(57)【要約】癌治療薬の送達および／または効力を改善するための方法および組成物が開示される。単一の剤または癌治療剤（例えば、大きいナノ治療薬から低分子量化学療法薬および／もしくは酸素ラジカルまでの範囲のサイズの治療剤）との組み合わせとして、降圧剤を対象に投与することにより、癌（例えば、線維形成性腫瘍などの固形腫瘍）を処置するかまたは防止するための方法および組成物が、開示される。2014505666.tif 000007
2014505666.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
癌治療の改善された送達または効力の必要性に基づき、対象を、降圧かつ／またはコラーゲン修飾剤（「AHCM」）の受容を必要としているものとして同定する工程；ならびに
（a）前記対象にAHCMを投与する工程、または
（b）癌治療を投与する工程
のいずれかまたは両方の工程
を含む、対象における癌治療の送達または効力を改善する方法であって、
AHCMが、癌治療の送達または効力を改善するのに十分な投薬量で投与される、方法。
【請求項２】
癌治療の改善された送達または効力の必要性に基づき、対象を、降圧かつ／またはコラーゲン修飾剤（「AHCM」）の受容を必要としているものとして同定する工程；ならびに
（a）前記対象にAHCMを投与する工程、または
（b）癌治療を投与する工程
のいずれかまたは両方の工程
を含む、対象における癌を処置するかまたは防止する方法であって、
AHCMが、癌を処置するかまたは防止するのに十分な投薬量で投与される、方法。
【請求項３】
（a）1nm、5nm、10nm、15nm、20nm、25nm、30nm、35nm、45nm、50nm、75nm、100nm、150nm、200nmより大きいが、300nmより小さい水力学的直径を有する実体として、AHCM、癌治療、または両方が投与されること；
（b）対象が、癌の診断またはAHCM投薬の開始の5日以内、10日以内、30日以内、60日以内、または100日以内にAHCMの用量を投与されていないこと；
（c）対象が、AHCMの投与の前に高血圧症でないかまたは高血圧症であったこと；
（d）AHCMが、癌治療の少なくとも1日前、2日前、3日前、もしくは5日前；または1週間前、2週間前、3週間前、4週間前、5週間前、またはそれ以前に投与されること；
（e）AHCMが、癌治療の少なくとも1日前、2日前、3日前、もしくは5日前；または1週間前、2週間前、3週間前、4週間前、5週間前、またはそれ以前に投与され、かつ前記癌治療と同時に投与されること、または
（f）AHCMが、少なくとも1時間、5時間、10時間、もしくは24時間；少なくとも2日、5日、10日、もしくは14日；少なくとも2週間、3週間、4週間、5週間、もしくは6週間；少なくとも2ヶ月、3ヶ月、4ヶ月、5ヶ月、もしくは6ヶ月；または少なくとも1年、2年、3年、4年、もしくは5年の期間にわたり連続的に投与されること
のうちの一つまたは複数を含む、請求項1または2記載の方法。
【請求項４】
AHCMが、
（i）アンジオテンシンII受容体遮断薬（AT1遮断薬）、
（ii）レニンアンジオテンシンアルドステロン系のアンタゴニスト（「RAASアンタゴニスト」）、
（iii）アンジオテンシン変換酵素（ACE）阻害剤、
（iv）トロンボスポンジン1（TSP-1）阻害剤、
（v）トランスフォーミング増殖因子β1（TGF-β1）阻害剤、または
（vi）結合組織増殖因子（CTGF）阻害剤
のうちの1種または複数種から選ばれる、請求項3記載の方法。
【請求項５】
AHCMが、ロサルタン（COZAAR（登録商標））、カンデサルタン（ATACAND（登録商標））、メシル酸エプロサルタン（TEVETEN（登録商標））、EXP 3174、イルベサルタン（AVAPRO（登録商標））、L158,809、オルメサルタン（BENICAR（登録商標））、サララシン、テルミサルタン（MICARDIS（登録商標））、バルサルタン（DIOVAN（登録商標））、またはそれらの誘導体のうちの1種または複数種から選ばれるAT1阻害剤である、請求項3記載の方法。
【請求項６】
AHCMがロサルタンである、請求項3記載の方法。
【請求項７】
AHCMが、アリスキレン（TEKTURNA（登録商標）、RASILEZ（登録商標））、レミキレン（Ro 42-5892）、エナルキレン（A-64662）、SPP635、またはそれらの誘導体のうちの1種または複数種から選ばれるRAASアンタゴニストである、請求項3記載の方法。
【請求項８】
AHCMが、ベナゼプリル（LOTENSIN（登録商標））、カプトプリル（CAPOTEN（登録商標））、エナラプリル（VASOTEC（登録商標））、ホシノプリル（MONOPRIL（登録商標））、リシノプリル（PRINIVIL（登録商標）、ZESTRIL（登録商標））、モエキシプリル（UNIVASC（登録商標））、ペリンドプリル（ACEON（登録商標））、キナプリル（ACCUPRIL（登録商標））、ラミプリル（ALTACE（登録商標））、トランドラプリル（MAVIK（登録商標））、またはそれらの誘導体のうちの1種または複数種から選ばれるACE阻害剤である、請求項3記載の方法。
【請求項９】
AHCMが、ABT-510、CVX-045、LSKL、またはそれらの誘導体のうちの1種または複数種から選ばれるTSP-1阻害剤である、請求項3記載の方法。
【請求項１０】
TGF-β1阻害剤が、抗TGF-β1抗体またはTGF-β1ペプチド阻害剤のうちの1種または複数種から選ばれる、請求項3記載の方法。
【請求項１１】
CTGF阻害剤が、DN-9693、FG-3019、またはそれらの誘導体のうちの1種または複数種から選ばれる、請求項3記載の方法。
【請求項１２】
AHCMが、癌治療の分散または効力を増強するのに十分な量で投与される、請求項4記載の方法。
【請求項１３】
AHCMが、対象における、コラーゲンのレベルもしくは産生の減少、腫瘍線維形成の減少、間質腫瘍輸送の増加、腫瘍灌流の改善、または腫瘍もしくは腫瘍血管系における癌治療の浸透もしくは拡散の増強、のうちの一つまたは複数を引き起こす用量で投与される、請求項4記載の方法。
【請求項１４】
AHCMが、ロサルタンであり、25〜100mg/日で投与される、請求項3記載の方法。
【請求項１５】
AHCMが、ロサルタンであり、12.5mg、25mg、50mg、または100mgの剤形で提供される、請求項3記載の方法。
【請求項１６】
AHCMが、ロサルタンであり、0.25〜17.5mg/日、0.5〜15mg/日、1.3〜12mg/日、1.5〜12mg/日、2〜12mg/日、2〜10mg/日、2〜5mg/日、2〜3mg/日の範囲の、または2mg/日の非降圧（sub-anti-hypertisive）用量で投与される、請求項3記載の方法。
【請求項１７】
AHCMが、ロサルタンであり、降圧または抗心不全のために使用される標準医療用量の1.1倍、1.5倍、1.7倍、2倍、3倍、4倍、5倍、10倍より多い用量、またはそれ以上の用量で投与される、請求項3記載の方法。
【請求項１８】
AHCMが、非降圧用量のAHCMによる第一の処置コースとして投与された後、標準高血圧用量以上のAHCMによる第二の処置コースとして投与される、請求項4記載の方法。
【請求項１９】
AHCMが、1nm、5nm、10nm、15nm、20nm、25nm、30nm、35nm、45nm、50nm、75nm、100nm、150nm、200nmより大きいが、300nmより小さい水力学的直径を有する実体として投与される、請求項4記載の方法。
【請求項２０】
AHCMが、ポリマーナノ粒子または脂質ナノ粒子として投与される、請求項19記載の方法。
【請求項２１】
癌治療が、1nm、5nm、10nm、15nm、20nm、25nm、30nm、35nm、45nm、50nm、75nm、100nm、150nm、200nmより大きいが、300nmより小さい水力学的直径を有する実体として投与される癌治療薬である、請求項4記載の方法。
【請求項２２】
癌治療薬が、ポリマーナノ粒子または脂質ナノ粒子として投与される、請求項21記載の方法。
【請求項２３】
AHCMまたは癌治療薬が、各々独立に、1nm以下もしくは0.1〜1.0nmの水力学的直径；5〜20nmもしくは5〜15nmの水力学的直径；または1nm、5nm、10nm、15nm、20nm、25nm、30nm、35nm、45nm、50nm、75nm、100nm、150nm、200nmであるが、300nmより小さい水力学的直径のサイズ範囲（nm）を有する実体として提供される、請求項4記載の方法。
【請求項２４】
対象が、
（i）高血圧症を有しないこと、
（ii）AHCM処置の開始の時点で、高血圧症のための処置をされていないこと；または
（iii）正常なもしくは低い血圧を有すること
のうちの一つまたは複数を有する、請求項4記載の方法。
【請求項２５】
対象が、癌の診断またはAHCM投薬の開始の5日以内、10日以内、30日以内、60日以内、または100日以内にAHCMを投与されていない、請求項4記載の方法。
【請求項２６】
対象が、癌治療を必要としているかまたは癌治療を検討されている、請求項4記載の方法。
【請求項２７】
対象が癌を有するか否かを決定する工程、ならびに該決定に応じてAHCMおよび癌治療を投与する工程を含む、請求項4記載の方法。
【請求項２８】
対象が、固形線維性腫瘍を有するリスクを有しているかまたは固形線維性腫瘍を有している、請求項4記載の方法。
【請求項２９】
対象が、前新生物状態を有しているかまたは癌の素因を有している、請求項28記載の方法。
【請求項３０】
癌が、膵臓癌、乳癌、結腸直腸癌、肺癌、皮膚癌、卵巣癌、前立腺癌、子宮頚癌、胃腸癌、胃癌、頭頸部癌、腎臓癌、もしくは肝臓癌、またはそれらの転移性病変のうちの1種または複数種から選ばれる、請求項4記載の方法。
【請求項３１】
AHCMが、癌治療の前におよび／または癌治療と組み合わせて投与される、請求項4記載の方法。
【請求項３２】
癌治療が、抗癌剤、手術、および／または放射線のうちの1種または複数種から選ばれる、請求項31記載の方法。
【請求項３３】
AHCMが、癌治療の少なくとも1日前、2日前、3日前、もしくは5日前；または1週間前、2週間前、3週間前、4週間前、5週間前、またはそれ以前に投与される、請求項32記載の方法。
【請求項３４】
AHCMが、対象が癌治療を受容する時間のうちの予め選択された一部の間、維持される、請求項32記載の方法。
【請求項３５】
AHCMが、癌治療が投与される期間全体の間、維持される、請求項34記載の方法。
【請求項３６】
AHCMが、少なくとも1時間、5時間、10時間、もしくは24時間；少なくとも2日、5日、10日、もしくは14日；少なくとも2週間、3週間、4週間、5週間、もしくは6週間；少なくとも2ヶ月、3ヶ月、4ヶ月、5ヶ月、もしくは6ヶ月；または少なくとも1年、2年、3年、4年、もしくは5年の期間にわたり連続的に投与される、請求項4記載の方法。
【請求項３７】
AHCMが、徐放性製剤として投与される、請求項4記載の方法。
【請求項３８】
AHCMが、経口送達、皮下送達、または静脈内連続送達のために製剤化される、請求項4記載の方法。
【請求項３９】
AHCMが、皮下ポンプ、インプラント、またはデポーを介して投与される、請求項4記載の方法。
【請求項４０】
癌治療が、
（i）ウイルス癌治療剤、抗癌治療剤の脂質ナノ粒子、抗癌治療剤のポリマーナノ粒子、癌標的に対する抗体、dsRNA剤、アンチセンスRNA剤、もしくは化学療法剤から選ばれる癌治療薬、
（ii）放射線、
（iii）手術、または
（iv）（i）〜（iii）の任意の組み合わせ
のうちの1種または複数種から選ばれる、請求項4記載の方法。
【請求項４１】
脂質ナノ粒子が、PEG化リポソームドキソルビシン（DOXIL（登録商標））またはリポソームパクリタキセル（例えば、Abraxane（登録商標））から選ばれる、請求項40記載の方法。
【請求項４２】
化学療法剤が、ゲムシタビン、シスプラチン、エピルビシン、5-フルオロウラシル、パクリタキセル、オキサリプラチン、またはロイコボリンから選ばれる、請求項40記載の方法。
【請求項４３】
癌標的に対する抗体が、HER-2/neu、HER3、VEGF、またはEGFRに対する抗体から選ばれる、請求項40記載の方法。
【請求項４４】
癌治療が、スニチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、ソラフェニブ、イコチニブ、ラパチニブ、ネラチニブ、バンデタニブ、BIBW 2992、もしくはXL-647から選ばれるチロシンキナーゼ阻害剤、またはセツキシマブ、パニツムマブ、ザルツムマブ、ニモツズマブ、ネシツムマブ、もしくはマツズマブから選ばれる抗EGFR抗体である、請求項4記載の方法。
【請求項４５】
化学療法剤が、細胞傷害剤または細胞分裂阻害剤である、請求項40記載の方法。
【請求項４６】
化学療法剤が、微小管阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤、タキサン、代謝拮抗薬、有糸分裂阻害剤、アルキル化剤、または挿入剤から選ばれる、請求項40記載の方法。
【請求項４７】
癌治療が、抗血管形成剤、血管標的薬、または血管破壊剤のうちの1種または複数種から選ばれる、請求項4記載の方法。
【請求項４８】
AHCMまたは癌治療が、経口、非経口、皮下、静脈内、直腸、筋肉内、腹腔内、鼻腔内、経皮から選ばれる全身投与、または吸入、もしくは腔内導入により、対象に投与される、請求項4記載の方法。
【請求項４９】
腫瘍サイズ；
トランスフォーミング増殖因子β1（TGFβ1）、結合組織増殖因子（CTGF）、もしくはトロンボスポンジン-1（TSP-1）のうちの1種もしくは複数種のレベルもしくはシグナリング；
腫瘍コラーゲンIレベル；
線維含量；
間質圧；
コラーゲンI、コラーゲンIII、コラーゲンIV、TGFβ1、CTGF、もしくはTSP-1から選ばれる血漿もしくは血清のバイオマーカー；
1種もしくは複数種の癌マーカーのレベル；
新たな病変の出現、代謝、低酸素発生の速度；
新たな疾患関連症状の出現；
組織量のサイズ；
疾患関連疼痛の量；
組織学的分析、小葉パターン、および／もしくは有系分裂細胞の有無；または
腫瘍侵襲性、原発腫瘍の血管新生、もしくは転移性蔓延
のうちの一つまたは複数の変化について対象をモニタリングする工程をさらに含む、請求項4記載の方法。
【請求項４９】
AHCMを含むナノ粒子を含む、薬学的組成物。
【請求項５０】
AHCMと癌治療剤とを含むナノ粒子を含む、薬学的組成物。
【請求項５１】
癌治療薬が、ウイルス癌治療剤、抗癌剤の脂質ナノ粒子、抗癌剤のポリマーナノ粒子、癌標的に対する抗体、dsRNA剤、アンチセンスRNA剤、または化学療法剤から選ばれる、請求項50記載の薬学的組成物。
【請求項５２】
ナノ粒子が、ポリマーナノ粒子または脂質ナノ粒子である、請求項49〜51のいずれか一項記載の薬学的組成物。
【請求項５３】
AHCMが、降圧または抗心不全のために使用されるAHCMの標準医療剤形に従った剤形で製剤化される、請求項49〜51のいずれか一項記載の薬学的組成物。
【請求項５４】
AHCMが、降圧または抗心不全のために使用されるAHCMの標準医療剤形の0.01倍、0.02倍、0.03倍、0.04倍、0.05倍、0.06倍、0.07倍、0.08倍、0.09倍、0.1倍、0.15倍、0.16倍、0.2倍、0.3倍、0.4倍、0.5倍、0.6倍、0.7倍より小さい剤形で製剤化される、請求項49〜51のいずれか一項記載の薬学的組成物。
【請求項５５】
AHCMが、降圧または抗心不全のために使用されるAHCMの標準医療剤形の1.1倍、1.5倍、1.7倍、2倍、3倍、4倍、5倍、10倍より大きい、またはそれ以上の剤形で製剤化される、請求項49〜51のいずれか一項記載の薬学的組成物。
【請求項５６】
AHCMが、降圧または抗心不全のために使用されるAHCMの標準医療剤形の0.01倍、0.02倍、0.03倍、0.04倍、0.05倍、0.06倍、0.07倍、0.08倍、0.09倍、0.1倍、0.15倍、0.16倍、0.2倍、0.3倍、0.4倍、0.5倍、0.6倍、0.7倍より小さい剤形で製剤化される、AHCMの剤形。
【請求項５７】
AHCMが、降圧または抗心不全のために使用されるAHCMの標準医療剤形の1.1倍、1.5倍、1.7倍、2倍、3倍、4倍、5倍、10倍より大きい、またはそれ以上の剤形で製剤化される、AHCMの剤形。
【請求項５８】
剤、例えば、診断剤またはイメージング剤の癌への接近を最適化するかまたは癌への送達を最適化する方法であって、
降圧かつ／またはコラーゲン修飾剤（「AHCM」）を対象に投与する工程；および
任意で、該対象に前記剤を投与する工程
を含み、
（a）診断剤もしくはイメージング剤が、1nm、5nm、もしくは20〜150nmより大きい水力学的直径を有すること；
（b）前記剤が、放射線剤、NMRA剤、造影剤であること；または
（c）対象が、前記剤の投与の前の少なくとも2日間、3日間、もしくは5日間、または1週間、2週間、3週間、4週間、5週間、もしくはそれ以上の間、前記剤の投与前に開始されるAHCM投与により処置されること
のうちの一つまたは複数を含む、方法。
【請求項５９】
癌または癌関連細胞を候補薬剤と接触させる工程；
前記候補薬剤の存在下または非存在下での癌細胞における変化を検出する工程
を含む、降圧かつ／またはコラーゲン修飾（AHCM）を同定する方法またはアッセイであって、
検出される変化が、活性型TGFβ、TGFβ1レベル、結合組織増殖因子（CTGF）レベル、またはコラーゲン（例えば、コラーゲン1）レベルの増加または減少のうちの一つまたは複数を含む、方法またはアッセイ。
【請求項６０】
候補薬剤が、レニンアンジオテンシンアルドステロン系のアンタゴニスト（「RAASアンタゴニスト」）、アンジオテンシン変換酵素（ACE）阻害剤、アンジオテンシンII受容体遮断薬（AT1遮断薬）、トロンボスポンジン1（TSP-1）阻害剤、トランスフォーミング増殖因子β1（TGF-β1）阻害剤、または結合組織増殖因子（CTGF）阻害剤のうちの1種または複数種から選ばれる、請求項59記載の方法またはアッセイ。
【請求項６１】
候補薬剤が、活性型TGFβ、TGFβ1レベル、結合組織増殖因子（CTGF）レベル、またはコラーゲンレベルのうちの一つまたは複数を低下させる、請求項59または60記載の方法またはアッセイ。
【請求項６２】
処置を行なった方法またはアッセイを参照値と比較する工程、および処置を行なった値と参照値との間の違いを比較する工程をさらに含む、請求項59または60記載の方法またはアッセイ。
【請求項６３】
インビトロ、インビボ、または両方の組み合わせで実施される、請求項59または60記載の方法またはアッセイ。
【請求項６４】
候補薬剤を培養培地へ添加し、活性型TGFβ、TGFβ1レベル、結合組織増殖因子（CTGF）レベル、またはコラーゲンレベルの増加または減少について条件培地を分析することにより、インビトロで候補薬剤を評価する工程を含む、請求項59または60記載の方法またはアッセイ。
【請求項６５】
候補薬剤を動物腫瘍モデルに投与する工程；および活性型TGFβ、TGFβ1レベル、結合組織増殖因子（CTGF）レベル、またはコラーゲンレベルの増加または減少について対象を分析する工程を含む、請求項59または60記載の方法またはアッセイ。
【請求項６６】
単独もしくは癌治療薬と組み合わせて癌の処置において使用するための、降圧かつ／もしくはコラーゲン修飾（AHCM）の組成物、または単独のもしくは癌治療薬と組み合わせられた降圧かつ／もしくはコラーゲン修飾（AHCM）の、癌を処置するための使用。
【請求項６７】
単独のまたは癌治療薬と組み合わせられた降圧かつ／またはコラーゲン修飾（AHCM）と、癌の処置のための使用説明書とを含む、治療キット。
【請求項６８】
単独のまたはイメージング剤と組み合わせられた降圧かつ／またはコラーゲン修飾（AHCM）と、癌の診断のための使用説明書とを含む、診断キット。
【請求項６９】
癌治療の改善された送達または効力の必要性に基づき、AHCMの受容を必要としているものとして対象を選択する工程；および
（a）前記対象にAHCMを投与する工程、または
（b）癌治療を投与する工程
のいずれかまたは両方の工程
を含む、降圧かつ／またはコラーゲン修飾剤（AHCM）を受容する対象を選択する方法であって、
AHCMが、癌治療の送達または効力を改善するのに十分な投薬量で投与される、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連する出願の相互参照
本願は、2010年11月18日出願の米国仮出願第61/415,192号；および2011年1月31日出願の米国仮出願第61/438,240号に基づく35U.S.C.§119(e)による恩典を主張する。それらの内容は各々参照によりその全体が本明細書に組み入れられる。
【０００２】
政府の援助
本発明は、国立衛生研究所により授与された助成番号PO1-CA-80124-03の下で連邦政府による資金提供を受けて作成された。米国政府は、本発明における一定の権利を有する。
【背景技術】
【０００３】
背景
生物医学研究における進歩は、前臨床環境および臨床環境の両方において、数種の新規の全身投与される分子薬剤およびナノ治療剤の導入をもたらした（Jones,D.(2007)Nat Rev Drug Discov 6,174-175（非特許文献1）；Moghimi,S.M.et al.(2005)Faseb J 19,311-330（非特許文献2））。これらの新たな剤は、腫瘍細胞に対するより大きい特異性または改善された薬力学的特性を提供する独特の標的に対して作用するが、それらの有効性は、腫瘍微小環境の特性による送達の限界を被っている（Jain,R.K.(1998)Nat Med 4,655-657（非特許文献3）；Sanhai,W.R.et al.(2008)Nat Nanotechnol 3,242-244（非特許文献4））。例えば、FDAにより認可されているPEG化リポソームドキソルビシン（DOXIL（登録商標））および複数の臨床試験が現在進行中である腫瘍退縮ウイルスは、そのサイズ（およそ100nm）が腫瘍内分散および治療的有効性を妨げている2種のナノ治療薬に相当する（Nemunaitis J,et al.(2001)J Clin Oncol 19:289-298（非特許文献5））。
【０００４】
腫瘍においては、全身投与後の薬物送達を支配する少なくとも二つの過程、即ち、組織中の血管輸送および組織への経血管輸送が、全ての治療薬のクラスについて、生理的障壁により妨げられる（Jain,R.K.& Stylianopoulos(2010)Nat Rev Clin Oncol.139（非特許文献6）；Chauhan,V.P.et al.(2009)Biophysical journal 97,330-336（非特許文献7））。これらの障壁は、特に、膵臓癌（Olive,K.P.et al.(2009)Science 324,1457-1461（非特許文献8））、結腸直腸癌（Halvorsen,T.B.& Seim,E.(1989)J Clin Pathol 42,162-166（非特許文献9））、肺癌および乳癌（Ronnov-Jessen,L.et al.(1996)Physiol Rev 76,69-125（非特許文献10））のような線維形成性腫瘍、線維性腫瘍を有する患者のための治療に影響する。線維性腫瘍は、典型的には、密なコラーゲンネットワークを有し、そのため、間質における小さい線維間隔が、10ナノメートルより大きい粒子の移動を遅らせる（Netti PA,et al.(2000)Cancer Res 60:2497-2503（非特許文献11）；Pluen A,et al.(2001)Proc Natl Acad Sci USA 98:4628-4633（非特許文献12）；Ramanujan S,et al.(2002)Biophys J 83:1650-1660（非特許文献13）；およびBrown E,et al.(2003)Nat Med 9:796-800（非特許文献14））。これらの障壁は、標的癌細胞に到達する薬物の量を限定し、低い薬物有効性をもたらす。
【０００５】
現在、ナノ治療薬および低分子量薬物についてのこれらの送達障壁を克服するためのアプローチは、限定的である。従って、新たな癌治療、特に、ナノ治療薬（例えば、脂質ナノ粒子またはポリマーナノ粒子およびウイルス）、タンパク質薬物、核酸薬物、ならびに低分子化学療法剤を含む癌治療の送達および分散を増強する新たな剤を同定する必要が存在する。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Jones,D.(2007)Nat Rev Drug Discov 6,174-175
【非特許文献２】Moghimi,S.M.et al.(2005)Faseb J 19,311-330
【非特許文献３】Jain,R.K.(1998)Nat Med 4,655-657
【非特許文献４】Sanhai,W.R.et al.(2008)Nat Nanotechnol 3,242-244
【非特許文献５】Nemunaitis J,et al.(2001)J Clin Oncol 19:289-298
【非特許文献６】Jain,R.K.& Stylianopoulos(2010)Nat Rev Clin Oncol.139
【非特許文献７】Chauhan,V.P.et al.(2009)Biophysical journal 97,330-336
【非特許文献８】Olive,K.P.et al.(2009)Science 324,1457-1461
【非特許文献９】Halvorsen,T.B.& Seim,E.(1989)J Clin Pathol 42,162-166
【非特許文献１０】Ronnov-Jessen,L.et al.(1996)Physiol Rev 76,69-125
【非特許文献１１】Netti PA,et al.(2000)Cancer Res 60:2497-2503
【非特許文献１２】Pluen A,et al.(2001)Proc Natl Acad Sci USA 98:4628-4633
【非特許文献１３】Ramanujan S,et al.(2002)Biophys J 83:1650-1660
【非特許文献１４】Brown E,et al.(2003)Nat Med 9:796-800
【発明の概要】
【０００７】
本発明は、高血圧（高血圧症）の処置のために認可されたアンジオテンシンII受容体アンタゴニスト薬物であるロサルタンが、癌治療薬の送達および効力を改善することの発見に、一部分、基づく。本発明者らは、とりわけ、ロサルタンが、固形腫瘍の間質マトリックスであるコラーゲンを正常化し、高分子量化学療法薬、例えば、ナノ治療薬を含む化学療法薬の分散および／または浸透を容易にすることを発見した。例えば、ロサルタンは、乳癌生検材料から単離された癌関連線維芽細胞（CAF）におけるコラーゲンIレベルを低下させ（例えば、コラーゲン産生を低下させ）、マウスにおけるヒトの乳房、膵臓、および皮膚の腫瘍の線維形成性モデルにおいて基質コラーゲンの用量依存性の低下を引き起こした。ロサルタンは、ナノ粒子（例えば、腫瘍退縮単純ヘルペスウイルス（HSV）およびPEG化リポソームドキソルビシン（DOXIL（登録商標）））の分散、治療効力、および／または浸透も改善した。本発明者らは、ロサルタンが、血管の除圧および血管正常化を容易にし、腫瘍灌流および低分子量化学療法薬の送達を改善し、従って、放射線および化学療法薬の治療効果を増強することも発見した。
【０００８】
従って、治療薬（例えば、癌治療薬）の送達および／または効力を改善するための方法および組成物が、開示される。単一の剤として、または治療剤（例えば、大きいナノ治療薬から低分子量化学療法薬および／もしくは酸素ラジカルまでの範囲のサイズの癌治療剤）と組み合わせて、降圧かつ／またはコラーゲン修飾剤を対象に投与することにより、癌（例えば、線維形成性腫瘍のような固形腫瘍）を処置するかまたは防止する方法および組成物が、開示される。
【０００９】
従って、一つの局面において、本発明は、対象における過剰増殖性障害（例えば、癌）を処置するかもしくは防止する方法、または治療（例えば、癌治療）の対象への送達および／もしくは効力を改善する方法を特色とする。方法は、対象における障害（例えば、癌もしくは腫瘍）を処置するかもしくは防止するか、または対象へ提供された治療（例えば、癌治療）の送達および／もしくは効力を改善するのに十分な条件、例えば、AHCMおよび抗癌剤の投薬量の条件の下で、降圧かつ／またはコラーゲン修飾剤（本明細書中、「AHCM」または「AHCM剤」と呼ばれる）を対象に投与する工程を含み；治療（例えば、癌治療）を投与する工程を任意で含む。
【００１０】
一つの態様において、方法は、以下のうちの一つまたは複数を含む：
（a）治療（例えば、癌治療）の改善された送達および／または効力の必要性に基づき、AHCMの受容を必要としているものとして対象が選択されるかまたは同定されること；
（b）約1nm、5nm、10nm、15nm、20nm、25nm、30nm、35nm、45nm、50nm、75nm、100nm、150nm、200nmより大きいが、300nmより小さい水力学的直径を有する実体、例えば、ナノ粒子として、AHCM、治療（例えば、癌治療）、または両方が投与されること；
（c）対象が、本明細書に記載される高血圧症のための処置（または処置の欠如）の履歴を有すること、例えば、対象が、癌の診断またはAHCM投薬の開始の5日以内、10日以内、30日以内、60日以内、または100日以内に、ある用量（例えば、対象の血圧を実質的に低下させるのに十分な用量、または非降圧（sub-anti-hypertentive）用量のいずれか）のAHCM、例えば、本明細書中に挙げられたAHCMまたは任意のAHCMを投与されていないこと。一つの態様において、対象は、AHCMの投与の前に高血圧症でないかまたは高血圧症であった；
（d）本明細書に記載された投薬計画により対象が処置されること。例えば、AHCM投与は癌治療の投与の開始の前に開始され、例えば、癌治療の少なくとも1日前、2日前、3日前、もしくは5日前、または1週間前、2週間前、3週間前、4週間前、5週間前、もしくはそれ以前に開始される（例えば、AHCMは、癌治療の少なくとも2週間前に投与される）；
（e）本明細書に記載された投薬計画に従い、AHCMおよび癌治療が提供されること。例えば、非降圧用量のAHCMによる第一の処置コースが提供された後、例えば、標準降圧用量以上である用量で、AHCMによる第二の高用量処置コースが提供される（例えば、第二コースは、抗癌治療の昇圧効果に対抗するであろうタイムコースで投与される）；
（f）少なくとも1時間、5時間、10時間、もしくは24時間；少なくとも2日、5日、10日、もしくは14日；少なくとも2週間、3週間、4週間、5週間、もしくは6週間；少なくとも2ヶ月、3ヶ月、4ヶ月、5ヶ月、もしくは6ヶ月；または少なくとも1年、2年、3年、4年、もしくは5年の期間にわたり実質的に連続的にAHCMが投与されること；
（g）治療、例えば、癌治療と逐次的にかつ／または同時にAHCMが投与されること。AHCMおよび治療は、任意の順序で（同一のまたは異なる投薬量で）投与され得、治療とオーバーラップしてもよい。一つの態様において、AHCMは、（例えば、工程（d）に記載されるように）治療の前に投与される。他の態様において、AHCMは、治療と逐次的にかつ同時に投与される（例えば、AHCMは（例えば、工程（d）に記載されるように）治療の前に投与され、かつ治療と同時に投与される）。さらに他の態様において、治療が最初に投与され、治療の開始後にAHCMが投与される。AHCMおよび治療の投与が同時である態様において、AHCMおよび治療の投与は、臨床的に適切に、例えば、（i）組み合わせ治療として、（ii）AHCMもしくは治療のいずれかによる治療の期間を含み、または（iii）任意の順序での（i）および（ii）の組み合わせとして、継続され得る。
【００１１】
一つの態様において、AHCMは、治療、例えば、癌治療の分散または効力を改変する（例えば、増強する）のに十分な量で投与される。いくつかの態様において、AHCMは、単独で腫瘍増大を阻害するかまたは防止するのには不十分であるが、治療、例えば、癌治療の分散または効力を改変する（例えば、増強する）のに十分な量で投与される。
【００１２】
一つの態様において、AHCMは、対象における、コラーゲンのレベルもしくは産生の減少、腫瘍線維形成の減少、間質腫瘍輸送の増加、腫瘍灌流の改善、または腫瘍もしくは腫瘍血管系における癌治療薬の浸透もしくは拡散の増強、のうちの一つまたは複数を引き起こす用量で投与される。
【００１３】
一つの態様において、AHCMは、
アンジオテンシンII受容体遮断薬（AT1遮断薬）、
レニンアンジオテンシンアルドステロン系のアンタゴニスト（「RAASアンタゴニスト」）、
アンジオテンシン変換酵素（ACE）阻害剤、
トロンボスポンジン1（TSP-1）阻害剤、
トランスフォーミング増殖因子β1（TGFβ1）阻害剤、
結合組織増殖因子（CTGF）阻害剤、または
これらの2種以上の組み合わせ
のうちの1種または複数種から選ばれる。
【００１４】
前後関係がそうでないことを記載しない限り、「AHCM」という用語は、本明細書に記載される1種または複数種の剤をさすことができる。
【００１５】
方法は、単独で、または1種もしくは複数種の癌治療と組み合わせて、1種、2種、3種、またはそれ以上のAHCMを含み得る。
【００１６】
一つの態様において、AHCMは、RAASアンタゴニストである。一態様において、RAASアンタゴニストは、アリスキレン（TEKTURNA（登録商標）、RASILEZ（登録商標））、レミキレン（Ro 42-5892）、エナルキレン（A-64662）、SPP635、またはそれらの誘導体のうちの1種または複数種から選ばれる。
【００１７】
もう一つの態様において、AHCMは、AT1阻害剤である。一態様において、AT1遮断薬は、ロサルタン（COZAAR（登録商標））、カンデサルタン（ATACAND（登録商標））、メシル酸エプロサルタン（TEVETEN（登録商標））、EXP 3174、イルベサルタン（AVAPRO（登録商標））、L158,809、オルメサルタン（BENICAR（登録商標））、サララシン、テルミサルタン（MICARDIS（登録商標））、バルサルタン（DIOVAN（登録商標））、またはそれらの誘導体のうちの1種または複数種から選ばれる。
【００１８】
さらにもう一つの態様において、AHCMは、ACE阻害剤である。一態様において、ACE阻害剤は、ベナゼプリル（LOTENSIN（登録商標））、カプトプリル（CAPOTEN（登録商標））、エナラプリル（VASOTEC（登録商標））、ホシノプリル（MONOPRIL（登録商標））、リシノプリル（PRINIVIL（登録商標）、ZESTRIL（登録商標））、モエキシプリル（UNIVASC（登録商標））、ペリンドプリル（ACEON（登録商標））、キナプリル（ACCUPRIL（登録商標））、ラミプリル（ALTACE（登録商標））、トランドラプリル（MAVIK（登録商標））、またはそれらの誘導体のうちの1種または複数種から選ばれる。
【００１９】
さらにもう一つの態様において、AHCMは、TSP-1阻害剤である。一態様において、TSP-1阻害剤は、ABT-510、CVX-045、LSKL、またはそれらの誘導体のうちの1種または複数種から選ばれる。
【００２０】
一つの態様において、AHCMは、TGFβ1阻害剤、例えば、抗TGFβ1抗体、TGFβ1ペプチド阻害剤である。ある種の態様において、TGFβ1阻害剤は、CAT-192、フレソリムマブ（GC 1008）、LY2157299、ペプチド144（P144）、SB-431542、SD-208、米国特許第7,846,908号および米国特許出願公開第2011/0008364号に記載された化合物、またはそれらの誘導体のうちの1種または複数種から選ばれる。
【００２１】
さらにもう一つの態様において、AHCMは、CTGF阻害剤である。ある種の態様において、CTGF阻害剤は、DN-9693、FG-3019、および欧州特許出願公開第1839655号、米国特許第7,622,454号に記載された化合物、またはそれらの誘導体のうちの1種または複数種から選ばれる。
【００２２】
本明細書に記載された例示的なAHCMは、限定的ではなく、例えば、本明細書に記載されたAHCMの誘導体が、本明細書に記載された方法において使用されてもよい。
【００２３】
AHMCの投薬量および剤形
本発明の方法は、治療（例えば、癌治療）を強化するためにAHCMを使用する。
【００２４】
一つの態様において、AHCMは、標準医療用量に相当する用量で投与される。AHCMの標準医療用量は、当技術分野において入手可能である。例えば、AHCMがAT1阻害剤、ロサルタンである場合、ヒトにおいて降圧のために使用される標準医療用量は、約25〜100mg/日である。本発明の方法において、ロサルタンは、単独で、または本明細書に記載された癌治療と組み合わせて、1日スケジュールで（1日1回または2回）、経口投与され得る。ロサルタンは、約12.5mg、25mg、50mg、または100mgの剤形（例えば、経口錠）で提供され得る。
【００２５】
ヒトにおいて降圧または抗心不全のために使用されるその他のAT1阻害剤の医療用量の例示的な標準は、以下の通りである：4〜32mg/日のカンデサルタン（ATACAND（登録商標））（例えば、4mg、8mg、16mg、または32mgのカンデサルタンを含有している経口投与用の剤形で入手可能）；400〜800mg/日のメシル酸エプロサルタン（TEVETEN（登録商標））（例えば、400mgまたは600mgのエプロサルタンを含有している経口投与用の剤形で入手可能）；150〜300mg/日のイルベサルタン（AVAPRO（登録商標））（例えば、150mgまたは300mgのイルベサルタンを含有している経口投与用の剤形で入手可能）；20〜40mg/日のオルメサルタン（BENICAR（登録商標））（5mg、20mg、または40mgのオルメサルタンを含有している経口投与用の剤形で入手可能）；20〜80mg/日のテルミサルタン（MICARDIS（登録商標））（例えば、20mg、40mg、または80mgのテルミサルタンを含有している経口投与用の剤形で入手可能）；および80〜320mg/日のバルサルタン（DIOVAN（登録商標））（例えば、40mg、80mg、160mg、または320mgのバルサルタンを含有している経口投与用の剤形で入手可能）。
【００２６】
一態様において、AHCMは、非降圧用量（例えば、高血圧症対象に投与された時に平均動脈血圧に対して有意な効果を有しない用量；または標準医療降圧用量より少ない用量）で投与される。一態様において、AHCMは、例えば、その投薬量での予め選択された回数の投与の後、例えば、所定の投薬量についての定常状態血漿レベルで、測定されるような、対象の平均動脈血圧を実質的に低下させない量で投与される。一態様において、AHCMは、1％未満、5％未満、10％未満、15％未満、20％未満、25％未満、30％未満、35％未満、40％未満、45％未満、50％未満、対象における平均動脈血圧を低下させる用量で、少なくとも1回、投与される。一態様において、AHCMは、そのAHCMについての標準医療降圧用量により引き起こされる低下の1％未満、5％未満、10％未満、15％未満、20％未満、25％未満、30％未満、35％未満、40％未満、45％未満、50％未満、60％未満、70％未満、80％未満、90％未満、血圧を低下させる用量で投与される。一態様において、AHCMは、対象の血圧を正常範囲、例えば、約120収縮期および約80拡張期にするであろうそのAHCMの用量、または対象の血圧を120+/-5収縮期および80+/-5拡張期の範囲にするであろう用量の1％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、60％、70％、80％、90％より少ない用量で投与される。
【００２７】
一態様において、AHCMは、降圧または抗心不全のために使用される標準医療用量より少ない用量（例えば、降圧または抗心不全のために使用される標準医療用量の0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7より少ない用量）で投与される。AHCMの標準医療用量は、当技術分野において入手可能である。例えば、AHCMがAT1阻害剤、ロサルタンであり、標準医療用量が約25〜100mg/日である場合、非最適降圧用量は、0.25〜17.5、0.5〜15、1.3〜12、1.5〜12、2〜12、2〜10、2〜5、2〜3mg/日の範囲、典型的には、2mg/日であり得る。一つの態様において、AHCMは、ロサルタンであり、25mg/日、20mg/日、15mg/日、10mg/日、5mg/日、4mg/日、3mg/日、2mg/日、1mg/日より少ない用量で投与される。ロサルタンは、単独で、または本明細書に記載された癌治療薬と組み合わせて、2〜3mg/日の非降圧用量で、一日スケジュールで（1日1回または2回）、経口投与され得る。その他のAT1阻害剤についての医療用量の例示的な標準は、以下の通りである：4〜32mg/日のカンデサルタン（ATACAND（登録商標））、400〜800mg/日のメシル酸エプロサルタン（TEVETEN（登録商標））、150〜300mg/日のイルベサルタン（AVAPRO（登録商標））、20〜40mg/日のオルメサルタン（BENICAR（登録商標））、20〜80mg/日のテルミサルタン（MICARDIS（登録商標））、および80〜320mg/日のバルサルタン（DIOVAN（登録商標））。一態様において、AHCMは、医療降圧用量または医療抗心不全用量の標準より少ない用量（例えば、カンデサルタン、エプロサルタン、イルベサルタン、オルメサルタン、テルミサルタン、およびバルサルタンのような他のAT1阻害剤について医療降圧用量または医療抗心不全用量の標準の0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7より少ない用量）で投与される。ある種の態様において、AHCMは、医療降圧剤形または医療抗心不全剤形の標準より小さい剤形（例えば、標準医療剤形の0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.15、0.16、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7より小さい剤形）で製剤化される。例えば、AHCMがロサルタンである場合、剤形は、約0.5mg〜11mg；1mg〜10mg；1〜5mg、または1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg、もしくは10mgであり得る。いくつかの態様において、ロサルタンは、12.5mg未満、例えば、約0.1mg、約0.2mg、約0.3mg、約0.4mg、約0.5mg、約0.6mg、約0.7mg、約0.8mg、約0.9mg、約1mg、約2mg、約3mg、約4mg、約5mg、約6mg、約7mg、約8mg、約9mg、約10mg、約11mg、または約12mgの剤形（例えば、経口錠）で提供され得る。
【００２８】
一つの態様において、AHCMは、錠剤（例えば、経口錠）として製剤化される。他の態様において、AHCMは、他の投与経路、例えば、皮下投与または静脈内投与のために製剤化される。
【００２９】
いくつかの態様において、AHCMの非降圧用量、または降圧もしくは抗心不全のために使用される標準医療用量より少ないAHCMの用量は、単独で対象に投与された場合に、腫瘍の増大または進行を阻害するかまたは防止するのに不十分な用量であり得る。
【００３０】
さらにもう一つの態様において、AHCMは、降圧または抗心不全のために使用される標準医療用量より多い用量（例えば、降圧または抗心不全のために使用される標準医療用量の1.1倍、1.5倍、1.7倍、2倍、3倍、4倍、5倍、10倍より多い用量、またはそれ以上の用量）で投与される。AHCMの標準医療用量は、当技術分野において入手可能であり；そのうちのいくつかが本明細書において例示される。
【００３１】
他の態様において、AHCMは、医療降圧剤形または医療抗心不全剤形の標準より大きい剤形（例えば、標準医療剤形の1.1倍、1.5倍、1.7倍、2倍、3倍、4倍、5倍、10倍より大きい、またはそれ以上の剤形）で製剤化される。AHCMの標準医療剤形は、当技術分野において入手可能であり；そのうちのいくつかが本明細書において例示される。
【００３２】
いくつかの態様において、医療降圧用量または医療抗心不全用量の標準と比較可能であるかまたはそれより多いAHCMの用量は、単独で対象に投与された場合に、腫瘍の増大または進行を阻害するかまたは防止するのに不十分な用量であり得る。
【００３３】
他の態様において、抗癌剤は、参照、例えば、添付文書上の投薬量、標準医療投薬量、または最大耐用量（MTD）と比較して、より多い投薬量で、またはより高い抗癌剤のレベルをもたらす計画で投与される。
【００３４】
ある種の態様において、抗癌剤は、参照、例えば、添付文書上の投薬量、標準医療投薬量、またはMTDと比較して、より少ない投薬量で、またはより低い抗癌剤のレベルをもたらす計画で投与される。いくつかの態様において、抗癌剤は、単独で投与された時には腫瘍の増大または進行を阻害するかまたは防止するのに有効でないが、AHCMと組み合わせて投与された時には腫瘍の増大または進行を阻害するかまたは防止するのに十分な量で、投与される。
【００３５】
いくつかの態様において、癌治療または癌治療薬は、AHCMと組み合わせて投与される時、AHCMの非存在下で使用されるであろう最低用量より少ない用量で、対象における癌を処置するかまたは防止するため、対象に投与される。
【００３６】
いくつかの態様において、AHCM剤および癌治療または癌治療薬の両方が対象に投与される時、降圧かつ／またはコラーゲン修飾剤の用量は、高血圧症関連障害または心不全を処置するために使用されるであろう最低用量より少ない用量であり得、癌治療または癌治療薬の用量は、対象における癌を処置するかまたは防止するためにAHCMの非存在下で使用されるであろう最低用量より少ない用量であり得る。
【００３７】
いくつかの態様において、対象に投与される癌治療または癌治療薬の用量は、癌を有する患者を処置するために単独で使用されるであろう最低用量より少なく、アジュバントとして対象に投与されるAHCM剤の用量は、癌を処置するために単独で使用されるであろう最低用量より少なくてもよい。そのような態様において、アジュバントとして対象に投与されるAHCM剤の用量は、非降圧用量であってもよいし、または高血圧症もしくは心不全の処置のための標準医療用量と比較可能であるかもしくはそれより多くてもよい。
【００３８】
いくつかの態様において、対象に投与される癌治療または癌治療薬の用量は、癌を有する患者を処置するためにAHCMの非存在下で使用されるであろう最低用量より少なく、アジュバントとして対象に投与されるAHCM剤の用量は、癌を処置するために単独で使用されるであろう最低用量より少ないが、癌治療の効力または癌治療薬の腫瘍への送達を改善するのに十分なものである。そのような態様において、アジュバントとして対象に投与されるAHCM剤の用量は、非降圧用量であってもよいし、または高血圧症もしくは心不全の処置のための標準医療用量と比較可能であるかもしくはそれより多くてもよい。
【００３９】
処置のための剤、例えば、抗癌剤および／またはAHCMの最低用量を決定するための方法は、当業者に周知である。例えば、熟練した当業者は、例えば、AHCMおよび／または抗癌剤の異なる用量を動物に投与し、対照と比較して腫瘍増大をモニタリングすることにより、特定の型の癌に対応する動物モデルにおいて、処置のために有効なAHCMおよび／または抗癌剤の最低用量を決定することができる。対照は、単独で（即ち、AHCMの非存在下で）抗癌剤により処置された動物であり得る。
【００４０】
AHCMおよび治療（例えば、癌治療）は、本明細書に記載されるように、組み合わせて、例えば、逐次的にかつ／または同時に、投与され得る。AHCMおよび治療は、任意の順序で（同一のもしくは異なる投薬量で）投与され得、かつ／または治療とオーバーラップしてもよい。一つの態様において、AHCMは治療の前に投与される。他の態様において、AHCMは治療と逐次的にかつ同時に投与される（例えば、AHCMは、治療の前に投与され、かつ治療と同時に投与される）。さらに他の態様において、癌治療が最初に投与され、AHCMが癌治療の開始の後に投与される。AHCMおよび治療の投与が同時である態様において、AHCMおよび癌治療の投与は、臨床的に適切に（i）組み合わせ治療として、（ii）AHCMもしくは癌治療のいずれかによる治療の期間を含み、または（iii）任意の順序での（i）および（ii）の組み合わせとして、継続され得る。
【００４１】
AHCMの投与は、実質的に連続的であり得る。例えば、AHCMの投与は、少なくとも1時間、5時間、10時間、24時間；2日、5日、10日、14日、またはそれ以上の期間にわたり実質的に連続的であり得る。
【００４２】
他の態様において、AHCMの投与は断続的であってもよく、例えば、治療コース中に、予め定められた間隔でギャップを有していてもよい。ある種の態様において、単独で、または治療（例えば、癌治療）と組み合わせて、2種以上の用量のAHCMが投与される。一つの態様において、AHCMは、治療コース中、非最適降圧用量および降圧用量で投与される。例えば、治療（例えば、癌治療）（例えば、平均動脈血圧を増加させる抗癌剤による処置、例えば、抗血管形成薬（例えば、Avastin、スニチニブ、またはソラフェニブ）による処置）の前にまたはその時点で、非最適降圧用量のAHCMを投与し；次いで、第二の降圧用量のAHCMを投与することができる。
【００４３】
治療実体のサイズ
本明細書に記載された方法は、使用または選択される処置モダリティの範囲、例えば、治療実体のサイズの、増強された柔軟性を可能にする。従って、一つの態様において、AHCMは、約1nm、5nm、10nm、100nm、500nm、または1,000nmより大きい水力学的直径を有する実体として投与される。例えば、AHCMは、タンパク質、例えば、抗体であり得る。AHCMは、低分子治療薬またはタンパク質、例えば、抗体としてのAHCMを含む、ナノ粒子、例えば、ポリマーナノ粒子またはリポソームとして投与されてもよい。
【００４４】
一態様において、癌治療は、癌治療薬（本明細書中、「抗癌剤」とも呼ばれる）であるか、または第二の治療剤は、約1nm、5nm、10nm、20nm、50nm、75nm、100nm、150nm、200nm、500nm、もしくは1,000nmより大きい水力学的直径を有する実体として投与される。例えば、抗癌剤は、タンパク質、例えば、抗体であり得る。抗癌剤は、低分子治療薬（即ち、約1nm以下の水力学的直径を有する分子）またはタンパク質、例えば、抗体としての抗癌剤を含む、ナノ粒子、例えば、ポリマーナノ粒子またはリポソームとして投与されてもよい。
【００４５】
一態様において、AHCMは、約1nmより大きい（例えば、約1nm、5nm、10nm、20nm、50nm、75nm、100nm、150nm、200nm、500nm、または1,000nmより大きい）水力学的直径を有する実体として投与され、抗癌剤は、約1nm以下の水力学的直径を有する実体として投与される。一つの態様において、AHCMは化学療法剤を含まない実体に存在する。AHCMは、長期放出のため、例えば、数時間、数日、数週間、数ヶ月、または数年にわたる実質的に連続的な放出のための長期放出型製剤へと製剤化されてもよい。
【００４６】
一態様において、AHCMは、約1nm以下の水力学的直径を有する実体として投与され、抗癌剤は、約1nmより大きい（例えば、約1nm、5nm、10nm、20nm、50nm、75nm、100nm、150nm、200nm、500nm、または1,000nmより大きい）水力学的直径を有する実体として投与される。
【００４７】
一態様において、AHCMは、約1nm以下の水力学的直径を有する実体として投与され、抗癌剤は、約1nm未満の水力学的直径を有する実体として投与される。
【００４８】
一態様において、AHCMは、約1nmより大きい（例えば、約1nm、5nm、10nm、20nm、50nm、75nm、100nm、150nm、200nm、500nm、または1,000nmより大きい）水力学的直径を有する実体として投与され、抗癌剤は、約1nmより大きい（例えば、約1nm、5nm、10nm、20nm、50nm、75nm、100nm、150nm、200nm、500nm、または1,000nmより大きい）水力学的直径を有する実体として投与される。AHCMと抗癌剤とは、別々の実体にあってもよいし、または同一の実体にあってもよい。例えば、別々の実体として提供する場合、AHCMを第一のナノ粒子として提供し、抗癌剤を第二のナノ粒子として提供することができる（例えば、第二のナノ粒子が、第一のナノ粒子と異なる構造的特性（例えば、サイズもしくは組成）または機能的特性（例えば、放出動力学もしくは薬力学的特性）を有する場合）。あるいは、AHCMおよび抗癌剤は、同一の実体で、例えば、同一のナノ粒子で提供されてもよい。
【００４９】
一態様において、AHCMは、1nm以下または2nm以下；2〜20nm、10〜25nm、20〜40nm、40nm、50〜150nm；10〜100nm、15〜100nm、20〜100nm、25〜100nm、35〜100nm、40〜100nm、45〜100nm、50〜100nm；10〜200nm、15〜200nm、20〜200nm、25〜200nm、35〜200nm、40〜200nm、45〜200nm、50〜200nm；10〜500nm、15〜500nm、20〜500nm、25〜500nm、35〜500nm、40〜500nm、45〜500nm、50〜500nm、75〜500nm、100〜500nm、150〜500nm、200〜500nm、300〜500nm；および10〜1000nm、15〜1000nm、20〜1000nm、25〜1000nm、35〜1000nm、40〜1000nm、45〜1000nm、50〜1000nm、75〜1000nm、100〜1000nm、150〜1000nm、200〜1000nm、300〜1000nm；または10nm、15nm、20nm、25nm、35nm、45nm、50nm、75nm、100nm、150nm、もしくは200nmの水力学的直径を有する治療実体から選択される。
【００５０】
一態様において、AHCMは、低分子治療薬であるか；タンパク質、例えば、抗体であるか；またはナノ粒子で提供される。
【００５１】
一態様において、抗癌剤または第二の治療剤は、1nm以下または2nm以下；2〜20nm、10〜25nm、20〜40nm、40nm、50〜150nm；10〜100nm、15〜100nm、20〜100nm、25〜100nm、35〜100nm、40〜100nm、45〜100nm、50〜100nm；10〜200nm、15〜200nm、20〜200nm、25〜200nm、35〜200nm、40〜200nm、45〜200nm、50〜200nm；10〜500nm、15〜500nm、20〜500nm、25〜500nm、35〜500nm、40〜500nm、45〜500nm、50〜500nm、75〜500nm、100〜500nm、150〜500nm、200〜500nm、300〜500nm；および10〜1000nm、15〜1000nm、20〜1000nm、25〜1000nm、35〜1000nm、40〜1000nm、45〜1000nm、50〜1000nm、75〜1000nm、100〜1000nm、150〜1000nm、200〜1000nm、300〜1000nm；または10nm、15nm、20nm、25nm、35nm、45nm、50nm、75nm、100nm、150nm、もしくは200nmの水力学的直径を有する治療実体から選択される。
【００５２】
一態様において、抗癌剤は、1nm以下の水力学的直径を有する低分子治療薬であるか；タンパク質、例えば、抗体であるか；またはナノ粒子で提供される。
【００５３】
一態様において、AHCMまたは抗癌剤または第二の治療剤は、各々独立に、以下のサイズ範囲（nm）を有する実体として提供され得る：1nm以下または0.1〜1.0nmの水力学的直径、例えば、典型的な低分子のもの；5〜20nmもしくは5〜15nmの水力学的直径、例えば、タンパク質、例えば、抗体のもの；または10〜5,000nm、20〜1,000nm、10〜500nm、10〜200nm、10〜150nm、もしくは10〜100nm、10〜25nm、20〜40nm、40nm、50〜150nm；10〜100nm、15〜100nm、20〜100nm、25〜100nm、35〜100nm、40〜100nm、45〜100nm、50nm〜100nm；10〜200nm、15〜200nm、20〜200nm、25〜200nm、35〜200nm、40〜200nm、45〜200nm、50nm〜200nm；10〜500nm、15〜500nm、20〜500nm、25〜500nm、35〜500nm、40〜500nm、45〜500nm、50〜500nm、75〜500nm、100〜500nm、150〜500nm、200〜500nm、300〜500nm；および10〜1000nm、15〜1000nm、20〜1000nm、25〜1000nm、35〜1000nm、40〜1000nm、45〜1000nm、50〜1000nm、75〜1000nm、100〜1000nm、150〜1000nm、200〜1000nm、300nm〜1000nm；または10nm、15nm、20nm、25nm、35nm、45nm、50nm、75nm、100nm、150nm、もしくは200nmの水力学的直径、例えば、典型的なナノ粒子の範囲。
【００５４】
対象
本明細書に記載された方法は、本明細書において定義された特徴または必要性を有する対象を処置するために使用され得る。態様において、対象または対象のための処置は、本明細書に記載された特徴に基づき選択される。一つの態様において、本明細書に記載された方法は、患者および治療の最適化された選択を可能にする。
【００５５】
いくつかの態様において、対象は、本明細書に記載された方法の任意の局面に供される前に選択または同定され得る。
【００５６】
一つの態様において、対象は、治療の最適化に基づき、例えば、治療（例えば、癌治療）の改善された送達および／または効力の必要性に基づき、AHCMの受容を必要としているものとして選択または同定される。
【００５７】
一つの態様において、対象は、AHCM処置の開始の時点で、またはAHCM投与のための患者の選択の時点で、高血圧症を有していないか、または高血圧症のため処置されていない。
【００５８】
一態様において、対象、例えば、患者は、癌の診断またはAHCM投薬の開始の5日以内、10日以内、30日以内、60日以内、または100日以内に、AHCM、例えば、本明細書に挙げられたAHCMまたは任意のAHCMの用量を投与されていない。
【００５９】
一態様において、対象、例えば、正常なまたは低い血圧を有する対象は、AHCMを必要としていることに基づき、選択または同定され、例えば、治療の最適化に基づき、例えば、治療（例えば、癌治療）の改善された送達および／または効力の必要性に基づき、AHCMの受容を必要としているものとして選択または同定される。
【００６０】
いくつかの態様において、癌治療の改善された送達もしくは効力、または治療の最適化の必要性に基づく、AHCMの受容を必要としている対象は、単独の癌治療に対して部分的に応答するかまたは応答しない対象である。
【００６１】
一態様において、AHCMは、癌処置を最適化する能力、例えば、癌治療の送達および／または効力を改善する能力に基づき、対象の処置のために選択される。
【００６２】
一態様において、処置される対象は、高血圧症患者ではなく、例えば、高血圧症の病歴を有していないか、または降圧剤により処置されたことがない。一つの態様において、処置される対象は、正常なまたは低い平均動脈血圧を有している。他の態様において、処置される対象は、降圧治療を受けたことがないか、または降圧治療により処置されていない。
【００６３】
一つの態様において、対象は癌治療を必要としている。もう一つの態様において、対象は、抗癌治療（例えば、本明細書に記載された抗癌治療薬のいずれかによる処置）を必要としているかまたは抗癌治療が検討されている。ある種の態様において、方法は、対象が癌（例えば、固体癌または線維性癌）を有するか否かを決定する工程、ならびに、該決定に応じて、AHCMおよび抗癌剤を投与する工程を含む。
【００６４】
他の態様において、対象は、癌を発症するかまたは再発を有するリスクを有し、例えば、前新生物または癌の遺伝学的素因を有する対象（例えば、BRCA1変異を有する対象；またはアジュバント環境で（例えば、タモキシフェンにより）処置されている乳癌患者）である。
【００６５】
他の態様において、対象は、早期癌、またはより進行性の（例えば、中程度の）もしくは転移性の癌を有する。
【００６６】
一つの態様において、対象は、膵臓癌（例えば、膵臓腺癌）、乳癌、結腸直腸癌、肺癌（例えば、小細胞肺癌もしくは非小細胞肺癌）、皮膚癌、卵巣癌、前立腺癌、子宮頚癌、胃腸癌（例えば、カルチノイドもしくは基質性）、胃癌、頭頸部癌、腎臓癌、もしくは肝臓癌、またはそれらの転移性病変のうちの1種または複数種から選ばれる、固形線維性腫瘍を有する。他の態様において、対象は、過剰増殖癌状態（例えば、良性、前悪性、または悪性の状態）を有する。対象は、障害を有するリスクを有する者、例えば、障害に罹患した親類を有する対象、または障害のリスクに関連した遺伝形質を有する対象であり得る。一つの態様において、対象は、症候性であってもよいしまたは無症候性であってもよい。一態様において、対象は、発癌性遺伝子または発癌性遺伝子産物の改変を保持している。一態様において、対象は、癌治療（例えば、同一のまたは他の抗癌剤、手術、および／または放射線）を受けている患者である。一態様において、対象は、癌治療（例えば、他の抗癌剤、手術、および／または放射線）を受けたことがある患者である。一つの態様において、対象は、癌治療により処置されたことがない。
【００６７】
一つの態様において、対象は、転移性癌、例えば、本明細書に開示された癌（膵臓癌（例えば、膵臓腺癌）、乳癌、結腸直腸癌、肺癌（例えば、小細胞肺癌もしくは非小細胞肺癌）、皮膚癌、卵巣癌、または肝臓癌のうちの1種または複数種）の転移性型を有する患者である。
【００６８】
一つの態様において、対象は、処置に対して耐性の癌または過剰増殖性障害を有する患者である。
【００６９】
いくつかの態様において、本明細書中の方法または薬学的組成物に供されるために選択される対象は、腎疾患または腎臓関連疾患を有していない。
【００７０】
一つの態様において、処置される対象は、哺乳動物、例えば、霊長類、典型的には、ヒト（例えば、本明細書に記載される癌または腫瘍を有するかまたはそのリスクを有する患者）である。
【００７１】
一つの態様において、処置される対象は、過剰増殖性障害、例えば、過剰増殖性結合組織障害（例えば、過剰増殖性線維性疾患）を有している。一つの態様において、過剰増殖性線維性疾患は、全身性であるか、または器官特異的である。例示的な過剰増殖性線維性疾患には、全身性障害（例えば、全身性硬化症、多巣性線維硬化症、骨髄移植レシピエントにおける強皮症性移植片対宿主病、腎性全身性線維症、強皮症）、ならびに器官特異的障害（例えば、肺、肝臓、心臓、腎臓、膵臓、皮膚、およびその他の器官の線維症）が含まれるが、これらに限定されない。
【００７２】
他の態様において、処置される対象は、過剰増殖性遺伝性障害、例えば、マルファン症候群またはロイス・ディーツ症候群から選ばれる過剰増殖性遺伝性障害を有している。
【００７３】
他の態様において、過剰増殖性障害（例えば、過剰増殖性線維性障害）は、慢性閉塞性肺疾患、喘息、大動脈瘤、放射線誘発線維症、骨格筋ミオパチー、糖尿病性腎症、および／または関節炎のうちの1種または複数種から選ばれる。
【００７４】
組み合わせ治療
一つの態様において、AHCMは、治療、例えば、癌治療（例えば、抗癌剤、手術、および／または放射線のうちの1種または複数種）と組み合わせて投与される。「化学療法薬」、「化学療法剤」、および「抗癌剤」という用語は、交換可能に本明細書において使用される。AHCMおよび癌治療の投与は、（オーバーラップを含みもしくは含まず）逐次的であってもよいし、または同時であってもよい。AHCMの投与は、治療（例えば、癌治療）コース中、連続的であってもよいしまたは断続的であってもよい。
【００７５】
一態様において、AHCM投与は、癌治療の投与の開始の前に開始され、例えば、癌治療の少なくとも1日前、2日前、3日前、もしくは5日前、または1週間前、2週間前、3週間前、4週間前、5週間前、またはそれ以前に開始される（例えば、AHCMは、癌治療の最低2週間前に投与される）。一態様において、それは、癌治療の開始のわずか5日前、10日前、20日前、30日前、60日前、または120日前に開始される。一態様において、AHCM投与は、癌治療の前に開始され、基準、例えば、時間に基づく基準、例えば、予め定められた日数のAHCMの投与または予め定められた回数のAHCM投与が満たされるまで、癌治療は開始されない。一態様において、基準は、予め選択されたAHCMのレベル、例えば、予め選択された血清中または血漿中のレベルを満たすものである。一つの態様において、基準は、コラーゲンI、コラーゲンIII、コラーゲンIV、トランスフォーミング増殖因子β1（TGFβ1）、結合組織増殖因子（CTGF）、またはトロンボスポンジン1（TSP-1）を含むが、これらに限定されないバイオマーカーの予め選択された血漿中または血清中のレベルを満たすものである。もう一つの態様において、基準は、腫瘍形態学の改変の予め選択されたレベルを満たすものである。
【００７６】
一つの態様において、AHCMの投与は、本明細書に記載される治療、例えば、癌治療と逐次的かつ／または同時である。
【００７７】
一態様において、対象が癌治療を受容する時間のうちの予め選択された部分の間、AHCMが投与されるか、またはAHCMの予め選択されたレベル、例えば、AHCMの血漿レベルが維持される。例として、AHCM治療は、癌治療が投与される期間全体、または抗癌剤の予め選択されたレベルが対象において持続する期間全体の間、維持される。
【００７８】
典型的には、AHCMによる治療は、癌治療スケジュール全体において継続される。さらに他の態様において、AHCMの投与は、癌治療の終了の前に中断される。他の態様において、AHCMの投与は、癌治療の終了の後に継続される。
【００７９】
一態様において、単独で、または癌治療と組み合わせて、2種以上の用量のAHCMが投与される。一つの態様において、AHCMは、治療コース中、非降圧用量および降圧用量で投与される。例えば、癌治療（例えば、平均動脈血圧を増加させる抗癌剤による処置、例えば、抗血管形成薬（例えば、Avastin、スニチニブ、またはソラフェニブ）による処置）の前にまたはその時点で、非最適降圧用量のAHCMを投与し；次いで、その後、降圧用量のAHCMを投与することができる。
【００８０】
一つの態様において、（単独の、または組み合わせられた）AHCMは、少なくとも15分、30分、45分の期間；少なくとも1時間、5時間、10時間、24時間の期間；少なくとも2日、5日、10日、14日の期間；少なくとも3週間、4週間、5週間、6週間、7週間、8週間の期間；少なくとも2ヶ月、3ヶ月、4ヶ月、5ヶ月、6ヶ月、7ヶ月、8ヶ月、9ヶ月、10ヶ月、11ヶ月の期間；少なくとも1年、2年、3年、4年、5年、またはそれ以上の期間にわたり実質的に連続的に投与される。一つの態様において、AHCMは徐放性製剤として投与される。ある種の態様において、AHCMは、連続送達、例えば、経口送達、皮下送達、または静脈内連続送達のために製剤化される。一つの態様において、AHCMは、植え込み式デバイス、例えば、ポンプ（例えば、皮下ポンプ）、インプラント、またはデポーを介して投与される。送達法は、本明細書に記載されるAHCM用量（例えば、標準用量、非降圧用量、または標準用量より多い用量）が、予め定められた期間（例えば、少なくとも15分、30分、45分；1時間、5時間、10時間、24時間、2日間、5日間、10日間、14日間；3週間、4週間、5週間、6週間、7週間、8週間；2ヶ月、3ヶ月、4ヶ月、5ヶ月、6ヶ月、7ヶ月、8ヶ月、9ヶ月、10ヶ月、11ヶ月；1年、2年、3年、4年、5年、またはそれ以上の期間）にわたり、投与されかつ／または対象において維持されるよう、最適化され得る。実質的に連続的なまたは長期放出型のAHCMの送達または製剤が、（化学療法と共に、または化学療法なしに）数時間、数日、数週間、数ヶ月、または数年の期間にわたる癌の防止または処置のために使用されてもよい。一つの態様において、癌治療は、ナノ治療（例えば、ウイルス癌治療剤（例えば、腫瘍退縮単純ヘルペスウイルス（HSV））、脂質ナノ粒子（例えば、リポソーム製剤（例えば、PEG化リポソームドキソルビシン（DOXIL（登録商標）））、もしくはポリマーナノ粒子）；癌標的に結合する抗体；RNAi剤もしくはアンチセンスRNA剤；化学療法剤（例えば、細胞傷害剤もしくは細胞分裂阻害剤）；放射線；もしくは手術；またはそれらの任意の組み合わせのうちの1種または複数種から選ばれる。AHCMと組み合わせて使用され得る抗癌治療の付加的な例は、以下に提供される。
【００８１】
他の態様において、AHCMおよび／または治療（例えば、癌または過剰増殖の治療）は、線維化促進（profibrotic）経路（例えば、TGFβおよび／またはCTGFの活性化に依存性または非依存性の経路）の阻害剤（「線維化促進経路阻害剤」）と組み合わせて投与される。一つの態様において、AHCMおよび／または癌治療は、エンドセリン1、PDGF、Wnt/βカテニン、IGF-1、TNFα、および／またはIL-4の阻害剤のうちの1種または複数種と組み合わせて投与される。もう一つの態様において、AHCMおよび／または癌治療は、エンドセリン1および／またはPDGFの阻害剤と組み合わせて投与される。他の態様において、AHCMおよび／または癌治療は、ケモカイン受容体4型（CXCR4）（例えば、AMD3100、MSX-122）；ストロマ由来因子1（SDF-1）（例えば、タンニン酸）；ヘッジホッグ（例えば、GDC-0449、シクロパミン、またはGANT58）のうちの1種または複数種の阻害剤と組み合わせて投与される。
【００８２】
AHCM、癌治療、および／または線維化促進経路阻害剤の投与は、（例えば、本明細書に記載されるように）逐次的（オーバーラップ含むかもしくは含まない）であってもよいし、または同時であってもよい。
【００８３】
癌治療
一つの態様において、処置される癌は、上皮、間葉系、または血液系の悪性疾患である。一態様において、処置される癌は、固形腫瘍（例えば、カルチノイド、癌腫、または肉腫）、軟部組織腫瘍（例えば、ヘム悪性疾患）、および転移性病変、例えば、本明細書に開示された癌のいずれかの転移性病変である。一つの態様において、処置される癌は、線維性または線維形成性の固形腫瘍、例えば、限定された腫瘍灌流、圧縮された血管、または線維性腫瘍間質のうちの一つまたは複数を有する腫瘍である。一つの態様において、固形腫瘍は、膵臓癌（例えば、膵臓腺癌）、乳癌、結腸直腸癌、肺癌（例えば、小細胞肺癌もしくは非小細胞肺癌）、皮膚癌、卵巣癌、または肝臓癌のうちの1種または複数種から選ばれる。処置される癌の付加的な例は、本明細書において以下に記載される。
【００８４】
もう一つの態様において、AHCMは、癌治療（例えば、抗癌剤、手術、および／または放射線のうちの1種または複数種）と組み合わせて投与される。一つの態様において、癌治療は、例えば、ナノ治療（例えば、ウイルス癌治療剤（例えば、腫瘍退縮単純ヘルペスウイルス（HSV））、脂質ナノ粒子（例えば、リポソーム製剤（例えば、PEG化リポソームドキソルビシン（DOXIL（登録商標）））、もしくはポリマーナノ粒子を含む、1種もしくは複数種のナノ治療剤）を含む癌治療薬；1種もしくは複数種の癌治療抗体（例えば、抗HER2抗体、抗EGFR抗体、抗CD20抗体）；RNAi剤およびアンチセンスRNA剤；1種もしくは複数種の化学療法剤（例えば、細胞傷害剤もしくは細胞分裂阻害剤を含む低分子量化学療法剤）；放射線；または手術、またはそれらの任意の組み合わせのうちの1種または複数種を含む。1種または複数種のAHCMと、1種または複数種の治療モダリティ（例えば、第一、第二、第三）、ナノ治療剤、抗体薬剤、低分子量化学療法剤、放射線との任意の組み合わせが使用され得る。例示的な癌治療薬には、ナノ治療剤（例えば、1種または複数種の脂質ナノ粒子（例えば、リポソーム製剤（例えば、PEG化リポソームドキソルビシン（DOXIL（登録商標））もしくはリポソームパクリタキセル（例えば、Abraxane（登録商標）））、またはポリマーナノ粒子）；1種または複数種の低分子量化学療法薬（例えば、ゲムシタビン、シスプラチン、エピルビシン、5-フルオロウラシル、パクリタキセル、オキサリプラチン、またはロイコボリン）；癌標的（例えば、HER-2/neu、HER3、VEGFのような増殖因子受容体）に対する1種または複数種の抗体；例えば、スニチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、ソラフェニブ、イコチニブ、ラパチニブ、ネラチニブ、バンデタニブ、BIBW 2992またはXL-647、抗EGFR抗体（例えば、セツキシマブ、パニツムマブ、ザルツムマブ、ニモツズマブ、ネシツムマブ、またはマツズマブ）のような低分子量薬剤および抗体薬剤を含む1種または複数種のチロシンキナーゼ阻害剤が含まれるが、これらに限定されない。組み合わせ治療において使用される化学療法剤の付加的な例は、以下に記載される。
【００８５】
一つの態様において、AHCMと組み合わせて使用される化学療法剤は、細胞傷害剤または細胞分裂阻害剤である。例示的な細胞傷害剤には、微小管阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤（例えば、イリノテカン）、またはタキサン（例えば、ドセタキセル）、代謝拮抗薬、有糸分裂阻害剤、アルキル化剤、挿入剤、シグナル伝達経路に干渉することができる剤、アポトーシスを促進する剤、および放射線が含まれる。さらに他の態様において、方法は、免疫調整剤、例えば、IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、IL-12、インターフェロンα、インターフェロンγ、またはGM-CSFのような免疫細胞増殖因子と組み合わせて使用され得る。
【００８６】
一つの態様において、AHCMは、単独で、または本明細書に記載された1種もしくは複数種の癌治療と組み合わせて、癌防止のため（例えば、単独で、または癌防止剤と組み合わせて）、活動性障害の期間に、または寛解もしくは活動性のより低い障害の期間に投与される。AHCMは、単独で、または本明細書に記載された1種もしくは複数種の癌治療と組み合わせて、癌防止のため、処置もしくは防止の前に、処置もしくは防止と同時に、処置もしくは防止の後に、または障害の寛解中に投与され得る。一つの態様において、癌治療は、AHCMと同時に、逐次的に、または両方の組み合わせで投与される。
【００８７】
一つの態様において、AHCMは、例えば、ハイリスク対象（例えば、前新生物もしくは癌の遺伝学的素因を有する対象（例えば、BRCA1変異を有する対象）；またはタモキシフェンにより処置された乳癌患者）における癌を処置するかまたは防止するため、単独で、または癌防止剤と組み合わせて投与される。
【００８８】
いくつかの態様において、単独の、または癌治療と組み合わせられたAHCMは、癌のための一次処置であり、例えば、癌を処置することを目的としたもう1種の薬物を以前に投与されたことがない対象において使用される。
【００８９】
他の態様において、単独の、または癌治療と組み合わせられたAHCMは、癌のための二次処置であり、例えば、癌を処置することを目的としたもう1種の薬物を以前に投与されたことがある対象において使用される。
【００９０】
他の態様において、単独の、または癌治療と組み合わせられたAHCMは、癌のための三次、四次、またはそれ以降の処置であり、例えば、癌を処置することを目的とした2種、3種、またはそれ以上の他の薬物を以前に投与されたことがある対象において使用される。
【００９１】
他の態様において、AHCMは、補助治療、例えば、主治療に付加される処置として投与される。
【００９２】
一つの態様において、AHCMは、アジュバント治療として投与される。
【００９３】
他の態様において、AHCMは、ネオアジュバント治療として投与される。
【００９４】
いくつかの態様において、AHCMは、癌の外科的切除／除去の前または後に、対象に投与される。
【００９５】
いくつかの態様において、AHCMは、癌の放射線処置の前、途中、および／または後に、対象に投与される。
【００９６】
いくつかの態様において、AHCMは、対象、例えば、癌治療（例えば、化学療法剤による処置、放射線治療、および／または手術）を受けるであろう癌患者、受けている癌患者、または受けたことがある癌患者に投与される。
【００９７】
他の態様において、AHCMは、癌治療の前に投与される。他の態様において、AHCMは、癌治療と同時に投与される。さらに他の態様において、AHCMは、癌治療の前に投与され、かつ癌治療と同時に投与される。同時投与の場合、AHCMは、癌治療の終了後、投与され続けてもよい。
【００９８】
他の態様において、AHCMは、癌治療と逐次的に投与される。例えば、AHCMは、癌治療による処置を開始する前、または癌治療による処置を終了した後に投与され得る。一つの態様において、AHCMの投与は、癌治療とオーバーラップし、癌治療の終了後に継続される。一つの態様において、AHCMは、同時に、逐次的に、または同時投与の後に癌治療もしくはAHCMのいずれかによる単独治療が行われる組み合わせとして、投与される。
【００９９】
一つの態様において、方法は、第一の治療剤としてAHCMを投与し、続いて、癌治療（例えば、第二の治療剤、放射線治療、および／または手術）を投与することを含む。もう一つの態様において、方法は、癌治療（例えば、第一の治療剤、放射線治療、および／または手術）を最初に投与し、続いて、第二の治療剤としてAHCMを投与することを含む。さらに他の態様において、方法は、第二、第三、またはそれ以上の付加的な治療剤（例えば、本明細書に記載される抗癌剤）と組み合わせて、AHCMを投与することを含む。
【０１００】
AHCMおよび／または本明細書に記載された抗癌剤は、対象に全身投与され得る（例えば、経口、非経口、皮下、静脈内、直腸、筋肉内、腹腔内、鼻腔内、経皮、または吸入、もしくは腔内導入）。典型的には、AHCMは経口投与される。ある種の態様において、AHCMおよび／または抗癌剤は、（例えば、腫瘍退縮ウイルスを介して）腫瘍内に投与される。
【０１０１】
いくつかの態様において、AHCMは、1種または複数種のAHCMと、薬学的に許容される賦形剤とを含む薬学的組成物として投与される。
【０１０２】
一態様において、AHCMは、組成物、例えば、薬学的組成物（例えば、同一のナノ粒子組成物）で投与されるか、またはその中に存在する。
【０１０３】
他の態様において、AHCMと癌治療とは、別々の組成物、例えば、薬学的組成物（例えば、ナノ粒子組成物）として投与される。他の態様において、AHCMと癌治療とは、別々に投与されるが、同一の経路（例えば、いずれも経口またはいずれも静脈内）を介して投与される。いくつかの態様において、AHCMと癌治療とは、異なる経路により投与される（例えば、AHCMは経口投与され、癌治療薬は静脈内投与される）。さらに他の例において、AHCMと癌治療とは、同一の組成物、例えば、薬学的組成物で投与される。
【０１０４】
対象のモニタリング
本発明の方法は、例えば、腫瘍サイズ；トランスフォーミング増殖因子β1（TGFβ1）、結合組織増殖因子（CTGF）、もしくはトロンボスポンジン1（TSP-1）のうちの1種もしくは複数種のレベルもしくはシグナリング；腫瘍コラーゲンIレベル；線維含量、間質圧力；血漿中もしくは血清中のバイオマーカー、例えば、コラーゲンI、コラーゲンIII、コラーゲンIV、TGFβ1、CTGF、TSP-1；1種もしくは複数種の癌マーカーのレベル；新たな病変の出現、代謝、低酸素発生の速度；新たな疾患関連症状の出現；組織量のサイズ、例えば、減少もしくは安定化；生活の質、例えば、疾患関連疼痛の量；組織学的分析、小葉パターン、および／もしくは有系分裂細胞の有無；腫瘍侵襲性、原発腫瘍の血管新生、転移性蔓延；集学的画像化技術を使用して可視化され得る腫瘍のサイズおよび位置；または臨床転帰に関係するその他の任意のパラメータ、のうちの一つまたは複数の変化（例えば、増加または減少）について、対象をモニタリングする工程をさらに含み得る。対象は、以下の期間のうちの一つまたは複数においてモニタリングされ得る：処置の開始の前；処置の途中；または処置の一つもしくは複数の要素が投与された後。モニタリングは、単独の、もしくは同一の抗癌剤と組み合わせられた同一のAHCMによるさらなる処置、または付加的な剤による付加的な処置の必要性を評価するために使用され得る。一般に、上記パラメータのうちの一つまたは複数の減少は、対象の改善された状態を示す。
【０１０５】
本発明の方法は、対象由来の核酸またはタンパク質を分析する工程、例えば、対象の遺伝子型を分析する工程をさらに含み得る。分析は、例えば、例えば、特定の投薬量、送達モード、送達時間、補助治療の内含、例えば、第二の剤と組み合わせた投与の適当性を評価するため、またはそれらを別の処置との間で選ぶため、または、一般に、対象の可能性のある薬物応答表現型もしくは遺伝子型を決定するため、使用され得る。核酸またはタンパク質は、処置の任意の段階で分析され得るが、好ましくは、対象の予防的または治療的な処置のためのAHCMの適切な投薬量および処置計画（例えば、処置1回当たりの量または処置の頻度）を決定するため、AHCMおよび／または抗癌剤の投与の前に分析される。
【０１０６】
剤形
もう一つの局面において、本発明は、AHCMと、抗癌剤、例えば、低分子またはタンパク質、例えば、抗体とを、単一の剤形で含む、薬学的に許容される組成物を特色とする。もう一つの態様において、AHCMおよび抗癌剤のうちの一方または両方は、ナノ粒子で提供される。AHCMと抗癌剤とは、別々の実体にあってもよいしまたは同一の実体にあってもよい。例えば、別々の実体として提供する場合、AHCMを第一のナノ粒子として提供し、抗癌剤を第二のナノ粒子として提供することができる（例えば、第二のナノ粒子が、第一のナノ粒子と異なる構造的特性（例えば、サイズもしくは組成）または機能的特性（例えば、放出動力学もしくは薬力学的特性）を有する場合）。あるいは、AHCMおよび抗癌剤は、同一の実体で、例えば、同一のナノ粒子で提供されてもよい。
【０１０７】
もう一つの局面において、本発明は、AHCM、例えば、本明細書に記載されたAHCMを含む薬学的に許容される組成物（例えば、ナノ粒子）を特色とする。一つの態様において、AHCMは、本明細書に記載された投薬量、例えば、標準医療剤形、非降圧剤形、または標準医療剤形より大きい剤形で存在する。
【０１０８】
一つの態様において、AHCMは、医療降圧剤形または医療抗心不全剤形の標準、例えば、本明細書に記載される標準医療剤形に従った剤形で製剤化される。
【０１０９】
ある種の態様において、AHCMは、医療降圧剤形または医療抗心不全剤形の標準より小さい剤形（例えば、標準医療剤形、例えば、本明細書に記載される標準医療剤形の0.01倍、0.02倍、0.03倍、0.04倍、0.05倍、0.06倍、0.07倍、0.08倍、0.09倍、0.1倍、0.15倍、0.16倍、0.2倍、0.3倍、0.4倍、0.5倍、0.6倍、0.7倍より小さい剤形）で製剤化される。他の態様において、AHCMは、医療降圧剤形または医療抗心不全剤形の標準より大きい剤形（例えば、標準医療剤形、例えば、本明細書に記載される標準医療剤形の1.1倍、1.5倍、1.7倍、2倍、3倍、4倍、5倍、10倍より大きい、またはそれ以上の剤形）で製剤化される。
【０１１０】
もう一つの局面において、本発明は、ナノ粒子、例えば、本明細書に記載された方法のために構築されたナノ粒子として、抗癌剤、例えば、本明細書に記載された抗癌剤を含む薬学的に許容される組成物を特色とする。
【０１１１】
もう一つの局面において、本発明は、単独で、または本明細書に記載された治療、例えば、抗癌剤と組み合わせて、AHCMを含み、例えば、癌の処置のための使用説明書を任意で含む治療キットを特色とする。一態様において、キットは、本明細書に記載された、薬学的調製物またはナノ粒子の1種または複数種の剤形を含む。
【０１１２】
送達法
もう一つの局面において、本発明は、剤、例えば、全身投与された剤、例えば、診断剤またはイメージング剤の、標的組織、例えば、癌への接近を最適化するか、または標的組織、例えば、癌への送達を最適化する方法を、特色とする。方法は、降圧かつ／またはコラーゲン修飾剤（「AHCM」）を対象に投与する工程を含み；かつ、剤、例えば、診断剤またはイメージング剤を該対象に投与する工程を任意で含む。
【０１１３】
一態様において、方法は、以下のうちの一つまたは複数を含む：
（a）AHCMが、降圧剤であり、標準医療用量、非降圧用量、または標準降圧用量より多い用量で投与されること；
（b）剤、例えば、診断剤またはイメージング剤が、1nm、5nm、または20nmより大きい水力学的直径を有し、例えば、ナノ粒子であること；
（c）剤が、イメージング剤、例えば、放射線剤、NMRA剤、造影剤であること；または
（d）対象が、本明細書に記載された投薬計画で処置されること、例えば、AHCM投与が、剤の投与の前、例えば、剤の投与の少なくとも1日前、2日前、3日前、もしくは5日前、または1週間前、2週間前、3週間前、4週間前、5週間前、またはそれ以前に開始されること。
【０１１４】
一態様において、AHCMは、剤の分散または効力を改変する（例えば、増強する）のに十分な量で、投与される。一つの態様において、AHCMは、剤の分散または効力を改変する（例えば、増強する）のに十分であるが、単独では腫瘍の増大または進行を阻害するかまたは防止するのに不十分な量で、投与される。
【０１１５】
一態様において、AHCMは、対象における、コラーゲンのレベルもしくは産生の減少、腫瘍線維形成の減少、間質腫瘍輸送の増加、腫瘍灌流の改善、または腫瘍もしくは腫瘍血管系における癌治療薬の浸透もしくは拡散の増強、のうちの一つまたは複数を引き起こす用量で、投与される。
【０１１６】
一態様において、対象は、癌治療、例えば、本明細書に記載される治療によりさらに処置される。
【０１１７】
一態様において、対象は、ヒト、または非ヒト動物、例えば、マウス、ラット、非ヒト霊長類、ウマ、もしくはウシである。
【０１１８】
もう一つの態様において、本発明は、単独で、または本明細書に記載された剤、例えば、診断剤またはイメージング剤と組み合わせて、AHCMを含み、例えば、癌の診断のための使用説明書を任意で含む診断キットを特色とする。
【０１１９】
スクリーニングアッセイ
もう一つの態様において、本発明は、AHCMを同定する方法またはアッセイを特色とする。方法またはアッセイは、癌または癌関連細胞（例えば、癌関連線維芽細胞の培養物）を準備する工程；癌または癌関連細胞を候補薬剤と接触させる工程；候補薬剤の存在下または非存在下で癌細胞における変化を検出する工程を含む。一つの態様において、検出される変化は、TGFβ1レベル、結合組織増殖因子（CTGF）レベル、またはコラーゲン（例えば、コラーゲン1）レベルの増加または減少のうちの一つまたは複数を含む。一つの態様において、候補薬剤は、レニンアンジオテンシンアルドステロン系のアンタゴニスト（「RAASアンタゴニスト」）、アンジオテンシン変換酵素（ACE）阻害剤、アンジオテンシンII受容体遮断薬（AT1遮断薬）、トロンボスポンジン1（TSP-1）阻害剤、トランスフォーミング増殖因子β1（TGFβ1）阻害剤、または結合組織増殖因子（CTGF）阻害剤のうちの1種または複数種から選ばれる。適当な候補薬剤は、TGFβ1レベル（例えば、全TGFβ1および／もしくは活性型TGFβ1）、結合組織増殖因子（CTGF）レベル、またはコラーゲンレベルのうちの1種または複数種を低下させる。
【０１２０】
方法またはアッセイは、処置を行なった方法またはアッセイを、参照値、例えば、候補薬剤の非存在下で、または対照剤、例えば、陽性剤（例えば、ロサルタン）もしくは陰性剤（例えば、生理食塩水対照）の添加により得られた値と比較する工程、および処置を行なった方法と対照方法との間の違いを比較する工程をさらに含み得る。
【０１２１】
方法またはアッセイは、インビトロ、インビボ、または両方の組み合わせで実施され得る。一つの態様において、方法またはアッセイは、例えば、癌関連細胞の培養物を使用して、インビトロで候補薬剤を評価する工程を含む。そのような態様において、候補薬剤は培養培地へ添加され；条件培地が、TGFβ1レベル、結合組織増殖因子（CTGF）レベル、またはコラーゲンレベルの増加または減少について分析される。
【０１２２】
もう一つの態様において、候補薬剤は、対象、例えば、動物モデル、例えば、動物腫瘍モデルに投与される。そのような態様において、候補薬剤は、適当な条件の下で対象に投与され；対象が、TGFβ1レベル、結合組織増殖因子（CTGF）レベル、またはコラーゲンレベルの増加または減少について分析される。一つの態様において、これらのパラメータのレベルは、添付の実施例に記載されるようにして分析される。
【０１２３】
さらに他の態様において、インビトロアッセイを使用して評価された候補薬剤が、インビボで試験される。
【０１２４】
もう一つの局面において、本発明は、本明細書に記載された癌または腫瘍の処置のための、単独のもしくは本明細書に記載された抗癌剤と組み合わせられたAHCM剤の使用のための組成物、または単独のもしくは本明細書に記載された抗癌剤と組み合わせられたAHCM剤の使用を特色とする。
【０１２５】
表題または番号付きもしくは文字付きの要素、例えば、（a）、（b）、（i）等は、読解の容易さのために提示されているに過ぎない。本文書における標題または番号付きもしくは文字付きの要素の使用は、工程もしくは要素がアルファベット順に実施されること、または工程もしくは要素が相互に区別されなければならないことを要求するものではない。
【０１２６】
本明細書において言及された刊行物、特許出願、特許、およびその他の参照は、全て、参照によりその全体が組み入れられる。
【０１２７】
本発明のその他の特色、目的、および利点は、説明および図面、ならびに特許請求の範囲から明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【０１２８】
【図１】インビトロの癌関連線維芽細胞（CAF）における全TGFβレベル、活性TGFβレベル、およびコラーゲンI合成に対するロサルタン（10μmol/L）の効果を示す棒グラフのパネルである。
【図２】腫瘍におけるコラーゲン産生に対するロサルタンの効果を示す。図2Aは、2週間にわたる、対照と比較した、ロサルタン（10mg/kg/日、20mg/kg/日、および60mg/kg/日）により処置されたHSTS26T腫瘍における、SHG画像法により査定されたコラーゲンレベルの用量依存性の低下を示す、写真のパネルである。スケールバー＝200μm。図2Bは、ロサルタンにより処置された腫瘍におけるコラーゲンレベルの用量依存性の低下を示す、15日間の最後に、それぞれ、20％、33％、および67％、SHGレベルを減少させた10mg/kg/日、20mg/kg/日、および60mg/kg/日のロサルタン用量の効果の用量応答曲線を示す。対照群と二つのより高い用量（20mg/kg/日および60mg/kg/日）との間には、統計的有意差があった（＊）。20mg/kg/日群と60mg/kg/日群との間にも、統計的有意差があった（†）。
【図３】HSTS26T腫瘍におけるコラーゲン含量に対するロサルタンの用量応答を示す棒グラフである。20mg/kg/日および60mg/kg/日のロサルタン処置は、それぞれ、42％および63％のコラーゲンI染色の低下をもたらした。各処置群における染色は、生理食塩水を受容した対照群と比較された。
【図４】マウスの平均動脈血圧（MABP）を用量依存的に減少させたロサルタンの効果を示す棒グラフである。20mg/kg/日は、10mmHg（＊p＜0.04）、MABPを減少させたが、MABPはSCIDマウスについての正常範囲（70mmHg〜95mmHg）内に留まっていた（13）。反対に、動物を60mg/kg/日により処置した時には、MABPの35mmHg（＊＊p＜0.04）の低下は、SCIDマウスにおける正常範囲MABPより低かった。
【図５】腫瘍におけるコラーゲンレベルに対するロサルタンの効果を示す。図5Aは、対照およびロサルタン（20mg/kg/日）により処置されたL3.6pl腫瘍およびMMTV腫瘍における、腫瘍切片におけるコラーゲンIおよび核の免疫染色の結果を示す。スケールバー＝100μm。（例えば、20mg/kg/日の）ロサルタン処置は、処置された腫瘍におけるコラーゲンレベルを有意に低下させた。図5Bは、20mg/kg/日のロサルタンによる2週間の処置の後の効果を要約する棒グラフである；ロサルタン処置は、L3.6pl（p＜0.03）およびFVB MMTV PyVTにおけるコラーゲンI免疫染色を、それぞれ、50％（p＜0.05）および47％（p＜0.05）有意に低下させた。図5Cは、対照およびロサルタン（20mg/kg/日）により処置されたHSTS26T腫瘍およびMu89腫瘍おける、腫瘍切片におけるコラーゲンIおよび核の免疫染色を示す写真のパネルである。HSTS26T腫瘍の端から200μmには、コラーゲンI免疫染色の検出可能な低下がないことに注意すること。この現象は、端および中心腫瘍区域の両方に持続的な染色が存在した、処置されたMu89腫瘍においては、それほど明白でない。スケールバー＝100μm。図5Dは、HSTS26TおよびMu89におけるコラーゲンI免疫染色を、それぞれ、44％（p＜0.02）および20％（p＜0.05）有意に低下させたロサルタンの効果を要約する棒グラフである。
【図６】HSTS26T腫瘍におけるTSP-1、活性TGFβ1、全TGFβ1、およびコラーゲンIに対するロサルタンの効果を示す棒グラフのパネルである。処置された動物は、ロサルタン（15mg/kg/日）を含む飲料水を受容した。腫瘍が、2週間の処置の後に切除され、ホモジナイズされ、ELISAにより全TGFβ1および活性型TGFβ1のレベルについて分析された。ロサルタン処置後のTSP-1の3.5倍の低下、活性TGFβ1の4倍の低下、およびコラーゲン1の2倍の低下に注意すること（p＜0.05）。
【図７】図7Aは、MU89腫瘍およびHSTS26T腫瘍の両方において、腫瘍TSP-1免疫染色を減少させたロサルタンの効果を示す。HSTS26T腫瘍において、ロサルタン処置後のTSP-1の変化は、コラーゲンI免疫染色の変化に対応する；TSP-1レベルは、腫瘍中心において減少するが、腫瘍の端から200μm以内では高いままである。TSP-1周縁部は、MU89腫瘍においては、より大きかった（端から500μm）。スケールバー＝100μm。図7Bは、HSTS26T腫瘍およびMU89腫瘍におけるTSP-1免疫染色を、それぞれ、73％（p＜0.04）および24％（p＜0.03）有意に低下させたロサルタン処置の効果を要約する棒グラフである。
【図８】ナノ粒子およびナノ治療薬の送達を増加させたロサルタンの効果を示す。図8Aは、HSTS26T腫瘍における腫瘍内（i.t.）注射された100nm直径ナノ粒子の分散を要約する2枚の写真（対照およびロサルタン）ならびに棒グラフを示す。ロサルタンは、両方の腫瘍型においてi.t.注射されたナノ粒子の分散を有意に増加させた（p＜0.001）（HSTS26Tにおいて1.5倍およびMu89において4倍）。分散パターンの分析は、対照腫瘍においては、腫瘍内ナノ粒子がより少なく、ナノ粒子の過半数が、針跡から後戻りし、腫瘍表面に蓄積したことを示す。対照的に、処置された腫瘍は、相当数の腫瘍内ナノ粒子を有する。スケールバー＝100μm。図8Bは、緑色蛍光タンパク質を発現するHSVの腫瘍内注射の24時間後のウイルス感染の分散を要約する2枚の写真（対照およびロサルタン）ならびに棒グラフを示す。対照腫瘍におけるHSV感染は、注射部位に近接した細胞に限定されているが、ロサルタンにより処置された腫瘍は、腫瘍内のHSV感染のより広範な蔓延を有する。スケールバー=1mm。ロサルタンは、HSTS26T腫瘍およびMu89腫瘍におけるウイルス蔓延を有意に増加させた（p＜0.05）。図8Cは、L3.6pl腫瘍における静脈内（i.v.）注射された100nm直径ナノ粒子の分散を要約する2枚の写真（対照およびロサルタン）ならびに棒グラフを示す。ナノ粒子は、灌流された血管の周囲に局在している。ロサルタンにより処置された腫瘍においては、対照腫瘍と比較して、ナノ粒子含量の2倍の増加（p＜0.05）が存在する。スケールバー＝100μm。
【図９】ロサルタン処置後のHSTS26T腫瘍における拡散係数の変化を示す棒グラフである。IgGの拡散係数が、SCIDマウスのドーサルウィンドウチャンバーに植え込まれたHSTS26T腫瘍において測定された。処置された動物は、i.p.注射によりロサルタンを受容し（40mg/kg/日）、対照動物は生理食塩水を受容した。結果は、多光子蛍光退色後回復（FRAP）により測定される拡散係数の有意な増加（p＜0.04）を示す。
【図１０】腫瘍血管からの距離（浸透深度）の関数として、存在する注射されたナノスフェアの画分を示す、代表的な分散プロファイルである。ナノスフェア浸透深度は、静脈内ナノスフェア注射の24時間後に切除された腫瘍からの凍結切片において分析された。特徴的な浸透長の平均値は、対照における18±5μm（平均値±SE）から、ロサルタンにより処置された腫瘍における37±6μmにまで増加した。6個の対照腫瘍および6個の処置された腫瘍において、各腫瘍につき10個の区域が分析された。
【図１１】DOXIL（登録商標）またはHSVにより処置された腫瘍の増大を有意に遅延させたロサルタンの効果を示す。図11A〜11Bは、HSVのi.t.注射の前に、ロサルタンまたは生理食塩水のいずれかにより2週間処置されたHSTS26T腫瘍（A）およびMu89腫瘍（B）を保持しているマウスからの結果の折れ線グラフを示す。単独のロサルタンは、Mu89腫瘍またはHSTS26T腫瘍の増大に影響を与えなかった。増大遅延は、単独のHSVにより処置された腫瘍と比較して、ロサルタンおよびHSVにより処置されたHSTS26T腫瘍において有意に長かった。HSVのi.t.注射は、Mu89腫瘍の増大を遅延させなかったが、ロサルタンおよびHSVの組み合わせによる処置は、Mu89腫瘍の増大を有意に遅らせた。図11Cは、i.v.DOXIL（登録商標）注入の前にロサルタン処置を受容したマウス（ロサルタンおよびDOXIL（登録商標））が、DOXIL（登録商標）単独を受容したもの（DOXIL（登録商標）単独）より小さい腫瘍を有していた、L3.6pl腫瘍における腫瘍体積に対する効果を示す。生理食塩水により処置されたマウスとロサルタンにより処置されたマウスとの間には、腫瘍サイズの差がないことに注意すること。図11Dは、DOXIL（登録商標）注入の1週間後の、対照腫瘍（左カラム）とロサルタンにより処置された腫瘍（右カラム）との間の、明らかなサイズの差を示す画像である。スケールバー＝1cm。DOXIL（登録商標）注入の1週間後、ロサルタンにより処置された腫瘍（右カラム）は、対照腫瘍（左カラム）より小さかった。
【図１２】コラーゲン構造とウイルス感染と壊死との間の関係を示す。図12A、Mu89腫瘍においては、コラーゲン束が腫瘍周縁部の周囲に見られる。時に、これらの束は、腫瘍へ突入し（黒矢印）、腫瘍を別々のコンパートメントに分割する。これらのコンパートメントは、HSVの移動を制限するようであり；それは、コラーゲン束により境界が示される領域の内部に壊死領域が封じ込められていることから明白である。これらの腫瘍をロサルタンにより処置した時、腫瘍の周縁部におけるコラーゲン束は完全なままであったが、突起は、より無秩序になった（挿入図）。これは、おそらく、ウイルス繁殖および壊死が境界を越えて拡張することを可能にした。スケールバー＝100μm。図12B、HSTS26Tにおいては、密な網目状コラーゲンネットワークが、注射点の直ぐ周囲の区域にウイルス感染を制限した。ロサルタン処置により、ネットワークの密度の低下が起こり、おそらく、それは、ウイルス粒子がより大きい区域に感染し、従って、より多くの腫瘍細胞に感染することを可能にした。矢印は、生細胞およびウイルス感染細胞をそれぞれ示す。スケールバー＝10μm。
【図１３】Mu89腫瘍（A）およびHSTS26T腫瘍（B）におけるウイルスの分散および感染の模式図を示す。模式図は、異なるコラーゲンネットワーク構造がどのようにウイルスの繁殖および分散に影響を与えるかを示す。コラーゲン線維（1）は、ウイルス粒子（丸い球、2）の移動および未感染（4）癌細胞の感染（3）を制限する。図13A、Mu89腫瘍においては、コラーゲン束が、腫瘍を、ウイルス粒子が超えることができない隔離された領域に分割している。ロサルタン処置は、コラーゲン束を不安定化し、ウイルス粒子がある領域から別の領域へ移動することを可能にする。図13B、HSTS26T腫瘍においては、コラーゲン構造は網目状のふるいである。ウイルス粒子は、ふるいを通って繁殖することができるが、注射部位から極めて遠くには拡張しない。ロサルタン処置は、腫瘍の内部領域における網目構造を有意に不安定化し、ウイルスが繁殖し、より大きい区域に感染することを可能にする。
【図１４】図14Aは、HSTS26TおよびMU89におけるHSV注射の21日後のウイルス感染（HSV免疫染色）および壊死を示す。完全腫瘍区域、壊死のヘマトキシリン染色、およびHSV免疫染色が示される。壊死領域は黒矢印により示される。HSTS26TとMU89との間に壊死区域の検出可能な差は存在しなかったが、MU89においては壊死が特定の領域に制限されており、HSTS26T腫瘍においては全体に壊死組織（HSV免疫染色により境界が示される）が存在する。スケールバー＝2mm。図14Bは、HSV注射前にロサルタンを受容した腫瘍（HSTS26TおよびMU89の両方）において、壊死の2倍の増加（p＜0.05）が存在することを示す棒グラフである。
【図１５】ロサルタン処置の後のHSTS26TおよびMU89についてのインビボ増殖速度を示す。腫瘍が切除され、増殖速度を査定するため、Ki67について染色された。HSTS26T腫瘍およびMU89腫瘍におけるロサルタン処置の後の陽性Ki67染色の統計的有意差は存在しなかった。しかしながら、2種の腫瘍型の間には増殖の有意な差が存在し、Ki67陽性細胞の数は、HSTS26T腫瘍において3倍高かった。
【図１６】CAF細胞、MU89細胞、およびHSTS26T細胞におけるAGTR1発現のPCR分析の結果を示す。MU89細胞およびCAFはAGTR1を発現するが、HSTS26T細胞は発現しない。HUVECが陽性対照として使用された。GAPDHレベルは、3種の試料が全てほぼ同量のcDNAを有していることを明らかにした。
【図１７】AT1遮断薬またはACE阻害剤によるアンジオテンシン阻害の、腫瘍微小環境を正常化する効果を示す。ARB、ロサルタンを用いた研究が示される。アンジオテンシン阻害は、（A）マウスにおける乳房腫瘍（MMTV）および膵臓腫瘍（L3.6PL）における間質マトリックス密度を減じ、（B）乳房腫瘍（E0771）および膵臓腫瘍（Pan-02）における圧縮ストレスを低下させる。（C）これは、腫瘍における灌流された血管（矢印）の画分を増加させ（E0771が示される）、（D）薬物および酸素の送達においてより効率的かつ効果的な、正常化された血管ネットワークをもたらす（E0771が示される）。
【図１８】AT1遮断薬またはACE阻害剤によるアンジオテンシン阻害の、腫瘍における薬物の輸送および分散を改善する効果を示す。ARB、ロサルタンを用いた研究が、ここに示される。腫瘍正常化を通して、アンジオテンシン阻害は、（A）増強された灌流を通して腫瘍酸素負荷を改善し（E0771が示される）、（B）血管に薬物をより迅速に送達させる。間質マトリックスの再組織化（C）も、線維形成性腫瘍（L3.6PLが示される）におけるナノ粒子の浸透を改善する（D）。
【図１９】AT1遮断薬またはACE阻害剤によるアンジオテンシン阻害の、癌治療の有効性を改善する効果を示す。ARB、ロサルタンを用いた研究が示される。化学療法と組み合わせて与えられたアンジオテンシン阻害は、（A）乳癌モデルにおける低MW化学療法薬ドキソルビシンの有効性を改善し、（B）腫瘍増大を遅くし、（C）動物生存率を増加させる（E0771が示される）。同様に、アンジオテンシン阻害（D、E）は、例えば、腫瘍重量（D）および／または腫瘍のサイズもしくは体積（E）を減少させることにより、膵臓腫瘍（L3.6PLが示される）におけるナノ粒子DOXIL（登録商標）の有効性を改善する。
【発明を実施するための形態】
【０１２９】
発明の詳細な説明
本発明は、降圧剤であるロサルタンが、癌治療薬の送達および効力を改善するという発見に、少なくとも一部分、基づく。
【０１３０】
腫瘍の異常なマトリックスは、多くの型の癌、例えば、膵臓癌、乳癌、肺癌、結腸直腸癌において、ナノ治療薬の送達を限定する。線維組織の過増大は、2種の機序、粘弾性障害および立体障害により、腫瘍におけるナノ治療薬の移動を妨害する。線維組織は高度に粘弾性であり、即ち、極めて濃密で堅く、従って、これらの薬物の移動を典型的なスピードの極一部へと遅くする。この組織は、基本的には、ナノ治療薬とほぼ同サイズの小さい孔を有する極めて密な網目であり、従って、これらの薬物のために多くの空間を与えず、血管（静脈注射の場合）または注射部位の近く（腫瘍内注射の場合）に制限することにより、それらの移動をしばしば停止させる。この障壁は、おそらく脳腫瘍を除き、全ての固形腫瘍に見出されるが、膵臓癌、乳癌、肺癌、および結腸直腸癌において最も顕著である。ナノ治療薬は、腫瘍微小環境を形成する孔に比べて大きいサイズのため、線維組織により特に妨げられる。
【０１３１】
ある種の態様において、出願人は、ロサルタンが、線維組織の密な網目の成分であるコラーゲンのようなマトリックス分子の産生を防止することを示した。ロサルタンは、TGFβ経路およびCTGF経路を阻害し、従って、それらの線維化促進活性を限定することにより、線維芽細胞および腫瘍細胞に作用すると考えられる。それは、多様な癌において線維芽細胞および腫瘍細胞の両方に高発現しているアンジオテンシンII 1型受容体（AT1）の活性を阻害することにより起こる。従って、ロサルタンは、TGFβおよびCTGFの活性化を含む、様々なシグナリング経路におけるAT1の下流の活性を阻害する。これらの2種の経路は、コラーゲンおよび線維組織のその他の成分の産生を促進するため、それらの阻害は、線維症が鎮まることを可能にするであろう。その結果、組織は、正常な周囲の器官にはるかに類似するようになり、従って、浸透がより容易になる。
【０１３２】
ロサルタンによる処置は、膵臓、乳房、皮膚、および軟部組織の腫瘍を含む、いくつかの型の腫瘍において、線維症のマーカーであるコラーゲンレベルを有意に低下させることが、本明細書において示される。さらに、線維症の低下は、腫瘍におけるナノ治療薬の改善された移動性をもたらし、それらがより容易に腫瘍に浸透することを可能にし、これらの薬物が腫瘍の全体により広く分散することを可能にし、腫瘍増大への抵抗においてより有効になるようにする。従って、ロサルタンは、ナノ治療薬を、癌に対してより有効にする。
【０１３３】
より具体的には、出願人は、ロサルタンが、数種の固形腫瘍の間質マトリックスであるコラーゲンを正常化し、それにより、高分子量（例えば、ナノ）化学療法薬のような化学療法薬の浸透を容易にすることを発見した。例えば、ロサルタンは、乳癌生検材料から単離された癌関連線維芽細胞（CAF）においてコラーゲンIレベルを低下させ、マウスにおけるヒトの乳房、膵臓、および皮膚の腫瘍の線維形成性モデルにおいて、基質コラーゲンの用量依存性の低下を引き起こした。ロサルタンは、ナノ粒子（例えば、腫瘍退縮単純ヘルペスウイルス（HSV）およびPEG化リポソームドキソルビシン（DOXIL（登録商標）））の分散、治療効力、および／または浸透も改善した。
【０１３４】
ナノ治療薬よりはるかに小さい低分子量治療薬は、間質マトリックス障壁により限定されないが、異常な血管および崩壊した血管のようなその他の障壁により同様に影響を受ける。
【０１３５】
他の態様において、出願人は、ロサルタンが血管の除圧を容易にし、従って、血管正常化を通して、腫瘍灌流および低分子量化学療法薬の送達を改善し、従って、放射線および化学療法薬の送達を容易にすることを発見した。
【０１３６】
従って、これらの剤は、血管正常化を通して、放射線化学増感剤である酸素ほどの小さい分子の送達を改善し（図18A〜18B）、間質マトリックス正常化を通して、より大きい剤の浸透も増強する（図18C、18D）。腫瘍微小環境全体のこの修復を通して、これらの剤は、乳癌モデルおよび膵臓癌モデルにおいて低分子量化学療法薬およびナノ治療薬の有効性を増強し、低下した腫瘍増大およびより長い動物生存をもたらす（図19A〜19E）。従って、アンジオテンシン阻害剤（例えば、アンジオテンシン受容体遮断薬）およびACE阻害剤は、治療薬の送達を増強することができ、従って、低分子量化学療法薬、低分子化学療法薬、生物製剤、核酸薬剤、およびナノ粒子治療を含む、全てのクラスの抗癌剤との組み合わせ治療のための広い適用可能性を有する。
【０１３７】
アンジオテンシン遮断薬は、他のアプローチに比べて多数の利点を示す。抗血管形成治療は、血管系のみを正常化し、限定された数の適応症のためにのみ認可されている。一方、ARBおよびACE-Iは、管理可能な有害効果を有する降圧剤としてFDAにより認可されている。コラーゲンマトリックスを正常化することができるマトリックス分解酵素は、腫瘍に対して選択的でなく、侵襲および転移を増加させる可能性がある。ARBおよびACE-Iは、正常組織におけるマトリックスリモデリングに関連した有意な合併症を有しておらず、降圧薬として安全である。低分子薬剤であるARBおよびACE-Iは、毒性をさらに限定するため、腫瘍への局在を増強するため、化学療法薬を含有しているナノベクター（例えば、リポソーム、ナノ粒子）を介して送達されてもよい。腫瘍への薬物送達を増強する、FDAにより認可された唯一の補助剤である抗血管形成薬は、血管壁内の「孔」のサイズを低下させ得るため、より大きい粒子についての送達を改善することはできない。アンジオテンシン遮断薬は、抗腫瘍診断薬および抗腫瘍治療の全てのクラスについて送達を改善することができる。
【０１３８】
従って、癌治療薬の送達および／または効力を改善する方法および組成物が、開示される。単一の剤として、または癌治療剤（例えば、大きいナノ治療薬から低分子量化学療法薬および／もしくは酸素までの範囲のサイズの治療剤）との組み合わせとして、降圧剤を対象に投与することにより、癌（例えば、線維形成性腫瘍のような固形腫瘍）を処置するかまたは防止する方法および組成物が、開示される。
【０１３９】
特定の用語を、最初に定義する。
【０１４０】
「約」および「およそ」とは、一般に、測定の性質または精度を考慮した、測定された量について許容される程度の誤差を意味するものとする。誤差の例示的な程度は、所定の値または値の範囲の20パーセント（％）以内、典型的には、10％以内、より典型的には、5％以内、4％以内、3％以内、2％以内、または1％以内である。
【０１４１】
「送達」とは、腫瘍への剤の送達に関して本明細書において使用されるように、所望の効果を有するため、腫瘍血管系、腫瘍間質マトリックス、または腫瘍細胞もしくは腫瘍関連細胞（例えば、線維芽細胞）のうちの一つまたは複数（または全て）に十分に近接して剤が配置されることをさす。剤は、例えば、癌治療（例えば、本明細書に記載される癌治療剤）、診断剤、またはイメージング剤であり得る。他に示されない限り、「剤」という用語は、本明細書において総称的に使用されるように、1種、2種、またはそれ以上の剤を含むことができる。
【０１４２】
一つの態様において、癌治療剤には、例えば、低分子薬物、タンパク質薬物、核酸薬物、腫瘍退縮ウイルス、ワクチン、抗体もしくはその断片、またはそれらの組み合わせのうちの1種または複数種が含まれる。癌治療剤は、「遊離型」であってもよいし、または送達媒体、例えば、粒子、例えば、ナノ粒子（例えば、脂質ナノ粒子、ポリマーナノ粒子、もしくはウイルス粒子）へパッケージングもしくは製剤化されていてもよい。治療剤の送達は、細胞の活性を改変するため、例えば、細胞を死滅させかつ／またはその分裂能を低下させるため、細胞に十分に近接して治療剤が配置されることを特徴とする。
【０１４３】
他の態様において、剤は、診断剤またはイメージング剤（例えば、放射線剤、NMRA剤、造影剤等のうちの1種または複数種）である。診断剤またはイメージング剤は、「遊離型」であってもよいし、または送達媒体へパッケージングもしくは製剤化されていてもよい。診断剤またはイメージング剤の送達は、標的細胞または標的組織の検出を可能にするため、標的細胞または標的組織に十分に近接して剤が配置されることを特徴とする。
【０１４４】
態様において、（AHCMの非存在下で実施されること以外は同一であるかまたは類似している送達と比較した）送達の増加（改善）には、
剤の、腫瘍血管系への送達、または腫瘍血管系における量もしくは濃度の増加；
剤の、腫瘍、例えば、腫瘍血管系間質マトリックスへの送達、または腫瘍、例えば、腫瘍血管系間質マトリックスにおける量もしくは濃度の増加；
剤の、腫瘍細胞もしくは腫瘍関連細胞（例えば、線維芽細胞）への送達、または腫瘍細胞もしくは腫瘍関連細胞（例えば、線維芽細胞）における量もしくは濃度の増加；
腫瘍血管系における流速、例えば、剤の流速の増加；
血管系形態学の改善（または正常化）（例えば、より腫瘍様でなくなること）；
腫瘍血管系の除圧；
腫瘍、例えば、間質マトリックスにおける孔サイズまたは剤の拡散速度の増加；
腫瘍、例えば、間質マトリックスにおける剤の灌流の増加；
剤の、より広いかつ／またはより均質の、腫瘍全体への分散；
剤の、より広いかつ／またはより均質の、腫瘍間質マトリックス全体への分散；
非腫瘍組織、例えば、末梢血に対する、腫瘍、例えば、腫瘍間質マトリックスにおける剤の割合の増加；
腫瘍、例えば、腫瘍血管系間質マトリックスにおけるTGFβ経路の阻害；
腫瘍、例えば、腫瘍血管系間質マトリックスにおけるCTGF経路の阻害；
アンジオテンシンII 1型受容体の活性の阻害；
腫瘍、例えば、腫瘍血管系間質マトリックスにおける線維症の減少；または
腫瘍、例えば、腫瘍血管系間質のマトリックスにおけるコラーゲンまたはコラーゲン沈着の減少
のうちの一つまたは複数が含まれ得る。
【０１４５】
いくつかの態様において、（AHCMの非存在下で実施されること以外は同一であるかまたは類似している送達と比較した）送達の増加（すなわち改善）には、腫瘍の少なくとも一部に分散する剤の量の増加も含まれ得る。いくつかの態様において、AHCMの存在下で腫瘍へ送達される剤の量の増加は、腫瘍全体に均質に分散してもよいしまたは不均質に分散してもよい。
【０１４６】
治療、例えば、癌治療に関して本明細書において使用されるような「効力」とは、検出可能であってもよいしまたは検出不可能であってもよい、症状の軽減、疾患の程度の減少、疾患の安定した状態、疾患進行の遅延または減速、疾患状態の緩解または緩和、および寛解（部分的または完全）を含むが、これらに限定されない、所望の効果を、治療が有する程度として特徴付けられる。
【０１４７】
癌治療の効力に関して、効力の改善は、AHCMによる処置の非存在下で実施されること以外は同一であるかまたは類似している処置と比較した、癌治療の抗腫瘍効果の増加、および／または癌治療の不要な副作用（例えば、毒性）の低下のうちの一つまたは複数を特徴とし得る。一つの態様において、癌治療の抗腫瘍効果の増加には、原発性もしくは転移性の腫瘍の増大の阻害；原発性もしくは転移性の腫瘍の量もしくは体積の低下；転移性病変のサイズもしくは数の低下；新たな転移性病変の発症の阻害；非侵襲性腫瘍の体積もしくは代謝のうちの一つもしくは複数の低下；延長された生存の提供；延長された無進行生存の提供；延長された進行停止時間の提供；および／または生活の質の増強のうちの一つまたは複数が含まれる。
【０１４８】
いくつかの態様において、AHCMと組み合わせられた癌治療に関して、本明細書において使用されるような「効力の改善」という用語は、単独の（即ち、AHCMの非存在下での）癌治療における原発性または転移性の腫瘍の増大の低下と比較した、少なくとも約5％、少なくとも約10％、少なくとも約20％、少なくとも約30％、少なくとも約40％、少なくとも約50％、少なくとも約60％、少なくとも約70％、少なくとも約80％、少なくとも約90％、少なくとも約95％、最大100％の、原発性または転移性の腫瘍の増大の低下の増加をさすことができる。いくつかの態様において、癌治療と組み合わせられたAHCMの投与は、単独の（即ち、AHCMの非存在下での）癌治療における原発性または転移性の腫瘍の増大の低下と比較して、少なくとも約1倍、少なくとも約2倍、少なくとも約3倍、少なくとも約5倍、少なくとも約6倍、少なくとも約7倍、またはそれ以上、原発性または転移性の腫瘍の増大の低下を増加させることができる。インビボの腫瘍増大をモニタリングする方法、例えば、これらに限定されないが、X線、CTスキャン、MRI、およびその他の当技術分野において認識されている医学的画像化法は、当技術分野において周知である。
【０１４９】
いくつかの態様において、AHCMと組み合わせられた癌治療に関して、本明細書において使用されるような「効力の改善」という用語は、単独の（即ち、AHCMの非存在下での）抗癌剤の灌流と比較した、例えば、少なくとも約5％、少なくとも約10％、少なくとも約20％、少なくとも約30％、少なくとも約40％、少なくとも約50％、少なくとも約60％、少なくとも約70％、少なくとも約80％、少なくとも約90％、少なくとも約95％、最大100％の、抗癌剤（例えば、低分子量治療薬またはDOXIL（登録商標）のようなナノ治療薬）の腫瘍への灌流の増加をさすことができる。いくつかの態様において、癌治療と組み合わせられたAHCMの投与は、単独の（即ち、AHCMの非存在下での）抗癌剤の灌流効率と比較して、少なくとも約1倍、少なくとも約2倍、少なくとも約3倍、少なくとも約5倍、少なくとも約6倍、少なくとも約7倍、またはそれ以上、抗癌剤（例えば、低分子量治療薬またはDOXIL（登録商標）のようなナノ治療薬）の腫瘍への灌流を増加させることができる。ポジトロン放出断層撮影（PET）および超音波または造影超音波を含むが、これらに限定されない、インビボの腫瘍灌流をモニタリングする方法は、当技術分野においてよく確立されている。
【０１５０】
いくつかの態様において、AHCMと組み合わせられた癌治療に関して、本明細書において使用されるような「効力の改善」という用語は、単独で（即ち、AHCMの非存在下で）癌治療が投与された時の少なくとも1種の癌バイオマーカーの発現レベルの低下と比較した、例えば、少なくとも約5％、少なくとも約10％、少なくとも約20％、少なくとも約30％、少なくとも約40％、少なくとも約50％、少なくとも約60％、少なくとも約70％、少なくとも約80％、少なくとも約90％、少なくとも約95％、最大100％の、（例えば、血液試料、血清試料、血漿試料、または組織生検材料のような生物学的試料における）少なくとも1種の癌バイオマーカーの発現レベルの低下の増加をさすことができる。いくつかの態様において、癌治療と組み合わせられたAHCMの投与は、単独で（即ち、AHCMの非存在下で）癌治療が投与された時の少なくとも1種の癌バイオマーカーの発現レベルの低下と比較して、少なくとも約1倍、少なくとも約2倍、少なくとも約3倍、少なくとも約5倍、少なくとも約6倍、少なくとも約7倍、またはそれ以上、（例えば、血液試料、血清試料、血漿試料、または組織生検材料のような生物学的試料における）少なくとも1種の癌バイオマーカーの発現レベルの低下を増加させることができる。血清／血漿癌バイオマーカーの例には、TGFβ1、TGFβ2、CTGF、TSP-1、コラーゲンI、コラーゲンII、コラーゲンIII、コラーゲンIVが含まれ得るが、これらに限定されない。血清／血漿癌バイオマーカーの発現レベルは、当技術分野において認識されている分析法、例えば、PCR、ウエスタンブロット、ELISA、および／または免疫染色を使用して、転写物レベルおよび／またはタンパク質レベルで測定され得る。
【０１５１】
「血圧」は、一般的に、収縮期血圧および拡張期血圧に基づき分類される。「収縮期血圧」またはPsysとは、心拍動中の血管内の血圧をさす。「拡張期血圧」またはPdiasとは、心拍動の間の圧力をさす。個体の年齢について認められている正常値より高い収縮期血圧または拡張期血圧の測定値は、高血圧前症または高血圧症として分類される。個体の年齢について認められている正常値より低い収縮期血圧または拡張期血圧の測定値は、低血圧症として分類される。成人についての「正常」収縮期圧は、典型的には、90〜120mmHgの範囲にあり；「正常」拡張期圧は、一般的に、60〜80mmHgの範囲にある。集団において、平均血圧（Psys/Pdias比）は、成人については110/65〜140/90mmHg；1歳児については95/65mmHg、6〜9歳については100/65mmHgの範囲であり得る。
【０１５２】
高血圧症は、高血圧前症（120/80〜139/89mmHg）；I度高血圧症（140/90〜159/99mmHg）、II度高血圧症（160/100mmHg以上）、収縮期高血圧症（140/90mmHg以上）を含むいくつかの亜分類を有する。収縮期高血圧症とは、収縮期圧は上昇しているが、拡張期圧は正常であるものをさし、高齢者に多い。これらの分類は、2回以上の受診で得られた患者の安静時血圧読み取りを平均化した後、なされる。
【０１５３】
高血圧症は、一般に、持続的に高い血圧に基づき診断される。一般的に、これは、少なくとも1週間間隔での3回の別々の血圧計測定を必要とする。しばしば、これは、医療機関への3回の別々の来診を要する。高血圧症患者の初期査定は、完全な病歴および身体検査を含むべきである。
【０１５４】
本明細書において使用されるように、「高血圧症」または「高血圧」とは、120以上（典型的には、140以上）の収縮期圧および80以上の拡張期圧を有する高血圧前症または高血圧症の段階をさす（本明細書中、全ての血圧がmmHgとして表される）。
【０１５５】
本明細書において使用されるように、「平均動脈圧」（MAP）という用語は、当技術分野において認識されており、心臓周期における平均をさし、心拍出量（CO）、全身血管抵抗（SVR）、および中心静脈圧（CVP）により決定される（MAP＝（CO×SVR）＋CVP）。正常安静時心拍数が存在する時、MAPは、収縮期圧（Psys）および拡張期圧（Pdias）の測定値からおよそ決定され得、MAPは、およそPdias＋1/3（Psys−Pdias）である。
【０１５６】
「降圧剤」とは、本明細書において使用されるように、選択された用量（本明細書において「降圧用量」と呼ばれる）で投与された時に、典型的には、患者（例えば、高血圧症患者）において、血圧を低下させる剤（例えば、化合物、タンパク質）をさす。降圧剤は、当技術分野において公知の用量で、高血圧を有する患者を処置するためにルーチンに臨床的に使用されている。例示的な降圧剤には、レニンアンジオテンシンアルドステロン系アンタゴニスト（「RAASアンタゴニスト」）、アンジオテンシン変換酵素（ACE）阻害剤、およびアンジオテンシンII受容体遮断薬（AT1遮断薬）が含まれるが、これらに限定されない。これらの剤のうちのいくつかの例示的な降圧用量も、本明細書に開示される。
【０１５７】
「非降圧用量」とは、本明細書において使用されるように、典型的には、高血圧のため患者を処置するために使用されるであろう最低用量より少ない、降圧剤の用量をさす。一態様において、非降圧用量は、以下の特性のうちの一つまたは複数を有する：
対象、例えば、高血圧症対象の血圧、例えば、平均動脈血圧を実質的に低下させない；
対象の平均動脈血圧を、1％未満、5％未満、10％未満、15％未満、20％未満、25％未満、30％未満、35％未満、40％未満、45％未満、50％未満、低下させる；
そのAHCMについての医療降圧用量の標準により引き起こされる低下の1％未満、5％未満、10％未満、15％未満、20％未満、25％未満、30％未満、35％未満、40％未満、45％未満、50％未満、60％未満、70％未満、80％未満、90％未満、またはそれ以下に、血圧を低下させる；
対象の血圧を正常範囲、例えば、120収縮期および80拡張期にするであろうそのAHCMの用量、もしくは対象の血圧を120+/-5収縮期および80+/-5拡張期の範囲にするであろう用量の1％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、60％、70％、80％、90％より少ない；または
医療降圧用量の標準より少ない。
【０１５８】
ある種の態様において、ある用量の、これらの基準のうちの一つまたは複数を満たす能力は、予め選択された回数、例えば、1回、2回、5回、もしくは10回の投薬の後、または定常状態レベル、例えば、血漿レベルが達成されるのに十分な投薬の後、測定され得る。
【０１５９】
「AHCM」とは、本明細書において使用されるように、以下の特性のうちの一つまたは複数を有する剤であり得る：
レニンアンジオテンシンアルドステロン系のアンタゴニスト（「RAASアンタゴニスト」）である、
アンジオテンシン変換酵素（ACE）阻害剤である、
アンジオテンシンII受容体遮断薬（AT1遮断薬）である、
トロンボスポンジン1（TSP-1）阻害剤である、
トランスフォーミング増殖因子β1（TGFβ1）阻害剤である、または
結合組織増殖因子（CTGF）阻害剤である。
【０１６０】
腫瘍の「処置」とは、本明細書において使用されるように、典型的には、
原発性もしくは転移性の腫瘍の増大の阻害；
原発性もしくは転移性の腫瘍の量もしくは体積の低下；
転移性病変のサイズもしくは数の低下；
新たな転移性病変の発症の阻害；
非侵襲性腫瘍の体積もしくは代謝のうちの一つもしくは複数の低下；
延長された生存の提供；
延長された無進行生存の提供；
延長された進行停止時間の提供；および／または
生活の質の増強
のうちの一つまたは複数をさす。
【０１６１】
本発明の様々な局面を、さらに詳細に以下に記載する。付加的な定義は、本明細書の全体で示される。
【０１６２】
降圧かつ／またはコラーゲン修飾剤（AHCM剤）
ある種の態様において、本発明の方法および組成物において使用されるAHCM剤は、レニンアンジオテンシンアルドステロン系のアンタゴニスト（「RAASアンタゴニスト」）、アンジオテンシン変換酵素（ACE）阻害剤、アンジオテンシンII受容体遮断薬（AT1遮断薬）、トロンボスポンジン1（TSP-1）阻害剤、トランスフォーミング増殖因子β1（TGFβ1）阻害剤、および結合組織増殖因子（CTGF）阻害剤のうちの1種または複数種から選ばれ得る。方法は、単独で、または1種もしくは複数種の癌治療薬と組み合わせて、1種、2種、3種、またはそれ以上のAHCM剤を含み得る。
【０１６３】
レニンアンジオテンシンアルドステロン系（RAAS）の例示的なアンタゴニストには、アリスキレン（TEKTURNA（登録商標）、RASILEZ（登録商標））、レミキレン（Ro 42-5892）、エナルキレン（A-64662）、SPP635、およびそれらの誘導体が含まれるが、これらに限定されない。
【０１６４】
例示的なアンジオテンシン変換酵素（ACE）阻害剤には、ベナゼプリル（LOTENSIN（登録商標））、カプトプリル（CAPOTEN（登録商標））、エナラプリル（VASOTEC（登録商標））、ホシノプリル（MONOPRIL（登録商標））、リシノプリル（PRINIVIL（登録商標）、ZESTRIL（登録商標））、モエキシプリル（UNIVASC（登録商標））、ペリンドプリル（ACEON（登録商標））、キナプリル（ACCUPRIL（登録商標））、ラミプリル（ALTACE（登録商標））、トランドラプリル（MAVIK（登録商標））、およびそれらの誘導体が含まれるが、これらに限定されない。
【０１６５】
例示的なアンジオテンシンII受容体遮断薬（AT1遮断薬）には、ロサルタン（COZAAR（登録商標））、カンデサルタン（ATACAND（登録商標））、メシル酸エプロサルタン（TEVETEN（登録商標））、EXP 3174、イルベサルタン（AVAPRO（登録商標））、L158,809、オルメサルタン（BENICAR（登録商標））、サララシン、テルミサルタン（MICARDIS（登録商標））、バルサルタン（DIOVAN（登録商標））、およびそれらの誘導体が含まれるが、これらに限定されない。
【０１６６】
一つの態様において、AT1遮断薬は、ロサルタンまたはその誘導体である。ロサルタンは、最小限の安全性リスクを有する降圧剤である（Johnston CI(1995)Lancet 346:1403-1407）。さらに、降圧特性に加えて、ロサルタンは、心臓および腎臓の線維症の罹患率を低下させることが示されている抗線維症剤でもある（Habashi JP,et al.(2006)Science 312:117-121；およびCohn RD,et al.(2007)Nat Med 13:204-210）。ロサルタンの抗線維症効果は、トロンボスポンジン1（TSP-1）のようなTGFβ1活性化因子のアンジオテンシンII I型受容体（AGTR1）により媒介されるダウンレギュレーションを介した活性トランスフォーミング増殖因子β1（TGFβ1）レベルの抑制により、一部分、引き起こされる（Habashi JP,et al.(2006)Science 312:117-121；Cohn RD,et al.(2007)Nat Med 13:204-210；Lavoie P,et al.(2005)J Hypertens 23:1895-1903；Chamberlain JS(2007)Nat Med 13:125-126；およびDietz HC(2010)J Clin Invest 120:403-407）。
【０１６７】
例示的なトロンボスポンジン1（TSP-1）阻害剤には、ABT-510、CVX-045、LSKL、およびそれらの誘導体が含まれるが、これらに限定されない。
【０１６８】
例示的なトランスフォーミング増殖因子β1（TGFβ1）阻害剤には、CAT-192、フレソリムマブ（GC1008）、LY 2157299、ペプチド144（P144）、SB-431542、SD-208、米国特許第7,846,908号および米国特許出願公開第2011/0008364号に記載された化合物、ならびにそれらの誘導体が含まれるが、これらに限定されない。
【０１６９】
例示的な結合組織増殖因子（CTGF）阻害剤には、DN-9693、FG-3019、および欧州特許出願公開第1839655号、米国特許第7,622,454号に記載された化合物、ならびにそれらの誘導体が含まれるが、これらに限定されない。
【０１７０】
例示的なβ遮断薬には、アテノロール（TENORMIN（登録商標））、ベタキソロール（KERLONE（登録商標））、ビソプロロール（ZEBETA（登録商標））、メトプロロール（LOPRESSOR（登録商標））、メトプロロール長期放出型（TOPROL XI（登録商標））、ナドロール（CORGARD（登録商標））、プロプラノロール（INDERAL（登録商標））、プロプラノロール長時間作用型（INDERAL LA（登録商標））、チモロール（BLOCADREN（登録商標））、アセブトロール（SECTRAL（登録商標））、ペンブトロール（LEVATOL（登録商標））、ピンドロール、カルベジロール（COREG（登録商標））、ラベタロール（NORMODYNE（登録商標）、TRANDATE（登録商標））、およびそれらの誘導体が含まれるが、これらに限定されない。
【０１７１】
一つの態様において、AHCM剤は、TGFβ1阻害剤、例えば、抗TGFβ1抗体、TGFβ1ペプチド阻害剤である。ある種の態様において、TGFβ1阻害剤は、CAT-192、フレソリムマブ（GC1008）、LY 2157299、ペプチド144（P144）、SB-431542、SD-208、米国特許第7,846,908号および米国特許出願公開第2011/0008364号に記載された化合物、またはそれらの誘導体のうちの1種または複数種から選ばれる。
【０１７２】
AHCM剤の投与のための適当な用量は、当技術分野において入手可能なAHCM剤の医療降圧用量の標準に基づき、評価され得る。
【０１７３】
ヒトにおけるAT1阻害剤についての降圧および抗心不全のための医療用量および医療投薬製剤の例示的な標準は、以下の通りである：約25〜100mg/日のロサルタン（約12.5mg、25mg、50mg、または100mgのロサルタンを含有している経口投与用の剤形で入手可能）；4〜32mg/日のカンデサルタン（ATACAND（登録商標））（例えば、4mg、8mg、16mg、または32mgのカンデサルタンを含有している経口投与用の剤形で入手可能）；400〜800mg/日のメシル酸エプロサルタン（TEVETEN（登録商標））（例えば、400mgまたは600mgのエプロサルタンを含有している経口投与用の剤形で入手可能）；150〜300mg/日のイルベサルタン（AVAPRO（登録商標））（例えば、150mgまたは300mgのイルベサルタンを含有している経口投与用の剤形で入手可能）；20〜40mg/日のオルメサルタン（BENICAR（登録商標））（5mg、20mg、または40mgのオルメサルタンを含有している経口投与用の剤形で入手可能）；20〜80mg/日のテルミサルタン（MICARDIS（登録商標））（例えば、20mg、40mg、または80mgのテルミサルタンを含有している経口投与用の剤形で入手可能）；および80〜320mg/日のバルサルタン（DIOVAN（登録商標））（例えば、40mg、80mg、160mg、または320mgのバルサルタンを含有している経口投与用の剤形で入手可能）。
【０１７４】
ヒトにおけるACE阻害剤についての降圧および抗心不全のための医療用量および医療投薬製剤の例示的な標準は、以下の通りである：10〜40mg/日のベナゼプリル（LOTENSIN（登録商標））（Lotensin（ベナゼプリル）は、5mg、10mg、20mg、または40mgのベナゼプリル塩酸塩を含有している経口投与用の錠剤として供給される）；25〜100mg/日のカプトプリル（CAPOTEN（登録商標））（約12.5mg、25mg、50mg、または100mgのカプトプリルを含有している経口投与用の剤形で入手可能）；5〜40mg/日のエナラプリル（VASOTEC（登録商標））（2.5mg、5mg、10mg、または20mgのエナラプリルを含有している経口投与用の剤形で入手可能）；10〜40mg/日のホシノプリル（MONOPRIL（登録商標））（10mg、20mg、または40mgのホシノプリルを含有している経口投与用の剤形で入手可能）；10〜40mg/日のリシノプリル（PRINIVIL（登録商標）、ZESTRIL（登録商標））（2.5mg、5mg、10mg、20mg、30mg、または40mgのリシノプリルを含有している経口投与用の剤形で入手可能）；7.5〜30mg/日のモエキシプリル（UNIVASC（登録商標））（7.5mgまたは15mgのモエキシプリルを含有している経口投与用の剤形で入手可能）；4〜8mg/日のペリンドプリル（ACEON（登録商標））（例えば、2mg、4mg、または8mgのペリンドプリルを含有している経口投与用の剤形で入手可能）、10〜80mg/日のキナプリル（ACCUPRIL（登録商標））（5mg、10mg、20mg、または40mgのキナプリルを含有している経口投与用の剤形で入手可能）；2.5〜20mg/日のラミプリル（ALTACE（登録商標））（1.25mg、2.5mg、5mg、または10mgのラミプリルを含有している経口投与用の剤形で入手可能）；1〜4mg/日のトランドラプリル（MAVIK（登録商標））（1mg、2mg、または4mgのトランドラプリルを含有している経口投与用の剤形で入手可能）。
【０１７５】
一つの態様において、AHCM剤は、降圧および抗心不全のための標準医療用量および標準医療投薬製剤、例えば、本明細書に記載される用量または投薬製剤で投与される。
【０１７６】
ある種の態様において、AHCM剤の非降圧用量または非降圧投薬製剤、例えば、標準医療用量または標準医療投薬製剤より少ないAHCM剤の用量が望ましい。一つの態様において、非降圧用量または非降圧投薬製剤は、高血圧症対象における血圧に対して最小限の効果を有する（例えば、高血圧症対象における平均動脈血圧を、20％未満、10％未満、5％未満、またはそれ以下に、減少させる）。ある種の態様において、AHCM剤は、医療降圧用量の標準（例えば、医療用量のより低い標準）の0.01、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9より少ない用量または投薬製剤で投与される。一つの態様において、用量または投薬製剤は、降圧または抗心不全のために使用される標準医療用量または標準医療投薬製剤の、例えば、0.01〜0.9倍、0.02〜0.8倍、0.05〜0.7倍、0.1〜0.5倍、0.1〜0.2倍の範囲である。AHCMの標準医療用量または標準医療投薬製剤は、当技術分野において入手可能であり、そのうちのいくつかが本明細書において例示される。
【０１７７】
さらに他の態様において、AHCM剤は、降圧または抗心不全のために使用される標準医療用量または標準医療投薬製剤より多い用量または投薬製剤（例えば、降圧または抗心不全のために使用される標準医療用量の1.1倍、1.5倍、1.7倍、2倍、3倍、4倍、5倍、10倍、またはそれ以上である用量または剤形）で投与される。一つの態様において、用量または投薬製剤は、降圧または抗心不全のために使用される標準医療用量または標準医療投薬製剤の、例えば、1.1〜10倍、1.5〜5倍、1.7〜4倍、または2〜3倍の範囲である。AHCMの標準医療用量または標準医療投薬製剤は、当技術分野において入手可能であり、そのうちのいくつかが本明細書において例示される。
【０１７８】
多数のAHCM、例えば、ロサルタンについての標準医療用量および標準医療剤形が、本明細書に提供される。一態様において、用量および／または剤形は、標準医療用量および／または標準医療剤形より低い（または高い）。例示的な態様において、それは、標準医療用量または標準医療剤形の0.01倍、0.02倍、0.05倍、0.1倍、0.2倍、0.5倍、0.7倍、0.8倍、0.9倍より低い。態様において、用量または剤形は、標準医療用量および／または標準医療剤形の低下した量の範囲内である量のAHCMを含有している。例えば、標準医療用量または標準医療剤形の0.01〜0.9倍、0.02〜0.8倍、0.05〜0.7倍、0.1〜0.5倍、0.1〜0.2倍であるAHCM剤形。ある種の態様において、用量または剤形の値が、標準医療用量または標準医療剤形より低い限り、用量または剤形の範囲は、本明細書に記述された低下した用量または剤形の0.5〜2.0倍である。例えば、ロサルタンについての標準医療剤形は、12.5mgである。従って、態様において、剤形は、0.125mg（.01×12.5mg）；0.625mg（0.05×12.5mg）；1.25mg（0.1×12.5mg）；2.5mg（0.2×12.5mg）；または6.25mg（0.5×12.5mg）である。一態様において、AHCM剤形は、用量または剤形の値が、標準医療用量または標準医療剤形より低い限り、0.5〜2.0（.125mg）＝0.0625〜0.25mg；0.5〜2.0（.625mg）＝0.312〜1.25mg；等である。この計算は、本明細書に記載された任意のAHCMについての標準医療用量および／または標準医療剤形に適用され得る。ある種の態様において、値は、医療値の標準より低い。他の態様において、値は、医療値の標準より高い。
【０１７９】
一つの態様において、AHCM剤の用量は、腫瘍試料における線維症の重度に基づき計算される。
【０１８０】
いくつかの態様において、AHCM剤の用量は、単独で投与された時には、抗腫瘍効果を有しない、例えば、腫瘍の増大または進行を阻害するかまたは防止する有意な効果を有しない、非降圧用量であり得る。いくつかの態様において、AHCM剤の用量は、降圧または抗心不全のために使用される標準医療用量または標準医療投薬製剤と比較可能であるかまたはそれより大きくてもよく、単独で投与された時には、抗腫瘍効果を有しない、例えば、腫瘍の増大または進行を阻害するかまたは防止する有意な効果を有しない。
【０１８１】
治療法
一つの局面において、本発明は、単独で、または治療剤、例えば、本明細書に記載される抗癌剤と組み合わせて、AHCM剤を対象に投与することにより、過剰増殖性障害（例えば、癌）を処置する方法に関する。
【０１８２】
本明細書において使用されるように、他に特記されない限り、「処置する」、「処置すること」、および「処置」という用語は、望ましくない生理学的変化または癌の発症もしくは蔓延のような障害を防止するかまたは遅くする（低下させる）ことを目的とした、治療的処置および予防的または防止的な措置の両方をさす。有益なまたは所望の臨床結果には、検出可能であってもよいしまたは検出不可能であってもよい、症状の軽減、疾患の程度の減少、疾患の安定した（即ち、悪化しない）状態、疾患進行の遅延または減速、疾患状態の緩解または緩和、および寛解（部分的または完全）が含まれる。「処置」とは、処置を受容しない場合に予想される生存と比較した生存の延長も意味し得る。処置を必要とする者には、状態もしくは障害を既に有する者が含まれ、状態もしくは障害を有する傾向がある者、または状態もしくは障害が防止されるべき者も含まれる。
【０１８３】
例えば、癌の処置の場合、いくつかの態様において、治療的処置とは、本明細書に記載された方法による投与、または本明細書に記載された薬学的組成物の投与の後の、腫瘍の増大または進行の阻害または低下をさすことができる。例えば、腫瘍の増大または進行は、処置の後、少なくとも約10％、少なくとも約15％、少なくとも約20％、少なくとも約30％、少なくとも約40％、または少なくとも約50％、阻害されるかまたは低下する。もう一つの態様において、腫瘍の増大または進行は、処置の後、50％超、例えば、少なくとも約60％または少なくとも約70％、阻害されるかまたは低下する。一つの態様において、腫瘍の増大または進行は、（例えば、本明細書に記載された薬学的組成物の非存在下における）対照と比較して、少なくとも約80％、少なくとも約90％、またはそれ以上、阻害されるかまたは低下する。
【０１８４】
もう一つの態様において、治療的処置とは、癌に関連した少なくとも一つの症状の軽減をさす。測定可能な低下には、処置の後の、血液試料中の血清／血漿癌バイオマーカーなどの癌バイオマーカーといった、測定可能なマーカーまたは症状の統計的に有意な低下が含まれる。一つの態様において、少なくとも1種の癌バイオマーカーまたは症状は、少なくとも約10％、少なくとも約15％、少なくとも約20％、少なくとも約30％、少なくとも約40％、または少なくとも約50％、軽減される。もう一つの態様において、少なくとも1種の癌バイオマーカーまたは症状は、50％超、例えば、少なくとも約60％または少なくとも約70％、軽減される。一つの態様において、少なくとも1種の癌バイオマーカーまたは症状は、（例えば、本明細書に記載された薬学的組成物の非存在下における）対照と比較して、少なくとも約80％、少なくとも約90％、またはそれ以上、軽減される。
【０１８５】
本明細書において使用されるように、他に特記されない限り、「防止する」、「防止すること」、および「防止」という用語は、患者が癌の再増大に罹患し始める前に行われ、かつ／または癌の重度を阻害するかもしくは低下させる行為を企図する。
【０１８６】
本明細書において使用されるように、他に特記されない限り、化合物の「治療的に有効な量」とは、障害（例えば、癌）の処置において治療的利益を提供するか、または障害（例えば、癌）に関連した一つもしくは複数の症状を遅延させるかもしくは最小化するのに十分な量である。化合物の治療的に有効な量とは、単独で、または他の治療剤と組み合わせて、障害の処置または管理において治療的利益を提供する、治療剤の量を意味する。「治療的に有効な量」という用語には、障害（例えば、癌）の治療全体を改善するか、その症状もしくは原因を低下させるかもしくは回避するか、またはもう一つの治療剤の治療効力を増強する量が包含され得る。
【０１８７】
本明細書において使用されるように、他に特記されない限り、化合物の「予防的に有効な量」とは、障害（例えば、癌の再増大、もしくは癌に関連した一つもしくは複数の症状）を防止するか、またはその再発を防止するのに十分な量である。化合物の予防的に有効な量とは、単独で、または他の治療剤と組み合わせて、障害の防止において予防的利益を提供する化合物の量を意味する。「予防的に有効な量」という用語には、予防全体を改善するか、またはもう一つの予防剤の予防効力を増強する量が包含され得る。
【０１８８】
本明細書において使用されるように、「患者」または「対象」という用語は、処置、観察、および／または実験の対象になるであろうまたは対象になった、動物、典型的には、ヒト（即ち、任意の年齢群の男女、例えば、小児科患者（例えば、乳児、子供、青年）もしくは成人患者（例えば、若年成人、中年成人、もしくは高齢成人）、または霊長類（例えば、カニクイザル、アカゲザル）；ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ネコ、および／もしくはイヌのような商業的に重要な哺乳動物；ならびに／もしくはニワトリ、アヒル、カモ、および／もしくはシチメンチョウのような商業的に重要なトリを含むトリのようなその他の哺乳動物をさす。その用語が化合物または薬物の投与と共に使用される時には、患者は、その化合物または薬物の処置、観察、および／または投与の対象となった。本明細書に記載された方法および／または薬学的組成物は、ネコおよびイヌのような家畜またはペットを処置するためにも使用され得る。
【０１８９】
本明細書において使用されるように、「癌」および「腫瘍」は同義語である。
【０１９０】
本明細書において使用されるように、「癌治療」および「癌処置」は同義語である。
【０１９１】
本明細書において使用されるように、「化学療法」、「化学療法薬」、「化学療法剤」、および「抗癌剤」は同義語である。
【０１９２】
いくつかの態様において、単独のまたは組み合わせられたAHCM剤は、癌のための一次処置であり、即ち、癌を処置することを目的としたもう1種の薬物を以前に投与されたことがない対象において使用される。
【０１９３】
他の態様において、単独のまたは組み合わせられたAHCM剤は、癌のための二次処置であり、即ち、癌を処置することを目的としたもう1種の薬物を以前に投与されたことがある対象において使用される。
【０１９４】
他の態様において、単独のまたは組み合わせられたAHCM剤は、癌のための三次または四次の処置であり、即ち、癌を処置することを目的とした2種または3種の他の薬物を以前に投与されたことがある対象において使用される。
【０１９５】
いくつかの態様において、AHCM剤は、癌の放射線処置または外科的処置の前、途中、および／または後に、対象に投与される。
【０１９６】
いくつかの態様において、AHCM剤は、少なくとも2種、少なくとも3種、もしくは少なくとも4種の癌治療もしくは抗癌剤を含む、少なくとも1種の癌治療もしくは抗癌剤に以前に応答しなかった対象に、単独で、または癌治療もしくは抗癌剤と組み合わせて投与される。そのような態様において、AHCM剤は、その対象が以前に応答しなかった癌治療もしくは抗癌剤と組み合わせて対象に投与されてもよいし、または対象が処置されたのとは異なる癌治療もしくは抗癌剤と組み合わせて対象に投与されてもよい。
【０１９７】
他の態様において、AHCM剤は、補助治療、即ち、主治療に付加される処置として投与される。態様において、主治療と組み合わせて投与されるAHCMのアジュバント効果は、相加的であり得る。
【０１９８】
ある種の態様において、癌は、上皮、間葉系、または血液系の悪性疾患である。ある種の態様において、処置される癌は、固形腫瘍（例えば、カルチノイド、癌腫、または肉腫）、軟部組織腫瘍（例えば、ヘム悪性疾患）、および転移性病変、例えば、本明細書に開示された癌のいずれかの転移性病変である。一つの態様において、処置される癌は、線維性または線維形成性の固形腫瘍、例えば、限定された腫瘍灌流、圧縮された血管、または線維性腫瘍間質のうちの一つまたは複数を有する腫瘍である。一つの態様において、固形腫瘍は、膵臓癌（例えば、膵臓腺癌）、乳癌、結腸直腸癌、肺癌（例えば、小細胞肺癌（SCLC）もしくは非小細胞肺癌（NSCLC））、皮膚癌、卵巣癌、肝臓癌、食道癌、子宮内膜癌、胃癌、頭頸部癌、腎臓癌、または前立腺癌のうちの1種または複数種から選ばれる。
【０１９９】
「過剰増殖性癌疾患または過剰増殖性癌障害」とは、全ての形質転換された細胞および組織ならびに全ての癌性の細胞および組織を含む、悪性であるかまたは良性であるかに関わらない、全ての新生物細胞の増大および増殖を意味する。過剰増殖性疾患または過剰増殖性障害には、前癌病変、異常細胞増大、良性腫瘍、悪性腫瘍、および「癌」が含まれるが、これらに限定されない。
【０２００】
本明細書において使用されるように、「癌」、「腫瘍」、または「腫瘍組織」という用語は、過度の細胞分裂に起因する異常な量の組織、ある種の場合には、過剰増殖性細胞タンパク質を発現しているか、過剰発現しているか、または異常に発現している細胞を含む組織をさす。癌、腫瘍、または腫瘍組織は、異常な増大特性を有し、有用な身体機能を有しない新生物細胞である「腫瘍細胞」を含む。癌、腫瘍、腫瘍組織、および腫瘍細胞は、良性または悪性であり得る。癌、腫瘍、または腫瘍組織は、「腫瘍関連非腫瘍細胞」、例えば、腫瘍または腫瘍組織に供給する血管を形成する血管細胞も含み得る。非腫瘍細胞は、腫瘍細胞により、複製し発達するよう誘導され得る（例えば、腫瘍または腫瘍組織における血管形成の誘導）。
【０２０１】
癌の例には、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、および白血病、またはリンパ系悪性疾患が含まれるが、これらに限定されない。そのような癌のより具体的な例は、以下に示され、以下のものを含む：扁平上皮癌（例えば、上皮性扁平上皮癌）、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺腺癌、および肺扁平上皮癌を含む肺癌、腹膜の癌、肝細胞癌、胃腸癌を含む胃癌、膵臓癌、膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、ヘパトーマ、乳癌、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜癌または子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝癌、肛門癌、陰茎癌、ならびに頭頸部癌。「癌」という用語には、原発性の悪性細胞または悪性腫瘍（例えば、最初の悪性疾患または腫瘍の部位以外の対象の身体部位へ細胞が遊走していないもの）、および二次性の悪性細胞または悪性腫瘍（例えば、悪性細胞または腫瘍細胞の転移、即ち、最初の腫瘍の部位とは異なる二次部位への遊走から発生したもの）が含まれる。
【０２０２】
癌または悪性疾患のその他の例には、急性小児リンパ芽球性白血病、急性リンパ芽球性白血病、急性リンパ球性白血病、急性骨髄球性白血病、副腎皮質癌、成人（原発性）肝細胞癌、成人（原発性）肝臓癌、成人急性リンパ球性白血病、成人急性骨髄球性白血病、成人ホジキン病、成人ホジキンリンパ腫、成人リンパ球性白血病、成人非ホジキンリンパ腫、成人原発性肝臓癌、成人軟部組織肉腫、エイズ関連リンパ腫、エイズ関連悪性疾患、肛門癌、星状細胞腫、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脳幹神経膠腫、脳腫瘍、乳癌、腎盂尿管癌、中枢神経系（原発性）リンパ腫、中枢神経系リンパ腫、小脳星状細胞腫、大脳星状細胞腫、子宮頸癌、小児（原発性）肝細胞癌、小児（原発性）肝臓癌、小児急性リンパ芽球性白血病、小児急性骨髄球性白血病、小児脳幹神経膠腫、小児小脳星状細胞腫、小児大脳星状細胞腫、小児頭蓋外胚細胞腫瘍、小児ホジキン病、小児ホジキンリンパ腫、小児視床下部視覚路神経膠腫、小児リンパ芽球性白血病、小児髄芽腫、小児非ホジキンリンパ腫、小児松果体テント上原始神経外胚葉性腫瘍、小児原発性肝臓癌、小児横紋筋肉腫、小児軟部組織肉腫、小児視覚路視床下部神経膠腫、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髄性白血病、結腸癌、皮膚T細胞リンパ腫、膵島細胞癌、子宮内膜癌、上衣細胞腫、上皮癌、食道癌、ユーイング肉腫および関連腫瘍、膵外分泌癌、頭蓋外胚細胞腫瘍、性腺外胚細胞腫瘍、肝外胆管癌、眼癌、女性乳癌、ゴーシェ病、胆嚢癌、胃癌、胃腸カルチノイド腫瘍、胃腸腫瘍、胚細胞腫瘍、妊娠性トロホブラスト腫瘍、ヘアリーセル白血病、頭頸部癌、肝細胞癌、ホジキン病、ホジキンリンパ腫、高ガンマグロブリン血症、下咽頭癌、腸癌、眼球内黒色腫、島細胞癌、膵島細胞癌、カポジ肉腫、腎臓癌、喉頭癌、口唇口腔癌、肝臓癌、肺癌、リンパ球増殖性障害、マクログロブリン血症、男性乳癌、悪性中皮腫、悪性胸腺腫、髄芽腫、黒色腫、中皮腫、原発不明転移性扁平上皮性頚部癌、転移性原発性扁平上皮性頚部癌、転移性扁平上皮性頚部癌、多発性骨髄腫、多発性骨髄腫／形質細胞新生物、脊髄異形成症候群、骨髄性白血病、骨髄球性白血病、骨髄増殖性障害、鼻腔副鼻腔癌、上咽頭癌、神経芽腫、妊娠時の非ホジキンリンパ腫、非黒色腫皮膚癌、非小細胞肺癌、原発不明転移性扁平上皮性頚部癌、中咽頭癌、骨／悪性線維性肉腫、骨肉腫／悪性線維性組織球腫、骨肉腫／骨の悪性線維性組織球腫、卵巣上皮癌、卵巣胚細胞腫瘍、卵巣低悪性度腫瘍、膵臓癌、パラプロテイン血症、紫斑病、副甲状腺癌、陰茎癌、褐色細胞腫、下垂体腫瘍、形質細胞新生物／多発性骨髄腫、原発性中枢神経系リンパ腫、原発性肝臓癌、前立腺癌、直腸癌、腎細胞癌、腎盂尿管癌、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、唾液腺癌、サルコイドーシス肉腫、セザリー症候群、皮膚癌、小細胞肺癌、小腸癌、軟部組織肉腫、扁平上皮性頚部癌、胃癌、テント上原始神経外胚葉性松果体腫瘍、T細胞リンパ腫、精巣癌、胸腺腫、甲状腺癌、腎盂および尿管の移行細胞癌、移行上皮性腎盂尿管癌、絨毛性腫瘍、尿管腎盂細胞癌、尿道癌、子宮癌、子宮肉腫、膣癌、視覚路視床下部神経膠腫、外陰癌、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、ウィルムス腫瘍、ならびに上にリストされた器官系に位置する新生物に加えた���の他の任意の過剰増殖性疾患が含まれるが、これらに限定されない。
【０２０３】
他の態様において、本明細書中の上記のAHCM剤は、過剰増殖性障害、例えば、過剰増殖性結合組織障害（例えば、過剰増殖性線維性疾患）を処置するために使用される。一つの態様において、過剰増殖性線維性疾患は、全身性であるか、または器官特異的である。例示的な過剰増殖性線維性疾患には、全身性障害（例えば、全身性硬化症、多巣性線維硬化症、骨髄移植レシピエントにおける強皮症性移植片対宿主病、腎性全身性線維症、強皮症）、ならびに器官特異的障害（例えば、肺、肝臓、心臓、腎臓、膵臓、皮膚、およびその他の器官の線維症）が含まれるが、これらに限定されない。
【０２０４】
他の態様において、処置される対象は、過剰増殖性遺伝性障害、例えば、マルファン症候群またはロイス・ディーツ症候群から選ばれる過剰増殖性遺伝性障害を有している。ロサルタンは、細胞外マトリックスタンパク質であるフィブリリン1をコードする遺伝子の変異により引き起こされる結合組織障害であるヒトマルファン症候群を処置することが示されている（Dietz,H.C.et al.(2010)New Engl J Med 363(9):852-863）。フィブリリン1は、弾性組織の微小線維および他の多くの結合組織の成分を構成している。マルファン症候群に罹患した患者は、大動脈瘤のような血管異常を有する。血管疾患は、小児期以降に血管破裂および死亡をもたらし得る。Dietzらは、潜在型TGFβの過度の活性化が病態生理学において重要な役割を有することを、マルファン症候群のマウスモデルにおいて最初に見出した。彼らは、罹患マウスにおいてロサルタンを使用し、血管の構築を改善する著しい効果を示し、大動脈瘤の発症を防止した。彼らは、マルファン症候群を有する子供を処置するためにもロサルタンを使用し、薬物が大動脈および筋肉の病変の進行を著しく防止し得ることを証明した。マルファン症候群以外の大動脈疾患も、ロサルタンの使用から利益を得る場合がある。従って、局所的な潜在型TGFβの活性化の阻害、および循環血中の活性TGFβレベルの減少は、ナノ治療薬の送達および効力を改変する、癌組織の細胞外マトリックスにおけるコラーゲン以外の結合組織の成分に対する効果を有し得る。
【０２０５】
他の態様において、過剰増殖性障害（例えば、過剰増殖性線維性障害）は、慢性閉塞性肺疾患、喘息、大動脈瘤、放射線誘発線維症、骨格筋ミオパシー、糖尿病性腎症、および／または関節炎のうちの一つまたは複数から選ばれる。
【０２０６】
本発明の方法および組成物により処置され得る付加的な例示的な過剰増殖性障害は、Sounni,N.E.et al.(2010)Diseases Models & Mechanisms 3:317-332に開示されている。
【０２０７】
組み合わせ治療
本明細書中の上記のAHCM剤は、本明細書に記載された癌を処置するため、例えば、放射線治療、手術のような1種もしくは複数種の付加的な治療と組み合わせて、かつ／または1種もしくは複数種の治療剤と組み合わせて投与され得ることが認識されるであろう。
【０２０８】
「と組み合わせて」とは、治療または治療剤が、同時に投与され、かつ／または送達のため共に製剤化されなければならないことを暗示するものではないが、これらの送達の方法は本発明の範囲内である。薬学的組成物は、1種または複数種の他の付加的な治療または治療剤と同時に、その前に、またはその後に投与され得る。一般に、各剤は、その剤について決定された用量および／または時間スケジュールで投与されるであろう。この組み合わせにおいて利用される付加的な治療剤は、単一組成物で共に投与されてもよいし、または異なる組成物で別々に投与されてもよいことが、さらに認識されるであろう。計画において利用される特定の組み合わせは、本発明の薬学的組成物の、治療的活性を有する付加的な剤との適合性、および／または達成すべき所望の治療効果を考慮に入れるであろう。
【０２０９】
一般に、組み合わせて利用される付加的な治療剤は、それらが個々に利用される場合のレベルを越えないレベルで利用されることが予想される。いくつかの態様において、組み合わせて利用されるレベルは、個々に利用されるものより低いであろう。
【０２１０】
一つの態様において、AHCMおよび／または治療（例えば、癌または過剰増殖性治療）は、線維化促進経路（例えば、TGFβおよび／またはCTGFの活性化に依存性または非依存性の経路）の阻害剤（「線維化促進経路阻害剤」）と組み合わせて投与される。一つの態様において、AHCMおよび／または癌治療は、エンドセリン1、PDGF、Wnt/βカテニン、IGF-1、TNFα、および／またはIL-4の阻害剤のうちの1種または複数種と組み合わせて投与される。もう一つの態様において、AHCMおよび／または癌治療は、エンドセリン1および／またはPDGFの阻害剤と組み合わせて投与される。他の態様において、AHCMおよび／または癌治療は、ケモカイン受容体4型（CXCR4）（例えば、AMD3100、MSX-122）；ストロマ由来因子1（SDF-1）（例えば、タンニン酸）；ヘッジホッグ（例えば、GDC-0449、シクロパミン、またはGANT58）のうちの1種または複数種の阻害剤と組み合わせて投与される。
【０２１１】
他の態様において、AHCMは、低分子量化学療法剤と組み合わせて投与される。例示的な低分子量化学療法剤には、13-シス-レチノイン酸（イソトレチノイン、ACCUTANE（登録商標））、2-CdA（2-クロロデオキシアデノシン、クラドリビン、LEUSTATIN（商標））、5-アザシチジン（アザシチジン、VIDAZA（登録商標））、5-フルオロウラシル（5-FU、フルオロウラシル、ADRUCIL（登録商標））、6-メルカプトプリン（6-MP、メルカプトプリン、PURINETHOL（登録商標））、6-TG（6-チオグアニン、チオグアニン、THIOGUANINE TABLOID（登録商標））、アブラキサン（タンパク質結合パクリタキセル）、アクチノマイシンD（ダクチノマイシン、COSMEGEN（登録商標））、アリトレチノイン（PANRETIN（登録商標））、オールトランスレチノイン酸（ATRA、トレチノイン、VESANOID（登録商標））、アルトレタミン（ヘキサメチルメラミン、HMM、HEXALEN（登録商標））、アメトプテリン（メトトレキサート、メトトレキサートナトリウム、MTX、TREXALL（商標）、RHEUMATREX（登録商標））、アミホスチン（ETHYOL（登録商標））、アラビノシルシトシン（Ara-C、シタラビン、CYTOSAR-U（登録商標））、三酸化ヒ素（TRISENOX（登録商標））、アスパラギナーゼ（エルウィニアL-アスパラギナーゼ、L-アスパラギナーゼ、ELSPAR（登録商標）、KIDROLASE（登録商標））、BCNU（カルムスチン、BiCNU（登録商標））、ベンダムスチン（TREANDA（登録商標））、ベキサロテン（TARGRETIN（登録商標））、ブレオマイシン（BLENOXANE（登録商標））、ブスルファン（BUSULFEX（登録商標）、MYLERAN（登録商標））、ロイコボリンカルシウム（シトロボラム因子、フォリン酸、ロイコボリン）、カンプトテシン11（CPT-11、イリノテカン、CAMPTOSAR（登録商標））、カペシタビン（XELODA（登録商標））、カルボプラチン（PARAPLATIN（登録商標））、カルムスチンウエハー（カルムスチン含有ポリフェプロサン20インプラント、GLIADEL（登録商標）ウエハー）、CCI-779（テムシロリムス、TORISEL（登録商標））、CCNU（ロムスチン、CeeNU）、CDDP（シスプラチン、PLATINOL（登録商標）、PLATINOL-AQ（登録商標））、クロラムブシル（leukeran）、シクロホスファミド（CYTOXAN（登録商標）、NEOSAR（登録商標））、ダカルバジン（DIC、DTIC、イミダゾールカルボキサミド、DTIC-DOME（登録商標））、ダウノマイシン（ダウノルビシン、ダウノルビシン塩酸塩、ルビドマイシン塩酸塩、CERUBIDINE（登録商標））、デシタビン（DACOGEN（登録商標））、デクスラゾキサン（ZINECARD（登録商標））、DHAD（ミトキサントロン、NOVANTRONE（登録商標））、ドセタキセル（TAXOTERE（登録商標））、ドキソルビシン（ADRIAMYCIN（登録商標）、RUBEX（登録商標））、エピルビシン（ELLENCE（商標））、エストラムスチン（EMCYT（登録商標））、エトポシド（VP-16、リン酸エトポシド、TOPOSAR（登録商標）、VEPESID（登録商標）、ETOPOPHOS（登録商標））、フロクスウリジン（FUDR（登録商標））、フルダラビン（FLUDARA（登録商標））、フルオロウラシル（クリーム）（CARAC（商標）、EFUDEX（登録商標）、FLUOROPLEX（登録商標））、ゲムシタビン（GEMZAR（登録商標））、ヒドロキシ尿素（HYDREA（登録商標）、DROXIA（商標）、MYLOCEL（商標））、イダルビシン（IDAMYCIN（登録商標））、イホスファミド（IFEX（登録商標））、イクサベピロン（IXEMPRA（商標））、LCR（ロイロクリスチン、ビンクリスチン、VCR、ONCOVIN（登録商標）、VINCASAR PFS（登録商標））、L-PAM（L-サルコリシン、メルファラン、フェニルアラニンマスタード、ALKERAN（登録商標））、メクロレタミン（メクロレタミン塩酸塩、ムスチン、ナイトロジェンマスタード、MUSTARGEN（登録商標））、メスナ（MESNEX（商標））、マイトマイシン（マイトマイシンC、MTC、MUTAMYCIN（登録商標））、ネララビン（ARRANON（登録商標））、オキサリプラチン（ELOXATIN（商標））、パクリタキセル（TAXOL（登録商標）、ONXAL（商標））、ペグアスパラガーゼ（PEG-L-アスパラギナーゼ、ONCOSPAR（登録商標））、PEMETREXED（ALIMTA（登録商標））、ペントスタチン（NIPENT（登録商標））、プロカルバジン（MATULANE（登録商標））、ストレプトゾシン（ZANOSAR（登録商標））、テモゾロミド（TEMODAR（登録商標））、テニポシド（VM-26、VUMON（登録商標））、TESPA（チオホスホアミド、チオテパ、TSPA、THIOPLEX（登録商標））、トポテカン（HYCAMTIN（登録商標））、ビンブラスチン（ビンブラスチン硫酸塩、ビンカロイコブラスチン、VLB、ALKABAN-AQ（登録商標）、VELBAN（登録商標））、ビノレルビン（ビノレルビン酒石酸塩、NAVELBINE（登録商標））、およびボリノスタット（ZOLINZA（登録商標））が含まれるが、これらに限定されない。
【０２１２】
もう一つの態様において、AHCM剤は生物製剤と共に投与される。癌の処置において有用な生物製剤は、当技術分野において公知であり、本発明の結合分子は、例えば、そのような公知の生物製剤と共に投与され得る。
【０２１３】
例えば、FDAは、乳癌の処置のため以下の生物製剤を認可している：HERCEPTIN（登録商標）（トラスツズマブ（Genentech Inc.,South San Francisco,Calif.）；HER2陽性乳癌における抗腫瘍活性を有するヒト化モノクローナル抗体）；FASLODEX（登録商標）（フルベストラント（AstraZeneca Pharmaceuticals,LP,Wilmington,Del.）；乳癌を処置するために使用されるエストロゲン受容体アンタゴニスト）；ARIMIDEX（登録商標）（アナストロゾール（AstraZeneca Pharmaceuticals,LP）；エストロゲンを作成するために必要とされる酵素アロマターゼを阻害する非ステロイド性アロマターゼ阻害剤）；Aromasin（登録商標）（エキセメスタン（Pfizer Inc.,New York,N.Y.）；乳癌の処置において使用される不可逆性ステロイド性アロマターゼ不活化剤）；FEMARA（登録商標）（レトロゾール（Novartis Pharmaceuticals,East Hanover,N.J.）；乳癌を処置するためFDAにより認可された非ステロイド性アロマターゼ阻害剤）；およびNOLVADEX（登録商標）（タモキシフェン（AstraZeneca Pharmaceuticals,LP）；乳癌を処置するためFDAにより認可された非ステロイド性抗エストロゲン）。本発明の結合分子が組み合わせられ得るその他の生物製剤には、AVASTIN（登録商標）（ベバシズマブ（Genentech Inc.）；血管形成を阻害するために設計された最初にFDAにより認可された治療）；およびZEVALIN（登録商標）（イブリツモマブチウキセタン（Biogen Idec,Cambridge,Mass.）；B細胞リンパ腫の処置のため現在認可されている放射標識モノクローナル抗体）が含まれる。
【０２１４】
さらに、FDAは、結腸直腸癌の処置のため、以下の生物製剤を認可している：AVASTIN（登録商標）；ERBITUX（登録商標）（セツキシマブ（ImClone Systems Inc.,New York,N.Y.およびBristol-Myers Squibb,New York,N.Y.）；上皮増殖因子受容体（EGFR）に対するモノクローナル抗体）；GLEEVEC（登録商標）（メシル酸イマチニブ；プロテインキナーゼ阻害剤）；およびERGAMISOL（登録商標）（レバミソール塩酸塩（Janssen Pharmaceutica Products,LP,Titusville,N.J.）；デュークスステージC結腸癌を有する患者における外科的切除後の5-フルオロウラシルと組み合わせられた補助処置として1990年にFDAにより認可された免疫調整剤）。
【０２１５】
肺癌の処置のための例示的な生物製剤には、TARCEVA（登録商標）（エルロチニブHCL（OSI Pharmaceuticals Inc.,Melville,N.Y.）；ヒト上皮増殖因子受容体1（HER1）経路を標的とするために設計された低分子）が含まれる。
【０２１６】
多発性骨髄腫の処置のための例示的な生物製剤には、VELCADE（登録商標）ベルケイド（ボルテゾミブ（Millennium Pharmaceuticals,Cambridge Mass.）；プロテアソーム阻害剤）が含まれる。付加的な生物製剤には、THALIDOMID（登録商標）（サリドマイド（Clegene Corporation,Warren,N.J.）；骨髄腫細胞の増大および生存を阻害する能力ならびに抗血管形成を含む、複数の作用を有すると考えられる免疫調整剤）が含まれる。
【０２１７】
付加的な例示的な癌治療抗体には、3F8、アバゴボマブ（abagovomab）、アデカツムマブ（adecatumumab）、アフツズマブ、アラシズマブペゴール（alacizumab pegol）、アレムツズマブ（CAMPATH（登録商標）、MABCAMPATH（登録商標））、アルツモマブペンテテート（altumomab pentetate）（HYBRI-CEAKER（登録商標））、アナツモマブマフェナトクス（anatumomab mafenatox）、アンルキンズマブ（anrukinzumab）（IMA-638）、アポリズマブ、アルシツモマブ（CEA-SCAN（登録商標））、バビツキシマブ（bavituximab）、ベクツモマブ（bectumomab）（LYMPHOSCAN（登録商標））、ベリムマブ（BENLYSTA（登録商標）、LYMPHOSTAT-B（登録商標））、ベシレソマブ（SCINTIMUN（登録商標））、ベバシズマブ（AVASTIN（登録商標））、ビバツズマブメルタンシン（bivatuzumab mertansine）、ブリナツモマブ（blinatumomab）、ブレンツキシマブベドチン、カンツズマブメルタンシン、カプロマブペンデチド（PROSTASCINT（登録商標））、カツマキソマブ（REMOVAB（登録商標））、CC49、セツキシマブ（C225、ERBITUX（登録商標））、シタツズマブボガトクス（citatuzumab bogatox）、シクスツムマブ（cixutumumab）、クリバツズマブテトラキセタン（clivatuzumab tetraxetan）、コナツムマブ（conatumumab）、ダセツズマブ、デノスマブ（PROLIA（登録商標））、デツモマブ（detumomab）、エクロメキシマブ（ecromeximab）、エドレコロマブ（PANOREX（登録商標））、エロツズマブ（elotuzumab）、エピツモマブシツキセタン（epitumomab cituxetan）、エプラツズマブ、エルツマキソマブ（ertumaxomab）（REXOMUN（登録商標））、エタラシズマブ（etaracizumab）、ファーレツズマブ、フィギツムマブ、フレソリムマブ、ガリキシマブ、ゲムツズマブオゾガマイシン（MYLOTARG（登録商標））、ギレンツキシマブ（girentuximab）、グラムバツムマブベドチン（glembatumumab vedotin）、イブリツモマブ（イブリツモマブチウキセタン、ZEVALIN（登録商標））、イゴボマブ（igovomab）（INDIMACIS-125（登録商標））、インテツムマブ（intetumumab）、イノツズマブオゾガマイシン、イピリムマブ、イラツムマブ（iratumumab）、ラベツズマブ（CEA-CIDE（登録商標））、レクサツムマブ、リンツズマブ、ルカツムマブ（lucatumumab）、ルミリキシマブ、マパツムマブ、マツズマブ、ミラツズマブ、ミンレツモマブ（minretumomab）、ミツモマブ（mitumomab）、ナコロマブタフェナトクス（nacolomab tafenatox）、ナプツモマブエスタフェナトクス（naptumomab estafenatox）、ネシツムマブ、ニモツズマブ（THERACIM（登録商標）、THERALOC（登録商標））、ノフェツモマブメルペンタン（nofetumomab merpentan）（VERLUMA（登録商標））、オファツムマブ（ARZERRA（登録商標））、オララツマブ（olaratumab）、オポルツズマブモナトクス（oportuzumab monatox）、オレゴボマブ（OVAREX（登録商標））、パニツムマブ（VECTIBIX（登録商標））、ペンツモマブ（pemtumomab）（THERAGYN（登録商標））、ペルツズマブ（OMNITARG（登録商標））、ピンツモマブ（pintumomab）、プリツムマブ（pritumumab）、ラムシルマブ、ラニビズマブ（LUCENTIS（登録商標））、リロツムマブ（rilotumumab）、リツキシマブ（MABTHERA（登録商標）、RITUXAN（登録商標））、ロバツムマブ（robatumumab）、サツモマブ（satumomab）ペンデチド、シブロツズマブ（sibrotuzumab）、シルツキシマブ（siltuximab）、ソンツズマブ（sontuzumab）、タカツズマブ（tacatuzumab）テトラキセタン（AFP-CIDE（登録商標））、タプリツモマブパプトクス（taplitumomab paptox）、テナツモマブ（tenatumomab）、TGN1412、チシリムマブ（ticilimumab）（トレメリムマブ）、ティガツズマブ、TNX-650、トシツモマブ（BEXXAR（登録商標））、トラスツズマブ（HERCEPTIN（登録商標））、トレメリムマブ、ツコツズマブセルモロイキン（tucotuzumab celmoleukin）、ベルツズマブ、ボロシキシマブ、ボツムマブ（votumumab）（HUMASPECT（登録商標））、ザルツムマブ（HUMAX-EGFR（登録商標））、およびザノリムマブ（HUMAX-CD4（登録商標））が含まれるが、これらに限定されない。
【０２１８】
他の態様において、AHCMはウイルス癌治療剤と組み合わせて投与される。例示的なウイルス癌治療剤には、ワクシニアウイルス（vvDD-CDSR）、癌胎児性抗原発現麻疹ウイルス、組換えワクシニアウイルス（TK欠失＋GM-CSF）、セネカバレー（Seneca Valley）ウイルス001、ニューカッスル病ウイルス、コクサッキーウイルスA21、GL-ONC1、EBNA1 C末端/LMP2キメラタンパク質発現組換え修飾型ワクシニアアンカラワクチン、癌胎児性抗原発現麻疹ウイルス、G207腫瘍退縮ウイルス、p53発現修飾型ワクシニアアンカラウイルスワクチン、OncoVEX GM-CSF修飾型1型単純ヘルペスウイルス、鶏痘ウイルスワクチンベクター、組換えワクシニア前立腺特異抗原ワクチン、ヒトパピローマウイルス16/18 L1ウイルス様粒子/AS04ワクチン、MVA-EBNA1/LMP2 Inj.ワクチン、四価HPVワクチン、四価ヒトパピローマウイルス（6型、11型、16型、18型）組換えワクチン（GARDASIL（登録商標））、組換え鶏痘-CEA（6D）/TRICOMワクチン；組換えワクシニア-CEA（6D）-TRICOMワクチン、組換え修飾型ワクシニアアンカラ-5T4ワクチン、組換え鶏痘-TRICOMワクチン、腫瘍退縮ヘルペスウイルスNV1020、HPV L1 VLPワクチンV504、ヒトパピローマウイルス二価（16型および18型）ワクチン（CERVARIX（登録商標））、単純ヘルペスウイルスHF10、Ad5CMV-p53遺伝子、組換えワクシニアDF3/MUC1ワクチン、組換えワクシニア-MUC-1ワクチン、組換えワクシニア-TRICOMワクチン、ALVAC MART-1ワクチン、ヒトプレプロエンケファリン（NP2）発現複製欠損I型単純ヘルペスウイルス（HSV-1）ベクター、野生型レオウイルス、レオウイルス3型Dearing株（REOLYSIN（登録商標））、腫瘍退縮ウイルスHSV1716、エプスタインバーウイルス標的抗原をコードする組換え修飾型ワクシニアアンカラ（MVA）に基づくワクチン、組換え鶏痘-前立腺特異抗原ワクチン、組換えワクシニア前立腺特異抗原ワクチン、組換えワクシニア-B7.1ワクチン、rAd-p53遺伝子、Ad5-デルタ24RGD、HPVワクチン580299、JX-594（チミジンキナーゼ欠失ワクシニアウイルス＋GM-CSF）、HPV-16/18 L1/AS04、鶏痘ウイルスワクチンベクター、ワクシニアチロシナーゼワクチン、MEDI-517 HPV-16/18 VLP AS04ワクチン、単純ヘルペスウイルスTK99UNのチミジンキナーゼを含有しているアデノウイルスベクター、HspE7、FP253/フルダラビン、ALVAC（2）黒色腫多重抗原治療用ワクチン、ALVAC-hB7.1、カナリアポックス-hIL-12黒色腫ワクチン、Ad-REIC/Dkk-3、rAd-IFN SCH 721015、TIL-Ad-INFg、Ad-ISF35、ならびにコクサッキーウイルスA21（CVA21、CAVATAK（登録商標））が含まれるが、これらに限定されない。
【０２１９】
他の態様において、AHCMはナノ医薬と組み合わせて投与される。例示的な癌ナノ医薬には、ABRAXANE（登録商標）（パクリタキセル結合アルブミンナノ粒子）、CRLX101（直鎖状のシクロデキストリンに基づくポリマーとコンジュゲートしたCPT）、CRLX288（ドセタキセルと生分解性ポリマーポリ（乳酸グリコール酸）とのコンジュゲート）、リポソームシタラビン（リポソームAra-C、DEPOCYT（商標））、リポソームダウノルビシン（DAUNOXOME（登録商標））、リポソームドキソルビシン（DOXIL（登録商標）、CAELYX（登録商標））、ダウノルビシンクエン酸塩封入リポソーム（DAUNOXOME（登録商標））、およびPEG抗VEGFアプタマー（MACUGEN（登録商標））が含まれるが、これらに限定されない。
【０２２０】
いくつかの態様において、AHCM剤は、パクリタキセルまたはパクリタキセル製剤、例えば、TAXOL（登録商標）、タンパク質結合パクリタキセル（例えば、ABRAXANE（登録商標））と組み合わせて投与される。例示的なパクリタキセル製剤には、ナノ粒子アルブミン結合パクリタキセル（Abraxis Bioscienceより販売されているABRAXANE（登録商標））、ドコサヘキサエン酸結合パクリタキセル（DHA-パクリタキセル、Protargaより販売されているTaxoprexin）、ポリグルタミン酸結合パクリタキセル（PG-パクリタキセル、パクリタキセルポリグルメクス（poliglumex）、CT-2103、Cell Therapeuticより販売されているXYOTAX）、腫瘍により活性化されるプロドラッグ（TAP）、ANG105（ImmunoGenより販売されている3個のパクリタキセル分子に結合したAngiopep-2）、パクリタキセル-EC-1（erbB2認識ペプチドEC-1と結合したパクリタキセル；Li et al,Biopolymers(2007)87:225-230を参照のこと）、およびグルコースとコンジュゲートしたパクリタキセル（例えば、2'-パクリタキセルメチル2-グルコピラノシルスクシネート、Liu et al.,Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters(2007)17:617-620を参照のこと）が含まれるが、これらに限定されない。
【０２２１】
癌を処置するための例示的なRNAi剤およびアンチセンスRNA剤には、CALAA-01、siG12D LODER（Local Drug EluteR）、およびALN-VSP02が含まれるが、これらに限定されない。
【０２２２】
他の癌治療剤には、サイトカイン（例えば、アルデスロイキン（IL-2、インターロイキン2、PROLEUKIN（登録商標））、αインターフェロン（IFNα、インターフェロンα、INTRON（登録商標）A（インターフェロンα-2b）、ROFERON-A（登録商標）（インターフェロンα-2a））、エポエチンアルファ（PROCRIT（登録商標））、フィルグラスチム（G-CSF、顆粒球コロニー刺激因子、NEUPOGEN（登録商標））、GM-CSF（顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、サルグラモスチム、LEUKINE（商標））、IL-11（インターロイキン11、オプレルベキン、NEUMEGA（登録商標））、インターフェロンα-2b（PEGコンジュゲート）（PEGインターフェロン、PEG-INTRON（商標））、およびペグフィルグラスチム（NEULASTA（商標）））、ホルモン治療剤（例えば、アミノグルテチミド（CYTADREN（商標））、アナストロゾール（ARIMIDEX（商標））、ビカルタミド（CASODEX（登録商標））、エキセメスタン（AROMASIN（登録商標））、フルオキシメステロン（HALOTESTIN（登録商標））、フルタミド（EULEXIN（登録商標））、フルベストラント（FASLODEX（登録商標））、ゴセレリン（ZOLADEX（登録商標））、レトロゾール（FEMARA（登録商標））、ロイプロリド（ELIGARD（商標）、LUPRON（登録商標）、LUPRON DEPOT（登録商標）、VIADUR（商標））、メゲストロール（メゲストロール酢酸エステル、MEGACE（登録商標））、ニルタミド（ANANDRON（登録商標）、NILANDRON（登録商標））、オクトレオチド（オクトレオチド酢酸塩、SANDOSTATIN（登録商標）、SANDOSTATIN LAR（登録商標））、ラロキシフェン（EVISTA（登録商標））、ロミプロスチム（NPLATE（登録商標））、タモキシフェン（NOVALDEX（登録商標））、およびトレミフェン（FARESTON（登録商標）））、ホスホリパーゼA2阻害剤（例えば、アナグレリド（AGRYLIN（登録商標）））、生物学的応答修飾剤（例えば、BCG（THERACYS（登録商標）、TICE（登録商標））およびダルベポエチンアルファ（ARANESP（登録商標）））、標的治療剤（例えば、ボルテゾミブ（VELCADE（登録商標））、ダサチニブ（SPRYCEL（商標））、デニロイキンジフチトクス（ONTAK（登録商標））、エルロチニブ（TARCEVA（登録商標））、エベロリムス（AFINITOR（登録商標））、ゲフィチニブ（IRESSA（登録商標））、イマチニブメシル酸塩（STI-571、GLEEVEC（商標））、ラパチニブ（TYKERB（登録商標））、ソラフェニブ（NEXAVAR（登録商標））、およびSU11248（スニチニブ、SUTENT（登録商標）））、免疫調整抗血管形成剤（例えば、CC-5013（レナリドミド、REVLIMID（登録商標））およびサリドマイド（THALOMID（登録商標）））、糖質コルチコイド（例えば、コルチゾン（ヒドロコルチゾン、ヒドロコルチゾンリン酸エステルナトリウム、ヒドロコルチゾンコハク酸エステルナトリウム、ALA-CORT（登録商標）、HYDROCORT ACETATE（登録商標）、ヒドロコルチゾンリン酸エステルLANACORT（登録商標）、SOLU-CORTEF（登録商標））、デカドロン（デキサメタゾン、デキサメタゾン酢酸エステル、デキサメタゾンリン酸エステルナトリウム、DEXASONE（登録商標）、DIODEX（登録商標）、HEXADROL（登録商標）、MAXIDEX（登録商標））、メチルプレドニゾロン（6-メチルプレドニゾロン、メチルプレドニゾロン酢酸エステル、メチルプレドニゾロンコハク酸エステルナトリウム、DURALONE（登録商標）、MEDRALONE（登録商標）、MEDROL（登録商標）、M-PREDNISOL（登録商���）、SOLU-MEDROL（登録商標））、プレドニゾロン（DELTA-CORTEF（登録商標）、ORAPRED（登録商標）、PEDIAPRED（登録商標）、PRELONE（登録商標））、およびプレドニゾン（DELTASONE（登録商標）、LIQUID PRED（登録商標）、METICORTEN（登録商標）、ORASONE（登録商標）））、ならびにビスホスホネート（例えば、パミドロン酸（AREDIA（登録商標））およびゾレドロン酸（ZOMETA（登録商標）））が含まれるが、これらに限定されない。
【０２２３】
いくつかの態様において、AHCM剤は、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、受容体チロシンキナーゼ（RTK）阻害剤）と組み合わせて使用される。例示的なチロシンキナーゼ阻害剤には、上皮増殖因子（EGF）経路阻害剤（例えば、上皮増殖因子受容体（EGFR）阻害剤）、血管内皮増殖因子（VEGF）経路阻害剤（例えば、血管内皮増殖因子受容体（VEGFR）阻害剤（例えば、VEGFR-1阻害剤、VEGFR-2阻害剤、VEGFR-3阻害剤））、血小板由来増殖因子（PDGF）経路阻害剤（例えば、血小板由来増殖因子受容体（PDGFR）阻害剤（例えば、PDGFRβ阻害剤））、RAF-1阻害剤、KIT阻害剤、およびRET阻害剤が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの態様において、AHCM剤と組み合わせて使用される抗癌剤は、アキシチニブ（AG013736）、ボスチニブ（SKI-606）、セジラニブ（RECENTIN（商標）、AZD2171）、ダサチニブ（SPRYCEL（登録商標）、BMS-354825）、エルロチニブ（TARCEVA（登録商標））、ゲフィチニブ（IRESSA（登録商標））、イマチニブ（Gleevec（登録商標）、CGP57148B、STI-571）、ラパチニブ（TYKERB（登録商標）、TYVERB（登録商標））、レスタウルチニブ（CEP-701）、ネラチニブ（HKI-272）、ニロチニブ（TASIGNA（登録商標））、セマキサニブ（セマキシニブ、SU5416）、スニチニブ（SUTENT（登録商標）、SU11248）、トセラニブ（toceranib）（PALLADIA（登録商標））、バンデタニブ（ZACTIMA（登録商標）、ZD6474）、バタラニブ（PTK787、PTK/ZK）、トラスツズマブ（HERCEPTIN（登録商標））、ベバシズマブ（AVASTIN（登録商標））、リツキシマブ（RITUXAN（登録商標））、セツキシマブ（ERBITUX（登録商標））、パニツムマブ（VECTIBIX（登録商標））、ラニビズマブ（Lucentis（登録商標））、ニロチニブ（TASIGNA（登録商標））、ソラフェニブ（NEXAVAR（登録商標））、アレムツズマブ（CAMPATH（登録商標））、ゲムツズマブオゾガマイシン（MYLOTARG（登録商標））、ENMD-2076、PCI-32765、AC220、ドビチニブラクテート（dovitinib lactate）（TKI258、CHIR-258）、BIBW 2992（TOVOK（商標））、SGX523、PF-04217903、PF-02341066、PF-299804、BMS-777607、ABT-869、MP470、BIBF 1120（VARGATEF（登録商標））、AP24534、JNJ-26483327、MGCD265、DCC-2036、BMS-690154、CEP-11981、チボザニブ（tivozanib）（AV-951）、OSI-930、MM-121、XL-184、XL-647、XL228、AEE788、AG-490、AST-6、BMS-599626、CUDC-101、PD153035、ペリチニブ（pelitinib）（EKB-569）、バンデタニブ（zactima）、WZ3146、WZ4002、WZ8040、ABT-869（リニファニブ）、AEE788、AP24534（ポナチニブ（ponatinib））、AV-951（チボザニブ）、アキシチニブ、BAY 73-4506（レゴラフェニブ（regorafenib））、ブリバニブアラニネート（BMS-582664）、ブリバニブ（BMS-540215）、セジラニブ（AZD2171）、CHIR-258（ドビチニブ）、CP 673451、CYC116、E7080、Ki8751、マシチニブ（masitinib）（AB1010）、MGCD-265、モテサニブジホスフェート（motesanib diphosphate）（AMG-706）、MP-470、OSI-930、パゾパニブ塩酸塩、PD173074、ソラフェニブトシル酸塩（Bay 43-9006）、SU 5402、TSU-68（SU6668）、バタラニブ、XL880（GSK1363089、EXEL-2880）からなる群より選択される。選択されたチロシンキナーゼ阻害剤は、スニチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、またはソラフェニブから選ばれる。一つの態様において、チロシンキナーゼ阻害剤はスニチニブである。
【０２２４】
一つの態様において、AHCMは、抗血管形成剤または血管標的薬または血管破壊剤のうちの1種または複数種と組み合わせて投与される。例示的な抗血管形成剤には、とりわけ、VEGF阻害剤（例えば、抗VEGF抗体（例えば、ベバシズマブ）；VEGF受容体阻害剤（例えば、イトラコナゾール）；内皮細胞の細胞増殖および／または遊走の阻害剤（例えば、カルボキシアミドトリアゾール、TNP-470）；血管形成刺激剤の阻害剤（例えば、スラミン）が含まれるが、これらに限定されない。血管標的薬（VTA）または血管破壊剤（VDA）は、癌腫瘍の血管系（血管）に傷害を与え、中心壊死を引き起こすよう設計される（例えば、Thorpe,P.E.(2004)Clin.Cancer Res.Vol.10:415-427に概説されている）。VTAは低分子であり得る。例示的な低分子VTAには、微小管を不安定化する薬物（例えば、コンブレタスタチンA-4リン酸ジナトリウム（CA4P）、ZD6126、AVE8062、Oxi 4503）；およびバジメザン（vadimezan）（ASA404）が含まれるが、これらに限定されない。
【０２２５】
同位体により標識された抗腫瘍抗体が、動物モデルにおいて、いくつかの場合には、ヒトにおいて、固形腫瘍およびリンパ腫／白血病における細胞を破壊するために成功裡に使用されていることが認識されるであろう。例示的な放射性同位体には、90Y、125I、131I、123I、111In、105Rh、153Sm、67Cu、67Ga、166Ho、177Lu、186Re、および188Reが含まれる。放射性核種は、核DNAにおいて複数の鎖破損を引き起こし、細胞死をもたらす電離放射線を生ずることにより作用する。治療用コンジュゲートを作製するために使用される同位体は、典型的には、短い飛程を有する高エネルギーのα粒子またはβ粒子を生ずる。そのような放射性核種は、近接している細胞、例えば、コンジュゲートが付着したまたは侵入した新生物細胞を死滅させる。それらは非局在細胞に対してはほとんどまたは全く効果を有しない。放射性核種は本質的に非免疫原性である。
【０２２６】
本明細書中の教示に従って、結合分子を、診断および治療の目的のため、異なる放射標識にコンジュゲートさせ得ることも認識されるであろう。この目的のため、上記の米国特許第6,682,134号、第6,399,061号、および第5,843,439号は、治療用抗体の投与の前に腫瘍を診断的に「画像化」するための放射標識された治療用コンジュゲートを開示している。「In2B8」コンジュゲートは、二官能性キレート剤、即ち、1-イソチオシアナトベンジル-3-メチル-DTPAおよび1-メチル-3-イソチオシアナトベンジル-DTPAの1：1混合物を含むMX-DTPA（ジエチレントリアミン五酢酸）を介して111Inに付着した、ヒトCD20抗原に特異的なマウスモノクローナル抗体2B8を含む。111Inは、検出可能な毒性なしに約1〜約10mCiを安全に投与することができ；画像化データが、その後の90Y標識抗体の分散を一般に予測するため、診断用放射性核種として特に好ましい。大部分の画像化研究は、5mCi 111Inにより標識された抗体を利用するが、それは、この用量が安全であり、かつより低い用量と比較して増加した画像化効率を有するためである。最適な画像化は、抗体投与の3〜6日後に起こる。例えば、Murray,J.Nuc.Med.26:3328(1985)およびCarraguillo et al.,J.Nuc.Med.26:67(1985)を参照のこと。
【０２２７】
ある種の態様において、AHCM剤および付加的な抗癌剤は、同時に投与され（例えば、同時もしくは同日の、もしくは同一の処置計画内での2種の剤の投与）、かつ／または逐次的に投与される（例えば、ある期間における1種の剤の投与、それに続く、第二の期間における、もしくは異なる処置計画内での他の剤の投与）。
【０２２８】
一つの態様において、AHCMは抗癌剤の前に投与される。他の態様において、AHCMが抗癌剤の前に投与され、続いて、AHCMおよび抗癌剤が同時投与される。
【０２２９】
ある種の態様において、AHCM剤および付加的な抗癌剤は、同時に投与される。例えば、ある種の態様において、AHCM剤および付加的な抗癌剤は、同時に、同日に、または同一の処置計画内で投与される。ある種の態様において、AHCM剤は、同日に、または同一の処置計画内で、付加的な抗癌剤の前に投与される。
【０２３０】
ある種の態様において、AHCM剤が、ある期間において付加的な抗癌剤と同時に投与され、その時点の後、付加的な抗癌剤による処置が中止され、AHCM剤による処置が継続される。
【０２３１】
他の態様において、AHCM剤が、ある期間において付加的な抗癌剤と同時に投与され、その時点の後、AHCM剤による処置が中止され、付加的な抗癌剤による処置が継続される。
【０２３２】
ある種の態様において、AHCM剤および付加的な抗癌剤は、逐次的に投与される。例えば、ある種の態様において、AHCM剤が、付加的な抗癌剤の処置計画が終了した後に、投与される。ある種の態様において、付加的な抗癌剤が、AHCM剤の処置計画が終了した後に、投与される。
【０２３３】
いくつかの態様において、AHCM剤および抗癌剤は、パルス投与で投与され得る。他の態様において、それらはパルスチェイス投与として投与されてもよく、例えば、AHCM剤が短期間にわたって投与され（パルス）、続いて、より長い期間にわたって抗癌剤が投与されるか（例えば、チェイス）、またはその逆である。
【０２３４】
診断の方法およびアッセイ
AHCM剤は、哺乳動物、好ましくは、ヒトにおける、癌の診断、処置、防止、および／または予後を改善するために使用され得る。これらの診断アッセイは、インビボで実施されてもよいし、またはインビトロで、例えば、血液試料、生検組織、もしくは剖検組織に対して実施されてもよい。
【０２３５】
従って、本発明は、個体に由来する組織またはその他の細胞もしくは体液における標的タンパク質または標的転写物の発現レベルを測定する工程、および測定された発現レベルを、正常組織または正常体液における標準標的発現レベルと比較し、標準と比較した発現レベルの増加が障害を示すものとする工程を含む、癌の診断において有用な診断法を提供する。
【０２３６】
一つの態様は、個体の組織試料または体液試料における標的の発現についてアッセイする工程、および試料における標的発現の存在またはレベルを、標準組織試料または標準体液試料のパネルにおける標的発現の存在またはレベルと比較し、標的発現または標準と比べた標的発現の増加の検出が、異常な過剰増殖性細胞増大を示すものとする工程を含む、液体試料または組織試料における異常な過剰増殖性細胞、例えば、前癌細胞または癌細胞の存在を検出する方法を提供する。
【０２３７】
本発明の一つの局面は、対象、好ましくは、哺乳動物、最も好ましくは、ヒトにおける癌のインビボの検出または診断のための方法である。一つの態様において、診断は、（a）AHCMにより処置されたことがあるかまたはAHCMにより処置されている対象に、癌抗原に対する標識された抗体またはその断片を有効量（例えば、非経口、皮下、または腹腔内）投与する工程；（b）標識された抗体が、標的が発現されている対象の部位に優先的に濃縮されること（および未結合の標識された分子が、バックグラウンドレベルにまで除去されること）を可能にするため、投与後に間隔を置く工程；（c）バックグラウンドレベルを決定する工程；ならびに（d）対象における標識された分子を検出し、バックグラウンドレベルを超える標識された分子の検出が、対象が標的の異常発現に関連した特定の疾患または障害を有することを示すものとする工程を含む。バックグラウンドレベルは、検出された標識された分子の量を、特定の系について以前に決定された標準値と比較することを含む、様々な方法により決定され得る。
【０２３８】
対象のサイズおよび使用される画像化システムが、診断画像を作製するために必要とされるイメージングモエティの量を決定するであろうことは、当技術分野において理解されるであろう。ヒト対象のための放射性同位体モエティの場合、注射される放射能の量は、通常、約5〜20ミリキュリーの範囲の、例えば、99Tcであろう。次いで、標識された結合分子、例えば、抗体または抗体断片は、特定のタンパク質を含有している細胞の位置に優先的に蓄積するであろう。インビボ腫瘍画像化は、S.W.Burchiel et al.,"Immunopharmacokinetics of Radiolabeled Antibodies and Their Fragments."(Chapter 13 in Tumor Imaging:The Radiochemical Detection of Cancer,S.W.Burchiel and B.A.Rhodes,eds.,Masson Publishing Inc.(1982)に記載されている。
【０２３９】
使用される標識の型および投与のモードを含むいくつかの変量に依って、標識された分子が対象における部位に優先的に濃縮され、未結合の標識された分子がバックグラウンドレベルにまで除去されることを可能にするための投与後の間隔は、6〜48時間または6〜24時間または6〜12時間である。もう一つの態様において、投与後の間隔は、5〜20日または7〜10日である。
【０２４０】
標識された分子の存在は、インビボスキャニングのための当技術分野において公知の方法を使用して、患者において検出され得る。これらの方法は、使用される標識の型に依る。当業者は、特定の標識を検出するための適切な方法を決定することができるであろう。本発明の診断法において使用され得る方法およびデバイスには、コンピューター断層撮影（CT）、ポジトロン放出断層撮影（PET）、磁気共鳴画像法（MRI）、および超音波検査のような全身スキャン、X線検査、核磁気共鳴画像法（NMR）、CATスキャン、または電子スピン共鳴画像法（ESR）が含まれるが、これらに限定されない。
【０２４１】
薬学的組成物
本明細書に記載された組成物は、投与のための多様な製剤に組み入れられ得る。より具体的には、組成物は、適切な、薬学的に許容される担体または希釈剤と組み合わせることにより、薬学的組成物へ製剤化され得、カプセル、粉末、顆粒、ゲル、スラリー、軟膏、溶液、坐剤、注射、吸入剤、およびエアロゾルのような、半固体、液体、または気体の形態の調製物へ製剤化され得る。従って、組成物の投与は、経口投与、頬投与、直腸投与、非経口投与、腹腔内投与、皮内投与、経皮投与、気管内投与を含む、様々な方式で達成され得る。さらに、組成物は、デポーまたは徐放性製剤で、全身投与ではなく局所投与されてもよい。
【０２４２】
さらに、組成物は、一般的な賦形剤、希釈剤、もしくは担体を用いて製剤化され、錠剤へ圧縮されてもよい、または便利な経口投与のためのエリキシルもしくは溶液として製剤化されてもよいし、または筋肉内経路もしくは静脈内経路により投与されてもよい。組成物は、経皮投与されてもよく、徐放性剤形等として製剤化されてもよい。組成物は、単独で投与されてもよいし、相互に組み合わせて投与されてもよく、または（本明細書に記述された）他の公知の化合物と組み合わせて使用されてもよい。
【０２４３】
本発明において使用するための適当な製剤は、Remington's Pharmaceutical Sciences(1985)に見出される。さらに、薬物送達のための方法の概説については、Langer(1990)Science 249:1527-1533を参照のこと。本明細書に記載された薬学的組成物は、当業者に公知の様式で、例えば、混合、溶解、造粒、糖衣錠作成、粉砕、乳化、封入、捕捉、または凍結乾燥の過程により製造され得る。以下の方法および賦形剤は、例示的なものに過ぎず、決して限定的なものではない。
【０２４４】
経口投与のための組成物は、当技術分野において公知の薬学的に許容される担体と組み合わせることにより製剤化され得る。そのような担体は、処置される患者による経口摂取のため、丸剤、カプセル、乳濁液、親油性および親水性の懸濁物、液体、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁物等として、化合物を製剤化することを可能にする。経口使用のための薬学的調製物は、組成物を賦形剤と混合し、所望により、適当な助剤を添加した後、顆粒の混合物を加工して、錠剤または糖衣錠のコアを入手することにより、入手され得る。適当な賦形剤は、特に、乳糖、ショ糖、マンニトール、またはソルビトールを含む糖のような増量剤；例えば、トウモロコシデンプン、コムギデンプン、コメデンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および／またはポリビニルピロリドン（PVP）のようなセルロース調製物である。
【０２４５】
吸入による投与のため、本発明に従い使用するための組成物は、適当な噴霧剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、もしくはその他の適当な気体の使用により加圧されたパックもしくは噴霧器から、または噴霧剤を含まない乾燥粉末吸入器から、エアロゾルスプレー提示の形態で便利に送達される。加圧されたエアロゾルの場合、投薬単位は、定量を送達するための弁を提供することにより決定され得る。化合物と、乳糖またはデンプンのような適当な粉末基剤との粉末混合物を含有している、例えば、ゼラチンのカプセルおよびカートリッジが、吸入器または吹送器において使用するため、製剤化され得る。
【０２４６】
組成物は、注射、例えば、ボーラス注射または連続注入による非経口投与のために製剤化されてもよい。注射のための製剤は、単位剤形で、例えば、アンプル、または保存剤が添加された多用量容器で提示され得る。組成物は、油性または水性の媒体による懸濁物、溶液、または乳濁液のような形態をとることができ、懸濁化剤、安定剤、および／または分散剤のような製剤化剤を含有し得る。
【０２４７】
組成物は、例えば、全て、体温では融解するが室温では固体となる、カカオ脂、カーボワックス、ポリエチレングリコール、またはその他のグリセリドのような従来の坐剤用基剤を含有している、坐剤または滞留浣腸のような直腸組成物へ製剤化されてもよい。
【０２４８】
さらに、組成物は、デポー調製物として製剤化されてもよい。そのような長時間作用型製剤は、植え込み（例えば、皮下もしくは筋肉内）または筋肉内注射により投与され得る。従って、例えば、化合物は、適当なポリマー性もしくは疎水性の材料を用いて（例えば、許容される油による乳濁液として）製剤化されてもよいし、またはイオン交換樹脂を用いて製剤化されてもよいし、または難溶性誘導体として、例えば、難溶性塩として製剤化されてもよい。
【０２４９】
脂質粒子（例えば、リポソーム）および乳濁液は、疎水性薬物のための送達媒体または担体の公知の例である。循環血中に長く滞留するリポソーム、例えば、ステルスリポソームを利用することができる。そのようなリポソームは、米国特許第5,013,556号に一般に記載されている。本発明の化合物は、米国特許第3,845,770号；第3,916,899号；第3,536,809号；第3,598,123号；および第4,008,719号に記載されたもののような放出制御手段および／または送達デバイスにより投与されてもよい。
【０２５０】
本発明において使用するための適当な薬学的組成物には、活性成分が治療的に有効な量で含有されている組成物が含まれる。投与される組成物の量は、当然、処置される対象、対象の体重、苦痛の重度、投与の様式、および処方する医師の判断に依存するであろう。有効量の決定は、特に、本明細書に提供される詳細な開示を考慮すれば、十分に当業者の能力の範囲内である。一般に、AHCM剤および／または癌治療薬の適当な1日用量は、治療効果を生ずるのに有効な最低用量である化合物の量であり得る。そのような有効用量は、一般に、上記の因子に依る場合がある。
【０２５１】
この処置を受容する対象は、霊長類、特に、ヒト、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、家禽、イヌ、ネコ、マウス、およびラットを含む、それを必要としている任意の動物である。
【０２５２】
化合物は、毎日、隔日、週3回、週2回、毎週、または隔週、投与され得る。投薬スケジュールには、「休薬日」が含まれてもよく、即ち、薬物は、2週間オン、1週間オフ、もしくは3週間オン、1週間オフ、もしくは4週間オン、1週間オフ等で投与されてもよいし、または休薬日なしに連続的に投与されてもよい。化合物は、経口、静脈内、腹腔内、外用、経皮、筋肉内、皮下、鼻腔内、舌下、またはその他の任意の経路により投与され得る。
【０２５３】
AHCM剤は（付加的な化学療法薬、放射線、または手術のような）他の処置と組み合わせて投与されるため、各剤または各治療の用量は、単一剤治療のための対応する用量より低くなり得る。投与のモードおよび正確な投薬量の決定は、十分に、熟練した医師の知識の範囲内である。
【０２５４】
一つの態様において、AHCMは、植え込み式注入デバイス、例えば、ポンプを介して投与される。植え込み式注入デバイスは、典型的には、フィルポートセプタムに穿通する皮下針により経皮的に充填され得る液体レザバーを含有しているハウジングを含む。薬物治療レザバーは、一般に、カテーテルを通して患者の身体部位へ液体を送達するため、デバイスアウトレットポートへ内部流路を介して連結される。典型的な注入デバイスは、コントローラー、およびレザバーから内部流路を通してデバイスのアウトレットポートへ液体を移動させるための、ポンプまたは弁のような液体移送メカニズムも含む。
【０２５５】
ナノ粒子
本明細書に記載されたAHCM剤、抗癌剤（例えば、本明細書に記載された低分子量抗癌剤、中分子量抗癌剤）、またはその両方は、ナノ粒子にパッケージングされてもよい。
【０２５６】
典型的には、ナノ粒子は、直径10nm、15nm、20nm、25nm、30nm、35nm、45nm、50nm、75nm、100nm、150nm、または200nm、または200〜1,000nm、例えば、10nm、15nm、20nm、25nm、30nm、35nm、45nm、50nm、75nm、100nm、150nm、または200nm、または20nmまたは30nmまたは50〜400nmである。より小さい粒子は、系からより迅速に除去される傾向がある。薬物は、ナノ粒子内に捕捉されていてもよいし、またはナノ粒子にカップリング、例えば、共有結合によりカップリングされていてもよいし、もしくはその他の方法で付着していてもよい。
【０２５７】
リポソームおよび固体脂質ナノ粒子のような、脂質または油に基づくナノ粒子が、本明細書に記載された剤を送達するために使用され得る。DOXIL（登録商標）は、リポソームナノ粒子の一例である。抗癌剤の送達のための固体脂質ナノ粒子は、Serpe et al.(2004)Eur.J.Pharm.Bioparm.58:673-680およびLu et al.（2006)Eur.J.Pharm.Sci.28:86-95に記載されている。ポリマーに基づくナノ粒子、例えば、PLGAに基づくナノ粒子が、本明細書に記載された剤を送達するために使用され得る。これらは、（ポリマーとの共有結合により、または共有結合なしに）ポリマーのマトリックスに治療剤が挿入される生分解性骨格に頼る傾向がある。PLGAは、ポリマーナノ粒子において広く使用されている（Hu et al.(2009)J.Control.Release 134:55-61；Cheng et al.(2007)Biomaterials 28:869-876、およびChan et al.(2009)Biomaterials 30:1627-1634を参照のこと）。PEG化PLGAに基づくナノ粒子も、抗癌剤を送達するために使用され得る（例えば、Danhhier et al.,(2009)J.Control.Release 133:11-17、Gryparis et al(2007)Eur.J.Pharm.Biopharm.67:1-8を参照のこと）。金属に基づく、例えば、金に基づくナノ粒子も、抗癌剤を送達するために使用され得る。タンパク質に基づく、例えば、アルブミンに基づくナノ粒子が、本明細書に記載された剤を送達するために使用され得、例えば、剤をヒトアルブミンのナノ粒子に結合させることができる。例示的な抗癌剤／タンパク質ナノ粒子は、パクリタキセルがアルブミンのナノ粒子に結合しているAbraxane（登録商標）である。
【０２５８】
ナノ粒子は、能動ターゲティング、受動ターゲティング、またはその両方を利用することができる。能動ターゲティングは、予め選択された部位、例えば、固形腫瘍またはその近くに存在する標的に結合するリガンドの内含に頼ることができる。受動ターゲティングナノ粒子は、拡散して、関心対象の部位、例えば、例えば、腫瘍において見られるような、過度に漏出性の微小血管系を特徴とする部位、および炎症の部位に蓄積することができる。
【０２５９】
広範囲のナノ粒子が、当技術分野において公知である。例示的なアプローチには、WO2010/005726、WO2010/005723、WO2010/005721、WO2010/121949、WO2010/0075072、WO2010/068866、WO2010/005740、WO2006/014626、7,820,788、7,780,984（これらの内容はその全体が参照により本明細書に組み入れられる）に記載されたものが含まれる。
【０２６０】
本発明は、以下の番号付きの項のいずれかにおいて定義され得る。
【０２６１】
1.癌治療の改善された送達または効力の必要性に基づき、対象を、降圧かつ／またはコラーゲン修飾剤（「AHCM」）の受容を必要としているものとして同定する工程；ならびに
（a）前記対象にAHCMを投与する工程、または
（b）癌治療を投与する工程
のいずれかまたは両方の工程
を含む、対象における癌治療の送達または効力を改善する方法であって、
AHCMが、癌治療の送達または効力を改善するのに十分な投薬量で投与される、方法。
【０２６２】
2.癌治療の改善された送達または効力の必要性に基づき、対象を、降圧かつ／またはコラーゲン修飾剤（「AHCM」）の受容を必要としているものとして同定する工程；ならびに
（a）前記対象にAHCMを投与する工程、または
（b）癌治療を投与する工程
のいずれかまたは両方の工程
を含む、対象における癌を処置するかまたは防止する方法であって、
AHCMが、癌を処置するかまたは防止するのに十分な投薬量で投与される、方法。
【０２６３】
3.（a）1nm、5nm、10nm、15nm、20nm、25nm、30nm、35nm、45nm、50nm、75nm、100nm、150nm、200nmより大きいが、300nmより小さい水力学的直径を有する実体として、AHCM、癌治療、または両方が投与されること；
（b）対象が、癌の診断またはAHCM投薬の開始の5日以内、10日以内、30日以内、60日以内、または100日以内にAHCMの用量を投与されていないこと；
（c）対象が、AHCMの投与の前に高血圧症でないかまたは高血圧症であったこと；
（d）AHCMが、癌治療の少なくとも1日前、2日前、3日前、もしくは5日前；または1週間前、2週間前、3週間前、4週間前、5週間前、またはそれ以前に投与されること；
（e）AHCMが、癌治療の少なくとも1日前、2日前、3日前、もしくは5日前；または1週間前、2週間前、3週間前、4週間前、5週間前、またはそれ以前に投与され、かつ前記癌治療と同時に投与されること、または
（f）AHCMが、少なくとも1時間、5時間、10時間、もしくは24時間；少なくとも2日、5日、10日、もしくは14日；少なくとも2週間、3週間、4週間、5週間、もしくは6週間；少なくとも2ヶ月、3ヶ月、4ヶ月、5ヶ月、もしくは6ヶ月；または少なくとも1年、2年、3年、4年、もしくは5年の期間にわたり連続的に投与されること
のうちの一つまたは複数を含む、項1または2の方法。
【０２６４】
4.AHCMが、
（i）アンジオテンシンII受容体遮断薬（AT1遮断薬）、
（ii）レニンアンジオテンシンアルドステロン系のアンタゴニスト（「RAASアンタゴニスト」）、
（iii）アンジオテンシン変換酵素（ACE）阻害剤、
（iv）トロンボスポンジン1（TSP-1）阻害剤、
（v）トランスフォーミング増殖因子β1（TGF-β1）阻害剤、または
（vi）結合組織増殖因子（CTGF）阻害剤
のうちの1種または複数種から選ばれる、項1〜3のいずれかの方法。
【０２６５】
5.AHCMが、ロサルタン（COZAAR（登録商標））、カンデサルタン（ATACAND（登録商標））、メシル酸エプロサルタン（TEVETEN（登録商標））、EXP 3174、イルベサルタン（AVAPRO（登録商標））、L158,809、オルメサルタン（BENICAR（登録商標））、サララシン、テルミサルタン（MICARDIS（登録商標））、バルサルタン（DIOVAN（登録商標））、またはそれらの誘導体のうちの1種または複数種から選ばれるAT1阻害剤である、項1〜4のいずれかの方法。
【０２６６】
6.AHCMがロサルタンである、項1〜5のいずれかの方法。
【０２６７】
7.AHCMが、アリスキレン（TEKTURNA（登録商標）、RASILEZ（登録商標））、レミキレン（Ro 42-5892）、エナルキレン（A-64662）、SPP635、またはそれらの誘導体のうちの1種または複数種から選ばれるRAASアンタゴニストである、項1〜6のいずれかの方法。
【０２６８】
8.AHCMが、ベナゼプリル（LOTENSIN（登録商標））、カプトプリル（CAPOTEN（登録商標））、エナラプリル（VASOTEC（登録商標））、ホシノプリル（MONOPRIL（登録商標））、リシノプリル（PRINIVIL（登録商標）、ZESTRIL（登録商標））、モエキシプリル（UNIVASC（登録商標））、ペリンドプリル（ACEON（登録商標））、キナプリル（ACCUPRIL（登録商標））、ラミプリル（ALTACE（登録商標））、トランドラプリル（MAVIK（登録商標））、またはそれらの誘導体のうちの1種または複数種から選ばれるACE阻害剤である、項1〜7のいずれかの方法。
【０２６９】
9.AHCMが、ABT-510、CVX-045、LSKL、またはそれらの誘導体のうちの1種または複数種から選ばれるTSP-1阻害剤である、項1〜8のいずれかの方法。
【０２７０】
10.TGF-β1阻害剤が、抗TGF-β1抗体またはTGF-β1ペプチド阻害剤のうちの1種または複数種から選ばれる、項4の方法。
【０２７１】
11.CTGF阻害剤が、DN-9693、FG-3019、またはそれらの誘導体のうちの1種または複数種から選ばれる、項4の方法。
【０２７２】
12.AHCMが、癌治療の分散または効力を増強するのに十分な量で投与される、項1〜11のいずれかの方法。
【０２７３】
13.AHCMが、対象における、コラーゲンのレベルもしくは産生の減少、腫瘍線維形成の減少、間質腫瘍輸送の増加、腫瘍灌流の改善、または腫瘍もしくは腫瘍血管系における癌治療の浸透もしくは拡散の増強、のうちの一つまたは複数を引き起こす用量で投与される、項1〜12のいずれかの方法。
【０２７４】
14.AHCMが、ロサルタンであり、25〜100mg/日で投与される、項1〜13のいずれかの方法。
【０２７５】
15.AHCMが、ロサルタンであり、12.5mg、25mg、50mg、または100mgの剤形で提供される、項1〜14のいずれかの方法。
【０２７６】
16.AHCMが、ロサルタンであり、0.25〜17.5mg/日、0.5〜15mg/日、1.3〜12mg/日、1.5〜12mg/日、2〜12mg/日、2〜10mg/日、2〜5mg/日、2〜3mg/日の範囲の、または2mg/日の非降圧用量で投与される、項1〜15のいずれかの方法。
【０２７７】
17.AHCMが、ロサルタンであり、降圧または抗心不全のために使用される標準医療用量の1.1倍、1.5倍、1.7倍、2倍、3倍、4倍、5倍、10倍より多い用量、またはそれ以上の用量で投与される、項1〜16のいずれかの方法。
【０２７８】
18.AHCMが、非降圧用量のAHCMによる第一の処置コースとして投与された後、標準降圧用量以上のAHCMによる第二の処置コースとして投与される、項1〜17のいずれかの方法。
【０２７９】
19.AHCMが、1nm、5nm、10nm、15nm、20nm、25nm、30nm、35nm、45nm、50nm、75nm、100nm、150nm、200nmより大きいが、300nmより小さい水力学的直径を有する実体として投与される、項1〜18のいずれかの方法。
【０２８０】
20.AHCMが、ポリマーナノ粒子または脂質ナノ粒子として投与される、項19の方法。
【０２８１】
21.癌治療が、1nm、5nm、10nm、15nm、20nm、25nm、30nm、35nm、45nm、50nm、75nm、100nm、150nm、200nmより大きいが、300nmより小さい水力学的直径を有する実体として投与される癌治療薬である、項1〜20のいずれかの方法。
【０２８２】
22.癌治療薬が、ポリマーナノ粒子または脂質ナノ粒子として投与される、項21の方法。
【０２８３】
23.AHCMまたは癌治療薬が、各々独立に、1nm以下もしくは0.1〜1.0nmの水力学的直径；5〜20nmもしくは5〜15nmの水力学的直径；または1nm、5nm、10nm、15nm、20nm、25nm、30nm、35nm、45nm、50nm、75nm、100nm、150nm、200nmより大きいが、300nmより小さい水力学的直径のサイズ範囲（nm）を有する実体として提供される、項1〜22のいずれかの方法。
【０２８４】
24.対象が、
（i）高血圧症を有しないこと、
（ii）AHCM処置の開始の時点で、高血圧症のための処置をされていないこと；または
（iii）正常なもしくは低い血圧を有すること
のうちの一つまたは複数を有する、項1〜23のいずれかの方法。
【０２８５】
25.対象が、癌の診断またはAHCM投薬の開始の5日以内、10日以内、30日以内、60日以内、または100日以内にAHCMを投与されていない、項1〜24のいずれかの方法。
【０２８６】
26.対象が、癌治療を必要としているかまたは癌治療を検討されている、項1〜25のいずれかの方法。
【０２８７】
27.対象が癌を有するか否かを決定する工程、ならびに該決定に応じてAHCMおよび癌治療を投与する工程を含む、項1〜26のいずれかの方法。
【０２８８】
28.対象が、固形線維性腫瘍を有するリスクを有しているかまたは固形線維性腫瘍を有している、項1〜27のいずれかの方法。
【０２８９】
29.対象が、前新生物状態を有しているかまたは癌の素因を有している、項28の方法。
【０２９０】
30.癌が、膵臓癌、乳癌、結腸直腸癌、肺癌、皮膚癌、卵巣癌、前立腺癌、子宮頚癌、胃腸癌、胃癌、頭頸部癌、腎臓癌、もしくは肝臓癌、またはそれらの転移性病変のうちの1種または複数種から選ばれる、項1〜29のいずれかの方法。
【０２９１】
31.AHCMが、癌治療の前におよび／または癌治療と組み合わせて投与される、項1〜30のいずれかの方法。
【０２９２】
32.癌治療が、抗癌剤、手術、および／または放射線のうちの1種または複数種から選ばれる、項1〜31のいずれかの方法。
【０２９３】
33.AHCMが、癌治療の少なくとも1日前、2日前、3日前、もしくは5日前；または1週間前、2週間前、3週間前、4週間前、5週間前、またはそれ以前に投与される、項1〜32のいずれかの方法。
【０２９４】
34.AHCMが、対象が癌治療を受容する時間のうちの予め選択された一部の間、維持される、項1〜33のいずれかの方法。
【０２９５】
35.AHCMが、癌治療が投与される期間全体の間、維持される、項1〜34のいずれかの方法。
【０２９６】
36.AHCMが、少なくとも1時間、5時間、10時間、もしくは24時間；少なくとも2日、5日、10日、もしくは14日；少なくとも2週間、3週間、4週間、5週間、もしくは6週間；少なくとも2ヶ月、3ヶ月、4ヶ月、5ヶ月、もしくは6ヶ月；または少なくとも1年、2年、3年、4年、もしくは5年の期間にわたり連続的に投与される、項1〜35のいずれかの方法。
【０２９７】
37.AHCMが、徐放性製剤として投与される、項1〜36のいずれかの方法。
【０２９８】
38.AHCMが、経口送達、皮下送達、または静脈内連続送達のために製剤化される、項1〜37のいずれかの方法。
【０２９９】
39.AHCMが、皮下ポンプ、インプラント、またはデポーを介して投与される、項1〜38のいずれかの方法。
【０３００】
40.癌治療が、
（i）ウイルス癌治療剤、抗癌治療剤の脂質ナノ粒子、抗癌治療剤のポリマーナノ粒子、癌標的に対する抗体、dsRNA剤、アンチセンスRNA剤、もしくは化学療法剤から選ばれる癌治療薬、
（ii）放射線、
（iii）手術、または
（iv）（i）〜（iii）の任意の組み合わせ
のうちの1種または複数種から選ばれる、項1〜39のいずれかの方法。
【０３０１】
41.脂質ナノ粒子が、PEG化リポソームドキソルビシン（DOXIL（登録商標））またはリポソームパクリタキセル（例えば、Abraxane（登録商標））から選ばれる、項40の方法。
【０３０２】
42.化学療法剤が、ゲムシタビン、シスプラチン、エピルビシン、5-フルオロウラシル、パクリタキセル、オキサリプラチン、またはロイコボリンから選ばれる、項40の方法。
【０３０３】
43.癌標的に対する抗体が、HER-2/neu、HER3、VEGF、またはEGFRに対する抗体から選ばれる、項40の方法。
【０３０４】
44.癌治療が、スニチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、ソラフェニブ、イコチニブ、ラパチニブ、ネラチニブ、バンデタニブ、BIBW 2992、もしくはXL-647から選ばれるチロシンキナーゼ阻害剤、またはセツキシマブ、パニツムマブ、ザルツムマブ、ニモツズマブ、ネシツムマブ、もしくはマツズマブから選ばれる抗EGFR抗体である、項1〜39のいずれかの方法。
【０３０５】
45.化学療法剤が、細胞傷害剤または細胞分裂阻害剤である、項40の方法。
【０３０６】
46.化学療法剤が、微小管阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤、タキサン、代謝拮抗薬、有糸分裂阻害剤、アルキル化剤、または挿入剤から選ばれる、項40または45の方法。
【０３０７】
47.癌治療が、抗血管形成剤、血管標的薬、または血管破壊剤のうちの1種または複数種から選ばれる、項1〜46のいずれかの方法。
【０３０８】
48.AHCMまたは癌治療が、経口、非経口、皮下、静脈内、直腸、筋肉内、腹腔内、鼻腔内、経皮から選ばれる全身投与、または吸入、もしくは腔内注入により、対象に投与される、項1〜47のいずれかの方法。
【０３０９】
49.腫瘍サイズ；
トランスフォーミング増殖因子β1（TGFβ1）、結合組織増殖因子（CTGF）、もしくはトロンボスポンジン-1（TSP-1）のうちの1種もしくは複数種のレベルもしくはシグナリング；
腫瘍コラーゲンIレベル；
線維含量；
間質圧；
コラーゲンI、コラーゲンIII、コラーゲンIV、TGFβ1、CTGF、もしくはTSP-1から選ばれる血漿もしくは血清のバイオマーカー；
1種もしくは複数種の癌マーカーのレベル；
新たな病変の出現、代謝、低酸素発生の速度；
新たな疾患関連症状の出現；
組織量のサイズ；
疾患関連疼痛の量；
組織学的分析、小葉パターン、および／もしくは有系分裂細胞の有無；または
腫瘍侵襲性、原発腫瘍の血管新生、もしくは転移性蔓延
のうちの一つまたは複数の変化について対象をモニタリングする工程をさらに含む、項1〜48のいずれかの方法。
【０３１０】
49.AHCMを含むナノ粒子を含む、薬学的組成物。
【０３１１】
50.AHCMと癌治療剤とを含むナノ粒子を含む、薬学的組成物。
【０３１２】
51.癌治療薬が、ウイルス癌治療剤、抗癌剤の脂質ナノ粒子、抗癌剤のポリマーナノ粒子、癌標的に対する抗体、dsRNA剤、アンチセンスRNA剤、または化学療法剤から選ばれる、項50の薬学的組成物。
【０３１３】
52.ナノ粒子が、ポリマーナノ粒子または脂質ナノ粒子である、項49〜51のいずれかの薬学的組成物。
【０３１４】
53.AHCMが、降圧または抗心不全のために使用されるAHCMの標準医療剤形に従った剤形で製剤化される、項49〜51のいずれかの薬学的組成物。
【０３１５】
54.AHCMが、降圧または抗心不全のために使用されるAHCMの標準医療剤形の0.01倍、0.02倍、0.03倍、0.04倍、0.05倍、0.06倍、0.07倍、0.08倍、0.09倍、0.1倍、0.15倍、0.16倍、0.2倍、0.3倍、0.4倍、0.5倍、0.6倍、0.7倍より小さい剤形で製剤化される、項49〜51のいずれかの薬学的組成物。
【０３１６】
55.AHCMが、降圧または抗心不全のために使用されるAHCMの標準医療剤形の1.1倍、1.5倍、1.7倍、2倍、3倍、4倍、5倍、10倍より大きい、またはそれ以上の剤形で製剤化される、項49〜51のいずれかの薬学的組成物。
【０３１７】
56.AHCMが、降圧または抗心不全のために使用されるAHCMの標準医療剤形の0.01倍、0.02倍、0.03倍、0.04倍、0.05倍、0.06倍、0.07倍、0.08倍、0.09倍、0.1倍、0.15倍、0.16倍、0.2倍、0.3倍、0.4倍、0.5倍、0.6倍、0.7倍より小さい剤形で製剤化される、AHCMの剤形。
【０３１８】
57.AHCMが、降圧または抗心不全のために使用されるAHCMの標準医療剤形の1.1倍、1.5倍、1.7倍、2倍、3倍、4倍、5倍、10倍より大きい、またはそれ以上の剤形で製剤化される、AHCMの剤形。
【０３１９】
58.剤、例えば、診断剤またはイメージング剤の癌への接近を最適化するかまたは癌への送達を最適化する方法であって、
降圧かつ／またはコラーゲン修飾剤（「AHCM」）を対象に投与する工程；および
任意で、該対象に前記剤を投与する工程
を含み、
（a）診断剤もしくはイメージング剤が、1nm、5nm、もしくは20〜150nmより大きい水力学的直径を有すること；
（b）前記剤が、放射線剤、NMRA剤、造影剤であること；または
（c）対象が、前記剤の投与の前の少なくとも2日間、3日間、もしくは5日間、または1週間、2週間、3週間、4週間、5週間、もしくはそれ以上の間、前記剤の投与前に開始されるAHCM投与により処置されること
のうちの一つまたは複数を含む、方法。
【０３２０】
59.癌または癌関連細胞を候補薬剤と接触させる工程；
前記候補薬剤の存在下または非存在下での癌細胞における変化を検出する工程
を含む、降圧かつ／またはコラーゲン修飾剤（AHCM）を同定する方法またはアッセイであって、
検出される変化が、活性型TGFβ、TGFβ1レベル、結合組織増殖因子（CTGF）レベル、またはコラーゲン（例えば、コラーゲン1）レベルの増加または減少のうちの一つまたは複数を含む、方法またはアッセイ。
【０３２１】
60.候補薬剤が、レニンアンジオテンシンアルドステロン系のアンタゴニスト（「RAASアンタゴニスト」）、アンジオテンシン変換酵素（ACE）阻害剤、アンジオテンシンII受容体遮断薬（AT1遮断薬）、トロンボスポンジン1（TSP-1）阻害剤、トランスフォーミング増殖因子β1（TGF-β1）阻害剤、または結合組織増殖因子（CTGF）阻害剤のうちの1種または複数種から選ばれる、項59の方法またはアッセイ。
【０３２２】
61.候補薬剤が、活性型TGFβ、TGFβ1レベル、結合組織増殖因子（CTGF）レベル、またはコラーゲンレベルのうちの一つまたは複数を低下させる、項59または60の方法またはアッセイ。
【０３２３】
62.処置を行なった方法またはアッセイを参照値と比較する工程、および処置を行なった値と参照値との間の違いを比較する工程をさらに含む、項59〜61のいずれかの方法またはアッセイ。
【０３２４】
63.インビトロ、インビボ、または両方の組み合わせで実施される、項59〜62のいずれかの方法またはアッセイ。
【０３２５】
64.候補薬剤を培養培地へ添加し、活性型TGFβ、TGFβ1レベル、結合組織増殖因子（CTGF）レベル、またはコラーゲンレベルの増加または減少について条件培地を分析することにより、インビトロで候補薬剤を評価する工程を含む、項59〜63のいずれかの方法またはアッセイ。
【０３２６】
65.候補薬剤を動物腫瘍モデルに投与する工程；および活性型TGFβ、TGFβ1レベル、結合組織増殖因子（CTGF）レベル、またはコラーゲンレベルの増加または減少について対象を分析する工程を含む、項59〜64のいずれかの方法またはアッセイ。
【０３２７】
66.単独もしくは癌治療薬と組み合わせて癌の処置において使用するための、降圧かつ／もしくはコラーゲン修飾剤（AHCM）の組成物、または単独のもしくは癌治療薬と組み合わせられた降圧かつ／もしくはコラーゲン修飾剤（AHCM）の、癌を処置するための使用。
【０３２８】
67.単独のまたは癌治療薬と組み合わせられた降圧かつ／またはコラーゲン修飾剤（AHCM）と、癌の処置のための使用説明書とを含む、治療キット。
【０３２９】
68.単独のまたはイメージング剤と組み合わせられた降圧かつ／またはコラーゲン修飾剤（AHCM）と、癌の診断のための使用説明書とを含む、診断キット。
【０３３０】
69.癌治療の改善された送達または効力の必要性に基づき、AHCMの受容を必要としているものとして対象を選択する工程；および
（a）前記対象にAHCMを投与する工程、または
（b）癌治療を投与する工程
のいずれかまたは両方の工程
を含む、降圧かつ／またはコラーゲン修飾剤（AHCM）を受容する対象を選択する方法であって、
AHCMが、癌治療の送達または効力を改善するのに十分な投薬量で投与される、方法。
【実施例】
【０３３１】
本発明を一般に説明したが、本発明は、以下の実施例を参照することにより、より容易に理解されるであろう。実施例は、本発明のある種の局面および態様の例示の目的のために含まれているに過ぎず、本発明を限定するためのものではない。
【０３３２】
下記実施例1〜6において、本発明者らは、AHCM剤、例えば、高血圧症の処置のために一般に臨床的に認可されているアンジオテンシンII受容体アンタゴニストであるロサルタンが、例えば、抗線維症効果を介して、ナノ医薬の浸透および効力を増強し得るか否かを査定した。ナノ治療薬は癌処置のための新たな期待を示しているが、その臨床効力は緩やかである（Jain RK,et al.(2010)Nat Rev Clin Oncol 7:653-664；Davis ME,et al.(2008)Nat Rev Drug Discov 7:771-782；Peer D,et al.(2007)Nat Nanotechnol 2:751-760；およびTorchilin VP(2005)Nat Rev Drug Discov 4:145-160）。理論により拘束されることは望まないが、腫瘍における密なコラーゲンネットワークは、一般に、ナノ治療薬の浸透および効力を低下させることができる。これは、部分的には、間質内の小さい線維間隔が、10ナノメートルより大きい粒子の移動を遅らせる線維性腫瘍において、特に、浸透が妨げられるためである（Netti PA,et al.(2000)Cancer Res 60:2497-2503；Pluen A,et al.(2001)Proc Natl Acad Sci USA 98:4628-4633；Ramanujan S,et al.(2002)Biophys J 83:1650-1660およびBrown E,et al.(2003)Nat Med 9:796-800）。FDAにより認可されているPEG化リポソームドキソルビシン（DOXIL（登録商標））および現在複数の臨床試験が進行中である腫瘍退縮ウイルスは、そのサイズ（およそ100nm）が腫瘍内分散および治療的有効性を妨げている2種のナノ治療薬に相当する（Nemunaitis J,et al.(2001)J Clin Oncol 19:289-298）。細菌コラゲナーゼ、リラキシン、ならびにマトリックスメタロプロテイナーゼ1および8のようなマトリックス修飾剤は、腫瘍におけるコラーゲンまたはプロテオグリカンのネットワークを修飾するために使用されており、腫瘍内（i.t.）注射された腫瘍退縮ウイルスの効力を改善した（Brown E,et al.(2003)Nat Med 9:796-800；McKee TD,et al.(2006)Cancer Res 66:2509-2513；Mok W,et al.(2007)Cancer Res 67:10664-10668；Ganesh S,et al.(2007)Cancer Res 67:4399-4407；およびKim J-H,et al.(2006)J Natl Cancer Inst 98:1482-1493）。さらに、リラキシンは、腫瘍マトリックスを通した輸送を改善することができるが、低分子量薬剤の送達を容易にすることはできない（米国特許第6,719,977号）。しかしながら、これらの剤は、正常組織毒性を生ずるか（例えば、細菌コラゲナーゼ）、または腫瘍進行のリスクを増加させる場合がある（例えば、リラキシン、マトリックスメタロプロテイナーゼ）。
【０３３３】
患者における高血圧症を管理するために認可されたロサルタン（Johnston CI(1995)Lancet 346:1403-1407）は、これらの安全性リスクの多くを有していない。さらに、その降圧特性に加えて、ロサルタンは、心臓および腎臓の線維症の罹患率を低下させることが示されている抗線維症剤でもある（Habashi JP,et al.(2006)Science 312:117-121；およびCohn RD,et al.(2007)Nat Med 13:204-210）。ロサルタンの抗線維症効果は、一部分、トロンボスポンジン1（TSP-1）のようなTGFβ1活性化因子のアンジオテンシンII I型受容体（AGTR1）により媒介されるダウンレギュレーションを介した、活性トランスフォーミング増殖因子β1（TGFβ1）レベルの抑制により引き起こされる（Habashi JP,et al.(2006)Science 312:117-121；Cohn RD,et al.(2007)Nat Med 13:204-210；Lavoie P,et al.(2005)J Hypertens 23:1895-1903；Chamberlain JS(2007)Nat Med 13:125-126；およびDietz HC(2010)J Clin Invest 120:403-407）。
【０３３４】
以下に証明されるように、AHCM剤、例えば、ロサルタンは、乳癌生検材料から単離された癌関連線維芽細胞（CAF）によるコラーゲンI産生を阻害した。さらに、AHCM剤、例えば、ロサルタンは、マウスにおけるヒトの乳房、膵臓、および皮膚の腫瘍の線維形成性モデルにおいて、基質コラーゲンの用量依存性の低下をもたらした。さらに、AHCM剤、例えば、ロサルタンは、腫瘍内注射された腫瘍退縮単純ヘルペスウイルス（HSV）の分散および治療効力を改善した。さらに、AHCM剤、例えば、ロサルタンは、静脈内注射されたPEG化リポソームドキソルビシン（DOXIL（登録商標））の効力も増強した。従って、癌治療薬（例えば、癌ナノ治療薬）と組み合わせた、AHCM剤、例えば、ロサルタンの投与は、線維形成性腫瘍を有する患者におけるナノ治療薬の効力を増強することができる。
【０３３５】
平均動脈血圧（MABP）に対して最小限の効果を有する用量を使用して、本発明者らは、4種の腫瘍モデル（自然発症マウス乳癌（FVB MMTV PyVT）、同所性膵臓腺癌（L3.6pl）、ならびに皮下に植え込まれた線維肉腫（HSTS26T）および黒色腫（Mu89））において、AHCM剤、例えば、ロサルタンが、コラーゲンIレベルを低下させることを以下に示した。さらに、本発明者らは、AHCM剤、例えば、ロサルタンが、腫瘍内（i.t.）または静脈内（i.v.）に注射されたナノ粒子の腫瘍内浸透も改善し得ることを以下に示した。
【０３３６】
さらに、本発明者らは、i.t.投与（遺伝子治療のため広く使用されている患者への投与の方法）（Hu JC,et al.(2006)Clin Cancer Res 12:6737-6747；Senzer NN,et al.(2009)J Clin Oncol 27:5763-5771；Breitbach CJ,et al.(2010)Cytokine Growth Factor Rev 21:85-89）された腫瘍退縮HSVの分散および効力、ならびにi.v.投与されたDOXIL（登録商標）の効力に、AHCM剤、例えば、ロサルタンが、如何に影響を与えるかを査定した。以下に示されるように、AHCM剤、例えば、ロサルタンは、i.t.注射された腫瘍退縮HSV、およびi.v.投与されたDOXIL（登録商標）の両方の効力を改善した。腫瘍内（i.t.）実験からの結果は、AHCM剤、例えば、ロサルタンが、間質輸送を改善することにより、間質空間におけるナノ粒子浸透を増強し得ることを示す。さらに、静脈内（i.v.）研究からの所見は、AHCM剤（例えば、ロサルタン）が、線維性固形腫瘍に対する全身投与されたナノ治療薬の効力を、膵臓腺癌のような高度に線維性の固形腫瘍ですら、改善し得ることを示す。従って、AHCM剤、例えば、FDAにより認可されている降圧薬であるロサルタンは、複数の腫瘍型における様々なナノ治療薬の効力を改善するために使用され得る。
【０３３７】
実施例1：ロサルタンは癌関連線維芽細胞（CAF）によるコラーゲンI合成を阻害する
乳房CAFによるTGFβ1の発現および活性化ならびにコラーゲンI産生に対するロサルタンの効果を調査した（図1）。ロサルタンは、インビトロで、癌関連線維芽細胞におけるTGFβ1活性化およびコラーゲンI産生を低下させる。細胞を、24時間、10μmol/Lのロサルタンにより処置した。ロサルタンは活性TGFβ1レベルを90％低下させたが、全TGFβ1レベルは影響を受けなかった。コラーゲンIレベルの対応する27％の減少が存在した。活性TGFβ1およびコラーゲンIの低下は、統計的に有意であった（スチューデントt検定p＜0.05）。腫瘍におけるコラーゲンはCAFにより主として産生されるため、腫瘍におけるコラーゲン含量に対するロサルタンの効果を調査した。
【０３３８】
実施例2：ロサルタンは用量依存的に腫瘍におけるコラーゲンIを減少させる
腫瘍内コラーゲンレベルに対するロサルタンの用量応答を決定するため、10mg/kg/日、20mg/kg/日、および60mg/kg/日のロサルタンを腹腔内（i.p.）注射し、ドーサルスキンフォールドチャンバーにおけるHSTS26T腫瘍における線維性コラーゲンのセカンドハーモニックジェネレーション（SHG）画像法（図2A〜2B）および腫瘍切片のコラーゲンI免疫染色（図3A〜3D）を実施した。SHGシグナル強度は、コラーゲンIおよびその他の線維形成性コラーゲン（例えば、コラーゲンIIIまたはV）が寄与するシグナルを含むことができるが、コラーゲンIは、一般に、大部分の軟部組織において優勢なコラーゲン型であり（Gelse K,et al.(2003)Adv Drug Deliv Rev 55:1531-1546）、従って、SHGシグナルの主な起源として寄与する。さらに、ヒト膵臓腫瘍においては、コラーゲンIが主な線維性コラーゲンであり、コラーゲンVのレベルは有意に低い（Mollenhauer J,et al.(1987)Pancreas 2:14-24）。20mg/kg/日および60mg/kg/日のロサルタン用量は、腫瘍内SHGシグナル強度を有意に低下させたが、10mg/kg/日の最低用量はSHGシグナル強度に対して有意な効果を有しなかった（図2Aおよび2B）。60mg/kg/日および20mg/kg/日のロサルタンの注射は、HSTS26T腫瘍におけるコラーゲンI免疫染色も、それぞれ、65％および42％、有意に低下させた（図3）。60mg/kg/日の用量による処置は、コラーゲンIの最も高度の低下をもたらし、平均動脈血圧（MABP）を35mmHg低下させた（p＜0.04；図4）。以下の実施例においては、20mg/kg/日の用量を使用した（しかし、それは、本明細書に記載された方法における他の用量の使用を限定するものでは決してない）。2週間のロサルタン処置の後、20mg/kg/日の用量は、10mmHg、MABPを低下させ（図4）、従って、MABPをSCIDマウスについての正常範囲（70〜95mmHg）内に維持した（Kristjansen PE,et al.(1993)Cancer Res 53:4764-4766）。それは、マウスの体重に対しても検出可能な効果を有しなかった（平均26±1g処置、対、26±1g対照）。20mg/kg/日の用量は、4種の腫瘍型（FVB MMTV PyVT、L3.6pl、HSTS26T、およびMu89）において、コラーゲンI免疫染色を、それぞれ、47％（p＜0.05）、50％（p＜0.03）、44％（p＜0.04）、および20％（p＜0.02）減少させた（図5A〜5D）。
【０３３９】
実施例3：ロサルタンは腫瘍におけるTSP-1発現を減少させる
TSP-1はTGFβ1活性化の重要な調節因子であり、ロサルタンは、マルファン症候群および筋ジストロフィー症のマウスモデルにおいてTSP-1発現およびTGFβ1活性化を低下させることが報告されている（Dietz HC(2010)J Clin Invest 120:403-407）。本明細書に示されるように、ホモジナイズされたHSTS26T腫瘍におけるタンパク質レベルの測定は、ロサルタンが、全TGFβ1レベルには影響を与えないが、TSP-1、活性TGFβ1、およびコラーゲンIのレベルを有意に低下させることを示した（図6）。ロサルタンは、HSTS26T（73％、p＜0.04）およびMu89（24％、p＜0.03）におけるTSP-1免疫染色も減少させた（図7A〜7B）。Mu89腫瘍およびHSTS26T腫瘍の両方において、TSP-1（図7A〜7B）およびコラーゲンI（図5C〜5D）についての免疫染色パターンは、密接にマッチした。本発明者らは、腫瘍周縁部におけるTSP-1およびコラーゲンIの高いレベルを検出したが、ロサルタンは、腫瘍中心におけるTSP-1およびコラーゲンIのレベルの明白な低下を誘導した（図5C、7A）。これらのデータは、コラーゲンIレベルの低下が、TSP-1発現のロサルタンにより誘導された低下によるTGFβ1の活性化の減少に、一部分、起因することを示す。
【０３４０】
実施例4：ロサルタンはナノ粒子およびナノ治療薬の腫瘍内分散を改善する
次いで、腫瘍間質マトリックスに関する以前の研究に基づき（Pluen A,et al.(2001)Proc Natl Acad Sci USA 98:4628-4633およびBrown E,et al.(2003)Nat Med 9:796-800）、本発明者らは、ロサルタンによるコラーゲン含量の減少が、ナノ粒子の腫瘍内分散を改善し得るか否かを決定しようと努力した。従って、本発明者らは、3種の異なる腫瘍型（HSTS26T、Mu89、およびL3.6pl）において、i.t.注射またはi.v.注射の後の蛍光ポリスチレンナノ粒子（直径100nm）の腫瘍内分散を測定した。ナノ粒子をi.t.注射されたマウスにおいて、ロサルタンは、腫瘍中心におけるナノ粒子の蓄積および浸透を改善した（図8A；HSTS26T p＜0.001、Mu89 p＜0.001）。反対に、対照腫瘍の中心には、ほとんどまたは全くナノ粒子蓄積が存在しなかった。対照腫瘍においては、注射されたナノ粒子の大部分が、腫瘍周縁部、および針挿入点の周囲に見出された（図8A）。本発明者らは、腫瘍退縮HSVの腫瘍内分散に対するロサルタンの効果も決定した。HSTS26TおよびMu89の両方において、ロサルタンは、腫瘍内注射されたHSVの腫瘍内蔓延を有意に増加させた（図8B）。これらの所見は、ロサルタンが大きいナノ粒子の分散を増加させることを示しており、本発明者らは、HSTS26Tにおいて、ロサルタンが、IgGの間質拡散を増加させ（図9）、IgG拡散データに基づき計算された平均間質マトリックス孔径を9.91±0.43nmから11.78±0.41nmへ増加させることも決定した（Nugent LJ,et al.(1984)Cancer Res 44:238-244）。
【０３４１】
次いで、本発明者らは、同所性膵臓腫瘍（L3.6pl）を有するマウスにおいて、i.v.注射されたナノ粒子の血管灌流および腫瘍内分散に対するロサルタンの効果を査定した。ロサルタンにより処置された腫瘍においては、血管から離れたビーズの腫瘍内の蓄積および浸透が有意に高かった（図8Cおよび図10）。これらの結果は、ロサルタンが、i.t.注射されたナノ粒子および／またはi.v.注射されたナノ粒子の両方の輸送および分散を改善することを示す。
【０３４２】
実施例5：ロサルタンはDOXIL（登録商標）および腫瘍退縮HSVの効力を改善する
次いで、本発明者らは、ロサルタンが、i.t.注射された腫瘍退縮HSVおよびi.v.注射されたDOXIL（登録商標）の効力を改善し得るか否かを決定した。HSVのi.t.注射と組み合わせられたロサルタンの効果を、HSTS26T腫瘍およびMu89腫瘍において決定した。ロサルタン単独の投与は、腫瘍増大速度に影響を与えなかった（図11Aおよび11B）。しかしながら、動物をHSVのi.t.注射の前に2週間ロサルタンにより処置した時、ロサルタンは、Mu89腫瘍およびHSTS26T腫瘍の両方において増大を有意に遅延させた（図11Aおよび11B）。ロサルタンおよびHSVにより処置されたマウスの50％において、HSTS26T腫瘍の体積は、最長9週間安定したままであった。Mu89腫瘍について、ロサルタンおよびHSVにより処置されたマウスは、腫瘍増大の遅延を有した。しかしながら、Mu89腫瘍における増大遅延は、一過性に過ぎず、ウイルス注射の4週間後には、全ての腫瘍が出発処置サイズより3倍大きかった。
【０３４３】
ロサルタンがi.v.注射されたナノ治療薬の効力を増加させ得るか否かを決定するため、同所性膵臓腫瘍（L3.6pl）を有するマウスを、DOXIL（登録商標）およびロサルタンにより処置した。腫瘍植え込みの4週間後、ロサルタン処置（20mg/kg/日）の開始の2週間後、本発明者らは、非抗腫瘍用量（即ち、癌の処置のため有効でない用量、例えば、腫瘍の増大および／または進行を阻害するかまたは防止するのに有効でない用量）のDOXIL（登録商標）（4mg/kg、i.v.）によりマウスを処置した。7日後、ロサルタンまたはDOXILは、単独では、平均腫瘍重量に影響を与えなかった（図11C）。しかしながら、ロサルタンおよびDOXIL（登録商標）により処置されたマウスにおいては、DOXIL（登録商標）単独を受容したマウスより、腫瘍が有意に小さかった（p＜0.001）（図11Cおよび11D）。
【０３４４】
実施例6：コラーゲン分散のパターンはロサルタンの有効性を調節する
ロサルタン-HSV組み合わせ治療に対する応答のHSTS26TとMu89との間の違いを調査するため、本発明者らは、HSVのi.t.注射の21日後、HSV感染および壊死のパターンを決定した。図12Aおよび12Bは、それぞれ、Mu89腫瘍（図12A）およびHSTS26T腫瘍（図12B）におけるコラーゲン構造の著しい違いを示す。理論により拘束されることは望まないが、コラーゲン構造のこれらの違いが、これらの腫瘍型におけるウイルス繁殖を改変した。Mu89腫瘍において、コラーゲン線維ネットワークはよく組織化されており、腫瘍内への指様の突起を形成した（図12Aおよび13A）。これらの突起は、腫瘍を、HSV粒子が横断することができない別個のコンパートメントに分割し、従って、ウイルス感染およびその結果の壊死は、感染コンパートメントに制限された（図14A）。ロサルタン処置は、ある程度、コラーゲン突起を破壊したが、完全には排除しなかった（図12A）。結果として、ロサルタンにより処置されたMu89腫瘍においては、コンパートメント間のウイルス粒子のある程度の交差が存在した。ロサルタンおよび／またはHSVの濃度を変動させることにより、破壊されるコラーゲン突起の量または程度（例えば、部分的または完全な破壊）をモジュレートし、従って、次に、腫瘍内のHSV粒子の分散に影響を与えることができる。対照的に、HSTS26T腫瘍において、密なコラーゲンネットワークは、よりびまん性であり、それほど線維性でなく、それほど区画化されていなかった（図12Bおよび13B）。この腫瘍において、密なコラーゲンネットワークは、ウイルス繁殖を減速させるようであったが、完全には妨害せず、増加したウイルス繁殖およびよりびまん性の壊死のパターンをもたらした（図14A）。
【０３４５】
考察
レニンアンジオテンシンアルドステロン系（RAAS）は、細胞外マトリックス成分の調節および産生において役割を果たすことが報告されている（Cook KL,et al.(2010)Cancer Res 70:8319-8328；Rodriguez-Vita J,et al.(2005)Circulation 111:2509-2517；およびWolf G(2006)Kidney Int 70:1914-1919）。アンジオテンシンIIは、TGFβ1依存性経路および非依存性経路の両方を介して、コラーゲン産生を刺激することが報告されている（Yang F,et al.(2009)Hypertension 54:877-884）。ロサルタンおよびその他のRAAS阻害剤は、線維症の様々な実験モデルにおいて、コラーゲンIおよびIIIならびに基底膜コラーゲンIVのレベルを低下させ（Toblli JE,et al.(2002)J Urol 168:1550-1555およびBoffa JJ,et al.(2003)J Am Soc Nephrol 14:1132-1144）、高血圧症患者において腎臓および心臓の線維症を逆転させることが報告されている（Lim DS,et al.(2001)Circulation 103:789-791およびKhalil A,et al.(2000)J Urol 164:186-191）。4種の異なる腫瘍型を使用して、本発明者らは、ロサルタンが、腫瘍におけるコラーゲンI産生も阻害することを、本明細書において初めて証明した。
【０３４６】
細菌コラゲナーゼ、リラキシン、ならびにマトリックスメタロプロテイナーゼ1および8のようなその他のマトリックス修飾剤は、腫瘍におけるコラーゲンまたはプロテオグリカンのネットワークを修飾することが報告されており、腫瘍内注射された腫瘍退縮ウイルスの効力を改善した（Brown E,et al.(2003)Nat Med 9:796-800；McKee TD,et al.(2006)Cancer Res 66:2509-2513；Mok W,et al.(2007)Cancer Res 67:10664-10668；Ganesh S,et al.(2007)Cancer Res 67:4399-4407；およびKim J-H,et al.(2006)J Natl Cancer Inst 98:1482-1493）。しかしながら、これらの剤は、正常組織毒性を生ずるか（例えば、細菌コラゲナーゼ）、または腫瘍進行のリスクを増加させる場合がある（例えば、リラキシン、マトリックスメタロプロテイナーゼ）。対照的に、ロサルタン（Johnston CI(1995)Lancet 346:1403-1407）は、限定された副作用を有する。ロサルタンは、数種の腫瘍型において転移の罹患率を低下させることが報告されている（Arafat HA,et al.(2007)J Am Coll Surg 204:996-1005）。
【０３４７】
上記実施例に示されるように、AHCM剤、例えば、ロサルタンは、コラーゲン含量を低下させ、次に、ナノ粒子およびナノ治療薬の間質輸送および腫瘍内分散を改善することができる。本発明者らは、コラーゲン線維ネットワークの組織化がナノ粒子分散に影響を与え得ることも発見した。これは、Mu89とHSTS26Tとの間の線維性コラーゲンIの構造的組織化の有意な違いのため、著しかった。Mu89腫瘍においては、線維性コラーゲンIの太い束が腫瘍周縁部を取り囲み、指様の突起を形成しており、それが、腫瘍塊を隔離されたコンパートメントへ細分し、ウイルス感染を注射部位／隔離されたコンパートメントへ制限している（図12Aおよび13A）。対照的に、HSTS26T腫瘍は、ウイルス蔓延を妨害するがウイルス粒子を注射部位へ制限しない網目状コラーゲン構造を有する（図12Bおよび13B）。Mu89腫瘍より遅いHSTS26T腫瘍の増大速度も、一部分、HSVと組み合わせられたロサルタンのHSTS26T腫瘍における増強された効力を説明することができる。従って、コラーゲン含量のみならず、コラーゲンネットワーク組織化も、腫瘍における大きい治療薬の浸透の限定において重要な役割を果たす。ある種の腫瘍におけるコラーゲンネットワークの含量および／または組織化に依って、AHCM剤（例えば、ロサルタン）および／または癌治療薬（例えば、HSV）の用量、投与法、および／または頻度を相応じて調整することができる。
【０３４８】
細胞傷害剤により処置された膵臓癌患者は、極めて高い再発の頻度を有し、5年生存率は5％未満である（Li J,et al.(2010)AAPS J 12:223-232）。膵臓腫瘍の不充分な血管供給および増加した線維含量が、細胞傷害薬の送達および効力の限定において有意な役割を果たしている可能性が最も高い（Olive KP,et al.(2009)Science 324:1457-1461）。本発明者らは、ヒト膵臓癌（L3.6pl）のマウス同所モデルにおいて、ロサルタンが、i.v.注射されたナノ粒子の腫瘍内分散および血管外浸透距離の両方を増加させることを示す。ナノ粒子の増加した分散および血管外漏出は、ロサルタンが、ナノ粒子およびウイルスのi.t.注射により示されたように、間質輸送を改善するのみならず、経血管輸送も改善することを示す。単独で使用された時、ロサルタンは、膵臓腫瘍の増大または処置されたマウスの体重に影響を与えなかった。しかしながら、DOXIL（登録商標）と組み合わせられたロサルタンは、DOXIL（登録商標）処置単独と比較して、腫瘍サイズを50％低下させた。これらの所見は、マウスにおける同所性膵臓癌において、ロサルタンが、i.v.注射されたDOXIL（登録商標）の腫瘍浸透および分散を増加させ、効力を増強したことを示す。
【０３４９】
ロサルタンの効果は間質空間に限定されない。RAAS系への修飾は、血管形成を阻害するか（Fujita M,et al.(2005)Carcinogenesis 26:271-279）、または腫瘍血流量を改変することもできる（Jain R,et al.(1984)IEEE Trans Son Ultrason 31:504-526およびZlotecki RA,et al.(1993)Cancer Res 53:2466-2468）。AGTR1のロサルタンによる阻害は、癌細胞によるVEGFの産生および内皮細胞におけるVEGFR1の発現を低下させ、腫瘍の血管形成および増大を阻害することもできる（Otake AH,et al.(2010)Cancer Chemother Pharmacol 66:79-87およびNoguchi R,et al.(2009)Oncol Rep 22:355-360）。本明細書に示されるように、ロサルタンは、HSTS26T腫瘍における腫瘍増大または血管密度には影響を与えなかった。ロサルタンは、AGTR1を発現する腫瘍細胞の増殖を低下させることもできる（Rhodes DR,et al.(2009)Proc Natl Acad Sci USA 106:10284-10289）。本発明者らは、AGTR1を発現しているヒト黒色腫Mu89において、癌細胞増殖（図15）または腫瘍サイズ（図16）の減少を見出さなかった。それらの研究と他の過去の研究との間の違いは、投薬量の違いによる可能性がある。例えば、過去の研究において、ロサルタンの用量は、本発明者らの研究において使用されたものより最大15倍高かった（Otake AH,et al.(2010)Cancer Chemother Pharmacol 66:79-87）。本発明者らは、単独では癌の処置のために無効である低用量ロサルタンが、癌の処置のため、（非治療レベルですら）癌治療または抗癌剤の効力を改善するために使用され得ることを、本明細書において示した。さらに、低用量ロサルタンは、より臨床的に翻訳可能なプロトコルを可能にし、低血圧合併症を回避することができる。
【０３５０】
RAASアンタゴニストを受容している患者は、乳癌および肺癌の低下した罹患率を有する（Lever AF,et al.(1998)Lancet 352:179-184）。高濃度で使用された時のRAASアンタゴニストの抗腫瘍特性について論じるため、異なる機序が報告されている（Ager EI,et al.(2008)Carcinogenesis 29:1675-1684；Lindberg H,et al.(2004)Acta Oncol 43:142-152；Miyajima A,et al.(2002)Cancer Res 62:4176-4179、およびRosenthal T,et al.(2009)J Hum Hypertens 23:623-635）。AGTR1シグナリングは、基質細胞および腫瘍細胞の増殖、ならびに癌細胞の遊走および播種を促進する炎症性のサイトカインおよびケモカインの転写を増加させることが報告されている（Deshayes F,Nahmias C(2005)Endocrinol Metab 16:293-299）。高濃度で投与されたRAASアンタゴニストによる活性TGFβ1レベルの低下は、転移を低下させることが報告されている（Jakowlew SB(2006)Cancer Metastasis Rev 25:435-457）。従って、抗腫瘍剤の送達の改善に加えて、ロサルタンは、腫瘍の進行および転移を阻害することもできる。単なる例として、低用量（例えば、単独で投与された場合には転移を低下させるかまたは防止するのに有効でない用量）で投与されたロサルタンを、（例えば、転移の処置および／または防止のために典型的に単独投与される用量より少ない用量の）抗転移剤と共に、腫瘍の進行および転移を阻害するために使用することができる。
【０３５１】
癌患者の処置において補助としてロサルタンを使用するためには、可能性のある副作用と共に投薬および処置のスケジュールを考慮することが重要である。本明細書に提示された用量および時間に依存する研究からの結果は、抗腫瘍処置の前の最低2週間のロサルタン投与を示す。患者における最大の効果を入手するため、抗腫瘍処置スケジュールの2週間前にロサルタン処置を開始し、抗腫瘍処置スケジュールの全体を通してそれを継続することが賢明であり得る。高血圧症患者における長期ロサルタン治療は、限定された管理可能な副作用を有していることが示されており、多くの抗腫瘍剤（例えば、抗VEGF薬）が血圧を増加させることが示されているため（Ager EI,et al.(2008)Carcinogenesis 29:1675-1684）、長期ロサルタン同時治療は、癌患者にとって有益であり得る。いくつかの態様において、患者は、マルファン症候群を有する患者の処置のために一般に使用される（Brooke BS,et al.(2008)N Engl J Med 358:2787-2795）、2mg/kg/日ロサルタンの用量で処置され得る。
【０３５２】
ロサルタンおよびARBは、限定された副作用を有するが、ロサルタン治療は、既知の腎疾患を有する患者のためには推奨されない。ロサルタンは、微小血管性もしくは大血管性の腎疾患を有する患者における腎不全、またはうっ血性心不全を誘導する場合がある（Sica DA,et al(2005)Clin Pharmacokinet 44:797-814）。低い腎機能を有する患者、またはカリウム補給剤もしくはカリウム保持性利尿薬を同時に受容している患者においては、高カリウム血症が起こる場合もある。最後に、ロサルタンにより処置された患者においては、高レベルの循環血中アンジオテンシンIIにより引き起こされる血管浮腫が、起こる場合がある（Sica DA,et al(2005)Clin Pharmacokinet 44:797-814）。
【０３５３】
腫瘍薬物耐性は、一般に、増加した薬物流出、薬物不活化、アポトーシスからの回避、および標的経路の改変を含む、多くのレベルで起こると考えられる（Longley DB,et al.(2005)J Pathol 205:275-292）。ロサルタンは抗腫瘍剤ではないため、長期処置後のロサルタン治療に対する腫瘍の耐性は、他の機序に起因し得る。TGFβ1活性化は、TSP-1に加えてMMPおよびインテグリンのような異なる剤により誘導されるため、ロサルタンに対する腫瘍の耐性は、TGFβ1の活性化およびシグナリングの変化に起因する可能性がある。しかしながら、心筋梗塞後の長期ロサルタン治療は、抗線維症特性の低下に関連していないことが報告されている（Schieffer B,et al.(1994)Circulation 89:2273-2282）。
【０３５４】
実施例1〜6に示されるように、本発明者らは、ロサルタンが、腫瘍における基質コラーゲン含量を低下させ、i.t.およびi.v.で送達されたナノ粒子の両方（DOXIL（登録商標）、HSV）の浸透および治療効力を改善することを示す。ロサルタンは、その臨床適用を増加させる可能性がある、血管作用特性および抗転移特性も示す。さらに、ロサルタンは、臨床使用のために既に認可されているため、癌患者におけるナノ治療薬の効力の改善のための安全かつ有効な補助を表す。
【０３５５】
実施例1〜6についての例示的な実験プロトコル
例示的な材料および方法
技術のより詳細な説明は、以下の付加的な材料および方法のセクションに提示される。
【０３５６】
簡単に説明すると、ヒト乳癌生検材料から単離されたCAFを、ロサルタンにより24時間処置した後、コラーゲンおよびサイトカインのレベルを測定した。タンパク質アッセイを市販のELISAキットを用いて行った。全ての動物実験を、機関内動物実験委員会（Institutional Animal Care and Use Committee）の認可の下で行った。ロサルタンを、最長2週間、10mg/kg/日、20mg/kg/日、または60mg/kg/日の濃度でi.p.投与した。2週間のロサルタン処置の後、HSV（i.t.）およびDOXIL（登録商標）（尾静脈を介した静脈内）により、マウスを処置した。切除された腫瘍を、生化学的分析のため、急速凍結させるか、または免疫組織化学のため、パラホルムアルデヒドで固定し、パラフィンもしくは最適切削温度化合物（OCT）で包埋した。
【０３５７】
付加的な材料および方法：
細胞培養
当技術分野において認識されているプロトコル、例えば、Orimo A,et al.(2005)Cell 121:335-348に記載されたプロトコルを使用して、ヒト乳癌生検材料からCAFを単離した。CAFを、500K細胞/ウェルの濃度で24穴プレートに播種した。細胞を24時間プレートに付着させた後、10μmol/lのロサルタンを24時間添加した（Schuttert JB,et al.(2003)Pflugers Arch 446:387-393）。バックグラウンドコラーゲンレベルを低下させるため、低血清において、処置を行った。24時間の処置期間の終了時に、条件培地を収集し、コラーゲンレベルについて分析した。
【０３５８】
タンパク質アッセイ
コラーゲンI測定は、I型C末端コラーゲンプロペプチド酵素連結免疫吸着アッセイ（ELISA）キット（Quidel,San Diego,CA）およびSircol可溶性コラーゲンアッセイ（Biocolor Ltd.,United Kingdom）を用いて行われた。TGFβ1アッセイは、ヒトTGFβ1 ELISAキット（R&D Systems,Minneapolis,MN）を用いて実施された。そのアッセイは、遊離型の成熟TGFβ1のみを測定する。TGFβ1の全レベルを測定するため、TGFβ1の潜在型を1N HClにより活性化した。TSP-1アッセイは、ヒトTSP-1 ELISAキット（R&D Systems,Minneapolis,MN）を用いて実施された。
【０３５９】
マウスおよび腫瘍モデル
全ての実験を、機関内動物実験委員会の認可の下で行った。ヒト軟部組織肉腫（HSTS26T）およびヒト黒色腫（Mu89）の腫瘍を、重症複合免疫不全（SCID）マウスの脚およびドーサルスキンフォールドチャンバーにおいて皮下で増大させた（Leunig M,et al.(1992)Cancer Res 52:6553-6560）。ヒト膵臓腺癌細胞（L3.6PL）を、SCIDマウスの膵臓において同所的に増大させた。膵尾部への100万個の細胞の夾膜下注射により、L3.6PL腫瘍を誘導した。自然発症FVB/N-Tg（MMTV-PyVT）634MU1/Jマウスにおいて、腫瘍サイズをモニタリングし、直径4〜6mmのサイズに達した時、処置のための腫瘍を選択した（Guy CT et al.(1992)Mol Cell Biol 12:954-961）。
【０３６０】
ロサルタンの調製および処置
Cozaar（ロサルタンカリウム）錠を、乳鉢および乳棒を使用して破砕した。次いで、2.5mg/mlの濃度を入手するため、粉末を水に溶解させた。次いで、溶液をろ過し、滅菌容器に保管した。10mg/kg/日、20mg/kg/日、または60mg/kg/日の濃度のロサルタンを、最長2週間、毎日、i.p.注射により投与した（Melo LG,et al.(1999)Am J Physiol 277:R624-R630）。
【０３６１】
組織の収集、包埋、および染色
免疫染色分析および定量化のための腫瘍を、マウスから採集し、4％パラホルムアルデヒドで固定し、パラフィンまたは最適切削温度化合物（OCT）（Sakura Finetek Torrance,CA）で包埋した。OCT包埋される腫瘍は、包埋および凍結の前に24時間ショ糖溶液に浸漬された。
【０３６２】
凍結切片におけるコラーゲンIおよびTSP-1の免疫染色
凍結切片を、免疫組織化学および画像化のため、10μmの切片に切断した。以前に記載されたプロトコル（Znati CA,et al.(2003)Clin Cancer Res 9:5508-5513）により、LF-67抗体（1:100希釈）を使用して、コラーゲンIを検出した。マウスと交差反応するヤギ抗ヒト抗体（sc-12312,Santa Cruz Biotechnology Inc.,Santa Cruz,CA）（1:50希釈）により、TSP-1を検出した。コラーゲンおよびTSP-1の分析のため、20倍の倍率の画像を、各スライドから無作為に得た。分析された全てのスライドからのピクセルの平均強度値に基づき設定された閾値より高いピクセルの数を測定することにより、コラーゲンおよびTSP-1の含量を決定した。コラーゲンIおよびトロンボスポンジン1の両方の免疫染色について、バックグラウンドシグナル強度は低く均一であった。本発明者らは、平均シグナル強度閾値が、コラーゲンおよびトロンボスポンジン1の免疫染色の正確な表示をもたらし、バックグラウンドシグナルを含んでいないことを確認した。
【０３６３】
コラーゲン線維のセカンドハーモニック画像法
セカンドハーモニックイメージング（SHG）画像法を、特注の多光子レーザー走査型顕微鏡（Brown E,et al.(2003)Nat Med 9:796-800）によりドーサルチャンバー腫瘍において実施した。Ti:サファイアレーザー（Mai-Tai Broadband：Spectra-Physics,Mountain View,CA）からの偏光を、ゼロオーダー1/4波長板（Newport Corporation,Irvine,CA）を使用して、円偏光へ変換した。810nmの励起波長および405nmで検出されたSHGシグナルを使用した。ドーサルチャンバー内にHSTS26T腫瘍を保持するSCIDマウスを、用量応答実験の期間中（15日間）、ロサルタン（10mg/kg/日、20mg/kg/日、もしくは60mg/kg/日）または生理食塩水のいずれかにより処置した。各マウスにおいて4個の関心領域を定めるため、血管マーカーを使用し、SHG画像法の同一領域に周期的に戻した。特注のMatlab（The MathWorks,Inc.,Natick,MA）コードにより、SHG画像を分析した。SHGシグナル陽性であった関心領域（ROI）の画分を、（ロサルタンまたは生理食塩水による処置の開始の前に）用量応答研究の1日目に入手されたSHGシグナルの量に対してノーマライズした。
【０３６４】
HSV感染およびナノ粒子分散の分析
腫瘍内注射：ナノ粒子および腫瘍退縮HSVを、4μl/分の流速で、シリンジポンプ（Harvard Apparatus Standard Pump 22,Holliston,Massachusetts）により注入した。本発明者らは、10μlの緑色蛍光タンパク質（GFP）発現HSV（2.5×105t.u.）、または10μlの蛍光ナノ粒子（100μmの直径；1×1013ナノ粒子/mlの濃度）を注射した。注射された腫瘍を、ナノスフェア注射の30分後、HSV注入の24時間後に切除した。切除された腫瘍を、針跡に垂直な角度で二分し、パラホルムアルデヒドで固定し、OCTで凍結させた。全ての腫瘍切片を、針跡の角度に垂直に入手した。腫瘍切片全体を、2倍の共焦点顕微鏡（Olympus BX61WI）により画像化し、画像をモザイクとして再構成した。ナノスフェア分散およびGFP陽性区域（HSV感染細胞）は、バックグラウンドシグナルより明るいピクセルの画分に相当する。
【０３６５】
静脈内注射：3.6×1013ナノ粒子/mlの濃度で10μlの全容量を、尾静脈を介して注射した。24時間後、機能的な血管を同定するため、FITC-レクチン50μlを注射した。レクチン注射の5分後、腫瘍を切除し、パラホルムアルデヒドで固定し、OCTで包埋した。次いで、腫瘍を切片化した後、共焦点画像法および分析を行った。バックグラウンドシグナルより明るいピクセルの画分を測定することにより、ナノスフェア分散の程度を決定した。灌流された血管の周りに輪郭を描き、各輪郭内のナノスフェア陽性ピクセルの画分を記録することにより、ナノスフェア浸透を決定した。輪郭は、灌流された各血管について30μm外側に拡張された。以前に記載されたアルゴリズム（Tong RT,et al.(2004)Cancer Res 64:3731-3736）を使用して、本発明者らは、ナノスフェア画分および血管からの距離のプロットを指数関数に適合させ、各血管からのナノスフェアの相対的な浸透深度を入手した。
【０３６６】
蛍光退色後回復による拡散測定
ドーサルスキンフォールドチャンバーに植え込まれたHSTS26T腫瘍を有するマウスを、1週間、ロサルタン（40mg/kg/日）のi.p.注射により処置した。以前に記載されたプロトコル（Chauhan VP,et al.(2009)Biophys J 97:330-336）に基づき、特注の多光子顕微鏡により、蛍光退色後回復（FRAP）測定を行った。IgG標識フルオレセインイソチオシアネート（0.5ml；2mg/ml）をi.t.注射し、トレーサーとして使用した。注射の約10分後、多光子FRAP（MP-FRAP）および空間フーリエ分析FRAP（SFA-FRAP）により、拡散を測定した。以下の方程式を使用して、SFA-FRAPデータを使用して、マトリックス孔サイズを計算した。
2014505666.tif 000003
式中、Dは腫瘍におけるプローブ分子についての拡散係数であり、D0は水中の拡散係数であり、λはプローブの水力学的半径と孔の半径との比率である（Nugent LJ,et al.(1984)Microvasc Res 28:270-274）。
【０３６７】
HSV感染、壊死、およびコラーゲン構造の分析
HSV注射の21日後のウイルス感染と壊死とコラーゲン構造との間の関係を決定するため、連続パラフィン切片を、ポリクローナルHSV-1抗体（DAKO,Glostrup Denmark）またはコラーゲンI抗体（LF-67）のいずれかにより染色した。パラフィン切片におけるコラーゲンI染色のため、スライドを3％過酸化水素により処理した後、Target Retrieval Solution,pH9（DAKO,Carpinteria,CA）による抗原賦活を行った。次いで、スライドを0.05％トリプシンにより処理した後、一次コラーゲンI抗体を1：500の希釈率で適用した。コラーゲンIまたはHSVにより染色された切片を、光学顕微鏡により画像化した。
【０３６８】
PCR分析
RNAを、RNeasyミニキット（Qiagen,Valencia,CA）を使用して抽出し、RT2第一鎖キット（SuperArray Biosciences Corporation,Frederick,MD）を使用してcDNAへ変換した。cDNAの質および濃度を、ND-200分光光度計（Nanodrop Technologies,Wilmington,DE）により測定した。PCR反応のため、全ての試料からのcDNAを1μg/μlに標準化した。反応を、HotStarTaq Plus DNA Polymerase（Qiagen,Valencia,CA）により実施した。AGTR1プライマーについて、本発明者らは、順方向プライマー
2014505666.tif 000004
、逆方向プライマー
2014505666.tif 000005
を使用した。
【０３６９】
Ki67染色、画像化、および分析
HSV注射の21日後に、パラフィン切片に対してKi67染色を行った。スライドをTarget Retrieval Solution（DAKO,Carpinteria,CA）によりマイクロウェーブ処理した後、一次抗体検出を行った。腫瘍切片全体を2倍の倍率で画像化し、モザイクとして再構成した。各腫瘍において20個の領域を無作為に選択した。各領域におけるKi67陽性細胞の画分を、手動の計数により決定した。
【０３７０】
DOXIL（登録商標）処置および腫瘍増大遅延
同所性膵臓L3.6PL腫瘍の植え込みの2週間後、マウスを、ロサルタンまたは生理食塩水による処置のため無作為に選択した。2週間のロサルタン処置（20mg/kg/日）の後、非抗腫瘍用量のDOXIL（登録商標）（4mg/kg）を尾静脈を介してi.v.注入した。DOXIL注射の1週間後、腫瘍を切除し測定した。
【０３７１】
ウイルス処置および腫瘍増大遅延
皮下にHSTS26T腫瘍およびMU89腫瘍を保持するScidマウスを、対照群およびロサルタン処置群へ無作為に分割した。その後、各アーム（対照および処置）を、HSV処置群および非HSV処置群へ分割した。2週間後に60mm3に達した腫瘍を、i.t.HSV注射のために選択した。PBSまたは2.5×105形質導入単位（t.u.）の腫瘍退縮HSV MGH2（E.Antonio Chiocca,Ohio State University,Columbus,OHからの寄贈）のいずれかの10μl i.t.注射により、腫瘍を処置した。24時間間隔で2回、腫瘍退縮HSVのi.t.注射を投与した。注射は、4μl/分の流速で、Harvard Apparatus Standard Pump 22注入／吸引シリンジポンプ系（Holliston,Massachusetts）を用いて行われた。腫瘍を2〜3日毎に測定した。腫瘍体積を以下のように推定した：V＝AB2/2。式中、Vは腫瘍体積であり；AおよびBはノギスにより測定された腫瘍の最大直径および最小直径である。
【０３７２】
統計
全ての動物実験が、各処置アームに少なくとも6匹のマウスを含んで実施された。HSTS26T腫瘍およびMU89腫瘍における腫瘍増大遅延研究は、各群に少なくとも8匹のマウスを含んで行われた。使用されたマウスの数についての合理性は、統計的有意性（p＜0.05）に達するためには、各群に少なくとも8匹のマウスが必要とされることを示した、本発明者らの以前の研究（McKee TD,et al.(2006)CancerRes 66:2509-2513およびMok W,et al.(2007)Cancer Res 67:10664-10668）の検出力計算に基づいた。二つの群を含む全ての統計分析を、スチューデントt検定を使用して行った。0.05未満のp値を、有意と見なした。複数の群については、一元配置のAnova検定後のチューキーのポストホック検定を、群間の統計的有意性を決定するために使用した。図中の統計的有意性は、アステリスク（「＊」）により同定される。
【０３７３】
実施例7：アンジオテンシン阻害は腫瘍微小環境の正常化により薬物送達を改善する
生物医学研究の進歩は、前臨床環境および臨床環境の両方において、数種の新規の全身投与される分子治療薬およびナノ治療薬の導入をもたらした（Jones,D.(2007)Nat Rev Drug Discov 6,174-175；Moghimi,S.M.et al.(2005)Faseb J 19,311-330）。これらの新たな剤は、腫瘍細胞に対するより大きい特異性または改善された薬力学的特性を与える独特の標的に対して作用するが、それらの有効性は、腫瘍微小環境の特性による送達の限界を被っている（Jain,R.K.(1998)Nat Med 4,655-657；Sanhai,W.R.et al.(2008)Nat Nanotechnol 3,242-244）。増大により誘導される機械的な力は、血管を圧縮し崩壊させて、腫瘍灌流を限定し、異常な血管系は、不均一な薬物血管外漏出をもたらす。送達の第三の決定要素、組織を通した間質輸送は、異常に密で屈折した腫瘍間質により、腫瘍におけるナノ医薬について、特に妨げられる（Jain,R.K.& Stylianopoulos(2010)Nat Rev Clin Oncol.139；Chauhan,V.P.et al.(2009)Biophysical journal 97,330-336）。これらの障壁は、膵臓癌（Olive,K.P.et al.(2009)Science 324,1457-1461）、結腸直腸癌（Halvorsen,T.B.& Seim,E.(1989)J Clin Pathol 42,162-166）、肺癌および乳癌（Ronnov-Jessen,L.et al.(1996)Physiol Rev 76,69-125）を含む、線維形成性腫瘍、線維性腫瘍を有する患者のための治療に特に影響し、標的癌細胞に到達する薬物の量を限定して、低い有効性をもたらす。現在、ナノ治療薬および低分子量薬物のためのこれらの送達障壁を克服するためのアプローチは限定されている。以前に、本発明者らは、リラキシンが、腫瘍マトリックスを通した輸送を改善し得るが、低MW薬剤の送達は容易にし得ないことを発見した（B.SeedおよびR.K.Jain.「Methods to Potentiate Cancer Therapies」、米国特許第6,719,977号、2004年4月13日）。
【０３７４】
腫瘍微小環境を正常化することができ、低分子量薬物および高分子量薬物の両方の送達を改善することができる、FDAにより認可されている剤のクラスが、本明細書に提示される。具体的には、本発明者らは、アンジオテンシン阻害が、乳房および膵臓の腫瘍を含む固形腫瘍における間質マトリックスを「正常化する」ことを示した（図17A）。本発明者らは、FDAにより認可されているアンジオテンシン受容体遮断薬（ARB）およびアンジオテンシン変換酵素阻害薬（ACE-I）が、この機序を通して、薬物送達を増強するため、腫瘍微小環境を改変し得るか否かを査定した。本発明者らは、ARBおよびACE-Iが、灌流を改善するために血管を除圧し（図17B〜17D）、血管機能を修復するために腫瘍の水力学的伝導率を増加させ（図18B）、かつナノ治療薬の浸透を増強するために間質マトリックス密度を減少させる（図18D）ことも決定した。これらの剤は、血管正常化を通して、放射線化学増感剤である酸素ほどの小さい分子の送達を改善し（図18A〜18B）、間質マトリックス正常化を通して、より大きい剤の浸透も増強する（図18C〜18D）。腫瘍微小環境全体のこの修復を通して、これらの剤は、乳癌および膵臓癌のモデルにおいて、低分子量化学療法薬およびナノ治療薬の有効性を増強し、低下した腫瘍増大およびより長い動物生存をもたらす（図19A〜19E）。本発明者らは、ARBおよびACE-Iが、治療薬の送達を増強することができ、従って、低分子化学療法薬、生物製剤、およびナノ粒子治療を含む、抗癌剤の全てのクラスとの組み合わせ治療のための広い適用可能性を有することを示した。
【０３７５】
アンジオテンシン遮断薬は、他のアプローチと比べて多数の利点を示す。抗血管形成治療は、血管系のみを正常化し、限定された数の適応症のためにのみ認可されている。一方、ARBおよびACE-Iは、管理可能な有害効果を有する降圧薬としてFDAにより認可されている。コラーゲンマトリックスを正常化することができるマトリックス分解酵素は、腫瘍に選択的でなく、侵襲および転移を増加させる場合がある。ARBおよびACE-Iは、一般に、正常組織におけるマトリックスリモデリングに関連した合併症を有しておらず、従って、降圧薬として安全である。低分子薬剤であるARBおよびACE-Iは、さらに毒性を限定するため、腫瘍への局在を増強するため、化学療法薬を含有しているナノベクター（例えば、リポソーム、ナノ粒子）を介して送達されてもよい。腫瘍への薬物送達を増強する唯一のFDAにより認可されている補助である抗血管形成薬は、一般に、血管壁における「孔」のサイズを低下させる場合があるため、より大きい粒子についての送達を改善することができない。反対に、本明細書に提示されたアンジオテンシン遮断薬は、抗腫瘍診断薬および抗腫瘍治療薬の全てのクラスについての送達を改善することができる。
【０３７６】
実施例8：固形腫瘍におけるコラーゲンを低下させるための降圧剤を同定するためのインビトロスクリーニング
この実施例は、腫瘍におけるコラーゲンIレベルを低下させる能力に基づき、降圧（AH）剤をランク付けするためのアッセイを提供する。
【０３７７】
大部分のコラーゲンIが癌関連線維芽細胞（CAF）により産生されるため、当業者は、AH処置後のCAFの上清において、その分子的な決定要素[活性TGFβ1、トロンボスポンジン1（TSP1）、および結合組織増殖因子（CTGF）]と共に、コラーゲンIのレベルを測定することができる。
【０３７８】
例えば、本発明者らは、ロサルタンが、インビトロで、乳房CAFにおけるTGFβ1活性化およびコラーゲンI産生を低下させることを決定した。細胞を、24時間、10μmol/Lのロサルタンにより処置した。ロサルタンは活性TGFβ1レベルを90％低下させたが（p＜0.05）、全TGFβ1レベルは影響を受けなかった。対応するコラーゲンIレベルの27％の減少が存在した（p＜0.05）（図1参照）。
【０３７９】
例示的な実験設計：
降圧剤：任意のFDAにより認可されているアンジオテンシン受容体遮断薬（ARB）を試験することができる。これらの剤の例示的な名称および用量は、http://www.globalrph.com/druglist.htmを介して見出され得るが、これに限定されない。
【０３８０】
アンジオテンシン変換酵素阻害薬（ACEI）もコラーゲンを低下させるが、それらは細胞上の受容体を標的とせず、従って、本発明者らは、それらのコラーゲンIに対する効果を測定しなかった。カルシウムチャンネル遮断薬を、コラーゲン低下効果について評価することもできる。
【０３８１】
細胞培養
以前に記載されたプロトコル（Orimo A,et al.(2005)Cell 121(3):335-348）を使用して、ヒト癌生検材料から癌関連線維芽細胞（CAF）を単離する。CAFを、500K細胞/ウェルの濃度で24穴プレートに播種し、24時間プレートに付着させた後、降圧薬を添加する。例えば、全てのロサルタン研究を、公開されたプロトコル（Schuttert JB,et al.(2003)Pflugers Arch 446(3):387-393）に基づき、24時間、10μmol/lで実施した。バックグラウンドコラーゲンレベルを低下させるため、処置を低血清において行うことができる。24時間の処置期間の終了時に条件培地を収集し、全TGFβ1、活性型TGFβ1、TSP-1、CTGF、およびコラーゲンのレベルについて分析することができる。
【０３８２】
タンパク質アッセイ
ロサルタン研究（Schuttert JB,et al.(2003)Pflugers Arch 446(3):387-393）において、コラーゲンI測定は、I型C末端コラーゲンプロペプチド酵素連結免疫吸着アッセイ（ELISA）キット（Quidel,San Diego,CA）およびSircol可溶性コラーゲンアッセイ（Biocolor Ltd.,United Kingdom）を用いて行われた。TGFβ1アッセイは、ヒトTGFβ1 ELISAキット（R&D Systems,Minneapolis,MN）を用いて実施された。そのアッセイは、遊離型の成熟TGFβ1のみを測定する。TGFβ1の全レベルを測定するため、潜在型TGFβ1を1N HClにより活性化した。TSP-1アッセイは、ヒトTSP-1 ELISAキット（R&D Systems,Minneapolis,MN）を用いて実施された。CTGF ELISAキットは、Leinco（www.leinco.com）から購入可能である。
【０３８３】
プロトコル概要：
乳癌、膵臓癌、および結腸癌に由来する癌関連線維芽細胞（CAF）を単離するかまたは購入する；
アンジオテンシンIおよびACEを含有している培地においてCAFおよび癌細胞を同時培養する；
例えば、6種の用量のAGTR1またはACEの阻害剤により、48時間、CAFを処置する；
上清を収集し、ELISAにより、TGFβ1、結合組織増殖因子（CTGF）、トロンボスポンジン1、および／またはコラーゲンIを測定する。ELISA測定は、3回以上繰り返されるべきである。
【０３８４】
付加的な例示的な試験：
（a）限られた数の腫瘍モデルにおいてインビボでインビトロ所見を確認する。
（b）新たなAHをスクリーニングするため、コラーゲンのより有効な修飾剤であるためのAHの特性を同定する。
【０３８５】
実施例9：腫瘍への薬物送達を改善するための別の線維化促進経路の阻害とのアンジオテンシン阻害の組み合わせ
本発明者らは、アンジオテンシンシグナリング阻害を通した間質マトリックスの正常化が、少なくとも部分的に、2種の機序を通して、薬物送達を改善することを発見した：血管灌流を改善するため、腫瘍における固有の圧縮力を弛緩させ、マトリックスにより直接付与される薬物輸送に対する粘弾性障害および立体障害を低下させる。アンジオテンシンシグナリング阻害は、これらの変化を生ずるため、下流の線維化促進性のTGFβ経路およびCTGF経路の活性化を安全に阻害することができる。いくつかの態様において、エンドセリン1、PDGF、Wnt／βカテニン、IGF-1、TNFα、およびIL-4を含む、TGFβおよびCTGFの活性化に依存しない線維化促進経路の阻害剤とのアンジオテンシン遮断薬の併用は、これらの効果を増強し、薬物の送達および有効性をさらに改善することができる。例えば、エンドセリン受容体遮断薬（ERB）およびPDGF阻害剤（PDGF-I）を、アンジオテンシン遮断薬と組み合わせて使用することができる。ERBは、肺動脈高血圧症を処置し、例えば、アンジオテンシン遮断薬と共に、癌のための治療のクラスとして使用され得る（Nelson et al.(2003)Nature Reviews Vol.3:110-116）。PDGF-Iは、腫瘍における可能性のある抗血管効果について報告されている（Baluk et al.(2005)Current Opinion in Genetics & Development 15:102-111、Andrae et al.(2008)Genes & Development 22:1276-1312）。エンドセリン阻害は、TGFβ合成の阻害（Ogata et al.(2002)Clinical Science 103(Suppl.48):284S-288S）を通して、肝臓（Binder et al.(2009)Mol.Cancer Ther.8:2452-2460）、肺（Park et al.(1997)Am J.Respir Crit Care Med Vol.156:600-608）、および心臓における線維形成を低下させることが報告されており、腫瘍モデルにおいて腫瘍の進行および転移を低下させることが報告されている（Nelson et al.（前記）；Binder et al.（前記））。一方、PDGF阻害は、特発性の肺線維症および強皮症における線維形成を防止することが報告されており（Grimminger et al.(2010)Nature Reviews Vol.9:956-970；Andrae et al.(2008)Genes & Development 22:1276-1312）、本発明者らは、それが腫瘍におけるコラーゲンレベルを低下させ得ることを決定した（示されないデータ）。ERBは、耐容性が高いことが報告されており、前立腺癌（James et al.(2009)European Urology 55:1112-1123）および非小細胞肺癌（Chiappori et al.(2008)Clin Cancer Res 14:1464-1469）における全体生存率を改善する可能性を有する。従って、慎重な投薬による、エンドセリン1および／またはPDGFの阻害とのアンジオテンシン阻害の組み合わせは、最小限の付加的な毒性で、薬物送達を相加的に改善するはずである。いくつかの態様において、改善された薬物送達および／または癌の処置のため、非降圧用量および／または非抗腫瘍用量で使用され得るアンジオテンシン阻害と組み合わせて、非医療用量でエンドセリン1および／またはPDGFの阻害を使用することができる。
【０３８６】
等価物
当業者は、本明細書に記載された本発明の特定の態様に対する多くの等価物を、ルーチンの実験のみを使用して、認識するかまたは確認することができるであろう。そのような等価物は、以下の特許請求の範囲に包含されるものとする。
【０３８７】
配列表：
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【図１】
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【図２】
2014505666.tif 000009
【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【配列表】
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【手続補正書】
【提出日】平成25年7月25日(2013.7.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
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【国際調査報告】
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