(57)【要約】本発明は、細菌感染、特にＭＲＳＡ感染の処置に非常に有効であるリポソーム製剤バンコマイシンの処方物を開示する。本発明は、細菌感染の処置のために本明細書中に開示される処方物の使用方法をさらに教示する。本明細書中に開示されるある処方物が、バンコマイシン処置に一般に関連するものより低毒性を生じると思われる、と本発明人等は確定した。【選択図】図１Ａ
2014523859.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
バンコマイシン、ＤＣＰリポソームおよび／またはＤＭＰＧリポソームを含む組成物。
【請求項２】
バンコマイシン、ＤＳＰＣ、ＤＣＰおよびコレステロールを含む請求項１記載の組成物。
【請求項３】
ＤＳＰＣ、ＤＣＰおよびコレステロールが７：２：１のモル比で存在する請求項２記載の組成物。
【請求項４】
バンコマイシン、ＤＳＰＣ、ＤＭＰＧおよびコレステロールを含む請求項１記載の組成物。
【請求項５】
ＤＳＰＣ、ＤＭＰＧおよびコレステロールが７：２：１のモル比で存在する請求項４記載の組成物。
【請求項６】
個体における感染を処置する方法であって、以下の：
バンコマイシン、ＤＣＰリポソームおよび／またはＤＭＰＧリポソームを含む組成物を提供すること；そして
感染を処置するために前記個体に治療的有効量の前記組成物を投与すること
を包含する方法。
【請求項７】
前記組成物がバンコマイシン、ＤＳＰＣ、ＤＣＰおよびコレステロールを含む請求項６記載の方法。
【請求項８】
ＤＳＰＣ、ＤＣＰおよびコレステロールが７：２：１のモル比で存在する請求項７記載の方法。
【請求項９】
前記組成物がＤＳＰＣ、ＤＭＰＧおよびコレステロールを含む請求項６記載の方法。
【請求項１０】
ＤＳＰＣ、ＤＭＰＧおよびコレステロールが７：２：１のモル比で存在する請求項９記載の方法。
【請求項１１】
前記感染が、以下の：黄色ブドウ球菌、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌、バンコマイシン中等度耐性黄色ブドウ球菌、肺炎球菌、腸球菌、エンテロコッカス・フェシウム、コアグラーゼ陰性ブドウ球菌およびその組合せからなる群から選択される微生物により引き起こされる細菌感染である請求項６記載の方法。
【請求項１２】
前記感染がメチシリン耐性黄色ブドウ球菌により引き起こされる請求項６記載の方法。
【請求項１３】
細菌感染を処置するためのキットであって、以下の：
バンコマイシン、ＤＣＰリポソームおよび／またはＤＭＰＧリポソームを含む組成物；ならびに
個体における細菌感染を処置するための使用説明書
を包含するキット。
【請求項１４】
前記組成物がバンコマイシン、ＤＳＰＣ、ＤＣＰおよびコレステロールを含む請求項１３記載のキット。
【請求項１５】
ＤＳＰＣ、ＤＣＰおよびコレステロールが７：２：１のモル比で存在する請求項１４記載のキット。
【請求項１６】
前記組成物がバンコマイシン、ＤＳＰＣ、ＤＭＰＧおよびコレステロールを含む請求項１３記載のキット。
【請求項１７】
ＤＳＰＣ、ＤＭＰＧおよびコレステロールが７：２：１のモル比で存在する請求項１６記載のキット。
【請求項１８】
前記細菌感染が、以下の：黄色ブドウ球菌、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌、バンコマイシン中等度耐性黄色ブドウ球菌、肺炎球菌、腸球菌、エンテロコッカス・フェシウム、コアグラーゼ陰性ブドウ球菌およびその組合せからなる群から選択される微生物により引き起こされる請求項１３記載のキット。
【請求項１９】
前記感染がメチシリン耐性黄色ブドウ球菌により引き起こされる請求項１３記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本明細書中に開示された発明は、一般的に、細菌感染の処置に関する。
（関連出願の相互参照）
【０００２】
本出願は、米国特許仮出願第６１／４７９，３０５号（２０１１年４月２６日出願）（この記載内容は、参照により本明細書中で援用される）からの優先権を主張する。
【背景技術】
【０００３】
本明細書中の出版物はすべて、各々の個々の出版物または特許出願が、参照により組入れられるべきであることを具体的に且つ独立して示された場合と同程度に、参照により組入れられる。以下の記述は、本発明を理解するに際して有用であり得る情報を包含する。本明細書中で提供される情報のいずれかが、従来技術であるかまたは本発明と関連する、あるいは具体的にまたは暗黙的に参照される任意の出版物が従来技術である、ということは容認されない。
【０００４】
メチシリン耐性黄色ブドウ球菌は、世界中の公衆衛生にとって大きな問題を有する。バンコマイシンに対する耐性増大を示すＭＲＳＡ株は、より大きい罹病率を伴う感染を引き起こし、今回だけのゴールドスタンダード抗ブドウ球菌薬の使用を脅かす。細菌感染のための、特に伝統的抗生物質に耐性である感染のための、改善された処置が、当該技術分野で必要とされている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
いくつかの実施形態では、本発明は、バンコマイシン、ＤＣＰリポソームおよび／またはＤＭＰＧリポソームを含む組成物を教示する。いくつかの実施形態では、組成物は、バンコマイシン、ＤＳＰＣ、ＤＣＰおよびコレステロールを含む。いくつかの実施形態では、ＤＳＰＣ、ＤＣＰおよびコレステロールは、７：２：１のモル比で存在する。いくつかの実施形態では、組成物は、バンコマイシン、ＤＳＰＣ、ＤＭＰＧおよびコレステロールを含む。ある実施形態では、ＤＳＰＣ、ＤＭＰＧおよびコレステロールは、７：２：１のモル比で存在する。
【０００６】
ある実施形態では、本発明は、個体における感染を処置する方法であって、以下の：バンコマイシン、ＤＣＰリポソームおよび／またはＤＭＰＧリポソームを含む組成物を提供すること；そして感染を処置するために個体に治療的有効量の組成物を投与することを包含する方法を教示する。
【０００７】
いくつかの実施形態では、組成物は、バンコマイシン、ＤＳＰＣ、ＤＣＰおよびコレステロールを含む。いくつかの実施形態では、ＤＳＰＣ、ＤＣＰおよびコレステロールは、７：２：１のモル比で存在する。いくつかの実施形態では、組成物は、ＤＳＰＣ、ＤＭＰＧおよびコレステロールを含む。いくつかの実施形態では、ＤＳＰＣ、ＤＭＰＧおよびコレステロールは、７：２：１のモル比で存在する。いくつかの実施形態では、感染は、以下の：黄色ブドウ球菌、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌、バンコマイシン中等度耐性黄色ブドウ球菌、肺炎球菌、腸球菌、エンテロコッカス・フェシウム、コアグラーゼ陰性ブドウ球菌およびその組合せからなる群から選択される微生物により引き起こされる細菌感染である。いくつかの実施形態では、感染は、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌により引き起こされる。
【０００８】
ある実施形態では、本発明は、細菌感染を処置するためのキットであって、以下の：バンコマイシン、ＤＣＰリポソームおよび／またはＤＭＰＧリポソームを含む組成物；ならびに個体における細菌感染を処置するためのその使用説明書を包含するキットを教示する。いくつかの実施形態では、組成物は、バンコマイシン、ＤＳＰＣ、ＤＣＰおよびコレステロールを含む。いくつかの実施形態では、ＤＳＰＣ、ＤＣＰおよびコレステロールは、７：２：１のモル比で存在する。いくつかの実施形態では、組成物は、バンコマイシン、ＤＳＰＣ、ＤＭＰＧおよびコレステロールを含む。いくつかの実施形態では、ＤＳＰＣ、ＤＭＰＧおよびコレステロールは、７：２：１のモル比で存在する。いくつかの実施形態では、細菌感染は、以下の：黄色ブドウ球菌、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌、バンコマイシン中等度耐性黄色ブドウ球菌、肺炎球菌、腸球菌、エンテロコッカス・フェシウム、コアグラーゼ陰性ブドウ球菌およびその組合せからなる群から選択される微生物により引き起こされる。いくつかの実施形態では、感染は、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌により引き起こされる。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
例示的実施形態を、参照図面で例証する。本明細書中で開示される実施形態および図面は、限定的というよりむしろ、例証とみなされるべきものである、と意図される。
【図１Ａ】本発明の一実施形態に従って、ＭＲＳＡの経時的殺害を実証する。ＬＡＣまたはＮＲＳ−３５を、遊離またはＤＣＰバンコマイシン・リポソーム製剤とともにインキュベートした。選択時点での生存ＣＦＵが示されている。（ａ）ＬＡＣ：３時間時点に関しては、遊離対ＤＣＰ  ＶＡＮ群に関するｐ値は、濃度０．３ｍｇ／Ｌおよび１．２５ｍｇ／Ｌでは＜０．００５であり、０．６ｍｇ／Ｌでは＜０．０１であった。６時間時点に関しては、ｐ値は、０．６ｍｇ／Ｌでの遊離対ＤＣＰ  ＶＡＮは０．０２であった。（ｂ）ＮＲＳ−３５：遊離対ＤＣＰ  ＶＡＮ群に関するｐ値は、濃度１．２５ｍｇ／Ｌでは＜０．００５（３時間）および＜０．０５（６時間）であった。結果は、３つの実験を代表するものである。
【図１Ｂ】本発明の一実施形態に従って、ＭＲＳＡの経時的殺害を実証する。ＬＡＣまたはＮＲＳ−３５を、遊離またはＤＣＰバンコマイシン・リポソーム製剤とともにインキュベートした。選択時点での生存ＣＦＵが示されている。（ａ）ＬＡＣ：３時間時点に関しては、遊離対ＤＣＰ  ＶＡＮ群に関するｐ値は、濃度０．３ｍｇ／Ｌおよび１．２５ｍｇ／Ｌでは＜０．００５であり、０．６ｍｇ／Ｌでは＜０．０１であった。６時間時点に関しては、ｐ値は、０．６ｍｇ／Ｌでの遊離対ＤＣＰ  ＶＡＮは０．０２であった。（ｂ）ＮＲＳ−３５：遊離対ＤＣＰ  ＶＡＮ群に関するｐ値は、濃度１．２５ｍｇ／Ｌでは＜０．００５（３時間）および＜０．０５（６時間）であった。結果は、３つの実験を代表するものである。
【図２Ａ】本発明の一実施形態に従って、ＭＲＳＡ全身感染の処置における遊離およびＤＣＰバンコマイシン・リポソーム製剤の効力を実証する。ＣＤ１マウスを、ＭＲＳＡ（ＬＡＣ）の４×１０６ＣＦＵで腹腔内感染させた。１時間後に、ＰＢＳ、ＤＣＰバンコマイシン・リポソーム製剤または遊離バンコマイシンでマウスを処置した。Ａ．２４時間での脾臓細菌負荷。ｐ値は、ＰＢＳ対ＤＣＰ  ＶＩＮに関しては０．００１であり、ＤＣＰ  ＶＡＮ対遊離ＶＡＮに関しては０．０７であった。Ｂ．２４時間後の腎臓細菌負荷。ｐ値は、ＰＢＳ対ＤＣＰ  ＶＩＮに関しては０．００１であり、ＰＢＳ対遊離ＶＡＮに関しては０．０３であり、ＤＣＰ  ＶＡＮ対遊離ＶＡＮに関しては０．０１５であった。線は、中央値を表している。
【図２Ｂ】本発明の一実施形態に従って、ＭＲＳＡ全身感染の処置における遊離およびＤＣＰバンコマイシン・リポソーム製剤の効力を実証する。ＣＤ１マウスを、ＭＲＳＡ（ＬＡＣ）の４×１０６ＣＦＵで腹腔内感染させた。１時間後に、ＰＢＳ、ＤＣＰバンコマイシン・リポソーム製剤または遊離バンコマイシンでマウスを処置した。Ａ．２４時間での脾臓細菌負荷。ｐ値は、ＰＢＳ対ＤＣＰ  ＶＩＮに関しては０．００１であり、ＤＣＰ  ＶＡＮ対遊離ＶＡＮに関しては０．０７であった。Ｂ．２４時間後の腎臓細菌負荷。ｐ値は、ＰＢＳ対ＤＣＰ  ＶＩＮに関しては０．００１であり、ＰＢＳ対遊離ＶＡＮに関しては０．０３であり、ＤＣＰ  ＶＡＮ対遊離ＶＡＮに関しては０．０１５であった。線は、中央値を表している。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本明細書中で引用される参考文献はすべて、参照により本明細書中で援用される。別記しない限り、本明細書中で用いられる技術用語および科学用語は、本発明が属する当該技術分野の当業者により一般に理解されるものと同じ意味を有する。Ｓｉｎｇｌｅｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ３ｒｄ  ｅｄ．，  Ｊ．  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ  （Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ＮＹ  ２００１）；Ｍａｒｃｈ，  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ５ｔｈ  ｅｄ．，  Ｊ．  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ  （Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ＮＹ  ２００１）；およびＳａｍｂｒｏｏｋ  ａｎｄ  Ｒｕｓｓｅｌ，  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ  ３ｒｄ  ｅｄ．，  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ  （Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，  ＮＹ  ２００１）は、本出願で用いられる用語の多くに対する一般的指針を当業者に提供する。
【００１１】
本発明の実施に用いられ得る、本明細書中で記載されるものと類似のまたは等価の多数の方法および物質を、当業者は認識するであろう。実際、本発明は、記載される方法および物質に決して限定されない。本発明の目的のために、以下の用語は、下記のように定義される。
【００１２】
本明細書中で用いる場合：
頭字語「ＭＲＳＡ」は、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（Ｓ．  ａｕｒｅｕｓ）を意味する。
頭字語「ＭＩＣ」は、最小抑制濃度を意味する。
頭字語「ＭＢＣ」は、最小殺細菌濃度を意味する。
頭字語「ＤＳＰＣ」は、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリンを意味する。
頭字語「ＤＭＰＧ」は、ジミリストイルホスファチジルグリセロールを意味する。
頭字語「ＤＣＰ」は、ジセチルホスフェートを意味する。
略語「ＣＨＯＬ」は、コレステロールを意味する。
【００１３】
本明細書中で用いる場合、「有益な結果」としては、疾患症状の重症度を少なくするかまたは軽減すること、疾患症状が悪化しないようにすること、疾患症状を治癒すること、疾患症状が発症しないようにすること、疾患症状を発症する被験体の機会を下げること、そして被験体の寿命または余命を延長すること、が挙げられるが、決してこれらに限定されない。
【００１４】
「症状」および「疾患症状」としては、本明細書中で用いる場合、細菌感染、それに関連した症状、およびその組合せが挙げられるが、決してこれらに限定されない。
【００１５】
「哺乳動物」は、本明細書中で用いる場合、哺乳綱の任意の成員、例えばヒト、非ヒト霊長類、例えばチンパンジー、ならびにその他の類人猿およびサル種；農場動物、例えば畜牛、ヒツジ、ブタ、ヤギおよびウマ；飼育哺乳動物、例えばイヌおよびネコ；実験室動物、例えば齧歯類、例えばマウス、ラットおよびモルモット等が挙げられるが、これらに限定されない。当該用語は、特定の年齢または性別を意味しない。したがって、成体および新生被験体、ならびに胎仔は、雌でも雄であっても、このよう後の範囲内に含まれるべきであるよう意図される。
【００１６】
「処置」および「処置すること」は、本明細書中で用いる場合、治療的処置および予防的または防止的手段の両方を指し、この場合、目的は、標的化病理学的症状を遅らせ（減らし）、病理学的症状を防止し、有益な結果を追求するかまたは獲得し、あるいは処置が最終的に不首尾であったとしても当該症状を個体が発症する機会を低下させることである。処置を必要とする者としては、当該症状を既に有する者、ならびに当該症状を有する傾向がある者または当該症状が防止されるべきである者が挙げられる。
【００１７】
いくつかの実施形態では、当該出願のある実施形態を記載し、特許請求するために用いられる成分の量、特性、例えば分子量、反応条件等を表す数値は、いくつかの場合には、「約」という用語により修飾されるものであると理解されるべきである。したがって、いくつかの実施形態では、説明文および添付の特許請求の範囲で記述される数的パラメーターは、特定の実施形態により得ることを求められる所望の特性によって変わり得る近似値である。いくつかの実施形態では、数的パラメーターは、報告された有意の数字の数にかんがみて、そして通常の丸め技法を適用することにより、解釈されるべきである。本出願の広範囲のいくつかの実施形態を記述している数的範囲及びパラメーターにもかかわらず、具体的例において記述される数値は、できるだけ精確に実施可能であると報告される。
【００１８】
メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）感染は、公衆衛生を悩ます最も挑戦的な感染の１つである。過去１０年間に亘って、共同体関連ＭＲＳＡ（ＣＡ−ＭＲＳＡ）の発生、特にＵＳＡ３００は、感染負荷増大に有意に関与してきた。ＭＲＳＡの処置のためのゴールドスタンダードはバンコマイシンであって、これは、細菌表面でのペプチドグリカン生合成を抑制する大型糖ペプチド抗生物質である。しかしながら、１．５より上のバンコマイシンＭＩＣを有する黄色ブドウ球菌は、それらが特定の宿主組織内でのＭＲＳＡの殺害をより難しくさせ得るので、より大きい罹患率および処置失敗と関連する、ということを多数の臨床試験が示している。
【００１９】
抗微生物試薬の抗微生物効力を増強するための戦略は、ある宿主組織への薬剤の送達を増強するためにリポソーム内に試薬を被包することである。リポソームは、食細胞により飲み込まれる細菌の抗生物質性殺害を改善することが示されているが、しかしそれらの組成によって、それらはさらにまた、細菌細胞質への抗生物質の送達を増強して、その抗微生物効力を直接的に増大し得る。付加的には、リポソーム・エントラップメントは、しばしば、薬剤に関連した毒性を低減し、したがって、より高い薬剤用量投与を可能にするための方法として用いられてきた。黄色ブドウ球菌の標的化のために、ピペラシリンのリポソーム・エントラップメントは、黄色ブドウ球菌の増殖抑制を改善することが示されている。従来の研究では、リポソームの異なる調製物内のバンコマイシンのエントラップメントはマクロファージ飲込みＭＲＳＡの排除を増大したが、しかし、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの細胞外黄色ブドウ球菌の殺害を大いに改善したというわけではなかった。本明細書中に開示されるように、遊離ＭＲＳＡに対するバンコマイシンの２つのリポソーム処方物の抗ブドウ球菌活性増強を、本発明人等は実証する。
【００２０】
いくつかの実施形態では、本発明は、バンコマイシン、ＤＣＰリポソームおよび／またはＤＭＰＧリポソームを含むリポソームバンコマイシンの組成物を教示する。いくつかの実施形態では、バンコマイシン・リポソーム製剤は、バンコマイシン、ＤＳＰＣ、ＤＣＰおよびコレステロールを含む。いくつかの実施形態では、ＤＳＰＣ、ＤＣＰおよびコレステロールは、７：２：１のモル比で存在する。他の実施形態では、バンコマイシン・リポソーム製剤は、バンコマイシン、ＤＳＰＣ、ＤＭＰＧおよびコレステロールを含む。いくつかの実施形態では、ＤＳＰＣ、ＤＭＰＧおよびコレステロールは、７：２：１のモル比で存在する。
【００２１】
いくつかの実施形態では、本発明は、個体における感染を処置する方法であって、バンコマイシンおよびＤＣＰリポソームおよび／またはＤＭＰＧリポソームを含む組成物を提供すること；そして個体に治療的用量の組成物を投与することを包含する方法を教示する。いくつかの実施形態では、バンコマイシン・リポソーム製剤は、バンコマイシン、ＤＳＰＣ、ＤＣＰおよびコレステロールを含む。いくつかの実施形態では、ＤＳＰＣ、ＤＣＰおよびコレステロールは、７：２：１のモル比で存在する。いくつかの実施形態では、バンコマイシン・リポソーム製剤は、ＤＳＰＣ、ＤＭＰＧおよびコレステロールを含む。いくつかの実施形態では、ＤＳＰＣ、ＤＭＰＧおよびコレステロールは、７：２：１のモル比で存在する。いくつかの実施形態では、本明細書中に開示されるバンコマイシン・リポソーム製剤処方物のうちの１つ以上により処置される感染は、以下の：黄色ブドウ球菌、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌、バンコマイシン中等度耐性黄色ブドウ球菌、肺炎球菌、腸球菌、エンテロコッカス・フェシウム、コアグラーゼ陰性ブドウ球菌およびその組合せからなる群から選択される微生物により引き起こされる感染である。いくつかの実施形態では、感染は、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌により引き起こされる。いくつかの実施形態では、感染は、グラム陽性細菌により引き起こされる。いくつかの実施形態では、処置される個体は哺乳動物である。いくつかの実施形態では、処置される個体はヒトである。ある実施形態では、処置される個体は免疫無防備状態である。いくつかの実施形態では、処置される個体は、１つ以上の付加的病原体により引き起こされる１つ以上の二次感染を有する。
【００２２】
本発明の方法およびキットによる薬学的組成物は、任意の投与経路による送達のために処方され得る。「投与経路」は、当該技術分野で既知の任意の投与経路を指し、例としてはエーロゾル、鼻、口腔、経粘膜、経皮または非経口的経路が挙げられるが、これらに限定されない。「経皮」投与は、局所的クリームまたは軟膏を用いて、あるいは経皮パッチにより成し遂げられ得る。「非経口」は、一般的に注射に関連した投与経路、例えば眼窩内、注入、動脈内、包内、心臓内、皮膚内、筋肉内、腹腔内、肺内、脊髄内、胸骨内、くも膜下腔内、子宮内、静脈内、くも膜下、被膜下、皮下、経粘膜または経気管を指す。非経口経路により、組成物は、注入または注射のための溶液または懸濁液の形態で存在し得る。経腸経路により、薬学的組成物は、錠剤、ゲルカプセル、糖衣錠、シロップ、懸濁液、溶液等の形態で存在し得る。局所経路により、本発明による化合物を基礎にした薬学的組成物は、皮膚および粘膜を処置するために処方され得るし、軟膏、クリーム、乳液、膏薬、粉末、浸漬パッド、溶液、ゲル、スプレー、ローションまたは懸濁液の形態で存在する。眼経路により、それらは、点眼薬の形態で存在し得る。
【００２３】
本発明の方法およびキットによる薬学的組成物は、製薬上許容可能な担体も含有し得る。「製薬上許容可能な担体」は、本明細書中で用いる場合、身体のある組織、器官または部分から、身体の別の組織、器官または部分に当該化合物を運ぶかまたは輸送するのに関与する製薬上許容可能な物質、組成物またはビヒクルを指す。例えば、担体は、液体または固体充填剤、希釈剤、賦形剤、溶媒または被包物質、あるいはその組合せであり得る。担体の各構成成分は、「製薬上許容可能」でなければならず、すなわち、それは、処方物の他の成分と相溶性でなければならない。それは、さらにまた、それが接触するようになり得る任意の組織または器官と接触して用いるのに適していなければならず、これは、毒性、刺激、アレルギー応答、免疫原性、またはその治療的利益より過剰に力を有する任意の他の合併症の危険を保有してはならない、ということを意味する。
【００２４】
本発明の方法およびキットによる薬学的組成物は、さらにまた、経口投与のために、被包され、錠剤化され、あるいは乳濁液またはシロップ中に調製され得る。製薬上許容可能な固体または液体担体は、組成物を増強または安定化するために、あるいは組成物の調製を手助けするために付加され得る。液体担体としては、シロップ、落花生油、オリーブ油、グリセリン、生理食塩水、アルコールおよび水が挙げられる。固体担体としては、デンプン、ラクトース、硫酸カルシウムニ水和物、白土、ステアリン酸マグネシウムまたはステアリン酸、タルク、ペクチン、アラビアゴム、寒天またはゼラチンが挙げられる。担体は、さらにまた、徐放性物質、例えばグリセリルモノステアレートまたはグリセリルジステアレートを、単独でまたは蝋とともに包含し得る。
【００２５】
薬学的調製物は、製薬の慣用的技法に従って、例えば錠剤形態のためには、必要な場合には、粉砕、混合、造粒および圧縮により；あるいは硬質ゼラチンカプセル形態のためには、粉砕、混合および充填により製造される。液体担体が用いられる場合、調製物は、シロップ、エリキシル、乳濁液、あるいは水性または非水性懸濁液の形態で存在する。このような液体処方物は、直接的に経口投与され得るし、または軟質ゼラチンカプセル中に充填され得る。
【００２６】
本発明の方法およびキットによる薬学的組成物は、治療的有効量で送達され得る。精確な治療的有効量は、所定の被験体における処置の効力の点で、最も有効な結果を生じる組成物の量である。この量は、種々の因子、例えば治療用化合物の特質（例えば、活性、薬物動態、薬力学および生物学的利用能）、被験体の生理学的状態（例えば、年齢、性別、疾患の種類および段階、全身状態、所定の投薬に対する応答性、ならびに医薬品の種類）、処方物中の製薬上許容可能な担体（単数または複数）の性質、ならびに投与経路によって変わるが、これらに限定されない。臨床および薬理学的技術分野における当業者は、慣例的実験により、例えば化合物の投与に対する被験体の応答をモニタリングし、したがって投与量を調整することにより、治療的有効量を決定し得る。付加的指針に関しては、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ｇｅｎｎａｒｏ  ｅｄ．  ２０ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ  ＰＡ，  ＵＳＡ）（２０００）を参照されたい。
【００２７】
典型的投与量は、既知の治療用化合物が用いられるメーカーにより推奨される、そしてさらにまた、動物モデルにおけるｉｎ  ｖｉｔｒｏでの応答（単数または複数）により当業者に示されるような、範囲であり得る。このような投与量は、典型的には、関連の生物学的活性を失うことなく、濃度または量の大きさを約一桁まで低減され得る。したがって、実際の投与量は、医者の判断、患者の症状、そして、例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ応答性または適切な動物モデルにおいて観察される応答を基礎にした治療方法の有効性によって決まる。
【００２８】
いくつかの実施形態では、本発明は、細菌感染を処置するためのキットにも関する。いくつかの実施形態では、キットは、個体におけるＭＲＳＡ感染を処置するために有用である。キットは、本明細書中に記載される組成物のうちの１つ以上を含めた物質または構成成分の集まりである。したがって、いくつかの実施形態では、キットは、バンコマイシン、ＤＣＰリポソームおよび／またはＤＭＰＧリポソームを含む組成物を含有する。いくつかの実施形態では、バンコマイシン・リポソーム製剤は、バンコマイシン、ＤＳＰＣ、ＤＣＰおよびコレステロールを含む。いくつかの実施形態では、ＤＳＰＣ、ＤＣＰおよびコレステロールは、７：２：１のモル比で存在する。他の実施形態では、バンコマイシン・リポソーム製剤は、バンコマイシン、ＤＳＰＣ、ＤＭＰＧおよびコレステロールを含む。いくつかの実施形態では、ＤＳＰＣ、ＤＭＰＧおよびコレステロールは、７：２：１のモル比で存在する。
【００２９】
本発明のキットにおいて設計される構成成分の正確な性質は、その意図される目的によって決まる。例えば、いくつかの実施形態は、細菌感染を処置するという目的のために設計される。いくつかの実施形態では、細菌感染は、以下の：黄色ブドウ球菌、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌、バンコマイシン中等度耐性黄色ブドウ球菌、肺炎球菌、腸球菌、エンテロコッカス・フェシウム、コアグラーゼ陰性ブドウ球菌およびその組合せからなる群から選択される微生物により引き起こされる。一実施形態では、感染は、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌により引き起こされる。いくつかの実施形態では、キットは、特に、哺乳動物被験体を処置するという目的のために設計される。他の実施形態では、キットは、特に、ヒト被験者を処置するという目的のために設計される。さらなる実施形態では、キットは、例えば農場動物、飼育動物および実験室動物（これらに限定されない）のような被験体を処置する獣医学的用途のために設計される。
【００３０】
使用説明書は、キットに包含され得る。「使用説明書」は、典型的には、所望の結果を実行するために、例えば細菌感染を処置するために、キットの構成成分の使用に際して用いられるべき技法を記載する具体的表現を含む。任意に、キットは、その他の有用な構成成分、例えば希釈剤、緩衝剤、製薬上許容可能な担体、注射器、カテーテル、アプリケーター、ピペッティングまたは測定ツール、包帯材料、または当業者に容易に認識されるようなその他の有用な装具も含有する。
【００３１】
キット中に集められる材料または構成成分は、実際的専門家に提供されて、その操作可能性および有用性を保持する任意の便利で且つ適切な方法で保存される。例えば、構成成分は、溶解、水和または凍結乾燥形態であり得る；それらは、室温で、冷蔵または冷凍温度で提供され得る。構成成分は、典型的には、適切な包装材（単数または複数）中に含有される。本明細書中で用いる場合、「包装材」という語句は、キットの内容物、例えば本明細書中に開示される本発明の組成物等を収容するために用いられる１つ以上の物理的構造物を指す。包装材は、好ましくは滅菌性の、夾雑物を含まない環境を提供するために、周知の方法により構築される。キットに用いられる包装材は、細菌感染を処置するに際して慣例的に利用されるものである。本明細書中で用いる場合、「包装」という用語は、個々のキット構成成分を保持し得る適切な固体マトリックスまたは材料、例えばガラス、プラスチック、紙、箔等を指す。したがって、例えば包装は、細菌感染を処置するために用いられる適量の本発明の組成物を含入するために用いられるガラスバイアルであり得る。包装材は、一般的に、内容物および／またはキットの目的および／またはその構成成分を示す外部ラベルを有する。
【００３２】
以下の非限定例は、本明細書中に開示される本発明の実施形態をさらに例証するために提供される。以下の実施例で開示される技法は、本発明の実行において十分に機能することが判明しているアプローチを表しており、したがって、その実行のための方式の例を構成するとみなされ得る、と当業者により理解されるべきである。しかしながら、当業者は、本発明の開示にかんがみて、多数の変更が、開示される具体的実施形態においてなされ得ると理解すべきであり、本発明の精神および範囲を逸脱しない限り、同様のまたは類似の結果を依然として得る。
実施例
実施例１
細菌株、マウスおよび化学製品
【００３３】
試験に用いたＭＲＳＡ株は、以下の通りである：ＮＲＳ−３５（病因関連ＭＲＳＡ；ＮＡＲＳＡから）、ＬＡＣ（ＣＡ−ＭＲＳＡ株；ｐｕｌｓｏｔｙｐｅ  ＵＳＡ  ３００）、ＡＴＣＣ  ２９２１３、ＡＴＣＣ  ４３３０００、および６つの付加的ＭＲＳＡ単離物；Ｃｅｄａｒｓ−Ｓｉｎａｉクリニカルラボラトリー（Ｃｅｄａｒｓ−Ｓｉｎａｉ  ＩＲＢ  ｅｘｅｍｐｔｉｏｎ  Ｐｒｏ００２２５４１）。１０週齢ＣＤ１雄マウスは、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒから購入した。ｌ，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）およびコレステロールは、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ  Ｌｉｐｉｄｓ  Ｉｎｃ．  （Ｂｕｒｎａｂｙ，  ＢＣ，  Ｃａｎａｄａ）から入手した。ジセチルホスフェート（ＤＣＰ）およびジミリストイルホスファチジルグリセロール（ＤＭＰＧ）は、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  （Ｓｔ．  Ｌｏｕｉｓ，  ＭＯ，  ＵＳＡ）から購入した。バンコマイシンは、Ｇｏｌｄ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  （Ｓｔ．  Ｌｏｕｉｓ，  ＭＯ，  ＵＳＡ）から入手した。
実施例２
リポソーム調製物
【００３４】
７：２：１のモル比でのＤＳＰＣ：ＤＭＰＧ：ＣＨＯＬ（ＤＳＰＣ  ７１．５ｍｇ、ＤＭＰＧ  １７．８ｍｇおよびコレステロール  ５ｍｇ）または７：２：１のモル比でのＤＳＰＣ：ＤＣＰ：ＣＨＯＬ（ＤＳＰＣ  ７１．５ｍｇ、ＤＣＰ  １４．１ｍｇおよびコレステロール  ５ｍｇ）の脂質混合物を、丸底エルレンマイヤーフラスコ中の１ｍＬのクロロホルム／メタノール（２：１  ｖ／ｖ比）に溶解した。回転蒸発器（Ｂｕｃｈｉ−Ｒｏｔａｖａｐｏｒ  Ｒ２０５、Ｂｒｉｎｋｍａｎｎ，  Ｔｏｒｏｎｔｏ，  ＯＮ，  Ｃａｎａｄａ）を用いて、５５℃で真空下で、有機溶媒を除去した。この工程は、薄い乾燥脂質皮膜を生じた。
【００３５】
バンコマイシン（５０ｍｇ／ｍＬ）の水溶液  １ｍｌを、薄い乾燥脂質皮膜に付加し、５５℃水浴中で１分間、手動で振盪した。次に、脂質懸濁液を、氷浴中に沈めながら、５分間音波処理した（Ｓｏｎｉｃ  Ｄｉｓｍｅｍｂｒａｔｏｒ  モデル５００、Ｆｉｓｃｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，  ＵＳＡ）。超音波発生装置は、如何なる時点でも、リポソーム懸濁液と直接接触しなかった。懸濁液を、保存のために一晩凍結乾燥した（Ｌａｂｃｏｎｃｏ  モデル７７５４０、ＵＳＡ）。
【００３６】
２３℃で走査するＮＩＣＯＭＰ  ２７０サブミクロン粒子サイズ分析器（Ｓａｎｔａ  Ｂａｒｂａｒａ，  ＣＡ，  ＵＳＡ）を用いて、光子相関分光法により、リポソームの平均直径を決定した。リポソームに関するサイズは、５２７．６ｎｍ±５８．２ｎｍであった。バンコマイシン・リポソーム製剤の調製のために、バンコマイシンを５０ｍｇ／ｍｌで用いた。これらのリポソームの被包効率（リポソームの内側に残存する活性化合物の量対導入されたバンコマイシンの初期量の比として定義される）を、黄色ブドウ球菌ＡＴＣＣ  ２９２１３の芝状物を有するミューラー・ヒントン寒天培地（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）中のウェル切片からの放射状分散により決定し、標準曲線からバンコマイシン濃度を算定した。効率は、ＤＣＰに関しては９％、ＤＭＰＧに関しては２０％であった。リポソームの再水和のために、リン酸塩緩衝溶液（ＰＢＳ）を付加し、掻き混ぜて、水浴中で４４℃で３０分間加熱して、次に、１２０００ｒｐｍで２０分間遠心分離した。上清を捨てて、ペレットをＰＢＳで再構成して、２日以内に用いた。
実施例３
ＭＲＳＡ殺害動力学検定
【００３７】
トッド・ヒューイットブロス（ＴＨＢ）中で振盪しながら、ＭＲＳＡ株を、３７℃で一晩、増殖させた。翌日、細菌をＰＢＳ中で２回洗浄し、ＴＨＢ（抗生物質含有と抗生物質無含有）に付加して、最終濃度を約２×１０５ＣＦＵ／ｍｌにした後、振盪しながら３７℃でインキュベートした。０、３および６時間目に、残存ＣＦＵの計数のために、細菌を寒天培地上でプレート化した。
実施例４
全身性ＭＲＳＡ感染の処置
【００３８】
一晩ＭＲＳＡ培養をＴＨＢ中に希釈して、振盪しながら３７℃で０．６のＯＤ６００に増殖させて、遠心分離し、次いで、ＰＢＳ中で２回洗浄した。１０週齢ＣＤ−１マウスを、３．９×１０６ＣＦＵのＭＲＳＡに腹腔内感染させた。感染の１時間後、ＰＢＳ、５０ｍｇ／ｋｇのＤＣＰバンコマイシン・リポソーム製剤または５０ｍｇ／ｋｇの遊離バンコマイシンをマウスに腹腔内注射した。２４時間後にマウスを屠殺して、脾臓および腎臓を採取し、均質化して、ＣＦＵの計数のために観点培地上でプレート化した。動物感染実験は、動物の使用および管理に関するシーダーズ・シナイ委員会により認可され、そして容認獣医学的標準を用いて実施された。
実施例５
統計学的分析
【００３９】
経時的殺害検定のために、非対合スチューデントｔ検定を用いて比較を行なった。熱実試験に関しては、群の平均に関する分散分析（ＡＮＯＶＡ）を算定し、ｐ値＜０．０５は統計学的に有意であるとみなした。
実施例６
バンコマイシン・リポソーム製剤処方物のＭＩＣおよびＭＢＣ
【００４０】
２つのバンコマイシン・リポソーム製剤処方物（それぞれのリポソーム調製物中の素あれらの含有物に基づいて、ＤＣＰおよびＤＭＰＧと呼ばれる）を試験で評価した。表１に示すように、ＤＣＰおよびＤＭＰＧバンコマイシンは、ＨＡ−ＭＲＳＡ株  ＮＲＳ−３５およびＣＡ−ＭＲＳＡ株  ＬＡＣに対して、遊離バンコマイシンと比較して、２分の１〜４分の１のＭＩＣを示した。ＭＢＣは、遊離バンコマイシンと比較して、抗生物質リポソーム製剤に関しては約４分の１であった（表２）。ＤＣＰバンコマイシンは、７つのＭＲＳＡ株のパネルに対してさらに評価した結果、遊離バンコマイシンと比較して約２分の１のＭＩＣを示した。抗生物質を有さない対照リポソームは、ＭＲＳＡ株の増殖を抑制しなかった（データは示されていない）。
実施例７
ＭＲＳＡのクリアランスにおけるバンコマイシン・リポソーム製剤の効力
【００４１】
次に、ＤＣＰバンコマイシンの抗微生物活性を、経時的殺害検定で検査した。遊離およびリポソーム製剤バンコマイシンに関して選択した濃度は、１／２×ＭＩＣ、１×ＭＩＣおよび２×ＭＩＣを包含した。図１ａに示したように、ＤＣＰバンコマイシンは、３時間後に３つの濃度のすべてで、通常のバンコマイシンと比較して、ＭＲＳＡ（ＬＡＣ）の殺害増大を実証した。ＤＣＰと遊離バンコマイシン群との間の差は、６時間で０．６ｍｇ／Ｌの用量に関しては依然として有意であったが、しかし他の２つの用量に関しては有意でなかった。１．２５ｍｇ／Ｌの用量では、ＤＣＰバンコマイシンも、３時間および６時間の療法で、遊離バンコマイシンより有効にＮＲＳ−３５を殺害した（図１ｂ）。殺害における有意差は、他の薬剤濃度では認められなかった。
実施例８
全身性ＭＲＳＡ感染モデルにおけるＤＣＰバンコマイシン・リポソーム製剤の効力
【００４２】
ｉｎ  ｖｉｖｏでのＤＣＰの効力を評価するために、１０〜１２匹のマウスの群にＭＲＳＡ（ＬＡＣ）を腹腔内接種した。１時間後、ＰＢＳ、５０ｍｇ／ｋｇの遊離バンコマイシンまたは５０ｍｇ／ｋｇのＤＣＰバンコマイシンをマウスに投与した。感染の２４時間後に、腎臓および脾臓におけるＣＦＵ負荷を計数した（図２）。全体的に、ＤＣＰバンコマイシンは、ＰＢＳ群と比較して、脾臓および腎臓における細菌負荷を２〜３ｌｏｇ低減した（ｐ≦０．００１）。遊離バンコマイシン処置と比較して、ＤＣＰバンコマイシン処置は、腎臓および脾臓の両方における細菌負荷を約１ｌｏｇ低減した。これは、腎臓ＣＦＵに関しては有意であったが、しかし脾臓ＣＦＵに関しては有意でなかった。
実施例９
ＭＩＣおよびＭＢＣの決定
【００４３】
ブロス希釈技法により、全株に関する遊離およびリポソーム製剤抗生物質のＭＩＣを決定した。要するに、２０μｇ／ｍｌから０．３μｇ／ｍｌへの遊離−またはリポソーム被包抗生物質の連続希釈液を調製した。細菌懸濁液に関しては、ＭＲＳＡの凍結ストックをヒツジ血液寒天プレート上に画線接種した。単一コロニーを新鮮な培地中に接種して、３７℃で２０時間振盪した。一晩細菌を希釈し、９６ウェルプレート（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）に付加して、１×１０５のおよその濃度を達成した。寒天培地上でのプレート化により、接種物を確証した。次に、９６ウェルプレートを、３７℃で振盪しながら、または振盪せずにインキュベートして、細菌の可視的増殖を抑制する抗生物質処方物の最低濃度を、２４時間後に決定した（ＭＩＣ）。振盪（２００ｒｐｍ）を伴うプレートのインキュベーションは、リポソーム調製物に関するＭＩＣ測定値の粘稠度を増大した。ＭＢＣの決定のために、ＭＩＣ決定のために用いたブロスを寒天培地上でプレート化して、元の接種材料の９９．９％が殺害された一次希釈液を同定した。ＭＩＣおよびＭＢＣ検定はすべて、少なくとも３回実施した。
実施例１０
表
【表１】
2014523859.tif 000003
【表２】
2014523859.tif 000004
【００４４】
上記の種々の方法および技術は、本発明を実行するための多数の方法を提供する。もちろん、記載される目的または利点の必ずしもすべてが本明細書中に記載される任意の特定の実施形態に従って達成され得るわけではない、と理解されるべきである。したがって、例えば、本明細書中で教示されるかまたは示唆されるような他の目的または利点を必ずしも達成することなく、本明細書中で教示されたような一利点または利点群を達成するかまたは最適化するように、当該方法は実施され得る、と当業者は認識するであろう。種々の代替物は、本明細書中で記述されている。いくつかの好ましい実施形態は、具体的には、１つの、別のまたはいくつかの特徴を包含するが、一方、他の実施形態は、具体的には、１つの、別のまたはいくつかの特徴を除外し、一方、さらに他の実施形態は、１つの、別のまたはいくつかの特徴の包含により特定の特徴を軽減する、と理解されるべきである。
【００４５】
さらに、異なる実施形態化らの種々の特徴の適用可能性を、当業者は認識するであろう。同様に、上記の種々の要素、特徴およびステップ、ならびに各々のこのような要素、特徴またはステップに関するその他の既知の等価物は、当該技術分野の当業者により種々の組合せで用いられ手、本明細書中に記載される原理に従って方法を実施し得る。種々の要素、特徴およびステップの中で、多様な実施形態に特定的に包含されるものもあれば、特定的に除外されるものもある。
【００４６】
ある実施形態および実施例に関連して本出願を開示してきたが、本出願の実施形態は、具体的に開示された実施形態を越えて他の代替的実施形態および／またはその使用、修正および等価物にまで広がる、と当業者により理解されるであろう。
【００４７】
いくつかの実施形態では、「１つの（ａ）」および「１つの（ａｎ）」および「その（ｔｈｅ）」という用語、ならびに本出願の特定の実施形態を記述する前後関係で（特に、以下の特許請求の範囲のうちのいずれかと関連して）用いられる同様の言及は、単数および複数の両方を包含するよう意図され得る。本明細書中の値の範囲の列挙は、その範囲内に入る各々の別個の値に独立して言及する略記方法として役立つよう単に意図される。本明細書中で別記しない限り、各々の個々の値は、本明細書中で独立して引用された場合のように、本明細書中に組入れられる。本明細書中で記載される方法はすべて、本明細書中で別記しない限り、または前後関係により明白に否定されない限り、任意の適切な順序で実施され得る。本明細書中のある実施形態に関連して提供される任意のおよびすべての実施例、または例示的言い方（例えば、「〜のような」）の使用は、単に、本出願をより良好に明確にするよう意図されており、別のやり方で特許請求される本出願の範囲に関する制限を述べるものではない。本明細書中の言い回しは、本出願の実行に不可欠なあらゆる非特許請求要素を示していると解釈されるべきである。
【００４８】
本出願の好ましい実施形態は、本出願を実行するための本発明人等に既知の最良の方式を含めて、本明細書中に記載されている。それらの好ましい実施形態における変更は、前記の説明を読めば、当業者に明らかになる。当業者は、適宜、このような変更を用い得るし、本出願は、本明細書中に具体的に記載されたものとは別の方法で実行され得る、と意図される。したがって、本出願の多数の実施形態は、適用可能な法令により許される場合、本明細書に添付される特許請求の範囲で列挙される対象のすべての修正および等価物を包含する。さらに、そのすべての考え得る変更における上記の要素の任意の組合せは、本明細書中で別記しない限り、または前後関係で明白に否定されない限り、本出願に包含される。
【００４９】
本明細書中で参照される特許、特許出願、特許出願の出版物およびその他の材料、例えば論文、書物、出版物、文書、事柄等はすべて、参照により本明細書中で援用されるが、但し、それらに関連した任意の審査ファイル履歴、本発明の文書と一致しないかまたは矛盾するそれらのいずれか、あるいは本発明の文書にここでまたは後に関連する特許請求の最も広い範囲に関して限定的影響を及ぼし得るそれらのいずれかは除外する。例として、組入れられたもののいずれかと関連する記述、定義および／または用語の使用と、本発明の文書と関連するものとの間に何らかの不一致または矛盾が存在する場合、本発明の文書における記述、定義および／または用語の使用が優位に立つ。
【００５０】
最後に、本明細書中に開示される本出願の実施形態は、本出願の実施形態の原理の例証である、と理解されるべきである。用いられ得る他の修正は、本出願の範囲内であり得る。したがって、例として、本出願の実施形態の代替的形状が本明細書中の教示に従って利用され得るが、しかしそれらに限定されない。したがって、本出願の実施形態は、まさに示され、記述されたようなものに限定されない。
【００５１】
１．  Ｓｔｒｙｊｅｗｓｋｉ，  Ｍ．  Ｅ．  ＆  Ｃｈａｍｂｅｒｓ，  Ｈ．  Ｆ．  （２００８）．  Ｓｋｉｎ  ａｎｄ  ｓｏｆｔ−ｔｉｓｓｕｅ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ  ｃａｕｓｅｄ  ｂｙ  ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ−ａｃｑｕｉｒｅｄ  ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ．  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ  ４６  Ｓｕｐｐｌ  ５，  Ｓ３６８−３７７．  
２．  Ｍｏｒａｎ，  Ｇ．  Ｊ．，  Ｋｒｉｓｈｎａｄａｓａｎ，  Ａ．，  Ｇｏｒｗｉｔｚ，  Ｒ．  Ｊ．，  Ｆｏｓｈｅｉｍ，  Ｇ．  Ｅ．，  ＭｃＤｏｕｇａｌ，  Ｌ．  Ｋ．，  Ｃａｒｅｙ，  Ｒ．  Ｂ．，  ｅｔ  ａｌ．  （２００６）．  Ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  Ｓ．  ａｕｒｅｕｓ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ  ａｍｏｎｇ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｅｍｅｒｇｅｎｃｙ  ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ．  Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３５５，  ６６６−６７４．  
３．  Ｔｏｒｃｈｉｌｉｎ，  Ｖ．  Ｐ．  （２００５）．  Ｒｅｃｅｎｔ  ａｄｖａｎｃｅｓ  ｗｉｔｈ  ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ  ａｓ  ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ｃａｒｒｉｅｒｓ．  Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ  ４，  １４５−１６０．  
４．  Ｍｕｇａｂｅ，  Ｃ，  Ａｚｇｈａｎｉ，  Ａ．  Ｏ．  ＆  Ｏｍｒｉ，  Ａ．  （２００６）．  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｄｅｈｙｄｒａｔｉｏｎ−ｒｅｈｙｄｒａｔｉｏｎ  ｖｅｓｉｃｌｅｓ  ｌｏａｄｅｄ  ｗｉｔｈ  ａｍｉｎｏｇｌｙｃｏｓｉｄｅ  ａｎｄ  ｍａｃｒｏｌｉｄｅ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ．  Ｉｎｔ  Ｊ  Ｐｈａｒｍ  ３０７，  ２４４−２５０．  
５．  Ｎａｃｕｃｃｈｉｏ，  Ｍ．  Ｃ，  Ｂｅｌｌｏｒａ，  Ｍ．  Ｊ．，  Ｓｏｒｄｅｌｌｉ，  Ｄ．  Ｏ．  ＆  ＤＡｑｕｉｎｏ，  Ｍ．  （１９８５）．  Ｅｎｈａｎｃｅｄ  ｌｉｐｏｓｏｍｅ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｐｉｐｅｒａｃｉｌｌｉｎ  ａｇａｉｎｓｔ  ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ．  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  ２７，  １３７−１３９．  
６．  Ｐｕｍｅｒａｎｔｚ，  Ａ．，  Ｍｕｐｐｉｄｉ，  Ｋ．，  Ａｇｎｉｈｏｔｒｉ，  Ｓ．，  Ｇｕｅｒｒａ，  Ｃ，  Ｖｅｎｋｅｔａｒａｍａｎ，  Ｖ．，  Ｗａｎｇ，  Ｊ  ｅｔ  ａｌ．  （２０１１）．  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｌｉｐｏｓｏｍａｌ  ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ  ａｎｄ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｋｉｌｌｉｎｇ  ｏｆ  ｍｅｔｉｃｉｌｌｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  （ＭＲＳＡ）．  Ｉｎｔ  Ｊ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  ３７，  １４０−１４４．  
７．  Ｏｎｙｅｊｉ，  Ｃ．  Ｏ．，  Ｎｉｇｈｔｉｎｇａｌｅ，  Ｃ．  Ｈ．  ＆  Ｍａｒａｎｇｏｓ，  Ｍ．  Ｎ．  （１９９４）．  Ｅｎｈａｎｃｅｄ  ｋｉｌｌｉｎｇ  ｏｆ  ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ  ｂｙ  ｌｉｐｏｓｏｍｅ−ｅｎｔｒａｐｐｅｄ  ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ  ａｎｄ  ｔｅｉｃｏｐｌａｎｉｎ．  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ２２，  ３３８−３４２．  
８．  Ｋａｄｒｙ，  Ａ．  Ａ．，  Ａｌ−Ｓｕｗａｙｅｈ，  Ｓ．  Ａ．，  Ａｂｄ−  Ａｌｌａｈ，  Ａ．  Ｒ．  ＆  Ｂａｙｏｍｉ，  Ｍ．  Ａ．  （２００４）．  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｏｓｔｅｏｍｙｅｌｉｔｉｓ  ｂｙ  ｌｉｐｏｓｏｍａｌ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ．  Ｊ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  ５４，  １１０３−１１０８．  
９．  Ａｎｄｅｒｓｏｎ，  Ｍ．  ＆  Ｏｍｒｉ，  Ａ．  （２００４）．  Ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  ｌｉｐｉｄ  ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｓｔａｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  ｒｅｌｅａｓｅ  ｋｉｎｅｔｉｃｓ  ｏｆ  ｌｉｐｏｓｏｍｅ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ  １１，  ３３−３９．  
１０．  Ｍｕｇａｂｅ，  Ｃ，  Ｈａｌｗａｎｉ，  Ｍ．，  Ａｚｇｈａｎｉ，  Ａ．  Ｏ．，  Ｌａｆｒｅｎｉｅ，  Ｒ．  Ｍ．  ＆  Ｏｍｒｉ，  Ａ．  （２００６）．  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  ｅｎｈａｎｃｅｄ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｌｉｐｏｓｏｍｅ−ｅｎｔｒａｐｐｅｄ  ａｍｉｎｏｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ  ａｇａｉｎｓｔ  ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｓｔｒａｉｎｓ  ｏｆ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ．  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  ５０，  ２０１６−２０２２．
【図１Ａ】
2014523859.tif 000005
【図１Ｂ】
2014523859.tif 000006
【図２Ａ】
2014523859.tif 000007
【図２Ｂ】
2014523859.tif 000008
【国際調査報告】
2014523859.tif 000009
2014523859.tif 000010
2014523859.tif 000011