(57)【要約】本発明は、以下の式の化合物2014500321.tif 000026（式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は本明細書に記載される通りである）またはその薬学的に許容される塩、該化合物を使用して骨関節炎を治療する方法、および該化合物を調製するプロセスを提供する。
2014500321.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式の化合物：
【化１】
2014500321.tif 000024
（式中、
Ｒ１は、−Ｃ１−５アルキル、−Ｃ（ＣＨ３）２（ＯＣＨ３）、−Ｃ（ＣＦ３）−シクロプロピルおよび−Ｃ（ＣＨ３）−シクロプロピルから選択され、
Ｒ２は、ハロ、−ＣＨ３、−ＣＦ３、および−ＣＨＦ２から選択され、
Ｒ３は、Ｈ、ハロ、および−ＣＨ３から選択される）
またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｒ１が、−Ｃ（ＣＨ３）３、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ（ＣＨ３）２（ＯＣＨ３）、−Ｃ（ＣＦ３）−シクロプロピル、および−Ｃ（ＣＨ３）−シクロプロピルから選択される、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３】
Ｒ２が、Ｂｒ、Ｃｌ、−ＣＨ３、−ＣＦ３、および−ＣＨＦ２から選択される、請求項１または２に記載の化合物、あるいはその薬学的に許容される塩。
【請求項４】
Ｒ２が、Ｃｌ、−ＣＦ３、および−ＣＨＦ２から選択される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項５】
Ｒ３が、Ｈ、Ｆ、および−ＣＨ３から選択される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項６】
Ｒ３が、Ｈまたは−ＣＨ３である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項７】
Ｒ３が、Ｈである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項８】
【化２】
2014500321.tif 000025
である化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤のうちの少なくとも１つとを含む、医薬組成物。
【請求項１０】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩の有効量を、それを必要とする患者に投与することを含む、骨関節炎由来の炎症について、患者を治療する方法。
【請求項１１】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩の有効量を、それを必要とする患者に投与することを含む、骨関節炎由来の疼痛について、患者を治療する方法。
【請求項１２】
医薬として使用するための請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１３】
療法に使用するための請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１４】
骨関節炎の治療に使用するための請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１５】
骨関節炎由来の疼痛の治療に使用するための請求項１６に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、骨関節炎の治療に有用な新規イミダゾール−２−ベンズアミド化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
骨関節炎は、関節軟骨ならびに骨、滑膜および関連する線維性関節組織を含む関節周囲構造の進行性破壊および炎症の程度の変化により特徴付けられる関節の複合的な変性疾患である。既存の薬物療法は、骨関節炎に関連する疼痛を減少させ得るが、時間とともに適度に効果的であり得るのみであり、そのような療法は可変の危険性／有益性の考慮を有する。非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤＳ）および／またはシクロオキシゲナーゼ−２阻害剤（ＣＯＸ−２阻害剤）を使用する現在の治療は有効であるが、顕著な心臓血管系および胃腸への影響を生じ得る。したがって、これらの薬物のクラスは、患者の既存または緊急の心臓血管および／または胃腸の状態に起因して多くの患者には禁忌であり得る。さらに、これらの療法中の患者は特定の薬物治療に対して難治性になり得る。
【０００３】
プロスタグランジンＥ２は、不安定な中間体プロスタグランジンＨ２（ＰＧＨ２）を生成するためにシクロオキシゲナーゼによりアラキドン酸の代謝を介して産生される。プロスタグランジンＨ２は次いで、ミクロソームプロスタグランジンＥ２シンターゼ−１（ｍＰＧＥＳ−１）によりＰＧＥ２にさらに代謝される。プロスタグランジンＥ２は、骨関節炎に関連する病態、例えば、熱、疼痛、および炎症の重要なメディエーターである。
【０００４】
骨関節炎に関連する疼痛および／または炎症を治療し、軽減するためのさらなる選択肢についての必要性が存在する。本発明は、ｍＰＧＥｓ−１阻害剤の新規阻害剤を提供し、骨関節炎の疼痛および／または炎症を患っている患者を治療するのに有用であり得る。
【０００５】
特許文献１は、以下に例示した式Ｉｃの化合物
【化１】
2014500321.tif 000003
（式中、Ａ、Ｍ、ＲＺ６、Ｒ２およびＲ６は、本明細書に記載した通りである）
を開示しており、ｍＰＧＥＳ−１の阻害に治療的有用性がある疾患の予防および／または治療に有用であると記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】国際公開第２０１１０４８００４号
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、式Ｉの化合物：
【化２】
2014500321.tif 000004
（式中、Ｒ１は、−Ｃ１−５アルキル、−Ｃ（ＣＨ３）２（ＯＣＨ３）、−Ｃ（ＣＦ３）−シクロプロピルおよび−Ｃ（ＣＨ３）−シクロプロピルから選択され、Ｒ２は、ハロ、−ＣＨ３、−ＣＦ３、および−ＣＨＦ２から選択され、Ｒ３は、Ｈ、ハロ、および−ＣＨ３から選択される）
またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【０００８】
本発明は、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩（式中、Ｒ１は好ましくは、−Ｃ（ＣＨ３）３、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ（ＣＨ３）２（ＯＣＨ３）、−Ｃ（ＣＦ３）−シクロプロピル、および−Ｃ（ＣＨ３）−シクロプロピルから選択される）を提供する。より好ましくは、Ｒ１は−Ｃ（ＣＨ３）３または−ＣＨ（ＣＨ３）２である。
【０００９】
本発明は、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩（式中、Ｒ２は、Ｂｒ、Ｃｌ、−ＣＨ３、−ＣＦ３、および−ＣＨＦ２から選択される）を提供する。より好ましくは、Ｒ２はＣｌ、−ＣＦ３、および−ＣＨＦ２から選択される。さらにより好ましくは、Ｒ２はＣｌである。
【００１０】
本発明は、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩（式中、Ｒ３は、Ｈ、Ｆ、および−ＣＨ３から選択される）を提供する。より好ましくは、Ｒ３はＨまたは−ＣＨ３である。さらにより好ましくはＲ３はＨである。
【００１１】
本発明はまた、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩（式中、Ｒ１は、−Ｃ１−５アルキル、−Ｃ（ＣＨ３）２（ＯＣＨ３）、−Ｃ（ＣＦ３）−シクロプロピルおよび−Ｃ（ＣＨ３）−シクロプロピルから選択され、Ｒ２は、Ｂｒ、Ｃｌ、−ＣＨ３、−ＣＦ３、および−ＣＨＦ２から選択される）を提供する。より好ましくは、Ｒ２は、Ｃｌ、−ＣＦ３、および−ＣＨＦ２である。さらにより好ましくは、Ｒ２はＣｌである。
【００１２】
本発明はまた、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩（式中、Ｒ１は、−Ｃ１−５アルキル、−Ｃ（ＣＨ３）２（ＯＣＨ３）、−Ｃ（ＣＦ３）−シクロプロピルおよび−Ｃ（ＣＨ３）−シクロプロピルから選択され、Ｒ２は、ハロ、−ＣＨ３、−ＣＦ３、および−ＣＨＦ２から選択され、Ｒ３は、Ｈ、Ｆ、および−ＣＨ３である）を提供する。より好ましくは、Ｒ３は、Ｈまたは−ＣＨ３から選択され、さらにより好ましくはＲ３はＨである。
【００１３】
本発明はまた、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩（式中、Ｒ１は、−Ｃ（ＣＨ３）３、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ（ＣＨ３）２（ＯＣＨ３）、−Ｃ（ＣＦ３）−シクロプロピル、および−Ｃ（ＣＨ３）−シクロプロピルから選択され、Ｒ２は、Ｂｒ、Ｃｌ、−ＣＨ３、−ＣＦ３、および−ＣＨＦ２から選択され、Ｒ３は、Ｈ、ハロ、および−ＣＨ３から選択される）を提供する。より好ましくは、Ｒ３は、Ｈ、Ｆ、および−ＣＨ３から選択される。さらにより好ましくは、Ｒ３は、Ｈまたは−ＣＨ３から選択され、なおさらにより好ましくはＲ３はＨである。
【００１４】
本発明はまた、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩（式中、Ｒ１は、−Ｃ（ＣＨ３）３、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ（ＣＨ３）２（ＯＣＨ３）、−Ｃ（ＣＦ３）−シクロプロピル、および−Ｃ（ＣＨ３）−シクロプロピルから選択され、Ｒ２は、Ｃｌ、−ＣＦ３、および−ＣＨＦ２から選択され、Ｒ３はＨまたは−ＣＨ３であり、なおさらにより好ましくはＲ３はＨである）を提供する。
【００１５】
本発明はまた、式ＩＩの化合物：
【化３】
2014500321.tif 000005
またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００１６】
本発明は、式ＩもしくはＩＩの化合物またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤のうちの少なくとも１つを提供する。
【００１７】
本発明は、骨関節炎に関連する疼痛および／または炎症について患者を治療する方法を提供する。その方法は、有効量の式ＩまたはＩＩに係る化合物、またはその薬学的に許容される塩を必要とする患者に投与することを含む。一形態において、その方法は、骨関節炎由来の疼痛について患者を治療することである。別の形態において、その方法は、骨関節炎由来の炎症について患者を治療することである。
【００１８】
本発明はまた、医薬として使用するための、式ＩもしくはＩＩに係る化合物、またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００１９】
本発明は、療法に使用するための、式ＩもしくはＩＩの化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００２０】
本発明は、骨関節炎に関連する疼痛および／または炎症の治療に使用するための、式ＩもしくはＩＩの化合物、またはその薬学的に許容される塩を提供する。より好ましくは、本発明は、骨関節炎病態に由来するかまたは骨関節炎病態に関連する疼痛および／または炎症の治療に使用するための、式ＩもしくはＩＩの化合物、またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
「薬学的に許容される塩」という用語は、臨床および／または獣医学的使用に許容可能であるとみなされる本発明の化合物の塩を指す。薬学的に許容される塩およびそれらを調製するための一般的な方法は当該技術分野において周知である。例えば、Ｐ．Ｓｔａｈｌら，Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｕｓｅ，（ＶＣＨＡ／Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，２００２）；Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅら，「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌ．６６，Ｎｏ．１，１９７７年１月を参照のこと。
【００２２】
「患者」とは、哺乳動物、好ましくはヒトを指す。
【００２３】
本発明の化合物、またはその塩は、当該技術分野において公知の様々な手段により調製され得、それらの一部は以下のスキーム、調製例および実施例に例示する。記載している経路の各々についての特定の合成工程は、式Ｉの化合物、またはその塩を調製するために異なる方法で、または異なるスキームからの工程と共に組み合わされてもよい。以下のスキームにおける各工程の生成物は、抽出、蒸発、沈殿、クロマトグラフィー、濾過、粉砕、および結晶化を含む、従来の方法により回収され得る。
【００２４】
さらに、以下のスキームに記載している中間体は複数の保護基を含む。可変の保護基は、実施される特定の反応条件および特定の変換に応じて各々の発生において同じであっても、異なっていてもよい。保護および脱保護条件は、当業者に周知であり、文献に記載されている。例えば、ＧｒｅｅｎｅおよびＷｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓを参照のこと。
【００２５】
本明細書に使用した略語は、Ａｌｄｒｉｃｈｉｍｉｃａ  Ａｃｔａ，Ｖｏｌ．１７，Ｎｏ．１，１９８４に従って定義される。他の略語は以下のように定義する：「Ｐｒｅｐ」は調製例を示し、「Ｅｘ」は実施例を示し、「ｍｉｎ」は分を示し、「ｋＰａＧ」はキロパスカルゲージを示し、「ＢＯＰ」はベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェートを示し、「ＤＩＰＥＡ」はジイソプロピルエチルアミンを示し、「ＤＣＣ」はジシクロヘキシルカルボジイミドを示し、「ＤＩＣ」はジイソプロピルカルボジイミドを示し、「ＤＭＡＰ」はジメチルアミノピリジンを示し、「ＤＭＦ」はジメチルホルムアミドを示し、「ＤＭＳＯ」はジメチルスルホキシドを示し、「ＥＤＣＩ」は１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドを示し、「Ｅｔ２Ｏ」はジエチルエーテルを示し、「ＥｔＯＡｃ」は酢酸エチルを示し、「ＨＡＴＵ」は２−（１Ｈ−７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェートメタンアミニウムを示し、「ＨＢＴＵ」はＯ−ベンゾトリアゾール−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−ウロニウム−ヘキサフルオロ−ホスフェートを示し、「ＨＯＡｔ」は１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾールを示し、「ＨＯＢｔ」はＮ−ヒドロキシベンゾトリアゾールを示し、「ＭｅＯＨ」はメチルアルコールまたはメタノールを示し、「ＰｙＢＯＰ（登録商標）」はベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェートを示し、「ＴＢＴＵ」はｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレートを示し、「ＴＦＡ」はトリフルオロ酢酸を示し、「ＴＨＦ」はテトラヒドロフランを示し、「ＩＣ５０」は薬剤についての可能な５０％の最大阻害反応を生じるその薬剤の濃度を示し、「ＥＤＴＡ」はエチレンジアミン四酢酸を示す。
【００２６】
以下のスキームにおいて、他に示さない限り、全ての置換基は以前に定義した通りである。試薬および開始物質は一般に当業者に容易に入手可能である。他は、公知の構造的に類似の化合物の合成と同様である有機および複素環化学の標準的な技術ならびに任意の新規手順を含む以下の調製例および実施例に記載されている手順により作製され得る。
【００２７】
【化４】
2014500321.tif 000006
式Ｉの化合物はスキームＡに示した反応に従って調製できる。スキームＡは、式Ｉの化合物を調製するための２つのバリエーションを示す。工程１は、ベンジルアミド１のアミドへのアシル化を示す。工程２におけるエステルの脱保護の後、２−アミノイミダゾールおよび置換安息香酸のカップリングを達成して、式Ｉの化合物を得る。工程１ａは、置換安息香酸の選択的アルキル化、その後のカップリング反応を示し、式Ｉの化合物を得る。「ＰＧ」は、エステルなどの酸、ならびにまたカルバメートおよびアミドなどのアミノ基のために開発した保護基である。このような保護基は周知であり、当該技術分野において理解される（上記）。
【００２８】
工程１において、ベンジルアミンは、ジクロロメタンまたはＴＨＦなどの非プロトン性溶媒中のトリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、またはピリジンなどの塩基の存在下で酸塩化物を使用してアシル化されて、所望のアミドを得ることができる。代替として、ベンジルアミンは、カップリング剤を使用する適切なカルボン酸でアシル化されてもよい。当業者は、カルボン酸およびアミンの反応から得られるアミド形成についての多くの方法および試薬が存在することを認識するだろう。例えば、カップリング試薬およびＤＩＥＡまたはトリエチルアミンなどのアミン塩基の存在下で適切な酸を用いる適切な化合物１の反応により、式２の化合物が得られる。カップリング試薬としては、ＤＣＣ、ＤＩＣ、ＥＤＣＩなどのカルボジイミドならびにＨＯＢｔおよびＨＯＡｔなどの芳香族オキシムが挙げられる。さらに、ＨＢＴＵ、ＨＡＴＵ、ＢＯＰ、ＰｙＢＯＰ（登録商標）、およびＴＢＴＵなどの非求核アニオンのウロニウムまたはホスホニウム塩が、より慣用的なカップリング試薬の代わりに使用されてもよい。ＤＭＡＰなどの添加剤が反応を高めるために使用されてもよい。
【００２９】
工程２において、保護された安息香酸は、水酸化リチウムまたは水酸化ナトリウムなどの塩基水溶液を使用して典型的に塩基性条件下で脱保護され、得られた塩は、塩酸などの酸水溶液で酸性化され得る。
【００３０】
工程３は２−アミノイミダゾールを用いる安息香酸のカップリングを例示する。典型的なカップリング条件はスキームＡ、工程１に記載し、当業者に公知の標準的なカップリング試薬を使用して式Ｉの化合物を得る。
【００３１】
代替として、工程１ａは、硫酸などの酸および所望のヒドロキシメチルアミドを用いたフリーデルクラフツアルキル化による置換安息香酸のアルキル化を例示する。得られた生成物である、化合物（３）は、次いで、スキームＡ、工程１に記載しているような典型的なカップリング条件下で適切な２−アミノイミダゾールとカップリングされて、式Ｉの化合物を得ることができる。
【００３２】
【化５】
2014500321.tif 000007
スキームＢは、式Ｉの化合物を形成するために、安息香酸位置においてイミダゾールを構成し、次いでベンジルアミンをアシル化することによる式Ｉの化合物の調製を例示する。
【００３３】
スキームＢの工程１において、化合物１、置換保護安息香酸のベンジルアミドは、トリエチルアミンなどの有機塩基を使用するｔ−ブトキシカルボニルなどの保護基を用いて保護されて、化合物５を得る。保護された安息香酸は次いで、水酸化ナトリウムまたは水酸化リチウムなどの塩基水溶液で脱保護されて化合物６を得、次いでその化合物６は、２−アミノイミダゾールでカップリングされて、化合物７を得る。カップリング条件はスキーム１、工程３に記載されている。次いでアミン保護基は、塩酸などの酸性条件下で除去されて、化合物８を得ることができる（工程４）。次いで化合物８におけるアミン基は、スキームＡ、工程１に記載されている適切なカルボン酸または酸塩化物でカップリングされて、式Ｉの化合物を得ることができる。
【実施例】
【００３４】
調製例および実施例
反対に示さない限り、本明細書に例示した化合物は、Ｓｙｍｙｘ（登録商標）Ｄｒａｗバージョン３．２（Ｓｙｍｙｘ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ，Ｉｎｃ．）またはＩＵＰＡＣＮＡＭＥＡＣＤＬＡＢＳを使用して命名し、番号付けした。
【００３５】
調製例１
３−ブロモ−４−（ジブロモメチル）ベンゾニトリル
四塩化炭素（２００ｍＬ）中の３−ブロモ−４−メチルベンゾニトリル（２５．０ｇ、１２７．５ｍｍｏｌ、１．０当量）およびＮＢＳ（５．５３ｇ、３０６．１ｍｍｏｌ、２．４当量）の混合物を、２日間９５℃で加熱する。得られた懸濁液を冷却し、濾過により固体を除去する。減圧下で濾液を濃縮し、得られた粗物質を、２〜５％のＴＨＦ／ヘキサン勾配で溶出するシリカゲル上のクロマトグラフィーに供して、標題化合物（３７．０９ｇ、８２％）を得る。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：δ８．１０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．７９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．３Ｈｚ），７．６７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２，１．３Ｈｚ），６．９９（ｓ，１Ｈ）。
【００３６】
調製例２
３−ブロモ−４−（ジフルオロメチル）ベンゾニトリル
窒素雰囲気下でジクロロメタン（２００ｍＬ）中の３−ブロモ−４−（ジブロモメチル）ベンゾニトリル（１９．２ｇ、５４．３ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、テトラフルオロホウ酸銀（２６．６９ｇ、１３５．７ｍｍｏｌ、２．５当量）を加え、室温で一晩攪拌する。濾過により固体を除去し、減圧下で濾液を濃縮し、得られた粗物質を、２〜５％のＴＨＦ／ヘキサン勾配で溶出するシリカゲル上のクロマトグラフィーに供して、標題化合物（９．０ｇ、７１％）を得る。ＧＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）（７９Ｂｒ／８１Ｂｒ）２３１／２３３（Ｍ）。
【００３７】
調製例３
メチル５−シアノ−２−（ジフルオロメチル）ベンゾエート
３−ブロモ−４−（ジフルオロメチル）ベンゾニトリル（８．８７ｇ、３８．２ｍｍｏｌ、１．０当量）、トリエチルアミン（１６．０ｍＬ、１１４．７ｍｍｏｌ、３．０当量）、メタノール（７０ｍＬ）、およびＤＭＦ（１２０ｍＬ）の混合物を窒素でパージし、次いで混合物を、酢酸パラジウム（ＩＩ）（８６７ｍｇ、３．８２ｍｍｏｌ、０．１当量）および１．３−ビス（ジフェニルホスフィノ）プロパン（１．６１ｇ、３．８２ｍｍｏｌ、０．１当量）で処理する。室温にて２日間、１３８ｋＰａＧの一酸化炭素下で混合物を攪拌し、次いで８０℃で１日間攪拌する。混合物を室温まで冷却し、Ｅｔ２Ｏ（３００ｍＬ）で希釈する。水および飽和ＮａＣｌ水溶液で混合物を洗浄し、有機層を分離する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。得られた粗物質を、１０〜１５％のＴＨＦ／ヘキサン勾配で溶出するシリカゲル上のクロマトグラフィーに供して、標題化合物（６．１９ｇ、７７％）を得る。ＧＣ／ＭＳ（ｍ／ｚ）２１１（Ｍ）。
【００３８】
調製例４
ベンジル５−シアノ−２−（トリフルオロメチル）ベンゾエート
窒素雰囲気下で、ＤＭＡ（４５ｍＬ）中の５−クロロ−２−（トリフルオロメチル）安息香酸（５．０２ｇ、２２．３５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、シアン化亜鉛（ＩＩ）（１．７７ｇ、１５．０７ｍｍｏｌ、０．６７当量）、亜鉛末（＜１０μＭ、３３０ｍｇ、５．０５ｍｍｏｌ、０．２３当量）、およびビス（トリ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィノ）パラジウム（５４０ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ、０．０５当量）を加える。９５℃にて９．５時間、窒素雰囲気下で混合物を攪拌する。炭酸セシウム（１３．３ｇ、４０．８２ｍｍｏｌ、１．８３当量）、次いで臭化ベンジル（３．０ｍＬ、２５．１５ｍｍｏｌ、１．１３当量）を加え、室温にて３．５時間、空気下で攪拌する。減圧下で濃縮し、水を加え、ＥｔＯＡｃで抽出する。有機相を分離し、飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。得られた粗物質を、０〜５０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサン勾配で溶出するシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーに供して、標題化合物（３．９ｇ、５７％）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）３０６（Ｍ＋１）。
【００３９】
調製例５
５−（アミノメチル）−２−（トリフルオロメチル）安息香酸
ベンジル５−シアノ−２−（トリフルオロメチル）ベンゾエート（３．９ｇ、１２．７８ｍｍｏｌ、１．０当量）、パラジウム（炭素上１０ｗｔ％、４００ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ、０．０３当量）、およびメタノール（１２８ｍＬ）を合わせ、混合物を水素でパージする。水素雰囲気下で一晩攪拌する。珪藻土のパッドで混合物を濾過し、次いでそのパッドを温メタノール（３×１５０ｍＬ）でリンスして、沈殿した生成物を得る。減圧下で濾液を濃縮して標題化合物（１．４ｇ、５０％）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）２２０（Ｍ＋１）。
【００４０】
調製例６
Ｎ−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチルプロパンアミド
２，２−ジメチルプロパンアミド（５．０ｇ、４９．４ｍｍｏｌ、１．０当量）および水酸化ナトリウム水溶液（１Ｍ、０．４９４ｍＬ、０．４９４ｍｍｏｌ、０．０１当量）の混合物に、水性ホルムアルデヒド（１３．３１Ｍ、３．７１ｍＬ、４９．４ｍｍｏｌ、１．０当量）を加える。室温にて２時間攪拌し、減圧下で濃縮して、白色固体を得る。粗物質をジクロロメタンで希釈し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、白色固体（６．４ｇ、９９％）として標題化合物を得る。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）：δ８．１４（ｂｒｓ，１Ｈ），５．４０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．７Ｈｚ），４．４６（ａｐｐｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），１．０６（ｓ，９Ｈ）。
【００４１】
調製例７
Ｎ−（ヒドロキシメチル）−２−メチルプロパンアミド
適切なアミドを使用して本質的に調製例６の方法により調製する。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）６．５１（ｂｒｓ，１Ｈ），４．７２（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．５，６．８Ｈｚ），３．６３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），２．３５（ｓｅｐ，１Ｈ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），１．１３（ｄ，６Ｈ，Ｊ＝６．９Ｈｚ）。
【００４２】
調製例８
５−［（２，２−ジメチルプロパノイルアミノ）メチル］−２−メチル安息香酸
硫酸（３．６７ｍＬ）を０℃まで冷却し、２−メチル安息香酸（５００ｍｇ、３．６７ｍｍｏｌ、１．０当量）およびＮ−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチルプロパンアミド（５０６ｍｇ、３．８６ｍｍｏｌ、１．０５当量）を加える。混合物を室温まで加温し、一晩攪拌する。水（２５ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で抽出する。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、粗化合物を得る。（水中の０．１％ＴＦＡ）中の５〜５０％（アセトニトリル中の０．１％ＴＦＡ）の勾配で溶出する、ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  ５μＭ  ＯＢＤ３０×７５ｍｍカラムでの逆相ＨＰＬＣにより物質を精製して、標題化合物（２５５ｍｇ、２８％）を得る。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）：δ１２．７６（ｓ，１Ｈ），８．０９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），７．６７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），７．２５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０，１．６Ｈｚ），７．２１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），４．２２（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），２．４６（ｓ，３Ｈ），１．１０（ｓ，９Ｈ）。
【００４３】
適切な安息香酸およびＮ−ヒドロキシメチルアミドを用いて本質的に調製例１１の方法により以下の表１の化合物を調製する。
【００４４】
【表１】
2014500321.tif 000008
【００４５】
調製例１２
メチル５−（アミノメチル）−２−（ジフルオロメチル）ベンゾエート塩酸塩
メチル５−シアノ−２−（ジフルオロメチル）ベンゾエート（９．３７ｇ、４４．４ｍｍｏｌ、１．０当量）、パラジウム（炭素上１０％、３．００ｇ、２．８２ｍｍｏｌ、０．０６４当量）、およびメタノール（５０ｍＬ）の混合物を窒素でパージし、次いで塩酸（３７ｗｔ％水溶液、８．０ｍＬ、１０５．６ｍｍｏｌ、２．３８当量）を加え、室温にて一晩、２７５ｋＰａＧの水素下で得られた懸濁液を攪拌する。濾過により固体を除去し、減圧下で濾液を濃縮し、４０℃の真空オーブン中で一晩、得られた材料を乾燥させて、薄茶色の固体（７．０１ｇ、８３％）として標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）２１６（Ｍ＋１）。
【００４６】
調製例１３
メチル５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノメチル）−２−（ジフルオロメチル）ベンゾエート
メタノール（３０ｍＬ）中のメチル５−（アミノメチル）−２−（ジフルオロメチル）ベンゾエート塩酸塩（１．７６ｇ、６．９９ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、トリエチルアミン（２．１４ｍＬ、１５．３９ｍｍｏｌ、２．２当量）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（１．８９ｇ、８．３９ｍｍｏｌ、１．２当量）を加える。混合物を室温にて３０分間攪拌し、減圧下で濃縮する。ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、水および飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄する。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。粗物質を、５〜１０％のＴＨＦ／ヘキサン勾配で溶出するシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーに供して、標題化合物（２．０ｇ、９０％）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）３１４（Ｍ−１）。
【００４７】
適切なアンモニウム塩または第一級アミンを用いて以下の化合物を本質的に調製例１３の方法により調製する。
【００４８】
【表２】
2014500321.tif 000009
【００４９】
調製例１６
２−（ジフルオロメチル）−５−［（２−メチルプロパノイルアミノ）メチル］安息香酸
室温にてジクロロメタン（５０ｍＬ）中のメチル５−（アミノメチル）−２−（ジフルオロメチル）ベンゾエート塩酸塩（１．３０ｇ、５．１７ｍｍｏｌ、１．０当量）およびトリエチルアミン（１．５１ｍＬ、１０．８５ｍｍｏｌ、２．１当量）の混合物に、塩化イソブチリル（０．５７１ｍＬ、５．４２ｍｍｏｌ、１．０５当量）を加え、１時間攪拌する。ジクロロメタンで混合物を希釈し、水、次いで飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄する。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。得られた粗物質を１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）に溶解し、水酸化ナトリウム（５Ｎの水溶液、２ｍＬ、１０ｍｍｏｌ、１．９３当量）を加える。得られた懸濁液を４０℃にて一晩攪拌する。混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣を、ｐＨが３になるまで、１Ｎの塩酸水溶液で処理する。得られた懸濁液をＥｔＯＡｃ（２×３０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、白色固体（１．３２ｇ、９４％）として標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）２７２（Ｍ＋１）。
【００５０】
調製例１７
５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノメチル）−２−（ジフルオロメチル）安息香酸
１，４−ジオキサン（２０ｍＬ）中のメチル５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノメチル）−２−（ジフルオロメチル）ベンゾエート（１．４３ｇ、４．５４ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を水酸化ナトリウム（５Ｎの水溶液、１．８１ｍＬ、９．０７ｍｍｏｌ、２．０当量）で処理し、室温にて一晩、混合物を攪拌する。減圧下で濃縮し、ＨＣｌ水溶液でｐＨを４に調整する。ＥｔＯＡｃ（２×４０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機抽出物を飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、分離し、Ｎａ２ＳＯ４で有機相を乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、標題化合物（１．２１ｇ、８８％）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）３１９（Ｍ＋１８）。
【００５１】
調製例１８
５−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノメチル）−２−クロロ−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ベンズアミド
２−アミノイミダゾールモノサルフェート（１．２９ｇ、７．０ｍｍｏｌ、１．０当量）および５−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］−２−クロロ安息香酸（２．００ｇ、７．０ｍｍｏｌ、１．０当量）の混合物に、ＤＭＦ（１４．０ｍＬ）、ＤＩＥＡ（５．１３ｍＬ、２９．４ｍｍｏｌ、４．２当量）およびＢＯＰ（３．８３ｇ、８．４ｍｍｏｌ、１．２当量）を加える。６０℃にて５時間攪拌する。得られた白色の沈殿物を濾過により分離する。１０％ＭｅＯＨ／ジクロロメタン（８００ｍＬ）で固体を粉砕し、シリカゲルのパッドにより混合物を濾過する。減圧下で濾液を濃縮し、得られた固体をＥｔ２Ｏ（１０ｍＬ）で粉砕し、濾過により標題化合物を白色固体（１．０１ｇ、４１％）として分離する。ＭＳ（ｍ／ｚ）（３５Ｃｌ／３７Ｃｌ）３５１／３５３（Ｍ＋１）。
【００５２】
適切な安息香酸を用いて以下の化合物を本質的に調製例１８の方法によって調製する。
【００５３】
【表３】
2014500321.tif 000010
【００５４】
調製例２１
５−（アミノメチル）−２−クロロ−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ベンズアミド二塩酸塩
５−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノメチル）−２−クロロ−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ベンズアミド（６４０ｍｇ、１．８２ｍｍｏｌ、１．０当量）を塩酸（ジオキサン中に４Ｍ、４．５６ｍＬ、１８．２４ｍｍｏｌ、１０．０当量）に溶解し、室温にて１時間攪拌する。反応混合物を、激しく回転させているＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）に注ぎ、得られた白色沈殿物を濾過により分離し、ＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で洗浄し、４０℃の真空オーブン中で一晩乾燥させて、白色固体（５９０ｍｇ、１００％）として標題化合物を得る。１Ｈ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，４００ＭＨｚ）δ７．５３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），７．４８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．４６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３，２．０Ｈｚ），７．０４（ｓ，２Ｈ），４．０５（ｓ，２Ｈ）。
【００５５】
適切なｔｅｒｔ−ブチルカルバメートを使用して以下の化合物を、本質的に調製例２１の方法により調製する。
【００５６】
【表４】
2014500321.tif 000011
【００５７】
調製例２４
メチル２−クロロ−５−［（２，２−ジメチルプロパノイルアミノ）メチル］ベンゾエート
熱的に制御された反応器に、メチル５−（アミノメチル）−２−クロロベンゾエート塩酸塩（７００ｇ、３．５１ｍｏｌ、１．０当量）、ジクロロメタン（４．９Ｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．７１Ｌ、９．８２ｍｏｌ、２．８当量）を加える。塩化ピバロイル（５１５ｍＬ、４．２１ｍｏｌ、１．２当量）を、内部温度が２１℃を超えないような速度で滴下して加える。添加が完了してから、室温で１時間、反応混合物を攪拌する。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１０Ｌ）でクエンチする。混合物をジクロロメタン（２×１Ｌ）で抽出し、有機抽出物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、油（１．１ｋｇ）を得、それをさらに精製せずに粗物質で保持した。ＭＳ  （ｍ／ｚ）（３５Ｃｌ／３７Ｃｌ）２８４／２８６（Ｍ＋１）。
【００５８】
調製例２５
２−クロロ−５−［（２，２−ジメチルプロパノイルアミノ）メチル］安息香酸
メチル２−クロロ−５−［（２，２−ジメチルプロパノイルアミノ）メチル］ベンゾエート（１．０５ｋｇ、３．７ｍｏｌ）、１，４−ジオキサン（５．２５Ｌ）および水（３．１５Ｌ）を一緒に加え、次いで水酸化リチウム（４０７．８ｇ、９．６ｍｏｌ）を加える。得られた懸濁液を室温にて１時間攪拌する。５ＮのＨＣｌ水溶液を、内部温度が３０℃を超えないような速度で滴下して加えて混合物をｐＨ１に酸性化する。溶液を濃縮して、約６Ｌの溶媒を除去し、得られた懸濁液を１０℃に冷却する。濾過し、得られた固体物質を水（８Ｌ）で洗浄し、シンター上で３時間乾燥させる。固体を回収し、４０℃にて４８時間、真空オーブン中で物質を乾燥させて、自由流動性白色固体（７７５ｇ、７７．７％）として標題化合物を得る。ＭＳ  （ｍ／ｚ）（３５Ｃｌ／３７Ｃｌ）２７０／２７２（Ｍ＋１）。
【００５９】
実施例１
２−クロロ−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）−４−メチル−５−［（２−メチルプロパノイルアミノ）メチル］ベンズアミド
【化６】
2014500321.tif 000012
ＤＭＦ（０．５６ｍＬ）中の２−クロロ−４−メチル−５−［（２−メチルプロパノイルアミノ）メチル］安息香酸（７５．０ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ、１．０当量）および２−アミノイミダゾールモノサルフェート（５１．４ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ、１．０当量）の混合物に、ＤＩＥＡ（０．２０４ｍＬ、１．１７ｍｍｏｌ、４．２当量）およびＢＯＰ（１５２ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ、１．２当量）を加える。６０℃にて５時間攪拌し、得られた沈殿物を濾過により分離する。９：１のジクロロメタン：メタノール（８００ｍＬ）で粉砕し、シリカゲルのパッドで濾過する。濾液を減圧下で濃縮して、白色固体（５７ｍｇ、６１％収率）として標題化合物を得る。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）：δ１１．７６（ｂｒｓ，２Ｈ），８．２０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），７．３３および７．３３（ｓおよびｓ，１Ｈおよび１Ｈ，アイソクロナス），６．７５（ｂｒｓ，２Ｈ），４．２１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．７Ｈｚ），２．４２（ｓｅｐ，１Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），２．２８（ｓ，３Ｈ），１．００（ｄ，６Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）．ＭＳ（ｍ／ｚ）（３５Ｃｌ／３７Ｃｌ）３３５／３３７（Ｍ＋１）。
【００６０】
適切な安息香酸を用いて以下の化合物を、本質的に実施例１の方法によって調製する。
【００６１】
【表５−１】
2014500321.tif 000013
【表５−２】
2014500321.tif 000014
【００６２】
Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）
実施例２：１１．７２（ｂｒｓ，２Ｈ），８．０５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），７．３２（ｓ，１Ｈ），７．２０および７．２０（ｓおよびｓ，１Ｈおよび１Ｈ，アイソクロナス），６．７２（ｂｒｓ，２Ｈ），４．２３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），２．３４（ｓ，３Ｈ），１．１０（ｓ，９Ｈ）。
実施例３：１１．８８（ｂｒｓ，２Ｈ），８．２９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），７．７１（ｂｒｓ，１Ｈ），７．６２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．５６（ｂｒｔ，１Ｈ，Ｊ＝５８Ｈｚ），７．４０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０，０．８Ｈｚ），６．７８（ｓ，２Ｈ），４．２８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．８Ｈｚ），２．３９（ｓｅｐ，１Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），０．９９（ｄ，６Ｈ，Ｊ＝６．９Ｈｚ）。
実施例４：１１．８１（ｂｒｓ，２Ｈ），８．３２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），７．４９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ），７．４７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），６．７７（ｓ，２Ｈ），４．２７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），２．４０（ｓｅｐ，１Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），０．９９（ｄ，６Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）。
実施例５：１１．７７（ｓ，２Ｈ），８．１４（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），７．５９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．３４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．１Ｈｚ），７．２０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０，２．１Ｈｚ），６．７５（ｂｒｓ，２Ｈ），４．２３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），１．１０（ｓ，９Ｈ）。
【００６３】
実施例６
２−クロロ−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）−５−［［（１−メチルシクロプロパンカルボニル）アミノ］メチル］ベンズアミド
【化７】
2014500321.tif 000015
５−（アミノメチル）−２−クロロ−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ベンズアミド二塩酸塩（１００ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ、１．０当量）および１−メチルシクロプロパンカルボン酸（４５．３ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ、１．３当量）をＤＭＦ（０．６９７ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（８２．５μＬ、０．５９ｍｍｏｌ、１．７当量）およびＢＯＰ（２３１ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ、１．５当量）を加える。混合物を６０℃にて一晩攪拌し、粗物質を、２０％から６０％ＥｔＯＡ／ヘキサン勾配で溶出するシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製する。ＥｔＯＡｃから物質を再結晶化し、濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄して、白色固体（１１６ｍｇ、５５％）として標題化合物を得る。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）δ１１．７６（ｂｒｓ，２Ｈ），８．１３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），７．４３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．３９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．３Ｈｚ），７．２９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２，１．３Ｈｚ），６．７４（ｂｒｓ，２Ｈ），４．２５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），１．２６（ｓ，３Ｈ），０．９３（ａｐｐｑ，２Ｈ，Ｊ＝３．１Ｈｚ），０．５０（ａｐｐｑ，２Ｈ，Ｊ＝３．２Ｈｚ）．ＭＳ（ｍ／ｚ）（３５Ｃｌ／３７Ｃｌ）３３３／３３５（Ｍ＋１）。
【００６４】
適切なアンモニウム塩およびカルボン酸を用いて以下の化合物を、本質的に実施例６の方法によって調製する。
【００６５】
【表６】
2014500321.tif 000016
【００６６】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）
実施例７：１１．６２（ｂｒｓ，２Ｈ），８．３９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．１Ｈｚ），７．４３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．４０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．１Ｈｚ），７．３０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２，２．１Ｈｚ），６．７３（ｓ，２Ｈ），４．２５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），３．１３（ｓ，３Ｈ），１．２４（ｓ，６Ｈ）。
実施例８：１１．９５（ｂｒｓ，２Ｈ），８．３６（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），７．７６（ｂｒｓ，１Ｈ），７．６６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．５９（ｂｒｔ，１Ｈ，Ｊ＝５５Ｈｚ），７．４５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），６．８０（ｓ，２Ｈ），４．３３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），２．２２（ａｐｐｓｅｘｔｅｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．５３（ｄｄｑ，１Ｈ，Ｊ＝１３．６，７．６，７．６Ｈｚ），１．３２（ｄｄｑ，１Ｈ，Ｊ＝１３．６，６．４，６．４Ｈｚ），１．０１（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），０．８０（ａｐｐｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）。
【００６７】
実施例９
２−クロロ−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）−５−［［［１−（トリフルオロメチル）シクロプロパンカルボニル］アミノ］メチル］ベンズアミド
【化８】
2014500321.tif 000017
ＴＨＦ（１．５５ｍＬ）中の１−（トリフルオロメチル）シクロプロパンカルボン酸（５４ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ、１．１当量）および５−（アミノメチル）−２−クロロ−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ベンズアミド二塩酸塩（１００ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ、１．０当量）の懸濁液に、ＤＩＥＡ（０．１８９ｍＬ、１．０８ｍｍｏｌ、３．５当量）、ＨＯＢｔ（５９．２ｍｇ、０．３８６ｍｍｏｌ、１．０８当量）、ＥＤＣＩ（７４ｍｇ、０．３８６ｍｍｏｌ、１．０８当量）を加え、室温にて３日間、反応混合物を攪拌する。減圧下で濃縮し、粗混合物を、（水中の０．１％ＴＦＡ）中の５〜６０％（アセトニトリル中の０．１％ＴＦＡ）勾配で溶出するＣ１８逆相固定相上でクロマトグラフィーに供して、白色固体（３９ｍｇ、３３％）として標題化合物を得る。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）：δ１１．８０（ｂｒｓ，２Ｈ），８．４１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．８Ｈｚ），７．４６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．４０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．１Ｈｚ），７．３０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３，２．１Ｈｚ），６．７５（ｂｒｓ，２Ｈ），４．２８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），１．３３−１．２０（ｍ，４Ｈ）．ＭＳ（ｍ／ｚ）（３５Ｃｌ／３７Ｃｌ）３８７／３８９（Ｍ＋１）。
【００６８】
実施例１０
２−クロロ−５−［（２−メチルプロパノイルアミノ）メチル］−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ベンズアミド
【化９】
2014500321.tif 000018
ＴＨＦ（０．７７ｍＬ）中の５−（アミノメチル）−２−クロロ−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ベンズアミド二塩酸塩（５０ｍｇ、０．１５４ｍｍｏｌ、１．０当量）の懸濁液に、トリエチルアミン（８０μＬ、０．５７ｍｍｏｌ、３．７当量）および塩化イソブチリル（１６．３μＬ、０．１５４ｍｍｏｌ、１．０当量）を加え、反応混合物を、室温にて１時間攪拌する。減圧下で反応混合物を濃縮し、水（１０ｍＬ）、ヘキサン（１０ｍＬ）、およびジエチルエーテル（１０ｍＬ）の混合物で粗固体を粉砕し、濾過により白色固体を分離し、４０℃の真空オーブン中で乾燥させて、標題化合物（１９ｍｇ、３８％収率）を得る：１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）：δ１１．７４（ｂｒｓ，２Ｈ），８．３０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），７．４２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．３６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），７．２６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０，２．０Ｈｚ），６．７３（ｂｒｓ，２Ｈ），４．２２（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），２．３７（ｓｅｐｔｅｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），０．９７（ｄ，６Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）．ＭＳ（ｍ／ｚ）（３５Ｃｌ／３７Ｃｌ）３２１／３２３（Ｍ＋１）。
【００６９】
適切なアンモニウム塩および酸塩化物を用いて以下の化合物を、本質的に実施例１０の方法によって調製する。
【００７０】
【表７】
2014500321.tif 000019
【００７１】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）
実施例１１：１１．８８（ｂｒｓ，２Ｈ），８．１１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），７．７０（ｂｒｓ，１Ｈ），７．６１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．５７（ｂｒｔ，１Ｈ，Ｊ＝５５Ｈｚ），７．３８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），６．７８（ｓ，２Ｈ），４．２８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．８Ｈｚ），１．０９（ｓ，９Ｈ）。
実施例１２：１１．８４（ｓ，２Ｈ），８．２０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），７．７４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），７．４８（ｓ，１Ｈ），７．４５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），６．７５（ｓ，２Ｈ），４．３３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），１．１２（ｓ，９Ｈ）。
実施例１３：１４．１２（ｂｒｓ，２Ｈ），７．６３（ｂｒｓ，１Ｈ），７．４２および７．４２（アイソクロナス  ｂｒ  ｓおよびｓ，１Ｈおよび１Ｈ），７．０１（ｓ，２Ｈ），６．４３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），４．４８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．５Ｈｚ），１．５５（ｑ，２Ｈ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），１．１６（ｓ，６Ｈ），０．８１（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）。
【００７２】
実施例１４
２−クロロ−５−［（２，２−ジメチルプロパノイルアミノ）メチル］−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ベンズアミド
【化１０】
2014500321.tif 000020
熱的に制御された反応容器に、２−クロロ−５−［（２，２−ジメチルプロパノイルアミノ）メチル］安息香酸（４２０ｇ、１．５６ｍｏｌ、１．０当量）、２−アミノイミダゾールモノサルフェート（３４９ｇ、１．８７ｍｏｌ、１．２当量）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．９４Ｌ）、Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（７２２ｇ、２．１８ｍｏｌ、１．４当量）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（８６９ｍＬ、４．９８ｍｏｌ、３．２当量）を加える。得られた懸濁液を、８０℃の内部温度で１８時間加熱する。反応混合物を１０℃に冷却し、混合物を氷水（１４Ｌ）に注ぎ、９０分間攪拌する。濾過により固体を回収し、空気中の物質を２４時間乾燥させ、さらに真空オーブン中で５０℃にて２４時間乾燥させる。固体物質をイソプロパノール（７Ｌ）中でスラリーにし、７３℃の内部温度で３時間加熱し、１０℃まで冷却する。懸濁液を濾過して、固体物質を分離する。その物質を空気中で２４時間、および真空オーブン中で５５℃にて４８時間乾燥させて、オフホワイト固体（４３５ｇ、８３．４％）として標題化合物を得る。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）：δ１１．８４（ｓ，２Ｈ），８．１３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），７．４７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．４０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７Ｈｚ），７．３１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３，２．０Ｈｚ），６．７３（ｓ，２Ｈ），４．２７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），１．１２（ｓ，９Ｈ）．ＭＳ（ｍ／ｚ）（３５Ｃｌ／３７Ｃｌ）３３５／３３７（Ｍ＋１）。
【００７３】
生物学的アッセイ
ヒトｍＰＧＥＳ−１酵素阻害アッセイ
ヒトｍＰＧＥＳ−１（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（商標）（カタログ番号９７００２ＲＧ、クローンＩＤ６３７４７２２））をｐｃＤＮＡ３．１内でサブクローニングし、２９３Ｅ細胞内で一時的に発現させた。ミクロソームを、公開された方法（Ｏｕｌｌｅｔら，Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  ｍｉｃｒｏｓｏｍａｌ  ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ  Ｅ  ｓｙｎｔｈａｓｅ−１，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ，２６ｐｐ４８９−４９５（２００２）；およびＴｈｏｒｅｎら，Ｈｕｍａｎ  Ｍｉｃｒｏｓｏｍａｌ  Ｐｒｏｓｔａｎｇｌａｎｄｉｎ  Ｅ  Ｓｙｎｔｈａｓｅ−１，Ｊ．Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．２７８（２５）ｐｐ２２１９９−２２２０９（２００３））に基づいて細胞ペレットから調製する。手短に述べると、ペレットを均質緩衝液（１５ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ８．０；０．２５Ｍのスクロース；０．１ｍＭのＥＤＴＡ；１ｍＭのグルタチオン）に入れ、氷上で５×３０秒超音波処理する。ホモジネートを４℃にて１０分間、５０００×ｇで遠心分離する。上清画分をデカントし、Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｑｕｉｃｋ−Ｓｅａｌ（登録商標）管内に負荷し、４℃にて９０分間、１５０，０００×ｇで遠心分離する。上清画分をデカンテーションにより捨て、ペレットをアッセイ緩衝液（１０ｍＭのリン酸ナトリウム、ｐＨ７．０；１０％グリセロール；２．５ｍＭのグルタチオン；コンプリートプロテアーゼインヒビターカクテル（Ｒｏｃｈｅ））中に再懸濁する。Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｏｏｍａｓｓｉｅ  Ｐｌｕｓ（商標）試薬を使用してタンパク質濃度を決定する。
【００７４】
酵素アッセイに関して、ミクロソームをアッセイ緩衝液中に希釈し、７μＬ／ウェルを３８４ウェルプレートに加える。化合物希釈プレート（Ｎｕｎｃカタログ番号２４９９４４）をＭｕｌｔｉｍｅｋ（商標）上で生成し、１μＬ／ウェルをアッセイプレートに加える。プロスタグランジンＨ２（ＰＧＨ２）を、使用直前にアッセイ緩衝液中に希釈し、７μＬ／ウェルを加える。最終濃度は４．４μｇ／ｍＬミクロソーム、および１．６９μＭ  ＰＧＨ２である。室温での２．５分のインキュベーション後、０．５ＮのＨＣｌ中の２．５μＬ／ウェルの１ｍｇ／ｍＬのＳｎＣｌ２を加えて反応を停止させる。５μＬの反応物を３８４ウェルプレートに移し、内部標準として重水素化ＰＧＥ２を含有するアセトニトリル（４５μＬ）をマルチドロップ（Ｍｕｌｔｉｄｒｏｐ）を用いて加え、プレートを−２０℃に保存する。ＰＧＥ２のための標準的なＬＣ／ＭＳ分析のためにプレートをＢｉｏｃｉｕｓ  Ｌｉｆｅｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｗａｋｅｆｉｅｌｄ，ＭＡ０１８８０）に載せる。そのデータを使用してＩＣ５０（μＭ）を算出する。例示した化合物は、１０μＭ未満のＩＣ５０μＭ値でヒトｍＰＧＥＳ−１を阻害する。３つの実施例の結果を表８に示す。その結果により、例示した化合物が、単離した酵素調製物中のｍＰＧＥＳ−１酵素の有効な阻害剤であることが実証される。
【００７５】
【表８】
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【００７６】
エイコサノイド選択性を測定するための細胞ベースのアッセイ
ヒト上皮肺癌細胞株Ａ５４９をＡＴＣＣ（ＣＣＬ−１８５）から得、Ｋａｉｇｈｎ’ｓＦ１２（「Ｆ１２Ｋ」）＋１０％ウシ胎仔血清、（ＦＢＳ）（プレーティング培地）、および５％ＣＯ２中に維持する。細胞を１週間に２回、１：３で継代する。
【００７７】
アッセイのために、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で一度、次いでトリプシン／ＥＤＴＡで一度、細胞を洗浄することによってフラスコから放す。３７℃で３〜５分後、細胞を１０ｍＬのプレーティング培地に懸濁し、２０００ｒｐｍ、２５℃で５分間、遠心分離する。上清を吸引し、細胞ペレットを１０ｍＬのＦ１２Ｋに再懸濁する。ＰＢＳおよびトリパンブルーで希釈している細胞のアリコートを血球計で計数することによって細胞数を決定する。細胞を処理する２４時間前に、９６ウェルＦａｌｃｏｎプレート中で４０，０００／ウェルにて播種する。化合物を、Ｓｃｒｅｅｎ  Ｍａｔｅｓ管内で１００倍の最終濃度までＤＭＳＯ中で希釈する。培地を細胞から除去し、新鮮な培地（９０μＬ／ウェル）を細胞に加える。化合物を１μＬ／ウェル、ｎ＝２に加えて、各々７つの濃度を得る。細胞を、３７℃、５％ＣＯ２で３０分間、調製する。プロスタグランジンＥ２産物を、１０倍の最終濃度までプレーティング培地で希釈した組換えヒトインターロイキン１β（ｒｈＩＬ−１β）を加えることによって誘導した。１０μＬ／ウェルのアリコートを加えて、最終的に０．１〜０．２ｎｇ／ｍＬのｒｈＩＬ−１β濃度を得る。処理時間は約１８時間である。馴化培地をｖ底ポリプロピレンプレートに移す。無血清Ｆ１２Ｋを、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ（商標））（１０μＬ／ウェル）と共に細胞（５０μＬ／ウェル）に加える。プレートを室温にて３０〜４５分間インキュベートし、次いでＡ４９０にてプレートリーダーで読み取り、生存能力を決定する。コントロールウェルは、毒性コントロールとして機能するように１０μＬ／ウェルの１０％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００を入れる。
【００７８】
馴化培地を、製造業者のプロトコル（Ｃａｙｍａｎ）に従って、特異的酵素免疫アッセイ（ＥＩＡ）によりＰＧＥ２およびＰＧＩ２のレベルについてアッセイする。手短に述べると、馴化培地（１μＬ）を、捕捉抗体でコーティングし、製造業者により供給されるＥＩＡ緩衝液（４９μＬ）を含有する９６ウェルプレートの各ウェルに加える。トレーサーをＥＩＡ緩衝液（５０μＬ）で希釈する。検出抗体をＥＩＡ緩衝液（５０μＬ）で希釈する。プレートを接着封止フィルムで覆い、１００ｒｐｍにてオービタルシェーカーで室温にて１時間インキュベートする。洗浄緩衝液をＭｉｌｌｉｐｏｒｅ精製水中で希釈し、プレート洗浄機を使用して、プレートを５×３５０μＬ／ウェルで洗浄する。基質（エルマン試薬）をＭｉｌｌｉｐｏｒｅ精製水（２００μＬ／ウェル）で希釈する。１００ｒｐｍにてオービタルシェーカーで室温にて約４５分後、プレートをプレートリーダーでＡ４１２にて読み取る。ＰＧＥ２の標準曲線を使用して、未知のものを校正する。表９に示した例示した化合物はＰＧＥ２形成を阻害する。その結果は、実施例がＰＧＥ２合成を阻害することを支持する。
【００７９】
【表９】
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【００８０】
ヒト全血アッセイ
健常志願者のドナーから血液をヘパリンナトリウムバキュテナー管内に採取する。ドナーは、彼らが供与の２週間以内にＮＳＡＩＤ、アスピリン、Ｃｅｌｅｂｒｅｘ、またはグルココルチコイドを服用していない彼らの確認に基づいて部分的に選択される。全ての管／ドナーを２５０ｍＬのＣｏｒｎｉｎｇ円錐遠心分離管内にプールし、４３６．５μＬ／ウェルを深いウェルのポリプロピレンプレート内に分配する。化合物を１００倍の最終濃度でＤＭＳＯ中に希釈し、２連または３連で４．５μＬ／ウェルを加えて、７点曲線を得る。血液を、湿気のある環境中で３７℃、５％ＣＯ２で前処理し、シリコーンキャップマットで３０分間、ゆるく覆い、その後、９μＬ／ウェルの、１ｍｇ／ｍＬのウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）／ＰＢＳ中の５ｍｇ／ｍＬのリポ多糖（ＬＰＳ）（Ｓｉｇｍａ０１１１：Ｂ４）の溶液を加えて、最終的に１００μｇ／ｍＬのＬＰＳ濃度を得る。プレートを、緩く覆い、約１００ｒｐｍにてオービタルシェーカーで、湿気のある環境中で３７℃、５％ＣＯ２にて、２０〜２４時間、インキュベートする。プレートをシリコーンキャップマットできつく密閉し、約１時間氷上で冷却する。次いでプレートを、エッペンドルフ５８１０Ｒ遠心分離機で、１８００×ｇ、１０分、４℃にて遠心分離する。滅菌濾過したチップを用いてＲａｉｎｉｎ  Ｌ２００を使用して血漿を細胞層から除去し、ｖ底ポリプロピレンプレートに移す。１００マイクロリットルを、Ｃｏｓｔａｒクラスター管ブロックに定量的に移し、４００μＬ／ウェルのメタノール停止試薬および内部標準、ｄ−４ＰＧＥ２、ｄ−４ＰＧＦ２α、およびｄ−４ＴＸ２βを加える。試料を５分間ボルテックスし、少なくとも１時間、−２０℃で置く。試料を、エッペンドルフ５８１０Ｒで４０００ｒｐｍにて１０分間、遠心分離する。
【００８１】
真空マニホルドでＷａｔｅｒｓ  ＨＬＢ３０ｍｇ／ベッド９６ウェルプレートを使用して固相抽出を実施する：１）マトリックスを、メタノール（１ｍＬ）、続いて水（１ｍＬ）中の０．１％ギ酸で洗浄する；２）４００μＬの試料を、水（９００μＬ）中の０．１％ギ酸と共に適用し、５分間結合させる；３）マトリックスを、水（６００μＬ）中の０．１％ギ酸、続いて８０／２０の水／メタノール（６００μＬ）で洗浄する；４）生成物を２〜５００μＬ体積の酢酸エチルで溶出する；５）試料を窒素下で乾燥させ、０．１％ギ酸（５０μＬ）を含む７５／２５の水／アセトニトリル中で再構成する。生成物をＬＣ／ＭＳ／ＭＳにより分析した。表１０に記載した実施例はＰＧＥ２生成を阻害する。その結果は、実施例がＰＧＥ２合成を阻害することを支持する。
【００８２】
【表１０】
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【００８３】
本発明の例示した化合物は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．Ｅａｓｔｏｎ  Ｐａ．１９９０に見出されるような許容される実務に従って医薬組成物に容易に製剤化され得る。
【００８４】
好ましい医薬組成物は経口投与のための錠剤またはカプセル剤として製剤化され得る。錠剤またはカプセル剤は有効量で本発明の化合物を含む。医薬組成物は、骨関節炎、より具体的には骨関節炎に関連する疼痛および／または炎症を治療するのに有効な量で患者に投与される。患者を治療するのに適切な量または有効な用量はヘルスケア提供者により決定され得る。
【国際調査報告】
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