(57)【要約】  本発明は、式（Ｉａ）2011502977.tif 000031の３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジンまたはその薬学的に許容できる塩である、多発性硬化症の治療に使用される化合物を提供する。
2011502977.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
多発性硬化症の治療に使用される化合物であって、式（Ｉａ）
【化１】
2011502977.tif 000030
の３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジンまたはその薬学的に許容できる塩である、化合物。
【請求項２】
自己免疫性脊髄炎の治療に使用される化合物であって、請求項１に記載の式（Ｉａ）の３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジンまたはその薬学的に許容できる塩である、化合物。
【請求項３】
前記３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジンが酸付加塩の形態である、請求項１または請求項２に記載の用途のための化合物。
【請求項４】
前記酸付加塩がメタンスルホン酸塩である、請求項３に記載の用途のための化合物。
【請求項５】
前記式（Ｉａ）の３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジンまたはその薬学的に許容できる塩が、９０％を超える異性体純度を有する、請求項１〜４のいずれか一項に記載の用途のための化合物。
【請求項６】
前記式（Ｉａ）の３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジンまたはその薬学的に許容できる塩が、９８％を超える異性体純度を有する、請求項５に記載の用途のための化合物。
【請求項７】
多発性硬化症の治療用の薬剤の製造のための請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項８】
自己免疫性脊髄炎の治療用の薬剤の製造のための請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項９】
多発性硬化症の治療方法であって、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物の有効治療量を、それを必要とする患者に投与することを含む、方法。
【請求項１０】
自己免疫性脊髄炎の治療方法であって、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物の有効治療量を、それを必要とする患者に投与することを含む、方法。
【請求項１１】
治療が、
・疾患の進行を止めること、
・疾患の進行を遅らせること、
・疾患の進行を変えること
・症状の緩和を、例えば１つまたは複数の症状の重篤度を除去または軽減することによって実現すること、
・寛解の期間を延ばすこと、
・再発を防ぐこと、
・再発の重篤度を低下すること、および
・ＭＳの再発−寛解の最初の期間から二次進行性ＭＳまでの進行を防ぐか、または遅らせること
のいずれか１つまたは複数からなる、またはそれらを含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の用途のための化合物、使用、または方法。
【請求項１２】
治療が、
・１つまたは複数の四肢の衰弱および／またはしびれ感、
・前記四肢の疼き、
・躯幹または手足の周りのきつく縛られたような感覚、
・１つまたは複数の四肢の振戦、
・片脚または両脚の引きずり歩行または制御不全、
・痙攣性または失調性不全対麻痺、
・１つまたは複数の四肢の麻痺、
・腱反射機能亢進、
・腹壁反射消失、
・レルミット徴候、
・球後視神経炎または視神経炎、
・歩行不安定、
・平衡障害、
・筋疲労の増加、
・脳幹症候群（複視、めまい、嘔吐）、
・排尿障害、
・片麻痺、
・三叉神経痛、
・他の疼痛症候群、
・眼振および運動失調、
・小脳型運動失調症、
・シャルコー３徴候−複視、
・両側核間性眼筋麻痺、
・顔面筋のミオキミアまたは麻痺、
・難聴、
・耳鳴り、
・無構造性幻聴（蝸牛連結部の障害が原因の）、
・一過性顔面知覚麻痺または三叉神経痛のもの、
・尿および／または便失禁、
・膀胱機能障害による多幸症、
・抑鬱、
・倦怠感、
・痴呆、
・腰部の鈍い疼痛、
・手足の激しい、灼けつく、局在のはっきりしない痛み、
・神経学的欠損の突然の発作、
・構音障害および運動失調、
・手足の発作性の痛みおよび異常錯覚感、
・閃光、
・発作性の痒み、
・強直発作、
・感覚の変化、
・視覚障害、
・筋衰弱、
・協調および言語困難、
・認識機能障害、
・高熱、および
・体動および無力障害
から選択されるいずれか１つの症状または任意の組合せの複数の症状の重症度の除去、改善、または軽減からなる、またはそれらを含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の用途のための化合物、使用、または方法。
【請求項１３】
治療が予防的治療である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の用途のための化合物、使用、または方法。
【請求項１４】
予防的治療が、再発の可能性または重症度を阻止または低減するために寛解の期間中に前記化合物を投与することを含む、請求項１３に記載の用途のための化合物、使用、または方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、多発性硬化症の治療におけるジヒドロテトラベナジンの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
多発性硬化症（ＭＳ）は、ミエリン鞘、すなわち中枢神経系の神経線維を取り巻く保護脂肪層が徐々に破壊することを特徴とする日常生活に支障を来す神経状態である。ミエリン鞘への損傷の結果として、神経線維は電気信号をもはや有効に伝えることができなくなり、それが感覚の変化、視覚障害、筋力低下、抑鬱、協調および言語困難、重度の疲労、認知機能障害、平衡に関連する問題、高熱、痛み、尿および便失禁を含めた様々な症状を引き起こす。より重症の例では、ＭＳは体動および無力障害を引き起こすことになる。
【０００３】
ＭＳは、一般には個体の免疫系による神経系への攻撃に起因する自己免疫疾患として分類される。
【０００４】
多発性硬化症は、３つの型、すなわち再発−寛解型ＭＳ、二次性進行型ＭＳ、および原発性進行型ＭＳに分類することができる。ＭＳ患者の約８０％においてＭＳは、症状がしばしば全く突然に再発する再発の期間と、次いで症状が改善される寛解の期間とが存在することを意味する再発と寛解の状態として出発する。再発の間の期間は、予測できない可能性がきわめて高く、再発の間にしばしば数年が経過することもある。
【０００５】
再発−寛解型ＭＳの初めの期間の後に、患者は、再発頻度の減少にもかかわらず、再発なしに神経障害が徐々に蓄積することを伴う二次性進行型ＭＳに進む場合がある。再発−寛解型ＭＳを有する人々の約半分が、最初の１０年間のうちに二次性進行段階へ進む。
【０００６】
第三の型のＭＳ、すなわち原発性進行型ＭＳは、ＭＳ患者の約１０％を苦しめている。この型のＭＳの場合、寛解の期間は存在せず、病気は発症から徐々に悪化する。これは障害の拡大を引き起こし、平均余命を低下させる場合がある。
【０００７】
現在、多発性硬化症に対する治療法は存在しないが、多数の様々な種類の薬物が症状を調節または管理するために使用され、その最も評判の良いものはメチルプレドニゾロンなどの抗炎症性ステロイド類である。ステロイド類は、再発の治療に一般に使用されるが、この疾患の進行を変えることは考えられない。主として副作用の理由で、ステロイド類を一度に約３週間を超えて使用しないこと、また１年あたり長くても約３クールのあいだ使用しないことが一般には勧められる。ステロイド類によって引き起こされる副作用には、消化不良および胸やけなどの胃炎症、胃潰瘍、情緒変調または気分変動、不眠、吐き気、骨がもろくなる骨粗鬆症、白内障、体重増加、むくみおよび肥満、にきび、ならびに糖尿病が挙げられる。ステロイド類は、一般には再発の約１０〜２０％の治療に適しているに過ぎない。
【０００８】
非ステロイド系抗炎症性薬物（ＮＳＡＩＤ）がＭＳの症状の幾つかを軽減またはそれに管理するために使用されているが、この場合もやはりそれらはこの疾患の進行には何も効果がない。さらにそれらは、胃炎症などのよく知られている副作用を有し、また胃出血および胃潰瘍を引き起こす可能性もある。
【０００９】
β−インターフェロンおよびコパキソンを含めた複数の療法が、ＭＳ再発の頻度を減少させ、障害の進行に関して緩やかな利益をもたらす「根本的（ｄｉｓｅａｓｅ  ｍｏｄｉｆｙｉｎｇ）」冶療法として認可されている。しかしながら今のところ、既存の薬物療法に付随する副作用のないＭＳに対する別の、より効力のある対症療法および根本的療法の必要性が残っている。
【００１０】
テトラベナジン（化学名１，３，４，６，７，１１−ヘキサヒドロ−９，１０−ジメトキシ−３−（２−メチルプロピル）−２Ｈ−ベンゾ（ａ）キノリジン−２−オン）は、１９５０年代後半から医薬用薬物として使用されてきた。最初は抗精神病薬として開発されたテトラベナジンは、現在はハンチントン病、片側バリズム、老人性舞踏病、チック、遅発性ジスキネジー、およびトゥーレット症候群などの多動性障害の対症療法に使用されており、例えばＪａｎｋｏｖｉｃらの論文、Ａｍ．Ｊ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ．（１９９９）Ａｕｇ；１５６（８）：１２７９〜８１およびＪａｎｋｏｖｉｃらの論文、Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ（１９９７）Ｆｅｂ；４８（２）：３５８〜６２を参照されたい。
【００１１】
テトラベナジンの一次薬理作用は、ヒト小胞モノアミン輸送体アイソフォーム２（ｈＶＭＡＴ２）を阻害することによって中枢神経系におけるモノアミン（例えばドーパミン、セロトニン、およびノルエピネフリン）の供給を低下させることである。この薬物は、シナプス後ドーパミン受容体も阻害する。
【００１２】
テトラベナジンは、様々な多動性障害の治療用の有効かつ安全な薬物であり、一般の神経弛緩薬とは対照的に、遅発性ジスキネジーを引き起こすことは実証されていない。それにもかかわらず、テトラベナジンは、抑鬱、パーキンソニズム、眠気、神経過敏または不安、不眠、およびまれには神経弛緩薬性悪性症候群を含めた複数の用量依存性副作用を示す。
【００１３】
テトラベナジンの中枢効果は、レセルピンのものと酷似しているが、ＶＭＡＴ１輸送体における活性を欠く点でレセルピンとは異なる。ＶＭＡＴ１輸送体における活性の欠如は、テトラベナジンが、レセルピンよりも末梢活性が少ないことを意味し、したがって低血圧症などのＶＭＡＴ１に関連する副作用を生じない。
【００１４】
テトラベナジンの化学構造は、下記図１に示すようなものである。
【化１】
2011502977.tif 000003
【００１５】
この化合物は、３および１１ｂ炭素原子にキラル中心を有し、したがって理論的には図２に示すように全体で４つの異性体の形が存在しうる。
【化２】
2011502977.tif 000004
【００１６】
図２において各異性体の立体化学的構造は、Ｃａｈｎ、Ｉｎｇｏｌｄ、およびＰｒｅｌｏｇにより開発された「Ｒ」および「Ｓ」命名法を用いて定義され、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｂｙ  Ｊｅｒｒｙ  Ｍａｒｃｈ，４ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９２，ｐａｇｅｓ  １０９〜１１４を参照されたい。図２において、また本特許出願におけるほかの場所で呼称「Ｒ」または「Ｓ」は、炭素原子の位置番号の順に与えられる。したがって、例えばＲＳは、３Ｒ，１１ｂＳの簡便な表記法である。同様に、下記ジヒドロテトラベナジンにおける場合のように３つのキラル中心が存在する場合、呼称「Ｒ」または「Ｓ」は、炭素原子２、３、１１ｂの順に記載される。したがって２Ｓ，３Ｒ，１１ｂＲ異性体は、簡便な表記法ではＳＲＲと呼ばれるなど。
【００１７】
市販のテトラベナジンは、ＲＲおよびＳＳ異性体のラセミ混合物であり、そのＲＲおよびＳＳ異性体（３および１１ｂ位における水素原子がｔｒａｎｓの相対的向きを有するので、個々にまたは集合的に以後ｔｒａｎｓ−テトラベナジンと呼ぶ）は、熱力学的に最も安定な異性体であるらしい。
【００１８】
テトラベナジンのバイオアベイラビリティは、やや劣りかつ変りやすい。それは初回通過代謝によって大々的に代謝され、ほとんどまたはまったく変化していないテトラベナジンが一般に尿中で検出される。その主要な代謝産物は、ジヒドロテトラベナジン（化学名２−ヒドロキシ−３−（２−メチルプロピル）−１，３，４，６，７，１１ｂ−ヘキサヒドロ−９，１０−ジメトキシ−ベンゾ（ａ）キノリジン）であり、テトラベナジン中の２−ケト基の還元によって形成され、この薬物の活性に主として関与していると考えられている（Ｍｅｈｖａｒらの論文、Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓｐ．１５，２５０〜２５５（１９８７）およびＪ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，７６，Ｎｏ．６，４６１〜４６５（１９８７）、ならびにＲｏｂｅｒｔｓらの論文、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍｃｏｌ．，２９：７０３〜７０８（１９８６）参照）。
【００１９】
親テトラベナジンのより安定なＲＲおよびＳＳ異性体から誘導され、３および１１ｂ位における水素原子間のｔｒａｎｓの相対的向きを有する４種類のジヒドロテトラベナジン異性体が、すでに同定されている（Ｋｉｌｂｏｕｒｎらの論文、Ｃｈｉｒａｌｉｔｙ，９：５９〜６２（１９９７）およびＢｒｏｓｓｉらの論文、Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ．，ｖｏｌ．ＸＬＩ，Ｎｏ．１９３，ｐｐ１７９３〜１８０６（１９５８）参照）。集合的に以後ｔｒａｎｓ−ジヒドロテトラベナジンと呼ばれるこれら４種類の異性体は、（＋）−α−ジヒドロテトラベナジン、（−）−α−ジヒドロテトラベナジン、（＋）−β−ジヒドロテトラベナジン、および（−）−β−ジヒドロテトラベナジンである。４種類のｔｒａｎｓ−ジヒドロテトラベナジン異性体の構造は、図３に示すようなものであると考えられる。
【化３】
2011502977.tif 000005
【００２０】
Ｋｉｌｂｏｕｒｎら（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，２７８：２４９〜２５２（１９９５）およびＭｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．，５：１１３〜１２６（１９９４）参照）は、意識下ラットの脳中の個々の放射能標識したジヒドロテトラベナジン異性体の特異的結合を調査した。かれらは、（＋）−α−［１１Ｃ］ジヒドロテトラベナジン（２Ｒ，３Ｒ，１１ｂＲ）異性体が、より高濃度のニューロン膜ドーパミン輸送体（ＤＡＴ）および小胞モノアミン輸送体（ＶＭＡＴ２）に付随して脳の領域に蓄積することを発見した。しかしながら、本質的に不活性な（−）−α−［１１Ｃ］ジヒドロテトラベナジン異性体は脳中にほとんど一様に分布しており、これはＤＡＴおよびＶＭＡＴ２との特異的結合が起こっていないことを示唆した。これらｉｎ  ｖｉｖｏの検討結果は、（＋）−α−［１１Ｃ］ジヒドロテトラベナジン異性体が（−）−α−［１１Ｃ］ジヒドロテトラベナジン異性体のＫｉよりも＞２０００倍高い［３Ｈ］メトキシテトラベナジンのＫｉを示すことを実証したｉｎ  ｖｉｔｒｏの検討結果と相互に関係していた。
【００２１】
国際特許公開番号ＰＣＴ／ＧＢ２００５／０００４６４号明細書（国際公開第２００５／０７７９４６号パンフレット）は、テトラベナジンの不安定なＲＳおよびＳＲ異性体（３および１１ｂ位における水素原子がｃｉｓの相対的向きを有するので、個々にまたは集合的に以後ｃｉｓ−テトラベナジンと呼ぶ）から誘導される医薬用ジヒドロテトラベナジン異性体の調製および使用について開示している。
【００２２】
これら４種類のｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジン異性体は、
（ａ）式（Ｉａ）
【化４】
2011502977.tif 000006
を有する３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジンの２Ｓ，３Ｓ，１１ｂＲ異性体、
（ｂ）式（Ｉｂ）
【化５】
2011502977.tif 000007
を有する３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジンの２Ｒ，３Ｒ，１１ｂＳ異性体、
（ｃ）式（Ｉｃ）
【化６】
2011502977.tif 000008
を有する３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジンの２Ｒ，３Ｓ，１１ｂＲ異性体、および
（ｄ）式（Ｉｄ）
【化７】
2011502977.tif 000009
を有する３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジンの２Ｓ，３Ｒ，１１ｂＳ異性体
である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２３】
【特許文献１】国際公開第２００５／０７７９４６号
【非特許文献】
【００２４】
【非特許文献１】Ｊａｎｋｏｖｉｃら、Ａｍ．Ｊ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ．（１９９９）Ａｕｇ；１５６（８）：１２７９〜８１
【非特許文献２】Ｊａｎｋｏｖｉｃら、Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ（１９９７）Ｆｅｂ；４８（２）：３５８〜６２
【非特許文献３】Ｍｅｈｖａｒら、Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓｐ．１５，２５０〜２５５（１９８７）
【非特許文献４】Ｍｅｈｖａｒら、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，７６，Ｎｏ．６，４６１〜４６５（１９８７）
【非特許文献５】Ｒｏｂｅｒｔｓら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍｃｏｌ．，２９：７０３〜７０８（１９８６）
【非特許文献６】Ｋｉｌｂｏｕｒｎら、Ｃｈｉｒａｌｉｔｙ，９：５９〜６２（１９９７）
【非特許文献７】Ｂｒｏｓｓｉら、Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ．，ｖｏｌ．ＸＬＩ，Ｎｏ．１９３，ｐｐ１７９３〜１８０６（１９５８）
【非特許文献８】Ｋｉｌｂｏｕｒｎら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，２７８：２４９〜２５２（１９９５）
【非特許文献９】Ｋｉｌｂｏｕｒｎら、Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．，５：１１３〜１２６（１９９４）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２５】
本発明者らの国際公開第２００７／０１７６４３号パンフレットは、３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジンの抗炎症薬としての使用について開示しているが、これら化合物を多発性硬化症の治療に使用することについては開示していない。
【課題を解決するための手段】
【００２６】
ここに、３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジンの２Ｓ，３Ｓ，１１ｂＲ異性体（上記式（Ｉａ））が、自己免疫性脳脊髄炎、すなわち多発性硬化症の確立されたモデルの進展を阻害することを見出した。今までに得られている実験結果に基づいて、式（Ｉａ）の化合物が、ヒトにおける多発性硬化症の治療に役立つはずであることが予見される。
【００２７】
したがって、第一の態様において、本発明は、多発性硬化症の治療に使用される化合物を提供し、この化合物は、式（Ｉａ）
【化８】
2011502977.tif 000010
の３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジンまたはその薬学的に許容できる塩である。
【００２８】
別の態様において、本発明は、自己免疫性脊髄炎の治療に使用される化合物を提供し、この化合物は、上記で定義した式（Ｉａ）の３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジンまたはその薬学的に許容できる塩である。
【００２９】
さらなる態様において、本発明は、
・多発性硬化症の治療用薬剤の製造のために、上記で定義した式（Ｉａ）の３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジンまたはその薬学的に許容できる塩である化合物の使用、
・自己免疫性脊髄炎の治療用薬剤の製造のために、上記で定義した式（Ｉａ）の３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジンまたはその薬学的に許容できる塩である化合物の使用、
・式（Ｉａ）の３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジンまたはその薬学的に許容できる塩の治療に有効な量を、それを必要としている患者に投与することを含む多発性硬化症の治療方法、
・式（Ｉａ）の３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジンまたはその薬学的に許容できる塩の治療に有効な量を、それを必要としている患者に投与することを含む自己免疫性脊髄炎の治療方法、
を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００３０】
【図１】多発性硬化症の実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）モデルにおける式（Ｉａ）の化合物の効力を示す図である。
【図２】多発性硬化症の実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）モデルにおける式（Ｉａ）の化合物の効力を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００３１】
式（Ｉａ）の３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジンは、便宜上、本明細書中では類義語の「式（Ｉａ）の化合物」または「本発明の化合物」または「本発明の異性体」または「異性体Ｂ」で呼ばれる。
【００３２】
式（Ｉａ）の化合物は、実質上純粋な形態、例えば９０％を超える、一般には９５％を超える、より好ましくは９８％を超える異性体純度で使用することができる。
【００３３】
本発明の文脈中の用語「異性体純度」とは、全ての異性体形態のジヒドロテトラベナジンの総量または濃度に対する式（Ｉａ）の化合物の量を指す。例えば、組成物中に存在する全ジヒドロテトラベナジンの９０％が式（Ｉａ）の化合物であるならば、その異性体純度は９０％である。
【００３４】
本発明において使用される式（Ｉａ）の３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジン化合物は、３，１１ｂ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロテトラベナジンを実質上含まない、好ましくは３，１１ｂ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロテトラベナジンを５％未満含有する、より好ましくは３，１１ｂ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロテトラベナジンを３％未満含有する、最も好ましくは３，１１ｂ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロテトラベナジンを１％未満含有する組成物の形態であることができる。
【００３５】
本明細書中で使用される用語「３，１１ｂ−ｃｉｓ−」は、ジヒドロテトラベナジン構造の３および１１ｂ位における水素原子が、ｃｉｓの相対的向きであることを意味する。
【００３６】
式（Ｉａ）の３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジン化合物は、実質上鏡像異性的に純粋な形態で、または３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジンの他の鏡像異性体を含む混合物として与えられることができる。
【００３７】
本発明の文脈中の用語「鏡像異性体純度」および「鏡像異性的に純粋な」とは、全ての鏡像異性体および異性体の形態のジヒドロテトラベナジンの総量または濃度に対する、存在する所与の３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジンの鏡像異性体の量を指す。例えば、組成物中に存在する全ジヒドロテトラベナジンの９０％が単一の鏡像異性体の形態であるならば、その鏡像異性体純度は９０％である。
【００３８】
例として、本発明のそれぞれの態様および実施形態において、式（Ｉａ）の３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジン化合物は、少なくとも５５％（例えば、少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９８％、９９％、９９．５％、または１００％）の鏡像異性体純度で存在することができる。最も好ましくは、式（Ｉａ）の３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジン化合物は、他のジヒドロテトラベナジン異性体を実質上含まない。
【００３９】
薬学的に許容できる塩
別段に文脈が必要としない限り、本出願における式（Ｉａ）の３，１１ｂ−ｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジン化合物またはその類義語に関する言及には、この化合物の遊離塩基だけでなく、その塩、具体的にはその酸付加塩もその範囲内に含まれる。
【００４０】
酸付加塩を形成する特定の酸には、３．５未満、より一般的には３未満のｐＫａ値を有する酸が挙げられる。例えばこの酸付加塩は、＋３．５から−３．５の範囲のｐＫａを有する酸から形成することができる。
【００４１】
好ましい酸付加塩にはスルホン酸、例えばメタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、カンファースルホン酸、およびナフタレンスルホン酸で作られるものが挙げられる。
【００４２】
酸付加塩を形成することができる一つの特定の酸は、メタンスルホン酸である。
【００４３】
酸付加塩は、本明細書中で述べる方法か、または従来の化学的方法、例えばＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ  Ｕｓｅ，Ｐ．Ｈｅｉｎｒｉｃｈ  Ｓｔａｈｌ（Ｅｄｉｔｏｒ），Ｃａｍｉｌｌｅ  Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ（Ｅｄｉｔｏｒ），ＩＳＢＮ：３−９０６３９−０２６−８，Ｈａｒｄｃｏｖｅｒ，３８８  ｐａｇｅｓ，Ａｕｇｕｓｔ  ２００２に記載の方法によって調製することができる。一般にこのような塩は、遊離塩基形態のこの化合物を適切な塩基または酸と、水中または有機溶媒中で、あるいはこの両方の混合物中で反応させることによって調製することができる。一般にはエーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、またはアセトニトリルなどの非水性媒体が使用される。
【００４４】
これらの塩は、一般には薬学的に許容できる塩である。しかしながらまた、薬学的に許容可能でない塩を中間形態として調製し、次いで薬学的に許容できる塩に転化することもできる。このような薬学的に許容可能でない塩もまた、本発明の一部を形成する。
【００４５】
式（Ｉａ）の化合物の調製方法
本発明のジヒドロテトラベナジンは、式（ＩＩ）
【化９】
2011502977.tif 000011
の化合物を、その式（ＩＩ）の化合物中の２，３−二重結合を水和するのに適した１つまたは複数の試薬と反応させ、その後、状況によっては所望のジヒドロテトラベナジン異性体の形態を分離および単離することを含む方法によって調製することができる。
【００４６】
２，３−二重結合の水和は、ジボランまたはボラン−エーテル（例えば、ボラン−テトラヒドロフラン（ＴＨＦ））などのボラン試薬を用いてヒドロホウ素化して中間のアルキルボラン付加体を生み出し、続いてこのアルキルボラン付加体を酸化し、塩基の存在下で加水分解することによって行うことができる。一般にヒドロホウ素化は、エーテル（例えばＴＨＦ）などの無水極性非プロトン性溶媒中で、通常は非高温、例えば室温において行われる。一般にはこのボラン−アルケン付加体を、水酸化アンモニウムまたはアルカリ金属水酸化物、例えば水酸化カリウムまたは水酸化ナトリウムなどの水酸化物イオン源をもたらす塩基の存在下で過酸化水素などの酸化剤で酸化する。プロセスＡのヒドロホウ素化−酸化−加水分解の一連の反応は、一般に２および３位における水素原子がｔｒａｎｓの相対的向きを有するジヒドロテトラベナジン異性体を与える。
【００４７】
式（ＩＩ）の化合物は、テトラベナジンを還元してジヒドロテトラベナジンを生み出し、続いてこのジヒドロテトラベナジンを脱水することによって調製することができる。テトラベナジンの還元は、水素化アルミニウムリチウムなどの水素化アルミニウム試薬か、あるいは水素化ホウ素ナトリウム、水素化ホウ素カリウム、または水素化ホウ素誘導体、例えば水素化トリ−ｓｅｃ−ブチルホウ素リチウムなどの水素化アルキルホウ素などの水素化ホウ素試薬を用いて達成することができる。あるいは、この還元のステップは、例えばラネーニッケルまたは酸化白金触媒上での接触水素化を用いて行うことができる。この還元のステップを行うための好適な条件は、下記でより詳細に述べ、または米国特許第２，８４３，５９１号明細書（Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ  Ｒｏｃｈｅ）およびＢｒｏｓｓｉらの論文、Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ，ｖｏｌ．ＸＬＩ，Ｎｏ．１９３，ｐｐ１７９３〜１８０６（１９５８）中に見出すことができる。
【００４８】
この還元反応の出発材料として使用されるテトラベナジンは、一般にはＲＲおよびＳＳ異性体の混合物（すなわちｔｒａｎｓ−テトラベナジン）であるため、還元のステップによって形成されるジヒドロテトラベナジンは、３および１１ｂ位に関して同一の立体配置を有することになり、また上記図３に示した既知のジヒドロテトラベナジン異性体の１つまたは複数の形態を取ることになる。したがってこのプロセスは、ジヒドロテトラベナジンの既知の異性体を得ること、それらを脱水してアルケン（ＩＩ）を形成すること、次いで必要な本発明のｃｉｓジヒドロテトラベナジン異性体を生み出す条件を用いてこのアルケン（ＩＩ）を「再水和すること」を伴うことができる。
【００４９】
アルケン（ＩＩ）へのジヒドロテトラベナジンの脱水は、アルコールを脱水してアルケンを形成するための様々な標準的条件を用いて行うことができ、例えばＪ．Ｍａｒｃｈ（同上）ｐａｇｅｓ  ３８９〜３９０、およびその中の参考文献を参照されたい。このような条件の例には、ハロゲン化リンまたはオキシハロゲン化リンなどのリン系脱水剤、例えばＰＯＣｌ３およびＰＣｌ５の使用が挙げられる。直接脱水に代わるものとして、ジヒドロテトラベナジンのヒドロキシル基をハロゲン（例えば、塩素または臭素）などの脱離基Ｌに転換し、次いでＨ−Ｌを取り除くための条件（例えば、塩基の存在）にかけることができる。ヒドロキシル基のハロゲン化物への転換は、当業化学者によく知られている方法を用いて、例えばトリフェニルホスフィンまたはトリブチルホスフィンなどのトリアルキルまたはトリアリールホスフィンの存在下で四塩化炭素または四臭化炭素と反応させることによって達成することができる。
【００５０】
ジヒドロテトラベナジンを得るための還元用の出発材料として使用されるテトラベナジンは商業的に得ることができ、または米国特許第２，８３０，９９３号明細書（Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ  Ｒｏｃｈｅ）に記載の方法によって合成することができる。
【００５１】
上記プロセス用の出発材料が鏡像異性体の混合物である場合、それらプロセスの生成物は、一般には鏡像異性体の対、例えばラセミ混合物と、場合によりジアステレオマー不純物であるはずである。不要なジアステレオマーは、クロマトグラフィー（例えばＨＰＬＣ）などの手法によって除去することができ、また個々の鏡像異性体は、当業化学者に知られている様々な方法によって分離することができる。例えばそれらは、
（ｉ）キラルクロマトグラフィー（キラル支持体上でのクロマトグラフィー）によって、または
（ｉｉ）光学的に純粋なキラル酸で塩を形成し、それら２種類のジアステレオマーの塩を分別晶出により分離し、次いでその塩からジヒドロテトラベナジンを解放することによって、または
（ｉｉｉ）光学的に純粋なキラル誘導体化剤（例えばエステル化剤）で誘導体（エステルなど）を形成し、得られたエピマーを分離（例えばクロマトグラフィーによって）し、次いでその誘導体をジヒドロテトラベナジンに転化することによって
分離することができる。
【００５２】
プロセスで得られた鏡像異性体の対を分離する、特に効果的であることが分かっている一つの方法は、ジヒドロテトラベナジンのヒドロキシル基をモッシャー酸の光学活性型、例えば下記に示すＲ（＋）異性体、
【化１０】
2011502977.tif 000012
またはその活性型によりエステル化することである。
【００５３】
次いでジヒドロベナジンの２つの鏡像異性体の得られたエステルを、クロマトグラフィー（例えばＨＰＬＣ）によって分離し、これら分離したエステルを、例えばメタノールなどの極性溶媒に溶かしたアルカリ金属水酸化物（例えばＮａＯＨ）などの塩基を用いて加水分解して個々のジヒドロベナジン異性体を得ることができる。
【００５４】
このプロセスにおいて出発材料として鏡像異性体の混合物を使用し、次に続いてこれら鏡像異性体の分離を行うことに対する代替案として、このプロセスを、ただ一種類の鏡像異性体が優位を占める生成物に導く単一鏡像異性体出発材料に関してそれぞれ行うことができる。このアルケン（ＩＩ）の単一鏡像異性体は、ＲＲ／ＳＳテトラベナジンを、水素化トリ−ｓｅｃ−ブチルホウ素リチウムを用いる立体選択的還元にかけて、ジヒドロテトラベナジンのＳＲＲおよびＲＳＳ鏡像異性体の混合物を生み出し、これら鏡像異性体を分離（例えば、分別晶出により）し、次いで分離されたジヒドロテトラベナジンの単一鏡像異性体を脱水して、式（ＩＩ）の化合物の単一鏡像異性体を主にまたは排他的に得ることによって調製することができる。
【００５５】
このプロセスを、下記スキーム１においてより詳細に例示する。
【化１１】
2011502977.tif 000013
【００５６】
スキーム１は、２および３位に結合している水素原子がｔｒａｎｓの相対的向きに配置された２Ｓ，３Ｓ，１１ｂＲおよび２Ｒ，３Ｒ，１１ｂＳ立体配置を有する個々のジヒドロテトラベナジン異性体の調製について例示する。
【００５７】
スキーム１における一連の反応の起点は、テトラベナジンのＲＲおよびＳＳ光学異性体のラセミ混合物である市販のテトラベナジン（ＩＶ）である。これらＲＲおよびＳＳ異性体のそれぞれにおいて、３および１１ｂ位における水素原子は、ｔｒａｎｓの相対的向きに配置されている。市販の化合物使用の代替案として、テトラベナジンを、米国特許第２，８３０，９９３号明細書に記載の手順に従って合成することができる（具体的には実施例１１参照）。
【００５８】
ＲＲおよびＳＳテトラベナジンのラセミ混合物を、水素化ホウ素還元剤である水素化トリ−ｓｅｃ−ブチルホウ素リチウム（「Ｌ−Ｓｅｌｅｃｔｒｉｄｅ」）を用いて還元して、ジヒドロテトラベナジンの既知の２Ｓ，３Ｒ，１１ｂＲおよび２Ｒ，３Ｓ，１１ｂＳ異性体の混合物（Ｖ）を得る。ここでは簡単にするために２Ｓ，３Ｒ，１１ｂＲ異性体のみを示している。水素化ホウ素ナトリウムでなく、水素化ホウ素還元剤としてより立体的要求の厳しい（ｓｔｅｒｉｃａｌｌｙ  ｄｅｍａｎｄｉｎｇ）Ｌ−Ｓｅｌｅｃｔｒｉｄｅを使用することによって、ジヒドロテトラベナジンのＲＲＲおよびＳＳＳ異性体の形成は、最小限にされまたは抑制される。
【００５９】
ジヒドロテトラベナジン異性体（Ｖ）を、塩素化炭化水素（例えばクロロホルムまたはジクロロメタン、好ましくはジクロロメタン）などの非プロトン性溶媒中で五塩化リンなどの脱水剤と反応させて、不飽和化合物（ＩＩ）を一対の鏡像異性体として形成する。スキーム中にはそのＲ−鏡像異性体のみを示す。この脱水反応は、室温より低い温度、例えば約０〜５℃で一般には行われる。
【００６０】
次いでこの不飽和化合物（ＩＩ）を立体選択的再水和にかけて、ジヒドロテトラベナジン（ＶＩ）と、３および１１ｂ位の水素原子がｃｉｓの相対的向きに配置され、かつ２および３位の水素原子がｔｒａｎｓの相対的向きに配置されているその鏡像すなわち対掌体（図示せず）とを生み出す。立体選択的再水和は、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中でボラン−ＴＨＦを用いて中間ボラン錯体（図示せず）を形成し、次いでそれを水酸化ナトリウムなどの塩基の存在下で過酸化水素で酸化する、ヒドロホウ素化手順によって達成することができる。
【００６１】
次いで最初の精製のステップ（例えばＨＰＬＣによる）を行って、２Ｓ，３Ｓ，１１ｂＲおよび２Ｒ，３Ｒ，１１ｂＳ異性体の混合物（スキーム中には２Ｓ，３Ｓ，１１ｂＲ異性体のみを図示する）として再水和反応シーケンスの生成物（Ｖ）を得ることができる。これら異性体を分離するには、この混合物を、ジクロロメタンに溶かした塩化オキサリルおよびジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）の存在下でＲ（＋）モッシャー酸で処理して一対のジアステレオ異性体エステル（ＶＩＩ）（その一方のジアステレオ異性体のみを図示する）を生み出し、次いでＨＰＬＣを用いて分離することができる。次いで水酸化ナトリウムなどのアルカリ金属水酸化物を用いて個々のエステルを加水分解して、単一異性体（ＶＩ）を得ることができる。
【００６２】
スキーム１に示した一連のステップの変形形態では、ＲＲ／ＳＳテトラベナジンの還元の後に、得られたジヒドロテトラベナジンの鏡像異性体の混合物（Ｖ）を分離して個々の鏡像異性体を得ることができる。分離は、（＋）または（−）カンファースルホン酸などのキラル酸と塩を形成し、得られるジアステレオ異性体を分別晶出によって分離して単一鏡像異性体の塩を生み出し、次いでその塩から遊離塩基を放出させることによって行うことができる。
【００６３】
この分離したジヒドロテトラベナジン鏡像異性体を脱水してアルケン（ＩＩ）の単一鏡像異性体を得ることができる。次いでアルケン（ＩＩ）の後続の再水和によりｃｉｓ−ジヒドロテトラベナジン（ＶＩ）の単一鏡像異性体が、主にまたは排他的に得られるはずである。この変形形態の利点は、モッシャー酸エステルの形成を伴わず、したがってモッシャー酸エステルを分離するために一般に使用されるクロマトグラフ分離を避けることである。
【００６４】
生物学的特性および治療的使用
式（Ｉａ）の化合物は、多発性硬化症の実験的自己免疫性脳脊髄炎モデルにおいて試験されてきており、ステロイド類による治療によってもたらされるレベルと類似の保護レベルを与えることが分かっている。この証拠に基づいて式（Ｉａ）の化合物が、ヒトにおける多発性硬化症の治療に役立つはずであるということが予見される。
【００６５】
多発性硬化症の文脈において本明細書中で使用される用語「治療する」および「治療」には、下記のいずれか１つまたは複数が含まれる。すなわち
・この疾患の進行を止めること、
・この疾患の進行を遅らせること、
・この疾患の進行を変えること、
・症状の緩和を、例えば１つまたは複数の症状の重篤度を除去または軽減することによって実現すること、
・寛解の期間を延ばすこと、
・再発を防ぐこと、
・再発の重篤度を低下すること、および
・ＭＳの再発−寛解の最初の期間から二次進行性ＭＳまでの進行を防ぐか、または遅らせること。
【００６６】
本発明により重篤度を除去または軽減することができる多発性硬化症の症状には、下記から選択されるいずれか１つの症状、または任意の組合せの複数の症状が含まれる。すなわち
・１つまたは複数の四肢の衰弱および／またはしびれ感、
・四肢の疼き、
・躯幹または手足の周りのきつく縛られたような感覚、
・１つまたは複数の四肢の振戦、
・片脚または両脚の引きずり歩行または制御不全、
・痙攣性または失調性不全対麻痺、
・１つまたは複数の四肢の麻痺、
・腱反射機能亢進、
・腹壁反射消失、
・レルミット徴候、
・球後視神経炎または視神経炎、
・歩行不安定、
・平衡障害、
・筋疲労の増加、
・脳幹症候群（複視、めまい、嘔吐）、
・排尿障害、
・片麻痺、
・三叉神経痛、
・他の疼痛症候群、
・眼振および運動失調、
・小脳型運動失調症、
・シャルコー３徴候−複視、
・両側核間性眼筋麻痺、
・顔面筋のミオキミアまたは麻痺、
・難聴、
・耳鳴り、
・無構造性幻聴（ｕｎｆｏｒｍｅｄ  ａｕｄｉｔｏｒｙ  ｈａｌｌｕｃｉｎａｔｉｏｎｓ）（蝸牛連結部の障害が原因の）、
・一過性顔面知覚麻痺または三叉神経痛のもの、
・尿および／または便失禁、
・膀胱機能障害による多幸症（ｂｌａｄｄｅｒ  ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｅｕｐｈｏｒｉａ）、
・抑鬱、
・倦怠感、
・痴呆、
・腰部の鈍い疼痛、
・手足の激しい、灼けつく、局在のはっきりしない痛み、
・神経学的欠損の突然の発作、
・構音障害および運動失調、
・手足の発作性の痛みおよび異常錯覚感、
・閃光、
・発作性の痒み、
・強直発作、
・感覚の変化、
・視覚障害、
・筋衰弱、
・協調および言語困難、
・認識機能障害、
・高熱、および
・体動および無力障害。
【００６７】
この化合物は、再発の可能性または重症度を阻止または低減するために寛解の期間中に予防的な意味で使用することができ、または再発に苦しむ患者の治療に使用することができる。好ましくはそれは予防的な意味で使用される。
【００６８】
式（Ｉａ）の化合物は、一般にそのような投与を必要とする被検体、例えばヒトの患者に投与されることになる。
【００６９】
この化合物は、治療または予防に役立ち、かつ通常は非毒性である量が一般には投与されることになる。しかしながら、状況によっては、本発明のジヒドロテトラベナジン化合物を投与する利益は、いかなる毒作用または副作用の不利点よりも勝ることもあり、この場合には、ある程度の毒性と関係がある量の化合物を投与することが望ましいと考えられる。
【００７０】
この化合物の一般的な１日量は、１日につき１０００ｍｇまで、例えば体重１キログラム当たり０．０１ミリグラムから１０ミリグラム、より一般的には体重１キログラム当たり０．０２５ミリグラムから５ミリグラムの範囲、例えば体重１キログラム当たり３ミリグラムまで、また状況によってはより高いまたはより低い用量を投与することもできるが、より一般的には体重１キログラム当たり０．１５ミリグラムから５ミリグラムであることができる。
【００７１】
例として１２．５ｍｇの初期出発用量を、１日につき２から３回投与することができる。この用量は、医師によって決められるその個体に対する最大許容かつ有効用量に達するまで３から５日ごとに１日当たり１２．５ｍｇまで増量することができる。最終的には投与される化合物の量は、その治療される疾患または生理的状態の性質、その治療の利益、および与えられる投薬計画によって生ずる副作用の有無に相応するはずであり、それは医師の自由裁量であることになる。
【００７２】
式（Ｉａ）の化合物またはその薬学的に許容できる塩は、唯一の治療薬として使用することもでき、または他の治療薬、例えばステロイド類またはインターフェロンと共に使用することもできる。
【００７３】
本発明の一つの一般的な実施形態では、式（Ｉａ）の化合物またはその薬学的に許容できる塩が、唯一の治療薬として用いられる。
【００７４】
医薬製剤
式（Ｉａ）の化合物またはその薬学的に許容できる塩は、一般には医薬組成物の形態で投与される。
【００７５】
それら医薬組成物は、経口、非経口、局所、鼻腔内、気管支内、眼、耳、直腸、膣内、または経皮的投与に適した任意の形態であることができる。これら組成物が非経口投与用である場合、それらを静脈内、筋内、腹膜内、皮下投与用に、または注射、輸液、または他の送達手段による標的器官または組織中への直接送達用に製剤化することができる。
【００７６】
経口投与に適した医薬剤形には、錠剤、カプセル剤、キャプレッツ、丸剤、トローチ剤、シロップ剤、液剤、スプレー、散剤、顆粒剤、エリキシル剤および懸濁剤、舌下錠、スプレー、ウェハースまたはパッチ貼付剤、および頬パッチ貼付剤が挙げられる。
【００７７】
本発明の化合物を含有する医薬組成物は、周知の手法により製剤化することができ、例えばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，ＵＳＡを参照されたい。
【００７８】
したがって、錠剤組成物は、単位用量の活性化合物を、糖または糖アルコールなどの不活性増量剤または担体、例えばラクトース、スクロース、ソルビトール、またはマンニトール、および／あるいは非糖性増量剤、例えば炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、タルク、炭酸カルシウム、またはセルロースもしくはその誘導体、例えばメチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、およびコーンスターチなどのデンプンと共に含有することができる。錠剤はまた、ポリビニルピロリドンなどの結着および造粒剤、崩壊剤（例えば、架橋カルボキシメチルセルロースなどの膨潤性架橋ポリマー）、滑沢剤（例えばステアリン酸塩）、保存剤（例えばパラベン類）、酸化防止剤（例えばＢＨＴ）、緩衝剤（例えば、リン酸またはクエン酸緩衝剤）、およびクエン酸塩／重炭酸塩混合物などの発泡剤などの標準成分を含有することもできる。このような医薬品添加剤はよく知られており、ここで詳細に考察する必要はない。
【００７９】
カプセル製剤は、硬ゼラチンまたは軟ゼラチンの種類のものであることができ、固体、半固体、または液体の形態で有効成分を含有することができる。これらゼラチンカプセルは、動物ゼラチンあるいは合成または植物から得られるその同等品で作ることができる。
【００８０】
固体剤形（例えば、錠剤、カプセル剤など）はコーティングされてもされなくてもよいが、一般には剤皮、例えば保護フィルムコーティング（例えば、ワックスまたはワニス）または溶出制御コーティングを有する。剤皮（例えばＥｕｄｒａｇｉｔ（商標）型ポリマー）は、胃−腸管内の所望の場所で有効成分を放出ように設計することができる。したがって、剤皮は、胃腸管内のある一定のｐＨ条件下で分解し、それによって胃中あるいは回腸または十二指腸中で化合物を選択的に放出するように選ぶことができる。
【００８１】
剤皮の代わりに、またはそれに加えて、この薬物は、溶出制御剤、例えば胃腸管中の様々な酸性またはアルカリ性の条件下で化合物を選択的に放出するようにすることができる溶出遅延剤を含む固体マトリックス中に与えることもできる。あるいは、マトリックス材料または溶出遅延コーティングは、その剤形が胃腸管を通過するにつれて実質上連続的に浸食される浸食性ポリマー（例えば、無水マレイン酸ポリマー）の形態を取ることもできる。
【００８２】
局所使用のための組成物には、軟膏剤、クリーム、スプレー、パッチ貼付剤、ゲル、液滴、および挿入剤（例えば眼内挿入剤）が挙げられる。このような組成物は、周知の方法により製剤化することができる。
【００８３】
非経口投与用の組成物は、一般に滅菌した水性または油性溶液または微細懸濁液として与えるか、または注射用に滅菌水を用いて即席で作り出すための微粒子の滅菌した粉末の形態で提供することができる。
【００８４】
直腸または膣内投与用の製剤の例には、例えば有効化合物を含有する造形された成形可能または蝋様の材料で作ることができる膣座薬または座剤が挙げられる。
【００８５】
吸入による投与用の組成物は、吸入可能な散剤組成物あるいはリキッドまたはパウダースプレーの形態を取ることができ、散剤吸入器またはエアロゾル調剤器を用いる標準的な形態で投与することができる。吸入による投与の場合、粉末製剤は、一般に有効成分ならびにラクトースなどの不活性固体粉末増量剤を含む。
【００８６】
本発明の化合物は、一般には単位投与形態で与えられるはずであり、またこのようなものとして所望レベルの生理学的活性を与えるのに十分な化合物を含有するはずである。例えば経口投与用の製剤は、有効成分を２ミリグラムから２００ミリグラム、より一般的には１０ミリグラムから１００ミリグラム、例えば１２．５ミリグラム、２５ミリグラム、５０ミリグラム含有することができる。
【００８７】
有効化合物は、それを必要とする患者（例えば、ヒトまたは動物の患者）に、所望の治療効果を得るのに十分な量が投与されることになる。
【実施例】
【００８８】
下記の非限定的な実施例は、本発明の化合物の合成および特性について例示する。
【００８９】
実施例１
ジヒドロテトラベナジンの２Ｓ，３Ｓ，１１ｂＲおよび２Ｒ，３Ｒ、１１ｂＳ異性体の調製
１Ａ．ＲＲ／ＳＳテトラベナジンの還元
【化１２】
2011502977.tif 000014
テトラヒドロフランに溶かした１Ｍ  Ｌ−Ｓｅｌｅｃｔｒｉｄｅ（登録商標）（１３５ｍｌ、１３５ｍｍｏｌ、２．８７当量）を、０℃でエタノール（７５ｍｌ）およびテトラヒドロフラン（７５ｍｌ）に溶かしたテトラベナジンＲＲ／ＳＳラセミ化合物（１５ｇ、４７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に３０分間かけてゆっくり加えた。添加が完了した後、混合物を０℃で３０分間撹拌し、次いで放置して室温まで温めた。
【００９０】
この混合物を砕いた氷（３００ｇ）の上に注ぎ、水（１００ｍｌ）を加えた。この溶液をジエチルエーテルで抽出（２×２００ｍｌ）し、一緒にしたエーテル性抽出物を水（１００ｍｌ）で洗浄し、無水炭酸カリウムで部分乾燥した。無水硫酸マグネシウムを用いて完全に乾燥し、濾過の後、溶媒を減圧において除去（光から保護、浴温＜２０℃）して黄白色の固体を得た。
【００９１】
この固体を石油エーテルでスラリー化（３０〜４０℃）し、濾過して白色の粉末状固体を得た（１２ｇ、８０％）。
【００９２】
１Ｂ．還元テトラベナジンの脱水
【化１３】
2011502977.tif 000015
０℃でジクロロメタン（２００ｍｌ）に溶かした実施例１Ａからの還元テトラベナジン生成物（２０ｇ、６２．７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、五塩化リン（３２．８ｇ、１５７．５ｍｍｏｌ、２．５当量）を３０分間かけて少しずつ加えた。添加が完了した後、反応混合物を０℃でさらに３０分間撹拌し、その溶液を、砕いた氷を含む２Ｍ炭酸ナトリウム水溶液（０℃）中にゆっくり注いだ。いったん最初の酸性気体の放出が終わったら、固体炭酸ナトリウムを用いて混合物を塩基性化（約ｐＨ１２）した。
【００９３】
このアルカリ性溶液を、酢酸エチル（８００ｍｌ）を用いて抽出し、一緒にした有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。濾過後、溶媒を減圧において除去して褐色の油を得た。これをカラムクロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル）により精製して半純粋のアルケンを黄色の固体として得た（１０．８７ｇ、５８％）。
【００９４】
１Ｃ．実施例１Ｂからの粗アルケンの水和
【化１４】
2011502977.tif 000016
室温で無水ＴＨＦ（５２ｍｌ）に溶かした実施例１Ｂからの粗アルケン（１０．８７ｇ、３６．１１ｍｍｏｌ）の溶液を、一滴ずつ加えた１Ｍボラン−ＴＨＦ（１５５．６ｍｌ、１５５．６ｍｍｏｌ、４．３０当量）で処理した。この反応物を２時間撹拌し、水（２０ｍｌ）を加え、その溶液を３０％水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ１２まで塩基性化した。
【００９５】
この撹拌アルカリ性反応混合物に３０％過酸化水素水溶液（３０ｍｌ）を加え、その溶液を加熱して１時間還流させてから放置して冷却した。水（１００ｍｌ）を加え、その混合物を酢酸エチルで抽出した（３×２５０ｍｌ）。有機抽出物を一緒にし、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過の後、溶媒を減圧において除去して黄色の油を得た（９ｇ）。
【００９６】
この油を、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｌｉｃｈｒｏｓｐｈｅｒ  Ｓｉ６０、５μｍ、２５０×２１．２０ｍｍ、移動相：ヘキサン：エタノール：ジクロロメタン（８５：１５：５）、ＵＶ  ２５４ｎｍ、流量：１０ｍｌ／分−１）を用いて注入量３５０ｍｇで精製し、続いて真空下で対象画分を濃縮した。次いで生成油をエーテルに溶解し、真空下でもう一度濃縮して、上記に示したジヒドロテトラベナジンラセミ化合物を黄色の泡として得た（５．７６ｇ、５０％）。
【００９７】
１Ｄ．モッシャーエステル誘導体の調製
【化１５】
2011502977.tif 000017
Ｒ−（＋）−α−メトキシ−α−トリフルオロメチルフェニル酢酸（５ｇ、２１．３５ｍｍｏｌ）、塩化オキサリル（２．０２ｍｌ）、およびＤＭＦ（０．１６ｍｌ）を無水ジクロロメタン（５０ｍｌ）に加え、その溶液を室温で４５分間撹拌した。この溶液を減圧下で濃縮し、残渣を無水ジクロロメタン（５０ｍｌ）中にもう一度溶解した。得られた溶液を、氷−水浴を用いて冷却し、それにジメチルアミノピリジン（３．８３ｇ、３１．３４ｍｍｏｌ）、続いて無水ジクロロメタンに溶かした実施例１Ｃの固体生成物（５ｇ、１５．６ｍｍｏｌ）の予備乾燥溶液（４Å篩で）を加えた。室温で４５分間撹拌した後、水（２３４ｍｌ）を加え、混合物をエーテルで抽出した（２×２００ｍｌ）。エーテル抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、シリカのパッドを通過させ、その生成物を、エーテルを用いて溶出した。
【００９８】
回収したエーテル溶出液を減圧下で濃縮して油を得た。これをカラムクロマトグラフィー（シリカ、ヘキサン：エーテル（１０：１））を用いて精製した。回収した対象カラム画分の蒸発および減圧下での溶媒除去により固形物が得られ、これをカラムクロマトグラフィー（シリカ、ヘキサン：酢酸エチル（１：１））を用いてさらに精製して３種類の主要成分を得た。これらをモッシャーエステルピーク１および２に部分分割した。
【００９９】
これら３成分のローディング３００ｍｇでの分取ＨＰＬＣ（カラム：２×Ｌｉｃｈｒｏｓｐｈｅｒ  Ｓｉ６０、５μｍ、２５０×２１．２０ｍｍ、移動相：ヘキサン：イソプロパノール（９７：３）、ＵＶ  ２５４ｎｍ、流量：１０ｍｌ／分−１）、続いて真空下における対象画分の濃縮により、純粋なモッシャーエステル誘導体
ピーク１（３．８９ｇ、４６．５％）
ピーク２（２．７８ｇ、３３％）
を得た。
【０１００】
これら２つのピークに対応する画分を加水分解にかけて、異性体ＡおよびＢとして同定され特徴づけられる個々のジヒドロテトラベナジン異性体を遊離させた。異性体ＡおよびＢは、それぞれ下記の構造
【化１６】
2011502977.tif 000018
の一つを有すると考えられる。
【０１０１】
より具体的には異性体Ｂは、下記実施例４で述べるＸ線結晶学的実験に基づく２Ｓ，３Ｓ，１１ｂＲ絶対配置を有すると考えられる。
【０１０２】
１Ｅ．異性体Ａを得るためのピーク１の加水分解
メタノール（２６０ｍｌ）に溶かしたモッシャーエステルピーク１（３．８９ｇ、７．２７ｍｍｏｌ）の溶液に２０％水酸化ナトリウム水溶液（８７．５ｍｌ）を加え、混合物を撹拌し加熱して１５０分間還流させた。室温に冷却後、水（２００ｍｌ）を加え、その溶液をエーテル（６００ｍｌ）で抽出し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過の後、減圧下で濃縮した。
【０１０３】
その残渣を酢酸エチル（２００ｍｌ）を用いて溶解し、溶液を水で洗浄（２×５０ｍｌ）し、有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過の後、減圧下で濃縮して黄色の泡を得た。この材料を、カラムクロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル：ヘキサン（１：１）から酢酸エチルまでの傾斜溶離）によって精製した。対象画分を一緒にし、溶媒を減圧下で除去した。残渣をエーテル中に溶解し、溶媒を減圧下でもう一度除去して異性体Ａを灰色がかった白色の泡として得た（１．１ｇ、４７％）。
【０１０４】
２Ｒ，３Ｒ，１１ｂＳ配置を有すると考えられる（絶対立体化学的性質は測定しなかった）異性体Ａは、１Ｈ−ＮＭＲ、１３Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ、質量分析、キラルＨＰＬＣ、およびＯＲＤによって特徴づけられる。異性体ＡのＩＲ、ＮＭＲ、およびＭＳのデータを表１に述べ、またキラルＨＰＬＣおよびＯＲＤのデータを表３に述べる。
【０１０５】
１Ｆ．ピーク２の加水分解による異性体Ｂの獲得
メタノール（１８５ｍｌ）に溶かしたモッシャーエステルピーク２（２．７８ｇ、５．１９ｍｍｏｌ）の溶液に２０％水酸化ナトリウム水溶液（６２．５ｍｌ）を加え、混合物を撹拌し加熱して１５０分間還流させた。室温に冷却後、水（１４２ｍｌ）を加え、その溶液をエーテル（４４０ｍｌ）で抽出し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過の後、減圧下で濃縮した。
【０１０６】
その残渣を酢酸エチル（２００ｍｌ）を用いて溶解し、溶液を水で洗浄（２×５０ｍｌ）し、有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過の後、減圧下で濃縮した。この残渣に石油エーテル（３０〜４０℃）を加え、その溶液をもう一度真空下で濃縮して異性体Ｂを白色の泡として得た（１．３４ｇ、８１％）。
【０１０７】
２Ｓ，３Ｓ，１１ｂＲ配置を有すると考えられる異性体Ｂは、１Ｈ−ＮＭＲ、１３Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ、質量分析、キラルＨＰＬＣ、ＯＲＤ、およびＸ線結晶学によって特徴づけられる。異性体ＢのＩＲ、ＮＭＲ、およびＭＳのデータを表１に述べ、またキラルＨＰＬＣおよびＯＲＤのデータを表２に述べる。Ｘ線結晶学データは、実施例３で述べる。
【０１０８】
表１において赤外スペクトルは、ＫＢｒ錠剤法を用いて測定した。１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、Ｖａｒｉａｎ  Ｇｅｍｉｎｉ  ＮＭＲ分光計（２００ＭＨｚ）を用いて重水素化クロロホルムに溶かした溶液に関して行った。１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルは、Ｖａｒｉａｎ  Ｇｅｍｉｎｉ  ＮＭＲ分光計（５０ＭＨｚ）を用いて重水素化クロロホルムに溶かした溶液に関して行った。質量スペクトルは、Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  Ｐｌａｔｆｏｒｍ  ＩＩ（ＥＳ＋条件）分光計を用いて得た。表２において旋光分散（Ｏｐｔｉｃａｌ  Ｒｏｔａｔｏｒｙ  Ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ）の形は、メタノール溶液中で２４℃においてＯｐｔｉｃａｌ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ＰｏｌＡＡｒ  ２００１計測器を用いて得た。ＨＰＬＣ保持時間の測定は、ＵＶ検出によるＨＰ１０５０  ＨＰＬＣクロマトグラフを使用して行った。
【０１０９】
【表１】
2011502977.tif 000019
【０１１０】
【表２】
2011502977.tif 000020
【０１１１】
実施例２
異性体Ｂの調製およびメシレート塩の調製の代替方法
２Ａ．ＲＲ／ＳＳテトラベナジンの還元
【化１７】
2011502977.tif 000021
テトラヒドロフランに溶かした１Ｍ  Ｌ−Ｓｅｌｅｃｔｒｉｄｅ（登録商標）（５２ｍｌ、５２ｍｍｏｌ、１．１当量）を、テトラヒドロフラン（５６ｍｌ）に溶かしたテトラベナジンラセミ化合物（１５ｇ、４７ｍｍｏｌ）の冷却（氷浴）した撹拌溶液に３０分間かけてゆっくり加えた。添加が完了した後、混合物を放置して室温まで温め、さらに６時間撹拌した。ＴＬＣ分析（シリカ、酢酸エチル）によれば、出発材料はきわめて少量しか残留していないことを示した。
【０１１２】
この混合物を、砕いた氷（１１２ｇ）、水（５６ｍｌ）、および氷酢酸（１２．２ｇ）の撹拌混合物上に注いだ。得られた黄色溶液をエーテルで洗浄（２×５０ｍｌ）し、固体炭酸ナトリウム（約１３ｇ）をゆっくり加えることによって塩基化した。この混合物に石油エーテル（３０〜４０℃）（５６ｍｌ）を撹拌しながら加え、粗β−ＤＨＴＢＺを濾過により白色固体として回収した。
【０１１３】
この粗固形物をジクロロメタン（約１５０ｍｌ）に溶解し、得られた溶液を水（４０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムを用いて乾燥し、濾過し、減圧において約４０ｍｌまで濃縮した。白色固形物の濃厚懸濁液が形成された。石油エーテル（３０〜４０℃）（５６ｍｌ）を加え、その懸濁液を実験室温度において１５分間撹拌した。生成物を濾過により回収し、石油エーテル（３０〜４０℃）（４０〜６０ｍｌ）を用いて純白になるまでフィルター上で洗浄してから室温で空気乾燥してβ−ＤＨＴＢＺを白色固体として得た（１０．１ｇ、６７％）。ＴＬＣ分析（シリカ、酢酸エチル）は１成分のみを示した。
【０１１４】
２Ｂ．ラセミβ−ＤＨＴＢＺのカンファースルホン酸塩の調製および分別晶出
実施例３Ａの生成物および１当量の（Ｓ）−（＋）−カンファー−１０−スルホン酸を、加熱しながら最少量のメタノールに溶解した。得られた溶液を放置して冷却し、次いで得られる固体沈殿物の形成が完了するまでエーテルでゆっくり希釈した。得られた白色結晶性固体を濾過により回収し、エーテルで洗浄してから乾燥した。
【０１１５】
カンファースルホン酸塩（１０ｇ）を、熱した無水エタノール（１７０ｍｌ）とメタノール（３０ｍｌ）の混合物中に溶解した。得られた溶液を撹拌し、放置して冷却した。２時間後、形成された沈殿物を濾過により白色結晶性固体として回収した（２．９ｇ）。この結晶性材料の試料を、分液漏斗中で過剰な飽和炭酸ナトリウム水溶液およびジクロロメタンと共に振とうした。有機相を分離し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧において濃縮した。その残渣を石油エーテル（３０〜４０℃）を用いて滴定し、有機溶液をもう一度濃縮した。Ｃｈｉｒｅｘ（Ｓ）−ＶＡＬおよび（Ｒ）−ＮＥＡ  ２５０×４．６ｍｍカラムと、流量１ｍｌ／分のヘキサン：エタノール（９８：２）溶離液とを用いたその塩のキラルＨＰＬＣ分析は、単離されたβ−ＤＨＴＢＺが一方の鏡像異性体に富む（ｅ．ｅ．約８０％）ことを示した。
【０１１６】
この濃縮カンファースルホン酸塩（１４ｇ）を加熱乾燥エタノール（１４０ｍｌ）に溶解し、プロパン−２−オール（４２０ｍｌ）を加えた。得られた溶液を撹拌すると１分以内に沈殿物を形成し始めた。この混合物を放置して室温まで冷却し、１時間撹拌した。形成された沈殿物を濾過により回収し、エーテルで洗浄し、乾燥して白色結晶性固体を得た（１２ｇ）。
【０１１７】
この結晶性材料を、分液漏斗中で過剰な飽和炭酸ナトリウム水溶液およびジクロロメタンと共に振とうした。有機相を分離し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧において濃縮した。その残渣を石油エーテル（３０〜４０℃）を用いて滴定し、有機溶液をもう一度濃縮して（＋）−β−ＤＨＴＢＺ（６．６ｇ、ＯＲＤ＋１０７．８度）を得た（真空中で乾燥後）。単離した鏡像異性体は、ｅ．ｅ．＞９７％を有する。
【０１１８】
２Ｃ．異性体Ｂの調製
ジクロロメタン（９０ｍｌ）に溶かした実施例３Ｂの生成物（６．６ｇ、２０．６ｍｍｏｌ）の撹拌した冷却（氷−水浴）溶液に、ジクロロメタン（５５ｍｌ）に溶かした五塩化リン（４．５ｇ、２１．６ｍｍｏｌ、１．０５当量）の溶液を１０分間かけて徐々に加えた。添加が完了したら、その得られた黄色溶液をさらに１０分間撹拌してから、水（９０ｍｌ）および砕いた氷（９０ｇ）の中に溶かした炭酸ナトリウム（１５ｇ）の急速撹拌混合物上に注いだ。この混合物をさらに１０分間撹拌し、分液漏斗に移した。
【０１１９】
いったん相が分離したら、褐色のジクロロメタン相を取り出し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧において濃縮して粗アルケン中間体を褐色の油として得た（約６．７ｇ）。ＴＬＣ分析（シリカ、酢酸エチル）は、（＋）−β−ＤＨＴＢＺが粗生成物中に少しも残っていないことを示した。
【０１２０】
この粗アルケンを無水テトラヒドロフラン（４０ｍｌ）中に溶解（乾燥窒素雰囲気）し、ＴＨＦに溶かしたボラン溶液（１Ｍ溶液、２．５当量、５２ｍｌ）を撹拌しながら１５分間かけて加えた。次いで反応混合物を室温で２時間撹拌した。ＴＬＣ分析（シリカ、酢酸エチル）は、アルケン中間体が反応混合物中に少しも残っていないことを示した。
【０１２１】
この撹拌している反応混合物に、水（１０ｍｌ）に溶かした水酸化ナトリウム（３．７ｇ）の溶液、続いて過酸化水素水溶液（５０％、約７ｍｌ）を加え、形成される２相混合物を還流状態で１時間撹拌した。この時点での有機相のＴＬＣ分析（シリカ、酢酸エチル）は、異性体Ｂに対して予想されるようなＲｆを有する生成物の様相を示した。特徴のある非極性成分もまた見られた。
【０１２２】
この反応混合物を放置して冷却し、分液漏斗に注いだ。上側の有機相を取り出し、減圧下で濃縮して大部分のＴＨＦを除去した。残渣をエーテル（安定化（ＢＨＴ）、７５ｍｌ）中に溶解し、水（４０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して黄白色の油を得た（８．１ｇ）。
【０１２３】
この黄色の油を、カラムクロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチルを１００％まで増加する酢酸エチル：ヘキサン（８０：２０））を用いて精製し、所望のカラム画分を回収し、それらを一緒にし、減圧において濃縮して青白い油を得た。これをエーテル（安定化、１８ｍｌ）で処理し、減圧において濃縮して異性体Ｂを黄白色の固い泡として得た（２．２ｇ）。
【０１２４】
実施例２Ｂにおいて述べた条件を用いたキラルＨＰＬＣにより、異性体Ｂが９７％を超える鏡像体余剰（ｅ．ｅ．）で生成されていることが確認された。
【０１２５】
旋光を、Ｂｅｌｌｉｎｇｈａｍ  Ｓｔａｎｌｅｙ  ＡＤＰ２２０旋光計を用いて測定し、＋１２３．５度の［αＤ］を得た。
【０１２６】
２Ｄ．異性体Ｂのメシレート塩の調製
実施例３Ｃからの異性体Ｂの１当量とメタンスルホン酸の１当量との混合物を最少量のエタノールに溶解し、次いでジエチルエーテルを加えることによって異性体Ｂのメタンスルホン酸塩を調製した。結果としての形を成した白色沈殿物を濾過により回収し、真空中で乾燥して、収率約８５％および純度（ＨＰＬＣによる）約９６％でメシレート塩を得た。
【０１２７】
実施例３
異性体Ｂに関するＸ線結晶学的検討
異性体Ｂの（Ｓ）−（＋）−カンファー−１０−スルホン酸塩を調製し、単結晶を下記の条件下でＸ線結晶学的に検討した。すなわち
【０１２８】
回折計：Ｎｏｎｉｕｓ  ＫａｐｐａＣＣＤ面積検出器（不斉単位に応じたｔ／ｉスキャンおよびＯＪスキャン）。
【０１２９】
胞の決定：ＤｉｒＡｘ（Ｄｕｉｓｅｎｂｅｒｇ，Ａ．Ｊ．Ｍ．の論文（１９９２）Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｃｒｙｓｔ．２５，９２〜９６）
【０１３０】
データ収集：Ｃｏｌｌｅｃｔ（Ｃｏｌｌｅｃｔ：Ｄａｔａ  ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｒ．Ｈｏｏｆｔ，Ｎｏｎｉｕｓ  Ｂ．Ｖ，１９９８）
【０１３１】
データの要約および胞の精密化：Ｄｅｍｏ（Ｚ．Ｏｔｗｉｎｏｗｓｋｉ  ＆  Ｗ．Ｍｉｎｏｒ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ（１９９７）Ｖｏｌ．２７６：Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒａｐｈｙ，ｐａｒｔ  Ａ，ｐｐ．３０７〜３２６；Ｃ．Ｗ．Ｃａｒｔｅｒ，Ｊｒ  ＆  Ｒ．Ｍ．Ｓｗｅｅｔ，Ｅｄｓ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ）。
【０１３２】
吸収補正：Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ，Ｇ．Ｍ．ＳＡＤＡＢＳ−Ｂｒｕｋｅｒ  Ｎｏｎｉｕｓ面積検出器  スケーリングおよび吸収補正−Ｖ２．＼０
【０１３３】
構造解析：ＳＨＥＬＸＳ９７（Ｇ．Ｍ．Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ，Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔ．（１９９０）Ａ４６  ４６７〜４７３）
構造精密化：ＳＨＥＬＸＳ９７（Ｇ．Ｍ．Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ（１９９７）、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｇｏｅｔｔｉｎｇｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）
【０１３４】
画像：Ｃａｍｅｒｏｎ−Ａ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｇｒａｐｈｉｃｓ  Ｐａｃｋａｇｅ（Ｄ．Ｍ．Ｗａｔｋｉｎ，Ｌ．Ｐｅａｒｃｅ  ａｎｄ  Ｃ．Ｋ．Ｐｒｏｕｔ，Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒａｐｈｙ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｏｘｆｏｒｄ，１９９３）
【０１３５】
特別項目：全ての水素原子は理想的位置に配置され、また全ての水素原子は、ディファレンスマップ中にあり、また拘束（ｒｅｓｔｒａｉｎｔｓ）を用いて精密化されたＮＨおよびＯＨのそれを除いてはライディングモデルを用いて精密化された。キラリティー：ＮＩ＝Ｒ、ＣＩ２＝Ｓ、ＣＩ３＝Ｓ、ＣＩ５＝Ｒ、Ｃ２１＝Ｓ、Ｃ２４＝Ｒ
【０１３６】
検討結果は、下記の表Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、およびＥ中で述べる。
【０１３７】
表中でラベルＲＵＳ０３５０は、異性体Ｂを指す。
【０１３８】
【表３】
2011502977.tif 000022
【０１３９】
【表４】
2011502977.tif 000023
【０１４０】
【表５】
2011502977.tif 000024
【０１４１】
【表６】
2011502977.tif 000025
【０１４２】
【表７】
2011502977.tif 000026
【０１４３】
【表８】
2011502977.tif 000027
【０１４４】
【表９】
2011502977.tif 000028
【０１４５】
上記で述べたデータに基づいて異性体Ｂは、式（Ｉａ）
【化１８】
2011502977.tif 000029
に対応する２Ｓ，３Ｓ，１１ｂＲの立体配置を有すると考えられる。
【０１４６】
実施例４
多発性硬化症の実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）モデルにおける式（Ｉａ）の化合物の効力の検討
ＥＡＥを誘発させるために５週齢から８週齢の間の成長した１０匹のＢｉｏｚｚｉマウスの各グループに、完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）に溶かしたマウス脊髄ホモジネート（ＳＣＨ）を脇腹に投与した。処理は下記の計画に従って行った。
【０１４７】
処理（１グループ当たりｎ＝８）
グループＡ−媒体（ｖｅｈｉｃｌｅ）対照
グループＢ−ＲＵ３５０  ３０ｍｇ／ｋｇ、１日目から１０日目まで、１日１回強制経口投与による
グループＣ−ＲＵ３５０  １０ｍｇ／ｋｇ、１日目から１０日目まで、１日２回強制経口投与による
グループＤ−陽性対照薬物
【０１４８】
ＰＢＳに溶かしたＳＣＨの２０ｍｇ／ｍｌ溶液を調製し、ＣＦＡと等容積で混ぜ合わせた。この混合物をＢｒａｎｓｏｎ  １２００ソニケーター中で１５分間音波処理し、次いで３分間ホモジナイズした。１００μｌ中１ｍｇの量を、マウスごとに尾の基部に皮下注射によって投与した。これに加えてマウスに、０．５ｍｌに溶かした２００ｎｇの百日咳毒素を、０日目、さらに４８時間後に腹腔内（ｉｐ）注射によって与えた。
【０１４９】
マウスは、１日目から１０日目まで上記要綱に従って処理された。式（Ｉａ）の化合物（すなわちＲＵＳ３５０）は、６ｍｇ／ｍｌ溶液が得られるように、滅菌蒸留水中に化合物（−２０℃で保存された）１５ｍｇを溶解することによって毎日調製した。グループＢのマウスに対しては、１００μｌの用量が強制経口投与によって毎日与えられた（体重２０ｇのマウス当たり３０ｍｇ／ｋｇに相当する）。グループＣのマウスについては、６ｍｇ／ｋｇ保存液（ｓｔｏｃｋ）の１ｍｌをさらに滅菌蒸留水中で１：３に希釈し、１００μｌの用量を１日２回経口投与した（体重２０ｇのマウス当たり２×１０ｍｇ／ｋｇに相当する）。グループＡ中のマウスについては、蒸留水が媒体対照としての役割を果たした。グループＤのマウスには、３日目〜７日目および１０日目〜１２日目に５ｍｇ／ｋｇの用量のデキサメタゾン（体重２０ｇのマウス当たり１００μｌに溶かした１００μｇ）を与えた。
【０１５０】
瀕死の動物は、英国内務省（Ｈｏｍｅ  Ｏｆｆｉｃｅ）の規定に従って安楽死させ、また残りのすべての動物は、誘発後２８日目に安楽死させた。最後にすべての動物から脳および脊髄を取り、組織病理学検査用に固定した。
【０１５１】
ＥＡＥ誘発の前（０日目）に、次いで５日目から終了まで毎日、マウスの体重を計った。５日目から臨床上の疾患を観察し、下記の方式に従って評点をつけた。
０：正常
０．５：臨床的症状のない体重減少
１：尾の弛緩性麻痺
１．５：立ち直り反射機能の障害
２：片方の後肢の麻痺
３：両側の後肢の麻痺
４：後肢および前肢の麻痺
５：瀕死の状態
【０１５２】
結果を図１および２に示す。
【０１５３】
これらの結果は、処理しない動物が体重減少を伴う激しいＥＡＥを発症したこと、およびステロイドによる処理がこの影響を顕著に阻害したことを示す。式（Ｉａ）の試験化合物もまた、この疾患に非常に大きな影響があった。試験化合物の単回３０ｍｇ／ｋｇ用量を毎日投与することによって中程度の保護がもたらされた。しかしながら、１０ｍｇ／ｋｇの１日量の２回投与は、ステロイドによってもたらされるレベルに似た、非常に高いレベルの保護を示した。
【０１５４】
したがって、データは、式（Ｉａ）の化合物がヒトにおけるＭＳの治療においてステロイドに代わるものとしての使用可能性を秘めていることを示している。
【０１５５】
実施例５
医薬組成物
（ｉ）錠剤製剤−Ｉ
本発明のジヒドロテトラベナジン５０ｍｇを、増量剤としてラクトース（ＢＰ）１９７ｍｇおよび滑沢剤としてステアリン酸マグネシウム３ｍｇと混ぜ合わせ、圧縮して、既知の方法で錠剤を形成することによってジヒドロテトラベナジンを含有する錠剤組成物を調製する。
【０１５６】
（ｉｉ）錠剤製剤−ＩＩ
本発明の化合物（２５ｍｇ）を、酸化鉄、ラクトース、ステアリン酸マグネシウム、白トウモロコシデンプン、およびタルクと混ぜ合わせ、圧縮して、既知の方法で錠剤を形成することによってジヒドロテトラベナジンを含有する錠剤組成物を調製する。
【０１５７】
（ｉｉｉ）カプセル製剤
本発明のジヒドロテトラベナジン１００ｍｇをラクトース１００ｍｇと混ぜ合わせ、得られた混合物を標準的な透明硬ゼラチンカプセル中に充填することによってカプセル製剤を調製する。
【０１５８】
均等物
本発明の根底をなす原理から逸脱することなく、前述の本発明の特定の実施形態に対して数多くの修正形態および変更形態を案出しうることは容易に明らかなはずである。本願は、そのようなすべての修正形態および変更形態を包含するものである。
【図１】
2011502977.tif 000032
【図２】
2011502977.tif 000033
【国際調査報告】
2011502977.tif 000034
2011502977.tif 000035
2011502977.tif 000036