(57)【要約】  ビス（チオヒドラジドアミド）化合物の投与は、癌を有する被験体の治療に、驚くほど有効であることが見出されている。ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を連続投与するか、または被験体において、該化合物の一定濃度が達成されるように、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を投与することを含む、癌を有する被験体を治療する方法を開示する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の構造式：
【化１】
2014534238.tif 000014
によって示されるビス（チオヒドラジドアミド）化合物、または薬学的に許容されるその塩、または遷移金属カチオンに錯体化した脱プロトン化型の有効量を被験体に連続投与することを含む、癌を有する被験体を治療する方法。
【請求項２】
癌が：
ｉ）線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、肛門癌、食道癌、胃癌、肝細胞癌、膀胱癌、子宮内膜癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、胃癌、心房粘液腫、扁平細胞癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、甲状腺および副甲状腺新生物、乳頭癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支原性肺癌、肝細胞腫、胆管癌、絨毛癌、セミノーマ、胚性癌腫、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌、精巣腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神経膠腫、下垂体新生物、星状細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽腫、聴神経腫瘍、シュワン腫、乏突起神経膠腫、髄膜腫、脊髄腫瘍、黒色腫、神経芽腫、褐色細胞腫、１〜３型内分泌新生物、網膜芽細胞腫からなる群より選択される、ヒト肉腫または癌腫；および
ｉｉ）急性リンパ球性白血病、急性骨髄性白血病；慢性白血病、真性多血症、多発性骨髄腫、ワルデンストレーム高グロブリン血症、重鎖病、Ｔ細胞白血病、Ｂ細胞白血病；混合細胞白血病、骨髄性白血病、好中球性白血病、好酸球性白血病、単球性白血病、骨髄単球性白血病、ネーゲリ型骨髄性白血病、および非リンパ球性白血病からなる群より選択される、白血病
からなる群より選択される、請求項１の方法。
【請求項３】
癌が、Ｂ細胞リンパ腫、非小細胞肺癌、腎臓癌または結腸直腸癌からなる群より選択される、請求項１の方法。
【請求項４】
ビス（チオヒドラジドアミド）化合物が、２つの一価カチオンＭ＋または１つの二価カチオンＭ２＋を含む二塩（ｄｉｓａｌｔ）である、請求項１の方法。
【請求項５】
ビス（チオヒドラジドアミド）化合物が２つの一価カチオンＭ＋を含む二塩である、請求項４の方法。
【請求項６】
Ｍ＋がＫ＋またはＮａ＋である、請求項５の方法。
【請求項７】
ビス（チオヒドラジドアミド）化合物が、遷移金属カチオンに錯体化したビス（チオヒドラジドアミド）化合物の脱プロトン化型である、請求項１の方法。
【請求項８】
遷移金属カチオンが、Ｎｉ２＋、Ｃｕ２＋、Ｃｏ２＋、Ｆｅ２＋、Ｚｎ２＋、Ｐｔ２＋またはＰｄ２＋である、請求項７の方法。
【請求項９】
遷移金属カチオンがＣｕ２＋である、請求項８の方法。
【請求項１０】
被験体がヒトである、請求項１〜９のいずれか一項の方法。
【請求項１１】
ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を全身投与する、請求項１〜１０のいずれか一項の方法。
【請求項１２】
ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を皮下投与する、請求項１〜１１のいずれか一項の方法。
【請求項１３】
ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を静脈内投与する、請求項１〜１１のいずれか一項の方法。
【請求項１４】
ビス（チオヒドラジドアミド化合物）の一定濃度が被験体において達成される、請求項１〜１３のいずれか一項の方法。
【請求項１５】
ビス（チオヒドラジドアミド）化合物の一定濃度が、血漿濃度、血清濃度、腫瘍部位での濃度、腫瘍内細胞における濃度、または腫瘍内血管系における濃度である、請求項１〜１４のいずれか一項の方法。
【請求項１６】
ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を７日間連続投与する、請求項１〜１５のいずれか一項の方法。
【請求項１７】
ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を７日間連続投与し、そして７日間連続投与を、少なくとも１回、さらに反復する、請求項１〜１６のいずれか一項の方法。
【請求項１８】
ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を、癌を治療するための単一療法として投与する、請求項１〜１７のいずれか一項の方法。
【請求項１９】
ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を、有効量のタキサンと組み合わせて投与する、請求項１〜１８のいずれか一項の方法。
【請求項２０】
タキサンがパクリタキセルである、請求項１９の方法。
【請求項２１】
ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を、放射線、低体温法および／または免疫療法の非存在下で投与する、請求項１〜２０のいずれか一項の方法。
【請求項２２】
以下の構造式：
【化２】
2014534238.tif 000015
によって示されるビス（チオヒドラジドアミド）化合物、または薬学的に許容されるその塩、または遷移金属カチオンに錯体化した脱プロトン化型の有効量を、被験体において、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物の一定濃度が存在するように、被験体に投与することを含む、癌を有する被験体を治療する方法。
【請求項２３】
癌が：
ｉ）線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、肛門癌、食道癌、胃癌、肝細胞癌、膀胱癌、子宮内膜癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、胃癌、心房粘液腫、扁平細胞癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、甲状腺および副甲状腺新生物、乳頭癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支原性肺癌、肝細胞腫、胆管癌、絨毛癌、セミノーマ、胚性癌腫、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌、精巣腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神経膠腫、下垂体新生物、星状細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽腫、聴神経腫瘍、シュワン腫、乏突起神経膠腫、髄膜腫、脊髄腫瘍、黒色腫、神経芽腫、褐色細胞腫、１〜３型内分泌新生物、網膜芽細胞腫からなる群より選択される、ヒト肉腫または癌腫；ならびに
ｉｉ）急性リンパ球性白血病、急性骨髄性白血病；慢性白血病、真性多血症、多発性骨髄腫、ワルデンストレーム高グロブリン血症、重鎖病、Ｔ細胞白血病、Ｂ細胞白血病；混合細胞白血病、骨髄性白血病、好中球性白血病、好酸球性白血病、単球性白血病、骨髄単球性白血病、ネーゲリ型骨髄性白血病、および非リンパ球性白血病からなる群より選択される、白血病
からなる群より選択される、請求項２２の方法。
【請求項２４】
癌が、Ｂ細胞リンパ腫、非小細胞肺癌、腎臓癌または結腸直腸癌からなる群より選択される、請求項２２の方法。
【請求項２５】
ビス（チオヒドラジドアミド）化合物が、２つの一価カチオンＭ＋または１つの二価カチオンＭ２＋を含む二塩である、請求項２２〜２４のいずれか一項の方法。
【請求項２６】
ビス（チオヒドラジドアミド）化合物が２つの一価カチオンＭ＋を含む二塩である、請求項２５の方法。
【請求項２７】
Ｍ＋がＫ＋またはＮａ＋である、請求項２６の方法。
【請求項２８】
ビス（チオヒドラジドアミド）化合物が、遷移金属カチオンに錯体化したビス（チオヒドラジドアミド）化合物の脱プロトン化型である、請求項２２〜２４のいずれか一項の方法。
【請求項２９】
遷移金属カチオンが、Ｎｉ２＋、Ｃｕ２＋、Ｃｏ２＋、Ｆｅ２＋、Ｚｎ２＋、Ｐｔ２＋またはＰｄ２＋である、請求項２８の方法。
【請求項３０】
遷移金属カチオンがＣｕ２＋である、請求項２９の方法。
【請求項３１】
被験体がヒトである、請求項２２〜３０のいずれか一項の方法。
【請求項３２】
ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を全身投与する、請求項２２〜３１のいずれか一項の方法。
【請求項３３】
ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を皮下投与する、請求項２２〜３２のいずれか一項の方法。
【請求項３４】
ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を静脈内投与する、請求項２２〜３２のいずれか一項の方法。
【請求項３５】
ビス（チオヒドラジドアミド化合物）の一定濃度が被験体において達成される、請求項２２〜３４のいずれか一項の方法。
【請求項３６】
ビス（チオヒドラジドアミド）化合物の一定濃度が、血漿濃度、血清濃度、腫瘍部位での濃度、腫瘍内細胞における濃度、または腫瘍内血管系における濃度である、請求項２２〜３５のいずれか一項の方法。
【請求項３７】
ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を７日間連続投与する、請求項２２〜３６のいずれか一項の方法。
【請求項３８】
ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を７日間連続投与し、そして７日間連続投与を、少なくとも１回、さらに反復する、請求項２２〜３７のいずれか一項の方法。
【請求項３９】
ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を、癌を治療するための単一療法として投与する、請求項２２〜３８のいずれか一項の方法。
【請求項４０】
ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を、有効量のタキサンと組み合わせて投与する、請求項２２〜３９のいずれか一項の方法。
【請求項４１】
タキサンがパクリタキセルである、請求項２０の方法。
【請求項４２】
ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を、放射線、低体温法および／または免疫療法の非存在下で投与する、請求項２２〜４１のいずれか一項の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、２０１１年１１月１０日出願の米国仮出願第６１／５５８，４１１号および２０１１年１１月１０日出願の米国仮出願第６１／５５８，４１２号に対する優先権を主張し、これらの出願各々の全内容は、本明細書に援用される。
【発明の概要】
【０００２】
発明の背景
エレスクロモールは、以下の構造式：
【０００３】
【化１】
2014534238.tif 000002
【０００４】
のビス（チオヒドラジドアミド）化合物である。エレスクロモールは、癌を治療するために用いられ、細胞生存と適合する閾値を超えて反応性酸素種（ＲＯＳ）のレベルを上昇させることによって、細胞において酸化ストレスを生じる能力に関して知られる。エレスクロモールは、１：１モル比で銅（Ｃｕ）キレートを容易に形成し、そしてこの生理活性エレスクロモール−Ｃｕ複合体の形成は、その活性に関する律速段階である。エレスクロモール効率を改善するための方法が非常に望ましい。
【０００５】
発明の要約  エレスクロモールは、単一剤として連続投与された際、または被験体において、エレスクロモールの一定レベルを維持する方式で、単一剤として投与された際、癌治療に驚くほど有効であることが見出されてきている。上記発見に基づき、被験体にエレスクロモールを連続投与することによって、癌を有する被験体を治療する方法を本明細書に記載する。
【０００６】
いくつかの態様において、本発明は、癌を有する被験体を治療する方法であって、以下の構造式：
【０００７】
【化２】
2014534238.tif 000003
【０００８】
によって示されるビス（チオヒドラジドアミド）化合物、または薬学的に許容されるその塩、または遷移金属カチオンに錯体化したその脱プロトン化型の有効量を被験体に連続投与することを含む方法を提供する。
【０００９】
いくつかの態様において、癌は：
ｉ）線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、肛門癌、食道癌、胃癌、肝細胞癌、膀胱癌、子宮内膜癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、胃癌、心房粘液腫、扁平細胞癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、甲状腺および副甲状腺新生物、乳頭癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支原性肺癌、肝細胞腫、胆管癌、絨毛癌、セミノーマ、胚性癌腫、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌、精巣腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神経膠腫、下垂体新生物、星状細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽腫、聴神経腫瘍、シュワン腫、乏突起神経膠腫、髄膜腫、脊髄腫瘍、黒色腫、神経芽腫、褐色細胞腫、１〜３型内分泌新生物、網膜芽細胞腫からなる群より選択される、ヒト肉腫または癌腫；ならびに
ｉｉ）急性リンパ球性白血病、急性骨髄性白血病；慢性白血病、真性多血症、多発性骨髄腫、ワルデンストレーム高グロブリン血症、重鎖病、Ｔ細胞白血病、Ｂ細胞白血病；混合細胞白血病、骨髄性白血病、好中球性白血病、好酸球性白血病、単球性白血病、骨髄単球性白血病、ネーゲリ型骨髄性白血病、および非リンパ球性白血病からなる群より選択される、白血病
からなる群より選択される。
【００１０】
いくつかの態様において、癌は、Ｂ細胞リンパ腫、非小細胞肺癌、腎臓癌または結腸直腸癌からなる群より選択される。
【００１１】
いくつかの態様において、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物は、ビス（チオヒドラジドアミド）の一定濃度が被験体において維持されるように投与される。１つの態様において、被験体はヒトである。
【００１２】
いくつかの態様において、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物は、２つの一価カチオンＭ＋または１つの二価カチオンＭ２＋を含む二塩（ｄｉｓａｌｔ）である。１つの態様において、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物は、２つの一価カチオンＭ＋を含む二塩である。さらなる態様において、Ｍ＋はＫ＋またはＮａ＋である。
【００１３】
いくつかの態様において、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物は、遷移金属カチオンに錯体化したビス（チオヒドラジドアミド）化合物の脱プロトン化型である。１つの態様において、遷移金属カチオンは、Ｎｉ２＋、Ｃｕ２＋、Ｃｏ２＋、Ｆｅ２＋、Ｚｎ２＋、Ｐｔ２＋またはＰｄ２＋である。さらなる態様において、遷移金属カチオンはＣｕ２＋である。
【００１４】
１つの態様において、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を全身投与する。別の態様において、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を皮下投与する。別の態様において、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を静脈内投与する。
【００１５】
１つの態様において、癌を治療する開示する方法は、治療されている被験体において、ビス（チオヒドラジドアミド化合物）の一定濃度を達成する。さらなる態様において、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物の一定濃度は、血漿濃度、血清濃度、腫瘍部位での濃度、腫瘍内細胞における濃度、または腫瘍内血管系における濃度である。
【００１６】
１つの態様において、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を７日間連続投与する。さらなる態様において、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を７日間連続投与し、そして７日間連続投与を、少なくとも１回、さらに反復する。別の態様において、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物の一定濃度が被験体において存在するように、７日間投与する。さらなる態様において、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物の一定濃度が被験体において存在するように、７日間投与し、そして７日間連続投与を、少なくとも１回、さらに反復する。
【００１７】
１つの態様において、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を、癌を治療するための単一療法として連続投与する。別の態様において、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を有効量のタキサンと組み合わせて連続投与する。さらなる態様において、タキサンはパクリタキセルである。別の態様において、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を、放射線、低体温法および／または免疫療法の非存在下で連続投与する。
【００１８】
１つの態様において、ビス（チオヒドラジドアミド）を、ビス（チオヒドラジドアミド）の一定濃度が被験体において存在するように、癌を治療するための単一療法として投与する。別の態様において、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を、ビス（チオヒドラジドアミド）の一定濃度が被験体において存在するように、有効量のタキサンと組み合わせて投与する。さらなる態様において、タキサンはパクリタキセルである。別の態様において、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を、ビス（チオヒドラジドアミド）の一定濃度が被験体において存在するように、放射線、低体温法および／または免疫療法の非存在下で投与する。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】図１は、ＰＢＭＣおよびＨＬ−６０細胞由来の核、細胞質ゾルおよびミトコンドリア分画における相対的銅レベルを示すグラフである。
【図２】図２は、異なる濃度のＣｕＣｌ２、ＤＳＦ−Ｃｕおよびエレスクロモール−Ｃｕで処理したＰＢＭＣおよびＨＬ−６０細胞におけるＭｉｔｏＳｏｘ  Ｒｅｄアッセイによって測定されるＲＯＳレベルを示すグラフである。
【図３】図３は、ビヒクルまたは１００ｎＭエレスクロモールで処理したＰＢＭＣおよびＨＬ−６０細胞における、細胞性銅レベルおよびエレスクロモールレベルを示すグラフである。
【図４】図４は、部分的に、エレスクロモール−６５Ｃｕおよび遊離６５Ｃｕで処理したＨＬ−６０細胞における、長期に渡って測定された６５Ｃｕおよび６３Ｃｕレベルを示すグラフである。図４は、部分的に、エレスクロモールによるＣｕシャトルの提唱される機構を示す模式図である。
【図５】図５は、エレスクロモールのＩ．Ｖ．ボーラス投与後の多様な時点での血漿エレスクロモール−Ｃｕ血漿濃度を示すグラフである。
【図６】図６は、連続投与されたエレスクロモールのマウス毒性研究において毎日測定された体重における％変化を示すグラフである。
【図７】図７は、連続投与されるエレスクロモールのマウス毒性研究における、脳、心臓、腎臓、脾臓、胸腺、精巣に関する、％臓器重量／体重を示すグラフである。
【図８】図８は、連続注入によってＤＲＤまたはエレスクロモール塩を投与されたか、あるいはＩ．Ｖ．ボーラス用量によってエレスクロモール塩を投与されたマウスにおける、Ｄａｕｄｉ  Ｂ細胞リンパ腫腫瘍の腫瘍移植後２６〜４１日目に測定された平均腫瘍体積を示すグラフである。
【図９】図９は、連続注入によってＤＲＤまたはエレスクロモール塩を投与されたマウスにおける、Ｈ１７０３ヒトＮＳＣＬＣ腫瘍の腫瘍移植後２２〜４３日目に測定された平均腫瘍体積を示すグラフである。
【図１０】図１０は、連続注入によってＤＲＤまたはエレスクロモール塩を投与されたか、あるいはＩ．Ｖ．ボーラス用量によってエレスクロモール塩を投与されたマウスにおける、７８６−Ｏ  ＲＣＣ腫瘍の腫瘍移植後１６〜３７日目に測定された平均腫瘍体積を示すグラフである。
【図１１】図１１は、連続注入によってＤＲＤまたはエレスクロモール塩を投与されたマウスにおける、ＨＣＴ１１６ヒト結腸腫瘍の腫瘍移植後１６〜３５日目に測定された平均腫瘍体積を示すグラフである。
【図１２】図１２は、連続注入によってＤＲＤまたはエレスクロモール塩を投与されたマウスにおける、ＳＷ４８０ヒト結腸腫瘍の腫瘍移植後１４〜３２日目に測定された平均腫瘍体積を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
化合物およびその配合物
本発明は、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物の有効量を被験体に連続投与するか、または被験体の体内で、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物、または薬学的に許容されるその塩、または遷移金属イオンに錯体化したその脱プロトン化型の一定の濃度が維持されるのに十分な間隔で、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物の量を被験体に投与することを含む、癌を有する被験体を治療する方法に関する。癌に関して治療中の被験体に投与しようとするビス（チオヒドラジドアミド）化合物は、以下の構造式：
【００２１】
【化３】
2014534238.tif 000004
【００２２】
によって提示されるエレスクロモールである。
【００２３】
本明細書記載のビス（チオヒドラジドアミド）化合物は、薬学的に許容される塩の型で存在してもよい。薬学的に許容される塩の型には、薬学的に許容される塩基性／カチオン性塩が含まれる。塩基付加塩には水酸化、炭酸、重炭酸アンモニウムまたはアルカリまたはアルカリ土類金属等の無機塩基、ならびにアルコキシド、アルキルアミド、アルキルおよびアリールアミン等の有機塩基に由来するものが含まれる。したがって、本発明の塩を調製する際に有用なこうした塩基には、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アンモニウム、炭酸カリウム等が含まれる。
【００２４】
１つの態様において、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物は、以下の構造式：
【００２５】
【化４】
2014534238.tif 000005
【００２６】
式中、Ｍ＋は薬学的に許容される一価カチオンであり、そしてＭ２＋は薬学的に許容される二価カチオンである
によって示される二塩の型である。「薬学的に許容される」は、カチオンが被験体への投与に適していることを意味する。Ｍ＋またＭ２＋の例には、Ｌｉ＋、Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｚｎ２＋、およびＮＲ４＋、式中、各Ｒは、独立に、水素、置換もしくは非置換アルキル基（例えばヒドロキシアルキル基、アミノアルキル基またはアンモニウムアルキル基）、または置換もしくは非置換アリール基（例えばフェニル、ナフチル、およびアントラシル、イミダゾリル、チエニル、フラニル、ピリジル、ピリミジル、ピラニル、ピラゾリル、ピロイル、ピラジニル、チアゾール、オキサゾリル、およびテトラゾール）であるか、あるいは２つのＲ基が、一緒に、芳香環に融合してもよい、置換または非置換非芳香族複素環を形成する、が含まれる。好ましくは、薬学的に許容されるカチオンは、Ｌｉ＋、Ｎａ＋、Ｋ＋、ＮＨ３（Ｃ２Ｈ５ＯＨ）＋、Ｎ（ＣＨ３）３（Ｃ２Ｈ５ＯＨ）＋、アルギニンまたはリジンである。より好ましくは、薬学的に許容されるカチオンはＮａ＋またはＫ＋である。Ｎａ＋がさらにより好ましい。
【００２７】
別の態様において、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物は、遷移金属イオンに錯体化した脱プロトン化型である。用語「錯体化」は、エレスクロモールが、１またはそれより多い配位共有結合または配位結合を通じて、遷移金属イオンに付着することを意味する。用語「キレート」は、エレスクロモールが、配位共有結合または配位結合を通じて、２またはそれより多い付着点で、遷移金属イオンに結合することを意味する。用語「配位」、「配位した」、「配位共有結合」および「配位結合」は、一般の当業者によって通常知られる意味を有する。ビス（チオヒドラジドアミド）化合物の「脱プロトン化型」は、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物、あるいはその塩、水和物、溶媒和物または多形から、１またはそれより多いプロトンが除去されている分子を指す。ビス（チオヒドラジドアミド）化合物の脱プロトン化型は、以下の構造式：
【００２８】
【化５】
2014534238.tif 000006
【００２９】
によって示される。
【００３０】
「遷移金属カチオン」は、周期表の３〜１２族の金属の陽性荷電イオンを指す。例には、Ｎｉ２＋、Ｃｕ＋、Ｃｕ２＋、Ｃｏ２＋、Ｃｏ３＋、Ｆｅ２＋、Ｆｅ３＋、Ｚｎ２＋、Ｐｔ２＋、Ｐｄ２＋、Ｖ４＋、Ｖ５＋、Ｃｒ２＋、Ｃｒ３＋、Ｃｒ４＋、Ｍｎ２＋、Ｍｎ３＋、Ｍｎ４＋およびＭｎ５＋が含まれる。特定の態様において、遷移金属カチオンは＋２電荷を有する。例には、Ｎｉ２＋、Ｃｕ２＋、Ｃｏ２＋、Ｆｅ２＋、Ｚｎ２＋、Ｐｔ２＋およびＰｄ２＋が含まれる。特定の態様において、遷移金属カチオンはＣｕ＋、Ｃｕ２＋またはＮｉ２＋である。より特定の態様において、遷移金属カチオンはＣｕ２＋である。本段落に列挙する遷移金属カチオンに対するビス（チオヒドラジドアミド）化合物、あるいはその塩、水和物、溶媒和物、多形または脱プロトン化型のモル比は、例えば０．５に等しいかまたはそれより大きく、そして２．０に等しいかまたはそれ未満である（すなわち０．５≦比≦２．０）か、あるいは１：１である。
【００３１】
遷移金属イオンに錯体化した本発明のビス（チオヒドラジドアミド）化合物の構造を以下に示す：
【００３２】
【化６】
2014534238.tif 000007
【００３３】
あるいはそのプロドラッグ、異性体、エステル、塩、水和物、溶媒和物、または多形であり、式中、Ｘは、＋２電荷を有する遷移金属カチオンである。好ましい態様において、ＸはＣｕ２＋である。
【００３４】
エレスクロモールは、好ましくは実質的に純粋な型であり、例えば重量５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９７％、９９％、９９．５％または９９．９％より純粋である。「重量パーセント純度」は、エレスクロモール重量を、不純物を加えたエレスクロモールの重量で割り、１００％を乗じたものを意味する。
【００３５】
米国特許第６，８００，６６０号、第６，７６２，２０４号、および第６，８２５，２３５号、ならびに米国公報第２００８／０１４６８４２号に記載される方法にしたがって、本発明のビス（チオヒドラジドアミド）化合物を調製してもよい。
【００３６】
全内容が本明細書に援用されるＷＯ  ２０１０／０４８２８４およびＷＯ  ２０１０／０４８２９３に記載される方法にしたがって、本発明のビス（チオヒドラジドアミド）化合物の遷移金属複合体を調製してもよい。
【００３７】
薬学的に許容されるキャリアーまたは希釈剤もまた含む薬学的組成物として、エレスクロモールを配合してもよい。本明細書において、「薬学的組成物」は、被験体への投与に適した形で、開示する化合物を含有する配合物であってもよい。適切な薬学的に許容されるキャリアーは、エレスクロモールの生物学的活性を阻害しない不活性成分を含有してもよい。薬学的に許容されるキャリアーは、生体適合性、すなわち非毒性、非炎症性、非免疫原性でなければならず、そして被験体への投与に際して他の望ましくない反応を回避しなければならない。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：  ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，  第１９版，  Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，  ペンシルバニア州イーストン（１９９５）に記載されるものなどの標準的薬学的配合技術を使用してもよい。
【００３８】
薬学的組成物は、バルクで、または単位投薬型であってもよい。単位投薬型は、多様な型のいずれであってもよく、これには例えば、カプセル、ＩＶバッグ、錠剤、エアロゾル吸入器上の単一ポンプ、またはバイアルが含まれる。単位用量中のビス（チオヒドラジドアミド）化合物、例えばエレスクロモールの量は、以下に論じるように、エレスクロモールの有効量である。単位用量中のビス（チオヒドラジドアミド）化合物、例えばエレスクロモールの量は、選択される投与経路にしたがって多様であろう。多様な経路が意図され、これには、局所、経口、経粘膜または非経口が含まれ、経皮、皮下、静脈内、筋内、腹腔内および鼻内が含まれる。１つの態様において、エレスクロモールを全身投与する。用語「全身投与する」または「全身投与」は、投与される剤、例えばエレスクロモールが、ターゲット部位に到達する前に、体全体に分布する投与経路を指す。全身投与は、経口および非経口投与両方を含む。この用語はまた、腫瘍部位に、または腫瘍部位近傍に、直接行われる、エレスクロモールの送達を排除する。
【００３９】
経口投与に関しては、エレスクロモールまたはその塩を適切な固体または液体キャリアーまたは希釈剤と合わせて、カプセル、錠剤、ピル、粉末、シロップ、溶液、懸濁物等を形成してもよい。
【００４０】
錠剤、ピル、カプセル等は、活性成分約１〜約９９重量パーセント、および結合剤、例えばトラガカントガム、アラビアゴム、コーンスターチまたはゼラチン；賦形剤、例えばリン酸二カルシウム；崩壊剤、例えばコーンスターチ、ジャガイモデンプンまたはアルギン酸；潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウム；および／または甘味剤、例えばスクロース、ラクトースまたはサッカリンを含有してもよい。単位投薬型がカプセルである場合、これは、上記タイプの材料に加えて、脂肪油などの液体キャリアーを含有してもよい。
【００４１】
多様な他の材料は、コーティングとして、または投薬単位の物理的型を修飾するために、存在してもよい。例えば、錠剤をシェラック、糖または両方でコーティングしてもよい。シロップまたはエリキシルは、活性成分に加えて、甘味剤としてのスクロース、保存剤としてのメチルおよびプロピルパラベン、色素およびフレーバー、例えばチェリーまたはオレンジフレーバー等も含有してもよい。
【００４２】
非経口投与に関しては、エレスクロモールを無菌水性または有機媒体と組み合わせて、注射可能溶液または懸濁物を形成してもよい。例えば、ゴマ油またはピーナツ油、水性プロピレングリコール等の中の溶液、ならびに化合物の水溶性の薬学的に許容される塩の水溶液を用いてもよい。グリセロール、液体ポリエチレングリコールおよび油中のその混合物中で、分散物もまた調製してもよい。保存および使用の一般的な条件下で、これらの調製物は、微生物増殖を防止する保存剤を含有する。
【００４３】
先に記載する配合物に加えて、エレスクロモールをデポ調製物として配合することもまた可能である。このタイプの適切な配合物には、架橋または水不溶性多糖配合物、重合可能酸化ポリエチレン配合物、含浸膜等を用いた、生体適合性および生物分解性ポリマー性ヒドロゲル配合物が含まれる。こうした長期作用配合物を、移植または経皮送達（例えば皮下または筋内）、筋内注射または経皮パッチによって、投与してもよい。したがって、例えば、適切なポリマー性または疎水性材料とともに、例えば許容されうる油中のエマルジョン、またはイオン交換樹脂、または難溶性の誘導体として、例えば難溶性の塩として、化合物を配合してもよい。
【００４４】
本発明のいくつかの態様において、投与様式は、ｉｎ  ｖｉｖｏでビス（チオヒドラジドアミド）を放出する医学的デバイスによるものであり、例えばデバイスには、ビス（チオヒドラジドアミド）を含むリザーバー、コーティング組成物、徐放ポリマーマトリックス等が含まれ、そしてデバイスはｉｎ  ｖｉｖｏでビス（チオヒドラジドアミド）を放出可能である。ｉｎ  ｖｉｖｏでの化合物放出の詳細は、当該技術分野に知られ；例えば、本明細書にその全解説が援用されるＢａｋｅｒら，  ”Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｃｔｉｖｅ  Ａｇｅｎｔｓ”，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，  １９８６を参照されたい。
【００４５】
本発明で使用するのに適したパッチには、例えば、マトリックス型パッチ；リザーバー型パッチ；モノリシックの接着剤中薬剤（ｄｒｕｇ−ｉｎ−ａｄｈｅｓｉｖｅ）型パッチ；多積層接着剤中薬剤型パッチ等が含まれる。これらのパッチは当該技術分野に周知であり；例えばその全解説が本明細書に援用されるＧｈｏｓｈ，  Ｔ．  Ｋ．；  Ｐｆｉｓｔｅｒ，  Ｗ．  Ｒ．；  Ｙｕｍ，  Ｓ．  Ｉ．  Ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ  ａｎｄ  Ｔｏｐｉｃａｌ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，  Ｉｎｔｅｒｐｈａｒｍ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｉｎｃ．  ｐ．  ２４９−２９７を参照されたい。一般の当業者は、本発明で使用可能な他のパッチを決定することも可能である。
【００４６】
パッチを、被験体の粘膜表面、例えば口腔の舌下または頬側膜等に接着するように設計してもよい。典型的には、こうしたパッチには、エレスクロモールを装填されている粘膜接着剤が含まれるであろう。典型的な粘膜接着剤の例は、本明細書にその全解説が援用される、Ｎａｇａｉ，  Ｊ．  Ｃｏｎｔｒｏｌ．  Ｒｅｌ．  （１９８５），  ２：１２１−１３４、およびＮａｇａｉら，  Ｐｈａｒｍ．  Ｉｎｔ．  （１９８５），  １９６−２００に記載される。
【００４７】
医学的デバイスはまた、エレスクロモールの連続注入のための手段として使用可能な、移植可能浸透圧ポンプであってもよい。非経口投与に適したエレスクロモールを含む液体配合物をこうしたデバイス中で使用してもよい。
【００４８】
上記配合物に加えて、配合物には、場合によって、１またはそれより多いさらなる薬剤、例えば他の抗真菌剤、抗炎症剤、抗生物質、抗ウイルス剤、免疫調節剤、抗原虫剤、ステロイド、鬱血除去剤、気管支拡張剤、抗ヒスタミン剤、抗癌剤等が含まれてもよいし、あるいは配合物はこれらと同時投与されてもよい。例えば、開示する化合物を、イブプロフェン、プレドニゾン（コルチコステロイド）ペントキシフィリン、アンホテリシンＢ、フルコナゾール、ケトコナゾール、イトラコナゾール、ペニシリン、アンピシリン、アモキシシリン等の薬剤と同時投与してもよい。配合物はまた、保存剤、可溶化剤、化学的緩衝剤、表面活性剤、乳化剤、着色剤、付臭剤および甘味剤も含有してもよい。
【００４９】
癌を治療するためのエレスクロモールの投与
驚くべきことに、エレスクロモールが、単一剤として連続投与された際、または被験体の体内で、エレスクロモールの一定レベルが維持されるような方式で単一剤として投与された際、癌治療に顕著に有効であることが発見された。したがって、本発明は、癌を治療するための方法であって、治療の必要がある被験体に、エレスクロモールを連続投与することを含むか、または被験体の体内でエレスクロモールレベルが一定のままであるように、被験体にエレスクロモールを投与することを含む、前記方法を提供する。
【００５０】
用語「連続投与された」、「連続して投与された」または「連続投与」は、被験体において一定の薬剤濃度が達成され、そして／または維持される投与様式を指す。１つの態様において、薬剤はエレスクロモールである。
【００５１】
用語「一定薬剤濃度」は、被験体における薬剤濃度の所定の測定値が、薬剤の望ましい療法濃度の５％、１０％、１５％または２０％以内であることを意味する。１つの態様において、一定薬剤濃度は、エレスクロモール投与によって被験体において達成される一定エレスクロモール濃度である。別の態様において、所望の治療目的を達成する、例えば１またはそれより多くの以下を部分的にまたは実質的に達成するのに十分な濃度である：癌の増殖または蔓延の抑止、癌の度合いの減少（例えば腫瘍サイズの減少または罹患部位数の減少）、癌の増殖速度の阻害、臨床症状または癌と関連する指標（例えば組織または血清構成要素）の回復または改善ならびに／あるいはひとたび除去されるかまたは寛解した後の癌再発可能性の減少。
【００５２】
１つの態様において、一定エレスクロモール濃度は、一定エレスクロモール血漿または血清濃度である。さらなる態様において、エレスクロモールの一定血漿または血清濃度は、１０ｎｇ／ｍＬ〜１００ｎｇ／ｍＬの範囲内である。例えば、被験体にエレスクロモールを投与することによって達成されるエレスクロモールの血漿濃度は、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５または１００ｎｇ／ｍＬである。他の態様において、一定エレスクロモール濃度は、腫瘍部位での、腫瘍内の細胞における、または腫瘍内の血管系における、一定エレスクロモール濃度である。
【００５３】
上に論じるような、被験体における一定エレスクロモール濃度の維持は、選択した投与経路に応じるであろう、多様な治療措置によって達成可能である。例えば、経口または非経口経路によるエレスクロモールの投与は、あらかじめ決定した時点での、エレスクロモールの反復投薬を伴ってもよい。あるいは、持続放出配合物を、被験体に、経口、皮下、または経粘膜投与してもよく、そして必要なエレスクロモール濃度が達成されそして維持されるように、当業者によって決定されるように、この投与を必要なだけしばしば反復してもよい。エレスクロモールはまた、ポンプを通じて、エレスクロモールを含む液体配合物の注入によって投与されてもよい。ポンプは、あらかじめ決定した速度で、エレスクロモールを含む溶液を送達する移植可能ポンプであってもよい。達成しようとするエレスクロモールレベルに応じて、または被験体に送達しようとする総１日用量に応じて、溶液中のエレスクロモールの濃度および注入速度を調整してもよい。
【００５４】
単位用量中で、または所定の期間に渡って、被験体に投与されるエレスクロモールの正確な量は、選択された投与経路、投薬頻度、および所望の一定のエレスクロモールレベルに応じるであろう。ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたは動物モデル試験系から得られた用量反応曲線から、そして薬剤の特定の血液レベルを達成することによって、または有効性の代理として働く適切なバイオマーカーにおける変化を監視することによって、有効単位用量を外挿してもよい。動物モデル試験から有効単位用量を外挿する際、当業者は、１つの種由来のｍｇ／ｋｇの単位で表された用量を、別の種においてｍｇ／ｋｇで表された同等の表面積用量に変換するために使用可能な因子をよく知っているであろう。こうした用量変換は、例えば、ＮＩＨ指針、ならびに本明細書にその全内容が援用される、Ｆｒｅｉｒｅｉｃｈ  Ｅ．Ｊ．ら，  Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ  ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｏｆ  ｔｏｘｉｃｉｔｙ  ｏｆ  ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  ａｇｅｎｔｓ  ｉｎ  ｍｏｕｓｅ，  ｒａｔ，  ｄｏｇ，  ｍｏｎｋｅｙ  ａｎｄ  ｍａｎ，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  Ｒｅｐ．  １９６６，  ５０（４），  ２１９−２４４に記載される仮定および定数を用いることによって、実行可能である。具体的には、１ｍｇ／ｋｇのマウス用量は、１２ｍｇ／ｋｇのヒト同等用量に対応する。
【００５５】
一般的に、本明細書記載の状態に関するエレスクロモールの推奨される１日用量範囲は、１日あたり約０．０１ｍｇ〜約３０００ｍｇの範囲内にある。具体的に、１日用量範囲は、１日あたり約５ｍｇ〜約５００ｍｇ、より具体的には、１日あたり約１０ｍｇ〜約２００ｍｇであるはずである。患者を管理する際、療法をより低い用量、おそらく約１ｍｇ〜約２５ｍｇで開始し、そして必要であれば、単一用量または分割用量のいずれかとして、１日あたり最大約２００ｍｇ〜約１０００ｍｇに増加させるべきである。いくつかの場合、一般の当業者には明らかであろうように、本明細書に開示する範囲の外のエレスクロモールの投薬量を用いる必要がありうる。さらに、臨床医または治療中の医師には、個々の患者反応と組み合わせて、どのようにそしていつ、療法を中断するか、調整するか、または終結させるかがわかるであろう。
【００５６】
いくつかの態様において、ヒト被験体に投与されるエレスクロモールの総１日用量は、２００〜３００ｍｇ／ｋｇの範囲内であり、例えばエレスクロモール２００、２０５、２１０、２１５、２２０、２２５、２３０、２３５、２４０、２４５、２５０、２５５、２６０、２６５、２７０、２７５、２８０、２８５、２９０、２９５または３００ｍｇ／ｋｇである。好ましい態様において、エレスクロモールの総１日用量は２８５ｍｇ／ｋｇである。あるいは、ヒト被験体に投与されるエレスクロモールの総１日用量は３００〜４００ｍｇ／ｋｇの範囲内であり、例えば３００、３０５、３１０、３１５、３２０、３２５、３３０、３３５、３４０、３４５、３５０、３５５、３６０、３６５、３７０、３７５、３８０、３８５、３９０、３９５または４００ｍｇ／ｋｇである。あるいは、ヒト被験体に投与されるエレスクロモールの総１日用量は１００〜２００ｍｇ／ｋｇの範囲内であり、例えば１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０、１５５、１６０、１６５、１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５または２００ｍｇ／ｋｇである。多様な態様において、選択される投与経路を通じて送達されるエレスクロモールの総１日用量は、被験体において、所望の一定のエレスクロモール濃度を達成し、そして／または維持するのに十分である。
【００５７】
エレスクロモールは一定の期間に渡って投与されるものとする。連続投与に適した期間は、被験体において一定のエレスクロモール濃度の達成および／または維持が望ましい期間である。投与期間は、０〜６０分間、例えば５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５または６０分間持続してもよい。あるいは、期間はまた、０〜２４時間、例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２、または２４時間持続してもよい。あるいは、期間はまた、１〜２１日間、例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、または２１日間持続してもよい。１つの態様において、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を７日間投与する。別の態様において、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物を、１〜２１日間、例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、または２１日間、全身投与する。
【００５８】
特定の期間に渡って、エレスクロモールの投与を含む治療を反復してもよい。１つの態様において、エレスクロモールの投与を含む第二の治療を、第一の治療が終了した直後に開始してもよい。別の態様において、治療を、エレスクロモールがまったく投与されない期間の後に反復してもよい。２つの治療の間の適切な間隔は、選択される投与経路およびエレスクロモール投与によって達成しようとする一定のエレスクロモール濃度に応じるであろうし、そして当業者によって決定可能である。理想的には、治療は、治療を処方するかまたは投与するヒトによって必要と見なされるだけ多い回数、または癌が寛解するまで、または以下の説明にしたがって癌を有する被験体が治療されるまで、反復されるものとする。１つの態様において、治療を少なくとも1回反復する。さらなる態様において、治療は、少なくとも1回さらに反復される7日間のエレスクロモール投与を含む。
【００５９】
癌を治療する方法
驚くべきことに、ビス（チオヒドラジドアミド）化合物、例えばエレスクロモールが、連続投与された際、または被験体において一定のエレスクロモール濃度が維持されるように投与された際、癌に対して顕著な単一剤活性を示すことが発見された。したがって、本発明は、癌を治療する方法であって、治療が必要な被験体に、エレスクロモールを連続投与するか、または被験体において一定のエレスクロモール濃度を維持するような方式でエレスクロモールを投与することを含む、前記方法を提供する。本発明の方法によって治療可能な癌は：
ｉ）線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、肛門癌、食道癌、胃癌、肝細胞癌、膀胱癌、子宮内膜癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、胃癌、心房粘液腫、扁平細胞癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、甲状腺および副甲状腺新生物、乳頭癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支原性肺癌、肝細胞腫、胆管癌、絨毛癌、セミノーマ、胚性癌腫、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌、精巣腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神経膠腫、下垂体新生物、星状細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽腫、聴神経腫瘍、シュワン腫、乏突起神経膠腫、髄膜腫、脊髄腫瘍、黒色腫、神経芽腫、褐色細胞腫、１〜３型内分泌新生物、網膜芽細胞腫からなる群より選択される、ヒト肉腫または癌腫；ならびに
ｉｉ）急性リンパ球性白血病、急性骨髄性白血病；慢性白血病、真性多血症、多発性骨髄腫、ワルデンストレーム高グロブリン血症、重鎖病、Ｔ細胞白血病、Ｂ細胞白血病；混合細胞白血病、骨髄性白血病、好中球性白血病、好酸球性白血病、単球性白血病、骨髄単球性白血病、ネーゲリ型骨髄性白血病、および非リンパ球性白血病からなる群より選択される、白血病
からなる群より選択される。
【００６０】
いくつかの態様において、本発明の方法によって治療可能な癌は、Ｂ細胞リンパ腫、非小細胞肺癌、腎臓癌または結腸直腸癌からなる群より選択される。
【００６１】
本明細書において、用語「被験体」は、ヒトおよび非ヒト動物を指し、獣医学的被験体が含まれる。用語「非ヒト動物」には、すべての脊椎動物、例えば哺乳動物および非哺乳動物、例えば非ヒト霊長類、マウス、ウサギ、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ニワトリ、両生類、および爬虫類が含まれる。好ましい態様において、被験体はヒトであり、そして患者と呼ばれることも可能である。
【００６２】
「癌を有する患者を治療する」ことには、１またはそれより多くの以下を部分的にまたは実質的に達成することが含まれる：癌の増殖または蔓延の抑止、癌の度合いの減少（例えば腫瘍サイズの減少または罹患部位数の減少）、癌の増殖速度の阻害、臨床症状または癌と関連する指標（例えば組織または血清構成要素）の回復または改善ならびに／あるいはひとたび除去されるかまたは寛解した後の癌再発可能性の減少。
【００６３】
用語「有効量」は、癌を治療するのに有効である一方、被験体において一定のエレスクロモール濃度を維持するのに必要なエレスクロモール量である。いくつかの態様において、エレスクロモールの有効量は、エレスクロモールの望ましい血漿または血清濃度を維持するのに十分である。他の態様において、エレスクロモールの有効量は、腫瘍部位で、腫瘍内の細胞において、または腫瘍内の血管系において、エレスクロモールの所望の濃度を維持するのに十分である。被験体に投与されるべきエレスクロモールの正確な量は、被験体において達成され、そして／または維持されるべきエレスクロモールレベル、ならびに上に論じるような正確な投与様式に応じるであろう。癌の治療のため、エレスクロモールを、別の抗癌剤、例えばタキサンと同時投与する場合、第二の抗癌剤の「有効量」は、使用する薬剤のタイプに応じるであろう。認可される抗癌剤に関して、適切な投薬量が知られ、そして被験体の状態、治療中の癌のタイプ、および用いられる本発明の化合物に応じて当業者により調整されるであろう。
【００６４】
用語「投与する」、「投与すること」または「投与」には、被験体の系内に、あるいは被験体におけるまたは被験体上の特定の領域に、薬学的組成物または剤を送達する任意の方法が含まれる。本発明の特定の態様において、剤を静脈内、筋内、皮下、皮内、鼻内、経口、経皮、または粘膜投与する。好ましい態様において、剤を全身投与する。剤の投与は、協調して働く何人かの人によって実行可能である。剤の投与には、例えば、直接または別の人を通じて、被験体に投与しようとする剤を処方し、そして／または指示を提供し、自己送達によって、例えば経口送達、皮下送達、中心ラインを通じた静脈内送達によって等で；あるいは訓練された専門家による送達、例えば静脈内送達、筋内送達、腫瘍内送達のいずれかによるなどで、特定の剤を与えることが含まれる。
【００６５】
１つの態様において、エレスクロモールは、単一療法として、例えば癌を治療しようとする被験体に投与される唯一の抗癌薬剤として投与される。エレスクロモールでの単一療法はまた、癌以外の徴候に関して投与可能な薬剤、例えば抗真菌剤、抗炎症剤、抗生物質、抗ウイルス剤、免疫調節剤、抗原虫剤、ステロイド、鬱血除去剤、気管支拡張剤、抗ヒスタミン剤等も含んでもよい。本発明はまた、放射線、低体温法および／または免疫療法と組み合わせたエレスクロモール投与を排除するよう意味される。
【００６６】
さらに別の態様において、ビスチオヒドラジドアミドを、有効量の別の抗癌薬剤、例えばタキサンと組み合わせて投与する。タキサンは、微小管形成を増進し、そして安定化させることによって作用しうる種類の抗癌薬剤を含む。用語「タキサン」は、パクリタキセル（例えば「タキソール（登録商標）」）およびパクリタキセル類似体を含むよう意味される。「パクリタキセル類似体」は、本明細書において、基本的なパクリタキセル骨格を有し、そして微小管形成を安定化させる化合物を意味するよう定義される。ドセタキセル（タキソテール（登録商標））を含む多くのパクリタキセル類似体が知られる。パクリタキセルおよびドセタキセルは、それぞれの構造式：
【００６７】
【化７】
2014534238.tif 000008
【００６８】
；および
【００６９】
【化８】
2014534238.tif 000009
【００７０】
を有する。
【００７１】
タキソール（登録商標）類似体の多様な構造的特徴が、先の刊行物、例えば本明細書にその全内容が援用されるＵＳ  ２００９／０１３７６８２に記載されてきている。
【００７２】
本発明の方法にしたがってビス（チオヒドラジドアミド）化合物とともに投与されるべきタキサンの投薬量は、治療される被験体および疾患の重症度に応じるであろう。タキサンの推奨される投薬量は、当該技術分野における任意の参考文献から得ることも可能であり、こうした文献には、限定されるわけではないが、Ｈａｒｄｍａｎら監修，  １９９６，  Ｇｏｏｄｍａｎ  ＆  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  Ｏｆ  Ｂａｓｉｓ  Ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  第９版，  Ｍｃ−Ｇｒａｗ−Ｈｉｌｌ，  ニューヨーク；  Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  （ＰＤＲ）  第５７版，  ２００３，  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｅｃｏｎｏｍｉｃｓ  Ｃｏ．，  Ｉｎｃ．，  ニュージャージー州モントベールが含まれる。
【００７３】
本発明のビス（チオヒドラジドアミド）化合物をタキサンと組み合わせて投与する場合、５分未満離して、３０分未満離して、１時間離して、約１時間離して、約１時間〜約２時間離して、約２時間〜約３時間離して、約３時間〜約４時間離して、約４時間〜約５時間離して、約５時間〜約６時間離して、約６時間〜約７時間離して、約７時間〜約８時間離して、約８時間〜約９時間離して、約９時間〜約１０時間離して、約１０時間〜約１１時間離して、約１１時間〜約１２時間離して、約１２時間〜１８時間離して、１８時間〜２４時間離して、２４時間〜３６時間離して、３６時間〜４８時間離して、４８時間〜５２時間離して、５２時間〜６０時間離して、６０時間〜７２時間離して、７２時間〜８４時間離して、８４時間〜９６時間離して、または９６時間〜１２０時間離して、投与してもよい。
【００７４】
本発明は、いかなる意味でも限定することを意図しない、以下の実施例によって例示される。
【実施例】
【００７５】
エレスクロモールは、反応性酸素種（ＲＯＳ）レベルの上昇を通じて、強力な抗癌活性を発揮するファースト・イン・クラス研究薬剤であり、そして現在、新規抗癌療法剤として臨床的評価がなされている。エレスクロモールは、細胞外銅（Ｃｕ）に優先的に結合し、そしてこの金属イオンを腫瘍細胞のミトコンドリアに選択的に輸送して、ミトコンドリアＲＯＳ生成を、そして続いてアポトーシスを促進する。
【００７６】
実施例１．  エレスクロモール−Ｃｕ複合体は、癌細胞のミトコンドリアにおいて、Ｃｕレベルを選択的に増加させる。
【００７７】
３人の独立のドナー由来のヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）およびヒト前骨髄腫瘍細胞株ＨＬ−６０を、エレスクロモール−Ｃｕ複合体で２時間処理した。続いて、細胞を、細胞質ゾル、核またはミトコンドリア分画に分画し、そして細胞内銅含量をＢＣＡアッセイによって決定した。図１は、ＰＢＭＣおよびＨＬ−６０細胞由来の、核、細胞質ゾルおよびミトコンドリア分画における相対的銅レベルを示す。両方の細胞タイプによるエレスクロモールの細胞取り込みが同様であるにもかかわらず、銅レベルは、ＨＬ−６０細胞においてのみ、特にミトコンドリア分画において増加した。
【００７８】
実施例２．  エレスクロモール−Ｃｕ複合体は、癌細胞のミトコンドリアにおいて、ＲＯＳレベルを増加させる。
【００７９】
ＰＢＭＣまたはＨＬ−６０細胞から単離したミトコンドリアを、ＤＭＳＯ、０．２μＭおよび１μＭの濃度の遊離銅（ＣｕＣｌ２）、０．２μＭおよび１μＭの濃度のジスルフィラム−Ｃｕ複合体（ＤＳＦ−Ｃｕ）、ならびに０．２μＭおよび１μＭの濃度のエレスクロモール−Ｃｕ複合体のいずれかで３０分間処理した。インキュベーションに続いて、ＲＯＳレベルをＭｉｔｏＳｏｘ  Ｒｅｄによって測定した。ＭｉｔｏＳｏｘ  Ｒｅｄアッセイの結果を、３人の独立のドナーから単離したＰＢＭＣでの実験、またはＨＬ−６０での個々の３回の実験の平均±ＳＤとして図２に示す。データによって、エレスクロモール−Ｃｕは、ＨＬ−６０由来ミトコンドリアにおいてＲＯＳを誘導するが、ＰＢＭＣから単離されたものでは誘導しないことが立証される。これらの結果は、エレスクロモール−Ｃｕが、癌細胞ミトコンドリアを選択的にターゲティングして、最終的に、酸化ストレスにおいて、決定的な上昇を生じることを示唆する。
【００８０】
実施例３．  癌細胞におけるＣｕレベルの選択的上昇は、エレスクロモールの示差的更新（ｕｐｄａｔｅ）によって引き起こされるのではない。
【００８１】
ＰＢＭＣおよびＨＬ−６０細胞を、ビヒクル（ＤＭＳＯ）または１００ｎＭエレスクロモールと３時間インキュベーションした。インキュベーションに続いて、ＰＢＭＣおよびＨＬ−６０細胞に関して、細胞性銅レベルおよびエレスクロモールレベルを測定し、そして図３に示す。結果によって、ＨＬ−６０細胞における銅レベルは、エレスクロモール処理に反応して顕著にそして選択的に上昇し、一方、ＨＬ６０細胞において、エレスクロモールレベルは、ＰＢＭＣにおけるものよりわずかにより低いことが立証される。結果によって、ＰＢＭＣおよびＨＬ−６０細胞によるエレスクロモールの示差的取り込みによってこの増加が引き起こされるのではないことが示唆される。
【００８２】
実施例４．エレスクロモール曝露の長さは、癌細胞において集積されるＣｕの量に比例する。
【００８３】
６５Ｃｕとエレスクロモールの複合体を調製した。６３Ｃｕが濃縮されたＨＬ−６０細胞を１００ｎＭエレスクロモール−６５Ｃｕまたは１００ｎＭの遊離６５Ｃｕで、１０％ＦＢＳ培地中、０、０．５、３および９時間処理した。誘導結合プラズマ質量分析（ＩＣＰ−ＭＳ）によって、細胞性６３Ｃｕおよび６５Ｃｕレベルを測定した。これらの測定の結果を図４に示し、そしてこれによって、エレスクロモール−６５Ｃｕ複合体は、ＨＬ−６０癌細胞において、６３Ｃｕの集積を引き起こすが、遊離６５Ｃｕは６３Ｃｕの集積を引き起こさないことが示される。結果によってまた、細胞に集積される銅の量が、ＨＬ−６０細胞が６５Ｃｕ−エレスクロモール複合体に曝露される時間の長さに正比例することもまた立証される。これらの結果によって、ｉｎ  ｖｉｖｏで連続してＣｕ−エレスクロモールに曝露する潜在的な利点が示唆される。
【００８４】
実施例５．  Ｉ．Ｖ．ボーラス用量としておよび連続注入として投与されるエレスクロモールおよびエレスクロモール−Ｃｕ複合体の薬物動態学的プロファイル。
【００８５】
マウスに、５０ｍｇ／ｋｇの単一Ｉ．Ｖ．ボーラス用量で投与されるエレスクロモール塩を投与した。マウスにまた、Ａｌｚｅｔポンプを通じて、連続注入によって、エレスクロモール塩を投与した。ポンプに、エレスクロモール塩の４０ｍｇ／ｍＬ溶液を充填し、そして３０ｇの平均体重に基づいて、溶液を、１μｌ／時間、３２ｍｇ／ｋｇ／日の総１日用量で投与した。溶液を連続７日間送達し、そしてポンプ移植７０時間後に収集した血漿レベルから曝露を計算した。図５は、ボーラス注射後の多様な時点での血漿エレスクロモールレベル（総エレスクロモールおよびエレスクロモール−Ｃｕ）、ならびにポンプ移植７０時間後のエレスクロモール−Ｃｕ血漿濃度を示す。結果は、Ｉ．Ｖ．ボーラス投与が初期に高いＣｍａｘを生じ、その後、迅速に排出されることを示す。これは、連続注入によって達成される持続エレスクロモール−Ｃｕレベルとは著しく対照的である。表１は、マウスにおける、Ｉ．Ｖ．ボーラス投与および連続注入、ならびにヒトにおける１時間注入後の総エレスクロモールおよびエレスクロモール−Ｃｕへの毎日曝露を示す。マウスにおけるＩ．Ｖ．ボーラス注射と同様、ヒトにおける１時間注入は、高レベルの総エレスクロモールを生じ、エレスクロモール−Ｃｕ複合体はおよそ１０倍より低いレベルであった。マウスにおける連続投与によって、エレスクロモール−Ｃｕレベル維持が達成されることから、癌患者を治療する際、注入期間を延長するための療法的利点が立証される。
【００８６】
表１．  Ｉ．Ｖ．ボーラス投与および連続注入後の、エレスクロモール−Ｃｕへの総１日曝露
【００８７】
【表１】
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【００８８】
実施例６．  Ａｌｚｅｔポンプを通じて連続投与されるエレスクロモール塩のマウス毒性研究
系統ＣＤ１の総数１５匹のマウスを毒性研究に用い、このうち１０匹をエレスクロモール塩処置群とし、そして５匹を対照群とした。Ａｌｚｅｔポンプに全部で２００μｌの注入溶液を充填し、そして１〜２時間以内に皮下移植した。注入溶液を７日間連続送達し、そしてポンプを第８日に新規ポンプと交換した。連続投薬の詳細を以下の表２に要約する。
【００８９】
表２．  マウス毒性研究のためのエレスクロモール塩の投薬
【００９０】
【表２】
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【００９１】
１毒物動態学
図６は、処置期間中に毎日測定された体重における％変化を示し、そして処置群および対照群の間で相違がないことを示す。結果によって、連続注入されたエレスクロモール塩によって体重変化は引き起こされないことが立証される。
【００９２】
図７は、脳、心臓、腎臓、脾臓、胸腺、精巣および肝臓に関する、％臓器重量／体重を示し、そして脾臓を除いて、試験したすべての臓器に関して、処置群および対照群の間で差がないことを示す。脾臓体重における穏やかな増加は、ビヒクル処置動物において観察される移植部位の反応性変化に関連した。結果によって、連続注入されるエレスクロモール塩によって臓器重量に変化は引き起こされないことが立証される。
【００９３】
以下の表３は、処置群および対照群に関して評価する、毒性関連パラメータのさらなる観察を要約する。これらの観察によって、エレスクロモール塩の連続投与に関連して、不都合な影響が存在しないことが示される。
【００９４】
表３．  対照群および処置群に関して測定された毒性関連パラメータ
【００９５】
【表３】
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【００９６】
毒性研究結果によって、エレスクロモールの連続投与が、マウスにおける急性毒性と関連しないことが示される。
【００９７】
実施例７．  連続投与エレスクロモールの単一剤抗癌活性
ヌードマウスにおけるヒト腫瘍異種移植片モデルを用いて、連続投与エレスクロモールの抗癌活性を評価した。具体的には、Ｄａｕｄｉ  Ｂ細胞リンパ腫、Ｈ１７０３非小細胞肺癌、７８６−Ｏ腎臓癌、ＨＣＴ１１６結腸直腸癌およびＳＷ４８０結腸直腸癌由来の腫瘍を所持するヌードマウスを実験に用いた。各腫瘍タイプあたり総数６匹のマウスを用いた。連続投与のため、Ａｌｚｅｔポンプにエレスクロモール塩の４０ｍｇ／ｍＬ溶液を充填し、そして溶液を１μｌ／時間で７日間送達した。新鮮なポンプと毎週交換した。３０ｇの平均体重に基づいて、連続注入によって、マウスに投与されるエレスクロモール塩の１日用量は、３２ｍｇ／ｋｇ／日であった。ビヒクル対照群は、１０％ＤＭＳＯ／１８％Ｃｒ−ＲＨ４０／Ｄ５Ｗ（ＤＲＤ）を充填したＡｌｚｅｔポンプを与えられた。この処置は、ボーラスＩ．Ｖ．注射によって送達される７５ｍｇ／ｋｇのエレスクロモール塩の週あたり５日間の投与を含む処置に匹敵した。
【００９８】
図８は、連続注入によってＤＲＤまたはエレスクロモール塩を投与されたか、あるいはＩ．Ｖ．ボーラス用量によってエレスクロモール塩を投与されたマウスにおける、Ｄａｕｄｉ  Ｂ細胞リンパ腫腫瘍の腫瘍移植後２６〜４１日目に測定された平均腫瘍体積を示す。
【００９９】
図９は、連続注入によってＤＲＤまたはエレスクロモール塩を投与されたマウスにおける、Ｈ１７０３ヒトＮＳＣＬＣ腫瘍の腫瘍移植後２２〜４３日目に測定された平均腫瘍体積を示す。
【０１００】
図１０は、連続注入によってＤＲＤまたはエレスクロモール塩を投与されたか、あるいはＩ．Ｖ．ボーラス用量によってエレスクロモール塩を投与されたマウスにおける、７８６−Ｏ  ＲＣＣ腫瘍の腫瘍移植後１６〜３７日目に測定された平均腫瘍体積を示す。
【０１０１】
図１１は、連続注入によってＤＲＤまたはエレスクロモール塩を投与されたマウスにおける、ＨＣＴ１１６ヒト結腸腫瘍の腫瘍移植後１６〜３５日目に測定された平均腫瘍体積を示す。
【０１０２】
図１２は、連続注入によってＤＲＤまたはエレスクロモール塩を投与されたマウスにおける、ＳＷ４８０ヒト結腸腫瘍の腫瘍移植後１４〜３２日目に測定された平均腫瘍体積を示す。
【０１０３】
以下の表４は、％対照として表された図８〜１２に示す結果を要約する。データによって、エレスクロモール塩の連続注入が、多様な癌モデルに関して、腫瘍増殖阻害を生じ、そしてこの阻害が、エレスクロモール塩の毎日ボーラス注射に比較した際、はるかにより顕著であることが立証される。
【０１０４】
表４．  連続投与されたエレスクロモール塩の抗癌単一剤活性
【０１０５】
【表４】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【国際調査報告】
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