(57)【要約】  式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容される塩、溶媒和物または水和物。式中、Ｙ、Ｚ、Ｒ３、Ｕ、Ｒ４、ｍおよびｎは、特許請求の範囲で定義した通りである。2014514246.tif 000102
2014514246.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容される塩、溶媒和物もしくは水和物。
【化１】
2014514246.tif 000094
（Ｙは、−Ｎ（Ｒ１Ａ）−、または、−Ｃ（Ｒ１Ｂ）（Ｒ２）−であり；ならびに
Ｒ１Ａは、−Ｘ−Ｒ５であり、およびＲ１Ｂは、−Ｑ−Ｒ５であり；
Ｘは各々独立に、直接結合、−Ｃ（Ｏ）−、−（ＣＨＲ６）ｐ−、−Ｎ（Ｒ６）−、もしくは、どちらの向きでもよい、−（ＣＨ２ＣＨＲ６）−、から選択され；
Ｑは各々独立に、直接結合、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ６）−、−Ｃ（Ｏ）−、Ｃ（Ｈ）（ＯＨ）−、−（ＣＨＲ６）ｐ−、もしくは、どちらの向きでもよい、−（ＣＨ２ＣＨＲ６）−、から選択され；
ｐが１もしくは２であり；
Ｕ＝ＯもしくはＳであり、
Ｒ５は、所望により、第２の芳香族もしくは非芳香族単環炭素環もしくは複素環に縮合して５−５、５−６、６−５または６−６の２環系を形成してもよい、５もしくは６個の環原子を有する単環芳香族もしくは非芳香族炭素環または複素環であって、単環系または２環系が、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、ＣＦ３、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルコキシおよび−ＮＲ７ＡＲ７Ｂから独立して選択される１個以上の置換基によって所望により置換されていてもよく、ここで
Ｒ７Ａ、Ｒ７Ｂは各々独立に、水素およびＣ１−４−アルキル、から選択され、ここでいずれのアルキル残基も、フッ素、ヒドロキシルおよびＣ１−４−アルコキシから独立して選択される１個以上の置換基によって所望により置換されていてもよく、
または
Ｒ７ＡおよびＲ７Ｂは、これらが結合されている窒素原子と共に、フッ素、ヒドロキシル、Ｃ１−４−アルキル、フルオロ−Ｃ１−４−アルキルおよびＣ１−４−アルコキシ、から独立して選択される１個以上の置換基によって所望により置換されていてもよい、４から７員飽和複素環を形成し；
Ｒ２はＨであり、
ＺはＮであり、ＺおよびＹを含む環は所望により置換されていてもよく、
ｎ＝０、１もしくは２、およびｍ＝０もしくは１、ただしｎ＝２の場合にｍ＝０という条件であり、ただしＺおよびＹがそれぞれＮである場合にｍもｎも０でないという条件であり、ならびに
Ｒ３およびＲ６は各々独立に、Ｈ、Ｃ１−４アルキルまたはシクロプロピルから選択され、Ｃ１−４アルキルまたはシクロプロピルのそれぞれは、フルオロおよびＣ１−４アルコキシから独立して選択される１個以上の置換基によって所望により置換されていてもよく；
Ｒ４が
（ｉ）いずれかの環が所望により置換されていてもよい、＊を付けた結合がＣＨ２に結合されている、以下から選択される６−５の２環系、または
【化２】
2014514246.tif 000095
（ｉｉ）いずれかの環が所望により置換されていてもよい、＊を付けた結合がＣＨ２に結合されている下記５−６の２環系、または
【化３】
2014514246.tif 000096
（ｉｉｉ）式、
−（Ｗ）ｖ（ＣＨ２）ｔＢ
で表されるラジカル、
（ここでＷは、所望により置換されていてもよいフェニル環またはピリジル環であり、ｖは０または１であり、およびｔは０または３であり、ただしｖ＝０の場合、ｔ＝３、およびｖ＝１の場合、ｔ＝０という条件であり；ならびに
Ｂは以下から選択され：
【化４】
2014514246.tif 000097
ここでＲ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は各々独立に、Ｈ、Ｃ１−４アルキルもしくはシクロプロピルから選択され、Ｃ１−４アルキルまたはシクロプロピルはそれぞれ、フルオロおよびＣ１−４アルコキシから独立して選択される１個以上の置換基によって所望により置換されていてもよく；または
Ｒ７およびＲ８は、それらが結合している窒素原子と共にアジリジン、アゼチジンおよびピロリジンより選択される３−５員複素環を形成し、そのそれぞれは、フルオロおよびＣ１−４アルコキシから独立して選択される１個以上の置換基によって所望により置換されていてもよい。）
【請求項２】
Ｒ７およびＲ８は各々独立に、Ｈ、Ｃ１−４アルキルまたはシクロプロピルから選択され、Ｃ１−４アルキルまたはシクロプロピルはそれぞれ、フルオロおよびＣ１−Ｃ４アルコキシから独立して選択される１個以上の置換基によって所望により置換されていてもよい、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ＺおよびＹを含む前記環が以下から選択され、＊を付けた結合が、カルボニル基の炭素に結合している、請求項１または請求項２に記載の化合物。
【化５】
2014514246.tif 000098
【請求項４】
ＺおよびＹを含む前記環が、フルオロ、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルコキシ、フルオロ−Ｃ１−４−アルキルおよびフルオロ−Ｃ１−４−アルコキシから独立して選択される１個以上の置換基によって所望により置換されていてもよい、先行するいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
前記ラジカル、−（Ｗ）ｖ（ＣＨ２）ｔＢ、が以下から選択され、そのいずれも所望により置換されていてもよく、＊を付けた結合がＣＨ２に結合している、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物。
【化６】
2014514246.tif 000099
【請求項６】
Ｒ４が以下から選択され、そのいずれも所望により置換されていてもよく、＊を付けた結合がＣＨ２に結合している、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物。
【化７】
2014514246.tif 000100
【請求項７】
Ｒ１０が水素である、先行するいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｗが所望により置換されていてもよいフェニル環である、先行するいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ４置換基が１つ以上のフルオロ置換基によって所望により置換されていてもよい、先行するいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ３がＨである、先行するいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ６がＨまたはメチルである、先行するいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ９がＨまたはメチルである、先行するいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ５が以下から選択され、＊を付けた結合がＲ５を分子の残りに結合して、そのそれぞれが請求項１で定義した所望の置換基によって場合により置換されていてもよい、先行するいずれか一項に記載の化合物。
【化８】
2014514246.tif 000101
【請求項１４】
Ｕ＝Ｏである、先行するいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｘは、−Ｃ（Ｏ）−、−（ＣＨＲ６）ｐ−、−Ｎ（Ｒ６）−、またはどちらの向きでもよい、−（ＣＨ２ＣＨＲ６）−、から独立して選択される、先行するいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｑは、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ６）−、−Ｃ（Ｏ）−、Ｃ（Ｈ）（ＯＨ）−、−（ＣＨＲ６）ｐ−、またはどちらの向きでもよい、−（ＣＨ２ＣＨＲ６）−、から独立して選択される、請求項１から１５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｘは、−Ｃ（Ｏ）−、−（ＣＨＲ６）ｐ−または−Ｎ（Ｒ６）、から独立して選択される、請求項１から１５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｑは、−Ｏ−、−Ｎ（Ｒ６）−、−Ｃ（Ｏ）−、Ｃ（Ｈ）（ＯＨ）−、−（ＣＨＲ６）ｐ−、から独立して選択される、請求項１から１５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１９】
（４−｛［（４−ベンジルピペリジン−１−イル）カルボニルアミノ］メチル｝フェニル）メタンアミニウムクロリド；
２，２，２−トリフルオロ酢酸；Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−［（４−メトキシフェニル）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミド；
２，２，２−トリフルオロ酢酸；Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−［（３−フルオロフェニル）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミド；
Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−［（４−フルオロフェニル）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミドヒドロクロライド；
２，２，２−トリフルオロ酢酸；Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−［（４−クロロフェニル）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミド；
２，２，２−トリフルオロ酢酸；Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−［（４−メチルフェニル）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミド
Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−（ピリジン−２−イルメチル）ピペリジン−１−カルボキサミド；
Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−（ピリジン−４−イルメチル）ピペリジン−１−カルボキサミド；
Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−（４−フルオロフェノキシ）ピペリジン−１−カルボキサミド；
Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−（フェニルスルファニル）ピペリジン−１−カルボキサミドヒドロクロライド；
Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−［（２−クロロフェニル）アミノ］ピペリジン−１−カルボキサミドジヒドロクロライド；
２，２，２−トリフルオロ酢酸；Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−［（４−フルオロフェニル）カルボニル］ピペリジン−１−カルボキサミド；
Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−［（４−フルオロフェニル）（ヒドロキシ）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミド；
Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−１−［（３−フルオロフェニル）メチル］ピペリジン−４−カルボキサミド；
Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−ベンジルピペラジン−１−カルボキサミド；
Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−［（２−クロロフェニル）メチル］ピペラジン−１−カルボキサミドジヒドロクロライド；
Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−（１，３−ベンゾオキサゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキサミド；
Ｎ−｛［４−（アミノメチル）−３−フルオロフェニル］メチル｝−４−ベンジルピペリジン−１−カルボキサミド；
４−ベンジル−Ｎ−［（４−カルバムイミドイルフェニル）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミド；
２，２，２−トリフルオロ酢酸；４−ベンジル−Ｎ−｛［４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルカルバムイミドイル）フェニル］メチル｝ピペリジン−１−カルボキサミド；
Ｎ−［（４−カルバムイミドイルフェニル）メチル］−４−（ピリジン−４−イルメチル）ピペリジン−１−カルボキサミド；
Ｎ−（１Ｈ−１，３−ベンゾジアゾール−６−イルメチル）−４−ベンジルピペリジン−１−カルボキサミド；
２，２，２−トリフルオロ酢酸；Ｎ−（１Ｈ−１，３−ベンゾジアゾール−５−イルメチル）−３−フェニルピロリジン−１−カルボキサミド；
２，２，２−トリフルオロ酢酸；Ｎ−（１Ｈ−１，３−ベンゾジアゾール−５−イルメチル）−３−ベンジルピロリジン−１−カルボキサミド；
Ｎ−［（２−アミノ−１Ｈ−１，３−ベンゾジアゾール−６−イル）メチル］−４−ベンジルピペリジン−１−カルボキサミド；
２，２，２−トリフルオロ酢酸；４−ベンジル−Ｎ−［（４−カルバムイミドアミドフェニル）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミド；
４−ベンジル−Ｎ−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イソインドール−５−イルメチル）ピペリジン−１−カルボキサミド、から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項２０】
先行するいずれか一項に記載の化合物を、医薬的に許容される担体と共に含む、医薬組成物。
【請求項２１】
ＰＡＲ２介在活性に応答する疾患もしくは状態の処置のための組成物の調製における、請求項１から１９のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物の使用。
【請求項２２】
エクスビボまたはインビボでのＰＡＲ２介在活性の低下のための、請求項２１に記載の使用。
【請求項２３】
前記疾患または状態が炎症、腸炎症、乾癬および掻痒を含む炎症性皮膚疾患、線維症、関節炎、疼痛、癌ならびに膵炎から選択される、請求項２１に記載の使用。
【請求項２４】
ＰＡＲ２介在活性の低下に応答する疾患または状態を処置するための方法であって、このような疾患に罹患している対象に請求項１から１９のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物の有効量を投与することを含む、方法。
【請求項２５】
炎症、腸炎症、乾癬および掻痒を含む炎症性皮膚疾患、線維症、関節炎、疼痛、癌ならびに膵炎の処置のための、請求項２４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特にＰＡＲ２受容体の拮抗作用に応答する状態、例えば炎症、腸炎症、乾癬および掻痒を含む炎症性皮膚疾患、線維症、関節炎、疼痛、癌および膵炎の処置のための、ＰＡＲ２受容体拮抗薬である化合物に、それを含有する組成物に、その調製のための工程に、および医薬品におけるその使用に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
プロテアーゼ活性化受容体（ＰＡＲ）は、タンパク質分解酵素によるその細胞外Ｎ末端ドメインの切断によって活性化される、７回膜貫通ドメインＧタンパク質共役受容体の一群である。新たに露出したＮ末端配列は、受容体の細胞外の面に結合して、それを活性化するテザーリガンドとして作用する。異なる酵素によって選択的に切断される４つのＰＡＲが説明されている；ＰＡＲ１、ＰＡＲ３およびＰＡＲ４はトロンビンによって、ＰＡＲ２およびＰＡＲ４は主にトリプシンおよびトリプターゼによって切断され、ＰＡＲ４はカテプシンＧによっても切断される。
【０００３】
胃腸管におけるＰＡＲ−２
胃腸管および膵臓は特に、ＰＡＲ２受容体を活性化することができる多数のプロテアーゼに露出されている。トリプシンは、生理学的消化を目的として、膵管内腔および上部胃腸管の中に放出される。胃腸管内に豊富な他のプロテアーゼとしては、腸内細菌に由来するプロテアーゼおよび疾患過程の間に産生されたプロテアーゼが挙げられる。粘膜表面では、タンパク質分解活性と、プロテアーゼインヒビタ、例えば膵分泌性トリプシンインヒビタ（ＰＳＴＩ）との間のバランスが常に存在する。
【０００４】
ＰＡＲ２受容体は胃腸管全域にわたって、特異的にはマスト細胞、平滑筋細胞、腸管筋ニューロンおよび平滑筋細胞にて、ならびに腸細胞の頂端側および基底外側の両方にて発現される（Ｋｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７）。胃腸内腔に存在するトリプシンは、頂端表面のＰＡＲ２を活性化することができるため、この受容体は、上皮が内腔過程を「感知する」手段を提供することもある。
【０００５】
腸において、運動性および分泌は、胃腸管の粘膜下および筋層間神経叢のニューロンによって調節される。これらのニューロンは、ＰＡＲ１、ＰＡＲ２およびＰＡＲ４を発現する。ＰＡＲ２は、小腸の粘膜下神経叢の分泌促進性ニューロンによって発現され、小腸の粘膜下神経叢では、ＳＬＩＧＲＬ−ＮＨ２またはトリプシンなどの作動薬によるＰＡＲ２の短時間の活性化によって、興奮性の上昇を伴うことが多い長期の脱分極が生じる。トリプターゼは、ニューロン興奮性の一過性脱分極および持続的向上も誘発する（Ｌｉｎｄｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００１）。このような所見により、ＰＡＲ２によって腸管筋ニューロンの一部が興奮して、これが腸炎症の運動障害の原因となり得ることが示されている。
【０００６】
最近の報告により、胃腸上皮細胞中のＰＡＲ２の活性化によって、２つの独立した経路であるＭＥＫ／ＥＲＫおよびＰＩ３Ｋ／Ａｋｔを介したＩＬ−８の放出を含む炎症誘発性シグナル伝達を誘発できることが結論付けられた。このためＰＡＲ２は、胃腸管の炎症性疾患を処置するための治療標的であることが確認された（Ｔａｎａｋａ  ｅｔ  ａｌ．，２００８）。クローン病患者からの線維化腸（ｆｉｂｒｏｔｉｃ  ｉｎｔｅｓｔｉｎｅ）の組織学的研究によって、（筋）線維芽細胞は数が増加し、腸壁のすべての層における線維症部位の主要な細胞タイプであることが指摘された（Ｐｕｃｉｌｏｗｓｋａ  ｅｔ  ａｌ．，２０００）。クローン病患者からの炎症組織の最近の分析によって、線維芽細胞を含めて、分析されたすべての細胞タイプにおけるＰＡＲ２の過剰発現が示された（Ｋｅｔａｂｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００７）。これらの結果は、肺および腎臓の線維症の間にＰＡＲ２の過剰発現を示す所見と一致している（Ｃｅｄｅｒｑｖｉｓｔ  ｅｔ  ａｌ．，２００５；Ｇｒａｎｄａｌｉａｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００３）。これらの研究では、ＰＡＲ２は、線維症の病因および持続可能性について、潜在的に重大な受容体として同定された。この仮説は、損傷後に組織再生を生じるプロテアーゼ第Ｘ因子によるＰＡＲ２の通常の活性化を、慢性炎症性腸疾患（ＩＢＤ、Ｂｏｒｅｎｓｚｔａｊｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００８）の結果としてこの系の反復刺激後に見られる線維性反応と関連づける報告によって最近立証された。
【０００７】
結論として、ＰＡＲ２活性化は、腸炎症および線維症の確立、維持および進行において重要である。
【０００８】
乾癬およびアトピー性皮膚炎と関連づけられる掻痒
ヒトの皮膚の掻痒は、ヒスタミンとプロテアーゼの両方によって誘発される可能性がある。ＰＡＲ２作動薬であるＳＬＩＧＲＬ−ＮＨ２がマウスにおいて引っかき挙動を引き起こす能力は、抗ヒスタミン処置によって拮抗されなかった（Ｓｈｉｍａｄａ  ｅｔ  ａｌ．，２００６）。著者らは、ＰＡＲ２が掻痒のヒスタミン非依存性メディエータであると結論付けた。このような解釈は、掻痒感を変換する感覚神経線維の末端上の受容体の同定によって補強された（Ｓｔｅｉｎｈｏｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，２０００）。皮膚などの非胃腸組織では、トリプターゼ、第Ｘ因子、第ＶＩＩａ因子および組織因子を含む他のプロテアーゼが可能であるように、ＰＡＲ２受容体を活性化することができる「組織トリプシン」が分泌される（Ｂｕｎｎｅｔｔ，２００６）。アトピー性皮膚炎患者において、ＰＡＲ−２は、掻痒の主因としても強く関連づけられてきた（Ｓｔｅｉｎｈｏｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，２００３）。
【０００９】
乾癬は、赤いうろこ状の皮膚の斑（「プラーク」）として通例発症する、よくある皮膚状態である。乾癬の人々は、局所的な炎症を引き起こす皮膚の血液供給の変化（赤み）に関連する皮膚細胞のより高速なターンオーバーを有する。乾癬は、感染症によるものではなく、感染性ではなく、癌性でもない。
【００１０】
乾癬における掻痒は、皮膚科学において重大であるが認識されないことが多い問題である。最近の研究では、かゆみが乾癬の入院患者の間で最も多い（６４％）愁訴であることが見出され（Ｓａｍｐｏｇｎａ  ｅｔ  ａｌ．，２００４）、他の複数の研究によって、掻痒が乾癬の主要な症状であることが確認されている（Ｖａｎ  ｄｅ  Ｋｅｒｋｈｏｆ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，２０００）。興味深いことに、ＰＡＲ２受容体は、多くのトリプターゼ陽性細胞がそうであるように、乾癬患者の皮膚で高度に発現される（Ｓｔｅｉｎｈｏｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９）。ＰＡＲ２受容体は、アトピー性皮膚炎や乾癬において真皮内におよび真皮と表皮の境界に、場合によっては乾癬病巣の表皮に見出される。このような細胞から放出されたトリプターゼはケラチノサイトにおいてＰＡＲ２を活性化し、ケラチノサイトは局所的な炎症の変化を誘発して、これによりアトピー性皮膚炎および乾癬の病態生理の原因となる場合がある。
【００１１】
さらに、ニューロパシー性掻痒などの他のタイプの掻痒がプロテアーゼによるＰＡＲ２受容体の活性化に関連づけらるという仮説が立てられている（Ｂｉｎｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００８）。
【００１２】
上記の理由で、ＰＡＲ２拮抗薬が乾癬および掻痒を含む炎症性皮膚疾患の処置に有効となることが期待される。とりわけ、ＰＡＲ２拮抗薬の局所または全身投与が乾癬の局所的な炎症によって引き起こされる掻痒を低減して、したがって乾癬のこのような対処されていない症状の標的処置となるであろうことが期待される。ＰＡＲ２拮抗薬が炎症によるまたは関節周囲の関節炎の処置に有効であろうことも期待されている。
【００１３】
疼痛
疼痛および／または不快感の伝達もＰＡＲ２受容体の活性化によって増大されるのは、活性化ペプチドの適用によってＣ線維が興奮されて、熱に対するＣ線維の感度を高めるためである（Ｄｉｎｇ−Ｐｆｅｎｎｉｇｄｏｒｆ  ｅｔ  ａｌ．，２００４）。
【００１４】
癌
ＰＡＲ−２は、細胞増殖、浸潤および転移に関連づけられてきた。ＰＡＲ２は腫瘍進行の重要なメディエータであり、トリプシンレベルが胃、結腸、卵巣および肺の腫瘍で上昇するという証拠が強まっている（Ｄｕｃｒｏｃ  ｅｔ  ａｌ．，２００２）。加えて、ＰＡＲ−２は肺癌、肝臓癌、前立腺癌、甲状腺癌、乳癌、胃（ｇａｓｔｒｉｕｍ）癌、結腸癌、膵臓癌、膀胱癌、黒色腫および神経膠芽腫において発現される（Ｊａｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００７およびその中の参考文献を参照のこと。）。
【００１５】
組織因子（ＴＦ）は、凝固カスケードの主要な構成要素であり、第ＶＩＩａ因子または第Ｘａ因子はこれを用いて凝固を開始することができる。癌患者は、明らかに一部はＴＦ含有微粒子（アポトーシスの際におそらく放出される小型膜様断片（ｓｍａｌｌ  ｍｅｍｂｒａｎｏｕｓ  ｆｒａｇｍｅｎｔｓ））の放出のために、血栓形成促進性状況にあることが多い。ＴＦは血管壁線維芽細胞中で高いレベルで発現されるが、内皮細胞および平滑筋細胞上でも発現されることがある（Ｋａｓｔｈｕｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００９）。ＴＦは癌にも著しく関与して、ＴＦの発現は一般に癌の病期と共に増加し（Ｋａｋｋａｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５；Ｋａｓｔｈｕｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００９）、転移に関与していると考えられる（Ｂｅｌｔｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００５）。実際にＴＦは、ＮＫ細胞からＴＦを保護して、脈管構造中でＴＦを維持するように作用する線維素性血塊を転移性細胞付近で形成する役割を果たすことがある（Ｐａｌｕｍｂｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，２００７）。
【００１６】
ＴＦ／第ＶＩＩａ因子／第Ｘａ因子複合体は、ＰＡＲ２の活性化を通じて乳癌腫の細胞遊走および浸潤を刺激する（Ｈｊｏｒｔｏｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００４；Ｍｏｒｒｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００６）。加えて、結腸および胃癌腫を含む他の癌において、活性化されたＰＡＲはＥＧＦＲ活性を、このため細胞増殖を刺激する（Ｃａｒｕｓｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００６）；Ｄａｒｍｏｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，２００４）。実際に、卵巣癌において、腫瘍タイプの組織病理学的分類とは関係なく、ＰＡＲ−２の増加が癌の進行と共に見られ、癌細胞ＰＡＲ−２の高度の発現が著しい予後不良に関連していた（Ｊａｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００７）。同様に、高レベルのＰＡＲ−２を伴う子宮癌のリンパ節転移がある患者は、低レベルの患者よりも予後が著しく不良であった（Ｊａｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００８）。ＰＡＲ−２は、乳癌、結腸癌、胃（ｇａｓｔｒｉｕｍ）癌、膵臓癌、肺癌、前立腺癌、黒色腫および神経膠芽腫における腫瘍血管新生にも関連づけられてきた（Ｊａｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００７を参照のこと。）。
【００１７】
膵炎
膵炎は、膵臓における望ましくないトリプシン活性の結果であると理解される炎症性状態である。膵臓におけるトリプシンの生物学的効果は、腺房細胞および導管細胞の内腔表面上で強く発現されるＰＡＲ２を通じて作用することが示されてきた（Ｃｅｐｐａ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１；Ｌａｕｋｋａｒｉｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００８）。膵臓中のＰＡＲ２におけるトリプシンの効果の拮抗作用は、膵炎の有効な処置であることが期待されている。
【００１８】
炎症
ＰＡＲ２受容体の活性化は、炎症性障害において重要であることが示されてきた。炎症性障害モデルでのインビボ研究に基づいて（Ｋｅｌｓｏ  ｅｔ  ａｌ，ＪＰＥＴ，２００６，３１６，１０１７−１０２４，Ｓｅｖｉｇｎｙ，ＰＮＡＳ，２０１１，１０８，２０，８４９１−８４９６およびＣｅｎａｃ  ｅｔ  ａｌ，ＪＤＲ，２０１０，８９，１０，１１２３−１１２８）、ＰＡＲ２受容体の拮抗作用が炎症性障害の処置において有効であると期待されている。 
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１９】
上記の理由で、ＰＡＲ２受容体は、上で言及した状態の処置における介入の標的と見なされている。治療的処置に好適である、利用可能なＰＡＲ−２の拮抗薬はほとんどない。したがって、療法のための小分子拮抗薬が所望されている。
【課題を解決するための手段】
【００２０】
本発明は、ＰＡＲ２受容体の拮抗薬である一種の化合物、および上で言及したようなＰＡＲ２受容体の拮抗作用に応答する適応症におけるその使用を供するものである。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本発明により、式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容される塩が提供される。
【００２２】
【化１】
2014514246.tif 000003
【００２３】
Ｙは、−Ｎ（Ｒ１Ａ）−または−Ｃ（Ｒ１Ｂ）（Ｒ２）−；であり
Ｒ１Ａは−Ｘ−Ｒ５であり、Ｒ１Ｂは−Ｑ−Ｒ５であり；
Ｘは、直接結合、−Ｃ（Ｏ）−、−（ＣＨＲ６）ｐ−、−Ｎ（Ｒ６）−、もしくは、どちらの向きでもよい、−（ＣＨ２ＣＨＲ６）−、から独立して選択され；
Ｑは、直接結合、−Ｏ−、Ｓ、−Ｎ（Ｒ６）−、−Ｃ（Ｏ）−、Ｃ（Ｈ）（ＯＨ）−、−（ＣＨＲ６）ｐ−、もしくは、どちらの向きでもよい、−（ＣＨ２ＣＨＲ６）−、から独立して選択され；
ｐは１もしくは２であり；
Ｕ＝ＯもしくはＳであり、
Ｒ５は、第２の芳香族もしくは非芳香族単環炭素環もしくは複素環に所望により縮合して５−５、５−６、６−５または６−６の２環系を形成してもよい、５もしくは６個の環原子を有する単環芳香族もしくは非芳香族炭素環または複素環であって、単環系または２環系は、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、ＣＦ３、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルコキシおよび−ＮＲ７ＡＲ７Ｂから独立して選択される１つ以上の置換基によって所望により置換されていてもよく、ここで
Ｒ７Ａ、Ｒ７Ｂは、各々独立に、水素およびＣ１−４−アルキルから選択され、ここでいずれのアルキル残基も、各々独立に、フッ素、ヒドロキシルおよびＣ１−４−アルコキシから選択される１個以上の置換基によって所望により置換されていてもよく、
または
Ｒ７ＡおよびＲ７Ｂは、これらが結合している窒素原子と共に、各々独立に、フッ素、ヒドロキシル、Ｃ１−４−アルキル、フルオロ−Ｃ１−４−アルキルおよびＣ１−４−アルコキシから選択される１個以上の置換基によって所望により置換されていてもよい、４から７員飽和複素環を形成し；
Ｒ２はＨであり、
ＺはＮもしくはＣＨであり、ＺおよびＹを含む環は所望により置換されていてもよく、
ｎ＝０、１もしくは２、およびｍ＝０もしくは１、ただしｎ＝２の場合にｍ＝０という条件であり、ただしＺおよびＹがそれぞれＮである場合には、ｍもｎも０でないという条件であり、ならびに
Ｒ３およびＲ６は、各々独立して、Ｈ、Ｃ１−４アルキルまたはシクロプロピルから選択され、Ｃ１−４アルキルまたはシクロプロピルのそれぞれは、各々独立に、フルオロおよびＣ１−４アルコキシから選択される１つ以上の置換基によって所望により置換されていてもよく；
Ｒ４は
（ｉ）  いずれかの環で所望により置換されていてもよく、＊を付けた結合がＣＨ２に結合されている、下記から選択される６−５の２環系
【００２４】
【化２】
2014514246.tif 000004
【００２５】
または
（ｉｉ）  いずれかの環で所望により置換されていてもよく、＊を付けた結合がＣＨ２に結合されている、下記の５−６の２環系
【００２６】
【化３】
2014514246.tif 000005
【００２７】
または
（ｉｉｉ）  式−（Ｗ）ｖ（ＣＨ２）ｔＢのラジカル
式中、Ｗは、所望により置換されたていてもよいフェニル環またはピリジル環であり、ｖは０または１であり、およびｔは０または３であり、ただしｖ＝０の場合、ｔ＝３、およびｖ＝１の場合、ｔ＝０という条件であり；ならびに
Ｂは下記から選択され
【００２８】
【化４】
2014514246.tif 000006
【００２９】
ここでＲ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、各々独立に、Ｈ、Ｃ１−４アルキルもしくはシクロプロピルから選択され、Ｃ１−４アルキルまたはシクロプロピルのそれぞれは、各々独立に、フルオロおよびＣ１−４アルコキシから選択される１つ以上の置換基によって所望により置換されていてもよく；または
Ｒ７およびＲ８は、それらが結合している窒素原子と共にアジリジン、アゼチジンおよびピロリジンから選択される３−５員複素環を形成し、そのそれぞれは、各々独立に、フルオロおよびＣ１−４アルコキシから選択される１つ以上の置換基によって所望により置換されていてもよい。
【００３０】
上記式（Ｉ）の化合物は、その塩の形、とりわけ医薬的に許容される塩、Ｎ−オキシド、水和物、溶媒和物および多型の形で調製されてもよい。本明細書における化合物に対するいずれの請求、または本明細書における「本発明の化合物」、「本発明が関係する化合物」、「式（Ｉ）の化合物」などの本発明における言及は、このような化合物の塩、Ｎ−オキシド、水和物、溶媒和物および多型を含む；
【００３１】
上記の定義は高い分子量の分子を潜在的に含むが、医薬品化学慣行の一般原理と一致して、本発明が関係する化合物が６００を超えない分子量を有するべきであることが好ましい。
【００３２】
本発明の化合物は、ＰＡＲ２受容体の拮抗薬である。したがって、別の広範な態様において、本発明は、ＰＡＲ２介在活性の低下に応答する疾患もしくは状態の処置における、またはＰＡＲ２介在活性の低下に応答する疾患もしくは状態の処置のための組成物の調製における、本発明の化合物の使用を提供する。
【００３３】
ＰＡＲ２介在活性の低下に応答する疾患または状態の例としては、腸炎症ならびに乾癬および掻痒を含む炎症性皮膚疾患などの炎症、線維症、関節炎、疼痛、ならび乳癌、結腸癌、胃（ｇａｓｔｒｉｕｍ）癌、膵臓癌、肺癌、前立腺癌、黒色腫および神経膠芽腫を含む癌ならびに膵炎を含む。
【００３４】
本発明が関係する化合物は、エクスビボまたはインビボでのＰＡＲ２介在活性の低下に使用してもよい。
【００３５】
本発明の一態様において、本発明の化合物は、腸炎症ならびに乾癬および掻痒を含む炎症性皮膚疾患などの炎症、線維症、関節炎、疼痛、ならび乳癌、結腸癌、胃（ｇａｓｔｒｉｕｍ）癌、膵臓癌、肺癌、前立腺癌、黒色腫および神経膠芽腫を含む癌ならびに膵炎を含む状態の処置のための組成物の調製に使用してもよい。
【００３６】
別の態様において、本発明は、上記の疾患タイプの処置の方法であって、このような疾患に罹患している対象に本発明の化合物の有効量を投与することを含む方法を提供する。
【００３７】
本発明の別の態様において、先行請求項のいずれかに記載の化合物を、１つ以上の医薬的に許容される担体および／または賦形剤と共に含む医薬組成物が提供される。
【００３８】
本発明の化合物を多種多様の投薬形で投与してもよい。このため本発明の化合物は、経口的に例えば錠剤、カプセル剤、トローチ剤、ロゼンジ剤、水性もしくは油性懸濁剤、分散性粉剤または顆粒剤として投与することができる。化合物は、舌下製剤として、例えば頬側製剤として投与できる。本発明の化合物は、非経口的に、皮下的に、静脈内に、筋肉内に、胸骨内に、経皮的に、吸入により、鼻内にまたは輸液技法のいずれで投与してもよい。化合物は、坐剤として投与してもよい。化合物は、局所的に投与してもよい。このため本発明の化合物は、経口的に、または吸入により、または局所的に、または鼻内に投与される。好ましい実施形態において、本発明の化合物は経口的に投与され、さらに好ましくは、本発明の化合物は錠剤またはカプセル剤として投与される。カプセル剤と関連して、硬ゼラチンカプセル形での、または当分野で公知の多くの徐放性製剤の１つでの化合物の投与が好ましいことが多くなる。また好ましい実施形態において、本発明の化合物は、局所処置として投与される。
【００３９】
本発明は、上記で定義した本発明の化合物またはその医薬的に許容される塩、および医薬的に許容される担体を含有する医薬組成物をさらに提供する。
【００４０】
本発明の化合物は通例、医薬的に許容される担体または希釈剤と共に投与するために製剤化される。例えば、固体経口形は活性化合物と共に、希釈剤、例えばラクトース、デキストロース、サッカロース、セルロース、コーンスターチまたはジャガイモデンプン；潤滑剤、例えばシリカ、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウムもしくはカルシウム、および／またはポリエチレングリコール；結合剤；例えばデンプン、アラビアゴム、ゼラチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースまたはポリビニルピロリドン；崩壊剤、例えばデンプン、アルギン酸またはデンプングリコール酸ナトリウム；発泡混合物；染料；甘味料；湿潤剤、例えばレシチン、ポリソルベート、ラウリル硫酸塩；ならびに一般に、医薬製剤で使用される非毒性および薬理学的に不活性な物質を含有してもよい。このような医薬調製物は、公知の方式で、例えば混合、造粒、打錠、糖コーティングまたはフィルムコーティングの工程によって製造してもよい。
【００４１】
経口投与用の液体分散剤は、シロップ剤、乳剤および懸濁剤でもよい。シロップ剤は、担体として、例えばサッカロースを、またはサッカロースと共にグリセリンおよび／もしくはマンニトールおよび／もしくはソルビトールを含有してもよい。懸濁剤および乳剤は、担体として、例えば天然ゴム、寒天、アルギン酸ナトリウム、ペクチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースまたはポリビニルアルコールを含有してもよい。筋肉内注射用の懸濁剤または液剤は、活性化合物と共に、医薬的に許容される担体、例えば滅菌水、オリーブ油、オレイン酸エチル、グリコール、例えばプロピレングリコールおよび所望ならば、好適な量の塩酸リドカインを含有してもよい。
【００４２】
本発明の化合物は好ましくは経口投与されるため、本発明は、カプセル剤または錠剤の形の、上記で定義した本発明の化合物またはその医薬的に許容される塩および医薬的に許容される担体を含有する医薬組成物をさらに提供する。
【００４３】
または、本発明の化合物は好ましくは局所投与される。化合物は、半固体、スプレー、薬用粉剤、液剤および薬用粘着系を含む、局所投与に好適ないずれの形に製剤化してもよい。本発明の化合物は、ひとたび製剤化されれば、罹患部位を覆うために皮膚組織上に塗布、スプレー、またはそうでなければ分散される外用局所薬として投与してもよい。局所薬剤送達は、乾癬、掻痒および疼痛の管理の分野において、とりわけ有効である。
【００４４】
注射または輸液用の液剤は担体として、例えば滅菌水を含有してもよく、またはこれらは、好ましくは滅菌、水性、等張性食塩溶液の形でもよい。
【００４５】
いずれの特定の患者の具体的な用量レベルも、用いられる具体的な化合物の活性、年齢、体重、全般的な健康状態、性別、食事、投与時間、投与経路、排泄速度、薬剤の組合せおよび処置を受けている特定の疾患の重症度を含む多種多様の因子によって変わることが理解されるであろう。最適な用量レベルおよび投薬頻度は、当分野で要求されるように、臨床試験によって決定されるであろう。しかし、通例の用量は体重１ｋｇ当たり約０．００１から５０ｍｇの範囲にあることが予想される。
【００４６】
用語
以下の定義は、別途明示または指摘されない限り、本明細書および添付請求項を通して適用される。
【００４７】
本発明の化合物中に存在する元素が異なる同位体、例えば炭素（Ｃ１３およびＣ１４）、窒素（Ｎ１４およびＮ１５）および水素（Ｈ１およびＨ２、すなわち重水素）として存在する場合、このような化合物は、化合物中に存在する元素の同位体形とは関係なく、本発明の一部を形成する。特に、本発明の化合物がいずれかの位置に水素を有する場合、この水素は重水素によって置換されてもよい。重水素置換によって生物活性分子の代謝安定性を上昇できることが、当分野で公知である。
【００４８】
「Ｃａ−ｂ−アルキル」という用語は、ａおよびｂが整数である場合、ａからｂ個の炭素原子を有する直鎖または分枝アルキル基を意味する。例えば「Ｃ１−４−アルキル」としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソ−ブチル、ｓｅｃ−ブチルおよびｔｅｒｔ−ブチルが挙げられ、「Ｃ１−６−アルキル」としては、上記のならびに直鎖および分枝鎖ペンチルおよびへキシルが挙げられる。
【００４９】
「フルオロ−Ｃａ−ｂ−アルキル」という用語は、ａおよびｂが整数である場合、１個以上のフッ素原子によって置換された直鎖または分枝Ｃａ−ｂ−アルキル基を意味する。例えばフルオロ−Ｃ１−４−アルキルとしては、フルオロメチル、トリフルオロメチル、２−フルオロエチルおよび２，２，２−トリフルオロエチルが挙げられる。
【００５０】
「Ｃａ−ｂ−アルコキシ」という用語は、ａおよびｂが整数である場合、酸素原子を介して分子の残部に結合されている直鎖または分枝Ｃａ−ｂ−アルキル基を指す。例えばＣ１−４−アルコキシとしては、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシおよびｔｅｒｔ−ブトキシが挙げられる。
【００５１】
「フルオロ−Ｃａ−ｂ−アルコキシ」という用語は、ａおよびｂが整数である場合、酸素原子を介して分子の残部に結合されているフルオロ−Ｃａ−ｂ−アルキル基を意味する。例えば「フルオロ−Ｃ１−４−アルコキシ」基としては、トリフルオロメトキシおよび２，２，２−トリフルオロエトキシが挙げられる。
【００５２】
「Ｃａ−ｂ−アルコキシ−Ｃｃ−ｄ−アルキル」という用語は、ａ、ｂ、ｃおよびｄが整数である場合、ｃからｄ個の炭素原子を有する直鎖または分枝アルキル基に連結された、ａからｂ個の炭素原子を有する直鎖または分枝アルコキシ基を意味する。例えば「Ｃ１−４−アルコキシ−Ｃ１−４−アルキル」としては、メトキシメチル、メトキシエチル、エトキシエチル、イソ−プロポキシエチル、ｎ−ブトキシエチルおよびｔｅｒｔ−ブトキシエチルが挙げられる。
【００５３】
「フルオロ−Ｃａ−ｂ−アルコキシ−Ｃｃ−ｄ−アルキル」という用語は、ａ、ｂ、ｃおよびｄが整数である場合、１個以上のフッ素原子によって置換されたＣａ−ｂ−アルコキシ−Ｃｃ−ｄ−アルキル基を意味する。例えば「フルオロ−Ｃ１−４−アルコキシ−Ｃ１−４−アルキル」としては、トリフルオロメトキシメチルおよびトリフルオロメトキシエチルが挙げられる。
【００５４】
「Ｃａ−ｂ−シクロアルキル」は、ａおよびｂが整数である場合、ａからｂ個の炭素原子を有する飽和単環式炭化水素環を意味する。例えば「Ｃ３−５−シクロアルキル」としては、シクロプロピル、シクロブチルおよびシクロペンチルが挙げられる。
【００５５】
「Ｃａ−ｂ−シクロアルキル−Ｃｃ−ｄ−アルキル」という用語は、ａ、ｂ、ｃおよびｄが整数である場合、ｃからｄ個の炭素原子を有する直鎖または分枝アルキル基に連結された、ａからｂ個の炭素原子を有する飽和単環式炭化水素環を意味する。例えば「Ｃ３−５−シクロアルキル−Ｃ１−４−アルキル」としては、シクロプロピルメチルおよびシクロブチルメチルが挙げられる。
【００５６】
本明細書で使用する場合、「炭素環式」という用語は、すべて炭素である１６個までの環原子を有する単環式、二環式または三環式ラジカルを指し、アリールおよびシクロアルキルが挙げられる。
【００５７】
別途詳述しない限り、「ヘテロシクリル」または「複素環」という用語は、Ｏ、ＮまたはＳなどの少なくとも１個のヘテロ原子を有し、残りの環原子が炭素である、４から７個の原子を有する飽和単環を意味する。複素環の例としては、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、オキセタニル、アゼチジニル、ピロリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ジオキサニル、ピペラジニルおよびホモピペラジニルが挙げられる。存在する場合、硫黄原子は酸化形（すなわちＳ＝ＯまたはＯ＝Ｓ＝Ｏ）であってもよい。酸化形の硫黄を含有する例示的な複素環基は、１，１−ジオキシド−チオモルホリニルおよび１，１−ジオキシド−イソチアゾリジニルである。
【００５８】
別途詳述しない限り、「ヘテロシクリル−Ｃａ−ｂ−アルキル」という用語は、ａおよびｂが整数である場合、上で定義したような複素環であって、前記環の炭素または窒素原子を介して直鎖または分枝Ｃａ−ｂ−アルキル基に直接結合されている複素環を意味する。例えば「ヘテロシクリル−Ｃ１−４−アルキル」基としては、ピペリジン−１−イルメチル、ピペリジン−４−イルメチルおよびモルホリン−４−イルメチルが挙げられる。
【００５９】
別途詳述しない限り、「ヘテロアリール」という用語は、環原子の１個以上が窒素、硫黄または酸素などの炭素以外である、５から１０個の環原子を含む単環式または縮合二環式複素芳香環系を意味する。１個の環のみが芳香族である必要があり、前記ヘテロアリール部分は、いずれかの環の炭素または窒素原子を介して分子の残部に連結することができる。ヘテロアリール基の例としては、フリル、ピロリル、チエニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、ピリジニル、ピリミジニル、テトラゾリル、キナゾリニル、インドリル、インドリニル、イソインドリル、イソインドリニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピラジニル、キノリニル、キノキサリニル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、ベンゾフラニル、２，３−ジヒドロベンゾフラニル、１，３−ベンゾジオキソリル、１，４−ベンゾジオキシニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイミダゾリル、アザベンゾイミダゾール、ベンゾトリアゾリルおよびクロマニルが挙げられる。
【００６０】
別途詳述しない限り、「Ｃａ−ｂ−アリール」という用語は、ａおよびｂが整数である場合、ａからｂ個の環原子を有し、少なくとも１個の環が芳香環である、単環式または縮合二環式炭化水素環系を意味する。例えば「Ｃ６−１０−アリール」基としては、フェニル、インデニル、２，３−ジヒドロインデニル（インダニル）、１−ナフチル、２−ナフチルまたは１，２，３，４−テトラヒドロナフチルが挙げられる。
【００６１】
別途詳述しない限り、「Ｃａ−ｂ−アリール−Ｃｃ−ｄ−アルキル」という用語は、ａ、ｂ、ｃおよびｄが整数である場合、直鎖または分枝Ｃｃ−ｄ−アルキル基に直接連結されているＣａ−ｂ−アリール基を指す。例えば「Ｃ６−１０−アリール−Ｃ１−４−アルキル」基としては、フェニルメチル（すなわちベンジル）およびフェニルエチルが挙げられる。
【００６２】
別途詳述しない限り、「ヘテロアリール−Ｃａ−ｂ−アルキル」という用語は、ａおよびｂが整数である場合、上で定義したヘテロアリール環であって、前記環の炭素または窒素原子を介して直鎖または分枝Ｃａ−ｂ−アルキル基に直接連結されているヘテロアリール環を意味する。例えば「ヘテロアリール−Ｃ１−４−アルキル」基としては、２−（ピリジン−２−イル）−エチルおよび１，２，４−オキサジアゾール−５−イルメチルが挙げられる。
【００６３】
この用語が存在する文脈で別途規定しない限り、「置換」という用語は、本明細書でいずれの部分にも適用されるように、４個までの適合可能な置換基を意味し、そのそれぞれは独立して、例えば（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、ヒドロキシ、ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、メルカプト、メルカプト（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、フェニル、ハロ（フルオロ、ブロモおよびクロロを含む）、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ニトロ、ニトリル（−ＣＮ）、オキソ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＲＡ、−ＣＯＲＡ、−ＳＯ２ＲＡ、−ＣＯＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＣＯＮＨＲＡ、−ＳＯ２ＮＨＲＡ、−ＣＯＮＲＡＲＢ、−ＳＯ２ＮＲＡＲＢ、−ＮＨ２、−ＮＨＲＡ、−ＮＲＡＲＢ、−ＯＣＯＮＨ２、−ＯＣＯＮＨＲＡ、−ＯＣＯＮＲＡＲＢ、−ＮＨＣＯＲＡ、−ＮＨＣＯＯＲＡ、−ＮＲＢＣＯＯＲＡ、−ＮＨＳＯ２ＯＲＡ、−ＮＲＢＳＯ２ＯＨ、−ＮＲＢＳＯ２ＯＲＡ、−ＮＨＣＯＮＨ２、−ＮＲＡＣＯＮＨ２、−ＮＨＣＯＮＨＲＢ、−ＮＲＡＣＯＮＨＲＢ、−ＮＨＣＯＮＲＡＲＢ、または−ＮＲＡＣＯＮＲＡＲＢであってもよく、ここでＲＡおよびＲＢは独立して、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、フェニルもしくは５もしくは６個の環原子を有する単環式ヘテロアリールであり、またはＲＡおよびＲＢは、同じ窒素原子に結合されている場合、環式アミノ基（例えばモルホリノ、ピペリジニル、ピペラジニルまたはテトラヒドロピロリル）を形成する。「所望の置換基」は、上記の置換基の１つでもよい。
【００６４】
本発明の化合物はこれに限定されるわけではないが、シス−およびトランス−形、Ｅ−およびＺ−形、Ｒ−、Ｓ−およびメソ−形、ケト−、ならびにエノール形を含む、１個以上の幾何、光学、エナンチオマー、ジアステレオマーおよび互変異性形で存在してもよい。別途明示しない限り、特定の化合物への言及は、そのラセミ混合物および他の混合物を含む、このようなすべての異性形を含む。適切な場合、このような異性体は、公知の方法（例えばクロマトグラフィー技法および再結晶技法）の利用または適応によって、その混合物から分離することができる。適切な場合、このような異性体は、公知の方法（例えば不斉合成）の利用または適応によって調製してもよい。
【００６５】
本明細書で使用する場合、「塩」としては、塩基付加塩、酸付加塩およびアンモニウム塩が挙げられる。上で簡潔に述べたように、酸性である本発明の化合物は、塩基、例えば水酸化ナトリウムおよびカリウムなどのアルカリ金属水酸化物；アルカリ土類金属水酸化物、例えば水酸化カルシウム、バリウムおよびマグネシウムによって；有機塩基、例えばＮ−メチル−Ｄ−グルカミン、コリントリス（ヒドロキシメチル）アミノ−メタン、Ｌ−アルギニン、Ｌ−リジン、Ｎ−エチルピペリジン、ジベンジルアミンなどによって、医薬的に許容される塩を含む塩を形成することができる。塩基性である本発明のこれらの化合物は、無機酸、例えば塩酸および臭化水素酸などのハロゲン化水素酸、硫酸、硝酸またはリン酸などによって、ならびに有機酸、例えば酢酸、トリフルオロ酢酸、酒石酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、リンゴ酸、サリチル酸、クエン酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、安息香酸、ベンゼンスルホン酸、グルタミン酸、乳酸およびマンデル酸などによって、医薬的に許容される塩を含む塩を形成することができる。塩基性窒素を有するこれらの化合物（Ｉ）は、医薬的に許容される対イオン、例えばクロリド、ブロミド、アセテート、ホルメート、ｐ−トルエンスルホナート、スクシナート、ヘミスクシナート、ナフタレン−ビススルホナート、メタンスルホナート、トリフルオロアセテート、キシナホアートなどによって第４級アンモニウム塩を形成することができる。塩に関する総説については、Ｓｔａｈｌ  ａｎｄ  ＷｅｒｍｕｔｈによるＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ  Ｕｓｅ（Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，Ｗｅｉｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ，２００２）を参照のこと。
【００６６】
本発明の化合物は水和物および溶媒和物の形で調製してもよいことが期待される。本明細書の請求項を含む、「本発明が関係する化合物」または「本発明の化合物」または「本化合物」などへのいずれの言及も、このような化合物の塩、水和物および溶媒和物への言及を含む。「溶媒和物」という用語は、本発明の化合物および化学量論量の１つ以上の医薬的に許容される溶媒分子、例えばエタノールを含む分子複合体を説明するために本明細書において使用する。「水和物」という用語は、前記溶媒が水であるときに用いられる。
【００６７】
本発明の個々の化合物は、アモルファス形および／または複数の多型形で存在してもよく、異なる晶癖で得られてもよい。本明細書の請求項を含む、「本発明が関係する化合物」または「本発明の化合物」または「本化合物」などへのいずれの言及も、アモルファスまたは多型形とは関係なく、化合物への言及を含む。
【００６８】
芳香環中に窒素原子を有する本発明のいくつかの化合物は、Ｎ−オキシドを形成してもよく、本発明は本発明の化合物をそのＮ−オキシド形で含む。
【００６９】
本発明の化合物では、いずれの適合可能な組合せにおいても、化合物が好ましく６００未満の分子量を有することに留意する。
【００７０】
基ＸおよびＱ
上で定義したように、Ｘは、直接結合、−Ｃ（Ｏ）−、ｐが１または２である−（ＣＨＲ６）ｐ−、例えば−（ＣＨ２）ｐ−、−（ＣＨＣＨ３）ｐ−、−（ＣＨＣＨ２ＣＨ３）ｐ−、−（ＣＨＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）ｐ、−（ＣＨＣＨ（ＣＨ３）２）ｐ−、−（ＣＨＣＨ（ＣＨ２）３）ｐ−、−（ＣＨＣ（ＣＨ３）３）ｐ−、−Ｎ（Ｒ６）、例えば−ＮＨ、−Ｎ（ＣＨ３）、−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）、−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、−Ｎ（ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２）もしくは−ＮＣＨ（ＣＨ２）３、またはどちらの向きでもよい、−（ＣＨ２ＣＨＲ６）−、例えば−（ＣＨ２ＣＨＣＨ３）−、から独立して選択され；
【００７１】
Ｑは、直接結合、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ６）−、−Ｃ（Ｏ）−、Ｃ（Ｈ）（ＯＨ）−、−（ＣＨＲ６）ｐ−、またはどちらの向きでもよい、−（ＣＨ２ＣＨＲ６）−、から独立して選択され、ここで、例えば−Ｎ（Ｒ６）−、−（ＣＨＲ６）ｐ−および−（ＣＨ２ＣＨＲ６）−、のそれぞれは、上の基Ｘについて定義されている。
【００７２】
本発明の実施形態において、Ｘは、−Ｃ（Ｏ）−、−（ＣＨＲ６）ｐ−、−Ｎ（Ｒ６）−、またはどちらの向きでもよい、−（ＣＨ２ＣＨＲ６）−、から独立して選択される。
【００７３】
本発明のさらなる実施形態において、Ｑは、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ６）−、−Ｃ（Ｏ）−、Ｃ（Ｈ）（ＯＨ）−、−（ＣＨＲ６）ｐ−、またはどちらの向きでもよい、−（ＣＨ２ＣＨＲ６）−、から独立して選択される。
【００７４】
基Ｕは、Ｏ（酸素原子）またはＳ（硫黄原子）のいずれかである。好ましい実施形態において、ＵはＯである。
【００７５】
基Ｒ３、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８Ｒ９およびＲ１０
上で定義したように、Ｒ３、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、各々独立して、Ｈ、Ｃ１−４アルキル、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、イソ−ブチルおよびｓｅｃ−ブチルまたはシクロプロピルから選択され、Ｃ１−４アルキルまたはシクロプロピルのそれぞれは、各々独立に、フルオロ、ならびにＣ１−４アルコキシ、例えばメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシおよびｔｅｒｔ−ブトキシから選択される１個以上の置換基によって所望により置換されていてもよい。本発明の実施形態において、Ｒ１０は水素である。さらなる実施形態において、Ｒ１０はＣ１−４アルキルである。
【００７６】
基Ｒ５
上で定義したように、Ｒ５は、第２の芳香族または非芳香族単環炭素環または複素環、例えばフェニルまたはピリジルに所望により縮合してもよい、５−５、５−６、６−５または６−６の２環系を形成する、５または６個の環原子を有する単環芳香族または非芳香族炭素環または複素環、例えばフェニル、ピリジル、ピペリジン、ピロール、イミダゾール、イミダゾリン、イミダゾロンであり、この単環系または２環系は、ハロゲン、例えばフルオロまたはクロロ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、ＣＦ３、Ｃ１−４−アルキル、例えばメチル、またはエチル、Ｃ１−４−アルコキシおよび−ＮＲ７ＡＲ７Ｂから独立して選択される１個以上の置換基によって所望により置換されていてもよく、ここで
Ｒ７Ａ、Ｒ７Ｂは、各々独立に、水素およびＣ１−４−アルキルから選択され、ここでいずれのアルキル残基も、各々独立に、フッ素、ヒドロキシルおよびＣ１−４−アルコキシから選択される１個以上の置換基によって所望により置換されていてもよく、
または
Ｒ７ＡおよびＲ７Ｂは、これらが結合している窒素原子と共に、フッ素、ヒドロキシル、Ｃ１−４−アルキル、フルオロ−Ｃ１−４−アルキルおよびＣ１−４−アルコキシから独立して選択される１個以上の置換基によって所望により置換されていてもよい、４から７員飽和複素環を形成する；
【００７７】
基Ｂ
上で定義したように、Ｂは下記から選択される。
【００７８】
【化５】
2014514246.tif 000007
【００７９】
ここでＲ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、各々独立に、Ｈ、もしくはＣ１−４アルキル、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、イソ−ブチルおよびｓｅｃ−ブチル、もしくはシクロプロピル、から選択され、Ｃ１−４アルキルまたはシクロプロピルのそれぞれは、各々独立に、フルオロ、クロロおよびブロモ、ならびにＣ１−４アルコキシ、例えばメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシおよびｔｅｒｔ−ブトキシ、から選択される１個以上の置換基によって所望により置換されていてもよく；または
Ｒ７およびＲ８は、それらが結合している窒素原子と共にアジリジン、アゼチジンおよびピロリジンより選択される３−５員複素環を形成し、そのそれぞれは、各々独立に、フルオロ、クロロおよびブロモならびにＣ１−Ｃ４アルコキシ、例えばメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシおよびｔｅｒｔ−ブトキシ、から選択される１個以上の置換基によって所望により置換されていてもよい。
【００８０】
本発明の現在好ましい実施形態において、Ｒ７およびＲ８は、Ｈ、Ｃ１−４アルキルまたはシクロプロピルより独立して選択され、Ｃ１−４アルキルまたはシクロプロピルはそれぞれ、フルオロおよびＣ１−Ｃ４アルコキシから独立して選択される１個以上の置換基によって所望により置換されていてもよい。
【００８１】
別の現在好ましい実施形態において、ＺおよびＹを含む環は以下から選択される。
【００８２】
【化６】
2014514246.tif 000008
【００８３】
式中、＊を付けた結合は、カルボニル基の炭素に結合している。さらに好ましくは、ＺおよびＹを含む環は、フルオロ、Ｃ１−４−アルキル、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、イソ−ブチルおよびｓｅｃ−ブチル、Ｃ１−４−アルコキシ、例えばメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシおよびｔｅｒｔ−ブトキシ、フルオロ−Ｃ１−４−アルキル、例えばフルオロメチル、トリフルオロメチル、２−フルオロエチルおよび２，２，２−トリフルオロエチル、ならびにフルオロ−Ｃ１−４−アルコキシ、例えばトリフルオロメトキシおよび２，２，２−トリフルオロエトキシ、から独立して選択される１個以上の置換基によって所望により置換されていてもよい。
【００８４】
別の好ましい実施形態において、ラジカル、−（Ｗ）ｖ（ＣＨ２）ｔＢは以下から選択される。
【００８５】
【化７】
2014514246.tif 000009
【００８６】
これらはいずれも所望により置換されていてもよく、＊を付けた結合は、分子の残りのＣＨ２に結合され、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は上で定義した通りである。なおより好ましくは、フェニル環は、１個以上のフルオロ置換基によって置換される。
【００８７】
現在好ましい実施形態において、ラジカル、−（Ｗ）ｖ（ＣＨ２）ｔＢはｖ＝１であり、Ｗは、所望により置換されていてもよいフェニル環またはピリジル環である。好ましくは、Ｗは場合により置換されたフェニル環である。なおさらに好ましい実施形態において、基Ｂおよび分子の残りのＣＨ２は、Ｗ環にパラ配置で結合される。
【００８８】
またさらに好ましい実施形態において、Ｒ４は以下から選択される。
【００８９】
【化８】
2014514246.tif 000010
【００９０】
これらはいずれも所望により置換されていてもよく、＊を付けた結合は、分子の残りのＣＨ２に結合され、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は上で定義した通りである。なおより好ましくは、フェニル環は１個以上のフルオロ置換基、好ましくは１または２または３個のフルオロ置換基によって置換される。
【００９１】
特に好ましい実施形態において、Ｒ３はＨである。
別の特に好ましい実施形態において、Ｚは−Ｎ＝である。
さらなる特に好ましい実施形態において、Ｒ６は、Ｈまたはメチルである。
さらに好ましい実施形態において、Ｒ９はＨまたはメチルである。
【００９２】
別の現在好ましい実施形態において、Ｒ５は以下から選択される。
【００９３】
【化９】
2014514246.tif 000011
【００９４】
ここで、＊を付けた結合はＲ５を分子の残りに結合して、そのそれぞれはハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、ＣＦ３、Ｃ１−４−アルキル、例えばメチル、エチル、Ｃ１−４−アルコキシ、例えばメトキシ、エトキシおよび−ＮＲ７ＡＲ７Ｂ、から独立して選択される１個以上の置換基によって所望により置換されていてもよく、Ｒ７Ａ、Ｒ７Ｂは、水素およびＣ１−Ｃ４アルキルからそれぞれ独立して選択され、いずれのアルキル残基もフッ素、ヒドロキシルおよびＣ１−４−アルコキシ、から独立して選択される１個以上の置換基によって所望により置換されていてもよく、
または
Ｒ７ＡおよびＲ７Ｂは、これらが結合されている窒素原子と共に、フッ素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ４アルキル、フルオロ−Ｃ１−Ｃ４−アルキルおよびＣ１−Ｃ４−アルコキシ、から独立して選択される１個以上の置換基によって所望により置換されていてもよい、４から７員飽和複素環を形成する。
【００９５】
本発明による化合物の具体的な例としては：
（４−｛［（４−ベンジルピペリジン−１−イル）カルボニルアミノ］メチル｝フェニル）メタンアミニウムクロリド；
２，２，２−トリフルオロ酢酸；Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−［（４−メトキシフェニル）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミド；
２，２，２−トリフルオロ酢酸；Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−［（３−フルオロフェニル）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミド；
Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−［（４−フルオロフェニル）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミドヒドロクロリド；
２，２，２−トリフルオロ酢酸；Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−［（４−クロロフェニル）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミド；
２，２，２−トリフルオロ酢酸；Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−［（４−メチルフェニル）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミド
Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−（ピリジン−２−イルメチル）ピペリジン−１−カルボキサミド；
Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−（ピリジン−４−イルメチル）ピペリジン−１−カルボキサミド；
Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−（４−フルオロフェノキシ）ピペリジン−１−カルボキサミド；
Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−（フェニルスルファニル）ピペリジン−１−カルボキサミドヒドロクロリド；
Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−［（２−クロロフェニル）アミノ］ピペリジン−１−カルボキサミドジヒドロクロリド；
２，２，２−トリフルオロ酢酸；Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−［（４−フルオロフェニル）カルボニル］ピペリジン−１−カルボキサミド；
Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−［（４−フルオロフェニル）（ヒドロキシ）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミド；
Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−１−［（３−フルオロフェニル）メチル］ピペリジン−４−カルボキサミド；
Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−ベンジルピペラジン−１−カルボキサミド；
Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−［（２−クロロフェニル）メチル］ピペラジン−１−カルボキサミドジヒドロクロリド；
Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝−４−（１，３−ベンゾオキサゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキサミド；
Ｎ−｛［４−（アミノメチル）−３−フルオロフェニル］メチル｝−４−ベンジルピペリジン−１−カルボキサミド；
４−ベンジル−Ｎ−［（４−カルバムイミドイルフェニル）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミド；
２，２，２−トリフルオロ酢酸；４−ベンジル−Ｎ−｛［４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルカルバムイミドイル）フェニル］メチル｝ピペリジン−１−カルボキサミド；
Ｎ−［（４−カルバムイミドイルフェニル）メチル］−４−（ピリジン−４−イルメチル）ピペリジン−１−カルボキサミド；
Ｎ−（１Ｈ−１，３−ベンゾジアゾール−６−イルメチル）−４−ベンジルピペリジン−１−カルボキサミド；
２，２，２−トリフルオロ酢酸；Ｎ−（１Ｈ−１，３−ベンゾジアゾール−５−イルメチル）−３−フェニルピロリジン−１−カルボキサミド；
２，２，２−トリフルオロ酢酸；Ｎ−（１Ｈ−１，３−ベンゾジアゾール−５−イルメチル）−３−ベンジルピロリジン−１−カルボキサミド；
Ｎ−［（２−アミノ−１Ｈ−１，３−ベンゾジアゾール−６−イル）メチル］−４−ベンジルピペリジン−１−カルボキサミド；
２，２，２−トリフルオロ酢酸；４−ベンジル−Ｎ−［（４−カルバムイミドアミドフェニル）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミド；
４−ベンジル−Ｎ−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イソインドール−５−イルメチル）ピペリジン−１−カルボキサミドが挙げられる。
【００９６】
合成
上の式（Ｉ）の化合物は、従来の方法によって、または従来の方法と同様に調製してもよい。本発明の実施例による中間体および化合物の調製は、これに限定されるわけではないが、以下のスキームによって特に例証されてもよい。
【００９７】
スキーム１  式（Ｉ）の化合物の一般合成経路
【００９８】
【化１０】
2014514246.tif 000012
【００９９】
ここでＲ１＊は、Ｒ１またはＲ１にただちに変換できる官能基のどちらかである。
上の式（Ｉ）の化合物は、標準手順を使用して、適切な第１級アミンのＮＨ（Ｒ２）ＣＨ２Ｒ１＊と（ａ）活性化尿素、（ｂ）アミンまたは（ｃ）カルボン酸との縮合によって調製してもよい。これらの別法すべては、下の実験項に例示されている。
以下の省略形を使用した：
【０１００】
【表１】
2014514246.tif 000013
【０１０１】
【表２】
2014514246.tif 000014
【０１０２】
実施例および中間体化合物
実験方法
すべての試薬は市販グレードであり、別途規定しない限り、そのままさらに精製せずに使用した。すべての場合で試薬グレードの溶媒を使用した。分析ＬＣＭＳは、フェノメネックス・シナジー、ＲＰ−Ｈｙｄｒｏ、１５０×４．６ｍｍ、４μｍカラムを装備したアジレント１１００システム（水（＋０．０８５％ＴＦＡ）中ＭｅＣＮ、２００〜３００ｎｍ、３０℃）またはフェノメネックス・ジェミニＣ１８、１００×４．６ｍｍ、４μｍカラムを装備したアジレント１１００システム（水中ＭｅＣＮ（１０ｍＭ重炭酸アンモニウム）、２００〜３００ｎｍ、４０℃）（下の文では＃を付けた）のどちらかで行った。高分解能質量スペクトル（ＨＲＭＳ）は、アジレント１１００ＨＰＬＣシステムに接続されたアジレントＭＳＤ−ＴＯＦで得た。分析の間、較正は、２つの質量によって点検を行い、必要な場合には自動的に補正した。スペクトルは、ポジティブ・エレクトロスプレー・モードで得る。得られた質量範囲はｍ／ｚ１００〜１１００であった。質量ピークのプロフィール検出を使用した。分析ＨＰＬＣは、フェノメネックス・シナジー、ＲＰ−Ｈｙｄｒｏ、１５０×４．６ｍｍ、４μｍカラムを使用したいずれかのアジレント１１００システムにおいて、１．５ｍＬ／分の流速および３０℃（２００〜３００ｎｍ）ならびに７分間の水（＋０．１％ＴＦＡ）中５〜１００％ＭｅＣＮ（＋０．０８５％ＴＦＡ）、７分間の水（＋０．１％ＴＦＡ）中５０〜１００％ＭｅＣＮ（＋０．０８５％ＴＦＡ）（下の文では＊＊を付けた）、７分間の水（＋０．１％ＴＦＡ）中５〜５０％ＭｅＣＮ（＋０．０８５％ＴＦＡ）（下の文では＊＊＊を付けた）または２０分間の水（＋０．１％ＴＦＡ）中５〜９５％ＭｅＣＮ（＋０．０８５％ＴＦＡ）（下の文では＊を付けた）のいずれかの勾配を用いて行った。フラッシュクロマトグラフィーは、レディセップ・シリカ・カラムを装備したコンビフラッシュ・コンパニオン・システムもしくはストラータＳＩ−１シリカギガチューブを装備したフラッシュ・マスター・パーソナル・システムのいずれかまたは重力下のガラスカラムにて行った。逆相ＨＰＬＣは、フェノメネックス・シナジーＨｙｄｒｏ  ＲＰ  １５０×１０ｍｍカラムもしくはＹＭＣ  ＯＤＳ−Ａ１００／１５０×２０ｍｍカラムを装備したギブソンシステム（ギブソン３２１平衡ポンプを備えたギブソン３２２ポンプおよびおギブソン２１５オートサンプラ）、またはエクステラＰｒｅｐ  ＭＳ  Ｃ１８  ５ｕｍ  １９×５０ｍｍシステムで行った。マイクロウェーブ照射は、バイオタージ・マイクロウェーブを用いて行った。反応は別途明示しない限り、室温にて行った。化合物は、ＡＣＤ  ６．０を使用して自動的に命名した。すべての化合物を真空オーブンで一晩乾燥させた。収率が含まれていない場合、中間体を粗生成物のまま使用した。反応はＴＬＣ、ＬＣＭＳまたはＨＰＬＣによって監視した。
【０１０３】
中間体１
ｔｅｒｔ−ブチル４−［（２−クロロフェニル）アミノ］ピペリジン−１−カルボキシラート
【０１０４】
【化１１】
2014514246.tif 000015
【０１０５】
１−クロロ−２−ヨードベンゼン（１．３１ｇ、５．４９ｍｍｏｌ）をジオキサン（１０ｍＬ）およびｔＢｕＯＮａ（６７２ｍｇ、６．９９ｍｍｏｌ）に溶解させて、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１８３ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）、キサントホス（３２６ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル４−アミノピペリジン−１−カルボキシラート（１．００ｇ、４．９９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１００℃にて３日間加熱した。溶媒を真空中で除去し、残渣をＤＣＭに溶解させて、濾過した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物（８２６ｍｇ、５３％）を淡黄色油として得た。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋２５５．５［ＭＨ］＋−ｔＢｕ。
【０１０６】
中間体２
２，２，２−トリフルオロ酢酸；Ｎ−（２−クロロフェニル）ピペリジン−４−アミン
【０１０７】
【化１２】
2014514246.tif 000016
【０１０８】
中間体１（８２６ｍｇ、２．６６ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２０ｍＬ）に溶解させて、ＴＦＡ（３ｍＬ）を添加した。反応混合物を室温にて１８時間撹拌した。溶媒を真空中で除去して、表題化合物（５００ｍｇ、５８％）を淡褐色ゴム状物質として得た。ＬＣＭＳ：純度１００％、ＥＳ＋２１１．５［ＭＨ］＋。
【０１０９】
中間体３
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−（｛４−［（メチルアミノ）メチル］フェニル｝メチル）カルバメート
【０１１０】
【化１３】
2014514246.tif 000017
【０１１１】
メタンスルホニルクロリド（１７１μＬ、２．２１ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１５ｍＬ）に溶解させて、０℃まで冷却した。ｔｅｒｔ−ブチルＮ−｛［４−（ヒドロキシメチル）フェニル］メチル｝カルバメート（５００ｍｇ、２．１１ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（３１６μＬ、２．２１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）溶液を添加して、反応混合物を２時間撹拌し、２．０ＭメチルアミンのＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液に滴加した。反応混合物を１８時間撹拌して、１Ｍ  ａｑ  Ｎａ２ＣＯ３（１００ｍＬ）中に注入し、ＤＣＭ（３×１００ｍＬ）で抽出した。合せた有機画分を脱水（ＭｇＳＯ４）し、真空中で濃縮して、粗表題化合物を黄色油（６０７ｍｇ）として得て、これをさらに精製せずに使用した。ＬＣＭＳ：純度８０％、ＥＳ＋２５１．６［ＭＨ］＋。
【０１１２】
中間体４
４−ベンジル−１−（１Ｈ−イミダゾール−１−イルカルボニル）ピペリジン
【０１１３】
【化１４】
2014514246.tif 000018
【０１１４】
ＣＤＩ（２３．１ｇ、１４３ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（３００ｍＬ）に溶解させて、０℃まで冷却した。４−ベンジルピペリジン（２５．１ｍＬ、１４３ｍｍｏｌ）を添加して、反応混合物を２時間撹拌した。ＤＣＭ（２００ｍＬ）を添加して、反応混合物を１０％  ａｑクエン酸（２×２５０ｍＬ）、飽和ａｑ  ＮａＨＣＯ３（２５０ｍＬ）および水（２５０ｍＬ）によって洗浄し、脱水（ＭｇＳＯ４）して、溶媒を真空中で除去して、表題化合物を黄色油（３６．０ｇ、９４％）として得て、これをさらに精製せずに使用した。ＬＣＭＳ：純度１００％、ＥＳ＋２７０．１［ＭＨ］＋。
【０１１５】
中間体５
４−フェニル−１−（１Ｈ−イミダゾール−１−イルカルボニル）ピペリジン
【０１１６】
【化１５】
2014514246.tif 000019
【０１１７】
４−ベンジルピペリジンの代わりに４−フェニル−ピペリジンを使用して、表題化合物（６４５ｍｇ、８１％）を中間体４と同様に、オフホワイト色固体として調製した。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋２５６．６［ＭＨ］＋。
【０１１８】
中間体６
１−［（４−ベンジルピペリジン−１−イル）カルボニル］−３−メチル−１Ｈ−イミダゾール−３−イウムヨージド
【０１１９】
【化１６】
2014514246.tif 000020
【０１２０】
中間体４（３６．０ｇ、１３３ｍｍｏｌ）をＥｔ２Ｏ（２００ｍＬ）に溶解させて、ＭｅＩ（２０．７ｍＬ、３３３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１８時間撹拌して、濾過によって沈澱を収集し、Ｅｔ２Ｏ（２×１００ｍＬ）で洗浄して、表題化合物（２６．６ｇ、４９％）を薄黄色固体として得て、これをさらに精製せずに使用した。ＬＣＭＳ：純度８７％、ＥＳ＋２８４．２［ＭＨ］＋。
【０１２１】
中間体７
１−［（４−フェニルピペリジン−１−イル）カルボニル］−３−メチル−１Ｈ−イミダゾール−３−イウムヨージド
【０１２２】
【化１７】
2014514246.tif 000021
【０１２３】
中間体４の代わりに中間体５を使用して、表題化合物（１２１ｍｇ、粗）を中間体６と同様に白色固体として調製した。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋２７０．６［ＭＨ］＋。
【０１２４】
中間体８
２，２，２−トリフルオロ酢酸；４−（アミノメチル）−２−フルオロベンゾニトリル
【０１２５】
【化１８】
2014514246.tif 000022
【０１２６】
４−ブロモメチル−２−フルオロ−ベンゾニトリル（５００ｍｇ、２．３４ｍｍｏｌ）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチルイミノジカルボキシラート（５０７ｍｇ、２．３４ｍｍｏｌ）をＴＨＦに溶解させて、０℃まで冷却した。ＮａＨ（９３．６ｍｇ、鉱油中６０％分散物、２．３４ｍｍｏｌ）を滴加して、反応混合物を０℃にて２時間撹拌した。反応混合物を飽和ａｑ  ＮＨ４Ｃｌ（１０ｍＬ）で反応停止させて、ＥｔＯＡｃ（２×２０ｍＬ）で抽出した。合せた有機画分を塩水（３０ｍＬ）で洗浄して、真空中で濃縮した。残渣をＥｔ２Ｏ（１０ｍＬ）に溶解させ、濾過して、真空中で濃縮した。残渣をＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解させて、ＴＦＡ（２．５ｍＬ）を添加した。反応混合物を１時間撹拌して、溶媒を真空中で除去して、粗表題化合物を黄色油として得て、これをさらに精製せずに使用した。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋１５１．４［ＭＨ］＋。
【０１２７】
中間体９
２−｛［４−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）フェニル］メチル｝−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イソインドール−１，３−ジオン
【０１２８】
【化１９】
2014514246.tif 000023
【０１２９】
［４−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）フェニル］メタノール（２５０ｍｇ、１．４４ｍｍｏｌ）、フタルアミド（２５３ｍｇ、１．７２ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（４２０ｍｇ、１．５８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（８ｍＬ）に溶解させて、１０分間撹拌した。ＤＩＡＤ（０．３１ｍＬ、１．５８ｍｍｏｌ）を２分間にわたって滴加して、反応混合物を２時間撹拌した。溶媒を真空中で除去して、残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製した。残渣をＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ）に溶解して、超音波処理して、濾過によって沈澱を収集し、表題化合物（１７４ｍｇ、４０％）を白色固体として得た。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋３０４．５［ＭＨ］＋。
【０１３０】
中間体１０
［４−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）フェニル］メタンアミン
【０１３１】
【化２０】
2014514246.tif 000024
【０１３２】
中間体９（１７０ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ（１５ｍＬ）に溶解させて、ヒドラジン水和物（０．６５ｍＬ、５５％  ａｑ溶液、１１．４ｍｍｏｌ）を添加して、反応混合物を３時間撹拌した。溶媒を真空中で除去して、生成物をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）に溶解させて、超音波処理して、濾過した。溶媒を真空中で除去して、表題化合物黄色固体として得て、これをさらに精製せずに使用した。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋１７４．４［ＭＨ］＋。
【０１３３】
中間体１１
１Ｈ−１，３−ベンゾジアゾール−６−イルメタノール
【０１３４】
【化２１】
2014514246.tif 000025
【０１３５】
１Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（５．００ｇ、３０．８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶解させて、０℃まで冷却した。水素化アルミニウムリチウム（５０．０ｍＬ、ＴＨＦ中２．４Ｍ、１２０ｍｍｏｌ）を滴加して、反応混合物を室温にて４日間撹拌した。反応混合物を０℃まで冷却して、１Ｍ  ａｑ  ＮａＯＨによって慎重に反応停止させ、濾過して、溶媒を真空中で除去した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物（８７２ｍｇ、１９％）を黄色油として得た。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋１４９．４［ＭＨ］＋。
【０１３６】
中間体１２
１Ｈ−１，３−ベンゾジアゾール−６−イルメタンアミン
【０１３７】
【化２２】
2014514246.tif 000026
【０１３８】
中間体１１（６０４ｍｇ、４．０８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解させ、ＤＰＰＡ（１．３５ｇ、４．８９ｍｍｏｌ）およびＤＢＵ（７４５ｍｇ、４．８９ｍｍｏｌ）を添加して、反応物を室温にて４時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮して、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈した。有機層を飽和ａｑ  ＮａＣｌ溶液（２×５０ｍＬ）で洗浄し、脱水（ＭｇＳＯ４）して、真空中で濃縮した。残渣をＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解させ、ＬｉＡｌＨ４溶液（１．７ｍＬ、ＴＨＦ中２．４Ｍ、４．０８ｍｍｏｌ）を添加して、反応混合物室温にて４日間撹拌した。反応混合物を０℃まで冷却して、ＭｅＯＨで反応停止させて、水で希釈して、真空中で溶媒を除去した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物（４０３ｍｇ、６７％）を黄色ゴム状物質として得た。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋１４８．４［ＭＨ］＋。
【０１３９】
中間体１３
２−アミノ−１Ｈ−１，３−ベンゾジアゾール−６−カルボキサミド
【０１４０】
【化２３】
2014514246.tif 000027
【０１４１】
３，４−ジアミノ安息香酸（２００ｍｇ、１．３１ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（５ｍＬ）に溶解させて、臭化シアン（１７０ｍｇ、１．６４ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１時間撹拌して、溶媒を真空中で除去して、残渣およびＫ２ＣＯ３（１８０ｍｇ、１．３１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２．５ｍＬ）に溶解させた。反応混合物を１０分間撹拌して、ＨＢＴＵ（７４０ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．９１ｍＬ、５．２４ｍｍｏｌ）およびＮＨ４Ｃｌ（１４０ｍｇ、２．６２ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１６時間撹拌して、ＥｔＯＡｃで希釈し、濾過して、溶媒を真空中で除去した。残渣をＤＣＭ（２０ｍＬ）に溶解させ、超音波処理して、生じた固体を濾過によって収集して、粗表題化合物（０．０５ｇ、２２％）を得て、これをさらに精製せずに使用した。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋１７７．２［ＭＨ］＋。
【０１４２】
中間体１４
６−（アミノメチル）−１Ｈ−１，３−ベンゾジアゾール−２−アミン
【０１４３】
【化２４】
2014514246.tif 000028
【０１４４】
中間体１３（０．２５ｇ、１．４２ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解させ、ＬｉＡｌＨ４（１．２４ｍＬ、ＴＨＦ中２．４Ｍ、２．９８ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を還流下で１６時間加熱して、１Ｍ  ａｑ  ＮａＯＨで反応停止させて、セライトで濾過して、溶媒を真空中で除去した。残渣をＤＣＭ（１５ｍＬ）に溶解させ、超音波処理して、生じた沈澱を濾過によって収集し、表題化合物（３０．０ｍｇ、１３％）を黄色／褐色ゴム状物質として得た。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋１６３．２［ＭＨ］＋。
【０１４５】
中間体１５
１Ｈ−１，２，３−ベンゾトリアゾール−６−カルボキサミド
【０１４６】
【化２５】
2014514246.tif 000029
【０１４７】
１Ｈ−１，２，３−ベンゾトリアゾール−５−カルボン酸（５００ｍｇ、３．１０ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（１．８７ｇ、４．９４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（７ｍＬ）に溶解させて、１５分間撹拌した。ＮＨ４Ｃｌ（３３０ｍｇ、６．２０ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２．１６ｍＬ、１２．４ｍｍｏｌ）を添加して、反応混合物を時間撹拌した。溶媒を真空中で除去して、残渣をＭｅＯＨ／ＤＣＭ（１：４）から粉砕して、表題化合物（４０６ｍｇ、８１％）を淡褐色固体として得た。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋１６３．１［ＭＨ］＋。
【０１４８】
中間体１６
１Ｈ−１，２，３−ベンゾトリアゾール−６−イルメタンアミン
【０１４９】
【化２６】
2014514246.tif 000030
【０１５０】
中間体１５（１００ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５ｍＬ）に溶解させて、ＬｉＡｌＨ４（０．５５ｍＬ、１．３０ｍｍｏｌ）を添加して、反応混合物を還流下で１６時間加熱した。反応混合物を１Ｍ  ａｑ  ＮａＯＨで反応停止させて、セライトで濾過して、カラムクロマトグラフィーによって精製し、粗表題化合物（５１ｍｇ）をオフホワイト色固体として得て、これをさらに精製せずに使用した。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋１４９．１［ＭＨ］＋。
【０１５１】
中間体１７
一般手順Ａ
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（４−｛［（４−ベンジルピペリジン−１−イル）カルボニルアミノ］メチル｝フェニル）メチル］カルバメート
【０１５２】
【化２７】
2014514246.tif 000031
【０１５３】
ＣＤＩ（２１０ｍｇ、１．３０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍＬ）に溶解させて、０℃まで冷却した。ｔｅｒｔ−ブチルＮ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝カルバメート（３００ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．２３ｍＬ、１．３３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）溶液を添加して、反応混合物を１８時間にわたって室温まで加温した。４−ベンジルピペリジン（０．２２ｍＬ、１．２５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．２３ｍＬ、１．３３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）溶液を添加して、反応混合物を６５時間撹拌して、ＤＣＭ（１０ｍＬ）で希釈し、１Ｍ  ａｑ  Ｎａ２ＣＯ３（２×２５ｍＬ）で洗浄して、脱水（ＭｇＳＯ４）し、真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物（３６５ ｍｇ、６６％）をオフホワイト色固体として得た。ＬＣＭＳ：純度９６．３％、ＥＳ＋４３８．８［ＭＨ］＋。
【０１５４】
中間体１８〜４６
中間体１８〜４６は、一般手順Ａと同様に調製した；下の表１を参照のこと。
【０１５５】
表１：中間体Ｂｏｃ保護アミンの調製
【０１５６】
【表３】
2014514246.tif 000032
【０１５７】
【表４】
2014514246.tif 000033
【０１５８】
【表５】
2014514246.tif 000034
【０１５９】
中間体４７
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−（｛４−［（｛４−［（４−フルオロフェニル）（ヒドロキシ）メチル］ピペリジン−１−イル｝カルボニルアミノ）メチル］フェニル｝メチル）カルバメート
【０１６０】
【化２８】
2014514246.tif 000035
【０１６１】
中間体３４（４６．０ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（２ｍＬ）に溶解させて、ＮａＢＨ４（１１．１ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温にて１時間撹拌して、水（１ｍＬ）で反応停止させた。溶媒を真空中で除去して、粗表題化合物を白色固体として得て、これをさらに精製せずに使用した。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋３７２．５［ＭＨ］＋。
【０１６２】
中間体４８
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−（｛４−［（｛１−［（３−フルオロフェニル）メチル］ピペリジン−４−イル｝ホルムアミド）メチル］フェニル｝メチル）カルバメート
【０１６３】
【化２９】
2014514246.tif 000036
【０１６４】
１−［（３−フルオロフェニル）メチル］ピペリジン−４−カルボン酸（３５０ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２ｍＬ）に溶解させて、０℃まで冷却した。ＤＩＰＥＡ（０．４６ｍＬ、２．６６ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（４８０ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）を添加して、反応混合物を２０分間撹拌した。ｔｅｒｔ−ブチルＮ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝カルバメート（３００ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）を添加して、反応混合物を２１時間にわたって室温まで加温した。溶媒を真空中で除去して、残渣をＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）と水（１５ｍＬ）とで分配した。有機画分を飽和ａｑ  ＮＨ４Ｃｌ（２０ｍＬ）、１Ｍ  ａｑ  Ｎａ２ＣＯ３（２０ｍＬ）および塩水（２０ｍＬ）で洗浄して、脱水（ＭｇＳＯ４）して、真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物（３８０ｍｇ、６６％）を得た。ＬＣＭＳ：純度１００％、ＥＳ＋４５６．８［ＭＨ］＋。
【０１６５】
中間体４９
一般手順Ｂ
４−ベンジル−Ｎ−［（４−シアノ−３−フルオロフェニル）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミド
【０１６６】
【化３０】
2014514246.tif 000037
【０１６７】
中間体８（６２０ｍｇ、２．３５ｍｍｏｌ）、中間体６（９７０ｍｇ、２．３５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１．１７ｍＬ、７．０５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２０ｍＬ）に溶解させて、室温にて１時間撹拌した。さらなる中間体６（２４３ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）を添加して、反応混合物を４時間撹拌し、溶媒を真空中で除去した。残渣をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）に溶解させて、１Ｍ  ａｑ  ＨＣｌ（２０ｍＬ）、１Ｍ  ａｑ  Ｎａ２ＣＯ３（２０ｍＬ）および塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物（４３３ｍｇ、５２％）を黄色油として得た。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋３５２．６［ＭＨ］＋。
【０１６８】
中間体５０〜５５
中間体５０〜５５を一般手順Ｂと同様に、中間体６および７を使用して調製した；下の表２を参照のこと。
【０１６９】
表２：アミンと活性化尿素とのカップリング
【０１７０】
【表６】
2014514246.tif 000038
【０１７１】
中間体５６
Ｎ−［（４−アミノフェニル）メチル］−４−ベンジルピペリジン−１−カルボキサミド
【０１７２】
【化３１】
2014514246.tif 000039
【０１７３】
中間体５２（３９０ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）をＡｃＯＨ（１０ｍＬ）に溶解させて、亜鉛末（７０６ｍｇ、１１．０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１８時間撹拌して、１Ｍ  ａｑ  Ｎａ２ＣＯ３（１５０ｍＬ）に注入した。溶液をＮａＯＨによってｐＨ１０まで塩基性化して、ＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。合せた有機画分を脱水（ＭｇＳＯ４）して、溶媒を真空中で除去した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物（１８３ｍｇ、５１％）を無色ゴム状物質として得た。ＬＣＭＳ：純度１００％、ＥＳ＋３２４．７［ＭＨ］＋。
【０１７４】
中間体５７
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［［（４−｛［（４−ベンジルピペリジン−１−イル）カルボニルアミノ］メチル｝フェニル）アミノ］（｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］イミノ｝）メチル］カルバメート
【０１７５】
【化３２】
2014514246.tif 000040
【０１７６】
中間体５６（１３２ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解させて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（１Ｅ）−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］イミノ｝（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］カルバメート（１２７ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を６日間撹拌して、溶媒を真空中で除去した。残渣をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）に溶解させ、１Ｍ  ａｑ  Ｎａ２ＣＯ３（３×５０ｍＬ）で洗浄し、脱水（ＭｇＳＯ４）して、溶媒を真空中で除去した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物（２３１ｍｇ、９６％）を無色ゴム状物質として得た。ＬＣＭＳ：純度１００％、ＥＳ＋５６６．８［ＭＨ］＋。
【０１７７】
中間体５８
ｔｅｒｔ−ブチル５−（｛［４−（ピリジン−４−イルメチル）ピペリジン−１−イル］カルボニルアミノ｝メチル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イソインドール−２−カルボキシラート
【０１７８】
【化３３】
2014514246.tif 000041
【０１７９】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝カルバメートの代わりにｔｅｒｔ−ブチル５−（アミノメチル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イソインドール−２−カルボキシラートを使用して、中間体５８を中間体２６と同様に調製し、表題化合物（８６ｍｇ、１３％）を得た。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋４５１．７［ＭＨ］＋。
【０１８０】
中間体５９
ｔｅｒｔ−ブチル５−（｛［４−（４−フルオロフェノキシ）ピペリジン−１−イル］カルボニルアミノ｝メチル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イソインドール−２−カルボキシラート
【０１８１】
【化３４】
2014514246.tif 000042
【０１８２】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］メチル｝カルバメートの代わりにｔｅｒｔ−ブチル５−（アミノメチル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イソインドール−２−カルボキシラートを使用して、中間体５９を中間体２８と同様に調製し、粗表題化合物を得て、これをさらに精製せずに使用した。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋４７０．６［ＭＨ］＋。
【０１８３】
中間体６０
４−ベンジル−Ｎ−［（４−シアノフェニル）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミド
【０１８４】
【化３５】
2014514246.tif 000043
【０１８５】
４−（アミノメチル）ベンゾニトリルヒドロクロリド（６．７９ｇ、４０．３ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２０．７ｍＬ、１２５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１００ｍＬ）に溶解させ、ＣＤＩ（７．１９ｇ、４４．３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍＬ）溶液を添加した。反応混合物を２時間撹拌して、ベンジルピペリジン（７．８５ｍＬ、４４．３ｍｍｏｌ）を滴加し、反応混合物を１６時間撹拌した。溶媒を真空中で除去して、残渣をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）に溶解させて、１Ｍ  ａｑ  ＨＣｌ（２×１００ｍＬ）、１Ｍ  ａｑ  Ｎａ２ＣＯ３（１００ｍＬ）および塩水で洗浄し、溶媒を真空中で除去して、表題化合物（１２．９ｇ、９６％）を黄色固体として得て、これをさらに精製せずに使用した。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋３３４．１［ＭＨ］＋。
【０１８６】
中間体６１
Ｎ−［（４−シアノフェニル）メチル］−４−（ピリジン−４−イルメチル）ピペリジン−１−カルボキサミド
【０１８７】
【化３６】
2014514246.tif 000044
【０１８８】
ＣＤＩ（９０．９ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍＬ）に０℃にて溶解させて、４−アミノメチル−ベンゾニトリル（９０．０ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（７２．４ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１時間にわたって室温まで加温した。反応混合物を０℃まで冷却して、４−ピペリジン−４−イルメチルピリジンジヒドロクロリド（１３９ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２１７ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ ｍＬ）溶液を添加した。反応混合物を時間撹拌して、真空中で濃縮した。残渣をＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（１３９ｍｇ、７８％）を無色固体として得た。ＬＣＭＳ：純度１００％、ＥＳ＋３３５．６［ＭＨ］＋。
【０１８９】
中間体６２
Ｎ−［（４−シアノフェニル）メチル］−３−フェニルピロリジン−１−カルボキサミド
【０１９０】
【化３７】
2014514246.tif 000045
【０１９１】
ＣＤＩ（４４１ｍｇ、２．７２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２５ｍＬ）に溶解させて、０℃まで冷却した。３−フェニルピロリジンＨＣｌ（０．５０ｇ、２．７２ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．４７ｍＬ、２．７２ｍｍｏｌ）を添加して、反応混合物を室温まで加温し、２４時間撹拌した。生成物を水（１５ｍＬ）で粉砕して、固体を濾過により収集した。残渣をＭｅＣＮ（１０ｍＬ）に溶解させ、ヨードメタン（０．６８ｍＬ、１０．９ｍｍｏｌ）を添加して、反応混合物を３日間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮して、ＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解させて、４−アミノメチルベンゾニトリルＨＣｌ（０．３７ｇ、２．１７ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．７２ｍＬ、４．１７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を４８時間撹拌して、真空中で濃縮し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）と水（７０ｍＬ）とで分配した。有機相を１Ｍ  ａｑ  ＨＣｌ（３０ｍＬ）、飽和ａｑ  ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）で洗浄して、脱水（ＭｇＳＯ４）し、真空中で濃縮した。残渣をエーテル（１０ｍＬ）で粉砕して、表題化合物（０．４７ｇ、７１％）をベージュ色固体として得た。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋３０６［ＭＨ］＋＃。
【０１９２】
中間体６３
４−ベンジル−Ｎ−［（４−シアノフェニル）メチル］ピペラジン−１−カルボキサミド
【０１９３】
【化３８】
2014514246.tif 000046
【０１９４】
中間体６３は、１−ベンジルピペラジン（０．７７ｍＬ、４．４４ｍｍｏｌ）および４−アミノメチルベンゾニトリルＨＣｌ（０．７５ｇ、４．４４ｍｍｏｌ）を使用して一般手順Ａと同様に調製して、表題化合物（１．２２ｇ、８２％）黄色油として得た。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋３３５．２［ＭＨ］＋＃。
【０１９５】
中間体６４
４−［（メチルアミノ）メチル］ベンゾニトリル
【０１９６】
【化３９】
2014514246.tif 000047
【０１９７】
メチルアミン（Ｈ２Ｏ中４０％、２５ｍＬ、３２２ｍｍｏｌ）を４−（ブロモメチル）ベンゾニトリル（４．００ｇ、２０．４ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（４０ｍＬ）溶液に添加して、反応混合物を２０時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮して、残渣をカラムクロマトグラフィーで精製し、表題化合物（１．１０ｇ、３７％）黄色油として得た。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋１４７．１［ＭＨ］＋。
【０１９８】
中間体６５
４−ベンジル−Ｎ−［（４−シアノフェニル）メチル］−Ｎ−メチルピペリジン−１−カルボキサミド
【０１９９】
【化４０】
2014514246.tif 000048
【０２００】
表題化合物は、中間体６（１．８０ｇ、４．３８ｍｍｏｌ）および中間体６４（０．７７ｇ、５．２７ｍｍｏｌ）を使用して一般手順Ｂと同様に調製して、表題化合物（１．４１ｍｇ、９３％）を黄色油として得た。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋３４８．１［ＭＨ］＋＃。
【０２０１】
中間体６６
１−ベンジル−Ｎ−［（４−シアノフェニル）メチル］ピペリジン−４−カルボキサミド
【０２０２】
【化４１】
2014514246.tif 000049
【０２０３】
１−ベンジルピペリジン−４−カルボン酸（１．００ｇ、４．５６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５０ｍＬ）溶液に１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドヒドロクロライド（０．９０ｇ、４．５５ｍｍｏｌ）およびヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（０．７０ｇ、４．５６ｍｍｏｌ）を添加して、反応混合物を１５分間撹拌した。反応物を０℃まで冷却して、４−アミノメチルベンゾニトリルヒドロクロライド（０．７７ｇ、４．５６ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１．５８ｍＬ、９．１３ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を２０時間撹拌して、真空中で濃縮した。生成物をＥｔＯＡｃ（７０ｍＬ）と飽和ａｑ  ＮａＨＣＯ３（２０ｍＬ）で分配して、水相をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で抽出した。有機画分を塩水（５０ｍＬ）で洗浄して、脱水（ＭｇＳＯ４）し、真空中で濃縮して、表題化合物（１．３４ｇ、８８％）を黄色固体として得た。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋３３４．１［ＭＨ］＋＃。
【０２０４】
中間体６７
４−ベンジル−Ｎ−［（４−シアノ−２−フルオロフェニル）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミド
【０２０５】
【化４２】
2014514246.tif 000050
【０２０６】
表題化合物は、中間体６（０．７６ｇ、２．６８ｍｍｏｌ）および４−（アミノメチル）−３−フルオロ−ベンゾニトリルＨＣｌ（０．５０ｇ、２．６８ｍｍｏｌ）を使用して一般手順Ｂと同様に調製し、表題化合物（４８２ｍｇ、５１％）を黄色固体として得た。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋３５２．３［ＭＨ］＋＃。
【０２０７】
中間体６８
Ｎ−［（４−シアノフェニル）メチル］−４−［（３−メトキシフェニル）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミド
【０２０８】
【化４３】
2014514246.tif 000051
【０２０９】
ＣＤＩ（６１３ｍｇ、３．７８ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（３０ｍＬ）に溶解させて、０℃まで冷却した。３−メトキシベンジル−４−ピペリジン（１．００ｇ、３．７８ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．６５ｍＬ、３．７８ｍｍｏｌ）を添加して、反応混合物を室温まで加温し、３日間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮して、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）と水（５０ｍＬ）で分配した。水相をＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で洗浄して、合せた有機画分を水（５０ｍＬ）で洗浄し、脱水（ＭｇＳＯ４）して、真空中で濃縮した。残渣ＭｅＣＮ（４０ｍＬ）に溶解させて、ヨードメタン（１．１７ｍＬ、１８．９ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を４日間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮して、ＤＭＦ（２２ｍＬ）中に再溶解させ、４−アミノメチルベンゾニトリルＨＣｌ（０．６４ｇ、３．７８ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１．３１ｍＬ、７．５６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を２４時間撹拌して、真空中で濃縮し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）と水（５０ｍＬ）とで分配した。有機相を水（２×５０ｍＬ）および塩水（５０ｍＬ）で洗浄して、脱水（ＭｇＳＯ４）し、真空中で濃縮して、表題化合物（１．１６ｇ、８４％）薄黄色油として得た。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋３６４．０［ＭＨ］＋＃。
【０２１０】
中間体６９
Ｎ−［（４−シアノフェニル）メチル］−４−［（３−ヒドロキシフェニル）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミド
【０２１１】
【化４４】
2014514246.tif 000052
【０２１２】
中間体６８（３１４ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）の−７８℃のＤＣＭ（１５ｍＬ）溶液に、ＤＣＭ（５ｍＬ）中のＢＢｒ３（０．３５ｍＬ、３．４４ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を−７８℃にて１時間撹拌して、次に室温まで徐々に加温し、さらに２時間撹拌した。混合物を飽和ａｑ  ＮＨ４Ｃｌ（２０ｍＬ）および水（２０ｍＬ）の添加によって反応停止させて、ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出した。合せた有機画分を塩水（５０ｍＬ）で洗浄して、脱水（ＭｇＳＯ４）し、真空中で濃縮して、粗表題化合物を白色泡（２５４ｍｇ、８５％）として得て、これをさらに精製せずに使用した。ＬＣＭＳ：ＥＳ−３４８［Ｍ−Ｈ］−＃。
【０２１３】
中間体７０
４−ベンジル−Ｎ−（プロパ−２−イン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキサミド
【０２１４】
【化４５】
2014514246.tif 000053
【０２１５】
表題化合物は、中間体６（２．００ｇ、４．８６ｍｍｏｌ）およびプロパギルアミン（０．３１ｍＬ、４．８６ｍｍｏｌ）を使用して一般手順Ｂと同様に調製し、表題化合物（１．１０ｇ、８８％）を白色固体として得た。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋２５７．０［ＭＨ］＋。
【０２１６】
中間体７１
２−Ｎ−ベンジル−５−ヨードピリジン−２，４−ジアミン
【０２１７】
【化４６】
2014514246.tif 000054
【０２１８】
２−クロロ−５−ヨードピリジン−４−アミン（１．７８ｇ、７．００ｍｍｏｌ）をＤＭＡ（２０ｍＬ）に溶解させた。４−メトキシベンジルアミン（４．５７ｍＬ、３５．０ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（２．９０ｇ、２１．０ｍｍｏｌ）を添加して、反応混合物を、バイオタージ・マイクロウェーブを使用して１９０℃にて２時間加熱した。溶媒を真空中で除去して、残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製し、表題化合物（０．６７ｇ、２７％）を黄色固体として得た。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋３５５．９［ＭＨ］＋。
【０２１９】
中間体７２
４−ベンジル−Ｎ−｛［６−（ベンジルアミノ）−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル］メチル｝ピペリジン−１−カルボキサミド
【０２２０】
【化４７】
2014514246.tif 000055
【０２２１】
中間体７０（５００ｍｇ、１．９５ｍｍｏｌ）および中間体７１（６９３ｍｇ、１．９５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解させた。ジクロロジ（トリフェニルホスフィノ（ｐｏｈｓｐｈｉｎｏ））パラジウム（６８．７ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（１１．１ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（１．０９ｍＬ、７．８０ｍｍｏｌ）を添加して、反応物を１００℃まで１．５時間加熱した。反応混合物を５０℃まで冷却して、ＤＢＵ（０．５８ｍＬ、３．９０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を５０℃まで３０分間加熱して、室温まで冷却した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈して、飽和ａｑ  ＮＨ４Ｃｌ（２０ ｍＬ）、水（２０ｍＬ）、塩水（２０ｍＬ）で洗浄して、脱水（ＭｇＳＯ４）し、真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物（４０．０ｍｇ、４．２４％）を白色固体として得た。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋４８４．１［ＭＨ］＋。
【０２２２】
中間体７３
４−ベンジル−Ｎ−［（４−シアノフェニル）メチル］ピペリジン−１−カルボチオアミド
【０２２３】
【化４８】
2014514246.tif 000056
【０２２４】
１，１’−チオカルボニルジイミダゾール（５０８ｍｇ、２．８５ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２５ｍＬ）に懸濁させた。４−ベンジルピペリジン（５００ｍｇ、２．８５ｍｍｏｌ）を添加して、反応混合物を３時間撹拌した。溶媒を真空中で除去して、生成物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）に溶解させ、水（１００ｍＬ）、１０％  ａｑクエン酸（１００ｍＬ）、飽和ａｑ  ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）および塩水（１００ｍＬ）で洗浄して、脱水（ＭｇＳＯ４）し、溶媒を真空中で除去した。残渣ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解させて、ＭｅＩ（１．０６ｍＬ、１６．８ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を４８時間撹拌して、真空中で濃縮した。反応混合物をＤＭＦ（１０ｍＬ）に再溶解させて、４−アミノメチルベンゾニトリルＨＣｌ（２８３ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．５８ｍＬ、３．３６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を２４時間撹拌して、真空中で濃縮し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）と水（５０ｍＬ）とで分配した。有機相を水（２×５０ｍＬ）および塩水（５０ｍＬ）で洗浄して、脱水（ＭｇＳＯ４）し、真空中で濃縮して、表題化合物（１７６ｍｇ、３０％）をオレンジ色油として得た。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋３５０．０［ＭＨ］＋＃。
【０２２５】
中間体７４
４−｛［（４−ベンジルピペリジン−１−イル）カルボニルアミノ］メチル｝ベンゾアート
【０２２６】
【化４９】
2014514246.tif 000057
【０２２７】
表題化合物（１．２２ｇ、９２％）は、中間体８の代わりにメチル４−（アミノメチル）−ベンゾアートヒドロクロライドを使用して、中間体４９と同様に、薄黄色固体として調製した。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋３６７．０［ＭＨ］＋。
【０２２８】
中間体７５
４−ベンジル−Ｎ−｛［４−（メチルカルバモイル）フェニル］メチル｝ピペリジン−１−カルボキサミド
【０２２９】
【化５０】
2014514246.tif 000058
【０２３０】
４−｛［（４−ベンジル−ピペリジン−１−カルボニル）−アミノ］−メチル｝−安息香酸メチルエステル（１．２２ｇ、３．３４ｍｍｏｌ）およびＬｉＯＨ一水和物（０．７０ｇ、１６．７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１５ｍＬ）および水（１５ｍＬ）に溶解させて、６０℃にて３時間撹拌した。有機物を真空中で除去して、溶液を水（５ｍＬ）で希釈し、１Ｍ  ａｑ  ＨＣｌ（１０ｍＬ）の添加により酸性化した。混合物をＤＣＭ（２×３０ｍＬ）で抽出した。合せた有機物を水（３０ｍＬ）、塩水（３０ｍＬ）で洗浄して、真空中で濃縮した。残渣をＤＭＦ（８ｍＬ）およびＨＢＴＵ（０．４８ｇ、１．２８ｍｍｏｌ）に溶解させて、ＤＩＰＥＡ（０．５８ｍＬ、３．４８ｍｍｏｌ）、次にメチルアミンヒドロクロライド（０．１６ｇ、２．３２ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温にて一晩撹拌した。
溶媒を真空中で除去した。生成物をＤＣＭに懸濁させ、超音波処理して、生じた固体を収集し、ＤＣＭで洗浄して、表題化合物（０．３４ｇ、８０．２％）を白色固体として得た。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋３６６．０［ＭＨ］＋。
【０２３１】
中間体７６
６−（アミノメチル）ピリジン−３−カルボニトリル
【０２３２】
【化５１】
2014514246.tif 000059
【０２３３】
５−シアノ−２−メチルピリジン（３．５０ｇ、２９．６ｍｍｏｌ）、ＡＩＢＮ（１．４７ｇ、９．００ｍｍｏｌ）およびＮ−ブロモスクシンイミド（５．６０ｇ、３１．１ｍｍｏｌ）を四塩化炭素（３０ｍＬ）に溶解させて、還流下で一晩加熱した。反応混合物をＤＣＭ（４０ｍＬ）で希釈して、飽和ａｑ  ＮａＨＣＯ３（３×１００ｍＬ）で洗浄し、脱水（ＭｇＳＯ４）して、真空中で濃縮した。生成物をカラムクロマトグラフィーによって精製した。残渣をＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解させて、ＮａＨ（０．７８ｇ、１９．５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）による５℃の撹拌懸濁物に添加した。５分後、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルイミノカルボキシラート（３．８７ｇ、１７．８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液を添加して、反応混合物を室温まで加温して、一晩撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮して、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）と水（５０ｍＬ）とで分配した。有機相を水（２×５０ｍＬ）および塩水（５０ｍＬ）で洗浄して、脱水（ＭｇＳＯ４）し、残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製した。残渣をＭｅＯＨ（５０ｍＬ）に溶解させて、０℃まで冷却した。ＨＣｌガスを１５分間通気して、生じた懸濁物を室温にて３時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮して、生成物をヘキサンによって粉砕し、表題化合物（１．５ｇ、９７％）を白色固体として得た。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋１３４．０［ＭＨ］＋＃。
【０２３４】
中間体７７
６−（｛［（４−ベンジルピペリジン−１−イル）カルボニル］アミノ｝メチル）ピリジン−３−カルボキサミド
【０２３５】
【化５２】
2014514246.tif 000060
【０２３６】
表題化合物（１．３０ｇ、６５％）は、中間体８の代わりに中間体７６を使用して、中間体４９と同様に、薄黄色固体として調製した。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋３５３．０［ＭＨ］＋＃。
【０２３７】
中間体７８
４−ベンジル−Ｎ−［（５−シアノピリジン−２−イル）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミド
【０２３８】
【化５３】
2014514246.tif 000061
【０２３９】
中間体７７（３５３ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（３９４ｕＬ、２．３０ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１５ｍＬ）に溶解させて、無水トリフルオロ酢酸（１５３ｕＬ、１．１５ｍｍｏｌ）を添加して、反応混合物を１時間撹拌した。反応混合物を水（１５ｍＬ）で反応停止させて、有機物を真空中で除去した。水相をＥｔＯＡｃ（２×３０ｍＬ）で抽出して、０．１Ｍ  ａｑ  ＨＣｌ（３０ｍＬ）、飽和ａｑ  ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）、塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、脱水（ＭｇＳＯ４）して、真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物（４０．０ｍｇ、４．２４％）を黄色固体として得た。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋３３５．０［ＭＨ］＋＃。
【０２４０】
中間体７９
４−ベンジル−Ｎ−［（６−シアノピリジン−３−イル）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミド
【０２４１】
【化５４】
2014514246.tif 000062
【０２４２】
表題化合物（１．３０ｇ、６５％）は、中間体８の代わりに５−アミノメチルピリジン−２−カルボニトルヒドロクロライドを使用して、中間体４９と同様に、白色固体として調製した。ＬＣＭＳ：ＥＳ＋３３５．０［ＭＨ］＋＃。
【０２４３】
［実施例１］
一般手順Ｃ
（４−｛［（４−ベンジルピペリジン−１−イル）カルボニルアミノ］メチル｝フェニル）メタンアミニウムクロリド
【０２４４】
【化５５】
2014514246.tif 000063
【０２４５】
中間体１７（３６５ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）をジオキサン（５ｍＬ）に溶解させて、ＨＣｌ（１．６６ｍＬ、ジオキサン中４Ｍ、６．６４ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を４日間撹拌して、沈澱を濾過によって収集し、ジオキサンおよびエーテルで洗浄して、表題化合物（２０５ｍｇ、７３％）を黄色固体として得た。Ｃ２１Ｈ２８Ｎ３ＯのＨＲＭＳ計算値：３３８．２２３２、実測値３３８．２２０９。ＨＰＬＣ：Ｒｆ９．４９分、１００％＊。
【０２４６】
［実施例２〜３４］
実施例２〜３４は、一般手順Ｃと同様に調製した；以下の表３を参照のこと。
【０２４７】
表３：中間体Ｂｏｃ保護アミンの脱保護
【０２４８】
【表７】
2014514246.tif 000064
【０２４９】
【表８】
2014514246.tif 000065
【０２５０】
【表９】
2014514246.tif 000066
【０２５１】
【表１０】
2014514246.tif 000067
【０２５２】
【表１１】
2014514246.tif 000068
【０２５３】
【表１２】
2014514246.tif 000069
【０２５４】
【表１３】
2014514246.tif 000070
【０２５５】
【表１４】
2014514246.tif 000071
【０２５６】
【表１５】
2014514246.tif 000072
【０２５７】
［実施例３５］
Ｎ−｛［４−（アミノメチル）−３−フルオロフェニル］メチル｝−４−ベンジルピペリジン−１−カルボキサミド
【０２５８】
【化５６】
2014514246.tif 000073
【０２５９】
中間体４９（０．１３０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）およびＣｏＣｌ２（４７．０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（４ｍＬ）に溶解させて、ＮａＢＨ４（８２．０ｍｇ、２．１６ｍｍｏｌ）を数回に分けて添加した。反応混合物を室温にて１時間撹拌して、１Ｍ  ａｑ  Ｎａ２ＣＯ３（２５ｍＬ）に注入して、ＥｔＯＡｃ（２×２５ｍＬ）で抽出した。合せた有機画分を塩水（５０ｍＬ）で洗浄して、溶媒を真空中で除去した。残渣をＨＰＬＣ（１％ギ酸）によって精製して、脱塩（ＤＣＭ中Ｋ２ＣＯ３）し、表題化合物（２０．０ｍｇ、１６％）を白色固体として得た。Ｃ２１Ｈ２６ＦＮ３Ｏの計算値：３５５．２０５９９１、実測値３５５．２０５６５１。ＨＰＬＣ：Ｒｆ  ５．１１分、９８．５％。
【０２６０】
［実施例３６］
一般手順Ｄ
４−ベンジル−Ｎ−［（４−カルバムイミドイルフェニル）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミド
【０２６１】
【化５７】
2014514246.tif 000074
【０２６２】
中間体６０（６．００ｇ、１８．０ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ（１５０ｍＬ）に溶解させて、０℃まで冷却し、ＨＣｌ（ｇ）を溶液に４５分間通気した。反応混合物を室温にて１６時間にわたって加温して、溶媒を真空中で除去した。残渣をＭｅＯＨ（１００ｍＬ）中の７Ｍ  ＮＨ３に溶解させて、反応混合物を６４時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、残渣を沸騰中のＥｔＯＨ／ＭｅＯＨ（１０：１）に溶解させて、濾過して、真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物（４．４５ｇ、７１％）を白色固体として得た。Ｃ２１Ｈ２６Ｎ４ＯのＨＲＭＳ計算値：３５０．２１０６６２、実測値３５０．２１１８０２。ＨＰＬＣ：Ｒｆ  ５．１１分、１００％。
【０２６３】
［実施例３７〜４７］
実施例３７〜４７は、一般手順Ｄと同様に調製した；以下の表４を参照のこと。
【０２６４】
表４：アミジンの調製
【０２６５】
【表１６】
2014514246.tif 000075
【０２６６】
【表１７】
2014514246.tif 000076
【０２６７】
【表１８】
2014514246.tif 000077
【０２６８】
［実施例５１］
４−ベンジル−Ｎ−｛［４−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）フェニル］メチル｝ピペリジン−１−カルボキサミド
【０２６９】
【化５８】
2014514246.tif 000078
【０２７０】
中間体１０（１００ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．２８ｍＬ、１．７１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解させ、中間体６（２３０ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１６時間撹拌して、溶媒を真空中で除去した。残渣をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）に溶解させて、１Ｍ  ａｑ  ＨＣｌ（２０ｍＬ）、１Ｍ  ａｑ  Ｎａ２ＣＯ３（２０ｍＬ）および塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、溶媒を真空中で除去した。残渣をＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（６１．９ｍｇ、２９％）を白色固体として得た。Ｃ２３Ｈ２６Ｎ４ＯのＨＲＭＳ計算値：３７４．２１０６６１、実測値３７４．２１１７１１。ＨＰＬＣ：Ｒｆ  ５．３０分、１００％。
【０２７１】
［実施例５２］
Ｎ−（１Ｈ−１，３−ベンゾジアゾール−６−イルメチル）−４−ベンジルピペリジン−１−カルボキサミド
【０２７２】
【化５９】
2014514246.tif 000079
【０２７３】
表題化合物（４．０６ｍｇ、７％）は、中間体１０の代わりに中間体１２を使用して、実施例４８と同様に、白色固体として調製した。Ｃ２１Ｈ２４Ｎ４ＯのＨＲＭＳ計算値：３４８．１９５０１１、実測値３４８．１９５６０１。ＨＰＬＣ：Ｒｆ  ５．１１分、１００％。
【０２７４】
［実施例５３］
４−ベンジル−Ｎ−｛１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イルメチル｝ピペリジン−１−カルボキサミド
【０２７５】
【化６０】
2014514246.tif 000080
【０２７６】
表題化合物（６．２７ｍｇ、３％）は、中間体１０の代わりに１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イルメタンアミンを使用して、実施例４８と同様に、白色固体として調製した。Ｃ２１Ｈ２４Ｎ４ＯのＨＲＭＳ計算値：３４８．１９５０１１、実測値３４８．１９５７１１。ＨＰＬＣ：Ｒｆ  ５．１８分、９９．８％。
【０２７７】
［実施例５４］
４−ベンジル−Ｎ−［（１−メチル−１Ｈ−１，３−ベンゾジアゾール−６−イル）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミド
【０２７８】
【化６１】
2014514246.tif 000081
【０２７９】
実施例４９（１００ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（９０．０ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解させて、ヨードメタン（１８．０μＬ、０．２９ｍｍｏｌ）を添加して、混合物を３時間撹拌した。反応混合物をＭｅＯＨで希釈して、真空中で濃縮した。残渣をＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（２１．１ｍｇ、２０％）を白色固体として得た。Ｃ２２Ｈ２６Ｎ４ＯのＨＲＭＳ計算値：３６２．２１０６６１、実測値３６２．２１２２４１。ＨＰＬＣ：Ｒｆ  ５．２４分、９９．３％。
【０２８０】
［実施例５５］
Ｎ−（１Ｈ−１，３−ベンゾジアゾール−６−イルメチル）−４−（４−フルオロフェノキシ）ピペリジン−１−カルボキサミド
【０２８１】
【化６２】
2014514246.tif 000082
【０２８２】
ＣＤＩ（６０．６ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２．５ｍＬ）に溶解させて、中間体１２（５０．０ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（０．５ｍＬ）溶液を添加した。反応混合物を１時間撹拌して、４−（４−フルオロフェノキシ）ピペリジンヒドロクロライド（８６．６ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１３０ｕＬ、０．７５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３．０ ｍＬ）溶液を添加した。反応混合物を１６時間撹拌して、真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーおよびＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（６１．４ｍｇ、４９％）を白色固体として得た。Ｃ２０Ｈ２１ＦＮ４Ｏ２のＨＲＭＳ計算値：３６８．１６４８５４、実測値３６８．１６４９３４。ＨＰＬＣ：Ｒｆ  ４．８３分、１００％。
【０２８３】
［実施例５６〜６０］
実施例５６〜６０は、４−（４−フルオロフェノキシ）ピペリジンの代わりに適切な市販の環状アミン誘導体を使用して、実施例５５と同様に調製した；下の表５を参照のこと。
【０２８４】
表５：１Ｈ−１，３−ベンゾジアゾール−６−イルメタンアミンからの尿素生成
【０２８５】
【表１９】
2014514246.tif 000083
【０２８６】
【表２０】
2014514246.tif 000084
【０２８７】
［実施例６１］
Ｎ−（１Ｈ−１，２，３−ベンゾトリアゾール−６−イルメチル）−４−ベンジルピペリジン−１−カルボキサミド
【０２８８】
【化６３】
2014514246.tif 000085
【０２８９】
中間体１６（５０．０ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）、中間体６（１３０ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．１５ｍＬ、０．９１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３ｍＬ）に溶解させて、１６時間撹拌した。さらなる中間体６（６５．０ｍｇ、０．１５ｍｏｌ）を添加して、反応混合物を２時間撹拌し、真空中で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）に溶解させて、１Ｍ  ａｑ  Ｎａ２ＣＯ３（２０ｍＬ）、飽和ａｑ  ＮＨ４Ｃｌ（２０ｍＬ）および塩水（３０ ｍＬ）で洗浄して、真空中で濃縮した。残渣を逆相ＨＰＬＣによって精製して、ＴＨＦおよび水（４ｍＬ、１：１）に溶解させて、ＬｉＯＨ（過剰量）を添加した。反応混合物を５０℃にて３時間加熱して、溶媒を真空中で除去した。残渣をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）に溶解させて、水（２０ｍＬ）および塩水（２０ｍＬ）で洗浄して、真空中で濃縮した。残渣を逆相ＨＰＬＣによって精製して、脱塩（ＤＣＭ中Ｋ２ＣＯ３）し、表題化合物（９．１０ｍｇ、８％）を白色固体として得た。Ｃ２０Ｈ２３Ｎ５ＯのＨＲＭＳ計算値：３４９．１９０２６、実測値３４９．１９０２７。ＨＰＬＣ：Ｒｆ  ５．８４分、９９．８％。
【０２９０】
［実施例６２］
Ｎ−［（２−アミノ−１Ｈ−１，３−ベンゾジアゾール−６−イル）メチル］−４−ベンジルピペリジン−１−カルボキサミド
【０２９１】
【化６４】
2014514246.tif 000086
【０２９２】
中間体１４（４０．０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）、中間体６（２１０ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１２０μＬ、０．７５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３ｍＬ）に溶解させて、反応混合物を１６時間撹拌した。溶媒を真空中で除去して、残渣をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で希釈し、水（２０ｍＬ）、１Ｍ  ａｑ  Ｎａ２ＣＯ３（３０ ｍＬ）および塩水で洗浄して、溶媒を真空中で除去した。残渣をＴＨＦ／水（１：１、５ｍＬ）に溶解させて、過剰量のＬｉＯＨを添加して、反応混合物を１６時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、残渣をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）に溶解させて、水（２０ｍＬ）および塩水（２０ｍＬ）で洗浄して、真空中で濃縮した。残渣をＨＰＬＣ（１％ＴＦＡ）によって精製して、脱塩（ＤＣＭ中Ｋ２ＣＯ３）し、カラムクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物（９．１３ｍｇ、１０％）を白色固体として得た。Ｃ２１Ｈ２５Ｎ５ＯのＨＲＭＳ計算値：３６３．２０５９１、実測値３６３．２０６１６。ＨＰＬＣ：Ｒｆ  ５．２９分、９７．１％。
【０２９３】
［実施例６３］
２，２，２−トリフルオロ酢酸；４−ベンジル−Ｎ−［（４−カルバムイミドアミドフェニル）メチル］ピペリジン−１−カルボキサミド
【０２９４】
【化６５】
2014514246.tif 000087
【０２９５】
中間体５７（２３０ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍＬ）に溶解させて、ＴＦＡ（２ｍＬ）を添加し、反応混合物を３時間撹拌した。溶媒を真空中で除去して、残渣をＥｔ２Ｏで粉砕し、ＨＰＬＣ（１％ＴＦＡ）によって精製して、表題化合物（９８．０ｍｇ、５０％）を無色ゴム状物質として得た。Ｃ２０Ｈ２５Ｎ５ＯのＨＲＭＳ計算値：３５１．２０５９１、実測値３５１．２０７０３。ＨＰＬＣ：Ｒｆ  ５．２３分、１００％。
【０２９６】
［実施例６４〜６８］
実施例６４〜６８は、実施例６３と同様に調製した；以下の表６を参照のこと。
【０２９７】
表６：中間体Ｂｏｃ保護アミンの脱保護
【０２９８】
【表２１】
2014514246.tif 000088
【０２９９】
【表２２】
2014514246.tif 000089
【０３００】
［実施例６９］
２，２，２−トリフルオロ酢酸；Ｎ−（｛６−アミノ−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル｝メチル）−４−ベンジルピペリジン−１−カルボキサミド
【０３０１】
【化６６】
2014514246.tif 000090
【０３０２】
中間体７２（４０．０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１ｍＬ）およびＴＦＡ（１ｍＬ）に溶解させて、３日間撹拌した。溶媒を真空中で除去して、残渣を逆相クロマトグラフィーによって精製して、表題化合物（１．１３ ｍｇ，３％）を白色固体として得た。ＬＣＭＳ純度１００％、ＥＳ＋３６４．０［ＭＨ］＋。ＨＰＬＣ：Ｒｆ  ５．１３分、９０％。
【０３０３】
［実施例７０］
２，２，２−トリフルオロ酢酸；４−ベンジル−Ｎ−｛［４−（Ｎ’，Ｎ，Ｎ−トリメチルカルバムイミドイル）フェニル］メチル｝ピペリジン−１−カルボキサミド
【０３０４】
【化６７】
2014514246.tif 000091
【０３０５】
中間体７６（０．２０ｇ、０．５５ｍｍｏｌ）、ＰＯＣｌ３（０．０８ｍＬ、０．８３ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．１１ｍＬ、０．６６ｍｍｏｌ）をＤＣＥ（５ｍＬ）に懸濁させて、還流下で２時間加熱した。ジメチルアミンヒドロクロライド（０．２２ｇ、２．７５ｍｍｏｌ）を添加して、混合物を還流下で５日間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、生成物をＤＣＭ（１０ｍＬ）に懸濁させ、超音波処理して、固体を濾過によって除去した。濾液を真空中で濃縮して、ＨＰＬＣ（１％ＴＦＡ）によって精製して、表題化合物（１０．０ｍｇ、３．５９％）を無色フィルムとして得た。ＬＣＭＳ純度１００％、ＥＳ＋３９３．０［ＭＨ］＋。ＨＰＬＣ：Ｒｆ  ５．２４分、９７％。
【０３０６】
［実施例７１］
２，２，２−トリフルオロ酢酸；４−ベンジル−Ｎ−（｛４−［（１Ｚ）−（メチルイミノ）（ピロリジン−１−イル）メチル］フェニル｝メチル）ピペリジン−１−カルボキサミド
【０３０７】
【化６８】
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【０３０８】
中間体７５（０．０８ｇ、０．２２ｍｍｏｌ）、ＰＯＣｌ３（０．０３ｍＬ、０．２６ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．０４ｍＬ、０．２６ｍｍｏｌ）をＤＣＥ（１ｍＬ）に懸濁させて、還流下で２時間加熱した。ピロリジン（０．０９ｍＬ、１．１０ｍｍｏｌ）を添加して、混合物を還流下で一晩撹拌した。溶媒を真空中で除去して、生成物をＤＣＭ（５ｍＬ）に懸濁させ、超音波処理して、固体を濾過によって除去し、残渣をクロマトグラフィーによって精製した。生成物をＤＣＭ（２ｍＬ）およびＴＦＡ（０．５ｍＬ）に溶解させて、室温にて１時間撹拌し、真空中で濃縮して、表題化合物（５．８４ｍｇ、６．５２％）を無色ガラス状物質として得た。ＬＣＭＳ純度１００％、ＥＳ＋４１９．０［ＭＨ］＋。ＨＰＬＣ：Ｒｆ  ５．４５分、９８％。
【０３０９】
生物学的試験
ＰＡＲ２研究
ＰＡＲ２受容体はＧｑシグナル伝達を通じて結合して、カルシウム動員の活性化を生じる。試験化合物の機能活性は、ヒトＰＡＲ２受容体をトランスフェクトした１３２１Ｎ１細胞において、カルシウム流動蛍光イメージング・プレート・リーダ（ＦＬＩＰＲ）アッセイを使用して、用量依存方式で化合物がＰＡＲ２（トリプシン攻撃）活性に拮抗する能力を測定することによって、通常通りに試験を行った。機能的阻害の確認を行うために、Ａ５４９株化細胞中で発現された未変性ＰＡＲ２受容体でも化合物を検査した。
【０３１０】
ＰＡＲ１およびＰＡＲ４受容体と比べたＰＡＲ２受容体への化合物の選択性を、未変性１３２１Ｎ１株化細胞を使用して評価した。ＰＡＲ２受容体における活性が、トリプシンの阻害とは対照的に受容体の直接阻害によるものであることを確認するために、酵素活性に対する社内化合物の活性を測定するために一連のセリンプロテアーゼアッセイを開発した。
【０３１１】
機能的カルシウム動員の研究
簡潔には、試験化合物をＤＭＳＯに２０ｍＭまでの濃度で溶解させて、マトリクス・スクリーンメイト・ラックに保存した。必要量の化合物をアッセイの日に９６ウェル化合物プレートに移し、アッセイ緩衝液で必要な最終濃度に希釈した；用量応答測定は、１０点曲線を作成するための１：３．１６段階希釈物を作製することによってアッセイした。次に化合物を、使用準備の整った３８４ウェルアッセイプレートに移した。化合物の効力に応じて最大濃度を調整して、２００μＭから６．３ｎＭの通例の濃度範囲を使用した。使用したアッセイ緩衝液は、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳおよび０．１％ＢＳＡ（プロテアーゼ不含有）を添加したＨＢＳＳ、ｐＨ７．４であった。ローディング／洗浄緩衝液は、アッセイ緩衝液と同じであった。
【０３１２】
ヒトＰＡＲ２トランスフェクト１３２１Ｎ１細胞は、１０％透析ＦＢＳ、１％ペニシリン／ストレプトマイシン、３７８．５μｇ／ｍｌジェネティシンＧ４１８サルフェートを添加したダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）中で培養して、加湿５％ＣＯ２制御雰囲気中で維持した。２から３日ごとに継代培養を行った。コンフルエントになったらＣａ２＋およびＭｇ２＋不含有ＰＢＳ／０．０２％（重量／体積）ＥＤＴＡを使用して細胞を浮上させて、１０００ｒｐｍにて３分間遠心分離して、培地に２×１０５細胞／ｍＬにて再懸濁させて、３８４ウェル黒色／透明コースタープレート（コースター＃３７１２）に移し（５０μＬ／ウェル）、３７℃にて５％ＣＯ２／９５％空気加湿インキュベータ内で４時間インキュベートした。細胞を３７℃のアッセイ緩衝液でバイオテックＥＬｘ４０５を用いて洗浄し、３回洗浄して、ウェルに緩衝液２０μＬを残した。洗浄後、細胞に、０．４８μｇ／ｍＬプルロン酸を含有する２μＭのフルオ−４ＡＭ染料（モレキュラープローブス）を、３７℃にて５％ＣＯ２下で６０分間添加した。インキュベーション後、細胞を３７℃のアッセイ緩衝液中でバイオテックＥＬｘ４０５を用いて洗浄し、３回洗浄して、各ウェル中に４０μＬを残して、使用前に３７℃にて１０分間インキュベートした。
【０３１３】
組合された作動薬／拮抗薬プロトコルを使用して、細胞内カルシウム濃度の変化を測定した。蛍光分析イメージング・プレート・リーダ（モレキュラーデバイス、サニーベール、カリフォルニア州、米国）を使用して、化合物（拮抗薬）を細胞プレートに添加した。化合物添加（１０μＬ）前に基底蛍光を１０秒間にわたって毎秒記録し、蛍光を１分間にわたって毎秒、次にさらに１分間にわたって６秒ごとに記録した。次に、ＦＬＩＰＲを使用してトリプシン（ＥＣ５０濃度）を添加して、上記のように蛍光を記録した。グラフパッドプリズム４．０（グラフパッドソフトウェアＩｎｃ．、サンディエゴ、カリフォルニア州）を使用して、曲線あてはめおよびパラメータ推定を行った。
【０３１４】
トリプシン酵素阻害
カルビオケムから市販されているプロテアーゼアッセイキット（カタログ番号５３９１２５）を使用して、トリプシン活性の阻害を決定した。キットによって、ＦＴＣ−カゼインの切断生成物を測定することによってトリプシン活性を定量した。酵素阻害活性を測定するために、基質添加前に、化合物をトリプシンで予備インキュベートした。化合物のＩＣ５０をトリプシン阻害のパーセンテージとして決定した。
【０３１５】
本発明の例示した化合物はすべて、ＰＡＲ２の効力のある選択的な阻害剤であることが見出された（表７を参照のこと）。
【０３１６】
表７：ＰＡＲ２拮抗活性
（Ａ：＜５μＭ、Ｂ：５〜２０μＭ、Ｃ：２０〜５０μＭ、Ｄ：５０〜１００μＭ）
【０３１７】
【表２３】
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【国際調査報告】
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2014514246.tif 000104