎の治療  細菌性膣炎（ＢＶ）の病歴およびＢＶの以前の治療をＩＴＴ集団について以下の表３２にまとめる。
【表３２】
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【０３１４】
全体で９５名（３７．３％）の対象がＢＶの以前のエピソードを報告し、現在のＢＶエピソードの平均期間は１５１．６日であった。治療群は、細菌性膣炎の病歴およびベースライン特徴に関して類似していた。
【０３１５】
有効性結果  治癒率のまとめ。ＰＰ集団およびＭＩＴＴ集団における治癒率のまとめ（一次終点治療的治癒率ならびに二次終点臨床的および細菌学的治癒率）を以下の表３３に示す。
【表３３】
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【０３１６】
以下の表３４に示されるように、ＭＩＴＴ集団の結果は、ＰＰ集団に類似する。
【表３４】
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【０３１７】
研究終了／治癒試験の訪問時の各治療的治癒基準による有無のまとめ  ４つの定められた治療的治癒基準のそれぞれについて、ＥＯＳ／ＴＯＣ訪問時の有無の結果を、ＰＰ集団について表３５に提示する。結果はＭＩＴＴ集団に類似する。
【表３５】
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【０３１８】
症状の解消にかかる時間  ＰＰ集団において、異常な分泌物および魚臭の両方の解消までにかかる時間の中央値、ならびに魚臭のみの解消までにかかる時間の中央値は、３つのメトロニダゾール１．３％治療群のすべてにおいてＭＧＶ０．７５％群より短く（時間の中央値はそれぞれ５日対６日、２日対３日であった）、異常な分泌物の解消までにかかる時間の中央値は、すべての治療群において等しい（時間の中央値は３日である）。症状（複数可）の解消にかかる時間のまとめを以下の表３６に示す。
【表３６】
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【０３１９】
サブグループ別治療的治癒率のまとめ  ＰＰ集団における治療的治癒率は、以下の表３７においてサブグループ別に提示される（年齢群、人種、民族、ベースラインでの現在のＢＶエピソードの期間、およびＢＶの以前のエピソード）。
【表３７】
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【０３２０】
サブグループ別の解析から明らかな治療的治癒の達成における有意な傾向は認められなかった。
【０３２１】
対象への質問結果  研究の終了時に、対象全員に質問票に記入するよう依頼した。以下の質問を具体的に対象に尋ね、研究薬物の使用に関する彼らのフィードバックを提供する。
・研究薬物の適用はどれくらい容易でしたか？
・研究薬物による治療の長さはどれくらい好都合でしたか？
・あなたが受けた治療にどれくらい満足していますか？
・今後ＢＶ症状が出た場合、この研究薬物による治療を好みますか？または別の治療を望みますか？
【０３２２】
結果のまとめを以下の表３８に示す。
【表３８】
2014518272.tif 000040
【０３２３】
４つの治療群の中で、本治療を「非常に適用しやすい」、「非常に好都合」（治療の長さについて）、および「非常に満足」と評価した対象が最も多かったのは、ＭＧ３３ＰＢ  １日群であった（データ図示せず）。
【０３２４】
安全性結果  薬物曝露。この３０日研究において、対象は、ＭＧＶをＱＤ×５日間連続、ＭＧ３３ＰＢをＱＤ×１日、ＭＧ３３ＰＢをＱＤ×３日間連続、またはＭＧ３３ＰＢをＱＤ×５日間連続して受けた。安全性集団の研究薬物曝露の平均日数のまとめを以下の表３９に示す。
【表３９】
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【０３２５】
全ての治療群において、対象の大半から研究生成物の漏出の報告はなかった、または最小の漏出が報告された。
【０３２６】
有害事象のまとめ  全体で、９２名（３６．２％）の対象が、有害事象（ＡＲ）を報告した。すべての有害事象は治療中に発生した有害事象（ＴＥＡＥ）であった。４つの治療群にわたって２９名（１１．４％）の対象がＴＥＡＥを有し、検査官は研究薬物に関連すると評価した。ＡＥのまとめを以下の表４０に示す。
治療中に発生した有害事象  ＴＥＡＥ全体で最も頻繁に報告された器官別大分類（ＳＯＣ）は、感染および侵入（４７［１８．５％］対象）、神経系疾患（３２［１２．６％］対象）、ならびに生殖系疾患および乳腺疾患（２７［１０．６％］対象）であった。器官別大分類（ＳＯＣ）によるすべてのＴＥＡＥのまとめを以下の表４１に示す。
【表４０】
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【表４１】
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【０３２７】
研究薬物との関係に関わらず、好ましい期間別で対象全体の２．０％超の発症率を有する、最も頻繁に報告されたＴＥＡＥは外陰膣カンジダ症（２５［９．８％］対象）および頭痛（２１［８．３％］対象）であった。研究薬物との関係に関わらず、好ましい期間別で対象全体の２．０％超の発症率を有するすべてのＴＥＡＥ、および対象全体の２．０％超の発症率で報告されたもののまとめを減少順に以下の表４２に示す。
【０３２８】
恐らく研究薬物に関連すると考えられる、または研究薬物に関連するＴＥＡＥのうち最も頻繁に報告されたものは、ＳＯＣカテゴリ「感染および侵入」の外陰膣カンジダ症、および「生殖系および乳腺疾患」ＳＯＣの外陰膣掻痒および灼熱感である。ＳＯＣ、好ましい期間、および全体で少なくとも６．０％の発生率を持つ研究薬物との関係によるＴＥＡＥのまとめを以下の表４３に示す。
【表４２】
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【表４３−１】
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【表４３−２】
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【０３２９】
有害事象の大半は、軽度または中度であった。計５名の対象が、低血糖、眩暈、腹痛、歯の膿瘍、外陰部浮腫、および膣の灼熱感を含む６つの重度事象を報告した。１名の対象（＃２９０４、１．３％１日）は、研究生成物に関連すると考えられる２つの重度事象（研究３日目に始まった膣の灼熱感および外陰部浮腫）を報告した。これらの事象は、外陰部掻痒、頭痛、腰痛、および外陰膣カンジダ症と同時に発生した。重度のＡＥの発生率において治療群間の差異は認められなかった。
【０３３０】
重度の有害事象  この研究中、ＭＧ３３ＰＢ  ＱＤ×１日治療群において、１（１．５％）対象に１つのＳＡＥ、低血糖が見られた。
【０３３１】
まとめ  この実施例では、細菌性膣炎に対する１．３％膣ゲル（試験ＭＧ３３ＰＢゲル）の有効性および安全性を探求した。１日１回１、３、または５日間のＭＧ３３ＰＢは、１日１回計５日間適用された市販のＭＧＶ０．７５％膣ゲル（ＭＧＶ）に類似する、または数値的により良好な治療的治癒率をもたらした（表３３〜３６）。分析したサブグループの分析から有効性の傾向は認められなかった（表３７）。治療を「非常に適用し易い」、「治療の長さが非常に便宜的」、および「非常に満足」と評価した対象の割合が最も高かったのは、ＭＧ３３ＰＢ  １日群であった（表３８）。有害事象の大半は、軽度および中度であることがわかった（表４０〜４３）。意外なことに、ＭＧ３３ＰＢによる５日間の治療計画が、治療後に認められる外陰膣カンジダ症を生じなかったことが発見された（表４２）。
実施例９：インビトロ皮膚感染モデルにおける抗菌有効性
【０３３２】
ガルドネレラバジナリスに対するいくつかの例示の高用量ＭＴＺゲルの抗菌有効性は、インビトロ実験において実証された。この実験では、試験ゲルにより治療され、定量された感染皮膚からＡＴＰから回収された。回収されたＡＴＰの量が低いほど、感染に対するゲルの有効性が高い。
【０３３３】
２つの研究：パイロット研究およびフルスケール研究を行った。パイロット研究の一般的な方法は以下のとおりである。
・新鮮な上皮膜を標準プロトコルに従って調製し、必要になるまで−２０℃で凍結保存した。
・膜を３ｍｍ×３ｍｍ切片に切断し、６０℃で１５分間熱処理して（以前の実験は、上皮膜からのバックグラウンド干渉を低減するために、これが最適な加熱時間であることを実証した。データ提示せず）、１０μＬのガルドネレラバジナリス（約５×１０７ｃｆｕ）細胞懸濁液を使用して感染させた。生菌数測定を行い、細胞懸濁液の調製後の細胞形成単位の数を得た。
・ＣｈｕｂＴｕｒ（登録商標）細胞を設定し、３ｍＬのリンガー液を細胞に添加し、湿度制御された環境を保証した。
・３５℃で２４時間培養した後、１０μＬの試験ゲルを上皮膜表面の上に適用した。
・接種した上皮膜の培養に続いて、２μＬの試験ゲルを上皮膜試料に適用することにより投薬を行った（各ゲルおよび開始時の時点についてｎ＝３、同一試料から複数の時点を測定しない）。
・投薬に続いて、４、８、および２４時間後の生きた有機体からのＡＴＰの存在について試料を分析した。
・正および負の対照を含めた。負の対照は、ｔ＝０で有機体または製剤を添加しなかった上皮膜試料を含み、正の対照は、ｔ＝０で有機体のみを添加した（製剤は添加しない）上皮膜試料を含んだ。
【０３３４】
フルスケール研究の場合、プロトコルに以下の変更を行った。
・上皮膜の初期感染および投薬前の嫌気性培養時間を３０分に低減した。
・ゲルへの曝露時間を２時間に低減して、経時的な有機体生存率の自然な減少を最小限にした。
・ＣｈｕｂＴｕｒ（登録商標）細胞を培養から除去し、ＡＴＰアッセイを行うことにより、ガルドネレラバジナリスに感染させた上皮膜試料にゲルを適用してから２時間後にゲルの有効性を試験した。
【０３３５】
結果：パイロット研究  図９は、例示の活性ゲルＭＧ３２ＰＢ（ｎ＝３、開始時）を適用したときのガルドネレラバジナリスに感染したＥＰ試料からのＡＴＰ放出の変動（１０アプリケーション投与）およびその未治療感染ＥＰ試料との比較を示す。対応するプラセボ、ＭＧ３２ＰＢ−Ｐ、および対照は、ｎ＝２で試験した。回収されたＡＴＰの量が低いほど、試験有機体に対する試験ゲルの有効性は高かった。
【０３３６】
図１０に提示されるデータから、正の対照（感染、未治療上皮膜）は、予想どおり、ＡＴＰの高い回収をもたらすことが認められたが、負の対照には低量のバックグラウンド干渉が認められた（未感染、未治療上皮膜）。製剤による投与時間もＡＴＰ回収に対する効果を示す。２４時間投薬に続いて、ＡＴＰのレベルがバックグラウンドＡＴＰ（負の対照）レベル付近に減少することがわかる。この現象は、程度の差はあるが、８時間時点に対して認められた。このパイロット研究から、経時的な自然細胞死の効果を減少させるために、初期培養時間（４、８、および２４時間）を低減すべきであることが決定された。フルスケール研究では、投薬時間を２時間に低減した。
【０３３７】
結果：フルスケール研究  図１１は、試験ゲルを適用したときの（活性試験ゲルの開始時ｎ＝６、およびプラセボの場合ｎ＝３）ガルドネレラバジナリス（ＡＴＣＣ１４０１８）に感染上皮膜試料から放出されたＡＴＰにおける変動、および市販の比較薬Ｍｅｔｒｏｇｅｌ（登録商標）との比較を示す。正の対照（ガルドネレラバジナリスに感染した未治療の上皮膜試料）および負の対照（未感染、未治療の上皮膜試料）も含めた。
【０３３８】
図１１に提示されるデータは、活性試験ゲルで治療した感染皮膚試料について、対応するプラセボゲルで治療された感染皮膚試料からのＡＴＰの回収と比較したときに、ＡＴＰ回収の低減が認められることを示す。製剤ＭＧ３２ＰＢは、回収されたＡＴＰレベル（データ図示せず）に関して、活性製剤とプラセボとの間に有効性の著しい差異を示した。感染した対象と比較して、活性製剤ＭＧ３２ＰＢのＡＴＰ回収に大幅な低減を示す著しい差異（ｐ＜０．０５）があり、製剤の良好な有効性を示す。
【０３３９】
例示の試験ゲルＭＧ３３ＰＢで治療した感染皮膚試料は、感染対照と比較して、活性製剤およびプラセボの両方について、著しく低い（ｐ＜０．０５）ＡＴＰ回収を示した。この製剤と他の製剤との間の主な差異を考慮すると、ポリカルボフィルＡＡ−１、生接着性ポリマー、賦形剤はＭＧ３３ＰＢ製剤中のみに存在するため、製剤ＭＧ３３ＰＢプラセボの有効性は予想外であった。
【０３４０】
製剤ＭＧ３５ＰＢは、任意の製剤で以前に治療されていない感染試料と比較したときに、活性製剤について有機体の生存率を低減することにほとんどまたはまったく影響しなかった。
【０３４１】
製剤ＭＧ３２ＰＢ−Ａ、ＭＧ３３ＰＢ−Ａ、およびＭＧ３３ＰＢ−Ｐのすべては、ヒト上皮膜上のガルドネレラバジナリスに対して同等の活性レベルを示した（Ｐ<０．０５）。しかしながら、Ｍｅｔｒｏｇｅｌ（登録商標）は、ＭＧ３２ＰＢ−Ｐ、ＭＧ３３ＰＢ−Ａ、およびＭＧ３５ＰＢ−Ｐと比較したときに、有意に効果的であった（ｐ<０．０５）。
【０３４２】
まとめ  ＭＧ３３ＰＢ−ＡおよびＭＧ３２ＰＢ−Ａは、他の製剤より高い有効性を有することが認められた。しかしながら、意外なことに、ＭＧ３３ＰＢ−Ｐ（メトロニダゾールを有しない）もＭＧ３３ＰＢ（１．３％メトロニダゾール）と等しくガルドネレラバジナリスに対して有効であることが発見された。
実施例１０：ディスク拡散抑制域アッセイを使用する抗菌有効性についての新規のメトロニダゾール製剤のインビトロ評価
【０３４３】
導入  微生物の増殖を抑制するために必要なベンジルアルコールの最小量を決定するために研究を行った。この研究では、３つのプラセボおよび１つの活性高用量ＭＴＺゲルのガルドネレラバジナリスに対する抗菌有効性を、ディスク拡散抑制域アッセイにより試験した。
【０３４４】
試験したゲルを以下の表４４に示す。
【表４４】
2014518272.tif 000047
【０３４５】
アッセイのために、約１×１０９ｃｆｕ／ｍＬで調整された３ｍＬのガルドネレラバジナリス懸濁液を調製した。１００μＬアリコートの懸濁液をピペットで取り、注入前コロンビア血液寒天培地（ＣＢＡ）プレートの表面上に置き、滅菌散布機を用いて懸濁液を寒天培地の表面全体に均一に広げた。次に寒天培地プレートを層流キャビネット下で乾燥させた。次に２０μＬの試験ゲルを１／４抗生物質アッセイディスクの表面に適用することにより抑制域アッセイを行い（各ゲルについてｎ＝６、注記：ディスクは抗生物質を含有しない）、層流キャビネット下で１分間の期間空気乾燥させた。次にディスクを反転させて、ガルドネレラバジナリスを事前に播種したプレートの表面の上に置き、３５℃で４８時間、嫌気性瓶内で培養した。ＡｎａｅｒｏＧｅｎ（商標）ガスパックの使用により嫌気性条件を維持した。培養に続いて、すべての製剤の抑制域をキャリパーで測定した。
【０３４６】
結果  図１２に示される結果は、ガルドネレラバジナリスに対してＭＧ３３ＰＢが有効であることを示し、抑制域がＣＢＡプレート上に観察される（データ図示せず）。活性製剤と比較して、プレート上で観察される抑制域がないことにより示されるように、プラセボＭＧ３３ＰＢプラセボ（０％、１％、および２％ＢＡ）のいずれかによる活性が見られた。
【０３４７】
まとめ  ＭＧ３３ＰＢは、ＭＴＺを含有しないプラセボゲルと比較して、ガルドネレラバジナリスに対して有効である。
【０３４８】
本明細書に引用される特許、特許文書、論文、要約、および他の出版物の開示は、それぞれ個別に組み込まれるかのように、参照することによりその全体が本明細書に組み込まれる。対立する場合は、定義を含む本明細書を優先する。本発明に対する様々な修正および変更は、本発明の範囲および趣旨から逸脱することなく当業者には明らかとなるであろう。例示の実施形態および実施例は単なる例として提供され、本発明の範囲を制限するものではない。本発明の範囲は、以下に記載される請求項によってのみ制限される。
【０３４９】
本出願において引用されるすべての出版物、特許、特許出願、および他の文書は、それぞれ個別の出版物、特許、特許出願、または他の文書が、あらゆる目的で参照することにより組み込まれることが個別に示されるのと同じ程度で、あらゆる目的で参照することによりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０３５０】
様々な特定の実施形態が図示および説明されたが、当然のことながら発明（複数可）の趣旨および範囲から逸脱することなく様々な変更を行うことができる。
【図１】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【国際調査報告】
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