(57)【要約】本発明は、皮膚色素沈着の調節を必要としている対象に小眼球症関連転写因子(MITF)の発現または活性化を阻害するための薬剤を投与する段階を含む、対象の皮膚色素沈着を調節するための方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
皮膚色素沈着を調節するための方法であって、それを必要としている対象に小眼球症関連転写因子(MITF)の発現または活性化を阻害する治療剤を含む薬学的組成物を投与する段階を含む方法。
【請求項２】
治療剤が、以下からなる群より選択される、請求項1記載の方法:
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
5-クロロ-7-[(2-クロロ-6-フルオロフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
(1S,2R,3S,6S)-1-ベンゾイル-6-tert-ブチルスピロ[2.5]オクタン-1,2-ジカルボニトリル;
N-[(4-クロロフェニル)(2-ヒドロキシ-1-ナフチル)メチル]-3-メトキシベンズアミド;
エチル-1-ベンジル-5-[3-(tert-ブチルアミノ)-2-ヒドロキシプロポキシ]-2-メチル-1H-インドール-3-カルボキシレート;
5-クロロ-7-[(2,5-ジメチルフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
N-[5-(2,3-ジヒドロ-1,4-ベンゾジオキシン-6-イル)-2-メチル-3-フロイル]グリシン;
[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]酢酸;
N-(2-フルオロフェニル)-2-{[5-(3-メチルフェニル)-1,3,4-オキサジアゾール-2-イル]チオ}アセトアミド;
N-[4-(6-メチル-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェニル]-2-[(5-メチル-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
2-(2-ブロモ-4-tert-ブチルフェノキシ)-N-(2-メトキシ-5-ニトロフェニル)アセトアミド;
メチル-5-{[(4-フルオロ-2-メチルフェニル)スルホニル](イソニコチノイル)アミノ}-2-メチル-1-ベンゾフラン-3-カルボキシレート;
1-(4-クロロベンジル)-N-(ピリジン-3-イルメチル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン;
2-{[5-(4-クロロフェニル)-4-(3-メチルフェニル)-4H-1,2,4-トリアゾール-3-イル]チオ}-N-(3-メトキシフェニル)アセトアミド;
N-フェニル-3-[(4-フェニル-1,3-チアゾール-2-イル)チオ]プロパンアミド;
エチル-[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]アセテート;
2-メチル-3-[(4-メチルピペリジン-1-イル)カルボニル]ナフト[2,3-b]フラン-4,9-ジオン;
N-(3-フェニルプロピル)-10H-フェノチアジン-10-カルボキサミド;
5-(4-クロロフェニル)-2-ピロリジン-1-イル-6H-1,3,4-チアジアジン;
7-(4-フルオロフェニル)-1-(2-フリルメチル)-5,5-ビス(トリフルオロメチル)-5,8-ジヒドロピリミド[4,5-d]ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン;
3-{[(2-ブロモ-4-メチルフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
3-{[4-(ヒドロキシメチル)-2-メトキシフェノキシ]メチル}安息香酸;
5-フェニル[1,2,5]オキサジアゾロ[3,4-b]ピラジン;
2,3,9-トリメトキシ-6a,12a-ジヒドロクロモエオ(dihydrochromoeo)[3,4-b]クロメン-12(6H)-オン;
4-[(4-クロロベンジル)オキシ]-3-メトキシ-N-(2-メチル-5-[1,3]オキサゾロ[4,5-b]ピリジン-2-イルフェニル)ベンズアミド;
3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イルチオ)プロパン酸;
3-{[(4-エトキシフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
N-[4-クロロ-3-(トリフルオロメチル)フェニル]-1-[(2,5-ジメトキシフェニル)スルホニル]ピペリジン-4-カルボキサミド;
N-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-2-[(5-ニトロ-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
5-[4-(4-tert-ブチルベンゾイル)ピペラジン-1-イル]-2-ニトロ-N-(ピリジン-3-イルメチル)アニリン;
3-{[2-クロロ-4-(ヒドロキシメチル)フェノキシ]メチル}安息香酸;
{[(2-クロロフェニル)アミノ][(3-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル;
{[(4-ブロモフェニル)アミノ][(4-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル; および
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
(3,5-ジ-t-ブチル-4-ヒドロキシベンジリデン)マロノニトリル;
2-アミノ-N-{5-[6-(ジメチルアミノ)-9H-プリン-9-イル]-4-ヒドロキシ-2-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロフラン-3-イル}-3-(4-メトキシフェニル)プロパンアミド;
1,3,6-トリヒドロキシ-7-メトキシ-2,8-ビス(3-メチルブタ-2-エン-1-イル)-9H-キサンテン-9-オン;
(3S,3aR,4R,6S,6aR,7S,8R,9bR)-6-アセトキシ-4-(ブチリルオキシ)-3,3a-ジヒドロキシ-3,6,9-トリメチル-8-{[(2Z)-2-メチルブタ-2-エノイル]オキシ}-2-オキソ-2,3,3a,4,5,6,6a,7,8,9b-デカヒドロアズレノ[4,5-b]フラン-7-イルヘキサノエート;
(1E,5S)-6,6,6-トリフルオロ-5-ヒドロキシ-1,5-ジフェニルヘキサ-1-エン-3-オン;
2-(4-メトキシフェニル)-1,3-ベンゾチアゾール;
エチル-4-アミノ-2-{[(1E)-3-(4-メチルフェニル)-3-オキソプロパ-1-エン-1-イル]チオ}ピリミジン-5-カルボキシレート;
3-[(5-クロロ-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)チオ]-5,5-ジメチルシクロヘキサ-2-エン-1-オン;
(2E)-3-[(5-メチル-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]-1-フェニルプロパ-2-エン-1-オン;
11,12-ジヒドロキシ-3-イソブチル-4,5,8-トリメチル-3,3a,4,6a,9,10,11,12-オクタヒドロ-1H-シクロウンデカ[d]イソインドール-1,15(2H)-ジオン;
3-(ヒドロキシメチル)-6-イソプロピル-5-[(2-メチルブタ-2-エノイル)オキシ]-2-オキソシクロヘキサ-3-エン-1-イル4-ヒドロキシ-2-メチルブタ-2-エノエート;
1,11,12-トリヒドロキシ-2,16-ジオキソ-11,20-エポキシピクラサ-3-エン-15-イル2-ヒドロキシ-2-メチルブタノエート;
1-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-3-[3-クロロ-4-(イソプロピルスルホニル)-2-チエニル]尿素;
それらの薬学的な塩;
ならびにそれらの任意の組み合わせ。
【請求項３】
治療剤が、以下からなる群より選択される、請求項2記載の方法:
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
5-クロロ-7-[(2-クロロ-6-フルオロフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
(1S,2R,3S,6S)-1-ベンゾイル-6-tert-ブチルスピロ[2.5]オクタン-1,2-ジカルボニトリル;
N-[(4-クロロフェニル)(2-ヒドロキシ-1-ナフチル)メチル]-3-メトキシベンズアミド;
エチル-1-ベンジル-5-[3-(tert-ブチルアミノ)-2-ヒドロキシプロポキシ]-2-メチル-1H-インドール-3-カルボキシレート;
5-クロロ-7-[(2,5-ジメチルフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
N-[5-(2,3-ジヒドロ-1,4-ベンゾジオキシン-6-イル)-2-メチル-3-フロイル]グリシン;
[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]酢酸;
N-(2-フルオロフェニル)-2-{[5-(3-メチルフェニル)-1,3,4-オキサジアゾール-2-イル]チオ}アセトアミド;
N-[4-(6-メチル-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェニル]-2-[(5-メチル-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
2-(2-ブロモ-4-tert-ブチルフェノキシ)-N-(2-メトキシ-5-ニトロフェニル)アセトアミド;
メチル-5-{[(4-フルオロ-2-メチルフェニル)スルホニル](イソニコチノイル)アミノ}-2-メチル-1-ベンゾフラン-3-カルボキシレート;
1-(4-クロロベンジル)-N-(ピリジン-3-イルメチル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン;
2-{[5-(4-クロロフェニル)-4-(3-メチルフェニル)-4H-1,2,4-トリアゾール-3-イル]チオ}-N-(3-メトキシフェニル)アセトアミド;
N-フェニル-3-[(4-フェニル-1,3-チアゾール-2-イル)チオ]プロパンアミド;
エチル-[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]アセテート;
2-メチル-3-[(4-メチルピペリジン-1-イル)カルボニル]ナフト[2,3-b]フラン-4,9-ジオン;
N-(3-フェニルプロピル)-10H-フェノチアジン-10-カルボキサミド;
5-(4-クロロフェニル)-2-ピロリジン-1-イル-6H-1,3,4-チアジアジン;
7-(4-フルオロフェニル)-1-(2-フリルメチル)-5,5-ビス(トリフルオロメチル)-5,8-ジヒドロピリミド[4,5-d]ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン;
3-{[(2-ブロモ-4-メチルフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
3-{[4-(ヒドロキシメチル)-2-メトキシフェノキシ]メチル}安息香酸;
5-フェニル[1,2,5]オキサジアゾロ[3,4-b]ピラジン;
2,3,9-トリメトキシ-6a,12a-ジヒドロクロモエオ[3,4-b]クロメン-12(6H)-オン;
4-[(4-クロロベンジル)オキシ]-3-メトキシ-N-(2-メチル-5-[1,3]オキサゾロ[4,5-b]ピリジン-2-イルフェニル)ベンズアミド;
3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イルチオ)プロパン酸;
3-{[(4-エトキシフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
N-[4-クロロ-3-(トリフルオロメチル)フェニル]-1-[(2,5-ジメトキシフェニル)スルホニル]ピペリジン-4-カルボキサミド;
N-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-2-[(5-ニトロ-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
5-[4-(4-tert-ブチルベンゾイル)ピペラジン-1-イル]-2-ニトロ-N-(ピリジン-3-イルメチル)アニリン;
3-{[2-クロロ-4-(ヒドロキシメチル)フェノキシ]メチル}安息香酸;
{[(2-クロロフェニル)アミノ][(3-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル;
{[(4-ブロモフェニル)アミノ][(4-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル; および
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
それらの薬学的に許容される塩;
ならびにそれらの任意の組み合わせ。
【請求項４】
治療剤が、以下からなる群より選択される、請求項2記載の方法:
(3,5-ジ-t-ブチル-4-ヒドロキシベンジリデン)マロノニトリル;
2-アミノ-N-{5-[6-(ジメチルアミノ)-9H-プリン-9-イル]-4-ヒドロキシ-2-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロフラン-3-イル}-3-(4-メトキシフェニル)プロパンアミド;
1,3,6-トリヒドロキシ-7-メトキシ-2,8-ビス(3-メチルブタ-2-エン-1-イル)-9H-キサンテン-9-オン;
(3S,3aR,4R,6S,6aR,7S,8R,9bR)-6-アセトキシ-4-(ブチリルオキシ)-3,3a-ジヒドロキシ-3,6,9-トリメチル-8-{[(2Z)-2-メチルブタ-2-エノイル]オキシ}-2-オキソ-2,3,3a,4,5,6,6a,7,8,9b-デカヒドロアズレノ[4,5-b]フラン-7-イルヘキサノエート;
(1E,5S)-6,6,6-トリフルオロ-5-ヒドロキシ-1,5-ジフェニルヘキサ-1-エン-3-オン;
2-(4-メトキシフェニル)-1,3-ベンゾチアゾール;
エチル-4-アミノ-2-{[(1E)-3-(4-メチルフェニル)-3-オキソプロパ-1-エン-1-イル]チオ}ピリミジン-5-カルボキシレート;
3-[(5-クロロ-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)チオ]-5,5-ジメチルシクロヘキサ-2-エン-1-オン;
(2E)-3-[(5-メチル-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]-1-フェニルプロパ-2-エン-1-オン;
11,12-ジヒドロキシ-3-イソブチル-4,5,8-トリメチル-3,3a,4,6a,9,10,11,12-オクタヒドロ-1H-シクロウンデカ[d]イソインドール-1,15(2H)-ジオン;
3-(ヒドロキシメチル)-6-イソプロピル-5-[(2-メチルブタ-2-エノイル)オキシ]-2-オキソシクロヘキサ-3-エン-1-イル4-ヒドロキシ-2-メチルブタ-2-エノエート;
1,11,12-トリヒドロキシ-2,16-ジオキソ-11,20-エポキシピクラサ-3-エン-15-イル2-ヒドロキシ-2-メチルブタノエート;
1-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-3-[3-クロロ-4-(イソプロピルスルホニル)-2-チエニル]尿素;
それらの薬学的に許容される塩;
およびそれらの任意の組み合わせ。
【請求項５】
治療剤が、以下からなる群より選択される、請求項2記載の方法:
1,3,6-トリヒドロキシ-7-メトキシ-2,8-ビス(3-メチルブタ-2-エン-1-イル)-9H-キサンテン-9-オン;
(1E,5S)-6,6,6-トリフルオロ-5-ヒドロキシ-1,5-ジフェニルヘキサ-1-エン-3-オン;
3-(ヒドロキシメチル)-6-イソプロピル-5-[(2-メチルブタ-2-エノイル)オキシ]-2-オキソシクロヘキサ-3-エン-1-イル-4-ヒドロキシ-2-メチルブタ-2-エノエート;
それらの薬学的に許容される塩;
およびそれらの任意の組み合わせ。
【請求項６】
薬学的組成物がさらなる治療剤を含む、請求項1〜4のいずれか一項記載の方法。
【請求項７】
薬学的組成物が、MITFの発現または活性化を阻害する治療剤を0.001%〜99%含む、請求項1記載の方法。
【請求項８】
薬学的組成物が局所用製剤として製剤化されている、請求項1記載の方法。
【請求項９】
薬学的組成物が非経口用製剤として製剤化されている、請求項1記載の方法。
【請求項１０】
薬学的組成物が経口用製剤として製剤化されている、請求項1記載の方法。
【請求項１１】
薬学的組成物が1日1回投与される、請求項1記載の方法。
【請求項１２】
以下を含む、薬学的組成物:
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
5-クロロ-7-[(2-クロロ-6-フルオロフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
(1S,2R,3S,6S)-1-ベンゾイル-6-tert-ブチルスピロ[2.5]オクタン-1,2-ジカルボニトリル;
N-[(4-クロロフェニル)(2-ヒドロキシ-1-ナフチル)メチル]-3-メトキシベンズアミド;
エチル-1-ベンジル-5-[3-(tert-ブチルアミノ)-2-ヒドロキシプロポキシ]-2-メチル-1H-インドール-3-カルボキシレート;
5-クロロ-7-[(2,5-ジメチルフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
N-[5-(2,3-ジヒドロ-1,4-ベンゾジオキシン-6-イル)-2-メチル-3-フロイル]グリシン;
[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]酢酸;
N-(2-フルオロフェニル)-2-{[5-(3-メチルフェニル)-1,3,4-オキサジアゾール-2-イル]チオ}アセトアミド;
N-[4-(6-メチル-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェニル]-2-[(5-メチル-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
2-(2-ブロモ-4-tert-ブチルフェノキシ)-N-(2-メトキシ-5-ニトロフェニル)アセトアミド;
メチル-5-{[(4-フルオロ-2-メチルフェニル)スルホニル](イソニコチノイル)アミノ}-2-メチル-1-ベンゾフラン-3-カルボキシレート;
1-(4-クロロベンジル)-N-(ピリジン-3-イルメチル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン;
2-{[5-(4-クロロフェニル)-4-(3-メチルフェニル)-4H-1,2,4-トリアゾール-3-イル]チオ}-N-(3-メトキシフェニル)アセトアミド;
N-フェニル-3-[(4-フェニル-1,3-チアゾール-2-イル)チオ]プロパンアミド;
エチル-[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]アセテート;
2-メチル-3-[(4-メチルピペリジン-1-イル)カルボニル]ナフト[2,3-b]フラン-4,9-ジオン;
N-(3-フェニルプロピル)-10H-フェノチアジン-10-カルボキサミド;
5-(4-クロロフェニル)-2-ピロリジン-1-イル-6H-1,3,4-チアジアジン;
7-(4-フルオロフェニル)-1-(2-フリルメチル)-5,5-ビス(トリフルオロメチル)-5,8-ジヒドロピリミド[4,5-d]ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン;
3-{[(2-ブロモ-4-メチルフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
3-{[4-(ヒドロキシメチル)-2-メトキシフェノキシ]メチル}安息香酸;
5-フェニル[1,2,5]オキサジアゾロ[3,4-b]ピラジン;
2,3,9-トリメトキシ-6a,12a-ジヒドロクロモエオ[3,4-b]クロメン-12(6H)-オン;
4-[(4-クロロベンジル)オキシ]-3-メトキシ-N-(2-メチル-5-[1,3]オキサゾロ[4,5-b]ピリジン-2-イルフェニル)ベンズアミド;
3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イルチオ)プロパン酸;
3-{[(4-エトキシフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
N-[4-クロロ-3-(トリフルオロメチル)フェニル]-1-[(2,5-ジメトキシフェニル)スルホニル]ピペリジン-4-カルボキサミド;
N-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-2-[(5-ニトロ-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
5-[4-(4-tert-ブチルベンゾイル)ピペラジン-1-イル]-2-ニトロ-N-(ピリジン-3-イルメチル)アニリン;
3-{[2-クロロ-4-(ヒドロキシメチル)フェノキシ]メチル}安息香酸;
{[(2-クロロフェニル)アミノ][(3-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル;
{[(4-ブロモフェニル)アミノ][(4-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル; および
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
(3,5-ジ-t-ブチル-4-ヒドロキシベンジリデン)マロノニトリル;
2-アミノ-N-{5-[6-(ジメチルアミノ)-9H-プリン-9-イル]-4-ヒドロキシ-2-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロフラン-3-イル}-3-(4-メトキシフェニル)プロパンアミド;
1,3,6-トリヒドロキシ-7-メトキシ-2,8-ビス(3-メチルブタ-2-エン-1-イル)-9H-キサンテン-9-オン;
(3S,3aR,4R,6S,6aR,7S,8R,9bR)-6-アセトキシ-4-(ブチリルオキシ)-3,3a-ジヒドロキシ-3,6,9-トリメチル-8-{[(2Z)-2-メチルブタ-2-エノイル]オキシ}-2-オキソ-2,3,3a,4,5,6,6a,7,8,9b-デカヒドロアズレノ[4,5-b]フラン-7-イルヘキサノエート;
(1E,5S)-6,6,6-トリフルオロ-5-ヒドロキシ-1,5-ジフェニルヘキサ-1-エン-3-オン;
2-(4-メトキシフェニル)-1,3-ベンゾチアゾール;
エチル-4-アミノ-2-{[(1E)-3-(4-メチルフェニル)-3-オキソプロパ-1-エン-1-イル]チオ}ピリミジン-5-カルボキシレート;
3-[(5-クロロ-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)チオ]-5,5-ジメチルシクロヘキサ-2-エン-1-オン;
(2E)-3-[(5-メチル-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]-1-フェニルプロパ-2-エン-1-オン;
11,12-ジヒドロキシ-3-イソブチル-4,5,8-トリメチル-3,3a,4,6a,9,10,11,12-オクタヒドロ-1H-シクロウンデカ[d]イソインドール-1,15(2H)-ジオン;
3-(ヒドロキシメチル)-6-イソプロピル-5-[(2-メチルブタ-2-エノイル)オキシ]-2-オキソシクロヘキサ-3-エン-1-イル4-ヒドロキシ-2-メチルブタ-2-エノエート;
1,11,12-トリヒドロキシ-2,16-ジオキソ-11,20-エポキシピクラサ-3-エン-15-イル2-ヒドロキシ-2-メチルブタノエート;
1-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-3-[3-クロロ-4-(イソプロピルスルホニル)-2-チエニル]尿素;
それらの薬学的に許容される塩;
ならびにそれらの任意の組み合わせ。
【請求項１３】
以下を含む、請求項12記載の薬学的組成物:
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
5-クロロ-7-[(2-クロロ-6-フルオロフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
(1S,2R,3S,6S)-1-ベンゾイル-6-tert-ブチルスピロ[2.5]オクタン-1,2-ジカルボニトリル;
N-[(4-クロロフェニル)(2-ヒドロキシ-1-ナフチル)メチル]-3-メトキシベンズアミド;
エチル-1-ベンジル-5-[3-(tert-ブチルアミノ)-2-ヒドロキシプロポキシ]-2-メチル-1H-インドール-3-カルボキシレート;
5-クロロ-7-[(2,5-ジメチルフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
N-[5-(2,3-ジヒドロ-1,4-ベンゾジオキシン-6-イル)-2-メチル-3-フロイル]グリシン;
[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]酢酸;
N-(2-フルオロフェニル)-2-{[5-(3-メチルフェニル)-1,3,4-オキサジアゾール-2-イル]チオ}アセトアミド;
N-[4-(6-メチル-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェニル]-2-[(5-メチル-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
2-(2-ブロモ-4-tert-ブチルフェノキシ)-N-(2-メトキシ-5-ニトロフェニル)アセトアミド;
メチル-5-{[(4-フルオロ-2-メチルフェニル)スルホニル](イソニコチノイル)アミノ}-2-メチル-1-ベンゾフラン-3-カルボキシレート;
1-(4-クロロベンジル)-N-(ピリジン-3-イルメチル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン;
2-{[5-(4-クロロフェニル)-4-(3-メチルフェニル)-4H-1,2,4-トリアゾール-3-イル]チオ}-N-(3-メトキシフェニル)アセトアミド;
N-フェニル-3-[(4-フェニル-1,3-チアゾール-2-イル)チオ]プロパンアミド;
エチル-[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]アセテート;
2-メチル-3-[(4-メチルピペリジン-1-イル)カルボニル]ナフト[2,3-b]フラン-4,9-ジオン;
N-(3-フェニルプロピル)-10H-フェノチアジン-10-カルボキサミド;
5-(4-クロロフェニル)-2-ピロリジン-1-イル-6H-1,3,4-チアジアジン;
7-(4-フルオロフェニル)-1-(2-フリルメチル)-5,5-ビス(トリフルオロメチル)-5,8-ジヒドロピリミド[4,5-d]ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン;
3-{[(2-ブロモ-4-メチルフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
3-{[4-(ヒドロキシメチル)-2-メトキシフェノキシ]メチル}安息香酸;
5-フェニル[1,2,5]オキサジアゾロ[3,4-b]ピラジン;
2,3,9-トリメトキシ-6a,12a-ジヒドロクロモエオ[3,4-b]クロメン-12(6H)-オン;
4-[(4-クロロベンジル)オキシ]-3-メトキシ-N-(2-メチル-5-[1,3]オキサゾロ[4,5-b]ピリジン-2-イルフェニル)ベンズアミド;
3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イルチオ)プロパン酸;
3-{[(4-エトキシフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
N-[4-クロロ-3-(トリフルオロメチル)フェニル]-1-[(2,5-ジメトキシフェニル)スルホニル]ピペリジン-4-カルボキサミド;
N-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-2-[(5-ニトロ-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
5-[4-(4-tert-ブチルベンゾイル)ピペラジン-1-イル]-2-ニトロ-N-(ピリジン-3-イルメチル)アニリン;
3-{[2-クロロ-4-(ヒドロキシメチル)フェノキシ]メチル}安息香酸;
{[(2-クロロフェニル)アミノ][(3-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル;
{[(4-ブロモフェニル)アミノ][(4-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル; および
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
それらの薬学的に許容される塩;
ならびにそれらの任意の組み合わせ。
【請求項１４】
以下を含む、請求項12記載の薬学的組成物:
(3,5-ジ-t-ブチル-4-ヒドロキシベンジリデン)マロノニトリル;
2-アミノ-N-{5-[6-(ジメチルアミノ)-9H-プリン-9-イル]-4-ヒドロキシ-2-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロフラン-3-イル}-3-(4-メトキシフェニル)プロパンアミド;
1,3,6-トリヒドロキシ-7-メトキシ-2,8-ビス(3-メチルブタ-2-エン-1-イル)-9H-キサンテン-9-オン;
(3S,3aR,4R,6S,6aR,7S,8R,9bR)-6-アセトキシ-4-(ブチリルオキシ)-3,3a-ジヒドロキシ-3,6,9-トリメチル-8-{[(2Z)-2-メチルブタ-2-エノイル]オキシ}-2-オキソ-2,3,3a,4,5,6,6a,7,8,9b-デカヒドロアズレノ[4,5-b]フラン-7-イルヘキサノエート;
(1E,5S)-6,6,6-トリフルオロ-5-ヒドロキシ-1,5-ジフェニルヘキサ-1-エン-3-オン;
2-(4-メトキシフェニル)-1,3-ベンゾチアゾール;
エチル-4-アミノ-2-{[(1E)-3-(4-メチルフェニル)-3-オキソプロパ-1-エン-1-イル]チオ}ピリミジン-5-カルボキシレート;
3-[(5-クロロ-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)チオ]-5,5-ジメチルシクロヘキサ-2-エン-1-オン;
(2E)-3-[(5-メチル-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]-1-フェニルプロパ-2-エン-1-オン;
11,12-ジヒドロキシ-3-イソブチル-4,5,8-トリメチル-3,3a,4,6a,9,10,11,12-オクタヒドロ-1H-シクロウンデカ[d]イソインドール-1,15(2H)-ジオン;
3-(ヒドロキシメチル)-6-イソプロピル-5-[(2-メチルブタ-2-エノイル)オキシ]-2-オキソシクロヘキサ-3-エン-1-イル4-ヒドロキシ-2-メチルブタ-2-エノエート;
1,11,12-トリヒドロキシ-2,16-ジオキソ-11,20-エポキシピクラサ-3-エン-15-イル2-ヒドロキシ-2-メチルブタノエート;
1-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-3-[3-クロロ-4-(イソプロピルスルホニル)-2-チエニル]尿素;
それらの薬学的に許容される塩;
およびそれらの任意の組み合わせ。
【請求項１５】
以下を含む、請求項12記載の薬学的組成物:
1,3,6-トリヒドロキシ-7-メトキシ-2,8-ビス(3-メチルブタ-2-エン-1-イル)-9H-キサンテン-9-オン;
(1E,5S)-6,6,6-トリフルオロ-5-ヒドロキシ-1,5-ジフェニルヘキサ-1-エン-3-オン;
3-(ヒドロキシメチル)-6-イソプロピル-5-[(2-メチルブタ-2-エノイル)オキシ]-2-オキソシクロヘキサ-3-エン-1-イル-4-ヒドロキシ-2-メチルブタ-2-エノエート;
それらの薬学的に許容される塩;
およびそれらの任意の組み合わせ。
【請求項１６】
さらなる治療剤をさらに含む、請求項12〜15のいずれか一項記載の薬学的組成物。
【請求項１７】
皮膚色素沈着を調節するのに使用するための、以下より選択される化合物:
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
5-クロロ-7-[(2-クロロ-6-フルオロフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
(1S,2R,3S,6S)-1-ベンゾイル-6-tert-ブチルスピロ[2.5]オクタン-1,2-ジカルボニトリル;
N-[(4-クロロフェニル)(2-ヒドロキシ-1-ナフチル)メチル]-3-メトキシベンズアミド;
エチル-1-ベンジル-5-[3-(tert-ブチルアミノ)-2-ヒドロキシプロポキシ]-2-メチル-1H-インドール-3-カルボキシレート;
5-クロロ-7-[(2,5-ジメチルフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
N-[5-(2,3-ジヒドロ-1,4-ベンゾジオキシン-6-イル)-2-メチル-3-フロイル]グリシン;
[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]酢酸;
N-(2-フルオロフェニル)-2-{[5-(3-メチルフェニル)-1,3,4-オキサジアゾール-2-イル]チオ}アセトアミド;
N-[4-(6-メチル-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェニル]-2-[(5-メチル-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
2-(2-ブロモ-4-tert-ブチルフェノキシ)-N-(2-メトキシ-5-ニトロフェニル)アセトアミド;
メチル-5-{[(4-フルオロ-2-メチルフェニル)スルホニル](イソニコチノイル)アミノ}-2-メチル-1-ベンゾフラン-3-カルボキシレート;
1-(4-クロロベンジル)-N-(ピリジン-3-イルメチル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン;
2-{[5-(4-クロロフェニル)-4-(3-メチルフェニル)-4H-1,2,4-トリアゾール-3-イル]チオ}-N-(3-メトキシフェニル)アセトアミド;
N-フェニル-3-[(4-フェニル-1,3-チアゾール-2-イル)チオ]プロパンアミド;
エチル-[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]アセテート;
2-メチル-3-[(4-メチルピペリジン-1-イル)カルボニル]ナフト[2,3-b]フラン-4,9-ジオン;
N-(3-フェニルプロピル)-10H-フェノチアジン-10-カルボキサミド;
5-(4-クロロフェニル)-2-ピロリジン-1-イル-6H-1,3,4-チアジアジン;
7-(4-フルオロフェニル)-1-(2-フリルメチル)-5,5-ビス(トリフルオロメチル)-5,8-ジヒドロピリミド[4,5-d]ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン;
3-{[(2-ブロモ-4-メチルフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
3-{[4-(ヒドロキシメチル)-2-メトキシフェノキシ]メチル}安息香酸;
5-フェニル[1,2,5]オキサジアゾロ[3,4-b]ピラジン;
2,3,9-トリメトキシ-6a,12a-ジヒドロクロモエオ[3,4-b]クロメン-12(6H)-オン;
4-[(4-クロロベンジル)オキシ]-3-メトキシ-N-(2-メチル-5-[1,3]オキサゾロ[4,5-b]ピリジン-2-イルフェニル)ベンズアミド;
3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イルチオ)プロパン酸;
3-{[(4-エトキシフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
N-[4-クロロ-3-(トリフルオロメチル)フェニル]-1-[(2,5-ジメトキシフェニル)スルホニル]ピペリジン-4-カルボキサミド;
N-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-2-[(5-ニトロ-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
5-[4-(4-tert-ブチルベンゾイル)ピペラジン-1-イル]-2-ニトロ-N-(ピリジン-3-イルメチル)アニリン;
3-{[2-クロロ-4-(ヒドロキシメチル)フェノキシ]メチル}安息香酸;
{[(2-クロロフェニル)アミノ][(3-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル;
{[(4-ブロモフェニル)アミノ][(4-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル; および
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
(3,5-ジ-t-ブチル-4-ヒドロキシベンジリデン)マロノニトリル;
2-アミノ-N-{5-[6-(ジメチルアミノ)-9H-プリン-9-イル]-4-ヒドロキシ-2-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロフラン-3-イル}-3-(4-メトキシフェニル)プロパンアミド;
1,3,6-トリヒドロキシ-7-メトキシ-2,8-ビス(3-メチルブタ-2-エン-1-イル)-9H-キサンテン-9-オン;
(3S,3aR,4R,6S,6aR,7S,8R,9bR)-6-アセトキシ-4-(ブチリルオキシ)-3,3a-ジヒドロキシ-3,6,9-トリメチル-8-{[(2Z)-2-メチルブタ-2-エノイル]オキシ}-2-オキソ-2,3,3a,4,5,6,6a,7,8,9b-デカヒドロアズレノ[4,5-b]フラン-7-イルヘキサノエート;
(1E,5S)-6,6,6-トリフルオロ-5-ヒドロキシ-1,5-ジフェニルヘキサ-1-エン-3-オン;
2-(4-メトキシフェニル)-1,3-ベンゾチアゾール;
エチル-4-アミノ-2-{[(1E)-3-(4-メチルフェニル)-3-オキソプロパ-1-エン-1-イル]チオ}ピリミジン-5-カルボキシレート;
3-[(5-クロロ-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)チオ]-5,5-ジメチルシクロヘキサ-2-エン-1-オン;
(2E)-3-[(5-メチル-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]-1-フェニルプロパ-2-エン-1-オン;
11,12-ジヒドロキシ-3-イソブチル-4,5,8-トリメチル-3,3a,4,6a,9,10,11,12-オクタヒドロ-1H-シクロウンデカ[d]イソインドール-1,15(2H)-ジオン;
3-(ヒドロキシメチル)-6-イソプロピル-5-[(2-メチルブタ-2-エノイル)オキシ]-2-オキソシクロヘキサ-3-エン-1-イル4-ヒドロキシ-2-メチルブタ-2-エノエート;
1,11,12-トリヒドロキシ-2,16-ジオキソ-11,20-エポキシピクラサ-3-エン-15-イル2-ヒドロキシ-2-メチルブタノエート;
1-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-3-[3-クロロ-4-(イソプロピルスルホニル)-2-チエニル]尿素;
それらの薬学的に許容される塩;
ならびにそれらの任意の組み合わせ。
【請求項１８】
皮膚色素沈着を調節するのに使用するための、以下より選択される請求項17記載の化合物:
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
5-クロロ-7-[(2-クロロ-6-フルオロフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
(1S,2R,3S,6S)-1-ベンゾイル-6-tert-ブチルスピロ[2.5]オクタン-1,2-ジカルボニトリル;
N-[(4-クロロフェニル)(2-ヒドロキシ-1-ナフチル)メチル]-3-メトキシベンズアミド;
エチル-1-ベンジル-5-[3-(tert-ブチルアミノ)-2-ヒドロキシプロポキシ]-2-メチル-1H-インドール-3-カルボキシレート;
5-クロロ-7-[(2,5-ジメチルフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
N-[5-(2,3-ジヒドロ-1,4-ベンゾジオキシン-6-イル)-2-メチル-3-フロイル]グリシン;
[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]酢酸;
N-(2-フルオロフェニル)-2-{[5-(3-メチルフェニル)-1,3,4-オキサジアゾール-2-イル]チオ}アセトアミド;
N-[4-(6-メチル-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェニル]-2-[(5-メチル-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
2-(2-ブロモ-4-tert-ブチルフェノキシ)-N-(2-メトキシ-5-ニトロフェニル)アセトアミド;
メチル-5-{[(4-フルオロ-2-メチルフェニル)スルホニル](イソニコチノイル)アミノ}-2-メチル-1-ベンゾフラン-3-カルボキシレート;
1-(4-クロロベンジル)-N-(ピリジン-3-イルメチル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン;
2-{[5-(4-クロロフェニル)-4-(3-メチルフェニル)-4H-1,2,4-トリアゾール-3-イル]チオ}-N-(3-メトキシフェニル)アセトアミド;
N-フェニル-3-[(4-フェニル-1,3-チアゾール-2-イル)チオ]プロパンアミド;
エチル-[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]アセテート;
2-メチル-3-[(4-メチルピペリジン-1-イル)カルボニル]ナフト[2,3-b]フラン-4,9-ジオン;
N-(3-フェニルプロピル)-10H-フェノチアジン-10-カルボキサミド;
5-(4-クロロフェニル)-2-ピロリジン-1-イル-6H-1,3,4-チアジアジン;
7-(4-フルオロフェニル)-1-(2-フリルメチル)-5,5-ビス(トリフルオロメチル)-5,8-ジヒドロピリミド[4,5-d]ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン;
3-{[(2-ブロモ-4-メチルフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
3-{[4-(ヒドロキシメチル)-2-メトキシフェノキシ]メチル}安息香酸;
5-フェニル[1,2,5]オキサジアゾロ[3,4-b]ピラジン;
2,3,9-トリメトキシ-6a,12a-ジヒドロクロモエオ[3,4-b]クロメン-12(6H)-オン;
4-[(4-クロロベンジル)オキシ]-3-メトキシ-N-(2-メチル-5-[1,3]オキサゾロ[4,5-b]ピリジン-2-イルフェニル)ベンズアミド;
3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イルチオ)プロパン酸;
3-{[(4-エトキシフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
N-[4-クロロ-3-(トリフルオロメチル)フェニル]-1-[(2,5-ジメトキシフェニル)スルホニル]ピペリジン-4-カルボキサミド;
N-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-2-[(5-ニトロ-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
5-[4-(4-tert-ブチルベンゾイル)ピペラジン-1-イル]-2-ニトロ-N-(ピリジン-3-イルメチル)アニリン;
3-{[2-クロロ-4-(ヒドロキシメチル)フェノキシ]メチル}安息香酸;
{[(2-クロロフェニル)アミノ][(3-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル;
{[(4-ブロモフェニル)アミノ][(4-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル; および
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
それらの薬学的に許容される塩;
ならびにそれらの任意の組み合わせ。
【請求項１９】
皮膚色素沈着を調節するのに使用するための、以下より選択される請求項17記載の化合物:
(3,5-ジ-t-ブチル-4-ヒドロキシベンジリデン)マロノニトリル;
2-アミノ-N-{5-[6-(ジメチルアミノ)-9H-プリン-9-イル]-4-ヒドロキシ-2-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロフラン-3-イル}-3-(4-メトキシフェニル)プロパンアミド;
1,3,6-トリヒドロキシ-7-メトキシ-2,8-ビス(3-メチルブタ-2-エン-1-イル)-9H-キサンテン-9-オン;
(3S,3aR,4R,6S,6aR,7S,8R,9bR)-6-アセトキシ-4-(ブチリルオキシ)-3,3a-ジヒドロキシ-3,6,9-トリメチル-8-{[(2Z)-2-メチルブタ-2-エノイル]オキシ}-2-オキソ-2,3,3a,4,5,6,6a,7,8,9b-デカヒドロアズレノ[4,5-b]フラン-7-イルヘキサノエート;
(1E,5S)-6,6,6-トリフルオロ-5-ヒドロキシ-1,5-ジフェニルヘキサ-1-エン-3-オン;
2-(4-メトキシフェニル)-1,3-ベンゾチアゾール;
エチル-4-アミノ-2-{[(1E)-3-(4-メチルフェニル)-3-オキソプロパ-1-エン-1-イル]チオ}ピリミジン-5-カルボキシレート;
3-[(5-クロロ-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)チオ]-5,5-ジメチルシクロヘキサ-2-エン-1-オン;
(2E)-3-[(5-メチル-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]-1-フェニルプロパ-2-エン-1-オン;
11,12-ジヒドロキシ-3-イソブチル-4,5,8-トリメチル-3,3a,4,6a,9,10,11,12-オクタヒドロ-1H-シクロウンデカ[d]イソインドール-1,15(2H)-ジオン;
3-(ヒドロキシメチル)-6-イソプロピル-5-[(2-メチルブタ-2-エノイル)オキシ]-2-オキソシクロヘキサ-3-エン-1-イル4-ヒドロキシ-2-メチルブタ-2-エノエート;
1,11,12-トリヒドロキシ-2,16-ジオキソ-11,20-エポキシピクラサ-3-エン-15-イル2-ヒドロキシ-2-メチルブタノエート;
1-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-3-[3-クロロ-4-(イソプロピルスルホニル)-2-チエニル]尿素;
それらの薬学的に許容される塩;
およびそれらの任意の組み合わせ。
【請求項２０】
皮膚色素沈着を調節するのに使用するための、以下より選択される請求項17記載の化合物:
1,3,6-トリヒドロキシ-7-メトキシ-2,8-ビス(3-メチルブタ-2-エン-1-イル)-9H-キサンテン-9-オン;
(1E,5S)-6,6,6-トリフルオロ-5-ヒドロキシ-1,5-ジフェニルヘキサ-1-エン-3-オン;
3-(ヒドロキシメチル)-6-イソプロピル-5-[(2-メチルブタ-2-エノイル)オキシ]-2-オキソシクロヘキサ-3-エン-1-イル-4-ヒドロキシ-2-メチルブタ-2-エノエート;
それらの薬学的に許容される塩;
およびそれらの任意の組み合わせ。
【請求項２１】
(iii) 小眼球症関連転写因子(MITF)の直接の転写標的のプロモーターに機能的に連結されたレポーター遺伝子を含みかつMITFを産生することができる細胞と、試験化合物とを接触させる段階; および
(iv) 該試験化合物とのインキュベーションの後にレポーター遺伝子発現の量を決定する段階
を含む、小眼球症関連転写因子(MITF)の発現または活性を調節する化合物を特定するためのアッセイ法であって、
対照または参照と比べた場合の、レポーター遺伝子の発現における変化によって、該化合物がMITFの発現または活性を調節することが示される、
アッセイ法。
【請求項２２】
試験化合物が、対照または参照と比べてMITFの発現または活性を阻害する、請求項21記載のアッセイ法。
【請求項２３】
プロモーターがTRPM1遺伝子のプロモーターである、請求項21または22記載のアッセイ法。
【請求項２４】
レポーター遺伝子がルシフェラーゼ遺伝子である、請求項21〜23のいずれか一項記載のアッセイ法。
【請求項２５】
細胞がMITFを内因的に産生する、請求項21〜24のいずれか一項記載のアッセイ法。
【請求項２６】
細胞がメラニン細胞であるか、または黒色腫細胞株に由来する、請求項21〜25のいずれか一項記載のアッセイ法。
【請求項２７】
試験化合物が0.01 nm〜約10 mMの終濃度でインキュベートされる、請求項21〜26のいずれか一項記載のアッセイ法。
【請求項２８】
試験化合物が、2種類以上の異なる濃度で試験される、請求項21〜27のいずれか一項記載のアッセイ法。
【請求項２９】
試験化合物が、10〜10,000倍の範囲にある2種類以上の異なる濃度で試験される、請求項28記載のアッセイ法。
【請求項３０】
試験化合物が、有機または無機低分子; サッカリン; オリゴ糖; 多糖; 生物学的高分子、例えばペプチド、タンパク質、ならびにペプチド類似体および誘導体; ペプチド模倣体; 核酸ならびに核酸類似体および誘導体(siRNA、shRNA、アンチセンスRNA、リボザイム、およびアプタマーを含むが、これらに限定されない); 細菌、植物、真菌、または動物細胞などの生物学的材料から作製された抽出物; 動物組織; 天然または合成組成物; ならびにこれらの任意の組み合わせからなる群より選択される、請求項21〜29のいずれか一項記載のアッセイ法。
【請求項３１】
選択された化合物が7未満のLogP値を有する、請求項21〜30のいずれか一項記載のアッセイ法。
【請求項３２】
選択された化合物が、MITF活性または発現の用量依存的な調節を示す、請求項21〜31のいずれか一項記載のアッセイ法。
【請求項３３】
ハイスループットスクリーニング(HTS)アッセイ法である、請求項21〜32のいずれか一項記載のアッセイ法。
【請求項３４】
請求項21〜33のいずれか一項記載のアッセイ法によって選択された化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、米国特許法第119条(e)の下、2011年9月1日付で出願された米国仮特許出願第61/530,197号の恩典を主張する。
【０００２】
発明の分野
本発明は、皮膚色素沈着の調節を必要としている対象に小眼球症関連転写因子(MITF)の発現または活性化を阻害するための薬剤を投与する段階を含む、対象の皮膚色素沈着を調節するための方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
皮膚色素沈着は、ヒトにおいて最も明らかでかつ審美的に顕著な表現型特性の1つである。皮膚色素沈着は、表皮内のメラニン色素（黄赤色のフェオメラニンから黒褐色のユーメラニンまで化学構造がさまざまである）の存在から生じる。極端に肌が白い表現型は、「赤毛-色白の」人々のなかで最も多く見られ、その人々は、特定の遺伝子多型を持つことが示されている。この色素沈着表現型に関する本発明者らの広範囲にわたる研究は、ヒトにおける多様な潜在的使用に向けて皮膚色素沈着を理解しかつ操作することの大きな関心につながった。
【０００４】
色素沈着の制御は、表皮内の複雑な一連の細胞内シグナルによって媒介される。メラニンへのチロシンの変換の酵素的機構はメラニン細胞のなかに存在するが、色素沈着にとって重要な開始シグナルの多くは、重なるケラチノサイト集団に由来する。同様に、ケラチノサイトは、メラニン細胞からのメラノソームのエキソサイトーシス輸送により、大部分の表皮メラニンが最終的に存在する細胞であるので、色素沈着の後期段階において重要な役割を果たす。
【０００５】
メラニン細胞内で、色素産生の量および質を制御する重要な経路は、メラニン細胞刺激ホルモン(MSH)によって調節される経路である。MSHは、プロペプチド前駆体プロオピオメラノコルチン(ProOpioMelanoCortin (POMC))の、12アミノ酸のペプチド切断産物である。MSHは、アデニル酸シクラーゼを活性化してcAMP産生を誘導するGタンパク質共役受容体であるメラニン細胞表面の受容体(メラノコルチン1受容体)に結合する。順に、上昇したcAMPレベルがCREB転写因子のリン酸化を引き起こし、これが小眼球症関連転写因子(MITF)遺伝子の転写を刺激する(Lin JY, Fisher DE: Melanocyte biology and skin pigmentation, Nature 2007, 445:843-850（非特許文献1）)。
【０００６】
MITFはメラニン細胞特異的な転写因子であり、これはメラニンの産生を調節する多数の遺伝子の発現を制御することが分かっている。色素酵素遺伝子の転写調節因子としての発見(Hemesath TJ, Steingrimsson E, McGill G, Hansen MJ, Vaught J, Hodgkinson CA, Arnheiter H, Copeland NG, Jenkins NA, Fisher DE: microphthalmia, a critical factor in melanocyte development, defines a discrete transcription factor family, Genes Dev 1994, 8:2770-2780（非特許文献2）)から、本発明者らは、MITFの発現および転写活性を制御する複数の経路に関する多くのことを見出してきた。MITFの変異は、完全な色素脱失または色素の色の変化を生じうる(Lin JY, Fisher DE: Melanocyte biology and skin pigmentation, Nature 2007, 445:843-850（非特許文献1）)。MITFプロモーターは、ヒトでの色素沈着において重要な役割を果たすことが個別に示された複数の因子によって調節される。これらには、Wnt経路(Widlund HR, Horstmann MA, Price ER, Cui J, Lessnick SL, Wu M, He X, Fisher DE: Beta-catenin-induced melanoma growth requires the downstream target Microphthalmia-associated transcription factor., J Cell Biol 2002, 158:1079-1087. Epub 2002 Sep 1016（非特許文献3）)、SOX10 (Huber WE, Price ER, Widlund HR, Du J, Davis IJ, Wegner M, Fisher DE: A tissue-restricted cAMP transcriptional response: SOX10 modulates alpha-melanocyte-stimulating hormone-triggered expression of microphthalmia-associated transcription factor in melanocytes., J Biol Chem 2003, 278:45224-45230. Epub 42003 Aug 45227（非特許文献4）)、およびPAX3 (Price ER, Fisher DE: Sensorineural deafness and pigmentation genes: melanocytes and the Mitf transcriptional network, Neuron 2001, 30:15-18（非特許文献5）)が含まれる。MITF、SOX10およびPAX3内の変異は、ワールデンブルグ症候群を有する患者で起こり、MITF変異は、「純粋な」メラニン細胞表現型を示す患者に生じるのに対し、SOX10またはPAX3変異はメラニン細胞欠損に加えてさらなる異常を引き起こしうる(Price ER, Fisher DE: Sensorineural deafness and pigmentation genes: melanocytes and the Mitf transcriptional network., Neuron 2001, 30:15-18（非特許文献5）)。MITFの翻訳後調節は、MITFのリン酸化(Hemesath TJ, Price ER, Takemoto C, Badalian T, Fisher DE: MAP kinase links the transcription factor Microphthalmia to c-Kit signalling in melanocytes, Nature 1998, 391:298-301（非特許文献6）)、ユビキチン化(Wu M, Hemesath TJ, Takemoto CM, Horstmann MA, Wells AG, Price ER, Fisher DZ, Fisher DE: c-Kit triggers dual phosphorylations, which couple activation and degradation of the essential melanocyte factor Mi, Genes Dev 2000, 14:301-312（非特許文献7）)、またはSUMO化(Miller AJ, Levy C, Davis IJ, Razin E, Fisher DE: Sumoylation of MITF and its related family members TFE3 and TFEB, J Biol Chem 2005, 280:146-155（非特許文献8）)を介して起こる。これらの修飾の機能的結果は、さらなる詳細がまだ理解されていないが、現時点で部分的に理解されている。まとめると、MITFの発現および活性の多様な制御は、低分子による色素沈着調節の潜在的機会に相当する。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Lin JY, Fisher DE: Melanocyte biology and skin pigmentation, Nature 2007, 445:843-850
【非特許文献２】Hemesath TJ, Steingrimsson E, McGill G, Hansen MJ, Vaught J, Hodgkinson CA, Arnheiter H, Copeland NG, Jenkins NA, Fisher DE: microphthalmia, a critical factor in melanocyte development, defines a discrete transcription factor family, Genes Dev 1994, 8:2770-2780
【非特許文献３】Widlund HR, Horstmann MA, Price ER, Cui J, Lessnick SL, Wu M, He X, Fisher DE: Beta-catenin-induced melanoma growth requires the downstream target Microphthalmia-associated transcription factor., J Cell Biol 2002, 158:1079-1087. Epub 2002 Sep 1016
【非特許文献４】Huber WE, Price ER, Widlund HR, Du J, Davis IJ, Wegner M, Fisher DE: A tissue-restricted cAMP transcriptional response: SOX10 modulates alpha-melanocyte-stimulating hormone-triggered expression of microphthalmia-associated transcription factor in melanocytes., J Biol Chem 2003, 278:45224-45230. Epub 42003 Aug 45227
【非特許文献５】Price ER, Fisher DE: Sensorineural deafness and pigmentation genes: melanocytes and the Mitf transcriptional network, Neuron 2001, 30:15-18
【非特許文献６】Hemesath TJ, Price ER, Takemoto C, Badalian T, Fisher DE: MAP kinase links the transcription factor Microphthalmia to c-Kit signalling in melanocytes, Nature 1998, 391:298-301
【非特許文献７】Wu M, Hemesath TJ, Takemoto CM, Horstmann MA, Wells AG, Price ER, Fisher DZ, Fisher DE: c-Kit triggers dual phosphorylations, which couple activation and degradation of the essential melanocyte factor Mi, Genes Dev 2000, 14:301-312
【非特許文献８】Miller AJ, Levy C, Davis IJ, Razin E, Fisher DE: Sumoylation of MITF and its related family members TFE3 and TFEB, J Biol Chem 2005, 280:146-155
【発明の概要】
【０００８】
色素沈着の制御は、メラニン細胞内でのMITF転写因子の調節を通じて主に行われることが示されている。メラニン細胞内のメラニン細胞刺激ホルモン(MSH)、エンドセリン、c-Kit、およびc-MET経路を含む複数のシグナル伝達経路がこの因子に集中している。これらのシグナルの源は、表皮内の、隣接したケラチノサイトから主に生じ、紫外線照射はこれらの刺激因子のいくつかの重要なトリガーである。色素沈着過剰は、多くのヒト集団内で共通のかつ美容上厄介な問題である。その原因は、完全には理解されていないが、しかしホルモンの、炎症後の、加齢性の、および他の病因を含む。色素沈着過剰を処置するための現在の戦略は、チロシナーゼ酵素の阻害、つまり効力が限られかつ毒性といくぶん関連した戦略に主に限定されている。
【０００９】
本発明の1つの局面は、対象の皮膚色素沈着を調節するための方法を提供する。いくつかの態様において、対象の皮膚色素沈着を調節するための方法は、皮膚色素沈着の調節を必要としている対象に小眼球症関連転写因子(MITF)の発現または活性化を阻害するための薬剤を投与する段階を含む。いくつかの態様において、MITFの発現または活性化を阻害するための薬剤は、本発明の低分子スクリーニングを用いて特定された化合物を含む。いくつかの態様において、MITFの発現または活性化を阻害するための薬剤は、以下からなる群より選択されうる:
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
5-クロロ-7-[(2-クロロ-6-フルオロフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
(1S,2R,3S,6S)-1-ベンゾイル-6-tert-ブチルスピロ[2.5]オクタン-1,2-ジカルボニトリル;
N-[(4-クロロフェニル)(2-ヒドロキシ-1-ナフチル)メチル]-3-メトキシベンズアミド;
エチル-1-ベンジル-5-[3-(tert-ブチルアミノ)-2-ヒドロキシプロポキシ]-2-メチル-1H-インドール-3-カルボキシレート;
5-クロロ-7-[(2,5-ジメチルフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
N-[5-(2,3-ジヒドロ-1,4-ベンゾジオキシン-6-イル)-2-メチル-3-フロイル]グリシン;
[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]酢酸;
N-(2-フルオロフェニル)-2-{[5-(3-メチルフェニル)-1,3,4-オキサジアゾール-2-イル]チオ}アセトアミド;
N-[4-(6-メチル-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェニル]-2-[(5-メチル-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
2-(2-ブロモ-4-tert-ブチルフェノキシ)-N-(2-メトキシ-5-ニトロフェニル)アセトアミド;
メチル-5-{[(4-フルオロ-2-メチルフェニル)スルホニル](イソニコチノイル)アミノ}-2-メチル-1-ベンゾフラン-3-カルボキシレート;
1-(4-クロロベンジル)-N-(ピリジン-3-イルメチル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン;
2-{[5-(4-クロロフェニル)-4-(3-メチルフェニル)-4H-1,2,4-トリアゾール-3-イル]チオ}-N-(3-メトキシフェニル)アセトアミド;
N-フェニル-3-[(4-フェニル-1,3-チアゾール-2-イル)チオ]プロパンアミド;
エチル-[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]アセテート;
2-メチル-3-[(4-メチルピペリジン-1-イル)カルボニル]ナフト[2,3-b]フラン-4,9-ジオン;
N-(3-フェニルプロピル)-10H-フェノチアジン-10-カルボキサミド;
5-(4-クロロフェニル)-2-ピロリジン-1-イル-6H-1,3,4-チアジアジン;
7-(4-フルオロフェニル)-1-(2-フリルメチル)-5,5-ビス(トリフルオロメチル)-5,8-ジヒドロピリミド[4,5-d]ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン;
3-{[(2-ブロモ-4-メチルフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
3-{[4-(ヒドロキシメチル)-2-メトキシフェノキシ]メチル}安息香酸;
5-フェニル[1,2,5]オキサジアゾロ[3,4-b]ピラジン;
2,3,9-トリメトキシ-6a,12a-ジヒドロクロモエオ(dihydrochromoeo)[3,4-b]クロメン-12(6H)-オン;
4-[(4-クロロベンジル)オキシ]-3-メトキシ-N-(2-メチル-5-[1,3]オキサゾロ[4,5-b]ピリジン-2-イルフェニル)ベンズアミド;
3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イルチオ)プロパン酸;
3-{[(4-エトキシフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
N-[4-クロロ-3-(トリフルオロメチル)フェニル]-1-[(2,5-ジメトキシフェニル)スルホニル]ピペリジン-4-カルボキサミド;
N-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-2-[(5-ニトロ-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
5-[4-(4-tert-ブチルベンゾイル)ピペラジン-1-イル]-2-ニトロ-N-(ピリジン-3-イルメチル)アニリン;
3-{[2-クロロ-4-(ヒドロキシメチル)フェノキシ]メチル}安息香酸;
{[(2-クロロフェニル)アミノ][(3-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル;
{[(4-ブロモフェニル)アミノ][(4-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル; および
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
(3,5-ジ-t-ブチル-4-ヒドロキシベンジリデン)マロノニトリル;
2-アミノ-N-{5-[6-(ジメチルアミノ)-9H-プリン-9-イル]-4-ヒドロキシ-2-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロフラン-3-イル}-3-(4-メトキシフェニル)プロパンアミド;
1,3,6-トリヒドロキシ-7-メトキシ-2,8-ビス(3-メチルブタ-2-エン-1-イル)-9H-キサンテン-9-オン;
(3S,3aR,4R,6S,6aR,7S,8R,9bR)-6-アセトキシ-4-(ブチリルオキシ)-3,3a-ジヒドロキシ-3,6,9-トリメチル-8-{[(2Z)-2-メチルブタ-2-エノイル]オキシ}-2-オキソ-2,3,3a,4,5,6,6a,7,8,9b-デカヒドロアズレノ[4,5-b]フラン-7-イルヘキサノエート;
(1E,5S)-6,6,6-トリフルオロ-5-ヒドロキシ-1,5-ジフェニルヘキサ-1-エン-3-オン;
2-(4-メトキシフェニル)-1,3-ベンゾチアゾール;
エチル-4-アミノ-2-{[(1E)-3-(4-メチルフェニル)-3-オキソプロパ-1-エン-1-イル]チオ}ピリミジン-5-カルボキシレート;
3-[(5-クロロ-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)チオ]-5,5-ジメチルシクロヘキサ-2-エン-1-オン;
(2E)-3-[(5-メチル-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]-1-フェニルプロパ-2-エン-1-オン;
11,12-ジヒドロキシ-3-イソブチル-4,5,8-トリメチル-3,3a,4,6a,9,10,11,12-オクタヒドロ-1H-シクロウンデカ[d]イソインドール-1,15(2H)-ジオン;
3-(ヒドロキシメチル)-6-イソプロピル-5-[(2-メチルブタ-2-エノイル)オキシ]-2-オキソシクロヘキサ-3-エン-1-イル4-ヒドロキシ-2-メチルブタ-2-エノエート;
1,11,12-トリヒドロキシ-2,16-ジオキソ-11,20-エポキシピクラサ-3-エン-15-イル2-ヒドロキシ-2-メチルブタノエート;
1-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-3-[3-クロロ-4-(イソプロピルスルホニル)-2-チエニル]尿素;
それらの薬学的に許容される塩;
ならびにそれらの任意の組み合わせ。
【００１０】
いくつかの態様において、MITFの発現または活性化を阻害するための薬剤は、以下からなる群より選択され得る:
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
5-クロロ-7-[(2-クロロ-6-フルオロフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
(1S,2R,3S,6S)-1-ベンゾイル-6-tert-ブチルスピロ[2.5]オクタン-1,2-ジカルボニトリル;
N-[(4-クロロフェニル)(2-ヒドロキシ-1-ナフチル)メチル]-3-メトキシベンズアミド;
エチル-1-ベンジル-5-[3-(tert-ブチルアミノ)-2-ヒドロキシプロポキシ]-2-メチル-1H-インドール-3-カルボキシレート;
5-クロロ-7-[(2,5-ジメチルフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
N-[5-(2,3-ジヒドロ-1,4-ベンゾジオキシン-6-イル)-2-メチル-3-フロイル]グリシン;
[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]酢酸;
N-(2-フルオロフェニル)-2-{[5-(3-メチルフェニル)-1,3,4-オキサジアゾール-2-イル]チオ}アセトアミド;
N-[4-(6-メチル-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェニル]-2-[(5-メチル-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
2-(2-ブロモ-4-tert-ブチルフェノキシ)-N-(2-メトキシ-5-ニトロフェニル)アセトアミド;
メチル-5-{[(4-フルオロ-2-メチルフェニル)スルホニル](イソニコチノイル)アミノ}-2-メチル-1-ベンゾフラン-3-カルボキシレート;
1-(4-クロロベンジル)-N-(ピリジン-3-イルメチル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン;
2-{[5-(4-クロロフェニル)-4-(3-メチルフェニル)-4H-1,2,4-トリアゾール-3-イル]チオ}-N-(3-メトキシフェニル)アセトアミド;
N-フェニル-3-[(4-フェニル-1,3-チアゾール-2-イル)チオ]プロパンアミド;
エチル-[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]アセテート;
2-メチル-3-[(4-メチルピペリジン-1-イル)カルボニル]ナフト[2,3-b]フラン-4,9-ジオン;
N-(3-フェニルプロピル)-10H-フェノチアジン-10-カルボキサミド;
5-(4-クロロフェニル)-2-ピロリジン-1-イル-6H-1,3,4-チアジアジン;
7-(4-フルオロフェニル)-1-(2-フリルメチル)-5,5-ビス(トリフルオロメチル)-5,8-ジヒドロピリミド[4,5-d]ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン;
3-{[(2-ブロモ-4-メチルフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
3-{[4-(ヒドロキシメチル)-2-メトキシフェノキシ]メチル}安息香酸;
5-フェニル[1,2,5]オキサジアゾロ[3,4-b]ピラジン;
2,3,9-トリメトキシ-6a,12a-ジヒドロクロモエオ[3,4-b]クロメン-12(6H)-オン;
4-[(4-クロロベンジル)オキシ]-3-メトキシ-N-(2-メチル-5-[1,3]オキサゾロ[4,5-b]ピリジン-2-イルフェニル)ベンズアミド;
3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イルチオ)プロパン酸;
3-{[(4-エトキシフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
N-[4-クロロ-3-(トリフルオロメチル)フェニル]-1-[(2,5-ジメトキシフェニル)スルホニル]ピペリジン-4-カルボキサミド;
N-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-2-[(5-ニトロ-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
5-[4-(4-tert-ブチルベンゾイル)ピペラジン-1-イル]-2-ニトロ-N-(ピリジン-3-イルメチル)アニリン;
3-{[2-クロロ-4-(ヒドロキシメチル)フェノキシ]メチル}安息香酸;
{[(2-クロロフェニル)アミノ][(3-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル;
{[(4-ブロモフェニル)アミノ][(4-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル;
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
それらの薬学的に許容される塩;
およびそれらの任意の組み合わせ。
【００１１】
いくつかの態様において、MITFの発現または活性化を阻害するための薬剤は、以下からなる群より選択され得る:
(3,5-ジ-t-ブチル-4-ヒドロキシベンジリデン)マロノニトリル;
2-アミノ-N-{5-[6-(ジメチルアミノ)-9H-プリン-9-イル]-4-ヒドロキシ-2-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロフラン-3-イル}-3-(4-メトキシフェニル)プロパンアミド;
1,3,6-トリヒドロキシ-7-メトキシ-2,8-ビス(3-メチルブタ-2-エン-1-イル)-9H-キサンテン-9-オン;
(3S,3aR,4R,6S,6aR,7S,8R,9bR)-6-アセトキシ-4-(ブチリルオキシ)-3,3a-ジヒドロキシ-3,6,9-トリメチル-8-{[(2Z)-2-メチルブタ-2-エノイル]オキシ}-2-オキソ-2,3,3a,4,5,6,6a,7,8,9b-デカヒドロアズレノ[4,5-b]フラン-7-イルヘキサノエート;
(1E,5S)-6,6,6-トリフルオロ-5-ヒドロキシ-1,5-ジフェニルヘキサ-1-エン-3-オン;
2-(4-メトキシフェニル)-1,3-ベンゾチアゾール;
エチル-4-アミノ-2-{[(1E)-3-(4-メチルフェニル)-3-オキソプロパ-1-エン-1-イル]チオ}ピリミジン-5-カルボキシレート;
3-[(5-クロロ-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)チオ]-5,5-ジメチルシクロヘキサ-2-エン-1-オン;
(2E)-3-[(5-メチル-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]-1-フェニルプロパ-2-エン-1-オン;
11,12-ジヒドロキシ-3-イソブチル-4,5,8-トリメチル-3,3a,4,6a,9,10,11,12-オクタヒドロ-1H-シクロウンデカ[d]イソインドール-1,15(2H)-ジオン;
3-(ヒドロキシメチル)-6-イソプロピル-5-[(2-メチルブタ-2-エノイル)オキシ]-2-オキソシクロヘキサ-3-エン-1-イル4-ヒドロキシ-2-メチルブタ-2-エノエート;
1,11,12-トリヒドロキシ-2,16-ジオキソ-11,20-エポキシピクラサ-3-エン-15-イル2-ヒドロキシ-2-メチルブタノエート;
1-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-3-[3-クロロ-4-(イソプロピルスルホニル)-2-チエニル]尿素;
それらの薬学的に許容される塩;
およびそれらの任意の組み合わせ。
【００１２】
いくつかの態様において、MITFの発現または活性化を阻害するための薬剤は、以下からなる群より選択され得る:
1,3,6-トリヒドロキシ-7-メトキシ-2,8-ビス(3-メチルブタ-2-エン-1-イル)-9H-キサンテン-9-オン;
(1E,5S)-6,6,6-トリフルオロ-5-ヒドロキシ-1,5-ジフェニルヘキサ-1-エン-3-オン;
3-(ヒドロキシメチル)-6-イソプロピル-5-[(2-メチルブタ-2-エノイル)オキシ]-2-オキソシクロヘキサ-3-エン-1-イル-4-ヒドロキシ-2-メチルブタ-2-エノエート;
それらの薬学的に許容される塩;
およびそれらの任意の組み合わせ。
【００１３】
MITFはメラニン細胞の分化/色素沈着において中心的な役割を果たす。MITFの発現はメラニン細胞刺激ホルモン(MSH)の下流のcAMP経路により調節され、その転写標的には、チロシナーゼ、およびチロシンからのメラニンの産生に能動的に関与する大部分の酵素が含まれる。ゆえに、本発明の1つの局面は、対象、特にヒトにおける皮膚色素沈着を調節するために使用されうる、小眼球症関連転写因子(MITF)の発現および/または活性を阻害する能力を有する化合物を特定する段階を含む。
【００１４】
本発明の別の局面は、MITF転写因子の活性を下方制御できる化合物を特定するための低分子スクリーニングを提供する。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
発明の詳細な説明
本発明の1つの局面は、対象の皮膚色素沈着を調節するための方法を提供する。皮膚色素沈着を調節する1つの方法は、メラニン細胞の制御および色素沈着過剰の阻害によるものである。皮膚色素沈着の調節は、黒色表皮症、白皮症、色素過剰症、色素失調症、肝斑および老化した手、マッキューン・オールブライト症候群、黒皮症、進行性色素性紫斑、スタージ・ウェーバー症候群、色素性乾皮症、およびワールデンブルグ症候群などの多数の状態において未解決である。色素沈着の制御は、メラニン細胞内でのMITF転写因子の調節を通じて主に行われることが示されている。メラニン細胞内のメラニン細胞刺激ホルモン(MSH)、エンドセリン、c-Kit、およびc-MET経路を含む複数のシグナル伝達経路がこの因子に集中している。これらのシグナルの源は、表皮内の、隣接したケラチノサイトから主に生じ、紫外線照射はこれらの刺激因子のいくつかの重要なトリガーである。
【００１６】
いくつかの態様において、対象の皮膚色素沈着を調節するための方法は、皮膚色素沈着の調節を必要としている対象に小眼球症関連転写因子(MITF)の発現または活性化を阻害するための薬剤を投与する段階を含む。
【００１７】
MITFの発現または活性化を阻害できる薬剤を特定するために、スクリーニングアッセイシステムを開発した。いくつかの態様において、本明細書において記述される化合物は、MITFの発現を、対照または参照レベルよりも少なくとも5% (例えば、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90、95%、99%、100%)阻害することができる。いくつかの態様において、本明細書において記述される化合物は、MITFの活性化を、対照または参照レベルよりも少なくとも5% (例えば、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90、95%、99%、100%)阻害することができる。MITFの発現または活性化の完全な阻害は必要とされないことが理解されるべきである。
【００１８】
スクリーニングアッセイシステムにしたがって、本発明者らは、小眼球症関連転写因子(MITF)の発現または活性化を阻害する能力を有する化合物を特定した。
【００１９】
いくつかの態様において、MITFの発現または活性化を阻害する能力を有する化合物は、以下からなる群より選択される:
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
5-クロロ-7-[(2-クロロ-6-フルオロフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
(1S,2R,3S,6S)-1-ベンゾイル-6-tert-ブチルスピロ[2.5]オクタン-1,2-ジカルボニトリル;
N-[(4-クロロフェニル)(2-ヒドロキシ-1-ナフチル)メチル]-3-メトキシベンズアミド;
エチル-1-ベンジル-5-[3-(tert-ブチルアミノ)-2-ヒドロキシプロポキシ]-2-メチル-1H-インドール-3-カルボキシレート;
5-クロロ-7-[(2,5-ジメチルフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
N-[5-(2,3-ジヒドロ-1,4-ベンゾジオキシン-6-イル)-2-メチル-3-フロイル]グリシン;
[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]酢酸;
N-(2-フルオロフェニル)-2-{[5-(3-メチルフェニル)-1,3,4-オキサジアゾール-2-イル]チオ}アセトアミド;
N-[4-(6-メチル-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェニル]-2-[(5-メチル-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
2-(2-ブロモ-4-tert-ブチルフェノキシ)-N-(2-メトキシ-5-ニトロフェニル)アセトアミド;
メチル-5-{[(4-フルオロ-2-メチルフェニル)スルホニル](イソニコチノイル)アミノ}-2-メチル-1-ベンゾフラン-3-カルボキシレート;
1-(4-クロロベンジル)-N-(ピリジン-3-イルメチル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン;
2-{[5-(4-クロロフェニル)-4-(3-メチルフェニル)-4H-1,2,4-トリアゾール-3-イル]チオ}-N-(3-メトキシフェニル)アセトアミド;
N-フェニル-3-[(4-フェニル-1,3-チアゾール-2-イル)チオ]プロパンアミド;
エチル-[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]アセテート;
2-メチル-3-[(4-メチルピペリジン-1-イル)カルボニル]ナフト[2,3-b]フラン-4,9-ジオン;
N-(3-フェニルプロピル)-10H-フェノチアジン-10-カルボキサミド;
5-(4-クロロフェニル)-2-ピロリジン-1-イル-6H-1,3,4-チアジアジン;
7-(4-フルオロフェニル)-1-(2-フリルメチル)-5,5-ビス(トリフルオロメチル)-5,8-ジヒドロピリミド[4,5-d]ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン;
3-{[(2-ブロモ-4-メチルフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
3-{[4-(ヒドロキシメチル)-2-メトキシフェノキシ]メチル}安息香酸;
5-フェニル[1,2,5]オキサジアゾロ[3,4-b]ピラジン;
2,3,9-トリメトキシ-6a,12a-ジヒドロクロモエオ[3,4-b]クロメン-12(6H)-オン;
4-[(4-クロロベンジル)オキシ]-3-メトキシ-N-(2-メチル-5-[1,3]オキサゾロ[4,5-b]ピリジン-2-イルフェニル)ベンズアミド;
3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イルチオ)プロパン酸;
3-{[(4-エトキシフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
N-[4-クロロ-3-(トリフルオロメチル)フェニル]-1-[(2,5-ジメトキシフェニル)スルホニル]ピペリジン-4-カルボキサミド;
N-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-2-[(5-ニトロ-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
5-[4-(4-tert-ブチルベンゾイル)ピペラジン-1-イル]-2-ニトロ-N-(ピリジン-3-イルメチル)アニリン;
3-{[2-クロロ-4-(ヒドロキシメチル)フェノキシ]メチル}安息香酸;
{[(2-クロロフェニル)アミノ][(3-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル;
{[(4-ブロモフェニル)アミノ][(4-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル; および
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
(3,5-ジ-t-ブチル-4-ヒドロキシベンジリデン)マロノニトリル;
2-アミノ-N-{5-[6-(ジメチルアミノ)-9H-プリン-9-イル]-4-ヒドロキシ-2-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロフラン-3-イル}-3-(4-メトキシフェニル)プロパンアミド;
1,3,6-トリヒドロキシ-7-メトキシ-2,8-ビス(3-メチルブタ-2-エン-1-イル)-9H-キサンテン-9-オン;
(3S,3aR,4R,6S,6aR,7S,8R,9bR)-6-アセトキシ-4-(ブチリルオキシ)-3,3a-ジヒドロキシ-3,6,9-トリメチル-8-{[(2Z)-2-メチルブタ-2-エノイル]オキシ}-2-オキソ-2,3,3a,4,5,6,6a,7,8,9b-デカヒドロアズレノ[4,5-b]フラン-7-イルヘキサノエート;
(1E,5S)-6,6,6-トリフルオロ-5-ヒドロキシ-1,5-ジフェニルヘキサ-1-エン-3-オン;
2-(4-メトキシフェニル)-1,3-ベンゾチアゾール;
エチル-4-アミノ-2-{[(1E)-3-(4-メチルフェニル)-3-オキソプロパ-1-エン-1-イル]チオ}ピリミジン-5-カルボキシレート;
3-[(5-クロロ-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)チオ]-5,5-ジメチルシクロヘキサ-2-エン-1-オン;
(2E)-3-[(5-メチル-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]-1-フェニルプロパ-2-エン-1-オン;
11,12-ジヒドロキシ-3-イソブチル-4,5,8-トリメチル-3,3a,4,6a,9,10,11,12-オクタヒドロ-1H-シクロウンデカ[d]イソインドール-1,15(2H)-ジオン;
3-(ヒドロキシメチル)-6-イソプロピル-5-[(2-メチルブタ-2-エノイル)オキシ]-2-オキソシクロヘキサ-3-エン-1-イル4-ヒドロキシ-2-メチルブタ-2-エノエート;
1,11,12-トリヒドロキシ-2,16-ジオキソ-11,20-エポキシピクラサ-3-エン-15-イル2-ヒドロキシ-2-メチルブタノエート;
1-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-3-[3-クロロ-4-(イソプロピルスルホニル)-2-チエニル]尿素;
それらの薬学的に許容される塩;
ならびにそれらの任意の組み合わせ。
【００２０】
いくつかの態様において、MITFの発現または活性化を阻害する能力を有する化合物は、以下からなる群より選択される:
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
5-クロロ-7-[(2-クロロ-6-フルオロフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
(1S,2R,3S,6S)-1-ベンゾイル-6-tert-ブチルスピロ[2.5]オクタン-1,2-ジカルボニトリル;
N-[(4-クロロフェニル)(2-ヒドロキシ-1-ナフチル)メチル]-3-メトキシベンズアミド;
エチル-1-ベンジル-5-[3-(tert-ブチルアミノ)-2-ヒドロキシプロポキシ]-2-メチル-1H-インドール-3-カルボキシレート;
5-クロロ-7-[(2,5-ジメチルフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
N-[5-(2,3-ジヒドロ-1,4-ベンゾジオキシン-6-イル)-2-メチル-3-フロイル]グリシン;
[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]酢酸;
N-(2-フルオロフェニル)-2-{[5-(3-メチルフェニル)-1,3,4-オキサジアゾール-2-イル]チオ}アセトアミド;
N-[4-(6-メチル-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェニル]-2-[(5-メチル-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
2-(2-ブロモ-4-tert-ブチルフェノキシ)-N-(2-メトキシ-5-ニトロフェニル)アセトアミド;
メチル-5-{[(4-フルオロ-2-メチルフェニル)スルホニル](イソニコチノイル)アミノ}-2-メチル-1-ベンゾフラン-3-カルボキシレート;
1-(4-クロロベンジル)-N-(ピリジン-3-イルメチル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン;
2-{[5-(4-クロロフェニル)-4-(3-メチルフェニル)-4H-1,2,4-トリアゾール-3-イル]チオ}-N-(3-メトキシフェニル)アセトアミド;
N-フェニル-3-[(4-フェニル-1,3-チアゾール-2-イル)チオ]プロパンアミド;
エチル-[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]アセテート;
2-メチル-3-[(4-メチルピペリジン-1-イル)カルボニル]ナフト[2,3-b]フラン-4,9-ジオン;
N-(3-フェニルプロピル)-10H-フェノチアジン-10-カルボキサミド;
5-(4-クロロフェニル)-2-ピロリジン-1-イル-6H-1,3,4-チアジアジン;
7-(4-フルオロフェニル)-1-(2-フリルメチル)-5,5-ビス(トリフルオロメチル)-5,8-ジヒドロピリミド[4,5-d]ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン;
3-{[(2-ブロモ-4-メチルフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
3-{[4-(ヒドロキシメチル)-2-メトキシフェノキシ]メチル}安息香酸;
5-フェニル[1,2,5]オキサジアゾロ[3,4-b]ピラジン;
2,3,9-トリメトキシ-6a,12a-ジヒドロクロモエオ[3,4-b]クロメン-12(6H)-オン;
4-[(4-クロロベンジル)オキシ]-3-メトキシ-N-(2-メチル-5-[1,3]オキサゾロ[4,5-b]ピリジン-2-イルフェニル)ベンズアミド;
3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イルチオ)プロパン酸;
3-{[(4-エトキシフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
N-[4-クロロ-3-(トリフルオロメチル)フェニル]-1-[(2,5-ジメトキシフェニル)スルホニル]ピペリジン-4-カルボキサミド;
N-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-2-[(5-ニトロ-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
5-[4-(4-tert-ブチルベンゾイル)ピペラジン-1-イル]-2-ニトロ-N-(ピリジン-3-イルメチル)アニリン;
3-{[2-クロロ-4-(ヒドロキシメチル)フェノキシ]メチル}安息香酸;
{[(2-クロロフェニル)アミノ][(3-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル;
{[(4-ブロモフェニル)アミノ][(4-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル; および
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
それらの薬学的に許容される塩;
ならびにそれらの任意の組み合わせ。
【００２１】
いくつかの態様において、MITFの発現または活性化を阻害する能力を有する化合物は、以下からなる群より選択される:
(3,5-ジ-t-ブチル-4-ヒドロキシベンジリデン)マロノニトリル;
2-アミノ-N-{5-[6-(ジメチルアミノ)-9H-プリン-9-イル]-4-ヒドロキシ-2-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロフラン-3-イル}-3-(4-メトキシフェニル)プロパンアミド;
1,3,6-トリヒドロキシ-7-メトキシ-2,8-ビス(3-メチルブタ-2-エン-1-イル)-9H-キサンテン-9-オン;
(3S,3aR,4R,6S,6aR,7S,8R,9bR)-6-アセトキシ-4-(ブチリルオキシ)-3,3a-ジヒドロキシ-3,6,9-トリメチル-8-{[(2Z)-2-メチルブタ-2-エノイル]オキシ}-2-オキソ-2,3,3a,4,5,6,6a,7,8,9b-デカヒドロアズレノ[4,5-b]フラン-7-イルヘキサノエート;
(1E,5S)-6,6,6-トリフルオロ-5-ヒドロキシ-1,5-ジフェニルヘキサ-1-エン-3-オン;
2-(4-メトキシフェニル)-1,3-ベンゾチアゾール;
エチル-4-アミノ-2-{[(1E)-3-(4-メチルフェニル)-3-オキソプロパ-1-エン-1-イル]チオ}ピリミジン-5-カルボキシレート;
3-[(5-クロロ-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)チオ]-5,5-ジメチルシクロヘキサ-2-エン-1-オン;
(2E)-3-[(5-メチル-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]-1-フェニルプロパ-2-エン-1-オン;
11,12-ジヒドロキシ-3-イソブチル-4,5,8-トリメチル-3,3a,4,6a,9,10,11,12-オクタヒドロ-1H-シクロウンデカ[d]イソインドール-1,15(2H)-ジオン;
3-(ヒドロキシメチル)-6-イソプロピル-5-[(2-メチルブタ-2-エノイル)オキシ]-2-オキソシクロヘキサ-3-エン-1-イル4-ヒドロキシ-2-メチルブタ-2-エノエート;
1,11,12-トリヒドロキシ-2,16-ジオキソ-11,20-エポキシピクラサ-3-エン-15-イル2-ヒドロキシ-2-メチルブタノエート;
1-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-3-[3-クロロ-4-(イソプロピルスルホニル)-2-チエニル]尿素;
それらの薬学的に許容される塩;
およびそれらの任意の組み合わせ。
【００２２】
いくつかの態様において、MITFの発現または活性化を阻害する能力を有する化合物は、以下からなる群より選択される:
1,3,6-トリヒドロキシ-7-メトキシ-2,8-ビス(3-メチルブタ-2-エン-1-イル)-9H-キサンテン-9-オン;
(1E,5S)-6,6,6-トリフルオロ-5-ヒドロキシ-1,5-ジフェニルヘキサ-1-エン-3-オン;
3-(ヒドロキシメチル)-6-イソプロピル-5-[(2-メチルブタ-2-エノイル)オキシ]-2-オキソシクロヘキサ-3-エン-1-イル-4-ヒドロキシ-2-メチルブタ-2-エノエート;
それらの薬学的に許容される塩;
およびそれらの任意の組み合わせ。
【００２３】
いくつかの態様において、小眼球症関連転写因子(MITF)の発現または活性化を阻害するための薬剤は、非経口的に投与することができ、その薬剤は、例えば、外用組成物として調製することができる。
【００２４】
薬学的組成物
本発明の1つの局面において、1種もしくは複数種(例えば1、2、3、4、5、6、7、8、9、10種もしくはそれ以上)の本明細書において記述される化合物(またはそのプロドラッグ、薬学的に許容される塩、もしくは他の薬学的に許容される形態)と、任意で薬学的に許容される賦形剤とを含む、薬学的組成物が提供される。特定の態様において、これらの組成物は任意で、1つまたは複数のさらなる治療剤をさらに含んでもよい。あるいは、本発明の化合物はそれを必要としている患者に、1つまたは複数の他の治療剤の投与と組み合わせて投与することもできる。例えば、皮膚色素沈着の調節において、本発明の化合物とともに薬学的組成物の中に含めるためのまたは共同投与するためのさらなる治療剤は、承認された皮膚色素沈着剤でありうる。
【００２５】
薬学的組成物中の化合物の量は、重量、モル、または体積に基づいていてもよい。いくつかの態様において、薬学的組成物は本発明の化合物を少なくとも0.0001%含む。いくつかの態様において、薬学的組成物は本発明の化合物を少なくとも0.1%含む。いくつかの態様において、薬学的組成物は本発明の化合物を少なくとも0.5%含む。いくつかの態様において、薬学的組成物は本発明の化合物を少なくとも1%含む。いくつかの態様において、薬学的組成物は本発明の化合物を少なくとも2%含む。いくつかの態様において、薬学的組成物は本発明の化合物を少なくとも3%含む。いくつかの態様において、薬学的組成物は本発明の化合物を少なくとも4%含む。いくつかの態様において、薬学的組成物は本発明の化合物を少なくとも5%含む。いくつかの態様において、薬学的組成物は本発明の化合物を少なくとも10%含む。いくつかの態様において、薬学的組成物は本発明の化合物を0.01%〜99%含む。いくつかの態様において、薬学的組成物は本発明の化合物を0.05%〜90%含む。いくつかの態様において、薬学的組成物は本発明の化合物を0.1%〜85%含む。いくつかの態様において、薬学的組成物は本発明の化合物を0.5%〜80%含む。いくつかの態様において、薬学的組成物は本発明の化合物を1%〜75%含む。いくつかの態様において、薬学的組成物は本発明の化合物を2%〜70%含む。いくつかの態様において、薬学的組成物は本発明の化合物を3%〜65%含む。いくつかの態様において、薬学的組成物は本発明の化合物を4%〜60%含む。いくつかの態様において、薬学的組成物は本発明の化合物を5%〜50%含む。
【００２６】
本発明の特定の化合物は、処置のために遊離形態で、または適切な場合にはその薬学的に許容される誘導体として存在してよいことも理解されよう。本発明によれば、薬学的に許容される誘導体は、薬学的に許容される塩、エスエル、このようなエステルの塩、またはプロドラッグ、あるいは、必要としている患者へ投与されると本明細書において別途記述されている化合物またはその代謝物もしくは残留物を直接的にまたは間接的に提供できる本発明の化合物の他の付加物または誘導体を含むが、これらに限定されない。
【００２７】
上記のように、本発明の薬学的組成物は、薬学的に許容される賦形剤を任意で含んでもよく、賦形剤は、本明細書において用いられる場合、望まれる特定の剤形に適合するように、いかなるおよび全ての溶媒、希釈剤、または他の液体媒体、分散補助物質または懸濁補助物質、界面活性剤、等張剤、増粘剤または乳化剤、保存料、抗酸化物質、固体結合剤、滑沢剤などを含む。Remington's Pharmaceutical Sciences, Sixteenth Edition, E. W. Martin (Mack Publishing Co., Easton, PA, 1980)には、薬学的組成物を製剤化する際に用いられるさまざまな賦形剤およびその調製のための公知の技法が開示されている。任意の従来の賦形剤媒質が本発明の化合物と、例えば任意の望ましくない生物学的作用を生じることによって、またはさもなければ薬学的組成物の任意の他の成分と有害な形で相互作用することによって不適合である場合を除き、その使用は、本発明の範囲内にあることが企図される。薬学的に許容される賦形剤として機能しうる物質のいくつかの例としては、糖、例えばラクトース、グルコースおよびスクロース; デンプン、例えばトウモロコシデンプンおよびジャガイモデンプン; セルロースおよびその誘導体、例えばナトリウムカルボキシメチルセルロース、エチルセルロースおよび酢酸セルロース; 粉末トラガカント; 麦芽；ゼラチン; タルク; 賦形剤、例えばカカオ脂および坐薬ろう; 油、例えばラッカセイ油、綿実油; ベニバナ油、ゴマ油; オリーブ油; トウモロコシ油およびダイズ油; グリコール; 例えばプロピレングリコール; エステル、例えばオレイン酸エチルおよびラウリン酸エチル; 寒天; 緩衝剤、例えば水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウム; アルギン酸; 発熱性物質を伴わない水; 等張性生理食塩水; リンゲル液; エチルアルコール、およびリン酸緩衝液; ならびに他の無毒適合性の滑沢剤、例えばラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウムが挙げられるが、これらに限定されることはなく、同様に着色剤、放出剤、コーティング剤、甘味料、香味剤および芳香剤、保存料および抗酸化物質も、調剤者の判断にしたがって組成物中に存在してよい。
【００２８】
経口投与用の液体剤形は、薬学的に許容されるエマルジョン、マイクロエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシルを含むが、これらに限定されない。液体剤形は、活性化合物に加えて、例えば、水または他の溶媒のような、当技術分野において通常使用される不活性希釈剤、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、1,3-ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油(特に、綿実油、ラッカセイ油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油、およびゴマ油)、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにその混合物のような、可溶化剤および乳化剤を含むことができる。不活性希釈剤の他に、経口組成物は補助物質、例えば湿潤剤、乳化剤および懸濁化剤、甘味料、香味剤および芳香剤を含むこともできる。
【００２９】
注射用調製物、例えば、滅菌注射用水性懸濁物または油性懸濁物は、適切な分散剤または湿潤剤および懸濁化剤を用い、公知の技術にしたがって製剤化することができる。滅菌注射用調製物は、無毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中にて、例えば、1,3-ブタンジオール中の溶液として、滅菌注射用溶液、懸濁液またはエマルジョンとすることもできる。利用可能な許容される媒体および溶媒の中には、水、リンゲル溶液(米国薬局方)および等張性塩化ナトリウム溶液がある。さらに、滅菌固定油が溶媒または懸濁化媒質として従来から利用されている。この目的のために、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含めて、任意の無刺激性の固定油を利用することができる。さらに、オレイン酸のような脂肪酸が注射用物質の調製において用いられる。
【００３０】
注射用製剤は、例えば、細菌保持フィルターを通じたろ過により、または使用の前に滅菌水もしくは他の滅菌注射用媒質中に溶解もしくは分散されうる滅菌固体組成物の形態で滅菌剤を組み込むことにより、滅菌することができる。
【００３１】
薬物の効果を長期化させるために、多くの場合、皮下注射または筋肉内注射からの薬物の吸収を遅延させることが望ましい。これは、難水溶性を有する結晶または無定形物質の液体懸濁物の使用によって達成することができる。薬物の吸収速度は次いで、その溶解速度に依存し、これが今度は、結晶サイズおよび結晶形態に依存しうる。あるいは、非経口投与された薬物形態の吸収の遅延は、油媒体中に薬物を溶解または懸濁することによって達成される。注射用デポー形態は、ポリラクチド-ポリグリコリドなどの生分解性ポリマー中に薬物のマイクロカプセル化マトリックスを形成させることによって作製される。薬物とポリマーとの比率および利用される特定のポリマーの性質に依り、薬物放出の速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例としては、ポリ(オルトエステル)およびポリ(無水物)が挙げられる。デポー注射用製剤は、生体組織と適合するリポソームまたはマイクロエマルジョン中に薬物を捕捉することによっても調製される。
【００３２】
直腸投与または膣投与のための組成物は、好ましくは、本発明の化合物と、周囲温度で固体であるが、体温では液体であるので、直腸腔または膣腔中で溶解し、活性化合物を放出するカカオ脂、ポリエチレングリコール、または坐薬ろうのような、適当な非刺激性の賦形剤または担体とを混合することによって調製されうる坐薬である。
【００３３】
経口投与のための固体剤形は、カプセル、錠剤、丸剤、粉末、および顆粒を含む。このような固体剤形において、活性化合物は、少なくとも1種の不活性な薬学的に許容される賦形剤もしくは担体、例えばクエン酸ナトリウムもしくはリン酸二カルシウム、ならびに/またはa) 充填剤もしくはエキステンダー、例えばデンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、およびケイ酸、b) 例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギネート、ゼラチン、ポリビニルピロリジノン、スクロース、およびアカシアゴムのような結合剤、c) 湿潤性物質、例えばグリセロール、d) 崩壊剤、例えば寒天(agar-agar)、炭酸カルシウム、ジャガイモデンプンもしくはタピオカデンプン、アルギン酸、特定のシリケート、および炭酸ナトリウム、e) 溶解遅延剤、例えばパラフィン、f) 吸収促進剤、例えば、第四級アンモニウム化合物、g) 例えば、セチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロールのような湿潤剤、h) 吸収剤、例えばカオリンおよびベントナイトクレイ、ならびにi) 滑沢剤、例えばタルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、およびこれらの混合物と混合される。カプセル、錠剤および丸剤の場合、剤形は緩衝剤を含むこともできる。
【００３４】
類似のタイプの固体組成物を、賦形剤、例えばラクトースまたは乳糖、および高分子量ポリエチレングリコールなどを用いた軟質充填ゼラチンカプセルおよび硬質充填ゼラチンカプセル中に、充填剤として利用することもできる。錠剤、糖衣錠、カプセル、丸剤および顆粒の固体剤形は、コーティングおよびシェル、例えば腸溶性コーティングおよび薬学的製剤化の技術分野において周知の他のコーティングとともに調製することができる。それらは任意で不透明剤を含んでもよく、それらはまた、活性成分のみを、または選択的に腸管の特定の部分において、任意で遅延した形で放出する組成物のものとすることもできる。使用できる埋め込み組成物の例としては、高分子物質およびろうが挙げられる。類似のタイプの固体組成物を、賦形剤、例えばラクトースまたは乳糖、および高分子量ポリエチレングリコールなどを用いた軟質充填ゼラチンカプセルおよび硬質充填ゼラチンカプセル中に、充填剤として利用することもできる。
【００３５】
活性化合物は、上記のように、1種または複数種の賦形剤とともにマイクロカプセル化形態とすることもできる。錠剤、糖衣錠、カプセル、丸剤、および顆粒の固体剤形は、コーティングおよびシェル、例えば腸溶性コーティング、放出制御コーティングおよび薬学的製剤化の技術分野において周知の他のコーティングとともに調製することができる。このような固体剤形において、活性化合物は、少なくとも1種の不活性希釈剤、例えばスクロース、ラクトースおよびデンプンと混合することができる。このような剤形は、通常の実務と同様に、不活性希釈剤以外のさらなる物質、例えば錠剤形成の滑沢剤および他の錠剤形成補助物質、例えばステアリン酸マグネシウムおよび微結晶性セルロースを含むこともできる。カプセル、錠剤および丸剤の場合、剤形は緩衝剤を含むこともできる。それらは任意で不透明剤を含んでもよく、それらはまた、活性成分のみを、または選択的に腸管の特定の部分において、任意で遅延した形で放出する組成物のものとすることもできる。使用できる埋め込み組成物の例としては、高分子物質およびろうが挙げられる。
【００３６】
本発明は、本発明の化合物の薬学的に許容される局所用製剤を包含する。本明細書において用いられる場合、「薬学的に許容される局所用製剤」という用語は、表皮への製剤の適用による本発明の化合物の皮内投与のために薬学的に許容される任意の製剤を意味する。本発明の特定の態様において、局所用製剤は、賦形剤系を含む。薬学的に有効な賦形剤は、溶媒(例えば、アルコール、ポリアルコール、水)、クリーム、ローション、軟膏、油、硬膏、リポソーム、粉末、エマルジョン、マイクロエマルジョン、および緩衝溶液(例えば、低張もしくは緩衝生理食塩水)、または局所投与用の医薬に関して当技術分野において公知の任意の他の賦形剤を含むが、これらに限定されない。当技術分野で公知のカーバー(carver)のより完全なリストは、当技術分野において標準的な参考テキスト、例えば、ともにMack Publishing Company, Easton, Pennsylvaniaによって刊行されたRemington's Pharmaceutical Sciences, 16th Edition, 1980および17th Edition, 1985によって提供されており、これらの開示はその全体が参照により本明細書に組み入れられる。特定の他の態様において、本発明の局所用製剤は、賦形剤を含むことができる。当技術分野において公知の任意の薬学的に許容される賦形剤を用いて、本発明の薬学的に許容される局所用製剤を調製することができる。本発明の局所用製剤に含めることができる賦形剤の例としては、保存料、抗酸化物質、保湿剤、皮膚軟化剤、緩衝剤、可溶化剤、他の浸透剤、皮膚保護薬、界面活性剤、および噴霧剤、ならびに/または本発明の化合物と組み合わせて用いられるさらなる治療剤が挙げられるが、これらに限定されない。適当な保存料は、アルコール、第四級アミン、有機酸、パラベン、およびフェノールを含むが、これらに限定されない。適当な抗酸化物質は、アスコルビン酸およびそのエステル、亜硫酸水素ナトリウム、ブチル化ヒドロキシトルエン、ブチル化ヒドロキシアニソール、トコフェロール、ならびにEDTAおよびクエン酸のようなキレート剤を含むが、これらに限定されない。適当な保湿剤は、グリセリン、ソルビトール、ポリエチレングリコール、尿素およびプロピレングリコールを含むが、これらに限定されない。本発明で用いるのに適した緩衝剤は、クエン酸、塩酸、および乳酸緩衝液を含むが、これらに限定されない。適当な可溶化剤は、第四級塩化アンモニウム、シクロデキストリン、安息香酸ベンジル、レシチンおよびポリソルベートを含むが、これらに限定されない。本発明の局所用製剤において使用できる適当な皮膚保護薬は、ビタミンE油、アラントイン、ジメチコーン、グリセリン、ワセリンおよび酸化亜鉛を含むが、これらに限定されない。
【００３７】
特定の態様において、本発明の薬学的に許容される局所用製剤は、少なくとも1つの本発明の化合物および浸透促進剤を含む。局所用製剤の選択は、処置される状態、本発明の化合物および存在する他の賦形剤の物理化学的特性、製剤中でのその安定性、利用可能な製造装置、ならびに費用制約条件を含む、さまざまな要因に依るであろう。本明細書において用いられる場合、「浸透促進剤」という用語は、好ましくは全身吸収がほとんどまたは全くないまま、薬理学的に活性な化合物を、角質層を通じて表皮または真皮へ輸送できる薬剤を意味する。多種多様の化合物が、皮膚を通じた薬物の浸透速度の増強におけるその有効性に関して評価されている。例えば、さまざまな皮膚浸透促進物質の使用および試験について調査しているPercutaneous Penetration Enhancers, Maibach H. I. and Smith H. E. (eds.), CRC Press, Inc., Boca Raton, Fla. (1995)、およびBuyuktimkin et al., Chemical Means of Transdermal Drug Permeation Enhancement in Transdermal and Topical Drug Delivery Systems, Gosh T. K., Pfister W. R., Yum S. I. (Eds.), Interpharm Press Inc., Buffalo Grove, I11. (1997)を参照されたい。特定の例示的な態様において、本発明で用いられる浸透促進剤は、トリグリセリド(例えば、ダイズ油)、アロエ組成物(例えば、アロエベラゲル)、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、オクトリフェニルポリエチレン(octolyphenylpolyethylene)グリコール、オレイン酸、ポリエチレングリコール400、プロピレングリコール、N-デシルメチルスルホキシド、脂肪酸エステル(例えば、ミリスチン酸イソプロピル、ラウリン酸メチル、モノオレイン酸グリセロールおよびモノオレイン酸プロピレングリコール)、ならびにN-メチルピロリドンを含むが、これらに限定されない。
【００３８】
特定の態様において、組成物は、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ゲル、粉末、溶液、スプレー、吸入薬またはパッチの形態であってもよい。特定の例示的な態様において、本発明による組成物の製剤はクリームであり、これは飽和または不飽和脂肪酸、例えばステアリン酸、パルミチン酸、オレイン酸、パルミト-オレイン酸、セチルまたはオレイルアルコールをさらに含有してよく、ステアリン酸が特に好ましい。本発明のクリームは、非イオン界面活性剤、例えば、ポリオキシ-40-ステアレートを含有することもできる。特定の態様において、活性成分を滅菌条件の下で、薬学的に許容される賦形剤および要求に応じて、必要とされる任意の保存料または緩衝液と混合する。眼科用製剤、点耳薬および点眼薬も、本発明の範囲内であると企図される。さらに、本発明は経皮パッチの使用を企図し、この経皮パッチは、身体への化合物の制御送達を提供するという付加的利点を有する。そのような剤形は、化合物を適切な媒質に溶解または分散させることによって作製される。上記のように、皮膚を通過する化合物の流れを増加させるために、浸透促進剤を用いることもできる。その速度は、速度制御膜を提供することにより、または化合物をポリマーマトリックス(例えば、PLGA)もしくはゲルに分散させることにより、制御することができる。
【００３９】
特定の態様において、本発明の組成物は外用に用いることができ、例えば、軟膏、クリーム、保護物質、粘着皮膚パッチ、パック、化粧水、乳液、ローション、入浴剤、ヘアローション、ヘアトニック、ヘアリキッド、シャンプーおよびリンスが含まれる。さらに、外用薬剤に一般的に用いられる成分、例えば、美白剤、保湿剤、油性成分、UV吸収剤、界面活性剤、増粘剤、アルコール、粉末成分、着色材料、水性成分、水およびさまざまな皮膚栄養素が、本発明の方法において用いられる酸化還元関連因子の発現を増強させるための薬剤中に任意でブレンドされてもよい。さらに、外用調製物に一般的に用いられる補助剤、例えば、金属キレート剤、例えばエデト酸ジナトリウム、エデト酸トリナトリウム、クエン酸ナトリウム、ポリリン酸ナトリウム、メタリン酸ナトリウム、グルコン酸; カフェイン、タンニン、ベラパミル、トラネキサム酸およびそれらの誘導体; 医薬剤、例えば甘草エキス、グラブリジン、カリン熱水抽出物、さまざまな生薬、酢酸トコフェロール、グリシリジネートおよびそれらの誘導体、またはそれらの塩; 美白剤、例えばビタミンC、アスコルビン酸リン酸マグネシウム、アスコルビン酸グルコシド、アルブチン、コウジ酸; 糖、例えばグルコース、フルクトース、マンノース、スクロース、およびトレハロース; ビタミンA、例えばレチノイン酸、レチノール、酢酸レチノール、およびパルミチン酸レチノールが、本発明の方法において用いられるMITFの発現を阻害するための薬剤中に任意でブレンドされてもよい。
【００４０】
本発明の化合物および薬学的組成物は、併用治療において製剤化および利用されうること、すなわち、その化合物および薬学的組成物は、1つもしくは複数の他の所望の治療用物質もしくは医学的手順とともに製剤化されうるか、あるいは1つもしくは複数の他の所望の治療用物質もしくは医学的手順と同時に、それより前に、またはそれより後に投与されうることも理解されよう。併用レジメンにおいて利用される治療(治療用物質または手順)の特定の組み合わせでは、所望の治療用物質および/または手順の適合性、ならびに達成されるべき所望の治療効果を考慮に入れる。利用される治療は、同じ障害に対して所望とされる効果を達成しうる(例えば、発明の化合物は別の皮膚色素沈着調節剤と同時に投与されうる)こと、またはそれらは異なる効果(例えば、副作用の制御)を達成しうることも理解されよう。
【００４１】
例えば、皮膚色素沈着の調節のための本発明の発明化合物と併用できる他の治療または皮膚色素沈着調節剤は、キナの木由来のキノリンベースのアルカロイド、特にキニーネ、クロロキニーネ; アルテミシニン; およびアミノアルキルフェノールを含むが、これらに限定されない。
【００４２】
特定の態様において、本発明の薬学的組成物は、1つまたは複数のさらなる治療的に活性な成分(例えば、化学療法薬および/または苦痛緩和剤)をさらに含む。本発明の目的のために、「苦痛緩和」という用語は、疾患の症状および/または治療レジメンの副作用の緩和に焦点を合わせているが、しかし治癒的ではない処置をいう。
【００４３】
さらに、本発明は、本発明の皮膚色素沈着調節化合物の薬学的に許容される誘導体を提供し、かつこれらの化合物、その薬学的組成物、またはこれらのうちのいずれかと、1つもしくは複数のさらなる治療剤とを組み合わせて用いて対象を処置する方法を提供する。
【００４４】
本発明の特定の化合物は、処置のために遊離形態で、または適切な場合にはその薬学的に許容される誘導体として存在してよいことも理解されよう。本発明によれば、薬学的に許容される誘導体は、薬学的に許容される塩、エスエル、このようなエステルの塩、またはプロドラッグ、あるいは、必要としている患者へ投与されると本明細書において別途記述されている化合物またはその代謝物もしくは残留物を直接的にまたは間接的に提供できる本発明の化合物の他の付加物または誘導体を含むが、これらに限定されない。
【００４５】
本発明は同様に、上記の化合物のプロドラッグ形態を提供し、ここでプロドラッグはインビボで代謝されて、上記のような類似体または誘導体を生じる。実際、上記の類似体または誘導体のいくつかは、別の類似体または誘導体のプロドラッグでありうる。「プロドラッグ」という用語は、当技術分野においてよく理解されており、生体システムにおいて薬学的に活性な化合物に変換される化合物を含む。例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, 1980, vol. 16, Mack Publishing Company, Easton, Pa., 61 and 424を参照されたい。
【００４６】
本発明の別の局面は、本発明による方法を好都合にかつ効果的に実施するためのキットに関する。一般に、薬学的パックまたはキットは、本発明の薬学的組成物の成分の1つまたは複数で満たされた1つまたは複数の容器を含む。こうした容器には薬学的製品の製造、使用または販売を統制する政府機関により定められた形式の表示を任意で添付してもよく、こうした表示はヒト投与のための製造、使用または販売の当該機関による認可を反映するものである。
【００４７】
薬学的使用および処置の方法
一般に、本発明の化合物を使用する方法は、それを必要としている対象に本発明の化合物の治療的有効量を投与する段階を含む。
【００４８】
本発明の化合物および薬学的組成物は、適切な経路によって投与することができる。適当な投与経路は、経口、腹腔内、皮下、筋肉内、経皮、直腸、舌下静脈内、口腔内、または吸入を含むが、これらに限定されない。好ましくは、本発明の化合物および薬学的組成物は、局所的に投与される。本発明の薬学的組成物は、化合物または混合物を、経口的に、非経口的に、静脈内に、皮内に、筋肉内にもしくは皮下に、直腸に、吸入によってもしくは口腔内投与によって、または経皮的に、投与可能にするのに適した、薬学的に許容される賦形剤を含有するのが好ましい。活性成分を、従来の薬学的に許容される賦形剤と混合または調合することができる。慣例的に利用され、かつ活性薬剤に対して不活性の、投与方式、媒体、賦形剤または担体は、本発明の薬学的組成物を調製および投与するために利用されうることが当業者によって理解されよう。そのような方法、媒体、賦形剤および担体の例は、例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th ed. (1990)に記述されているものであり、その開示は参照により本明細書に組み入れられる。対象において用いられる本発明の製剤は、薬剤を、1つまたは複数の許容されるその賦形剤、および任意で他の治療剤とともに含む。賦形剤は、製剤の他の成分と適合性であり、かつそのレシピエントに有害でないという意味において「許容され」ていなければならない。製剤は慣例的に、単位剤形で提示することができ、製薬学の分野において周知の任意の方法によって調製することができる。全ての方法は、薬剤と、1つまたは複数の補助成分を構成する賦形剤とを混ぜ合わせる段階を含む。一般に、製剤は、薬剤と賦形剤とを均質かつ密接に混ぜ合わせ、その後、必要なら、生成物をその単位投与量に分割することによって調製される。
【００４９】
経口投与に適した形態は、当技術分野で認められている手順によって調製される錠剤、トローチ、カプセル、エリキシル、懸濁液、シロップ、カシェ剤、チューインガムなどを含む。そのような治療的に有用な組成物または調製物中の活性化合物の量は、適当な投与量が得られる量である。シロップ製剤は一般に、香味剤または着色剤を有する、液体担体、例えば、エタノール、グリセリンまたは水中の、化合物または塩の懸濁液または溶液からなる。組成物が錠剤の形態である場合、固体製剤を調製するために日常的に用いられる1つまたは複数の薬学的賦形剤を利用することができる。そのような賦形剤の例としては、ステアリン酸マグネシウム、デンプン、ラクトースおよびスクロースが挙げられる。組成物がカプセルの形態である場合、慣例的カプセル封入の使用が一般に適当であり、例えば、硬質ゼラチンカプセルシェル中に前記の賦形剤を用いる。組成物が軟質ゼラチンシェルカプセルの形態である場合、分散液または懸濁液を調製するために日常的に用いられる薬学的賦形剤を考慮することができ、例えば、水性ガム、セルロース、シリケートまたは油が軟質ゼラチンカプセルシェルに組み入れられる。
【００５０】
非経口投与に適した製剤は慣例的に、好ましくはレシピエントの血液と等張性の、薬剤の滅菌水性調製物を含む。適当な賦形剤溶液は、リン酸緩衝生理食塩水、生理食塩水、水、乳酸加リンゲル液またはデキストロース(5%水溶液)を含む。そのような製剤は慣例的に、薬剤と水とを混合して溶液または懸濁液を作製することによって調製することができ、これを滅菌容器に充填し、細菌汚染に対して密封する。好ましくは、滅菌物質は、最終滅菌の必要がないように、無菌製造条件の下で用いられる。そのような製剤は、1つまたは複数の付加的成分を任意で含有してもよく、この成分は保存料、例えばメチルヒドロキシベンゾエート、クロロクレゾール、メタクレゾール、フェノールおよび塩化ベンザルコニウムを含むことができる。そのような物質は、製剤が多回用量容器で提示される場合に特段に重要である。
【００５１】
緩衝液を含有させて、製剤に適したpH値を与えることもできる。適当な緩衝物質は、リン酸ナトリウムおよび酢酸ナトリウムを含む。塩化ナトリウムまたはグリセリンを用いて、製剤を血液と等張性にすることができる。
【００５２】
所望であれば、製剤を窒素のような不活性雰囲気の下で容器に充填することができ、単位用量または多回用量形態にて、例えば、密閉アンプルにて、好都合に提示することができる。
【００５３】
当業者は、本発明の方法によって、対象に投与される本発明の組成物のさまざまな成分の量が、前記の要因に依存することを承知しているであろう。
【００５４】
典型的な坐薬製剤は、このような方法で投与された場合に活性な化合物またはその薬学的に許容される塩を、結合剤および/または滑沢剤、例えば高分子量グリコール、ゼラチン、カカオ脂または他の低融点植物ろうもしくは脂肪とともに含む。典型的な経皮用製剤は、慣例的な水性もしくは非水性媒体、例えば、クリーム、軟膏、ローションもしくはペーストを含み、または薬用プラスチック、パッチもしくは膜の形態である。
【００５５】
典型的な吸入用組成物は、慣例的な噴霧剤、例えばジクロロジフルオロメタンまたはトリクロロフルオロメタンを用いてエアロゾルの形態で投与されうる溶液、懸濁液またはエマルジョンの形態である。
【００５６】
本発明の化合物または薬学的組成物の治療的有効量は、いずれの場合にも、いくつかの要因、例えば、数ある中でも、健康状態、年齢、性別、サイズ、および処置される対象の状態、意図される投与の方法、ならびに意図される剤形を受け入れる対象の能力に依存する。活性薬剤の治療的有効量は、処置される状態に所望の効果を及ぼすのに十分な量である。
【００５７】
本明細書において用いられる「処置」という用語は、動物、詳細には哺乳動物、より詳細にはヒトにおける状態または疾患の任意の処置を含み、(i) それを有すると未だ診断されていない対象において疾患もしくは状態が発生することを予防すること; (ii) 疾患もしくは状態を阻害すること、すなわちその発現を停止させること; 疾患もしくは状態を軽減すること、すなわち状態の後退を引き起こすこと; または疾患によって引き起こされる状態、すなわち疾患の症状を軽減することを含む。例えば、皮膚色素沈着を調節する方法において、所望の効果は、皮膚色素沈着の調節が問題である疾患もしくは障害の進行の一部のもしくは全部の阻害、遅延もしくは予防; 皮膚色素沈着の調節が問題である疾患もしくは障害の再発の阻害、遅延もしくは予防; または皮膚色素沈着の調節が哺乳動物、例えばヒトにおいて問題である疾患もしくは障害の発症もしくは発現の予防である。
【００５８】
「治療有効量」という用語は、そのような処置を必要としている哺乳動物に投与された場合、本明細書において定義される、処置をもたらすのに十分なその量をいう。治療有効量は、処置される対象および疾患状態、苦痛の重症度ならびに投与の方法に依って変化することがあり、当業者によって日常的に決定されうる。
【００５９】
有効量、毒性および治療効力は、例えば、LD50 (集団の50%に対して致死的な用量)およびED50 (集団の50%において治療的に有効な用量)を決定するために、細胞培養または実験動物での標準的な薬学的手順によって決定することができる。投与量は、利用される剤形および使用される投与経路に依って変化しうる。毒性効果と治療効果との用量比は、治療指数であり、LD50/ED50比として表現することができる。大きな治療指数を示す組成物および方法が好ましい。治療的に有効な用量は、最初に細胞培養アッセイから推定することができる。また、用量は、細胞培養において、または適切な動物モデルにおいて決定されたIC50 (すなわち、症状の最大半量の阻害を達成する、本発明の化合物の濃度)を含む循環血漿濃度範囲を達成するように動物モデルにおいて製剤化されうる。血漿中レベルは、例えば、高性能液体クロマトグラフィーによって測定することができる。任意の特定の投与量の効果を、適当なバイオアッセイ法によってモニターすることができる。投与量は医師により決定され、必要に応じて、観察された処置の効果に合わせて調整されうる。
【００６０】
特定の態様において、本明細書において記述される本発明の化合物を含む組成物の有効な用量を、患者に一回投与することができる。特定の態様において、本発明の化合物を含む組成物の有効な用量を、患者に繰り返し投与することができる。例えば、0.1 mg/kg、0.5 mg/kg、1.0 mg/kg、2.0 mg/kg、2.5 mg/kg、5 mg/kg、10 mg/kg、15 mg/kg、20 mg/kg、25 mg/kg、30 mg/kg、40 mg/kg、50 mg/kg、またはそれ以上のような、本発明の化合物を含む組成物の治療量を患者に投与することができる。本発明の化合物を含む組成物は、ある時間をかけて、例えば5分間、10分間、15分間、20分間、または25分間かけて投与することができる。正当ならば、投与は、例えば定期的に、例えば3時間、6時間、12時間、もしくはそれより長い期間にわたって1時間ごとに、または例えば1ヶ月間、2ヶ月間、3ヶ月間、4ヶ月間、もしくはそれより長い期間にわたって隔週で(すなわち、2週間ごとに)、繰り返すことができる。場合によっては、最初の処置レジメンの後、より低い頻度で処置を施すことができる。例えば、3ヶ月間にわたって隔週ごとの投与の後、6ヶ月間もしくは1年間またはそれより長い期間にわたって1ヶ月に1回、投与を繰り返すことができる。
【００６１】
本明細書において記述される組成物の投与量は、医師により決定され、必要に応じて、観察された処置の効果に合わせて調整されうる。処置の継続期間および頻度に関して、処置が治療効果を与えている時点を決定するために、および投与量を増やすか減らすかどうか、投与頻度を増やすか減らすかどうか、処置を中止するかどうか、処置を再開するかどうか、または処置レジメンに他の変更を加えるかどうかを決定するために対象をモニターすることは、熟練した臨床医には慣例である。投薬スケジュールは、本発明の化合物に対する対象の感受性などのいくつかの臨床学的因子に依って週1回から毎日まで変化しうる。
【００６２】
いくつかの態様において、本明細書において記述される技術は、本明細書において記述される本発明の化合物と、任意で薬学的に許容される担体とを含む薬学的組成物に関する。薬学的に許容される担体および希釈剤は、生理食塩水、水性緩衝溶液、溶媒および/または分散媒を含む。そのような担体および希釈剤の使用は、当技術分野において周知である。薬学的に許容される担体として機能しうる材料のいくつかの非限定的な例としては、(1) 糖、例えばラクトース、グルコースおよびスクロース; (2) デンプン、例えばトウモロコシデンプンおよびジャガイモデンプン; (3) セルロースおよびその誘導体、例えばナトリウムカルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、微結晶性セルロースおよび酢酸セルロース; (4) 粉末トラガカント; (5) 麦芽; (6) ゼラチン; (7) 滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウムおよびタルク; (8) 賦形剤、例えばカカオ脂および坐薬ろう; (9) 油、例えばラッカセイ油、綿実油、ヒマワリ油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油およびダイズ油; (10) グリコール、例えばプロピレングリコール; (11) ポリオール、例えばグリセリン、ソルビトール、マンニトール、およびポリエチレングリコール(PEG); (12) エステル、例えばオレイン酸エチルおよびラウリン酸エチル; (13) 寒天; (14) 緩衝剤、例えば水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウム; (15) アルギン酸; (16) 発熱性物質を伴わない水; (17) 等張性生理食塩水; (18) リンゲル液; (19) エチルアルコール; (20) pH緩衝液; (21) ポリエステル、ポリカーボネート、および/またはポリ無水物; (22) 増量剤、例えばポリペプチドおよびアミノ酸; (23) 血清成分、例えば血清アルブミン、HDLおよびLDL; (22) C2〜C12アルコール、例えばエタノール; ならびに(23) 薬学的製剤において利用される他の無毒適合性の物質が挙げられる。湿潤剤、着色剤、放出剤、コーティング剤、甘味剤、香味剤、芳香剤、保存料および抗酸化物質も製剤に存在することができる。「賦形剤」、「担体」、「薬学的に許容される担体」などのような用語は、本明細書において互換的に用いられる。いくつかの態様において、担体は活性薬剤、例えば本明細書において記述される本発明の化合物の分解を阻害する。
【００６３】
理論によって束縛されるわけではないが、特定の態様において、本発明の化合物は肝臓期の寄生生物を選択的に阻害する。
【００６４】
本発明によれば、皮膚色素沈着を調節することができる。
【００６５】
定義
便宜上、本明細書、実施例および添付の特許請求の範囲において利用される特定の用語をここにまとめる。特に指定のない限り、または文脈から暗示されない限り、以下の用語および語句は、以下に示される意味を含む。明示的に別段の定めをした場合を除き、または文脈から明らかな場合を除き、以下の用語および語句は、その用語または語句が、関連する技術分野において獲得している意味を除外するものではない。定義は、特定の態様を記述する際に役立つように提供されており、発明の範囲は特許請求の範囲によってのみ限定されるので、特許請求する発明を限定することは意図されない。他に定義されない限り、本明細書において用いられる全ての技術的および科学的用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解される意味と同じ意味を有する。
【００６６】
本明細書において用いられる「生物学的に活性な」という用語は、天然に存在する分子の構造的、調節的または生化学的機能を有するタンパク質をいい、細胞でのおよび/またはインビボでのアッセイ法において分子活性を示す。
【００６７】
本明細書において用いられる「異性体」という用語は、同じ分子式を有するが、しかし異なる構造式を有する化合物をいう。異性体は、同じ官能基を有する場合を除いて、類似の特性を必ずしも共有するわけではない。立体異性体、鏡像異性体、幾何異性体などのような、多くの異なるクラスの異性体が存在する。構造異性および立体異性(空間異性)の2種の主要な形態の異性が存在する。
【００６８】
「R」および「S」という記号表示は、そのキラル中心の周りの分子の絶対配置を表すように用いられる。この記号表示は接頭辞としてまたは接尾辞として表示することができる; それらはハイフンによって異性体から切り離されていてもまたは切り離されていなくてもよい; それらはハイフンでつながれていてもまたはつながれていなくてもよい; かつそれらは括弧で囲まれていてもまたは囲まれていなくてもよい。
【００６９】
本明細書において用いられる「S異性体」という用語は、原子番号に基づく、カーン・インゴルド・プレローグ順位則(CIP)にしたがって、その置換基それぞれに順位を割り当てるという体系によったキラル中心Sを有する鏡像異性体をいい、ここで原子番号の順位は反時計回りの方向に減少し、それがS鏡像異性体(「左」を意味する、ラテン語のシネストラ(Sinestra)由来)である。理論に限定されることを望むわけではないが、4つのうちの最低順位のものが観察者側からみて遠くに置かれるように中心が配向された場合に、観察者には2つの可能性がみてとれる; 残る3つの置換基の順位が、時計回りの方向に減少するなら、それはR (「右」を意味する、ラテン語のレクタス(Rectus)由来)と表記され、反時計回りの方向に減少するなら、それはS (「左」を意味する、ラテン語のシネストラ由来)である。
【００７０】
本明細書において用いられる「処置する」という用語は、処置される対象の疾患経過を変化させることをいう。処置の治療効果は、非限定的に、疾患の発生または再発を予防すること、症状の軽減、疾患の直接的または間接的な病理的帰結の減少、疾患進行の速度の低下、疾患状態の改善または一時的緩和、および寛解または予後の改善を含む。
【００７１】
本明細書において用いられる「薬学的に許容される賦形剤」という用語は、本発明の薬学的組成物の活性成分(例えば、本発明の化合物)と適合性のある(および好ましくはそれを安定化する能力を持つ)、かつ処置される対象にとって有害ではない担体および媒体をいう。例えば、本発明の化合物とともに特定のより可溶性の複合体を形成する可溶化剤を、化合物の送達のための薬学的賦形剤として利用することができる。適当な担体および媒体は、当業者には公知である。本明細書において用いられる「賦形剤」という用語は、全てのそのような担体、アジュバント、希釈剤、溶媒、または他の不活性添加剤を包含する。適当な薬学的に許容される賦形剤は、水、塩溶液、アルコール、植物油、ポリエチレングリコール、ゼラチン、ラクトース、アミロース、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ケイ酸、粘性の高いパラフィン、香油、脂肪酸モノグリセリドおよびジグリセリド、ペトロエトラル脂肪酸エステル(petroethral fatty acid ester)、ヒドロキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドンなどを含むが、これらに限定されない。本発明の薬学的組成物は、滅菌することもでき、所望であれば、本発明の活性化合物と有害には反応しない補助剤、例えば、滑沢剤、保存料、安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響を与えるための塩、緩衝液、着色料、香味料および/または芳香族物質などと混合することができる。
【００７２】
「塩」および「薬学的に許容される塩」という用語は、本明細書において開示される化合物の有機塩および無機塩、化合物の立体異性体、または化合物のプロドラッグをいう。したがって、本明細書において用いられる場合、「薬学的に許容される塩」という用語は、酸と本発明の化合物の塩基性基とから形成された塩である。例証となる塩は、硫酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、酸性クエン酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸塩、パントテン酸塩、酒石酸水素塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチシン酸塩(gentisinate)、フマル酸塩、グルコン酸塩、グロクロン酸塩、糖酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、p-トルエンスルホン酸塩、およびパモ酸塩を含むが、これらに限定されない。
【００７３】
「薬学的に許容される塩」という用語は、カルボン酸官能基などの酸性官能基を有する本明細書において開示される化合物と、薬学的に許容される無機または有機塩基とから調製される塩もいう。適当な塩基は、ナトリウム、カリウム、およびリチウムなどのアルカリ金属の水酸化物; カルシウムおよびマグネシウムなどのアルカリ土類金属の水酸化物; アルミニウムおよび亜鉛などの他の金属の水酸化物; アンモニア、および有機アミン、例えば非置換またはヒドロキシ置換モノアルキルアミン、ジアルキルアミン、またはトリアルキルアミン; ジシクロヘキシルアミン; トリブチルアミン; ピリジン; N-メチル、N-エチルアミン; ジエチルアミン; トリエチルアミン; モノ-(2-ヒドロキシ-低級アルキルアミン)、ビス-(2-ヒドロキシ-低級アルキルアミン)、もしくはトリス-(2-ヒドロキシ-低級アルキルアミン)、例えばモノ-(2-ヒドロキシエチル)アミン、ビス-(2-ヒドロキシエチル)アミン、もしくはトリス-(2-ヒドロキシエチル)アミン、2-ヒドロキシ-tert-ブチルアミン、またはトリス-(ヒドロキシメチル)メチルアミン、N,N,-ジ-低級アルキル-N-(ヒドロキシ低級アルキル)-アミン、例えばN,N-ジメチル-N-(2-ヒドロキシエチル)アミン、またはトリ-(2-ヒドロキシエチル)アミン; N-メチル-D-グルカミン; ならびにアミノ酸、例えばアルギニン、リジンなどを含むが、これらに限定されない。他の薬学的に許容される塩は、the Handbook of Pharmaceutical Salts. Properties, Selection, and Use (P. Heinrich Stahl and C. Wermuth, Eds., Verlag Helvetica Chica Acta, Zurich, Switzerland (2002))に記述されている。他の態様において、「薬学的に許容される塩」という用語は、酸と本発明の化合物の塩基性基とから形成された塩である。例証となる塩は、硫酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、酸性クエン酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸塩、パントテン酸塩、酒石酸水素塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチシン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グロクロン酸塩、糖酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、p-トルエンスルホン酸塩、およびパモ酸塩を含むが、これらに限定されない。
【００７４】
本明細書において用いられる「対象」という用語は、脊椎動物、好ましくは哺乳動物、より好ましくは霊長目の動物、さらにより好ましくはヒトをいう。哺乳動物は、非限定的に、ヒト、霊長目の動物、野生動物、野生化した動物、家畜、競技用動物、およびペットを含む。いくつかの態様において、対象は、家庭用および商業用家畜、例えば、限定されるものではないが、ウシ、ブタ、ウマおよび他の商業用動物を含む。いくつかの態様において、対象は、雄性対象であるが、しかし、対象は同様に、雌性対象、および雌性対象から雄性対象に性転換されている対象を含む。霊長目の動物は、チンパンジー、カニクイザル、クモザル、およびマカク、例えば、アカゲザルを含む。げっ歯類は、マウス、ラット、ウッドチャック、フェレット、ウサギおよびハムスターを含む。家庭用および狩猟用動物は、ウシ、ウマ、ブタ、シカ、バイソン、バッファロー、ネコ科の種、例えばイエネコ、イヌ科の種、例えばイヌ、キツネ、オオカミ、鳥類の種、例えばニワトリ、エミュー、ダチョウ、ならびに魚類、例えばマス、ナマズおよびサケを含む。「患者」または「対象」は、上記の任意のサブセット、例えば、前記の全てを含む。本明細書において記述される局面の特定の態様において、対象は哺乳動物、例えば、霊長目の動物、例えば、ヒトである。「患者」および「対象」という用語は、本明細書において互換的に用いられる。加えて、本明細書において記述される方法および組成物を用いて、家畜化された動物および/またはペットを処置することができる。
【００７５】
「プロドラッグ」という用語は、前駆体化合物として製剤化され、投与の後に、化学的または生理学的過程を介して(例えば、生理学的pHにされることによってまたは酵素活性を通じて)インビボで化合物の活性成分を活性化または放出する化合物をいう。プロドラッグの合成および使用に関する考察は、Higuchi and Stella, Prodrugs as Novel Delivery Systems, vol. 14 of the ACS Symposium Series、およびBioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987によって提供されている。したがって、「プロドラッグ」という用語は、いくつかの化学的または生理学的過程(例えば、酵素的過程および代謝的加水分解)を介して、いくつかの補助化合物または特定の環境条件、例えば、pHなどによりインビボで活性化されうる不活性な形態に変換されうる化合物をいう。プロドラッグは、対象に投与される時は不活性、すなわちエステルでありうるが、しかしインビボで活性化合物に変換され、例えば、加水分解によって遊離カルボン酸または遊離ヒドロキシルに変換される。プロドラッグ化合物は、生物における溶解性、組織適合性または遅延放出の利点を与えることが多い。「プロドラッグ」という用語は、そのようなプロドラッグが対象に投与された場合にインビボで活性化合物を放出する、いかなる共有結合された担体も含むようにも意図される。
【００７６】
本明細書において用いられる「治療的有効量」という用語は、処置によって有益なまたは所望の臨床結果をもたらすのに十分な量をいう。治療的有効量は、当業者によって認識されるように、処置される特定の疾患、投与の経路、選択される賦形剤、および併用療法の可能性に依って変化するであろう。
【００７７】
治療的有効量の決定は、十分に当業者の能力の範囲内である。一般に、治療的有効量は、対象の病歴、年齢、状態、性別だけでなく、対象の医学的状態の重症度およびタイプ、ならびに他の薬学的に活性な薬剤の投与によって変化しうる。さらに、治療的有効量は、当業者によって認識されるように、処置される特定の疾患、投与の経路、選択される賦形剤、および併用療法の可能性に依って変化するであろう。
【００７８】
本明細書において用いられる「皮膚」という用語は、動物の表皮および/または真皮をいう。
【００７９】
「減少する」、「低減した」、「低減」、「減少する」または「阻害する」という用語は全て、一般には統計的に有意な量の減少を意味するように本明細書において用いられる。しかしながら、誤解を避けるために、「低減した」、「低減」または「減少する」もしくは「阻害する」は、基準レベルと比較して、少なくとも10%の減少、例えば基準レベル(例えば、本発明の化合物が存在しない場合) と比較して、少なくとも約20%、もしくは少なくとも約30%、もしくは少なくとも約40%、もしくは少なくとも約50%、もしくは少なくとも約60%、もしくは少なくとも約70%、もしくは少なくとも約80%、もしくは少なくとも約90%の減少、または最大100%のおよび100%を含む減少(例えば、基準試料と比較して、レベルが消失)、または10〜100%の間の任意の減少を意味する。
【００８０】
「増加した」、「増加する」または「増強する」もしくは「活性化する」という用語は全て、一般には統計的に有意な量の増加を意味するように本明細書において用いられる; 何らかの誤解を避けるために、「増加した」、「増加する」または「増強する」もしくは「活性化する」という用語は、基準レベルと比較して、少なくとも10%の増加、例えば基準レベルと比較して、少なくとも約20%、もしくは少なくとも約30%、もしくは少なくとも約40%、もしくは少なくとも約50%、もしくは少なくとも約60%、もしくは少なくとも約70%、もしくは少なくとも約80%、もしくは少なくとも約90%の増加、または最大100%のおよび100%を含む増加、または10〜100%の間の任意の増加、あるいは基準レベル(例えば、本発明の化合物が存在しない場合)と比較して、少なくとも約2倍、もしくは少なくとも約3倍、もしくは少なくとも約4倍、もしくは少なくとも約5倍、もしくは少なくとも約10倍の増加、または2倍〜10倍の間の任意の増加、またはそれ以上の増加を意味する。
【００８１】
「統計的に有意な」または「有意に」という用語は、統計的有意性をいい、正常なマーカー濃度を少なくとも2標準偏差(2SD)下回るか、またはそれより低いことを一般的に意味する。この用語は、差があるという統計的証拠をいう。これは、帰無仮説が実際に真実である場合に帰無仮説を棄却するとの結論を下す確率と定義される。結論はp値を用いて行うことが多い。
【００８２】
本明細書において用いられる「実質的に」という用語は、少なくとも約60%、または好ましくは少なくとも約70%もしくは少なくとも約80%、または少なくとも約90%、少なくとも約95%、少なくとも約97%もしくは少なくとも約99%もしくはそれ以上の割合、あるいは70%〜100%の間の任意の整数の割合を意味する。
【００８３】
本明細書において用いられる「含む(comprising)」または「含む(comprises)」という用語は、本発明にとって必須であるものの、本質的であるか否かによらず、明記されていない要素を含める余地のある、組成物、方法、およびその各成分に関して用いられる。
【００８４】
本明細書において用いられる「から本質的になる」という用語は、所与の態様にとって必要な要素をいう。この用語は、本発明のその態様の基本的および新規または機能的な特徴に著しい影響を及ぼさない追加の要素の存在を許容する。
【００８５】
「からなる」という用語は、態様のその記述において引用されていないいかなる要素も除外する、本明細書において記述される組成物、方法、およびその各成分をいう。
【００８６】
本明細書および添付の特許請求の範囲において用いられる場合、単数形「1つの(a)」、「1つの(an)」および「その(the)」は、文脈上特記される場合を除き、複数の参照を含む。このように、例えば、「その方法」という言及は、本明細書において記述のおよび/または本開示等を読むことにより当業者に明らかとなるタイプの1つまたは複数の方法、および/または段階を含む。
【００８７】
実施例または特に指定される場合を除き、本明細書において用いられた成分または反応条件の量を表現する全ての数値は、全ての例において「約」という用語によって修飾されると理解すべきである。百分率に関連して用いる場合の「約」という用語は、±1%を意味しうる。
【００８８】
本出願および特許請求の範囲において、単数形の使用は、特に明記されていなければ、複数形を含む。加えて、「または」の使用は、特に指定のない限り、「および/または」を意味する。さらに、用語「含む(including)」の使用ならびに「含む(includes)」および「含まれる(included)」のような他の形態の使用は、限定されるものではない。また、「要素」または「成分」のような用語は、特に明記されていなければ、1つの単位を含む要素および成分と、2つ以上の単位を含む要素および成分の両方を包含する。
【００８９】
本明細書において他に定義されない限り、本出願に関連して用いられる科学的および技術的用語は、本開示が属する技術分野の当業者によって一般的に理解される意味を有するものとする。本発明は、本明細書において記述される特定の方法論、プロトコルおよび試薬などに限定されず、したがって変化しうることが理解されるべきである。本明細書において用いられる専門用語は、特定の態様を記述することのみを目的とし、もっぱら特許請求の範囲によって定義される本発明の範囲を限定することを意図していない。免疫学および分子生物学における一般用語の定義は、The Merck Manual of Diagnosis and Therapy, 18th Edition, Merck Research Laboratories刊行, 2006 (ISBN 0-911910-18-2); Robert S. Porter et al. (eds.), The Encyclopedia of Molecular Biology, Blackwell Science Ltd.刊行, 1994 (ISBN 0-632-02182-9); およびRobert A. Meyers (ed.), Molecular Biology and Biotechnology: a Comprehensive Desk Reference, VCH Publishers, Inc.刊行, 1995 (ISBN 1-56081-569-8); Immunology by Werner Luttmann, Elsevier刊行, 2006において見出すことができる。分子生物学における一般用語の定義は、Benjamin Lewin, Genes IX, Jones & Bartlett Publishing刊行, 2007 (ISBN-13:9780763740634); Kendrew et al. (eds.), The Encyclopedia of Molecular Biology, Blackwell Science Ltd.刊行, 1994 (ISBN 0-632-02182-9); ならびにRobert A. Meyers (ed.), Maniatis et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y., USA (1982); Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2 ed.), Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y., USA (1989); Davis et al., Basic Methods in Molecular Biology, Elsevier Science Publishing, Inc., New York, USA (1986); またはMethods in Enzymology: Guide to Molecular Cloning Techniques Vol.152, S. L. Berger and A. R. Kimmerl Eds., Academic Press Inc., San Diego, USA (1987); Current Protocols in Molecular Biology (CPMB) (Fred M. Ausubel, et al. ed., John Wiley and Sons, Inc.)、Current Protocols in Protein Science (CPPS) (John E. Coligan, et. al., ed., John Wiley and Sons, Inc.)およびCurrent Protocols in Immunology (CPI) (John E. Coligan, et. al., ed. John Wiley and Sons, Inc.)において見出され、これらは全て、その全体が参照により本明細書に組み入れられる。
【００９０】
前述の詳細な説明および以下の実施例は、一例にすぎず、本発明の範囲に対する限定と解釈されるべきではないことが理解される。当業者には明らかであるような、開示された態様に対するさまざまな変更および修正が、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなくなされうる。さらに、特定されている全ての特許、特許出願および刊行物は、例えば、本発明に関連して用いられうるそのような刊行物において記述されている方法論を記述および開示する目的で、参照により本明細書に明示的に組み入れられる。これらの刊行物は、本出願の出願日より前のその開示のためだけに提供される。これに関して、先行発明であるとの理由でまたは他のいかなる理由によっても、本発明者らがそのような開示に先行する権利がないことを認めるものと解釈されるべきことは何もない。日付に関する陳述またはこれらの書面の内容に関する表現は全て、出願者が入手可能な情報に基づいており、これらの書面の内容または日付の正確さに関するいかなる承認も構成するものではない。
【００９１】
スクリーニングアッセイ法
別の局面において、本明細書において開示されるのは、MITFの発現または活性を調節できる化合物を特定するための方法である。概して、本方法は、細胞と試験化合物とを接触させる段階、およびレポーターの発現を対照または参照と比較する段階を含む。対照または参照と比べた場合の、レポーターの発現、量、または活性における変化によって、化合物がMITFの発現または活性を調節できることが示される。対照は、化合物と接触されない試料でありうる。対照は、MITF発現または活性の既知のモジュレーターで処理される試料でありうる。これは陽性対照として機能することができる。陽性対照は、MITFの既知のインヒビターで処理される試料でありうる。
【００９２】
アッセイ法の態様において、細胞は、MITFを産生することができ、MITFの直接の転写標的のプロモーターに機能的に連結されたレポーター遺伝子を含む。細胞はMITFを内因性遺伝子から産生することができる。あるいは、または加えて、細胞は、外来性MITF遺伝子を含む形質転換細胞でありうる。
【００９３】
本明細書において用いられる場合、「レポーター遺伝子」という用語は、検出可能な反応またはシグナルを生ずる分子を発現する遺伝子をいう。本明細書において用いられる場合、「検出可能な」という用語は、分子の存在の検出、画像化および/またはモニタリングを可能にする分子、または分子中の要素もしくは官能基をいう。検出可能な反応は、観察によってまたは機器によって検出可能であるシグナルの、変化、または発生を一般的にいう。非限定的に、発現された分子は、直接検出することができ、またはその分子は、試薬の存在下において検出可能なシグナルを生成することができる。さらに、培養におけるレポーターの量を決定するために利用可能な方法のいずれかを利用することができる。いくつかの態様において、検出可能な反応は光学的シグナルであり、すなわち、レポーターは光学的レポーターである。適当な光学的レポーターは、蛍光レポーターおよび化学発光基を含むが、これらに限定されない。
【００９４】
いくつかの態様において、検出可能な反応は、蛍光または蛍光の変化、例えば、蛍光強度、蛍光励起波長もしくは蛍光発光波長の分布、蛍光寿命、および/または蛍光偏光における変化である。いくつかの態様において、レポーター遺伝子は、試薬からの検出可能なシグナルの生成を触媒しうる酵素を発現する。
【００９５】
いくつかの態様において、レポーター遺伝子は、ルシフェラーゼを発現する。
【００９６】
いくつかの態様において、レポーター遺伝子は、蛍光タンパク質を発現する。用いるのに適した蛍光タンパク質の例としては、緑色蛍光タンパク質、赤色蛍光タンパク質(例えば、DsRed)、黄色蛍光タンパク質、シアン蛍光タンパク質、青色蛍光タンパク質、およびその変種(例えば米国特許第6,403,374号、同第6,800,733号、および同第7,157,566号を参照のこと)が挙げられるが、これらに限定されない。GFP変種の具体例としては、高感度GFP (EGFP)、不安定化EGFP、Doan et al, Mol. Microbiol, 55: 1767-1781 (2005)に記述されているGFP変種、Crameri et al, Nat. Biotechnol., 14:315319 (1996)に記述されているGFP変種、Rizzo et al, Nat. Biotechnol, 22:445 (2004)およびTsien, Annu. Rev. Biochem., 67:509 (1998)に記述されているセルリアン蛍光タンパク質、ならびにNagal et al, Nat. Biotechnol., 20:87-90 (2002)に記述されている黄色蛍光タンパク質が挙げられるが、これらに限定されない。DsRed変種は、例えば、Shaner et al, Nat. Biotechnol., 22: 1567-1572 (2004)に記述されており、mStrawberry、mCherry、morange、mBanana、mHoneydew、およびmTangerineを含む。さらなるDsRed変種は、例えば、Wang et al, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 101: 16745-16749 (2004)に記述されており、mRaspberryおよびmPlumを含む。DsRed変種のさらなる例としては、Fischer et al, FEBS Lett., 577:227-232 (2004)に記述されているmRFPmarsおよびFischer et al, FEBS Lett, 580:2495-2502 (2006)に記述されているmRFPrubyが挙げられる。
【００９７】
蛍光タンパク質の他の非限定的なリストには、AceGFP、AcGFP1、AmCyan1、AQ143、AsRed2、Azami-Green (mAG)、Cerulean、Cerulean、Citrine、cOFP、CopGFP、Cyan、CyPet、Dronpa、DsRed/DsRed2/DsRed-Express、DsRed-Monomer、EBFP、ECFP、EGFP、Emerald、eqFP611、EYFP、GFPs、HcRed1、HcRed-tandem、J-Red、Kaede、KFP、KikGR、mBanana、mCFP、mCherry、mCitrine、mEosEP、mHoneydew、MiCy、mKO、mOrange、mPlum、mRaspberry、mRFP1、mStrawberry、mTangerine、mYFP、mYFP、mYFP、PA-GFP、PA-mRFP、PhiYFP、PS-CFP-2、Renilla、tdEosFP、tdTomato、T-Sapphire、TurboGFP、UV-T-Sapphire、Venus、YPet、ZsYellow1、ならびにその誘導体および類似体が含まれる。1つの態様において、蛍光タンパク質は、緑色蛍光タンパク質(Green Fluorescent Protein; GFP)である。
【００９８】
例えば、フルオロフォアまたは蛍光タンパク質からの、蛍光の検出のために当技術分野において公知の特定の装置または方法は、インビボ近赤外蛍光(例えば、Frangioni, Curr. Opin. Chem. Biol, 7:626-634 (2003)を参照のこと)、Maestro(商標)インビボ蛍光画像化システム(Cambridge Research & Instrumentation, Inc.; Woburn, Mass.)、フライングスポットスキャナを用いたインビボ蛍光画像化(例えば、Ramanujam et al, IEEE Transactions on Biomedical Engineering, 48: 1034-1041 (2001)を参照のこと)などを含むが、これらに限定されない。光学的反応を検出するための他の方法または装置は、非限定的に、目視検査、CCDカメラ、ビデオカメラ、写真フィルム、レーザー走査装置、蛍光光度計、光ダイオード、量子カウンター、落射蛍光顕微鏡、走査型顕微鏡、フローサイトメーター、蛍光マイクロプレートリーダー、または光電子増倍管を用いたシグナル増幅を含む。
【００９９】
レポーター遺伝子は、MITFの直接の転写標的であるプロモーターに、機能的に連結されうる。「MITFの直接の転写標的のプロモーター」とは、MITFによって直接調節される任意の遺伝子プロモーターを意味する。これはMITFとプロモーターとの直接的な相互作用によるものでありうる。いくつかの態様において、MITFの直接の転写標的のプロモーターは、TRPM1遺伝子のプロモーターである。
【０１００】
アッセイ法のため、細胞は、試験化合物と接触させる前に一定の期間、任意で増殖させてもよい。いくつかの態様において、実施者は、適切な容器中に既に播かれている細胞を得ることができ、一定の期間、増殖させることができる。他の態様において、実施者は、適切な容器中に細胞をプレーティングし、試験化合物と接触させる前に一定の期間、例えば、少なくとも1日間、少なくとも2日間、少なくとも3日間、少なくとも4日間、少なくとも5日間、少なくとも6日間、少なくとも7日間、またはそれより長い期間、細胞を増殖させる。
【０１０１】
十分な期間、細胞を試験化合物に接触させた後に、レポーターの量(例えば、発現または活性)を測定し、対照または参照と比較する。例えば、接触時間は数秒間から数日間または数週間でありうる。実施者は、最適なシグナル対ノイズ比、時間的制約、試験される試験化合物の量、細胞数、試験容量、アッセイ法のための試薬の利用可能性などを得るために、接触時間を最適化することができる。
【０１０２】
本明細書において用いられる場合、「試験化合物」という用語は、運動ニューロン生存を刺激および/または増大および/または促進させるその能力についてスクリーニングされることになる、化合物および/または組成物をいう。試験化合物は、化学物質および化学物質の混合物、例えば有機または無機低分子; サッカリン; オリゴ糖; 多糖; 生物学的高分子、例えばペプチド、タンパク質、ならびにペプチド類似体および誘導体; ペプチド模倣体; 核酸; 核酸類似体および誘導体; 細菌、植物、真菌、または動物細胞などの生物学的材料から作製された抽出物; 動物組織; 天然または合成組成物; ならびにこれらの任意の組み合わせを含む、多種多様の異なる化合物を含みうる。いくつかの態様において、試験化合物は低分子である。
【０１０３】
可能性のある試験化合物の数は数百万に昇る。低分子、ポリマーおよびゲノムに基づくライブラリーを開発する方法は、例えば、Ding, et al. J Am. Chem. Soc. 124: 1594-1596 (2002)およびLynn, et al., J. Am. Chem. Soc. 123: 8155-8156 (2001)に記述されている。市販の化合物ライブラリーは、例えば、ArQule、Pharmacopia、graffinity、Panvera、Vitas-M Lab、Biomol InternationalおよびOxfordから入手することができる。本明細書に記述のスクリーニング装置および方法を用いて、これらのライブラリーをスクリーニングすることができる。NIH Roadmap、Molecular Libraries Screening Centers Network (MLSCN)からのものなどの、化学物質ライブラリーも用いることができる。化合物ライブラリーの包括的リストはwww.broad.harvard.edu/chembio/platform/screening/compound_libraries/index.htm.で見出すことができる。化学物質ライブラリーまたは化合物ライブラリーは、最終的にハイスループットスクリーニングまたは工業的製造において通常用いられる保存された化学物質のコレクションである。化学物質ライブラリーは、簡単に言えば、一連の、保存された化学物質からなりうる。各化学物質は、化合物の化学構造、純度、量、および物理化学的特徴などの情報を含んだ、何らかのデータベースに保存された関連情報を有する。
【０１０４】
実施される特定の態様に依って、試験化合物は溶液中に遊離状態で提供されてもよく、または担体、もしくは固体支持体、例えばビーズに付着されていてもよい。いくつかの適当な固体支持体が試験化合物の固定化のために利用されてもよい。適当な固体支持体の例としては、アガロース、セルロース、デキストラン(すなわち、セファデックス(Sephadex)、セファロース(Sepharose)として市販されている)カルボキシメチルセルロース、ポリスチレン、ポリエチレングリコール(PEG)、ろ紙、ニトロセルロース、イオン交換樹脂、プラスチックフィルム、ポリアミンメチルビニルエーテルマレイン酸コポリマー、ガラスビーズ、アミノ酸コポリマー、エチレン-マレイン酸コポリマー、ナイロン、絹などが挙げられる。さらに、本明細書において記述される方法の場合、試験化合物は個別に、または群でスクリーニングすることができる。群スクリーニングは、所与の群について2つ以上の陽性結果が期待されないような、有効な試験化合物のヒット率が低いと期待される場合には特に有用である。
【０１０５】
試験化合物は任意の所望の濃度で試験することができる。例えば、試験化合物は0.01 nm〜約10 mMの終濃度で試験することができる。さらに、試験は、2種類以上(例えば、2、3、4、5、6、7、8、9、10種類またはそれ以上)の異なる濃度で行うことができる。これは、試験化合物がある範囲の濃度においてのみ活性であるなら、有益でありうる。試験化合物が2種類以上の異なる濃度で試験される場合、濃度差は10〜10,000倍(例えば、10〜5000倍、10〜1000倍、10〜500倍、または10〜250倍)に及びうる。
【０１０６】
いくつかの態様において、試験化合物は、2回以上アッセイされ、MITF発現または活性を再現性よく調節する場合に選択される。
【０１０７】
いくつかの態様において、アッセイ法は、任意の他のスクリーニングにてスコア化された化合物の決定を行う段階をさらに含む。これは、さまざまなアッセイ法での化合物の活性を記述しているさまざまな化学データベースを調べることによって達成することができる。これは、本アッセイ法に特有のものである化合物を特定する際に役立ちうる。例えば、Broad InstituteのChemBank分析ツールを利用することができる。ChemBankは、Broad Instituteで行われた限り、スクリーニングの詳細な性質に関係なく、低分子スクリーニングの結果のデータベースである。いくつかの態様において、3種より少ない(例えば、3、2、1または0種)のスクリーニングにおいて点を得ている化合物が選択される。
【０１０８】
いくつかの態様において、選択された試験化合物は、MITF発現または活性の用量依存的な調節を示す。いくつかの態様において、選択された試験化合物は、アッセイ法において、MITF発現または活性の最大の調節を示す。これは、極めて強力なモジュレーター(IC50に基づく)のなかにもごく弱い最大抑制しかもたらしえないものもあれば、それほど強力ではない他のモジュレーター(IC50に基づく)が、そのIC50を下回る用量でさえ、かなり高い抑制を生じうることもあるので、有益でありうる。
【０１０９】
薬物の分配係数は、薬物が体内のその意図した標的にいかに簡単に到達できるか、薬物がその標的に到達したら、及ぼす効果がいかに強いか、および薬物が活性な形態で体内にいかに長くとどまるかに強く影響を与える。LogPは、所与の分子の薬らしさを評価するために医薬化学において用いられる1つの基準であり、これを用いて親油性効率、効能およびLogPを計算し、これによって研究化合物の質を査定する。LogP値は、当技術分野において周知の方法を用いて実験的に決定することができる。あるいは、または加えて、LogP値は化合物の化学構造から予測することができる。LogP値を予測するための方法も当技術分野において周知である。例えば、Ghose and Crippen (J. Comp. Chem. 9, 80(1988))を参照されたい。
【０１１０】
一般的に、0.7〜5.9の範囲のLogP値を有する化合物は、皮膚に浸透するが、しかし、log Pow値が5.5よりも高いなら皮膚浸透が減弱されうる。したがって、いくつかの態様において、選択された試験化合物は、6未満または6に等しい(例えば、5未満もしくは5に等しい、4未満もしくは4に等しい、3未満もしくは3に等しい、2未満もしくは2に等しい、または1未満もしくは1に等しい) LogPを有する。いくつかの態様において、選択された化合物は、0.5〜6 (例えば、0.5〜5.5、0.5)の範囲のLogP値を有する。
【０１１１】
1つの態様において、選択された化合物は、約0.7〜約6の範囲のLogP値を有する。
【０１１２】
非限定的に、細胞は、最適なシグナル対ノイズ比を与える任意の密度でプレーティングまたは培養することができる。例えば、細胞は、384ウェルプレート中に細胞1,000〜20,000個/ウェルの密度でプレーティングまたは培養することができる。いくつかの態様において、運動ニューロンは、384ウェルプレート中に細胞1,000、2,000、4,000、8,000、12,000、16,000、または20,000個/ウェルの密度でプレーティングされる。前述に基づき、当業者は、他の細胞培養容器のためにプレーティング密度を調整することができる。例えば、使用する該容器の寸法と384ウェルプレートの1ウェルの寸法とを計算することができ、使用する該容器と384ウェルプレートの1ウェルとの間での体積または表面積比に基づいて、プレーティングされる細胞の数をスケール変更することができる。
【０１１３】
アッセイ法は、細胞培養のために当業者にとって利用可能な任意の適当な容器または器具にて行うことができる。例えば、アッセイ法は、24ウェル、96ウェル、または384ウェルプレート中で行うことができる。1つの態様において、アッセイ法は384ウェルプレート中で行われる。
【０１１４】
本明細書において開示される局面のための細胞は、当業者にとって利用可能な任意の供給源から得ることができる。さらに、細胞は任意の起源のものであってもよい。したがって、いくつかの態様において、細胞は哺乳動物供給源に由来する。いくつかの態様において、細胞はメラニン細胞であるか、または黒色腫細胞株に由来する。1つの態様において、細胞はヒト黒色腫細胞株Skmel5に由来する。
【０１１５】
いくつかの態様において、細胞は対象、例えば患者に由来する。いくつかの態様において、対象、例えば患者は、皮膚色素沈着の調節を必要としている。
【０１１６】
いくつかの態様において、スクリーニング方法は、ハイスループットスクリーニングである。ハイスループットスクリーニング(HTS)は、ロボット工学、データ処理および制御ソフトウェア、液体取り扱い装置、ならびに高感度検出器を用いる科学実験のための方法である。ハイスループットスクリーニングまたはHTSは、研究者が何百万もの生化学、遺伝学または薬理学試験を迅速に行うことを可能にする。ハイスループットスクリーニングは、当業者に周知であり、例えば、米国特許第5,976,813号; 同第6,472,144号; 同第6,692,856号; 同第6,824,982号; および同第7,091,048号に記述されているものであり、それらの各々の内容は、その全体が参照により本明細書に組み入れられる。
【０１１７】
HTSは候補化合物のライブラリーに対してアッセイ法のスクリーニングを行うために自動化を用いる。アッセイ法とは、生化学的または生物学的機構の特定の活性について、通常は阻害または刺激についての、試験である。典型的なHTSスクリーニングライブラリーまたは「デッキ」は、100,000種から2,000,000種超の化合物を含みうる。
【０１１８】
HTSの重要な実験器具または試験容器はマイクロタイタープレートである: すなわち、ウェルと呼ばれる小さな開口ディボット(divots)のグリッドを特徴とする、通常は使い捨てであるプラスチック製の小さな容器である。HTS用の最新のマイクロプレートは一般には384、1536、または3456個のウェルを有する。これらは全て96の倍数で、8×12の9 mm間隔のウェルを有する元の96ウェルマイクロプレートを反映している。
【０１１９】
アッセイ法の準備をするために、研究者はプレートの各ウェルに、運動ニューロン細胞集団のような、彼らが実験を行うために用いることを望む適切な試薬を充填する。試薬をウェル中の化合物に吸収、結合、またはそれ以外の反応をさせる(または反応に失敗させる)ために、いくらかのインキュベーション時間が経過した後、プレートのウェル全てに対して手動または機械のいずれかにより測定を行う。(例えば)コンピューターがそれ自体では容易に決定することができない変化を探るために、研究者が顕微鏡を用いる場合、手動測定が必要となることが多い。それ以外では、専用の自動分析機がウェル上で、比色測定、放射能計数などのような、いくつかの実験を行うことができる。この場合、機械が各実験の結果を数値のグリッドとして出力し、値に対する各数字マッピングは1つのウェルから得る。高性能分析機はこのように数分間隔で数十のプレートを測定することができ、何千もの実験データ点を非常に迅速に生成する。
【０１２０】
別の局面において、本発明は、本明細書において記述されるスクリーニングアッセイ法によって選択された化合物を提供する。本明細書において記述されるスクリーニングアッセイ法によって選択された化合物の類似体、誘導体、異性体、および薬学的に許容される塩も本明細書において特許請求されることが理解されるべきである。
【０１２１】
いくつかの態様において、本発明は、いずれかの番号付けされた項目に示すように記述することができる。
1. 皮膚色素沈着を調節するための方法であって、それを必要としている対象に小眼球症関連転写因子(MITF)の発現または活性化を阻害する治療剤を含む薬学的組成物を投与する段階を含む方法。
2. 治療剤が、以下からなる群より選択される、項目1記載の方法:
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
5-クロロ-7-[(2-クロロ-6-フルオロフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
(1S,2R,3S,6S)-1-ベンゾイル-6-tert-ブチルスピロ[2.5]オクタン-1,2-ジカルボニトリル;
N-[(4-クロロフェニル)(2-ヒドロキシ-1-ナフチル)メチル]-3-メトキシベンズアミド;
エチル-1-ベンジル-5-[3-(tert-ブチルアミノ)-2-ヒドロキシプロポキシ]-2-メチル-1H-インドール-3-カルボキシレート;
5-クロロ-7-[(2,5-ジメチルフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
N-[5-(2,3-ジヒドロ-1,4-ベンゾジオキシン-6-イル)-2-メチル-3-フロイル]グリシン;
[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]酢酸;
N-(2-フルオロフェニル)-2-{[5-(3-メチルフェニル)-1,3,4-オキサジアゾール-2-イル]チオ}アセトアミド;
N-[4-(6-メチル-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェニル]-2-[(5-メチル-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
2-(2-ブロモ-4-tert-ブチルフェノキシ)-N-(2-メトキシ-5-ニトロフェニル)アセトアミド;
メチル-5-{[(4-フルオロ-2-メチルフェニル)スルホニル](イソニコチノイル)アミノ}-2-メチル-1-ベンゾフラン-3-カルボキシレート;
1-(4-クロロベンジル)-N-(ピリジン-3-イルメチル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン;
2-{[5-(4-クロロフェニル)-4-(3-メチルフェニル)-4H-1,2,4-トリアゾール-3-イル]チオ}-N-(3-メトキシフェニル)アセトアミド;
N-フェニル-3-[(4-フェニル-1,3-チアゾール-2-イル)チオ]プロパンアミド;
エチル-[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]アセテート;
2-メチル-3-[(4-メチルピペリジン-1-イル)カルボニル]ナフト[2,3-b]フラン-4,9-ジオン;
N-(3-フェニルプロピル)-10H-フェノチアジン-10-カルボキサミド;
5-(4-クロロフェニル)-2-ピロリジン-1-イル-6H-1,3,4-チアジアジン;
7-(4-フルオロフェニル)-1-(2-フリルメチル)-5,5-ビス(トリフルオロメチル)-5,8-ジヒドロピリミド[4,5-d]ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン;
3-{[(2-ブロモ-4-メチルフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
3-{[4-(ヒドロキシメチル)-2-メトキシフェノキシ]メチル}安息香酸;
5-フェニル[1,2,5]オキサジアゾロ[3,4-b]ピラジン;
2,3,9-トリメトキシ-6a,12a-ジヒドロクロモエオ(dihydrochromoeo)[3,4-b]クロメン-12(6H)-オン;
4-[(4-クロロベンジル)オキシ]-3-メトキシ-N-(2-メチル-5-[1,3]オキサゾロ[4,5-b]ピリジン-2-イルフェニル)ベンズアミド;
3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イルチオ)プロパン酸;
3-{[(4-エトキシフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
N-[4-クロロ-3-(トリフルオロメチル)フェニル]-1-[(2,5-ジメトキシフェニル)スルホニル]ピペリジン-4-カルボキサミド;
N-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-2-[(5-ニトロ-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
5-[4-(4-tert-ブチルベンゾイル)ピペラジン-1-イル]-2-ニトロ-N-(ピリジン-3-イルメチル)アニリン;
3-{[2-クロロ-4-(ヒドロキシメチル)フェノキシ]メチル}安息香酸;
{[(2-クロロフェニル)アミノ][(3-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル;
{[(4-ブロモフェニル)アミノ][(4-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル; および
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
(3,5-ジ-t-ブチル-4-ヒドロキシベンジリデン)マロノニトリル;
2-アミノ-N-{5-[6-(ジメチルアミノ)-9H-プリン-9-イル]-4-ヒドロキシ-2-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロフラン-3-イル}-3-(4-メトキシフェニル)プロパンアミド;
1,3,6-トリヒドロキシ-7-メトキシ-2,8-ビス(3-メチルブタ-2-エン-1-イル)-9H-キサンテン-9-オン;
(3S,3aR,4R,6S,6aR,7S,8R,9bR)-6-アセトキシ-4-(ブチリルオキシ)-3,3a-ジヒドロキシ-3,6,9-トリメチル-8-{[(2Z)-2-メチルブタ-2-エノイル]オキシ}-2-オキソ-2,3,3a,4,5,6,6a,7,8,9b-デカヒドロアズレノ[4,5-b]フラン-7-イルヘキサノエート;
(1E,5S)-6,6,6-トリフルオロ-5-ヒドロキシ-1,5-ジフェニルヘキサ-1-エン-3-オン;
2-(4-メトキシフェニル)-1,3-ベンゾチアゾール;
エチル-4-アミノ-2-{[(1E)-3-(4-メチルフェニル)-3-オキソプロパ-1-エン-1-イル]チオ}ピリミジン-5-カルボキシレート;
3-[(5-クロロ-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)チオ]-5,5-ジメチルシクロヘキサ-2-エン-1-オン;
(2E)-3-[(5-メチル-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]-1-フェニルプロパ-2-エン-1-オン;
11,12-ジヒドロキシ-3-イソブチル-4,5,8-トリメチル-3,3a,4,6a,9,10,11,12-オクタヒドロ-1H-シクロウンデカ[d]イソインドール-1,15(2H)-ジオン;
3-(ヒドロキシメチル)-6-イソプロピル-5-[(2-メチルブタ-2-エノイル)オキシ]-2-オキソシクロヘキサ-3-エン-1-イル4-ヒドロキシ-2-メチルブタ-2-エノエート;
1,11,12-トリヒドロキシ-2,16-ジオキソ-11,20-エポキシピクラサ-3-エン-15-イル2-ヒドロキシ-2-メチルブタノエート;
1-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-3-[3-クロロ-4-(イソプロピルスルホニル)-2-チエニル]尿素;
それらの薬学的な塩;
ならびにそれらの任意の組み合わせ。
3. 治療剤が、以下からなる群より選択される、項目2記載の方法:
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
5-クロロ-7-[(2-クロロ-6-フルオロフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
(1S,2R,3S,6S)-1-ベンゾイル-6-tert-ブチルスピロ[2.5]オクタン-1,2-ジカルボニトリル;
N-[(4-クロロフェニル)(2-ヒドロキシ-1-ナフチル)メチル]-3-メトキシベンズアミド;
エチル-1-ベンジル-5-[3-(tert-ブチルアミノ)-2-ヒドロキシプロポキシ]-2-メチル-1H-インドール-3-カルボキシレート;
5-クロロ-7-[(2,5-ジメチルフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
N-[5-(2,3-ジヒドロ-1,4-ベンゾジオキシン-6-イル)-2-メチル-3-フロイル]グリシン;
[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]酢酸;
N-(2-フルオロフェニル)-2-{[5-(3-メチルフェニル)-1,3,4-オキサジアゾール-2-イル]チオ}アセトアミド;
N-[4-(6-メチル-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェニル]-2-[(5-メチル-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
2-(2-ブロモ-4-tert-ブチルフェノキシ)-N-(2-メトキシ-5-ニトロフェニル)アセトアミド;
メチル-5-{[(4-フルオロ-2-メチルフェニル)スルホニル](イソニコチノイル)アミノ}-2-メチル-1-ベンゾフラン-3-カルボキシレート;
1-(4-クロロベンジル)-N-(ピリジン-3-イルメチル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン;
2-{[5-(4-クロロフェニル)-4-(3-メチルフェニル)-4H-1,2,4-トリアゾール-3-イル]チオ}-N-(3-メトキシフェニル)アセトアミド;
N-フェニル-3-[(4-フェニル-1,3-チアゾール-2-イル)チオ]プロパンアミド;
エチル-[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]アセテート;
2-メチル-3-[(4-メチルピペリジン-1-イル)カルボニル]ナフト[2,3-b]フラン-4,9-ジオン;
N-(3-フェニルプロピル)-10H-フェノチアジン-10-カルボキサミド;
5-(4-クロロフェニル)-2-ピロリジン-1-イル-6H-1,3,4-チアジアジン;
7-(4-フルオロフェニル)-1-(2-フリルメチル)-5,5-ビス(トリフルオロメチル)-5,8-ジヒドロピリミド[4,5-d]ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン;
3-{[(2-ブロモ-4-メチルフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
3-{[4-(ヒドロキシメチル)-2-メトキシフェノキシ]メチル}安息香酸;
5-フェニル[1,2,5]オキサジアゾロ[3,4-b]ピラジン;
2,3,9-トリメトキシ-6a,12a-ジヒドロクロモエオ[3,4-b]クロメン-12(6H)-オン;
4-[(4-クロロベンジル)オキシ]-3-メトキシ-N-(2-メチル-5-[1,3]オキサゾロ[4,5-b]ピリジン-2-イルフェニル)ベンズアミド;
3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イルチオ)プロパン酸;
3-{[(4-エトキシフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
N-[4-クロロ-3-(トリフルオロメチル)フェニル]-1-[(2,5-ジメトキシフェニル)スルホニル]ピペリジン-4-カルボキサミド;
N-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-2-[(5-ニトロ-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
5-[4-(4-tert-ブチルベンゾイル)ピペラジン-1-イル]-2-ニトロ-N-(ピリジン-3-イルメチル)アニリン;
3-{[2-クロロ-4-(ヒドロキシメチル)フェノキシ]メチル}安息香酸;
{[(2-クロロフェニル)アミノ][(3-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル;
{[(4-ブロモフェニル)アミノ][(4-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル; および
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
それらの薬学的に許容される塩;
ならびにそれらの任意の組み合わせ。
4. 治療剤が、以下からなる群より選択される、項目2記載の方法:
(3,5-ジ-t-ブチル-4-ヒドロキシベンジリデン)マロノニトリル;
2-アミノ-N-{5-[6-(ジメチルアミノ)-9H-プリン-9-イル]-4-ヒドロキシ-2-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロフラン-3-イル}-3-(4-メトキシフェニル)プロパンアミド;
1,3,6-トリヒドロキシ-7-メトキシ-2,8-ビス(3-メチルブタ-2-エン-1-イル)-9H-キサンテン-9-オン;
(3S,3aR,4R,6S,6aR,7S,8R,9bR)-6-アセトキシ-4-(ブチリルオキシ)-3,3a-ジヒドロキシ-3,6,9-トリメチル-8-{[(2Z)-2-メチルブタ-2-エノイル]オキシ}-2-オキソ-2,3,3a,4,5,6,6a,7,8,9b-デカヒドロアズレノ[4,5-b]フラン-7-イルヘキサノエート;
(1E,5S)-6,6,6-トリフルオロ-5-ヒドロキシ-1,5-ジフェニルヘキサ-1-エン-3-オン;
2-(4-メトキシフェニル)-1,3-ベンゾチアゾール;
エチル-4-アミノ-2-{[(1E)-3-(4-メチルフェニル)-3-オキソプロパ-1-エン-1-イル]チオ}ピリミジン-5-カルボキシレート;
3-[(5-クロロ-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)チオ]-5,5-ジメチルシクロヘキサ-2-エン-1-オン;
(2E)-3-[(5-メチル-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]-1-フェニルプロパ-2-エン-1-オン;
11,12-ジヒドロキシ-3-イソブチル-4,5,8-トリメチル-3,3a,4,6a,9,10,11,12-オクタヒドロ-1H-シクロウンデカ[d]イソインドール-1,15(2H)-ジオン;
3-(ヒドロキシメチル)-6-イソプロピル-5-[(2-メチルブタ-2-エノイル)オキシ]-2-オキソシクロヘキサ-3-エン-1-イル4-ヒドロキシ-2-メチルブタ-2-エノエート;
1,11,12-トリヒドロキシ-2,16-ジオキソ-11,20-エポキシピクラサ-3-エン-15-イル2-ヒドロキシ-2-メチルブタノエート;
1-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-3-[3-クロロ-4-(イソプロピルスルホニル)-2-チエニル]尿素;
それらの薬学的に許容される塩;
およびそれらの任意の組み合わせ。
5. 治療剤が、以下からなる群より選択される、項目2記載の方法:
1,3,6-トリヒドロキシ-7-メトキシ-2,8-ビス(3-メチルブタ-2-エン-1-イル)-9H-キサンテン-9-オン;
(1E,5S)-6,6,6-トリフルオロ-5-ヒドロキシ-1,5-ジフェニルヘキサ-1-エン-3-オン;
3-(ヒドロキシメチル)-6-イソプロピル-5-[(2-メチルブタ-2-エノイル)オキシ]-2-オキソシクロヘキサ-3-エン-1-イル-4-ヒドロキシ-2-メチルブタ-2-エノエート;
それらの薬学的に許容される塩;
およびそれらの任意の組み合わせ。
6. 薬学的組成物がさらなる治療剤を含む、項目1〜4のいずれか一項目に記載の方法。
7. 薬学的組成物が、MITFの発現または活性化を阻害する治療剤を0.001%〜99%含む、項目1記載の方法。
8. 薬学的組成物が局所用製剤として製剤化されている、項目1記載の方法。
9. 薬学的組成物が非経口用製剤として製剤化されている、項目1記載の方法。
10. 薬学的組成物が経口用製剤として製剤化されている、項目1記載の方法。
11. 薬学的組成物が1日1回投与される、項目1記載の方法。
12. 以下を含む、薬学的組成物:
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
5-クロロ-7-[(2-クロロ-6-フルオロフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
(1S,2R,3S,6S)-1-ベンゾイル-6-tert-ブチルスピロ[2.5]オクタン-1,2-ジカルボニトリル;
N-[(4-クロロフェニル)(2-ヒドロキシ-1-ナフチル)メチル]-3-メトキシベンズアミド;
エチル-1-ベンジル-5-[3-(tert-ブチルアミノ)-2-ヒドロキシプロポキシ]-2-メチル-1H-インドール-3-カルボキシレート;
5-クロロ-7-[(2,5-ジメチルフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
N-[5-(2,3-ジヒドロ-1,4-ベンゾジオキシン-6-イル)-2-メチル-3-フロイル]グリシン;
[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]酢酸;
N-(2-フルオロフェニル)-2-{[5-(3-メチルフェニル)-1,3,4-オキサジアゾール-2-イル]チオ}アセトアミド;
N-[4-(6-メチル-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェニル]-2-[(5-メチル-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
2-(2-ブロモ-4-tert-ブチルフェノキシ)-N-(2-メトキシ-5-ニトロフェニル)アセトアミド;
メチル-5-{[(4-フルオロ-2-メチルフェニル)スルホニル](イソニコチノイル)アミノ}-2-メチル-1-ベンゾフラン-3-カルボキシレート;
1-(4-クロロベンジル)-N-(ピリジン-3-イルメチル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン;
2-{[5-(4-クロロフェニル)-4-(3-メチルフェニル)-4H-1,2,4-トリアゾール-3-イル]チオ}-N-(3-メトキシフェニル)アセトアミド;
N-フェニル-3-[(4-フェニル-1,3-チアゾール-2-イル)チオ]プロパンアミド;
エチル-[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]アセテート;
2-メチル-3-[(4-メチルピペリジン-1-イル)カルボニル]ナフト[2,3-b]フラン-4,9-ジオン;
N-(3-フェニルプロピル)-10H-フェノチアジン-10-カルボキサミド;
5-(4-クロロフェニル)-2-ピロリジン-1-イル-6H-1,3,4-チアジアジン;
7-(4-フルオロフェニル)-1-(2-フリルメチル)-5,5-ビス(トリフルオロメチル)-5,8-ジヒドロピリミド[4,5-d]ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン;
3-{[(2-ブロモ-4-メチルフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
3-{[4-(ヒドロキシメチル)-2-メトキシフェノキシ]メチル}安息香酸;
5-フェニル[1,2,5]オキサジアゾロ[3,4-b]ピラジン;
2,3,9-トリメトキシ-6a,12a-ジヒドロクロモエオ[3,4-b]クロメン-12(6H)-オン;
4-[(4-クロロベンジル)オキシ]-3-メトキシ-N-(2-メチル-5-[1,3]オキサゾロ[4,5-b]ピリジン-2-イルフェニル)ベンズアミド;
3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イルチオ)プロパン酸;
3-{[(4-エトキシフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
N-[4-クロロ-3-(トリフルオロメチル)フェニル]-1-[(2,5-ジメトキシフェニル)スルホニル]ピペリジン-4-カルボキサミド;
N-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-2-[(5-ニトロ-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
5-[4-(4-tert-ブチルベンゾイル)ピペラジン-1-イル]-2-ニトロ-N-(ピリジン-3-イルメチル)アニリン;
3-{[2-クロロ-4-(ヒドロキシメチル)フェノキシ]メチル}安息香酸;
{[(2-クロロフェニル)アミノ][(3-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル;
{[(4-ブロモフェニル)アミノ][(4-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル; および
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
(3,5-ジ-t-ブチル-4-ヒドロキシベンジリデン)マロノニトリル;
2-アミノ-N-{5-[6-(ジメチルアミノ)-9H-プリン-9-イル]-4-ヒドロキシ-2-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロフラン-3-イル}-3-(4-メトキシフェニル)プロパンアミド;
1,3,6-トリヒドロキシ-7-メトキシ-2,8-ビス(3-メチルブタ-2-エン-1-イル)-9H-キサンテン-9-オン;
(3S,3aR,4R,6S,6aR,7S,8R,9bR)-6-アセトキシ-4-(ブチリルオキシ)-3,3a-ジヒドロキシ-3,6,9-トリメチル-8-{[(2Z)-2-メチルブタ-2-エノイル]オキシ}-2-オキソ-2,3,3a,4,5,6,6a,7,8,9b-デカヒドロアズレノ[4,5-b]フラン-7-イルヘキサノエート;
(1E,5S)-6,6,6-トリフルオロ-5-ヒドロキシ-1,5-ジフェニルヘキサ-1-エン-3-オン;
2-(4-メトキシフェニル)-1,3-ベンゾチアゾール;
エチル-4-アミノ-2-{[(1E)-3-(4-メチルフェニル)-3-オキソプロパ-1-エン-1-イル]チオ}ピリミジン-5-カルボキシレート;
3-[(5-クロロ-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)チオ]-5,5-ジメチルシクロヘキサ-2-エン-1-オン;
(2E)-3-[(5-メチル-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]-1-フェニルプロパ-2-エン-1-オン;
11,12-ジヒドロキシ-3-イソブチル-4,5,8-トリメチル-3,3a,4,6a,9,10,11,12-オクタヒドロ-1H-シクロウンデカ[d]イソインドール-1,15(2H)-ジオン;
3-(ヒドロキシメチル)-6-イソプロピル-5-[(2-メチルブタ-2-エノイル)オキシ]-2-オキソシクロヘキサ-3-エン-1-イル4-ヒドロキシ-2-メチルブタ-2-エノエート;
1,11,12-トリヒドロキシ-2,16-ジオキソ-11,20-エポキシピクラサ-3-エン-15-イル2-ヒドロキシ-2-メチルブタノエート;
1-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-3-[3-クロロ-4-(イソプロピルスルホニル)-2-チエニル]尿素;
それらの薬学的に許容される塩;
ならびにそれらの任意の組み合わせ。
13. 以下を含む、項目12記載の薬学的組成物:
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
5-クロロ-7-[(2-クロロ-6-フルオロフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
(1S,2R,3S,6S)-1-ベンゾイル-6-tert-ブチルスピロ[2.5]オクタン-1,2-ジカルボニトリル;
N-[(4-クロロフェニル)(2-ヒドロキシ-1-ナフチル)メチル]-3-メトキシベンズアミド;
エチル-1-ベンジル-5-[3-(tert-ブチルアミノ)-2-ヒドロキシプロポキシ]-2-メチル-1H-インドール-3-カルボキシレート;
5-クロロ-7-[(2,5-ジメチルフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
N-[5-(2,3-ジヒドロ-1,4-ベンゾジオキシン-6-イル)-2-メチル-3-フロイル]グリシン;
[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]酢酸;
N-(2-フルオロフェニル)-2-{[5-(3-メチルフェニル)-1,3,4-オキサジアゾール-2-イル]チオ}アセトアミド;
N-[4-(6-メチル-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェニル]-2-[(5-メチル-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
2-(2-ブロモ-4-tert-ブチルフェノキシ)-N-(2-メトキシ-5-ニトロフェニル)アセトアミド;
メチル-5-{[(4-フルオロ-2-メチルフェニル)スルホニル](イソニコチノイル)アミノ}-2-メチル-1-ベンゾフラン-3-カルボキシレート;
1-(4-クロロベンジル)-N-(ピリジン-3-イルメチル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン;
2-{[5-(4-クロロフェニル)-4-(3-メチルフェニル)-4H-1,2,4-トリアゾール-3-イル]チオ}-N-(3-メトキシフェニル)アセトアミド;
N-フェニル-3-[(4-フェニル-1,3-チアゾール-2-イル)チオ]プロパンアミド;
エチル-[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]アセテート;
2-メチル-3-[(4-メチルピペリジン-1-イル)カルボニル]ナフト[2,3-b]フラン-4,9-ジオン;
N-(3-フェニルプロピル)-10H-フェノチアジン-10-カルボキサミド;
5-(4-クロロフェニル)-2-ピロリジン-1-イル-6H-1,3,4-チアジアジン;
7-(4-フルオロフェニル)-1-(2-フリルメチル)-5,5-ビス(トリフルオロメチル)-5,8-ジヒドロピリミド[4,5-d]ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン;
3-{[(2-ブロモ-4-メチルフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
3-{[4-(ヒドロキシメチル)-2-メトキシフェノキシ]メチル}安息香酸;
5-フェニル[1,2,5]オキサジアゾロ[3,4-b]ピラジン;
2,3,9-トリメトキシ-6a,12a-ジヒドロクロモエオ[3,4-b]クロメン-12(6H)-オン;
4-[(4-クロロベンジル)オキシ]-3-メトキシ-N-(2-メチル-5-[1,3]オキサゾロ[4,5-b]ピリジン-2-イルフェニル)ベンズアミド;
3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イルチオ)プロパン酸;
3-{[(4-エトキシフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
N-[4-クロロ-3-(トリフルオロメチル)フェニル]-1-[(2,5-ジメトキシフェニル)スルホニル]ピペリジン-4-カルボキサミド;
N-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-2-[(5-ニトロ-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
5-[4-(4-tert-ブチルベンゾイル)ピペラジン-1-イル]-2-ニトロ-N-(ピリジン-3-イルメチル)アニリン;
3-{[2-クロロ-4-(ヒドロキシメチル)フェノキシ]メチル}安息香酸;
{[(2-クロロフェニル)アミノ][(3-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル;
{[(4-ブロモフェニル)アミノ][(4-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル; および
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
それらの薬学的に許容される塩;
ならびにそれらの任意の組み合わせ。
14. 以下を含む、項目12記載の薬学的組成物:
(3,5-ジ-t-ブチル-4-ヒドロキシベンジリデン)マロノニトリル;
2-アミノ-N-{5-[6-(ジメチルアミノ)-9H-プリン-9-イル]-4-ヒドロキシ-2-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロフラン-3-イル}-3-(4-メトキシフェニル)プロパンアミド;
1,3,6-トリヒドロキシ-7-メトキシ-2,8-ビス(3-メチルブタ-2-エン-1-イル)-9H-キサンテン-9-オン;
(3S,3aR,4R,6S,6aR,7S,8R,9bR)-6-アセトキシ-4-(ブチリルオキシ)-3,3a-ジヒドロキシ-3,6,9-トリメチル-8-{[(2Z)-2-メチルブタ-2-エノイル]オキシ}-2-オキソ-2,3,3a,4,5,6,6a,7,8,9b-デカヒドロアズレノ[4,5-b]フラン-7-イルヘキサノエート;
(1E,5S)-6,6,6-トリフルオロ-5-ヒドロキシ-1,5-ジフェニルヘキサ-1-エン-3-オン;
2-(4-メトキシフェニル)-1,3-ベンゾチアゾール;
エチル-4-アミノ-2-{[(1E)-3-(4-メチルフェニル)-3-オキソプロパ-1-エン-1-イル]チオ}ピリミジン-5-カルボキシレート;
3-[(5-クロロ-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)チオ]-5,5-ジメチルシクロヘキサ-2-エン-1-オン;
(2E)-3-[(5-メチル-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]-1-フェニルプロパ-2-エン-1-オン;
11,12-ジヒドロキシ-3-イソブチル-4,5,8-トリメチル-3,3a,4,6a,9,10,11,12-オクタヒドロ-1H-シクロウンデカ[d]イソインドール-1,15(2H)-ジオン;
3-(ヒドロキシメチル)-6-イソプロピル-5-[(2-メチルブタ-2-エノイル)オキシ]-2-オキソシクロヘキサ-3-エン-1-イル4-ヒドロキシ-2-メチルブタ-2-エノエート;
1,11,12-トリヒドロキシ-2,16-ジオキソ-11,20-エポキシピクラサ-3-エン-15-イル2-ヒドロキシ-2-メチルブタノエート;
1-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-3-[3-クロロ-4-(イソプロピルスルホニル)-2-チエニル]尿素;
それらの薬学的に許容される塩;
およびそれらの任意の組み合わせ。
15. 以下を含む、項目12記載の薬学的組成物:
1,3,6-トリヒドロキシ-7-メトキシ-2,8-ビス(3-メチルブタ-2-エン-1-イル)-9H-キサンテン-9-オン;
(1E,5S)-6,6,6-トリフルオロ-5-ヒドロキシ-1,5-ジフェニルヘキサ-1-エン-3-オン;
3-(ヒドロキシメチル)-6-イソプロピル-5-[(2-メチルブタ-2-エノイル)オキシ]-2-オキソシクロヘキサ-3-エン-1-イル-4-ヒドロキシ-2-メチルブタ-2-エノエート;
それらの薬学的に許容される塩;
およびそれらの任意の組み合わせ。
16. さらなる治療剤をさらに含む、項目12〜15のいずれか一項目に記載の薬学的組成物。
17. 皮膚色素沈着を調節するのに使用するための、以下より選択される化合物:
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
5-クロロ-7-[(2-クロロ-6-フルオロフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
(1S,2R,3S,6S)-1-ベンゾイル-6-tert-ブチルスピロ[2.5]オクタン-1,2-ジカルボニトリル;
N-[(4-クロロフェニル)(2-ヒドロキシ-1-ナフチル)メチル]-3-メトキシベンズアミド;
エチル-1-ベンジル-5-[3-(tert-ブチルアミノ)-2-ヒドロキシプロポキシ]-2-メチル-1H-インドール-3-カルボキシレート;
5-クロロ-7-[(2,5-ジメチルフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
N-[5-(2,3-ジヒドロ-1,4-ベンゾジオキシン-6-イル)-2-メチル-3-フロイル]グリシン;
[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]酢酸;
N-(2-フルオロフェニル)-2-{[5-(3-メチルフェニル)-1,3,4-オキサジアゾール-2-イル]チオ}アセトアミド;
N-[4-(6-メチル-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェニル]-2-[(5-メチル-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
2-(2-ブロモ-4-tert-ブチルフェノキシ)-N-(2-メトキシ-5-ニトロフェニル)アセトアミド;
メチル-5-{[(4-フルオロ-2-メチルフェニル)スルホニル](イソニコチノイル)アミノ}-2-メチル-1-ベンゾフラン-3-カルボキシレート;
1-(4-クロロベンジル)-N-(ピリジン-3-イルメチル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン;
2-{[5-(4-クロロフェニル)-4-(3-メチルフェニル)-4H-1,2,4-トリアゾール-3-イル]チオ}-N-(3-メトキシフェニル)アセトアミド;
N-フェニル-3-[(4-フェニル-1,3-チアゾール-2-イル)チオ]プロパンアミド;
エチル-[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]アセテート;
2-メチル-3-[(4-メチルピペリジン-1-イル)カルボニル]ナフト[2,3-b]フラン-4,9-ジオン;
N-(3-フェニルプロピル)-10H-フェノチアジン-10-カルボキサミド;
5-(4-クロロフェニル)-2-ピロリジン-1-イル-6H-1,3,4-チアジアジン;
7-(4-フルオロフェニル)-1-(2-フリルメチル)-5,5-ビス(トリフルオロメチル)-5,8-ジヒドロピリミド[4,5-d]ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン;
3-{[(2-ブロモ-4-メチルフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
3-{[4-(ヒドロキシメチル)-2-メトキシフェノキシ]メチル}安息香酸;
5-フェニル[1,2,5]オキサジアゾロ[3,4-b]ピラジン;
2,3,9-トリメトキシ-6a,12a-ジヒドロクロモエオ[3,4-b]クロメン-12(6H)-オン;
4-[(4-クロロベンジル)オキシ]-3-メトキシ-N-(2-メチル-5-[1,3]オキサゾロ[4,5-b]ピリジン-2-イルフェニル)ベンズアミド;
3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イルチオ)プロパン酸;
3-{[(4-エトキシフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
N-[4-クロロ-3-(トリフルオロメチル)フェニル]-1-[(2,5-ジメトキシフェニル)スルホニル]ピペリジン-4-カルボキサミド;
N-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-2-[(5-ニトロ-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
5-[4-(4-tert-ブチルベンゾイル)ピペラジン-1-イル]-2-ニトロ-N-(ピリジン-3-イルメチル)アニリン;
3-{[2-クロロ-4-(ヒドロキシメチル)フェノキシ]メチル}安息香酸;
{[(2-クロロフェニル)アミノ][(3-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル;
{[(4-ブロモフェニル)アミノ][(4-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル; および
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
(3,5-ジ-t-ブチル-4-ヒドロキシベンジリデン)マロノニトリル;
2-アミノ-N-{5-[6-(ジメチルアミノ)-9H-プリン-9-イル]-4-ヒドロキシ-2-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロフラン-3-イル}-3-(4-メトキシフェニル)プロパンアミド;
1,3,6-トリヒドロキシ-7-メトキシ-2,8-ビス(3-メチルブタ-2-エン-1-イル)-9H-キサンテン-9-オン;
(3S,3aR,4R,6S,6aR,7S,8R,9bR)-6-アセトキシ-4-(ブチリルオキシ)-3,3a-ジヒドロキシ-3,6,9-トリメチル-8-{[(2Z)-2-メチルブタ-2-エノイル]オキシ}-2-オキソ-2,3,3a,4,5,6,6a,7,8,9b-デカヒドロアズレノ[4,5-b]フラン-7-イルヘキサノエート;
(1E,5S)-6,6,6-トリフルオロ-5-ヒドロキシ-1,5-ジフェニルヘキサ-1-エン-3-オン;
2-(4-メトキシフェニル)-1,3-ベンゾチアゾール;
エチル-4-アミノ-2-{[(1E)-3-(4-メチルフェニル)-3-オキソプロパ-1-エン-1-イル]チオ}ピリミジン-5-カルボキシレート;
3-[(5-クロロ-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)チオ]-5,5-ジメチルシクロヘキサ-2-エン-1-オン;
(2E)-3-[(5-メチル-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]-1-フェニルプロパ-2-エン-1-オン;
11,12-ジヒドロキシ-3-イソブチル-4,5,8-トリメチル-3,3a,4,6a,9,10,11,12-オクタヒドロ-1H-シクロウンデカ[d]イソインドール-1,15(2H)-ジオン;
3-(ヒドロキシメチル)-6-イソプロピル-5-[(2-メチルブタ-2-エノイル)オキシ]-2-オキソシクロヘキサ-3-エン-1-イル4-ヒドロキシ-2-メチルブタ-2-エノエート;
1,11,12-トリヒドロキシ-2,16-ジオキソ-11,20-エポキシピクラサ-3-エン-15-イル2-ヒドロキシ-2-メチルブタノエート;
1-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-3-[3-クロロ-4-(イソプロピルスルホニル)-2-チエニル]尿素;
それらの薬学的に許容される塩;
ならびにそれらの任意の組み合わせ。
18. 皮膚色素沈着を調節するのに使用するための、以下より選択される項目17記載の化合物:
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
5-クロロ-7-[(2-クロロ-6-フルオロフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
(1S,2R,3S,6S)-1-ベンゾイル-6-tert-ブチルスピロ[2.5]オクタン-1,2-ジカルボニトリル;
N-[(4-クロロフェニル)(2-ヒドロキシ-1-ナフチル)メチル]-3-メトキシベンズアミド;
エチル-1-ベンジル-5-[3-(tert-ブチルアミノ)-2-ヒドロキシプロポキシ]-2-メチル-1H-インドール-3-カルボキシレート;
5-クロロ-7-[(2,5-ジメチルフェニル)(ピリジン-2-イルアミノ)メチル]キノリン-8-オール;
N-[5-(2,3-ジヒドロ-1,4-ベンゾジオキシン-6-イル)-2-メチル-3-フロイル]グリシン;
[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]酢酸;
N-(2-フルオロフェニル)-2-{[5-(3-メチルフェニル)-1,3,4-オキサジアゾール-2-イル]チオ}アセトアミド;
N-[4-(6-メチル-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェニル]-2-[(5-メチル-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
2-(2-ブロモ-4-tert-ブチルフェノキシ)-N-(2-メトキシ-5-ニトロフェニル)アセトアミド;
メチル-5-{[(4-フルオロ-2-メチルフェニル)スルホニル](イソニコチノイル)アミノ}-2-メチル-1-ベンゾフラン-3-カルボキシレート;
1-(4-クロロベンジル)-N-(ピリジン-3-イルメチル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン;
2-{[5-(4-クロロフェニル)-4-(3-メチルフェニル)-4H-1,2,4-トリアゾール-3-イル]チオ}-N-(3-メトキシフェニル)アセトアミド;
N-フェニル-3-[(4-フェニル-1,3-チアゾール-2-イル)チオ]プロパンアミド;
エチル-[3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)フェノキシ]アセテート;
2-メチル-3-[(4-メチルピペリジン-1-イル)カルボニル]ナフト[2,3-b]フラン-4,9-ジオン;
N-(3-フェニルプロピル)-10H-フェノチアジン-10-カルボキサミド;
5-(4-クロロフェニル)-2-ピロリジン-1-イル-6H-1,3,4-チアジアジン;
7-(4-フルオロフェニル)-1-(2-フリルメチル)-5,5-ビス(トリフルオロメチル)-5,8-ジヒドロピリミド[4,5-d]ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン;
3-{[(2-ブロモ-4-メチルフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
3-{[4-(ヒドロキシメチル)-2-メトキシフェノキシ]メチル}安息香酸;
5-フェニル[1,2,5]オキサジアゾロ[3,4-b]ピラジン;
2,3,9-トリメトキシ-6a,12a-ジヒドロクロモエオ[3,4-b]クロメン-12(6H)-オン;
4-[(4-クロロベンジル)オキシ]-3-メトキシ-N-(2-メチル-5-[1,3]オキサゾロ[4,5-b]ピリジン-2-イルフェニル)ベンズアミド;
3-(1,3-ベンゾチアゾール-2-イルチオ)プロパン酸;
3-{[(4-エトキシフェノキシ)アセチル]アミノ}安息香酸;
N-[4-クロロ-3-(トリフルオロメチル)フェニル]-1-[(2,5-ジメトキシフェニル)スルホニル]ピペリジン-4-カルボキサミド;
N-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-2-[(5-ニトロ-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]アセトアミド;
5-[4-(4-tert-ブチルベンゾイル)ピペラジン-1-イル]-2-ニトロ-N-(ピリジン-3-イルメチル)アニリン;
3-{[2-クロロ-4-(ヒドロキシメチル)フェノキシ]メチル}安息香酸;
{[(2-クロロフェニル)アミノ][(3-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル;
{[(4-ブロモフェニル)アミノ][(4-フルオロベンジル)チオ]メチレン}マロノニトリル; および
1-[(1S,3R,5R,7S)-3-(3,4-ジメチルフェニル)アダマンタン-1-イル]メタンアミン;
それらの薬学的に許容される塩;
ならびにそれらの任意の組み合わせ。
19. 皮膚色素沈着を調節するのに使用するための、以下より選択される項目17記載の化合物:
(3,5-ジ-t-ブチル-4-ヒドロキシベンジリデン)マロノニトリル;
2-アミノ-N-{5-[6-(ジメチルアミノ)-9H-プリン-9-イル]-4-ヒドロキシ-2-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロフラン-3-イル}-3-(4-メトキシフェニル)プロパンアミド;
1,3,6-トリヒドロキシ-7-メトキシ-2,8-ビス(3-メチルブタ-2-エン-1-イル)-9H-キサンテン-9-オン;
(3S,3aR,4R,6S,6aR,7S,8R,9bR)-6-アセトキシ-4-(ブチリルオキシ)-3,3a-ジヒドロキシ-3,6,9-トリメチル-8-{[(2Z)-2-メチルブタ-2-エノイル]オキシ}-2-オキソ-2,3,3a,4,5,6,6a,7,8,9b-デカヒドロアズレノ[4,5-b]フラン-7-イルヘキサノエート;
(1E,5S)-6,6,6-トリフルオロ-5-ヒドロキシ-1,5-ジフェニルヘキサ-1-エン-3-オン;
2-(4-メトキシフェニル)-1,3-ベンゾチアゾール;
エチル-4-アミノ-2-{[(1E)-3-(4-メチルフェニル)-3-オキソプロパ-1-エン-1-イル]チオ}ピリミジン-5-カルボキシレート;
3-[(5-クロロ-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)チオ]-5,5-ジメチルシクロヘキサ-2-エン-1-オン;
(2E)-3-[(5-メチル-1H-ベンズイミダゾール-2-イル)チオ]-1-フェニルプロパ-2-エン-1-オン;
11,12-ジヒドロキシ-3-イソブチル-4,5,8-トリメチル-3,3a,4,6a,9,10,11,12-オクタヒドロ-1H-シクロウンデカ[d]イソインドール-1,15(2H)-ジオン;
3-(ヒドロキシメチル)-6-イソプロピル-5-[(2-メチルブタ-2-エノイル)オキシ]-2-オキソシクロヘキサ-3-エン-1-イル4-ヒドロキシ-2-メチルブタ-2-エノエート;
1,11,12-トリヒドロキシ-2,16-ジオキソ-11,20-エポキシピクラサ-3-エン-15-イル2-ヒドロキシ-2-メチルブタノエート;
1-[3,5-ビス(トリフルオロメチル)フェニル]-3-[3-クロロ-4-(イソプロピルスルホニル)-2-チエニル]尿素;
それらの薬学的に許容される塩;
およびそれらの任意の組み合わせ。
20. 皮膚色素沈着を調節するのに使用するための、以下より選択される項目17記載の化合物:
1,3,6-トリヒドロキシ-7-メトキシ-2,8-ビス(3-メチルブタ-2-エン-1-イル)-9H-キサンテン-9-オン;
(1E,5S)-6,6,6-トリフルオロ-5-ヒドロキシ-1,5-ジフェニルヘキサ-1-エン-3-オン;
3-(ヒドロキシメチル)-6-イソプロピル-5-[(2-メチルブタ-2-エノイル)オキシ]-2-オキソシクロヘキサ-3-エン-1-イル-4-ヒドロキシ-2-メチルブタ-2-エノエート;
それらの薬学的に許容される塩;
およびそれらの任意の組み合わせ。
21. (iii) 小眼球症関連転写因子(MITF)の直接の転写標的のプロモーターに機能的に連結されたレポーター遺伝子を含みかつMITFを産生することができる細胞と、試験化合物とを接触させる段階; および
(iv) 該試験化合物とのインキュベーションの後にレポーター遺伝子発現の量を決定する段階
を含む、小眼球症関連転写因子(MITF)の発現または活性を調節する化合物を特定するためのアッセイ法であって、
対照または参照と比べた場合の、レポーター遺伝子の発現における変化によって、該化合物がMITFの発現または活性を調節することが示される、
アッセイ法。
22. 試験化合物が、対照または参照と比べてMITFの発現または活性を阻害する、項目21記載のアッセイ法。
23. プロモーターがTRPM1遺伝子のプロモーターである、項目21または22記載のアッセイ法。
24. レポーター遺伝子がルシフェラーゼ遺伝子である、項目21〜23のいずれか一項目に記載のアッセイ法。
25. 細胞がMITFを内因的に産生する、項目21〜24のいずれか一項目に記載のアッセイ法。
26. 細胞がメラニン細胞であるか、または黒色腫細胞株に由来する、項目21〜25のいずれか一項目に記載のアッセイ法。
27. 試験化合物が0.01 nm〜約10 mMの終濃度でインキュベートされる、項目21〜26のいずれか一項目に記載のアッセイ法。
28. 試験化合物が、2種類以上の異なる濃度で試験される、項目21〜27のいずれか一項目に記載のアッセイ法。
29. 試験化合物が、10〜10,000倍の範囲にある2種類以上の異なる濃度で試験される、項目28記載のアッセイ法。
30. 試験化合物が、有機または無機低分子; サッカリン; オリゴ糖; 多糖; 生物学的高分子、例えばペプチド、タンパク質、ならびにペプチド類似体および誘導体; ペプチド模倣体; 核酸ならびに核酸類似体および誘導体(siRNA、shRNA、アンチセンスRNA、リボザイム、およびアプタマーを含むが、これらに限定されない); 細菌、植物、真菌、または動物細胞などの生物学的材料から作製された抽出物; 動物組織; 天然または合成組成物; ならびにこれらの任意の組み合わせからなる群より選択される、項目21〜29のいずれか一項目に記載のアッセイ法。
31. 選択された化合物が7未満のLogP値を有する、項目21〜30のいずれか一項目に記載のアッセイ法。
32. 選択された化合物が、MITF活性または発現の用量依存的な調節を示す、項目21〜31のいずれか一項目に記載のアッセイ法。
33. ハイスループットスクリーニング(HTS)アッセイ法である、項目21〜32のいずれか一項目に記載のアッセイ法。
34. 項目21〜33のいずれか一項目に記載のアッセイ法によって選択された化合物。
【実施例】
【０１２２】
MITFアンタゴニストのスクリーニングの実施を成功させるために、本発明者らはTRPM1-ルシフェラーゼレポーターを利用した。本発明者らは、TRPM1遺伝子が複数のMITF結合部位を含み、MITF転写活性化に反応して極端に強い上方制御を示すことを観察していた。それゆえ、黒色腫細胞に安定的に組み込まれたTRPM1-ルシフェラーゼレポーターは、スクリーニングアッセイ法に有効である。黒色腫細胞の使用は、初代ヒトメラニン細胞ほど完全には関連していないが、スクリーニングに速さおよび再現性の利点をもたらした。加えて、大部分のヒト黒色腫細胞株は、外因的に供給されるメラニン細胞刺激ホルモンまたはcAMPアゴニストには依存しないベースラインのcAMPシグナル伝達を示し、その結果、アッセイシステムの均一性にさらに寄与する。
【０１２３】
MITF発現の抑制またはMITF活性の阻害のいずれかによる、MITF活性を広く抑制するスクリーニングを設計するために、本発明者らは、MITFの強力な直接の転写標的のプロモーター、すなわちTRPM1遺伝子のプロモーターを含有するルシフェラーゼレポーターを利用し、本発明者らは、医学的または審美的利益のために小眼球症関連転写因子(MITF)の発現または活性化を阻害する能力を有する活性成分を特定した。本発明者らは以前に、多数のMITF結合部位を含み、かつMITF過剰発現に強力な形で直接反応するTRPM1遺伝子(「メラスタチン」とも呼ばれる)を、MITFの直接の標的として特定した(Miller AJ, Du J, Rowan S, Hershey CL, Widlund HR, Fisher DE: Transcriptional regulation of the melanoma prognostic marker melastatin (TRPM1) by MITF in melanocytes and melanoma, Cancer Res 2004, 64:509-516)。TRPM1発現はまた、ヒト黒色腫細胞株内での、ならびに臨床色素性病変(母斑および黒色腫)でのMITF発現に密接に相関する。
【０１２４】
TRPM1プロモーターをルシフェラーゼ遺伝子に核酸連結し、レトロウイルスベクターおよびレンチウイルスベクターに挿入した。レンチウイルスベクターを用いて、初代ヒトメラニン細胞に感染させ、これを次に、Broad Chemical Geneticsコアスクリーニング施設、およびその天然産物/抽出物ライブラリーによる一次スクリーニングに供した。バックアップとして、レトロウイルスベクターを用いて、黒色腫細胞のゲノムに安定的に組み込み、これを同一の低分子スクリーニングに用いることができる。スクリーニングの最適化は、ホルスコリンおよびMSHを陽性対照の低分子(これらはcAMPおよびMITFの発現を上方制御する(D'Orazio JA, Nobuhisa T, Cui R, Arya M, Spry M, Wakamatsu K, Igras V, Kunisada T, Granter SR, Nishimura EK, Ito S, Fisher DE: Topical drug rescue strategy and skin protection based on the role of Mc1r in UV-induced tanning, Nature 2006, 443:340-344))として用い、実施した。細胞の数または生存性を変化させずにMSH誘導性TRPM1-ルシフェラーゼを抑制する低分子が、このスクリーニングにおける初期の「ヒット」に相当する。陰性対照は、同じ細胞内に構成的ルシフェラーゼベクター(例えば、チミジンキナーゼプロモーターのような構成的プロモーターによって駆動される)を含み、基礎転写機構の非特異的インヒビター（そうでなければ候補ヒットの二次/三次分析時に詳細に評価されるはずの何らかのもの）についての対照とする。
【０１２５】
スクリーニングのデザイン
有利な増殖特性およびSkmel5が典型的なレベルのMITFタンパク質を発現するという本発明者らの過去の経験によって、ヒト黒色腫細胞株Skmel5を利用した。加えて、本発明者らの過去の経験から、MITFレベルがMITFの複数の色素沈着標的遺伝子の発現と相関することが実証されており、このことから、MITFによる色素沈着経路の転写制御がこの細胞株内で損なわれないままであることが強く示唆される。それゆえ、組み込まれたTRPM1-ルシフェラーゼレポーターを作製し、その後の細胞を2回(連続的に)クローニングして、レポーター細胞集団の純度を確保した。細胞を薬物選択の中で維持して、ルシフェラーゼレポーターの維持を確実にした(薬物を除いた場合、ルシフェラーゼシグナルの最終的な消失を観察した)。再クローニングの後、異なる分離株を、低分子スクリーニングに必要とされる場合、384ウェルプレート上でのクローン性増殖に基づいてさらなる使用のために選択した。TRPM1-ルシフェラーゼシグナルの抑制についての陽性対照には、MITFに対するshRNAをコードするレンチウイルスを利用した。このベクターは再現性のあるMITF mRNAレベルの下方制御、および対応する(90%超の)ルシフェラーゼ測定値の低減を生じた。プレーティング効率の日差変動を測定し、スクリーニングでさらに用いるために選択した株の非常に高い再現性を認めた。
【０１２６】
天然産物、既知の生理活性物質、およびさらなる化合物(計およそ13,000種の化合物)の混合物を含むBroad Institute由来のライブラリーを用いてスクリーニングを実施した。初期段階のデータ収集および分析を表1にまとめた。表示の通り、「ヒット」は、TRPM1-ルシフェラーゼ活性の抑制により定義され、スクリーニングされた分子のおよそ1% (約130種の化合物)を構成した。このスクリーニングにおいてレポーターを抑制する候補ヒットの効果の再現性、用量依存性、および効力/大きさをさらに評価するためにさらなる分析/検証を実施した。
【０１２７】
この分析における第一段階は、再現性の直接試験を実施することであった。継続分析に値する化合物は、スクリーニングを繰り返しても同じように挙動する必要があった。第二に、Broad InstituteのChemBank分析ツールを利用した。ChemBankは、Broad Instituteで行われた限り、スクリーニングの詳細な性質に関係なく、低分子スクリーニングの結果のデータベースである。このデータセットにて候補ヒットの挙動を調べることの価値は、そのヒットがスクリーニングに特有のものであるかどうか、またはそれらがさらなる無関係のスクリーニングにおいても「スコア化」されるかどうかを、本発明者らが素早く決定するのに役立つということである。ChemBankデータセット内に含まれる何百種ものスクリーニングから、本発明者らは、ChemBankにリスト化されている(数百種のスクリーニングのうち、その数は絶えず増大している) 3種またはそれ以下のスクリーニングにてスコア化された場合に限り候補ヒットを保持することを選択した。第三の検証基準は、用量漸増分析での挙動であった。
【０１２８】
候補ヒットは、TRPM1-ルシフェラーゼシグナルの用量依存的な抑制を示した場合にのみ許容できるとした。用量反応の形状はヒット間で変化しうるので、本発明者らは、用量依存的な効果を生ずる全ての候補を含めることを選択した。決定された第4の基準は、最大半量の抑制用量を表すIC50 (以前にはqAC50と記述されていた)である。候補ヒットの大部分は、この基準によって高ナノモルから低マイクロモルの範囲内にあった(これらの検証データの全てが表1に記載されている)。第5の基準は、(任意の用量での)最大抑制であり、これは、それを達成するために必要とされた用量にかかわらず、達成できた抑制の大きさを表した。これは、極めて強力なインヒビター(IC50に基づく)のなかにもごく弱い最大抑制しかもたらしえないものもあれば、それほど強力ではない他のインヒビター(IC50に基づく)が、そのIC50を下回る用量でさえ、かなり高い抑制を生じうることもあるので、有益な基準である。決定される第6の基準はLogP分配係数であり、これは親油性の予測因子である。この場合、本発明者らは、GhoseおよびCrippenの方法を用いて、予測されるオクタノール-水分配係数を計算した(J. Comp. Chem. 9, 80(1988))。これは潜在的な皮膚浸透の推定にすぎないが、理論上は、局所有効性の確度を優先度付けする際に役立つので、この分析を行った。第7の基準は、蛍光生存性プローブを利用した毒性の分析(CellTiter-Fluo(商標) Cell Viability Assay (Promega))であった。このエンドポイントの解釈は、それが、標準誤差で割った対照と薬物処理との間のばらつきの合成を表すという事実によって複雑である。表1に示した結果は、上記の基準の全てを満たした34種の候補分子を示す。具体的には、これらの化合物は、再現性のあるTRPM1-ルシフェラーゼ抑制および用量反応挙動を示した。その効力の大部分は、1 uMをわずかに下回るまたは上回る範囲にあった。そして、親油性スコアは皮膚浸透能の不完全な予測因子のままである。しかしながら、3超の数は、浸透する可能性がより高くなりうる。表1中のデータから分かるように、かなりの数のヒットがその基準に適合する。
【０１２９】
【表１】
2014529628.tif 000002
2014529628.tif 000003
【０１３０】
本発明者らは、Cutaneous Biology Research Center (CBRC)に低分子スクリーニングのためのコア施設をつくった。本発明者らは現在、自動化設備を有しており、これによって本発明者らは、1) 細胞を96ウェルおよび384ウェルの形式でプレーティングすること; 2) 化学ライブラリー由来の低分子化合物を96ウェルおよび384ウェル組織培養プレートにピンでトランスファーすること; 3) マルチウェルプレートにおける発光、蛍光、および吸光度を読み取ることが可能になっている。設置された設備は、ハイスループットスクリーニングの完全な過程を行うための独自の可能性を提供する。
【０１３１】
ルシフェラーゼ遺伝子を、MITF結合部位の転写制御下にクローニングして、MITF発現および/または活性の負または正の調節に反応するようにした。SK-MEL5細胞においてこのレポーターシステムを用い、市販の、生物活性化合物および天然産物に相当するおよそ2000種の化合物の化学ライブラリーをスクリーニングした。スクリーニングはBroad Instituteで、その自動化設備を用い、二つ組のウェルで個別に2回繰り返された。レポーターを4分の1に抑制することおよび個別の2回のスクリーニング間での再現性に基づいて、ヒットを選択した。データ分析から、Broad Instituteで行われたスクリーニング間で高度に再現性のある18種の化合物が明らかになった。本発明者らがCBRCでこのスクリーニングを繰り返したときは、それらのヒットを再現することを目的とした。同じ実験的設定および同じ化学ライブラリーを用いた。以下は、行われたアッセイ法の詳細なプロトコルである。DMSOウェルと比較してレポーターを4分の1に抑制するという同じ基準を適用したスクリーニングのデータ分析により、Broadスクリーニングからのヒットとして選択した18種中13種の化合物がCBRCでヒットとしてスコア化されることが実証された。これは、その設備およびワークフローを確証するものである。
【０１３２】
アッセイ法プロトコル(設備: Well Mate, Mtrix Inc.; Rapid Plate, Caliper Inc; Victor X3, Perkin Elmer Inc.)
1. 1日目に培地(DMEM, 10% FBS, 1×PenStrep) 25 μl中にて1ウェルあたり5000個のSK-MEL5-Luc細胞をプレーティングする。
2. 2日目に化学ライブラリー(10 mMのライブラリー濃度) 100 nlをピンでトランスファーする。
3. 3日目、ピンによるトランスファーから24時間後に、SteadyLite Plus (Perkin Elmer)試薬25 μlを加える; 60 rpmで2分間、ボルテックスで撹拌する。発光を1.5秒間測定する。
【国際調査報告】
2014529628.tif 000004
2014529628.tif 000005
2014529628.tif 000006