(57)【要約】  本発明は，式（Ｉ）の化合物から選ばれるＣＤＫ阻害剤又は薬剤学的に許容し得るその塩とソラフェニブ，ラパチニブ，エルロチニブ，シスプラチン，５−フルオロウラシル，ドセタキセル又はセツキシマブ又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩を含む，扁平上皮癌の治療において用いる薬剤組合せに関する。当該薬物組合せは頭頸部扁平上皮癌（SCCHN）の治療に用いられたとき相乗作用を示す。本発明は，当該組合せを含む薬剤組成物に，また，当該組合せの治療上有効量を用いて頭頸部扁平上皮癌（SCCHN）を治療するための方法にも関する。
2014515394.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
頭頸部扁平上皮癌の治療における使用のための薬剤組合せであって，式Ｉ；
【化１】
2014515394.tif 000037
〔式中，Ａｒはフェニル基であり，無置換であるか又はハロゲン，ニトロ，シアノ，Ｃ１〜Ｃ４アルキル，トリフルオロメチル，ヒドロキシル又はＣ１〜Ｃ４アルコキシから選ばれる１，２又は３個の同一の又は異なった置換基で置換されている。〕の化合物から選ばれるＣＤＫ阻害剤又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物と；ソラフェニブ，ラパチニブ，エルロチニブ，シスプラチン，５−フルオロウラシル，ドセタキセル又はセツキシマブのから選ばれる抗腫瘍剤の１種又は２種以上とを含んでなるものである，薬剤組合せ。
【請求項２】
請求項１の使用のための薬剤組合せであって，式Ｉの化合物においてフェニル基が塩素，臭素，フッ素又はヨウ素，Ｃ１〜Ｃ４アルキル又はトリフルオロメチルから選ばれる１，２又は３個の同一の又は異なった置換基で置換されているものである；又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物である，薬剤組合せ。
【請求項３】
請求項２の使用のための薬剤組合せであって，式Ｉの化合物においてフェニル基が塩素で置換されているものである，薬剤組合せ。
【請求項４】
請求項３の使用のための薬剤組合せであって，式Ｉの化合物が（＋）−トランス−２−（２−クロロフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチルピロリジン−３−イル）クロメン−４−オン塩酸塩（化合物Ａ）である，薬剤組合せ。
【請求項５】
請求項２の使用のための薬剤組合せであって，式Ｉの化合物においてフェニル基が塩素及びトリフルオロメチルから選ばれる２種の異なった置換基で置換されているものである，薬剤組合せ。
【請求項６】
請求項５の使用のための薬剤組合せであって，式Ｉの化合物が（＋）−トランス−３−[２[（２−クロロ−４−トリフルオロメチルフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチルピロリジン−３−イル）クロメン−４−オン塩酸塩（化合物Ｂ）である，薬剤組合せ。
【請求項７】
請求項１〜６の何れかの使用のための薬剤組合せであって，該抗腫瘍剤がソラフェニブである，薬剤組合せ。
【請求項８】
請求項１〜６の何れかの使用のための薬剤組合せであって，該抗腫瘍剤がラパチニブである，薬剤組合せ。
【請求項９】
請求項１〜６の何れかの使用のための薬剤組合せであって，該抗腫瘍剤がエルロチニブである，薬剤組合せ。
【請求項１０】
請求項１〜６の何れかの使用のための薬剤組合せであって，該抗腫瘍剤がシスプラチン及び５−フルオロウラシルである，薬剤組合せ。
【請求項１１】
請求項１〜１０の何れかの使用のための薬剤組合せであって，放射線を更に含んでなるものである薬剤組合せ。
【請求項１２】
式Ｉの化合物から選ばれるＣＤＫ阻害剤又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物と，ソラフェニブ，ラパチニブ，エルロチニブ，シスプラチン，５−フルオロウラシル，ドセタキセル又はセツキシマブ又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩とを，薬剤学的に許容し得る担体と共に含んでなる，薬剤組成物。
【請求項１３】
患者における頭頸部扁平上皮癌の治療のための方法であって，該患者に式Ｉ；
【化２】
2014515394.tif 000038
〔式中，Ａｒはフェニル基であり，無置換であるか又はハロゲン，ニトロ，シアノ，Ｃ１〜Ｃ４アルキル，トリフルオロメチル，ヒドロキシル又はＣ１〜Ｃ４アルコキシから選ばれる１，２又は３個の同一又は異なった置換基で置換されている。〕の化合物又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物から選ばれるＣＤＫ阻害剤の治療上有効量を，ソラフェニブ，ラパチニブ，エルロチニブ，シスプラチン，５−フルオロウラシル，ドセタキセル又はセツキシマブから選ばれる１種又は２種以上の抗腫瘍剤と組み合わせて投与することを含んでなる方法。
【請求項１４】
請求項１３の方法であって，式Ｉの化合物が（＋）−トランス−２−（２−クロロフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチルピロリジン−３−イル）クロメン−４−オン塩酸塩（化合物Ａ）である，方法。
【請求項１５】
請求項１３の方法であって，式Ｉの化合物が（＋）−トランス−３−[２[（２−クロロ−４−トリフルオロメチルフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチルピロリジン−３−イル）クロメン−４−オン塩酸塩（化合物Ｂ）である，方法。
【請求項１６】
請求項１３〜１５の何れかの方法であって，該抗腫瘍剤がソラフェニブである，方法。
【請求項１７】
請求項１３〜１５の何れかの方法であって，該抗腫瘍剤がラパチニブである，方法。
【請求項１８】
請求項１３〜１５の何れかの方法であって，該抗腫瘍剤がエルロチニブである，方法。
【請求項１９】
請求項１３〜１５の何れかの方法であって，該抗腫瘍剤がシスプラチン及び５−フルオロウラシルである，方法。
【請求項２０】
請求項１３〜１５の何れかの方法であって，放射線を更に含んでなるものである，方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は，（本明細書に記載されている）式Ｉの化合物又はその薬剤学的に許容し得る塩から選択されるサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）阻害剤と，１種又は２種以上の抗腫瘍剤とを含んでなる，頭頸部扁平上皮癌（SCCHN）の治療に使用するための薬剤組合せに関する。本発明の薬剤組合せは，頭頸部扁平上皮癌（SCCNH）の治療に使用したとき相乗効果を示す。従って，本発明は，相乗的薬剤組合せに関する。本発明は更に，上記組合せを含んでなる薬剤組成物に，また上記薬剤組合せを患者に投与することにより看者の頭頸部扁平上皮癌（SCCHN）を治療する方法にも関する。
【背景技術】
【０００２】
癌は，細胞増殖の異常な制御によって特徴づけられる疾患群である。１００種を超える異なったタイプの癌が存在し，それらは，最初に罹患する細胞のタイプによって，例えば，膀胱癌，乳癌，結腸癌，直腸癌，子宮内膜癌，腎臓（腎細胞）癌，白血病，小細胞肺癌，非小細胞肺癌，膵臓癌，前立腺癌，甲状腺癌，皮膚癌，非ホジキンリンパ腫，及び黒色種及び頭頸部癌等に分類されている。扁平上皮癌は，全ての頭頸部癌のうちの９０％超を占めている。頭頸部扁平上皮癌は，頭頸部癌の大多数を構成しており，解剖学的領域の至る所の粘膜表面から発生する。それらは鼻腔，副鼻腔，口腔，鼻咽頭，中咽頭，下咽頭，及び喉頭の腫瘍を含む。
【０００３】
実際，頭頸部癌（HNC）は，世界中で６番目によくみられる癌であり，年間症例は世界中で640,000例を超える。頭頸部癌の90％より多くは扁平上皮の組織学のもの（HNSCC）である。頭頸部癌患者の35％〜45％は，最終的には当該疾患により死亡する。米国だけをみると，頭頸部の扁平上皮癌は，全ての悪性腫瘍のうちの約４％を構成している。これは，１年あたりに新規に診断される頭頸部の扁平上皮癌を有する100,000人中，推定17人に相当する（Jemal A, Siegel R, Ward E, et al. Cancer statistics, 2008, CA Cancer
J. Clin. 2008 Mar-Apr; 58(2):71-96）。頭頸部扁平上皮癌（SCCHN）は，局所再発及び遠隔再発が依然として高率のままであるために，並びに２番目の原発腫瘍の発生のため，手強い臨床課題である。頭頸部扁平上皮癌において使用されている，幾つかの分子標的治療剤として，セツキシマブ，ベバシズマブ，エルロチニブ，及びレオウイルスが挙げられる。最も質の高いデータが，セツキシマブ（組換えモノクローナル抗体）について，放射線治療単独に対し放射線治療＋セツキシマブを比較した無作為臨床試験の2006年の出版以降，入手できる（"Radiotherapy plus
cetuximab for squamous-cell carcinoma of the head and neck". N Engl J Med
2006; 354 (6): 567&#8211;78）。別の研究が，シスプラチン単独に対し，セツキシマブをシスプラチンの使用を伴う慣用の化学療法剤に追加することの効果を評価している。この研究では，慣用の化学療法剤にセツキシマブを追加することによる生存率又は無疾患生存率の改善は認められなかった（J Clin Oncol. 2005; 23 (34): 8646&#8211;54）。しかしながら，2007年3月に完了した別の研究が，生存率の改善があることを見出した。この研究は，欧州でのマルチセンターによる第III相臨床試験であり，EXTREME（Erbitux
in First-Line Treatment of Recurrent or Metastatic Head and Neck Cancer：再発性又は転移性頭頸部癌の第一選択治療おけるエルビタックス）研究と呼ばれている。
【０００４】
更に，ＣＤＫ（サイクリン依存性キナーゼ）阻害剤が，癌や，白血球の望ましくない増殖を伴う免疫学的疾患等，過剰な細胞増殖によって特徴づけられる疾患のための抗増殖治療において使用するのに有用であることが，十分に確立されている。ＣＤＫ阻害剤として有用なフラボン誘導体が，公開されたPCT特許公報No. WO 2004-004632（米国特許第7,271,193号）に記載されており，当該特許出願は，特にサイクリン依存性キナーゼの阻害のための化合物，それらの製造方法，サイクリン依存性キナーゼの阻害及び細胞増殖の阻害の方法，癌を含む増殖性疾患の治療におけるそのような化合物の使用に関するものである。公開されたPCT公開出願No. WO 2005-053699（米国特許第7,772,207号）は，同時の，逐次的な，又は別々の投与のための組み合わせ製剤としての，ＣＤＫ阻害剤と１−（２−Ｃ−シアノ−２−ジオキシ−ｐ−Ｄ−アラビノペントフラノシル）−Ｎ４−パルミトイルシトシン又はその代謝産物を含んでなる薬剤に関するものである。PCT公開出願No. WO 2008-122779（米国特許出願公開第2010-0143350号）は，チロシンキナーゼ阻害剤とのＣＤＫ阻害剤の組合せ及び増殖性疾患の治療におけるその使用を記述している。PCT公開出願No. WO 2008-139271（米国特許出願公開第2010-0305057号）は，癌の治療において使用するための，パクリタキセル，ドセタキセル，トキソルビシン又はゲムシタビンと，少なくとも１種のサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）阻害剤とを含んでなる薬剤組合せに関するものである。PCT公開出願No. WO 2010-128443は，放射線照射と少なくとも１種のサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）阻害剤又は薬剤学的に許容し得るその塩若しくは溶媒和物とを含んでなるものである，癌の治療のための組合せを記述している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
種々の抗癌剤の種々の組合せが，頭頸部扁平上皮癌（SCCHN）を含む種々の癌治療のプロトコールにおいて重要な前進であることが証明されてはいるが，SCCHN（それらは治療が困難であり，またそれらは慣用の抗腫瘍剤による治療に耐性を示してきた）の治療のための薬剤には，依然として幾つかの満たされていない必要事項及び改善の余地がある。より具体的には，異なった作用機序を有する既知の抗癌剤を投与するための新たな組合せアプローチの開発が，この分野における重要な前進を示すものとなろう。そのような異なった作用機序を有する抗癌剤の組合せを伴うプロトコールは，ある組合せの場合には機能するかも知れないが，別の抗癌剤の組合せの場合には同様には機能しないかも知れず，そのような組合せは必ずしも有利な治療効果を有する組合せとはならないであろう。しかしながら，本発明者らは，サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）阻害剤と１種又は２種以上の抗腫瘍剤とを含んでなる抗癌剤の薬剤組合せが，頭頸部扁平上皮癌（SCCHN）の治療のためにＣＤＫ阻害剤又は抗腫瘍剤が単独で使用される場合よりも，大きな有効性を与えることを見出した。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明の一面によれば，頭頸部扁平上皮癌（SCCHN）の治療に使用するための，式（Ｉ）の化合物又はその薬剤学的に許容し得る塩より選ばれるサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）阻害剤と，１種又は２種以上の抗腫瘍剤とを含んでなる，薬剤組合せが提供される。
【０００７】
別の一面において，本発明は，頭頸部扁平上皮癌（SCCHN）の治療に使用するための，式（Ｉ）の化合物又は薬剤学的に許容し得る塩その若しくは溶媒和物より選ばれるサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）阻害剤と，１種又は２種以上の抗腫瘍剤，並びに少なくとも１種の薬剤学的に許容し得る担体とを含んでなる薬剤組成物を提供する。
【０００８】
別の一面において，本発明は，患者の頭頸部扁平上皮癌（SCCHN）の治療のための，該患者に，治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物又は薬剤学的に許容し得るその塩より選ばれるサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）阻害剤を，治療上有効な量の１種又は２種以上の抗腫瘍剤と共に投与することを含んでなる方法に関する。
【０００９】
別の一面において，本発明は，頭頸部扁平上皮癌（SCCHN）の治療において使用するための，治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物又はその薬剤学的に許容し得る塩より選ばれるサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）阻害剤と，治療上有効な量の１種又は２種以上の抗腫瘍剤とを含んでなる薬剤組合せであって，相乗効果を示すものである組合せを提供する。
【００１０】
なおも別の一面において，本発明は，式（Ｉ）の化合物より選ばれるサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）阻害剤と，１種又は２種以上の抗腫瘍剤とを含んでなるキットに関し，ここに該キットは，頭頸部扁平上皮癌を治療するための方法としての組合せ治療の使用に向けた，印刷された指示を含む添付書類を更に含んでよいものである。
【００１１】
本発明の他の面及び応用範囲は，以下の詳細な記述から明らかとなるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１ａ】図１ａは，SCC25細胞におけるソラフェニブ及びラパチニブの投与での％阻害結果のグラフ表示である。
【図１ｂ】図１ｂは，SCC25細胞における化合物Ａ及び化合Ｂの投与での％阻害結果のグラフ表示である。
【図２ａ】図２ａは，Detroit-562細胞におけるソラフェニブ及びラパチニブの投与での％阻害結果のグラフ表示である。
【図２ｂ】図２ｂは，Detroit-562細胞における化合物Ａ及び化合物Ｂの投与での％阻害結果のグラフ表示である。
【図３ａ】図３ａは，FADU細胞におけるソラフェニブ及びラパチニブの投与での％阻害結果のグラフ表示である。
【図３ｂ】図３ｂは，FADU細胞における化合物Ａ及び化合物Ｂの投与での％阻害結果のグラフ表示である。
【図４ａ】図４ａは，Detroit-562細胞におけるエルロチニブの投与での％阻害結果のグラフ表示である。
【図４ｂ】図４ｂは，FADU細胞におけるエルロチニブの投与での％阻害結果のグラフ表示である。
【図５ａ】図５ａは，Detroit-562細胞におけるシスプラチン，５−フルオロウラシル及びドセタキセルの投与での％阻害結果のグラフ表示である。
【図５ｂ】図５ｂは，FADU細胞におけるシスプラチン，５−フルオロウラシル及びドセタキセルの投与での％阻害のグラフ表示である。
【図６ａ】図６ａは，SCC-25細胞における化合物Ａ及びソラフェニブの，単独及び組合せ投与での％細胞毒性結果のグラフ表示である。
【図６ｂ】図６ｂは，SCC-25細胞における化合物Ｂ及びソフェラニブの単独及び組合せ投与での％細胞毒性結果のグラフ表示である。
【図７ａ】図７ａは，Detroit-562細胞における化合物Ａ及びソフェラニブの単独及び組合せ投与での％細胞毒性結果のグラフ表示である。
【図７ｂ】図７ｂは，Detroit-562細胞における化合物Ｂ及びソフェラニブの単独及び組合せ投与での％細胞毒性結果のグラフ表示である。
【図８ａ】図８ａは，FADU細胞における化合物Ａ及びソフェラニブの単独及び組合せ投与での％細胞毒性結果のグラフ表示である。
【図８ｂ】図８ｂは，FADU細胞における化合物Ｂ及びソフェラニブの単独及び組合せ投与での％細胞毒性結果のグラフ表示である。
【図９ａ】図９ａは，SCC-25細胞における化合物Ａ及びラパチニブの単独及び組合せ投与での％細胞毒性結果のグラフ表示である。
【図９ｂ】図９ｂは，SCC-25細胞における化合物Ｂ及びラパチニブの単独及び組合せ投与での％細胞毒性結果のグラフ表示である。
【図１０ａ】図１０ａは，Detroit-562細胞における化合物Ａ及びラパチニブの単独及び組合せ投与での％細胞毒性結果のグラフ表示である。
【図１０ｂ】図１０ｂは，Detroit-562細胞における化合物Ｂ及びラパチニブの単独及び組合せ投与での％細胞毒性結果のグラフ表示である。
【図１１ａ】図１１ａは，FADU細胞における化合物Ａ及びラパチニブの単独及び組合せ投与での％細胞毒性結果のグラフ表示である。
【図１１ｂ】図１１ｂは，FADU細胞における化合物Ｂ及びラパチニブの単独及び組合せ投与での％細胞毒性結果のグラフ表示である。
【図１２ａ】図１２ａは，Detroit-562細胞における化合物Ａ及びエルロチニブの単独及び組合せ投与での％細胞毒性結果のグラフ表示である。
【図１２ｂ】図１２ｂは，FADU細胞における化合物Ａ及びエルロチニブの単独及び組合せ投与での％細胞毒性結果のグラフ表示である。
【図１３ａ】図１３ａは，Detroit-562細胞における化合物Ａ，シスプラチン及び５−ＦＵの単独及び組合せ投与での％細胞毒性結果のグラフ表示である。
【図１３ｂ】図１３ｂは，FADU細胞における化合物Ａ，シスプラチン及び５−フルオロウラシルの単独及び組合せ投与での細胞毒性結果のグラフ表示である。
【図１４ａ】図１４ａは，Detroit-562細胞における化合物Ａ，ドセタキセル，シスプラチン及び５−ＦＵの単独及び組合せ投与での％細胞毒性結果のグラフ表示である。
【図１４ｂ】図１４ｂは，FADU細胞における化合物Ａ，ドセタキセル，シスプラチン及び５−ＦＵの単独及び組合せ投与での％細胞毒性結果のグラフ表示である。
【図１５ａ】図１５ａは，ソラフェニブ及び化合物Ａの単独及び組合せ投与によるSCC-25細胞内のカスパーゼ３の活性化のグラフ表示である。
【図１５ｂ】図１５ｂは，ソラフェニブ及び化合物Ｂの単独及び組合せ投与によるSCC-25細胞内のカスパーゼ３の活性化のグラフ表示である。
【図１６ａ】図１６ａは，ラパチニブ及び化合物Ａの単独及び組合せ投与によるSCC-25細胞内のカスパーゼ３の活性化のグラフ表示である。
【図１６ｂ】図１６ｂは，ラパチニブ及び化合物Ｂの単独及び組合せ投与によるSCC-25細胞内のカスパーゼの活性化のグラフ表示である。
【図１７ａ】図１７ａは，化合物Ａ，シスプラチン及びセツキシマブの単独及び組合せで処理されたFaDu異種移植片における体重推移のグラフ表示である。
【図１７ｂ】図１７ｂは，化合物Ａ，シスプラチン及びセツキシマブの単独及び組合せで処理されたFaDu異種移植片の腫瘍増殖阻害のグラフ表示である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明は，頭頸部扁平上皮癌（SCCHN）の治療において用いるための薬剤組合せであって，（本明細書に記載の）式（Ｉ）の化合物又は薬剤学的に許容し得るその塩から選ばれるサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）阻害剤と，１種又は２種以上の抗腫瘍剤とを含んでなり，当該組合せが相乗効果を示すものを包含する。
【００１４】
本発明によれば，頭頸部扁平上皮癌（SCCHN）治療に用いるための薬剤組成物が提供され，当該薬剤組成物は，式（Ｉ）の化合物又は薬剤学的に許容し得るその塩から選ばれる治療上有効量のサイクリン依存性キナーゼ（CDK）阻害剤と，１種又は２種以上の抗腫瘍剤と，そして所望により薬剤学的に許容し得る担体と，を含んでなる。
【００１５】
本発明は更に，患者の頭頸部扁平上皮癌の治療方法を提供し，当該治療方法は，（本明細書に記載の）式（Ｉ）の化合物又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物から選ばれる治療上有効量のＣＤＫ阻害剤と，ソラフェニブ，ラパチニブ，エルロチニブ，シスプラチン，５−フルオロウラシル及びドセタキセル又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩よりなる群から選ばれる１種又は２種以上の抗腫瘍剤の治療上有効量とを患者に投与することを含み，当該組合せに含まれる当該ＣＤＫ阻害剤及び当該抗腫瘍剤は，同時に又は逐次的の何れでも投与される。
【００１６】
上記で又は以下において用いる一般的用語は，本開示の文脈において，別途特記しない限り，好ましくは以下の意味を有する。即ち，本発明の文脈において使用される一般的用語の定義は，以下に示すとおりである。
【００１７】
単数形「a」，「an」及び「the」は，文脈が明白に別のものを指示していない限り，複数についても含む。
【００１８】
本明細書において用いる「サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）阻害剤」又は「ＣＤＫ阻害剤」の語は，１種又は２種以上の既知のサイクリン依存性キナーゼに対抗する活性を示す化合物を意味する。本発明の文脈においてＣＤＫ阻害剤は，PCT公開出願であるNo. WO2004004632に開示されているピロリジン置換フラボン化合物であり，この出願は，その全体を参照することにより本明細書に組み込まれている。本発明のＣＤＫ阻害剤は，本明細書において以下に記載された式Ｉの化合物又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物から特に選択される。更に，本明細書において用いる「ＣＤＫ阻害剤」の語は，式Ｉの化合物についても及び／又は式Ｉの化合物の薬剤学的に許容し得る溶媒和物についてもいう。
【００１９】
「抗腫瘍剤」の語は「化学療法剤」又は「抗癌剤」と同義であり，新生物の増殖を阻害または防止することにより作用する治療剤をいう。「抗腫瘍剤」又は「抗癌剤」の語は，一般的に，癌細胞の増殖を阻害する化合物（即ち，抗増殖剤）をいう。一般的に，抗腫瘍剤は，抗増殖性細胞毒物及び抗増殖性細胞分裂阻害剤という２つのクラスに分かれている。細胞毒物は，癌細胞が増殖するのを，（１）DNAを複製する細胞の能力を妨害することにより及び（２）癌細胞に細胞死及び／又はアポトーシスを誘導することにより，防止する。細胞増殖阻害剤は，細胞増殖を制御する細胞シグナル伝達の過程を調節し，妨害し，又は阻害することを介して作用する。
【００２０】
「薬剤学的に許容し得る塩」の語は，（本明細書に記載の）式Ｉの化合物及び抗腫瘍剤の酸付加塩をいい，ここに酸は，塩酸，臭化水素酸，無機酸等のような無機酸；又はベンゼンスルホン酸，マレイン酸，シュウ酸，フマル酸，コハク酸，ｐ−トルエンスルホン酸及びマレイン酸等のような有機酸から選ばれる。
【００２１】
本明細書において用いる「組合せ」又は「薬剤組合せ」の語は，抗癌剤即ち式Ｉで示される化合物から選ばれるCDK阻害剤と新生物の増殖を阻害又は防止するように作用する１種又は２種以上の抗腫瘍剤との，即ち式Ｉで示される化合物から選ばれるCDK阻害剤と細胞分裂阻害剤又は細胞毒物から選ばれる抗腫瘍剤という，抗癌剤の組み合わせ投与を意味し，それらは，独立して，同時に，又はそれら組合せの相手方同士が相乗効果を示すことを許容する時間的間隔内で別々に，投与してよい。
【００２２】
本明細書において用いる「相乗的」又は「相乗」の語は，本発明に包含される抗癌剤の組合せによって達成できる効果が，抗癌剤即ち式ＩのCDK阻害剤又は薬剤学的に許容し得るその塩と抗腫瘍剤又はそれらの薬剤学的に許容し得る塩とを単独治療剤と用いて得られる結果の和より大きいことを意味する。有利なことに，そのような相乗作用は，同じ投与量でより大きな有効性を提供し，及び／又は多剤耐性の構築を防止し又は遅らせる。
【００２３】
本明細書において頭頸部扁平上皮癌の治療に関して用いる「治療上有効量」の語は，本発明の組合せで治療される患者において次の１つ又は２つ以上の効果を引き起こすことのできる量をいう。即ち：（ｉ）腫瘍の増殖のある程度の阻害，遅延，増殖の完全阻止；（ｉｉ）腫瘍細胞の数の減少；（ｉｉｉ）腫瘍サイズの縮小；（ｉｖ）周囲の器官への腫瘍細胞の浸潤の阻害（即ち，減少，遅延，又は完全阻止）；（ｖ）転移の阻害（即ち，減少，遅延，又は完全阻止）；（ｖｉ）抗腫瘍免疫応答の亢進；及び／又は（ｖｉｉ）頭頸部扁平上皮癌（SCCHN）に関連した１種又は２種以上の症状の，ある程度の緩解。
【００２４】
本明細書において用いる「被験者（subject）」の語は，治療，観察又は実験の対象とされている動物，好ましくは哺乳動物，最も好ましくはヒトをいう。被験者の語は，本発明の文脈において，「患者（patient）」の語と交換可能に用いることができる。
【００２５】
本明細書において用いる「同時に」の語は２種又は３種以上の治療剤（抗癌剤）が同時に投与されることを意味し，「逐次的に」は２種又は３種以上の治療剤が同一の時間枠内において治療上働かせることができることを意味し，「別々に」は，一方の薬剤と他方とを投与する間隔が大きい，即ち最初に投与された薬剤が，２番目の薬剤が投与されるときにはもはや治療上有効量としては血液中に存在しないであろうことを意味する。
【００２６】
本明細書において用いる「カスパーゼ３活性」の語は，癌細胞におけるアポトーシスの増加をいう。
【００２７】
「アポトーシス」の語は，細胞内における一連の分子的ステップがその死へと導くものであるタイプの細胞死をいう。これは，不必要な又は異常な細胞を除去する身体の正常な方法である。アポトーシスのプロセスは，癌細胞においては阻止されている可能性がある。プログラムされた細胞死とも呼ばれる（Dictionary of cancer terms, National Cancer Institute）。「アポトーシスを増加」の語は，プログラムされた細胞死の速度の増加，即ち，抗腫瘍剤単独又はCDK阻害剤単独に曝露（接触）したのと比べてより多くの細胞が死のプロセスへと誘導されること，と定義される。
【００２８】
「薬剤学的に許容し得る担体」の語は，当業者に周知の崩壊剤，結合剤，賦形剤，滑沢剤その他の１種又は２種以上をいう。
【００２９】
本発明においては，頭頸部扁平上皮癌（SCCNH）の治療に用いる抗癌剤の薬剤組合せが提供される。本発明者は，抗癌剤の薬剤組合せの開発のために広範な研究を行い，本件の相乗的薬剤組合せに到達した。式Ｉの化合物又はその薬剤学的に許容し得る塩から選ばれるサイクリン依存性キナーゼ（CDK）阻害剤と１種又は２種以上の抗腫瘍剤との組合せを含んでなる薬剤組合せが，頭頸部扁平上皮癌（SCCHN）の治療に用いたとき相乗的効果を示すことが見出された。
【００３０】
上記CDK阻害剤は，サイクリン依存性キナーゼを阻害するピロリジン置換フラボン化合物である。本発明の薬剤組合せにおいて用いられるCDK阻害剤は，以下に記載される式Ｉの化合物又は薬剤学的に許容し得るその塩又はその溶媒和物である。式Ｉの化合物は，有望なCDK阻害剤であり，それらは多くの癌細胞の増殖を阻害することができる。上に示したように式（Ｉ）のCDK阻害剤は，それらの薬剤学的に許容し得る塩の形で使用してもよい。「薬剤学的に許容し得る塩」の語に包含される塩は，当該化合物の無毒な塩をいう。代表的塩としては酢酸塩，安息香酸塩，ベンゼンスルホン酸塩，重炭酸塩，塩化物，クエン酸塩，塩酸塩，メシル酸塩，メチルスルホン酸塩，酒石酸塩，トシル酸塩及びトリフルオロ酢酸塩が挙げられるが，これらに限定されない。式（Ｉ）の化合物の好ましい塩としては塩酸塩，メタンスルホン酸塩，トリフルオロ酢酸塩が挙げられる。
【００３１】
一具体例として，本発明の薬剤組合せに用いられるCDK阻害剤は，下記の式Ｉで示される化合物，+
【００３２】
【化１】
2014515394.tif 000003
【００３３】
〔式中，Ａｒはフェニル基であり，無置換であるか又はハロゲン，ニトロ，シアノ，Ｃ１〜Ｃ４アルキル，トリフルオロメチル，ヒドロキシル又はＣ１〜Ｃ４アルコキシから選ばれる１，２又は３個の同一又は異なった置換基で置換されている。〕又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物から選ばれる。
【００３４】
本明細書において上に示されたように，CDK阻害剤の塩は，本発明の式（Ｉ）の化合物の無毒な塩をいう。代表的な塩としては，酢酸塩，安息香酸塩，ベンゼンスルホン酸塩，重炭酸塩，塩化物，クエン酸塩，塩酸塩，メシル酸塩，メチルスルホン酸塩，酒石酸塩，トシル酸塩及びトリフルオロ酢酸塩が挙げられるが，それらに限られない。式（Ｉ）の化合物の好ましい塩としては，塩酸塩，メタンスルホン酸塩及びトリフルオロ酢酸塩等が挙げられる。
【００３５】
本発明の一具体例においては，CDK阻害剤は，下に式ＩＡで示すように，式Ｉの化合物の（＋）−トランス異性体， 
【００３６】
【化２】
2014515394.tif 000004
【００３７】
〔式中，Ａｒはフェニル基であり，無置換であるか又はハロゲン，ニトロ，シアノ，Ｃ１〜Ｃ４アルキル，トリフルオロメチル，ヒドロキシル又はＣ１〜Ｃ４アルコキシから選ばれる１，２又は３個の同一又は異なった置換基で置換されている。〕又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物である。
【００３８】
本発明の別の一具体例によれば，本発明の薬剤組合せで用いられるCDK阻害剤は，式Ｉ〔式中，フェニル基は塩素，臭素，フッ素又はヨウ素，Ｃ１〜Ｃ４アルキル又はトリフルオロメチルから選ばれる１，２又は３個の同一又は異なった置換基で置換されている。〕の化合物又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物である。
【００３９】
本発明の別の一具体例においては，本発明の薬剤組合せで用いられるCDK阻害剤は，式Ｉ〔式中，フェニル基は塩素で置換されている。〕の化合物又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物である。
【００４０】
本発明の別の一具体例においては，本発明の薬剤組合せで用いられるCDK阻害剤は，式Ｉ〔式中，フェニル基は塩素及びトリフルオロメチルから選ばれる２個の異なった置換基で置換されている。〕の化合物又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物である。
【００４１】
式（Ｉ）で示されるCDK阻害剤が少なくとも２個の不斉中心を有しており，従って２種の異なった光学異性体〔即ち，（＋）又は（−）鏡像異性体〕の形で存在することが，当業者により認識されるであろう。そのような全ての鏡像異性体及びそれらの混合物（ラセミ混合物を含む）が，本発明の範囲に含まれる。式Ｉの化合物のそれら鏡像異性体は，参照により本明細書に組み込まれるPCT出願公開No. WO2004004632に開示された方法により得ることができ，又は式Ｉの化合物の鏡像異性体はまた，キラルＨＰＬＣ及び酵素的分割等のような当業者に周知の方法によっても得ることができる。
【００４２】
或いは，式Ｉの化合物の鏡像異性体は，光学活性な出発材料を用いて合成することができる。式Ｉの化合物の製造（それは薬剤学的に許容し得る塩及び溶媒和物の形であってよい）及び当該化合物を含む経口及び／又は非経口の薬剤組成物の製造は，一般的にPCT出願公開No.WO2004004632に開示されている。この特許出願は，参照により本明細書に組み込まれているが，式Ｉで示されるCDK阻害剤が有意な抗癌効果を示すことを開示している。本明細書において上に示したように，式ＩのCDK阻害剤は，それらの塩の形で用いてもよい。式Ｉの化合物の好ましい塩としては，塩酸塩，メタンスルホン酸塩及びトリフルオロ酢酸塩が挙げられる。
【００４３】
本発明の別の一具体例によれば，本発明の薬剤組合せにおいて用いられるCDK阻害剤は，（＋）−トランス−２−（２−クロロフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチルピロリジン−３−イル）クロメン−４−オン塩酸塩（本明細書において化合物Ａという）又は（＋）−トランス−３−[２[（２−クロロ−４−トリフルオロメチルフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチルピロリジン−３−イル）クロメン−４−オン塩酸塩（本明細書において化合物Ｂという）から選ばれる。
【００４４】
本発明の一具体例において，薬剤組合せで用いられるCDK阻害剤は，（＋）−トランス−２−（２−クロロフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチルピロリジン−３−イル）クロメン−４−オン塩酸塩（化合物Ａ）である。
【００４５】
本発明の更なる具体例において，薬剤組合せで用いられるCDK阻害剤は，（＋）−トランス−３−[２[（２−クロロ−４−トリフルオロメチルフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチルピロリジン−３−イル）クロメン−４−オン塩酸塩（化合物Ｂ）である。
【００４６】
それらの抗腫瘍剤は，癌細胞が増殖するのを防止する（即ち，抗増殖剤）。本発明において，薬剤組合せに含める抗腫瘍剤としては，細胞分裂阻害剤又は細胞毒物を選んでよい。
【００４７】
本発明の一具体例によれば，本発明の薬剤組合せに用いる抗腫瘍剤は，細胞分裂阻害剤である。
【００４８】
本発明の別の一具体例によれば，本発明の薬剤組合せに用いる抗腫瘍剤は，細胞毒物である。
【００４９】
本発明の一具体例によれば，本発明の薬剤組合せにおいて用いられる抗腫瘍剤が細胞分裂阻害剤である場合には，それはソラフェニブ，ラパチニブ又はエルロチニブ等のような小さな分子，又はセツキシマブ等のようなモノクローナル抗体から選ばれる。
【００５０】
本発明の別の一具体例によれば，本発明の薬剤組合せにおいて用いられる抗腫瘍剤が細胞毒物の場合，それはシスプラチン，５−フルオロウラシル及び／又はドセタキセル又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩から選ばれる。
【００５１】
本発明の別の一具体例によれば，式（Ｉ）の化合物又は薬剤学的に許容し得るその塩から選ばれるCDK阻害剤と１種又は２種以上の抗腫瘍剤とを含んでなる薬剤組合せには，頭頸部扁平上皮癌（SCCHN）の治療のために，放射線療法の使用を更に含めることができる。
【００５２】
本発明において用いられるこれら特定の抗腫瘍剤は，商業的に容易に入手できる。
【００５３】
ソラフェニブは，インビトロで腫瘍細胞の増殖を減少させるキナーゼ阻害剤である。ソラフェニブは，複数の細胞内（CRAF, BRAF及び変異BRAF）及び表面（KIT, FLT-3, RET, VEGFR-1〜3及びPDGFR-β）キナーゼを阻害することが示されている。これらのキナーゼのうち数種は，腫瘍細胞のシグナル伝達，血管新生及びアポトーシスに関与すると考えられている。ソラフェニブは，ヒトの肝細胞癌と腎細胞癌及びその他の数種のヒト腫瘍異種移植片の，免疫低下マウス中での腫瘍増殖と血管新生とを阻害した。それは化学的には，４−（４−｛３−[４−クロロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル]ウレイド｝フェノキシ）Ｎ２−メチルピリジン−２−カルボキサミド−４−メチルベンゼンスルホネートと命名されている。ソラフェニブは，商業的に入手可能であり，進行した腎細胞癌（RCC）の患者及び切除不能の肝細胞癌（HCC）の患者の治療用に，バイエルによってNexavar（登録商標）として米国で販売されている。それはまた，欧州医薬品庁によっても，HCCの患者用に及び先行のIFN-α又はインターロイキン−２に基づく療法が奏功せず又はそのような療法が不適切と考えられる進行したRCCの患者の治療用に承認されている（"Preclinical
overview of sorafenib, a multikinase inhibitor that targets both Raf and VEGF
and PDGF receptor tyrosine kinase signaling"，Cancer
Therapeutics 2008; 7(10):3129-40）。
【００５４】
ラパチニブは，上皮成長因子受容体（EGFR[ErbB1]）及びヒト上皮受容体２（HER2[HrbB2]）受容体の双方の，細胞内チロシンキナーゼドメインの４−アニリノキナゾリンキナーゼ阻害剤である。ラパチニブは，インビトロ及び種々の動物モデルにおいて，でErbBに駆動される腫瘍細胞増殖を阻害する。それはトシル酸塩の１水和物として存在しており，化学名は，Ｎ−（３−クロロ−４−{[（３−フルオロフェニル）メチル]オキシ}フェニル−６−[５−（｛［２−（メチルスルホニル）エチル］アミノ｝メチル）−２−フラニル]−４−キナゾリンアミン  ビス（４−メチルベンゼンスルホン酸）一水和物である。メシル酸ラパチニブ一水和物は，二重のチロシン阻害剤であり，HER2成長受容体を遮断し，そしてHER2陽性乳癌の治療のために組合せ療法において用いられている（" Lapatinib in the treatment of breast cancer"，Expert Review of Anticancer Therapy (Future Drugs) 7 (9): 1183&#8211;92）。このものは米国においてグラクソ・スミスクラインによりTYKERB（登録商標）のブランド名で販売されており，商業的に入手可能である。ラパチニブは，２個の癌遺伝子即ちEGFR（上皮成長因子受容体）及びHER2/neu（ヒトEGFR 2型）に関連したチロシンキナーゼ活性を阻害する（"A unique
structure for epidermal  growth  factor  receptor 
bound  to  GW572016  (Lapatinib):  relationships among
protein conformation, inhibitor off-rate, and receptor activity in tumor cells"，Cancer Res. 2004 Sep 15; 64(18): 6652-9）。ラパチニブは，EGFR/HER2蛋白質結合ドメインのATP結合ポケットに結合することによって受容体のシグナル伝達過程を阻害し，それにより自己リン酸化とそれに続くシグナル伝達機構の活性化とを阻害する（"Lapatinib: a novel dual tyrosine kinase inhibitor with
activity in solid tumors". Annals of Pharmacotherapy: 40 (2); 261&#8211;269）。
【００５５】
エルロチニブは，EGFR阻害剤である。この薬物は，このタイプの最初の薬物であるゲフィチニブ（イレッサ（登録商標））に続くものである。ゲフィチニブ及びエルロチニブは，商業的に入手し得る上皮成長因子受容体チロシンキナーゼ阻害剤（EGFR-TKIs）であり，非小細胞肺癌（NSCLC）の治療用に広く用いられている。エルロチニブは，種々の癌において高度に発現され時には変異を起こしている上皮成長因子受容体（EGFR）チロシンキナーゼを特異的に標的とする。それは，この受容体のアデノシントリリン酸（ATP）結合部位に，可逆的な仕方で結合する（J Clin Oncol,
2007;25:1960-1966)）。
【００５６】
シスプラチンは，白金化合物であり，細胞毒性抗癌剤として働く。この白金に基づく化学療法薬は，DNAを損傷し且つアポトーシスを誘導することにより癌細胞を殺す。シスプラチンは，肉腫，ある種の癌（例えば，小細胞肺癌，及び卵巣がん），リンパ腫，及び生殖細胞腫瘍を含む，種々のタイプの癌の治療用に商業的に入手可能である。シスプラチンは，細胞サイクルに非特異的な細胞毒物であり，活発に分裂している細胞に対してもまた細胞サイクルに入る前の単に休止している細胞に対しても効果的であり，インビボで作用し，DNAに結合し架橋を引き起こし，究極的にはアポトーシス（プログラムされた細胞死）を引き起こす。
【００５７】
フルオロウラシル（5-FU）は，代謝拮抗薬であり且つ細胞毒性の抗癌剤である。5−FUは，DNA合成を阻害し，そして細胞死及び脳脊髄液によく浸透する。5-FUは，RNA及びDNAの合成を妨害する代謝拮抗薬として商業的に入手可能である。5-FUは，結腸，直腸，乳腺，胃及び膵臓の癌等のようなあるタイプの癌に対し，治療上有用である。
【００５８】
ドセタキセルは，有糸分裂及び間期の細胞機能に必須の細胞内微小管ネットワークを破壊することによって作用するタキソイドファミリーに属する抗腫瘍剤である。ドセタキセルは，遊離のチューブリンに結合して，チューブリンが集合して安定な微小管を形成するのを促進しつつ，同時にそれらの分解を阻害する。これは正常な機能を持たない微小管束の産生とそれらの微小管束の安定化をもたらし，これは細胞における有糸分裂阻害という結果をもたらす。微小管へのドセタキセルの結合は，結合した微小管における原繊維の数を変化させず，これは現在臨床的に使用されている殆どの紡錘体毒とは異なる特徴である。ドセタキセルは，SanofyによりTaxotere（登録商標）の名で世界的に販売されており，商業的に入手可能である。
【００５９】
セツキシマブは，上皮成長因子（EGFR）に対し向けられた組換えキメラ型モノクローナル抗体であり，抗腫瘍活性を有する。セツキシマブは，EGFRの細胞外ドメインに結合し，それによりそれ以降の受容体の活性化及び２量体化を妨害し，この受容体の活性化及び２量体化の減少はシグナル伝達の阻害と抗増殖効果をもたらし得る。この薬剤はEGFR依存性の原発腫瘍の増殖及び転移を阻害する。セツキシマブは，転移性結腸直腸癌及び頭頸部癌の治療用にErbitux（登録商標）として商業的に入手可能である。
【００６０】
別の一具体例によれば，本発明は頭頸部扁平上皮癌（SCCHN）の治療に用いるための薬剤組合せに関し，この組合せは，式Ｉの化合物から選ばれるサイクリン依存性キナーゼ（CDK）阻害剤又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物と，ソラフェニブ，ラパチニブ，エルロチニブ，シスプラチン，５−フルオロウラシル若しくはドセタキセル又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩又はモノクローナル抗体のセツキシマブよりなる選ばれる１種又は２種以上の抗腫瘍剤を含んでなる。
【００６１】
別の一具体例においては，本発明は頭頸部扁平上皮癌（SCCHN）の治療に用いるための薬剤組合せに向けられており，この組合せは，式Ｉの化合物より選ばれるサイクリン依存性キナーゼ（CDK）阻害剤又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物と，とソラフェニブとを含んでなる。
【００６２】
本発明の別の一具体例は，頭頸部扁平上皮癌の治療に用いるための薬剤組合せを提供し，この組合せは，式Ｉの化合物から選ばれるサイクリン依存性キナーゼ（CDK）阻害剤又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物と，ラパチニブとを含んでなる。
【００６３】
別の一具体例においては，本発明は頭頸部扁平上皮癌の治療に用いるための薬剤組合せに向けられており，この組合せは，式Ｉの化合物から選ばれるサイクリン依存性キナーゼ（CDK）阻害剤又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物と，エルロチニブとを含んでなる。
【００６４】
本発明の別の一具体例は，頭頸部扁平上皮癌の治療に用いるための薬剤組合せを提供し，この組合せは，式Ｉの化合物から選ばれるサイクリン依存性キナーゼ（CDK）阻害剤又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物と；シスプラチン及び５−フルオロウラシル又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩とを含んでなる。
【００６５】
別の一具体例においては，本発明は，頭頸部扁平上皮癌の治療において使用するための薬剤組合せに向けられており，この組合せは，式Ｉの化合物から選ばれるサイクリン依存性キナーゼ（CDK）阻害剤又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物と；ドセタキセル，シスプラチン及び５−フルオロウラシル又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩とを含んでなる。
【００６６】
本発明の更なる一具体例は，頭頸部扁平上皮癌の治療に用いるための薬剤組合せを提供し，この組合せは化合物Ａ又は化合物Ｂから選ばれるCDK阻害剤と，ソラフェニブ，ラパチニブ，エルロチニブ，シスプラチン，５−フルオロウラシル又はドセタキセル又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩から選ばれる１種又は２種以上の抗腫瘍剤とを含んでなる。
【００６７】
別の一具体例においては，本発明は頭頸部扁平上皮癌の治療に用いるための薬剤組合せを提供し，この組合せは化合物Ａとソラフェニブ又は薬剤学的に許容し得るその塩とを含んでなる。
【００６８】
別の一具体例においては，本発明は頭頸部扁平上皮癌の治療に用いるための薬剤組合せに向けられており，この組合せは，化合物Ａとラパチニブ又は薬剤学的に許容し得るその塩とを含んでなる。
【００６９】
別の一具体例においては，本発明は頭頸部扁平上皮癌の治療に用いるための薬剤組合せに向けられており，この組合せは，化合物Ａとエルロチニブ又は薬剤学的に許容し得るその塩とを含んでなる。
【００７０】
別の一具体例においては，本発明は頭頸部扁平上皮癌の治療に用いるための薬剤組合せに向けられており，この組合せは，化合物Ａと，シスプラチン及び５−フルオロウラシル又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩とを含んでなる。
【００７１】
本発明の更なる具体例は，頭頸部扁平上皮癌の治療に用いるための薬剤組合せに向けられており，この組合せは，化合物Ａと，ドセタキセル，シスプラチン及び５−フルオロウラシル又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩を含んでなる。
【００７２】
別の一具体例においては，本発明は頭頸部扁平上皮癌の治療に用いるための薬剤組合せを提供し，この組合せは化合物Ｂとソラフェニブ又は薬剤学的に許容し得るその塩とを含んでなる。
【００７３】
別の一具体例においては，本発明は頭頸部扁平上皮癌の治療に用いるための薬剤組合せを提供し，この組合せは化合物Ｂとラパチニブ又は薬剤学的に許容し得るその塩とを含んでなる。
【００７４】
本発明の別の一具体例によれば，式Ｉの化合物から選ばれるCDK阻害剤とソラフェニブ，ラパチニブ又はエルロチニブから選ばれる抗腫瘍剤とを含んでなる薬剤組合せ，又は
式Ｉの化合物から選ばれるCDK阻害剤とシスプラチン及び５−フルオロウラシルから選ばれる抗腫瘍剤とを含んでなる薬剤組合せ，又は式Ｉの化合物から選ばれるCDK阻害剤とシスプラチン，５−フルオロウラシル及びドセタキセルから選ばれる抗腫瘍剤とを含んでなる薬剤組合せは，それらの成分の物理的結合によって得られる各組合せに専ら限定されるものではなく，別々の投与が可能なものも包含されており，同時に，逐次的に，又は組合せの最大効果が得られるような時間的間隔をあけて，投与することができる。こうして，この薬剤組合せは，頭頸部扁平上皮癌の効果的治療のために，同時に又は逐次的に投与してよい。
【００７５】
別の一具体例によれば，本発明は，式Ｉの化合物から選ばれるCDK阻害剤と，ソラフェニブ，ラパチニブ，エルロチニブ，シスプラチン，５−フルオロウラシル又はドセタキセル若しくは薬剤学的に許容し得るそれらの塩から選ばれる１種又は２種以上の抗腫瘍剤とを含んでなる，扁平上皮癌の治療に用いるための薬剤組合せに向けられている。
【００７６】
別の一具体例によれば，本発明は，扁平上皮癌の治療に用いるための，放射線と，化合物Ａ又は化合物Ｂから選ばれるCDK阻害剤と，ソラフェニブ，ラパチニブ，エルロチニブ，シスプラチン，５−フルオロウラシル又はドセタキセル若しくは薬剤学的に許容し得るそれらの塩から選ばれる１種又は２種以上の抗腫瘍剤とを含んでなる薬剤組合せに向けられている。
【００７７】
別の一具体例によれば，本発明は，頭頸部扁平上皮癌（SCCHN）の治療に用いるための薬剤組合せに関し，この組合せは，化合物Ａ又は化合物Ｂから選ばれるサイクリン依存性キナーゼ（CDK）阻害剤と，シスプラチン及び／又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩及びモノクローナル抗体であるセツキシマブとを含んでなる。
【００７８】
別の一具体例によれば，本発明は，頭頸部扁平上皮癌（SCCHN）の治療に用いるための薬剤組合せに関し，この組合せは，放射線と，化合物Ａ又は化合物Ｂ又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩選ばれるサイクリン依存性キナーゼ（CDK）阻害剤と，そしてモノクローナル抗体であるセツキシマブとを含んでなる。
【００７９】
更なる具体例においては，本発明は（本明細書に記載されている）式Ｉの化合物から選ばれるCDK阻害剤又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物の治療上有効量と，ソラフェニブ，ラパチニブ，エルロチニブ，ドセタキセル，シスプラチン，５−フルオロウラシルよりなる群から選ばれる１種又は２種以上の抗腫瘍剤の治療上有効量との組合せとを，薬剤学的に許容し得る担体と共に含んでなる，薬剤組成物を提供する。
【００８０】
別の一具体例においては，本発明は，治療上有効量の式Ｉの化合物から選ばれるCDK阻害剤又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物と治療上有効量のソラフェニブとを，薬剤学的に許容し得る担体と共に含んでなる，薬剤組成物に関する。
【００８１】
別の一具体例においては，本発明は，治療上有効量の式Ｉの化合物から選ばれるCDK阻害剤又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物と治療上有効量のラパチニブとを，薬剤学的に許容し得る担体と共に含んでなる，薬剤組成物に関する。
【００８２】
別の一具体例においては，本発明は，治療上有効量の式Ｉの化合物から選ばれるCDK阻害剤又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物と，治療上有効量のエルロチニブとを，薬剤学的に許容し得る担体と共に含んでなる，薬剤組成物に関する。
【００８３】
更なる一具体例においては，本発明は，治療上有効量の式Ｉの化合物から選ばれるCDK阻害剤又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物と，治療上有効量のシスプラチン及び治療上有効量の５−フルオロウラシル又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩とを，薬剤学的に許容し得る担体と共に含んでなる，薬剤組成物を提供する。
【００８４】
別の一具体例においては，本発明は，治療上有効量の化合物Ａ又は化合物Ｂから選ばれるCDK阻害剤と，治療上有効量の１種又は２種以上の抗腫瘍剤又は薬剤学的に許容し得るその塩とを，薬剤学的に許容し得る担体と共に含んでなる，薬剤組成物に関する。
【００８５】
別の一具体例においては，本発明は，治療上有効量の化合物Ａ又は化合物Ｂから選ばれるCDK阻害剤と，治療上有効量のソラフェニブ，ラパチニブ,エルロチニブ，シスプラチン及び５−フルオロウラシル又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩よりなる群より選ばれる１種又は２種以上の抗腫瘍剤とを，薬剤学的に許容し得る担体と共に含んでなる，薬剤組成物に関する。
【００８６】
更なる別の一具体例においては，本発明は，治療上有効量の化合物Ａと，治療上有効量のソラフェニブとを，薬剤学的に許容し得る担体と共に含んでなる，薬剤組成物に関する。
【００８７】
別の一具体例においては，本発明は，治療上有効量の化合物Ａと，治療上有効量のラパチニブとを，薬剤学的に許容し得る担体と共に含んでなる，薬剤組成物に関する。
【００８８】
別の一具体例においては，本発明は，治療上有効量の化合物Ｂと，治療上有効量のソラフェニブとを薬剤学的に許容し得る担体と共に含んでなる，薬剤組成物に関する。
【００８９】
別の一具体例においては，本発明は，治療上有効量の化合物Ｂと，治療上有効量のラパチニブとを薬剤学的に許容し得る担体と共に含んでなる，薬剤組成物に関する。
【００９０】
別の一具体例においては，本発明は，治療上有効量の化合物Ａと，治療上有効量のエルロチニブとを薬剤学的に許容し得る担体と共に含んでなる，薬剤組成物に関する。
【００９１】
別の一具体例においては，本発明は，治療上有効量の化合物Ａ      とシスプラチン及び５−フルオロウラシル又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩とを薬剤学的に許容し得る担体と共に含んでなる薬剤組成物に関する。
【００９２】
別の一具体例においては，本発明は，治療上有効量の化合物Ａ，ドセタキセル，シスプラチン及び５−フルオロウラシル又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩を薬剤学的に許容し得る担体と共に含んでなる薬剤組成物に関する。
【００９３】
更なる具体例において，本発明は，患者における頭頸部扁平上皮癌の治療のための方法に向けられており，当該方法は，治療上有効量の式（Ｉ）の化合物から選ばれるCDK阻害剤又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩又は溶媒和物と，治療上有効量のソラフェニブ，ラパチニブ又はエルロチニブから選ばれる抗腫瘍剤とを患者に投与することを含んでなり，当該CDK阻害剤及び当該抗腫瘍剤又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩は，同時に又は逐次的に投与される。
【００９４】
別の一具体例においては，本発明は，患者における頭頸部扁平上皮癌の治療のための方法に向けられており，当該方法は，治療上有効量の式（Ｉ）の化合物から選ばれるCDK阻害剤又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩又は溶媒和物と，治療上有効量のシスプラチン及び５−フルオロウラシル又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩の各々とを患者に投与することを含んでなり，当該CDK阻害剤及びシスプラチン及び５−フルオロウラシルは同時に又は逐次的に投与される。
【００９５】
更なる具体例において，本発明は，患者における頭頸部扁平上皮癌の治療のための方法に向けられており，当該方法は，治療上有効量の化合物Ａ又は化合物Ｂから選ばれるCDK阻害剤と，治療上有効量のソラフェニブ，ラパチニブ又はエルロチニブから選ばれる抗腫瘍剤とを患者に投与することを含んでなり，化合物Ａ又は化合物Ｂ及び抗腫瘍剤は同時に又は逐次的に投与される。
【００９６】
更なる一具体例においては，本発明は，患者における頭頸部扁平上皮癌の治療のための方法に向けられており，当該方法は，治療上有効量の化合物Ａ又は化合物Ｂから選ばれるCDK阻害剤と，治療上有効量のソラフェニブとを患者に投与することを含んでなり，化合物Ａ又は化合物Ｂ及びソラフェニブは同時に又は逐次的に投与される。
【００９７】
別の一具体例においては，本発明は，患者における頭頸部扁平上皮癌の治療のための方法に向けられており，当該方法は，治療上有効量の化合物Ａ又は化合物Ｂから選ばれるCDK阻害剤と，治療上有効量のラパチニブとを患者に投与することを含んでなり，化合物Ａ又は化合物Ｂ及びラパチニブは同時に又は逐次的に投与される。
【００９８】
本発明の別の一具体例は，患者における頭頸部扁平上皮癌の治療のための方法を提供し，当該方法は，治療上有効量の化合物Ａ又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物と，治療上有効量のエルロチニブとを患者に投与することを含んでなり，化合物Ａ及びエルロチニブは同時に又は逐次的に投与される。
【００９９】
別の一具体例においては，本発明は，患者における頭頸部扁平上皮癌の治療のための方法に向けられており，当該方法は，治療上有効量の化合物Ａ又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物と，治療上有効量のシスプラチン及び５−フルオロウラシル又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩とを患者に投与することを含んでなり，化合物Ａ，シスプラチン及び５−フルオロウラシルは同時に又は逐次的に投与される。
【０１００】
本発明の別の一具体例は，患者における頭頸部扁平上皮癌の治療のための方法に向けられており，当該方法は，治療上有効量の式（Ｉ）の化合物から選ばれるCDK阻害剤又は薬剤学的に許容し得るその塩又はその溶媒和物と，治療上有効量の抗腫瘍剤又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩とを患者に投与することを含んでなり，ここにCDK阻害剤及び抗腫瘍剤又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩は逐次的に投与される。
【０１０１】
別の一具体例によれば，本発明は，患者における頭頸部扁平上皮癌の治療のための方法に向けられており，当該方法は，治療上有効量の化合物Ａ又は化合物Ｂと，ソラフェニブ，ラパチニブ又はエルロチニブから選ばれる治療上有効量の抗腫瘍剤とを患者に投与することを含んでなり，ここに化合物Ａ又は化合物Ｂは及びソラフェニブ，ラパチニブ又はエルロチニブから選ばれる抗腫瘍剤は，化合物Ａ又は化合物Ｂがソラフェニブ又はラパチニブ又はエルロチニブの投与より前に又は後に投与されるように，逐次的に投与される。
【０１０２】
別の一具体例によれば，本発明は，患者における頭頸部扁平上皮癌の治療のための方法に関するものであり，当該方法は，治療上有効量の化合物Ａと治療上有効量のソラフェニブとを患者に投与することを含んでなり，ここに化合物Ａとソラフェニブとは，化合物Ａがソラフェニブの投与より前に又は後に投与されるように，逐次的に投与される。
【０１０３】
別の一具体例によれば，本発明は，患者における頭頸部扁平上皮癌の治療のための方法に関するものであり，当該方法は，治療上有効量の化合物Ｂと治療上有効量のソラフェニブとを患者に投与することを含んでなり，ここに化合物Ｂとソラフェニブとは，化合物Ｂがソラフェニブの投与より前に又は後に投与されるように，逐次的に投与される。
【０１０４】
別の一具体例によれば，本発明は，患者における頭頸部扁平上皮癌の治療のための方法に関するものであり，当該方法は，治療上有効量の化合物Ａと治療上有効量のラパチニブとを患者に投与することを含んでなり，ここに化合物Ａとラパチニブとは，化合物Ａがラパチニブの投与より前に又は後に投与されるように，逐次的に投与される。
【０１０５】
別の一具体例によれば，本発明は，患者における頭頸部扁平上皮癌の治療のための方法に関するものであり，当該方法は，治療上有効量の化合物Ｂと治療上有効量のラパチニブとを患者に投与することを含んでなり，ここに化合物Ｂとラパチニブとは，合物Ｂがラパチニブの投与より前に又は後に投与されるように，逐次的に投与される。
【０１０６】
別の一具体例によれば，本発明は，患者における頭頸部扁平上皮癌の治療のための方法に関するものであり，当該方法は，治療上有効量の化合物Ａと治療上有効量のエルロチニブとを患者に投与することを含んでなり，ここに化合物Ａとエルロチニブとは，合物Ａがエルロチニブの投与より前に又は後に投与されるように，逐次的に投与される。
【０１０７】
別の一具体例によれば，本発明は，患者における頭頸部扁平上皮癌の治療のための方法に関するものであり，当該方法は，治療上有効量の化合物Ａと，治療上有効量のシスプラチン及び５−フルオロウラシル又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩を患者に投与することを含んでなり，ここに化合物Ａ，シスプラチン及び５−フルオロウラシル又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩は，化合物Ａがシスプラチン及び／又は５−フルオロウラシルの投与の前又は後に投与されるように，逐次的に投与される。
【０１０８】
別の一具体例によれば，本発明は，患者における頭頸部扁平上皮癌の治療のための方法に関するものであり，当該方法は，治療上有効量の化合物Ａと，治療上有効量のドセタキセル，シスプラチン及び５−フルオロウラシル又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩を投与することを含んでなり，ここに化合物Ａ，ドセタキセル，シスプラチン及び５−フルオロウラシル又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩は，化合物Ａがドセタキセル，シスプラチン及び／又は５−フルオロウラシル又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩の投与より前又は後に投与されるように，逐次的に投与される。
【０１０９】
別の一具体例においては，本発明は，頭頸部扁平上皮癌（SCCHN）の治療又は予防のための医薬を製造するための，式Ｉの化合物から選ばれるCDK阻害剤又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩又はそれらの溶媒和物と，１種又は２種以上の抗腫瘍剤又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩との組合せの使用を提供する。
【０１１０】
本発明の別の一具体例は，式（Ｉ）の化合物から選ばれる治療上有効量のCDK阻害剤又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩と，抗腫瘍剤とを含んでなる，頭頸部扁平上皮癌（SCCHN）の治療用の医薬の製造のための薬剤組成物を提供する。
【０１１１】
本発明によれば，式Ｉの化合物から選ばれるCDK阻害剤と，ソラフェニブ，ラパチニブ又はエルロチニブから選ばれる抗腫瘍剤又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩との２種組合せは，それらCDK阻害剤，ソラフェニブ又はラパチニブ又はエルロチニブの何れを単独で用いた場合に達成されるよりも大きな効果，例えば抗癌効果を生み出し得る。
【０１１２】
本発明によれば，本明細書に記載の式Ｉの化合物から選ばれるCDK阻害剤とシスプラチン及び５−フルオロウラシルとの３種組合せの投与は，それらCDK阻害剤又はシスプラチン又は５−フルオロウラシルの何れかを単独で用いた場合に達成されるよりも大きな効果，例えば抗癌効果を生み出し得る。
【０１１３】
本発明の薬剤組成物の投与経路は，特に限定されない。一具体例においては，組成物に含まれる各活性成分（組合せに含まれる抗癌剤）は，投与形態に応じて，経口か非経口かの異なった経路で投与しなければならないかも知れない。経口投与のための投与形態は錠剤又はカプセル剤であってよく，非経口投与のための形態は静脈内注射，静脈内注入，皮下注射，経皮注射，腹腔内注射等であってよい。直腸投与のためには，例えば坐剤として，又は投与経路は腫瘍への直接の注射であってよく，又は領域的（regional）送達又は局所的（local）送達であってよい。経口用の錠剤の場合，一般に使用されている担体としては，乳糖，トウモロコシデンプン，炭酸マグネシウム，タルク，及びショ糖等が挙げられ，並びにステアリン酸マグネシウム等のような滑沢剤が一般的に添加される。カプセル形態での経口投与には，有用な担体としては，乳糖，トウモロコシデンプン，炭酸マグネシウム，タルク及びショ糖等が挙げられる。筋肉内，腹腔内，皮下及び静脈内の使用のためには，活性成分の無菌溶液が通常用いられ，溶液のｐＨは適切に調節され緩衝化されなければならない。
【０１１４】
本発明を実施するにおいて，式Ｉの化合物から選ばれるCDK阻害剤は，その良好な血中レベルを維持するために経口でも非経口でも投与でき，１種又は２種以上の抗腫瘍剤は，経口又は非経口，静脈内，皮下又は筋肉内又はその他の如何なる適切な投与経路で投与してもよい。
【０１１５】
一具体例においては，本発明の組合せに含まれる治療剤（CDK阻害剤及び抗腫瘍剤）は，薬剤組成物の通常の手順に従って調製される。
【０１１６】
実施において，経口投与のための経口剤は，活性成分，充填剤，及び必要なら結合剤，滑沢剤，着色剤，矯味剤等を添加し，得られた混合物を通常の手順に従って錠剤，コーティング錠，顆粒剤，散剤，細粒剤，カプセル剤その他へと形成することによって，製造することができる。充填剤の例としては，乳糖，トウモロコシデンプン，白糖，グルコース，ソルビトール，結晶セルロース，シリカ等が挙げられるが，これらに限定されない。結合剤の例としては，ポリビニルアルコール，エチルセルロース，メチルセルロース，アラビアゴム，ヒドロキシプロピルセルロース，ヒドロキシプロピルメチルセルロース等が挙げられるが，これらに限定されない。滑沢剤の例としては，ステアリン酸マグネシウム，タルク，シリカ等が挙げられるが，これらに限定されない。着色剤は，製剤に添加することの認められている如何なる着色剤でもよい。矯味剤の例としては，カカオ粉，メントール，アロマティックパウダー，薄荷油，樟脳，経皮粉等が挙げられるが，これらに限定されない。得られた錠剤及び顆粒剤は，必要に応じて，例えばショ糖又はゼラチンで適切にコーティングしてよい。本発明の薬剤組成物がパッチの形で経皮的に投与される場合には，好ましくは，塩を形成していない，いわゆる遊離形を選ぶのが好ましい。注射剤は，静脈内注入剤として又は静脈内，皮下又は筋肉内注射剤として，慣用の手順で調製してよい。懸濁化剤の例としては，メチルセルロース，ポリソルベート８０，ヒドロキシエチルセルロース，アラビアゴム，トラガント粉末，カルボキシメチルセルロースナトリウム，ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート等が挙げられるが，これらに限定されない。溶解補助剤の例としては，ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油，ポリソルベート８０，ニコチンアミド，ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート，マクロゴール，ヒマシ油からの脂肪酸エチルエステル等が挙げられるが，これらに限定されない。安定化剤の例としては，硫酸ナトリウム，ピロ亜硫酸ナトリウム等が挙げられるが，これらに限定されない。保存剤の例としては，パラヒドロキシ安息香酸メチル，パラヒドロキシ安息香酸エチル，ソルビン酸，フェノール，クレゾール，クロロクレゾール等が挙げられるが，これらに限定されない。
【０１１７】
治療剤（CDK阻害剤及び抗腫瘍剤又は抗癌剤）の投与のための有効な投与量は症状の重篤度，年齢，性別，体重及び患者の感受性の差，投与の様式，時間，間隔及び持続時間，製剤の性質，形態及びタイプ，活性成分のタイプ等に応じて，変動する。ある具体例においては，それらの治療剤は両剤が依然活性である時間枠内に投与される。当業者は，投与された治療剤の半減期を測定することにより，そのような時間枠を決定することができよう。本明細書において既に示したように，薬剤組成物に含まれる活性成分は，同時に又は逐次的に投与することができる。当業者は，本発明の範囲と本質の内において種々の変更が可能であることを認識するであろう。
【０１１８】
効果的な投与のためには，本発明の薬剤組合せの各治療剤は特定の用量範囲で提供される。例えば，化合物Ａのような，式Ｉの化合物から選ばれるCDK阻害剤は，通常の用量範囲75mg/m2/日〜200 mg/m2/日で提供してよく；化合物Ｂのような，式Ｉの化合物から選ばれる別のCDK阻害剤は，通常の用量範囲である経口50mg〜350mgで提供してよい。更に，抗腫瘍剤のうち，シスプラチンは40mg/m2/日〜200mg/m2/日の用量範囲で提供してよく，５−フルオロウラシルは40mg/m2/日〜200mg/m2/日の用量範囲で提供してよく，ドセタキセルは通常の用量範囲20mg/m2/日〜75mg/m2/日で提供してよく，ソラフェニブは少なくとも約200mg〜400mg（2×200mg錠）経口２回で提供してよく，ラパチニブは500〜1500mg/日の用量で提供してよく，エルロチニブは約150mg/日〜300mg/日の用量で提供してよい。
【０１１９】
更なる具体例において，本発明は，式Ｉの化合物又は薬剤学的に許容し得るその塩から選ばれる治療的有効量のCDK阻害剤とソラフェニブ，ラパチニブ，エルロチニブ，シスプラチン及び５−フルオロウラシル又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩から選ばれる１種又は２種以上の抗腫瘍剤との組合せを含んでなるキットを提供する。
【０１２０】
本発明により提供される組合せは，あるアッセイ系において評価がなされており，その実験の詳細は下記のとおりである。
【０１２１】
本発明の組合せの相乗効果は，例えば化合物Ａ又は化合物Ｂとして本明細書に記載の式ＩのCDK阻害剤とソラフェニブ，ラパチニブ，エルロチニブ，シスプラチン，５−フルオロウラシル又はドセタキセルより選ばれる１種又は２種以上の抗腫瘍剤の組合せを用いてインビトロ試験を行うことにより実証される。それらの抗腫瘍剤をCDK阻害剤と共に頭頸部扁平上皮癌の治療に用いた場合，式ＩのCDK阻害剤単独又は抗腫瘍剤単独で処置した場合よりも増殖細胞中のアポトーシスが増加する。例えば，本明細書に記載のデータから，式ＩのCDK阻害剤，即ち化合物Ａ又は化合物Ｂとして記載された化合物は，ソラフェニブ，ラパチニブ，エルロチニブ，シスプラチン，５−フルオロウラシル又はドセタキセルから選ばれる１種又は２種以上の抗腫瘍剤との組合せで，頭頸部扁平上皮癌の治療に相乗的な有効性を有している。本発明の薬剤組合せで示されるこの相乗作用はまた，本明細書に示されるようにインビボでも実証されている。
【０１２２】
本発明の種々の具体例の活性に実質的影響を及ぼさない改良は本明細書に開示された発明の範囲に含まれるものと理解される。従って，以下の実施例は，本発明を説明するが限定するものではないことが意図されている。
【０１２３】
〔実施例１〕
Ａ）CDK阻害剤（式Ｉの化合物）の製造のための一般的手順：
式Ｉの化合物は，参照により本明細書に導入されるPCT特許公報No. WO 2004/004632及びPCT特許公報No. WO 2007/148158に開示された方法に従って製造してよい。
【０１２４】
式Ｉの化合物又は薬剤学的に許容し得るその塩の製造のための一般的工程は，次のステップを含んでなる：
ａ）式VIAで示される中間化合物の，分割され鏡像異性体として純粋な（−）−トランス鏡像異性体。
【０１２５】
【化３】
2014515394.tif 000005
【０１２６】
を，ルイス酸触媒の存在下に無水酢酸で処理して，式VIIAの分割されているアセチル化された化合物を得る。
【０１２７】
【化４】
2014515394.tif 000006
【０１２８】
ｂ）この分割されアセチル化された式VIIAの化合物を式ＡｒＣＯＯＨの酸又は式ＡｒＣＯＣｌの酸塩化物又は式（ＡｒＣＯ）２Ｏの酸無水物又は式ＡｒＣＯＯＣＨ３〔式中，Ａｒは式Ｉの化合物について上で定義したとおりである。〕のエステルと，塩基及び溶媒の存在下に反応させて，分割されたている式VIIIAの化合物を得る；
【０１２９】
【化５】
2014515394.tif 000007
【０１３０】
ｃ）分割されている式VIIIAの化合物を適当な溶媒中で塩基で処理して対応する式IXAの分割されているβ−ジケトン化合物を得る：
【０１３１】
【化６】
2014515394.tif 000008
【０１３２】
〔式中，Ａｒは上で定義した通りである。〕
ｄ）この分割されている式IXAのβ−ジケトン化合物を塩酸等のような酸で処理して，対応する式XAの環状化合物を得る。
【０１３３】
【化７】
2014515394.tif 000009
【０１３４】
ｅ）式XAの化合物を120〜180℃の範囲の加熱下に脱アルキル化剤で処理することにより脱アルキル化に付して式Ｉの化合物の（＋）−トランス鏡像異性体を得，そして所望によりこの化合物を薬剤学的に許容し得る塩に変換する。
【０１３５】
ステップ（ａ）において利用されるルイス酸は，ＢＦ３，Ｅｔ２Ｏ，塩化亜鉛，塩化アルミニウム及び塩化チタンから選ばれる。
【０１３６】
工程のステップ（ｂ）において利用される塩基は，トリエチルアミン，ピリジン及びDCC-DMAPの組合せ（Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド及び４−ジメチルアミノピリジンの組合せ）から選んでよい。
【０１３７】
式VIIIAの化合物の対応する式IXAのβ−ジケトン化合物への転移反応がBaker-Venkataraman rearrangement (J. Chem. Soc., 1381 (1933) and
Curr. Sci., 4,214 (1933))として知られていることは，当業者に明らかであろう。
【０１３８】
工程のステップ（ｃ）において用いられる塩基は，リチウムヘキサメチルジシラジド，ナトリウムヘキサメチルジシラジド，カリウムヘキサメチルジシラジド，水素化ナトリウム及び水素化カリウムから選んでよい。好ましい塩基の１つはリチウムヘキサメチルジシラジドである。
【０１３９】
工程のステップ（ｅ）において式IXAの化合物の脱アルキル化用いられる脱アルキル化剤は，ピリジン塩酸塩，三臭化ホウ素，三フッ化ホウ素エーテラート及び塩化アルミニウムから選んでよい。好ましい脱アルキル化剤の１つはピリジン塩酸塩である。
【０１４０】
式VIAで示される出発化合物の製造は，１−メチル−４−ピペリドンを１，３，５−トリメトキシベンゼンの氷酢酸溶液と反応させて１−メチル−４−（２，４，６−トリメトキシフェニル）−１，２，３，６−テトラヒドロピリジンを得，これを三フッ化ホウ素ジエチルエーテラート，水素化ホウ素ナトリウム及びテトラヒドロフランと反応させて１−メチル−４−（２，４，６−トリメトキシフェニル）ピペリジン−３−オールを得ることを含む。１−メチル−４−（２，４，６−トリメトキシフェニル）ピペリジン−３−オールの式VIAで示される化合物への変換は，この化合物１−メチル−４−（２，４，６−トリメトキシフェニル）ピペリジン−３−オールのピペリジン環上にあるヒドロキシル基を，トリエチルアミン，ピリジン，炭酸カルシウム又は炭酸ナトリウム等のような酸素求核剤の存在下に，ｐ−トルエンスルホニルクロリド，メタンスルホニルクロリド，トリフルオロメタンスルホン酸無水物又は五塩化リン等のような適切な試薬で処理してトシル，メシル，トリフラート又はハロゲン化物等のような脱離基に変換し，続いて，イソプロパノール，エタノール又はプロパノール等のようなアルコール系溶媒中において，酢酸ナトリウム又は酢酸カリウム等のような酸素求核試薬の存在下に環の縮合を行うことを含む。
【０１４１】
Ｂ）（＋）−トランス−２−（２−クロロフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチルピロリジン−３−イル）クロメン−４−オン塩酸塩（化合物Ａ）の製造
溶融させたピリジン塩酸塩（4.1ｇ，35.6mmol）を（＋）−トランス−２−（２−クロロフェニル）−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチルピロリジン−３−イル）−５，７−ジメトキシクロメン−４−オン（0.4ｇ，0.9mmol）に加え，180℃に1.5時間加熱した。反応混合物を25℃まで冷却し，メタノール（10mL）で希釈し，Ｎａ２ＣＯ３を用いてpH10まで塩基性にした。この混合物を濾過し，有機層を濃縮した。残差を水（5mL）に懸濁させ，30分間撹拌し，濾過し乾燥させて，化合物である（＋）−トランス−２−（２−クロロフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチルピロリジン−３−イル）クロメン−４−オンを得た。
収量：0.25ｇ(70％)；ＩＲ(ＫＢｒ)：3422, 3135,
1664, 1623, 1559 cm-1；
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ7.56 (d, 1H), 7.36
(m, 3H), 6.36 (s, 1H), 6.20 (s, 1H), 4.02 (m, 1H), 3.70 (m, 2H), 3.15 (m, 2H),
2.88 (m, 1H), 2.58 (s, 3H), 2.35 (m, 1H), 1.88 (m, 1H); MS (ES+): m/z  402
(M+1)；
分析:C21H20ClNO5  C, 62.24 (62.71); H, 5.07 (4.97); N, 3.60 (3.48); Cl, 9.01 (8.83).
【０１４２】
上で得られた化合物（0.2ｇ，0.48mmol）をIPA（5mL）に懸濁させ， 3.5％HCl（25mL）を加えた。懸濁液を透明な溶液になるまで加熱した。溶液を冷却して固形物を濾過し，化合物である（＋）−トランス−２−（２−クロロフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチルピロリジン−３−イル）クロメン−４−オン塩酸塩を得た。
収量：0.21ｇ（97％）；融点：188〜192℃；[α]D25＝＋21.3°（ｃ＝0.2，メタノール）；
1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 7.80 (d, 1H), 7.60
(m, 3H), 6.53 (s, 1H), 6.37 (s, 1H), 4.23 (m, 1H), 3.89 (m, 2H), 3.63 (m, 1H),
3.59 (dd, 1H), 3.38 (m, 1H), 2.90 (s, 3H), 2.45 (m, 1H), 2.35 (m, 1H); MS
(ES+): m/z 402 (M+1)(遊離塩基).
【０１４３】
この化合物をキラルHPLCに付した。キラルＨＰＬＣは，カラムとしてChiralcel OD-H（250×4.6mm）及び溶媒系として，ＴＦＡ（0.4％）を含むヘキサン：エタノール（92:08）を用いた。１mL/分の溶媒流速で264nmにおいて結果を記録した。キラルＨＰＬＣにおい，描かれているように，化合物（＋）−トランス−２−（２−クロロフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチルピロリジン−３−イル）クロメン−４−オン塩酸塩は100％ e.eであることが示された。
【０１４４】
Ｃ）（＋）−トランス−２−（２−クロロ−４−トリフルオロメチルフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチル−ピロリジン−３−イル）クロメン−４−オン塩酸塩（化合物Ｂ）の製造
化合物（＋）−トランス−２−（２−クロロ−４−トリフルオロメチルフェニル）−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチルピロリジン−３−イル）−５，７−ジメトキシクロメン−４−オン（0.25ｇ，0.5mmol）と，ピリジン塩酸塩（0.25ｇ，2.16mmol）とそして触媒量のキノリンとの混合物を，180℃にて2.5時間加熱した。反応混合物をメタノール（25mL）で希釈し，固形Na2CO3でpH10まで塩基性にした。反応混合物を濾過し，メタノールで洗浄した。有機層を濃縮し，残渣を，クロロホルム中0.1％アンモニア及び4.5％メタノールを溶離液として用いてカラムクロマトグラフィーにより精製し，化合物（＋）−トランス−２−（２−クロロ−４−トリフルオロメチルフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチルピロリジン−３−イル）クロメン−４−オンを，黄色個体としてを得た
収量：0.15ｇ（63.7％）；
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 7.99 (m, 2H), 7.83
(d, 1H), 6.65 (s, 1H), 6.41 (s, 1H), 4.24 (m, 1H), 3.90 (m, 2H), 3.70 (m, 1H),
3.60 (m, 1H), 3.41 (m, 1H), 2.99 (s, 3H), 2.54 (m, 1H), 2.28 (m, 1H); MS (ES+):
m/z  470 (M+1).
【０１４５】
上で得られた化合物（0.1ｇ，0.2mmol）をメタノール（2mL）に懸濁させ，エーテル性HClで処理し，有機溶媒を留去して，化合物（＋）−トランス−２−（２−クロロ−４−トリフルオロメチルフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチルピロリジン−３−イル）クロメン−４−オン塩酸塩を得た。
収量：0.1ｇ（92.8％)；
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 8.02 (d, 2H), 7.83
(d, 1H), 6.64 (s, 1H), 6.41 (s, 1H), 4.23 (m, 1H), 3.73 (m, 2H), 3.68 (m, 1H),
3.51 (m, 1H), 3.39 (m, 1H), 2.99 (s, 3H), 2.54 (m, 1H), 2.31 (m, 1H).
【０１４６】
CDK阻害剤と１種又は２種以上の抗腫瘍剤とからなる組合せの使用を含むインビトロ試験
本発明の組合せの相乗効果を示す，（＋）−トランス−２−（２−クロロフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチルピロリジン−３−イル）クロメン−４−オン塩酸塩（化合物Ａ）と（＋）−トランス−２−（２−クロロ−４−トリフルオロメチルフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチル−ピロリジン−３−イル）クロメン−４−オン塩酸塩（化合物Ｂ）とから選ばれるCDK阻害剤と，ソラフェニブ，ラパチニブ，エルロチニブ，ドセタキセル，シスプラチン又は５−フルオロウラシルから選ばれる１種又は２種以上の抗腫瘍剤とを含んでなる組合せの使用を伴うインビトロ試験が，以下の実施例に記載されている。
【０１４７】
〔実施例２〕
材料：
ソラフェニブ，ラパチニブ及びエルロチニブをLC Labs（米国）から入手した。シスプラチン，５−フルオロウラシル及びドセタキセルをSigmaから入手した。CK-8 細胞毒性キットをDojindo Molecular Technologies（日本）より入手した。培養培地及び胎仔牛血清（FBS）をSigma（セントルイス，ミズリー）及びGibco（ペーズリー，スコットランド）から，それぞれ入手した。頭頸部癌細胞であるSCC-25，Detroit 562，及びFADUをAmerican
Type Culture Collection（ATCC, マナッサス，バージニア）から入手した。細胞は，10％FBS，安定化ペニシリン−ストレプトマイシン溶液を添加し無菌濾過したDulbecco改良イーグル培地（DMEM）（ペニシリン100単位／mL及びストレプトマイシン100mg/mLを含む）中で維持した。加湿された（37℃，5％CO2）インキュベーター内で，細胞を75-cm2培養フラスコ中で増殖させ，維持した。細胞は，80％コンフルエントに達したとき継代した。
【０１４８】
細胞増殖アッセイ：
対数的に増殖する細胞を3×10３個／ウェルの密度でプレートに播き，終夜回復させた。細胞を種々の濃度の種々の抗癌剤（化合物Ａ，化合物Ｂ，ソフェラニブ，ラパチニブ，エルロチニブ，シスプラチン，ドセタキセル及び５−フルオロウラシル）を加え，対照細胞にはジメチルスルホキシド（DMSO）溶媒を0.2％の濃度で含有する標準の培地を加えた。72時間後，細胞毒性を，CKK-8（細胞計数キット-8）試薬（Dojindo Molecular Technologies, 日本）；WST-8（２−（２−メトキシ−４−ニトロフェニル）−３−（４−ニトロフェニル）−５−（２，４−ジスルフォフェニル））−２Ｈ−テトラゾリウム，モノナトリウム塩によりアッセイした。メーカーの指示書に従って，５μL/ウェルのCCK-8試薬を加え，プレートを２時間インキュベートした。毒性は，Tecan Sapphire マルチ蛍光マイクロプレートリーダー（Tecan，ドイツ，GmbH）で，650nmに対して補正し対照に対して標準化させて，波長450nmで測定した。
【０１４９】
SCC-25，Detroit 562，及びFADUのインビトロ増殖の特徴づけのため，並びに抗癌剤である化合物Ａ，化合物Ｂ，ソラフェニブ，ラパチニブ，エルロチニブ，シスプラチン，ドセタキセル及び５−フルオロウラシルの，組合せで用いたときの抗増殖／細胞毒活性を試験するために，CCK-8非放射性比色アッセイを行った。CCK-8は，Dojindoのテトラゾリウム塩，WST[８[２−（２−メトキシ−４−ニトロフェニル）−３−（４−ニトロフェニル）−５−（２，４−ジスルフォフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウム，モノナトリウム塩]を用いた手軽なアッセイを可能にし，これは，水溶性電子担体である１−メトキシPMSの存在下に，フォルマザン色素を生成する。セルにCCK-8溶液が直接加えられ，諸成分の事前混合は不要である。CCK-8は，細胞増殖及び細胞毒性アッセイにおいて生存細胞数を決定するための，高感度の非放射性比色アッセイである。WST-8は，細胞のデヒドロゲナーゼにより橙色のフォルマザン生成物へと生物還元され，これは組織培養培地に可溶性である。生成するフォルマザンの量は生存細胞の数に正比例する。WTS-8を用いた細胞増殖アッセイの検出感度は，MTT, XTT, MTS又はWST-1等のような他のテトラゾリウム塩を用いるアッセイに比べて，高い。光学密度は測定波長450nmで測定され，参照波長は630nmであった。
【０１５０】
化合物Ａ，化合物Ｂ，ソラフェニブ，ラパチニブ，エルロチニブ，ドセタキセル，シスプラチン及び５−ＦＵの50％阻害濃度（IC50）の決定
SCC-25，Detroit 562及びFADU細胞における化合物Ａ，化合物Ｂ，ソラフェニブ，ラパチニブのIC50を決定するために，及びDetroit562及びFADU細胞におけるエルロチニブ，ドセタキセル，シスプラチン及び5-FUのIC50を決定するために，これらの細胞はそれら特定の抗癌剤（「試験化合物」）により，下記に述べる濃度で処理された。これらの抗癌剤は全て，次の最終濃度即ち0.03μM，0.1μM，0.3μM，1μM，3μM，10μM，30μM及び100μMの投与量において，細胞毒性を，特に50％細胞毒性を示すそれらの能力について分析された。組織培養グレードの96ウェルプレートに細胞を3000個／ウェル（200μL中）の密度で播き，加湿した5％±0.2 CO2，37℃±5℃のインキュベーター内で24時間回復させた。24時間後，ジメチルスルホキシド（DMSO）に溶解させた200×（必要濃度の200倍の濃度を200×と表す）試験化合物（化合物Ａ，化合物Ｂ，ラパチニブ，ソラフェニブ，エルロチニブ，ドセタキセル，シスプラチン及び５−フルオロウラシル）の1μLを細胞に加えた。ウェル内のDMSOの最終濃度は0.5％であった。加湿した5％±0.2
CO2，37℃±5℃のインキュベーター内でプレートを48時間インキュベートした。48時間後，プレートをCO2インキュベーターから取り出し，ウェルあたり5μLの細胞計数キット（CCK-8）を加えた。同プレートを37℃に3時間維持し，次いで室温に戻るに任せた。450nmの波長での吸光度をTecan safire リーダーで読み取った。下記式を用いて％細胞毒性を算出した。
【０１５１】
【数１】
2014515394.tif 000010
【０１５２】
72時間におけるSCC-25細胞での用量応答試験は，化合物Ａ，化合物Ｂ，ソラフェニブ及びラパチニブが，0.4μM，1.1μM，2.7μM及び0.5μMのそれぞれで50％の増殖を阻害（IC50）することを示した。結果を表１に示し，図１ａ及び１ｂにグラフで示す。
【０１５３】
Detroit-562細胞における72時間での用量応答試験は，化合物Ａ，化合物Ｂ，ソラフェニブ及びラパチニブが，1.3μM，14.1μM，6.1μM及び3.9μMのそれぞれで50％の増殖を阻害（IC50）することを示した 。結果を表２に示し，図２ａ，２ｂにグラフで示す。
【０１５４】
FADU細胞における72時間での用量応答試験は，化合物Ａ，化合物Ｂ，ソラフェニブ及びラパチニブが，1.3μM，4.1μM，8.4μM及び2.6μMのそれぞれで50％の増殖を阻害（IC50）することを示した。結果を表３に示し，図３ａ及び３ｂにグラフで示す。
【０１５５】
Detroit-562細胞における72時間での用量応答試験は，化合物Ａ及びエルロチニブが，1.3μM及び2.3μMでそれぞれ50％の増殖を阻害（IC50）することを示した。結果を表４に示し，図４ａにグラフで示す。
【０１５６】
FADU細胞における72時間での用量応答試験は，化合物Ａ及びエルロチニブが，1.3μM及び10.2μMでそれぞれ50％の増殖を阻害（IC50）することを示した。結果を表５に示し，図４ｂにグラフで示す。
【０１５７】
Detroit-562細胞における72時間での用量応答試験は，シスプラチン，化合物Ａ及び５−ＦＵが，14.6μM，1.3μM及び6.3μMでそれぞれ50％の増殖を阻害（IC50）することを示した。結果を表６に示し，図５ａにグラフで示す。
【０１５８】
FADU細胞における72時間での用量応答試験は，シスプラチン，化合物Ａ及び５−ＦＵが，8.3μM，1.3μM及び11.6μMでそれぞれ50％の増殖を阻害（IC50）することを示した。結果を表７に示し，図５ｂにグラフで示す。
【０１５９】
Detroit-562細胞における72時間での用量応答試験は，ドセタキセル，シスプラチン，化合物Ａ及び５−ＦＵが，それぞれ，0.009μM，0.3μM，0.1μM及び0.31μMで10％の増殖を阻害（IC10）し，また0.85μM，14.6μM，1.3μM及び6.3μMで50％の増殖を阻害（IC50）することを示した。結果を表６に示し，図５ａにグラフで示す。
【０１６０】
FADU細胞における72時間での用量応答試験は，ドセタキセル，シスプラチン，化合物Ａ，及び５−ＦＵが，それぞれ0.003μM，0.25μM，0.08μM，及び0.31μMで10％の増殖を阻害（IC10）し，0.16μM，8.3μM，1.3μM，及び11.6μMで50％の増殖を阻害（IC50）することを示した。結果を表７に示し，図５ａにグラフで示す。
【０１６１】
同様に，全ての試験化合物（抗癌剤）について，細胞毒性アッセイにおいて個々の化合物が30％，70％及び90％の活性をそれぞれ示す投与量から，IC30，IC70及びIC90濃度を決定した。
【０１６２】
【表１】
2014515394.tif 000011
【０１６３】
【表２】
2014515394.tif 000012
【０１６４】
【表３】
2014515394.tif 000013
【０１６５】
【表４】
2014515394.tif 000014
【０１６６】
【表５】
2014515394.tif 000015
【０１６７】
【表６】
2014515394.tif 000016
【０１６８】
【表７】
2014515394.tif 000017
【０１６９】
〔実施例４〕
SCC-25細胞及びFADU細胞における化合物Ａ及びソラフェニブの組合せ試験
Ａ）SCC-25細胞
次の最終濃度即ち0.18μMの投与量でのソラフェニブと，次の最終濃度即ち0.1μM，0.4μM及び4.1μMの投与量での化合物Ａとを，単独投与で，及びこれら２種の抗癌剤についてのこれらの投与量範囲のあらゆる可能な組合せで，分析した。処理の流れは次のとおりである；SCC-25細胞をソラフェニブで0〜24時間処理した。24時間の終わりに，無添加のMEM（最小必須培地）培地で細胞を２回洗浄した。10％血清（200μL／ウェル）を添加した新たなMEMを加え，続いて化合物Ａで24時間〜96時間処理した。結果を表８に示し，また図６ａにグラフで示す。
【０１７０】
【表８】
2014515394.tif 000018
【０１７１】
Ｂ）Detroit-562細胞．
次の最終濃度即ち1.8μMの投与量でのソフェラニブと，次の最終濃度即ち0.5μM，1.3μM及び12.1μMの投与量での化合物Ａとを，単独投与で，及びこれら２種の抗癌剤についてのこれらの投与量範囲のあらゆる可能な組合せで，分析した。処理の流れは次のとおりである；Detroit-562細胞をソフェラニブで0〜24時間処理した。24時間の終わりに，無添加のMEM培地で細胞を2回洗浄した。10％血清（200μL／ウェル）を添加した新たなMEMを加え，続いて化合物Ａで24時間〜96時間処理した。結果を表９に示し，また図７ａにグラフで示す
【０１７２】
【表９】
2014515394.tif 000019
【０１７３】
Ｃ）FADU細胞
次の最終濃度即ち3.9μMの投与量でのソラフェニブと，次の最終濃度即ち0.2μM，1.3μM及び8.3μMの投与量での化合物Ａとを，単独投与で，及びこれら２種の抗癌剤についてのこれらの投与量範囲のあらゆる可能な組合せで，分析した。処理の流れは次のとおりである；FADU細胞をソラフェニブで0〜24時間処理した。24時間の終わりに，無添加のMEM培地で細胞を2回洗浄した。10％血清（200μL／ウェル）を添加した新たなMEMを加え，続いて化合物Ａで24時間〜96時間処理した。結果を表１０に示し，また図８ａにグラフで示す。
【０１７４】
【表１０】
2014515394.tif 000020
【０１７５】
〔実施例５〕
SCC-25，Detroit-562及びFADU細胞における化合物Ｂ及びソラフェニブの組合せ試験
Ａ）SCC-25細胞
次の最終濃度即ち0.18μMの投与量のソラフェニブと，次の最終濃度即ち0.2μM，1.1μM及び4.8μMの投与量の化合物Ｂとを，単独投与で，及びこれら２種の抗癌剤についてのこれらの投与量範囲のあらゆる可能な組合せで，分析した。処理の流れは次のとおりである；SCC-25細胞をソラフェニブで0〜24時間処理した。24時間の終わりに，無添加のMEM培地で細胞を２回洗浄した。10％血清（200μL／ウェル）を添加した新たなMEMを加え，続いて化合物Ｂで24時間〜96時間処理した。結果を表１１に示し，また図６ｂにグラフで示す。
【０１７６】
【表１１】
2014515394.tif 000021
【０１７７】
Ｂ）Detroit-562細胞
次の最終濃度即ち1.8μMの投与量でのソフェラニブと，次の最終濃度即ち2.7μM，14.1μM及び25.5μMの投与量での化合物Ｂとを，単独投与で，及びこれら２種の抗癌剤についてのこれらの投与量範囲のあらゆる可能な組合せで，分析した。処理の流れは次のとおりである；Detroit-562細胞をソフェラニブで0〜24時間処理した。24時間の終わりに，無添加のMEM培地で細胞を2回洗浄した。10％血清（200μL／ウェル）を添加した新たなMEMを加え，続いて化合物Ｂで24時間〜96時間処理した。結果を表１２に示し，また図７ｂにグラフで示す。
【０１７８】
【表１２】
2014515394.tif 000022
【０１７９】
Ｃ）FADU細胞
次の最終濃度即ち3.9μMの投与量でのソラフェニブと，次の最終濃度即ち2.3μM，4.1μM及び9.6μMの投与量での化合物Ｂとを，単独投与で，及びこれら２種の薬物についてのこれらの投与量範囲のあらゆる可能な組合せで，分析した。処理の流れは次のとおりである；FADU細胞をソラフェニブで0〜24時間処理した。24時間の終わりに，無添加のMEM培地で細胞を2回洗浄した。10％血清（200μL／ウェル）を添加した新たなMEMを加え，続いて化合物Ｂで24時間〜96時間処理した。結果を次の表１３に示し，また図８ｂにグラフで示す。
【０１８０】
【表１３】
2014515394.tif 000023
【０１８１】
〔実施例６〕
SCC-25，Detroit-562及びFADU細胞における化合物Ａ及びラパチニブの組合せ試験
Ａ）SCC-25癌細胞
次の最終濃度即ち0.2μMの投与量でのラパチニブと，次の最終濃度即ち0.2μM，0.5μM及び3.3μMの投与量での化合物Ａとを，単独投与で，及びこれら２種の薬物についてのこれらの投与量範囲のあらゆる可能な組合せで，分析した。処理の流れは次のとおりである；SCC-25細胞をラパチニブで0〜24時間処理した。24時間の終わりに，無添加のMEM培地で細胞を2回洗浄した。10％血清（200μL／ウェル）を添加した新たなMEMを加え，続いて化合物Ａで24時間〜96時間処理した。結果を次の表１４に示し，また図９ａにグラフで示す。
【０１８２】
【表１４】
2014515394.tif 000024
【０１８３】
Ｂ）Detroit-562癌細胞
次の最終濃度即ち1μMの投与量でのラパチニブと，次の最終濃度即ち0.5μM，1.3μM及び12.1μMの投与量での化合物Ａとを，単独投与で，及びこれら２種の抗癌剤についてのこれらの投与量範囲のあらゆる可能な組合せで，分析した。処理の流れは次のとおりである；Detroit-562細胞をラパチニブで0〜24時間処理した。24時間の終わりに，無添加のMEM培地で細胞を2回洗浄した。10％血清（200μL／ウェル）を添加した新たなMEMを加え，続いて化合物Ａで24時間〜96時間処理した。結果を次の表１５に示し，また図１０ａにグラフで示す。
【０１８４】
【表１５】
2014515394.tif 000025
【０１８５】
Ｃ）FADU癌細胞
次の最終濃度即ち0.8μMの投与量でのラパチニブと，次の最終濃度即ち0.2μM，1.3μM及び8.3μMの投与量での化合物Ａとを，単独投与で，及びこれら２種の薬物についてのこれらの投与量範囲のあらゆる可能な組合せで，分析した。処理の流れは次のとおりである；FADU細胞をラパチニブで0〜24時間処理した。24時間の終わりに，無添加のMEM培地で細胞を2回洗浄した。10％血清（200μL／ウェル）を添加した新たなMEMを加え，続いて化合物Ａで24時間〜96時間処理した。結果を次の表１６に示し，また図１１ａにグラフで示す。
【０１８６】
【表１６】
2014515394.tif 000026
【０１８７】
〔実施例７〕
SCC-25，Detroit-562及びFADU細胞における化合物Ｂ及びラパチニブの組合せ試験
Ａ）SCC-25癌細胞
次の最終濃度即ち0.2μMの投与量でのラパチニブと，次の最終濃度即ち0.2μM，1.1μM及び4.8μMの投与量での化合物Ｂとを，単独投与で，及びこれら２種の薬物についてのこれらの投与量範囲のあらゆる可能な組合せで，分析した。処理の流れは次のとおりである；SCC-25細胞をソラフェニブで0〜24時間処理した。24時間の終わりに，無添加のMEM培地で細胞を２回洗浄した。10％血清（200μL／ウェル）を添加した新たなMEMを加え，続いて化合物Ａで24時間〜96時間処理した。結果を表１７に示し，また図９ｂにグラフで示す。
【０１８８】
【表１７】
2014515394.tif 000027
【０１８９】
Ｂ）Detroit-562癌細胞
次の最終濃度即ち1.0μMの投与量でのラパチニブと，次の最終濃度即ち2.7μM，14.1μM及び25.2μMの投与量での化合物Ｂとを，単独投与で，及びこれら２種の薬物についてのこれらの投与量範囲のあらゆる可能な組合せで，分析した。処理の流れは次のとおりである；Detroit-562細胞をラパチニブで0〜24時間処理した。24時間の終わりに，無添加のMEM培地で細胞を２回洗浄した。10％血清（200μL／ウェル）を添加した新たなMEMを加え，続いて化合物Ａで24時間〜96時間処理した。結果を表１８に示し，図１０ｂにグラフで示す。
【０１９０】
【表１８】
2014515394.tif 000028
【０１９１】
Ｃ）FADU癌細胞
次の最終濃度即ち0.8μMの投与量でのラパチニブと，次の最終濃度即ち2.3μM，4.1μM及び9.6μMの投与量での化合物Ｂとを，単独投与で，及びこれら２種の抗癌剤についてのこれらの投与量範囲のあらゆる可能な組合せで，分析した。処理の流れは次のとおりである；FADU細胞をラパチニブで0〜24時間処理した。24時間の終わりに，無添加のMEM培地で細胞を２回洗浄した。10％血清（200μL／ウェル）を添加した新たなMEMを加え，続いて化合物Ａで24時間〜96時間処理した。結果を表１９に示し，また図１１ｂにグラフで示す。
【０１９２】
【表１９】
2014515394.tif 000029
【０１９３】
〔実施例８〕
Detroit-562細胞における化合物Ａ及びエルロチニブのIC30の濃度での組合せ試験
エルロチニブと化合物Ａとの組合せが双方の抗癌剤のIC30において相乗的であることが見出された。IC30におけるエルロチニブは20.3％の細胞毒性を示し，IC30における化合物Ａは8.30％の細胞毒性を示した。しかしながら，IC30におけるエルロチニブでの24時間とこれに続くIC30における化合物Ａでの48時間という組合せとして用いた場合，60％までの細胞毒性の増大が示され，これは相加効果より32％大きい細胞毒性であり，Detroit-562細胞におけるこれら２種の抗癌剤の間の，0.35という併用指数（combination index）での相乗効果を示唆している。結果を表２０に示し，また図１２ａにグラフで示す。
【０１９４】
【表２０】
2014515394.tif 000030
【０１９５】
〔実施例９〕
FADU細胞における化合物Ａとエルロチニブとの組合せ試験
エルロチニブと化合物Ａとの組合せがこれら双方の抗癌剤のIC30において相乗的であることが見出された。IC30におけるエルロチニブは16％の細胞毒性を示しIC30における化合物Ａは12.3％の細胞毒性を示した。しかしながら，IC30の濃度のエルロチニブでの24時間とこれに続くIC30の濃度での化合物Ａでの48時間という組合せとして用いた場合，77％までの細胞毒性の増大が示され，これは相加効果より49％大きい細胞毒性であり，FADU細胞におけるこれら２種の薬物の間の，0.23という併用指数での相乗効果を示唆している。結果を表２１に示し，また図１２ｂにグラフで示す。
【０１９６】
【表２１】
2014515394.tif 000031
【０１９７】
化合物Ａ，シスプラチン及び５−ＦＵよりなる３種組合せの使用を伴うインビトロ試験
【０１９８】
〔実施例１０〕
Detroit-562細胞における化合物Ａ，シスプラチン及び５−ＦＵのIC30での組合せ試験
化合物Ａと（シスプラチン及び５−ＦＵ）との組合せが各抗癌剤のIC30において相乗的であることが見出された。IC30における化合物Ａは10.4％の細胞毒性を示し，IC30における（シスプラチン及び５−ＦＵ）は28.60％の細胞毒性を示した。しかしながら，IC30における（シスプラチン及び５−ＦＵ）での24時間と，これに続くIC30における化合物Ａでの48時間という組合せとして用いた場合，71%までの細胞毒性の増大が示され，これは相加効果より33％大きい細胞毒性であり，Detroit-562細胞におけるこれら３種の抗癌剤の間における0.39という併用指数での相乗効果を示唆している。他方，シスプラチン及び５−ＦＵの２種組合せは0.9という併用指数を示した。これらの結果を表２２に示し，また図１３ａにグラフで示す。
【０１９９】
【表２２】
2014515394.tif 000032
【０２００】
〔実施例１１〕
FADU細胞における化合物Ａ，シスプラチン及び５−ＦＵのIC30での組合せ試験
化合物Ａと（シスプラチン及び５−ＦＵ）との組合せが各抗癌剤のIC30において相乗的であることが見出された。IC30での化合物Ａは6.1％の細胞毒性を示し，IC30における（シスプラチン及び５−ＦＵ）は30.1％の細胞毒性を示した。しかしながら，IC30の濃度における（シスプラチン及び５−ＦＵ）での24時間と，これに続くIC30における化合物Ａでの48時間という組合せとして用いた場合，81％までの細胞毒性の増大が示され，これは相加効果より44％大きい細胞毒性であり，FADU細胞におけるこれら３種の薬物の相乗効果の間における0.23と併用指数での相乗効果を示唆している。一方，シスプラチン及び５−ＦＵの２種組合せは0.89という併用指数を示した。これらの結果を表２３に示し，また図１３ｂにグラフで示す。
【０２０１】
【表２３】
2014515394.tif 000033
【０２０２】
〔実施例１２〕
Detroit-562細胞における化合物Ａ，シスプラチン及び５−ＦＵの，ドセタキセルとのIC30における組合せ試験
化合物Ａと（シスプラチン及び５−ＦＵ）の，ドセタキセルとの組合せが各抗癌剤のIC30において相乗的であることが見出された。化合物Ａ及びドセタキセルはIC30において，それぞれ16.8％及び18.30％の細胞毒性を示し，（シスプラチン及び５−ＦＵ）はIC30において31.3％の細胞毒性を示した。しかしながら，IC30の濃度におけるドセタキセルでの12時間と，これに続くIC30の濃度における（シスプラチン及び５−ＦＵ）での12時間，及びこれに続くIC30の濃度における化合物Ａでの48時間という組合せとして用いた場合，0.29の併用指数で96.38％までの細胞毒性の増大が示された。結果を表２４に示し，図１４ａにグラフで示す。
【０２０３】
【表２４】
2014515394.tif 000034
【０２０４】
〔実施例１３〕
FADU細胞における化合物Ａ，シスプラチン及び５−ＦＵの，ドセタキセルとのIC30における組合せ試験
化合物Ａと（シスプラチン及び５−ＦＵ）の，ドセタキセルとの組合せが各抗癌剤のIC30において相乗的であることが見出された。化合物Ａ及びドセタキセルはIC30の濃度において，それぞれ11.77％及び20.02％の細胞毒性を示した。（シスプラチン及び５−ＦＵ）はIC30の濃度において51.39％の細胞毒性を示した。しかしながら，IC30の濃度におけるドセタキセルでの12時間と，これに続くIC30の濃度における（シスプラチン及び５−ＦＵ）での12時間，及びこれに続くIC30の濃度における化合物Ａでの48時間という組合せとして用いた場合，0.12の併用指数で98.24％までの細胞毒性の増大が示された。結果を表２５に示し，図１４ｂにグラフで示す。
【０２０５】
【表２５】
2014515394.tif 000035
【０２０６】
〔実施例１４〕
切断されたカスパーゼ−３発現レベルの分析
この研究は，化合物Ａ又は化合物Ｂと組み合わせたソフェラニブ又はラパチニブからなる組合せが増殖を阻害するメカニズム及びそれが頭頸部癌細胞のアポトーシスを誘導し得るか否かを評価するために行われた。細胞を96ウェルプレートに7.5×103個／ウェルの密度に播いた。播種の24時間後に，最小必須培地を新たな10％血清を含む最小必須培地に交換した。以下に述べるように，SCC-25，Detroit-562及びFADU細胞を抗癌剤（化合物Ａ又は化合物Ｂとの組合せでのソラフェニブ又はラパチニブ）の特定濃度で処理し，48時間インキュベートした。48時間の最後に，タンパク質の発現を測定するために，細胞を96ウェルプレート中で800×ｇで５分間遠沈させた。培養上清を除去し，200μLのカスパーゼ−３アッセイ緩衝液を加えて，プレートを再度800×ｇで５分間遠心した。上清を除去し，細胞を100μLのカスパーゼ−３溶解緩衝液で溶解させ，オービタルシェイカー中300rpmにて室温で30分間インキュベートした。更にプレートを800×ｇで10分間遠心し，90μLの上清を新たな黒色ウェルプレートに移した。90μLの溶解緩衝液に100μLのカスパーゼ−３基質を添加して37℃にて30分間インキュベートした。インキュベーションの最後に，励起波長485nm及び発光波長535nmにおいて，Tecan Safireマルチモードリーダーでプレートを読み取った。
【０２０７】
Ａ）カスパーゼ−３活性を評価するためのSCC-25細胞におけるソラフェニブ及び化合物Ａ又は化合物Ｂの処理パターン
ソラフェニブによる24時間の処理に続く化合物Ａ又は化合物Ｂの何れかによる48時間の処理は，単独処理の場合に比べてカスパーゼ−３発現の顕著な上昇を示した。図１５ａ及び図１５ｂにグラフで示されているように，化合物Ａ又は化合物Ｂの何れも，組合せにおいてカスパーゼ−３発現をより強力に誘導した。
【０２０８】
Ｂ）カスパーゼ−３活性を評価するためのSCC-25細胞におけるラパチニブ及び化合物Ａ又は化合物Ｂの処理パターン
ラパチニブによる24時間の処理に続く化合物Ａ又は化合物Ｂの何れかによる48時間の処理は，単独処理の場合に比べてカスパーゼ−３発現の顕著な上昇を示した。図１６ａ及び図１６ｂにグラフで示されているように，化合物Ａ又は化合物Ｂの何れも，組合せにおいてカスパーゼ−３発現をより強力に誘導した。
【０２０９】
〔実施例１５〕
ヒト頭頸部癌FaDu（下咽頭扁平上皮癌）異種移植片におけるインビボ有効性試験
臨床癌調査（Clinical cancer search）2003,9, 6052-6061に記載されている方法に従ってインビボ試験を行った。参照により，アッセイの教示に関するその開示を本明細書に組み込む。
【０２１０】
目的
この試験の目的は，ヒト頭頸部癌FaDuの異種移植片モデルにおける，化合物Ａとセツキシマブとの，又はシスプラチン及びセツキシマブの双方との組合せの抗腫瘍活性を評価することである。
【０２１１】
重度複合免疫不全（severe combined immune deficiency (SCID)）マウス系（CbySmn.CB17-Prkdcscid/J）において異種移植片モデルを用い，以下に記載の方法によりインビボ試験を行った。試験結果の統計学的解析が可能であるよう，統計学的に有意な数のマウスを群あたりに選んだ（n=6）。
【０２１２】
方法
非必須アミノ酸及び10％胎仔牛血清を含んだFaDu細胞を，MEM（最小必須培地）中5％CO2，37℃のインキュベーター内で増殖させた。1000rpmでの10分間の遠心により細胞をペレット化した。冷却済みの塩類混合液中に６×10６個／mLのカウントとなるように細胞を懸濁させた；この細胞懸濁液0.2mLを氷上に維持し，SCIDマウスの皮下に注射した。それとわかる腫瘍塊の有無についてマウスを１日おきに観察した。腫瘍サイズが3〜5mm径に達したとき処置群と無処置対照群とからなる各郡に動物を無作為に分けた。処置群は，５つの群即ち１）化合物Ａのみ（第１群）；２）セツキシマブのみ（第２群）；３）シスプラチンのみ（第３群）；４）化合物Ａ＋セツキシマブ（第４群）；及び５）化合物Ａ＋シスプラチン＋セツキシマブ（第５群）より構成された。対照群は処置を受けなかった。単独薬物処置即ち第１，２及び３群に関し，化合物Ａ（35mg/kg）は腹腔経路で，３週間にわたって週の１日目から始めて週５日，１日１回投与され，合計で１５回投与された；シスプラチン（1mg/kg）は，週１回，週の１日目に投与され，合計で３回投与された。セツキシマブは，３週間にわたって週２回，週の１日目及び４日目に投与され，合計で６回投与された。薬物の組合せによる即ち化合物Ａ及びセツキシマブによる処置において従った順序は，２時間の化合物Ａの投与にセツキシマブが続くものであった：
【０２１３】
薬物の組合せ即ち化合物Ａ，シスプラチン及びセツキシマブによる処置において従った順序は，２時間のシスプラチンの投与に２時間の化合物Ａが，次いでセツキシマブが続くものであった。腫瘍の測定は２〜３日間隔で行った。増殖抑制％（GI％）を，実験の終わりに算出した。
【０２１４】
最終手順：
実験の終わりに，高投与量ペントバルビタールナトリウム（100mg/kg，i.p./i.v.）により又は二酸化炭素ガスに曝すことにより，動物を安楽死させた
【０２１５】
結果
結果を表２６に示し，また図１７ａにグラフで示す。図１７ａは，薬物（治療剤）の投与期間にわたっての平均群体重のプロットを示す。図１７ｂは，18日の期間にわたる頭頸部癌（Fadu）異種移植片の平均％腫瘍重量を示す。
【０２１６】
【表２６】
2014515394.tif 000036
【０２１７】
処置群において，増殖阻害はｐ＜0.001と高度に有意であった，即ち抗腫瘍剤の組合せの使用を伴う第４及び５群は，それぞれ腫瘍増殖（TG）阻害が79％及び77％であった。何れの処置群においても体重の優位な減少はなかった。
【０２１８】
結論
化合物Ａとセツキシマブとの組合せ及び化合物Ａ，セツキシマブ及びシスプラチンの組合せは，FaDu頭頸部癌異種移植片モデルにおいて同様の抗腫瘍活性を示し，これらの何れの薬物単独の場合よりも優位に高かった。
【０２１９】
以上，本発明の種々の具体例を詳細に記述してきたが，本発明の精神又は範囲から逸脱するなしにその多くの自明な変形が可能であることから，上記の全段落により定義される本発明が上述の具体的詳細に限定されるものではないことを理解しなければならない。
【図１ａ】
2014515394.tif 000039
【図１ｂ】
2014515394.tif 000040
【図２ａ】
2014515394.tif 000041
【図２ｂ】
2014515394.tif 000042
【図３ａ】
2014515394.tif 000043
【図３ｂ】
2014515394.tif 000044
【図４ａ】
2014515394.tif 000045
【図４ｂ】
2014515394.tif 000046
【図５ａ】
2014515394.tif 000047
【図５ｂ】
2014515394.tif 000048
【図６ａ】
2014515394.tif 000049
【図６ｂ】
2014515394.tif 000050
【図７ａ】
2014515394.tif 000051
【図７ｂ】
2014515394.tif 000052
【図８ａ】
2014515394.tif 000053
【図８ｂ】
2014515394.tif 000054
【図９ａ】
2014515394.tif 000055
【図９ｂ】
2014515394.tif 000056
【図１０ａ】
2014515394.tif 000057
【図１０ｂ】
2014515394.tif 000058
【図１１ａ】
2014515394.tif 000059
【図１１ｂ】
2014515394.tif 000060
【図１２ａ】
2014515394.tif 000061
【図１２ｂ】
2014515394.tif 000062
【図１３ａ】
2014515394.tif 000063
【図１３ｂ】
2014515394.tif 000064
【図１４ａ】
2014515394.tif 000065
【図１４ｂ】
2014515394.tif 000066
【図１５ａ】
2014515394.tif 000067
【図１５ｂ】
2014515394.tif 000068
【図１６ａ】
2014515394.tif 000069
【図１６ｂ】
2014515394.tif 000070
【図１７ａ】
2014515394.tif 000071
【図１７ｂ】
2014515394.tif 000072
【手続補正書】
【提出日】平成26年1月31日(2014.1.31)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
頭頸部扁平上皮癌の治療における使用のための薬剤組合せであって，式Ｉ；
【化１】
2014515394.tif 000073
〔式中，Ａｒはフェニル基であり，無置換であるか又はハロゲン，ニトロ，シアノ，Ｃ１〜Ｃ４アルキル，トリフルオロメチル，ヒドロキシル又はＣ１〜Ｃ４アルコキシから選ばれる１，２又は３個の同一の又は異なった置換基で置換されている。〕の化合物から選ばれるＣＤＫ阻害剤又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物と；ソラフェニブ，ラパチニブ，エルロチニブ，シスプラチン，５−フルオロウラシル，ドセタキセル又はセツキシマブから選ばれる抗腫瘍剤の１種又は２種以上とを含んでなるものである，薬剤組合せ。
【請求項２】
請求項１の使用のための薬剤組合せであって，式Ｉの化合物においてフェニル基が塩素，臭素，フッ素又はヨウ素，Ｃ１〜Ｃ４アルキル又はトリフルオロメチルから選ばれる１，２又は３個の同一の又は異なった置換基で置換されているものである；又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物である，薬剤組合せ。
【請求項３】
請求項２の使用のための薬剤組合せであって，式Ｉの化合物においてフェニル基が塩素で置換されているものである，薬剤組合せ。
【請求項４】
請求項３の使用のための薬剤組合せであって，式Ｉの化合物が（＋）−トランス−２−（２−クロロフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチルピロリジン−３−イル）クロメン−４−オン塩酸塩（化合物Ａ）である，薬剤組合せ。
【請求項５】
請求項２の使用のための薬剤組合せであって，式Ｉの化合物においてフェニル基が塩素及びトリフルオロメチルから選ばれる２種の異なった置換基で置換されているものである，薬剤組合せ。
【請求項６】
請求項５の使用のための薬剤組合せであって，式Ｉの化合物が（＋）−トランス−３−[２[（２−クロロ−４−トリフルオロメチルフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチルピロリジン−３−イル）クロメン−４−オン塩酸塩（化合物Ｂ）である，薬剤組合せ。
【請求項７】
請求項１〜６の何れかの使用のための薬剤組合せであって，該抗腫瘍剤がソラフェニブである，薬剤組合せ。
【請求項８】
請求項１〜６の何れかの使用のための薬剤組合せであって，該抗腫瘍剤がラパチニブである，薬剤組合せ。
【請求項９】
請求項１〜６の何れかの使用のための薬剤組合せであって，該抗腫瘍剤がエルロチニブである，薬剤組合せ。
【請求項１０】
請求項１〜６の何れかの使用のための薬剤組合せであって，該抗腫瘍剤がシスプラチン及び５−フルオロウラシルである，薬剤組合せ。
【請求項１１】
請求項１〜１０の何れかの使用のための薬剤組合せであって，放射線を更に含んでなるものである薬剤組合せ。
【請求項１２】
式Ｉ；
【化２】
2014515394.tif 000074
〔式中，Ａｒはフェニル基であり，無置換であるか又はハロゲン，ニトロ，シアノ，Ｃ１〜Ｃ４アルキル，トリフルオロメチル，ヒドロキシル又はＣ１〜Ｃ４アルコキシから選ばれる１，２又は３個の同一の又は異なった置換基で置換されている。〕の化合物から選ばれるＣＤＫ阻害剤又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物と，ソラフェニブ，ラパチニブ，エルロチニブ，シスプラチン，５−フルオロウラシル，ドセタキセル又はセツキシマブ又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩から選ばれる１種又は２種以上の抗腫瘍剤とを，薬剤学的に許容し得る担体と共に含んでなる，頭頸部扁平上皮癌治療用薬剤組成物。
【請求項１３】
式Ｉの化合物が（＋）−トランス−３−[２[（２−クロロ−４−トリフルオロメチルフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチルピロリジン−３−イル）クロメン−４−オン塩酸塩（化合物Ｂ）である，請求項１２の薬剤組成物。
【請求項１４】
（＋）−トランス−３−[２[（２−クロロ−４−トリフルオロメチルフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチルピロリジン−３−イル）クロメン−４−オン塩酸塩（化合物Ｂ）と，ソラフェニブ，ラパチニブ，エルロチニブ，シスプラチン，５−フルオロウラシル，ドセタキセル又はセツキシマブ又は薬剤学的に許容し得るそれらの塩から選ばれる１種又は２種以上の抗腫瘍剤とを，薬剤学的に許容し得る担体と共に含んでなる，請求項１２の頭頸部扁平上皮癌治療用薬剤組成物。
【請求項１５】
頭頸部扁平上皮癌治療用の医薬の製造のための，式Ｉ；
【化３】
2014515394.tif 000075
〔式中，Ａｒはフェニル基であり，無置換であるか又はハロゲン，ニトロ，シアノ，Ｃ１〜Ｃ４アルキル，トリフルオロメチル，ヒドロキシル又はＣ１〜Ｃ４アルコキシから選ばれる１，２又は３個の同一の又は異なった置換基で置換されている。〕の化合物から選ばれるＣＤＫ阻害剤又は薬剤学的に許容し得るその塩又は溶媒和物の治療上有効量をソラフェニブ，ラパチニブ，エルロチニブ，シスプラチン，５−フルオロウラシル，ドセタキセル又はセツキシマブから選ばれる抗腫瘍剤の１種又は２種以上の治療上有効量と組合せて含んでなる薬剤組成物の使用。
【請求項１６】
該式Ｉの化合物が（＋）−トランス−２−（２−クロロフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチルピロリジン−３−イル）クロメン−４−オン塩酸塩（化合物Ａ）である，請求項１５の薬剤組成物の使用。
【請求項１７】
該式Ｉの化合物が（＋）−トランス−３−[２[（２−クロロ−４−トリフルオロメチルフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチルピロリジン−３−イル）クロメン−４−オン塩酸塩（化合物Ｂ）である，請求項１５の薬剤組成物の使用。
【国際調査報告】
2014515394.tif 000076
2014515394.tif 000077
2014515394.tif 000078