(57)【要約】    【課題】本発明は徐放のための医薬製剤、ならびに徐放および長い半減期製剤の組み合わせを用いた治療レジメンを送達するための方法を提供する。本発明は、ペプチドおよび小分子薬の改善された薬物動態を提供する。    【解決手段】徐放医薬製剤は、全身投与のための治療薬を含み、治療薬は、活性剤および対象の体温で可逆マトリクスを形成することができるアミノ酸配列を含む。【選択図】図８
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記を含む徐放医薬製剤：
全身投与のための治療薬であって、活性剤および対象の体温で可逆マトリクスを形成することができるアミノ酸配列を含み、前記可逆マトリクスは水素結合および／または疎水性相互作用により形成される治療薬、ならびに
投与されるとマトリクスの形成を誘導する１つ以上の薬学的に許容される賦形剤および／または希釈剤。
【請求項２】
前記製剤は投与されると注射部位からの遅い吸収を提供する、請求項１に記載の医薬製剤。
【請求項３】
前記製剤は、可逆マトリクスを形成するアミノ酸配列なしの活性剤に対するＰＫプロファイルと比べて、投与されると平坦なＰＫプロファイルを提供する、請求項２に記載の医薬製剤。
【請求項４】
前記ＰＫプロファイルは浅いＣｍａｘおよび／または低いピーク対トラフ比および／または長いＴｍａｘを有する、請求項３に記載の医薬製剤。
【請求項５】
前記マトリクスの形成はタンパク質濃度が減少するにつれ反転する、請求項１〜４のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項６】
体温またはその付近でマトリクスを形成することができる前記アミノ酸配列は、４〜１０のアミノ酸の繰り返し単位を有する繰り返しペプチド配列である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項７】
前記繰り返し単位は、マトリクスの形成において１、２、または３つの水素結合を形成する、請求項６に記載の医薬製剤。
【請求項８】
体温でマトリクスを形成することができる前記アミノ酸配列は絹、エラスチン、コラーゲン、またはケラチンのアミノ酸配列、またはその模倣物である、請求項６に記載の医薬製剤。
【請求項９】
体温でマトリクスを形成することができる前記アミノ酸配列は［ＶＰＧＸＧ］９０を含み、各ＸはＶ、Ｇ、およびＡから選択され、Ｖ：Ｇ：Ａの比は約５：３：２であり得る、請求項１〜６のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項１０】
体温でマトリクスを形成することができる前記アミノ酸配列は［ＶＰＧＸＧ］１２０を含み、各ＸはＶ、Ｇ、およびＡから選択され、Ｖ：Ｇ：Ａの比は約５：３：２であり得る、請求項９に記載の医薬製剤。
【請求項１１】
体温でマトリクスを形成することができる前記アミノ酸配列は［ＶＰＧＶＧ］９０を含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項１２】
体温でマトリクスを形成することができる前記アミノ酸配列はエラスチン様ペプチド（ＥＬＰ）配列である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項１３】
体温でマトリクスを形成することができる前記アミノ酸配列は、ランダムコイルまたは非球状拡張構造を形成する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項１４】
体温でマトリクスを形成することができる前記アミノ酸配列はランダムコイル、または非球状拡張構造を含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項１５】
前記対象はヒトであり、前記体温は約３７℃である、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項１６】
前記対象は非ヒト哺乳類である、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項１７】
前記活性剤はタンパク質である、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項１８】
前記治療薬は、前記タンパク質活性剤と対象の体温でマトリクスを形成することができる前記アミノ酸配列の間の組換え融合タンパク質である、請求項１７に記載の医薬製剤。
【請求項１９】
前記タンパク質活性剤は、約３０秒〜約１０時間、または約３０秒〜約１時間の範囲の循環半減期を有する、請求項１８に記載の医薬製剤。
【請求項２０】
前記活性剤はＧＬＰ−１受容体アゴニストまたはその誘導体、ＶＰＡＣ２選択的アゴニストまたはその誘導体、ＧＩＰ受容体アゴニストまたはその誘導体あるいはグルカゴン受容体アゴニストまたはその誘導体である、請求項１９に記載の医薬製剤。
【請求項２１】
前記製剤は、ＧＬＰ１受容体アゴニスト、グルカゴン受容体アゴニスト、およびＧＩＰ受容体アゴニストの少なくとも２つを含む共製剤である、請求項１９に記載の医薬製剤。
【請求項２２】
前記タンパク質活性剤は凝固因子であり、前記凝固因子は第ＶＩＩ因子、第ＶＩＩＩ因子、または第ＩＸ因子であり得る、請求項１９に記載の医薬製剤。
【請求項２３】
前記活性剤はＧＬＰ−１（Ａ８Ｇ，７−３７）ＥＬＰ１−１２０およびＧＬＰ−１（Ａ８Ｇ，７−３７）ＥＬＰ４−１２０（ＰＢ１０４６）から選択される、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項２４】
前記タンパク質活性剤はインスリンまたはその誘導体である、請求項１９に記載の医薬製剤。
【請求項２５】
前記治療薬は、前記活性剤と対象の体温でマトリクスを形成することができる前記アミノ酸配列の間の化学複合体である、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項２６】
前記活性剤は、化学療法薬、例えば、下記から選択される化学療法薬である、請求項２５に記載の医薬製剤：メトトレキサート、ダウノマイシン、マイトマイシン、シスプラチン、ビンクリスチン、エピルビシン、フルオロウラシル、ベラパミル、シクロホスファミド、シトシンアラビノシド、アミノプテリン、ブレオマイシン、マイトマイシンＣ、デモコルチン、エトポシド、ミトラマイシン、クロランブシル、メルファラン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、タモキシフェン、パクリタキセル、ビンブラスチン、カンプトテシン、アクチノマイシンＤ、シタラビン、およびコンブレスタチン。
【請求項２７】
前記薬剤は免疫原性分子であり、または免疫調節物質であり、または抗炎症薬である、請求項２５に記載の医薬製剤。
【請求項２８】
前記治療薬は、約０．５ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの範囲で存在する、請求項１〜２７のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項２９】
前記治療薬は約５ｍｇ／ｍＬ〜約１２５ｍｇ／ｍＬの範囲で存在する、請求項２８に記載の医薬製剤。
【請求項３０】
前記治療薬は約１０ｍｇ／ｍＬ〜約５０ｍｇ／ｍＬ、または約１５ｍｇ／ｍＬ〜約３０ｍｇ／ｍＬの範囲で存在する、請求項２８に記載の医薬製剤。
【請求項３１】
前記治療薬は貯蔵条件では相転移マトリクスを形成しない、請求項１〜３０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
前記貯蔵条件は約４０℃未満、または約３７℃未満、または約３０℃未満、または約２７℃未満、または約２５℃未満である、請求項３１に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
前記製剤は少なくとも２５ｍＭ塩化ナトリウム、または少なくとも３０ｍＭ塩化ナトリウム、または少なくとも４０ｍＭ塩化ナトリウム、または少なくとも５０ｍＭ塩化ナトリウム、または少なくとも７５ｍＭ塩化ナトリウム、または少なくとも１００ｍＭ塩化ナトリウム、または少なくとも１５０ｍＭ塩化ナトリウムのイオン強度を有する、請求項１〜３２のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項３４】
前記製剤は約０．９％生理食塩水以下のイオン強度を有する、請求項１〜３３のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項３５】
前記製剤は塩化カルシウム、塩化マグネシウム、塩化カリウム、リン酸二水素カリウム、塩化ナトリウム、およびリン酸水素二ナトリウムのうちの２つ以上を含む、請求項３４に記載の医薬製剤。
【請求項３６】
前記製剤は表４、表５、または表６に列挙される構成成分を含む、請求項３５に記載の医薬製剤。
【請求項３７】
前記製剤は１週間に１回、１週間に２回、または１ヶ月に１〜５回の投与のためのプレドーズペンまたはシリンジの形態でパッケージされる、請求項１〜３６のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項３８】
活性剤および［ＶＰＧＸＧ］９０を含むアミノ酸配列を含み、各ＸはＶ、Ｇ、およびＡから選択される治療薬、ならびにヒト対象に投与されると、水性形態から可逆マトリクスを形成するための、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤および／または希釈剤を含む、徐放医薬製剤。
【請求項３９】
前記製剤は投与されると注射部位からの遅い吸収を提供する、請求項３８に記載の医薬製剤。
【請求項４０】
前記製剤は前記アミノ酸配列なしの活性剤に対するＰＫプロファイルと比べて、投与されると平坦なＰＫプロファイルを提供する、請求項３９に記載の医薬製剤。
【請求項４１】
前記ＰＫプロファイルは浅いＣｍａｘおよび／または低いピーク対トラフ比および／または長いＴｍａｘを有する、請求項４０に記載の医薬製剤。
【請求項４２】
前記マトリクスの形成はタンパク質濃度が減少するにつれ反転する、請求項３７〜４１のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項４３】
前記アミノ酸配列は［ＶＰＧＸＧ］１２０を含み、各ＸはＶ、Ｇ、およびＡから選択される、請求項４２に記載の医薬製剤。
【請求項４４】
Ｖ、Ｇ、およびＡは約５：３：２の比である、請求項３７〜４３のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項４５】
前記活性剤はタンパク質である、請求項３７〜４４のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項４６】
前記治療薬は前記タンパク質活性剤と前記アミノ酸配列の間の組換え融合タンパク質である、請求項４５に記載の医薬製剤。
【請求項４７】
前記タンパク質活性剤は約３０秒〜約１０時間、または約３０秒〜約１時間の範囲の循環半減期を有する、請求項４６に記載の医薬製剤。
【請求項４８】
前記活性剤はＧＬＰ−１受容体アゴニストまたはその誘導体、ＶＰＡＣ２選択的アゴニストまたはその誘導体、ＧＩＰ受容体アゴニストまたはその誘導体あるいはグルカゴン受容体アゴニストまたはその誘導体である、請求項４６に記載の医薬製剤。
【請求項４９】
前記製剤はＧＬＰ１受容体アゴニスト、グルカゴン受容体アゴニスト、およびＧＩＰ受容体アゴニストの少なくとも２つを含む共製剤である、請求項４６に記載の医薬製剤。
【請求項５０】
前記タンパク質活性剤は凝固因子であり、前記凝固因子は第ＶＩＩ因子、第ＶＩＩＩ因子、または第ＩＸ因子であり得る、請求項４６に記載の医薬製剤。
【請求項５１】
前記タンパク質活性剤はインスリンまたはその誘導体である、請求項４６に記載の医薬製剤。
【請求項５２】
前記活性剤はＧＬＰ−１（Ａ８Ｇ，７−３７）ＥＬＰ１−１２０およびＧＬＰ−１（Ａ８Ｇ，７−３７）ＥＬＰ４−１２０（ＰＢ１０４６）から選択される、請求項３８〜５１のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項５３】
前記治療薬は前記活性剤と前記アミノ酸配列の間の化学複合体である、請求項３８〜５２のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項５４】
前記活性剤は化学療法薬、例えば、下記から選択される化学療法薬である、請求項５３に記載の医薬製剤：メトトレキサート、ダウノマイシン、マイトマイシン、シスプラチン、ビンクリスチンエピルビシン、フルオロウラシル、ベラパミル、シクロホスファミド、シトシンアラビノシド、アミノプテリン、ブレオマイシン、マイトマイシンＣ、デモコルチン、エトポシド、ミトラマイシン、クロランブシル、メルファラン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、タモキシフェン、パクリタキセル、ビンブラスチン、カンプトテシン、アクチノマイシンＤ、シタラビン、およびコンブレスタチン。
【請求項５５】
前記薬剤は免疫原性分子であり、または免疫調節物質であり、または抗炎症薬である、請求項５３に記載の医薬製剤。
【請求項５６】
前記治療薬は約０．５ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの範囲で存在する、請求項３８〜５６のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項５７】
前記治療薬は約５ｍｇ／ｍＬ〜約１２５ｍｇ／ｍＬの範囲で存在する、請求項５６に記載の医薬製剤。
【請求項５８】
前記治療薬は約１０ｍｇｍＬ〜約５０ｍｇ／ｍＬの範囲、または約１５ｍｇ／ｍＬ〜約３０ｍｇ／ｍＬの範囲で存在する、請求項５６に記載の医薬製剤。
【請求項５９】
前記治療薬は貯蔵条件ではマトリクスを形成しない、請求項３８〜５８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項６０】
前記貯蔵条件は約４０℃未満、または約３７℃未満、または約３０℃未満、または約２７℃未満、または約２５℃未満である、請求項５９に記載の医薬組成物。
【請求項６１】
前記製剤は、少なくとも２５ｍＭ塩化ナトリウム、または少なくとも３０ｍＭ塩化ナトリウム、または少なくとも４０ｍＭ塩化ナトリウム、または少なくとも５０ｍＭ塩化ナトリウム、または少なくとも７５ｍＭ塩化ナトリウム、または少なくとも１００ｍＭ塩化ナトリウムのイオン強度を有する、請求項３８〜６０のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項６２】
前記製剤は約０．９％生理食塩水以下のイオン強度を有する、請求項６１のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項６３】
前記製剤は塩化カルシウム、塩化マグネシウム、塩化カリウム、リン酸二水素カリウム、塩化ナトリウム、およびリン酸水素二ナトリウムのうちの２つ以上を含む、請求項６１に記載の医薬製剤。
【請求項６４】
前記製剤は表４、表５、または表６に列挙される構成成分を含む、請求項６３に記載の医薬製剤。
【請求項６５】
前記製剤は１週間に１回、１週間に２回、または１ヶ月に１〜５回の投与のためのプレドーズペンまたはシリンジの形態でパッケージされる、請求項３８〜６４のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項６６】
活性剤の徐放レジメンを送達するための方法であって、請求項１〜６５のいずれか一項に記載の製剤を、治療の必要な対象に投与することを含み、前記製剤は１ヶ月に約１〜約８回投与される、方法。
【請求項６７】
前記活性剤はＧＬＰ−１またはその類似体であり、１ヶ月に約１〜約８回投与される、請求項６６に記載の方法。
【請求項６８】
前記活性剤はＶＩＰまたはその類似体であり、１ヶ月に約１〜約８回投与される、請求項６６に記載の方法。
【請求項６９】
前記製剤はだいたい毎週投与される、請求項６６〜６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７０】
前記製剤は皮下または筋肉内に投与される、請求項６６〜６９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７１】
前記投与部位は病的部位ではない、請求項６６〜６９のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
優先権
本出願は、２０１１年８月２４に出願された米国仮特許出願第６１／５２６，９４０号および２０１１年１０月２６日に出願された米国仮特許出願第６１／５５１，５０６号（その各々はその全体が本明細書で参照により組み込まれる）に対し優先権を主張する。
【０００２】
発明の分野
本発明は徐放のための医薬製剤、および徐放製剤を用いた治療レジメンを送達するための方法に関する。
【０００３】
電子的に提出されたテキストファイルの説明
これに添えて電子的に提出されたテキストファイルの内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる：配列表のコンピュータ可読フォーマットコピー（ファイル名：ＰＨＡＳ＿０２４＿０２ＷＯ＿ＳｅｑＬｉｓｔ＿ＳＴ２５．ｔｘｔ、記録日：２０１２年８月１４日、ファイルサイズ３キロバイト）。
【背景技術】
【０００４】
ペプチドおよび小分子薬の有効性は、そのような薬物の循環における半減期、ならびに実質的に一定の血漿レベルを得るのが困難なことによりしばしば制限される。例えば、インクレチンＧＬＰ−１は、循環におけるその短い半減期に反撃するために比較的高い用量で投与されなければならず、これらの高い用量は、とりわけ悪心と関係する。Ｍｕｒｐｈｙ  ａｎｄ  Ｂｌｏｏｍ、Ｎｏｎｐｅｐｔｉｄｉｃ  ｇｌｕｃａｇｏｎ  −ｌｉｋｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  １  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｇｏｎｉｓｔｓ：  Ａ  ｍａｇｉｃ  ｂｕｌｌｅｔ  ｆｏｒ  ｄｉａｂｅｔｅｓ？  ＰＮＡＳ  １０４  （３）：６８９−６９０  （２００７）。さらに、ペプチド薬血管作用性小腸ペプチド（ＶＩＰ）は、いくつかの推定では、１分未満の半減期を示し、これによりこの薬剤は、薬学的用途で実際的でないものになっている。Ｄｏｍｓｃｈｋｅ  ｅｔ  ａｌ、Ｖａｓｏａｃｔｉｖｅ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｉｎ  ｍａｎ：  ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ，  ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ａｎｄ  ｃｉｒｃｕｌａｔｏｒｙ  ｅｆｆｅｃｔｓ．  Ｇｕｉ  １９：  １０４９−１０５３  （１９７８）；  Ｈｅｎｎｉｎｇ  ａｎｄ  Ｓａｗｍｉｌｌｅｒ，  Ｖａｓｏａｃｔｉｖｅ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｐｅｐｔｉｄｅ：  ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  ｅｆｆｅｃｔｓ，  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ４９：２７−３７  （２００１）。ペプチド薬物の短い血漿半減期は、しばしば、速い腎臓クリアランスならびに体循環中の酵素分解による。
【０００５】
ペプチドおよび小分子薬の薬物動態を改善するための戦略は大きな需要がある。
【発明の概要】
【０００６】
本発明は徐放のための医薬製剤、および徐放製剤を用いた治療レジメンを送達するための方法を提供する。よって、本発明はペプチドおよび小分子薬の改善された薬物動態を提供する。
【０００７】
１つの態様では、本発明は徐放医薬製剤を提供する。製剤は全身投与のための治療薬を含み、ここで、治療薬は活性剤および対象の体温で可逆マトリクスを形成することができるアミノ酸配列を含む。可逆マトリクスは、水素結合（例えば、分子内および／または分子間水素結合）により、ならびに疎水性寄与により形成される。製剤はさらに、投与されるとマトリクスの形成を誘導する、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤および／または希釈剤を含む。マトリクスは、注射部位からの循環への遅い吸収を提供する。徐放、または注射部位からの遅い吸収は、濃度が注射部位で消散するので、マトリクスの遅い反転による。製品が循環内に移動した時点で、製剤は、長い半減期および改善された安定性を与える。よって、遅い吸収および長い半減期の独特の組み合わせが達成され、トラフ比に対する浅いピークおよび／または長いＴｍａｘを有する所望のＰＫプロファイルが得られる。
【０００８】
ある一定の実施形態では、アミノ酸配列はエラスチン様タンパク質（ＥＬＰ）配列である。ＥＬＰ配列は、エラスチンタンパク質に関連する、またはその模倣物である構造ペプチド単位または配列を含むまたはから構成される。アミノ酸配列は選択された製剤により可視および可逆の逆相転移を示し得る。すなわち、アミノ酸配列は転移温度（Ｔｔ）より下では構造的に乱され、製剤中で高可溶性となり得るが、製剤の温度がＴｔを超えて上昇すると、鋭い（２−３℃範囲）無秩序−秩序相転移を示し得る。温度に加えて、アミノ酸ポリマの長さ、アミノ酸組成、イオン強度、ｐＨ、圧力、選択した溶媒、有機溶質の存在、温度、およびタンパク質濃度もまた、転移特性に影響する可能性があり、これらは、所望の吸収プロファイルに対し調整され得る。マトリクスを形成するアミノ酸配列のための他の例示的な配列または構造は本明細書で開示される。
【０００９】
様々な実施形態では、全身投与のための活性剤はタンパク質またはペプチドであり、これは短い循環半減期、例えば約３０秒〜約１時間、〜約２時間、または〜約５時間を有し得る。いくつかの実施形態では、タンパク質またはペプチドは３０秒〜約１０時間の循環半減期を有する。治療薬は、タンパク質活性剤と、マトリクスを形成することができるアミノ酸配列の間の組換え融合タンパク質とすることができる。例示的なペプチド活性剤としては、ＧＬＰ−１受容体アゴニスト（例えば、ＧＬＰ−１またはその誘導体）、グルカゴン受容体アゴニスト（例えば、グルカゴン、オキシントモジュリンまたはその誘導体）、ＶＰＡＣ２選択的アゴニスト（例えば、血管作用性小腸ペプチド（ＶＩＰ）またはその誘導体）、ＧＩＰ受容体アゴニスト（例えばグルコース依存性インスリン分泌刺激ペプチド（ＧＩＰ）またはその誘導体）、あるいはインスリンまたはその誘導体が挙げられる。また、タンパク質活性剤は凝固因子、例えば第ＶＩＩ因子、第ＶＩＩＩ因子、または第ＩＸ因子である。本発明による送達のための他のタンパク質および小分子薬は本明細書で開示される。注射部位からの遅い吸収を提供することにより、腎臓クリアランスおよび分解を制御することができ、よって所望のＰＫプロファイルが達成される。
【００１０】
別の態様では、本発明は、活性剤の徐放レジメンを送達するための方法を提供する。方法は、本明細書で記載される製剤を、治療の必要な対象に投与することを含み、ここで、製剤は１ヶ月に約１〜約８回投与される。いくつかの実施形態では、製剤はだいたい毎週投与され、ならびに、皮下または筋肉内に（例えば）投与され得る。いくつかの実施形態では、投与部位は病的部位ではなく、すなわち、治療薬は対象とする作用部位に直接投与されない。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】３７℃以上までの温度変化により誘導されるＥＬＰ１タンパク質の相転移（濁度の増加により図示される）を示す。この特性は注射部位からの遅い吸収を提供する。
【図２】２５℃以上までの温度変化により誘導されるＥＬＰ４タンパク質の相転移（濁度の増加により図示される）を示す。この特性はデポー様送達を提供する。
【図３】理論に縛られること望まないが、観察される転移に対する可能性のあるメカニズムを示し、ここで、水殻はある一定の条件下で排除され、水素結合の形成が可能になる。
【図４】３７℃、約０．０１ｍｇ／ｍｌ未満のタンパク質濃度でのＥＬＰ４シリーズ転移を示し、例えば、注射部位で低タンパク質濃度の徐放製剤が可能になる。
【図５】３７℃直下、約１０ｍｇ／ｍｌ以上の比較的高いタンパク質濃度でのＥＬＰ１シリーズ転移を示し、比較的高い量の活性剤を有する徐放製剤が可能になる。
【図６】０．３、０．６、０．９および１．３５ｍｇ／ｋｇの２型糖尿病を有する成人対象へのＳＣ投与後の、Ｇｌｐ−ｌ／ＥＬＰｌ−１２０（本明細書ではＰＢ１０２３またはＧｌｙｍｅｒａとも呼ばれる）に対する薬物動態パラメータの概要を示す。
【図７】第０日に０．３、０．６、０．９および１．３５ｍｇ／ｋｇの２型糖尿病を有する成人対象へのｓ．ｃ．投与後の、Ｇｌｐ−ｌ／ＥＬＰｌ−１２０（本明細書でＰＢ１０２３またはＧｌｙｍｅｒａとも呼ばれる）の平均血清濃度を示す（片対数軸）。
【図８】２型糖尿病：Ｇｌｙｍｅｒａプログラム概観薬物動態クロスオーバー研究を示す。９０ｍｇの、５０ｍｇ／ｍＬおよび１００ｍｇ／ｍＬ製剤としての２型糖尿病を有する成人対象へのｓ．ｃ．投与後のＧｌｙｍｅｒａの平均血清濃度を示す（片対数軸）。
【図９】９０ｍｇの５０ｍｇ／ｍＬおよび１００ｍｇ／ｍＬ製剤としての２型糖尿病を有する成人対象へのｓ．ｃ．投与後のＧｌｙｍｅｒａに対する薬物動態パラメータの概要を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明は徐放のための医薬製剤、および徐放製剤を用いた治療レジメンを送達するための方法を提供する。よって、本発明はペプチドおよび小分子薬の改善された薬物動態、例えば低いピーク対トラフ比、および／または長いＴｍａｘを有する比較的平坦なＰＫプロファイルを提供する。ＰＫプロファイルは、比較的希な投与スケジュール、例えば、いくつかの実施形態では１ヶ月に１〜８回の注射で維持することができる。
【００１３】
１つの態様では、本発明は徐放医薬製剤を提供する。製剤は全身投与のための治療薬を含み、ここで、治療薬は活性剤および対象の体温でマトリクスを形成することができるアミノ酸配列を含む。可逆マトリクスは水素結合（例えば、分子内および／または分子間水素結合）により、ならびに疎水性寄与により形成される。製剤はさらに、投与されるとマトリクスの形成を誘導する、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤および／または希釈剤を含む。マトリクスは注射部位から循環への遅い吸収を提供し、理論に縛られないが、この遅い吸収は、タンパク質濃度が注射部位で減少につれ、マトリクスの遅い反転による。遅い吸収プロファイルは、平坦なＰＫプロファイル、ならびに好都合で快適な投与レジメンを提供する。例えば、様々な実施形態では、日にちの経過に伴う（例えば、２〜約６０日、または約４〜約３０日）活性剤の血漿濃度は、１０倍超で、または約５倍超で、または約３倍超で変化しない。一般に、この平坦なＰＫプロファイルは、製剤の複数の（実質的に等間隔）投与、例えば少なくとも２、少なくとも約５、または少なくとも約１０投与にわたって見られる。いくつかの実施形態では、遅い吸収は、約５時間超、約１０時間超、約２０時間超、約３０時間超、または約５０時間超のＴｍａｘ（最高血漿濃度到達時間）により表される。
【００１４】
徐放、または注射部位からの遅い吸収は、対象の体温で水素結合マトリクスを形成することができるアミノ酸配列、ならびに製剤の構成成分により制御される。
【００１５】
いくつかの実施形態では、アミノ酸配列は、タンパク質骨格基および／または側鎖基を介して水素結合を形成する、およびマトリクス形成に疎水性相互作用を与え得る構造単位を含む。いくつかの実施形態では、アミノ酸側鎖は、水素結合供与基を含まず、水素結合は実質的にタンパク質骨格を介して形成される。例示的なアミノ酸としては、プロリン、アラニン、バリン、グリシン、およびイソロイシン、ならびに同様のアミノ酸が挙げられる。いくつかの実施形態では、構造単位は実質的に繰り返し構造単位であり、そのため、実質的に繰り返し構造モチーフ、および実質的に繰り返し水素結合能力を生成させる。これらのおよび他の実施形態では、アミノ酸配列は少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも４０％、または少なくとも５０％のプロリンを含み、これらは実質的に繰り返しパターンで配置され得る。この状況では、実質的に繰り返しパターンは、アミノ酸配列の少なくとも５０％または少なくとも７５％のプロリン残基が限定できる構造単位の一部であることを意味する。さらに他の実施形態では、アミノ酸配列は水素結合供与側鎖を有するアミノ酸、例えばセリン、スレオニン、および／またはチロシンを含む。いくつかの実施形態では、繰り返し配列は、１〜約４つのプロリン残基を含むことができ、残りの残基は独立して非極性残基、例えばグリシン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、およびバリンから選択される。非極性または疎水性残基は疎水性相互作用をマトリクスの形成に与え得る。
【００１６】
アミノ酸配列は貯蔵温度よりも高い温度で注射されると「ゲル様」状態を形成し得る。例示的な配列は繰り返しペプチド単位を有し、および／または、より低い温度では比較的非構造化され、より高い温度では、水素結合された、構造化状態を達成し得る。
【００１７】
いくつかの実施形態では、体温でマトリクスを形成することができるアミノ酸配列は、４〜１０のアミノ酸の繰り返し単位を有するペプチドである。繰り返し単位はマトリクスの形成において１、２、または３つの水素結合を形成し得る。ある一定の実施形態では、体温でマトリクスを形成することができるアミノ酸配列は絹、エラスチン、コラーゲン、またはケラチンのアミノ酸配列、またはその模倣物、あるいは米国特許６，３５５，７７６号（本明細書で参照により組み込まれる）において開示されるアミノ酸配列である。
【００１８】
ある一定の実施形態では、アミノ酸配列はエラスチン様タンパク質（ＥＬＰ）配列である。ＥＬＰ配列は、エラスチンタンパク質に関連する、またはその模倣物である構造ペプチド単位または配列を含むまたはから構成される。ＥＬＰ配列は、３〜約２０のアミノ酸、またはいくつかの実施形態では、４〜１０のアミノ酸、例えば４、５または６のアミノ酸の構造単位から構成される。個々の構造単位の長さは変動してもよく、または均一でもよい。例示的な構造単位としては、配列番号：１−１２（下記）により規定される単位が挙げられ、これらはタンデム−繰り返し単位を含む繰り返し構造単位として使用され得、またはいくつかの組み合わせで使用され得る。よって、ＥＬＰは、下記で規定されるように、配列番号：１−１２から選択される構造単位（複数可）を含む、またはから本質的に構成され得る。
【００１９】
構造単位がＥＬＰ単位である実施形態を含む、いくつかの実施形態では、アミノ酸配列は約１０〜約５００の構造単位、または、ある一定の実施形態では約５０〜約２００構造単位、またはある一定の実施形態では、約８０〜約２００の構造単位、または約８０〜約１５０の構造単位、例えば配列番号：１−１２により規定される単位の１つまたは組み合わせを含む、またはから本質的に構成される。よって、構造単位は集合的に、約５０〜約２０００のアミノ酸残基、または約１００〜約８００のアミノ酸残基、または約２００〜約７００のアミノ酸残基、または約４００〜約６００のアミノ酸残基の長さを有し得る。
【００２０】
アミノ酸配列は選択された製剤により可視および可逆の逆相転移を示し得る。すなわち、アミノ酸配列は、転移温度（Ｔｔ）より下では構造的に乱され、製剤中で高可溶性となり得るが、製剤の温度がＴｔを超えて上昇すると、鋭い（２−３℃範囲）無秩序−秩序相転移を示し得る．温度に加えて、アミノ酸ポリマの長さ、アミノ酸組成、イオン強度、ｐＨ、圧力、温度、選択した溶媒、有機溶質の存在、およびタンパク質濃度もまた、転移特性に影響する可能性があり、これらは、所望の吸収プロファイルに対し製剤において調整され得る。吸収プロファイルは、時間経過に伴う活性剤の血漿濃度または活性を決定することにより容易に試験することができる。
【００２１】
ある一定の実施形態では、ＥＬＰ構成成分（複数可）は構造単位、例えば、限定はされないが、下記から形成され得る：
（ａ）テトラペプチドＶａｌ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ、またはＶＰＧＧ（配列番号：１）；
（ｂ）テトラペプチドＩｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ、またはＩＰＧＧ（配列番号：２）；
（ｃ）ペンタペプチドＶａｌ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｘ−Ｇｌｙ（配列番号：３）、またはＶＰＧＸＧ、ここで、Ｘは任意の天然または非天然アミノ酸残基であり、Ｘは任意でポリマまたはオリゴマリピート間で変動する；
（ｄ）ペンタペプチドＡｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ、またはＡＶＧＶＰ（配列番号：４）；
（ｅ）ペンタペプチドＩｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｘ−Ｇｌｙ、またはＩＰＧＸＧ（配列番号：５）、ここで、Ｘは任意の天然または非天然アミノ酸残基であり、Ｘは任意でポリマまたはオリゴマリピート間で変動する；
（ｅ）ペンタペプチドＩｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ、またはＩＰＧＶＧ（配列番号：６）；
（ｆ）ペンタペプチドＬｅｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｘ−Ｇｌｙ、またはＬＰＧＸＧ（配列番号：７）、ここでＸは任意の天然または非天然アミノ酸残基であり、Ｘは任意でポリマまたはオリゴマリピート間で変動する；
（ｇ）ペンタペプチドＬｅｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ、またはＬＰＧＶＧ（配列番号：８）；
（ｈ）ヘキサペプチドＶａｌ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ、またはＶＡＰＧＶＧ（配列番号：９）；
（ｉ）オクタペプチドＧｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ、またはＧＶＧＶＰＧＶＧ（配列番号：１０）；
（ｊ）ノナペプチドＶａｌ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｇｌｙ、またはＶＰＧＦＧＶＧＡＧ（配列番号：１１）；および
（ｋ）ノナペプチドＶａｌ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ、またはＶＰＧＶＧＶＰＧＧ（配列番号：１２）。
【００２２】
配列番号：ｌ−１２により規定されるそのような構造単位は、構造繰り返し単位を形成することができ、または組み合わせて使用されＥＬＰを形成し得る。いくつかの実施形態では、ＥＬＰ構成成分は、配列番号：１−１２から選択される構造単位の１つまたは組み合わせ（例えば、２、３または４）から完全に（またはほぼ完全に）形成される。他の実施形態では、ＥＬＰ構成成分の少なくとも７５％、または少なくとも８０％、または少なくとも９０％は、配列番号：１−１２から選択される構造単位の１つまたは組み合わせから形成され、それらは繰り返し単位として存在し得る。
【００２３】
ある一定の実施形態では、ＥＬＰはＶａｌ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｘ−Ｇｌｙ（配列番号：３）の繰り返し単位、例えばタンデム繰り返し単位を含み、ここで、Ｘは上記で規定される通りであり、全ＥＬＰ構成成分（ＶＰＧＸＧ（配列番号：３）以外の構造単位を含み得る）に対するＶａｌ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｘ−Ｇｌｙ（配列番号：３）単位のパーセンテージは、ＥＬＰの約５０％超、または約７５％超、または約８５％超、または約９５％超である。ＥＬＰは、配列番号：３の５〜１５構造単位（例えば約１０構造単位）のモチーフを含むことができ、ゲスト残基Ｘは、モチーフ内の少なくとも２つまたは少なくとも３つの単位間で変動する。ゲスト残基は独立して、例えば非極性または疎水性残基、例えばアミノ酸Ｖ、Ｉ、Ｌ、Ａ、Ｇ、およびＷから選択され得る（かつ、所望の逆相転移特性を保持するように選択され得る）。
【００２４】
いくつかの実施形態では、ＥＬＰはβターン構造を形成し得る。βターン構造を生成するのに好適な例示的なペプチド配列は、国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ９６／０５１８６号（その全体が本明細書で参照により組み込まれる）において記載される。例えば、配列ＶＰＧＸＧ（配列番号：３）中の、第４残基（Ｘ）はβターンの形成を排除せずに変更することができる。
【００２５】
例示的なＥＬＰの構造は、表示法ＥＬＰｋ［ＸｉＹｊ−ｎ］を用いて記載することができ、ここで、ｋは特定のＥＬＰ繰り返し単位を指定し、角括弧で囲まれた大文字は、一文字アミノ酸コードであり、それらの対応する添字は、構造単位内の各ゲスト残基Ｘの相対比を指定し（適切な場合）、ｎは構造リピートの数で表されるＥＬＰの全長を示す。例えば、ＥＬＰ１［Ｖ５Ａ２Ｇ３−１０］は、ペンタペプチドＶＰＧＸＧ（配列番号：３）の１０の繰り返し単位を含むＥＬＰ構成成分を指定し、ここで、Ｘは約５：２：３の相対比のバリン、アラニン、およびグリシンであり；ＥＬＰ１［Ｋ１Ｖ２Ｆ１−４］はペンタペプチドＶＰＧＸＧ（配列番号：３）の４の繰り返し単位を含むＥＬＰ構成成分を指定し、ここで、Ｘは約１：２：１の相対比のリジン、バリン、およびフェニルアラニンであり；ＥＬＰ１［Ｋ１Ｖ７Ｆ１−９］は、ペンタペプチドＶＰＧＸＧ（配列番号：３）の９の繰り返し単位を含むポリペプチドを指定し、ここで、Ｘは約１：７：１の相対比のリジン、バリン、およびフェニルアラニンであり；ＥＬＰ１［Ｖ−５］は、ペンタペプチドＶＰＧＸＧ（配列番号：３）の５の繰り返し単位を含むポリペプチドを指定し、ここでＸはバリンであり；ＥＬＰ１［Ｖ−２０］は、ペンタペプチドＶＰＧＸＧ（配列番号：３）の２０の繰り返し単位を含むポリペプチドを指定し、ここで、Ｘはバリンであり；ＥＬＰ２［５］は、ペンタペプチドＡＶＧＶＰ（配列番号：４）の５の繰り返し単位を含むポリペプチドを指定し；ＥＬＰ３［Ｖ−５］は、ペンタペプチドＩＰＧＸＧ（配列番号：５）の５の繰り返し単位を含むポリペプチドを指定し、ここでＸはバリンであり；ＥＬＰ４［Ｖ−５］は、ペンタペプチドＬＰＧＸＧ（配列番号：７）の５の繰り返し単位を含むポリペプチドを指定し、Ｘはバリンである。
【００２６】
ＥＬＰに関しては、Ｔｔはゲスト残基の疎水性の関数である。よって、ゲスト残基（複数可）のアイデンティティおよびそれらのモル分率（複数可）を変動させることにより、広い範囲にわたって逆転移を示すＥＬＰを合成することができる。よって、あるＥＬＰ長でのＴｔは、より大きな分率の疎水性ゲスト残基をＥＬＰ配列に組み込むことにより減少させることができる。好適な疎水性ゲスト残基の例としては、バリン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、トリプトファンおよびメチオニンが挙げられる。チロシンは中程度に疎水性であり、これもまた使用され得る。反対に、Ｔｔは、下記から選択されるものなどの残基を組み込むことにより増加させることができる：グルタミン酸、システイン、リジン、アスパラギン酸、アラニン、アスパラギン、セリン、スレオニン、グリシン、アルギニン、およびグルタミン。
【００２７】
１００，０００を超える分子量を有するポリペプチドでは、ＰＣＴ／ＵＳ９６／０５１８６号（その全体が本明細書で参照により組み込まれる）に開示される疎水性スケールは、特定のＥＬＰ配列の近似Ｔｔを予想するための１つの手段を提供する。１００，０００未満の分子量を有するポリペプチドでは、Ｔｔは下記二次関数により予想または決定することができる：Ｔｔ＝Ｍ０＋Ｍ１Ｘ＋Ｍ２Ｘ２、ここでＸは、融合タンパク質のＭＷであり、Ｍ０＝１１６．２１；Ｍ１＝−１．７４９９；Ｍ２−０．０１０３４９である。
【００２８】
いくつかの実施形態では、ＥＬＰは製剤条件で約１０〜約３７℃、例えば約２０〜約３７℃、または約２５〜約３７℃の範囲のＴｔを提供するように選択または設計される。いくつかの実施形態では、生理的条件（例えば、０．９％生理食塩水）での転移温度は、わずかにより低い末梢温度を考慮して約３４〜３６℃である。
【００２９】
ある一定の実施形態では、体温で水素結合マトリクスを形成することができるアミノ酸配列は［ＶＰＧＸＧ］９０を含み、ここで、各Ｘは、Ｖ、Ｇ、およびＡから選択され、Ｖ：Ｇ：Ａの比は約５：３：２とすることができる。例えば、体温で水素結合マトリクスを形成することができるアミノ酸配列は［ＶＰＧＸＧ］１２０を含むことができ、ここで、各ＸはＶ、Ｇ、およびＡから選択され、Ｖ：Ｇ：Ａの比は約５：３：２とすることができる。ここで示されるように、このＥＬＰの１２０の構造単位は、約５〜１５ｍｇ／ｍｌ（例えば、約１０ｍｇ／ｍｌ）のタンパク質により、約３７℃の転移温度を提供することができる。約５０〜約１００ｍｇ／ｍＬの濃度では、相転移温度は約３５．５℃（体温直下）であり、末梢体温をちょうど３７℃未満とすることが可能である。
【００３０】
また、体温でマトリクスを形成することができるアミノ酸配列は［ＶＰＧＶＧ］９０、または［ＶＰＧＶＧ］１２０を含む。本明細書で示されるように、このＥＬＰの１２０の構造単位は、約０，００５〜約０．０５ｍｇ／ｍｌ（例えば、約０．０１ｍｇ／ｍｌ）のタンパク質により、約３７℃の転移温度を提供することができる。
【００３１】
エラスチン様ペプチド（ＥＬＰ）タンパク質ポリマおよび組換え融合タンパク質は、米国特許公開番号第２０１０／００２２４５５号（本明細書で参照により組み込まれる）において記載されるように調製することができる。
【００３２】
他の実施形態では、体温でマトリクスを形成することができるアミノ酸配列はランダムコイルまたは非球状拡張構造を含み得る。例えば、体温でマトリクスを形成することができるアミノ酸配列は、米国特許公開番号第２００８／０２８６８０８号、ＷＩＰＯ特許公開番号第２００８／１５５１３４号、および米国特許公開番号第２０１１／０１２３４８７号（その各々は本明細書で参照により組み込まれる）において開示されるアミノ酸配列を含み得る。
【００３３】
例えば、いくつかの実施形態では、アミノ酸配列は、少なくとも４０のアミノ酸の非構造化組換えポリマを含む。例えば、非構造化ポリマは、非構造化ポリマに含まれるグリシン（Ｇ）、アスパラギン酸（Ｄ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、スレオニン（Ｔ）、グルタミン酸（Ｅ）およびプロリン（Ｐ）残基の合計が、総アミノ酸の約８０％超を構成する場合に規定され得る。いくつかの実施形態では、少なくとも５０％のアミノ酸は、Ｃｈｏｕ−Ｆａｓｍａｎアルゴリズムにより決定されるように二次構造を欠いている。非構造化ポリマは約１００、１５０、２００以上を超える近接したアミノ酸を含み得る。いくつかの実施形態では、アミノ酸配列はランダムコイルドメインを形成する。特に、「ランダムコイル高次構造」を有するまたは形成するポリペプチドまたはアミノ酸ポリマは、実質的に規定される二次および三次構造を欠く。
【００３４】
様々な実施形態では、意図される対象はヒトであり、体温は約３７℃であり、よって治療薬は、この温度で徐放を提供するように設計される。水素結合および／または疎水性相互作用の反転による循環への緩徐放出は、体温が一定のままであっても、製品が注射部位で拡散するので、濃度の降下により駆動される。他の実施形態では、対象は非ヒト哺乳類であり、治療薬は、哺乳類の体温で徐放を示すように設計され、それはいくつかの実施形態では、例えば、ある一定の飼いならされたペット（例えば、イヌまたはネコ）あるいは家畜（例えば、雌ウシ、ウマ、ヒツジ、またはブタ）では約３０〜約４０℃であり得る。一般に、Ｔｔは、製剤の貯蔵条件（１０〜約２５℃、または１５〜２２℃であり得る）よりも高く、そのため、治療薬は注射のための溶液中にとどまったままである。
【００３５】
治療薬は、一般に「全身送達」のためのものであり、薬剤は病的部位または作用部位に局所的に送達されないことを意味する。その代わりに、薬剤は注射部位から血流中に吸収され、そこで、薬剤は全身的に作用し、作用部位に循環を介して輸送される。
【００３６】
様々な実施形態では、活性剤はタンパク質またはペプチドであり、それらは短い循環半減期、例えば約３０秒〜約１時間を有し得る。治療薬はタンパク質活性剤と対象の体温で水素結合マトリクスを形成することができるアミノ酸配列の間の組換え融合タンパク質としてもよい。例示的なペプチド活性剤としては、ＧＩＰ受容体アゴニスト、例えばグルコース依存性インスリン分泌刺激ペプチド（ＧＩＰ）またはその誘導体が挙げられる。さらに例示的なペプチド活性剤としては、ＧＬＰ１受容体アゴニスト、例えばＧＬＰ−１またはその誘導体（ＧＬＰ１  ７−３６またはＧＬＰ１  ７−３７を含む）、あるいはエキセンディンまたはその誘導体が挙げられる。他の実施形態では、タンパク質またはペプチド薬はグルカゴン受容体アゴニスト（グルカゴン、オキシントモジュリンまたはその誘導体を含む）である。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ−１受容体アゴニストは、ＵＳ２０１１／０２５７０９２号（その全体が本明細書で参照により組み込まれる）において記載されるアミノ酸配列を有するデュアルアゴニストである。他のデュアルまたはマルチ受容体アゴニストはＵＳ２０１１／０１６６０２号およびＵＳ２０１０／００１９０７０１号（その各々は、特にその中で記載されるＧＬＰ−１受容体コアゴニストの構造および配列に関して、本明細書で参照により組み込まれる）に記載される。ＧＬＰ−１受容体コアゴニストの追加の記載は、Ｐｏｃａｉ  Ａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｇｌｕｃａｇｏｎ−Ｌｉｋｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  １／Ｇｌｕｃａｇｏｎ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｄｕａｌ  Ａｇｏｎｉｓｍ  Ｒｅｖｅｒｓｅｓ  Ｏｂｅｓｉｔｙ  ｉｎ  Ｍｉｃｅ，  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ５８：２２５８−２２６６  （２００９）およびＰａｔｔｅｒｓｏｎ  ＪＴ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎ−ｔｅｒｍｉｎａｌ  ｒｅｓｉｄｕｅｓ  ｗｉｔｈ  ｔｈｅ  ｃｅｎｔｒａｌ  ｒｅｇｉｏｎ  ｉｎ  ｇｌｕｃａｇｏｎ−ｒｅｌａｔｅｄ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ，  Ｊ．  Ｐｅｐｔ．  Ｓｃｉ．  １７：６５９−６６６  （２０１１）（その各々は本明細書でその全体が参照により組み込まれる）において見出され得る。別の実施形態では、本発明は、ＧＬＰ１受容体アゴニスト、グルカゴン受容体アゴニスト、およびＧＩＰ受容体アゴニストの任意の２つの共製剤を提供する。他の実施形態では、タンパク質またはペプチド薬はＶＰＡＣ２選択的アゴニスト、例えば血管作用性小腸ペプチド（ＶＩＰ）またはその誘導体である。また、タンパク質活性剤は凝固因子、例えば第ＶＩＩ因子、第ＶＩＴＩ因子、または第ＩＸ因子であり、あるいは他の実施形態ではインスリン（例えば、米国仮特許出願第６１／５６３，９８５号（本明細書で参照により組み込まれる）に記載されるように、単鎖インスリンまたはＡ鎖もしくはＢ鎖融合タンパク質）またはモノクローナル抗体もしくは単鎖抗体である。また、活性剤は米国特許公開番号第２０１１／０１２３４８７号（本明細書で参照により組み込まれる）に記載される通りである。本発明による例示的な治療薬としては、ＧＬＰ−１（Ａ８Ｇ，７−３７）ＥＬＰ１−１２０（本明細書ではＰＢ１０２３と呼ばれる）またはＧＬＰ−１（Ａ８Ｇ，７−３７）ＥＬＰ４−１２０（ＰＢ１０４６）が挙げられる。注射部位からの遅い吸収を提供することにより、腎臓クリアランスおよび分解を制御することができ、よって所望のＰＫプロファイルが達成される。
【００３７】
様々な実施形態では、本発明は、患者において実質的な食欲抑制を誘導しないものおよび／または患者において実質的な悪心を誘導しないもの、例えばＰＣＴＵＳ１２／４４３８３号（本明細書で参照により組み込まれる）に記載されるものなどの用量および／またはレジメンを含む。
【００３８】
他の実施形態では、治療薬は活性剤と対象の体温でマトリクスを形成することができるアミノ酸配列の間の化学複合体である。例えば、活性剤は化学療法薬、例えば下記から選択される化学療法薬とすることができる：メトトレキサート、ダウノマイシン、マイトマイシン、シスプラチン、ビンクリスチン、エピルビシン、フルオロウラシル、ベラパミル、シクロホスファミド、シトシンアラビノシド、アミノプテリン、ブレオマイシン、マイトマイシンＣ、デモコルチン（ｄｅｍｏｃｏｌｃｉｎｅ）、エトポシド、ミトラマイシン、クロランブシル、メルファラン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、タモキシフェン、パクリタキセル、ビンブラスチン、カンプトテシン、アクチノマイシンＤ、シタラビン、およびコンブレスタチン。また、薬剤は、免疫原性分子、または免疫調節物質、あるいは抗炎症薬、例えば米国特許公開番号第２００９／０００４１０４号（その全体が本明細書で参照により組み込まれる）に記載される薬剤であってもよい。また、薬剤は、オピオイド分子、例えば、例として、米国仮特許出願第６１／５９７，８９８号（本明細書で参照により組み込まれる）に記載されるようなオキシコドン、モルヒネ、またはコデインであってもよい。化学複合体は切断可能なリンカーを介してもよく、それについては多くの型が当技術分野で知られている。米国特許第６，３２８，９９６号（その全体が本明細書で参照により組み込まれる）を参照されたい。
【００３９】
製剤は投与されるとマトリクスの形成を誘導する、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤および／または希釈剤を含む。例えば、そのような賦形剤としては塩、および水素結合を安定化するように作用し得る他の賦形剤が挙げられる。例示的な塩としてはアルカリ土類金属塩、例えばナトリウム、カリウム、およびカルシウムが挙げられる。対イオンとしては、塩化物およびリン酸が挙げられる。例示的な塩としては、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化マグネシウム、塩化カルシウム、およびリン酸カリウムが挙げられる。
【００４０】
製剤中のタンパク質濃度は、賦形剤と共に、投与温度でマトリクスの形成を駆動するように調整される。例えば、タンパク質濃度が高いほど、マトリクスの形成の駆動を助け、このために必要とされるタンパク質濃度は、使用されるＥＬＰシリーズによって変動する。例えば、ＥＬＰ１−１２０、または匹敵する転移温度を有するアミノ酸配列を使用する実施形態では、タンパク質は約１ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの範囲で存在し、または約５ｍｇ／ｍＬ〜約１２５ｍｇ／ｍＬの範囲で存在する。治療薬は、約１０ｍｇ／ｍＬ〜約５０ｍｇ／ｍＬ、または約１５ｍｇ／ｍＬ〜約３０ｍｇ／ｍＬの範囲で存在することができる。ＥＬＰ４−１２０、または匹敵する転移温度を有するアミノ酸配列を使用する実施形態では、タンパク質は約０．００５ｍｇ／ｍＬ〜約１０ｍｇ／ｍＬの範囲で存在し、または約０．０１ｍｇ／ｍＬ〜約５ｍｇ／ｍＬの範囲で存在する。
【００４１】
治療薬は体温（例えば、３７℃、またはいくつかの実施形態では３４〜３６℃）でのマトリクスの形成を駆動するのに十分な、ｐＨ、イオン強度で、および一般に賦形剤と共に製剤化される。治療薬は一般に、貯蔵条件でマトリクスを形成しないように調製される。貯蔵条件は一般に製剤の転移温度未満、例えば約３２℃未満、または約３０℃未満、約２７℃未満、または約２５℃未満、または約２０℃未満、または約１５℃未満である。例えば、製剤は、血液と等張であり、または生理的条件を模倣するイオン強度を有し得る。例えば、製剤は少なくとも２５ｍＭ塩化ナトリウム、または少なくとも３０ｍＭ塩化ナトリウム、または少なくとも４０ｍＭ塩化ナトリウム、または少なくとも５０ｍＭ塩化ナトリウム、または少なくとも７５ｍＭ塩化ナトリウム、または少なくとも１００ｍＭ塩化ナトリウム、または少なくとも１５０ｍＭ塩化ナトリウムのイオン強度を有し得る。ある一定の実施形態では、製剤は、０．９％生理食塩水未満のイオン強度を有する。いくつかの実施形態では、製剤は、塩化カルシウム、塩化マグネシウム、塩化カリウム、リン酸二水素カリウム、塩化ナトリウム、およびリン酸水素二ナトリウムのうちの２つ以上を含む。液体製剤は、表４、表５、または表６で列挙される構成成分を含むことができ、冷蔵または室温で貯蔵することができる。
【００４２】
製剤は、１週間に１回、１週間に２回、または１ヶ月に１〜８回の投与のためのプレドーズペンまたはシリンジの形態でパッケージすることができ、または従来のバイアルなどに充填することができる。
【００４３】
例示的な実施形態では、本発明は治療薬を含む徐放医薬製剤を提供し、治療薬（例えば、ペプチドまたはタンパク質治療薬）は、活性剤および［ＶＰＧＸＧ］９０、または［ＶＰＧＸＧ］１２０を含むアミノ酸配列を含み、各ＸはＶ、Ｇ、およびＡから選択される。Ｖ、Ｇ、およびＡは、約５：３：２の比で存在し得る。また、アミノ酸配列は［ＶＰＧＶＧ］９０または［ＶＰＧＶＧ］１２０を含む。製剤はさらに、ヒト対象に投与されると、水性形態から可逆マトリクスを形成するための、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤および／または希釈剤を含む。活性剤はある一定の実施形態では、ＧＬＰ−１またはその誘導体（例えば、ＧＬＰ−１、Ａ８Ｇ，７−３７）、あるいは血管作用性小腸ペプチド（ＶＩＰ）またはその誘導体（例えば、メチオニンなどのＮ末端部分を有する）、あるいはオキシントモジュリンまたはその誘導体、あるいはインスリンまたはその誘導体である。ＧＬＰ−１およびその誘導体は米国特許公開番号第２０１１／０１２３４８７号（本明細書で参照により組み込まれる）において開示される。ＶＩＰおよびその誘導体は米国特許公開番号第２０１１／０１７８０１７号（本明細書で参照により組み込まれる）において開示される。インスリンおよびその誘導体は米国仮特許出願第６１／５６３，９８５号（本明細書で参照により組み込まれる）において記載される。
【００４４】
これらの実施形態では、治療薬は約０．５ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの範囲で存在することができ、または約５ｍｇ／ｍＬ〜約１２５ｍｇ／ｍＬの範囲で存在する。治療薬は、約１０ｍｇ／ｍＬ〜約５０ｍｇ／ｍＬの範囲、または約１５ｍｇ／ｍＬ〜約３０ｍｇ／ｍＬの範囲で存在する。製剤は少なくとも２５ｍＭ塩化ナトリウム、または少なくとも３０ｍＭ塩化ナトリウム、または少なくとも４０ｍＭ塩化ナトリウム、または少なくとも５０ｍＭ塩化ナトリウム、または少なくとも７５ｍＭ塩化ナトリウム、または少なくとも１００ｍＭ塩化ナトリウムのイオン強度を有し得る。製剤は、約０．９％生理食塩水未満のイオン強度を有し得る。製剤は、塩化カルシウム、塩化マグネシウム、塩化カリウム、リン酸二水素カリウム、塩化ナトリウム、およびリン酸水素二ナトリウムのうちの２つ以上を含む。製剤は表４、表５、または表６に列挙される構成成分を含み得る。
【００４５】
例えば、所望の安定性を達成するための他の製剤構成成分もまた使用され得る。そのような構成成分としては、１つ以上のアミノ酸または糖アルコール（例えば、マンニトール）、保存剤、および緩衝剤が挙げられ、そのような成分は当技術分野でよく知られている。
【００４６】
別の態様では、本発明は、活性剤の徐放レジメンを送達するための方法を提供する。方法は、本明細書で記載される製剤を、治療の必要な対象に投与することを含み、ここで、製剤は１ヶ月に約１〜約８回投与される。例えば、活性剤はＧＬＰ−１またはその類似体であってもよく、米国特許出願第１３／５３４，８３６号（本明細書で参照により組み込まれる）において記載される方法で投与される。例えば、治療薬は、ＥＬＰ１（例えば、約９０〜約１５０のＥＬＰ単位を有する）に融合されたＧＬＰ−１  ７−３６または７−３７（代わりに８位にＧｌｙを有する）であってもよい。ＧＬＰ−１融合物は、例えば、治療の必要な患者に投与することにより、糖尿病（１または２型）、代謝疾患、または肥満の治療のために使用され得る。また、活性剤はＶＩＰまたはその類似体であり、米国特許公開番号第２０１１／０１７８０１７（本明細書で参照により組み込まれる）において記載される方法で投与される。ＶＩＰは、受容体結合プロファイルを変化させるために、Ｎ末端に追加の部分、例えばメチオニンを有することができ、これもまた、米国特許公開番号第２０１１／０１７８０１７号（その記載は本明細書で参照により組み込まれる）に記載される。ＶＩＰはＥＬＰ１（約９０〜約１５０のＥＬＰ単位を有する）に融合され得る。ＶＩＰ活性剤は、制御されないまたは抵抗性高血圧症、あるいは肺動脈高血圧症（ＰＡＨ）、および慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、などから選択される状態を治療する方法において用途が見出される。
【００４７】
いくつかの実施形態では、製剤はだいたい毎週投与され、皮下または筋肉内に投与され得る。いくつかの実施形態では、投与部位は、病的部位ではなく、例えば、対象とする作用部位ではない。
【００４８】
様々な実施形態では、活性剤の血漿濃度は、製剤の複数の投与、例えば少なくとも２、少なくとも約５、または少なくとも約１０回投与の経過にわたって、１０倍超で、または約５倍、または約３倍で変化しない。投与は実質的に等間隔、例えば、例として、約毎日、または１週間に約１回、または１ヶ月に１〜約５回とされる。
【００４９】
ある一定の実施形態では、対象はヒトであるが、他の実施形態では、非ヒト哺乳類、例えば、飼いならされたペット（例えば、イヌまたはネコ）、あるいは家畜または農場動物（例えば、ウマ、雌ウシ、ヒツジ、またはブタ）であってもよい。
【実施例】
【００５０】
ある一定のアミノ酸配列により示される相転移特性を図１（ＥＬＰ１）および図２（ＥＬＰ４）に示す。相転移は濁度の増加として観察することができる。図３は、理論に縛られること望まないが、ある濃度に対する相転移温度を超える温度での、水殻の排除および水素結合の形成により駆動される相転移のための可能性のあるメカニズムを示す。
【００５１】
図４は３７℃、約０．０１ｍｇ／ｍＬ未満のタンパク質濃度でのＥＬＰ４シリーズ（約１２０構造単位）転移を示し、低タンパク質濃度の徐放製剤が可能になる。より高い濃度では、徐放は十分に遅く、デポー様製剤が提供される。図５は約１０ｍｇ／ｍＬ〜約１００ｍｇ／ｍＬ、またはそれ以上の比較的高いタンパク質濃度での３５〜３７℃の間のＥＬＰ１シリーズ転移を示し、比較的高い量の活性剤を有する徐放製剤が可能になる。
【００５２】
様々な製剤をＰＢ１０２３（ＧＬＰ−１、Ａ８Ｇ，７−３７、ＥＬＰ１−１２０）およびＰＢ１０４６（ＧＬＰ−１、Ａ８Ｇ，７−３７、ＥＬＰ４−１２０）に対し、様々なタンパク質濃度およびイオン強度で調製した。３７℃水浴により誘導される転移を試験した。
【００５３】
表１は、タンパク質濃度およびイオン強度により変動させた、ＰＢ１０２３およびＰＢ１０４６の製剤に対する相転移の決定を示す。示されるように、少なくとも５０ｍｇ／ｍＬのＰＢ１０２３の、少なくとも、１０ｍＭ  Ｈｉｓおよび５５ｍＭ  ＮａＣｌのイオン強度を有する製剤は、３７℃で転移した（３５．５℃の近似転移温度を有する）。２５ｍｇ／ｍＬのＰＢ１０２３および約通常生理食塩水のイオン強度の製剤もまた、３７℃で転移した。１ｍｇ／ｍＬと低いＰＢ１０４６の、通常生理食塩水と同様のイオン強度を有する製剤は３７℃で転移した。
【００５４】
表２に示されるように、通常生理食塩水、ＤＰＢＳ、または１ｘリン酸緩衝生理食塩水のいずれか中の２５ｍｇ／ｍｌのＰＢ１０２３の製剤は、所望の転移特性を生成させるのに十分であった。水だけでは、所望の転移特性を支持しなかった。
【００５５】
表３に示されるように、２５ｍｇ／ｍｌのＰＢ１０２３の製剤は、３７℃で転移し、５０ｍＭ  ＮａＣｌに等しいイオン強度を有する。
【００５６】
表４、表５、および表６は、本発明のある一定の実施形態によるいくつかの緩衝製剤を示す。
【００５７】
図６はＧＬＰ−１／ＥＬＰｌ−１２０（本明細書ではＰＢ１Ｇ２３またはＧｌｙｍｅｒａとも呼ばれる）の、２型糖尿病を有する成人対象への０．３、０．６、０．９および１．３５ｍｇ／ｋｇのＳＣ投与後の薬物動態パラメータの概要を示す。
【００５８】
図７は、第０日に０．３、０．６、０．９および１．３５ｍｇ／ｋｇの２型糖尿病を有する成人対象へのｓ．ｃ．投与後の、ＧＬＰ−１／ＥＬＰ１−１２０（本明細書ではＰＢ１０２３またはＧｌｙｍｅｒａとも呼ばれる）の平均血清濃度を示す（片対数軸）。
【００５９】
図８は２型糖尿病：Ｇｌｙｍｅｒａプログラム概観薬物動態クロスオーバー研究を示す。９０ｍｇの、５０ｍｇ／ｍＬおよび１００ｍｇ／ｍＬ製剤としての２型糖尿病を有する成人対象へのｓ．ｃ．投与後のＧｌｙｍｅｒａの平均血清濃度を示す（片対数軸）。５０ｍｇ／ｍＬおよび１００ｍｇ／ｍＬに対する平均血清分布に対する時間経過は、１００ｍｇ／ｍＬ用量が血流に、５０ｍｇ／ｍＬ用量よりも遅く入る（すなわち、１００ｍｇ／ｍＬデータセットはより遅い上昇速度を有する）ことを除き、全体としてほぼ等価であることに注意すべきである。
【００６０】
図９は、９０ｍｇの５０ｍｇ／ｍＬおよび１００ｍｇ／ｍＬ製剤としての２型糖尿病を有する成人対象へのｓ．ｃ．投与後のＥＬＰ１−１２０（本明細書ではＰＢ１０２３またはＧｌｙｍｅｒａとも呼ばれる）に対する薬物動態パラメータの概要を示す。
【表１】
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【表２】
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【表３】
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【表４】
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【表５】
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【表６】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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