(57)【要約】  患者における髄鞘再生に有効な方法であって、前記患者を、アンドロゲン受容体に結合して作用しアンドロゲン受容体誘導生物学的応答を誘発するアンドロゲン受容体リガンドを、髄鞘再生を誘導するために十分な投与量で用いて、処置することを含む、方法が開示される。前記アンドロゲン化合物は、好ましくは、アンドロゲン受容体とエストロゲン受容体の両方を標的とするアンドロゲンのＭＥＮＴを含み、前記方法は、男性の避妊と神経変性のための処置との両方を提供するために、アンドロゲン化合物とプロゲスチン化合物とを組み合わせることを含む。【選択図】図６
2014508809.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
脱髄に罹患した患者を、前記脱髄の少なくとも一部を修復するために、インプラントまたは経皮装置の形態の、薬学的に有効な投与量の、アンドロゲン受容体に結合して作用するアンドロゲン受容体リガンドを用いて処置することを含む患者の髄鞘再生のための方法であって、前記インプラント中の前記アンドロゲン受容体リガンドの前記薬学的に有効な投与量は、約４，０００〜２０，０００μｇ／日であり、前記経皮装置中の前記アンドロゲン受容体リガンドの前記薬学的に有効な投与量は、約４０，０００〜２００，０００μｇ／日である、方法。
【請求項２】
前記アンドロゲン受容体リガンドが、テストステロン、７α−メチル−１９−ノルテストステロンおよびその誘導体、ならびに５α−デヒドロテストステロンからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記アンドロゲン受容体リガンドが、ＭＥＮＴを皮下移植用インプラントの形態で含み、前記投与量が、約４００〜２，０００μｇ／日を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記アンドロゲン受容体リガンドが、ＭＥＮＴを含み、前記薬学的に有効な投与量が、前記ＭＥＮＴを、ゲルの形態で、約４，０００〜２０，０００μｇ／日を含む投与量で含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記アンドロゲン受容体リガンドが、テストステロンを含み、前記薬学的に有効な投与量が、前記テストステロンを、約４０，０００〜２００，０００μｇ／日で含むゲルの形態で含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記患者が、男性患者を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記薬学的に有効な投与量が、エストロゲン受容体に結合して作用するエストロゲン受容体リガンドを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記エストロゲン受容体リガンドが、エストラジオールを含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記薬学的に許容され得る投与量が、プロゲスチン化合物を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記プロゲスチン化合物が、ネストロン（登録商標）を含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記ネストロン（登録商標）が、５ｍｇ／日以下の有効投与量で存在する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記プロゲスチン化合物が、１６−メチレン−１７α−アセトキシ−１９−ノルプレグナ−４−エン−３，２０−ジオン（ネストロン（登録商標））、１８−メチルネストロン（登録商標）、ノメゲストロールアセテート、トリメゲストン、ノルゲスチメート、ジエノゲスト、ドロスピレノン、クロルマジノンアセテート、プロメゲストン、レトロプロゲステロン、および１７−ヒドロキシプロゲステロンからなる群から選択される、請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
患者の髄鞘再生のための方法であって、脱髄に罹患した前記患者を、少なくとも一部の前記脱髄を修復するために、薬学的に有効な投与量の、エストロゲン受容体に結合して作用するエストロゲン受容体リガンドを用いて処置することを含む、方法。
【請求項１４】
前記エストロゲン受容体リガンドが、１７β−エストラジオールおよび１７α−エストラジオールからなる群から選択される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記患者が、女性を含み、前記エストロゲンが、エストラジオールを含み、前記薬学的に許容され得る投与量が、約２０μｇ〜２ｍｇ／ｄを含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
ＭＳに罹患した患者を、前記患者の少なくとも部分的な髄鞘再生をもたらすために、インプラントまたは経皮装置の形態である、薬学的に有効な投与量の、アンドロゲン受容体に結合して作用するアンドロゲン受容体リガンドを用いて処置することを含むＭＳの処置方法であって、前記インプラント中の前記アンドロゲン受容体リガンドの前記薬学的に有効な投与量は、約４，０００〜２０，０００μｇ／日を含み、前記経皮装置中の前記アンドロゲン受容体リガンドの前記薬学的に有効な投与量は、約４０，０００〜２００，０００μｇ／日を含む、方法。
【請求項１７】
前記アンドロゲン受容体リガンドが、テストステロン、ＭＥＮＴおよびその誘導体、ならびに５α−デヒドロテストステロンからなる群から選択される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記アンドロゲン受容体リガンドが、ＭＥＮＴを含む、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記ＭＥＮＴが、前記ＭＥＮＴを約４００〜２，０００μｇ／日含む皮下インプラントの形態である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記ＭＥＮＴが、約４，０００〜２０，００μｇ／日の前記ＭＥＮＴを含むゲルの形態である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記アンドロゲン受容体リガンドが、テストステロンを含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
前記テストステロンが、前記テストステロンを約４０，０００〜２００，０００μｇ／日含むゲルの形態である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記患者が、男性患者を含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項２４】
脱髄に罹患した患者を、少なくとも一部の前記脱髄を修復するために、薬学的に有効な投与量の、アンドロゲン受容体に結合して作用するアンドロゲン受容体リガンドを用いて処置することを含む患者の髄鞘再生のための方法であって、前記アンドロゲン受容体リガンドの前記薬学的に有効な投与量は、約０．３９〜３．４５ｍｇ／ｍｌの血漿レベルをもたらすために十分な量である、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
＜関連出願の相互参照＞
この出願は、２０１１年３月２２日に出願された米国仮特許出願第６１／４６６，２５２号の出願日の利益を主張するものであり、この仮特許出願の開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
＜発明の分野＞
本発明は、ミエリン変性および神経変性の予防の分野に関する。より詳細には、本発明は、多発性硬化症（ＭＳ）などの神経変性疾患の処置のための、ミエリン修復（髄鞘再生）に関する。
【背景技術】
【０００３】
＜発明の背景＞
多発性硬化症（ＭＳ）は、中枢神経系（ＣＮＳ）の進行性の機能不全性疾患であり、女性が男性の２倍を超える数で罹患する（１−４）。神経損傷は、ＭＳの初期に始まり、脱髄が活発に起こる間には急性軸索損傷が既に存在していることが示唆されている（５）。しかしながら、ＭＳで髄鞘再生が起こることが知られており（６、７）、髄鞘再生により軸索喪失が防御される（８）。実際、髄鞘再生プラークでは顕著な軸索損傷は観察されない（５）。ＭＳが進行するにつれて、軸索は、髄鞘再生を受けにくくなる。
【０００４】
ＭＳは、脳および脊髄（ｓｐｉｎａｌ  ｃｈｏｒｄ）の軸索周辺の脂肪性髄鞘が損傷し、脱髄および瘢痕化、ならびに広範な症候および症状が引き起こされる炎症性疾患である。特に、ＭＳは、脳および脊髄（ｓｐｉｎａｌ  ｃｈｏｒｄ）の神経細胞が互いに伝達し合う能力に影響を及ぼす。ミエリンが失われると、軸索はもはや有効に神経伝達を行うことができない。ＭＳ自体には、男性患者も女性患者も罹患する。
【０００５】
現行の多発性硬化症（ＭＳ）に関する薬理学的処置は、免疫調節薬および抗炎症薬に限定されているが、これらは対症療法にすぎず、疾患の進行遅延を顕著に遅延させるものではない（１２）。
【０００６】
またＭＳに対する有効な処置戦略には、不可逆的な軸索喪失を防ぐために、軸索の脱髄を逆行させる治療剤も含めなければならない。男性ホルモンであるテストステロンは、ＭＳおよび神経保護に有益な効果を奏する可能性がある（９）。
【０００７】
しかしながら、ミエリン修復の内因的能力を刺激することに、未だ対処されていない重要な治療的必要性が存在している（１３）。実際、ミエリンは、ＭＳの初期段階において、自然な治癒過程の一部として大規模に修復される場合があり、このことは、ほとんどの症例で、疾患が開始する際、再発／寛解の過程を経ることを説明している。但し、ミエリン修復の能力は、その後、進行的に減少し、疾患は進行的に悪化する。さらに、ミエリン修復の効率性は患者によって著しく異なり、ＭＳの有病率は女性の方が男性より高いものの、一般に男性のＭＳ患者は女性よりも早く身体障害の境界に達し、また男性は疾患の進行がより速く、転帰もより不良である（１４）。
【０００８】
７α−メチル−１９−ノルテストステロン（ＭＥＮＴ）は、別の強力な合成アンドロゲンであり、５α還元を受けず、それゆえ、特に前立腺に対する刺激がより少ないことが理由となって、長期的臨床使用に関する研究が行われてきた。ＭＥＮＴ自体は、例えば、男性避妊（１０）、ならびに性腺機能低下男性の性行動および気分の維持（１１）に有用な物質として認識されてきた。ＭＥＮＴは、男性対象に対し、テストステロンの１０〜１２倍活性であることが示されてきた（１５）。例えば、米国特許第６，７６７，９０２号には、ＭＥＮＴおよびその薬学的に許容され得る塩を、好ましくは避妊のために男性に投与する唯一の精子抑制剤として、投与することによる男性避妊法が開示されている。
【０００９】
別の公知のアンドロゲンは、５α−ジヒドロテストステロン、すなわちＤＨＴである。実際、ＤＨＴは、アンドロゲン受容体に対し、テストステロンの約３倍を超える親和性を有する。ＤＨＴは、おそらく男性型脱毛と前立腺障害を引き起こすその作用が最もよく知られている。別の公知のアンドロゲン代謝物質は、エストラジオールであり、主に、女性に存在する支配的性ホルモンとして知られている。しかしながら、エストラジオールは男性にも存在し、テストステロンの代謝産物である。
【００１０】
さらに、エストロゲンは、ＭＳの実験モデルにおいて、神経保護効果および抗炎症効果を奏することが先に文献で報告されている（１７）。さらに、アンドロゲン療法が、ＭＳ以外のミエリン疾患、特に白質委縮症、に対して治療効果を奏し得ることも見出されている（１８）。
【発明の概要】
【００１１】
＜発明の概要＞
本発明によれば、脱髄に罹患した患者を、少なくとも一部の脱髄を修復するために、薬学的に有効な投与量の、アンドロゲン受容体に結合して作用するアンドロゲン受容体リガンドを用いて処置することを含む、患者の髄鞘再生のための方法が見出された。好ましい実施形態において、アンドロゲン受容体リガンドは、テストステロン、７α−メチル−１９−ノルテストステロンおよびその誘導体、ならびに、５α−デヒドロテストステロンから選択される。
【００１２】
本発明の方法の一実施形態によれば、アンドロゲン受容体リガンドは、ＭＥＮＴを皮下移植用インプラントの形態で含み、投与量は、約４００〜２，０００μｇ／日を含む。
【００１３】
本発明の方法の別の実施形態によれば、アンドロゲン受容体リガンドは、ＭＥＮＴを含み、薬学的に有効な投与量は、ＭＥＮＴを、ゲルの形態で、約１２〜１６ｍｇ／ｇを含む投与量で含む。
【００１４】
本発明の方法の別の実施形態によれば、アンドロゲン受容体リガンドは、テストステロンを含み、薬学的に有効な投与量は、テストステロンを約５〜１０ｍｇ含むゲルの形態で含む。
【００１５】
本発明の好ましい実施形態によれば、患者は、男性患者を含む。
【００１６】
本発明の方法の別の実施形態によれば、薬学的に有効な投与量は、エストロゲン受容体に結合して作用するエストロゲン受容体リガンドを含む。好ましくは、エストロゲン受容体リガンドは、エストラジオールを含む。
【００１７】
本発明の方法の別の実施形態によれば、薬学的に有効な投与量は、プロゲスチン化合物を含む。好ましくは、プロゲスチン化合物は、ネストロン（Ｎｅｓｔｏｒｏｎｅ）（登録商標）を含む。好ましい実施形態において、ネストロン（登録商標）は、５ｍｇ／日以下の有効投与量で存在する。一実施形態において、プロゲスチン化合物は、１６−メチレン−１７α−アセトキシ−１９−ノルプレグナ−４−エン−３，２０−ジオン（ネストロン（登録商標））、１８−メチルネストロン（登録商標）、ノメゲストロールアセテート、トリメゲストン，ノルゲスチメート、ジエノゲスト、ドロスピレノン、クロルマジノンアセテート、プロメゲストン、レトロプロゲステロン、および１７−ヒドロキシプロゲステロンから選択される。
【００１８】
本発明によれば、患者の髄鞘再生のための方法であって、脱髄に罹患した患者を、少なくとも一部の脱髄を修復するために、薬学的に有効な投与量の、エストロゲン受容体に結合して作用するエストロゲン受容体リガンドを用いて処置することを含む方法が見出された。好ましい実施形態において、エストロゲン受容体リガンドは、１７β−エストラジオールおよび１７α−エストラジオールから選択される。好ましくは、患者は、女性を含み、エストロゲンは、エストラジオールを含み、薬学的に許容され得る投与量は、約２０μｇ〜２ｍｇ／ｄを含む。
【００１９】
本発明によれば、ＭＳを処置するための方法であって、ＭＳに罹患した患者を、患者の髄鞘再生を少なくとも部分的に有効にするために、薬学的に有効な投与量の、アンドロゲン受容体に結合して作用するアンドロゲン受容体リガンドを用いて処置することを含む方法も見出された。好ましい実施形態において、アンドロゲン受容体リガンドは、テストステロン、ＭＥＮＴおよびその誘導体、ならびに、５α−デヒドロテストステロンから選択される。好ましくは、アンドロゲン受容体リガンドは、ＭＥＮＴを含む。好ましい実施形態において、ＭＥＮＴは、約４００〜２，０００μｇ／日のＭＥＮＴを含有する皮下インプラントの形態である。別の実施形態において、ＭＥＮＴは、約１２〜１６ｍｇ／ｇのＭＥＮＴを含むゲルの形態である。
【００２０】
本発明の方法の一実施形態において、アンドロゲン受容体リガンドは、テストステロンを含む。好ましい実施形態において、テストステロンは、テストステロンを約５〜１０ｍｇ含むゲルの形態である。
【００２１】
本発明の当該方法の好ましい実施形態によれば、患者は、男性患者を含む。
【００２２】
本発明によれば、特定のアンドロゲン受容体リガンド（テストステロン、７α−メチル−１９−ノルテストステロン、５α−ジヒドロテストステロンを含む）および特定のエストロゲン受容体リガンド（エストラジオールなど）が、髄鞘再生に対し、非常に有益な効果を有することがここで見出され、実証された。そして、これらのアンドロゲン受容体リガンドおよびエストロゲン受容体リガンド（ステロイド）は、インビトロモデルにおいて、髄鞘再生に対し、予測を一層上回る有益な効果を奏することが示された。例えば、テストステロンは、インビボでクプリゾン中毒により誘導される脱髄後に非常に強力な髄鞘形成促進効果を奏すること、またインビトロで小脳切片の器官型培養物に対して非常に強力な髄鞘形成促進効果を奏することが示された。これらのテストステロンの髄鞘形成促進効果は、雄と雌の動物の両方で観察された。この髄鞘形成促進効果が、アンドロゲン受容体に明確に関与していることは明らかである。その理由として、この効果が、５α−ジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）により模倣されること、ＣｒｅｌｏｘＰ技術を使用した中枢神経特異的アンドロゲン受容体不活化トランスジェニックマウスにおいてこの効果の喪失が示されたこと、さらには、アンドロゲン受容体遺伝子変異によりアンドロゲンに完全に不感受性となっている精巣女性化マウスにおいてこの効果が観察されないことが挙げられる。最後に、この髄鞘形成促進効果は、７α−メチル−１９−ノルテストステロン（ＭＥＮＴ）およびアンドロゲン受容体に結合するが、５α−還元酵素と相互作用しない他のアンドロゲンでも観察される。テストステロンの場合、５α−還元酵素の作用により、ＤＨＴに変換される。
【００２３】
また、テストステロンがオリゴデンドロサイト前駆細胞の増殖および成熟を促進すること、さらに、テストステロンがミクログリア応答およびアストログリア増殖を制御することも示された。反応性ミクログリア細胞とアストロサイトの数は、いずれも神経炎症および脳組織損傷の指標となるものであるが、テストステロンによる処理後、対照実験と比較して正常なレベルに戻る。
【００２４】
さらに、テストステロンは、ＭＳの主な攻撃標的であるマウス脊髄にリゾレシチンを定位注入することによって誘導される脱髄モデルにおいて、髄鞘再生を促進することも示された。このモデルにおいて、テストステロンの髄鞘形成促進効果は、ＡＲＫＯマウスおよびアンドロゲン受容体が欠失している精巣女性化マウスのＣＮＳでは失われ、またこの効果は、ＭＥＮＴにより模倣され得る。このモデルにおいて、テストステロンによる処理は、機能的転帰の改善を伴う。
【００２５】
クプリゾンモデルを使用して、エストラジオールも髄鞘形成促進効果を奏すること、またテストステロンがアロマターゼノックアウトマウスにおいてその効率性を喪失することも示された。したがって、アンドロゲンとエストロゲンの両方が、この髄鞘再生効果に重要な役割を担っていることは明らかである。したがって、これは、アンドロゲン受容体を標的とし、エストロゲン受容体と相互作用するエストロゲン（７α−メチルエストラジオール）に変換される化合物であるＭＥＮＴについて重要である。
【００２６】
本発明によれば、アンドロゲン受容体（ＡＲ）が、ミエリン修復を促進するための主要な治療標的として特定された。本発明者による実験結果から、ＡＲリガンドが軸索の髄鞘再生を強力に促進することも実証された。エストロゲン様活性も有するＡＲリガンドが、最も優れた治療能力を有する可能性がある。ＡＲリガンドとしては、テストステロン（アロマターゼ酵素により、エストラジオールに変換される）、ＭＥＮＴ（７α−メチル−エストラジオールに変換される）および５α−ＤＨＴ（５α−アンドロスタン−３β，１７β−ジオール（３βアジオール）に変換され、この物質はエストロゲン受容体β（ＥＲβ）に強く結合する）（１６）が挙げられる。実際に、これらの実験結果から、テストステロンの髄鞘形成促進効果が、アロマターゼノックアウトマウスにおいて著しく減少することが示される。
【００２７】
本発明は、以下の詳細な説明を参照することで、より十分に理解し得るものであり、説明では順に図を参照する。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】図１は、雄マウス脳梁におけるミエリン塩基性タンパク質の染色濃度に関するグラフおよび画像図である。
【図２Ａ】図２Ａは、クプリゾン中毒後の５α−ジヒドロテストステロンまたは７α−メチル−１９−ノルテストステロンを用いた処理により、髄鞘形成がもたらされることを示すグラフ表示である。
【図２Ｂ】図２Ｂは、ミエリン塩基性タンパク質の染色強度を示すグラフ表示である。
【図３】図３は、テストステロンによるミクログリア応答およびアストログリア増殖（ｅｓｔｒｏｇｌｉｏｓｉｓ）の制御を示す画像およびグラフ表示である；
【図４】図４は、クプリゾンにより誘導される脱髄を示すグラフおよび画像表示である。
【図５】図５は、クプリゾン中毒後のテストステロンによる髄鞘再生に対する刺激を表す画像およびグラフ表示である。
【図６】図６は、ホルモン処理後のオリゴデンドロサイトの数を示すグラフ表示である。
【図７】図７は、脳梁軸索の髄鞘形成を示すグラフ表示である。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
詳細な説明
本発明は、最も詳細には、特定のアンドロゲンの特別な性質を見出したことに基づくものである。最も詳細には、これらのアンドロゲンは、アンドロゲン受容体に結合して作用し、アンドロゲン−受容体−誘導生物学的応答を誘発する。これらのアンドロゲンとしては、テストステロン、７α−メチル−１９−ノルテストステロン（ＭＥＮＴ）、ＭＥＮＴの誘導体［例えば、フルオロ−メチル−１９−ノルテストステロン（ｅＦ−ＭＥＮＴ）］、および５α−ジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）が挙げられ、このうち、ＭＥＮＴが最も好ましく、またエストロゲン（例えば、エストラジオールおよび７αメチルエストラジオール）が挙げられる。
【００３０】
アンドロゲン受容体リガンドとエストロゲン受容体リガンドとは、特定の投与量レベルで用いられるべきである。例えば、アンドロゲン受容体リガンド（ＭＥＮＴなど）に関しては、約４００〜２，０００μｇ／日、好ましくは約１，６００μｇ／日の投与量レベルで用いられることが好ましい。これらの投与量は、皮下インプラントを用いた使用の場合に好ましい。しかしながら、経皮適用（経皮ゲルなど）と関連して使用する場合には、明らかにより多量のアンドロゲンを用いる必要があり、この場合、投与量レベルは、約４，０００〜２０，０００μｇ／日（４〜２０ｍｇ／日）、好ましくは約１６，０００μｇ／日（１６ｍｇ／日）である。他方、活性がＭＥＮＴの約１／１０であるアンドロゲン（テストステロンなど）を用いるとき、投与量は、皮下インプラントの場合には、約４，０００〜２０，０００μｇ／日、好ましくは約１６，０００μｇ／日が必要であろうし、経皮的に使用する場合（例えば、経皮ゲル組成物を用いる場合）には、これらの約１０倍が必要であろう
【００３１】
動物実験により、去勢した雄のマウスの血漿および脳に、皮下シラスティックインプラントを５および１０ｍｍの寸法で用いて以下のステロイドを誘導し、その平均レベルを、ガスクロマトグラフィー／質量分析により測定し、ミエリン応答を誘導させた。結果は以下のとおりであった。
【表１】
2014508809.tif 000003
【００３２】
さらなる実験において、去勢した雄マウスの血漿に、皮下シラスティックインプラントを用いてＭＥＮＴを誘導し、そのレベルを、放射免疫測定によって決定し、ミエリン応答も含めた。結果は、以下のとおりであった。
【表２】
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【００３３】
但し、これらのアンドロゲン（例えば、ＭＥＮＴ）、およびエストロゲン（例えば、エストラジオール）について、そのような有効用量を送達させるために必要とされる投与量を、特定の投与経路に応じて決定することは、薬学分野の当業者の通常の手段の範囲内である。インビボで投与されるアンドロゲン（例えば、ＭＥＮＴ）の投与量が、受容者の年齢、性別、健康および体重、（もしあれば）併用する処置の種類、処置の頻度、所望の薬学的効果の特性に依存し得ることは、理解される。本明細書で提供される有効用量の範囲は、限定を意図するものではなく、好ましい用量範囲を示すものである。しかしながら、最も好ましい投与量は、関連分野の当業者によって理解され、決定され得るように、個々の対象に適合させ得るものである。例えば、Ｂｅｒｋｏｗら、編、Ｔｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ、第１６版、Ｍｅｒｃｋ  ＆  Ｃｏ．、Ｒａｈｗａｙ、ＮＪ（１９９２）；Ｇｏｏｄｍａｎら、編、Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、第８版、Ｐｅｒｇａｍｅｎ  Ｐｒｅｓｓ  Ｉｎｃ．、Ｅｌｍｓｆｏｒｄ、ＮＹ（１９９０）；Ｋａｔｚｕｎｇ、Ｂａｓｉｃ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、Ａｐｐｌｅｔｏｎ  ＆  Ｌａｎｇ、Ｎｏｒｗａｌｋ、ＣＮ（１９９２）；Ａｖｅｒｙ’ｓ  Ｄｒｕｇ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、第３版、ＡＤＩＳ  Ｐｒｅｓｓ  Ｌｔｄ．、Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ、Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ、ＭＤ（１９８７）；Ｅｂａｄｉ、Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、Ｌｉｔｔｌｅ，  Ｂｒｏｗｎ  ＆  Ｃｏ．、Ｂｏｓｔｏｎ、ＭＡ（１９８５）；Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、第１７版、Ａｌｐｈｏｎｚｏ  Ｒ．Ｇｅｎａｒｏ、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡ（１９８５）を参照されたい。これらの参考文献は、全体として、参照により本明細書に組み込まれる。
【００３４】
投与量は、従来の用量漸増試験を用いて、臨床医により、決定することができる。投与量は、上記の好ましい範囲内であると予期され得る。さらに、この議論は、本発明の非常に重要なアンドロゲン成分に関して詳述しているものの、当然ながら、本発明のエストロゲン代謝物質についても同等に適用し得る。
【００３５】
加えて、「薬学的に有効」という用語は、対象において望ましい変化をもたらすために十分な量を意味する。当該量は、特定の薬物の効力、所望の治療効果、意図する処置の適用方法に応じた期間等の要因に応じて変化するであろう。薬学分野の当業者であれば、標準的な手順にしたがって、薬物の毒性レベルと最小有効用量の両方を決定することができるであろう。本発明の送達装置からの薬物のインビトロでの拡散は、例えば、Ｃｈｉｅｎら、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．、６３、３６５（１９７４）に開示される方法、または、米国特許第３，７１０，７９５号明細書に記載される方法（いずれの開示も参照により本明細書に組み込まれる）により、決定し得る。
【００３６】
本発明の特定のアンドロゲン化合物は、様々な方法で適用することができ、経口でも投与し得るが、好ましくは非経口で投与され、例えば、ゲル、パッチなどで投与され得る。また本発明の特定のアンドロゲンは、広範囲の投与量で投与することができ、例えばインプラントなどを用いて患者に吸収させる場合、約４００μｇ／日の低用量から最大約２，０００μｇ／日の広範な範囲であり得、ゲルまたは同様の経皮システムの場合は、約１２μｇ／日から最大約１６μｇ／日であり得る。送達は、連続的（例えば、皮下インプラントによるなど）、または場合により逐次的のいずれかであってよく、例えば、６〜８週間継続的に投与した後に、１〜２週間の送達の休止期間を設けるなどでもよい。
【００３７】
本発明の好ましい実施形態によれば、薬学的に有効な投与量のアンドロゲンＭＥＮＴを、髄鞘再生を刺激するために十分な投与量で用いて、脱髄に罹患した患者のＭＳを処置し、髄鞘再生を得るための方法が提供される。好ましくは、利用されるＭＥＮＴの量は、インプラントの形態の場合に、１日用量で約４００〜２，０００μｇ／日、好ましくは約１，６００μｇ／日となる。
【００３８】
本発明の一実施形態において、上記組成物は、非経口投与のための投与形態、例えば、ゲルまたはスプレーなどを用いる経皮投与の形態、および皮下インプラントの形態、に適合される。
【００３９】
但し、別の実施形態においては、これらの組成物は経口投与のために適合させることもでき、経口的に活性な他のアンドロゲンを含むこともでき、例えば、錠剤、カプセル剤、カシェ剤、糖衣錠、丸薬、ペレット剤、顆粒、散剤、溶液、乳化液、懸濁液などの形態に適合させることができる。
【００４０】
本出願人は、これらの特別なアンドロゲン化合物およびエストロゲン化合物が、髄鞘再生に関して、およびＭＳなどの病態の特別な処置に関して、予想外の特性を有し得ることを見出した。
【００４１】
本発明の別の実施形態によれば、本発明による特定のアンドロゲン受容体リガンドおよび／またはエストロゲン受容体リガンドと特定のプロゲスチン化合物との組合せが、髄鞘再生に関連して非常に有益であり得ることも見出された。この点に関し、先に出願された国際出願番号ＰＣＴ／ＵＳ１０／５３２０１（この出願は、２００９年１０月１９日に出願された米国仮特許出願第６１／２７９，３２０号の利益を主張する）が参照され、これらの両方の出願が参照により本明細書に組み込まれる。
【００４２】
これらの先行出願によれば、患者の神経変性は、プロゲスチン受容体に結合して作用し、アンドロゲン受容体と相互作用することなく、およびアンドロゲンまたは糖質コルチコイド生物学的応答を誘導することなく、プロゲステロン−受容体−誘導生物学的応答を誘発する、薬学的に有効な投与量のプロゲスチン化合物を用いて処置し得ることが開示されている。詳細には、薬学的に有効な投与量は５ｍｇ／日以下であり、これにより神経変性が予防または軽減される。好ましくは、薬学的に有効な投与量は、約１００〜４００μｇ／日であり、好ましくは、プロゲスチン化合物は、１６−メチレン−１７α−アセトキシ−１９−ノルプレグナ−４−エン−３，２０−ジオン（ネストロン（登録商標））、１８−メチルネストロン（登録商標）、ノメゲストロールアセテート、トリメゲストン、ノルゲスチメート、ジエノゲスト、ドロスピレノン、クロルマジノンアセテート、プロメゲストン、レトロプロゲステロン、および１７−ヒドロキシプロゲステロンからなる群から選択される化合物である。このように、この先行出願のプロゲスチンと、本発明のアンドロゲン受容体リガンドおよび／またはエストロゲン受容体リガンドとを組み合わせることにより、さらに有益な予測外の髄鞘再生が得られることが見出された。
【００４３】
テストステロン処置の髄鞘再生に対する効果を観察するために、最初にクプリゾン処置により脱髄を起こし、次いでマウスに、テストステロンの皮下シラスティックインプラントを６週間移植した。雄マウスの脳梁におけるミエリン塩基性タンパク質の染色濃度を図１に示す。
【００４４】
その結果、強い髄鞘再生が、テストステロンで６週間処置したマウスにおいて観察され、一方、未処置のマウスではいずれもミエリンが回復しなかった。ＮＭ（対照の去勢した雄）、Ｃｕｐ  Ｍ（クプリゾン処置し、空のインプラントを入れた雄）、Ｃｕｐ  Ｍ＋Ｔ（テストステロンで処置した後、クプリゾン処置した雄）、ＮＦ（対照の卵巣摘出した雌）、Ｃｕｐ  Ｆ（クプリゾン処置し、空のインプラントを入れた雌）、Ｃｕｐ  Ｆ＋Ｔ（テストステロンで処置した後、クプリゾン処置した雌）を示す。その結果、実験を受けた雄マウスと雌マウスの両方で、テストステロンによる強いミエリン形成促進効果があることが実証される。図ｂ、ｄおよびｆには、抗−ＭＢＰ抗体で免疫染色したマウス脳梁の代表的画像が示されている。このように、画像ｂには、対照マウスにおけるミエリン染色が示されている；画像ｄには、１２週間のクプリゾン処置により激しい脱髄が脳梁に引き起こされ、テストステロン処置を行わない場合は髄鞘再生がほとんど起こらないことが示されている。最後に、画像ｆには、６週間のテストステロン処置により、クプリゾン中毒後の脳梁の髄鞘再生が促進されることが示されている。
【００４５】
図２Ａおよび２Ｂに示されるように、クプリゾン中毒後、５α−デヒドロテストステロンまたは７α−メチル−１９−ノルテストステロン（ＭＥＮＴ）で処置すると、髄鞘再生の促進がもたらされた。図２Ａには、脳梁における０．０１ｍｍ２あたりのＣＡＩＩ＋オリゴデンドロサイトの数が示されている。図２Ｂには、ミエリン塩基性タンパク質の染色強度（Ｃ：対照の去勢した雄、Ｃｕｐ：１２週間のクプリゾン中毒後、Ｃｕｐ＋ＤＨＴ：クプリゾン中毒後に６週間のＤＨＴを用いた処置、およびＣｕｐ＋ＭＥＮＴ：クプリゾン中毒後に６週間のＭＥＮＴを用いた処置）が示されている。このように、テストステロンの髄鞘再生効果が、ＭＥＮＴによって模倣され得ることが明らかである。ＭＥＮＴは、アンドロゲン受容体に結合するアンドロゲンであり、男性対象においてテストステロンの約１０〜１２倍強力であり、５α還元酵素と相互作用せず、同様にＤＨＴとも相互作用しない（１５）。
【００４６】
図３には、上述のように、テストステロンが、ミクログリア応答とアストログリア増殖を制御することが示されている。図３Ａに示されるように、（ａ）対照マウス（去勢した雄）の脳梁では、活性化ミクログリア細胞（ｌｂａ  １陽性細胞）はほとんど観察されなかった、（ｂ）１２週間のクプリゾン中毒後、活性化ミクログリア細胞の濃度は劇的に増加した、および（ｃ）クプリゾン中毒後、テストステロンを用いて９週間処置した後では、活性化ミクログリア細胞の数は顕著に減少した。図３Ｂに示されるように、去勢した雄（ＣＭ）、クプリゾンを用いて１２週間中毒化した雄（Ｃｏｐ  Ｍ）、および、クプリゾン中毒後、テストステロンを用いて９週間処置した雄（Ｃｕｐ＋Ｔ）における活性ミクログリア細胞の数により、テストステロンによる処置後、反応性ミクログリア細胞およびアストロサイトの数は正常なレベルに戻るが、対照実験では戻らないことが再び実証される。
【００４７】
図４で実証されるように、マウスに１２週間クプリゾンを摂食させることにより、マウス脳梁の軸索は明らかに脱髄する。なお、クプリゾンは、銅キレート剤であり、ＣＮＳのオリゴデンドロサイトに対して毒性を示すが、軸索は残される。いずれの場合も、図４に示されるように、長期間のクプリゾン中毒などの後は、脳梁軸索に自発的髄鞘再生は生じない。しかしながら、クプリゾン食餌の停止後、テストステロンの皮下シラスティックインプラントをマウスに入れて３〜６週間処置するとき、新たな髄鞘を形成するオリゴデンドロサイトで脳梁線維が再び満たされる。同様の結果が図５に示される。
【００４８】
以下の実験では、テストステロン（Ｔ）、５α−ジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）、およびＭＥＮＴについては１０ｍｍ、エストラジオール（Ｅ２）については５ｍｍで、さらなる皮下シラスティックインプラントを移植し、これらのインプラントにより、テストステロン、ＤＨＴおよびＥ２が、生理学的に高レベルで血漿組織および脳組織に産生された。それぞれについて、１２週間のクプリゾン中毒化と、続けて６週間のホルモン処置を行った後に得られた結果を図６および７に示す。
【００４９】
アンドロゲン受容体（テストステロンなど）により得られる、中枢神経系においてアンドロゲン受容体が選択的に不活化される場合での髄鞘再生効果の機序をさらに実証するために、これらの髄鞘再生効果を停止させた。Ｃｒｅ／ｌｏｘ技術により中枢神経系を選択的に不活化して行った実験、および、遺伝子変異により機能的アンドロゲン受容体を除去した精巣女性化マウスで行った実験において、テストステロンの髄鞘再生効果は失われた。さらにアロマターゼノックアウトマウスを用いた場合において、テストステロンによる髄鞘再生効果が低減したことから、アンドロゲン受容体とエストロゲン受容体の両方が関与していることが示唆される。
【００５０】
本明細書において、詳細な実施形態を参照して本発明を説明してきたが、これらの実施形態は、本発明の原理および応用の単なる例示にすぎないことが理解されるべきである。したがって、添付の特許請求の範囲に定義された本発明の趣旨および範囲を逸脱することなく、上記の例証的な実施形態に数多くの修正がなされ得ること、および他の配置が考案され得ることが、理解されるべきである。
【００５１】
参考文献
【表３Ａ】
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【表３Ｂ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図６】
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【図７】
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【図１】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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