(57)【要約】  本開示は、ＭＡＧＥＡ３結合抗体を含む併用療法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＭＡＧＥＡ３でワクチン接種したヒト患者から誘導された、ＭＡＧＥＡ３に結合する単離されたモノクローナル抗体またはその結合フラグメント。
【請求項２】
軽鎖可変領域および／または重鎖可変領域を含む、単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントであって、
ａ．前記軽鎖可変領域が、配列番号８、１８、２８、３８もしくはそれに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号９、１９、１９、２９、３９もしくはそれに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および配列番号１０、２０、３０、４０もしくはそれに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む；ならびに／または
ｂ．前記重鎖可変領域が、配列番号５、１５、２５、３５もしくはそれに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号６、１６、２６、３６もしくはそれに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および／または配列番号７、１７、２７、３７もしくはそれに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む、
請求項１に記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント。
【請求項３】
配列番号４、１４，２４、３４またはそれに少なくとも８０％同一な配列を含む軽鎖可変領域および配列番号３、１３、２３、３３またはそれに少なくとも８０％同一な配列を含む重鎖可変領域を含む、請求項１または２に記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント。
【請求項４】
配列番号４２を含むエピトープに結合する、請求項１から３のいずれかに記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント。
【請求項５】
配列番号４５を含むエピトープに結合する、請求項１から４のいずれかに記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント。
【請求項６】
配列番号４６を含むエピトープに結合する、請求項１から５のいずれかに記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント。
【請求項７】
ＭＡＧＥＡ４、ＭＡＧＥＡ１およびＭＡＧＥＡ１０に結合しない、請求項１から６のいずれかに記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント。
【請求項８】
ＭＡＧＥＡ２に結合しない、請求項７に記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント。
【請求項９】
請求項１から８のいずれかに記載のＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントを含む、医薬組成物。
【請求項１０】
過剰増殖疾患の治療に使用するための、請求項１から８のいずれかに記載のＭＡＧＥＡ３結合抗体もしくはその結合フラグメントまたは請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記過剰増殖疾患が、基底細胞癌；膀胱癌；骨癌；中枢神経系腫瘍；バーキットリンパ腫；乳癌；子宮頸癌；慢性骨髄性白血病；結腸癌；直腸癌；結腸直腸癌、食道癌；ユーイングファミリーの腫瘍；肝外胆管癌；胆嚢癌；消化管間葉性腫瘍（ＧＩＳＴ）；神経膠腫；頭頸部癌；膵島細胞腫瘍；カポジ肉腫；白血病；肝臓癌；リンパ腫；ホジキンリンパ腫；非ホジキンリンパ腫；中皮腫；多発性骨髄腫／形質細胞腫瘍；骨髄性白血病；鼻咽頭癌；神経芽細胞腫；小細胞肺癌；非小細胞肺癌；中咽頭癌；卵巣癌；膵臓癌；副甲状腺癌；陰茎癌；咽頭癌；クロム親和性細胞腫；下垂体腫瘍；前立腺癌；腎細胞（腎臓）癌；気道癌腫；網膜芽細胞腫；皮膚癌（黒色腫）；小腸癌；軟部組織肉腫；扁平上皮癌；扁平上皮頸部癌；胃癌；Ｔ細胞リンパ腫；精巣癌；咽喉癌；甲状腺癌；腎盂および尿管の移行上皮癌；尿道癌；子宮癌；腟癌；外陰癌およびウィルムス腫瘍から選択される、請求項１０における使用のための、請求項１から８のいずれかに記載のＭＡＧＥＡ３結合抗体もしくはその結合フラグメントまたは請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記過剰増殖疾患が、ＭＡＧＥＡ３の発現によって特徴付けられる、請求項１０または請求項１１における使用のための、請求項１から８のいずれかに記載のＭＡＧＥＡ３結合抗体もしくはその結合フラグメントまたは請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記過剰増殖疾患が、ＭＡＧＥＡ３の発現によって特徴付けられ、前記過剰増殖疾患が、黒色腫、乳癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、多発性骨髄腫および／または膵臓癌から選択される、請求項１０から１３のいずれかにおける使用のための、請求項１から８のいずれかに記載のＭＡＧＥＡ３結合抗体もしくはその結合フラグメントまたは請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
請求項１から８のいずれかに記載のＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントを含む、診断組成物。
【請求項１５】
過剰増殖疾患の診断において使用するための、請求項１から８のいずれかに記載のＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントに関する。本発明はさらに、疾患、特に過剰増殖疾患を治療するためのかかるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントの使用、およびかかる併用を用いて疾患、特に過剰増殖疾患を治療するための方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
がん治療では、罹患組織を可能な限り効果的かつ選択的に治療することが一般的な目的である。治療的モノクローナル抗体は、腫瘍選択的抗原またはエピトープを標的化することによって腫瘍選択的な治療を可能にする、医薬的に活性な薬剤のクラスと考えられている。
【０００３】
しかし、ある種のがん、例えば、ヒト増殖因子レセプター（例えば、ＨＥＲ−２ＲまたはＥＧＦＲ）に関連するがんでは、治療的抗体によって標的化されるエピトープは正常組織上でも見出され、これは、抗体投与の際の有害な副作用、またはかかる抗体の薬物動態学的挙動における末梢シンク効果を説明する。
【０００４】
がんと闘うように天然の免疫応答を刺激するために適用される、全身的に活性な免疫刺激薬物または抗体を適用することによって、同様の状況が成り立つ。かかる免疫刺激因子は、例えば、ＴＬＲ−７レセプターまたはＴＬＲ−９レセプターの活性化因子などの、自然免疫系の活性化因子である。
【０００５】
それにもかかわらず、モノクローナル抗体は、過去数十年間にわたってがんを治療するための治療ツールとして次第に受容されてきた。キメラ抗体およびヒト化抗体の出現は、モノクローナル治療的抗体の成功に顕著に寄与したが、これは、第二および第三世代のモノクローナル抗体が、それらの免疫原性の低下に関して、元のマウス由来モノクローナル抗体と比較して、改善された副作用プロフィールを示したからである。
【０００６】
ヒト化抗体の治療有効性が証明されたにもかかわらず、完全ヒト抗体が興味を集めている。しかし、その生成は、今なお技術的困難の傾向がある。例えば、完全ヒト抗体をマウス（このマウスでは、抗体をコードするゲノム領域は、ヒト対応物において置換されている）において生成することは、負担が大きいままである。代替的アプローチ（例えば、ファージディスプレイ）は、ヒト免疫系の天然の可変性および複雑性を欠いている。
【０００７】
従って、（腫瘍）限局化様式の作用を可能にする、規制認可を満たす可能性が増加した治療的モノクローナル抗体が、継続して必要とされている。さらに、改善された有効性を可能にするがん治療が一般に望まれている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の目的は、がんなどの過剰増殖疾患を含むヒト疾患を治療／診断するための治療／診断ツールとして使用され得る、医薬的に活性な薬剤を提供することである。特に、本発明の目的は、罹患組織における限局化した免疫反応を確実にすることによって過剰増殖疾患を選択的に治療するために使用され得る、医薬的に活性な薬剤の併用を提供することである。
【０００９】
さらに、本発明の目的は、かかる医薬的に活性な薬剤および医薬的に活性な薬剤のかかる併用を使用することによって、例えばがんなどの過剰増殖疾患に罹患している患者または罹患している疑いのある患者を治療および／または診断する方法を提供することである。
【００１０】
これらおよび他の目的は、本明細書の以下の記載から明らかとなり、個々の独立請求項の対象によって解決される。本発明の好ましい実施形態のいくつかは、従属請求項の対象を形成する。本発明のなお別の実施形態は、以下の記載から取られ得る。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
第一の態様において、本発明は、単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントに一般に関する。
【００１２】
従って、第一の態様の一実施形態において、本発明は、かかる単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントを含む医薬組成物に関する。
【００１３】
従って、第一の態様の別の実施形態において、本発明は、かかる単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントを含む診断組成物に関する。
【００１４】
かかるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントは、モノクローナルのキメラ、ヒト化もしくはヒト抗体またはそれらの結合フラグメントであり得る。患者由来のヒトモノクローナル抗体が好まれ得る。
【００１５】
別の実施形態において、かかるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントは、ＭＡＧＥ−ＭＡＧＥＡ１、ＭＡＧＥＡ４、ＭＡＧＥＡ１０および／または任意選択でさらにはＭＡＧＥＡ２などの他のＭＡＧＥアイソフォームを超えて、ＭＡＧＥＡ３に対して優先的に結合する。
【００１６】
好ましい例示的なＭＡＧＥＡ３結合抗体またはそのフラグメントは、例示的抗体１２２Ｇ３、３２Ｈ２、３４Ｇ９もしくは１０２Ｇ１０の可変重鎖および／もしくは可変軽鎖、または例示的抗体１２２Ｇ３、３２Ｈ２、３４Ｇ９もしくは１０２Ｇ１０の可変重鎖および／もしくは可変軽鎖と少なくとも８０％の配列同一性を有する可変重鎖および／もしくは可変軽鎖、を含み得る。
【００１７】
他の好ましい例示的ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはそのフラグメントは、それらの可変重鎖および／または可変軽鎖内に、例示的抗体１２２Ｇ３、３２Ｈ２、３４Ｇ９もしくは１０２Ｇ１０の相補性決定領域（ＣＤＲ）の少なくとも１つ、２つまたは３つ全てを含み得る。かかる抗体はまた、それらの可変重鎖および／または可変軽鎖内に、例示的抗体１２２Ｇ３、３２Ｈ２、３４Ｇ９もしくは１０２Ｇ１０のＣＤＲと少なくとも８０％の配列同一性を有するＣＤＲを含み得る。
【００１８】
本発明はさらに、過剰増殖疾患、特にＭＡＧＥＡ３を発現する腫瘍を治療する際に使用するための、かかる特異的ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントを含む医薬組成物に関する。
【００１９】
本発明はさらに、過剰増殖疾患、特にＭＡＧＥＡ３を発現する腫瘍を治療するための医薬品の製造における、かかる特異的ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントの使用に関する。
【００２０】
本発明はさらに、かかる特異的ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントを患者に投与することによる、過剰増殖疾患、特にＭＡＧＥＡ３を発現する腫瘍を治療する方法に関する。かかる過剰増殖疾患には、好ましくは、黒色腫、乳癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、多発性骨髄腫および／または膵臓癌が含まれる。
【００２１】
本発明のこの第一の態様の一実施形態において、ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントを含む医薬組成物は、免疫系を活性化することが可能な化合物を含まない。
【００２２】
本発明のこの第一の態様の別の実施形態において、この医薬組成物は、ＭＡＧＥＡ３結合抗体または結合フラグメントを、唯一の医薬的に活性な薬剤として含む。
【００２３】
本発明のこの第一の態様の他の実施形態において、本明細書中に記載されるＭＡＧＥＥ−Ａ３結合抗体またはその結合フラグメントは、例えば本明細書中で言及される過剰増殖疾患に罹患した患者を診断するための診断ツールとして使用される。例えばＭＡＧＥＡ３および／またはＭＡＧＥＡ６を発現する過剰増殖疾患の存在および／または発生を診断するために、かかる抗体を使用することが好まれ得る。かかる過剰増殖疾患には、黒色腫、乳癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、多発性骨髄腫および／または膵臓癌が含まれ得る。
【００２４】
従って、一実施形態において、本発明は、本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体または結合フラグメントを含む診断組成物に関する。かかる診断組成物は、例えばＭＡＧＥＡ３および／またはＭＡＧＥＡ６を発現する過剰増殖疾患の存在および／または発生を診断するのに使用され得る。かかる過剰増殖疾患には、黒色腫、乳癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、多発性骨髄腫および／または膵臓癌が含まれ得る。
【００２５】
別の実施形態において、本発明は、過剰増殖疾患を診断する際に使用するための、本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントに関する。これらの疾患は、ＭＡＧＥＡ３および／またはＭＡＧＥＡ６を発現し得る。かかる過剰増殖疾患には、黒色腫、乳癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、多発性骨髄腫および／または膵臓癌が含まれ得る。
【００２６】
別の実施形態において、本発明は、過剰増殖疾患を診断するための組成物および／または医薬品の製造における、本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントの使用に関する。これらの疾患は、ＭＡＧＥＡ３および／またはＭＡＧＥＡ６を発現し得る。かかる過剰増殖疾患には、黒色腫、乳癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、多発性骨髄腫および／または膵臓癌が含まれ得る。
【００２７】
なお別の実施形態において、本発明は、本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントを使用することによって、ヒトまたは動物における過剰増殖疾患を診断する方法に関する。これらの疾患は、ＭＡＧＥＡ３および／またはＭＡＧＥＡ６を発現し得る。かかる過剰増殖疾患には、黒色腫、乳癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、多発性骨髄腫および／または膵臓癌が含まれ得る。
【００２８】
第二の態様では、本発明は、少なくとも１つの腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体またはその結合フラグメントと、少なくとも１つの免疫系を活性化することが可能な化合物との併用に関する。
【００２９】
第二の態様の一実施形態において、本発明は、少なくとも１つの腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体またはその結合フラグメントと、少なくとも１つの免疫系を活性化することが可能な化合物とを含む医薬組成物に関する。
【００３０】
確実にする記載から明らかになるように、かかるＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメントは好ましくは、ＣＴ抗原に結合し、ＮＹ−ＥＳＯ−１またはＭＡＧＥＡ３がその例である。かかる抗体またはその結合フラグメントは、モノクローナルのキメラ、ヒト化もしくはヒト抗体またはそれらの結合フラグメントであり得る。患者由来のヒトモノクローナル抗体が好まれ得る。
【００３１】
好ましい例示的なＭＡＧＥＡ３結合抗体またはそのフラグメントは、以下で言及されるようなＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントであり得る。例示的なＮＹ−ＥＳＯ−１結合抗体またはその結合フラグメントは、ＥＰ  １１  １５０  ５２７．７中で言及されるものであり得る。
【００３２】
以下の記載から明らかになるように、免疫応答を活性化することが可能な化合物は、好ましくは、本明細書の以下に記載されるような、免疫系の少なくとも１つの天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子、免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子のアゴニスト活性化因子、または免疫系の天然のインヒビターもしくは少なくとも共インヒビターの少なくとも１つのアンタゴニストエフェクターから選択され得る。いくつかの好ましい例示的代表は、ＣＤ４０Ｌ、抗ＣＤ４０アゴニスト抗体、例えばＣＰ−８７０，８９３およびＳＧＮ−４０および抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体、例えばトレメリムマブおよびイピリムマブである。
【００３３】
従って、好ましい例示的実施形態は、（ｉ）以下で言及されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはそのフラグメントおよび（ｉｉ）ＣＤ４０Ｌまたは抗ＣＤ４０アゴニスト抗体、例えばＣＰ−８７０，８９３およびＳＧＮ−４０または抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体、例えばトレメリムマブおよびイピリムマブを含む、医薬組成物に関する。
【００３４】
好ましい実施形態において、医薬組成物は、以下に記載するような、（ｉ）以下で言及されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはそのフラグメントなどのＴＡＡ結合抗体または結合フラグメント、（ｉｉ）免疫系の少なくとも１つの天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子、または免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子の少なくとも１つのアゴニスト活性化因子、および（ｉｉｉ）免疫系の天然のインヒビターもしくは少なくとも共インヒビターの少なくとも１つのアンタゴニストエフェクター、を含み得る。いくつかの好ましい例示的実施形態は、（ｉ）ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはそのフラグメント、（ｉｉ）ＣＤ４０Ｌまたは抗ＣＤ４０アゴニスト抗体、例えばＣＰ−８７０，８９３もしくはＳＧＮ−４０、および（ｉｉｉ）抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体、例えばトレメリムマブおよびイピリムマブを含む医薬組成物に関する。
【００３５】
本発明の第二の態様の別の実施形態において、上記医薬的に活性な薬剤、即ち、以下で言及されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはそのフラグメントなどのＴＡＡ結合抗体またはそのフラグメントおよび免疫系を刺激することが可能な化合物は、単一の医薬組成物内では併用されないが、実際には、種々の医薬組成物からなるキットの形態で存在し、活性な薬剤は、種々の医薬組成物間で少なくともある程度まで分割されている。
【００３６】
例えば、かかるキットの１つの医薬組成物は、ＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメント、例えば以下で言及されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントを含み得るが、第二の医薬組成物は、免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子の少なくとも１つのアゴニスト活性化因子、例えば抗ＣＤ４０アゴニスト抗体または免疫系の天然のインヒビターもしくは少なくとも共インヒビターの少なくとも１つのアンタゴニストエフェクター、例えば抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体を含み得る。
【００３７】
キットが、以下で言及されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはそのフラグメントなどのＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメント、ならびに免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子の少なくとも１つのアゴニスト活性化因子、例えば抗ＣＤ４０アゴニスト抗体および免疫系の天然のインヒビターもしくは少なくとも共インヒビターの少なくとも１つのアンタゴニストエフェクター、例えば抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体の両方を含む実施形態において、かかるキットの１つの医薬組成物は、ＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメント、例えば以下で言及されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントを含み得、第二の医薬組成物は、免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子の少なくとも１つのアゴニスト活性化因子、例えば抗ＣＤ４０アゴニスト抗体を含み得、第三の医薬組成物は、免疫系の天然のインヒビターもしくは少なくとも共インヒビターの少なくとも１つのアンタゴニストエフェクター、例えば抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体を含み得る。その代替として、第二の医薬組成物は、免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子の少なくとも１つのアゴニスト活性化因子、例えば抗ＣＤ４０アゴニスト抗体および免疫系の天然のインヒビターもしくは少なくとも共インヒビターの少なくとも１つのアンタゴニストエフェクター、例えば抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体の両方を含み得る。
【００３８】
かかるキットは、キットを形成する種々の医薬調製物の引き続く投与および／または少なくとも部分的に同時の投与による患者の治療を可能にし、従って、上記併用の時宜にかなった最適化された治療レジメンを可能にし得る。
【００３９】
本発明は、過剰増殖疾患などの疾患の治療における使用のための、少なくとも１つの以下で言及されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはそのフラグメントなどの腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体またはその結合フラグメントおよび免疫系を活性化することが可能な少なくとも１つの化合物の併用にも関する。以下で言及されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントなどのＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメント、および少なくとも１つの免疫系を活性化することが可能な化合物は、以下に記載されるように選択され得る。
【００４０】
以下に記載するように、本発明に従う活性な薬剤、即ち以下で言及されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはそのフラグメントなどのＴＡＡ結合抗体またはそのフラグメントおよび免疫系を刺激することが可能な化合物の併用は、患者が、かかる活性な薬剤を含む上記医薬組成物、キットまたは併用の投与の前に、それと同時に、またはそれに引き続いて細胞傷害性治療に供される場合に、改善された有効性を提供し得る。患者が、かかる活性な薬剤を含む上記医薬組成物、キットまたは併用の投与の前にまたはそれと同時にかかる細胞傷害性治療を受けることが好まれ得る。
【００４１】
かかる細胞傷害性治療が細胞傷害性薬剤の投与を含む場合、かかる細胞傷害性薬剤は、本発明に従う医薬組成物またはキット中に含まれ得る。かかる細胞傷害性薬剤の１つの例示的な好ましい代表は、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）である。
【００４２】
本発明の第二の態様の別の実施形態において、本発明に従う医薬組成物およびキットは、がんなどの過剰増殖疾患に罹患しているか、またはかかる疾患に易発性であると疑われる患者を治療するために使用され得る。
【００４３】
好ましくは、本発明に従う医薬組成物およびキットは、ＴＡＡの発現によって特徴付けられるがん、例えばＭＡＧＥＡ３などのＣＴ抗原の発現によって特徴付けられるがんに罹患しているか、またはかかるがんに易発性であると疑われる患者を治療するために使用され得る。
【００４４】
本発明に従う医薬組成物およびキット内に含まれるＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメントが、以下で言及されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントである場合、黒色腫、乳癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、多発性骨髄腫および／または膵臓癌などのがんの治療。
【００４５】
従って、本発明の第二の態様の別の実施形態はまた、患者の治療における使用のための医薬品に関し、ここで、以下に記載される医薬組成物またはキットが使用される。ＴＡＡ結合抗体または結合フラグメントは、好ましくは、ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントであり得、免疫応答を活性化することが可能な化合物は、好ましくは、以下に記載するような、免疫系の少なくとも１つの天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子、免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子のアゴニスト活性化因子、または免疫系の天然のインヒビターもしくは少なくとも共インヒビターの少なくとも１つのアンタゴニストエフェクターから選択され得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント、抗ＣＤ４０アゴニスト抗体、例えばＣＰ−８７０，８９３およびＳＧＮ−４０および／または抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体、例えばトレメリムマブおよびイピリムマブの併用が想定される。
【００４６】
かかる医薬品は、かかる医薬品の投与の前に、それと同時に、またはそれに引き続いて細胞傷害性治療に供される患者に対して使用され得る。一実施形態において、細胞傷害性治療には化学療法が含まれ得る。
【００４７】
かかる医薬品は、特に、がんなどの過剰増殖疾患の治療に使用され得る。
【００４８】
本発明は、本発明の第二の態様の一実施形態において、患者を治療するための医薬品の製造における、以下に記載される医薬組成物またはキットの使用にも関する。ＴＡＡ結合抗体または結合フラグメントは、好ましくはＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントであり得、免疫応答を活性化することが可能な化合物は、好ましくは、以下に記載されるような、免疫系の少なくとも１つの天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子、免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子のアゴニスト活性化因子、または免疫系の天然のインヒビターもしくは少なくとも共インヒビターの少なくとも１つのアンタゴニストエフェクターから選択され得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント、抗ＣＤ４０アゴニスト抗体、例えばＣＰ−８７０，８９３およびＳＧＮ−４０および／または抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体、例えばトレメリムマブおよびイピリムマブの併用が想定される。
【００４９】
かかる医薬品は、かかる医薬品の投与の前に、それと同時に、またはそれに引き続いて細胞傷害性治療に供される患者に対して使用され得る。一実施形態において、細胞傷害性治療には化学療法が含まれ得る。
【００５０】
かかる医薬品は、特に、がんなどの過剰増殖疾患の治療に使用され得る。
【００５１】
本発明は、以下に記載される医薬組成物またはキットを患者に投与することによって患者を治療する方法にも関する。ＴＡＡ結合抗体または結合フラグメントは、好ましくは、ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントであり得、免疫応答を活性化することが可能な化合物は、好ましくは、以下に記載されるような、免疫系の少なくとも１つの天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子、免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子のアゴニスト活性化因子、または免疫系の天然のインヒビターもしくは少なくとも共インヒビターの少なくとも１つのアンタゴニストエフェクターから選択され得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント、抗ＣＤ４０アゴニスト抗体、例えばＣＰ−８７０，８９３およびＳＧＮ−４０および／または抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体、例えばトレメリムマブおよびイピリムマブの併用が想定される。
【００５２】
かかる方法は、かかる医薬品の投与の前に、それと同時に、またはそれに引き続いて細胞傷害性治療に供される患者について考慮され得る。一実施形態において、細胞傷害性治療には化学療法が含まれ得る。
【００５３】
かかる方法は、がんなどの過剰増殖疾患の治療のために考慮され得る。
【図面の簡単な説明】
【００５４】
【図１Ａ−Ｂ】ＭＡＧＥＡ３上のエピトープに対する組換えヒトモノクローナル抗体の結合を示す図である。抗体１２２Ｇ３、３２Ｈ２、３４Ｇ９および１０２Ｇ１０を、ＭＡＧＥＡ３タンパク質全体にわたる重複ペプチドで被覆したプレートを使用して、ＥＬＩＳＡによって分析した。抗体１２２Ｇ３、３２Ｈ２、３４Ｇ９または１０２Ｇ１０は、ＭＡＧＥＡ３の重複ペプチドの１つまたはいくつかに結合した（Ａ〜Ｄ）。
【図１Ｃ−Ｄ】ＭＡＧＥＡ３上のエピトープに対する組換えヒトモノクローナル抗体の結合を示す図である。抗体１２２Ｇ３、３２Ｈ２、３４Ｇ９および１０２Ｇ１０を、ＭＡＧＥＡ３タンパク質全体にわたる重複ペプチドで被覆したプレートを使用して、ＥＬＩＳＡによって分析した。抗体１２２Ｇ３、３２Ｈ２、３４Ｇ９または１０２Ｇ１０は、ＭＡＧＥＡ３の重複ペプチドの１つまたはいくつかに結合した（Ａ〜Ｄ）。
【図２】組換えヒトモノクローナル抗体によるＭＡＧＥＡ３の免疫沈降を示す図である。抗体１２２Ｇ３および３２Ｈ２を、ＭＡＧＥＡ３を内因的に発現するＳＫ−ＭＥＬ−３７細胞の溶解物と共にインキュベートした（レーンＢ）。抗体沈降したＭＡＧＥＡ３タンパク質を、ＭＡＧＥＡ３特異的抗体を使用するウエスタンブロットによって検出した。コントロールとして、抗体単独（レーンＡ）またはＭＡＧＥＡ３を発現しないＨＥＫ２９３Ｔ細胞の溶解物と共にインキュベートした抗体（レーンＣ）を使用した。
【図３】組換えヒトモノクローナル抗体による、ＭＡＧＥＡ４以外のＭＡＧＥＡの認識。ヒト抗体１２２Ｇ３、３２Ｈ２、３４Ｇ９および１０２Ｇ１０を使用して、ウエスタンブロット分析において組換えＭＡＧＥＡ３タンパク質（レーンＡ）および組換えＭＡＧＥＡ４タンパク質（レーンＢ）を検出した。
【図４Ａ−Ｂ】組換えヒトモノクローナル抗体のＥＣ５０決定を示す図である。組換えＭＡＧＥＡ３で被覆したプレートならびにヒトモノクローナル抗体１２２Ｇ３、３２Ｈ２、３４Ｇ９および１０２Ｇ１０の連続希釈を使用したＭＡＧＥＡ３−ＥＬＩＳＡを実施した（Ａ〜Ｄ）。ＥＣ５０値を各図中に示す。
【図４Ｃ−Ｄ】組換えヒトモノクローナル抗体のＥＣ５０決定を示す図である。組換えＭＡＧＥＡ３で被覆したプレートならびにヒトモノクローナル抗体１２２Ｇ３、３２Ｈ２、３４Ｇ９および１０２Ｇ１０の連続希釈を使用したＭＡＧＥＡ３−ＥＬＩＳＡを実施した（Ａ〜Ｄ）。ＥＣ５０値を各図中に示す。
【発明を実施するための形態】
【００５５】
本発明を、その好ましい実施形態のいくつかについて詳細に記載する前に、以下の一般的定義を提供する。
【００５６】
以下に例示的に記載される本発明は、本明細書中に具体的に開示されていない任意の１つまたは複数の要素、１つまたは複数の限定の非存在下で、適切に実施され得る。
【００５７】
本発明は、特定の実施形態についておよび特定の図面を参照して記載されるが、本発明はそれらに限定されず、特許請求の範囲のみによって限定される。
【００５８】
用語「含む（comprising）」が、明細書および特許請求の範囲において使用される場合、これは他の要素を排除しない。本発明の目的のために、用語「〜からなる（consisting of）」は、用語「〜から構成される（comprising of）」の好ましい実施形態とみなされる。以下で、少なくとも特定数の実施形態を含む群が規定される場合、これはまた、好ましくはこれらの実施形態のみからなる群を開示するものと理解すべきである。
【００５９】
本発明の目的のために、用語「得られた（obtained）」は、用語「取得可能（obtainable）」の好ましい実施形態であるとみなされる。以下で、例えば抗体が特定の供給源から取得可能であると規定される場合、これはまた、この供給源から得られた抗体を開示すると理解すべきである。
【００６０】
不明確または明確な物品が使用される場合、単数形の名詞（例えば、「a」、「an」または「the」）を参照すると、これは、そうでないと具体的に述べられた場合を除き、その名詞の複数形を含む。用語「約（about）」または「およそ（approximately）」は、本発明の文脈において、問題となる特徴の技術的効果がなおも確実となることを当業者が理解する、正確さの隔たりを示す。この用語は典型的に、±１０％の、好ましくは±５％の、示された数値からの逸脱を示す。
【００６１】
技術用語は、その一般的な意味で使用される。特定の意味が特定の用語に伝達される場合、用語の定義は、その用語が使用される文脈において、以下に示される。
【００６２】
用語「腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）」は、その最も広い意味では、腫瘍において排他的に発現されない場合、従って、抗体ベースの治療のための潜在的な免疫療法標的として機能し得る場合に、主要な因子に関連する。腫瘍組織におけるＴＡＡの主要なおよび好ましくは排他的な発現は、治療的抗体媒介性の免疫反応が腫瘍のみに限局化されることを確実にし、その結果、薬物動態学的挙動に対する上記有害な事象および影響は、腫瘍および正常組織の両方において発現する抗原を標的化する治療的抗体と同程度に観察されることは少なくともない。
【００６３】
かかるＴＡＡの発現は、かかる発現されたＴＡＡの抗体への接近可能性を背景として、および／またはかかる発現されたＴＡＡの免疫系への接近可能性を背景として見なければならないと理解すべきである。
【００６４】
従って、ＴＡＡの発現は、正常組織においてＤＮＡレベルまたはＲＮＡレベルで生じ得るが、タンパク質レベルでの発現には翻訳されない。結果として、かかるＴＡＡは、治療的抗体を主に利用可能にする程度で正常組織中で発現されることはないが、これは、かかる抗体が、アミノ酸ストレッチを含む抗原および／またはエピトープを認識すると一般に理解されるからである。
【００６５】
さらに、例えば、それらがＭＨＣ発現を示さず、従って、Ｔ細胞によって標的化され得ない、および従って、免疫特権があると一般にみなされているという意味において、免疫系に機能的に接近できない精巣などの組織が存在し得る。かかる免疫特権の正常組織においてＴＡＡが発現される場合であっても、かかるＴＡＡに結合する抗体は、従って、かかる正常組織において免疫応答を誘発しない。さらに、免疫応答は、ＴＡＡを発現する腫瘍組織に限定される。
【００６６】
ＴＡＡの好ましい群は、いわゆる「がん／精巣抗原（ＣＴ抗原）」である。この群は、多様な腫瘍、または正常には精巣（即ち、免疫特権組織）のいずれかにおいて発現される、独自のクラスのＴＡＡとして登場した。それらのゲノムコーディング、機能、腫瘍発現などに関する情報を含む、ＣＴ抗原の特性に関する概要は、とりわけ、Caballeroら、2009、Cancer Science、100(11)、2014-2021中に見出すことができる。この文献の開示は、特にＣＴ抗原の性質ならびに異なる型の腫瘍内での特異的ＣＴ抗原の存在および分布に関して、参照によって組み込まれる（例えば、Caballeroら（上記参照）の表１を参照のこと）。
【００６７】
ＣＴ抗原に関する詳細な情報は、http://www.cta.lncc.br/中に見出すことができる。このデータベースによって提供される情報、特にＣＴ抗原の遺伝子ファミリー、特定のファミリーメンバー、それらの染色体位置、ＣＴ識別子および腫瘍におけるタンパク質発現パターンに関する情報は、参照によって組み込まれる。
【００６８】
ＣＴ抗原の例は、表１中に見出すことができる。
【００６９】
【表１】
2014524891.tif 000002
【００７０】
用語「ＣＴ抗原」は、遺伝子ファミリーならびに遺伝子ファミリーの個々のメンバーの両方に関して、交換可能に使用される。
【００７１】
以下において、ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントに対し言及がなされる場合、これは、かかる抗体がＣＴ抗原ＭＡＧＥＡ３に結合することを意味すると理解すべきである。かかる言及は通常、以下で言及されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはそのフラグメント、ならびに特に、１２２Ｇ３、３２Ｈ２、３４Ｇ９もしくは１０２Ｇ１０などの本明細書中で言及される特異的抗体およびそれらの配列ホモログを含むものとする。用語ＭＡＧＥＡ３とは、好ましくはヒトＭＡＧＥＡ３タンパク質をいい、従って、配列番号４１のアミノ酸配列を含むタンパク質を指し得る。
【００７２】
抗体またはそのフラグメントが、ＭＡＧＥＡ３に結合すると記述される場合、これは、この抗体またはその結合フラグメントが好ましくは、前記抗原に特異的に結合すること、即ち、他の抗原よりも高い親和性でその抗原に結合することを意味する。これは特に、ＮＹ−ＥＳＯなどの異なる遺伝子ファミリー由来の他のＣＴ抗原が、この抗体またはその結合フラグメントによって認識されないことを意味している。
【００７３】
例えば、抗体またはフラグメントは、その抗体またはフラグメントの可変領域が、同族抗原を認識および結合する場合、その同族抗原に対して特異的であり、検出可能な優先性が、結合親和性における測定可能な差異に起因して、類似ではあるが同一ではない配列の他の既知のポリペプチドからその抗原を識別する。抗原特異的抗体およびフラグメントは、抗体の可変領域の外側の配列、特に抗体またはフラグメントの定常領域中の配列との相互作用を介して、他のタンパク質（例えば、黄色ブドウ球菌（S. aureus）プロテインＡまたはＥＬＩＳＡ技術における他の抗体）とも相互作用し得ることが理解されよう。ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントとプロテインＡまたはプロテインＧとの相互作用は、抗原特異的相互作用とはみなされないことを理解すべきである。抗体の結合特異性を決定するためのスクリーニングアッセイは周知であり、当該分野で慣用的に実施されている。かかるアッセイの包括的な考察については、Harlowら（編）、Antibodies A Laboratory Manual; Cold Spring Harbor Laboratory； Cold Spring Harbor、NY(1988)、第６章を参照のこと。本発明の文脈において企図されるＭＡＧＥＡ３は、典型的には腫瘍組織または免疫特権組織でしか発現されないので、特異的結合抗体またはそのフラグメントは、好ましくは、腫瘍組織中で、ＭＡＧＥＡ３のみに検出可能に結合する（一般的なアッセイによって判断する）が、腫瘍組織および正常組織の両方において発現される他のポリペプチドには結合しない。
【００７４】
しかし、ＭＡＧＥＡ３は、ＭＡＧＥＡファミリーのメンバーであり、ＭＡＧＥＡファミリーの他のメンバーの少なくともいくつか、例えばＭＡＧＥＡ６（約９６％の相同性）またはＭＡＧＥＡ２（約８４％の相同性）と、有意な相同性を共有する。ＭＡＧＥＡ１およびＭＡＧＥＡ４（約６８％の相同性）またはＭＡＧＥＡ１０（約５０％の相同性）などの他のファミリーメンバーとの相同性は、より低い。
【００７５】
ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントは通常、例えばＭＡＧＥＡファミリーの他のメンバーよりも強くＭＡＧＥＡ３と結合するという意味において特異的であるが、ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントは、ＭＡＧＥＡ３と９６％の配列同一性を共有することを考慮すると、ＭＡＧＥＡ６、および特にヒトＭＡＧＥＡ６にも結合し得る。従って、本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体または結合フラグメントは、ＭＡＧＥＡ６結合抗体またはその結合フラグメントとも称され得る。ＭＡＧＥＡ３とＭＡＧＥＡ６との間の高い相同性を考慮すると、これらのタンパク質は、例えば癌の発生において、同一ではないにしても類似した役割を有すると推測され、その結果、ＭＡＧＥＡ３およびＭＡＧＥＡ６に対するかかる汎反応性は、治療上有利であり得る。本発明に従うＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントがＭＡＧＥＡ６にも結合する能力は、これらの抗体がＭＡＧＥＡ６よりもＭＡＧＥＡ３により強く結合することを排除するわけではない。いくつかの実施形態において、ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントは、任意選択で、さらにはＭＡＧＥＡ６に結合しなくてもよい。
【００７６】
ＭＡＧＥＡ３ならびに他のファミリーメンバー、例えばＭＡＧＥＡ１、ＭＡＧＥＡ４およびＭＡＧＥＡ１０の発現パターンは、癌型間で異なり得ることが観察されており、このことは、癌の発生および進行におけるこれらのタンパク質の異なる役割に注意を向け得る。医薬的に活性なＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントが、実際にＭＡＧＥＡ３の機能だけを妨害することを確実にするために、本発明に従う抗体または結合フラグメントは、ＭＡＧＥＡ３だけを認識するが、好ましくはＭＡＧＥＡ４、ＭＡＧＥＡ１および／またはＭＡＧＥＡ１０を認識しないことが好まれ得る。かかる抗体は、ＭＡＧＥＡ３に優先的に結合するとみなされる。ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントが、例えばＭＡＧＥＡ４に結合しないという主張は、特定の標的に対する抗体結合の優先性を決定するために一般に使用される実験に基づいていることを理解すべきである。この限りにおいて、ＭＡＧＥＡ３、ＭＡＧＥＡ４などの異なる抗原を基材上に被覆し、引き続いて特定の抗体の結合が試験されるＥＬＩＳＡアッセイなどを使用し得る。従って、本発明に従うＭＡＧＥＡ３結合抗体およびその結合フラグメントは、例えば、一般的なＥＬＩＳＡアッセイまたはウエスタンブロットアッセイで決定され得るように、陰性コントロール抗体を超えてＭＡＧＥＡ１、ＭＡＧＥＡ４およびＭＡＧＥ１０に検出可能に結合しない可能性がある。
【００７７】
従って、いくつかの実施形態において、本発明は、ＭＡＧＥＡ３に優先的に結合し、従ってＭＡＧＥＡ４、ＭＡＧＥＡ１、ＭＡＧＥＡ１０および／または任意選択でさらにはＭＡＧＥＡ２に結合しないＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントに関する。
【００７８】
抗体またはその結合フラグメントは、それらがＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントであるか、または例えば本明細書中に記載される他の抗体（例えば、抗ＣＤ４０アゴニスト抗体）であるかに関わらず、低いナノモル濃度〜低いピコモル濃度の、またはさらにはピコモル濃度の範囲を下回る濃度の、抗体（またはその結合フラグメント）のその抗原への結合に関する平衡解離定数（ＫＤ）を有し得る（結合力）。従って、ＫＤは、約０．１＊１０−１２〜約１＊１０−８の範囲内、好ましくは約０．１＊１０−１２〜約０．１＊１０−７の範囲内、より好ましくは約０．１＊１０−１２〜約１０＊１０−９の範囲内、なおより好ましくは約０．１＊１０−１２〜約１＊１０−９の範囲内であり得る。最も好ましいＫＤは、約０．１＊１０−１２〜約０．１＊１０−９の範囲内、約０．１＊１０−１２〜約１０＊１０−１２の範囲内、または約０．１＊１０−１２〜約１＊１０−１２の範囲内（例えば、約０．９＊１０−１２、約０．８＊１０−１２、約０．７＊１０−１２、約０．６＊１０−１２または約０．５＊１０−１２）であり得る。従って、本明細書の以下に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントは、約３００ｐＭ以下、約２００ｐＭ以下、約１００ｐＭ以下、約９０ｐＭ以下、約８０ｐＭ以下、約７０ｐＭ以下、約６０ｐＭ以下、約５０ｐＭ以下、約４０ｐＭ以下、約３０ｐＭ以下、約２０ｐＭ以下のＫＤを有し得る。さらに低いＫＤが、ＣＤＲの最適化によって達成可能であり得る。
【００７９】
ＫＤは、通常、２つの分子間の相互作用の親和性の尺度であるとみなされる。厳密に言えば、親和性は、単一の部位におけるある分子の別の分子への結合の強度を記述する。しかし、抗体は通常、抗原に対する結合部位を２つ有する。この相互作用の強度は、通常結合力であるとみなされる。
【００８０】
本発明の文脈において、用語「親和性」は、例えば、一価ｓｃＦｖのその抗原への相互作用の強度、ならびに典型的な二価抗体のその抗原への結合の強度の両方を記述するために使用される。
【００８１】
抗体またはその結合フラグメントのＫＤ値および従ってその親和性／結合力は、当該分野で確立されたアプローチを使用して決定され得る。
【００８２】
それらの抗原に対する、本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体または結合フラグメントなどの抗体の親和性の別の測定は、ＥＣ５０濃度である。抗体またはその結合フラグメントは、ＭＡＧＥＡ３結合抗体もしくはその結合フラグメントまたは例えば抗ＣＤ４０アゴニスト抗体などの本明細書中に記載される他の抗体であるかに関わらず、低ナノモル濃度〜低ピコモル濃度またはさらにはピコモル濃度を下回る範囲で、その抗原に対する抗体（またはその結合フラグメント）の結合についてのＥＣ５０を有し得る。従って、ＥＣ５０は、約０．１＊１０−１２〜約１＊１０−８の範囲内、好ましくは約０．１＊１０−１２〜約０．１＊１０−７の範囲内、より好ましくは約０．１＊１０−１２〜約１０＊１０−９の範囲内、なおより好ましくは約０．１＊１０−１２〜約１＊１０−９の範囲内であり得る。最も好ましいＥＣ５０は、約０．１＊１０−１２〜約０．１＊１０−９の範囲内、約０．１＊１０−１２〜約１０＊１０−１２の範囲内または約０．１＊１０−１２〜約１＊１０−１２の範囲内、例えば、約０．９＊１０−１２、約０．８＊１０−１２、約０．７＊１０−１２、約０．６＊１０−１２もしくは約０．５＊１０−１２であり得る。従って、以下に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントは、約３００ｐＭ以下、約２００ｐＭ以下、約１００ｐＭ以下、約９０ｐＭ以下、約８０ｐＭ以下、約７０ｐＭ以下、約６０ｐＭ以下、約５０ｐＭ以下、約４０ｐＭ以下、約３０ｐＭ以下、約２０ｐＭ以下のＥＣ５０を有し得る。さらに低いＥＣ５０が、ＣＤＲの最適化によって達成可能であり得る。
【００８３】
ＥＣ５０は、ＥＬＩＳＡにおいてその抗原に対する抗体の最大半量の結合が観察された濃度として決定される。
【００８４】
抗体およびその結合フラグメントは、本発明の文脈において使用される場合、即ち、それらがＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントであるか、または例えば以下で言及される抗ＣＤ４０アゴニスト抗体などの本明細書中に記載される他の抗体であるかに関わらず、好ましくは、モノクローナルのキメラ、ヒト化またはヒト抗体であり得る。これらの抗体は、好ましくはＩｇＧクラスの抗体である。
【００８５】
少なくともＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントに関して、モノクローナルヒト抗体を使用することが好まれ得る。かかる抗体は、好ましくは「患者由来」である。
【００８６】
「患者由来」のヒトモノクローナル抗体とは、上で規定したＴＡＡならびに特にＭＡＧＥＡ３および／またはＭＡＧＥＡ６を発現する腫瘍に罹患している患者から得られた抗体をいう。いくつかの実施形態において、上で規定したＴＡＡならびに特にＭＡＧＥＡ３および／またはＭＡＧＥＡ６を発現する腫瘍に罹患しており、疾患の好ましい臨床経過を示す患者からかかる抗体を単離することが好まれ得る。かかる疾患の好ましい臨床経過は、例えば、生活の質、全生存、改善された腫瘍増殖停止時間、および／または改善されたＲＥＣＩＳＴ基準から、明らかになり得る。ＲＥＣＩＳＴ（「固形腫瘍における応答評価基準（Response Evaluation Criteria In Solid Tumors）」）は、例えば、患者が、かかる腫瘍の治療に対する、完全なまたは少なくとも部分的な応答を示したか否かを決定するために使用される。これらの基準の説明および概要は、とりわけ、Eisenhauerら(2009) European Journal of Cancer、228〜247またはhttp://www.eortc.be/recist/（これらは参照によって組み込まれる）中に見出すことができる。
【００８７】
疾患の好ましい臨床経過は、腫瘍を有すると診断され、例えば非特異的化学療法および／またはＭＡＧＥＡ３などのＣＴ抗原を用いたワクチン接種を受けた患者において観察され得ることを理解すべきである。腫瘍を有すると診断された患者が、例えばＭＡＧＥＡ３抗原でワクチン接種されていない場合であっても、疾患の好ましい臨床経過を示した患者は、ＭＡＧＥＡ３結合抗体の単離および同定にふさわしい可能性がある。
【００８８】
かかる患者由来抗体の使用は、それらが単離された患者とは異なる患者に投与される場合であっても、少なくとも同等の有効性を提供するとみなされる。例えば、本明細書中で言及される特異的ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントは、黒色腫または乳癌に罹患しており、全長ヒトＭＡＧＥＡ３でワクチン接種された患者から単離されたものである。ＭＡＧＥＡ３によるワクチン接種は、ＣｐＧなどの免疫刺激剤を含むアジュバントにより支持され得る。かかる抗体は、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋細胞傷害性Ｔ細胞をマウスの異種移植された腫瘍中に動員し、ＭＡＧＥＡ３および／またはＭＡＧＥＡ６を発現する患者の腫瘍にも動員することが可能であると推測される。
【００８９】
患者由来のヒトモノクローナル抗体は、上述のように疾患の好ましい臨床経過を示す患者から単離されたものであることを考慮すると、ＭＡＧＥＡ３および／またはＭＡＧＥＡ６の過剰発現によって特徴付けられる癌などの過剰増殖疾患に罹患している他のヒト患者においても効力を示すと推測され得る。これらの抗体は、完全にヒト配列を有し、従って、例えば免疫原性に関して問題がないはずである。
【００９０】
かかる患者由来のヒトモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体のいくつかの例には、１２２Ｇ３、３２Ｈ２、３４Ｇ９または１０２Ｇ１０が含まれる。ＭＡＧＥＡ３でワクチン接種された患者から得られたこれらの抗体のうち、３２Ｈ２および３４Ｇ９を、アジュバントＣｐＧをさらに受けた患者から得た。
【００９１】
１２２Ｇ３の可変重鎖は、例えば、配列番号１によってコードされる。１２２Ｇ３の可変軽鎖は、例えば、配列番号２によってコードされる。従って、１２２Ｇ３の可変重鎖は、配列番号３のアミノ酸配列を有する。従って、１２２Ｇ３の可変軽鎖は、配列番号４のアミノ酸配列を有する。１２２Ｇ３の可変重鎖に関して、ＣＤＲ１は配列番号５のアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ２は配列番号６のアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ３は配列番号７のアミノ酸配列を有する。１２２Ｇ３の可変軽鎖に関して、ＣＤＲ１は配列番号８のアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ２は配列番号９のアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ３は配列番号１０のアミノ酸配列を有する。
【００９２】
３２Ｈ２の可変重鎖は、例えば配列番号１１によってコードされる。３２Ｈ２の可変軽鎖は、例えば、配列番号１２によってコードされる。従って、３２Ｈ２の可変重鎖は、配列番号１３のアミノ酸配列を有する。従って、３２Ｈ２の可変軽鎖は、配列番号１４のアミノ酸配列を有する。３２Ｈ２の可変重鎖に関して、ＣＤＲ１は配列番号１５のアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ２は配列番号１６のアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ３は配列番号１７のアミノ酸配列を有する。３２Ｈ２の可変軽鎖に関して、ＣＤＲ１は配列番号１８のアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ２は配列番号１９のアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ３は配列番号２０のアミノ酸配列を有する。
【００９３】
３４Ｇ９の可変重鎖は、例えば、配列番号２１によってコードされる。３４Ｇ９の可変軽鎖は、例えば、配列番号２２によってコードされる。従って、３４Ｇ９の可変重鎖は、配列番号２３のアミノ酸配列を有する。従って、３４Ｇ９の可変軽鎖は、配列番号２４のアミノ酸配列を有する。３４Ｇ９の可変重鎖に関して、ＣＤＲ１は配列番号２５のアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ２は配列番号２６のアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ３は配列番号２７のアミノ酸配列を有する。３４Ｇ９の可変軽鎖に関して、ＣＤＲ１は配列番号２８のアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ２は配列番号２９のアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ３は配列番号３０のアミノ酸配列を有する。
【００９４】
１０２Ｇ１０の可変重鎖は、例えば、配列番号３１によってコードされる。１０２Ｇ１０の可変軽鎖は、例えば、配列番号３２によってコードされる。従って、１０２Ｇ１０の可変重鎖は、配列番号３３のアミノ酸配列を有する。従って、１０２Ｇ１０の可変軽鎖は、配列番号３４のアミノ酸配列を有する。１０２Ｇ１０の可変重鎖に関して、ＣＤＲ１は配列番号３５のアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ２は配列番号３６のアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ３は配列番号３７のアミノ酸配列を有する。１０２Ｇ１０の可変軽鎖に関して、ＣＤＲ１は配列番号３８のアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ２は配列番号３９のアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ３は配列番号４０のアミノ酸配列を有する。
【００９５】
抗体の特異性および親和性は、その可変重鎖および軽鎖の配列ならびに特にそのＣＤＲによって大部分決定されるので、これらの特性は、ヒト患者由来抗体の可変重鎖および軽鎖の配列またはそのＣＤＲが他の骨格中に移入されている場合でさえも維持されると推測され得る。従って、本発明は、例えばモノクローナルのキメラまたはヒト化抗体であるヒト患者由来抗体由来の可変重鎖および軽鎖の配列ならびに特にそのＣＤＲを使用する、ＭＡＧＥ３結合抗体およびその結合フラグメントにも関する。事実、他の完全にヒト抗体のフレームワーク位置において、例えばマウス由来のアミノ酸を導入することは、例えば、ＡＤＣＣ応答を改善し得ることが公知である。例えば、かかる改変を選択するための規則は、例えばＥＰ  ０  ４５１  ２１６から得られ得る。ＣＤＲまたはＣＤＲのセットが一旦同定されると、抗体の親和性および／または特異性を維持したままで、例えばＣＤＲ（複数可）において保存的アミノ酸置換を実施することが可能であることも公知である。好ましくは保存的である、即ち１つのアミノ酸の、匹敵する物理化学的特性を有する別のアミノ酸による置き換え（例えば、ＬｅｕによるＡｌａのまたはＡｓｐによるＧｌｕの）であるが、必ずしも保存的でなくてもよいかかる置換は、ＣＤＲおよび／またはフレームワーク領域中のアミノ酸を変化させ、次いで、例えばＢＩＡＣＯＲＥ測定を使用して、その抗原結合について、改変された抗体対元の抗体を試験することによって同定され得る。
【００９６】
従って、ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントの例には、軽鎖可変領域および／または重鎖可変領域を含むモノクローナル抗体またはその結合フラグメントが含まれ、ここで、
ａ）軽鎖可変領域が、配列番号８、１８、２８、３８もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号９、１９、２９、３９もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および／または配列番号１０、２０、３０、４０もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む；ならびに／あるいは
ｂ）重鎖可変領域が、配列番号５、１５、２５、３５もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号６、１６、２６、３６もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および／または配列番号７、１７、２７、３７もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む。
【００９７】
ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントの他の例には、軽鎖可変領域および／または重鎖可変領域を含むモノクローナル抗体またはその結合フラグメントが含まれ、ここで、
ａ）軽鎖可変領域が、配列番号８もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号９もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および／または配列番号１０もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む；ならびに／あるいは
ｂ）重鎖可変領域が、配列番号５もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号６もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および／または配列番号７もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む。
【００９８】
ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントの他の例には、軽鎖可変領域および／または重鎖可変領域を含むモノクローナル抗体またはその結合フラグメントが含まれ、ここで、
ａ）軽鎖可変領域が、配列番号１８もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号１９もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および／または配列番号２９もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む；ならびに／あるいは
ｂ）重鎖可変領域が、配列番号１５もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号１６もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および／または配列番号１７もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む。
【００９９】
ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントの他の例には、軽鎖可変領域および／または重鎖可変領域を含むモノクローナル抗体またはその結合フラグメントが含まれ、ここで、
ａ）軽鎖可変領域が、配列番号２８もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号２９もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および／または配列番号３０もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む；ならびに／あるいは
ｂ）重鎖可変領域が、配列番号２５もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号２６もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および／または配列番号２７もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む。
【０１００】
ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントの他の例には、軽鎖可変領域および／または重鎖可変領域を含むモノクローナル抗体またはその結合フラグメントが含まれ、ここで、
ａ）軽鎖可変領域が、配列番号３８もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号３９もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および／または配列番号４０もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む；ならびに／あるいは
ｂ）重鎖可変領域が、配列番号３５もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号３６もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および／または配列番号３７もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む。
【０１０１】
ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントの他の例には、軽鎖可変領域および／または重鎖可変領域を含むモノクローナル抗体またはその結合フラグメントが含まれ、ここで、
ａ）軽鎖可変領域が、配列番号８、１８、２８、３８もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号９、１９、２９、３９もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および配列番号１０、２０、３０、４０もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む；ならびに／または
ｂ）重鎖可変領域が、配列番号５、１５、２５、３５もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号６、１６、２６、３６もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および配列番号７、１７、２７、３７もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む。
【０１０２】
ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントの他の例には、軽鎖可変領域および／または重鎖可変領域を含むモノクローナル抗体またはその結合フラグメントが含まれ、ここで、
ａ）軽鎖可変領域が、配列番号８もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号９もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および配列番号１０もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む；ならびに／または
ｂ）重鎖可変領域が、配列番号５もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号６もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および配列番号７もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む。
【０１０３】
ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントの他の例には、軽鎖可変領域および／または重鎖可変領域を含むモノクローナル抗体またはその結合フラグメントが含まれ、ここで、
ａ）軽鎖可変領域が、配列番号１８もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号１９もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および配列番号２０もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む；ならびに／または
ｂ）重鎖可変領域が、配列番号１５もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号１６もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および配列番号１７もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む。
【０１０４】
ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントの他の例には、軽鎖可変領域および／または重鎖可変領域を含むモノクローナル抗体またはその結合フラグメントが含まれ、ここで、
ａ）軽鎖可変領域が、配列番号２８もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号２９もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および配列番号３０もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む；ならびに／または
ｂ）重鎖可変領域が、配列番号２５もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号２６もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および配列番号２７もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む。
【０１０５】
ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントの他の例には、軽鎖可変領域および／または重鎖可変領域を含むモノクローナル抗体またはその結合フラグメントが含まれ、ここで、
ａ）軽鎖可変領域が、配列番号３８もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号３９もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および配列番号４０もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む；ならびに／または
ｂ）重鎖可変領域が、配列番号３５もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号３６もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および配列番号３７もしくはそれに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む。
【０１０６】
好ましくは、これら全ての実施形態において、配列同一性は、少なくとも約８５％、より好ましくは少なくとも約９０％、なおより好ましくは少なくとも約９５％、最も好ましくは少なくとも約９６％、９７％、９８％または約９９％である。配列同一性は、それぞれの配列の全長にわたって決定され得る。
【０１０７】
２つの配列間の％同一性の決定は、好ましくは、KarlinおよびAltschul (1993) Proc. Natl. Acad. Sci USA 90: 5873-5877の数学アルゴリズムを使用して達成される。かかるアルゴリズムは、ＮＣＢＩ（http://www.ncbi.nlm.nih.gov/blast/Blast.cge）で入手可能なAltschulら(1990) J. Mol. Biol. 215: 403-410のＢＬＡＳＴｎプログラムおよびＢＬＡＳＴｐプログラム中に組み込まれている。
【０１０８】
％同一性の決定は、ＢＬＡＳＴｎプログラムおよびＢＬＡＳＴｐプログラムの標準的パラメータを用いて実施される。
【０１０９】
ＢＬＡＳＴポリヌクレオチド検索は、ＢＬＡＳＴｎプログラムを用いて実施される。一般的パラメータについて、「マックス標的配列（Max Target Sequences）」ボックスを１００に設定し得、「ショートクエリー（Short queries）」ボックスにチェックマークをつけ得、「予測閾値（Expect threshold）」ボックスを１０に設定し得、「ワードサイズ（Word Size）」ボックスを２８に設定し得る。スコアリングパラメータについて、「一致／不一致スコア（Match/mismatch Scores）」を１，−２に設定し得、「ギャップコスト（Gap Costs）」ボックスを線形に設定し得る。フィルターおよびマスキングパラメータについて、「低い複雑性の領域（Low complexity regions）」ボックスにチェックマークをつけ得、「種特異的反復（Species-specific repeats）」ボックスにはチェックマークをつけなくてもよく、「ルックアップテーブルのみについてマスク（Mask for lookup table only）」ボックスにチェックマークをつけ得、「小文字をマスク（Mask lower case letters）」ボックスにはチェックマークをつけなくてもよい。
【０１１０】
ＢＬＡＳＴタンパク質検索は、ＢＬＡＳＴｐプログラムを用いて実施される。一般的パラメータについて、「マックス標的配列」ボックスを１００に設定し得、「ショートクエリー」ボックスにチェックマークをつけ得、「予測閾値」ボックスを１０に設定し得、「ワードサイズ（Word Size）」ボックスを「３」に設定し得る。スコアリングパラメータについて、「マトリックス（Matrix）」ボックスを「ＢＬＯＳＵＭ６２」に設定し得、「ギャップコスト」ボックスを「存在：１１  伸長：１（Existence: 11 Extension:1）」に設定し得、「組成調整（Compositional adjustments）」ボックスを、「条件的組成スコアマトリックス調整（Conditional compositional score matrix adjustment）」に設定し得る。フィルターおよびマスキングパラメータについて、「低い複雑性の領域」ボックスにはチェックマークをつけなくてもよく、「ルックアップテーブルのみについてマスク」ボックスにはチェックマークをつけなくてもよく、「小文字をマスク」ボックスにはチェックマークをつけなくてもよい。
【０１１１】
上記軽鎖可変領域および重鎖可変領域のＣＤＲは、好ましくは、ヒト由来抗体のフレームワーク領域および定常領域中、即ち、本明細書中に記載されるように、ヒト患者から得られた抗体について決定された配列中に、埋め込まれている。好ましくは、これらの抗体はＩｇＧクラスの抗体である。
【０１１２】
しかし、上記軽鎖可変領域および重鎖可変領域のＣＤＲは、特に、他のヒト抗体に由来するフレームワーク領域および定常領域のヒト配列が、抗体依存的細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）において有効であることが示されている場合に、かかる配列中に埋め込まれていてもよい。この文脈において、例えば、治療適用のために首尾よく使用されたヒト化治療的抗体のヒト定常配列およびフレームワーク配列を使用することが可能である。上記軽鎖可変領域および重鎖可変領域のＣＤＲは、好ましくは、ヒトＩｇＧクラスのかかるヒト化抗体のフレームワーク領域および定常領域中に組み込まれる。
【０１１３】
さらに、上記軽鎖可変領域および重鎖可変領域のＣＤＲは、フレームワーク領域および定常領域に関して、本質的にヒト配列中に埋め込まれ得る。しかし、定常領域も同様ではあるが、特にフレームワーク領域は、抗原結合および／または例えばＡＤＣＣを増強することが公知のマウス抗体中に典型的に見出されるようなアミノ酸を含み得る（例えば、欧州特許出願ＥＰ  ０  ４５１  ２１６を参照）。好ましくは、これらの抗体はＩｇＧクラスの抗体である。
【０１１４】
他のＭＡＧＥＡ３結合抗体および結合フラグメントは、配列番号４、１４、２４、３４もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列を含む軽鎖可変領域および／または配列番号３、１３、２３、３３もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列を含む重鎖可変領域を含む、抗体またはその結合フラグメントに関する。
【０１１５】
他のＭＡＧＥＡ３結合抗体および結合フラグメントは、配列番号４、１４、２４、３４またはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列を含む軽鎖可変領域および配列番号３、１３、１７、２３、３３またはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列を含む重鎖可変領域を含む、抗体またはその結合フラグメントに関する。
【０１１６】
他のＭＡＧＥＡ３結合抗体および結合フラグメントは、配列番号４またはそれに対し少なくとも８０％同一な配列を含む軽鎖可変領域および配列番号３、１３、２３、３３またはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列を含む重鎖可変領域を含む、抗体またはその結合フラグメントに関する。
【０１１７】
他のＭＡＧＥＡ３結合抗体および結合フラグメントは、配列番号１４またはそれに対し少なくとも８０％同一な配列を含む軽鎖可変領域および配列番号３、１３、２３、３３またはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列を含む重鎖可変領域を含む、抗体またはその結合フラグメントに関する。
【０１１８】
他のＭＡＧＥＡ３結合抗体および結合フラグメントは、配列番号２４またはそれに対し少なくとも８０％同一な配列を含む軽鎖可変領域および配列番号３、１３、２３、３３またはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列を含む重鎖可変領域を含む、抗体またはその結合フラグメントに関する。
【０１１９】
他のＭＡＧＥＡ３結合抗体および結合フラグメントは、配列番号３４またはそれに対し少なくとも８０％同一な配列を含む軽鎖可変領域および配列番号３、１３、２３、３３またはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列を含む重鎖可変領域を含む、抗体またはその結合フラグメントに関する。
【０１２０】
他のＭＡＧＥＡ３結合抗体および結合フラグメントは、配列番号４、１４、２４、３４またはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列を含む軽鎖可変領域および配列番号３またはそれに対し少なくとも８０％同一な配列を含む重鎖可変領域を含む、抗体またはその結合フラグメントに関する。
【０１２１】
他のＭＡＧＥＡ３結合抗体および結合フラグメントは、配列番号４、１４、２４、３４またはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列を含む軽鎖可変領域および配列番号１３またはそれに対し少なくとも８０％同一な配列を含む重鎖可変領域を含む、抗体またはその結合フラグメントに関する。
【０１２２】
他のＭＡＧＥＡ３結合抗体および結合フラグメントは、配列番号４、１４、２４、３４またはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列を含む軽鎖可変領域および配列番号２３またはそれに対し少なくとも８０％同一な配列を含む重鎖可変領域を含む、抗体またはその結合フラグメントに関する。
【０１２３】
他のＭＡＧＥＡ３結合抗体および結合フラグメントは、配列番号４、１４、２４、３４またはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列を含む軽鎖可変領域および配列番号３３またはそれに対し少なくとも８０％同一な配列を含む重鎖可変領域を含む、抗体またはその結合フラグメントに関する。
【０１２４】
他のＭＡＧＥＡ３結合抗体および結合フラグメントは、配列番号４またはそれに対し少なくとも８０％同一な配列を含む軽鎖可変領域および配列番号３またはそれに対し少なくとも８０％同一な配列を含む重鎖可変領域を含む、抗体またはその結合フラグメントに関する。
【０１２５】
他のＭＡＧＥＡ３結合抗体および結合フラグメントは、配列番号１４またはそれに対し少なくとも８０％同一な配列を含む軽鎖可変領域および配列番号１３またはそれに対し少なくとも８０％同一な配列を含む重鎖可変領域を含む、抗体またはその結合フラグメントに関する。
【０１２６】
他のＭＡＧＥＡ３結合抗体および結合フラグメントは、配列番号２４またはそれに対し少なくとも８０％同一な配列を含む軽鎖可変領域および配列番号２３またはそれに対し少なくとも８０％同一な配列を含む重鎖可変領域を含む、抗体またはその結合フラグメントに関する。
【０１２７】
他のＭＡＧＥＡ３結合抗体および結合フラグメントは、配列番号３４またはそれに対し少なくとも８０％同一な配列を含む軽鎖可変領域および配列番号３３またはそれに対し少なくとも８０％同一な配列を含む重鎖可変領域を含む、抗体またはその結合フラグメントに関する。
【０１２８】
好ましくは、これら全ての実施形態において、配列同一性は、少なくとも約８５％。より好ましくは少なくとも約９０％、なおより好ましくは少なくとも約９５％、最も好ましくは少なくとも約９８％または少なくとも約９９％である。配列同一性は上記のように決定される。配列同一性は、それぞれの配列の全長にわたって決定され得る。
【０１２９】
上記軽鎖可変領域および重鎖可変領域は、好ましくは、ヒト由来抗体の定常領域中、即ち、本明細書中に記載されるように、ヒト患者から得られた抗体について決定された配列中に、埋め込まれている。好ましくは、これらの抗体は、ＩｇＧ１クラスなどのＩｇＧクラスの抗体である。
【０１３０】
しかし、上記軽鎖可変領域および重鎖可変領域はまた、特に、かかる配列がＡＤＣＣにおいて有効であることが示されている場合に、他のヒト抗体に由来する定常領域のヒト配列中に埋め込まれていてもよい。この文脈において、例えば、治療適用のために首尾よく使用されたヒト化治療的抗体のヒト定常配列を使用することが可能である。上記軽鎖可変領域および重鎖可変領域は、好ましくは、ヒトＩｇＧクラスのかかるヒト化抗体の定常領域中に組み込まれる。
【０１３１】
さらに、上記軽鎖可変領域および重鎖可変領域は、定常領域について本質的にヒト配列中に埋め込まれ得る。しかし、定常領域は、例えばＡＤＣＣを増強することが公知のマウス抗体中に典型的に見出されるようなアミノ酸を含み得る。好ましくは、これらの抗体はＩｇＧクラスの抗体である。
【０１３２】
本発明に従うＭＡＧＥＡ３結合抗体または結合フラグメントは、配列番号４２、配列番号４３および／または配列番号４４内に含まれるエピトープ（複数可）に結合し得る。
【０１３３】
好ましくは、本発明に従うＭＡＧＥＡ３結合抗体または結合フラグメントは、配列番号４５、配列番号４６、配列番号４７および／または配列番号４８内に含まれるエピトープ（複数可）に結合し得る。
【０１３４】
また好ましくは、本発明に従うＭＡＧＥＡ３結合抗体または結合フラグメントは、配列番号１０８内に含まれるエピトープ（複数可）に結合し得る。
【０１３５】
本発明は、上記ＭＡＧＥＡ３結合抗体および結合フラグメントと同じエピトープまたは同じエピトープの一部に対して実質的に結合するＭＡＧＥＡ３結合抗体およびその結合フラグメントを使用することもまた企図している。
【０１３６】
さらに、本発明は、ＭＡＧＥＡ３に対する結合および好ましくはヒトＭＡＧＥＡ３に対する結合に関して上記ＭＡＧＥＡ３結合抗体およびその結合フラグメントと競合するＭＡＧＥＡ３結合抗体およびその結合フラグメントを使用することを考慮する。
【０１３７】
エピトープマッピングは、ＭＡＧＥＡ３の種々のフラグメントを生成し、次いで、抗体またはその結合フラグメントに対する結合についてこれらのフラグメントを試験することによって、実施され得る。結合は、ＥＬＩＳＡを使用して測定され得る。結合は、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）を使用しても決定され得る。ＪＰＴ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ＧｍｂＨ（Ｂｅｒｌｉｎ、Ｇｅｒｍａｎｙ）のＰｅｐＳｐｏｔ（商標）などの市販のペプチドアレイ、Ｐｅｐｔｉｄｅｓ＆Ｅｌｅｐｈａｎｔｓ、Ｎｕｔｈｅｔａｌ、Ｇｅｒｍａｎｙにより提供されるソリューション、またはプロテオミクスベースの質量分析法もまた使用できる。特定の抗原またはエピトープに対する結合についての競合は、当該分野で公知のアッセイを使用して決定され得る。例えば、本発明に従う抗体を標識し、ＭＡＧＥＡ３に対するその結合について試験し得る。引き続いて、未標識１２２Ｇ３（または任意の他のＭＡＧＥＡ３結合抗体）が添加されて、標識された抗体の結合にそれが影響を与えるか否かが決定されるか、または標識された抗体の結合が、種々の濃度のかかる未標識ＭＡＧＥＡ３結合抗体の存在下もしくは非存在下で研究される。かかる標識は、放射性標識もしくは蛍光標識または他種の検出可能な標識であり得る。
【０１３８】
特定の抗原またはエピトープに対する結合についての競合は、本発明に従う抗体について、少なくとも約５０％または少なくとも約７０％または少なくとも約８０％または少なくとも約９０％または少なくとも約９５％または少なくとも約９９％または約１００％の、抗原またはエピトープに対する結合の減少によって決定される。結合は、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）装置、種々の蛍光検出技術（例えば、蛍光相関分光法、蛍光相互相関分光法、蛍光寿命測定法など）または種々の型のラジオイムノアッセイ、あるいは標的分子に対する抗体の結合を追跡するために使用される他のアッセイを使用して、測定され得る。
【０１３９】
上述のように、本発明は、ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントを考慮する。全長抗体は、定常ドメインおよび可変ドメインを含む。定常領域は、抗体の抗原結合フラグメント中に存在する必要はない。
【０１４０】
従って、結合フラグメントは、インタクトな全長抗体の一部（例えば、完全抗体の抗原結合領域または可変領域）を含み得る。抗体フラグメントの例には、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、ＩｄおよびＦｖフラグメント；ダイアボディ（diabody）；線状抗体；単鎖抗体分子（例えばｓｃＦｖ）；多重特異的抗体フラグメント（例えば、二重特異的、三重特異的および多重特異的抗体（例えば、ダイアボディ、トリアボディ（triabody）、テトラボディ（tetrabody）））；ミニボディ（minibody）；キレート組換え抗体；トリボディ（tribody）またはバイボディ（bibody）；イントラボディ（intrabody）；ナノボディ（nanobody）；小モジュール免疫薬（ＳＭＩＰ）、結合ドメイン免疫グロブリン融合タンパク質；ラクダ化（camelized）抗体；ＶＨＨ含有抗体；および抗体フラグメントから形成される任意の他のポリペプチドが含まれる。当業者は、抗体の抗原結合機能が、全長抗体のフラグメントによって実行され得ることを理解している。
【０１４１】
Ｆａｂフラグメントは、ＶＬドメイン、ＶＨドメイン、ＣＬドメインおよびＣＨ１ドメインからなる。Ｆ（ａｂ’）２フラグメントは、ヒンジ領域においてジスルフィド結合によって連結された、２つのＦａｂフラグメントを含む。Ｆｄは、抗体の単腕のＶＨドメインおよびＣＨ１ドメインである。Ｆｖフラグメントは、抗体の単腕のＶＬドメインおよびＶＨドメインである。
【０１４２】
結合フラグメントは、一価もしくは多価の、またはモノマーもしくはマルチマー（例えば、テトラマー）の、ＣＤＲ由来の結合ドメインもまた包含する。
【０１４３】
ＭＡＧＥＡ３結合抗体およびその結合フラグメントは、本明細書中に開示された例示的抗体、結合フラグメントおよび配列のバリアントもまた包含し得る。バリアントには、１つまたは複数の本明細書中に開示された例示的抗体、フラグメントおよび配列と同じまたは実質的に同じ親和性および特異性のエピトープ結合を有する、１つまたは複数のアミノ酸配列の置換、欠失および／または付加を含むペプチドおよびポリペプチドが含まれる。従って、バリアントには、本明細書中に開示された例示的抗体、フラグメントおよび配列に対する、１つまたは複数のアミノ酸配列の置換、欠失および／または付加を含むペプチドおよびポリペプチドが含まれ、かかる置換、欠失および／または付加は、エピトープ結合の親和性および特異性における実質的な変化を引き起こさない。例えば、抗体またはフラグメントのバリアントは、配列番号３、４などのアミノ酸配列のうち１つまたは複数を含む抗体またはフラグメントに対する、１つまたは複数の変化から生じ得るか、あるいはこのとき、変化した抗体またはフラグメントは、出発配列と同じまたは実質的に同じ親和性および特異性のエピトープ結合を有する。
【０１４４】
抗体またはその結合フラグメントは、本発明の文脈において一般に言及される限り、抗体または抗体部分の、例えば１つまたは複数の他のタンパク質またはペプチドとの共有結合または非共有結合によって形成される、より大きい免疫接着分子の一部でもあり得る。かかる免疫接着分子の例には、テトラマーｓｃＦｖ分子を作製するための、ストレプトアビジンコア領域の使用（Kipriyanov, S. M.ら(1995) Human Antibodies and Hybridomas 6:93-101）、ならびに二価のビオチン化ｓｃＦｖ分子を作製するためのシステイン残基、マーカーペプチドおよびＣ末端ポリヒスチジンタグの使用（Kipriyanov, S. M.ら(1994) Mol. Immunol. 31:1047-1058）が含まれる。免疫接着分子を含む抗体およびフラグメントは、本明細書中に記載されるように、標準的な組換えＤＮＡ技術を使用して得ることができる。好ましい抗原結合部分は、完全ドメイン、または完全ドメインの対である。
【０１４５】
本発明の結合抗体および結合フラグメントは、ＶＨドメインからなるドメイン抗体（ｄＡｂ）フラグメント（Wardら、Nature 341:544-546、1989）もまた包含し得る。本発明の抗体および結合フラグメントは、ＶＨドメインおよびＶＬドメインが単一のポリペプチド鎖上で発現されるが、同じ鎖上の２つのドメイン間での対形成を可能にするには短すぎるリンカーを使用することによって、それらのドメインを、別の鎖の相補的ドメインと対形成させ、２つの抗原結合部位を生成する、二価の抗体であるダイアボディもまた包含する（例えば、ＥＰ  ４０４，０９７；ＷＯ  ９３／１１１６１；Holligerら, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-6448、1993およびPoljakら、Structure 2:1121-1123、1994を参照）。ダイアボディは、二重特異的でも単一特異的であってもよい。
【０１４６】
上述のように、本発明の抗体および結合フラグメントは、単鎖抗体フラグメント（ｓｃＦｖ）もまた包含する。ｓｃＦｖは、抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）に作動可能に連結された抗体重鎖可変領域（ＶＨ）を含み、この重鎖可変領域および軽鎖可変領域は、一緒にまたは個々に、結合部位を形成する。ｓｃＦｖは、アミノ末端にＶＨ領域を含み得、カルボキシ末端にＶＬ領域を含み得る。あるいは、ｓｃＦｖは、アミノ末端にＶＬ領域を含み、カルボキシ末端にＶＨ領域を含み得る。さらに、Ｆｖフラグメントの２つのドメインＶＬおよびＶＨは、別々の遺伝子によってコードされるが、これらは、組換え方法を使用して、これらが単一のタンパク質鎖として生成されるのを可能にする合成リンカーによって連結され得、ＶＬ領域およびＶＨ領域が対形成して一価分子を形成する（単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）としても公知；例えば、Birdら(1988) Science 242:423-426；およびHustonら(1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883を参照のこと）。
【０１４７】
ｓｃＦｖは、重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間にポリペプチドリンカーを任意選択でさらに含み得る。かかるポリペプチドリンカーは、１と５０個との間のアミノ酸、あるいは３と１２個との間のアミノ酸、あるいは２個のアミノ酸を一般に含む。ｓｃＦｖ中の重鎖と軽鎖とを連結するためのリンカーペプチドの例には、５アミノ酸の配列Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒが含まれる。他の例には、リンカーを生成する、この配列の１つまたは複数のタンデムリピート（例えば、Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒの２〜４リピートを含むポリペプチド）が含まれる。
【０１４８】
本発明の抗体および結合フラグメントは、重鎖抗体（ＨＣＡｂ）もまた包含する。従来の抗体のＨ２Ｌ２構造の例外は、ラクダ科動物（ラクダ、ヒトコブラクダおよびラマ；Hamers-Castermanら、1993 Nature 363: 446；Nguyenら、1998 J. Mol. Biol、275: 413）、ウォビゴンシャーク（wobbegong shark）（Nuttallら、Mol Immunol. 38:313-26、2001）、ナースシャーク（nurse shark）（Greenbergら、Nature 374:168-73、1995；Rouxら、1998 Proc. Nat. Acad. Sci. USA 95: 11804）およびスポッティドラットフィッシュ（spotted ratfish）（Nguyenら、「Heavy-chain antibodies in Camelidae; a case of evolutionary innovation」、2002 Immunogenetics 54(1): 39-47）において見出される、いくつかのアイソタイプの免疫グロブリン中に存在する。これらの機能的抗体が重鎖のみのダイマーである（「重鎖抗体」または「ＨＣＡｂ」という）という点において、これらの抗体は、重鎖可変領域のみを使用して抗原結合領域を見かけ上形成し得る。従って、本発明の抗体および結合フラグメントのいくつかの実施形態は、腫瘍関連抗原に特異的に結合する重鎖抗体（ＨＣＡｂ）であり得る。例えば、ＩｇＧのクラスであり、軽鎖を欠く重鎖抗体は、ラクダ、ヒトコブラクダおよびラマを含む属ラクダ科（Camelidae）の動物によって産生される（Hamers-Castermanら、Nature 363:446-448 (1993)）。ＨＣＡｂは、従来のＩｇＧ抗体の約１６０ｋＤａの分子量ではなく、約９５ｋＤａの分子量を有する。それらの結合ドメインは、重鎖可変ドメインのみからなり、これはしばしばＶＨＨと呼ばれ、従来のＶＨから区別される。Muyldermansら、J. Mol. Recognit. 12:131-140 (1999)。重鎖抗体の可変ドメインは、ナノボディと呼ぶ場合もある（Cortez-Retamozoら、Cancer Research 64:2853-57、2004）。ナノボディライブラリーは、Conrathら（Antimicrob Agents Chemother 45: 2807-12、2001）に記載したように免疫したヒトコブラクダから、または組換え方法を使用して、生成され得る。
【０１４９】
第一の定常ドメイン（ＣＨ１）が存在しない（スプライスコンセンサスシグナルの喪失に起因して、ｍＲＮＡプロセシングの間にスプライスアウトされた）ので、可変ドメイン（ＶＨＨ）の直ぐ後には、ヒンジ領域、ＣＨ２およびＣＨ３ドメインが続く（Nguyenら、Mol. Immunol. 36:515-524 (1999)；Woolvenら、Immunogenetics 50:98-101 (1999)）。ラクダ科動物のＶＨＨは、報告によれば、ヒンジ、ＣＨ２およびＣＨ３ドメインを含みＣＨ１ドメインを欠くＩｇＧ２およびＩｇＧ３の定常領域と組換えられる（Hamers-Castermanら、上記）。例えば、ラマＩｇＧ１は、ＶＨがヒンジ、ＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３ドメインを含む定常領域と組換えられる従来の（Ｈ２Ｌ２）抗体アイソタイプであるが、ラマＩｇＧ２およびＩｇＧ３は、ＣＨ１ドメインを欠き、軽鎖を含まない、重鎖のみのアイソタイプである。
【０１５０】
ＨＣＡｂは軽鎖を欠くが、これらは抗原結合レパートリーを有する。ＨＣＡｂの遺伝的生成機構は、Nguyenら Adv. Immunol 79:261-296 (2001)および Nguyenら、Immunogenetics 54:39-47 (2002)に概説されている。ナースシャークを含むサメは、同様の抗原レセプター含有の単一のモノマーＶドメインを示す。Irvingら、J. Immunol. Methods 248:31-45 (2001)；Rouxら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95:11804 (1998)。
【０１５１】
ＶＨＨは、小さいインタクトな抗原結合フラグメント（例えば、約１５ｋＤａ、１１８〜１３６残基のフラグメント）を含む。ラクダ科動物のＶＨＨドメインは、高い親和性で抗原に結合することが見出されており（Desmyterら、J. Biol. Chem. 276:26285-90、2001）、ＶＨＨ親和性は、典型的にはナノモル濃度の範囲であり、ＦａｂフラグメントおよびｓｃＦｖフラグメントの親和性と同等である。ＶＨＨは、可溶性が高く、ｓｃＦｖフラグメントおよびＦａｂフラグメントの対応する誘導体よりも安定である。ＶＨフラグメントは、可溶性形態で生成することが比較的困難であったが、フレームワーク残基がよりＶＨＨ様に変更される場合、溶解度および特異的結合における改善が得られ得る（例えば、Reichmanら、J Immunol Methods 1999、231:25-38を参照のこと）。ＶＨＨは、それらをより親水性にし、Ｌ鎖によって置き換えられるまで、折り畳みおよびアセンブリの間に小胞体（ＥＲ）中でＨ鎖に通常は結合するＢｉＰ（免疫グロブリン重鎖結合タンパク質）との相互作用の延長を防止する、アミノ酸置換を保有する。ＶＨＨが親水性を増したおかげで、ＥＲからの分泌が改善される。
【０１５２】
機能的ＶＨＨは、免疫されたラクダ科動物ＨＣＡｂのタンパク質分解的切断によって、組換えＶＨＨを生じる免疫されたラクダ科動物のＢ細胞またはナイーブもしくは合成ライブラリーからのＶＨＨ遺伝子の直接的クローニングによって、得ることができる。所望の抗原特異性を有するＶＨＨは、ファージディスプレイ方法論によっても得ることができる。ファージディスプレイにおいてＶＨＨを使用することは、ＦａｂまたはｓｃＦｖと比較してかなり単純かつより有効であるが、これは、機能的抗原結合フラグメントを得るために、１つのドメインがクローニングされ、発現される必要があるだけだからである。Muyldermans、Biotechnol. 74:277-302 (2001)；Ghahroudiら、FEBS Lett. 414:521-526 (1997)；およびvan der Lindenら、J. Biotechnol. 80:261-270 (2000)。ラクダ科動物の重鎖を有する抗体を生成するための方法は、米国特許公開２００５０１３６０４９号および同２００５００３７４２１号にも記載されている。
【０１５３】
結合抗体およびその結合フラグメントは、例えば、１つまたは複数の保存的置換（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４または１５個の保存的置換）を有する、任意の上記具体的に記載された軽鎖または重鎖のアミノ酸配列もまた包含し得る。保存的置換の候補であるアミノ酸配列の位置を決定でき、任意の特定のアミノ酸について保存的置換をもたらす合成および天然に存在するアミノ酸を選択することができる。保存的置換を選択するための考慮事項には、任意の特定のアミノ酸置換が行われる状況、側鎖の疎水性もしくは極性、側鎖の全体的サイズ、および生理的条件下で酸性もしくは塩基性の特徴を有する側鎖のｐＫ値、が含まれる。例えば、リジン、アルギニンおよびヒスチジンが、互いに適切に置換される場合が多い。当該分野で公知のように、これは、３つのアミノ酸が全て塩基性側鎖を有しているからであるが、リジンおよびアルギニンの側鎖のｐＫ値は、ヒスチジン（約６）に対してよりも、互いに対してかなり近い（約１０および１２）。同様に、グリシン、アラニン、バリン、ロイシンおよびイソロイシンが、互いに適切に置換される場合が多いが、但し、グリシンは、その群の他のメンバーでは適切に置換されない場合が多い。互いに適切に置換される場合が多いアミノ酸の他の群には、グルタミン酸およびアスパラギン酸からなる群；フェニルアラニン、チロシンおよびトリプトファンからなる群；ならびにセリン、スレオニンおよび任意選択でチロシンからなる群が含まれるが、これらに限定されない。
【０１５４】
アミノ酸配列に対する保存的修飾またはコードするヌクレオチドに対する対応する修飾を生成することによって、本明細書中に開示される例示的抗体およびフラグメントの特徴と類似した機能的および化学的特徴を有する抗体またはその結合フラグメントを生成することができる。
【０１５５】
結合抗体およびその結合フラグメントは、本発明の文脈において言及される場合、本明細書中に開示される例示的抗体、フラグメントおよび配列の誘導体を包含し得る。誘導体には、化学的に修飾されたポリペプチドもしくはペプチド、またはそのバリアント、フラグメントもしくは誘導体が含まれる。例としては、１つまたは複数のポリマー、例えば水溶性ポリマー、Ｎ結合型もしくはＯ結合型炭水化物、糖、リン酸、および／または他のかかる分子、例えば、フルオロフォアなどの検出可能な標識の共有結合が含まれる。
【０１５６】
標識剤は、本発明の抗体または抗原に直接的または間接的のいずれかでカップリングされ得る。間接的カップリングの一例は、スペーサー部分の使用によるものである。さらに、本発明の抗体は、さらなるドメインを含み得、前記ドメインは、共有結合または非共有結合によって連結される。この連結は、当該分野で公知の上記した方法に従う遺伝的融合に基づき得るか、または例えば国際出願ＷＯ９４／０４６８６に記載される化学的架橋によって実施され得る。本発明の抗体を含む融合タンパク質中に存在するさらなるドメインは、好ましくは、可撓性リンカー、有利にはポリペプチドリンカーによって連結され得、前記ポリペプチドリンカーは、前記さらなるドメインのＣ末端と本発明の抗体のＮ末端との間（または逆もしかり）の距離にわたるのに充分な長さの、複数の親水性のペプチド結合したアミノ酸を含む。治療的または診断的に活性な薬剤が、種々の方法によって、本発明の抗体またはその抗原結合フラグメントにカップリングされ得る。これには、例えば、共有的な方法、例えばペプチド結合によって、治療的または診断的に活性な薬剤にカップリングされた、本発明の抗体の可変領域を含む単鎖融合タンパク質が含まれる。さらなる例には、さらなる分子に共有結合または非共有結合によってカップリングされた抗原結合フラグメントを少なくとも含む分子が含まれ、以下の非限定的な例示的リスト中のものが含まれる。Trauneckerら、Int. J. Cancer Surp. SuDP 7 (1992)、51-52は、ＣＤ３に対するＦｖ領域が、可溶性ＣＤ４または他のリガンド、例えばＯＶＣＡおよびＩＬ−７にカップリングされている、二重特異的試薬ヤヌシン（janusin）を記載している。同様に、ＭＡＧＥＡ３に対するＦｖ領域は、例えば抗ＣＤ４０アゴニスト抗体の一部および／または抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体の一部にカップリングされ得る。同様に、本発明の抗体の可変領域は、Ｆｖ分子へと構築され得、列挙した文献中に示したような代替的リガンドにカップリングされ得る。Higginsら、J. Infect Disease 166 (1992)、198-202は、ＧＰ１２０のＶ３領域中の特異的配列に対する抗体に架橋されたＯＫＴ３からなるヘテロコンジュゲート化抗体を記載している。かかるヘテロコンジュゲート化抗体はまた、本発明の方法の抗体中に含まれる少なくとも可変領域を使用して構築され得る。特異的抗体のさらなる例には、Fangerら、Cancer Treat. Res. 68 (1993)、181-194およびFangerら、Crit. Rev. Immunol. 12 (1992)、101-124に記載された抗体が含まれる。従来の抗体を含む免疫毒素であるコンジュゲートは、当該分野で広く記載されている。この毒素は、従来のカップリング技術によって抗体にカップリングされ得るか、またはタンパク質毒素部分を含む免疫毒素が、融合タンパク質として生成され得る。本発明の抗体は、かかる免疫毒素を得るための対応する方法で使用され得る。かかる免疫毒素の例示は、Byersら、Seminars Cell. Biol. 2 (1991)、59-70およびFangerら、Immunol. Today 12 (1991)、51-54によって記載されている。
【０１５７】
上記融合タンパク質は、切断可能なリンカーまたはプロテアーゼの切断部位をさらに含み得る。これらのスペーサー部分は、今度は、不溶性または可溶性のいずれかであり得（Dienerら、Science 231 (1986)、148）、標的部位における抗原からの薬物放出を可能にするように選択され得る。
【０１５８】
免疫療法のための本発明の抗体および抗原にカップリングされ得る治療的薬剤の例は、薬物、放射性同位体、レクチンおよび毒素である。本発明の抗体および抗原にコンジュゲート化され得る薬物には、マイトマイシンＣ、ダウノルビシンおよびビンブラスチンなどの薬物と古典的に称される化合物が含まれる。例えば腫瘍免疫療法のために、放射性同位体とコンジュゲート化した本発明の抗体または抗原を使用する際には、特定の同位体が、白血球分布ならびに安定性および放射などの因子に依存して、他の同位体よりも好ましい場合がある。
【０１５９】
いくつかの放射体が、他の放射体よりも好ましい場合がある。一般に、α粒子およびβ粒子を放射する放射性同位体が、免疫療法では好ましい。ショートレンジの高エネルギー放射体、例えば２１２Ｂｉが好ましい。治療目的のために本発明の抗体または抗原に結合され得る放射性同位体の例は、１２５Ｉ、１３１Ｉ、９０Ｙ、６７Ｃｕ、２１２Ｂｉ、２１２Ａｔ、２１１Ｐｂ、４７Ｓｃ、１０９Ｐｄおよび１８８Ｒｅである。本発明の抗体または抗原にカップリングされ得る他の治療的薬剤、ならびにｅｘ  ｖｉｖｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏの治療プロトコルは、公知であるか、または当業者によって容易に確認され得る。
【０１６０】
好ましくは、本明細書中で言及されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントには、とりわけ配列番号１〜１００によって特徴付けられた、フラグメント、バリアントなどを得るために本明細書中に記載されるように次いでさらに改変され得る、上述の特異的ＭＡＧＥＡ３抗体が含まれる。
【０１６１】
これら特異的な個々のＭＡＧＥＡ３結合抗体またはそのフラグメントは全て、ＭＡＧＥＡ３発現腫瘍に罹患しており、完全なもしくは少なくとも部分的なレスポンダーであると分類された患者から直接得られたか、またはかかる患者の抗体から誘導されたかのいずれかである点で、共通している。従って、これらは、モノクローナルヒト患者由来抗体の本質的な特性を維持している、モノクローナルヒト患者由来抗体またはモノクローナルのキメラ、ヒト化もしくはヒト抗体、その結合フラグメントおよびそれらのバリアントのいずれかである。
【０１６２】
かかる抗体およびその結合フラグメントは、ＭＡＧＥＡ３および／もしくはＭＡＧＥＡ６発現腫瘍またはさらには他の癌型の治療において、特に有効であると推測することは尤もであると思われる。かかる抗体の有効性は、例えばＣＤ４＋、ＣＤ８＋細胞傷害性Ｔ細胞を活性化することによって、腫瘍に対する免疫応答を誘導するその能力から生じ得る。１２２Ｇ３および３２Ｈ２などの特定の抗体ならびにそれから誘導される結合フラグメント、バリアントなどは、かなり高い親和性（それぞれ、３１ｐＭおよび１９ｐＭ）を有すると考えられるので、好まれ得る。さらに、これらは、ＭＡＧＥＡ１、ＭＡＧＥＡ２、ＭＡＧＥＡ４ならびにＭＡＧＥＡ１０を超えてＭＡＧＥＡ３を優先的に認識すると考えられる。
【０１６３】
本発明はさらに、かかる抗体をコードする核酸分子、その可変軽鎖および／または重鎖をコードする核酸分子、ならびにその可変軽鎖および／または重鎖のＣＤＲ１、ＣＤＲ２および／またはＣＤＲ３をコードする核酸分子に関する。
【０１６４】
本発明はさらに、かかる核酸分子を含むベクターおよび／またはかかるベクターに関する。
【０１６５】
本発明はまた、上述のＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントのいずれかを含む医薬組成物に関する。
【０１６６】
本発明はさらに、過剰増殖疾患、特にＭＡＧＥＡ３および／またはＭＡＧＥＡ６を発現する腫瘍の治療において使用するための、上述のＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントのいずれかを含む医薬組成物に関する。
【０１６７】
本発明はさらに、過剰増殖疾患、特にＭＡＧＥＡ３および／またはＭＡＧＥＡ６を発現する腫瘍を治療するための医薬品の製造における、上述のＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントのいずれかの使用に関する。
【０１６８】
本発明はさらに、上述のＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントのいずれかを患者に投与することによる、過剰増殖疾患、特にＭＡＧＥＡ３および／またはＭＡＧＥＡ６を発現する腫瘍を治療する方法に関する。
【０１６９】
上述のように、本発明は、ある実施形態では、抗体およびその結合フラグメントをコードする核酸分子、かかる核酸分子を含むベクター、ならびにかかる核酸配列およびベクターを含む宿主細胞にも関する。
【０１７０】
抗体およびその結合フラグメントは、単一の核酸（例えば、抗体の軽鎖および重鎖ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む単一の核酸）または各々が抗体または抗体フラグメントの異なる部分をコードする２つ以上の別々の核酸によってコードされ得る。これに関して、本発明は、上記抗体または結合フラグメントのいずれか（例えば、配列番号３、１３、２３、３３、４、１４、２４、３４の上記軽鎖可変領域もしくは上記重鎖可変領域のいずれか、または配列番号５、１５、２５、３５、６、１６、２６、３６、７、１７、２７、３７、８、１８、２８、３８、９、１９、２９、３９、１０、２０、３０、４０のＣＤＲのいずれか）をコードする１つまたは複数の核酸を提供する。この核酸分子は、ＤＮＡ、ｃＤＮＡ、ＲＮＡなどであり得る。
【０１７１】
本発明の一態様によれば、本発明は、抗体またはその部分の重鎖可変領域をコードする核酸を提供する。例示的核酸配列は、配列番号１、１１、２１、３１中に提供される。本発明は、抗体またはその部分の軽鎖可変領域をコードする核酸もまた提供する。例示的核酸配列は、配列番号２、１２、２２、３２中に提供される。
【０１７２】
本発明は、本発明の抗体および抗体フラグメントに関して考察されるように、１つまたは複数の保存的置換（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４または１５個の保存的置換）を含む軽鎖または重鎖の上記アミノ酸配列のいずれかをコードする核酸もまた包含し、この置換を含む抗体またはフラグメントは、１つまたは複数の本明細書中に開示される例示的抗体、フラグメントおよび配列と同じまたは実質的に同じ親和性および特異性のエピトープ結合を有する。
【０１７３】
好ましくは、本発明のポリヌクレオチドは、原核生物細胞または真核生物細胞での発現を可能にする発現制御配列に作動可能に連結される。前記ポリヌクレオチドの発現は、このポリヌクレオチドの、翻訳可能なｍＲＮＡへの転写を含む。真核生物細胞、好ましくは哺乳動物細胞での発現を確実にする調節エレメントは、当業者に周知である。これらには、通常、転写の開始を確実にする調節配列、ならびに任意選択で転写の終結および転写物の安定化を確実にするポリＡシグナルが含まれる。さらなる調節エレメントには、転写および翻訳エンハンサーならびに／または天然に付随するもしくは異種のプロモーター領域が含まれ得る。
【０１７４】
本明細書中に記載される核酸は、ベクター、例えば核酸発現ベクターおよび／またはターゲティングベクター中に挿入され得る。かかるベクターは、例えば、細胞またはトランスジェニック動物における抗体または結合フラグメントの発現のために、種々の方法で使用され得る。従って、本発明は、任意の１つまたは複数の本発明の核酸を含むベクターを提供する。「ベクター」は、適切な宿主細胞中に核酸配列を運搬する能力を有する任意の分子または組成物であり、この宿主細胞中で、コードされたポリペプチドの合成が起こり得る。典型的にかつ好ましくは、ベクターは、所望の核酸配列（例えば、本発明の核酸）を組み込むために、当該分野で公知の組換えＤＮＡ技術を使用して操作された核酸である。望ましくは、ベクターは、ＤＮＡからなる。しかし、核酸に基づかないベクター、例えばリポソームもまた当該分野で公知であり、本発明に関連して使用され得る。本発明のベクターは、単一の型の核酸（例えば、プラスミド）または非核酸分子（例えば、脂質またはポリマー）に基づき得る。あるいは、ベクターは、核酸と非核酸との組み合わせ（即ち、「キメラ」ベクター）であり得る。例えば、核酸を保有するプラスミドは、送達ビヒクルとして脂質またはポリマーを用いて製剤化され得る。かかるベクターは、それぞれ、本明細書中で「プラスミド−脂質複合」および「プラスミド−ポリマー」複合と呼ばれる。本発明の遺伝子移入ベクターは、宿主細胞のゲノム中に組み込まれ得るか、またはエピソームの形態で宿主細胞中に存在し得る。
【０１７５】
ベクターは典型的に、ベクターが使用される宿主細胞中で機能的であるように選択される（ベクターは、遺伝子の増幅および／または遺伝子の発現が生じ得るように、宿主細胞の機構と適合性である）。抗体またはその結合フラグメントをコードする核酸分子は、原核生物、酵母、昆虫（バキュロウイルス系）および／または真核生物の宿主細胞中で増幅／発現され得る。宿主細胞の選択は、抗体またはフラグメントが、移行後に修飾される（例えば、グリコシル化および／またはリン酸化される）か否かに、部分的に依存する。その場合、酵母、昆虫および哺乳動物の宿主細胞が好ましい。
【０１７６】
発現ベクターは典型的に、以下の成分の１つまたは複数を含む（それらが核酸分子によって既に提供されていない場合）：プロモーター、１つまたは複数のエンハンサー配列、複製起点、転写終結配列、ドナーおよびアクセプタースプライス部位を含む完全イントロン配列、分泌のためのリーダー配列、リボソーム結合部位、ポリアデニル化配列、発現すべきポリペプチドをコードする核酸を挿入するためのポリリンカー領域、ならびに選択マーカーエレメント。
【０１７７】
いくつかの態様において、本発明はさらに、本発明の核酸またはベクターを含む細胞（例えば、単離または精製された細胞）を提供する。この細胞は、本発明の核酸またはベクターによってコードされるポリペプチドを産生するように、本発明の核酸またはベクターで形質転換することが可能な任意の型の細胞であり得る。細胞は、好ましくは、哺乳動物（例えばヒト）の細胞であり、より好ましくはハイブリドーマ細胞、胚性幹細胞または受精卵である。胚性幹細胞または受精卵は、ヒト胚性幹細胞またはヒト受精卵でなくてもよい。
【０１７８】
宿主細胞は、原核生物宿主細胞（例えば大腸菌（E. coli））または真核生物宿主細胞（例えば、酵母細胞、昆虫細胞または脊椎動物細胞）であり得る。宿主細胞は、適切な条件下で培養される場合、抗体または結合フラグメントを発現し、この抗体または結合フラグメントは、引き続いて培養培地から回収され得るか（宿主細胞がそれを培地中に分泌する場合）、またはそれを産生する宿主細胞から直接回収され得る（それが分泌されない場合）。適切な宿主細胞の選択は、種々の因子、例えば所望の発現レベル、グリコシル化またはリン酸化などの活性にとって望ましいもしくは必要なポリペプチド修飾、および生物学的に活性な分子への折り畳みの容易さに依存する。多数の適切な宿主細胞は当該分野で公知であり、多くは、American Type Culture Collection (ATCC)、Manassas、Vaから入手可能である。例としては、哺乳動物細胞、例えば、チャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ）（ＡＴＣＣ番号ＣＣＬ６１）ＣＨＯ  ＤＨＦＲ細胞（Urlaubら Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97、4216-4220 (1980)）、ヒト胎児由来腎臓（ＨＥＫ）２９３または２９３Ｔ細胞（ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ１５７３）、３Ｔ３細胞（ＡＴＣＣ番号ＣＣＬ９２）、あるいはＰＥＲ．Ｃ６細胞が含まれる。
【０１７９】
本発明の核酸またはベクターを含む細胞は、抗体またはその結合フラグメント、あるいはそれらの部分（例えば、核酸またはベクターによってコードされる重鎖配列または軽鎖配列）を産生するために使用され得る。本発明の核酸またはベクターを細胞中に導入した後、細胞は、コードされた配列の発現に適した条件下で培養される。次いで、抗体、抗原結合フラグメント、または抗体の部分が、細胞から単離され得る。
【０１８０】
ＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメントならびに免疫系を活性化することが可能な化合物は、組成物、特に医薬組成物に製剤化され得る。かかる組成物は、治療的または予防的に有効な量の、抗体もしくはその結合フラグメントおよび／または免疫系を活性化することが可能な化合物を、適切な担体、例えば、医薬的に許容される薬剤との混合物中に含む。
【０１８１】
本発明の医薬組成物中で使用するための医薬的に許容される薬剤には、担体、賦形剤、希釈剤、抗酸化剤、防腐剤、着色料、香味料および希釈剤、乳化剤、懸濁剤、溶媒、フィラー、充填剤、緩衝液、送達ビヒクル、等張化剤、共溶媒、湿潤剤、錯化剤、緩衝剤、抗菌剤ならびに界面活性剤が含まれる。
【０１８２】
組成物は、液体形態または凍結乾燥もしくはフリーズドライ形態であり得、１つまたは複数の凍結保護剤、賦形剤、界面活性剤、高分子量構造添加剤および／または充填剤を含み得る（例えば、米国特許第６，６８５，９４０号、同第６，５６６，３２９号および同第６，３７２，７１６号を参照のこと）。
【０１８３】
組成物は、非経口投与に適切であり得る。例示的組成物は、当業者が利用可能な任意の経路（例えば、関節内、皮下、静脈内、筋内、腹腔内、脳内（実質内）、脳室内、筋内、眼内、動脈内または病巣内経路）によって、動物中に注射または注入するのに適切である。非経口製剤は、典型的に、任意選択で医薬的に許容される防腐剤を含む、無菌の、発熱物質を含まない、等張の水溶液である。
【０１８４】
非水性溶媒の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油（例えば、オリーブ油）および注射可能な有機エステル（例えば、オレイン酸エチル）である。水性担体には、水、アルコール／水溶液、乳濁物または懸濁物（生理食塩水および緩衝化媒体が含まれる）が含まれる。非経口ビヒクルには、塩化ナトリウム溶液、リンゲルデキストロース、デキストロースおよび塩化ナトリウム、乳酸リンゲルまたは不揮発油が含まれる。静脈内ビヒクルには、流体および栄養補給剤、電解質補給剤、例えばリンゲルデキストロースに基づくものなどが含まれる。防腐剤および他の添加剤、例えば、抗菌剤、抗酸化剤、キレート剤、不活性ガスなどもまた、存在し得る。一般には、Remington's Pharmaceutical Science、第16版、Mack編、1980（これは、本明細書中で参照により組み込まれる）を参照のこと。
【０１８５】
本明細書中に記載される医薬組成物は、生成物の局所濃度（例えば、ボーラス、デポー効果）および／または特定の局所環境での安定性もしくは半減期の増加を提供する様式で、制御または持続送達するために製剤化され得る。組成物は、ポリマー化合物、例えばポリ乳酸、ポリグリコール酸などの粒子状調製物、ならびに薬剤、例えば生分解性マトリックス、注射可能ミクロスフェア、マイクロカプセル状粒子、マイクロカプセル、生体内分解性粒子ビーズ、リポソームおよび次いでデポー注射として送達され得る活性な薬剤の制御または持続放出を提供する移植可能な送達デバイスなどを用いた、本発明の抗体、結合フラグメント、核酸またはベクターの製剤を含み得る。
【０１８６】
生分解性および非生分解性ポリマーマトリックスの両方が、本発明の組成物を送達するために使用され得、かかるポリマーマトリックスは、天然または合成のポリマーを含み得る。生分解性マトリックスが好ましい。放出が生じる期間は、ポリマーの選択に基づく。典型的には、数時間と３〜１２カ月間との間の範囲の期間にわたる放出が、最も望ましい。
【０１８７】
あるいはまたはさらに、組成物は、本発明の抗体、結合フラグメント、核酸またはベクターが吸収またはカプセル化された、メンブレン、スポンジまたは他の適切な材料の、罹患領域中への移植を介して、局所投与され得る。移植デバイスが使用される場合、このデバイスは、任意の適切な組織または器官中に移植され得、本発明の抗体、結合フラグメント、核酸またはベクターの送達は、ボーラスを介して、または連続投与を介して、または連続注入を使用してカテーテルを介して、デバイスを通じて直接的であり得る。
【０１８８】
結合抗体もしくはその結合フラグメントおよび／または免疫系を活性化することが可能な化合物を含む医薬組成物は、吸入のために、例えば乾燥粉末として、製剤化され得る。吸入溶液もまた、エアロゾル送達のための液化噴霧剤中に製剤化され得る。なお別の製剤において、溶液が噴霧され得る。
【０１８９】
抗体またはその結合フラグメントおよび／または免疫系を活性化することが可能な化合物を含む特定の製剤が経口投与され得る。この様式で投与される製剤は、固体投薬形態（例えば、錠剤およびカプセル）の複合において習慣的に使用される担体を含むまたは含まない状態で製剤化され得る。例えば、カプセルは、胃腸管中の地点で製剤の活性な部分を放出するように設計され得、このとき、バイオアベイラビリティが最大化され、全身以前の分解が最小化される。さらなる薬剤が、選択的結合剤の吸収を促進するために含まれ得る。希釈剤、香味料、低融点ワックス、植物油、滑沢剤、懸濁剤、錠剤崩壊剤および結合剤もまた、使用され得る。
【０１９０】
いくつかの実施形態において、上述の医薬組成物は、ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントを含み得るが、免疫系を刺激することが可能な化合物を含まなくてもよい。用語「免疫系を刺激することが可能な化合物」は、以下に記載するように理解すべきであり、これには特に、ＣＤ４０Ｌまたは抗ＣＤ４０アゴニスト抗体、例えばＣＰ−８７０，８９３またはＳＧＮ−４０、および（ｉｉｉ）抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体、例えばＴｒｅｍｅｌｉｍｕｍａｂおよびＩｐｉｌｉｍｕｍａｂが含まれる。
【０１９１】
いくつかの他の実施形態において、上述の医薬組成物は、ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントを、唯一の医薬的に活性な薬剤として含み得る。
【０１９２】
さらに、本明細書中で企図されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントおよび全ての型の医薬組成物は、過剰増殖疾患に罹患している患者を治療する方法および／または個体を過剰増殖疾患が発生しないように予防する方法において投与され得る。
【０１９３】
用語「過剰増殖疾患」とは、がんまたは腫瘍と一般に称される疾患をいう。
【０１９４】
特に記載しない限り、用語「がん」および「腫瘍」は、本明細書中で交換可能に使用される。これらの用語は、特に、基底細胞癌；膀胱癌；骨癌、例えば骨肉腫；中枢神経系の腫瘍、例えば、小脳星状細胞腫、大脳星状細胞腫／悪性神経膠腫、頭蓋咽頭腫、上衣芽細胞腫（ependymoblastoma）、上衣腫、髄芽腫、髄上皮腫、中分化度の松果体実質腫瘍、原発性神経外胚葉性腫瘍、松果体芽腫および脊髄腫瘍；バーキットリンパ腫；乳癌；子宮頸癌；慢性骨髄性白血病；結腸癌；直腸癌；結腸直腸癌；食道癌；ユーイングファミリーの腫瘍（Ewing family of tumor）；肝外胆管癌；胆嚢癌；消化管間葉性腫瘍（ＧＩＳＴ）；神経膠腫；頭頸部癌；膵島細胞腫瘍；カポジ肉腫；白血病；肝臓癌；リンパ腫；ホジキンリンパ腫；非ホジキンリンパ腫；Ｔ細胞リンパ腫；中皮腫；多発性骨髄腫／形質細胞腫瘍；骨髄性白血病；多発性骨髄腫；鼻咽頭癌；神経芽細胞腫；小細胞肺癌；非小細胞肺癌；中咽頭癌；骨肉腫；卵巣癌；膵臓癌；副甲状腺癌；陰茎癌；咽頭癌（pharyngeal cancer）；クロム親和性細胞腫；下垂体腫瘍；前立腺癌；腎細胞癌；気道癌腫；網膜芽細胞腫；皮膚癌（黒色腫）；小腸癌；軟部組織肉腫；扁平上皮癌；扁平上皮頸部癌（squamous neck cancer）；胃癌；精巣癌；咽喉癌（throat cancer）；甲状腺癌；腎盂および尿管の移行上皮癌；尿道癌；子宮癌；腟癌；外陰癌ならびにウィルムス腫瘍を含む群から選択されるがんおよび腫瘍に関連するが、これらに限定されない。
【０１９５】
黒色腫、乳癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、多発性骨髄腫および／または膵臓癌の治療は、本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体もしくはその結合フラグメントまたは医薬組成物を使用した場合に、特に有効であり得る。
【０１９６】
上述のように、本発明の第一の態様の他の実施形態において、本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントは、例えば、本明細書中で言及される過剰増殖疾患に罹患している患者を診断するための診断ツールとして使用される。例えば、ＭＡＧＥＡ３および／またはＭＡＧＥＡ６を発現する過剰増殖疾患の存在および／または発生を診断するためにかかる抗体を使用することが好まれ得る。かかる過剰増殖疾患には、黒色腫、乳癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、多発性骨髄腫および／または膵臓癌が含まれ得る。ＭＡＧＥＡ３結合抗体およびその結合フラグメントは好ましくは、ＭＡＧＥＡ４、ＭＡＧＥＡ１もしくはＭＡＧＥＡ１０の過剰発現によって追加的にまたは専ら特徴付けられる癌を超えて、ＭＡＧＥＡ３および／またはＭＡＧＥＡ６によって主に特徴付けられ任意選択でＭＡＧＥＡ２の過剰発現によって特徴付けられる上述の癌などの過剰増殖疾患を同定するために使用され得る。ＭＡＧＥＡ３および／またはＭＡＧＥＡ６ならびに任意選択でＭＡＧＥＡ２の過剰発現によって特徴付けられる癌などの過剰増殖疾患に対して主に有効な治療が利用可能である場合、本発明の抗体ならびにそこから誘導される抗体および結合フラグメントは、臨床試験における患者集団の層別化のために、またはコンパニオン診断として、即ち、治療が有効である患者を選択するために、使用され得る。
【０１９７】
従って、一実施形態において、本発明は、本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体または結合フラグメントを含む診断組成物に関する。かかる診断組成物は、例えば、ＭＡＧＥＡ３および／またはＭＡＧＥＡ６ならびに任意選択でＭＡＧＥＡ２を発現する過剰増殖疾患の存在および／または発生の診断において使用され得る。かかる過剰増殖疾患には、黒色腫、乳癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、多発性骨髄腫および／または膵臓癌が含まれ得る。
【０１９８】
別の実施形態において、本発明は、過剰増殖疾患の診断において使用するための、本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントに関する。これらの疾患は、ＭＡＧＥＡ３および／またはＭＡＧＥＡ６ならびに任意選択でＭＡＧＥＡ２を発現し得る。かかる過剰増殖疾患には、黒色腫、乳癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、多発性骨髄腫および／または膵臓癌が含まれ得る。
【０１９９】
別の実施形態において、本発明は、過剰増殖疾患を診断するための組成物および／または医薬品の製造における、本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントの使用に関する。これらの疾患は、ＭＡＧＥＡ３および／またはＭＡＧＥＡ６ならびに任意選択でＭＡＧＥＡ２を発現し得る。かかる過剰増殖疾患には、黒色腫、乳癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、多発性骨髄腫および／または膵臓癌が含まれ得る。
【０２００】
なお別の実施形態において、本発明は、本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントを使用することによって、ヒトまたは動物における過剰増殖疾患を診断する方法に関する。これらの疾患は、ＭＡＧＥＡ３および／またはＭＡＧＥＡ６ならびに任意選択でＭＡＧＥＡ２を発現し得る。かかる過剰増殖疾患には、黒色腫、乳癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、多発性骨髄腫および／または膵臓癌が含まれ得る。
【０２０１】
かかる方法および使用は、ヒト身体の外側で実施され得る。この限りにおいて、サンプル、例えば、組織サンプルは、例えば切迫したまたは進行中の癌発生に罹患していると疑われる個体から得られ得る。このサンプルは次いで、例えば、ＭＡＧＥＡ３および／またはＭＡＧＥＡ６の発現について試験される。典型的には、この決定は、例えば、ＭＡＧＥＡ３および／またはＭＡＧＥＡ６の発現レベルを、健康な個体、または同じ個体の健康な組織のいずれかから得られたサンプルのそれぞれの発現レベルと比較することを典型的に含む。
【０２０２】
従って、本発明は、例えば、ヒトまたは動物の個体における過剰増殖疾患を診断する方法であって、
ａ）本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体または結合フラグメントを使用して、少なくともＭＡＧＥＡ３の発現について、ヒトまたは動物の個体のサンプルを試験するステップ；
ｂ）コントロールサンプルにおける少なくともＭＡＧＥＡ３の発現と比較するステップ；
ｃ）ステップａ）およびｂ）で得られたデータを比較することによって、過剰増殖疾患の存在および／またはおそらくは発生を決定するステップ
を少なくとも含む方法に関する。
【０２０３】
ステップａ）およびｂ）は、好ましくは、ヒトまたは動物の身体の外側で実施され得る。サンプルは、組織、臓器などであり得る。コントロールサンプルは、上記のとおりであり得る。
【０２０４】
しかし、かかる方法および使用は、ヒト身体に対して直接実施されてもよい。この限りにおいて、抗体は、検出可能なマーカーで標識され得、例えば、切迫したまたは進行中の癌発生に罹患している疑いがある個体に投与され得、抗体の局在ならびにＭＡＧＥＡ３および／またはＭＡＧＥＡ６の発現レベルが、個体において直接決定される。
【０２０５】
従って、本発明は、例えば、ヒトまたは動物の個体において、例えば、過剰増殖疾患の治療を試験するための臨床試験のために患者集団を層別化する方法であって、
ａ）本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体または結合フラグメントを使用して、少なくともＭＡＧＥＡ３の発現についてヒトまたは動物の個体のサンプルを試験するステップ；
ｂ）コントロールサンプルにおける少なくともＭＡＧＥＡ３の発現と比較するステップ；
ｃ）ステップａ）およびｂ）で得られたデータを比較することによって、患者集団を選択するステップ
を少なくとも含む方法に関する。
【０２０６】
ステップａ）およびｂ）は、好ましくは、ヒトまたは動物の身体の外側で実施され得る。サンプルは、組織、臓器などであり得る。コントロールサンプルは、上記のとおりであり得る。
【０２０７】
本発明はまた、データ獲得の方法であって、
ａ）本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントをヒトまたは動物の個体に投与するステップ；
ｂ）ヒトまたは動物の個体におけるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントの分布を決定するステップ；および
ｃ）ヒトまたは動物の個体における少なくともＭＡＧＥＡ３の発現を決定するステップ
を少なくとも含む方法に関する。
【０２０８】
上述のように、第二の態様において、本発明は、本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントなどのＴＡＡ結合抗体と、免疫系を刺激することが可能な化合物との併用に関する。
【０２０９】
本発明のこの第二の態様は、とりわけ、５−ＦＵで治療した同系ＮＹ−ＥＳＯ−１陽性結腸腫瘍を有するマウスが、ＮＹ−ＥＳＯ−１結合抗体１２Ｄ７（配列番号１０９の可変軽鎖および配列番号１１０の可変重鎖を有する）の投与後にＣＤ４＋、ＣＤ８＋Ｔ細胞の浸潤を示し、この効果が、抗ＣＤ４０アゴニスト抗体のさらなる投与の際により明白になるという、実験的知見に基づいている。これらの治療の結果として、腫瘍サイズが減少する。このＮＹ−ＥＳＯ−１結合抗体ならびに他の特異的ＮＹ−ＥＳＯ−１結合抗体およびそのフラグメントは、ＥＰ  １１  １５０  ５２７．７に詳細に記載されている。
【０２１０】
この仮説に拘束されることは望まないが、ＴＡＡ結合抗体、例えばＣＴ抗原ＮＹ−Ｅｓｏ−１結合抗体１２Ｄ７の投与が、治療的観点（例えば、腫瘍破壊に関して）から腫瘍の部位に限局化される免疫応答を誘発すると仮定される。この型の限局化免疫応答は、免疫系を活性化することが可能な化合物、例えばＣＤ４０アゴニスト抗体の投与によって、さらに強化および／または延長され得ると考えられる。例えば、本明細書中に開示されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントが、かかる免疫系を活性化することが可能な化合物と併用される場合、同じ型の協同的作用が観察され得ると推測される。
【０２１１】
広範囲の免疫調節剤（即ち、免疫応答を刺激することが可能な化合物）と称され得るもの、およびさらには非特異的細胞傷害性剤と共に、非常に選択的な腫瘍標的化剤（即ち、ＴＡＡ結合抗体、例えば、本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント）を使用するこの併用アプローチは、疾患治療を顕著に改善し得るいくつかの利点を提供し得る。
【０２１２】
５−ＦＵなどの化合物を用いた標準的な化学療法、例えば、ｔｏｌｌ−７レセプターまたはｔｏｌｌ−９レセプターのアゴニスト、ＣＤ−４０レセプターアゴニスト、抗ＣＴＬＡ−４アンタゴニスト抗体を介する一般的な免疫調節物質に焦点を当てた治療、ならびにＥＧＦレセプターまたはＨＥＲ−２レセプターに対する治療的抗体を含むなおさらに標的化された治療は、種々の副作用に悩まされている。
【０２１３】
細胞傷害性薬剤を用いた化学療法は、一般に分裂している細胞に影響を与える。免疫調節物質は、腫瘍を指向していない他の免疫反応ならびに有害な自己免疫反応を増強する。ＥＧＦレセプターまたはＨＥＲ−２レセプターに対する抗体は、腫瘍組織中だけでなく、他の分化した正常細胞、例えば心臓の細胞中でも同様に、機能的に適切である。
【０２１４】
これらの特性は、例えば投薬量を制限し得、従って、これらの他の治療的に非常に重要な治療原理の有効性を制限し得る、「オフターゲットな」（標的（ターゲット）は腫瘍である）副作用を導く。
【０２１５】
以下に記載されるモノクローナルヒト患者由来抗体であり得る、ＴＡＡ結合抗体および好ましくはＣＴ抗原結合抗体、例えば本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントの使用によって、全身的に活性な免疫調節物質の治療的に重要な効果が促進され得るが、これは、これらの活性が、目的の治療領域、即ちＭＡＧＥＡ３結合抗体などのＴＡＡ結合抗体によって事前選択された腫瘍組織に、より限定されると考えられるからである。本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントなどのＴＡＡ結合抗体による目的の治療領域即ち腫瘍組織のこの前提とされた事前選択、および免疫調節剤の広範囲の活性をこれらの治療目的の領域に集中させることは、少なくともある程度まで、オフターゲット関連の有害事象を制限するはずである。これは、次に、例えば、通常より高い濃度の免疫調節剤、例えば抗ＣＤ４０アゴニスト抗体を使用すること、従って、その治療的潜在力からより高い程度まで利益を得ることを可能にするはずである。より有効な投薬レジメン、例えば、医薬的に活性な薬剤の引き続く投与のための短くした間隔もまた、想定することができる。
【０２１６】
最初の免疫応答が、本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントなどのＴＡＡ結合抗体によって腫瘍組織のみに選択的に標的化されることを考えると、さらなる強化が、腫瘍組織だけに優先的にもたらされるだけのようにも思われる。かかる限局化された一体化した腫瘍特異的免疫応答は、例えば５−ＦＵによる化学療法が、本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントなどのＴＡＡをＴＡＡ結合抗体に容易に接近できるようにする場合、特に有効であり得る。
【０２１７】
上記観察に基づくと、５−ＦＵ、ＮＹ−ＥＳＯ−１結合抗体１２Ｄ７および抗ＣＤ４０アゴニスト抗体の併用について観察された効果は、他のＣＴ抗原結合抗体またはＴＡＡ結合抗体、例えば本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントについて一般に、免疫系の他の活性化因子、例えばＣＤ４０Ｌ、抗ＯＸ４０アゴニスト抗体、抗ＣＤ１３７アゴニスト抗体、抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体、抗ＰＤ−１アンタゴニスト抗体または抗ＣＤ２５アンタゴニスト抗体について、および他の細胞ストレスを誘導する治療、例えば放射線についても適用され得ることが尤もであると考えられる。
【０２１８】
従って、第二の態様の一実施形態において、本発明は、少なくとも１つの腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体またはその結合フラグメント、例えば本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントと、少なくとも１つの免疫系を活性化することが可能な化合物とを含む、医薬組成物に関する。かかる医薬的に活性な薬剤の併用はまた、以下に記載する医薬組成物のキット内に含まれ得る。
【０２１９】
用語「キット」は、本発明が、例えば以下に記載する過剰増殖疾患の、医薬的に活性な薬剤の併用による治療を考慮していること、およびこれらの医薬的に活性な薬剤（例えば、ＭＡＧＥＡ３結合抗体、抗ＣＤ４０アゴニスト抗体および／または抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体）が、単一の医薬投薬形態内で併用される必要がないことを示していることを理解すべきである。実際、例えば治療の間のこれらの抗体の異なる薬物動態学的特性を明らかにすることができるため、例えばＭＡＧＥＡ３結合抗体および抗ＣＤ４０アゴニスト抗体を、別々に提供された医薬投薬形態の形態で実際に使用することが有利であり得る。従って、用語「キット」はまた、かかる型の提供が排除されないとしても、例えば、医薬的に活性な薬剤を含む別々の医薬投薬形態を必ず同時に提供することをいうと理解すべきではない。用語「キット」は、本発明が、治療の間の、異なる医薬的に活性な薬剤の併用の使用に焦点を当てていること、およびこの併用が、例えば、例えば本発明に従う方法または使用において次いで使用され得る別々の単一の医薬投薬形態として提供され得ることを示している。
【０２２０】
従って、第二の態様の一実施形態において、本発明は、過剰増殖疾患などの疾患の治療において使用するための、少なくとも１つの腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体またはその結合フラグメント、例えば本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントと、少なくとも１つの免疫系を活性化することが可能な化合物との併用にも関する。ＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメントおよび少なくとも１つの免疫系を活性化することが可能な化合物は、以下に記載するように選択され得る。かかる併用の成分は、例えば過剰増殖疾患の治療のために、同時にまたは順次使用され得る。
【０２２１】
用語「腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）」は、上記のように使用される。ＴＡＡの例は一般に、ＥＰ  １１  １５０  ５２７．７の表から得られ得る。
【０２２２】
用語「免疫系を活性化することが可能な化合物」とは、ＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメント、例えば本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントによって誘発された最初の免疫応答を延長および／または強化することが可能な、医薬的に許容される化合物をいう。
【０２２３】
かかる化合物には、ＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメント、例えば本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントが、かかる化合物の投与の前、それと同時またはその後に投与されない場合でさえ、体液性または細胞性免疫応答を刺激するまたは少なくとも共刺激することが知られている化合物が含まれ得る。
【０２２４】
従って、好ましくは、用語「免疫系を活性化することが可能な化合物」とは、例えば、例えば樹状細胞、マクロファージ、好中球および好酸球を含む抗原提示細胞（ＡＰＣ）の成熟、Ｔ細胞活性化、例えばＣＤ４＋ヘルパーＴ細胞および／またはＣＤ８＋細胞傷害性Ｔ細胞の増殖を含むＴ細胞増殖、Ｔ細胞の拡大増殖、メモリーＴ細胞の維持および／またはＮＫ細胞の増殖を刺激または少なくとも共刺激する、医薬的に許容される化合物をいう。本発明の目的のために、ＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメント、例えばＣＴ抗原結合抗体またはその結合フラグメントおよび特に本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントは「免疫系を活性化することが可能な化合物」の代表とみなされないことを理解すべきである。
【０２２５】
上記「免疫系を活性化することが可能な化合物」は、異なる機構を介して、免疫系に対してその活性化機能を発揮し得る。
【０２２６】
例えば、「免疫系を活性化することが可能な化合物」は、例えば、例えば樹状細胞、マクロファージ、好中球または好酸球を含む抗原提示細胞（ＡＰＣ）の成熟、Ｔ細胞活性化、例えばＣＤ４＋ヘルパーＴ細胞および／またはＣＤ８＋細胞傷害性Ｔ細胞の増殖を含むＴ細胞増殖、Ｔ細胞の拡大増殖、メモリーＴ細胞の維持および／またはＮＫ細胞の増殖などの上記活性の刺激または少なくとも共刺激に関与することが知られている、免疫系の天然成分を含み得る。かかる本発明に従う免疫系の天然成分は、「免疫系を活性化することが可能な化合物」であり、これには、ＣＤ４０、ＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）、ＣＤ８０、ＣＤ８０リガンド、Ｃ８６およびＣＤ８６リガンド、ＤＲ５、Ｂ７、ＯＸ４０、ＣＤ１３７、サイトカイン、例えば、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＴＮＦ−ａ、ＭＩＰ−１ａなどが含まれる。「免疫系を活性化することが可能な化合物」の下位群からのこれらの成分は、「免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子」と称され得る。この下位群の好ましい代表は、ＣＤ４０Ｌである。
【０２２７】
しかし、「免疫系を活性化することが可能な化合物」には、免疫系の天然成分を構成しないが、上記免疫系の天然成分の活性を誘導および／または増加させる化合物、即ち、「免疫系の天然の刺激因子または少なくとも共刺激因子」に対するアゴニスト効果を有する化合物もまた含まれ得る。「免疫系を活性化することが可能な化合物」のこの下位群は、「免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子のアゴニスト活性化因子」と称され得る。この後者の下位群の好ましい実施形態には、抗ＣＤ４０アゴニスト抗体、例えばＣＰ−８７０，８９３、ＳＧＮ−４０、ＦＧＫ４５．５またはそのヒト化形態、抗ＯＸ４０アゴニスト抗体、例えばＯＸ８６、抗ＣＤ１３７アゴニスト抗体、例えばＢＭＳ−６６３５１３などが含まれる。かかる因子および抗体に関する情報は、とりわけ、Weinerら(2010)、Nature Reviews、10、317-327、Fonsattiら(2010)、Seminars in Oncology、37(5)、517-523またはVonderheide(2007)、Molecular Pathways、13(4)、1083-1088から得ることができる。
【０２２８】
他の「免疫系を活性化することが可能な化合物」には、例えば、例えば樹状細胞、マクロファージ、好中球または好酸球を含む抗原提示細胞（ＡＰＣ）の成熟、Ｔ細胞活性化、例えばＣＤ４＋ヘルパーＴ細胞および／またはＣＤ８＋細胞傷害性Ｔ細胞の増殖を含むＴ細胞増殖、Ｔ細胞の拡大増殖、メモリーＴ細胞の維持および／またはＮＫ細胞の増殖などの上記活性に対して、免疫系の天然成分の阻害効果を発揮する化合物が含まれる。上記活性に対する阻害効果または少なくとも共阻害効果を有するかかる免疫系の天然成分の例には、例えば、ＣＴＬＡ４、ＣＤ２５ＰＤ−１またはｓＭＩＣＡが含まれる。「免疫系を活性化することが可能な化合物」のこのさらなる下位群は、「免疫系の天然のインヒビターもしくは少なくとも共インヒビターのアンタゴニストエフェクター」と称され得る。「免疫系の天然のインヒビターもしくは少なくとも共インヒビターのアンタゴニストエフェクター」の例には、抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体、例えばトレメリムマブおよびイピリムマブ、抗ＣＤ２５アンタゴニスト抗体、例えばダクリズマブおよび抗ＰＤ１アンタゴニスト抗体、例えばＣＴ−０１１が含まれる。かかる因子および抗体に関する情報は、とりわけ、Weber、(2008)、The Oncologist、13(補遺4)、16-25またはFonsattiら(2010)、Seminars in Oncology、37(5)、517-523から得ることができる。
【０２２９】
本発明の１つの好ましい実施形態において、「免疫系を活性化することが可能な化合物」は、ＣＤ４０Ｌ、ＣＰ−８７０，８９３およびＳＧＮ−４０を含む抗ＣＤ４０アゴニスト抗体ならびにトレメリムマブおよびイピリムマブを含む抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体から選択される。
【０２３０】
抗体、例えば、ＣＰ−８７０，８９３およびＳＧＮ−４０を含む抗ＣＤ４０アゴニスト抗体またはトレメリムマブおよびイピリムマブを含む抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体が、免疫系を活性化することが可能な化合物として使用される場合、それらは、それぞれの抗体の結合フラグメント、バリアントなどとして使用され得ることを理解すべきである。
【０２３１】
他の「免疫系を活性化することが可能な化合物」には、自然免疫系に対して作用することが知られている化合物、例えば、Ｔｏｌｌ様レセプター２、３、４、５、７、８および９を含むＴｏｌｌ様レセプターの活性化因子が含まれる。かかる化合物には、細菌リポタンパク質、ＬＰＳ、二本鎖ＲＮＡ、ポリＩ：Ｃ（ポリイノシンポリシチジン酸）、細菌フラジェリンレシキモド（resiquimod）（Ｒ８４８）およびＣｐＧ−ＯＤＮが含まれる。
【０２３２】
上述のように、ＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメント、例えば本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントは、異なる様式で免疫系を活性化することが可能な化合物と併用され得る。
【０２３３】
従って、ＴＡＡ結合抗体、例えば本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体は、免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子、免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子のアゴニスト活性化因子、または免疫系の天然のインヒビターもしくは少なくとも共インヒビターのアンタゴニストエフェクターと、併用され得る。
【０２３４】
具体的な例は、本明細書中に開示されるＭＡＧＥＡ３結合抗体（例えば１２２Ｇ３または３２Ｈ２）の、抗ＣＤ４０アゴニスト抗体、例えばＣＰ−８７０，８９３またはＳＧＮ−４０、抗ＯＸ４０アゴニスト抗体、例えばＯＸ８６および／または抗ＣＤ１３７アゴニスト抗体、例えばＢＭＳ−６６３５１３との併用である。
【０２３５】
別の具体的な例は、本明細書中に開示されるＭＡＧＥＡ３結合抗体（例えば１２２Ｇ３または３２Ｈ２）の、抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体、例えばトレメリムマブまたはイピリムマブおよび／または抗ＣＤ２５アンタゴニスト抗体、例えばダクリズマブとの併用である。
【０２３６】
しかし、ＴＡＡ結合抗体、例えば本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントはまた、例えば、（ｉ）免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子または免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子のアゴニスト活性化因子、および（ｉｉ）免疫系の天然のインヒビターもしくは少なくとも共インヒビターのアンタゴニストエフェクターと併用され得る。
【０２３７】
具体的な例は、本明細書中に開示されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント（例えば１２２Ｇ３または３２Ｈ２）の、抗ＣＤ４０アゴニスト抗体、例えばＣＰ−８７０，８９３またはＳＧＮ−４０、および抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体、例えばトレメリムマブまたはイピリムマブとの併用である。
【０２３８】
他の例には、ＯＸ８６、ＢＭＳ−６６３５１３、ＣＴ−０１１および／またはダクリズマブがさらに含まれ得る。
【０２３９】
自然免疫系に対して作用することが知られているさらなる化合物、例えばＴｏｌｌ様レセプター１、２、３、４、５、７、８および９の活性化因子が含まれ得る。
【０２４０】
好ましい実施形態には、唯一の医薬的に活性な薬剤としての、本明細書中に開示されたＭＡＧＥＡ３結合抗体（例えば１２２Ｇ３または３２Ｈ２）の、抗ＣＤ４０アゴニスト抗体、例えばＣＰ−８７０，８９３またはＳＧＮ−４０との併用が含まれる。
【０２４１】
別の好ましい実施形態には、唯一の医薬的に活性な薬剤としての、本明細書中に開示されたＭＡＧＥＡ３結合抗体（例えば１２２Ｇ３または３０Ｈ１０）の、抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体、例えばトレメリムマブまたはイピリムマブとの併用が含まれる。
【０２４２】
なお別の好ましい実施形態には、唯一の医薬的に活性な薬剤としての、本明細書中に開示されたＭＡＧＥＡ３結合抗体（例えば１２２Ｇ３または３２Ｈ２）の、抗ＣＤ４０アゴニスト抗体、例えばＣＰ−８７０，８９３またはＳＧＮ−４０、および抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体、例えばトレメリムマブまたはイピリムマブとの併用が含まれる。
【０２４３】
種々の医薬的に活性な成分、例えばＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント、免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子、免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子のアゴニスト活性化因子、または免疫系の天然のインヒビターもしくは少なくとも共インヒビターのアンタゴニストエフェクターが、多重特異的抗体、例えば二重特異的抗体またはその結合フラグメント内で併用され得ることが、上記されている。これは、ＭＡＧＥＡ３結合抗体および抗ＣＤ４０アゴニスト抗体もしくは抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体またはそれらの結合フラグメントの具体的な例について示される。しかし、この原則は、免疫系を活性化することが可能な他の化合物にも同様に拡張され得ることが理解されよう。
【０２４４】
従って、ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントの一部と、（ｉ）抗ＣＤ４０アゴニスト抗体またはその結合フラグメントの一部または（ｉｉ）抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体またはその結合フラグメントの一部とは、二重特異的抗体中で併用され得る。
【０２４５】
かかる二重特異的抗体またはフラグメントは、いくつかの立体配置のものであり得る。例えば、二重特異的抗体は、単一の抗体（または抗体フラグメント）と似ているが、二つの異なる抗原結合部位（可変領域）を有し得る。二重特異的抗体は、化学的技術（Kranzら(1981)、Proc. Natl. Acad. Sci. USA、78: 5807）または組換えＤＮＡ技術によって、生成され得る。二重特異的抗体は、少なくとも２つの異なるエピトープに対する結合特異性を有し得、このうち少なくとも１つは、それに対する抗体が同定された腫瘍関連抗原のエピトープである。抗体および結合フラグメントは、異種抗体でもあり得る。異種抗体は、一緒に連結された２つ以上の抗体または抗体結合フラグメント（Ｆａｂ）であり、それぞれの抗体またはフラグメントは、異なる特異性を有する。
【０２４６】
かかる二重特異的抗体の使用は、ＴＡＡ結合抗体によって誘発されると推定されている最初の限局化免疫応答の強化および／または延長が、可能な限り正確に腫瘍に制限されるという利点を有し得る。
【０２４７】
この概念は、ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントの一部、抗ＣＤ４０アゴニスト抗体またはその結合フラグメントの一部、および抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体またはその結合フラグメントの一部を例えば含む、三重特異的抗体にももちろん拡張され得る。
【０２４８】
既に示したように、上記併用は、例えば二重特異的抗体の場合単一の医薬組成物の形態で提供され得、または医薬組成物のキットとして提供され得る。
【０２４９】
キットが企図される場合、これは、異なる併用中の別々の医薬組成物中に医薬的に活性な薬剤を含み得る。これは再度、細胞傷害性薬剤、ＭＡＧＥＡ３結合抗体、抗ＣＤ４０アゴニスト抗体および抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体の具体的な例として示される。しかし、この原則は、他の併用にしかるべく適応され得ることが理解されよう。
【０２５０】
上記例において、キットは、２つの医薬組成物からなり得、第一の医薬組成物は細胞傷害性薬剤を含み、第二の医薬組成物はＭＡＧＥＡ３結合抗体および抗ＣＤ４０アゴニスト抗体を含む。このキットは、（この場合）ＭＡＧＥＡ３抗原および／またはＭＡＧＥＡ６がＭＡＧＥＡ３結合抗体に対しより容易に接近できるようにすると推定される化学療法で、患者を最初に治療することを可能にする。しかし、第二の医薬組成物の引き続く投与は、次いで、ＭＡＧＥＡ３結合抗体および抗ＣＤ４０アゴニスト抗体の両方の同時送達を確実にする。これは、ＭＡＧＥＡ３結合抗体が限局化免疫応答を誘発して直ぐに、抗ＣＤ４０アゴニスト抗体がその活性を示すことを可能にする。
【０２５１】
別の例において、キットは、３つの医薬組成物からなり得、第一の医薬組成物は細胞傷害性薬剤を含み、第二の医薬組成物はＭＡＧＥＡ３結合抗体を含み、第三の医薬組成物は抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体を含む。このキットは、（この場合）ＭＡＧＥＡ３抗原がＭＡＧＥＡ３結合抗体に対しより容易に接近できるようにすると推定される化学療法で患者を最初に治療することを可能にする。次いで、第二および第三の医薬組成物は、互いに別々に投与されて、ＴＡＡ結合抗体による限局化免疫応答を最初に誘発し、抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体がその機能を完全に発揮できるようになる前に、かかる免疫応答の発生のための充分な時間を持たせ得る。しかし、抗ＣＴＬＡ４抗体は、既に存在するＭＡＧＥＡ３特異的Ｔ細胞を抑制解除するのにも役立ち得る。これらの細胞は、ＭＡＧＥＡ３結合抗体媒介性の抗原提示をさらに強めるＭＡＧＥＡ３特異的抗体の引き続く投与によって、さらに活性化され得る。かかる場合について、第三の医薬組成物は、第二の医薬組成物の前に、または第二の医薬組成物と少なくとも同時に投与され得る。
【０２５２】
かかるキットは、従って、例えば、微調整された時宜にかなった投与によって、例えばそれぞれの抗体の異なる薬物動態学的特性を構成するために使用され得る。
【０２５３】
上記併用の有効性は、かかる併用を受ける患者が細胞傷害性治療に供される場合に増強され得ることを上記してきた。
【０２５４】
用語「細胞傷害性治療」には、化学療法、放射線療法、手術、温熱療法などが含まれる。化学療法は、細胞傷害性薬剤、例えば、ドセタキセルおよびパクリタキセルを含むタキサン、アントラサイクリン、シスプラチン、カルボプラチン、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、カペシタビン、ナベルビンまたはゾレドロネートの投与を含み得る。
【０２５５】
化学療法および特に上記細胞傷害性薬剤が細胞傷害性治療として使用される場合、これらの薬剤は、上で企図した医薬組成物およびキット中に含まれ得る。好ましくは、５−ＦＵが含まれ得る。
【０２５６】
本明細書中で企図される医薬組成物またはキットの形態をとり得る医薬的に活性な薬剤の併用は、過剰増殖疾患に罹患した患者の治療における使用のための医薬品として使用され得る。
【０２５７】
本明細書中で企図される医薬組成物またはキットの形態をとり得る医薬的に活性な薬剤の併用は、過剰増殖疾患に罹患した患者を治療するための医薬品の製造においても使用され得る。
【０２５８】
さらに、本明細書中で企図される医薬組成物またはキットの形態をとり得る医薬的に活性な薬剤の併用は、過剰増殖疾患に罹患した患者を治療する方法において投与され得る。
【０２５９】
用語「過剰増殖疾患」は、上述のように使用される。免疫系を刺激することが可能な化合物と共に本明細書中に記載されるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントを使用することは、黒色腫、乳癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、多発性骨髄腫および／または膵臓癌の治療に特に有用であり得、特に有効であり得る。
【０２６０】
特定のがんに対する、本発明に従う医薬組成物またはキットの有効性および／または選択性は、例えば異なるＣＴ抗原に結合する異なるＴＡＡ結合抗体または結合フラグメントが存在し、かつ併用される場合に、増大し得る。従って、上記医薬組成物またはキットは、例えば、ＭＡＧＥＡ３およびＮＹ−ＥＳＯ−１結合抗体またはそれらの結合フラグメントの、例えば、抗ＣＤ４０アゴニスト抗体もしくはその結合フラグメントおよび／または抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体もしくはその結合フラグメントとの併用を含み得る。他の併用は、ＥＰ  １１  １５０  ５２７．７から得られ得る。
【０２６１】
ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントと免疫系を刺激することが可能な化合物との併用は、医薬的に許容される賦形剤、投与経路などに関して記載したような医薬組成物の形態で適用され得る。
【０２６２】
ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントが、免疫系を刺激することが可能な化合物との併用において使用される場合、かかる抗体は、上記の形態（単鎖抗体など）をとり得るか、または上記のように標識によって改変され得る。
【０２６３】
ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントと免疫系を刺激することが可能な化合物との併用は、上記のような治療方法にも使用され得、ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントと免疫系を刺激することが可能な化合物との併用を含む医薬組成物またはキットは、上記のような使用のために適用され得る。
【０２６４】
本発明は、いくつかの例に関してここで記載されているが、これらは限定と解釈すべきではない。
【実施例】
【０２６５】
実験１：ＭＡＧＥＡ３抗体の単離
患者材料
メモリーＢ細胞の単離のための血清および末梢血リンパ球を、当地の倫理委員会によって承認され、患者がサインしたインフォームドコンセントに従って患者から収集した。
【０２６６】
黒色腫または乳癌に罹患している患者に、アジュバントと複合体化した全長ヒトＭＡＧＥＡ３をワクチン接種した。患者は、ＭＡＧＥＡ３について血清陽性であった。本明細書中に記載される抗体３２Ｈ２および３４Ｇ９を、アジュバントＣｐＧをさらに受けた黒色腫患者から誘導した。本明細書中に記載される抗体１２２Ｇ３および１０２Ｇ１０は、乳癌患者から誘導した。両方の患者は、血清中に、ＭＡＧＥＡ３に対する抗体力価を有した。
【０２６７】
メモリーＢ細胞培養物
メモリーＢ細胞を、ヒト末梢血単核球から、汎Ｂ細胞マーカーＣＤ２２（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ、Ｂｅｒｇｉｓｃｈ  Ｇｌａｄｂａｃｈ、Ｇｅｒｍａｎｙ）に対するＭＡＣＳビーズを使用し、その後フィコエリトリンコンジュゲート化ｍＡｂ抗ヒトＩｇＤおよびＡＰＣコンジュゲート化抗体抗ヒトＩｇＭ、ＣＤ３、ＣＤ８、ＣＤ５６（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ、Ｂａｓｅｌ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）で染色することによる２ステップの選択手順を用いて単離した。あるいは、フィコエリトリンコンジュゲート化ｍＡｂ抗ヒトＩｇＤ、ＡＰＣコンジュゲート化ｍＡｂ抗ヒトＩｇＭ、ＣＤ３、ＣＤ５６、ＣＤ８およびＦＩＴＣコンジュゲート化ｍＡｂ抗ヒトＣＤ２２（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ、Ｂａｓｅｌ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を使用する１ステップのプロトコルを適用した。セルソーティングを、ＭｏＦｌｏ  ＸＤＰセルソーター（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ）を使用して実施した。次いで、ＣＤ２２陽性かつＩｇＭ陰性、ＩｇＤ陰性のＢ細胞を、Ｂ９５−８細胞から得たＥＢＶ含有上清と共にインキュベートした（１０％ウシ胎仔血清を補充したＲＰＭＩ  １６４０を含むＢ細胞培地中）。細胞を、ボランティアドナーから調製した３０．０００の照射したフィーダーＰＢＬ上に、ＣｐＧ２００６を補充したＩＭＤＭ培地中で、１ウェル当たり１０細胞で播種した。
【０２６８】
１１〜１４日間の培養後、メモリーＢ細胞培養物の馴化培地を、ＥＬＩＳＡによってＭＡＧＥＡ３特異的抗体の存在についてスクリーニングした。
【０２６９】
ＭＡＧＥＡ３  ＥＬＩＳＡ
細菌中で発現させたＨｉｓタグ化ＭＡＧＥＡ３を、カラム精製し、９６ウェルのマイクロプレート（Ｃｏｓｔａｒ、ＵＳＡ）を被覆するために使用した。プレートをＰＢＳ−Ｔで洗浄し、２％ＢＳＡ（Ｓｉｇｍａ、Ｂｕｃｈｓ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を含むＰＢＳで室温で１時間ブロッキングした。患者の血清、Ｂ細胞馴化培地または組換え抗体調製物を、室温で２時間インキュベートした。ＭＡＧＥＡ３に対するヒトＩｇＧの結合を、西洋ワサビペルオキシダーゼコンジュゲート化ヤギ抗ヒトＦｃ−γ特異的抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ，Ｅｕｒｏｐｅ  Ｌｔｄ．、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅｓｈｉｒｅ、ＵＫ）を使用し、その後ＴＭＢ基質溶液（ＴＭＢ、Ｓｉｇｍａ、Ｂｕｃｈｓ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を使用してＨＲＰ活性を測定して、決定した。
【０２７０】
単一細胞−ＲＴ−ＰＣＲ
ＭＡＧＥＡ３反応性メモリーＢ細胞培養物から得た単一細胞を、第一鎖緩衝液（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、ＬｕＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を含む９６ウェルのＰＣＲプレート中に配置した。ランダムヘキサマープライマー（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、ＬｕＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を使用して、ｃＤＮＡを調製した。標準的なプロトコル（Wardemannら、Science 301巻, 2003年, 1374〜1377頁）に従って、免疫グロブリン重鎖および軽鎖可変領域のＰＣＲ増幅を実施した。免疫グロブリン重鎖および軽鎖可変領域を、ネステッドＰＣＲアプローチを使用して増幅した。第一ラウンドのＰＣＲを、ＩｇＧ定常領域に特異的なプライマーならびに重鎖および軽鎖Ｉｇ可変領域ファミリーの全てのシグナルペプチドに特異的なプライマーミックスを用いて実施した（Wardemannら、Science 301巻, 2003年, 1374〜1377頁）。引き続いて、ネステッドＰＣＲを、免疫グロブリンＪ領域ならびに重鎖および軽鎖Ｉｇ可変領域ファミリーのフレームワーク１の５’領域に特異的なプライマーミックスを使用して実施した。配列分析を実施して、選択されたＢ細胞培養物中に存在する個々の抗体クローンを同定した。引き続いて、各抗体クローンのＩｇ可変重領域および軽領域を、発現ベクター中にクローニングして、ヒトＩｇＧ１、ヒトＩｇκまたはヒトＩｇλの定常領域を提供した。Ｉｇ重および軽発現ベクターのＨＥＫ２９３細胞中への同時トランスフェクションにより、抗体クローンを生成した。親Ｂ細胞培養物のＭＡＧＥＡ３反応性をおそらく担う抗体クローンの同定を、ＭＡＧＥＡ３−ＥＬＩＳＡおよびコントロールＥＬＩＳＡにおいて、組換え抗体クローンの再スクリーニングの際に実施した。このアプローチは、１２２Ｇ３、３２Ｈ２、３４Ｇ９および１０２Ｇ１０の同定につながった。
【０２７１】
Ｉｇ可変領域中の、プライマーにコードされた配列不一致を同定し修正するために、３’プライマーとして、Ｉｇ重鎖および軽鎖定常領域の保存された領域に特異的な２つのプライマー対を使用し、５’プライマーとして、Ｉｇシグナルペプチドに特異的なプライマーミックスを使用して、半ネステッドプロトコルを使用するさらなるＰＣＲ増幅を実施した。ＰＣＲ産物を、ＴＯＰＯ（商標）ベクター（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、ＬｕＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ、Ｌｕｃｅｒｎｅ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）中にクローニングした。完全Ｉｇ可変領域の配列決定を実施し、その情報を使用して、信頼のおけるヒト抗体配列を抗体発現ベクター中にクローニングするための特異的プライマーを設計した。このアプローチを抗体１２２Ｇ３、３２Ｈ２、３４Ｇ９および１０２Ｇ１０に適用して、患者において存在するとして、Ｉｇ可変領域の完全抗体配列の同定を生じた。この配列を、引き続く特徴付けステップにおいて次いで使用されるこれらの抗体の組換え産生のために使用した。
【０２７２】
抗体の産生および精製
ヒト抗体の一過的遺伝子発現を、ポリエチレンイミントランスフェクション法（ＰＥＩ、Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅ  Ｗａｒｒｉｎｇｔｏｎ、ＵＳＡ）を使用した、２９３−Ｔヒト胚性腎臓細胞またはチャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ中への抗体発現ベクターのトランスフェクションによって達成した。トランスフェクション後、細胞を、無血清培地（ＧｌｕｔａＭＡＸ−Ｉ  Ｇｉｂｃｏを補充したＯＰＴＩ−ＭＥＭ  Ｉ）中で培養した。３〜６日間の培養後に上清を回収し、高速タンパク質液体クロマトグラフィーデバイス（ＦＰＬＣ）（ＧＥ  ＨｅａｌｔｈＣａｒｅ、Ｓｗｅｄｅｎ）で、プロテインＡカラム（ＧＥ  ＨｅａｌｔｈＣａｒｅ、Ｓｗｅｄｅｎ）を使用して、ＩｇＧを精製した。
【０２７３】
実験２：抗体のエピトープマッピング
エピトープマッピングＥＬＩＳＡ
各隣接ペプチド（Ｐｅｐｔｉｄｅｓ＆Ｅｌｅｐｈａｎｔｓ、Ｎｕｔｈｅｔａｌ、Ｇｅｒｍａｎｙ）によって共有される１０ａａの重複を有する、ＭＡＧＥＡ３タンパク質全体にわたる２０マーのペプチドを使用して、Ｍａｘｉｓｏｒｐ  ＥＬＩＳＡプレート（Ｎｕｎｃ、Ｒｏｃｈｅｓｔｅｒ、ＮＹ）を被覆した。コントロールとして、ＮＹ−ＥＳＯ−１タンパク質由来のアミノ酸４０〜２１を示す２０マーのペプチドを使用した（ｒｅｖ）。２０マーのペプチドによって示されるＭＡＧＥＡ３のアミノ酸を、以下の表に示す。ＭＡＧＥＡ３のアミノ酸の番号付けは、配列番号４１に基づく。
【０２７４】
【表２】
2014524891.tif 000003
【０２７５】
ヒト組換え抗体を１μｇ／ｍｌの濃度で使用した。結合したヒト抗体を、西洋ワサビペルオキシダーゼコンジュゲート化ヤギ抗ヒトＩｇＧ  Ｆｃ−γ特異的抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ，Ｅｕｒｏｐｅ  Ｌｔｄ．、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅｓｈｉｒｅ、ＵＫ）を使用して検出した。
【０２７６】
結果を図１に示す。
【０２７７】
実験３：ＭＡＧＥＡ３の免疫沈降
精製した組換えＭＡＧＥＡ３タンパク質、およびＭＡＧＥＡ３を内因的に発現することが公知のＳＫ−Ｍｅｌ−３７細胞から調製した溶解物を、ヒトＭＡＧＥＡ３特異的抗体と共にインキュベートし、その後、プロテインＧビーズ（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｂｉｏｌａｂｓ、Ｂｉｏｃｏｎｃｅｐｔ、Ａｌｌｓｃｈｗｉｌ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）と共にインキュベートした。結合したタンパク質を、勾配ＳＤＳポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＮｕＰａｇｅ  ４〜１２％  Ｂｉｓ−Ｔｒｉｓ  Ｇｅｌ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、ＬｕＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ、Ｌｕｃｅｒｎｅ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）後にウエスタンブロットによって分析した。検出抗体として、マウスモノクローナル抗体Ｍ３Ｈ６７（ＬＩＣＲ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ＵＳＡにより提供される）を使用した。
【０２７８】
結果を図２に示す。
【０２７９】
実験４：ＭＡＧＥＡ３およびＭＡＧＥＡ４に対する示差的結合
組換えＭＡＧＥＡ３タンパク質および組換えＭＡＧＥＡ４タンパク質を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥにおいて分離し、メンブレン上にブロットした。メンブレンを、ヒト抗体１２２Ｇ３または３２Ｈ２と共にインキュベートした。膜上のタンパク質に対するヒト抗体の結合を、ＨＲＰ標識したヤギ抗ヒトＩｇＧ（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ、Ｍｉｌａｎ  Ａｎａｌｙｔｉｃａ  ＡＧ、Ｒｈｅｉｎｆｅｌｄｅｎ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を使用して評価した。結果を図３に示す。
【０２８０】
実験５：ＭＡＧＥＡ３抗体のＥＣ５０の決定
飽和実験により、それらの対応するＭＡＧＥＡ３ペプチドに対する、ヒトモノクローナル抗体１２２ｇ３、３２Ｈ２、３４Ｇ９および１２２Ｇ１０の最大半量の結合濃度を同定した。競合実験において、１０ｐＭから１００μＭまでの範囲で増加する濃度のＭＡＧＥＡ３ペプチドを、１．５ｎｇ／ｍｌの濃度のそれらの適切な抗体と混合し、次いでこの混合物を、１０ｍｇ／ｍｌの対応するペプチドで被覆したＥＬＩＳＡプレートに移した。
【０２８１】
結果を図４に示す。
【０２８２】
実験６：抗体特異性
陰性コントロールとしての、組換え発現したＭＡＧＥＡ３、ＭＡＧＥＡ６、ＭＡＧＥＡ２、ＭＡＧＥＡ１、ＭＡＧＥＡ４、ＭＡＧＥＡ１０、ＭＡＧＥ−Ｃ１、ＭＡＧＥ−Ｃ２およびＤＨＦＲを、ＥＬＩＳＡプレート上に被覆し、これらのタンパク質に対するＭＡＧＥＡ３抗体１２２Ｇ３および３２Ｈ２の結合を試験した。
【０２８３】
結果を、以下の表中にまとめる。
【０２８４】
【表３】
2014524891.tif 000004
【０２８５】
実験７：Ｔ細胞刺激
単球由来ＤＣ
単球を、磁気粒子にカップリングされた抗ＣＤ１４抗体（ＭＡＣＳ、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｂｅｒｇｉｓｃｈ  Ｇｌａｄｂａｃｈ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して、ボランティアドナーから得たＰＢＭＣから単離する。単球を、ＧＭ−ＣＳＦおよびＩＬ−４（Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ、Ｌｏｎｄｏｎ、ＵＫ）を補充したＤＣ培地（ＣｅｌｌＧｒｏ  ＤＣ培地、ＣｅｌｌＧｅｎｉｘ  Ｆｒｅｉｂｕｒｇ、Ｇｅｒｍａｎｙ）中で、２×１０６／ｍｌの細胞密度で培養する。５日目に、単球由来ＤＣを回収し、９６ウェルの平底プレート中で免疫複合体と共にインキュベートする。ＴＮＦ−αおよびｓＣＤ４０Ｌの添加によって成熟を誘導する。
【０２８６】
免疫複合体形成
組換えＭＡＧＥＡ３タンパク質を、等モル濃度比で、種々のヒトモノクローナル抗体と共にＣｅｌｌＧｒｏ培地中でインキュベートする。
【０２８７】
Ｔ細胞刺激アッセイ
免疫複合体および対応するＭＡＧＥＡ３特異的ＣＤ８Ｔ細胞と共に共インキュベートしたまたはしなかった成熟した単球由来ＤＣを、ヒト血清およびＢｒｅｆｅｌｄｉｎ  Ａを補充したＲＰＭＩ中で、１：１の細胞比でマイクロタイタープレート中でインキュベートする。
【０２８８】
次いで、透過処理し、蛍光標識した抗体抗ＩＦＮ−γによる細胞内染色を使用して細胞を固定した後に、細胞内ＩＦＮ−γの産生をモニタリングする。
【０２８９】
実験８：抗体媒介性のｉｎ  ｖｉｖｏ抗腫瘍効果
マウスに、ＭＡＧＥＡ３を発現する同系腫瘍細胞を接種し、腫瘍が触知できるようになったら、細胞傷害性療法を適用する。引き続いて、ＭＡＧＥＡ３特異的抗体を投与する。腫瘍成長に対する治療の効果を、ノギスを使用して経時的に腫瘍面積をモニタリングすることによって測定する。
【０２９０】
腫瘍に対する免疫エフェクター細胞活性の誘導および／または増強を、腫瘍浸潤リンパ球の分析、ｅｘ  ｖｉｖｏ  ＣＴＬアッセイ、ｅｘ  ｖｉｖｏサイトカイン分泌、ｉｎ  ｖｉｖｏ  ＣＴＬアッセイによって、またはコントロールと比較したＭＡＧＥＡ３特異的抗体の投与後の免疫エフェクター細胞レパートリーのシフトをモニタリングすることによって測定する。
【０２９１】
本発明のいくつかの実施形態は、以下に関する：
【０２９２】
１．単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント。
【０２９３】
２．ＭＡＧＥ＿Ａ３に優先的に結合する、実施形態１に記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント。
【０２９４】
３．ＭＡＧＥＡ３には結合するがＭＡＧＥＡ４には結合しない、実施形態１または２に記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント。
【０２９５】
４．ＭＡＧＥＡ３には結合するがＭＡＧＥＡ４、ＭＡＧＥＡ１および／またはＭＡＧＥＡ１０には結合しない、実施形態１、２または３のいずれかに記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント。
【０２９６】
５．ＭＡＧＥＡ３には結合するがＭＡＧＥＡ２には結合しない、実施形態１、２、３または４のいずれかに記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント。
【０２９７】
６．ＭＡＧＥＡ３には結合するがＭＡＧＥＡ６には結合しない、実施形態１、２、３、４または５のいずれかに記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント。
【０２９８】
７．約３００ｐＭ以下のＫＤでＭＡＧＥＡ３に結合する、実施形態１、２、３、４、５または６のいずれかに記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント。
【０２９９】
８．約２００ｐＭ以下のＫＤでＭＡＧＥＡ３に結合する、実施形態７に記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント。
【０３００】
９．約１００ｐＭ以下のＫＤでＭＡＧＥＡ３に結合する、実施形態８に記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント。
【０３０１】
１０．約５０ｐＭ以下のＫＤでＭＡＧＥＡ３に結合する、実施形態９に記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント。
【０３０２】
１１．配列番号４２を含むエピトープに結合する、実施形態１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０のいずれかに記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント。
【０３０３】
１２．配列番号４３を含むエピトープに結合する、実施形態１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０のいずれかに記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント。
【０３０４】
１３．配列番号４４を含むエピトープに結合する、実施形態１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０のいずれかに記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント。
【０３０５】
１４．軽鎖可変領域および／または重鎖可変領域を含む、実施形態１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２または１３のいずれかに記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントであって、
ａ．軽鎖可変領域は、配列番号８、１８、２８、３８もしくはそれらに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号９、１９、２９、３９もしくはそれらに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および／または配列番号１０、２０、３０、４０もしくはそれらに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む；ならびに／または
ｂ．重鎖可変領域は、配列番号５、１５、２５、３５もしくはそれらに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号６、１６、２６、３６もしくはそれらに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および／または配列番号７、１７、２７、３７もしくはそれらに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む。
【０３０６】
１５．軽鎖可変領域および／または重鎖可変領域を含む、実施形態１４に記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントであって、
ａ．軽鎖可変領域は、配列番号８、１８、２８、３８もしくはそれらに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号９、１９、２９、３９もしくはそれらに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および配列番号１０、２０、３０、４０もしくはそれらに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む；ならびに／または
ｂ．重鎖可変領域は、配列番号５、１５、２５、３５もしくはそれらに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号６、１６、２６、３６もしくはそれらに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および配列番号７、１７、２７、３７もしくはそれらに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む。
【０３０７】
１６．配列番号４、１４、２４、３４もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列を含む軽鎖可変領域および／または配列番号３、１３、２３、３３もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列を含む重鎖可変領域を含む、実施形態１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２または１３のいずれかに記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ−３結合抗体またはその結合フラグメント。
【０３０８】
１７．配列番号４、１４、２４、３４またはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列を含む軽鎖可変領域および配列番号３、１３、２３、３３またはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列を含む重鎖可変領域を含む、実施形態１６に記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ−３結合抗体またはその結合フラグメント。
【０３０９】
１８．軽鎖可変領域および／または重鎖可変領域を含む、単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ−３結合抗体またはその結合フラグメントであって、
ａ．軽鎖可変領域が、配列番号８、１８、２８、３８もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号９、１９、２９、３９もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および／または配列番号１０、２０、３０、４０もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む；ならびに／あるいは
ｂ．重鎖可変領域が、配列番号５、１５、２５、３５もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号６、１６、２６、３６もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および／または配列番号７、１７、２７、３７もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む、
単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ−３結合抗体またはその結合フラグメント。
【０３１０】
１９．軽鎖可変領域および／または重鎖可変領域を含む、実施形態１８に記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントであって、
ａ．軽鎖可変領域は、配列番号８、１８、２８、３８もしくはそれらに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号９、１９、２９、３９もしくはそれらに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および配列番号１０、２０、３０、４０もしくはそれらに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む；ならびに／または
ｂ．重鎖可変領域は、配列番号５、１５、２５、３５もしくはそれらに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号６、１６、２６、３６もしくはそれらに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および配列番号７、１７、２７、３７もしくはそれらに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む。
【０３１１】
２０．軽鎖可変領域および／または重鎖可変領域を含む、実施形態１９に記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントであって、
ａ．軽鎖可変領域は、配列番号８、１８もしくはそれらに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号９、１９もしくはそれらに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および配列番号１０、２０もしくはそれらに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む；ならびに／または
ｂ．重鎖可変領域は、配列番号５、１５もしくはそれらに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号６、１６もしくはそれらに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および配列番号７、１７もしくはそれらに少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む。
【０３１２】
２１．配列番号４、１４、２４、３４もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列を含む軽鎖可変領域および／または配列番号３、１３、２３、３３もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列を含む重鎖可変領域を含む、単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ−３結合抗体またはその結合フラグメント。
【０３１３】
２２．配列番号４、１４、２４、３４もしくはそれに少なくとも８０％同一な配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号３、１３、２３、３３もしくはそれに少なくとも８０％同一な配列を含む重鎖可変領域とを含む、実施形態２１に記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体または結合フラグメント。
【０３１４】
２３．配列番号４、１４もしくはそれに少なくとも８０％同一な配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号３、１３もしくはそれに少なくとも８０％同一な配列を含む重鎖可変領域とを含む、実施形態２２に記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体または結合フラグメント。
【０３１５】
２４．配列番号３、１３、２３、３３の可変重鎖またはそれに８０％同一な配列をコードする核酸配列を含む核酸分子。
【０３１６】
２５．配列番号４、１４、２４、３４の可変軽鎖またはそれに８０％同一な配列をコードする核酸配列を含む核酸分子。
【０３１７】
２６．配列番号５、１５、２５、３５、６、１６、２６、３６、７、１７、２７、３７の可変重鎖領域ＣＲＤまたはそれに少なくとも８０％同一な配列をコードする核酸配列を含む核酸分子。
【０３１８】
２７．配列番号８、１８、２８、３８、９、１９、２９、３９、１０、２０、３０、４０の可変軽鎖領域ＣＲＤまたはそれに８０％同一な配列をコードする核酸配列を含む核酸分子。
【０３１９】
２８．実施形態２４〜２７のいずれかに記載の核酸分子を含むベクター。
【０３２０】
２９．実施形態２４〜２７のいずれかに記載の核酸分子またはベクターもしくは実施形態２８で形質転換された細胞。
【０３２１】
３０．実施形態１〜２３のいずれかに記載のＭＡＧＥＡ３結合抗体もしくはその結合フラグメント、実施形態２４〜２７のいずれかに記載の核酸分子、実施形態２８に記載のベクター、または実施形態２９に記載の細胞を含む、医薬組成物。
【０３２２】
３１．免疫系を活性化することが可能な化合物を含まない、実施形態３０に記載の医薬組成物。
【０３２３】
３２．ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントを唯一の医薬的に活性な薬剤として含む、実施形態３０に記載の医薬組成物。
【０３２４】
３３．過剰増殖疾患の治療に使用するための、実施形態３０〜３２のいずれかに記載の医薬組成物。
【０３２５】
３４．過剰増殖疾患を治療するための医薬品の製造における、実施形態１〜２３のいずれかに記載の抗体もしくはその結合フラグメント、実施形態２４〜２７のいずれかに記載の核酸分子、実施形態２８に記載のベクター、実施形態２９に記載の細胞、または実施形態３１〜３２のいずれかに記載の医薬組成物の使用。
【０３２６】
３５．実施形態１〜２３のいずれかに記載の抗体もしくはその結合フラグメントまたは実施形態３０〜３２のいずれかに記載の医薬組成物を、それを必要とする患者に投与することによって過剰増殖疾患を治療する方法。
【０３２７】
３６．過剰増殖疾患が、ＭＡＧＥＡ３の発現によって特徴付けられる、実施形態３３〜３５のいずれかに記載の医薬組成物、使用または方法。
【０３２８】
３７．過剰増殖疾患が、基底細胞癌；膀胱癌；骨癌；中枢神経系腫瘍；バーキットリンパ腫；乳癌；子宮頸癌；慢性骨髄性白血病；結腸癌；直腸癌；結腸直腸癌、食道癌；ユーイングファミリーの腫瘍；肝外胆管癌；胆嚢癌；消化管間葉性腫瘍（ＧＩＳＴ）；神経膠腫；頭頸部癌；膵島細胞腫瘍；カポジ肉腫；白血病；肝臓癌；リンパ腫；ホジキンリンパ腫；非ホジキンリンパ腫；中皮腫；多発性骨髄腫／形質細胞腫瘍；骨髄性白血病；鼻咽頭癌；神経芽細胞腫；小細胞肺癌；非小細胞肺癌；中咽頭癌；卵巣癌；膵臓癌；副甲状腺癌；陰茎癌；咽頭癌；クロム親和性細胞腫；下垂体腫瘍；前立腺癌；腎細胞（腎臓）癌；気道癌腫；網膜芽細胞腫；皮膚癌（黒色腫）；小腸癌；軟部組織肉腫；扁平上皮癌；扁平上皮頸部癌；胃癌；Ｔ細胞リンパ腫；精巣癌；咽喉癌；甲状腺癌；腎盂および尿管の移行上皮癌；尿道癌；子宮癌；腟癌；外陰癌およびウィルムス腫瘍から選択される、実施形態３３〜３６のいずれかに記載の医薬組成物、使用または方法。
【０３２９】
３８．過剰増殖疾患が、黒色腫、乳癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、多発性骨髄腫および／または膵臓癌から選択される、実施形態３３〜３６のいずれかに記載の医薬組成物、使用または方法。
【０３３０】
３９．少なくとも１つの腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体またはその結合フラグメントおよび免疫系を活性化することが可能な少なくとも１つの化合物を含む、医薬組成物。
【０３３１】
４０．ａ）少なくとも１つの腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体またはその結合フラグメントを含む第一の医薬組成物；および
ｂ）免疫系を活性化することが可能な少なくとも１つの化合物を含む第二の医薬組成物
を含む、医薬組成物のキット。
【０３３２】
４１．少なくとも１つのＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメントがＣＴ抗原に結合する、実施形態３９に記載の医薬組成物または実施形態４０に記載のキット。
【０３３３】
４２．少なくとも１つのＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメントが、表１から選択されるＣＴ抗原に結合する、実施形態３９〜４１のいずれかに記載の医薬組成物またはキット。
【０３３４】
４３．少なくとも１つのＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメントが、モノクローナルのキメラ、ヒト化もしくはヒト抗体またはそれらの結合フラグメントである、実施形態３９〜４２のいずれかに記載の医薬組成物またはキット。
【０３３５】
４４．少なくとも１つのＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメントが、モノクローナルのヒト患者由来抗体またはその結合フラグメントである、実施形態３９〜４３のいずれかに記載の医薬組成物またはキット。
【０３３６】
４５．少なくとも１つのＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメントが、ＩｇＧクラスから選択される定常領域を含む、実施形態３９〜４４のいずれかに記載の医薬組成物またはキット。
【０３３７】
４６．少なくとも１つのＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメントが、約０．１＊１０−１２〜約１＊１０−６ＭのＫｄでＴＡＡに結合する、実施形態３９〜４５のいずれかに記載の医薬組成物またはキット。
【０３３８】
４７．実施形態３９〜４６のいずれかに記載の医薬組成物またはキットの一部であるＴＡＡ抗体もしくはその結合フラグメントおよび／または任意の他の抗体もしくはその結合フラグメントが、薬物、放射性同位体、レクチンおよび／または毒素にカップリングされている、実施形態３９〜４６のいずれかに記載の医薬組成物またはキット。
【０３３９】
４８．少なくとも１つのＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメントが、ＭＡＧＥＡ３に結合する、実施形態３９〜４７のいずれかに記載の医薬組成物またはキット。
【０３４０】
４９．少なくとも１つのＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメントが、ＭＡＧＥＡ３に結合し、患者由来のモノクローナルヒト抗体またはその結合フラグメントである、実施形態３９〜４８のいずれかに記載の医薬組成物またはキット。
【０３４１】
５０．少なくとも１つのＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメントが、ＭＡＧＥＡ３に結合し、軽鎖可変領域および／または重鎖可変領域を含み、
ａ．軽鎖可変領域が、配列番号８、１８、２８、３８もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号９、１９、２９、３９もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および／または配列番号１０、２０、３０、４０もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む；ならびに／あるいは
ｂ．重鎖可変領域が、配列番号５、１５、２５、３５もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号６、１６、２６、３６もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および／または配列番号７、１７、２７、３７もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む、
実施形態３９〜４９のいずれかに記載の医薬組成物またはキット。
【０３４２】
５１．少なくとも１つのＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメントが、ＭＡＧＥＡ３に結合し、軽鎖可変領域および／または重鎖可変領域を含み、
ａ．軽鎖可変領域が、配列番号８、１８、２８、３８もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号９、１９、２９、３９もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および配列番号１０、２０、３０、４０もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む；ならびに／または
ｂ．重鎖可変領域が、配列番号５、１５、２５、３５もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ１、配列番号６、１６、２６、３６もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ２、および配列番号７、１７、２７、３７もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列から選択されるＣＤＲ３を少なくとも含む、
実施形態５０に記載の医薬組成物またはキット。
【０３４３】
５２．少なくとも１つのＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメントが、ＭＡＧＥＡ３に結合し、該抗体または結合フラグメントが、配列番号４、１４、２４、３４もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列を含む軽鎖可変領域および／または配列番号３、１３、２３、３３もしくはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列を含む重鎖可変領域を含む、実施形態３９〜４９のいずれかに記載の医薬組成物またはキット。
【０３４４】
５３．少なくとも１つのＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメントが、ＭＡＧＥＡ３に結合し、該抗体または結合フラグメントが、配列番号４、１４、２４、３４またはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列を含む軽鎖可変領域および／または配列番号３、１３、２３、３３またはそれらに対し少なくとも８０％同一な配列を含む重鎖可変領域を含む、実施形態５２に記載の医薬組成物またはキット。
【０３４５】
５４．免疫系を活性化することが可能な少なくとも１つの化合物が、免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子、免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子のアゴニスト活性化因子、または免疫系の天然のインヒビターもしくは少なくとも共インヒビターのアンタゴニストエフェクターから選択される、実施形態３９〜５３のいずれかに記載の医薬組成物またはキット。
【０３４６】
５５．免疫系を活性化することが可能な少なくとも１つの化合物が、ＣＤ４０Ｌ、抗ＣＤ４０アゴニスト抗体、抗ＯＸ４０アゴニスト抗体、抗ＣＤ１３７アゴニスト抗体、抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体および抗ＣＤ２５アンタゴニスト抗体から選択される、実施形態３９〜５４のいずれかに記載の医薬組成物またはキット。
【０３４７】
５６．免疫系を活性化することが可能な少なくとも１つの化合物が、ＣＤ４０Ｌ、ＣＰ−８７０，８９３、ＳＧＮ−４０、トレメリムマブおよびイピリムマブから選択される、実施形態３９〜５５のいずれかに記載の医薬組成物またはキット。
【０３４８】
５７．組成物またはキットが、少なくとも２つの免疫系を活性化することが可能な化合物を含み、そのうち第一の化合物が、免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子または免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子のアゴニスト活性化因子から選択され、そのうち第二の化合物が、免疫系の天然のインヒビターもしくは少なくとも共インヒビターのアンタゴニストエフェクターから選択される、実施形態３９〜５６のいずれかに記載の医薬組成物またはキット。
【０３４９】
５８．第一の免疫系を活性化することが可能な化合物が、ＣＤ４０Ｌ、抗ＣＤ４０アゴニスト抗体、抗ＯＸ４０アゴニスト抗体および抗ＣＤ１３７アゴニスト抗体から選択され、第二の免疫系を活性化することが可能な化合物が、抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体および抗ＣＤ２５アンタゴニスト抗体から選択される、実施形態５７に記載の医薬組成物またはキット。
【０３５０】
５９．第一の免疫系を活性化することが可能な化合物が、ＣＤ４０Ｌ、ＣＰ−８７０，８９３およびＳＧＮ−４０から選択され、第二の免疫系を活性化することが可能な化合物が、トレメリムマブおよびイピリムマブから選択される、実施形態５８に記載の医薬組成物またはキット。
【０３５１】
６０．少なくとも１つのＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメントおよび免疫系を活性化することが可能な少なくとも１つの化合物が、二重特異的抗体またはその結合フラグメントの形態をとる、実施形態３９、または実施形態４１〜５９のいずれかに記載の医薬組成物。
【０３５２】
６１．二重特異的抗体が、（ｉ）ＴＡＡ結合部分および（ｉｉ）免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子のアゴニスト活性化因子または免疫系の天然のインヒビターもしくは少なくとも共インヒビターのアンタゴニストエフェクターとして作用する部分を含む、実施形態６０に記載の医薬組成物。
【０３５３】
６２．二重特異的抗体が、（ｉ）ＣＴ抗原結合部分および（ｉｉ）抗ＣＤ４０アゴニスト抗体、抗ＯＸ４０アゴニスト抗体、抗ＣＤ１３７アゴニスト抗体、抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体または抗ＣＤ２５アンタゴニスト抗体として作用する部分を含む、実施形態６１に記載の医薬組成物。
【０３５４】
６３．二重特異的抗体が、（ｉ）ＭＡＧＥＡ３結合部分および（ｉｉ）抗ＣＤ４０アゴニスト抗体または抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体として作用する部分を含む、実施形態６２に記載の医薬組成物。
【０３５５】
６４．細胞傷害性薬剤をさらに含む、実施形態３９または４１〜６３のいずれかに記載の医薬組成物。
【０３５６】
６５．細胞傷害性薬剤が、５−フルオロウラシル、タキサン、アントラサイクリン、シスプラチン、カルボプラチン、ゲムシタビン、カペシタビン、ナベルビンまたはゾレドロネートから選択される、実施形態３９、または実施形態４１〜６４のいずれかに記載の医薬組成物。
【０３５７】
６６．細胞傷害性薬剤を含む第三の医薬組成物を含む、実施形態４０〜５９のいずれかに記載のキット。
【０３５８】
６７．細胞傷害性薬剤が、５−フルオロウラシル、タキサン、アントラサイクリン、シスプラチン、カルボプラチン、ゲムシタビン、カペシタビン、ナベルビンまたはゾレドロネートから選択される、実施形態６６に記載のキット。
【０３５９】
６８．細胞傷害性薬剤、ＣＴ抗原結合抗体またはその結合フラグメント、ならびに（ｉ）免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子、（ｉｉ）免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子のアゴニスト活性化因子、および／または（ｉｉｉ）免疫系の天然のインヒビターもしくは少なくとも共インヒビターのアンタゴニストエフェクターから選択される少なくとも１つの化合物を含む、実施形態３９〜６７のいずれかに記載の医薬組成物またはキット。
【０３６０】
６９．細胞傷害性薬剤、ＣＴ抗原結合抗体またはその結合フラグメント、ならびに免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子のアゴニスト活性化因子からまたは免疫系の天然のインヒビターもしくは少なくとも共インヒビターのアンタゴニストエフェクターから選択される少なくとも１つの化合物を含む、実施形態３９〜６８のいずれかに記載の医薬組成物またはキット。
【０３６１】
７０．細胞傷害性薬剤、ＣＴ抗原結合抗体またはその結合フラグメント、免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子のアゴニスト活性化因子から選択される少なくとも１つの化合物、および免疫系の天然のインヒビターもしくは少なくとも共インヒビターのアンタゴニストエフェクターから選択される少なくとも１つの化合物を含む、実施形態３９〜６９のいずれかに記載の医薬組成物またはキット。
【０３６２】
７１．ＣＴ抗原結合抗体またはその結合フラグメントがＭＡＧＥＡ３を認識し、免疫系の天然の刺激因子もしくは少なくとも共刺激因子のアゴニスト活性化因子から選択される少なくとも１つの化合物が、抗ＣＤ４０アゴニスト抗体であり、免疫系の天然のインヒビターもしくは少なくとも共インヒビターのアンタゴニストエフェクターから選択される少なくとも１つの化合物が、抗ＣＴＬＡ４アンタゴニスト抗体である、実施形態６８〜７０のいずれかに記載の医薬組成物またはキット。
【０３６３】
７２．患者の治療における使用のための、少なくとも１つの腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体またはその結合フラグメントと免疫系を活性化することが可能な少なくとも１つの化合物との併用であって、ＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメントおよび免疫系を活性化することが可能な少なくとも１つの化合物が患者に投与される、併用。
【０３６４】
７３．実施形態４１〜６３のいずれかに記載のＴＡＡ結合抗体またはその結合フラグメントおよび免疫系を活性化することが可能な少なくとも１つの化合物が患者に投与される、実施形態７２における使用のための併用。
【０３６５】
７４．患者が、前記併用の投与の前に、それと同時に、またはそれに引き続いて細胞傷害性治療に供される、実施形態７３における使用のための併用。
【０３６６】
７５．細胞傷害性治療が、化学療法、放射線療法、手術および／または温熱療法を含む、実施形態７４における使用のための併用。
【０３６７】
７６．化学療法が、５−フルオロウラシル、タキサン、アントラサイクリン、シスプラチン、カルボプラチン、ゲムシタビン、カペシタビン、ナベルビンまたはゾレドロネートから選択される薬剤の投与を含む、実施形態７５における使用のための併用。
【０３６８】
７７．過剰増殖疾患を治療するための、実施形態７２〜７６における使用のための併用。
【０３６９】
７８．ＴＡＡの発現によって特徴付けられる過剰増殖疾患を治療するための、実施形態７７における使用のための併用。
【０３７０】
７９．前記ＴＡＡがＣＴ抗原である、実施形態７８における使用のための併用。
【０３７１】
８０．前記ＣＴ抗原がＭＡＧＥＡ３である、実施形態７９における使用のための併用。
【０３７２】
８１．前記過剰増殖疾患が、基底細胞癌；膀胱癌；骨癌；中枢神経系腫瘍；バーキットリンパ腫；乳癌；子宮頸癌；慢性骨髄性白血病；結腸癌；直腸癌；結腸直腸癌、食道癌；ユーイングファミリーの腫瘍；肝外胆管癌；胆嚢癌；消化管間葉性腫瘍（ＧＩＳＴ）；神経膠腫；頭頸部癌；膵島細胞腫瘍；カポジ肉腫；白血病；肝臓癌；リンパ腫；ホジキンリンパ腫；非ホジキンリンパ腫；中皮腫；多発性骨髄腫／形質細胞腫瘍；骨髄性白血病；鼻咽頭癌；神経芽細胞腫；小細胞肺癌；非小細胞肺癌；中咽頭癌；；卵巣癌；膵臓癌；副甲状腺癌；陰茎癌；咽頭癌；クロム親和性細胞腫；下垂体腫瘍；前立腺癌；腎細胞（腎臓）癌；気道癌腫；網膜芽細胞腫；皮膚癌（黒色腫）；小腸癌；軟部組織肉腫；扁平上皮癌；扁平上皮頸部癌；胃癌；Ｔ細胞リンパ腫；精巣癌；咽喉癌；甲状腺癌；腎盂および尿管の移行上皮癌；尿道癌；子宮癌；腟癌；外陰癌およびウィルムス腫瘍から選択される、実施形態７２〜８０のいずれかにおける使用のための併用。
【０３７３】
８２．患者の治療における使用のための医薬品であって、実施形態３９〜７１のいずれかに記載の医薬組成物もしくはキット、または少なくとも１つの腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体もしくはその結合フラグメントと免疫系を活性化することが可能な少なくとも１つの化合物との併用が患者に投与される、医薬品。
【０３７４】
８３．患者が、実施形態３９〜７１のいずれかに記載の医薬組成物もしくはキットの投与、または少なくとも１つの腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体もしくはその結合フラグメントと免疫系を活性化することが可能な少なくとも１つの化合物との併用の投与の前に、それと同時に、またはそれに引き続いて、細胞傷害性治療に供される、実施形態８２における使用のための医薬品。
【０３７５】
８４．細胞傷害性治療が、化学療法、放射線療法、手術および／または温熱療法を含む、実施形態８３における使用のための医薬品。
【０３７６】
８５．化学療法が、５−フルオロウラシル、タキサン、アントラサイクリン、シスプラチン、カルボプラチン、ゲムシタビン、カペシタビン、ナベルビンまたはゾレドロネートから選択される薬剤の投与を含む、実施形態８４における使用のための医薬品。
【０３７７】
８６．過剰増殖疾患を治療するための、実施形態８２〜８５における使用のための医薬品。
【０３７８】
８７．ＴＡＡの発現によって特徴付けられる過剰増殖疾患を治療するための、実施形態８６における使用のための医薬品。
【０３７９】
８８．前記ＴＡＡがＣＴ抗原である、実施形態８７における使用のための医薬品。
【０３８０】
８９．前記ＣＴ抗原がＭＡＧＥＡ３である、実施形態８８における使用のための医薬品。
【０３８１】
９０．前記過剰増殖疾患が、基底細胞癌；膀胱癌；骨癌；中枢神経系腫瘍；バーキットリンパ腫；乳癌；子宮頸癌；慢性骨髄性白血病；結腸癌；直腸癌；結腸直腸癌、食道癌；ユーイングファミリーの腫瘍；肝外胆管癌；胆嚢癌；消化管間葉性腫瘍（ＧＩＳＴ）；神経膠腫；頭頸部癌；膵島細胞腫瘍；カポジ肉腫；白血病；肝臓癌；リンパ腫；ホジキンリンパ腫；非ホジキンリンパ腫；中皮腫；多発性骨髄腫／形質細胞腫瘍；骨髄性白血病；鼻咽頭癌；神経芽細胞腫；小細胞肺癌；非小細胞肺癌；中咽頭癌；；卵巣癌；膵臓癌；副甲状腺癌；陰茎癌；咽頭癌；クロム親和性細胞腫；下垂体腫瘍；前立腺癌；腎細胞（腎臓）癌；気道癌腫；網膜芽細胞腫；皮膚癌（黒色腫）；小腸癌；軟部組織肉腫；扁平上皮癌；扁平上皮頸部癌；胃癌；Ｔ細胞リンパ腫；精巣癌；咽喉癌；甲状腺癌；腎盂および尿管の移行上皮癌；尿道癌；子宮癌；腟癌；外陰癌およびウィルムス腫瘍から選択される、実施形態８６〜８９のいずれかにおける使用のための医薬品。
【０３８２】
９１．少なくとも１つの腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体またはその結合フラグメントおよび免疫系を活性化することが可能な少なくとも１つの化合物が、実施形態３９〜７１のいずれかに記載のとおりである、実施形態８２〜９０のいずれかにおける使用のための医薬品。
【０３８３】
９２．実施形態３９〜７１のいずれかに記載の医薬組成物またはキット、あるいは少なくとも１つの腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体またはその結合フラグメントと免疫系を活性化することが可能な少なくとも１つの化合物との併用の、患者を治療するための医薬品の製造における使用。
【０３８４】
９３．患者が、実施形態３９〜７１のいずれかに記載の医薬組成物またはキットの投与、あるいは少なくとも１つの腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体またはその結合フラグメントと免疫系を活性化することが可能な少なくとも１つの化合物との併用の投与の前に、それと同時に、またはそれに引き続いて、細胞傷害性治療に供される、実施形態９２に記載の使用。
【０３８５】
９４．細胞傷害性治療が、化学療法、放射線療法、手術および／または温熱療法を含む、実施形態９３における使用。
【０３８６】
９５．化学療法が、５−フルオロウラシル、タキサン、アントラサイクリン、シスプラチン、カルボプラチン、ゲムシタビン、カペシタビン、ナベルビンまたはゾレドロネートから選択される薬剤の投与を含む、実施形態９４における使用。
【０３８７】
９６．過剰増殖疾患を治療するための、実施形態９２〜９５における使用。
【０３８８】
９７．ＴＡＡの発現によって特徴付けられる過剰増殖疾患を治療するための、実施形態９６における使用。
【０３８９】
９８．前記ＴＡＡがＣＴ抗原である、実施形態９７における使用。
【０３９０】
９９．前記ＣＴ抗原がＭＡＧＥＡ３である、実施形態９８における使用。
【０３９１】
１００．前記過剰増殖疾患が、基底細胞癌；膀胱癌；骨癌；中枢神経系腫瘍；バーキットリンパ腫；乳癌；子宮頸癌；慢性骨髄性白血病；結腸癌；直腸癌；結腸直腸癌、食道癌；ユーイングファミリーの腫瘍；肝外胆管癌；胆嚢癌；消化管間葉性腫瘍（ＧＩＳＴ）；神経膠腫；頭頸部癌；膵島細胞腫瘍；カポジ肉腫；白血病；肝臓癌；リンパ腫；ホジキンリンパ腫；非ホジキンリンパ腫；中皮腫；多発性骨髄腫／形質細胞腫瘍；骨髄性白血病；鼻咽頭癌；神経芽細胞腫；小細胞肺癌；非小細胞肺癌；中咽頭癌；；卵巣癌；膵臓癌；副甲状腺癌；陰茎癌；咽頭癌；クロム親和性細胞腫；下垂体腫瘍；前立腺癌；腎細胞（腎臓）癌；気道癌腫；網膜芽細胞腫；皮膚癌（黒色腫）；小腸癌；軟部組織肉腫；扁平上皮癌；扁平上皮頸部癌；胃癌；Ｔ細胞リンパ腫；精巣癌；咽喉癌；甲状腺癌；腎盂および尿管の移行上皮癌；尿道癌；子宮癌；腟癌；外陰癌およびウィルムス腫瘍から選択される、実施形態９２〜９９のいずれかに記載の使用。
【０３９２】
１０１．少なくとも１つの腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体またはその結合フラグメントおよび免疫系を活性化することが可能な少なくとも１つの化合物が、実施形態４１〜６３のいずれかに記載のとおりである、実施形態９２〜１００のいずれかに記載の使用。
【０３９３】
１０２．実施形態３９〜７１のいずれかに記載の医薬組成物またはキット、あるいは少なくとも１つの腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体またはその結合フラグメントと免疫系を活性化することが可能な少なくとも１つの化合物との併用を患者に投与することによって、患者を治療する方法。
【０３９４】
１０３．患者が、実施形態３９〜７１のいずれかに記載の医薬組成物もしくはキットの投与、または少なくとも１つの腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体もしくはその結合フラグメントと免疫系を活性化することが可能な少なくとも１つの化合物との併用の投与の前に、それと同時に、またはそれに引き続いて、細胞傷害性治療に供される、実施形態１０２における方法。
【０３９５】
１０４．細胞傷害性治療が、化学療法、放射線療法、手術および／または温熱療法を含む、実施形態１０３における方法。
【０３９６】
１０５．化学療法が、５−フルオロウラシル、タキサン、アントラサイクリン、シスプラチン、カルボプラチン、ゲムシタビン、カペシタビン、ナベルビンまたはゾレドロネートから選択される薬剤の投与を含む、実施形態１０４における方法。
【０３９７】
１０６．過剰増殖疾患を治療するための、実施形態１０２〜１０５における方法。
【０３９８】
１０７．ＴＡＡの発現によって特徴付けられる過剰増殖疾患を治療するための、実施形態１０６における方法。
【０３９９】
１０８．前記ＴＡＡがＣＴ抗原である、実施形態１０７における方法。
【０４００】
１０９．前記ＣＴ抗原がＭＡＧＥＡ３である、実施形態１０８における方法。
【０４０１】
１１０．前記過剰増殖疾患が、基底細胞癌；膀胱癌；骨癌；中枢神経系腫瘍；バーキットリンパ腫；乳癌；子宮頸癌；慢性骨髄性白血病；結腸癌；直腸癌；結腸直腸癌、食道癌；ユーイングファミリーの腫瘍；肝外胆管癌；胆嚢癌；消化管間葉性腫瘍（ＧＩＳＴ）；神経膠腫；頭頸部癌；膵島細胞腫瘍；カポジ肉腫；白血病；肝臓癌；リンパ腫；ホジキンリンパ腫；非ホジキンリンパ腫；中皮腫；多発性骨髄腫／形質細胞腫瘍；骨髄性白血病；鼻咽頭癌；神経芽細胞腫；小細胞肺癌；非小細胞肺癌；中咽頭癌；；卵巣癌；膵臓癌；副甲状腺癌；陰茎癌；咽頭癌；クロム親和性細胞腫；下垂体腫瘍；前立腺癌；腎細胞（腎臓）癌；気道癌腫；網膜芽細胞腫；皮膚癌（黒色腫）；小腸癌；軟部組織肉腫；扁平上皮癌；扁平上皮頸部癌；胃癌；Ｔ細胞リンパ腫；精巣癌；咽喉癌；甲状腺癌；腎盂および尿管の移行上皮癌；尿道癌；子宮癌；腟癌；外陰癌およびウィルムス腫瘍から選択される、実施形態１０２〜１０９のいずれかに記載の方法。
【０４０２】
１１１．少なくとも１つの腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体またはその結合フラグメントおよび免疫系を活性化することが可能な少なくとも１つの化合物が、実施形態３９〜７１のいずれかに記載のとおりである、実施形態１０２〜１１０のいずれかにおける方法。
【０４０３】
１１２．診断において使用するための、実施形態１〜２３のいずれかに記載のＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント。
【０４０４】
１１３．実施形態１〜２３のいずれかに記載のＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントを含む、診断組成物。
【０４０５】
１１４．過剰増殖疾患が診断される、実施形態１１２における使用のためのＭＡＧＥＡ３結合抗体もしくはその結合フラグメントまたは実施形態１１３に記載の診断組成物。
【０４０６】
１１５．過剰増殖疾患が、基底細胞癌；膀胱癌；骨癌；中枢神経系腫瘍；バーキットリンパ腫；乳癌；子宮頸癌；慢性骨髄性白血病；結腸癌；直腸癌；結腸直腸癌、食道癌；ユーイングファミリーの腫瘍；肝外胆管癌；胆嚢癌；消化管間葉性腫瘍（ＧＩＳＴ）；神経膠腫；頭頸部癌；膵島細胞腫瘍；カポジ肉腫；白血病；肝臓癌；リンパ腫；ホジキンリンパ腫；非ホジキンリンパ腫；中皮腫；多発性骨髄腫／形質細胞腫瘍；骨髄性白血病；鼻咽頭癌；神経芽細胞腫；小細胞肺癌；非小細胞肺癌；中咽頭癌；；卵巣癌；膵臓癌；副甲状腺癌；陰茎癌；咽頭癌；クロム親和性細胞腫；下垂体腫瘍；前立腺癌；腎細胞（腎臓）癌；気道癌腫；網膜芽細胞腫；皮膚癌（黒色腫）；小腸癌；軟部組織肉腫；扁平上皮癌；扁平上皮頸部癌；胃癌；Ｔ細胞リンパ腫；精巣癌；咽喉癌；甲状腺癌；腎盂および尿管の移行上皮癌；尿道癌；子宮癌；腟癌；外陰癌およびウィルムス腫瘍から選択される、実施形態１１４における使用のためのＭＡＧＥＡ３結合抗体もしくはその結合フラグメントまたは診断組成物。
【０４０７】
１１６．過剰増殖疾患が、ＭＡＧＥＡ３および／またはＭＡＧＥＡ６の過剰発現によって特徴付けられる、実施形態１１４または１１５における使用のためのＭＡＧＥＡ３結合抗体もしくはその結合フラグメントまたは診断組成物。
【０４０８】
１１７．過剰増殖疾患が、黒色腫、乳癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、多発性骨髄腫および／または膵臓癌から選択される、実施形態１１４〜１１６における使用のためのＭＡＧＥＡ３結合抗体もしくはその結合フラグメントまたは診断組成物。
【０４０９】
１１８．ヒトまたは動物の個体における過剰増殖疾患を診断する方法であって、
ａ．実施形態１〜２３のいずれかに記載のＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントを使用して、少なくともＭＡＧＥＡ３の発現について、ヒトまたは動物の個体のサンプルを試験するステップ；
ｂ．コントロールサンプルにおける少なくともＭＡＧＥＡ３の発現と比較するステップ；
ｃ．ステップａ）およびｂ）で得られたデータを比較することによって、過剰増殖疾患の存在および／またはおそらくは発生を決定するステップ
を少なくとも含む方法。
【０４１０】
１１９．データ獲得の方法であって、
ａ．実施形態１〜２３のいずれかに記載のＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントをヒトまたは動物の個体に投与するステップ；
ｂ．ヒトまたは動物の個体におけるＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントの分布を決定するステップ；および
ｃ．実施形態１〜２３のいずれかに記載のＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントを使用して、ヒトまたは動物の個体における少なくともＭＡＧＥＡ３の発現を決定するステップ
を少なくとも含む方法。
【０４１１】
１２０．前記過剰増殖疾患が、基底細胞癌；膀胱癌；骨癌；中枢神経系腫瘍；バーキットリンパ腫；乳癌；子宮頸癌；慢性骨髄性白血病；結腸癌；直腸癌；結腸直腸癌、食道癌；ユーイングファミリーの腫瘍；肝外胆管癌；胆嚢癌；消化管間葉性腫瘍（ＧＩＳＴ）；神経膠腫；頭頸部癌；膵島細胞腫瘍；カポジ肉腫；白血病；肝臓癌；リンパ腫；ホジキンリンパ腫；非ホジキンリンパ腫；中皮腫；多発性骨髄腫／形質細胞腫瘍；骨髄性白血病；鼻咽頭癌；神経芽細胞腫；小細胞肺癌；非小細胞肺癌；中咽頭癌；；卵巣癌；膵臓癌；副甲状腺癌；陰茎癌；咽頭癌；クロム親和性細胞腫；下垂体腫瘍；前立腺癌；腎細胞（腎臓）癌；気道癌腫；網膜芽細胞腫；皮膚癌（黒色腫）；小腸癌；軟部組織肉腫；扁平上皮癌；扁平上皮頸部癌；胃癌；Ｔ細胞リンパ腫；精巣癌；咽喉癌；甲状腺癌；腎盂および尿管の移行上皮癌；尿道癌；子宮癌；腟癌；外陰癌およびウィルムス腫瘍から選択される、実施形態１１８または１１９に記載の方法。
【０４１２】
１２１．過剰増殖疾患が、ＭＡＧＥＡ３および／またはＭＡＧＥＡ６の過剰発現によって特徴付けられる、実施形態１１８〜１２０のいずれかに記載の方法。
【０４１３】
１２２．過剰増殖疾患が、黒色腫、乳癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、多発性骨髄腫および／または膵臓癌から選択される、実施形態１１８〜１２１のいずれかに記載の方法。
【０４１４】
１２３．抗体が、ヒトモノクローナル患者由来ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントである、実施形態１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２または２３のいずれかに記載の単離されたモノクローナルＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメント。
【０４１５】
１２４．抗体が、ヒトモノクローナル患者由来ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントである、実施形態３０、３１、３２、３３、３６、３７もしくは３８のいずれかに記載の医薬組成物、実施形態３４、３６、３７もしくは３８のいずれかに記載の使用、または実施形態３５、３６、３７もしくは３８のいずれかに記載の方法。
【０４１６】
１２５．抗体が、ヒトモノクローナル患者由来ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントである、実施形態３９、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６８、６９、７０もしくは７１のいずれかに記載の医薬組成物、または実施形態４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６６、６７、６８、６９、７０または７１のいずれかに記載のキット。
【０４１７】
１２６．抗体が、ヒトモノクローナル患者由来ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントである、実施形態７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０または８１のいずれかに記載の併用。
【０４１８】
１２７．抗体が、ヒトモノクローナル患者由来ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントである、実施形態８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０または９１のいずれかに記載の医薬品。
【０４１９】
１２８．抗体が、ヒトモノクローナル患者由来ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントである、実施形態９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１のいずれかに記載の使用。
【０４２０】
１２９．抗体が、ヒトモノクローナル患者由来ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントである、実施形態１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０または１１１のいずれかに記載の方法。
【０４２１】
１３０．抗体が、ヒトモノクローナル患者由来ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントである、実施形態１１２、１１４、１１５、１１６または１１７のいずれかに記載の使用のためのＭＡＧＥＡ３結合抗体もしくはその結合フラグメント、または実施形態１１３、１１４、１１５、１１６もしくは１１７のいずれかに記載の診断組成物。
【０４２２】
１３１．抗体が、ヒトモノクローナル患者由来ＭＡＧＥＡ３結合抗体またはその結合フラグメントである、実施形態１１８、１１９、１２０、１２１または１２２のいずれかに記載の方法。
【図１Ａ−Ｂ】
2014524891.tif 000005
【図１Ｃ−Ｄ】
2014524891.tif 000006
【図４Ａ−Ｂ】
2014524891.tif 000007
【図４Ｃ−Ｄ】
2014524891.tif 000008
【図２】
2014524891.tif 000009
【図３】
2014524891.tif 000010
【配列表】
2014524891000001.app
【国際調査報告】
2014524891.tif 000011
2014524891.tif 000012
2014524891.tif 000013
2014524891.tif 000014