(57)【要約】  本発明は、アリールスルホンアミド誘導体の治療的使用を対象とする。【特許請求の範囲】
【請求項１】
黄斑浮腫の予防、治療および／または軽減のための、式（Ｉ）：
【化１】
2014505030.tif 000005
の化合物またはこの医薬的に許容される塩の１つの、１％または２％の用量であって、
式中、
Ｒ１は、置換されていないかまたはハロゲン、Ｃ１−Ｃ３アルキル基、Ｃ１−Ｃ３アルコキシ基、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチルもしくはトリフルオロメトキシ基の中から選択される１以上の原子もしくは原子群によって置換されている芳香環を表し、
Ｒ２は、水素原子または場合によりフェニル基、ＣＯＮＨ２基もしくは１以上のフッ素原子によって置換された１から４個の炭素原子を有する直鎖、分枝もしくは環状炭化水素鎖を表し、
Ｒ３は、水素原子、ヒドロキシ基を表すか、またはＲ４と共に−ＣＨ＝Ｎ−基または直鎖もしくは分枝Ｃ２−Ｃ４アルキレン基を形成し、
Ｒ４は、水素原子を表すかまたはＲ３と共に−ＣＨ＝Ｎ−基または直鎖もしくは分枝Ｃ２−Ｃ４アルキレン基を形成し、
Ｒ５は、水素原子またはＣ１−Ｃ３アルキル基を表し、
Ｒ６は、水素原子またはハロゲンを表し、
Ｙは、飽和または不飽和の、直鎖または分枝の、場合により酸素原子によって２個の炭素原子の間で中断された、Ｃ２−Ｃ４アルキレン基を表す
用量。
【請求項２】
糖尿病性網膜症に関連するまたは糖尿病性網膜症によって引き起こされる黄斑浮腫の予防、治療および／または軽減のための、請求項１に記載の用量。
【請求項３】
１日１回または１日２回投与のための、請求項１または請求項２に記載の用量。
【請求項４】
化合物が、化合物Ｎｏ．４９、またはこの医薬的に許容される塩の１つであることを特徴とする、請求項１から３の一項に記載の用量。
【請求項５】
請求項３に記載の化合物がフマル酸塩、リン酸塩またはヘミコハク酸塩であることを特徴とする、請求項１から４の一項に記載の用量。
【請求項６】
有効成分として、１％または２％用量の請求項１から５に記載の式（Ｉ）の化合物、および少なくとも１つの医薬的に許容される賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項７】
組成物が局所投与に適する、請求項６に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
アリールスルホンアミドは、例えばＷＯ０３／１０６４２８から公知であり、前記公報では、式（Ｉ）：
【０００２】
【化１】
2014505030.tif 000002
の化合物ならびにこれらの塩が開示され、式中、
Ｒ１は、置換されていないかまたはハロゲン、Ｃ１−Ｃ３アルキル基、Ｃ１−Ｃ３アルコキシ基、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチルもしくはトリフルオロメトキシ基の中から選択される１以上の原子もしくは原子群によって置換されている芳香環を表し、
Ｒ２は、水素原子、または場合によりフェニル基、ＣＯＮＨ２基もしくは１以上のフッ素原子によって置換された１から４個の炭素原子を有する直鎖、分枝もしくは環状炭化水素鎖を表し、
Ｒ３は、水素原子、ヒドロキシ基を表すか、またはＲ４と共に−ＣＨ＝Ｎ−基または直鎖もしくは分枝Ｃ２−Ｃ４アルキレン基を形成し、
Ｒ４は、水素原子を表すかまたはＲ３と共に−ＣＨ＝Ｎ−基または直鎖もしくは分枝Ｃ２−Ｃ４アルキレン基を形成し、
Ｒ５は、水素原子またはＣ１−Ｃ３アルキル基を表し、
Ｒ６は、水素原子またはハロゲンを表し、
Ｙは、飽和または不飽和の、直鎖または分枝の、場合により酸素原子によって２個の炭素原子の間が中断された、Ｃ２−Ｃ４アルキレン基を表す。
芳香族系は、フェニル系、１−もしくは２−ナフチル系または２−もしくは３−チエニル系を意味する。
【０００３】
ＷＯ０３／１０６４２８の内容は参照により本明細書に組み込まれる。
【０００４】
これらの化合物は、様々な形態の疼痛、例えば炎症性痛覚過敏、異痛症、例えば糖尿病、神経障害（坐骨神経の絞扼、腰痛）、任意の形態の外傷、手術（抜歯、扁桃切除術）、間質性膀胱炎、炎症性腸疾患および癌に関連する神経因性疼痛の治療において有用であると述べられている。
これらはまた、好中球遊走に関連する任意の病変、例えば急性呼吸窮迫症候群、乾癬、肺閉塞症、炎症性腸疾患および関節リウマチの治療においても有用であると述べられている。
化合物はまた、これらの作用機構のために、ブラジキニンのＢ１受容体が関与する、特に過剰発現される任意の病的状態の治療または予防においても使用される。
既に挙げた様々な形態の疼痛および炎症性疾患に加えて、式（Ｉ）の化合物は、ＷＯ０３／１０６４２８の開示によれば、特定の呼吸疾患、例えば喘息、気管支炎、アレルギーおよびウイルス起源の胸膜炎または鼻炎、特定の形態の糖尿病、特定の皮膚疾患、例えば皮膚炎、湿疹、乾癬、眼疾患、例えば緑内障および網膜炎、アルツハイマー病、敗血症性ショック、特に頭蓋が関与する外傷、特に癌細胞の増殖を遅らせるまたは阻害することにより、一部の癌、より詳細には前立腺の癌を治療するために使用され得る。
【０００５】
さらに、式（Ｉ）の化合物は、投与の方法および病変の種類に依存して、一般に治療される患者の１ｋｇにつき０．０５から１０ｍｇの投与量で使用されることが示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】国際公開第０３／１０６４２８号
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明によれば、すべてのブラジキニンＢ１受容体アンタゴニストが黄斑浮腫の予防、治療および／または軽減において有用とは限らないことが認められた。ここに、上記で挙げた式（Ｉ）の化合物ならびにこれらの医薬的に許容される塩は、黄斑浮腫、特に糖尿病性網膜症によって引き起こされるまたは糖尿病性網膜症に関連する黄斑浮腫の予防、治療および／または軽減において有用であること、ならびに、特に前記黄斑浮腫を予防する、治療するまたは軽減するために必要な投与量は先行技術において指示されている投与量よりもはるかに低いことが見出された。実際に、特に糖尿病性網膜症によって引き起こされるまたは糖尿病性網膜症に関連する、黄斑浮腫の予防、治療および／または軽減のために有用な式（Ｉ）の化合物の有効用量は、０．００４から０．０３ｍｇ／ｋｇ患者／日の間に含まれる。
【０００８】
これは図１によってさらに例示され、図１は、ストレプトゾトシン誘発性糖尿病のＢｒｏｗｎ−Ｎｏｒｗａｙ（Ａ）およびＷｉｓｔａｒラット（Ｂ）において点眼薬として与えたアリールスルホンアミド化合物Ｎｏ．４９の網膜血管透過性への作用を要約する。
【０００９】
糖尿病性網膜症は、世界中で継続的に拡大しつつある集団である、糖尿病患者の１８％から４５％が罹患する主要な合併症である。糖尿病性網膜症および視力を脅かす糖尿病性網膜症を有する４０歳以上のアメリカ人の数は、２０５０年には３倍になり、糖尿病性網膜症については２００５年の５５０万人から１６００万人に、視力を脅かす糖尿病性網膜症については２００５年の１２０万人から３４０万人になる。６５歳以上における増加はより顕著である（糖尿病性網膜症については２５０万人から９９０万人に、視力を脅かす糖尿病性網膜症については５０万人から１９０万人に）。さらに、１０年間にわたる糖尿病性黄斑浮腫の発生率は、３０歳前および３０歳以降に診断された患者の間で２０から４０％に及ぶ。この点において、糖尿病性黄斑浮腫は米国の労働年齢人口における失明の主要原因である。糖尿病性網膜症の発生率は、人種、糖尿病の種類、年齢および動脈血圧の状態によって異なる。増殖性網膜症、黄斑浮腫および視力を脅かす網膜症の有病率は、それぞれ２−５％、５−７％および６−８％の範囲内である。初期段階では、糖尿病性網膜症は無細胞毛細管の虚血領域を特徴とし、糖尿病が経時的に進行するとともに、網膜血管漏出、血管出芽、血管新生および出血が起こり、最終的には視力の喪失に至る。糖尿病患者では、視力喪失と、液体蓄積をもたらす血管血漿漏出および斑の中心内の硬性滲出物の沈着と定義される、臨床的に有意の黄斑浮腫との間に関連がある。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】図１Ａは、ストレプトゾトシン誘発性糖尿病のＢｒｏｗｎ−Ｎｏｒｗａｙラットにおいて点眼薬として与えた化合物Ｎｏ．４９の網膜血管透過性への作用を示す。図１Ｂは、ストレプトゾトシン誘発性糖尿病のＷｉｓｔａｒラットにおいて点眼薬として与えた化合物Ｎｏ．４９の網膜血管透過性への作用を示す。
【図２】ＳＴＺ糖尿病ラットにおける網膜血管漏出の結果を示す（３つの試験）。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本明細書からさらに理解されるように、式（Ｉ）の化合物は黄斑浮腫を治療するのに特に効果的であることが示された。
【００１２】
本明細書に関連して、「黄斑浮腫」という用語は、これを引き起こす基礎疾患とは独立して理解されねばならず、および任意の形態の網膜症に関連すると理解されねばならない。この用語は、例えば、糖尿病性網膜症、加齢性黄斑変性、色素性網膜炎、眼手術、網膜静脈閉塞症（中心静脈閉塞症もしくは分枝静脈閉塞症のいずれかもしくは両方）に関連するまたはこれらによって引き起こされる黄斑浮腫を包含する。黄斑浮腫の他の例は、視力を脅かす網膜症、増殖性網膜症、臨床的に有意の黄斑浮腫または糖尿病性網膜症の間の慢性黄斑浮腫、ならびに糖尿病性網膜症と通常理解されるものの任意の他の病期に関連するまたはこれらによって引き起こされる。
【００１３】
本発明の化合物は、上記で定義された式（Ｉ）の化合物ならびにこれらの医薬的に許容される塩である。
【００１４】
すべての化合物は、ＷＯ０３／１０６４２８に記載されている方法によって調製することができる。
【００１５】
式（Ｉ）として上述した対象の化合物の医薬的に許容される塩は、例えば、硫酸塩、ヘミ硫酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、コハク酸塩、安息香酸塩、カンシル酸塩、酢酸塩、リン酸塩、塩化物、臭化物、アスパラギン酸塩またはパモ酸塩から選択され得る。
【００１６】
式（Ｉ）の化合物は、黄斑浮腫、特に糖尿病性網膜症に関連するまたは糖尿病性網膜症によって引き起こされる黄斑浮腫の予防、治療および／または軽減において特に有用と考えられる。これは、例えば化合物Ｎ［［４−（４，５−ジヒドロ−１Ｈイミダゾール−２イル）フェニル］メチル］−２−［２−［−（４−メトキシ−２，６−ジメチルフェニル）スルホニル］メチルアミノ］エトキシ］−Ｎ−メチル−アセトアミドまたはこの塩、例えばこのリン酸塩、硫酸塩もしくはヘミ硫酸塩に当てはまる。この化合物は、ＷＯ０３／１０６４２８の化合物Ｎｏ．４９として例示され、この構造式は：
【００１７】
【化２】
2014505030.tif 000003
である。
【００１８】
これを本明細書では「化合物Ｎｏ．４９」と称する。
【実施例】
【００１９】
［実施例１］
式（Ｉ）のアリールスルホンアミド化合物の黄斑浮腫への作用
式（Ｉ）のアリールスルホンアミド化合物の黄斑浮腫への作用、特に糖尿病性網膜症に関連するまたは糖尿病性網膜症によって引き起こされる黄斑浮腫への作用を、以下で説明するように検討した。
【００２０】
げっ歯動物へのストレプトゾトシンの投与は膵β細胞の大量の破壊を生じさせ、従って、血糖の顕著な上昇および、部分的に１型糖尿病の初期段階を模倣する糖尿病状態の発症を引き起こす。これに関して、ストレプトゾトシン処置ラットは、血液網膜関門の破断、炎症メディエータであるサイトカインおよび増殖因子（ＶＥＧＦ、塩基性線維芽細胞増殖因子）の増加、ミクログリア細胞の活性化および白血球うっ滞を特徴とする炎症性網膜症を発症する。
【００２１】
化合物Ｎｏ．４９（フマル酸塩およびリン酸塩）を点眼薬として７日間、ストレプトゾトシン糖尿病の色素沈着（ｐｉｇｍｅｎｔｅｄ）Ｂｒｏｗｎ−Ｎｏｒｗａｙラットおよび非色素沈着Ｗｉｓｔａｒラットに与え、その後網膜浮腫への作用を測定した。
【００２２】
雄性Ｂｒｏｗｎ−ＮｏｒｗａｙまたはＷｉｓｔａｒラットを、６５ｍｇ／ｋｇの腹腔内ストレプトゾトシンの皮下注射によって糖尿病にした。＜３５０ｍｇ／ｄｌの血糖を有するラットは試験から除外した。７日後、Ｂｒｏｗｎ−Ｎｏｒｗａｙラットを、０．１、０．３、１および３％の化合物Ｎｏ．４９のリン酸塩を含む点眼薬またはこのビヒクル（食塩水）１滴（１０μｌ）で１日２回７日間処置した。Ｗｉｓｔａｒラットは、０．３および１％の化合物Ｎｏ．４９のフマル酸塩を含む点眼薬またはこのビヒクル（食塩水）１滴（１０μｌ）で同じ期間（７日目から７日間）にわたって処置した。１５日目に、エバンスブルー染料の網膜含量の測定によって網膜血管漏出を判定した。
【００２３】
図１に示すように、網膜血管透過性は、対照正常血糖ラットと比較して糖尿病Ｂｒｏｗｎ−ＮｏｒｗａｙおよびＷｉｓｔａｒラットにおいて有意に上昇した。糖尿病Ｂｒｏｗｎ−ＮｏｒｗａｙおよびＷｉｓｔａｒラットでは、化合物Ｎｏ．４９は血糖に影響を及ぼさなかった。糖尿病Ｂｒｏｗｎ−Ｎｏｒｗａｙラットでは、化合物Ｎｏ．４９のリン酸塩は網膜浮腫を用量依存的に低減し、最大５５％減少させた。２つの別々の予備試験において、１％化合物Ｎｏ．４９点眼薬は網膜浮腫を最大５８％および６３％減少させた（データは示していない。）。糖尿病Ｗｉｓｔａｒラットでは、０．３および１％の両方の化合物Ｎｏ．４９フマル酸塩は網膜血管透過性を消失させた（図１）。これらのデータは、ストレプトゾトシンで糖尿病にした２つの異なるラット系統において、化合物Ｎｏ．４９は血管網膜関門の破断を顕著に低減したことを示す。
【００２４】
図１は、ストレプトゾトシン誘発性糖尿病のＢｒｏｗｎ−Ｎｏｒｗａｙ（Ａ）およびＷｉｓｔａｒラット（Ｂ）において点眼薬として与えた化合物Ｎｏ．４９の網膜血管透過性への作用を示す。より詳細には、図１Ａは、ストレプトゾトシン糖尿病Ｂｒｏｗｎ−Ｎｏｒｗａｙラットにおける網膜血管漏出への、点眼薬（０．１から３％）として１日２回７日間点眼した化合物Ｎｏ．４９の用量反応である。組換え組織カリクレイン結合タンパク質（ｒＫＢＰ）を参照薬剤として使用し、血管漏出測定の４８時間前に硝子体内投与した。数値は、１２眼／群（６匹のラット）の平均±平均標準誤差である。＊＊＊は、スチューデントｔ検定においてＰ＜０．００１であることを意味する。
図１Ｂは、ストレプトゾトシン糖尿病Ｗｉｓｔａｒラットにおける網膜血管漏出への、点眼薬（０．３および１％）として１日２回７日間点眼した化合物Ｎｏ．４９の作用を示す。数値は、６から１１眼／群の平均±平均標準誤差である。＊＊は、一方向ＡＮＯＶＡ、次いでスチューデントｔ検定におけるＰ＜０．０１、＊＊＊はＰ＜０．００１を意味する。
【００２５】
化合物Ｎｏ．４９のリン酸塩が局所点眼後に網膜に達する経路を検討し、これが主として全身循環によるのかまたは経眼的および／もしくは眼周囲経路によるのかを判定した。糖尿病Ｂｒｏｗｎ−Ｎｏｒｗａｙラットを、一方の眼において３％化合物Ｎｏ．４９リン酸塩で７日間、または匹敵する１日投与量（０．６ｍｇ／ラット）で皮下的に処置した。化合物Ｎｏ．４９で処置した眼では、網膜血管透過性は有意に３７％（Ｐ＜０．００１）低下し、一方反対側の眼は影響を受けないままであった。加えて、ラットへの０．６ｍｇの化合物Ｎｏ．４９リン酸塩の毎日の皮下投与は網膜血管透過性に作用を及ぼさなかった。これらのデータは、局所投与後の化合物Ｎｏ．４９リン酸塩がおそらく経角膜および強膜／脈絡膜循環を介して網膜血管系に達し、全身再分布の寄与は全くないかまたはごくわずかであることを示す。
【００２６】
糖尿病ラットにおいて化合物Ｎｏ．４９リン酸塩による網膜血管透過性の低下に関与する分子経路を探索するため、サイトカイン、血管作用性メディエータおよび増殖因子のｍＲＮＡの発現を、１％化合物Ｎｏ．４９リン酸塩の点眼薬で７日間処置したまたは処置しなかった対照および糖尿病Ｗｉｓｔａｒラットの網膜において定量化した。Ｂ１Ｒ、Ｂ２Ｒ、ｉ−ＮＯＳ、ｅ−ＮＯＳ、ＣＯＸ−２、ＩＣＡＭ−１、ＶＥＧＦ−Ｒ２、ＶＥＧＦ−ａ、ＩＬ−１βおよびＨＩＦ−１αのｍＲＮＡ発現は、対照と比較して糖尿病ラット網膜ではそれぞれ７．５倍（Ｐ＜０．０５）、５．５倍、１５倍（Ｐ＜０．０１）、６．５倍、８倍（Ｐ＜０．０５）、８倍、５倍（Ｐ＜０．０５）、１２倍、６．５倍（Ｐ＜０．０１）および７倍（Ｐ＜０．０５）増大していた。ＴＮＦ−α  ｍＲＮＡの発現は不変のままであった。１％化合物Ｎｏ．４９点眼薬での７日間の処置後、Ｂ１Ｒ、Ｂ２Ｒ、ｉ−ＮＯＳ、ｅ−ＮＯＳ、ＣＯＸ−２、ＩＣＡＭ−１、ＶＥＧＦ−Ａ、ＩＬ−１αおよびＨＩＦ−１αのｍＲＮＡ発現は対照レベルに下方調節されたが、ＶＥＧＦ−Ａの発現は５０％低減された。文献（Ｇａｒｄｎｅｒ  ａｎｄ  Ａｎｔｏｎｅｔｔｉ，２００８）と一致して、これらのデータは、糖尿病ラットの網膜が炎症特徴を提示することを示す。興味深いことに、化合物Ｎｏ．４９リン酸塩は、血糖には影響を及ぼさずに糖尿病の発症に関連する網膜炎症応答を減弱させた。
【００２７】
化合物Ｎｏ．４９リン酸塩がストレプトゾトシン糖尿病Ｗｉｓｔａｒラットの網膜血管系への白血球接着に及ぼす作用も、化合物Ｎｏ．４９リン酸塩の投与の同じプロトコール（１％点眼薬を１日２回７日間）を使用して検討した。糖尿病ラットの網膜血管中の白血球の数は、対照非糖尿病動物と比較して有意に増加していた（Ｐ＜０．０５）。化合物Ｎｏ．４９リン酸塩での処置後、糖尿病ラットにおける白血球うっ滞は有意に減弱した（Ｐ＜０．０５）。ＩＣＡＭ−１は白血球接着において鍵となる役割を果たすことが示されているので、これらの所見は、化合物Ｎｏ．４９リン酸塩によるＩＣＡＭ−１発現の減少と一致する。
【００２８】
さらに、白色家兎および有色（ｐｉｇｍｅｎｔｅｄ）家兎における眼分布試験を実施した。眼組織および血漿中の放射能の分布を、２％（塩基当量）１４Ｃ−化合物Ｎｏ．４９製剤３０μｌの白色家兎（右眼のみ）への単回眼投与後に検討し、有色家兎（両眼）と比較した。
種々の薬物動態プロフィールが組織中で得られた。具体的には：
−硝子体、網膜および脈絡膜における有色家兎についてのより長いｔ１／２（白色家兎より少なくとも２倍高い。）
−房水、網膜、脈絡膜、全血および血漿における有色家兎についてのより高い曲線下面積（ＡＵＣ）０−４８（白色家兎より少なくとも２倍高い。）
−有色家兎についてのより低いＣｍａｘ（白色家兎より少なくとも２倍低い。）。
これらの値は網膜および脈絡膜における化合物の色素固定に関連する。
【００２９】
同様の薬物動態プロフィールが血漿中で認められた：
−８８ｎｇ／ｍＬのＣｍａｘ
−１５から３０分のＴｍａｘ
−約２０時間のｔ１／２。
化合物Ｎｏ．４９を白色家兎の右眼に投与した場合、左眼で房水および網膜に関して低濃度が検出され、薬剤のわずかな移動を示した。
【００３０】
特に糖尿病性網膜症に関連するまたは糖尿病性網膜症によって引き起こされる、黄斑浮腫の予防、治療および／または軽減のための式（Ｉ）の化合物、例えば特に化合物Ｎｏ．４９は、通常無菌点眼液によってヒトに局所投与される。用量は、１％溶液１滴（１滴の容積は約３０μＬである。）を１日１回から、２％溶液２滴を１日２回までにわたる。７０ｋｇの患者という仮定に基づき、用量は、０．００４ｍｇ／ｋｇ患者／日（片方の眼においてのみ１％溶液１滴を毎日）から０．０３ｍｇ／ｋｇ患者／日（両眼において２％溶液２滴を１日２回）まで様々である。
【００３１】
黄斑浮腫の予防、治療および／または軽減のための式（Ｉ）の化合物、例えば化合物Ｎｏ．４９は、１日１回、例えば午前中に、または１日２回投与のために１２時間の間隔を置いて（朝と夕方）投与することができる。
【００３２】
特に糖尿病性網膜症に関連するまたは糖尿病性網膜症によって引き起こされる、黄斑浮腫の予防、治療および／または軽減のための、式（Ｉ）の化合物またはこの医薬的に許容される塩の１つの用量の例は、中でも特に：
−片方の眼もしくは両眼に１％溶液を１日１回もしくは２回、または
−片方の眼もしくは両眼に２％溶液を１日１回もしくは２回
である。
加えて、リン酸塩形態で投与された化合物Ｎｏ．４９はフマル酸塩と同等の活性を有することが示されている。
【００３３】
［実施例２］
式（Ｉ）のアリールスルホンアミド化合物と別のブラジキニンＢ１受容体アンタゴニストの作用の比較
実験プロトコール
糖尿病を誘発するため、成体Ｂｒｏｗｎ−Ｎｏｒｗａｙラット（８−１２週齢）に新鮮調製したストレプトゾトシン（ＳＴＺ）（クエン酸緩衝液、ｐＨ４．５中１０ｍｍｏｌ／Ｌで５０ｍｇ／ｋｇ体重）の単回腹腔内注射を実施した。血清グルコースレベルをＳＴＺ注射の２日後およびその後は週に１回検査した。３５０ｍｇ／ｄＬより高い血中グルコースレベルを有する動物だけを糖尿病ラットとして使用した。
【００３４】
非糖尿病ラット（６−８匹のラット）を、ＳＴＺまたは化合物Ｎｏ．４９または化合物Ｂでの処理を行わない陽性対照群として使用した（図２における対照群）。
【００３５】
糖尿病の発症の８日後（即ち８日目）に、糖尿病ラットを群に分け、各群につき６−８匹のラット（１２−１６の眼）とした。
【００３６】
処置は以下のとおりであった：
８日目から１４日目まで、動物を１％の化合物Ｎｏ．４９（フマル酸塩として生理的血清（０．９％ＮａＣｌ）中に可溶化した−「Ｃｐｄ  ４９」群）、１％の化合物Ｂ（ジクロロヒドラート塩として生理的血清（０．９％ＮａＣｌ）中に可溶化した−「Ｃｐｄ  Ｂ」群）、または対応する食塩水ビヒクル（「Ｄｉａｂ」群、即ち生理的血清（０．９％ＮａＣｌ））の両眼への１０μｌの点眼で毎日処置した。２つの実験において、糖尿病ラットの群は、陽性参照薬剤として使用した組換えカリクレイン結合タンパク質（「ｒＫＢＰ」群）で硝子体内経路によって処置した。このような条件で、ｒＫＢＰは網膜血管漏出を一貫して約５０％低減することが示されている（Ｄｒ．ＪＸ  Ｍａ，Ｃｈａｒｌｅｓｓｏｎ  ＬＬＣ，Ｏｋｌａｈｏｍａ  Ｃｉｔｙ，Ｏｋｌａｈｏｍａ，ＵＳＡ）。
【００３７】
化合物Ｂは、以下の式：
【００３８】
【化３】
2014505030.tif 000004
を有する。
【００３９】
１４日目に、記述されているプロトコール（Ｇａｏ  Ｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉ，４６，６８９−６９８，２００３）に従って血管から網膜へのエバンスブルー−アルブミン漏出を測定することによって血管透過性を定量化した。簡単に述べると、エバンスブルーを、大腿静脈を介して注射し、２時間循環させた。次に、左心室を介してあらかじめ温めたＰＢＳをラットに注入した。灌流の直後に、網膜を手術用顕微鏡下で慎重に切除し、ホモジナイズした。分光計を用いて網膜ホモジネート中のエバンスブルー染料の濃度を測定し、総タンパク質濃度によって正規化した。
【００４０】
統計解析：
図２は、ＳＴＺ糖尿病ラットにおける網膜血管漏出の結果を示す（３つの試験）。
【００４１】
最初に、ｒＫＢＰ処置ラットとビヒクル処置ラットにおける血管漏出平均値を、パラメトリックまたはノンパラメトリック検定（分散の均一性に応じて）を用いて比較した。２つの平均値の差が統計的に有意である場合は、薬剤処置群とビヒクル処置群の平均値を、一方向ＡＮＯＶＡ（または分散が均一でない場合はノンパラメトリック解析）、次いでポストホック検定を用いて比較した。図２において：Ｐ値はダネット検定により０．００１より下である（「＊＊＊」）；「ＮＳ」は有意でないことを意味する。
【００４２】
ブラジキニンＢ１受容体アンタゴニスト：
化合物Ｎｏ．４９および化合物ＢはどちらもブラジキニンＢ１受容体アンタゴニストであることが示された。特に化合物Ｂは、ヒトＢ１受容体に対して１．６ｎＭの阻害定数（Ｋｉ）を有し、７．８のｐＡ２を有していた。Ｋｉは、ＨＥＫ２９３ヒト細胞膜上のＢ１受容体に特異的なリガンドである、［３Ｈ］ｄｅｓ−Ａｒｇ１０−カリジンとの競合結合実験から得られる濃度−反応曲線に基づいて計算した。ｐＡ２は、ラット回腸上のｄｅｓ−Ａｒｇ１０−カリジン（Ｂ１受容体アゴニスト）に対する濃度−反応曲線から得られるＳｃｈｉｌｄ曲線に基づいて計算した。
【００４３】
結論：
上記結果によれば、２つのブラジキニンＢ１受容体アンタゴニストは、特に上記で明らかにされたように局所投与後、黄斑浮腫に対して必ずしも同じ活性を有するわけではないことが示された。従って、化合物Ｂなどの一部のブラジキニンＢ１受容体アンタゴニストは黄斑浮腫に対して有意でない活性を有し得るが、一方式（Ｉ）の化合物は、特に糖尿病性網膜症に関連するまたは糖尿病性網膜症によって引き起こされる、黄斑浮腫の予防、治療および／または軽減のために使用することができる。
【図１】
2014505030.tif 000006
【図２】
2014505030.tif 000007
【手続補正書】
【提出日】平成25年8月8日(2013.8.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
黄斑浮腫の予防、治療および／または軽減における使用のための、式（Ｉ）：
【化１】
2014505030.tif 000008
の化合物またはこの医薬的に許容される塩の１つの、１％または２％の用量であって、
式中、
Ｒ１は、置換されていないかまたはハロゲン、Ｃ１−Ｃ３アルキル基、Ｃ１−Ｃ３アルコキシ基、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチルもしくはトリフルオロメトキシ基の中から選択される１以上の原子もしくは原子群によって置換されている芳香環を表し、
Ｒ２は、水素原子、または場合によりフェニル基、ＣＯＮＨ２基もしくは１以上のフッ素原子によって置換された１から４個の炭素原子を有する直鎖、分枝もしくは環状炭化水素鎖を表し、
Ｒ３は、水素原子、ヒドロキシ基を表すか、またはＲ４と共に−ＣＨ＝Ｎ−基または直鎖もしくは分枝Ｃ２−Ｃ４アルキレン基を形成し、
Ｒ４は、水素原子を表すか、またはＲ３と共に−ＣＨ＝Ｎ−基または直鎖もしくは分枝Ｃ２−Ｃ４アルキレン基を形成し、
Ｒ５は、水素原子またはＣ１−Ｃ３アルキル基を表し、
Ｒ６は、水素原子またはハロゲンを表し、
Ｙは、飽和または不飽和の、直鎖または分枝の、場合により酸素原子によって２個の炭素原子の間で中断された、Ｃ２−Ｃ４アルキレン基を表す
用量。
【請求項２】
黄斑浮腫が糖尿病性網膜症に関連するまたは糖尿病性網膜症によって引き起こされることを特徴とする、請求項１に記載の黄斑浮腫の予防、治療および／または軽減における使用のための用量。
【請求項３】
用量が１日１回または１日２回投与のためであることを特徴とする、請求項１または請求項２に記載の黄斑浮腫の予防、治療および／または軽減における使用のための用量。
【請求項４】
化合物が、化合物Ｎｏ．４９：
【化２】
2014505030.tif 000009
またはこの医薬的に許容される塩の１つであることを特徴とする、請求項１から３のいずれか一項に記載の黄斑浮腫の予防、治療および／または軽減における使用のための用量。
【請求項５】
請求項４に記載の化合物がフマル酸塩、リン酸塩、硫酸塩またはヘミ硫酸塩であることを特徴とする、請求項１から４の一項に記載の黄斑浮腫の予防、治療および／または軽減における使用のための用量。
【請求項６】
有効成分として、１％または２％用量の請求項１から５に記載の化合物、および少なくとも１つの医薬的に許容される賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項７】
組成物が局所投与に適する、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
組成物が点眼製剤である、請求項６に記載の医薬組成物。
【国際調査報告】
2014505030.tif 000010
2014505030.tif 000011
2014505030.tif 000012
2014505030.tif 000013