(57)【要約】本発明は、フィセチン、バイカレイン、またはクロロゲン酸の合成アナログであり得る、神経保護特性、抗炎症特性、グルタチオン促進特性、および／または酸化防止特性を維持する神経保護ポリフェノール化合物を提供する。神経保護ポリフェノール化合物は、ニューロン保護、増殖、および／または再生を促す、増強する、そして／または増加させるのに有用である。ポリフェノール化合物は、細胞内グルタチオン（ＧＳＨ）レベルを増加させるそして／または維持するのにさらに有用である。ポリフェノール化合物はまた、糖尿病、パーキンソン病、ハンチントン病、アルツハイマー病、非アルツハイマー型認知症、多発性硬化症、外傷性脳障害、脊髄損傷、またはＡＬＳを含む神経変性状態を処置する、予防する、緩和する、そして／または遅延させるのにも有用である。
2014524426.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物：
【化４３】
2014524426.tif 000061
またはその薬学的に許容され得る塩であって、
式中、Ｚが、ＮまたはＯであり、Ｚが、Ｎである場合、
【化４４】
2014524426.tif 000062
は、
【化４５】
2014524426.tif 000063
であり、Ｚが、Ｏである場合、
【化４６】
2014524426.tif 000064
は、
【化４７】
2014524426.tif 000065
であり、
Ｒ１およびＲ２が、それぞれ、他方とは独立して、Ｈ、任意選択で置換されたＣ１〜６アルキル、−ＯＲａ、−ＮＯ２、または−Ｎ（Ｒｃ）２であり、Ｒ１およびＲ２の両方が、−ＯＲａである場合、任意選択で、それらは、組み合わさって、式
【化４８】
2014524426.tif 000066
の５〜６員環を形成し、
ｚが、１または２であり、
Ｒ３が、Ｈ、任意選択で置換されたＣ１〜６アルキル、または−ＯＲａであり、
Ｒ４が、存在する場合、Ｒａであり、
Ｒ５およびＲ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｒｅ、Ｒｂ、同じもしくは異なるＲａおよび／もしくはＲｂの１つもしくは複数で置換されたＲｅ、同じもしくは異なるＲａおよび／もしくはＲｂの１つもしくは複数で置換された−ＯＲｅ、同じもしくは異なるＲａおよび／もしくはＲｂの１つもしくは複数で置換された−ＳＲｅ、同じもしくは異なるＲａおよび／もしくはＲｂの１つもしくは複数で置換された−Ｃ（Ｏ）Ｒｅ、−Ｎ（Ｒａ）Ｒｅ（ここで、Ｒｅは、同じもしくは異なるＲａおよび／もしくはＲｂの１つもしくは複数で置換されている）、−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｒｂ、−Ｏ−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｒｂ、−Ｓ−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｒｂ、−Ｏ−（Ｃ（Ｒｂ）２）ｍ−Ｒａ、−Ｎ（Ｒａ）−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｒｂ、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−ＣＨ（（ＣＨ２）ｍＲｂ）Ｒｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｒｂ、−Ｏ−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｒｂ、−Ｎ（（Ｃ（Ｒａ）２）ｍＲｂ）２、−Ｓ−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｒｂ、−Ｎ（Ｒａ）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒａ）−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｒｂ、−Ｎ（Ｒａ）−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｃ（Ｒａ）（Ｒｂ）２、または−Ｎ（Ｒａ）−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒａ）−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｒｂであり、
Ｒａが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ７〜１６アリールアルキル、３〜１０員ヘテロアリシクリル、４〜１１員ヘテロアリシクリルアルキル、５〜１５員ヘテロアリール、または６〜１６員ヘテロアリールアルキルであり、
Ｒｂが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、＝Ｏ、＝Ｓ、−ＯＲａ、−Ｏ−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−ＯＲａ、−ＳＲａ、＝ＮＲａ、＝ＮＯＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、ハロ、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｓ（Ｏ）Ｒａ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒａ、−ＳＯ３Ｒａ、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒｃ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒａ、−ＣＯ２Ｒａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｃ）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒｃ）２、−［Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）］ｎＲａ、−［Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）］ｎＯＲａ、または−［Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）］ｎＮ（Ｒｃ）２であり、
Ｒｃが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｒａであるか、またはその代わりに、２つのＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒に、任意選択で、同じもしくは異なるさらなるヘテロ原子の１つもしくは複数を含んでいてもよく、かつ任意選択で、同じもしくは異なるＲａおよび／もしくはＲｄ基の１つもしくは複数で置換される３〜１０員ヘテロアリシクリルもしくは５〜１０員ヘテロアリールを形成し、
Ｒｄが、それぞれ、＝Ｏ、−ＯＲａ、ハロＣ１〜３アルキルオキシ、Ｃ１〜６アルキル、＝Ｓ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒａ）２、ハロ、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｓ（Ｏ）Ｒａ、−Ｓ（Ｏ２）Ｒａ、−ＳＯ３Ｒａ、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒａ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒａ、−ＣＯ２Ｒａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）２、−［Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）］ｎＲａ、−（Ｃ（Ｒａ）２）ｎ−ＯＲａ、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜６ハロアルキル、−ＯＣ（Ｏ）Ｒａ、−Ｏ（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−ＯＲａ、−Ｓ（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−ＯＲａ、−Ｎ（Ｒａ）−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−ＯＲａ、−［Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）］ｎＯＲａ、−［Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）］ｎＮ（Ｒａ）２、または−Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜６ハロアルキルであり、２つのＲｄが、それらが結合している原子（複数可）と一緒に、組み合わさって、任意選択で、１つもしくは複数のヘテロ原子を含有し、かつ任意選択で、１つもしくは複数のＲａで置換された、３〜１０員の部分的にまたは完全に飽和した単環式または二環式の環を形成し、
Ｒｅが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ７〜１６アリールアルキル、３〜１０員ヘテロアリシクリル、４〜１１員ヘテロアリシクリルアルキル、５〜１５員ヘテロアリール、または６〜１６員ヘテロアリールアルキルであり、
２つのＲ５、および独立して、２つのＲ６が、それらが結合している隣接炭素と一緒に、組み合わさって、任意選択で、１つもしくは複数のヘテロ原子を含有し、かつ任意選択で、１つもしくは複数のＲａおよび／またはＲｂで置換された、４〜１０員の不飽和の、部分的に飽和した、または完全に飽和した単環式または二環式の環を形成し、
ｍが、それぞれ、１、２、または３であり、
ｎが、それぞれ、０、１、２、または３であり、
ｘが、０、１、２、３、または４であり、かつ
ｙが、０、１、２、または３であるが、
ただし、化合物が、フィセチンでも、バイカレインでも、ＰＭ−００１でも、ＰＭ−００２でも、ＰＭ−００３でも、ＰＭ−００４でも、ＰＭ−００８でも、ＰＭ−０１４でもないことを条件とする、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項２】
式ＩＩＡ
【化４９】
2014524426.tif 000067
に従う、請求項１に記載の化合物であって、
式中、Ｒ１およびＲ２が、それぞれ、他方とは独立して、Ｈ、任意選択で置換されたＣ１〜６アルキル、−ＯＲａ、または−Ｎ（Ｒｃ）２であり、Ｒ３が、Ｈ、任意選択で置換されたＣ１〜６アルキル、または−ＯＲａであり、Ｒ４が、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、Ｃ６〜１０アリール、またはＣ７〜１６アリールアルキルであり、Ｒ５およびＲ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ７〜１６アリールアルキル、−ＯＲａ、−Ｏ−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−ＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、ハロ、−ＣＦ３、−ＣＯ２Ｒａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｃ）２であり、任意選択で、２つのＲ５が、それらが結合している隣接炭素と一緒に、組み合わさって、６員不飽和アリール環を形成し、前記６員アリール環が、任意選択で、１つまたは複数のＲａおよび／またはＲｂで置換される、式ＩＩＡに従う、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１およびＲ２が、それぞれ、他方とは独立して、−ＯＲａであり、Ｒ３が、Ｈまたは任意選択で置換されたＣ１〜６アルキルであり、Ｒ４が、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、Ｃ６〜１０アリール、またはＣ７〜１６アリールアルキルである、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１およびＲ２のうちの一方が、任意選択で置換されたＣ１〜６アルキルであり、Ｒ１およびＲ２のうちの他方が、Ｈ、−ＯＲａ、または−Ｎ（Ｒｃ）２であり、Ｒ３が、Ｈまたは任意選択で置換されたＣ１〜６アルキルであり、Ｒ４が、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、Ｃ６〜１０アリール、またはＣ７〜１６アリールアルキルである、請求項２に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１およびＲ２のうちの一方が、Ｈまたは−ＯＲａであり、Ｒ１およびＲ２のうちの他方が、Ｈまたは−Ｎ（Ｒｃ）２であるが、ただし、Ｒ１およびＲ２のうちの少なくとも一方が、Ｈではないことを条件とし、Ｒ３が、Ｈまたは任意選択で置換されたＣ１〜６アルキルであり、Ｒ４が、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、Ｃ６〜１０アリール、またはＣ７〜１６アリールアルキルである、請求項２に記載の化合物。
【請求項６】
式ＩＩＢ
【化５０】
2014524426.tif 000068
に従う、請求項３に記載の化合物であって、
式中、Ｒａが、ＨまたはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ３が、ＨまたはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ４が、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、Ｃ６〜１０アリール、またはＣ７〜１６アリールアルキルであり、Ｒ５およびＲ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、−ＯＲａ、−Ｏ−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−ＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、ハロ、−ＣＦ３、−ＣＯ２Ｒａ、または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｃ）２であり、Ｒｃが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｒａであるか、またはその代わりに、２つのＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒に、３〜７員ヘテロアリシクリルを形成する、式ＩＩＢに従う、請求項３に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒａが、ＨまたはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ３が、ＨまたはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ４が、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、またはＣ４〜１１シクロアルキルアルキルであり、Ｒ５およびＲ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、−ＯＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、ハロ、−ＣＦ３、−ＣＯ２Ｒａ、または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｃ）２である、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
式ＩＩＩＡ
【化５１】
2014524426.tif 000069
に従う、請求項１に記載の化合物であって、
式中、Ｒ１およびＲ２が、それぞれ、他方とは独立して、Ｈ、任意選択で置換されたＣ１〜６アルキル、−ＯＲａ、または−Ｎ（Ｒｃ）２であり、Ｒ３が、Ｈ、任意選択で置換されたＣ１〜６アルキル、または−ＯＲａであり、Ｒ５およびＲ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ７〜１６アリールアルキル、−ＯＲａ、−Ｏ−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−ＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、ハロ、−ＣＦ３、−ＣＯ２Ｒａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｃ）２であり、任意選択で、２つのＲ５が、それらが結合している隣接炭素と一緒に、組み合わさって、６員不飽和アリール環を形成し、前記６員アリール環が、任意選択で、１つまたは複数のＲａおよび／またはＲｂで置換される、式ＩＩＩＡに従う、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ１およびＲ２が、それぞれ、他方とは独立して、−ＯＲａであり、Ｒ３が、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、または−ＯＲａである、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ１およびＲ２のうちの一方が、任意選択で置換されたＣ１〜６アルキルであり、Ｒ１およびＲ２のうちの他方が、Ｈ、−ＯＲａ、または−Ｎ（Ｒｃ）２であり、Ｒ３が、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、または−ＯＲａである、請求項８に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ１およびＲ２のうちの一方が、Ｈまたは−ＯＲａであり、Ｒ１およびＲ２のうちの他方が、Ｈまたは−Ｎ（Ｒｃ）２であるが、ただし、Ｒ１およびＲ２のうちの少なくとも一方が、Ｈではないことを条件とし、Ｒ３が、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、または−ＯＲａである、請求項８に記載の化合物。
【請求項１２】
式ＩＩＩＢ
【化５２】
2014524426.tif 000070
に従う、請求項９に記載の化合物であって、
式中、Ｒａが、それぞれ、ＨまたはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ３が、Ｈ、−ＯＨ、−ＯＣ１〜６アルキル、またはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ５およびＲ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、−ＯＲａ、−Ｏ−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−ＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、ハロ、−ＣＦ３、−ＣＯ２Ｒａ、または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｃ）２であり、Ｒｃが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｒａであるか、またはその代わりに、２つのＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒に、３〜７員ヘテロアリシクリルを形成し、任意選択で、２つのＲ５が、それらが結合している隣接炭素と一緒に、組み合わさって、６員不飽和アリール環を形成し、前記６員アリール環が、任意選択で、１つまたは複数のＲａおよび／またはＲｂで置換される、請求項９に記載の化合物。
【請求項１３】
式ＩＩＩＣまたはＩＩＩＤ
【化５３】
2014524426.tif 000071
に従う、請求項１２に記載の化合物であって、
式中、Ｒａが、それぞれ、ＨまたはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ３が、Ｈ、−ＯＨ、−ＯＣ１〜６アルキル、またはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、またはハロであり、Ｒｃが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｒａであるか、またはその代わりに、２つのＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒に、３〜７員ヘテロアリシクリルを形成し、Ｒ７が、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、またはハロである、式ＩＩＩＣまたはＩＩＩＤに従う、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ３が、Ｈ、−ＯＨ、またはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ５およびＲ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、−ＯＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、ハロ、−ＣＦ３、−ＣＯ２Ｒａ、または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｃ）２である、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１５】
式ＩＩＩＥ
【化５４】
2014524426.tif 000072
に従う、請求項１４に記載の化合物であって、
式中、Ｒ５ａおよびＲ５ｂが、それぞれ、独立して、ＨまたはＣ１〜６アルキルである、式ＩＩＩＥに従う、請求項１４に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒａが、それぞれ、独立して、ＨまたはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ６が、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＨ、−ＯＣ１〜６アルキル、−Ｎ（Ｒｃ）２、ハロ、または−ＣＦ３である、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒａのうちの一方が、Ｈであり、他方のＲａが、Ｃ１〜６アルキルである、請求項１６に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｒａの両方が、Ｈである、請求項１６に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｒａの両方が、Ｃ１〜６アルキルである、請求項１６に記載の化合物。
【請求項２０】
ｙが、０、１、または２である、請求項１７〜１９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２１】
ｙが、０または１である、請求項１７〜１９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２２】
式ＩＩＩＦ
【化５５】
2014524426.tif 000073
に従う、請求項１１に記載の化合物であって、
式中、Ｒ２が、Ｈまたは−ＯＲａであり、Ｒ３が、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、または−ＯＲａである、式ＩＩＩＦに従う、請求項１１に記載の化合物。
【請求項２３】
式ＩＩＩＧ
【化５６】
2014524426.tif 000074
に従う、請求項２２に記載の化合物であって、
式中、Ｒ５ａおよびＲ５ｂが、それぞれ、独立して、ＨまたはＣ１〜６アルキルであり、Ｒｃが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｒａであるか、またはその代わりに、２つのＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒に、任意選択で置換された３〜７員ヘテロアリシクリルを形成する、式ＩＩＩＧに従う、請求項２２に記載の化合物。
【請求項２４】
Ｒ６が、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＨ、−ＯＣ１〜６アルキル、ハロ、または−ＣＦ３である、請求項２３に記載の化合物。
【請求項２５】
ｙが、０、１、または２である、請求項２４に記載の化合物。
【請求項２６】
−Ｎ（Ｒｃ）２が、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、エチルメチルアミノ、アジリジン−１−イル、アゼチジン−１−イル、ピロリジン−１−イル、ピペリジン−１−イル、または４−Ｃ１〜６アルキル置換ピペラジン−１−イルである、請求項２５に記載の化合物。
【請求項２７】
式ＩＩＩＨまたはＩＩＩＪ
【化５７】
2014524426.tif 000075
に従う、請求項２２に記載の化合物であって、
式中、Ｒ３が、Ｈ、−ＯＨ、−ＯＣ１〜６アルキル、またはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＲａ、−ＳＲａ、またはハロであり、Ｒｃが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｒａであるか、またはその代わりに、２つのＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒に、任意選択で置換された３〜７員ヘテロアリシクリルを形成し、Ｒ７が、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、またはハロである、式ＩＩＩＨまたはＩＩＩＪに従う、請求項２２に記載の化合物。
【請求項２８】
Ｒ６が、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＨ、−ＯＣ１〜６アルキル、ハロ、または−ＣＦ３である、請求項２７に記載の化合物。
【請求項２９】
ｙが、０、１、または２である、請求項２８に記載の化合物。
【請求項３０】
−Ｎ（Ｒｃ）２が、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、エチルメチルアミノ、アジリジン−１−イル、アゼチジン−１−イル、ピロリジン−１−イル、ピペリジン−１−イル、または４−Ｃ１〜６アルキル置換ピペラジン−１−イルである、請求項２９に記載の化合物。
【請求項３１】
式ＩＶＡ
【化５８】
2014524426.tif 000076
の化合物であって、
式中、Ｒ１およびＲ２が、それぞれ、他方とは独立して、Ｈ、任意選択で置換されたＣ１〜６アルキル、−ＯＲａ、または−Ｎ（Ｒｃ）２であり、Ｒ３が、Ｈ、任意選択で置換されたＣ１〜６アルキル、または−ＯＲａであり、Ｒ５およびＲ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ７〜１６アリールアルキル、−ＯＲａ、−Ｏ−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−ＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、ハロ、−ＣＦ３、−ＣＯ２Ｒａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｃ）２であり、任意選択で、２つのＲ５が、それらが結合している隣接炭素と一緒に、組み合わさって、６員不飽和アリール環を形成し、前記６員アリール環が、任意選択で、１つもしくは複数のＲａおよび／またはＲｂで置換されるが、ただし、化合物が、クロロゲン酸ではないことを条件とする、式ＩＶＡの化合物。
【請求項３２】
Ｒ１およびＲ２が、それぞれ、他方とは独立して、−ＯＲａであり、Ｒ３が、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、または−ＯＲａである、請求項３１に記載の化合物。
【請求項３３】
Ｒ１およびＲ２のうちの一方が、任意選択で置換されたＣ１〜６アルキルであり、Ｒ１およびＲ２のうちの他方が、Ｈ、−ＯＲａ、または−Ｎ（Ｒｃ）２であり、Ｒ３が、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、または−ＯＲａである、請求項３１に記載の化合物。
【請求項３４】
Ｒ１およびＲ２のうちの一方が、Ｈまたは−ＯＲａであり、Ｒ１およびＲ２のうちの他方が、Ｈまたは−Ｎ（Ｒｃ）２であるが、ただし、Ｒ１およびＲ２のうちの少なくとも一方が、Ｈではないことを条件とし、Ｒ３が、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、または−ＯＲａである、請求項３１に記載の化合物。
【請求項３５】
式ＩＶＢ
【化５９】
2014524426.tif 000077
に従う、請求項３２に記載の化合物であって、
式中、Ｒａが、それぞれ、ＨまたはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ３が、Ｈ、−ＯＨ、−ＯＣ１〜６アルキル、またはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ５およびＲ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、−ＯＲａ、−Ｏ−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−ＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、ハロ、−ＣＦ３、−ＣＯ２Ｒａ、または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｃ）２であり、Ｒｃが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｒａであるか、またはその代わりに、２つのＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒に、３〜７員ヘテロアリシクリルを形成し、任意選択で、２つのＲ５が、それらが結合している隣接炭素と一緒に、組み合わさって、６員不飽和アリール環を形成し、前記６員アリール環が、任意選択で、１つもしくは複数のＲａおよび／またはＲｂで置換される、式ＩＶＢに従う、請求項３２に記載の化合物。
【請求項３６】
式ＩＶＣまたはＩＶＤ
【化６０】
2014524426.tif 000078
に従う、請求項３５に記載の化合物であって、
式中、Ｒａが、それぞれ、ＨまたはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ３が、Ｈ、−ＯＨ、−ＯＣ１〜６アルキル、またはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、またはハロであり、Ｒｃが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｒａであるか、またはその代わりに、２つのＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒に、３〜７員ヘテロアリシクリルを形成し、Ｒ７が、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、またはハロである、式ＩＶＣまたはＩＶＤに従う、請求項３５に記載の化合物。
【請求項３７】
Ｒ３が、Ｈ、−ＯＨ、またはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ５およびＲ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、−ＯＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、ハロ、−ＣＦ３、−ＣＯ２Ｒａ、または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｃ）２である、請求項３５に記載の化合物。
【請求項３８】
式ＩＶＥ
【化６１】
2014524426.tif 000079
に従う、請求項３７に記載の化合物であって、
式中、Ｒ５ａおよびＲ５ｂが、それぞれ、独立して、ＨまたはＣ１〜６アルキルである、式ＩＶＥに従う、請求項３７に記載の化合物。
【請求項３９】
Ｒａが、それぞれ、独立して、ＨまたはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ６が、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＨ、−ＯＣ１〜６アルキル、−Ｎ（Ｒｃ）２、ハロ、または−ＣＦ３である、請求項３８に記載の化合物。
【請求項４０】
Ｒａのうちの一方が、Ｈであり、他方のＲａが、Ｃ１〜６アルキルである、請求項３９に記載の化合物。
【請求項４１】
Ｒａの両方が、Ｈである、請求項３９に記載の化合物。
【請求項４２】
Ｒａの両方が、Ｃ１〜６アルキルである、請求項３９に記載の化合物。
【請求項４３】
ｙが、０、１、または２である、請求項４０〜４２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項４４】
ｙが、０または１である、請求項４０〜４２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項４５】
式ＩＶＦ
【化６２】
2014524426.tif 000080
に従う、請求項３４に記載の化合物であって、
式中、Ｒ２が、Ｈまたは−ＯＲａであり、Ｒ３が、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、または−ＯＲａである、式ＩＶＦに従う、請求項３４に記載の化合物。
【請求項４６】
式ＩＶＧ
【化６３】
2014524426.tif 000081
に従う、請求項４５に記載の化合物であって、
式中、Ｒ５ａおよびＲ５ｂが、それぞれ、独立して、ＨまたはＣ１〜６アルキルであり、Ｒｃが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｒａであるか、またはその代わりに、２つのＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒に、任意選択で置換された３〜７員ヘテロアリシクリルを形成する、式ＩＶＧに従う、請求項４５に記載の化合物。
【請求項４７】
Ｒ６が、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＨ、−ＯＣ１〜６アルキル、ハロ、または−ＣＦ３である、請求項４６に記載の化合物。
【請求項４８】
ｙが、０、１、または２である、請求項４７に記載の化合物。
【請求項４９】
−Ｎ（Ｒｃ）２が、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、エチルメチルアミノ、アジリジン−１−イル、アゼチジン−１−イル、ピロリジン−１−イル、ピペリジン−１−イル、または４−Ｃ１〜６アルキル置換ピペラジン−１−イルである、請求項４８に記載の化合物。
【請求項５０】
式ＩＶＨまたはＩＶＪ
【化６４】
2014524426.tif 000082
に従う、請求項４５に記載の化合物であって、
式中、Ｒ３が、Ｈ、−ＯＨ、−ＯＣ１〜６アルキル、またはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＲａ、−ＳＲａ、またはハロであり、Ｒｃが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｒａであるか、またはその代わりに、２つのＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒に、任意選択で置換された３〜７員ヘテロアリシクリルを形成し、Ｒ７が、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、またはハロである、式ＩＶＨまたはＩＶＪに従う、請求項４５に記載の化合物。
【請求項５１】
Ｒ６が、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＨ、−ＯＣ１〜６アルキル、ハロ、または−ＣＦ３である、請求項５０に記載の化合物。
【請求項５２】
ｙが、０、１、または２である、請求項５１に記載の化合物。
【請求項５３】
−Ｎ（Ｒｃ）２が、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、エチルメチルアミノ、アジリジン−１−イル、アゼチジン−１−イル、ピロリジン−１−イル、ピペリジン−１−イル、または４−Ｃ１〜６アルキル置換ピペラジン−１−イルである、請求項５２に記載の化合物。
【請求項５４】
４−メトキシ−２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−００７）、
４−エトキシ−２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−０２３）、
４−イソプロポキシ−２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−０２４）、
４−イソプロポキシ−２−（２，４−ジヒドロキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−０８４）、
４−シクロペンチロキシ−２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−１２１）、
４−メトキシ−２−（３−ヒドロキシ，４−メトキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−００１）、
４−メトキシ−２−（３，４−ジエトキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−００４）、
４−メトキシ−２−（４−ヒドロキシ，３−メトキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−０１７）、
４−メトキシ−２−フェニルキノリン（ＣＭＳ−０２１）、
４−メトキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−０２２）、
４−メトキシ−２−（２，４−ジヒドロキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−０８３）、
４−メトキシ−２−（４−ジメチルアミノフェニル）キノリン（ＣＭＳ−１０９）、
４−メトキシ−２−（４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）キノリン（ＣＭＳ−１１０）、
４−メトキシ−２−（３−ヒドロキシ−４−ニトロフェニル）キノリン（ＣＭＳ−１１１）、
４−イソプロポキシ−２−（４−ジメチルアミノフェニル）キノリン（ＣＭＳ−１１２）、または
４−イソプロポキシ−２−（４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）キノリン（ＣＭＳ−１１３）である化合物。
【請求項５５】
２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−３−ヒドロキシ−６−メチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＰＭ−０１０）、
２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−６−エチル−３−ヒドロキシ−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＰＭ−０１３）、
２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−３−ヒドロキシ−６−プロピル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＰＭ−０１２）、
２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０４０）、
３−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル）−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０６９）、
２−（４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０６５）、
２−（４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル）−３−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０７２）、
２−（４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシフェニル）−３−ヒドロキシ−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０５９）、
２−（４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル）−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０６４）、
２−（４−（クロロメチル）−３−メトキシフェニル）−３−ヒドロキシ−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０７８）、
３−ヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシ−４−メトキシフェニル）−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０９２）、
２−（４−（ジメチルアミノ）フェニル）−３−ヒドロキシ−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１１７）、
３−ヒドロキシ−２−（４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１１４）、
２−（４−（ジメチルアミノ）フェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１１８）、
３−ヒドロキシ−２−（３−メトキシ−４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１３９）、
３−ヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシ−４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１４０）、
２−（３，４−ジエトキシフェニル）−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０１８）、
２−（３，４−ジエトキシフェニル）−３−ヒドロキシ−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０２５）、
２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−３−ヒドロキシ−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０２７）、
２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０２８）、
２−（３，４−ジエトキシフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０３６）、
２−（３，４−ジエトキシフェニル）−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０３８）、
３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−２−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾ［ｆ］クロメン−１−オン（ＣＭＳ−０４１）、
２−（４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシフェニル）−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０５８）、
２−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−３−ヒドロキシ−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０９３）、
２−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０９４）、
３−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル）−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０７０）、
２−（４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１１５）、
６，７−ジメチル−２−（４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１１６）、
２−（４−（ジメチルアミノ）フェニル）−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１１９）、
２−（４−（ジメチルアミノ）フェニル）−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１２０）、または
３−ヒドロキシ−６，７−ジメチル−２−（４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１２２）である化合物。
【請求項５６】
（Ｅ）−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−１−（２−ヒドロキシ−４，５−ジメチルフェニル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−０１１）、
（Ｅ）−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−１−（１−ヒドロキシナフタレン−２−イル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−０３４）、
（Ｅ）−３−（３−ヒドロキシ−４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）−１−（１−ヒドロキシナフタレン−２−イル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−１３８）、
（Ｅ）−１−（１−ヒドロキシナフタレン−２−イル）−３−（３−メトキシ−４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−１３７）、
（Ｅ）−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−１−（２−ヒドロキシ−５−イソプロピルフェニル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−１２９）、
（Ｅ）−３−（３，４−ジエトキシフェニル）−１−（２−ヒドロキシ−４，５−ジメチルフェニル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−０１３）、
（Ｅ）−３−（３，４−ジエトキシフェニル）−１−（１−ヒドロキシナフタレン−２−イル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−０３２）、
（Ｅ）−３−（４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシフェニル）−１−（１−ヒドロキシナフタレン−２−イル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−０６３）、
（Ｅ）−３−（３−（ベンジルオキシ）−４−メトキシフェニル）−１−（２−ヒドロキシ−４，５−ジメチルフェニル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−０８６）、
（Ｅ）−３−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−１−（２−ヒドロキシ−４，５−ジメチルフェニル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−０８７）、または
（Ｅ）−１−（２−ヒドロキシ−４，５−ジメチルフェニル）−３−（３−ヒドロキシ−４−メトキシフェニル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−０８８）である化合物。
【請求項５７】
請求項１〜５６のいずれか一項に記載の１つもしくは複数の化合物および薬学的に許容され得るキャリヤ、賦形剤、またはビヒクルを含む医薬組成物。
【請求項５８】
それを必要とする患者において、ニューロンの保護、成長、および／または再生を促す、増加させる、そして／または増強する方法であって、請求項１〜５６のいずれか一項に記載の１つもしくは複数の化合物または請求項５７に記載の組成物を含む医薬組成物の有効量を前記患者に対して投与するステップを含む、方法。
【請求項５９】
それを必要性とする患者において、ニューロンの保護、成長、および／または再生を促す、増加させる、そして／または増強することが、前記患者におけるグルタチオンレベルを維持することを含む、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
前記化合物が、１〜３週間の期間にわたって投与される、請求項５８に記載の方法。
【請求項６１】
前記化合物が、経口的に、静脈内に、吸入により、経皮的に、または皮下に投与される、請求項５８に記載の方法。
【請求項６２】
前記化合物が、血栓溶解剤と共投与される、請求項５８に記載の方法。
【請求項６３】
前記血栓溶解剤が、治療量未満の用量または量で共投与される、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
前記血栓溶解剤が、組織プラスミノーゲン活性化因子、テネクテプラーゼ、ウロキナーゼ、デスモテプラ−ゼ、レテプラーゼ、アルテプラーゼ、アニストレプラーゼ、ストレプトキナーゼ、またはその組み合わせを含む、請求項６２に記載の方法。
【請求項６５】
糖尿病、パーキンソン病、ハンチントン病、アルツハイマー病、非アルツハイマー型認知症、多発性硬化症、外傷性脳障害、脊髄損傷、またはＡＬＳを含む状態を処置するか、低下させるか、緩和するか、または予防する方法であって、それを必要とする患者に対して、請求項１〜５６のいずれか一項に記載の化合物または請求項５７に記載の医薬組成物の有効量を投与するステップを含む、方法。
【請求項６６】
前記患者が、敗血症、外傷、および／またはショックを経験しているまたはそれを経験する危険性がある、請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
前記化合物が、１〜３週間の期間にわたって投与される、請求項６５に記載の方法。
【請求項６８】
前記化合物が、血栓溶解剤と共投与される、請求項６５に記載の方法。
【請求項６９】
前記血栓溶解剤が、治療量未満の用量または量で共投与される、請求項６８に記載の方法。
【請求項７０】
前記血栓溶解剤が、組織プラスミノーゲン活性化因子、テネクテプラーゼ、ウロキナーゼ、デスモテプラ−ゼ、レテプラーゼ、アルテプラーゼ、アニストレプラーゼ、ストレプトキナーゼ、またはその組み合わせを含む、請求項６８に記載の方法。
【請求項７１】
前記化合物が、経口的に、静脈内に、吸入により、経皮的に、または皮下に投与される、請求項６５に記載の方法。
【請求項７２】
前記状態を促す、増加させる、そして／または増強することが、前記患者におけるグルタチオンレベルを維持することを含む、請求項６５に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（政府支援についての表明）
本発明は、米国国立神経疾患・脳卒中研究所、米国国立衛生研究所より授与された、認可番号第１Ｕ０１ＮＳ０６０６８５号の政府支援を受けて成し遂げられた。上記政府は、本発明における一定の権利を有する。
【０００２】
（関連出願への相互参照）
本願は、２０１１年８月１２日に出願された米国仮特許出願第６１／５２２，８７８号の優先権を主張する。この米国仮特許出願の開示内容は、その全体が参考として本明細書に援用される。
【０００３】
（分野）
本発明は、神経保護、神経栄養、抗炎症、および／または酸化防止特性を有する化合物を提供する。化合物は、ニューロンの保護、成長、および／または再生を促す、増強する、そして／または増加させるのに有用である。化合物はまた、細胞内グルタチオン（ＧＳＨ）レベルを増加させる、増強する、そして／または維持するための使用をも見出す。本発明は、神経変性状態の処置、予防、および緩和のための方法ならびに糖尿病およびハンチントン病の処置、予防、および緩和のための方法であって、本明細書において開示され、かつ主張される化合物の有効量を、それを必要性とする被験体に対して投与するステップを含む、方法にさらに関する。
【背景技術】
【０００４】
（背景）
ＣＮＳの大多数の年齢関連性の障害と関連する神経細胞死を予防する利用可能な薬剤は、現在ない。これについて多くの理由があるが、おそらく、最も重要なのは、複数の因子が神経細胞死の一因となり、単一の経路を標的にしても、うまくいきそうにないということである。この病気の１つの例は、米国において成人の能力障害の主要な原因となり、かつ死の３番目に主要な原因となる虚血発作である（非特許文献１）。世界的に、およそ５００万人が、発作で毎年死んでおり、死亡率は、２０２０年までに２倍になることが推測される（非特許文献２）。脳虚血と関連する神経細胞死は、呼吸を支持するための酸素およびＡＴＰ合成の不足、解糖産物である乳酸の蓄積によるアシドーシス、神経栄養性の支持の損失、複数の代謝ストレス、ならびに炎症に起因する複数の因子によるものである（非特許文献３および非特許文献４）。現在の創薬パラダイムの焦点は、高親和性単一標的リガンドの開発にあるが、細胞の死の一因となる多くの傷害があるために、単一の分子標的に対して向けられる薬剤は、発作などのような状態と関連する神経細胞死を処置するのに有効となりそうにない。この結論は、発作のための処置を同定するための薬剤開発に対する、単一の高親和性標的アプローチの失敗によって支持される。実際に、現在までの、唯一のＦＤＡにより承認されている処置は、血管作用物質である組換え組織型プラスミノーゲン活性化因子（ｒｔ−ＰＡ）である（非特許文献５）。代替のアプローチは、神経機能の維持に関連する複数の生物学的活性を有する小分子を同定することである。
【０００５】
フラボノール（ｆｌａｖｏｎａｌ）であるフィセチンは、経口的に活性で、新規な神経保護的で、かつ認知増強性の分子であることが分かった（非特許文献６）。フィセチンは、直接的な酸化防止活性を有するだけではなく、それは、Ｎｒｆ２５などのような転写因子の活性化を介して、主な細胞内酸化防止剤であるグルタチオンの細胞内レベルを増加させることができる。フィセチンはまた、酸化ストレスの存在下において、ミトコンドリアの機能を維持することもできる。そのうえ、それは、免疫細胞に対して抗炎症活性を有し、５−リポキシゲナーゼの活性を阻害し、それによって、過酸化脂質およびそれらの炎症促進性の副産物の産生を低下させる（非特許文献６）。この広い範囲の作用は、フィセチンが、発作を含む、複数の障害と関連する、神経機能の損失を低下させるための能力を有することを示唆する。
【０００６】
フィセチンは、発作のウサギ小血餅塞栓症モデルにおいて有効であることが示されたが（非特許文献７）、細胞ベースのアッセイにおけるその比較的高いＥＣ５０（２〜５μＭ）ならびにさらに低親油性（ＣＬｏｇＰ  １．２４）、高ｔＰＳＡ（１０７Å）、多くの水素結合供与体（ＨＢＤ＝５）、および乏しい生物学的利用率（非特許文献８）は、フィセチンが、発作などのような神経障害を処置するために治療上使用されることになる場合、医薬の化学的改良の余地があることを示唆する。しかしながら、神経保護に関連する、複数の標的経路を活性化するためのその能力を考慮すると、改良点のスクリーニングは、単一の標的薬剤の開発に対する現在の古典的アプローチよりも、著しく複雑となる。本発明は、抗炎症および神経栄養活性ならびに酸化ストレスの条件下でグルタチオンを維持するための能力を含む、他の重要な作用を同時に維持しながら、インビトロ虚血モデルにおいて神経保護活性が有意に増強したフィセチン誘導体の同定を容易にしたスクリーニングに対する多段階的アプローチの使用に、部分的に基づく。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｖｅｒｏｎｉｑｕｅら、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ．（２０１１）１２３（４）、ｅ１８−ｅ２０９
【非特許文献２】Ｄｏｎｎａｎら、Ｔｈｅ  Ｌａｎｃｅｔ．（２００８），３７１（９６２４）、１６１２−１６２３
【非特許文献３】Ｌｉｐｔｏｎ，  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  Ｒｅｖ．（１９９９）７９、１４３１−１５６８
【非特許文献４】Ｐａｎｄｙａら、Ｃｅｎｔ．  Ｎｅｒｖ．  Ｓｙｓｔ．  Ａｇｅｎｔｓ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．（２０１１）Ａｐｒ  ２７、ＰＭＩＤ：２１５２１１６５
【非特許文献５】Ｇｒｅｅｎら、Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．  Ｔｏｄａｙ．（２００６）１１、６８１−６９３
【非特許文献６】Ｍａｈｅｒ、Ｇｅｎｅｓ．  Ｎｕｔｒ．（２００９）、Ｓｅｐ  １０、ＰＭＩＤ：１９７５６８１０
【非特許文献７】Ｍａｈｅｒら、Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．（２００７）１１７３、１１７−１２５
【非特許文献８】Ｓｈｉａら、Ｊ．  Ａｇｒｉｃ．  Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．（２００９）５７（１）、８３−８９
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
（要旨）
様々な実施形態において、本発明は、糖尿病、ハンチントン病、パーキンソン病、アルツハイマー型認知症、非アルツハイマー型認知症、多発性硬化症、外傷性脳障害、脊髄損傷、およびＡＬＳなどのような医学的状態で悩む患者の処置においてならびに虚血または塞栓性発作などのような虚血を伴う状態ならびにそれらの症状および続発症の処置のために使用することができるポリフェノール化合物ならびにアナログに関する。本発明の化合物は、患者におけるグルタチオンレベルを維持するために使用することができ、神経保護効果をもたらすことができる。
【０００９】
様々な実施形態において、本発明の化合物が、式Ｉの化合物：
【００１０】
【化１】
2014524426.tif 000003
【００１１】
またはその薬学的に許容され得る塩であり、
式中、Ｚが、ＮまたはＯであり、Ｚが、Ｎである場合、
【００１２】
【化２】
2014524426.tif 000004
【００１３】
は、
【００１４】
【化３】
2014524426.tif 000005
【００１５】
であり、Ｚが、Ｏである場合、
【００１６】
【化４】
2014524426.tif 000006
【００１７】
は、
【００１８】
【化５】
2014524426.tif 000007
【００１９】
であり、
Ｒ１およびＲ２が、それぞれ、他方とは独立して、Ｈ、任意選択で置換されたＣ１〜６アルキル、−ＯＲａ、−ＮＯ２、または−Ｎ（Ｒｃ）２であり、Ｒ１およびＲ２の両方が、−ＯＲａである場合、任意選択で、それらは、組み合わさって、式
【００２０】
【化６】
2014524426.tif 000008
【００２１】
の５〜６員環を形成し、
ｚが、１または２であり、
Ｒ３が、Ｈ、任意選択で置換されたＣ１〜６アルキル、または−ＯＲａであり、
Ｒ４が、存在する場合、Ｒａであり、
Ｒ５およびＲ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｒｅ、Ｒｂ、同じもしくは異なるＲａおよび／もしくはＲｂの１つもしくは複数で置換されたＲｅ、同じもしくは異なるＲａおよび／もしくはＲｂの１つもしくは複数で置換された−ＯＲｅ、同じもしくは異なるＲａおよび／もしくはＲｂの１つもしくは複数で置換された−ＳＲｅ、同じもしくは異なるＲａおよび／もしくはＲｂの１つもしくは複数で置換された−Ｃ（Ｏ）Ｒｅ、Ｒｅが、同じもしくは異なるＲａおよび／もしくはＲｂの１つもしくは複数で置換された−Ｎ（Ｒａ）Ｒｅ、−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｒｂ、−Ｏ−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｒｂ、−Ｓ−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｒｂ、−Ｏ−（Ｃ（Ｒｂ）２）ｍ−Ｒａ、−Ｎ（Ｒａ）−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｒｂ、−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−ＣＨ（（ＣＨ２）ｍＲｂ）Ｒｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｒｂ、−Ｏ−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｒｂ、−Ｎ（（Ｃ（Ｒａ）２）ｍＲｂ）２、−Ｓ−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｒｂ、−Ｎ（Ｒａ）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒａ）−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｒｂ、−Ｎ（Ｒａ）−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｃ（Ｒａ）（Ｒｂ）２、または−Ｎ（Ｒａ）−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒａ）−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−Ｒｂであり、
Ｒａが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ７〜１６アリールアルキル、３〜１０員ヘテロアリシクリル（ｈｅｔｅｒｏａｌｉｃｙｃｌｙｌ）、４〜１１員ヘテロアリシクリルアルキル（ｈｅｔｅｒｏａｌｉｃｙｃｌｙｌａｌｋｙｌ）、５〜１５員ヘテロアリール、または６〜１６員ヘテロアリールアルキルであり、
Ｒｂが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、＝Ｏ、＝Ｓ、−ＯＲａ、−Ｏ−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−ＯＲａ、−ＳＲａ、＝ＮＲａ、＝ＮＯＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、ハロ、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｓ（Ｏ）Ｒａ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒａ、−ＳＯ３Ｒａ、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒｃ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒａ、−ＣＯ２Ｒａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｃ）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒｃ）２、−［Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）］ｎＲａ、−［Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）］ｎＯＲａ、または−［Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）］ｎＮ（Ｒｃ）２であり、
Ｒｃが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｒａであるか、またはその代わりに、２つのＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒に、任意選択で、同じもしくは異なるさらなるヘテロ原子の１つもしくは複数を含んでいてもよく、かつ任意選択で、同じもしくは異なるＲａおよび／もしくはＲｄ基の１つもしくは複数で置換される３〜１０員ヘテロアリシクリルもしくは５〜１０員ヘテロアリールを形成し、
Ｒｄが、それぞれ、＝Ｏ、−ＯＲａ、ハロＣ１〜３アルキルオキシ、Ｃ１〜６アルキル、＝Ｓ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒａ）２、ハロ、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｓ（Ｏ）Ｒａ、−Ｓ（Ｏ２）Ｒａ、−ＳＯ３Ｒａ、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒａ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒａ、−ＣＯ２Ｒａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）２、−［Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）］ｎＲａ、−（Ｃ（Ｒａ）２）ｎ−ＯＲａ、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜６ハロアルキル、−ＯＣ（Ｏ）Ｒａ、−Ｏ（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−ＯＲａ、−Ｓ（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−ＯＲａ、−Ｎ（Ｒａ）−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−ＯＲａ、−［Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）］ｎＯＲａ、−［Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）］ｎＮ（Ｒａ）２、または−Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜６ハロアルキルであり、２つのＲｄが、それらが結合している原子（複数可）と一緒に、組み合わさって、任意選択で、１つもしくは複数のヘテロ原子を含有し、かつ任意選択で、１つもしくは複数のＲａで置換された、３〜１０員の部分的にまたは完全に飽和した単環式または二環式の環を形成し、
Ｒｅが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ７〜１６アリールアルキル、３〜１０員ヘテロアリシクリル、４〜１１員ヘテロアリシクリルアルキル、５〜１５員ヘテロアリール、または６〜１６員ヘテロアリールアルキルであり、
２つのＲ５、および独立して、２つのＲ６が、それらが結合している隣接炭素と一緒に、組み合わさって、任意選択で、１つもしくは複数のヘテロ原子を含有し、かつ任意選択で、１つもしくは複数のＲａおよび／またはＲｂで置換された、４〜１０員の不飽和の、部分的に飽和した、または完全に飽和した単環式または二環式の環を形成し、
ｍが、それぞれ、１、２、または３であり、
ｎが、それぞれ、０、１、２、または３であり、
ｘが、０、１、２、３、または４であり、かつ
ｙが、０、１、２、または３であるが、
ただし、化合物が、フィセチン、バイカレイン、ＰＭ−００１、ＰＭ−００２、ＰＭ−００３、ＰＭ−００４、ＰＭ−００８、またはＰＭ−０１４ではないことを条件とする。
いくつかの実施形態において、化合物が、式ＩＩＡ
【００２２】
【化７】
2014524426.tif 000009
【００２３】
とすることができ、
式中、Ｒ１およびＲ２が、それぞれ、他方とは独立して、Ｈ、任意選択で置換されたＣ１〜６アルキル、−ＯＲａ、または−Ｎ（Ｒｃ）２であり、Ｒ３が、Ｈ、任意選択で置換されたＣ１〜６アルキル、または−ＯＲａであり、Ｒ４が、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、Ｃ６〜１０アリール、またはＣ７〜１６アリールアルキルであり、Ｒ５およびＲ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ７〜１６アリールアルキル、−ＯＲａ、−Ｏ−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−ＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、ハロ、−ＣＦ３、−ＣＯ２Ｒａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｃ）２であり、任意選択で、２つのＲ５が、それらが結合している隣接炭素と一緒に、組み合わさって、６員不飽和アリール環を形成し、前記６員アリール環が、任意選択で、１つもしくは複数のＲａおよび／またはＲｂで置換される。
【００２４】
いくつかの実施形態において、Ｒ１およびＲ２が、それぞれ、他方とは独立して、−ＯＲａであり、Ｒ３が、Ｈまたは任意選択で置換されたＣ１〜６アルキルであり、Ｒ４が、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、Ｃ６〜１０アリール、またはＣ７〜１６アリールアルキルである。
【００２５】
いくつかの実施形態において、Ｒ１およびＲ２のうちの一方が、任意選択で置換されたＣ１〜６アルキルであり、Ｒ１およびＲ２のうちの他方が、Ｈ、−ＯＲａ、または−Ｎ（Ｒｃ）２であり、Ｒ３が、Ｈまたは任意選択で置換されたＣ１〜６アルキルであり、Ｒ４が、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、Ｃ６〜１０アリール、またはＣ７〜１６アリールアルキルである。
【００２６】
いくつかの実施形態において、Ｒ１およびＲ２のうちの一方が、Ｈまたは−ＯＲａであり、Ｒ１およびＲ２のうちの他方が、Ｈまたは−Ｎ（Ｒｃ）２であるが、ただし、Ｒ１およびＲ２のうちの少なくとも一方が、Ｈではないことを条件とし、Ｒ３が、Ｈまたは任意選択で置換されたＣ１〜６アルキルであり、Ｒ４が、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、Ｃ６〜１０アリール、またはＣ７〜１６アリールアルキルである。
【００２７】
いくつかの実施形態において、化合物が、式ＩＩＢ
【００２８】
【化８】
2014524426.tif 000010
【００２９】
とすることができ、
式中、Ｒａが、ＨまたはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ３が、ＨまたはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ４が、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、Ｃ６〜１０アリール、またはＣ７〜１６アリールアルキルであり、Ｒ５およびＲ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、−ＯＲａ、−Ｏ−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−ＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、ハロ、−ＣＦ３、−ＣＯ２Ｒａ、または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｃ）２であり、Ｒｃが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｒａであるか、またはその代わりに、２つのＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒に、３〜７員ヘテロアリシクリルを形成する。
【００３０】
いくつかの実施形態において、Ｒａが、ＨまたはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ３が、ＨまたはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ４が、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、またはＣ４〜１１シクロアルキルアルキルであり、Ｒ５およびＲ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、−ＯＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、ハロ、−ＣＦ３、−ＣＯ２Ｒａ、または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｃ）２である。
いくつかの実施形態において、化合物が、式ＩＩＩＡ
【００３１】
【化９】
2014524426.tif 000011
【００３２】
とすることができ、
式中、Ｒ１およびＲ２が、それぞれ、他方とは独立して、Ｈ、任意選択で置換されたＣ１〜６アルキル、−ＯＲａ、または−Ｎ（Ｒｃ）２であり、Ｒ３が、Ｈ、任意選択で置換されたＣ１〜６アルキル、または−ＯＲａであり、Ｒ５およびＲ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ７〜１６アリールアルキル、−ＯＲａ、−Ｏ−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−ＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、ハロ、−ＣＦ３、−ＣＯ２Ｒａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｃ）２であり、任意選択で、２つのＲ５が、それらが結合している隣接炭素と一緒に、組み合わさって、６員不飽和アリール環を形成し、前記６員アリール環が、任意選択で、１つもしくは複数のＲａおよび／またはＲｂで置換される。
【００３３】
いくつかの実施形態において、Ｒ１およびＲ２が、それぞれ、他方とは独立して、−ＯＲａであり、Ｒ３が、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、または−ＯＲａである。
【００３４】
いくつかの実施形態において、Ｒ１およびＲ２のうちの一方が、任意選択で置換されたＣ１〜６アルキルであり、Ｒ１およびＲ２のうちの他方が、Ｈ、−ＯＲａ、または−Ｎ（Ｒｃ）２であり、Ｒ３が、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、または−ＯＲａである。
【００３５】
いくつかの実施形態において、Ｒ１およびＲ２のうちの一方が、Ｈまたは−ＯＲａであり、Ｒ１およびＲ２のうちの他方が、Ｈまたは−Ｎ（Ｒｃ）２であるが、ただし、Ｒ１およびＲ２のうちの少なくとも一方が、Ｈではないことを条件とし、Ｒ３が、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、または−ＯＲａである。
いくつかの実施形態において、化合物が、式ＩＩＩＢ
【００３６】
【化１０】
2014524426.tif 000012
【００３７】
とすることができ、
式中、Ｒａが、それぞれ、ＨまたはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ３が、Ｈ、−ＯＨ、−ＯＣ１〜６アルキル、またはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ５およびＲ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、−ＯＲａ、−Ｏ−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−ＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、ハロ、−ＣＦ３、−ＣＯ２Ｒａ、または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｃ）２であり、Ｒｃが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｒａであるか、またはその代わりに、２つのＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒に、３〜７員ヘテロアリシクリルを形成し、任意選択で、２つのＲ５が、それらが結合している隣接炭素と一緒に、組み合わさって、６員不飽和アリール環を形成し、前記６員アリール環が、任意選択で、１つもしくは複数のＲａおよび／またはＲｂで置換される。
いくつかの実施形態において、化合物が、式ＩＩＩＣまたはＩＩＩＤ
【００３８】
【化１１】
2014524426.tif 000013
【００３９】
とすることができ、
式中、Ｒａが、それぞれ、ＨまたはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ３が、Ｈ、−ＯＨ、−ＯＣ１〜６アルキル、またはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、またはハロであり、Ｒｃが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｒａであるか、またはその代わりに、２つのＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒に、３〜７員ヘテロアリシクリルを形成し、Ｒ７が、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、またはハロである。
【００４０】
いくつかの実施形態において、Ｒ３が、Ｈ、−ＯＨ、またはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ５およびＲ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、−ＯＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、ハロ、−ＣＦ３、−ＣＯ２Ｒａ、または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｃ）２である。
いくつかの実施形態において、化合物が、式ＩＩＩＥ
【００４１】
【化１２】
2014524426.tif 000014
【００４２】
とすることができ、
式中、Ｒ５ａおよびＲ５ｂが、それぞれ、独立して、ＨまたはＣ１〜６アルキルである。
【００４３】
いくつかの実施形態において、Ｒａが、それぞれ、独立して、ＨまたはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ６が、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＨ、−ＯＣ１〜６アルキル、−Ｎ（Ｒｃ）２、ハロ、または−ＣＦ３である。
【００４４】
いくつかの実施形態において、Ｒａのうちの一方が、Ｈであり、他方のＲａが、Ｃ１〜６アルキルである。
【００４５】
いくつかの実施形態において、Ｒａの両方が、Ｈである。
【００４６】
いくつかの実施形態において、Ｒａの両方が、Ｃ１〜６アルキルである。
【００４７】
いくつかの実施形態において、ｙが、０、１、または２である。
【００４８】
いくつかの実施形態において、ｙが、０または１である。
【００４９】
いくつかの実施形態において、化合物が、式ＩＩＩＦ
【００５０】
【化１３】
2014524426.tif 000015
【００５１】
とすることができ、
式中、Ｒ２が、Ｈまたは−ＯＲａであり、Ｒ３が、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、または−ＯＲａである。
いくつかの実施形態において、化合物が、式ＩＩＩＧ
【００５２】
【化１４】
2014524426.tif 000016
【００５３】
に従うものであり、
式中、Ｒ５ａおよびＲ５ｂが、それぞれ、独立して、ＨまたはＣ１〜６アルキルであり、Ｒｃが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｒａであるか、またはその代わりに、２つのＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒に、任意選択で置換された３〜７員ヘテロアリシクリルを形成する。
【００５４】
いくつかの実施形態において、Ｒ６が、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＨ、−ＯＣ１〜６アルキル、ハロ、または−ＣＦ３である。
【００５５】
いくつかの実施形態において、ｙが、０、１、または２である。
【００５６】
いくつかの実施形態において、−Ｎ（Ｒｃ）２が、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、エチルメチルアミノ、アジリジン（ａｚｉｒｉｎｄｉｎ）−１−イル、アゼチジン−１−イル、ピロリジン−１−イル、ピペリジン−１−イル、または４−Ｃ１〜６アルキル置換ピペラジン−１−イルである。
【００５７】
いくつかの実施形態において、化合物が、式ＩＩＩＨまたはＩＩＩＪとすることができ、
【００５８】
【化１５】
2014524426.tif 000017
【００５９】
式中、Ｒ３が、Ｈ、−ＯＨ、−ＯＣ１〜６アルキル、またはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＲａ、−ＳＲａ、またはハロであり、Ｒｃが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｒａであるか、またはその代わりに、２つのＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒に、任意選択で置換された３〜７員ヘテロアリシクリルを形成し、Ｒ７が、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、またはハロである。
【００６０】
いくつかの実施形態において、Ｒ６が、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＨ、−ＯＣ１〜６アルキル、ハロ、または−ＣＦ３である。
【００６１】
いくつかの実施形態において、ｙが、０、１、または２である。
【００６２】
いくつかの実施形態において、−Ｎ（Ｒｃ）２が、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、エチルメチルアミノ、アジリジン−１−イル、アゼチジン−１−イル、ピロリジン−１−イル、ピペリジン−１−イル、または４−Ｃ１〜６アルキル置換ピペラジン−１−イルである。
【００６３】
様々な実施形態において、化合物が、式ＩＶＡ
【００６４】
【化１６】
2014524426.tif 000018
【００６５】
とすることができ、
式中、Ｒ１およびＲ２が、それぞれ、他方とは独立して、Ｈ、任意選択で置換されたＣ１〜６アルキル、−ＯＲａ、または−Ｎ（Ｒｃ）２であり、Ｒ３が、Ｈ、任意選択で置換されたＣ１〜６アルキル、または−ＯＲａであり、Ｒ５およびＲ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ７〜１６アリールアルキル、−ＯＲａ、−Ｏ−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−ＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、ハロ、−ＣＦ３、−ＣＯ２Ｒａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｃ）２であり、任意選択で、２つのＲ５が、それらが結合している隣接炭素と一緒に、組み合わさって、６員不飽和アリール環を形成し、前記６員アリール環が、任意選択で、１つもしくは複数のＲａおよび／またはＲｂで置換されるが、ただし、化合物が、クロロゲン酸ではないことを条件とする。
【００６６】
いくつかの実施形態において、Ｒ１およびＲ２が、それぞれ、他方とは独立して、−ＯＲａであり、Ｒ３が、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、または−ＯＲａである。
【００６７】
いくつかの実施形態において、Ｒ１およびＲ２のうちの一方が、任意選択で置換されたＣ１〜６アルキルであり、Ｒ１およびＲ２のうちの他方が、Ｈ、−ＯＲａ、または−Ｎ（Ｒｃ）２であり、Ｒ３が、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、または−ＯＲａである。
【００６８】
いくつかの実施形態において、Ｒ１およびＲ２のうちの一方が、Ｈまたは−ＯＲａであり、Ｒ１およびＲ２のうちの他方が、Ｈまたは−Ｎ（Ｒｃ）２であるが、ただし、Ｒ１およびＲ２のうちの少なくとも一方が、Ｈではないことを条件とし、Ｒ３が、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、または−ＯＲａである。
【００６９】
いくつかの実施形態において、化合物が、式ＩＶＢ
【００７０】
【化１７】
2014524426.tif 000019
【００７１】
とすることができ、
Ｒａが、それぞれ、ＨまたはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ３が、Ｈ、−ＯＨ、−ＯＣ１〜６アルキル、またはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ５およびＲ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、−ＯＲａ、−Ｏ−（Ｃ（Ｒａ）２）ｍ−ＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、ハロ、−ＣＦ３、−ＣＯ２Ｒａ、または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｃ）２であり、Ｒｃが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｒａであるか、またはその代わりに、２つのＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒に、３〜７員ヘテロアリシクリルを形成し、任意選択で、２つのＲ５が、それらが結合している隣接炭素と一緒に、組み合わさって、６員不飽和アリール環を形成し、前記６員アリール環が、任意選択で、１つもしくは複数のＲａおよび／またはＲｂで置換される。
いくつかの実施形態において、化合物が、式ＩＶＣまたはＩＶＤ
【００７２】
【化１８】
2014524426.tif 000020
【００７３】
とすることができ、
式中、Ｒａが、それぞれ、ＨまたはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ３が、Ｈ、−ＯＨ、−ＯＣ１〜６アルキル、またはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、またはハロであり、Ｒｃが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｒａであるか、またはその代わりに、２つのＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒に、３〜７員ヘテロアリシクリルを形成し、Ｒ７が、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、またはハロである。
【００７４】
いくつかの実施形態において、Ｒ３が、Ｈ、−ＯＨ、またはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ５およびＲ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ４〜１１シクロアルキルアルキル、−ＯＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、ハロ、−ＣＦ３、−ＣＯ２Ｒａ、または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｃ）２である。
【００７５】
いくつかの実施形態において、化合物が、式ＩＶＥ
【００７６】
【化１９】
2014524426.tif 000021
【００７７】
とすることができ、
式中、Ｒ５ａおよびＲ５ｂが、それぞれ、独立して、ＨまたはＣ１〜６アルキルである。
【００７８】
いくつかの実施形態において、Ｒａが、それぞれ、独立して、ＨまたはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ６が、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＨ、−ＯＣ１〜６アルキル、−Ｎ（Ｒｃ）２、ハロ、または−ＣＦ３である。
【００７９】
いくつかの実施形態において、Ｒａのうちの一方が、Ｈであり、他方のＲａが、Ｃ１〜６アルキルである。
【００８０】
いくつかの実施形態において、Ｒａの両方が、Ｈである。
【００８１】
いくつかの実施形態において、Ｒａの両方が、Ｃ１〜６アルキルである。
【００８２】
いくつかの実施形態において、ｙが、０、１、または２である。
【００８３】
いくつかの実施形態において、ｙが、０または１である。
【００８４】
いくつかの実施形態において、化合物が、式ＩＶＦ
【００８５】
【化２０】
2014524426.tif 000022
【００８６】
とすることができ、
式中、Ｒ２が、Ｈまたは−ＯＲａであり、Ｒ３が、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、または−ＯＲａである。
いくつかの実施形態において、化合物が、式ＩＶＧ
【００８７】
【化２１】
2014524426.tif 000023
【００８８】
に従うものであり、
式中、Ｒ５ａおよびＲ５ｂが、それぞれ、独立して、ＨまたはＣ１〜６アルキルであり、Ｒｃが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｒａであるか、またはその代わりに、２つのＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒に、任意選択で置換された３〜７員ヘテロアリシクリルを形成する。
【００８９】
いくつかの実施形態において、Ｒ６が、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＨ、−ＯＣ１〜６アルキル、ハロ、または−ＣＦ３である。
【００９０】
いくつかの実施形態において、ｙが、０、１、または２である。
【００９１】
いくつかの実施形態において、−Ｎ（Ｒｃ）２が、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、エチルメチルアミノ、アジリジン−１−イル、アゼチジン−１−イル、ピロリジン−１−イル、ピペリジン−１−イル、または４−Ｃ１〜６アルキル置換ピペラジン−１−イルである。
いくつかの実施形態において、化合物が、式ＩＶＨまたはＩＶＪ
【００９２】
【化２２】
2014524426.tif 000024
【００９３】
に従うものであり、
式中、Ｒ３が、Ｈ、−ＯＨ、−ＯＣ１〜６アルキル、またはＣ１〜６アルキルであり、Ｒ６が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＲａ、−ＳＲａ、またはハロであり、Ｒｃが、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｒａであるか、またはその代わりに、２つのＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒に、任意選択で置換された３〜７員ヘテロアリシクリルを形成し、Ｒ７が、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＲａ、−ＳＲａ、−Ｎ（Ｒｃ）２、またはハロである。
【００９４】
いくつかの実施形態において、Ｒ６が、それぞれの存在について独立して、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−ＯＨ、−ＯＣ１〜６アルキル、ハロ、または−ＣＦ３である。
【００９５】
いくつかの実施形態において、ｙが、０、１、または２である。
【００９６】
いくつかの実施形態において、−Ｎ（Ｒｃ）２が、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、エチルメチルアミノ、アジリジン−１−イル、アゼチジン−１−イル、ピロリジン−１−イル、ピペリジン−１−イル、または４−Ｃ１〜６アルキル置換ピペラジン−１−イルである。
いくつかの実施形態において、化合物が、
４−メトキシ−２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−００７）、
４−エトキシ−２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−０２３）、
４−イソプロポキシ−２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−０２４）、
４−イソプロポキシ−２−（２，４−ジヒドロキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−０８４）、
４−シクロペンチロキシ−２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−１２１）、
４−メトキシ−２−（３−ヒドロキシ，４−メトキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−００１）、
４−メトキシ−２−（３，４−ジエトキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−００４）、
４−メトキシ−２−（４−ヒドロキシ，３−メトキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−０１７）、
４−メトキシ−２−フェニルキノリン（ＣＭＳ−０２１）、
４−メトキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−０２２）、
４−メトキシ−２−（２，４−ジヒドロキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−０８３）、
４−メトキシ−２−（４−ジメチルアミノフェニル）キノリン（ＣＭＳ−１０９）、
４−メトキシ−２−（４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）キノリン（ＣＭＳ−１１０）、
４−メトキシ−２−（３−ヒドロキシ−４−ニトロフェニル）キノリン（ＣＭＳ−１１１）、
４−イソプロポキシ−２−（４−ジメチルアミノフェニル）キノリン（ＣＭＳ−１１２）、または
４−イソプロポキシ−２−（４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）キノリン（ＣＭＳ−１１３）である。
【００９７】
いくつかの実施形態において、化合物が、
２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−３−ヒドロキシ−６−メチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＰＭ−０１０）、
２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−６−エチル−３−ヒドロキシ−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＰＭ−０１３）、
２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−３−ヒドロキシ−６−プロピル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＰＭ−０１２）、
２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０４０）、
３−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル）−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０６９）、
２−（４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０６５）、
２−（４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル）−３−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０７２）、
２−（４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシフェニル）−３−ヒドロキシ−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０５９）、
２−（４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル）−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０６４）、
２−（４−（クロロメチル）−３−メトキシフェニル）−３−ヒドロキシ−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０７８）、
３−ヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシ−４−メトキシフェニル）−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０９２）、
２−（４−（ジメチルアミノ）フェニル）−３−ヒドロキシ−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１１７）、
３−ヒドロキシ−２−（４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１１４）、
２−（４−（ジメチルアミノ）フェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１１８）、
３−ヒドロキシ−２−（３−メトキシ−４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１３９）、
３−ヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシ−４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１４０）、
２−（３，４−ジエトキシフェニル）−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０１８）、
２−（３，４−ジエトキシフェニル）−３−ヒドロキシ−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０２５）、
２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−３−ヒドロキシ−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０２７）、
２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０２８）、
２−（３，４−ジエトキシフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０３６）、
２−（３，４−ジエトキシフェニル）−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０３８）、
３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−２−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾ［ｆ］クロメン−１−オン（ＣＭＳ−０４１）、
２−（４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシフェニル）−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０５８）、
２−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−３−ヒドロキシ−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０９３）、
２−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０９４）、
３−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル）−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０７０）、
２−（４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１１５）、
６，７−ジメチル−２−（４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１１６）、
２−（４−（ジメチルアミノ）フェニル）−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１１９）、
２−（４−（ジメチルアミノ）フェニル）−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１２０）、または
３−ヒドロキシ−６，７−ジメチル−２−（４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１２２）である。
【００９８】
いくつかの実施形態において、化合物が、
（Ｅ）−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−１−（２−ヒドロキシ−４，５−ジメチルフェニル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−０１１）、
（Ｅ）−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−１−（１−ヒドロキシナフタレン−２−イル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−０３４）、
（Ｅ）−３−（３−ヒドロキシ−４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）−１−（１−ヒドロキシナフタレン−２−イル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−１３８）、
（Ｅ）−１−（１−ヒドロキシナフタレン−２−イル）−３−（３−メトキシ−４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−１３７）、
（Ｅ）−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−１−（２−ヒドロキシ−５−イソプロピルフェニル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−１２９）、
（Ｅ）−３−（３，４−ジエトキシフェニル）−１−（２−ヒドロキシ−４，５−ジメチルフェニル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−０１３）、
（Ｅ）−３−（３，４−ジエトキシフェニル）−１−（１−ヒドロキシナフタレン−２−イル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−０３２）、
（Ｅ）−３−（４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシフェニル）−１−（１−ヒドロキシナフタレン−２−イル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−０６３）、
（Ｅ）−３−（３−（ベンジルオキシ）−４−メトキシフェニル）−１−（２−ヒドロキシ−４，５−ジメチルフェニル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−０８６）、
（Ｅ）−３−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−１−（２−ヒドロキシ−４，５−ジメチルフェニル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−０８７）、または
（Ｅ）−１−（２−ヒドロキシ−４，５−ジメチルフェニル）−３−（３−ヒドロキシ−４−メトキシフェニル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−０８８）である。
【００９９】
関連する態様において、本発明は、本明細書において記載される１つもしくは複数の化合物および薬学的に許容され得るキャリヤ、賦形剤、またはビヒクルを含む医薬組成物の有効量を投与するステップを含む、処置の方法を提供する。
【０１００】
さらなる態様において、本発明は、それを必要とする被験体において、虚血の１つもしくは複数の症状を処置するか、低下させるか、緩和するか、または予防する方法であって、本明細書において記載される１つもしくは複数の化合物、または本明細書において記載される化合物の１つもしくは複数を含む医薬組成物の有効量を被験体に対して投与するステップを含む方法を提供する。
【０１０１】
本発明は、様々な実施形態において、虚血の処置のための、下記に記載される化合物の有効量を投与するステップを含む、処置の方法に関する。本発明は、それを必要とする患者または被験体において、虚血またはその１つもしくは複数の続発症もしくは症状を処置するか、低下させるか、緩和するか、または予防する方法であって、本明細書において開示される、１つもしくは複数の化合物の有効量を被験体に対して投与するステップを含む方法を提供することができる。たとえば、患者は、ヒトとすることができ、または被験体は、他の哺乳動物とすることができる。
【０１０２】
様々な実施形態において、本発明は、（１）虚血発作、（２）出血性卒中、（３）心臓血管系疾患（たとえば虚血性の心臓の状態、心臓バイパス手術または心臓弁置換術を受けている患者）、（４）虚血関連性の脊髄損傷、（５）糖尿病患者における虚血、および（６）塞栓性発作またはその任意の症状もしくは続発症の処置のために、下記に記載される化合物の有効量を投与するステップを含む、処置の方法に関する。化合物はまた、上記に列挙される状態のいずれかについて危険性がある患者の処置に使用することもできる。
【０１０３】
いくつかの実施形態において、被験体が、塞栓性発作を経験したことがある。いくつかの実施形態において、被験体が、塞栓性発作を経験する危険性がある。いくつかの実施形態において、本明細書において記載される１つもしくは複数のポリフェノール化合物、または本明細書において記載されるポリフェノール化合物の１つもしくは複数を含む医薬組成物が、血栓溶解剤と共投与される。様々な実施形態において、血栓溶解剤が、治療量未満の用量または量で、共投与することができる。たとえば、血栓溶解剤は、組織プラスミノーゲン活性化因子、テネクテプラーゼ、ウロキナーゼ、デスモテプラ−ゼ（ｄｅｓｍｏｔｅｐｌａｓｅ）、レテプラーゼ、アルテプラーゼ、アニストレプラーゼ、ストレプトキナーゼ、またはその組み合わせを含むことができる。
【０１０４】
様々な実施形態において、本発明は、糖尿病、パーキンソン病、ハンチントン病、アルツハイマー病、非アルツハイマー型（ｎｏｎ−Ａｌｚｈｅｒｉｍｅｒ’ｓ）認知症、多発性硬化症、外傷性脳障害、またはＡＬＳを処置するための方法であって、それを必要とする患者に対して、本明細書において開示され、かつ主張される本発明の化合物の有効量を投与するステップを含む、方法を提供する。様々な実施形態において、患者が、敗血症、外傷、および／またはショックを経験しているまたはそれを経験する危険性がある。たとえば、患者は、ヒトとすることができるまたは他の哺乳動物とすることができる。
【０１０５】
他の実施形態において、本発明は、それを必要とする被験体において、ニューロンの保護、成長、および／または再生を促す、増加させる、そして／または増強する方法であって、本明細書において記載される１つもしくは複数の化合物、または本明細書において記載される化合物の１つもしくは複数を含む医薬組成物の有効量を被験体に対して投与するステップを含む方法を提供する。
【０１０６】
他の態様において、本発明は、それを必要性とする被験体において、グルタチオン（ＧＳＨ）レベルを維持するまたは増加させることによって、ニューロンの保護、成長、および／または再生を促す、増加させる、そして／または増強する方法であって、本明細書において記載される１つもしくは複数の化合物、または本明細書において記載される化合物の１つもしくは複数を含む医薬組成物の有効量を被験体に対して投与するステップを含む方法を提供する。いくつかの実施形態において、１つもしくは複数の化合物または医薬組成物が、１〜３週間の期間にわたって投与される。いくつかの実施形態において、１つもしくは複数の化合物または医薬組成物が、被験体の残りの人生の間、投与される。いくつかの実施形態において、１つもしくは複数の化合物または医薬組成物が、効き目のある効果が実現されるまで、投与される。
【０１０７】
いくつかの実施形態において、化合物または医薬組成物が、経口的に、静脈内に、吸入により（ｉｎｈａｌａｔｉｏｎａｌｌｙ）、経皮的に、または皮下に投与される。
【０１０８】
いくつかの実施形態において、化合物が、組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔＰＡ）と共投与される。たとえば、ｔＰＡは、治療量未満の用量または量で、共投与することができる。
【図面の簡単な説明】
【０１０９】
【図１】図１は、ウサギ小血餅塞栓性発作モデル（ＲＳＣＥＭ）におけるクロロゲン酸（ＣＧＡ）処置後の行動的な改善を示す図である。累積コントロール曲線（点線）は、１．５８±０．１５ｍｇ（ｎ＝２６）のＰ５０値を有する。塞栓形成の５分間後から始めたＣＧＡ処置（５０ｍｇ／ｋｇ）は、３．６１±０．５２ｍｇまでＰ５０値を増加させた（ｎ＝１９、＊Ｐ＜０．０５）（濃い実線）。濃い円
【０１１０】
【化２３】
2014524426.tif 000025
【０１１１】
は、コントロール群についての生データを示し、三角
【０１１２】
【化２４】
2014524426.tif 000026
【０１１３】
は、ＣＧＡ処置群についての生データを示す。特定の血餅重量について正常なウサギは、Ｙ軸上の０％にプロットされる記号によって示されるのに対して、特定の血餅重量について正常でないウサギは、Ｙ軸上の１００％にプロットされる記号によって示される。
【図２】図２は、ウサギにおいて塞栓性発作後に投与された場合のＣＧＡについての治療可能時間域（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｗｉｎｄｏｗ）が、６０分間であることを示す図である。グラフは、塞栓形成後の時間（分）の関数としての行動（Ｐ５０値）を示す。ＣＧＡは、塞栓形成の５および６０分間後に投与された場合、Ｐ５０値を有効に増加させた（Ｐ＜０．０５、ビヒクル処置コントロール群と比較して）。
【図３】図３は、培養ＨＴ２２マウス海馬細胞に対するフィセチンの薬理学的効果を示す図である。この発作インビトロアッセイにおいて、ＨＴ２２細胞は、単独でまたは様々な濃度のフィセチンの存在下において、２時間、２０μＭヨード酢酸（ＩＡＡ）により処理した。２４時間目に、細胞生存は、標準的なＭＴＴアッセイを使用して測定した。細胞生存はまた、光学顕微鏡によっても確認した。神経保護の非存在下において、＞９５％の細胞集団は、２４時間以内に死滅する。グラフは、フィセチンが、５〜２５μＭの濃度範囲にわたって神経保護的であり、８５％超まで生存を増加させることを示す。
【図４】図４は、ウサギ小血餅塞栓性発作モデル（ＲＳＣＥＭ）におけるフィセチン処置後の行動的な改善を示す図である。コントロール曲線（点線）は、１．０６±０．１５ｍｇ（ｎ＝１９）のＰ５０値を有する。塞栓形成の５分後から始めたフィセチン処置（５０ｍｇ／ｋｇ、静脈内（ＩＶ））は、２．５３±０．５５ｍｇまでＰ５０値を増加させた（ｎ＝１９、＊Ｐ＜０．０５）（濃い実線）。濃い円
【０１１４】
【化２５】
2014524426.tif 000027
【０１１５】
は、コントロール群からの生データを示し、三角
【０１１６】
【化２６】
2014524426.tif 000028
【０１１７】
は、フィセチン処置群についての生データを示す。特定の血餅重量について正常なウサギは、Ｙ軸上の０％にプロットされる記号によって示されるのに対して、特定の血餅重量について正常でないウサギは、Ｙ軸上の１００％にプロットされる記号によって示される。
【図５】図５は、培養細胞に対するバイカレインの薬理学的効果を示す図である。（Ａ）栄養因子の離脱（ｗｉｔｈｄｒａｗａｌ）。初代皮質ニューロンは、１８日齢ラット胚から調製し、バイカレイン（１０〜１０，０００ｎＭ）を有する血清を含有する培地において、低細胞密度１×１０６／３５ｍｍの皿で培養し、生存能力は、生死アッセイ（ｌｉｖｅ−ｄｅａｄ  ａｓｓａｙ）を使用して、２日後にアッセイした。（Ｂ）興奮毒性アッセイは、Ｅ１４マウス初代皮質ニューロン培養物により行った。培養の１１日後に、細胞は、１０分間、１０μＭグルタミン酸に対して曝露し、その後、様々な濃度のバイカレイン（０．２〜５μＭ）を追加した。細胞生存能力は、標準的なＭＴＴアッセイにより２４時間後に決定した。（Ｃ）ＰＣ１２細胞は、グルコースを欠乏させ、次いで、バイカレインの非存在下または存在下においてインキュベートした。細胞生存能力は、ＭＴＴアッセイを使用して、２４時間後に決定した。（Ｄ）ＲＣＧ−５神経細胞は、５〜２５μＭバイカレインの存在下または非存在下において、２時間、３０μＭヨード酢酸により処理した。いくつかの実験において、バイカレインは、虚血イベントの２時間後に追加した。細胞生存（％）は、ＭＴＴアッセイによって２４時間後に測定した。バイカレインは、虚血前に
【０１１８】
【化２７】
2014524426.tif 000029
【０１１９】
または虚血の２時間後に
【０１２０】
【化２８】
2014524426.tif 000030
【０１２１】
追加した。
【図６】図６は、培養ＨＴ２２マウス海馬細胞に対するバイカレインの薬理学的効果を示す図である。発作インビトロアッセイにおいて、ＨＴ２２細胞は、単独でまたは様々な濃度のバイカレインの存在下において、２時間、２０μＭヨード酢酸（Ｇ３ＰＤＨの不可逆阻害剤）により処理した。２４時間目に、細胞生存は、標準的なＭＴＴアッセイを使用して測定した。細胞生存はまた、光学顕微鏡によっても確認した。神経保護の非存在下において、＞９５％の細胞集団は、２４時間以内に死滅する。グラフは、バイカレインが、２．５〜１０μＭの濃度範囲にわたって神経保護的であり、薬剤が、生存を８０％超まで増加させたことを示す。
【図７】図７は、ウサギ小血餅塞栓性発作モデル（ＲＳＣＥＭ）における塞栓形成の６０分後に与えられたバイカレイン処置後の行動的な改善を示す図である。コントロール曲線（点線）は、１．３７±０．２０ｍｇ（ｎ＝２１）のＰ５０値を有する。塞栓形成の６０分後から始めたバイカレイン処置（１００ｍｇ／ｋｇ、皮下（ＳＣ））は、２．１５±０．１２ｍｇまでＰ５０値を増加させた（ｎ＝１４、＊Ｐ＜０．０５）（濃い実線）。濃い円
【０１２２】
【化２９】
2014524426.tif 000031
【０１２３】
は、コントロール群からの生データを示し、三角
【０１２４】
【化３０】
2014524426.tif 000032
【０１２５】
は、バイカレイン処置群についての生データを示す。特定の血餅重量について正常なウサギは、Ｙ軸上の０％にプロットされる記号によって示されるのに対して、特定の血餅重量について正常でないウサギは、Ｙ軸上の１００％にプロットされる記号によって示される。
【図８】図８は、フラボノイドライブラリ合成の方法を示す図である。
【図９】図９は、代表的なクロロゲン酸誘導体を示す図である。
【図１０】図１０は、カルコン誘導体の合成手法を示す図である。
【図１１】図１１は、フラボン誘導体の合成手法を示す図である。
【図１２】図１２は、フラボノール誘導体の合成手法を示す図である。
【図１３】図１３は、キノリン誘導体の合成手法を示す図である。
【図１４】図１４は、化合物ＰＭ−００１、ＰＭ−００２、ＰＭ−００３、およびＰＭ−００８についての例証となる合成手法を示す図である。
【図１５】図１５は、化合物ＰＭ−００４、ＰＭ−０１０、ＰＭ−０１２、およびＰＭ−０１３についての例証となる合成手法を示す図である。
【図１６】図１６は、化合物ＣＭＳ−０７８についての例証となる合成手法を示す図である。
【図１７】図１７は、化合物ＣＭＳ−１２９およびＣＭＳ−１３８についての例証となる合成手法を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【０１２６】
（詳細な説明）
定義
以下の語および句は、それらが使用される文脈が、別なふうに示さない限りまたはそれらが、異なるものを意味するように特別に定義されない限り、下記に記載される意味を有するように意図される。
【０１２７】
本明細書において使用されるように、「投与」は、たとえば経腸および非経口投与を含む、局所的および全身的な投与を指す。本明細書において記載される化合物についての投与のルートは、被験体に対しての、たとえば、経口（「ｐｏ」）投与、坐剤としての投与、局所接触、静脈内（「ｉｖ」）、腹腔内（「ｉｐ」）、筋肉内（「ｉｍ」）、病巣内、鼻内、もしくは皮下（「ｓｃ」）投与、または緩効性デバイス、たとえばミニ浸透圧ポンプ、デポー製剤の移植などを含む。投与は、非経口および経粘膜（たとえば経口、経鼻、膣、直腸、または経皮）を含む、任意のルートによるものとすることができる。非経口投与は、たとえば静脈内、筋肉内、細動脈内（ｉｎｔｒａ−ａｒｔｅｒｉｏｌｅ）、皮内、皮下、腹腔内、脳室内、イオン泳動、および頭蓋内を含む。送達の他の方法は、リポソーム製剤、静脈内注入、経皮パッチなどの使用を含むが、これらに限定されない。
【０１２８】
用語「全身投与」および「全身的に投与される」は、化合物または組成物が、循環系を介して、医薬作用についての標的部位を含む、身体における部位に対して送達されるように、哺乳動物に対して、化合物または組成物を投与する方法を指す。全身投与は、経口、鼻内、直腸、および非経口（つまり、筋肉内、静脈内、動脈内、経皮、および皮下などのような、消化管を通す以外の）投与を含むが、これらに限定されない。
【０１２９】
用語「共投与すること」または「共投与」は、たとえば、本明細書において記載されるポリフェノール化合物および他の活性な作用物質（たとえば認知改善薬）に関して使用される場合、両方が生理学的効果を同時に実現することができるような、記載されるポリフェノール化合物および第２の活性な作用物質の投与を指す。しかしながら、２つの作用物質は、一緒に投与される必要はない。ある実施形態において、一方の作用物質の投与が、他方の投与に先行することができる。同時の生理学的効果は、必ずしも、同時に、血液循環における両方の作用物質の存在を要する必要はない。しかしながら、ある実施形態において、共投与は、典型的に、任意の所定の用量について、それらの最大血清濃度の有意な割合（たとえば２０％またはそれ以上、好ましくは３０％または４０％またはそれ以上、より好ましくは５０％または６０％またはそれ以上、最も好ましくは７０％または８０％または９０％またはそれ以上）で、身体において（たとえば血漿において）同時に存在する、両方の作用物質をもたらす。
【０１３０】
本明細書において使用されるように、用語「処置すること」および「処置」は、用語が適用される疾患または状態のいずれか（たとえば虚血および／または虚血発作）またはそのような疾患もしくは状態の１つもしくは複数の症状の発病を遅延させる、その進行を遅らせるもしくは逆転させる、その重症度を低下させる、またはそれを軽減するもしくは予防することを指す。
【０１３１】
用語「緩和」は、その病態もしくは疾患の１つもしくは複数の症状の低下もしくは排除および／またはその病態または疾患の１つもしくは複数の症状の速度の低下または発病もしくは重症度の遅延および／またはその病態もしくは疾患の予防を指す。
【０１３２】
本明細書において使用されるように、句「〜から本質的になる」は、方法または組成物において含まれる活性な医薬作用物質および方法または組成物の意図される目的に対して不活性な任意の賦形剤の属または種を指す。いくつかの実施形態において、句「〜から本質的になる」が、本明細書において記載されるポリフェノール化合物以外の、１つもしくは複数のさらなる活性な作用物質の包含を明確に除外する。
【０１３３】
用語「被験体」、「個体」、および「患者」は、哺乳動物、好ましくはヒトまたは非ヒト霊長動物だけではなく、家畜化された（ｄｏｍｅｓｔｉｃａｔｅｄ）哺乳動物（たとえばイヌ科の動物またはネコ科の動物）、実験用哺乳動物（たとえばマウス、ラット、ウサギ、ハムスタ、モルモット）、および農業用哺乳動物（たとえばウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ）を区別なく指す。様々な実施形態において、被験体が、外来患者として、病院、精神科医療施設において医師もしくは他のヘルスワーカの看護下にあるまたは他の臨床状況下にあるヒト（たとえば成人男性、成人女性、思春期の男性、思春期の女性、男の子供、女の子供）とすることができる。ある実施形態において、被験体が、医師または他のヘルスワーカの看護または処方下になくてもよい。
【０１３４】
本明細書において使用される「虚血」または「虚血イベント」は、局所的なエリアに対する血管の封鎖による、そのエリアに対する不十分な血液供給（つまり血液循環）によって特徴付けられる疾患および障害を指す。虚血は、たとえば発作および一過性脳虚血発作を含む。発作は、たとえば虚血発作（これらに限定されないが、心原性脳塞栓症（ｃａｒｄｉｏｅｍｂｏｌｉｃ  ｓｔｒｏｋｅ）、アテローム塞栓性またはアテローム血栓性発作、つまり、頸動脈、大動脈、心臓、および脳におけるアテローム性動脈硬化症によって引き起こされる発作、小血管発作（つまり小窩性卒中）、血管壁の疾患、つまり脈管炎によって引き起こされる発作、感染症によって引き起こされる発作、血液疾患によって引き起こされる発作、片頭痛によって引き起こされる発作、ならびにホルモン療法などのような薬物投与によって引き起こされる発作を含む）、出血性虚血発作、脳内出血、ならびにクモ膜下出血を含む。
【０１３５】
用語「有効量」または「治療有効量」は、所望の生物学的結果（たとえば虚血または虚血と関連する症状の予防、遅延、低下、または阻害）を誘発するのに十分な、活性な作用物質の量を指す。その結果は、疾患のサイン、症状、もしくは原因の軽減または生命システムの任意の他の所望される変化であってもよい。用語「治療有効量」は、ある期間にわたって、病気に冒されたエリアに対して繰り返し適用された場合に、疾患状態における実質的な改善を引き起こす、製剤の任意の量を示すために本明細書において使用される。量は、処置されている状態、状態の進行の段階、ならびに適用される製剤のタイプおよび濃度により、変動するであろう。任意の所与の事例における適切な量は、当業者らに直ちに明らかになるであろう、またはルーチン的な実験作業により決定することができるであろう。
【０１３６】
「治療量未満の用量」は、それ自体、意図される薬理学的効果を誘発する（たとえば、塞栓性の血餅を溶解する）のに、機能的に不十分であるまたは量的に、その特定の薬理学的作用物質について確立された治療量未満である、薬理学的に活性な作用物質の投与量または被験体において薬理学的に活性な作用物質の実際のレベルのいずれかとしての薬理学的に活性な作用物質（複数可）の用量を指す（たとえば、当業者が参考にする参考文献において公開される、たとえば、Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ’  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ，  ６６ｔｈ  Ｅｄ．，  ２０１１、Ｔｈｏｍｓｏｎ  ＨｅａｌｔｈｃａｒｅまたはＢｒｕｎｔｏｎら、Ｇｏｏｄｍａｎ  ＆  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，  １１ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，  ２００６、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌにおいて公開される薬理学的作用物質についての用量）。「治療量未満の用量」は、相対的な用語（つまり、従来から投与されている、薬理学的に活性な作用物質のうちの量についてのパーセンテージ量（１００％未満）として）で定義することができる。たとえば、治療量未満の投薬量は、従来から投与されている、薬理学的に活性な作用物質の量の約１％〜約７５％とすることができる。いくつかの実施形態において、治療量未満の用量が、従来から投与されている、薬理学的に活性な作用物質の量の約７５％、５０％、３０％、２５％、２０％、１０％、またはそれ未満とすることができる。
【０１３７】
「治療効果」は、その用語が本明細書において使用されるように、上記に記載される治療上の有益性および／または予防的な有益性を包含する。予防的な効果は、疾患もしくは状態の出現を遅延させることもしくは排除すること、疾患もしくは状態の症状の発症を遅延させることもしくは排除すること、疾患もしくは状態の進行を遅らせること、停止させること、もしくは逆転させること、またはその任意の組み合わせを含む。
記号
【０１３８】
【化３１】
2014524426.tif 000033
【０１３９】
は、単結合を意味し、
【０１４０】
【化３２】
2014524426.tif 000034
【０１４１】
は、二重結合を意味し、
【０１４２】
【化３３】
2014524426.tif 000035
【０１４３】
は、三重結合を意味する。記号
【０１４４】
【化３４】
2014524426.tif 000036
【０１４５】
は、記号が付加されている二重結合の末端上のいずれかの位置を占める、二重結合上の基を指す、すなわち、二重結合の幾何学的配置、Ｅ−またはＺ−は、いろいろに解釈でき、両方の異性体が、含まれることが意味される。ある基が、その親の式から取り除かれて示される場合、
【０１４６】
【化３５】
2014524426.tif 000037
【０１４７】
記号は、その親の構造式から基を分離するために理論上切断された結合の末端部に使用されるであろう。
【０１４８】
化学構造が示されるまたは記載される場合、他に明示的に述べられない限り、炭素はすべて、４つの原子価に従うように水素置換を有すると仮定される。たとえば、下記の概略図の左側の構造において、９つの水素が、暗示されている。９つの水素は、右手構造において示される。時に、構造中の特定の原子は、置換としての水素（複数可）（明確に示される水素）を有するとして文字式、たとえばＣＨ２ＣＨ２で記載される。前述の記述的な技術は、そうでなければ複雑な構造の記載となることに対して、簡潔さおよび単純さを提供するために、化学技術分野において共通とされるものであることが当業者によって理解されるであろう。
【０１４９】
【化３６】
2014524426.tif 000038
【０１５０】
本出願において、いくつかの環構造は、総称的に示され、本文どおりに記載されるであろう。たとえば、下記の概略図において環Ａが、フェニルを記載するために使用される場合、環Ａ上には、多くとも４つの水素がある（ＲがＨではない場合）。
【０１５１】
【化３７】
2014524426.tif 000039
【０１５２】
基Ｒが、たとえば基：
【０１５３】
【化３８】
2014524426.tif 000040
【０１５４】
におけるように、環系上で「自由に動きまわる」として示される場合、
他に定められない限り、置換基Ｒは、安定した構造が形成される限り、「」記号との結合を伴う原子以外の、融合された二環式環系の任意の原子上に属することができる。示される例において、Ｒ基は、インドリル環系の５員または６員環のいずれかにおける原子に属することができる。
【０１５５】
たとえば式：
【０１５６】
【化３９】
2014524426.tif 000041
【０１５７】
におけるように、１つを超える、そのような、示される「自由に動きまわる」基がある場合、
２つの基、すなわちＲおよび親構造に対する付加を示す結合がある場合、他に定められない限り、「自由に動きまわる」基は、環系の任意の原子に属することができるが、それぞれが、環系上の、示される、暗示される、または明確に示される水素に取って代わり、化学的に安定した化合物が、そのような配置によって形成されるだろうということがなおまた仮定される。
基Ｒが、たとえば、式：
【０１５８】
【化４０】
2014524426.tif 000042
【０１５９】
におけるように、飽和炭素を含有する環系上に存在するとして示される場合、
この例において、ｙが、１を超え得る場合、それぞれが、環上の、今示される、暗示される、または明確に示される水素に取って代わることを仮定して、他に定められない限り、２つのＲは、同じ炭素に属することができる。単純な例は、Ｒがメチル基である場合であり、示される環の炭素（「環状の」炭素）上にジェミナルなジメチルが存在し得る。他の例において、その同じ炭素を含む、同じ炭素上の２つのＲは、環を形成し、したがって、スピロ環（「スピロシクリル（ｓｐｉｒｏｃｙｃｌｙｌ）」基）構造を作り出すことができる。先の例を使用すると、２つのＲは、たとえば、式：
【０１６０】
【化４１】
2014524426.tif 000043
【０１６１】
におけるように、たとえば、シクロヘキサンとスピロ環配置でピペリジン環を形成する。
【０１６２】
その最も広い意味における「アルキル」は、直鎖、分岐、または環式炭化水素構造およびその組み合わせを含むように意図される。アルキル基は、完全飽和または不飽和の１つもしくは複数の単位を有するものとすることができるが、芳香族ではない。一般に、アルキル基は、固定された整数または整数の範囲のいずれかの添字によって定義される。たとえば、「Ｃ８アルキル」は、ｎ−オクチル、イソ−オクチル、３−オクチニル、シクロヘキセニルエチル、シクロヘキシルエチル、およびその他同種のものを含み、添字「８」は、この用語によって定義される基がすべて、８つの固定された炭素数を有することを示す。他の例において、用語「Ｃ１〜６アルキル」は、１〜６つの炭素原子を有し、任意の不飽和、分岐、および／または環、必要な数の水素によって決まるアルキル基を指す。Ｃ１〜６アルキル基の例は、メチル、エチル、ビニル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、イソブチル、イソブテニル、ペンチル、ペンチニル、ヘキシル、シクロヘキシル、ヘキセニル、およびその他同種のものを含む。特定の数の炭素を有するアルキル残基が総称的に指定される場合、その数の炭素を有する幾何異性体はすべて、包含されるように意図される。たとえば、「プロピル」または「Ｃ３アルキル」のどちらも、それぞれ、ｎ−プロピル、ｃ−プロピル、プロペニル、プロピニル、およびイソプロピルを含む。シクロアルキルは、アルキルのサブセットであり、３〜１３の炭素原子の環式炭化水素基を含む。シクロアルキル基の例は、ｃ−プロピル、ｃ−ブチル、ｃ−ペンチル、ノルボルニル、ノルボルネニル、ｃ−ヘキセニル、アダマンチル、およびその他同種のものを含む。言及されるように、アルキルは、アルカニル、アルケニル、およびアルキニル残基（ならびにその組み合わせ）を指し、それは、たとえばシクロヘキシルメチル、ビニル、アリル、イソプレニル、およびその他同種のものを含むように意図される。特定の数の炭素を有するアルキルは、より特異的であるが、なお総称的な幾何学的制約条件を使用して、指定することができ、たとえば、３〜６つの炭素を有するシクロアルキルのみを意味する「Ｃ３〜６シクロアルキル」は、その特定の定義において含まれることが意味される。他に指定のない限り、アルキル基は、単独であるかまたは他の基の一部、たとえば−Ｃ（Ｏ）アルキルであるかどうかにかかわらず、１〜２０の炭素を有する、すなわちＣ１〜２０アルキルである。例「−Ｃ（Ｏ）アルキル」において、定義される炭素総数制限がない場合、「アルキル」が総称的に示されるので、−Ｃ（Ｏ）アルキル基のカルボニルは、炭素総数に含まれない。しかし、特定の炭素制限が示される場合、たとえば、用語「任意選択で置換されたＣ１〜２０アルキル」において、任意選択の置換が、「オキソ」を含む場合、そのような「オキソ」置換によって形成される任意のカルボニルの炭素は、それらが本来の炭素総数制限の一部であったので、炭素総数に含まれる。しかしながら、なおまた、「任意選択で置換されたＣ１〜２０アルキル」について言及すると、任意選択の置換が、炭素を含有する基、たとえばＣＨ２ＣＯ２Ｈを含む場合、この基における２つの炭素は、Ｃ１〜２０アルキル炭素制限に含まれない。
【０１６３】
炭素数限度が、それ自体が２つの用語を含む用語の初めに示される場合、炭素数制限は、両方の用語について包括的なものとして理解される。たとえば用語「Ｃ７〜１４アリールアルキル」について、用語「アリール」および「アルキル」部分の両方は、この例において最大１４の炭素総数に含まれるが、上記の「オキソ」の例におけるように、それらが、基の指定される炭素総数由来の炭素を組み込まない限り、その上のさらなる置換基は、原子総数に含まれない。同様に、原子数限度が示される場合、たとえば「６〜１４員ヘテロアリールアルキル」の「ヘテロアリール」および「アルキル」部分の両方は、原子総数制限に含まれるが、それらが、基の指定される炭素総数由来の炭素を組み込まない限り、その上のさらなる置換基は、原子総数に含まれない。他の例において、「Ｃ４〜１０シクロアルキルアルキル」は、アルキレン、アルキリデン、またはアルキリジンを介して親構造に結合されたシクロアルキルを意味し、この例において、基は、アルキレン、アルキリデン、またはアルキリジンサブユニットを含めて、１０の炭素に制限される。他の例として、たとえば「Ｃ７〜１４アリールアルキル」の「アルキル」部分は、たとえば、用語「Ｃ７〜１４アリールアルキレン」または「Ｃ６〜１０アリール−ＣＨ２ＣＨ２−」におけるように、他に述べられない限り、アルキレン、アルキリデン、またはアルキリジンを含むように意味される。
【０１６４】
「アルキレン」は、もっぱら炭素および水素原子からなり、不飽和を含有せず、１〜１０の炭素原子を有する、直線、分岐、および環式（ならびにその組み合わせ）の二価のラジカル、たとえばメチレン、エチレン、プロピレン、ｎ−ブチレン、およびその他同種のものを指す。アルキレンは、アルキルに似ており、アルキルと同じ残基を参照するが、２つの結合場所を有し、特に、完全に飽和されている。アルキレンの例は、エチレン（−ＣＨ２ＣＨ２−）、プロピレン（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、ジメチルプロピレン（−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２−）、シクロヘキサン−１，４−ジイル、およびその他同種のものを含む。
【０１６５】
「アルキリデン」は、もっぱら炭素および水素原子からなり、２〜１０の炭素原子を有する、直線、分岐、および環式（ならびにその組み合わせ）の不飽和二価ラジカル、たとえばエチリデン、プロピリデン、ｎ−ブチリデン、およびその他同種のものを指す。アルキリデンは、アルキルに似ており、アルキルと同じ残基を参照するが、２つの結合場所および特に、二重結合不飽和の少なくとも１つの単位を有する。アルキリデンの例は、ビニリデン（−ＣＨ＝ＣＨ−）、シクロヘキシルビニリデン（−ＣＨ＝Ｃ（Ｃ６Ｈ１３）−）、シクロヘキセン−１，４−ジイル、およびその他同種のものを含む。
【０１６６】
「アルキリジン」は、もっぱら炭素および水素原子からなり、２〜１０の炭素原子を有する、直線、分岐、および環式（ならびにその組み合わせ）の不飽和二価ラジカル、たとえばプロピリド−２−イニル、ｎ−ブチリド−１−イニル、およびその他同種のものを指す。アルキリジンは、アルキルに似ており、アルキルと同じ残基を参照するが、２つの結合場所および特に、三重結合不飽和の少なくとも１つの単位を有する。
【０１６７】
上記のラジカル、「アルキレン」、「アルキリデン」、および「アルキリジン」のいずれも、任意選択で置換される場合、それ自体が不飽和を含有することができるアルキル置換を含有することができる。たとえば２−（２−フェニルエチニル−ブタ−３−エニル）−ナフタレン（ＩＵＰＡＣ名）は、そのラジカルの２位にビニル置換基を有するｎ−ブチリド（ｂｕｔｙｌｉｄ）−３−イニルラジカルを含有する。アルキルおよびその炭素含有置換の組み合わせは、３０炭素原子に制限される。
「アルコキシ」は、基−Ｏ−アルキルを指し、ここで、アルキルは、本明細書において定義されるとおりである。アルコキシは、例として、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｔ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｎ−ペンタオキシ、シクロヘキシルオキシ、シクロヘキセニルオキシ、シクロプロピルメチルオキシ、およびその他同種のものを含む。
【０１６８】
「ハロアルキルオキシ」は、基−Ｏ−アルキルを指し、ここで、アルキルは、本明細書において定義されるとおりであり、さらに、アルキルは、１つもしくは複数のハロゲンで置換される。例として、ハロＣ１〜３アルキルオキシ基は、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２Ｈ、−ＯＣＨＦ２、−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｉ、−ＯＣ（ＣＨ３）２Ｂｒ、−ＯＣＨ２Ｃｌ、およびその他同種のものを含む。
【０１６９】
「アシル」は、基−Ｃ（Ｏ）Ｈ、−Ｃ（Ｏ）アルキル、−Ｃ（Ｏ）アリール、およびＣ（Ｏ）ヘテロシクリル（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｙｌ）を指す。
【０１７０】
「α−アミノ酸」は、天然に存在し、かつ市販で入手可能なα−アミノ酸およびその光学異性体を指す。典型的な天然の市販で入手可能なα−アミノ酸は、グリシン、アラニン、セリン、ホモセリン、トレオニン、バリン、ノルバリン、ロイシン、イソロイシン、ノルロイシン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リシン、オルニチン、ヒスチジン、アルギニン、システイン、ホモシステイン、メチオニン、フェニルアラニン、ホモフェニルアラニン、フェニルグリシン、オルト−チロシン、メタ−チロシン、パラ−チロシン、トリプトファン、グルタミン、アスパラギン、プロリン、およびヒドロキシプロリンである。「α−アミノ酸の側鎖」は、上記に定義されるα−アミノ酸のα−炭素上に見つけられるラジカル、たとえば水素（グリシンについて）、メチル（アラニンについて）、ベンジル（フェニルアラニンについて）などを指す。
【０１７１】
「アミノ」は、基ＮＨ２を指す。
【０１７２】
「アミド」は、基Ｃ（Ｏ）ＮＨ２または−Ｎ（Ｈ）アシルを指す。
【０１７３】
「アリール」（時に「Ａｒ」と呼ばれる）は、他に指定のない限り、単一の環（たとえばフェニル）または複数の縮合環（たとえばナフチルもしくはアントリル）を有する６〜１５炭素原子の一価芳香族炭素環式基を指し、この縮合環は、芳香族であってもよく、またはなくてもよい（たとえば２−ベンゾオキサゾリノン、２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン−３（４Ｈ）−オン−７−イル、９，１０−ジヒドロフェナントレニル、インダニル、テトラリニル、およびフルオレニルならびにその他同種のもの）が、ただし、結合場所は、アリール基の芳香族部分の原子を通してのものであり、結合場所の芳香族部分は、芳香環における炭素のみを含有することを条件とする。任意の芳香環部分がヘテロ原子を含有する場合、基は、アリールではなくヘテロアリールとなる。アリール基は、単環式、二環式、三環式、または四環式である。
【０１７４】
「アリーレン」は、少なくとも２つの基が結合されるアリールを指す。より詳細な例については、「フェニレン」は、二価フェニル環ラジカルを指す。フェニレンは、したがって、付加された、２つより多くの基が結合されてもよいが、フェニレンは、それに結合している最低２つの非水素基によって定義される。
【０１７５】
「アリールアルキル」は、アルキレン、アルキリデン、またはアルキリジンラジカルのうちの１つを介して親構造にアリール部分が結合している残基を指す。例として、ベンジル、フェネチル、フェニルビニル、フェニルアリル、およびその他同種のものを含む。「任意選択で置換された」と指定される場合、アリールアルキル基のアリールおよび対応するアルキレン、アルキリデン、またはアルキリジン部分の両方は、任意選択で置換することができる。例として、「Ｃ７〜１１アリールアルキル」は、合計１１の炭素に制限されたアリールアルキルを指し、たとえば、フェニルエチル、フェニルビニル、フェニルペンチル、およびナフチルメチルはすべて、「Ｃ７〜１１アリールアルキル」基の例である。
【０１７６】
「アリールオキシ」は、基−Ｏ−アリールを指し、ここで、アリールは、本明細書において定義されるとおりであり、例として、フェノキシ、ナフトキシ、およびその他同種のものを含む。
【０１７７】
「カルボキシル」、「カルボキシ」、または「カルボキシレート」は、ＣＯ２Ｈまたはその塩を指す。
【０１７８】
「カルボキシルエステル」または「カルボキシエステル」または「エステル」は、基−ＣＯ２アルキル、−ＣＯ２アリール、または−ＣＯ２ヘテロシクリルを指す。
【０１７９】
「カーボネート」は、基−ＯＣＯ２アルキル、−ＯＣＯ２アリール、または−ＯＣＯ２ヘテロシクリルを指す。
【０１８０】
「カルバメート」は、基−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｎ（Ｈ）カルボキシル、または−Ｎ（Ｈ）カルボキシルエステルを指す。
【０１８１】
「シアノ」または「ニトリル」は、基−ＣＮを指す。
【０１８２】
「ホルミル」は、特定のアシル基−Ｃ（Ｏ）Ｈを指す。
【０１８３】
「ハロ」または「ハロゲン」は、フルオロ、クロロ、ブロモ、およびヨードを指す。
【０１８４】
「ハロアルキル」および「ハロアリール」は、それぞれ、１つもしくは複数のハロゲンにより置換されたアルキルおよびアリールラジカルを総称的に指す。例として、「ジハロアリール」、「ジハロアルキル」、「トリハロアリール」などは、必ずしも、複数の同じハロゲンではないが、複数のハロゲンにより置換されたアリールおよびアルキルを指し、したがって、４−クロロ−３−フルオロフェニルは、ジハロアリール基である。
【０１８５】
「ヘテロアルキル」は、すべてではないが、１つもしくは複数の炭素が、ヘテロ原子と交換されたアルキルを指す。ヘテロアルキル基は、直鎖または分岐幾何学的配置のいずれかを有する。例として、「２〜６員ヘテロアルキル」は、最大の６つの原子のうちの少なくとも１つがヘテロ原子でなければならないので、多くとも５つの炭素原子を含有することができる基であり、基は、直鎖または分岐である。また、本発明の目的のために、ヘテロアルキル基は、常に炭素原子から始まる、すなわち、ヘテロアルキルは、１つもしくは複数のヘテロ原子を含有してもよいが、親分子に対する付加の場所は、ヘテロ原子ではない。２〜６員ヘテロアルキル基は、たとえば−ＣＨ２ＸＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＸＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＸＣＨ２ＣＨ３、Ｃ（ＣＨ２）２ＸＣＨ２ＣＨ３、およびその他同種のものを含み、Ｘが、たとえば、Ｏ、ＮＨ、ＮＣ１〜６アルキル、およびＳ（Ｏ）０〜２である。
【０１８６】
修飾語としての「ペルハロ」は、そのように修飾された基が、すべてのその利用可能な水素がハロゲンと交換されていることを意味する。例として、「ペルハロアルキル」があるであろう。ペルハロアルキルは、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、ペルクロロエチル、およびその他同種のものを含む。
【０１８７】
「ヒドロキシ」または「ヒドロキシル」は、基−ＯＨを指す。
【０１８８】
「ヘテロ原子」は、Ｏ、Ｓ、Ｎ、またはＰを指す。
【０１８９】
最も広い意味における「ヘテロシクリル」は、芳香族および非芳香族環系を含み、より詳細には、炭素原子および１〜５つのヘテロ原子からなる、安定した３〜１５員環ラジカルを指す。この説明の目的のために、ヘテロシクリルラジカルは、単環式、二環式、または三環式環系とすることができ、これらは、縮合系または架橋環系およびスピロ環系を含むことができ、ヘテロシクリルラジカルにおける窒素、リン、炭素、または硫黄原子は、任意選択で、様々な酸化状態に酸化することができる。特定の例において、基−Ｓ（Ｏ）０〜２−は、−Ｓ−（スルフィド）、−Ｓ（Ｏ）−（スルホキシド）、および−ＳＯ２−（スルホン）連結を指す。便宜上、窒素、排他的ではないが、特に、環状芳香族窒素として定義されるものは、特定の例において明示的にそのように定義されなかったが、それらの対応するＮ−オキシド形態を含むように意味される。したがって、たとえば、ピリジル環を有する化合物について、対応するピリジル−Ｎ−オキシドは、今開示されている化合物に含まれるように意味される。そのうえ、環状窒素原子は、任意選択で、四級化することができる。「ヘテロ環」は、ヘテロアリールおよびヘテロアリシクリルを含む、すなわち、ヘテロ環式環は、部分的にまたは完全に飽和または芳香族である。したがって、「ヘテロシクリルアルキル」などのような用語は、ヘテロアリシクリルアルキルおよびヘテロアリールアルキルを含む。ヘテロシクリルラジカルの例は、アゼチジニル、アクリジニル、ベンゾジオキソリル（ｂｅｎｚｏｄｉｏｘｏｌｙｌ）、ベンゾジオキサニル、ベンゾフラニル、カルバゾイル、シンノリニル、ジオキソラニル、インドリジニル、ナフチリジニル（ｎａｐｈｔｈｙｒｉｄｉｎｙｌ）、ペルヒドロアゼピニル（ｐｅｒｈｙｄｒｏａｚｅｐｉｎｙｌ）、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサジニル、フタラジニル、プテリジニル、プリニル、キナゾリニル、キノキサリニル、キノリニル、イソキノリニル、テトラゾイル、テトラヒドロイソキノリル、ピペリジニル、ピペラジニル、２−オキソピペラジニル、２−オキソピペリジニル、２−オキソピロリジニル、２−オキソアゼピニル、アゼピニル、ピロリル、４−ピペリドニル（４−ｐｉｐｅｒｉｄｏｎｙｌ）、ピロリジニル、ピラゾリル、ピラゾリジニル、イミダゾリル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、ジヒドロピリジニル、テトラヒドロピリジニル、ピリジニル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、オキサゾリル、オキサゾリジニル、オキサゾリジニル、トリアゾリル、イソオキサゾリル、イソオキサゾリジニル、モルホリニル、チアゾリル、チアゾリニル、チアゾリジニル、イソチアゾリル、キヌクリジニル、イソチアゾリジニル、インドリル、イソインドリル、インドリニル、イソインドリニル、オクタヒドロインドリル（ｏｃｔａｈｙｄｒｏｉｎｄｏｌｙｌ）、オクタヒドロイソインドリル（ｏｃｔａｈｙｄｒｏｉｓｏｉｎｄｏｌｙｌ）、キノリル、イソキノリル、デカヒドロイソキノリル、ベンゾイミダゾリル、チアジアゾリル、ベンゾピラニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、フリル、ジアザビシクロヘプタン、ジアザパン（ｄｉａｚａｐａｎｅ）、ジアゼピン、テトラヒドロフリル、テトラヒドロピラニル、チエニル、ベンゾチエリイル（ｂｅｎｚｏｔｈｉｅｌｉｙｌ）、チアモルホリニル（ｔｈｉａｍｏｒｐｈｏｌｉｎｙｌ）、チアモルホリニルスルホキシド、チアモルホリニルスルホン、ジオキサホスホラニル（ｄｉｏｘａｐｈｏｓｐｈｏｌａｎｙｌ）、およびオキサジアゾリルを含むが、これらに限定されない。
【０１９０】
「ヘテロアリール」は、１〜１０の環状炭素原子および１〜４つの環状ヘテロ原子を有する芳香族基を指す。ヘテロアリール基は、少なくとも１つの芳香環構成成分を有するが、ヘテロアリールは、完全に不飽和または部分的に不飽和とすることができる。基におけるいずれかの芳香環がヘテロ原子を有する場合、たとえば、基における他の芳香環がヘテロ原子を有していない場合でさえ、基はヘテロアリールとなる。たとえば、２Ｈ−ピリド［３，２−ｂ］［１，４］オキサジン−３（４Ｈ）−オン−７−イル、インドリル、およびベンゾイミダゾリルは、「ヘテロアリール」である。ヘテロアリール基は、単一の環（たとえばピリジニル、イミダゾリル、もしくはフリル）または複数の縮合環（たとえばインドリジニル、キノリニル、ベンゾイミダゾリル、もしくはベンゾチエニル）を有することができ、縮合環が、芳香族であってもよいもしくはなくてもよいおよび／またはヘテロ原子を含有してもよいもしくはしなくてもよいが、ただし、親分子に対する付加の場所は、ヘテロアリール基の芳香族部分の原子を通してのものであることを条件とする。一実施形態において、ヘテロアリール基の窒素および／または硫黄環原子（複数可）が、Ｎ−オキシド（Ｎ→Ｏ）、スルフィニル、またはスルホニル部分を提供するために、任意選択で、酸化される。ヘテロ環式環かどうかにかかわらずヘテロ環式環において亜リン酸を含有する、本明細書において記載される化合物は、亜リン酸の酸化形態を含む。ヘテロアリール基は、単環式、二環式、三環式、または四環式である。
【０１９１】
「ヘテロアリールオキシ」は、Ｏ−ヘテロアリールを指す。
【０１９２】
「ヘテロアリーレン」は、総称的に、それに付加された少なくとも２つの基を有する、任意のヘテロアリールを指す。より詳細な例については、「ピリジレン」は、二価ピリジル環ラジカルを指す。ピリジレンは、したがって、付加された、２つを超える基を有することができるが、それに付加された最低２つの非水素基によって定義される。
【０１９３】
「ヘテロ脂環式（ｈｅｔｅｒｏａｌｉｃｙｃｌｉｃ）」は、特に、非芳香族ヘテロシクリルラジカルを指す。ヘテロ脂環式は、不飽和を含有していてもよいが、芳香族ではない。言及されるように、アリールおよびヘテロアリールは、芳香環を介して親構造に付加される。従って、たとえば２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン−３（４Ｈ）−オン−４−イルは、ヘテロ脂環式であるが、２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン−３（４Ｈ）−オン−７−イルは、アリールである。他の例において、２Ｈ−ピリド［３，２−ｂ］［１，４］オキサジン−３（４Ｈ）−オン−４−イルは、ヘテロ脂環式であるが、２Ｈ−ピリド［３，２−ｂ］［１，４］オキサジン−３（４Ｈ）−オン−７−イルは、ヘテロアリールである。
【０１９４】
「ヘテロシクリルアルキル」は、たとえばアルキレンリンカーを介して親構造に連結されたヘテロシクリル基、たとえば（テトラヒドロフラン−３−イル）メチル−または（ピリジン−４−イル）メチルを指す。
【０１９５】
【化４２】
2014524426.tif 000044
【０１９６】
「ヘテロシクリルオキシ（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｙｌｏｘｙ）」は、基−Ｏ−ヘテロシクリルを指す。
「ニトロ」は、基−ＮＯ２を指す。
【０１９７】
「オキソ」は、二重結合酸素ラジカル、＝Ｏを指す。
【０１９８】
「オキシ」は、−Ｏ・ラジカル（→Ｏとしても指定される）、すなわち、単結合酸素ラジカルを指す。例として、Ｎ−オキシドは、オキシラジカルを持つ窒素である。
【０１９９】
その結合構造を有する基が、２つのパートナーに結合していることが示される場合、すなわち、二価のラジカル、たとえば−ＯＣＨ２−である場合、他に明示的に述べられない限り、２つのパートナーのいずれかが、一方の末端部で特定の基に結合することができ、他方のパートナーが、二価の基の他方の末端部に必然的に結合することが理解される。別の言い方をすれば、二価のラジカルは、示される方向に制限されるように解釈されない、たとえば、「−ＯＣＨ２−」は、書かれるように「−ＯＣＨ２−」だけではなく、「−ＣＨ２Ｏ−」もまた意味するように意図される。
【０２００】
「任意選択の」または「任意選択で」は、続いて記載されるイベントまたは状況が、起こってもよいまたは起こらなくてもよいことならびに記載が、前記イベントまたは状況が起こる事例および起こらない事例を含むことを意味する。当業者は、１つもしくは複数の任意選択の置換基を含有すると記載される任意の分子に関して、合成的に実現可能な化合物のみが含まれることを意味することを理解するであろう。「任意選択で置換された」は、用語におけるすべての続く修飾語を指す、たとえば、用語「任意選択で置換されたアリールＣ１〜８アルキル」において、任意選択の置換が、アリールＣ１〜８アルキル基の「Ｃ１〜８アルキル」部分および「アリール」部分の両方で起こってもよい。また、例として、任意選択で置換されたアルキルは、任意選択で置換されたシクロアルキル基を含む。用語「置換された」は、特定の基またはラジカルを修飾するために使用される場合、特定の基またはラジカルの１つもしくは複数の水素原子が、それぞれ、互いから独立して、下記に定義されるように、同じまたは異なる置換基と交換されることを意味する。したがって、基が、「任意選択で置換された」と定義される場合、その定義は、基が、下記に定義されるラジカルの１つもしくは複数により置換される場合およびそれが置換されない場合を包含するように意味される。
【０２０１】
特定の基またはラジカルにおける飽和炭素原子上の１つもしくは複数の水素を置換するための置換基（単一の炭素上の２つの任意の水素は、＝Ｏ、＝ＮＲ７０、＝Ｎ−ＯＲ７０、＝Ｎ２、または＝Ｓと交換することができる）は、他に指定のない限り、−Ｒ６０、ハロ、＝Ｏ、−ＯＲ７０、−ＳＲ７０、−Ｎ（Ｒ８０）２、ペルハロアルキル、−ＣＮ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、＝Ｎ２、−Ｎ３、−ＳＯ２Ｒ７０、−ＳＯ３−Ｍ＋、−ＳＯ３Ｒ７０、−ＯＳＯ２Ｒ７０、−ＯＳＯ３−Ｍ＋、−ＯＳＯ３Ｒ７０、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）２（Ｍ＋）２、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）２Ｍ２＋、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）Ｏ−Ｍ＋、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、−Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、−Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、−ＣＯ２−Ｍ＋、−ＣＯ２Ｒ７０、−Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８０）２、−Ｃ（ＮＲ７０）（Ｒ８０）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ７０、−ＯＣ（Ｓ）Ｒ７０、−ＯＣＯ２−Ｍ＋、−ＯＣＯ２Ｒ７０、−ＯＣ（Ｓ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、−ＮＲ７０ＣＯ２−Ｍ＋、−ＮＲ７０ＣＯ２Ｒ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８０）２、−ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、および−ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）Ｎ（Ｒ８０）２であり、Ｒ６０は、Ｃ１〜６アルキル、３〜１０員ヘテロシクリル、３〜１０員ヘテロシクリルＣ１〜６アルキル、Ｃ６〜１０アリール、またはＣ６〜１０アリールＣ１〜６アルキルであり、Ｒ７０が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、水素またはＲ６０であり、Ｒ８０が、それぞれ、それぞれの存在について独立して、Ｒ７０であるか、またはその代わりに、２つのＲ８０は、それらが結合している窒素原子と一緒に、Ｏ、Ｎ、およびＳから選択される、１〜４つの同じまたは異なるさらなるヘテロ原子を任意選択で含む、３〜７員ヘテロアリシクリルを形成し、そのうちのＮが、任意選択で、ＨまたはＣ１〜Ｃ３アルキル置換を有し、Ｍ＋が、それぞれ、正味の単一の正電荷を有する対イオンである。Ｍ＋は、それぞれ、それぞれの存在について独立して、たとえば、Ｋ＋、Ｎａ＋、Ｌｉ＋などのようなアルカリイオン、＋Ｎ（Ｒ６０）４などのようなアンモニウムイオン、または［Ｃａ２＋］０．５、［Ｍｇ２＋］０．５、もしくは［Ｂａ２＋］０．５などのようなアルカリ土類イオン（「添字０．５は、たとえば、そのような二価のアルカリ土類イオンについての対イオンの一方が、本明細書において記載される化合物のイオン化形態とし、他方が、塩素イオンなどのような典型的な対イオンとすることができることまたは２つのイオン化された化合物が、そのような二価のアルカリ土類イオンについての対イオンとして果たすことができることまたは二重にイオン化された化合物が、そのような二価のアルカリ土類イオンについての対イオンとして果たすことができることを意味する）。特定の例として、−Ｎ（Ｒ８０）２は、−ＮＨ２、−ＮＨ−アルキル、−ＮＨ−ピロリジン−３−イル、Ｎ−ピロリジニル、Ｎ−ピペラジニル、４Ｎ−メチル−ピペラジン−１−イル、Ｎ−モルホリニル、およびその他同種のものを含むように意味される。
【０２０２】
不飽和炭素を含有する基における不飽和炭素原子上の水素に取って代わるための置換基は、他に指定のない限り、−Ｒ６０、ハロ、−Ｏ−Ｍ＋、−ＯＲ７０、−ＳＲ７０、−Ｓ−Ｍ＋、−Ｎ（Ｒ８０）２、ペルハロアルキル、−ＣＮ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−ＳＯ２Ｒ７０、−ＳＯ３−Ｍ＋、−ＳＯ３Ｒ７０、−ＯＳＯ２Ｒ７０、−ＯＳＯ３−Ｍ＋、−ＯＳＯ３Ｒ７０、−ＰＯ３−２（Ｍ＋）２、−ＰＯ３−２Ｍ２＋、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）Ｏ−Ｍ＋、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、−Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、−Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、−ＣＯ２−Ｍ＋、−ＣＯ２Ｒ７０、−Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、−Ｃ（ＮＲ７０）Ｎ（Ｒ８０）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ７０、−ＯＣ（Ｓ）Ｒ７０、−ＯＣＯ２−Ｍ＋、−ＯＣＯ２Ｒ７０、−ＯＣ（Ｓ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、−ＮＲ７０ＣＯ２Ｍ＋、−ＮＲ７０ＣＯ２Ｒ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８０）２、−ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、および−ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）Ｎ（Ｒ８０）２であり、Ｒ６０、Ｒ７０、Ｒ８０、およびＭ＋が先に定義されるとおりであり、置換アルケンまたはアルキンの場合、置換基は、−Ｏ−Ｍ＋、−ＯＲ７０、−ＳＲ７０、または−Ｓ−Ｍ＋ではないことを条件とする。
【０２０３】
そのような窒素原子を含有する基における窒素原子上の水素に取って代わるための置換基は、他に指定のない限り、−Ｒ６０、−Ｏ−Ｍ＋、−ＯＲ７０、−ＳＲ７０，−Ｓ−Ｍ＋、−Ｎ（Ｒ８０）２、ペルハロアルキル、−ＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ７０、−ＳＯ３−Ｍ＋、−ＳＯ３Ｒ７０、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ７０、−ＯＳＯ３−Ｍ＋、−ＯＳＯ３Ｒ７０、−ＰＯ３２−（Ｍ＋）２、−ＰＯ３２−Ｍ２＋、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）Ｏ−Ｍ＋、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）（ＯＲ７０）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、−Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、−Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、−ＣＯ２Ｒ７０、−Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、−Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０、ＯＣ（Ｏ）Ｒ７０、−ＯＣ（Ｓ）Ｒ７０、−ＯＣＯ２Ｒ７０、−ＯＣ（Ｓ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、−ＮＲ７０ＣＯ２Ｒ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８０）２、−ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、および−ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）Ｎ（Ｒ８０）２であり、Ｒ６０、Ｒ７０、Ｒ８０、およびＭ＋が、先に定義されるとおりである。
【０２０４】
一実施形態において、置換された基が、１、２、３、もしくは４つの置換基、１、２、もしくは３つの置換基、１もしくは２つの置換基、または１つの置換基を有する。
【０２０５】
すべての置換された基において、それら自体に対するさらなる置換基を有する置換基を決定することによって得られるポリマー（たとえば、置換アリール基とそれ自体が置換される置換基としての置換アリール基を有する、置換アリール、これは、置換アリール基によってさらに置換される、など）は、本明細書における包含が意図されないことが理解される。言語がそのような複数の置換を認める場合、置換のそのような繰り返しの最大数は、３とする。
【０２０６】
「スルホンアミド」は、基−ＳＯ２ＮＨ２、−Ｎ（Ｈ）ＳＯ２Ｈ、−Ｎ（Ｈ）ＳＯ２アルキル、−Ｎ（Ｈ）ＳＯ２アリール、または−Ｎ（Ｈ）ＳＯ２ヘテロシクリルを指す。
【０２０７】
「スルホニル」は、基−ＳＯ２Ｈ、−ＳＯ２アルキル、−ＳＯ２アリール、または−ＳＯ２ヘテロシクリルを指す。
「スルファニル」は、基−ＳＨ、−Ｓ−アルキル、−Ｓ−アリール、または−Ｓ−ヘテロシクリルを指す。
【０２０８】
「スルフィニル」は、基−Ｓ（Ｏ）Ｈ、−Ｓ（Ｏ）アルキル、−Ｓ（Ｏ）アリール、または−Ｓ（Ｏ）ヘテロシクリルを指す。
【０２０９】
「適した脱離基」は、用語が当業者によって理解されるように定義される、すなわち、反応に際して、新しい結合が形成されることになっている場合、炭素が、新しい結合の形成に際して基を失う、炭素上の基である。適した脱離基を用いる典型的な例は、たとえばｓｐ３混成炭素上の求核置換反応であり（ＳＮ２またはＳＮ１）、たとえば、脱離基が、ブロミドなどのようなハロゲン化物である場合、反応物は、臭化ベンジルであってもよい。そのような反応の他の典型的な例は、芳香族求核置換反応（ＳＮＡｒ）である。他の例は、離脱基を持つ芳香族反応パートナーの間の結合への挿入反応（たとえば遷移金属による）、その後に続く還元カップリングである。「適した離脱基」は、そのような機構的な制限に限定されない。適した離脱基の例は、ハロゲン、任意選択で置換されたアリールまたはスルホン酸アルキル、ホスホネート、アジ化物、および−Ｓ（Ｏ）０〜２Ｒを含み、Ｒが、たとえば、任意選択で置換されたアルキル、任意選択で置換されたアリール、または任意選択で置換されたヘテロアリールである。有機合成の当業者らは、様々な反応下で所望の反応を実行するために適した離脱基を直ちに同定するであろう。
【０２１０】
「立体異性体（複数可）」は、同じ原子の結合性を有するが、空間において異なる原子配置を有する化合物を指す。立体異性体は、シス−トランス異性体、ＥおよびＺ異性体、鏡像異性体、およびジアステレオマーを含む。本明細書において記載される化合物またはそれらの薬学的に許容され得る塩は、１つもしくは複数の不斉中心を含有することができ、したがって、（Ｒ）−もしくは（Ｓ）−としてまたはアミノ酸については（Ｄ）−もしくは（Ｌ）−として絶対的な立体化学の点から定義することができる鏡像異性体、ジアステレオマー、および他の立体異性体形態をもたらすことができる。本発明は、そのような可能な異性体ならびにそれらのラセミ形態および光学的に純粋な形態をすべて含むように意味される。光学的に活性な（＋）および（−）、（Ｒ）−および（Ｓ）−、または（Ｄ）−および（Ｌ）−異性体は、キラルシントン、キラル試薬を使用して調製することができるまたはたとえば結晶化によって分離することができるジアステレオマーの塩もしくは複合体の形成によって；たとえば結晶化によって分離することができる、ジアステレオマーの誘導体の形成、鏡像異性体に特異的な試薬による一方の鏡像異性体の選択的な反応、たとえば酵素的酸化もしくは還元、その後に続く修飾および未修飾鏡像異性体の分離を介して；またはたとえば、結合した不斉リガンドを有するシリカなどのようなキラル支持体上でのもしくはキラル溶媒の存在下におけるキラル環境における、ガス−液体もしくは液体クロマトグラフィーなどのように、従来の技術を使用して分割することができる。所望の鏡像異性体が、上記に記載される分離手順のうちの１つによって他の化学成分に変換される場合、さらなるステップが、所望の鏡像異性体形態を遊離するために必要とされてもよいことが十分に理解されるであろう。その代わりに、特定の鏡像異性体は、光学的に活性な試薬、基質、触媒、もしくは溶媒を使用することによってまたは不斉転換によって一方の鏡像異性体を他方に変換することによって不斉合成によって合成することができる。特定の鏡像異性体が濃縮された鏡像異性体の混合物について、主な構成成分である鏡像異性体は、再結晶によってさらに濃縮することができる（収量において付随する損失を伴う）。
【０２１１】
本明細書において記載される化合物が、オレフィン二重結合または幾何学的不斉性の他の中心を含有する場合、かつ他に指定のない限り、化合物が、ＥおよびＺ幾何異性体の両方を含むことが意図される。
【０２１２】
「互変異性体」は、エノール−ケトおよびイミン−エナミンの互変異性体またはピラゾール、イミダゾール、ベンゾイミダゾール、トリアゾール、およびテトラゾールなどのような、−Ｎ＝Ｃ（Ｈ）−ＮＨ−環原子配置を含有するヘテロアリール基の互変異性形態などのような、原子の電子的結合においておよび／または陽子の位置においてのみ異なる、分子の代替の形態を指す。当業者は、他の互変異性の環原子配置が、本明細書において可能であり、企図されることを認識するであろう。
【０２１３】
「薬学的に許容され得る塩」は、化合物の薬学的に許容され得る塩を指し、これらの塩は、当技術分野においてよく知られている様々な有機および無機対イオンに由来し、単なる例としてであるが、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、テトラアルキルアンモニウム、およびその他同種のもの；ならびに分子が、塩基性の機能性を含有する場合、塩酸塩、臭化水素酸塩、酒石酸塩、メシル酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、シュウ酸塩、およびその他同種のものなどのような有機または無機酸塩を含む。薬学的に許容され得る酸付加塩は、遊離塩基の生物学的効果を保持し、同時に、生物学的にまたはその他の点で有害でない、たとえば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、およびその他同種のものなどのような無機酸ならびに酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸、およびその他同種のものなどのような有機酸である酸性パートナーによって形成される塩である。薬学的に許容され得る塩基付加塩は、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン、アルミニウム塩、およびその他同種のものなどのような無機塩基に由来するものを含む。例示的な塩は、アンモニウム、カリウム、ナトリウム、カルシウム、およびマグネシウム塩である。薬学的に許容され得る有機無毒塩基に由来する塩は、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、２−ジメチルアミノエタノール、２−ジエチルアミノエタノール、ジシクロヘキシルアミン、リシン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、プリン、ピペラジン、ピペリジン、Ｎ−エチルピペリジン、ポリアミン樹脂、およびその他同種のものなどのような、第１級、第２級、および第３級アミン、天然に存在する置換アミン、環状アミン、および塩基性イオン交換樹脂を含む置換アミンの塩を含むが、これらに限定されない。例示的な有機塩基は、イソプロピルアミン、ジエチルアミン、エタノールアミン、トリメチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、コリン、およびカフェインである。（たとえば、参照によって本明細書において組み込まれるＳ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅら、「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ」、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，１９７７；６６：１−１９を参照されたい）。
【０２１４】
「プロドラッグ」は、たとえば、消化管における加水分解または血液における酵素的転換によって、親化合物を得るためにインビボにおいて変換される化合物を指す。一般的な例は、カルボン酸部分を持つ活性な形態を有する化合物のエステルおよびアミド形態を含むが、これらに限定されない。本発明の化合物の薬学的に許容され得るエステルの例は、アルキルエステル（たとえば、約１〜約６つの炭素を有する）を含むが、これらに限定されず、アルキル基は、直鎖または分枝鎖である。許容され得るエステルはまた、シクロアルキルエステルおよびこれに限定されないがベンジルなどのようなアリールアルキルエステルをも含む。本発明の化合物の薬学的に許容され得るアミドの例は、第１級アミドならびに第２級および第３級アルキルアミド（たとえば、約１〜約６つの炭素を有する）を含むが、これらに限定されない。本発明の化合物のアミドおよびエステルは、従来の方法に従って調製することができる。プロドラッグの完全な議論は、Ｔ．Ｈｉｇｕｃｈｉ  ａｎｄ  Ｖ．Ｓｔｅｌｌａ、「Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ  ａｓ  Ｎｏｖｅｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ」、Ｖｏｌ  １４  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａ．Ｃ．Ｓ．Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  ＳｅｒｉｅｓにおいておよびＢｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ、ｅｄ．Ｅｄｗａｒｄ  Ｂ．Ｒｏｃｈｅ，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ、１９８７において提供され、これらの両方は、すべての目的のために、参照によって本明細書において組み込まれる。
【０２１５】
「代謝産物」は、動物またはヒトの身体において、代謝または生体内変換、たとえば、酸化、還元、もしくは加水分解によってなどのように、より極性の分子へのまたは抱合体への生体内変換によって産生される、化合物の分解産物もしくは最終産物またはその塩を指す（参照によって本明細書において組み込まれるＧｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ、「Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ」  ８ｔｈ  Ｅｄ．、Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ、Ｇｉｌｍａｎら（ｅｄｓ）、１９９０を参照されたい）。本明細書において記載される化合物の代謝産物またはその塩は、それ自体、身体において、生物学的に活性な化合物になり得る。本明細書において記載されるプロドラッグは、この基準を満たすであろうが、すなわち、インビボにおいて、記載される生物学的に活性な親化合物を形成するであろうが、「代謝産物」は、プログループ（ｐｒｏｇｒｏｕｐ）を失ったことが企図される化合物ではなく、むしろ、本明細書において記載される生物学的活性を保持する、本明細書において記載される化合物の投与に際してインビボにおいて形成される他のすべての化合物を包含するように意味される。したがって、本発明の一態様は、本明細書において記載される化合物の代謝産物である。たとえば、生物学的に活性な代謝産物は、思いがけず発見される、すなわち、プロドラッグ設計は、それ自体、試みなかった。別の言い方をすれば、本発明の方法を実施する結果として本質的に形成される生物学的に活性な化合物は、本明細書において企図され、開示される。「溶媒和化合物」は、溶質の分子またはイオンとの溶媒分子の組み合わせによって形成される複合体を指す。溶媒は、有機化合物、無機化合物、またはその両方の混合物とすることができる。溶媒のいくつかの例は、メタノール、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、ジメチルスルホキシド、および水を含むが、これらに限定されない。本明細書において記載される化合物は、非溶媒和形態ならびに水、エタノール、およびその他同種のものなどのような、薬学的に許容され得るまたはされない溶媒との溶媒和形態で存在することができる。今開示される化合物の溶媒和形態は、本明細書において企図され、少なくとも属の用語において、本発明によって包含される。
【０２１６】
上記の定義が、容認できない置換パターン（たとえば、５つのフルオロ基で置換されたメチル）を含むようには意図されないことが理解される。そのような容認できない置換パターンは、当業者によって容易に認識される。
【０２１７】
１．  導入
ａ．  急性虚血発作カスケード
過去５０年の間に、実験による発作研究は、虚血発作後のニューロンおよびグリア細胞の死の原因である多くの因子を同定した。細胞死の第一の原因の１つは、虚血後に直ちに起こる「エネルギー欠乏」または高エネルギーリン酸の枯渇である［５、１６、２６〜２９］。塞栓性発作において、微小循環の機能障害もまた、梗塞部から遠位の虚血の進展に対する要因となるかもしれない［３０］。塞栓性発作の直後に、興奮性アミノ酸（ＥＡＡ）神経伝達物質は、シナプス前末端から多量に放出される。いくつかのＥＡＡ、とりわけグルタミン酸は、虚血応答を伝えることができ、また、「ニューロンの死の遅延」またはニューロンの壊死の延長を引き起こすこともできる［３１〜３５］。重要なのは、フリーラジカル種、酸素フリーラジカル、およびスーパーオキシドの役割であり、これらは、虚血傷害後に大量に産生され、虚血性壊死および血管損傷についての、可能性のあるメディエータとして同定された［５、３６〜３８］。発作後に、メカニズムのカスケードは、活性化され、これは、中心だけではなく、適時の方法において投与された場合、適切な処置によって、可能性として救うことができる、脳組織の領域または一部分として定義される「虚血半影」にも実質的な傷害を引き起こす［３９および４０］。「虚血半影」における細胞は、フリーラジカルなどのような虚血カスケードの特異的なメディエータの有害な作用が、抑制されるまたはブロックされる場合、それらが生存し得るので、神経保護作用物質についての妥当な標的であるように思われる。
【０２１８】
ｂ．神経障害の処置のための神経保護ポリフェノール化合物
ポリフェノールの化合物は、それらが、果物および野菜ならびに茶、コーヒー、赤ワイン、およびオリーブオイルなどのような産物において見つけられるので、関心が持たれるようになった微量栄養素である［４１〜４６］。植物由来の天然産物は、心臓血管系疾患の危険性を低下させることが仮定された［４５〜４９］。最近、「フレンチパラドックス」は、多くの注目を受け、多量の新鮮な果物および野菜ならびに赤ワインを含む地中海ダイエットの有益性の可能性を示した［４１〜４４］。地中海ダイエットの薬理学的根拠は、食事の天然産物におけるポリフェノールの化合物の存在量にあり得る［４５、４８、４９］。神経変性疾患およびニューロンの細胞死における、ポリフェノールの分子の可能性のある保護機構において、いくつかの関心事があった［４７、５０〜５２］。酸化ストレスモデルを使用して、Ｍａｈｅｒおよび共同研究者ら［５３］ならびに他の研究者ら［４７、５０、５４］は、フィセチン（３，３’，４’，７−テトラヒドロキシフラボン）が、細胞内シグナルを調整し、酸化により誘発されるアポトーシスのメカニズムを低下させることができることを示した。げっ歯動物の研究は、ケルセチン（３，３’，４’，５，７ペンタヒドロキシフラボン）が、虚血イベント後の神経学的な障害および脳梗塞エリアを低下させることができ［５５］、リスベラトロール（５−［（Ｅ）−２−（４−ヒドロキシフェニル）−エテニル］ベンゼン−１，３−ジオール）が、発作の処置において有用であるかもしれない［５６〜５８］ことを示した。したがって、多様な構造エレメントを有するいくつかのポリフェノールの化合物は、虚血誘発性のニューロンの変性および神経学的な障害を低下させることができると思われる。
【０２１９】
ｉ．クロロゲン酸（ＣＧＡ）
アーティチョーク、ブルーベリー、およびコーヒーなどのような多くの食物は、多量のクロロゲン酸［（１，３，４，５−テトラヒドロキシ−シクロヘキサンカルボン酸３−（３，４−ジヒドロキシシンナメート）、ＣＧＡ［３１、５９、６０］、コーヒー酸およびキナ酸のポリフェノールエステル［４５、４６、６１、６２］を含有する。ポリフェノールフェニルプロパノイドエステルＣＧＡは、酸化防止特性を有すると、長い間、考えられてきており［５９、６３、６４］、したがって、発作の処置において有益となり得る。ＣＧＡについての最近の科学文献は、それが、作用の複数のメカニズムを介して有益な効果をもたらし得ることを示唆する。酸化防止剤であることに加えて、ＣＧＡは、ラットにおいて抗炎症特性を有し［６５］、それはまた、高親和性（または強力な）メタロプロテアーゼ−９（ＭＭＰ−９）阻害剤としても最近記載された［６６］。発作の進行における３つのメカニズムすべての重要性を考慮すると［６７〜７４］、ＣＧＡは、塞栓性発作の不利益な行動的な結果を低下させるまたは減ずるための治療薬として、研究のための強力な薬剤候補であるように思われる。結果は、ＣＧＡが、ウサギ小血餅塞栓性発作モデル（ＲＳＣＥＭ）において続く行動を有効に改善することを示す（図１）。
【０２２０】
ｉｉ．フィセチン
フィセチン（３，７，３’，４’−テトラヒドロキシフラボン）は、効力のある酸化防止およびフリーラジカル排除特性を有すると思われる、構造的に不均質であるポリフェノールの化合物のフラボノイドファミリーのメンバーである［７５］。フラボノイドは、３つの別個のメカニズムによって酸化ストレスから神経細胞を保護し、これらの１つのみが、それらの酸化防止活性と直接関連する［５３］。活性酸素種（ＲＯＳ）の蓄積を予防することに加えて、フラボノイドは、細胞のグルタチオン（ＧＳＨ）の初期の損失または細胞の中へのＣａ＋２の後期の流入をブロックすることができる。より最近では、特定のフラボノイドは、神経栄養活性を有し、神経細胞の発生、維持、および再生を促すことができることが分かった。ニューロンの分化についての十分に研究されたモデルを使用して、ＰＣ１２細胞において神経突起成長を誘発するためのフラボノイドの能力。神経保護的なフラボノイドの小さなサブセットもまた、神経突起成長を誘発することができ、これらの最良のものは、フラボン、フィセチンであることが分かった［５３］。フィセチンによる神経突起成長の誘発は、Ｒａｓ−Ｒａｆ−ＥＲＫ経路の活性化に依存する。フィセチンはまた、マウスにおいて記憶を研究するための十分に確立されたモデルである物体識別試験を使用して、記憶を増強するためのその能力についても試験された。経口用量のフィセチンは、ロリプラムと同様に、記憶を強化することが分かった［７６］。これらの結果は、ある種のフラボノイドが、損傷を受けた神経の回復を促すのにおよび神経細胞死を予防するのに非常に有用となり得ることを示す。これらの神経保護作用の結果として、フィセチンが虚血損傷を低下させるのに有効であるかどうかが決定された。図２は、フィセチンもまた、ＲＳＣＥＭにおいて神経保護的であることを示す。
【０２２１】
ｉｉｉ．バイカレイン
リポキシゲナーゼ（ＬＯＸ）は、多価不飽和脂肪酸の中に分子酸素を組み込むジオキシゲナーゼであり、酸素の挿入の部位に基づいて、一般に、５−、１２−、または１５−ＬＯＸと分類される［７７］。最近の証拠は、１２−ＬＯＸが、虚血誘発性の神経細胞損失および浮腫において役割を果たし得ることを示唆し、これは、虚血発作後の不都合な転帰と関連する主な合併症である［７８］。虚血におけるＧＳＨレベルにおける初期の低下および１２−ＬＯＸの活性化の間に相関がある［７９、８０］。インビトロ細胞培養アッセイを使用して、１２−ＬＯＸ阻害剤は、グルタミン酸誘発性の細胞死をブロックすることが示され［８０］、５−および１２−ＬＯＸ阻害剤の両方は、海馬スライス培養物において虚血傷害をブロックする［８１］。バイカレイン（５，６，７トリヒドロキシフラボン）はまた、ラット脳虚血において、好中球媒介性の炎症反応を低下させる１２／１５−ＬＯＸ阻害剤でもある［８２］。バイカレインは、効力のあるフリーラジカル捕捉薬およびキサンチンオキシダーゼ阻害剤である［８３、８４］。１２−ＬＯＸに加えて、バイカレインは、５−ＬＯＸおよびロイコトリエン合成に対して弱い阻害効果を有する［８５］。多くのフラボノイドが、ＬＯＸおよびＣＯＸサブタイプの両方を阻害するための能力を有することが実際に観察された［８６］。総合的に考えると、１２／１５−ＬＯＸが、虚血後の神経変性を媒介し得る重要な酵素となるように思われる。１２／１５−ＬＯＸ阻害剤が、発作後に梗塞部の容積を低下させることを示す予備的な証拠は、公開されている［８２、８７］。
【０２２２】
バイカレインによる１２−ＬＯＸの阻害が、神経保護的であり、バイカレインが、ウサギ発作モデルおよびげっ歯動物発作モデルにおいて十分に作用するが、バイカレインは、少なくとも部分的に、１２−ＬＯＸの阻害によって機能する。１２−ＬＯＸの産物が、毒性であることが示されているが、他は、ＬＯＸ酵素の産物、１９，１７Ｓ−ドコサトリエン（ｄｏｃａｓａｔｒｉｅｎｅ）（ＮＰＤ１）が、マウス虚血を含む様々なモデルにおいて神経保護的であることを実証した［８８］。ＮＰＤ１は、１５−ＬＯＸを通して脂肪酸代謝から主として誘導されるが［８８］、バイカレインは、主として、１２−ＬＯＸの阻害剤であり、そのため、この重要な生存促進性の分子の合成は、バイカレインの存在下において有意に変化しないはずである。他のＬＯＸ代謝産物は、アラキドン酸、ＨＥＴＥであり、血管新生性であり、発作後の新しい血管成長を促すのに有利である［８９］。しかしながら、ＮＰＤ１と同様に、１５−ＬＯＸによって生成されたＨＥＴＥ、１５（Ｓ）−ＨＥＴＥは、５（Ｓ）−ＨＥＴＥまたは１２（Ｓ）−ＨＥＴＥよりもはるかに効力がある［８９］。そのため、バイカレインによる１２−ＬＯＸの阻害は、虚血後の新血管新生に対して有意な影響を有するはずがない。
【０２２３】
最近、Ｌｏおよび共同研究者らは、バイカレインなどのようなＬＯＸ阻害剤が、ニューロンに対して神経保護的であり、虚血発作後の血管損傷および浮腫を予防し得ることを示す、一連の研究を公開した［７８、９０］。実際に、ｖａｎ  Ｌｅｙｅｎおよび共同研究者らの最近の報告は、そのグループが、新しいＬＯＸ阻害剤候補を同定するためにライブラリのバーチャルスクリーニングによって発作を処置するための薬剤開発アプローチを試みていることを示唆した［７８、９０］。総合的に考えると、前臨床研究に沿ったＬｏおよび共同研究者らの前臨床研究の結果は、発作を処置するための価値のある標的として、ＬＯＸをさらに支持するものである。
【０２２４】
上記に記載される３つの薬剤クラスについて、研究した。クロロゲン酸、フィセチン、およびバイカレインはすべて、酸化防止活性を有する化合物のポリフェノールファミリーのメンバーである。さらに、化合物のそれぞれの多機能性を記載する、文献における実質的な情報がある。証拠は、多様な構造エレメントを有する３つのポリフェノールの化合物が、虚血誘発性のニューロンの変性および神経学的な障害を低下させることができることを示す。強力なインビトロおよびインビボ予備データに基づいて、本明細書において記載されるポリフェノール化合物について、研究し、親化合物よりも有効になり得る、試験のための新しい誘導体を、合成した。
【０２２５】
２．処置に適用可能な被験体
本発明の様々な実施形態は、虚血または虚血が起こる状態を処置する方法であって、それを必要とする被験体に対してポリフェノールアナログを投与するステップを含む方法を提供する。方法は、虚血または虚血が起こる状態のための処置または予防を必要とする被験体を同定するステップをさらに含んでいてもよい。
【０２２６】
処置に適用可能な被験体は、虚血イベント、たとえば塞栓性発作を経験した被験体を含む。虚血または虚血イベントを経験したことが知られている被験体において、ポリフェノール化合物（複数可）は、虚血イベントの推測される発生の２４時間以内に、たとえば、虚血イベントの推測される発生の２０時間、１８時間、１６時間、１２時間、１０時間、８時間、５時間、３時間、１時間、またはそれ未満以内に、一般に投与される。様々な実施形態において、ポリフェノール化合物（複数可）が、虚血イベントの５、１０、２０、３０、４５、６０、７５、９０、１０５、および／または１２０分後に投与される。様々な実施形態において、ポリフェノール化合物（複数可）が、虚血イベント後の２、３、４、５、および／または６時間以内に投与することができる。様々な実施形態において、ポリフェノール化合物（複数可）が、虚血イベント後の６時間までに、たとえば１２時間または２４時間までに投与することができる。
【０２２７】
いくつかの実施形態において、被験体が、虚血を発症する危険性があり、ポリフェノール化合物（複数可）が、虚血イベントの発生を予防するために予防的に投与される。たとえば、被験体は、大手術を受ける予定があってもよく、外科手術手技は、虚血イベント、たとえば塞栓性発作の危険性に被験体を曝露する。様々な実施形態において、ポリフェノール化合物（複数可）が、虚血イベントを経験している被験体の危険性を低下させるまたはその発生を予防するために、心臓外科手術、たとえば心バイパス手術を受けている被験体に対して投与することができる。化合物は、虚血の発生を予防するまたは緩和するために、外科手術前、その間、および／またはその後に投与することができる。
【０２２８】
３．処置を受けやすい状態
ポリフェノール化合物（複数可）は、心血管系虚血および虚血発作を含む虚血の処置に有用になり得る。いくつかの実施形態において、被験体が、塞栓性発作、たとえば心原性脳塞栓またはアテローム血栓性発作を経験しているまたはそれを経験する危険性がある。
【０２２９】
虚血は、血流がないまたは低い結果であり、臨床的に認識可能な障害をもたらす。すべてのタイプの虚血の間に、１つの根底にある共通性、「虚血カスケード」の活性化がある。カスケードの重要な構成成分は、組織代謝の低下、エネルギー貯蔵の枯渇、ならびに最初の傷害の期間に依存して、興奮毒性のカスケードのトリガリング、フリーラジカル形成、炎症、血管傷害、および細胞死をもたらすプログラム細胞死を含む。
【０２３０】
たとえば、発作において、血流の低下および重度の酸素不足は、細胞の代謝および生存能力が保護された、中程度の虚血組織から成る組織領域によって囲まれた、死滅するであろう、重度に虚血の組織の中核から構成される虚血脳エリアをもたらす。発作後のまだ未決定であるが、ある期間の間、細胞のおよび臨床的な機能を改善するために、ポリフェノールなどのような新規な療法により標的にするための、「半影」と共通して呼ばれる、救うことができる組織の領域があるように思われる。
【０２３１】
フリーラジカル種は、細胞死および臨床的な障害をもたらす、虚血カスケードの進行における重要なメディエータであるように思われる。これは、虚血構成成分がある、多くの疾患の中心となる。フリーラジカルは、１つもしくは複数の不対電子を有する化学化合物であり、これは、それらを、様々な脳基質と高度に反応性にする。フリーラジカルは、それらの中核となる反応性の種、酸素、窒素、または硫黄によって分類することができる。活性酸素種（ＲＯＳ）は、通常、スーパーオキシド、過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）、ヒドロキシラジカル、一重項酸素などのような酸素ベースの分子を指すのに対して、反応性の窒素種は、一酸化窒素（ＮＯ）およびペルオキシナイトライトを含むことができる。硫黄フリーラジカルは、グルタチオン（ＧＳＨ）から生成されるＧＳ・、水和二酸化硫黄、または三酸化硫黄アニオンラジカル（（・）ＳＯ（３）（−））の形態をとってもよい。酸素、窒素、または硫黄ベースのフリーラジカルのレベルの増加は、すべての細胞型の構成成分である膜、ＤＮＡ、脂質二重層、およびタンパク質を含む、事実上すべての細胞構成成分に対して損傷を引き起こし得る。
【０２３２】
ポリフェノールの化合物は、フリーラジカルの影響を低下させることができる、外部の酸化防止活性を有し、したがって、組織損傷および臨床的な障害をブロックする。内部的には、作用のメカニズムとしてポリフェノールが細胞内ＧＳＨを増加させる能力により、それらはまた、フリーラジカル損傷を低下させるまたは減ずることができる。そのうえ、多くのポリフェノールの化合物は、抗興奮毒性効果（つまり、細胞に対するグルタミン酸誘発性の損傷に対抗するための能力）を有する。グルタミン酸毒性は、虚血カスケードの主要なイニシエータのうちの１つである。ポリフェノールがこの有害な作用をブロックすることができるので、それらは、神経保護化合物として作用することができる。
【０２３３】
ポリフェノールのこれらの活性は、塞栓性発作、虚血発作、出血性卒中、虚血性の心臓の状態（心臓バイパス手術、心臓弁置換術を受けている患者）、および虚血関連性の脊髄損傷などのような様々な疾患に適用することができる。
【０２３４】
ポリフェノール化合物（複数可）はまた、糖尿病ならびにその症状、多発性硬化症（ＭＳ）ならびにその症状、認知症（アルツハイマーおよび非アルツハイマー病）ならびにその症状、外傷性脳障害ならびにその症状、ならびに脊髄損傷ならびにその症状の処置に使用することができる。化合物（複数可）はまた、これらの状態のいずれかの危険性がある患者を処置するために使用することもできる。
【０２３５】
糖尿病の合併症は、その疾患を有する患者における罹患率および死亡率の両方の主な原因である。慢性高血糖症は、これらの合併症の主な原因であると思われ、また、高血糖症の下流の結果は、タンパク質糖化、活性酸素種（ＲＯＳ）産生、および炎症を含む、複数の病態生理学的プロセスを含む。１型糖尿病の遺伝的モデル、Ａｋｉｔａマウスを使用して、発明者らは、フィセチンが、糖尿病の２つの主な合併症を低下させることを最近示した（Ｍａｈｅｒら  ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ  ６：ｅ２１２２６、２０１１）。フィセチンは、血糖の上昇に対して効果を有しなかったが、それは、腎臓肥大およびアルブミン尿を低下させ、オープンフィールド試験において正常レベルの歩行を維持した。これは、グリオキサラーゼ１酵素活性における増加およびグリオキサラーゼ１についての補助因子であるグルタチオンの合成のための律速酵素の発現における上昇と共に、フィセチンにより処置された動物の血液、腎臓、および脳におけるＭＧによって糖化される（ｇｌｙｃａｔｅ）タンパク質における低下と相関した。最終糖化産物に対する受容体（ＲＡＧＥ）、血清アミロイドＡおよび血清Ｃ−反応性タンパク質、タンパク質酸化、糖化、および炎症のマーカーの発現もまた、糖尿病のＡｋｉｔａマウスにおいて増加し、フィセチンによって低下した。フィセチンが、糖尿病と関連するＭＧ−タンパク糖化の上昇を下げ、その疾患の複数の合併症を寛解させることが結論付けられる。そのため、フィセチンまたは合成誘導体は、糖尿病合併症の処置のための、治療上の使用の可能性を有していてもよい。したがって、本発明は、糖尿病または１つもしくは複数のその続発症もしくは症状を処置するか、低下させるか、緩和するか、または予防するための方法を提供する。
【０２３６】
多発性硬化症（ＭＳ）は、中枢神経系（ＣＮＳ）の複雑な慢性炎症脱髄疾患である。その正確な原因は、不明瞭であり、その病因の理解は不十分である。多発性硬化症（ＭＳ）における慢性能力障害は、免疫調節性の療法に対して、不十分に過ぎないが適用可能なニューロンの変性によるものである。メカニズムは、わかりにくいままであるが、酸化ストレスが重要な役割を果たし得るという証拠が蓄積されている。ジメチルフマレート（ＤＭＦ）は、再発寛解型多発性硬化症を有する患者において、疾患活性および進行を低下させる有望な新規な経口治療薬である。これらの効果は、免疫調節性および神経保護メカニズムから生じることが推定される。発明者らは、グルタチオン代謝をアップレギュレートするためのその能力およびその抗炎症活性の組み合わせによってＤＭＦの保護効果が媒介されることを最近示した（Ａｌｂｒｅｃｈｔら  Ｊ．Ｎｅｕｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ９：１６３、２０１２）。これらの２つの特性は、フィセチンおよび多くのフィセチン誘導体によって共有され、これらの化合物が、ＭＳの処置において有効となる可能性を有することを示唆する。さらに、フラボノイドルテオリンなどのような、フィセチンと密接に関係する化合物は、ＭＳの動物モデルにおいていくつかの効能を示した（Ｔｈｅｏｈａｒｉｄｅｓ、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ６：２９、２００９）。したがって、本発明は、ＭＳまたは１つもしくは複数のその続発症もしくは症状を処置するか、低下させるか、緩和するか、予防するための方法を提供する。
【０２３７】
認知症は、記憶、思考、言語、および判断における機能障害をもたらす、認知機能における進行性の衰退ならびに行動における変化である。様々なタイプの認知症がある。アルツハイマー病（ＡＤ）に加えて、他の一般的な形態は、血管性認知症、前頭側頭葉型認知症、意味性認知症、およびレビー小体を有する認知症を含む。フィセチンは、神経栄養因子における減少ならびに酸化ストレス、タンパク質凝集、および炎症の増加などのような、ＡＤおよび他の認知症において脳機能の損失の一因となる、多くの因子を模倣する、複数の細胞ベースのモデルにおいて有効である。重要なことには、フィセチンは、ＡＤのマウスモデルにおいて、記憶喪失を予防することも、記憶を回復させることもできる。全体的に、これらの結果は、フィセチンおよびフィセチン誘導体が、他のタイプの認知症に対して有効になり得、とりわけ、多くの認知症が。年齢の増加と関連しているように、フィセチンが、細胞培養モデルおよび動物において、神経細胞機能における年齢関連性の変化を低下させるのに有効であることを示唆する。したがって、本発明は、糖尿病または１つもしくは複数のその続発症または症状を処置するか、低下させるか、緩和するか、または予防するための方法を提供する。
【０２３８】
外傷性脳障害（ＴＢＩ）は、４５歳またはそれよりも若い一般人および軍人の個人において、死および能力障害の主要な原因である。ＴＢＩは、動物モデルにおいて再現することができる、ヒトにおける認知の障害をもたらす。ＴＢＩの転帰を低下させるための有効な処置はない。ＴＢＩは、神経栄養因子ならびにシナプス可塑性およびニューロンのシグナル伝達に関与する分子における減少ならびに酸化ストレスにおける増加と関連する。フィセチンは、ＴＢＩにおける脳機能の機能障害の一因となる、多くの因子を模倣する、複数の細胞ベースのモデルにおいて有効である。さらに、それは、動物において、シナプス可塑性およびニューロンのシグナル伝達を増強することができる。したがって、フィセチンおよびフィセチン誘導体は、ヒトにおいて、ＴＢＩの影響を低下させるのに有効となりそうである。いくつかの実施形態において、被験体が、虚血イベントを経験したことがある。本発明の方法によって処置される虚血は、様々な様式で生じてもよい。様々な実施形態において、虚血が、身体における血管閉塞の間に生じてもよい。血管閉塞は、壁外の圧迫、動脈攣縮、血管壁の疾患、血栓症、塞栓症、および凝血を含むが、これらに限定されない、様々な状態によって引き起こされてもよい。様々な実施形態において、虚血が、発作の間にまたはその結果として生じ得る。他の実施形態において、虚血が、不整脈または心臓発作などのような心イベントの間にまたはその結果として生じ得る。他の実施形態において、虚血が、心臓血管手術の間に生じ得る。他の実施形態において、虚血が、外傷性脳障害の間にまたはその結果として生じ得る。特定の実施形態において、急性虚血発作を有する被験体が、本発明の方法によって処置される。したがって、本発明は、外傷性脳障害または１つもしくは複数のその続発症もしくは症状を処置するか、低下させるか、緩和するか、予防するための方法を提供する。
【０２３９】
いくつかの実施形態において、被験体が、虚血イベントを経験する危険性がある。上記に議論されるように、ポリフェノール化合物（複数可）は、虚血の発生を予防するまたは緩和するために、大手術、たとえば心臓血管手術の前に、その間に、またはその後に、被験体に対して投与することができる。
【０２４０】
４．虚血を処置するおよび予防するのに使用される化合物
本発明の様々な実施形態は、ポリフェノールアナログを提供する。様々な実施形態において、ポリフェノールアナログは、クロロゲン酸、フィセチン、バイカレイン、またはその組み合わせから誘導される。しかしながら、ポリフェノールアナログは、それら自体、クロロゲン酸、フィセチン、またはバイカレインではない。様々な実施形態において、ポリフェノールアナログが、フラボノール、キノリン、またはシンナメートを構造的に含む。様々な実施形態において、ポリフェノールアナログが、フラボノールまたはキノロンを構造的に含む。
【０２４１】
機能的に、関心のあるポリフェノールアナログは、神経保護化合物として機能することができ、虚血および虚血と関連する症状の処置および予防のために、被験体に対して投与することができる。本明細書において提供される化合物は、親化合物と比較して、つまりクロロゲン酸、フィセチン、またはバイカレインと比較して、神経保護活性の改善をもたらす。本明細書において記載されるポリフェノールアナログは、低用量で、たとえば、等価な神経保護効果を実現するために必要とされる親化合物の用量の約７５％、５０％、２５％、またはそれ未満である用量で、親化合物と比較して、等価な神経保護効果をもたらすことができる。様々な実施形態において、本明細書において記載されるポリフェノールアナログが、ＭＭＰ−９を阻害する（たとえばクロロゲン酸のように）。いくつかの実施形態において、本明細書において記載されるポリフェノールアナログが、抗炎症および／または酸化防止特性を有する。たとえば、他のフラボノイド化合物のように、本明細書において記載されるポリフェノールアナログは、たとえば、活性酸素種（ＲＯＳ）の蓄積を予防し、細胞のグルタチオン（ＧＳＨ）の初期の損失および／または細胞の中へのＣａ＋２の後期の流入をブロックすることによって、酸化ストレスから神経細胞を保護することができる。いくつかの実施形態において、ポリフェノールアナログが、神経栄養活性を有し、神経突起成長の誘発または促進を含む、神経細胞の発生、維持、および再生を促すことができる（たとえばフィセチンのように）。いくつかの実施形態において、ポリフェノールアナログが、１２−ＬＯＸを阻害し、フリーラジカルを排除し、そして／またはキサンチンオキシダーゼを阻害することができる（たとえばバイカレインのように）。好ましいポリフェノールアナログは、血液脳関門を透過し、横断するための能力を有する。
【０２４２】
構造的に、様々な実施形態において、化合物が、本明細書において記載されるように、式Ｉ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＩＩＣ、ＩＩＩＤ、ＩＩＩＥ、ＩＩＩＦ、ＩＩＩＧ、ＩＩＩＨ、および／またはＩＩＩＪのいずれか１つの構造を含むことができ、化合物が、フィセチン、バイカレイン、ＰＭ−００１、ＰＭ−００２、ＰＭ−００３、ＰＭ−００４、ＰＭ−００８、および／またはＰＭ−０１４ではない。様々な実施形態において、化合物が、本明細書において記載されるように、式ＩＶＡ、ＩＶＢ、ＩＶＣ、ＩＶＤ、ＩＶＥ、ＩＶＦ、ＩＶＧ、ＩＶＨ、ＩＶＪのいずれか１つの構造を含むことができ、化合物が、クロロゲン酸ではない。
様々な実施形態において、ポリフェノールアナログが、
４−メトキシ−２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−００７）、
４−エトキシ−２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−０２３）、
４−イソプロポキシ−２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−０２４）、
４−イソプロポキシ−２−（２，４−ジヒドロキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−０８４）、
４−シクロペンチロキシ−２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−１２１）、
４−メトキシ−２−（３−ヒドロキシ，４−メトキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−００１）、
４−メトキシ−２−（３，４−ジエトキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−００４）、
４−メトキシ−２−（４−ヒドロキシ，３−メトキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−０１７）、
４−メトキシ−２−フェニルキノリン（ＣＭＳ−０２１）、
４−メトキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−０２２）、
４−メトキシ−２−（２，４−ジヒドロキシフェニル）キノリン（ＣＭＳ−０８３）、
４−メトキシ−２−（４−ジメチルアミノフェニル）キノリン（ＣＭＳ−１０９）、
４−メトキシ−２−（４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）キノリン（ＣＭＳ−１１０）、
４−メトキシ−２−（３−ヒドロキシ−４−ニトロフェニル）キノリン（ＣＭＳ−１１１）、
４−イソプロポキシ−２−（４−ジメチルアミノフェニル）キノリン（ＣＭＳ−１１２）、または
４−イソプロポキシ−２−（４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）キノリン（ＣＭＳ−１１３）である。
【０２４３】
様々な実施形態において、ポリフェノールアナログが、
２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−３−ヒドロキシ−６−メチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＰＭ−０１０）、
２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−６−エチル−３−ヒドロキシ−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＰＭ−０１３）、
２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−３−ヒドロキシ−６−プロピル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＰＭ−０１２）、
２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０４０）、
３−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル）−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０６９）、
２−（４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０６５）、
２−（４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル）−３−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０７２）、
２−（４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシフェニル）−３−ヒドロキシ−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０５９）、
２−（４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル）−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０６４）、
２−（４−（クロロメチル）−３−メトキシフェニル）−３−ヒドロキシ−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０７８）、
３−ヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシ−４−メトキシフェニル）−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０９２）、
２−（４−（ジメチルアミノ）フェニル）−３−ヒドロキシ−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１１７）、
３−ヒドロキシ−２−（４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１１４）、
２−（４−（ジメチルアミノ）フェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１１８）、
３−ヒドロキシ−２−（３−メトキシ−４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１３９）、
３−ヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシ−４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１４０）、
２−（３，４−ジエトキシフェニル）−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０１８）、
２−（３，４−ジエトキシフェニル）−３−ヒドロキシ−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０２５）、
２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−３−ヒドロキシ−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０２７）、
２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０２８）、
２−（３，４−ジエトキシフェニル）−３−ヒドロキシ−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０３６）、
２−（３，４−ジエトキシフェニル）−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０３８）、
３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−２−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾ［ｆ］クロメン−１−オン（ＣＭＳ−０４１）、
２−（４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシフェニル）−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０５８）、
２−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−３−ヒドロキシ−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０９３）、
２−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０９４）、
３−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル）−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−０７０）、
２−（４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１１５）、
６，７−ジメチル−２−（４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１１６）、
２−（４−（ジメチルアミノ）フェニル）−６，７−ジメチル−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１１９）、
２−（４−（ジメチルアミノ）フェニル）−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１２０）、または
３−ヒドロキシ−６，７−ジメチル−２−（４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１２２）である。
【０２４４】
様々な実施形態において、ポリフェノールアナログが、
（Ｅ）−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−１−（２−ヒドロキシ−４，５−ジメチルフェニル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−０１１）、
（Ｅ）−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−１−（１−ヒドロキシナフタレン−２−イル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−０３４）、
（Ｅ）−３−（３−ヒドロキシ−４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）−１−（１−ヒドロキシナフタレン−２−イル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−１３８）、
（Ｅ）−１−（１−ヒドロキシナフタレン−２−イル）−３−（３−メトキシ−４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−１３７）、
（Ｅ）−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−１−（２−ヒドロキシ−５−イソプロピルフェニル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−１２９）、
（Ｅ）−３−（３，４−ジエトキシフェニル）−１−（２−ヒドロキシ−４，５−ジメチルフェニル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−０１３）、
（Ｅ）−３−（３，４−ジエトキシフェニル）−１−（１−ヒドロキシナフタレン−２−イル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−０３２）、
（Ｅ）−３−（４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシフェニル）−１−（１−ヒドロキシナフタレン−２−イル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−０６３）、
（Ｅ）−３−（３−（ベンジルオキシ）−４−メトキシフェニル）−１−（２−ヒドロキシ−４，５−ジメチルフェニル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−０８６）、
（Ｅ）−３−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−１−（２−ヒドロキシ−４，５−ジメチルフェニル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−０８７）、または
（Ｅ）−１−（２−ヒドロキシ−４，５−ジメチルフェニル）−３−（３−ヒドロキシ−４−メトキシフェニル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−０８８）である。
【０２４５】
様々な実施形態において、ポリフェノールアナログが、表１、表２、表３、表４、表６、表７、および／または表８において提供されるポリフェノール化合物から選択される。
【０２４６】
様々な実施形態において、ポリフェノールアナログが、ＰＭ−０１０、ＰＭ−０１３、ＰＭ−０１２、ＣＭＳ−００７、ＣＭＳ−０１１、ＣＭＳ−０２３、ＣＭＳ−０２４、ＣＭＳ−０３４、ＣＭＳ−０４０、ＣＭＳ−０５９、ＣＭＳ−０６９、およびその組み合わせからなる群から選択される（つまり、表６において列挙される化合物から選択される）。様々な実施形態において、ポリフェノールアナログが、ＣＭＳ−０３４、ＣＭＳ−０４０、ＣＭＳ−０６５、ＣＭＳ−０７２、ＰＭ−０１０、ＰＭ−０１３、ＰＭ−０１２、ＣＭＳ−０１１、ＣＭＳ−０５９、ＣＭＳ−０６４、ＣＭＳ−０６９、ＣＭＳ−０７８、ＣＭＳ−０９２、ＣＭＳ−００７、ＣＭＳ−０２３、ＣＭＳ−０２４、ＣＭＳ−０８４、およびその組み合わせからなる群から選択される（つまり、表７において列挙される化合物から選択される）。様々な実施形態において、ポリフェノールアナログが、ＣＭＳ−０３４、ＣＭＳ−０９２、ＣＭＳ−１１４、ＣＭＳ−１１７、ＣＭＳ−１１８、ＣＭＳ−１２１、ＣＭＳ−１２９、ＣＭＳ−１３７、ＣＭＳ−１３８、ＣＭＳ−１３９、ＣＭＳ−１４０、およびその組み合わせからなる群から選択される（つまり、表８において列挙される化合物から選択される）。様々な実施形態において、ポリフェノールアナログが、ＣＭＳ−００７、ＣＭＳ−０１１、ＣＭＳ−０２３、ＣＭＳ−０２４、ＣＭＳ−０３４、ＣＭＳ−０４０、ＣＭＳ−０６９、およびその組み合わせからなる群から選択される。他の実施形態において、ポリフェノールアナログが、ＣＭＳ−０２３、ＣＭＳ−０２４、ＣＭＳ−０４０、ＣＭＳ−０６９、およびその組み合わせからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、ポリフェノールアナログが、ＣＭＳ−０２３である。
【０２４７】
様々な実施形態において、フィセチン、バイカレイン、クロロゲン酸、ＰＭ−００１、ＰＭ−００２、ＰＭ−００３、ＰＭ−００４、ＰＭ−００８、およびＰＭ−０１４が、たとえば、主張される組成物からおよび本発明の方法における使用から、明確に除外される。
【０２４８】
５．虚血を処置し、予防するのに有用なポリフェノール化合物の同定のためのスクリーニングアッセイ
虚血の１つもしくは複数の症状を処置する、予防する、そして／または緩和する際のそれらの神経保護特性およびそれらの使用にとって関心のあるポリフェノールアナログは、インビトロおよび／またはインビボスクリーニングアッセイにおいて化合物を試験することによって同定することができる。
【０２４９】
多数のインビトロにおけるアッセイは、当技術分野において知られており、使用を見出す。試験化合物は、神経細胞死、限定を伴うことなく、栄養因子の離脱（ＴＦＷ）、興奮毒性、グルコース飢餓、および化学的に誘発される虚血を含む、１つもしくは複数の神経毒性パラダイムを阻害するためのそれらの能力についてスクリーニングすることができる。たとえば、化合物は、確立されたインビトロ発作モデルにおいて、グリセルアルデヒド３−リン酸デヒドロゲナーゼ（Ｇ３ＰＤＨ）の不可逆阻害剤であるヨード酢酸（ＩＡＡ）の存在下において、インビトロにおいて培養された海馬細胞と接触させることができる。関心のある化合物は、ＩＡＡの存在下において培養された海馬細胞の少なくとも８０％の生存を保護する。関心のある化合物の神経保護特性はまた、インビトロ興奮毒性アッセイにおいてスクリーニングすることもできる。そのようなインビトロニューロン興奮毒性アッセイは、当技術分野において知られている（たとえばＩｓｈｉｇｅら、Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ  Ｂｉｏｌ  Ｍｅｄ，（２００１）３０（４）：ｐ．４３３−４６を参照されたい）。関心のある化合物は、グルタミン酸の存在下において、初代培養ニューロンの少なくとも３５％の生存を保護する。たとえば、栄養因子の離脱にさらされた場合に、ニューロン細胞生存を決定するためのインビトロアッセイは、当技術分野において知られており、Ａｂｅ、Ｊａｐａｎ  Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，（１９９０）５３：ｐ．２２１−２２７において記載される。細胞生存は、たとえば、ＭＴＴ（３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド）アッセイ、アネキシンアッセイ、分染細胞毒性（ＤｉＳＣ）アッセイ、細胞ＡＴＰの損失を決定するためのＡＴＰアッセイ、細胞膜エステラーゼ活性および細胞膜完全性の損失を測定するフルオレセインジアセテートアッセイ、ならびにプロピジウムヨージドアッセイを含む、当技術分野において知られている任意の方法を使用して、測定することができる。
【０２５０】
ポリフェノールアナログが、発作の１つもしくは複数の症状を処置する、予防する、そして／または緩和する能力はまた、インビボアッセイにおいて評価することもできる。そのようなアッセイは、当技術分野において知られており、使用を見出す。ある適用可能なインビボスクリーニングアッセイは、たとえばＬａｐｃｈａｋら、Ｓｔｒｏｋｅ（２００２）３３（９）：２２７９−８４およびＬａｐｃｈａｋ、Ｅｘｐ  Ｎｅｕｒｏｌ．（２００７）２０５（２）：４０７−１３において議論されるウサギ血餅塞栓性発作モデルである。ウサギ小血餅塞栓性発作モデル（ＲＳＣＥＭ）およびウサギ大血餅塞栓性発作モデル（ＲＬＣＥＭ）は、塞栓性発作後に試験ポリフェノールアナログの可能性のある神経保護特性および安全性プロファイルを決定するために使用することができる。ウサギは、脳循環に小さな凝血（ＲＳＣＥＭ）または大きな凝血（ＲＬＣＥＭ）を注射することによって塞栓形成させる。行動的な分析は、２４時間後に行われ、ウサギの５０％において重度の神経学的な障害をもたらす有効な発作用量（ＥＳ５０）または血餅量（ミリグラム）の決定を可能にする。薬剤は、ビヒクルにより処置されたコントロール群と比較して、ＥＳ５０を増加させる場合、神経保護的であると考えられる。
【０２５１】
インビトロおよび／またはインビボアッセイにおいて神経保護的であることが決定された化合物は、被験体に対する投与についてのそれらの妥当性について、たとえば突然変異誘発性、細胞毒性、および血液脳関門を透過し、横断するための能力について、さらに試験することができる。そのようなアッセイは、当技術分野においてよく知られており、使用を見出す。たとえば、化合物の突然変異誘発性の特性は、Ａｍｅｓ突然変異誘発性アッセイを使用して評価することができ（たとえばＭｏｒｔｅｌｍａｎｓら、Ｍｕｔａｔ．  Ｒｅｓ．（２０００）４５５（１−２）：２９−６０を参照されたい）、細胞毒性は、シトクロムＰ４５０アッセイを使用して決定することができ、血液脳関門（ＢＢＢ）透過は、ＭＤＣＫ細胞アッセイを使用して決定することができる（たとえばＷａｎｇら、Ｉｎｔｌ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ（２００５）２８８（２）：３４９−３５９およびＲｕｂｉｎ，ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ（１９９１）１１５（６）：１７２５−３５を参照されたい）。関心のある化合物は、１０μＭ未満の濃度で、Ａｍｅｓ突然変異誘発性アッセイにおいて突然変異誘発性ではなく、１０μＭを超える濃度で、ＣＹＰ４５０阻害についてのＩＣ５０を有し、血液脳関門を透過し、横断するための、中程度〜高い可能性を有する。ＢＢＢ透過についての可能性は、ＭＤＣＫ細胞アッセイにおいて測定されるように、脳または中枢神経系（ＣＮＳ）の中への輸送についての流出定量、Ｐａｐｐ  Ａ→Ｂが、３．０×１０−６ｃｍ／ｓに等しくまたはそれを超え、脳またはＣＮＳからの流出が、３．０未満である場合、高いと考えられる。ＢＢＢ透過についての可能性は、ＭＤＣＫ細胞アッセイにおいて測定されるように、脳または中枢神経系（ＣＮＳ）の中への輸送についての流出定量、Ｐａｐｐ  Ａ→Ｂが、３．０×１０−６ｃｍ／ｓに等しくまたはそれを超え、１０＞流出≧３．０×１０−６ｃｍ／ｓである場合、中程度であると考えられる。
【０２５２】
神経保護的であり、かつ被験体に対する投与についての所望の特性を有することが決定された化合物（突然変異誘発性が低いもしくはない、シトクロムＰ４５０細胞毒性が低いもしくはない、または血液脳関門を透過し、横断するための能力が中程度〜高い）は、細胞毒性についてさらに試験することができる。当技術分野において知られている任意の細胞毒性アッセイを使用することができる。様々な実施形態において、見込みを示す化合物が、Ｃｔｏｘランキングを決定するために、ＣｅｅＴｏｘ（商標）パネルにさらにかけることができる。
【０２５３】
ＣｅｅＴｏｘ（商標）の量的な測定値は、以下のうちの１つもしくは複数を含むことができる：
（１）膜完全性（ＧＳＴまたはアデニル酸キナーゼ漏出）
（２）ＭＴＴおよびＡＴＰレベルを測定するミトコンドリアの機能
（３）たとえばプロピジウムヨージドを使用する細胞増殖
（４）ＧＳＨおよび８−イソプロスタンの両方を測定する酸化ストレス
（５）カスパーゼ３活性化を測定するアポトーシス
（６）Ｐｇｐ相互作用
（７）溶解性、ならびに
（８）ミクロソームの代謝安定性。
【０２５４】
ＣｅｅＴｏｘ（商標）の量的な測定値の使用は、たとえばＭｃＫｉｍ、Ｃｏｍｂ  Ｃｈｅｍ  Ｈｉｇｈ  Ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ  Ｓｃｒｅｅｎ．（２０１０）１３（２）：１８８−２０６；ＭｃＫｉｍら、Ｃｕｔａｎ  Ｏｃｕｌ  Ｔｏｘｉｃｏｌ．（２０１０）２９（３）：１７１−９２；およびＬａｐｃｈａｋ  ａｎｄ  ＭｃＫｉｍ、Ｔｒａｎｓｌ  Ｓｔｒｏｋｅ  Ｒｅｓ．（２０１１）２（１）：５１−５９において記載される。ＣｅｅＴｏｘ（商標）アルゴリズムに基づいて、上記に記載される最初の７つのアッセイについてのＣｅｅＴｏｘ（商標）パネルからの結果は、細胞毒性値を割り当て、かつポリフェノール化合物の相対的な細胞毒性の可能性を決定するために使用することができる。ＣｅｅＴｏｘ（商標）の量的な測定値は、可能性のある細胞内標的および毒性のメカニズムを同定し、かつラットの１４日間のインビボ繰り返し用量研究において毒性が生じるであろうと期待される推測濃度（Ｃｔｏｘ値）を提供するために使用することができる。
【０２５５】
ミクロソームの代謝安定性アッセイ（つまり、上記のアッセイ８）は、薬剤候補の安定性を決定し、かつ化合物優先順位付けを支援するために行うことができる。望ましいポリフェノール化合物は、インビボにおける効果の可能性および２１μＭを超える、好ましくは５１μＭを超えるＣｔｏｘランキング（μＭ）を示すであろう。
【０２５６】
６．製剤および投与
ａ．製剤
様々な実施形態において、本発明は、本発明のポリフェノール化合物（複数可）の治療有効量と共に薬学的に許容され得る賦形剤を含む医薬組成物を提供する。「薬学的に許容され得る賦形剤」は、一般に、安全で、無毒で、望ましい医薬組成物を調製するのに有用な賦形剤を意味し、獣医の使用およびヒト医薬での使用に許容され得る賦形剤を含む。そのような賦形剤は、固体、液体、半固体、またはエアロゾル組成物の場合には気体であってもよい。
【０２５７】
様々な実施形態において、本発明による医薬組成物が、投与の任意のルートを介しての送達のために製剤されてもよい。「投与のルート」は、エアロゾル、経鼻、経口、経粘膜、経皮、または非経口を含むが、これらに限定されない、当技術分野において知られている任意の投与経路を指してもよい。「経皮」投与は、局所クリームもしくは外用薬を使用してまたは経皮パッチの手段によって達成されてもよい。「非経口」は、眼窩内、注入、動脈内、頸動脈内、包内（ｉｎｔｒａｃａｐｓｕｌａｒ）、心臓内、皮内、筋肉内、腹腔内、肺内、脊髄内、胸骨内（ｉｎｔｒａｓｔｅｒｎａｌ）、髄腔内、子宮内、静脈内、クモ膜下、被膜下（ｓｕｂｃａｐｓｕｌａｒ）、皮下、経粘膜、または経皮気管内を含む、一般に注射と関連する投与のルートを指す。いくつかの実施形態において、化合物が、適切なルートによって、たとえば経口的に、非経口的に、（静脈内に（ＩＶ）、筋肉内に（ＩＭ）、ｄｅｐｏ−ＩＭ、皮下に（ＳＱ）、およびｄｅｐｏ−ＳＱ）、舌下に、鼻腔内に（吸入）、鞘内に、局所的に、イオン泳動的に、または直腸に投与される。好ましくは、化合物は、たとえば、脳の組織への送達のために、化合物が血液脳関門を横断するようなルートによって投与される。当業者らに知られている剤形は、化合物の送達に適している。
【０２５８】
非経口ルートを介して、組成物は、注入もしくは注射のための溶液もしくは懸濁液のまたは凍結乾燥粉末としての形態をしていてもよい。経腸ルートを介して、医薬組成物は、錠剤、ゲルカプセル、糖衣錠、シロップ、懸濁液、溶液、粉末、顆粒剤、エマルション、制御放出を可能にするマイクロスフェアもしくはナノスフェア、または脂質小胞もしくはポリマー小胞の形態をとることができる。非経口ルートを介して、組成物は、注入のためのまたは注射のための溶液または懸濁液の形態をしていてもよい。局所ルートを介して、本発明による化合物をベースとする医薬組成物は、皮膚および粘膜の処置のために製剤されてもよく、外用薬、クリーム、乳剤、軟膏剤、粉末、浸透性のパッド、溶液、ゲル、噴霧剤、ローション、または懸濁液の形態をしている。それらはまた、制御放出を可能にするマイクロスフェアもしくはナノスフェアまたは脂質小胞もしくはポリマー小胞またはポリマーパッチおよびヒドロゲルの形態をとることもできる。これらの局所ルート組成物は、臨床的な徴候に依存して、無水形態または水性形態のいずれかをとることができる。目のルートを介して、それらは、点眼剤の形態をしていてもよい。
【０２５９】
本発明による医薬組成物はまた、任意の薬学的に許容され得るキャリヤを含有することもできる。本明細書において使用される「薬学的に許容され得るキャリヤ」は、ある組織、器官、または身体の一部分から身体の他の組織、器官、または一部分まで、関心のある化合物を運ぶまたは輸送することに関与する、薬学的に許容され得る物質、組成物、またはビヒクルを指す。たとえば、キャリヤは、液体または固体の増量剤、希釈剤、賦形剤、溶媒、もしくは被包物質またはその組み合わせであってもよい。キャリヤの構成成分はそれぞれ、それが、製剤の他の成分と適合性でなければならないことにおいて、「薬学的に許容され得なければならない」。それはまた、それが接触し得る、あらゆる組織または器官と接触する使用に適していなければならず、それが、その治療上の有益性に著しく勝る毒性、刺激、アレルギー応答、免疫原性、または他の合併症の危険性をもたらしてはならないことを意味する。
【０２６０】
治療有効量のポリフェノールを含有する組成物が、提供される。化合物は、経口投与のための錠剤、カプセル、もしくはエリキシル剤などのような、適した医薬調製物の中にまたは非経口投与のための滅菌溶液または懸濁液中に好ましくは製剤される。典型的に、上記に記載される化合物は、当技術分野においてよく知られている技術および手順を使用して、医薬組成物の中に製剤される。
【０２６１】
化合物は、「天然の」形態または所望される場合、塩、エステル、アミド、プロドラッグ、誘導体、およびその他同種のものの形態で投与することができるが、ただし、塩、エステル、アミド、プロドラッグ、または誘導体は、薬理学的に適している、つまり、本発明の方法（複数可）において有効であることを条件とする。活性作用物質の塩、エステル、アミド、プロドラッグ、および他の誘導体は、有機合成化学の当業者らに知られている、標準的な手順を使用して調製することができ、たとえばＭａｒｃｈ（１９９２）Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ；  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，４ｔｈ  Ｅｄ．Ｎ．Ｙ．Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅによって記載される。
【０２６２】
そのような誘導体を製剤する方法は、当業者らに知られている。たとえば、多くの販売業者のジスルフィド塩は、参照によって本明細書において組み込まれるＰＣＴ国際公開第２０００／０５９８６３号パンフレットにおいて記載される。同様に、治療用ペプチド、ペプトイド、または他のミメティックの酸性塩は、適した酸との反応を典型的に伴う従来の方法論を使用して、遊離塩基から調製することができる。一般に、薬剤の塩基形態は、メタノールまたはエタノールなどのような極性有機溶媒中に溶解され、酸は、それに追加される。結果として生じる塩は沈殿するまたはそれほど極性ではない溶媒の追加によって溶液から取り出すことができる。酸付加塩の調製に適した酸は、有機酸、たとえば、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸、および同種のものならびに無機酸、たとえば塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、およびその他同種のものの両方を含むが、これらに限定されない。酸付加塩は、適した塩基との処理によって、遊離塩基に再変換することができる。本明細書における活性作用物質のある種の特に好ましい酸付加塩は、塩酸または臭化水素酸を使用して調製されてもよいなどのような、ハロゲン化物塩を含む。反対に、本発明の活性作用物質の塩基性塩の調製は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アンモニウム、水酸化カルシウム、トリメチルアミン、またはその他同種のものなどのような、薬学的に許容され得る塩基を使用して、類似する方式で調製される。ある実施形態において、塩基性塩は、アルカリ金属塩、たとえばナトリウム塩および銅塩を含む。
【０２６３】
塩基性薬剤の塩形態の調製については、カウンターイオンのｐＫａは、好ましくは、薬剤のｐＫａよりも少なくとも約２ｐＨ低い。同様に、酸性薬剤の塩形態の調製については、カウンターイオンのｐＫａは、好ましくは、薬剤のｐＫａよりも少なくとも約２ｐＨ高い。これは、カウンターイオンが、溶液のｐＨを、ｐＨｍａｘよりも低いレベルに至らせるのを可能にし、塩の溶解性が、遊離酸または塩基の溶解性に勝つ塩プラトーに達する。活性な医薬成分（ＡＰＩ）および酸または塩基におけるイオン化可能な基のｐＫａ単位における差異の一般化された規則は、プロトン移動をエネルギー的に好都合なものにするのが目的である。ＡＰＩおよびカウンターイオンのｐＫａが、著しく異ならない場合、固体複合体は、形成され得るが、水性環境において速やかに不均化を起こし得る（つまり、薬剤およびカウンターイオンの個々の要素に分かれる）。
【０２６４】
好ましくは、カウンターイオンは、薬学的に許容され得るカウンターイオンである。適したアニオン塩形態は、酢酸塩、安息香酸塩、ベンジレート（ｂｅｎｚｙｌａｔｅ）、酒石酸水素塩、ブロミド、炭酸塩、クロリド、クエン酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストレート、フマル酸塩、グルセプテート、グルコン酸塩、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨージド、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、臭化メチル、硫酸メチル、ムチン酸塩（ｍｕｃａｔｅ）、ナプシレート、パモ酸塩（エンボネート）、リン酸塩および二リン酸塩、サリチル酸塩およびジサリチレート、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩、トリエチオジド、吉草酸塩、ならびにその他同種のものを含むが、これらに限定されず、適したカチオン塩形態は、アルミニウム、ベンザチン、カルシウム、エチレンジアミン、リシン、マグネシウム、メグルミン、カリウム、プロカイン、ナトリウム、トロメタミン、亜鉛、およびその他同種のものを含むが、これらに限定されない。
【０２６５】
様々な実施形態において、エステルの調製が、活性作用物質の分子構造内に存在するヒドロキシルおよび／またはカルボキシル基の機能付与を典型的に伴う。ある実施形態において、エステルが、典型的に、遊離アルコール基のアシル置換誘導体、つまり、式ＲＣＯＯＨのカルボン酸に由来する部分であり、Ｒが、アルキル、好ましくはより低級のアルキルである。エステルは、従来の水素化分解または加水分解手順を使用することによって、所望される場合、遊離酸に再変換することができる。
【０２６６】
アミドもまた、当業者らに知られているまたは関係のある文献において記載される技術を使用して、調製することができる。たとえば、アミドは、適したアミン反応物を使用して、エステルから調製されてもよいまたはそれらは、アンモニアもしくは低級アルキルアミンとの反応によって、無水物または酸塩化物から調製されてもよい。
【０２６７】
本明細書において記載される化合物または生理学的に許容され得るその塩もしくはエステルの１つもしくは複数の約１ｍｇ〜約１０００ｍｇは、許容される薬務によって要求されるように、単位剤形において、生理学的に許容され得るビヒクル、キャリヤ、賦形剤、バインダー、保存剤、安定剤、香料などと調合される。それらの組成物または調製における活性物質の量は、示される範囲の適した投薬量が得られるようなものである。組成物は、好ましくは、単位剤形で製剤され、投薬量はそれぞれ、約１〜１０００ｍｇ、２〜８００ｍｇ、５〜５００ｍｇ、１０〜４００ｍｇ、５０〜２００ｍｇ、たとえば約５ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇ、２０ｍｇ、２５ｍｇ、３０ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、５０ｍｇ、６０ｍｇ、７０ｍｇ、８０ｍｇ、９０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、７００ｍｇ、８００ｍｇ、９００ｍｇ、または１０００ｍｇの活性成分を含有する。用語「単位剤形」は、ヒト被験体および他の哺乳動物についての単一の投薬量として適した物理的に個別の単位を指し、それぞれの単位は、適した医薬賦形剤と関連して、所望の治療効果をもたらすように計算された所定の量の活性物質を含有する。
【０２６８】
組成物を調製するために、化合物は、適した薬学的に許容され得るキャリヤと混合される。化合物（複数可）の混合または追加に際して、結果として生じる混合物は、溶液、懸濁液、エマルション、またはその他同種のものであってもよい。リポソーム懸濁液はまた、薬学的に許容され得るキャリヤとして適していてもよい。これらは、たとえば、錠剤形態については、必要な場合、粉砕、混合、造粒、および圧縮または硬ゼラチンカプセル形態については、粉砕、混合、および充填を伴う、当業者らに知られている方法に従って、調製されてもよい。液体キャリヤが使用される場合、調製物は、シロップ、エリキシル剤、エマルション、または水性もしくは非水懸濁液の形態とすることができる。そのような液体製剤は、直接、ｐ．ｏ．投与されてもよく、または軟ゼラチンカプセルの中に充填されてもよい。結果として生じる混合物の形態は、投与の意図されるモードおよび選択されるキャリヤまたはビヒクルにおける化合物の溶解性を含む、多くの因子に依存する。有効な濃度は、処置される疾患、障害、または状態の少なくとも１つの症状を軽くするまたは寛解させるのに十分であり、経験的に決定されてもよい。
【０２６９】
本明細書において提供される化合物の投与に適した医薬キャリヤまたはビヒクルは、投与の特定のモードに適していることが当業者らに知られている任意のそのようなキャリヤを含む。そのうえ、活性物質はまた、所望の作用を損なわない他の活性物質とまたは所望の作用を補足するもしくは他の作用を有する物質と混合することもできる。化合物は、組成物において唯一の薬学的に活性な成分として製剤されてもよいまたは他の活性成分と組み合わせられてもよい。
【０２７０】
化合物が不十分な溶解性を示す場合、可溶化するための方法が、使用されてもよい。そのような方法は、知られており、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）などのような共溶媒の使用、Ｔｗｅｅｎ（商標）などのような界面活性剤の使用、Ｓｏｌｕｔｏｌ（登録商標）（エチレンオキシドおよび１２−ヒドロキシステアリン酸）などのような可溶化剤の使用、ならびに水性重炭酸ナトリウムにおける溶解を含むが、これらに限定されない。塩またはプロドラッグなどのような化合物の誘導体もまた、有効な医薬組成物を製剤するのに使用されてもよい。
【０２７１】
化合物の濃度は、化合物が投与される障害の少なくとも１つの症状を軽くするもしくは寛解させる、そして／または予防的な状況において有効である投与に際しての量の送達に有効である。典型的に、組成物は、１回の投薬量（たとえば毎日）の投与のために製剤される。
【０２７２】
化合物は、持効性製剤またはコーティングなどのような、身体からの急速な排除からそれらを保護するキャリヤと共に調製されてもよい。そのようなキャリヤは、これらに限定されないがマイクロカプセル化送達系などのような放出制御製剤を含む。活性化合物は、処置される患者に対して有害な副作用の非存在下において治療上有用な効果を発揮するのに十分な量で、薬学的に許容され得るキャリヤ中に含まれる。治療上有効な濃度は、処置される障害について知られているインビトロおよびインビボモデル系において化合物を試験することによって経験的に決定されてもよい。治療上または予防的に有効な用量は、最初に低用量を投与し、次いで、副作用が最小限であるまたはない、所望の効果を実現する用量に達するまで、徐々に増加させることによって、決定することができる。
【０２７３】
様々な実施形態において、化合物が、複数の用量容器または単一の用量容器中に密封することができる。密封された化合物および組成物は、たとえば、使用のために組み立てることができる構成部品を含む、キットにおいて提供することができる。たとえば、凍結乾燥形態の化合物阻害剤および適した希釈剤は、使用前の組み合わせのための、分離された構成成分として提供されてもよい。キットは、共投与のための化合物阻害剤および第２の治療剤を含んでいてもよい。阻害剤および第２の治療剤は、個別の構成部品として提供されてもよい。キットは、複数の容器を含んでいてもよく、それぞれの容器は、ポリフェノール化合物の一単位用量もしくは一より多い単位用量を保持する。容器は、経口投与のための錠剤、ゲルカプセル、徐放性カプセル、およびその他同種のもの；非経口投与のためのデポー産物、あらかじめ充填された注射器、アンプル、バイアル、およびその他同種のもの；ならびに局所投与のためのパッチ、メディパッド（ｍｅｄｉｐａｄ）、クリーム、およびその他同種のものを含むが、これらに限定されない、投与の所望のモードに好ましくは適している。
【０２７４】
薬剤組成物における活性化合物の濃度および／または量は、活性化合物の吸収、不活性化、および排泄速度、投与計画、ならびに投与される量ならびに当業者らに知られている他の因子に依存するであろう。
【０２７５】
活性成分は、一度に投与されてもよいまたは時間をおいて投与するために多くのより小さな用量に分割されてもよい。処置の正確な投薬量および継続期間は、処置されている疾患によるものであり、知られている試験プロトコールを使用してまたはインビボもしくはインビトロ試験データから外挿によって、経験的に決定されてもよいことが理解される。濃度および投薬量の値はまた、軽減されるべき状態の重症度により変化してもよいことが注意されたい。任意の特定の被験体について、特定の投薬量レジメンは、個体の必要性および組成物を投与するまたはその投与を監督する人の専門的な判断に従って、ある期間にわたって調節されるべきであることならびに本明細書において記載される濃度範囲は、例示的なものにすぎず、主張される組成物の範囲または実施を限定するようには意図されないことがさらに理解されたい。
【０２７６】
経口投与が所望される場合、化合物は、胃の酸性環境からそれを保護する製剤において提供することができる。たとえば、組成物は、胃においてその完全性を維持し、腸において活性化合物を放出する腸溶コーティングにおいて製剤することができる。組成物はまた、制酸薬または他のそのような成分と組み合わせて製剤されてもよい。
【０２７７】
経口組成物は、一般に、不活性希釈剤または食用のキャリヤを含むであろう、また、錠剤に圧縮されてもよいまたはゼラチンカプセル中に密封されてもよい。経口治療投与の目的のために、活性化合物（複数可）は、賦形剤と共に組み込み、錠剤、カプセル、またはトローチの形態で使用することができる。薬学的に適合性の結合剤および補助材料は、組成物の一部として含むことができる。
【０２７８】
様々な実施形態において、錠剤、丸剤、カプセル、トローチ、およびその他同種のものは、類似する性質の以下の成分または化合物のいずれかを含有することができる：これらに限定されないが、トラガカントゴム、アラビアゴム、コーンスターチ、またはゼラチンなどのようなバインダー；微結晶セルロース、デンプン、またはラクトースなどのような賦形剤；これらに限定されないが、アルギン酸およびコーンスターチなどのような崩壊剤；これに限定されないが、ステアリン酸マグネシウムなどのような潤滑剤；これに限定されないが、コロイド状二酸化ケイ素などのようなギルダント（ｇｉｌｄａｎｔ）；スクロースまたはサッカリンなどのような甘味剤；ならびにペパーミント、サリチル酸メチル、または果実矯味剤などのような調味料。
【０２７９】
投薬単位形態が、カプセルである場合、それは、上記のタイプの物質に加えて、脂肪油などのような液体キャリヤを含有することができる。そのうえ、投薬単位形態は、投薬単位の物理的形態を修飾する、様々な他の物質、たとえば、糖のコーティングおよび他の腸溶剤を含有することができる。化合物はまた、エリキシル剤、懸濁液、シロップ、ウェーハ、チューインガム、またはその他同種のものの構成成分として投与することができる。シロップは、活性化合物に加えて、甘味剤としてのスクロースならびにある種の保存剤、染料および着色剤、ならびに香料を含有してもよい。
【０２８０】
活性物質はまた、所望の作用を損なわない他の活性物質とまたは所望の作用を補足する物質と混合することもできる。
【０２８１】
非経口、皮内、皮下、または局所適用のために使用される溶液または懸濁液は、以下の構成成分のいずれかを含むことができる：注射用水などのような滅菌希釈剤、生理食塩水、不揮発性油、ゴマ油、ヤシ油、ラッカセイ油、綿実油、およびその他同種のものなどのような、天然に存在する植物油、またはオレイン酸エチルおよびその他同種のものなどのような合成脂肪ビヒクル、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、または他の合成溶媒；ベンジルアルコールおよびメチルパラベンなどのような抗菌物質；アスコルビン酸および亜硫酸水素ナトリウムなどのような酸化防止剤；エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）などのようなキレート剤；酢酸、クエン酸、およびリン酸などのようなバッファー；ならびに塩化ナトリウムおよびデキストロースなどのような張性の調節のための作用物質。非経口調製物は、ガラス、プラスチック、または他の適した物質から作製されるアンプル、使い捨ての注射器、または複数用量のバイアル中に密封することができる。バッファー、保存剤、酸化防止剤、およびその他同種のものは、必要に応じて組み込むことができる。
【０２８２】
様々な実施形態において、化合物が、静脈内投与のために製剤される。静脈内に投与される場合、適したキャリヤは、生理的食塩水、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）、ならびにグルコース、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、およびその混合物などのような濃化剤および可溶化剤を含有する溶液を含む。組織標的リポソームを含むリポソーム懸濁液はまた、薬学的に許容され得るキャリヤとして適していてもよい。これらは、たとえば米国特許第４，５２２，８１１号明細書において記載されるように、知られている方法に従って調製されてもよい。いくつかの実施形態において、化合物が、たとえば、静脈内投与のためのビヒクルとして、７０％Ｓｏｌｕｔｏｌ  ＨＳ１５および３０％食塩水を使用して、食塩水中Ｓｏｌｕｔｏｌ  ＨＳ１５において製剤される。
【０２８３】
活性化合物は、持効性製剤またはコーティングなどのような、身体からの急速な排除から化合物を保護するキャリヤと共に調製されてもよい。そのようなキャリヤは、これらに限定されないが、移植片およびマイクロカプセル化送達系ならびにコラーゲン、エチレン酢酸ビニル、ポリ酸無水物、ポリグリコール酸、ポリオルトエステル、ポリ乳酸、およびその他同種のものなどのような生分解性で生体適合性のポリマーなどのような放出制御製剤を含む。そのような製剤の調製のための方法は、当業者らに知られている。
【０２８４】
ｂ．投与および投薬
ポリフェノールアナログの投与は、虚血が生じるまたは虚血が生じる状態の前に、その間に、またはその後に実行されてもよい。たとえば、様々な実施形態において、ポリフェノールアナログが、有益な効果（たとえば神経保護および／または神経栄養効果）のために、外科手術（たとえば心臓血管手術）前に投与することができ、ポリフェノールアナログの投与が、外科手術の間に継続することができ、かつ、ポリフェノールアナログの投与が、外科手術後に継続することができる。他の実施形態において、ポリフェノールアナログが、被験体が血管閉塞を被った後に、投与することができる。特定の実施形態において、血管閉塞が、発作である。様々な実施形態において、ポリフェノールアナログが、血管閉塞の５、１０、２０、３０、４５、６０、７５、９０、１０５、および／または１２０分後に投与することができる。様々な実施形態において、ポリフェノールアナログが、血管閉塞の２、３、４、５、および／または６時間後に投与することができる。様々な実施形態において、ポリフェノールアナログが、血管閉塞後の６時間までに、投与することができる。様々な実施形態において、ポリフェノールアナログが、血管閉塞後の１２時間までに投与されてもよい。様々な実施形態において、ポリフェノールアナログが、血管閉塞後の２４時間までに投与されてもよい。
【０２８５】
様々な実施形態において、被験体に投与されるポリフェノールアナログの初回量、その後に続く、被験体に投与されるポリフェノールアナログの１つもしくは複数の維持量があってもよい。他の実施形態において、ポリフェノールアナログが、被験体に対して継続的に投与することができる。
【０２８６】
様々な実施形態において、ポリフェノールアナログが、適切なルートによって、たとえば経口的に、非経口的に（ＩＶ、ＩＭ、ｄｅｐｏ−ＩＭ、ＳＱ、およびｄｅｐｏ−ＳＱ）、舌下に、鼻腔内に（吸入）、鞘内に、局所的に、または直腸に投与することができる。当業者らに知られている剤形は、ポリフェノールアナログの送達に適している。
【０２８７】
本発明による医薬組成物は、治療有効量で送達されてもよい。正確な治療有効量は、所与の被験体における処置の効能の点から、最も有効な結果を得るであろう、組成物のその量である。この量は、治療用化合物の特質（活性、薬物動態、薬力学、および生物学的利用率を含む）、被験体の生理学的状態（年齢、性別、疾患タイプおよび段階、全身健康状態、所与の投薬量に対する応答性、ならびに薬物投与のタイプを含む）、製剤中の薬学的に許容され得るキャリヤ（複数可）の性質、ならびに投与のルートを含むが、これらに限定されない、様々な因子に依存して、変動するであろう。臨床および薬理学の技術分野における当業者は、たとえば、化合物の投与に対する被験体の応答をモニターし、したがって投薬量を調節することによって、ルーチン的な実験作業を通して、治療有効量を決定することができるであろう。さらなる手引きについては、たとえばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ（Ｅｄｉｔｏｒ），  ２１ｓｔ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  ２００５、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  ＷｉｌｋｉｎｓおよびＳｉｎｋｏ、Ｍａｒｔｉｎ’ｓ  Ｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  ６ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  ２０１０、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓを参照されたい。
【０２８８】
本発明の有効なポリフェノールアナログの典型的な投薬量は、動物モデルにおけるインビトロ応答（複数可）によって当業者に示されるものとすることができる。そのような投薬量は、典型的に、適切な生物学的活性を失うことなく、濃度または量において約１桁まで低下させることができる。したがって、実際の投薬量は、医師の判断、患者の状態、およびたとえば、適切な初代培養細胞もしくは生検を実施された虚血組織などのような、組織培養された（ｈｉｓｔｏｃｕｌｔｕｒｅ）組織サンプルのインビトロにおける応答性または適切な動物モデルにおいて観察される応答に基づいた、治療方法の有効性に依存するであろう。
【０２８９】
様々な実施形態において、ポリフェノールアナログが、経腸的にまたは非経口的に投与されてもよい。経口的に投与される場合、ポリフェノールアナログは、当業者らによく知られているように、経口投与のための、通常の剤形で投与することができる。これらの剤形は、錠剤およびカプセルの通常の固体単位剤形ならびに溶液、懸濁液、およびエリキシル剤などのような液体剤形を含む。固体剤形が使用される場合、ポリフェノールアナログが、毎日１回または２回だけしか、投与される必要がないように、それらが、徐放性のタイプであることが好ましい。
【０２９０】
経口剤形は、毎日１、２、３、または４回、患者に対して投与することができる。ポリフェノールアナログは、毎日、３回または３回より少ない回数、より好ましくは１回または２回、投与されることが好ましい。従って、ポリフェノールアナログは、経口剤形で投与されることが好ましい。どのような経口剤形が使用されても、それは、胃の酸性環境からポリフェノールアナログを保護するように設計されることが好ましい。腸溶剤皮錠剤は、当業者らによく知られている。そのうえ、酸性の胃から保護するようにそれぞれがコーティングされた小さな球体により充填されたカプセルもまた、当業者らによく知られている。
【０２９１】
経口的に投与される場合、虚血の症状を阻害する、そして／または虚血イベントを予防するのに治療上有効な投与量は、約１０ｍｇ／日〜約１０００ｍｇ／日、たとえば約２０ｍｇ／日〜約５００ｍｇ／日、たとえば約５０ｍｇ／日〜約２００ｍｇ／日である。いくつかの実施形態において、被験体が、約５．０〜約２００ｍｇ／ｋｇ、たとえば約１０．０〜約１００ｍｇ／ｋｇ、たとえば約１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、７５ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ、１２５ｍｇ／ｋｇ、１５０ｍｇ／ｋｇ、１７５ｍｇ／ｋｇ、または２００ｍｇ／ｋｇの用量のポリフェノールアナログ化合物（複数可）を投与される。患者は、ある用量で始められてもよいが、用量は、患者の状態が変化するにつれて、次第に変動させてもよい（必要に応じて増加させてもよいまたは減少させてもよい）ことが理解される。転帰の評価に依存して、より高い用量が、使用されてもよい。たとえば、ある実施形態において、１０００ｍｇ／日まで、たとえば２００ｍｇ／日、３００ｍｇ／日、４００ｍｇ／日、５００ｍｇ／日、６００ｍｇ／日、７００ｍｇ／日、８００ｍｇ／日、９００ｍｇ／日、または１０００ｍｇ／日を投与することができる。
【０２９２】
ポリフェノールアナログはまた、ナノ結晶分散製剤で、好都合に送達されてもよい。そのような製剤の調製は、たとえば米国特許第５，１４５，６８４号明細書において記載される。ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤のナノ結晶分散液およびそれらの使用の方法は、米国特許第６，０４５，８２９号明細書において記載される。ナノ結晶製剤は、典型的に、より大きな生物学的利用率の薬剤化合物をもたらす。
【０２９３】
様々な実施形態において、ポリフェノールアナログが、たとえばＩＶ、ＩＭ、ｄｅｐｏ−ＩＭ、ＳＣ、またはｄｅｐｏ−ＳＣによって、非経口的に投与することができる。非経口的に投与される場合、約５．０〜約５００ｍｇ／日、好ましくは毎日約１０〜約２００ｍｇの治療有効量を、送達することができる。デポー製剤が、月に一度または２週間ごとに一度、注射のために使用される場合、用量は、約５．０ｍｇ／日〜約５００ｍｇ／日または約１０ｍｇ〜約２００ｍｇの毎月の用量となるはずである。様々な実施形態において、非経口剤形が、ｄｅｐｏ製剤とすることができる。
【０２９４】
様々な実施形態において、ポリフェノールアナログが、舌下に投与することができる。舌下に与えられる場合、ポリフェノールアナログは、非経口投与について上記に記載される量で、毎日１〜４回、与えることができる。
【０２９５】
様々な実施形態において、ポリフェノールアナログが、鼻腔内に投与することができる。このルートによって与えられる場合、適切な剤形は、当業者らに知られているように、鼻内噴霧剤または乾燥粉末である。鼻内投与についてのポリフェノールアナログの投薬量は、非経口投与について上記に記載される量である。
【０２９６】
様々な実施形態において、ポリフェノールアナログが、鞘内に投与することができる。このルートによって与えられる場合、適切な剤形は、当業者らに知られているように、非経口剤形とすることができる。脊髄内投与についてのポリフェノールアナログの投薬量は、非経口投与について上記に記載される量である。
【０２９７】
ある実施形態において、ポリフェノールアナログが、局所的に投与することができる。このルートによって与えられる場合、適切な剤形は、クリーム、外用薬、またはパッチである。局所的に投与される場合、投薬量は、約５．０ｍｇ／日〜約５００ｍｇ／日である。パッチによって送達することができる量が制限されるので、２つ以上のパッチが、使用されてもよい。パッチの数およびサイズは、重要ではなく、重要なことは、当業者らに知られているように、ポリフェノールアナログの治療有効量が送達されるということである。ポリフェノールアナログは、当業者らに知られているように、坐剤によって直腸に投与することができる。坐剤によって投与される場合、治療有効量は、約５．０ｍｇ〜約５００ｍｇである。
【０２９８】
様々な実施形態において、ポリフェノールアナログが、当業者らに知られているように、移植片によって投与することができる。移植片によってポリフェノールアナログを投与する場合、治療有効量は、デポー投与について上記に記載される量である。
【０２９９】
投与の厳密な投薬量および頻度は、当業者である投与する医師によく知られているように、処置されている特定の状態、処置されている状態の重症度、特定の患者の年齢、体重、および全身健康状態、ならびに個体が受けているかもしれない他の薬物投与に依存するであろうということは、当業者に明らかであるはずである。
【０３００】
７．併用療法
本明細書において記載されるポリフェノールアナログは、虚血を予防し、処置し、寛解させるために、現在用いられている治療措置と組み合わせて使用することができる。様々な実施形態において、ポリフェノールアナログが、組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔＰＡ）の措置と共投与することができる。ｒｔＰＡの最適な用量は、脳損傷を解消しないので、本明細書において記載されるポリフェノールアナログの１つもしくは複数の共投与は、特に、ｔＰＡについての処置ウィンドウ（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｗｉｎｄｏｗ）（これは、非常に短いので、その投与から多くの被験体が利益を得ない）を増加させるのに被験体にとって有益になり得る。ｔＰＡとのポリフェノールアナログの１つもしくは複数の共投与は、虚血イベントの６時間以内に、たとえば５、４、３、２、１時間以内に看護を受ける患者に特に役に立つ。ｔＰＡは、精製されてもよいまたは組換えであってもよい。ｔＰＡの多数の組換えバージョンは、共投与に利用可能であり、限定を伴うことなく、アルテプラーゼ、レテプラーゼ、テネクテプラーゼ（ＴＮＫａｓｅ）、およびデスモテプラ−ゼを含む。いくつかの実施形態において、１つもしくは複数のポリフェノールアナログが、治療量未満の用量のｔＰＡと共投与される。
【０３０１】
心原性脳塞栓症を経験したことがあるまたは経験する危険性がある患者において、ポリフェノールアナログは、抗凝固薬の措置と共投与することができる。例示的な抗凝固薬は、アスピリン、ヘパリン、ワルファリン、およびダビガトランを含む。
【０３０２】
頸動脈狭窄症を経験したことがあるまたは経験する危険性がある患者において、ポリフェノールアナログは、抗血小板薬の措置と共投与することができる。最も頻繁に使用される抗血小板医薬品は、アスピリンである。アスピリンの代替物は、抗血小板薬クロピドグレル（Ｐｌａｖｉｘ）である。いくつかの研究は、アスピリンが、他の抗血小板薬と組み合わせると非常に有効となることを示す。いくつかの実施形態において、患者が、血液凝固を低下させるために、低用量のアスピリンおよび抗血小板薬ジピリダモール（Ａｇｇｒｅｎｏｘ）の組み合わせを処方される。チクロピジン（Ｔｉｃｌｉｄ）は、使用を見出す他の抗血小板である。中程度にまたは重度に狭くなった頸部（頸動脈）動脈を有する患者は、頸動脈内膜切除術を必要としてもよいまたはそれから利益を得てもよい。この予防の外科手術は、最初のまたは続く発作を予防するために、頸動脈から脂肪沈着物（アテロームプラーク）を取り除く。いくつかの実施形態において、患者が、頸動脈血管形成術またはステント挿入を必要としてもよいまたはそれから利益を得てもよい。頸動脈血管形成術は、詰まった動脈を広げるために風船様のデバイスを使用し、それを開いたまま保つために小さなワイヤーチューブ（ステント）を動脈の中に配置することを伴う。
【０３０３】
心房細動を経験したことがあるまたは経験する危険性がある患者において、ポリフェノールアナログは、抗凝固薬（発作を予防するため）および／または速度制御を実現するための薬理学的作用物質の措置と共投与することができる。例示的な抗凝固薬は、アスピリン、ヘパリン、ワルファリン、およびダビガトランを含む。例示的な速度制御薬剤は、ベータ遮断薬（たとえばメトプロロール、アテノロール、ビソプロロール）、非ジヒドロピリジンカルシウムチャネル遮断薬（たとえばジルチアゼムまたはベラパミル）、および強心配糖体（たとえばジゴキシン）を含む。
【０３０４】
必要に応じて、ポリフェノールアナログはまた、経頭蓋レーザー療法または超音波を受けている患者に対して投与することができる。
【０３０５】
８．キット
本発明はまた、虚血を処置するためのキットにも関する。キットは、虚血を処置し、予防し、そして／または緩和し、神経保護効果をもたらすために、本発明の方法を実施するのに有用である。キットは、本明細書において記載されるポリフェノールアナログの少なくとも１つを含む物質または構成成分の集合体である。したがって、いくつかの実施形態において、キットが、本発明の１つもしくは複数のポリフェノールアナログを含む組成物を含有する。
【０３０６】
本発明のキット中に構成される構成成分の厳密な性質は、その意図される目的に依存する。たとえば、いくつかの実施形態は、発作患者または心血管系患者を処置する目的で構成される。一実施形態において、キットが、特に、哺乳動物被験体を処置する目的で構成される。他の実施形態において、キットが、特に、ヒト被験体を処置する目的で構成される。さらなる実施形態において、キットが、これらに限定されないが、家畜、家庭動物、および実験動物などのような被験体を処置する、獣医学の適用のために構成される。
【０３０７】
使用のための説明書は、キットに含まれてもよい。「使用のための説明書」は、典型的に、虚血を処置するためなどのような、所望の転帰を達成するためにキットの構成成分を使用する際に用いられることとなる技術について説明する有形の表現を含む。任意選択で、キットはまた、当業者らによって直ちに認識されるように、希釈剤、バッファー、薬学的に許容され得るキャリヤ、注射器、カテーテル、アプリケータ、ピペットまたは測定ツール、包帯材料、または他の有用な装具などのような、他の有用な構成成分をも含有する。
【０３０８】
キット中にまとめられた物質または構成成分は、従事者に提供され、それらの操作性および有用性を保つ任意の好都合で、適した様式で保管することができる。たとえば、構成成分は、溶解、脱水、または凍結乾燥形態をとることができ、それらは、室温、冷蔵温度、または凍結温度で提供することができる。構成成分は、適した包装材料（複数可）中に典型的に含有される。本明細書において用いられるように、句「包装材料」は、本発明の組成物およびその他同種のものなどのような、キットの内容物を収容するために使用される１つもしくは複数の物理的構造を指す。包装材料は、好ましくは滅菌で、混入物なしの環境をもたらすために、よく知られている方法によって構築される。本明細書において使用されるように、用語「パッケージ」は、個々のキット構成成分を保持することができる、適した固体マトリックスまたはガラス、プラスチック、紙、ホイル、およびその他同種のものなどのような材料を指す。したがって、たとえば、パッケージは、ポリフェノールアナログを含有する、適した量の本発明の組成物を含有するために使用されるガラスバイアルとすることができる。包装材料は、一般に、内容物および／またはキットの目的および／またはその構成成分を示す外部ラベルを有する。
【実施例】
【０３０９】
以下の実施例は、主張される本発明を限定するためではなく、例証するために提示される。
【０３１０】
実施例１−クロロゲン酸は、ウサギにおいて塞栓性発作後に神経学的な性能を改善する
ビヒクルまたはクロロゲン酸のボーラス注射のいずれかを、小さなサイズの凝血の懸濁液を使用する塞栓形成の５分後から始めて、１分間にわたって静脈内に投与した。このシリーズの研究において、ＣＧＡは、５０ｍｇ／ｋｇで投与した［６５］。行動的な分析は、処置の２４時間後に行い、これにより、計数的な用量−応答分析曲線を構築した。図１は、理論上の計数的な分析曲線上に重ねた生データのグラフ図を示す。重ねたグラフについては、正常動物は、０％のＹ軸上にプロットされ、正常でない動物は、１００％にプロットされる。図は、データ（円または三角）および統計的にフィットさせた計数的な曲線の間にポジティブな相関があることを示す。さらに、ＣＧＡは、ビヒクルコントロールと比較して、Ｐ５０値（処置群の５０％において異常をもたらす血餅用量）を増加させた。Ｓ字形曲線に対して計数的なデータをフィットさせるために使用される方法の詳細な議論については、Ｚｉｖｉｎ  ａｎｄ  Ｗａｕｄ［９１］を参照されたい。ウサギ小血餅塞栓性発作モデル（ＲＳＣＥＭ）におけるクロロゲン酸の薬理は、公開されている（Ｌａｐｃｈａｋ、Ｅｘｐ  Ｎｅｕｒｏｌ．２００７  ２０５（２）：４０７−１３）。その原稿において、ＣＧＡが、ＲＳＣＥＭにおいて、６０分間の治療可能時間域を有することが示される。図２は、治療可能時間域データを示す。
【０３１１】
実施例２−フィセチンは、インビトロおよびインビボにおいて神経保護的である
これらの研究について、培養ＨＴ２２マウス海馬細胞を、インビトロ発作アッセイとして使用した［８０］。ＨＴ２２細胞は、単独でまたは様々な濃度のフィセチンの存在下において、２時間、グリセルアルデヒド３−リン酸デヒドロゲナーゼ（Ｇ３ＰＤＨ）の不可逆阻害剤であるヨード酢酸（ＩＡＡ）により処理した。Ｇ３ＰＤＨは、解糖経路の酵素であり、これは、ＡＴＰの合成のために使用される「高エネルギー」中間体である１，３−ビスホスホグリセリン酸の合成を触媒する。細胞生存は、細胞生存についての標準的な比色定量ＭＴＴ（３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド）アッセイを使用して測定した。ＭＴＴは、生きている細胞によって切断され、濃青色ホルマザン産物が得られる淡黄色基質である。このプロセスは、活性なミトコンドリアを必要とし、さらに、死んだばかりの細胞は、有意な量のＭＴＴを切断しない。グラフ（図３）は、ＨＴ２２細胞の生存に対するフィセチンの用量依存的な効果があることを示す。
【０３１２】
ＣＧＡについて上記に記載されるＲＳＣＥＭアッセイを使用して、塞栓形成の２４時間後に測定する、行動的な転帰に対するフィセチン（５０ｍｇ／ｋｇ）の効果を試験する。
【０３１３】
図４は、薬剤を塞栓形成の５分後に与えた場合に、フィセチン投与もまた、行動的な機能を増加させたことを示す。フィセチンによってもたらされるＰ５０における増加の程度は、ＣＧＡ（上記参照）についてのものよりも低い、しかしながら、増加は、グラフにおいて示されるビヒクルコントロール曲線から統計的に有意である。これらの最初の発見の間の差異は、投薬の差異によって単に引き起こされるものかもしれず、最適な神経保護能力における真の差異を反映していないかもしれない。
【０３１４】
ＮＴ２２細胞を使用するおよびＲＳＣＥＭにおけるフィセチンおよび他のフラボノイドの薬理は、公開されている（Ｍａｈｅｒら、Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．２００７，１１７３：１１７−２５）。その原稿において、フィセチンおよびバイカレインは、ＨＴ２２細胞アッセイにおいて有効な神経保護作用物質であり、フィセチンが、ＲＳＣＥＭを使用する塞栓性発作後の行動を改善することが示される。
【０３１５】
実施例３−インビトロにおける１２−ＬＯＸ阻害剤バイカレインの神経保護効果
図５において、パネルＡ〜Ｄは、バイカレインが、４つのさらなる神経毒性パラダイムにおいて、神経細胞死を阻害することができることを示す。これらは、栄養因子の離脱（ＴＦＷ）、興奮毒性、グルコース飢餓、および最も重要な化学的虚血モデルを含む。バイカレインは、栄養因子の離脱についてのアッセイである血清含有培地において、新たに平板培養した低密度培養ラット皮質ニューロンの生存を劇的に促す［９２］（図５Ａ）。公開される興奮毒性アッセイ［５３］を使用すると、バイカレインは、細胞の約３５％を救出する（図５Ｂ）。
【０３１６】
バイカレインはまた、グルコース飢餓アッセイ［９３］において神経保護的であり、ＰＣ１２細胞を使用する結果は、再現された。これらの細胞がグルコースについて飢餓状態にある場合、ＮＧＦの存在下において、およそ７０％の最大の生存がある。バイカレインは、８０％を超える生存を促す（図５Ｃ）。最後に、バイカレインは、虚血傷害の２時間後に追加された場合でさえ、フィセチンについて上記に記載される、Ｇ３ＰＤＨの不可逆阻害剤、ＩＡＡを使用する化学的虚血モデルにおいて細胞死を予防する（図５Ｄ）。
【０３１７】
図６は、バイカレインもまた、インビトロにおいて、ＨＴ２２海馬細胞の細胞生存を促すのに有効であることを示す。バイカレイン誘発性の細胞生存についての有効量は、同じ培養モデルを使用する、フィセチン誘発性の細胞生存について必要とされるものよりも低い。図７は、バイカレインが、塞栓形成の６０分間後に投与された場合、発作誘発性の行動的な障害を有意に（ｐ＜０．０５）改善し、Ｐ５０値を増加させたことを示す。行動におけるバイカレイン誘発性の改善は、０にプロットされるＹ軸上に示される行動的に「正常な」動物の数における増加と直接相関する。ＲＳＣＥＭにおけるバイカレインの薬理は、公開されている（Ｌａｐｃｈａｋら、Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ．  ２００７，  １５０（３）：５８５−９１）。その原稿において、化合物が、ＲＳＣＥＭにおいて、６０分間の最小の治療可能時間域を有することが示される。
【０３１８】
結果は、リード化合物が、このプログラムについての主要なインビトロスクリーニングであるＨＴ２２細胞インビトロ発作モデルにおいてまたは主要なインビボ薬剤開発スクリーニングであるＲＳＣＥＭを使用してインビボにおいて、神経保護的であることを示す。フィセチンおよびバイカレインは、海馬細胞を使用すると、インビトロにおいて、細胞生存を促す。バイカレインはまた、興奮毒性を含む、４つの異なるインビトロパラダイムを使用して、細胞生存を増加させるのにも有効である。ＣＧＡ、フィセチン、およびバイカレインはまた、発作誘発性の行動的な障害を低下させるまたはウサギ小血餅塞栓性発作モデルにおいて行動を改善するのに有効である（Ｌａｐｃｈａｋ、Ｅｘｐ  Ｎｅｕｒｏｌ．  ２００７  ２０５（２）：４０７−１３およびＭａｈｅｒら、Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．  ２００７，１１７３：１１７−２５）。ＣＧＡおよびバイカレインの両方は、塞栓形成の１時間後に投与された場合に、行動を改善するのに有効であるが、どちらも、塞栓形成の３時間後に投与された場合、行動を改善しない。
【０３１９】
全体として、結果は、３つの化合物クラスが、インビトロおよびインビボにおいて、有意な効能を有することを示す。上記に記載される３つの親化合物は、ＣＧＡ、フィセチン、およびバイカレインの親バックボーン（骨格）上の様々な置換位置をカバーする集中的多様性ライブラリアプローチを使用して、化学的最適化のためのベースを形成するために使用した。
【０３２０】
実施例４−ライブラリの多様性志向性の合成
以下の実施例は、フィセチン、バイカレイン、およびＣＧＡに基づく３０〜４０の化合物の小さなライブラリを合成するための化学合成プログラムを概説する。結果として生じる新規な化合物は、高い効能の化合物を同定することができるように、インビトロ発作ＨＴ２２細胞アッセイを使用してスクリーニングした。インビボＲＳＣＥＭスクリーニングプロセスに進むように見なされる化合物については、それは、１０〜１００ｎＭの範囲のＥＣ５０値を有するべきである。最も低いＥＣ５０値を有する化合物を、研究のために、ＲＳＣＥＭに進める。
【０３２１】
実施例５−フラボンの例証となる合成手法
フラボンを合成するために、単純な基本単位を利用する固相合成を介しての直列「キャッチアンドリリース」プロトコールを用いた（図８）。これらの基本単位は、２−ヒドロキシアセトンフェノン、フェノール（対応するアセトフェノンへの転換のための）、およびベンズアルデヒドを含む。
【０３２２】
ケミカルバイオロジーアプローチは、必須である、バイカレインの５、６、および７−ヒドロキシル基ならびにフィセチンの３、３’、および４’−ヒドロキシル基を中心にして、小さな集中的多様性志向性合成ライブラリを開発するために使用した。これらの基は、複数のアッセイにおいて、構造活性相関によって決定されるように、両方の化合物に対して活性を与える［たとえば［１０１］およびＭａｈｅｒ、Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，（２００６）４０（１０）：１１０５−１１１１を参照されたい）。ライブラリは、多様性志向性合成（ＤＯＳ）の法則に従って生成し、インビトロにおいて、１０〜１００ｎＭのＥＣ５０を目標として、フラボンの薬理学的特性を改善しようと試みるものである［１０２］。図８において示される合成プロトコールは、アセトフェノンおよびベンズアルデヒドに由来する産物を示す２つのサブライブラリの中にこれらの基本単位を組み込む。これは、バイカレインの５，６，７−トリヒドロキシル基およびフィセチンの３，３’，および４’−ヒドロキシル基が維持されるように、コンビナトリアル化される（ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌｉｚｅ）ことになるＣ−３位を残す。
【０３２３】
この合成手法は、いくつかの知られているフラボノイド合成方法論から得られ［８３、１０３］、それぞれからの利点を組み込んでいる。２−ヒドロキシ−アセトフェノンから始まって、この基本単位は、リンカー、たとえばシリルエーテル連結（右矢印）またはヒドラゾン連結（左矢印）を使用して、固体支持体（ポリスチレンベースの樹脂）上に捕捉した。当業者に知られている他のリンカーは、十分であろうが、これらの樹脂捕捉方法は両方とも、パラレルおよびコンビナトリアルライブラリについて十分に特徴付けられている［１０４］。シリルエーテル経路は、いくつかの誘導体の調製の間に有意な利点を有するが、ヒドラゾン経路は、天然産物のフラボンヒドロキシル基を維持する誘導体の合成について好ましい方法である。アセトフェノン部分は、ヒドラジン樹脂がシッフ塩基を形成することができる唯一のカルボニルであるので、ヒドラゾン形成は、アセトフェノン部分に対して選択的である［１０５］。示されるシリルエーテルプロトコールは、２−ヒドロキシ位を選択的にシリル化するように設計される。続くクライゼン-シュミット縮合（塩基性条件下で）により、樹脂結合カルコンが得られる［１０６］。臭化セレン樹脂によるセレン媒介性の環形成性の（ｃｙｃｌａｔｉｖｅ）再捕捉は、支持されたカルコンの弱酸性の放出に続く［８３］。
【０３２４】
この直列捕捉−反応−放出−再捕捉プロセスを用いることによって、合成後の精製の必要性を伴うことなく最終生産物の濃縮および純度が実現される。最終の放出は、Ｃ−３＝Ｈ誘導体については、過酸化水素による処理を介してもたらされ、これらの産物のさらなる酸化は、並行して、Ｃ−３＝ＯＨ誘導体を生成する［１０７］。これらの合成は、０．０５ｍｍｏｌ規模で実行し、１０〜１５ｍｇのそれぞれの化合物が得られた。
【０３２５】
フィセチンおよびバイカレイン骨格に基づく小さな多様性ライブラリは、発明者らのアッセイにおいて生物学的活性を改善するために、さらなる官能基を有する基本単位を用いた。Ｆ、Ｃｌ、ＯＭｅ、ＯＡｃ、ＮＨＭｅ、ＮＨＡｃ、ＣＮ、ＣＦ３、およびＯＨなどのような置換は、フィセチンおよびバイカレインの非ヒドロキシル化位置において調査した。Ｆは、水素結合に参加することができるので［１０８］、バイカレインの５、６、または７ヒドロキシルおよびフィセチンの３、７、３’、または４’−ヒドロキシルにおけるＯＨについてのＦのいくつかの置換もまた、含めた。様々な制約条件、フィルタ、および多様性の測定基準は、バイカレインおよびフィセチンについて、それぞれ、３０〜４０まで誘導体の数を低下させるために、［１０９］において概説されるように、ライブラリを選択するために使用することができる。
【０３２６】
実施例６−ＣＧＡ誘導体の例証となる合成手法
コーヒー（構造ＩＩ）およびキナ（構造ＩＩＩ）酸からのＣＧＡ（図９）（構造Ｉ）の効率的な合成（６５％の収量）は、記載されている［１１０］。この合成手法は、置換桂皮酸（ＩＶ、Ｖ）およびシクロヘキセンカルボン酸（ＶＩ、ＶＩＩ）の市販での入手可能性に基づいて、種々様々のＣＧＡ誘導体の合成を可能にする。
【０３２７】
最初に、クロロゲン酸のコーヒー酸部分上の置換基を多様化した。２もしくは３−モノヒドロキシ桂皮、２、３、もしくは４メチル桂皮、２、３、もしくは４−ニトロ桂皮、２，３−クロロもしくは２，３，４−フルオロ、または４−アミノ桂皮酸（Ｖ）を出発物質として使用した。これらは、クロロゲン酸誘導体の第１のクラスを生成するために、Ｓｅｆｋｏｗ［１１０］によって記載されるように、キナ酸の保護形態と反応させた。分子のキナ酸部分に基づいて、クロロゲン酸誘導体を合成し、カルボン酸基を維持するために、様々な市販で入手可能な置換シクロヘキセンカルボン酸（ＶＩ、ＶＩＩ）を、オレフィン結合でビスヒドロキシル化し、ジヒドロキシシクロヘキサンカルボン酸（ＶＩＩＩ、ＩＸ）を生成した。ジヒドロキシシクロヘキサンＶＩＩＩおよびＩＸを出発物質として使用した。公開されるヒドロキシ基保護手順［１１０］は、キナ酸置換誘導体を合成するために使用した。化合物の数は、上記に記載されるように合成されたキナ酸誘導体および桂皮酸誘導体の組み合わせを使用することによって、また、シクロヘキセンカルボン酸の代わりに置換ヘキサノールを使用することによって、実質的に増加させることができる。
【０３２８】
最初の研究は、上記に記載される手法を使用して合成されたライブラリのそれぞれからの化合物のインビトロスクリーニングからなった。それぞれのライブラリからの誘導体は、下記に記載されるインビトロ発作モデルを使用して、効力に基づいて選択した。許容され得るＥＣ５０値と共に神経保護活性を示す最も有効な化合物を、インビボ最適化に進めた。
【０３２９】
実施例７−例証となる合成手法
化学：一般的な方法。試薬および無水溶媒はすべて、市販の供給源から得、一般的に認められるように使用した。１Ｈ  ＮＭＲおよび１３Ｃ  ＮＭＲは、示す溶媒を使用して、Ｖａｒｉａｎ、ＶＮＭＲＳ−５００スペクトロメータで、それぞれ、５００および１２５ＭＨｚで記録した。化学シフト（δ）は、内部標準としてのテトラメチルシラン（ＴＭＳ）と比べた百万分率（ｐｐｍ）で示す。結合定数（Ｊ）は、ヘルツ（Ｈｚ）で表現し、シグナル形状について使用する従来の略語は、ｓ＝一重線；ｄ＝二重線；ｔ＝三重線；ｍ＝多重線；ｄｄ、二重線の二重線；ｂｒｓ＝広い一重線とする。質量分析法（ＬＣ／ＭＳ）は、Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＬＣ−２０ＡＤスペクトロメータおよびＴｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ＬＴＱ  Ｏｒｂｉｔｒａｐ−ＸＬスペクトロメータによるエレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）質量分析を使用して実行した。試験した化合物はすべて、少なくとも９５％の純度を有した。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、ＥＭＤシリカゲルＦ−２５４プレート（厚さ０．２５ｍｍ）を使用した。フラッシュクロマトグラフィーは、ＥＭＤシリカゲル６０、２３０〜４００メッシュを使用した。
【０３３０】
置換カルコンＣＭＳ−０１３、０３２、０３３、０５７、０６３、０８５、０８６、０８６Ａ、１０５〜１０８、および１３７の合成は、メタノール中でのＢａ（ＯＨ）２を使用する、適切に置換されたアルデヒドとの２’−ヒドロキシアセトフェノンの縮合によって、実行した（Ｓｏｇａｗａら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（１９９３）３６（２４）、３９０４−３９０９）（手法１）。トリ−ヒドロキシカルコンＣＭＳ−０１１、０３４、および０８７は、ジクロロメタン中でのＢＢｒ３との処理によって、対応するカルコンから調製し（Ｃｈｕら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ．（２００４）６０（１１）、２６４７−２６５５）、ジ−ヒドロキシカルコンＣＭＳ−０８８は、対応するカルコンから、メタノール７中で、パラ−トルエンスルホン酸（ｐＴＳＡ）を使用して、テトラヒドロピラン（ＴＨＰ）脱保護によって合成した。置換フラボンＣＭＳ−０１８、０３８、０５８、０６８、０８９、１１５、１１６、１１９、および１２０は、ＤＭＳＯ中で、Ｉ２を使用して、対応するカルコンから合成した（Ｃａｂｒｅｒａら、Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．（２００７）１５（１０）、３３５６−３３６７）（手法２）。ヒドロキシフラボンＣＭＳ−０２Ｐ（別名ＰＭ−００２）、０２８、０６４、０７２、および０９４は、それぞれ、ジクロロメタン中でＢＢｒ３（Ｃｈｕら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ．（２００４）、前掲）またはＥｔＯＡｃ／メタノール中でＨ２、Ｐｄ／Ｃ（Ｈｏｒｉｅら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（１９８６）２９（１１）、２２５６−２２６２）を使用する脱メチル化／脱エチル化または脱ベンジル化によって、対応するカルコンから得た。
【０３３１】
置換フラボノールＣＭＳ−０２５、０３６、０３７、０５９、０６５、０９０、０９１、１１４、１１７、１１８、１２２、および１３９は、対応するアルデヒドから、メタノール中で、５．４％  ＮａＯＨ、３０％  Ｈ２Ｏ２を使用して、調製した（手法３）（Ｑｉｎら、Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．（２００８）５１（６）、１８７４−１８８４）。知られている化合物フィセチン、ＣＭＳ−０２Ｐ（別名ＰＭ−００２）、およびＣＭＳ−０４Ｐ（別名ＰＭ−００４）は、Ｉｎｄｏｆｉｎｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓから購入し、他のヒドロキシフラボノールＣＭＳ−０２７、０４０、０４１、０６９、０７０、０９２、０９３、および１４０は、脱メチル化／脱エチル化（ジクロロメタン中ＢＢｒ３）（Ｃｈｕら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ．（２００４）、前掲）または脱ベンジル化（ＥｔＯＡｃ／メタノール中でＨ２、Ｐｄ／Ｃ）（Ｈｏｒｉｅら、Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．（１９８６）前掲）法によって、それらの対応するフラボノール（手法３）から得た。置換キノリンＣＭＳ−００１、００４、００７、０１７、０２１〜０２４、０８３、０８４、１０９〜１１３、および１２１は、メタノール中で、Ｈ２ＳＯ４を使用する、適切に置換されたアルデヒドとの２’−アミノアセトフェノンの縮合によって合成した（手法４）（Ｗａｎｇら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ．（２００９）５０（１９）、２２６１−２２６５）。
【０３３２】
カルコン誘導体ＣＭＳ−０１３、０３２、０３３、０５７、０６３、０８５、０８６、１０５〜１０８、および１３７の合成についての一般的な手順Ａ。ＭｅＯＨ（３ｍＬ／ｍｍｏｌ）中２’−ヒドロキシアセトフェノン（１ｅｑ）、アリールアルデヒド（１ｅｑ）、およびＢａ（ＯＨ）２（１ｅｑ）の混合物を、４０℃で、１２時間、撹拌した。メタノールは、蒸発させ、残留物は、水により希釈し、１Ｎ  ＨＣｌにより中和し、酢酸エチルにより抽出した。有機層は、鹹水溶液により洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させた。固体残留物は、ＣＨ２Ｃｌ２／ヘキサンから再結晶化し、液体残留物は、シリカゲル（２３０〜４００メッシュ）を使用して、フラッシュクロマトグラフィーによって精製し、１０〜３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンにより、３０〜９０％収量のカルコンが得られた。
【０３３３】
化合物ＣＭＳ−０２Ｐ（別名ＰＭ−００２）、０１１、０２７、０２８、０３４、０４１、０８７、０９３、０９４、および１４０の合成についての一般的な手順Ｂ（メチル／エチル脱保護）。ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ／ｍｍｏｌ）中の、適切に保護された出発物質（１ｅｑ）の、撹拌し、０℃に冷却した溶液に、ＢＢｒ３（２ｅｑ／アルコキシ基）を追加し、混合物は、窒素大気下で室温で一晩撹拌した。反応混合物は、５％Ｎａ２ＨＰＯ４溶液を追加することによってクエンチし、ＣＨ２Ｃｌ２により抽出し、組み合わせた有機抽出物は、鹹水により洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させた。結果として生じる固体は、メタノールから再結晶化した。
【０３３４】
カルコンＣＭＳ−０８８の合成についての方法Ｃ。ＭｅＯＨ（２ｍｌ）中のカルコンＣＭＳ−０８６Ａ（７４．７ｍｇ、０．２０３ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ｐ−トルエンスルホン酸（７７．３ｍｇ、０．４０７ｍｍｏｌ）を追加した。反応混合物は、室温で３時間、撹拌し、反応を終了させた後、溶媒は、蒸発させ、残留物は、水（２０ｍＬ）により希釈し、次いで、飽和ＮａＨＣＯ３により中和し、ＥｔＯＡｃにより抽出した。組み合わせた抽出物は、鹹水により洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させた。残留物は、シリカゲル（２３０〜４００メッシュ）を使用して、フラッシュクロマトグラフィーによって精製し、２０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサンにより、黄色の固体として、ＣＭＳ−０８８の９４％の収量が得られた。
【０３３５】
化合物ＣＭＳ−６４、０６９、０７０、０７２、および０９２の合成についての一般的な手順Ｄ（脱ベンジル化）。ベンジル保護フラボンおよびフラボノールは、１：１  ＥｔＯＡｃ／エタノール（１０ｍＬ／ｍｍｏｌ）中に溶解し、次いで、木炭（５％ｗ／ｗ）上で５％パラジウムにより処理し、混合物は、水素雰囲気（風船圧）下で一晩撹拌した。反応混合物は、ろ過し、溶媒は、蒸発させ、結果として生じる固体は、ジクロロメタン／メタノールから再結晶化した。
【０３３６】
フラボン誘導体ＣＭＳ−０１８、０３８、０５８、０６８、０８９、１１５、１１６、１１９、および１２０の合成についての一般的な手順Ｅ。ＤＭＳＯ（１ｍＬ／ｍｍｏｌ）中のカルコン（１ｅｑ）およびヨウ素（０．０１ｅｑ）の溶液は、３〜６時間、１３０℃で加熱した。反応混合物は、冷却し、水により希釈し、ＣＨ２Ｃｌ２により抽出し、水性飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３により洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させた。固体残留物は、ＣＨ２Ｃｌ２／ヘキサンから再結晶化し、液体残留物は、シリカゲル（２３０〜４００メッシュ）を使用して、フラッシュクロマトグラフィーによって精製し、３０〜８０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンにより、５０〜９５％収量のフラボンが得られた。
【０３３７】
合成フラボノール誘導体ＣＭＳ−０２５、０３６、０３７、０５９、０６５、０９０、０９１、１１４、１１７、１１８、１２２、および１３９についての一般的な手順Ｆ。ＭｅＯＨ（５ｍＬ／ｍｍｏｌ）中カルコンの撹拌し、冷却した０℃溶液に、５．４％  ＮａＯＨ（３．２ｍＬ／ｍｍｏｌ）を追加し、その後、３０％  Ｈ２Ｏ２（０．３７ｍＬ／ｍｍｏｌ）を滴下し、混合物は、０℃で３時間、撹拌し、次いで、氷浴は、そのまま放置し、再投入せず、撹拌は、一晩継続させた。反応混合物は、２Ｍ  ＨＣｌにより酸性化し、結果として生じる沈殿は、ろ過によって収集し、水により洗浄し、ジクロロメタンから再結晶化し、４０〜９０％収量のフラボノールが得られた。
【０３３８】
キノリン誘導体ＣＭＳ−００１、００４、００７、０１７、０２１〜０２４、０８３、０８４、１０９〜１１３、および１２１の合成についての一般的な手順Ｇ。アルコール（３ｍＬ／ｍｍｏｌ）中２’−アミノアセトフェノン（１ｅｑ）および芳香族アルデヒド（１〜３ｅｑ）の撹拌溶液に、Ｈ２ＳＯ４（０．７５ｅｑ）を追加し、混合物は、１２〜２４時間、還流させた。反応混合物は、冷却し、溶媒は、蒸発させ、残留物は、水により希釈した。水溶液は、５％水性ＮａＨＣＯ３溶液により中和し、酢酸エチルにより抽出した。有機混合体（ｃｏｍｂｉｎｅ）は鹹水により洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させた。１０〜５０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するシリカゲル上での、結果として生じる残留物のフラッシュクロマトグラフィーにより、１５〜５０％収量の４−アルコキシ２−アリールキノリンが得られた。
【０３３９】
選択的な化合物（ＣＭＳ−０１１、ＣＭＳ−１２１、およびＣＭＳ−１４０）についての分析データ：（Ｅ）−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−１−（２−ヒドロキシ−４，５−ジメチルフェニル）プロパ−２−エン−１−オン（ＣＭＳ−０１１）。一般的な手順Ｂの後に、オレンジ色の固体としてカルコンＣＭＳ−０１３から得られたＣＭＳ−０１１（９５％の収量）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，  ５００  ＭＨｚ）δ  ｐｐｍ  ２．２３（ｓ，  ３Ｈ），  ２．２４（ｓ，  ３Ｈ），  ６．７８（ｓ，  １Ｈ）６．８２（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２３（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．５，  ２．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３１（ｄ，  Ｊ  ＝  ２．０  Ｈｚ，  １Ｈ  ），  ７．７２（ｑ，  Ｊ  ＝  １５．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ８．０２（ｓ，  １Ｈ），  ９．１１（ｂｒ  ｓ，  ＯＨ），  ９．８１（ｂｒ  ｓ，  ＯＨ），  １２．７９（ｓ，  ＯＨ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，  １２５  ＭＨｚ）δ  ｐｐｍ  １８．７２，  ２０．４６，  １１６．１８，  １１６．３６，  １１７．９４，  １１８．４５，  １１８．６９，  １２３．１９，  １２６．６５，  １２７．５９，  １３０．９１，  １４６．０４，  １４６．１２，  １４６．９２，  １４９．５９，  １６１．２３，  １９３．３６；ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ  Ｃ１７Ｈ１６Ｏ４（［Ｍ］＋）に対する計算値２８４；実測値２８５（［Ｍ＋Ｈ］＋）。
【０３４０】
４−（４−（シクロペンチロキシ）キノリン−２−イル）ベンゼン−１，２−ジオール（ＣＭＳ−１２１）。一般的な手順Ｇの後に、黄色の固体として得られたＣＭＳ−１２１（１６％の収量）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，  ５００  ＭＨｚ）δ  ｐｐｍ  １．６６（ｍ，  ２Ｈ），  １．７９（ｍ，  ２Ｈ），  １．８９（ｍ，  ２Ｈ），  ２．０７（ｍ，  ２Ｈ），  ５．３０（ｍ，  ２Ｈ），  ６．８５（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３１（ｓ，  １Ｈ），  ７．４４（ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．５４（ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．５，  ２．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６７（ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ  ），  ７．７５（ｄ，  Ｊ  ＝  ２．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８８（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．０４（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ９．２１（ｂｒｓ，  ＯＨ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，  １２５  ＭＨｚ）δ  ｐｐｍ  ２４．１９，  ３２．７１，  ８０．１２，  ９９．２８，  １１５．０２，  １１５．９９，  １１９．４１，  １２０．６０，  １２１．９７，  １２５．２１，  １２８．９３，  １３０．３０，  １３１．１１，  １４５．８８，  １４７．７１，  １４９．１１，  １５７．９２，  １６０．７３；ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ  Ｃ２０Ｈ１９ＮＯ３（［Ｍ＋Ｈ］＋）に対する計算値３２２．１４３７；実測値３２２．１４１２（［Ｍ＋Ｈ］＋）。
【０３４１】
３−ヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシ−４−（ピロリジン−１−イル）フェニル）−４Ｈ−ベンゾ［ｈ］クロメン−４−オン（ＣＭＳ−１４０）。一般的な手順Ｂの後に、橙赤色の固体として化合物ＣＭＳ−１３９から得られたＣＭＳ−１４０（５０％の収量）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，  ５００  ＭＨｚ）δ  ｐｐｍ  １．８８（ｓ，  ４Ｈ），  ３．４５（ｓ，  ４Ｈ），  ６．７４（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８５（ｍ，  ５Ｈ），  ８．０４（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．１１（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．６８（ｄ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ９．３７（ｓ，  １Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，  １２５  ＭＨｚ）δ  ｐｐｍ  ２５．１６，  ５０．１９，  １１４．３８，  １１４．６９，  １１７．９４，  １２０．６１，  １２０．７４，  １２０．９９，  １２２．５４，  １２４．１０，  １２４．８７，  １２８．０６，  １２８．８７，  １２９．７７，  １３５．３７，  １３９．１９，  １４０．２９，  １４６．３４，  １４６．４４，  １５１．６５，  １７２．１９；ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ  Ｃ２３Ｈ１９ＮＯ４（［Ｍ＋Ｈ］＋）に対する計算値３７４．１３８６；実測値３７４．１４０２（［Ｍ＋Ｈ］＋）。
【０３４２】
実施例８−フィセチン誘導体の構造活性相関および神経保護活性分析
方法
生物学：細胞培養。ウシ胎児血清（ＦＣＳ）および透析されたＦＣＳ（ＤＦＣＳ）は、Ｈｙｃｌｏｎｅ（Ｌｏｇａｎ、ＵＴ）のものとした。ダルベッコー修飾イーグル培地（ＤＭＥＭ）は、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）から購入した。ＨＴ２２細胞（Ｍａｈｅｒら、Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．（２００７）１１７３、１１７−１２５）は、１０％ＦＣＳおよび抗生物質を補足したＤＭＥＭ中で成長させた。ＰＣ１２細胞は、１０％ＦＣＳ、５％ウマ血清、および抗生物質を補足したＤＭＥＭ中で成長させた。Ｎ９小膠細胞は、１０％ＦＣＳ、１×非必須アミノ酸、１×必須アミノ酸、および抗生物質を補足したＤＭＥＭ中で成長させた。
【０３４３】
細胞毒性アッセイ。細胞生存能力は、標準的な手順に基づいて３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）アッセイの改良バージョンによって決定した（Ｍａｈｅｒら、Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．（２００７）、前掲）。細胞は、ウェル当たり５×１０３細胞の密度で９６ウェルマイクロタイタープレート上に接種した。インビトロ虚血アッセイのために、翌日、培地を、７．５％ＤＦＣＳを補足したＤＭＥＭと交換し、細胞を、２０μＭヨード酢酸（ＩＡＡ）により単独でまたは様々な誘導体の存在下で処理した。２時間後、それぞれのウェル中の培地を吸引し、ＩＡＡはないが、誘導体を含有する新鮮な培地と交換した。２０時間後、それぞれのウェル中の培地を、吸引し、２．５μｇ／ｍｌ  ＭＴＴを含有する新鮮な培地と交換した。３７℃での４時間のインキュベーション後、細胞は、５０％ジメチルホルムアミドおよび２０％ＳＤＳ（ｐＨ４．７）を含有する１００μｌの溶液により可溶化した。５７０ｎｍの吸光度を、マイクロプレート読み取り装置（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）により翌日、測定した。結果は、ウェルの目視検査によって確認した。コントロールは、毒性について試験するための化合物を単独でおよびアッセイ化学に対する干渉について試験するための、細胞なしの化合物を含んだ。
【０３４４】
分化アッセイ。Ｎ２培地中のＰＣ１２細胞は、２４時間、誘導体（１〜１０μＭ）またはポジティブコントロールとしてのフィセチン（１０μＭ）により処理し、細胞を神経突起の存在についてスコア化した。ＰＣ１２細胞は、通常の増殖培地において処理した場合よりも、Ｎ２培地において処理した場合、神経突起をはるかに速やかに産生する。それぞれの処理について、それぞれの３つの個別のフィールドにおける１００細胞を数えた。１つもしくは複数の神経突起＞１細胞体直径長が観察された場合、細胞は、ポジティブであるとスコア化した。
【０３４５】
抗炎症アッセイ。７．５％ＤＦＣＳを有するＤＭＥ中で平板培養したマウスＮ９小膠細胞は、単独でもしくはフィセチン誘導体（１〜１０μＭ）の存在下において１０μｇ／ｍｌ細菌性脂質多糖体（Ｓｉｇｍａ）またはポジティブコントロールとしてのフィセチン（１０μＭ）により処理した。２４時間後、培地を除去し、浮遊細胞を除去するために短い間、回転させ、１００μｌを、９６ウェルプレートにおいて、１００μｌのグリース試薬（Ｓｉｇｍａ）を使用して、ＮＯについてアッセイした。室温での１０分間のインキュベーション後に、５５０ｎｍの吸収度を、マイクロプレート読み取り装置で読み取った。
【０３４６】
総グルタチオン。総細胞内グルタチオンを、記載されるように化学アッセイによって決定した（Ｍａｈｅｒ，Ｐ．ら、Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．（２００６）４０（１０）、１１０５−１１１１）。
【０３４７】
ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびイムノブロッティング。Ｎｒｆ２のイムノブロッティングのために、核抽出物を、未処理細胞ならびに１、２、および４時間、フィセチン誘導体により処理した細胞から、記載されるように（Ｓｃｈｒｅｉｂｅｒら、Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．（１９８９）１７（１５）、６４１９）調製した。フィセチンは、ポジティブコントロールとして使用した。それぞれの誘導体については、細胞死を予防するのに非常に有効であった濃度を使用した。タンパク質濃度は、ＢＣＡタンパク質アッセイ（Ｐｉｅｒｃｅ）を使用して決定した。等量のタンパク質を、２．５×ＳＤＳサンプルバッファー中で可溶化し、１０％ＳＤＳポリアクリルアミドゲル上で分離し、ニトロセルロースに転写した。サンプルの装填および転写が等しいことを、ポンソー−Ｓによりニトロセルロースを染色することによって確認した。転写は、ＴＢＳ／０．１％  Ｔｗｅｅｎ  ２０中５％の脱脂乳により室温で１時間、ブロックし、次いで、ＴＢＳ／０．０５％  Ｔｗｅｅｎ  ２０中５％ＢＳＡにおいて希釈した一次抗体中で４℃で一晩インキュベートした。使用した一次抗体は、Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ、ＣＡ）の抗Ｎｒｆ２（＃ＳＣ１３０３２；１／１０００）およびＣｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ（Ｂｅｖｅｒｌｙ、ＭＡ）の抗β−アクチン（＃５１２５；１／２０，０００）とした。転写物は、ＴＢＳ／０．０５％  Ｔｗｅｅｎ  ２０によりすすぎ、ＴＢＳ／０．１％  Ｔｗｅｅｎ  ２０中５％脱脂乳において１／５０００に希釈したホースラディッシュペルオキシダーゼヤギ抗ウサギまたはヤギ抗マウス（Ｂｉｏｒａｄ、Ｈｅｒｃｕｌｅｓ、ＣＡ）中で室温で１時間、インキュベートした。免疫ブロットは、Ｓｕｐｅｒ  Ｓｉｇｎａｌ試薬（Ｐｉｅｒｃｅ、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、ＩＬ）により現像した。
【０３４８】
Ｔｒｏｌｏｘ等価活性濃度（ＴＥＡＣ）の決定。フラボノイドについてのＴＥＡＣ値は、記載されるように決定した（Ｍａｈｅｒ，Ｐ．ら、Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．（２００６）、前掲）。手短かに言えば、ペルオキソ二硫酸カリウムにより一晩処理し、７３４ｎｍで約０．７のＯＤまで希釈した２５０μｌの２，２’−アジノビス（３−エチルベンゾチアゾリン６−スルホネート）（ＡＢＴＳ）を、エタノール中２．５μｌの誘導体溶液に追加した。ＡＢＴＳラジカルカチオンの還元による吸収度における変化を、４分間、７３４ｎｍで測定した。ＴＥＡＣを計算するために、問題となっている誘導体についての吸光度の阻害パーセンテージ対濃度のプロットの傾きを、Ｔｒｏｌｏｘについてのプロットの傾きによって割った。
【０３４９】
結果
本明細書において記載される様々な実施形態は、脳透過を増加させ、また、そのＳＡＲをより理解するために、好結果のＣＮＳ薬剤と比較して望ましい物理化学的特性もまた維持しながらまたは改善しながら（分子量≦４００、ｔＰＳＡ≦５、ｔＰＳＡ≦９０、ＨＢＤ≦３、ＨＢＡ≦７）、複数の神経保護経路の活性化に基づいて、フィセチンに対して改善された効力を示すフィセチンアナログの発見に部分的に基づく（Ｈｉｔｃｈｃｏｃｋら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２００６）４９（２６）、７５５９−７５８３；およびＰａｊｏｕｈｅｓｈら、ＮｅｕｒｏＲｘ．（２００５）２、５４１−５５３）。フィセチンの改善に対する２つのアプローチについて調査した。第１に、体系的な方式における様々なヒドロキシル基の除去／修飾／交換について調査した。第２のアプローチにおいて、重要な構造エレメントを同時に維持しながら、キノリンにそれを変化させることによるフラボン骨格の修飾について、調査した。
【０３５０】
一次スクリーニングについて、ＨＴ２２神経細胞株と組み合わせたインビトロ虚血モデル（Ｍａｈｅｒら、Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．（２００７）１１７３、１１７−１２５）を選んだ。このスクリーンについては、１μＭのＥＣ５０についてのカットオフを選んだ。ＨＴ２２細胞において虚血を誘発するために、発明者らは、解糖酵素グリセルアルデヒド３−リン酸デヒドロゲナーゼ（Ｇ３ＰＤＨ）のよく知られている不可逆阻害剤であるヨード酢酸（ＩＡＡ）を使用した（Ｗｉｎｋｌｅｒら、Ｅｘｐ．Ｅｙｅ  Ｒｅｓ．（２００３）７６、７１５−７２３）。ＩＡＡは、神経保護分子についてのいくつかの最近のスクリーニングを含めて（Ｂｉｒａｂｏｎｅｙｅら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２００９）５２（１４）、４３５８−４３６９；Ｂｉｒａｂｏｎｅｙｅら、Ｃｈｅｍ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２０１０）５（１）、７９−８５）、神経細胞において虚血を誘発するための、多くの他の研究において使用された（Ｒｅｓｈｅｆら、Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．（１９９７）２３８、３７−４０；Ｓｐｅｒｌｉｎｇら、Ｎｅｕｒｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．（２００３）３５１、１３７−１４０；Ｒｅｇｏら、Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．（１９９９）２４、３５１−３５８；Ｓｉｇａｌｏｖら  Ｊ．Ｍｏｌ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．（２０００）１５、１４７−１５４；およびＲｅｉｎｅｒら、Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．（１９９０）１１９、１７５−１７８）。神経細胞のＩＡＡ処理後の変化は、虚血発作の動物モデルにおいて見られたものに対して非常に類似しており（Ｌｉｐｔｏｎら、Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｖ．（１９９９）７９、１４３１−１５６８）、膜電位における変化（Ｒｅｉｎｅｒら、Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．（１９９０）１１９、１７５−１７８）、リン脂質の崩壊（Ｔａｙｌｏｒら、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．（１９９６）２７６、１２２４−１２３１）、ＡＴＰの損失（Ｗｉｎｋｌｅｒら、Ｅｘｐ．Ｅｙｅ  Ｒｅｓ．（２００３）７６、７１５−７２３；Ｓｐｅｒｌｉｎｇら、Ｎｅｕｒｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．（２００３）３５１、１３７−１４０）、ならびに活性酸素種（ＲＯＳ）における増加（Ｔａｙｌｏｒら、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．（１９９６）、前掲；およびＳｐｅｒｌｉｎｇら、Ｎｅｕｒｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．（２００３）３５１、１３７−１４０）を含む。
【０３５１】
３つの第２のスクリーニングは、発作および他の神経障害に非常に関連するフィセチンの３つの重要な活性の評価を可能にした：主な内因性細胞酸化防止剤であるグルタチオン（ＧＳＨ）の維持、抗炎症活性の指標である、ＬＰＳ誘発性の小膠細胞の活性化の阻害、および神経栄養活性の基準であるＰＣ１２細胞分化。これらの活性はすべて、発作において見られる神経細胞損失に関連する（Ｇｅｌｄｅｒｂｌｏｍら、Ｓｔｒｏｋｅ．２００９，４０（５）、１８４９−１８５７；Ｐａｎｄｙａら、Ｃｅｎｔ．Ｎｅｒｖ．Ｓｙｓｔ．Ａｇｅｎｔｓ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２０１１）Ａｐｒ  ２７；Ｌｅｗｅｒｅｎｚら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．（２０１０）１１３（２）、５０２−５０４）。以前のおよび進行中の研究は、フィセチンのこれらの活性が、別個の経路を介して媒介されるが、３つすべてが、インビボにおけるフィセチンの神経保護効果にとって重要であるかもしれないことを示唆する（Ｍａｈｅｒ，Ｐ．Ｇｅｎｅｓ．Ｎｕｔｒ．（２００９）Ｓｅｐ  １０）。ＧＳＨの維持を評価するために、ＧＳＨ損失および酸化ストレスの誘発因子であるグルタミン酸の非存在および存在下の両方における、化合物による２４時間の処理後の総細胞内ＧＳＨレベル（Ｔａｎら、Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２００１）１、４９７−５０６；Ｍａｈｅｒら、Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．（２００６）４０（１０）、１１０５−１１１１）を測定した。ＬＰＳ誘発性の小膠細胞の活性化の阻害は、単独でおよび化合物の存在下においてＬＰＳによりＮ９マウス小膠細胞を処理し、２４時間後に培地の中へのＮＯ放出をアッセイすることによって決定した（Ｚｈｅｎｇら、Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．（２００８）８，（３）、４８４−４９４）。ＰＣ１２細胞分化は、化合物によりＰＣ１２細胞を処理し、２４時間後に神経突起成長について調査することによって決定した。すべての場合において、フィセチンは、ポジティブコントロールとして使用した（Ｓａｇａｒａら、Ｊ．  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．（２００４）９０、１１４４−１１５５）。
【０３５２】
構造活性相関
薬剤の水素結合特性は、それらのＣＮＳ取込みプロファイルに有意に影響を及ぼし得、極性分子は、一般に、不十分なＣＮＳ作用物質であり、低い親油性（ＣＬｏｇＰ）および高度な水素結合は、ＢＢＢ透過を減少させる（Ｐａｊｏｕｈｅｓｈら、ＮｅｕｒｏＲｘ．（２００５）２、５４１−５５３）。フィセチンの活性における４つの異なるヒドロキシル基の役割について、研究した。７−ヒドロキシルの除去（ＣＭＳ−０４Ｐ（別名ＰＭ−００４））は、フィセチンに対して約６倍、ＧＳＨ維持活性またはＰＣ１２細胞分化のいずれの損失も伴うことなく、インビトロ虚血の一次スクリーニングにおいて神経保護活性を改善し、また、親油性をも増強した（ＣＬｏｇＰ１．２４〜１．８２（表１））ことが分かった。さらに、この修飾は、フィセチンと比べて、抗炎症活性を変化させなかった（表１）。
【０３５３】
表１〜３は、インビトロにおける虚血アッセイにおける保護についての半最大有効濃度（ＥＣ５０）が、２時間、２０μＭ  ＩＡＡの存在下において、様々な用量のそれぞれの誘導体に対してＨＴ２２細胞を曝露することによって、決定されたことを示す（ＨＴ２２／ＩＡＡ）。細胞生存能力は、ＭＴＴアッセイによって２４時間後に決定した。ＧＳＨを維持するための能力（ＧＳＨ）は、５ｍＭグルタミン酸の存在下において、様々な用量のそれぞれの誘導体（１〜１０μＭ）によりＨＴ２２細胞を処理することによって決定した。２４時間後に、細胞抽出物は、調製し、総ＧＳＨについて分析した。フィセチン（１０μＭ）は、ポジティブコントロールとして使用した。ＰＣ１２細胞分化を誘発するための能力（ＰＣ１２  ｄｉｆｆ’ｎ）は、２４時間、様々な用量のそれぞれの誘導体（１〜１０μＭ）によりＮ２培地においてＰＣ１２細胞を処理することによって決定した。分化は、ポジティブコントロールとしてのフィセチン（１０μＭ）による目視検査によって評価した。抗炎症活性（ミクログリア）は、２４時間、単独でまたは様々な用量のそれぞれの誘導体（１〜１０μＭ）の存在下において、細菌性脂質多糖体により処理したＮ９小膠細胞において評価した。フィセチンは、ポジティブコントロールとして使用した。直接的な酸化防止活性の基準であるＴＥＡＣ値は、ＡＢＴＳ脱色アッセイを使用して決定した。
【０３５４】
【表１−１】
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【０３５５】
【表１−２】
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【０３５６】
【表１−３】
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【０３５７】
この発見は、典型的なＣＮＳ薬剤とより一致する値まで、親油性およびｔＰＳＡを改善するために、７−ヒドロキシル基の疎水基との交換に拍車をかけた（Ｈｉｔｃｈｃｏｃｋら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２００６）４９（２６）、７５５９−７５８３およびＰａｊｏｕｈｅｓｈら、ＮｅｕｒｏＲｘ．（２００５）２、５４１−５５３）。Ａ環へのベンゼン環の追加（ＣＭＳ−０４０）は、神経保護活性を、約５．５倍、さらに増強し、β−ナフチル（ＣＭＳ−０４１）誘導体とは対照的に、さらにより顕著な効果が、α−ナフチル誘導体（ＣＭＳ−０４０）で見られた（表１）。しかしながら、この修飾は、酸化ストレスの条件下で誘導体がＧＳＨを維持する能力を低下させた。この誘導体については、３−ヒドロキシルは、神経保護活性に影響を与えるようには見えなかった（ＣＭＳ−０４０対ＣＭＳ−０２Ｐ（別名ＰＭ−００２））が、抗炎症活性を増強した。発明者らはまた、神経保護におけるＢ環ヒドロキシルの役割およびアルファナフチル誘導体の他の重要な活性についても検査した。エトキシ基への両方のヒドロキシルの変化（ＣＭＳ−０３６、ＣＭＳ−０３８）は、神経保護活性を大幅に低下させただけではなく、抗炎症活性およびＰＣ１２細胞分化を誘発するための能力の両方をも排除した。メトキシ基へのヒドロキシルの一方のみの変化は、３−ヒドロキシル基の非存在下において（ＣＭＳ−０７２）、ＣＭＳ−０４０に対して、神経保護活性を約２倍を増強したが、３ヒドロキシルの存在下において（ＣＭＳ−０７０）、ＣＭＳ−０４０と比べて神経保護活性を大幅に低下させた。さらに、この修飾は、酸化ストレスの条件下でＧＳＨを維持するための能力を回復させなかった、また、３ヒドロキシルを有していない誘導体（ＣＭＳ−０７２）もまた、抗炎症活性およびＰＣ１２細胞分化を誘発するための能力を欠いた。
【０３５８】
驚いたことに、ベンジルオキシ基への４’−ヒドロキシルの変化（ＣＭＳ−０６５）は、３−ヒドロキシルの存在下において神経保護活性を回復させた。第３級窒素（多くのＣＮＳの薬剤の特徴）を有する化合物は、より高度な脳浸透を示す（Ｈｉｔｃｈｃｏｃｋら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２００６）４９（２６）、７５５９−７５８３；Ｐａｊｏｕｈｅｓｈら、ＮｅｕｒｏＲｘ．（２００５）２、５４１−５５３；およびＬｌｏｙｅｄら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（１９８６）２９、４５３−４６２）。しかしながら、神経保護活性の点からも有効であったのは、４’−位での両方のヒドロキシルの単一のジメチルアミノ基への交換であり、これは、３−ヒドロキシル基の存在下（ＣＭＳ−１１８）において、高度に神経保護的な化合物およびその非存在下（ＣＭＳ−１２０）において、いくぶん有効でない化合物をもたらし、また、この修飾により、２つの水素結合供与体が排除された。ＣＭＳ−１１８は、ＧＳＨレベルを維持するための能力を取り戻したが、それは、抗炎症および神経栄養活性の両方を欠いた。４’−位でのピロリジン基へのジメチルアミンの修飾は、３−ヒドロキシルの存在下（ＣＭＳ−１１４）において、優れた神経保護活性を有した化合物を与え、また、ＰＣ１２細胞分化を誘発することもできたが、不十分な抗炎症活性を有し、ＧＳＨレベルを維持しなかった。要するに、追加のベンゼン環（α−ナフチル）は、７５倍まで神経保護活性を増強したが、多くの誘導体は、酸化ストレス下でＧＳＨを維持するための能力を欠いた。抗炎症活性におけるいくらかの欠乏は、これらのアナログにおいて示された。フィセチンの薬理学的特性の改善に対する第２のアプローチもまた、調査した。
【０３５９】
この第２のアプローチについて、ベンゼン環の２つのメチル基（ＣＭＳ−０２７）との交換は、ＣＭＳ−０４０に類似するＣＬｏｇＰおよびｔＰＳＡを有するが、Ａ環へのそれほどかさばらない追加を伴う誘導体を生成するために実行した（表１）。驚いたことに、この誘導体は、ＣＭＳ−０４０と比較して、有意に減少した神経保護活性を示しただけではなく、ＧＳＨレベルの維持の連続した減退と共に、ＰＣ１２細胞分化を誘発するための能力をも失った。３−ヒドロキシルの除去は、神経保護活性を２倍、増強した（ＣＭＳ−０２８）が、ＰＣ１２細胞分化の誘発もＧＳＨの維持も回復させなかった。Ｂ環ヒドロキシルの修飾は、複雑な結果をもたらした。メトキシへの一方のヒドロキシルの修飾（ＣＭＳ−０６４、ＣＭＳ−０６９、ＣＭＳ−０９２）は、神経保護活性を約１０〜２０倍、改善したが、抗炎症活性を低下させた。ＣＭＳ−０４０の誘導体による結果と同様に、エトキシ基への両方のＢ環ヒドロキシル基の修飾（ＣＭＳ−０１８、ＣＭＳ−０２５）は、類似するレベルの神経保護活性を示した。
【０３６０】
また、これらの誘導体は、ＧＳＨを維持するまたはＰＣ１２細胞分化を誘発するための能力をたとえあったとしてもほとんど示さず、それらはまた、抗炎症活性の低下をも示した。メトキシ、ベンジルオキシジメチル誘導体が、３−ヒドロキシルの存在下（ＣＭＳ−０５９）において、ＣＭＳ−０２７と比べて神経保護活性の増強を示したが、それは、比較的低い抗炎症活性を示した。さらに、Ｂ環ヒドロキシルの分離（ＣＭＳ−０９３、ＣＭＳ−０９４）は、神経保護活性だけではなく、他の重要な活性をも同様に排除した。しかしながら、ＣＭＳ−０４０の誘導体による結果と同様に、４’位でのヒドロキシルの単一のジメチルアミノ基との交換は、優れた神経保護活性を有する化合物をもたらしたが、それは、３−ヒドロキシルの存在下においてのみであった（ＣＭＳ−１１７対ＣＭＳ−１１９）。この化合物はまた、ＧＳＨを維持するための能力を取り戻したが、神経栄養および抗炎症活性を欠いた。４’位への単一のピロリジン基の追加は、その代わりに、３ヒドロキシルの存在下においてのみ、優れた神経保護活性を有した化合物を与え（ＣＭＳ−１２２対ＣＭＳ−１１６）、また、ＧＳＨレベルを維持し、ＰＣ１２細胞分化を誘発することができたが、なお不十分な抗炎症活性を有した。しかしながら、この誘導体への３’ヒドロキシルの追加は、酸化ストレスの条件下でＧＳＨを維持し、ＰＣ１２分化を誘発し、適度な抗炎症活性を有することもできる顕著な神経保護活性を有する化合物（ＣＭＳ−１４０）をもたらした。
【０３６１】
カルコンは、フラボノイドの合成における中間体であり、活性に対する、Ｃ−環を開環する効果を決定するために使用した（表２）。驚いたことに、ナフチル（ＣＭＳ−０３４）およびジメチル誘導体（ＣＭＳ−０１１）の両方のカルコンは、それらのフラボン対応物と比較して、類似した（ＣＭＳ−０３４）または増強された（ＣＭＳ−０１１）神経保護活性を有し、また、酸化ストレスの条件下でＧＳＨを維持するための能力を含む、重要な活性をも、すべて取り戻した。対照的に、両方のＢ環ヒドロキシルが修飾されたカルコンは、神経保護活性を有しなかった（ＣＭＳ−０３２、ＣＭＳ−０１３、ＣＭＳ−０８６）または神経保護活性を大幅に低下させた（ＣＭＳ−０６３）。さらに、ＣＭＳ−０１１のＢ環ヒドロキシルの分割（ＣＭＳ−０８７）は、酸化ストレスの条件下でＧＳＨを維持するための能力を排除した。メトキシへのヒドロキシルの転換（ＣＭＳ−０８８）もまた、ＰＣ１２細胞分化を促すための能力を排除した。
【０３６２】
【表２】
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【０３６３】
フィセチンの改善に対する代替のアプローチとして、発明者らは、キノリン骨格においてフラボンの重要な構造エレメントを保持しながら、効力および生理化学的な特性をさらに改善するための試みにおいて、フラボン骨格を修飾し、それをキノリン骨格に変化させた（表３）。
【０３６４】
【表３−１】
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【０３６５】
【表３−２】
2014524426.tif 000050
【０３６６】
化合物ＣＭＳ−００７は、フィセチンに比べて神経保護活性において約７５倍の増加を示し、酸化ストレスの条件下でＧＳＨを維持し、強力な抗炎症活性を有した。それは、ＰＣ１２細胞分化を誘発しなかった。神経保護活性を増強することができるかどうか、そして／またはＰＣ１２細胞分化活性を回復させることができるかどうかを確かめるために、多くの修飾について調査した。興味深いことには、Ｃ環上のメトキシ基についてのエトキシ（ＣＭＳ−０２３）またはイソ−プロポキシ（ＣＭＳ−０２４）への置換は、分化活性を回復させたが、ＣＭＳ−００７に比べて神経保護活性をも、わずかに改善した（約２倍）。Ｏ−メチル基のＯ−シクロペンチル環との交換は、神経保護活性（ＣＭＳ−１２１）について、フィセチンに比べてＥＣ５０において＞４００倍減少し、かつ重要な活性のすべてを維持する化合物をもたらした。すべての形態について、Ｂ環ヒドロキシルの一方（ＣＭＳ−０２２）もしくは両方（ＣＭＳ−０２１）の除去またはこれらのヒドロキシルの一方または両方の、メトキシ（ＣＭＳ−００１、ＣＭＳ−０１７）、エトキシ（ＣＭＳ−００４）、ニトロ（ＣＭＳ−１１１）、または塩素もしくはフッ素（示さず）への転換は、神経保護活性を大幅に低下させたまたは排除した。すべてのこれらの変化はまた、すべての他の重要な活性をも低下させたまたは排除した。２つの環ヒドロキシルの分割（ＣＭＳ−０８３、ＣＭＳ−０８４）もまた、神経保護活性を低下させ、ＧＳＨを維持し、かつＰＣ１２細胞分化を誘発するための能力を排除したが、抗炎症活性に影響を与えなかった。フラボン骨格に基づく誘導体とは対照的に、Ｂ環の４’位への単一のジメチルアミノ（ＣＭＳ−１０９、ＣＭＳ−１１２）またはピロリジン基（ＣＭＳ−１１０、ＣＭＳ−１１３）の追加は、３’，４’ジヒドロキシ誘導体と比べて、神経保護活性を増強せず、全体として、他の重要な活性の低下または排除をもたらした。したがって、キノリン骨格の存在下において、Ｂ環上のカテコール基は、活性に不可欠となる。
【０３６７】
転写因子Ｎｒｆ２は、多くの様々な細胞型においてＧＳＨ代謝を調節する際に重要な役割を果たす（Ｌｅｗｅｒｅｎｚら、Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ  ＆  Ｒｅｄｏｘ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ．（２０１１）１４、１４４９−１４６５）。発明者らは、フィセチンが、Ｎｒｆ２を誘発することができ、これが、ＧＳＨレベルを増強するためのその能力と相関することを示した（Ｍａｈｅｒ，Ｐ．ら、Ｇｅｎｅｓ．Ｎｕｔｒ．（２００９）Ｓｅｐ  １０）。ＧＳＨレベルを維持することができる誘導体が、Ｎｒｆ２を増加させることによってそうするかどうかを決定するために、発明者らは、ポジティブコントロールとしてフィセチンを使用して、誘導体により処理した細胞の核におけるＮｒｆ２レベルについて調査した（表４）。驚いたことに、ＧＳＨレベルを維持した誘導体のすべてが、Ｎｒｆ２を誘発したとは限らなかった。これは、ＧＳＨレベルの維持に非常に有効であったにもかかわらずそれらのどれもＮｒｆ２を増加させなかった、キノリン骨格に基づく誘導体について特に該当した。
【０３６８】
【表４】
2014524426.tif 000051
【０３６９】
転写因子Ｎｒｆ２を誘発するためにＧＳＨレベルを維持する誘導体の能力は、未処理および誘導体により処理した細胞の核抽出物のＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびウェスタンブロッティングによってアッセイした。フィセチン処理は、ポジティブコントロールとして使用した。
【０３７０】
議論
いくつかの重要な発見は、この研究から明らかになる。最初に、フラボン骨格内で、ＳＡＲは、４つの別個の生物学的活性の中での様々な選択性を実証し、６００倍まで神経保護活性を改善した（ＣＭＳ−１４０）。インビボにおける効能にとって重要となりそうな活性をすべて維持することが可能であるが、これらの活性は、それぞれ、特異的で別個の構造的な必要条件を有するように思われる。したがって、本明細書において記載される化合物を使用して、インビボにおいて効能を有する化合物に到達するように、他の重要な活性および化合物の物理的特性と、神経保護活性の増強のバランスを保つことは可能である。さらなる発見は、これまでに合成されたフィセチン誘導体の神経保護活性も、他の重要な３つの活性のいずれも、ＴＥＡＣ値によって定義される酸化防止活性との相関を示さないことである（表１）。
【０３７１】
フィセチン誘導体について試験した活性は、それぞれ、別個の構造的な必要条件を示す。たとえば、フラボン構造内で（表１）、ＧＳＨの維持は、最も厳密な構造的な必要条件を提示する。それは、Ａ環の修飾に対して非常に感受性である（ＣＭＳ−０４０、ＣＭＳ−０２７）。第３級アミノ基とのＢ環ヒドロキシルの置換は、３ヒドロキシル基が存在する限り、Ａ環修飾の存在下においてでさえ（ＣＭＳ−１１７、ＣＭＳ−１１８）、ＧＳＨの維持と適合する。対照的に、フラボンベースの誘導体の抗炎症活性は、とりわけ３−ヒドロキシル基の存在下において、Ａ環の修飾に対して特に感受性ではない（たとえばＣＭＳ−０４０対ＣＭＳ−０４Ｐ（別名ＰＭ−００４））。しかしながら、フラボンベースの誘導体の抗炎症活性は、Ｂ環ヒドロキシルの修飾に対してそれほど耐性ではなく（たとえばＣＭＳ−０３６、ＣＭＳ−０７２）、また、３−ヒドロキシル基の存在にかかわらず、第３級アミノ基の置換にそれほど耐性ではない（たとえばＣＭＳ−１１７、ＣＭＳ−１１９）。第３級アミノ基の抗炎症を弱める効果は、３’位にヒドロキシル基を再び追加することによって低下する（ＣＭＳ−１４０）。フラボンベースの誘導体のＰＣ１２分化を促す活性は、それが、Ａ環に対する修飾にいくぶんより耐性であるので、ＧＳＨを維持する活性と類似するが、それほど厳しくない一連の構造的な必要条件を示す（たとえば、ＣＭＳ−０２７ではなくＣＭＳ−０４０）。そのうえ、この活性は、Ｂ環ヒドロキシルの修飾に対して感受性であるが、それは、ＧＳＨを維持する活性を排除する、限られた修飾に耐性がある（たとえばＣＭＳ−０６５）。
【０３７２】
フラボン構造が、開環されて、カルコンを生じたら（表２）、Ｂ環ヒドロキシルの修飾のみが、フィセチン誘導体のＧＳＨを維持する活性に影響を与える。１つの例外は、Ｂ環上にメトキシおよびベンジルオキシ基を有するＣＭＳ−０８６である。カルコンベースの誘導体のＰＣ１２分化を促す活性は、ＧＳＨを維持する活性に類似する構造的な必要条件を示す。興味深いことには、α−ナフサカルコンベースの誘導体の抗炎症活性は、Ｂ環ヒドロキシルの修飾によって排除されるが、ジメチルカルコンベースの誘導体の抗炎症活性は、このタイプの修飾にはるかにより耐性である。
【０３７３】
キノリン骨格は、フラボンの重要な構造エレメントを保存し、他の列挙される活性を維持しながら、神経保護活性の増強（＞４００×まで）をもたらす。これらの誘導体は、フィセチンと比べて、ＴＥＡＣ値（表１）に基づいて、フリーラジカル排除活性が低下しているが、いくつかのものは、記載されるインビトロアッセイにおいて非常に神経保護的である。そのうえ、この骨格を有する最も神経保護的な化合物は、ヒドロキシル基を有するが、それらは、ポリフェノールではない。興味深いことには、この骨格の状況内で、それぞれの活性についての構造的な必要条件は、いくぶんよりはっきりしている。ＧＳＨの維持については、Ｂ環上のカテコール基は、重要である。ＰＣ１２分化を促す活性は、Ｂ環上のカテコール基およびＣ環の４−位上の疎水基の両方を必要とする。抗炎症活性についての必要条件は、いくぶんそれほど厳密ではないが、フラボンベースの誘導体と類似する方式で、Ｂ環ヒドロキシルの修飾に対して感受性である。
【０３７４】
フィセチンの３つの他の列挙される活性から神経保護活性を分離することは可能である。この結果は、３つの活性のどれも、インビトロ虚血アッセイにおいて神経保護における役割を果たさないことを示唆する。分化を促す活性および抗炎症活性の両方は、インビボにおいてＣＮＳの機能を維持する際に重要な役割を有し得るが、単一の細胞型を用いるインビトロアッセイにおいて関連しそうにない。より驚くべきことは、ＧＳＨを維持するための能力が、ＧＳＨ損失がこの細胞死パラダイムの構成成分であるように、インビトロ虚血アッセイにおいて神経保護にとって不可欠ではないということである（Ｍａｈｅｒら、Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．（２００７）１１７３、１１７−１２５）。しかしながら、神経保護について最も低いＥＣ５０を有する化合物はすべて、ＧＳＨレベルの維持に有効である。さらに、ＧＳＨを維持しない有効な神経保護化合物の多くはまた、酸化防止活性についてのインビトロアッセイであるＴＥＡＣアッセイによって定義されるように、好適な酸化防止剤ではない。理論によって束縛されることを望むものではないが、これらの結果は、本明細書において記載される化合物による神経保護が、これらの化合物の、まだ未決定であるが、いくつかの他の作用によって媒介されることを示唆する。
【０３７５】
驚いたことに、ＧＳＨレベルを維持するための能力は、化合物によるＮｒｆ２の誘発と相関しなかった。ＧＳＨ利用の低下またはＧＳＨ搬出の阻害を含む、化合物によって調整され得る、ＧＳＨレベルを維持するための多くの他のメカニズムがある（Ｌｅｗｅｒｅｎｚら、Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ  ＆  Ｒｅｄｏｘ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ．（２０１１）１４、１４４９−１４６５）。
【０３７６】
本明細書において記載されるフィセチン誘導体はまた、ＨＢＤ、ＣＬｏｇＰ、およびｔＰＳＡの点から医薬の化学的特性も改善されており、ＣＮＳ薬剤についての基準内にある（Ｈｉｔｃｈｃｏｃｋら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２００６）４９（２６）、７５５９−７５８３；およびＰａｊｏｕｈｅｓｈら、ＮｅｕｒｏＲｘ．（２００５）２、５４１−５５３）。また、本明細書において記載されるフィセチン誘導体は、それらが、経口投与後に修飾を受けやすいことが知られているＡ環ヒドロキシル基を欠くので、代謝されそうになく、生物学的利用率および脳透過の増強がもたらされる（Ｓｈｉａら、Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．（２００９）５７（１）：８３−８９）。
【０３７７】
多標的ポリフェノールフィセチンから始めて、虚血の細胞培養ベースのモデルにおいて、非常に増強された神経保護活性を示す、多くの誘導体を調製した（たとえばＣＭＳ−０１１  ５０ｎＭ、ＣＭＳ−１２１  ７ｎＭ、およびＣＭＳ−１４０  ５ｎＭ）。より効力のあるフィセチン誘導体の多くはまた、好適なＣＮＳ薬剤様の特性をも有する。これらの誘導体のいくつかはまた、フィセチンの他の３つの記載される活性を維持し、発作および他の神経疾患に対する相関によってそれらの効能を実証する。この主要な活性に必ずしも直接、関連しない他の重要な活性を同時に維持しながら、フィセチンなどのようなポリフェノールの主要な活性を増強することが可能である。
【０３７８】
実施例９−インビトロ発作スクリーニングアッセイ
ＨＴ２２細胞スクリーニング：化学物質ライブラリの急速なスクリーニングのために、化合物ヨード酢酸（ＩＡＡ）の追加によって誘発されるマウスＨＴ２２海馬細胞死アッセイを使用した。ＩＡＡは、解糖酵素グリセルアルデヒド３−リン酸デヒドロゲナーゼ（Ｇ３ＰＤＨ）のよく知られている不可逆阻害剤である。ＩＡＡは、神経細胞において虚血を誘発するために、多くの他の研究において使用された［１１１〜１１５］。神経細胞のＩＡＡ処理後の変化は、虚血発作の動物モデルにおいて見られる変化に対して非常に類似しており［１１６］、膜電位における変化［１１５］、リン脂質の崩壊［１１７］、ＡＴＰの損失、および活性酸素種（ＲＯＳ）における増加［１１２、１１７］を含む。２０μＭ  ＩＡＡによるＨＴ２２細胞の２時間の処理は、ＩＡＡの追加の２０時間後に測定した場合、８５〜９０％細胞死を誘発する。ＩＡＡの特定の用量は、非常に再現可能な細胞死アッセイをもたらし、これは、アッセイを、広範囲の薬剤濃度を試験するための、有効で再現可能なスクリーニングにする。たとえば、図３、５、および６に示されるように、２０μＭ  ＩＡＡによるＨＴ２２細胞の処理によって引き起こされる細胞死は、フラボノイドフィセチンおよびバイカレインによって、用量依存的な方法において予防することができる。
【０３７９】
化学的虚血アッセイのために、ＨＴ２２細胞は、５×１０３細胞／ウェルで９６ウェル組織培養皿において平板培養した［１１８、１１９］。翌日、０．５、２、および５μＭの化合物を追加し、その後、２０μＭ  ＩＡＡを追加する。２時間後、培地は、同じ濃度の化合物を含有するＩＡＡなしの培地と交換する。データポイントはすべて、四通り取り、コントロールは、毒性についての化合物のみのものおよびアッセイに対する干渉についての、細胞なしの化合物を含む。２０時間後、細胞生存能力は、３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）アッセイによって決定する［１２０］。ポジティブなヒット（つまりＩＡＡ毒性からの保護）は、目視検査によって確認する。ＥＣ５０（インビトロにおける５０％の神経保護に必要とされる薬剤の濃度）を決定し、細胞の５０％以上を救出する化合物は、１０ｎＭ〜５０μＭの用量−応答曲線にあわせた。
【０３８０】
興奮毒性細胞アッセイ：興奮毒性により死滅する皮質ニューロンの初代培養物は、以前に記載されるように調製した［１２１］。手短かに言えば、ＢＡＬＢ／ｃマウス胚皮質を刻み、２０分間、０．１％トリプシンにより処理した。遠心分離後、細胞は、８２７Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）プラス１０％ウシ胎児血清中に再懸濁し、１ｍＬ青色Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆピペットチップを通してピペット操作の繰り返しによって引き離す。次いで、細胞は、８２７Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌプラス１０％ウシ胎児血清および２０％グリア増殖調整培地中、９６ウェルポリ−Ｌ−リシンおよびラミニンコーティングマイクロタイタープレート（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ、Ｂｅｄｆｏｒｄ、ＭＡ、ＵＳＡ）において、ウェル当たり１×１０５細胞で平板培養する。２日後に、培地は、吸引し、無血清８２７Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ培地プラス１０μｇ／ｍＬシトシンアラビノシドと交換する。培養物は、平板培養の１１日後に培地を変更せずに使用し、アストロサイトが本質的にない。それらは、１０μＭグルタミン酸に、その後、様々な濃度の化合物に曝露する。細胞生存能力は、蛍光生／死アッセイを使用して、２４時間後に決定する。グリア調整培地は、コンフルエントなラットアストロサイト培養物から調製する［１２１］。細胞は、無血清培地により２回洗浄し、増殖調整培地を産生するために、無血清Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ培地において２日間、インキュベートする。
【０３８１】
実施例１０−虚血を処置し、予防するのに有用なポリフェノール化合物
３つの骨格のいずれかから誘導される化合物は、インビトロ発作スクリーニングアッセイを使用して同定した。活性な神経保護化合物を選択するために反復プロセスを使用した。関心のある化合物は、細胞生存を促し、下記の２つのアッセイのそれぞれにおいてＥＣ５０≦１００ｎＭであった。化合物は、それぞれのアッセイについて特異的な程度まで細胞生存を増加させた。
【０３８２】
（１）２０μＭヨード酢酸（ＩＡＡ）の存在下において、マウスＨＴ２２海馬細胞において≧８０％の細胞生存（インビトロ虚血モデルにおいて）。Ｍａｈｅｒら、Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．２００７、１１７３：１１７−２５を参照されたい。
（２）１０μＭグルタミン酸の存在下において、初代マウス皮質ニューロンにおいて≧３５％の細胞生存（インビトロ興奮毒性アッセイにおいて）。Ｉｓｈｉｇｅら、Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ  Ｂｉｏｌ  Ｍｅｄ，  ２００１，  ３０（４）：ｐ．  ４３３−４６を参照されたい。
【０３８３】
表５は、３つの化合物、フィセチン、クロロゲン酸、およびバイカレインについてのスクリーニング活性データを示す。
【０３８４】
【表５】
2014524426.tif 000052
【０３８５】
表６は、上記（１）についてのＩＡＡ  ＨＴ２２細胞アッセイおよび上記（２）についての初代皮質細胞グルタミン酸アッセイを使用するスクリーニングからの活性の詳細について報告する。上記に定義される一次スクリーニングアッセイを使用して、表５において記載される基準においてあらかじめ決定されたパーセンテージまで細胞生存を増加させる化合物を同定した。表６において列挙される化合物は、３つの骨格から誘導したものであり、上記に述べられる基準を満たす。
【０３８６】
【表６−１】
2014524426.tif 000053
【０３８７】
【表６−２】
2014524426.tif 000054
【０３８８】
表７は、フィセチンベースの化合物の合成および試験に由来する構造活性相関（ＳＡＲ）データを要約する。要約により、ＨＴ２２細胞ＩＡＡバイオアッセイを使用して、生物活性の増強をもたらす、特異的な化学的修飾を記載した。表７はまた、ＨＴ２２細胞バイオアッセイにおいてＥＣ５０≦１００ｎＭを有する、生存＞８０％を増加させる３つの化合物をも含む（つまりＣＭＳ−０３４、ＰＭ−００２、ＣＭＳ−０９２）。
【０３８９】
【表７−１】
2014524426.tif 000055
【０３９０】
【表７−２】
2014524426.tif 000056
【０３９１】
【表７−３】
2014524426.tif 000057
【０３９２】
【表７−４】
2014524426.tif 000058
【０３９３】
フラボンフィセチンは、虚血および発作のいくつかの重要な側面を模倣するマウスＨＴ２２海馬化学的虚血（ＩＡＡ毒性）アッセイを使用して、小分子のライブラリのスクリーニングを通して、リード神経保護化合物として同定した。次いで、フィセチンは、その効力、物理化学的、ならびに吸収、分布、代謝、および排泄（ＡＤＭＥ）特性を改善し、その構造活性相関（ＳＡＲ）を理解するために修飾した。たとえば、脳透過を増強するために、ＣＬｏｇＰを増加させ、ｔＰＳＡを低下させる必要があった。フィセチンの最初のＳＡＲ研究は、Ａ環上のヒドロキシル基の非存在が、その効力を増強することを示唆した。たとえば、化合物２（ＰＭ−００４）および３（ＰＭ−００１）の両方は、フィセチンよりも６倍効力がある。しかしながら、Ｂ環の３−位のヒドロキシル基の存在／非存在は、フィセチンの効力に対して影響を及ぼさない（化合物２および３を比較）。化合物３の効力をさらに改善するために、複数の疎水基をＡ環上の様々な位置に追加した。Ａ環の６および／または７位でのメチル基の追加は、フィセチンの約１０〜１００倍、効力を改善した（たとえば化合物１２（ＰＭ−０１０））が、より疎水性のナフタレン基の追加（たとえば化合物７（ＰＭ−００２）および８（ＰＭ−００３））は、フィセチンの約４０倍、効力を改善し、ＣｌｏｇＰを増加させ、ｔＰＳＡを低下させた。Ｃ環についてのＳＡＲ研究は、４’位のメトキシなどのような水素結合受容基および３’位のヒドロキシルなどのような水素結合供与基が、効力をさらに増強したことを示唆した。たとえば、化合物１７（ＣＭＳ−０６４）、１８（ＣＭＳ−０６９）、および２０（ＣＭＳ−０９２）は、４０ｎＭ未満のＥＣ５０を有する、最も効力のある化合物の一部である。しかしながら、化合物のいくつかは、特定の量（≧８０％）まで生存を増加させなかったので、ＣＭＳ−０９２のみが保留化合物となる。これらの化合物はまた、脳透過の増強と一致するＣＬｏｇＰおよびｔＰＳＡを有する。
【０３９４】
フラボン骨格もまた、効力およびＣＬｏｇＰなどのような物理化学的特性をさらに改善するために、修飾し、それを、キノリン骨格に変化させた。ある実施形態において、キノリン環「Ｎ」原子およびキノリン環の４−位置のアルコキシ基ならびに３’，４’−二置換Ｃ環を含めて、Ｂ環上の水素結合受容体などのように、キノリン骨格において、フラボンの構造エレメントが、保存された。キノリン骨格に対するＳＡＲは、キノリン環の４−位のより疎水性のアルコキシ基が、効力を増強したことを示した（イソプロポキシ〜エトキシ＞メトキシ）。フィセチンよりも約１４０倍効力があり、最も活性なフラボン、化合物２０（ＣＭＳ−０９２）と同様に効力がある化合物２３（ＣＭＳ−０２３）を同定した。
【０３９５】
ＳＡＲの提供に加えて、表７は、保留化合物として果たしてもよいさらなる化合物、たとえばＰＭ−００８、ＣＭＳ−０４０、ＰＭ−０１０、ＰＭ−０１３、ＰＭ−０１２、ＣＭＳ−０１１、ＣＭＳ−００７、ＣＭＳ−０２３、およびＣＭＳ−０２４の情報を提供する。しかしながら、他の化合物、たとえばＣＭＳ−０３４、ＰＭ−００２、ＣＭＳ−０９２は、ＨＴ２２細胞アッセイにおいて、ＥＣ５０≦１００ｎＭを有する。
【０３９６】
表８は、ＨＴ２２細胞アッセイにおいて基準（ＥＣ５０≦１００ｎＭで生存＞８０％を増加させる）を満たし、化合物ＣＭＳ−１１７、ＣＭＳ−１１８、ＣＭＳ−１２１、ＣＭＳ−１２９、ＣＭＳ−１３９、およびＣＭＳ−１４０を含む一連の化合物（たとえばＣＭＳ−０３４、ＣＭＳ−０２９、ＰＭ−００２、ＣＭＳ−１１７、ＣＭＳ−１１８、ＣＭＳ−１２１、ＣＭＳ−１２９、ＣＭＳ−１３９、およびＣＭＳ−１４０）を示す。
【０３９７】
【表８−１】
2014524426.tif 000059
【０３９８】
【表８−２】
2014524426.tif 000060
【０３９９】
選択した化合物は、Ａｍｅｓ試験（たとえばＭｏｒｔｅｌｍａｎｓら、Ｍｕｔａｔ．Ｒｅｓ．（２０００）４５５（１−２）：２９−６０を参照されたい）、ＣＰ４５０アッセイ、およびＭＤＣＫ細胞アッセイにおける血液脳関門（ＢＢＢ）透過を使用して、プロファイルした（Ｗａｎｇら、Ｉｎｔｌ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ（２００５）２８８（２）：３４９−３５９およびＲｕｂｉｎら、Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ（１９９１）１１５（６）：１７２５−３５を参照されたい）。関心のある化合物は、以下の基準を満たす。
【０４００】
（１）化合物は、濃度＜１０μＭで決定されるＡｍｅｓ突然変異誘発性アッセイにおいて突然変異誘発性にならない。
【０４０１】
（２）ＣＹＰ４５０阻害についてのＩＣ５０は、≧１０μＭとなるべきである。この発見レベルの試験は、シトクロムＰ４５０酵素（ＣＹＰ４５０１Ａ２、ＣＹＰ４５０２Ｃ９、ＣＹＰ４５０３Ａ４、およびＣＹＰ４５０２Ｄ６）がどのように化合物と相互作用するかを決定する。この試験は、排泄および解毒についての代謝を担う酵素系が、主として、肝臓におけるシトクロムＰ４５０系であるので、行われる。
【０４０２】
（３）血液脳関門（ＢＢＢ）透過についてのＭＤＣＫ細胞アッセイにおいて、両方向についての見かけの透過係数（Ｐａｐｐ）は、流出比と共に計算される（Ｐａｐｐ  Ｂ→Ａ／Ｐａｐｐ  Ａ→Ｂ）。ＢＢＢ透過についての可能性は、
１）Ｐａｐｐ  Ａ→Ｂ≧３．０×１０−６ｃｍ／ｓおよび流出＜３．０である場合、高い；
２）Ｐａｐｐ  Ａ→Ｂ≧３．０×１０−６ｃｍ／ｓおよび１０＞流出≧３．０×１０−６ｃｍ／ｓである場合、中程度；
３）Ｐａｐｐ  Ａ→Ｂ≧３．０×１０−６ｃｍ／ｓおよび流出≧１０またはＰａｐｐ  Ａ→Ｂ＜３．０×１０−６ｃｍ／ｓである場合、低いと考えられるであろう。
【０４０３】
ＭＤＣＫアッセイ戦略は、高いおよび中程度のカテゴリーにおける化合物のみが遂行されるので、ＢＢＢを横断するのに好適な可能性を有する化合物の同定を確実にする。
【０４０４】
Ａｍｅｓアッセイ、シトクロムＰ４５０アッセイ、およびＭＤＣＫアッセイにおいてその選択基準を満たす化合物は、ＣｅｅＴｏｘパネルを使用し、その結果としてのＣｔｏｘランキングと共にさらにスクリーニングする。ＭｃＫｉｍ、Ｃｏｍｂ  Ｃｈｅｍ  Ｈｉｇｈ  Ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ  Ｓｃｒｅｅｎ．（２０１０）１３（２）：１８８−２０６；ＭｃＫｉｍら、Ｃｕｔａｎ  Ｏｃｕｌ  Ｔｏｘｉｃｏｌ．（２０１０）２９（３）：１７１−９２；およびＬａｐｃｈａｋ  ａｎｄ  ＭｃＫｉｍ、Ｔｒａｎｓｌ  Ｓｔｒｏｋｅ  Ｒｅｓ．（２０１１）２（１）：５１−５９を参照されたい。ＣｅｅＴｏｘの量的な測定値は、以下を含む：
（１）膜完全性（ＧＳＴまたはアデニル酸キナーゼ漏出）
（２）ＭＴＴおよびＡＴＰレベルを測定するミトコンドリアの機能：
（３）プロピジウムヨージドを使用する細胞増殖
（４）ＧＳＨおよび８−イソプロスタンの両方を測定する酸化ストレス
（５）カスパーゼ３活性化を測定するアポトーシス
（６）Ｐｇｐ相互作用
（７）溶解性
（８）ミクロソームの代謝安定性。
【０４０５】
ＣｅｅＴｏｘアルゴリズムに基づいて、上記に記載される最初の７つのアッセイのＣｅｅＴｏｘパネルからの結果は、細胞毒性に基づいて化合物を順位付けし、可能性のある細胞内標的および毒性のメカニズムを同定し、かつラットの１４日間のインビボ繰り返し用量研究において毒性が生じるであろうと期待される推測濃度（Ｃｔｏｘ値）を提供するために使用される。
【０４０６】
ミクロソーム代謝安定性アッセイは、化合物安定性を決定するために行われる。結果は、ＣＴｏｘランキングとは別々に示され、化合物が静脈内に臨床的に投与されるので、定まったカットオフ基準は、確立されていない。
成功の基準：（１）インビボにおける効果の可能性：
Ｃｔｏｘランキング（μＭ）１〜２０  高い−続行せず
２１から５０  中程度−続行
５１〜３００  低い−続行。
【０４０７】
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４６．  Ｓｃａｌｂｅｒｔ，  Ａ．，  ｅｔ  ａｌ．  Ｄｉｅｔａｒｙ  ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ｏｆ  ｄｉｓｅａｓｅｓ．  Ｃｒｉｔ  Ｒｅｖ  Ｆｏｏｄ  Ｓｃｉ  Ｎｕｔｒ，  ２００５．  ４５（４）：  ｐ  ２８７−３０６．
４７．  Ｄａｊａｓ，  Ｆ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｂｙ  ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ．  Ｂｒａｚ  Ｊ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ  Ｒｅｓ，  ２００３．  ３６（１２）：  ｐ．  １６１３−１６２０．
４８．  Ｂａｕｒ，  Ｊ．Ａ．  ａｎｄ  Ｄ．  Ａ．  Ｓｉｎｃｌａｉｒ，  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｏｆ  ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ：  ｔｈｅ  ｉｎ  ｖｉｖｏ  ｅｖｉｄｅｎｃｅ．  Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ，  ２００６．  ５（６）：  ｐ．  ４９３−５０６．
４９．  Ｒａｍａｓｓａｍｙ，  Ｃ．，  Ｅｍｅｒｇｉｎｇ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｉｃ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ  ｄｉｓｅａｓｅｓ：  ａ  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｔｈｅｉｒ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｔａｒｇｅｔｓ．  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，  ２００６，  ５４５（１）：  ｐ．  ５１−６４．
５０．  Ｄａｊａｓ，  Ｆ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｅｌｌ  ｃｕｌｔｕｒｅ  ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｎ  ｖｉｖｏ  ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｃａｐａｃｉｔｙ  ｏｆ  ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ．  Ｎｅｕｒｏｔｏｘ  Ｒｅｓ，  ２００３．  ５（６）：  ｐ．  ４２５−３２．
５１．  Ｒｉｖｅｒａ，  Ｆ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｏｍｅ  ａｓｐｅｃｔｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｉｎ  ｖｉｖｏ  ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｃａｐａｃｉｔｙ  ｏｆ  ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ：  ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ．  Ｎｅｕｒｏｔｏｘ  Ｒｅｓ，  ２００４．  ６（７−８）：  ｐ．  ５４３−５３．
５２．  Ｗｏｏｄｍａｎ，  Ｏ．Ｌ．  ａｎｄ  Ｅ．  Ｃｈａｎ，  Ｖａｓｃｕｌａｒ  ａｎｄ  ａｎｔｉ−ｏｘｉｄａｎｔ  ａｃｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｆｌａｖｏｎｏｌｓ  ａｎｄ  ｆｌａｖｏｎｅｓ．  Ｃｌｉｎ  Ｅｘｐ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ，  ２００４．  ３１（１１）：  ｐ．  ７８６−９０．
５３．  Ｉｓｈｉｇｅ，  Ｋ．，  Ｄ．  Ｓｃｈｕｂｅｒｔ，  ａｎｄ  Ｙ．  Ｓａｇａｒａ，  Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ  ｐｒｏｔｅｃｔ  ｎｅｕｒｏｎａｌ  ｃｅｌｌｓ  ｆｒｏｍ  ｏｘｉｄａｔｉｖｅ  ｓｔｒｅｓｓ  ｂｙ  ｔｈｒｅｅ  ｄｉｓｔｉｎｃｔ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ．  Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ  Ｂｉｏｌ  Ｍｅｄ，  ２００１．  ３０（４）：  ｐ．  ４３３−４６．
５４．  Ａｕｄｄｙ，  Ｂ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ  ｏｆ  ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｒｅｅ  Ｉｎｄｉａｎ  ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  ｐｌａｎｔｓ，  ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌｌｙ  ｕｓｅｄ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ  ｄｉｓｅａｓｅｓ．  Ｊ  Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ，  ２００３．  ８４（２−３）：  ｐ．  １３１−８．
５５．  Ｌａｏ，  Ｃ．Ｊ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍｉｃｒｏｇｌｉａ，  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ａｎｄ  ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−１ｂｅｔａ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｓｏｐｈｏｒａ  ｊａｐｏｎｉｃａ  Ｉ．  ｏｎ  ｃｅｒｅｂｒａｌ  ｉｎｆａｒｃｔ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｂｙ  ｉｓｃｈｅｍｉａ−ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ  ｉｎ  ｒａｔｓ．  Ａｍ  Ｊ  Ｃｈｉｎ  Ｍｅｄ，  ２００５．  ３３（３）：  ｐ．  ４２５−３８．
５６．  Ｓｉｎｈａ，  Ｋ．，  Ｇ．  Ｃｈａｕｄｈａｒｙ，  ａｎｄ  Ｙ．Ｋ．  Ｇｕｐｔａ，  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ  ａｇａｉｎｓｔ  ｏｘｉｄａｔｉｖｅ  ｓｔｒｅｓｓ  ｉｎ  ｍｉｄｄｌｅ  ｃｅｒｅｂｒａｌ  ａｒｔｅｒｙ  ｏｃｃｌｕｓｉｏｎ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｓｔｒｏｋｅ  ｉｎ  ｒａｔｓ．  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ，  ２００２．  ７１  （６）：  ｐ．  ６５５−  ６５．
５７．  Ｈｕａｎｇ，  Ｓ．Ｓ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ  ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｉｎｆａｒｃｔ  ｓｉｚｅ  ｉｎ  Ｌｏｎｇ−Ｅｖａｎｓ  ｒａｔｓ  ｓｕｂｊｅｃｔｅｄ  ｔｏ  ｆｏｃａｌ  ｃｅｒｅｂｒａｌ  ｉｓｃｈｅｍｉａ．  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ，  ２００１．  ６９（９）：  ｐ．  １０５７−６５．
５８．  Ｉｋｅｄａ，  Ｋ．，  Ｈ．  Ｎｅｇｉｓｈｉ，  ａｎｄ  Ｙ．  Ｙａｍｏｒｉ，  Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ  ｎｕｔｒｉｅｎｔｓ  ａｎｄ  ｈｙｐｏｘｉａ／ｉｓｃｈｅｍｉａ  ｂｒａｉｎ  ｉｎｊｕｒｙ  ｉｎ  ｒｏｄｅｎｔｓ．  Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ，  ２００３．  １８９（１−２）：  ｐ．  ５５−６１．
５９．  Ｙｅｎ，  Ｗ．  Ｊ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  ｒｏａｓｔｅｄ  ｃｏｆｆｅｅ  ｒｅｓｉｄｕｅｓ．  Ｊ  Ａｇｒｉｃ  Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ，  ２００５．  ５３（７）：  ｐ．  ２６５８−６３．
６０．  Ｚｈｅｎｇ，  Ｗ．  ａｎｄ  Ｓ．Ｙ．  Ｗａｎｇ，  Ｏｘｙｇｅｎ  ｒａｄｉｃａｌ  ａｂｓｏｒｂｉｎｇ  ｃａｐａｃｉｔｙ  ｏｆ  ｐｈｅｎｏｌｉｃｓ  ｉｎ  ｂｌｕｅｂｅｒｒｉｅｓ，  ｃｒａｎｂｅｒｒｉｅｓ，  ｃｈｏｋｅｂｅｒｒｉｅｓ，  ａｎｄ  ｌｉｎｇｏｎｂｅｒｒｉｅｓ．  Ｊ  Ａｇｒｉｃ  Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ，  ２００３．  ５１（２）：  ｐ．  ５０２−９．
６１．  Ａｒｕｏｍａ，  Ｏ．Ｉ．，  Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ  ａｃｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｐｌａｎｔ  ｆｏｏｄｓ：  ｕｓｅ  ｏｆ  ｏｘｉｄａｔｉｖｅ  ＤＮＡ  ｄａｍａｇｅ  ａｓ  ａ  ｔｏｏｌ  ｆｏｒ  ｓｔｕｄｙｉｎｇ  ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ  ｅｆｆｉｃａｃｙ．  Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ  Ｒｅｓ，  １９９９．  ３０（６）：  ｐ．  ４１９−２７．
６２．  Ｃｈａｓｓｅｖｅｎｔ，  Ｆ．，  ［Ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ  ａｃｉｄ，  ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｎｄ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ］．  Ａｎｎ  Ｎｕｔｒ  Ａｌｉｍｅｎｔ，  １９６９．  ２３（１）：  ｐ．  Ｓｕｐｐｌ：  １−１４．
６３．  Ｆａｒａｈ，  Ａ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ  ａｃｉｄｓ  ａｎｄ  ｌａｃｔｏｎｅｓ  ｉｎ  ｒｅｇｕｌａｒ  ａｎｄ  ｗａｔｅｒ−ｄｅｃａｆｆｅｉｎａｔｅｄ  Ａｒａｂｉｃａ  ｃｏｆｆｅｅｓ．  Ｊ  Ａｇｒｉｃ  Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ，  ２００６．  ５４（２）：  ｐ．  ３７４−８１．
６４．  Ｆａｒａｈ  Ａ，  Ｄ．Ｃ．，  Ｐｈｅｎｏｌｉｃ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ｉｎ  ｃｏｆｆｅｅ．  Ｂｒ  Ｊ  Ｐｌａｎｔ  Ｐｈｙｓｉｏｌ，  ２００６．  １８（１）：  ｐ．  ２３−３６．
６５．  ｄｏｓ  Ｓａｎｔｏｓ，  Ｍ．Ｄ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ，  ａｎａｌｇｅｓｉｃ  ａｎｄ  ａｎｔｉｐｙｒｅｔｉｃ  ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｎａｔｕｒａｌ  ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ  ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ  ａｃｉｄ．  Ｂｉｏｌ  Ｐｈａｒｍ  Ｂｕｌｌ，  ２００６．  ２９（１１）：  ｐ．  ２２３６−４０．
６６．  Ｊｉｎ，  Ｕ．Ｈ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ａ  ｐｈｅｎｏｌｉｃ  ｃｏｍｐｏｕｎｄ，  ５−ｃａｆｆｅｏｙｌｑｕｉｎｉｃ  ａｃｉｄ  （ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ  ａｃｉｄ），  ｉｓ  ａ  ｎｅｗ  ｔｙｐｅ  ａｎｄ  ｓｔｒｏｎｇ  ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ−９  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ：  ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｆｒｏｍ  ｍｅｔｈａｎｏｌ  ｅｘｔｒａｃｔ  ｏｆ  Ｅｕｏｎｙｍｕｓ  ａｌａｔｕｓ．  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ，  ２００５．  ７７（２２）：  ｐ．  ２７６０−９．
６７．  Ｌａｐｃｈａｋ，  Ｐ．Ａ．  ａｎｄ  Ｄ．Ｍ．  Ａｒａｕｊｏ，  Ｒｅｄｕｃｉｎｇ  ｂｌｅｅｄｉｎｇ  ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ａｆｔｅｒ  ｔｈｒｏｍｂｏｌｙｔｉｃ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  ｓｔｒｏｋｅ：  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｏｆ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ａｎｄ  ｓｐｉｎ  ｔｒａｐ  ａｇｅｎｔｓ．  ＣＮＳ  Ｄｒｕｇｓ，  ２００１．  １５（１１）：  ｐ．  ８１９−２９．
６８．  Ｌａｐｃｈａｋ，  Ｐ．Ａ．，  Ｄ．Ｆ．  Ｃｈａｐｍａｎ，  ａｎｄ  Ｊ．Ａ．  Ｚｉｖｉｎ，  Ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｒｅｄｕｃｅｓ  ｔｈｒｏｍｂｏｌｙｔｉｃ  （ｔｉｓｓｕｅ  ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ  ａｃｔｉｖａｔｏｒ）−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ  ａｆｔｅｒ  ｔｈｒｏｍｂｏｅｍｂｏｌｉｃ  ｓｔｒｏｋｅ．  Ｓｔｒｏｋｅ，  ２０００．  ３１（１２）：  ｐ．  ３０３４−４０．
６９．  Ｍｏｎｔａｎｅｒ，  Ｊ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｓ  ｒｅｌａｔｅｄ  ｔｏ  ｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃ  ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ａｆｔｅｒ  ｃａｒｄｉｏｅｍｂｏｌｉｃ  ｓｔｒｏｋｅ．  Ｓｔｒｏｋｅ，  ２００１．  ３２（１２）：  ｐ．  ２７６２−７．
７０．  Ｍｏｎｔａｎｅｒ，  Ｊ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ−９  ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｌｅｖｅｌ  ｐｒｅｄｉｃｔｓ  ｉｎｔｒａｃｒａｎｉａｌ  ｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃ  ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ａｆｔｅｒ  ｔｈｒｏｍｂｏｌｙｓｉｓ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｓｔｒｏｋｅ．  Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，  ２００３．  １０７（４）：  ｐ．  ５９８−６０３．
７１．  Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ，  Ｇ．Ａ．，  Ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ  ｉｎ  ｂｒａｉｎ  ｉｎｊｕｒｙ．  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｔｒａｕｍａ，  １９９５．  １２（５）：  ｐ．  ８３３−４２．
７２．  Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ，  Ｇ．  Ａ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ  ｉｎ  ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ  ｉｎｊｕｒｙ  ｔｏ  ｒａｔ  ｂｒａｉｎ：  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＭＭＰ−９  ｌｉｎｋｅｄ  ｔｏ  ｓｔｒｏｍｅｌｙｓｉｎ−１  ａｎｄ  ｍｉｃｒｏｇｌｉａ  ｉｎ  ｃｅｌｌ  ｃｕｌｔｕｒｅｓ．  Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ，  ２００１．  ８９３（１−２）：  ｐ．  １０４−１２．
７３．  Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ，  Ｇ．Ａ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｔｕｍｏｒ  ｎｅｃｒｏｓｉｓ  ｆａｃｔｏｒ−ａｌｐｈａ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｇｅｌａｔｉｎａｓｅ  Ｂ  ｃａｕｓｅｓ  ｄｅｌａｙｅｄ  ｏｐｅｎｉｎｇ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｂｌｏｏｄ−ｂｒａｉｎ  ｂａｒｒｉｅｒ：  ａｎ  ｅｘｐａｎｄｅｄ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｗｉｎｄｏｗ．  Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ，  １９９５．  ７０３（１−  ２）：  ｐ．  １５１−５．
７４．  Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ，  Ｇ．Ａ．  ａｎｄ  Ｍ．  Ｎａｖｒａｔｉｌ，  Ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｂｌｏｃｋｓ  ｅｄｅｍａ  ｉｎ  ｉｎｔｒａｃｅｒｅｂｒａｌ  ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｒａｔ．  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，  １９９７．  ４８（４）：  ｐ．  ９２１−６．
７５．  Ｌｏｔｉｔｏ，  Ｓ．Ｂ．  ａｎｄ  Ｂ．  Ｆｒｅｉ，  Ｃｏｎｓｕｍｐｔｉｏｎ  ｏｆ  ｆｌａｖｏｎｏｉｄ−ｒｉｃｈ  ｆｏｏｄｓ  ａｎｄ  ｉｎｃｒｅａｓｅｄ  ｐｌａｓｍａ  ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ  ｃａｐａｃｉｔｙ  ｉｎ  ｈｕｍａｎｓ：  Ｃａｕｓｅ，  ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅ，  ｏｒ  ｅｐｉｐｈｅｎｏｍｅｎｏｎ？  Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ  Ｂｉｏｌ  Ｍｅｄ，  ２００６．  ４１  （１２）：  ｐ．  １７２７−４６．
７６．  Ｍａｈｅｒ，  Ｐ．  ａｎｄ  Ｄ．  Ｓｃｈｕｂｅｒｔ，  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｂｙ  ｒｅａｃｔｉｖｅ  ｏｘｙｇｅｎ  ｓｐｅｃｉｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｎｅｒｖｏｕｓ  ｓｙｓｔｅｍ．  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ，  ２０００．  ５７（８−９）：  ｐ．  １２８７−３０５．
７７．  Ｓｈｉｍｉｚｕ，  Ｔ．  ａｎｄ  Ｌ．Ｓ．  Ｗｏｌｆｅ，  Ａｒａｃｈｉｄｏｎｉｃ  ａｃｉｄ  ｃａｓｃａｄｅ  ａｎｄ  ｓｉｇｎａｌ  ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ．  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ，  １９９０．  ５５（１）：  ｐ．  １−１５．
７８．  ｖａｎ  Ｌｅｙｅｎ，  Ｋ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｏｖｅｌ  ｌｉｐｏｘｙｇｅｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ａｓ  ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｒｅａｇｅｎｔｓ．  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｒｅｓ，  ２００８．  ８６（４）：  ｐ．  ９０４−９．
７９．  Ｓｈｏｒｎｉｃｋ，  Ｌ．  Ｐ．  ａｎｄ  Ｍ．  Ｊ．  Ｈｏｌｔｚｍａｎ，  Ａ  ｃｒｙｐｔｉｃ，  ｍｉｃｒｏｓｏｍａｌ−ｔｙｐｅ  ａｒａｃｈｉｄｏｎａｔｅ  １２−ｌｉｐｏｘｙｇｅｎａｓｅ  ｉｓ  ｔｏｎｉｃａｌｌｙ  ｉｎａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｂｙ  ｏｘｉｄａｔｉｏｎ−ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｃｕｌｔｕｒｅｄ  ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  ｃｅｌｌｓ．  Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ，  １９９３．  ２６８（１）：  ｐ．  ３７１−６．
８０．  Ｌｉ，  Ｙ．，  Ｐ．  Ｍａｈｅｒ，  ａｎｄ  Ｄ．  Ｓｃｈｕｂｅｒｔ，  Ａ  ｒｏｌｅ  ｆｏｒ  １２−ｌｉｐｏｘｙｇｅｎａｓｅ  ｉｎ  ｎｅｒｖｅ  ｃｅｌｌ  ｄｅａｔｈ  ｃａｕｓｅｄ  ｂｙ  ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ  ｄｅｐｌｅｔｉｏｎ．  Ｎｅｕｒｏｎ，  １９９７．  １９：  ｐ．  ４５３−４６３．
８１．  Ｍｏｒｉ，  Ｈ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｐｔｅｒｉｎ−６−ａｌｄｅｈｙｄｅ  ｉｎ  ｇｅｒｂｉｌ  ｇｌｏｂａｌ  ｂｒａｉｎ  ｉｓｃｈｅｍｉａ：  ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｗｉｔｈ  ｔｈｏｓｅ  ｏｆ  ａｌｐｈａ−ｐｈｅｎｙｌ−Ｎ−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ  ｎｉｔｒｏｎｅ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｌｅｔｔ，  １９９８．  ２４１  （２−３）：  ｐ．  ９９−１０２．
８２．  Ｈｗａｎｇ  ，  Ｙ  ．Ｓ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｈｗａｎｇｒｙｕｎ−Ｈａｅ−Ｄｏｋ−ｔａｎｇ  （Ｈｕａｎｇｌｉａｎ−Ｊｉｅ−Ｄｕ−Ｔａｎｇ）  ｅｘｔｒａｃｔ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ  ｒｅｄｕｃｅ  ｉｓｃｈｅｍｉａ−ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ  ｂｒａｉｎ  ｉｎｊｕｒｙ  ａｎｄ  ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ  ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｒａｔｓ．  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ，  ２００２．  ７１（１８）：  ｐ．  ２１０５−１７．
８３．  Ｈｕａｎｇ，  Ｍ．Ｔ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｃｕｒｃｕｍｉｎ，  ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ  ａｃｉｄ，  ｃａｆｆｅｉｃ  ａｃｉｄ，  ａｎｄ  ｆｅｒｕｌｉｃ  ａｃｉｄ  ｏｎ  ｔｕｍｏｒ  ｐｒｏｍｏｔｉｏｎ  ｉｎ  ｍｏｕｓｅ  ｓｋｉｎ  ｂｙ  １２−０−ｔｅｔｒａｄｅｃａｎｏｙｌｐｈｏｒｂｏｌ−  １３−ａｃｅｔａｔｅ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ，  １９８８．  ４８（２１）：  ｐ．  ５９４１−６．
８４．  Ｍｉｄｄｌｅｔｏｎ，  Ｅ．，  Ｃ．  Ｋａｎｄａｓｗａｍｉ，  ａｎｄ  Ｔ．Ｃ．  Ｔｈｅｏｈａｒｉｄｅｓ，  Ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｐｌａｎｔ  ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ  ｏｎ  ｍａｍｍａｌｉａｎ  ｃｅｌｌｓ：  ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，  ｈｅａｒｔ  ｄｉｓｅａｓｅ  ａｎｄ  ｃａｎｃｅｒ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｒｅｖ．，  ２０００．  ５２：  ｐ．  ６７３−７５１．
８５．  Ｓｅｋｉｙａ，  Ｋ．  ａｎｄ  Ｈ．  Ｏｋｕｄａ，  Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｌａｔｅｌｅｔ  ｌｉｐｏｘｙｇｅｎａｓｅ  ｂｙ  Ｂａｉｃａｌｅｉｎ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ，  １９８２．  １０５（３）：  ｐ．  １０９０−５．
８６．  Ｙｏｏｎ，  Ｊ．  Ｈ．  ａｎｄ  Ｓ．  Ｊ．  Ｂａｅｋ，  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｔａｒｇｅｔｓ  ｏｆ  ｄｉｅｔａｒｙ  ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ  ｗｉｔｈ  ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ．  Ｙｏｎｓｅｉ  Ｍｅｄ  Ｊ，  ２００５．  ４６（５）：  ｐ．  ５８５−９６．
８７．  ｖａｎ  Ｌｅｙｅｎ，  Ｋ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂａｉｃａｌｅｉｎ  ａｎｄ  １２／１５−ｌｉｐｏｘｙｇｅｎａｓｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｉｓｃｈｅｍｉｃ  ｂｒａｉｎ．  Ｓｔｒｏｋｅ，  ２００６．  ３７（１２）：  ｐ．  ３０１４−８．
８８．  Ｍａｒｃｈｅｓｅｌｌｉ，  Ｖ．  Ｌ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｏｖｅｌ  ｄｏｃｏｓａｎｏｉｄｓ  ｉｎｈｉｂｉｔ  ｂｒａｉｎ  ｉｓｃｈｅｍｉａ−ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ  ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｐｒｏ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｇｅｎｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．  Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ，  ２００３．  ２７８（４４）：  ｐ．  ４３８０７−１７．
８９．  Ｚｈａｎｇ，  Ｂ．，  Ｈ．  Ｃａｏ，  ａｎｄ  Ｇ．Ｎ．  Ｒａｏ，  １５（Ｓ）−ｈｙｄｒｏｘｙｅｉｃｏｓａｔｅｔｒａｅｎｏｉｃ  ａｃｉｄ  ｉｎｄｕｃｅｓ  ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｖｉａ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｌ３Ｋ−Ａｋｔ−ｍＴＯＲ−Ｓ６Ｋｌ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ，  ２００５．  ６５（１６）：  ｐ．  ７２８３−９１．
９０．  Ｊｉｎ，  Ｇ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  ａｇａｉｎｓｔ  ｃｅｒｅｂｒｏｖａｓｃｕｌａｒ  ｉｎｊｕｒｙ：  ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎｓ  ｏｆ  １２／１５−ｌｉｐｏｘｙｇｅｎａｓｅ  ｔｏ  ｅｄｅｍａ  ｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ａｆｔｅｒ  ｔｒａｎｓｉｅｎｔ  ｆｏｃａｌ  ｉｓｃｈｅｍｉａ．  Ｓｔｒｏｋｅ，  ２００８．  ３９（９）：  ｐ．  ２５３８−４３．
９１．  Ｚｉｖｉｎ，  Ｊ．Ａ．  ａｎｄ  Ｄ．Ｒ．  Ｗａｕｄ，  Ｑｕａｎｔａ１  ｂｉｏａｓｓａｙ  ａｎｄ  ｓｔｒｏｋｅ．  Ｓｔｒｏｋｅ，  １９９２．  ２３（５）：  ｐ．  ７６７−７３．
９２．  Ａｂｅ，  Ｋ．，  Ｍ．  Ｔａｋａｙａｎａｇｉ，  ａｎｄ  Ｈ．  Ｓａｉｔｏ，  Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  ｈｕｍａｎ  ｂａｓｉｃ  ＦＧＦ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｍｏｄｉｆｉｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ＣＳ２３  ｏｎ  ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｏｆ  ｐｒｉｍａｒｙ  ｃｕｌｔｕｒｅｄ  ｎｅｕｒｏｎｓ  ｆｒｏｍ  ｖａｒｉｏｕｓ  ｒｅｇｉｏｎｓ  ｏｆ  ｆｅｔａｌ  ｒａｔ  ｂｒａｉｎ．  Ｊａｐａｎ  Ｊ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，  １９９０．  ５３：  ｐ．  ２２１−２２７．
９３．  Ｌｅｅ，  Ｈ．Ｈ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｎａｔｕｒａｌ  ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ  ｏｎ  ｎｅｕｒｏｎａｌ  ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｉｎ  ｐｒｉｍａｒｙ  ｃｕｌｔｕｒｅｄ  ｃｅｎｔｒａｌ  ｎｅｕｒｏｎｓ  ａｇａｉｎｓｔ  ｇｌｕｔａｍａｔｅ−  ａｎｄ  ｇｌｕｃｏｓｅ  ｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｎｅｕｒｏｎａｌ  ｄｅａｔｈ．  Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ，  ２００３．  ９８６（１−２）：  ｐ．  １０３−１３．
９４．  Ｌａｐｃｈａｋ，  Ｐ．Ａ．  ａｎｄ  Ｊ．Ａ．  Ｚｉｖｉｎ，  Ｅｂｓｅｌｅｎ，  ａ  ｓｅｌｅｎｏ−ｏｒｇａｎｉｃ  ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ，  ｉｓ  ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ａｆｔｅｒ  ｅｍｏｂｌｉｃ  ｓｔｒｏｋｅｓ  ｉｎ  ｒａｂｂｉｔｓ  −  Ｓｙｎｅｒｇｉｓｍ  ｗｉｔｈ  ｌｏｗ  ｄｏｓｅ  ｔｉｓｓｕｅ  ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ  ａｃｔｉｖａｔｏｒ．  Ｓｔｒｏｋｅ，  ２００３．  ３４：  ｐ．  ２０１３−２０１８．
９５．  Ｌａｐｃｈａｋ，  Ｐ．Ａ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｔｒａｎｓｃｒａｎｉａｌ  ｎｅａｒ−ｉｎｆｒａｒｅｄ  ｌｉｇｈｔ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｉｍｐｒｏｖｅｓ  ｍｏｔｏｒ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ  ｅｍｂｏｌｉｃ  ｓｔｒｏｋｅｓ  ｉｎ  ｒａｂｂｉｔｓ：  Ａｎ  ｅｘｔｅｎｄｅｄ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｗｉｎｄｏｗ  ｓｔｕｄｙ  ｕｓｉｎｇ  ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ  ａｎｄ  ｐｕｌｓｅ  ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｍｏｄｅｓ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，  ２００７．  １４８（４）：  ｐ．  ９０７−９１４．
９６．  Ｌａｐｃｈａｋ，  Ｐ．Ａ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｓｐｉｎ  ｔｒａｐ  ａｇｅｎｔ  ｄｉｓｏｄｉｕｍ−  ［ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌｉｍｉｎｏ）ｍｅｔｈｙｌ］  ｂｅｎｚｅｎｅ−１，３−ｄｉｓｕｌｆｏｎａｔｅ  Ｎ−ｏｘｉｄｅ  （ｇｅｎｅｒｉｃ  ＮＸＹ−０５９）  ｏｎ  ｉｎｔｒａｃｅｒｅｂｒａｌ  ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ  ｉｎ  ａ  ｒａｂｂｉｔ  Ｌａｒｇｅ  ｃｌｏｔ  ｅｍｂｏｌｉｃ  ｓｔｒｏｋｅ  ｍｏｄｅｌ：  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｓｔｕｄｉｅｓ  ｗｉｔｈ  ｔｉｓｓｕｅ  ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ  ａｃｔｉｖａｔｏｒ．  Ｓｔｒｏｋｅ，  ２００２．  ３３（６）：  ｐ．  １６６５−７０．
９７．  Ｃｈｏｕｄｈｒｉ，  Ｔ．Ｆ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｕｓｅ  ｏｆ  ａ  ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ  ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ  ａｓｓａｙ  ｔｏ  ｏｂｊｅｃｔｉｖｅｌｙ  ｑｕａｎｔｉｆｙ  ｉｎｔｒａｃｅｒｅｂｒａｌ  ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ  ｉｎ  ｍｉｃｅ．  Ｓｔｒｏｋｅ，  １９９７．  ２８（１，１）：  ｐ．  ２２９６−３０２．
９８．  Ｗａｕｄ，  Ｄ．Ｒ．，  Ｏｎ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｓｓａｙｓ  ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ  ｑｕａｎｔａ１  ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ．  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｔｈｅｏｒｙ，  １９７２．  １８３：  ｐ．  ５７７−６０７．
９９．  Ｗｉｎｅｒ，  Ｂ．Ｊ．，  Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  Ｉｎ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｄｅｓｉｇｎ．  ２  ｅｄ．  １９７１，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：  ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ．  ９０７．
１００．  Ｓｎｅｄｅｃｏｒ，  Ｇ．Ｗ．  ａｎｄ  Ｗ．Ｇ．  Ｃｏｃｈｒａｎ，  Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ．  ７  ｅｄ．  １９８０，  Ａｍｅｓ，ｌｏｗａ：  Ｉｏｗａ  Ｓｔａｔｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ．  ５０７．
１０１．  Ｍａｈｅｒ，  Ｐ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ａ  ｎｏｖｅｌ  ａｐｐｒｏａｃｈ  ｔｏ  ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ  ｆｏｒ  ｎｅｗ  ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｓｔｒｏｋｅ．  Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ，  ２００７．  １１７３：  ｐ．  １１７−２５．
１０２．  Ｓｉｌｖｅｒｍａｎ，  Ｒ．，  Ｔｈｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｃｔｉｏｎ．  ２００４：  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ．
１０３．  Ｌｉａｏ，  Ｈ．Ｌ．  ａｎｄ  Ｍ．Ｋ．  Ｈｕ，  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ  ｏｆ  ５，６，７−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌＢａｉｃａｌｅｉｎ  ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ．  Ｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍ  Ｂｕｌｌ  （Ｔｏｋｙｏ），  ２００４．  ５２（１０）：  ｐ．  １１６２−５．
１０４．  Ｈａｒｉｋｒｉｓｈｎａｎ，  Ｌ．Ｓ．  ａｎｄ  Ｈ．Ｄ．  Ｈｏｌｌｉｓ  Ｓｈｏｗａｌｔｅｒ，  Ａ  ｎｏｖｅｌ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ２，３−ｄｉｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ｂｅｎｚｏｐｙｒａｎ−４−ｏｎｂｅｓ  ａｎｄ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｓｏｌｉｄ  ｐｈａｓｅ．  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，  ２０００．  ５６：  ｐ．  ５１５−１９．
１０５．  Ｖａｚｑｕｅｚ，  Ｊ．  ａｎｄ  Ｆ．  Ａｌｂｅｒｉｃｉａ，  Ａ  ｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔ  ｓｅｍｉｃａｒｂａｚｉｄｅ  ｒｅｓｉｎ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｓｏｌｉｄ−ｐｈａｓｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｋｅｔｏｎｅｓ  ａｎｄ  ａｌｄｅｈｙｄｅｓ．  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，  ２００６．  ４７：  ｐ．  １６５７−１６６１．
１０６．  Ｌａｗｒｅｎｃｅ，  Ｎ．  Ｊ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｌｉｎｋｅｄ  ｐａｒａｌｌｅｌ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  ＭＴＴ  ｂｉｏａｓｓａｙ  ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ  ｏｆ  ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ｃｈａｌｃｏｎｅｓ．  Ｊ  Ｃｏｍｂ  Ｃｈｅｍ，  ２００１．  ３（５）：  ｐ．  ４２１−６．
１０７．  Ｌｉｎ，  Ｙ．Ｍ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈａｌｃｏｎｅｓ  ａｎｄ  ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ  ａｓ  ａｎｔｉ−ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ  ａｇｅｎｔｓ．  Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ，  ２００２．  １０（８）：  ｐ．  ２７９５−８０２．
１０８．  Ｒａｚｇｕｌｉｎ，  Ａ．Ｖ．  ａｎｄ  Ｓ．  Ｍｅｃｏｕｉ，  Ｂｉｎｄｉｎｇ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  ａｒｏｍａｔｉｃ  ｃａｒｂｏｎ−ｂｏｕｎｄ  ｆｌｕｏｒｉｎｅ．  Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ，  ２００６．  ４９（２６）：  ｐ．  ７９０２−６．
１０９．  Ｗｅｂｅｒ，  Ｊ．，  Ｃｕｒｒｅｎｔ  ｓｔａｔｕｓ  ｏｆ  ｖｉｒｔｕａｌ  ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ  ｌｉｂｒａｒｙ  ｄｅｓｉｇｎ．  ＱＳＡＲ  ＆  Ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，  ２００５．  ２４（７）：  ｐ．  ８０９−８２３．
１１０．  Ｓｅｆｋｏｗ，  Ｍ．，  Ｆｉｒｓｔ  ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ  ａｃｉｄ．  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｏｒｇ  Ｃｈｅｍ，  ２００１  （６）：  ｐ．  １１３７−４１．
１１１．  Ｒｅｓｈｅｆ，  Ａ．，  Ｏ．  Ｓｐｅｒｌｉｎｇ，  ａｎｄ  Ｅ．  Ｚｏｒｅｆ−Ｓｈａｎｉ，  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｋｉｎａｓｅ  Ｃ  ｐｒｏｔｅｃｔ  ｒａｔ  ｎｅｕｒｏｎａｌ  ｃｕｌｔｕｒｅｓ  ａｇａｉｎｓｔ  ｉｓｃｈｅｍｉａ−ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ  ｉｎｓｕｌｔ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｌｅｔｔ，  １９９７．  ２３８（１−２）：  ｐ．  ３７−４０．
１１２．  Ｓｐｅｒｌｉｎｇ，  Ｏ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｒｅａｃｔｉｖｅ  ｏｘｙｇｅｎ  ｓｐｅｃｉｅｓ  ｐｌａｙ  ａｎ  ｉｍｐｏｒｔａｎｔ  ｒｏｌｅ  ｉｎ  ｉｏｄｏａｃｅｔａｔｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｎｅｕｒｏｔｏｘｉｃｉｔｙ  ｉｎ  ｐｒｉｍａｒｙ  ｒａｔ  ｎｅｕｒｏｎａｌ  ｃｕｌｔｕｒｅｓ  ａｎｄ  ｉｎ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ  ＰＣ１２  ｃｅｌｌｓ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｌｅｔｔ，  ２００３．  ３５１  （３）：  ｐ．  １３７−４０．
１１３．  Ｒｅｇｏ，  Ａ．Ｃ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｄｉｓｔｉｎｃｔ  ｇｌｙｃｏｌｙｓｉｓ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ  ｒｅｔｉｎａｌ  ｃｅｌｌ  ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ  ｔｏ  ｇｌｕｔａｍａｔｅｍｅｄｉａｔｅｄ  ｉｎｊｕｒｙ．  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ  Ｒｅｓ，  １９９９．  ２４（３）：  ｐ．  ３５１−８．
１１４．  Ｓｉｇａｌｏｖ，  Ｅ．，  ｅｔ  ａｌ．，  ＶＩＰ−Ｒｅｌａｔｅｄ  ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ａｇａｉｎｓｔ  ｌｏｄｏａｃｅｔａｔｅ  ｔｏｘｉｃｉｔｙ  ｉｎ  ｐｈｅｏｃｈｒｏｍｏｃｙｔｏｍａ  （ＰＣ１２）  ｃｅｌｌｓ：  ａ  ｍｏｄｅｌ  ｆｏｒ  ｉｓｃｈｅｍｉｃ／ｈｙｐｏｘｉｃ  ｉｎｊｕｒｙ．  Ｊ  Ｍｏｌ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，  ２０００．  １５（３）：  ｐ．  １４７−５４．
１１５．  Ｒｅｉｎｅｒ，  Ｐ．Ｂ．，  Ａ．Ｇ．  Ｌａｙｃｏｃｋ，  ａｎｄ  Ｃ．Ｊ．  Ｄｏｌｌ，  Ａ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｉｓｃｈｅｍｉａ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ  ｓｌｉｃｅ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｌｅｔｔ，  １９９０．  １１  ９（２）：  ｐ．  １７５−８．
１１６．  Ｍａｇｎｏｎｉ，  Ｓ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｌｐｈａ−ｍｅｌａｎｏｃｙｔｅ−ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ  ｈｏｒｍｏｎｅ  ｉｓ  ｄｅｃｒｅａｓｅｄ  ｉｎ  ｐｌａｓｍａ  ｏｆ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ａｃｕｔｅ  ｂｒａｉｎ  ｉｎｊｕｒｙ．  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｔｒａｕｍａ，  ２００３．  ２０（３）：  ｐ．  ２５１−６０．
１１７．  Ｃｒａｃｋ，  Ｐ．Ｊ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  ｏｆ  ＮＦ−ｋａｐｐａ６  ｉｎ  ｎｅｕｒｏｎａｌ  ｃｅｌｌ  ｄｅａｔｈ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ  ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ−Ｉ  ｋｎｏｃｋｏｕｔ  ｍｏｕｓｅ  ｉｎ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｔｏ  ｉｓｃｈｅｍｉａ−ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ  ｉｎｊｕｒｙ．  Ｓｔｒｏｋｅ，  ２００６．  ３７（６）：  ｐ．  １５３３−８．
１１８．  Ｌｉ，  Ｙ．，  Ｐ．  Ｍａｈｅｒ，  ａｎｄ  Ｄ．  Ｓｃｈｕｂｅｒｔ，  Ａ  ｒｏｌｅ  ｆｏｒ  １２−ｌｉｐｏｘｙｇｅｎａｓｅ  ｉｎ  ｎｅｒｖｅ  ｃｅｌｌ  ｄｅａｔｈ  ｃａｕｓｅｄ  ｂｙ  ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ  ｄｅｐｌｅｔｉｏｎ．  Ｎｅｕｒｏｎ，  １９９７．  １９（２）：  ｐ．  ４５３−６３．
１１９．  Ｌｉ，  Ｙ．，  Ｐ．  Ｍａｈｅｒ，  ａｎｄ  Ｄ．  Ｓｃｈｕｂｅｒｔ，  Ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ  Ｃ  ｒｅｇｕｌａｔｅｓ  ｇｌｕｔａｍａｔｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｎｅｒｖｅ  ｃｅｌｌ  ｄｅａｔｈ．  Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ，  １９９８．  ９５（１３）：  ｐ．  ７７４８−５３．
１２０．  Ｈａｎｓｅｎ，  Ｍ．Ｂ．，  Ｓ．Ｅ．  Ｎｉｅｌｓｅｎ，  ａｎｄ  Ｋ．  Ｂｅｒｇ，  Ｒｅ−ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｆｕｒｔｈｅｒ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ａ  ｐｒｅｃｉｓｅ  ａｎｄ  ｒａｐｉｄ  ｄｙｅ  ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  ｍｅａｓｕｒｉｎｇ  ｃｅｌｌ  ｇｒｏｗｔｈ／ｃｅｌｌ  ｋｉｌｌ．  Ｊ  ｌｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ，  １９８９．  １１  ９（２）：  ｐ．  ２０３−１０．
１２１．  Ｓｃｈｕｂｅｒｔ，  Ｄ．  ａｎｄ  Ｄ．  Ｐｉａｓｅｃｋｉ，  Ｏｘｉｄａｔｉｖｅ  ｇｌｕｔａｍａｔｅ  ｔｏｘｉｃｉｔｙ  ｃａｎ  ｂｅ  ａ  ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｅｘｃｉｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ  ｃａｓｃａｄｅ．  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，  ２００１．  ２１  （１  ９）：  ｐ．  ７４５５−６２．
１２２．  Ｍａｒｏｎ，  Ｄ．Ｍ．  ａｎｄ  Ｂ．Ｎ．  Ａｍｅｓ，  Ｒｅｖｉｓｅｄ  ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｍｕｔａｇｅｎｉｃｉｔｙ  ｔｅｓｔ．  Ｍｕｔａｔ  Ｒｅｓ，  １９８３．  １１３（３−４）：  ｐ．  １７３−２１５．
１２３．  Ｗａｎｇ，  Ｑ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＭＤＲ−ＭＤＣＫ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅ  ａｓ  ａ  ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ  ｓｃｒｅｅｎ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｂｌｏｏｄ−ｂｒａｉｎ  ｂａｒｒｉｅｒ．  Ｉｎｔ  Ｊ  Ｐｈａｒｍ，  ２００５．  ２８８（２）：  ｐ．  ３４９−５９．
１２４．  ＭａｃＬｅｌｌａｎ，  Ｃ．Ｌ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｔｈｅ  ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ  ｏｆ  ｈｙｐｏｔｈｅｒｍｉａ  ｏｎ  ｏｕｔｃｏｍｅ  ａｆｔｅｒ  ｉｎｔｒａｃｅｒｅｂｒａｌ  ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ  ｉｎ  ｒａｔｓ．  Ｓｔｒｏｋｅ，  ２００６．  ３７（５）：  ｐ．  １２６６−７０．
１２５．  Ｂｅｄｅｒｓｏｎ，  Ｊ．Ｂ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ２，３，５−ｔｒｉｐｈｅｎｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ  ｃｈｌｏｒｉｄｅ  ａｓ  ａ  ｓｔａｉｎ  ｆｏｒ  ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｃｅｒｅｂｒａｌ  ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ｒａｔｓ．  Ｓｔｒｏｋｅ，  １９８６．  １７（６）：  ｐ．  １３０４−８．
１２６．  Ｇｕｎｄｅｒｓｅｎ，  Ｈ．  Ｊ．Ｇ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｔｈｅ  ｎｅｗ  ｓｔｅｒｅｏｌｏｇｉｃａｌ  ｔｏｏｌｓ：  Ｄｉｓｅｃｔｏｒ，  ｆｒａｃｔｉｏｎａｔｏｒ，  ｎｕｃｌｅａｔｏｒ  ａｎｄ  ｐｏｉｎｔ  ｓａｍｐｌｅｄ  ｉｎｔｅｒｃｅｐｔｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｕｓｅ  ｉｎ  ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ  ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  ｄｉａｇｎｏｓｉｓ．  ＡＰＭＩＳ，  １９８８．  ９６：  ｐ．  ８５７−８８１．
１２７．  Ｔｒｉｇｕｅｒｏ，  Ｄ．，  Ｊ．  Ｂｕｃｉａｋ，  ａｎｄ  Ｗ．Ｍ．  Ｐａｒｄｒｉｄｇｅ，  Ｃａｐｉｌｌａｒｙ  ｄｅｐｌｅｔｉｏｎ  ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｂｌｏｏｄ−ｂｒａｉｎ  ｂａｒｒｉｅｒ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  ｏｆ  ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  ｐｌａｓｍａ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ．  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ，  １９９０．  ５４（６）：  ｐ．  １８８２−８．
１２８．  Ｗｉｅｂｅｒｓ，  Ｄ．Ｏ．，  Ｈ．Ｐ．  Ａｄａｍｓ，  Ｊｒ．，  ａｎｄ  Ｊ．Ｐ．  Ｗｈｉｓｎａｎｔ，  Ａｎｉｍａｌ  ｍｏｄｅｌｓ  ｏｆ  ｓｔｒｏｋｅ：  ａｒｅ  ｔｈｅｙ  ｒｅｌｅｖａｎｔ  ｔｏ  ｈｕｍａｎ  ｄｉｓｅａｓｅ？  Ｓｔｒｏｋｅ，  １９９０．  ２１（１）：  ｐ．  １−３．
１２９．  Ｚｉｖｉｎ，  Ｊ．Ａ．  ａｎｄ  Ｊ．Ｃ．  Ｇｒｏｔｔａ，  Ａｎｉｍａｌ  ｓｔｒｏｋｅ  ｍｏｄｅｌｓ．  Ｔｈｅｙ  ａｒｅ  ｒｅｌｅｖａｎｔ  ｔｏ  ｈｕｍａｎ  ｄｉｓｅａｓｅ．  Ｓｔｒｏｋｅ，  １９９０．  ２１（７）：  ｐ．  ９８１−３．
１３０．  Ｇｒｏｔｔａ，  Ｊ．，  Ｒｏｄｅｎｔ  ｍｏｄｅｌｓ  ｏｆ  ｓｔｒｏｋｅ  ｌｉｍｉｔａｔｉｏｎｓ．  Ｗｈａｔ  ｃａｎ  ｗｅ  ｌｅａｒｎ  ｆｒｏｍ  ｒｅｃｅｎｔ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｔｒｉａｌｓ  ｏｆ  ｔｈｒｏｍｂｏｌｙｓｉｓ？  Ａｒｃｈ  Ｎｅｕｒｏｌ，  １９９６．  ５３（１０）：  ｐ．  １０６７−７０．
１３１．  Ｇｉｎｓｂｅｒｇ，  Ｍ．Ｄ．，  Ｔｈｅ  ｖａｌｉｄｉｔｙ  ｏｆ  ｒｏｄｅｎｔ  ｂｒａｉｎ−ｉｓｃｈｅｍｉａ  ｍｏｄｅｌｓ  ｉｓ  ｓｅｌｆ−ｅｖｉｄｅｎｔ．  Ａｒｃｈ  Ｎｅｕｒｏｌ，  １９９６．  ５３（１０）：  ｐ．  １０６５−７；  ｄｉｓｃｕｓｓｉｏｎ  １０７０。
【０４０８】
本明細書において記載される実施例および実施形態は、説明的な目的のみのためのものであり、それを考慮した様々な修飾または変更は、当業者らに示唆され、本出願の精神および範囲ならびに添付される請求項の範囲内に含まれることが理解される。本明細書において引用される刊行物、特許、および特許出願はすべて、すべての目的のために、それらの全体が参照によってこれによって組み込まれる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【国際調査報告】
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