(57)【要約】血漿カリクレイン結合タンパク質およびかかるタンパク質の使用方法を記載する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
活性形態のヒト血漿カリクレインと結合する抗体もしくはその機能的断片であり、前記抗体もしくはその抗原結合断片はＸ１１５−Ｆ０２の重鎖可変ドメイン由来の３つのＣＤＲ領域および／もしくはＸ１１５−Ｆ０２の軽鎖可変ドメイン由来の３つのＣＤＲ領域を含み、または前記抗体もしくはその抗原結合断片はＸ１２４−Ｇ０１の重鎖可変ドメイン由来の３つのＣＤＲ領域および／もしくはＸ１２４−Ｇ０１の軽鎖可変ドメイン由来の３つのＣＤＲ領域を含む、活性形態のヒト血漿カリクレインと結合する抗体もしくはその機能的断片。
【請求項２】
重鎖可変領域がＸ１１５−Ｆ０２の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖可変領域がＸ１１５−Ｆ０２の軽鎖可変ドメインを含む、請求項１の抗体またはその抗原結合断片。
【請求項３】
重鎖可変領域がＸ１２４−Ｇ０１の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖可変領域がＸ１２４−Ｇ０１の軽鎖可変ドメインを含む、請求項１の抗体またはその抗原結合断片。
【請求項４】
前記抗体またはその機能的断片が血漿カリクレインと結合するおよび血漿カリクレインを阻害する、請求項１の抗体またはその機能的断片。
【請求項５】
請求項１の抗体もしくはその抗原結合断片ならびに医薬上許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項６】
請求項１の抗体またはその抗原結合断片を対象に投与することを含む、対象の血漿カリクレイン関連障害を治療または予防する方法。
【請求項７】
前記血漿カリクレイン関連障害は、浮腫、関節リウマチ、痛風、腸疾患、口腔粘膜炎、神経障害性疼痛、炎症性疼痛、脊髄狭窄−脊髄退化変性疾患、動脈もしくは静脈血栓症、術後イレウス、大動脈瘤、骨関節炎、血管炎、遺伝性血管性浮腫、脳浮腫、肺塞栓症、脳卒中、心室補助装置もしくはステントの凝血、頭部外傷もしくは腫瘍周囲脳浮腫、敗血症、急性中大脳動脈（ＭＣＡ）虚血事象（脳卒中）、再狭窄（例えば、血管形成術後）、全身性紅斑性狼瘡性腎炎、ならびに熱傷からなる群から選択される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
請求項１の抗体またはその抗原結合断片を対象に投与すること；ならびに対象中のタンパク質と血漿カリクレイン間の相互作用が存在する場合に検出することを含む、対象の血漿カリクレインの検出法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、２０１１年１月６日に出願された米国特許出願第６１／４３０，４４２号の優先権を主張する。先の出願の開示は本願の開示の一部である（および参照することにより本願の開示に組み込まれる）とみなされる。
【背景技術】
【０００２】
血漿カリクレインはセリンプロテイナーゼの一種である。プレカリクレインは血漿カリクレインの前駆体である。
【発明の概要】
【０００３】
血漿カリクレインは接触系のセリンプロテイナーゼ成分であり、様々な炎症性、心血管性、感染性（敗血症）および腫瘍性の疾患の潜在的な薬物標的である（Ｓａｉｎｚ  Ｉ．Ｍ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｔｈｒｏｍｂ  Ｈａｅｍｏｓｔ  ９８，７７−８３，２００７）。接触系は、異物のもしくは負荷電の表面との接触時に第ＸＩＩａ因子により、または内皮細胞表面上でプロリルカルボキシペプチダーゼにより活性化される（図１）（Ｓａｉｎｚ  Ｉ．Ｍ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｔｈｒｏｍｂ  Ｈａｅｍｏｓｔ  ９８，７７−８３，２００７）。血漿カリクレインの活性化により、その第ＸＩＩ因子のフィードバック活性化を介して内因性凝固が増幅され、炎症性ノナペプチドであるブラジキニン産生を介して炎症が増強される。血漿カリクレインは循環中の主要なキニノゲナーゼとして、主として血管系におけるブラジキニンの生成に関与する。主要な天然の血漿カリクレイン阻害剤であるＣ１阻害剤タンパク質（Ｃ１−ＩＮＨ）の遺伝的欠損により、遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）が引き起こされる。ＨＡＥの患者は、未知のトリガーによりしばしば誘発される有痛性浮腫の急性発作に襲われる（Ｚｕｒａｗ  Ｂ．Ｌ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３５９，１０２７−１０３６，２００８）。動物モデルにおける薬物使用または遺伝的研究から、血漿カリクレイン−キニン系（血漿ＫＫＳ）が様々な疾患に関与すると考えられている。
【０００４】
血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、抗体、例えば、阻害性抗体）は、効力および特異性が高く、また血清中滞留時間が長いため、様々な疾患および容態、例えば、血漿カリクレイン活性が関与する疾患および容態の治療薬として有用である。効力が高いということは、有効性が高く薬物用量が低いと言い換えることができ、また特異性が高いということは、関連するオフターゲットセリンプロテイナーゼの阻害により副作用を低減す得るということである。一般に、低分子セリンプロテイナーゼの特異性は抗体阻害剤ほど高くはない。血清中滞留時間が長ければ低頻度の投薬が可能となる。
【０００５】
いくつかの態様では、本開示は、活性形態の血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）と結合し、かつ例えば、前血漿カリクレイン（例えば、ヒト前血漿カリクレインおよび／またはマウス前血漿カリクレイン）と結合しない単離タンパク質（例えば、抗体、例えば、ヒト抗体）を特徴とする。
【０００６】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、本明細書に記載のカリクレイン結合タンパク質と同じエピトープと結合するかまたは結合についてそれと競合する。いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、本明細書に記載のタンパク質（例えば、Ｅｐｉ−Ｋａｌ２）および／または低分子（例えば、ＡＥＢＳＦ）と同じエピトープと結合するかまたは結合についてそれと競合し、かつ前血漿カリクレインと結合しない。
【０００７】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１（本明細書では、ＤＸ−２９２２とも呼ばれる）、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される。
【０００８】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１と同じエピトープと競合するかまたは結合し、例えば、前血漿カリクレインと結合しない。
【０００９】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３と同じエピトープと競合するかまたは結合し、例えば、前血漿カリクレインと結合しない。
【００１０】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、Ｘ１０１−Ａ０１と同じ部位と競合するかまたは結合し、例えば、前血漿カリクレインと結合しない。
【００１１】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４と同じ部位と競合するかまたは結合し、例えば、前血漿カリクレインと結合しない。
【００１２】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、Ｘ１１５−Ｆ０２と同じ部位と競合するかまたは結合し、例えば、前血漿カリクレインと結合しない。
【００１３】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、Ｘ１２４−Ｇ０１と同じ部位と競合するかまたは結合し、例えば、前血漿カリクレインと結合しない。
【００１４】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、Ｘ６３−Ｇ０６と同じ部位と競合するかまたは結合し、例えば、前血漿カリクレインと結合しない。
【００１５】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。
【００１６】
ある実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン、またはその断片の触媒ドメインの活性部位またはその付近で結合するかまたは血漿カリクレインの活性部位と重複するエピトープと結合し、例えば、前血漿カリクレインと結合しない。
【００１７】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレインの触媒三連構造を形成するアミノ酸Ｈｉｓ４３４、Ａｓｐ４８３、および／またはＳｅｒ５７８（番号はヒト配列に基づく）の１つまたは複数と結合し、例えば、前血漿カリクレインと結合しない。
【００１８】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、アミノ酸Ｓｅｒ４７９、Ｔｙｒ５６３、および／またはＡｓｐ５８５（番号はヒト配列に基づく）の１つまたは複数と結合し、例えば、前血漿カリクレインと結合しない。
【００１９】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、Ａｒｇ５５１、Ｇｌｎ５５３、Ｔｙｒ５５５、Ｔｈｒ５５８、および／またはＡｒｇ５６０（番号はヒトカリクレインの配列に基づく）の１つまたは複数のアミノ酸と結合する。他の実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、Ａｒｇ５５１、Ｇｌｎ５５３、Ｔｙｒ５５５、Ｔｈｒ５５８、および／またはＡｒｇ５６０（番号はヒト配列に基づく）の２つ、３つ、４つまたは５つ（すなわち、すべて）のアミノ酸と結合し、例えば、前血漿カリクレインと結合しない。
【００２０】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、Ｓ４７８、Ｎ４８１、Ｓ５２５、およびＫ５２６（番号はヒトカリクレインの配列に基づく）の１つまたは複数のアミノ酸と結合する。他の実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、Ｓ４７８、Ｎ４８１、Ｓ５２５、およびＫ５２６（番号はヒトカリクレインの配列に基づく）の２つ、３つまたは４つ（すなわち、すべて）のアミノ酸と結合する。
【００２１】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、第ＸＩＩａ因子および／またはブラジキニン産生を標準、例えば、このタンパク質が存在しない同じ条件下での第ＸＩＩａ因子および／またはブラジキニン産生と比較して、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、または約９５％超低減する。
【００２２】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質の見かけの阻害定数（Ｋｉ，ａｐｐ）は、１０００、５００、１００、１０、１、０．５または０．２ｎＭ未満である。
【００２３】
１つの実施形態では、ＨＣおよびＬＣ可変ドメイン配列は、同じポリペプチド鎖の構成要素である。
【００２４】
別の実施形態では、ＨＣおよびＬＣ可変ドメイン配列は異なるポリペプチド鎖の構成要素である。例えば、このタンパク質は、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４）である。血漿カリクレイン結合タンパク質は、可溶性Ｆａｂ（ｓＦａｂ）であり得る。
【００２５】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、ｉｎ  ｖｉｖｏで、例えば、ヒトにおいて、血清中滞留時間が１週間、２週間、３週間、４週間、５週間またはそれ以上である。１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、ｉｎ  ｖｉｖｏで、例えば、ヒトにおいて、血清中滞留時間が１週間、２週間、３週間、４週間、５週間またはそれ以上であるＩｇＧ、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４である。
【００２６】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質を、血清中滞留時間を向上させる部分、例えば、本明細書に記載の部分と物理的に結合させる。１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、例えば、ＰＥＧ化、血清アルブミン（例えば、ヒト血清アルブミン）への融合、ヒト血清アルブミンへの接合、ＨＥＳ化（ＨＥＳ化は、薬物特徴を修飾するかまたは非構造組換えポリマー（ＵＲＰ）に融合するように薬剤物質に連鎖したヒドロキシエチルデンプン（「ＨＥＳ」）誘導体を利用する）等を含むように修飾する。
【００２７】
他の実施では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、Ｆａｂ２’、ｓｃＦｖ、小体、ｓｃＦｖ：：Ｆｃ融合物、Ｆａｂ：：ＨＳＡ融合物、ＨＳＡ：：Ｆａｂ融合物、Ｆａｂ：：ＨＳＡ：：Ｆａｂ融合物、または本明細書の結合タンパク質の１つの抗原結合部位を含む他の分子を含む。これらＦａｂのＶＨおよびＶＬ領域は、ＩｇＧ、Ｆａｂ、Ｆａｂ２、Ｆａｂ２’、ｓｃＦｖ、ＰＥＧ化Ｆａｂ、ＰＥＧ化ｓｃＦｖ、ＰＥＧ化Ｆａｂ２、ＶＨ：：ＣＨ１：：ＨＳＡ＋ＬＣ、ＨＳＡ：：ＶＨ：：ＣＨ１＋ＬＣ、ＬＣ：：ＨＳＡ＋ＶＨ：：ＣＨ１、ＨＳＡ：：ＬＣ＋ＶＨ：：ＣＨ１、または他の適切な構築物として提供できる。
【００２８】
１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、ヒト抗体またはヒト化抗体であるか、ヒトで非免疫原性を示す。例えば、このタンパク質は、１つまたは複数のヒト抗体フレームワーク領域、例えば、すべてのヒトフレームワーク領域を含む。
【００２９】
１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、ヒトＦｃドメイン、またはヒトＦｃドメインと少なくとも９５、９６、９７、９８、もしくは９９％同じであるＦｃドメインを含む。
【００３０】
１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、霊長類抗体または霊長類化抗体であるか、ヒトで非免疫原性を示す。例えば、このタンパク質は、１つまたは複数の霊長類抗体フレームワーク領域、例えば、すべての霊長類フレームワーク領域を含む。
【００３１】
１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、霊長類Ｆｃドメイン、または霊長類Ｆｃドメインと少なくとも９５、９６、９７、９８、もしくは９９％同じであるＦｃドメインを含む。「霊長類」としては、ヒト（Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ）、チンパンジー（Ｐａｎ  ｔｒｏｇｌｏｄｙｔｅｓおよびＰａｎ  ｐａｎｉｓｃｕｓ（ボノボ））、ゴリラ（Ｇｏｒｉｌｌａ  ｇｏｒｉｌｌａ）、テナガザル、サル、キツネザル、アイアイ（Ｄａｕｂｅｎｔｏｎｉａ  ｍａｄａｇａｓｃａｒｉｅｎｓｉｓ）、およびメガネザルが挙げられる。
【００３２】
１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、ヒトフレームワーク領域、またはヒトフレームワーク領域と少なくとも９５、９６、９７、９８、もしくは９９％同じであるフレームワーク領域を含む。
【００３３】
ある実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、マウスまたはウサギ由来の配列を含まない（例えば、マウスまたはウサギ抗体ではない）。
【００３４】
ある実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、例えば、血漿カリクレインを発現する細胞もしくは組織への結合が可能である。
【００３５】
１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、物理的にナノ粒子と結合し、ナノ粒子を血漿カリクレイン発現細胞もしくは組織へ導く使用できる。
【００３６】
いくつかの態様では、本開示は、本明細書に記載のカリクレイン結合タンパク質と同じエピトープと結合するかまたは結合についてそれと競合する単離タンパク質（例えば、抗体、例えば、ヒト抗体）を特徴とする。
【００３７】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のタンパク質（例えば、Ｅｐｉ−Ｋａｌ２）および／または低分子（例えば、ＡＥＢＳＦ）と同じエピトープと結合するかまたは結合についてそれと競合する。
【００３８】
いくつかの実施形態では、この単離タンパク質は、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列と軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列とを含み：
重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、および／または
軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、
このタンパク質は血漿カリクレインと結合する。
【００３９】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４の重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、
軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４の軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を（それぞれ）含む。
【００４０】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）を阻害する。
【００４１】
いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＸ８１−Ｂ０１由来である、ならびに／または軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＸ８１−Ｂ０１由来である。
【００４２】
いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＸ６７−Ｄ０３由来である、ならびに／または軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＸ６７−Ｄ０３由来である。
【００４３】
いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＸ６３−Ｇ０６由来である、ならびに／または軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＸ６３−Ｇ０６由来である。
【００４４】
いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＭ１６２−Ａ０４由来である、ならびに／または軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＭＪ１６２−Ａ０４由来である。
【００４５】
いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＸ１１５−Ｆ０２由来である、ならびに／または軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＸ１１５−Ｆ０２由来である。
【００４６】
いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＸ１２４−Ｇ０１由来である、ならびに／または軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＸ１２４−Ｇ０１由来である。
【００４７】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメインを含む。
【００４８】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４の軽鎖可変ドメインを（それぞれ）含む。
【００４９】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、Ｘ８１−Ｂ０１の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、Ｘ８１−Ｂ０１の軽鎖可変ドメインを含む。
【００５０】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、Ｘ６７−Ｄ０３の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、Ｘ６７−Ｄ０３の軽鎖可変ドメインを含む。
【００５１】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖、および／または本明細書に記載のタンパク質の軽鎖を含む。
【００５２】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４の重鎖ならびに／またはＭ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４の軽鎖を（それぞれ）含む。
【００５３】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の重鎖ならびに／またはＸ８１−Ｂ０１の軽鎖を含む。
【００５４】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の重鎖ならびに／またはＸ６７−Ｄ０３の軽鎖を含む。
【００５５】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４の重鎖および／またはＭ１６２−Ａ０４の軽鎖を含む。
【００５６】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１１５−Ｆ０２の重鎖および／またはＸ１１５−Ｆ０２の軽鎖を含む。
【００５７】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１２４−Ｇ０１の重鎖および／またはＸ１２４−Ｇ０１の軽鎖を含む。
【００５８】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。
【００５９】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、第ＸＩＩａ因子および／またはブラジキニン産生を標準、例えば、このタンパク質が存在しない同じ条件下での第ＸＩＩａ因子および／またはブラジキニン産生と比較して、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、または約９５％超低減する。
【００６０】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、１つまたは複数の以下の特徴を含む：
（ａ）ヒトＣＤＲもしくはヒトフレームワーク領域；
（ｂ）免疫グロブリンＨＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＨＣ可変ドメインのＣＤＲと少なくとも８５、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、もしくは１００％同じであるＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）含むこと；
（ｃ）免疫グロブリンＬＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＬＣ可変ドメインのＣＤＲと少なくとも８５、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、もしくは１００％同じであるＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）含むこと；
（ｄ）免疫グロブリンＬＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＬＣ可変ドメインと少なくとも８５、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、もしくは１００％同じであること（例えば、全体またはフレームワーク領域またはＣＤＲにおいて）
（ｅ）免疫グロブリンＨＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＨＣ可変ドメインと少なくとも８５、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、もしくは１００％同じであること（例えば、全体またはフレームワーク領域またはＣＤＲにおいて）；
（ｆ）タンパク質が、本明細書に記載のタンパク質によって結合したエピトープと結合する、もしくは本明細書に記載のタンパク質と結合について競合すること；
（ｇ）霊長類ＣＤＲもしくは霊長類フレームワーク領域；
（ｈ）免疫グロブリンＨＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＨＣ可変ドメインのＣＤＲ１と、少なくとも１個、かつ２もしくは３個のみアミノ酸が異なるＣＤＲ１を含むこと；
（ｉ）免疫グロブリンＨＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＨＣ可変ドメインのＣＤＲ２と、少なくとも１個、かつ２、３、４、５、６、７、もしくは８個のみアミノ酸が異なるＣＤＲ２を含むこと；
（ｊ）免疫グロブリンＨＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＨＣ可変ドメインのＣＤＲ３と、少なくとも１個、かつ２、３、４、５、もしくは６個のみアミノ酸が異なるＣＤＲ３を含むこと；
（ｋ）免疫グロブリンＬＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＬＣ可変ドメインのＣＤＲ１と、少なくとも１個、かつ２、３、４、もしくは５個のみアミノ酸が異なるＣＤＲ１を含むこと；
（ｌ）免疫グロブリンＬＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＬＣ可変ドメインのＣＤＲ２と、少なくとも１個、かつ２、３、もしくは４個のみアミノ酸が異なるＣＤＲ２を含むこと；
（ｍ）免疫グロブリンＬＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＬＣ可変ドメインのＣＤＲ３と、少なくとも１個、かつ２、３、４、もしくは５個のみアミノ酸が異なるＣＤＲ３を含むこと；
（ｎ）免疫グロブリンＬＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＬＣ可変ドメインと、少なくとも１個、かつ２、３、４、５、６、７、８、９、もしくは１０個のみアミノ酸が異なること（例えば、全体またはフレームワーク領域またはＣＤＲにおいて）；ならびに
（ｏ）免疫グロブリンＨＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＨＣ可変ドメインと、少なくとも１個、かつ２、３、４、５、６、７、８、９、もしくは１０個のみアミノ酸が異なること（例えば、全体またはフレームワーク領域またはＣＤＲにおいて）。
【００６１】
いくつかの実施形態では、このタンパク質の見かけの阻害定数（Ｋｉ，ａｐｐ）は、１０００、５００、１００、１０、１、０．５または０．２ｎＭ未満である。
【００６２】
いくつかの実施形態では、抗体は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態と結合する。
【００６３】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される抗体の軽鎖および重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００６４】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される抗体の重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００６５】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される抗体の軽鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００６６】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される抗体の軽鎖および重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００６７】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される抗体の重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００６８】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される抗体の軽鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００６９】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる重鎖の群の対応するＣＤＲから選択される重鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００７０】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる軽鎖の群の対応するＣＤＲから選択される軽鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００７１】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる重鎖の群の対応するＣＤＲから選択される重鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）ならびにＭ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４（それぞれ）からなる軽鎖の群の対応するＣＤＲから選択される１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）の軽鎖ＣＤＲ有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００７２】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の軽鎖および重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００７３】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００７４】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の軽鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００７５】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１から選択される抗体の軽鎖および重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００７６】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００７７】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の軽鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００７８】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の重鎖の対応するＣＤＲ由来の重鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００７９】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の軽鎖の対応するＣＤＲ由来の軽鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００８０】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の重鎖由来の重鎖ＣＤＲを１つもしくは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）ならびにＸ８１−Ｂ０１の軽鎖の対応するＣＤＲ由来の軽鎖ＣＤＲを１つもしくは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００８１】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の軽鎖および重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００８２】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００８３】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の軽鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００８４】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３から選択される抗体の軽鎖および重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００８５】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００８６】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の軽鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００８７】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の重鎖の対応するＣＤＲ由来の重鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００８８】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の軽鎖の対応するＣＤＲ由来の軽鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００８９】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の重鎖由来の重鎖ＣＤＲを１つもしくは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）ならびにＸ６７−Ｄ０３の軽鎖の対応するＣＤＲ由来の軽鎖ＣＤＲを１つもしくは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００９０】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１２４−Ｇ０１またはＸ１１５−Ｆ０２の軽鎖および重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００９１】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１２４−Ｇ０１またはＸ１１５−Ｆ０２の重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００９２】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１２４−Ｇ０１またはＸ１１５−Ｆ０２の軽鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００９３】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１２４−Ｇ０１またはＸ１１５−Ｆ０２から選択される抗体の軽鎖および重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００９４】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１２４−Ｇ０１またはＸ１１５−Ｆ０２の重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００９５】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１２４−Ｇ０１またはＸ１１５−Ｆ０２の軽鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００９６】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１２４−Ｇ０１またはＸ１１５−Ｆ０２の重鎖の対応するＣＤＲ由来の重鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００９７】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１２４−Ｇ０１またはＸ１１５−Ｆ０２の軽鎖の対応するＣＤＲ由来の軽鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００９８】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１２４−Ｇ０１またはＸ１１５−Ｆ０２の重鎖由来の重鎖ＣＤＲを１つもしくは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）ならびにＸ１２４−Ｇ０１またはＸ１１５−Ｆ０２の軽鎖の対応するＣＤＲ由来の軽鎖ＣＤＲを１つもしくは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【００９９】
１つの実施形態では、ＨＣおよびＬＣ可変ドメイン配列は、同じポリペプチド鎖の構成要素である。
【０１００】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、ｉｎ  ｖｉｖｏで、例えば、ヒトにおいて、血清中滞留時間が１週間、２週間、３週間、４週間、５週間またはそれ以上である。１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、ｉｎ  ｖｉｖｏで、例えば、ヒトにおいて、血清中滞留時間が１週間、２週間、３週間、４週間、５週間またはそれ以上であるＩｇＧ、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４である。
【０１０１】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質を、血清中滞留時間を向上させる部分、例えば、本明細書に記載の部分と物理的に結合させる。１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、例えば、ＰＥＧ化、血清アルブミン（例えば、ヒト血清アルブミン）への融合、ヒト血清アルブミンへの接合、ＨＥＳ化（ＨＥＳ化は、薬物特徴を修飾するかまたは非構造組換えポリマー（ＵＲＰ）に融合するように薬剤物質に連鎖したヒドロキシエチルデンプン（「ＨＥＳ」）誘導体を利用する）等を含むように修飾する。
【０１０２】
別の実施形態では、ＨＣおよびＬＣ可変ドメイン配列は異なるポリペプチド鎖の構成要素である。例えば、このタンパク質は、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４）である。タンパク質は、可溶性Ｆａｂ（ｓＦａｂ）であり得る。
【０１０３】
他の実施形態では、このタンパク質は、Ｆａｂ２’、ｓｃＦｖ、小体、ｓｃＦｖ：：Ｆｃ融合物、Ｆａｂ：：ＨＳＡ融合物、ＨＳＡ：：Ｆａｂ融合物、Ｆａｂ：：ＨＳＡ：：Ｆａｂ融合物、または本明細書の結合タンパク質の１つの抗原結合部位を含む他の分子を含む。これらＦａｂのＶＨおよびＶＬ領域は、ＩｇＧ、Ｆａｂ、Ｆａｂ２、Ｆａｂ２’、ｓｃＦｖ、ＰＥＧ化Ｆａｂ、ＰＥＧ化ｓｃＦｖ、ＰＥＧ化Ｆａｂ２、ＶＨ：：ＣＨ１：：ＨＳＡ＋ＬＣ、ＨＳＡ：：ＶＨ：：ＣＨ１＋ＬＣ、ＬＣ：：ＨＳＡ＋ＶＨ：：ＣＨ１、ＨＳＡ：：ＬＣ＋ＶＨ：：ＣＨ１、または他の適切な構築物として提供できる。
【０１０４】
１つの実施形態では、このタンパク質は、ヒト抗体またはヒト化抗体であるか、ヒトで非免疫原性を示す。例えば、このタンパク質は、１つまたは複数のヒト抗体フレームワーク領域、例えば、すべてのヒトフレームワーク領域を含む。
【０１０５】
１つの実施形態では、このタンパク質は、ヒトＦｃドメイン、またはヒトＦｃドメインと少なくとも９５、９６、９７、９８、もしくは９９％同じであるＦｃドメインを含む。
【０１０６】
１つの実施形態では、このタンパク質は、霊長類抗体または霊長類化抗体であるか、ヒトで非免疫原性を示す。例えば、このタンパク質は、１つまたは複数の霊長類抗体フレームワーク領域、例えば、すべての霊長類フレームワーク領域を含む。
【０１０７】
１つの実施形態では、このタンパク質は、霊長類Ｆｃドメイン、または霊長類Ｆｃドメインと少なくとも９５、９６、９７、９８、もしくは９９％同じであるＦｃドメインを含む。「霊長類」としては、ヒト（Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ）、チンパンジー（Ｐａｎ  ｔｒｏｇｌｏｄｙｔｅｓおよびＰａｎ  ｐａｎｉｓｃｕｓ（ボノボ））、ゴリラ（Ｇｏｒｉｌｌａ  ｇｏｒｉｌｌａ）、テナガザル、サル、キツネザル、アイアイ（Ｄａｕｂｅｎｔｏｎｉａ  ｍａｄａｇａｓｃａｒｉｅｎｓｉｓ）、およびメガネザルが挙げられる。
【０１０８】
１つの実施形態では、このタンパク質は、ヒトフレームワーク領域、またはヒトフレームワーク領域と少なくとも９５、９６、９７、９８、もしくは９９％同じであるフレームワーク領域を含む。
【０１０９】
ある実施形態では、このタンパク質は、マウスまたはウサギ由来の配列を含まない（例えば、マウスまたはウサギ抗体ではない）。
【０１１０】
ある実施形態では、このタンパク質は、例えば、血漿カリクレインを発現する細胞もしくは組織への結合が可能である。
【０１１１】
１つの実施形態では、このタンパク質は、物理的にナノ粒子と結合し、ナノ粒子を血漿カリクレイン発現細胞もしくは組織へ導く使用できる。
【０１１２】
いくつかの態様では、本開示は、本明細書に記載のカリクレイン結合タンパク質（例えば、医薬上許容される担体を含む）を含む医薬組成物を特徴とする。いくつかの実施形態では、組成物は、他のタンパク質種を少なくとも１０、２０、３０、５０、７５、８５、９０、９５、９８、９９、または９９．９％含まないことができる。１つの実施形態では、医薬組成物は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレイン）と結合しないまたは血漿カリクレイン（例えば、Ｋｉ，ａｐｐ５０００ｎＭ以上のヒト血漿カリクレイン）と結合する結合タンパク質断片を少なくとも１０、２０、３０、５０、７５、８５、９０、９５、９８、９９、または９９．９％含まない。
【０１１３】
いくつかの態様では、本開示は、対象の血漿カリクレイン関連障害を治療または予防する方法を特徴とし、本方法は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）と結合し、例えば、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）と結合しない単離タンパク質（例えば、抗体、例えば、ヒト抗体）を対象に投与することを含む。
【０１１４】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のタンパク質（例えば、Ｅｐｉ−Ｋａｌ２）および／または低分子（例えば、ＡＥＢＳＦ）と同じエピトープと結合するかまたは結合についてそれと競合する。
【０１１５】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のカリクレイン結合タンパク質と同じエピトープと結合するかまたは結合についてそれと競合する。
【０１１６】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン関連障害は、関節リウマチ、痛風、腸疾患、口腔粘膜炎、神経障害性疼痛、炎症性疼痛、脊柱管狭窄−変性脊椎疾患、動脈もしくは静脈血栓症、術後イレウス、大動脈瘤、骨関節炎、血管炎、浮腫、遺伝性血管性浮腫、脳浮腫、肺塞栓症、脳卒中、心室補助装置もしくはステントの凝血、頭部外傷もしくは腫瘍周囲脳浮腫、敗血症、急性中大脳動脈（ＭＣＡ）虚血事象（脳卒中）、再狭窄（例えば、血管形成術後）、全身性紅斑性狼瘡性腎炎、ならびに熱傷からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、接触活性化系（すなわち、内因性の活性化系）に関連した異常な凝血を、例えば、ＡＰＴＴ凝固アッセイによる測定で、少なくとも１０％低減する。他の実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、接触活性化系に関連する異常な凝血を少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９９％、またはさらには１００％（すなわち、異常な凝血が検出されない）低減する。
【０１１７】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質を、障害の別の治療法と併用投与する。
【０１１８】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される。
【０１１９】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１と同じエピトープと競合するかまたは結合する。
【０１２０】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３と同じエピトープと競合するかまたは結合する。
【０１２１】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４またはＸ１１５−Ｆ０２と同じエピトープと競合するかまたは結合する。
【０１２２】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。
【０１２３】
ある実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン、またはその断片の触媒ドメインの活性部位またはその付近と結合するかまたは血漿カリクレインの活性部位と重複するエピトープと結合する。
【０１２４】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレインの触媒三連構造を形成するアミノ酸Ｈｉｓ４３４、Ａｓｐ４８３、および／またはＳｅｒ５７８（番号はヒト配列に基づく）の１つまたは複数と結合する。
【０１２５】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、アミノ酸Ｓｅｒ４７９、Ｔｙｒ５６３、および／またはＡｓｐ５８５（番号はヒト配列に基づく）の１つまたは複数と結合する。
【０１２６】
他の実施形態では、このタンパク質は、Ａｒｇ５５１、Ｇｌｎ５５３、Ｔｙｒ５５５、Ｔｈｒ５５８、および／またはＡｒｇ５６０（番号はヒト配列に基づく）の１つまたは複数のアミノ酸と結合する。いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、Ｓ４７８、Ｎ４８１、Ｓ５２５、およびＫ５２６（番号はヒトカリクレインの配列に基づく）の１つまたは複数のアミノ酸と結合する。
【０１２７】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、第ＸＩＩａ因子および／またはブラジキニン産生を標準、例えば、このタンパク質が存在しない同じ条件下での第ＸＩＩａ因子および／またはブラジキニン産生と比較して、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、または約９５％超低減する。
【０１２８】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質の見かけの阻害定数（Ｋｉ，ａｐｐ）は、１０００、５００、１００、１０、５、１、０．５、または０．２ｎＭ未満である。
【０１２９】
１つの実施形態では、ＨＣおよびＬＣ可変ドメイン配列は、同じポリペプチド鎖の構成要素である。
【０１３０】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、ｉｎ  ｖｉｖｏで、例えば、ヒトにおいて、血清中滞留時間が１週間、２週間、３週間、４週間、５週間またはそれ以上である。１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、ｉｎ  ｖｉｖｏで、例えば、ヒトにおいて、血清中滞留時間が１週間、２週間、３週間、４週間、５週間またはそれ以上であるＩｇＧ、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４である。
【０１３１】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質を、血清中滞留時間を向上させる部分、例えば、本明細書に記載の部分と物理的に結合させる。
【０１３２】
別の実施形態では、ＨＣおよびＬＣ可変ドメイン配列は異なるポリペプチド鎖の構成要素である。例えば、血漿カリクレイン結合タンパク質は、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４）である。血漿カリクレイン結合タンパク質は、可溶性Ｆａｂ（ｓＦａｂ）であり得る。
【０１３３】
他の実施では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、Ｆａｂ２’、ｓｃＦｖ、小体、ｓｃＦｖ：：Ｆｃ融合物、Ｆａｂ：：ＨＳＡ融合物、ＨＳＡ：：Ｆａｂ融合物、Ｆａｂ：：ＨＳＡ：：Ｆａｂ融合物、または本明細書の結合タンパク質の１つの抗原結合部位を含む他の分子を含む。これらＦａｂのＶＨおよびＶＬ領域は、ＩｇＧ、Ｆａｂ、Ｆａｂ２、Ｆａｂ２’、ｓｃＦｖ、ＰＥＧ化Ｆａｂ、ＰＥＧ化ｓｃＦｖ、ＰＥＧ化Ｆａｂ２、ＶＨ：：ＣＨ１：：ＨＳＡ＋ＬＣ、ＨＳＡ：：ＶＨ：：ＣＨ１＋ＬＣ、ＬＣ：：ＨＳＡ＋ＶＨ：：ＣＨ１、ＨＳＡ：：ＬＣ＋ＶＨ：：ＣＨ１、または他の適切な構築物として提供できる。
【０１３４】
１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、ヒト抗体またはヒト化抗体であるか、ヒトで非免疫原性を示す。例えば、このタンパク質は、１つまたは複数のヒト抗体フレームワーク領域、例えば、すべてのヒトフレームワーク領域を含む。
【０１３５】
１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、ヒトＦｃドメイン、またはヒトＦｃドメインと少なくとも９５、９６、９７、９８、もしくは９９％同じであるＦｃドメインを含む。
【０１３６】
１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、霊長類抗体または霊長類化抗体であるか、ヒトで非免疫原性を示す。例えば、このタンパク質は、１つまたは複数の霊長類抗体フレームワーク領域、例えば、すべての霊長類フレームワーク領域を含む。
【０１３７】
１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、霊長類Ｆｃドメイン、または霊長類Ｆｃドメインと少なくとも９５、９６、９７、９８、もしくは９９％同じであるＦｃドメインを含む。「霊長類」としては、ヒト（Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ）、チンパンジー（Ｐａｎ  ｔｒｏｇｌｏｄｙｔｅｓおよびＰａｎ  ｐａｎｉｓｃｕｓ（ボノボ））、ゴリラ（Ｇｏｒｉｌｌａ  ｇｏｒｉｌｌａ）、テナガザル、サル、キツネザル、アイアイ（Ｄａｕｂｅｎｔｏｎｉａ  ｍａｄａｇａｓｃａｒｉｅｎｓｉｓ）、およびメガネザルが挙げられる。
【０１３８】
１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、ヒトフレームワーク領域、またはヒトフレームワーク領域と少なくとも９５、９６、９７、９８、もしくは９９％同じであるフレームワーク領域を含む。
【０１３９】
ある実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、マウスまたはウサギ由来の配列を含まない（例えば、マウスまたはウサギ抗体ではない）。
【０１４０】
ある実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、例えば、血漿カリクレインを発現する細胞もしくは組織への結合が可能である。
【０１４１】
１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、物理的にナノ粒子と結合し、ナノ粒子を血漿カリクレイン発現細胞もしくは組織へ導く使用できる。
【０１４２】
対象の血漿カリクレイン関連障害を治療または予防する方法が提供され、本方法は、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列と軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列とを含む単離タンパク質（例えば、抗体、例えば、ヒト抗体）を対象に投与することを含み、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、このタンパク質は血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）と結合する。
【０１４３】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン関連障害は、関節リウマチ、痛風、腸疾患、口腔粘膜炎、神経障害性疼痛、炎症性疼痛、脊柱管狭窄−変性脊椎疾患、動脈もしくは静脈血栓症、術後イレウス、大動脈瘤、骨関節炎、血管炎、浮腫、遺伝性血管性浮腫、脳浮腫、肺塞栓症、脳卒中、心室補助装置もしくはステントの凝血、頭部外傷もしくは腫瘍周囲脳浮腫、敗血症、急性中大脳動脈（ＭＣＡ）虚血事象（脳卒中）、再狭窄（例えば、血管形成術後）、全身性紅斑性狼瘡性腎炎、ならびに熱傷からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、接触活性化系（すなわち、内因性の活性化系）に関連した異常な凝血を、例えば、ＡＰＴＴ凝固アッセイによる測定で、少なくとも１０％（例えば、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９９％、またはさらには１００％（すなわち、異常な凝血が検出されない））低減する。
【０１４４】
いくつかの実施形態では、このタンパク質を、障害の別の治療法と併用投与する。
【０１４５】
いくつかの実施形態では、このタンパク質を、エカランチド、Ｃ１エステラーゼ阻害剤、アプロチニン、ブラジキニンＢ２受容体阻害剤（例えば、イカチバント）からなる群から選択される第２薬剤と併用投与する。
【０１４６】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４の重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、ならびに／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４の軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域の軽鎖可変ドメインを（それぞれ）含む。
【０１４７】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレインを阻害する。
【０１４８】
いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＸ８１−Ｂ０１由来である、ならびに／または軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＸ８１−Ｂ０１由来である。
【０１４９】
いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＸ６７−Ｄ０３由来である、ならびに／または軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＸ６７−Ｄ０３由来である。
【０１５０】
いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＭ１６２−Ａ０４由来である、ならびに／または軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＭ１６２−Ａ０４由来である。
【０１５１】
いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＸ１１５−Ｆ０２由来である、ならびに／または軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＸ１１５−Ｆ０２由来である。
【０１５２】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメインを含む。
【０１５３】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４の軽鎖可変ドメインを含む。
【０１５４】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、Ｘ８１−Ｂ０１の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、Ｘ８１−Ｂ０１の軽鎖可変ドメインを含む。
【０１５５】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、Ｘ６７−Ｄ０３の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、Ｘ６７−Ｄ０３の軽鎖可変ドメインを含む。
【０１５６】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖、および／または本明細書に記載のタンパク質の軽鎖を含む。
【０１５７】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４の重鎖ならびに／またはＭ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４の軽鎖を（それぞれ）含む。
【０１５８】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の重鎖ならびに／またはＸ８１−Ｂ０１の軽鎖を含む。
【０１５９】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の重鎖ならびに／またはＸ６７−Ｄ０３の軽鎖を含む。
【０１６０】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４の重鎖および／またはＭ１６２−Ａ０４の軽鎖を含む。
【０１６１】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１１５−Ｆ０２もしくはＸ１２４−Ｇ０１の重鎖ならびに／またはＸ１１５−Ｆ０２もしくはＸ１２４−Ｇ０１の軽鎖を含む。
【０１６２】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。
【０１６３】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、第ＸＩＩａ因子および／またはブラジキニン産生を標準、例えば、このタンパク質が存在しない同じ条件下での第ＸＩＩａ因子および／またはブラジキニン産生と比較して、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、または約９５％超低減する。
【０１６４】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、１つまたは複数の以下の特徴を含む：（ａ）ヒトＣＤＲもしくはヒトフレームワーク領域；（ｂ）免疫グロブリンＨＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＨＣ可変ドメインのＣＤＲと少なくとも８５、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、もしくは１００％同じであるＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）含むこと；（ｃ）免疫グロブリンＬＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＬＣ可変ドメインのＣＤＲと少なくとも８５、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、もしくは１００％同じであるＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）含むこと；（ｄ）免疫グロブリンＬＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＬＣ可変ドメインと少なくとも８５、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、もしくは１００％同じであること（例えば、全体またはフレームワーク領域またはＣＤＲにおいて）；（ｅ）免疫グロブリンＨＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＨＣ可変ドメインと少なくとも８５、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、もしくは１００％同じであること（例えば、全体またはフレームワーク領域またはＣＤＲにおいて）；（ｆ）タンパク質が、本明細書に記載のタンパク質によって結合したエピトープと結合する、もしくは本明細書に記載のタンパク質と結合について競合すること；ならびに（ｇ）霊長類ＣＤＲもしくは霊長類フレームワーク領域。
【０１６５】
いくつかの実施形態では、このタンパク質の見かけの阻害定数（Ｋｉ，ａｐｐ）は、１０００、５００、１００、１０、５、１、０．５、または０．２ｎＭ未満である。
【０１６６】
いくつかの実施形態では、抗体は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレイン）の活性形態と結合する。
【０１６７】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される抗体の軽鎖および重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１６８】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される抗体の重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１６９】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される抗体の軽鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１７０】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される抗体の軽鎖および重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１７１】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される抗体の重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１７２】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される抗体の軽鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１７３】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる重鎖の群の対応するＣＤＲから選択される重鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１７４】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる軽鎖の群の対応するＣＤＲから選択される軽鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１７５】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる重鎖の群の対応するＣＤＲから選択される重鎖ＣＤＲを１つもしくは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）ならびにＭ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４（それぞれ）からなる軽鎖の群の対応するＣＤＲから選択される軽鎖ＣＤＲを１つもしくは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１７６】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の軽鎖および重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１７７】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１７８】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の軽鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１７９】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１から選択される抗体の軽鎖および重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１８０】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１８１】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の軽鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１８２】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の重鎖の対応するＣＤＲ由来の重鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１８３】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の軽鎖の対応するＣＤＲ由来の軽鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１８４】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の重鎖由来の重鎖ＣＤＲを１つもしくは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）ならびにＸ８１−Ｂ０１の軽鎖の対応するＣＤＲ由来の軽鎖ＣＤＲを１つもしくは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１８５】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の軽鎖および重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１８６】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１８７】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の軽鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１８８】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３から選択される抗体の軽鎖および重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１８９】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１９０】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の軽鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１９１】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の重鎖の対応するＣＤＲ由来の重鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１９２】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の軽鎖の対応するＣＤＲ由来の軽鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１９３】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の重鎖由来の重鎖ＣＤＲを１つもしくは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）ならびにＸ６７−Ｄ０３の軽鎖の対応するＣＤＲ由来の軽鎖ＣＤＲを１つもしくは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１９４】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１１５−Ｆ０２またはＸ１２４−Ｇ０１の軽鎖および重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１９５】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１１５−Ｆ０２またはＸ１２４−Ｇ０１の重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１９６】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１１５−Ｆ０２またはＸ１２４−Ｇ０１の軽鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１９７】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１１５−Ｆ０２またはＸ１２４−Ｇ０１から選択される抗体の軽鎖および重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１９８】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１１５−Ｆ０２またはＸ１２４−Ｇ０１の重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０１９９】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１１５−Ｆ０２またはＸ１２４−Ｇ０１の軽鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２００】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１１５−Ｆ０２またはＸ１２４−Ｇ０１の重鎖の対応するＣＤＲ由来の重鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２０１】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１１５−Ｆ０２またはＸ１２４−Ｇ０１の軽鎖の対応するＣＤＲ由来の軽鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２０２】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１１５−Ｆ０２もしくはＸ１２４−Ｇ０１の重鎖由来の重鎖ＣＤＲを１つもしくは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）ならびにＸ１１５−Ｆ０２もしくはＸ１２４−Ｇ０１の軽鎖の対応するＣＤＲ由来の軽鎖ＣＤＲを１つもしくは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２０３】
１つの実施形態では、ＨＣおよびＬＣ可変ドメイン配列は、同じポリペプチド鎖の構成要素である。
【０２０４】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、ｉｎ  ｖｉｖｏで、例えば、ヒトにおいて、血清中滞留時間が１週間、２週間、３週間、４週間、５週間またはそれ以上である。１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、ｉｎ  ｖｉｖｏで、例えば、ヒトにおいて、血清中滞留時間が１週間、２週間、３週間、４週間、５週間またはそれ以上であるＩｇＧ、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４である。
【０２０５】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質を、血清中滞留時間を向上させる部分、例えば、本明細書に記載の部分と物理的に結合させる。
【０２０６】
別の実施形態では、ＨＣおよびＬＣ可変ドメイン配列は異なるポリペプチド鎖の構成要素である。例えば、このタンパク質は、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４）である。タンパク質は、可溶性Ｆａｂ（ｓＦａｂ）であり得る。
【０２０７】
他の実施では、タンパク質は、Ｆａｂ２’、ｓｃＦｖ、小体、ｓｃＦｖ：：Ｆｃ融合物、Ｆａｂ：：ＨＳＡ融合物、ＨＳＡ：：Ｆａｂ融合物、Ｆａｂ：：ＨＳＡ：：Ｆａｂ融合物、または本明細書の結合タンパク質の１つの抗原結合部位を含む他の分子を含む。これらＦａｂのＶＨおよびＶＬ領域は、ＩｇＧ、Ｆａｂ、Ｆａｂ２、Ｆａｂ２’、ｓｃＦｖ、ＰＥＧ化Ｆａｂ、ＰＥＧ化ｓｃＦｖ、ＰＥＧ化Ｆａｂ２、ＶＨ：：ＣＨ１：：ＨＳＡ＋ＬＣ、ＨＳＡ：：ＶＨ：：ＣＨ１＋ＬＣ、ＬＣ：：ＨＳＡ＋ＶＨ：：ＣＨ１、ＨＳＡ：：ＬＣ＋ＶＨ：：ＣＨ１、または他の適切な構築物として提供できる。
【０２０８】
１つの実施形態では、このタンパク質は、ヒト抗体またはヒト化抗体であるか、ヒトで非免疫原性を示す。例えば、このタンパク質は、１つまたは複数のヒト抗体フレームワーク領域、例えば、すべてのヒトフレームワーク領域を含む。
【０２０９】
１つの実施形態では、このタンパク質は、ヒトＦｃドメイン、またはヒトＦｃドメインと少なくとも９５、９６、９７、９８、もしくは９９％同じであるＦｃドメインを含む。
【０２１０】
１つの実施形態では、このタンパク質は、霊長類抗体または霊長類化抗体であるか、ヒトで非免疫原性を示す。例えば、このタンパク質は、１つまたは複数の霊長類抗体フレームワーク領域、例えば、すべての霊長類フレームワーク領域を含む。
【０２１１】
１つの実施形態では、このタンパク質は、霊長類Ｆｃドメイン、または霊長類Ｆｃドメインと少なくとも９５、９６、９７、９８、もしくは９９％同じであるＦｃドメインを含む。「霊長類」としては、ヒト（Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ）、チンパンジー（Ｐａｎ  ｔｒｏｇｌｏｄｙｔｅｓおよびＰａｎ  ｐａｎｉｓｃｕｓ（ボノボ））、ゴリラ（Ｇｏｒｉｌｌａ  ｇｏｒｉｌｌａ）、テナガザル、サル、キツネザル、アイアイ（Ｄａｕｂｅｎｔｏｎｉａ  ｍａｄａｇａｓｃａｒｉｅｎｓｉｓ）、およびメガネザルが挙げられる。
【０２１２】
１つの実施形態では、このタンパク質は、ヒトフレームワーク領域、またはヒトフレームワーク領域と少なくとも９５、９６、９７、９８、もしくは９９％同じであるフレームワーク領域を含む。
【０２１３】
ある実施形態では、このタンパク質は、マウスまたはウサギ由来の配列を含まない（例えば、マウスまたはウサギ抗体ではない）。
【０２１４】
ある実施形態では、このタンパク質は、例えば、血漿カリクレインを発現する細胞もしくは組織への結合が可能である。
【０２１５】
１つの実施形態では、このタンパク質は、物理的にナノ粒子と結合し、ナノ粒子を血漿カリクレイン発現細胞もしくは組織へ導く使用できる。
【０２１６】
いくつかの態様では、本開示は、対象の創傷治癒を促進する方法を特徴とし、本方法は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）と結合し、例えば、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）と結合しない単離タンパク質（例えば、抗体、例えば、ヒト抗体）を対象に投与することを含む。
【０２１７】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のカリクレイン結合タンパク質と同じエピトープと結合するかまたは結合についてそれと競合する。いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のタンパク質（例えば、Ｅｐｉ−Ｋａｌ２）および／または低分子（例えば、ＡＥＢＳＦ）と同じエピトープと結合するかまたは結合についてそれと競合する。
【０２１８】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、別の創傷治癒治療と併用投与する。
【０２１９】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される。
【０２２０】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１と同じエピトープと競合するかまたは結合する。
【０２２１】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３と同じエピトープと競合するかまたは結合する。
【０２２２】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４と同じエピトープと競合するかまたは結合する。
【０２２３】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、Ｘ１１５−Ｆ０２またはＸ１２４−Ｇ０１と同じエピトープと競合するかまたは結合する。
【０２２４】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレイン）と結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレイン）の活性形態と結合する。
【０２２５】
ある実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン、またはその断片の触媒ドメインの活性部位またはその付近と結合するかまたは血漿カリクレインの活性部位と重複するエピトープと結合する。
【０２２６】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレインの触媒三連構造を形成するアミノ酸Ｈｉｓ４３４、Ａｓｐ４８３、および／またはＳｅｒ５７８（番号はヒト配列に基づく）の１つまたは複数と結合する。他の実施形態では、このタンパク質は、基質認識領域を形成するＡｒｇ５５１、Ｇｌｎ５５３、Ｔｙｒ５５５、Ｔｈｒ５５８、および／またはＡｒｇ５６０（番号はヒト配列に基づく）の１つまたは複数のアミノ酸と結合する。いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、Ｓ４７８、Ｎ４８１、Ｓ５２５、およびＫ５２６（番号はヒトカリクレインの配列に基づく）の１つまたは複数のアミノ酸と結合する。
【０２２７】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、アミノ酸Ｓｅｒ４７９、Ｔｙｒ５６３、および／またはＡｓｐ５８５（番号はヒト配列に基づく）の１つまたは複数と結合する。
【０２２８】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、第ＸＩＩａ因子および／またはブラジキニン産生を標準、例えば、このタンパク質が存在しない同じ条件下での第ＸＩＩａ因子および／またはブラジキニン産生と比較して、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、または約９５％超低減する。
【０２２９】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質の見かけの阻害定数（Ｋｉ，ａｐｐ）は、１０００、５００、１００、１０、５、１、０．５、または０．２ｎＭ未満である。
【０２３０】
１つの実施形態では、ＨＣおよびＬＣ可変ドメイン配列は、同じポリペプチド鎖の構成要素である。
【０２３１】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、ｉｎ  ｖｉｖｏで、例えば、ヒトにおいて、血清中滞留時間が１週間、２週間、３週間、４週間、５週間またはそれ以上である。１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、ｉｎ  ｖｉｖｏで、例えば、ヒトにおいて、血清中滞留時間が１週間、２週間、３週間、４週間、５週間またはそれ以上であるＩｇＧ、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４である。
【０２３２】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質を、血清中滞留時間を向上させる部分、例えば、本明細書に記載の部分と物理的に結合させる。
【０２３３】
別の実施形態では、ＨＣおよびＬＣ可変ドメイン配列は異なるポリペプチド鎖の構成要素である。例えば、血漿カリクレイン結合タンパク質は、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４）である。血漿カリクレイン結合タンパク質は、可溶性Ｆａｂ（ｓＦａｂ）であり得る。
【０２３４】
他の実施では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、Ｆａｂ２’、ｓｃＦｖ、小体、ｓｃＦｖ：：Ｆｃ融合物、Ｆａｂ：：ＨＳＡ融合物、ＨＳＡ：：Ｆａｂ融合物、Ｆａｂ：：ＨＳＡ：：Ｆａｂ融合物、または本明細書の結合タンパク質の１つの抗原結合部位を含む他の分子を含む。これらＦａｂのＶＨおよびＶＬ領域は、ＩｇＧ、Ｆａｂ、Ｆａｂ２、Ｆａｂ２’、ｓｃＦｖ、ＰＥＧ化Ｆａｂ、ＰＥＧ化ｓｃＦｖ、ＰＥＧ化Ｆａｂ２、ＶＨ：：ＣＨ１：：ＨＳＡ＋ＬＣ、ＨＳＡ：：ＶＨ：：ＣＨ１＋ＬＣ、ＬＣ：：ＨＳＡ＋ＶＨ：：ＣＨ１、ＨＳＡ：：ＬＣ＋ＶＨ：：ＣＨ１、または他の適切な構築物として提供できる。
【０２３５】
１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、ヒト抗体またはヒト化抗体であるか、ヒトで非免疫原性を示す。例えば、このタンパク質は、１つまたは複数のヒト抗体フレームワーク領域、例えば、すべてのヒトフレームワーク領域を含む。
【０２３６】
１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、ヒトＦｃドメイン、またはヒトＦｃドメインと少なくとも９５、９６、９７、９８、もしくは９９％同じであるＦｃドメインを含む。
【０２３７】
１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、霊長類抗体または霊長類化抗体であるか、ヒトで非免疫原性を示す。例えば、このタンパク質は、１つまたは複数の霊長類抗体フレームワーク領域、例えば、すべての霊長類フレームワーク領域を含む。
【０２３８】
１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、霊長類Ｆｃドメイン、または霊長類Ｆｃドメインと少なくとも９５、９６、９７、９８、もしくは９９％同じであるＦｃドメインを含む。「霊長類」としては、ヒト（Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ）、チンパンジー（Ｐａｎ  ｔｒｏｇｌｏｄｙｔｅｓおよびＰａｎ  ｐａｎｉｓｃｕｓ（ボノボ））、ゴリラ（Ｇｏｒｉｌｌａ  ｇｏｒｉｌｌａ）、テナガザル、サル、キツネザル、アイアイ（Ｄａｕｂｅｎｔｏｎｉａ  ｍａｄａｇａｓｃａｒｉｅｎｓｉｓ）、およびメガネザルが挙げられる。
【０２３９】
１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、ヒトフレームワーク領域、またはヒトフレームワーク領域と少なくとも９５、９６、９７、９８、もしくは９９％同じであるフレームワーク領域を含む。
【０２４０】
ある実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、マウスまたはウサギ由来の配列を含まない（例えば、マウスまたはウサギ抗体ではない）。
【０２４１】
ある実施形態では、このタンパク質は、例えば、血漿カリクレインを発現する細胞もしくは組織への結合が可能である。
【０２４２】
１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、物理的にナノ粒子と結合し、ナノ粒子を血漿カリクレイン発現細胞もしくは組織へ導く使用できる。
【０２４３】
いくつかの態様では、本開示は、対象の創傷治癒を促進する方法を特徴とし、本方法は、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列と軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列とを含む単離タンパク質（例えば、抗体、例えば、ヒト抗体）を対象に投与することを含み、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、このタンパク質は血漿カリクレインと結合する。
【０２４４】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、別の創傷治癒治療と併用投与する。
【０２４５】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４の重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、ならびに／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４の軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域の軽鎖可変ドメインを（それぞれ）含む。
【０２４６】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレインを阻害する。
【０２４７】
いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＸ８１−Ｂ０１由来である、ならびに／または軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＸ８１−Ｂ０１由来である。
【０２４８】
いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＸ６７−Ｄ０３由来である、ならびに／または軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＸ６７−Ｄ０３由来である。
【０２４９】
いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＭ１６２−Ａ０４由来である、ならびに／または軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＭ１６２−Ａ０４由来である。
【０２５０】
いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＭ１９９−Ａ０８由来である、ならびに／または軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＭ１９９−Ａ０８由来である。
【０２５１】
いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＸ１１５−Ｆ０２またはＸ１２４−Ｇ０１由来である、ならびに／または軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域はＸ１１５−Ｆ０２もしくはＸ１２４−Ｇ０１由来である。
【０２５２】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメインを含む。
【０２５３】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４の軽鎖可変ドメインを（それぞれ）含む。
【０２５４】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、Ｘ８１−Ｂ０１の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、Ｘ８１−Ｂ０１の軽鎖可変ドメインを含む。
【０２５５】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、Ｘ６７−Ｄ０３の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、Ｘ６７−Ｄ０３の軽鎖可変ドメインを含む。
【０２５６】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖、および／または本明細書に記載のタンパク質の軽鎖を含む。
【０２５７】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４の重鎖ならびに／またはＭ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４の軽鎖を（それぞれ）含む。
【０２５８】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の重鎖ならびに／またはＸ８１−Ｂ０１の軽鎖を含む。
【０２５９】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の重鎖ならびに／またはＸ６７−Ｄ０３の軽鎖を含む。
【０２６０】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４の重鎖および／またはＭ１６２−Ａ０４の軽鎖を含む。
【０２６１】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１１５−Ｆ０２もしくはＸ１２４−Ｇ０１の重鎖ならびに／またはＸ１１５−Ｆ０２もしくはＸ１２４−Ｇ０１の軽鎖を含む。
【０２６２】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。
【０２６３】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、第ＸＩＩａ因子および／またはブラジキニン産生を標準、例えば、このタンパク質が存在しない同じ条件下での第ＸＩＩａ因子および／またはブラジキニン産生と比較して、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、または約９５％超低減する。
【０２６４】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、１つまたは複数の以下の特徴を含む：
（ａ）ヒトＣＤＲもしくはヒトフレームワーク領域；
（ｂ）免疫グロブリンＨＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＨＣ可変ドメインのＣＤＲと少なくとも８５、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、もしくは１００％同じであるＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）含むこと；
（ｃ）免疫グロブリンＬＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＬＣ可変ドメインのＣＤＲと少なくとも８５、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、もしくは１００％同じであるＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）含むこと；
（ｄ）免疫グロブリンＬＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＬＣ可変ドメインと少なくとも８５、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、もしくは１００％同じであること（例えば、全体またはフレームワーク領域またはＣＤＲにおいて）
（ｅ）免疫グロブリンＨＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＨＣ可変ドメインと少なくとも８５、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、もしくは１００％同じであること（例えば、全体またはフレームワーク領域またはＣＤＲにおいて）；
（ｆ）タンパク質が、本明細書に記載のタンパク質によって結合したエピトープと結合する、もしくは本明細書に記載のタンパク質と結合について競合すること；ならびに
（ｇ）霊長類ＣＤＲもしくは霊長類フレームワーク領域。
【０２６５】
いくつかの実施形態では、このタンパク質の見かけの阻害定数（Ｋｉ，ａｐｐ）は、１０００、５００、１００、５、１、０．５または０．２ｎＭ未満である。
【０２６６】
いくつかの実施形態では、抗体は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態と結合する。
【０２６７】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ−１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される抗体の軽鎖および重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２６８】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される抗体の重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２６９】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される抗体の軽鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２７０】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される抗体の軽鎖および重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２７１】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される抗体の重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２７２】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される抗体の軽鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２７３】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる重鎖の群の対応するＣＤＲから選択される重鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２７４】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる軽鎖の群の対応するＣＤＲから選択される軽鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２７５】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる重鎖の群の対応するＣＤＲから選択される重鎖ＣＤＲを１つもしくは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）ならびにＭ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４（それぞれ）からなる軽鎖の群の対応するＣＤＲから選択される軽鎖ＣＤＲを１つもしくは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２７６】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の軽鎖および重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２７７】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２７８】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の軽鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２７９】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１から選択される抗体の軽鎖および重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２８０】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２８１】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の軽鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２８２】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の重鎖の対応するＣＤＲ由来の重鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２８３】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の軽鎖の対応するＣＤＲ由来の軽鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２８４】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ８１−Ｂ０１の重鎖由来の重鎖ＣＤＲを１つもしくは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）ならびにＸ８１−Ｂ０１の軽鎖の対応するＣＤＲ由来の軽鎖ＣＤＲを１つもしくは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２８５】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の軽鎖および重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２８６】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２８７】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の軽鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２８８】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３から選択される抗体の軽鎖および重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２８９】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２９０】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の軽鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２９１】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の重鎖の対応するＣＤＲ由来の重鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２９２】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の軽鎖の対応するＣＤＲ由来の軽鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２９３】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ６７−Ｄ０３の重鎖由来の重鎖ＣＤＲを１つもしくは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）ならびにＸ６７−Ｄ０３の軽鎖の対応するＣＤＲ由来の軽鎖ＣＤＲを１つもしくは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２９４】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１１５−Ｆ０２またはＸ１２４−Ｇ０１の軽鎖および重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２９５】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１１５−Ｆ０２またはＸ１２４−Ｇ０１の重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２９６】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１１５−Ｆ０２またはＸ１２４−Ｇ０１の軽鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２９７】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１１５−Ｆ０２またはＸ１２４−Ｇ０１から選択される抗体の軽鎖および重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２９８】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１１５−Ｆ０２またはＸ１２４−Ｇ０１の重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０２９９】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１１５−Ｆ０２またはＸ１２４−Ｇ０１の軽鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０３００】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１１５−Ｆ０２またはＸ１２４−Ｇ０１の重鎖の対応するＣＤＲ由来の重鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０３０１】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１１５−Ｆ０２またはＸ１２４−Ｇ０１の軽鎖の対応するＣＤＲ由来の軽鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０３０２】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｘ１１５−Ｆ０２もしくはＸ１２４−Ｇ０１の重鎖由来の重鎖ＣＤＲを１つもしくは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）ならびにＸ１１５−Ｆ０２もしくはＸ１２４−Ｇ０１の軽鎖の対応するＣＤＲ由来の軽鎖ＣＤＲを１つもしくは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０３０３】
１つの実施形態では、ＨＣおよびＬＣ可変ドメイン配列は、同じポリペプチド鎖の構成要素である。
【０３０４】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、ｉｎ  ｖｉｖｏで、例えば、ヒトにおいて、血清中滞留時間が１週間、２週間、３週間、４週間、５週間またはそれ以上である。１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、ｉｎ  ｖｉｖｏで、例えば、ヒトにおいて、血清中滞留時間が１週間、２週間、３週間、４週間、５週間またはそれ以上であるＩｇＧ、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４である。
【０３０５】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質を、血清中滞留時間を向上させる部分、例えば、本明細書に記載の部分と物理的に結合させる。
【０３０６】
別の実施形態では、ＨＣおよびＬＣ可変ドメイン配列は異なるポリペプチド鎖の構成要素である。例えば、このタンパク質は、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４）である。タンパク質は、可溶性Ｆａｂ（ｓＦａｂ）であり得る。
【０３０７】
他の実施では、タンパク質は、Ｆａｂ２’、ｓｃＦｖ、小体、ｓｃＦｖ：：Ｆｃ融合物、Ｆａｂ：：ＨＳＡ融合物、ＨＳＡ：：Ｆａｂ融合物、Ｆａｂ：：ＨＳＡ：：Ｆａｂ融合物、または本明細書の結合タンパク質の１つの抗原結合部位を含む他の分子を含む。これらＦａｂのＶＨおよびＶＬ領域は、ＩｇＧ、Ｆａｂ、Ｆａｂ２、Ｆａｂ２’、ｓｃＦｖ、ＰＥＧ化Ｆａｂ、ＰＥＧ化ｓｃＦｖ、ＰＥＧ化Ｆａｂ２、ＶＨ：：ＣＨ１：：ＨＳＡ＋ＬＣ、ＨＳＡ：：ＶＨ：：ＣＨ１＋ＬＣ、ＬＣ：：ＨＳＡ＋ＶＨ：：ＣＨ１、ＨＳＡ：：ＬＣ＋ＶＨ：：ＣＨ１、または他の適切な構築物として提供できる。
【０３０８】
１つの実施形態では、このタンパク質は、ヒト抗体またはヒト化抗体であるか、ヒトで非免疫原性を示す。例えば、このタンパク質は、１つまたは複数のヒト抗体フレームワーク領域、例えば、すべてのヒトフレームワーク領域を含む。
【０３０９】
１つの実施形態では、このタンパク質は、ヒトＦｃドメイン、またはヒトＦｃドメインと少なくとも９５、９６、９７、９８、もしくは９９％同じであるＦｃドメインを含む。
【０３１０】
１つの実施形態では、このタンパク質は、霊長類抗体または霊長類化抗体であるか、ヒトで非免疫原性を示す。例えば、このタンパク質は、１つまたは複数の霊長類抗体フレームワーク領域、例えば、すべての霊長類フレームワーク領域を含む。
【０３１１】
１つの実施形態では、このタンパク質は、霊長類Ｆｃドメイン、または霊長類Ｆｃドメインと少なくとも９５、９６、９７、９８、もしくは９９％同じであるＦｃドメインを含む。「霊長類」としては、ヒト（Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ）、チンパンジー（Ｐａｎ  ｔｒｏｇｌｏｄｙｔｅｓおよびＰａｎ  ｐａｎｉｓｃｕｓ（ボノボ））、ゴリラ（Ｇｏｒｉｌｌａ  ｇｏｒｉｌｌａ）、テナガザル、サル、キツネザル、アイアイ（Ｄａｕｂｅｎｔｏｎｉａ  ｍａｄａｇａｓｃａｒｉｅｎｓｉｓ）、およびメガネザルが挙げられる。
【０３１２】
１つの実施形態では、このタンパク質は、ヒトフレームワーク領域、またはヒトフレームワーク領域と少なくとも９５、９６、９７、９８、もしくは９９％同じであるフレームワーク領域を含む。
【０３１３】
ある実施形態では、このタンパク質は、マウスまたはウサギ由来の配列を含まない（例えば、マウスまたはウサギ抗体ではない）。
【０３１４】
ある実施形態では、このタンパク質は、例えば、血漿カリクレインを発現する細胞もしくは組織への結合が可能である。
【０３１５】
１つの実施形態では、このタンパク質は、物理的にナノ粒子と結合し、ナノ粒子を血漿カリクレイン発現細胞もしくは組織へ導く使用できる。
【０３１６】
いくつかの態様では、本開示は、対象のリウマチ性関節炎を治療または予防する方法を特徴とし、本方法は、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列と軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列とを含む単離タンパク質（例えば、抗体、例えば、ヒト抗体）を対象に投与することを含み、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、このタンパク質は血漿カリクレインと結合する。
【０３１７】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。
【０３１８】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、別の関節リウマチ治療と併用投与する。
【０３１９】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）を阻害する。
【０３２０】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメインを含む。
【０３２１】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖、および／または本明細書に記載のタンパク質の軽鎖を含む。
【０３２２】
いくつかの態様では、本開示は、対象の痛風を治療または予防する方法を特徴とし、本方法は、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列と軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列とを含む単離タンパク質（例えば、抗体、例えば、ヒト抗体）を対象に投与することを含み、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、このタンパク質は血漿カリクレインと結合する。
【０３２３】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。
【０３２４】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、別の痛風治療と併用投与する。
【０３２５】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）を阻害する。
【０３２６】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメインを含む。
【０３２７】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖、および／または本明細書に記載のタンパク質の軽鎖を含む。
【０３２８】
いくつかの態様では、本開示は、対象の腸疾患を治療または予防する方法を特徴とし、本方法は、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列と軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列とを含む単離タンパク質（例えば、抗体、例えば、ヒト抗体）を対象に投与することを含み、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、このタンパク質は血漿カリクレインと結合する。
【０３２９】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。
【０３３０】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、別の腸疾患治療と併用投与する。
【０３３１】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）を阻害する。
【０３３２】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメインを含む。
【０３３３】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖、および／または本明細書に記載のタンパク質の軽鎖を含む。
【０３３４】
いくつかの態様では、本開示は、対象の口腔粘膜炎を治療または予防する方法を特徴とし、本方法は、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列と軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列とを含む単離タンパク質（例えば、抗体、例えば、ヒト抗体）を対象に投与することを含み、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、このタンパク質は血漿カリクレインと結合する。
【０３３５】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。
【０３３６】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、別の口腔粘膜炎治療と併用投与する。
【０３３７】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）を阻害する。
【０３３８】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメインを含む。
【０３３９】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖、および／または本明細書に記載のタンパク質の軽鎖を含む。
【０３４０】
いくつかの態様では、本開示は、対象の神経障害性疼痛を治療または予防する方法を特徴とし、本方法は、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列と軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列とを含む単離タンパク質（例えば、抗体、例えば、ヒト抗体）を対象に投与することを含み、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、このタンパク質は血漿カリクレインと結合する。
【０３４１】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。
【０３４２】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、別の神経障害性疼痛治療と併用投与する。
【０３４３】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）を阻害する。
【０３４４】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメインを含む。
【０３４５】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖、および／または本明細書に記載のタンパク質の軽鎖を含む。
【０３４６】
いくつかの態様では、本開示は、対象の炎症性疼痛を治療または予防する方法を特徴とし、本方法は、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列と軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列とを含む単離タンパク質（例えば、抗体、例えば、ヒト抗体）を対象に投与することを含み重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、このタンパク質は血漿カリクレインと結合する。
【０３４７】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。
【０３４８】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、別の炎症性疼痛治療と併用投与する。
【０３４９】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）を阻害する。
【０３５０】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメインを含む。
【０３５１】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖、および／または本明細書に記載のタンパク質の軽鎖を含む。
【０３５２】
いくつかの態様では、本開示は、対象の脊柱管狭窄−変性脊椎疾患を治療または予防する方法を特徴とし、本方法は、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列と軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列とを含む単離タンパク質（例えば、抗体、例えば、ヒト抗体）を対象に投与することを含み、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、このタンパク質は血漿カリクレインと結合する。
【０３５３】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。
【０３５４】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、別の脊柱管狭窄−変性脊椎疾患治療と併用投与する。
【０３５５】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）を阻害する。
【０３５６】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメインを含む。
【０３５７】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖、および／または本明細書に記載のタンパク質の軽鎖を含む。
【０３５８】
いくつかの態様では、本開示は、対象の動脈もしくは静脈血栓症を治療または予防する方法を特徴とし、本方法は、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列と軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列とを含む単離タンパク質（例えば、抗体、例えば、ヒト抗体）を対象に投与することを含み、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、このタンパク質は血漿カリクレインと結合する。
【０３５９】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。
【０３６０】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、別の動脈もしくは静脈血栓症治療と併用投与する。
【０３６１】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）を阻害する。
【０３６２】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメインを含む。
【０３６３】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖、および／または本明細書に記載のタンパク質の軽鎖を含む。
【０３６４】
いくつかの態様では、本開示は、対象の術後イレウスを治療または予防する方法を特徴とし、本方法は、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列と軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列とを含む単離タンパク質（例えば、抗体、例えば、ヒト抗体）を対象に投与することを含み、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、このタンパク質は血漿カリクレインと結合する。
【０３６５】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。
【０３６６】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、別の術後イレウス治療と併用投与する。
【０３６７】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）を阻害する。
【０３６８】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメインを含む。
【０３６９】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖、および／または本明細書に記載のタンパク質の軽鎖を含む。
【０３７０】
いくつかの態様では、本開示は、対象の大動脈瘤を治療または予防する方法を特徴とし、本方法は、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列と軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列とを含む単離タンパク質（例えば、抗体、例えば、ヒト抗体）を対象に投与することを含み、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、このタンパク質は血漿カリクレインと結合する。
【０３７１】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。
【０３７２】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、別の大動脈瘤治療と併用投与する。
【０３７３】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）を阻害する。
【０３７４】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメインを含む。
【０３７５】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖、および／または本明細書に記載のタンパク質の軽鎖を含む。
【０３７６】
いくつかの態様では、本開示は、対象の骨関節炎を治療または予防する方法を特徴とし、本方法は、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列と軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列とを含む単離タンパク質（例えば、抗体、例えば、ヒト抗体）を対象に投与することを含み、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、このタンパク質は血漿カリクレインと結合する。
【０３７７】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。
【０３７８】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、別の骨関節炎治療と併用投与する。
【０３７９】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）を阻害する。
【０３８０】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメインを含む。
【０３８１】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖、および／または本明細書に記載のタンパク質の軽鎖を含む。
【０３８２】
いくつかの態様では、本開示は、対象の血管炎を治療または予防する方法を特徴とし、本方法は、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列と軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列とを含む単離タンパク質（例えば、抗体、例えば、ヒト抗体）を対象に投与することを含み、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、このタンパク質は血漿カリクレインと結合する。
【０３８３】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。
【０３８４】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、別の血管炎治療と併用投与する。
【０３８５】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）を阻害する。
【０３８６】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメインを含む。
【０３８７】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖、および／または本明細書に記載のタンパク質の軽鎖を含む。
【０３８８】
いくつかの態様では、本開示は、対象の頭部外傷もしくは腫瘍周囲脳浮腫を治療または予防する方法を特徴とし、本方法は、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列と軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列とを含む単離タンパク質（例えば、抗体、例えば、ヒト抗体）を対象に投与することを含み、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、このタンパク質は血漿カリクレインと結合する。
【０３８９】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。
【０３９０】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、別の頭部外傷もしくは腫瘍周囲脳浮腫治療と併用投与する。
【０３９１】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）を阻害する。
【０３９２】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメインを含む。
【０３９３】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖、および／または本明細書に記載のタンパク質の軽鎖を含む。
【０３９４】
いくつかの態様では、本開示は、対象の敗血症を治療または予防する方法を特徴とし、本方法は、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列と軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列とを含む単離タンパク質（例えば、抗体、例えば、ヒト抗体）を対象に投与することを含み、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、このタンパク質は血漿カリクレインと結合する。
【０３９５】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。
【０３９６】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、別の敗血症治療と併用投与する。
【０３９７】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）を阻害する。
【０３９８】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメインを含む。
【０３９９】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖、および／または本明細書に記載のタンパク質の軽鎖を含む。
【０４００】
いくつかの態様では、本開示は、対象の急性中大脳動脈（ＭＣＡ）虚血事象（脳卒中）を治療または予防する方法を特徴とし、本方法は、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列と軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列とを含む単離タンパク質（例えば、抗体、例えば、ヒト抗体）を対象に投与することを含み、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、このタンパク質は血漿カリクレインと結合する。
【０４０１】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。
【０４０２】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、別の急性中大脳動脈（ＭＣＡ）虚血事象（脳卒中）治療と併用投与する。
【０４０３】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）を阻害する。
【０４０４】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメインを含む。
【０４０５】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖、および／または本明細書に記載のタンパク質の軽鎖を含む。
【０４０６】
いくつかの態様では、本開示は、対象の再狭窄（例えば、血管形成術後）を治療または予防する方法を特徴とし、本方法は、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列と軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列とを含む単離タンパク質（例えば、抗体、例えば、ヒト抗体）を対象に投与することを含み重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、このタンパク質は血漿カリクレインと結合する。
【０４０７】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。
【０４０８】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、別の再狭窄（例えば、血管形成術後）治療と併用投与する。
【０４０９】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）を阻害する。
【０４１０】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメインを含む。
【０４１１】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖、および／または本明細書に記載のタンパク質の軽鎖を含む。
【０４１２】
いくつかの態様では、本開示は、対象の全身性紅斑性狼瘡性腎炎を治療または予防する方法を特徴とし、本方法は、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列と軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列とを含む単離タンパク質（例えば、抗体、例えば、ヒト抗体）を対象に投与することを含み、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、このタンパク質は血漿カリクレインと結合する。
【０４１３】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。
【０４１４】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、別の全身性紅斑性狼瘡性腎炎の治療と併用投与する。
【０４１５】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）を阻害する。
【０４１６】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメインを含む。
【０４１７】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖、および／または本明細書に記載のタンパク質の軽鎖を含む。
【０４１８】
いくつかの態様では、本開示は、対象の熱傷を治療または予防する方法を特徴とし、本方法は、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列と軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列とを含む単離タンパク質（例えば、抗体、例えば、ヒト抗体）を対象に投与することを含み、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列が、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメイン由来の１つ、２つ、もしくは３つ（例えば、３つ）のＣＤＲ領域を含み、このタンパク質は血漿カリクレインと結合する。
【０４１９】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。
【０４２０】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、別の熱傷治療と併用投与する。
【０４２１】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）を阻害する。
【０４２２】
いくつかの実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖可変ドメインを含み、および／または軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列は、本明細書に記載のタンパク質の軽鎖可変ドメインを含む。
【０４２３】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、本明細書に記載のタンパク質の重鎖、および／または本明細書に記載のタンパク質の軽鎖を含む。
【０４２４】
いくつかの態様では、本開示は、試料中血漿カリクレインの検出法を特徴とし、本方法は、試料を血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、本明細書に記載の血漿カリクレイン結合タンパク質）と接触させることを含むこと；ならびにタンパク質と血漿カリクレイン間の相互作用が存在する場合に検出する。
【０４２５】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、検出可能な標識を含む。
【０４２６】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）および血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態と結合する。
【０４２７】
いくつかの態様では、本開示は、対象の血漿カリクレインの検出法を特徴とし、本方法は、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、本明細書に記載の血漿カリクレイン結合タンパク質）を対象に投与すること；ならびに対象中のタンパク質と血漿カリクレイン間の相互作用が存在する場合に検出することを含む。例えば、検出は、対象の画像化を含む。
【０４２８】
いくつかの実施形態では、このタンパク質はさらに、検出可能な標識を含む。
【０４２９】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）および血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態と結合する。
【０４３０】
いくつかの態様では、本開示は、例えば、血漿カリクレイン関連障害を治療または予防する方法において血漿カリクレイン活性の調節法を特徴とする。本方法は、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、本明細書に記載の血漿カリクレイン結合タンパク質）と血漿カリクレインとを（例えば、ヒト対象において）接触させて血漿カリクレイン活性を調節することを含む。
【０４３１】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。
【０４３２】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン関連障害は、関節リウマチ、痛風、腸疾患、口腔粘膜炎、神経障害性疼痛、炎症性疼痛、脊柱管狭窄−変性脊椎疾患、動脈もしくは静脈血栓症、術後イレウス、大動脈瘤、骨関節炎、血管炎、浮腫、遺伝性血管性浮腫、脳浮腫、肺塞栓症、脳卒中、心室補助装置もしくはステントによって誘発される凝固、頭部外傷もしくは腫瘍周囲脳浮腫、敗血症、急性中大脳動脈（ＭＣＡ）虚血事象（脳卒中）、再狭窄（例えば、血管形成術後）、全身性紅斑性狼瘡性腎炎／血管炎、ならびに熱傷からなる群から選択される。
【０４３３】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、接触活性化系（すなわち、内因性の活性化系）に関連した異常な凝血を、例えば、ＡＰＴＴ凝固アッセイによる測定で、少なくとも１０％低減する。他の実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、接触活性化系に関連する異常な凝血を少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９９％、またはさらには１００％（すなわち、異常な凝血が検出されない）低減する。
【０４３４】
いくつかの態様では、本開示は、血漿カリクレイン関連障害の治療法を特徴とし、本方法は、対象に、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、本明細書に記載の血漿カリクレイン結合タンパク質）を対象中の血漿カリクレイン関連障害を治療する上で十分な量投与することを含む。本方法は、さらに、対象への血漿カリクレイン関連障害治療（例えば、本明細書に記載の治療）である第２療法の提供を含むことができる。
【０４３５】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン関連障害は、関節リウマチ、痛風、腸疾患、口腔粘膜炎、神経障害性疼痛、炎症性疼痛、脊柱管狭窄−変性脊椎疾患、動脈もしくは静脈血栓症、術後イレウス、大動脈瘤、骨関節炎、血管炎、浮腫、遺伝性血管性浮腫、脳浮腫、肺塞栓症、脳卒中、心室補助装置もしくはステントによって誘発される凝固、頭部外傷もしくは腫瘍周囲脳浮腫、敗血症、急性中大脳動脈（ＭＣＡ）虚血事象（脳卒中）、再狭窄（例えば、血管形成術後）、全身性紅斑性狼瘡性腎炎／血管炎、ならびに熱傷からなる群から選択される。
【０４３６】
いくつかの態様では、本開示は、対象の画像化法を特徴とする。本方法は、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、本明細書に記載の血漿カリクレイン結合タンパク質）を対象に投与すること、および例えば、対象中のタンパク質と血漿カリクレイン間の相互作用が存在する場合に検出することを含む。
【０４３７】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）および血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態と結合する。
【０４３８】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン活性を阻害しない。
【０４３９】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン活性（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）を阻害する。
【０４４０】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、検出可能な標識（例えば、放射性核種またはＭＲＩで検出可能な標識）を含み得る。
【０４４１】
いくつかの実施形態では、対象は血漿カリクレイン関連障害を呈するかまたは呈することが疑われる。本方法は、例えば、血漿カリクレイン関連障害の診断に有用である。
【０４４２】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン関連障害は、関節リウマチ、痛風、腸疾患、口腔粘膜炎、神経障害性疼痛、炎症性疼痛、脊柱管狭窄−変性脊椎疾患、動脈もしくは静脈血栓症、術後イレウス、大動脈瘤、骨関節炎、血管炎、浮腫、遺伝性血管性浮腫、脳浮腫、肺塞栓症、脳卒中、心室補助装置もしくはステントによって誘発される凝固、頭部外傷もしくは腫瘍周囲脳浮腫、敗血症、急性中大脳動脈（ＭＣＡ）虚血事象（脳卒中）、再狭窄（例えば、血管形成術後）、全身性紅斑性狼瘡性腎炎、ならびに熱傷からなる群から選択される。
【０４４３】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、接触活性化系（すなわち、内因性の活性化系）に関連した異常な凝血を、例えば、ＡＰＴＴ凝固アッセイによる測定で、少なくとも１０％（例えば、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９９％、またはさらには１００％（すなわち、異常な凝血が検出されない））低減する。
【０４４４】
いくつかの態様では、本開示は、血漿カリクレイン、例えば、対象または試料（例えば、生検試料）画像化法を特徴とする。本方法は、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、本明細書に記載の血漿カリクレイン結合タンパク質）を、例えば、対象または試料に投与することを含み、タンパク質と血漿カリクレイン間の相互作用が存在する場合に検出する。
【０４４５】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）および血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態と結合する。
【０４４６】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン活性を阻害しない。
【０４４７】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン活性（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）を阻害する。
【０４４８】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、検出可能な標識（例えば、放射性核種またはＭＲＩで検出可能な標識）を含み得る。
【０４４９】
いくつかの実施形態では、対象は血漿カリクレイン関連障害を呈するかまたは呈することが疑われる。本方法は、例えば、血漿カリクレイン関連障害の診断に有用である。
【０４５０】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン関連障害は、関節リウマチ、痛風、腸疾患、口腔粘膜炎、神経障害性疼痛、炎症性疼痛、脊柱管狭窄−変性脊椎疾患、動脈もしくは静脈血栓症、術後イレウス、大動脈瘤、骨関節炎、血管炎、浮腫、遺伝性血管性浮腫、脳浮腫、肺塞栓症、脳卒中、心室補助装置もしくはステントによって誘発される凝固、頭部外傷もしくは腫瘍周囲脳浮腫、敗血症、急性中大脳動脈（ＭＣＡ）虚血事象（脳卒中）、再狭窄（例えば、血管形成術後）、全身性紅斑性狼瘡性腎炎、ならびに熱傷からなる群から選択される。
【０４５１】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、接触活性化系（すなわち、内因性の活性化系）に関連した異常な凝血を、例えば、ＡＰＴＴ凝固アッセイによる測定で、少なくとも１０％（例えば、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９９％、またはさらには１００％（すなわち、異常な凝血が検出されない））低減する。
【０４５２】
１つの態様では、本開示は、本明細書に記載の障害、例えば、関節リウマチ、痛風、腸疾患、口腔粘膜炎、神経障害性疼痛、炎症性疼痛、脊柱管狭窄−変性脊椎疾患、動脈もしくは静脈血栓症、術後イレウス、大動脈瘤、骨関節炎、血管炎、浮腫、遺伝性血管性浮腫、脳浮腫、肺塞栓症、脳卒中、心室補助装置もしくはステントによって誘発される凝固、頭部外傷もしくは腫瘍周囲脳浮腫、敗血症、急性中大脳動脈（ＭＣＡ）虚血事象（脳卒中）、再狭窄（例えば、血管形成術後）、全身性紅斑性狼瘡性腎炎、もしくは熱傷の治療；または創傷治癒を促進するための本明細書に記載の血漿カリクレイン結合タンパク質の使用を特徴とする。
【０４５３】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）および血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態と結合する。
【０４５４】
１つの態様では、本開示は、本明細書に記載の障害、例えば、関節リウマチ、痛風、腸疾患、口腔粘膜炎、神経障害性疼痛、炎症性疼痛、脊柱管狭窄−変性脊椎疾患、動脈もしくは静脈血栓症、術後イレウス、大動脈瘤、骨関節炎、血管炎、浮腫、遺伝性血管性浮腫、脳浮腫、肺塞栓症、脳卒中、心室補助装置もしくはステントによって誘発される凝固、頭部外傷もしくは腫瘍周囲脳浮腫、敗血症、急性中大脳動脈（ＭＣＡ）虚血事象（脳卒中）、再狭窄（例えば、血管形成術後）、全身性紅斑性狼瘡性腎炎、もしくは熱傷治療薬製造；または創傷治癒薬製造における本明細書に記載の血漿カリクレイン結合タンパク質の使用を特徴とする。
【０４５５】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、接触活性化系（すなわち、内因性の活性化系）に関連した異常な凝血を、例えば、ＡＰＴＴ凝固アッセイによる測定で、少なくとも１０％（例えば、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９９％、またはさらには１００％（すなわち、異常な凝血が検出されない））低減する。
【０４５６】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）の活性形態とは結合する。
【０４５７】
本発明の１つまたは複数の実施形態の詳細について、添付の図面および以下の説明に記載する。本発明の他の特徴、目的、および利点は、本明細書および図面から、ならびに特許請求の範囲から明らかであろう。
【０４５８】
本願を通して引用された、参考文献、係属特許出願、公開もしくは非公開特許出願等のすべての引例ならびに以下に挙げるものの内容は、それらの全体を参照することによって本明細書に明示的に組み込まれる。矛盾する場合、ここの任意の定義を含む本明細書が制御する。
【図面の簡単な説明】
【０４５９】
【図１】内因性の凝固経路および炎症における血漿カリクレイン（ｐＫａｌ）の役割を表す略図である。
【図２】カラゲナン誘発性ラット足浮腫に対するＭ１６２−Ａ０４の効果を表す図である。足の腫れは水置換法により測定した。
【図３】カラゲナン誘発性温度痛覚過敏に対するＭ１６２−Ａ０４の効果を表す図である。カラゲナン注射後に疼痛潜時をハーグリーブス法により測定した。
【図４】ＲＯＬＩＣ親和性成熟を用いて見出された同じ抗体の非生殖系列化（Ｘ６３−Ｇ０６）型と生殖系列化されたコドン至適化（Ｘ８１−Ｂ０１）型の軽鎖ＤＮＡ配列の整列を表す図である。アスタリスク（＊）で示される位置は保存されている部分であり、空白部分はＸ８１−Ｂ０１中でコドン至適化または生殖系列化のいずれかにより変化した塩基に対応する。
【図５】ＲＯＬＩＣ親和性成熟を用いて見出された同じ抗体の非生殖系列化（Ｘ６３−Ｇ０６）型と生殖系列化されたコドン至適化（Ｘ８１−Ｂ０１）型の軽鎖アミノ酸配列の整列を表す図である。アスタリスク（＊）で示される位置は保存されている部分であり、空白部分はＸ８１−Ｂ０１中で生殖系列化により変化したアミノ酸に対応する。非生殖系列化抗体（Ｘ６３−Ｇ０６）と生殖系列化されたコドン至適化抗体（Ｘ８１−Ｂ０１）の間では合計１１個のアミノ酸が異なる。
【図６】ＲＯＬＩＣ親和性成熟を用いて見出された同じ抗体の非生殖系列化（Ｘ６３−Ｇ０６）型と生殖系列化されたコドン至適化（Ｘ８１−Ｂ０１）型の重鎖ＤＮＡ配列の整列を表す図である。アスタリスク（＊）で示される位置は保存されている部分であり、空白部分はＸ８１−Ｂ０１中でコドン至適化により変化したＤＮＡ塩基に対応する。
【図７】ＲＯＬＩＣ親和性成熟を用いて見出された同じ抗体の非生殖系列化（Ｘ６３−Ｇ０６）型と生殖系列化されたコドン至適化（Ｘ８１−Ｂ０１）型の重鎖アミノ酸配列の整列を表す図である。アスタリスク（＊）で示される位置は保存されている部分である。この２つの抗体は重鎖のアミノ酸配列が同じである。
【図８Ａ】Ｘ８１−Ｂ０１とｐＫａｌとの結合に対するＥＰＩ−ＫＡＬ２競合を表す図である。Ｘ８１−Ｂ０１（ＩｇＧ）をＣＭ５  ＢＩＡＣＯＲＥ（商標）チップの抗ヒトＦｃ断片特異的表面で捕捉した。１μＭのＥＰＩ−ＫＡＬ２の存在下（図中、下のセンサグラム）または不在下（図中、上のセンサグラム）で、ｐＫａｌ（１００ｎＭ）を表面に流した。
【図８Ｂ】Ｘ６７−Ｄ０３とｐＫａｌとの結合に対するＥＰＩ−ＫＡＬ２競合を表す図である。Ｘ６７−Ｄ０３（ＩｇＧ）をＣＭ５  Ｂｉａｃｏｒｅチップの抗ヒトＦｃ断片特異的表面で捕捉した。１μＭのＥＰＩ−ＫＡＬ２の存在下（図中、下のセンサグラム）または不在下（図中、上のセンサグラム）で、ｐＫａｌ（１００ｎＭ）を表面に流した。
【図９】表１２に記載されている抗体に対するＣＬＩＰＳエピトープマッピングの結果を表す図である。
【図１０Ａ】様々な種由来のｐＫａｌ配列のＣｌｕｓｔａｌＷ整列を表す図である。「＊」で示される位置は種間で保存されている位置であり、「：」で示される位置は種間での保存的置換を表す。「．」で示される位置は一部の種において非保存的置換を有する。「＠」の記号により示される一続きのアミノ酸は、溶媒接触可能表面積の計算から溶媒曝露が著しいことが示された。「＋」により示される一続きのアミノ酸は、表１２に記載されている抗体の潜在的エピトープとして同定された。灰色で強調されているアミノ酸は、溶媒接触可能表面積の計算により、Ｋｕｎｉｔｚドメイン活性部位阻害剤と複合体を形成したときに埋没することが判明したものである。下線位置は触媒三連構造を形成するアミノ酸（Ｈｉｓ４３４、Ａｓｐ４８３およびＳｅｒ５７８、番号はヒト配列に基づく）である。
【図１０Ｂ】様々な種由来のｐＫａｌ配列のＣｌｕｓｔａｌＷ整列を表す図である。「＊」で示される位置は種間で保存されている位置であり、「：」で示される位置は種間での保存的置換を表す。「．」で示される位置は一部の種において非保存的置換を有する。「＠」の記号により示される一続きのアミノ酸は、溶媒接触可能表面積の計算から溶媒曝露が著しいことが示された。「＋」により示される一続きのアミノ酸は、表１２に記載されている抗体の潜在的エピトープとして同定された。灰色で強調されているアミノ酸は、溶媒接触可能表面積の計算により、Ｋｕｎｉｔｚドメイン活性部位阻害剤と複合体を形成したときに埋没することが判明したものである。下線位置は触媒三連構造を形成するアミノ酸（Ｈｉｓ４３４、Ａｓｐ４８３およびＳｅｒ５７８、番号はヒト配列に基づく）である。
【図１０Ｃ】様々な種由来のｐＫａｌ配列のＣｌｕｓｔａｌＷ整列を表す図である。「＊」で示される位置は種間で保存されている位置であり、「：」で示される位置は種間での保存的置換を表す。「．」で示される位置は一部の種において非保存的置換を有する。「＠」の記号により示される一続きのアミノ酸は、溶媒接触可能表面積の計算から溶媒曝露が著しいことが示された。「＋」により示される一続きのアミノ酸は、表１２に記載されている抗体の潜在的エピトープとして同定された。灰色で強調されているアミノ酸は、溶媒接触可能表面積の計算により、Ｋｕｎｉｔｚドメイン活性部位阻害剤と複合体を形成したときに埋没することが判明したものである。下線位置は触媒三連構造を形成するアミノ酸（Ｈｉｓ４３４、Ａｓｐ４８３およびＳｅｒ５７８、番号はヒト配列に基づく）である。
【図１１Ａ】本明細書の実施例１２に記載されている（ｉ）ＤＸ−２９２２抗体および（ｉｉ）Ｍ６−Ｄ０９抗体に対するＥｐｉ−Ｋａｌ２のＢｉａｃｏｒｅ競合解析を表す図である。
【図１１Ｂ】本明細書の実施例１２に記載されている（ｉ）ＤＸ−２９２２抗体および（ｉｉ）Ｍ６−Ｄ０９抗体に対するＥｐｉ−Ｋａｌ２のＢｉａｃｏｒｅ競合解析を表す図である。
【図１２】本明細書の実施例１２に記載されている（ｉ）ＤＸ−２９１１抗体および（ｉｉ）Ｍ６−Ｄ０９抗体に対するＡＥＢＳＦのＢｉａｃｏｒｅ競合解析を表す図である。
【図１３】Ｂｉｏｃｏｒｅ解析を表す図であり、ＤＸ−２９２２が、高分子量キニノーゲン（ＨＭＷＫ）と結合した血漿カリクレインと結合することを示している。
【図１４】ラットのカラゲナン誘発性足浮腫（ＣＰＥ）におけるＸ１０１−Ａ０１による浮腫の用量依存的阻害を示すグラフを示す図である。
【図１５】ラットのカラゲナン誘発性足浮腫におけるＤＸ−２９３０腹腔内投与による浮腫の用量依存的阻害を示すグラフを示す図である。
【図１６】ラットのカラゲナン誘発性足浮腫におけるＤＸ−２９３０皮下投与による浮腫の用量依存的阻害を示すグラフを示す図である。
【図１７】薬物動態評価のためのＳｐｒａｇｕｅ−ＤａｗｌｅｙラットへのＩＶおよびＳＣ投与後の平均ＤＸ−２９３０血清濃度を示すグラフを示す図である。
【図１８】薬物動態評価のためのカニクイザルへのＩＶおよびＳＣ投与後の平均ＤＸ−２９３０血清濃度を示すグラフを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【０４６０】
定義
便宜上、本発明をさらに詳述する前に、本明細書、実施例および添付の特許請求の範囲で使用する特定の用語をここに定義する。他の用語は本明細書に初出時に定義する。
【０４６１】
単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈においてはっきりと別段の指摘がされない限り、複数形の指示対象を含む。
【０４６２】
本明細書で使用する「アゴニスト」という用語は、タンパク質の生体活性を模倣するまたは上方制御する（例えば、増強するまたは補充する）薬剤を指すことを意味する。アゴニストは、野生型タンパク質または野生型タンパク質の少なくとも１つの生体活性を有するその誘導体であり得る。アゴニストは、タンパク質の少なくとも１つの生体活性を増大する化合物でもあり得る。アゴニストは、ポリペプチドと別の分子、例えば、標的ペプチドもしくは核酸との相互作用を増大する化合物でもあり得る。
【０４６３】
本明細書で使用する「アンタゴニスト」は、タンパク質の少なくとも１つの生体活性を下方制御する（例えば、抑制するまたは阻害する）薬剤を指すことを意味する。アンタゴニストは、タンパク質と別の分子（例えば、標的ペプチドまたは酵素基質）間の相互作用を阻害するまたは低減する化合物であり得る。アンタゴニストは、遺伝子発現を下方制御するまたは発現するタンパク質の存在量を低減する化合物でもあり得る。
【０４６４】
「抗体」という用語は、少なくとも１つの免疫グロブリン可変ドメイン（可変領域）または免疫グロブリン可変ドメイン（可変領域）配列を含むタンパク質を指す。例えば、抗体は、重（Ｈ）鎖可変領域（本明細書でＶＨまたはＨＶと略す）、および軽（Ｌ）鎖可変領域（本明細書でＶＬまたはＬＶと略す）を含むことができる。別の例では、抗体は２本の重（Ｈ）鎖可変領域および２本の軽（Ｌ）鎖可変領域を含む。「抗体」という用語は、抗体の抗原結合断片（例えば、単鎖抗体、ＦａｂおよびｓＦａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｄ断片、Ｆｖ断片、ｓｃＦｖ、およびドメイン抗体（ｄＡｂ）断片（ｄｅ  Ｗｉｌｄｔ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １９９６；  ２６（３）：６２９−３９．））ならびに完全抗体を包含する。抗体は、ＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、ＩｇＭ（ならびにこれらのサブタイプ）の構造特性を有できる。抗体は、あらゆる供給源に由来し得るが、霊長類（ヒトおよび非ヒト霊長類）抗体および霊長類化抗体が好ましい。
【０４６５】
ＶＨおよびＶＬ領域は、「フレームワーク領域」（「ＦＲ」）と呼ばれるさらに保存的な領域と共に散在する「相補性決定領域」（「ＣＤＲ」）と呼ばれる超可変領域にさらに細分できる。フレームワーク領域およびＣＤＲの範囲は正確に定義されている（Ｋａｂａｔ，  Ｅ．Ａ．，  ｅｔ  ａｌ．  （１９９１）  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，  Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｕ．Ｓ．  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，  ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．  ９１−３２４２，  ａｎｄ  Ｃｈｏｔｈｉａ，  Ｃ．  ｅｔ  ａｌ．  （１９８７）  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  １９６：９０１−９１７を参照されたい）。本明細書ではＫａｂａｔ（カバット）の定義を使用する。各ＶＨおよびＶＬは、典型的には、３つのＣＤＲおよび４つのＦＲから構成され、これらはアミノ末端からカルボキシ末端まで、ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順序で配置している。
【０４６６】
本明細書で使用する「免疫グロブリン可変ドメイン配列」とは、１つまたは複数のＣＤＲ領域が抗原結合部位に適した高次構造で配置されるように免疫グロブリン可変ドメインの構造を形成できるアミノ酸配列を指す。例えば、配列は、天然可変ドメインのアミノ酸配列のすべてまたは一部を含み得る。例えば、配列は、１、２、または３つ以上のＮ末端またはＣ末端アミノ酸、内部アミノ酸を省いてもよく、１つまたは複数の挿入または追加末端アミノ酸を含んでもよく、他の改変を含んでもよい。１つの実施形態では、免疫グロブリン可変ドメイン配列を含むポリペプチドは、別の免疫グロブリン可変ドメイン配列と結合して、抗原結合部位（例えば、血漿カリクレインと選択的に相互作用する構造）を形成できる。
【０４６７】
抗体のＶＨまたはＶＬ鎖は、重鎖または軽鎖定常領域のすべてまたは一部をさらに含み、それにより、免疫グロブリン重鎖または軽鎖をそれぞれ形成できる。１つの実施形態では、抗体は、２本の免疫グロブリン重鎖および２本の免疫グロブリン軽鎖の四量体であり、ここで、免疫グロブリン重鎖および軽鎖は、例えば、ジスルフィド結合によって相互に連結している。ＩｇＧの場合、重鎖定常領域は、３つの免疫グロブリンドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３）を含む。軽鎖定常領域は、ＣＬドメインを含む。重鎖および軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含む。抗体の定常領域は、典型的には、宿主組織または因子（免疫系の様々な細胞（例えば、エフェクター細胞）および従来の補体系の第１成分（Ｃｌｑ）を含む）への抗体の結合を媒介する。免疫グロブリン軽鎖は、κ型またはλ型であり得る。１つの実施形態では、抗体は、グリコシル化されている。抗体は、抗体依存性細胞傷害性および／または補体媒介細胞傷害性に機能的であり得る。
【０４６８】
抗体の１つまたは複数の領域はヒトでもあり得、事実上ヒトでもあり得る。例えば、１つまたは複数の可変領域はヒトでもあり得、事実上ヒトでもあり得る。例えば、１つまたは複数のＣＤＲは、ヒト（例えば、ＨＣ  ＣＤＲ１、ＨＣ  ＣＤＲ２、ＨＣ  ＣＤＲ３、ＬＣ  ＣＤＲ１、ＬＣ  ＣＤＲ２、および／またはＬＣ  ＣＤＲ３）であり得る。各軽鎖（ＬＣ）および／または重鎖（ＨＣ）ＣＤＲはヒトであり得る。ＨＣ  ＣＤＲ３はヒトであり得る。１つまたは複数のフレームワーク領域（例えば、ＨＣおよび／またはＬＣのＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、および／またはＦＲ４）は、ヒトであり得る。例えば、Ｆｃ領域はヒトであり得る。１つの実施形態では、すべてのフレームワーク領域はヒトであり、例えば、ヒト体細胞（例えば、免疫グロブリンを産生する造血細胞または非造血細胞）由来である。１つの実施形態では、ヒト配列は（例えば、生殖系列核酸によってコードされる）生殖系列配列である。１つの実施形態では、選択されたＦａｂのフレームワーク（ＦＲ）残基を、ほとんどの類似する霊長類生殖系列遺伝子（特に、ヒト生殖系列遺伝子）中の対応する残基のアミノ酸種類に変換できる。１つまたは複数の定常領域はヒトでもあり得、事実上ヒトでもあり得る。例えば、少なくとも７０、７５、８０、８５、９０、９２、９５、９８、または１００％の免疫グロブリン可変ドメイン、定常領域、定常ドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、および／またはＣＬ１）、または完全抗体はヒトでもあり得、事実上ヒトでもあり得る。
【０４６９】
抗体のすべてまたは一部は、免疫グロブリン遺伝子またはそのセグメントによってコードできる。例示的なヒト免疫グロブリン遺伝子としては、κ、λ、α（ＩｇＡ１およびＩｇＡ２）、γ（ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４）、δ、εおよびμ定常領域遺伝子、ならびに多数の免疫グロブリン可変領域遺伝子が挙げられる。完全長の免疫グロブリン「軽鎖」（約２５ＫＤａまたは約２１４個のアミノ酸）はＮＨ２末端（約１１０個のアミノ酸）における可変領域遺伝子、およびＣＯＯＨ末端におけるκまたはλ定常領域遺伝子によってコードされる。完全長の免疫グロブリン「重鎖」（約５０ＫＤａまたは約４４６個のアミノ酸）は、同様に、可変領域遺伝子（約１１６個のアミノ酸）および他の上記の定常領域遺伝子の１つ、例えば、γ（約３３０個のアミノ酸をコードする）によってコードされる。ＨＣ  ＣＤＲ３が約３個のアミノ酸残基から３５個超のアミノ酸残基まで異なるので、ヒトＨＣの長さは大きく変動する。
【０４７０】
完全長抗体の「抗原結合断片」という用語は、目的の標的に特異的と結合する能力を保持した完全長抗体の１つまたは複数の断片を指す。完全長抗体の「抗原結合断片」という用語に包含される結合断片の例としては、
（ｉ）Ｆａｂ断片（ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインからなる一価断片）；
（ｉｉ）ヒンジ領域でジスルフィド結合により結合した２個のＦａｂ断片を含む二価断片であるＦ（ａｂ’）２断片；
（ｉｉｉ）ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；
（ｉｖ）抗体の単一アームのＶＬおよびＶＨドメインからなるＦｖ断片、
（ｖ）ＶＨドメインからなるｄＡｂ断片（Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，  （１９８９）  Ｎａｔｕｒｅ  ３４１：５４４−５４６）；ならびに
（ｖｉ）単離相補性決定領域（ＣＤＲ）が挙げられる。さらに、Ｆｖ断片の２つのドメインであるＶＬおよびＶＨは別々の遺伝子によりコードされるが、それらは、ＶＬおよびＶＨ領域が対合して単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として知られる一価分子を形成するタンパク質単鎖として作製されることを可能にする合成リンカーにより、組換え方法を用いて結合できる。例えば、米国特許第５，２６０，２０３号、同第４，９４６，７７８号、および同第４，８８１，１７５号；Ｂｉｒｄ  ｅｔ  ａｌ．  （１９８８）  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６；ならびにＨｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．  （１９８８）  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ８５：５８７９−５８８３を参照されたい。
【０４７１】
抗体断片は、当業者に知られている従来技術を含む、適切なあらゆる技術を用いて得ることができる。「単一特異性抗体」という用語は、特定の標的（例えば、エピトープ）に対して単一の結合特異性および親和性を示す抗体を指す。この用語は「モノクローナル抗体」または「モノクローナル抗体組成物」を含み、本明細書で使用する場合、抗体がどのように生成されたかを問わず、単一の分子組成物の抗体またはその断片の調製物を指す。
【０４７２】
抗体は、結合特性が実質的に保持される限り、フレームワーク領域内の１つまたは複数の非生殖系列アミノ酸を抗体の対応する生殖系列アミノ酸に復帰させることにより「生殖系列化」される。
【０４７３】
阻害定数（Ｋｉ）は、阻害効力の測定値を提供する；それは酵素活性を半減させるために必要であり、酵素または基質の濃度に依存しない阻害剤の濃度である。見かけのＫｉ（Ｋｉ，ａｐｐ）は、反応（例えば、酵素活性）の程度に対する異なる濃度の阻害剤（例えば、阻害結合タンパク質）の阻害効果を測定することにより異なる基質濃度で得られる；モリソン式（方程式１）に阻害剤濃度の関数として擬１次速度定数の変化を当てはめることにより、見かけのＫｉの概算値が得られる。Ｋｉは、Ｋｉ，ａｐｐ対基質濃度プロットの線形回帰分析から導いたｙ切片から得られる。
【数１】
2014506257.tif 000003
方程式１
【０４７４】
式中、ｖは測定した速度；ｖ０は阻害剤なしの速度；Ｋｉ，ａｐｐは見かけの阻害定数；Ｉは総阻害剤濃度；およびＥは総酵素濃度。
【０４７５】
本明細書で使用する「結合親和性」とは、見かけ上の結合定数つまりＫＡを指す。ＫＡは、解離定数（ＫＤ）の逆数である。結合タンパク質は、例えば、特定の標的分子に対する結合親和性が少なくとも１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１０１０および１０１１Ｍ−１であり得る。第２標的と比較して第１標的への結合タンパク質のより高い親和性の結合は、第２標的への結合に対するＫＡ（またはＫＤ値）より高い第１標的への結合に対するＫＡ（またはより小さいＫＤ値）によって示すことができる。かかる場合、結合タンパク質は、第２標的（例えば、第２高次構造の同じタンパク質もしくはその模倣物；または第２タンパク質）と比較して第１標的（例えば、第１高次構造のタンパク質またはその模倣物）に対して特異性を有する。（例えば、特異性または他の比較における）結合親和性の相違は、少なくとも１．５、２、３、４、５、１０、１５、２０、３７．５、５０、７０、８０、９１、１００、５００、１０００、１０，０００または１０５倍であり得る。
【０４７６】
結合親和性は、平衡透析、平衡結合、ゲル濾過、ＥＬＩＳＡ、表面プラズモン共鳴、または分光法（例えば、蛍光アッセイを使用する）を含む様々な方法により決定できる。結合親和性の例示的評価条件は、ＨＢＳ−Ｐ緩衝液（１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．００５％（ｖ／ｖ）界面活性剤Ｐ２０）である。これらの技術を使用して、結合タンパク質（または標的）濃度の関数として結合した結合タンパク質および遊離結合タンパク質の濃度を測定できる。結合した結合タンパク質の濃度（［結合］）は、以下の式：
【数２】
2014506257.tif 000004
（式中、（Ｎ）は標的分子当たりの結合部位数である）によって遊離結合タンパク質の濃度（［遊離］）および標的上の結合タンパク質の結合部位の濃度と関連付けられる。
【０４７７】
しかしながら、ＫＡは常に正確に決定する必要はない。なぜなら、時によっては、ＫＡに比例する親和性の定量的測定値（例えば、ＥＬＩＳＡまたはＦＡＣＳ分析等の方法を用いて決定する）を得れば十分であり、したがって、比較のため（より高い親和性が、例えば、２倍高いかどうかの決定等）に使用して、例えば、機能アッセイ（例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏアッセイ）における活性によって親和性の定性的測定値を得ることもでき、親和性の推定値を得ることもできるからである。
【０４７８】
「結合タンパク質」という用語は、標的分子と相互作用し得るタンパク質を指す。この用語を「リガンド」と同義的に使用する。「血漿カリクレイン結合タンパク質」とは、血漿カリクレインと相互作用（例えば、結合）し得るタンパク質を指し、特に優先的にまたは特異的に血漿カリクレインと相互作用するおよび／または血漿カリクレインを阻害するタンパク質を含む。タンパク質は、タンパク質のない同じ条件下の血漿カリクレイン活性と比較して血漿カリクレイン活性を低減する場合、血漿カリクレインを阻害する。いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は抗体である。
【０４７９】
「保存的アミノ酸置換」とは、アミノ酸残基が類似の側鎖を有するアミノ酸残基に置換されたものである。類似の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、当該技術分野で定義されている。これらのファミリーとしては、塩基性側鎖を有するアミノ酸（例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖を有するアミノ酸（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、無電荷極性側鎖を有するアミノ酸（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン）、非極性側鎖を有するアミノ酸（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）、β分岐側鎖を有するアミノ酸（例えば、トレオニン、バリン、イソロイシン）、および芳香族側鎖を有するアミノ酸（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）が挙げられる。
【０４８０】
結合タンパク質の１つまたは複数のフレームワークおよび／またはＣＤＲのアミノ酸残基が、本明細書に記載の結合タンパク質と比較して１つまたは複数の変異（例えば、置換（例えば、非必須アミノ酸の保存的置換または置換）、挿入、または欠失）を含むことが可能である。血漿カリクレイン結合タンパク質は、変異（例えば、置換（例えば、非必須アミノ酸の保存的置換または置換）、挿入、または欠失）（例えば、少なくとも１、２、３、もしくは４、ならびに／または１５、１２、１０、９、８、７、６、５、４、３、もしくは２個未満の変異）、本明細書に記載の結合タンパク質と比較して、例えば、このタンパク質機能に対して大幅な影響を及ぼさない変異を有し得る。変異はフレームワーク領域、ＣＤＲ、および／または定常領域に存在できる。いくつかの実施形態では、変異はフレームワーク領域に存在する。いくつかの実施形態では、変異はＣＤＲに存在する。いくつかの実施形態では、変異は定常領域に存在する。特定の置換が容認できるかどうか、すなわち、結合活性等の生体特性に悪影響を及ぼさないかどうかについては、例えば、変異が保存的であるかどうかを評価することによって、またはＢｏｗｉｅ，  ｅｔ  ａｌ．  （１９９０）  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４７：１３０６−１３１０の方法により予想できる。
【０４８１】
生体ポリマーのモチーフ配列は、アミノ酸が異なり得る位置を含むことができる。例えば、かかる文脈中の記号「Ｘ」は、一般に、別段の指定のない限り、任意のアミノ酸（例えば、２０種の天然アミノ酸のいずれか）を指し、例えば、システイン以外の任意のアミノ酸を指す。他の許容されるアミノ酸を、例えば、丸括弧および斜線を用いて示すこともできる。例えば、「（Ａ／Ｗ／Ｆ／Ｎ／Ｑ）」とは、アラニン、トリプトファン、フェニルアラニン、アスパラギン、およびグルタミンが、その特定の位置で許容されることを意味する。
【０４８２】
「事実上ヒトの」免疫グロブリン可変領域とは、免疫グロブリン可変領域が正常なヒトで免疫原性応答を誘発しないように十分な数のヒトフレームワークアミノ酸位置を含む免疫グロブリン可変領域である。「事実上ヒト」抗体とは、抗体が正常なヒトで免疫原性応答を誘発しないように十分な数のヒトアミノ酸位置を含む抗体である。
【０４８３】
「エピトープ」とは、結合タンパク質（例えば、Ｆａｂまたは完全長抗体等の抗体）によって結合される標的化合物上の部位を指す。標的化合物がタンパク質である場合、この部位は、完全にアミノ酸成分から構成されるか、完全にタンパク質のアミノ酸の化学修飾（例えば、グリコシル部分）から構成されるか、またはそれらの組み合わせから構成され得る。重複エピトープは、少なくとも１つの共通のアミノ酸残基、グリコシル基、リン酸基、硫酸基、または他の分子の特徴を含む。
【０４８４】
第１結合タンパク質（例えば、抗体）は、第２結合タンパク質（例えば、抗体）が結合する標的化合物上の同じ部位と結合する場合、または例えば、第２結合タンパク質が結合する部位を有するアミノ酸配列または他の分子の特性（例えば、グリコシル基、リン酸基、または硫酸基）に関して重複（例えば、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％重複）部位と結合する場合、第２結合タンパク質と「同じエピトープと結合する」。
【０４８５】
第１結合タンパク質（例えば、抗体）は、第１結合タンパク質のエピトープに対する結合が第２結合タンパク質（例えば、抗体）のエピトープに対する結合量を（例えば、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、または１００％超）低減する場合、第２結合タンパク質と「結合について競合する」。競合は、直接的（例えば、第１結合タンパク質は第２結合タンパク質が結合するエピトープと同じであるか、または重複するエピトープと結合する）でもあり得、間接的（例えば、第１結合タンパク質のエピトープ結合は、標的化合物において、第２結合タンパク質のエピトープへの結合能を低減する立体的な変化を引き起こす）でもあり得る。
【０４８６】
２配列間の「相同性」または「配列同一性」（これらの用語は本明細書において同義的に使用する）の計算を、以下のように行う。至適に比較できるように配列を整列させる（例えば、至適に整列するために第１および第２アミノ酸配列または核酸配列の一方または両方にギャップを導入し、比較するために非相同配列を無視できる）。ギャップペナルティ１２、ギャップ伸長ペナルティ４、およびフレームシフトギャップペナルティ５を使用したＢｌｏｓｓｕｍ６２スコアリング行列を有するＧＣＧソフトウェアパッケージのＧＡＰプログラムを使用して、至適なスコアとして至適な整列を決定する。次いで、対応するアミノ酸の位置またはヌクレオチドの位置のアミノ酸残基またはヌクレオチドを比較する。第１配列中の位置が第２配列中の対応する位置と同じのアミノ酸残基またはヌクレオチドで占められている場合、その位置で分子は同じである（本明細書で使用する、アミノ酸または核酸の「同一性」は、アミノ酸または核酸の「相同性」と同義である）。２配列間の同じ率（％）は、配列が共有する同じの位置の数の関数である。
【０４８７】
１つの好ましい実施形態では、比較のために整列させた基準配列の長さは、基準配列の長さの少なくとも３０％、好ましくは少なくとも４０％、さらに好ましくは少なくとも５０％、よりさらに好ましくは少なくとも６０％、よりさらに好ましくは少なくとも７０％、８０％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、または１００％である。例えば、基準配列は、免疫グロブリン可変ドメイン配列の長さであり得る。
【０４８８】
「ヒト化」免疫グロブリン可変領域は、免疫グロブリン可変領域が正常なヒトで免疫原性応答を誘発しないように十分な数のヒトフレームワークアミノ酸位置を含むように修飾された免疫グロブリン可変領域である。「ヒト化」免疫グロブリンの説明としては、例えば、米国特許第６，４０７，２１３号および米国特許第５，６９３，７６２号が挙げられる。
【０４８９】
本明細書で使用する「低ストリンジェンシー、中ストリンジェンシー、高ストリンジェンシー、または超高ストリンジェンシー条件下のハイブリッド形成」という用語は、ハイブリッド形成および洗浄の条件を説明する。ハイブリッド形成反応を実施するための指針は、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  Ｎ．Ｙ．  （１９８９），  ６．３．１−６．３．６に見出すことができる。水性方法および非水性方法は、この参考文献に記載されており、いずれをも使用できる。本明細書で参照する特異的ハイブリッド形成条件は、以下のとおりである：１）約４５℃での６×塩化ナトリウム／クエン酸ナトリウム（ＳＳＣ）、続いて少なくとも５０℃の０．２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ中で２回洗浄する低ストリンジェンシーハイブリッド形成条件（洗浄温度は、低ストリンジェンシー条件では５５℃に上昇させることができる）、２）約４５℃での６×ＳＳＣ、続いて６０℃の０．２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳで１回もしくは複数回洗浄する中ストリンジェンシーハイブリッド形成条件、３）約４５℃での６×ＳＳＣ、続いて６５℃の０．２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳで１回もしくは複数回洗浄する高ストリンジェンシーハイブリッド形成条件、ならびに４）６５℃での０．５Ｍリン酸ナトリウム、７％ＳＤＳ、続いて６５℃の０．２×ＳＳＣ、１％ＳＤＳで１回もしくは複数回洗浄する超高ストリンジェンシーハイブリッド形成条件。超高ストリンジェンシー条件（４）が好ましい条件であり、別段の指定のない限り、これを使用する。本開示には、低、中、高、または超高ストリンジェンシーで本明細書に記載の核酸またはその相補物（例えば、本明細書に記載の結合タンパク質をコードする核酸）とハイブリッド形成する核酸が含まれる。核酸は、基準核酸と同じの長さであってもよく、基準核酸の長さの３０、２０、または１０％以内であってもよい。核酸は、本明細書に記載の免疫グロブリン可変ドメイン配列をコードする領域に対応できる。
【０４９０】
「単離組成物」とは、単離組成物を得ることができる天然試料の少なくとも１つの成分の少なくとも９０％から取り出された組成物を指す。人工的または天然に産生された組成物は、目的の種または種の集団が重量−重量ベースで少なくとも５、１０、２５、５０、７５、８０、９０、９２、９５、９８、または９９％の純度である場合、「少なくとも一定の純度の組成物」であり得る。
【０４９１】
「単離」タンパク質とは、単離タンパク質を得ることができる天然試料の成分の少なくとも９０％から取り出されたタンパク質を指す。目的の種または種の集団が重量−重量ベースで少なくとも５、１０、２５、５０、７５、８０、９０、９２、９５、９８、または９９％の純度である場合、「少なくとも」一定の純度のタンパク質であり得る。
【０４９２】
「修飾因子」という用語は、ポリペプチド、核酸、ポリマー、複合体、分子、低分子、化合物、種等（天然または非天然）、または調節を引き起こす能力を有し得る細菌、植物、真菌、もしくは動物細胞や動物組織等の生体物質からの抽出物を指す。修飾因子において、機能特性、生体活性もしくは過程またはこれらの組み合わせの（直接的または間接的な）阻害剤または活性化因子（例えば、アゴニスト、部分的アンタゴニスト、部分的アゴニスト、逆アゴニスト、アンタゴニスト、抗菌剤、微生物感染または増殖の阻害剤等）としての潜在的活性をアッセイにおいて評価し得る。かかるアッセイでは、多数の修飾因子を同時にスクリーニングし得る。修飾因子の活性は既知、未知、または部分的に既知であり得る。
【０４９３】
「必須」アミノ酸残基の変化が実質的な活性損失に至るのに対して、「非必須」アミノ酸残基は生体活性を消失せずまたはさらに好ましくは実質的に修飾せず、結合剤（例えば、抗体）の野生型配列から修飾できる残基である。
【０４９４】
主題の方法により治療されるべき「患者」、「標的」または「宿主」（これらの用語を同義的に使用する）とは、ヒトまたは非ヒト動物のいずれかを意味し得る。
【０４９５】
「プレカリクレイン」および「前血漿カリクレイン」という用語は、本明細書において同義的に使用され、プレカリクレインとしても知られる活性血漿カリクレインのチモーゲン形態を指す。
【０４９６】
対象の疾患の「予防」または対象の疾患を「予防する」という用語は、対象に薬物治療を供すること（例えば、薬剤投与）を指し、疾患の少なくとも１つの症状が予防されるように、すなわち、望ましくない容態（例えば、宿主動物の疾患または他の望ましくない容態）の発現から宿主を保護するように望ましくない容態の臨床的顕在化の前に投与されることである。疾患の「予防」は「予防法」または「予防治療」とも呼び得る。
【０４９７】
本明細書で使用する「実質的に同じ」（または「実質的に相同」）という用語は、第１および第２個のアミノ酸または核酸配列が類似の活性（例えば、結合活性、結合優先性、または生体活性）を有する（またはこれらを有するタンパク質をコードする）ように第２個のアミノ酸または核酸配列と同じまたは等価な（例えば、類似の側鎖、例えば、保存的アミノ酸置換を有する）アミノ酸残基またはヌクレオチドを十分な数で含む第１個のアミノ酸または核酸配列を指すために本明細書で使用する。抗体の場合、第２抗体は、同じの抗原に対して同じの特異性を有し、少なくとも５０％、少なくとも２５％、または少なくとも１０％の親和性を有する。
【０４９８】
本明細書に開示の配列と類似または相同な（例えば、少なくとも約８５％配列同一性）配列も本明細書の一部である。いくつかの実施形態では、配列同一性は、約８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または９９％超である。いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、本明細書に記載の結合タンパク質と約８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または９９％超の配列同一性を有できる。いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、本明細書に記載の結合タンパク質とＨＣおよび／またはＬＣフレームワーク領域（例えば、ＨＣおよび／またはＬＣ  ＦＲ１、２、３、および／または４）において約８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または９９％超の配列同一性を有できる。いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、本明細書に記載の結合タンパク質とＨＣおよび／またはＬＣ  ＣＤＲ（例えば、ＨＣおよび／またはＬＣ  ＣＤＲ１、２、および／または３）において約８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または９９％超の配列同一性を有できる。いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、本明細書に記載の結合タンパク質と定常領域（例えば、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、および／またはＣＬ１）において約８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または９９％超の配列同一性を有できる。
【０４９９】
さらに、核酸セグメントが選択的ハイブリッド形成条件下（例えば、高ストリンジェントなハイブリッド形成条件下）で鎖の相補物とハイブリッド形成する場合、実質的な同一性が存在する。核酸は、完全細胞、細胞溶解物、部分精製形態、または実質的に純粋な形態で存在し得る。
【０５００】
統計的有意性は当該技術分野で既知の任意の方法により決定できる。例示的な統計的検定としては、スチューデントＴ検定、マンホイットニーＵのノンパラメトリック検定、およびウィルコクソンのノンパラメトリック統計検定が挙げられる。いくつかの統計的に有意な関係は０．０５または０．０２未満のＰ値を有する。特定の結合タンパク質は、（例えば、特異性または結合において）統計的有意差（例えば、Ｐ値＜０．０５または０．０２）を示し得る。例えば、２つの状態間の識別可能な定性的または定量的差異を示す、「誘発する」、「阻害する」、「増強する」、「上昇する」、「増大する」、「低減する」等の用語は、２つの条件間の差異（例えば、統計的有意差）を指し得る。
【０５０１】
「治療有効量」は、好ましくは、測定可能な変数、例えば、血漿カリクレイン活性を未治療対象と比較して、統計的に有意な程度または少なくとも約２０％、さらに好ましくは少なくとも約４０％、よりさらに好ましくは少なくとも約６０％、それよりさらに好ましくは少なくとも約８０％調節する。測定可能な変数（例えば、疾患関連変数）を調節する化合物の能力は、ヒトの障害および容態、例えば、リウマチ性関節炎または口腔粘膜炎における有効性を予想する動物モデル系で評価できる。あるいは、組成物のこの特性は、化合物のｉｎ  ｖｉｔｒｏでの変数調節能力を検討することにより評価できる。
【０５０２】
対象の疾患（または容態）を「治療すること」または疾患を呈する対象を「治療すること」は、疾患の少なくとも１つの症状が治癒される、緩和されるまたは低減するように薬剤投与、例えば、薬物投与を対象に施すことを指す。
【０５０３】
対象の疾患の「予防」という用語は、対象に薬物治療を供すること（例えば、薬剤投与）を指し、疾患の少なくとも１つの症状が予防されるように、すなわち、望ましくない容態（例えば、宿主動物の疾患または他の望ましくない容態）の発現から宿主を保護するように望ましくない容態の臨床的顕在化の前に投与されることである。疾患の「予防」は「予防法」または「予防治療」とも呼び得る。
【０５０４】
「予防有効量」とは、所望の予防成果を達成するために必要な投与量および期間で有効な量を指す。典型的には、予防用量は疾患の前または初期段階の対象に使用されるため、予防有効量は治療有効量より少ない。
【０５０５】
本明細書で使用される「ＤＸ−２９２２」という用語は、「Ｘ１０１−Ａ０１」という用語と同義的に使用される。この抗体の他の変異体を以下に記載する。
【表１】
2014506257.tif 000005
【０５０６】
本明細書で使用される「ＤＸ−２９３０」という用語は、「Ｘ１２４−Ｇ０１」という用語と同義的に使用される。この抗体の他の変異体を以下に記載する。
【表２】
2014506257.tif 000006
2014506257.tif 000007
【０５０７】
本明細書で使用する「非構造組換えポリマー」（ＵＲＰ）という用語は、第２構造を備えず変性ペプチド配列と共通点を共有する（例えば、生理的条件下で変性ペプチド配列のような典型的な作用を示す）アミノ酸配列を指す。ＵＲＰ配列は定義した三次構造に欠け、それらは限定されているかまたは例えば、Ｃｈｏｕ−Ｆａｓｍａアルゴリズムによって検出した第２構造を有さない。
【０５０８】
血漿カリクレイン結合タンパク質
血漿カリクレイン結合タンパク質は、完全長（例えば、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４）、ＩｇＭ、ＩｇＡ（例えば、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２）、ＩｇＤおよびＩｇＥ）であってもよく、抗原結合断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２またはｓｃＦｖ断片）であってもよい。この結合タンパク質は、２本の重鎖免疫グロブリンと２本の軽鎖免疫グロブリンを含んでもよく、単鎖抗体であってもよい。血漿カリクレイン結合タンパク質は、組換えタンパク質、例えば、ヒト化、ＣＤＲ移植、キメラ、脱免疫化もしくはｉｎ  ｖｉｔｒｏ作製抗体等であり得、任意にヒト生殖系列免疫グロブリン配列由来の定常領域を含み得る。１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質はモノクローナル抗体である。
【０５０９】
１つの態様では、本開示は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウスカリクレイン）と結合し、少なくとも１つの免疫グロブリン可変領域を含むタンパク質（例えば、単離タンパク質）を特徴とする。例えば、このタンパク質は、重鎖（ＨＣ）免疫グロブリン可変ドメイン配列および／または軽鎖（ＬＣ）免疫グロブリン可変ドメイン配列を含む。１つの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウスカリクレイン）と結合するおよび血漿カリクレインを阻害する。
【０５１０】
タンパク質は、１つまたは複数の以下の特徴を含むことができる：
（ａ）ヒトＣＤＲもしくはヒトフレームワーク領域；
（ｂ）免疫グロブリンＨＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＨＣ可変ドメインのＣＤＲと少なくとも８５、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、もしくは１００％同じであるＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）含むこと；
（ｃ）免疫グロブリンＬＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＬＣ可変ドメインのＣＤＲと少なくとも８５、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、もしくは１００％同じであるＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）含むこと；
（ｄ）免疫グロブリンＬＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＬＣ可変ドメインと少なくとも８５、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、もしくは１００％同じであること（例えば、全体またはフレームワーク領域またはＣＤＲにおいて）
（ｅ）免疫グロブリンＨＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＨＣ可変ドメインと少なくとも８５、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、もしくは１００％同じであること（例えば、全体またはフレームワーク領域またはＣＤＲにおいて）；
（ｆ）タンパク質が、本明細書に記載のタンパク質によって結合したエピトープと結合する、もしくは本明細書に記載のタンパク質と結合について競合すること；
（ｇ）霊長類ＣＤＲもしくは霊長類フレームワーク領域；
（ｈ）免疫グロブリンＨＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＨＣ可変ドメインのＣＤＲ１と、少なくとも１個、かつ２もしくは３個のみアミノ酸が異なるＣＤＲ１を含むこと；
（ｉ）免疫グロブリンＨＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＨＣ可変ドメインのＣＤＲ２と、少なくとも１個、かつ２、３、４、５、６、７、もしくは８個のみアミノ酸が異なるＣＤＲ２を含むこと；
（ｊ）免疫グロブリンＨＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＨＣ可変ドメインのＣＤＲ３と、少なくとも１個、かつ２、３、４、５、もしくは６個のみアミノ酸が異なるＣＤＲ３を含むこと；
（ｋ）免疫グロブリンＬＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＬＣ可変ドメインのＣＤＲ１と、少なくとも１個、かつ２、３、４、もしくは５個のみアミノ酸が異なるＣＤＲ１を含むこと；
（ｌ）免疫グロブリンＬＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＬＣ可変ドメインのＣＤＲ２と、少なくとも１個、かつ２、３、もしくは４個のみアミノ酸が異なるＣＤＲ２を含むこと；
（ｍ）免疫グロブリンＬＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＬＣ可変ドメインのＣＤＲ３と、少なくとも１個、かつ２、３、４、もしくは５個のみアミノ酸が異なるＣＤＲ３を含むこと；
（ｎ）免疫グロブリンＬＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＬＣ可変ドメインと、少なくとも１個、かつ２、３、４、５、６、７、８、９、もしくは１０個のみアミノ酸が異なること（例えば、全体またはフレームワーク領域またはＣＤＲにおいて）；ならびに
（ｏ）免疫グロブリンＨＣ可変ドメイン配列が、本明細書に記載のＨＣ可変ドメインと、少なくとも１個、かつ２、３、４、５、６、７、８、９、もしくは１０個のみアミノ酸が異なること（例えば、全体またはフレームワーク領域またはＣＤＲにおいて）。
【０５１１】
血漿カリクレイン結合タンパク質は、単離タンパク質であり得る（例えば、他のタンパク質を少なくとも７０、８０、９０、９５、または９９％含まない）。いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質またはその組成物は、血漿カリクレイン結合タンパク質と比較して不活性または部分的に活性である（例えば、５０００ｎＭ以上のＫｉ，ａｐｐで血漿カリクレインと結合する）抗体切断断片（例えば、切断されたＤＸ−２９２２）から単離される。例えば、血漿カリクレイン結合タンパク質は、かかる抗体切断断片を少なくとも７０％含まず；
他の実施形態では、結合タンパク質は、不活性または部分的に活性な抗体切断断片を少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９９％、またはさらには１００％含まない。
【０５１２】
血漿カリクレイン結合タンパク質は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレイン）をさらに阻害し得る。
【０５１３】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、プレカリクレイン（例えば、ヒトプレカリクレインおよび／またはマウスプレカリクレイン）とは結合しないが、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウスカリクレイン）の活性形態と結合する。
【０５１４】
ある実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレイン、またはその断片の触媒ドメインの活性部位またはその付近と結合するかまたは血漿カリクレインの活性部位と重複するエピトープと結合する。
【０５１５】
いくつかの態様では、このタンパク質は、本明細書に記載のタンパク質と同じエピトープと結合するかまたは結合についてそれと競合する。
【０５１６】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４と競合するかまたはそれと同じエピトープと結合する。
【０５１７】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、（例えば、以下に相当する血漿カリクレイン上の位置）ＣＬＩＰＳペプチドＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、もしくはＣ７、またはこれらのペプチドの２つ以上と結合し、例えば、このタンパク質は、Ｃ５およびＣ６と結合する。ＣＬＩＰＳペプチドＣ１〜Ｃ７は、ＣＬＩＰＳエピトープマッピングにより同定される血漿カリクレイン中のペプチドである（図９および１０Ａ〜１０Ｃを参照されたい）。Ｃ１は触媒ドメインの５５〜６７位に対応し、Ｃ２は８１〜９４位に、Ｃ３は１０１〜１０８位に、Ｃ４は１３７〜１５１位に、Ｃ５は１６２〜１７８位に、Ｃ６は１８６〜１９７位に、およびＣ７は血漿カリクレインの２１４〜２１７位に相当する。
【０５１８】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、図９に示すエピトープと結合する。
【０５１９】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレインの触媒三連構造を形成するアミノ酸Ｈｉｓ４３４、Ａｓｐ４８３、および／またはＳｅｒ５７８（番号はヒト配列に基づく）の１つまたは複数と結合する。
【０５２０】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、Ａｒｇ５５１、Ｇｌｎ５５３、Ｔｙｒ５５５、Ｔｈｒ５５８、および／またはＡｒｇ５６０（番号はヒト配列に基づく）の１つまたは複数のアミノ酸と結合する。いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、Ｓ４７８、Ｎ４８１、Ｓ５２５、およびＫ５２６（番号はヒトカリクレインの配列に基づく）の１つまたは複数のアミノ酸と結合する。
【０５２１】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、アミノ酸Ｓｅｒ４７９、Ｔｙｒ５６３、および／またはＡｓｐ５８５（番号はヒト配列に基づく）の１つまたは複数と結合する。
【０５２２】
血漿カリクレインの活性部位の間隙は、触媒三連構造（Ｈｉｓ４３４、Ａｓｐ４８３、およびＳｅｒ５７８）を形成する３個のアミノ酸を含み、結合した基質の酵素的加水分解に至る（触媒三連構造残基は図１０の下線である）。ＣＬＩＰＳエピトープマッピング分析用に選択したペプチドは接近可能な表面であり、活性部位の近傍を形成するか囲むかのいずれかであることを確定した。ペプチドＣ１は活性部位ヒスチジン４３４を含む。ペプチドＣ３は活性部位アスパラギン酸４８３を含む。ペプチドＣ６は活性部位セリン５７８を含む。抗体は、アミノ酸配列中で不連続的なアミノ酸の露出した複数の表面と結合することが可能である。例えば、ＣＬＩＰＳ分析により、Ｘ８１−Ｂ０１はＣ２、Ｃ３、Ｃ５およびＣ６ペプチドと結合すると思われる。
【０５２３】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、ＣＬＩＰＳペプチドＣ１、ペプチドＣ２、ペプチドＣ３、ペプチドＣ４、ペプチドＣ５、ペプチドＣ６、またはペプチドＣ７由来のアミノ酸を１つまたは複数含むエピトープと結合する。
【０５２４】
いくつかの実施形態では、このタンパク質は、ＣＬＩＰＳペプチド由来（例えば、少なくとも２個のペプチドＣ１、ペプチドＣ２、ペプチドＣ３、ペプチドＣ４、ペプチドＣ５、ペプチドＣ６、またはペプチドＣ７由来）の少なくとも２個の異なるアミノ酸を含むエピトープと結合する。
【０５２５】
タンパク質は、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレイン）と、少なくとも１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１０１０および１０１１Ｍ−１の結合親和性で結合できる。１つの実施形態では、このタンパク質は、ヒト血漿カリクレインと１×１０−３、５×１０−４ｓ−１、または１×１０−４ｓ−１より遅いＫｏｆｆで結合する。１つの実施形態では、このタンパク質は、ヒト血漿カリクレインと１×１０２、１×１０３、または５×１０３Ｍ−１ｓ−１より速いＫｏｎで結合する。１つの実施形態では、このタンパク質は血漿カリクレインと結合するが、組織カリクレインおよび／または血漿プレカリクレインとは、血漿カリクレインと結合するほど結合しない（例えば、このタンパク質は、組織カリクレインおよび／または血漿プレカリクレインと結合する効果が低い（例えば、陰性対照と比較して、例えば、５、１０、５０、１００、もしくは１０００倍低いまたはまったくない））。
【０５２６】
１つの実施形態では、このタンパク質は、ヒト血漿カリクレイン活性を、例えば、１０−５、１０−６、１０−７、１０−８、１０−９、および１０−１０Ｍ未満のＫｉで阻害する。タンパク質は、例えば、１００ｎＭ、１０ｎＭ、１、０．５、または０．２ｎＭ未満のＩＣ５０を有すことができる。例えば、このタンパク質は、血漿カリクレイン活性、ならびに第ＸＩＩａ因子（例えば、第ＸＩＩ因子由来）および／もしくはブラジキニン（例えば、高分子量キニノーゲン（ＨＭＷＫ）由来）の産生を調節し得る。タンパク質は、血漿カリクレイン活性、および／または第ＸＩＩａ因子（例えば、第ＸＩＩ因子由来）および／またはブラジキニン（例えば、高分子量キニノーゲン（ＨＭＷＫ）由来）の産生を阻害し得る。タンパク質のヒト血漿カリクレインに対する親和性は１００ｎｍ未満、１０ｎＭ未満、５ｎＭ未満、１ｎＭ未満、０．５ｎＭ未満のＫＤを特徴とすることができる。１つの実施形態では、このタンパク質は、血漿カリクレインを阻害するが、組織カリクレインについては血漿カリクレインを阻害するほど阻害しない（例えば、このタンパク質は組織カリクレインを阻害する効果が低い（例えば、陰性対照と比較して、例えば、５、１０、５０、１００、もしくは１０００倍低いまたはまったくない））。
【０５２７】
いくつかの実施形態では、このタンパク質の見かけの阻害定数（Ｋｉ，ａｐｐ）は、１０００、５００、１００、５、１、０．５または０．２ｎＭ未満である。
【０５２８】
血漿カリクレイン結合タンパク質は抗体であり得る。血漿カリクレイン結合抗体は単ポリペプチド（例えば、ｓｃＦｖ）中、または異なるポリペプチド（例えば、ＩｇＧまたはＦａｂ）上に含まれるＨＣおよびＬＣ可変ドメイン配列を有し得る。
【０５２９】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、ＤＸ−２９２２、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される抗体の軽鎖および重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０５３０】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される抗体の重鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０５３１】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される抗体の軽鎖を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０５３２】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される抗体の軽鎖および重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０５３３】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される抗体の重鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０５３４】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる群から選択される抗体の軽鎖抗体可変領域を有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０５３５】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる重鎖の群の対応するＣＤＲから選択される重鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０５３６】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる軽鎖の群の対応するＣＤＲから選択される軽鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０５３７】
１つの好ましい実施形態では、このタンパク質は、重鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）ならびにＭ１６２−Ａ０４、Ｍ１９９−Ａ０８、Ｍ１６０−Ｇ１２、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ１０１−Ａ０１、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９、Ｘ１１５−Ｈ０６、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１、Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１２４−Ｇ０１、Ｘ１１５−Ｇ０４、Ｍ２９−Ｄ０９、Ｍ１４５−Ｄ１１、Ｍ０６−Ｄ０９およびＭ３５−Ｇ０４からなる軽鎖の群の対応するＣＤＲから選択される軽鎖ＣＤＲを１つまたは複数（例えば、１つ、２つ、または３つ）有する抗体（例えば、ヒト抗体）である。
【０５３８】
１つの実施形態では、ＨＣおよびＬＣ可変ドメイン配列は、同じポリペプチド鎖の構成要素である。別の実施形態では、ＨＣおよびＬＣ可変ドメイン配列は異なるポリペプチド鎖の構成要素である。例えば、このタンパク質は、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４）である。タンパク質は、可溶性Ｆａｂであり得る。他の実施では、タンパク質は、Ｆａｂ２’、ｓｃＦｖ、小体、ｓｃＦｖ：：Ｆｃ融合物、Ｆａｂ：：ＨＳＡ融合物、ＨＳＡ：：Ｆａｂ融合物、Ｆａｂ：：ＨＳＡ：：Ｆａｂ融合物、または本明細書の結合タンパク質の１つの抗原結合部位を含む他の分子を含む。これらＦａｂのＶＨおよびＶＬ領域は、ＩｇＧ、Ｆａｂ、Ｆａｂ２、Ｆａｂ２’、ｓｃＦｖ、ＰＥＧ化Ｆａｂ、ＰＥＧ化ｓｃＦｖ、ＰＥＧ化Ｆａｂ２、ＶＨ：：ＣＨ１：：ＨＳＡ＋ＬＣ、ＨＳＡ：：ＶＨ：：ＣＨ１＋ＬＣ、ＬＣ：：ＨＳＡ＋ＶＨ：：ＣＨ１、ＨＳＡ：：ＬＣ＋ＶＨ：：ＣＨ１、または他の適切な構築物として提供できる。
【０５３９】
１つの実施形態では、このタンパク質は、ヒト抗体またはヒト化抗体であるか、ヒトで非免疫原性を示す。例えば、このタンパク質は、１つまたは複数のヒト抗体フレームワーク領域、例えば、すべてのヒトフレームワーク領域、またはヒトフレームワーク領域と少なくとも８５、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９％同じであるフレームワーク領域を含む。１つの実施形態では、このタンパク質は、ヒトＦｃドメイン、またはヒトＦｃドメインと少なくとも９５、９６、９７、９８、もしくは９９％同じであるＦｃドメインを含む。
【０５４０】
１つの実施形態では、このタンパク質は、霊長類抗体または霊長類化抗体であるか、ヒトで非免疫原性を示す。例えば、このタンパク質は、霊長類フレームワーク領域と少なくとも８５、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９％同じである１つまたは複数の霊長類抗体フレームワーク領域、例えば、すべての霊長類フレームワーク領域を含む。１つの実施形態では、このタンパク質は、霊長類Ｆｃドメイン、または霊長類Ｆｃドメインと少なくとも９５、９６、９７、９８、もしくは９９％同じであるＦｃドメインを含む。「霊長類」としては、ヒト（Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ）、チンパンジー（Ｐａｎ  ｔｒｏｇｌｏｄｙｔｅｓおよびＰａｎ  ｐａｎｉｓｃｕｓ（ボノボ））、ゴリラ（Ｇｏｒｉｌｌａ  ｇｏｒｉｌｌａ）、テナガザル、サル、キツネザル、アイアイ（Ｄａｕｂｅｎｔｏｎｉａ  ｍａｄａｇａｓｃａｒｉｅｎｓｉｓ）、およびメガネザルが挙げられる。
【０５４１】
いくつかの実施形態では、ヒト血漿カリクレインに対する霊長類抗体の親和性は、１０００、５００、１００、１０、５、１、０．５ｎＭ未満、例えば、１０ｎＭ未満、１ｎＭ未満、または０．５ｎＭ未満のＫＤを特徴とする。
【０５４２】
ある実施形態では、このタンパク質は、マウスまたはウサギ由来の配列を含まない（例えば、マウスまたはウサギ抗体ではない）。
【０５４３】
いくつかの態様では、本開示は、血漿カリクレイン関連の障害または容態の治療（または予防）法における、血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレイン）と結合し、かつ少なくとも１つの免疫グロビン可変領域を含むタンパク質（例えば、結合タンパク質、例えば、抗体）（例えば、本明細書に記載のタンパク質）の使用を提供する。例えば、血漿カリクレイン結合タンパク質は、重鎖（ＨＣ）免疫グロブリン可変ドメイン配列および軽鎖（ＬＣ）免疫グロブリン可変ドメイン配列を含む。いくつかの例示的な血漿カリクレイン結合タンパク質を本明細書に記載する。
【０５４４】
血漿カリクレイン結合タンパク質は、単離タンパク質であり得る（例えば、他のタンパク質を少なくとも７０、８０、９０、９５、または９９％含まない）。
【０５４５】
血漿カリクレイン結合タンパク質は、血漿カリクレイン、例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレインをさらに阻害し得る。いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質がヒトおよびマウス血漿カリクレインの両方と結合することが好ましく、それはかかる抗体の有効性をマウスモデルで試験し得るからである。
【０５４６】
血漿カリクレイン
血漿カリクレイン結合タンパク質が発現し得る例示的な血漿カリクレイン配列は、ヒト、マウス、またはラット血漿カリクレインアミノ酸配列、これらの配列、またはそれらの断片の１つと８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同じである配列（例えば、以下に提示する配列）を含むことができる。
【０５４７】
選択に使用したヒト血漿カリクレイン配列および続くスクリーニングを以下に示す（寄託番号ＮＰ＿０００８８３．２）。使用したヒト血漿カリクレイン（８６ｋＤａ）をヒト血漿から精製し、市販のベンダーにより第ＸＩＩａ因子と活性化させた。第ＸＩＩａ因子は、ポリペプチド配列を１箇所（Ａｒｇ３７１とＩｌｅ３７２との間であり、以下の配列中「／」で印を付けた切断部位）で切断することによりプレカリクレインを活性化し、２個のジスルフィド結合ポリペプチド（約５２ｋＤａの重鎖および約３４ｋＤａの触媒ドメイン）からなる活性血漿カリクレインを生成する［Ｃｏｌｍａｎ  ａｎｄ  Ｓｃｈｍａｉｅｒ，  （１９９７）  “Ｃｏｎｔａｃｔ  Ｓｙｓｔｅｍ：  Ａ  Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  Ｍｏｄｕｌａｔｏｒ  Ｗｉｔｈ  Ａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｎｔ，  Ｐｒｏｆｉｂｒｉｎｏｌｙｔｉｃ，  Ａｎｔｉａｄｈｅｓｉｖｅ，  ａｎｄ  Ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  Ａｔｔｒｉｂｕｔｅｓ”  Ｂｌｏｏｄ，  ９０，  ３８１９−３８４３］
ＧＣＬＴＱＬＹＥＮＡＦＦＲＧＧＤＶＡＳＭＹＴＰＮＡＱＹＣＱＭＲＣＴＦＨＰＲＣＬＬＦＳＦＬＰＡＳＳＩＮＤＭＥＫＲＦＧＣＦＬＫＤＳＶＴＧＴＬＰＫＶＨＲＴＧＡＶＳＧＨＳＬＫＱＣＧＨＱＩＳＡＣＨＲＤＩＹＫＧＶＤＭＲＧＶＮＦＮＶＳＫＶＳＳＶＥＥＣＱＫＲＣＴＳＮＩＲＣＱＦＦＳＹＡＴＱＴＦＨＫＡＥＹＲＮＮＣＬＬＫＹＳＰＧＧＴＰＴＡＩＫＶＬＳＮＶＥＳＧＦＳＬＫＰＣＡＬＳＥＩＧＣＨＭＮＩＦＱＨＬＡＦＳＤＶＤＶＡＲＶＬＴＰＤＡＦＶＣＲＴＩＣＴＹＨＰＮＣＬＦＦＴＦＹＴＮＶＷＫＩＥＳＱＲＮＶＣＬＬＫＴＳＥＳＧＴＰＳＳＳＴＰＱＥＮＴＩＳＧＹＳＬＬＴＣＫＲＴＬＰＥＰＣＨＳＫＩＹＰＧＶＤＦＧＧＥＥＬＮＶＴＦＶＫＧＶＮＶＣＱＥＴＣＴＫＭＩＲＣＱＦＦＴＹＳＬＬＰＥＤＣＫＥＥＫＣＫＣＦＬＲＬＳＭＤＧＳＰＴＲＩＡＹＧＴＱＧＳＳＧＹＳＬＲＬＣＮＴＧＤＮＳＶＣＴＴＫＴＳＴＲ／ＩＶＧＧＴＮＳＳＷＧＥＷＰＷＱＶＳＬＱＶＫＬＴＡＱＲＨＬＣＧＧＳＬＩＧＨＱＷＶＬＴＡＡＨＣＦＤＧＬＰＬＱＤＶＷＲＩＹＳＧＩＬＮＬＳＤＩＴＫＤＴＰＦＳＱＩＫＥＩＩＩＨＱＮＹＫＶＳＥＧＮＨＤＩＡＬＩＫＬＱＡＰＬＮＹＴＥＦＱＫＰＩＣＬＰＳＫＧＤＴＳＴＩＹＴＮＣＷＶＴＧＷＧＦＳＫＥＫＧＥＩＱＮＩＬＱＫＶＮＩＰＬＶＴＮＥＥＣＱＫＲＹＱＤＹＫＩＴＱＲＭＶＣＡＧＹＫＥＧＧＫＤＡＣＫＧＤＳＧＧＰＬＶＣＫＨＮＧＭＷＲＬＶＧＩＴＳＷＧＥＧＣＡＲＲＥＱＰＧＶＹＴＫＶＡＥＹＭＤＷＩＬＥＫＴＱＳＳＤＧＫＡＱＭＱＳＰＡ
【０５４８】
ヒト、マウス、およびラットのプレカリクレインアミノ酸配列、ならびにそれらをコードするｍＲＮＡ配列を下に示す。プレカリクレイン配列は、活性血漿カリクレイン（ｐｋａｌ）の単ポリペプチド鎖が（「／」で示した）１箇所で切断されて２本鎖を生成している点を除き、血漿カリクレインと同じである。以下に提示する配列はシグナル配列を含む完全配列である。発現細胞からの分泌時、シグナル配列は除去されることが予想される。
【０５４９】
ヒト血漿カリクレイン（寄託番号ＮＰ＿０００８８３．２）
＞ｇｉ｜７８１９１７９８｜基準｜ＮＰ＿０００８８３．２｜血漿カリクレインＢ１前駆体［ヒト（Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ）］
ＭＩＬＦＫＱＡＴＹＦＩＳＬＦＡＴＶＳＣＧＣＬＴＱＬＹＥＮＡＦＦＲＧＧＤＶＡＳＭＹＴＰＮＡＱＹＣＱＭＲＣＴＦＨＰＲＣＬＬＦＳＦＬＰＡＳＳＩＮＤＭＥＫＲＦＧＣＦＬＫＤＳＶＴＧＴＬＰＫＶＨＲＴＧＡＶＳＧＨＳＬＫＱＣＧＨＱＩＳＡＣＨＲＤＩＹＫＧＶＤＭＲＧＶＮＦＮＶＳＫＶＳＳＶＥＥＣＱＫＲＣＴＳＮＩＲＣＱＦＦＳＹＡＴＱＴＦＨＫＡＥＹＲＮＮＣＬＬＫＹＳＰＧＧＴＰＴＡＩＫＶＬＳＮＶＥＳＧＦＳＬＫＰＣＡＬＳＥＩＧＣＨＭＮＩＦＱＨＬＡＦＳＤＶＤＶＡＲＶＬＴＰＤＡＦＶＣＲＴＩＣＴＹＨＰＮＣＬＦＦＴＦＹＴＮＶＷＫＩＥＳＱＲＮＶＣＬＬＫＴＳＥＳＧＴＰＳＳＳＴＰＱＥＮＴＩＳＧＹＳＬＬＴＣＫＲＴＬＰＥＰＣＨＳＫＩＹＰＧＶＤＦＧＧＥＥＬＮＶＴＦＶＫＧＶＮＶＣＱＥＴＣＴＫＭＩＲＣＱＦＦＴＹＳＬＬＰＥＤＣＫＥＥＫＣＫＣＦＬＲＬＳＭＤＧＳＰＴＲＩＡＹＧＴＱＧＳＳＧＹＳＬＲＬＣＮＴＧＤＮＳＶＣＴＴＫＴＳＴＲＩＶＧＧＴＮＳＳＷＧＥＷＰＷＱＶＳＬＱＶＫＬＴＡＱＲＨＬＣＧＧＳＬＩＧＨＱＷＶＬＴＡＡＨＣＦＤＧＬＰＬＱＤＶＷＲＩＹＳＧＩＬＮＬＳＤＩＴＫＤＴＰＦＳＱＩＫＥＩＩＩＨＱＮＹＫＶＳＥＧＮＨＤＩＡＬＩＫＬＱＡＰＬＮＹＴＥＦＱＫＰＩＣＬＰＳＫＧＤＴＳＴＩＹＴＮＣＷＶＴＧＷＧＦＳＫＥＫＧＥＩＱＮＩＬＱＫＶＮＩＰＬＶＴＮＥＥＣＱＫＲＹＱＤＹＫＩＴＱＲＭＶＣＡＧＹＫＥＧＧＫＤＡＣＫＧＤＳＧＧＰＬＶＣＫＨＮＧＭＷＲＬＶＧＩＴＳＷＧＥＧＣＡＲＲＥＱＰＧＶＹＴＫＶＡＥＹＭＤＷＩＬＥＫＴＱＳＳＤＧＫＡＱＭＱＳＰＡ
【０５５０】
ヒト血漿カリクレインｍＲＮＡ（寄託番号ＮＰ＿０００８９２）
＞ｇｉ｜７８１９１７９７｜基準｜ＮＰ＿０００８９２．３｜ヒト（Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ）カリクレインＢ、血漿（フレッチャー因子）１（ＫＬＫＢ１）、ｍＲＮＡ
ＡＧＡＡＣＡＧＣＴＴＧＡＡＧＡＣＣＧＴＴＣＡＴＴＴＴＴＡＡＧＴＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＴＣＡＣＣＴＣＣＡＡＧＡＡＧＣＡＡＴＴＧＴＧＴＴＴＴＣＡＧＡＡＴＧＡＴＴＴＴＡＴＴＣＡＡＧＣＡＡＧＣＡＡＣＴＴＡＴＴＴＣＡＴＴＴＣＣＴＴＧＴＴＴＧＣＴＡＣＡＧＴＴＴＣＣＴＧＴＧＧＡＴＧＴＣＴＧＡＣＴＣＡＡＣＴＣＴＡＴＧＡＡＡＡＣＧＣＣＴＴＣＴＴＣＡＧＡＧＧＴＧＧＧＧＡＴＧＴＡＧＣＴＴＣＣＡＴＧＴＡＣＡＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＣＣＡＡＴＡＣＴＧＣＣＡＧＡＴＧＡＧＧＴＧＣＡＣＡＴＴＣＣＡＣＣＣＡＡＧＧＴＧＴＴＴＧＣＴＡＴＴＣＡＧＴＴＴＴＣＴＴＣＣＡＧＣＡＡＧＴＴＣＡＡＴＣＡＡＴＧＡＣＡＴＧＧＡＧＡＡＡＡＧＧＴＴＴＧＧＴＴＧＣＴＴＣＴＴＧＡＡＡＧＡＴＡＧＴＧＴＴＡＣＡＧＧＡＡＣＣＣＴＧＣＣＡＡＡＡＧＴＡＣＡＴＣＧＡＡＣＡＧＧＴＧＣＡＧＴＴＴＣＴＧＧＡＣＡＴＴＣＣＴＴＧＡＡＧＣＡＡＴＧＴＧＧＴＣＡＴＣＡＡＡＴＡＡＧＴＧＣＴＴＧＣＣＡＴＣＧＡＧＡＣＡＴＴＴＡＴＡＡＡＧＧＡＧＴＴＧＡＴＡＴＧＡＧＡＧＧＡＧＴＣＡＡＴＴＴＴＡＡＴＧＴＧＴＣＴＡＡＧＧＴＴＡＧＣＡＧＴＧＴＴＧＡＡＧＡＡＴＧＣＣＡＡＡＡＡＡＧＧＴＧＣＡＣＣＡＧＴＡＡＣＡＴＴＣＧＣＴＧＣＣＡＧＴＴＴＴＴＴＴＣＡＴＡＴＧＣＣＡＣＧＣＡＡＡＣＡＴＴＴＣＡＣＡＡＧＧＣＡＧＡＧＴＡＣＣＧＧＡＡＣＡＡＴＴＧＣＣＴＡＴＴＡＡＡＧＴＡＣＡＧＴＣＣＣＧＧＡＧＧＡＡＣＡＣＣＴＡＣＣＧＣＴＡＴＡＡＡＧＧＴＧＣＴＧＡＧＴＡＡＣＧＴＧＧＡＡＴＣＴＧＧＡＴＴＣＴＣＡＣＴＧＡＡＧＣＣＣＴＧＴＧＣＣＣＴＴＴＣＡＧＡＡＡＴＴＧＧＴＴＧＣＣＡＣＡＴＧＡＡＣＡＴＣＴＴＣＣＡＧＣＡＴＣＴＴＧＣＧＴＴＣＴＣＡＧＡＴＧＴＧＧＡＴＧＴＴＧＣＣＡＧＧＧＴＴＣＴＣＡＣＴＣＣＡＧＡＴＧＣＴＴＴＴＧＴＧＴＧＴＣＧＧＡＣＣＡＴＣＴＧＣＡＣＣＴＡＴＣＡＣＣＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＴＴＣＴＴＴＡＣＡＴＴＣＴＡＴＡＣＡＡＡＴＧＴＡＴＧＧＡＡＡＡＴＣＧＡＧＴＣＡＣＡＡＡＧＡＡＡＴＧＴＴＴＧＴＣＴＴＣＴＴＡＡＡＡＣＡＴＣＴＧＡＡＡＧＴＧＧＣＡＣＡＣＣＡＡＧＴＴＣＣＴＣＴＡＣＴＣＣＴＣＡＡＧＡＡＡＡＣＡＣＣＡＴＡＴＣＴＧＧＡＴＡＴＡＧＣＣＴＴＴＴＡＡＣＣＴＧＣＡＡＡＡＧＡＡＣＴＴＴＡＣＣＴＧＡＡＣＣＣＴＧＣＣＡＴＴＣＴＡＡＡＡＴＴＴＡＣＣＣＧＧＧＡＧＴＴＧＡＣＴＴＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＴＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＴＴＴＴＧＴＴＡＡＡＧＧＡＧＴＧＡＡＴＧＴＴＴＧＣＣＡＡＧＡＧＡＣＴＴＧＣＡＣＡＡＡＧＡＴＧＡＴＴＣＧＣＴＧＴＣＡＧＴＴＴＴＴＣＡＣＴＴＡＴＴＣＴＴＴＡＣＴＣＣＣＡＧＡＡＧＡＣＴＧＴＡＡＧＧＡＡＧＡＧＡＡＧＴＧＴＡＡＧＴＧＴＴＴＣＴＴＡＡＧＡＴＴＡＴＣＴＡＴＧＧＡＴＧＧＴＴＣＴＣＣＡＡＣＴＡＧＧＡＴＴＧＣＧＴＡＴＧＧＧＡＣＡＣＡＡＧＧＧＡＧＣＴＣＴＧＧＴＴＡＣＴＣＴＴＴＧＡＧＡＴＴＧＴＧＴＡＡＣＡＣＴＧＧＧＧＡＣＡＡＣＴＣＴＧＴＣＴＧＣＡＣＡＡＣＡＡＡＡＡＣＡＡＧＣＡＣＡＣＧＣＡＴＴＧＴＴＧＧＡＧＧＡＡＣＡＡＡＣＴＣＴＴＣＴＴＧＧＧＧＡＧＡＧＴＧＧＣＣＣＴＧＧＣＡＧＧＴＧＡＧＣＣＴＧＣＡＧＧＴＧＡＡＧＣＴＧＡＣＡＧＣＴＣＡＧＡＧＧＣＡＣＣＴＧＴＧＴＧＧＡＧＧＧＴＣＡＣＴＣＡＴＡＧＧＡＣＡＣＣＡＧＴＧＧＧＴＣＣＴＣＡＣＴＧＣＴＧＣＣＣＡＣＴＧＣＴＴＴＧＡＴＧＧＧＣＴＴＣＣＣＣＴＧＣＡＧＧＡＴＧＴＴＴＧＧＣＧＣＡＴＣＴＡＴＡＧＴＧＧＣＡＴＴＴＴＡＡＡＴＣＴＧＴＣＡＧＡＣＡＴＴＡＣＡＡＡＡＧＡＴＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＣＡＡＡＴＡＡＡＡＧＡＧＡＴＴＡＴＴＡＴＴＣＡＣＣＡＡＡＡＣＴＡＴＡＡＡＧＴＣＴＣＡＧＡＡＧＧＧＡＡＴＣＡＴＧＡＴＡＴＣＧＣＣＴＴＧＡＴＡＡＡＡＣＴＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＴＴＧＡＡＴＴＡＣＡＣＴＧＡＡＴＴＣＣＡＡＡＡＡＣＣＡＡＴＡＴＧＣＣＴＡＣＣＴＴＣＣＡＡＡＧＧＴＧＡＣＡＣＡＡＧＣＡＣＡＡＴＴＴＡＴＡＣＣＡＡＣＴＧＴＴＧＧＧＴＡＡＣＣＧＧＡＴＧＧＧＧＣＴＴＣＴＣＧＡＡＧＧＡＧＡＡＡＧＧＴＧＡＡＡＴＣＣＡＡＡＡＴＡＴＴＣＴＡＣＡＡＡＡＧＧＴＡＡＡＴＡＴＴＣＣＴＴＴＧＧＴＡＡＣＡＡＡＴＧＡＡＧＡＡＴＧＣＣＡＧＡＡＡＡＧＡＴＡＴＣＡＡＧＡＴＴＡＴＡＡＡＡＴＡＡＣＣＣＡＡＣＧＧＡＴＧＧＴＣＴＧＴＧＣＴＧＧＣＴＡＴＡＡＡＧＡＡＧＧＧＧＧＡＡＡＡＧＡＴＧＣＴＴＧＴＡＡＧＧＧＡＧＡＴＴＣＡＧＧＴＧＧＴＣＣＣＴＴＡＧＴＴＴＧＣＡＡＡＣＡＣＡＡＴＧＧＡＡＴＧＴＧＧＣＧＴＴＴＧＧＴＧＧＧＣＡＴＣＡＣＣＡＧＣＴＧＧＧＧＴＧＡＡＧＧＣＴＧＴＧＣＣＣＧＣＡＧＧＧＡＧＣＡＡＣＣＴＧＧＴＧＴＣＴＡＣＡＣＣＡＡＡＧＴＣＧＣＴＧＡＧＴＡＣＡＴＧＧＡＣＴＧＧＡＴＴＴＴＡＧＡＧＡＡＡＡＣＡＣＡＧＡＧＣＡＧＴＧＡＴＧＧＡＡＡＡＧＣＴＣＡＧＡＴＧＣＡＧＴＣＡＣＣＡＧＣＡＴＧＡＧＡＡＧＣＡＧＴＣＣＡＧＡＧＴＣＴＡＧＧＣＡＡＴＴＴＴＴＡＣＡＡＣＣＴＧＡＧＴＴＣＡＡＧＴＣＡＡＡＴＴＣＴＧＡＧＣＣＴＧＧＧＧＧＧＴＣＣＴＣＡＴＣＴＧＣＡＡＡＧＣＡＴＧＧＡＧＡＧＴＧＧＣＡＴＣＴＴＣＴＴＴＧＣＡＴＣＣＴＡＡＧＧＡＣＧＡＡＡＡＡＣＡＣＡＧＴＧＣＡＣＴＣＡＧＡＧＣＴＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＡＴＧＴＣＴＧＧＣＴＧＡＡＧＣＣＣＧＣＴＴＴＣＡＧＣＡＣＧＣＣＧＴＡＡＣＣＡＧＧＧＧＣＴＧＡＣＡＡＴＧＣＧＡＧＧＴＣＧＣＡＡＣＴＧＡＧＡＴＣＴＣＣＡＴＧＡＣＴＧＴＧＴＧＴＴＧＴＧＡＡＡＴＡＡＡＡＴＧＧＴＧＡＡＡＧＡＴＣＡＡＡＡＡＡ
【０５５１】
マウス血漿カリクレイン（寄託番号ＮＰ＿０３２４８１．１）
＞ｇｉ｜６６８０５８４｜基準｜ＮＰ＿０３２４８１．１｜カリクレインＢ、血漿１［ハツカネズミ（Ｍｕｓ  ｍｕｓｃｕｌｕｓ）］
ＭＩＬＦＮＲＶＧＹＦＶＳＬＦＡＴＶＳＣＧＣＭＴＱＬＹＫＮＴＦＦＲＧＧＤＬＡＡＩＹＴＰＤＡＱＹＣＱＫＭＣＴＦＨＰＲＣＬＬＦＳＦＬＡＶＴＰＰＫＥＴＮＫＲＦＧＣＦＭＫＥＳＩＴＧＴＬＰＲＩＨＲＴＧＡＩＳＧＨＳＬＫＱＣＧＨＱＩＳＡＣＨＲＤＩＹＫＧＬＤＭＲＧＳＮＦＮＩＳＫＴＤＮＩＥＥＣＱＫＬＣＴＮＮＦＨＣＱＦＦＴＹＡＴＳＡＦＹＲＰＥＹＲＫＫＣＬＬＫＨＳＡＳＧＴＰＴＳＩＫＳＡＤＮＬＶＳＧＦＳＬＫＳＣＡＬＳＥＩＧＣＰＭＤＩＦＱＨＳＡＦＡＤＬＮＶＳＱＶＩＴＰＤＡＦＶＣＲＴＩＣＴＦＨＰＮＣＬＦＦＴＦＹＴＮＥＷＥＴＥＳＱＲＮＶＣＦＬＫＴＳＫＳＧＲＰＳＰＰＩＰＱＥＮＡＩＳＧＹＳＬＬＴＣＲＫＴＲＰＥＰＣＨＳＫＩＹＳＧＶＤＦＥＧＥＥＬＮＶＴＦＶＱＧＡＤＶＣＱＥＴＣＴＫＴＩＲＣＱＦＦＩＹＳＬＬＰＱＤＣＫＥＥＧＣＫＣＳＬＲＬＳＴＤＧＳＰＴＲＩＴＹＧＭＱＧＳＳＧＹＳＬＲＬＣＫＬＶＤＳＰＤＣＴＴＫＩＮＡＲＩＶＧＧＴＮＡＳＬＧＥＷＰＷＱＶＳＬＱＶＫＬＶＳＱＴＨＬＣＧＧＳＩＩＧＲＱＷＶＬＴＡＡＨＣＦＤＧＩＰＹＰＤＶＷＲＩＹＧＧＩＬＳＬＳＥＩＴＫＥＴＰＳＳＲＩＫＥＬＩＩＨＱＥＹＫＶＳＥＧＮＹＤＩＡＬＩＫＬＱＴＰＬＮＹＴＥＦＱＫＰＩＣＬＰＳＫＡＤＴＮＴＩＹＴＮＣＷＶＴＧＷＧＹＴＫＥＱＧＥＴＱＮＩＬＱＫＡＴＩＰＬＶＰＮＥＥＣＱＫＫＹＲＤＹＶＩＮＫＱＭＩＣＡＧＹＫＥＧＧＴＤＡＣＫＧＤＳＧＧＰＬＶＣＫＨＳＧＲＷＱＬＶＧＩＴＳＷＧＥＧＣＧＲＫＤＱＰＧＶＹＴＫＶＳＥＹＭＤＷＩＬＥＫＴＱＳＳＤＶＲＡＬＥＴＳＳＡ
【０５５２】
マウス血漿カリクレインｍＲＮＡ（寄託番号ＮＭ＿００８４５５．２）
＞ｇｉ｜２３６４６５８０４｜基準｜ＮＭ＿００８４５５．２｜ハツカネズミ（Ｍｕｓ  ｍｕｓｃｕｌｕｓ）カリクレインＢ、血漿１（Ｋｌｋｂ１）、ｍＲＮＡ
ＡＧＡＣＣＧＣＣＣＴＣＧＧＴＧＣＣＡＴＡＴＴＣＡＧＡＧＧＧＣＴＴＧＡＡＧＡＣＣＡＴＣＴＴＣＡＴＧＴＧＡＡＧＡＣＴＣＣＣＴＣＴＣＣＴＣＣＡＧＡＡＣＣＡＣＡＡＣＧＴＧＡＣＣＡＴＣＣＴＴＣＣＡＧＧＡＴＧＡＴＴＴＴＡＴＴＣＡＡＣＣＧＡＧＴＧＧＧＴＴＡＴＴＴＴＧＴＴＴＣＣＴＴＧＴＴＴＧＣＴＡＣＣＧＴＣＴＣＣＴＧＴＧＧＧＴＧＴＡＴＧＡＣＴＣＡＡＣＴＧＴＡＴＡＡＡＡＡＴＡＣＣＴＴＣＴＴＣＡＧＡＧＧＴＧＧＧＧＡＴＣＴＡＧＣＴＧＣＣＡＴＣＴＡＣＡＣＣＣＣＡＧＡＴＧＣＣＣＡＧＴＡＣＴＧＴＣＡＧＡＡＧＡＴＧＴＧＣＡＣＴＴＴＴＣＡＣＣＣＣＡＧＧＴＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＡＧＣＴＴＴＣＴＣＧＣＣＧＴＧＡＣＴＣＣＡＣＣＣＡＡＡＧＡＧＡＣＡＡＡＴＡＡＡＣＧＧＴＴＴＧＧＴＴＧＣＴＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＧＣＡＴＴＡＣＡＧＧＧＡＣＴＴＴＧＣＣＡＡＧＡＡＴＡＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＧＧＣＣＡＴＴＴＣＴＧＧＴＣＡＴＴＣＴＴＴＡＡＡＧＣＡＧＴＧＴＧＧＣＣＡＴＣＡＡＡＴＡＡＧＴＧＣＴＴＧＣＣＡＣＣＧＡＧＡＣＡＴＡＴＡＣＡＡＡＧＧＡＣＴＴＧＡＴＡＴＧＡＧＡＧＧＧＴＣＣＡＡＣＴＴＴＡＡＴＡＴＣＴＣＴＡＡＧＡＣＣＧＡＣＡＡＴＡＴＴＧＡＡＧＡＡＴＧＣＣＡＧＡＡＡＣＴＧＴＧＣＡＣＡＡＡＴＡＡＴＴＴＴＣＡＣＴＧＣＣＡＡＴＴＴＴＴＣＡＣＡＴＡＴＧＣＴＡＣＡＡＧＴＧＣＡＴＴＴＴＡＣＡＧＡＣＣＡＧＡＧＴＡＣＣＧＧＡＡＧＡＡＧＴＧＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＣＡＣＡＧＴＧＣＡＡＧＣＧＧＡＡＣＡＣＣＣＡＣＣＡＧＣＡＴＡＡＡＧＴＣＡＧＣＧＧＡＣＡＡＣＣＴＧＧＴＧＴＣＴＧＧＡＴＴＣＴＣＡＣＴＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＧＣＧＣＴＴＴＣＧＧＡＧＡＴＡＧＧＴＴＧＣＣＣＣＡＴＧＧＡＴＡＴＴＴＴＣＣＡＧＣＡＣＴＣＴＧＣＣＴＴＴＧＣＡＧＡＣＣＴＧＡＡＴＧＴＡＡＧＣＣＡＧＧＴＣＡＴＣＡＣＣＣＣＣＧＡＴＧＣＣＴＴＴＧＴＧＴＧＴＣＧＣＡＣＣＡＴＣＴＧＣＡＣＣＴＴＣＣＡＴＣＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＴＴＴＣＴＴＣＡＣＧＴＴＣＴＡＣＡＣＧＡＡＴＧＡＡＴＧＧＧＡＧＡＣＡＧＡＡＴＣＡＣＡＧＡＧＡＡＡＴＧＴＴＴＧＴＴＴＴＣＴＴＡＡＧＡＣＧＴＣＴＡＡＡＡＧＴＧＧＡＡＧＡＣＣＡＡＧＴＣＣＣＣＣＴＡＴＴＣＣＴＣＡＡＧＡＡＡＡＣＧＣＴＡＴＡＴＣＴＧＧＡＴＡＴＡＧＴＣＴＣＣＴＣＡＣＣＴＧＣＡＧＡＡＡＡＡＣＴＣＧＣＣＣＴＧＡＡＣＣＣＴＧＣＣＡＴＴＣＣＡＡＡＡＴＴＴＡＣＴＣＴＧＧＡＧＴＴＧＡＣＴＴＴＧＡＡＧＧＧＧＡＡＧＡＡＣＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＣＴＴＣＧＴＧＣＡＡＧＧＡＧＣＡＧＡＴＧＴＣＴＧＣＣＡＡＧＡＧＡＣＴＴＧＴＡＣＡＡＡＧＡＣＡＡＴＣＣＧＣＴＧＣＣＡＧＴＴＴＴＴＴＡＴＴＴＡＣＴＣＣＴＴＡＣＴＣＣＣＣＣＡＡＧＡＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＧＡＧＧＧＧＴＧＴＡＡＡＴＧＴＴＣＣＴＴＡＡＧＧＴＴＡＴＣＣＡＣＡＧＡＴＧＧＣＴＣＣＣＣＡＡＣＴＡＧＧＡＴＣＡＣＣＴＡＴＧＧＣＡＴＧＣＡＧＧＧＧＡＧＣＴＣＣＧＧＴＴＡＴＴＣＴＣＴＧＡＧＡＴＴＧＴＧＴＡＡＡＣＴＴＧＴＧＧＡＣＡＧＣＣＣＴＧＡＣＴＧＴＡＣＡＡＣＡＡＡＡＡＴＡＡＡＴＧＣＡＣＧＴＡＴＴＧＴＧＧＧＡＧＧＡＡＣＡＡＡＣＧＣＴＴＣＴＴＴＡＧＧＧＧＡＧＴＧＧＣＣＡＴＧＧＣＡＧＧＴＣＡＧＣＣＴＧＣＡＡＧＴＧＡＡＧＣＴＧＧＴＡＴＣＴＣＡＧＡＣＣＣＡＴＴＴＧＴＧＴＧＧＡＧＧＧＴＣＣＡＴＣＡＴＴＧＧＴＣＧＣＣＡＡＴＧＧＧＴＡＣＴＧＡＣＡＧＣＴＧＣＣＣＡＴＴＧＣＴＴＴＧＡＴＧＧＡＡＴＴＣＣＣＴＡＴＣＣＡＧＡＴＧＴＧＴＧＧＣＧＴＡＴＡＴＡＴＧＧＣＧＧＡＡＴＴＣＴＴＡＧＴＣＴＧＴＣＣＧＡＧＡＴＴＡＣＧＡＡＡＧＡＡＡＣＧＣＣＴＴＣＣＴＣＧＡＧＡＡＴＡＡＡＧＧＡＧＣＴＴＡＴＴＡＴＴＣＡＴＣＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＡＧＴＣＴＣＡＧＡＡＧＧＣＡＡＴＴＡＴＧＡＴＡＴＴＧＣＣＴＴＡＡＴＡＡＡＧＣＴＴＣＡＧＡＣＧＣＣＣＣＴＧＡＡＴＴＡＴＡＣＴＧＡＡＴＴＣＣＡＡＡＡＡＣＣＡＡＴＡＴＧＣＣＴＧＣＣＴＴＣＣＡＡＡＧＣＴＧＡＣＡＣＡＡＡＴＡＣＡＡＴＴＴＡＴＡＣＣＡＡＣＴＧＴＴＧＧＧＴＧＡＣＴＧＧＡＴＧＧＧＧＣＴＡＣＡＣＧＡＡＧＧＡＡＣＡＡＧＧＴＧＡＡＡＣＧＣＡＡＡＡＴＡＴＴＣＴＡＣＡＡＡＡＧＧＣＴＡＣＴＡＴＴＣＣＴＴＴＧＧＴＡＣＣＡＡＡＴＧＡＡＧＡＡＴＧＣＣＡＧＡＡＡＡＡＡＴＡＣＡＧＡＧＡＴＴＡＴＧＴＴＡＴＡＡＡＣＡＡＧＣＡＧＡＴＧＡＴＣＴＧＴＧＣＴＧＧＣＴＡＣＡＡＡＧＡＡＧＧＣＧＧＡＡＣＡＧＡＣＧＣＴＴＧＴＡＡＧＧＧＡＧＡＴＴＣＣＧＧＴＧＧＣＣＣＣＴＴＡＧＴＣＴＧＴＡＡＡＣＡＣＡＧＴＧＧＡＣＧＧＴＧＧＣＡＧＴＴＧＧＴＧＧＧＴＡＴＣＡＣＣＡＧＣＴＧＧＧＧＴＧＡＡＧＧＣＴＧＣＧＣＣＣＧＣＡＡＧＧＡＣＣＡＡＣＣＡＧＧＡＧＴＣＴＡＣＡＣＣＡＡＡＧＴＴＴＣＴＧＡＧＴＡＣＡＴＧＧＡＣＴＧＧＡＴＡＴＴＧＧＡＧＡＡＧＡＣＡＣＡＧＡＧＣＡＧＴＧＡＴＧＴＡＡＧＡＧＣＴＣＴＧＧＡＧＡＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＣＴＧＡＧＧＡＧＧＣＴＧＧＧＴＡＣＣＡＡＧＧＡＧＧＡＡＧＡＡＣＣＣＡＧＣＴＧＧＣＴＴＴＡＣＣＡＣＣＴＧＣＣＣＴＣＡＡＧＧＣＡＡＡＣＴＡＧＡＧＣＴＣＣＡＧＧＡＴＴＣＴＣＧＧＣＴＧＴＡＡＡＡＴＧＴＴＧＡＴＡＡＴＧＧＴＧＴＣＴＡＣＣＴＣＡＣＡＴＣＣＧＴＡＴＣＡＴＴＧＧＡＴＴＧＡＡＡＡＴＴＣＡＡＧＴＧＴＡＧＡＴＡＴＡＧＴＴＧＣＴＧＡＡＧＡＣＡＧＣＧＴＴＴＴＧＣＴＣＡＡＧＴＧＴＧＴＴＴＣＣＴＧＣＣＴＴＧＡＧＴＣＡＣＡＧＧＡＧＣＴＣＣＡＡＴＧＧＧＡＧＣＡＴＴＡＣＡＡＡＧＡＴＣＡＣＣＡＡＧＣＴＴＧＴＴＡＧＧＡＡＡＧＡＧＡＡＴＧＡＴＣＡＡＡＧＧＧＴＴＴＴＡＴＴＡＧＧＴＡＡＴＧＡＡＡＴＧＴＣＴＡＧＡＴＧＴＧＡＴＧＣＡＡＴＴＧＡＡＡＡＡＡＡＧＡＣＣＣＣＡＧＡＴＴＣＴＡＧＣＡＣＡＧＴＣＣＴＴＧＧＧＡＣＣＡＴＴＣＴＣＡＴＧＴＡＡＣＴＧＴＴＧＡＣＴＣＴＧＧＡＣＣＴＣＡＧＣＡＧＡＴＣＴＣＡＧＡＧＴＴＡＣＣＴＧＴＣＣＡＣＴＴＣＴＧＡＣＡＴＴＴＧＴＴＴＡＴＴＡＧＡＧＣＣＴＧＡＴＧＣＴＡＴＴＣＴＴＴＣＡＡＧＴＧＧＡＧＣＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡ
【０５５３】
ラット血漿カリクレイン（寄託番号ＮＰ＿０３６８５７．２）
＞ｇｉ｜１６２１３８９０５｜基準｜ＮＰ＿０３６８５７．２｜カリクレインＢ、血漿１［ドブネズミ（Ｒａｔｔｕｓ  ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ）］
ＭＩＬＦＫＱＶＧＹＦＶＳＬＦＡＴＶＳＣＧＣＬＳＱＬＹＡＮＴＦＦＲＧＧＤＬＡＡＩＹＴＰＤＡＱＨＣＱＫＭＣＴＦＨＰＲＣＬＬＦＳＦＬＡＶＳＰＴＫＥＴＤＫＲＦＧＣＦＭＫＥＳＩＴＧＴＬＰＲＩＨＲＴＧＡＩＳＧＨＳＬＫＱＣＧＨＱＬＳＡＣＨＱＤＩＹＥＧＬＤＭＲＧＳＮＦＮＩＳＫＴＤＳＩＥＥＣＱＫＬＣＴＮＮＩＨＣＱＦＦＴＹＡＴＫＡＦＨＲＰＥＹＲＫＳＣＬＬＫＲＳＳＳＧＴＰＴＳＩＫＰＶＤＮＬＶＳＧＦＳＬＫＳＣＡＬＳＥＩＧＣＰＭＤＩＦＱＨＦＡＦＡＤＬＮＶＳＨＶＶＴＰＤＡＦＶＣＲＴＶＣＴＦＨＰＮＣＬＦＦＴＦＹＴＮＥＷＥＴＥＳＱＲＮＶＣＦＬＫＴＳＫＳＧＲＰＳＰＰＩＩＱＥＮＡＶＳＧＹＳＬＦＴＣＲＫＡＲＰＥＰＣＨＦＫＩＹＳＧＶＡＦＥＧＥＥＬＮＡＴＦＶＱＧＡＤＡＣＱＥＴＣＴＫＴＩＲＣＱＦＦＴＹＳＬＬＰＱＤＣＫＡＥＧＣＫＣＳＬＲＬＳＴＤＧＳＰＴＲＩＴＹＥＡＱＧＳＳＧＹＳＬＲＬＣＫＶＶＥＳＳＤＣＴＴＫＩＮＡＲＩＶＧＧＴＮＳＳＬＧＥＷＰＷＱＶＳＬＱＶＫＬＶＳＱＮＨＭＣＧＧＳＩＩＧＲＱＷＩＬＴＡＡＨＣＦＤＧＩＰＹＰＤＶＷＲＩＹＧＧＩＬＮＬＳＥＩＴＮＫＴＰＦＳＳＩＫＥＬＩＩＨＱＫＹＫＭＳＥＧＳＹＤＩＡＬＩＫＬＱＴＰＬＮＹＴＥＦＱＫＰＩＣＬＰＳＫＡＤＴＮＴＩＹＴＮＣＷＶＴＧＷＧＹＴＫＥＲＧＥＴＱＮＩＬＱＫＡＴＩＰＬＶＰＮＥＥＣＱＫＫＹＲＤＹＶＩＴＫＱＭＩＣＡＧＹＫＥＧＧＩＤＡＣＫＧＤＳＧＧＰＬＶＣＫＨＳＧＲＷＱＬＶＧＩＴＳＷＧＥＧＣＡＲＫＥＱＰＧＶＹＴＫＶＡＥＹＩＤＷＩＬＥＫＩＱＳＳＫＥＲＡＬＥＴＳＰＡ
【０５５４】
ラット血漿カリクレインｍＲＮＡ（寄託番号ＮＰ＿０１２７２５）
＞ｇｉ｜１６２１３８９０４｜基準｜ＮＰ＿０１２７２５．２｜ドブネズミ（Ｒａｔｔｕｓ  ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ）カリクレインＢ、血漿１（Ｋｌｋｂ１）、ｍＲＮＡ
ＴＧＡＡＧＡＣＴＡＧＣＴＴＣＡＴＧＴＧＡＡＧＡＣＴＣＣＴＴＣＴＣＣＴＣＣＡＧＣＡＧＣＡＣＡＡＡＧＣＡＡＣＣＡＴＣＣＴＴＣＣＡＧＧＡＴＧＡＴＴＴＴＡＴＴＣＡＡＡＣＡＡＧＴＧＧＧＴＴＡＴＴＴＴＧＴＴＴＣＣＴＴＧＴＴＣＧＣＴＡＣＡＧＴＴＴＣＣＴＧＴＧＧＧＴＧＴＣＴＧＴＣＡＣＡＡＣＴＧＴＡＴＧＣＡＡＡＴＡＣＣＴＴＣＴＴＣＡＧＡＧＧＴＧＧＧＧＡＴＣＴＧＧＣＴＧＣＣＡＴＣＴＡＣＡＣＣＣＣＧＧＡＴＧＣＣＣＡＧＣＡＣＴＧＴＣＡＧＡＡＧＡＴＧＴＧＣＡＣＧＴＴＴＣＡＣＣＣＣＡＧＧＴＧＣＣＴＧＣＴＣＴＴＣＡＧＣＴＴＣＣＴＴＧＣＣＧＴＧＡＧＴＣＣＡＡＣＣＡＡＧＧＡＧＡＣＡＧＡＴＡＡＡＡＧＧＴＴＴＧＧＧＴＧＣＴＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＧＣＡＴＴＡＣＡＧＧＧＡＣＴＴＴＧＣＣＡＡＧＡＡＴＡＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＧＧＣＣＡＴＴＴＣＴＧＧＴＣＡＴＴＣＴＴＴＡＡＡＡＣＡＧＴＧＴＧＧＣＣＡＴＣＡＡＴＴＡＡＧＴＧＣＴＴＧＣＣＡＣＣＡＡＧＡＣＡＴＡＴＡＣＧＡＡＧＧＡＣＴＧＧＡＴＡＴＧＡＧＡＧＧＧＴＣＣＡＡＣＴＴＴＡＡＴＡＴＡＴＣＴＡＡＧＡＣＣＧＡＣＡＧＴＡＴＴＧＡＡＧＡＡＴＧＣＣＡＧＡＡＡＣＴＧＴＧＣＡＣＡＡＡＴＡＡＴＡＴＴＣＡＣＴＧＣＣＡＡＴＴＴＴＴＣＡＣＡＴＡＴＧＣＴＡＣＡＡＡＡＧＣＡＴＴＴＣＡＣＡＧＡＣＣＡＧＡＧＴＡＣＡＧＧＡＡＧＡＧＴＴＧＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＣＧＣＡＧＴＴＣＡＡＧＴＧＧＡＡＣＧＣＣＣＡＣＣＡＧＴＡＴＡＡＡＧＣＣＡＧＴＧＧＡＣＡＡＣＣＴＧＧＴＧＴＣＴＧＧＡＴＴＣＴＣＡＣＴＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＧＣＴＣＴＣＴＣＡＧＡＧＡＴＣＧＧＴＴＧＣＣＣＣＡＴＧＧＡＴＡＴＴＴＴＣＣＡＧＣＡＣＴＴＴＧＣＣＴＴＴＧＣＡＧＡＣＣＴＧＡＡＴＧＴＡＡＧＣＣＡＴＧＴＣＧＴＣＡＣＣＣＣＣＧＡＴＧＣＣＴＴＣＧＴＧＴＧＴＣＧＣＡＣＣＧＴＴＴＧＣＡＣＣＴＴＣＣＡＴＣＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＴＴＣＴＴＣＡＣＡＴＴＣＴＡＣＡＣＧＡＡＴＧＡＧＴＧＧＧＡＧＡＣＧＧＡＡＴＣＡＣＡＧＡＧＧＡＡＴＧＴＴＴＧＴＴＴＴＣＴＴＡＡＧＡＣＡＴＣＴＡＡＡＡＧＴＧＧＡＡＧＡＣＣＡＡＧＴＣＣＣＣＣＴＡＴＴＡＴＴＣＡＡＧＡＡＡＡＴＧＣＴＧＴＡＴＣＴＧＧＡＴＡＣＡＧＴＣＴＣＴＴＣＡＣＣＴＧＣＡＧＡＡＡＡＧＣＴＣＧＣＣＣＴＧＡＡＣＣＣＴＧＣＣＡＴＴＴＣＡＡＧＡＴＴＴＡＣＴＣＴＧＧＡＧＴＴＧＣＣＴＴＣＧＡＡＧＧＧＧＡＡＧＡＡＣＴＧＡＡＣＧＣＧＡＣＣＴＴＣＧＴＧＣＡＧＧＧＡＧＣＡＧＡＴＧＣＧＴＧＣＣＡＡＧＡＧＡＣＴＴＧＴＡＣＡＡＡＧＡＣＣＡＴＣＣＧＣＴＧＴＣＡＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＴＡＣＴＣＡＴＴＧＣＴＴＣＣＣＣＡＡＧＡＣＴＧＣＡＡＧＧＣＡＧＡＧＧＧＧＴＧＴＡＡＡＴＧＴＴＣＣＴＴＡＡＧＧＴＴＡＴＣＣＡＣＧＧＡＴＧＧＣＴＣＴＣＣＡＡＣＴＡＧＧＡＴＣＡＣＣＴＡＴＧＡＧＧＣＡＣＡＧＧＧＧＡＧＣＴＣＴＧＧＴＴＡＴＴＣＴＣＴＧＡＧＡＣＴＧＴＧＴＡＡＡＧＴＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＴＣＴＧＡＣＴＧＴＡＣＧＡＣＡＡＡＡＡＴＡＡＡＴＧＣＡＣＧＴＡＴＴＧＴＧＧＧＡＧＧＡＡＣＡＡＡＣＴＣＴＴＣＴＴＴＡＧＧＡＧＡＧＴＧＧＣＣＡＴＧＧＣＡＧＧＴＣＡＧＣＣＴＧＣＡＡＧＴＡＡＡＧＴＴＧＧＴＴＴＣＴＣＡＧＡＡＴＣＡＴＡＴＧＴＧＴＧＧＡＧＧＧＴＣＣＡＴＣＡＴＴＧＧＡＣＧＣＣＡＡＴＧＧＡＴＡＣＴＧＡＣＧＧＣＴＧＣＣＣＡＴＴＧＣＴＴＴＧＡＴＧＧＧＡＴＴＣＣＣＴＡＴＣＣＡＧＡＣＧＴＧＴＧＧＣＧＴＡＴＡＴＡＴＧＧＣＧＧＧＡＴＴＣＴＴＡＡＴＣＴＧＴＣＡＧＡＧＡＴＴＡＣＡＡＡＣＡＡＡＡＣＧＣＣＴＴＴＣＴＣＡＡＧＴＡＴＡＡＡＧＧＡＧＣＴＴＡＴＴＡＴＴＣＡＴＣＡＧＡＡＡＴＡＣＡＡＡＡＴＧＴＣＡＧＡＡＧＧＣＡＧＴＴＡＣＧＡＴＡＴＴＧＣＣＴＴＡＡＴＡＡＡＧＣＴＴＣＡＧＡＣＡＣＣＧＴＴＧＡＡＴＴＡＴＡＣＴＧＡＡＴＴＣＣＡＡＡＡＡＣＣＡＡＴＡＴＧＣＣＴＧＣＣＴＴＣＣＡＡＡＧＣＴＧＡＣＡＣＡＡＡＴＡＣＡＡＴＴＴＡＴＡＣＣＡＡＣＴＧＣＴＧＧＧＴＧＡＣＴＧＧＡＴＧＧＧＧＣＴＡＣＡＣＡＡＡＧＧＡＡＣＧＡＧＧＴＧＡＧＡＣＣＣＡＡＡＡＴＡＴＴＣＴＡＣＡＡＡＡＧＧＣＡＡＣＴＡＴＴＣＣＣＴＴＧＧＴＡＣＣＡＡＡＴＧＡＡＧＡＡＴＧＣＣＡＧＡＡＡＡＡＡＴＡＴＡＧＡＧＡＴＴＡＴＧＴＴＡＴＡＡＣＣＡＡＧＣＡＧＡＴＧＡＴＣＴＧＴＧＣＴＧＧＣＴＡＣＡＡＡＧＡＡＧＧＴＧＧＡＡＴＡＧＡＴＧＣＴＴＧＴＡＡＧＧＧＡＧＡＴＴＣＣＧＧＴＧＧＣＣＣＣＴＴＡＧＴＴＴＧＣＡＡＡＣＡＴＡＧＴＧＧＡＡＧＧＴＧＧＣＡＧＴＴＧＧＴＧＧＧＴＡＴＣＡＣＣＡＧＣＴＧＧＧＧＣＧＡＡＧＧＣＴＧＴＧＣＣＣＧＣＡＡＧＧＡＧＣＡＡＣＣＡＧＧＡＧＴＣＴＡＣＡＣＣＡＡＡＧＴＴＧＣＴＧＡＧＴＡＣＡＴＴＧＡＣＴＧＧＡＴＡＴＴＧＧＡＧＡＡＧＡＴＡＣＡＧＡＧＣＡＧＣＡＡＧＧＡＡＡＧＡＧＣＴＣＴＧＧＡＧＡＣＡＴＣＴＣＣＡＧＣＡＴＧＡＧＧＡＧＧＣＴＧＧＧＴＡＣＴＧＡＴＧＧＧＧＡＡＧＡＧＣＣＣＡＧＣＴＧＧＣＡＣＣＡＧＣＴＴＴＡＣＣＡＣＣＴＧＣＣＣＴＣＡＡＧＴＣＣＴＡＣＴＡＧＡＧＣＴＣＣＡＧＡＧＴＴＣＴＣＴＴＣＴＧＣＡＡＡＡＴＧＴＣＧＡＴＡＧＴＧＧＴＧＴＣＴＡＣＣＴＣＧＣＡＴＣＣＴＴＡＣＣＡＴＡＧＧＡＴＴＡＡＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＡＧＡＣＡＣＡＧＴＴＧＣＴＡＡＡＧＡＣＡＧＣＧＣＣＡＴＧＣＴＣＡＡＧＣＧＴＧＣＴＴＣＣＴＧＣＣＴＴＧＡＧＣＡＡＣＡＧＧＡＡＣＧＣＣＡＡＴＧＡＧＡＡＣＴＡＴＣＣＡＡＡＧＡＴＴＡＣＣＡＡＧＣＣＴＧＴＴＴＧＧＡＡＡＴＡＡＡＡＴＧＧＴＣＡＡＡＧＧＡＴＴＴＴＴＡＴＴＡＧＧＴＡＧＴＧＡＡＡＴＴＡＧＧＴＡＧＴＴＧＴＣＣＴＴＧＧＡＡＣＣＡＴＴＣＴＣＡＴＧＴＡＡＣＴＧＴＴＧＡＣＴＣＴＧＧＡＣＣＴＣＡＧＣＡＧＡＴＣＡＣＡＧＴＴＡＣＣＴＴＣＴＧＴＣＣＡＣＴＴＣＴＧＡＣＡＴＴＴＧＴＧＴＡＣＴＧＧＡＡＣＣＴＧＡＴＧＣＴＧＴＴＣＴＴＣＣＡＣＴＴＧＧＡＧＣＡＡＡＧＡＡＣＴＧＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＴＴＣＴＡＴＣＣＡＴＴＧＧＧＡＡＡＡＡＧＡＧＡＴＣＴＴＴＧＴＡＡＣＡＴＴＴＣＣＴＴＴＡＣＡＡＴＡＡＡＡＡＧＡＴＧＴＴＣＴＡＣＴＴＧＧＡＣＴＴＧＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡ
【０５５５】
ディスプレイライブラリー
ディスプレイライブラリーは、実体のコレクションであり、各実体は、利用しやすいポリペプチド成分ならびにポリペプチド成分をコードもしくは同定する回収可能な成分を含む。ポリペプチド成分は変化し、その結果、異なるアミノ酸配列が表現される。ポリペプチド成分は、任意の長さ（例えば、３個のアミノ酸〜３００個超のアミノ酸）であり得る。ディスプレイライブラリーの実体は、複数のポリペプチド成分（例えば、ｓＦａｂの２本のポリペプチド鎖）を含むことができる。１つの例示的な実施形態では、ディスプレイライブラリーを使用して、血漿カリクレインと結合するタンパク質を同定できる。選択では、ライブラリーの各メンバーのポリペプチド成分を、血漿カリクレイン（またはそれらの断片）で探索し、ポリペプチド成分が血漿カリクレインと結合する場合、ディスプレイライブラリーメンバーを、典型的には、支持体上の保持によって同定する。
【０５５６】
保持されたディスプレイライブラリーメンバーを支持体から回収し、分析する。分析は、増幅およびその後の類似または類似しない条件下での選択を含むことができる。例えば、陽性選択と陰性選択を交互に行うことができる。分析は、詳細な特性決定のためのポリペプチド成分のアミノ酸配列決定およびポリペプチド成分の精製も含むことができる。
【０５５７】
ディスプレイライブラリー用に様々な形式を使用できる。例としては、下記が挙げられる。
【０５５８】
ファージディスプレイ：タンパク質成分は、典型的には、バクテリオファージ被膜タンパク質と共有結合している。結合は、被膜タンパク質に融合したタンパク質成分をコードする核酸の翻訳に由来する。結合には、可動性ペプチドリンカー、プロテイナーゼ部位、または終止コドンの抑制の結果として組み込まれたアミノ酸が含まれ得る。ファージディスプレイは、例えば、米国特許第５，２２３，４０９号；Ｓｍｉｔｈ  （１９８５）  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２８：１３１５−１３１７；ＷＯ９２／１８６１９号；ＷＯ９１／１７２７１号；ＷＯ９２／２０７９１号；ＷＯ９２／１５６７９号；ＷＯ９３／０１２８８号；ＷＯ９２／０１０４７号；ＷＯ９２／０９６９０号；ＷＯ９０／０２８０９号；ｄｅ  Ｈａａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９９）  Ｊ．Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ  ２７４：１８２１８−３０；  Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９８）  Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ４：１−２０；  Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ｅｔ  ａｌ．  （２０００）  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｔｏｄａｙ  ２：３７１−８  ａｎｄ  Ｈｏｅｔ  ｅｔ  ａｌ．  （２００５）  Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  ２３（３）３４４−８に記載されている。タンパク質成分を表示するバクテリオファージは、増殖させ、標準的なファージ調製方法（例えば、増殖培地からのＰＥＧ沈殿法）を用いて採集することができる。各ディスプレイファージの選択後、選択したタンパク質成分をコードする核酸を、選択したファージを感染させた細胞またはファージ自体から増幅後に単離できる。各コロニーまたはプラークを選別し、核酸を単離し、配列決定することができる。
【０５５９】
他のディスプレイ形式。他のディスプレイ形式としては、細胞ベースのディスプレイ（例えば、ＷＯ０３／０２９４５６号を参照されたい）、タンパク質−核酸融合（例えば、米国特許第６，２０７，４４６号を参照されたい）、リボゾームディスプレイ（例えば、Ｍａｔｔｈｅａｋｉｓ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９４）  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ９１：９０２２およびＨａｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．  （２０００）  Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  １８：１２８７−９２；  Ｈａｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．  （２０００）  Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．  ３２８：４０４−３０；およびＳｃｈａｆｆｉｔｚｅｌ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９９）  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ．  ２３１（１−２）：１１９−３５を参照されたい）、およびＥ．ｃｏｌｉ周辺質ディスプレイ（Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ．  ２００５  Ｎｏｖ  ２２；ＰＭＩＤ：  １６３３７９５８）が挙げられる。
【０５６０】
足場。ディスプレイに有用な足場には、以下が含まれる：抗体（例えば、Ｆａｂ断片、単鎖Ｆｖ分子（ｓｃＦＶ）、単一ドメイン抗体、ラクダ抗体、およびラクダ化抗体）；Ｔ細胞受容体；ＭＨＣタンパク質；細胞外ドメイン（例えば、フィブロネクチンＩＩＩ型受容体、ＥＧＦ反復）；プロテイナーゼ阻害剤（例えば、Ｋｕｎｉｔｚドメイン、エコチン、ＢＰＴＩ等）；ＴＰＲ反復；三葉構造；ジンクフィンガードメイン；ＤＮＡ結合タンパク質；特に、単量体ＤＮＡ結合タンパク質；ＲＮＡ結合タンパク質；酵素、例えば、プロテイナーゼ（特に、不活化プロテイナーゼ）、ＲＮａｓｅ；シャペロン（例えば、チオレドキシンおよび熱ショックタンパク質）；細胞内シグナル伝達ドメイン（ＳＨ２およびＳＨ３ドメイン等）；直鎖および拘束ペプチド；ならびに直鎖ペプチド基質。ディスプレイライブラリーは、合成および／または天然の多様性を含み得る。例えば、米国特許第２００４−０００５７０９号を参照されたい。
【０５６１】
ディスプレイ技術を使用して、標的の特定のエピトープと結合する結合タンパク質（例えば、抗体）を得ることもできる。これは、例えば、特定のエピトープを欠くかエピトープ内で例えば、アラニンにて変異された競合非標的分子を用いることにより行うことができる。かかる非標的分子は、ディスプレイライブラリー標的と結合時の競合分子として、または、例えば、標的特異性ではないディスプレイライブラリーメンバーを分離する洗浄液中で捕捉するための前溶出剤として、下記の否定的選択手順で使用できる。
【０５６２】
反復選択。１つの好ましい実施形態では、ディスプレイライブラリー技術を反復様式で使用する。第１ディスプレイライブラリーを使用して、標的のための結合タンパク質を１つまたは複数同定する。次いで、変異誘発法を用いてこれらの同定された結合タンパク質を変化させ、第２ディスプレイライブラリーを形成する。次いで、例えば、より高いストリンジェンシー、またはより高い競合性の結合および洗浄条件を用いることにより、親和性のより高い結合タンパク質を第２ライブラリーから選択する。
【０５６３】
いくつかの実施形態では、変異誘発は、結合面の領域を標的とする。例えば、同定された結合タンパク質が抗体である場合、変異誘発は、本明細書に記載の重鎖または軽鎖のＣＤＲ領域に向けることができる。さらに、変異誘発は、ＣＤＲ付近またはＣＤＲに隣接したフレームワーク領域に向けることができる。抗体の場合、変異誘発は、例えば、正確な段階的改善を行うために１つまたは数個のＣＤＲに限定することもできる。例示的な変異誘発技術としては、エラープローンＰＣＲ、組換え、ＤＮＡシャフリング、部位特異的変異誘発およびカセット変異誘発が挙げられる。
【０５６４】
反復選択の１つの例では、本明細書に記載の方法を使用して、標的に対して少なくとも最小限の結合特異性または最小限の活性（例えば、０．５ｎＭ、１ｎＭ、１０ｎＭ、または１００ｎＭ未満の結合についての平衡解離定数）で血漿カリクレインと結合するタンパク質をディスプレイライブラリーから最初に同定する。最初に同定したタンパク質をコードする核酸配列を、変異の導入のための核酸鋳型として使用して、例えば、第１タンパク質と比較して増強された特性（例えば、結合親和性、反応速度、または安定性）を有する第２タンパク質を同定する。
【０５６５】
オフレート選択。遅い解離速度は、特にポリペプチドとその標的との間の相互作用に関して高親和性と予想することができるため、本明細書に記載の方法を使用して、標的への結合相互作用のための所望の（例えば、低減した）速度論的解離速度を有する結合タンパク質を単離することができる。
【０５６６】
ディスプレイライブラリーから解離の遅い結合タンパク質を選択するために、ライブラリーを固定した標的と接触させる。次いで、固定した標的を、非特異的にまたは弱く結合した生体分子を除去する第１溶液で洗浄する。次いで、結合した結合タンパク質を、飽和量の遊離標的または標的特異的高親和性競合モノクローナル抗体（すなわち、粒子に付着しない標的の複製物）を含む第２溶液で溶離する。遊離標的は、標的から解離した生体分子と結合する。再結合は、より低い濃度の固定した標的と比較して、飽和量の遊離標的により効果的に阻止される。
【０５６７】
第２溶液は、実質的に生理的であるかストリンジェントである溶液条件を有し得る。典型的には、第２溶液の溶液条件は、第１溶液の溶液条件と同じである。第２溶液の画分を、初期画分と後期画分とを区別するための一過性の順序で採集する。後期画分は、初期画分中の生体分子よりも遅い速度で標的から解離する生体分子を含む。
【０５６８】
さらに、長期間のインキュベーション後でさえも標的と結合し続けるディスプレイライブラリーメンバーを採集することも可能である。これらを、カオトロピック条件を用いて解離させるか、標的に付着させながら増幅させるかのいずれかを行うことができる。例えば、標的に結合したファージを、細菌細胞に接触させることができる。
【０５６９】
特異性の選択またはスクリーニング。本明細書に記載のディスプレイライブラリースクリーニング方法は、非標的分子と結合するディスプレイライブラリーメンバーを廃棄する選択またはスクリーニング過程を含み得る。非標的分子の例としては、磁性ビーズ上のストレプトアビジン、ウシ血清アルブミン等の遮断薬、脱脂牛乳、大豆タンパク質、任意の捕捉もしくは標的固定モノクローナル抗体、または標的を発現しない非形質移入細胞が挙げられる。
【０５７０】
１つの実施形態では、いわゆる「陰性選択」工程を使用して、標的分子と、関連する非標的分子と、関連するが異なる非標的分子とを識別する。ディスプレイライブラリーまたはそのプールを、非標的分子と接触させる。非標的と結合しない試料メンバーを採集して、標的分子への結合についての選択、またはその後の陰性選択に使用する。陰性選択工程は、標的分子と結合するライブラリーメンバーの選択前に行うことも後に行うこともできる。
【０５７１】
別の実施形態では、スクリーニング工程を使用する。ディスプレイライブラリーメンバーを標的分子との結合のために単離後、単離した各ライブラリーメンバーの非標的分子（例えば、上に挙げた非標的）への結合能について試験する。例えば、高処理ＥＬＩＳＡスクリーニングを用いて、このデータを得ることができる。ＥＬＩＳＡスクリーニングを用いて、各ライブラリーメンバーの標的への結合ならびに関連標的または標的のサブユニット（例えば、血漿カリクレイン）に対する異種間の反応性についての定量的データを得ることもでき、異なる条件下（ｐＨ６またはｐＨ７．５等）でも用いることができる。（例えば、コンピュータおよびソフトウェアを用いて）非標的結合データと標的結合データを比較して、標的に特異的に結合するライブラリーメンバーを同定する。
【０５７２】
他の例示的発現ライブラリー
タンパク質の他のコレクション型（例えば、発現ライブラリー）を用いて、特定の特性（例えば、血漿カリクレインとの結合能）を有するタンパク質（例えば、抗体のタンパク質アレイ、例えば、Ｄｅ  Ｗｉｌｄｔ  ｅｔ  ａｌ．  （２０００）  Ｎａｔ．  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  １８：９８９−９９４を参照されたい）、λｇｔ１１ライブラリー、２ハイブリッドライブラリー等を含む）を同定できる。
【０５７３】
例示的ライブラリー
非ヒト霊長類を免疫化し、ファージ上にディスプレイできる霊長類抗体遺伝子を採集することが可能である（以下を参照されたい）。かかるライブラリーから、免疫化で使用した抗原と結合する抗体を選択できる。例えば、Ｖａｃｃｉｎｅ．  （２００３）  ２２（２）：２５７−６７またはＩｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ．  （２００５）  ５７（１０）：７３０−８を参照されたい。したがって、チンパンジーもしくはマカクの免疫化、血漿カリクレインと結合するならびに血漿カリクレインを阻害する霊長類抗体を選択もしくはスクリーニングする様々な方法を用いることにより、血漿カリクレインと結合するならびに血漿カリクレインを阻害する霊長類抗体を得ることができる。ヒト定常領域を有する霊長類化Ｆａｂのキメラを作製することもできる（Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｍｏｌ  Ｔｈｅｒ．  （２００４）  ６（６）：６７５−８３を参照されたい）。「カニクイマカクザルおよびヒトの成分由来の遺伝子操作した霊長類化抗体は、ヒト抗体と構造的に識別不能である。したがって、霊長類化抗体は、ヒトにおいて有害反応を引き起こす可能性が低く、長期の慢性治療に潜在的に適切となる」Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇ  Ｄｒｕｇｓ．  （２００１）  ２（５）：６３５−８。
【０５７４】
１つの例示的ライブラリー型は、それぞれが免疫グロブリンドメイン（例えば、免疫グロブリン可変ドメイン）を含む多様なポリペプチドプールを提示する。目的のものは、ライブラリーメンバーが、霊長類または「霊長類化」（例えば、ヒト、非ヒト霊長類または「ヒト化」等）免疫グロブリンドメイン（例えば、免疫グロブリン可変ドメイン）またはヒト定常領域を有するキメラ霊長類化Ｆａｂを含むディスプレイライブラリーである。ヒトまたはヒト化免疫グロブリンドメインライブラリーを使用して、例えば、ヒト抗原を認識するヒトまたは「ヒト化」抗体を同定し得る。抗体の定常領域およびフレームワーク領域がヒトであるため、これらの抗体をヒトに投与時、それら抗体自体が抗原として認識され標的化されることを回避し得る。定常領域は、ヒト免疫系のエフェクター機能を補充するために至適化もし得る。ｉｎ  ｖｉｔｒｏディスプレイ選択過程は、正常なヒト免疫系が自己抗原に対する抗体を生成できないという課題を克服する。
【０５７５】
典型的な抗体ディスプレイライブラリーは、ＶＨドメインおよびＶＬドメインを含むポリペプチドを表示する。「免疫グロブリンドメイン」とは、免疫グロブリン分子の可変または定常ドメイン由来のドメインを指す。免疫グロブリンドメインは、典型的には、約７つのβ鎖および保存ジスルフィド結合から形成される２つのβ−シートを含む（例えば、Ａ．  Ｆ．  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ａ．  Ｎ．  Ｂａｒｃｌａｙ，  １９８８，  Ａｎｎ．  Ｒｅｖ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ６：３８１−４０５を参照されたい）。ディスプレイライブラリーは、抗体をＦａｂ断片として（例えば、２本のポリペプチド鎖を用いて）または単鎖Ｆｖとして（例えば、単ポリペプチド鎖を用いて）表示できる。他の形式も使用できる。
【０５７６】
Ｆａｂおよび他の形式の場合、表示された抗体は、軽鎖および／または重鎖の一部として定常領域を１つまたは複数含むことができる。１つの実施形態では、例えば、Ｆａｂの場合、各鎖は１つの定常領域を含む。他の実施形態では、さらなる定常領域を表示する。
【０５７７】
抗体ライブラリーは、いくつかの過程により構築できる（例えば、ｄｅ  Ｈａａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９９，  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  ２７４：１８２１８−３０；  Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９８，  Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ４：１−２０；  Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０００，  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｔｏｄａｙ  ２１：３７１−３７８、およびＨｏｅｔ  ｅｔ  ａｌ．  （２００５）  Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  ２３（３）３４４−８を参照されたい）。さらに、各過程の要素を他の過程の要素と組み合わせることができる。これらの過程は、単一の免疫グロブリンドメイン（例えば、ＶＨまたはＶＬ）または複数の免疫グロブリンドメイン（例えば、ＶＨおよびＶＬ）に変異が導入されるように使用できる。変異は、例えば、１つまたは複数のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、および／またはＦＲ４の領域（重鎖および軽鎖可変ドメインのいずれかおよび両方のかかる領域を指す）中の免疫グロブリン可変ドメインに導入できる。この変異（１つまたは複数）は、所与の可変ドメインの全３つのＣＤＲ、または（例えば、重鎖可変ドメインの）ＣＤＲ１およびＣＤＲ２に導入し得る。任意の組み合わせが実行可能である。１つの過程では、ＣＤＲをコードする多様なオリゴヌクレオチドの核酸の対応する領域への挿入により抗体ライブラリーを構築する。オリゴヌクレオチドは、単量体ヌクレオチドまたはトリヌクレオチドを用いて合成できる。例えば、Ｋｎａｐｐｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０００，  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  ２９６：５７−８６は、オリゴヌクレオチドを許容するために操作した制限部位を有する鋳型とトリヌクレオチド合成を用いてオリゴヌクレオチドをコードするＣＤＲを構築する方法について記載している。
【０５７８】
別の過程では、動物（例えば、齧歯類）を血漿カリクレインで免疫化する。この動物を任意に抗原で追加免疫してさらに応答を刺激する。次いで、この動物から脾臓細胞を単離し、ＶＨおよび／またはＶＬドメインをコードする核酸を増幅し、ディスプレイライブラリー中の発現についてクローニングする。
【０５７９】
さらに別の過程では、ナイーブ生殖系列免疫グロブリン遺伝子から増幅した核酸から抗体ライブラリーを構築する。増幅した核酸は、ＶＨおよび／またはＶＬドメインをコードする核酸を含む。免疫グロブリンコード核酸の供給源を以下に記載する。増幅は、ＰＣＲ（例えば、保存された定常領域にアニーリングするプライマーを使用）、または別の増幅方法を含むことができる。
【０５８０】
免疫グロブリンドメインをコードする核酸は、例えば、霊長類（例えば、ヒト）、マウス、ウサギ、ラクダ、または齧歯類の免疫細胞から得ることができる。１つの例では、細胞を特定の特性について選択する。様々な成熟期のＢ細胞を選択できる。別の例では、Ｂ細胞はナイーブである。
【０５８１】
１つの実施形態では、蛍光活性化細胞選別器（ＦＡＣＳ）を用いて表面に結合したＩｇＭ、ＩｇＤ、またはＩｇＧ分子を発現するＢ細胞を選別する。さらに、ＩｇＧの異なるアイソタイプを発現するＢ細胞を単離できる。別の好ましい実施形態では、Ｂ細胞またはＴ細胞をｉｎ  ｖｉｔｒｏで培養する。細胞は、例えば、支持細胞との培養により、またはマイトジェンもしくは他の修飾試薬（ＣＤ４０抗体、ＣＤ４０リガンドもしくはＣＤ２０、酢酸ミリスチン酸ホルボール、細菌リポ多糖、コンカナバリンＡ、植物性血球凝集素、またはヤマゴボウマイトジェン等）の添加によりｉｎ  ｖｉｔｒｏで刺激できる。
【０５８２】
別の実施形態では、細胞は、本明細書に記載の疾患または容態（例えば、血漿カリクレイン関連の疾患または容態）を呈する対象から単離される。
【０５８３】
１つの好ましい実施形態では、細胞は、体細胞超変異プログラムを活性化している。例えば、抗免疫グロブリン、抗ＣＤ４０、および抗ＣＤ３８抗体での処置により細胞を刺激して免疫グロブリン遺伝子の体細胞変異誘発を施行することができる、（例えば、Ｂｅｒｇｔｈｏｒｓｄｏｔｔｉｒ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００１，  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １６６：２２２８を参照されたい）。別の実施形態では、細胞はナイーブである。
【０５８４】
免疫グロブリン可変ドメインをコードする核酸は、以下の例示的方法により天然のレパートリーから単離できる。まず、ＲＮＡを免疫細胞から単離する。完全長（すなわち、キャッピングされた）ｍＲＮＡを解離する（例えば、子牛腸ホスファターゼでキャッピングされていないＲＮＡの分解による）。次いで、タバコ酸ピロホスファターゼを用いてキャップを除去し、逆転写を用いてｃＤＮＡを産生する。
【０５８５】
第１（アンチセンス）鎖の逆転写は、任意の適切なプライマーと任意の方法で行うことができる。例えば、ｄｅ  Ｈａａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９９，  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  ２７４：１８２１８−３０を参照されたい。プライマー結合領域は、例えば、免疫グロブリンの異なるアイソタイプを逆転写するために異なる免疫グロブリン間で一定であり得る。プライマー結合領域は、免疫グロブリンの特定のアイソタイプに特異的でもあり得る。典型的には、プライマーは、少なくとも１つのＣＤＲをコードする配列の３末端側である領域に特異的である。別の実施形態では、ポリｄＴプライマーを使用し得る（および重鎖遺伝子にとって好ましいかもしれない）。
【０５８６】
合成配列は、逆転写した鎖の３末端に連結できる。合成配列は、逆転写後のＰＣＲ増幅中の順方向プライマーの結合のためのプライマー結合部位として使用できる。合成配列の使用により、利用可能な多様性を完全に捕捉するために異なる順方向プライマーのプールを使用する必要性を回避できる。
【０５８７】
次いで、可変ドメインコード遺伝子を、例えば、１回または複数回ラウンドを用いて増幅する。複数回ラウンドを使用する場合、信頼性を高めるためにネスト化プライマーを使用できる。次いで、増幅した核酸を、ディスプレイライブラリーベクターにクローニングする。
【０５８８】
二次スクリーニング方法
標的と結合する候補ライブラリーメンバーを選択後、各候補ライブラリーメンバーをさらに分析して、例えば、標的（例えば、血漿カリクレイン）の結合特性をさらに特性決定することができる。各候補ライブラリーメンバーは、１つまたは複数の二次スクリーニングアッセイに供することができる。アッセイは、結合特性、触媒特性、阻害特性、生理特性（例えば、細胞傷害性、腎臓クリアランス、免疫原性）、構造特性（例えば、安定性、高次構造、オリゴマー形成状態）または別の機能特性について行うことができる。同じアッセイを異なる条件下で反復使用して、例えば、ｐＨ、イオン感受性、または温度感受性を決定することができる。
【０５８９】
適切な場合、アッセイは、ディスプレイライブラリーメンバーを直接使用することもでき、選択されるポリペプチドコード核酸から産生される組換えポリペプチドを使用することもでき、選択されるポリペプチド配列に基づき合成される合成ペプチドを使用することもできる。選択されるＦａｂの場合、Ｆａｂを評価することもでき、修飾してインタクトなＩｇＧタンパク質として産生することもできる。結合特性のための例示的アッセイとしては、以下が挙げられる。
【０５９０】
ＥＬＩＳＡ。結合タンパク質は、ＥＬＩＳＡアッセイを用いて評価できる。例えば、各タンパク質を、底面が標的（例えば、限られた量の標的）で被膜されているマイクロタイタープレートに接触させる。プレートを緩衝液で洗浄して非特異的に結合したポリペプチドを除去する。次いで、プレート上の標的と結合した結合タンパク質の量を、結合タンパク質（例えば、標的または結合タンパク質の一定の部分）を認識できる抗体でのプレートの探索により決定する。抗体は、検出系（例えば、適切な基質を与えた場合に比色産物を産生するアルカリホスファターゼまたは西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）等の酵素）に連結する。
【０５９１】
均一結合アッセイ。本明細書に記載の結合タンパク質の標的結合能は、均一アッセイを用いて分析できる（すなわち、アッセイの全成分を添加後、さらなる流動物の操作を必要としない）。例えば、均一アッセイとして蛍光共鳴エネルギー転移（ＦＲＥＴ）を使用できる（例えば、Ｌａｋｏｗｉｃｚ  ｅｔ  ａｌ．の米国特許第５，６３１，１６９号；Ｓｔａｖｒｉａｎｏｐｏｕｌｏｓ，  ｅｔ  ａｌ．の米国特許第４，８６８，１０３号を参照されたい）。第２分子が第１分子に近接して存在する場合、その放出された蛍光エネルギーが第２分子（例えば、標的）上の蛍光標識により吸収されることができるように第１分子（例えば、画分中で同定された分子）上のフルオロフォア標識を選択する。第２分子上の蛍光標識は転移エネルギーに吸収時に蛍光を発する。標識間のエネルギー転移の効率は分子間距離に比例するため、分子間の空間的関係を評価できる。分子間で結合が生じる状況では、アッセイにおける「アクセプター」分子標識の蛍光放出は最大であるはずである。ＦＲＥＴによるモニタリングのために構成された結合事象は、標準的な蛍光定量検出法により、例えば、蛍光光度計を用いて、都合よく測定できる。第１または第２結合分子の量を滴定することにより結合曲線を作成して平衡結合定数を推定できる。
【０５９２】
均一アッセイの別の例は、ＡＬＰＨＡＳＣＲＥＥＮ（商標登録）（Ｐａｃｋａｒｄ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ，  Ｍｅｒｉｄｅｎ  ＣＴ）である。ＡＬＰＨＡＳＣＲＥＥＮ（商標登録）は２つの標識されたビーズを使用する。一方のビーズは、レーザーによって励起時に一重項酸素を生成する。他方のビーズは、一重項酸素が第１ビーズから拡散されてそれと衝突した場合に光シグナルを生成する。シグナルは、２つのビーズが近接している場合にのみ生成される。一方のビーズをディスプレイライブラリーメンバーに付着し、他方を標的に付着することができる。シグナルを測定して、結合範囲を決定する。
【０５９３】
表面プラズモン共鳴法（ＳＰＲ）。結合タンパク質と標的との間の相互作用は、ＳＰＲを用いて分析できる。ＳＰＲつまり生体分子相互作用分析（ＢＩＡ）は、いかなる反応体も標識せずに、生体特異的相互作用をリアルタイムで検出する。ＢＩＡチップの結合表面の質量（結合事象を示す）の変化により、表面付近の光の屈折率が変化する（表面プラズモン共鳴法（ＳＰＲ）の光学現象）。屈折度の変化により、検出可能なシグナルが生成され、これを生体分子間のリアルタイム反応の指標として測定する。ＳＰＲの使用方法については、例えば、米国特許第５，６４１，６４０号；Ｒａｅｔｈｅｒ，  １９８８，  Ｓｕｒｆａｃｅ  Ｐｌａｓｍｏｎｓ  Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ；  Ｓｊｏｌａｎｄｅｒ  ａｎｄ  Ｕｒｂａｎｉｃｚｋｙ，  １９９１，  Ａｎａｌ．  Ｃｈｅｍ．  ６３：２３３８−２３４５；  Ｓｚａｂｏ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９５，  Ｃｕｒｒ．  Ｏｐｉｎ．  Ｓｔｒｕｃｔ．  Ｂｉｏｌ．  ５：６９９−７０５およびＢＩＡｃｏｒｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ＡＢ  （Ｕｐｐｓａｌａ，  Ｓｗｅｄｅｎに提供されているオンライン情報源に記載されている。
【０５９４】
ＳＰＲ由来の情報を使用して、標的への結合タンパク質の結合についての平衡解離定数（ＫＤ）、および速度変数（ＫｏｎおよびＫｏｆｆを含む）の正確かつ定量的な測定値を得ることができる。かかるデータを使用して、異なる生体分子を比較することができる。例えば、発現ライブラリーから選択されるタンパク質を比較して、標的に対する親和性が高いまたはＫｏｆｆが遅いタンパク質を同定できる。この情報は、構造活性関係（ＳＡＲ）を明らかにするために使用することもできる。例えば、親タンパク質の成熟版の速度および平衡結合変数を、親タンパク質の変数と比較できる。特定の結合変数（例えば、高親和性および遅いＫｏｆｆ）と相関する所与の位置の変異型アミノ酸を同定できる。この情報は、構造モデリングと（例えば、Ｘ線結晶学またはＮＭＲによる相同モデリング、エネルギー極小化、または構造決定を用いて）組み合わせることができる。結果として、タンパク質とその標的との間の物理的相互作用を理解することができ、これを使用して、他の設計過程を誘導することができる。
【０５９５】
細胞アッセイ。細胞表面上の目的の標的を一過性または安定して発現し、表示する細胞に結合する能力について、結合タンパク質をスクリーニングできる。例えば、血漿カリクレイン結合タンパク質を蛍光標識し、拮抗抗体の存在下または不在下での血漿カリクレインへの結合を、フローサイトメトリー（例えば、ＦＡＣＳ装置）を用いた蛍光強度の変化により検出できる。
【０５９６】
血漿カリクレイン結合タンパク質を得るための他の例示的方法
ディスプレイライブラリーの使用の他に、他の方法を用いて血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、抗体）を得ることができる。例えば、血漿カリクレイン結合タンパク質またはそれらの断片を、非ヒト動物（例えば、齧歯類）中の抗原として使用できる。
【０５９７】
１つの実施形態では、非ヒト動物は、少なくとも一部のヒト免疫グロブリン遺伝子を含む。例えば、ヒトＩｇ遺伝子座の巨大断片により、マウス抗体産生において欠損したマウス株を操作することが可能である。ハイブリドーマ技術を用いて、所望の特異性を有する遺伝子由来の抗原特異的モノクローナル抗体（Ｍａｂ）を産生および選択し得る。例えば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（商標登録）、Ｇｒｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９４，  Ｎａｔ．  Ｇｅｎ．  ７：１３−２１；米国特許第２００３−００７０１８５号、ＷＯ９６／３４０９６号（１９９６年１０月３１日公開）、およびＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＵＳ９６／０５９２８号（１９９６年４月２９日出願）を参照されたい。
【０５９８】
別の実施形態では、非ヒト動物からモノクローナル抗体を得、次いで、修飾、例えば、ヒト化または脱免疫化する。Ｗｉｎｔｅｒは、ヒト化抗体を調製するために使用し得るＣＤＲグラフティング法について記載している（英国特許第２１８８６３８Ａ号（１９８７年３月２６日出願）；米国特許第５，２２５，５３９号）。特定のヒト抗体のすべてのＣＤＲを少なくとも一部の非ヒトＣＤＲと置換してもよいし、ＣＤＲの一部のみを非ヒトＣＤＲと置換してもよい。要されるのは、所定の抗原へのヒト化抗体の結合に要される数のＣＤＲを置換することのみである。
【０５９９】
ヒト化抗体は、ヒトＦｖ可変領域由来の等価な配列への抗原の結合に直接関与しないＦｖ可変領域配列の置換により生成できる。ヒト化抗体の一般的な生成方法については、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，  Ｓ．  Ｌ．，  １９８５，  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２９：１２０２−１２０７により、Ｏｉ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８６，  ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ４：２１４により、およびＱｕｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．、米国特許第５，５８５，０８９号、米国特許第５，６９３，７６１号および米国特許第５，６９３，７６２号により提供されている。それらの方法は、少なくとも１本の重鎖または軽鎖由来の免疫グロブリンＦｖ可変領域のすべてまたは一部をコードする核酸配列の単離、操作、および発現を含む。かかる核酸の供給源は多く利用可能である。例えば、上記のように、所定の標的に対する抗体を産生するハイブリドーマから核酸を得ることができる。次いで、ヒト化抗体をコードする組換えＤＮＡまたはその断片を、適切な発現ベクターにクローニングできる。
【０６００】
血漿カリクレイン結合タンパク質の免疫原性の減少
免疫グロブリン血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、ＩｇＧまたはＦａｂ血漿カリクレイン結合タンパク質）を、免疫原性を低減するように修飾し得る。対象が治療分子に対する免疫応答を生じる機会が低減するので、免疫原性の減少は、治療薬としての使用を意図する血漿カリクレイン結合タンパク質で望ましい。血漿カリクレイン結合タンパク質の免疫原性の減少に有用な技術としては、潜在的なヒトＴ細胞エピトープの欠失／修飾およびＣＤＲの外側の配列（例えば、フレームワークおよびＦｃ）の「生殖系列化」が挙げられる。
【０６０１】
血漿カリクレイン結合抗体は、ヒトＴ細胞エピトープの特異的欠失またはＷＯ９８／５２９７６号およびＷＯ００／３４３１７号に開示の方法による「脱免疫化」により修飾し得る。簡単に述べると、抗体の重鎖および軽鎖可変領域をＭＨＣクラスＩＩと結合するペプチドについて分析し、これらのペプチドが、潜在的Ｔ細胞エピトープを提示する（ＷＯ９８／５２９７６号およびＷＯ００／３４３１７号に定義）。潜在的なＴ細胞エピトープの検出のために、「ペプチドトレッディング（ｐｅｐｔｉｄｅ  ｔｈｒｅａｄｉｎｇ）」と呼ばれるコンピュータモデリングアプローチを適用し、ヒトＭＨＣクラスＩＩ結合ペプチドのデータベースに加えて、ＷＯ９８／５２９７６号およびＷＯ００／３４３１７号に記載のように、ＶＨおよびＶＬ配列中に存在するモチーフを検索できる。これらのモチーフは、１８個の主要ＭＨＣクラスＩＩ  ＤＲアロタイプのいずれかと結合することにより、潜在的なＴ細胞エピトープを構成する。検出された潜在的なＴ細胞エピトープは、可変領域中の少数のアミノ酸残基を置換することにより、または好ましくは単一アミノ酸の置換により排除できる。可能な保存的置換を行う限り、ヒト生殖系列抗体配列のこの位置に共通のアミノ酸を頻繁に使用し得るが、これは他を排除しない。ヒト生殖系列配列については、Ｔｏｍｌｉｎｓｏｎ，  Ｉ．Ａ．  ｅｔ  ａｌ．，  １９９２，  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  ２２７：７７６−７９８；  Ｃｏｏｋ，  Ｇ．  Ｐ．  ｅｔ  ａｌ．，  １９９５，  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｔｏｄａｙ  Ｖｏｌ．  １６  （５）：  ２３７−２４２；  Ｃｈｏｔｈｉａ，  Ｄ．  ｅｔ  ａｌ．，  １９９２，  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏ．  ２２７：７９９−８１７に開示されている。Ｖ  ＢＡＳＥディレクトリは、ヒト免疫グロブリン可変領域配列の包括的ディレクトリを提供している（Ｔｏｍｌｉｎｓｏｎ，  Ｉ．Ａ．  ｅｔ  ａｌ．  ＭＲＣ  Ｃｅｎｔｒｅ  ｆｏｒ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，  Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，  ＵＫによって編纂されている）。脱免疫化の変化を同定後、ＶＨおよびＶＬをコードする核酸を、変異誘発または他の合成方法（例えば、ｄｅ  ｎｏｖｏ合成、カセット置換等）により構築できる。変異誘発した可変配列は、任意に、ヒト定常領域（例えば、ヒトＩｇＧ１）またはκ定常領域と融合できる。
【０６０２】
一部の場合、潜在的Ｔ細胞エピトープは、抗体機能にとって重要であることが知られているまたは予想される残基を含む。例えば、潜在的Ｔ細胞エピトープは、通常、ＣＤＲに偏っている。さらに、潜在的Ｔ細胞エピトープは、抗体の構造および結合に重要なフレームワーク残基で生じ得る。これらの潜在的エピトープを排除するために変化させるには、一部の場合、例えば、変化した鎖および変化していない鎖の作製および試験によりさらに精査する必要がある。可能な場合、ＣＤＲと重複する潜在的Ｔ細胞エピトープを、ＣＤＲの外側の置換により排除した。一部の場合、ＣＤＲ内の修飾は唯一の選択肢であるので、置換を含む変異型および含まない変異型を試験すべきである。他の場合、潜在的Ｔ細胞エピトープを排除するのに必要な置換は、抗体結合にとって重要であり得るフレームワーク内の残基位置で行う。これらの場合、置換を含む変異型および含まない変異型を試験すべきである。したがって、一部の場合、至適な脱免疫化抗体を同定するために、重鎖および軽鎖可変領域を脱免疫化したいくつかの変異型を設計し、様々な重／軽鎖の組み合わせを試験した。次いで、脱免疫化の範囲（すなわち、可変領域に残る潜在的Ｔ細胞エピトープ数）と併せて異なる変異型の結合親和性を考慮することにより最終的な脱免疫化抗体を選択できる。脱免疫化を用いて、任意の抗体、例えば、非ヒト配列を含む抗体（例えば、合成抗体）、マウス抗体、他の非ヒトモノクローナル抗体、またはディスプレイライブラリーから単離した抗体を修飾できる。
【０６０３】
血漿カリクレイン結合抗体は、結合特性が実質的に保持される限り、フレームワーク領域の１つまたは複数の非生殖系列アミノ酸を抗体の対応する生殖系列アミノ酸に戻すことによりカリクレイン結合抗体を「生殖系列化」する。類似の方法を、定常領域（例えば、定常免疫グロブリンドメイン）中で使用することもできる。
【０６０４】
血漿カリクレインと結合する抗体（例えば、本明細書に記載の抗体）は、１つまたは複数の生殖系列配列にさらに類似する抗体の可変領域を作製するために修飾し得る。例えば、抗体は、基準生殖系列配列にさらに類似させるために、１、２、３、もしくは４個以上のアミノ酸置換を、例えば、フレームワーク、ＣＤＲ、または定常領域中に含むことができる。１つの例示的な生殖系列化方法は、単離抗体の配列に類似する（例えば、特定のデータベースで最も類似する）生殖系列配列を１つまたは複数同定することを含むことができる。次いで、単離抗体を、漸進的に、または他の変異との組み合わせのいずれかにより（アミノ酸レベルで）変異させる。例えば、一部のまたはすべての可能な生殖系列変異をコードする配列を含む核酸ライブラリーを作製する。次いで、変異抗体を評価し、例えば、単離抗体と比較して１つまたは複数のさらなる生殖系列残基を有し、かつ依然として有用な（例えば、機能活性を有する）抗体を同定する。１つの実施形態では、単離抗体に可能な限り多くの生殖系列残基を導入する。
【０６０５】
１つの実施形態では、変異誘発を用いて、フレームワークおよび／または定常領域に１つまたは複数の生殖系列残基を置換または挿入する。例えば、生殖系列フレームワークおよび／または定常領域の残基は、修飾される非可変領域と類似する（例えば、最も類似する）生殖系列配列に由来することができる。変異誘発後、抗体の活性（例えば、結合または他の機能活性）を評価して、１つまたは複数の生殖系列残基が耐容性を示す（すなわち、活性を無効にしない）かどうかを決定できる。類似の変異誘発をフレームワーク領域中で実施できる。
【０６０６】
生殖系列配列の選択は、異なる方法で実施できる。例えば、生殖系列配列が選択性または類似性について所定の基準（例えば、少なくとも一定の同じ率（％）、例えば、少なくとも７５、８０、８５、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、または９９．５％同じ）を満たす場合に生殖系列配列を選択できる。この選択は、少なくとも２、３、５、または１０個の生殖系列配列を用いて実施できる。ＣＤＲ１およびＣＤＲ２の場合、類似の生殖系列配列の同定は、１つのかかる配列の選択を含むことができる。ＣＤＲ３の場合、類似の生殖系列配列の同定は、１つのかかる配列の選択を含むことができるが、アミノ末端部分およびカルボキシ末端部分に別々に関わる２つの生殖系列配列の使用を含み得る。他の実施では、１つを超えるまたは２つを超える生殖系列配列を使用して、例えば、コンセンサス配列を形成する。
【０６０７】
１つの実施形態では、特定の基準可変ドメイン配列（例えば、本明細書に記載の配列）に関して、関連可変ドメイン配列は、基準ＣＤＲ配列中の残基（ヒト生殖系列配列（すなわち、ヒト生殖系列核酸によってコードされるアミノ酸配列）中の対応する位置の残基と同じの残基）と同じではないＣＤＲアミノ酸位置の少なくとも３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、９５または１００％を有する。
【０６０８】
１つの実施形態では、特定の基準可変ドメイン配列（例えば、本明細書に記載の配列）に関して、関連可変ドメイン配列は、ヒト生殖系列配列（例えば、基準可変ドメイン配列と関連する生殖系列配列）由来のＦＲ配列と同じのＦＲ領域の少なくとも３０、５０、６０、７０、８０、９０または１００％を有する。
【０６０９】
したがって、所与の目的の抗体と類似の活性を有するが、１つまたは複数の生殖系列配列、特に１つまたは複数のヒト生殖系列配列とさらに類似する抗体を単離することが可能である。例えば、抗体は、ＣＤＲの外側領域（例えば、フレームワーク領域）中の生殖系列配列と少なくとも９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、または９９．５％同じであり得る。さらに、抗体は、修飾される可変領域に類似する（例えば、最も類似する）生殖系列配列由来の生殖系列残基をＣＤＲ領域中に少なくとも１、２、３、４、または５つ含むことができる。主な目的の生殖系列配列は、ヒト生殖系列配列である。抗体の活性（例えば、ＫＡにより測定した結合活性）は、元の抗体の係数内、すなわち１００、１０、５、２、０．５、０．１、および０．００１であり得る。
【０６１０】
ヒト免疫グロブリン遺伝子の生殖系列配列は決定されており、ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ  ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｓｙｓｔｅｍ（商標）（ＩＭＧＴ）およびＶ  ＢＡＳＥディレクトリ（Ｔｏｍｌｉｎｓｏｎ，  Ｉ．Ａ．  ｅｔ  ａｌ．  ＭＲＣ  Ｃｅｎｔｒｅ  ｆｏｒ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，  Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，  ＵＫによって編纂されている）を含むいくつかの供給源から利用可能である。
【０６１１】
Ｖκについての例示的な生殖系列基準配列は、Ｏ１２／Ｏ２、Ｏ１８／Ｏ８、Ａ２０、Ａ３０、Ｌ１４、Ｌ１、Ｌ１５、Ｌ４／１８ａ、Ｌ５／Ｌ１９、Ｌ８、Ｌ２３、Ｌ９、Ｌ２４、Ｌ１１、Ｌ１２、Ｏ１１／Ｏ１、Ａ１７、Ａ１、Ａ１８、Ａ２、Ａ１９／Ａ３、Ａ２３、Ａ２７、Ａ１１、Ｌ２／Ｌ１６、Ｌ６、Ｌ２０、Ｌ２５、Ｂ３、Ｂ２、Ａ２６／Ａ１０、およびＡ１４を含む。例えば、Ｔｏｍｌｉｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９５，  ＥＭＢＯ  Ｊ．  １４（１８）：４６２８−３を参照されたい。
【０６１２】
ＨＣ可変ドメインの生殖系列基準配列は、特定の標準構造（例えば、Ｈ１およびＨ２超可変ループ中の１〜３つの構造）を有する配列に基づくことができる。Ｃｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９２，  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  ２２７：７９９−８１７；  Ｔｏｍｌｉｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９２，  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  ２２７：７７６−７９８）；およびＴｏｍｌｉｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９５，  ＥＭＢＯ  Ｊ．  １４（１８）：４６２８−３８に記載のように、免疫グロブリン可変ドメインの超可変ループの標準構造は、その配列から推測できる。１〜３つの構造を有する例示的配列は、ＤＰ−１、ＤＰ−８、ＤＰ−１２、ＤＰ−２、ＤＰ−２５、ＤＰ−１５、ＤＰ−７、ＤＰ−４、ＤＰ−３１、ＤＰ−３２、ＤＰ−３３、ＤＰ−３５、ＤＰ−４０、７−２、ｈｖ３００５、ｈｖ３００５ｆ３、ＤＰ−４６、ＤＰ−４７、ＤＰ−５８、ＤＰ−４９、ＤＰ−５０、ＤＰ−５１、ＤＰ−５３、およびＤＰ−５４を含む。
【０６１３】
タンパク質産生
標準的な組換え核酸法を使用して、血漿カリクレインと結合するタンパク質を発現させることができる。一般に、タンパク質をコードする核酸配列を核酸発現ベクターにクローニングする。勿論、タンパク質が複数のポリペプチド鎖を含む場合、各鎖を、同じまたは異なる細胞内で発現する発現ベクター（例えば、同じまたは異なるベクター）にクローニングできる。
【０６１４】
抗体産生。いくつかの抗体（例えば、Ｆａｂ）は、細菌細胞（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ細胞）中で産生できる（例えば、Ｎａｄｋａｒｎｉ，  Ａ．  ｅｔ  ａｌ．，  ２００７  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｘｐｒ  Ｐｕｒｉｆ  ５２（１）：２１９−２９を参照されたい）。例えば、Ｆａｂが、ディスプレイ実体とバクテリオファージタンパク質（またはその断片）との間の抑制可能な終止コドンを含むファージディスプレイベクター中の配列によりコードされる場合、ベクター核酸を、終止コドンを抑制できない細菌細胞に移入できる。この場合、Ｆａｂは遺伝子ＩＩＩタンパク質に融合せず、周辺質および／または培地に分泌される。
【０６１５】
また真核細胞内で抗体を産生させることもできる。１つの実施形態では、抗体（例えば、ｓｃＦｖ）をピキア（Ｐｉｃｈｉａ）（例えば、Ｐｏｗｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００１，Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｍｅｔｈｏｄｓ．  ２５１：１２３−３５；Ｓｃｈｏｏｎｏｏｇｈｅ  Ｓ．  ｅｔ  ａｌ．，  ２００９  ＢＭＣ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．９：７０；Ａｂｄｅｌ−Ｓａｌａｍ，ＨＡ．  ｅｔ  ａｌ．，  ２００１  Ａｐｐｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  ５６（１−２）：１５７−６４；Ｔａｋａｈａｓｈｉ  Ｋ．  ｅｔ  ａｌ．，  ２０００  Ｂｉｏｓｃｉ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  ６４（１０）：２１３８−４４；Ｅｄｑｖｉｓｔ，Ｊ．  ｅｔ  ａｌ．，  １９９１  Ｊ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  ２０（３）：２９１−３００を参照されたい）、ハンゼウラ（Ｈａｎｓｅｕｌａ）またはサッカロミセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）のような酵母細胞内で発現させる。当業者は、例えば、酸素条件（例えば、Ｂａｕｍａｎｎ  Ｋ．  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１０  ＢＭＣ  Ｓｙｓｔ．Ｂｉｏｌ．４：１４１を参照されたい）、モル浸透圧濃度（例えば、Ｄｒａｇｏｓｉｔｓ，Ｍ．  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１０  ＢＭＣ  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  １１：２０７を参照されたい）、温度（例えば、Ｄｒａｇｏｓｉｔｓ，Ｍ．  ｅｔ  ａｌ．，  ２００９  Ｊ  Ｐｒｏｔｅｏｍｅ  Ｒｅｓ．８（３）：１３８０−９２を参照されたい）、発酵条件（例えば、Ｎｉｎｇ，Ｄ．  ｅｔ  ａｌ．，  ２００５  Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．ａｎｄ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３８（３）：２９４−２９９を参照されたい）、酵母の菌株（例えば、Ｋｏｚｙｒ，ＡＶ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００４  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ（Ｍｏｓｋ）３８（６）：１０６７−７５；Ｈｏｒｗｉｔｚ，ＡＨ．  ｅｔ  ａｌ．，  １９８８  Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ８５（２２）：８６７８−８２；Ｂｏｗｄｉｓｈ，Ｋ．  ｅｔ  ａｌ．  １９９１  Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２６６（１８）：１１９０１−８を参照されたい）、抗体産生を増強するタンパク質過剰発現（例えば、Ｇａｓｓｅｒ，Ｂ．  ｅｔ  ａｌ．，  ２００６  Ｂｉｏｔｅｃｈｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．９４（２）：３５３−６１を参照されたい）、培養物の酸性度のレベル（例えば、Ｋｏｂａｙａｓｈｉ  Ｈ．  ｅｔ  ａｌ．，  １９９７  ＦＥＭＳ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  Ｌｅｔｔ  １５２（２）：２３５−４２を参照されたい）、基質および／またはイオンの濃度（例えば、Ｋｏ  ＪＨ．  ｅｔ  ａｌ．，  ２９９６  Ａｐｐｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  ６０（１）：４１−８を参照されたい）を至適化することにより、酵母での抗体産生を最大限にすることができる。さらに、酵母系を用いて、半減期の長い抗体を産生させることができる（例えば、Ｓｍｉｔｈ，ＢＪ．  ｅｔ  ａｌ．，  ２００１  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ  Ｃｈｅｍ  １２（５）：７５０−７５６を参照されたい）。
【０６１６】
１つの好ましい実施形態では、抗体を哺乳動物細胞内で産生する。クローン抗体またはその抗原結合断片を発現するために好ましい哺乳動物宿主細胞としては、チャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ細胞）（例えば、Ｋａｕｆｍａｎ  ａｎｄ  Ｓｈａｒｐ，  １９８２，  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  １５９：６０１  ６２１に記載のＤＨＦＲ選択マーカーを使用したＵｒｌａｕｂ  ａｎｄ  Ｃｈａｓｉｎ，  １９８０，  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ７７：４２１６−４２２０に記載のｄｈｆｒ−ＣＨＯ細胞が挙げられる）、リンパ球細胞系、例えば、ＮＳ０骨髄腫細胞およびＳＰ２細胞、ＣＯＳ細胞、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞（Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｍｅｔｈｏｄｓ  （２００４）  ２８９（１−２）：６５−８０）、およびトランスジェニック動物（例えば、トランスジェニック哺乳動物）由来の細胞が挙げられる。例えば、細胞は、哺乳動物上皮細胞である。
【０６１７】
いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質を植物細胞内または無細胞系で産生させる（例えば、Ｇａｌｅｆｆｉ，Ｐ．  ｅｔ  ａｌ．，  ２００６  Ｊ  Ｔｒａｎｓｌ  Ｍｅｄ  ４：３９を参照されたい）。
【０６１８】
組換え発現ベクターは、多様な免疫グロブリンドメインをコードする核酸配列に加えて、宿主細胞内でベクターの複製を調節する配列（例えば、複製起点）および選択マーカー遺伝子等の追加配列を保有し得る。選択マーカー遺伝子は、ベクターが導入された宿主細胞の選択を容易にする（例えば、米国特許第４，３９９，２１６号、同第４，６３４，６６５号および同第５，１７９，０１７号を参照されたい）。例えば、典型的には、選択マーカー遺伝子は、ベクターが導入された宿主細胞にＧ４１８、ハイグロマイシンまたはメトトレキサート等の薬剤耐性を付与する。好ましい選択マーカー遺伝子としては、ジヒドロ葉酸還元酵素（ＤＨＦＲ）遺伝子（メトトレキサート選択／増幅を有するｄｈｆｒ−宿主細胞用）およびｎｅｏ遺伝子（Ｇ４１８選択用）が挙げられる。
【０６１９】
抗体またはその抗原結合部分の組換え発現のための例示的な系では、抗体重鎖および抗体軽鎖の両方をコードする組換え発現ベクターを、リン酸カルシウム媒介形質移入によりｄｈｆｒ−ＣＨＯ細胞内に導入する。組換え発現ベクター内で、抗体の重鎖および軽鎖遺伝子を、エンハンサー／プロモーター調節因子（例えば、ＳＶ４０、ＣＭＶ、およびアデノウイルス等に由来する、ＣＭＶエンハンサー／ＡｄＭＬＰプロモーター調節因子またはＳＶ４０エンハンサー／ＡｄＭＬＰプロモーター調節因子等）にそれぞれ作動可能に連結して、遺伝子の高レベルの転写を駆動する。組換え発現ベクターはまた、メトトレキサート選択／増幅を用いてベクターで形質移入したＣＨＯ細胞の選択を可能とするＤＨＦＲ遺伝子も保有する。選択された形質転換宿主細胞を培養して、抗体の重鎖および軽鎖を発現させ、培養培地からインタクトな抗体を採集する。標準的な分子生物学的技術を用いて、組換え発現ベクターを調製し、宿主細胞を形質移入し、形質転換を選択し、宿主細胞を培養し、培養培地から抗体を採集する。例えば、一部の抗体は、タンパク質Ａまたはタンパク質Ｇ結合マトリックスを用いた親和性クロマトグラフィーにより単離できる。
【０６２０】
Ｆｃドメインを含む抗体のために、抗体産生系は、Ｆｃ領域がグリコシル化された抗体を産生し得る。例えば、ＩｇＧ分子のＦｃドメインを、ＣＨ２ドメイン中のアスパラギン２９７位でグリコシル化する。アスパラギンは、二分岐型オリゴ糖での修飾のための部位である。グリコシル化は、Ｆｃｇ受容体および補体Ｃ１ｑによって媒介されるエフェクター機能に必要であることが実証されている（Ｂｕｒｔｏｎ  ａｎｄ  Ｗｏｏｆ，  １９９２，  Ａｄｖ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ５１：１−８４；  Ｊｅｆｆｅｒｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９８，  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｒｅｖ．  １６３：５９−７６）。１つの実施形態では、Ｆｃドメインは、アスパラギン２９７位に相当する残基を適切にグリコシル化する哺乳動物発現系で産生される。Ｆｃドメインはまた、他の真核生物翻訳後修飾も含み得る。
【０６２１】
抗体は、トランスジェニック動物によって産生することもできる。例えば、米国特許第５，８４９，９９２号には、トランスジェニック哺乳動物の乳腺中の抗体の発現方法について記載されている。乳汁特異的プロモーター、目的の抗体をコードする核酸、および分泌のためのシグナル配列を含む導入遺伝子を構築する。かかるトランスジェニック哺乳動物の雌により産生された乳汁は、そこで分泌される目的の抗体を含む。抗体は、乳汁から精製することもでき、一部の適用のために直接使用することもできる。
【０６２２】
血漿カリクレイン結合タンパク質の特性決定
ＩＣ５０（５０％阻害濃度）およびＥＣ５０（５０％有効濃度）。一連の結合タンパク質または結合タンパク質群内で、より低いＩＣ５０値またはＥＣ５０値を有する結合タンパク質は、より高いＩＣ５０値またはＥＣ５０値を有する結合タンパク質よりも血漿カリクレインのさらに強力な阻害剤であるとみなされる。例示的な結合タンパク質は、例えば、血漿カリクレイン活性阻害に関するｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイで測定したところ、血漿カリクレインが２ｐＭ時に８００ｎＭ、４００ｎＭ、１００ｎＭ、２５ｎＭ、５ｎＭ、または１ｎＭ未満のＩＣ５０値を有する。
【０６２３】
また血漿カリクレイン結合タンパク質を、第ＸＩＩ因子の活性およびＨＭＷＫ（高分子量キニノーゲン）シグナル伝達事象、例えば、第ＸＩＩａ因子および／またはブラジキニン産生に関しても特性決定し得る。
【０６２４】
結合タンパク質は、血漿カリクレインに対する選択性について評価することもできる。例えば、血漿カリクレイン結合タンパク質は、血漿カリクレインに対する効力についてアッセイして、カリクレインパネルならびに各カリクレインについてのＩＣ５０値もしくはＥＣ５０値を決定することができる。１つの実施形態では、血漿カリクレインに対して低いＩＣ５０値またはＥＣ５０値を示し、試験パネル内の別のカリクレインに対してより高い（例えば、少なくとも２倍、５倍、または１０倍高い）ＩＣ５０値またはＥＣ５０値を示す化合物は、血漿カリクレインに対して選択的であるとみなされる。
【０６２５】
血漿カリクレインの血清中半減期を決定するために、血漿カリクレイン結合タンパク質による薬物動態実験をラット、マウスまたはサルで行うことができる。同様に、結合タンパク質の効果を、例えば、本明細書に記載の疾患または容態（例えば、血漿カリクレイン関連障害）を治療するための治療薬としての使用に関してｉｎ  ｖｉｖｏで、例えば、疾患の動物モデル（例えば、ラット後肢のカラゲニン誘発性浮腫（Ｗｉｎｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｒｏｃ  Ｓｏｃ  Ｅｘｐ  Ｂｉｏｌ  Ｍｅｄ．１９６２；１１１：５４４−７））で評価し得る。
【０６２６】
医薬組成物
血漿カリクレイン（例えば、ヒト血漿カリクレインおよび／またはマウス血漿カリクレイン）と結合し、例えば、少なくとも１つの免疫グロブリン可変領域を含むタンパク質（例えば、結合タンパク質）を、血漿カリクレイン関連の疾患または容態の治療（または予防）法に使用できる。結合タンパク質は、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、本明細書に記載の血漿カリクレインへの結合が同定された抗体分子、他のポリペプチドまたはペプチド）を含む組成物（例えば、医薬上許容される組成物または医薬組成物）中に存在できる。血漿カリクレイン結合タンパク質は、医薬上許容される担体と共に処方できる。医薬組成物としては、治療組成物および診断組成物（例えば、ｉｎ  ｖｉｖｏ画像化のための標識血漿カリクレイン結合タンパク質を含む組成物）、ならびに血漿カリクレイン関連の疾患または容態の治療（または予防）のための標識血漿カリクレイン結合タンパク質を含む組成物が挙げられる。
【０６２７】
医薬上許容される担体は、生理的に適合する任意およびすべての溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤、抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤を含む。吸入および鼻腔内投与に適した担体も意図されるが、好ましくは、担体は、静脈内、筋肉内、皮下、非経口、脊髄、または表皮投与（例えば、注射または注入）に適している。投与経路に応じて、酸の作用および化合物を不活化し得る他の天然条件から化合物を保護するための材料で血漿カリクレイン結合タンパク質を被膜し得る。
【０６２８】
医薬上許容される塩とは、化合物の所望の生体活性を保持し、いかなる望ましくない毒性作用も与えない塩である（例えば、Ｂｅｒｇｅ，  Ｓ．Ｍ．，  ｅｔ  ａｌ．，  １９７７，  Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｓｃｉ．  ６６：１−１９を参照されたい）。かかる塩の例としては、酸付加塩および塩基付加塩が挙げられる。酸付加塩としては、非毒性無機酸（塩酸、硝酸、リン酸、硫酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、亜リン酸等）、ならびに非毒性有機酸（脂肪族モノカルボン酸、脂肪族ジカルボン酸、フェニル置換アルカン酸、ヒドロキシアルカン酸、芳香族酸、脂肪族スルホン酸、および芳香族スルホン酸等）に由来する酸付加塩が挙げられる。塩基付加塩としては、アルカリ土類金属（ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム等）、ならびに非毒性有機アミン（Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、Ｎ−メチルグルカミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、プロカイン等）由来の塩基付加塩が挙げられる。
【０６２９】
組成物は様々な形態であってよい。これらは、例えば、液体、半固体および固体投与形態（溶液（例えば、注射液および注入液）、分散液もしくは懸濁液、錠剤、丸剤、粉末剤、リポソームおよび坐剤等）を含む。形態は、意図する投与方法および治療への適用に応じ得る。ヒトへの抗体の投与のために使用される組成物に類似の組成物等、多数の組成物が注射液または注入液の形態である。例示的な投与方法は、非経口（例えば、静脈内、皮下、腹腔内、筋肉内）である。１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質を静脈内注入または静脈内注射により投与する。別の好ましい実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質を筋肉内注射または皮下注射により投与する。
【０６３０】
本明細書で使用する「非経口投与」および「非経口的に投与される」という語句は、経腸および局所投与以外の投与方法を意味し、通常、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、髄腔内、硬膜外および胸骨内への注射および点滴が挙げられるが、これらに限定されない注射による。
【０６３１】
組成物は、高濃度の薬剤に適した溶液、マイクロエマルジョン、分散液、リポソーム、または他の規則正しい構造として処方できる。滅菌注射液は、上記に列挙した成分の単独または組み合わせを含む適切な溶媒中に必要量の結合タンパク質を組み込んだ後、必要に応じて濾過滅菌することにより調製できる。一般に、基剤としての分散媒および上記に列挙した必要な他の成分を含む滅菌溶媒へ活性化合物を組み込むことにより分散液を調製する。滅菌注射液の調製用の滅菌粉末剤の場合、好ましい調製方法は、有効成分および事前に濾過滅菌したその溶液由来の任意のさらなる所望の成分の粉末が得られる真空乾燥および凍結乾燥である。溶液の適切な流動性は、例えば、レシチン等のコーティングの使用により、分散液の場合は必要な粒径の維持により、および界面活性剤の使用により維持できる。吸収を遅延化させる薬剤（例えば、モノステアリン酸塩およびゼラチン）を組成物中に含めることにより、注射用組成物を長期吸収させることができる。
【０６３２】
血漿カリクレイン結合タンパク質は、様々な方法により投与できるが、多数の適用において好ましい投与経路／投与方法は静脈内注射または静脈内注入である。例えば、治療的適用のため、血漿カリクレイン結合タンパク質は、約１〜１００ｍｇ／ｍ２または７〜２５ｍｇ／ｍ２の用量に到達するための３０、２０、１０、５、または１ｍｇ／分未満の速度の静脈内注入により投与できる。投与経路および／または投与方法は、所望の結果に応じて異なる。ある実施形態では、活性化合物は、化合物を急速な放出から保護する担体を用いて調製し得る（徐放剤（インプラントを含む）およびマイクロカプセル化送達系等）。エチレン酢酸ビニル、ポリ酸無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、およびポリ乳酸等の生分解性生体適合性ポリマーを使用できる。かかる製剤の多数の調製方法が利用可能である。例えば、Ｓｕｓｔａｉｎｅｄ  ａｎｄ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，  Ｊ．Ｒ．  Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，  ｅｄ．，  １９７８，  Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，  Ｉｎｃ．，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋを参照されたい。
【０６３３】
医薬組成物は、医療機器を使用して投与できる。例えば、１つの実施形態では、本明細書に開示の医薬組成物は、機器（例えば、針無し皮下注射機器、ポンプ、またはインプラント）を使用して投与できる。
【０６３４】
ある実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、ｉｎ  ｖｉｖｏで確実に適切に分配されるように処方できる。例えば、血液脳関門（ＢＢＢ）は、多数の高親水性化合物を排除する。本明細書に開示の治療化合物は、（所望の場合）ＢＢＢを確実に通過するように、例えば、リポソーム中に処方できる。リポソームの製造方法については、例えば、米国特許第４，５２２，８１１号；同第５，３７４，５４８号；ならびに同第５，３９９，３３１号を参照されたい。リポソームは、特定の細胞または臓器に選択的に輸送されて標的化した薬剤送達を増強する１つまたは複数の部分を含み得る（例えば、Ｖ．Ｖ．  Ｒａｎａｄｅ，  １９８９，  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  ２９：６８５を参照されたい）。
【０６３５】
投与計画は、至適な所望の応答（例えば、治療反応）が得られるように調節される。例えば、治療状況の要件によって示されるように、単回ボーラスを投与してもよく、複数回に分割した用量を経時的に投与してもよく、用量を比例的に減量もしくは増量してもよい。投与を容易にし、投与量を均一にするために、投与量単位形態で非経口組成物を処方することが特に有利である。本明細書で使用する場合、投与量単位形態とは、治療すべき対象への単回投与に適した物理的に分離した単位を指し、各単位は、必要な医薬担体と組み合わせて所望の治療効果が得られるように計算された所定量の活性化合物を含む。投与量単位形態の仕様は、
（ａ）活性化合物の固有の特徴および達成すべき特定の治療効果、ならびに
（ｂ）個体の感受性の処置のためのかかる活性化合物の配合分野に固有の制限、によって影響を受け、これらに直接依存し得る。
【０６３６】
本明細書に開示の結合タンパク質（例えば、抗体）の治療有効量または予防有効量の例示的範囲は０．１〜２０ｍｇ／ｋｇ、さらに好ましくは１〜１０ｍｇ／ｋｇであるが、これらに限定されない。抗血漿カリクレイン抗体は、例えば、静脈内注入により、例えば、約１〜１００ｍｇ／ｍ２または約５〜３０ｍｇ／ｍ２の用量に到達するための３０、２０、１０、５、または１ｍｇ／分未満の速度で投与できる。抗体よりも低分子量の結合タンパク質では、適量は比例的に低値であり得る。投与量値は、緩和すべき容態の型および重症度に応じて変わり得る。特定の対象のための具体的な投与計画は、個体の必要性ならびに組成物の投与者もしくは投与監視者の専門的な判断により経時的に調整できる。
【０６３７】
本明細書に開示の医薬組成物は、「治療有効量」または「予防有効量」の本明細書に開示の血漿カリクレイン結合タンパク質を含み得る。「治療有効量」とは、所望の治療成果を達成するために必要な投与量および期間で有効な量を指す。組成物の治療有効量は、個体の病態、年齢、性別、および体重、ならびに個体の所望の応答を誘発するタンパク質の能力等の要因に応じて変わり得る。治療有効量はまた、組成物のいずれの毒性作用または有害作用よりも治療に有利な効果が勝る量である。
【０６３８】
「治療有効量」は、好ましくは、測定可能な変数、例えば、循環ＩｇＧ抗体レベルを未治療対象と比較して、統計的に有意な程度または少なくとも約２０％、さらに好ましくは少なくとも約４０％、よりさらに好ましくは少なくとも約６０％、それよりさらに好ましくは少なくとも約８０％調節する。測定可能な変数（例えば、疾患関連変数）を調節する化合物の能力は、ヒトの障害および容態、例えば、血漿カリクレイン関連疾患における有効性を予想する動物モデル系で評価できる。あるいは、組成物のこの特性は、化合物のｉｎ  ｖｉｔｒｏでの変数調節能力を検討することにより評価できる。
【０６３９】
「予防有効量」とは、所望の予防成果を達成するために必要な投与量および期間で有効な量を指す。典型的には、予防用量は疾患の前または初期段階の対象に使用されるため、予防有効量は治療有効量より少ない。
【０６４０】
安定性および保持
１つの実施形態では、カリクレイン結合タンパク質を、循環中（例えば、血液、血清、リンパ液、または他の組織内）でのその安定性および／または保持を、例えば、少なくとも１．５、２、５、１０、または５０倍改善する部分と物理的に結合する。例えば、血漿カリクレイン結合タンパク質を、ポリマー、例えば、実質的に非抗原性のポリマー（ポリアルキレンオキシドまたはポリエチレンオキシド等）と結合させることができる。適切なポリマーの重量は大幅に変化する。約２００〜約３５，０００（または約１，０００〜約１５，０００、および２，０００〜約１２，５００）の範囲の数平均分子量を有するポリマーを使用できる。例えば、血漿カリクレイン結合タンパク質は、水溶性ポリマー、例えば、親水性ポリビニルポリマー、例えば、ポリビニルアルコールおよびポリビニルピロリドンと結合できる。かかるポリマーの列挙としては、ポリアルキレンオキシドホモポリマー（ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）またはポリプロピレングリコール等）、ポリオキシエチレン化ポリオール、それらのコポリマーおよびそれらのブロックコポリマー（ブロックコポリマーの水溶性が維持される場合）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０６４１】
また血漿カリクレイン結合タンパク質を担体タンパク質、例えば、ヒト血清アルブミンのような血清アルブミンと結合させることもできる（例えば、Ｓｍｉｔｈ，ＢＪ．  ｅｔ  ａｌ．，  ２００１  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ  Ｃｈｅｍ  １２（５）：７５０−７５６を参照されたい）。例えば、翻訳融合を用いて担体タンパク質を血漿カリクレイン結合タンパク質と結合させる。
【０６４２】
また血漿カリクレイン結合タンパク質をＨＥＳ化誘導体として修飾することもできる。血漿カリクレイン結合タンパク質のＨＥＳ化の過程では、ヒドロキシエチルデンプンを用いてタンパク質を修飾する。タンパク質のＨＥＳ化により、タンパク質の循環血中半減期が延長され、また腎クリアランスも減少し得る。
【０６４３】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の血漿カリクレイン結合タンパク質は、非構造組換えポリマー（ＵＲＰ）に融合している（例えば、その全体を参照することによって内容が本明細書に組み込まれる米国特許第７，８４６，４４５号を参照されたい）。
【０６４４】
ＵＲＰは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｇｌｕ、およびＰｒｏからなるポリペプチドであり、第２構造を有さない。水性溶媒中、ＵＲＰは、高度に溶媒和させて、ポリペプチド単独より分子量の大きな顕性分子量と結合するタンパク質を提供する。ＵＲＰ配列は、血漿カリクレイン結合タンパク質に融合して、
（ｉ）循環半減期を増大する、
（ｉｉ）組織選択性を改善する、
（ｉｉｉ）結合タンパク質を分解から保護する、
（ｉｖ）免疫原性を低減する、
（ｖ）Ｔ細胞エピトープを遮断する、
（ｖｉ）可溶性を高める、
（ｖｉｉ）ｐＨプロファイルおよびタンパク質電荷の同質を改善する、
（ｖｉｉｉ）鋭敏なｐＫａによる精製特性を改善する、
（ｉｘ）処方および送達を改善する、ならびに、
（ｘ）タンパク質産生を改善することができる（例えば、その全体を参照することによって本明細書に組み込まれる米国特許第７，８４６，４４５号を参照されたい）。
【０６４５】
一般的に、ＵＲＰ配列は、血清タンパク質（例えば、抗体）との相互作用等の意図しない活性を備えないように設計すべきである。当業者は、例えば、固定化血清タンパク質への結合レベルを検出するＥＬＩＳＡアッセイを用いて、ＵＲＰの意図しない活性を試験できる。いくつかの実施形態では、ＵＲＰは血清タンパク質（例えば、アルブミン）と相互作用して血漿カリクレイン結合タンパク質の循環半減期を増大することが所望され得る。
【０６４６】
一般的に、ＵＲＰ配列は生理的条件下で変性ペプチド配列のように行動し、したがって、生理的条件下で十分に定義した二次および三次構造に欠けることが望ましい。所定のポリペプチドの二次および三次構造の確認方法は当業者に知られており、「遠紫外線」スペクトラル領域（１９０〜２５０ｎｍ）、およびコンピュータプログラムまたはアルゴリズムにおけるＣＤ分光法、例えば、Ｃｈｏｕ−Ｆａｓｍａｎ  ａｌｇｏｒｉｔｈｍ  （Ｃｈｏｕ，  Ｐ．  Ｙ．，  ｅｔ  ａｌ．  （１９７４）  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  １３：  ２２２−４５）が挙げられるが、これらに限定されない。ＵＲＰ配列は、典型的には、生理的条件下（例えば、ｐＨ６．５〜７．８および３０〜３７℃）で、類似の分子量の球状タンパク質と比較して高い立体配座柔軟性を有し、大型流体半径（ストークスの半径）も有する。
【０６４７】
１つの実施形態では、ＵＲＰ配列は低い免疫原性を有する。好ましいＵＲＰは、立体配座のエピトープ形成を回避するように設計される。例えば、特定の興味は、水溶液中の密集して折り畳まれた立体構造を取る傾向が低いＵＲＰ配列である。特に、低い免疫原性は、抗原発現細胞内の抗原過程に抵抗する配列を選択し、ＭＨＣと十分に結合しない配列を選択し、および／または宿主（例えば、ヒト）配列に由来する配列を選択することによって到達できる。
【０６４８】
いくつかの実施形態では、ＵＲＰ配列は、高程度のプロテイナーゼ耐性を有し、血清半減期を伸ばす。ＵＲＰは、タンパク質配列に対する効果を特徴とすることもでき、例えば、このタンパク質は、ＵＲＰ欠損の対応するタンパク質と比較し長い血清半減期および／または高い可溶性を示す。血清半減期の確認方法は、当該技術分野において知られている（例えば、Ａｌｖａｒｅｚ，  Ｐ．，  ｅｔ  ａｌ．  （２００４）  Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ，  ２７９：  ３３７５−８１を参照されたい）。当該技術分野において利用可能であるかまたは本明細書において例示されるいずれかの方法を実施することによって、得られたタンパク質が非修飾タンパク質と比較して長い血清半減期を有するかどうかを容易に決定できる。
【０６４９】
ＵＲＰは、
（ａ）ＵＲＰ含有タンパク質の血清半減期延長；
（ｂ）得られたタンパク質の可溶性増大；
（ｃ）プロテイナーゼ耐性の増大；ならびに／または
（ｄ）得られたＵＲＰ含有タンパク質の免疫原性低下、をもたらす上で必要な任意の長さであり得る。いくつかの実施形態では、ＵＲＰは、約３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、３００、４００または４００超の連続アミノ酸を有する。タンパク質に組み込まれる場合、ＵＲＰは、得られたタンパク質が複数のＵＲＰ、または複数のＵＲＰ断片を含むように分裂し得る。得られたタンパク質中の全ＵＲＰ配列の合計の長さが少なくとも４０個のアミノ酸である場合、これらの個々のＵＲＰ配列の一部またはすべては４０個未満のアミノ酸であり得る。好ましくは、得られたタンパク質は４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００または２００超のアミノ酸を超えるＵＲＰ配列の合計の長さを有する。
【０６５０】
いくつかの実施形態では、ＵＲＰの等電点（ｐＩ）は、１．０、１．５、２．０、２．５、３．０、３．５、４．０、４．５、５．０、５．５、６．０、６．５、７．０、７．５、８．０、８．５、９．０、９．５、１０．０、１０．５、１１．０、１１．５、１２．０、１２．５またはさらには１３．０である。
【０６５１】
一般的に、ＵＲＰ配列は親水性アミノ酸が豊富であり、疎水性または芳香族アミノ酸含有パーセンテージは低い。適切な親水性残基としては、グリシン、セリン、アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩、リジン、アルギニン、およびトレオニンが挙げられるが、これらに限定されない。ＵＲＰ構築に不利な疎水性残基としては、トリプトファン、フェニルアラニン、チロシン、ロイシン、イソロイシン、バリン、およびメチオニンが挙げられる。ＵＲＰ配列は、グリシン豊富であり得るが、ＵＲＰ配列はアミノ酸グルタミン酸塩、アスパラギン酸塩、セリン、トレオニン、アラニンまたはプロリン豊富であってもよい。したがって、主要アミノ酸は、Ｇ、Ｅ、Ｄ、Ｓ、Ｔ、ＡまたはＰであり得る。プロリン残基の含有はタンパク質分解に対する感受性を低減する傾向がある。
【０６５２】
いくつかの実施形態では、ＵＲＰ配列は、生理的条件下で水中および水性培地中の可溶性を増大する親水性残基を含む。親水性残基の含有は、水性製剤中の凝集形成ならびにＵＲＰ配列の他のタンパク質もしくはペプチド（例えば、血漿カリクレイン結合タンパク質）への融合を低減し、可溶性を高め、凝集体形成および免疫原性を低減できる。
【０６５３】
ＵＲＰ配列は、タンパク質に望ましくない特性を付与するアミノ酸を回避する、例えば、システイン（ジスルフィド成形および酸化を回避する）、メチオニン（酸化を回避する）、アスパラギンおよびグルタミン（脱アミド化を回避する）ようにさらに設計できる。
【０６５４】
いくつかの実施形態では、ＵＲＰは、グリシン豊富である（例えば、総アミノ酸の３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または１００％はグリシンである）ように設計する。グリシン豊富なペプチドの立体配座自由（例えば、変性ペプチドの特性）は増大しているため、グリシン豊富なＵＲＰは、本明細書に記載の方法および組成物の使用が企図される。グリシン豊富な配列の長さは、約５個のアミノ酸〜４００個のアミノ酸と異なり得る。例えば、単一、連続したグリシン豊富な配列の長さは、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、７０、８０、９０、１００、１２０、１４０、１６０、１８０、２００、２４０、２８０、３２０または４００または４００超のアミノ酸を含むことができる。グリシン豊富な配列は、両端にグリシン残基を含み得る。
【０６５５】
いくつかの実施形態では、ＵＲＰ配列は、特定の組織、細胞タイプまたは細胞系統に対する融合タンパク質の選択性を高めるように至適化される。得られたタンパク質が特定の細胞より小さい位置にあるように誘導するＵＲＰも使用できる：細胞外液マトリックス、核、細胞質、細胞骨格、血漿および／または細胞内膜質構造（被覆小窩、ゴルジ体、小胞体、エンドソーム、リソソーム、およびミトコンドリアが挙げられるが、これらに限定されない）。これらの様々な組織特異性、細胞タイプ特異性の、細胞より小さい位置に特異的な配列は既知であり、多くのタンパク質データベースから入手可能である。かかる選択的ＵＲＰ配列は、無作為または半無作為ＵＲＰ配列ライブラリーを産生することによって得ることができ、それらを動物または患者に注射し、組織試料中の所望の組織選択性を有する配列を決定する。配列決定は、質量分析によって実施できる。類似の方法を用いて、経口、口腔内、腸内、経鼻、外皮、腹膜、肺、直腸内、または真皮内取り込みを促進するＵＲＰ配列を選択できる。
【０６５６】
１つの実施形態では、ＵＲＰ配列は、膜から細胞を取り込みまたは輸送する傾向にある正電荷アミノ酸（アルギニンまたはリジン等）が豊富である。いくつかの実施形態では、ＵＲＰ配列は、１つまたは複数のプロテイナーゼ感受性配列を含むように設計できる。かかるＵＲＰ配列は、本発明の生成物が標的位置に達した後に切断できる。ＵＲＰ配列は、アスパラギン酸またはグルタミン酸残基導入によって過剰な負電荷を保因するように設計できる。特定の興味は、５％超、６％、７％、８％、９％、１０％、１５％、３０％超のグルタミン酸ならびに２％未満のリジンもしくはアルギニンを含むＵＲＰである。かかるＵＲＰは、過剰な負電荷を保因し、結果として、ペプチドの個々の負電荷間の静電反発力のために開立体構造を取る傾向にある。かかる過剰負電荷は流体半径を効果的に増大し、結果としてかかる分子の腎クリアランスを低減し得る。したがって、ＵＲＰ配列中の負電荷アミノ酸の頻度および分布を制御することによってＵＲＰ配列の効果的な正電荷および流体半径を調節できる。
【０６５７】
ＵＲＰは、配列モチーフが直接反復（すなわちＡＢＣＡＢＣＡＢＣＡＢＣ）または逆方向反復（ＡＢＣＣＢＡＡＢＣＣＢＡ）を形成する形成（モチーフ）ｘの反復アミノ酸配列を含むことができ、これらの反復数は、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３５、４０、５０または５０超であり得る。ＵＲＰ（またはＵＲＰ内反復）はしばしば１、２、３、４、５または６個の異なるタイプのアミノ酸のみを含む。ＵＲＰは典型的には、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６または３６超のアミノ酸長のヒトアミノ酸配列反復からなるが、ＵＲＰはまた、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０個のアミノ酸長の非ヒトアミノ酸配列からなってもよい。
【０６５８】
１つの実施形態では、ＵＲＰは、ヒト配列に由来する。ヒトゲノムは、１つの特定のアミノ酸の豊富な多くの副配列を含む。特定の興味は、親水性アミノ酸（セリン、トレオニン、グルタミン酸塩、アスパラギン酸塩、またはグリシン等）の豊富なアミノ酸配列である。特定の興味は、いくつかの疎水性アミノ酸を含み、かかる副配列は水溶液中で非構造および高可溶性であると予想される。かかるヒト副配列は、それらの用途をさらに改善するために修飾できる。ＵＲＰ設計に使用する例示的なヒト配列を本明細書の表２４および２５に示す。
【０６５９】
ヒトタンパク質由来の配列の使用は、ヒト対象において免疫原性の低下したＵＲＰの設計において特に所望される。ＵＲＰ配列は、Ｔ細胞エピトープを除去して免疫原性を低減するように設計できる。例えば、変性、非構造立体構造傾向のアミノ酸組成物を用いて一連の半無作為配列を合成して、これらの配列のヒトＴ細胞エピトープの存在およびそれらはヒト配列かどうかを評価できる。ヒトＴ細胞エピトープアッセイについては説明されている（Ｓｔｉｃｋｌｅｒ，  Ｍ．，  ｅｔ  ａｌ．  （２００３）  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ，  ２８１：  ９５−１０８）。適切なアミノ酸組成物を用いてヒト配列をオリゴマー化または連結させることによって、ヒト配列をＵＲＰ配列設計に組み込むことができる。これらは、直接反復であっても逆方向反復であっても様々な反復の混合であってもよい。１つの実施形態では、完全ＵＲＰ配列は、ヒト配列由来である。
【０６６０】
反復アミノ酸を含むＵＲＰの例としては、ポリ−グリシン、ポリ−グルタミン酸、ポリ−アスパラギン酸、ポリ−セリン、ポリ−トレオニン、（ＧＸ）ｎ（式中、Ｇはグリシンであり、Ｘはセリン、アスパラギン酸、グルタミン酸、トレオニン、またはプロリンであり、ｎは少なくとも２０である）、（ＧＧＸ）ｎ（式中、Ｘはセリン、アスパラギン酸、グルタミン酸、トレオニン、またはプロリンであり、ｎは少なくとも１３である）、（ＧＧＧＸ）ｎ（式中、Ｘはセリン、アスパラギン酸、グルタミン酸、トレオニン、またはプロリンであり、ｎは少なくとも１０である）、（ＧＧＧＧＸ）ｎ（式中、Ｘはセリン、アスパラギン酸、グルタミン酸、トレオニン、またはプロリンであり、ｎは少なくとも８である）、（ＧｚＸ）ｎ（式中、Ｘはセリン、アスパラギン酸、グルタミン酸、トレオニン、またはプロリンであり、ｎは少なくとも１５であり、ｚは１〜２０である）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０６６１】
かかる反復数は、１０〜１００間の任意の数値であり得る。本発明の生成物は、半無作為配列であるＵＲＰ配列を含み得る。例としては、少なくとも３０、４０、５０、６０または７０％グリシンを含み、グリシンは十分に分散し、トリプトファン、フェニルアラニン、チロシン、バリン、ロイシン、およびイソロイシンの総濃度は、総合した場合に７０、６０、５０、４０、３０、２０、または１０％未満である半無作為配列が挙げられる。好ましい半無作為ＵＲＰ配列は、少なくとも４０％グリシンを含み、トリプトファン、フェニルアラニン、チロシン、バリン、ロイシン、およびイソロイシンの総濃度は１０％未満である。より好ましい無作為ＵＲＰ配列は、少なくとも５０％グリシンを含み、トリプトファン、フェニルアラニン、チロシン、バリン、ロイシン、およびイソロイシンの総濃度は５％未満である。ＵＲＰ配列は、ＵＲＰ配列またはＵＲＰ配列断片の２つ以上短い配列を結合することによって設計できる。かかる組み合わせは、ＵＲＰ配列を含む生成物の医薬特性をより良好に調節でき、ＵＲＰ配列をコードするＤＮＡ配列の反復性を低減でき、ＵＲＰコード配列の発現を改善して組み換えを低減できる。
【０６６２】
ＵＲＰ配列は、血漿カリクレイン結合タンパク質の軽鎖（ＬＣ）または重鎖（ＨＣ）のいずれかのＮ末端にあることができ、単一ＵＲＰはＨＣまたはＬＣのいずれかの片端と結合できる。例えば、リンカーを介してＶＨ：：ＣＤＲ３：：ＪＨをＶＬ：：ＪＬと結合してｓｃＦｖを作製することができ、これは次いでＵＲＰと融合できる。
【０６６３】
１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、血漿カリクレインを阻害するＦａｂ断片を含み、ＬＣが１００以上（例えば、１２０、１４０、１６０、１８０、２００、３００、４００または４００超）のアミノ酸のＵＲＰに融合しており、ＨＣが２００以上（例えば、２２０、２４０、２６０、２８０、３００、３５０、４００、４５０、５００、６００または６００超）のアミノ酸のＵＲＰに融合している血漿プレカリクレインと結合しない。１つの実施形態では、ＵＲＰは、ＬＣのカルボキシ末端およびＨＣのカルボキシ末端に融合している。１つの実施形態では、ＵＲＰは、本質的に等量のＧｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｇｌｕ、およびＰｒｏ残基を有する。１つの実施形態では、ＵＲＰ配列は、六量体反復を含まない。１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、Ｆａｂ断片）は、Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、Ｘ６７−Ｇ０４、およびＭ１６０−Ｇ１２からなる群から選択される。
【０６６４】
１つの実施形態では、ＨＣ：：ＵＲＰ２およびＬＣ：：ＵＲＰ１は、酵母株、例えば、ピキア・パストリス（Ｐｉｃｈｉａ  ｐａｓｔｏｒｉｓ）（ＢＭＣ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  ２００９  Ａｕｇ  １１；９：７０．  ＰＭＩＤ  １９６７１１３４；  Ｊ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ．  ２００５  Ｍａｙ  ３１；３８（３）：２９４−９．  ＰＭＩＤ  １５９４３９０４；  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  Ｂｉｏｅｎｇ．  ２００６  Ｊｕｎ  ５；９４（２）：３５３−６１．  ＰＭＩＤ  １６５７０３１７）、サッカロマイセス・セレヴィシエ（サッカロマイセス・セレヴィシエ）（ＢＭＣ  Ｓｙｓｔ  Ｂｉｏｌ．  ２０１０  Ｏｃｔ  ２２；４：１４１．  ＰＭＩＤ  ２０９６９７５９；  ＢＭＣ  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ．  ２０１０  Ｍａｒ  ２６；１１：２０７．  ＰＭＩＤ  ２０３４６１３７）、またはハンセヌラ・ポリモルファ（Ｈａｎｓｅｎｕｌａ  ｐｏｌｙｍｏｒｐｈａ）（Ａｐｐｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  ２００１  Ｊｕｌ；５６（１−２）：１５７−６４．  ＰＭＩＤ  １１４９９９２４）中で産生する。当業者は、血漿カリクレイン結合タンパク質およびＵＲＰポリペプチドを含む融合タンパク質産生における使用に所望される特定の酵母株の適切なプロモーターおよびシグナル配列を使用できる。
【０６６５】
１つの実施形態では、ＨＣ：：ＵＲＰ２およびＬＣ：：ＵＲＰ１は、哺乳動物細胞、例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞内で産生される。ＣＨＯ細胞を用いるタンパク質産生に有用であるシグナル配列およびプロモーターは、文献中で知られている。
【０６６６】
キット
本明細書に記載の血漿カリクレイン結合タンパク質は、キット中に（例えば、キットの成分として）提供できる。例えば、キットは
（ａ）血漿カリクレイン結合タンパク質、例えば、血漿カリクレイン結合タンパク質を含む組成物（例えば、医薬組成物）、および、任意に
（ｂ）情報資料を含む。情報資料は、本明細書に記載の方法および／または本明細書に記載の方法のための血漿カリクレイン結合タンパク質の使用に関する説明資料、指示資料、販売資料または他の資料であり得る。
【０６６７】
キットの情報資料は、その形態が限定されない。１つの実施形態では、情報資料は、化合物の産生、化合物の分子量、濃度、有効期限、バッチまたは産生部位情報等の情報を含むことができる。１つの実施形態では、情報資料は、障害および容態（例えば、血漿カリクレイン関連の疾患または容態）を治療、予防、または診断するための結合タンパク質の使用に関する。
【０６６８】
１つの実施形態では、情報資料は、本明細書に記載の方法を実施するために適切な方法、例えば、適切な用量、投与形態、または投与方法（例えば、本明細書に記載の用量、投与形態、または投与方法）で血漿カリクレイン結合タンパク質を投与するための使用説明書を含むことができる。別の実施形態では、情報資料は、適切な対象、例えば、ヒト、例えば、本明細書に記載の障害または容態（例えば、血漿カリクレイン関連の疾患または容態）を呈するかまたはリスクのあるヒトに血漿カリクレイン結合タンパク質を投与するための使用説明書を含むことができる。例えば、資料は、本明細書に記載の障害または容態（例えば、血漿カリクレイン関連疾患）を呈する患者に血漿カリクレイン結合タンパク質を投与するための使用説明書を含むことができる。キットの情報資料は、その形態が限定されない。多くの場合、情報資料（例えば、使用説明書）は印刷物として提供されるが、他の形式（コンピュータ媒体資料等）でも提供され得る。
【０６６９】
血漿カリクレイン結合タンパク質は、任意の形態（例えば、液体、乾燥形態または凍結乾燥形態）で提供できる。血漿カリクレイン結合タンパク質は実質的に純粋および／または無菌であることが好ましい。血漿カリクレイン結合タンパク質が溶液で提供される場合、溶液は好ましくは水溶液であり、滅菌水溶液が好ましい。血漿カリクレイン結合タンパク質が乾燥形態として提供される場合、一般に、適切な溶媒の添加によって再構成する。溶媒（例えば、滅菌水または滅菌緩衝液）は任意にキット中に提供できる。
【０６７０】
キットは、血漿カリクレイン結合タンパク質を含む組成物用の容器を１つまたは複数含むことができる。いくつかの実施形態では、キットは、組成物および情報資料用に別々の容器、仕切りまたは区画を含む。例えば、組成物を、瓶、バイアル、またはシリンジに含めることもでき、情報資料を容器と関連させて含めることもできる。他の実施形態では、キットの個別の要素を単一の非分割容器内に含める。例えば、組成物を、ラベルの形態で情報資料を添付した瓶、バイアルまたはシリンジ中に含める。いくつかの実施形態では、キットは、個別の容器を複数（例えば、パックで）含み、各容器は１つまたは複数の単位投与形態（例えば、本明細書に記載の投与形態）の血漿カリクレイン結合タンパク質を含む。例えば、キットは、複数のシリンジ、アンプル、ホイルパッケージ、またはブリスターパックを含み、それぞれが単一の単位用量の血漿カリクレイン結合タンパク質を含む。キットの容器は、気密性、防水性（例えば、湿気または蒸発の変化を防止する）、および／または遮光性であり得る。
【０６７１】
キットは、組成物の投与に適した機器、例えば、シリンジ、吸入器、点滴器（例えば、点眼器）、スワブ（例えば、綿棒または木製スワブ）、またはかかる送達機器のいずれかを任意に含む。１つの実施形態では、機器は、結合タンパク質を一定量投与するインプラント機器である。本開示は、例えば、本明細書に記載の成分の組み合わせによるキットの提供方法も特徴とする。
【０６７２】
治療
血漿カリクレインと結合するタンパク質（例えば、本明細書に記載のタンパク質）は、特にヒト対象における治療および予防に有用である。
これらの結合タンパク質を、例えば血漿カリクレイン関連障害を含めた様々な障害および容態を治療、予防および／または診断するべき対象に、あるいは例えばｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｅｘ  ｖｉｖｏで培養細胞に投与する。例えば、培養細胞から放出される血漿カリクレインの作用を、これらの結合タンパク質を用いて変化させる（Ｌｉｌｌａら，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．２８４（２０）：１３７９２−１３８０３（２００９））。治療には、障害、障害の症状または障害の素因を軽減する、緩和する、変化させる、矯正する、改善する、向上させるまたはそれらに影響を与えるのに有効な量を投与することを含む。また治療により、疾患または容態の発症を遅延させ得る、例えば、発症を予防し得る、または悪化を予防し得る。
【０６７３】
本明細書で使用する場合、障害の予防に有効な標的結合剤の量、つまり結合剤の予防有効量とは、単回または複数回用量を対象に投与時、障害、例えば、本明細書に記載の障害（例えば、血漿カリクレイン関連疾患）の発現または再発の予防または遅延化に有効な標的結合剤、例えば、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、本明細書に記載の抗血漿カリクレイン抗体）の量を指す。
【０６７４】
血漿カリクレイン結合タンパク質および他剤の投与方法は、「医薬組成物（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ）」にも記載されている。使用する分子の適切な投与量は、対象の年齢および体重ならびに使用する特定の薬剤に応じ得る。結合タンパク質は、例えば、血漿カリクレインとその基質（例えば、第ＸＩＩ因子またはＨＭＷＫ）間の望ましくない相互作用を阻害、低減するために競合薬として使用できる。血漿カリクレイン結合タンパク質の用量は、患者における血漿カリクレインの活性を特に疾患部位で９０％、９５％、９９％、または９９．９％ブロッキングする上で十分な量であり得る。これは、疾患に応じて、０．１、１．０、３．０、６．０、または１０．０ｍｇ／Ｋｇ要し得る。これらの用量は、分子質量が１５０，０００ｇ／モル（２つの結合部位）であるＩｇＧにおいて、５Ｌ血液量の結合部位の約１８ｎＭ、１８０ｎＭ、５４０ｎＭ、１．０８μＭ、および１．８μＭ相当である。
【０６７５】
１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質を、細胞、例えば、ｉｎ  ｖｉｖｏ血漿カリクレインの活性を阻害する（例えば、血漿カリクレインの少なくとも１つの活性を阻害する、例えば、第ＸＩＩａ因子および／またはブラジキニン産生を低減する）ために使用する。結合タンパク質は、これら自体でまたは薬物（例えば、細胞傷害薬、細胞傷害性酵素、または放射性同位体）と結合させることにより使用できる。本方法は、結合タンパク質単独または薬物（例えば、細胞傷害薬）と結合させた結合タンパク質を、かかる治療を必要とする対象に投与することを含む。例えば、血漿カリクレインを実質的に阻害しない血漿カリクレイン結合タンパク質は、毒素等の作用因子を含むナノ粒子を血漿カリクレイン関連細胞または組織に送達する、例えば、血漿カリクレイン関連障害を治療するために使用し得る。
【０６７６】
血漿カリクレイン結合タンパク質は、血漿カリクレイン発現細胞を認識し、（例えば、近傍または混じった）血漿カリクレイン関連の障害または容態を伴う細胞と結合できるため、血漿カリクレイン結合タンパク質は、任意のかかる細胞の活性を阻害する（例えば、血漿カリクレインの少なくとも１つの活性を阻害する、例えば、第ＸＩＩａ因子および／またはブラジキニン産生を低減する）ために用いて、血漿カリクレイン関連疾患を阻害できる。血漿カリクレイン活性の低減は、血漿カリクレイン関連障害の発現および／または進行における血漿カリクレイン活性に依存し得る細胞を間接的に阻害できる。
【０６７７】
結合タンパク質は、薬物（例えば、任意の様々な細胞傷害薬および治療薬）を血漿カリクレインが存在する細胞および組織に送達するために使用し得る。例示的な薬物としては、放射線放出化合物、植物、真菌、もしくは細菌起源の分子、生体タンパク質、ならびにそれらの混合物が挙げられる。細胞傷害薬は、細胞内で作用する細胞傷害薬（短距離放射体、例えば、短距離高エネルギーα放射体の毒素等）であり得る。
【０６７８】
血漿カリクレイン発現細胞を標的にするために、プロドラッグ系を使用できる。例えば、第１結合タンパク質を、プロドラッグ活性化因子と近接した場合のみで活性化されるプロドラッグと抱合する。プロドラッグ活性化因子を、第２結合タンパク質、好ましくは標的分子上の非競合部位と結合する第２結合タンパク質に抱合する。２つの結合タンパク質が競合結合部位に結合するか非競合結合部位に結合するかどうかについては、従来の競合結合アッセイにより決定できる。例示的薬剤プロドラッグ対については、Ｂｌａｋｅｌｙ  ｅｔ  ａｌ．，  （１９９６）  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  ５６：３２８７  ３２９２に記載されている。
【０６７９】
血漿カリクレイン結合タンパク質はｉｎ  ｖｉｖｏで直接使用して、天然の補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）または抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を介して、抗原発現細胞を排除することができる。本明細書に記載の結合タンパク質は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、もしくはＩｇＧ３由来のＦｃ部分、または補体と結合するＩｇＭの対応部分等の補体結合エフェクタードメインを含むことができる。１つの実施形態では、標的細胞集団は、本明細書に記載の結合剤および適切なエフェクター細胞にてｅｘ  ｖｉｖｏ処置する。この処置は、補体または補体を含む血清の添加によって補足できる。さらに、本明細書に記載の結合タンパク質で被膜した標的細胞の食作用を、補体タンパク質の結合により改善できる。別の実施形態では、標的（補体結合エフェクタードメインを含む結合タンパク質で被膜した細胞）を補体により溶解する。
【０６８０】
血漿カリクレイン結合タンパク質の投与方法は、「医薬組成物（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ）」に記載されている。使用する分子の適切な投与量は、対象の年齢および体重ならびに使用する特定の薬物に応じる。結合タンパク質は、例えば、天然または病理学的な作用因子と血漿カリクレイン間の望ましくない相互作用を阻害または低減するために競合薬として使用できる。
【０６８１】
血漿カリクレイン結合タンパク質は、高分子および低分子、例えば、遺伝子を遺伝子療法目的で内皮または上皮内細胞に送達して、血漿カリクレイン発現組織のみを標的とするために使用できる。結合タンパク質は、様々な細胞傷害薬（治療薬、放射線放出化合物、植物、真菌、もしくは細菌起源の分子、生体タンパク質、およびこれらの混合物を含む）を送達するために使用し得る。細胞傷害薬は、本明細書に記載のように、細胞内作用細胞傷害薬（短距離放射体、例えば、短距離高エネルギーα放射体等）であり得る。
【０６８２】
ポリペプチド毒素の場合、組換え核酸技術を使用して、翻訳様式として結合タンパク質（例えば、抗体またはその抗原結合断片）および細胞毒素（またはそのポリペプチド成分）をコードする核酸を構築することができる。次いで、例えば、細胞内で組換え核酸を発現し、コードされた融合ポリペプチドを単離する。
【０６８３】
あるいは、血漿カリクレイン結合タンパク質は、高エネルギー放射体（例えば、ある部位に局在した場合にいくつかの細胞が死滅する放射性同位体（１３１Ｉ等）、γ放射体）に結合できる。例えば、Ｓ．Ｅ．  Ｏｒｄｅｒ，  “Ａｎａｌｙｓｉｓ，  Ｒｅｓｕｌｔｓ，  ａｎｄ  Ｆｕｔｕｒｅ  Ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ”，  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｙ，  Ｒ．Ｗ．  Ｂａｌｄｗｉｎ  ｅｔ  ａｌ．  （ｅｄｓ．），  ｐｐ  ３０３  ３１６  （Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ  １９８５）を参照されたい。他の適切な放射性同位体としては、２１２Ｂｉ、２１３Ｂｉ、および２１１Ａｔ等のａ放射体、ならびに１８６Ｒｅおよび９０Ｙ等のｂ放射体が挙げられる。さらに、１７７Ｌｕも造影剤および細胞傷害薬の両方として使用し得る。
【０６８４】
１３１Ｉ、９０Ｙ、および１７７Ｌｕで標識した抗体を用いる放射免疫療法（ＲＩＴ）が熱心に臨床的に調査されている。これら３つの核種の物理的特性は著しく異なるため、放射性核種の選択は、目的の組織に最大の線量を送達するために非常に重要である。９０Ｙのより高いβエネルギー粒子は、嵩高い腫瘍に効果的であり得る。１３１Ｉの比較的低いエネルギーのβ粒子が理想的であるが、放射性ヨウ化分子のｉｎ  ｖｉｖｏ脱ハロゲン化は、主に抗体の内在化に不利である。対照的に、１７７Ｌｕは０．２〜０．３ｍｍ範囲のみの低エネルギーβ粒子を有し、９０Ｙと比較してはるかに低い線量を骨髄に送達する。さらに、（９０Ｙと比較して）長い物理的半減期のため、体滞留時間が長い。結果として、比較的低い線量で、１７７Ｌｕ標識作用因子のより高い活性（より高いｍＣｉ量）を骨髄に投与できる。様々な癌の治療における１７７Ｌｕ標識抗体の使用を調査したいくつかの臨床研究が行われている。（Ｍｕｌｌｉｇａｎ  Ｔ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９５，  Ｃｌｉｎ．  Ｃａｎｃ．  Ｒｅｓ．  １：  １４４７−１４５４；  Ｍｅｒｅｄｉｔｈ  ＲＦ，  ｅｔ  ａｌ．，  １９９６，  Ｊ．  Ｎｕｃｌ．  Ｍｅｄ．  ３７：１４９１−１４９６；  Ａｌｖａｒｅｚ  ＲＤ，  ｅｔ  ａｌ．，  １９９７，  Ｇｙｎｅｃｏｌ．  Ｏｎｃｏｌ．  ６５：  ９４−１０１）。
【０６８５】
例示的疾患および容態
本明細書に記載の血漿カリクレイン結合タンパク質は、血漿カリクレイン活性が関与する疾患もしくは容態（例えば、本明細書に記載の疾患もしくは容態）の治療、またはそれらに関連する１つまたは複数の症状の治療（または予防）に有用である。いくつかの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、血漿カリクレイン結合ＩｇＧまたはＦａｂ）は、血漿カリクレイン活性を阻害する。
【０６８６】
本明細書に記載の血漿カリクレイン結合タンパク質によって治療（または予防）できるかかる疾患および容態の例としては、関節リウマチ、痛風、腸疾患、口腔粘膜炎、神経障害性疼痛、炎症性疼痛、脊柱管狭窄−変性脊椎疾患、動脈もしくは静脈血栓症、術後イレウス、大動脈瘤、骨関節炎、血管炎、浮腫、遺伝性血管性浮腫、脳浮腫、肺塞栓症、脳卒中、心室補助装置もしくはステントによって誘発される凝固、頭部外傷もしくは腫瘍周囲脳浮腫、敗血症、急性中大脳動脈（ＭＣＡ）虚血事象（脳卒中）、再狭窄（例えば、血管形成術後）、全身性紅斑性狼瘡性腎炎、ならびに熱傷が挙げられる。本明細書に記載の血漿カリクレイン結合タンパク質も創傷治癒を促進するために使用することができる。本明細書に記載の血漿カリクレイン結合タンパク質は、血管形成促進ブラジキニン産生のブロッキングが挙げられるが、これらに限定されない機序によって腫瘍学治療として使用されることもできる。
【０６８７】
治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質を、血漿カリクレイン活性が関与する障害を呈するかまたは呈することが疑われる対象へ投与し、それにより、その障害を治療する（例えば、障害の症状もしくは特徴を寛解もしくは改善するかまたは疾患進行を遅延化、安定化および／もしくは停止する）。
【０６８８】
血漿カリクレイン結合タンパク質は、治療有効量で投与できる。血漿カリクレイン結合タンパク質の治療有効量は、単回または複数回用量で対象へ投与時、対象を治療する（例えば、対象の障害症状の少なくとも１つを、かかる治療を行わない場合に予想される程度を超えて治癒する、緩和する、軽減するまたは改善する）に有効な量である。組成物の治療有効量は、個体の病態、年齢、性別、および体重、ならびに個体の所望の応答を誘発する化合物の能力等の要因に応じて変わり得る。治療有効量はまた、組成物のいずれの毒性作用または有害作用よりも治療に有利な効果が勝る。治療有効投与量は好ましくは、未治療対象と比較して測定可能な変数を好ましく調節する。測定可能な変数を阻害する化合物の能力は、ヒト障害における有効性を予想する動物モデル系で評価できる。
【０６８９】
投与計画は、至適な所望の応答（例えば、治療反応）が得られるように調節できる。例えば、治療状況の要件によって示されるように、単回ボーラスを投与してもよく、複数回に分割した用量を長期間投与してもよく、用量を比例的に減量もしくは増量してもよい。投与を容易にし、投与量を均一にするために、投与量単位形態で非経口組成物を処方することが特に有利である。本明細書で使用する場合、投与量単位形態とは、処置すべき対象への単回投与に適した物理的に分離した単位を指し、各単位は、必要な医薬担体と組み合わせて所望の治療効果が得られるように計算された所定量の活性化合物を含む。
【０６９０】
関節リウマチ
関節リウマチ（ＲＡ）は自己免疫性の慢性炎症性疾患であり、関節の腫脹および疼痛を引き起こし、通常は関節破壊をもたらす。一般にＲＡは、疾患活動の「再燃」の間に疾患症状の寛解を挟む再発／寛解の経過をたどる。ＲＡは、シェーグレン症候群（涙腺および唾液腺の炎症により引き起こされるドライアイおよび口内乾燥）、胸膜炎（深呼吸および咳嗽時に疼痛を引き起こす胸膜の炎症）、リウマチ小結節（肺内で発症する小結節部位の炎症）、心外膜炎（臥位または前傾姿勢の際に疼痛を引き起こす心膜の炎症）、フェルティ症候群（ＲＡに伴って見られる脾腫および白血球減少症であり、対象は易感染性となる）および血管炎（血流を阻止することがある血管の炎症）を含めた数多くのさらなる炎症性疾患を伴う。血漿カリクレインが関節リウマチに関与すると考えられている。
【０６９１】
活動性ＲＡの症状としては、疲労、食欲不振、微熱、筋肉痛および関節痛、ならびに硬直が挙げられる。筋肉および関節の硬直は通常、午前中および非活動期の後が最も顕著である。再燃時には、一般的には滑膜炎の結果として、関節が発赤したり、腫脹したり、疼痛を伴ったり、敏感になったりすることが多い。
【０６９２】
関節リウマチ治療には、薬剤の併用、安静、関節強化訓練および関節保護が含まれる。関節リウマチの治療では２つのクラスの薬剤、すなわち抗炎症性の「第１選択薬」および「疾患修飾性抗リウマチ薬」（ＤＭＡＲＤ）が用いられる。第１選択薬としては、ＮＳＡＩＤＳ（例えば、アスピリン、ナプロキセン、イブプロフェンおよびエトドラク）およびコルチゾン（副腎皮質ステロイド剤）が挙げられる。ＤＭＡＲＤ、例えば、金（例えば、金塩、金チオグルコース、金チオリンゴ酸、経口金剤）、メトトレキサート、スルファサラジン、Ｄ−ペニシラミン、アザチオプリン、シクロホスファミド、クロラムブシル、およびシクロスポリン、レフルノミド、エタネルセプト、インフリキシマブ、アナキンラ、およびアダリムマブ、およびヒドロキシクロロキン等は、疾患寛解を促進し進行性関節破壊を予防するが、ＤＭＡＲＤは抗炎症剤ではない。
【０６９３】
本開示は、ＲＡを呈するかまたは呈することが疑われる対象に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより関節リウマチを治療する（例えば、１つまたは複数の症状を改善する、安定させるもしくは除去する、またはＲＡ尺度の対象のスコアを改善するもしくは安定させる）方法を提供する。さらに、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を第２治療法、例えば、少なくとも１つの抗炎症性の「第１選択薬」（例えば、ＮＳＡＩＤおよび／またはコルチゾン）および／またはＤＭＡＲＤと併用投与することによりＲＡを治療する方法を提供する。また本開示は、ＲＡ発症リスクがある対象（例えば、ＲＡの家族歴または遺伝子素因を呈する対象）に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、予防有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより関節リウマチまたはその症状を予防する方法も提供する。
【０６９４】
さらに、ＲＡを呈するかまたは呈することが疑われる対象に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより関節リウマチ関連の障害（シェーグレン症候群、胸膜炎、肺リウマチ小結節、心外膜炎、フェルティ症候群および血管炎）を治療する（例えば、１つまたは複数の症状を改善する、安定させるまたは除去する）方法を提供する。
【０６９５】
ＲＡおよびＲＡの症状の評価に有用な尺度としては、例えば、関節リウマチ重症度尺度（Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｓｅｖｅｒｉｔｙ  Ｓｃａｌｅ）（ＲＡＳＳ；Ｂａｒｄｗｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，  （２００２）Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ  ４１（１）：３８−４５）、ＳＦ−３６関節炎に固有の健康指標（Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｉｎｄｅｘ）（ＡＳＨＩ；Ｗａｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，  （１９９９）Ｍｅｄ．Ｃａｒｅ．３７（５  Ｓｕｐｐｌ）：ＭＳ４０−５０）、関節の炎影響測定尺度（Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｉｍｐａｃｔ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｓｃａｌｅｓ）または関節炎の影響測定尺度２（Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｉｍｐａｃｔ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｓｃａｌｅｓ２）（ＡＩＭＳまたはＡＩＭＳ２；Ｍｅｅｎａｎら（１９９２）Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ．３５（１）：１−１０）；スタンフォード健康状態質問票（Ｓｔａｎｆｏｒｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  Ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ）（ＨＡＱ）、ＨＡＱＩＩまたは改訂ＨＡＱ（例えば、Ｐｉｎｃｕｓら（１９８３）Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ．２６（１１）：１３４６−５３を参照されたい）。
【０６９６】
治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質を送達する用量を決定するための指針は、通常は齧歯類においてアジュバント中の自己または異種ＩＩ型コラーゲンによる免疫化により誘導されるコラーゲン誘発性関節炎（ＣＩＡ）のような関節リウマチの動物モデルから入手し得る（Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ  Ｍｅｄ．９８：２０７−１６（２００４））。
【０６９７】
痛風
痛風とは、体組織中に沈着した尿酸の結晶により生じる容態のことである。痛風は、体内での尿酸の過負荷および関節炎症（関節炎）発作の再発を特徴とする。慢性痛風により、尿酸の硬い塊が関節の内部および周辺に沈着したり、腎機能低下や腎臓結石が生じたりすることがある。痛風は、体の尿酸処理能力の遺伝的な異常に関係する場合が多い。尿酸は多くの食べ物の一部であるプリンの分解産物である。尿酸処理に異常があると、有痛性関節炎発作（痛風発作）、腎臓結石および尿酸結晶による腎臓のろ過細管の閉塞を引き起こし、腎臓不全に陥る可能性がある。患者によっては、関節炎や腎臓障害が起こらずに、血中尿酸レベルの上昇（高尿酸血症）だけが生じる場合もある。
【０６９８】
痛風の症状としては、例えば、罹患した足またはその他の身体部分の突然の激しい疼痛、腫脹、発赤、熱感および硬直ならびに微熱が挙げられる。
【０６９９】
痛風の治療法としては、例えば、非ステロイド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）、コルヒチンおよび経口糖質コルチコイド、関節注射により投与する関節内糖質コルチコイド、キサンチンオキシダーゼ阻害剤（例えば、アロプリノール、フェブキソスタット）、尿酸排泄促進剤（例えば、プロベネシド、ＥＤＴＡ）、尿酸オキシダーゼ（例えば、ペグロチカーゼ）、炭酸水素ナトリウムならびに低プリン食が挙げられる。
【０７００】
本開示は、痛風を呈するかまたは呈することが疑われる対象に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより痛風を治療する（例えば、１つまたは複数の症状または悪化を改善する、安定させるまたは除去する）方法を提供する。さらに、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を、第２治療法、例えば、ＮＳＡＩＤ、コルヒチン、経口糖質コルチコイド、関節注射により投与する関節内糖質コルチコイド、キサンチンオキシダーゼ阻害剤（例えば、アロプリノール、フェブキソスタット）、尿酸排泄促進剤（例えば、プロベネシド、ＥＤＴＡ）、尿酸オキシダーゼ（例えば、ペグロチカーゼ）、炭酸水素ナトリウムおよび／または低プリン食と併用投与することにより痛風を治療する方法を提供する。また本開示は、痛風を発症するリスクのある対象（例えば、痛風の家族歴または遺伝子素因を呈する対象）に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、予防有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより痛風またはその症状を予防する方法も提供する。
【０７０１】
治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質を送達する用量を決定するための指針は、痛風の動物モデルから入手してもよく、例えば、ＲｅｇｉｎａｔｏおよびＯｌｓｅｎ，Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．１９（２）：１３４−４５（２００７）ならびにそこで引用されている参考文献を参照されたい。
【０７０２】
腸疾患（ＩＢＤ）
炎症性腸疾患（ＩＢＤ）とは、大腸および場合によっては小腸の一群の炎症状態のことである。ＩＢＤの主要な形態はクローン病および潰瘍性大腸炎（ＵＣ）である。はるかに少ない例はＩＢＤの他の形態：コラーゲン大腸炎、リンパ球性大腸炎、虚血性大腸炎、空置大腸炎、ベーチェット症候群、感染性大腸炎および不確定大腸炎が占める。クローン病とＵＣの主な違いは炎症性変化の位置と性質である。クローン病は口から肛門まで消化管の任意の部分を冒し得る（飛び石病変）が、大部分の症例は回腸末端部から始まる。これに対し、潰瘍性大腸炎は結腸および直腸に限定される。顕微鏡的には、潰瘍性大腸炎が粘膜（消化管の上皮層）に限定されるのに対し、クローン病は腸壁全体を冒す。最後に、クローン病および潰瘍性大腸炎では、異なる割合で腸以外の症状（例えば、肝臓障害、関節炎、皮膚症状および眼障害等）が現れる。
【０７０３】
ＩＢＤの症状としては、腹痛、嘔吐、下痢、血便、体重減少、体重増加および様々な訴えまたは疾患（関節炎、壊疽性膿皮症、原発性硬化性胆管炎）が挙げられる。診断は、一般に病変部の生検を伴う大腸内視鏡検査により行う。稀に、特異な症状によりクローン病とも潰瘍性大腸炎とも診断が明確に下されない場合がある。このような場合、不確定大腸炎と診断され得る。
【０７０４】
ＩＢＤの治療では、重症度のレベルによって、症状をコントロールするために免疫抑制を必要とする場合がある。アザチオプリン、メトトレキサートまたは６−メルカプトプリンのような免疫抑制剤を使用し得る。より一般的には、ＩＢＤの治療にメサラミンの一種を必要とする。多くの場合、疾患再燃をコントロールするためにステロイド剤を使用するが、ステロイド剤はかつて維持薬として許容されていた。インフリキシマブのような生物学的製剤を用いて、クローン病または潰瘍性大腸炎の患者の治療が行われてきた。重症例では、外科手術、例えば、腸切除術、狭窄形成術、または一時的もしくは恒久的な結腸フィステル形成術もしくは回腸フィステル形成術等が必要な場合もある。ＩＢＤの別の医学的治療法が様々な形態で存在するが、こうした方法は、長期間のステロイド曝露または外科的切除を避けるために、基礎となる病態のコントロールに焦点を当てる。通常、プレドニゾンのような抗炎症作用のある薬物を投与することにより治療を開始する。炎症が良好にコントロールされれば、患者は通常、疾患を寛解状態に維持するためにＡｓａｃｏｌ（メサラミン剤の１つ）のような軽い薬物に切り替えられる。良好にコントロールされなければ、上記免疫抑制剤とメサラミン（同様に抗炎症作用を有し得る）の組合せを患者に応じて投与したり、投与しなかったりする。
【０７０５】
本開示は、ＩＢＤを呈するかまたは呈することが疑われる対象に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することによりＩＢＤを治療する（例えば、１つまたは複数の症状を改善する、安定させるまたは除去する）方法を提供する。さらに、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を、第２治療法、例えば、免疫抑制（例えば、アザチオプリン、メトトレキサート、６−メルカプトプリン）、メサラミン、ステロイドおよび／またはインフリキシマブと併用投与することによりＩＢＤを治療する方法を提供する。また本開示は、ＩＢＤを発症するリスクのある対象（例えば、ＩＢＤの家族歴または遺伝子素因を呈する対象）に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、予防有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することによりＩＢＤまたはその症状を予防する方法も提供する。
【０７０６】
治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質を送達する用量を決定するための指針は、ＩＢＤの動物モデルから入手してもよく、例えば、米国特許第６，１１４，３８２号、国際公開第２００４／０７１１８６号およびそこで引用されている参考文献に記載されているものを参照されたい。
【０７０７】
口腔粘膜炎
口腔粘膜炎は、通常は癌の化学療法および放射線療法の副作用として生じる口腔内粘膜の疼痛性炎症および潰瘍である。
【０７０８】
口腔粘膜炎の症状としては、例えば、潰瘍、辺縁部の紅斑症、発赤を伴う灼熱感、発話、摂食または開口時の困難、および味覚異常（味覚の変化）が挙げられる。
【０７０９】
口腔粘膜炎の治療法としては、口腔衛生（塩類口腔洗浄剤、ＧＥＬＣＬＡＩＲ（登録商標）、ＣＡＰＨＯＳＯＬ（登録商標）、ＭＵＧＡＲＤ（登録商標））、パリフェルミン（ヒトケラチノサイト増殖因子の一種）、サイトカインおよびその他の炎症調節剤（例えば、ＩＬ−１、ＩＬ−１１、ＴＧＦ−ベータ３）、アミノ酸補給（例えば、グルタミン）、ビタミン、コロニー刺激因子、凍結療法およびレーザー療法が挙げられる。
【０７１０】
本開示は、口腔粘膜炎を呈するかまたは呈することが疑われる対象に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより口腔粘膜炎を治療する（例えば、１つまたは複数の症状を改善、低減もしくは除去する、または対象の粘膜炎尺度のスコアを安定させる）方法を提供する。さらに、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を、第２治療法、例えば、口腔衛生（塩類口腔洗浄剤、ＧＥＬＣＬＡＩＲ（登録商標）、ＣＡＰＨＯＳＯＬ（登録商標）、ＭＵＧＡＲＤ（登録商標））、パリフェルミン（ヒトケラチノサイト増殖因子の一種）、サイトカインおよび／または炎症調節剤（例えば、ＩＬ−１、ＩＬ−１１、ＴＧＦ−ベータ３）、アミノ酸補給（例えば、グルタミン）、ビタミン、コロニー刺激因子、凍結療法および／またはレーザー療法と併用投与することにより口腔粘膜炎を治療する方法を提供する。また本開示は、口腔粘膜炎を発症するリスクのある対象（例えば、化学療法もしくは放射線療法を受けたことがあるか、または現在受けている対象）に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、予防有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより口腔粘膜炎またはその症状を予防する方法も提供する。
【０７１１】
口腔粘膜炎の評価に有用な尺度としては、世界保健機関（ＷＨＯ）経口毒性スコア（Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｆｏｒ  ｒｅｐｏｒｔｉｎｇ  ｒｅｓｕｌｔｓ  ｏｆ  ｃａｎｃｅｒ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．Ｇｅｎｅｖａ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ：Ｗｏｒｌｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ；１９７９：１５−２２）、口腔粘膜炎の米国国立癌研究所共通有害事象基準（ＮＣＩ−ＣＴＣ）（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｃｏｍｍｏｎ  Ｔｏｘｉｃｉｔｙ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ．Ｖｅｒｓｉｏｎ  ２．０，Ｊｕｎｅ  １，１９９９，Ｓｏｎｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｎｃｅｒ．８５：２１０３−２１１３（１９９９））および口腔粘膜炎評価尺度（Ｏｒａｌ  Ｍｕｃｏｓｉｔｉｓ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  Ｓｃａｌｅ）（ＯＭＡＳ）が挙げられる。
【０７１２】
治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質を送達する用量を決定するための指針は、造血幹細胞移植の前処理レジメンにより誘導される口腔粘膜炎の動物モデル（Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｚｈｏｎｇｈｕａ  Ｋｏｕ  Ｑｉａｎｇ  Ｙｉ  Ｘｕｅ  Ｚａ  Ｚｈｉ．４２（１１）：６７２−６（２００７））のような口腔粘膜炎の動物モデルから入手し得る。
【０７１３】
神経障害性疼痛
神経障害性疼痛は、通常は組織損傷を伴う複雑な慢性の疼痛状態である。神経障害性疼痛では、神経線維自体が損傷、機能障害または傷害を有し得る。これらの損傷した神経線維は他の疼痛中枢へ誤ったシグナルを送る。神経線維傷害による影響としては、傷害部位および傷害周辺部の両方における神経機能の変化が挙げられる。
【０７１４】
神経障害性疼痛の症状としては、例えば、電撃痛、灼熱痛、刺痛および痺れが挙げられる。
【０７１５】
神経障害性疼痛の治療法としては、例えば、薬物療法（例えば、非ステロイド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）（例えば、ＡＬＥＶＥ（登録商標）、ＭＯＴＲＩＮ（登録商標）またはモルヒネ）、抗痙攣剤および抗うつ薬）および侵襲製または埋込装置（例えば、電気刺激）が挙げられる。
【０７１６】
本開示は、神経障害性疼痛を呈するかまたは呈することが疑われる対象に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより神経障害性疼痛を治療する（例えば、１つまたは複数の症状を改善、低減もしくは除去するかまたは対象の疼痛スコアを安定させる）方法を提供する。さらに、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を、第２治療法、例えば、非外科的治療（（例えば、非ステロイド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）（例えば、ＡＬＥＶＥ（登録商標）、ＭＯＴＲＩＮ（登録商標）またはモルヒネ）、抗痙攣薬剤および／または抗うつ薬）および／または侵襲性または埋込装置（例えば、電気刺激）と併用投与することにより神経障害性疼痛を治療する方法を提供する。また本開示は、神経障害性疼痛を発症するリスクのある対象（例えば、組織傷害を経験したことのある対象）に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、予防有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより神経障害性疼痛またはその症状を予防する方法も提供する。
【０７１７】
神経障害性疼痛の評価に有用な尺度としては、例えば、Ｗｏｎｇ−Ｂａｋｅｒ顔疼痛評価尺度（Ｗｏｎｇ−Ｂａｋｅｒ  ＦＡＣＥＳ  Ｐａｉｎ  Ｒａｔｉｎｇ  Ｓｃａｌｅ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ）、視覚的アナログ尺度（ＶＡＳ）（Ｈｕｓｋｉｓｓｏｎ，Ｊ．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．９（５）：７６８−９（１９８２））、ＭｃＧｉｌｌ疼痛質問票（ＭＰＱ）（Ｍｅｌｚａｃｋ，Ｐａｉｎ  １（３）：２７７−９９（１９７５））、記述子差異尺度（ＤＤＳ）（ＧｒａｃｅｌｙおよびＫｗｉｌｏｓｚ，Ｐａｉｎ  ３５（３）：２７９−８８（１９８８））、顔疼痛尺度−改訂版（ＦＰＳ−Ｒ）（Ｈｉｃｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐａｉｎ  ９３（２）：１７３−８３（２００１））、数的１１点ボックス（ＢＳ−１１）（Ｊｅｎｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｌｉｎ  Ｊ  Ｐａｉｎ  ５（２）：１５３−９（１９８９））、数的評価尺度（ＮＲＳ−１１）（Ｈａｒｔｒｉｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐａｉｎ  Ｐｒａｃｔ  ３（４）：３１０−６（２００３））、痛覚計疼痛指標（ＤＰＩ）（Ｈａｒｄｙ  ｅｔ  ａｌ．，  （１９５２）．Ｐａｉｎ  Ｓｅｎｓａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ．Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ：Ｔｈｅ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ  Ｃｏ．）および簡易疼痛調査票（ＢＰＩ）（ＣｌｅｅｌａｎｄおよびＲｙａｎ  Ａｎｎ．Ａｃａｄ．Ｍｅｄ．Ｓｉｎｇａｐ．２３（２）：１２９−３８（１９９４））が挙げられる。
【０７１８】
治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質を送達する用量を決定するための指針は、神経障害性疼痛の動物モデルから入手してもよく、例えば、Ｍａｒｔｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ  Ｍｅｄ．８４：２３３−４２（２００３）およびそこで引用されている参考文献を参照されたい。
【０７１９】
炎症性疼痛
炎症性疼痛は、細胞レベルでの組織の統合性に対する発作、例えば、貫通創傷、熱傷、超低温、骨折、関節炎、自己免疫状態、過度の伸展、感染症および血管狭窄等により引き起こされる。炎症では、プロスタグランジンおよびブラジキニンを含めた広範な炎症性分子が侵害受容器の感度の変化を誘発し維持する複雑な神経免疫相互作用の結果として、一次痛覚過敏が生じる。
【０７２０】
炎症性疼痛の治療法としては、例えば、非ステロイド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）および副腎皮質ステロイド剤が挙げられる。
【０７２１】
本開示は、炎症性疼痛を呈するかまたは呈することが疑われる対象に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより炎症性疼痛を治療する（例えば、１つまたは複数の症状を改善、低減または除去する）方法を提供する。さらに、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を、第２治療法、例えば、非ステロイド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）および／または副腎皮質ステロイド剤と併用投与することにより炎症性疼痛を治療する方法を提供する。また本開示は、炎症性疼痛を発症するリスクのある対象（例えば、発作、例えば、貫通創傷、熱傷、超低温、骨折、関節炎、自己免疫状態、過度の伸展または感染症等を経験したことがある対象）に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、予防有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより炎症性疼痛またはその症状を予防する方法も提供する。
【０７２２】
炎症性疼痛の評価に有用な尺度としては、例えば、Ｗｏｎｇ−Ｂａｋｅｒ顔疼痛評価尺度（Ｗｏｎｇ−Ｂａｋｅｒ  ＦＡＣＥＳ  Ｐａｉｎ  Ｒａｔｉｎｇ  Ｓｃａｌｅ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ）、視覚的アナログ尺度（ＶＡＳ）（Ｈｕｓｋｉｓｓｏｎ，Ｊ．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．９（５）：７６８−９（１９８２））、ＭｃＧｉｌｌ疼痛質問票（ＭＰＱ）（Ｍｅｌｚａｃｋ，Ｐａｉｎ  １（３）：２７７−９９（１９７５））、記述子差異尺度（ＤＤＳ）（ＧｒａｃｅｌｙおよびＫｗｉｌｏｓｚ，Ｐａｉｎ  ３５（３）：２７９−８８（１９８８））、顔疼痛尺度−改訂版（ＦＰＳ−Ｒ）（Ｈｉｃｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐａｉｎ  ９３（２）：１７３−８３（２００１））、数的１１点ボックス（Ｊｅｎｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｌｉｎ  Ｊ  Ｐａｉｎ  ５（２）：１５３−９（１９８９））、数的評価尺度（Ｈａｒｔｒｉｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐａｉｎ  Ｐｒａｃｔ  ３（４）：３１０−６（２００３））、痛覚計疼痛指標（Ｈａｒｄｙ  ｅｔ  ａｌ．，  （１９５２）．Ｐａｉｎ  Ｓｅｎｓａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ．Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ：Ｔｈｅ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ  Ｃｏ．）および簡易疼痛調査票（ＢＰＩ）（ＣｌｅｅｌａｎｄおよびＲｙａｎ  Ａｎｎ．Ａｃａｄ．Ｍｅｄ．Ｓｉｎｇａｐ．２３（２）：１２９−３８（１９９４））が挙げられる。
【０７２３】
治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質を送達する用量を決定するための指針は、慢性炎症性疼痛の動物モデル（Ｗｉｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐａｉｎ．１０（６）：５３７−４９（２００６））ならびに疼痛および痛覚過敏の炎症性モデル（ＲｅｎおよびＤｕｂｎｅｒ，ＩＬＡＲ  Ｊ．４０（３）：１１１−１１８（１９９９））のような炎症性疼痛の動物モデルから入手し得る。
【０７２４】
脊柱管狭窄症
脊柱管狭窄症は、脊柱管が狭窄して脊髄と神経を圧迫する医学的状態である。これは通常、加齢に伴って生じる一般的な脊髄変性によるものである。また脊柱管狭窄症は、脊椎椎間板ヘルニア、骨粗鬆症または腫瘍が原因で起こることもある。脊柱管狭窄症は、頸椎、胸椎または腰椎を冒し得る。同じ患者で３か所すべてに脊柱管狭窄症が存在する場合もある。
【０７２５】
脊柱管狭窄症の症状としては、例えば、下肢の疼痛または痙攣、背部および臀部の放散痛、頸部および肩部の疼痛、バランス喪失、ならびに腸または膀胱機能の喪失（馬尾症候群）が挙げられる。
【０７２６】
脊柱管狭窄症の治療法としては、例えば、非外科的治療（例えば、理学療法、非ステロイド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）（例えば、アスピリン、イブプロフェンおよびインドメタシン）、鎮痛剤（例えば、アセトアミノフェン）、コンドロイチン硫酸、グルコサミン、安静または活動制限、バックブレースまたはコルセット、硬膜外ステロイド注射（例えば、副腎皮質ステロイド剤））および外科手術（例えば、除圧椎弓切除術、椎弓切開術および癒合術）が挙げられる。
【０７２７】
本開示は、脊柱管狭窄症を呈するかまたは呈することが疑われる対象に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより脊柱管狭窄症を治療する（例えば、１つまたは複数の症状を改善、低減または除去する）方法を提供する。さらに、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を、第２治療法、例えば、非外科的治療（例えば、理学療法および／または非ステロイド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）（例えば、アスピリン、イブプロフェンまたはインドメタシン）、鎮痛剤（例えば、アセトアミノフェン）、コンドロイチン硫酸、グルコサミン、安静または活動制限、バックブレースまたはコルセット、硬膜外ステロイド注射（例えば、副腎皮質ステロイド剤）および／または外科手術（例えば、除圧椎弓切除術、椎弓切開術および／または癒合術）と併用投与することにより脊柱管狭窄症を治療する方法を提供する。また本開示は、脊柱管狭窄症を発症するリスクのある対象（例えば、脊髄変性を呈する対象）に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、予防有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより脊柱管狭窄症またはその症状を予防する方法も提供する。
【０７２８】
治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質を送達する用量を決定するための指針は、腰部脊柱管狭窄症のモデル（Ｓｅｋｉｇｕｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｐｉｎｅ  ２９，１１０５−１１１１（２００４））のような脊柱管狭窄症の動物モデルから入手し得る。
【０７２９】
動脈および静脈血栓症   動脈血栓症とは、動脈内で血栓が形成されることである。ほとんどの場合、動脈血栓症はアテロームの破裂の後に生じ、このためアテローム血栓症と呼ばれる。
【０７３０】
動脈血栓症は、脳卒中および心筋梗塞を含めた数多くの疾患と関連する。血栓性脳卒中では、血栓（血餅）は通常、アテローム性動脈硬化プラークの周囲に形成される。動脈の閉塞が緩やかなため、症候性血栓性脳卒中の発症は遅くなる。血栓性脳卒中は２つのカテゴリー、すなわち大血管疾患および小血管疾患に分けることができる。前者は、内頸動脈、椎骨動脈およびウィリス輪のような血管に影響を与える。後者は、Ｗｉｌｌｉｓ輪の分岐のような小血管に影響を与え得る。心筋梗塞（ＭＩ）は、多くの場合は血栓による冠動脈の閉塞を原因とする、梗塞（虚血に起因する組織の死）によって引き起こされる。救急医療を直ちに受けなければ、ＭＩはすぐに致命的となり得る。
【０７３１】
静脈血栓とは、静脈内で形成される血餅のことである。静脈内で形成された血餅がちぎれると、右心に運ばれてから肺の中へ運ばれることがある。このようにして血栓の破片が運ばれることが塞栓症であり、塞栓性となる血栓を形成する過程が血栓塞栓症と呼ばれる。肺に留まる塞栓症が肺塞栓症（ＰＥ）である。肺塞栓は非常に重篤な状態であり、速やかに認識し治療しなければ致命的となり得る。
【０７３２】
表在性静脈血栓症は不快感を引き起こすことはあるが、一般的には重篤な結果をもたらすことはなく、下肢の深部静脈または骨盤静脈で形成される深部静脈血栓症（ＤＶＴ）とは異なる。心房または心室中隔欠損症の患者では、塞栓が動脈系に入って静脈起源の全身性塞栓症が生じ得る。かかる事象は奇異性塞栓症と呼ばれる。
【０７３３】
動脈および／または静脈血栓症の予防法としては、薬物療法（例えば、抗凝固剤（例えば、ヘパリン）、アスピリンおよびビタミンＥ）および機械的方法（例えば、機械的下肢ポンプ（空気圧ストッキング））が挙げられる。
【０７３４】
本開示は、動脈および／または静脈血栓症を呈するかまたは呈することが疑われる対象に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより動脈および／または静脈血栓症を治療する（例えば、１つまたは複数の症状を改善、低減または除去する）方法を提供する。さらに、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を、第２治療法、例えば、抗凝固剤（例えば、ヘパリン）、アスピリンおよび／またはビタミンＥ、ならびに／あるいは機械的方法（例えば、機械的下肢ポンプ（空気圧ストッキング）と併用投与することにより動脈および／または静脈血栓症を治療する方法を提供する。また本開示は、動脈および／または静脈血栓症を発症するリスクのある対象（例えば、脳卒中または心筋梗塞を経験したことがある対象）に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、予防有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより動脈および／または静脈血栓症あるいはその症状を予防する方法も提供する。
【０７３５】
治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質を送達する用量を決定するための指針は、動脈もしくは静脈血栓症の動物モデル、例えばｄｏｕｂｌｅ−ｔｕｃｋ動脈血栓症モデル（Ｇｏｍｅｚ−Ｊｏｒｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．Ｖａｓｃ．Ｉｎｔｅｒ．Ｒａｄ．９（４）：６３３−６３８（１９９８）、静脈血流が低流量状態であるラット静脈血栓症モデル（Ｆｒｅｄｒｉｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｌｏｏｄ  Ｃｏａｇｕｌ  Ｆｉｂｒｉｎｏｌｙｓｉｓ．５（２）：２４３−８（１９９４））ならびに静脈血栓症および自然発症肺塞栓症のイヌモデル（Ｆｒｉｓｂｉｅｌ，Ｓｐｉｎａｌ  Ｃｏｒｄ  ４３，６３５−６３９（２００５））等から入手し得る。
【０７３６】
術後イレウス
術後イレウスとは、通常は腹部外科手術後に、腸の一部分が一時的に麻痺することである。術後イレウスは一般に腹部外科手術の２４〜７２時間後に起こる。
【０７３７】
術後イレウスの症状としては、例えば、中等度の広汎性の腹部不快感、便秘症、腹部膨満、悪心もしくは嘔吐、腸運動欠如および／または鼓腸、ならびに過剰なおくびが挙げられる。
【０７３８】
術後イレウスの治療法としては、例えば、手術部分がある部位の聴診により蠕動音が聴取されるまでの絶食（ｎｉｌ  ｐｅｒ  ｏｓ）（ＮＰＯ、すなわち「口から何も摂取しない」）、経鼻胃吸引、非経口摂取および薬物療法（例えば、ラクツロースおよびエリスロマイシン）が挙げられる。
【０７３９】
本開示は、術後イレウスを呈するかまたは呈することが疑われる対象に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより術後イレウスを治療する（例えば、１つまたは複数の症状を改善、低減または除去する）方法を提供する。さらに、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を、第２治療法、例えば、絶食、経鼻胃吸引、非経口摂取および／または薬物療法（例えば、ラクツロースおよび／またはエリスロマイシン）と併用投与することにより術後イレウスを治療する方法を提供する。また本開示は、術後イレウスを発症するリスクのある対象（例えば、腹部外科手術を受けた対象）に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、予防有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより術後イレウスまたはその症状を予防する方法も提供する。
【０７４０】
治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質を送達する用量を決定するための指針は、術後イレウスの動物モデル、例えば、歪みゲージ変換器を用いて覚醒ラットの術後イレウスを研究するためのモデル（Ｈｕｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｓｕｒｇ  Ｒｅｓ．７４（２）：１１２−８（１９９８））等から入手し得る。
【０７４１】
大動脈瘤
大動脈瘤は、通常その位置での大動脈壁の根本的な脆弱性を示す任意の大動脈腫脹（拡張または動脈瘤）を表す一般用語である。大動脈瘤のタイプには、大動脈根動脈瘤、胸部大動脈瘤、腹部大動脈瘤および胸腹部大動脈瘤がある。
【０７４２】
無傷である大動脈瘤のほとんどは症状を引き起こさない。これらが拡張すると、例えば、不安またはストレス感、悪心または嘔吐、冷や汗、速い心拍数、腹痛、背部痛、下肢疼痛または麻痺、結節性紅斑（通常、足首近辺で見られる下肢病変）、および大動脈弓を回る左側の反回喉頭神経が伸展することによる嗄声を含めた、大動脈瘤の症状が生じ得る。動脈瘤が破裂すると、激痛および大量の内出血が生じる場合があり、直ちに治療を行わなければ致命的となる。
【０７４３】
大動脈瘤の治療法としては、例えば、薬物療法、外科的治療および血管内治療が挙げられる。破裂のリスクがあまり高くない小型の動脈瘤は、ベータ遮断剤のような高血圧治療薬またはマトリックスメタロプロテイナーゼ−９阻害のためのドキシサイクリンで治療し得る。外科的治療は通常、大動脈の拡張部分の切開および人工（ＤａｃｒｏｎまたはＧｏｒｅ−ｔｅｘ）パッチチューブの挿入を含む。観血手術による修復に代わる低侵襲性の血管内治療は、経皮法による（通常、大腿動脈から）大動脈の疾患部位への血管内ステントの留置を含む。
【０７４４】
本開示は、大動脈瘤を呈するかまたは呈することが疑われる対象に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより大動脈瘤を治療する（例えば、１つまたは複数の症状を安定させる、低減するまたは除去する）方法を提供する。さらに、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を、第２治療法、例えば、薬物療法（例えば、高血圧治療薬（例えば、ベータ遮断剤）またはドキシサイクリン）、外科手術および／または血管内治療と併用投与することにより大動脈瘤を治療する方法を提供する。また本開示は、大動脈瘤を発症するリスクのある対象（例えば、高血圧を呈する対象）に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、予防有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより大動脈瘤またはその症状を予防する方法も提供する。
【０７４５】
治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質を送達する用量を決定するための指針は、大動脈瘤の動物モデル、例えば、腔内エラスターゼ注入と管腔外塩化カルシウム曝露を組み合わせて用いたラット腹部大動脈瘤モデル（Ｔａｎａｋａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｖａｓｃ  Ｓｕｒｇ．５０（６）：１４２３−３２（２００９））から入手し得る。
【０７４６】
骨関節炎
骨関節炎は変形性関節症としても知られ、１つまたは複数の関節の破壊およびその結果としての軟骨喪失を特徴とする。骨関節炎は、関節内の骨端を保護する軟骨が徐々に劣化して生じる。軟骨の滑らかな表面が粗くなり刺激が生じる。軟骨が完全に摩滅すると骨端が損傷する。通常、手、足、脊椎および大きな体重がかかる関節（臀部および膝等）が骨関節炎に罹患する。
【０７４７】
骨関節炎の症状としては、例えば、疼痛、圧痛、硬直、柔軟性の喪失、きしむような感覚および骨棘が挙げられる。
【０７４８】
骨関節炎の治療法としては、保存的手段（例えば、安静、減量、理学療法および作業療法）および薬物療法（例えば、アセトアミノフェン、関節上の皮膚への鎮痛クリーム剤（例えば、カプサイシン、サリシン、サリチル酸メチルおよびメントール）の塗布、非ステロイド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）（例えば、アスピリン、イブプロフェン、ナブメトンおよびナプロキセン）およびＣｏｘ・２阻害剤が挙げられる。
【０７４９】
本開示は、骨関節炎を呈するかまたは呈することが疑われる対象に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより骨関節炎を治療する（例えば、１つまたは複数の症状を安定させる、低減するもしくは除去する、または対象の骨関節炎尺度を安定させる）方法を提供する。さらに、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を、第２治療法、例えば、保存的手段（例えば、安静、減量、理学療法および作業療法）および／または薬物療法（例えば、アセトアミノフェン、局所鎮痛クリーム剤、ＮＳＡＩＤ（例えば、アスピリン、イブプロフェン、ナブメトンまたはナプロキセン）および／またはＣｏｘ・２阻害剤と併用投与することにより骨関節炎を治療する方法を提供する。また本開示は、骨関節炎を発症するリスクのある対象（例えば、関節損傷を有したことのある対象）に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、予防有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより骨関節炎またはその症状を予防する方法も提供する。
【０７５０】
骨関節炎の評価に有用は尺度としては、例えば、膝損傷および骨関節炎の結果スコア（Ｋｎｅｅ  Ｉｎｊｕｒｙ  ａｎｄ  Ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｏｕｔｃｏｍｅ  Ｓｃｏｒｅ）（ＫＯＯＳ；Ｒｏｏｓら（１９９８）Ｊ．Ｏｒｔｈｏｐ．Ｓｐｏｒｔｓ  Ｐｈｙｓ．Ｔｈｅｒ．２８（２）：８８−９６）、西オンタリオ・マクマスター大学骨関節炎指標（Ｗｅｓｔｅｒｎ  Ｏｎｔａｒｉｏ  ａｎｄ  ＭｃＭａｓｔｅｒ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｉｅｓ  Ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｔｉｓ  Ｉｎｄｅｘ）（ＷＯＭＡＣ；Ｒｏｏｓら（２００３）Ｈｅａｌｔｈ  Ｑｕａｌ．Ｌｉｆｅ  Ｏｕｔｃｏｍｅｓ  １（１）：１７）および３６項目簡易式全般的健康状態尺度（３６−ｉｔｅｍ  Ｓｈｏｒｔ  Ｆｏｒｍ  Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｃａｌｅ）（ＳＦ−３６  ＧＨＳ）、ならびに当該技術分野で公知のその他の評価ツールが挙げられる。
【０７５１】
治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質を送達する用量を決定するための指針は、骨関節炎の動物モデル、例えば、大腿脛骨関節内へのモノヨード酢酸（ＭＩＡ）注射によりヒト骨関節炎で見られるものと同様の関節軟骨の喪失を促進した齧歯類（Ｇｕｚｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．  Ｔｏｘｉｃｏｌ  Ｐａｔｈｏｌ．３１（６）：６１９−２４（２００３））および前十字靭帯（ＡＣＬ）切断により骨関節炎の誘発したイヌ（ＦｉｆｅおよびＢｒａｎｄｔ，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ．８４（５）：１４３２−１４３９（１９８９））から入手し得る。
【０７５２】
血管炎
血管炎は、炎症性の血管破壊を特徴とする異種の疾患からなる群を指す。動脈も静脈もともに罹患し得る。リンパ管炎が血管炎の一種とみなされる場合もある。血管炎は、主に白血球の移動とその結果による損傷に起因する。血管炎は、根本原因、罹患している血管の位置、または血管の種類もしくは大きさによって分類することができる。血管炎は数多くのさらなる疾患および容態、例えば、川崎病、ベーチェット病、結節性多発動脈炎、ウェゲナー肉芽腫症、クリオグロブリン血症、高安動脈炎、チャーグ・ストラウス症候群、巨細胞性動脈炎（側頭動脈炎）、ヘノッホ・シェーンライン紫斑病、リウマチ性疾患（例えば、関節リウマチおよび全身性紅斑性狼瘡性）、癌（例えば、リンパ腫）、感染症（例えば、Ｃ型肝炎）、化学物質および薬物（例えば、アンフェタミン、コカインおよび主成分として炭疽防御抗原を含有する炭疽ワクチン）への曝露に関連する。
【０７５３】
血管炎の症状としては、例えば、発熱、体重減少、触知可能な紫斑、網状皮斑、筋肉痛または筋炎、関節痛または関節炎、多発性単神経炎、頭痛、脳卒中、耳鳴、視力低下、急性視力障害、心筋梗塞、高血圧症、壊疽、鼻出血、出血性咳嗽、肺浸潤、腹痛、血便、穿孔および糸球体腎炎が挙げられる。
【０７５４】
血管炎の治療法としては、例えば、コルチゾン関連薬物療法（例えば、プレドニゾン）および免疫抑制薬（例えば、シクロホスファミド）が挙げられる。
【０７５５】
本開示は、血管炎を呈するかまたは呈することが疑われる対象に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより血管炎を治療する（例えば、１つまたは複数の症状を安定させる、改善するもしくは除去する、または対象の血管炎尺度のスコアを安定させる）方法を提供する。さらに、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を、第２治療法（例えば、コルチゾン関連薬物療法（例えば、プレドニゾン）および／または免疫抑制薬（例えば、シクロホスファミド）と併用投与することにより血管炎を治療する方法を提供する。また本開示は、血管炎を発症するリスクのある対象（例えば、川崎病、ベーチェット病、結節性多発動脈炎、ウェゲナー肉芽腫症、クリオグロブリン血症または高安動脈炎等に罹患したことがある対象）に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、予防有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより血管炎またはその症状を予防する方法も提供する。
【０７５６】
本開示はまた、全身性紅斑性狼瘡性関連の血管炎を呈するかまたは呈することが疑われる対象に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより全身性紅斑性狼瘡性関連の血管炎を治療する（例えば、１つまたは複数の症状を安定させる、低減するもしくは除去する、または患者の血管炎尺度のスコアを安定させる）方法も提供する。さらに、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を、第２治療法、例えば、コルチゾン関連薬物療法（例えば、プレドニゾン）および／または免疫抑制薬（例えば、シクロホスファミド）と併用投与することにより全身性紅斑性狼瘡性関連の血管炎を治療する方法を提供する。
【０７５７】
さらに、血管炎関連の疾患（川崎病、ベーチェット病、結節性多発動脈炎、ウェゲナー肉芽腫症、クリオグロブリン血症、高安動脈炎、チャーグ・ストラウス症候群、巨細胞性動脈炎（側頭動脈炎）、ヘノッホ・シェーンライン紫斑病、リウマチ性疾患（例えば、関節リウマチおよび全身性紅斑性狼瘡性）、癌（例えば、リンパ腫）、感染症（例えば、Ｃ型肝炎）、化学物質および薬物（例えば、アンフェタミン、コカインおよび主成分として炭疽防御抗原を含有する炭疽ワクチンへの曝露））を呈するかまたは呈することが疑われる対象に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより血管炎関連の疾患を治療する（例えば、１つまたは複数の症状を改善、低減または除去する）方法を提供する。また本開示は、血管炎関連の疾患を発症するリスクのある対象に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、予防有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより血管炎関連の疾患またはその症状を予防する方法も提供する。
【０７５８】
骨関節炎の評価に有用な尺度としては、例えば、Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ血管炎活動性スコア（Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ  Ｖａｓｃｕｌｉｔｉｓ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｓｃｏｒｅ）（ＢＶＡＳ）第３版（Ｍｕｋｈｔｙａｒ  ｅｔ  ａｌ．  Ａｎｎ  Ｒｈｅｕｍ  Ｄｉｓ．６８（１２）：１８２７−３２（２００９））および当該技術分野で公知のその他の評価ツールが挙げられる。
【０７５９】
治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質を送達する用量を決定するための指針は、血管炎の動物モデルから入手してもよく、例えば、Ｋａｔｚ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｌｉｎ  Ｒｅｖ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．３５（１−２）：１１−８（２００８）およびそこで引用されている参考文献に記載されているものを参照されたい。
【０７６０】
頭部外傷
頭部外傷は、脳への傷害を含んでも含まなくてもよい頭部への外傷を指す。頭部外傷のタイプには、脳振盪、硬膜外血腫、硬膜下血腫、脳挫傷およびびまん性軸索損傷がある。
【０７６１】
頭部外傷の症状としては、例えば、昏睡、錯乱、傾眠、人格変化、発作、悪心および嘔吐、頭痛、および患者に意識はあるが後に悪化する意識清明期、脳脊髄液漏出、目に見える頭部または顔面の変形または陥没（眼を動かすことができないまたは眼が片側に逸れていれば、折れた顔面骨が眼筋を神経支配する神経を圧迫していることを示す場合がある）、頭皮または顔面の創傷または打撲、頭蓋底骨折、乳様突起の皮下出血、鼓室内出血、脳脊髄液鼻漏および耳漏が挙げられる。
【０７６２】
頭部外傷の治療法としては、例えば、頭蓋内圧上昇のコントロール（例えば、鎮静、麻痺剤、脳脊髄液分流）、減圧開頭術、バルビツール酸昏睡、高張食塩水および低体温法が挙げられる。
【０７６３】
本開示は、頭部外傷を呈するかまたは呈することが疑われる対象に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより頭部外傷を治療する（例えば、１つまたは複数の症状を安定させる、低減するもしくは除去する、または対象の頭部外傷尺度のスコアを安定させる）方法を提供する。さらに、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を、第２治療法、例えば、頭蓋内圧上昇のコントロール（例えば、鎮静、麻痺剤および／または脳脊髄液分流）、減圧開頭術、バルビツール酸昏睡、高張食塩水および／または低体温法と併用投与することにより頭部外傷を治療する方法を提供する。また本開示は、頭部外傷を発症するリスクのある対象（例えば、危険な活動またはコンタクトスポーツに参加する対象）に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、予防有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより痛風またはその症状を予防する方法も提供する。
【０７６４】
頭部外傷および頭部外傷の症状の評価に有用な尺度としては、例えば、グラスゴー昏睡尺度（Ｔｅａｓｄａｌｅ  ａｎｄ  Ｊｅｎｎｅｔｔ，Ｌａｎｃｅｔ  １３；２（７８７２）：８１−４（１９７４）），および当該技術分野で公知のその他の評価ツールが挙げられる。
【０７６５】
治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質を送達する用量を決定するための指針は、頭部外傷の動物モデルから入手してもよく、例えば、Ｃｅｒｎａｋ，ＮｅｕｒｏＲｘ．２（３）：４１０−４２２（２００５）に記載されているものおよびそこで引用されている参考文献を参照されたい。
【０７６６】
脳浮腫
脳浮腫とは、脳の細胞内および／または細胞外間隙に水分が過剰に蓄積されることである。脳浮腫のタイプには、例えば、血管原性脳浮腫、細胞傷害性脳浮腫、浸透圧性脳浮腫および間質性脳浮腫がある。
【０７６７】
血管原性脳浮腫は、血液脳関門（ＢＢＢ）を構成する内皮のタイトジャンクションの破壊が原因である。これにより、通常は遮断される血管内のタンパク質および液体が脳実質の細胞外間隙内に侵入することが可能となる。血漿成分が一度ＢＢＢを横断すると、浮腫が広がり、その広がりは極めて急速かつ広範なものとなり得る。白質内に侵入した水分は線維路に沿って細胞外へ移動し、灰白質にも影響を与え得る。このタイプの浮腫は、外傷、腫瘍、局所的炎症、脳虚血後期および高血圧性脳症に対する反応として見られる。ＢＢＢ機能障害に関与する機序の一部には、動脈高血圧または外傷による物理的破壊、腫瘍により促進される血管作動性および内皮破壊性の化合物（例えば、アラキドン酸、興奮性神経伝達物質、エイコサノイド、ブラジキニン、ヒスタミンおよびフリーラジカル）の放出がある。血管原性のいくつかの特殊な下位カテゴリーとして、静水学的脳浮腫、脳癌による脳浮腫、高地脳浮腫が挙げられる。
【０７６８】
細胞傷害性脳浮腫は、細胞代謝が乱れることでグリア細胞膜のナトリウムおよびカリウムポンプが不適切に機能することが原因である。その結果、細胞内にナトリウムおよび水分が保持される。細胞傷害性浮腫は、様々な中毒（ジニトロフェノール、トリエチルスズ、ヘキサクロロフェン、イソニアジド）、ライ症候群、重度の低体温症、早期虚血、脳症、早期脳卒中または低酸素症、心停止、偽性脳腫瘍および脳毒素において見られる。
【０７６９】
浸透圧性脳浮腫は、過剰な水分摂取（または低ナトリウム血症）、抗利尿ホルモン不適合分泌症候群（ＳＩＡＤＨ）、血液透析、または高浸透圧性高血糖状態（ＨＨＳ）（以前は高浸透圧性非ケトン性アシドーシス（ＨＯＮＫ））における血糖の急激な低下により、血漿が希釈され、脳浸透圧が血清浸透圧を上回って異常な圧力が生じたときに起こる。
【０７７０】
間質性脳浮腫は閉塞性水頭症で生じる。この形態の浮腫は、脳脊髄液（ＣＳＦ）脳関門が破裂してＣＳＦが心室上皮を横断することにより、ＣＳＦが脳へ侵入して白質の細胞外間隙内に広がることが原因である。
【０７７１】
脳浮腫（例えば、腫瘍周囲脳浮腫）の症状としては、例えば、頭痛、協調運動障害（運動失調）、脱力、ならびに見当識障害、記憶喪失、幻覚、精神病的行動および昏睡を含めた意識レベルの低下が挙げられる。
【０７７２】
脳浮腫（例えば、腫瘍周囲脳浮腫）の治療法としては、例えば、薬物療法（例えば、デキサメタゾン、マンニトール、利尿剤）および外科的減圧術が挙げられる。
【０７７３】
本開示は、脳浮腫（例えば、腫瘍周囲脳浮腫）を呈するかまたは呈することが疑われる対象に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより脳浮腫（例えば、腫瘍周囲脳浮腫）を治療する（例えば、１つまたは複数の症状を安定させる、低減するまたは除去する）方法を提供する。さらに、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を、第２治療法、例えば、薬物療法（例えば、デキサメタゾン，マンニトールおよび／または利尿剤）および／または外科的減圧術と併用投与することにより脳浮腫（例えば、腫瘍周囲脳浮腫）を治療する方法を提供する。また本開示は、脳浮腫を発症するリスクのある対象（例えば、脳浮腫であると診断された対象）に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、予防有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより脳浮腫またはその症状を予防する方法も提供する。
【０７７４】
治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質を送達する用量を決定するための指針は、脳浮腫の動物モデル、例えば、虚血部位に再循環を引き起こし得るラット脳塞栓症モデル（Ｋｏｉｚｕｍｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊｐｎ  Ｊ  Ｓｔｒｏｋｅ  ８：１−８（１９８６））から入手し得る。
【０７７５】
敗血症
敗血症とは、全身の炎症状態、および既知のまたは疑わしい感染症の存在を特徴とする重篤な医学的状態のことである。この免疫応答は、血液、尿、肺、皮膚またはその他の組織中の微生物によって引き起こされ、急性期タンパク質の広範囲な活性化を生じて補体系および凝固経路に影響を与え、続いて血管系および諸器官の損傷を引き起こし得る。様々なレベルの敗血症としては、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症（確認されている感染過程に応答したＳＩＲＳ）、重度敗血症（器官の機能不全、低灌流または低血圧症を伴う敗血症）および敗血症性ショック（適切な輸液蘇生に対して難治性である動脈性低血圧症または低灌流異常を伴う敗血症）が挙げられる。
【０７７６】
敗血症の症状としては、例えば、感染症に関連した一般的症状、全身に現れる急性炎症、低体温または発熱、頻拍、頻呼吸または過換気による低炭酸症、白血球減少症、白血球増加症、桿状核球血症および器官（例えば、肺脳、肝臓、腎臓および／または心臓）機能不全が挙げられる。
【０７７７】
敗血症の治療法としては、例えば、抗生物質、昇圧薬、インスリン、副腎皮質ステロイド剤、ドロトレコギンアルファ、感染した体液収集物の外科的排膿、補液および器官機能不全の適当な補助（例えば、腎不全における血液透析、肺機能不全における機械的換気、血液製剤の輸注、ならびに循環不全の薬物および輸液療法）が挙げられる。蘇生への全身的アプローチである早期目標指向療法を用いて、重度の敗血症および敗血症性ショックを治療し得る。
【０７７８】
本開示は、敗血症を呈するかまたは呈することが疑われる対象に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより敗血症を治療する（例えば、１つまたは複数の症状を安定させる、低減するもしくは除去する、または対象の敗血症尺度のスコアを安定させる）方法を提供する。さらに、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を、第２治療法、例えば、抗生物質、昇圧薬、インスリン、副腎皮質ステロイド剤、ドロトレコギンアルファ、感染した体液収集物の外科的排膿、補液および器官機能不全の適当な補助（例えば、腎不全における血液透析、肺機能不全における機械的換気、血液製剤の輸注ならびに／あるいは循環不全の薬物および／または輸液療法）ならびに／あるいは早期目標指向療法（ＥＧＤＴ）と併用投与することにより痛風を治療する方法を提供する。また本開示は、敗血症を発症するリスクのある対象（例えば、感染症であると診断された対象）に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、予防有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより敗血症またはその症状を予防する方法も提供する。
【０７７９】
敗血症および敗血症の症状の評価に有用な尺度としては、例えば、Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ敗血症尺度（Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ  Ｓｅｐｓｉｓ  Ｓｃａｌｅ）（Ｍｅｅｋ  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ  Ｂｕｒｎ  Ｃａｒｅ  Ｒｅｈａｂｉｌ．１２（６）：５６４−８（１９９１））および当該技術分野で公知のその他の評価ツールが挙げられる。
【０７８０】
治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質を送達する用量を決定するための指針は、敗血症の動物モデルから入手してもよく、例えば、米国特許第６，９６４，８５６号およびＢｕｒａｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．４（１０）：８５４−６５（２００５）ならびにそこで引用されている参考文献に記載されているものを参照されたい。
【０７８１】
急性中大脳動脈（ＭＣＡ）虚血性事象（脳卒中）
急性中大脳動脈（ＭＣＡ）虚血事象（脳卒中）とは、血栓症（例えば、静脈血栓症）、塞栓症または全身性低灌流により引き起こされる虚血（グルコースおよび酸素の供給不足）に起因する脳への血液供給障害により、脳機能（１つまたは複数）の喪失が急速に進むことである。その結果、脳の罹患部が機能できなくなり、体の片側の１つまたは複数の四肢が動かせなくなったり、会話の理解または発話ができなくなったり、片側の視野が見えなくなったりする。脳卒中は医学的な緊急事態であり、恒久的な神経損傷、合併症および／または死をもたらし得る。
【０７８２】
急性中大脳動脈（ＭＣＡ）虚血事象（脳卒中）の症状としては、例えば、片麻痺、顔面の感覚低下および筋力低下、痺れ感、知覚または振動感覚の低下、嗅覚、味覚、聴覚または視覚の変化（全体的または部分的）、眼瞼下垂および眼筋衰弱、反射減退、バランス障害および眼振、呼吸数および心拍数の変化、頭を片側に回旋できない胸鎖乳突筋の衰弱、舌の衰弱（舌の突出しおよび／または左右への移動ができない）、失語症、失行症、視野欠損、記憶欠損、半側無視、支離滅裂な思考、錯乱、性欲過剰な身振り、病態失認、歩行困難、運動協調性の変化および眩暈、ならびに／あるいは平衡失調が挙げられる。
【０７８３】
急性中大脳動脈（ＭＣＡ）虚血事象（脳卒中）の治療法としては、例えば、血栓溶解（例えば、組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔＰＡ））、血栓除去術、血管形成術およびステント術、低体温療法ならびに薬物療法（例えば、アスピリン、クロピドグレルおよびジピリダモール）が挙げられる。
【０７８４】
本開示は、急性中大脳動脈（ＭＣＡ）虚血事象（脳卒中）を呈するかまたは呈することが疑われる対象に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより急性中大脳動脈（ＭＣＡ）虚血事象（脳卒中）を治療する（例えば、１つまたは複数の症状を安定させる、低減もしくは除去する、または対象の脳卒中尺度のスコアを安定させる）方法を提供する。さらに、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を、第２治療法、例えば、血栓溶解（例えば、組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔＰＡ））、血栓除去術、血管形成術およびステント術、低体温療法ならび／または薬物療法（例えば、アスピリン、クロピドグレルおよびジピリダモール）と併用投与することにより急性中大脳動脈（ＭＣＡ）虚血事象（脳卒中）を治療する方法を提供する。また本開示は、急性中大脳動脈（ＭＣＡ）虚血事象（脳卒中）を発症するリスクのある対象（例えば、全身性低灌流を経験したことのある対象）に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、予防有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより急性中大脳動脈（ＭＣＡ）虚血事象（脳卒中）またはその症状を予防する方法も提供する。
【０７８５】
急性中大脳動脈（ＭＣＡ）虚血事象（脳卒中）および急性中大脳動脈（ＭＣＡ）虚血事象（脳卒中）症状の評価に有用な尺度としては、例えば、オックスフォードコミュニティストロークプロジェクト（Ｏｘｆｏｒｄ  Ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ  Ｓｔｒｏｋｅ  Ｐｒｏｊｅｃｔ）の分類（ＯＣＳＰ、ＢａｍｆｏｒｄまたはＯｘｆｏｒｄ分類としても知られる）（Ｂａｍｆｏｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｌａｎｃｅｔ  ３３７（８７５６）：１５２１−６（１９９１））およびＴＯＡＳＴ（Ｔｒｉａｌ  ｏｆ  Ｏｒｇ  １０１７２  ｉｎ  Ａｃｕｔｅ  Ｓｔｒｏｋｅ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）（Ａｄａｍｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｔｒｏｋｅ  ２４（１）：３５−４１（１９９３））が挙げられる。
【０７８６】
治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質を送達する用量を決定するための指針は、急性中大脳動脈（ＭＣＡ）虚血事象（脳卒中）の動物モデルから入手してもよく、例えば、Ｂｅｅｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ  ８９５：１８−２４（２００１），Ｂｕｃｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｔｒｏｋｅ  ２３（２）：２７３−９（１９９２），Ｃａｒｍｉｃｈａｅｌ，ＮｅｕｒｏＲｘ  ２：３９６−４０９（２００５），Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｔｒｏｋｅ  １７（４）：７３８−４３（１９８６），Ｄｉｔｔｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｔｒｏｋｅ  ３４：２２５２−７（２００３），Ｄｉｔｔｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  １５６：５０（２００６），Ｇｅｒｒｉｅｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  １２２：２０１−１１（２００３），Ｇｅｒｒｉｅｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｔｒｏｋｅ  ３５：２３７２−２３７７（２００４），Ｇｒａｈａｍ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｏｍｐ  Ｍｅｄ  ５４：４８６−４９６（２００４），Ｋｏｉｚｕｍｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊｐｎ  Ｊ  Ｓｔｒｏｋｅ  ８：１−８（２００４），Ｌｏｎｇａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｔｒｏｋｅ  ２０（１）：８４−９１（１９８９），Ｍａｙｚｅｌ−Ｏｒｅｇ，Ｍａｇｎ  Ｒｅｓｏｎ  Ｍｅｄ  ５１：１２３２−８（２００４），Ｓｃｈｍｉｄ−Ｅｌｓａｅｓｓｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｔｒｏｋｅ  ２９（１０）：２１６２−７０（１９８９），Ｔａｍｕｒａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｃｅｒｅｂ  Ｂｌｏｏｄ  Ｆｌｏｗ  Ｍｅｔａｂ  １：５３−６０（１９８１），Ｗａｔｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎｎ  Ｎｅｕｒｏｌ  １７：４９７−５０４（１９８５）およびＺｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｃｅｒｅｂ  Ｂｌｏｏｄ  Ｆｌｏｗ  Ｍｅｔａｂ  １７：１２３−３５（１９９７）ならびにそこで引用されている参考文献に記載されているものを参照されたい。
【０７８７】
再狭窄
再狭窄とは、血管が狭窄して血流量が制限される狭窄症の再発のことである。再狭窄は通常、狭窄を起こしてから、血管形成術のような治療を受けて閉塞を取り除いた後、再び狭窄する動脈またはその他の大血管に関係する。再狭窄は管腔の周径の５０％以上の減少と定義することができ、バルーン血管形成術を受けた患者で発生率が高く（２５〜５０％）、患者の大部分が６ヶ月以内にさらなる血管形成術を必要とした。
【０７８８】
再狭窄の治療法としては、例えば、ステントなしでまたはステントの両端で再狭窄が起こった場合の追加の血管形成術、ステント内で再狭窄が起こった場合の血管形成術の反復および元の部分への別のステントの挿入、薬物溶出ステント、近接照射療法ならびに冠動脈内照射が挙げられる。
【０７８９】
本開示は、再狭窄（例えば、血管形成術後）を呈するかまたは呈することが疑われる対象に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより再狭窄（例えば、血管形成術後）を治療する（例えば、１つまたは複数の症状を安定させる、低減するまたは除去する）方法を提供する。さらに、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を、第２治療法、例えば、ステントなしでまたはステントの両端で再狭窄が起こった場合の追加の血管形成術、ステント内で再狭窄が起こった場合の血管形成術の繰り返しおよび元の部分への別のステントの挿入、薬物溶出ステント、近接照射療法ならびに／あるいは冠動脈内照射と併用投与することにより再狭窄（例えば、血管形成術後）を治療する方法を提供する。また本開示は、再狭窄を発症するリスクのある対象（例えば、狭窄症に罹患したことのある対象）に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、予防有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより再狭窄またはその症状を予防する方法も提供する。
【０７９０】
治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質を送達する用量を決定するための指針は、再狭窄の動物モデルから入手してもよく、例えば、米国特許第５，３０４，１２２号および同第６，０３４，０５３号、およびＫａｎｔｏｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ  Ｒａｄｉａｔ  Ｍｅｄ．１（１）：４８−５４（１９９９）、ならびにそこで引用されている参考文献に記載されているものを参照されたい。
【０７９１】
全身性紅斑性狼瘡性腎炎
全身性紅斑性狼瘡性腎炎は、慢性自己免疫性結合組織疾患である全身性紅斑性狼瘡性（ＳＬＥ）により引き起こされる腎臓の炎症である。ＳＬＥは、血管の炎症性の破壊を特徴とする障害である血管炎を伴い得る。
【０７９２】
全身性紅斑性狼瘡性腎炎の症状としては、例えば、腎疾患の一般的症状、体重増加、高血圧、濃い泡沫尿、および眼、下肢、足首または指の周りの腫脹が挙げられる。
【０７９３】
全身性紅斑性狼瘡性腎炎の治療法としては、例えば、ステロイド療法（例えば、副腎皮質ステロイド剤）、化学療法（例えば、シクロホスファミド、アザチオプリン、ミコフェノール酸モフェチルまたはシクロスポリン）および免疫抑制剤（例えば、ミコフェノール酸モフェチルおよび静脈内シクロホスファミド）が挙げられる。
【０７９４】
本開示は、全身性紅斑性狼瘡性腎炎を呈するかまたは呈することが疑われる対象に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより全身性紅斑性狼瘡性腎炎を治療する（例えば、１つまたは複数の症状を安定させる、低減するもしくは除去する、または対象の狼瘡尺度のスコアを安定させる）方法を提供する。さらに、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を、第２治療法、例えば、ステロイド療法（例えば、副腎皮質ステロイド剤）、化学療法（例えば、シクロホスファミド、アザチオプリン、ミコフェノール酸モフェチルおよび／またはシクロスポリン）および／または免疫抑制剤（例えば、ミコフェノール酸モフェチルおよび／または静脈内シクロホスファミド）と併用投与することにより全身性紅斑性狼瘡性腎炎を治療する方法を提供する。また本開示は、全身性紅斑性狼瘡性腎炎を発症するリスクのある対象（例えば、狼瘡であると診断された対象または狼瘡の家族歴または遺伝子素因を呈する対象）に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、予防有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより全身性紅斑性狼瘡性腎炎またはその症状を予防する方法も提供する。
【０７９５】
全身性紅斑性狼瘡性腎炎、ならびに全身性紅斑性狼瘡性腎炎の症状の評価に有用な尺度としては、例えば、生検に基づく世界保健機関（ＷＨＯ）の分類（Ｗｅｅｎｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．１５（２）：２４１−５０（２００４））および当該技術分野で公知のその他の評価ツールが挙げられる。
【０７９６】
治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質を送達する用量を決定するための指針は、全身性紅斑性狼瘡性腎炎の動物モデルから入手してもよく、例えば、米国特許第７，２６，５２６１号、Ｐｅｎｇ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ  Ｍｅｄ．１０２：２２７−７２（２００４）およびそこで引用されている参考文献に記載されているものを参照されたい。
【０７９７】
熱傷および創傷治癒
熱傷は、熱、電気、化学物質、光、放射線または摩擦により起こり得る傷害の一種である。神経まで達する重度の傷害により、筋肉、骨、血管、真皮および上皮のどの組織も損傷を受けた後に疼痛を伴い得る。罹患部位および重症度に応じて、熱傷の被害者は、ショック、感染症、電解質不均衡および呼吸困難を含めた様々な潜在的に致命的な合併症を経験し得る。熱傷では、表皮および真皮要素への損傷を生じる鍵となる傷害がいくつかあり、これを初期傷害（例えば、熱傷害、炎症性メディエーター傷害、虚血による傷害）と後発傷害に分けることができる。過度の熱により、急激なタンパク質変性および細胞損傷が引き起こされる。例えば、灌流の起こった表面下の熱傷における組織損傷の多くは、熱傷により活性化された炎症の毒性メディエーター（例えば、オキシダントおよび／またはプロテイナーゼ）により引き起こされ得る。好中球による創傷酸素の消費が組織低酸素症をもたらし得る。熱傷による細胞死とともに瞬時に表面血管血栓症が生じ、虚血およびさらなる組織損傷が引き起こされる。初期熱傷後の後発傷害およびメディエーター損傷としては、例えば、神経組織、表面上の細菌、局所的な腐食性物質および表面上の滲出液により引き起こされる炎症；ならびに過剰な創傷タンパク質分解活性およびオキシダント放出による生存細胞と新たな組織増殖への継続的な損傷が挙げられる。
【０７９８】
熱傷の治療法としては、例えば、静脈内輸液、包帯、疼痛管理（例えば、鎮痛剤（例えば、イブプロフェンおよびアセトアミノフェン）、麻薬および局所麻酔薬）、炎症性メディエーター阻害剤および抗生物質が挙げられる。
【０７９９】
本開示は、熱傷を呈するかまたは呈することが疑われる対象に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより熱傷を治療する（例えば、１つまたは複数の症状を安定させる、低減するもしくは除去する、または対象の熱傷尺度のスコアを安定させる）および／または創傷治癒を促進する方法を提供する。さらに、血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を、第２治療法、例えば、静脈内輸液、包帯、疼痛管理（例えば、鎮痛剤（例えば、イブプロフェンおよびアセトアミノフェン）、麻薬および局所麻酔薬）、炎症性メディエーター阻害剤および抗生物質と併用投与することにより熱傷を治療する方法を提供する。また本開示は、熱傷を発症するリスクのある対象（例えば、職業により熱傷のリスクが生じる対象、例えば、消防士や調理師）に血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、予防有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質）を投与することにより熱傷またはその症状を予防する方法も提供する。
【０８００】
熱傷および熱傷の症状の評価に有用な尺度としては、例えば、程度、深度および総体表面積（ＴＢＳＡ）による熱傷尺度（Ｍｅｅｋ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｂｕｒｎ  Ｃａｒｅ  Ｒｅｈａｂｉｌ．１２（６）：５６４−８（１９９１））ならびに当該技術分野で公知のその他の評価ツールが挙げられる。
【０８０１】
治療有効量の血漿カリクレイン結合タンパク質を送達する用量を決定するための指針は、熱傷の動物モデル、例えば、ブタ熱傷モデル（ＳｉｎｇｅｒおよびＭｃＣｌａｉｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ  Ｍｅｄ．７８：１０７−１９（２００３）、ヒツジ熱傷モデル（Ｊｏｎｋａｍ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｈｏｃｋ，２８：７０４−７０９（２００７））、ウサギ熱傷モデル（Ｎｗａｒｉａｋｕ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｕｒｎｓ，２２：３２４−３２７（１９９６））およびマウス熱創傷モデル（Ｓｔｅｖｅｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ  Ｍｅｄ．７８：９５−１０５（２００３））等から入手し得る。
【０８０２】
併用療法
本明細書に記載の血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、抗血漿カリクレイン抗体、例えば、抗血漿カリクレインＦａｂまたはＩｇＧ）は、血漿カリクレイン活性に関連する疾患または容態（例えば、本明細書に記載の疾患または容態）を治療するための１つまたは複数の他の療法と併用投与できる。例えば、血漿カリクレイン結合タンパク質は、外科手術、血漿カリクレイン阻害剤、例えば、低分子阻害剤、別の抗血漿カリクレインＦａｂまたはＩｇＧ（例えば、本明細書に記載の別のＦａｂまたはＩｇＧ）、別の血漿カリクレイン阻害剤、ペプチド阻害剤、または低分子阻害剤と共に治療的または予防的に使用できる。本明細書に記載の血漿カリクレイン結合タンパク質との併用療法に使用できる血漿カリクレイン阻害剤の例としては、例えば、ＷＯ９５／２１６０１号またはＷＯ２００３／１０３４７５号に記載された血漿カリクレイン阻害剤が挙げられる。
【０８０３】
１つまたは複数の血漿カリクレイン阻害剤を、１つまたは複数の本明細書に記載の血漿カリクレイン結合タンパク質と併用して使用できる。例えば、併用により、副作用が軽減するように低分子阻害剤の必要量をより少なくすることができる。
【０８０４】
本明細書に記載の血漿カリクレイン結合タンパク質を、特に限定されないが、例えば、関節リウマチ、痛風、腸疾患、口腔粘膜炎、神経障害性疼痛、炎症性疼痛、脊柱管狭窄−変性脊椎疾患、動脈もしくは静脈血栓症、術後イレウス、大動脈瘤、骨関節炎、血管炎、頭部外傷もしくは腫瘍周囲脳浮腫、敗血症、急性中大脳動脈（ＭＣＡ）虚血事象（脳卒中）、再狭窄（例えば、血管形成術後）、全身性紅斑性狼瘡性腎炎、熱傷または創傷治癒の最新の治療法を含めた、血漿カリクレイン関連の疾患または容態の１つまたは複数の最新の治療法と併用投与し得る。例えば、ｐＫａｌ阻害は疾患治療の新規な機序であり、したがって、他の治療法と相乗的または相加的な効果をもたらし得る。例えば、血漿カリクレインを阻害するまたは血漿カリクレイン活性の下流事象を阻害する本明細書に記載のタンパク質を、血漿カリクレイン関連疾患の別の治療法、例えば、外科手術または、例えば、本明細書に記載の第２薬剤の投与等と組み合わせて使用し得る。例えば、第２薬剤としては、エカランチド、Ｃ１エステラーゼ阻害剤（例えば、ＣＩＮＲＹＺＥ（商標））、アプロチニン（ＴＲＡＳＹＬＯＬ（登録商標））、ブラジキニンＢ２受容体阻害剤（例えば、イカチバント（ＦＩＲＡＺＹＲ（登録商標））を挙げ得る。
【０８０５】
「併用」という用語は、同じ患者を治療するための２つ以上の薬剤または療法の使用を指し、これらの薬剤または療法の使用または作用は時間的に重複する。これらの薬剤または療法は（例えば、患者に投与する単一製剤としてまたは同時投与する２つの別々の製剤として）同時投与することも、任意の順序で連続投与することもできる。連続投与は異なる時点で行われる投与である。１つの薬剤と別の薬剤との投与間隔は、数分間、数時間、数日間、または数週間であり得る。本明細書に記載の血漿カリクレイン結合タンパク質を使用して、例えば、投与される別の薬剤関連の副作用を軽減するために別の療法の投与量を低減することもできる。したがって、併用は、血漿カリクレイン結合タンパク質の不在下で使用するより少なくとも１０、２０、３０、または５０％低い投与量での第２薬の投与を含むことができる。
【０８０６】
また第２薬剤または治療法は、血漿カリクレイン関連の治療のための別の薬剤であってもよい。血漿カリクレイン関連の疾患または容態の別の治療法の非限定的な例としては、例えば、エカランチド、Ｃ１エステラーゼ阻害剤（例えば、ＣＩＮＲＹＺＥ（商標））、アプロチニン（ＴＲＡＳＹＬＯＬ（登録商標））、ブラジキニンＢ２受容体阻害剤（例えば、イカチバント（ＦＩＲＡＺＹＲ（登録商標））または本明細書に記載の第２結合タンパク質が挙げられる。
【０８０７】
併用療法は、他の治療法の副作用を低減する薬剤の投与を含み得る。薬剤は、血漿カリクレイン関連疾患の治療の副作用を低減する薬剤であり得る。例えば、炎症性疾患では、ｐＫａｌ阻害剤はステロイドを節約し得る。炎症の治療ではＴＮＦ−アルファ阻害剤との、また癌および／または血管新生の治療では．ＶＥＧＦブロッカーとの協力作用も生じ得る。
【０８０８】
診断での使用
本明細書に記載の血漿カリクレインと結合するタンパク質は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏ診断に有用である。本明細書に記載の血漿カリクレイン結合タンパク質（例えば、血漿カリクレインと結合し血漿カリクレインを阻害するタンパク質、または血漿カリクレインと結合するが血漿カリクレインを阻害しないタンパク質）を、例えば、血漿カリクレインが活性な疾患または容態（例えば、本明細書に記載の疾患もしくは容態）の治療過程中、または本明細書に記載の疾患もしくは容態の診断において、例えば、ｉｎ  ｖｉｖｏ画像化で使用できる。
【０８０９】
１つの態様では、本開示は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏで（例えば、対象のｉｎ  ｖｉｖｏ画像化で）血漿カリクレインの存在を検出するための診断方法を提供する。本方法は、対象中または対象由来の試料中の血漿カリクレインの局在化を含み得る。試料評価に関して、本方法は、例えば、
（ｉ）試料を血漿カリクレイン結合タンパク質と接触させること；ならびに
（ｉｉ）試料中の血漿カリクレイン結合タンパク質の位置を検出すること、を含み得る。
【０８１０】
血漿カリクレイン結合タンパク質を使用して、試料中の血漿カリクレイン発現の定性的または定量的レベルを決定することもできる。本方法は、基準試料（例えば、対照試料、例えば、陰性対照）を結合タンパク質と接触させ、基準試料の対応する評価を確定することも含み得る。対照試料または対象と比較した試料または対象中の複合体形成の変化（例えば、統計的に有意な変化）は、試料中の血漿カリクレインの存在を示し得る。１つの実施形態では、血漿カリクレイン結合タンパク質は、別のカリクレインタンパク質（組織カリクレインおよび／または血漿プレカリクレイン等）と交差反応しない。例えば、結合タンパク質は血漿カリクレインと結合するよりも別のカリクレインタンパク質またはプレカリクレインと５〜１０倍低く（またはさらに低く）結合する。例えば、結合タンパク質は血漿カリクレインとは１０〜５０ｐＭのＫＤで結合できる一方、組織カリクレインおよび／またはプレカリクレインとは〜１０ｎＭで結合する。
【０８１１】
血漿カリクレイン結合タンパク質を検出可能な物質で直接または間接的に標識して、結合または非結合抗体の検出を容易にし得る。適切な検出可能な物質としては、様々な酵素、配合団、蛍光物質、発光物質および放射性物質が挙げられる。
【０８１２】
血漿カリクレイン結合タンパク質と血漿カリクレインとの間の複合体形成を、血漿カリクレインと結合する結合タンパク質または結合しない結合タンパク質を評価することにより検出し得る。従来の検出アッセイ（例えば、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、放射免疫アッセイ（ＲＩＡ）または組織の免疫組織化学）を使用できる。血漿カリクレイン結合タンパク質をさらに標識するために、検出可能な物質で標識した標準および非標識血漿カリクレイン結合タンパク質を用いた競合免疫アッセイにより試料中の血漿カリクレインの存在をアッセイできる。アッセイの１つの例では、生体試料、標識標準、および血漿カリクレイン結合タンパク質を組み合わせて、非標識結合タンパク質と結合する標識標準の量を決定する。試料中の血漿カリクレインの量は、血漿カリクレイン結合タンパク質と結合する標識標準の量に反比例する。
【０８１３】
フルオロフォア発色団で標識したタンパク質を調製できる。抗体および他のタンパク質が最大約３１０ｎｍの波長の光を吸収するため、３１０ｎｍ超、好ましくは４００ｎｍ超の波長を実質的に吸収する蛍光部分を選択すべきである。様々な適切な蛍光剤および発色団について、Ｓｔｒｙｅｒ，１９６８，  Ｓｃｉｅｎｃｅ  １６２：５２６  ａｎｄ  Ｂｒａｎｄ，  Ｌ．  ｅｔ  ａｌ．，  １９７２，  Ａｎｎｕ．  Ｒｅｖ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  ４１：８４３  ８６８により記載されている。米国特許第３，９４０，４７５号、同第４，２８９，７４７号、および同第４，３７６，１１０号に開示の手順等の従来の手順によって、タンパク質を蛍光発色団で標識できる。いくつかの上記の所望の特性を有する１つの蛍光剤群は、フルオレセインおよびローダミンを含むキサンチン系色素である。別の蛍光化合物群はナフチルアミンである。いったんフルオロフォアまたは発色団で標識されると、タンパク質を使用して、例えば、蛍光顕微鏡法（共焦点または逆重畳顕微鏡法等）を用いて、試料中の血漿カリクレインの存在または位置を検出できる。
【０８１４】
組織学的分析。本明細書に記載のタンパク質を使用して、免疫組織化学を実施できる。例えば、抗体の場合、標識（精製またはエピトープタグ等）を使用して抗体を合成することもできるし、例えば、標識または標識結合基の抱合によって検出可能に標識することもできる。例えば、キレーターを抗体に付着させることができる。次いで、抗体を、組織学的調製物（例えば、顕微鏡スライド上に存在する組織の固定切片）と接触させる。結合のためのインキュベーション後、調製物を洗浄して、非結合抗体を除去する。次いで、調製物を、例えば、顕微鏡法を用いて分析し、抗体が調製物と結合したかどうかを同定する。
【０８１５】
勿論、抗体（または他のポリペプチドまたはペプチド）は結合時に非標識であり得る。結合および洗浄後、検出できるように抗体を標識する。
【０８１６】
タンパク質アレイ。血漿カリクレイン結合タンパク質は、タンパク質アレイ上に固定することもできる。タンパク質アレイは、例えば、医学試料（単離細胞、血液、血清、生検等）をスクリーニングするために診断手段として使用できる。勿論、タンパク質アレイは、例えば、血漿カリクレインまたは他の標的分子と結合する他の結合タンパク質を含むこともできる。
【０８１７】
ポリペプチドアレイの産生方法については、例えば、Ｄｅ  Ｗｉｌｄｔ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０００，  Ｎａｔ．  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  １８：９８９−９９４；  Ｌｕｅｋｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９９，  Ａｎａｌ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  ２７０：１０３−１１１；  Ｇｅ，  ２０００，  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．  ２８，  ｅ３，  Ｉ−ＶＩＩ；  ＭａｃＢｅａｔｈ  ａｎｄ  Ｓｃｈｒｅｉｂｅｒ，  ２０００，  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２８９：１７６０−１７６３；ＷＯ０１／４０８０３号およびＷＯ９９／５１７７３Ａ１号に記載されている。アレイのためのポリペプチドは、例えば、市販のロボット装置（例えば、Ｇｅｎｅｔｉｃ  ＭｉｃｒｏＳｙｓｔｅｍｓまたはＢｉｏＲｏｂｏｔｉｃｓから）を用いて、高速でスポットできる。アレイ基板は、例えば、ニトロセルロース、プラスチック、ガラス（例えば、表面改質ガラス）であり得る。アレイはまた、多孔質マトリックス（例えば、アクリルアミド、アガロース、または別のポリマー）を含むこともできる。
【０８１８】
例えば、アレイは、例えば、上記Ｄｅ  Ｗｉｌｄｔに記載のように抗体のアレイであり得る。タンパク質を産生する細胞を、整列させた形式でフィルター上で増殖させることができる。ポリペプチド産生を誘発し、発現したポリペプチドを、細胞が配置されたフィルターに固定する。タンパク質アレイを標識標的と接触させて、標的の各固定化ポリペプチドへの結合範囲を決定できる。アレイの各アドレスでの結合範囲に関する情報は、プロファイルとして、例えば、コンピュータデータベースに保存できる。タンパク質アレイを複製物中で産生して、（例えば、標的および非標的の）結合プロファイルを比較するために使用することができる。
【０８１９】
ＦＡＣＳ（蛍光活性化細胞選別器）。血漿カリクレイン結合タンパク質は、細胞、例えば、試料（例えば、患者試料）中の細胞を標識するために使用できる。結合タンパク質を、蛍光化合物に付着させる（または付着可能である）。次いで、蛍光活性化細胞選別器を用いて（例えば、Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ  Ｉｍｍｕｎｏｃｙｔｏｍｅｔｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，  Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ  ＣＡから販売されている選別器を用いて；米国特許第５，６２７，０３７号；同第５，０３０，００２号；ならびに同第５，１３７，８０９号も参照されたい）細胞を選別できる。細胞が選別器を通過時、レーザービームが蛍光化合物を励起する一方で、検出器が通過した細胞を計数し、蛍光化合物が細胞に付着しているかどうかを蛍光の検出により決定する。各細胞に結合した標識の量を定量および分析して、試料を特性決定できる。
【０８２０】
選別器は、細胞を偏向させ、結合タンパク質の結合した細胞を結合タンパク質の結合しなかった細胞から分離することもできる。分離した細胞は、培養および／または特性決定できる。
【０８２１】
ｉｎ  ｖｉｖｏ画像化。ｉｎ  ｖｉｖｏで血漿カリクレイン発現組織の存在の検出法も特徴とする。本方法は、
（ｉ）対象（例えば、患者で、例えば、血漿カリクレイン関連の疾患または容態を呈する患者）に、検出可能なマーカーを抱合した抗血漿カリクレイン抗体を投与すること；
（ｉｉ）血漿カリクレイン発現組織または細胞の前記の検出可能なマーカーを検出する手段に対象を曝露すること、を含む。例えば、対象を、例えば、ＮＭＲまたは他の断層撮影方法により画像化する。
【０８２２】
画像診断に有用な標識の例としては、放射標識（１３１Ｉ、１１１Ｉｎ、１２３Ｉ、９９ｍＴｃ、３２Ｐ、１２５Ｉ、３Ｈ、１４Ｃ、および１８８Ｒｈ等）、蛍光標識（フルオレセインおよびローダミン等）、核磁気共鳴活性標識、陽電子放出断層撮影（「ＰＥＴ」）スキャナにより検出可能な陽電子放出同位体、化学発光体（ルシフェリン等）、および酵素マーカー（ペルオキシダーゼまたはホスファターゼ等）が挙げられる。短距離放射体（短距離検出プローブにより検出可能な同位体等）も使用できる。タンパク質は、かかる試薬で標識できる；例えば、Ｗｅｎｓｅｌ  ａｎｄ  Ｍｅａｒｅｓ，  １９８３，  Ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏｉｍａｇｉｎｇ  ａｎｄ  Ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ，  Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  ｆｏｒ  ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ｒｅｌａｔｉｎｇ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｉｎｇ  ｏｆ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｄ．  Ｃｏｌｃｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８６，  Ｍｅｔｈ．  Ｅｎｚｙｍｏｌ．  １２１：  ８０２  ８１６を参照されたい。
【０８２３】
結合タンパク質は、放射性同位体（１４Ｃ、３Ｈ、３５Ｓ、１２５Ｉ、３２Ｐ、１３１Ｉ等）で標識できる。放射性標識した結合タンパク質は、診断的検査（例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイ）に使用できる。同位体標識した結合タンパク質の比活性は、放射性標識の半減期、同位体純度、および標識がどのように抗体に組み込まれたかに応じて異なる。
【０８２４】
放射性標識された結合タンパク質の場合、結合タンパク質を患者に投与し、結合タンパク質が応答する抗原を保有する細胞に局在し、例えば、γ線カメラまたは放出断層撮影を用いた放射性核種スキャニング等の既知の技術を用いて、ｉｎ  ｖｉｖｏで検出または「画像化」する。例えば、Ａ．Ｒ．  Ｂｒａｄｗｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ  ｉｎ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｉｍａｇｉｎｇ”，  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｙ，  Ｒ．Ｗ．  Ｂａｌｄｗｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，  （ｅｄｓ．），  ｐｐ  ６５  ８５  （Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ  １９８５）を参照されたい。あるいは、放射標識が陽電子（例えば、１１Ｃ、１８Ｆ、１５Ｏ、および１３Ｎ）を放出する場合、Ｂｒｏｏｋｈアベン  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙに存在する指定されたＰｅｔ  ＶＩ等の陽電子放出横断断層撮影スキャナを使用できる。
【０８２５】
ＭＲＩ造影剤。核磁気共鳴（ＭＲＩ）は、ＮＭＲを用いて生きている対象の内部特性を視覚化し、予後診断、診断、治療、および外科手術に有用である。ＭＲＩは、明らかな便益がある場合、放射性トレーサー化合物なしで使用できる。一部のＭＲＩ技術について、ＥＰ−Ａ−０  ５０２  ８１４にまとめられている。一般に、異なる環境における水プロトンの緩和時間定数Ｔ１およびＴ２に関する相違が造影に用いられる。しかしながら、これらの相違は、鮮明な高解像度の画像を得るには不十分であり得る。
【０８２６】
これらの緩和時間定数の相違は、造影剤によって強調し得る。かかる造影剤の例としては、いくつかの磁性造影剤、常磁性造影剤（主にＴ１を改変する）および強磁性造影剤または超常磁性造影剤（主にＴ２応答を改変する）が挙げられる。キレート（例えば、ＥＤＴＡ、ＤＴＰＡおよびＮＴＡキレート）を使用して、一部の常磁性物質（例えば、Ｆｅ＋３、Ｍｎ＋２、Ｇｄ＋３）を付着する（そして毒性を減らす）ことができる。他の造影剤は、粒子（例えば、直径１０ｍｍ〜約１０ｎｍ未満）の形態であり得る。粒子は、強磁性、反強磁性、または超常磁性であり得る。粒子は、例えば、磁鉄鉱（Ｆｅ３Ｏ４）、γ−Ｆｅ２Ｏ３、鉄酸塩、および遷移元素の他の磁性無機化合物を含み得る。磁性粒子は、非磁性造影剤を含むか含まない１つまたは複数の磁性結晶を含み得る。非磁性物質は、合成または天然ポリマー（セファロース、デキストラン、デキストリン、デンプン等）等を含み得る。
【０８２７】
血漿カリクレイン結合タンパク質を、ＮＭＲ活性１９Ｆ原子を含む指示基または複数のかかる原子で標識できる。これは、（ｉ）実質的にすべての天然に豊富なフッ素原子が１９Ｆ同位体であり、したがって、実質的にすべてのフッ素含有化合物がＮＭＲ活性である；（ｉｉ）多数の化学的に活性なポリフッ素化化合物（トリフルオロ酢酸無水物等）が比較的安価で市販されている；ならびに（ｉｉｉ）ヘモグロビン代替物として酸素を運搬するために使用されるペルフルオロポリエーテル等、多数のフッ素化化合物がヒトにおける使用において医学的に承認されているからである。かかるインキュベーション時間後、Ｐｙｋｅｔｔ，  １９８２，  Ｓｃｉ．  Ａｍ．  ２４６：７８  ８８に記載の装置等の装置を用いて全身ＭＲＩを実行し、血漿カリクレイン発現組織を局在化して、画像化する。
【０８２８】
以下の実施例は、さらなる例証を提示するが、これらに限定されない。
［実施例］
［実施例１］
【０８２９】
本発明者らは、いくつかの抗体阻害剤および血漿カリクレイン結合剤（ｐＫａｌ）を見出した。これらのうち最も強力なものをさらに特性決定し、見かけの阻害定数（Ｋｉ，ａｐｐ）＜１０ｎＭを有すること、他の被験セリンプロテイナーゼに関して特異的なｐＫａｌ阻害剤であること、およびプレカリクレインと結合しないことが示された。阻害剤および結合剤のＣＤＲアミノ酸配列をそれぞれ表１および２に示す。
【表３】
2014506257.tif 000008
2014506257.tif 000009
2014506257.tif 000010
【０８３０】
2014506257.tif 000011
2014506257.tif 000012
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【表４】
2014506257.tif 000018
2014506257.tif 000019
2014506257.tif 000020
【０８３１】
ｐＫａｌ抗体結合剤の軽鎖（ＬＣ）および重鎖（ＨＣ）可変ドメインのアミノ酸配列を以下に示す。
2014506257.tif 000021
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［実施例２］
【０８３２】
主要な抗体阻害剤
見かけの阻害定数（Ｋｉ，ａｐｐ）、他のセリンプロテイナーゼの阻害の欠如、ブラジキニン生成の阻害、および血漿プレカリクレインへの結合の欠如に関する特異性に基づき、主要な血漿カリクレイン阻害剤としての抗体を選択した（表３）。血漿カリクレインは、約５００ｎＭの濃度の不活性チモーゲン（プレカリクレイン）として血漿中を循環する。プレカリクレインと結合した抗体は活性血漿カリクレインを阻害し難くなり得、効力に要するｉｎ  ｖｉｖｏ用量が大幅に上昇し得る。そのため、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）アッセイを使用して、プレカリクレインと結合しない抗体を同定した（データは示していない）。特異的に、ヒトＩｇＧ（Ｘ８１−Ｂ０１、Ｍ１６２−Ａ０４（Ｒ８４−Ｈ０５）；Ｍ１６０−Ｇ１２（Ｒ８４−Ｄ０２）；およびＭ１４２−Ｈ０８）を抗ヒトＦｃ表面および１００ｎＭの血漿カリクレインまたは１００ｎＭもしくは５００ｎＭのプレカリクレインを用いてＣＭ５チップ上で捕捉した。プレカリクレインをアプロチニン−セファロースで治療して活性血漿カリクレインを除去した。Ｘ８１−Ｂ０１に使用したプレカリクレインは、試験した他の３つの抗体：Ｍ１６２−Ａ０４（Ｒ８４−Ｈ０５）；Ｍ１６０−Ｇ１２（Ｒ８４−Ｄ０２）；およびＭ１４２−Ｈ０８により観察された屈折指標の移行を回避するためにＳＰＲ流れる緩衝液（ＨＥＰＥＳ緩衝生理食塩水）の正確な調製物に変換した緩衝液であった。
【０８３３】
表３に列挙した抗体のうち、Ｍ１４２−Ｈ０８のみがヒト血漿カリクレインをナノモル以下のＫｉ，ａｐｐで阻害した。しかしながら、Ｍ１４２−Ｈ０８がＩｇＧとして産生された場合、それは重鎖のＣＤＲ３内で切断されることが見出された。したがって、本発明者らは、親和性を改善するために２つのアプローチ：１）ＲＯＬＩＣ（軽鎖の急速至適化（Ｒａｐｉｄ  Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｌｉｇｈｔ  Ｃｈａｉｎｓ））と呼ばれる新規形態の軽鎖混合を用いた、Ｍ１６２−Ａ０４およびＭ１６０−Ｇ１２の親和性成熟（例えば、ＷＯ２００９／１０２９２７号および米国特許第２００９−０２１５１１９号を参照されたい）；ならびに２）Ｍ１４２−Ｈ０８の結合および阻害特性を保持しつつ生じるＩｇＧ切断を防止するためのＭ１４２−Ｈ０８の配列至適化、を施行することを決定した。
【表５】
2014506257.tif 000035
［実施例３］
【０８３４】
Ｍ１４２−Ｈ０８の配列至適化
表３に列挙した抗体のうち、Ｍ１４２−Ｈ０８のみがヒトｐＫａｌをナノモル以下のＫｉ，ａｐｐで阻害する。しかしながら、Ｍ１４２−Ｈ０８がＩｇＧとして産生された場合、それは重鎖のＣＤＲ３中で切断されることが見出された。Ｍ１４２−Ｈ０８は、質量分析によりＨＣ−ＣＤＲ３配列（ＧＧＬＬＬＷＦＲＥＬＫＳＮＹＦＤＹ）の「ＷＦＲ」配列のアルギニン後に切断されることが見出された。この切断により、抗体（ＣＨＯおよび２９３Ｔヒト腎細胞の両方）を発現するために使用された細胞由来のプロテイナーゼは、単一の特異的部位で抗体を酵素的に切断することが示唆される。本発明者らは、Ｍ１４２−Ｈ０８の結合および阻害特性を保持しつつ生じるＩｇＧの切断を防止するアミノ酸置換を同定するために、Ｍ１４２−Ｈ０８のＨＣ−ＣＤＲ３配列を変異させた。同様に「切り取られた」抗体を用いた先の実験により、宿主細胞プロテイナーゼにより切り取られずに標的となる酵素の強力な阻害を保持する抗体を同定するためには、単に推定Ｐ１位（プロテイナーゼのサブサイト１、表４を参照されたい）に注目することは不十分であり得ることが示唆された。そのため、本発明者らは、切り取られていないが依然として強力なｐＫａｌ阻害剤であるＭ１４２−Ｈ０８変異体を同定するために、切断部位の周辺領域内の単一点変異の小さなライブラリーを作製した。本発明者らは、このライブラリーを「設計によるＣＤＲ３」ライブラリーと呼ぶ。この小さなライブラリーは、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１、またはＰ１’部位のいずれかに無作為のコドンＮＮＫを含むＰＣＲプライマーを用いて構築した。これにより、各４位が任意の２０種のアミノ酸（２０＋２０＋２０＋２０＝８０メンバ）を含み得る小さなライブラリーが得られる。ＰＣＲを用いて、このライブラリーを、標準的なファージミドベクターであるｐＭｉｄ２１ベクター中のＭ１４２−Ｈ０８Ｆａｂ配列にクローニングした。
【表６】
2014506257.tif 000036
【０８３５】
ＤＮＡシークエンシングにより、本発明者らは、可能な８０個の抗体中６１個を採集した（表５）。これらの抗体を小サイズ（〜２０μｇ）のＦａｂ断片として産生し、Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−アミノメチルクマリンを合成ペプチド基質として用いて、ｉｎ  ｖｉｔｒｏプロテイナーゼ切断アッセイにおけるヒトｐＫａｌに対する阻害について試験した。ヒトｐＫａｌ阻害剤であることが見出されたＦａｂを、完全長ヒトＩｇＧ１抗体への変換のために本発明者らのｐＢＲＨ１ｆベクター（２９３Ｔ細胞内のＩｇＧの一過性発現ベクター）中にサブクローニングした。次いで、５個の抗体が２９３Ｔ細胞内で発現し、タンパク質Ａセファロースクロマトグラフィーにより精製された。抗体をＳＤＳ−ＰＡＧＥにより分析して、どの阻害剤変異体が宿主細胞プロテイナーゼ（１つまたは複数）により切断されていないか決定した（データは示していない）。切断された抗体（５５９Ａ−Ｘ６７−Ｇ０５、５５９Ａ−Ｘ６７−Ｈ０１、５５９Ａ−Ｘ６７−Ｇ０９）は３８〜４９ｋＤａ分子量マーカーで転位された余分なバンドを有した。このバンドは５５９Ａ−Ｘ６７−Ｈ０４および５５９Ａ−Ｘ６７−Ｄ０３抗体中では存在せず、これらの抗体はインタクトであることが示される。
【０８３６】
ＳＤＳ−ＰＡＧＥにより切断されていないことが示されたもののＫｉ，ａｐｐ値を定常状態の酵素動力学により決定した（表５）。興味深いことに、Ｐ２位は、アミノ酸置換によりｐＫａｌのインタクトな抗体阻害剤が得られた唯一の位置であった。Ｐ３位で採集した１４個の異なる変異（表５）のうち、１個の変異（ＷからＬ）のみがＦａｂとしてのｐＫａｌ阻害剤であることが見出されたが、ＩｇＧとして切り取られたことが続いて示された。Ｐ１位の１６個の異なる変異（表５）のいずれもｐＫａｌ阻害剤ではないことが見出された。Ｐ１位の１５個の異なる変異中８個がＦａｂとしてｐＫａｌ阻害剤であることが見出されたが、すべてＩｇＧとして切り取られた。したがって、Ｐ２位の変異のみが発現中に切り取られなかった抗体阻害剤に至った。Ｐ２位で採集した１６個の異なる変異（表５）のうち、８個の変異体はＦａｂとしてのｐＫａｌ阻害剤であることが見出されたが、ＩｇＧとして切り取られたことが続いて示された。Ｐ２位の４個の変異体：Ｘ６７−Ｇ０４（ＦからＡ）、Ｘ６７−Ｃ０３（ＦからＭ）、Ｘ６７−Ｆ０１（ＦからＱ）およびＸ６７−Ｄ０３（ＦからＮ）は、ナノモル以下のＫｉ，ａｐｐ値を有することが見出された。最高効力の抗体はＸ６７−Ｄ０３（Ｋｉ，ａｐｐ＝０．１ｎＭ）である。表６に示した２つの抗体はＩｇＧとして発現時に切断されず、ナノモル以下のＫｉ，ａｐｐでｐＫａｌを阻害することが見出された。
【０８３７】
非生殖系列（Ｘ６３−Ｇ０６）および生殖系列の軽鎖のＤＮＡおよびアミノ酸配列整列、ＲＯＬＩＣ親和性成熟を用いて見出された同じ抗体のコドン至適化（Ｘ８１−Ｂ０１）型を図４および５にそれぞれ示す。非生殖系列（Ｘ６３−Ｇ０６）および生殖系列の重鎖のＤＮＡおよびアミノ酸配列整列、ＲＯＬＩＣ親和性成熟を用いて見出された同じ抗体のコドンの至適化（Ｘ８１−Ｂ０１）型を図６および７にそれぞれ示す。
【表７】
2014506257.tif 000037
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【０８３８】
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【表８】
2014506257.tif 000054
【０８３９】
ＲＯＬＩＣを用いて見出されたｐＫａｌの親和性成熟抗体阻害剤の軽鎖（ＬＣ）および重鎖（ＨＣ）可変ドメインのアミノ酸配列を以下に示す。
2014506257.tif 000055
Ｘ８１−Ｂ０１は上述のとおり、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞で産生される生殖系列化ＩｇＧ型のＸ６３−Ｇ０６Ｆａｂである。
Ｘ１０１−Ａ０１（別名ＤＸ−２９２２）は、ＣＨＯ細胞で産生される生殖系列化ＩｇＧ型のＸ６３−Ｇ０６Ｆａｂである。
［実施例４］
【０８４０】
親和性成熟
切り取られた抗体（Ｍ１４２−Ｈ０８）配列の至適化に加えて、本発明者らは、ファージディスプレイにより同定した２つの抗体（Ｍ１６２−Ａ０４およびＭ１６０−Ｇ１２）上で親和性成熟も実施した。これらの抗体の両方が１桁のナノモル効力でヒトｐＫａｌを阻害し、ｐＫａｌ特異的であると思われ、プレカリクレインと結合しない（表３）。最初に、本発明者らは、ＲＯＬＩＣ（軽鎖の急速至適化（Ｒａｐｉｄ  Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｌｉｇｈｔ  Ｃｈａｉｎｓ））と呼ばれる新規形態の軽鎖混合をＭ１６２−Ａ０４およびＭ１６０−Ｇ１２上で実施した（例えば、ＷＯ２００９／１０２９２７号および米国特許第２００９−０２１５１１９号を参照されたい）。ＲＯＬＩＣにより見出された抗体のスクリーニングにより、本発明者らは、Ｍ１６０−Ｇ１２と同じの重鎖を共有するナノモル以下の効力（Ｘ６３−Ｇ０６）を有する１つの抗体を同定した。次いで、本発明者らは、Ｍ１６２−Ａ０４およびＸ６３−Ｇ０６中のＣＤＲ３配列に基づきＨＶ−ＣＤＲ３スパイキング親和性成熟ライブラリーを構築した（下記）。
【０８４１】
ＲＯＬＩＣによる親和性成熟。本発明者らは、表３のうち切断されなかった２つのリード（Ｍ１６２−Ａ０４およびＭ１６０−Ｇ１２）の親和性成熟にＲＯＬＩＣを使用した。この過程により、ナノモル以下のＫｉ，ａｐｐでｐＫａｌを阻害する１つの抗体を同定した（表７）。Ｘ６３−Ｇ０６はＦａｂ断片としてｐＫａｌを約０．４ｎＭのＫｉ，ａｐｐで阻害する。この抗体を、生殖系列化しかつＣＨＯ細胞発現のために配列を至適化したＩｇＧ（Ｘ８１−Ｂ０１）に変換時、約０．２ｎＭのＫｉ，ａｐｐでｐＫａｌを阻害することが見出された。
［実施例５］
【０８４２】
重鎖ＣＤＲ１／２およびＣＤＲ３の親和性成熟
本発明者らは、２つの異なる親抗体阻害剤リード：Ｍ１６２−Ａ０４およびＸ６３−Ｇ０６に基づく非常に強力な抗体を同定するために、さらに２つの親和性成熟戦略を用いた。一方のアプローチは、追加のＣＤＲ１／２多様性に対して２つの異なる親抗体阻害剤リード（Ｍ１６２−Ａ０４およびＸ６３−Ｇ０６）のＨＣのＣＤＲ１／２を混ぜたライブラリーの生成であった。もう一方のアプローチは、これらのリードに基づく重鎖ＣＤＲ３スパイキングライブラリーの作製であった。
【０８４３】
８２個の抗体がＣＤＲ１／２およびＣＤＲ３領域のいずれかにおける修飾に起因するＭ１６２−Ａ０４の改善に基づき見出された。これを表８に示す。１０ｎＭの抗体（Ｆａｂ断片として）を用いた阻害スクリーニングにより、３３個の抗体がｐＫａｌ活性を９０％超阻害したことが明らかになった。いくつかの抗体は、ヒトｐＫａｌのナノモル以下の阻害剤であることが示された。
【０８４４】
６２個の抗体がＣＤＲ１／２およびＣＤＲ３領域のいずれかにおける修飾に起因するＸ６３−Ｇ０６の改善に基づき見出された。これを表９に示す。１０ｎＭの抗体（Ｆａｂ断片として）を用いた阻害スクリーニングにより、２４個の抗体がｐＫａｌ活性を９０％超阻害したことが明らかになった。いくつかの抗体は、ヒトｐＫａｌのナノモル以下の阻害剤であることが示された。
【表１０】
2014506257.tif 000056
2014506257.tif 000057
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【０８４５】
Ｍ１６２−Ａ０４に基づくＣＤＲ１／２およびＣＤＲ３スパイキング親和性成熟ライブラリーから得られたｐＫａｌ抗体の軽鎖（ＬＣ）および重鎖（ＨＣ）可変ドメインのアミノ酸配列。
2014506257.tif 000059
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【表１１】
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2014506257.tif 000076
2014506257.tif 000077
【０８４６】
Ｘ６３−Ｇ０６に基づくＣＤＲ１／２およびＣＤＲ３スパイキング親和性成熟ライブラリーから得られたｐＫａｌ抗体の軽鎖（ＬＣ）および重鎖（ＨＣ）可変ドメインのアミノ酸配列。
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［実施例６］
【０８４７】
Ｍ１６２−Ａ０４（ＩｇＧ）およびＸ１０１−Ａ０１のｉｎ  ｖｉｖｏ試験
ブラジキニンおよびその他の生物活性キニンは、カラゲナン誘発性の浮腫および炎症性疼痛に関与するとこれまで考えられてきた（Ｓｈａｒｍａ  Ｊ．Ｎ．ら（１９９８）Ｉｎｆｌａｍｍｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ６，９−１７；Ａｓａｎｏ  Ｍ．ら（１９９７）Ｂｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  １２２，１４３６−１４４０；Ｄｅ  Ｃａｍｐｏｓ  Ｒ．Ｏ．ら（１９９６）Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ３１６，２７７−２８６）。血漿カリクレインおよび組織カリクレイン１は哺乳動物の２つの主要なキニノゲナーゼである（Ｓｃｈｍａｉｅｒ  Ａ．Ｈ．（２００８）Ｉｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ  ８，１６１−１６５）。特異的血漿カリクレイン阻害剤であるＭ１６２−Ａ０４（Ｍ１６２−Ａ４）（ＩｇＧ）を試験して、それがカラゲナン誘発性浮腫に有効であるかどうかを判定した。実験計画の概要を表１０に示す。溶媒（ＰＢＳ）、抗体および陽性対照（インドメタシン）の投与経路（ＲＯＡ）は腹膜内（ＩＰ）であり、これらをカラゲナン注射（２％カラゲナン溶液０．１ｍＬ）の３０分前に投与した。図２より、１０ｍｇ／ｋｇ以上の抗体の投与がカラゲナン誘発性浮腫の低減に陽性対照（インドメタシン）と同等に有効であることが明らかである。しかし、抗体はカラゲナン誘発性温度痛覚過敏の低減には有効ではなかった（図３）。浮腫と痛覚過敏における有効性の分離の理由は明らかではないが、異なるキニン代謝産物の生物活性の違いによるものと思われる。Ｌｙｓ−ｄｅｓＡｒｇ９−ブラジキニンは最も強力なＢ１受容体のアゴニストであり、主に疼痛過敏性に関与すると考えられている（Ｌｅｅｂ−Ｌｕｎｄｂｅｒｇ  Ｌ．Ｍら（２００５）Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｒｅｖ  ５７，２７−７７）。このキニン代謝産物は、血漿カリクレインではなく組織カリクレイン１により生成される（Ｓｃｈｍａｉｅｒ  Ａ．Ｈ．（２００８）Ｉｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ  ８，１６１−１６５）。このキニン生成およびその結果生じるブラジキニン受容体活性化の違いにより、このモデルにおける浮腫と痛覚過敏の予想外の非共役性説明され得る。
【０８４８】
表１０Ｂに示される実験計画を用いて、もう１つのｐＫａｌ抗体阻害剤Ｘ１０１−Ａ０１もＣＰＥモデルで試験した。図１４のデータは、Ｘ１０１−Ａ０１が、浮腫を陽性対照（インドメタシン）に匹敵する程度まで用量依存的に阻害したことを示している。
【表１２】
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【表１３】
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［実施例７］
【０８４９】
血漿カリクレインの選択された抗体阻害剤の評価
選択された至適化抗体（Ｘ８１−Ｂ０１およびＸ６７−Ｄ０３）の評価を表１１に示す。いずれの抗体も、いかなる推定脱アミド、異性化、または酸化部位も有さない。
【表１４】
2014506257.tif 000092
［実施例８］
【０８５０】
エピトープマッピング
選択された抗ｐＫａｌ抗体が結合したｐＫａｌ領域をいくつかの方法を用いて調査した。第１に、競合アッセイを用いて、抗体がｐＫａｌ結合について既知の活性部位指向阻害剤と競合するかどうかを決定した。第２に、ｐＫａｌ阻害剤であったか単にｐＫａｌ結合剤であったかに応じて抗体を分類した。第三に、ｐＫａｌの配列および三次元構造に基づく合成ペプチドおよびペプチド構造を用いてエピトープを調査した。これらのペプチド構造を「ＣＬＩＰＳ」（足場上の化学的結合ペプチド（Ｃｈｅｍｉｃａｌｌｙ  Ｌｉｎｋｅｄ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｏｎ  Ｓｃａｆｆｏｌｄｓ））と呼び、Ｐｅｐｓｃａｎという名のサービス会社のための報酬によって試験を実施した。
【０８５１】
第四に、抗体の（ヒト以外の）他種由来のｐＫａｌの阻害能力を試験した（阻害における相違を説明し得るアミノ酸を同定するためにｐＫａｌのアミノ酸配列は決定済である）。
【０８５２】
競合アッセイ
ＢＩＡＣＯＲＥ（商標）ＳＰＲアッセイを用いて、目的の抗体とｐＫａｌの既知の活性部位阻害剤との競合について試験した。ＥＰＩ−ＫＡＬ２は、組織因子経路阻害剤の第１ドメインに基づくｐＫａｌの強力な（Ｋｉ，ａｐｐ＝０．１ｎＭ）活性部位阻害剤かつＫｕｎｉｔｚドメイン阻害剤である（Ｍａｒｋｌａｎｄ  （１９９６）  Ｉｔｅｒａｔｉｖｅ  ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈｉｇｈ−ａｆｆｉｎｉｔｙ  ｐｒｏｔｅａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｕｓｉｎｇ  ｐｈａｇｅ  ｄｉｓｐｌａｙ．  ２．  Ｐｌａｓｍａ  ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ  ａｎｄ  ｔｈｒｏｍｂｉｎ，  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ３５（２４）：８０５８−６７）。Ｋｕｎｉｔｚドメインは、セリンプロテイナーゼの既知の活性部位阻害剤（ｐＫａｌ等）である。
【０８５３】
ＥＰＩ−ＫＡＬ２配列は、
ＥＡＭＨＳＦＣＡＦＫＡＤＤＧＰＣＲＡＡＨＰＲＷＦＦＮＩＦＴＲＱＣＥＥＦＳＹＧＧＣＧＧＮＱＮＲＦＥＳＬＥＥＣＫＫＭＣＴＲＤである
（斜体のアミノ酸は、ＴＦＰＩと異なるアミノ酸である）。
【０８５４】
図８Ａ〜８Ｂに示すように、抗体Ｘ８１−Ｂ０１およびＸ６７−Ｄ０３は、ＥＰＩ−ＫＡＬ２の存在下、ｐＫａｌ結合について競合した。この結果により、これらの抗体は、活性部位近傍と結合するかまたはｐＫａｌ−ＥＰＩ−ＫＡＬ２複合体の高次構造をアロステリック変化させるかのいずれかにより、抗体の結合を防止することが示される。
【０８５５】
抗体結合剤か抗体阻害剤か
表１および２に示されるように、ファージディスプレイにより見出されたすべての固有の抗体を、ｐＫａｌ阻害剤である、または結合剤であるが阻害剤ではないという特性決定を行った。ｐＫａｌの活性を阻害する抗体は、活性部位付近で結合して基質相互作用を妨げる（競合阻害剤）か、活性部位から離れたところで結合して活性部位の構造のアロステリック変化を引き起こす（非競合的阻害剤）かのどちらかである。ｐＫａｌと結合するがそれを阻害しない抗体は、活性部位付近で結合する可能性は低く、非触媒ドメイン（すなわち、アップルドメイン）と結合すると思われる。表１２は、選択された抗体をｐＫａｌの阻害剤または結合剤で分類したものである。また表１２には、記載されている抗体に関して、抗体が阻害剤としてマウスｐＫａｌと交差反応するかどうか、および抗体がプレカリクレインと結合するかどうかを実証するものも示してある。
【表１５】
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2014506257.tif 000094
Ｃ１〜Ｃ７：ＣＬＩＰＳエピトープマッピングにより同定したｐＫａｌにおけるペプチド（図９および１０Ａ〜１０Ｃを参照されたい）。Ｃ１は触媒ドメインの５５〜６７位に相当、Ｃ２は８１〜９４位に相当、Ｃ３は１０１〜１０８位に相当、Ｃ４は１３７〜１５１位に相当、Ｃ５は１６２〜１７８位に相当、Ｃ６は１８６〜１９７位に相当、およびＣ７は２１４〜２１７位に相当する。
【０８５６】
ＣＬＩＰＳを用いたエピトープマッピング
表１２に列挙した１１個の抗ｐＫａｌ抗体と、５０００個の異なる合成ＣＬＩＰＳ（足場上の化学的結合ペプチド（Ｃｈｅｍｉｃａｌｌｙ  Ｌｉｎｋｅｄ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｏｎ  Ｓｃａｆｆｏｌｄｓ））に対する結合について、以下のＣＬＩＰＳ方法項目に記載のようにＰｅｐｓｃａｎにより試験した。この分析により、ｐＫａｌ中ペプチド領域は、各被験抗体の抗体エピトープの一部分である可能性が高いという確認に至った（図９）。
【０８５７】
ＣＬＩＰＳ方法
標的となるタンパク質のアミノ酸配列に基づき、標準的なＦｍｏｃ化学を用いて線形およびＣＬＩＰＳペプチドを合成し、三フッ素酸をスカベンジャーと共に用いて保護を外した。高次構造的エピトープを還元するために、足場上の化学的結合ペプチド（Ｃｈｅｍｉｃａｌｌｙ  Ｌｉｎｋｅｄ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｏｎ  Ｓｃａｆｆｏｌｄｓ）（ＣＬＩＰＳ）技術を用いて、化学的足場の上で拘束ペプチドを合成した（Ｔｉｍｍｅｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．  （２００７）。例えば、単一ループ式ペプチドはジシステインを含むように合成し、α、α’−ジブロモキシレンで処理することによってそのジシステインを環化した。間隔が変化する位置にシステイン残基を導入することによってループのサイズを変化させた。新たに導入したシステイン以外にシステインが存在している場合には、そのシステインをアラニンで置換した。クレジットカード形式のポリプロピレン製ＰＥＰＳＣＡＮカード（４５５ペプチド形式／カード）の上でＣＬＩＰＳ鋳型の０．５ｍＭ溶液（１，３−ビス（ブロモメチル）ベンゼンを含む炭酸水素アンモニウム溶液（２０ｍＭ、ｐＨ７．９）／アセトニトリル（１：１（ｖ／ｖ））等）と反応させることにより、ペプチド中に複数あるシステインの側鎖をＣＬＩＰＳ鋳型と結合させた。カードを溶液で完全に覆いつつ、溶液中で３０〜６０分間穏やかに撹拌した。最後に、カードを過剰なＨ２Ｏで徹底的に洗浄し、１パーセントＳＤＳ／０．１パーセントβ−メルカプトエタノールのＰＢＳ溶液（ｐＨ７．２）を含む中断緩衝液の中で７０℃にて３０分間にわたって超音波処理後、Ｈ２Ｏの中でさらに４５分間にわたって超音波処理した。ＰＥＰＳＣＡＮをベースとしたＥＬＩＳＡによって各ペプチドへの抗体の結合を試験した。共有結合ペプチドを含む４５５ウェルのクレジットカード形式ポリプロピレン製カードを、一次抗体溶液、例えば、ＳＱ（４％ウマ血清、５％卵白アルブミン（ｗ／ｖ）のＰＢＳ／１％Ｔｗｅｅｎ溶液中で、またはＰＢＳ溶液で希釈した、例えば、２０％ＳＱ）と呼ばれるブロッキング溶液で希釈した１マイクログラム／ｍＬからなる一次抗体溶液で一晩インキュベートした。洗浄後、ペプチドを１／１０００希釈のウサギ抗ヒト抗体ペルオキシダーゼまたはヤギ抗ヒトＦＡＢペルオキシダーゼで２５℃にて１時間インキュベートした。洗浄後、ペルオキシダーゼ基質である２，２’−アジノ−ジ−３−エチルベンツチアゾリンスルホン酸（ＡＢＴＳ）および２マイクロリットルの３パーセントＨ２Ｏ２を添加した。１時間後、色の展開を測定した。この色の展開を電荷結合素子（ＣＣＤ）カメラおよび画像処理システムを用いて（Ｓｌｏｏｔｓｔｒａ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９６に最初に記載されたように）定量化した。
【０８５８】
データ計算
生データ：光学濃度（任意ＯＤ単位）
生データはＣＣＤカメラにより得られた光学値である。この値はほぼ０〜３０００の範囲であり、対数尺度は標準的な９６ウェルプレートＥＬＩＳＡリーダーの１〜３に類似する。最初に、ペルオキシダーゼの着色前にＣＣＤカメラによりカードの写真を作製し、次いでペルオキシダーゼ着色後に再度写真を作製する。これら２枚の写真を互いに差し引き、生データと呼ばれるデータを得る。これをＰｅｐｌａｂ（商標登録）データベース中にコピーする。次いで、この値をエクセルにコピーし、このファイルを生データファイルとしてラベリングする。１つの追跡操作が可能である。時折、ウェルには偽陽性値に至る気泡が含まれ、カードを手作業で検査し、気泡により生じた値をいずれも０としてスコア化する。
【０８５９】
通常、アッセイは反復しない（顧客の要求に応じてのみ）。反復試験は通常、非常に類似している。加えて、数千のペプチドデータセットには類似したペプチドが多くの含まれるため、結果は決して１つのペプチドの認識に基づかず、類似したペプチドファミリーに基づく。１個もしくは数個のペプチドが結合しない場合、またはより低い結合を示す場合、反復実験において、通常、異なるエピトープマッピングに起因しない。
【０８６０】
Ｔｉｍｍｅｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．  （２００７）．  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  ｍｉｍｉｃｒｙ  ｏｆ  ａ  ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ  ｅｐｉｔｏｐｅ  ｕｓｉｎｇ  ＣＬＩＰＳＴＭ  ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｒｅｃｏｇｎｉｔ．  ２０：２８３−９９
Ｓｌｏｏｔｓｔｒａ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９６）．  Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ａｓｐｅｃｔｓ  ｏｆ  ａｎｔｉｂｏｄｙ−ａ抗原  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ  ｒｅｖｅａｌｅｄ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｓｍａｌｌ  ｒａｎｄｏｍ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｌｉｂｒａｒｉｅｓ，  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ，１，  ８７−９６。
［実施例９］
【０８６１】
異種由来のｐＫａｌ配列分析
すべての利用可能なｐＫａｌ配列を公開データベースから得て、ＣｌｕｓｔａｌＷを用いて整列し、領域は溶媒露出度に基づいて強調され、活性部位Ｋｕｎｉｔｚ阻害剤およびＣＬＩＰＳ分析により同定したペプチドと接触した（図１０Ａ〜１０Ｃ）。これらの種のそれぞれに由来するクエン酸血漿を得て、市販のプレカリクレイン活性化因子（Ｅｎｚｙｍｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから）を製造業者の説明書にしたがって用いて活性化した。次いで、Ｘ８１−Ｂ０１の存在または不在下において各試料中のカリクレイン活性を測定した。
【０８６２】
Ｘ８１−Ｂ０１は、ブタｐＫａｌ以外のすべての種由来のｐＫａｌを阻害したことが見出された。ＣＬＩＰＳ分析によりＸ８１−Ｂ０１がＣ２（８１〜９４位）、Ｃ３（１０１〜１０８位）、Ｃ５（１６２〜１７８位）およびＣ６（１８６〜１９７位）と結合するｐＫａｌの４つのペプチドが同定されたため、これらのペプチドに相当するブタｐＫａｌ配列における相違を評価して、Ｘ８１−Ｂ０１によるブタｐＫａｌの阻害の欠如を説明する潜在的なアミノ酸変化を同定した。ペプチドＣ２およびＣ３は配列中で近接しており、両方とも異種間の配列が非常に類似している。しかしながら、４７９位が異なる。ブタ、カエル、およびイヌを除いたすべての種の４７９位がセリンである。カエルおよびイヌのｐＫａｌ配列の４７９位は、それぞれアラニンおよびトレオニンであり、これらの両方がセリンの保存的置換とみなされる。対して、ブタｐＫａｌ配列の４７９位はロイシンであり、これはセリンの保存的置換である可能性は非常に低い。ブタｐＫａｌにおけるペプチドＣ５は他種由来の配列に非常に類似している。しかしながら、５６３位については、ヒスチジンが存在しているのはブタｐＫａｌのみである（図１０Ｃの太字）。カエル以外のすべての他種において、この位置はチロシンである。Ｘ８１−Ｂ０１により阻害されるカエルｐＫａｌにおいて、この位置はトレオニンである。ブタｐＫａｌ中のペプチドＣ６も他の配列に非常に類似している。しかしながら、ブタｐＫａｌ配列中のみ、５８５位がグルタミン酸塩である（図１０Ｃの太字）。すべての他種において、この位置はアスパラギン酸塩である。この分析はＸ８１−Ｂ０１と相互作用するｐＫａｌ中の潜在的臨界残基を示し得る。
［実施例１０］
【０８６３】
血漿カリクレイン結合タンパク質の有効性を評価するためのｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏアッセイ
プレカリクレインと結合するか、カリクレインと結合するか：プレカリクレインと結合しないｐＫａｌ抗体阻害剤が、プレカリクレインと結合する抗体よりも優れていことを、実験的に示すことができる。例えば、活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）血漿凝固時間アッセイを用いて、プレカリクレインと結合しないｐＫａｌ抗体阻害剤（例えば、ＤＸ−２９２２）の効力と、プレカリクレインと結合する阻害剤（例えば、Ｍ６−Ｄ０９）とを比較するｉｎ  ｖｉｔｒｏ実験を計画することができる。ＡＰＴＴアッセイでは、ｐＫａｌの活性が関与する内因性凝固経路の接触系成分を特異的に活性化する試薬を添加して、血漿中での凝血を誘発する。ｐＫａｌの阻害またはｐＫａｌの遺伝的欠陥によりａＰＰＴが長くなるということが文献において公知である（例えば、Ｍｏｒｉｓｈｉｔａ，Ｈ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｔｈｒｏｍｂ  Ｒｅｓ，１９９４．７３（３−４）：ｐ．１９３−２０４；Ｗｙｎｎｅ  Ｊｏｎｅｓ，Ｄ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｒ  Ｊ  Ｈａｅｍａｔｏｌ，２００４．１２７（２）：ｐ．２２０−３を参照されたい）。市販のＡＰＴＴ試薬および凝固分析装置を用いて、誘発された凝固が観察される時間に様々な濃度のＭ６−Ｄ０９またはＤＸ−２９２２をクエン酸化ヒト血漿にスパイクすることの効果を測定するｉｎ  ｖｉｔｒｏ実験を行うことができる（表１３）。正常な血漿試料中においてＭ６−Ｄ０９が高濃度のプレカリクレイン（約５００ｎＭ）と結合することから、Ｍ６−Ｄ０９によるＡＰＴＴ延長に対して観察されるＥＣ５０がＤＸ−２９２２のものよりも有意に高いことが予想される。ＡＰＴＴの延長により示されるｐＫａｌ抗体阻害剤の有効性は、アテローム性動脈硬化症、脳卒中、血管炎、動脈瘤および心室補助装置を埋め込まれた患者において観察されるような異常な血餅形成を伴う心血管疾患の治療または予防における抗体の治療的使用の可能性を支持するものである。
【表１６】
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【０８６４】
ラット浮腫モデルにおける有効性：また、プレカリクレインと結合しないｐＫａ抗体阻害剤の増大した効力を証明するｉｎ  ｖｉｖｏ実験を行うこともできる。ラット浮腫のカラゲナン誘発性足浮腫（ＣＰＥ）モデルは一般的な薬理モデルである。１グループのラットにＭ６−Ｄ０９およびＤＸ−２９２２を用量漸増的に腹腔内（ＩＰ）注射により処置した後、カラゲナン（例えば、０．１ｍＬの１０％（ｗ／ｖ）溶液）をラットの足に注射する（表１４）。観察される足の腫れの低減においてＤＸ−２９２２の方がＭ６−Ｄ０９よりも有効であることが予想される。抗体の有効性は、腫脹（例えば、遺伝性血管性浮腫、脳卒中による浮腫、脳浮腫）またはブラジキニン仲介性の炎症および疼痛（例えば、関節リウマチ、炎症性腸疾患）を伴う様々な炎症性疾患における抗体の治療的使用を支持するものである。
【表１７】
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【０８６５】
ｉｎ  ｖｉｖｏ実験を実施し、ＣＰＥラット浮腫モデルにおける腹腔内および皮下注射後の抗炎症性効力および血漿カリクレイン結合タンパク質、ＤＸ−２９３０の有効性を示す。
【０８６６】
ラット両肢にカラゲナン（例えば０．１ｍＬの１％ｗ／ｖ溶液）注射前に、ラットの１群を漸増量のＤＸ−２９３０の腹腔内（ＩＰ）注射によって治療した。足の腫れを、確立された手順を用いた流体置換に準じてプレチスモグラフィーによって測定した。カラゲナン注射３０分前に、この実験における陽性対照インドメタシンを５ｍｇ／Ｋｇ  ＩＰ投与した。ＤＸ−２９３０投与は、１、３、１０、および３０ｍｇ／Ｋｇと変動した。右後肢に０．１ｍＬの１％カラゲナン注射し、投与から４時間後に肢体積は最大２倍増大した。５ｍｇ／Ｋｇインドメタシンを用いた前処理は、この反応を試験期間の〜５０％阻害した。カラゲナン投与から３０分前のＤＸ−２９３０の腹腔内注射によって、向上作用が１ｍｇ／Ｋｇ用量では観察されないが、３０ｍｇ／Ｋｇ用量ではインドメタシンに類似した作用が測定されるようにカラゲナン誘発性反応を用量依存的に阻害する。
【０８６７】
ラット右後肢に０．１ｍＬの１％カラゲナン溶液注射から２４時間前に、ＤＸ−２９３０をＳＣ投与した。足の腫れを、確立された手順を用いた流体置換に準じてプレチスモグラフィーによって測定した。カラゲナン注射３０分前に、この実験における陽性対照インドメタシンを５ｍｇ／Ｋｇ  ＩＰ投与した。ＤＸ−２９３０投与は、１、３、１０、および３０ｍｇ／Ｋｇと変動した。対して、カラゲナン投与から２４時間前のＤＸ−２９３０皮下注射は、カラゲナン反応を用量依存的に阻害しただけではなく、この治療レジメンによってインドメタシンより有意な改善が得られ、カラゲナン誘発性浮腫の発現は遅延化し、試験の時間的経過を通して全用量でカラゲナン反応は有意に阻害された。
【０８６８】
半減期の測定：ラットにおけるＤＸ−２９２２およびＤＸ−２９３０の薬物動態特性を決定し、カニクイザルにおけるＤＸ−２９３０の薬物動態特性を決定した。以下に示された時点に血清を採取した。ＥＬＩＳＡによりＤＸ−２９２２およびＤＸ−２９３０の濃度を決定し、薬物動態変数（クリアランス、半減期、分布容積等）を得るためにそれを時間に対してプロットした。
【０８６９】
ラットにおける単回静注、皮下または腹腔内投与後のＤＸ−２９２２およびＤＸ−２９３０の薬物動態
本試験の目標は、雄Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットへの単回静注（ＩＶ）、皮下（ＳＣ）、または腹腔内（ＩＰ）注射後における血漿カリクレイン抗体阻害剤であるＤＸ−２９２２およびＤＸ−２９３０の薬物動態を評価することであった。
【０８７０】
４２匹の雄Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットを、それぞれ６匹の動物からなる７用量群に割り当てた。０日目、全動物に投与した。１〜３群にそれぞれ１ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、または２０ｍｇ／Ｋｇ  ＤＸ−２９２２単回をＩＶ注射した。４および５群にそれぞれ２０ｍｇ／Ｋｇ  ＤＸ−２９２２単回をＳＣまたはＩＰ注射した。６および７群にそれぞれ２０ｍｇ／Ｋｇ  ＤＸ−２９３０を単回ＩＶまたはＳＣ注射した。０日目、投与から約５分および４時間後に１群当たり３匹の動物（コホート１）から採血した。残りの１群当たり３匹の動物（コホート２）を投与から約１時間後に出血させた。１、２、４、７、１０、１４、１８、および２１日目、各群から全動物を出血させた。適任のＥＬＩＳＡ方法を用いて血清試料を分析した。ＷｉｎＮｏｎｌｉｎプロフェッショナルバージョン５．３（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ  Ｉｎｃ．，  Ｃａｒｙ，  ＮＣ）を用いて薬物動態変数を算出した。すべてのデータを非コンパートメント的に分析した。試験設計を表１５に要約する。
【表１８】
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【０８７１】
薬物動態変数推定値を表１６に要約する。
【表１９】
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【０８７２】
全用量群に投与して５分後〜投与して５０４時間（２１日間）後、ＤＸ−２９２２血清濃度を検出した。ＩＶ投与後の平均ＣｍａｘおよびＡＵＣ最終値は用量に比例し、投与量を漸増するにつれて線形的に増大した。ＩＶクリアランスは、急速かつ独立用量で、平均値１．７２ｍＬ／時間／Ｋｇ〜１．９１ｍＬ／時間／Ｋｇ交差用量群の範囲であった。平均排泄半減期値は投与量を漸増するにつれて低減し、１ｍｇ／ｋｇ  ＩＶ用量群の２６８時間〜２０ｍｇ／ｋｇ用量群の１５６時間の範囲であった。容量分布は血清容量より高く、血管外分布が示唆された。ＳＣおよびＩＰ投与後、平均排泄半減期はそれぞれ１１５時間および２０１時間であった。ＳＣおよびＩＰ経路によって投与した場合の相対的生物学的利用能はそれぞれ約２０％および０．３％であった。
【０８７３】
全用量群に投与して５分後〜投与して５０４時間（２１日間）後、ＤＸ−２９３０血清濃度を検出した。ＩＶ投与後の平均ＣｍａｘおよびＡＵＣ最終値は、それぞれ４１５μｇ／ｍＬおよび３９５５７μｇ／ｍＬ×時間であった。平均クリアランスおよび排泄半減期値はそれぞれ０．４１ｍＬ／時間／ｋｇおよび２２０時間であった。容量分布は血清容量と一致し、血管外分布に限定されることが示唆された。ＳＣ経路によって投与した場合の相対的生物学的利用能は約５２％であった。
【０８７４】
ＤＸ−２９３０の平均血清濃度データを図１７および図１８に図示する。
［実施例１１］
【０８７５】
ｐＫａｌのアミノ酸変異を用いたエピトープマッピング
本明細書の実施例８に記載されているエピトープマッピングの実験に基づき、本発明者らは、ＲＣＳＢ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄａｔａ  Ｂａｎｋ（ワールドワイドウェブ上のｒｃｓｂ．ｏｒｇ；ｐｄｂコード２ＡＮＹで利用できる）で公開されている三次元モデルを調べ、抗体結合と相互作用して酵素阻害を生じ得ると本発明者らが推論した、酵素活性部位付近にある表面の接触可能なループのアミノ酸のセットの集まりを同定した。これらのアミノ酸をアラニンに置換し、各変異体の触媒ドメインをピキア・パストリス（Ｐｉｃｈｉａ  ｐａｓｔｏｒｉｓ）においてＨｉｓタグ融合して発現させ、ＩＭＡＣにより精製した。４つの異なる変異のｐＫａｌ変異体を合成し試験した。
【０８７６】
変異体１：ヒトカリクレイン配列（寄託番号ＮＰ＿００８８３．２）のアミノ酸残基Ｓ４７８、Ｎ４８１、Ｓ５２５およびＫ５２６をアラニンに変異させた。これらのアミノ酸は基質認識に関与することが明らかとなった（Ｓ３サブサイト）。
【０８７７】
変異体２：ヒトカリクレイン配列（寄託番号ＮＰ＿００８８３．２）のアミノ酸残基Ｒ５５１、Ｑ５５３、Ｙ５５５、Ｔ５５８およびＲ５６０をアラニンに変異させた。これらの残基は活性部位基質認識に関与することが明らかとなった（Ｓ１’サブサイト）。
【０８７８】
変異体３：ヒトカリクレイン配列（寄託番号ＮＰ＿００８８３．２）のアミノ酸Ｄ５７２、Ｋ５７５およびＤ５７７をアラニンに変異させた。これらのアミノ酸残基は基質認識に関与する（Ｓ１’サブサイト）。
【０８７９】
変異体４：ヒトカリクレイン配列（寄託番号ＮＰ＿００８８３．２）のアミノ酸Ｎ３９５、Ｓ３９７およびＳ３９８をアラニンに変異させた。これらの残基は血漿カリクレインの活性部位から遠位にある。
【０８８０】
４つの変異体のうちの３つ（変異体１、２および４）がｐＫａｌの野生型触媒ドメインと類似の活性を有する。変異体３におけるアミノ酸置換により、結合アッセイにおいて、試験したどの抗ｐＫａｌ抗体によっても認識されない不活性タンパク質が生じた。
【０８８１】
変異体１、２および４の阻害に関して試験した抗体を本明細書の表１７に示す。グループ１の抗体（すなわち、ヒトおよびマウスｐＫａｌを阻害するが、プレカリクレインとは結合しない抗体）で測定したＫｉ，ａｐｐ値によれば、この抗体のグループは、変異体２で変異させなかったが、変異体１または４で変異させた残基に依存していなかったアミノ酸を含むｐＫａｌ上のエピトープと結合することが明らかである。さらに、血漿カリクレイン結合タンパク質Ｘ８１−Ｂ０１／Ｘ１０１−Ａ０１／ＤＸ−２９２２および親和性成熟誘導体Ｘ１１５−Ｂ０７とカリクレインとの相互作用は、変異体１における置換により悪影響を受ける。抗体がプレカリクレインと結合する能力の違いの例に関しては、例えば、ＤＸ−２９２２（グループ１）のプレカリクレインとの結合をＭ６−Ｄ０９（グループ３）のものと比較した図１１Ａおよび１１Ｂを参照されたい。
【０８８２】
グループ２の抗体（すなわち、ヒトｐＫａｌを阻害するがマウスｐｋａｌは阻害せず、かつプレカリクレインと結合しない抗体）は、アミノ酸の変異にあまり影響されなかったが、このことは、これらの抗体が代わりのアミノ酸と接触することを示している。グループ２の抗体は、セリンプロテイナーゼの活性部位に結合することが知られているＫｕｎｉｔｚドメインと複合体を形成したｐＫａｌ（ＥＰＩ−ＫＡＬ２）と結合することができなかったことから、活性部位の付近で結合すると思われる。さらに、グループ２の抗体の１つ（Ｍ１４５−Ｄ１１）は、Ｂｉａｃｏｒｅアッセイにおいて、トリプシン様セリンプロテイナーゼの低分子共有結合性阻害剤である自殺阻害剤ＡＥＢＳＦ（４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホン酸フルオリド・塩酸塩）により不活性化されたｐＫａｌと結合することができないという点で、グループ１の抗体と類似していた（図１２）。しかし、グループ２に割り当てられた他の抗体（Ｍ２９−Ｄ０９）は、ＡＥＢＳＦで不活性化されたｐＫａｌと結合することができた。このことは、類似した結合特性を共有しているにもかかわらず、この抗体がＭ１４５−Ｄ１１とは違うエピトープと結合し得ることを示している。
【０８８３】
グループ３の抗体はヒトおよびマウスｐＫａｌを阻害したが、プレカリクレインとは結合しなかった。このグループの抗体の１つであるＭ６−Ｄ０９は、ＥＰＩ−ＫＡＬ２またはＡＥＢＳＦのいずれかにより不活性化されたｐＫａｌと結合することができなかった。このことは、このｐＫａｌ阻害剤のグループが活性部位付近の別のアミノ酸と相互作用することを示している。変異体２に対するＭ６−Ｄ０９のＫｉ，ａｐｐが約５倍増加した（すなわち、Ｍ６−Ｄ０９の効力が減少した）。
［実施例１２］
【０８８４】
親和性成熟
軽鎖の至適化を含む本明細書の実施例４および５に記載されている親和性成熟に加え、本発明者らは、２つの異なる親抗ｐＫａｌ抗体の可変重鎖のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３のアミノ酸が異なるライブラリーにより親和性をさらに至適化することを試みた。さらなる至適化のために選択した抗体（Ｘ６３−Ｇ０６およびＭ１６２−Ａ０４）はともに、治療用血漿カリクレイン抗体阻害剤としてさらに開発するのに望ましい特性を示し、その特性には、ａ）ヒトおよび齧歯類血漿カリクレインを完全に阻害する、ならびにｂ）プレカリクレインとは結合しないことが含まれる。いくつかの実施形態では、ヒトｐＫａｌの完全な阻害は、疾患用途において血漿カリクレインの活性をブロックするために重要である。齧歯類ｐＫａｌの阻害は、毒性評価を含めた前臨床開発を容易にする。ｐＫａｌ抗体阻害剤がプレカリクレインと結合しないことは、活性ｐＫａｌ標的に対する抗体治療薬のバイオアベイラビリティーを最大化するために、および有効性を得るのに必要な用量を潜在的に低減するためには非常に望ましい特性である。
【０８８５】
４つの異なるファージディスプレイライブラリーを用いて親和性成熟を行った。各親抗体（例えば、Ｉ６２−Ａ０４）に関して、重鎖のＣＤＲ１とＣＤＲ２の両方に異なるアミノ酸位置を含むライブラリーを構築した。２つの親抗体それぞれに関して、重鎖ＣＤＲ３における位置が異なる追加のライブラリーを構築した。高親和性の抗体を得るために、後続のラウンドごとに活性ｐＫａｌの量を低減すながら上記４つの各ファージディスプレイライブラリーのそれぞれを選択した（パニングを行った）。選択された抗体におけるプレカリクレインとの結合の出現を最小限にするために、最初に出力ライブラリーを固定化されたプレカリクレインに対して枯渇させた。Ｆａｂ断片としてのスクリーニング後に、本発明者らは、表１６に示される親和性成熟抗体（すなわち、「Ｘ１１５」で始まる識別番号の抗体）を見出した。
【０８８６】
見出された４つの抗体（Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９およびＸ１１５−Ｈ０６）は、ＤＸ−２９２２親抗体（Ｆａｂ断片としてＸ６３−Ｇ０６、２９３Ｔ細胞で産生されるＩｇＧとしてＸ８１−Ｂ０１またはＣＨＯ細胞で産生されるＩｇＧとしてＸ１０１−Ａ０１としても知られる）に由来するものであり、強力なｐＫａｌ阻害剤であることがわかった。比較用にＤＸ−２９２２のアミノ酸配列が示してある。３つ親和性成熟抗体（Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｅ０９およびＸ１１５−Ｈ０６）がＨｖ−ＣＤＲ３中に変異を含むのに対し、Ｘ１１５−Ｄ０５は異なるＨｖ−ＣＤＲ１／ＣＤＲ２を有するということが明らかである。他の４つの見出された抗体（Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１およびＸ１１５−Ｇ０４）はＭ１６２−Ａ０４親抗体に由来するものである。８つの親和性成熟抗体は、すべてプレカリクレインと結合しない。
【表２０】
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【表２１】
2014506257.tif 000101
【０８８７】
平衡Ｋｉ，ａｐｐ測定。酵素と阻害剤溶液をプレインキュベートした後、基質との反応を開始させて見かけの阻害定数（Ｋｉ，ａｐｐ値）を測定した。９６ウェルプレート中、１０μＬの１０×酵素溶液と１０μＬの１０×阻害剤溶液を７０μＬの反応緩衝液に加えて、酵素と阻害剤を３０℃で２時間プレインキュベートした。１０μＬの１０×基質濃縮ストックを加えて反応を開始させ、励起波長／発光波長をそれぞれ３６０ｎｍ／４６０ｎｍに設定した蛍光プレートリーダーにより３０℃でモニターした。蛍光の増加により動力学データを得、各条件での初速度を合計阻害剤濃度に対してプロットした。強く結合する阻害剤ではデータを下の等式に当てはめた：
【数３】
2014506257.tif 000102
方程式１
【０８８８】
式中、Ａ＝各阻害剤濃度で観察された初速度；Ａｏ＝阻害剤の不在下で観察された初速度；Ａｉｎｈ＝酵素阻害剤複合体で観察された初速度；Ｉｎｈ＝阻害剤の濃度；Ｅ＝合計酵素濃度（浮動変数として処理）；およびＫｉ，ａｐｐ＝見かけの平衡阻害定数。
【０８８９】
抗体阻害剤のグループ。グループ１の抗体は、ヒトおよびマウスｐＫａｌを阻害するが、プレカリクレインと結合しない。グループ２の抗体はヒトｐＫａｌを阻害するが、マウスｐＫａｌは阻害せず、またプレカリクレインと結合しない。グループ３の抗体は、ヒトおよびマウスｐＫａｌを阻害するが、プレカリクレインと結合する。
【０８９０】
例示的カリクレイン抗体Ｅｐｉ−Ｋａｌ２とのＢｉａｃｏｒｅ競合解析。Ｅｐｉ−Ｋａｌ２は、カリクレインの活性部位と結合することにより作用するカリクレイン抗体阻害剤である（配列は実施例８を参照されたい）。本明細書ではＢｉａｃｏｒｅ競合解析を、試験カリクレイン抗体がＥｐｉ−Ｋａｌ２と同じ部位と結合するかどうかを判定するためのアッセイとして用い、活性部位との結合に関するＥｐｉ−Ｋａｌ２と試験抗体との間の競合（例えば、置換）を測定することにより評価する。
【０８９１】
ＣＭ５センサーチップ上にヤギ抗ヒトＦｃ断片特異的ＩｇＧまたは抗ヒトＦａｂ  ＩｇＧを、アミンカップリングにより約５０００ＲＵの固定化密度で固定化した。ＩｇＧ／ｓＦａｂの５０ｎＭ溶液を５μｌ／分で１〜２分間注入することにより、抗ｐＫａｌ抗体またはｓＦａｂをそれぞれの表面で捕捉した。捕捉されたＩｇＧまたはｓＦａｂ上にヒトｐＫａｌ（１００ｎＭ）またはヒトｐＫａｌ−ｅｐ−ｋａｌ２複合体（１μＭのＥｐｉ−Ｋａｌ２とともに室温で１時間プレインキュベートした１００ｎＭのｈｐＫａｌ）を２０〜５０μｌ／分で５分間注入し、次いで５〜１０分間の分離段階を行った。分離段階終了時に結合反応を記録した。ｐＫａｌ−Ｅｐｉ−Ｋａｌ２複合体と抗ｐＫａｌ抗体との結合がｈｐＫａｌのみの注入と比べて有意に減少（＞７０％）した場合、抗ｐＫａｌ  ＩｇＧまたはｓＦａｂは、ヒトｐＫａｌとの結合についてＥｐｉ−Ｋａｌ２と競合するものとみなした。１０ｍＭグリシン（ｐＨ１．５）の流速１００μｌ／分でのパルスによりセンサーチップ表面を再生した。ランニング緩衝液としてＨＢＳ−Ｐ（１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌおよび０．００５％の界面活性剤Ｐ２０）を用いて、２５℃で測定を行った。Ｅｐｉ−Ｋａｌ２に関するＢｉａｃｏｒｅ競合解析の結果を本明細書の図１１Ａおよび１１Ｂに示す。
【０８９２】
低分子カリクレイン阻害剤ＡＥＢＳＦとのＢｉａｃｏｒｅ競合解析
ＡＥＢＳＦ（すなわち、４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホン酸フルオリド・塩酸塩）はカリクレインの低分子阻害剤である。本明細書では、カリクレイン阻害でＡＥＢＳＦにより利用される部位と同じ部位（または重複する部位）で試験抗体が結合するかどうかをＢｉａｃｏｒｅ競合解析を用いて判定する。
【０８９３】
ＣＭ５センサーチップ上にヤギ抗ヒトＦｃ断片特異的ＩｇＧまたは抗ヒトＦａｂ  ＩｇＧを、アミンカップリングにより約５０００ＲＵの固定化密度で固定化した。ＩｇＧ／ｓＦａｂの５０ｎＭ溶液を５μｌ／分で１〜２分間注入することにより、抗ｐＫａｌ  ＩｇＧまたはｓＦａｂをそれぞれの表面で捕捉した。捕捉されたＩｇＧまたはｓＦａｂ上にヒトｐＫａｌ（１００ｎＭ）またはヒトｐＫａｌ−ＡＥＢＳＦ複合体（１μＭのＡＥＢＳＦとともに室温で１時間プレインキュベートした１００ｎＭのｈｐＫａｌ）を２０〜５０μｌ／分で５分間注入し、次いで５〜１０分間の分離段階を行った。分離段階終了時に結合反応を記録した。ｐＫａｌ−ＡＥＢＳＦ複合体と抗ｐＫａｌ抗体との結合がｈｐＫａｌのみの注入と比べて有意に減少（＞７０％）した場合、抗ｐＫａｌ  ＩｇＧまたはｓＦａｂは、ヒトｐＫａｌとの結合についてＡＥＢＳＦと競合するものとみなした１０ｍＭグリシン（ｐＨ１．５）の流速１００μｌ／分でのパルスによりセンサーチップ表面を再生した。ランニング緩衝液としてＨＢＳ−Ｐ（１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌおよび０．００５％の界面活性剤Ｐ２０）を用いて、２５℃で測定を行った。ＡＥＢＳＦに関するＢｉａｃｏｒｅ競合解析の結果を本明細書の図１２に示す。
【０８９４】
以下は、軽鎖可変領域(LV)、および重鎖可変領域(HV)領域配列である8つの例示的な親和性成熟抗pKal抗体である:
５５９Ａ−Ｍ００２９−Ｄ０９−ＬＶ
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５５９Ａ−Ｍ０１６２−Ａ０４  ＬＶ
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５５９Ａ−Ｍ０００６−Ｄ０９  ＨＶ
ＧＡＡＧＴＴＣＡＡＴＴＧＴＴＡＧＡＧＴＣＴＧＧＴＧＧＣＧＧＴＣＴＴＧＴＴＣＡＧＣＣＴＧＧＴＧＧＴＴＣＴＴＴＡＣＧＴＣＴＴＴＣＴＴＧＣＧＣＴＧＣＴＴＣＣＧＧＡＴＴＣＡＣＴＴＴＣＴＣＴＴＴＴＴＡＣＴＡＴＡＴＧＧＴＴＴＧＧＧＴＴＣＧＣＣＡＡＧＣＴＣＣＴＧＧＴＡＡＡＧＧＴＴＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＴＴＣＴＧＴＴＡＴＣＴＡＴＣＣＴＴＣＴＧＧＴＧＧＣＡＴＴＡＣＴＧＴＴＴＡＴＧＣＴＧＡＣＴＣＣＧＴＴＡＡＡＧＧＴＣＧＣＴＴＣＡＣＴＡＴＣＴＣＴＡＧＡＧＡＣＡＡＣＴＣＴＡＡＧＡＡＴＡＣＴＣＴＣＴＡＣＴＴＧＣＡＧＡＴＧＡＡＣＡＧＣＴＴＡＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＧＧＣＣＧＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＴＧＣＧＡＧＡＧＡＴＡＡＡＴＧＧＧＣＧＧＴＧＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＡＣＴＡＣＴＡＣＴＡＣＧＣＴＡＴＧＧＡＣＧＴＣＴＧＧＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＣＡＣＧＧＴＣＡＣＣＧＴＣＴＣＡＡＧＣ
５５９Ａ−Ｍ００３５−Ｇ０４  ＨＶ
ＧＡＡＧＴＴＣＡＡＴＴＧＴＴＡＧＡＧＴＣＴＧＧＴＧＧＣＧＧＴＣＴＴＧＴＴＣＡＧＣＣＴＧＧＴＧＧＴＴＣＴＴＴＡＣＧＴＣＴＴＴＣＴＴＧＣＧＣＴＧＣＴＴＣＣＧＧＡＴＴＣＡＣＴＴＴＣＴＣＴＴＡＴＴＡＣＣＡＴＡＴＧＴＣＴＴＧＧＧＴＴＣＧＣＣＡＡＧＣＴＣＣＴＧＧＴＡＡＡＧＧＴＴＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＴＴＣＴＧＴＴＡＴＣＴＣＴＣＣＴＴＣＴＧＧＴＧＧＣＴＣＴＡＣＴＡＡＧＴＡＴＧＣＴＧＡＣＴＣＣＧＴＴＡＡＡＧＧＴＣＧＣＴＴＣＡＣＴＡＴＣＴＣＴＡＧＡＧＡＣＡＡＣＴＣＴＡＡＧＡＡＴＡＣＴＣＴＣＴＡＣＴＴＧＣＡＧＡＴＧＡＡＣＡＧＣＴＴＡＡＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＴＧＣＡＧＴＣＴＡＣＴＡＴＴＧＴＧＣＧＡＧＡＧＧＣＧＧＴＴＣＧＡＧＣＧＡＴＴＡＣＧＣＴＴＧＧＧＧＧＡＧＴＴＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＣＴＡＣＴＡＣＴＴＴＧＡＣＴＡＣＴＧＧＧＧＣＣＡＧＧＧＡＡＣＣＣＴＧＧＴＣＡＣＣＧＴＣＴＣＡＡＧＣ
［実施例１３］
【０８９５】
血漿カリクレイン結合タンパク質のＵＲＰ融合タンパク質
表１９に、Ｅ．ｃｏｌｉ中、ＵＲＰ１に融合するＭ１６０−Ｇ１２軽鎖（ＬＣ）およびＵＲＰ２に融合するＭ１６０−Ｇ１２重鎖（ＨＣ）分泌を惹起できる、注釈付きの配列ベクターｐＭ１６０Ｇ１２ＵＲＰ１２を示す。表１９中、番号付きＤＮＡ配列には感嘆符（！）後の各行で示す注釈付きである。ＵＲＰはアミノ酸配列において第２構造を有さない。これらの配列はｐｉ桁に由来する。
【０８９６】
ＵＲＰ１は、ｐｉの第１の４２０桁に由来する。Ｉがｐｉ桁であり、Ｊが次の桁である場合、ＩＭ＝１＋整数（（１０＊Ｉ＋ｊ）／１６）である。ＩＭが１または７であり、次のＡＡがＧｌｙである場合、ＩＭ＝２はＡｌａを示し、３はＳｅｒを示し、４はＴｈｒを示し、５はＧｌｕを示し、および６はＰｒｏを示す。ＵＲＰ２は４２１〜８４０桁を使用する。表２０に、注釈のないｐＭ１６０Ｇ１２ＵＲＰ１２の配列を含む。表２１に、ＬＣ（Ｍ１６０−Ｇ１２）：：ＵＲＰ１のアミノ酸配列を提示する。表２２にＨＣ（Ｍ１６０−Ｇ１２）：：ＵＲＰ２をコードするＤＮＡを示す。表２３に、ＨＣ（Ｍ１６０−Ｇ１２）：：ＵＲＰ２のアミノ酸配列を示す。
【０８９７】
表１９〜２３はすべて、例示的な血漿カリクレインであるＭ１６０−Ｇ１２のＦａｂを阻害する血漿カリクレインを示す。本明細書に記載の任意の抗体は、このまたは類似の構築内に入れることができることが本明細書において企図される。さらに、他の配列をＵＲＰに使用できる。特に、抗体Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、およびＸ６７−Ｇ０４はＭ１６０−Ｇ１２と置換できる。米国特許第７，８４６，４４５号（その全体を参照することによって本明細書に組み込まれる）由来の配列を本明細書に記載の血漿カリクレイン結合タンパク質と共に使用することもできる。
【表２２】
2014506257.tif 000103
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【表２３】
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【表２４】
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【表２５】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８Ａ】
2014506257.tif 000131
【図８Ｂ】
2014506257.tif 000132
【図９】
2014506257.tif 000133
【図１０Ａ】
2014506257.tif 000134
【図１０Ｂ】
2014506257.tif 000135
【図１０Ｃ】
2014506257.tif 000136
【図１１Ａ】
2014506257.tif 000137
【図１１Ｂ】
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【図１２】
2014506257.tif 000139
【図１３】
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【図１４】
2014506257.tif 000141
【図１５】
2014506257.tif 000142
【図１６】
2014506257.tif 000143
【図１７】
2014506257.tif 000144
【図１８】
2014506257.tif 000145
【手続補正書】
【提出日】平成25年9月5日(2013.9.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００１】  本願は、２０１１年１月６日に出願された米国特許出願第６１／４３０，４４２号の優先権を主張する。先の出願の開示は本願の開示の一部である（および参照することにより本願の開示に組み込まれる）とみなされる。 配列表 本出願は、ＥＦＳ−Ｗｅｂ経由にてＡＳＣＩＩ形式で提出された配列表を含み、その全体が本明細書中に参考として援用される。２０１２年２月２４日に作成された前述のＡＳＣＩＩのコピーは、Ｄ２３７１３７Ｐ．ｔｘｔという名称であり、前記のサイズは１４１８９６５バイトである。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４５９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４５９】
【図１】内因性の凝固経路および炎症における血漿カリクレイン（ｐＫａｌ）の役割を表す略図である。
【図２】カラゲナン誘発性ラット足浮腫に対するＭ１６２−Ａ０４の効果を表す図である。足の腫れは水置換法により測定した。
【図３】カラゲナン誘発性温度痛覚過敏に対するＭ１６２−Ａ０４の効果を表す図である。カラゲナン注射後に疼痛潜時をハーグリーブス法により測定した。
【図４】ＲＯＬＩＣ親和性成熟を用いて見出された同じ抗体の非生殖系列化（Ｘ６３−Ｇ０６）型（配列番号：２５５８）と生殖系列化されたコドン至適化（Ｘ８１−Ｂ０１）型（配列番号：２５５９）の軽鎖ＤＮＡ配列の整列を表す図である。アスタリスク（＊）で示される位置は保存されている部分であり、空白部分はＸ８１−Ｂ０１中でコドン至適化または生殖系列化のいずれかにより変化した塩基に対応する。
【図５】ＲＯＬＩＣ親和性成熟を用いて見出された同じ抗体の非生殖系列化（Ｘ６３−Ｇ０６）型（配列番号：２５６０）と生殖系列化されたコドン至適化（Ｘ８１−Ｂ０１）型（配列番号：２５６１）の軽鎖アミノ酸配列の整列を表す図である。アスタリスク（＊）で示される位置は保存されている部分であり、空白部分はＸ８１−Ｂ０１中で生殖系列化により変化したアミノ酸に対応する。非生殖系列化抗体（Ｘ６３−Ｇ０６）と生殖系列化されたコドン至適化抗体（Ｘ８１−Ｂ０１）の間では合計１１個のアミノ酸が異なる。
【図６】ＲＯＬＩＣ親和性成熟を用いて見出された同じ抗体の非生殖系列化（Ｘ６３−Ｇ０６）型（配列番号：２５６３）と生殖系列化されたコドン至適化（Ｘ８１−Ｂ０１）型（配列番号：２５６２）の重鎖ＤＮＡ配列の整列を表す図である。アスタリスク（＊）で示される位置は保存されている部分であり、空白部分はＸ８１−Ｂ０１中でコドン至適化により変化したＤＮＡ塩基に対応する。
【図７】ＲＯＬＩＣ親和性成熟を用いて見出された同じ抗体の非生殖系列化（Ｘ６３−Ｇ０６）型（配列番号：２５６５）と生殖系列化されたコドン至適化（Ｘ８１−Ｂ０１）型（配列番号：２５６４）の重鎖アミノ酸配列の整列を表す図である。アスタリスク（＊）で示される位置は保存されている部分である。この２つの抗体は重鎖のアミノ酸配列が同じである。
【図８Ａ】Ｘ８１−Ｂ０１とｐＫａｌとの結合に対するＥＰＩ−ＫＡＬ２競合を表す図である。Ｘ８１−Ｂ０１（ＩｇＧ）をＣＭ５  ＢＩＡＣＯＲＥ（商標）チップの抗ヒトＦｃ断片特異的表面で捕捉した。１μＭのＥＰＩ−ＫＡＬ２の存在下（図中、下のセンサグラム）または不在下（図中、上のセンサグラム）で、ｐＫａｌ（１００ｎＭ）を表面に流した。
【図８Ｂ】Ｘ６７−Ｄ０３とｐＫａｌとの結合に対するＥＰＩ−ＫＡＬ２競合を表す図である。Ｘ６７−Ｄ０３（ＩｇＧ）をＣＭ５  Ｂｉａｃｏｒｅチップの抗ヒトＦｃ断片特異的表面で捕捉した。１μＭのＥＰＩ−ＫＡＬ２の存在下（図中、下のセンサグラム）または不在下（図中、上のセンサグラム）で、ｐＫａｌ（１００ｎＭ）を表面に流した。
【図９】表１２に記載されている抗体に対するＣＬＩＰＳエピトープマッピングの結果を表す図である（それぞれ登場順に配列番号２５６６−２５７２）。
【図１０Ａ】様々な種由来のｐＫａｌ配列のＣｌｕｓｔａｌＷ整列を表す図である（それぞれ登場順に配列番号２５７３−２５８０）。「＊」で示される位置は種間で保存されている位置であり、「：」で示される位置は種間での保存的置換を表す。「．」で示される位置は一部の種において非保存的置換を有する。「＠」の記号により示される一続きのアミノ酸は、溶媒接触可能表面積の計算から溶媒曝露が著しいことが示された。「＋」により示される一続きのアミノ酸は、表１２に記載されている抗体の潜在的エピトープとして同定された。灰色で強調されているアミノ酸は、溶媒接触可能表面積の計算により、Ｋｕｎｉｔｚドメイン活性部位阻害剤と複合体を形成したときに埋没することが判明したものである。下線位置は触媒三連構造を形成するアミノ酸（Ｈｉｓ４３４、Ａｓｐ４８３およびＳｅｒ５７８、番号はヒト配列に基づく）である。
【図１０Ｂ】様々な種由来のｐＫａｌ配列のＣｌｕｓｔａｌＷ整列を表す図である。「＊」で示される位置は種間で保存されている位置であり、「：」で示される位置は種間での保存的置換を表す。「．」で示される位置は一部の種において非保存的置換を有する。「＠」の記号により示される一続きのアミノ酸は、溶媒接触可能表面積の計算から溶媒曝露が著しいことが示された。「＋」により示される一続きのアミノ酸は、表１２に記載されている抗体の潜在的エピトープとして同定された。灰色で強調されているアミノ酸は、溶媒接触可能表面積の計算により、Ｋｕｎｉｔｚドメイン活性部位阻害剤と複合体を形成したときに埋没することが判明したものである。下線位置は触媒三連構造を形成するアミノ酸（Ｈｉｓ４３４、Ａｓｐ４８３およびＳｅｒ５７８、番号はヒト配列に基づく）である。
【図１０Ｃ】様々な種由来のｐＫａｌ配列のＣｌｕｓｔａｌＷ整列を表す図である。「＊」で示される位置は種間で保存されている位置であり、「：」で示される位置は種間での保存的置換を表す。「．」で示される位置は一部の種において非保存的置換を有する。「＠」の記号により示される一続きのアミノ酸は、溶媒接触可能表面積の計算から溶媒曝露が著しいことが示された。「＋」により示される一続きのアミノ酸は、表１２に記載されている抗体の潜在的エピトープとして同定された。灰色で強調されているアミノ酸は、溶媒接触可能表面積の計算により、Ｋｕｎｉｔｚドメイン活性部位阻害剤と複合体を形成したときに埋没することが判明したものである。下線位置は触媒三連構造を形成するアミノ酸（Ｈｉｓ４３４、Ａｓｐ４８３およびＳｅｒ５７８、番号はヒト配列に基づく）である。
【図１１Ａ】本明細書の実施例１２に記載されている（ｉ）ＤＸ−２９２２抗体および（ｉｉ）Ｍ６−Ｄ０９抗体に対するＥｐｉ−Ｋａｌ２のＢｉａｃｏｒｅ競合解析を表す図である。
【図１１Ｂ】本明細書の実施例１２に記載されている（ｉ）ＤＸ−２９２２抗体および（ｉｉ）Ｍ６−Ｄ０９抗体に対するＥｐｉ−Ｋａｌ２のＢｉａｃｏｒｅ競合解析を表す図である。
【図１２】本明細書の実施例１２に記載されている（ｉ）ＤＸ−２９１１抗体および（ｉｉ）Ｍ６−Ｄ０９抗体に対するＡＥＢＳＦのＢｉａｃｏｒｅ競合解析を表す図である。
【図１３】Ｂｉｏｃｏｒｅ解析を表す図であり、ＤＸ−２９２２が、高分子量キニノーゲン（ＨＭＷＫ）と結合した血漿カリクレインと結合することを示している。
【図１４】ラットのカラゲナン誘発性足浮腫（ＣＰＥ）におけるＸ１０１−Ａ０１による浮腫の用量依存的阻害を示すグラフを示す図である。
【図１５】ラットのカラゲナン誘発性足浮腫におけるＤＸ−２９３０腹腔内投与による浮腫の用量依存的阻害を示すグラフを示す図である。
【図１６】ラットのカラゲナン誘発性足浮腫におけるＤＸ−２９３０皮下投与による浮腫の用量依存的阻害を示すグラフを示す図である。
【図１７】薬物動態評価のためのＳｐｒａｇｕｅ−ＤａｗｌｅｙラットへのＩＶおよびＳＣ投与後の平均ＤＸ−２９３０血清濃度を示すグラフを示す図である。
【図１８】薬物動態評価のためのカニクイザルへのＩＶおよびＳＣ投与後の平均ＤＸ−２９３０血清濃度を示すグラフを示す図である。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５４７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５４７】  選択に使用したヒト血漿カリクレイン配列および続くスクリーニングを以下に示す（寄託番号ＮＰ＿０００８８３．２）。使用したヒト血漿カリクレイン（８６ｋＤａ）をヒト血漿から精製し、市販のベンダーにより第ＸＩＩａ因子と活性化させた。第ＸＩＩａ因子は、ポリペプチド配列を１箇所（Ａｒｇ３７１とＩｌｅ３７２との間であり、以下の配列中「／」で印を付けた切断部位）で切断することによりプレカリクレインを活性化し、２個のジスルフィド結合ポリペプチド（約５２ｋＤａの重鎖および約３４ｋＤａの触媒ドメイン）からなる活性血漿カリクレインを生成する［Ｃｏｌｍａｎ  ａｎｄ  Ｓｃｈｍａｉｅｒ，  （１９９７）  “Ｃｏｎｔａｃｔ  Ｓｙｓｔｅｍ：  Ａ  Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  Ｍｏｄｕｌａｔｏｒ  Ｗｉｔｈ  Ａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｎｔ，  Ｐｒｏｆｉｂｒｉｎｏｌｙｔｉｃ，  Ａｎｔｉａｄｈｅｓｉｖｅ，  ａｎｄ  Ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  Ａｔｔｒｉｂｕｔｅｓ”  Ｂｌｏｏｄ，  ９０，  ３８１９−３８４３］ＧＣＬＴＱＬＹＥＮＡＦＦＲＧＧＤＶＡＳＭＹＴＰＮＡＱＹＣＱＭＲＣＴＦＨＰＲＣＬＬＦＳＦＬＰＡＳＳＩＮＤＭＥＫＲＦＧＣＦＬＫＤＳＶＴＧＴＬＰＫＶＨＲＴＧＡＶＳＧＨＳＬＫＱＣＧＨＱＩＳＡＣＨＲＤＩＹＫＧＶＤＭＲＧＶＮＦＮＶＳＫＶＳＳＶＥＥＣＱＫＲＣＴＳＮＩＲＣＱＦＦＳＹＡＴＱＴＦＨＫＡＥＹＲＮＮＣＬＬＫＹＳＰＧＧＴＰＴＡＩＫＶＬＳＮＶＥＳＧＦＳＬＫＰＣＡＬＳＥＩＧＣＨＭＮＩＦＱＨＬＡＦＳＤＶＤＶＡＲＶＬＴＰＤＡＦＶＣＲＴＩＣＴＹＨＰＮＣＬＦＦＴＦＹＴＮＶＷＫＩＥＳＱＲＮＶＣＬＬＫＴＳＥＳＧＴＰＳＳＳＴＰＱＥＮＴＩＳＧＹＳＬＬＴＣＫＲＴＬＰＥＰＣＨＳＫＩＹＰＧＶＤＦＧＧＥＥＬＮＶＴＦＶＫＧＶＮＶＣＱＥＴＣＴＫＭＩＲＣＱＦＦＴＹＳＬＬＰＥＤＣＫＥＥＫＣＫＣＦＬＲＬＳＭＤＧＳＰＴＲＩＡＹＧＴＱＧＳＳＧＹＳＬＲＬＣＮＴＧＤＮＳＶＣＴＴＫＴＳＴＲ／ＩＶＧＧＴＮＳＳＷＧＥＷＰＷＱＶＳＬＱＶＫＬＴＡＱＲＨＬＣＧＧＳＬＩＧＨＱＷＶＬＴＡＡＨＣＦＤＧＬＰＬＱＤＶＷＲＩＹＳＧＩＬＮＬＳＤＩＴＫＤＴＰＦＳＱＩＫＥＩＩＩＨＱＮＹＫＶＳＥＧＮＨＤＩＡＬＩＫＬＱＡＰＬＮＹＴＥＦＱＫＰＩＣＬＰＳＫＧＤＴＳＴＩＹＴＮＣＷＶＴＧＷＧＦＳＫＥＫＧＥＩＱＮＩＬＱＫＶＮＩＰＬＶＴＮＥＥＣＱＫＲＹＱＤＹＫＩＴＱＲＭＶＣＡＧＹＫＥＧＧＫＤＡＣＫＧＤＳＧＧＰＬＶＣＫＨＮＧＭＷＲＬＶＧＩＴＳＷＧＥＧＣＡＲＲＥＱＰＧＶＹＴＫＶＡＥＹＭＤＷＩＬＥＫＴＱＳＳＤＧＫＡＱＭＱＳＰＡ  （配列番号：１）
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５４９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５４９】  ヒト血漿カリクレイン（寄託番号ＮＰ＿０００８８３．２）  ＞ｇｉ｜７８１９１７９８｜基準｜ＮＰ＿０００８８３．２｜血漿カリクレインＢ１前駆体［ヒト（Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ）］ＭＩＬＦＫＱＡＴＹＦＩＳＬＦＡＴＶＳＣＧＣＬＴＱＬＹＥＮＡＦＦＲＧＧＤＶＡＳＭＹＴＰＮＡＱＹＣＱＭＲＣＴＦＨＰＲＣＬＬＦＳＦＬＰＡＳＳＩＮＤＭＥＫＲＦＧＣＦＬＫＤＳＶＴＧＴＬＰＫＶＨＲＴＧＡＶＳＧＨＳＬＫＱＣＧＨＱＩＳＡＣＨＲＤＩＹＫＧＶＤＭＲＧＶＮＦＮＶＳＫＶＳＳＶＥＥＣＱＫＲＣＴＳＮＩＲＣＱＦＦＳＹＡＴＱＴＦＨＫＡＥＹＲＮＮＣＬＬＫＹＳＰＧＧＴＰＴＡＩＫＶＬＳＮＶＥＳＧＦＳＬＫＰＣＡＬＳＥＩＧＣＨＭＮＩＦＱＨＬＡＦＳＤＶＤＶＡＲＶＬＴＰＤＡＦＶＣＲＴＩＣＴＹＨＰＮＣＬＦＦＴＦＹＴＮＶＷＫＩＥＳＱＲＮＶＣＬＬＫＴＳＥＳＧＴＰＳＳＳＴＰＱＥＮＴＩＳＧＹＳＬＬＴＣＫＲＴＬＰＥＰＣＨＳＫＩＹＰＧＶＤＦＧＧＥＥＬＮＶＴＦＶＫＧＶＮＶＣＱＥＴＣＴＫＭＩＲＣＱＦＦＴＹＳＬＬＰＥＤＣＫＥＥＫＣＫＣＦＬＲＬＳＭＤＧＳＰＴＲＩＡＹＧＴＱＧＳＳＧＹＳＬＲＬＣＮＴＧＤＮＳＶＣＴＴＫＴＳＴＲＩＶＧＧＴＮＳＳＷＧＥＷＰＷＱＶＳＬＱＶＫＬＴＡＱＲＨＬＣＧＧＳＬＩＧＨＱＷＶＬＴＡＡＨＣＦＤＧＬＰＬＱＤＶＷＲＩＹＳＧＩＬＮＬＳＤＩＴＫＤＴＰＦＳＱＩＫＥＩＩＩＨＱＮＹＫＶＳＥＧＮＨＤＩＡＬＩＫＬＱＡＰＬＮＹＴＥＦＱＫＰＩＣＬＰＳＫＧＤＴＳＴＩＹＴＮＣＷＶＴＧＷＧＦＳＫＥＫＧＥＩＱＮＩＬＱＫＶＮＩＰＬＶＴＮＥＥＣＱＫＲＹＱＤＹＫＩＴＱＲＭＶＣＡＧＹＫＥＧＧＫＤＡＣＫＧＤＳＧＧＰＬＶＣＫＨＮＧＭＷＲＬＶＧＩＴＳＷＧＥＧＣＡＲＲＥＱＰＧＶＹＴＫＶＡＥＹＭＤＷＩＬＥＫＴＱＳＳＤＧＫＡＱＭＱＳＰＡ  （配列番号：２）
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５５０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５５０】  ヒト血漿カリクレインｍＲＮＡ（寄託番号ＮＰ＿０００８９２）  ＞ｇｉ｜７８１９１７９７｜基準｜ＮＰ＿０００８９２．３｜ヒト（Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ）カリクレインＢ、血漿（フレッチャー因子）１（ＫＬＫＢ１）、ｍＲＮＡＡＧＡＡＣＡＧＣＴＴＧＡＡＧＡＣＣＧＴＴＣＡＴＴＴＴＴＡＡＧＴＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＴＣＡＣＣＴＣＣＡＡＧＡＡＧＣＡＡＴＴＧＴＧＴＴＴＴＣＡＧＡＡＴＧＡＴＴＴＴＡＴＴＣＡＡＧＣＡＡＧＣＡＡＣＴＴＡＴＴＴＣＡＴＴＴＣＣＴＴＧＴＴＴＧＣＴＡＣＡＧＴＴＴＣＣＴＧＴＧＧＡＴＧＴＣＴＧＡＣＴＣＡＡＣＴＣＴＡＴＧＡＡＡＡＣＧＣＣＴＴＣＴＴＣＡＧＡＧＧＴＧＧＧＧＡＴＧＴＡＧＣＴＴＣＣＡＴＧＴＡＣＡＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＣＣＡＡＴＡＣＴＧＣＣＡＧＡＴＧＡＧＧＴＧＣＡＣＡＴＴＣＣＡＣＣＣＡＡＧＧＴＧＴＴＴＧＣＴＡＴＴＣＡＧＴＴＴＴＣＴＴＣＣＡＧＣＡＡＧＴＴＣＡＡＴＣＡＡＴＧＡＣＡＴＧＧＡＧＡＡＡＡＧＧＴＴＴＧＧＴＴＧＣＴＴＣＴＴＧＡＡＡＧＡＴＡＧＴＧＴＴＡＣＡＧＧＡＡＣＣＣＴＧＣＣＡＡＡＡＧＴＡＣＡＴＣＧＡＡＣＡＧＧＴＧＣＡＧＴＴＴＣＴＧＧＡＣＡＴＴＣＣＴＴＧＡＡＧＣＡＡＴＧＴＧＧＴＣＡＴＣＡＡＡＴＡＡＧＴＧＣＴＴＧＣＣＡＴＣＧＡＧＡＣＡＴＴＴＡＴＡＡＡＧＧＡＧＴＴＧＡＴＡＴＧＡＧＡＧＧＡＧＴＣＡＡＴＴＴＴＡＡＴＧＴＧＴＣＴＡＡＧＧＴＴＡＧＣＡＧＴＧＴＴＧＡＡＧＡＡＴＧＣＣＡＡＡＡＡＡＧＧＴＧＣＡＣＣＡＧＴＡＡＣＡＴＴＣＧＣＴＧＣＣＡＧＴＴＴＴＴＴＴＣＡＴＡＴＧＣＣＡＣＧＣＡＡＡＣＡＴＴＴＣＡＣＡＡＧＧＣＡＧＡＧＴＡＣＣＧＧＡＡＣＡＡＴＴＧＣＣＴＡＴＴＡＡＡＧＴＡＣＡＧＴＣＣＣＧＧＡＧＧＡＡＣＡＣＣＴＡＣＣＧＣＴＡＴＡＡＡＧＧＴＧＣＴＧＡＧＴＡＡＣＧＴＧＧＡＡＴＣＴＧＧＡＴＴＣＴＣＡＣＴＧＡＡＧＣＣＣＴＧＴＧＣＣＣＴＴＴＣＡＧＡＡＡＴＴＧＧＴＴＧＣＣＡＣＡＴＧＡＡＣＡＴＣＴＴＣＣＡＧＣＡＴＣＴＴＧＣＧＴＴＣＴＣＡＧＡＴＧＴＧＧＡＴＧＴＴＧＣＣＡＧＧＧＴＴＣＴＣＡＣＴＣＣＡＧＡＴＧＣＴＴＴＴＧＴＧＴＧＴＣＧＧＡＣＣＡＴＣＴＧＣＡＣＣＴＡＴＣＡＣＣＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＴＴＣＴＴＴＡＣＡＴＴＣＴＡＴＡＣＡＡＡＴＧＴＡＴＧＧＡＡＡＡＴＣＧＡＧＴＣＡＣＡＡＡＧＡＡＡＴＧＴＴＴＧＴＣＴＴＣＴＴＡＡＡＡＣＡＴＣＴＧＡＡＡＧＴＧＧＣＡＣＡＣＣＡＡＧＴＴＣＣＴＣＴＡＣＴＣＣＴＣＡＡＧＡＡＡＡＣＡＣＣＡＴＡＴＣＴＧＧＡＴＡＴＡＧＣＣＴＴＴＴＡＡＣＣＴＧＣＡＡＡＡＧＡＡＣＴＴＴＡＣＣＴＧＡＡＣＣＣＴＧＣＣＡＴＴＣＴＡＡＡＡＴＴＴＡＣＣＣＧＧＧＡＧＴＴＧＡＣＴＴＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＴＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＴＴＴＴＧＴＴＡＡＡＧＧＡＧＴＧＡＡＴＧＴＴＴＧＣＣＡＡＧＡＧＡＣＴＴＧＣＡＣＡＡＡＧＡＴＧＡＴＴＣＧＣＴＧＴＣＡＧＴＴＴＴＴＣＡＣＴＴＡＴＴＣＴＴＴＡＣＴＣＣＣＡＧＡＡＧＡＣＴＧＴＡＡＧＧＡＡＧＡＧＡＡＧＴＧＴＡＡＧＴＧＴＴＴＣＴＴＡＡＧＡＴＴＡＴＣＴＡＴＧＧＡＴＧＧＴＴＣＴＣＣＡＡＣＴＡＧＧＡＴＴＧＣＧＴＡＴＧＧＧＡＣＡＣＡＡＧＧＧＡＧＣＴＣＴＧＧＴＴＡＣＴＣＴＴＴＧＡＧＡＴＴＧＴＧＴＡＡＣＡＣＴＧＧＧＧＡＣＡＡＣＴＣＴＧＴＣＴＧＣＡＣＡＡＣＡＡＡＡＡＣＡＡＧＣＡＣＡＣＧＣＡＴＴＧＴＴＧＧＡＧＧＡＡＣＡＡＡＣＴＣＴＴＣＴＴＧＧＧＧＡＧＡＧＴＧＧＣＣＣＴＧＧＣＡＧＧＴＧＡＧＣＣＴＧＣＡＧＧＴＧＡＡＧＣＴＧＡＣＡＧＣＴＣＡＧＡＧＧＣＡＣＣＴＧＴＧＴＧＧＡＧＧＧＴＣＡＣＴＣＡＴＡＧＧＡＣＡＣＣＡＧＴＧＧＧＴＣＣＴＣＡＣＴＧＣＴＧＣＣＣＡＣＴＧＣＴＴＴＧＡＴＧＧＧＣＴＴＣＣＣＣＴＧＣＡＧＧＡＴＧＴＴＴＧＧＣＧＣＡＴＣＴＡＴＡＧＴＧＧＣＡＴＴＴＴＡＡＡＴＣＴＧＴＣＡＧＡＣＡＴＴＡＣＡＡＡＡＧＡＴＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＣＡＡＡＴＡＡＡＡＧＡＧＡＴＴＡＴＴＡＴＴＣＡＣＣＡＡＡＡＣＴＡＴＡＡＡＧＴＣＴＣＡＧＡＡＧＧＧＡＡＴＣＡＴＧＡＴＡＴＣＧＣＣＴＴＧＡＴＡＡＡＡＣＴＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＴＴＧＡＡＴＴＡＣＡＣＴＧＡＡＴＴＣＣＡＡＡＡＡＣＣＡＡＴＡＴＧＣＣＴＡＣＣＴＴＣＣＡＡＡＧＧＴＧＡＣＡＣＡＡＧＣＡＣＡＡＴＴＴＡＴＡＣＣＡＡＣＴＧＴＴＧＧＧＴＡＡＣＣＧＧＡＴＧＧＧＧＣＴＴＣＴＣＧＡＡＧＧＡＧＡＡＡＧＧＴＧＡＡＡＴＣＣＡＡＡＡＴＡＴＴＣＴＡＣＡＡＡＡＧＧＴＡＡＡＴＡＴＴＣＣＴＴＴＧＧＴＡＡＣＡＡＡＴＧＡＡＧＡＡＴＧＣＣＡＧＡＡＡＡＧＡＴＡＴＣＡＡＧＡＴＴＡＴＡＡＡＡＴＡＡＣＣＣＡＡＣＧＧＡＴＧＧＴＣＴＧＴＧＣＴＧＧＣＴＡＴＡＡＡＧＡＡＧＧＧＧＧＡＡＡＡＧＡＴＧＣＴＴＧＴＡＡＧＧＧＡＧＡＴＴＣＡＧＧＴＧＧＴＣＣＣＴＴＡＧＴＴＴＧＣＡＡＡＣＡＣＡＡＴＧＧＡＡＴＧＴＧＧＣＧＴＴＴＧＧＴＧＧＧＣＡＴＣＡＣＣＡＧＣＴＧＧＧＧＴＧＡＡＧＧＣＴＧＴＧＣＣＣＧＣＡＧＧＧＡＧＣＡＡＣＣＴＧＧＴＧＴＣＴＡＣＡＣＣＡＡＡＧＴＣＧＣＴＧＡＧＴＡＣＡＴＧＧＡＣＴＧＧＡＴＴＴＴＡＧＡＧＡＡＡＡＣＡＣＡＧＡＧＣＡＧＴＧＡＴＧＧＡＡＡＡＧＣＴＣＡＧＡＴＧＣＡＧＴＣＡＣＣＡＧＣＡＴＧＡＧＡＡＧＣＡＧＴＣＣＡＧＡＧＴＣＴＡＧＧＣＡＡＴＴＴＴＴＡＣＡＡＣＣＴＧＡＧＴＴＣＡＡＧＴＣＡＡＡＴＴＣＴＧＡＧＣＣＴＧＧＧＧＧＧＴＣＣＴＣＡＴＣＴＧＣＡＡＡＧＣＡＴＧＧＡＧＡＧＴＧＧＣＡＴＣＴＴＣＴＴＴＧＣＡＴＣＣＴＡＡＧＧＡＣＧＡＡＡＡＡＣＡＣＡＧＴＧＣＡＣＴＣＡＧＡＧＣＴＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＡＴＧＴＣＴＧＧＣＴＧＡＡＧＣＣＣＧＣＴＴＴＣＡＧＣＡＣＧＣＣＧＴＡＡＣＣＡＧＧＧＧＣＴＧＡＣＡＡＴＧＣＧＡＧＧＴＣＧＣＡＡＣＴＧＡＧＡＴＣＴＣＣＡＴＧＡＣＴＧＴＧＴＧＴＴＧＴＧＡＡＡＴＡＡＡＡＴＧＧＴＧＡＡＡＧＡＴＣＡＡＡＡＡＡ  （配列番号：３）
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５５１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５５１】  マウス血漿カリクレイン（寄託番号ＮＰ＿０３２４８１．１）  ＞ｇｉ｜６６８０５８４｜基準｜ＮＰ＿０３２４８１．１｜カリクレインＢ、血漿１［ハツカネズミ（Ｍｕｓ  ｍｕｓｃｕｌｕｓ）］ＭＩＬＦＮＲＶＧＹＦＶＳＬＦＡＴＶＳＣＧＣＭＴＱＬＹＫＮＴＦＦＲＧＧＤＬＡＡＩＹＴＰＤＡＱＹＣＱＫＭＣＴＦＨＰＲＣＬＬＦＳＦＬＡＶＴＰＰＫＥＴＮＫＲＦＧＣＦＭＫＥＳＩＴＧＴＬＰＲＩＨＲＴＧＡＩＳＧＨＳＬＫＱＣＧＨＱＩＳＡＣＨＲＤＩＹＫＧＬＤＭＲＧＳＮＦＮＩＳＫＴＤＮＩＥＥＣＱＫＬＣＴＮＮＦＨＣＱＦＦＴＹＡＴＳＡＦＹＲＰＥＹＲＫＫＣＬＬＫＨＳＡＳＧＴＰＴＳＩＫＳＡＤＮＬＶＳＧＦＳＬＫＳＣＡＬＳＥＩＧＣＰＭＤＩＦＱＨＳＡＦＡＤＬＮＶＳＱＶＩＴＰＤＡＦＶＣＲＴＩＣＴＦＨＰＮＣＬＦＦＴＦＹＴＮＥＷＥＴＥＳＱＲＮＶＣＦＬＫＴＳＫＳＧＲＰＳＰＰＩＰＱＥＮＡＩＳＧＹＳＬＬＴＣＲＫＴＲＰＥＰＣＨＳＫＩＹＳＧＶＤＦＥＧＥＥＬＮＶＴＦＶＱＧＡＤＶＣＱＥＴＣＴＫＴＩＲＣＱＦＦＩＹＳＬＬＰＱＤＣＫＥＥＧＣＫＣＳＬＲＬＳＴＤＧＳＰＴＲＩＴＹＧＭＱＧＳＳＧＹＳＬＲＬＣＫＬＶＤＳＰＤＣＴＴＫＩＮＡＲＩＶＧＧＴＮＡＳＬＧＥＷＰＷＱＶＳＬＱＶＫＬＶＳＱＴＨＬＣＧＧＳＩＩＧＲＱＷＶＬＴＡＡＨＣＦＤＧＩＰＹＰＤＶＷＲＩＹＧＧＩＬＳＬＳＥＩＴＫＥＴＰＳＳＲＩＫＥＬＩＩＨＱＥＹＫＶＳＥＧＮＹＤＩＡＬＩＫＬＱＴＰＬＮＹＴＥＦＱＫＰＩＣＬＰＳＫＡＤＴＮＴＩＹＴＮＣＷＶＴＧＷＧＹＴＫＥＱＧＥＴＱＮＩＬＱＫＡＴＩＰＬＶＰＮＥＥＣＱＫＫＹＲＤＹＶＩＮＫＱＭＩＣＡＧＹＫＥＧＧＴＤＡＣＫＧＤＳＧＧＰＬＶＣＫＨＳＧＲＷＱＬＶＧＩＴＳＷＧＥＧＣＧＲＫＤＱＰＧＶＹＴＫＶＳＥＹＭＤＷＩＬＥＫＴＱＳＳＤＶＲＡＬＥＴＳＳＡ  （配列番号：４）
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５５２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５５２】  マウス血漿カリクレインｍＲＮＡ（寄託番号ＮＭ＿００８４５５．２）＞ｇｉ｜２３６４６５８０４｜基準｜ＮＭ＿００８４５５．２｜ハツカネズミ（Ｍｕｓ  ｍｕｓｃｕｌｕｓ）カリクレインＢ、血漿１（Ｋｌｋｂ１）、ｍＲＮＡＡＧＡＣＣＧＣＣＣＴＣＧＧＴＧＣＣＡＴＡＴＴＣＡＧＡＧＧＧＣＴＴＧＡＡＧＡＣＣＡＴＣＴＴＣＡＴＧＴＧＡＡＧＡＣＴＣＣＣＴＣＴＣＣＴＣＣＡＧＡＡＣＣＡＣＡＡＣＧＴＧＡＣＣＡＴＣＣＴＴＣＣＡＧＧＡＴＧＡＴＴＴＴＡＴＴＣＡＡＣＣＧＡＧＴＧＧＧＴＴＡＴＴＴＴＧＴＴＴＣＣＴＴＧＴＴＴＧＣＴＡＣＣＧＴＣＴＣＣＴＧＴＧＧＧＴＧＴＡＴＧＡＣＴＣＡＡＣＴＧＴＡＴＡＡＡＡＡＴＡＣＣＴＴＣＴＴＣＡＧＡＧＧＴＧＧＧＧＡＴＣＴＡＧＣＴＧＣＣＡＴＣＴＡＣＡＣＣＣＣＡＧＡＴＧＣＣＣＡＧＴＡＣＴＧＴＣＡＧＡＡＧＡＴＧＴＧＣＡＣＴＴＴＴＣＡＣＣＣＣＡＧＧＴＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＡＧＣＴＴＴＣＴＣＧＣＣＧＴＧＡＣＴＣＣＡＣＣＣＡＡＡＧＡＧＡＣＡＡＡＴＡＡＡＣＧＧＴＴＴＧＧＴＴＧＣＴＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＧＣＡＴＴＡＣＡＧＧＧＡＣＴＴＴＧＣＣＡＡＧＡＡＴＡＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＧＧＣＣＡＴＴＴＣＴＧＧＴＣＡＴＴＣＴＴＴＡＡＡＧＣＡＧＴＧＴＧＧＣＣＡＴＣＡＡＡＴＡＡＧＴＧＣＴＴＧＣＣＡＣＣＧＡＧＡＣＡＴＡＴＡＣＡＡＡＧＧＡＣＴＴＧＡＴＡＴＧＡＧＡＧＧＧＴＣＣＡＡＣＴＴＴＡＡＴＡＴＣＴＣＴＡＡＧＡＣＣＧＡＣＡＡＴＡＴＴＧＡＡＧＡＡＴＧＣＣＡＧＡＡＡＣＴＧＴＧＣＡＣＡＡＡＴＡＡＴＴＴＴＣＡＣＴＧＣＣＡＡＴＴＴＴＴＣＡＣＡＴＡＴＧＣＴＡＣＡＡＧＴＧＣＡＴＴＴＴＡＣＡＧＡＣＣＡＧＡＧＴＡＣＣＧＧＡＡＧＡＡＧＴＧＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＣＡＣＡＧＴＧＣＡＡＧＣＧＧＡＡＣＡＣＣＣＡＣＣＡＧＣＡＴＡＡＡＧＴＣＡＧＣＧＧＡＣＡＡＣＣＴＧＧＴＧＴＣＴＧＧＡＴＴＣＴＣＡＣＴＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＧＣＧＣＴＴＴＣＧＧＡＧＡＴＡＧＧＴＴＧＣＣＣＣＡＴＧＧＡＴＡＴＴＴＴＣＣＡＧＣＡＣＴＣＴＧＣＣＴＴＴＧＣＡＧＡＣＣＴＧＡＡＴＧＴＡＡＧＣＣＡＧＧＴＣＡＴＣＡＣＣＣＣＣＧＡＴＧＣＣＴＴＴＧＴＧＴＧＴＣＧＣＡＣＣＡＴＣＴＧＣＡＣＣＴＴＣＣＡＴＣＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＴＴＴＣＴＴＣＡＣＧＴＴＣＴＡＣＡＣＧＡＡＴＧＡＡＴＧＧＧＡＧＡＣＡＧＡＡＴＣＡＣＡＧＡＧＡＡＡＴＧＴＴＴＧＴＴＴＴＣＴＴＡＡＧＡＣＧＴＣＴＡＡＡＡＧＴＧＧＡＡＧＡＣＣＡＡＧＴＣＣＣＣＣＴＡＴＴＣＣＴＣＡＡＧＡＡＡＡＣＧＣＴＡＴＡＴＣＴＧＧＡＴＡＴＡＧＴＣＴＣＣＴＣＡＣＣＴＧＣＡＧＡＡＡＡＡＣＴＣＧＣＣＣＴＧＡＡＣＣＣＴＧＣＣＡＴＴＣＣＡＡＡＡＴＴＴＡＣＴＣＴＧＧＡＧＴＴＧＡＣＴＴＴＧＡＡＧＧＧＧＡＡＧＡＡＣＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＣＴＴＣＧＴＧＣＡＡＧＧＡＧＣＡＧＡＴＧＴＣＴＧＣＣＡＡＧＡＧＡＣＴＴＧＴＡＣＡＡＡＧＡＣＡＡＴＣＣＧＣＴＧＣＣＡＧＴＴＴＴＴＴＡＴＴＴＡＣＴＣＣＴＴＡＣＴＣＣＣＣＣＡＡＧＡＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＧＡＧＧＧＧＴＧＴＡＡＡＴＧＴＴＣＣＴＴＡＡＧＧＴＴＡＴＣＣＡＣＡＧＡＴＧＧＣＴＣＣＣＣＡＡＣＴＡＧＧＡＴＣＡＣＣＴＡＴＧＧＣＡＴＧＣＡＧＧＧＧＡＧＣＴＣＣＧＧＴＴＡＴＴＣＴＣＴＧＡＧＡＴＴＧＴＧＴＡＡＡＣＴＴＧＴＧＧＡＣＡＧＣＣＣＴＧＡＣＴＧＴＡＣＡＡＣＡＡＡＡＡ��ＡＡＡＴＧＣＡＣＧＴＡＴＴＧＴＧＧＧＡＧＧＡＡＣＡＡＡＣＧＣＴＴＣＴＴＴＡＧＧＧＧＡＧＴＧＧＣＣＡＴＧＧＣＡＧＧＴＣＡＧＣＣＴＧＣＡＡＧＴＧＡＡＧＣＴＧＧＴＡＴＣＴＣＡＧＡＣＣＣＡＴＴＴＧＴＧＴＧＧＡＧＧＧＴＣＣＡＴＣＡＴＴＧＧＴＣＧＣＣＡＡＴＧＧＧＴＡＣＴＧＡＣＡＧＣＴＧＣＣＣＡＴＴＧＣＴＴＴＧＡＴＧＧＡＡＴＴＣＣＣＴＡＴＣＣＡＧＡＴＧＴＧＴＧＧＣＧＴＡＴＡＴＡＴＧＧＣＧＧＡＡＴＴＣＴＴＡＧＴＣＴＧＴＣＣＧＡＧＡＴＴＡＣＧＡＡＡＧＡＡＡＣＧＣＣＴＴＣＣＴＣＧＡＧＡＡＴＡＡＡＧＧＡＧＣＴＴＡＴＴＡＴＴＣＡＴＣＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＡＧＴＣＴＣＡＧＡＡＧＧＣＡＡＴＴＡＴＧＡＴＡＴＴＧＣＣＴＴＡＡＴＡＡＡＧＣＴＴＣＡＧＡＣＧＣＣＣＣＴＧＡＡＴＴＡＴＡＣＴＧＡＡＴＴＣＣＡＡＡＡＡＣＣＡＡＴＡＴＧＣＣＴＧＣＣＴＴＣＣＡＡＡＧＣＴＧＡＣＡＣＡＡＡＴＡＣＡＡＴＴＴＡＴＡＣＣＡＡＣＴＧＴＴＧＧＧＴＧＡＣＴＧＧＡＴＧＧＧＧＣＴＡＣＡＣＧＡＡＧＧＡＡＣＡＡＧＧＴＧＡＡＡＣＧＣＡＡＡＡＴＡＴＴＣＴＡＣＡＡＡＡＧＧＣＴＡＣＴＡＴＴＣＣＴＴＴＧＧＴＡＣＣＡＡＡＴＧＡＡＧＡＡＴＧＣＣＡＧＡＡＡＡＡＡＴＡＣＡＧＡＧＡＴＴＡＴＧＴＴＡＴＡＡＡＣＡＡＧＣＡＧＡＴＧＡＴＣＴＧＴＧＣＴＧＧＣＴＡＣＡＡＡＧＡＡＧＧＣＧＧＡＡＣＡＧＡＣＧＣＴＴＧＴＡＡＧＧＧＡＧＡＴＴＣＣＧＧＴＧＧＣＣＣＣＴＴＡＧＴＣＴＧＴＡＡＡＣＡＣＡＧＴＧＧＡＣＧＧＴＧＧＣＡＧＴＴＧＧＴＧＧＧＴＡＴＣＡＣＣＡＧＣＴＧＧＧＧＴＧＡＡＧＧＣＴＧＣＧＣＣＣＧＣＡＡＧＧＡＣＣＡＡＣＣＡＧＧＡＧＴＣＴＡＣＡＣＣＡＡＡＧＴＴＴＣＴＧＡＧＴＡＣＡＴＧＧＡＣＴＧＧＡＴＡＴＴＧＧＡＧＡＡＧＡＣＡＣＡＧＡＧＣＡＧＴＧＡＴＧＴＡＡＧＡＧＣＴＣＴＧＧＡＧＡＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＣＴＧＡＧＧＡＧＧＣＴＧＧＧＴＡＣＣＡＡＧＧＡＧＧＡＡＧＡＡＣＣＣＡＧＣＴＧＧＣＴＴＴＡＣＣＡＣＣＴＧＣＣＣＴＣＡＡＧＧＣＡＡＡＣＴＡＧＡＧＣＴＣＣＡＧＧＡＴＴＣＴＣＧＧＣＴＧＴＡＡＡＡＴＧＴＴＧＡＴＡＡＴＧＧＴＧＴＣＴＡＣＣＴＣＡＣＡＴＣＣＧＴＡＴＣＡＴＴＧＧＡＴＴＧＡＡＡＡＴＴＣＡＡＧＴＧＴＡＧＡＴＡＴＡＧＴＴＧＣＴＧＡＡＧＡＣＡＧＣＧＴＴＴＴＧＣＴＣＡＡＧＴＧＴＧＴＴＴＣＣＴＧＣＣＴＴＧＡＧＴＣＡＣＡＧＧＡＧＣＴＣＣＡＡＴＧＧＧＡＧＣＡＴＴＡＣＡＡＡＧＡＴＣＡＣＣＡＡＧＣＴＴＧＴＴＡＧＧＡＡＡＧＡＧＡＡＴＧＡＴＣＡＡＡＧＧＧＴＴＴＴＡＴＴＡＧＧＴＡＡＴＧＡＡＡＴＧＴＣＴＡＧＡＴＧＴＧＡＴＧＣＡＡＴＴＧＡＡＡＡＡＡＡＧＡＣＣＣＣＡＧＡＴＴＣＴＡＧＣＡＣＡＧＴＣＣＴＴＧＧＧＡＣＣＡＴＴＣＴＣＡＴＧＴＡＡＣＴＧＴＴＧＡＣＴＣＴＧＧＡＣＣＴＣＡＧＣＡＧＡＴＣＴＣＡＧＡＧＴＴＡＣＣＴＧＴＣＣＡＣＴＴＣＴＧＡＣＡＴＴＴＧＴＴＴＡＴＴＡＧＡＧＣＣＴＧＡＴＧＣＴＡＴＴＣＴＴＴＣＡＡＧＴＧＧＡＧＣＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡ  （配列番号：５）
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５５３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５５３】  ラット血漿カリクレイン（寄託番号ＮＰ＿０３６８５７．２）  ＞ｇｉ｜１６２１３８９０５｜基準｜ＮＰ＿０３６８５７．２｜カリクレインＢ、血漿１［ドブネズミ（Ｒａｔｔｕｓ  ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ）］ＭＩＬＦＫＱＶＧＹＦＶＳＬＦＡＴＶＳＣＧＣＬＳＱＬＹＡＮＴＦＦＲＧＧＤＬＡＡＩＹＴＰＤＡＱＨＣＱＫＭＣＴＦＨＰＲＣＬＬＦＳＦＬＡＶＳＰＴＫＥＴＤＫＲＦＧＣＦＭＫＥＳＩＴＧＴＬＰＲＩＨＲＴＧＡＩＳＧＨＳＬＫＱＣＧＨＱＬＳＡＣＨＱＤＩＹＥＧＬＤＭＲＧＳＮＦＮＩＳＫＴＤＳＩＥＥＣＱＫＬＣＴＮＮＩＨＣＱＦＦＴＹＡＴＫＡＦＨＲＰＥＹＲＫＳＣＬＬＫＲＳＳＳＧＴＰＴＳＩＫＰＶＤＮＬＶＳＧＦＳＬＫＳＣＡＬＳＥＩＧＣＰＭＤＩＦＱＨＦＡＦＡＤＬＮＶＳＨＶＶＴＰＤＡＦＶＣＲＴＶＣＴＦＨＰＮＣＬＦＦＴＦＹＴＮＥＷＥＴＥＳＱＲＮＶＣＦＬＫＴＳＫＳＧＲＰＳＰＰＩＩＱＥＮＡＶＳＧＹＳＬＦＴＣＲＫＡＲＰＥＰＣＨＦＫＩＹＳＧＶＡＦＥＧＥＥＬＮＡＴＦＶＱＧＡＤＡＣＱＥＴＣＴＫＴＩＲＣＱＦＦＴＹＳＬＬＰＱＤＣＫＡＥＧＣＫＣＳＬＲＬＳＴＤＧＳＰＴＲＩＴＹＥＡＱＧＳＳＧＹＳＬＲＬＣＫＶＶＥＳＳＤＣＴＴＫＩＮＡＲＩＶＧＧＴＮＳＳＬＧＥＷＰＷＱＶＳＬＱＶＫＬＶＳＱＮＨＭＣＧＧＳＩＩＧＲＱＷＩＬＴＡＡＨＣＦＤＧＩＰＹＰＤＶＷＲＩＹＧＧＩＬＮＬＳＥＩＴＮＫＴＰＦＳＳＩＫＥＬＩＩＨＱＫＹＫＭＳＥＧＳＹＤＩＡＬＩＫＬＱＴＰＬＮＹＴＥＦＱＫＰＩＣＬＰＳＫＡＤＴＮＴＩＹＴＮＣＷＶＴＧＷＧＹＴＫＥＲＧＥＴＱＮＩＬＱＫＡＴＩＰＬＶＰＮＥＥＣＱＫＫＹＲＤＹＶＩＴＫＱＭＩＣＡＧＹＫＥＧＧＩＤＡＣＫＧＤＳＧＧＰＬＶＣＫＨＳＧＲＷＱＬＶＧＩＴＳＷＧＥＧＣＡＲＫＥＱＰＧＶＹＴＫＶＡＥＹＩＤＷＩＬＥＫＩＱＳＳＫＥＲＡＬＥＴＳＰＡ  （配列番号：６）
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５５４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５５４】  ラット血漿カリクレインｍＲＮＡ（寄託番号ＮＰ＿０１２７２５）  ＞ｇｉ｜１６２１３８９０４｜基準｜ＮＰ＿０１２７２５．２｜ドブネズミ（Ｒａｔｔｕｓ  ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ）カリクレインＢ、血漿１（Ｋｌｋｂ１）、ｍＲＮＡＴＧＡＡＧＡＣＴＡＧＣＴＴＣＡＴＧＴＧＡＡＧＡＣＴＣＣＴＴＣＴＣＣＴＣＣＡＧＣＡＧＣＡＣＡＡＡＧＣＡＡＣＣＡＴＣＣＴＴＣＣＡＧＧＡＴＧＡＴＴＴＴＡＴＴＣＡＡＡＣＡＡＧＴＧＧＧＴＴＡＴＴＴＴＧＴＴＴＣＣＴＴＧＴＴＣＧＣＴＡＣＡＧＴＴＴＣＣＴＧＴＧＧＧＴＧＴＣＴＧＴＣＡＣＡＡＣＴＧＴＡＴＧＣＡＡＡＴＡＣＣＴＴＣＴＴＣＡＧＡＧＧＴＧＧＧＧＡＴＣＴＧＧＣＴＧＣＣＡＴＣＴＡＣＡＣＣＣＣＧＧＡＴＧＣＣＣＡＧＣＡＣＴＧＴＣＡＧＡＡＧＡＴＧＴＧＣＡＣＧＴＴＴＣＡＣＣＣＣＡＧＧＴＧＣＣＴＧＣＴＣＴＴＣＡＧＣＴＴＣＣＴＴＧＣＣＧＴＧＡＧＴＣＣＡＡＣＣＡＡＧＧＡＧＡＣＡＧＡＴＡＡＡＡＧＧＴＴＴＧＧＧＴＧＣＴＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＧＣＡＴＴＡＣＡＧＧＧＡＣＴＴＴＧＣＣＡＡＧＡＡＴＡＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＧＧＣＣＡＴＴＴＣＴＧＧＴＣＡＴＴＣＴＴＴＡＡＡＡＣＡＧＴＧＴＧＧＣＣＡＴＣＡＡＴＴＡＡＧＴＧＣＴＴＧＣＣＡＣＣＡＡＧＡＣＡＴＡＴＡＣＧＡＡＧＧＡＣＴＧＧＡＴＡＴＧＡＧＡＧＧＧＴＣＣＡＡＣＴＴＴＡＡＴＡＴＡＴＣＴＡＡＧＡＣＣＧＡＣＡＧＴＡＴＴＧＡＡＧＡＡＴＧＣＣＡＧＡＡＡＣＴＧＴＧＣＡＣＡＡＡＴＡＡＴＡＴＴＣＡＣＴＧＣＣＡＡＴＴＴＴＴＣＡＣＡＴＡＴＧＣＴＡＣＡＡＡＡＧＣＡＴＴＴＣＡＣＡＧＡＣＣＡＧＡＧＴＡＣＡＧＧＡＡＧＡＧＴＴＧＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＣＧＣＡＧＴＴＣＡＡＧＴＧＧＡＡＣＧＣＣＣＡＣＣＡＧＴＡＴＡＡＡＧＣＣＡＧＴＧＧＡＣＡＡＣＣＴＧＧＴＧＴＣＴＧＧＡＴＴＣＴＣＡＣＴＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＧＣＴＣＴＣＴＣＡＧＡＧＡＴＣＧＧＴＴＧＣＣＣＣＡＴＧＧＡＴＡＴＴＴＴＣＣＡＧＣＡＣＴＴＴＧＣＣＴＴＴＧＣＡＧＡＣＣＴＧＡＡＴＧＴＡＡＧＣＣＡＴＧＴＣＧＴＣＡＣＣＣＣＣＧＡＴＧＣＣＴＴＣＧＴＧＴＧＴＣＧＣＡＣＣＧＴＴＴＧＣＡＣＣＴＴＣＣＡＴＣＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＴＴＣＴＴＣＡＣＡＴＴＣＴＡＣＡＣＧＡＡＴＧＡＧＴＧＧＧＡＧＡＣＧＧＡＡＴＣＡＣＡＧＡＧＧＡＡＴＧＴＴＴＧＴＴＴＴＣＴＴＡＡＧＡＣＡＴＣＴＡＡＡＡＧＴＧＧＡＡＧＡＣＣＡＡＧＴＣＣＣＣＣＴＡＴＴＡＴＴＣＡＡＧＡＡＡＡＴＧＣＴＧＴＡＴＣＴＧＧＡＴＡＣＡＧＴＣＴＣＴＴＣＡＣＣＴＧＣＡＧＡＡＡＡＧＣＴＣＧＣＣＣＴＧＡＡＣＣＣＴＧＣＣＡＴＴＴＣＡＡＧＡＴＴＴＡＣＴＣＴＧＧＡＧＴＴＧＣＣＴＴＣＧＡＡＧＧＧＧＡＡＧＡＡＣＴＧＡＡＣＧＣＧＡＣＣＴＴＣＧＴＧＣＡＧＧＧＡＧＣＡＧＡＴＧＣＧＴＧＣＣＡＡＧＡＧＡＣＴＴＧＴＡＣＡＡＡＧＡＣＣＡＴＣＣＧＣＴＧＴＣＡＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＴＡＣＴＣＡＴＴＧＣＴＴＣＣＣＣＡＡＧＡＣＴＧＣＡＡＧＧＣＡＧＡＧＧＧＧＴＧＴＡＡＡＴＧＴＴＣＣＴＴＡＡＧＧＴＴＡＴＣＣＡＣＧＧＡＴＧＧＣＴＣＴＣＣＡＡＣＴＡＧＧＡＴＣＡＣＣＴＡＴＧＡＧＧＣＡＣＡＧＧＧＧＡＧＣＴＣＴＧＧＴＴＡＴＴＣＴＣＴＧＡＧＡＣＴＧＴＧＴＡＡＡＧＴＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＴＣＴＧＡＣＴＧＴＡＣＧＡＣＡＡＡＡＡＴＡＡＡＴＧＣＡＣＧＴＡＴＴＧＴＧＧＧＡＧＧＡＡＣＡＡＡＣＴＣＴＴＣＴＴＴＡＧＧＡＧＡＧＴＧＧＣＣＡＴＧＧＣＡＧＧＴＣＡＧＣＣＴＧＣＡＡＧＴＡＡＡＧＴＴＧＧＴＴＴＣＴＣＡＧＡＡＴＣＡＴＡＴＧＴＧＴＧＧＡＧＧＧＴＣＣＡＴＣＡＴＴＧＧＡＣＧＣＣＡＡＴＧＧＡＴＡＣＴＧＡＣＧＧＣＴＧＣＣＣＡＴＴＧＣＴＴＴＧＡＴＧＧＧＡＴＴＣＣＣＴＡＴＣＣＡＧＡＣＧＴＧＴＧＧＣＧＴＡＴＡＴＡＴＧＧＣＧＧＧＡＴＴＣＴＴＡＡＴＣＴＧＴＣＡＧＡＧＡＴＴＡＣＡＡＡＣＡＡＡＡＣＧＣＣＴＴＴＣＴＣＡＡＧＴＡＴＡＡＡＧＧＡＧＣＴＴＡＴＴＡＴＴＣＡＴＣＡＧＡＡＡＴＡＣＡＡＡＡＴＧＴＣＡＧＡＡＧＧＣＡＧＴＴＡＣＧＡＴＡＴＴＧＣＣＴＴＡＡＴＡＡＡＧＣＴＴＣＡＧＡＣＡＣＣＧＴＴＧＡＡＴＴＡＴＡＣＴＧＡＡＴＴＣＣＡＡＡＡＡＣＣＡＡＴＡＴＧＣＣＴＧＣＣＴＴＣＣＡＡＡＧＣＴＧＡＣＡＣＡＡＡＴＡＣＡＡＴＴＴＡＴＡＣＣＡＡＣＴＧＣＴＧＧＧＴＧＡＣＴＧＧＡＴＧＧＧＧＣＴＡＣＡＣＡＡＡＧＧＡＡＣＧＡＧＧＴＧＡＧＡＣＣＣＡＡＡＡＴＡＴＴＣＴＡＣＡＡＡＡＧＧＣＡＡＣＴＡＴＴＣＣＣＴＴＧＧＴＡＣＣＡＡＡＴＧＡＡＧＡＡＴＧＣＣＡＧＡＡＡＡＡＡＴＡＴＡＧＡＧＡＴＴＡＴＧＴＴＡＴＡＡＣＣＡＡＧＣＡＧＡＴＧＡＴＣＴＧＴＧＣＴＧＧＣＴＡＣＡＡＡＧＡＡＧＧＴＧＧＡＡＴＡＧＡＴＧＣＴＴＧＴＡＡＧＧＧＡＧＡＴＴＣＣＧＧＴＧＧＣＣＣＣＴＴＡＧＴＴＴＧＣＡＡＡＣＡＴＡＧＴＧＧＡＡＧＧＴＧＧＣＡＧＴＴＧＧＴＧＧＧＴＡＴＣＡＣＣＡＧＣＴＧＧＧＧＣＧＡＡＧＧＣＴＧＴＧＣＣＣＧＣＡＡＧＧＡＧＣＡＡＣＣＡＧＧＡＧＴＣＴＡＣＡＣＣＡＡＡＧＴＴＧＣＴＧＡＧＴＡＣＡＴＴＧＡＣＴＧＧＡＴＡＴＴＧＧＡＧＡＡＧＡＴＡＣＡＧＡＧＣＡＧＣＡＡＧＧＡＡＡＧＡＧＣＴＣＴＧＧＡＧＡＣＡＴＣＴＣＣＡＧＣＡＴＧＡＧＧＡＧＧＣＴＧＧＧＴＡＣＴＧＡＴＧＧＧＧＡＡＧＡＧＣＣＣＡＧＣＴＧＧＣＡＣＣＡＧＣＴＴＴＡＣＣＡＣＣＴＧＣＣＣＴＣＡＡＧＴＣＣＴＡＣＴＡＧＡＧＣＴＣＣＡＧＡＧＴＴＣＴＣＴＴＣＴＧＣＡＡＡＡＴＧＴＣＧＡＴＡＧＴＧＧＴＧＴＣＴＡＣＣＴＣＧＣＡＴＣＣＴＴＡＣＣＡＴＡＧＧＡＴＴＡＡＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＡＧＡＣＡＣＡＧＴＴＧＣＴＡＡＡＧＡＣＡＧＣＧＣＣＡＴＧＣＴＣＡＡＧＣＧＴＧＣＴＴＣＣＴＧＣＣＴＴＧＡＧＣＡＡＣＡＧＧＡＡＣＧＣＣＡＡＴＧＡＧＡＡＣＴＡＴＣＣＡＡＡＧＡＴＴＡＣＣＡＡＧＣＣＴＧＴＴＴＧＧＡＡＡＴＡＡＡＡＴＧＧＴＣＡＡＡＧＧＡＴＴＴＴＴＡＴＴＡＧＧＴＡＧＴＧＡＡＡＴＴＡＧＧＴＡＧＴＴＧＴＣＣＴＴＧＧＡＡＣＣＡＴＴＣＴＣＡＴＧＴＡＡＣＴＧＴＴＧＡＣＴＣＴＧＧＡＣＣＴＣＡＧＣＡＧＡＴＣＡＣＡＧＴＴＡＣＣＴＴＣＴＧＴＣＣＡＣＴＴＣＴＧＡＣＡＴＴＴＧＴＧＴＡＣＴＧＧＡＡＣＣＴＧＡＴＧＣＴＧＴＴＣＴＴＣＣＡＣＴＴＧＧＡＧＣＡＡＡＧＡＡＣＴＧＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＴＴＣＴＡＴＣＣＡＴＴＧＧＧＡＡＡＡＡＧＡＧＡＴＣＴＴＴＧＴＡＡＣＡＴＴＴＣＣＴＴＴＡＣＡＡＴＡＡＡＡＡＧＡＴＧＴＴＣＴＡＣＴＴＧＧＡＣＴＴＧＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡ  （配列番号：７）
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０６６０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０６６０】  反復アミノ酸を含むＵＲＰの例としては、ポリ−グリシン、ポリ−グルタミン酸、ポリ−アスパラギン酸、ポリ−セリン、ポリ−トレオニン、（ＧＸ）ｎ（配列番号：８）（式中、Ｇはグリシンであり、Ｘはセリン、アスパラギン酸、グルタミン酸、トレオニン、またはプロリンであり、ｎは少なくとも２０である）、（ＧＧＸ）ｎ（配列番号：９）（式中、Ｘはセリン、アスパラギン酸、グルタミン酸、トレオニン、またはプロリンであり、ｎは少なくとも１３である）、（ＧＧＧＸ）ｎ（配列番号：１０）（式中、Ｘはセリン、アスパラギン酸、グルタミン酸、トレオニン、またはプロリンであり、ｎは少なくとも１０である）、（ＧＧＧＧＸ）ｎ（配列番号：１１）（式中、Ｘはセリン、アスパラギン酸、グルタミン酸、トレオニン、またはプロリンであり、ｎは少なくとも８である）、（ＧｚＸ）ｎ（配列番号：１２）（式中、Ｘはセリン、アスパラギン酸、グルタミン酸、トレオニン、またはプロリンであり、ｎは少なくとも１５であり、ｚは１〜２０である）が挙げられるが、これらに限定されない。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０８２９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０８２９】  本発明者らは、いくつかの抗体阻害剤および血漿カリクレイン結合剤（ｐＫａｌ）を見出した。これらのうち最も強力なものをさらに特性決定し、見かけの阻害定数（Ｋｉ，ａｐｐ）＜１０ｎＭを有すること、他の被験セリンプロテイナーゼに関して特異的なｐＫａｌ阻害剤であること、およびプレカリクレインと結合しないことが示された。阻害剤および結合剤のＣＤＲアミノ酸配列をそれぞれ表１および２に示す。【表３】
2014506257.tif 000146
2014506257.tif 000147
2014506257.tif 000148
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０８３０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０８３０】
2014506257.tif 000149
2014506257.tif 000150
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【表４】
2014506257.tif 000156
2014506257.tif 000157
2014506257.tif 000158
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０８３１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０８３１】  ｐＫａｌ抗体結合剤の軽鎖（ＬＣ）および重鎖（ＨＣ）可変ドメインのアミノ酸配列を以下に示す（それぞれ登場順に配列番号７４９−８９８）。2014506257.tif 000159
2014506257.tif 000160
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2014506257.tif 000171
2014506257.tif 000172
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０８３３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０８３３】  表３に列挙した抗体のうち、Ｍ１４２−Ｈ０８のみがヒト血漿カリクレインをナノモル以下のＫｉ，ａｐｐで阻害した。しかしながら、Ｍ１４２−Ｈ０８がＩｇＧとして産生された場合、それは重鎖のＣＤＲ３内で切断されることが見出された。したがって、本発明者らは、親和性を改善するために２つのアプローチ：１）ＲＯＬＩＣ（軽鎖の急速至適化（Ｒａｐｉｄ  Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｌｉｇｈｔ  Ｃｈａｉｎｓ））と呼ばれる新規形態の軽鎖混合を用いた、Ｍ１６２−Ａ０４およびＭ１６０−Ｇ１２の親和性成熟（例えば、ＷＯ２００９／１０２９２７号および米国特許第２００９−０２１５１１９号を参照されたい）；ならびに２）Ｍ１４２−Ｈ０８の結合および阻害特性を保持しつつ生じるＩｇＧ切断を防止するためのＭ１４２−Ｈ０８の配列至適化、を施行することを決定した。【表５】
2014506257.tif 000173
［実施例３］
【手続補正１５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０８３４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０８３４】  Ｍ１４２−Ｈ０８の配列至適化  表３に列挙した抗体のうち、Ｍ１４２−Ｈ０８のみがヒトｐＫａｌをナノモル以下のＫｉ，ａｐｐで阻害する。しかしながら、Ｍ１４２−Ｈ０８がＩｇＧとして産生された場合、それは重鎖のＣＤＲ３中で切断されることが見出された。Ｍ１４２−Ｈ０８は、質量分析によりＨＣ−ＣＤＲ３配列（ＧＧＬＬＬＷＦＲＥＬＫＳＮＹＦＤＹ（配列番号：８９９））の「ＷＦＲ」配列のアルギニン後に切断されることが見出された。この切断により、抗体（ＣＨＯおよび２９３Ｔヒト腎細胞の両方）を発現するために使用された細胞由来のプロテイナーゼは、単一の特異的部位で抗体を酵素的に切断することが示唆される。本発明者らは、Ｍ１４２−Ｈ０８の結合および阻害特性を保持しつつ生じるＩｇＧの切断を防止するアミノ酸置換を同定するために、Ｍ１４２−Ｈ０８のＨＣ−ＣＤＲ３配列を変異させた。同様に「切り取られた」抗体を用いた先の実験により、宿主細胞プロテイナーゼにより切り取られずに標的となる酵素の強力な阻害を保持する抗体を同定するためには、単に推定Ｐ１位（プロテイナーゼのサブサイト１、表４を参照されたい）に注目することは不十分であり得ることが示唆された。そのため、本発明者らは、切り取られていないが依然として強力なｐＫａｌ阻害剤であるＭ１４２−Ｈ０８変異体を同定するために、切断部位の周辺領域内の単一点変異の小さなライブラリーを作製した。本発明者らは、このライブラリーを「設計によるＣＤＲ３」ライブラリーと呼ぶ。この小さなライブラリーは、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１、またはＰ１’部位のいずれかに無作為のコドンＮＮＫを含むＰＣＲプライマーを用いて構築した。これにより、各４位が任意の２０種のアミノ酸（２０＋２０＋２０＋２０＝８０メンバ）を含み得る小さなライブラリーが得られる。ＰＣＲを用いて、このライブラリーを、標準的なファージミドベクターであるｐＭｉｄ２１ベクター中のＭ１４２−Ｈ０８Ｆａｂ配列にクローニングした。【表６】
2014506257.tif 000174
【手続補正１６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０８３７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０８３７】  非生殖系列（Ｘ６３−Ｇ０６）および生殖系列の軽鎖のＤＮＡおよびアミノ酸配列整列、ＲＯＬＩＣ親和性成熟を用いて見出された同じ抗体のコドン至適化（Ｘ８１−Ｂ０１）型を図４および５にそれぞれ示す。非生殖系列（Ｘ６３−Ｇ０６）および生殖系列の重鎖のＤＮＡおよびアミノ酸配列整列、ＲＯＬＩＣ親和性成熟を用いて見出された同じ抗体のコドンの至適化（Ｘ８１−Ｂ０１）型を図６および７にそれぞれ示す。【表７】
2014506257.tif 000175
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2014506257.tif 000177
2014506257.tif 000178
【手続補正１７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０８３８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０８３８】
2014506257.tif 000179
2014506257.tif 000180
2014506257.tif 000181
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2014506257.tif 000189
2014506257.tif 000190
2014506257.tif 000191
【表８】
2014506257.tif 000192
【手続補正１８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０８３９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０８３９】  ＲＯＬＩＣを用いて見出されたｐＫａｌの親和性成熟抗体阻害剤の軽鎖（ＬＣ）および重鎖（ＨＣ）可変ドメインのアミノ酸配列を以下に示す（それぞれ登場順に配列番号１１３８−１１４７）。2014506257.tif 000193
Ｘ８１−Ｂ０１は上述のとおり、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞で産生される生殖系列化ＩｇＧ型のＸ６３−Ｇ０６Ｆａｂである。  Ｘ１０１−Ａ０１（別名ＤＸ−２９２２）は、ＣＨＯ細胞で産生される生殖系列化ＩｇＧ型のＸ６３−Ｇ０６Ｆａｂである。［実施例４］
【手続補正１９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０８４４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０８４４】  ６２個の抗体がＣＤＲ１／２およびＣＤＲ３領域のいずれかにおける修飾に起因するＸ６３−Ｇ０６の改善に基づき見出された。これを表９に示す。１０ｎＭの抗体（Ｆａｂ断片として）を用いた阻害スクリーニングにより、２４個の抗体がｐＫａｌ活性を９０％超阻害したことが明らかになった。いくつかの抗体は、ヒトｐＫａｌのナノモル以下の阻害剤であることが示された。【表１０】
2014506257.tif 000194
2014506257.tif 000195
2014506257.tif 000196
【手続補正２０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０８４５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０８４５】  Ｍ１６２−Ａ０４に基づくＣＤＲ１／２およびＣＤＲ３スパイキング親和性成熟ライブラリーから得られたｐＫａｌ抗体の軽鎖（ＬＣ）および重鎖（ＨＣ）可変ドメインのアミノ酸配列（それぞれ登場順に配列番号１６４０−１８０３）。2014506257.tif 000197
2014506257.tif 000198
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2014506257.tif 000212
【表１１】
2014506257.tif 000213
2014506257.tif 000214
2014506257.tif 000215
【手続補正２１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０８４６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０８４６】  Ｘ６３−Ｇ０６に基づくＣＤＲ１／２およびＣＤＲ３スパイキング親和性成熟ライブラリーから得られたｐＫａｌ抗体の軽鎖（ＬＣ）および重鎖（ＨＣ）可変ドメインのアミノ酸配列（それぞれ登場順に配列番号２１７６−２２９９）。2014506257.tif 000216
2014506257.tif 000217
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2014506257.tif 000227
【手続補正２２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０８５３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０８５３】  ＥＰＩ−ＫＡＬ２配列は、  ＥＡＭＨＳＦＣＡＦＫＡＤＤＧＰＣＲＡＡＨＰＲＷＦＦＮＩＦＴＲＱＣＥＥＦＳＹＧＧＣＧＧＮＱＮＲＦＥＳＬＥＥＣＫＫＭＣＴＲＤ（配列番号：２３００）である（斜体のアミノ酸は、ＴＦＰＩと異なるアミノ酸である）。
【手続補正２３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０８８６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０８８６】  見出された４つの抗体（Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｄ０５、Ｘ１１５−Ｅ０９およびＸ１１５−Ｈ０６）は、ＤＸ−２９２２親抗体（Ｆａｂ断片としてＸ６３−Ｇ０６、２９３Ｔ細胞で産生されるＩｇＧとしてＸ８１−Ｂ０１またはＣＨＯ細胞で産生されるＩｇＧとしてＸ１０１−Ａ０１としても知られる）に由来するものであり、強力なｐＫａｌ阻害剤であることがわかった。比較用にＤＸ−２９２２のアミノ酸配列が示してある。３つ親和性成熟抗体（Ｘ１１５−Ｂ０７、Ｘ１１５−Ｅ０９およびＸ１１５−Ｈ０６）がＨｖ−ＣＤＲ３中に変異を含むのに対し、Ｘ１１５−Ｄ０５は異なるＨｖ−ＣＤＲ１／ＣＤＲ２を有するということが明らかである。他の４つの見出された抗体（Ｘ１１５−Ｆ０２、Ｘ１１５−Ａ０３、Ｘ１１５−Ｄ０１およびＸ１１５−Ｇ０４）はＭ１６２−Ａ０４親抗体に由来するものである。８つの親和性成熟抗体は、すべてプレカリクレインと結合しない。【表２０】
2014506257.tif 000228
2014506257.tif 000229
【表２１】
2014506257.tif 000230
【手続補正２４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０８９４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０８９４】  以下は、軽鎖可変領域(LV)、および重鎖可変領域(HV)領域配列である8つの例示的な親和性成熟抗pKal抗体である（それぞれ登場順に配列番号２３８５−２４４２）:  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【手続補正２５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０８９７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０８９７】  表１９〜２３はすべて、例示的な血漿カリクレインであるＭ１６０−Ｇ１２のＦａｂを阻害する血漿カリクレインを示す。本明細書に記載の任意の抗体は、このまたは類似の構築内に入れることができることが本明細書において企図される。さらに、他の配列をＵＲＰに使用できる。特に、抗体Ｍ１６２−Ａ０４、Ｍ１４２−Ｈ０８、Ｘ６３−Ｇ０６、Ｘ８１−Ｂ０１、Ｘ６７−Ｄ０３、およびＸ６７−Ｇ０４はＭ１６０−Ｇ１２と置換できる。米国特許第７，８４６，４４５号（その全体を参照することによって本明細書に組み込まれる）由来の配列を本明細書に記載の血漿カリクレイン結合タンパク質と共に使用することもできる。【表２２】
2014506257.tif 000231
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2014506257.tif 000237
2014506257.tif 000238
2014506257.tif 000239
2014506257.tif 000240
2014506257.tif 000241

【表２３】
2014506257.tif 000242
2014506257.tif 000243
2014506257.tif 000244
2014506257.tif 000245
【表２４】
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【表２５】
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【国際調査報告】
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