(57)【要約】  本明細書において、リジン−２１、ロイシン−２２、およびロイシン−２３が欠失する成長ホルモン放出因子（ＧＲＦ）類似体が説明される。これらの類似体は、ＧＲＦ活性を保持する。例えば対象または生体系において成長ホルモン分泌を誘発するための、例えばＧＲＦ受容体作動薬としての前記類似体の使用も説明される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）（配列番号１）
Ｘ１−Ｘ２−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｘ８−Ｘ９−Ｔｙｒ−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｌｅｕ−Ｘ１５−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｘ１８−Ｘ１９−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６−Ｘ２７−Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１−Ｘ３２−Ｘ３３（Ｉ）
のドメインを含み、式中、
Ｘ１が、ＴｙｒまたはＨｉｓであり、
Ｘ２が、Ａｌａ、Ｄ−Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、α−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、Ｖａｌ、またはＧｌｙであり、
Ｘ８が、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ａｌａ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、またはＡｉｂであり、
Ｘ９が、Ｓｅｒ、Ａｓｐ、またはＡｌａであり、
Ｘ１１が、ＡｒｇまたはＬ−ホモアルギニン（ＨｏＡｒｇ）であり、
Ｘ１２が、Ｌｙｓ、Ｌ−オルニチン（Ｏｒｎ）、またはＨｏＡｒｇであり、
Ｘ１３が、ＶａｌまたはＩｌｅであり、
Ｘ１５が、ＧｌｙまたはＡｌａであり、
Ｘ１８が、Ｌｙｓ、Ｌ−オルニチン、Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸、Ｌ−２，３−ジアミノプロピオン酸、またはＳｅｒであり、
Ｘ１９が、ＡｌａまたはＬｅｕであり、
Ｘ２２が、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、
Ｘ２３が、ＩｌｅまたはＬｅｕであり、
Ｘ２４が、Ｍｅｔ、Ｉｌｅ、Ｎｌｅ、またはＬｅｕであり、
Ｘ２５が、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ａｉｂ、またはＡｌａであり、
Ｘ２６が、Ａｒｇ、Ｄ−Ａｒｇ、ＨｏＡｒｇ、またはＬｙｓであり、
Ｘ２７がＡｌａであるか、または不在であり、
Ｘ２８がＡｌａであるか、または不在であり、
Ｘ２９がＡｒｇであるか、または不在であり、
Ｘ３０がＡｌａであるか、または不在であり、
Ｘ３１がＡｌａであるか、または不在であり、
Ｘ３２がＡｒｇであるか、または不在であり、
Ｘ３３がＬ−ホモセリン（ＨｏＳｅｒ）であるか、または不在であり、
Ｘ１８がＳｅｒである場合、Ｘ２７〜Ｘ３２またはＸ２７〜Ｘ３３が存在する、成長ホルモン放出因子（ＧＲＦ）類似体、
またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｘ１がＴｙｒである、請求項１に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項３】
Ｘ２が、ＡｌａまたはＤ−Ａｌａである、請求項１または２に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項４】
Ｘ８が、ＡｌａまたはＡｓｐである、請求項１〜３のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項５】
Ｘ８がＡｓｐである、請求項４に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項６】
Ｘ９がＳｅｒである、請求項１〜５のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項７】
Ｘ１１がＡｒｇである、請求項１〜６のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項８】
Ｘ１２が、ＬｙｓまたはＨｏＡｒｇである、請求項１〜７のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項９】
Ｘ１２がＬｙｓである、請求項８に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項１０】
Ｘ１５がＡｌａである、請求項１〜９のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項１１】
Ｘ１８が、ＯｒｎまたはＬｙｓである、請求項１〜１０のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項１２】
Ｘ１８がＬｙｓである、請求項１１に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項１３】
Ｘ２２がＡｓｐである、請求項１〜１２のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項１４】
Ｘ２３がＩｌｅである、請求項１〜１３のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項１５】
Ｘ２４がＬｅｕである、請求項１〜１４のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項１６】
Ｘ２５が、ＡｌａまたはＳｅｒである、請求項１〜１５のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項１７】
Ｘ２５がＡｌａである、請求項１６に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項１８】
Ｘ２６が、ＡｒｇまたはＤ−Ａｒｇである、請求項１〜１７のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項１９】
Ｘ２６がＡｒｇである、請求項１８に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項２０】
Ｘ２７がＡｌａである、請求項１〜１９のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項２１】
Ｘ２８がＡｌａである、請求項１〜２０のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項２２】
Ｘ２９がＡｒｇである、請求項１〜２１のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項２３】
Ｘ３０がＡｌａである、請求項１〜２２のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項２４】
Ｘ３１がＡｌａである、請求項１〜２３のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項２５】
Ｘ３２がＡｒｇである、請求項１〜２４のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項２６】
Ｘ３３がＨｏＳｅｒである、請求項１〜２５のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項２７】
Ｘ２７〜Ｘ３３のうちの少なくとも１つが不在である、請求項１〜１９のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項２８】
Ｘ２７〜Ｘ３３が、不在である、請求項２７に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項２９】
前記ドメインが、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ（配列番号２）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ｓ−ｒ（配列番号３）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−ａｉｂ−Ｒ（配列番号４）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｏ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ｓ−ｒ（配列番号５）、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｏ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ｓ−ｒ（配列番号６）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ｓ−ｒ（配列番号７）、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号８）、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｓ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号９）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１０）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ｌ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１１）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１２）、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１３）、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１４）、
Ｙ−Ｓ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１５）、
Ｙ−Ｇ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１６）、
Ｙ−Ｌ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１７）、
Ｙ−Ｇ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＨｏＳｅｒ（配列番号１８）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＨｏＳｅｒ（配列番号１９）であり、
ａ＝Ｄ−Ａｌａ、Ｏ＝Ｌ−オルニチン、Ａｉｂ＝α−アミノイソ酪酸、ＨｏＳｅｒ＝Ｌ−ホモセリン、およびｒ＝Ｄ−Ａｒｇである、請求項１に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項３０】
（ｉ）アミノ末端修飾基、（ｉｉ）カルボキシ末端修飾基、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の両方をさらに含む、請求項１〜２８のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項３１】
前記アミノ末端修飾基が、直鎖もしくは分枝鎖の飽和Ｃ１−Ｃ６アシル基または不飽和Ｃ３−Ｃ６アシル基である、請求項３０に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項３２】
前記アミノ末端修飾基が、アセチル基（Ａｃ）である、請求項３１に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項３３】
前記アミノ末端修飾基が、トランス−３−ヘキセノイル基である、請求項３０に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項３４】
前記カルボキシ末端修飾基が、ＮＨ２である、請求項３０〜３３のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項３５】
前記ＧＲＦ類似体が、
トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２０）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ｓ−ｒ−ＮＨ２（配列番号２１）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−ａｉｂ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２２）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｏ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ｓ−ｒ−ＮＨ２（配列番号２３）、
トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｏ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ｓ−ｒ−ＮＨ２（配列番号２４）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ｓ−ｒ−ＮＨ２（配列番号２５）、
トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２６）、
トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｓ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２７）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２８）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ｌ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２９）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３０）、
トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３１）、
トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３２）、
Ｙ−Ｓ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３３）、
Ｙ−Ｇ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３４）、
Ｙ−Ｌ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３５）、
Ｙ−Ｇ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＨｏＳｅｒ−ＮＨ２（配列番号３６）、または
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＨｏＳｅｒ−ＮＨ２（配列番号３７）であり、
ａ＝Ｄ−Ａｌａ、Ｏ＝Ｌ−オルニチン、Ａｉｂ＝α−アミノイソ酪酸、ＨｏＳｅｒ＝Ｌ−ホモセリン、およびｒ＝Ｄ−Ａｒｇである、請求項１に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項３６】
前記ＧＲＦ類似体が、Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２８）である、請求項３５に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項３７】
前記ＧＲＦ類似体が、Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ｌ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２９）である、請求項３５に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項３８】
前記ＧＲＦ類似体が、Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３０）である、請求項３５に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項３９】
前記ＧＲＦ類似体が、トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３１）である、請求項３５に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項４０】
前記ＧＲＦ類似体が、トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３２）である、請求項３５に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項４１】
請求項１〜４０のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体を含む、薬学的組成物。
【請求項４２】
１つ以上の薬学的に許容される担体、賦形剤、および／または希釈剤をさらに含む、請求項４１に記載の薬学的組成物。
【請求項４３】
成長ホルモン分泌の誘発を必要とする対象において、それを行うための方法であって、有効量の請求項１〜４０のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体、または請求項４１もしくは４２に記載の薬学的組成物を前記対象に投与することを含む、方法。
【請求項４４】
前記ＧＲＦ類似体が、約０．１ｍｇ〜約２０ｍｇの日用量で投与される、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記ＧＲＦ類似体が、静脈内に、経口的に、経皮的に、皮下的に、粘膜的に、筋肉内に、鼻腔内に、肺内に、非経口的に、直腸内に、または局所的に投与される、請求項４３または４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記ＧＲＦ類似体が、皮下的に投与される、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記ＧＲＦ類似体が、鼻腔内に投与される、請求項４５に記載の方法。
【請求項４８】
前記ＧＲＦ類似体が、経皮的に投与される、請求項４５に記載の方法。
【請求項４９】
対象の成長ホルモン分泌を誘発するための、請求項１〜４０のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体、または請求項４１もしくは４２に記載の薬学的組成物の使用。
【請求項５０】
対象の成長ホルモン分泌を誘発するための薬剤を調製するための、請求項１〜４０のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体、または請求項４１もしくは４２に記載の薬学的組成物の使用。
【請求項５１】
前記ＧＲＦ類似体が、約０．１ｍｇ〜約２０ｍｇの日用量で投与するためのものである、請求項４９または５０に記載の使用。
【請求項５２】
前記ＧＲＦ類似体が、静脈内、経口、経皮、皮下、粘膜、筋肉内、鼻腔内、肺内、非経口、直腸内、または局所投与用である、請求項４９〜５１のいずれか１項に記載の使用。
【請求項５３】
前記ＧＲＦ類似体が、皮下投与用である、請求項５２に記載の使用。
【請求項５４】
前記ＧＲＦ類似体が、鼻腔内投与用である、請求項５２に記載の使用。
【請求項５５】
前記ＧＲＦ類似体が、経皮投与用である、請求項５２に記載の使用。
【請求項５６】
対象の成長ホルモン分泌を誘発するための薬剤を調製するための、請求項１〜４０のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体、または請求項４１もしくは４２に記載の薬学的組成物。
【請求項５７】
対象の成長ホルモン分泌の誘発に使用するための、請求項１〜４０のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体、または請求項４１もしくは４２に記載の薬学的組成物。
【請求項５８】
前記ＧＲＦ類似体が、約０．１ｍｇ〜約２０ｍｇの日用量で投与するためのものである、請求項５６または５７に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項５９】
前記ＧＲＦ類似体が、静脈内、経口、経皮、皮下、粘膜、筋肉内、鼻腔内、肺内、非経口、直腸内、または局所投与用である、請求項５６〜５８のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項６０】
前記ＧＲＦ類似体が、皮下投与用である、請求項５９に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項６１】
前記ＧＲＦ類似体が、鼻腔内投与用である、請求項５９に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項６２】
前記ＧＲＦ類似体が、経皮投与用である、請求項５９に記載のＧＲＦ類似体。
【請求項６３】
薬剤としての、請求項１〜４０のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体、または請求項４１もしくは４２に記載の薬学的組成物の使用。
【請求項６４】
薬剤として使用するための、請求項１〜４０のいずれか１項に記載のＧＲＦ類似体、または請求項４１もしくは４２に記載の薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、２０１１年４月２１に出願された、米国仮出願第６１／４７７，７７５号の利益を主張し、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本発明は、概して、成長ホルモン放出因子（ＧＲＦ）受容体の作動薬、およびその使用に関する。特に、本発明は、ＧＲＦ類似体およびその使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
成長ホルモン（ＧＨ）は、哺乳類の下垂体前葉の成長ホルモン分泌細胞で生成され、一生を通じて分泌される。これは、その分泌および合成を刺激するＧＲＦと、それらを阻害するソマトスタチンの２つの視床下部ペプチドによって、主に脳で制御される。いくつかの末梢因子がＧＨ分泌を調節する。それらの中で、インスリン様成長因子（ＩＧＦ−１）は、ＧＨに応えて肝臓により生成され、ＧＨ分泌に負のフィードバックを及ぼすように視床下部に作用するため、重要である。
【０００４】
ヒトおよび動物で示される、加齢に伴うＧＨ分泌の減少が、生物の加齢を開始する、またはそれに関与する異化作用への代謝の変化を後押しする。高齢者において観察される、筋量の喪失、脂肪組織の蓄積、骨脱灰、および損傷後の組織再生能力の喪失は、ＧＨの分泌の減少と相関する。
【０００５】
よって、ＧＨは、子供の線形成長に関与し、かつ成人のタンパク質代謝を制御する生理学的タンパク質同化剤である。
【０００６】
ＧＲＦ（ＧＨ放出ホルモンまたはＧＨＲＨとも称される）は、下垂体前葉の成長ホルモン分泌細胞からのＧＨの発現、合成、放出を調節する視床下部によって分泌される４４個のアミノ酸ペプチドである（Ｆｒｏｈｍａｎ  ＬＡ  ｅｔ  ａｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ１９８６，７：２２３−２５３）。ヒトＧＲＦ（ｈＧＲＦ（１−２９）、セルモレリン）の最初の２９個のアミノ酸から成るペプチドは、完全長ペプチドの生物活性を保持し（Ｌａｎｃｅ，Ｖ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ１９８４，１１９：２６５−２７２）、子供のＧＨ分泌欠乏の治療に臨床的に使用されてきた（Ｔｈｏｒｎｅｒ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  １９９６，８１：１１８９−１１９６）。最近になって、加齢に関連する成長ホルモンＧＨ−インスリン様成長因子（ＩＧＦ）−Ｉ軸の機能における低下を反転させるＧＲＦの可能性が評価されている（Ｋｈｏｒｒａｍ，Ｏ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｏｂｓｔｅｔｒｉｃｓ  ａｎｄ  Ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｙ２００１，４４：８９３−９０１）。
【０００７】
ｈＧＲＦ（１−２９）の薬学的調製物は、臨床使用のために入手可能である（Ｇｅｒｅｆ（登録商標）、Ｌａｂｏｒａｔｏｉｒｅｓ  Ｓｅｒｏｎｏ  Ｓ．Ａ．）。しかしながら、その薬理学的価値は、主に急速な酵素分解に対するその感受性による、その短い半減期（ヒトへの静脈内注射後約１２分）により制限される（Ｆｒｏｈｍａｎ，Ｌ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ１９８６，７８：９０６−９１３）。
【０００８】
よって、ＧＲＦ受容体またはＧＨＲＨ受容体（ＧＨＲＨｒ）に対して作動薬特性を呈する新規ＧＲＦ類似体の開発の必要がある。
【０００９】
本説明は、いくつかの文献を参照し、その内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｆｒｏｈｍａｎ  ＬＡ  ｅｔ  ａｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ１９８６，７：２２３−２５３
【非特許文献２】Ｌａｎｃｅ，Ｖ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ１９８４，１１９：２６５−２７２
【非特許文献３】Ｔｈｏｒｎｅｒ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  １９９６，８１：１１８９−１１９６
【非特許文献４】Ｋｈｏｒｒａｍ，Ｏ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｏｂｓｔｅｔｒｉｃｓ  ａｎｄ  Ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｙ２００１，４４：８９３−９０１
【非特許文献５】Ｆｒｏｈｍａｎ，Ｌ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ１９８６，７８：９０６−９１３
【発明の概要】
【００１１】
本発明は、ＧＲＦ類似体およびその使用に関する。
第１の態様では、本発明は、式（Ｉ）（配列番号１）
Ｘ１−Ｘ２−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｘ８−Ｘ９−Ｔｙｒ−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｌｅｕ−Ｘ１５−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｘ１８−Ｘ１９−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６−Ｘ２７−Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１−Ｘ３２−Ｘ３３    （Ｉ）
のドメインを含み、式中、
Ｘ１が、ＴｙｒまたはＨｉｓであり、
Ｘ２が、Ａｌａ、Ｄ−Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、α−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、Ｖａｌ、またはＧｌｙであり、
Ｘ８が、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ａｌａ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、またはＡｉｂであり、
Ｘ９が、Ｓｅｒ、Ａｓｐ、またはＡｌａであり、
Ｘ１１が、ＡｒｇまたはＬ−ホモアルギニンであり、
Ｘ１２が、Ｌｙｓ、Ｌ−オルニチン、またはＬ−ホモアルギニンであり、
Ｘ１３が、ＶａｌまたはＩｌｅであり、
Ｘ１５が、ＧｌｙまたはＡｌａであり、
Ｘ１８が、Ｌｙｓ、Ｌ−オルニチン、Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸、Ｌ−２，３−ジアミノプロピオン酸、またはＳｅｒであり、
Ｘ１９が、ＡｌａまたはＬｅｕであり、
Ｘ２２が、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、
Ｘ２３が、ＩｌｅまたはＬｅｕであり、
Ｘ２４が、Ｍｅｔ、Ｉｌｅ、Ｎｌｅ、またはＬｅｕであり、
Ｘ２５が、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ａｉｂ、またはＡｌａであり、
Ｘ２６が、Ａｒｇ、Ｄ−Ａｒｇ、Ｌ−ホモアルギニン、またはＬｙｓであり、
Ｘ２７がＡｌａであるか、または不在であり、
Ｘ２８がＡｌａであるか、または不在であり、
Ｘ２９がＡｒｇであるか、または不在であり、
Ｘ３０がＡｌａであるか、または不在であり、
Ｘ３１がＡｌａであるか、または不在であり、
Ｘ３２がＡｒｇであるか、または不在であり、
Ｘ３３がＨｏＳｅｒであるか、または不在であり、
Ｘ１８がＳｅｒである場合、Ｘ２７〜Ｘ３２またはＸ２７〜Ｘ３３が存在する、成長ホルモン放出因子（ＧＲＦ）類似体、
またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００１２】
ある実施形態では、Ｘ１はＴｙｒである。
【００１３】
ある実施形態では、Ｘ２は、ＡｌａまたはＤ−Ａｌａである。
【００１４】
ある実施形態では、Ｘ８は、ＡｌａまたはＡｓｐであり、さらなる実施形態では、Ａｓｐである。
【００１５】
ある実施形態では、Ｘ９はＳｅｒである。
【００１６】
ある実施形態では、Ｘ１１はＡｒｇである。
【００１７】
ある実施形態では、Ｘ１２は、ＬｙｓまたはＬ−ホモアルギニンであり、さらなる実施形態では、Ｌｙｓである。
【００１８】
ある実施形態では、Ｘ１５はＡｌａである。
【００１９】
ある実施形態では、Ｘ１８は、Ｌ−オルニチンまたはＬｙｓであり、さらなる実施形態では、Ｌｙｓである。
【００２０】
ある実施形態では、Ｘ２２はＡｓｐである。
【００２１】
ある実施形態では、Ｘ２３はＩｌｅである。
【００２２】
ある実施形態では、Ｘ２４はＬｅｕである。
【００２３】
ある実施形態では、Ｘ２５は、ＡｌａまたはＳｅｒであり、さらなる実施形態では、Ａｌａである。
【００２４】
ある実施形態では、Ｘ２６は、ＡｒｇまたはＤ−Ａｒｇであり、さらなる実施形態では、Ａｒｇである。
【００２５】
ある実施形態では、Ｘ２７はＡｌａである。
【００２６】
ある実施形態では、Ｘ２８はＡｌａである。
【００２７】
ある実施形態では、Ｘ２９はＡｒｇである。
【００２８】
ある実施形態では、Ｘ３０はＡｌａである。
【００２９】
ある実施形態では、Ｘ３１はＡｌａである。
【００３０】
ある実施形態では、Ｘ３２はＡｒｇである。
【００３１】
ある実施形態では、Ｘ３３はＨｏＳｅｒである。
【００３２】
別の実施形態では、Ｘ２７〜Ｘ３３のうちの少なくとも１つは不在である。さらなる実施形態では、Ｘ２７〜Ｘ３３は不在である。
【００３３】
ある実施形態では、上述のドメインは、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ（配列番号２）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ｓ−ｒ（配列番号３）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−ａｉｂ−Ｒ（配列番号４）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｏ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ｓ−ｒ（配列番号５）、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｏ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ｓ−ｒ（配列番号６）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ｓ−ｒ（配列番号７）、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号８）、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｓ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号９）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１０）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ｌ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１１）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１２）、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１３）、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１４）、
Ｙ−Ｓ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１５）、
Ｙ−Ｇ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１６）、
Ｙ−Ｌ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１７）、
Ｙ−Ｇ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＨｏＳｅｒ（配列番号１８）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＨｏＳｅｒ（配列番号１９）であり、
ａ＝Ｄ−Ａｌａ、Ｏ＝Ｌ−オルニチン、Ａｉｂ＝α−アミノイソ酪酸、ＨｏＳｅｒ＝Ｌ−ホモセリン、およびｒ＝Ｄ−Ａｒｇである。
【００３４】
ある実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、（ｉ）アミノ末端修飾基、（ｉｉ）カルボキシ末端修飾基、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の両方をさらに含む。
【００３５】
さらなる実施形態では、上述のアミノ末端修飾基は、直鎖もしくは分枝鎖の飽和Ｃ１−Ｃ６アシル基または不飽和Ｃ３−Ｃ６アシル基である。またさらなる実施形態では、上述のアミノ末端修飾基は、アセチル基（Ａｃ）である。別の実施形態では、上述のアミノ末端修飾基は、トランス−３−ヘキセノイル基である。
【００３６】
さらなる実施形態では、上述のカルボキシ末端修飾基は、ＮＨ２である。
【００３７】
実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、
トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２０）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ｓ−ｒ−ＮＨ２（配列番号２１）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−ａｉｂ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２２）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｏ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ｓ−ｒ−ＮＨ２（配列番号２３）、
トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｏ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ｓ−ｒ−ＮＨ２（配列番号２４）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ｓ−ｒ−ＮＨ２（配列番号２５）、
トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２６）、
トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｓ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２７）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２８）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ｌ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２９）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３０）、
トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３１）、
トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３２）、
Ｙ−Ｓ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３３）、
Ｙ−Ｇ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３４）、
Ｙ−Ｌ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３５）、
Ｙ−Ｇ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＨｏＳｅｒ−ＮＨ２（配列番号３６）、または
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＨｏＳｅｒ−ＮＨ２（配列番号３７）であり、
ａ＝Ｄ−Ａｌａ、Ｏ＝Ｌ−オルニチン、Ａｉｂ＝α−アミノイソ酪酸、およびｒ＝Ｄ−Ａｒｇである。
【００３８】
さらなる実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２８）である。
【００３９】
別のさらなる実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ｌ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２９）である。
【００４０】
別のさらなる実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３０）である。
【００４１】
別のさらなる実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３１）である。
【００４２】
別のさらなる実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３２）である。
【００４３】
別の態様では、本発明は、上述のＧＲＦ類似体を含む薬学的組成物を提供する。
【００４４】
ある実施形態では、上述の薬学的組成物は、１つ以上の薬学的に許容される担体、賦形剤、および／または希釈剤をさらに含む。
【００４５】
ある態様では、本発明は、成長ホルモン分泌の誘発を必要とする対象において、それを行うための方法を提供し、前記方法は、有効量の上述のＧＲＦ類似体または薬学的組成物を前記対象に投与することを含む。
【００４６】
別の態様では、本発明は、対象において成長ホルモン分泌を誘発するための、上述のＧＲＦ類似体または薬学的組成物の使用を提供する。
【００４７】
別の態様では、本発明は、対象において成長ホルモン分泌を誘発するための薬剤を調製するために、上述のＧＲＦ類似体または薬学的組成物の使用を提供する。
【００４８】
別の態様では、本発明は、対象において成長ホルモン分泌を誘発するための薬剤を調製するために、上述のＧＲＦ類似体または薬学的組成物を提供する。
【００４９】
別の態様では、本発明は、対象において成長ホルモン分泌を誘発するために、上述のＧＲＦ類似体または薬学的組成物を提供する。
【００５０】
別の態様では、本発明は、薬剤としての上述のＧＲＦ類似体または薬学的組成物の使用を提供する。
【００５１】
別の態様では、本発明は、薬剤として使用するための上述のＧＲＦ類似体または薬学的組成物を提供する。
【００５２】
ある実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、約０．１ｍｇ〜約２０ｍｇの日用量で投与される、または投与するように適応される。
【００５３】
実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、静脈内に、経口的に、経皮的に、皮下的に、粘膜的に、筋肉内に、鼻腔内に、肺内に、非経口的に、直腸内に、または局所的に、さらなる実施形態では、皮下的に、または経皮的に投与される、または投与するように適応される。
【００５４】
本発明の他の目的、利点、および特徴は、その具体的な実施形態の以下の非制限的な説明を読むことにより、さらに明らかになるだろう。
【発明を実施するための形態】
【００５５】
本発明の発明者は、動物モデルにおいて、ＧＨＲＨｒを発現する細胞に対して作動薬活性を呈し、ＧＨ分泌を誘発する新規ＧＲＦ類似体を発見した。
【００５６】
未変性ヒトＧＲＦは、次の構造：
Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ａｓｐ−Ｉｌｅ−Ｍｅｔ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ（配列番号３８）を有する４４個のアミノ酸のペプチドである。
【００５７】
ＧＲＦ（１−４４）の２９個のアミノ酸Ｎ末端断片（ＧＲＦ（１−２９）として知られる）は、ＧＲＦ（１−４４）と同様の生物活性および効力を呈することが示されてきた。ＧＲＦ（１−２９）は、次の配列を有する：
Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ａｓｐ−Ｉｌｅ−Ｍｅｔ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ（配列番号３９）。
【００５８】
ＧＲＦ（１−２９）とＧＲＦ（１−４４）との間、即ち、未変性ヒトＧＲＦの残基３０〜４３（または他の残基）に対応する、１〜１４個のアミノ酸が付加されるＣ末端でＧＲＦ（１−２９）の配列を有する中間体形態（長さにおいて）も、ＧＲＦ活性を保有する。さらに、未変性配列に１つ以上のアミノ酸置換を有する特定のＧＲＦ変異型は、ＧＲＦ活性を保有することが知られる。
【００５９】
本発明のＧＲＦ類似体は、ＧＲＦの変異型ならびにその活性断片および／または変異型であり、未変性ヒトＧＲＦ（１−４４）の残基２１〜２３（上記に示される配列で下線付きのＬｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ）に対応する位置で、３個のアミノ酸残基欠失、そのＮ末端断片ＧＲＦ（１−２９）、または上述の中間体形態を含む。本発明のＧＲＦ類似体は、位置１８（上記に示される配列のイタリック体）に対応するセリンの変化、好ましくは未変性ヒトＧＲＦ（１−４４）のＬｙｓ、Ｌ−オルニチン、Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸、またはＬ−２，３−ジアミノプロピオン酸との置換、そのＮ末端断片ＧＲＦ（１−２９）、または上述の中間体形態をさらに含むことができる。これらのＧＲＦ類似体は、動物モデルにおいて、ＧＨＲＨｒを発現する細胞に対して作動薬活性を呈し、ＧＨ分泌を誘発する。
【００６０】
用語「ＧＲＦ類似体」、「ＧＲＦ受容体作動薬」、「ＧＲＦペプチド」、「ＧＲＦペプチド化合物」、または「ペプチド化合物」は、以下にさらに詳細に説明される、動物モデルにおいて、ＧＨＲＨｒを発現する細胞に対して作動薬活性を呈し、ＧＨ分泌を誘発する本発明の化合物を指すために、本明細書において互換的に使用される。
【００６１】
用語「ＧＲＦ」（成長ホルモン放出因子）および「ＧＨＲＨ」（成長ホルモン放出ホルモン）は、本明細書において互換的に使用される。同様に、用語「ＧＲＦ受容体」、「ＧＲＦｒ」、「ＧＨＲＨ受容体」、および「ＧＨＲＨｒ」は、本明細書において互換的に使用される。
【００６２】
本発明は、式（Ｉ）（配列番号１）：
Ｘ１−Ｘ２−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｘ８−Ｘ９−Ｔｙｒ−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｌｅｕ−Ｘ１５−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｘ１８−Ｘ１９−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６−Ｘ２７−Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１−Ｘ３２−Ｘ３３      （Ｉ）
のドメインを含み、式中、
Ｘ１が、ＴｙｒまたはＨｉｓであり、
Ｘ２が、Ａｌａ、Ｄ−Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、α−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、Ｖａｌ、またはＧｌｙであり、
Ｘ８が、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ａｌａ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、またはＡｉｂであり、
Ｘ９が、Ｓｅｒ、Ａｓｐ、またはＡｌａであり、
Ｘ１１が、ＡｒｇまたはＬ−ホモアルギニンであり、
Ｘ１２が、Ｌｙｓ、Ｌ−オルニチン、またはＬ−ホモアルギニンであり、
Ｘ１３が、ＶａｌまたはＩｌｅであり、
Ｘ１５が、ＧｌｙまたはＡｌａであり、
Ｘ１８が、Ｌｙｓ、Ｌ−オルニチン、Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸、Ｌ−２，３−ジアミノプロピオン酸、またはＳｅｒであり、
Ｘ１９が、ＡｌａまたはＬｅｕであり、
Ｘ２２が、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、
Ｘ２３が、ＩｌｅまたはＬｅｕであり、
Ｘ２４が、Ｍｅｔ、Ｉｌｅ、Ｎｌｅ、またはＬｅｕであり、
Ｘ２５が、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ａｉｂ、またはＡｌａであり、
Ｘ２６が、Ａｒｇ、Ｄ−Ａｒｇ、Ｌ−ホモアルギニン、またはＬｙｓであり、
Ｘ２７がＡｌａであるか、または不在であり、
Ｘ２８がＡｌａであるか、または不在であり、
Ｘ２９がＡｒｇであるか、または不在であり、
Ｘ３０がＡｌａであるか、または不在であり、
Ｘ３１がＡｌａであるか、または不在であり、
Ｘ３２がＡｒｇであるか、または不在であり、
Ｘ３３がＨｏＳｅｒであるか、または不在であり、
Ｘ１８がＳｅｒである場合、Ｘ２７〜Ｘ３２またはＸ２７〜Ｘ３３が存在する、成長ホルモン放出因子（ＧＲＦ）類似体、
またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００６３】
本発明は、式（ＩＩ）（配列番号４０）：
Ｘ１−Ｘ２−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｘ８−Ｘ９−Ｔｙｒ−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｌｅｕ−Ｘ１５−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｘ１８−Ｘ１９−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６−Ｘ２７−Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１−Ｘ３２−Ｘ３３（ＩＩ）
のドメインを含み、式中、
Ｘ１は、任意のアミノ酸であり、ある実施形態では、ＴｙｒまたはＨｉｓであり、さらなる実施形態では、Ｔｙｒであり、
Ｘ２は、任意のアミノ酸であり、ある実施形態では、Ａｌａ、Ｄ−Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、α−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、Ｖａｌ、またはＧｌｙであり、さらなる実施形態では、ＡｌａまたはＤ−Ａｌａであり、
Ｘ８は、任意のアミノ酸であり、ある実施形態では、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ａｌａ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、またはＡｉｂであり、さらなる実施形態では、ＡｌａまたはＡｓｐであり、さらなる実施形態では、Ａｓｐであり、
Ｘ９は、任意のアミノ酸であり、ある実施形態では、Ｓｅｒ、Ａｓｐ、またはＡｌａであり、さらなる実施形態では、Ｓｅｒであり、
Ｘ１１は、任意のアミノ酸であり、ある実施形態では、ＡｒｇまたはＬ−ホモアルギニンであり、さらなる実施形態では、Ａｒｇであり、
Ｘ１２は、任意のアミノ酸であり、ある実施形態では、Ｌｙｓ、Ｌ−オルニチン、またはＬ−ホモアルギニンであり、さらなる実施形態では、ＬｙｓまたはＬ−ホモアルギニンであり、またさらなる実施形態では、Ｌｙｓであり、
Ｘ１３は、任意のアミノ酸であり、ある実施形態では、ＶａｌまたはＡｌａであり、さらなる実施形態では、Ｖａｌであり、
Ｘ１５は、任意のアミノ酸であり、ある実施形態では、ＧｌｙまたはＡｌａであり、さらなる実施形態では、Ａｌａであり、
Ｘ１８は、任意のアミノ酸であり、ある実施形態では、Ｌｙｓ、Ｌ−オルニチン、Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸またはＬ−２，３−ジアミノプロピオン酸、さらなる実施形態では、ＬｙｓまたはＬ−オルニチンであり、またさらなる実施形態では、Ｌｙｓであり、
Ｘ１９は、ＡｌａまたはＬｅｕであり、
Ｘ２２は、任意のアミノ酸であり、ある実施形態では、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、さらなる実施形態では、Ａｓｐであり、
Ｘ２３は、任意のアミノ酸であり、ある実施形態では、ＩｌｅまたはＬｅｕであり、さらなる実施形態では、Ｉｌｅであり、
Ｘ２４は、任意のアミノ酸であり、ある実施形態では、Ｍｅｔ、Ｉｌｅ、Ｎｌｅ、またはＬｅｕであり、さらなる実施形態では、ＭｅｔまたはＬｅｕであり、さらなる実施形態では、Ｌｅｕであり、
Ｘ２５は、任意のアミノ酸であり、ある実施形態では、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ａｉｂ、またはＡｌａであり、さらなる実施形態では、ＡｌａまたはＳｅｒであり、またさらなる実施形態では、Ａｌａであり、
Ｘ２６は、任意のアミノ酸であり、ある実施形態では、Ａｒｇ、Ｄ−Ａｒｇ、Ｌ−ホモアルギニンまたはＬｙｓであり、さらなる実施形態では、ＡｒｇまたＤ−Ａｒｇであり、またさらなる実施形態では、Ａｒｇであり、
Ｘ２７は、任意のアミノ酸であり、ある実施形態では、Ａｌａであるか、または不在であり、
Ｘ２８は、任意のアミノ酸であり、ある実施形態では、Ａｌａであるか、または不在であり、
Ｘ２９は、任意のアミノ酸であり、ある実施形態では、Ａｒｇであるか、または不在であり、
Ｘ３０は、任意のアミノ酸であり、ある実施形態では、Ａｌａであるか、または不在であり、
Ｘ３１は、任意のアミノ酸であり、ある実施形態では、Ａｌａであるか、または不在であり、
Ｘ３２は、任意のアミノ酸であり、ある実施形態では、Ａｒｇであるか、または不在であり、
Ｘ３３は、任意のアミノ酸であり、ある実施形態では、ＨｏＳｅｒであるか、または不在であり、
Ｘ１８がＳｅｒである場合、Ｘ２７〜Ｘ３２またはＸ２７〜Ｘ３３が存在する、成長ホルモン放出因子（ＧＲＦ）類似体、
またはその薬学的に許容される塩をさらに提供する。
【００６４】
本明細書で使用される、用語「アミノ酸」は、天然に存在するアミノ酸のＬ−およびＤ−異性体の両方、ならびにペプチドの合成類似体を調製するためにペプチド化学で使用される、他のアミノ酸（例えば、天然に存在するアミノ酸、非天然のアミノ酸、核酸配列によってコードされないアミノ酸等）を含む。天然に存在するアミノ酸の例は、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、スレオニン等である。
【００６５】
他のアミノ酸は、例えば、アミノ酸の非遺伝的にコードされる形態ならびにＬ−アミノ酸の同類置換を含む。天然に存在する、非遺伝的にコードされるアミノ酸は、例えば、β−アラニン、３−アミノ−プロピオン酸、２，３−ジアミノプロピオン酸、α−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、４−アミノ−酪酸、Ｎ−メチルグリシン（サルコシン）、ヒドロキシプロリン、オルニチン（例えば、Ｌ−オルニチン）、シトルリン、ｔ−ブチルアラニン、ｔ−ブチルグリシン、Ｎ−メチルイソロイシン、フェニルグリシン、シクロヘキシルアラニン、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、ノルバリン、２−ナプチルアラニン、ピリジルアラニン、３−ベンゾチエニルアラニン、４−クロロフェニルアラニン、２−フルオロフェニルアラニン、３−フルオロフェニルアラニン、４−フルオロフェニルアラニン、ペニシラミン、１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−３−カルボキシル酸（ｃａｒｂｏｘｙｌｉｘ  ａｃｉｄ）、β−２−チエニルアラニン、メチオニンスルホキシド、Ｌ−ホモアルギニン（Ｈｏａｒｇ）、Ｎ−アセチルリジン、２−アミノ酪酸、２−アミノ酪酸、２，４，−ジアミノ酪酸（Ｄ−またはＬ−）、ｐ−アミノフェニルアラニン、Ｎ−メチルバリン、ホモシステイン、ホモセリン（ＨｏＳｅｒ）、システイン酸、イプシロン−アミノヘキサン酸、δ−アミノ吉草酸、または２，３−ジアミノ酪酸（Ｄ−またはＬ−）等を含む。これらのアミノ酸は、生化学／ペプチド化学の分野において周知である。
【００６６】
実施形態では、本発明のドメインまたはＧＲＦ類似体は、上述のドメインまたはＧＲＦ類似体に対して、機能的に等価なアミノ酸残基の置換を含有する改変配列を有するポリペプチドを含む。例えば、配列内の１つ以上のアミノ酸残基は、機能的等価物としての機能を果たす類似する極性（類似する物理化学特性を有する）の別のアミノ酸によって置換され、無変化改質をもたらすことができる。配列内のアミノ酸の置換は、アミノ酸が属するクラスの他のメンバーから選択され得る。例えば、正電荷（塩基性）アミノ酸は、アルギニン、リジン、およびヒスチジン（ならびにホモアルギニンおよびオルニチン）を含む。非極性（疎水性）アミノ酸は、ロイシン、イソロイシン、アラニン、フェニルアラニン、バリン、プロリン、トリプトファン、およびメチオニンを含む。無電荷極性アミノ酸は、セリン、スレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、およびグルタミンを含む。負電荷（酸性）アミノ酸は、グルタミン酸およびアスパラギン酸を含む。アミノ酸グリシンは、非極性アミノ酸族または無電荷（中立）極性アミノ酸族のいずれかに含まれ得る。アミノ酸の族内で行われる置換は、一般に、同類置換と理解される。
【００６７】
上述のドメインまたはＧＲＦ類似体は、すべてのＬ−アミノ酸、すべてのＤ−アミノ酸、またはＬ−およびＤ−アミノ酸の混合物を含むことができる。ある実施形態では、上述のドメインまたはＧＲＦ類似体は、少なくとも１つのＤ−アミノ酸（例えば、１、２、３、４、または５以上のＤ−アミノ酸）を含む。ある実施形態では、上述のドメインまたはＧＲＦ類似体は、少なくとも１つのＤ−Ａｌａおよび／またはＤ−Ａｒｇ残基を含む。ある実施形態では、前記少なくとも１つのＤ−アミノ酸は、ドメインまたはＧＲＦ類似体のＮ末端および／またはＣ末端部分（例えば、最後の２つまたは３つのＮ−および／またはＣ末端残基内）に位置する。１つ以上のＤ−アミノ酸の存在は、典型的に、プロテアーゼ／ペプチダーゼ開裂への感受性の低下により、増加した安定性を有する（例えば生体内）が生物活性を保持するペプチドをもたらす。
【００６８】
実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、塩、例えば、薬学的に許容される塩の形態である。本明細書で使用される、用語「薬学的に許容される塩」とは、親化合物の生物活性を保持し、生物学的に、ないしは別の方法で望ましくなくはない化合物の塩を指す。そのような塩は、類似体の最終的な単離および精製中に原位置で調製されるか、または遊離塩基官能基を好適な酸と反応させることにより、個別に調製され得る。本明細書に開示されるＧＲＦ類似体の多くは、アミノ基および／もしくはカルボキシル基またはその類似する基の存在によって、酸および／または塩基塩を形成することができる。
【００６９】
薬学的に許容される酸添加塩は、無機酸および有機酸から調製され得る。代表的な酸添加塩としては、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、クエン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、デカン酸塩、ジグルコン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、フマル酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩（イソチアネート）、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、オクタン酸塩、シュウ酸塩、パルミトエート（ｐａｌｍｉｔｏａｔｅ）、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、リン酸塩、グルタミン酸塩、重炭酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、およびウンデカン酸塩が挙げられるが、これらに限定されない。無機酸に由来する塩は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等を含む。有機酸に由来する塩は、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエン−スルホン酸、サリチル酸を含む。薬学的に許容される酸添加塩を形成するために利用され得る酸の例としては、例えば、無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、およびリン酸）、および有機酸（例えば、シュウ酸、マレイン酸、コハク酸、およびクエン酸）が挙げられる。
【００７０】
塩基性添加塩も、カルボン酸含有部分を、薬学的に許容される金属カチオンの水酸化物、炭酸塩、または重炭酸塩等の好適な塩基と、あるいはアンモニアまたは有機一級、二級、もしくは三級アミンと反応させることにより調製され得る。薬学的に許容される塩は、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、およびアルミナム塩等のアルカリ金属またはアルカリ土類金属に基づくカチオン、ならびに他の中でもアンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアンモニウム、ジメチルアンモニウム、トリメチルアンモニウム、トリエチルアンモニウム、ジエチルアンモニウム、およびエチルアンモニウムを含む非毒性四級アンモニアおよびアミンカチオンを含むが、これらに限定されない。塩基性添加塩の形成に有用な他の代表的な有機アミンは、例えば、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペリジン、ピペラジン等を含む。有機塩基に由来する塩は、一級、二級、および三級アミンを含むが、これらに限定されない。
【００７１】
ある実施形態では、式（Ｉ）および／または（ＩＩ）において、Ｘ３０〜Ｘ３２は不在である。別の実施形態では、Ｘ３０〜Ｘ３３は不在である。
【００７２】
ある実施形態では、式（Ｉ）および／または（ＩＩ）において、Ｘ２７〜Ｘ２９は、次の通りである：Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｒｇ。
【００７３】
別の実施形態では、式（Ｉ）および／または（ＩＩ）において、Ｘ２７〜Ｘ３２は不在である。別の実施形態では、Ｘ２７〜Ｘ３３は不在である。
【００７４】
別の実施形態では、式（Ｉ）および／または（ＩＩ）において、Ｘ１８はＬｙｓであり、Ｘ２７〜Ｘ２９、Ｘ２７〜Ｘ３２、またはＸ２７〜Ｘ３３は存在する。ある実施形態では、Ｘ２７〜Ｘ３２は次の通りである：Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｒｇ（配列番号４１）。ある実施形態ではＸ２７〜Ｘ３３は次の通りである：Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＨｏＳｅｒ（配列番号４２）。
【００７５】
ある実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、上記に定義される式ＩまたはＩＩの１つのドメインを含む。ある実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、上記に定義される式ＩまたはＩＩの２つ以上（例えば、２、３、４、または５）のドメインを含む。
【００７６】
実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、上記に定義される式ＩまたはＩＩのドメインに加えて、前記ドメインのアミノおよび／またはカルボキシ末端に共有結合的に連結されるアミノ酸（天然に存在する、または合成）をもう１つ含むことができる。ある実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、上記に定義される式（Ｉ）または（ＩＩ）のドメインに、Ｎおよび／またはＣ末端に最大２５個の追加のアミノ酸を含む。さらなる実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、上記に定義される式（Ｉ）または（ＩＩ）のドメインのＮおよび／またはＣ末端に、最大２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、または１個の追加のアミノ酸を含む。ある実施形態では、上述のドメインまたはＧＲＦ類似体は、約１００以下の残基、さらなる実施形態では、約９０、８０、７０、６０、５０、４０、または３５以下の残基を含有する。ある実施形態では、上述のドメインまたはＧＲＦ類似体は、約２６の残基〜約１００の残基を含有する。さらなる実施形態では、上述のドメインまたはＧＲＦ類似体は、約２６の残基〜約５０の残基を含有する。さらなる実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、約２６の残基〜約４５の残基を含有する。さらなる実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、約２６の残基〜約４０の残基を含有する。さらなる実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、約２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、または３９の残基を含有する。
【００７７】
ある実施形態では、上述のドメインまたはＧＲＦ類似体は、ペプチド模倣体である。ペプチド模倣体は、典型的に、そのペプチド等価物の極性、３次元の大きさ、および機能性を保持することを特徴とするが、ペプチド結合／連結のうちの１つ以上が、多くの場合、より安定した連結によって置換されている。一般に、アミド結合を置換する結合（アミド結合代替）は、多くの、またはすべてのアミド結合の特性、例えば、配座、立体容積、静電性質、水素結合の電位等を保存する。典型的なペプチド結合置換は、エステル、ポリアミン、およびそれらの誘導体、ならびにアミノメチルおよびケトメチレン等の置換されたアルカンおよびアルケンを含む。例えば、上述のドメインまたはＧＲＦ類似体は、−ＣＨ２ＮＨ−、−ＣＨ２Ｓ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−（シスまたはトランス）、−ＣＨ２ＳＯ−、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−、または−ＣＯＣＨ２−等の連結によって置換された１つ以上のペプチド連結を有することができる。そのようなペプチド模倣体は、そのペプチド等価物に対してより高い化学安定性、良好な生物学的／薬学的特性（例えば、半減期、吸収、効力、効率等）、および／または減少した抗原性を有し得る。
【００７８】
実施形態では、ＧＲＦ類似体は、上記に定義される式（Ｉ）または（ＩＩ）のドメインから成る。
【００７９】
実施形態では、上述のドメインは、次の配列：
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ（配列番号２）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ｓ−ｒ（配列番号３）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−ａｉｂ−Ｒ（配列番号４）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｏ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ｓ−ｒ（配列番号５）、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｏ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ｓ−ｒ（配列番号６）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ｓ−ｒ（配列番号７）、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号８）、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｓ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号９）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１０）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ｌ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１１）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１２）、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１３）、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１４）、
Ｙ−Ｓ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１５）、
Ｙ−Ｇ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１６）、
Ｙ−Ｌ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１７）、
Ｙ−Ｇ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＨｏＳｅｒ（配列番号１８）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＨｏＳｅｒ（配列番号１９）のうちの１つを含み、
ａ＝Ｄ−Ａｌａ、Ｏ＝Ｌ−オルニチン、Ａｉｂ＝α−アミノイソ酪酸、ＨｏＳｅｒ＝Ｌ−ホモセリン、およびｒ＝Ｄ−Ａｒｇである。
【００８０】
さらなる実施形態では、上述のドメインは、次の配列：
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号８）、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｓ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号９）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１０）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ｌ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１１）、もしくは
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１２）、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１３）、または
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１４）のうちの１つを含み、
ａ＝Ｄ−Ａｌａである。
【００８１】
実施形態では、上述のドメインは、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ（配列番号２）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ｓ−ｒ（配列番号３）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−ａｉｂ−Ｒ（配列番号４）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｏ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ｓ−ｒ（配列番号５）、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｏ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ｓ−ｒ（配列番号６）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ｓ−ｒ（配列番号７）、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号８）、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｓ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号９）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１０）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ｌ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１１）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１２）、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１３）、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１４）、
Ｙ−Ｓ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１５）、
Ｙ−Ｇ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１６）、
Ｙ−Ｌ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１７）、
Ｙ−Ｇ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＨｏＳｅｒ（配列番号１８）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＨｏＳｅｒ（配列番号１９）であり（またはそれらから成る）、
ａ＝Ｄ−Ａｌａ、Ｏ＝Ｌ−オルニチン、Ａｉｂ＝α−アミノイソ酪酸、ＨｏＳｅｒ＝Ｌ−ホモセリン、およびｒ＝Ｄ−Ａｒｇである。
【００８２】
さらなる実施形態では、上述のドメインは、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号８）、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｓ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号９）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１０）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ｌ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１１）、または
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１２）、
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１３）、または
Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１４）であり（またはそれらから成る）、
ａ＝Ｄ−Ａｌａである。
【００８３】
さらなる実施形態では、上述のドメインは、Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号８）である。
【００８４】
さらなる実施形態では、上述のドメインは、Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｓ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号９）である。
【００８５】
さらなる実施形態では、上述のドメインは、Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１０）であり、ａ＝Ｄ−Ａｌａである。
【００８６】
さらなる実施形態では、上述のドメインは、Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ｌ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１１）であり、ａ＝Ｄ−Ａｌａである。
【００８７】
さらなる実施形態では、上述のドメインは、Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１２）であり、ａ＝Ｄ−Ａｌａである。
【００８８】
さらなる実施形態では、上述のドメインは、Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１３）である。
【００８９】
さらなる実施形態では、上述のドメインは、Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ（配列番号１４）である。
【００９０】
実施形態では、上述のＧＲＦ類似体またはドメインのＮ−および／またはＣ末端アミノ酸は、例えば、アミド化、アセチル化、アシル化、または当該技術分野において既知の任意の他の修飾によって修飾され得る。
【００９１】
したがって、別の態様では、本発明は、式（ＩＩＩ）：
Ｚ１−Ｘ１−Ｘ２−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｘ８−Ｘ９−Ｔｙｒ−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｌｅｕ−Ｘ１５−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｘ１８−Ｘ１９−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６−Ｘ２７−Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１−Ｘ３２−Ｘ３３−Ｚ２  （ＩＩＩ）
即ち
Ｚ１−［式ＩまたはＩＩのドメイン］−Ｚ２
のＧＲＦ類似体を提供し、
式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ８、Ｘ９、Ｘ１１〜Ｘ１３、Ｘ１５、Ｘ１８、Ｘ１９、およびＸ２２〜Ｘ３３は、上記に定義される通りであり、
Ｚ１は、アミノ末端修飾であるか、または不在であり、
Ｚ２は、カルボキシ末端修飾であるか、または不在である。
【００９２】
ある実施形態では、ＧＲＦ類似体のアミノ末端残基（即ち、Ｎ末端端部の遊離アミノ基）は、例えば部分／化学基（Ｚ１）の共有結合により修飾される（例えば、分解に対する保護）。ある実施形態では、アミノ末端修飾（Ｚ１）は、Ｃ１−Ｃ１６またはＣ３−Ｃ１６のアシル基（直鎖または分枝鎖、飽和または不飽和）であり、さらなる実施形態では、飽和Ｃ１−Ｃ６アシル基（直鎖または分枝鎖）または不飽和Ｃ３−Ｃ６アシル基（直鎖または分枝鎖）であり、さらなる実施形態では、アセチル基（ＣＨ３−ＣＯ−、Ａｃ）である。別の実施形態では、Ｚ１は、Ｘ１に結合される１つ以上のアミノ酸（例えば、１〜２５個の追加のアミノ酸、例えば、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、または１個のアミノ酸）の配列である。ある実施形態では、Ｚ１が不在の場合、Ｘ２はＤ−Ａｌａである。
【００９３】
別の実施形態では、アミノ末端修飾（Ｚ１）は、５〜８個の原子の主鎖を含む疎水性尾部であり、主鎖は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、またはＣ６−１２アリールによって置換され得、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキルまたはＣ６−１２、および主鎖は、主鎖の少なくとも２個の原子に結合される少なくとも１つの剛性部分を含み、剛性部分は、二重結合、三重結合、飽和もしくは不飽和Ｃ３−９シクロアルキル、またはＣ６−１２アリールである。さらなる実施形態では、Ｚ１は、
【化１】
2014515751.tif 000002
（式中、Ｒは、Ｈ、ＣＨ３、またはＣＨ２ＣＨ３であり、二重結合は、シスまたはトランスである）、
【化２】
2014515751.tif 000003
（式中、Ｒは、Ｈ、ＣＨ３、またはＣＨ２ＣＨ３であり、Ｘは、シスまたはトランス構成にあり、前記ＧＲＦ類似体は、ラセミ混合物または純粋な鏡像異性体である）、
【化３】
2014515751.tif 000004
（式中、Ｒは、Ｈ、ＣＨ３、またはＣＨ２ＣＨ３であり、ＲがＣＨ３またはＣＨ２ＣＨ３であるとき、Ｘは、シスまたはトランス構成にある）、
【化４】
2014515751.tif 000005
（式中、Ｒは、Ｈ、ＣＨ３、またはＣＨ２ＣＨ３であり、Ｘは、シスまたはトランス構成にあり、前記ＧＲＦ類似体は、ラセミ混合物または純粋な鏡像異性体である）、
【化５】
2014515751.tif 000006
（式中、Ｒは、Ｈ、ＣＨ３、またはＣＨ２ＣＨ３であり、ＲがＣＨ３またはＣＨ２ＣＨ３であるとき、Ｘは、シスまたはトランス構成にあり、前記ＧＲＦ類似体は、ラセミ混合物または純粋な鏡像異性体である）、
【化６】
2014515751.tif 000007
（式中、Ｒは、Ｈ、ＣＨ３、またはＣＨ２ＣＨ３であり、Ｘは、シスまたはトランス構成にあり、前記ＧＲＦ類似体は、ラセミ混合物または純粋な鏡像異性体である）、
【化７】
2014515751.tif 000008
（式中、Ｒは、Ｈ、ＣＨ３、またはＣＨ２ＣＨ３であり、ＲがＣＨ３またはＣＨ２ＣＨ３であるとき、Ｘは、シスまたはトランス構成にあり、前記ＧＲＦ類似体は、ラセミ混合物または純粋な鏡像異性体である）、
【化８】
2014515751.tif 000009
（式中、Ｒは、Ｈ、ＣＨ３、またはＣＨ２ＣＨ３であり、ＲがＣＨ３またはＣＨ２ＣＨ３であるとき、Ｘは、シスまたはトランス構成にある）、
【化９】
2014515751.tif 000010
（式中、Ｒは、Ｈ、ＣＨ３、またはＣＨ２ＣＨ３である）、
【化１０】
2014515751.tif 000011
（式中、Ｒは、Ｈ、ＣＨ３、またはＣＨ２ＣＨ３である）、
【化１１】
2014515751.tif 000012
（式中、Ｒは、Ｈ、ＣＨ３、またはＣＨ２ＣＨ３である）、または
【化１２】
2014515751.tif 000013
である。
【００９４】
ある実施形態では、アミノ末端修飾（Ｚ１）は、トランス−ＣＨ３−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−ＣＯまたはトランス−３−ヘキセノイルである。
【００９５】
ある実施形態では、ＧＲＦ類似体のカルボキシ末端残基（即ち、ペプチドのＣ末端端部の遊離カルボキシ基）は、修飾される（例えば、分解に対する保護）。ある実施形態では、修飾は、アミド化（ＮＨ２基によるＯＨ基の置換）であり、よって、そのような場合、Ｚ２は、ＮＨ２基である。さらなる実施形態では、Ｚ２は、１つ以上のアミノ酸（例えば、１〜２５個の追加のアミノ酸、例えば、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、または１個のアミノ酸）の配列である。
【００９６】
本発明のＧＲＦ類似体は、プロテアーゼ抵抗性、血漿タンパク質結合、増加した血漿半減期、細胞内透過等の、追加の生物学的特性をＧＲＦ類似体に付与する修飾をさらに含むことができる。そのような修飾は、例えば、脂肪酸（例えば、Ｃ６−Ｃ１８）のＧＲＦ類似体への共有結合、アルブミン（例えば、米国特許第７，２６８，１１３号を参照）等のタンパク質への結合、グリコシル化、ビオチン化、またはペグ化（例えば、米国特許第７，２５６，２５８号および第６，５２８，４８５号）を含む。上述のＧＲＦ類似体の修飾は、アプローチの範囲、または操作され得る可能な修飾を制限しない。
【００９７】
実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、
トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２０）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ｓ−ｒ−ＮＨ２（配列番号２１）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−ａｉｂ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２２）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｏ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ｓ−ｒ−ＮＨ２（配列番号２３）、
トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｏ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ｓ−ｒ−ＮＨ２（配列番号２４）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ｓ−ｒ−ＮＨ２（配列番号２５）、
トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２６）、
トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｓ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２７）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２８）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ｌ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２９）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３０）、
トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３１）、
トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３２）、
Ｙ−Ｓ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３３）、
Ｙ−Ｇ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３４）、
Ｙ−Ｌ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３５）、
Ｙ−Ｇ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＨｏＳｅｒ−ＮＨ２（配列番号３６）、または
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＨｏＳｅｒ−ＮＨ２
（配列番号３７）であり、
ａ＝Ｄ−Ａｌａ、Ｏ＝Ｌ−オルニチン、Ａｉｂ＝α−アミノイソ酪酸、ｒ＝Ｄ−Ａｒｇ、およびＨｏＳｅｒ＝Ｌ−ホモセリンである。
【００９８】
実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、
トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２６）、
トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｓ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２７）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２８）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ｌ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２９）、
Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３０）、
トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３１）、
トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３２）であり、
ａ＝Ｄ−Ａｌａである。
【００９９】
さらなる実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２６）である。
【０１００】
さらなる実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｓ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２７）である。
【０１０１】
さらなる実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２８）である。
【０１０２】
さらなる実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ｌ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号２９）である。
【０１０３】
さらなる実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、Ｙ−ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３０）である。
【０１０４】
さらなる実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｉ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３１）である。
【０１０５】
さらなる実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、トランス−３−ヘキセノイル−Ｙ−Ａ−Ｄ−Ａ−Ｉ−Ｆ−Ｔ−Ｄ−Ｓ−Ｙ−Ｒ−Ｋ−Ｖ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ｒ−Ｑ−Ｄ−Ｌ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−Ａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ２（配列番号３２）である。
【０１０６】
ある実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、未変性配列（例えば、ヒトＧＲＦ（１−４４）、ＧＲＦ（１−２９）、ＧＲＦ（１−４０）等の中間体形態、ならびにＮ末端アシル化およびそのＣ末端的にアミド化された形態）を含むＧＲＦペプチドに類似する、またはそれより大幅に高い生物活性および／または効力を呈する。さらなる実施形態では、上述の生物活性および／または効力は、生体内生物活性および／または効力（例えば、生体内ＧＨ分泌活性および／または効力）である。さらなる実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、未変性配列（例えば、ＧＲＦ（１−２９））を含むＧＲＦペプチドより大幅に高い（またはそれに対して大幅に増加した）生物活性および／または効力を呈する。そのような生物活性および／または効力は、動物モデル、例えば、本明細書に記載されるマウスおよびラットモデルにおいて測定され得る。使用される大幅に高いとは、未変性配列（例えば、ＧＲＦ（１−４４）、ＧＲＦ（１−２９））を含むＧＲＦペプチドより少なくとも２倍、３倍、４倍、または５倍高い効力を指す。別の実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、未変性配列（例えば、ヒトＧＲＦ（１−４４）、ＧＲＦ（１−２９）、ＧＲＦ（１−４０）等の中間体形態、ならびにＮ末端アシル化およびそのＣ末端的にアミド化された形態）を含むＧＲＦペプチドに類似する、またはそれより大幅に高い安定性（例えば、生体内安定性）を呈する。さらなる実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、未変性ＧＦＲ配列（例えば、ＧＲＦ（１−２９））を含むＧＲＦペプチドより大幅に高い（またはそれに対して大幅に増加した）生体内安定性（半減期）を呈する。
【０１０７】
本発明のＧＲＦ類似体は、ＧＲＦ類似体（組み換え発現）をコードする核酸を含む宿主細胞における発現により、または化学合成（例えば、固相ペプチド合成）により生成され得る。ペプチドは、当該技術分野において周知の手動および自動固相工程により容易に合成することができる。好適な合成は、例えば、「Ｔ−ｂｏｃ」または「Ｆｍｏｃ」工程を利用することにより行うことができる。固相合成の技法および工程は、例えば、Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，  ｂｙ  Ｅ．Ａｔｈｅｒｔｏｎ  ａｎｄ  Ｒ．Ｃ．Ｓｈｅｐｐａｒｄ，ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ  ｂｙ  ＩＲＬ，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，１９８９に記載されている。代替的に、ペプチドは、例えば、Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．３７：９３３−９３６，１９９６、Ｂａｃａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１７：１８８１−１８８７，１９９５、Ｔａｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｅｓ．４５：２０９−２１６，１９９５、Ｓｃｈｎｏｌｚｅｒ  ａｎｄ  Ｋｅｎｔ，Ｓｃｉｅｎｃｅ２５６：２２１−２２５，１９９２、Ｌｉｕ  ａｎｄ  Ｔａｍ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１６：４１４９−４１５３，１９９４、Ｌｉｕ  ａｎｄ  Ｔａｍ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９１：６５８４−６５８８，１９９４、およびＹａｍａｓｈｉｒｏ  ａｎｄ  Ｌｉ，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｅｓ．３１：３２２−３３４，１９８８）に記載されるように、セグメント縮合により調製され得る。ペプチドの合成に有用な他の方法は、Ｎａｋａｇａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１０７：７０８７−７０９２，１９８５に記載されている。
【０１０８】
遺伝コードによりコードされる天然に存在するアミノ酸を含むペプチドおよびペプチド類似体は、標準的な方法を使用する組み換えＤＮＡ技術を使用することによっても調製され得る。組み換え技術によって生成されたペプチドは、当該技術分野において周知の方法を使用して（例えば、Ｎ末端アシル化［例えば、アセチル化］、Ｃ末端アミド化）修飾され得る。したがって、実施形態では、本明細書に記載されるＧＲＦ類似体が遺伝コードによってコードされる天然に存在するアミノ酸を含有する場合、ＧＲＦ類似体は、組み換え法を使用して生成することができ、実施形態では、例えば、先ほど記述した修飾（例えば、アシル化、アミド化）を受けることができる。したがって、別の態様では、本発明は、上述のドメインまたはＧＲＦ類似体をコードする核酸をさらに提供する。本発明は、上述の核酸を含むベクターも提供する。また別の態様では、本発明は、上述の核酸および／またはベクターを含む細胞（例えば、宿主細胞）を提供する。本発明は、例えば、当該技術分野において周知の培養培地、生成方法、単離方法、および精製方法を使用して、本発明のペプチドまたはＧＲＦ類似体を発現させる／生成するために、上述のもの等、組み換え発現系、ベクター、および宿主細胞をさらに提供する。
【０１０９】
本発明のＧＲＦ類似体は、逆相クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、イオン交換クロマトグラフィー、分子ふるいクロマトグラフィー、親和性クロマトグラフィー、ゲル電気泳動等の当該技術分野において周知の多くのペプチド精製法により精製され得る。特定のペプチドまたはペプチド類似体を精製するために使用される実際の条件は、一部、合成戦略、および実質電荷、疎水性、親水性等の因子に依存し、当業者には明らかであろう。親和性クロマトグラフィー精製に関して、例えば、ペプチドまたはペプチド類似体に特異的に結合する任意の抗体が使用され得る。
【０１１０】
ある実施形態では、上述のＧＲＦ類似体は、実質的に純粋である。化合物は、それに天然に付随する化合物から分離されるとき、「実質的に純粋」である。典型的に、化合物は、サンプルの全材料の少なくとも６０重量％、より一般的には７５重量％、８０重量％、または８５重量％、好ましくは９０重量％を超える、より好ましくは９５重量％を超えるとき、実質的に純粋である。よって、例えば、化学的に合成される、または組み換え技術によって生成されるポリペプチドは、一般に、その天然に会合する構成成分を含まない。核酸分子は、本発明のＤＮＡが由来する生物の天然に存在するゲノムに通常隣接するコード配列と即座に隣接しない（即ち、共有結合的に連結する）とき、実質的に純粋である。実質的に純粋な化合物は、例えば、天然源から抽出することによって、ポリペプチド化合物をコードする組み換え核酸分子の発現によって、または化学合成によって得ることができる。純度は、カラムクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、ＨＰＬＣ等の任意の適切な方法を使用して測定することができる。
【０１１１】
別の態様では、本発明は、上述のＧＲＦ類似体を含む組成物（例えば、薬学的組成物）を提供する。ある実施形態では、組成物は、１つ以上の薬学的に許容される担体、賦形剤、および／または希釈剤をさらに含む。
【０１１２】
本明細書に使用される、「薬学的に許容される」（または「生物学的に許容される」）とは、生体内で毒性または有害な生物学的作用の不在を特徴とする材料を指す。これは、妥当な利益／リスク比に見合う、過度の毒性、刺激、アレルギー応答、または他の問題もしくは合併症なく、対象（例えば、ヒト、動物）の生物学的流体および／もしくは組織ならびに／または器官と接触する使用に適した、妥当な医学的判断の範囲内のそれらの化合物、組成物、および／または投与形態を指す。
【０１１３】
用語「薬学的に許容される担体、賦形剤、および／または希釈剤」とは、薬学的組成物の調製に通常使用される添加剤を指し、例えば、溶剤、分散媒、生理食塩水、界面活性剤、可溶化剤、潤滑剤、乳化剤、コーティング剤、抗菌剤および抗真菌剤、キレート化剤、ｐＨ調節剤、緩和剤、緩衝剤、還元剤、抗酸化剤、等張剤、吸収遅延剤等を含む（例えば、Ｒｏｗｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ；６ｔｈｅｄｉｔｉｏｎ，２００９を参照）。
【０１１４】
本発明のＧＲＦ類似体は、静脈内、経口、経皮、腹腔内、皮下、粘膜、筋肉内、鼻腔内、肺内、非経口、または局所投与等の任意の従来の経路を介して投与するために製剤化され得る。そのような製剤の調製は、当該技術分野において周知である（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ；２１ｓｔｅｄｉｔｉｏｎ，２００５を参照）。
【０１１５】
本発明のＧＲＦ類似体および組成物は、対象においてＧＨの分泌を誘発する、または刺激するのに有用であり得る。
【０１１６】
したがって、別の態様では、本発明は、成長ホルモン分泌の誘発または増加を必要とする対象において、それを行うための方法を提供し、前記方法は、有効量の上述のＧＲＦ類似体または上述の薬学的組成物を前記対象に投与することを含む。
【０１１７】
別の態様では、本発明は、対象において成長ホルモン分泌を誘発する、または増加させるための、上述のＧＲＦ類似体または上述の薬学的組成物の使用を提供する。
【０１１８】
別の態様では、本発明は、対象において成長ホルモン分泌を誘発する、増加させるための薬剤を調製するために、上述のＧＲＦ類似体または上述の薬学的組成物の使用を提供する。
【０１１９】
別の態様では、本発明は、対象において成長ホルモン分泌を誘発する、または増加させるための薬剤を調製するために、上述のＧＲＦ類似体または上述の薬学的組成物を提供する。
【０１２０】
別の態様では、本発明は、対象において成長ホルモン分泌の誘発する、または増加させるのに使用するための、上述のＧＲＦ類似体または上述の薬学的組成物を提供する。
【０１２１】
本明細書で使用される、用語「刺激する」、「増加させる」、もしくは「誘発する」、またはそれらの用語の任意の変形は、測定可能な生物活性の増加を指す。実施形態では、増加は、対照に対して少なくとも１０％、２０％、４０％、６０％、８０％、９０％、９５％、１００％（２倍）、２００％（３倍）の生物活性の増加である。例えば、ＧＲＦ類似体は、ＧＲＦ類似体を投与されなかった対象と比較して、ＧＨレベルの増加がＧＲＦ類似体の対象（例えば、動物、ヒト）への投与後に測定されるとき、ＧＨＲＨｒ活性を刺激することが分かる。
【０１２２】
それらのＧＨＲＨｒ作動薬活性およびＧＨ放出特性を考慮すると、本発明のＧＲＦ類似体および組成物は、ＧＨ／ＩＧＦ−１分泌の刺激が望ましい予防的および／または治療的用途、例えば、ＧＲＦおよび／またはＧＨ機能（例えば、ＧＨおよび／またはＧＨＲＨ機能の減少が疾患／障害の病因に関与する）に関連する状態／障害／疾患の治療または防止のための薬剤として有用であり得る。ＧＨ、ＧＲＦ、またはＧＲＦ類似体／誘導体の投与が有益であり得る疾患および状態は、当該技術分野において広範囲に説明されている（例えば、第ＷＯ２００９／００９７２７号、第ＷＯ２００６／０４２４０８号、第ＷＯ２００５／０３７３０７号、第ＷＯ２００４／１０５７８９号を参照）。そのような状態／障害／疾患は、例えば、脂肪蓄積に関連する症候群、高コレステロール血症、肥満症、Ｘ症候群、脂肪肥大症、脂肪萎縮症、脂肪異栄養症（例えば、ＨＩＶ関連脂肪異栄養症症候群）、認知機能障害、昼間覚醒状態障害（ｉｍｐａｉｒｅｄ  ｄａｙｔｉｍｅ  ｖｉｇｉｌａｎｃｅ）、免疫系の機能低下（例えば、Ｔ細胞欠乏症等の免疫不全）、筋タンパク質異化作用、筋肉減少症、虚弱、放射線療法および／または化学療法関連の副作用（例えば、ＨＩＶ感染および癌患者において）等の筋消耗に関連する疾患／状態、悪液質（例えば、癌患者において）、視床下部の下垂体性低身長症、火傷、骨粗鬆症、腎不全、偽関節骨折、急性／慢性消耗性疾患または感染、創傷治癒、術後問題、乳汁分泌不全、女性の不妊症、神経変性状態、ＧＲＦ受容体依存性腫瘍、加齢に関する状態、睡眠障害／機能障害を含む。
【０１２３】
したがって、他の態様では、本発明は、（１）例えば、加齢、軽度の認知障害（ＭＣＩ）、プレアルツハイマー症候群（アルツハイマー発症前）、認知症および／または睡眠障害（例えば、加齢関連睡眠障害）に関連する状態における昼間覚醒状態（ｄａｙｔｉｍｅ  ｖｉｇｉｌａｎｃｅ）および／または認知機能を刺激する、（２）脂肪蓄積および／もしくは高コレステロール血症（肥満症、腹部肥満症／脂肪症、代謝障害を伴う腹部肥満症、相対性ＧＨ欠乏を伴う腹部肥満症、代謝症候群またはＸ症候群、脂肪肥大症、脂肪萎縮症、脂肪異栄養症（例えば、ＨＩＶ関連脂肪異栄養症症候群）、脂質異常症、高トリグリセリド血症）に関連する代謝状態を改善する／防止する／治療する、（３）例えば、筋量および／もしくは機能を増加させるために、特に高齢者対象における、急性もしくは慢性腎不全（例えば、急性もしくは慢性腎不全消耗症）、慢性心不全（例えば、慢性心不全消耗症）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、嚢胞性線維症（例えば、成人における嚢胞性線維症消耗症）、虚弱、火傷、感染（敗血症）、筋ジストロフィー、うっ血性心不全、神経変性状態（アルツハイマー、プレアルツハイマー症候群、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ＡＩＤＳ、長期コルチコステロイド療法後のタンパク質栄養障害、偽関節骨折後、股関節骨折、外傷、または大手術（術後問題）後、骨粗鬆症、長期不動化、癌関連悪液質、筋肉減少症（例えば、加齢関連筋肉減少症）、Ｇｌ吸収不良（短腸症候群（ＳＢＳ）、クローン病）で観察されるもの等の異化／消耗状態における同化作用を改善する、（４）加齢、ＨＩＶ感染／ＡＩＤＳに関連する、または高投与量化学療法および／もしくは放射線療法（ＨＩＶ感染および癌患者において）後等の、免疫不全状態（例えば、Ｔ細胞免疫不全）の免疫機能または再構成を改善する、（５）脂質パラメータ（（ａ）コレステロールを減少させる、（ｂ）非ＨＤＬコレステロールを減少させる、（ｃ）トリグリセリドを減少させる、および／もしくは（ｄ）総コレステロール／ＨＤＬコレステロールの割合を減少させる）を変更する、（６）身体組成パラメータ（（ａ）除脂肪体重を増加させる、（ｂ）体幹脂肪を減少させる、（ｃ）内臓脂肪を減少させる、（ｄ）腹囲を減少させる、（ｅ）内臓脂肪組織（ＶＡＴ）を減少させる、および／もしくは（ｆ）ＶＡＴ／皮下脂肪組織（ＳＡＴ）比を減少させる）を変更する、（７）受胎能を強化する、もしくは不妊症を治療する（女性において）、乳汁分泌不全治療する、（８）ＧＨ欠乏症（例えば、腹部肥満症を伴うＧＨ欠乏症）を治療する、例えば成人において、ＧＨ補充療法を提供する、特発性低身長（ＩＳＳ）を治療する、（９）ＧＲＦ受容体関連腫瘍を治療する、（１０）視床下部の下垂体性低身長症を治療する、（１１）創傷治癒を改善する、（１２）火傷を治療する、（１３）急性／慢性消耗性疾患もしくは感染を治療する、ならびに／または（１４）骨形成の欠乏または減少（例えば、骨粗鬆症）を特徴とする状態を防止する／治療するための方法を提供し、本方法は、有効量の上述のＧＲＦ類似体もしくはその薬学的に許容される塩、または上述のＧＲＦ類似体もしくはその薬学的に許容される塩を含む組成物（例えば、薬学���に許容される担体／賦形剤と共に）を、それを必要する対象に投与することを含む。
【０１２４】
他の態様では、本発明は、上述の状態、疾患、もしくは障害を改善する、防止する、および／または治療するために、あるいは上述の状態、疾患、もしくは障害を改善する、防止する、および／または治療するための薬剤を調製する／製造するための、上述のＧＲＦ類似体もしくはその薬学的に許容される塩、または上述のＧＲＦ類似体もしくはその薬学的に許容される塩を含む組成物（例えば、薬学的に許容される担体／賦形剤と共に）の使用を提供する。他の態様では、本発明は、上述の状態、疾患、もしくは障害を改善する、防止する、および／または治療するために使用するための、あるいは上述の状態、疾患、もしくは障害を改善する、防止する、および／または治療するための薬剤を調製する／製造するための、上述のＧＲＦ類似体もしくはその薬学的に許容される塩、または上述のＧＲＦ類似体もしくはその薬学的に許容される塩を含む組成物（例えば、薬学的に許容される担体／賦形剤と共に）を提供する。
【０１２５】
本明細書で使用される、用語「治療」または「治療する」とは、障害／疾患および／もしくは障害／疾患の症状を回復する、治癒する、軽減する、緩和する、変更する、治療する、寛解させる、改善する、進行を減少させる、または影響を及ぼす目的で、上述のＧＲＦ類似体もしくはその薬学的に許容される塩、または上述の組成物を対象に適用する、または投与する、あるいは上述のＧＲＦ類似体もしくはその薬学的に許容される塩、または上述の組成物を、障害、疾患、障害もしくは疾患の症状を有する対象から単離した組織もしくは細胞系に適用する、または投与することとして定義される。ある実施形態では、治療は、血糖制御に作用をもたらさない、または実質的に作用をもたらさない（例えば、臨床的に著しい作用がない）。
【０１２６】
本明細書で使用される、用語「防止」または「防止する」とは、疾患／障害もしくは症状の開始／出現前に投与されるとき、疾患／障害もしくは症状の開始を防止する、または遅延する、あるいは疾患／障害もしくは症状の重篤度を減少させる目的で、上述のＧＲＦ類似体もしくはその薬学的に許容される塩、または上述の組成物を対象に適用する、または投与する、あるいは上述のＧＲＦ類似体もしくはその薬学的に許容される塩、または上述の組成物を、障害／疾患になりやすい素因を有する、または障害／疾患を発症するリスクにある対象から単離した組織もしくは細胞系に適用する、または投与することとして定義される。
【０１２７】
「有効量」とは、投薬量で、必要な時間期間の間、所望の生物活性（例えば、ＧＨ分泌を誘発する）、および／または予防的／治療的結果（例えば、上述の疾患／障害の防止および／または治療）を達成するための有効量を指す。「治療有効量」とは、療法に関する有効量を指し、「予防的有効量」とは、予防に関する有効量を指す。本発明の化合物の有効量は、個人の疾患状態、年齢、性別、および体重等の因子、ならびに化合物が個人において所望の応答を引き出す能力により変動し得る。投薬量レジメンは、最適な予防的／治療的応答を提供するように調節され得る。有効量は、化合物の任意の毒性または有害作用が予防的／治療的有益作用を上回るものでもある。任意の特定の対象に関して、特定の投薬量レジメンは、個人の必要性および組成物を投与する者またはその投与を管理する者の専門的な判断により経時的に調節され得る。ある実施形態では、ＧＲＦ類似体は、約０．０１ｍｇ〜約３０ｍｇの日用量で、さらなる実施形態では、約０．１ｍｇ〜約２０または２５ｍｇの日用量で、さらなる実施形態では、約０．５ｍｇ〜約２０ｍｇの日用量で、さらなる実施形態では、約１ｍｇ〜約２０ｍｇの日用量で投与される。
【０１２８】
本発明のＧＲＦ類似体、もしくはその薬学的に許容される塩、または組成物は、静脈内、経口、経皮、腹腔内、皮下、粘膜、筋肉内、鼻腔内、肺内、非経口、または局所等の任意の従来の経路により投与され得る、またはそれによる投与用であり得る。ある実施形態では、ＧＲＦ類似体またはその薬学的に許容される塩は、皮下経路により投与される、またはそれによる投与用である。別の実施形態では、ＧＲＦ類似体またはその薬学的に許容される塩は、経皮経路により（例えば、経皮パッチ等の経皮送達系を使用することにより）投与される、またはそれによる投与用である。したがって、別の態様では、本発明は、上述のＧＲＦ類似体（またはその薬学的に許容される塩）または薬学的組成物を含む、経皮パッチ等の経皮送達系を提供する。経皮送達のための方法および系は、当該技術分野において周知であり、例えば、Ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ  Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，２００３およびＴｒａｎｓｄｅｒｍａｌ  ａｎｄ  Ｔｏｐｉｃａｌ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，Ａｄｒｉａｎ  Ｃ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ，２００３に記載されている。別の実施形態では、ＧＲＦ類似体またはその薬学的に許容される塩は、経口投与により投与される、またはそれによる投与用である。ある実施形態では、ＧＲＦ類似体またはその薬学的に許容される塩は、鼻腔内経路により投与される、またはそれによる投与用である。
【０１２９】
ある実施形態では、上述の防止および／または治療は、１つ以上の追加の活性剤／治療剤と組み合わせて、上述のＧＲＦ類似体、もしくはその薬学的に許容される塩、または組成物を投与することを含む。予防剤／治療剤および／または組成物の組み合わせは、任意の従来の投薬形態で、投与される、または同時投与（例えば、異なる時点で連続的に、同時に）され得る。本発明に関する同時投与は、臨床転帰の改善を達成するために、協調治療の過程で２つ以上の治療薬を投与することを指す。そのような同時投与は、同一の広がりも持つ、即ち、重複する時間期間中に生じ得る。例えば、第１の薬剤は、第２の薬剤が投与される前、同時に、投与される前後、および投与された後に患者に投与され得る。ある実施形態では、薬剤は、単一組成物に組み合わされ／製剤化され、よって同時に投与され得る。ある実施形態では、本発明の１つ以上の活性剤（複数可）は、問題の障害を防止する、または治療するために現在使用される１つ以上の薬剤（複数可）と組み合わせて使用／投与され得る。
【０１３０】
本明細書で使用される、用語「対象」または「患者」とは、哺乳類、例えば、ネコ、イヌ、マウス、モルモット、ウマ、ウシ、ヒツジ、およびヒト等の温血動物を意味する。ある実施形態では、対象は哺乳類である。さらなる実施形態では、上述の対象はヒトである。
【０１３１】
本発明を実行するための方法（複数可）
本発明は以下の非限定的な実施例によりさらに詳細に図示される。
【０１３２】
以下の略語が本明細書において使用される。
【表１】
2014515751.tif 000014
【０１３３】
本出願全体を通して、天然に存在するアミノ酸は、１文字または３文字コードを使用して、互換的に称される（それらの間の対応に関しては、次の表Ｉを参照）。
【表２】
2014515751.tif 000015
【実施例】
【０１３４】
実施例１：材料および方法
ＧＲＦ類似体の合成および調製
固相合成
本発明のＧＲＦ類似体は、０．７５ｍｍｏｌ／ｇの負荷で、適切な側鎖保護およびベンズヒドリルアミン（ＢＨＡ）樹脂（ＢＡＣＨＥＭ  ＡＧ）を有するフルオレニルメトキシカルボニル−保護α−アミノ酸を使用して、手動または自動固相ペプチド合成アプローチを使用して作製された。アミノ酸のカップリングの前に、６−アミノヘキサン酸およびリンクリンカー（Ｒｉｎｋ  ｌｉｎｋｅｒ）を樹脂にカップリングし、次いで、［２−（６−クロロ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルアミニウムヘキサフルオロホスフェート］（ＨＣＴＵ）または（１−シアノ−２−エトキシ−２−オキソエチリデンアミノオキシ）ジメチルアミノ−モルホリノ−カルベニウムヘキサフルオロホスフェート（ＣＯＭＵ）およびΝ，Ν−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中のジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）を使用して、約１時間、Ｆｍｏｃ−［９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニル］保護アミノ酸をカップリングした。ＤＭＦ中２０％（ｖ／ｖ）ピペリジンを使用して、約０．５時間、Ｆｍｏｃ脱保護を行った。本発明のペプチドをアセチルでＮキャッピングするための一般工程は、無水酢酸およびＤＩＥＡを使用して行った。合成の完了後、同時に側鎖脱保護しながら、ペプチドを固相支持体から切断した。０．１％のトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）中でアセトニトリル勾配を使用して、Ｃ１８カラム上で分取ＲＰ−ＨＰＬＣにより粗直鎖ペプチドをさらに精製した。アセトニトリルを除去するために、ペプチドを真空乾燥させ、０．１％のＴＦＡから凍結乾燥させた。分析高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により純度を評価し、Ｖｏｙａｇｅｒ（商標）機器（ＰｅｒＳｅｐｔｉｖｅ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  Ｉｎｃ．）を使用して、マトリックス支援レーザー脱離／イオン化質量（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ）分析により質量を決定した。
【０１３５】
本発明のＧＲＦ類似体の活性の決定
アルカリホスファターゼ（ＡＰ）アッセイ
代表的なＧＲＦペプチドの活性は、ヒトＧＲＦ受容体およびアルカリホスファターゼリポータ遺伝子を発現させるために安定して形質移入された仔ハムスター腎（ＢＨＫ）細胞上で試験された。刺激の前に、９６ウェルプレートで、０．５×１０５細胞／ウェルの濃度で、細胞を２４時間培養した。刺激前に、細胞をＤＰＢＳで２回洗浄し、アッセイ緩衝液（２０ｍＭのＨＥＰＥＳおよび１％の熱失活させたウシ胎仔血清（ＦＢＳ）で補充された、フェノールレッドを含まないＤＭＥＭ）中で１０〜３０分インキュベートした。ＧＲＦペプチドの用量応答曲線は、１０−５Ｍ〜１０−１１Ｍのペプチドの濃度で２４時間行われた。上清を採取し、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓのアルカリホスファターゼ検出キットを使用して、アルカリホスファターゼレベルの分析を行った。
【０１３６】
マウスにおけるＧＲＦ類似体の投与およびサンプル採取
ＣＤ−１マウス（雌、体重２０〜２５ｇ）をＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｉｎｃ．から得た。Ｇｕｉｄｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ａｎｉｍａｌｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｃａｎａｄｉａｎ  Ｃｏｕｎｃｉｌ  ｏｎ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅの原則に沿ったＡｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅのプロトコルに従い、動物を使用した。動物は、１２：１２の明：暗周期下で、標準的な固形飼料で保持された。動物は、１つのケージにマウス４匹の群で維持された。
【０１３７】
実験の日に、マウスは、ＧＲＦ類似体（２０ｍＭの酢酸ナトリウム（ＡｃＯＮａ）＋ｐＨ５の５％のマンニトールに溶解された１０μｇ／マウス）の皮下注射を受けた。注射１０分後に、マウスはイソルフラン（ｉｓｏｌｕｆｒａｎｅ）で麻酔された。血液サンプル（５００μｌ）は、心内穿刺により得た。血液は、Ｋ３ＥＤＴＡで前処理されたマイクロタイター（ｍｉｃｒｏｔａｉｎｅｒ）内に設置され、直ちに卓上遠心器で２分間、１３，０００ＲＰＭで遠心分離された。血漿を採取し、ネジキャップＥｐｐｅｎｄｏｒｆ（商標）チューブの中に設置し、液体窒素中で急速冷凍した。次いで、アッセイまでサンプルを−８０℃に維持した。ＧＨレベルの決定は、以下に記載するように行われた。
【０１３８】
ラットにおけるＧＲＦ類似体の投与およびサンプル採取
スプラーグドーレイラット（雌、体重２５０〜３００ｇ）をＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｉｎｃ．から得た。Ｇｕｉｄｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ａｎｉｍａｌｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｃａｎａｄｉａｎ  Ｃｏｕｎｃｉｌ  ｏｎ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅの原則に沿ったＡｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅのプロトコルに従い、動物を使用した。動物は、１２：１２の明：暗周期下で、標準的な固形飼料で保持された。動物は、１つのケージにラット４匹の群で維持された。
【０１３９】
動物は、２．５％のイソフルランで麻酔された。頸動脈を露出させるために頸部に中央開口部を作った。血液を取り出すために、ポリプロピレンチューブ（ＰＥ−５０）で頸動脈をカニューレ処置した。外科的準備の後、ラットは、ＧＲＦ類似体（２０ｍＭのＡｃＯＮａ＋ｐＨ５の５％のマンニトールに溶解された１０μｇ／ラット）の皮下注射を受けた。薬物動態研究のために、時間点につき群ごとに４〜８匹の動物から血液サンプル（４００μＬ）を採取した。血液サンプル（４００μｌ）は、薬物注射の０、１０、２０、３０、４５、および６０分後に頸動脈カテーテルを介して採取された。血液は、Ｋ３ＥＤＴＡで前処理されたマイクロタイター（ｍｉｃｒｏｔａｉｎｅｒ）内に設置され、直ちに卓上遠心器で２分間、１３，０００ＲＰＭで遠心分離された。血漿を採取し、ネジキャップＥｐｐｅｎｄｏｒｆ（商標）の中に設置し、液体窒素中で急速冷凍した。次いで、アッセイまでサンプルを−８０℃に維持した。ＧＨレベルの決定は、以下に記載するように行われた。
【０１４０】
血漿サンプルのＧＨレベルの決定
ラットおよびマウスの血漿サンプルを、慎重にボルテックスにかけ、４℃で２分間、９，０００ＲＰＭで遠心分離した。Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅのラット／マウス成長ホルモンＥＬＩＳＡキット（カタログ番号ＥＺＲＭＧＨ−４５Ｋ）を使用して、ＧＨレベルの投薬量が行われた。サンプルの上清は、最初にＧＨ  ＥＬＩＳＡアッセイ緩衝液で２０倍希釈され、この希釈の１０μｌが９０μｌのＧＨ  ＥＩＡアッセイ緩衝液を含むＥＬＩＳＡプレートに添加された。工程の残りは、製造者の指示に従い行われ、得られたデータは、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（商標）ソフトウェアを使用して分析された。
【０１４１】
実施例２：ＧＲＦ類似体のＧＨＲＨｒ作動薬活性
代表的なＧＲＦ類似体の生体外活性は、ヒトＧＨＲＨｒを発現する仔ハムスター腎（ＢＨＫ）細胞で試験された。結果は表ＩＩに提示される。
【表３−１】
2014515751.tif 000016
【表３−２】
2014515751.tif 000017
【０１４２】
実施例３：ＧＲＦ類似体ＧＨ放出特性
本明細書に記載されるＧＲＦ類似体は、雌のマウスおよびラットにおいて、ＧＨ放出を誘発するその能力について試験された。未変性ＧＲＦ（１−２９）より活性である、Ｎ末端アセチル化、Ｃ末端アミド化、Ａｓｐ（８）で置換されたＡｓｎ（８）、Ａｌａ（１５）で置換されたＧｌｙ（１５）、およびＬｅｕ（２７）で置換されたＭｅｔ（２７）を有する未変性ＧＲＦ（１−２９）ペプチドの類似体（配列番号４３）によって誘発されたＧＨ放出も、比較のために平行して測定された。データを表ＩＩＩ（マウス）およびＩＶ〜Ｖ（ラット）に提示する。
【表４−１】
2014515751.tif 000018
【表４−２】
2014515751.tif 000019
【表５−１】
2014515751.tif 000020
【表５−２】
2014515751.tif 000021
【表６−１】
2014515751.tif 000022
【表６−２】
2014515751.tif 000023
【０１４３】
本発明は、その特定の実施形態により上記に記載されてきたが、付属の特許請求の範囲に定義されるように、本発明の趣旨および本質から逸脱することなく修正され得る。特許請求の範囲において、用語「含む」は、非限定的な用語として使用され、実質的に句「〜を含むがこれに限定されない」と等しい。単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、特に明確に記載されない限り、対応する複数の参照を含む。
【配列表】
2014515751000001.app
【国際調査報告】
2014515751.tif 000024
2014515751.tif 000025
2014515751.tif 000026