(57)【要約】  本発明は、メタボリックシンドロームの発症を防止するまたは発症のリスクを低減するためのガラクトオリゴ糖組成物の使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
メタボリックシンドロームの発症を防止するまたは発症のリスクを低減する方法において使用するための、二糖Ｇａｌ（β１−３）−Ｇｌｃ；Ｇａｌ（β１−３）−Ｇａｌ；Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ；Ｇａｌ（α１−６）−Ｇａｌ；三糖Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−４）−Ｇｌｃ；Ｇａｌ（β１−３）−Ｇａｌ（β１−４）−Ｇｌｃ；四糖Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−４）−Ｇｌｃ；および五糖Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−４）−Ｇｌｃを含むガラクトオリゴ糖の混合物を含む組成物。
【請求項２】
冠動脈疾患、冠動脈心疾患、心臓発作、および脳卒中等の心血管系障害を防止するまたはそのリスクを低減する方法において使用するための、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
凍結乾燥粉末形態、シロップ形態、または錠剤形態で提供される、請求項１または請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
凍結乾燥粉末形態の組成物であって、２．７５〜２０ｇの前記粉末組成物中に１．３５〜９．６ｇのガラクトオリゴ糖、好ましくは４〜１０ｇの前記粉末中に１．９６〜４．９ｇのガラクトオリゴ糖、最も好ましくは５．５ｇの前記粉末中に２．７ｇのガラクトオリゴ糖を含む、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
シロップ形態の組成物であって、３．５５〜２５．２９ｇの前記シロップ中に１．３５〜９．６ｇのガラクトオリゴ糖、好ましくは５．１６〜１２．９ｇの前記シロップ中に１９．６〜４．９ｇのガラクトオリゴ糖、最も好ましくは７．２５ｇの前記シロップ中に２．７ｇのガラクトオリゴ糖を含む、請求項３に記載の組成物。
【請求項６】
メタボリックシンドロームの発症を防止するまたは発症のリスクを低減する方法における、二糖Ｇａｌ（β１−３）−Ｇｌｃ；Ｇａｌ（β１−３）−Ｇａｌ；Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ；Ｇａｌ（α１−６）−Ｇａｌ；三糖Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−４）−Ｇｌｃ；Ｇａｌ（β１−３）−Ｇａｌ（β１−４）−Ｇｌｃ；四糖Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−４）−Ｇｌｃ；および五糖Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−４）−Ｇｌｃを含むガラクトオリゴ糖の混合物を含む組成物の使用。
【請求項７】
コレステロールおよびトリグリセリドの血中レベルを低下させるための医薬の製造における、二糖Ｇａｌ（β１−３）−Ｇｌｃ；Ｇａｌ（β１−３）−Ｇａｌ；Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ；Ｇａｌ（α１−６）−Ｇａｌ；三糖Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−４）−Ｇｌｃ；Ｇａｌ（β１−３）−Ｇａｌ（β１−４）−Ｇｌｃ；四糖Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−４）−Ｇｌｃ；および五糖Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−４）−Ｇｌｃを含むガラクトオリゴ糖の混合物を含む組成物の使用。
【請求項８】
二糖Ｇａｌ（β１−３）−Ｇｌｃ；Ｇａｌ（β１−３）−Ｇａｌ；Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ；Ｇａｌ（α１−６）−Ｇａｌ；三糖Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−４）−Ｇｌｃ；Ｇａｌ（β１−３）−Ｇａｌ（β１−４）−Ｇｌｃ；四糖Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−４）-Ｇｌｃ；および五糖Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−４）−Ｇｌｃを含むガラクトオリゴ糖の混合物を含む有効量のガラクトオリゴ糖組成物を哺乳動物に投与することを含む、メタボリックシンドロームの発症を防止するまたは発症のリスクを低減する方法。
【請求項９】
前記哺乳動物がヒトである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記組成物が、凍結乾燥粉末形態、シロップ形態、または錠剤形態で提供される、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
前記ガラクトオリゴ糖組成物が、単回投与としてまたは間隔を数時間空けた２回の別個の投与として連日経口投与される、請求項８に記載の方法。
【請求項１２】
前記組成物が、凍結乾燥粉末形態の組成物であって、２．７５〜２０ｇの前記粉末組成物中に１．３５〜９．６ｇのガラクトオリゴ糖、好ましくは４〜１０ｇの前記粉末中に１．９６〜４．９ｇのガラクトオリゴ糖、最も好ましくは５．５ｇの前記粉末中に２．７ｇのガラクトオリゴ糖を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
前記組成物が、シロップ形態の組成物であって、一日量が、３．５５〜２５．２９ｇの前記シロップ中に１．３５〜９．６ｇのガラクトオリゴ糖、好ましくは５．１６〜１２．９ｇの前記シロップ中に１９．６〜４．９ｇのガラクトオリゴ糖、最も好ましくは７．２５ｇの前記シロップ中に２．７ｇのガラクトオリゴ糖を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１４】
二糖Ｇａｌ（β１−３）−Ｇｌｃ；Ｇａｌ（β１−３）−Ｇａｌ；Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ；Ｇａｌ（α１−６）−Ｇａｌ；三糖Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−４）−Ｇｌｃ；Ｇａｌ（β１−３）−Ｇａｌ（β１−４）−Ｇｌｃ；四糖Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−４）−Ｇｌｃ；および五糖Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−４）−Ｇｌｃを含むガラクトオリゴ糖の混合物を含む有効量のガラクトオリゴ糖組成物を哺乳動物に投与することを含む、冠動脈疾患、冠動脈心疾患、心臓発作、脳卒中等の心血管系障害を防止するまたはそのリスクを低減する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、メタボリックシンドロームの発症を防止するまたは発症のリスクを低減する方法において使用するためのガラクトオリゴ糖の混合物を含む組成物に関する。本発明は更に、ガラクトオリゴ糖の混合物を含む組成物を経口投与することによりメタボリックシンドロームの発症を防止するまたは発症のリスクを低減する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ガラクトオリゴ糖は、哺乳動物の胃腸の消化酵素に対して抵抗性であるが特定の結腸細菌によって発酵される非消化性炭水化物である。
【０００３】
メタボリックシンドロームは、冠動脈疾患、心疾患、心臓発作、心臓損傷等の心血管系障害のリスクを上昇させ且つ脳卒中のリスクを上昇させる、一緒に起こる一群の危険因子に与えられた名称である。
【０００４】
メタボリックシンドロームには複数の定義がなされてきたが、現在最も一般的に用いられているのは世界保健機関（ＷＨＯ）の定義である。
【０００５】
ＷＨＯによれば、メタボリックシンドロームの基準または危険因子は以下の通りである：１）ウエスト・ヒップ比が男性で０．９、女性で０．８５を超える中心性肥満；２）３０ｋｇ／ｍ２を超える肥満度指数（ＢＭＩ）；３）１４０／９０を超える血圧；４）１．７ｍｍｏｌ／ｌを超えるトリグリセリド；５）男性で０．９ｍｍｏｌ／ｌ未満、女性で１ｍｍｏｌ／ｌ未満の高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）コレステロール；６）空腹時または糖負荷２時間後の血糖が７．８ｍｍｏｌ／ｌを超える；および７）高インスリン正常血糖クランプ中のグルコース取込みが集団の下位四分の一に含まれる。
【０００６】
一般的に、個体の心疾患、糖尿病、および脳卒中のリスクは、個体が有するメタボリック危険因子の数と共に上昇する。メタボリックシンドロームの人は、メタボリックシンドロームでない人と比べて心疾患を２倍発症し易く、糖尿病を５倍発症し易い。
【０００７】
今日まで、メタボリックシンドローム管理の目的は心疾患および糖尿病のリスクを低減することである。医師は通常、生活習慣の変更を勧め且つ／または薬、例えば血圧、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）コレステロール、および血糖を下げるためのβ遮断薬、利尿薬、および／または連日低用量アスピリンの組合せを処方する。生活習慣の変更の推奨には、おそらくは１日当たり５００〜１，０００カロリー少なく食べることによる、減量、および１週間に５〜７日の３０分間の、ウォーキング等の中等度強度の運動が含まれる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
二重盲検無作為化プラセボ対照クロスオーバーヒト試験において、ガラクトオリゴ糖の混合物を含む組成物の経口投与がコレステロールおよびトリグリセリドの血中レベルを低減でき、したがってメタボリックシンドロームの発症を防止するまたは発症のリスクを低減する方法において使用できることが見出された。
【０００９】
このガラクトオリゴ糖の混合物は、二糖Ｇａｌ（β１−３）−Ｇｌｃ；Ｇａｌ（β１−３）−Ｇａｌ；Ｇａｌｅ（β１−６）−Ｇａｌ；Ｇａｌ（α１−６）−Ｇａｌ；三糖Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−４）−Ｇｌｃ；Ｇａｌ（β１−３）−Ｇａｌ（β１−４）−Ｇｌｃ；四糖Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−４）−Ｇｌｃ；および五糖Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−６）−Ｇａｌ（β１−４）−Ｇｌｃを含んでいた。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
このガラクトオリゴ糖の混合物は欧州特許出願公開第１６４４４８２号に開示されており、この文献はラクトースをこのガラクトオリゴ糖混合物に変換するガラクトシダーゼ酵素活性を生み出すBifidobacterium bifudumの新規な株を記載している。この新規な混合物は腸においてプレバイオティック特性および抗炎症特性を有することが示されている。
【００１１】
このガラクトオリゴ糖の混合物はＢｉｍｕｎｏ（登録商標）の名称で市販されており、クラサド社（Ｃｌａｓａｄｏ  Ｌｔｄ；ミルトンキーンズ、英国）から入手可能である。
【００１２】
本発明の一態様では、メタボリックシンドロームの発症を防止するまたは発症のリスクを低減する方法において使用するための上記ガラクトオリゴ糖の混合物を含む組成物が提供される。
【００１３】
このガラクトオリゴ糖の混合物は、冠動脈疾患、冠動脈心疾患、心臓発作、脳卒中等の心血管系障害を防止する方法においても使用され得る。好ましくは、有効量のガラクトオリゴ糖が単回投与としてまたは数時間空けた２回の別個の投与として毎日投与される。
【００１４】
本発明の第２の態様では、上記ガラクトオリゴ糖の混合物を含む有効量のガラクトオリゴ糖組成物をヒト等の哺乳動物に投与することを含む、メタボリックシンドロームの発症を防止するまたは発症のリスクを低減する方法が提供される。
【００１５】
Ｂｉｍｕｎｏとして知られる製品は、ガラクトオリゴ糖の混合物として少なくとも４９％の乾燥物質を含む。組成物の残部には、グルコース、ガラクトース、ラクトース、アカシアガム、クエン酸等の非活性成分が含まれ得る。
【００１６】
組成物は、凍結乾燥粉末形態、シロップ形態、または錠剤（ｐａｓｔｉｌｌｅ）形態であり得る。これは好ましくは毎日経口摂取される。粉末組成物は、好ましくは、２．７５〜２０ｇの粉末組成物中に１．３５〜９．６ｇのガラクトオリゴ糖、好ましくは４〜１０ｇの粉末中にｌ．９６〜４．９ｇのガラクトオリゴ糖、最も好ましくは５．５ｇの組成物中に２．７ｇのガラクトオリゴ糖を含む。組成物は飲料、好ましくは熱い飲料に加えてもよく、食品、例えば朝食用シリアルに振りかけてもよい。
【００１７】
あるいは、ガラクトオリゴ糖は、非活性成分がグルコース、ガラクトース、ラクトース、およびクエン酸を含み得るシロップまたは錠剤（脱水シロップ）として提供され得る。一日量のシロップは、３．５５〜２５．２９ｇのシロップ組成物中に１．３５〜９．６ｇのガラクトオリゴ糖混合物、好ましくは５．１６〜１２．９ｇのシロップ中に１．９６〜４．９ｇのガラクトオリゴ糖、最も好ましくは７．２５ｇのシロップ中に２．７ｇのガラクトオリゴ糖を含み得る。
【実施例】
【００１８】
以下に実施例を用いて本発明を更に詳細に説明する。
【００１９】
実施例１
「スティック・パック（ｓｔｉｃｋ−ｐａｃｋ）」中にパッケージングした、最終製品５．５ｇ当たり以下を含む、凍結乾燥粉末化組成物。
ガラクトオリゴ糖（ＧＯＳ）混合物  ２．７５ｇ
ラクトース                        １．４０ｇ
単糖（グルコース、ガラクトース）  ０．６４ｇ
乾燥助剤                          ０．２４ｇ
灰分                              ０．２３ｇ
水分                              ０．１９ｇ
タンパク質                        ０．０５ｇ
【００２０】
実施例２
最終製品７．２５ｇ当たり以下を含むシロップ組成物。
ガラクトオリゴ糖（ＧＯＳ）混合物  ２．７５ｇ
ラクトース                        ０．５８ｇ
単糖（グルコース、ガラクトース）  １．６９ｇ
灰分                              ０．２３ｇ
水分                              １．９５ｇ
タンパク質                        ０．０５ｇ
【００２１】
実施例３
過体重の成人におけるメタボリックシンドローム危険因子へのガラクトオリゴ糖の有効性
【００２２】
試験
メタボリックシンドロームに関連する危険因子を３つ以上有し且つ心血管系疾患のリスクが高い合計４５〜５０名のヒト被験者（ｈｕｍａｎ  ｓｕｂｊｅｃｔｓ）をリクルートした。同数の男性および女性を試験コホートに含めた。
【００２３】
被験者の選択に用いたメタボリックシンドローム因子には以下が含まれる：インスリン抵抗性（空腹時のグルコース（６〜７ｍｍｏｌ／ｌ）とインスリンとの比の上昇として測定される）、高血圧、脂質異常症［低い高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）コレステロール（＜１ｍｍｏｌ／ｌ）、高いトリグリセリド（＞１．３ｍｍｏｌ／ｌ）］、腹囲（男性では＞４０；女性では＞３５）。
【００２４】
更なる選択基準は以下の通りである：
・１８〜６５歳
・ＢＭＩ＞２５ｋｇ／ｍ２
・過去１２ヶ月以内に心筋梗塞／脳卒中または癌を有していない
・糖尿病（診断されているか、または空腹時グルコース＞７ｍｍｏｌ／ｌ）でなく、かつ、他の内分泌障害を有さない
・慢性的な冠疾患、腎疾患、腸疾患／胃腸障害を有さず、かつ、胆汁うっ滞性肝疾患または膵炎の病歴もない
・高脂血症、高血圧、炎症、凝固亢進の薬物治療中ではなく、かつ、腸の運動または吸収に影響を与える薬物の使用中でもない
・アルコール／薬物の乱用歴がない
・減量措置の予定がなく、かつ、減量措置中でない
・食事性の抗酸化剤または他のファイトケミカル、プレバイオティック、もしくはプロバイオティックサプリメントを摂取していない
・妊娠中、授乳中、６ヶ月以内の妊娠の予定、または出産の可能性がいずれもなく、且つ有効な避妊措置を用いていない
・過去１ヶ月以内に抗生物質を摂取していない
・貧血でない（ヘモグロビンが男性＞１４ｇ／ｄｌ、女性＞１１．５ｇ／ｄｌ）
・非喫煙者
【００２５】
選択基準に適合した志願者に、空腹時（１２時間）血液サンプルを採取し、ＢＭＩ、腹囲、および血圧を測定するスクリーニングセッションに参加するよう求めた。スクリーニング血液サンプル（約１０ｍｌ）をロイヤル・バークシャー病院（Ｒｏｙａｌ  Ｂｅｒｋｓｈｉｒｅ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ）で総コレステロール（ＴＣ）、ＨＤＬコレステロール、トリアシルグリセロール、グルコース、およびインスリンについて分析した。貧血の個体（Ｈｂ＜１４ｇ／ｄｌの男性、１１．５ｇ／ｄｌの女性）または上記分析で「異常な」血液生化学を示した個体は自動的に除外された。測定値からメタボリックリスクの高い個体を特定し、試験への参加を求めた。
【００２６】
処置ＡまたはＢを２つの試験群について１：１の割当比で各参加者にランダムに割り当てた（性別による層別化を含む）。志願者には大学合計６回訪問することが求められた。試験は、マルトデキストリンをプラセボとする無作為化対照二重盲検クロスオーバー試験とした。志願者には、間に６週間の休薬期間を設けて被験製品（ＧＯＳ）および／またはプラセボを１２週間にわたり毎日摂取するよう指示した。ＧＯＳおよびプラセボはどちらも粉末小袋（５．５ｇ）で提供し、これらをボウル１杯のシリアルに振りかけてまたは何らかの飲料に加えて毎日摂取するよう志願者に指示した。事前に検証した４日間の食事日記（週末２日および平日２日）により食習慣を評価した。介入の０、６、および１２週目に志願者は栄養部署を訪れ、サンプル採取および測定が行われた。
【００２７】
各訪問時、空腹時血液サンプル（約２０ｍｌ）を取り、これを用いて複数のリスクマーカーを分析した（全て市販のキットを使用）。調べたマーカーは、
・脂質プロファイル（総コレステロール、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）コレステロール、ＨＤＬコレステロール、トリグリセリド、および非エステル化脂肪酸）
・空腹時に測定されたグルコースとインスリンの比率から推定されるインスリン抵抗性
・炎症／血栓バイオマーカー（Ｃ反応性タンパク質およびＩＬ６を含む）
であった。
【００２８】
０、１２、１８、および３０週目に、変化を調べるために一連の人体計測値（体重、血圧、および腹囲を含む）を得た。
【００２９】
結果
被験者のベースライン特性
試験集団の人口統計学的特性を表１に示す。
【００３０】
【表１】
2014518253.tif 000002
【００３１】
結腸微生物叢への影響
５．５ｇのＢｉｍｕｎｏ（２．７５ｇの活性ＧＯＳの投与）の連日摂取により、６週間後に、プラセボレベル（１ｗｋ）（ｐ＜０．０５）およびベースラインレベル（ｐ＜０．０５）の両方と比べてBifidobacteriumの数を有意に増加させることが示された（表２）。１２週間摂取後、Ｂｉｍｕｎｏ摂取は、プラセボ（１２ｗｋ）（ｐ＜０．０００１）およびベースライン（ｐ＜０．０５）と比べてBifidobacteriumおよびLactobacillus sppの数を有意に増加させた。同時に、Clostridium hystoliticum群の種およびDesulfovibrio sppのレベルをプラセボ（１２ｗｋ）（ｐ＜０．０００１）およびベースライン（ｐ＜０．０５）と比べて有意に減少させた（表２）。
【００３２】
Atopobium spp、C. coccoides／E. rectale、E. cylindroides、E. hallii、Clostridium cluster IX、F. prausnitzii cluster、beta-Proteobacteria、Bacteroides sppの数の変化の点では、１２週間の処置期間中、Ｂｉｍｕｎｏまたはプラセボ摂取後に有意な影響は記録されなかった。
【００３３】
炎症バイオマーカーへの影響
試験期間（プラセボ、Ｂｉｍｕｎｏ）中の糞便中ｓＩｇＡ（分泌型免疫グロブリンＡ）、糞便中カルプロテクチン、および血中炎症バイオマーカー（ＩＬ−６、ＣＲＰ）のレベルに関する結果を表３に示す。
【００３４】
１２週間にわたるＢｉｍｕｎｏ連日摂取は、分泌型ＩｇＡ（ｐ＜０．０５対プラセボ；ｐ＜０．０１対ベースライン）およびカルプロテクチン（ｐ＜０．０１対プラセボ；ｐ＜０．０５対ベースライン）の両方を有意に低減した（表３）。同時に、炎症促進性サイトカインであるＩＬ−６の血中レベル（ｐ＜０．０５対プラセボ；ｐ＜０．０５対ベースライン）および炎症バイオマーカーであるＣ反応性タンパク質（ｐ＜０．０５対プラセボ；ｐ＜０．０５対ベースライン）の有意な低減が１２週間にわたるＢｉｍｕｎｏ連日摂取後に確認された。
【００３５】
メタボリックシンドローム危険因子への影響
１２週間にわたるＢｉｍｕｎｏ連日摂取は、血中インスリンレベル（ｐ＜０．０５対プラセボ；ｐ＜０．０１対ベースライン）、血中トリグリセリド（ｐ＜０．０５対プラセボ；ｐ＜０．０５対ベースライン）、総コレステロール（ｐ＜０．０５対プラセボ；ｐ＜０．０５対ベースライン）、および総コレステロールとＨＤＬコレステロールの比（ｐ＜０．０５対プラセボ；ｐ＜０．０５対ベースライン）を有意に低下させ、このことは、メタボリックシンドロームのリスクの全体的低減を示している（表４）。
【００３６】
結論
メタボリックシンドロームを発症するリスクがある集団において５．５ｇのＢｉｍｕｎｏ（２．７５ｇの活性ＧＯＳを送達する）の補給は、有益な常在性細菌のBifidobacterium属およびLactobacillus属を増加させつつ、C. hystoliticum亜群および硫酸還元細菌に属するような有害な細菌のレベルを低減することにより、結腸微生物叢の組成を有意に変化させた。この微生物叢の変化により、腸のコロニー形成耐性（ｃｏｌｏｎｉｓａｔｉｏｎ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ）が増加して、カルプロテクチンレベルの低下により見られるように結腸の炎症が低減した。同時に、ｓＩｇＡレベルの上昇は、上皮の障壁機能の向上を示唆し、これは、結腸炎症の低減と一緒に、宿主中の炎症バイオマーカー（ＩＬ−６、ＣＲＰ）のレベルを低下させ得る。
【００３７】
結腸微生物叢の組成および腸の障壁機能の改善によるこの全体的保護は、メタボリックシンドロームの既知の危険因子であるインスリン、コレステロール、およびトリグリセリドのレベルに有益な影響を与えると考えられる。
【００３８】
【表２】
2014518253.tif 000003
【００３９】
【表３】
2014518253.tif 000004
【００４０】
【表４】
2014518253.tif 000005
【国際調査報告】
2014518253.tif 000006
2014518253.tif 000007
2014518253.tif 000008