(57)【要約】  本発明は、創傷床における因子の結合のために使用され得るアプタマー変性ポリマーおよびその材料を提供する。例えば、アプタマー変性材料は、ポリマー発泡体材料に共役されたポリペプチドであり得る。このような材料は、例えば、ドレッシング材、創傷インサート、またはパッドのために使用することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリペプチドに共役されたポリマー発泡体基材を含む創傷ドレッシング材において、前記ポリペプチドがＰ２２（配列番号１）に対して少なくとも９０％同一である配列を含むことを特徴とする創傷ドレッシング材。
【請求項２】
請求項１に記載の創傷ドレッシング材において、前記ポリペプチドが前記ポリマー発泡体に共有結合されることを特徴とする創傷ドレッシング材。
【請求項３】
請求項１に記載の創傷ドレッシング材において、前記ポリペプチドのアミノまたはカルボキシル末端がＰＥＧスペーサー−システイン残基を含むことを特徴とする創傷ドレッシング材。
【請求項４】
請求項３に記載の創傷ドレッシング材において、前記ポリペプチドがチオエーテル結合を介して前記ポリマー発泡体に結合されることを特徴とする創傷ドレッシング材。
【請求項５】
請求項４に記載の創傷ドレッシング材において、前記リンカーがＥＭＣＳ由来のリンカーまたはｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳ由来のリンカーであることを特徴とする創傷ドレッシング材。
【請求項６】
請求項５に記載の創傷ドレッシング材において、前記ポリマー発泡体が置換シリル由来のリンカーを含むことを特徴とする創傷ドレッシング材。
【請求項７】
請求項６に記載の創傷ドレッシング材において、前記置換シリル由来のリンカーが、アミノウンデシルトリエトキシシランまたはアミノプロピルジイソプロピルエトキシシランから誘導されることを特徴とする創傷ドレッシング材。
【請求項８】
請求項１乃至７の何れか１項に記載の創傷ドレッシング材において、さらに、前記創傷ドレッシング材に結合された増殖因子、ケモカインまたはサイトカインを含むことを特徴とする創傷ドレッシング材。
【請求項９】
請求項８に記載の創傷ドレッシング材において、前記増殖因子が顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）であることを特徴とする創傷ドレッシング材。
【請求項１０】
請求項１乃至９の何れか１項に記載の創傷ドレッシング材において、前記ポリマー発泡体基材が網状連続気泡発泡体であることを特徴とする創傷ドレッシング材。
【請求項１１】
請求項１乃至９の何れか１項に記載の創傷ドレッシング材において、前記ポリマー発泡体基材が、ポリビニルアルコール、ポリウレタン、ポリプロピレン、ポリスチレン、ポリオール、ポロキサマー、アミノグリコシド、アミノ糖、またはこれらの１つまたは複数の組み合わせを含むことを特徴とする創傷ドレッシング材。
【請求項１２】
配列番号２（ＧＨＱＧＱＨＩＧＱＭＳ）のアミノ酸配列を含むことを特徴とするポリペプチド。
【請求項１３】
請求項１２に記載のポリペプチドにおいて、さらに、アミノまたはカルボキシル末端Ｃｙｓ残基を含むことを特徴とするポリペプチド。
【請求項１４】
請求項１２に記載のポリペプチドにおいて、さらに、配列ＡＥＥＡｃ−Ｃｙｓ−ＮＨ２をＣ末端に含むことを特徴とするポリペプチド。
【請求項１５】
ポリペプチドに共役されたポリマー発泡体基材を含む創傷ドレッシング材において、前記ポリペプチドが請求項１３または１４に記載の配列を含むことを特徴とする創傷ドレッシング材。
【請求項１６】
請求項１５に記載の創傷ドレッシング材において、前記ポリペプチドが前記ポリマー発泡体に共有結合されることを特徴とする創傷ドレッシング材。
【請求項１７】
請求項１６に記載の創傷ドレッシング材において、前記ポリペプチドがチオエーテル結合を介して前記ポリマー発泡体に結合されることを特徴とする創傷ドレッシング材。
【請求項１８】
請求項１７に記載の創傷ドレッシング材において、前記リンカーがＥＭＣＳ由来のリンカーまたはｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳ由来のリンカーであることを特徴とする創傷ドレッシング材。
【請求項１９】
請求項１６に記載の創傷ドレッシング材において、前記ポリマー発泡体が置換シリル由来のリンカーを含むことを特徴とする創傷ドレッシング材。
【請求項２０】
請求項１９に記載の創傷ドレッシング材において、前記置換シリル由来のリンカーが、アミノウンデシルトリエトキシシランまたはアミノプロピルジイソプロピルエトキシシランから誘導されることを特徴とする創傷ドレッシング材。
【請求項２１】
請求項１５乃至２０の何れか１項に記載の創傷ドレッシング材において、さらに、前記創傷ドレッシング材に結合された増殖因子、ケモカインまたはサイトカインを含むことを特徴とする創傷ドレッシング材。
【請求項２２】
請求項２１に記載の創傷ドレッシング材において、前記増殖因子が血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）であることを特徴とする創傷ドレッシング材。
【請求項２３】
請求項１５乃至２２の何れか１項に記載の創傷ドレッシング材において、前記ポリマー発泡体基材が網状連続気泡発泡体であることを特徴とする創傷ドレッシング材。
【請求項２４】
請求項１５乃至２３の何れか１項に記載の創傷ドレッシング材において、前記ポリマー発泡体基材が、ポリビニルアルコール、ポリウレタン、ポリプロピレン、ポリスチレン、ポリオール、ポロキサマー、アミノグリコシド、アミノ糖、またはこれらの１つまたは複数の組み合わせを含むことを特徴とする創傷ドレッシング材。
【請求項２５】
創傷の治療方法において、創傷部位を請求項１乃至１１または１５乃至２４の何れか１項に記載の創傷ドレッシング材と接触させるステップを含むことを特徴とする方法。
【請求項２６】
増殖因子、ケモカインまたはサイトカインを結合するための方法において、
（ａ）前記増殖因子、ケモカインまたはサイトカインを含む流体を、請求項１乃至１１または１５乃至２４の何れか１項に記載の創傷ドレッシング材と接触させ、それにより、前記増殖因子、ケモカインまたはサイトカインを前記創傷ドレッシング材に結合させるステップ
を含むことを特徴とする方法。
【請求項２７】
請求項２６に記載の方法において、さらに、
（ｂ）前記創傷ドレッシング材を少なくとも第２の流体と接触させ、前記創傷ドレッシング材に結合された前記増殖因子、ケモカインまたはサイトカインの一部または全てが前記第２の流体中に溶出されるステップ
を含むことを特徴とする方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１１年４月２９日に出願された米国仮特許出願第６１／５１８，１４８号に対する優先権を主張し、その内容全体は参照によって本明細書中に援用される。
【０００２】
本開示は、一般的に、創傷の治癒および創傷の治療法に関する。より詳細には、限定を意図しないが、本開示は、創傷床における因子の可逆的な結合のための変性材料、例えば、シリル変性ポリウレタン発泡体に関する。
【背景技術】
【０００３】
臨床研究および実践により、組織部位の近傍に減圧を提供すると、組織部位における新しい組織の増殖が増進および加速されることが示されている。この現象の応用は多数あるが、減圧の適用は特に創傷の治療において成功を収めている。この治療（医学界では「陰圧創傷療法（ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ  ｗｏｕｎｄ  ｔｈｅｒａｐｙ）」「減圧療法」または「真空療法」と呼ばれることが多い）は、より迅速な治癒および肉芽組織構築の増大を含むいくつかの利益を提供する。陰圧創傷療法の主要な臨床的利益の１つは創傷滲出液を効果的に除去できることであり、それにより浮腫が低減され、組織の除圧が可能になる。陰圧創傷療法は、創傷から除去される有害および有益な因子をいつも区別できるわけではない。これに対処するために使用されるコラーゲン、ＰＶＡ、ＰＥＧ、およびフィブリノーゲンなどのコーティングは、多くの場合、共有結合性、均一性、あるいは標的特異性でないということが欠点である。通常、これらは特定の部位でタンパク質に結合できず、活性部位がその機能を保持できるような形で細胞に提供することができない。従って、例えば、ドレッシング材、創傷インサート、パッドなどにおいて使用するために、共有結合による分子の結合を可能にし、結合され得る化合物の種類、これらを結合する化学反応、および／またはタンパク質が細胞に与えられる方向性を特定し得る改善が非常に望ましいであろう。
【発明の概要】
【０００４】
本開示は、創傷床からの因子などの因子の結合のために使用され得るアプタマー（例えば、ポリペプチド）変性ポリマーを含む新規の材料を提供する。いくつかの実施形態では、因子は内因性である。他の実施形態では、因子は外因性である。いくつかの実施形態では結合は可逆的であり、他の実施形態では不可逆的である。
【０００５】
いくつかの実施形態では、配列番号２（Ｐ１６、ＧＨＱＧＱＨＩＧＱＭＳ）と同一であるアミノ酸配列、配列番号２に対して少なくとも９０％同一である配列、または配列番号２に関して１、２、もしくは３個のアミノ酸置換もしくは欠失を含む配列を含むポリペプチドが提供される。いくつかの態様では、アミノ酸配列はさらに、アミノまたはカルボキシル末端Ｃｙｓ残基を含む（例えば、実施形態のポリペプチドのアミノまたはカルボキシル末端は、ＰＥＧスペーサー−システイン残基を含む）。例えば、アミノ酸配列は、配列ＡＥＥＡｃ−Ｃｙｓ−ＮＨ２をＣ末端に含むことができる。またさらなる態様では、配列番号２（ＧＨＱＧＱＨＩＧＱＭＳ）のアミノ酸配列または配列番号２に対して少なくとも９０％同一である配列を含むポリペプチドなどの実施形態のポリペプチドに共役されたポリマー発泡体基材を含む創傷ドレッシング材が提供される。
【０００６】
特定の実施形態では、ポリペプチドに共役されたポリマー発泡体基材を含む創傷ドレッシング材が提供されており、ここでポリペプチドは、配列番号１（Ｐ２２、ＮＡＩＱＥＡＲＲＬＬＮＬＳＲＤ）と同一であるアミノ酸配列、配列番号１に対して少なくとも９０％同一である配列、または配列番号１に関して１、２、もしくは３個のアミノ酸置換もしくは欠失を含む配列を含む。いくつかの態様では、アミノ酸配列はさらに、アミノまたはカルボキシル末端Ｃｙｓ残基を含む（例えば、実施形態のポリペプチドのアミノまたはカルボキシル末端は、ＰＥＧスペーサー−システイン残基を含む）。例えば、アミノ酸配列は、配列ＡＥＥＡｃ−Ｃｙｓ−ＮＨ２をＣ末端に含むことができる。
【０００７】
いくつかの実施形態では、実施形態のポリペプチドはポリマー発泡体に共有結合される（例えば、創傷ドレッシング材を形成するために）。いくつかの態様では、ポリペプチドはチオエーテルリンカーを介してポリマー発泡体に結合される。例えば、リンカーは、ＥＭＣＳ由来のリンカーまたはｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳ由来のリンカーであり得る。いくつかの態様では、チオエーテルリンカーは、ポリペプチド中のＣｙｓ残基、例えばポリペプチドのＡＥＥＡｃ−Ｃｙｓ−ＮＨ２配列中のＣｙｓ残基などを含む。またさらなる態様では、ポリペプチドとポリマー発泡体との間のリンカーは、シリル由来のリンカー（例えば、アミノウンデシルトリエトキシシランまたはアミノプロピルジイソプロピルエトキシシランから誘導された置換シリル由来のリンカー）であり得る。またさらなる態様では、実施形態のポリペプチドは、非共有結合（例えば、ビオチン−アビジン結合など）を介してポリマー発泡体に結合される。
【０００８】
特定の態様では、実施形態の創傷ドレッシング材はさらに、創傷ドレッシング材に結合（例えば、実施形態のポリペプチドとの相互作用を介して創傷ドレッシング材に結合）された増殖因子、ケモカインまたはサイトカインを含む。いくつかの態様では、増殖因子は、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）である。特定の態様では、増殖因子は血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）である。
【０００９】
いくつかの実施形態では、実施形態のポリペプチドはポリマー発泡体に結合されて、創傷ドレッシング材を形成する。例えば、ポリマー発泡体基材は、網状連続気泡発泡体であり得る。ポリマー発泡体の例としては、ポリビニルアルコール、ポリウレタン、ポリプロピレン、ポリスチレン、ポリオール、ポロキサマー、アミノグリコシド、アミノ糖、またはこれらの１つまたは複数の組み合わせを含む発泡体基材が挙げられるが、限定されない。
【００１０】
さらなる実施形態では、増殖因子、ケモカインまたはサイトカインを結合するための方法が提供されており、本方法は、増殖因子、ケモカインまたはサイトカインを含む流体（例えば、体液など）と、実施形態に従う創傷ドレッシング材とを接触させ、それにより、増殖因子、ケモカインまたはサイトカインを結合することを含む。いくつかの態様では、実施形態の創傷ドレッシング材は、創傷部位に陰圧をかける際に使用するのに適している。さらなる態様では、方法は、創傷ドレッシング材と接触する流体の一部または全てを除去することを含む。またさらなる態様では、実施形態の方法はさらに、創傷ドレッシング材を少なくとも第２の流体と接触させることを含み、ここで、創傷ドレッシング材に結合された増殖因子、ケモカインまたはサイトカインの一部または全てが第２の流体中に溶出される。特定の態様では、実施形態の方法はインビトロ法であると定義される。
【００１１】
またさらなる実施形態では、実施形態に従う創傷ドレッシング材を含む、創傷の治療のための組成物が提供される。いくつかの態様では、創傷部位を実施形態の創傷ドレッシング材と接触させることを含む、創傷の治療方法が提供される。特定の態様では、実施形態の方法はさらに、創傷部位に陰圧をかけることを含む。
【００１２】
本発明のシステムおよび／または方法のいずれかの実施形態はどれも、記載されるステップ、要素、および／または特徴のいずれかを含む／包含する／含有する／有するというよりむしろ、記載されるステップ、要素、および／または特徴のいずれかからなるまたはから本質的になることができる。従って、請求項のいずれかにおいて、「からなる」または「から本質的になる」という用語を上記のオープンエンド型の連結動詞のいずれかの代わりに使用して、所与の請求項の範囲を、オープンエンド型の連結動詞を使用した場合の範囲から変更することができる。
【００１３】
本開示のその他の目的、特徴および利点は、以下の詳細な説明から明らかになるであろう。しかしながら、この詳細な説明から本発明の趣旨および範囲内の種々の変化および修正が当業者に明らかになり得るので、本発明の特定の実施形態を示す詳細な説明および特定の実施例が説明だけの目的で与えられることは理解されるべきである。特定の化合物が１つの特定の一般式に属されるというだけの理由で、別の一般式に属せないことも意味するものではないことに注意されたい。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
以下の図面は例として示され、限定的なものではない。簡潔かつ明瞭にするために、所与の構造の全ての特徴がその構造が出現する全ての図面において常に標識化されているわけではない。同一の参照番号は、必ずしも同一の構造を示すわけではない。むしろ、同じ参照番号は、同一でない参照番号の場合と同様の特徴または同様の機能性を有する特徴を示すために使用され得る。
【００１５】
【図１】図１は、本発明の変性創傷インサートの一つを有し、創傷部位および創傷治療装置に連結された本発明の創傷ドレッシング材の一実施形態の側面図を示す。
【図２】図２は、図２の変性創傷インサートの拡大側面図を示す。
【図３】図３は、本発明の創傷ドレッシング材および／または変性創傷インサートを含み、そして／あるいはこれらに連結され、そして／あるいはこれらと共に使用され得る創傷治療装置の一実施形態の略ブロック図を示す。
【図４】図４は、本発明のいくつかの実施形態に従う概略図を示す。この側面図では、遊離ヒドロキシ基を有するポリウレタンベースのポリマーは、Ｒ’−（ＣＨ２）ｎ−Ｓｉ（ＯＨ）３試薬により変性されている。
【図５】図５は、ｏ−フタルジアルデヒド（ＯＰＡ）検定を用いて、シリル化３０ｐｈｒキトサン発泡体（「３０ＰＨＲ  Ｓｉ」）の遊離アミノ基の数をシリル化網状連続気泡発泡体（「ＲＯＣＦ」）と比較する結果を示す。どちらの場合も、シリル化基は、化合物６０２（アミノプロピルジイソプロピルエトキシシラン）からの（Ｈ２Ｎ（ＣＨ２）３）（ｉ−Ｐｒ）２Ｓｉ−であった。結果は相対蛍光単位（ＲＦＵ）に関して提供される。高感度のアミン検出試薬であるＯＰＡ単独は、対照としての役割も果たす。
【図６】図６は、化合物６３０（アミノウンデシルトリエトキシシラン）からの基（Ｈ２Ｎ（ＣＨ２）１１）（ＥｔＯ）２Ｓｉ−によってシリル化され、Ｔｅｘａｓ  Ｒｅｄ（登録商標）で処理された網状連続気泡発泡体と、単独およびＴｅｘａｓ  Ｒｅｄ（登録商標）と一緒の非シリル化網状連続気泡発泡体（「ＲＯＣＦ」）との相対蛍光単位（「ＲＦＵ」）を比較する結果を示す。結果は相対蛍光単位（ＲＦＵ）に関して提供される。ＰＢＳ、およびＰＢＳ中のＲＯＣＦも分析して、これらの材料の自己蛍光がＲＦＵ示度を歪曲しないであろうことを保証した。ＰＢＳはリン酸緩衝食塩水である。
【図７】図７は、トルエンジイソシアネート（ＴＤＩ）、キトサン、およびＶｏｒａｎｏｌ（商標）３０１０トリオールの重合に基づいたポリウレタンの３つの繰返し単位を示す。
【図８】図８は、化合物６０２でシリル化されると、３０ＰＨＲキトサン／Ｐ−２２は、より多くの顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）を捕獲する。簡単に言うと、３３３ｎｇ／ｍＬのＧＭ−ＣＳＦをサンプルと共に２４時間インキュベートした。非結合タンパク質を洗い流してから、サンプルをイミダゾールベースの緩衝剤Ｅ１で溶出させた。サンプルをＰＢＳとの緩衝剤交換により清浄化し、ＥＬＩＳＡにより定量した。結果は、Ｐ−２２を有する正のサンプルは２９９ｐｇ／ｍＬのＧＭ−ＣＳＦを捕獲したが、３０ＰＨＲ単独は１２４ｐｇ／ｍＬを結合したことを示す。
【図９】図９Ａおよび図９Ｂは、Ｔｅｘａｓ  Ｒｅｄ蛍光染料によるシラン化ＲＯＣＦのイメージを提供する。図９Ａは明視野イメージを示し、通常の光における−Ｓｉｌ／ＲＯＣＦの方向性および外観が示される。図９Ｂは６３０に共役されたＴｅｘａｓ  ＲｅｄのＴＲＩＴＣイメージングを示し、染料の−Ｓｉｌへの共役の成功が示される。これにより、６３０がＲＯＣＦにうまく付着した証拠が提供される。イメージは両方とも２０×倍率で撮影した。
【図１０】図１０は、オリゴペプチド（Ｐ１６、配列番号２）、ＡＥＥＡｃ−Ｃｙｓリンカー、ＥＭＣＳリンカー、置換シリル基、ならびにペグ化トリオールおよびトルエンジイソシアネートに基づくポリウレタン骨格を含むアプタマー変性高分子発泡体の実施形態の一部について、構造および結合性情報を提供する。
【図１１】図１１は、Ｐ２２／ＧＭ−ＣＳＦ実験の溶出結果を提供する。Ｐ２２はＢａｃｈｅｍ  Ａｍｅｒｉｃａｓ  Ｉｎｃ．２０１０ペプチドカタログから入手した。Ｐ２２は、ＧＭ−ＣＳＦを抑制する形で結合するＧＭ−ＣＳＦアンタゴニストである。簡単に言うと、Ｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳ化学によって３３０ｎｍｏｌのＰ２２をポリウレタンベースのＲＯＣＦに共役させた。Ｐ２２−リンカー−発泡体構築物を１μｇのＧＭ−ＣＳＦと共に一晩インキュベートし、５回洗浄し、厳密な溶出を受けさせた。溶出に先行する洗浄は、非特異的に結合したタンパク質が無視できるレベル（１００ｐｇ／ｍＬ未満）まで低減されることを示した。溶出の際、最も多い捕獲ペプチドを有するサンプルＳ３は、ＲＯＣＦ単独よりも４９％優れていた。ＲＯＣＦ／Ｐ２２に結合したＧＭ−ＣＳＦの全量６０８ｐｇ／ｍＬは、非特異的に負の対照Ｃ１に結合したＧＭ−ＣＳＦの量３７６ｐｇ／ｍＬよりも多かった。サンプルＳ１〜Ｓ３は全てペプチド−リンカー−発泡体を含有し、Ｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳ濃度がＳ１からＳ３に向かって増大した（Ｓ１＝１０×Ｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳ＋Ｐ２２、Ｓ２＝２５×Ｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳ＋Ｐ２２およびＳ３＝５０×Ｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳ＋Ｐ２２）。Ｃ１はＲＯＣＦ単独であり、Ｃ２はシラン化ＲＯＣＦ＋ＥＭＣＳ−Ｐ２２であり、Ｃ３はシラン化ＲＯＣＦ−ＥＭＣＳ＋Ｐ２２であった。ペプチドをポリウレタンに共有結合させるための技術はまだ証明されていないので、この実験に利用可能な正の対照は存在しなかった。しかしながら、正の対照は、実験結果に基づいて次の実験のために後で開発された。データは平均±標準偏差で与えられる。
【図１２】図１２は、オリゴペプチド（Ｐ１６、配列番号２）、ＡＥＥＡｃ−Ｃｙｓリンカー、ＥＭＣＳリンカー、置換シリル基、ならびにペグ化トリオール、トルエンジイソシアネートおよびキトサンオリゴマーに基づくポリウレタンコポリマーを含むアプタマー変性高分子発泡体の実施形態の一部について、構造および結合性情報を提供する。
【図１３】図１３は、オリゴペプチド（Ｐ１６、配列番号２）、ＡＥＥＡｃ−Ｃｙｓリンカー、ＥＭＣＳリンカー、ならびにペグ化トリオール、トルエンジイソシアネートおよびキトサンオリゴマーに基づくポリウレタン−コポリマーを含むアプタマー変性高分子発泡体の実施形態の一部について、構造および結合性情報を提供する。
【図１４】図１４は、ＲＯＣＦは、Ｐ１６（ＶＥＧＦのための新規設計された捕獲ペプチド）が共有結合されると、８２％多いＶＥＧＦを捕獲することが示される。Ｃ１はＲＯＣＦ単独であり、Ｃ２はＲＯＣＦ＋ＥＭＣＳ−Ｐ１６であり、Ｃ３はＲＯＣＦ−ＥＭＣＳ＋Ｐ１６であり、Ｃ４はシラン化ＲＯＣＦ単独であり、Ｃ５＝シラン化ＲＯＣＦ＋ＥＭＣＳ−Ｐ１６であり、Ｃ６はシラン化ＲＯＣＦ−ＥＭＣＳ＋Ｐ１６であり、Ｓ１は５０×Ｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳ＋Ｐ１６であり、そしてＳ２は１００×Ｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳ＋Ｐ１６であった。Ｗ＝ＰＢＳ洗浄後の最終物、Ｅ１＝５０ｍＭのＴｒｉｓ、８０ｍＭのＮａＣｌ、２５０ｍＭのイミダゾール、４５分。Ｗ５（左側）は、最終ＰＢＳ洗浄においてＲＯＣＦ中に非特異的に保持されたＶＥＧＦ（ｐｇ／ｍＬ）を示す。Ｅ１（右側）は、最後の洗浄の後に有機溶媒により発泡体およびペプチドから除去されたＶＥＧＦの量を示す。溶出データは、Ｓ２（Ｐ１６−リンカー−発泡体）が、最も多くＶＥＧＦが結合した負の対照Ｃ４（シラン化ＲＯＣＦ）よりも８２％多いＶＥＧＦを結合したことを示す。Ｓ２は５８４ｐｇ／ｍＬを結合したが、Ｃ４は３２１ｐｇ／ｍを結合した。Ｓ２は最高濃度のＥＭＣＳを有し、従って、共有結合したＰ１６が最も多い。このデータは、発泡体に共有結合したＰ１６の量と、発泡体によって捕獲された標的タンパク質の量との間の強い相関関係を示す。データは平均±標準偏差で与えられる。
【図１５】図１５は、陰圧創傷療法（ＮＰＷＴ）と併用されるドレッシング材において使用されるアプタマー変性ポリマーを示す。この実施形態では、アプタマーは、マクロファージに対する走化性分子のＭＣＰ１に選択的である。このような変性ドレッシング材は、マクロファージの創傷への遊走を刺激し、それにより、創傷を慢性状態から治癒状態へ進行させるために使用され得る。
【図１６】図１６は、ペグ化トリオール、トルエンジイソシアネートおよびキトサンオリゴマーに基づくポリウレタンコポリマーに共有結合したオリゴペプチド（Ｐ１６、配列番号２）を含むアプタマー変性高分子発泡体の実施形態の一部について、構造および結合性情報を提供する。
【図１７】図１７は、本発明の実施形態のいくつかに従う概略図を示す。この側面図では、異なる解離定数（Ｋｄ値）で異なる因子に結合する、特異的に設計されたタンパク質で変性されたインサートが示される。この実施形態では、変性インサートには、様々な薬剤、例えば、創傷の清浄化、治癒の促進、溶液の安定性などのための薬剤を含有する治療溶液（計量ボーラス投与）が流されている（連続的または間欠的に）。「滲出液」と標識されるブロック矢印は材料から出ていく混合物を表し、ドレッシング材が接触され得る治療溶液および創傷からの滲出液が含まれる。
【図１８】図１８は、溶液中のＶＥＧＦに、抗ＶＥＧＦ抗体に結合されたビーズを通過させた。溶液がビーズを通過した後、ビーズを沈降させ、洗浄した。次に、洗浄したビーズを内皮細胞遊走検定のために使用した。この実験からの結果は、３時間後に、抗体を持たないビーズよりも２倍多い細胞が、抗体（およびＶＥＧＦ）に結合されたビーズに向かって遊走したことを示した。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
いくつかの態様では、本開示はアプタマー変性材料を提供し、これは、いくつかの実施形態では、創傷環境において特定の因子、例えば、血管新生などの生物学的応答を引き起こす因子を捕獲および濃縮するため、あるいは生体分子または生物活性化合物を創傷床に送達するための創傷インサートとして使用され得る。いくつかの実施形態では、因子は内因性である。他の実施例では、因子は外因性である。いくつかの実施形態では結合は可逆的であり、他の実施形態では不可逆的である。
【００１７】
一態様では、本発明は、（ａ）基材と、（ｂ）ポリマー発泡体に共有結合されたアプタマーとを含む、アプタマー官能化創傷ドレッシング材を提供する。いくつかの実施形態では、基材はポリマー発泡体である。いくつかの実施形態では、アプタマーは、ポリペプチド、小分子バインダー、デンドリマー、ナノ粒子、および／またはオリゴヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、前記アプタマーはポリペプチドである。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは合成である。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは天然である。
【００１８】
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、ポリマー発泡体に共有結合される。いくつかの実施形態では、ポリペプチドのＣ末端は、ＰＥＧスペーサー−システイン残基を含む。いくつかの実施形態では、アプタマーは、リンカーを介してポリマー発泡体に結合される。いくつかの実施形態では、リンカーはＥＭＣＳ由来のリンカーまたはｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳ由来のリンカーである。いくつかの実施形態では、リンカーは置換シリル由来のリンカーである。いくつかの実施形態では、置換シリル由来のリンカーは、化合物６３０（アミノウンデシルトリエトキシシラン）から誘導される。いくつかの実施形態では、置換シリル由来のリンカーは、化合物６０２（アミノプロピルジイソプロピルエトキシシラン）から誘導される。いくつかの実施形態では、リンカーは第１および第２のリンカーを含み、第１のリンカーはＥＭＣＳ由来のリンカーまたはｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳ由来のリンカーであり、第２のリンカーは置換シリル由来のリンカーである。
【００１９】
いくつかの実施形態では、リンカーは、酸素原子を介してポリマー発泡体に結合される。いくつかの実施形態では、リンカーは、窒素原子を介してポリマー発泡体に結合される。いくつかの実施形態では、アプタマーは、創傷環境において内因性または外因性の因子に結合するように構成される。いくつかの実施形態では、結合は不可逆的である。いくつかの実施形態では、結合は可逆的である。いくつかの実施形態では、アプタマーは血管内皮増殖因子に結合するように構成される。いくつかの実施形態では、アプタマーは血小板由来増殖因子に結合するように構成される。いくつかの実施形態では、アプタマーは線維芽細胞増殖因子に結合するように構成される。いくつかの実施形態では、アプタマーはケラチノサイト増殖因子に結合するように構成される。いくつかの実施形態では、アプタマーは顆粒球マクロファージコロニー刺激因子に結合するように構成される。
【００２０】
いくつかの実施形態では、基材は網状連続気泡発泡体である。いくつかの実施形態では、基材は、ポリビニルアルコール、ポリウレタン、ポリプロピレン、ポリスチレン、ポリオール、ポロキサマー、アミノグリコシド、アミノ糖、またはこれらの１つまたは複数の組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、ポリマー発泡体は、第１のモノマーサブユニットを含む。いくつかの実施形態では、第１のモノマーサブユニットはジイソシアネートである。いくつかの実施形態では、ジイソシアネートはトルエンジイソシアネート、メチレンジフェニルジイソシアネート、またはエチルリジンジイソシアネートである。いくつかの実施形態では、ポリマー発泡体はさらに第２のモノマーサブユニットを含む。いくつかの実施形態では、第２のモノマーはトリオールである。いくつかの実施形態では、トリオールはペグ化グリセリンである。いくつかの実施形態では、ポリマー発泡体はさらに第３のモノマーサブユニットを含む。いくつかの実施形態では、第３のモノマーサブユニットはアミノグリコシドである。いくつかの実施形態では、アミノグリコシドはキトサンである。いくつかの実施形態では、アミノグリコシドはグルコサミンである。いくつかの実施形態では、第３のモノマーサブユニットはネオマイシンである。いくつかの実施形態では、第３のモノマーサブユニットはジベカシンである。いくつかの実施形態では、第３のモノマーサブユニットはカナマイシンである。いくつかの実施形態では、第３のモノマーサブユニットはトブラマイシンである。いくつかの実施形態では、第３のモノマーサブユニットはストレプトマイシンである。いくつかの実施形態では、第３のモノマーサブユニットはゲンタマイシンである。いくつかの実施形態では、ポリマー発泡体はさらに、オリゴマーサブユニットを含む。いくつかの実施形態では、オリゴマーサブユニットはキトサンベースのオリゴマーである。いくつかの実施形態では、オリゴマーサブユニットはグルコサミンベースのオリゴマーである。
【００２１】
別の態様では、本発明はアプタマー変性ポリマーを提供し、ポリマー骨格は、式：
2014514330.tif 000002
の第１の繰返し単位を含み、式中、
Ｕ１は第１の繰返し単位の非変性部分であり、
Ｌ１はリンカー分子または結合であり、
Ｌ２はリンカー分子または結合である。
【００２２】
いくつかの実施形態では、Ｌ１は結合であり、第１の繰返し単位の式はさらに、
2014514330.tif 000003
であると定義される。
【００２３】
いくつかの実施形態では、Ｌ２は結合であり、第１の繰返し単位の式はさらに、
2014514330.tif 000004
であると定義される。
【００２４】
いくつかの実施形態では、Ｌ１およびＬ２は結合であり、第１の繰返し単位の式はさらに、
2014514330.tif 000005
であると定義される。
【００２５】
いくつかの実施形態では、Ｕ１は式：
2014514330.tif 000006
を有し、式中、側鎖の結合点はＬ１に接続する。
【００２６】
いくつかの実施形態では、Ｕ１は式：
2014514330.tif 000007
を有し、式中、側鎖の結合点はＬ１に接続する。
【００２７】
いくつかの実施形態では、Ｕ１は式：
2014514330.tif 000008
を有し、式中、側鎖の結合点はＬ１に接続する。
【００２８】
いくつかの実施形態では、Ｕ１は式：
2014514330.tif 000009
を有し、式中、
ｎ１、ｎ２およびｎ３はそれぞれ独立して０〜２０であり、
側鎖の結合点はＬ１に接続する。
【００２９】
いくつかの実施形態では、Ｕ１は、トリオールベースのモノマーに基づいている。いくつかの実施形態では、トリオールベースのモノマーは、５００〜５，０００ｇ／モルの間の分子量を有するペグ化グリセリン分子である。
【００３０】
いくつかの実施形態では、Ｌ１は式−Ｏ−Ｓｉ（Ｒ１）（Ｒ２）−Ｒ３−Ｘ−を有し、式中、
Ｒ１およびＲ２は独立して、水素、ヒドロキシ、ハロ、アルキル（Ｃ≦６）またはアルコキシ（Ｃ≦６）であり、
Ｒ３はアルカンジイル（Ｃ≦２０）であり、
Ｘは−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−または−Ｓ−であり、ＸはＬ２またはアプタマーに接続される。
【００３１】
いくつかの実施形態では、Ｒ１およびＲ２はイソプロピルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１およびＲ２はヒドロキシである。いくつかの実施形態では、Ｒ３はアルカンジイル（Ｃ３〜１１）である。いくつかの実施形態では、Ｒ３は−（ＣＨ２）３−である。いくつかの実施形態では、Ｒ３は−（ＣＨ２）１１−である。いくつかの実施形態では、Ｘは−ＮＨ−である。
【００３２】
いくつかの実施形態では、Ｌ１またはＬ２はアミノチオリンカーである。いくつかの実施形態では、Ｌ１またはＬ２はＮＨＳ−マレイミド架橋剤である。いくつかの実施形態では、Ｌ１またはＬ２はＮＨＳ−ハロアセチル架橋剤である。いくつかの実施形態では、Ｌ１またはＬ２はＮＨＳ−ピリジルジチオール架橋剤である。
【００３３】
いくつかの実施形態では、アミノチオリンカーは、ＳＭ（ＰＥＧ）２４、ＳＭ（ＰＥＧ）１２、ＳＭ（ＰＥＧ）８、ＳＭ（ＰＥＧ）６、ＳＭ（ＰＥＧ）４、Ｓｕｌｆｏ−ＬＣ−ＳＭＰＴ、ＳＭ（ＰＥＧ）２、Ｓｕｌｆｏ−ＫＭＵＳ、ＬＣ−ＳＭＣＣ、ＬＣ−ＳＰＤＰ、Ｓｕｌｆｏ−ＬＣ−ＳＰＤＰ、ＳＭＰＨ、Ｓｕｌｆｏ−ＳＭＰＢ、ＳＭＰＢ、ＳＭＰＴ、ＳＩＡＢ、Ｓｕｌｆｏ−ＳＩＡＢ、Ｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳ、ＥＭＣＳ、Ｓｕｌｆｏ−ＳＭＣＣ、ＳＭＣＣ、ＭＢＳ、ＧＭＢＳ、Ｓｕｌｆｏ−ＧＭＢＳ、Ｓｕｌｆｏ−ＭＢＳ、ＳＰＤＰ、ＳＢＡＰ、ＢＭＰＳ、ＡＭＡＳ、およびＳＩＡからなる群から選択される試薬から誘導される。
【００３４】
いくつかの実施形態では、アプタマー変性ポリマーは第２の繰返し単位を含む。いくつかの実施形態では、第２の繰返し単位はキトサンベースのオリゴマーである。
【００３５】
いくつかの実施形態では、Ｕ１は式：
2014514330.tif 000010
を有し、式中、側鎖の結合点はＬ１に接続する。
【００３６】
いくつかの実施形態では、Ｌ１は式：
2014514330.tif 000011
を有する。
【００３７】
いくつかの実施形態では、Ｌ２は式：
2014514330.tif 000012
を有する。
【００３８】
いくつかの実施形態では、Ｌ２は、式−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）５−Ｓ−Ｃｙｓ−ＡＥＥＡｃ−を有し、式中、ＡＥＥＡｃは、
2014514330.tif 000013
である。
【００３９】
いくつかの実施形態では、アプタマー変性ポリマーはさらに第２の繰返し単位を含む。
【００４０】
いくつかの実施形態では、第２の繰返し単位は、式：
2014514330.tif 000014
を有する。
【００４１】
いくつかの実施形態では、アプタマーは、８〜１２個の残基を有するオリゴペプチドである。いくつかの実施形態では、オリゴペプチドは、配列ＧＨＱＧＱＨＩＧＱＭＳを有する。いくつかの実施形態では、アプタマーはＰ１６である。いくつかの実施形態では、アプタマーはＰ２２である。
【００４２】
いくつかの実施形態では、アプタマー変性ポリマーはさらに、式：
2014514330.tif 000015
の第３の繰返し単位を含み、式中Ｘは、
−  アルカンジイル（Ｃ≦１２）−、
−  アレーンジイル（≦１２）−、
−  アレーンジイル（≦６）−ＣＨ２−アレーンジイル（≦６）−、
またはこれらの基のいずれかの置換型である。
【００４３】
いくつかの実施形態では、Ｘはさらに、
2014514330.tif 000016
であると定義される。
【００４４】
いくつかの実施形態では、第３の繰返し単位はポリウレタン繰返し単位である。いくつかの実施形態では、第３の繰返し単位はエーテルベースのポリウレタン繰返し単位である。いくつかの実施形態では、第３の繰返し単位はエステルベースのポリウレタン繰返し単位である。いくつかの実施形態では、ポリマーは連続気泡発泡体である。
【００４５】
別の態様では、本発明は、
ａ）１つまたは複数のヒドロキシ基を有する第１の繰返し単位と、
ｂ）１つまたは複数の−Ｏ−Ｓｉ（Ｒ１）（Ｒ２）−Ｒ３−Ｘ−リンカー−アプタマー基を有する利用する第２の繰返し単位と
を含むアプタマー変性ポリマーまたはコポリマーを提供し、式中、
Ｒ１およびＲ２は独立して、水素、ヒドロキシ、ハロ、アルキル（Ｃ≦６）またはアルコキシ（Ｃ≦６）であり、
Ｒ３は、アルカンジイル（Ｃ≦２０）であり、
Ｘは、−ＮＨ−または−Ｓ−であり、
リンカーは、−Ｃ（Ｏ）−アルカンジイル（Ｃ≦１２）−であり、
アプタマーは、アミノ基、ヒドロキシ基またはメルカプト基のいずれかを介してリンカー基に結合された生物学的に活性なタンパク質である。
【００４６】
いくつかの実施形態では、第１の繰返し単位は、２つのヒドロキシ基を有する。
【００４７】
いくつかの実施形態では、第１の繰返し単位は、式：
2014514330.tif 000017
を有する。
【００４８】
いくつかの実施形態では、Ｒ１およびＲ２はイソプロピルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１およびＲ２はヒドロキシである。いくつかの実施形態では、Ｒ３はアルカンジイル（Ｃ３〜１１）である。いくつかの実施形態では、Ｒ３は−（ＣＨ２）３−である。
【００４９】
いくつかの実施形態では、第２の繰返し単位は、式：
2014514330.tif 000018
を有する。
【００５０】
いくつかの実施形態では、Ｒ３は−（ＣＨ２）１１−である。いくつかの実施形態では、第２の繰返し単位は、式：
2014514330.tif 000019
を有する。
【００５１】
いくつかの実施形態では、Ｘは−ＮＨ−である。いくつかの実施形態では、リンカーはさらに、式：
2014514330.tif 000020
によって定義され、カルボニル炭素がＸに結合されている。
【００５２】
いくつかの実施形態では、アプタマーは、システイン残基のメルカプト基によりリンカーを介して結合される。いくつかの実施形態では、アプタマーは顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）である。
【００５３】
いくつかの実施形態では、アプタマー変性ポリマーはさらに、式：
2014514330.tif 000021
の第３の繰返し単位を含み、式中Ｘは、
−  アルカンジイル（Ｃ≦１２）−、
−  アレーンジイル（≦１２）−、
−  アレーンジイル（≦６）−ＣＨ２−アレーンジイル（≦６）−、
またはこれらの基のいずれかの置換型である。
【００５４】
いくつかの実施形態では、Ｘはさらに、
2014514330.tif 000022
であると定義される。
【００５５】
いくつかの実施形態では、第３の繰返し単位はポリウレタン繰返し単位である。いくつかの実施形態では、第３の繰返し単位はエーテルベースのポリウレタン繰返し単位である。いくつかの実施形態では、第３の繰返し単位はエステルベースのポリウレタン繰返し単位である。いくつかの実施形態では、ポリマーは連続気泡発泡体である。
【００５６】
別の態様では、本発明は、上記または下記のようなアプタマー変性ポリマーまたはコポリマーを含む創傷インサートを提供する。別の態様では、本発明は、創傷に隣接した患者の皮膚に連結されるように構成された創傷インサートおよびドレープを含む創傷ドレッシング材を提供する。いくつかの実施形態では、創傷ドレッシング材はさらに、ドレープおよび流体源に連結されるように構成された流体送達パッドを含み、流体源は、創傷ドレッシング材を通して流体を創傷に送達するように作動可能である。
【００５７】
別の態様では、本発明は、創傷ドレッシング材と、創傷ドレッシング材に連結されるように構成された流体源とを含む創傷治療装置を提供し、流体源は、流体を創傷ドレッシング材に送達するように作動可能である。いくつかの実施形態では、装置はさらに、創傷ドレッシング材に連結されるように構成された真空源を含み、真空源は、創傷ドレッシング材に陰圧をかけるように作動可能である。いくつかの実施形態では、流体は、標的結合を増強するかあるいは創傷床への標的の放出を容易にする機能性溶液を含む。いくつかの実施形態では、流体は、生理食塩水、わずかに酸性ｐＨ、わずかに塩基性ｐＨを有する溶液、種々の界面活性剤（例えば、ポリソルベート）を有する溶液、ＥＤＴＡおよび／またはＥＧＴＡを含む。いくつかの実施形態では、流体は、次亜塩素酸および次亜塩素酸イオンを含む。
【００５８】
Ａ．定義
本明細書で使用される場合、「アプタマー」という用語は、特定の標的分子に結合するオリゴ核酸またはペプチド分子を指すだけでなく、標的分子またはイオンに結合するどのリガンドも指す。例えば、本明細書で使用される場合、「アプタマー」は、Ｃａ２＋に結合するＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸）を含むであろう。
【００５９】
化学基との関連で使用される場合、「水素」は−Ｈを意味し、「ヒドロキシ」は−ＯＨを意味し、「オキソ」は＝Ｏを意味し、「ハロ」は独立して−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒまたは−Ｉを意味し、「アミノ」は−ＮＨ２を意味し（アミノという用語を含有する基、例えば、アルキルアミノの定義については以下を参照）、「ヒドロキシアミノ」は−ＮＨＯＨを意味し、「ニトロ」は−ＮＯ２を意味し、イミノは＝ＮＨを意味し（イミノという用語を含有する基、例えば、アルキルイミノの定義については以下を参照）、「シアノ」は−ＣＮを意味し、「アジド」は−Ｎ３を意味し、一価の状況での「ホスファート」は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２またはその脱プロトン化型を意味し、二価の状況での「ホスファート」は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）Ｏ−またはその脱プロトン化型を意味し、「メルカプト」は−ＳＨを意味し、「チオ」は＝Ｓを意味し、「チオエーテル」は−Ｓ−を意味し、「スルホンアミド」は−ＮＨＳ（Ｏ）２−を意味し（スルホンアミドという用語を含有する基、例えば、アルキルスルホンアミドの定義については以下を参照）、「スルホニル」は−Ｓ（Ｏ）２−を意味し（スルホニルという用語を含有する基、例えば、アルキルスルホニルの定義については以下を参照）、そして「スルフィニル」は−Ｓ（Ｏ）−を意味する（スルフィニルという用語を含有する基、例えば、アルキルスルフィニルの定義については以下を参照）。
【００６０】
記号「−」は単結合を意味し、「＝」は二重結合を意味し、「≡」は三重結合を意味する。記号
2014514330.tif 000023
は、任意的な結合を表し、存在する場合には単結合または二重結合のいずれかである。記号
2014514330.tif 000024
は単結合または二重結合を表す。従って、例えば、構造
2014514330.tif 000025
は、構造
2014514330.tif 000026
を含む。当業者によって理解されるように、このような環原子はどれも２つ以上の二重結合の一部を形成しない。記号
2014514330.tif 000027
は、結合を垂直に横切って描かれる場合、基の結合点を示す。読者が結合点を迅速かつ明白に識別する助けとなるように、結合点は通常、より大きい基に対してだけこの方法で識別されることが注目される。記号
2014514330.tif 000028
は単結合を意味するが、この場合、くさびの太い端部に結合された基は「頁の外側」に向いている。記号
2014514330.tif 000029
は単結合を意味するが、この場合、くさびの太い端部に結合された基は、「頁の内側」に向いている。記号
2014514330.tif 000030
は、単結合を意味するが、この場合、立体配置（例えば、ＲまたはＳのいずれか）または幾何配置（例えば、ＥまたはＺのいずれか）は定義されていない。
【００６１】
本出願において示される構造の原子における未定義の原子価はどれも、暗黙のうちに、原子に結合される水素原子を表す。基「Ｒ」が、例えば、式：
2014514330.tif 000031
において環系の「浮遊基（ｆｌｏａｔｉｎｇ  ｇｒｏｕｐ）」として示される場合、Ｒは、安定した構造が形成される限り、環原子のいずれかに結合された水素原子（描写される、暗示される、あるいは明確に定義される水素を含む）をどれでも置換し得る。基「Ｒ」が、例えば、式：
2014514330.tif 000032
のように縮合環系の「浮遊基」として示される場合、Ｒは，他に指定されない限り、縮合環のいずれかの環原子のいずれかに結合された水素をどれでも置換し得る。置換可能な水素には、安定した構造が形成される限り、描写される水素（例えば、上記の式で窒素に結合された水素）と、暗示される水素（例えば、図示されていないが、存在が理解される上記の式の水素）と、明確に定義される水素と、その存在が環原子の同一性に依存する任意的な水素（例えば、Ｘが−ＣＨ−に等しい場合、基Ｘに結合された水素）とが含まれる。描写される例において、Ｒは縮合環系の５員環または６員環のいずれかに存在し得る。上記の式において、括弧で囲まれた基「Ｒ」のすぐ後の下付き文字「ｙ」は、数値変数を表す。他に指定されない限り、この変数は、０、１、２、または３以上の任意の整数（環または環系の置換可能な水素原子の最大数によってのみ限定される）であり得る。
【００６２】
以下の基および種類については、次に来る括弧でくくられた下付き文字がさらに、以下のように基／種類を定義する：「（Ｃｎ）」は基／種類の中の炭素原子の正確な数（ｎ）を定義する。「（Ｃ≦ｎ）」は、基／種類中に存在し得る炭素原子の最大数（ｎ）を定義し、最小数は問題となっている基に対してできる限り小さく、例えば、基「アルケニル（Ｃ≦８）」または種類「アルケン（Ｃ≦８）」中の炭素原子の最小数は２であることが理解される。例えば、「アルコキシ（Ｃ≦１０）」は、１〜１０個の炭素原子（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、もしくは１０個、またはその中で誘導可能な任意の範囲（例えば、３〜１０個の炭素原子））を有するアルコキシ基を指定する。（Ｃｎ〜ｎ’）は、基の中の炭素原子の最小数（ｎ）および最大数（ｎ’）の両方を定義する。同様に、「アルキル（Ｃ２〜１０）」は、２〜１０個の炭素原子（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、もしくは１０個、またはその中で誘導可能な任意の範囲（例えば、３〜１０個の炭素原子））を有するアルキル基を指定する。
【００６３】
「飽和」という用語は、本明細書で使用される場合、以下に言及されることを除いて、このうように修飾された化合物または基が、炭素−炭素二重結合および炭素−炭素三重結合を全く有さないことを意味する。この用語は、炭素−ヘテロ原子多重結合、例えば、炭素酸素二重結合または炭素窒素二重結合を除外しない。さらに、この用語は、ケト−エノール互変異性またはイミン／エナミン互変異性の一部として生じ得る炭素−炭素二重結合を除外しない。
【００６４】
「脂肪族」という用語は、「置換」修飾語を伴わずに使用される場合、このように修飾された化合物／基が、非環式または環状であるが、芳香族炭化水素化合物または基でないことを示す。脂肪族化合物／基において、炭素原子は、直鎖、分枝鎖、または非芳香環（脂環式）において互いに結合され得る。脂肪族化合物／基は、単結合によって結合される飽和であってもよいし（アルカン／アルキル）、あるいは１つまたは複数の二重結合を有する（アルケン／アルケニル）か、または１つまたは複数の三重結合を有する（アルキン／アルキニル）不飽和であってもよい。「脂肪族」という用語が「置換」修飾語を伴わずに使用される場合、炭素および水素原子のみが存在する。この用語が「置換」修飾語と共に使用される場合、１つまたは複数の水素原子は独立して、−ＯＨ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｈ２、−ＮＯ２、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２ＣＨ３、−ＣＮ、−ＳＨ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２または−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ３によって置換されている。
【００６５】
「アルキル」という用語は、「置換」修飾語を伴わずに使用される場合、結合点、線状または分枝状、シクロ、環状または非環式構造としての炭素原子を有し、炭素および水素以外の原子を有さない一価の飽和脂肪族基を指す。従って、本明細書で使用される場合、シクロアルキルはアルキルのサブセットである。基−ＣＨ３（Ｍｅ）、−ＣＨ２ＣＨ３（Ｅｔ）、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３（ｎ−Ｐｒ）、−ＣＨ（ＣＨ３）２（ｉｓｏ−Ｐｒ）、−ＣＨ（ＣＨ２）２（シクロプロピル）、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３（ｎ−Ｂｕ）、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３（ｓｅｃ−ブチル）、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２（ｉｓｏ−ブチル）、−Ｃ（ＣＨ３）３（ｔｅｒｔ−ブチル）、−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）３（ｎｅｏ−ペンチル）、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、およびシクロヘキシルメチルは、アルキル基の非限定的な例である。「アルカンジイル」という用語は、「置換」修飾語を伴わずに使用される場合、結合点、線状または分枝状、シクロ、環状または非環式構造としての１つまたは２つの飽和炭素原子を有し、炭素−炭素二重または三重結合を有さず、炭素および水素以外の原子を有さない二価の飽和脂肪族基を指す。基−ＣＨ２−（メチレン）、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、および
2014514330.tif 000033
は、アルカンジイル基の非限定的な例である。「アルキリデン」という用語は、「置換」修飾語を伴わずに使用される場合、二価の基＝ＣＲＲ’を指し、式中、ＲおよびＲ’は独立して、水素、アルキルであるか、あるいはＲおよびＲ’は一緒になって、少なくとも２個の炭素原子を有するアルカンジイルを表す。アルキリデン基の非限定的な例としては、＝ＣＨ２、＝ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）、および＝Ｃ（ＣＨ３）２が挙げられる。これらの用語のいずれかが「置換」修飾語と共に使用される場合、１つまたは複数の水素原子は独立して、−ＯＨ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＨ２、−ＮＯ２、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２ＣＨ３、−ＣＮ、−ＳＨ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２または−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ３によって置換されている。以下の基は、置換アルキル基の非限定的な例である：−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２Ｃｌ、−ＣＦ３、−ＣＨ２ＣＮ、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ３、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、−ＣＨ２ＯＣＨ３、−ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）ＣＨ３、−ＣＨ２ＮＨ２、−ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２、および−ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ。「フルオロアルキル」という用語は置換アルキルのサブセットであり、１つまたは複数の水素がフルオロ基によって置換されており、炭素、水素およびフッ素を除いて他の原子は存在しない。基−ＣＨ２Ｆ、−ＣＦ３、および−ＣＨ２ＣＦ３は、フルオロアルキル基の非限定的な例である。「アルカン」は化合物Ｈ−Ｒを指し、式中、Ｒはアルキルである。
【００６６】
「アルケニル」という用語は、「置換」修飾語を伴わずに使用される場合、結合点、線状または分枝状、シクロ、環状または非環式構造としての炭素原子、少なくとも１つの非芳香族炭素−炭素二重結合を有し、炭素−炭素三重結合を有さず、炭素および水素以外の原子を有さない一価の不飽和脂肪族基を指す。アルケニル基の非限定的な例としては、−ＣＨ＝ＣＨ２（ビニル）、−ＣＨ＝ＣＨＣＨ３、−ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２（アリル）、−ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ３、および−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ６Ｈ５が挙げられる。「アルケンジイル」という用語は、「置換」修飾語を伴わずに使用される場合、結合点、線状または分枝状、シクロ、環状または非環式構造としての２個の炭素原子、少なくとも１つの非芳香族炭素−炭素二重結合を有し、炭素−炭素三重結合を有さず、炭素および水素以外の原子を有さない二価の不飽和脂肪族基を指す。基−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、および
2014514330.tif 000034
は、アルケンジイル基の非限定的な例である。これらの用語が「置換」修飾語と共に使用される場合、１つまたは複数の水素原子は独立して、−ＯＨ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＨ２、−ＮＯ２、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２ＣＨ３、−ＣＮ、−ＳＨ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２または−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ３によって置換されている。基−ＣＨ＝ＣＨＦ、−ＣＨ＝ＣＨＣｌおよび−ＣＨ＝ＣＨＢｒは、置換アルケニル基の非限定的な例である。「アルケン」は化合物Ｈ−Ｒを指し、式中、Ｒはアルケニルである。
【００６７】
「アリール」という用語は、「置換」修飾語を伴わずに使用される場合、結合点としての芳香族炭素原子を有する一価の不飽和芳香族基を指し、前記炭素原子は１つまたは複数の６員芳香環構造の一部を形成し、ここで環原子は全て炭素であり、この基は、炭素および水素以外の原子で構成されない。２つ以上の環が存在する場合、環は縮合されていてもよいし、縮合されていなくてもよい。本明細書で使用される場合、この用語は、第１の芳香環または存在する任意の付加的な芳香環に結合された１つまたは複数のアルキル基の存在（炭素数の制限が許せば）を除外しない。アリール基の非限定的な例としては、フェニル（Ｐｈ）、メチルフェニル、（ジメチル）フェニル、−Ｃ６Ｈ４ＣＨ２ＣＨ３（エチルフェニル）、ナフチル、およびビフェニルから誘導される一価の基が挙げられる。「アレーンジイル」という用語は、「置換」修飾語を伴わずに使用される場合、結合点としての２つの芳香族炭素原子を有する二価の芳香族基を指し、前記炭素原子は１つまたは複数の６員芳香環構造の一部を形成し、ここで環原子は全て炭素であり、一価の基は炭素および水素以外の原子で構成されない。本明細書で使用される場合、この用語は、第１の芳香環または存在する任意の付加的な芳香環に結合された１つまたは複数のアルキル基の存在（炭素数の制限が許せば）を除外しない。２つ以上の環が存在する場合、環は縮合されていてもよいし、縮合されていなくてもよい。アレーンジイル基の非限定的な例としては、
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が挙げられる。これらの用語が「置換」修飾語と共に使用される場合、１つまたは複数の水素原子は独立して、−ＯＨ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＨ２、−ＮＯ２、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２ＣＨ３、−ＣＮ、−ＳＨ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２または−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ３によって置換されている。「アレーン」は化合物Ｈ−Ｒを指し、式中、Ｒはアリールである。
【００６８】
「アラルキル」という用語は、「置換」修飾語を伴わずに使用される場合、一価の基−アルカンジイル−アリールを指し、ここで、アルカンジイルおよびアリールという用語はそれぞれ上記の定義と一致する形で使用される。アラルキルの非限定的な例は、フェニルメチル（ベンジル、Ｂｎ）および２−フェニル−エチルである。この用語が「置換」修飾語と共に使用される場合、アルカンジイルおよび／またはアリールからの１つまたは複数の水素原子は独立して、−ＯＨ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＨ２、−ＮＯ２、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２ＣＨ３、−ＣＮ、−ＳＨ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２または−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ３によって置換されている。置換アラルキルの非限定的な例は、（３−クロロフェニル）−メチル、および２−クロロ−２−フェニル−エタ−１−イルである。
【００６９】
「ヘテロアリール」という用語は、「置換」修飾語を伴わずに使用される場合、結合点としての芳香族炭素原子または窒素原子を有する一価の芳香族基を指し、前記炭素原子または窒素原子は芳香環構造の一部を形成し、ここで、環原子の少なくとも１つは窒素、酸素または硫黄であり、この基は、炭素、水素、芳香族窒素、芳香族酸素および芳香族硫黄以外の原子で構成されない。本明細書で使用される場合、この用語は、芳香環または存在する任意の付加的な芳香環に結合された１つまたは複数のアルキル基の存在（炭素数の制限が許せば）を除外しない。ヘテロアリール基の非限定的な例としては、フラニル、イミダゾリル、インドリル、インダゾリル（Ｉｍ）、メチルピリジル、オキサゾリル、ピリジル、ピロリル、ピリミジル、ピラジニル、キノリル、キナゾリル、キノキサリニル、チエニル、およびトリアジニルが挙げられる。「ヘテロアレーンジイル」という用語は、「置換」修飾語を伴わずに使用される場合、２つの結合点として２つの芳香族炭素原子、２つの芳香族窒素原子、または１つの芳香族炭素原子および１つの芳香族窒素原子を有する二価の芳香族基を指し、前記原子は１つまたは複数の芳香環構造の一部を形成し、ここで、環原子の少なくとも１つは窒素、酸素または硫黄であり、二価の基は、炭素、水素、芳香族窒素、芳香族酸素および芳香族硫黄以外の原子で構成されない。本明細書で使用される場合、この用語は、第１の芳香環または存在する任意の付加的な芳香環に結合された１つまたは複数のアルキル基の存在（炭素数の制限が許せば）を除外しない。２つ以上の環が存在する場合、環は縮合されていてもよいし、縮合されていなくてもよい。ヘテロアレーンジイル基の非限定的な例としては、
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が挙げられる。
【００７０】
これらの用語が「置換」修飾語と共に使用される場合、１つまたは複数の水素原子は独立して、−ＯＨ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＨ２、−ＮＯ２、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２ＣＨ３、−ＣＮ、−ＳＨ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２または−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ３によって置換されている。
【００７１】
「アシル」という用語は、「置換」修飾語を伴わずに使用される場合、基−Ｃ（Ｏ）Ｒを指し、式中、Ｒは、水素、アルキル、アリール、アラルキルまたはヘテロアリールである（これらの用語は上記で定義される通りである）。基−ＣＨＯ、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３（アセチル、Ａｃ）、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ２）２、−Ｃ（Ｏ）Ｃ６Ｈ５、−Ｃ（Ｏ）Ｃ６Ｈ４ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、−Ｃ（Ｏ）（イミダゾリル）は、アシル基の非限定的な例である。「チオアシル」は、基−Ｃ（Ｏ）Ｒの酸素原子が硫黄原子で置換されている（−Ｃ（Ｓ）Ｒ）こと以外は、類似した方法で定義される。これらの用語のいずれかが「置換」修飾語と共に使用される場合、１つまたは複数の水素原子は独立して、−ＯＨ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＨ２、−ＮＯ２、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２ＣＨ３、−ＣＮ、−ＳＨ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２または−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ３によって置換されている。基−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２ＣＦ３、−ＣＯ２Ｈ（カルボキシル）、−ＣＯ２ＣＨ３（メチルカルボキシル）、−ＣＯ２ＣＨ２ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２（カルバモイル）、および−ＣＯＮ（ＣＨ３）２は、置換アシル基の非限定的な例である。
【００７２】
「アルコキシ」という用語は、「置換」修飾語を伴わずに使用される場合、基−ＯＲを指し、式中、Ｒはアルキルである（この用語は上記で定義される通りである）。アルコキシ基の非限定的な例としては、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＯＣＨ（ＣＨ３）２、−ＯＣＨ（ＣＨ２）２、−Ｏ−シクロペンチル、および−Ｏ−シクロヘキシルが挙げられる。「アルケニルオキシ」、「アルキニルオキシ」、「アリールオキシ」、「アラルコキシ」、「ヘテロアリールオキシ」、および「アシルオキシ」という用語は、「置換」修飾語を伴わずに使用される場合、−ＯＲで定義される基を指し、式中、Ｒはそれぞれ、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、ヘテロアリール、およびアシルである。同様に、「アルキルチオ」という用語は、「置換」修飾語を伴わずに使用される場合、基−ＳＲを指し、式中、Ｒはアルキルである（この用語は上記で定義される通りである）。「アルコキシジイル」という用語は、「置換」修飾語を伴わずに使用される場合、二価の基−Ｏ−アルカンジイル−を指す。これらの用語のいずれかが「置換」修飾語と共に使用される場合、１つまたは複数の水素原子は独立して、−ＯＨ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＨ２、−ＮＯ２、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２ＣＨ３、−ＣＮ、−ＳＨ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２または−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ３によって置換されている。「アルコール」という用語は上記で定義されるアルカンに対応し、水素原子の少なくとも１つがヒドロキシ基によって置換されている。
【００７３】
「アルキルアミノ」という用語は、「置換」修飾語を伴わずに使用される場合、基−ＮＨＲを指し、式中、Ｒはアルキルである（この用語は上記で定義される通りである）。アルキルアミノ基の非限定的な例としては、−ＮＨＣＨ３および−ＮＨＣＨ２ＣＨ３が挙げられる。「ジアルキルアミノ」という用語は、「置換」修飾語を伴わずに使用される場合、基−ＮＲＲ’を指し、式中、ＲおよびＲ’は同じアルキル基であっても、異なるアルキル基であってもよく、あるいは、ＲおよびＲ’は一緒になってアルカンジイルを表すこともできる。ジアルキルアミノ基の非限定的な例としては、−Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｎ（ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ３）、およびＮ−ピロリジニルが挙げられる。「アルコキシアミノ」、「アルケニルアミノ」、「アルキニルアミノ」、「アリールアミノ」、「アラルキルアミノ」、「ヘテロアリールアミノ」、および「アルキルスルホニルアミノ」という用語は、「置換」修飾語を伴わずに使用される場合、−ＮＨＲで定義される基を指し、式中、Ｒはそれぞれ、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、ヘテロアリール、およびアルキルスルホニルである。アリールアミノ基の非限定的な例は−ＮＨＣ６Ｈ５である。「アミド」（アシルアミノ）という用語は、「置換」修飾語を伴わずに使用される場合、基−ＮＨＲを指し、式中、Ｒはアシルである（この用語は上記で定義される通りである）。アミド基の非限定的な例は−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ３である。「アルキルイミノ」という用語は、「置換」修飾語を伴わずに使用される場合、二価の基＝ＮＲを指し、式中、Ｒはアルキルである（この用語は上記で定義される通りである）。これらの用語のいずれかが「置換」修飾語と共に使用される場合、１つまたは複数の水素原子は独立して、−ＯＨ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＨ２、−ＮＯ２、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２ＣＨ３、−ＣＮ、−ＳＨ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２または−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ３によって置換されている。基−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＣＨ３および−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＣＨ３は置換アミド基の非限定的な例である。
【００７４】
「アルキルスルホニル」および「アルキルスルフィニル」という用語は、「置換」修飾語を伴わずに使用される場合、それぞれ基−Ｓ（Ｏ）２Ｒおよび−Ｓ（Ｏ）Ｒを指し、式中、Ｒはアルキルである（この用語は上記で定義される通りである）。「アルケニルスルホニル」、「アルキニルスルホニル」、「アリールスルホニル」、「アラルキルスルホニル」、および「ヘテロアリールスルホニル」という用語は、類似の方法で定義される。これらの用語のいずれかが「置換」修飾語と共に使用される場合、１つまたは複数の水素原子は独立して、−ＯＨ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＨ２、−ＮＯ２、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２ＣＨ３、−ＣＮ、−ＳＨ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２または−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ３によって置換されている。
【００７５】
「グリコシド」という用語は、糖基が非炭水化物部分に結合された化合物を指す。通常、糖基（グリコン）は、リンカーとして酸素、窒素または硫黄原子を有するグリコシド結合によって、そのアノマー炭素を介して別の基（アグリコン）に結合される。
【００７６】
「単糖」は炭水化物の基本構造単位であり、より簡単な単位に容易に加水分解することができない。単純な単糖類の元素式はＣｎＨ２ｎＯｎであり、式中、整数ｎは少なくとも３であり、８以上であることはめったにない。単純な単糖類は一般的に炭素原子の数ｎに従って命名され得る：トリオース、テトロース、ペントース、ヘキソースなど。単糖は、開鎖（非環式）、環状またはこれらの混合物でよい。これらの環状形態において、環は通常５または６個の原子を有する。これらの形態はそれぞれ、フランおよびピランとの類推によって、フラノースおよびピラノースと呼ばれる。単糖はさらに、アルドース（非環式形態の鎖の端部にカルボニル基を有するもの）と、ケトース（鎖の端部にカルボニル基が存在しないもの）とに分類され得る。アルドースの非限定的な例としては、グリコールアルデヒド、グリセルアルデヒド、エリトロース、トレオース、リボース、アラビノース、キシロース、リキソース、アロース、アルトロース、グルコース、マンノース、グロース、イドース、ガラクトースおよびタロースが挙げられる。アルドースの非限定的な例としては、ジヒドロキシアセトン、エリトルロース、リブロース、キシルロース、フルクトース、プシコース、ソルボースおよびタガトースが挙げられる。「Ｄ−」および「Ｌ−」接頭辞は、互いに鏡像である２つの特定の立体異性体を区別するために使用され得る。単糖という用語は、そのＯ−アセチル誘導体も包含する。
【００７７】
「アミノ糖」または「アミノグリコシド」は、糖、デオキシ糖、糖酸または糖アルコールの誘導体を指し、１つまたは複数のヒドロキシ基がもう１つのアミノ基によって置換されている。「アミノ単糖」は、単糖、デオキシ単糖、単糖酸または糖アルコールの誘導体を指し、１つまたは複数のヒドロキシ基がもう１つのアミノ基によって置換されている。これらの用語は、そのＮ−およびＯ−アセチル誘導体も包含する。非限定的な例としては、Ｎ−アセチルグルコサミン、ガラクトサミン、グルコサミンおよびシアル酸が挙げられる。
【００７８】
「デオキシ糖」という用語は、炭水化物のヒドロキシ基の１つが水素原子によって置換されている糖誘導体を指す。「デオキシ単糖」は、本明細書において定義される単糖から誘導されるデオキシ糖である。これらの用語は、そのＯ−アセチル誘導体も包含する。デオキシ単糖の非限定的な例は、デオキシリボース（リボースに基づく）、フコース、およびラムノースである。
【００７９】
「糖酸」という用語は、アルデヒド官能基または１つまたは複数のヒドロキシ官能基がカルボキシル基に酸化されている糖誘導体を指す。アルドン酸は、アルドースのアルデヒド官能基が酸化されているものである。ウロソン酸は、２−ケトースの第１のヒドロキシル基が酸化されてα−ケト酸を形成しているものである。ウロン酸は、アルドースまたはケトースの末端ヒドロキシル基が酸化されているものである。アルダル酸は、アルドースの両端部が酸化されているものである。非限定的なアルドン酸には、グリセリン酸（３Ｃ）、キシロン酸（５Ｃ）、グルコン酸（６Ｃ）、およびアスコルビン酸（６Ｃ、不飽和ラクトン）が含まれる。ウロソン酸の非限定的な例としては、ノイラミン酸（５−アミノ−３，５−ジデオキシ−Ｄ−グリセロ−Ｄ−ガラクト−ノン−２−ウロソン酸）およびケトデオキシオクトウロソン酸（ＫＤＯまたは３−デオキシ−Ｄ−マンノ−オクト−２−ウロソン酸）が挙げられる。ウロン酸の非限定的な例としては、グルクロン酸（６Ｃ）、ガラクトウロン酸（６Ｃ）、およびイズロン酸（６Ｃ）が挙げられる。アルダル酸の非限定的な例としては、酒石酸（４Ｃ）、メソ−ガラクタル酸（粘液酸）（６Ｃ）、およびＤ−グルカル酸（サッカリン酸）（６Ｃ）が挙げられる。「単糖酸」は、単糖から誘導される糖酸である。これらの用語は、そのＯ−アセチル誘導体も包含する。
【００８０】
「糖アルコール」という用語は、そのカルボニル基（アルデヒドまたはケトン、還元糖）が第１級または第２級ヒドロキシル基へ還元されている糖誘導体を指す。糖アルコールの非限定的な例としては、グリコール（２−炭素）、グリセロール（３−炭素）、エリスリトール（４−炭素）、トレイトール（４−炭素）、アラビトール（５−炭素）、キシリトール（５−炭素）、リビトール（５−炭素）、マンニトール（６−炭素）、ソルビトール（６−炭素）、ズルシトール（６−炭素）、イジトール（６−炭素）、イソマルト（１２−炭素）、マルチトール（１２−炭素）、ラクチトール（１２−炭素）またはポリグリシトールが挙げられる。「単糖アルコール」は、単糖から誘導される糖アルコールである。これらの用語は、そのＯ−アセチル誘導体も包含する。
【００８１】
本明細書で使用される場合、「単糖類基」という用語は、結合点としての炭素原子を有する一価の炭水化物基を指す。この用語は、単糖（例えば、グルコース）、デオキシ単糖（例えば、フコース）、単糖酸（例えば、グルコン酸）、単糖アルコール（例えば、キシリトール）またはアミノ単糖（例えば、グルコサミン）からヒドロキシルラジカルを除去して得られる基を包含する。通常、単糖類基は、酸素原子リンカーによって、そのアノマー炭素を介して別の基（アグリコン）に結合される。場合によっては、リンカーは窒素または硫黄原子であり得る。
【００８２】
「二糖類基」は２つの単糖類基からなる一価の炭水化物基であり、第２の単糖類基が第１の単糖類基のヒドロキシ基の水素を置換する。二糖類基の非限定的な例としては、スクロース、ラクツロース、ラクトース、マルトース、トレハロースおよびセロビオースから誘導されるものが挙げられる。
【００８３】
「三糖類基」は３つの単糖類基からなる一価の炭水化物基であり、第２の単糖類基が第１の単糖類基のヒドロキシ基の水素を置換し、第３の単糖類基が第１または第２の単糖類基のいずれかのヒドロキシ基の水素を置換する。
【００８４】
オリゴ糖は、３〜１０個、好ましくは３〜６個の単糖類基からなる一価の炭水化物基であり、第２の単糖類が第１の単糖類のヒドロキシ基の水素を置換し、第３の単糖類が第１または第２の単糖類基のいずれかのヒドロキシ基の水素を置換し、次の単糖類基が既に結合された単糖類基のいずれかの水素を置換し、従って、線状または分枝状のいずれかの構造が形成される。
【００８５】
「シリル」という用語は、「置換」修飾語を伴わずに使用される場合、基−ＳｉＲ３を指し、式中、各Ｒは独立して、水素または非置換アルキルである（この基は上記で定義される通りである）。「置換シリル」という用語は、基−ＳｉＲ３を指し、式中、Ｒ基の少なくとも１つ、そして全ての数のＲ基は独立して、置換アルキルまたは−ＯＨ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＨ２、−ＮＯ２、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２ＣＨ３、−ＣＮ、−ＳＨ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２または−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ３である。置換シリル基の残りのＲ基はどれも独立して水素または非置換アルキルである。「シリル化」または「シラン化（ｓｉｌａｎａｔｅｄ）」という用語は、所与の化合物がシリルおよび／または置換シリル基を含有するように誘導体化されていることを指す。略語「−Ｓｉｌ」は、シリルおよび／または置換シリル基を指す。
【００８６】
「連結される」という用語は、接続されるが、必ずしも直接ではなく、必ずしも機械的ではないと定義され、「連結される」２つの項目は互いに一体となり得る。「ａ」および「ａｎ」という用語は、本開示がそうでないことを明確に必要としない限り、１つまたは複数であると定義される。「実質的に」、「およそ」および「約」という用語は、当業者によって理解されるように、ほぼ指定されたものであるが、必ずしも完全にそうではないと定義される。
【００８７】
「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」（ならびに「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などの含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）の任意の形態）、「有する（ｈａｖｅ）」（ならびに「有する（ｈａｓ）」および「有している（ｈａｖｉｎｇ）」などの有する（ｈａｖｅ）の任意の形態）、「包含する（ｉｎｃｌｕｄｅ）」（ならびに「包含する（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」および「包含している（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」などの包含する（ｉｎｃｌｕｄｅ）の任意の形態）、そして「含有する（ｃｏｎｔａｉｎ）」（ならびに「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｓ）」および「含有している（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」などの含有する（ｃｏｎｔａｉｎ）の任意の形態）という用語はオープンエンド型の連結動詞である。結果として、１つまたは複数のステップを「含む」、「有する」、「包含する」または「含有する」方法はこれらの１つまたは複数のステップを有するが、これらの１つまたは複数のステップのみを有することに限定されない。同様に、１つまたは複数の要素を「含む」、「有する」、「包含する」または「含有する」創傷ドレッシング材はこれらの１つまたは複数の要素を有するが、これらの要素のみを有することに限定されない。例えば、創傷インサートおよびドレープを含む創傷ドレッシング材において、創傷ドレッシング材は指定される要素を包含するが、これらの要素のみを有することに限定されない。例えば、このような創傷ドレッシング材は、創傷治療装置に連結されるように構成された接続パッドも包含し得る。
【００８８】
「効果的な」という用語は、この用語が本明細書および／または特許請求の範囲において使用される場合、所望される、期待される、または意図される結果を達成するために適切であることを意味する。
【００８９】
本明細書で使用される場合、「ＩＣ５０」という用語は、得られる最大応答の５０％である阻害用量を指す。この定量的尺度は、所与の生物学的、生化学的または化学的プロセス（またはプロセスの構成要素成分、すなわち、酵素、細胞、細胞受容体または微生物）を半分だけ阻害するために特定の薬物または他の物質（阻害剤）がどのくらい必要であるかを示す。
【００９０】
本明細書で使用される場合、「患者」または「被験者」という用語は、ヒト、サル、雌ウシ、ヒツジ、ヤギ、イヌ、ネコ、マウス、ラット、モルモット、またはこれらの遺伝子導入種などの生きている哺乳類生物を指す。特定の実施形態では、患者または被験者は霊長類である。ヒト被験者の非限定的な例は、成人、青少年、乳児および胎児である。
【００９１】
「ＰＢＳ」はリン酸緩衝食塩水であり、「ｐｈｒ」は重量部であり、「ＯＰＡ」はオルト−フタルジアルデヒドであり、「ＲＴ」は室温である。
【００９２】
本明細書で一般的に使用される場合、「薬学的に許容可能な」は、妥当な利益／リスク比に見合って過度の毒性、刺激作用、アレルギー応答、または他の問題または合併症を伴わずに、健全な医学的判断の範囲内で、人間および動物の組織、器官、および／または体液との接触において使用するのに適しているような化合物、材料、組成物、および／または剤形を指す。
【００９３】
「薬学的に許容可能な塩」は、上記で定義されたように薬学的に許容可能であり、所望の薬理学的活性を有する本発明の化合物の塩を意味する。このような塩には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸、あるいは１，２−エタンジスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、３−フェニルプロピオン酸、４，４’−メチレンビス（３−ヒドロキシ−２−エン−１−カルボン酸）、４−メチルビシクロ［２．２．２］オクタ−２−エン−１−カルボン酸、酢酸、脂肪族モノおよびジカルボン酸、脂肪族硫酸、芳香族硫酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、炭酸、ケイ皮酸、クエン酸、シクロペンタンプロピオン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール酸、ヘプタン酸、へキサン酸、ヒドロキシナフトエ酸、乳酸、ラウリル硫酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムコン酸、ｏ−（４−ヒドロキシベンゾイル）安息香酸、シュウ酸、ｐ−クロロベンゼンスルホン酸、フェニル置換されたアルカン酸、プロピオン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ピルビン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、酒石酸、第３級ブチル酢酸、トリメチル酢酸などの有機酸と共に形成される酸付加塩が含まれる。薬学的に許容可能な塩には、存在する酸性プロトンが無機または有機塩基と反応することができる場合に形成され得る塩基付加塩も含まれる。許容可能な無機塩基には、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アルミニウムおよび水酸化カルシウムが含まれる。許容可能な有機塩基には、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、Ｎ−メチルグルカミンなどが含まれる。塩が全体として薬理学的に許容可能である限り、本発明の任意の塩の一部を形成する特定のアニオンまたはカチオンが重要ではないことは認識されるべきである。薬学的に許容可能な塩の付加的な例ならびにその調製および使用方法は、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，ａｎｄ  Ｕｓｅ（Ｐ．Ｈ．Ｓｔａｈｌ  ＆  Ｃ．Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ  ｅｄｓ．，Ｖｅｒｌａｇ  Ｈｅｌｖｅｔｉｃａ  Ｃｈｉｍｉｃａ  Ａｃｔａ，２００２）において与えられる。
【００９４】
「予防」または「予防する」には、（１）疾患のリスクがあり得る、そして／あるいは疾患にかかりやすい可能性があるが、疾患の病態または総体症状のいずれかまたは全てをまだ経験または表示していない被験者または患者においてその疾患の発症を抑制すること、および／または（２）疾患のリスクがあり得る、そして／あるいは疾患にかかりやすい可能性があるが、疾患の病態または総体症状のいずれかまたは全てをまだ経験または表示していない被験者または患者においてその疾患の病態または総体症状の発生を遅延することが含まれる。
【００９５】
本明細書で使用される場合、「ポリマー」という用語は「コポリマー」を含む。
【００９６】
「繰返し単位」は、有機、無機または金属−有機のいずれでも、特定の材料、例えば、フレームワークおよび／またはポリマーの最も簡単な構造実体である。ポリマー鎖の場合、繰返し単位は、ネックレスのビーズのように、鎖に沿ってうまくつなげられる。例えば、ポリエチレン−［ＣＨ２ＣＨ２］ｎ−において、繰返し単位は−ＣＨ２ＣＨ２−である。下付き文字「ｎ」は重合度、すなわち連結される繰返し単位の数を示す。「ｎ」の値が未定義のままである場合、あるいは「ｎ」が存在しない場合、それは単に、括弧内の式の繰り返しと、材料の高分子性とを指定するだけである。繰返し単位の概念は、金属有機フレームワーク、変性ポリマー、熱硬化性ポリマーなどのように、繰返し単位間の結合性が３次元的に延在する場合にも等しく当てはまる。
【００９７】
「網状連続気泡発泡体」またはＲＯＣＦという用語は、相互接続された固体支柱のネットワークからなる多孔質構造を有する発泡体材料を指す。連続気泡は網状化プロセスによって形成され、これは次に、ネットワークの形態であるか、あるいはパーツのネットワークを有すると定義される。全ての支柱は接続されているので、連続気泡の多孔性も接続されて、連続多孔質材料を形成する。ＲＯＣＦは、特に、細孔サイズ、相対密度、および基材の３つの独立した特性によって定義することができる。いくつかの実施形態では、ＲＯＣＦはポリウレタンから作られる。
2014514330.tif 000037
【００９８】
上記の定義は、参照によって本明細書中に援用される参考文献のいずれかにおける相反するあらゆる定義に優先する。しかしながら、特定の用語が定義されるという事実は、未定義である用語がどれも限定されていないことを示すと考えられてはならない。むしろ、使用される全ての用語は、当業者が本発明の範囲および実施を認識できるように本発明を明確に説明すると思われる。
【００９９】
さらに、特定の方法で構成されるデバイスまたは構造は少なくともその方法で構成されるが、具体的に説明される方法以外の方法で構成されることも可能である。
【０１００】
Ｂ．アプタマー変性材料
一態様では、本発明は、増殖、分化、または血管新生などの有意な生物学的応答を引き起こす因子を含む、創傷環境における特定の因子を捕獲および濃縮するための共有結合システムを提供する。この技術は、例えば、生体分子または生物活性化合物を創傷床に送達するために使用され得る。本明細書において提供されるアプタマー変性材料は、いくつかの実施形態では、創傷環境における特定の因子、例えば、血管新生などの生物学的応答を引き起こす因子を捕獲および濃縮するため、あるいは内因性または外因性の生体分子または生物活性化合物を創傷床に送達するためのシステムとして使用され得る。
【０１０１】
一態様では、少なくとも３つの成分：（１）ポリマーと、（２）例えば、ポリマーの側鎖を介して直接、あるいはポリマーに結合された別のリンカー分子を介して、ポリマーに共有結合された少なくとも１つのリンカーと、（３）ポリマー骨格に共有結合され得る（より一般的には、リンカーに共有結合されるであろう）少なくとも１つのアプタマー分子とを含むアプタマー変性材料が提供される。
【０１０２】
１）適切なポリマー
本発明と共に使用するためのポリマーには、疎水性または親水性ポリウレタン、キトサン、架橋および／または非架橋ポリオレフィン、ポリオール、エチレン酢酸ビニル（ＥＶＡ）、エラストマー、例えば、アクリロニトリルブタジエン（ＮＢＲ）、ポリクロロプレン（ＰＣＰまたはＣＲ）、エチレンプロピレンゴム（ＥＰＲおよびＥＰＤＭ）、ポロキサマー、シリコーン、および／またはフルオロカーボンポリマーが含まれる。例えば、いくつかの実施形態では、キトサンベースのポリウレタンポリマーが使用され得る。
【０１０３】
ポリウレタンは反応ポリマーである。ウレタン結合は、イソシアネート基−Ｎ＝Ｃ＝Ｏをヒドロキシ基と反応させることによって生じ、通常は触媒および他の添加剤の存在下において、ポリイソシアネートとジオールまたはポリオールとの重付加反応によってポリウレタンが生じる。ポリイソシアネートは、２つ以上のイソシアネート官能基を有する分子Ｒ−（Ｎ＝Ｃ＝Ｏ）ｎ（式中、ｎ＞２）であり、ポリオールは、２つ以上のヒドロキシル官能基を有する分子Ｒ’−（ＯＨ）ｎ（式中、ｎ＞２）である。反応生成物は、ウレタン結合−ＲＮＨＣＯＯＲ’−を含有するポリマーである。ポリウレタンは、液体イソシアネートと、ポリオール、触媒、および他の添加剤の液体ブレンドとを反応させることによって生じ得る。ポリオールおよび他の添加剤のブレンドは、樹脂または樹脂ブレンドと呼ぶこともできる。いくつかの実施形態では、樹脂ブレンド添加剤は、鎖延長剤、架橋剤、界面活性剤、難燃剤、発泡剤、顔料、および／または充填剤を含んでいてもよい。通気性または空気透過性の連続気泡型フレキシブルウレタンポリマーの合成は、例えば、参照によってその全体が本明細書中に援用される米国特許第５，６８６，５０１号明細書によって教示されている。
【０１０４】
２つのイソシアネート基を含有する分子はジイソシアネートと呼ばれる。イソシアネートは、ジフェニルメタンジイソシアネート（ＭＤＩ）、ジフェニルエタンジイソシアネート（ＥＤＩ）、またはトルエンジイソシアネート（ＴＤＩ）などの芳香族、あるいはヘキサメチレンジイソシアネート（ＨＤＩ）またはイソホロンジイソシアネート（ＩＰＤＩ）などの脂肪族に分類され得る。高分子イソシアネートの例は高分子ジフェニルメタンジイソシアネートであり、これは、２つ、３つ、および４つ、またはそれ以上のイソシアネート基を有する分子のブレンドである。イソシアネートはさらに、特にこれらをポリオールと反応させてプレポリマーを形成することによって変性させることもできる。「準プレポリマー」は、イソシアネート対ヒドロキシル基の化学量論比が２：１よりも大きい場合に形成される。「真のプレポリマー」は、化学量論比が２：１に等しい場合に形成される。イソシアネートの重要な特徴には、その分子骨格、ＮＣＯ含有量％、官能性、および粘度が含まれる。
【０１０５】
２つのヒドロキシル基を含有する分子はジオールと呼ばれる。例としては、エチレングリコール（ＥＧ）、１，４−ブタンジオール（ＢＤＯ）、ジエチレングリコール（ＤＥＧ）が挙げられる。３つのヒドロキシル基を含有する分子はトリオールと呼ばれる。例としては、グリセロールが挙げられる。ポリオールはそれ自体がポリマーであり得る。例えば、ポリオールは、ヒドロキシまたはアミノ含有開始剤へのプロピレンオキシド（ＰＯ）、エチレンオキシド（ＥＯ）の塩基触媒付加によって、あるいはアジピン酸などの二酸と、エチレングリコールまたはジプロピレングリコール（ＤＰＧ）などのグリコールとのポリエステル化によって形成され得る。ＰＯまたはＥＯで延長されたポリオールは通常ポリエーテルポリオールと呼ばれる。ポリエステル化によって形成されたポリオールは通常ポリエステルポリオールと呼ばれる。開始剤、増量剤、およびポリオールの分子量の選択は通常、その物理的状態、および得られるポリウレタンの物理特性に影響を与える。ポリオールの重要な特徴は、その分子骨格、開始剤、分子量、第１級ヒドロキシル基％、官能性、および粘度である。
【０１０６】
ポリウレタンの１つの属性は、発泡体へ変えることができることである。いくつかの実施形態ではこれを達成するために少量の水も添加されてもよい。水はイソシアネートと反応して、二酸化炭素ガスを形成し、これが、混合プロセスの間に形成されたセルを充填および膨張させる。ＨＦＣ−２４５ｆａ（１，１，１，３，３−ペンタフルオロプロパン）およびＨＦＣ−１３４ａ（１，１，１，２−テトラフルオロエタン）などの特定のハロカーボン、ならびにｎ−ペンタンなどの炭化水素を含む発泡剤が使用されてもよい。いくつかの実施形態では、発泡プロセスの間にポリマーの特性を変更するために界面活性剤が使用され得る。
【０１０７】
ポリウレタンの特性は、通常、主にポリオールの選択によって決定され得るが、ジイソシアネートもいくらかの影響を与える。例えば、硬化速度は、一般に、所与の官能基の反応性、および官能性イソシアネート基の数によって影響されるであろう。
【０１０８】
より柔らかく、弾性であり、よりフレキシブルなポリウレタンは通常、一般にポリエーテルポリオールと呼ばれる線状の二官能性ポリエチレングリコールセグメントを使用してウレタン連鎖を形成する場合に得られる。多官能性ポリオールは三次元架橋構造（この場合も、低密度発泡体の形態であってもよい）を形成するので、これらが使用される場合には、通常、より剛性の生成物が得られる。例えば、使用する触媒およびポリオールを変更することによって粘弾性特性を調節すると、室温よりも皮膚の温度において非常に柔らかい記憶発泡体を得ることができる。
【０１０９】
本発明のいくつかの実施形態では、ポリウレタン発泡体は、イソシアネートおよびポリオールの重合、通常は、トルエンジイソシアネートおよびマルチアームポリエーテルポリオールの重合によって形成される。これらの成分は、イソシアネートおよびヒドロキシル基が１対１の比率であるようにインデックスされてもよい。
【０１１０】
キトサンは、甲殻類の外骨格から誘導される線状の多糖類であり、いくつかの実施形態では、以下の式：
2014514330.tif 000038
によって表すことができる。いくつかの実施形態では、キトサンは、ランダムに分配されたβ−（１−４）−連結Ｄ−グルコサミン（脱アセチル化単位）およびＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミン（アセチル化単位）で構成される線状の多糖類である。ヒドロキシ基およびアミノ基の存在は、様々な種類の共役化学の利用を可能にする。例えば、キトサンは、ジイソシアネートまたはトリイソシアネート分子と重合および／または共重合されてもよく、ジイソシアネートまたはトリシオシアネート（ｔｒｉｓｉｏｃｙａｎａｔｅ）プレポリマーのポリウレタンポリマーまたはコポリマーへの重合および／または共重合が含まれる。
【０１１１】
いくつかの実施形態では、キトサンに加えて、キトサン以外のポリオールが使用されてもよい。キトサンのポリオール樹脂への付加は、イソシアネートとキトサン環のヒドロキシル基との間のウレタン結合を形成する。得られる発泡体は、発泡体の支柱において利用可能なキトサンセグメントを含有し、キトサンの特性の一部を発泡体に与える。さらに、キトサンの付加は、オーバーインデックスされた発泡体を生じ、キトサンセグメント上の残りのヒドロキシル基およびアミン基は、付加的な界面化学に利用可能である。例えば、図７は、ＴＤＩ、キトサン、およびＶｏｒａｎｏｌ（商標）３０１０トリオールの重合に基づいたポリウレタンの繰返し単位を示す。いくつかの実施形態では、キトサンまたは別のジオールもしくはポリオールは、ジイソシアネート分子またはプレポリマー１．０ｇ当たりキトサン０．０５〜０．５ｇの比率でポリウレタンに重合され得る。このような手順のさらなる詳細および例は以下の実施例セクションにおいて提供される。
【０１１２】
５、１０、２０および３０ＰＨＲ（ポリウレタン樹脂１００グラム当たりのキトサンのグラム数）の配合物が製造され、試験された。これらは、発泡体とｏ−フタルジアルデヒドとの共役による結合に利用可能な表面アミンの量によって特徴付けられた。相対蛍光単位ＲＦＵは、発泡体の表面で利用可能な第１級アミンに比例することが見出された。
【０１１３】
２）リンカー変性ポリマー骨格
いくつかの実施形態では、本発明は、置換シリル変性ポリマーを提供する。例としては、ポリウレタン（疎水性でも親水性でもよい）、キトサン、架橋および／または非架橋ポリオレフィン、ポリオール、エチレン酢酸ビニル（ＥＶＡ）、エラストマー、例えば、アクリロニトリルブタジエン（ＮＢＲ）、ポリクロロプレン（ＰＣＰまたはＣＲ）、エチレンプロピレンゴム（ＥＰＲおよびＥＰＤＭ）、シリコーン、および／またはフルオロカーボンポリマーに基づく繰返し単位を含むものが挙げられる。例えば、いくつかの実施形態では、キトサンベースのポリウレタンポリマーまたはコポリマーが使用され得る。いくつかの実施形態では、置換シリル基は酸素原子を介してポリマーまたはコポリマーに結合される。他の実施形態では、置換シリル基は、ポリマーまたはコポリマーの炭素原子に直接結合される。
【０１１４】
いくつかの実施形態では、本発明は、置換シリル基、例えば、（Ｈ２Ｎ（ＣＨ２）３）（ｉＰｒ）２Ｓｉ−および（Ｈ２Ｎ（ＣＨ２）１１）（ＥｔＯ）２Ｓｉ−で変性された高分子材料を提供する。いくつかの実施形態では、本発明の材料は、高分子発泡体を含む。発泡体材料の例としては、例えばキトサンベースのポリウレタン発泡体材料を含むポリウレタンベースの発泡体（疎水性でも親水性でもよい）を挙げることができる。適切であり得るその他の発泡体には、キトサン、架橋および／または非架橋ポリオレフィン、ポリオール、エチレン酢酸ビニル（ＥＶＡ）、ならびにエラストマー、例えば、アクリロニトリルブタジエン（ＮＢＲ）、ポリクロロプレン（ＰＣＰまたはＣＲ）、エチレンプロピレンゴム（ＥＰＲおよびＥＰＤＭ）、シリコーン、およびフルオロカーボンポリマーが含まれる。例えば、いくつかの実施形態では、キトサンベースのポリウレタン発泡体が使用され得る。いくつかの実施形態では、置換シリル基は酸素原子を介して発泡体に結合される。他の実施形態では、置換シリル基は発泡体の炭素原子に直接結合される。
【０１１５】
本明細書において開示されるシリル化ポリウレタン発泡体は、ヒドロキシ基を含むポリマーにおいてこのような基をシリル化することによって製造され得る。本明細書で使用される場合、シリル化は、分子への置換シリル基（Ｒ３Ｓｉ−）の導入である。これには、置換シリル基による化合物の水素、例えばヒドロキシ基の水素の置換が含まれ、例えば、化合物３−アミノプロピルジイソプロピルエトキシシランは、適切な条件下でヒドロキシ基そのような基と反応して、新しい共有Ｓｉ−Ｏ結合を形成し、それによりＨ２Ｎ（ＣＨ２）３Ｓｉ（ｉＰｒ）２−基が酸素に結合され、これは次に、前にヒドロキシ基が結合されていた分子の結合点に結合されるであろう。メカニズムに束縛されることなく、生成物の酸素原子はヒドロキシ基反応物の酸素原子と同じであってもよい。参照によってその全体が本明細書中に援用される「Ｈｏｗ  ｄｏ  Ｉ  ａｐｐｌｙ  ｍｙ  Ｓｉｌａｎｅ？」Ｇｅｌｅｓｔ  Ｃａｔａｌｏｇ．２００６の１９−２０頁を参照されたい。
【０１１６】
以下の実施例１は、アミノ置換シリル基がどのようにして３０ＰＨＲキトサン発泡体に付着され得るかを詳細に説明する。実施例２は、マレイミド−チオール共役が、式：
2014514330.tif 000039
を有するＳｕｌｆｏ−ＥＭＣＳを用いてどのようにして実施され得るかを説明する。いくつかの実施形態では、Ｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳ分子の一端にあるＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＮＨＳエステル）がリンカーまたはポリマーの遊離アミノ基と反応することができる。分子の他方の端部にあるマレイミド基は、例えば、ペプチドアプタマーの−ＳＨ基と反応して、安定なチオエーテル結合を形成するために使用され得る。この方法では、Ｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳは、ペプチドをポリマーまたはコポリマー（発泡体基材を含む）に連結するために使用され得る。
【０１１７】
さらに、マレイミド−チオール共役において使用されるペプチドは、通常、特別に変性されたＣ末端を有する。例えば、Ｃ末端は、共役を容易にするために反応性−ＳＨ基を有するＣｙｓ残基で「キャップ」され得る。Ｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳ共役において、Ｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳは通常過剰に使用され、例えば、反応を容易にするためにオルガノシラン架橋剤に対して５０〜１００×モル過剰で使用される。このような反応は、例えば、ｐＨ７．０〜７．５および室温において実行され得る。このような方法はさらに、当業者により適用される有機化学の原理および技術を用いて修正および最適化され得る。このような原理および技術は、例えば、Ｍａｒｃｈ’ｓ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ（２００７）において教示されており、これも参照によってその全体が本明細書中に援用される。例えば、その他の適切なアミノ−チオリンカーが使用されてもよい。これらには、例えば：ＳＭ（ＰＥＧ）２４、ＳＭ（ＰＥＧ）１２、ＳＭ（ＰＥＧ）８、ＳＭ（ＰＥＧ）６、ＳＭ（ＰＥＧ）４、Ｓｕｌｆｏ−ＬＣ−ＳＭＰＴ、ＳＭ（ＰＥＧ）２、Ｓｕｌｆｏ−ＫＭＵＳ、ＬＣ−ＳＭＣＣ、ＬＣ−ＳＰＤＰ、Ｓｕｌｆｏ−ＬＣ−ＳＰＤＰ、ＳＭＰＨ、Ｓｕｌｆｏ−ＳＭＰＢ、ＳＭＰＢ、ＳＭＰＴ、ＳＩＡＢ、Ｓｕｌｆｏ−ＳＩＡＢ、ＥＭＣＳ、Ｓｕｌｆｏ−ＳＭＣＣ、ＳＭＣＣ、ＭＢＳ、ＧＭＢＳ、Ｓｕｌｆｏ−ＧＭＢＳ、Ｓｕｌｆｏ−ＭＢＳ、ＳＰＤＰ、ＳＢＡＰ、ＢＭＰＳ、ＡＭＡＳ、およびＳＩＡが含まれる。
【０１１８】
本発明のいくつかの実施形態では、シリル化ポリマーはさらに、付加的なリンカー分子、例えばオリゴペプチドオリゴマーによって変性されるであろう。いくつかの実施形態では、付加的なリンカーは、シリル化ポリマーまたはコポリマーの骨格に共有結合される。他の実施形態では、リンカーは、ポリマーまたはコポリマーの側鎖または側基に共有結合される。いくつかの実施形態では、付加的なリンカーはシリル化ポリマーまたはコポリマーの置換シリル基の官能基（例えば、アミノ基）を介して結合されて材料−リンカー１−リンカー２変性材料を形成し、ここで、リンカー１は、本明細書で議論されるものなどの置換シリル基（ヘテロ二官能性シラン架橋剤としても知られている）であり、リンカー２は、別の第２の置換シリル基または別のタイプのリンカー分子（オリゴペプチドなど）である。いくつかの実施形態では、リンカー２は、リンカー１上の末端アミノまたはメルカプト基と、ＥＭＣＳ（Ｎ−［ε−マレイミドカプロイルオキシ］スクシンイミドエステル）との反応から形成され得る。以下の実施例２を参照されたい。
【０１１９】
例えばシリル化によって形成される界面層のさらなる官能基化は、シリル基またはリンカー２基の他方の端部を、以下でさらに議論される「捕獲ペプチド」を含むアプタマーに連結することによって達成することができる。
【０１２０】
３）アプタマー−リンカー変性ポリマー骨格
いくつかの実施形態では、ペプチドベースのアプタマーを含むアプタマーは、ポリマーまたはコポリマーに共役され得る。本明細書では「捕獲ペプチド」とも呼ばれるペプチドアプタマーは、そのシグナル伝達能力または他の機能を阻害することなく、創傷環境においてタンパク質標的を結合するために使用することができる。このような捕獲ペプチドは、患者の創傷床の全域で生物学的に活性なタンパク質を捕獲し、その濃度を増大するため、例えば、標的化される生物学的応答を強化または活性化するために使用することもできる。これらおよび他の使用は以下でより詳細に説明される。
【０１２１】
いくつかの実施形態では、リンカーはさらに１つまたは複数の異なるタイプのアプタマーに結合されて、ポリマー骨格−リンカー−アプタマー複合物を形成する。いくつかの実施形態では、リンカーはポリマーの骨格に共有結合される。他の実施形態では、リンカーは、ポリマーの側基に共有結合される。いくつかの実施形態では、アプタマーはポリマーの骨格に直接結合され、ポリマー骨格−アプタマー複合物を形成する。
【０１２２】
ポロキサマー−ＥＭＣＳ−ペプチド構築物もアプタマーを発泡体に結合するためにうまく使用された。ポロキサマーの疎水性部分は、発泡体と強力な疎水性相互作用を有する。親水性「アーム」はアミノ基を有し、これは次にＥＭＣＳリンカーを用いてオリゴペプチドに結合される。
【０１２３】
いくつかの実施形態では、アプタマーは、コンピュータで選択されるか、あるいはファージディスプレイで誘導された「捕獲ペプチド」である。このような「捕獲ペプチド」は、特定のタンパク質またはタンパク質ファミリーを結合の標的にするために使用することができる。このようなペプチドの一例は、アミノ酸配列ＧＨＱＧＱＨＩＧＱＭＳ−ＡＥＥＡｃ−Ｃｙｓ−ＮＨ２によって定義されるｐ−１６であり、ここで、ＡＥＥＡｃ−Ｃｙｓ−ＮＨ２は、ＥＭＣＳリンカーにより提供されるマレイミド基への共役のために特別に変性されたＣ末端である。Ｐ−１６はＶＥＧＦおよびＰＤＧＦ、そして潜在的にＰＤＧＦスーパーファミリーの他のメンバーに結合することが示されている。
【０１２４】
以下の実施例２では、Ｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳ（［Ｎ−ε−マレイミドカプロイルオキシ］スルホスクシンイミドエステル）架橋剤を介したアプタマーの３０ＰＨＲキトサン発泡体への共役が報告される。
【０１２５】
例えば、いったん結合されれば、３−アミノプロピル−ジイソプロピルエトキシシランの末端アミノ基は、捕獲ペプチドまたはアプタマーの結合に利用しやすいままである。いくつかの実施形態では、生物学的に活性なペプチドは、その生物活性を保持するような方法でこの末端アミン基に結合され得る。これらの結合されたペプチドは、例えばドレッシング材、創傷インサートまたはパッドの一部として材料が使用される場合、創傷床の全域で生物学的に活性なタンパク質を捕獲し、その濃度を増大して、標的化される生物学的応答を強化または活性化するように使用され得る。例えば、ドレッシング材は、創傷床において血管内皮増殖因子などのタンパク質を濃縮して血管新生を引き起こし、そして／あるいは細管形成を引き起こすように調製され得る。この方法で、このような材料は、創傷環境における種々の生物学的経路をより上手に調節するために使用され得る。
【０１２６】
ペプチドまたは因子がシラン架橋剤の他方の端部に結合される場合、所与の条件セットにおいて所与の標的分子に特異的である解離定数（ＫＤ）、または結合親和性を有するであろう。いくつかの実施形態では、１つまたは複数の標的の可逆的な結合を可能にし得る。いくつかの実施形態では、上述の標的は、本明細書で企図される方法およびデバイスの一部として使用される場合、放出されて創傷内に戻り得る。いくつかの実施形態では、結合された因子を解離して創傷環境に戻すのを助けるだけでなく、保持される滲出要素と相乗的に相互作用をして、有利な創傷治癒応答が得られるように作用を調節するための成分が点滴注入溶液に添加され得る。点滴注入溶液のタイプは、以下でさらに詳細に議論される。
【０１２７】
いくつかの実施形態においてペプチドリンカーから結合分子を解離するために使用され得る点滴注入成分の例としては、生理食塩水、わずかに酸性ｐＨ、わずかに塩基性ｐＨを有する溶液、種々の界面活性剤（すなわち、ポリソルベート）を有する溶液、ＥＤＴＡまたはＥＧＴＡが挙げられる。いくつかの実施形態では、リンカーからの結合因子の解離を開始するために点滴注入される流体は、因子−リンカー複合体の結合強度（これは、次に解離定数によって決定される）に依存するであろう。解離定数は、リンカー／ペプチド／アプタマーを設計するために、対象の因子のアミノ酸化学の知識を用いて修正され得る。
【０１２８】
変性されたドレッシング材または創傷インサートの一例は、Ｃａ２＋（創傷由来またはそうでないもの）を結合し、それを創傷部位に保持することができるものである。創傷治癒の初期段階の間、Ｃａ２＋イオンは、通常、細胞から細胞外空間へ局所的に放出される。得られる高Ｃａ２＋濃度は、接着、遊走および分化などの創傷治癒に関与する多くの細胞プロセスの正のエフェクターであると考えられる。高Ｃａ２＋濃度が必要とされる場合、あるいは創傷床に有益である場合、キレート剤（例えば、ＥＤＴＡ）を含有する溶液による点滴注入またはフラッシングは、Ｃａ２＋のドレッシング材および創傷床への結合を破壊するために使用され得る。
【０１２９】
本発明と共に使用するための別の因子は、鉄の結合のための血漿タンパク質のトランスフェリンである。慢性創傷の流体は著しくより低いトランスフェリンレベルを有することが示されおり、これは慢性創傷において酸化ストレスが生じることを示す。遊離鉄はフリーラジカルの形成において役割を果たし得ることが知られている。理論に束縛されることなく、高レベルの遊離鉄は組織損傷の増悪および創傷治癒の遅延の一因となり得る。トランスフェリンのドレッシング材への結合および濃縮を用いて、創傷床において遊離鉄を隔離し、次に適切な点滴注入溶液により放出し、そして次に陰圧の使用の後、滲出液により除去することができる。この特定の時間依存性の遊走および鉄レベルの調節は、患者に著しい利益を提供することができる。代替的な視点では、鉄に対するトランスフェリンの親和性は非常に高いが、ｐＨを中性よりも低くすると累進的に低下するという点で可逆的である。鉄濃度の局在化に対する必要性が欠かせなければ、低ｐＨ溶液の点滴注入を使用して、鉄をトランスフェリンから解放または放出することができる。
【０１３０】
ヒアルロナンまたはヒアルロン酸は、本発明と共に使用することが企図される別の可能な標的である。理論に束縛されることなく、放出に適した溶液による点滴注入の前にヒアルロナンを創傷床に固定および濃縮することを用いて、ケラチノサイトの増殖および遊走に寄与し、コラーゲン沈着を低減する（これは次に、瘢痕の低減をもたらすことが知られている）ことができる。ヒアルロナンは、創傷部位において発泡体に結合されたときに有益であり得るそのフリーラジカル捕捉機能についても知られている。
【０１３１】
その抗菌および抗炎症特性について知られているラクトフェリンは、本発明の実施形態のいくつかのための別の可能な標的である。内皮細胞から分泌されると、ラクトフェリンは、これらが一緒に線維芽細胞の遊走および増殖をもたらす能力が著しく増大されるという点で、ＦＧＦ２との相乗効果を有することが示されている。特異的に設計されたアプタマーを使用して、ＬＦおよびＦＧＦ２の両方を結合し、適切な治療的時間枠で適切な点滴注入溶液によりこれらを放出することができる。
【０１３２】
ＴＧＦＢ−３は、本発明の実施形態のいくつかのための別の標的、別の可能な標的であり得る。このタンパク質は、マトリックス分子の再編成を促進し、真皮構築の改善および瘢痕の低減をもたらす。ＴＧＦＢ−３は、機能性である前に活性化を必要とする潜在形態で分泌される。潜在ＴＧＦＢ−３の活性化は、トロンボスポンジン−１（ＴＳＰ−１）への結合によって生じる。従って、ＴＳＰ−１は、いくつかの実施形態において、ＴＧＦＢ−３活性を調節するための点滴注入流体中の成分として使用され得る。
【０１３３】
可能性のある他の標的としては、数ある中でも、カルモジュリン、Ｓ−１００、チロキシンおよびコール酸受容体が挙げられる。
【０１３４】
Ｃ．アプタマー変性材料の使用
上記の変性ポリマーおよびそれから製造される材料は、（ａ）創傷環境における生物学的標的の捕獲および濃縮、（ｂ）結合の化学的性質の特定、および／または（ｃ）標的因子が細胞に提示される方向性の指示を含む様々な目的のために使用することができる。以下の実施例セクションにおいてより詳細に議論されるように、ＲＯＣＦの一種であるペプチド変性ＧｒａｎｕＦｏａｍ（商標）（ＧＦ）を含むアプタマー変性ポリウレタンは、特定のタンパク質標的をインビトロで捕獲するために使用され得る。例えば、抗ＶＥＧＦペプチドのペプチドＰ１６および抗ＧＭ−ＣＳＦペプチドのＰ２２をＲＯＣＦに共有結合させて、これらのアプタマーが標的タンパク質を捕獲することが実証された。実施例２および３は、Ｐ２２で被覆されたＲＯＣＦによって捕獲されるＧＭ−ＣＳＦの量を定量する
結果を提供し、実施例４は、Ｐ１６で被覆されたＲＯＣＦによって捕獲されるＶＥＧＦの量を定量する結果を示す。
【０１３５】
いくつかの実施形態では、アプタマー変性ポリマーは、そのシグナル伝達能力または他の機能を阻害することなく、創傷環境においてタンパク質標的を結合するために使用され得る。このようなアプタマー変性ポリマーはドレッシング材または創傷インサートの一部として使用されて、例えば、患者の創傷床の全域で生物学的に活性なタンパク質を捕獲し、その濃度を増大し、例えば、標的化される生物学的応答を強化または活性化することができる。
【０１３６】
いくつかの実施形態では、このようなドレッシング材は、創傷床において血管内皮増殖因子などの対象のタンパク質を濃縮して、血管新生および細管形成を引き起こすために使用され得る。さらに、ペプチドは、マトリックスメタロプロテイナーゼなどの治癒プロセスに悪影響を及ぼすタンパク質と拮抗するか、それを隔離するように設計され得る。従って、このようなアプタマー変性ポリマーで作られたドレッシング材は、いくつかの実施形態では、種々の生物学的経路を調節するため、あるいは創傷環境において望ましくない生物活性分子または酵素の存在を管理するために使用され得る。
【０１３７】
ドレッシング材に加えて、ヘテロ二官能性シリル変性リンカーおよびポリウレタンベースのポリマーまたはコポリマーを用いるものを含むアプタマー変性ポリマーは、多彩な他の材料、マトリックスおよび生物医学装置（カテーテルを含む）においても使用することができる。このような実施形態では、これらは、様々なアプタマー、または他の化合物（抗菌剤を含む）を共役させるために使用され得る。これらの材料を陰圧に基づく療法に適用することは、以下でより詳細に議論される。
【０１３８】
本発明の材料は、本明細書に明記される適応症における使用のためでもそれ以外のためでも、当該技術分野において知られている化合物よりも効果的であり、毒性が低く、長く作用し、強力であり、少ない副作用を生じ、容易に吸収され、そして／あるいは良好な薬物動態学的プロファイル（例えば、高い経口バイオアベイラビリティおよび／または低いクリアランス）を有し得るという利点も有し、そして／あるいは当該技術分野において知られている化合物を上回ってその他の有用な薬理学的、物理的、または化学的な特性を有することができる。
【０１３９】
本発明のいずれかの塩の一部を形成する特定のアニオンまたはカチオンは、塩が全体として薬理学的に許容可能である限り重要でないことは認識されるべきである。薬学的に許容可能な塩の付加的な例ならびにその調製および使用方法は、参照によって本明細書中に援用されるＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，ａｎｄ  Ｕｓｅ（２００２）で与えられる。
【０１４０】
Ｄ．発泡体材料ベースを含むインサートの調製
別の態様では、発泡体ベースのポリマーは、アプタマーに共有結合される前または後に、物理的および／または化学的に処理、被覆または操作され得る。変性創傷インサートを製造するいくつかの実施形態は、発泡体の少なくとも一部を圧縮する（および／またはフェルト状にする）ことを含む。いくつかの実施形態は、外部圧縮力が存在しなくても発泡体が実質的に圧縮されたままであるように、圧縮された発泡体を処理する（例えば、熱を加える、あるいは塗布されたコーティングを活性化することにより）ことを含む。例えば、いくつかの実施形態では、処理は、発泡体の弾力性を低減するのに十分な高温まで発泡体（例えば、発泡体）を加熱することを含む。例えば、発泡体は、発泡体の弾力性が低減され、そして／あるいは緩和される温度まで加熱することができるが、温度は発泡体の融解温度よりも低い（例えば、高温により発泡体が分解されないように）。このようにして、発泡体は、熱および圧力（圧縮力）を用いて圧縮硬化され、発泡体において生じる圧縮歪みを緩和することができる。一般に、高温を用いて圧縮硬化を達成する。発泡体の弾力性が低減され、そして／あるいは圧縮力が存在しなくても発泡体が実質的に圧縮されたままであるように所望の「硬化」を達成するために、温度は１５８華氏温度〜４８２華氏温度の範囲であり得る（例えば、使用される特定の発泡体に依存して、１４０、１６０、１８０、２００、２２０、２４０、２６０、２８０、３００、３２０、３４０、３６０、３８０、４００、４２０、４４０、４６０、４８０、５００華氏温度のいずれかに等しい、それよりも低い、それよりも高い、あるいはその間である）。発泡体は、導入された硬化の保持を助けるために、冷却サイクルを受けてもよい。例えば、発泡体は、室温または周囲温度よりも低い温度（例えば、０、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、または７０華氏温度のいずれかに等しい、それよりも低い、それよりも高い、あるいはその間である温度）まで冷却され得る。変性創傷インサートを形成する本発明の方法のいくつかの実施形態では、発泡体は２つの加熱プレートまたはプラテンの間（例えば、プレートまたはプラテンプレス内、および／またはプレートが発泡体の弾力性を低減するのに十分な温度まで加熱されるところ）に配設され、プレスが作動され、発泡体が所望の全厚または圧縮度まで圧縮されるようにプレートを互いに向かって（例えば、厚い部分３０４の厚さ３２０と垂直に）移動させる。このようなプレスは電気式、機械式および／または水圧式で作動さることができる。
【０１４１】
変性創傷インサートを製造する本発明の方法のいくつかの実施形態は、発泡体の圧縮部分が、圧縮力が存在しなくても室温（例えば、７２華氏温度の温度）で実質的に圧縮されたままであるように発泡体を冷却する（例えば、発泡体を加熱した後）ことも含む。他の実施形態では、発泡体の冷却には、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、および／または１５０華氏温度に等しい、これらよりも低い、これらよりも高い、あるいはこれらのいずれかの間である温度または温度範囲において、発泡体の圧縮部分が、圧縮力が存在しなくても実質的に圧縮されたままであるように発泡体に施されたコーティングを冷却することが含まれる。
【０１４２】
発泡体の厚い領域および薄い領域は、例えばレーザー切断などの任意の適切な方法によって形成することができる。このような方法は、例えば、参照によって本明細書中に援用される米国特許出願公開第２０１１／０１７８４５１号明細書によって教示されている。
【０１４３】
このような実施形態では、コーティングは、例えば、発泡体にコーティングを噴霧する、発泡体をコーティング中に浸漬する、および／またはコーティングを発泡体中に分散させる任意の他の適切な方法などによって発泡体中に分散され得る。いくつかの実施形態では、例えば、比較的低い温度（例えば、発泡体単独の場合よりも低い）で起こる遷移温度（例えば、融点、ガラス転移点など）を有するか、あるいは乾燥されると剛性を発現する材料を発泡体に被覆することができる。いくつかの実施形態では、コーティングは、発泡体がより低い温度で（例えば、加熱することなく）圧縮（および／または圧縮硬化）されることを可能にするように構成することができるので、冷却または乾燥されるとコーティングは剛性になるか、あるいは他の方法で膨張に対して抵抗性になり、発泡体をその圧縮された形状で保持する。例えば、発泡体を圧縮する前に流体接着剤が厚い部分に適用され、圧縮力を除去する前に乾燥させることができるので、乾燥された接着剤が圧縮された厚さの膨張に抵抗し得る。他の実施形態では、コーティングは、圧縮が可逆的である（例えば、少なくとも部分的および／または完全に可逆的である）ように発泡体を圧縮硬化させるように構成することができるので、発泡体は温まるか、水を吸収すると膨張することができる（例えば、創傷内または創傷上に配置した後）。いくつかの実施形態では、コーティングは架橋性ポリマーを含み、そして／あるいは、活性化は、架橋性ポリマーの少なくとも一部に変性を引き起こすために、コーティングを光および／または高温（例えば、周囲温度よりも高い温度、例えば、架橋性ポリマーの少なくとも一部に架橋を引き起こすのに十分な温度など）にさらすことを含む。
【０１４４】
適切なコーティングの例としては、ｎ−メチロールアクリルアミド（ＮＭＡ）を含有する架橋性ポリマーが挙げられる。ＮＭＡは、多くの他のモノマー（アクリルおよびビニルなど）と共重合され得るモノマーである。加熱（例えば、約１４０℃まで）すると、ＮＭＡはそれ自体および他のヒドロキシル含有基（例えば、カルボキシル）と反応する。同様に、尿素ホルムアルデヒド、メラミンホルムアルデヒド、および／またはフェノールホルムアルデヒドはそれ自体および他のヒドロキシル含有ポリマーと反応させられて、架橋を形成することができる。他の架橋剤は、例えば、ヒドロキシル含有ポリマーと高温で反応してこれらを架橋する変性エチレン尿素を含むことができる。他の架橋剤は、ほとんどのポリマーを高温で架橋し得る過酸化物を含むことができる。ヒドロキシルおよびカルボキシル基を含有するポリマーは混ぜ合わせられてもよく、加熱されるとポリエステル架橋を形成し得る。さらに、室温で低反応性を有し、加熱されると急速に反応して架橋を有するエポキシポリマーを形成するエポキシプレポリマーを使用することができる。同様に、高温およびヒドロキシル基、アミン、または水分の存在下でのみ著しく速く反応して、ポリウレタンまたはポリ尿素を形成し得る高分子イソシアネートが使用されてもよい。
【０１４５】
いくつかの実施形態では、高密度領域および低密度領域の組み合わせが協働して、本発明の変性創傷インサートに種々の特徴を提供する。例えば、高密度領域はより小さい凝集セルサイズおよび増大されたセル密度を有するので、高密度領域は改善されたウィッキング機能を有し、流体をより効果的に伝達する（例えば、低密度領域よりも効果的に流体を創傷表面から引き離す、および／または流体を流体源から創傷表面へ伝達する）。また高密度領域は、一般に、低密度領域よりも機械的に強力なので、高密度領域は、低密度領域および／または全体としての変性創傷インサートに構造的な支持を提供することができる（例えば、変性創傷インサートは、低密度領域に平行でない方向の引裂に対して抵抗性である）。さらに、低密度領域はより大きい有効セルまたは細孔サイズを有するので、低密度領域は目詰まりの影響を受けにくい。特に、陰圧がかけられて、流体および／または滲出液が創傷から変性創傷インサートを通して引き離される場合、低密度領域のより大きい細孔サイズは、流体が高密度領域から引っ張られるよりも速い速度で、流体が低密度領域から引っ張られることを可能にし得るので、微粒子および顆粒状物質は低密度領域へそして／あるいは低密度領域から引っ張られて、高密度領域における目詰まりの可能性を阻止および／または低減する。いくつかの実施形態では、発泡体は、変性創傷インサートのウィッキング特性を改善するために、親水性材料で被覆することもできる。
【０１４６】
また低密度領域は、創傷ドレッシング材が曲がる、そして／あるいは他の方法で創傷に一致することができるように構成されてもよい。例えば、低密度領域は比較的より容易に曲がり（そして／あるいは、低密度領域に沿って変性創傷インサートが曲げられたり折り畳まれたりする場合に弾性が低い）、例えば、変性創傷インサートを２つに折ることができ、そして／あるいは変性創傷インサートをプレートやピンなどの付加的なハードウェアに一致させることができる。
【０１４７】
典型的な単密度発泡体の変性創傷インサートは、陰圧下で、典型的な単密度発泡体の変性創傷インサートが全ての方向に比例的に接触するように等方性である。いくつかの実施形態では、本発明の変性創傷インサートは異方性であるように構成されてもよく、創傷閉鎖を機械的に手助けするように本発明の変性創傷インサートを構成することができる。例えば、低密度領域は高密度領域よりも密度が低い（そして、陰圧下でより縮むであろう）。従って、変性創傷インサートに陰圧が加えられると、低密度領域は高密度領域よりも大きく収縮するので、高密度領域も一緒に引っ張られ、変性創傷インサートは縦方向よりも横方向に大きく収縮するであろう。他の実施形態では、本発明の変性創傷インサートは、交互にそして連続して、より大きい閉環形状の高密度領域および低密度領域を有するように構成することができ、陰圧下で、変性創傷インサートは横方向にそれ自体の中心に向かって内側に収縮するであろう。
【０１４８】
いくつかの実施形態では、厚い部分、薄い部分、高密度領域、および／または低密度領域は被覆および／または印刷されて（圧縮の前または後のいずれか）、発泡体の個々の領域または全体としての発泡体の親水性または疎水性特性を高めることができる。また、このような被覆領域は抗生物質または閉塞低下剤（ｂｌｏｃｋａｇｅ−ｒｅｄｕｃｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）などの他の添加剤を含有していてもよいし、そして／あるいはこれらで被覆されていてもよい。
【０１４９】
本発明のいくつかの実施形態では、創傷ドレッシング材は、患者（例えば、３０）の創傷（例えば、２６）の上、および／または創傷表面（例えば、４２）の上またはそれに接触させて配置されるように構成された創傷ドレッシング材を含む。
【０１５０】
本発明の創傷治療方法のいくつかの実施形態は、変性創傷インサート（例えば、３４ａ、３４ｂなどの本発明の変性創傷インサートのいずれか）を患者（例えば、３０）の創傷（例えば、２６）上に配置することを含み、ここで、変性創傷インサートは、高密度領域（例えば、４０４）と、高密度領域の密度よりも低い密度を有する低密度領域（例えば、４０８）とを有する発泡体（例えば、３００）を含む。いくつかの実施形態では、発泡体は無菌である（例えば、実質的に微生物および／または細菌を含まない）。いくつかの実施形態はさらに、ドレープが変性創傷インサートおよび創傷を被覆し、ドレープと創傷の間に空間を形成するように、ドレープ（例えば、３８）を創傷に隣接する皮膚（例えば、４６）に連結することを含む。いくつかの実施形態は、創傷ドレッシング材を通して（例えば、変性創傷インサートを通して）創傷に陰圧をかけることを含む。いくつかの実施形態では、創傷への陰圧の印加は、創傷ドレッシング材に連結される真空源（例えば、図１の装置１４、または図３の真空源２００）を活性化することを含む。いくつかの実施形態は、創傷ドレッシング材を通して流体を創傷に送達することを含む。いくつかの実施形態では、流体の送達は、創傷ドレッシング材に連結される流体源（例えば、図３の流体源２４８）を活性化することを含む。
【０１５１】
本発明の創傷治療システムのいくつかの実施形態は、システム１０のいずれかの実施形態（またはシステム１０のいずれかの実施形態の構成要素の任意のサブセット）と、本発明の変性創傷インサートおよび／または創傷ドレッシング材の１つまたは複数とを含む。
【０１５２】
本明細書に記載されるデバイス、システム、および方法の種々の説明的な実施形態は、開示される特定な形態に限定されることを意図しない。むしろこれらは特許請求の範囲に包含される全ての修正および代替案を含む。
【０１５３】
語句「ための手段（ｍｅａｎｓ  ｆｏｒ）」または「ためのステップ（ｓｔｅｐ  ｆｏｒ）」をそれぞれ用いる所与の請求項においてこのような限定が明確に詳述されない限り、特許請求の範囲は、ミーンズプラスまたはステッププラスファンクション限定を含むことを意図せず、これらを含むと解釈されてはならない。
【０１５４】
上記の利益および利点は１つの実施形態に関連してもよいし、いくつかの実施形態に関連してもよいことは理解されるであろう。さらに、「ａｎ（１つの）」項目への言及は、他に指定されない限り、これらの項目の１つまたは複数を指すことも理解されるであろう。
【０１５５】
本明細書に記載される方法のステップは、任意の適切な順序で、あるいは適切な場合には同時に実行され得る。
【０１５６】
適切な場合には、上記の例のいずれかの態様は記載される他の例のいずれかの態様と組み合わせられて、同等または異なる特性を有し、そして同一または異なる問題に対処するさらなる例を形成してもよい。
【０１５７】
好ましい実施形態の上記の説明が単なる例として与えられ、当業者によって種々の修正が成され得ることは理解されるであろう。上記の詳述、例およびデータは、例示的な実施形態の構造および使用の完全な説明を提供する。種々の実施形態がある程度詳細に、あるいは１つまたは複数の個々の実施形態を参照して上記で説明されたが、本発明の範囲から逸脱することなく当業者は開示される実施形態に多数の変更を加えることができるであろう。
【０１５８】
Ｅ．アプタマー変性創傷インサートを含むデバイス
上記のアプタマー変性ポリマーおよびそれから製造される材料は、（ａ）創傷環境における生物学的標的の捕獲および濃縮（創傷床へ放出して戻すという選択肢を有する）、（ｂ）結合の化学的性質の特定、および／または（ｃ）標的因子が細胞に提示される方向性の指示を含む様々な目的のために使用することができる。
【０１５９】
アプタマー変性ポリマーのために作られたドレッシング材または創傷インサートは、陰圧創傷療法と一緒に使用され得る。いくつかの実施形態では、発泡体を通過する際に創傷流体中の有益な分子を選択するアプタマーまたは小ペプチドリンカー（リガンド）が被覆された適合性の発泡体は、それにより、これらが陰圧創傷療法キャニスタ内へ除去されるのを防止し得る。創傷流体からの選択に適切な分子には、代謝産物、増殖因子、ケモカインおよびサイトカインが含まれ、これらは、陰圧創傷療法用ドレッシング材を通る流体の流れを妨害しないであろう。いくつかの実施形態では、適切なリンカーは、創傷流体分子の「活性部位」が生物学的応答を誘発するために依然として利用可能であるような方向性で創傷流体分子と結合し得る。例えば、１つのこのような分子はＶＥＧＦであり得る。ＶＥＧＦは、細胞受容体に結合する特定の部位を分子上に有する。ＶＥＧＦ分子の細胞受容体への結合は、生物学的応答（通常、血管新生）を開始するために使用され得る。
【０１６０】
いくつかの実施形態では、本明細書で教示される方法は、ＭＣＰｌなどのマクロファージに対して走化性の分子に結合するために使用することができ（図１５）、これは、マクロファージの創傷への遊走を刺激し、それにより、創傷を慢性状態から治癒状態へ進行させるために使用され得る。いくつかの実施形態では、ＰＤＧＦまたはコラーゲン断片は増殖期または炎症後期の間に結合され、線維芽細胞の創傷への遊走を刺激し得る。マクロファージの、そして次に線維芽細胞の創傷への遊走の刺激は、創傷治癒の炎症期から増殖期への創傷の進行の助けになり得る。いくつかの実施形態では、一酸化窒素シンターゼは、創傷流体から結合されて、灌流を刺激し得る。これは、より高いレベルの栄養物が創傷へ入るようにすることによって治癒の促進に役立つことができる。いくつかの実施形態では、ＩＬ４またはＩＬ１０などの抗炎症性サイトカインは結合されて、炎症を減少させることができ、従って、創傷を治癒の炎症期から増殖期へより急速に進行させる。ＤＮＡ断片もドレッシング材に結合され得る。いくつかの実施形態では、高荷電ＤＮＡの結合は、電流がドレッシング材を通って流れるようにすることができる。電気的な刺激は長年にわたって創傷の治療において使用されている。従って、ＤＮＡの創傷ドレッシング材への結合は、電流の創傷への適用を可能にし得る。
【０１６１】
ペプチド（この場合は抗体）に結合されたアプタマーがまだ生物活性を保持し得るかどうかの実験を行った。溶液中のＶＥＧＦに、抗ＶＥＧＦ抗体に結合させたビーズを通過させた。溶液がビーズを通過した後、ビーズを沈降させ、洗浄した。次に、洗浄したビーズを内皮細胞遊走検定のために使用した。この実験からの結果は、３時間後に、抗体を持たないビーズよりも２倍多い細胞が、抗体（およびＶＥＧＦ）に結合されたビーズに向かって遊走したことを示した。図１８を参照されたい。従って、抗体に結合されたＶＥＧＦは生物活性を保持することができると示された。
【０１６２】
ここで図面、より具体的には図１を参照すると、本発明の創傷治療システム１０の一実施形態が示されている。図示される実施形態では、装置１０は、創傷治療装置１４と、導管２２によって装置１４に連結された創傷ドレッシング材１８とを含む。図示されるように、ドレッシング材１８は患者３０の創傷２６に連結されるように構成される（連結されて示される）。より詳細には、図示される実施形態において、ドレッシング材１８は、変性創傷インサート３４およびドレープ３８を含む。図示されるように、変性創傷インサート３４は創傷２６上に（例えば、創傷表面４２上または創傷表面４２に隣接して）配置されるように構成され（配置されて示される）、そして／あるいはドレープ３８は、ドレープ３８が変性創傷インサート３４および創傷２６を被覆し、ドレープ３８と創傷２６（例えば、創傷表面４２）との間に空間５０を形成するように、創傷２６に隣接する患者の皮膚４６に連結されるように構成される（連結されて示される）。
【０１６３】
装置１４は、例えば、創傷ドレッシング材１８に（例えば、導管２２を介して）陰圧をかけるために作動可能である（および／または作動される）ように構成された真空源と、（例えば、導管２２を介して）流体（例えば、薬用流体、抗菌流体、洗浄流体などの導入流体）を創傷ドレッシング材１８に送達するために作動可能である（および／または作動される）ように構成された流体源とを含むことができる。システム１０は、従来技術において記載されているものと同様の種々の構成および／または方法のいずれかで実行し、そして／あるいは作動させ、そして／あるいは患者３０に連結することができる。例えば、種々の創傷療法システムおよび構成要素は、ＫＣＩ  ＵＳＡ，Ｉｎｃ（Ｓａｎ  Ａｎｔｏｎｉｏ，Ｔｅｘａｓ，Ｕ．Ｓ．Ａ．）および／またはその子会社および関連会社（集合的に「ＫＣＩ」）を通して、および／またはこれらから市販されている。
【０１６４】
導管２２は単腔導管（例えば真空源および／または流体源および装置１４の間で切り替えられる）を含むこともできるし、例えば、流体が個々にそして／あるいは同時に、創傷ドレッシング材１８に送達され、そして／あるいは陰圧が印加され得るように、多数の単腔導管または多腔導管を含むこともできる。さらに、導管２２は、例えば、陰圧の印加および／または流体の送達のための第１の管腔と、ドレープ３８と表面４２の間の圧力または陰圧を感知するために圧力センサに連結するための少なくとも１つの付加的な管腔とを含むことができる。いくつかの実施形態では、導管２２は、多数の管腔（例えば、陰圧の印加および／または流体の送達のための中央管腔と、中央管腔に隣接してまたはその周囲に配設される１つまたは複数の周囲管腔とを有する単一の導管であり、周囲管腔がドレープ３８と表面４２との間の圧力または陰圧（例えば、空間５０において）を感知するために圧力センサへ連結され得る場合）を含むことができる。管腔は、中央管腔と、中央管腔の周りに放射状に配設された他の管腔とを有するように配置されていてもよいし、あるいはその他の適切な配置であってもよい。管腔は別々の導管内に提供されてもよい。図示される実施形態において、システム１０はさらに、導管２２に連結されるように構成された（連結されて示される）創傷ドレッシング材接続パッド５４を含む。適切な接続パッド５４の一例は、ＫＣＩから市販されている「Ｖ．Ａ．Ｃ．Ｔ．Ｒ．Ａ．Ｃ．（登録商標）Ｐａｄ」である。適切なドレープ３８の一例としては、ＫＣＩから市販されている「Ｖ．Ａ．Ｃ．（登録商標）Ｄｒａｐｅ」が挙げられる。
【０１６５】
ここで図２を参照すると、変性創傷インサート３４の側面図が示されている。変性創傷インサート３４は、上面１００、下面１０４、側面１０８、１１２および内部容積１１６を有する。変性創傷インサート３４の１つの面しか示されていないが、変性創傷インサート３４が、図示される面に垂直に延在する深さを有する３次元の矩形容積を含むことは、当業者により理解されるであろう。他の実施形態では、変性創傷インサート３４は、例えば、丸い円柱形状、奇抜な形状などの任意の適切な形状を有することもできるし、あるいは創傷（例えば、２６および／または創傷表面４２）の不規則な形状に適合するように切り取られてもよい。変性創傷インサート３４は、例えば、連続気泡発泡体（網状であってもよい）などの発泡体を含むことができる。
【０１６６】
本発明の創傷治療方法の実施形態は、システム１０の一実施形態の略ブロック図が示される図１を参照してさらに良く理解され得る。図示される実施形態では、創傷ドレッシング材１８は装置１４に連結されており、装置１４は、導管２０８によって、キャニスタ２０４（例えば、創傷ドレッシング材１８から滲出液などを受け取るように構成される）に連結された真空源２００（例えば、真空ポンプなど）を含む。図示される実施形態では、装置１４はさらに、導管２２０および／またはＴ字型継手２２４によって導管２０８に連結された第１の圧力トランスデューサ２１６と、導管２３２によってキャニスタ２０４および／または創傷ドレッシング材１８に連結された第２の圧力トランスデューサ２２８とを有する圧力センサ２１２を含む。圧力センサ２１２は、創傷ドレッシング材１８において、そして／あるいは創傷ドレッシング材１８、圧力センサ２１２および／または真空源２００に連結された（例えば、導管内の）種々の管腔のいずれかにおいて、陰圧を感知するように構成される。
【０１６７】
図示される実施形態において、装置１４はさらに、導管２３２に連結された圧力解放バルブ２３６を含む。さらに、図示される実施形態において、キャニスタ２０４および真空源２００は導管２４０によって創傷ドレッシング材１８に連結され、そして／あるいはキャニスタ２０４は、液体または固体粒子が導管２０８に入るのを防止するためにキャニスタ２０４の出口または出口付近にフィルタ２４４を含むことができる。フィルタ２４４は、例えば、水性および／または油性の液体がフィルタの表面でビーズ状になるように疎水性および／または親油性である細菌フィルタを含むことができる。装置１４は、通常、作動中に、真空源２００がフィルタ２４４を通る十分な空気の流れを提供するように、フィルタ２４４での圧力降下があまり大きくないように（例えば、圧力降下が、真空源２００から創傷ドレッシング材１８からの陰圧の印加を実質的に妨げないように）構成される。
【０１６８】
図示される実施形態において、装置１４はさらに、例えばＴ字型または他の適切な継手２５６などによって導管２４０に連結された導管２５２によって創傷ドレッシング材１８に連結された流体源２４８を含む。いくつかの実施形態では、Ｔ字型継手２５６は、創傷ドレッシング材１８と真空源２００との間、または創傷ドレッシング材１８と流体源２４８との間の連通を選択的に可能にすることができるように切換えバルブなどを含むことができる。いくつかの実施形態では、装置１４は、真空源２００および流体源２４８の一方だけを含む。流体源２４８だけを含む装置１４の実施形態では、キャニスタ２０４および／または圧力センサ２１２も省略することができる。図示されるものなどの種々の実施形態において、図１を参照して上記で説明されるように、導管２３２および／または導管２４０および／または導管２５２は結合され、そして／あるいは単一の多腔導管内に含まれていてもよい。いくつかの実施形態では、流体源２４８は、創傷ドレッシング材１８に直接連結される（例えば、導管２５２は接続パッド５４などを介して一端が創傷ドレッシング材１８に連結され、導管２５２は他端が流体源２４８に連結され、そして導管２５２はＴ字型継手２５６に連結されない）。
【０１６９】
図３に示されるものなどの種々の実施形態において、装置１４は、キャニスタ中の液体がフィルタ２４４を閉塞するレベルに到達したらすぐに、導管２０８内に非常に大きい負の（または大気圧よりも低い）圧力が生じ、トランスデューサ２１６によって感知されるように構成することができる。トランスデューサ２１６は、このような圧力変化をキャニスタの充満であると解釈し、これを、キャニスタ２０４を空にするおよび／または交換する必要があるというＬＣＤ上のメッセージおよび／またはブザーによって知らせ、そして／あるいは真空源２００を自動的に遮断するか、あるいは動作を停止する回路に接続され得る。
【０１７０】
装置１４は、負の（または大気圧よりも低い）圧力を（例えば、連続的、間欠的、および／または定期的に）創傷部位に印加するように、そして／あるいは圧力解放バルブ２３６が創傷部位の圧力を迅速に大気圧にすることを可能にするように構成することができる。従って、例えば圧力を１０分間隔で解放するように装置１４がプログラミングされる場合、これらの間隔で、圧力解放バルブ２３６は指定される時間開き、圧力を創傷部位で均一にしてから、閉鎖して陰圧を回復させることができる。一定の陰圧が創傷部位にかけられているとき、バルブ２３６は、大気からまたは大気への漏出を防止するために閉鎖したままであることが認識されるであろう。この状態で、ポンプ２００を連続的に運転および／または作動させることはないが、所望のレベルの陰圧（すなわち、大気圧よりも低い所望の圧力）を維持するために時々または定期的に運転および／または作動させて創傷部位で陰圧を保持することが可能であり、陰圧はトランスデューサ２１６によって感知される。これにより電力が節約され、機器がその電池電源において長期間作動することが可能になる。
【０１７１】
いくつかの実施形態では、電気パルス、光、超音波および温度を用いて、因子を除去する、あるいはその濃度を調節することができる。
【０１７２】
Ｆ．点滴注入溶液
いくつかの実施形態では、本明細書で開示されるアプタマー変性ポリマーから製造されるドレッシング材は、例えば陰圧治療の患者の創傷への適用において、創傷点滴注入溶液と一緒に使用され得る。いくつかの実施形態では、点滴注入溶液は、発泡体に結合された因子を放出する、あるいはその放出を調節するのに役立つ成分を含む。
【０１７３】
結合分子を解離するためにいくつかの実施形態で使用され得る点滴注入成分の例としては、生理食塩水、わずかに酸性ｐＨを有する溶液、わずかに塩基性ｐＨを有する溶液、種々の界面活性剤（すなわち、ポリソルベート）を有する溶液、わずかなイオン電荷を有する溶液、ＥＤＴＡまたはＥＧＴＡが挙げられる。いくつかの実施形態では、リンカーからの結合因子の解離を開始するために点滴注入される流体は、因子−リンカー複合体の結合強度（これは、次に解離定数によって決定される）に依存するであろう。解離定数は、リンカー／ペプチドを設計するために、対象の因子のアミノ酸化学の知識を用いて修正され得る。
【０１７４】
いくつかの実施形態では、点滴注入溶液は、次亜塩素酸（ＨＯＧ）および次亜塩素酸イオンを含む。両方とも殺生物作用に有効な抗菌剤の例である。例えば、ＨＯＣｌは通常広範囲の微生物（例えば、真菌、細菌、ウィルス、真菌、酵母など）を、多くの場合比較的短い時間で死滅させることができる（例えば、１０秒未満の時間内に９９％を超える微生物を死滅させることができる）。このような抗菌剤は、本発明の反応性薬剤および流体（例えば、水および／または水溶液、例えば生理食塩水など）の組み合わせによって発生または形成させることができ、過去に創傷治療において使用された抗生物質および他の一般的な抗菌剤よりも有効および／または多用途であり得る。例えば、抗生物質は細菌特異的であり得るので、特定の創傷または感染のために使用するのに適した抗生物質を決定する検査が必要とされ得る、そして／あるいは抗生物質は個々の創傷および／または感染に対して限られた有効性だけを有し得る（例えば、検査が実施されない場合、および／または創傷が複数の異なる細菌に感染している場合）。このような検査は適切な抗生物質を決定するために数日を要することがあり、有効な抗生物質の治療または選択が遅延する。さらに、細菌は抗生物質に対する抵抗性を生じることがあり、抗生物質は時間が経つと有効性が低下し得る。さらに、抗生物質は通常静脈内に投与（全身的に）されるので、抗生物質は有益な細菌（例えば、患者の消化器系において）を死滅させ得る、そして／あるいは臓器障害（例えば、患者の肝臓に）を引き起こし得る。
【０１７５】
対照的に、本発明の実施形態の反応性薬剤（および／または反応性薬剤の抗菌生成物）は、様々な微生物（例えば、真菌、細菌、ウィルス、真菌、酵母など）を死滅させ得る広域性の殺菌力を有するように構成することができる。さらに、本発明の反応性薬剤（および／または反応性薬剤の抗菌生成物）は局所的に送達されることが可能である（臓器に対する全身性の障害または他の副作用などを防止する）。
【０１７６】
しかしながら、ＦＩＯＣｌまたはＯＣＦ−は、酸化可能な有機物質との反応性のために、これまで創傷ケア用途における利用が限られていた。例えば、次亜塩素酸を発生させる従来技術の方法は、塩水の電気分解などを必要としていた（例えば、患者のベッドサイドに高価な設備を備える）。別の例として、市販の化学薬品（例えば、漂白剤）は、５％以上の次亜塩素酸濃度を有し、これは、医学的用途を認めるためには高すぎる（例えば、細胞毒性を生じ得る）。さらに、適切な医学的濃度（例えば、２〜２０ｍＭの次亜塩素酸溶液）では、溶液の約９９％以上は水であり、出荷が必要以上に高価および／または困難である。さらに、容器との反応が通常次亜塩素酸溶液を分解するか、あるいはその濃度を低下させるので、次亜塩素酸溶液の貯蔵は困難である。しかしながら、本発明の創傷インサートは反応性薬剤が付着され得る（創傷インサートの発泡体中に反応性薬剤が付着されている）ので、生理食塩水または水などの流体を適用すると、ＯＣｌ（および／またはＣｌＯ−）が放出され（例えば、次亜塩素酸を形成するため）、殺生物作用のために創傷に送達される。
【実施例】
【０１７７】
Ｇ．実施例
以下の実施例は、本発明の好ましい実施形態を実証するために包含される。以下の実施例において開示される技術は本発明の実施において十分に機能すると本発明者により発見された技術を表し、従って、その実施のために好ましい形態を構成すると考えられることは当業者によって認識されるべきである。しかしながら、当業者は、本開示を鑑みて、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく開示される特定の実施形態に多数の変化を起こし、同様または類似の結果をまだ得ることが可能であると認識すべきである。
【０１７８】
実施例１  −  ３０ｐｈｒキトサン界面層の調製およびシラン化
この手順では、芳香族ジイソシアネートおよび三分枝状ポリオールミックス１．０ｇ当たり０．３ｇのキトサン（Ｓｉｇｍａ  Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｎｕｍｂｅｒ  ４４８８７７）を用いて製造した３０重量部（ｐｅｒ  ｈｕｎｄｒｅｄ  ｒｅｓｉｎ）（３０ｐｈｒ）のキトサン発泡体に、ヘテロ二官能性シラン架橋剤３−アミノ−プロピルジイソプロピルエトキシシランを付着させた。次に、３−アミノプロピルジイソプロピルエトキシシラン（Ｇｅｌｅｓｔ（商標）化合物ＳＩＡ０６０２．０）により、コポリマーの複数の−ＯＨ基をシリル化した。これは、以下にさらに記載されるプロトコルを用いて達成した。
【０１７９】
得られたシリル化３０ｐｈｒキトサン発泡体は、相対蛍光単位（ＲＦＵ）を比較するｏ−フタルジアルデヒド（ＯＰＡ）検定を用いて、シリル化網状連続気泡発泡体と比較した。ＯＰＡは、第１級−ＮＨ２基に結合すると蛍光を発する。従って、３０ｐｈｒキトサン発泡体のＲＦＵは、例えばＯＰＡ単独よりも大きく、第１級−ＮＨ２の存在を示すはずである。この試験の結果は以下の表１および図５に示される。この定量分析により、シリル化３０ｐｈｒキトサン発泡体（「３０ＰＨＲ  Ｓｉ」）は、相対的に、シリル化網状連続気泡発泡体（ＲＯＣＦ  Ｓｉ）（６．４５ｅ６）の２倍の数のＲＦＵ（１．２５ｅ７）を有することが実証された。この結果は、シリル化３０ｐｈｒキトサン発泡体がシリル化網状連続気泡発泡体よりも多くの遊離アミノ基を有することと一致する。
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【０１８０】
図５は、ｏ−フタルジアルデヒド（ＯＰＡ）検定を用いて、シリル化３０ｐｈｒキトサン発泡体（「３０ＰＨＲ  Ｓｉ」）の遊離アミノ基の数をシリル化網状連続気泡発泡体（「ＲＯＣＦ  Ｓｉ」）と比較する結果を示す。結果は相対蛍光単位（ＲＦＵ）に関して提供される。高感度のアミン検出試薬である単独のＯＰＡは、対照としての役割も果たす。
【０１８１】
これらの実験の実行において使用される装置には以下が含まれる：
・  プレートリーダー（Ｂｉｏｔｅｋ−Ｓｙｎｅｒｇｙ  ４）
・  ＴＲＩＴＣ対応の顕微鏡（Ｏｌｙｍｐｕｓ−ＩＸ５１）
・  ３０ｐｈｒキトサン発泡体のブロック
・  ＰＢＳパック（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ２８３８４）
・  ９６ウェル、黒色、透明底（Ｇｒｅｉｎｅｒ  ６５５２０９）
・  ３−アミノプロピルジイソプロピルエトキシシラン、Ｇｅｌｅｓｔ化合物ＳＩＡ０６０２．０（「化合物６０２」）（この化合物は乾燥して保持された）
・  ２５ｍＬのガラスシンチレーションバイアル
・  オルト−フタルジアルデヒドまたはＯＰＡ（Ｓｉｇｍａ  Ｐ／Ｎ−Ｐ０５３２）
・  １インチのコルク穿孔器
・  ４ｍｍの生検パンチ。
【０１８２】
使用した試験手順には、以下のステップが含まれていた：
・  ９５％のＥｔＯＨ溶液を調製した。
・  ドラフト内で、２５ｍＬシンチレーションバイアル中に９５％ＥｔＯＨ中の１５％の３−アミノプロピルジイソプロピルエトキシシラン溶液を調製し、振とう器上に５分間置いた
・  １パックのＰＢＳ粉末および５００ｍＬのＤＩ  Ｈ２Ｏを混合することにより、ＰＢＳを調製した。
・  デリスライサーを用いて２ｍｍ厚の３０ｐｈｒ発泡体のシートを発泡体ブロックから切断した。
・  １インチのコルク穿孔器でクーポンを切り取った。
・  全てのサンプル調製ステップをガラスシンチレーションバイアル中で実施した。
・  クーポンを１５％シラン溶液の１０ｍＬバイアル中に浸漬し、ガラス棒でバイアルの底に押し付けて、発泡体内部に閉じ込められた気泡を除去し、振とう器上に１５分間置いた。１０ｍＬの９５％ＥｔＯＨ溶液をシラン溶液で置き換えたことを除いて同様の方法で、負の対照を調製した。
・  クーポンをシラン溶液から鉗子で取り出し、９５％ＥｔＯＨ浴に移して、約３秒間穏やかにかき混ぜ、過剰のシランを洗い流した。次に、この洗浄を繰り返した。
・  次に、クーポンを清浄な２５０ｍＬのビーカーに移し、これらが互いに接触しないことを保証した。
・  ビーカーを８０℃に予熱したオーブン内に２時間入れた。加熱の後、ビーカーをオーブンから取り出し、室温まで冷却させた。あるいは、クーポンをビーカー中に入れ、被覆せずに、室温で２４時間インキュベートさせてもよい。
・  ４ｍｍの生検パンチを用いてシリル化および非シリル化３０ｐｈｒからクーポンを切り取った。各クーポンの秤量も行った。
・  定量化ステップ：
・  ２００μＬのＯＰＡを黒色９６ウェルプレート上の各クーポン添加し、プレートを被覆しおよび跡を消し、室温で２分間インキュベートした。
・  プレートをプレートリーダーに入れ、ＯＰＡ検定プロトコルを開始した。
【０１８３】
実施例２  −  捕獲ペプチドの３０ＰＨＲキトサン界面層へのＳｕｌｆｏ−ＥＭＣＳ共役
１．０ｇのポリウレタンに対して０．３ｇのキトサン（Ｓｉｇｍａ  Ｐ／Ｎ４４８８７７）を用いて３０重量部（３０ｐｈｒ）のキトサンプロトタイプを配合した。これらの実験の実行において、以下の試験装置、材料および手順を使用した。
【０１８４】
これらの実験の実行において使用される材料には以下が含まれる：
・  １インチのシラン化キトサンクーポン
・  Ｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳ（Ｐｉｅｒｃｅ−２２３０７）
・  ＢｕｐＨホウ酸緩衝剤パック（Ｐｉｅｒｃｅ−２８３７２）
・  ＥＤＴＡ（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ−Ｅ９８８５−５００Ｇ）
・  ２５ｍＬのシンチレーションバイアル
【０１８５】
これらの実験の実行において使用される材料には以下が含まれる：
【０１８６】
使用した試験手順には、以下に記載されるステップが含まれていた：Ｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳ（これは、使用の直前に再構成させた）を除いて全ての緩衝剤および試薬を前もって調製した。参照によってその全体が本明細書中に援用されるＳｕｌｆｏ−ＥＭＣＳ  Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｉｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｓ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ−Ｐｉｅｒｃｅ）を参照されたい。
１．１．  ＢｕｐＨホウ酸緩衝剤：製造業者の使用説明書に従って、２パックのＢｕｐＨホウ酸緩衝剤粉末を１ＬのＤＩ  Ｈ２Ｏに添加した。
１．２．  １４６ｍｇのＥＤＴＡを５００ｍＬのＢｕｐＨホウ酸緩衝剤中に溶解させることによって共役緩衝剤のＢｕｐＨホウ酸緩衝剤／５ｍＭのＥＤＴＡを調製した。
１．３．  Ｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳの添加ステップを実施する直前に、室温まで温めたＳｕｌｆｏ−ＥＭＣＳを再構成させた。５０ｍｇのＳｕｌｆｏ−ＥＭＣＳは、製造業者の使用説明書に従って、１００×ストックのために１．２２ｍＬのＢｕｐＨホウ酸緩衝剤／ＥＤＴＡ中で再構成させた。
１．４．  製造業者の使用説明書に従って、捕獲ペプチドを再構成させた。１０ｍＭの作用溶液を調製した。
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１．５．  バイアルにより吸収されるタンパク質およびペプチドの量を最小限にするために、ガラスシンチレーションバイアル中でサンプル調製ステップを実施した。
１．６．  概説．実験は以下のように進行した（約２．５時間）：反応混合物１→洗浄→反応混合物２→洗浄→４℃で使用または貯蔵
１．７．
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１．８．  反応混合物１：１００×Ｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳの調製。この反応はＳｕｌｆｏ−ＥＭＣＳを変性キトサン基材に結合する。
１．８．１  Ｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳの調製。１．２２ｍＬのＢｕｐＨホウ酸緩衝剤／ＥＤＴＡをＳｕｌｆｏ−ＥＭＣＳの５０ｍｇのバイアルに添加してから、十分に振とうさせ、約１０秒間ボルテックスさせた。次に、約２分間溶解させ、再構成の１５分以内に使用した。
１．８．２  実施例１からのキトサンクーポンを反応混合物の各バイアルに移した。負の対照はＳｕｌｆｏ−ＥＭＣＳまたはペプチドを有さず、反応においてこれらの試薬の代わりにＢｕｐＨホウ酸緩衝剤／ＥＤＴＡを用いた。
１．８．３  ガラス棒を用いて、シラン化キトサンクーポンを押し付けて、発泡体表面との均一な反応性を保証した。
１．８．４  反応１の混合物を室温で３０分間振とう器に入れた。
１．９．  Ｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳが共役されたらすぐに、クーポンをＢｕｐＨホウ酸緩衝剤中で洗浄した。ガラス棒を用いて、気泡をクーポンから搾り出し、全ての過剰なＳｕｌｆｏ−ＥＭＣＳが除去されることを保証する。
１．１０．  反応混合物２の調製：ペプチド反応。
１．１０．１  ＥＭＣＳ結合発泡体を捕獲ペプチド（Ｐ２２、市販の抗ＧＭ−ＣＳＦペプチド）に添加し、ＢｕｐＨホウ酸緩衝剤／ＥＤＴＡミックスを各反応バイアル中に添加した
１．１０．２  ガラス棒を用いて発泡体クーポンを押し付け、発泡体表面との均一な反応性を保証した。
１．１０．３  反応混合物２を室温で３０分間振とう器上に置いた。Ｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳ架橋剤へのこの共役捕獲ペプチドを発泡体に付着させた。
１．１１．  次に、クーポンをＢｕｐＨホウ酸緩衝剤中で洗浄して、過剰のペプチドを除去した。再度、清浄なガラス棒を使用して気泡を除去し、均一な洗浄を保証した。
１．１２．  増殖因子結合のために直ちにクーポンを使用するか、あるいは湿ったクーポンをフタの付いたバイアルに移し、使える状態になるまで７〜１０日を超えずに４℃で貯蔵する。
１．１３．  ３３３ｎｇ／ｍＬの顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）ＧＭ−ＣＳＦをサンプルと共に２４時間インキュベートした。非結合タンパク質を洗い流してから、サンプルをイミダゾールベースの緩衝剤Ｅ１で溶出させた後、ＰＢＳにより緩衝剤交換を行い、ＥＬＩＳＡにより定量化した。結果は、Ｐ−２２を有する正のサンプルは２９９ｐｇ／ｍＬのＧＭ−ＣＳＦを捕獲したが、負のサンプルは１２４ｐｇ／ｍＬを結合したことを示す。図８を参照されたい。
【０１８７】
実施例３  −  Ｐ２２変性連続気泡型網状ポリマーおよびＣＭ−ＣＳＦの捕獲
この研究では、上記の実施例で説明したキトサン基材の代わりにＲＯＣＦを用いた。ＯＰＡの代わりにＤｙＬｉｇｈｔ  Ｆｌｕｏｒ  Ｔｅｘａｓ  Ｒｅｄ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｐ／Ｎ４６４１２）を使用した。これもＮＨ２反応性染料であるが、異なる波長で蛍光を発する。
【０１８８】
Ｇｅｌｅｓｔ化合物ＳＩＡ０６０２．０の代わりにＧｅｌｅｓｔ化合物６３０を使用した。化合物６３０はより短いアルカン鎖を有し、プロピル基を持たないが、同じ基本機能を実行する。
【０１８９】
ＲＯＣＦに結合した−Ｓｉｌの蛍光分析。ＲＯＣＦに結合したシリルまたは置換シリル基の量を決定するために、ＮＨ２−反応性フルオロフォアのＴｅｘａｓ  Ｒｅｄ蛍光染料を視覚化および定量化のために６３０リンカーに共役させた。６３０のヘテロ二官能性は、一端にあるそのＳｉ原子が発泡体の−ＯＨ基に結合することを可能にし、他端は、ＮＨ２反応性化学を容易にする−ＮＨ２基を提供する。６３０がＲＯＣＦに付着されたら、Ｔｅｘａｓ  ＲｅｄによるインキュベーションでＲＯＣＦ上の架橋剤の存在を同定した。蛍光分析は、シリルまたは置換シリル基化合物６３０がＲＯＣＦの付着の成功を示した（図９Ａおよび９Ｂ）。試験群の蛍光定量は５８４／６３０のＥｘ／Ｅｍで約４２，０００ＲＦＵを示したが、負の対照であるシリルまたは置換シリル基を持たないＲＯＣＦは、バックグラウンドレベルのＲＯＣＦ／染料の相互作用により全部で２，５８６．５ＲＦＵを生じた（図６）。従って、−Ｓｉｌの共役は蛍光の約１６倍の増大を生じ、これは、発泡体に付着した−Ｓｉｌリンカーの数に相当する。ＰＢＳ、およびＰＢＳ中のＲＯＣＦも分析して、これらの材料の自己蛍光がＲＦＵ示度を歪曲しないであろうことを保証した。データは平均±標準偏差で与えられる。
【０１９０】
−Ｓｉｌ結合があれば、「捕獲ペプチド」は次にアミノ−官能化ＲＯＣＦに共役される。そうするために、実施例２で開発したＳｕｌｆｏ−ＥＭＣＳ化学を用いて、市販のＧＭ−ＣＳＦアンタゴニスト捕獲ペプチドＰ２２をＲＯＣＦに共役させた。Ｐ２２−リンカー−発泡体構築物をＧＭ−ＣＳＦと共にインキュベートし、厳密に洗浄し、溶出させた。溶出したＧＭ−ＣＳＦをＥＬＩＳＡにより定量した（図１１）。最も多いＰ２２を有するサンプルＳ３は、ＲＯＣＦ単独よりも４９％多いＧＭ−ＣＳＦを捕獲した。ＲＯＣＦ／Ｐ２２により捕獲されたＧＭ−ＣＳＦの全量６０８ｐｇ／ｍＬは、負の対照のＲＯＣＦ単独に非特異的に結合されたＧＭ−ＣＳＦの量３７６ｐｇ／ｍＬよりも多かった。サンプルＳ１〜Ｓ３は全てＰ２２−リンカー−発泡体からなり、Ｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳ濃度がＳ１からＳ３に向かって増大した。
【０１９１】
Ｐ２２／Ｇ−ＣＳＦ実験の溶出結果：Ｐ２２は、Ｂａｃｈｅｍ  Ａｍｅｒｉｃａｓ  Ｉｎｃ．２０１０ペプチドカタログから入手した。Ｐ２２は、ＧＭ−ＣＳＦを抑制する形で結合するＧＭ−ＣＳＦアンタゴニストである。簡単に言うと、Ｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳ化学によって３３０ｎｍｏｌのＰ２２をＲＯＣＦに共役させた。Ｐ２２−リンカー−発泡体構築物を１μｇのＧＭ−ＣＳＦと共に一晩インキュベートし、５回洗浄し、厳密な溶出を受けさせた。溶出に先行する洗浄は、非特異的に結合したタンパク質が無視できるレベル（１００ｐｇ／ｍＬ未満）まで低減されることを示した。溶出の際、最も多い捕獲ペプチドを有するサンプルＳ３は、ＲＯＣＦ単独よりも４９％優れていた。ＲＯＣＦ／Ｐ２２に結合したＧＭ−ＣＳＦの全量６０８ｐｇ／ｍＬは、非特異的に負の対照Ｃ１に結合したＧＭ−ＣＳＦの量３７６ｐｇ／ｍＬよりも多かった。サンプルＳ１〜Ｓ３は全てペプチド−リンカー−発泡体からなり、Ｓｕｌｆｏ−ＥＭＣＳ濃度がＳ１からＳ３に向かって増大した。ペプチドをポリウレタンに共有結合させるための技術はまだ証明されていないので、この実験に利用可能な正の対照は存在しなかった。しかしながら、正の対照は、実験結果に基づいて次の実験のために後で開発された。データは、平均±標準誤差で与えられる。
【０１９２】
実施例４  −  Ｐ１６変性ポリマーおよびＶＥＧＦの捕獲
抗ＶＥＧＦペプチドのＰ１６は新規に設計した。設計は、ＶＥＧＦ二量体の二量体Ｘ線結晶学的構造に基づいた。真の生物学的設計におけるアミノ酸残基は変性されて、結合親和性を増強または低減することができる。
【０１９３】
Ｐ１６を新規に設計した。Ｐ１６はＶＥＧＦ二量体のＸ線結晶学的構造に基づき、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄａｔａ  Ｂａｎｋに受入番号１ｖｐｆとして登録された。Ｐ１６ペプチド設計は、２つのＶＥＧＦホモダイマー間で生じる二量体化の天然現象を模倣する。
【０１９４】
Ｐ１６は、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄａｔａ  Ｂａｎｋ構造１ｖｐｆにおける鎖Ｃの二量体界面を模倣する１１ａａ配列からなる。Ｐ１６配列は、大部分は疎水性残基からなり、少しの荷電残基が全体に散在している。唯一の置換はａａ１において生じ、プロリンからの立体的な妨害を最小限にするために、プロリンをグリシンで置換した。
【０１９５】
さらなる実験は、Ｐ１６がタンパク質標的ＶＥＧＦを捕獲することを実証する。Ｐ１６／ＶＥＧＦ実験から得られるＥＬＩＳＡ結果は、Ｐ１６がそのタンパク質標的ＶＥＧＦを捕獲することを示した（図１４）。Ｐ１６をＲＯＣＦに共役し、ＶＥＧＦと共にインキュベートし、厳密に洗浄してから、有機溶媒で溶出させた。この実験では、試験群（Ｐ１６−リンカー−発泡体）は５８４ｐｇ／ｍＬを結合し、最高の負の対照は、３２１ｐｇ／ｍＬを結合した。非特異的な結合は、ＲＯＣＦおよび標的タンパク質ＶＥＧＦの両方の疎水性の性質により期待される。しかしながら、これらのデータは、構造ベースのペプチド設計が、ＲＯＣＦの非特異的な疎水特性を超えて、標的特異性のタンパク質捕獲を増強したことを示す。
【０１９６】
実施例３および４において要約された結果は、−Ｓｉｌ基がＲＯＣＦにうまく共役されたことを示す。正の試験群の蛍光定量は、５８４／６３０のＥｘ／Ｅｍで約２１，７０２．５ＲＦＵを示したが、負の対照である−Ｓｉｌを持たないＲＯＣＦは、バックグラウンドレベルのＲＯＣＦ／染料の相互作用により全部で２，５８６．５ＲＦＵを生じた。Ｐ１６およびＰ２２は、ＲＯＣＦ基材上に付着されたリンカーにうまく共役された。最後に、その標的タンパク質を捕獲するＰ１６およびＰ２２の有効性を定量することが可能であった。Ｐ１６の場合、溶出データは、ことを示す。正のサンプルが最高の負の対照のシラン化ＲＯＣＦよりも８２％多いＶＥＧＦを結合する。正のサンプルは５８４ｐｇ／ｍＬを結合したが、負のサンプルは３２１ｐｇ／ｍＬを結合した。Ｐ２２については、最も多い捕獲ペプチドを有するサンプルは、ＲＯＣＦ単独よりも４９％優れていた。ＲＯＣＦ／Ｐ２２に結合したＧＭ−ＣＳＦの全量６０８ｐｇ／ｍＬは、負の対照に非特異的に結合されたＧＭ−ＣＳＦの量３７６ｐｇ／ｍＬよりも多い。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９Ａ）】
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【図９Ｂ）】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【国際調査報告】
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