(57)【要約】  本発明は、所望の速度の血清クリアランス達成するために機能するさまざまなグリコシル化構造の抗体、例えばヒト抗体の組成物を提供する。本発明はまた、抗体、例えばヒト抗体の薬物動態を調節する方法およびこのような抗体を含有する治療組成物を提供する。これらの方法は、所望の速度の血清クリアランスを達成するために、抗体、例えばヒト抗体のさまざまなグリコシル化構造に依存する。
2014505075.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト抗体またはこの抗原結合部分を含む組成物であって、
（ａ）オリゴマンノース型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グルコシル化部位においてグリコシル化された、第１のレベルの抗体またはこの抗原結合部分、および
（ｂ）フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グルコシル化部位においてグリコシル化された、第２のレベルの抗体またはこの抗原結合部分、
を含み、所望の速度の血清クリアランスを示す組成物。
【請求項２】
Ｎ結合型グリコシル化部位が、抗体のＦｃ領域のアスパラギン残基である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
アスパラギン残基がＡｓｎ２９７である、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
オリゴマンノース型構造が、Ｍ５、Ｍ６、Ｍ７、Ｍ８およびＭ９からなる群から独立して選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造が、ＮＧＡ２Ｆ、ＮＡ１Ｆ、ＮＡ２Ｆ、ＮＧＡ２Ｆ−ＧｌｃＮＡｃおよびＮＡ１Ｆ−ＧｌｃＮＡｃからなる群から独立して選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
第１のレベルが約０から１００％である、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
第１のレベルが約１０から３０％である、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
第１のレベルが、約０％、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、８％、９９％、および約１００％からなる群から選択される、請求項６に記載の組成物。
【請求項９】
第２のレベルが約０から１００％である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１０】
第２のレベルが約７０から９０％である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】
第２のレベルが、約０％、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、８％、９９％、および約１００％からなる群から選択される、請求項９に記載の組成物。
【請求項１２】
所望の速度の血清クリアランスが急速な血清クリアランスである、請求項１に記載の組成物。
【請求項１３】
第１のレベルが約５０％を超える、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
第１のレベルが約３０％を超える、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１５】
第１のレベルが約５１から１００％である、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１６】
第１のレベルが約３１から１００％である、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１７】
所望の速度の血清クリアランスが緩速な血清クリアランスである、請求項１に記載の組成物。
【請求項１８】
第１のレベルが約０から５０％である、請求項１７に記載の組成物。
【請求項１９】
第１のレベルが約１０から３０％である、請求項１７に記載の組成物。
【請求項２０】
抗体またはこの抗原結合部分がλ軽鎖を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項２１】
抗体またはこの抗原結合部分が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３およびＩｇＧ４の定常領域からなる群から選択される重鎖定常領域を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項２２】
重鎖定常領域がＩｇＧ１重鎖である、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２３】
抗体またはこの抗原結合部分がＩｇＧ１重鎖定常領域およびλ軽鎖を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項２４】
抗体またはこの抗原結合部分が、哺乳動物細胞において産生される、請求項１に記載の組成物。
【請求項２５】
抗体またはこの抗原結合部分が、ＣＨＯ細胞において産生される、請求項２４に記載の組成物。
【請求項２６】
抗体またはこの抗原結合部分が、骨髄腫細胞系において産生される、請求項１に記載の組成物。
【請求項２７】
抗体またはこの抗原結合部分が抗ＩＬ−１２抗体である、請求項１に記載の組成物。
【請求項２８】
抗体またはこの抗原結合部分が抗ＩＬ−２３抗体である、請求項１に記載の組成物。
【請求項２９】
抗体またはこの抗原結合部分がＡＢＴ−８７４またはこの断片である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３０】
抗体またはこの抗原結合部分が、配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３および配列番号２６のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３１】
ヒト抗体またはこの抗原結合部分が、配列番号２７のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２および配列番号２８のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２をさらに含む、請求項３０に記載の組成物。
【請求項３２】
ヒト抗体またはこの抗原結合部分が、配列番号２９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１および配列番号３０のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１をさらに含む、請求項３１に記載の組成物。
【請求項３３】
抗体またはこの抗原結合部分が、配列番号３１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３２のアミノ酸配列含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３４】
抗体またはこの抗原結合部分が、ＣＮＴ０１２７５、トシツモマブ、ＷＲＩ−１７０、ＷＯ１、ＴＮＦ−Ｈ９Ｇ１、ＴＨＹ−３２、ＴＨＹ−２９、ＴＥＬ１６、ＴＥＬ１４、Ｔｅｌ１３、ＳＭ１、Ｓ１−１、ＲＳＰ４、ＲＨ−１４、ＲＦ−ＴＳ７、ＲＦ−ＳＪ２、ＲＦ−ＳＪ１、ＲＦ−ＡＮ、ＰＲ−ＴＳ２、ＰＲ−ＴＳ１、ＰＲ−ＳＪ２、ＰＲ−ＳＪ１、ＰＨＯＸ１５、ＰＡＧ−１、ＯＧ−３１、ＮＯ．１３、ＮＭ３Ｅ２  ＳＣＦＶ、ＭＵＣ１−１、ＭＮ２１５、ＭＣ１１６、ＭＡＤ−２、ＭＡＢ６７、ＭＡＢ６３、ＭＡＢ６０、ＭＡＢ５９、ＭＡＢ５７、ＭＡＢ５６、ＭＡＢ１１１、ＭＡＢ１０７、Ｌ３０５５−ＢＬ、Ｋ６Ｈ６、Ｋ６Ｆ５、Ｋ５Ｇ５、Ｋ５Ｃ７、Ｋ５Ｂ８、Ｋ４Ｂ８、ＪＡＣ−１０、ＨＵＣ、ＨＭＳＴ−１、ＨＩＨ２、ＨＩＨ１０、ＨＢＷ４−１、ＨＢＰ２、ＨＡ１、Ｈ６−３Ｃ４、Ｈ２１０、ＧＰ４４、ＧＧ４８、ＧＧ３、ＧＡＤ−２、ＦＯＭ−Ａ、ＦＯＭ−１、ＦＯＧ１−Ａ３、ＦＯＧ−Ｂ、ＤＰＣ、ＤＰＡ、ＤＯＢ１、ＤＯ１、ＣＬＬ００１、ＣＬＬ−２４９、ＣＤ４−７４、ＣＢ−２０１、Ｃ３０４  ＲＦ、ＢＳＡ３、ＢＯ３、ＢＯ１、ＢＥＮ−２７、Ｂ−３３、Ｂ−２４、ＡＮＴＩ−ＴＥＳＴ、ＡＮＴＩ−ＥＳＴ、ＡＮＴＩ−ＤＩＧＢ、ＡＮＴＩ−ＤＩＧＡ、ＡＩＧ、９６０４、４４８．９Ｇ．Ｆ１、３３．Ｈ１１、３２．Ｂ９、２４Ａ５、１Ｂ９／Ｆ２、１３Ｅ１０、１２３ＡＶ１６−１、１１−５０、および１．３２からなる群から選択される抗体またはこの断片である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３５】
組成物が、バッファー、ポリオールおよび界面活性剤からなる群から選択される追加の薬剤をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３６】
バッファーが、Ｌ−ヒスチジン、コハク酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、リン酸ナトリウムおよびリン酸カリウムからなる群から選択される、請求項３５に記載の組成物。
【請求項３７】
ポリオールが、マンニトールおよびソルビトールからなる群から選択される請求項３５に記載の組成物。
【請求項３８】
界面活性剤が、ポリソルベート８０、ポリソルベート２０およびＢＲＩＪ界面活性剤からなる群から選択される、請求項３５に記載の組成物。
【請求項３９】
組成物がメチオニンをさらに含む、請求項３５に記載の組成物。
【請求項４０】
抗体またはこの抗原結合部分の濃度が約０．１から２５０ｍｇ／ｍｌである、請求項１に記載の組成物。
【請求項４１】
組成物が非経口投与に適切である、請求項１に記載の組成物。
【請求項４２】
組成物が静脈内注射または静脈内注入に適切である、請求項１に記載の組成物。
【請求項４３】
組成物が皮下注射または筋肉内注射に適切である、請求項１に記載の組成物。
【請求項４４】
追加の治療薬をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項４５】
追加の治療薬が、ブデソニド（ｂｕｄｅｎｏｓｉｄｅ）、表皮成長因子、副腎皮質ステロイド、シクロスポリン、スルファサラジン、アミノサリチル酸塩、６−メルカプトプリン、アザチオプリン、メトロニダゾール、リポキシゲナーゼ阻害剤、メサラミン、オルサラジン、バルサラジド、抗酸化剤、トロンボキサン阻害剤、ＩＬ−１受容体拮抗薬、抗ＩＬ−１βモノクローナル抗体、抗ＩＬ−６モノクローナル抗体、成長因子、エラスターゼ阻害剤、ピリジニル−イミダゾール化合物、ＴＮＦ、ＬＴ、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１８、ＥＭＡＰ−ＩＩ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＦＧＦおよびＰＤＧＦの抗体または作動薬、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤ４５、ＣＤ６９、ＣＤ９０もしくはこれらのリガンドの抗体、メトトレキサート、シクロスポリン、ＦＫ５０６、ラパマイシン、ミコフェノール酸モフェチル、レフルノミド、ＮＴＨＥ、イブプロフェン、副腎皮質ステロイド、プレドニゾロン、ホスホジエステラーゼ阻害剤、アデノシン作動薬、抗血栓薬、補体阻害剤、アドレナリン作動薬、ＩＲＡＫ、ＮＩＫ、ＩＫＫ、ｐ３８、ＭＡＰキナーゼ阻害剤、ＩＬ−１β転換酵素阻害剤、ＴＮＦα転換酵素阻害剤、Ｔ細胞シグナル伝達阻害剤、メタロプロテイナーゼ阻害剤、スルファサラジン、アザチオプリン、６−メルカプトプリン、アンジオテンシン転換酵素阻害剤、可溶性サイトカイン受容体、可溶性ｐ５５ＴＮＦ受容体、可溶性ｐ７５ＴＮＦ受容体、ｓＩＬ−１ＲＩ、ｓＩＬ−１ＲＩＩ、ｓＩＬ−６Ｒ、抗炎症性サイトカイン、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１３およびＴＧＦβからなる群から選択される、請求項４４に記載の組成物。
【請求項４６】
追加の治療薬が、抗ＴＮＦ抗体およびこれらの抗体断片、ＴＮＦＲ−Ｉｇ構築体、ＴＡＣＥ阻害剤、ＰＤＥ４阻害剤、副腎皮質ステロイド、ブデソニド（ｂｕｄｅｎｏｓｉｄｅ）、デキサメタゾン、スルファサラジン、５−アミノサリチル酸、オルサラジン、ＩＬ−１β転換酵素阻害剤、ＩＬ−１ｒａ、チロシンキナーゼ阻害剤、６−メルカプトプリンおよびＩＬ−１１からなる群から選択される、請求項４４に記載の組成物。
【請求項４７】
追加の治療薬が、副腎皮質ステロイド、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、アザチオプリン、シクロホスファミド、シクロスポリン、メトトレキサート、４−アミノピリジン、チザニジン、インターフェロン−β１ａ、インターフェロン−β１ｂ、コポリマー１、高圧酸素、静注用免疫グロブリン、クラドリビン（ｃｌａｂｒｉｂｉｎｅ）、ＴＮＦ、ＬＴ、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１８、ＥＭＡＰ−ＩＩ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＦＧＦ、ＰＤＧＦの抗体もしくは作動薬、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤ４５、ＣＤ６９、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ９０もしくはこれらのリガンドに対する抗体、メトトレキサート、シクロスポリン、ＦＫ５０６、ラパマイシン、ミコフェノール酸モフェチル、レフルノミド、ＮＴＨＥ、イブプロフェン、副腎皮質ステロイド、プレドニゾロン、ホスホジエステラーゼ阻害剤、アデノシン作動薬、抗血栓薬、補体阻害剤、アドレナリン作動薬、ＩＲＡＫ、ＮＩＫ、ＩＫＫ、ｐ３８もしくはＭＡＰキナーゼ阻害剤、ＩＬ−１β転換酵素阻害剤、ＴＡＣＥ阻害剤、Ｔ細胞シグナル伝達阻害剤、キナーゼ阻害剤、メタロプロテイナーゼ阻害剤、スルファサラジン、アザチオプリン、６−メルカプトプリン、アンジオテンシン転換酵素阻害剤、可溶性サイトカイン受容体、可溶性ｐ５５ＴＮＦ受容体、可溶性ｐ７５ＴＮＦ受容体、ｓＩＬ−１ＲＩ、ｓＩＬ−１ＲＩＩ、ｓＩＬ−６Ｒ、ｓＩＬ−１３Ｒ、抗Ｐ７、ｐ−セレクチン糖タンパク質リガンド（ＰＳＧＬ）、抗炎症性サイトカイン、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３およびＴＧＦβからなる群から選択される、請求項４４に記載の組成物。
【請求項４８】
ヒト抗体またはこの抗原結合部分を含む組成物であって、
（ａ）オリゴマンノース型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された約０から１００％の抗体またはこの抗原結合部分、および
（ｂ）フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された約０から１００％の抗体またはこの抗原結合部分、
を含み、所望の速度の血清クリアランスを示す組成物。
【請求項４９】
ヒト抗体またはこの抗原結合部分を含む組成物であって、
（ａ）オリゴマンノース型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された約１０から３０％の抗体またはこの抗原結合部分、および
（ｂ）フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された約７０から９０％の抗体またはこの抗原結合部分、
を含み、所望の速度の血清クリアランスを示す組成物。
【請求項５０】
ＡＢＴ−８７４またはこの抗原結合部分を含む組成物であって、
（ａ）約０から１００％のＡＢＴ−８７４が、Ｍ５、Ｍ６、Ｍ７、Ｍ８およびＭ９からなる群から独立して選択されるオリゴマンノース構造により、Ａｓｎ２９７においてグリコシル化され、
（ｂ）約０から１００％のＡＢＴ−８７４が、ＮＧＡ２Ｆ、ＮＡ１Ｆ、ＮＡ２Ｆ、ＮＧＡ２Ｆ−ＧｌｃＮＡｃおよびＮＡ１Ｆ−ＧｌｃＮＡｃからなる群から独立して選択されるフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖構造により、Ａｓｎ２９７においてグリコシル化された、組成物。
【請求項５１】
ＡＢＴ−８７４またはこの抗原結合部分を含む組成物であって、
（ａ）約１０から３０％のＡＢＴ−８７４が、Ｍ５、Ｍ６、Ｍ７、Ｍ８およびＭ９からなる群から独立して選択されるオリゴマンノース構造により、Ａｓｎ２９７においてグリコシル化され、
（ｂ）約７０から９０％のＡＢＴ−８７４が、ＮＧＡ２Ｆ、ＮＡ１Ｆ、ＮＡ２Ｆ、ＮＧＡ２Ｆ−ＧｌｃＮＡｃおよびＮＡ１Ｆ−ＧｌｃＮＡｃからなる群から独立して選択されるフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖構造により、Ａｓｎ２９７においてグリコシル化された、組成物。
【請求項５２】
ヒト抗体またはこの抗原結合部分を含む組成物の薬物動態を調節する方法であって、
（ａ）オリゴマンノース型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された抗体の第１のレベルを調節するステップ、および
（ｂ）フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された抗体の第２のレベルを調節するステップ、
を含み、第１のレベルおよび第２のレベルの調節が、所望の速度の血清クリアランスをもたらし、その結果、ヒト抗体またはこの抗原結合部分を含む組成物の薬物動態を調節する方法。
【請求項５３】
Ｎ結合型グリコシル化部位が、抗体のＦｃ領域のアスパラギン残基である、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
アスパラギン残基がＡｓｎ２９７である、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
オリゴマンノース型構造が、Ｍ５、Ｍ６、Ｍ７、Ｍ８およびＭ９からなる群から独立して選択される、請求項５２に記載の方法。
【請求項５６】
フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造が、ＮＧＡ２Ｆ、ＮＡ１Ｆ、ＮＡ２Ｆ、ＮＧＡ２Ｆ−ＧｌｃＮＡｃおよびＮＡ１Ｆ−ＧｌｃＮＡｃからなる群から独立して選択される、請求項５２に記載の方法。
【請求項５７】
第１のレベルが約０から１００％である、請求項５２に記載の方法。
【請求項５８】
第１のレベルが約１０から３０％である、請求項５２に記載の方法。
【請求項５９】
第１のレベルが、約０％、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、８％、９９％、および約１００％からなる群から選択される、請求項５７に記載の方法。
【請求項６０】
第２のレベルが約０から１００％である、請求項５２に記載の方法。
【請求項６１】
第２のレベルが約１０から３０％である、請求項５２に記載の方法。
【請求項６２】
第２のレベルが、約０％、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、８％、９９％および約１００％からなる群から選択される、請求項６０に記載の方法。
【請求項６３】
所望の速度の血清クリアランスが急速な血清クリアランスである、請求項５２に記載の方法。
【請求項６４】
第１のレベルが約５０％を超える、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
第１のレベルが約３０％を超える、請求項６３に記載の方法。
【請求項６６】
第１のレベルが約５１から１００％である、請求項６４に記載の方法。
【請求項６７】
第１のレベルが約３１から１００％である、請求項６５に記載の方法。
【請求項６８】
所望の速度の血清クリアランスが緩速な血清クリアランスである、請求項５２に記載の方法。
【請求項６９】
第１のレベルが約０から１００％である、請求項６８に記載の方法。
【請求項７０】
第２のレベルが約７０から９０％である、請求項６８に記載の方法。
【請求項７１】
抗体またはこの抗原結合部分がλ軽鎖を含む、請求項５２に記載の方法。
【請求項７２】
抗体またはこの抗原結合部分が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３およびＩｇＧ４の定常領域からなる群から選択される重鎖定常領域を含む、請求項５２に記載の方法。
【請求項７３】
重鎖定常領域がＩｇＧ１である、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
抗体またはこの抗原結合部分がＩｇＧ１重鎖定常領域およびλ軽鎖を含む、請求項５２に記載の方法。
【請求項７５】
抗体またはこの抗原結合部分が哺乳動物細胞において産生される、請求項５２に記載の方法。
【請求項７６】
抗体またはこの抗原結合部分がＣＨＯ細胞において産生される、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
抗体またはこの抗原結合部分が骨髄腫細胞系において産生される、請求項５２に記載の方法。
【請求項７８】
抗体またはこの抗原結合部分が抗ＩＬ−１２抗体である、請求項５２に記載の方法。
【請求項７９】
抗体またはこの抗原結合部分が抗ＩＬ−２３抗体である、請求項５２に記載の方法。
【請求項８０】
抗体またはこの抗原結合部分がＡＢＴ−８７４またはこの断片である、請求項５２に記載の方法。
【請求項８１】
抗体またはこの抗原結合部分が、配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３および配列番号２６のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３を含む、請求項５２に記載の方法。
【請求項８２】
ヒト抗体またはこの抗原結合部分が、配列番号２７のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２および配列番号２８のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２をさらに含む、請求項８１に記載の方法。
【請求項８３】
ヒト抗体またはこの抗原結合部分が、配列番号２９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１および配列番号３０のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１をさらに含む、請求項８２に記載の方法。
【請求項８４】
抗体またはこの抗原結合部分が、配列番号３１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３２のアミノ酸配列含む軽鎖可変領域を含む、請求項５２に記載の方法。
【請求項８５】
抗体またはこの抗原結合部分が、ＣＮＴ０１２７５、トシツモマブ、ＷＲＩ−１７０、ＷＯ１、ＴＮＦ−Ｈ９Ｇ１、ＴＨＹ−３２、ＴＨＹ−２９、ＴＥＬ１６、ＴＥＬ１４、Ｔｅｌ１３、ＳＭ１、Ｓ１−１、ＲＳＰ４、ＲＨ−１４、ＲＦ−ＴＳ７、ＲＦ−ＳＪ２、ＲＦ−ＳＪ１、ＲＦ−ＡＮ、ＰＲ−ＴＳ２、ＰＲ−ＴＳ１、ＰＲ−ＳＪ２、ＰＲ−ＳＪ１、ＰＨＯＸ１５、ＰＡＧ−１、ＯＧ−３１、ＮＯ．１３、ＮＭ３Ｅ２  ＳＣＦＶ、ＭＵＣ１−１、ＭＮ２１５、ＭＣ１１６、ＭＡＤ−２、ＭＡＢ６７、ＭＡＢ６３、ＭＡＢ６０、ＭＡＢ５９、ＭＡＢ５７、ＭＡＢ５６、ＭＡＢ１１１、ＭＡＢ１０７、Ｌ３０５５−ＢＬ、Ｋ６Ｈ６、Ｋ６Ｆ５、Ｋ５Ｇ５、Ｋ５Ｃ７、Ｋ５Ｂ８、Ｋ４Ｂ８、ＪＡＣ−１０、ＨＵＣ、ＨＭＳＴ−１、ＨＩＨ２、ＨＩＨ１０、ＨＢＷ４−１、ＨＢＰ２、ＨＡ１、Ｈ６−３Ｃ４、Ｈ２１０、ＧＰ４４、ＧＧ４８、ＧＧ３、ＧＡＤ−２、ＦＯＭ−Ａ、ＦＯＭ−１、ＦＯＧ１−Ａ３、ＦＯＧ−Ｂ、ＤＰＣ、ＤＰＡ、ＤＯＢ１、ＤＯ１、ＣＬＬ００１、ＣＬＬ−２４９、ＣＤ４−７４、ＣＢ−２０１、Ｃ３０４  ＲＦ、ＢＳＡ３、ＢＯ３、ＢＯ１、ＢＥＮ−２７、Ｂ−３３、Ｂ−２４、ＡＮＴＩ−ＴＥＳＴ、ＡＮＴＩ−ＥＳＴ、ＡＮＴＩ−ＤＩＧＢ、ＡＮＴＩ−ＤＩＧＡ、ＡＩＧ、９６０４、４４８．９Ｇ．Ｆ１、３３．Ｈ１１、３２．Ｂ９、２４Ａ５、１Ｂ９／Ｆ２、１３Ｅ１０、１２３ＡＶ１６−１、１１−５０、および１．３２からなる群から選択される抗体またはこの断片である、請求項５２に記載の組成物。
【請求項８６】
ＡＢＴ−８７４またはこの抗原結合部分を含む組成物の薬物動態を調節する方法であって、
（ａ）Ｍ５、Ｍ６、Ｍ７、Ｍ８およびＭ９からなる群から独立して選択されるオリゴマンノース型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化されたＡＢＴ−８７４またはこの抗原結合断片の第１のレベルを調節するステップ、
（ｂ）ＮＧＡ２Ｆ、ＮＡ１Ｆ、ＮＡ２Ｆ、ＮＧＡ２Ｆ−ＧｌｃＮＡｃおよびＮＡ１Ｆ−ＧｌｃＮＡｃからなる群から独立して選択されるフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化されたＡＢＴ−８７４またはこの抗原結合断片の第２のレベルを調節するステップ、
を含み、第１のレベルおよび第２のレベルの調節が、所望の速度の血清クリアランスをもたらし、その結果、ＡＢＴ−８７４またはこの抗原結合部分を含む組成物の薬物動態を調節する方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
抗体治療は広く用いられている。市場にはおよそ数十の治療抗体が存在する。組み換え技術を使用して作製された抗体はグリコシル化でき、従って、例えば、抗体依存性細胞毒性および補体依存性細胞毒性などの抗体のエフェクター機能に影響を与えることによって、抗体の治療有効性に影響を与えることができる、多数のグリコフォームとして存在する（Ｊｅｆｆｅｒｉｓ，Ｒ．（２００９），Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ３０（７）：３５６−３６２）。
【０００２】
幾つかの前臨床試験により、組み換え抗体の薬物動態に対するグリコシル化およびグリコフォームが豊富であることの、ある効果が指摘されているが、組み換え抗体の薬物動態に対するグリコシル化およびグリコフォームが豊富であることの効果は、臨床試験においては同定されていない（例えば、Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９（３）：２４０−２４９；Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ，１７（５）５２９−５４０；Ｋａｎｄａ  ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ  １７（１）：１０４−１１８；Ｋｅｃｋ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ  ３６：４９−６０；Ｍｉｌｌｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ  ３６：４１−４７；Ｎｅｗｋｉｒｋ  ｅｔ  ａｌ．（１９９６）Ｃｌｉｎ  Ｅｘｐ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １０６：２５９−２６４；Ｗａｗｒｚｙｎｃｚａｋ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ２９（２）：２１３−２２０；Ｗｒｉｇｈｔ  ｅｔ  ａｌ（１９９４）Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  １８０：１０８７−１０９６；Ｚｈｏｕ（２００８）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ９９（３）：６５２−６６５；Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９（３）：２４０−２４９を参照されたい。）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】Ｊｅｆｆｅｒｉｓ，Ｒ．（２００９），Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ３０（７）：３５６−３６２
【非特許文献２】Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９（３）：２４０−２４９
【非特許文献３】Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ，１７（５）５２９−５４０
【非特許文献４】Ｋａｎｄａ  ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ  １７（１）：１０４−１１８
【非特許文献５】Ｋｅｃｋ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ  ３６：４９−６０
【非特許文献６】Ｍｉｌｌｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ  ３６：４１−４７
【非特許文献７】Ｎｅｗｋｉｒｋ  ｅｔ  ａｌ．（１９９６）Ｃｌｉｎ  Ｅｘｐ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １０６：２５９−２６４
【非特許文献８】Ｗａｗｒｚｙｎｃｚａｋ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ２９（２）：２１３−２２０
【非特許文献９】Ｗｒｉｇｈｔ  ｅｔ  ａｌ（１９９４）Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  １８０：１０８７−１０９６
【非特許文献１０】Ｚｈｏｕ（２００８）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ９９（３）：６５２−６６５
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
従って、抗体のグリコフォームおよびグリコシル化抗体の薬物動態に対する関連効果のさらに詳しい特徴付けの必要がある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は、ヒト抗体のグリコフォームのレベルおよびタイプと、抗体の血清クリアランスの速度との間の関係の知見に少なくとも一部は基づく。より詳細には、ヒト抗ＩＬ−１２／ＩＬ−２３ｐ４０抗体（ＡＢＴ−８７４）の８種のグリコフォームが、ヒト対象へのこの組成物の注射後、ＡＢＴ−８７４の組成物中に同定されている。８種のグリコフォームの構造解析により、グリコフォームを２つのグループ：オリゴマンノース型構造およびフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造に分離することができ、この分離は、８種のグリコフォームの薬物動態解析によりさらに裏付けられた。
【０００６】
２つのグループの母集団薬物動態モデリングにより、ＡＢＴ−８７４のオリゴマンノース型構造は、ＡＢＴ−８７４のフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造よりおよそ４０％早いクリアランス速度を有するが、フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造の９０％と比較して、ＡＢＴ−８７４組成物中のオリゴマンノース型構造の百分率は約１０％であるので、ＡＢＴ−８７４全体のクリアランス速度は影響されないことが実証された。
【０００７】
２つのグループの母集団薬物動態モデリングにより、ＡＢＴ−８７４組成物中のオリゴマンノース型構造のレベルが、オリゴ糖構造の全レベルのおよそ３０％に増加しても、抗体またはこの抗原結合断片の薬物動態または血清クリアランスの速度に対する影響を有さないことがさらに実証された。
【０００８】
従って、一態様において、本発明は、ヒト抗体またはこの抗原結合部分を含む組成物を提供する。本組成物は、オリゴマンノース型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グルコシル化部位においてグリコシル化された、第１のレベルの抗体またはこの抗原結合部分およびフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グルコシル化部位においてグリコシル化された、第２のレベルの抗体またはこの抗原結合部分を含み、本組成物は所望の速度の血清クリアランスを示す。
【０００９】
一実施形態において、Ｎ結合型グリコシル化部位は、抗体のＦｃ領域のアスパラギン残基、例えばＡｓｎ２９７である。
【００１０】
一実施形態において、オリゴマンノース型構造は、Ｍ５、Ｍ６、Ｍ７、Ｍ８およびＭ９からなる群から独立して選択される。
【００１１】
一実施形態において、フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造は、ＮＧＡ２Ｆ、ＮＡ１Ｆ、ＮＡ２Ｆ、ＮＧＡ２Ｆ−ＧｌｃＮＡｃおよびＮＡ１Ｆ−ＧｌｃＮＡｃからなる群から独立して選択される。
【００１２】
一実施形態において、第１のレベルは約０から１００％である。別の実施形態において、第１のレベルは約１０から３０％である。さらに別の実施形態において、第１のレベルは、約０％、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、８％、９９％、および約１００％からなる群から選択される。
【００１３】
一実施形態において、第２のレベルは約０から１００％である。別の実施形態において、第２のレベルは約７０から９０％である。さらに別の実施形態において、第２のレベルは、０％、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、８％、９９％、および約１００％からなる群から選択される。
【００１４】
所望の速度の血清クリアランスは、急速な血清クリアランスであってよい。一実施形態において、第１のレベルは約５０％を超える。別の実施形態において、第１のレベルは約３０％を超える。一実施形態において、第１のレベルは約５１から１００％である。別の実施形態において、第１のレベルは約３１から１００％である。
【００１５】
所望の速度の血清クリアランスは、緩速の血清クリアランスであってよい。一実施形態において、第１のレベルは、０から５０％である。別の実施形態において、第１のレベルは、約１０から３０％である。
【００１６】
抗体またはこの抗原結合部分は、λ軽鎖を含んでよい。
【００１７】
抗体またはこの抗原結合部分は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３およびＩｇＧ４の定常領域からなる群から選択される重鎖定常領域を含んでよい。一実施形態において、重鎖定常領域は、ＩｇＧ１重鎖である。別の実施形態において、抗体またはこの抗原結合部分は、ＩｇＧ１重鎖定常領域およびλ軽鎖を含む。
【００１８】
抗体またはこの抗原結合部分は、哺乳動物細胞、ＣＨＯ細胞または骨髄腫細胞系において作製することができる。
【００１９】
抗体またはこの抗原結合部分は、抗ＩＬ−１２抗体および抗ＩＬ−２３抗体もしくはＡＢＴ−８７４またはこれらの断片であってよい。
【００２０】
一実施形態において、抗体またはこの抗原結合部分は、配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３および配列番号２６のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３を含む。一実施形態において、ヒト抗体またはこの抗原結合部分は、配列番号２７のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２および配列番号２８のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２をさらに含む。別の実施形態において、ヒト抗体またはこの抗原結合部分は、配列番号２９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１および配列番号３０のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１をさらに含む。
【００２１】
一実施形態において、抗体またはこの抗原結合部分は、配列番号３１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３２のアミノ酸配列含む軽鎖可変領域を含む。
【００２２】
一実施形態において、抗体またはこの抗原結合部分は、ＣＮＴ０１２７５、トシツモマブ、ＷＲＩ−１７０、ＷＯ１、ＴＮＦ−Ｈ９Ｇ１、ＴＨＹ−３２、ＴＨＹ−２９、ＴＥＬ１６、ＴＥＬ１４、Ｔｅｌ１３、ＳＭ１、Ｓ１−１、ＲＳＰ４、ＲＨ−１４、ＲＦ−ＴＳ７、ＲＦ−ＳＪ２、ＲＦ−ＳＪ１、ＲＦ−ＡＮ、ＰＲ−ＴＳ２、ＰＲ−ＴＳ１、ＰＲ−ＳＪ２、ＰＲ−ＳＪ１、ＰＨＯＸ１５、ＰＡＧ−１、ＯＧ−３１、ＮＯ．１３、ＮＭ３Ｅ２  ＳＣＦＶ、ＭＵＣ１−１、ＭＮ２１５、ＭＣ１１６、ＭＡＤ−２、ＭＡＢ６７、ＭＡＢ６３、ＭＡＢ６０、ＭＡＢ５９、ＭＡＢ５７、ＭＡＢ５６、ＭＡＢ１１１、ＭＡＢ１０７、Ｌ３０５５−ＢＬ、Ｋ６Ｈ６、Ｋ６Ｆ５、Ｋ５Ｇ５、Ｋ５Ｃ７、Ｋ５Ｂ８、Ｋ４Ｂ８、ＪＡＣ−１０、ＨＵＣ、ＨＭＳＴ−１、ＨＩＨ２、ＨＩＨ１０、ＨＢＷ４−１、ＨＢＰ２、ＨＡ１、Ｈ６−３Ｃ４、Ｈ２１０、ＧＰ４４、ＧＧ４８、ＧＧ３、ＧＡＤ−２、ＦＯＭ−Ａ、ＦＯＭ−１、ＦＯＧ１−Ａ３、ＦＯＧ−Ｂ、ＤＰＣ、ＤＰＡ、ＤＯＢ１、ＤＯ１、ＣＬＬ００１、ＣＬＬ−２４９、ＣＤ４−７４、ＣＢ−２０１、Ｃ３０４  ＲＦ、ＢＳＡ３、ＢＯ３、ＢＯ１、ＢＥＮ−２７、Ｂ−３３、Ｂ−２４、ＡＮＴＩ−ＴＥＳＴ、ＡＮＴＩ−ＥＳＴ、ＡＮＴＩ−ＤＩＧＢ、ＡＮＴＩ−ＤＩＧＡ、ＡＩＧ、９６０４、４４８．９Ｇ．Ｆ１、３３．Ｈ１１、３２．Ｂ９、２４Ａ５、１Ｂ９／Ｆ２、１３Ｅ１０、１２３ＡＶ１６−１、１１−５０、および１．３２からなる群から選択される抗体またはこの断片である。
【００２３】
本発明の組成物は、バッファー、ポリオールおよび界面活性剤からなる群から選択される追加の薬剤をさらに含むことができる。一実施形態において、バッファーは、Ｌ−ヒスチジン、コハク酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、リン酸ナトリウムおよびリン酸カリウムからなる群から選択される。一実施形態において、ポリオールは、マンニトールおよびソルビトールからなる群から選択される。一実施形態において、界面活性剤は、ポリソルベート８０、ポリソルベート２０およびＢＲＩＪ界面活性剤からなる群から選択される。一実施形態において、本発明の組成物は、メチオニンをさらに含む。
【００２４】
組成物中の抗体またはこの抗原結合部分の濃度は、約０．１から２５０ｍｇ／ｍｌであってよい。
【００２５】
本発明の組成物は、非経口投与、静脈注射もしくは静脈内注入または皮下注射または筋肉内注射に適切であってよい。
【００２６】
本発明の組成物は、追加の治療薬をさらに含んでもよい。一実施形態において、追加の治療薬は、ブデソニド（ｂｕｄｅｎｏｓｉｄｅ）、表皮成長因子、副腎皮質ステロイド、シクロスポリン、スルファサラジン、アミノサリチル酸塩、６−メルカプトプリン、アザチオプリン、メトロニダゾール、リポキシゲナーゼ阻害剤、メサラミン、オルサラジン、バルサラジド、抗酸化剤、トロンボキサン阻害剤、ＩＬ−１受容体拮抗薬、抗ＩＬ−１βモノクローナル抗体、抗ＩＬ−６モノクローナル抗体、成長因子、エラスターゼ阻害剤、ピリジニル−イミダゾール化合物、ＴＮＦ、ＬＴ、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１８、ＥＭＡＰ−ＩＩ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＦＧＦ、およびＰＤＧＦの抗体もしくは作動薬、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤ４５、ＣＤ６９、ＣＤ９０もしくはこれらのリガンドに対する抗体、メトトレキサート、シクロスポリン、ＦＫ５０６、ラパマイシン、ミコフェノール酸モフェチル、レフルノミド、ＮＴＨＥ、イブプロフェン、副腎皮質ステロイド、プレドニゾロン、ホスホジエステラーゼ阻害剤、アデノシン作動薬、抗血栓薬、補体阻害剤、アドレナリン作動薬、ＩＲＡＫ、ＮＩＫ、ＩＫＫ、ｐ３８、ＭＡＰキナーゼ阻害剤、ＩＬ−１β転換酵素阻害剤、ＴＮＦα転換酵素阻害剤、Ｔ細胞シグナル伝達阻害剤、メタロプロテイナーゼ阻害剤、スルファサラジン、アザチオプリン、６−メルカプトプリン、アンジオテンシン転換酵素阻害剤、可溶性サイトカイン受容体、可溶性ｐ５５ＴＮＦ受容体、可溶性ｐ７５ＴＮＦ受容体、ｓＩＬ−１ＲＩ、ｓＩＬ−１ＲＩＩ、ｓＩＬ−６Ｒ、抗炎症性サイトカイン、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１３およびＴＧＦβからなる群から選択される。別の実施形態において、追加の治療薬は、抗ＴＮＦ抗体およびこれらの抗体断片、ＴＮＦＲ−Ｉｇ構築体、ＴＡＣＥ阻害剤、ＰＤＥ４阻害剤、副腎皮質ステロイド、ブデソニド（ｂｕｄｅｎｏｓｉｄｅ）、デキサメタゾン、スルファサラジン、５−アミノサリチル酸、オルサラジン、ＩＬ−１β転換酵素阻害剤、ＩＬ−１ｒａ、チロシンキナーゼ阻害剤、６−メルカプトプリンおよびＩＬ−１１からなる群から選択される。さらに別の実施形態において、追加の治療薬は、副腎皮質ステロイド、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、アザチオプリン、シクロホスファミド、シクロスポリン、メトトレキサート、４−アミノピリジン、チザニジン、インターフェロン−β１ａ、インターフェロン−β１ｂ、コポリマー１、高圧酸素、静注用免疫グロブリン、クラドリビン（ｃｌａｂｒｉｂｉｎｅ）、ＴＮＦ、ＬＴ、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１８、ＥＭＡＰ−ＩＩ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＦＧＦ、ＰＤＧＦの抗体もしくは作動薬、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤ４５、ＣＤ６９、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ９０もしくはこれらのリガンドに対する抗体、メトトレキサート、シクロスポリン、ＦＫ５０６、ラパマイシン、ミコフェノール酸モフェチル、レフルノミド、ＮＴＨＥ、イブプロフェン、副腎皮���ステロイド、プレドニゾロン、ホスホジエステラーゼ阻害剤、アデノシン作動薬、抗血栓薬、補体阻害剤、アドレナリン作動薬、ＩＲＡＫ、ＮＩＫ、ＩＫＫ、ｐ３８もしくはＭＡＰキナーゼ阻害剤、ＩＬ−１β転換酵素阻害剤、ＴＡＣＥ阻害剤、Ｔ細胞シグナル伝達阻害剤、キナーゼ阻害剤、メタロプロテイナーゼ阻害剤、スルファサラジン、アザチオプリン、６−メルカプトプリン、アンジオテンシン転換酵素阻害剤、可溶性サイトカイン受容体、可溶性ｐ５５ＴＮＦ受容体、可溶性ｐ７５ＴＮＦ受容体、ｓＩＬ−１ＲＩ、ｓＩＬ−１ＲＩＩ、ｓＩＬ−６Ｒ、ｓＩＬ−１３Ｒ、抗Ｐ７、ｐ−セレクチン糖タンパク質リガンド（ＰＳＧＬ）、抗炎症性サイトカイン、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３およびＴＧＦβからなる群から選択される。
【００２７】
別の態様において、本発明は、ヒト抗体またはこの抗原結合部分を含む組成物を提供する。本組成物は、０から１００％の、オリゴマンノース型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された抗体またはこの抗原結合部分および０から１００％の、フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された抗体またはこの抗原結合部分を含み、本組成物は所望の速度の血清クリアランスを示す。
【００２８】
さらに別の態様において、本発明は、ヒト抗体またはこの抗原結合部分を含む組成物を提供する。本組成物は、約１０から３０％の、オリゴマンノース型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された抗体またはこの抗原結合部分および約７０から９０％の、フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された抗体またはこの抗原結合部分を含み、本組成物は所望の速度の血清クリアランスを示す。
【００２９】
一態様において、本発明は、ＡＢＴ−８７４またはこの抗原結合部分を含む組成物を提供する。本組成物は、約０から１００％の、Ｍ５、Ｍ６、Ｍ７、Ｍ８およびＭ９からなる群から独立して選択される、オリゴマンノース構造により、Ａｓｎ２９７においてグリコシル化されたＡＢＴ−８７４および約０から１００％の、ＮＧＡ２Ｆ、ＮＡ１Ｆ、ＮＡ２Ｆ、ＮＧＡ２Ｆ−ＧｌｃＮＡｃおよびＮＡ１Ｆ−ＧｌｃＮＡｃからなる群から独立して選択される、フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖構造により、Ａｓｎ２９７においてグリコシル化されたＡＢＴ−８７４を含む。
【００３０】
別の態様において、本発明は、ＡＢＴ−８７４またはこの抗原結合部分を含む組成物を提供する。本組成物は、約１０から３０％の、Ｍ５、Ｍ６、Ｍ７、Ｍ８およびＭ９からなる群から独立して選択される、オリゴマンノース構造により、Ａｓｎ２９７においてグリコシル化されたＡＢＴ−８７４および約７０から９０％の、ＮＧＡ２Ｆ、ＮＡ１Ｆ、ＮＡ２Ｆ、ＮＧＡ２Ｆ−ＧｌｃＮＡｃおよびＮＡ１Ｆ−ＧｌｃＮＡｃからなる群から独立して選択される、フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖構造により、Ａｓｎ２９７においてグリコシル化されたＡＢＴ−８７４を含む。
【００３１】
一態様において、本発明は、ヒト抗体またはこの抗原結合部分を含む組成物の薬物動態を調節する方法を提供する。本方法は、オリゴマンノース型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された抗体の第１のレベルを調節するステップおよびフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された抗体の第２のレベルを調節するステップを含み、第１のレベルおよび第２のレベルの調節が、所望の速度の血清クリアランスをもたらし、その結果、ヒト抗体またはこの抗原結合部分を含む組成物の薬物動態を調節する。
【００３２】
Ｎ結合型グリコシル化部位は、抗体のＦｃ領域のアスパラギン残基、例えばＡｓｎ２９７であってよい。
【００３３】
一実施形態において、オリゴマンノース型構造は、Ｍ５、Ｍ６、Ｍ７、Ｍ８およびＭ９からなる群から独立して選択される。
【００３４】
一実施形態において、フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造は、ＮＧＡ２Ｆ、ＮＡ１Ｆ、ＮＡ２Ｆ、ＮＧＡ２Ｆ−ＧｌｃＮＡｃおよびＮＡ１Ｆ−ＧｌｃＮＡｃからなる群から独立して選択される。
【００３５】
一実施形態において、第１のレベルは約０−１００％である。別の実施形態において、第１のレベルは約１０−３０％である。一実施形態において、第１のレベルは、約０％、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、８％、９９％および約１００％からなる群から選択される。
【００３６】
一実施形態において、第２のレベルは約０から１００％である。別の実施形態において、第２のレベルは約７０から９０％である。さらに別の実施形態において、第２のレベルは、約０％、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、８％、９９％および約１００％からなる群から選択される。
【００３７】
一実施形態において、所望の速度の血清クリアランスは、急速な血清クリアランスである。一実施形態において、第１のレベルは約５０％を超える。別の実施形態において、第１のレベルは約３０％を超える。一実施形態において、第１のレベルは約５１から１００％である。別の実施形態において、第１のレベルは、約３１から１００％である。
【００３８】
一実施形態において、所望の速度の血清クリアランスは、緩速の血清クリアランスである。一実施形態において、第１のレベルは約０から１００％である。一実施形態において、第２のレベルは約１０から３０％である。
【００３９】
抗体またはこの抗原結合部分は、λ軽鎖を含んでよい。
【００４０】
抗体またはこの抗原結合部分は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３およびＩｇＧ４の定常領域からなる群から選択される重鎖定常領域を含んでよい。一実施形態において、重鎖定常領域は、ＩｇＧ１である。一実施形態において、抗体またはこの抗原結合部分は、ＩｇＧ１重鎖定常領域およびλ軽鎖を含む。
【００４１】
抗体またはこの抗原結合部分は、哺乳動物細胞、ＣＨＯ細胞または骨髄腫細胞系において作製することができる。
【００４２】
抗体またはこの抗原結合部分は、抗ＩＬ−１２抗体および抗ＩＬ−２３抗体もしくはＡＢＴ−８７４またはこれらの断片であってよい。
【００４３】
一実施形態において、抗体またはこの抗原結合部分は、配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３および配列番号２６のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３を含む。一実施形態において、ヒト抗体またはこの抗原結合部分は、配列番号２７のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２および配列番号２８のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２をさらに含む。別の実施形態において、ヒト抗体またはこの抗原結合部分は、配列番号２９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１および配列番号３０のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１をさらに含む。一実施形態において、抗体またはこの抗原結合部分は、配列番号３１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３２のアミノ酸配列含む軽鎖可変領域を含む。
【００４４】
一実施形態において、抗体またはこの抗原結合部分は、ＣＮＴ０１２７５、トシツモマブ、ＷＲＩ−１７０、ＷＯ１、ＴＮＦ−Ｈ９Ｇ１、ＴＨＹ−３２、ＴＨＹ−２９、ＴＥＬ１６、ＴＥＬ１４、Ｔｅｌ１３、ＳＭ１、Ｓ１−１、ＲＳＰ４、ＲＨ−１４、ＲＦ−ＴＳ７、ＲＦ−ＳＪ２、ＲＦ−ＳＪ１、ＲＦ−ＡＮ、ＰＲ−ＴＳ２、ＰＲ−ＴＳ１、ＰＲ−ＳＪ２、ＰＲ−ＳＪ１、ＰＨＯＸ１５、ＰＡＧ−１、ＯＧ−３１、ＮＯ．１３、ＮＭ３Ｅ２  ＳＣＦＶ、ＭＵＣ１−１、ＭＮ２１５、ＭＣ１１６、ＭＡＤ−２、ＭＡＢ６７、ＭＡＢ６３、ＭＡＢ６０、ＭＡＢ５９、ＭＡＢ５７、ＭＡＢ５６、ＭＡＢ１１１、ＭＡＢ１０７、Ｌ３０５５−ＢＬ、Ｋ６Ｈ６、Ｋ６Ｆ５、Ｋ５Ｇ５、Ｋ５Ｃ７、Ｋ５Ｂ８、Ｋ４Ｂ８、ＪＡＣ−１０、ＨＵＣ、ＨＭＳＴ−１、ＨＩＨ２、ＨＩＨ１０、ＨＢＷ４−１、ＨＢＰ２、ＨＡ１、Ｈ６−３Ｃ４、Ｈ２１０、ＧＰ４４、ＧＧ４８、ＧＧ３、ＧＡＤ−２、ＦＯＭ−Ａ、ＦＯＭ−１、ＦＯＧ１−Ａ３、ＦＯＧ−Ｂ、ＤＰＣ、ＤＰＡ、ＤＯＢ１、ＤＯ１、ＣＬＬ００１、ＣＬＬ−２４９、ＣＤ４−７４、ＣＢ−２０１、Ｃ３０４  ＲＦ、ＢＳＡ３、ＢＯ３、ＢＯ１、ＢＥＮ−２７、Ｂ−３３、Ｂ−２４、ＡＮＴＩ−ＴＥＳＴ、ＡＮＴＩ−ＥＳＴ、ＡＮＴＩ−ＤＩＧＢ、ＡＮＴＩ−ＤＩＧＡ、ＡＩＧ、９６０４、４４８．９Ｇ．Ｆ１、３３．Ｈ１１、３２．Ｂ９、２４Ａ５、１Ｂ９／Ｆ２、１３Ｅ１０、１２３ＡＶ１６−１、１１−５０、および１．３２からなる群から選択される抗体またはこの断片である。
【００４５】
一態様において、本発明は、ＡＢＴ−８７４またはこの抗原結合部分を含む組成物の薬物動態を調節する方法を提供する。本方法は、Ｍ５、Ｍ６、Ｍ７、Ｍ８およびＭ９からなる群から独立して選択されるオリゴマンノース型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化されたＡＢＴ−８７４またはこの抗原結合断片の第１のレベルを調節するステップおよびＮＧＡ２Ｆ、ＮＡ１Ｆ、ＮＡ２Ｆ、ＮＧＡ２Ｆ−ＧｌｃＮＡｃおよびＮＡ１Ｆ−ＧｌｃＮＡｃからなる群から独立して選択されるフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化されたＡＢＴ−８７４またはこの抗原結合断片の第２のレベルを調節するステップを含み、第１のレベルおよび第２のレベルの調節が、所望の速度の血清クリアランスをもたらし、その結果、ＡＢＴ−８７４またはこの抗原結合部分を含む組成物の薬物動態を調節する。
【００４６】
本発明の他の特長および有利性は、以下の詳細な説明および特許請求の範囲により明らかになると思われる。
【００４７】
この特許または出願ファイルは、少なくとも１つの、カラーで作成された図面を含有する。この特許または特許出願公報の、カラーの図面を含むコピーは、請求に応じ、必要な料金の支払により、特許庁により提供されるものである。
【図面の簡単な説明】
【００４８】
【図１Ａ】健常対象へのＡＢＴ−８７４の７００ｍｇ単回ＩＶ注入後の、個別のＡＢＴ−８７４のオリゴマンノース型（１Ａ）およびフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造（ＦＢＯ）（１Ｂ）のグリコフォームの継時的な平均±ＳＤを示す図である（対数−線形尺度）。
【図１Ｂ】健常対象へのＡＢＴ−８７４の７００ｍｇ単回ＩＶ注入後の、個別のＡＢＴ−８７４のオリゴマンノース型（１Ａ）およびフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造（ＦＢＯ）（１Ｂ）のグリコフォームの継時的な平均±ＳＤを示す図である（対数−線形尺度）。
【図２Ａ】ＡＢＴ−８７４の７００ｍｇ単回ＩＶ注入後の、グリコフォームグループ１（ＦＢＯ）およびグループ２（オリゴマンノース）に関する血清濃度−時間プロファイルの平均±ＳＤを線形（２Ａ）および対数−線形（２Ｂ）尺度で示す図である。
【図２Ｂ】ＡＢＴ−８７４の７００ｍｇ単回ＩＶ注入後の、グリコフォームグループ１（ＦＢＯ）およびグループ２（オリゴマンノース）に関する血清濃度−時間プロファイルの平均±ＳＤを線形（２Ａ）および対数−線形（２Ｂ）尺度で示す図である。
【図３−１】個別の予測ＡＢＴ−８７４濃度対観察された濃度および重み付き残差対時間の適合度プロットを提示する図である。上の左のパネルは、ＡＢＴ−８７４グループ１（ＦＢＯ）の個別予測濃度（ＩＰＲＥ）対観察濃度を示し、上の右のパネルは、ＡＢＴ−８７４グループ２（オリゴマンノース）の個別予測濃度（ＩＰＲＥ）対観察濃度を示す。濃度分析対母集団予測濃度（ＰＲＥＤ）に関して、中央の左のパネルは、ＡＢＴ−８７４グループ１（ＦＢＯ）の条件付き重み付き残差（ＣＷＲＥＳ）を示し、中央の右のパネルは、ＡＢＴ−８７４グループ２（オリゴマンノース）の条件付き重み付き残差（ＣＷＲＥＳ）を示す。濃度分析対時間に関して、下の左のパネルは、ＡＢＴ−８７４グループ１（ＦＢＯ）の条件付き重み残差（ＣＷＲＥＳ）を示し、下の右のパネルは、ＡＢＴ−８７４グループ２（オリゴマンノース）の条件付き重み残差（ＣＷＲＥＳ）を示す。
【図３−２】個別の予測ＡＢＴ−８７４濃度対観察された濃度および重み付き残差対時間の適合度プロットを提示する図である。上の左のパネルは、ＡＢＴ−８７４グループ１（ＦＢＯ）の個別予測濃度（ＩＰＲＥ）対観察濃度を示し、上の右のパネルは、ＡＢＴ−８７４グループ２（オリゴマンノース）の個別予測濃度（ＩＰＲＥ）対観察濃度を示す。濃度分析対母集団予測濃度（ＰＲＥＤ）に関して、中央の左のパネルは、ＡＢＴ−８７４グループ１（ＦＢＯ）の条件付き重み付き残差（ＣＷＲＥＳ）を示し、中央の右のパネルは、ＡＢＴ−８７４グループ２（オリゴマンノース）の条件付き重み付き残差（ＣＷＲＥＳ）を示す。濃度分析対時間に関して、下の左のパネルは、ＡＢＴ−８７４グループ１（ＦＢＯ）の条件付き重み残差（ＣＷＲＥＳ）を示し、下の右のパネルは、ＡＢＴ−８７４グループ２（オリゴマンノース）の条件付き重み残差（ＣＷＲＥＳ）を示す。
【図４】ＡＢＴ−８７４のグループ２（オリゴマンノース；左）およびグループ１（ＦＢＯ；右）に関する視覚的予測チェック（ｖｉｓｕａｌ  ｐｒｅｄｉｃｔｉｖｅ  ｃｈｅｃｋｓ）を示す図である。実線：中央予測濃度；点線：予測濃度の５パーセンタイルおよび９５パーセンタイル；○：観察濃度。
【図５】純粋なＦＢＯ（明るい灰色）およびオリゴマンノース（中間の灰色）のＡＢＴ−８７４グリコフォーム（９０％予測区間）の、シミュレーションされた薬物動態プロファイルを示す図である。
【図６】７０／３０のＦＢＯ／オリゴマンノース（左）および６０／４０（右）を含む試験用ＡＢＴ−８７４製品の、参照製品（９０／１０）と一緒にプロットされた、シミュレーションされた薬物動態プロファイルを示す図である。
【図７】異なるグリコフォーム組成物において、それぞれ１０００回反復された生物学的同等性試験による、試験用組成物対参照組成物（９０／１０）のＡＵＣ０−２８ｄの比に関するシミュレーションされた９０％信頼区間を示す図である。
【図８】異なるグリコフォーム組成物において、それぞれ１０００回反復された生物学的同等性試験による、試験用組成物対参照組成物（９０／１０）のＣｍａｘの比に関するシミュレーションされた９０％信頼区間を示す図である。
【図９】９０／１０の組成物を参照として使用して、生物学的同等性の基準（０．８０から１．２５）を満たさない試験複製の百分率を示す図である。上の左のパネルは、ＡＵＣを満たさない試験を示す。上の右のパネルはＣｍａｘを満たさない試験を示す。下のパネルは、ＡＵＣまたはＣｍａｘを満たさない試験を示す。
【発明を実施するための形態】
【００４９】
本発明は、ヒト抗体のグリコフォームのレベルおよびタイプと、抗体の血清クリアランスの速度との間の関係の発見に、少なくとも一部は基づく。より詳細には、ヒト抗ＩＬ−１２／ＩＬ−２３ｐ４０抗体（ＡＢＴ−８７４）の８種のグリコフォームが、ヒト対象への投与後、ＡＢＴ−８７４の組成物中に同定されている。８種のグリコフォームの構造解析により、グリコフォームを２つのグループ：オリゴマンノース型構造およびフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造に分離することができ、この分離は、８種のグリコフォームの薬物動態解析によりさらに裏付けられた。
【００５０】
２つのグループの母集団薬物動態モデリングにより、ＡＢＴ−８７４のオリゴマンノース型構造は、ＡＢＴ−８７４のフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造よりおよそ４０％早いクリアランス速度を有するが、フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造の９０％と比較して、ＡＢＴ−８７４組成物中のオリゴマンノース型構造の百分率は約１０％であるので、ＡＢＴ−８７４全体のクリアランス速度は影響されないことが実証された。
【００５１】
２つのグループの母集団薬物動態モデリングにより、ＡＢＴ−８７４組成物中のオリゴマンノース型構造のレベルが、オリゴ糖構造の全レベルのおよそ３０％に増加しても、抗体またはこの抗原結合断片の薬物動態または血清クリアランス速度に対する影響を有さないことがさらに実証された。
【００５２】
従って、本発明は、所望の速度の血清クリアランスを達成するために、さまざまなレベルのグリコフォームを含有する、抗体およびこれらの抗原結合断片の組成物を提供する。加えて、本発明は、ヒト抗体の薬物動態を調節する方法および所望の速度の血清クリアランスを達成するために、ヒト抗体を伴う治療組成物を提供する。
【００５３】
Ｉ．定義
冠詞「ａ」および「ａｎ」は、本明細書において、１または複数の（即ち少なくとも１）の、冠詞の文法的目的語を指すために使用される。例としては、「ある要素（ａｎ  ｅｌｅｍｅｎｔ）」は、１つの要素または複数の要素を意味する。
【００５４】
大部分の天然のペプチド（またはタンパク質）は、一次ペプチド鎖の長さに  沿って、選択数のアミノ酸に対する特異的連結を介してペプチドに結合した炭化水素または糖類部分を含む。従って、多数の天然のペプチドは、「糖ペプチド」もしくは「糖タンパク質」と呼ばれ、または「グリコシル化」タンパク質もしくはペプチドと称される。
【００５５】
「グリコフォーム」という用語は、タンパク質のアイソフォーム、例えば、結合されたグリカンの数および／またはタイプだけが異なる抗体を指す。糖タンパク質は多くの場合、多数の異なるグリコフォームからなる。
【００５６】
糖タンパク質に見出される主な糖は、グルコース、ガラクトース、マンノース、フコース、Ｎ−アセチルガラクトサミン（「ＧａｌＮＡｃ」）、Ｎ−アセチルグルコサミン（「ＧｌｃＮＡｃ」）およびシアル酸（例えば、Ｎ−アセチルノイラミン酸（「ＮＡＮＡ」または「ＮｅｕＡｃ」、式中「Ｎｅｕ」はノイラミン酸である。）、「Ａｃ」は「アセチル」を指す。）。糖類のプロセシングはＥＲの内腔において共翻訳的に起こり、Ｎ結合型糖タンパク質に関してはゴルジ装置において続く。
【００５７】
ペプチド鎖に結合したオリゴ糖構造は、「グリカン」分子として知られている。天然の糖ペプチドに見出されるグリカン構造は、通常２つのクラス、「Ｎ結合型グリカン」もしくは「Ｎ結合型オリゴ糖」および「Ｏ結合型グリカン」もしくは「Ｏ結合型オリゴ糖」に分類される。
【００５８】
「Ｏ結合型グリカン」を含むペプチドは、セリン、トレオニン、チロシン、ヒドロキシリジン、およびまたはヒドロキシプロリン残基のヒドロキシ酸素に結合した糖を、一次タンパク質中に有する。
【００５９】
真核細胞中に発現されたペプチドは、通常、Ｎグリカンを含む。「Ｎグリカン」は、タンパク質中のアスパラギンまたはアルギニン残基のアミド窒素において、Ｎ−アセチルグルコサミン残基を介してＮグリコシル化される。これらの「Ｎ結合型グリコシル化部位」は、例えば、アミノ酸配列、アスパラギン−Ｘ−セリン／トレオニンを含有するペプチドの一次構造中で起こり、式中、Ｘは、プロリンおよびアスパラギン酸を除く任意のアミノ酸残基である。
【００６０】
グリカンの一次構造を決定する技術は、当分野において周知であり、例えば、Ｍｏｎｔｒｅｕｉｌ、「Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｇｌｙｃｏｐｅｐｔｉｄｅｓ」Ｉｎ  Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ｉｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ．２７３−３２７，１９９６，Ｅｄｓ．Ｓｅｖｅｒｉａｎ  Ｄａｍｉｔｒｉｕ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，ＮＹに詳細に説明されている。従って、細胞により産生されたペプチドの集団を単離し、これらに結合するグリカンの構造を決定することは、当業者にとって日常的な事柄である。例えば、有効な方法は、（ｉ）加水分解、アセトリシス、ヒドラジン分解などの化学的切断または亜硝酸脱アミノのいずれかによるグリコシド結合の分割、（ｉｉ）メチル化の完了、その後の加水分解またはメタノリシスおよび部分的にメチル化された単糖類のガス液体クロマトグラフィーおよび質量分析、ならびに（ｉｉｉ）エキソグリコシダーゼを使用する単糖類間のアノマー結合の定義に利用可能であり、これにより、逐次分解による一次グリカン構造の洞察もまた提供される。順相ＨＰＬＣ（ＮＰ−ＨＰＬＣ）、質量分析法および核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光分析、例えば強磁気ＮＭＲもまた、グリカンの一次構造を決定するために使用できる。
【００６１】
炭水化物分析のためのキットおよび機器もまた市販されている。Ｆｌｕｏｒｏｐｈｏｒｅ  Ａｓｓｉｓｔｅｄ  Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ（ＦＡＣＥ）が、Ｇｌｙｋｏ，Ｉｎｃ．（Ｎｏｖａｔｏ、Ｃａｌｉｆ．）から利用可能である。ＦＡＣＥ分析において、Ｎ結合グリカンに関してはＥｎｄｏ  ＨまたはＮ−グリカナーゼ（ＰＮｇａｓｅ  Ｆ）のいずれかを用いて、またはＳｅｒ／Ｔｈｒ結合グリカンに関してはヒドラジンを用いて、複合糖質がペプチドから放出される。その後グリカンは、還元末端において、非構造識別様式でフルオロフォアを用いて標識される。フルオロフォアにより標識されたグリカンは、その後、糖類の電荷／質量比および流体力学的容積に基づき、ポリアクリルアミドゲルにおいて分離される。ＵＶ光下でゲルの画像を撮影し、グリカンの組成を、標準と比較した泳動距離により決定する。オリゴ糖を、エキソグリコシダーゼ消化による糖類の逐次除去の結果、泳動シフトを分析することによりこの様式で配列決定できる。
【００６２】
すべてのＮ結合型オリゴ糖は、Ｍａｎ３ＧｌｃＮＡｃ２の共通の「五糖コア」を有する（「Ｍａｎ」はマンノースを指し、「Ｇｌｃ」はグルコースを指し、「ＮＡｃ」はＮ−アセチルを指す、ならびに「ＧｌｃＮＡｃ」はＮ−アセチルグルコサミンを指す。）。五糖コアは、「トリマンノースコア」または「パウチマンノースコア」とも称される。
【００６３】
Ｎ−グリカンは、末梢の糖、例えばＭａｎ３ＧｌｃＮＡｃ２コア構造に付加されたＮ−アセチルグルコサミン、ガラクトース、Ｎ−アセチルガラクトサミン、Ｎ−アセチルノイラミン酸、フコースおよびシアル酸を含む、分枝（「アンテナ」とも呼ばれる。）の存在および／または数に関して異なる。場合により、この構造は、コアのフコース分子および／またはキシロース分子もまた含有することができる。標準糖鎖生物学命名法の総説に関しては、Ｅｓｓｅｎｔｉａｌｓ  ｏｆ  Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ  Ｖａｒｋｉ  ｅｔ  ａｌ．ｅｄｓ．，１９９９，ＣＳＨＬ  Ｐｒｅｓｓを参照されたく、この内容は参照により本明細書に組み込まれる。
【００６４】
Ｎ−グリカンは、これらの分枝した構成要素（例えばオリゴマンノース型、複合体またはハイブリッド）に従って分類される。「オリゴマンノース型」または「高マンノース型」のＮ−グリカンは、５以上のマンノース残基を有する。
【００６５】
「複合型」Ｎ−グリカンは、通常、五糖コアの１，３マンノースアームに結合した少なくとも１つのＧｌｃＮＡｃおよび１，６マンノースアームに結合した少なくとも１つのＧｌｃＮＡｃを有する。複合型Ｎ−グリカンはまた、場合によりシアル酸または誘導体、例えばＮ−アセチルノイラミン酸により修飾された、ガラクトース（「Ｇａｌ」）またはＮ−アセチルガラクトサミン残基を有してもよい。複合型Ｎ−グリカンはまた、「バイセクティング（ｂｉｓｅｃｔｉｎｇ）」ＧｌｃＮＡｃおよびコアフコース（「Ｆｕｃ」）を含む鎖内置換を有してもよい。複合Ｎ−グリカンはまた、五糖コアに多数のアンテナを有してもよく、従って、「マルチアンテナリーグリカン（ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ａｎｔｅｎｎａｒｙ−ｔｙｐｅ  ｇｌｙｃａｎｓ）」とも称される。
【００６６】
「ハイブリッド型」Ｎ−グリカンは、五糖コアの１，３マンノースアームの末端に少なくとも１つのＧｌｃＮＡｃおよびトリマンノースコアの１，６マンノースアームに０以上のマンノースを含む。
【００６７】
一実施形態において、本発明の組成物内に存在する、および／または特許請求する方法における使用に適切な、ヒト抗体またはこの抗原結合断片は、オリゴマンノース型構造を含む。別の実施形態において、本発明の組成物内に存在する、および／または特許請求する方法における使用に適切な、ヒト抗体またはこの抗原結合断片は、マルチアンテナリー構造を含む。別の実施形態において、本発明の組成物内に存在する、および／または特許請求する方法における使用に適切な、ヒト抗体またはこの抗原結合断片は、ハイブリッド型構造を含む。さらに別の実施形態において、本発明の組成物内に存在する、および／または特許請求する方法における使用に適切な、ヒト抗体またはこの抗原結合断片は、オリゴマンノース型構造、マルチアンテナリー構造およびハイブリッド型構造からなる群から独立して選択されるＮ−グリカン構造を含む。
【００６８】
本発明の組成物内に存在できる、および／または本発明の方法に使用できるオリゴマンノース型構造は、本明細書において「Ｍ５」、「Ｍ６」、「Ｍ７」、「Ｍ８」および「Ｍ９」と称される。
【００６９】
一実施形態において、Ｍ５オリゴマンノース型構造は、構造（Ｉ）：
【００７０】
【化１】
2014505075.tif 000003
を有する。
【００７１】
一実施形態において、Ｍ６オリゴマンノース型構造は、構造（ＩＩ）：
【００７２】
【化２】
2014505075.tif 000004
を有する。
【００７３】
一実施形態において、Ｍ７オリゴマンノース型構造は、構造（ＩＩＩ）：
【００７４】
【化３】
2014505075.tif 000005
を有する。
【００７５】
別の実施形態において、Ｍ７オリゴマンノース型構造は、構造（ＩＶ）：
【００７６】
【化４】
2014505075.tif 000006
を有する。
【００７７】
別の実施形態において、Ｍ７オリゴマンノース型構造は、構造（Ｖ）：
【００７８】
【化５】
2014505075.tif 000007
を有する。
【００７９】
一実施形態において、Ｍ８オリゴマンノース型構造は、構造（ＶＩ）：
【００８０】
【化６】
2014505075.tif 000008
を有する。
【００８１】
別の実施形態において、Ｍ８オリゴマンノース型構造は、構造（ＶＩＩ）：
【００８２】
【化７】
2014505075.tif 000009
を有する。
【００８３】
別の実施形態において、Ｍ８オリゴマンノース型構造は、構造（ＶＩＩＩ）：
【００８４】
【化８】
2014505075.tif 000010
を有する。
【００８５】
一実施形態において、Ｍ９オリゴマンノース型構造は、構造（ＩＸ）：
【００８６】
【化９】
2014505075.tif 000011
を有する。
【００８７】
一実施形態において、本発明の組成物内に存在できる、および／または本発明の方法に使用できるオリゴマンノース型構造は、Ｍ５、Ｍ６、Ｍ７、Ｍ８およびＭ９からなる群から独立して選択される。
【００８８】
一実施形態において、本発明の組成物内に存在できる、および／または本発明の方法に使用できる、マルチアンテナリー構造は、「バイアンテナリーオリゴ糖型構造」である。「バイアンテナリーオリゴ糖型構造」は、２つの枝またはアームおよびアームに０、１または２個のガラクトースが付加されたコアフコースを有するＮ結合型グリカンである。一実施形態において、本発明の組成物内に存在できる、および／または本発明の方法に使用できる「バイアンテナリーオリゴ糖型構造」は、バイセクト型（ｂｉｓｅｃｔｅｄ）である。一実施形態において、本発明の組成物内に存在できる、および／または本発明の方法に使用できる「バイアンテナリーオリゴ糖型構造」は、例えば、フコースで置換されたコアを含む「フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造」である。
【００８９】
一実施形態において、本発明の組成物内に存在できる、および／または本発明の方法に使用できる「フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造」は、「アシアロフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造」であり、「アシアロ、二ガラクトシル化バイアンテナリー、フコース置換コア（ａｓｉａｌｏ，ｂｉｇａｌａｃｔｏｓｙｌａｔｅｄ，ｂｉａｎｔｅｎｎａｒｙ，ｃｏｒｅ−ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｆｕｃｏｓｅ）」とも称され、本明細書において「ＮＡ２Ｆ」と称される。
【００９０】
別の実施形態において、本発明の組成物内に存在できる、および／または本発明の方法に使用できる「フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造」は、アシアロ、アガラクト、フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造であり、アシアロ、アガラクト−、バイアンテナリー、フコース置換コア（ａｓｉａｌｏ，ａｇａｌａｃｔｏ−，ｂｉａｎｔｅｎｎａｒｙ，ｃｏｒｅ−ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｆｕｃｏｓｅ）とも称され、本明細書において「ＮＧＡ２Ｆ」と称される。
【００９１】
別の実施形態において、本発明の組成物内に存在できる、および／または本発明の方法に使用できる「フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造」は、アシアロ、フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造であり、アシアロ、一ガラクトシル化バイアンテナリーフコース置換コア（ａｓｉａｌｏ，ｍｏｎｏｇａｌａｃｔｏｓｙｌａｔｅｄ  ｂｉａｎｔｅｎｎａｒｙ，ｃｏｒｅ−ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｆｕｃｏｓｅ）とも称され、本明細書において「ＮＡ１Ｆ」と称される。
【００９２】
別の実施形態において、本発明の組成物内に存在できる、および／または本発明の方法に使用できる「フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造」は、アシアロ、アガラクト、フコシル化バイアンテナリー−バイセクティングＮ−アセチルグルコサミンオリゴ糖型構造（ａｓｉａｌｏ，ａｇａｌａｃｔｏ，ｆｕｃｏｓｙｌａｔｅｄ  ｂｉａｎｔｅｎｎａｒｙ，ｍｉｎｕｓ  ａ  ｂｉｓｅｃｔｉｎｇ  Ｎ−ａｃｅｔｙｌｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ  ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ−ｔｙｐｅ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ）であり、アシアロ、アガラクト−、バイアンテナリーフコース置換コア−バイセクティングＮ−アセチルグルコサミンとも称され（ａｓｉａｌｏ，ａｇａｌａｃｔｏ−，ｂｉａｎｔｅｎｎａｒｙ，ｃｏｒｅ−ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｆｕｃｏｓｅ  ｍｉｎｕｓ  ａ  ｂｉｓｅｃｔｉｎｇ  Ｎ−ａｃｅｔｙｌｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ）、本明細書において「ＮＧＡ２Ｆ−ＧｌｃＮＡｃ」と称される。
【００９３】
さらに別の実施形態において、本発明の組成物内に存在できる、および／または本発明の方法に使用できる「フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造」はアシアロ、モノガラクト、フコシル化バイアンテナリー−バイセクティングＮ−アセチルグルコサミンオリゴ糖型構造（ａｓｉａｌｏ，ｍｏｎｏｇａｌａｃｔｏ，ｆｕｃｏｓｙｌａｔｅｄ  ｂｉａｎｔｅｎｎａｒｙ，ｍｉｎｕｓ  ａ  ｂｉｓｅｃｔｉｎｇ  Ｎ−ａｃｅｔｙｌｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ  ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ−ｔｙｐｅ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ）であり、アシアロ、一ガラクトシル化バイアンテナリーフコース置換コア−バイセクティングＮ−アセチルグルコサミン（ａｓｉａｌｏ，ｍｏｎｏｇａｌａｃｔｏｓｙｌａｔｅｄ  ｂｉａｎｔｅｎｎａｒｙ，ｃｏｒｅ−ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｆｕｃｏｓｅ  ｍｉｎｕｓ  ａ  ｂｉｓｅｃｔｉｎｇ  Ｎ−ａｃｅｔｙｌｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ）とも称され、本明細書において、「ＮＡ１Ｆ−ＧｌｃＮＡｃ」と称される。
【００９４】
一実施形態において、ＮＡ２Ｆフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造は、構造（Ｘ）：
【００９５】
【化１０】
2014505075.tif 000012
を有する。
【００９６】
一実施形態において、ＮＧＡ２Ｆフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造は構造（ＸＩ）：
【００９７】
【化１１】
2014505075.tif 000013
を有する。
【００９８】
一実施形態において、ＮＡ１Ｆフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造は、構造（ＸＩＩ）：
【００９９】
【化１２】
2014505075.tif 000014
を有する。
【０１００】
別の実施形態において、ＮＡ１Ｆフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造は、構造（ＸＩＩＩ）：
【０１０１】
【化１３】
2014505075.tif 000015
を有する。
【０１０２】
一実施形態において、ＮＧＡ２Ｆ−ＧｌｃＮＡｃおよびＮＡ１Ｆ−ＧｌｃＮＡｃフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造は、構造（ＸＩＶ）：
【０１０３】
【化１４】
2014505075.tif 000016
を有する。
【０１０４】
一実施形態において、ＮＡ１Ｆ−ＧｌｃＮＡｃフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造は、構造（ＸＶ）：
【０１０５】
【化１５】
2014505075.tif 000017
を有する。
【０１０６】
一実施形態において、フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造は、ＮＧＡ２Ｆ、ＮＡ１Ｆ、ＮＡ２Ｆ、ＮＧＡ２Ｆ−ＧｌｃＮＡｃおよびＮＡ１Ｆ−ＧｌｃＮＡｃからなる群から独立して選択される。
【０１０７】
添付の実施例に記載のように、抗体組成物中のヒト抗体のグリコフォームのレベルおよびタイプと、抗体の血清クリアランスの速度との関係が発見された。従って、本発明は、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化されたさまざまなレベルの抗体またはこれらの抗原結合断片を含む、抗体またはこれらの抗原結合断片（例えば、ヒト抗体またはこれらの抗原結合断片）の組成物およびこれらの組成物の使用方法を提供する。
【０１０８】
組成物中でＦｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片に関する「レベル」という用語は、組成物中の１種のグリコフォームの、組成物中の全グリコフォームレベルに対する関係を指し、全体のうちの百分率、例えば０から１００％として表される。組成物中のレベルは、分子、モルまたは重量のパーセントで測定された、絶対量であってよい。
【０１０９】
ヒト抗体またはこの抗原結合部位のさまざまなレベルのグリコフォームを含む組成物は、さまざまなグリコフォーム組成物により、所望の速度の血清クリアランスが達成できるという点で有用である。所望の速度の血清クリアランスを達成することは、さまざまな臨床適用において有用である。例えば、抗体療法が、乾癬などの慢性病態を治療するために投与される場合、例えば、少ない頻度で治療が施され、療法を適用するために患者が医療提供者に頻繁に出かける必要がないように、半減期の長さおよび付随する緩速の血清クリアランスが望ましいと思われる。代替的には、抗体療法が敗血症などの急性病態を治療するために投与される場合、例えば、任意の悪影響の可能性が低減されるように、半減期の短さおよび付随する急速な血清クリアランスが望ましいと思われる。
【０１１０】
本明細書において使用する場合、「所望の速度の血清クリアランス」という用語は、抗体または組成物が投与される病状の治療に適切な、さまざまなレベルのグリコフォームの抗体またはこの抗原結合断片を含む組成物の血清クリアランスの速度を指す。
【０１１１】
さらに、添付の実施例に記載のように、生物学的同等性試験のシミュレーションにより、抗体組成物中のオリゴマンノース型構造のレベルが、約３０％を超えて、例えば、約３１から１００％に増加すると、抗体またはこの抗原結合断片の血清クリアランスの速度が上昇することが実証された。同様に、オリゴマンノース型構造のレベルが、約３０％未満、例えば、約１０から３０％に減少すると、抗体またはこの抗原結合断片の血清クリアランスの速度が減少する。
【０１１２】
組成物中のオリゴマンノース様構造のレベルの調節および／またはフコシル化バイアンテナリー構造のレベルの調節は、血清クリアランスの速度を「調節する」（例えば、上昇または低下させる。）ために使用できる。本明細書において使用する場合、「急速な血清クリアランス」は当分野において公知であり、オリゴマンノース型構造のレベルが、組成物中のグリコシル化抗体またはこれらの抗原結合断片の全レベルの約３０％を超える、または約５０％を超える、２タイプのオリゴ糖型構造を含む、本明細書に記載のヒト抗体組成物のクリアランス速度を含む。「緩速の血清クリアランス」は当分野において公知であり、オリゴマンノース型構造のレベルが、組成物中のグリコシル化抗体またはこれらの抗原結合断片の全レベルの約０から１００％または約１０から３０％である、２タイプのオリゴ糖型構造を含む、ヒト抗体組成物のクリアランス速度を含む。
【０１１３】
抗体またはこの抗原結合断片の血清クリアランスの速度は、当業者にとって日常の方法および本明細書に記載の方法により決定することができる。
【０１１４】
ヒト抗体またはこの抗原結合断片を含む組成物の血清クリアランスの速度の調節（例えば、上昇または低下）は、例えば、組成物の血清クリアランス速度と、適切な対照とを比較することにより決定することができる。適切な対照の選択は、当業者にとって日常的である。例えば、ヒト抗体またはこの抗原結合断片を含む組成物の血清クリアランスの速度は、組成物の血清クリアランス速度と、さまざまなＮ−グリカン、例えばさまざまなレベルおよび／またはタイプのＮ−グリカン以外は同じ成分から基本的になる、第２の組成物の血清クリアランス速度とを比較することによって決定することができる。適切な対照は、異なる細胞型において組み換え的に産生された抗体またはこの抗原結合断片を含む組成物であってもよい。例えば、第１の組成物はＣＨＯ細胞において産生され、対照組成物は異なるタイプの細胞において産生されてもよい。
【０１１５】
「薬物動態」という用語は、身体と抗体などの治療薬との、その投与後の相互作用の仕方を指す。薬物動態パラメーターは、吸収、分散、代謝および排出の程度および速度を説明する。
【０１１６】
「血清クリアランス」という用語は、抗体またはこの抗原結合断片が血清から除去される体積／単位時間を指す。血清クリアランス（Ｃｌ）は、下記のように定義される：
Ｃｌ＝Ｖｄ×Ｋｅ＝Ｄ／ＡＵＣ
Ｖｄは、抗体が投与された後に迅速に分散され、血清および周囲組織の間で平衡化される見かけの容積である。Ｋｅは、抗体が身体から除去される速度である。Ｄは抗体の投与量である。ＡＵＣは、投与後の血清抗体濃度（Ｃｐ）の曲線下面積または積分である。
【０１１７】
Ｖｄはさらに下記のように定義される：
Ｖｄ＝Ｄ／Ｃ０
式中、Ｃ０は、血清中の抗体の初期濃度または定常状態の濃度である。
【０１１８】
Ｋｅは、
Ｋｅ＝：ｌｎ（２）／Ｔ１／２＝Ｃｌ／Ｖｄ
として定義され、
式中、Ｔ１／２は、生物学的半減期または抗体濃度が元の値の半分に達するまでに必要な時間である。
【０１１９】
ＡＵＣは、投与後の血清抗体濃度（Ｃｐ）の曲線下面積または積分である。
【０１２０】
従って、血清クリアランス速度は、抗体の半減期に逆に関連している。正常なヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２およびＩｇＧ４の半減期は、約２０から２５日であり、正常なヒトＩｇＧ３の半減期は、約７日である（Ｊｅｆｆｅｒｉｓ，Ｒ．（２００９），Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ３０（７）：３５６−３６２）。
【０１２１】
「抗体」という用語は、ジスルフィド結合により相互連結された４つのポリペプチド鎖、２つの重（Ｈ）鎖および２つの軽（Ｌ）鎖から構成される任意の免疫グロブリン（Ｉｇ）分子またはＩｇ分子の基本のエピトープ結合特長を保有する、任意のこの機能性断片、突然変異体、変異体もしくは誘導体を、広い意味で指す。このような突然変異体、変異体または誘導体の抗体の型は当分野において公知であり、この限定されない実施形態を本明細書において議論する。免疫グロブリン分子は、任意のタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡおよびＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２）またはサブクラスであってよい。
【０１２２】
完全長抗体において、各重鎖は、重鎖可変領域（本明細書においてＨＣＶＲまたはＶＨと略される。）および重鎖定常領域から構成される。重鎖定常領域は、３つのドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３から構成される。各軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書において、ＬＣＶＲまたはＶＬと略される。）および軽鎖定常領域から構成される。軽鎖定常領域は、１つのドメイン、ＣＬから構成される。ＶＨおよびＶＬ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる、より保存された領域が散在する、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変性の領域にさらに分割することができる。各ＶＨおよびＶＬは、３つのＣＤＲおよび４つのＦＲから構成され、アミノ末端からカルボキシ末端に以下の順：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４で配列される。軽鎖は、カッパまたはラムダのいずれかに分類される。重鎖は、ガンマ、ミュー、アルファ、デルタまたはイプシロンに分類され、抗体のアイソタイプが、それぞれＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤおよびＩｇＥと定義される。
【０１２３】
免疫グロブリンの定常ドメインは、重鎖または軽鎖の定常ドメインを指す。ヒトＩｇＧの重鎖および軽鎖定常ドメインのアミノ酸配列は、当分野において公知である。
【０１２４】
「Ｆｃ領域」という用語は、無傷の抗体のパパイン消化により作製され得る、免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を指す。Ｆｃ領域は、天然配列のＦｃ領域であっても、または変異体Ｆｃ領域であってもよい。免疫グロブリンのＦｃ領域は、一般に２つの定常ドメイン、ＣＨ２ドメインおよびＣＨ３ドメインを含み、場合によりＣＨ４ドメインを含む。具体的には、ＩｇＧ、ＩｇＡおよびＩｇＤタイプにおいて、Ｆｃ領域は、重鎖のＣＨ２およびＣＨ３に由来する２つの同一タンパク質断片から構成される。ＩｇＭおよびＩｇＥのＦｃ領域は、３つの重鎖定常ドメイン、ＣＨ２、ＣＨ３およびＣＨ４を含有する。
【０１２５】
抗体のエフェクター機能を改変するための、Ｆｃ部分のアミノ酸残基の置換は、当分野において公知である（米国特許第５，６４８，２６０号明細書および同第５，６２４，８２１号明細書）。抗体のＦｃ部分は、幾つかの重要なエフェクター機能、例えば、サイトカイン誘導、抗体依存性細胞媒介細胞障害（ＡＤＣＣ）、食作用、補体依存性細胞障害（ＣＤＣ）ならびに抗体および抗原−抗体複合体の半減期／クリアランス速度を媒介する。特定のヒトＩｇＧアイソタイプ、特にＩｇＧ１およびＩｇＧ３は、ＡＤＣＣおよびＣＤＣを、それぞれ、ＦｃγＲｓおよび補体Ｃ１ｑへの結合を介して媒介する。
【０１２６】
本明細書において使用する場合、「Ｆｃ領域」という用語はまた、免疫グロブリン（抗体）のＦｃ領域の天然の対立遺伝子変異体ならびに置換、付加または欠失である改変を有するが、Ａｎｓ２９７グリコシル化には影響を与えない変異体もまた含む。例えば、１以上のアミノ酸が、生物学的機能の実質的喪失を伴わずに、免疫グロブリンのＦｃ領域のＮ末端またはＣ末端から欠失されてもよい。このような変異体は当分野において公知の一般規則に従って、活性に対する影響が最小になるように選択することができる（例えば、Ｂｏｗｉｅ，Ｊ．Ｕ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４７（１９９０）１３０６−１３１０を参照されたい。）。
【０１２７】
各重鎖のＣＨ２ドメインは、Ｎ−グリカンと免疫グロブリン分子とを「アスパラギン残基２９７」（「Ａｓｎ−２９７」）において連結する、アスパラギン残基におけるＮ結合型グリコシル化のための単一部位を含有する（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄ．，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．９１−３２４２）。
【０１２８】
「ラムダ（λ）軽鎖」という用語は、第２２染色体の免疫グロブリンラムダ遺伝子座によりコードされる、抗体の低分子ポリペプチドユニットを指す。上記のように、哺乳動物において、２タイプの抗体軽鎖、ラムダ（λ）軽鎖およびカッパ（κ）鎖がある。本明細書において使用する場合、λ軽鎖という用語は、λ軽鎖の突然変異体、変異体または誘導体の型を含む。
【０１２９】
抗体の「抗原結合部分」または「抗原結合断片」（もしくは単純に「抗体部分」）という用語は、抗原に特異的に結合する能力を保有する、抗体の１以上の断片（例えばｈＩＬ−１２）を指す。このような抗体の実施形態はまた、二以上の異なる抗原に特異的に結合する、二特異性（ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ）、二重特異性（ｄｕａｌ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ）または多重特異性（ｍｕｌｔｉ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ）の型であってもよい。抗体の「抗原結合部分」という用語に包含される結合断片の例は、（ｉ）Ｆａｂ断片、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインからなる１価の断片；（ｉｉ）Ｆ（ａｂ’）２断片、ジスルフィド架橋によりヒンジ領域において連結された２つのＦａｂ断片を含む二価の断片；（ｉｉｉ）ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；（ｉｖ）抗体の単一アームのＶＬおよびＶＨドメインからなるＦｖ断片；（ｖ）単一の可変ドメインを含むｄＡｂ断片（Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ  ３４１：５４４−５４６，Ｗｉｎｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＣＴ  ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  ＷＯ９０／０５１４４  Ａ１）；ならびに（ｖｉ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。さらに、Ｆｖ断片の２つのドメイン、ＶＬおよびＶＨは、別々の遺伝子によりコードされるが、これらは、組み換え法を使用して、ＶＬおよびＶＨ領域対が一価の分子を形成する単一のタンパク質鎖として作ることができる、合成リンカーにより接合できる（単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として公知であり、例えば、Ｂｉｒｄ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６およびＨｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：５８７９−５８８３を参照されたい。）。単鎖抗体の他の形態、例えばダイアボディ（ｄｉａｂｏｄｉｅｓ）もまた包含される。ダイアボディは、ＶＨおよびＶＬドメインが単一のポリペプチド鎖において発現されるが、使用するリンカーが短すぎて同じ鎖上の２つのドメインの間に対形成できず、その結果、このドメインを、別の鎖の相補性ドメインと対形成させ、２つの抗原結合部位を作製する、二価の二特異性抗体である（例えば、Ｈｏｌｌｉｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９９３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：６４４４−６４４８；Ｐｏｌｊａｋ  ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ２：１１２１−１１２３を参照されたい。）。このような単鎖抗体もまた、当分野において周知のように、抗体の「抗原結合部分」という用語内に包含されることが意図される（Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ  ａｎｄ  Ｄｕｂｅｌ  ｅｄｓ．，Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ（２００１）Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ．Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，７９０（ＩＳＢＮ  ３−５４０−４１３５４−５）。
【０１３０】
さらにまた、抗体またはこの抗原結合部分は、抗体または抗体部分と、１以上の他のタンパク質またはペプチドとの共有結合性または非共有結合性の会合により形成される、より大きな免疫接着（ｉｍｍｕｎｏａｄｈｅｓｉｏｎ）分子の一部であってよい。このような免疫接着分子の例は、四量体ｓｃＦｖ分子を作るためのストレプトアビジンコア領域の使用（Ｋｉｐｒｉｙａｎｏｖ，Ｓ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｈｕｍａｎ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ  ６：９３−１０１）および二価のビオチン化ｓｃＦｖ分子を作るための、システイン残基、マーカーペプチドおよびＣ末端ポリヒスチジンタグの使用（Ｋｉｐｒｉｙａｎｏｖ，Ｓ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３１：１０４７−１０５８）を含む。ＦａｂおよびＦ（ａｂ’）２断片などの抗体部分は、全抗体から、既存の技術、例えば、それぞれ、全抗体のパパイン消化またはペプシン消化を使用して調製することができる。さらに、抗体、抗体部分および免疫接着分子は、本明細書に記載の標準的組み換えＤＮＡ技術を使用して得ることができる。好ましい抗原結合部分は、完全なドメインまたは完全なドメインの対である。
【０１３１】
「多価結合タンパク質」という用語は、２以上の抗原結合部位を含む結合タンパク質を指す。ある実施形態において、多価結合タンパク質は３以上の抗原結合部位を有するように操作され、一般に天然の抗体ではない。「多重特異的結合タンパク質」という用語もまた、２以上の関係のある標的または無関係な標的と結合できる結合タンパク質を指す。デュアルバリアブルドメイン（Ｄｕａｌ  ｖａｒｉａｂｌｅ  ｄｏｍａｉｎ）（ＤＶＤ−Ｉｇ（商標））結合タンパク質は、２以上の抗原結合部位を含み、四価または多価の結合タンパク質である。ＤＶＤ−Ｉｇ（商標）は、単一特異的、即ち、１種の抗原と結合できても、または多重特異的、即ち、２以上の抗原と結合できてもよい。２つの重鎖ＤＶＤ−Ｉｇ（商標）ポリペプチドおよび２つの軽鎖ＤＶＤ−Ｉｇ（商標）ポリペプチドを含むＤＶＤ−Ｉｇ（商標）結合タンパク質は、ＤＶＤ−Ｉｇ（商標）と称される。ＤＶＤ−Ｉｇ（商標）の各半分は、重鎖ＤＶＤ−Ｉｇ（商標）ポリペプチドおよび軽鎖ＤＶＤ−Ｉｇ（商標）ポリペプチドならびに２つの抗原結合部位を含む。各結合部位は、重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインならびに抗原結合に関与する合計６つのＣＤＲ／抗原結合部位を含む。
【０１３２】
「二特異性抗体」という用語は、クアドローマ技術（Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｃ．ａｎｄ  Ａ．Ｃ．Ｃｕｅｌｌｏ（１９８３）Ｎａｔｕｒｅ  ３０５（５９３４）：５３７−４０）、２つの異なるモノクローナル抗体の化学的コンジュゲーション（Ｓｔａｅｒｚ，Ｕ．Ｄ．ｅｔ  ａｌ．（１９８５）Ｎａｔｕｒｅ  ３１４（６０１２）：６２８−３１）、またはＦｃ領域に突然変異を導入し、そのうちの１つのみが機能性二特異性抗体である複数の異なる免疫グロブリン種をもたらすｋｎｏｂ−ｉｎｔｏ−ｈｏｌｅもしくは同様の取り組み（Ｈｏｌｌｉｇｅｒ，Ｐ．ｅｔ  ａｌ．（１９９３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：６４４４−８．１８）により作製される完全長抗体を指す。分子機能により、二特異性抗体は、この２つの結合アームのうちの１つ（ＨＣ／ＬＣの１対）において１つの抗原（またはエピトープ）と結合し、この第２のアーム（ＨＣ／ＬＣの異なる１対）において異なる抗原（またはエピトープ）と結合する。この定義により、二特異性抗体は、２つの（特異性およびＣＤＲ配列の両方において）異なる抗原結合アームを有し、結合する各抗原に対して一価である。
【０１３３】
「二重特異性抗体」という用語は、この２つの結合アーム（ＨＣ／ＬＣの一対）のそれぞれにおいて、２つの異なる抗原（またはエピトープ）と結合できる完全長抗体を指す（ＰＣＴ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．ＷＯ０２／０２７７３）。従って、二重特異性結合タンパク質は、同一の特異性および同一のＣＤＲ配列を有する２つの同一の抗原結合アームを有し、結合する各抗原に対して二価である。
【０１３４】
「モノクローナル抗体」または「ｍＡｂ」という用語は、実質的に同種の抗体の集団から得られた抗体を指し、即ち、集団を含む個別の抗体は、少量存在し得る天然の突然変異の可能性を除いて同一である。モノクローナル抗体は、高度に特異的であり、単一の抗原を対象とする。さらに、異なる決定基（エピトープ）を対象とする異なる抗体を通常含むポリクローナル抗体の調製とは対照的に、各ｍＡｂは、抗原の単一の決定基を対象とする。修飾語句「モノクローナル」は、任意の特定の方法による抗体の作製を必要とすると解釈すべきではない。ある実施形態において、モノクローナル抗体は、ハイブリドーマ技術により作製される。
【０１３５】
「キメラ抗体」という用語は、１つの種由来の重鎖および軽鎖の可変領域配列および別の種由来の定常領域配列を含む抗体、例えば、ヒト定常領域に連結されたネズミの重鎖および軽鎖の可変領域を有する抗体を指す。
【０１３６】
「ＣＤＲグラフト化抗体」という用語は、１つの種由来の重鎖および軽鎖の可変領域配列を含むが、ＶＨおよび／またはＶＬのＣＤＲ領域の１以上の配列が別の種のＣＤＲ配列と置き換えられている抗体、例えば、ネズミの重鎖および軽鎖可変領域を有するが、ネズミＣＤＲ（例えばＣＤＲ３）の１以上がヒトＣＤＲ配列と置き換えられている抗体を指す。
【０１３７】
「ヒト抗体」という用語は、Ｋａｂａｔらにより記載された（Ｋａｂａｔ，ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．９１−３２４２を参照されたい。）ヒト生殖細胞系免疫グロブリン配列に対応する可変領域および定常領域を有する抗体を含む。本発明のヒト抗体は、例えばＣＤＲおよび特にＣＤＲ３において、ヒト生殖細胞系免疫グロブリン配列によりコードされないアミノ酸残基（例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏのランダムな突然変異誘発もしくは部位特異的突然変異誘発またはｉｎ  ｖｉｖｏの体細胞突然変異により導入された突然変異）を含んでもよい。突然変異は、米国特許第６，９１４，１２８号明細書に記載された「選択的突然変異誘発の取り組み」を使用して導入されることが好ましく、この全内容は参照により本明細書に組み込まれる。ヒト抗体は、アミノ酸残基、例えば、ヒト生殖細胞系免疫グロブリン配列によりコードされない、活性を強化するアミノ酸残基により置き換えられた、少なくとも１つの位置を有してもよい。ヒト抗体は、ヒト生殖細胞系免疫グロブリン配列の一部ではないアミノ酸残基により置き換えられた、最大２０の位置を有することができる。別の実施形態において、最大１０、最大５、最大３または最大２の位置が置き換えられる。好ましい実施形態において、これらの置き換えは、以下の詳細に記載するように、ＣＤＲ領域内である。しかし、「ヒト抗体」という用語は、本明細書において使用する場合、別の哺乳動物種、例えばネズミの生殖細胞系に由来するＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列にグラフト化された抗体を含むことは意図されない。ヒト抗体または完全ヒト抗体の作製方法は、当分野において公知であり、ヒトＢ細胞のＥＢＶ形質転換、ファージディスプレイ、酵母ディスプレイ、ｍＲＮＡディスプレイまたは他のディスプレイ技術により調製された抗体ライブラリからのヒト抗体または完全ヒト抗体の選択およびさらに上で定義された重鎖および軽鎖のゲノム領域のすべてまたは一部を含むヒトＩｇ遺伝子座のすべてまたは一部に関してトランスジェニックであるネズミまたは他の種由来のヒト抗体または完全ヒト抗体の選択を含む。選択されたヒト抗体は、意図された標的に対する親和性を強化するために、好ましくはＣＤＲ領域または隣接する残基のｉｎ  ｖｉｔｒｏの突然変異誘発を含む、当分野が認めた方法により、親和性が成熟していてもよい。
【０１３８】
「組み換えヒト抗体」という語句は、組み換え手段により調製、発現、作製もしくは単離されたヒト抗体、例えば、宿主細胞にトランスフェクトされた組み換え発現ベクターを使用して発現された抗体、組み換え、コンビナトリアルヒト抗体ライブラリから単離された抗体、ヒト免疫グロブリン遺伝子のトランスジェニック動物（例えばマウス）から単離された抗体（例えば、Ｔａｙｌｏｒ，Ｌ．Ｄ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９２）Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２０：６２８７−６２９５を参照されたい。）またはヒト免疫グロブリン遺伝子配列の他のＤＮＡ配列へのスプライシングを伴う任意の他の手段により、調製、発現、作製もしくは単離された抗体を含む。このような組み換えヒト抗体は、ヒト生殖細胞系免疫グロブリン配列に由来する可変領域および定常領域を有する（Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｕ．Ｓ．  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．９１−３２４２を参照されたい。）。しかし、特定の実施形態において、このような組み換えヒト抗体は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏの突然変異誘発（またはヒトＩｇ配列のトランスジェニック動物を使用する場合、ｉｎ  ｖｉｖｏの体細胞突然変異誘発）に供され、従って、組み換え抗体のＶＨおよびＶＬ領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖細胞系ＶＨおよびＶＬ配列に由来し、関連するが、ヒト抗体生殖細胞系レパートリ内に、ｉｎ  ｖｉｖｏで天然に存在することはできない配列である。しかし、特定の実施形態において、このような組み換え抗体は、選択的突然変異誘発の取り組みもしくは復帰突然変異または両方の結果である。
【０１３９】
本明細書において使用する場合、「単離抗体」は、異なる抗原特異性を有する他の抗体を実質的に含まない抗体を指すことが意図される（例えば、ヒトＩＬ−１２および／またはＩＬ−２３に特異的に結合する、例えばヒトＩＬ−１２／ＩＬ−２３のｐ４０サブユニットに結合する単離抗体は、ヒトＩＬ−１２およびＩＬ−２３以外の抗原に特異的に結合する抗体を実質的に含まない。）。しかし、ヒトＩＬ−１２および／またはＩＬ−２３に特異的に結合する単離抗体は、他の抗原、例えば、他の種由来のヒトＩＬ−１２および／またはＩＬ−２３分子と交差反応性を有することがある。さらに、単離抗体は、他の細胞物質および／または化学物質を実質的に含まないと思われる。
【０１４０】
本明細書において使用する場合、「中和抗体」（または「ヒトＩＬ−１２および／またはＩＬ−２３の活性を中和する抗体」または「ＩＬ−１２／ＩＬ−２３のｐ４０サブユニットの活性を中和する抗体」）は、ヒトＩＬ−１２および／またはＩＬ−２３に対する結合（例えば、ＩＬ−１２／ＩＬ−２３のｐ４０サブユニットに対する結合）が、ヒトＩＬ−１２および／またはＩＬ−２３の生物学的活性（例えば、ＩＬ−１２／ＩＬ−２３ｐ４０サブユニットの生物学的活性）の阻害をもたらす抗体を指すことが意図される。ヒトＩＬ−１２および／またはＩＬ−２３の生物学的活性のこの阻害、例えば、フィトヘマグルチニン芽球増殖アッセイ（ＰＨＡ）におけるヒトフィトヘマグルチニン芽球増殖の阻害またはヒトＩＬ−１２および／またはＩＬ−２３受容体の結合アッセイ（例えば、インターフェロンガンマ誘導アッセイ）における受容体結合の阻害は、ヒトＩＬ−１２および／またはＩＬ−２３の生物学的活性の１以上のインジケーターを測定することによって評価することができる。ヒトＩＬ−１２および／またはＩＬ−２３の生物学的活性のこれらのインジケーターは、当分野において公知の幾つかの標準的ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏアッセイの１以上および米国特許第６，９１４，１２８号明細書に記載のアッセイ（例えば、カラム１０９、３１行からカラム１１３の５５行の実施例３）により評価することができ、この全内容は参照により本明細書に組み込まれる。
【０１４１】
「ヒト化抗体」という用語は、非ヒト種（例えばマウス）由来の重鎖および軽鎖の可変領域配列を含むが、ＶＨおよび／またはＶＬ配列の少なくとも一部が、より「ヒト様」であるように、即ちヒト生殖細胞系可変配列により類似するように改変されている抗体を指す。ヒト化抗体の１つのタイプはＣＤＲグラフト化抗体であり、このＣＤＲグラフト化抗体においてヒトＣＤＲ配列が非ヒトＶＨおよびＶＬ配列に導入され、対応する非ヒトＣＤＲ配列と置き換えられる。さらに、「ヒト化抗体」は、対象の抗原に特異的に結合し、ヒト抗体のアミノ酸配列を実質的に有するフレームワーク（ＦＲ）領域および非ヒト抗体のアミノ酸配列を実質的に有する相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む抗体またはこの変異体、誘導体、アナログもしくは断片である。
【０１４２】
「ヒトインターロイキン１２」または「ヒトＩＬ−１２」（本明細書においてｈＩＬ−１２またはＩＬ−１２と略される。）という語句は、本明細書において使用する場合、マクロファージおよび樹状細胞により主に分泌されるヒトサイトカインを含む。この用語は、ジスルフィド架橋により両方が一緒に連結された３５ｋＤのサブユニット（ｐ３５）および４０ｋＤのサブユニット（ｐ４０）を含むヘテロ二量体タンパク質を含む。このヘテロ二量体タンパク質は「ｐ７０サブユニット」と称される。ヒトＩＬ−１２の構造は、例えば、Ｋｏｂａｙａｓｈｉ，ｅｔ  ａｌ．（１９８９）Ｊ．Ｅｘｐ  Ｍｅｄ．１７０：８２７−８４５；Ｓｅｄｅｒ，ｅｔ  ａｌ．（１９９３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．９０：１０１８８−１０１９２；Ｌｉｎｇ，ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｊ．Ｅｘｐ  Ｍｅｄ．１５４：１１６−１２７；Ｐｏｄｌａｓｋｉ，ｅｔ  ａｌ．（１９９２）Ａｒｃｈ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．２９４：２３０−２３７；およびＹｏｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）ＥＭＢＯ  Ｊｏｕｒｎａｌ  １９（１４）：３５３０−３５４１にさらに記載されている。ヒトＩＬ−１２という用語は組み換えヒトＩＬ−１２（ｒｈＩＬ−１２）を含むことが意図され、標準的組み換え発現方法により調製することができる。
【０１４３】
「ヒトインターロイキン２３」または「ヒトＩＬ−２３」（本明細書においてｈＩＬ−２３またはＩＬ−２３と略される。）という語句は、本明細書において使用する場合、マクロファージおよび樹状細胞により主に分泌されるヒトサイトカインを含む。この用語は、ジスルフィド架橋により両方が一緒に連結された１９ｋＤのサブユニット（ｐ１９）および４０ｋＤのサブユニット（ｐ４０）を含むヘテロ二量体タンパク質を含む。このヘテロ二量体タンパク質は「ｐ４０／ｐ１９」ヘテロ二量体と称される。ヒトＩＬ−２３の構造は、例えば、Ｂｅｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３８２：９４２−９５５；Ｌｕｐａｒｄｕｓ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３８２：９３１−９４１にさらに記載されている。ヒトＩＬ−２３という用語は組み換えヒトＩＬ−２３（ｒｈＩＬ−２３）を含むことが意図され、これは、標準的組み換え発現方法により調製することができる。
【０１４４】
「ヒトＩＬ−１２／ＩＬ−２３のｐ４０サブユニット」または「ヒトＩＬ−１２および／またはＩＬ−２３のｐ４０サブユニット」または「ｐ４０サブユニット」という語句は、本明細書において使用する場合、ヒトＩＬ−１２およびヒトＩＬ−２３に共通するｐ４０サブユニットを指すことが意図される。ＩＬ−１２／ＩＬ−２３のｐ４０サブユニットの構造は、例えば、Ｙｏｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）ＥＭＢＯ  Ｊｏｕｒｎａｌ  １９（１４）：３５３０−３５４１に記載されている。
【０１４５】
ＩＩ．本発明の組成物
本発明は、所望の速度の血清クリアランスを示す抗体またはこの抗原結合断片（例えば、ヒト抗体またはこの抗原結合断片）を含む組成物を提供する。一態様において、本組成物は、オリゴマンノース型構造により、抗体のＦｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された、第１のレベルの抗体またはこの抗原結合断片（例えば、ヒト抗体またはこの抗原結合断片）ならびにフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された、第２のレベルの抗体またはこの抗原結合部分を含む。
【０１４６】
本発明はまた、オリゴマンノース型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された約０−１００％の抗体またはこの抗原結合部分およびフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された約０−１００％の抗体またはこの抗原結合部分を含む、抗体またはこの抗原結合部分（例えば、ヒト抗体またはこの抗原結合断片）を含む組成物を提供する。
【０１４７】
本発明は、約０−１００％のＡＢＴ−８７４が、Ｍ５、Ｍ６、Ｍ７、Ｍ８およびＭ９からなる群から独立して選択されるオリゴマンノース構造により、Ａｓｎ２９７においてグリコシル化され、約０−１００％のＡＢＴ−８７４が、ＮＧＡ２Ｆ、ＮＡ１Ｆ、ＮＡ２Ｆ、ＮＧＡ２Ｆ−ＧｌｃＮＡｃおよびＮＡ１Ｆ−ＧｌｃＮＡｃからなる群から独立して選択されるフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖構造により、Ａｓｎ２９７においてグリコシル化されるＡＢＴ−８７４またはこの抗原結合部分を含む組成物をさらに提供する。
【０１４８】
抗体またはこの抗原結合断片のＦｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位は、アスパラギン残基またはアルギニン残基であってよい。一実施形態において、抗体またはこの抗原結合断片のＦｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位は、アスパラギン残基である。一実施形態において、このアスパラギン残基はＡｓｎ２９７である。Ａｓｎ２９７におけるグリコシル化に加えて、抗体またはこの抗原結合部分は、抗体またはこの抗原結合部分の他の部位、例えば、Ｎ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化されてもよいこともまた企図される。
【０１４９】
グリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片のオリゴマンノース型構造は、Ｍ５、Ｍ６、Ｍ７、Ｍ８および／またはＭ９であってよい。一実施形態において、グリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片のオリゴマンノース型構造は、Ｍ５、Ｍ６、Ｍ７、Ｍ８およびＭ９からなる群から独立して選択される。
【０１５０】
組成物中のグリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片のオリゴマンノース型構造のレベルは、組成物中に含まれる抗体またはこの抗原結合部分の全レベルの約０から１００％であってよい。一実施形態において、組成物中の第１のレベル（グリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片のオリゴマンノース型構造のレベル）は、約０％、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、８％、９９％、および約１００％からなる群から選択される。別の実施形態において、組成物中の抗体またはこの抗原結合部分の第１のレベルは、約１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％および約３０％からなる群から選択される。幾つかの実施形態において、この第１のレベルは、約０から１０％、約１０から２０％、約１０から３０％、約２０から３０％、約３０から４０％、約５０から６０％、約６０から７０％、約７０から８０％、約８０から９０％または約９０から１００％のレベルを有し得ることが意図される。他の実施形態において、この第１のレベルは、約０から３％、約４から１０％、約１１から１５％、約１６から２０％、約２１から２５％、約２６から３０％、約３１から３５％、約３６から４０％、約４１から４５％、約４６から５０％、約５１から５５％、約５６から６０％、約６１から６５％、約６６から７０％、約７１から７５％、約７６から８０％、約８１から８５％、約８６から９０％、約９１から９５％、約９６から１００％に及ぶことができる。上に列挙したレベルおよび範囲の中間にあるレベルおよび範囲、例えば、約１０．５％または５から３３％もまた、本発明の一部であることが意図される。例えば、上に列挙した値の任意の組み合わせを、上限および／または下限として使用した値の範囲が含まれることが意図される。
【０１５１】
グリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片のフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造は、ＮＧＡ２Ｆ、ＮＡ１Ｆ、ＮＡ２Ｆ、ＮＧＡ２Ｆ−ＧｌｃＮＡｃ、および／または  ＮＡ１Ｆ−ＧｌｃＮＡｃであってよい。一実施形態において、フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造は、ＮＧＡ２Ｆ、ＮＡ１Ｆ、ＮＡ２Ｆ、ＮＧＡ２Ｆ−ＧｌｃＮＡｃおよびＮＡ１Ｆ−ＧｌｃＮＡｃからなる群から独立して選択される。
【０１５２】
組成物中のグリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片のフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造は、組成物中に含まれる抗体またはこの抗原結合部分の全レベルの約０から１００％であってよい。一実施形態において、組成物中の第２のレベル（グリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片のフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造のレベル）は、約０％、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、８％、９９％、および約１００％からなる群から選択される。別の実施形態において、組成物中の抗体またはこの抗原結合部分の第２のレベルは、約７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％および約９０％からなる群から選択される。他の実施形態において、この第２のレベルは約０から１００％に及んでよく、幾つかの実施形態において、約０から１０％、約１０から２０％、約２０から３０％、約３０から４０％、約５０から６０％、約６０から７０％、約７０から８０％、約８０から９０％、約７０から９０％または約９０から１００％を有することが意図される。他の実施形態において、この第１のレベルは、約０から５％、約６から１０％、約１１から１５％、約１６から２０％、約２１から２５％、約２６から３０％、約３１から３５％、約３６から４０％、約４１から４５％、約４６から５０％、約５１から５５％、約５６から６０％、約６１から６５％、約６６から７０％、約７１から７５％、約７６から８０％、約８１から８５％、約８６から９０％、約９０から９６％または約９７から１００％に及ぶことができる。上に列挙したレベルおよび範囲の中間にあるレベルおよび範囲、例えば、約７０．５％または約７３から８１％もまた、本発明の一部であることが意図される。例えば、上に列挙した値の任意の組み合わせを、上限および／または下限として使用した値の範囲が含まれることが意図される。
【０１５３】
本発明の組成物は、組成物の所望の速度の血清クリアランス、例えば、急速または緩速の血清クリアランスを提供するように機能する。急速な血清クリアランスを望む場合、組成物中のグリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片のオリゴマンノース型構造のレベルは、約５０％を超えてよい。一実施形態において急速な血清クリアランスを望む場合、組成物中のグリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片のオリゴマンノース型構造のレベルは、組成物中に含まれる抗体またはこの抗原結合部分の総レベルの約５１から１００％である。緩速な血清クリアランスを望む場合、組成物中のグリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片のオリゴマンノース型構造のレベルは、組成物中に含まれる抗体またはこの抗原結合部分の総レベルの約０から１００％である。
【０１５４】
本発明の組成物における使用に適切な抗体は、ポリクローナル、モノクローナル、組み換え抗体、単鎖抗体、ハイブリッド抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体またはこれらの抗原結合断片を含む。抗原に対する１または２の結合部位および免疫グロブリンのＦｃ部分を含有する抗体様分子もまた使用することができる。一実施形態において、本発明の組成物および方法における使用に適切な抗体またはこれらの抗原結合断片は、ヒト化抗体またはこれらの抗原結合断片である。一実施形態において、本発明の組成物および方法における使用に適切なヒト抗体またはこの抗原結合断片は、組み換え的に作製されたヒト抗体またはこの抗原結合部分である。
【０１５５】
特定の実施形態において、抗体は、重鎖定常領域、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡおよびＩｇＥ定常領域ならびにこの中にＫａｂａｔに記載された任意のアロタイプ変異体（Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．９１−３２４２）を含む。好ましくは、抗体重鎖定常領域は、ＩｇＧ１重鎖定常領域である。
【０１５６】
本発明は、抗体またはこの抗原結合部分が、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥおよびＩｇＭからなる群から選択される組成物を含む。
【０１５７】
別の実施形態において、抗体がラムダ鎖含有抗体またはこの抗原結合部分である。
【０１５８】
さらなる実施形態において、抗体またはこの抗原結合部分は、ＩｇＧ１のＦｃ領域およびλ軽鎖を含む。前述のＩｇＧ１のＦｃ領域およびλ軽鎖は、ＩｇＧ１のＦｃ領域およびλ軽鎖を含有する、任意の公知のヒト抗体から選択することができる。
【０１５９】
ラムダ鎖含有抗体の例、例えば、本発明の組成物および方法に含まれ得るラムダ鎖含有抗体は、当分野において周知であり、本発明に包含されることが理解される。ラムダ鎖含有抗体の例は、限定するものではないが、全内容が、参照により本明細書に組み込まれるＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ＷＯ２００７／１４９０３２（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）に記載の、抗ＩＬ−１７抗体であるＡｎｔｉｂｏｄｙ７、抗ＩＬ−１２抗体  Ｊ６９５（Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）、抗ＩＬ−１３抗体  ＣＡＴ−３５４（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、抗ヒトＣＤ４抗体  ＣＥ９ｙ４ＰＥ（ＩＤＥＣ−１５１、クレノリキシマブ）（Ｂｉｏｇｅｎ  ＩＤＥＣ／Ｇｌａｘｏ  Ｓｍｉｔｈ  Ｋｌｉｎｅ）、抗ヒトＣＤ４抗体  ＩＤＥＣ  ＣＥ９．１／ＳＢ−２１０３９６（ケリキシマブ）（Ｂｉｏｇｅｎ  ＩＤＥＣ）、抗ヒトＣＤ８０抗体  ＩＤＥＣ−１１４（ガリキシマブ）（Ｂｉｏｇｅｎ  ＩＤＥＣ）、抗狂犬病ウイルスタンパク質抗体  ＣＲ４０９８（フォラビルマブ（ｆｏｒａｖｉｒｕｍａｂ））および抗ヒトＴＮＦ関連アポトーシス誘導リガンド受容体２（ＴＲＡＩＬ−２）抗体  ＨＧＳ−ＥＴＲ２（レクサムツマブ）（Ｈｕｍａｎ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．）を含む。
【０１６０】
一実施形態において、ラムダ鎖含有抗体またはこの抗原結合部分は、トシツモマブ、ＷＲＩ−１７０、ＷＯ１、ＴＮＦ−Ｈ９Ｇ１、ＴＨＹ−３２、ＴＨＹ−２９、ＴＥＬ１６、ＴＥＬ１４、Ｔｅｌ１３、ＳＭ１、Ｓ１−１、ＲＳＰ４、ＲＨ−１４、ＲＦ−ＴＳ７、ＲＦ−ＳＪ２、ＲＦ−ＳＪ１、ＲＦ−ＡＮ、ＰＲ−ＴＳ２、ＰＲ−ＴＳ１、ＰＲ−ＳＪ２、ＰＲ−ＳＪ１、ＰＨＯＸ１５、ＰＡＧ−１、ＯＧ−３１、ＮＯ．１３、ＮＭ３Ｅ２  ＳＣＦＶ、ＭＵＣ１−１、ＭＮ２１５、ＭＣ１１６、ＭＡＤ−２、ＭＡＢ６７、ＭＡＢ６３、ＭＡＢ６０、ＭＡＢ５９、ＭＡＢ５７、ＭＡＢ５６、ＭＡＢ１１１、ＭＡＢ１０７、Ｌ３０５５−ＢＬ、Ｋ６Ｈ６、Ｋ６Ｆ５、Ｋ５Ｇ５、Ｋ５Ｃ７、Ｋ５Ｂ８、Ｋ４Ｂ８、ＪＡＣ−１０、ＨＵＣ、ＨＭＳＴ−１、ＨＩＨ２、ＨＩＨ１０、ＨＢＷ４−１、ＨＢＰ２、ＨＡ１、Ｈ６−３Ｃ４、Ｈ２１０、ＧＰ４４、ＧＧ４８、ＧＧ３、ＧＡＤ−２、ＦＯＭ−Ａ、ＦＯＭ−１、ＦＯＧ１−Ａ３、ＦＯＧ−Ｂ、ＤＰＣ、ＤＰＡ、ＤＯＢ１、ＤＯ１、ＣＬＬ００１、ＣＬＬ−２４９、ＣＤ４−７４、ＣＢ−２０１、Ｃ３０４  ＲＦ、ＢＳＡ３、ＢＯ３、ＢＯ１、ＢＥＮ−２７、Ｂ−３３、Ｂ−２４、ＡＮＴＩ−ＴＥＳＴ、ＡＮＴＩ−ＥＳＴ、ＡＮＴＩ−ＤＩＧＢ、ＡＮＴＩ−ＤＩＧＡ、ＡＩＧ、９６０４、４４８．９Ｇ．Ｆ１、３３．Ｈ１１、３２．Ｂ９、２４Ａ５、１Ｂ９／Ｆ２、１３Ｅ１０、１２３ＡＶ１６−１、１１−５０および１．３２からなる群から選択される。
【０１６１】
本発明の一態様において、組成物は、ＩＬ−１２／ＩＬ−２３のｐ４０サブユニットのエピトープに結合するヒト抗体を含有する。一実施形態において、ｐ４０サブユニットがＩＬ−１２のｐ３５サブユニットに結合される場合、抗体はｐ４０サブユニットに結合する。一実施形態において、ｐ４０サブユニットがＩＬ−２３のｐ１９サブユニットに結合される場合、抗体はｐ４０サブユニットに結合する。一実施形態において、ｐ４０サブユニットがＩｌ−１２のｐ３５サブユニットに結合される場合、およびｐ４０サブユニットがＩｌ−２３のｐ１９サブユニットに結合される場合、抗体はｐ４０サブユニットに結合する。好ましい実施形態において、抗体またはこの抗原結合部分は、米国特許第６，９１４，１２８号明細書に記載の抗体様であり、この全内容は参照により本明細書に組み込まれる。例えば、好ましい実施形態において、抗体は、米国特許第６，９１４，１２８号明細書に記載のＹ６１およびＪ６９５からなる群から選択される抗体が結合する、ＩＬ−１２のｐ４０サブユニットのエピトープに結合する。ヒト抗体の中で特に好ましいものは、米国特許第６，９１４，１２８号明細書に記載のＡＢＴ−８７４である。ＩＬ−１２および／またはＩＬ−２３に結合し、本発明の製剤に使用することができる他の抗体は、米国特許第６，９０２，７３４号明細書に記載のヒト抗ＩＬ−１２抗体Ｃ３４０を含み、この全内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０１６２】
本発明の別の実施形態において、製剤は、ヒトＩＬ−１２／ＩＬ−２３のｐ４０サブユニットの生物学的活性を中和するヒト抗体またはこの抗原結合部分を含有する。一実施形態において、抗体またはこの抗原結合部分は、遊離のｐ４０、例えば単量体ｐ４０またはｐ４０ホモ二量体、例えば２つの同一のｐ４０サブユニットを含有する二量体の生物学的活性を中和する。好ましい実施形態において、ｐ４０サブユニットがＩｌ−１２のｐ３５サブユニットに結合される場合および／またはｐ４０サブユニットがＩＬ−２３のｐ１９サブユニットに結合される場合、抗体またはこの抗原結合部分は、ｐ４０サブユニットの生物学的活性を中和する。
【０１６３】
本発明のさらに別の実施形態において、製剤は、重鎖および軽鎖のＣＤＲ３、それぞれ配列番号２５および２６で示されるアミノ酸配列を有するヒト抗体またはこの抗原結合部分を含有する。一実施形態において、本発明の組成物における使用に適切な抗体は、重鎖および軽鎖のＣＤＲ２、それぞれ配列番号２７および２８で示されるアミノ酸配列をさらに含む。別の実施形態において、本発明の組成物における使用に適切な抗体は、重鎖および軽鎖のＣＤＲ１、それぞれ配列番号２９および３０で示されるアミノ酸配列をさらに含む。さらに別の実施形態において、重鎖可変領域および軽鎖可変領域、それぞれ配列番号３１および配列番号３２で示されるアミノ酸配列を含む。
【０１６４】
幾つかの実施形態において、本発明は、ヒト抗ＩＬ−１２抗体を含む組成物を提供する。このような抗ＩＬ−１２抗体は、例えば、ＷＯ０２１２５００Ａ２；ＵＳ６９０２７３４；ＵＳ７０６３９６４；ＵＳ７１６６２８５；ＵＳ７２７９１５７；ＵＳ２００５００２９３７Ａ１；ＵＳ２００８０９０２９０Ａ１；ＥＰ１３０９６９２Ａ２、ＷＯ０６０７１８０４；ＷＯ０３０８２２０６；ＥＰ１４９４７１２；ＷＯ０６０６９０３６Ａ２；ＥＰ１８３６２９４Ａ２；ＵＳ２００９０２０２５４９；ＵＳ１２５００１２０、ＥＰ１８３９１２０に開示されたものを含み、これらの全内容は参照により明確に本明細書に組み込まれる。本発明の組成物における使用に適切なＩＬ−１２抗体の追加の限定されない例は、ＵＳ５８１１５２３、ＵＳ５４５７０３８、ＵＳ５５６９４５４、ＵＳ５６４８０７２、ＵＳ５６４８４６７、ＵＳ６３００４７８、ＵＳ６５５５６５８、ＵＳ７１２２６３３、ＵＳ２００２０１３７８９８、ＵＳ２００４００４４１８６、ＵＳ２００７０１０４６８０、ＵＳ６３３９９４８、ＵＳ６７０６２６４、ＵＳ６８３０７５１、ＵＳ７１３８１１５、ＵＳ２００５００７９１７７、ＵＳ２００７００２０２３３、ＵＳ５８５３６９７、ＵＳ５７８０５９７、ＵＳ６２２５１１７、ＵＳ２００３０２０４０５９、ＵＳ６４１０８２４、ＵＳ２００２０１９４６３１、ＵＳ２００３００５６２３３、ＵＳ６９０２７３４、ＵＳ７０６３９６４、ＵＳ７１６６２８５、ＵＳ７２７９１５７、ＵＳ２００３０１２４１２３、ＵＳ２００５０００２９３７、ＵＳ２００５０１１２１２７、ＵＳ２００５０１９６８３８、ＵＳ２００５０２１４２９３、ＵＳ２００８００９０２９０、ＵＳ２００３０１５７１０５、ＵＳ７２４７７１１、ＵＳ２００５０１３７３８５、ＵＳ７２５２９７１、ＵＳ２００６００６７９３６およびＵＳ２００８００３８８３１に開示されており、これらの全内容は、参照により明確に本明細書に組み込まれる。
【０１６５】
他の実施形態において、本発明は、ヒト抗ＩＬ−２３抗体を含む組成物を提供する。このような抗ＩＬ２３抗体は、例えば、ＷＯ０２０９７０４８、ＵＳ２００３１５７１０５、ＷＯ０４１０１７５０；ＵＳ７２４７７１１；ＥＰ１６２３０１１；ＷＯ０６０３６７４５；ＵＳ７２５２９７１；およびＵＳ２００８０３８８３１、ＷＯ０７０７６５２４；ＵＳ２００７２１８０６４；ＥＰ１９７１３６６；ＷＯ０７００５９５５；ＵＳ２００７００９５２６、およびＥＰ１８９６０７３に開示されたものを含み、これらの全内容は、参照により明確に本明細書に組み込まれる。
【０１６６】
本発明の組成物および方法における使用に適切な抗体またはこの抗体結合断片は、免疫グロブリン軽鎖および重鎖の遺伝子を、宿主細胞において当業者にとって日常的な方法に従って組み換え発現することにより調製することができる。抗体を組み換え的に発現させるために、宿主細胞に、抗体の免疫グロブリン軽鎖および重鎖をコードするＤＮＡ断片を担持する１以上の組み換え発現ベクターを、この軽鎖および重鎖が宿主細胞において発現し、好ましくは宿主細胞が培養されている培地に分泌され、この培地から抗体が回収され得るようにトランスフェクトする。Ｓａｍｂｒｏｏｋ，Ｆｒｉｔｓｃｈ  ａｎｄ  Ｍａｎｉａｔｉｓ（ｅｄｓ），Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ；Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．，（１９８９），Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ，（１９８９）およびＢｏｓｓ  ｅｔ  ａｌ．による米国特許第４，８１６，３９７号明細書に記載された方法論などの、標準的組み換えＤＮＡ方法論を使用して、抗体の重鎖および軽鎖の遺伝子を得、これらの遺伝子を組み換え発現ベクターに組み込み、ベクターを宿主細胞に導入する。
【０１６７】
本発明の抗体または抗体部分を発現させるために、上記のように得られた、部分的または完全長の軽鎖および重鎖をコードするＤＮＡは、遺伝子が、転写および翻訳の調節配列に動作可能に連結されるように、発現ベクター内に挿入される。これに関連して、「動作可能に連結される」という用語は、抗体遺伝子が、ベクター内の転写および翻訳の調節配列が、抗体遺伝子の転写および翻訳を制御する、これらの意図される機能を果たすように、ベクター内にライゲーションされることを意味することが意図される。発現ベクターおよび発現調節配列は、使用される発現宿主細胞と適合するように選択される。抗体の軽鎖遺伝子および抗体の重鎖遺伝子は、別々のベクターに挿入されてもよく、またはより典型的には、両方の遺伝子が同じ発現ベクターに挿入される。抗体遺伝子は、標準的方法（例えば、抗体遺伝子断片およびベクターの相補的制限部位のライゲ―ションまたは制限部位が存在しない場合、平滑末端ライゲ―ション）により発現ベクターに挿入される。軽鎖および重鎖  配列の挿入前に、発現ベクターはすでに抗体  定常領域  配列を担持していてもよい。さらにまたは代替的に、組み換え発現ベクターは、宿主細胞からの抗体鎖の分泌を容易にするシグナルペプチドをコードできる。抗体鎖遺伝子は、シグナルペプチドが、抗体鎖遺伝子のアミノ末端にインフレームで連結されるように、ベクター内にクローン化できる。シグナルペプチドは、免疫グロブリンシグナルペプチドであっても、または異種シグナルペプチド（即ち、非免疫グロブリンタンパク質由来のシグナルペプチド）であってもよい。
【０１６８】
軽鎖および重鎖の発現のために、重鎖および軽鎖をコードする発現ベクターは、宿主細胞に、標準的技術によりトランスフェクトされる。「トランスフェクション」という用語のさまざまな形態は、外因性ＤＮＡの、原核性または真核性の宿主細胞への導入に一般的に使用される多種多様な技術、例えば、エレクトロポレーション、リン酸カルシウム沈殿、ＤＥＡＥ−デキストラントランスフェクションなどを包含することが意図される。
【０１６９】
適切にグリコシル化され、所望の速度の血清クリアランスを有する抗体またはこの抗原結合断片を作製するために、動物または植物に基づく発現系が使用できる。例えばチャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ）、マウス線維芽細胞およびマウス骨髄腫細胞（Ａｒｚｎｅｉｍｉｔｔｅｌｆｏｒｓｃｈｕｎｇ．１９９８  Ａｕｇｕｓｔ；４８（８）：８７０−８８０）、ヤギ、ヒツジ、マウスおよび他などのトランスジェニック動物（Ｄｅｎｔｅ  Ｐｒｏｇ．Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｌ．１９８９  Ｒｅｓ．３００：８５−９８，Ｒｕｔｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８  Ｃｅｌｌ  ５３（６）：８４７−８５６；Ｗａｒｅ，Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．１９９３  Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｈａｅｍｏｓｔａｓｉｓ  ６９（６）：１１９４−１１９４；Ｃｏｌｅ，Ｅ．Ｓ．，ｅｔ  ａｌ．１９９４  Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２６５−２６５）、植物（シロイヌナズナ（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ  ｔｈａｌｉａｎａ）、タバコなど）（Ｓｔａｕｂ，ｅｔ  ａｌ．２０００  Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １８（３）：３３３−３３８）（ＭｃＧａｒｖｅｙ，Ｐ．Ｂ．，ｅｔ  ａｌ．１９９５  Ｂｉｏ−Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １３（１３）：１４８４−１４８７；Ｂａｒｄｏｒ，Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．１９９９  Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｐｌａｎｔ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ４（９）：３７６−３８０）または昆虫細胞（鱗翅目細胞に感染するオートグラファ・カルフォルニカ核多角体ウイルス（Ａｕｔｏｇｒａｐｈａ  ｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｎｕｃｌｅａｒ  ｐｏｌｙｈｅｄｒｏｓｉｓ  ｖｉｒｕｓ）などの組み換えバキュロウイルスを組み合わせた、スポドプテラ・フルギペルダ（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）Ｓｆ９、Ｓｆ２１、トリコプルシア・ニ（Ｔｒｉｃｈｏｐｌｕｓｉａ  ｎｉ）など、）（Ａｌｔｍａｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９  Ｇｌｙｃｏｃｏｎｊ．Ｊ．１６（２）：１０９−１２３）を使用することができる。
【０１７０】
本発明の組み換え抗体の発現に好ましい哺乳動物宿主細胞は、チャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ細胞）（ＤＨＦＲ選択可能マーカー、例えばＲ．Ｊ．Ｋａｕｆｍａｎ  ａｎｄ  Ｐ．Ａ．Ｓｈａｒｐ（１９８２）Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１５９：６０１−６２１に記載のものと一緒に使用する、Ｕｒｌａｕｂ  ａｎｄ  Ｃｈａｓｉｎ，（１９８０）Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７７：４２１６−４２２０に記載のｄｈｆｒ−ＣＨＯ細胞を含む。）、ＮＳ０骨髄腫細胞、ＣＯＳ細胞およびＳＰ２細胞を含む。抗体遺伝子をコードする組み換え発現ベクターを哺乳動物宿主細胞に導入する場合、抗体は、宿主細胞において抗体が発現できる、またはより好ましくは、宿主細胞が成長する培養培地内に抗体が分泌され得るために十分な期間宿主を培養することにより産生される。抗体は、標準的タンパク質精製方法を使用して培養培地から回収することができる。
【０１７１】
宿主細胞はまた、ｓｃＦｖ分子などの無傷の抗体部分を作製するために使用することができる。上記の手順の変形は、本発明の範囲内であることが理解されるものとする。例えば、宿主細胞に、本発明の抗体の軽鎖または重鎖のいずれか（両方ではない。）をコードするＤＮＡをトランスフェクトすることは、望ましいと思われる。組み換えＤＮＡ技術はまた、抗原、例えばｈＩＬ−１２に結合するために必ずしも必要でない軽鎖および重鎖のいずれか、または両方をコードするＤＮＡの一部またはすべてを除去するために使用することもできる。このような切断型ＤＮＡ分子から発現される分子もまた本発明の抗体により包含される。加えて、１つの重鎖および１つの軽鎖が１種の抗原、例えばＩＬ−１２に対して特異的であり、他の重鎖および軽鎖が、異なる抗原に対して特異的である、二官能性抗体は、標準的化学的架橋方法を使用して作製できる。
【０１７２】
一実施形態において、本発明の組成物および方法における使用に適切な抗体またはこの抗原結合断片は、抗体重鎖および抗体軽鎖の両方をコードする組み換え発現ベクターを使用して調製され、ｄｈｆｒ−ＣＨＯ細胞内にリン酸カルシウム媒介トランスフェクションにより導入される。組み換え発現ベクターにおいて、抗体の重鎖および軽鎖遺伝子は、（例えば、ＣＭＶエンハンサー／ＡｄＭＬＰプロモーター制御エレメントまたはＳＶ４０エンハンサー／ＡｄＭＬＰプロモーター制御エレメントなどのＳＶ４０、ＣＭＶ、アデノウイルスなどに由来する。）エンハンサー／プロモーター制御エレメントにそれぞれ動作可能に連結され、遺伝子の高レベルの転写を駆動する。組み換え発現ベクターはまたＤＨＦＲ遺伝子を担持し、メトトレキサート選択／増幅を使用して、ベクターをトランスフェクトされたＣＨＯ細胞の選択を可能にする。選択された形質転換体宿主細胞を、抗体の重鎖および軽鎖を発現できるように培養し、無傷の抗体を培養培地から回収する。標準的分子生物学技術を使用して、組み換え発現ベクターを調製し、宿主細胞をトランスフェクトし、形質転換体を選択し、宿主細胞を培養し、抗体を培養培地から回収する。本発明の組成物における使用のための抗体またはこれらの抗原結合部分は、ヒト免疫グロブリン遺伝子に関してトランスジェニックである動物（例えばマウス）において発現させることができる（例えばＴａｙｌｏｒ，Ｌ．Ｄ．ｅｔ  ａｌ．（１９９２）Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２０：６２８７−６２９５を参照されたい。）。植物細胞もまた、本発明の抗体またはこの抗原結合部分発現するトランスジェニック植物を作製するために改変することができる。
【０１７３】
本発明の組成物は、追加の薬剤をさらに含むことができる。例えば、本発明の組成物は、バッファー、ポリオールおよび／または界面活性剤をさらに含むことができる。
【０１７４】
本明細書において使用する場合、「バッファー」は、この酸−塩基コンジュゲート成分の作用によりｐＨの変化に抵抗する、緩衝化された溶液を指す。本発明に使用するバッファーは、約４．０から約４．５、約４．５から約５．０、約５．０から約５．５、約５．５から約６、約６．０から約６．５、約５．７から約６．３、約６．５から約７．０、約７．５から約８．０の範囲のｐＨを有する。この範囲にｐＨを調節するバッファーの例は、酢酸塩（例えば酢酸ナトリウム）、コハク酸塩（例えばコハク酸ナトリウム）、グルコンサン塩、ヒスチジン、クエン酸塩（例えばクエン酸ナトリウム）、リン酸塩（例えば、リン酸ナトリウムまたはリン酸カリウム）および他の有機酸バッファーを含む。一実施形態において、バッファーは、Ｌ−ヒスチジン、コハク酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、リン酸ナトリウム、およびリン酸カリウムからなる群から選択される。本発明の一実施形態において、バッファーはＬ−ヒスチジンを含む。一実施形態において、本発明のバッファーは１から５０ｍＭのヒスチジンを含み、ｐＨ５から７である。本発明の一実施形態において、バッファーは１０ｍＭのヒスチジンを含み、ｐＨ約６である。
【０１７５】
「ポリオール」は、複数のヒドロキシル基を有する物質であり、糖（還元糖および非還元糖）、糖アルコールおよび糖酸を含む。本明細書において好ましいポリオールは、約６００ｋＤ未満（例えば約１２０から約４００ｋＤまでの範囲）の分子量を有する。「還元糖」は、金属イオンを還元できる、またはタンパク質中のリジンもしくは他のアミノ基と共有的に反応できるヘミアセタール基を含有し、「非還元糖」は、還元糖のこれらの特性を有さない糖である。還元糖の例は、フルクトース、マンノース、マルトース、ラクトース、アラビノース、キシロース、リボース、ラムノース、ガラクトースおよびグルコースである。非還元糖は、スクロース、トレハロース、ソルボース、メレジトースおよびラフィノースを含む。マンニトール、キシリトール、エリトリトール、トレイトール、ソルビトールおよびグリセロールは糖アルコールの例である。糖酸に関しては、これらは、Ｌ−グルコン酸塩およびこの金属塩を含む。製剤が凍結−融解安定であることを望む場合、ポリオールは、好ましくは、製剤中の抗体を不安定にするような凍結温度（例えば−２０℃）において結晶化しないポリオールである。ポリオールは、等張化剤としても作用することができる。一実施形態において、ポリオールは、マンニトールおよびソルビトールからなる群から選択される。本発明の一実施形態において、本組成物の一成分は、約１０から約１００ｍｇ／ｍｌ（例えば約１から１０％）の濃度のマンニトールである。本発明の特定の実施形態において、マンニトールの濃度は、約３０から約５０ｍｇ／ｍｌ（例えば約３から５％）である。本発明の好ましい実施形態において、マンニトールの濃度は約４０ｍｇ／ｍｌ（例えば約４％）である。
【０１７６】
「界面活性剤」は、洗浄剤とも称される。洗浄剤の例は、ポリソルベート（例えば、ポリソルベート２０または８０）またはポロキサマー（例えば、ポロキサマー１８８）などの非イオン性洗浄剤を含む。洗浄剤の量は、洗浄剤が、製剤化された抗体の凝集を減少させる、および／または製剤中の微粒子の形成を最小化する、および／または吸着を減少させるように加える。本発明の好ましい実施形態において、製剤は、ポリソルベートである界面活性剤を含む。本発明の別の好ましい実施形態において、製剤は、洗浄剤のポリソルベート８０またはＴｗｅｅｎ８０を含有する。Ｔｗｅｅｎ８０は、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレアートを表すために使用される用語である（Ｆｉｅｄｌｅｒ，Ｌｅｘｉｋｏｎ  ｄｅｒ  Ｈｉｆｓｓｔｏｆｆｅ，Ｅｄｉｔｉｏ  Ｃａｎｔｏｒ  Ｖｅｒｌａｇ  Ａｕｌｅｎｄｏｒｆ，４ｔｈ  ｅｄ．，１９９６を参照されたい。）。一実施形態において、界面活性剤は、ポリソルベート８０、ポリソルベート２０およびＢＲＩＪ界面活性剤からなる群から選択される。好ましい一実施形態において、組成物は、約０．００１から０．１％の間のポリソルベート８０、または約０．００５および０．０５％の間のポリソルベート８０、例えば、約０．００１、約０．００５、約０．０１、約０．０５、または約０．１％のポリソルベート８０を含有する。好ましい実施形態において、約０．０１％のポリソルベート８０が本発明の組成物中に見出される。
【０１７７】
別の実施形態において、メチオニンなどの安定剤または抗酸化剤を、組成物に加えることができる。本発明の組成物において有用な他の安定剤は、当業者に公知であり、限定するものではないが、グリシンおよびアルギニンを含む。
【０１７８】
本発明の組成物、例えば医薬組成物は、対象への投与に適切である。通常、医薬組成物は、医薬として許容される担体を含む。本明細書において使用する場合、「医薬として許容される担体」は、生理学的に相溶性のある、ありとあらゆる溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤（ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｄｅｌａｙｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）などを含む。医薬として許容される担体の例は、水、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、デキストロース、グリセロール、エタノールなどの１以上、ならびにこれらの組み合わせを含む。多くの場合、等張剤、例えば、糖、マンニトール、ソルビトールなどのポリアルコールまたは塩化ナトリウムを組成物中に含むことが好ましいであろう。医薬として許容される担体は、湿潤剤もしくは乳化剤、保存料またはバッファーなどの少量の補助物質をさらに含むことができ、これらは抗体または抗体部分の保存可能期間または有効性を強化する。
【０１７９】
本発明の組成物および本発明の方法を使用して開発された組成物は、非経口投与に適切な医薬組成物に組み込むことができる。好ましくは、抗体または抗体部分は、約０．１から約２５０ｍｇ／ｍｌ抗体を含有する注射可能な溶液として調製されるものである。特定の実施形態において、抗体またはこの抗原結合部分、例えばヒト抗ＩＬ−１２抗体またはこの抗原結合部分は、約４０  ｍｇ／ｍｌ、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２、２３０、２４０、または約２５０ｍｇ／ｍｌの濃度で溶液、例えば注射可能な溶液中に存在する。
【０１８０】
注射可能な溶液は、フリントガラスバイアルもしくはアンバーバイアル、アンプルまたは充填済み注射器中の液体または凍結乾燥された剤形のいずれかで構成され得る。バッファーは、Ｌ−ヒスチジン（１から５０ｍＭ）であってよく、最適には５から１０ｍＭ、ｐＨ５．０から７．０（最適にはｐＨ６．０）である。他の適切なバッファーは、限定するものではないが、コハク酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、リン酸ナトリウムまたはリン酸カリウムを含む。塩化ナトリウムは、溶液の毒性を改変するために、０から３００ｍＭ（最適には液体剤形に関して１５０ｍＭ）の濃度で使用することができる。凍結保護物質、主に０から１０％のスクロース（最適には０．５から１．０％）を、凍結乾燥剤形用に含むことができる。他の適切な凍結保護物質は、トレハロースおよびラクトースを含む。充填剤主に０から１０％のマンニトール（最適には２から４％）を、凍結乾燥剤形用に含むことができる。
【０１８１】
一実施形態において、本組成物は、抗体を約０．０１ｍｇ／ｋｇから１０ｍｇ／ｋｇの投薬量で含む。抗体のより好ましい投薬量は、１週間おきに約１ｍｇ／ｋｇの投与または毎週約０．３ｍｇ／ｋｇの投与を含む。
【０１８２】
一般に、本発明の組成物の適切な投与量、例えば１日投与量は、治療効果を生み出すために有効な最小の投与量である組成物の量である。このような有効な投与量は、概して上記の要因に依存すると思われる。一実施形態において、本発明の組成物の有効量は、ＩＬ−１２および／またはＩＬ−２３の活性が有害である障害を患う対象において、ＩＬ−１２および／またはＩＬ−２３の活性（例えばＩＬ−１２／ＩＬ−２３のｐ４０サブユニットの活性）を阻害する量である。一実施形態において、本組成物は、４０ｍｇ、５０ｍｇ、８０ｍｇまたは１００ｍｇ／注射の活性成分である抗体の有効投与量を提供する。別の実施形態において、本組成物は、約０．１から２５０ｍｇの抗体に及ぶ有効投与量を提供する。所望であれば、有効投与量の組成物は、２，３，４，５，６またはこれ以上の分割投与量（ｓｕｂ−ｄｏｓｅｓ）として投与され、１日を通して適切な間隔に分けて、場合により単位剤形で投与されてもよい。
【０１８３】
本発明の実施形態において、組成物中の抗体の投薬量は、約１から約２００ｍｇの間である。実施形態において、組成物中の抗体の投薬量は、約３０および約１４０ｍｇの間、約４０および約１２０ｍｇの間、約５０および約１１０ｍｇの間、約６０および約１００ｍｇの間または約７０および約９０ｍｇの間である。さらなる実施形態において、本組成物は、ＩＬ−１２および／またはＩＬ−２３に結合する（例えば、ＩＬ−１２および／またはＩＬ−２３のｐ４０サブユニットに結合する。）抗体投薬量またはこの抗原結合断片を、例えば約１、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０または約２５０ｍｇで含む。
【０１８４】
上に列挙した投薬量の中間の範囲、例えば約２から１３９ｍｇはまた、本発明の一部であることが意図される。例えば、上に列挙した値の任意の組み合わせを、上限および／または下限として使用した値の範囲が含まれることが意図される。
【０１８５】
投薬量の値は、緩和されるべき病態の重症度により変動してよい。任意の特定の対象に関して、具体的投薬レジメンは、個人の要求および組成物を投与する、または組成物の投与を管理する人物の専門的な判断に従って、経時的に調整されるべきであり、本明細書において説明した投薬量範囲は、例示だけであり、特許請求する組成物の範囲または実践を限定する意図のものではないことは、さらに理解されるべきである。
【０１８６】
本発明の組成物はさまざまな形態であってよい。これらは、例えば、液体、半固体および固体の剤形、例えば溶液（例えば注射可能なおよび注入可能な溶液）、分散液または懸濁液、錠剤、丸薬、粉末、リポソームおよび坐薬を含む。好ましい形態は、投与および治療適用の意図される様式に依存する。典型的な好ましい組成物は、注射可能または注入可能な溶液の形態、例えば、他の抗体によるヒトの受動免疫に使用されるものと同様の組成物である。投与の好ましい様式は、非経口（例えば、静脈内、皮下、腹腔内、筋肉内）である。好ましい実施形態において、抗体は、静脈内注入または静脈内注射により投与される。別の好ましい実施形態において、抗体は、筋肉内注射または皮下注射により投与される。
【０１８７】
治療組成物は、製造および保存状態下で通常滅菌され、安定でなければならない。本組成物は、溶液、マイクロエマルション、分散液、リポソームまたは高薬剤濃度に適した他の秩序構造として製剤化できる。滅菌の注射可能な溶液は、適切な溶媒中の必要量の活性化合物（即ち抗体または抗体部分）を、上記の成分の１つまたは組み合わせに組み込み、必要に応じてその後、ろ過滅菌することによって調製することができる。一般に、分散液は、活性化合物を、基本分散媒および上記からの必要な他の成分を含有する滅菌ビヒクルに組み込むことにより調製される。滅菌注射可能溶液の調製用の、滅菌凍結乾燥粉末の場合、調製の好ましい方法は、活性成分＋任意の追加の所望の成分の粉末を、あらかじめ滅菌ろ過されたこれらの溶液から得る、真空乾燥およびスプレー乾燥である。溶液の適度な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングの使用、分散液の場合、要求された粒径の維持および界面活性剤の使用により保持することができる。注射可能な組成物の持続的吸収は、組成物中に吸収を遅延させる薬剤、例えばモノステアリン酸塩およびゼラチンを含むことによりもたらすことができる。
【０１８８】
本発明の抗体および抗体部分は当分野において公知のさまざまな方法により投与することができるが、多数の治療適用に関して、投与の好ましい経路／様式は、皮下注射、静脈内注射または注入である。当業者には理解されるであろうように、投与の経路および／または様式は、所望の結果に依存して変動するものである。特定の実施形態において、組成物の活性化合物は、例えば、インプラント、経皮貼布およびマイクロカプセル化された送達系を含む徐放性製剤などのように、急速な放出に対して化合物を保護するであろう担体と一緒に調製することができる。生分解性の生体適合性ポリマー、例えばエチレン酢酸ビニル、ポリ酸無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステルおよびポリ乳酸を使用することができる。このような製剤の調製のための多数の方法が、特許権をとっているか、または当業者に周知である。例えば、Ｓｕｓｔａｉｎｅｄ  ａｎｄ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｊ．Ｒ．Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，ｅｄ．，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９７８を参照されたい。
【０１８９】
特定の実施形態において、本発明の組成物は、例えば、不活性希釈剤または吸収可能な食用担体と一緒に、経口投与することができる。本組成物はまた、ハードシェルゼラチンカプセルまたはソフトシェルゼラチンカプセルに封入、錠剤に圧縮または対象の食事に直接組み込んでもよい。経口治療的投与のために、本組成物は賦形剤に組み込まれてもよく、摂取可能な錠剤、バッカル錠、トローチ、カプセル、エリキシル剤、懸濁液、シロップ、ウェファーなどの形態で使用することができる。非経口投与以外により本発明の組成物を投与するために、この不活性化を防止するための材料で組成物をコーティングするか、または組成物とこの不活性化を防止するための材料とを同時投与する必要があると思われる。
【０１９０】
追加の治療薬もまた、本発明の組成物に組み込むことができる。特定の実施形態において、本発明の抗体または抗体部分は、１以上の追加の治療薬と、同時製剤化および／または同時投与される。さらに、本発明の組成物は、２以上の追加の治療薬を含み得ることもまた意図される。治療薬を組み合わせた組成物は、投与する治療薬を低投薬量で有利に利用でき、従って、さまざまな単剤療法に伴われる毒性または合併症の可能性を避けることができる。本発明の組成物が併用療法を含む場合、対象に抗体単独で投与する場合より、抗体の低投薬量が望ましいことは、当業者には理解されると思われる（例えば、より低い投与量の抗体を使用して所望の治療効果の達成が可能な併用療法の使用を介して、順に、相乗治療効果を達成することができる。）。
【０１９１】
一実施形態において、本発明の組成物は、抗体（２以上）の組み合わせまたは抗体の「カクテル」を含む。本発明の組成物は、単独または追加の薬剤、例えば治療薬と組み合わせて使用することができ、追加の薬剤は、この意図される目的に関して当業者により選択されることは理解されるべきである。例えば、追加の薬剤は、本発明の抗体により治療される疾患または病態の治療に有用であることが、当分野において承認されている治療薬であってよい。追加の薬剤はまた、治療組成物に対して有益な特質をもたらす薬剤、例えば組成物の粘度をもたらす薬剤であってよい。
【０１９２】
一実施形態において、適切な追加の治療薬は、ブデソニド（ｂｕｄｅｎｏｓｉｄｅ）、表皮成長因子、副腎皮質ステロイド、シクロスポリン、スルファサラジン、アミノサリチル酸塩、６−メルカプトプリン、アザチオプリン、メトロニダゾール、リポキシゲナーゼ阻害剤、メサラミン、オルサラジン、バルサラジド、抗酸化剤、トロンボキサン阻害剤、ＩＬ−１受容体拮抗薬、抗ＩＬ−１βモノクローナル抗体、抗ＩＬ−６モノクローナル抗体、成長因子、エラスターゼ阻害剤、ピリジニル−イミダゾール化合物、他のヒトサイトカインまたは成長因子に対する抗体またはこれらの拮抗薬、例えばＴＮＦ（アダリムマブ／ＨＵＭＩＲＡを含む。）、ＬＴ、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１８、ＥＭＡＰ−ＩＩ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＦＧＦおよびＰＤＧＦからなる群から選択される。本発明の抗体またはこれらの抗原結合部分は、細胞表面分子、例えばＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤ４５、ＣＤ６９、ＣＤ９０またはこれらのリガンドに対する抗体と組み合わせることができる。本発明の抗体またはこれらの抗原結合部分はまた、メトトレキサート、シクロスポリン、ＦＫ５０６、ラパマイシン、ミコフェノール酸モフェチル、レフルノミド、イブプロフェンなどのＮＴＨＥ、プレドニゾロンなどの副腎皮質ステロイド、ホスホジエステラーゼ阻害剤、アデノシン作動薬、抗血栓薬、補体阻害剤、アドレナリン作動薬、ＴＮＦもしくはＩＬ−１などの炎症促進性サイトカインによるシグナル伝達に干渉する薬剤（例えば、ＩＲＡＫ、ＮＩＫ、ＩＫＫ、ｐ３８またはＭＡＰキナーゼ阻害剤）、ＩＬ−１β転換酵素阻害剤（例えば、Ｖｘ７４０）、抗Ｐ７、ｐ−セレクチン糖タンパク質リガンド（ＰＳＧＬ）、ＴＮＦα転換酵素阻害剤、キナーゼ阻害剤などのＴ細胞シグナル伝達阻害剤、メタロプロテイナーゼ阻害剤、スルファサラジン、アザチオプリン、６−メルカプトプリン、アンジオテンシン転換酵素阻害剤、可溶性サイトカイン受容体およびこれらの誘導体（例えば、可溶性ｐ５５またはｐ７５ＴＮＦ受容体、ｓＩＬ−１ＲＩ、ｓＩＬ−１ＲＩＩ、ｓＩＬ−６Ｒ、可溶性ＩＬ−１３受容体（ｓＩＬ−１３））および抗炎症性サイトカイン（例えば、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１３およびＴＧＦβ）などの薬剤と組み合わせることができる。
【０１９３】
別の実施形態において、適切な追加の治療薬は、抗ＴＮＦ抗体およびこれらの抗体断片、ＴＮＦＲ−Ｉｇ構築体、ＴＡＣＥ阻害剤、ＰＤＥ４阻害剤、副腎皮質ステロイド、ブデソニド（ｂｕｄｅｎｏｓｉｄｅ）、デキサメタゾン、スルファサラジン、５−アミノサリチル酸、オルサラジン、ＩＬ−１β転換酵素阻害剤、ＩＬ−１ｒａ、チロシンキナーゼ阻害剤、６−メルカプトプリンおよびＩＬ−１１からなる群から選択される。
【０１９４】
さらに別の実施形態において、適切な追加の治療薬は、副腎皮質ステロイド、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、アザチオプリン、シクロホスファミド、シクロスポリン、メトトレキサート、４−アミノピリジン、チザニジン、インターフェロン−β１ａ、インターフェロン−β１ｂ、コポリマー１、高圧酸素、静注用免疫グロブリン、クラドリビン（ｃｌａｂｒｉｂｉｎｅ）、ＴＮＦ、ＬＴ、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１８、ＥＭＡＰ−ＩＩ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＦＧＦ、ＰＤＧＦの抗体もしくは作動薬、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤ４５、ＣＤ６９、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ９０もしくはこれらのリガンドに対する抗体、メトトレキサート、シクロスポリン、ＦＫ５０６、ラパマイシン、ミコフェノール酸モフェチル、レフルノミド、ＮＴＨＥ、イブプロフェン、副腎皮質ステロイド、プレドニゾロン、ホスホジエステラーゼ阻害剤、アデノシン作動薬、抗血栓薬、補体阻害剤、アドレナリン作動薬、ＩＲＡＫ、ＮＩＫ、ＩＫＫ、ｐ３８もしくはＭＡＰキナーゼ阻害剤、ＩＬ−１β転換酵素阻害剤、ＴＡＣＥ阻害剤、Ｔ細胞シグナル伝達阻害剤、キナーゼ阻害剤、メタロプロテイナーゼ阻害剤、スルファサラジン、アザチオプリン、６−メルカプトプリン、アンジオテンシン転換酵素阻害剤、可溶性サイトカイン受容体、可溶性ｐ５５ＴＮＦ受容体、可溶性ｐ７５ＴＮＦ受容体、ｓＩＬ−１ＲＩ、ｓＩＬ−１ＲＩＩ、ｓＩＬ−６Ｒ、ｓＩＬ−１３Ｒ、抗Ｐ７、ｐ−セレクチン糖タンパク質リガンド（ＰＳＧＬ）、抗炎症性サイトカイン、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３およびＴＧＦβからなる群から選択される。
【０１９５】
ＩＩＩ．本発明の方法
本発明はまた、本発明は、抗体またはこの抗原結合断片の所望の速度の血清クリアランスを得るために、抗体またはこの抗原結合断片、例えばヒト抗体またはこの抗原結合断片を含む組成物の薬物動態を調節する方法を提供する。本方法は、オリゴマンノース型構造によりグリコシル化された、抗体またはこの抗原結合断片の第１のレベルを調節するステップおよびフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造によりグリコシル化された、抗体またはこの抗原結合断片の第２のレベルを調節するステップを含み、第１のレベルおよび第２のレベルの調節が、抗体の所望の速度の血清クリアランスをもたらす。
【０１９６】
本発明はまた、抗体またはこの抗原結合断片の所望の速度の血清クリアランスを達成するために、ＡＢＴ−８７４またはこの抗原結合部分を含む組成物の薬物動態を調節するための方法を提供する。本方法は、Ｍ５、Ｍ６、Ｍ７、Ｍ８およびＭ９からなる群から独立して選択されるオリゴマンノース型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化されたＡＢＴ−８７４の第１のレベルを調節するステップおよびＮＧＡ２Ｆ、ＮＡ１Ｆ、ＮＡ２Ｆ、ＮＧＡ２Ｆ−ＧｌｃＮＡｃおよびＮＡ１Ｆ−ＧｌｃＮＡｃからなる群から独立して選択されるフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化されたＡＢＴ−８７４の第２のレベルを調節するステップを含み、第１のレベルおよび第２のレベルの調節が所望の速度の血清クリアランスをもたらし、その結果、ＡＢＴ−８７４またはこの抗原結合部分を含む組成物の薬物動態を調節する。
【０１９７】
本発明は、抗体またはこの抗原結合部分、例えばヒト抗体  またはこの抗原結合断片の薬物動態を、これらを必要とする対象に投与するために、調節する方法をさらに提供する。本方法は、抗体またはこの抗原結合部分を、オリゴマンノース型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化するステップ、抗体を、フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化するステップおよび抗体またはこの抗原結合断片の所望の速度の血清クリアランスを達成するために、組成物中に適切なレベルのこれらのグリコフォームを含むステップを含む。
【０１９８】
ＡＢＴ−８７４またはこの抗原結合部分の薬物動態を調節する方法もまた、本発明により提供される。本方法は、ＡＢＴ−８７４またはこの抗原結合部分を、オリゴマンノース型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化するステップ、ＡＢＴ−８７４を、フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化するステップおよびＡＢＴ−８７４またはこの抗原結合断片の所望の速度の血清クリアランスを達成するために、組成物中に適切なレベルのこれらのグリコフォームを含むステップを含む。
【０１９９】
本発明はまた、ＡＢＴ−８７４またはこの抗原結合部分を、Ｍ５、Ｍ６、Ｍ７、Ｍ８およびＭ９からなる群から独立して選択されるオリゴマンノース型構造により、Ａｓｎ２９７においてグリコシル化するステップ、ＡＢＴ−８７４を、ＮＧＡ２Ｆ、ＮＡ１Ｆ、ＮＡ２Ｆ、ＮＧＡ２Ｆ−ＧｌｃＮＡｃおよびＮＡ１Ｆ−ＧｌｃＮＡｃからなる群から独立して選択されるフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造により、Ａｓｎ２９７においてグリコシル化するステップ、およびＡＢＴ−８７４またはこの抗原結合断片の所望の速度の血清クリアランスを達成するために、組成物中に適切なレベルのこれらのグリコフォームを含むステップにより、ＡＢＴ−８７４またはこの抗原結合部分の薬物動態を調節する方法を提供する。
【０２００】
特定のグリコシル化パターンを有する、抗体またはこの抗原結合断片を調製するさまざまな方法が、当分野において公知である（例えば、Ｊｅｆｆｅｒｉｓ，Ｒ．（２００９），Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ３０（７）：３５６−３６２；Ｊｅｆｆｅｒｉｓ（２００７）Ｖａｃｃｉｎｅｓ  ＆  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ７（９）：１４０１−１４１３を参照されたい。）。
【０２０１】
例えば、適切な宿主における対象となる組み換え抗体またはこの抗原結合断片の調製は、多くの場合、対象となる抗体またはこの抗原結合断片の一方の鎖が、１以上のオリゴマンノース型構造によりＦｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位において約１００％グリコシル化され、対象となる抗体またはこの抗原結合断片の他方の鎖が、１以上のフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位において約１００％グリコシル化された組成物の産生をもたらし、その結果、１以上のオリゴマンノース型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された約５０％の抗体またはこの抗原結合断片および１以上のフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された約５０％の抗体またはこの抗原結合断片を含む組成物を提供する。
【０２０２】
糖タンパク質の合成および／または糖タンパク質のプロセシングの阻害剤は、所望のグリコシル化パターンを有する抗体またはこの抗原結合断片の作製に使用することができる。例えば、糖タンパク質の合成および／または糖タンパク質のプロセシングの選択的阻害剤は、対象となる抗体またはこの抗原結合断片を含む培養液に添加することができる。このような阻害剤は当分野において公知であり、例えばキフネンシンを含み、キフネンシンは、マンノシダーゼＩ酵素活性の阻害剤である。キフネンシンは、放線菌のキタサトスポリア・キフネンス（Ｋｉｔａｓａｔｏｓｐｏｒｉａ  ｋｉｆｕｎｅｎｓｅ）Ｎｏ．９４８２から１９８７年に最初に単離され（Ｍ．Ｉｗａｍｉ，ｅｔ  ａｌ．（９１８７），Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．，４０，６１２）、１−アミノ−マンノジリマイシンの環状オキサミド誘導体である。十分な濃度のキフネンシンを、対象となる抗体またはこの抗原結合断片を含む培養液に添加することにより、フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造の産生が防止され、その結果、約１００％の、１以上のオリゴマンノース型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片および約０％の、１以上のフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片を含む組成物がもたらされる。キフネンシンの段階希釈液およびこの希釈液を、対象となる抗体またはこの抗原結合断片を含む培養液に添加することにより、約８０から１００％の、１以上のオリゴマンノース型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片および約０から２０％の、１以上のフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片を含む組成物が作製される。
【０２０３】
約１００％のフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造を含む、対象となる抗体またはこの抗原結合断片を含む組成物を調製するために、抗体またはこの抗原結合断片を含む組成物を、オリゴマンノース型構造に特異的に結合するコンカナバリン（Ｃｏｎｃａｖａｌｉｎ）Ａカラムを通すことができる。例えば、Ｔｒｉｓなどのバッファーをカラムの溶出に使用する場合、溶出液は、１以上のオリゴマンノース型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位において約０％がグリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片を含む組成物である。例えば、オリゴマンノースまたはマンノースを含むバッファーをカラムの溶出に使用する場合、溶出液は、１以上のオリゴマンノース型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位において約５０％がグリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片を含む。当業者は、バッファーおよび／またはこのようなカラムから溶出されるさまざまな分画の回収中のオリゴマンノースおよび／またはマンノースの濃度を容易に変動させ、１以上のオリゴマンノース型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位において約０％から約５０％がグリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片を含む組成物を調製することができる。当業者はまた、上記のように調製されたさまざまな量の組成物を容易に混合し、１以上のオリゴマンノース型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位において約０％から約１００％がグリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片を含む組成物および／または１以上のフコシル化バイアンテナリーオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位において約０％から約１００％がグリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片を含む組成物に達することができる。
【０２０４】
チャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ）、マウス線維芽細胞およびマウス骨髄腫細胞などの、動物または植物に基づく発現系（Ａｒｚｎｅｉｍｉｔｔｅｌｆｏｒｓｃｈｕｎｇ．１９９８  Ａｕｇ；４８（８）：８７０−８８０；米国特許第５，５４５，５０４号明細書）；ヤギ、ヒツジ、マウスなどのトランスジェニック動物（Ｄｅｎｔｅ  Ｐｒｏｇ．Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｌ．１９８９  Ｒｅｓ．３００：８５−９８，Ｒｕｔｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８  Ｃｅｌｌ  ５３（６）：８４７−８５６；Ｗａｒｅ，Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．１９９３  Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｈａｅｍｏｓｔａｓｉｓ  ６９（６）：１１９４−１１９４；Ｃｏｌｅ，Ｅ．Ｓ．，ｅｔ  ａｌ．１９９４  Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２６５−２６５）；植物（シロイヌナズナ（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ  ｔｈａｌｉａｎａ）、タバコなど）（Ｓｔａｕｂ，ｅｔ  ａｌ．２０００  Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １８（３）：３３３−３３８）（ＭｃＧａｒｖｅｙ，Ｐ．Ｂ．，ｅｔ  ａｌ．１９９５  Ｂｉｏ−Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １３（１３）：１４８４−１４８７；Ｂａｒｄｏｒ，Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．１９９９  Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｐｌａｎｔ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ４（９）：３７６−３８０）；ならびに昆虫細胞（鱗翅目細胞に感染するオートグラファ・カルフォルニカ核多角体ウイルス（Ａｕｔｏｇｒａｐｈａ  ｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｎｕｃｌｅａｒ  ｐｏｌｙｈｅｄｒｏｓｉｓ  ｖｉｒｕｓ）などの組み換えバキュロウイルスを組み合わせた、スポドプテラ・フルギペルダ（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）Ｓｆ９、Ｓｆ２１、トリコプルシア・ニ（Ｔｒｉｃｈｏｐｌｕｓｉａ  ｎｉ）など、）（Ａｌｔｍａｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９  Ｇｌｙｃｏｃｏｎｊ．Ｊ．１６（２）：１０９−１２３）もまた、対象となる１以上のオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片を作製するために使用することができる。糖タンパク質の作製にさらに適切な、当分野において公知の発現宿主系は、ＣＨＯ細胞：Ｒａｊｕ  Ｗ０９９２２７６４Ａ１およびＰｒｅｓｔａ  Ｗ００３／０３５８３５Ａ１；ハイブリドーマ細胞：Ｔｒｅｂａｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，Ｊ．Ｉｎｉｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，２３０：５９−７０；昆虫細胞：Ｈｓｕ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，ＪＢＣ，２７２：９０６２−９７０，ならびに植物細胞：Ｇｅｒｎｇｒｏｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｗ００４／０７４４９９Ａ２を含む。
【０２０５】
加えて、哺乳動物宿主細胞を遺伝子操作して、細胞中で発現される糖タンパク質中の末端シアル酸の程度を増加させ、シアル酸トランスフェラーゼおよび適切な基質を使用して、投与前にｉｎ  ｖｉｔｒｏで、シアル酸を対象となるタンパク質とコンジュゲートさせる方法ならびに成長培地の組成またはヒトグリコシル化に関与する酵素の発現を改変する方法は、当分野において公知である（Ｓ．Ｗｅｉｋｅｒｔ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１９９９，１７，１１１６−１１２１；Ｗｅｒｎｅｒ，Ｎｏｅ，ｅｔ  ａｌ  １９９８  Ａｒｚｎｅｉｍｉｔｔｅｌｆｏｒｓｃｈｕｎｇ  ４８（８）：８７０−８８０；Ｗｅｉｋｅｒｔ，Ｐａｐａｃ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９；Ａｎｄｅｒｓｅｎ  ａｎｄ  Ｇｏｏｃｈｅｅ  １９９４  Ｃｕｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．５：５４６−５４９；Ｙａｎｇ  ａｎｄ  Ｂｕｔｌｅｒ  ２０００  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇｉｎ．６８（４）：３７０−３８０）。代替的には、培養ヒト細胞も使用できる。
【０２０６】
遺伝子改変されたグリコシル化経路を有する微生物もまた、対象となる１以上のオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片を作製するために使用することができる。例えば、幾つかのグリコシルトランスフェラーゼは、サッカロマイセス・セレビシエ（Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）（ＧａｌＴ、ＧｎＴ  Ｉ）、アスペルギルス・ニデュランス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｄｕｌａｎｓ）（ＧｎＴ  Ｉ）および他の真菌において、別々にクローン化され、発現されている（Ｙｏｓｈｉｄａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，Ｋａｌｓｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５  Ｇｌｙｃｏｃｏｎｊ．Ｊ．１２（３）：３６０−３７０，Ｓｃｈｗｉｅｎｔｅｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５；Ｇｒａｈａｍ  ａｎｄ  Ｅｍｒ，１９９１  Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１１４（２）：２０７−２１８；Ｙｏｋｏ−ｏ  ｅｔ  ａｌ．２００１  ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．４８９（１）：７５−８０；Ｓｈｉｎｄｏ  ｅｔ  ａｌ，．１９９３  Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６８（３５）：２６３３８−２６３４５；Ｃｈｉｂａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８  Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７３，２６２９８−２６３０４；特開平８−３３６３８７号公報；Ｍａｒｔｉｎｅｔ  ｅｔ  ａｌ．（Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｌｅｔｔ．１９９８，２０（１２），１１７１−１１７７）；米国特許第５，８３４，２５１号明細書）。
【０２０７】
フコシル化が減少した、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片を作製するための方法および微生物もまた当分野において公知であり、対象となる１以上のオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片を作製するために使用することができる。例えば、米国特許第６，９４６，２９２号明細書、同第７，２１４，７７５号明細書、同第６，６０２，６８４号明細書、同第２７２，０６６号明細書；同第６，９４６，２９２号明細書、同第６，８０３，２２５号明細書、米国特許出願公開第２００４／０１９１２５６号明細書、同第２００４／０１３６９８６号明細書、同第２００７／００２０２６０号明細書；同第２００７／００２０２６０号明細書、同第２００４００３８３８１号明細書およびＰＣＴ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．ＷＯ／０１１４５２２を参照されたく、これらの全内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０２０８】
本発明の一実施形態において、対象となる１以上のオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片は米国特許第７，６２９，１６３号明細書、同第７，５９８，０５５号明細書、米国特許出願公開第２００９／０３０４６９０号明細書、ＰＣＴ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏｓ．：ＷＯ０２／００８７９、ＷＯ０３／０５６９１４、ＷＯ０４／０７４４９８、ＷＯ０４／０７４４９９、Ｃｈｏｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，ＰＮＡＳ，１００：５０２２−５０２７；Ｈａｍｉｌｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｎａｔｕｒｅ，３０１：１２４４−１２４６およびＢｏｂｒｏｗｉｃｚ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ，１４：７５７−７６６）に記載された、ピキア・パトリス（Ｐｉｃｈｉａ  ｐａｓｔｏｒｉｓ）、ハンセニューラポリモルファ（Ｈａｎｓｅｎｕｌａｐｏｌｙｍｏｒｐｈａ）、ピキア・スティプティス（Ｐｉｃｈｉａ  ｓｔｉｐｔｉｓ）、ピキア・メタノリカ（Ｐｉｃｈｉａ  ｍｅｔｈａｎｏｌｉｃａ）、ピキア属（Ｐｉｃｈｉａ  ｓｐ．）、クリベロマイセス属（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ  ｓｐ．）、カンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ）、アスペルギルス・ニデュランス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｄｕｌａｎｓ）およびトリコデルマ・リーゼイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｓｅｅｉ）などの単細胞または多細胞の真菌において組み換え的に作製でき、これらすべての全内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０２０９】
ひとたび、対象となる１以上のオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片が組み換え的に作製されたら、当分野において公知の方法および例えば、Ｋｏｈｉｅｒ  ＆  Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，（１９７５）Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：４９５；Ｂｒｏｄｅｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ．５１−６３，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８７）；．Ｇｏｄｉｎｇ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，ｐｐ．５９−１０４（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，１９８６）；ならびにＪａｋｏｂｏｖｉｔｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９９３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：２５５１−２５５およびＪａｋｏｂｏｖｉｔｓ  ｅｔ  ａｌ，（１９９３）Ｎａｔｕｒｅ  ３６２：２５５−２５８に記載の方法を使用して、精製および単離することができる。組み換え的に作製された、対象となる１以上のオリゴ糖型構造により、Ｆｃ領域のＮ結合型グリコシル化部位においてグリコシル化された抗体またはこの抗原結合断片のグリカンの分析および分布は、限定するものではないが、ＨＰＬＣ、ＮＭＲ、ＬＣＭＳおよびＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳを含む、当業者に公知の幾つかの質量分析方法により決定することができる。さらに、当分野の既存の方法は、タンパク質のグリコフォームの分析的特徴付けを可能にし、抗体のオリゴ糖型構造を解析し、検証する。（例えば、Ｂｅｃｋ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ９：４８２−５０１を参照されたい。）。これらの方法は、液体クロマトグラフィー、電気泳動および質量分析ならびにペプチド、糖ペプチドおよびグリカンのフィンガープリント法および構造解析を含む。
【０２１０】
本明細書に記載の本発明の方法の他の適切な変形および適合は明白であり、本発明の範囲または本明細書に開示の実施形態から逸脱することなく適切な等価物を使用して実施できることは、当業者には容易に明らかであると思われる。すでに本発明を詳細に説明してきたが、本発明は、以下の実施例を参照することによりより明確に理解されると思われ、以下の実施例は、例示の目的で含まれるものであり、本発明を限定する意図のものではない。本出願を通して引用したすべての図面およびすべての参考文献、特許および公開特許出願の内容ならびに図面は、これらの全体が参照により本明細書に明確に組み込まれる。
【実施例】
【０２１１】
［実施例１］
健常対象におけるＡＢＴ−８７４のグリコフォームの母集団薬物動態解析
ＡＢＴ−８７４の薬物動態を、４種の第１相試験において、健常ボランティアにおけるＩＶ、ＳＣおよびＩＭ注射後検査した。健常ボランティアにおいて、単回投与のＡＢＴ−８７４の薬物動態を、０．１ｍｇ／ｋｇから約１０ｍｇ／ｋｇ（約７００ｍｇ）の投与量範囲にわたるＩＶ投与、および０．１ｍｇ／ｋｇから５．０ｍｇ／ｋｇの投与量範囲にわたるＳＣ投与後に評価した。ＩＶ投与後、薬物動態は、２コンパートメントモデル（ｔｗｏ  ｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔ  ｍｏｄｅｌ）により最もよく説明される。平均消失相半減期は、１．０から５．０ｍｇ／ｋｇの単回ＩＶ投与後およそ８から９日であり、７００ｍｇ単回注入後およそ１３日であった。１００ｍｇのＡＢＴ−８７４単回投与のＳＣ投与後、ピーク濃度の時間の中央値は６０時間に達し、３６から１４４時間に及び、平均絶対バイオアベイラビリティーはおよそ４７．０％，であり、平均終末消失相半減期はおよそ８日であった。０．１ｍｇ／ｋｇから５．０ｍｇ／ｋｇに及ぶ投与量のＳＣ投与後、ＡＵＣおよびＣｍａｘは投与量線形であった。ＩＭ投与後、ＡＢＴ−８７４の絶対バイオアベイラビリティーはおよそ６３％であった。
【０２１２】
ＡＢＴ−８７４は、臨床試験において、２種の製剤、凍結乾燥粉末および液体製剤として投与され、これらの製剤は、３種の異なる生産規模、１０００Ｌ、３０００Ｌおよび６０００Ｌで製造された。生産ロットにおける差は、さまざまなレベルの電荷変異体、凝集体およびＮ結合型グリコシル化（グリコフォーム）を含む。
【０２１３】
組み換えモノクローナル抗体に特有であるように、ＡＢＴ−８７４は、翻訳後修飾に供される。ＡＢＴ−８７４に観察される翻訳後修飾は、重鎖のＦｃ領域の単一部位（Ａｓｎ２９７）におけるＮ結合型グリコシル化を含む。Ｏ結合型グリコシル化は観察されていない。ＡＢＴ−８７４中に観察される優勢な炭水化物種は、０および１の末端ガラクトース残基を含有するＮ結合型フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖（ＦＢＯ）構造（それぞれＮＧＡ２ＦおよびＮＡ１Ｆ）であり、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞において産生されたＩｇＧ抗体に固有である。オリゴ糖に関する略称を表１に要約する。
【０２１４】
【表１】
2014505075.tif 000018
【０２１５】
ＡＢＴ−８７４に関してここで観察される最も高頻度で見られるグリコフォームは、ＮＧＡ２ＦおよびＮＡ１Ｆであった。臨床試験用のバッチ内に観察されるグリコフォームは、オリゴマンノースが４から１０％に及んだ。
【０２１６】
材料および方法
データソース
グリコフォーム分析を、３０００Ｌプロセスを使用して製造されたＡＢＴ−８７４の凍結乾燥粉末製剤の７００ｍｇＩＶ注入後回収された、個別のＡＢＴ−８７４血清濃度−時間データを使用して実施した。これは、試験Ｍ１０−２２０の投与計画Ｅであった。
【０２１７】
試験Ｍ１０−２２０は、逐次設計に従って実施された単回投与の非盲検試験であった。一般的に健康状態良好な成人の男性および女性のボランティア（Ｎ＝７５）を、選択基準に従って試験の参加に選択した。７５人の対象のうちの十五（１５）人が、試験Ｍ１０−２２０に登録し、投与計画Ｅを受け、投与計画Ｅは、試験１日目に３０分間かけて投与される７００ｍｇ単回ＩＶ注入からなった。投与計画Ｅに使用されたＡＢＴ−８７４製剤は、再構成された、３０００Ｌプロセスを使用して製造された凍結乾燥粉末であった。
【０２１８】
ＡＢＴ−８７４（投与計画Ｅ）の７００ｍｇのＩＶ注入後、血清ＡＢＴ−８７４濃度決定用血液試料を、投薬前（０時間）、３０分（３０分のＩＶ注入の終了時）および注入開始後、６、１２、２４、３６、４８、７２、１２０、１６８、２４０、３３６、５０４、６７２、１００８および１３４４時間に収集した。ヒト血清中のＡＢＴ−８７４グリコフォーム濃度決定用血液試料は、投薬前（０時間）、３０分（３０分のＩＶ注入の終了時）および投与後、６、１２、２４、３６、４８、７２、１２０、１６８、２４０、３３６、５０４および６７２時間に収集した。
【０２１９】
３０００Ｌプロセスにより製造された、再構成用凍結乾燥粉末を、７００ｍｇのＩＶ注入アームに使用した。ヒト血清中のＡＢＴ−８７４グリコフォームの分析に使用されたアッセイにより決定された、各８種のＡＢＴ−８７４グリコフォームのそれぞれの百分率および計算投与量を、表２に示す。
【０２２０】
【表２】
2014505075.tif 000019
【０２２１】
全ＡＢＴ−８７４の測定方法
血清中のＡＢＴ−８７４濃度試料の分析を、ＡＬＴＡ  Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡにおいて、有効なブリッジング電気化学発光（ＥＣＬ）アッセイ方法を使用して実施した。ＡＢＴ−８７４に関する定量下限（ＬＬＯＱ）を、１：５希釈液（７．５ｎｇ／ｍＬ無希釈血清）を使用して１．５ｎｇ／ｍＬに確定した。
【０２２２】
個別のＡＢＴ−８７４グリコフォーム分析
血清ＡＢＴ−８７４グリコフォーム分析を、Ａｂｂｏｔｔ  Ｂｉｏｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｅｎｔｅｒ，１００  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｄｒｉｖｅ，Ｗｏｒｃｅｓｔｅｒ，ＭＡ０１６０５において実施した。
【０２２３】
ＡＢＴ−８７４グリコフォームの測定方法
８種のグリコフォーム、Ｍ５、Ｍ６、Ｍ７、全ＮＡＦ１、ＮＡＦ１  ＧｌｃＮａｃ、ＮＡ２Ｆ、ＮＧＡ２Ｆ、ＮＧＡ２Ｆ  ＧｌｃＮａｃを同定し、分析を実施し、ヒト血清中の全ＡＢＴ−８７４のうちのこれらの百分率を評価した。
【０２２４】
各グリコフォームの百分率を、ＩＬ１２アフィニティークロマトグラフィーを使用したヒト血清由来のＡＢＴ−８７４の回収および２アミノベンズアミド（２ＡＢ）標識化を使用した、順相高速液体クロマトグラフィー（ＮＰＨＰＬＣ）を用いた、オリゴ糖（グリコフォーム）分析のための適格な方法を使用して決定した。アッセイの定量限界（ＬＯＱ）は、１５μｇ／ｍＬ  ＡＢＴ−８７４に設定した。
【０２２５】
母集団薬物動態、データセットおよび解析の慣例
最終薬剤物質のグリコフォームの仕様は、これらの構造組成に基づくオリゴ糖種のグループ分けを伴う。これらの仕様に関して、個別のグリコフォーム含有量は報告されていないが、各オリゴ糖種の結果は報告されている。ＡＢＴ−８７４に関して、仕様結果は、コアフコースの存在（ＦＢＯ）または不在（オリゴンマノース種）に基づいて報告される。さらに、予備薬物動態解析において、ＦＢＯグループ内に個別のＦＢＯ種すべてが、マンノース種が有するものと類似の薬物動態値を有すると思われた。従って、薬物動態解析の目的で、グリコフォーム濃度のデータは、２つのグループ、グループ１（グリコフォーム全ＮＡＦ１、ＮＡＦ１  ＧｌｃＮａｃ、ＮＡ２Ｆ、ＮＧＡ２Ｆ、ＮＧＡ２Ｆ  ＧｌｃＮａｃ）およびグループ２（グリコフォームＭ５、Ｍ６、Ｍ７）に要約された。
【０２２６】
母集団薬物動態解析の目的で、ＮＯＮＭＥＭのフォーマット済みデータファイルを、試験Ｍ１０−２２０の薬物動態データベースから作成した。グリコフォームの百分率に全ＡＢＴ−８７４血清濃度を掛け、個別のＡＢＴ−８７４グリコフォーム濃度を決定した。個別のグリコフォームの血清濃度を、前記のグループ分けに基づき各対象に加えた。
【０２２７】
投薬前に行った血清ＡＢＴ−８７４濃度測定は、母集団に基づく薬物動態解析に含まれた。利用可能な場合、実際の記録されたサンプリング時間および投薬量を、プロトコル時間の代わりに解析に使用した。
【０２２８】
薬物動態解析に含まれるデータ
７００ｍｇのＡＢＴ−８７４のＩＶ投薬後に観察された、定量の限界（１５μｇ／ｍＬ）を上回る、少なくとも１回の血清ＡＢＴ−８７４濃度測定を提供するすべての対象（Ｎ＝１５）を、解析に含めた。
【０２２９】
定量限界を下回るデータの補完
投薬前に定量下限を下回ることが報告された血清ＡＢＴ−８７４濃度値（ＢＬＱ）は排除した。しかし、投薬後に観察された、定量下限を下回る初回血清ＡＢＴ−８７４濃度は、定量下限の半分（ＬＬＯＱ／２）に設定し、その後のすべてのＢＬＱ値を排除した。
【０２３０】
測定範囲外の操作
臨床データベースからのすべての個別の血清ＡＢＴ−８７４濃度／時間データを列挙し、薬物動態評価から排除した場合、排除理由とともにデータセットに書き留めた。
【０２３１】
母集団薬物動態モデリング
ＩＬ−００１においてＡＢＴ−８７４の単回投与のＩＶ投与後、薬物動態は、双指数関数線形動態に従った。従って、当初の仮定は、試験Ｍ１０  ２２０において観察されたＡＢＴ−８７４の薬物動態プロファイルは、２コンパートメント線形動態に従うというものであった。別のモデルがより適切であるという強力な証拠が存在した場合、構造モデルに対する修正がなされた。
【０２３２】
母集団薬物動態モデルを、ＮＯＮＭＥＭソフトウェア（２倍精度、バージョンＶＩ  レベル１．１）を用いた非線形混合効果モデリングを使用して作成した。相互作用を含む条件付き一次近似法（ｆｉｒｓｔ−ｏｒｄｅｒ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎａｌ  ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ  ｍｅｔｈｏｄ）（ＦＯＣＥＩ）を、ＮＯＮＭＥＭ内に用いた。モデルを、ステップワイズ様式において、複雑性を増加させて作成した。尤度比検定を、代替の階層モデルを識別するための仮設検定に使用した。指数関数および／または加法誤差のモデルの組み合わせを使用して、対象間および対象内の変動の分布を特徴付けた。さまざまな誤差構造（加法、比例および加法および比例の統合）の適切性を、モデルへの適合によって評価した。
【０２３３】
ＮＯＮＭＥＭソフトウェアにより計算された目的関数値（ＯＦＶ）は、ほぼカイ２乗（χ２）分布であり、目的関数の差を、モデルの作成を導くために使用した。階層モデルを比較する場合、薬物動態モデル中の加法モデルのパラメーター（１自由度［ｄｆ］）は、これがＯＦＶを６．６３（１％水準の有意性に達する。）を超え得て低下させる場合、有意であると考えた。２自由度（２つの追加モデルパラメーター）を用いると、臨界値は、それぞれ９．２１であった。実施したすべての統計的検定は両側であり、１％の有意水準において評価した。
【０２３４】
非階層モデル間の選択を、赤池情報量基準（Ａｋａｉｋｅ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  Ｃｒｉｔｅｒｉｏｎ）（ＡＩＣ）（目的関数およびモデル中のパラメーターの数に基づく、最も低いＡＩＣ値が好ましい。）、モデルの適合の視覚的チェック、モデルのパラメーターの標準誤差および対象間の変化ならびにランダムな残余誤差により決定した。
【０２３５】
薬物動態に関する共変量（年齢、性別、人種、実験室測定）の影響は、サンプルサイズが１５人の対象なので、調査しなかった。
【０２３６】
変数増加法（ｆｏｒｗａｒｄ  ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ  ｐｒｏｃｅｓｓ）の終了時のモデルは、飽和ＮＯＮＭＥＭモデルと称される。飽和モデルの定義後、各影響因子の統計的有意性−パラメーターの関係（即ち残余誤差モデル）を、ステップワイズ除去法において個別に検定した。飽和モデル中の特定の影響因子をこのヌル値に固定し、モデルを動かし、新たしい目的関数を得た。ステップワイズ除去相において、パラメーターの有意性を、ｐ＜０．００１水準（ＯＦＶで、１ｄｆに関して少なくとも１０．８３単位が増加する。）において評価した。この手順を、有意なパラメーターだけが残るまで影響因子に関して繰り返した。得られたモデルは、最終ＮＯＮＭＥＭモデルと称された。
【０２３７】
最終モデルは、構造モデルの定義、母集団平均および個別の固定効果パラメーターの推定値ならびに個体間および残差のランダム効果パラメーターの推定値から構成された。
【０２３８】
モデルの選択基準
薬物動態および臨床応答モデルの選択は、下記の基準に基づいた。
１．好ましいモデル由来の観察血清濃度および予測血清濃度が、別のモデルよりランダムに統一線（切片が０で勾配が１の直線）にわたって分布した。
２．好ましいモデルの重み付き残差が、別のモデルより系統的バイアスが少ないことを示した。
３．好ましいモデルが、適度な適合度プロットならびに平均パラメーターおよびこれらの標準誤差の、生理学的に妥当な、および／または統計的に有意な、推定値（９５％信頼区間はゼロを含まなかった。）を示した。
【０２３９】
単純モデルから出発して、モデルの複雑性を、上記の基準に一致するまで拡大した。
【０２４０】
モデルの評価
開発されたモデルを、その場の開発中およびモデルの開発が完了した後の両方において評価した。モデルの評価に使用した方法は、適合度プロット、視覚的および数値的予測チェック（ｖｉｓｕａｌ  ａｎｄ  ｎｕｍｅｒｉｃ  ｐｒｅｄｉｃｔｉｖｅ  ｃｈｅｃｋｓ）ならびにブートストラップ評価を含んだ。
【０２４１】
モデル評価は、開発されたモデルの予測性能を決定し、観察を説明するためのモデルの有用性を試験した。
【０２４２】
適合度プロット
適合度プロットを、モデル評価のためにその場で作成した：
・観察データプロット対予測データプロットを、線形尺度および対数尺度において提示した。母集団および個別の予測を、それぞれが統一線および線形または平坦な傾向線を含む別のプロットにおいて、観察と比較した。
・重み付き残差または条件付き重み付き残差を、母集団予測値および時間に対してプロットした。
・観察、個別予測および母集団予測対時間を示す個別のプロットを提示する。臨床応答の変数を、対応する薬物動態プロファイルに重ね合わせた。
・個体間ランダム効果（ＥＴＡ）および条件付き重み付き残差（ＣＷＲＥＳ）のヒストグラムおよびＱＱプロットを提示する。
・関連パラメーターおよび／またはランダム効果の経験的ベイズ推定値（ＥＢＥ）に対してプロットした共変量を示す、可能性のある影響因子−パラメーターの関係を可視化した。
・ランダム効果の相関行列の散布図を作成した。
【０２４３】
基本モデルおよび最終モデルに関する選択された適合度プロットを、並行して提示し、共変量を含むことにより達成されたモデル適合の改良を実証した。
【０２４４】
視覚的予測チェック（Ｖｉｓｕａｌ  Ｐｒｅｄｉｃｔｉｖｅ  Ｃｈｅｃｋｓ）
視覚的予測チェックのために、データセットの１０００のシミュレーション複製を、ＮＯＮＭＥＭを使用して作成した。その後、シミュレーション予測を、観察データを、シミュレーションデータの選択されたパーセンタイル間隔に重ね合わせることによって、観察されたデータと比較した。関連のある視覚的予測チェックは、観察および予測された、濃度および臨床応答対時間を含んだ。観察は、プロトコルによりスケジュールされた時間を使用して時間幅（ｔｉｍｅ  ｂｉｎｓ）に分類した。観察データを、１０００のシミュレーションデータセット由来の対応する９５％予測区間に対してプロットした。
【０２４５】
ブートストラップ評価
モデルパラメーターの信頼区間を推定するために、１０００のブートストラップ複製を、元のデータセットからＮの対象をランダムに（復元）サンプリングすることにより構築した。Ｎは、元のデータセット中の対象の数である。モデルパラメーターを、各ブートストラップ複製用に推定し、得られた値を使用して、中央値および信頼区間を推定した。
【０２４６】
ブートストラップ統計は、収束に成功した複製だけに基づいた。ブートストラップのモデルパラメーターに関する中央値および９５％信頼区間を、個別の複製の結果の５０％パーセンタイルおよび２．５から９７．５パーセンタイルの範囲として導いた。元のデータセットに基づくモデルパラメーターを、ブートストラップの結果と比較した。
【０２４７】
臨床試験シミュレーション
生物学的同等性試験の臨床試験シミュレーションを、Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ  Ｔｒｉａｌ  Ｓｉｍｕｌａｔｏｒ（登録商標）（Ｖｅｒｓｉｏｎ  ２．２．１）を使用して実施し、全ＡＢＴ−８７４の薬物動態を、グリコフォームグループ（グループ１／グループ２）の以下の組成：１００／０、９５／５、９０／１０、８０／２０、７０／３０および６０／４０においてシミュレーションした。Ｍ１０  ２２０試験に使用したＡＢＴ−８７４薬物製品ロットは、およそ９０％のグループ１および１０％のグループ２からなり、シミュレーションの参照製品として使用した。他のグループ１／グループ２組成の製品を、シミュレーションにおける試験製品として定義した。
【０２４８】
両方のグリコフォームグループに関するＮＯＮＭＥＭ解析により導かれた最終母集団薬物動態モデルを、点推定の共分散構造（ＴＨＥＴＡ）および個体間変動（ＥＴＡ）を使用するＰｈａｒｓｉｇｈｔ  Ｔｒｉａｌ  Ｓｉｍｕｌａｔｏｒ（登録商標）に移行した。
【０２４９】
各グリコフォーム組成に関して、全ＡＢＴ−８７４の血清濃度を、１０，０００の対象／治療アームに関してシミュレートした。各対象に関して、台形公式を使用して計算した最高血清濃度（Ｃｍａｘ）および曲線下面積（ＡＵＣ０−２８ｄ）を推定した。ｎ＝７５の対象／治療群を含む一千の複製を、試験グループおよび参照グループの両方のための関する１０，０００のシミュレーション対象からランダムに取り出した。１５０の対象（７５／アーム）のサンプルサイズは、ＣｍａｘおよびＡＵＣの中心値（試験／参照）の真変成比が１．００である場合、等価基準を満たす＞８０％の確率を提供すると思われる。計算は、１５の対象由来のデータを使用した、推定の誤差項の分散に基づいた。
【０２５０】
生物学的同等性解析に関する現在の推奨に基づいて、ＡＵＣ０−２８ｄおよびＣｍａｘを計算のために対数変換した。従って、試験対参照の組成の比の９０％信頼区間（ＣＩ）は：
【０２５１】
【数１】
2014505075.tif 000020
として計算した。
【０２５２】
μＴは、試験アーム中のｌｏｇ  ＡＵＣ０−２８ｄおよびＣｍａｘの値の平均であり、参照アームのμＲ、ｔ０．０５，ｖはα＝０．０５におけるｔの臨界値であり、ｖはＡＮＯＶＡから得られたＭＳＥの計算に使用した自由度であり、Ｎは各アーム中の対象の数である。
【０２５３】
９０％信頼区間（ＣＩ）が８０％から１２５％（生物学的同等性の基準）の範囲外であった場合の複製の百分率を計算し、グラフで提示した。
【０２５４】
対象の動態
成人の男性および女性の対象（Ｎ＝７５）を、試験Ｍ１０  ２２０に登録した。十五（１５）の対象に、ＡＢＴ−８７４の３０分の単回７００ｍｇ注入を与えた。
【０２５５】
人口統計
母集団薬物動態解析に含まれる対象の人口統計データの要約を、ＣＳＲ（Ｒ＆Ｄ／０９／０６５）．４に見出すことができる。
【０２５６】
解析されたデータセット
母集団薬物動態解析のために、ＡＢＴ−８７４の３０分の７００ｍｇ単回ＩＶ注入に曝露され（Ｎ＝１５）、少なくとも１回の測定可能な血清濃度を有したすべての対象を、解析に含めた。２人の対象は、スケジュールにない時点に取り出されたサンプルを有した（対象１１０および１１１）。これらの２つのサンプルに関してグリコフォーム濃度が決定できなかったので、これらのサンプルは、母集団薬物動態解析に含めなかった。
【０２５７】
結果
ＡＢＴ−８７４のグリコフォーム濃度
個別の、要約したグリコフォームパーセントの結果は、表３から１０に見出すことができる。
【０２５８】
【表３】
2014505075.tif 000021
【０２５９】
【表４】
2014505075.tif 000022
【０２６０】
【表５】
2014505075.tif 000023
【０２６１】
【表６】
2014505075.tif 000024
【０２６２】
【表７】
2014505075.tif 000025
【０２６３】
【表８】
2014505075.tif 000026
【０２６４】
【表９】
2014505075.tif 000027
【０２６５】
【表１０】
2014505075.tif 000028
【０２６６】
ＡＢＴ−８７４の７００ｍｇ単回ＩＶ注入後、経時的な個別のＡＢＴ−８７４のグリコフォームの血清濃度の平均±ＳＤを図１に提示する。すべてのＦＢＯ種の平均血清濃度は、投薬後１４日にわたって、類似の低下速度を有すると思われる。まとめると、マンノース種、および特にＭ５の平均濃度は、投与量投与後１４日にわたって、ＦＢＯ種より速い速度で減少すると思われる。ＦＢＯ種およびマンノース種の薬物動態における類似性は、５種のＦＢＯ種および３種のマンノース種を、さらなる解析のために２つの主要なグループにグループ分けする裏付けとなる。
【０２６７】
ＡＢＴ−８７４の７００ｍｇ単回ＩＶ注入後、グリコフォームグループ１（ＦＢＯ）およびグループ２（オリゴマンノース）に関する血清濃度の平均±ＳＤ−時間のプロファイルを、線形尺度および対数線形尺度で、図２に提示する。
【０２６８】
全ＡＢＴ−８７４（すべてのグリコフォーム）およびグループ１に関する中央ＣＬ値は類似しており（＜１０％の差）、一方、グループ２に関する中央ＣＬ値は、全ＡＢＴ−８７４およびグループ１両方の中央ＣＬ値より約４０％大きかった。中央Ｖ１値は、グループ１および２ならびに全ＡＢＴ−８７４の間で類似していた。これは、グループ２のグリコフォームに関する消失が、グループ１のグリコフォームより速く、全ＡＢＴ−８７４のＣＬがグループ１により主に駆動されることを示している。
【０２６９】
母集団薬物動態モデリング
ＡＢＴ−８７４の早期母集団薬物動態モデリングに基づき、モデル作成過程は、中心コンパートメントおよびクリアランス（ＣＬ）に関する１つのＥＴＡを含む末梢コンパートメントからの線形消失を有する２コンパートメントモデルならびに両方のグリコフォームグループに関する比例残余誤差モデルから出発した。元々のモデルに関するＯＦＶは、グループ１（モデルラン１００）に関して１２６５．４９７およびグループ２（ラン１０１）に関して５２５．３７４であった。評価すべきさらなる薬物動態パラメーターは、中心コンパートメントの分布容積（Ｖ１）、コンパートメント間のクリアランス（Ｑ）および末梢コンパートメントの分布容量（Ｖ２）であった。Ｖ１についてのさらなる指数関数的な個体間項の包含は、それぞれ、グループ１に関して８５．４８２（モデルラン１０２）およびグループ２に関して３１．５２３（モデルラン１０３）のＯＦＶの低下につながった。ＣＬおよびＶの間の相関のため、「ＢＬＯＣＫ」文を、モデルの＄ＯＭＥＧＡブロックに使用し、これにより、それぞれ、グループ１およびグループ２に関して、１０．８５８（モデルラン１０４）および１１．６３６（モデルラン１０５）のＯＦＶのさらなる低下につながった。統合誤差モデルに対する残余誤差（比例＋加法）の拡張は、１２．２４８ポイント（グループ１）および３６．５８４ポイント（グループ２）のさらなるＯＦＶの改良につながった。これらのモデルのさらなる改良は達成できなかったので、従って、モデルラン１０６およびラン１０７を、それぞれグリコフォームのグループ１およびグループ２に関する最終モデルとして選択した。
【０２７０】
結果
母集団薬物動態モデル
母集団薬物動態モデルにおいて、ＡＢＴ−８７４血清濃度は、中心コンパートメントおよび末梢コンパートメントからの線形消失除去を有する２コンパートメントモデルにより最もよく説明された。
【０２７１】
両方のグリコフォームグループに関するＡＢＴ−８７４モデルからの推定薬物動態パラメーター値およびこれらの関連する変動を表１１に記載する。
【０２７２】
【表１１】
2014505075.tif 000029
【０２７３】
変動の量は、すべてのモデルパラメーターに関して容認可能であり、相対標準誤差（％ＲＳＥ）は、最終モデルの任意のモデルパラメーターに関して１５％以下であった。
【０２７４】
概して、最終薬物動態モデルは、両方のＡＢＴ−８７４グリコフォームグループに関する健常対象中の観察血清濃度を適切に説明した。予測ＡＢＴ−８７４濃度対観察ＡＢＴ−８７４濃度は、統一線の周りに散乱した。条件付き重み付き残差は、予測濃度またはサンプリング時間に対してプロットした場合、任意の主要な傾向を示さず、このモデルが適切に不偏であり、両方のＡＢＴ−８７４グリコフォームグループのクリアランスが相対的に時間依存性であったことを示した。
【０２７５】
この薬物動態パラメーターモデルに関する要約統計量を、表１２に示す。
【０２７６】
【表１２】
2014505075.tif 000030
【０２７７】
全ＡＢＴ−８７４（すべてのグリコフォーム）およびグループ１の中央ＣＬ値は類似しており（＜１０％の差）、一方、グループ２に関する中央ＣＬ値は、全ＡＢＴ−８７４およびグループ１両方の中央ＣＬ値より約４０％大きかった。中央Ｖ１値は、グループ１および２ならびに全ＡＢＴ−８７４の間で類似していた。これは、グループ２のグリコフォームに関する消失が、グループ１のグリコフォームより速く、全ＡＢＴ−８７４のＣＬがグループ１により主に駆動されることを示唆している。
【０２７８】
モデル評価
ＡＢＴ−８７４薬物動態モデル
適合度プロット
ＡＢＴ−８７４のＣＬおよびＶ１に関する個体間変動は、それぞれ、グループ１に関して３６．２％および４１．８％であり、グループ２に関して４７．３％および５６．２％であった。最終モデルに関する適合度を、グラフで評価した。個別の予測ＡＢＴ−８７４濃度対観察濃度および重み付き残差対時間の適合度プロットを、図３に提示する。このプロットは、観察ＡＢＴ−８７４濃度および予測ＡＢＴ−８７４濃度が、ランダムに統一線（ゼロ切片および勾配１を有する直線）にわたって分布したので、モデルが、全ＡＢＴ−８７４の血清濃度範囲にわたった観察を適切に説明したことを示し、重み付き残差のプロットは、母集団予測濃度または経時的な全身傾向がなかったことを明らかにした。
【０２７９】
視覚的予測チェック
グリコフォームグループにより階層化された１０００のシミュレーションの視覚的予測チェックの結果を、図４に示す。全体として、観察データ中の変動は、両方のグループに関して優れた精密度で説明された。
【０２８０】
ブートストラップ評価
１０００のブートストラップ複製のうちの合計９８７が、ＡＢＴ−８７４グループ１およびグループ２の最終モデルに関してランに成功した。
【０２８１】
元のデータセットに基づく推定薬物動態パラメーター値は、グリコフォームの両方のグループに関するブートストラップ複製から推定されたパラメーターの中央値と十分一致していた（表１３）。この一致により、両方のグリコフォームグループに関するＡＢＴ−８７４薬物動態モデルによるパラメーター値の推定が強固であり、尤度プロファイルの大域的最小点に基づくことが実証された。
【０２８２】
ＡＢＴ−８７４薬物動態モデル中の薬物動態パラメーターに関する推定値の推定標準誤差（ＳＥ）により、４つの薬物動態パラメーターに関するブートストラップ検証による９５％信頼区間は一つもゼロを含まなかった。
【０２８３】
【表１３】
2014505075.tif 000031
【０２８４】
ＡＢＴ−８７４グリコフォーム薬物動態のシミュレーション：生物学的同等性解析
全ＡＢＴ−８７４の薬物動態に対する、さまざまな百分率のグリコフォームグループの影響を理解するために、生物学的同等性試験のシミュレーションを、参照として９０／１０組成を含む異なるグリコフォーム組成の試験製品を使用して実施した。例示目的で、純粋な１００％ＦＢＯおよび１００％オリゴマンノースのＡＢＴ−８７４の薬物動態プロファイルをシミュレートし、図５にプロットした。７０／３０のＦＢＯ／オリゴマンノースおよび６０／４０を含む試験製品対９０／１０組成を含む参照製品の薬物動態プロファイルを、図６に示す。
【０２８５】
異なる組成対参照の効果の推定のために、８０％から１２５％の範囲外の９０％信頼区間を有する複製の百分率を計算し、グラフで提示した（ＡＵＣ０−２８ｄ：図７、Ｃｍａｘ：図７）。生物学的同等性基準を満たさなかった試験の百分率対グリコフォーム比を図９に示す。
【０２８６】
シミュレーション結果は、ＡＵＣ０−２８ｄおよびＣｍａｘ比に関する９０％信頼区間が、１５０人の対象のサンプルサイズ（ｎ＝７５／アーム）を有する試験の９０％以上の生物学的同等性範囲内に適合するので、全オリゴマンノース百分率が５％から３０％まで変動することが、全ＡＢＴ−８７４の薬物動態に対する影響が少ないことを示している。７５人の対象／アームにおいて、オリゴマンノースの百分率が４０％以上に増加すると、生物学的同等性基準を満たさない尤度が２０％を超える。生物学的同等性基準を満たす可能性は、サンプルサイズの増加に伴い上昇すると思われる。
【０２８７】
ＡＢＴ−８７４のグリコフォームの薬物動態の本解析において、２つの母集団ＰＫモデルを構築し、フコシル化バイアンテナリーオリゴ糖（ＦＢＯ）グリコフォームおよびオリゴマンノースグリコフォームの薬物動態を説明した。両方の生化学的特性（フコースの有無）の類似性および個別のグリコフォームの予備薬物動態解析が、８種のグリコフォームを２つの主要な種にグループ分けする裏付けとなる。２つの母集団ＰＫモデルはこれら２つのグリコフォームグループの薬物動態を適切に説明し、ＡＢＴ−８７４のオリゴマンノースグリコフォーム（グループ２）が、ＦＢＯグリコフォーム（グループ１）よりおよそ４０％早いクリアランスを有することを実証した。
【０２８８】
今日までヒトの試験に使用されたＡＢＴ−８７４の臨床ロットにおいて、オリゴマンノース種の百分率はおよそ１０％以下であった。現在の試験において、ＡＢＴ−８７４の組成は、およそ９０％のＦＢＯおよび１０％のオリゴマンノースであった。この組成において、ＦＢＯグループ（グループ１）、オリゴマンノースグループ（グループ２）および全ＡＢＴ−８７４（すべて）のクリアランス推定値により、ＦＢＯグループが、全ＡＢＴ−８７４推定値（２７．６ｍＬ／ｈｒ）と類似のクリアランス（２６．９ｍＬ／ｈｒ）を有し、一方オリゴマンノースグループの推定値はおよそ４０％高かった（４２．８ｍＬ／ｈｒ）ことが実証された。このことは、たとえオリゴマンノースグループのクリアランスが増加しても、全ＡＢＴ−８７４のクリアランスは、ＦＢＯグループにより主に調節されることを実証している。従って、オリゴマンノース種のクリアランスがＦＢＯグリコフォームより高くても、ＡＢＴ−８７４のグリコフォームのうちの百分率が少ないので、全ＡＢＴ−８７４の全体の薬物動態に対する影響は最小である。
【０２８９】
生物学的同等性試験のシミュレーションを実施し、全ＡＢＴ−８７４の薬物動態に影響を与えるために必要と思われる変化の大きさを調査した。結果は、ＡＵＣ０−２８ｄおよびＣｍａｘの比に関する９０％信頼区間が８０％から１２５％の範囲外に収まる試験の百分率が、１０％のオリゴマンノース種を含むＡＢＴ−８７４製品の百分率と類似しているので、オリゴマンノース種の増加がおよそ３０％までなら、生物学的同等性試験の失敗の危険性の増加が最小であることを示している。オリゴマンノース種の百分率が３０％を超えて増加した場合、生物学的同等性に欠ける危険性は増加するであろう。従って、臨床的に使用されたものより２倍（約２０％）のオリゴマンノース種の増加は、本試験に使用した臨床供給品（オリゴマンノース約１０％）と類似の曝露を提供する。これらのシミュレーションは、最大およそ３０％のオリゴマンノースのＡＢＴ−８７４のグリコフォーム組成の変化が、全ＡＢＴ−８７４の薬物動態への影響を最小にするものであることを裏付ける。
【０２９０】
要約
ＡＢＴ−８７４のグリコフォームに関する母集団薬物動態解析を、７００ｍｇのＡＢＴ−８７４単回ＩＶ注入を受けた１５人の対象由来の血清濃度データを使用して実施した。ＡＢＴ−８７４の８種の異なるグリコフォームを、これらの類似の薬物動態および生化学的特性に基づき、ＦＢＯオリゴ糖またはオリゴマンノースのいずれかにグループ分けし、解析した。両方のグリコフォームグループに関する最終母集団薬物動態モデルは、中心コンパートメントおよび末梢コンパートメントからの線形消失、ならびにコンパートメント間のクリアランス有し、中心コンパートメントのＣＬおよびＶ１に関する２つの指数関数的個体間変動である、（比例項および加法項を有する。）統合残余誤差モデルを含む２コンパートメントモデルである。最終モデルの信頼度および薬物動態パラメーターのばらつきを、適合度プロット、個別のデータプロットの検査、ブートストラップ評価および視覚的予測チェックにより確認した。
【０２９１】
最終母集団薬物動態モデルを使用して、本試験において投与した製剤（９０％のフコシル化バイアンテナリー、１０％のオリゴマンノース）と類似の組成の製剤およびオリゴマンノースの百分率が０％から４０％に及ぶ変動組成のグリコフォームからなる仮説的試験製剤の投与後のＡＢＴ−８７４の血清濃度をシミュレーションした。シミュレーション対象を使用して、並行グループの生物学的試験の複製をシミュレーションした。各対象に関して、ＡＵＣ０−２８ｄおよびＣｍａｘを計算した。各組成に関して、参照組成（９０／１０）に対する比およびこの９０％信頼区間を、各反復試験において計算した。８０％から１２５％の範囲外の試験組成および参照組成の間のＡＵＣ０−２８ｄおよびＣｍａｘの比の９０％信頼区間を有する複製の百分率を計算した。シミュレーション結果は、全オリゴマンノース百分率の変動が０％から３０％までなら、全ＡＢＴ−８７４の薬物動態に対する影響が少ないことを実証している。
【０２９２】
等価物
当業者は、本明細書に記載の本発明の特定の実施形態に対する多数の等価物を認識、またはこれ以上の日常的な実験を使用しなくても解明できると思われる。このような等価物は、以下の特許請求の範囲により包含されることが意図される。
【図１Ａ】
2014505075.tif 000032
【図１Ｂ】
2014505075.tif 000033
【図２Ａ】
2014505075.tif 000034
【図２Ｂ】
2014505075.tif 000035
【図３−１】
2014505075.tif 000036
【図３−２】
2014505075.tif 000037
【図４】
2014505075.tif 000038
【図５】
2014505075.tif 000039
【図６】
2014505075.tif 000040
【図７】
2014505075.tif 000041
【図８】
2014505075.tif 000042
【図９】
2014505075.tif 000043
【配列表】
2014505075000001.app
【国際調査報告】
2014505075.tif 000044
2014505075.tif 000045
2014505075.tif 000046