(57)【要約】本発明は、ＰＭ−２抗体、機能的フラグメント、修飾形態および異型、核酸、ならびに他の組成物を提供する。抗体、機能的フラグメント、修飾形態および異型、核酸、ならびに他の組成物は、処置方法および診断方法で有用である。１つの方法は、被験体における新形成、腫瘍、または癌の転移を処置するのに有効な量のＰＭ−２抗体またはその機能的フラグメントを被験体に投与することによる、処置を必要とする被験体における新形成、腫瘍、または癌の転移の処置を含む。
2011519819.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
処置を必要とする被験体において新形成、腫瘍、または癌の転移を処置するための方法であって、該方法は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合について競合する抗体またはその機能的フラグメントを、該被験体における該新形成、腫瘍、または癌の転移を処置するのに有効な量、該被験体に投与する工程を含む、方法。
【請求項２】
１つまたは複数の部位での転移性の新形成、腫瘍、または癌の形成または確立を軽減または阻害するための方法であって、該方法は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合について競合する抗体またはその機能的フラグメントを、被験体の１つまたは複数の他の部位での転移性の新形成、腫瘍、または癌の形成または確立を軽減または阻害するのに有効な量、該被験体に投与する工程を含む、方法。
【請求項３】
処置を必要とする被験体における原発性の新形成、腫瘍、または癌から離れた１つまたは複数の部位、位置、または領域への原発性の新形成、腫瘍、または癌の転移を軽減または阻害するための方法であって、該方法は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合について競合する抗体またはその機能的フラグメントを、該被験体における該原発性の新形成、腫瘍、または癌から離れた１つまたは複数の部位、位置、または領域への該原発性の新形成、腫瘍、または癌の転移を軽減または阻害するのに有効な量、該被験体に投与する工程を含む、方法。
【請求項４】
処置を必要とする被験体における新形成、腫瘍、または癌から生じる転移の形成または確立を軽減または阻害するための方法であって、該方法は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合について競合する抗体またはその機能的フラグメントを、該被験体における新形成、腫瘍、または癌から生じる転移の形成または確立を軽減または阻害するのに有効な量、該被験体に投与する工程を含む、方法。
【請求項５】
処置を必要とする被験体における転移に進展するか転移を生じ得る新形成細胞、腫瘍細胞、または癌細胞の成長、増殖、移動性、または侵襲性を軽減または阻害するための方法であって、該方法は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合について競合する抗体またはその機能的フラグメントを、該転移に進展するか転移を生じ得る新形成細胞、腫瘍細胞、または癌細胞の成長、増殖、移動性、または侵襲性を軽減または阻害するのに有効な量、該被験体に投与する工程を含む、方法。
【請求項６】
処置を必要とする被験体における新形成、腫瘍、または癌の再発、あるいは新形成、腫瘍、または癌の進行を軽減または阻害するための方法であって、該方法は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合について競合する抗体またはその機能的フラグメントを、該被験体における新形成、腫瘍、または癌の再発、あるいは新形成、腫瘍、または癌の進行の軽減または阻害に有効な量、該被験体に投与する工程を含む、方法。
【請求項７】
被験体で転移が形成または確立された後に該転移の成長または増殖を軽減または阻害するための方法であって、該方法は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合について競合する抗体またはその機能的フラグメントを、該被験体で該転移が形成または確立された後に該転移の成長または増殖を軽減または阻害するのに有効な量、該被験体に投与する工程を含む、方法。
【請求項８】
被験体で転移が形成または確立された後に該被験体におけるさらなる転移の形成または確立を軽減または阻害するための方法であって、該方法は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合について競合する抗体またはその機能的フラグメントを、該被験体で転移が形成または確立された後に該被験体におけるさらなる転移の形成または確立を軽減または阻害するのに有効な量、該被験体に投与する工程を含む、方法。
【請求項９】
前記新形成、腫瘍、癌、または転移が、脳、脊椎、頭部もしくは頸部、乳房、食道、口腔、鼻咽頭、鼻もしくは洞、甲状腺、頭部もしくは頸部、胃腸管、胃、小腸、十二指腸、回腸、空腸、肺、肝臓、膵臓、腎臓、副腎、膀胱、結腸、直腸、尿生殖器、前立腺、子宮、子宮内膜、子宮頸部、卵巣、骨髄、リンパ、血液、骨、精巣、陰茎、皮膚もしくは筋肉、または造血系の少なくとも一部を冒すかそこに存在する、請求項１から８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記新形成、腫瘍、癌、または転移が造血性である、請求項１から８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記新形成、腫瘍、癌、または転移が、肉腫、癌腫、腺癌、黒色腫、骨髄腫、芽細胞腫、神経膠腫、リンパ腫、または白血病を含む、請求項１から８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
新形成、腫瘍、癌、または転移が、肺腺癌、肺癌腫、びまん性または間質性胃癌腫、結腸腺癌、前立腺腺癌、食道癌腫、乳癌腫、膵腺癌、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、または子宮腺癌を含む、請求項１から８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記新形成、腫瘍、癌、または転移が、ステージＩ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、またはＶの新形成、腫瘍、癌、または転移を含む、請求項１から８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
新形成、腫瘍、癌、または転移が進行性に悪化している、請求項１から８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記新形成、腫瘍、癌、または転移が寛解期にある、請求項１から８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記新形成、腫瘍、癌、または転移が固形または液状である、請求項１から８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記ＰＭ−２抗体または機能的フラグメントを、前記被験体の局所、領域、または全身に投与する、請求項１から８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記新形成、腫瘍、癌、または転移に関連する１つまたは複数の有害な身体症状を緩和または改善することをもたらす、請求項１から８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記処置により、転移の数、体積、またはサイズが軽減または減少するか、転移の数、体積、またはサイズの増加が阻害または防止されるか、前記新形成、腫瘍、癌、または転移の進行または悪化が阻害されるか、転移の細胞溶解またはアポトーシスが刺激されるか、転移の成長、増殖、または生存が阻害、軽減、または減少される、請求項１から８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
前記被験体の寿命が延長または長期化する、請求項１から８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
前記被験体が、抗新生物処置もしくは治療、抗腫瘍処置もしくは治療、抗癌処置もしくは治療、抗転移処置もしくは治療、または免疫促進処置もしくは治療の候補であるか、それを受けているか、それを受けていた、請求項１から８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
抗細胞増殖処置もしくは治療または免疫促進処置もしくは治療を前記被験体に施す工程をさらに含む、請求項１から８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
前記処置または治療が、外科的切除、照射療法、放射線療法、化学療法、免疫療法、または温熱療法を含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記抗細胞増殖処置または治療が、アルキル化剤、代謝拮抗物質、植物抽出物、植物性アルカロイド、ニトロソ尿素、ホルモン、ヌクレオシド、またはヌクレオチドアナログを含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
前記抗細胞増殖処置または治療が、シクロホスファミド、アザチオプリン、シクロスポリンＡ、プレドニゾロン、メルファラン、クロラムブシル、メクロレタミン、ブスルファン、メトトレキサート、６−メルカプトプリン、チオグアニン、５−フルオロウラシル、シトシンアラビノシド、ＡＺＴ、５−アザシチジン（５−ＡＺＣ）および５−アザシチジン関連化合物、ブレオマイシン、アクチノマイシンＤ、ミトラマイシン、マイトマイシンＣ、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、ストレプトゾトシン、ヒドロキシ尿素、シスプラチン、ミトタン、プロカルバジン、ダカルバジン、タキソール、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ドキソルビシン、およびジブロモマンニトールから選択される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２６】
前記免疫促進処置または治療が、リンパ球、形質細胞、マクロファージ、樹状細胞、ＮＫ細胞、またはＢ細胞を含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２７】
前記免疫促進処置または治療が、抗体、細胞成長因子、細胞生存因子、細胞分化因子、サイトカイン、またはケモカインを含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２８】
前記免疫促進処置または治療が、ＩＬ−２、ＩＬ−１α、ＩＬ−１β、ＩＬ−３、ＩＬ−６、ＩＬ−７、顆粒球−マクロファージ−コロニー刺激因子（ＧＭＣＳＦ）、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−１２、ＴＮＦ−α、ＴＮＦβ、ＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−１β、ＲＡＮＴＥＳ、ＳＤＦ−１、ＭＣＰ−１、ＭＣＰ−２、ＭＣＰ−３、ＭＣＰ−４、エオタキシン、エオタキシン−２、Ｉ−３０９／ＴＣＡ３、ＡＴＡＣ、ＨＣＣ−１、ＨＣＣ−２、ＨＣＣ−３、ＬＡＲＣ／ＭＩＰ−３α、ＰＡＲＣ、ＴＡＲＣ、ＣＫβ、ＣＫβ６、ＣＫβ７、ＣＫβ８、ＣＫβ９、ＣＫβ１１、ＣＫβ１２、Ｃ１０、ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＥＮＡ−７８、ＧＣＰ−２、ＰＢＰ／ＣＴＡＰＩＩＩβ−ＴＧ／ＮＡＰ−２、Ｍｉｇ、ＰＢＳＦ／ＳＤＦ−１、およびリンホタクチンから選択される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２９】
前記ＰＭ−２抗体または機能的フラグメントを、抗細胞増殖処置もしくは治療または免疫促進処置もしくは治療を施す前、それと実質的に同時、またはその後に投与する、請求項２２に記載の方法。
【請求項３０】
前記被験体が哺乳動物である、請求項１から８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３１】
前記被験体がヒトである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記被験体が、新形成、腫瘍、癌、または転移の処置または治療を受けているか、またはそれを受けていた、請求項１から８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３３】
処置を必要とする被験体における新形成、腫瘍、または癌の転移を処置するための方法であって、該方法は、配列番号１または２に示す重鎖配列または軽鎖配列と少なくとも７０％同一の重鎖配列および軽鎖配列を含む抗体または機能的フラグメントを、該被験体における該新形成、腫瘍、または癌の転移を処置するのに有効な量、該被験体に投与する工程を含む、方法。
【請求項３４】
１つまたは複数の部位での転移性の新形成、腫瘍、または癌の形成または確立を軽減または阻害するための方法であって、該方法は、配列番号１または２に示す重鎖配列または軽鎖配列と少なくとも７０％同一の重鎖配列および軽鎖配列を含む抗体または機能的フラグメントを、被験体の１つまたは複数の他の部位での転移性の新形成、腫瘍、または癌の形成または確立を軽減または阻害するのに有効な量、該被験体に投与する工程を含む、方法。
【請求項３５】
処置を必要とする被験体における原発性の新形成、腫瘍、または癌から離れた１つまたは複数の部位、位置、または領域への原発性の新形成、腫瘍、または癌の転移を軽減または阻害するための方法であって、該方法は、配列番号１または２に示す重鎖配列または軽鎖配列と少なくとも７０％同一の重鎖配列および軽鎖配列を含む抗体または機能的フラグメントを、該被験体における該原発性の新形成、腫瘍、または癌から離れた１つまたは複数の部位、位置、または領域への該原発性の新形成、腫瘍、または癌の転移を軽減または阻害するのに有効な量、該被験体に投与する工程を含む、方法。
【請求項３６】
処置を必要とする被験体における新形成、腫瘍、または癌から生じる転移の形成または確立を軽減または阻害するための方法であって、該方法は、配列番号１または２に示す重鎖配列または軽鎖配列と少なくとも７０％同一の重鎖配列および軽鎖配列を含む抗体またはその機能的フラグメントを、該被験体における新形成、腫瘍、または癌から生じる転移の形成または確立を軽減または阻害するのに有効な量、該被験体に投与する工程を含む、方法。
【請求項３７】
処置を必要とする被験体における転移に進展するか転移を生じ得る新形成細胞、腫瘍細胞、または癌細胞の成長、増殖、移動性、または侵襲性を軽減または阻害するための方法であって、該方法は、配列番号１または２に示す重鎖配列または軽鎖配列と少なくとも７０％同一の重鎖配列および軽鎖配列を含む抗体または機能的フラグメントを、該転移に進展するか該転移を生じ得る新形成細胞、腫瘍細胞、または癌細胞の成長、増殖、移動性、または侵襲性を軽減または阻害するのに有効な量、該被験体に投与する工程を含む、方法。
【請求項３８】
処置を必要とする被験体における新形成、腫瘍、または癌の再発、あるいは新形成、腫瘍、または癌の進行を軽減または阻害するための方法であって、該方法は、配列番号１または２に示す重鎖配列または軽鎖配列と少なくとも７０％同一の重鎖配列および軽鎖配列を含む抗体または機能的フラグメントを、該被験体における新形成、腫瘍、または癌の再発、あるいは新形成、腫瘍、または癌の進行の軽減または阻害に有効な量、該被験体に投与する工程を含む、方法。
【請求項３９】
被験体で転移が形成または確立された後に該転移の成長または増殖を軽減または阻害するための方法であって、該方法は、配列番号１または２に示す重鎖配列または軽鎖配列と少なくとも７０％同一の重鎖配列および軽鎖配列を含む抗体またはその機能的フラグメントを、該被験体で該転移が形成または確立された後に該転移の成長または増殖を軽減または阻害するのに有効な量、該被験体に投与する工程を含む、方法。
【請求項４０】
被験体で転移が形成または確立された後に該被験体におけるさらなる転移の形成または確立を軽減または阻害するための方法であって、該方法は、配列番号１または２に示す重鎖配列または軽鎖配列と少なくとも７０％同一の重鎖配列および軽鎖配列を含む抗体または機能的フラグメントを、該被験体で転移が形成または確立された後に該被験体におけるさらなる転移の形成または確立を軽減または阻害するのに有効な量、該被験体に投与する工程を含む、方法。
【請求項４１】
前記新形成、腫瘍、癌、または転移が、脳、脊椎、頭部もしくは頸部、乳房、食道、口腔、鼻咽頭、鼻もしくは洞、甲状腺、頭部もしくは頸部、胃腸管、胃、小腸、十二指腸、回腸、空腸、肺、肝臓、膵臓、腎臓、副腎、膀胱、結腸、直腸、尿生殖器、前立腺、子宮、子宮内膜、子宮頸部、卵巣、骨髄、リンパ、血液、骨、精巣、陰茎、皮膚もしくは筋肉、または造血系の少なくとも一部を冒すかそこに存在する、請求項３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４２】
前記新形成、腫瘍、癌、または転移が造血性である、請求項３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４３】
前記新形成、腫瘍、癌、または転移が、肉腫、癌腫、腺癌、黒色腫、骨髄腫、芽細胞腫、神経膠腫、リンパ腫、または白血病を含む、請求項３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４４】
新形成、腫瘍、癌、または転移が、肺腺癌、肺癌腫、びまん性または間質性胃癌腫、結腸腺癌、前立腺腺癌、食道癌腫、乳癌腫、膵腺癌、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、または子宮腺癌を含む、請求項３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４５】
前記新形成、腫瘍、癌、または転移が、ステージＩ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、またはＶの新形成、腫瘍、癌、または転移を含む、請求項３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４６】
新形成、腫瘍、癌、または転移が進行性に悪化している、請求項３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４７】
前記新形成、腫瘍、癌、または転移が寛解期にある、請求項３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４８】
前記新形成、腫瘍、癌、または転移が固形または液状である、請求項３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４９】
ＰＭ−２抗体または機能的フラグメントを、前記被験体の局所、領域、または全身に投与する、請求項３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５０】
前記新形成、腫瘍、癌、または転移に関連する１つまたは複数の有害な身体症状を緩和または改善することをもたらす、請求項３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５１】
前記処置により、転移の数、体積、またはサイズが軽減または減少するか、転移の数、体積、またはサイズの増加が阻害または防止されるか、前記新形成、腫瘍、癌、または転移の進行または悪化が阻害されるか、転移の細胞溶解またはアポトーシスが刺激されるか、転移の成長、増殖、または生存が阻害、軽減、または減少される、請求項３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５２】
前記被験体の寿命を延長または長期化する、請求項３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５３】
前記被験体が、抗新生物処置もしくは治療、抗腫瘍処置もしくは治療、抗癌処置もしくは治療、抗転移処置もしくは治療、または免疫促進処置もしくは治療の候補であるか、それを受けているか、それを受けていた、請求項３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５４】
抗細胞増殖処置もしくは治療または免疫促進処置もしくは治療を前記被験体に施す工程をさらに含む、請求項３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５５】
前記処置またはは治療が、外科的切除、照射療法、放射線療法、化学療法、免疫療法、または温熱療法を含む、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
前記抗細胞増殖処置または治療が、アルキル化剤、代謝拮抗物質、植物抽出物、植物性アルカロイド、ニトロソ尿素、ホルモン、ヌクレオシド、またはヌクレオチドアナログを含む、請求項５４に記載の方法。
【請求項５７】
前記抗細胞増殖処置または治療が、シクロホスファミド、アザチオプリン、シクロスポリンＡ、プレドニゾロン、メルファラン、クロラムブシル、メクロレタミン、ブスルファン、メトトレキサート、６−メルカプトプリン、チオグアニン、５−フルオロウラシル、シトシンアラビノシド、ＡＺＴ、５−アザシチジン（５−ＡＺＣ）および５−アザシチジン関連化合物、ブレオマイシン、アクチノマイシンＤ、ミトラマイシン、マイトマイシンＣ、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、ストレプトゾトシン、ヒドロキシ尿素、シスプラチン、ミトタン、プロカルバジン、ダカルバジン、タキソール、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ドキソルビシン、およびジブロモマンニトールから選択される、請求項５４に記載の方法。
【請求項５８】
前記免疫促進処置または治療が、リンパ球、形質細胞、マクロファージ、樹状細胞、ＮＫ細胞、またはＢ細胞を含む、請求項５４に記載の方法。
【請求項５９】
前記免疫促進処置または治療が、抗体、細胞成長因子、細胞生存因子、細胞分化因子、サイトカイン、またはケモカインを含む、請求項５４に記載の方法。
【請求項６０】
前記免疫促進処置または治療が、ＩＬ−２、ＩＬ−１α、ＩＬ−１β、ＩＬ−３、ＩＬ−６、ＩＬ−７、顆粒球−マクロファージ−コロニー刺激因子（ＧＭＣＳＦ）、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−１２、ＴＮＦ−α、ＴＮＦβ、ＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−１β、ＲＡＮＴＥＳ、ＳＤＦ−１、ＭＣＰ−１、ＭＣＰ−２、ＭＣＰ−３、ＭＣＰ−４、エオタキシン、エオタキシン−２、Ｉ−３０９／ＴＣＡ３、ＡＴＡＣ、ＨＣＣ−１、ＨＣＣ−２、ＨＣＣ−３、ＬＡＲＣ／ＭＩＰ−３α、ＰＡＲＣ、ＴＡＲＣ、ＣＫβ、ＣＫβ６、ＣＫβ７、ＣＫβ８、ＣＫβ９、ＣＫβ１１、ＣＫβ１２、Ｃ１０、ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＥＮＡ−７８、ＧＣＰ−２、ＰＢＰ／ＣＴＡＰＩＩＩβ−ＴＧ／ＮＡＰ−２、Ｍｉｇ、ＰＢＳＦ／ＳＤＦ−１、およびリンホタクチンから選択される、請求項５４に記載の方法。
【請求項６１】
ＰＭ−２抗体または機能的フラグメントを、前記抗細胞増殖処置もしくは治療または免疫促進処置もしくは治療を施す前、それと実質的に同時、またはその後に投与する、請求項５４に記載の方法。
【請求項６２】
前記被験体が哺乳動物である、請求項３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６３】
前記被験体がヒトである、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
前記被験体が、新形成、腫瘍、癌、または転移の処置または治療を受けているか、またはそれを受けていた、請求項３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６５】
前記抗体またはその機能的フラグメントが、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列と少なくとも７０％同一の重鎖配列および軽鎖配列を含む、請求項３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６６】
前記抗体またはその機能的フラグメントが、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列の１つまたは複数のＣＤＲと少なくとも８０％同一の１つまたは複数のＣＤＲを有する重鎖配列および軽鎖配列を含む、請求項３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６７】
前記抗体またはその機能的フラグメントが、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列の１つまたは複数のＣＤＲと少なくとも９０％同一の１つまたは複数のＣＤＲを有する重鎖配列および軽鎖配列を含む、請求項３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６８】
前記抗体またはその機能的フラグメントが、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列の１つまたは複数のＣＤＲと少なくとも１００％同一の１つまたは複数のＣＤＲを有する重鎖配列および軽鎖配列を含む、請求項３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６９】
前記抗体またはその機能的フラグメントが、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合するエピトープまたは抗体に結合する、請求項１から８または３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７０】
前記抗原が、ＢＸＰＣ−３細胞、ＭＫＮ細胞、またはＣＲＬ細胞上で発現される約１１５ｋＤａのタンパク質抗原を含む、請求項６９に記載の方法。
【請求項７１】
前記抗体またはその機能的フラグメントが、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合について競合する、請求項１から８または３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７２】
前記抗体またはその機能的フラグメントが、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合するエピトープに結合し、該エピトープが、ＢＸＰＣ−３細胞、ＭＫＮ細胞、またはＣＲＬ細胞上で発現される約１１５ｋＤａのタンパク質抗原上に存在する、請求項１から８または３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７３】
前記抗体またはその機能的フラグメントが、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＢＸＰＣ−３細胞、ＭＫＮ細胞、またはＣＲＬ細胞上で発現される約１１５ｋＤａのタンパク質抗原上に存在するエピトープへの結合について競合する、請求項１から８または３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
この出願は、２００７年１２月２１日に出願された、出願第６１／０１６，２１９号（これは、その全体が参考として本明細書に明確に援用される）への優先権を主張する。
【０００２】
発明の分野
本発明は、ＰＭ−２として公知の抗体に関する（ＷＯ２００４／００５３５１号）。ＰＭ−２と示される抗体はＩｇＭであり、異なる新形成、癌、腫瘍、および転移型に結合する。ＰＭ−２は、種々の癌細胞型の成長を阻害し、種々の癌細胞型のアポトーシスを刺激または誘導する。ＰＭ−２はまた、原発性の新形成、腫瘍、または癌を生じる１つまたは複数の部位での転移の形成または確立または１つまたは複数の他の部位で形成または確立された転移の成長または増殖を軽減する。
【背景技術】
【０００３】
緒言
種々の身体区画中の播種性腫瘍細胞（ＤＴＣ）は、潜在的に、癌の進行および再発に寄与する。ＤＴＣは、原発性癌の周辺部位での転移性疾患の最終的発症に関連し得る。したがって、ＤＴＣの減少により、転移性腫瘍の確立または形成または確立された転移性腫瘍の成長または増殖を軽減または阻害する可能性が高まる。本発明は、この必要性に取り組み、関連する利益を提供する。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
概要
本発明は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する細胞、抗原、またはエピトープへの結合につき競合する単離および精製された抗体および機能的フラグメントを提供する。１つの実施形態では、抗体または機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と新形成細胞、腫瘍細胞、癌細胞、または転移細胞への結合につき競合する。
【０００５】
特定の態様では、抗体または機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と、１つまたは複数の胃腺癌、結腸直腸腺癌、肺扁平上皮癌腫、肺腺癌、食道扁平上皮癌腫、膵腺癌、膀胱の尿路上皮癌腫、腎細胞癌腫、前立腺腺癌腫、乳管癌腫、乳房小葉癌腫、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、または子宮細胞腺癌上の抗原への結合につき競合する。別の実施形態では、抗体または機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と、胃腺癌、結腸直腸腺癌、肺扁平上皮癌腫、肺腺癌、食道扁平上皮癌腫、膵腺癌、膀胱の尿路上皮癌腫、腎細胞癌腫、前立腺腺癌、乳管癌腫、乳房小葉癌腫、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、または子宮細胞腺癌への結合につき競合する。さらなる実施形態では、抗体または機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と、ＨＴ−２９（ＡＴＣＣ受入番号ＨＴＢ−３８；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２９９）、ＣＡＣＯ−２（ＡＴＣＣ受入番号ＨＢＴ−３７；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １６９）、ＣＯＬＯ−３２０（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １４４）、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２１）、ＡＳＰＣ−１（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８２）、ＢＸＰＣ−３（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８７）、またはＡ５４９（ＡＴＣＣ受入番号ＣＣＬ−１８５）細胞への結合につき競合する。さらなる実施形態では、抗体またはその機能的フラグメントは、１つまたは複数の胃腺癌、結腸直腸腺癌、肺扁平上皮癌腫、肺腺癌、食道扁平上皮癌腫、膵腺癌、膀胱の尿路上皮癌腫、腎細胞癌腫、前立腺腺癌、乳管癌腫、乳房小葉癌腫、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、子宮細胞腺癌、またはＨＴ−２９（ＡＴＣＣ受入番号ＨＴＢ−３８；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２９９）、ＣＡＣＯ−２（ＡＴＣＣ受入番号ＨＢＴ−３７；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １６９）、ＣＯＬＯ−３２０（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １４４）、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２１）、ＡＳＰＣ−１（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８２）、ＢＸＰＣ−３（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８７）、またはＡ５４９（ＡＴＣＣ受入番号ＣＣＬ−１８５）細胞の増殖を阻害または軽減するか、アポトーシスを刺激または誘導する。
【０００６】
本発明はまた、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する細胞、抗原、またはエピトープに結合する単離および精製された抗体およびその機能的フラグメントを提供する。１つの実施形態では、抗体または機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する腺癌細胞または扁平上皮癌腫に結合する。別の実施形態では、抗体またはその機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合するエピトープまたは抗原（例えば、ＢＸＰＣ−３細胞、ＭＫＮ細胞、またはＣＲＬ細胞上で発現される約１１５ｋＤａのタンパク質抗原）に結合する。さらなる実施形態では、抗体またはその機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合につき競合する。さらに別の実施形態では、抗体またはその機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合するエピトープに結合し、このエピトープは、ＢＸＰＣ−３細胞、ＭＫＮ細胞、またはＣＲＬ細胞上で発現される約１１５ｋＤａのタンパク質抗原上に存在する。特定の態様では、抗体または機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する１つまたは複数の胃腺癌、結腸直腸腺癌、肺扁平上皮癌腫、肺腺癌、食道扁平上皮癌腫、膵腺癌、膀胱の尿路上皮癌腫、腎細胞癌腫、前立腺腺癌、乳管癌腫、乳房小葉癌腫、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、または子宮細胞腺癌に結合する。別の実施形態では、抗体または機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する胃腺癌、結腸直腸腺癌、肺扁平上皮癌腫、肺腺癌、食道扁平上皮癌腫、膵腺癌、膀胱の尿路上皮癌腫、腎細胞癌腫、前立腺腺癌、乳管癌腫、乳房小葉癌腫、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、または子宮細胞腺癌に結合する。さらなる実施形態では、抗体または機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合するＨＴ−２９（ＡＴＣＣ受入番号ＨＴＢ−３８；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２９９）、ＣＡＣＯ−２（ＡＴＣＣ受入番号ＨＢＴ−３７；��ＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １６９）、ＣＯＬＯ−３２０（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １４４）、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２１）、ＡＳＰＣ−１（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８２）、ＢＸＰＣ−３（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８７）、またはＡ５４９（ＡＴＣＣ受入番号ＣＣＬ−１８５）細胞に結合する。
【０００７】
本発明は、さらに、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の重鎖配列または軽鎖配列の可変領域と約６０％以上同一の重鎖または軽鎖可変領域配列を含む単離または精製した抗体および機能的フラグメントを提供する。１つの実施形態では、抗体またはその部分配列は、配列番号１として挙げた重鎖可変領域配列と少なくとも６０％以上（例えば、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％など）同一の配列または配列番号２として挙げた軽鎖可変領域配列と少なくとも６０％以上（例えば、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％など）同一の配列を含む。別の実施形態では、抗体または部分配列は、配列番号１として挙げた重鎖可変領域配列と少なくとも６０％以上（例えば、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％など）同一の配列および配列番号２として挙げた軽鎖可変領域配列と少なくとも６０％以上（例えば、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％など）同一の配列を含む。さらなる実施形態では、抗体または部分配列は、配列番号１として挙げた重鎖可変領域配列中の１つまたは複数のＣＤＲと少なくとも８０〜８５％、８５〜９０％、９０〜９５％、または９５〜１００％同一の配列または配列番号２として挙げた軽鎖可変領域配列中の１つまたは複数のＣＤＲ（例えば、配列番号１のアミノ酸１１〜１８、３６〜４３、または８２〜１００、または配列番号２のアミノ酸２６〜３４、５２〜５８、または９７〜１０３）と少なくとも８０〜８５％、８５〜９０％、９０〜９５％、または９５〜１００％同一の配列を含む。種々の態様では、抗体またはその機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合するエピトープまたは抗原（例えば、ＢＸＰＣ−３細胞、ＭＫＮ細胞、またはＣＲＬ細胞上で発現される約１１５ｋＤａのタンパク質抗原）に結合する。抗体またはその機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合につき競合する。抗体またはその機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合するエピトープに結合し、このエピトープは、ＢＸＰＣ−３細胞、ＭＫＮ細胞、またはＣＲＬ細胞上で発現される約１１５ｋＤａのタンパク質抗原上に存在する。抗体またはその機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と、ＢＸＰＣ−３細胞、ＭＫＮ細胞、またはＣＲＬ細胞上で発現される約���１５ｋＤａのタンパク質抗原上に存在するエピトープへの結合につき競合する。
【０００８】
本発明は、さらに、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の１つまたは複数のアミノ酸の付加、欠失、または置換を有する単離および精製された抗体およびその機能的フラグメントを提供する。特定の態様では、抗体または機能的フラグメントは、配列番号１として挙げた重鎖可変領域配列と少なくとも８０〜８５％、８５〜９０％、９０〜９５％、または９５〜１００％同一の配列または配列番号２として挙げた軽鎖可変領域配列と少なくとも８０〜８５％、８５〜９０％、９０〜９５％、または９５〜１００％同一の配列を有する。さらなる態様では、抗体または機能的フラグメントは、配列番号１および２に示した重鎖または軽鎖可変領域配列中の１つまたは複数のＣＤＲ（例えば、配列番号１のアミノ酸１１〜１８、３６〜４３、または８２〜１００、または配列番号２のアミノ酸２６〜３４、５２〜５８、または９７〜１０３）と１００％同一であり、配列番号１および２に示した重鎖または軽鎖可変領域配列中のＣＤＲの外側の領域と１００％未満同一である重鎖配列または軽鎖配列を有する。
【０００９】
本発明はまた、抗原または細胞（例えば、新形成細胞、癌細胞、腫瘍細胞、または転移細胞）への結合に対する、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の結合親和性の約１〜５０００倍以内の結合親和性を有する抗体およびその機能的フラグメントを提供する。種々の実施形態では、抗体および機能的フラグメントは、胃腺癌、結腸直腸腺癌、肺扁平上皮癌腫、肺腺癌、食道扁平上皮癌腫、膵腺癌、膀胱の尿路上皮癌腫、腎細胞癌腫、前立腺腺癌、乳管癌腫、乳房小葉癌腫、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、または子宮細胞腺癌への結合に対する細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の結合親和性の約１〜５０００倍以内の結合親和性を有する。さらなる実施形態では、抗体または機能的フラグメントは、ＨＴ−２９（ＡＴＣＣ受入番号ＨＴＢ−３８；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２９９）、ＣＡＣＯ−２（ＡＴＣＣ受入番号ＨＢＴ−３７；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １６９）、ＣＯＬＯ−３２０（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １４４）、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２１）、ＡＳＰＣ−１（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８２）、ＢＸＰＣ−３（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８７）、またはＡ５４９（ＡＴＣＣ受入番号ＣＣＬ−１８５）細胞への結合に対する、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の結合親和性の約１〜５０００倍以内の結合親和性を有する。さらなる実施形態では、抗体または機能的フラグメントは、本明細書中に記載の１つまたは複数の細胞または細胞株（例えば、胃腺癌、結腸直腸腺癌、肺扁平上皮癌腫、肺腺癌、食道扁平上皮癌腫、膵腺癌、膀胱の尿路上皮癌腫、腎細胞癌腫、前立腺腺癌、乳管癌腫、乳房小葉癌腫、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、または子宮細胞腺癌など、またはＨＴ−２９（ＡＴＣＣ受入番号ＨＴＢ−３８；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２９９）、ＣＡＣＯ−２（ＡＴＣＣ受入番号ＨＢＴ−３７；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １６９）、ＣＯＬＯ−３２０（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １４４）、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２１）、ＡＳＰＣ−１（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８２）、ＢＸＰＣ−３（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８７）、またはＡ５４９（ＡＴＣＣ受入番号ＣＣＬ−１８５）細胞）への結合に対して約ＫＤ１０−５Ｍ〜約ＫＤ１０−１３Ｍ以内の結合親和性を有する。かかる抗体には、例えば、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合するエピトープまたは抗原（例えば、ＢＸＰＣ−３細胞、ＭＫＮ細胞、またはＣＲＬ細胞上で発現される約１１５ｋＤａのタンパク質抗原）に結合する抗体またはその機能的フラグメントが含まれる。抗体またはその機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と、ＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合につき競合する。抗体またはその機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合するエピトープに結合し、このエピトープはＢＸＰＣ−３細胞、ＭＫＮ細胞、またはＣＲＬ細胞上で発現される約１１５ｋＤａのタンパク質抗原上に存在する。抗体またはその機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と、ＢＸＰＣ−３細胞、ＭＫＮ細胞、またはＣＲＬ細胞上で発現される約１１５ｋＤａのタンパク質抗原上に存在するエピトープへの結合につき競合する。
【００１０】
本発明の抗体には、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＥ、およびＩｇＤが含まれる。種々の態様では、ＩｇＧは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４である。
【００１１】
本発明の抗体の機能的フラグメントおよび部分配列には、本明細書中に記載の種々の抗体の機能的フラグメントおよび部分配列が含まれる。特定の実施形態では、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と、細胞、抗原、またはエピトープへの結合につき競合するか、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する細胞、抗原、またはエピトープへの少なくとも部分的な結合を保持する、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の機能的フラグメントを提供する。特定の態様では、機能的フラグメントまたは部分配列は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、Ｆｄ、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、ジスルフィド連結Ｆｖ（ｓｄＦｖ）、ＶＬ、ＶＨ、三重特異性（Ｆａｂ３）、二重特異性（Ｆａｂ２）、二特異性抗体（（ＶＬ−ＶＨ）２または（ＶＨ−ＶＬ）２）、トライアボディ（三価）、テトラボディ（四価）、ミニボディ（（ｓｃＦＶ−ＣＨ３）２）、二重特異性単鎖Ｆｖ（Ｂｉｓ−ｓｃＦｖ）、ＩｇＧｄｅｌｔａＣＨ２、ｓｃＦｖ−Ｆｃ、および（ｓｃＦｖ）２−Ｆｃである。さらなる態様では、全長抗体の重鎖または軽鎖、または重鎖または軽鎖可変領域の機能的フラグメントまたは部分配列には、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の重鎖配列または軽鎖配列の１つまたは複数のＣＤＲ（例えば、配列番号１のアミノ酸１１〜１８、３６〜４３、または８２〜１００、または配列番号２のアミノ酸２６〜３４、５２〜５８、または９７〜１０３）が含まれる。さらなる態様では、全長抗体の重鎖または軽鎖、または重鎖または軽鎖可変領域の機能的フラグメントまたは部分配列は、約２０〜３０、３０〜５０、５０〜１００、１００〜１５０、１５０〜２００、２００〜２５０、２５０〜３００、３００〜４００、４００〜５００アミノ酸残基長を有する。
【００１２】
本発明はまた、異種ドメインを含む抗体および部分配列を提供する。１つの実施形態では、異種ドメインには、検出可能な標識、タグ、または細胞毒性薬が含まれる。特定の態様では、検出可能な標識またはタグは、酵素、酵素基質、リガンド、受容体、放射性核種、Ｔ７−、Ｈｉｓ−、ｍｙｃ−、ＨＡ−、またはＦＬＡＧ−タグ、高電子密度試薬、エネルギー移動分子、常磁性標識、フルオロフォア、発色団、化学発光剤、または生物発光剤である。
【００１３】
本発明は、さらに、抗体およびその機能的フラグメントをコードする核酸配列を提供する。１つの実施形態では、核酸配列は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体またはその部分配列の重鎖または軽鎖可変領域配列をコードする核酸配列と少なくとも７５〜１００％相補的または同一である（例えば、配列番号１のアミノ酸１１〜１８、３６〜４３、または８２〜１００、または配列番号２のアミノ酸２６〜３４、５２〜５８、または９７〜１０３（配列番号３のヌクレオチド３１〜５４、１０６〜１２９、および２４４〜３００、および配列番号４のヌクレオチド７６〜１０２、１５４〜１７４、または２８９〜３０９など））。別の実施形態では、核酸は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の部分配列をコードする（例えば、配列番号１のアミノ酸１１〜１８、３６〜４３、または８２〜１００、または配列番号２のアミノ酸２６〜３４、５２〜５８、または９７〜１０３（配列番号３のヌクレオチド３１〜５４、１０６〜１２９、および２４４〜３００、ならびに配列番号４のヌクレオチド７６〜１０２、１５４〜１７４、または２８９〜３０９など））。特定の態様では、核酸配列は、約１０〜２０、２０〜３０、３０〜５０、５０〜１００、１００〜１５０、１５０〜２００、２００〜２５０、２５０〜３００、３００〜４００、４００〜５００、または５００〜１０００ヌクレオチド長である。さらなる態様では、核酸配列は、配列番号１または２またはその部分配列をコードする核酸と特異的にハイブリッド形成するか、配列番号１または２、または配列番号１または２の部分配列をコードする核酸に相補的な核酸配列と特異的にハイブリッド形成する（例えば、配列番号３のヌクレオチド３１〜５４、１０６〜１２９、および２４４〜３００、および配列番号４のヌクレオチド７６〜１０２、１５４〜１７４、または２８９〜３０９）。さらなる態様では、核酸は、配列番号１または２またはその部分配列をコードするか相補的な核酸配列と特異的にハイブリッド形成するアンチセンスポリヌクレオチド、低分子干渉ＲＮＡ、またはリボザイム核酸である。アンチセンスポリヌクレオチド、低分子干渉ＲＮＡ、およびリボザイムポリヌクレオチドは、約１０〜２０、２０〜３０、３０〜５０、５０〜１００、１００〜１５０、１５０〜２００、２００〜２５０、２５０〜３００、３００〜４００、４００〜５００、５００〜１０００、１０００〜２０００ヌクレオチド長を有することができ、配列番号１または２、またはその部分配列をコードする核酸配列に少なくとも９０％相補的であるか同一であり得る（例えば、配列番号１のアミノ酸１１〜１８、３６〜４３、または８２〜１００、または配列番号２のアミノ酸２６〜３４、５２〜５８、または９７〜１０３（配列番号３のヌクレオチド３１〜５４、１０６〜１２９、および２４４〜３００、および配列番号４のヌクレオチド７６〜１０２、１５４〜１７４、または２８９〜３０９など））。なおさらなる態様���は、核酸配列は、発現調節配列またはベクター（例えば、ウイルス、細菌、真菌、または哺乳動物のベクター）を含むことができる。
【００１４】
本発明は、さらに、配列番号１または２に示す重鎖または軽鎖可変領域配列と少なくとも６０％以上（例えば、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％など）同一の配列、または細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の重鎖または軽鎖可変領域配列と少なくとも６０％以上（例えば、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％など）同一の配列を含む抗体またはその部分配列を発現する単離および精製された細胞ならびに形質転換された宿主細胞を提供する。かかる細胞には、抗体またはその部分配列を安定または一過性に発現することができるか、抗体またはその部分配列をコードする核酸またはベクターで安定または一過性に形質転換することができる真核細胞および非真核細胞が含まれる。
【００１５】
本発明はさらにキットを提供する。種々の実施形態では、キットは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と、抗原、エピトープ、または細胞（例えば、新形成細胞、癌細胞、腫瘍細胞、または転移細胞）への結合につき競合する抗体またはその機能的フラグメントを含む。特定の態様では、キットは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と、胃腺癌、結腸直腸腺癌、肺扁平上皮癌腫、肺腺癌、食道扁平上皮癌腫、膵腺癌、膀胱の尿路上皮癌腫、腎細胞癌腫、前立腺腺癌、乳管癌腫、乳房小葉癌腫、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、または子宮細胞腺癌への結合につき競合する抗体またはその機能的フラグメントを含む。さらなる実施形態では、キットは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と、ＨＴ−２９（ＡＴＣＣ受入番号ＨＴＢ−３８；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２９９）、ＣＡＣＯ−２（ＡＴＣＣ受入番号ＨＢＴ−３７；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １６９）、ＣＯＬＯ−３２０（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １４４）、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２１）、ＡＳＰＣ−１（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８２）、ＢＸＰＣ−３（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８７）、またはＡ５４９（ＡＴＣＣ受入番号ＣＣＬ−１８５）細胞への結合につき競合する抗体またはその機能的フラグメントを含む。
【００１６】
本発明のキットはまた、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する細胞、抗原、またはエピトープに結合する抗体および機能的フラグメントを含む。１つの実施形態では、キットは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する腺癌細胞または扁平上皮癌（細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する胃腺癌細胞、肺腺癌細胞、膵腺癌細胞、結腸腺癌細胞、乳腺癌細胞、食道扁平上皮癌など）に結合する抗体または機能的フラグメントを含む。別の実施形態では、キットは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する胃腺癌、結腸直腸腺癌、肺扁平上皮癌腫、肺腺癌、食道扁平上皮癌腫、膵腺癌、膀胱の尿路上皮癌腫、腎細胞癌腫、前立腺腺癌、乳管癌腫、乳房小葉癌腫、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、または子宮細胞腺癌に結合する抗体または機能的フラグメントを含む。さらなる実施形態では、キットは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合するＨＴ−２９（ＡＴＣＣ受入番号ＨＴＢ−３８；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２９９）、ＣＡＣＯ−２（ＡＴＣＣ受入番号ＨＢＴ−３７；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １６９）、ＣＯＬＯ−３２０（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １４４）、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２１）、ＡＳＰＣ−１（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８２）、ＢＸＰＣ−３（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８７）、またはＡ５４９（ＡＴＣＣ受入番号ＣＣＬ−１８５）細胞に結合する抗体または機能的フラグメントを含む。
【００１７】
本発明のキットは、さらに、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の重鎖配列または軽鎖配列の可変領域と約６０％以上同一の重鎖または軽鎖可変領域配列を含む抗体および機能的フラグメントを含む。１つの実施形態では、キットは、配列番号１として挙げた重鎖可変領域配列と少なくとも６０％以上（例えば、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％など）同一の配列または配列番号２として挙げた軽鎖可変領域配列と少なくとも６０％以上（例えば、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％など）同一の配列を有する抗体またはその部分配列を含む。別の実施形態では、キットは、配列番号１として挙げた重鎖可変領域配列と少なくとも６０％以上（例えば、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％など）同一の配列および配列番号２として挙げた軽鎖可変領域配列と少なくとも６０％以上（例えば、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％など）同一の配列を有する抗体または部分配列を含む。さらなる実施形態では、キットは、配列番号１として挙げた重鎖可変領域配列中の１つまたは複数のＣＤＲ（例えば、配列番号１のアミノ酸１１〜１８、３６〜４３、または８２〜１００）と少なくとも８０〜８５％、８５〜９０％、９０〜９５％、９５〜１００％同一の配列、または配列番号２として挙げた軽鎖可変領域配列中の１つまたは複数のＣＤＲ（例えば、配列番号２のアミノ酸２６〜３４、５２〜５８、または９７〜１０３）と少なくとも８０〜８５％、８５〜９０％、９０〜９５％、９５〜１００％同一の配列を有する抗体または部分配列を含む。
【００１８】
さらなる実施形態では、キットはまた、抗細胞増殖処置もしくは治療薬または免疫促進処置もしくは治療薬、または抗新形成薬、抗癌薬、または抗腫瘍薬、または抗転移薬、またはその製品（例えば、抗体、抗細胞増殖処置もしくは治療または免疫促進処置もしくは治療の被験体への局所、領域、または全身送達のため）を含む。特定の態様では、説明書は、望ましくない細胞増殖または細胞増殖障害（例えば、新形成、腫瘍、癌、または転移）の処置のための説明書である。
【００１９】
本発明は、なおさらに、薬学的組成物を提供する。１つの実施形態では、組成物は、抗体または機能的フラグメントおよび薬学的に許容可能なキャリアまたは賦形剤を含む。別の実施形態では、組成物は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と、細胞、抗原、またはエピトープへの結合につき競合するか、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する細胞、抗原、またはエピトープに結合するか、配列番号１または２に示す重鎖配列または軽鎖配列の可変領域と約６０％以上同一の重鎖または軽鎖可変領域配列、または配列番号１または２に示す重鎖または軽鎖可変領域配列中の１つまたは複数のＣＤＲ（例えば、配列番号１のアミノ酸１１〜１８、３６〜４３、または８２〜１００、または配列番号２のアミノ酸２６〜３４、５２〜５８、または９７〜１０３）と少なくとも８０〜８５％、８５〜９０％、９０〜９５％、９５〜１００％同一の配列を含む抗体、および薬学的に許容可能なキャリアまたは賦形剤を含む。
【００２０】
抗体、機能的フラグメント、および修飾形態は、処置を必要とする被験体の処置に有用である。したがって、本発明は、望ましくない細胞増殖（細胞増殖障害または過剰増殖障害など）を有するか有するリスクのある被験体の処置（例えば、治療または予防）における抗体および機能的フラグメントの使用方法を提供する。１つの実施形態では、方法は、抗体または機能的フラグメント（例えば、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体）を、望ましくない細胞増殖の処置に有効な量で、望ましくない細胞増殖（例えば、細胞増殖障害）を有するか有するリスクのある被験体に投与する工程を含む。特定の態様では、細胞増殖障害は、転移性または非転移性で固体または液状の新形成、悪性疾患、腫瘍、または癌である。種々の態様では、望ましくない細胞増殖（例えば、細胞増殖障害）は、脳、頭部または頸部、乳房、食道、口腔、鼻咽頭、鼻腔または副鼻腔、胃、十二指腸、回腸、空腸、肺、肝臓、膵臓、腎臓、副腎、甲状腺、膀胱、結腸、直腸、前立腺、子宮、子宮内膜、子宮頸部、卵巣、骨髄、リンパ、血液、骨、精巣、皮膚または筋肉、または造血系の少なくとも一部を冒すかそこに存在する。さらなる態様では、望ましくない細胞増殖（例えば、細胞増殖障害）には、乳房、肺、甲状腺、頭頸部、鼻咽頭、鼻腔または副鼻腔、脳、脊椎、副腎、リンパ、胃腸管、口腔、食道、胃、十二指腸、回腸、空腸、小腸、結腸、直腸、尿生殖器、子宮、子宮内膜、卵巣、子宮頸部、膀胱、精巣、陰茎、前立腺、腎臓、膵臓、副腎、肝臓、骨、骨髄、リンパ、血液、筋肉、皮膚の少なくとも一部を冒すかそこに存在するか、造血性である、新形成、腫瘍、癌、または転移が含まれる。さらなる特定の態様では、新形成、腫瘍、癌、または転移は、肉腫、癌腫、腺癌、黒色腫、骨髄腫、芽細胞腫、神経膠腫、リンパ腫  白血病である。さらなる特定の態様では、新形成、腫瘍、または癌は、胃腺癌、結腸直腸腺癌、肺扁平上皮癌腫、肺腺癌、食道扁平上皮癌腫、膵腺癌、膀胱の尿路上皮癌腫、腎細胞癌腫、前立腺腺癌、乳管癌腫、乳房小葉癌腫、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、子宮腺癌、またはその転移である。
【００２１】
別の実施形態では、方法は、抗体または機能的フラグメント（例えば、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体）を、転移を有するか有するリスクのある被験体に、被験体内の他の部位、位置、または領域への腫瘍、癌、または新形成の拡大または伝搬を軽減または阻害するのに有効な量で投与する工程を含む。種々の態様では、方法により、原発性の腫瘍または癌の１つまたは複数の他の部位への転移、１つまたは複数の他の部位での転移の形成または確立が軽減または阻害され、それにより、腫瘍または癌の再発または腫瘍または癌の進行が阻害または軽減される。さらなる態様では、方法により、転移が潜在的に発症するか発症している腫瘍細胞または癌細胞（例えば、播種性腫瘍細胞）の成長、増殖、移動性、または侵襲性が軽減または阻害されるか、原発性の腫瘍または癌から生じた原発性の腫瘍または癌から離れた１つまたは複数の他の部位、位置、または領域への転移の形成または確立が軽減または阻害されるか、転移が形成または確立された後の原発性の腫瘍または癌から離れた１つまたは複数の他の部位、位置、または領域への転移の成長または増殖が軽減または阻害されるか、転移が形成または確立された後のさらなる転移の形成または確立が軽減または阻害される。
【００２２】
さらなる特定の態様では、新形成、腫瘍、癌、または転移は、進行性に悪化しているか寛解期にある。なおさらなる態様では、処置により、細胞増殖障害（すなわち、新形成、腫瘍、または癌）に関連する１つまたは複数の身体症状が緩和または改善されるか、新形成、腫瘍、または癌の体積が軽減または減少するか、新形成、腫瘍、または癌の体積の増加が阻害または防止されるか、新形成、腫瘍、または癌の進行または悪化が阻害されるか、新形成、腫瘍、または癌の細胞溶解またはアポトーシスが刺激されるか、新形成、腫瘍、または癌の増殖または転移が阻害、軽減、または減少するか、被験体の寿命が延長または長期化されるか、被験体の生活の質が改善される。
【００２３】
方法は、被験体への局所、領域、または全身投与を含む。例示的な被験体（例えば、ヒトなどの哺乳動物）には、抗細胞増殖障害または抗過剰増殖障害（例えば、抗新形成障害、抗腫瘍障害、抗癌障害、または抗転移障害）または免疫促進処置または治療の候補であり、これらを受けているか、またはそれを受けていた被験体が含まれる。
【００２４】
本発明はまた、処置を必要とする被験体における障害の組み合わせ処置方法をさらに提供する。１つの実施形態では、本方法は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する細胞への結合につき競合する抗体を被験体に投与する工程および抗細胞増殖処置もしくは治療または免疫促進処置もしくは治療を被験体に施す工程（例えば、相互の前、実質的に同時、または後）を含む。種々の態様では、抗細胞増殖処置もしくは治療または免疫促進処置もしくは治療には、外科的切除、放射線療法、放射線療法、化学療法、免疫療法、温熱療法（hyperthermia）、アルキル化剤、代謝拮抗物質、植物抽出物、植物性アルカロイド、ニトロソ尿素、ホルモン、ヌクレオシドまたはヌクレオチドのアナログ、リンパ球、形質細胞、マクロファージ、樹状細胞、ＮＫ細胞またはＢ細胞、抗体、細胞成長因子、細胞生存因子、細胞分化因子、サイトカイン、インターフェロン、またはケモカインが含まれる。
【００２５】
抗体およびその機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体に結合する細胞または細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体に結合する抗原の存在の検出、スクリーニング、および同定に有用である。したがって、本発明は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体に結合する細胞、抗原、およびエピトープの検出またはスクリーニング方法、本発明の方法にしたがって処置可能な被験体の同定方法を提供する。１つの実施形態では、本方法は、抗体または機能的フラグメントと、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体に結合する細胞、抗原、またはエピトープとを結合させる条件下で生体物質または生体サンプルを抗体または機能的フラグメントと接触させる工程、および細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体に結合する細胞または抗原への抗体または機能的フラグメントの結合をアッセイする工程を含む。細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体に結合する細胞、抗原、またはエピトープへの抗体または機能的フラグメントの結合は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体に結合する細胞、抗原、またはエピトープを生体材料が含むことを示す。１つの態様では、生体材料または生体サンプルを、哺乳動物（例えば、ヒトなどの霊長類）被験体から得る。
【００２６】
本発明は、さらに、望ましくない細胞増殖または細胞増殖障害（例えば、新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移）を有するか有するリスクが増加した被験体の診断方法を提供する。種々の実施形態では、本方法は、被験体由来の生体材料または生体サンプルを準備する工程、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する細胞、抗原、またはエピトープに結合する抗体または機能的フラグメント、または細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の重鎖配列または軽鎖配列の可変領域と約６０％以上同一の重鎖または軽鎖可変領域配列を含む抗体または機能的フラグメントへの結合につき競合する抗体または機能的フラグメントと生体材料または生体サンプルを、抗体または機能的フラグメントを結合させる条件下で接触させる工程、および細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体に結合する細胞、抗原、またはエピトープへの抗体の結合についてアッセイする工程を含む。特定の態様では、被験体の診断方法は、望ましくない細胞増殖または細胞増殖障害（例えば、新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移）を有するか有するリスクが増加している被験体を同定する。１つの態様では、生体材料または生体サンプルを、哺乳動物（例えば、ヒトなどの霊長類）被験体から得る。さらなる態様では、生体材料または生体サンプルは、生検（肺、膵臓、胃、乳房、食道、卵巣、または子宮の生検など）を含む。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】図１は、ネガティブコントロールと比較した場合に２４時間のインキュベーション後にＰＭ−２モノクローナル抗体がＢＸＰＣ−３ヒト膵癌細胞でアポトーシスを誘導することを示す。Ｙ軸は、４１５ｎｍと４９０ｎｍとの間の基準波長（Ａ４１５−Ａ４９０）の吸光度の相違である。上清中のＰＭ−２抗体の濃度は６μｇまたは１２μｇ／ｍｌのいずれかであり、ネガティブコントロールはＲＰＭＩ  １４６０培地である。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
詳細な説明
本発明は、少なくとも一部が、種々の新形成細胞、癌細胞、腫瘍細胞、および転移細胞に結合する抗体に基づく。限定されない例示的な抗体は、ブダペスト条約の下で２００３年７月２日にＧｅｒｍａｎ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅｓ（“ＤＳＭＺ”  −  Ｄｅｕｔｓｃｈｅ  Ｓａｍｍｌｕｎｇ  ｖｏｎ  Ｍｉｋｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｅｎ  ｕｎｄ  Ｚｅｌｌｋｕｌｔｕｒｅｎ  ＧｍｂＨ，Ｍａｓｃｈｅｒｏｄｅｒ  Ｗｅｇ  ｌｂ，３８１２４  Ｂｒａｕｎｓｃｈｗｅｉｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）で寄託された、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表される指定のＰＭ−２抗体である。細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体は、種々の新形成細胞、癌細胞、腫瘍細胞、および転移細胞に特異的に結合するヒトＩｇＭ抗体である。したがって、ＰＭ−２は、種々の新形成細胞、癌細胞、腫瘍細胞、および転移細胞上に発現する抗原に結合する。ＰＭ−２は、種々の新形成細胞、癌細胞、腫瘍細胞、および転移細胞の増殖を阻害または軽減することができる。ＰＭ−２はまた、種々の新形成細胞、癌細胞、腫瘍細胞、および転移細胞のアポトーシスを刺激または誘導することができる。
【００２９】
本発明の抗体には、ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体が含まれる。抗体は、アミド結合または等価物によって共有結合したアミノ酸（すなわち、「残基」）を含むタンパク質である。用語「モノクローナル」は、抗体に関して使用する場合、単一のクローン（任意の真核生物、原核生物、またはファージのクローンが含まれる）に基づくか、これらから得るか、これらに由来する抗体をいう。したがって、「モノクローナル」抗体を、抗体が産生される方法ではなく、構造によって定義する。
【００３０】
本発明の抗体は、任意の抗体クラス（ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＡ、ＩｇＤ）またはサブクラスに属し得る。ＩｇＧの例示的なサブクラスは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４である。
【００３１】
本発明の抗体は、κ軽鎖配列またはλ軽鎖配列（天然に存在する抗体などの全長、その混合物（すなわち、κ鎖配列とλ鎖配列との融合物）、およびその部分配列／フラグメントのいずれか）を有し得る。天然に存在する抗体分子は、２つのκ軽鎖または２つのλ軽鎖を含む。κ軽鎖とλ軽鎖との間の主な相違は、定常領域の配列にある。
【００３２】
重鎖配列および軽鎖配列によって示されるＰＭ−２抗体のアミノ酸および核酸配列（配列番号１〜４）を以下に示す。
【００３３】
【化１】
2011519819.tif 000003
配列番号１および２に示した各重鎖配列および軽鎖配列中に３つ存在する予想されるＣＤＲを、便宜上、ＬＣ−ＣＤＲ１、ＬＣ−ＣＤＲ２、およびＬＣ−ＣＤＲ３ならびにＨＣ−ＣＤＲ１、ＨＣ−ＣＤＲ２、およびＨＣ−ＣＤＲ３と示す。重鎖および軽鎖のＣＤＲは、それぞれ、配列番号１のアミノ酸１１〜１８、３６〜４３、または８２〜１００、および配列番号２のアミノ酸２６〜３４、５２〜５８、または９７〜１０３に存在することが予想され、配列番号３のヌクレオチド３１〜５４、１０６〜１２９、および２４４〜３００、および配列番号４のヌクレオチド７６〜１０２、１５４〜１７４、または２８９〜３０９に対応する。
【００３４】
本発明によれば、それぞれ、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体に構造的および／または機能的に関連する単離および精製された抗体および機能的（例えば、細胞、抗原、またはエピトープ結合）フラグメントを提供する。種々の実施形態では、抗体および機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と、細胞、抗原、またはエピトープへの結合につき競合する。さらなる実施形態では、抗体および機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と、腺癌細胞または扁平上皮癌への結合につき競合する。さらなる実施形態では、抗体および機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と、１つまたは複数の胃腺癌、結腸直腸腺癌、肺扁平上皮癌腫、肺腺癌、食道扁平上皮癌腫、膵腺癌、膀胱の尿路上皮癌腫、腎細胞癌腫、前立腺腺癌、乳管癌腫、乳房小葉癌腫、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、または子宮細胞腺癌への結合につき競合する。なおさらなる実施形態では、抗体および機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と、胃腺癌、結腸直腸腺癌、肺扁平上皮癌腫、肺腺癌、食道扁平上皮癌腫、膵腺癌、膀胱の尿路上皮癌腫、腎細胞癌腫、前立腺腺癌、乳管癌腫、乳房小葉癌腫、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、または子宮細胞腺癌への結合につき競合する。なおさらなる実施形態では、抗体および機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と、ＨＴ−２９（ＡＴＣＣ受入番号ＨＴＢ−３８；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２９９）、ＣＡＣＯ−２（ＡＴＣＣ受入番号ＨＢＴ−３７；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １６９）、ＣＯＬＯ−３２０（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １４４）、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２１）、ＡＳＰＣ−１（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８２）、ＢＸＰＣ−３（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８７）、またはＡ５４９（ＡＴＣＣ受入番号ＣＣＬ−１８５）細胞への結合につき競合する。特定の態様では、抗体および機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の細胞または抗原への結合を、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、またはそれを超えて競合的に阻害する。
【００３５】
本発明によれば、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する細胞、抗原、またはエピトープに結合する抗体および機能的フラグメントも提供する。１つの実施形態では、単離または精製した抗体またはその機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する細胞、抗原、またはエピトープに結合する。特定の態様では、抗体またはその機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する腺癌細胞または扁平上皮癌上に存在する細胞、抗原、またはエピトープに結合する。さらなる特定の態様では、抗体またはその機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する１つまたは複数の胃腺癌、結腸直腸腺癌、肺扁平上皮癌腫、肺腺癌、食道扁平上皮癌腫、膵腺癌、膀胱の尿路上皮癌腫、腎細胞癌腫、前立腺腺癌、乳管癌腫、乳房小葉癌腫、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、または子宮細胞腺癌上に存在する細胞、抗原、またはエピトープに結合する。さらなる特定の態様では、抗体またはその機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合するＨＴ−２９（ＡＴＣＣ受入番号ＨＴＢ−３８；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２９９）、ＣＡＣＯ−２（ＡＴＣＣ受入番号ＨＢＴ−３７；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １６９）、ＣＯＬＯ−３２０（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １４４）、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２１）、ＡＳＰＣ−１（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８２）、ＢＸＰＣ−３（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８７）、またはＡ５４９（ＡＴＣＣ受入番号ＣＣＬ−  １８５）細胞上に存在する細胞、抗原、またはエピトープに結合する。
【００３６】
用語「結合する」または「結合」は、抗体または機能的フラグメントに関して使用する場合、抗体または機能的フラグメントが分子レベルで細胞または抗原上に存在する対応エピトープ（抗原決定基）と相互作用することを意味する。アミノ酸を含む抗原のエピトープは、典型的には、比較的短い配列（例えば、約５〜１５アミノ酸長）を含む。エピトープは、連続または不連続であり得る。不連続なアミノ酸配列のエピトープは、タンパク質折り畳みによって形成される。エピトープの同定技術は当業者に公知であり、抗体結合についての重複オリゴペプチドのスクリーニング（例えば、米国特許第４，７０８，８７１号）、市販のエピトープマッピング用ファージディスプレイペプチドライブラリーキット（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  ＢｉｏＬａｂｓ）が含まれる。エピトープ長のペプチド配列を使用して動物を免疫化し、この動物からペプチド配列に結合する抗体を得た場合の推定によってエピトープを同定することもできる。このエピトープを、コンピュータプログラム（ＢＥＰＩＴＯＰＥ（Ｏｄｏｒｉｃｏら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｒｅｃｏｇｎｉｔ．１６：２０（２００３））など）を使用して予想することができる。
【００３７】
本発明は、さらに、細胞の成長または増殖を阻害、減少、または軽減するか、細胞の死、溶解、またはアポトーシスを刺激または誘導する抗体および機能的フラグメントを提供する。特定の実施形態では、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の新形成細胞、腫瘍細胞、癌細胞、または転移細胞への結合により、細胞の成長または増殖を阻害、減少、または軽減するか、細胞の死、溶解、またはアポトーシスを刺激または誘導する。別の実施形態では、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の胃腺癌、結腸直腸腺癌、肺扁平上皮癌腫、肺腺癌、食道扁平上皮癌腫、膵腺癌、膀胱の尿路上皮癌腫、腎細胞癌腫、前立腺腺癌、乳管癌腫、乳房小葉癌腫、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、または子宮細胞腺癌への結合により、細胞の成長または増殖を阻害、減少、または軽減するか、細胞の死、溶解、またはアポトーシスを刺激または誘導する。さらなる実施形態では、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体のＨＴ−２９（ＡＴＣＣ受入番号ＨＴＢ−３８；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２９９）、ＣＡＣＯ−２（ＡＴＣＣ受入番号ＨＢＴ−３７；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １６９）、ＣＯＬＯ−３２０（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １４４）、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２１）、ＡＳＰＣ−１（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８２）、ＢＸＰＣ−３（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８７）、またはＡ５４９（ＡＴＣＣ受入番号ＣＣＬ−１８５）細胞への結合により、細胞の成長または増殖を阻害、減少、または軽減するか、細胞の死、溶解、またはアポトーシスを刺激または誘導する。
【００３８】
本発明は、さらに、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と構造的および／または機能的に関連する抗体および機能的フラグメントを提供する。この抗体および機能的フラグメントは、配列番号１または２に対して同一度を示すか、配列番号１または２内の配列（例えば、１つまたは複数のＣＤＲ（配列番号１のアミノ酸１１〜１８、３６〜４３、または８２〜１００、または配列番号２のアミノ酸２６〜３４、５２〜５８、または９７〜１０３など））と同一度を示す重鎖または軽鎖可変領域配列を含む。特定の実施形態では、抗体および機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の重鎖配列または軽鎖配列の可変領域または細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体内の配列（例えば、１つまたは複数のＣＤＲ（配列番号１のアミノ酸１１〜１８、３６〜４３、または８２〜１００、または配列番号２のアミノ酸２６〜３４、５２〜５８、または９７〜１０３など））と約６０％以上同一の重鎖または軽鎖可変領域配列を含む。他の特定の実施形態では、抗体または機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の重鎖可変領域配列または細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体内の配列（例えば、１つまたは複数のＣＤＲ（配列番号１のアミノ酸１１〜１８、３６〜４３、または８２〜１００、または配列番号２のアミノ酸２６〜３４、５２〜５８、または９７〜１０３など））と少なくとも６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、またはそれを超えて同一の重鎖または軽鎖を含む。さらなる特定の実施形態では、抗体または機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体中の１つまたは複数のＣＤＲ（例えば、配列番号１のアミノ酸１１〜１８、３６〜４３、または８２〜１００、または配列番号２のアミノ酸２６〜３４、５２〜５８、または９７〜１０３）と少なくとも８０〜８５％、８５〜９０％、９０〜９５％、９５〜１００％同一の重鎖または軽鎖可変領域配列を含む。特定の態様では、抗体またはその機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体中の各重鎖または軽鎖可変領域配列中の１、２、または３つのＣＤＲ（例えば、配列番号１のアミノ酸１１〜１８、３６〜４３、または８２〜１００、または配列番号２のアミノ酸２６〜３４、５２〜５８、または９７〜１０３）と９５〜��００％同一の重鎖または軽鎖可変領域配列を含む。
【００３９】
したがって、本発明の抗体および機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と少なくとも部分的に配列が同一の抗体および機能的フラグメントを含む。かかる抗体および機能的フラグメントの同一率は６０％ほどの低さであり得るか、より高くあり得る（例えば、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％など）。
【００４０】
同一率は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体または細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体内の連続する領域または区域の全配列長に及び得る。特定の態様では、同一率を共有する配列の長さは、５個以上のアミノ酸（例えば、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５個などの連続するアミノ酸）である。さらなる特定の態様では、同一率を共有する配列の長さは、２５個以上の連続するアミノ酸（例えば、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５個などの連続するアミノ酸）である。さらなる特定の態様では、同一率を共有する配列の長さは、３５個以上の連続するアミノ酸（例えば、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４５、４７、４８、４９、５０個などの連続するアミノ酸）である。なおさらなる特定の態様では、同一率を共有する配列の長さは、５０個以上の連続するアミノ酸（例えば、５０〜５５、５５〜６０、６０〜６５、６５〜７０、７０〜７５、７５〜８０、８０〜８５、８５〜９０、９０〜９５、９５〜１００、１００〜１１０個などの連続するアミノ酸）である。なおさらなる特定の態様では、同一率を共有する配列の長さは、可変領域配列の任意のＣＤＲ（例えば、配列番号１のアミノ酸１１〜１８、３６〜４３、または８２〜１００、または配列番号２のアミノ酸２６〜３４、５２〜５８、または９７〜１０３）またはＣＤＲの外側であるが重鎖配列または軽鎖配列の可変領域内の領域（細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体など）の長さに等しい。
【００４１】
用語「同一性」およびその文法上のバリエーションは、２つ以上の参照した実体が同一であることを意味する。したがって、２つの抗体配列が同一である場合、これらは少なくとも参照した領域または部分内に同一のアミノ酸配列を有する。２つの核酸配列が同一である場合、これらは少なくとも参照した領域または部分内に同一のポリヌクレオチド配列を有する。同一性は、配列の規定区域（領域またはドメイン）を対象とし得る。「同一区域」は、同一である２つ以上の参照した実体の一部をいう。したがって、２つのタンパク質配列または核酸配列が１つまたは複数の配列領域にわたって同一である場合、これらは、この領域内に同一性を有する。例示的な同一性は、基準抗体または機能的フラグメント（例えば、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体またはその部分配列）と５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、またはそれを超えて配列が同一のアミノ酸配列を有する抗体および機能的フラグメントである。
【００４２】
用語「相同な」または「相同性」は、２つ以上の参照した実体が所与の領域または部分にわたって少なくとも一部が同一性を有することを意味する。相同または同一「区域、領域、またはドメイン」は、２つ以上の参照した実体の一部が相同性を有するか同一であることを意味する。したがって、２つの抗体配列が１つまたは複数の配列領域にわたって同一である場合、これらはこれらの領域中で同一性を有する。「実質的相同性」は、参照分子または相同性を有する参照分子の関連／対応する領域または部分の１つまたは複数の構造または機能（例えば、生物学的機能）の少なくとも部分的な構造または機能を有するか有すると予想されるように分子が構造的または機能的に保存されることを意味する。実質的相同性を有する抗体または機能的フラグメントは、少なくとも部分的な参照抗体の活性または機能を有するか有すると予想される。例えば、特定の実施形態では、１つまたは複数の修飾（例えば、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の置換、欠失、または付加）を有する細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の細胞、抗原、またはエピトープへの結合につき少なくとも部分的に競合する能力を保持するか、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する細胞、抗原、またはエピトープへの部分的結合を少なくとも保持し、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体に対する実質的な相同性を有すると見なされる。
【００４３】
２配列間の同一性（相同性）の範囲を、当該分野で公知のコンピュータプログラムおよび数学アルゴリズムを使用して確認することができる。配列同一率（相同率）を計算するかかるアルゴリズムは、一般に、比較領域または区域にわたる配列のギャップおよびミスマッチを計算する。例えば、ＢＬＡＳＴ（例えば、ＢＬＡＳＴ  ２．０）検索アルゴリズム（例えば、Ａｌｔｓｃｈｕｌら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３（１９９０）を参照のこと（ＮＣＢＩから公的に利用可能））は、以下に示す例示的検索パラメータを有する。ミスマッチ−２；ギャップオープン５；ギャップ伸長２。ポリペプチド配列比較のために、ＢＬＡＳＴＰアルゴリズムを、典型的には、スコアリング行列（ＰＡＭ１００、ＰＡＭ  ２５０、ＢＬＯＳＵＭ  ６２、またはＢＬＯＳＵＭ  ５０など）と組み合わせて使用する。ＦＡＳＴＡ（例えば、ＦＡＳＴＡ２およびＦＡＳＴＡ３）およびＳＳＥＡＲＣＨ配列比較プログラムも使用して、同一性の範囲を定量する（Ｐｅａｒｓｏｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：２４４４（１９８８）；Ｐｅａｒｓｏｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ．１３２：１８５（２０００）；ａｎｄ  Ｓｍｉｔｈら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１４７：１９５（１９８１））。Ｄｅｌａｕｎａｙベースのトポロジーマッピングを使用したタンパク質構造の類似性の定量プログラムも開発されている（Ｂｏｓｔｉｃｋら、Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ．３０４：３２０（２００３））。
【００４４】
本発明の抗体および機能的フラグメントには、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の少なくとも１つまたは複数の部分的活性または機能を保持する抗体および機能的フラグメントが含まれる。本明細書中に開示のように、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する抗原は、悪性および非悪性の新形成細胞、腫瘍細胞、および癌細胞上で発現する。細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体に結合し、したがって、ＰＭ−２の標的抗原を発現する細胞の非例示的な例には、胃腺癌、結腸直腸腺癌、肺扁平上皮癌腫、肺腺癌、食道扁平上皮癌腫、膵腺癌、膀胱の尿路上皮癌腫、腎細胞癌腫、前立腺腺癌、乳管癌腫、乳房小葉癌腫、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、または子宮細胞腺癌の細胞、またはＨＴ−２９（ＡＴＣＣ受入番号ＨＴＢ−３８；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２９９）、ＣＡＣＯ−２（ＡＴＣＣ受入番号ＨＢＴ−３７；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １６９）、ＣＯＬＯ−３２０（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １４４）、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２１）、ＡＳＰＣ−１（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８２）、ＢＸＰＣ−３（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８７）、またはＡ５４９（ＡＴＣＣ受入番号ＣＣＬ−１８５）細胞が含まれる。したがって、種々の実施形態では、抗体または機能的フラグメントは、１つまたは複数の細胞（胃腺癌、結腸直腸腺癌、肺扁平上皮癌腫、肺腺癌、食道扁平上皮癌腫、膵腺癌、膀胱の尿路上皮癌腫、腎細胞癌腫、前立腺腺癌、乳管癌腫、乳房小葉癌腫、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、または子宮細胞腺癌の細胞、またはＨＴ−２９（ＡＴＣＣ受入番号ＨＴＢ−３８；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２９９）、ＣＡＣＯ−２（ＡＴＣＣ受入番号ＨＢＴ−３７；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １６９）、ＣＯＬＯ−３２０（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １４４）、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２１）、ＡＳＰＣ−１（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８２）、ＢＸＰＣ−３（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８７）、またはＡ５４９（ＡＴＣＣ受入番号ＣＣＬ−１８５）細胞など）に結合する。
【００４５】
細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する（または結合につき競合する）細胞、抗原、またはエピトープに結合する抗体および機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体よりも細胞、抗原、またはエピトープに対するより高いまたは低い相対結合親和性を有し得る。したがって、さらなる本発明の抗体および機能的フラグメントには、細胞、抗原、またはエピトープへの結合に対して、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体より高いか、ほぼ同一か、より低い結合親和性を有する抗体および機能的フラグメントが含まれる。例えば、本発明の抗体または機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の２〜５、５〜１０、１０〜１００、１００〜１０００、または１０００〜１０，０００倍またはかかる値以内またはこれらを含む任意の数値または範囲を超えるかこれら未満の親和性を有し得る。１つの実施形態では、抗体またはその機能的フラグメントは、新形成細胞、癌細胞、腫瘍細胞、または転移細胞への結合に対して、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の結合親和性の約１〜５０００倍以内の結合親和性を有する。別の実施形態では、抗体またはその機能的フラグメントは、胃腺癌、結腸直腸腺癌、肺扁平上皮癌腫、肺腺癌、食道扁平上皮癌腫、膵腺癌、膀胱の尿路上皮癌腫、腎細胞癌腫、前立腺腺癌、乳管癌腫、乳房小葉癌腫、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、または子宮細胞腺癌への結合に対して、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の結合親和性の約１〜５０００倍以内の結合親和性を有する。さらなる実施形態では、抗体またはその機能的フラグメントは、ＨＴ−２９（ＡＴＣＣ受入番号ＨＴＢ−３８；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２９９）、ＣＡＣＯ−２（ＡＴＣＣ受入番号ＨＢＴ−３７；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １６９）、ＣＯＬＯ−３２０（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １４４）、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２１）、ＡＳＰＣ−１（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８２）、ＢＸＰＣ−３（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８７）、またはＡ５４９（ＡＴＣＣ受入番号ＣＣＬ−１８５）細胞への結合に対して、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の結合親和性の約１〜５０００倍以内の結合親和性を有する。上記の実施形態では、結合親和性は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６��０によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の結合親和性の１〜５０００倍を超えるかそれ未満であり得る。
【００４６】
結合親和性を、会合（Ｋａ）および解離（Ｋｄ）速度によって決定することができる。平衡親和性定数Ｋは、Ｋａ／Ｋｄとの比である。会合（Ｋａ）および解離（Ｋｄ）速度を、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）を使用して測定することができる（Ｒｉｃｈ  ａｎｄ  Ｍｙｓｚｋａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１１：５４（２０００）；Ｅｎｇｌｅｂｉｅｎｎｅ，Ａｎａｌｙｓｔ．１２３：１５９９（１９９８））。リアルタイムでの結合率の検出およびモニタリングのための装置および方法は公知であり、市販されている（ＢｉａＣｏｒｅ  ２０００，Ｂｉａｃｏｒｅ  ＡＢ，Ｕｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ；ａｎｄ  Ｍａｌｍｑｖｉｓｔ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓ．２７：３３５（１９９９））。
【００４７】
さらなる特異的な制限されない抗体および機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する細胞、抗原、またはエピトープに対して、約Ｋｄ１０−２Ｍ〜約Ｋｄ１０−１５Ｍ以内または約Ｋｄ１０−６Ｍ〜約Ｋｄ１０−１２Ｍ以内の結合親和性を有する（または結合につき競合する）。特定の実施形態では、結合親和性は、５×１０−２Ｍ、１０−２Ｍ、５×１０−３Ｍ、１０−３Ｍ、５×１０−４Ｍ、１０−４Ｍ、５×１０−５Ｍ、１０−５Ｍ、５×１０−６Ｍ、１０−６Ｍ、５×１０−７Ｍ、１０−７Ｍ、５×１０−８Ｍ、１０−８Ｍ、５×１０−９Ｍ、１０−９Ｍ、５×１０−１０Ｍ、１０−１０Ｍ、５×１０−１１Ｍ、１０−１１Ｍ、５×１０−１２Ｍ、１０−１２Ｍ、５×１０−１３Ｍ、１０−１３Ｍ、５×１０−１４Ｍ、１０−１４Ｍ、５×１０−１５Ｍ、および１０−１５Ｍ未満である。特定の実施形態では、抗体または機能的フラグメントは、新形成細胞、癌細胞、腫瘍細胞、または転移細胞への結合に対して約Ｋｄ１０−５Ｍ〜約Ｋｄ１０−１３Ｍ内の結合親和性を有する。さらなる特定の実施形態では、抗体または機能的フラグメントは、腺癌細胞または扁平上皮癌（胃腺癌、結腸直腸腺癌、肺扁平上皮癌腫、肺腺癌、食道扁平上皮癌腫、膵腺癌、膀胱の尿路上皮癌腫、腎細胞癌腫、前立腺腺癌、乳管癌腫、乳房小葉癌腫、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、または子宮細胞腺癌など）への結合に対して約Ｋｄ１０−５Ｍ〜約Ｋｄ１０−１３Ｍ以内の結合親和性を有する。さらなる特定の実施形態では、抗体または機能的フラグメントは、ＨＴ−２９（ＡＴＣＣ受入番号ＨＴＢ−３８；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２９９）、ＣＡＣＯ−２（ＡＴＣＣ受入番号ＨＢＴ−３７；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １６９）、ＣＯＬＯ−３２０（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １４４）、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２１）、ＡＳＰＣ−１（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８２）、ＢＸＰＣ−３（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８７）、またはＡ５４９（ＡＴＣＣ受入番号ＣＣＬ−１８５）細胞への結合に対して約Ｋｄ１０−５Ｍ〜約Ｋｄ１０−１３Ｍ以内の結合親和性を有する。
【００４８】
細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する細胞、抗原、またはエピトープに結合するか、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と、細胞、抗原、またはエピトープへの結合につき競合する抗体および機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体よりも高いか低い相対細胞増殖阻害活性または軽減活性または高いか低い相対細胞アポトーシス誘導活性または刺激活性を有し得る。したがって、本発明の抗体および機能的フラグメントには、ＰＭ−２抗体が結合するか、ＰＭ−２抗体が細胞、抗原、またはエピトープへの結合につき競合し、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体よりも高いか低い相対細胞増殖阻害活性または軽減活性または高いか低い相対細胞アポトーシス誘導活性または刺激活性を有する、細胞、抗原、またはエピトープに結合する抗体および機能的フラグメントが含まれる。
【００４９】
したがって、本発明の抗体には、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と異なる配列を有するが、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の１つまたは複数の活性または機能を少なくとも一部保持する抗体が含まれる。例示的な活性および機能には、例えば、ＰＭ−２抗体が結合する細胞への結合；ＰＭ−２抗体が結合する抗原への結合；ＰＭ−２抗体が結合するエピトープへの結合；ＰＭ−２抗体との細胞、抗原、またはエピトープへの結合の競合；細胞の成長または増殖の阻害または軽減、または細胞の死、溶解、またはアポトーシスの刺激または誘導（例えば、新形成細胞、腫瘍細胞、癌細胞、または転移細胞）；１つまたは複数の胃腺癌、結腸直腸腺癌、肺扁平上皮癌腫、肺腺癌、食道扁平上皮癌腫、膵腺癌、膀胱の尿路上皮癌腫、腎細胞癌腫、前立腺腺癌、乳管癌腫、乳房小葉癌腫、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、または子宮細胞腺癌への結合；ＨＴ−２９（ＡＴＣＣ受入番号ＨＴＢ−３８；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２９９）、ＣＡＣＯ−２（ＡＴＣＣ受入番号ＨＢＴ−３７；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １６９）、ＣＯＬＯ−３２０（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １４４）、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２１）、ＡＳＰＣ−１（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８２）、ＢＸＰＣ−３（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８７）、またはＡ５４９（ＡＴＣＣ受入番号ＣＣＬ−１８５）細胞の成長または増殖の阻害、またはＨＴ−２９（ＡＴＣＣ受入番号ＨＴＢ−３８；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２９９）、ＣＡＣＯ−２（ＡＴＣＣ受入番号ＨＢＴ−３７；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １６９）、ＣＯＬＯ−３２０（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １４４）、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２１）、ＡＳＰＣ−１（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８２）、ＢＸＰＣ−３（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８７）、またはＡ５４９（ＡＴＣＣ受入番号ＣＣＬ−１８５）細胞の死、溶解、またはアポトーシスの刺激または誘導などが含まれる。
【００５０】
したがって、本発明によれば、修飾形態が未修飾または基準の抗体または機能的フラグメントの活性または機能の少なくとも一部を保持する場合の、修飾された抗体および機能的フラグメントも提供する。１つの実施形態では、抗体またはその機能的フラグメントは、抗体または機能的フラグメントが細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるインタクトな全長ＰＭ−２抗体の少なくとも一部の活性または機能を保持する場合に、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の１つまたは複数のアミノ酸の付加、欠失、または置換を有する重鎖または軽鎖可変領域配列を含む。１つの態様では、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の１つまたは複数のアミノ酸の付加、欠失、または置換を有する抗体または機能的フラグメントは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する細胞、抗原、またはエピトープへの結合につき競合する。別の態様では、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の１つまたは複数のアミノ酸の欠失、置換、または付加を有する抗体または機能的フラグメントは、ＰＭ−２抗体が結合する細胞、抗原、またはエピトープに結合する。さらなる態様では、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の１つまたは複数のアミノ酸の欠失、置換、または付加を有する抗体または機能的フラグメントは、ＰＭ−２抗体が増殖を阻害または軽減する細胞の増殖を阻害または軽減する。さらなる態様では、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の１つまたは複数のアミノ酸の欠失、置換、または付加を有する抗体または機能的フラグメントは、ＰＭ−２抗体が死、溶解、またはアポトーシスを刺激または誘導する細胞の死、溶解、またはアポトーシスを刺激または誘導する。なおさらなる特定の態様では、細胞の成長または増殖は、コントロール（非処置）細胞と比較して少なくとも２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７５％またはそれを超えるか、かかる比率の範囲内またはこれらに含まれる任意の数値または範囲で阻害、減少、または軽減される。なおさらなる特定の態様では、細胞の死、溶解、またはアポトーシスは、コントロール（非処置）細胞と比較して少なくとも２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７５％，またはそれを超えるか、かかる比率の範囲内またはこれらに含まれる任意の数値または範囲である。
【００５１】
本明細書中で使用する場合、用語「修飾する」またはその文法上のバリエーションは、組成物が基準組成物から逸脱することを意味する。かかる修飾されたタンパク質、核酸、および他の組成物は、基準の未修飾のタンパク質、核酸、または組成物より活性が高いか低く、または機能が異なり得る。
【００５２】
修飾物（置換物、付加物、および欠失物が含まれる）を、「バリアント」ということもできる。アミノ酸バリアントの特定の非限定的な例には、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体、フラグメント、および部分配列が含まれる。例示的なＰＭ−２抗体の部分配列およびフラグメントには、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する細胞、抗原、またはエピトープへの結合につきＰＭ−２抗体と少なくとも部分的に競合するか、細胞、抗原、またはエピトープへの少なくとも一部の結合活性を保持するか、ＰＭ−２抗体が増殖を阻害または軽減する細胞の増殖を阻害または軽減する能力を保持するか、ＰＭ−２抗体が死、溶解、またはアポトーシスを刺激または誘導する細胞の死、溶解、またはアポトーシスを刺激または誘導する能力を保持する、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の一部が含まれる。
【００５３】
本明細書中で使用する場合、用語「フラグメント」または「部分配列」は、全長分子の一部を意味する。したがって、抗体のフラグメントまたは部分配列は、インタクトな全長基準抗体より１つまたは複数のアミノ酸が少ない（例えば、重鎖または軽鎖の可変領域または定常領域のアミノ末端またはカルボキシ末端のいずれかからの１つまたは複数の内部または末端アミノ酸欠失）。核酸フラグメントは、全長比較核酸配列よりも少なくとも１ヌクレオチド少ない。したがって、フラグメントは、全長未変性分子までの任意の長さであり得る。
【００５４】
用語「機能的フラグメント」および「機能的部分配列」は、抗体をいう場合、機能または活性を有する抗体の一部をいう。例えば、機能的フラグメントは、インタクトな基準抗体の１つまたは複数の部分的な機能または活性（例えば、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の機能または活性）を保持することができる。例えば、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるインタクトな全長ＰＭ−２抗体の細胞または抗原への結合につき競合するか、インタクトな全長ＰＭ−２抗体が結合する細胞または抗原に結合するＰＭ−２抗体の部分配列を機能的部分配列と見なす。
【００５５】
抗体フラグメント（一本鎖抗体が含まれる）は、重鎖または軽鎖可変領域（例えば、１つまたは複数のＣＤＲ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、またはＣＤＲ３など）、それぞれ、配列番号１のアミノ酸１１〜１８、３６〜４３、または８２〜１００、および配列番号２のアミノ酸２６〜３４、５２〜５８、または９７〜１０３）の全てまたは一部を単独または１つまたは複数の以下の全てまたは一部と組み合わせて含むことができる：ヒンジ領域、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３ドメイン。重鎖または軽鎖可変領域（例えば、１つまたは複数のＣＤＲ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、またはＣＤＲ３など）、それぞれ、配列番号１のアミノ酸１１〜１８、３６〜４３、または８２〜１００、および配列番号２のアミノ酸２６〜３４、５２〜５８、または９７〜１０３）のヒンジ領域、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３ドメインとの任意の組み合わせの抗原結合部分配列も含まれる。
【００５６】
本発明の例示的な抗体の部分配列およびフラグメントには、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、Ｆｄ、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、ジスルフィド連結Ｆｖ（ｓｄＦｖ）、ＶＬ、ＶＨ、三重特異性（Ｆａｂ３）、二重特異性（Ｆａｂ２）、二特異性抗体（（ＶＬ−ＶＨ）２または（ＶＨ−ＶＬ）２）、トライアボディ（三価）、テトラボディ（四価）、ミニボディ（（ｓｃＦＶ−ＣＨ３）２）、二重特異性単鎖Ｆｖ（Ｂｉｓ−ｓｃＦｖ）、ＩｇＧｄｅｌｔａＣＨ２、ｓｃＦｖ−Ｆｃ、および（ｓｃＦｖ）２−Ｆｃが含まれる。かかる部分配列およびフラグメントは、全長抗体としての結合親和性、全長抗体としての結合特異性、または全長抗体としての１つまたは複数の活性または機能（例えば、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の機能または活性）を有し得る。
【００５７】
抗体の部分配列およびフラグメントを組み合わせることができる。例えば、ＶＬまたはＶＨ部分配列をリンカー配列によって連結し、それにより、ＶＬ−ＶＨキメラを形成することができる。特に、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の重鎖可変配列を、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の軽鎖可変配列と組み合わせることができる。したがって、本発明は、１）細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１として挙げた重鎖可変配列によって示したＰＭ−２抗体の重鎖可変配列；および２）細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号２として挙げた軽鎖可変配列によって示したＰＭ−２抗体の軽鎖可変配列ならびに相互の組み合わせを提供する。単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）部分配列の組み合わせをリンカー配列によって連結し、それにより、ｓｃＦｖ−ｓｃＦｖキメラを形成することができる。抗体の部分配列およびフラグメントには、一本鎖抗体または可変領域のみまたは他の部分配列の全てまたは一部との組み合わせが含まれる。
【００５８】
修飾タンパク質には、さらに、アミノ酸置換物が含まれる。置換は保存的または非保存的であり得、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の定常領域または可変領域（例えば、ＣＤＲまたはＦＲなどの超可変領域）中に存在し得る。特定の実施形態では、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表される修飾ＰＭ−２抗体は、１つまたは数個の保存的または非保存的アミノ酸置換を有する。
【００５９】
超可変領域内の抗原結合に寄与する抗体の構造決定基（相補性決定領域（ＣＤＲ、各重鎖配列および軽鎖配列中に３個存在し、便宜上、ＨＣ−ＣＤＲ１、ＨＣ−ＣＤＲ２、およびＨＣ−ＣＤＲ３；ならびにＬＣ−ＣＤＲ１、ＬＣ−ＣＤＲ２、およびＬＣ−ＣＤＲ３と指定される；それぞれ、配列番号１のアミノ酸１１〜１８、３６〜４３、および８２〜１００、ならびに配列番号２のアミノ酸２６〜３４、５２〜５８、および９７〜１０３）など）が当業者に公知である。Ｄ領域およびＪ領域などのさらなる領域の位置も当業者に公知である。１つまたは複数のＣＤＲ配列が、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の少なくとも一部の機能または活性（例えば、細胞、抗原、またはエピトープの結合、結合親和性（例えば、Ｋｄ）、細胞増殖の阻害、または細胞アポトーシスの刺激または誘導など）を維持するのに十分な配列同一性を有する抗体およびその部分配列。
【００６０】
したがって、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の定常領域または可変領域中のアミノ酸置換は許容される可能性がある。細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体のＣＤＲの外側の可変領域中の１つまたは少数の置換も、少なくとも一部の細胞、抗原、またはエピトープの結合活性が保持されるか、部分的な細胞増殖阻害活性またはアポトーシス刺激または誘導活性が保持される範囲に少なくとも許容される可能性がある。細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体のＣＤＲ（例えば、配列番号１のアミノ酸１１〜１８、３６〜４３、または８２〜１００、および配列番号２のアミノ酸２６〜３４、５２〜５８、または９７〜１０３）中の１つまたは少数の保存的置換も、少なくとも一部の細胞、抗原、またはエピトープの結合活性が保持されるか（すなわち、細胞または抗原結合が破壊されない）、部分的な細胞増殖阻害活性またはアポトーシス刺激または誘導活性が保持される範囲に少なくとも許容される可能性がある。細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の超可変領域（例えば、ＣＤＲ）中の多数のアミノ酸の非保存的置換は、１つまたは複数の細胞、抗原、またはエピトープの結合活性、結合親和性（例えば、Ｋｄ）、または抗体の機能または活性（細胞増殖の阻害、細胞アポトーシスの刺激または誘導など）に影響を及ぼす可能性がある。
【００６１】
「保存的置換」は、あるアミノ酸の生物学的、化学的、または構造的に類似する残基への置換である。「生物学的に類似の」は、置換が生物学的活性（例えば、細胞結合または細胞増殖の阻害活性またはアポトーシスの誘導または刺激活性）を破壊しないことを意味する。「構造的に類似の」は、アミノ酸が類似の長さ（アラニン、グリシン、およびセリンなど）または類似のサイズを有する側鎖を有することを意味する。「化学的に類似の」は、残基が同一の電荷を有するか、共に親水性または疎水性を示すことを意味する。特定の例には、一方の疎水性残基（イソロイシン、バリン、ロイシン、またはメチオニンなど）の他方への置換または一方の極性残基の他方への置換（アルギニンのリジンへの置換、グルタミン酸のアスパラギン酸への置換、またはグルタミンのアスパラギンへの置換、セリンのトレオニンへの置換など）が含まれる。
【００６２】
特定の実施形態では、重鎖または軽鎖超可変領域の配列またはこの配列中の領域（ＣＤＲ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、またはＣＤＲ３；配列番号１のアミノ酸１１〜１８、３６〜４３、または８２〜１００、または配列番号２のアミノ酸２６〜３４、５２〜５８、または９７〜１０３）またはＦＲなど）は、１〜１０個、１〜５個、１〜３個、またはそれ未満（例えば、１個または２個）のアミノ酸置換を有するであろう。さらなる実施形態では、重鎖または軽鎖超可変領域の配列内のアミノ酸置換は、１つを超えるＣＤＲ内に存在しない。さらなる実施形態では、重鎖または軽鎖超可変領域の配列内の置換はＣＤＲ内に存在しない。別の実施形態では、超可変領域配列内の置換はＦＲ内に存在しない。
【００６３】
所与の修飾の影響を、未修飾抗体（例えば、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体）の細胞または抗原結合活性、親和性または抗体の機能または活性を少なくとも一部保持する抗体および機能的フラグメントを同定するために容易にアッセイすることができる。例えば、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の可変領域（例えば、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、またはＣＤＲ３内またはその外側）中のアミノ酸置換を、細胞、抗原、またはエピトープの結合、細胞増殖の阻害または軽減活性、細胞の死、溶解、またはアポトーシスの誘導または刺激などについてアッセイすることができる。
【００６４】
領域変異性分析を使用して、相補性決定領域（ＣＤＲ）およびフレームワーク領域（ＦＲ）中の特定の置換の影響を予想することができる（Ｓｈａｐｉｒｏら、Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６３：２５９（１９９９））。簡潔に述べれば、配列比較により、ＩｇイントロンＤＮＡ内に存在するジヌクレオチド配列およびトリヌクレオチド配列間の変異性の階層が示され、程度の差はあるが変異性を示す領域が予想される。定量的構造活性相関（ＱＳＡＲ）を使用して、抗体認識ドメインの性質を同定し、したがって、リガンド結合に関与するアミノ酸を同定することができる。次いで、ＯＳＡＲに基づいた予想モデルを使用して、置換（変異）の影響を予想することができる。例えば、その抗原と相互作用する抗体の会合速度および解離速度に及ぼす変異の影響を使用して、両速度定数（ＫａおよびＫｄ）についての定量的予想モデルを構築し、これを使用して抗体に及ぼす他の変異の影響を予想する（Ｄｅ  Ｇｅｎｓｔら、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．２７７：２９８９７（２００２））。したがって、当業者は、かかる分析を使用して、非置換抗体または機能的フラグメントの活性または機能の少なくとも一部を保持する抗体または機能的フラグメントが得られる可能性がある抗体および機能的フラグメントのアミノ酸置換を同定することができる。
【００６５】
変異誘発のための残基または領域の別の同定方法は「アラニンスキャニング変異誘発」と呼ばれ、例えば、Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ  ａｎｄ  Ｗｅｌｌｓ（Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４４：１０８１（１９８９））によって記載されている。標的残基の残基または基を同定し（例えば、ａｒｇ、ａｓｐ、ｈｉｓ、ｌｙｓ、およびｇｌｕなどの荷電残基）、細胞中または細胞の外側の周辺水性環境とのアミノ酸の相互作用に影響を及ぼすように中性または負電荷のアミノ酸（最も望ましくは、アラニンまたはポリアラニン）により置換する。次いで、置換に対する機能的感受性を示すドメインを、置換部位でのまたは置換部位に対するさらなるまたは他のバリアントの導入によって洗練させる。したがって、アミノ酸配列バリエーションの導入のための部位が予め決定される一方で、変異を予め決定する必要はない。例えば、所与の部位での変異のパフォーマンスを最適にするために、アラニンスキャニング変異誘発またはランダム変異誘発を、標的コドンまたは標的領域で行うことができ、発現されたバリアントを、抗原または細胞の結合、または新形成細胞、腫瘍細胞、癌細胞、または転移細胞のアポトーシスを誘導するか増殖を阻害する能力についてスクリーニングする。
【００６６】
天然に存在するＬ−アミノ酸がＤ型アミノ酸と置換されること以外は、アミノ酸置換を、同一アミノ酸と置換することができる。したがって、修飾物には、Ｌ−アミノ酸の１つまたは複数のＤ−アミノ酸との置換またはＬ−アミノ酸を置換したＤ−アミノ酸の混合物が含まれる。修飾物には、構造的および機能的アナログ（例えば、合成または非天然のアミノ酸またはアミノ酸アナログおよび誘導体化形態を有するペプチド模倣物）も含まれる。
【００６７】
修飾形態には、さらに、誘導体化配列（例えば、遊離アミノ基がアミン塩酸塩、ｐ−トルエンスルホニル基、カルボベンゾキシ基を形成するアミノ酸；塩（メチルおよびエチルエステル）由来の遊離カルボキシ基；Ｏ−アシルまたはＯ−アルキル誘導体および天然に存在するアミノ酸誘導体を形成する遊離ヒドロキシル基（例えば、４−ヒドロキシプロリン（プロリンについて）、５−ヒドロキシリジン（リジンについて）、ホモセリン（セリンについて）、オルニチン（リジンについて）など））が含まれる。当該分野で公知の方法（例えば、ＰＣＲベースの部位特異的変異誘発、欠失変異誘発、および挿入変異誘発、化学修飾および化学変異誘発、架橋など）を使用して、修飾物を産生することができる。
【００６８】
修飾形態には、付加および挿入が含まれる。例えば、付加は、タンパク質（例えば、抗体）、核酸、または他の組成物への任意の分子型の共有結合または非共有結合であり得る。典型的には、付加および挿入により、異なる機能または活性が付与される。
【００６９】
付加物および挿入物には、融合（キメラ）ポリペプチドまたは核酸配列が含まれ、これは、配列に共有結合した基準未変性（野生型）配列中に通常は存在しない１つまたは複数の分子を有する配列である。特定の例は、多機能タンパク質（例えば、多重特異性抗体）を産生するための別のタンパク質（例えば、抗体）のアミノ酸配列である。
【００７０】
本発明によれば、異種ドメインを含む抗体、核酸、および他の組成物を提供する。したがって、異種ドメインは、小さなまたは巨大な機能的部分の種々の異なる型のいずれかからなり得る。かかる部分には、核酸、ペプチド、炭水化物、脂質、または小有機化合物（薬物（例えば、細胞抗増殖薬）など）、金属（金、銀）などが含まれる。異種ドメインは、アミノ酸付加物または挿入物であり得る。
【００７１】
異種ドメインの特定の非限定的な例には、例えば、タグ、検出可能な標識、および細胞毒性薬が含まれる。タグおよび検出可能な標識の特定の例には、酵素（西洋ワサビペルオキシダーゼ、ウレアーゼ、カタラーゼ、アルカリホスファターゼ、β−ガラクトシダーゼ、クロラムフェニコールトランスフェラーゼ）；酵素基質；リガンド（例えば、ビオチン）；受容体（アビジン）；放射性核種（例えば、Ｃ１４、Ｓ３５、Ｐ３２、Ｐ３３、Ｈ３、Ｉ１２５、Ｉ１３１、ガリウム−６７および６８、スカンジウム−４７、インジウム−１１１、ラジウム−２２３）；Ｔ７−、Ｈｉｓ−、ｍｙｃ−、ＨＡ−、およびＦＬＡＧ−タグ；高電子密度試薬；エネルギー移動分子；常磁性標識；フルオロフォア（フルオレセイン、フルオレスカミン、ローダミン、フィコエリトリン、フィコシアニン、アロフィコシアニン）；発色団；化学発光物質（イミダゾール、ルシフェラーゼ、アクリジニウム、シュウ酸塩）；および生物発光剤が含まれる。細胞毒性薬（細胞毒素）の特定の例には、ジフテリア毒素、コレラ毒素、およびリシンが含まれる。
【００７２】
異種ドメインのさらなる例には、例えば、抗細胞増殖薬（例えば、抗新形成薬、抗腫瘍薬、抗癌薬、または抗転移薬）が含まれる。抗細胞増殖薬（例えば、抗新形成薬、抗腫瘍薬、抗癌薬、または抗転移薬、細胞毒素など）の特定の非限定的な例を本明細書中に開示し、これらは当該分野で公知である。
【００７３】
２つの実体が少なくとも一部の異なる機能または活性を維持するように、リンカー配列を、タンパク質（例えば、抗体）、核酸、または他の組成物と、付加物または挿入物（例えば、異種ドメイン）との間に挿入することができる。リンカー配列は、１つまたは複数の性質を有することができ、この性質には、可動性構造、規則正しい二次構造を形成することができないこと、またはいずれかのドメインを促進するか相互作用することができる疎水性または荷電性が含まれる。典型的に可動性タンパク質領域中に見出されるアミノ酸には、Ｇｌｙ、Ａｓｎ、およびＳｅｒが含まれる。他の中性付近のアミノ酸（ＴｈｒおよびＡｌａなど）を、リンカー配列中で使用することもできる。リンカー配列の長さを変化させることができる（例えば、米国特許第６，０８７，３２９号を参照のこと）。リンカーには、さらに、化学架橋剤および抱合剤（スルホ−スクシンイミジル誘導体（スルホ−ＳＭＣＣ、スルホ−ＳＭＰＢ）、スベリン酸ジスクシンイミジル（ＤＳＳ）、グルタル酸ジスクシンイミジル（ＤＳＧ）、および酒石酸ジスクシンイミジル（ＤＳＴ）など）が含まれる。
【００７４】
付加のさらなる例には、保護基／ブロッキング基および任意の多数の化学修飾によるグリコシル化、脂肪酸、脂質、アセチル化、リン酸化、アミド化、ホルミル化、ユビキチン化、および誘導体化が含まれる。他の変更形態および可能性は当業者に容易に明らかであり、本発明の範囲内であると見なされる。
【００７５】
組成物の修飾語として使用される用語「単離された」は、組成物が人為的に作製されるか、その天然に存在するｉｎ  ｖｉｖｏ環境中の１つまたは複数の他の成分から分離されることを意味する。一般に、このようにして分離された組成物は、例えば、１つまたは複数のタンパク質、核酸、脂質、炭水化物、細胞膜と通常は天然で会合する１つまたは複数の材料を実質的に含まない。したがって、単離された組成物は、組成物が天然に存在する生物の細胞中の他の生体成分または（例えば、合成または細胞培養によって）産生される人工培地から実質的に分離される。例えば、単離されたポリペプチドは、他のポリペプチドおよび核酸から実質的に分離され、何百万ものポリペプチドまたは核酸配列に存在するポリペプチドまたはポリヌクレオチドのライブラリー（例えば、ポリペプチドライブラリー、ゲノムライブラリー、またはｃＤＮＡライブラリーなど）を含まない。単離された核酸は、他のポリペプチドおよび核酸から実質的に分離され、何百万ものポリペプチドまたは核酸配列に存在するポリペプチドまたはポリヌクレオチドのライブラリー（例えば、ポリペプチドライブラリー、ゲノムライブラリー、またはｃＤＮＡライブラリーなど）を含まない。用語「単離された」は、組成物の別の物理的形態（例えば、単離されたタンパク質には、タンパク質多量体、翻訳後修飾（例えば、グリコシル化、リン酸化）、または誘導体化形態が含まれ得る）を排除しない。
【００７６】
組成物の修飾語として使用される用語「精製された」は、典型的には天然で会合している物質のほとんどまたは全てを含まない組成物をいう。したがって、細胞から分離したタンパク質は、標準的な方法によって細胞区画から単離した場合に実質的に精製されたと見なされる一方で、化学合成された核酸配列は、その化学的前駆体から分離された場合に実質的に精製されたと見なされる。したがって、「精製された」は、絶対的純度を必要としない。さらに、「精製された」組成物を、１つまたは複数の他の分子と組み合わせることができる。したがって、用語「精製された」は、組成物の組み合わせを排除しない。
【００７７】
「精製された」タンパク質および核酸には、標準的な精製方法によって産生されたタンパク質および核酸が含まれる。この用語には、宿主細胞中の組換え発現および化学合成によって産生されたタンパク質および核酸も含まれる。「精製された」はまた、夾雑物レベルがヒトまたは非ヒト動物への投与に関する規制当局（例えば、食品医薬品局（ＦＤＡ））に許容されるレベル未満である組成物をいうことができる。
【００７８】
実質的純度とは、分子質量の少なくとも約６０％以上であり得る。純度は、約７０％または８０％以上でもあり得、より高くてもよい（例えば、９０％以上）。純度は、例えば、薬学的キャリア中の重量％による分子の量が６０％未満であり得るが、通常は会合している他の成分と比較した分子の相対比率はより高いであろう。純度を、任意の適切な方法（例えば、ＵＶ分光法、クロマトグラフィ（例えば、ＨＰＬＣ、気相）、ゲル電気泳動（例えば、銀染色またはクーマシー染色）、および配列分析（ペプチドおよび核酸）が含まれる）によって決定することができる。
【００７９】
ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体の産生方法は当該分野で公知である。例えば、ＰＭ−２抗原またはその免疫原性フラグメントを、任意選択的に、キャリア（キーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）またはオボアルブミン（例えば、ＢＳＡ）など）に抱合するか、アジュバント（フロイント完全または不完全アジュバントなど）と混合し、これを使用して動物を免疫化する。従来のハイブリドーマテクノロジーを使用して、ＰＭ−２抗原に応答する免疫化動物由来の脾細胞を単離し、骨髄腫細胞と融合することができる。ハイブリドーマによって産生されたモノクローナル抗体を、例えば、ＥＬＩＳＡによってＰＭ−２抗原との反応性についてスクリーニングすることができる。抗体および機能的フラグメントをスクリーニングおよび選択するためのさらなる制限されない特定の方法には、ファージディスプレイ、リボゾームによるタンパク質−ｍＲＮＡ連結、およびｍＲＮＡディスプレイ、酵母、細菌、哺乳動物細胞、またはレトロウイルス上のディスプレイ、区画化によるマイクロビーズ、タンパク質−ＤＮＡディスプレイ、酵母２−ハイブリッドによる成長選択、タンパク質フラグメント相補性が含まれる（Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ，Ｒ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２３：１１０５（２００５））。
【００８０】
細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と、細胞、抗原、またはエピトープへの結合につき競合する抗体を、従来の競合結合アッセイを使用してスクリーニングおよび同定することができる。スクリーニングした抗体を、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と細胞、抗原、またはエピトープへの結合につき競合する能力に基づいて選択する。抗体がＰＭ−２抗体と細胞または抗原への結合につき競合するか、細胞、抗原、またはエピトープへのＰＭ−２抗体の結合を阻害、防止、または遮断する能力を、当該分野で公知の種々のアッセイ（酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）が含まれる）によって決定することができる。
【００８１】
タンパク質および抗体、その部分配列およびフラグメント、ならびに他の修飾された配列を、遺伝的方法によって産生することができる。かかる技術には、Ｃｏｓ細胞またはＥ．ｃｏｌｉなどの宿主細胞中へのタンパク質または抗体をコードする遺伝子の全てまたは一部の発現が含まれる。かかる宿主細胞は、全長またはフラグメント（例えば、ｓｃＦｖ）を発現することができる（例えば、Ｗｈｉｔｌｏｗら、Ｉｎ：Ｍｅｔｈｏｄｓ：  Ａ  Ｃｏｍｐａｎｉｏｎ  ｔｏ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  ２：９７（１９９１），Ｂｉｒｄら、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３（１９８８）；および米国特許第４，９４６，７７８号を参照のこと）。抗体および機能的フラグメントならびに核酸配列を、当業者に公知の方法（例えば、自動化ペプチド合成装置（例えば、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，ＣＡを参照のこと））を使用した化学合成によって産生することもできる。
【００８２】
抗体生成に適切な細胞または抗原を、当該分野で公知の種々の標準的なタンパク質精製技術または組換え発現技術のいずれかによって産生することができる。例えば、ＰＭ−２抗原は、細胞（ＨＴ−２９（ＡＴＣＣ受入番号ＨＴＢ−３８；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２９９）、ＣＡＣＯ−２（ＡＴＣＣ受入番号ＨＢＴ−３７；ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １６９）、ＣＯＬＯ−３２０（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １４４）、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２１）、ＡＳＰＣ−１（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８２）、ＢＸＰＣ−３（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１６８７）、Ａ５４９（ＡＴＣＣ受入番号ＣＣＬ−１８５）ＭＫＮ、およびＣＲＬ細胞など）上に存在する。したがって、例えば、全細胞、またはかかる細胞の調製物、細胞抽出物、または画分を使用して動物を免疫化し、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と細胞または抗原への結合につき競合するか、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する細胞または抗原に結合する抗体を産生することができる。
【００８３】
免疫化することができる動物には、マウス、ラット、ウサギ、ヤギ、ヒツジ、ウシもしくは仔牛、モルモット、または霊長類が含まれる。最初および任意の選択的なその後の免疫化は、静脈内、腹腔内、筋肉内、または皮下経路を介して行うことができる。その後の免疫化は、同一または異なる濃度のＰＭ−２抗原調製物で行うことができ、規則的または不規則な間隔で行うことができる。
【００８４】
動物には、ヒトＩｇＧ遺伝子座が含まれるように遺伝的に修飾された動物が含まれ、それにより、ヒト抗体を産生するために使用することができる。内因性免疫グロブリンを発現しない１つまたは複数のヒト免疫グロブリン遺伝子を有するトランスジェニック動物は、例えば、米国特許第５，９３９，５９８号に記載されている。ヒトポリクローナル抗体およびヒトモノクローナル抗体のさならなる産生方法は記載されている（例えば、Ｋｕｒｏｉｗａら、Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２０：８８９（２００２）；ＷＯ９８／２４８９３号；ＷＯ９２／０１０４７号；ＷＯ９６／３４０９６号；ＷＯ９６／３３７３５；米国特許第５，４１３，９２３号；同第５，６２５，１２６号；同第５，６３３，４２５号；同第５，５６９，８２５号；同第５，６６１，０１６号；同第５，５４５，８０６号；同第５，８１４，３１８号；同第５，８８５，７９３号；同第５，９１６，７７１号；および同第５，９３９，５９８号を参照のこと）。ヒト抗体産生テクノロジーの解説は、Ｌｏｎｂｅｒｇ  ａｎｄ  Ｈｕｓｚａｒ（Ｉｎｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：６５（１９９５））に記載されている。
【００８５】
抗体を、他の技術（ハイブリドーマテクノロジー、組換えテクノロジー、およびファージディスプレイテクノロジー、またはその組み合わせが含まれる）を使用して生成することもできる（米国特許第４，９０２，６１４号、同第４，５４３，４３９号、および同第４，４１１，９９３号を参照のこと；Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ：Ａ  Ｎｅｗ  Ｄｉｍｅｎｓｉｏｎ  ｉｎ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｎａｌｙｓｅｓ，Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ，Ｋｅｎｎｅｔｔ，ＭｃＫｅａｒｎ，ａｎｄ  Ｂｅｃｈｔｏｌ（ｅｄｓ．），１９８０およびＨａｒｌｏｗら、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，２ｎｄ  ｅｄ．１９８８も参照のこと）。
【００８６】
抗体の部分配列およびフラグメントを、抗体のタンパク質分解性加水分解（例えば、全抗体のペプシンまたはパパイン消化）によって調製することができる。ペプシンでの酵素的切断によって産生された抗体の部分配列およびフラグメントにより、Ｆ（ａｂ’）２と呼ばれる５Ｓフラグメントが得られる。このフラグメントを、チオール還元剤を使用してさらに切断して、１価の３．５Ｓ  Ｆａｂ’フラグメントを産生することができる。あるいは、ペプシンを使用した酵素的切断により、２つの１価のＦａｂ'フラグメントおよびＦｃフラグメントが直接産生される（例えば、米国特許第４，０３６，９４５号および同第４，３３１，６４７号；およびＥｄｅｌｍａｎら、Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｙｍｏｌ．１：４２２（１９６７）を参照のこと）。単鎖Ｆｖおよび抗体を、米国特許第４，９４６，７７８号および同第５，２５８，４９８号；Ｈｕｓｔｏｎら、Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．２０３：４６（１９９１）；Ｓｈｕら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：７９９５（１９９３）；およびＳｋｅｒｒａら、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４０：１０３８（１９８８）に記載のように産生することができる。他の抗体切断方法（１価の軽鎖−重鎖フラグメントを形成するための重鎖の分離、フラグメントのさらなる切断、または他の酵素的もしくは化学的切断など）も使用することができる。
【００８７】
特徴が変化した（結合親和性の増加など）修飾された抗体および機能的フラグメントを、当業者に公知の方法を使用して産生することができる。例えば、親和性成熟技術を使用して、抗体結合親和性を改良することができる（米国特許出願公開第２００４／０１６２４１３  Ａ１号；米国特許第６，６５６，４６７号，同第６，５３１，５８０号，同第６，５９０，０７９号，および同第５，９５５，３５８号；Ｆｉｅｄｌｅｒら、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．１５：９３１（２００２）；Ｐａｎｃｏｏｋら、Ｈｙｂｒｉｄ．Ｈｙｂｒｉｄｏｍｉｃｓ  ２０：３８３（２００１）；Ｄａｕｇｈｅｒｔｙら、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．１１：８２５（１９９８）；Ｗｕら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９５：６０３７（１９９８）；およびＯｓｂｏｕｒｎら、Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２：１８１（１９９６））。
【００８８】
抗体を、当該分野で公知の種々の技術（例えば、ＣＤＲグラフティング（欧州特許第２３９，４００号；Ｗ０９１／０９９６７号；米国特許第５，２２５，５３９号；同第５，５３０，１０１号；および同第５，５８５，０８９号）、ベニアリングおよびリサーフェシング（欧州特許第５９２，１０６号；欧州特許第５１９，５９６号；Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２８：４８９（１９９１）；Ｓｔｕｄｎｉｃｋａら、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ７：８０５（１９９４）；Ｒｏｇｕｓｋａ．ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９１：９６９（１９９４））、および鎖シャフリング（米国特許第５，５６５，３３２）が含まれる）を使用してヒト化することができる。以前にヒトコンセンサス配列（Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３１：１６９（１９９４）；およびＰａｄｌａｎ，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２８：４８９（１９９１））を使用して、ヒト化抗体が産生されていた（Ｃａｒｔｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８９：４２８５（１９９２）；およびＰｒｅｓｔａら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２６２３（１９９３））。
【００８９】
キメラ抗体の産生方法は、当該分野で公知である（例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２９：１２０２（１９８５）；Ｏｉら、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ４：２１４（１９８６）；Ｇｉｌｌｉｅｓら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  １２５：１９１（１９８９）；ならびに米国特許第５，８０７，７１５号；同第４，８１６，５６７号；および同第４，８１６，３９７号）。ある種の抗体由来の可変ドメインが別の種の可変ドメインに置換されたキメラ抗体は、例えば、Ｍｕｎｒｏ，Ｎａｔｕｒｅ  ３１２：５９７（１９８４）；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ  ３１２：６０４（１９８４）；Ｓｈａｒｏｎら、Ｎａｔｕｒｅ  ３０９：３６４（１９８４）；Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８１：６８５１（１９８４）；Ｂｏｕｌｉａｎｎｅら、Ｎａｔｕｒｅ  ３１２：６４３（１９８４）；Ｃａｐｏｎら、Ｎａｔｕｒｅ  ３３７：５２５（１９８９）；およびＴｒａｕｎｅｃｋｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ  ３３９：６８（１９８９）に記載されている。
【００９０】
抗体産生方法でさらに使用することができる適切な技術には、親和性精製、未変性ゲル精製、ＨＰＬＣまたはＲＰ−ＨＰＬＣ、サイズ排除、プロテインＡカラムでの精製、またはこれらの技術の任意の組み合わせが含まれる。抗体アイソタイプを、ＥＬＩＳＡアッセイを使用して決定することができる。例えば、ヒトＩｇを、マウスＩｇ吸収抗ヒトＩｇを使用して同定することができる。
【００９１】
本発明によれば、抗体および機能的フラグメントの産生方法をさらに提供する。１つの実施形態では、方法は、ＰＭ−２抗原またはＰＭ−２抗原を発現する細胞を動物に投与する工程、ＰＭ−２抗原またはＰＭ−２抗原を発現する細胞に結合する抗体の発現について動物をスクリーニングする工程、ＰＭ−２抗原またはＰＭ−２抗原を発現する細胞に結合する抗体を産生する動物を選択する工程、選択した動物から抗体を単離する工程を含む。別の実施形態では、方法は、ＰＭ−２抗原またはＰＭ−２抗原を発現する細胞をヒト免疫グロブリンを発現することができる動物に投与する工程、ＰＭ−２抗原またはＰＭ−２抗原を発現する細胞に結合する抗体を産生する動物から脾臓細胞を単離する工程、脾臓細胞を骨髄腫細胞と融合してハイブリドーマを産生する工程、およびＰＭ−２抗原またはＰＭ−２抗原を発現する細胞に結合する抗体の発現についてハイブリドーマをスクリーニングする工程を含む。
【００９２】
本発明によれば、本明細書中に記載の抗体および抗体の機能的フラグメントを発現する宿主細胞を提供する。特定の実施形態では、宿主細胞を、精製または単離し、任意選択的に、発現した抗体または機能的フラグメントをコードする核酸で形質転換しなかった。さらなる実施形態では、宿主細胞は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、またはそれを超えた配列同一性を有する重鎖配列または軽鎖配列を含む抗体または機能的フラグメントを発現する。さらなる実施形態では、宿主細胞は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の重鎖可変領域配列または軽鎖可変領域配列中の１つまたは複数のＣＤＲ（例えば、配列番号１のアミノ酸１１〜１８、３６〜４３、または８２〜１００、および配列番号２のアミノ酸２６〜３４、５２〜５８、または９７〜１０３）と少なくとも８０〜８５％、８５〜９０％、９０〜９５％、９５〜１００％同一の重鎖配列または軽鎖配列を発現する。
【００９３】
本発明によれば、単離および精製された核酸を提供する。本発明の核酸には、特に、１）細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と構造的または機能的に関連する抗体および機能的フラグメントをコードする核酸配列；２）細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体、または配列番号１または２の配列の全部または一部（例えば、１つまたは複数のＣＤＲ、配列番号１のアミノ酸１１〜１８、３６〜４３、または８２〜１００、または配列番号２のアミノ酸２６〜３４、５２〜５８、または９７〜１０３（配列番号３のヌクレオチド３１〜５４、１０６〜１２９、および２４４〜３００ならびに配列番号４のヌクレオチド７６〜１０２、１５４〜１７４、または２８９〜３０９など））を含む抗体および機能的フラグメントをコードする核酸配列；３）細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体との配列同一性を有する抗体および機能的フラグメントをコードする核酸配列と相補性または同一性を示す核酸配列、および４）細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と配列同一性を有する抗体および機能的フラグメントをコードする配列（配列番号３のヌクレオチド３１〜５４、１０６〜１２９、および２４４〜３００ならびに配列番号４のヌクレオチド７６〜１０２、１５４〜１７４、または２８９〜３０９など）とハイブリッド形成する核酸配列が含まれる。
【００９４】
特定の実施形態では、核酸配列は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体またはその機能的フラグメントの重鎖配列または軽鎖配列をコードする。別の実施形態では、核酸配列は、配列番号１をコードする核酸配列と７５〜１００％相補的であるか同一である。さらなる実施形態では、核酸配列は、配列番号２をコードする核酸配列と７５〜１００％相補的であるか同一である。
【００９５】
タンパク質（アミノ酸の置換、付加、または欠失を含む抗体など）を、核酸によってコードすることができる。したがって、アミノ酸の置換、付加、または欠失を含むタンパク質をコードする核酸配列も提供する。
【００９６】
用語「核酸」および「ポリヌクレオチド」などは、ホスホエステル結合またはその等価物によって連結される少なくとも２個以上のリボ核酸塩基対またはデオキシリボ核酸塩基対（ヌクレオチド）をいう。核酸には、ポリヌクレオチドおよびポリヌクレオシドが含まれる。核酸には、一本鎖、二重鎖、または三重鎖の環状または線状の分子が含まれる。例示的な核酸には、ＲＮＡ、ＤＮＡ、ｃＤＮＡ，ゲノム核酸、天然に存在する核酸、および天然に存在しない核酸（例えば、合成核酸）が含まれるが、これらに限定されない。
【００９７】
核酸は、種々の長さであり得る。核酸の長さは、典型的には、約２０ヌクレオチド〜２０Ｋｂの範囲またはかかる長さの範囲内またはこれを含む任意の数値または範囲（１０ヌクレオチド〜１０Ｋｂ、１〜５Ｋｂ以下、１０００〜約５００ヌクレオチド以下の長さ）である。核酸はまた、より短くてよい（例えば、１００〜約５００ヌクレオチド、約１２〜２５、２５〜５０、５０〜１００、１００〜２５０、または約２５０〜５００ヌクレオチド長、またはかかる長さの範囲内またはこれを含む任意の数値または範囲）。特定の実施形態では、核酸配列は、約１０〜２０、２０〜３０、３０〜５０、５０〜１００、１００〜１５０、１５０〜２００、２００〜２５０、２５０〜３００、３００〜４００、４００〜５００、５００〜１０００、１０００〜２０００ヌクレオチド長、またはかかる長さの範囲内またはこれを含む任意の数値または範囲の長さを有する。さらなる実施形態では、核酸配列は、配列番号１または２、またはその部分配列（配列番号３のヌクレオチド３１〜５４、１０６〜１２９、および２４４〜３００ならびに配列番号４のヌクレオチド７６〜１０２、１５４〜１７４、または２８９〜３０９など）コードするための長さの範囲である。より短いポリヌクレオチドは、一般に、一本鎖ＤＮＡまたは二本鎖ＤＮＡの「オリゴヌクレオチド」または「プローブ」という。しかし、かかるオリゴヌクレオチドの長さに上限は存在しない。
【００９８】
ポリヌクレオチドには、Ｌ型またはＤ型およびその混合物が含まれ、さらに、被験体への投与時の変性に耐性を示すように修飾することができる。特定の例には、被験体の種々の組織または流動物中に存在するエンドヌクレアーゼおよびエキソヌクレアーゼに耐性を示す５’および３’結合が含まれる。
【００９９】
本発明によれば、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の全てまたはフラグメントをコードする核酸とハイブリッド形成する核酸配列を提供する。１つの実施形態では、核酸配列は、配列番号１またはその一部（例えば、配列番号３のヌクレオチド３１〜５４、１０６〜１２９、および２４４〜３００）をコードする核酸と特異的にハイブリッド形成する。別の実施形態では、核酸配列は、配列番号２またはその一部（例えば、配列番号４のヌクレオチド７６〜１０２、１５４〜１７４、または２８９〜３０９）をコードする核酸と特異的にハイブリッド形成する。さらなる実施形態では、核酸配列は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の全部、部分配列、またはフラグメントをコードする核酸配列と少なくとも７５〜１００％相補的または相同である。
【０１００】
用語「ハイブリッド形成する」およびその文法上のバリエーションは、核酸配列間の結合をいう。ハイブリッド形成する配列は、一般に、基準核酸または基準配列と相補的な配列と約５０％を超えた相同性（例えば、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、またはそれを超える同一性）を有するであろう。基準配列（例えば、基準配列のアミノ酸配列をコードする核酸）と１００％（すなわち、完全に）相補的なハイブリッド形成する配列は、１００％塩基対合を示し、ミスマッチが存在しない。ハイブリッド形成する配列の間のハイブリッド形成領域は、典型的には、少なくとも約１２〜１５ヌクレオチド、１５〜２０ヌクレオチド、２０〜３０ヌクレオチド、３０〜５０ヌクレオチド、５０〜１００ヌクレオチド、１００〜２００ヌクレオチド、またはそれを超えるか、かかる長さの範囲内またはこれを含む任意の数値または範囲である。
【０１０１】
本発明によれば、アンチセンスポリヌクレオチド、低分子干渉ＲＮＡ、およびリボザイム核酸をさらに提供する。１つの実施形態では、アンチセンスポリヌクレオチド、低分子干渉ＲＮＡ、またはリボザイム核酸は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体、または配列番号１または２またはその一部をコードする核酸と特異的にハイブリッド形成し、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体、または配列番号１または２の発現を任意選択的に軽減する。別の実施形態では、アンチセンスポリヌクレオチド、低分子干渉ＲＮＡ、またはリボザイム核酸は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体、または配列番号１または２、または配列番号１または２の部分配列をコードする核酸配列（例えば、配列番号３のヌクレオチド３１〜５４、１０６〜１２９、および２４４〜３００または配列番号４のヌクレオチド７６〜１０２、１５４〜１７４、または２８９〜３０９）と少なくとも６０％以上（例えば、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％など）相補的または相同である。アンチセンスポリヌクレオチドは、約１０〜２０、２０〜３０、３０〜５０、５０〜１００、１００〜１５０、１５０〜２００、２００〜２５０、２５０〜３００、３００〜４００、４００〜５００、５００〜１０００、１０００〜２０００ヌクレオチド長またはかかる長さの範囲内またはこれを含む任意の数値または範囲を有し得る。
【０１０２】
本明細書中で使用する場合、用語「アンチセンス」は、特異的ＤＮＡまたはＲＮＡ配列に結合することができるポリヌクレオチドまたはペプチド核酸をいう。アンチセンスには、ＲＮＡ転写物またはＤＮＡに結合する一本鎖、二本鎖、三本鎖、またはそれを超える鎖のＲＮＡおよびＤＮＡポリヌクレオチドおよびペプチド核酸（ＰＮＡ）が含まれる。特定の例には、センスＲＮＡに結合するＲＮＡおよびＤＮＡアンチセンスが含まれる。例えば、一本鎖核酸は、代謝、異化、細胞からのグリコーゲンの除去または分解に関与するタンパク質転写物をターゲティングすることができる（例えば、ｍＲＮＡ）。アンチセンス分子は、典型的には、センス鎖に対して９５〜１００％相補的であるが、「部分的に」相補的であり得る（いくつかのヌクレオチドのみがセンス分子に結合する（１００％未満の相補性（例えば、９５％、９０％、８０％、７０％、および時折それ未満）、またはかかる比率の範囲内またはこれを含む任意の数値または範囲）。
【０１０３】
三重鎖形成アンチセンスは、二本鎖ＤＮＡに結合し、それにより、遺伝子の転写を阻害することができる。遺伝子の転写開始部位（例えば、開始部位から−１０と＋１０との間の位置）由来のオリゴヌクレオチドは、１つの特定の例である。
【０１０４】
遺伝子発現阻害のための低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡまたはＲＮＡｉという）は、当該分野で公知である（例えば、Ｋｅｎｎｅｒｄｅｌｌら、Ｃｅｌｌ  ９５：１０１７（１９９８）；Ｆｉｒｅら、Ｎａｔｕｒｅ，３９１：８０６（１９９８）；ＷＯ０２／４４３２１号；ＷＯ０１／６８８３６号；ＷＯ００／４４８９５号、ＷＯ  ９９／３２６１９号、ＷＯ０１／７５１６４号、ＷＯ０１／９２５１３号、ＷＯ０１／２９０５８号、ＷＯ０１／８９３０４号、ＷＯ０２／１６６２０号；およびＷＯ０２／２９８５８号を参照のこと）。ＲＮＡｉサイレンシングを、「ヘアピン」構造を形成するＲＮＡをコードする核酸またはコード核酸の各末端由来のＲＮＡの発現、それによるハイブリッド形成する２つのＲＮＡ分子の作製によって誘導することができる。
【０１０５】
ＲＮＡの特異的切断を触媒する酵素的ＲＮＡ分子であるリボザイムを使用して、コードされるタンパク質の発現を阻害することができる。リボザイムは、相補的な標的ＲＮＡと配列特異的ハイブリッドを形成し、次いで、切断される。特定の例には、例えば、代謝、異化、グリコーゲンの除去または分解に関与するタンパク質をコードする配列の内ヌクレオチド結合分解を特異的且つ有効に触媒することができる操作されたハンマーヘッドモチーフリボザイム分子が含まれる。
【０１０６】
アンチセンス、リボザイム、ＲＮＡｉ、および三重鎖形成核酸を、本明細書中で集合的に「阻害性核酸」または「阻害性ポリヌクレオチド」という。かかる阻害性核酸または阻害性ポリヌクレオチドは、結合する配列または標的、結果的に、必要に応じてコードされるタンパク質の発現を阻害または軽減することができる。
【０１０７】
阻害性ポリヌクレオチドは、ｉｎ  ｖｉｖｏで機能するための発現調節エレメントを必要としない。阻害性ポリヌクレオチドは、細胞によって吸収すされるか、受動核酸によって細胞に侵入することができる。阻害性ポリヌクレオチドを、ベクターを使用して任意選択的に細胞に導入することができる。阻害性ポリヌクレオチドは、転写されるように核酸によってコードされ得る。さらに、阻害性ポリヌクレオチドをコードする核酸を、細胞内またはｉｎ  ｖｉｖｏにおけるコードされたアンチセンスの発現の維持または増加のための発現調節エレメントに作動可能に連結させることができる。阻害性核酸を、本明細書中に開示されているか、データベース中で利用可能なタンパク質および核酸配列に基づいてデザインすることができる。
【０１０８】
核酸配列には、ヌクレオチドおよびヌクレオシドの置換、付加、および欠失、ならびに誘導体化形態および融合／キメラ配列（例えば、組換えポリペプチドをコードする）がさらに含まれる。例えば、遺伝暗号の縮重のために、核酸には、コードする核酸、その修飾形態、およびバリアントに関して縮重する配列および部分配列が含まれる。他の例は、コードする配列に相補的な核酸である。
【０１０９】
核酸の欠失物（部分配列およびフラグメント）は、約１０〜２５、２５〜５０、または５０〜１００ヌクレオチドを有し得る。かかる核酸は、遺伝子操作のためのポリペプチド部分配列の発現のため（ＰＣＲ増幅のプライマーおよびテンプレートとして）および細胞、培養培地、生物サンプル（例えば、組織、器官、血液、または血清）、または被験体中のタンパク質をコードする配列の存在または量の検出（例えば、ハイブリッド形成による）のためのプローブとして有用である。
【０１１０】
種々の標準的なクローニング技術および化学合成技術を使用して、核酸を産生することができる。技術には、核酸増幅（例えば、抗体コード配列にアニーリングすることができるプライマー（例えば、縮重プライマー混合物）を使用したゲノムＤＮＡまたはｃＤＮＡ標的を用いるポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ））が含まれるが、これらに限定されない。核酸を、化学合成（例えば、固相ホスホルアミダイト合成）または遺伝子からの転写によって産生することもできる。次いで、産生された配列を、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで翻訳するか、プラスミド中でクローン化するか、増殖させ、次いで、細胞（例えば、酵母または細菌などの宿主細胞、動物細胞または哺乳動物細胞などの真核生物、または植物）中で発現することができる。
【０１１１】
本発明によれば、本発明の核酸配列を含むベクターをさらに提供する。１つの実施形態では、ベクターは、本明細書中に記載の抗体または機能的フラグメントをコードする核酸配列を含む。別の実施形態では、ベクターは、コードする核酸配列を含む。
【０１１２】
ベクターには、ウイルス、原核生物（細菌）、および真核生物（植物、真菌、哺乳動物）のベクターが含まれる。ベクターを、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏでの核酸発現のために使用することができる。「発現ベクター」といわれるかかるベクターは、核酸（細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体、その部分配列およびフラグメントをコードする核酸、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の修飾形態またはバリアントをコードする核酸、阻害性核酸をコードする核酸が含まれる）の導入およびコードされたタンパク質または阻害性核酸（例えば、溶液中または固相中）の細胞中または被験体中におけるｉｎ  ｖｉｖｏでの発現に有用である。
【０１１３】
ベクターを、核酸の操作のために使用することもできる。遺伝子操作のために、「クローニングベクター」を使用し、挿入された核酸を転写または翻訳することができる。
【０１１４】
ベクターは、一般に、細胞におけるｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏでの増殖のための複製起点を含む。ベクター内に存在する調節エレメント（発現調節エレメントが含まれる）を、必要に応じて転写および翻訳を容易にするために含めることができる。
【０１１５】
ベクターは、選択マーカーを含むことができる。「選択マーカー」は、遺伝子を含む細胞を選択可能な遺伝子である。「正の選択」は、選択マーカーを含む細胞が正の選択への曝露の際に生存する過程をいう。薬物耐性は正の選択マーカーの一例である−マーカーを含む細胞は選択薬を含む培養培地中で生存し、マーカーを欠く細胞は死滅するであろう。選択マーカーには、薬物耐性遺伝子（Ｇ４１８耐性を付与するｎｅｏ；ハイグロマイシン耐性を付与するｈｙｇｒ；およびピューロマイシン耐性を付与するｐｕｒｏなど）が含まれる。他の正の選択マーカー遺伝子には、マーカーを含む細胞を同定またはスクリーニング可能な遺伝子が含まれる。これらの遺伝子には、特に、蛍光タンパク質（ＧＦＰおよびＧＦＰ様発色団、ルシフェラーゼ）の遺伝子、ｌａｃＺ遺伝子、アルカリホスファターゼ遺伝子、および表面マーカー（ＣＤ８など）が含まれる。「負の選択」は、負の選択マーカーを含む細胞が適切な負の選択薬への曝露の際に死滅する過程をいう。例えば、単純ヘルペスウイルス−チミジンキナーゼ（ＨＳＶ−ｔｋ）遺伝子（Ｗｉｇｌｅｒら、Ｃｅｌｌ  １１：２２３（１９７７））を含む細胞は、薬物ガンシクロビル（ＧＡＮＣ）に感受性を示す。同様に、ｇｐｔ遺伝子は、細胞に６−チオキサンチンへの感受性を付与する。
【０１１６】
ウイルスベクターには、レトロウイルス（分裂細胞および非分裂細胞の感染のためのレンチウイルス）、フォーミーウイルス（米国特許第５，６２４，８２０号、同第５，６９３，５０８号、同第５，６６５，５７７号、同第６，０１３，５１６号、および同第５，６７４，７０３号；ＷＯ９２／０５２６６号およびＷＯ９２／１４８２９号）、アデノウイルス（米国特許第５，７００，４７０号、同第５，７３１，１７２号、および同第５，９２８，９４４号）、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）（米国特許第５，６０４，０９０号）、単純ヘルペスウイルスベクター（米国特許第５，５０１，９７９号）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）ベースのベクター（米国特許第５，５６１，０６３号）、レオウイルス、ロタウイルスゲノム、サルウイルス４０（ＳＶ４０）、またはパピローマウイルス（Ｃｏｎｅら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８１：６３４９（１９８４）；Ｅｕｋａｒｙｏｔｉｃ  Ｖｉｒａｌ  Ｖｅｃｔｏｒｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｇｌｕｚｍａｎ  ｅｄ．，１９８２；Ｓａｒｖｅｒら、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１：４８６（１９８１）；米国特許第５，７１９，０５４号）に基づいたウイルスベクターが含まれる。アデノウイルスは、ゆっくり複製し、そして／または最終的に分化した細胞に効率的に感染し、これを使用して、ゆっくり複製し、そして／または最終的に分化した細胞をターゲティングすることができる。発現に有用なさらなるウイルスベクターには、パルボウイルス、ノーウォークウイルス、コロナウイルス、パラミクソウイルスおよびラブドウイルス、トガウイルス（例えば、シンドビス・ウイルスおよびセムリキ森林ウイルス）、および水疱性口内炎ウイルス（ＶＳＶ）が含まれる。
【０１１７】
核酸が発現調節エレメントに作動可能に連結された場合に核酸を発現することができる。本明細書中で使用する場合、用語「作動可能に連結された」は、その意図する様式で操作することが可能な参照したエレメント間の物理的または機能的関係をいう。したがって、核酸に「作動可能に連結された」発現調節エレメントは、調節エレメントが核酸転写を調整し、必要に応じて、転写物の翻訳を調整することを意味する。
【０１１８】
用語「発現調節エレメント」は、作動可能に連結された核酸の発現に影響を及ぼす核酸をいう。プロモーターおよびエンハンサーは、発現調節エレメントの特定の非限定的な例である。「プロモーター配列」は、下流（３’方向）配列の転写を開始することができるＤＮＡ調節領域である。プロモーター配列は、転写開始を容易にするヌクレオチドを含む。エンハンサーはまた、遺伝子発現を調節するが、作動可能に連結された遺伝子の転写開始部位から少し離れて機能することができる。エンハンサーは、遺伝子の５’末端または３’末端のいずれか、および遺伝子内（例えば、イントロンまたはコード配列中）で機能する。さらなる発現調節エレメントには、リーダー配列および融合パートナー配列、多重遺伝子（すなわち、多シストロン性メッセージ）作製のための配列内リボゾーム結合部位（ＩＲＥＳ）エレメント、イントロン（ｍＲＮＡをインフレーム翻訳させるための遺伝子の正確な読み取り枠の維持）のためのスプライシングシグナル、目的の転写物を適切にポリアデニル化するためのポリアデニル化シグナル、および終止コドンが含まれる。
【０１１９】
発現調節エレメントには、シグナルまたは刺激の非存在下で作動可能に連結された核酸の転写が起こる「構成性」エレメントが含まれる。作動可能に連結された核酸の発現を増加または減少させるシグナルまたは刺激に応答して発現を付与する発現調節エレメントは、「調節性」である。シグナルまたは刺激に応答して作動可能に連結された核酸の発現を増加させる調節性エレメントを、「誘導性エレメント」という。シグナルまたは刺激に応答して作動可能に連結された核酸の発現を減少させる調節性エレメントを、「抑制性エレメント」という（すなわち、シグナルは発現を減少させ、シグナルが除去されるか存在しない場合、発現が増加する）。
【０１２０】
発現調節エレメントには、「組織特異的発現調節エレメント」といわれる特定の組織または細胞型で活性なエレメントが含まれる。組織特異的発現調節エレメントは、典型的には、特定の細胞型または組織型でより活性である。これは、組織特異的発現調節エレメントが、他の細胞型または組織型と比較した場合に転写活性化タンパク質または特定の細胞型または組織型で活性な他の転写調節因子によって認識されるからである。
【０１２１】
組織特異的発現調節エレメントには、過剰増殖性細胞（細胞増殖障害（新形成、腫瘍、癌、および転移が含まれる）など）で活性なプロモーターおよびエンハンサーが含まれる。かかるプロモーターの特定の非限定的な例は、ヘキソキナーゼＩＩ、ＣＯＸ−２、α−フェトプロテイン、癌胎児性抗原、ＤＥ３／ＭＵＣ１、前立腺特異的抗原、Ｃ−ｅｒＢ２／ｎｅｕ、テロメラーゼ逆転写酵素、および低酸素症応答性プロモーターである。
【０１２２】
細菌発現のために、構成性プロモーターにはＴ７が含まれ、誘導性プロモーターにはバクテリオファージλのｐＬ、ｐｌａｃ、ｐｔｒｐ、ｐｔａｃ（ｐｔｒｐ  ｌａｃハイブリッドプロモーター）などが含まれる。昆虫細胞系では、構成性または誘導性プロモーター（例えば、エクジソン）を使用することができる。酵母では、構成性プロモーターには、例えば、ＡＤＨまたはＬＥＵ２が含まれ、誘導性プロモーターにはＧＡＬなどが含まれる（例えば、Ａｕｓｕｂｅｌら、Ｉｎ：Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２，Ｃｈ．１３，ｅｄ．，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈ．Ａｓｓｏｃ．＆  Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，１９８８；Ｇｒａｎｔら、Ｉｎ：Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，１５３：５１６−５４４（１９８７），ｅｄｓ．Ｗｕ  ＆  Ｇｒｏｓｓｍａｎ，１９８７，Ａｃａｄ．Ｐｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙ．；Ｇｌｏｖｅｒ，ＤＮＡ  Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ｖｏｌ．ＩＩ，Ｃｈ．３，ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ，Ｗａｓｈ．，Ｄ．Ｃ．，１９８６；Ｂｉｔｔｅｒ，Ｉｎ：Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，１５２：６７３−６８４（１９８７），ｅｄｓ．Ｂｅｒｇｅｒ  ＆  Ｋｉｍｍｅｌ，Ａｃａｄ．Ｐｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙ．；およびＳｔｒａｔｈｅｒｎら、Ｔｈｅ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｙｅａｓｔ  Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｅｄｓ．Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｒｅｓｓ，Ｖｏｌｓ．Ｉ  ａｎｄ  ＩＩ（１９８２）を参照のこと）。
【０１２３】
哺乳動物発現のために、ウイルスまたは他の生物起源の構成性プロモーターを使用することができる。例えば、ＳＶ４０（すなわち、ウイルス長末端反復（ＬＴＲ））などまたは哺乳動物細胞のゲノム由来の誘導性プロモーター（例えば、メタロチオネインＩＩＡプロモーター；熱ショックプロモーター、ステロイド／甲状腺ホルモン／レチノイン酸受容体エレメント）または哺乳動物ウイルス由来の誘導性プロモーター（例えば、アデノウイルス後期プロモーター；マウス乳癌ウイルスＬＴＲ）を使用する。
【０１２４】
本発明によれば、本発明の核酸およびベクターで形質転換またはトランスフェクションした宿主細胞を提供する。１つの実施形態では、細胞を、抗体、機能的フラグメント、重鎖配列または軽鎖配列、または重鎖配列または軽鎖配列の一部（例えば、可変領域、または１つまたは複数のＣＤＲ（配列番号１のアミノ酸１１〜１８、３６〜４３、または８２〜１００、または配列番号２のアミノ酸２６〜３４、５２〜５８、または９７〜１０３（配列番号３のヌクレオチド３１〜５４、１０６〜１２９、および２４４〜３００または配列番号４のヌクレオチド７６〜１０２、１５４〜１７４、または２８９〜３０９など）））をコードする核酸で安定にまたは一過性に形質転換する。別の実施形態では、宿主細胞を、アンチセンスまたは阻害性核酸で安定にまたは一過性に形質転換する。
【０１２５】
宿主細胞には、原核細胞および真核細胞（細菌、真菌（酵母）、植物、昆虫、および動物（例えば、哺乳動物（霊長類およびヒトが含まれる））細胞など）が含まれるが、これらに限定されない。細胞は、初代細胞分離株、細胞培養物（例えば、継代、樹立、または不死化された細胞株）、またはｅｘ  ｖｉｖｏまたは被験体内（ｉｎ  ｖｉｖｏ）での複数の細胞、組織、器官の一部であり得る。例えば、組換えバクテリオファージ核酸、プラスミド核酸、またはコスミド核酸の発現ベクターで形質転換された細菌；組換え酵母発現ベクターで形質転換された酵母；組換えウイルス発現ベクター（例えば、カリフラワーモザイクウイルス、ＣａＭＶ；タバコモザイクウイルス、ＴＭＶ）を感染させたか、組換えプラスミド発現ベクター（例えば、Ｔｉプラスミド）で形質転換された植物細胞系；組換えウイルス発現ベクター（例えば、バキュロウイルス）を感染させた昆虫細胞系；および組換えウイルス発現ベクター（例えば、レトロウイルス、アデノウイルス、ワクシニアウイルス）を感染させた動物細胞系、または安定に発現するように操作された形質転換動物細胞系。
【０１２６】
用語「形質転換した」または「トランスフェクションした」は、細胞（例えば、宿主細胞）または生物に関して使用する場合、細胞への外因性分子（例えば、タンパク質または核酸（例えば、導入遺伝子））の組み込み後の細胞中の遺伝子の変化を意味する。したがって、「トランスフェクションした」または「形質転換した」細胞は、ヒトの手（例えば、組換えＤＮＡ技術）によって外因性分子が導入された細胞またはその子孫である。  
【０１２７】
核酸を、細胞およびその子孫中で安定にまたは一過性にトランスフェクションまたは形質転換（発現）することができる。したがって、宿主細胞には、抗体、機能的フラグメント、または核酸を安定にまたは一過性に発現する宿主細胞が含まれる。細胞を、増殖させ、導入した抗体を発現させるか、核酸を転写することができる。複製中に変異が起こり得るので、トランスフェクションまたは形質転換された細胞の子孫は親細胞と同一でなくて良い。
【０１２８】
典型的には、細胞のトランスフェクションまたは形質転換には、プラスミド、ウイルス（ウイルスベクターなど）と呼ばれる「ベクター」または核酸の挿入または組み込みによって操作することができる当該分野で公知の他のビヒクルが使用される。
【０１２９】
ウイルス粒子または小胞を、標的細胞リガンドまたは受容体に結合する表面上のタンパク質の封入によって特定の細胞型（例えば、過剰増殖性細胞）にターゲティングされるようにデザインすることができる。あるいは、細胞型特異的プロモーターおよび／またはエンハンサーを、標的細胞中で核酸が発現するようにベクター中に含めることができる。したがって、ウイルス粒子または小胞自体、ウイルスベクター、またはウイルス表面上のタンパク質を、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ、ｅｘ  ｖｉｖｏ、またはｉｎ  ｖｉｖｏでのトランスフェクションまたは形質転換のために標的細胞に合わせて作製することができる。
【０１３０】
標的細胞（例えば、宿主細胞）への組成物（例えば、タンパク質および核酸）の導入を、当該分野で公知の方法（浸透圧ショック（例えば、リン酸カルシウム）、エレクトロポレーション、微量注入、細胞融合など）によって行うこともできる。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ、ｅｘ  ｖｉｖｏ、およびｉｎ  ｖｉｖｏでの核酸およびポリペプチドの導入を、他の技術を使用して行うこともできる。例えば、重合物質（ポリエステル、ポリアミン酸、ヒドロゲル、ポリビニルピロリドン、エチレン−ビニルアセタート、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、硫酸プロタミン、またはラクチド／グリコリドコポリマー、ポリラクチド／グリコリドコポリマー、またはエチレンビニルアセタートコポリマーなど）。核酸を、コアセルベーション技術または界面重合（例えば、それぞれ、ヒドロキシメチルセルロースまたはゼラチン−マイクロカプセル、またはポリ（メチルメタクロラート）マイクロカプセルの使用による）によって調製したマイクロカプセル中またはコロイド系中に捕捉することができる。コロイド分散系には、巨大分子複合体、ナノカプセル、ミクロスフィア、ビーズ、および脂質ベースの系（水中油型乳濁液、ミセル、混合ミセル、およびリポソームが含まれる）が含まれる。
【０１３１】
細胞への種々の組成物の導入のためのリポソームは当該分野で公知であり、例えば、ホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、リポフェクチン、およびＤＯＴＡＰが含まれる（例えば、米国特許第４，８４４，９０４号、同第５，０００，９５９号、同第４，８６３，７４０号、および同第４，９７５，２８２号；およびＧＩＢＣＯ−ＢＲＬ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，Ｍｄ）。遺伝子療法に有用なピペラジンベースの両親媒性カチオン性脂質も公知である（例えば、米国特許第５，８６１，３９７号を参照のこと）。カチオン性脂質系も公知である（例えば、米国特許第５，４５９，１２７号を参照のこと）。重合物質、マイクロカプセル、およびコロイド分散系（リポソームなど）を、本明細書中で集合的に「小胞」という。したがって、細胞、組織、または器官への、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ、ｉｎ  ｖｉｖｏ、およびｅｘ  ｖｉｖｏでのウイルスおよび非ウイルスベクターの送達手段が含まれる。
【０１３２】
本発明はｉｎ  ｖｉｖｏ法を含む。例えば、ＰＭ−２抗体または機能的フラグメントが結合する望ましくない増殖細胞などの細胞または細胞増殖障害は、被験体（哺乳動物（例えば、ヒト被験体）など）中に存在し得る。したがって、かかる細胞を有する被験体を、例えば、かかる細胞に結合する抗体またはその部分配列もしくはフラグメントの投与によって処置することができる。
【０１３３】
本発明によれば、被験体における望ましくない細胞増殖または細胞増殖性障害または細胞過剰増殖性障害の処置方法を提供する。かかる方法を、本明細書中に記載の任意の抗体、機能的フラグメント、修飾形態、および異型を使用し実施することができる。１つの実施形態では、方法は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体を、被験体における望ましくない細胞増殖または細胞増殖性障害もしくは細胞過剰増殖性傷害を処置するのに有効な量で被験体に投与する工程を含む。
【０１３４】
本明細書中で使用する場合、用語「細胞増殖障害」および「細胞過剰増殖性障害」ならびにその文法上のバリエーションは、細胞、組織、または器官に関して使用する場合、任意の望ましくない、過剰な、または異常な細胞、組織、または器官の成長、増殖、分化、または生存をいう。過剰増殖性細胞は、成長、増殖、または生存が望ましい細胞（基準の正常細胞（例えば、同一の組織または器官に由来するが、過剰増殖性細胞ではない細胞）または正常に分化できない細胞など）よりも高い細胞を示す。望ましくない細胞増殖および過剰増殖性障害には、被験体における望ましくないか、過剰であるか、異常な細胞数、細胞成長、細胞増殖、細胞生存、または分化によって特徴づけられる疾患および生理学的容態（共に過形成容態）が含まれる。かかる障害の特定の例には、転移性および非転移性の新形成、腫瘍、および癌（悪性疾患）が含まれる。
【０１３５】
種々の実施形態では、方法は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体を、被験体における細胞増殖性障害または細胞過剰増殖性障害の処置に有効な量で被験体に投与する工程を含む。特定の態様では、障害は、新形成、腫瘍、または転移性または非転移性の癌（悪性疾患）である。さらなる態様では、障害は、乳房、肺、甲状腺、頭頸部、鼻咽頭、鼻腔または副鼻腔、脳、脊椎、副腎、甲状腺、リンパ、胃腸（口腔、食道、胃、十二指腸、回腸、空腸（小腸）、結腸、直腸）、尿生殖器（子宮、卵巣、子宮内膜、子宮頸部、膀胱、精巣、陰茎、前立腺）、腎臓、膵臓、副腎、肝臓、骨、骨髄、リンパ、血液、筋肉、皮膚、または造血系の少なくとも一部に影響を及ぼすか、存在する。
【０１３６】
用語「腫瘍」、「癌」、および「新形成」を交換可能に使用し、これらは、その成長、増殖、または生存が正常な対応細胞の成長、増殖、または生存を超える細胞または細胞集団（例えば、細胞増殖性障害または細胞分化障害）をいう。典型的には、成長は制御されない。用語「悪性疾患」は、近隣組織の浸潤をいう。用語「転移」は、部位、位置、または領域が原発性の腫瘍または癌と異なる被験体内の他の部位、位置、または領域への腫瘍、癌、または新形成の拡大または伝搬をいう。
【０１３７】
本発明の方法を使用して、原発性の腫瘍または癌の他の部位への転移、または原発性の腫瘍または癌から離れた部位での転移性の腫瘍または癌の形成または確立を軽減または阻害し、それにより、腫瘍または癌の再発または腫瘍または癌の進行を阻害または軽減することができる。したがって、本発明の方法は、特に、１）転移を潜在的に発症するか発症している腫瘍細胞または癌細胞（例えば、播種性腫瘍細胞、ＤＴＣ）の成長、増殖、移動性、または侵襲性を軽減または阻害する工程；２）原発性の腫瘍または癌から離れた１つまたは複数の他の部位、位置、または領域への原発性の腫瘍または癌の転移の形成または確立を軽減または阻害する工程；３）転移が形成または確立された後に原発性の腫瘍または癌から離れた１つまたは複数の他の部位、位置、または領域への転移の成長または増殖を軽減または阻害する工程；および４）転移が形成または確立された後のさらなる転移の形成または確立を軽減または阻害する工程を含む。
【０１３８】
新形成、腫瘍、および癌には、肉腫、癌腫、腺癌、黒色腫、骨髄腫、芽細胞腫、神経膠腫、リンパ腫、または白血病が含まれる。例示的な癌には、例えば、癌腫、肉腫、腺癌、黒色腫、神経腫瘍（芽腫、神経膠腫）、中皮腫、および網膜内皮性、リンパ性、または造血性の  新生物形成障害（例えば、骨髄腫、リンパ腫、または白血病）が含まれる。特定の態様では、新形成、腫瘍、または癌には、肺腺癌、肺癌、びまん性または間質性胃癌、結腸腺癌、前立腺腺癌、食道癌、乳癌、膵腺癌、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、または子宮腺癌が含まれる。
【０１３９】
新形成、腫瘍、および癌には、良性、悪性、転移性、および非転移性の型が含まれ、任意の病期（Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、またはＶ）または悪性度（Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３など）の新形成、腫瘍、または癌、または進行中、悪化中、安定化、または寛解されている新形成、腫瘍、癌、または転移が含まれる。
【０１４０】
新形成、腫瘍、および癌は、多数の原発性腫瘍型（乳房、肺、甲状腺、頭頸部、鼻咽頭、鼻腔または副鼻腔、脳、脊椎、副腎、甲状腺、リンパ、胃腸（口腔、食道、胃、十二指腸、回腸、空腸（小腸）、結腸、直腸）、尿生殖器（子宮、卵巣、子宮内膜、子宮頸部、膀胱、精巣、陰茎、前立腺）、腎臓、膵臓、副腎、肝臓、骨、骨髄、リンパ、血液、筋肉、皮膚、および造血系が含まれるが、これらに限定されない）から生じ得、二次部位へ転移することができる。
【０１４１】
「固形の新形成、腫瘍、または癌」は、典型的には相互に凝集して塊を形成する新形成、腫瘍、または癌（例えば、転移）をいう。特定の例には、内蔵腫瘍（黒色腫、乳癌、膵癌、子宮癌、および卵巣癌、睾丸癌（セミノーマが含まれる）、胃癌または結腸癌、肝細胞癌、副腎癌、腎癌、および膀胱癌、肺癌、頭頸部癌、および脳腫瘍／癌など）が含まれる。
【０１４２】
癌腫は、上皮組織または内分泌組織の悪性疾患をいい、呼吸器系癌腫（肺癌、小細胞肺癌）、胃腸系癌腫、泌尿生殖器系癌腫、睾丸癌、乳癌、前立腺癌、内分泌系癌腫、および黒色腫が含まれる。この用語には、癌肉腫も含まれ、例えば、癌肉腫には、癌性組織および肉腫性組織から構成される悪性腫瘍が含まれる。腺癌には、腺組織の癌腫または腫瘍が腺様構造を形成する癌腫が含まれる。黒色腫は、メラノサイトおよび皮膚、眼（網膜を含む）、または身体の他の領域で生じ得る色素細胞由来の他の細胞の悪性腫瘍をいう。さらなる癌腫は、子宮／子宮頸部、子宮内膜、肺、頭頸部、結腸、膵臓、精巣、副腎、腎臓、食道、胃、肝臓、および卵巣から形成され得る。
【０１４３】
肉腫は、間葉細胞起源の悪性腫瘍をいう。例示的な肉腫には、例えば、リンパ肉腫、脂肪肉縮、骨肉腫、軟骨肉腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、および線維肉腫が含まれる。
【０１４４】
神経新形成には、神経膠腫、膠芽細胞腫、髄膜腫、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、星状細胞腫、乏突起膠細胞腫が含まれる。
【０１４５】
処置に適している新形成、腫瘍、および癌の特定の非限定的な例には、悪性および非悪性の新形成、腫瘍、癌、および転移が含まれる。特に、任意の病期（例えば、ステージＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、またはＩＶ）または悪性度（例えば、グレードＧ１、Ｇ２、またはＧ３）の新形成、腫瘍、癌、または転移。さらなる非限定的な例には、胃腺癌、結腸直腸腺癌、肺扁平上皮癌腫、肺腺癌、食道扁平上皮癌腫、膵腺癌、膀胱の尿路上皮癌腫、腎臓癌腫、前立腺腺癌、乳管癌腫、乳房小葉癌腫、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、または子宮腺癌が含まれる。
【０１４６】
「液状の新形成、腫瘍、または癌」は、網膜内皮性または造血系の新形成、腫瘍、または癌（リンパ腫、骨髄腫、または白血病など）、または事実上拡散する新形成をいう。白血病の特定の例には、急性および慢性のリンパ芽球性白血病、骨髄芽球性白血病、および多発性骨髄腫が含まれる。典型的には、かかる疾患は、低分化急性白血病（例えば、赤芽急性白血病および急性巨核芽球性白血病）から生じる。特定の骨髄性障害には、急性前骨髄性白血病（ＡＰＭＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、および慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）が含まれるが、これらに限定されない。リンパ性悪性疾患には、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）（Ｂ細胞系ＡＬＬおよびＴ細胞系ＡＬＬが含まれる）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、前リンパ球性白血病（ＰＬＬ）、毛様細胞白血病（ＨＬＬ）、およびワルデンシュトレームマクログロブリン血症（ＷＭ）が含まれるが、これらに限定されない。特定の悪性リンパ腫には、非ホジキンリンパ腫および異型、末梢Ｔ細胞リンパ腫、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫（ＡＴＬ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫（ＣＴＣＬ）、大顆粒リンパ球性白血病（ＬＧＦ）、ホジキン病、およびリード・スターンバーグ病が含まれる。
【０１４７】
本明細書中で使用する場合、用語「処置する」、「処置している」、「処置」、およびその文法上のバリエーションは、患者において生理学的応答または結果が得られることが望まれるプロトコール、レジメン、過程、またはレメディに各患者を供することを意味する。あらゆる被処置患者が特定の処置プロトコール、レジメン、過程、またはレメディに応答できるわけではない場合があるので、処置によってそれぞれおよびあらゆる患者または患者集団で所望の生理学的応答または結果を達成される必要はない。したがって、所与の患者または患者集団は、処置に応答できないか、不適格に応答し得る。
【０１４８】
本発明の方法を、任意の投与様式または任意の経路、全身、領域、および局所投与によって実施することができる。例示的な投与経路には、静脈内、動脈内、皮内、筋肉内、皮下、胸膜内、経皮（局所）、経粘膜、頭蓋内、脊髄内、眼内、直腸、経口（食事性）、および粘膜が含まれる。
【０１４９】
本発明の方法には、特に、所与の被験体の容態における検出可能なまたは測定可能な改善（細胞増殖性障害または細胞過剰増殖性障害、新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移の存在に関連する１つまたは複数の有害な（身体）症状または結果の緩和または改善（すなわち、治療上の利点または有利な結果）など）が得られる方法が含まれる。
【０１５０】
治療上の利点または有利な効果は、細胞増殖または細胞過剰増殖性障害（新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移など）に関連するか、これらに起因する容態または病状の客観的または主観的な一過性、一時的、または長期の改善または有害な症状の発症、重症度、持続時間、または頻度の軽減である。例えば、細胞増殖または細胞過剰増殖性障害（新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移など）の１つまたは複数の関連する病状、有害な症状、または合併症の重症度、持続時間、または頻度の増加または部分的軽減、または１つまたは複数の生理学的、生化学的、または細胞的な発現または特徴の阻害または逆転が認められる場合、本発明の処置方法のクリニカルエンドポイントが達成される。したがって、治療上の利点または改善は、治癒（標的増殖細胞（例えば、新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移）の破壊または細胞増殖または細胞過剰増殖性障害（新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移など）に関連するか、これらに起因する１つまたは複数の、ほとんどまたはすべての病状、有害な症状、または合併症の消失など）である。しかし、治療上の利点または改善は、全ての標的増殖細胞（例えば、新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移）の治癒または完全な破壊、または細胞増殖または細胞過剰増殖性障害（新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移など）に関連するか、これらに起因するすべての病状、有害な症状、または合併症の消失を必要としない。例えば、腫瘍または癌の進行または悪化の阻害による腫瘍細胞または癌細胞の集団の部分的破壊または腫瘍または癌の質量、サイズ、または細胞数の安定化により、腫瘍または癌の質量、サイズ、または細胞の一部または大部分が残存するにもかかわらず、数日、数週間、または数ヵ月だけでも死亡率を減少させ、寿命を延長することができる。
【０１５１】
治療上の利点の特定の非限定的な例には、新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移の体積（サイズまたは細胞質量）または細胞数の軽減、新形成、腫瘍、または癌の体積の増加の阻害または防止（例えば、安定化）、新形成、腫瘍、または癌の進行、悪化、または転移の遅延または阻害、新形成、腫瘍、または癌の細胞溶解またはアポトーシスの刺激、誘導、または増加、または新形成、腫瘍、または癌の増殖、成長、または転移の阻害が含まれる。本発明の方法は、直ちに効果が得られなくて良い。例えば、処置後に新形成、腫瘍、または癌の細胞数または細胞質量が増加するが、新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移の細胞溶解またはアポトーシス後に所与の被験体における腫瘍細胞の質量、サイズ、または細胞数を最終的に徐々に安定化または軽減することができる。
【０１５２】
阻害、軽減、減少、遅延、または防止することができる新形成、腫瘍、癌、および転移に関連するさらなる有害な症状および合併症には、例えば、嘔気、食欲減退、嗜眠、疼痛、および不快感が含まれる。したがって、細胞過剰増殖性障害に関連するかこれに起因する有害な症状または合併症の重症度、持続時間、または頻度の部分的または完全な減少または軽減、被験体における改善が十分であること（エネルギー、食欲、精神の向上が十分なことなど）はすべて治療上の利点の特定の非限定的な例である。したがって、治療上の利点または改善には、処置した被験体の生活の質の主観的改善も含まれ得る。
【０１５３】
種々の実施形態では、本方法により、新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移のサイズまたは体積が軽減または減少されるか、新形成、腫瘍、または癌、転移のサイズまたは体積の増加が阻害または防止されるか、新形成、腫瘍、または癌の進行または悪化が阻害または遅延されるか、新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移の細胞溶解またはアポトーシスが刺激されるか、新形成、腫瘍、または癌の増殖または転移が阻害、軽減、減少、または遅延する。さらなる実施形態では、本方法により、被験体の寿命が延長または長期化する。さらなる実施形態では、本方法により、被験体の生活の質が改善される。
【０１５４】
新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移を含む生検サンプル（例えば、血液または組織サンプル）の試験によって新形成細胞、腫瘍細胞、癌細胞、または転移細胞の体積または細胞数を確証し、それにより、新形成細胞、腫瘍細胞、癌細胞、または転移細胞の質量、数、または体積の減少または安定化、または新形成細胞、腫瘍細胞、癌細胞、または転移細胞の確立、形成、増殖、成長、または生存（アポトーシス）の阻害が起こったかどうかを確証することができる。固形の新形成、腫瘍、または癌のために、侵襲性および非侵襲性の画像化法により、新形成、腫瘍、または癌のサイズまたは体積を確認することができる。例えば、細胞（例えば、造血性細胞過剰増殖性障害、播種性腫瘍細胞）の集団、数、および型についての血液、血清、または骨髄の試験により、新形成細胞、腫瘍細胞、癌細胞、または転移細胞の質量または数の軽減または安定化、または新形成、腫瘍、癌、または転移の確立、形成、増殖、成長、または生存（アポトーシス）の阻害が起こったかどうかを確証することができる。
【０１５５】
本発明の組成物および方法を、任意の他の処置または治療と組み合わせて、所望の効果を得ることができる。特に、抗細胞増殖活性または機能を有すると特徴づけられている処置および治療を適用可能である。例示的な処置および治療には、抗細胞増殖または免疫促進の薬剤または薬物が含まれる。
【０１５６】
処置および治療を、本発明の任意の他の方法の前、実質的に同時に行うことができる（例えば、抗細胞増殖障害または抗細胞過剰増殖性障害（例えば、新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移））。
【０１５７】
したがって、本発明は、任意の抗体、機能的フラグメント、ならびに修飾形態および異型を任意の治療レジメン、処置プロトコール、または組成物（本明細書中に記載されているか当該分野で公知の抗細胞増殖のプロトコール、薬剤、または薬物など）と組み合わせて本発明の方法を使用する組み合わせ方法を提供する。１つの実施形態では、本方法は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体、および抗細胞増殖または免疫促進の処置、薬剤、または薬物を投与する工程を含む。抗細胞増殖または免疫促進の処置、薬剤、または薬物を、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の投与前、実質的に同時、または投与後に投与することができる。
【０１５８】
本明細書中で使用する場合、「抗細胞増殖」「抗新形成」、「抗腫瘍」、または「抗癌」処置、治療、活性、または効果は、異常または望ましくない細胞増殖（細胞過剰増殖）、細胞過剰増殖性障害、新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移に関連するか、これらに起因する病状、有害な症状、または合併症の処置で有用な任意の治療、処置レジメン、薬剤、薬物、プロトコール、または過程を意味する。特定の治療、処置レジメン、薬剤、薬物、プロトコール、または過程により、細胞増殖、細胞成長、細胞過剰増殖、新形成、腫瘍、または癌（悪性）の成長、増殖、生存、または転移を阻害、減少、遅滞、軽減、遅延、または防止することができる。かかる処置、治療、レジメン、プロトコール、薬剤、および薬物は、細胞周期の進行または細胞の増殖または成長の破壊、軽減、阻害、または遅延、細胞のアポトーシス、溶解、または死滅の増加、刺激、または増強、核酸またはタンパク質の合成または代謝の阻害、細胞分裂の軽減、減少、阻害、または遅延、細胞生存の減少、軽減、阻害、または細胞生存因子、成長因子、またはシグナル伝達経路（細胞外または細胞内）の産生または利用によって操作することができる。
【０１５９】
抗細胞増殖処置および治療の例には、化学療法、免疫療法、放射線療法（イオン化療法または化学療法）、局所または領域の高熱（高温）療法、および外科的切除が含まれる。
【０１６０】
抗細胞増殖性の薬剤および薬物の特定の非限定的なクラスには、アルキル化剤、代謝拮抗物質、植物抽出物、植物性アルカロイド、ニトロソ尿素、ホルモン（ステロイド）、ヌクレオシドおよびヌクレオチドアナログが含まれる。微生物毒素の特定の非限定的な例には、細菌コレラ毒素、百日咳毒素、炭疽毒素、ジフテリア毒素、および植物毒素リシンが含まれる。薬物の特定の例には、シクロホスファミド、アザチオプリン、シクロスポリンＡ、メルファラン、クロラムブシル、メクロレタミン、ブスルファン、メトトレキサート、６−メルカプトプリン、チオグアニン、５−フルオロウラシル、５−フルオロウリジン、シトシンアラビノシド、ＡＺＴ、５−アザシチジン（５−ＡＺＣ）および５−アザシチジン関連化合物、ブレオマイシン、アクチノマイシンＤ、ミトラマイシン、マイトマイシンＣ、カルムスチン、カリチアマイシン、ロムスチン、セムスチン、ストレプトゾトシン、テニポシド、エトポシド、ヒドロキシ尿素、シスプラチン、カルボプラチン、レバミソール、ミトタン、プロカルバジン、ダカルバジン、タキソール、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ドキソルビシン、ダウノマイシン、およびジブロモマンニトールが含まれる。ホルモンの特定の非限定的な例には、プレドニゾン、プレドニゾロン、ジエチルスチルベステロール、フルタミド、ロイプロリド、およびゴナトロフィン放出ホルモンアンタゴニストが含まれる。
【０１６１】
放射線療法には、被験体への内部または外部への送達が含まれる。例えば、α、β、γ、およびＸ線を、被験体に内在化させずに被験体外部に照射するか、放射性同位体に物理的に接触させることができる。Ｘ線線量の特定の例は、長期（３〜５週間）のための５０〜２００レントゲンの１日量から２０００〜６０００レントゲンの単回線量までの範囲である。線量は非常に変化し、曝露期間、同位体の半減期、照射型、細胞型、処置部位、および疾患の進行段階に依存する。放射性核種の特定の非限定的な例には、例えば、４７Ｓｃ、６７Ｃｕ、７２Ｓｅ、８８Ｙ、９０Ｓｒ、９０Ｙ、９７Ｒｕ、９９Ｔｃ、１０５Ｒｈ、１１１Ｉｎ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、１４９Ｔｂ、１５３Ｓｍ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１９４Ｏｓ、２０３Ｐｂ、２１１Ａｔ、２１２Ｂｉ、２１３Ｂｉ、２１２Ｐｂ、２２３Ｒａ、２２５Ａｃ、２２７Ａｃ、および２２８Ｔｈが含まれる。
【０１６２】
腫瘍細胞に結合する抗体は、抗細胞増殖処置または治療の特定の例である。抗腫瘍抗体には、例えば、白血病細胞ＣＤ３３抗原に結合するＭ１９５抗体（米国特許第６，５９９，５０５号）；卵巣癌腫ＣＡ６腫瘍関連抗原に結合するモノクローナル抗体ＤＳ６（米国特許第６，５９６，５０３号）；上皮細胞表面Ｈ抗原に結合するヒトＩＢＤ１２  モノクローナル抗体（米国特許第４，８１４，２７５号）；および結腸、乳房、卵巣、および肺の癌腫によって発現されるＬｅｘ炭水化物エピトープに結合するＢＲ９６抗体が含まれる。使用することができるさらなる抗腫瘍抗体には、例えば、ハーセプチン（抗Ｈｅｒ−２ｎｅｕ抗体）、リツキサン（登録商標）、ゼバリン、ベバシズマブ（アバスチン）、ベキサール、キャンパス（登録商標）、オンコリム、１７−１Ａ（エドレコロマブ）、３Ｆ８（抗神経芽細胞腫抗体）、ＭＤＸ−ＣＴＬＡ４、ＩＭＣ−Ｃ２２５（セツキシマブ）、およびマイロターグが含まれる。
【０１６３】
本明細書中で使用する場合、用語「免疫促進」は、処置、治療、薬剤、または薬物に関して使用する場合、処置、治療、薬剤、または薬物によって体液または細胞媒介性の免疫応答を増加、刺激、誘導、または促進されることを意味する。かかるし治療は、全身の免疫応答を増強するか、特定の標的（例えば、細胞増殖性障害または細胞過剰増殖性障害（新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移など））に対する免疫応答を増強することができる。
【０１６４】
免疫促進薬の特定の非限定的な例には、抗体、細胞成長因子、細胞生存因子、細胞分化因子、サイトカイン、インターフェロン、およびケモカインが含まれる。免疫促進薬および処置のさらなる例には、細胞増殖障害に対する抗体を発現するか、そうでなければ細胞増殖障害に対する免疫応答を開始する可能性があるリンパ球、形質細胞、マクロファージ、樹状細胞、ＮＫ細胞、およびＢ細胞などの免疫細胞が含まれる。免疫原性を増強または刺激するサイトカインには、ＩＬ−２、ＩＬ−１α、ＩＬ−１β、ＩＬ−３、ＩＬ−６、ＩＬ−７、顆粒球−マクロファージ−コロニー刺激因子（ＧＭＣＳＦ）、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−１２、ＴＮＦ−α、およびＴＮＦβが含まれ、免疫促進薬も非限定的な例である。ケモカイン（ＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−１β、ＲＡＮＴＥＳ、ＳＤＦ−１、ＭＣＰ−１、ＭＣＰ−２、ＭＣＰ−３、ＭＣＰ−４、エオタキシン、エオタキシン−２、Ｉ−３０９／ＴＣＡ３、ＡＴＡＣ、ＨＣＣ−１、ＨＣＣ−２、ＨＣＣ−３、ＰＡＲＣ、ＴＡＲＣ、ＬＡＲＣ／ＭＩＰ−３α、ＣＫβ、ＣＫβ６、ＣＫβ７、ＣＫβ８、ＣＫβ９、ＣＫβ１１、ＣＫβ１２、Ｃ１０、ＩＬ−８、ＥＮＡ−７８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＣＰ−２、ＰＢＰ／ＣＴＡＰＩＩＩβ−ＴＧ／ＮＡＰ−２、Ｍｉｇ、ＰＢＳＦ／ＳＤＦ−１、およびリンホタクチンが含まれる）は、免疫促進薬のさらなる非限定的な例である。
【０１６５】
本発明の方法には、特に、別の処置プロトコールまたは治療レジメン、過程、またはレメディの必要性または使用が軽減される方法も含まれる。例えば、新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移について、本発明の方法は、所与の被験体において、抗細胞増殖性（例えば、抗新形成、抗腫瘍、抗癌、または抗転移）または免疫促進する処置または治療（新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移の処置または治療のための化学療法薬、放射線療法、免疫療法、または手術など）の頻度が減少するか、用量が軽減されるか、または排除される場合に治療上の利点を有する。
【０１６６】
本発明によれば、抗細胞増殖性（例えば、抗新形成、抗腫瘍、抗癌、または抗転移）処置または治療の必要性または使用を軽減する方法を提供する。１つの実施形態では、本方法は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体を、細胞過剰増殖性障害（例えば、新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移）を処置し、抗細胞増殖療法（抗新形成療法、抗腫瘍療法、抗癌療法、または抗転移療法）または免疫促進療法の必要性を軽減または排除するのに有効な量で被験体に投与する工程を含む。本方法を、抗新形成療法、抗腫瘍療法、抗癌療法、抗転移療法、または免疫促進療法を施す前、それと実質的に同時、またはその後に実施することができる。
【０１６７】
治療上の利点または改善を達成するのに望まれる処置方法または治療における用量または「有効量」または「十分な量」には、例えば、標的（例えば、細胞過剰増殖性障害）の病状、有害な症状、または合併症の進行または悪化の防止、阻害、または遅延が満足な結果であるにもかかわらず、標的（例えば、細胞過剰増殖性障害）に関連するか、これに起因する１つ、いくつか、またはすべての病状、有害な症状、または合併症の測定可能または検出可能な範囲への任意の客観的または主観的な緩和または改善が含まれる。したがって、細胞過剰増殖性障害の場合、量は、所与の被験体に治療上の利点を提供するか、所与の被験体における障害の病状、有害な症状、または合併症を緩和または改善するのに十分であろう。処置もしくは治療の標的（例えば、細胞過剰増殖性障害）の状態または処置もしくは治療の任意の副作用によって示されるように、単回または複数回の用量を投与することができるか、用量を比例的に増加または減少させることができる。
【０１６８】
例示的な制限されない量（用量）は、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの範囲、およびかかる範囲内の任意の数値、範囲、または値である。より多いまたは少ない量（用量）を投与することができる（例えば、０．０１〜５００ｍｇ／ｋｇ、およびかかる範囲内の任意の数値、範囲、または値）。さらなる例示的な非限定的な量（または用量）は、約０．１〜５０ｍｇ／ｋｇ、０．５〜５０ｍｇ／ｋｇ、１．０〜２５ｍｇ／ｋｇ、１．０〜１０ｍｇ／ｋｇの範囲、およびかかる範囲内の任意の数値、範囲、または値である。
【０１６９】
本発明の方法を、１日、１週間、１ヶ月、または１年に１回または複数回（例えば、１〜１０、１〜５、または１〜３回）実施することができる。当業者は、投与を遅延または中断する適切な時期を理解しているであろう。例示的な非限定的投薬スケジュールは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０週間、または２０週間超あたり１〜７回、およびかかる範囲内の任意の数値、範囲、または値である。
【０１７０】
勿論、任意の処置または治療に典型的なことだが、被験体によって処置に対する応答が異なり、いくつかの被験体は特定の処置プロトコール、レジメン、または過程に応答できないか、不適切に応答し得る。したがって、有効量または十分な量は、処置される障害（例えば、細胞増殖、良性過形成または新形成、腫瘍、または癌）およびその型または病期（例えば、腫瘍または癌の悪性度および（進行している場合）後期または初期）、所望される治療効果、ならびに各被験体（例えば、被験体、性別、年齢内の生物学的利用能など）および遺伝的および後成的変異性（例えば、薬理ゲノミクス）に基づいた処置に対する被験体の応答に少なくとも一部が依存するであろう。
【０１７１】
細胞毒性および細胞生存度（細胞のアポトーシス、溶解、成長、増殖など）を、当該分野で公知の比色分析アッセイ、発光アッセイ、放射測定アッセイ、または蛍光定量アッセイに基づいた種々の方法で測定することができる。細胞生存度の決定のための比色分析技術には、例えば、トリパンブルー排除が含まれる。簡潔に述べれば、細胞をトリパンブルーで染色し、血球計を使用して計数する。生存細胞は色素を排除するのに対して、死細胞および死亡しつつある細胞は青色色素を取り込むので、光学顕微鏡下で容易に区別される。生存細胞によってニュートラルレッドが吸収され、細胞リソソーム中で濃縮される。生存細胞を、光学顕微鏡を使用したニュートラルレッド染色細胞数の定量によって決定することができる。
【０１７２】
細胞生存度を決定するための蛍光定量技術には、例えば、ヨウ化プロピジウム（蛍光ＤＮＡ挿入剤）が含まれる。ヨウ化プロピジウムは生存細胞から排除されるが、死細胞の核を染色する。次いで、ヨウ化プロピジウム標識細胞のフローサイトメトリーを使用して、生存細胞および死細胞を定量することができる。乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）の放出は細胞の構造変化および死を示し、分光学的酵素アッセイによって測定することができる。ブロモデオキシウリジン（ＢｒｄＵ）を新たに合成したＤＮＡに組み込み、蛍光色素標識抗体を使用して検出することができる。蛍光色素Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８はＤＮＡを標識し、これを使用して、細胞の増殖を定量することができる（例えば、フローサイトメトリー）。蛍光色素カルボキシフルオレセインジアセタートスクシンイミジルエステル（ＣＦＳＥまたはＣＦＤＡ−ＳＥ）の定量的組み込みにより、細胞分裂を分析することができる（例えば、フローサイトメトリー）。この技術を、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏのいずれかで使用することができる。７−アミノアクチノマイシンＤ（７−ＡＡＤ）は、ＤＮＡとの会合の際にスペクトルシフトを受ける蛍光挿入剤であり、細胞分裂を分析することができる（例えば、フローサイトメトリー）。
【０１７３】
細胞増殖決定のための放射測定技術には、例えば、生細胞の新たに合成したＤＮＡに組み込まれる［３Ｈ］−チミジンが含まれ、これは、細胞増殖の決定に頻繁に使用される。死細胞からのクロム（５１Ｃｒ）放出をシンチレーションカウンティングによって定量し、それにより細胞生存度を定量することができる。
【０１７４】
細胞生存度決定のための発光技術には、例えば、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ発光細胞生存度アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｍａｄｉｓｏｎ  ＷＩ）が含まれる。この技術は、ＡＴＰの存在量を定量して生存細胞数を決定する。
【０１７５】
細胞生存度および細胞増殖の決定のための市販のキットには、例えば、細胞増殖Ｂｉｏｔｒａｋ  ＥＬＩＳＡ（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、ＮＪ）；Ｇｕａｖａ  ＶｉａＣｏｕｎｔ（商標）アッセイ（蛍光試薬取り込みの相違に基づいて細胞数および細胞生存度を迅速に決定する）（Ｇｕａｖａ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｈａｙｗａｒｄ，ＣＡ）；ＣｙＱＵＡＮＴ（登録商標）細胞増殖アッセイキット（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ）；およびＣｙｔｏＬｕｘアッセイキット（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）が含まれる。ＤＥＬＦＩＡ（登録商標）アッセイキット（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）は、時間分解蛍光分光法を使用して細胞増殖および細胞生存度を決定することができる。Ｑｕａｎｔｏｓ（商標）細胞増殖アッセイは、溶解細胞由来のＤＮＡ−色素複合体の蛍光を測定する蛍光ベースのアッセイである（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ，Ｌａ  Ｊｏｌｌａ，ＣＡ）。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ細胞生存度アッセイは、細胞生存度測定のための発光アッセイである（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ  ＷＩ）。
【０１７６】
用語「被験体」および「患者」は本明細書中で交換可能に使用され、動物、典型的には哺乳動物（ヒト、非ヒト霊長類（ゴリラ、チンパンジー、オランウータン、マカク、テナガザル）、愛玩動物（イヌおよびネコ）、家畜（ウマ、ウシ、ヤギ、ヒツジ、ブタ）、実験動物（マウス、ラット、ウサギ、モルモット）など）をいう。被験体には、ｉｎ  ｖｉｖｏでの有効性の研究のための疾患モデル動物（例えば、マウス、ラット、および非ヒト霊長類など）（例えば、新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移動物モデル）が含まれる。ヒト被験体には、小児（例えば、新生児、乳児、幼児、およびティーンエイジャー（１歳と５歳との間、５歳と１０歳との間、および１０歳と１８との間）、成人（１８歳と６０歳との間）、および高齢者（例えば、６０歳と６５歳との間、６５歳と７０歳との間、および７０歳と１００歳との間）が含まれる。
【０１７７】
被験体には、処置を必要とする哺乳動物（例えば、ヒト）（望ましくないまたは異常な細胞増殖（細胞過剰増殖）または細胞過剰増殖性障害を有する）が含まれる。被験体はまた、望ましくない細胞増殖または細胞過剰増殖性障害を有するリスクのある被験体が含まれる。被験体には、さらに、かかる処置を保証する検査室診断または臨床診断による抗細胞増殖処置もしくは治療または免疫促進処置もしくは治療を必要とする被験体、抗細胞増殖治療または免疫促進治療を受ける被験体、および抗細胞増殖治療または免疫促進治療を受け、且つ再発または回帰リスクのある被験体が含まれる。
【０１７８】
リスクのある被験体には、細胞増殖性障害または細胞過剰増殖性障害（例えば、良性の過形成、新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移）の病歴を有する被験体、遺伝的素因を有する被験体、または上記障害を以前に罹患している被験体、および再発または回帰リスクのある被験体が含まれる。リスクのある被験体には、さらに、発癌性物質または変異原に環境曝露された被験体（喫煙者など）または職業上環境（産業、化学、農業）にある被験体が含まれる。細胞増殖性障害または細胞過剰増殖性障害（新形成、腫瘍、または癌など）の発症リスクのあるかかる被験体を、腫瘍関連遺伝子、遺伝子欠失、または遺伝子変異についての遺伝子スクリーニングを使用して同定することができる。Ｂｒｃａ１を欠く被験体は、例えば、乳癌発症リスクがある。結腸癌発症リスクがある被験体は、例えば、大腸腺腫性ポリポーシス（ＡＰＣ）などの腫瘍抑制遺伝子が欠失または変異している。細胞増殖障害に対する特定の遺伝的素因を有するリスクのある被験体は公知である（例えば、Ｔｈｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｃａｎｃｅｒ  ２ｎｄ  ｅｄ．ｂｙ  Ｂｅｒｔ  Ｖｏｇｅｌｓｔｅｉｎ（Ｅｄｉｔｏｒ），Ｋｅｎｎｅｔｈ  Ｗ．Ｋｉｎｚｌｅｒ（Ｅｄｉｔｏｒ）（２００２）ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ；Ｔｈｅ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｃａｎｃｅｒ．Ｅｄｉｔｅｄ  ｂｙ  ＷＢ  Ｃｏｌｅｍａｎ  ａｎｄ  ＧＪ  Ｔｓｏｎｇａｌｉｓ（２００１）Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ；およびＴｈｅ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ．Ｍｅｎｄｅｌｓｏｈｎら、ＷＢ  Ｓａｕｎｄｅｒｓ（１９９５）を参照のこと）。
【０１７９】
したがって、リスクのある被験体を、細胞増殖性障害または細胞過剰増殖性障害を発症する可能性または細胞増殖障害の治癒後に同一または異なる細胞増殖性障害または細胞過剰増殖性障害が再発または回帰する可能性を阻害または軽減するために処置することができる。かかる処置の結果は、細胞増殖性障害または細胞過剰増殖性障害の発症リスクの軽減または処置したリスクのある被験体における細胞増殖性障害または細胞過剰増殖性障害、またはその病状、有害な症状、または合併症の防止であり得る。
【０１８０】
本発明は、さらに、任意選択的にキット構成要素の使用説明書（例えば、本発明の方法を実施するための説明書）と組み合わせて適切な包装材料に包装された抗体、機能的フラグメント、修飾形態および異型、核酸、薬剤、薬物、および薬学的処方物を含むキットを提供する。１つの実施形態では、キットは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体を含む。１つの態様では、説明書は、望ましくない細胞増殖または過剰増殖（すなわち、細胞過剰増殖性障害）を処置するための説明書である。別の態様では、説明書は、新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移の処置のための説明書である。さらなる実施形態では、キットは、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体、ならびに望ましくない細胞増殖または過剰増殖（すなわち、細胞過剰増殖性障害）の処置、および抗細胞増殖または免疫促進の処置、薬剤、または薬物のための説明書を含む。種々の態様では、キットは、抗新形成剤、抗癌剤、または抗腫瘍剤を含む。なおさらなる態様では、キットは、製品（例えば、抗体または核酸、抗細胞増殖または免疫促進の処置、薬剤、または薬物を被験体に局所的、領域的、または全身に送達させるための製品）を含む。
【０１８１】
用語「包装材料」は、キットの成分を格納する物理的構造をいう。包装材料は、成分を無菌に維持することができ、かかる目的のために一般的に使用される材料から作製することができる（例えば、紙、段ボール、ガラス、プラスチック、ホイル、アンプルなど）。ラベルまたは添付文書は、適切な書面での説明書（例えば、本発明の方法の実施（例えば、細胞増殖性障害または細胞過剰増殖性障害の処置）、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合するＰＭ−２抗原、エピトープ、または細胞のスクリーニング、検出、または同定のためのアッセイ）を含むことができる。したがって、さらなる実施形態では、キットは、溶液中、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ、ｉｎ  ｖｉｖｏ、またはｅｘ  ｖｉｖｏで本発明の方法を実施するための説明書を含むラベルまたは添付文書を含む。
【０１８２】
したがって、説明書は、本明細書中に記載の任意の本発明の方法を実施するための説明書を含むことができる。例えば、本発明の薬学的組成物を、細胞増殖性障害または細胞過剰増殖性障害（新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移など）を処置するために被験体に投与するための説明書と共に容器、パック、またはディスペンサー中に含めることができる。説明書は、さらに、満足なクリニカルエンドポイントまたは起こり得る任意の有害な症状または合併症の表示、保存情報、使用期限、または規制当局（食品医薬品局など）に必要とされるヒト被験体での使用のための任意の情報を含むことができる。
【０１８３】
説明書は、「印刷物」（例えば、キット内の紙または厚紙、またはキットまたは包装材料に添付したか、キットの成分を含むバイアルまたはチューブに付着させたラベル）に記載することができる。説明書は音声またはビデオテープを含むことができ、さらに、コンピュータ読み出し可能媒体（ディスク（フロッピー（登録商標）ディスクまたはハードディスク）、光学ＣＤ（ＣＤ−またはＤＶＤ−ＲＯＭ／ＲＡＭなど）、磁気テープ、電気記憶媒体（ＲＡＭおよびＲＯＭなど）、およびこれらのハイブリッド（磁気／光学記憶媒体など）など）に含めることができる。
【０１８４】
本発明のキットは、さらに、緩衝剤、保存料、またはタンパク質／核酸安定剤を含むことができる。キットはまた、活性アッセイのためのコントロール成分（例えば、コントロールサンプルまたは標準）を含むことができる。各キット成分を、各容器内または混合物中に封入することができ、種々の容器の全てを１つまたは複数のパッケージ内に含めることができる。
【０１８５】
抗体（例えば、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体）、核酸、および他の組成物、ならびに本発明の方法を、薬学的処方物中に含めるか、これを使用することができる。かかる薬学的処方物は、ｉｎ  ｖｉｖｏまたはｅｘ  ｖｉｖｏでの被験体の処置または被験体への投与もしくは送達に有用である。
【０１８６】
薬学的処方物は、「薬学的に許容可能な」および「生理学的に許容可能な」キャリア、希釈剤、または賦形剤を含む。本明細書中で使用する場合、用語「薬学的に許容可能な」および「生理学的に許容可能な」には、薬学的投与に適合可能な溶媒（水性または非水性）、溶液、乳濁液、分散媒、コーティング、等張剤、および吸収促進剤または吸収遅延剤が含まれる。かかる処方物を、液体、乳濁液、懸濁液、シロップ、もしくはエリキシル、または固体形態；錠剤（コーティングまたは非コーティング）、カプセル（硬または軟）、粉末、顆粒、結晶、またはマイクロビーズ中に含めることができる。補足化合物（例えば、防腐剤、抗菌薬、抗ウイルス薬、および抗真菌薬）も、処方物に組み込むことができる。
【０１８７】
薬学的処方物を、特定の局所、領域、または全身投与または送達経路に適合するように作製することができる。したがって、薬学的処方物は、特定の経路による投与に適切なキャリア、希釈剤、または賦形剤を含む。本発明の組成物のための投与経路の特定の非限定的な例は、非経口（例えば、静脈内、動脈内、皮内、筋肉内、皮下、胸膜内、経皮（局所）、経粘膜、頭蓋内、脊髄内、眼内、直腸）、経口（食事性）、粘膜への投与、および処置方法または投与プロトコールに適切な任意の他の処方物である。
【０１８８】
非経口適用のために使用される溶液または懸濁液は、滅菌希釈剤（注射用蒸留水、生理食塩水、固定油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、または他の合成溶媒など）；抗菌薬（ベンジルアルコールまたはメチルパラベンなど）；抗酸化剤（アスコルビン酸または亜硫酸水素ナトリウムなど）；キレート剤（エチレンジアミン四酢酸など）；緩衝液（酢酸緩衝液、クエン酸緩衝液、またはリン酸緩衝液など）、および張性の調整のための薬剤（塩化ナトリウムまたはデキストロースなど）を含むことができる。ｐＨを、酸または塩基（塩酸または水酸化ナトリウムなど）を使用して調整することができる。
【０１８９】
注射用薬学的処方物は、滅菌水溶液（水溶性の場合）または分散液および滅菌注射液または分散液の即時調製のための滅菌粉末を含む。静脈内投与のために、適切なキャリアには、生理的塩類溶液、静菌化蒸留水、クレモフォールＥＬ（商標）（ＢＡＳＦ，Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ，ＮＪ）、またはリン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）が含まれる。キャリアは、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、および液体ポリエチレングリコールなど）、およびその適切な混合物を含む溶媒または分散媒であり得る。例えば、レシチンなどのコーティングの使用、分散液の場合の必要な粒径の維持、および界面活性剤の使用によって流動性を維持することができる。抗菌薬および抗真菌薬には、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、およびチメロサールが含まれる。等張剤（例えば、糖）、ポリアルコール（マンニトール、ソルビトールなど）、塩化ナトリウムを組成物中に含めることができる。吸収を遅延させる薬剤（例えば、モノステアリン酸アルミニウムまたはゼラチン）の含有により、注射用組成物の吸収を延長することができる。
【０１９０】
滅菌注射用組成物を、上記成分の１つまたは複数の組み合わせと共に適切な溶媒中に必要量の活性組成物を組み込むことによって調製することができる。一般に、分散液を、基剤分散媒および任意の他の成分を含む滅菌ビヒクルへの活性組成物の組み込みによって調製する。滅菌注射液の調製のための滅菌粉末の場合、調製方法には、例えば、以前に調製したその溶液から有効成分および任意のさらなる所望の成分の粉末が得られる真空乾燥およびフリーズドライが含まれる。
【０１９１】
経粘膜または経皮投与のために、浸透すべきバリアに適切な浸透剤を処方物中で使用する。かかる浸透剤は当該分野で公知であり、例えば、経粘膜投与のための界面活性剤、胆汁酸塩、およびフシジン酸誘導体が含まれる。鼻内噴霧、吸入デバイス（例えば、吸引器）、または座剤の使用によって経粘膜投与を行うことができる。経皮投与のために、活性化合物を、軟膏、蝋膏、ゲル、クリーム、またはパッチに処方する。
【０１９２】
薬学的処方物を、身体からの急速な排出から防御するキャリア（モノステアリン酸グリセリルまたはステアリン酸グリセリルなどの制御放出処方物または時間遅延材料など）を使用して調製することができる。処方物を、局所、領域、もしくは全身送達、または制御放出もしくは徐放を達成するための製品（埋入物およびマイクロカプセル化送達系など）を使用して送達させることもできる。
【０１９３】
生分解性の生体適合性ポリマー（エチレンビニルアセタート、ポリ酸無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルソエステル、およびポリ乳酸など）を使用することができる。かかる処方物の調製方法は、当業者に公知である。材料を、Ａｌｚａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，ＣＡ）から購入することもできる。リポソーム懸濁液（抗体またはウイルスコートタンパク質を使用して細胞または組織にターゲティングされるリポソームが含まれる）を、薬学的に許容可能なキャリアとして使用することもできる。これらを、例えば、米国特許第４，５２２，８１１号に記載の公知の方法にしたがって調製することができる。
【０１９４】
投与に適切なさらなる薬学的処方物は当該分野で公知である（例えば、Ｇｅｎｎａｒｏ（ｅｄ．），Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２０ｔｈ  ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ（２０００）；Ａｎｓｅｌら、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，７ｔｈ  ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ（１９９９）；Ｋｉｂｂｅ（ｅｄ．），Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，３ｒｄ  ｅｄ．（２０００）；およびＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｓｏｌｉｄ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ，Ｔｅｃｈｎｏｎｉｃ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｉｎｃ．，Ｌａｎｃａｓｔｅｒ，Ｐａ．，（１９９３）を参照のこと）。
【０１９５】
本発明にしたがって使用した組成物（タンパク質（抗体）、核酸（阻害性）、処置、治療、薬剤、薬物、および薬学的処方物が含まれる）を、投与を容易にし、投薬量を均一にするための投薬単位形態にパッケージングすることができる。本明細書中で使用する場合、「投薬単位形態」は、単回投薬処置として適切な物理的に個別の単位をいい、各単位は、所望の処置または治療の（例えば、有利な）効果が得られるように計算されたキャリア、賦形剤、希釈剤、またはビヒクルと組み合わせた一定量の組成物を含む。単位投薬形態は、種々の要因（使用した特定の組成物、達成すべき効果、ならびに処置される被験体の薬力学および薬理ゲノミクスが含まれるが、これらに限定されない）に依存するであろう。
【０１９６】
本発明は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する細胞、抗原、またはエピトープをスクリーニング、検出、および同定する無細胞（例えば、溶液中、固相中）の方法および細胞ベースの（例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏ）方法を提供する。本方法を、溶液中、生体材料または生体サンプルを使用したｉｎ  ｖｉｔｒｏ、および、例えば、動物由来の新形成、腫瘍、癌、または転移の細胞、組織、または器官（例えば、生検）を使用したｉｎ  ｖｉｖｏで行うことができる。
【０１９７】
本発明によれば、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する細胞、抗原、またはエピトープを同定、検出、またはスクリーニングする方法を提供する。１つの実施形態では、本方法は、生体材料または生体サンプルを、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と、細胞、抗原、またはエピトープに抗体を結合させる条件下で接触させる工程、および細胞、抗原、またはエピトープへの抗体の結合をアッセイする工程を含む。細胞、抗原、またはエピトープへの抗体の結合は、その存在を検出する。１つの態様では、生体材料または生体サンプルを哺乳動物被験体から得る。さらなる態様では、細胞、抗原、またはエピトープに結合する抗体は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と異なる。
【０１９８】
本発明はまた、望ましくないまたは異常な細胞増殖または細胞過剰増殖性障害（例えば、新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移）を有するか有するリスクが増加した被験体の進行を診断およびモニタリングする無細胞（例えば、溶液中、固相中）の方法および細胞ベースの（例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏ）方法を提供する。本方法を、溶液中、生体材料または生体サンプル（例えば、新形成、腫瘍、癌、または転移の細胞、組織、または器官を含むことができるかまたは示すことができる疑いのある細胞の生検）を使用してｉｎ  ｖｉｖｏで行うことができる。本方法をｉｎ  ｖｉｖｏで（例えば、哺乳動物中で）行うこともできる。
【０１９９】
本発明によれば、望ましくないまたは異常な細胞増殖または細胞過剰増殖性障害（例えば、新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移）を有するか有するリスクが増加した被験体の進行を診断およびモニタリングする方法を提供する。１つの実施形態では、本方法は、被験体由来の生体材料または生体サンプルを準備する工程、生体材料または生体サンプルを、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と、細胞、抗原、またはエピトープに抗体を結合させる条件下で接触させる工程、および細胞、抗原、またはエピトープへの抗体の結合をアッセイする工程を含む。細胞、抗原、またはエピトープへの抗体の結合により、望ましくないまたは異常な細胞増殖または細胞過剰増殖性障害（例えば、新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移）を有するか有するリスクが増加した被験体を診断する。１つの態様では、生体材料または生体サンプルをヒトから得る。別の態様では、生体材料または生体サンプルは、生検（例えば、肺、膵臓、胃、乳房、食道、卵巣、または子宮の生検）を含む。望ましくないまたは異常な細胞増殖または細胞過剰増殖性障害（例えば、新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移）の進行のモニタリング方法を、規則的または不規則な間隔で（例えば、必要に応じて、毎日、２週間毎、毎週、２ヶ月毎、毎月、年４回、年２回または半年毎、毎年など）行うことができる。
【０２００】
本発明の同定アッセイ、検出アッセイ、スクリーニングアッセイ、および診断アッセイを、疑いのある過剰増殖細胞（例えば、細胞過剰増殖性障害の細胞または適切なサンプル）の分析によって実施することができる。細胞には、乳房、肺、甲状腺、頭頸部、鼻咽頭、鼻腔または副鼻腔、脳、脊椎、副腎、甲状腺、リンパ、胃腸（口腔、食道、胃、十二指腸、回腸、空腸（小腸）、結腸、直腸）、尿生殖器（子宮、卵巣、子宮内膜、子宮頸部、膀胱、精巣、陰茎、前立腺）、腎臓、膵臓、副腎、肝臓、骨、骨髄、リンパ、血液、筋肉、皮膚、および造血系、ならびに転移部位または二次部位由来の過剰増殖性の不死化された新形成、腫瘍、および癌の細胞株および初代分離株が含まれる。
【０２０１】
タンパク質（例えば、抗体）、材料、サンプル、または処置などの組成物に関して使用する場合、用語「接触」は、組成物（例えば、抗体などのタンパク質）と他の言及した実体との間の直接または間接的な相互作用を意味する。直接相互作用の特定の例は結合である。間接的相互作用の特定の例は、組成物が中間体分子に作用し、それにより、言及した実体に作用する場合である。したがって、例えば、細胞（例えば、細胞過剰増殖性障害を含む）の抗体との接触は、抗体を細胞に結合させることまたは抗体を中間体（例えば、抗原）と作用させ、それにより、細胞と作用させることを含む。
【０２０２】
用語「アッセイ」、「測定」、およびその文法上のバリエーションは本明細書中で交換可能で使用され、定性的決定または定量的決定のいずれかまたは定性的決定および定量的決定の両方をいう。この用語を結合に関して使用する場合、結合の相対量、親和性、または特異性を評価する任意の手段（本明細書中に記載されているか当該分野で公知の種々の方法が含まれる）が意図される。例えば、抗体結合を、ＥＬＩＳＡアッセイ、ウェスタンブロットアッセイ、または免疫沈降アッセイによってアッセイまたは測定することができる。
【０２０３】
他で定義しない限り、本明細書中で使用した全ての技術用語および科学用語は、本発明が関連する当業者によって一般的に理解される意味を有する。本明細書中に記載のものと類似するか等価な方法および材料を本発明の実務または試験で使用することができるが、適切な方法および材料を本明細書中に記載する。
【０２０４】
本明細書中に引用した全ての刊行物、特許、Ｇｅｎｂａｎｋ受入番号、および他のリファレンスは、その全体が参考として援用される。矛盾する場合、本明細書（定義を含む）を調節する。
【０２０５】
本明細書中で使用する場合、単数形「ａ」、「ａｎｄ」、および「ｔｈｅ」には、他の文脈で明確に示さない限り、複数形が含まれる。したがって、例えば、「抗体」という言及には複数の抗体が含まれ、「処置または治療」という言及には、複数の同時、連続、または系次的な投与、処置、または治療などが含まれ得る。
【０２０６】
本明細書中で使用する場合、全ての数値または数値の範囲には、他の文脈で明確に示さない限り、かかる範囲内または範囲を含む整数およびかかる範囲内または範囲を含む値または整数の分数が含まれる。したがって、例えば、９０〜１００％の範囲という言及には、かかる値以内または値を含む任意の数値または範囲（９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９５％、９７％など、および９１．１％、９１．２％、９１．３％、９１．４％、９１．５％など、９２．１％、９２．２％、９２．３％、９２．４％、９２．５％など）およびかかる範囲内の任意の数字の範囲（９０〜９２％、９０〜９５％、９５〜９８％、９６〜９８％、９９〜１００％など）が含まれる。さらなる例では、１〜５，０００倍の範囲という言及には、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０倍など、ならびに１．１、１．２、１．３、１．４、１．５倍など、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５倍など、およびかかる範囲内の任意の数字の範囲（１〜２、５〜１０、１０〜５０、５０〜１００、１００〜５００、１００〜１０００、５００〜１０００、１０００〜２０００、１０００〜５０００など）が含まれる。さらなる例では、ＫＤ１０−５Ｍ〜約ＫＤ１０−１３Ｍの範囲という言及には、かかる値の以内または値を含む任意の数値または範囲が含まれる。
【０２０７】
本発明を、一般に、多数の実施形態を説明するために肯定的言語を使用して本明細書中に開示している。本発明はまた、具体的には、特定の主題（物質または材料、方法の工程および条件、プロトコール、手順、アッセイ、または分析など）の全部または一部が排除される実施形態を含む。したがって、本発明が何を含まないかに関して本発明が本明細書中に明確に示されていないにもかかわらず、本発明中に明確に含まれない態様を開示する。
【０２０８】
多数の本発明の実施形態を説明してきたが、本発明の精神および範囲を逸脱することなく種々の修正形態を得ることができると理解されるであろう。したがって、以下の実施例は本発明の例示を意図するが、特許請求の範囲に記載の本発明の範囲を制限しない。
【実施例】
【０２０９】
（実施例１）
本実施例は、種々の材料および方法の説明を含む。
【０２１０】
細胞培養
以下のヒト細胞株を使用した：ＢＸＰＣ−３（膵臓腺癌；ＡＴＣＣ（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｐ．Ｏ．  Ｂｏｘ  １５４９，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ  ２０１０８）Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．ＣＲＬ−１６８７）、ＣＡＣＯ−２（結腸腺癌）、Ｃｏｌｏ−２０６Ｆ（結腸癌腫）、および／またはＡ５４９（肺）。細胞株を、１０％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）、２ｍＭ  グルタミン、およびペニシリン／ストレプトマイシン（共に１％）を補足したＲＰＭ１−１６４０培地（ＰＡＡ，Ｖｉｅｎｎａ，Ａｕｓｔｒｉａ）中で培養し、加湿した５％ＣＯ２雰囲気下にて３７℃でインキュベートした。記載のアッセイのために、細胞をサブコンフルエンシーまで培養し、トリプシン／ＥＤＴＡを使用して剥離し、使用前にリン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）で２回洗浄した。
【０２１１】
ハイブリドーマの産生
リンパ球を、以下のようにＨＡＢ−１異種骨髄腫への融合によって不死化した：ＨＡＢ−１異種骨髄腫細胞を、添加物を含まないＲＰＭＩ１６４０（ＰＡＡ，Ｖｉｅｎｎａ，Ａｕｓｔｒｉａ）で２回洗浄し、細胞を１５００ｒｐｍで５分間遠心分離した。次いで、脾臓またはリンパ節のいずれかから得た凍結リンパ球を解凍し、これらの細胞を添加物を含まないＲＰＭＩ１６４０で２回洗浄し、これらの細胞を１５００ｒｐｍで５分間遠心分離した。ＨＡＢ−１およびリンパ球の細胞ペレットの両方を添加物を含まない１０ｍｌ  ＲＰＭＩ１６４０に再懸濁し、Ｎｅｕｂａｕｅｒ細胞計数チャンバーで計数した。細胞を再度洗浄し、ＨＡＢ−１細胞およびリンパ球を１：２〜１：３の比率で添加し、これらを混合し、混合物を１５００ｒｐｍで８分間遠心分離した。ポリエチレングリコール１５００（ＰＥＧ）を３７℃に予熱し、５０ｍｌ管をゆっくり回転させながらペレット上にＰＥＧを慎重に滴下した。次に、ペレットを穏やかに再懸濁し、管を３７℃の水浴中で正確に９０秒間回転させた。添加物を含まない１０ｍｌピペットに満たしたＲＰＭＩで２回細胞を洗浄し、細胞を１５００ｒｐｍ５分間遠心分離した。１ｍｌのＲＰＭＩ１６４０をＨＡＴサプリメント（ＰＡＡ，Ｖｉｅｎｎａ，Ａｕｓｔｒｉａ）、１０％ＦＣＳ、１％グルタミン、および１％ペニシリン／ストレプトマイシン（「ＲＰＭＩ１６４０  ＨＡＴ」）と共に２４ウェルプレートの各ウェルに添加した。
【０２１２】
細胞ペレットをＲＰＭＩ１６４０  ＨＡＴに溶解し、０．５ｍｌの細胞を２４ウェルプレートの各ウェルに添加した。次いで、２４ウェルプレートを３７℃のインキュベーターに配置し、ＲＰＭＩ１６４０  ＨＡＴ培地を毎週交換した。４〜６週間後、細胞培養物の上清を酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）にて抗体産生についてスクリーニングした。
【０２１３】
このプロトコールを使用して、生成されたおよそ８０％〜９０％のトリオーマが生存しており、およそ５０％が免疫グロブリンを分泌する。陽性クローンを、自己腫瘍組織切片に対して免疫組織化学的に試験し、陽性反応を示したクローンをその後に再クローン化した。
【０２１４】
ｃＤＮＡ合成およびＲＴ−ＰＣＲ
抗体配列を得るために、ＱｉａｇｅｎのＲＮＡＳＥキットを使用して、トリオーマから全ＲＮＡを単離した。総ＲＮＡを、当該分野で標準的な方法（例えば、Ｋｒｅｎｎら（Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１５：１６８−１７５，１９９９）に記載の方法）を使用して調製することもできる。ハイブリドーマ細胞株ＰＭ−２から得た総ＲＮＡ由来のｃＤＮＡ合成を、５μｇの総ＲＮＡを使用し、製造者の説明書にしたがってＧｉｂｃｏ  ＢＲＬ（Ｅｇｇｅｎｓｔｅｉｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）Ｍ−ＭＬＶ逆転写酵素を使用して行った。１．７５ｍＭ  ＭｇＣ１２、０．４ｐＭプライマー、２００μＭの各ｄＮＴＰ、およびｌＵ  Ｔａｑポリメラーゼ（ＭＢＩ  Ｆｅｒｍｅｎｔａｓ，Ｓｔ．Ｌｅｏｎ−Ｒｏｔ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して、体積２５μｌにてＶＨおよびＶＬ遺伝子の増幅を行った。ＰＣＲ産物を、以下のサイクルプロフィールを使用して増幅させた：９５℃で２分間、その後に９４℃で３０秒間、それぞれ、６５℃で（ＶＨ３およびＶＨ４プライマーについて）、６０℃（ＶＨ１、ＶＨ２、ＶＨ５、ＶＨ６について）、および５２℃（ＶＬプライマーについて）３０秒間を３５サイクル、７２℃で４分間の最終伸長。
【０２１５】
抗体の配列決定
ＰＣＲ産物を、２％アガロース（Ｒｏｔｈ，Ｋａｒｌｓｒｕｈｅ，Ｇｅｒｍａｎｙ）によるゲル電気泳動およびその後のＪｅｔｓｏｒｂゲル抽出キット（Ｇｅｎｏｍｅｄ，Ｂａｄ  Ｏｅｙｎｈａｕｓｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用したＰＣＲ産物のゲル抽出を使用して精製した。次いで、ＰＣＲ産物を、ｐＣＲ−Ｓｃｒｉｐｔ  Ａｍｐ  ＳＫ＋クローニングキット（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ，Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用してクローン化した。１０個の陽性クローンを、ＤｙｅＤｅｏｘｙターミネーションサイクル配列決定キット（Ａｐｐｌｉｅｄ  ＢｉｏＳｙｓｔｅｍｓ  Ｉｎｃ．，Ｗｅｉｔｅｒｓｔａｄｔ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して配列決定し、  ＡＢＩＰｒｉｓｍ３７３自動化ＤＮＡシークエンサーを使用して分析した（両鎖を、Ｔ３およびＴ７プライマーを使用して配列決定した）。配列を、ＤＮＡＳＩＳ  ｆｏｒ  Ｗｉｎｄｏｗｓ（登録商標）配列比較ソフトウェアならびにＧｅｎＢａｎｋおよびＩＭＧＴ／Ｖ−ＱＵＥＳＴデータベースを使用して分析した。Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ（「ＩＭＧＴ」）データベースは、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔe  Ｍｏｎｔｐｅｌｌｉｅｒ，Ｍｏｎｔｐｅｌｌｉｅｒ，ＦｒａｎｃｅのＭａｒｉｅ−Ｐａｕｌｅ  Ｌｅｆｒａｎｃによって調整されている。
【０２１６】
パラフィン切片の免疫組織化学的染色
パラフィン包埋ヒト組織を切片にし（２μｍ）、パラフィンを以下のように除去した：それぞれ５分間のキシレン洗浄を２回、それぞれ５分間の１００％エタノール洗浄を２回、それぞれ５分間の９０％エタノール洗浄を２回、それぞれ５分間の７０％エタノール洗浄を２回、および蒸留水での洗浄を３回。
【０２１７】
組織切片を含むスライドを、７５ｍｌ蒸留水および２５ｍｌ脱マスキング溶液（Ｄｅｍａｓｋｉｅｒｕｎｇｓｌｏｅｓｕｎｇ  Ｇ，Ｂｉｏｌｏｇｏ，Ｋｒｏｎｓｈａｇｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を含む予熱水浴中にて１００℃で２０分間インキュベートした。スライドを、Ｔｒｉｓ／ＮａＣｌ（５リットルの蒸留水中に３グラムＴｒｉｓ、４０．５グラムＮａＣＩを含み、ＨＣｌでｐＨ７．４に調整）に５分間入れ、スライドあたり１５μｌの０．５％ウシ血清アルブミン画分Ｖ（「ＢＳＡ」、Ｒｏｔｈ，Ｋａｒｌｓｒｕｈｅ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を含むリン酸緩衝化生理食塩水（「ＰＢＳ」）で１５〜３０分間ブロッキングし、Ｔｒｉｓ／ＮａＣｌで１回洗浄した。
【０２１８】
切片を、ＰＭ−２抗体および無関係のヒトモノクローナルＩｇＭ抗体（ＣｈｒｏｍＰｕｒｅ  ＩｇＭ，Ｄｉａｎｏｖａ，Ｈａｍｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ，１０μｇ／ｍｌ）またはマウスＣＡＭ  ５．２抗体（ＢＳＡ／ＰＢＳ（Ｄａｋｏ，Ｈａｍｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）で５０倍希釈）と共に加湿インキュベーター中で３７℃にて２．５時間インキュベートした。次いで、切片をＴｒｉｓ／ＮａＣＩ（５リットルの蒸留水中に３グラムＴｒｉｓ、１４０．５グラムＮａＣＩを含み、ＨＣｌでｐＨ７．４に調整）で３回洗浄し、その後にペルオキシダーゼ標識ウサギ抗ヒトまたはウサギ抗マウス抱合体（Ｄａｋｏ）（３０％ウサギ血清（抗体１０３／５１用）を含むＰＢＳで５０倍希釈）と室温で１時間インキュベートした。Ｔｒｉｓ／ＮａＣＩでの３回の洗浄後、組織切片をＰＢＳ中で１０分間インキュベートし、その後にジアミノベンジジン（０．０５％）−過酸化水素（０．０２％）にて室温（ＲＴ）で１０分間染色した。流水を使用して反応を停止させ、切片をヘマトキシリンで対比染色した。グリセロール−ゼラチンを使用したマウント後、光学顕微鏡を使用して切片を分析した。
【０２１９】
自己腫瘍由来の凍結切片の免疫組織化学的染色
凍結ヒト組織を切片にし（４μｍ）、アセトン中で固定し、風乾し、Ｔｒｉｓ／ＮａＣｌ（５リットルの蒸留水中に３グラムＴｒｉｓ、４０．５グラムＮａＣＩを含み、ＨＣｌでｐＨ７．４に調整）で洗浄した。次いで、凍結切片を、３％粉乳を含むＰＢＳにて室温で３０分間ブロッキングした。Ｔｒｉｓ／ＮａＣｌでの３回の洗浄後、切片を、ＰＭ−２ヒトＩｇＭ抗体、無関係のヒトモノクローナルＩｇＭ（Ｃｈｒｏｍｐｕｒｅ  ＩｇＭ，Ｄｉａｎｏｖａ，１０μｇ／ｍｌ）またはマウスＣＡＭ５．２抗体（ＢＳＡ／ＰＢＳ（Ｄａｋｏ）で５０倍希釈）と室温で３０分間インキュベートした。切片をＴｒｉｓ／ＮａＣｌで３回洗浄し、その後に二次抗体（ペルオキシダーゼ標識ウサギ抗ヒトまたはウサギ抗マウス抱合体１：５０）と室温で３０分間インキュベートした。Ｔｒｉｓ／ＮａＣｌでの３回の洗浄およびＰＢＳ中での１０分間のインキュベーション後、切片をジアミノベンジジン（０．０５％）−過酸化水素（０．０２％）にて室温で１０分間染色した。流水下で反応を停止させ、切片をヘマトキシリンで対比染色した。グリセロール−ゼラチンを使用したマウント後、光学顕微鏡を使用して切片を分析した。
【０２２０】
腫瘍細胞膜抽出物の調製
当該分野で標準的な方法を使用して、腫瘍細胞からの膜タンパク質の単離を記載のように行った（例えば、Ｈｅｎｓｅｌら（Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ８１：２２９−２３５，１９９９）に記載）。特に、コンフルエントなＢＸＰＣ−３腫瘍細胞をＰＢＳで２回洗浄し、細胞スクレーパで回収し、遠心分離し、低張緩衝液（２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、３ｍＭ  ＫＣｌ、３ｍＭ  ＭｇＣｌ２）に再懸濁し、氷上で１５分間インキュベートした。次いで、細胞を５分間超音波処理し、１０，０００×ｇで１０分間の遠心分離によって核をペレット化した。上清をスイング式ローター中にて１０，０００×ｇで４０分間遠心分離して膜をペレット化した。低張緩衝液でのペレットの洗浄後、ペレットを膜溶解緩衝液（５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、０．１ｍＭ  ＥＤＴＡ、１０％グリセロール、および１％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００）に再溶解した。完全プロテアーゼインヒビター（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ，Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ）も全溶液に添加した。
【０２２１】
ウェスタンブロッティング
例えば、Ｈｅｎｓｅｌら（Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ８１：２２９−２３５，１９９９）に記載の標準的な方法を使用してウェスタンブロットを行った。簡潔に述べれば、ブロッティングしたニトロセルロース膜を、３％低脂肪粉乳を含むＰＢＳでブロッキングし、その後に２０〜４０μｇのＰＭ−２ヒトＩｇＭ抗体または無関係のヒトコントロールＩｇＭ（ＣｈｒｏｍＰｕｒｅ  ＩｇＭ，Ｄｉａｎｏｖａ）と１時間インキュベートした。二次抗体（ペルオキシダーゼ共役ウサギ抗ヒトＩｇＭ抗体、１：１，０００，Ｄｉａｎｏｖａ）を、Ｐｉｅｒｃｅ（ＫＭＦ，Ｓｔ．Ａｕｇｕｓｔｉｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）のＳＵＰＥＲＳＩＧＮＡＬ化学発光キットを使用して検出した。
【０２２２】
サイトスピン調製
接着性の成長細胞を、トリプシン／ＥＤＴＡ（ＰＡＡ，Ｖｉｅｎｎａ，Ａｕｓｔｒｉａ）の添加によって剥離し、その後に加湿インキュベーター中での５分間のインキュベーション（３７℃、５％ＣＯ２）および１，５００ｒｐｍで５分間の遠心分離を行った。次いで、細胞を、１０ｍｌのＲＰＭＩ−１６４０細胞培養培地（ＰＡＡ，Ｖｉｅｎｎａ，Ａｕｓｔｒｉａ）で２回洗浄した。細胞膜を、密度１×１０５細胞／ｍｌに調整した。この溶液から、サイトスピン遠心分離機（サイトスピン２，Ｓｈａｎｄｏｎ，ＵＫ）を使用して１００μ１を顕微鏡スライド上にて５０ｒｐｍで２分間遠心分離した。得られたサイトスピンを少なくとも２時間乾燥させ、以下に明記の通り染色した。
【０２２３】
サイトスピンおよび凍結切片の免疫ペルオキシダーゼ染色
サイトスピンを室温で少なくとも２時間乾燥させるか、凍結切片を切断後少なくとも２時間乾燥させた。次いで、切片またはサイトスピンを、アセトン中で１０分間固定した。固定した凍結切片／サイトスピンを室温で３０分間乾燥させ、Ｔｒｉｓ−ＮａＣｌ（５リットルの蒸留水中に３グラムＴｒｉｓ、４０．５グラムＮａＣＩを含み、ＨＣｌでｐＨ７．４に調整）で３回洗浄し、Ｔｒｉｓ／ＮａＣｌに５分間入れた。凍結切片／サイトスピンを、３％粉乳を含むＰＢＳ（１００μ１／凍結切片／サイトスピン）で１５〜３０分間ブロッキングし、Ｔｒｉｓ−ＮａＣｌで３回洗浄した。凍結切片／サイトスピンを、凍結切片／サイトスピンあたり１００μ１の一次抗体（例えば、０．５％ＢＳＡ／ＰＢＳ中に２０μｇ／ｍｌ；ＢＳＡ／ＰＢＳで５０倍希釈したＣＫ  ８；ＢＳＡ／ＰＢＳで１０倍希釈したＣＡＭ  ５．２；またはネガティブコントロールとしてのＲＰＭＩ１６４０培地（ＰＡＡ，Ｖｉｅｎｎａ，Ａｕｓｔｒｉａ））中にて室温の湿室中で３０分間インキュベートした。インキュベーション後、凍結切片／サイトスピンを、Ｔｒｉｓ−ＮａＣｌで３回洗浄した。
【０２２４】
次いで、凍結切片／サイトスピンを、凍結切片／サイトスピンあたり二次抗体（７０％ＰＢＳ＋３０％ウサギまたはヒト血清＋例えば、５０倍ウサギ抗マウス抗体（ペルオキシダーゼ共役）、または５０倍ウサギ抗ヒトＩｇＭ抗体（ペルオキシダーゼ共役；Ｄａｋｏ，Ｈａｍｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を含む１００μｌの溶液中にて湿室中、室温で３０分間インキュベートし、Ｔｒｉｓ−ＮａＣｌで３回洗浄し、ＰＢＳに１０分間入れた。凍結切片／サイトスピンを、０．０５％ジアミノベンジジンおよび０．０２％過酸化水素（Ｓｉｇｍａ，Ｔａｕｆｋｉｒｃｈｅｎ（Ｍｕｅｎｃｈｅｎ），Ｇｅｒｍａｎｙ）を含む１００μｌ溶液中で１０分間インキュベートした。インキュベーション後、凍結切片／サイトスピンを蒸留水で洗浄し、ヘマトキシリン含有溶液（Ｒｏｔｈ，Ｋａｒｌｓｒｕｈｅ，Ｇｅｒｍａｎｙ）に５分間入れた。次いで、凍結切片／サイトスピンを、流水下で１５分間リンスし、蒸留水で洗浄し、予め加温したグリセロール−ゼラチンで覆った。
【０２２５】
（実施例２）
本実施例は、ＰＭ−２モノクローナル抗体を発現する細胞株の生成を説明する。
【０２２６】
上記のように、癌患者の脾臓またはリンパ節から得たリンパ球の異種骨髄腫細胞株ＨＡＢ−１との融合によってハイブリドーマを発現するＰＭ−２モノクローナル抗体を得た（Ｆａｌｌｅｒ，ら、Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ６２：５９５−５９８，１９９０）。リンパ系供給源を、患者の年齢または性別に関して予め選択しなかった。得られた細胞は、３細胞の融合物であるトリオーマとして公知のハイブリドーマ型である。正常なＢリンパ球のように、このトリオーマは抗体を産生する能力を持たなければならない。抗体の特異性を、トリオーマ生成のために使用した患者由来の元のリンパ球の特異性によって決定する。
【０２２７】
ハイブリドーマ上清を、ＥＬＩＳＡアッセイを使用して抗体産生についてスクリーニングした。ＥＬＩＳＡ後、主に、腫瘍特異的反応性についてその自己腫瘍に対して免疫組織化学的に抗体を試験した。ＰＭ−２を、膵臓癌患者のリンパ球から生成した。
【０２２８】
ヒトモノクローナル抗体ＰＭ−２の重鎖可変領域のアミノ酸配列（配列番号１）および核酸配列（配列番号３）を本明細書中に開示する。ＰＭ−２重鎖可変領域のＣＤＲ１はアミノ酸１１〜１８をコードするヌクレオチド３１〜５４にわたり、ＣＤＲ２はアミノ酸３６〜４３をコードするヌクレオチド１０６〜１２９にわたり、ＣＤＲ３はアミノ酸８２〜１００をコードするヌクレオチド２４４〜３００にわたる。
【０２２９】
ヒトモノクローナル抗体ＰＭ−２の軽鎖可変領域のアミノ酸配列（配列番号２）および核酸配列（配列番号４）を本明細書中に開示する。ＰＭ−２軽鎖可変領域のＣＤＲ１はアミノ酸２６〜３４をコードするヌクレオチド７６〜１０２にわたり、ＣＤＲ２はアミノ酸５２〜５８をコードするヌクレオチド１５４〜１７４にわたり、ＣＤＲ３はアミノ酸９７〜１０３をコードするヌクレオチド２８９〜３０９にわたる。
【０２３０】
（実施例３）
本実施例は、ＰＭ−２抗体の免疫組織化学的特徴を説明する。
【０２３１】
ハイブリドーマによって分泌されたＰＭ−２モノクローナル抗体を特徴づけるために、材料と方法に記載の免疫ペルオキシダーゼアッセイを使用して、正常組織および腫瘍組織のパネルに対する抗体を試験した。このアッセイにより、組織が抗体によって染色された概観および抗原分布が得られる。
【０２３２】
第１に、異なる患者由来の同一の腫瘍型に対する抗体を試験した。次いで、他の器官の腫瘍に対する抗体を試験し、最終的には正常組織に対する抗体を試験した。これらのアッセイを使用して、ヒトＰＭ−２モノクローナル抗体を同定した。ＰＭ−２モノクローナル抗体は、ＩｇＭ／λアイソタイプである（表１）。
【０２３３】
【表１】
2011519819.tif 000004
ヒトモノクローナルＩｇＭ抗体の遺伝的起源を調査するために、ＶＨおよびＶＬ遺伝子を増幅し、クローン化し、配列決定した。配列をＩＭＧＴ／Ｖ−ＱＵＥＳＴデータベース中の生殖系列配列と比較して、最も相同性の高い生殖系列遺伝子を同定し、体細胞変異を検出した。結果を表２に示す。表２にまとめた通り、最も近い報告された生殖系列ＶＨ遺伝子に対するＶＨセグメントのヌクレオチド配列の同一度は９７．２〜１００％の範囲であった。
【０２３４】
【表２】
2011519819.tif 000005
生殖系列遺伝子に対するＶＨ領域の高い相同性および低いＲ／Ｓ比（抗体の親和性成熟の指標である）は、抗体が抗原接触に起因する体細胞変異による親和性成熟を受けなかったことを示す。相同性がもっとも高いＶＬ生殖系列遺伝子に対するＶＬセグメントのヌクレオチド配列の同一度は、λ軽鎖遺伝子を使用した９７．２〜９９．０％の範囲であった。データは、ＰＭ−２が天然に存在する非親和性成熟化抗体のファミリーに属することを示す。
【０２３５】
自己腫瘍に対する最初の試験後、ＰＭ−２抗体の反応パターンを、種々のパラフィン包埋および凍結包埋された癌腫および正常組織に対する免疫組織化学的染色を使用してより詳細に調査した。ＰＭ−２抗体は、検出可能な正常組織への結合を示さなかった（表３）。
【０２３６】
【表３】
2011519819.tif 000006
抗体ＰＭ−２は、試験した種々の腫瘍組織（膵臓腺癌および浸潤性乳管癌が含まれる）に対して広範な染色パターンを示した。ＰＭ−２抗体は、スクリーニングした１４７の異なる腫瘍サンプル（癌腫）の多数（９９％）に結合する（表４）。
【０２３７】
【表４】
2011519819.tif 000007
これらの実験におけるポジティブコントロール抗体は、ヒトサイトケラチン５／６（「ＣＫ  ５／６」；Ｄａｋｏ  Ａ／Ｓ，Ｄｅｎｍａｒｋ）に対するマウスモノクローナル抗体またはヒトサイトケラチン（「ＣＡＭ  ５．２」；Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ，Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ）に対するマウスモノクローナル抗体であった。
【０２３８】
ＰＭ−２によって認識される抗原を決定するために、膵腺癌細胞株ＢＸＰＣ−３の膜抽出物を使用してウェスタンブロットを行った。抗体ＰＭ−２は、細胞株ＢＸＰＣ−３上の約１１５ｋＤａのタンパク質抗原と反応した。抗体ＰＭ−２は、ＭＫＮおよびＣＲＬの細胞膜画分上のタンパク質抗原と反応した。これは、約１００および１１５ｋＤａの二重のバンドとして時折出現する。
【０２３９】
ＰＭ−２はまた、多数の癌腫細胞株を特異的に染色した。特に、ＰＭ−２抗体は、ＣＡＣＯ−２ヒト結腸直腸腺癌細胞株（ＡＴＣＣ受入番号ＨＢＴ−３７、ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １６９）、ヒト結腸癌腫細胞株ＣＯＬＯ−３２０（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  １４４）、ヒト結腸癌腫細胞株ＣＯＬＯ−２０６Ｆ（ＤＳＭＺ受入番号ＡＣＣ  ２１）、ＨＴ−２９ヒト結腸直腸腺癌細胞株（ＡＴＣＣ受入番号ＨＴＢ−３８）、ＡＳＰＣ−１膵癌腫細胞、ＢＸＰＣ−３膵癌腫細胞株、およびＡ５４９肺癌腫細胞に特異的に結合する。
【０２４０】
（実施例４）
本実施例は、アポトーシスを誘導するＰＭ−２抗体を説明する。  
【０２４１】
当該分野の多数のアッセイ標準を使用して、抗体が細胞のアポトーシスを誘導するかどうかを決定することができる。例えば、ＣＥＬＬ  ＤＥＡＴＨ  ＤＥＴＥＣＴＩＯＮ  ＥＬＩＳＡＰＬＵＳ（Ｒｏｃｈｅ，Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して、ＰＭ−２抗体がアポトーシスを誘導する範囲を分析した。細胞死検出ＥＬＩＳＡは、ＤＮＡおよびヒストンにそれぞれ指向するマウスモノクローナル抗体を使用した、定量的サンドイッチ酵素免疫アッセイの原理に基づく。このアッセイは、アポトーシスによって死滅する細胞の細胞質に放出されるモノヌクレオソームおよびオリゴヌクレオソームを特異的に決定する。
【０２４２】
特に、１×１０４ＢＸＰＣ−３腫瘍細胞を９６ウェルプレートにプレートし、異なる濃度のヒトＩｇＭ−抗体の存在下にて７％ＣＯ２を含むＣＯ２インキュベーター中、３７℃で２４時間インキュベートした。無関係のＩｇＭ抗体を含む枯渇した細胞培養上清をネガティブコントロールとして使用した。インキュベーション後、細胞を１０分間遠心分離し、上清を除去した。次いで、得られた細胞ペレットを、溶解緩衝液と共に室温で３０分間インキュベートした。遠心分離後、上清をストレプトアビジンコーティングマイクロタイタープレート（ＭＴＰ）に移し、免疫試薬（１０％抗ヒストン−ビオチン、１０％抗ＤＮＡ−ペルオキシダーゼ（抗ＤＮＡ  ＰＯＤ）と８０％インキュベーション緩衝液との混合物）を添加し、その後に室温のＭＴＰ震盪機にて２５０ｒｐｍで２時間インキュベートした。インキュベーション後、非結合成分を、インキュベーション緩衝液を使用した洗浄工程によって除去した。ＰＯＤを、基質としてＡＢＴＳ（商標）（１  ＡＢＴＳ（商標）（２，２’−アジノ−ジ［３−エチル−ベンズ−チアゾリン−スルホナート）錠を含む５ｍｌ基質緩衝液）を使用して測光法で決定した。抗体誘導性アポトーシスを、緑色沈殿の色の強度の決定によって測定した。この沈殿は、ブランク（基準波長約４９０ｎｍ）としてのＡＢＴＳ（商標）溶液と比較した４１５ｎｍの波長でのＥＬＩＳＡリーダーを使用したこの反応の結果として形成される。この色の強度に基づいて、抗体誘導性アポトーシスレベルを計算した。これらの試験は、インキュベーション２４時間後にＰＭ−２がＢＸＰＣ−３膵臓腫瘍細胞株のアポトーシスを誘導することを明確に示した。
【０２４３】
さらに、図１に示すように、ＰＭ−２モノクローナル抗体は、ネガティブコントロールと比較した場合にインキュベーション２４時間後にＢＸＰＣ−３ヒト膵癌腫細胞のアポトーシスを誘導する。Ｙ軸は４１５ｎｍと基準波長４９０ｎｍとの間の吸光度（Ａ４１５−Ａ４９０）の相違であり、ネガティブコントロールはＲＰＭＩ  １４６０培地である。ＰＭ−２抗体の濃度は、６μｇまたは１２μｇ／ｍｌ上清のいずれかであった。
【０２４４】
（実施例５）
本実施例は、細胞増殖を阻害する抗体を説明する。
【０２４５】
細胞増殖を、当該分野の標準である多数の方法（例えば、テトラゾリウム塩の還元）によってアッセイすることができる。黄色のテトラゾリウム塩３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド（「ＭＴＴ」）（Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．  Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）は、その一部がミトコンドリアデヒドロゲナーゼ酵素の作用によって代謝活性細胞によって還元されて、ＮＡＤＨおよびＮＡＤＰＨの還元等価物が生成される。得られた細胞内の紫色ホルマザンを溶解し、分光光度的手段によって定量することができる。ＭＴＴ細胞増殖アッセイは細胞増殖率を測定し、代謝事象によってアポトーシスが誘導される場合、細胞生存度の減少を測定する。
【０２４６】
ＭＴＴアッセイのために、ＢＸＰＣ−３細胞をトリプシン処理し、１０％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）、１％  グルタミン、および１％  ペニシリン／ストレプトマイシン（完全培地）を含む１０ｍｌのＲＰＭＩ−１４６０培地に細胞を再懸濁した。次いで、細胞を計数し、１×１０６細胞／ｍｌに希釈した。５０μｌのこの懸濁液を、９６ウェルプレートのウェルにピペッティングして約５×１０４細胞／ウェルにした。ウェルの１列目を空のままにした。次いで、完全培地で希釈した５０μｌの抗体を各ウェルに添加した。次いで、９６ウェルプレートを、３７℃インキュベーター中で２４〜４８時間インキュベートした。インキュベーション後、５０μｌ  ＭＴＴ溶液（５ｍｇ／ｍｌ  ＰＢＳ）を各ウェルに添加した。９６ウェルプレートを３７℃で３０分間インキュベートし、８００×ｇで５分間遠心分離した。上清を吸引し、１５０μｌのジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を各ウェルに添加し、細胞ペレットを再懸濁した。波長５４０ｎｍおよび基準波長６９０ｎｍでの吸光度をＥＬＩＳＡリーダーで決定した。
【０２４７】
２４または４８時間後、ＰＭ−２抗体は濃度依存性様式で各腫瘍細胞株の細胞増殖を阻害した一方で、枯渇細胞培養上清を使用したコントロールでは不変のままであった。
【０２４８】
同様に、ＢＸＰＣ−３膵癌腫細胞のＰＭ−２モノクローナル抗体とのインキュベーションにより、２４時間後および４８時間後の増殖および細胞生存度が減少した。
【０２４９】
（実施例６）
本実施例は、新生物のｉｎ  ｖｉｖｏ画像化を説明する。
【０２５０】
本明細書中に記載の方法を使用して、直腸結腸癌腫などの新生物を有する疑いのある患者に、一定用量の放射性ヨウ素標識ＰＭ−２抗体（別の腫瘍特異的ポリペプチド）および放射性標識非特異性抗体を投与することができる。Ｇｏｌｄｅｎｂｅｒｇら（Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．，２９８：１３８４，１９７８）の手順にしたがって、画像化のために腫瘍を局在化することができる。１３１Ｉ−ＰＭ−２抗体およびＴｃ−９９ｍ標識された非特異的抗体の同体積の溶液の輸液を静脈内で患者に投与することができる。試薬の静脈内投与の前に、典型的には、患者を、抗体調製物（非標識）または抗体調製物と同種の抗体に対する過敏症について予め試験する。１３１Ｉの甲状腺取り込みを遮断するために、ルゴール液を経口投与する。この投与は、放射性ヨウ素標識抗体の注射の１日以上前から、１日あたり５滴を２回または３回の用量で開始する。種々の身体領域および視点の画像を、標識調製物の注射から４、８、および２４時間後に撮影することができる。存在する場合、新生物（例えば、直腸結腸癌腫）を、ＤｅＬａｎｄら（Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．４０：３０４６，１９８０）によって１３１Ｉ標識抗ＣＥＡ抗体およびＴｃ−９９ｍ標識ヒト血清アルブミンについて記載のように、ガンマカメラ画像によって１３１Ｉ数からＴｃ−９９ｍ数を差し引いくことによって検出する。注射８時間後、画像は通常は明確であり、２４時間までのスキャンで改善される。
【０２５１】
（実施例７）
本実施例は、播種性腫瘍細胞（ＤＴＣ）の研究を説明する。
【０２５２】
血中の播種性腫瘍細胞（ＤＴＣ）の検出は、多数の変動要因（腫瘍からの細胞の遊離、サンプルの調製、およびサンプリングの時点が含まれる）に依存する。したがって、小動物の血液における正の結果または負の結果は変動し得る。
【０２５３】
骨髄中のＤＴＣの検出は、動物中のＤＴＣ細胞のより正確な指標であり得る。なぜなら、骨髄は血液よりもはるかに「安定な」区画であるからである。さらに、骨髄中の腫瘍細胞はより局所的に固定され、一旦これらの細胞が骨髄に侵入すると、髄内に維持される可能性がより高い。したがって、骨髄中のＤＴＣの検出は、血中のＤＴＣの測定に影響を及ぼす変動要因に対する依存性は低い。
【０２５４】
ＤＴＣに及ぼすＰＭ−２抗体の影響を決定するために、異種移植胃癌（胃腺癌細胞株）のマウス動物モデルを使用した（Ｉｌｌｅｒｔら、Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ  ２０：５４９（２００３））。この動物モデルでは、胃腺癌細胞株を胃内に移植する場合、局所腫瘍成長および遠隔転移の形成が起こる。ＤＴＣはまた、このモデルにおいて骨髄および血中で検出される。この動物モデルにおけるＤＴＣの発達は、転移性腫瘍成長と相関した（Ｉｌｌｅｒｔら、Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ  ２０：５４９（２００３））。
【０２５５】
サイトケラチン２０（ＣＫ２０）の発現は、この胃癌動物モデルにおけるＤＴＣのマーカーである。抗体ＰＭ−２またはコントロールＩｇＭで処置した胃癌を有する動物の骨髄および血液中のＤＴＣの存在を、ＣＫ２０レベルの測定によって決定した。データは、コントロールＩｇＭと比較してＰＭ−２抗体で処置した動物におけるＣＫ２０レベルが軽減することを示し、これは、動物においてＰＭ−２がＤＴＣを軽減させたことを示す。
【０２５６】
動物（２０匹／群）中の骨髄中のＤＴＣを投薬量３００μｇ（５回）で処置したところ、ＩｇＭについては１４匹の動物がＤＴＣに陽性であったのに対して、ＰＭ−２処置群では、７匹の動物しかＤＴＣに陽性ではなかった。このデータは、ＰＭ−２処置動物の骨髄中のＤＴＣの７０％から３５％への減少を示す（ｐ＝０，０５６２；フィッシャーの正確検定）。
【０２５７】
動物における総腫瘍負荷の測定として、動物の骨髄中および血中のＤＴＣを決定した。コントロールＩｇＭ群では、２０匹のうち１０匹が骨髄中および血中の両方にＤＴＣを有し、ＰＭ−２療法後には２０匹のうち３匹のみが骨髄中および血中の両方にＤＴＣを有していた（５０％対１５％，ｐ＝０，０４０７，フィッシャーの正確検定）。
【０２５８】
高頻度高用量（投薬量５×３００μｇ）のＰＭ−２と低頻度低用量（３×２００μｇ）との比較は、高用量で骨髄中のＤＴＣが減少することを示す。低頻度低用量（３×２００μｇ）では、７／１０動物が骨髄中のＤＴＣに陽性を示した（７０％）。対照的に、高頻度高用量（投薬量５×３００μｇ）では、７／２０動物が骨髄中のＤＴＣに陽性を示した（３５％）。
【０２５９】
上記結果は、ＰＭ−２抗体が転写の確立および形成を軽減することができることを示す。
【０２６０】
（実施例８）
本実施例は、ＰＭ−２抗体のさらなる免疫組織化学的特徴付けを説明する。
【０２６１】
免疫組織化学び分析により、ＰＭ−２抗体が種々の癌形態に結合することが明らかとなった。特に、ＰＭ−２は全ての悪性度および病期の肺腺癌に結合し、男性と女性の間で相違は認められなかった。ＰＭ−２は全ての悪性度および病期の肺扁平上皮癌に結合し、男性と女性の間で相違は認められなかった。したがって、ＰＭ−２抗原は、男性および女性の両方の全ての悪性度および病期の肺腺癌および肺扁平上皮癌腫に上で遍在的に発現する。したがって、ＰＭ−２抗原は、男性および女性の両方の全病期の肺腺癌および肺扁平上皮癌腫の処置のための治療としてのＰＭ−２抗体およびその機能的フラグメントの標的である。
【０２６２】
免疫組織化学分析により、ＰＭ−２抗体が種々の癌転移型に結合することも明らかとなった。特に、ＰＭ−２は、肺腺癌および肺扁平上皮癌腫から生じるリンパ節および脳への転移に結合する。ＰＭ−２はまた、乳房の浸潤性腺管癌および浸潤性小葉癌から生じるリンパ節転移に結合する。ＰＭ−２は、さらに、結腸腺癌から生じる肝臓およびリンパ節転移に結合する。ＰＭ−２は、さらに、胃腺癌（腸およびびまん性）、膵腺癌、および頭頸部扁平上皮癌腫から生じるリンパ節転移に結合する。ＰＭ−２は、さらに、直腸、食道、耳下腺、皮膚、鼻、結腸、副腎の悪性黒色腫（転移）に結合する。
【０２６３】
したがって、ＰＭ−２抗原は、これらおよび他の癌から生じる転移性腫瘍の確立もしくは形成または確立された転移性腫瘍の成長の軽減または阻害、および転移性腫瘍の形成もしくは確立に対する癌の再発もしくは進行のリスクまたは確立もしくは形成された転移の成長もしくは増殖の軽減のための良好な療法としてのＰＭ−２抗体およびその機能的フラグメントの良好な標的である。
【図１】
2011519819.tif 000008
【手続補正書】
【提出日】平成22年8月19日(2010.8.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
2011519819000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成22年11月11日(2010.11.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
処置を必要とする被験体において新形成、腫瘍、または癌の転移を処置するための組成物であって、該組成物は、
細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合について競合する抗体またはその機能的フラグメントの、該被験体における該新形成、腫瘍、または癌の転移を処置するのに有効な量
を含む、組成物。
【請求項２】
処置を必要とする被験体における新形成、腫瘍、または癌から生じる転移の形成または確立を軽減または阻害するための組成物であって、該組成物は、
細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合について競合する抗体またはその機能的フラグメントの、該被験体における新形成、腫瘍、または癌から生じる転移の形成または確立を軽減または阻害するのに有効な量
を含む、組成物。
【請求項３】
処置を必要とする被験体における転移に進展し得るか転移を生じ得る新形成細胞、腫瘍細胞、または癌細胞の成長、増殖、移動性、または侵襲性を軽減または阻害するための組成物であって、該組成物は、
細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合について競合する抗体またはその機能的フラグメントの、該転移に進展し得るか転移を生じ得る新形成細胞、腫瘍細胞、または癌細胞の成長、増殖、移動性、または侵襲性を軽減または阻害するのに有効な量
を含む、組成物。
【請求項４】
処置を必要とする被験体における新形成、腫瘍、または癌の再発、あるいは新形成、腫瘍、または癌の進行を軽減または阻害するための組成物であって、該組成物は、
細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合について競合する抗体またはその機能的フラグメントの、該被験体における新形成、腫瘍、または癌の再発、あるいは新形成、腫瘍、または癌の進行の軽減または阻害に有効な量
を含む、組成物。
【請求項５】
被験体で転移が形成または確立された後に該転移の成長または増殖を軽減または阻害するための組成物であって、該組成物は、
細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合について競合する抗体またはその機能的フラグメントの、該被験体で該転移が形成または確立された後に該転移の成長または増殖を軽減または阻害するのに有効な量
を含む、組成物。
【請求項６】
前記新形成、腫瘍、癌、または転移が、脳、脊椎、頭部もしくは頸部、乳房、食道、口腔、鼻咽頭、鼻もしくは洞、甲状腺、頭部もしくは頸部、胃腸管、胃、小腸、十二指腸、回腸、空腸、肺、肝臓、膵臓、腎臓、副腎、膀胱、結腸、直腸、尿生殖器、前立腺、子宮、子宮内膜、子宮頸部、卵巣、骨髄、リンパ、血液、骨、精巣、陰茎、皮膚もしくは筋肉、または造血系の少なくとも一部を冒すかそこに存在する、請求項１から５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７】
前記新形成、腫瘍、癌、または転移が造血性である、請求項１から５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項８】
前記新形成、腫瘍、癌、または転移が、肉腫、癌腫、腺癌、黒色腫、骨髄腫、芽細胞腫、神経膠腫、リンパ腫、または白血病を含む、請求項１から５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９】
新形成、腫瘍、癌、または転移が、肺腺癌、肺癌腫、びまん性または間質性の胃癌腫、結腸腺癌、前立腺腺癌、食道癌腫、乳癌腫、膵腺癌、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、または子宮腺癌を含む、請求項１から５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記組成物の投与が、前記新形成、腫瘍、癌、または転移に関連する１つまたは複数の有害な身体症状を緩和または改善することをもたらす、請求項１から５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１１】
前記処置により、転移の数、体積、またはサイズが軽減または減少するか、転移の数、体積、またはサイズの増加が阻害または防止されるか、前記新形成、腫瘍、癌、または転移の進行または悪化が阻害されるか、転移の細胞溶解またはアポトーシスが刺激されるか、転移の成長、増殖、または生存が阻害、軽減、または減少される、請求項１から５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１２】
前記組成物の投与が、前記被験体の寿命が延長または長期化する、請求項１から５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１３】
前記被験体が、抗新生物処置もしくは抗新生物治療、抗腫瘍処置もしくは抗腫瘍治療、抗癌処置もしくは抗癌治療、抗転移処置もしくは抗転移治療、または免疫促進処置もしくは免疫促進治療の候補であるか、それを受けているか、それを受けていた、請求項１から５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１４】
前記被験体が哺乳動物である、請求項１から５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１５】
前記被験体がヒトである、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
処置を必要とする被験体における新形成、腫瘍、または癌の転移を処置するための組成物であって、該組成物は、
配列番号１または２に示す重鎖配列または軽鎖配列と少なくとも７０％同一の重鎖配列および軽鎖配列を含む抗体または機能的フラグメントの、該被験体における該新形成、腫瘍、または癌の転移を処置するのに有効な量
を含む、組成物。
【請求項１７】
処置を必要とする被験体における新形成、腫瘍、または癌から生じる転移の形成または確立を軽減または阻害するための組成物であって、該組成物は、
配列番号１または２に示す重鎖配列または軽鎖配列と少なくとも７０％同一の重鎖配列および軽鎖配列を含む抗体またはその機能的フラグメントの、該被験体における新形成、腫瘍、または癌から生じる転移の形成または確立を軽減または阻害するのに有効な量
を含む、組成物。
【請求項１８】
処置を必要とする被験体における転移に進展し得るか転移を生じ得る新形成細胞、腫瘍細胞、または癌細胞の成長、増殖、移動性、または侵襲性を軽減または阻害するための組成物であって、該組成物は、
配列番号１または２に示す重鎖配列または軽鎖配列と少なくとも７０％同一の重鎖配列および軽鎖配列を含む抗体または機能的フラグメントの、該転移に進展し得るか該転移を生じ得る新形成細胞、腫瘍細胞、または癌細胞の成長、増殖、移動性、または侵襲性を軽減または阻害するのに有効な量
を含む、組成物。
【請求項１９】
処置を必要とする被験体における新形成、腫瘍、または癌の再発、あるいは新形成、腫瘍、または癌の進行を軽減または阻害するための組成物であって、該組成物は、
配列番号１または２に示す重鎖配列または軽鎖配列と少なくとも７０％同一の重鎖配列および軽鎖配列を含む抗体または機能的フラグメントの、該被験体における新形成、腫瘍、または癌の再発、あるいは新形成、腫瘍、または癌の進行の軽減または阻害に有効な量
を含む、組成物。
【請求項２０】
被験体で転移が形成または確立された後に該転移の成長または増殖を軽減または阻害するための組成物であって、該組成物は、
配列番号１または２に示す重鎖配列または軽鎖配列と少なくとも７０％同一の重鎖配列および軽鎖配列を含む抗体またはその機能的フラグメントの、該被験体で該転移が形成または確立された後に該転移の成長または増殖を軽減または阻害するのに有効な量
を含む、組成物。
【請求項２１】
被験体で転移が形成または確立された後に該被験体におけるさらなる転移の形成または確立を軽減または阻害するための組成物であって、該組成物は、
配列番号１または２に示す重鎖配列または軽鎖配列と少なくとも７０％同一の重鎖配列および軽鎖配列を含む抗体または機能的フラグメントの、該被験体で転移が形成または確立された後に該被験体におけるさらなる転移の形成または確立を軽減または阻害するのに有効な量
を含む、組成物。
【請求項２２】
前記新形成、腫瘍、癌、または転移が、脳、脊椎、頭部もしくは頸部、乳房、食道、口、鼻咽頭、鼻もしくは洞、甲状腺、頭部もしくは頸部、胃腸管、胃、小腸、十二指腸、回腸、空腸、肺、肝臓、膵臓、腎臓、副腎、膀胱、結腸、直腸、尿生殖器、前立腺、子宮、子宮内膜、子宮頸部、卵巣、骨髄、リンパ、血液、骨、精巣、陰茎、皮膚もしくは筋肉、または造血系の少なくとも一部を冒すかそこに存在する、請求項１６から２１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２３】
前記新形成、腫瘍、癌、または転移が造血性である、請求項１６から２１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２４】
前記新形成、腫瘍、癌、または転移が、肉腫、癌腫、腺癌、黒色腫、骨髄腫、芽細胞腫、神経膠腫、リンパ腫、または白血病を含む、請求項１６から２１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２５】
前記組成物の投与が、前記新形成、腫瘍、癌、または転移に関連する１つまたは複数の有害な身体症状を緩和または改善することをもたらす、請求項１６から２１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２６】
前記処置により、転移の数、体積、またはサイズが軽減または減少するか、転移の数、体積、またはサイズの増加が阻害または防止されるか、前記新形成、腫瘍、癌、または転移の進行または悪化が阻害されるか、転移の細胞溶解またはアポトーシスが刺激されるか、転移の成長、増殖、または生存が阻害、軽減、または減少される、請求項１６から２１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２７】
前記組成物の投与が、前記被験体の寿命を延長または長期化する、請求項１６から２１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２８】
前記被験体が哺乳動物である、請求項１６から２１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２９】
前記被験体がヒトである、請求項２８に記載の組成物。
【請求項３０】
前記抗体またはその機能的フラグメントが、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列と少なくとも７０％同一の重鎖配列および軽鎖配列を含む、請求項１６から２１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３１】
前記抗体またはその機能的フラグメントが、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列の１つまたは複数のＣＤＲと少なくとも８０％同一の１つまたは複数のＣＤＲを有する重鎖配列および軽鎖配列を含む、請求項１６から２１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３２】
前記抗体またはその機能的フラグメントが、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列の１つまたは複数のＣＤＲと少なくとも９０％同一の１つまたは複数のＣＤＲを有する重鎖配列および軽鎖配列を含む、請求項１６から２１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３３】
前記抗体またはその機能的フラグメントが、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列の１つまたは複数のＣＤＲと少なくとも１００％同一の１つまたは複数のＣＤＲを有する重鎖配列および軽鎖配列を含む、請求項１６から２１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３４】
前記抗体またはその機能的フラグメントが、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合するエピトープまたは抗体に結合する、請求項１から５または１６から２１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３５】
前記抗体またはその機能的フラグメントが、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合について競合する、請求項１から５または１６から２１のいずれか１項に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２６】
本発明は、さらに、望ましくない細胞増殖または細胞増殖障害（例えば、新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移）を有するか有するリスクが増加した被験体の診断方法を提供する。種々の実施形態では、本方法は、被験体由来の生体材料または生体サンプルを準備する工程、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体と、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合する細胞、抗原、またはエピトープに結合する抗体または機能的フラグメント、または細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体の重鎖配列または軽鎖配列の可変領域と約６０％以上同一の重鎖または軽鎖可変領域配列を含む抗体または機能的フラグメントへの結合につき競合する抗体または機能的フラグメントと生体材料または生体サンプルを、抗体または機能的フラグメントを結合させる条件下で接触させる工程、および細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体に結合する細胞、抗原、またはエピトープへの抗体の結合についてアッセイする工程を含む。特定の態様では、被験体の診断方法は、望ましくない細胞増殖または細胞増殖障害（例えば、新形成、腫瘍、もしくは癌、または転移）を有するか有するリスクが増加している被験体を同定する。１つの態様では、生体材料または生体サンプルを、哺乳動物（例えば、ヒトなどの霊長類）被験体から得る。さらなる態様では、生体材料または生体サンプルは、生検（肺、膵臓、胃、乳房、食道、卵巣、または子宮の生検など）を含む。
・本発明はさらに、以下を提供し得る：
・（項目１）
処置を必要とする被験体において新形成、腫瘍、または癌の転移を処置するための方法であって、当該方法は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合について競合する、抗体またはその機能的フラグメントを、当該被験体における当該新形成、腫瘍、または癌の転移を処置するのに有効な量、当該被験体に投与する工程を含む、方法。
・（項目２）
１つまたは複数の部位での転移性の新形成、腫瘍、または癌の形成または確立を軽減または阻害するための方法であって、当該方法は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合について競合する、抗体またはその機能的フラグメントを、被験体の１つまたは複数の他の部位での転移性の新形成、腫瘍、または癌の形成または確立を軽減または阻害するのに有効な量、当該被験体に投与する工程を含む、方法。
・（項目３）
処置を必要とする被験体における原発性の新形成、腫瘍、または癌から離れた１つまたは複数の部位、位置、または領域への原発性の新形成、腫瘍、または癌の転移を軽減または阻害するための方法であって、当該方法は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合について競合する、抗体またはその機能的フラグメントを、当該被験体における当該原発性の新形成、腫瘍、または癌から離れた１つまたは複数の部位、位置、または領域への当該原発性の新形成、腫瘍、または癌の転移を軽減または阻害するのに有効な量、当該被験体に投与する工程を含む、方法。
・（項目４）
処置を必要とする被験体における新形成、腫瘍、または癌から生じる転移の形成または確立を軽減または阻害するための方法であって、当該方法は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合について競合する、抗体またはその機能的フラグメントを、当該被験体における新形成、腫瘍、または癌から生じる転移の形成または確立を軽減または阻害するのに有効な量、当該被験体に投与する工程を含む、方法。
・（項目５）
処置を必要とする被験体における転移に進展し得るか転移を生じ得る新形成細胞、腫瘍細胞、または癌細胞の成長、増殖、移動性、または侵襲性を軽減または阻害するための方法であって、当該方法は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合について競合する、抗体またはその機能的フラグメントを、当該転移に進展し得るか転移を生じ得る新形成細胞、腫瘍細胞、または癌細胞の成長、増殖、移動性、または侵襲性を軽減または阻害するのに有効な量、当該被験体に投与する工程を含む、方法。
・（項目６）
処置を必要とする被験体における新形成、腫瘍、または癌の再発、あるいは新形成、腫瘍、または癌の進行を軽減または阻害するための方法であって、当該方法は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合について競合する、抗体またはその機能的フラグメントを、当該被験体における新形成、腫瘍、または癌の再発、あるいは新形成、腫瘍、または癌の進行の軽減または阻害に有効な量、当該被験体に投与する工程を含む、方法。
・（項目７）
被験体で転移が形成または確立された後に当該転移の成長または増殖を軽減または阻害するための方法であって、当該方法は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合について競合する、抗体またはその機能的フラグメントを、当該被験体で当該転移が形成または確立された後に当該転移の成長または増殖を軽減または阻害するのに有効な量、当該被験体に投与する工程を含む、方法。
・（項目８）
被験体で転移が形成または確立された後に当該被験体におけるさらなる転移の形成または確立を軽減または阻害するための方法であって、当該方法は、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合について競合する、抗体またはその機能的フラグメントを、当該被験体で転移が形成または確立された後に当該被験体におけるさらなる転移の形成または確立を軽減または阻害するのに有効な量、当該被験体に投与する工程を含む、方法。
・（項目９）
上記新形成、腫瘍、癌、または転移が、脳、脊椎、頭部もしくは頸部、乳房、食道、口（ｍｏｕｔｈ）、鼻咽頭、鼻もしくは洞、甲状腺、頭部もしくは頸部、胃腸管、胃、小腸、十二指腸、回腸、空腸、肺、肝臓、膵臓、腎臓、副腎、膀胱、結腸、直腸、尿生殖器、前立腺、子宮、子宮内膜、子宮頸部、卵巣、骨髄、リンパ、血液、骨、精巣、陰茎、皮膚もしくは筋肉、または造血系の少なくとも一部を冒すかそこに存在する、項目１から８のいずれか１項に記載の方法。
・（項目１０）
上記新形成、腫瘍、癌、または転移が造血性である、項目１から８のいずれか１項に記載の方法。
・（項目１１）
上記新形成、腫瘍、癌、または転移が、肉腫、癌腫、腺癌、黒色腫、骨髄腫、芽細胞腫、神経膠腫、リンパ腫、または白血病を含む、項目１から８のいずれか１項に記載の方法。
・（項目１２）
新形成、腫瘍、癌、または転移が、肺腺癌、肺癌腫、びまん性または間質性の胃癌腫、結腸腺癌、前立腺腺癌、食道癌腫、乳癌腫、膵腺癌、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、または子宮腺癌を含む、項目１から８のいずれか１項に記載の方法。
・（項目１３）
上記新形成、腫瘍、癌、または転移が、ステージＩ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、またはＶの新形成、腫瘍、癌、または転移を含む、項目１から８のいずれか１項に記載の方法。
・（項目１４）
新形成、腫瘍、癌、または転移が進行性に悪化している、項目１から８のいずれか１項に記載の方法。
・（項目１５）
上記新形成、腫瘍、癌、または転移が寛解期にある、項目１から８のいずれか１項に記載の方法。
・（項目１６）
上記新形成、腫瘍、癌、または転移が固形または液状である、項目１から８のいずれか１項に記載の方法。
・（項目１７）
上記ＰＭ−２抗体または機能的フラグメントを、上記被験体の局所、領域、または全身に投与する、項目１から８のいずれか１項に記載の方法。
・（項目１８）
上記新形成、腫瘍、癌、または転移に関連する１つまたは複数の有害な身体症状を緩和または改善することをもたらす、項目１から８のいずれか１項に記載の方法。
・（項目１９）
上記処置により、転移の数、体積、またはサイズが軽減または減少するか、転移の数、体積、またはサイズの増加が阻害または防止されるか、上記新形成、腫瘍、癌、または転移の進行または悪化が阻害されるか、転移の細胞溶解またはアポトーシスが刺激されるか、転移の成長、増殖、または生存が阻害、軽減、または減少される、項目１から８のいずれか１項に記載の方法。
・（項目２０）
上記被験体の寿命が延長または長期化する、項目１から８のいずれか１項に記載の方法。
・（項目２１）
上記被験体が、抗新生物処置もしくは抗新生物治療、抗腫瘍処置もしくは抗腫瘍治療、抗癌処置もしくは抗癌治療、抗転移処置もしくは抗転移治療、または免疫促進処置もしくは免疫促進治療の候補であるか、それを受けているか、それを受けていた、項目１から８のいずれか１項に記載の方法。
・（項目２２）
抗細胞増殖処置もしくは治療または免疫促進処置もしくは治療を上記被験体に施す工程をさらに含む、項目１から８のいずれか１項に記載の方法。
・（項目２３）
上記処置または治療が、外科的切除、照射療法、放射線療法、化学療法、免疫療法、または温熱療法を含む、項目２２に記載の方法。
・（項目２４）
上記抗細胞増殖処置または治療が、アルキル化剤、代謝拮抗物質、植物抽出物、植物性アルカロイド、ニトロソ尿素、ホルモン、ヌクレオシド、またはヌクレオチドアナログを含む、項目２２に記載の方法。
・（項目２５）
上記抗細胞増殖処置または治療が、シクロホスファミド、アザチオプリン、シクロスポリンＡ、プレドニゾロン、メルファラン、クロラムブシル、メクロレタミン、ブスルファン、メトトレキサート、６−メルカプトプリン、チオグアニン、５−フルオロウラシル、シトシンアラビノシド、ＡＺＴ、５−アザシチジン（５−ＡＺＣ）および５−アザシチジン関連化合物、ブレオマイシン、アクチノマイシンＤ、ミトラマイシン、マイトマイシンＣ、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、ストレプトゾトシン、ヒドロキシ尿素、シスプラチン、ミトタン、プロカルバジン、ダカルバジン、タキソール、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ドキソルビシン、およびジブロモマンニトールから選択される、項目２２に記載の方法。
・（項目２６）
上記免疫促進処置または治療が、リンパ球、形質細胞、マクロファージ、樹状細胞、ＮＫ細胞、またはＢ細胞を含む、項目２２に記載の方法。
・（項目２７）
上記免疫促進処置または治療が、抗体、細胞成長因子、細胞生存因子、細胞分化因子、サイトカイン、またはケモカインを含む、項目２２に記載の方法。
・（項目２８）
上記免疫促進処置または治療が、ＩＬ−２、ＩＬ−１α、ＩＬ−１β、ＩＬ−３、ＩＬ−６、ＩＬ−７、顆粒球−マクロファージ−コロニー刺激因子（ＧＭＣＳＦ）、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−１２、ＴＮＦ−α、ＴＮＦβ、ＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−１β、ＲＡＮＴＥＳ、ＳＤＦ−１、ＭＣＰ−１、ＭＣＰ−２、ＭＣＰ−３、ＭＣＰ−４、エオタキシン、エオタキシン−２、Ｉ−３０９／ＴＣＡ３、ＡＴＡＣ、ＨＣＣ−１、ＨＣＣ−２、ＨＣＣ−３、ＬＡＲＣ／ＭＩＰ−３α、ＰＡＲＣ、ＴＡＲＣ、ＣＫβ、ＣＫβ６、ＣＫβ７、ＣＫβ８、ＣＫβ９、ＣＫβ１１、ＣＫβ１２、Ｃ１０、ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＥＮＡ−７８、ＧＣＰ−２、ＰＢＰ／ＣＴＡＰＩＩＩβ−ＴＧ／ＮＡＰ−２、Ｍｉｇ、ＰＢＳＦ／ＳＤＦ−１、およびリンホタクチンから選択される、項目２２に記載の方法。
・（項目２９）
上記ＰＭ−２抗体または機能的フラグメントを、抗細胞増殖処置もしくは治療または免疫促進処置もしくは治療を施す前、それと実質的に同時、またはその後に投与する、項目２２に記載の方法。
・（項目３０）
上記被験体が哺乳動物である、項目１から８のいずれか１項に記載の方法。
・（項目３１）
上記被験体がヒトである、項目３０に記載の方法。
・（項目３２）
上記被験体が、新形成、腫瘍、癌、または転移の処置または治療を受けているか、またはそれを受けていた、項目１から８のいずれか１項に記載の方法。
・（項目３３）
処置を必要とする被験体における新形成、腫瘍、または癌の転移を処置するための方法であって、当該方法は、配列番号１または２に示す重鎖配列または軽鎖配列と少なくとも７０％同一の重鎖配列および軽鎖配列を含む抗体または機能的フラグメントを、当該被験体における当該新形成、腫瘍、または癌の転移を処置するのに有効な量、当該被験体に投与する工程を含む、方法。
・（項目３４）
１つまたは複数の部位での転移性の新形成、腫瘍、または癌の形成または確立を軽減または阻害するための方法であって、当該方法は、配列番号１または２に示す重鎖配列または軽鎖配列と少なくとも７０％同一の重鎖配列および軽鎖配列を含む抗体または機能的フラグメントを、被験体の１つまたは複数の他の部位での転移性の新形成、腫瘍、または癌の形成または確立を軽減または阻害するのに有効な量、当該被験体に投与する工程を含む、方法。
・（項目３５）
処置を必要とする被験体における原発性の新形成、腫瘍、または癌から離れた１つまたは複数の部位、位置、または領域への原発性の新形成、腫瘍、または癌の転移を軽減または阻害するための方法であって、当該方法は、配列番号１または２に示す重鎖配列または軽鎖配列と少なくとも７０％同一の重鎖配列および軽鎖配列を含む抗体または機能的フラグメントを、当該被験体における当該原発性の新形成、腫瘍、または癌から離れた１つまたは複数の部位、位置、または領域への当該原発性の新形成、腫瘍、または癌の転移を軽減または阻害するのに有効な量、当該被験体に投与する工程を含む、方法。
・（項目３６）
処置を必要とする被験体における新形成、腫瘍、または癌から生じる転移の形成または確立を軽減または阻害するための方法であって、当該方法は、配列番号１または２に示す重鎖配列または軽鎖配列と少なくとも７０％同一の重鎖配列および軽鎖配列を含む抗体またはその機能的フラグメントを、当該被験体における新形成、腫瘍、または癌から生じる転移の形成または確立を軽減または阻害するのに有効な量、当該被験体に投与する工程を含む、方法。
・（項目３７）
処置を必要とする被験体における転移に進展し得るか転移を生じ得る新形成細胞、腫瘍細胞、または癌細胞の成長、増殖、移動性、または侵襲性を軽減または阻害するための方法であって、当該方法は、配列番号１または２に示す重鎖配列または軽鎖配列と少なくとも７０％同一の重鎖配列および軽鎖配列を含む抗体または機能的フラグメントを、当該転移に進展し得るか当該転移を生じ得る新形成細胞、腫瘍細胞、または癌細胞の成長、増殖、移動性、または侵襲性を軽減または阻害するのに有効な量、当該被験体に投与する工程を含む、方法。
・（項目３８）
処置を必要とする被験体における新形成、腫瘍、または癌の再発、あるいは新形成、腫瘍、または癌の進行を軽減または阻害するための方法であって、当該方法は、配列番号１または２に示す重鎖配列または軽鎖配列と少なくとも７０％同一の重鎖配列および軽鎖配列を含む抗体または機能的フラグメントを、当該被験体における新形成、腫瘍、または癌の再発、あるいは新形成、腫瘍、または癌の進行の軽減または阻害に有効な量、当該被験体に投与する工程を含む、方法。
・（項目３９）
被験体で転移が形成または確立された後に当該転移の成長または増殖を軽減または阻害するための方法であって、当該方法は、配列番号１または２に示す重鎖配列または軽鎖配列と少なくとも７０％同一の重鎖配列および軽鎖配列を含む抗体またはその機能的フラグメントを、当該被験体で当該転移が形成または確立された後に当該転移の成長または増殖を軽減または阻害するのに有効な量、当該被験体に投与する工程を含む、方法。
・（項目４０）
被験体で転移が形成または確立された後に当該被験体におけるさらなる転移の形成または確立を軽減または阻害するための方法であって、当該方法は、配列番号１または２に示す重鎖配列または軽鎖配列と少なくとも７０％同一の重鎖配列および軽鎖配列を含む抗体または機能的フラグメントを、当該被験体で転移が形成または確立された後に当該被験体におけるさらなる転移の形成または確立を軽減または阻害するのに有効な量、当該被験体に投与する工程を含む、方法。
・（項目４１）
上記新形成、腫瘍、癌、または転移が、脳、脊椎、頭部もしくは頸部、乳房、食道、口（ｍｏｕｔｈ）、鼻咽頭、鼻もしくは洞、甲状腺、頭部もしくは頸部、胃腸管、胃、小腸、十二指腸、回腸、空腸、肺、肝臓、膵臓、腎臓、副腎、膀胱、結腸、直腸、尿生殖器、前立腺、子宮、子宮内膜、子宮頸部、卵巣、骨髄、リンパ、血液、骨、精巣、陰茎、皮膚もしくは筋肉、または造血系の少なくとも一部を冒すかそこに存在する、項目３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
・（項目４２）
上記新形成、腫瘍、癌、または転移が造血性である、項目３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
・（項目４３）
上記新形成、腫瘍、癌、または転移が、肉腫、癌腫、腺癌、黒色腫、骨髄腫、芽細胞腫、神経膠腫、リンパ腫、または白血病を含む、項目３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
・（項目４４）
新形成、腫瘍、癌、または転移が、肺腺癌、肺癌腫、びまん性または間質性胃癌腫、結腸腺癌、前立腺腺癌、食道癌腫、乳癌腫、膵腺癌、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌、または子宮腺癌を含む、項目３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
・（項目４５）
上記新形成、腫瘍、癌、または転移が、ステージＩ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、またはＶの新形成、腫瘍、癌、または転移を含む、項目３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
・（項目４６）
新形成、腫瘍、癌、または転移が進行性に悪化している、項目３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
・（項目４７）
上記新形成、腫瘍、癌、または転移が寛解期にある、項目３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
・（項目４８）
上記新形成、腫瘍、癌、または転移が固形または液状である、項目３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
・（項目４９）
ＰＭ−２抗体または機能的フラグメントを、上記被験体の局所、領域、または全身に投与する、項目３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
・（項目５０）
上記新形成、腫瘍、癌、または転移に関連する１つまたは複数の有害な身体症状を緩和または改善することをもたらす、項目３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
・（項目５１）
上記処置により、転移の数、体積、またはサイズが軽減または減少するか、転移の数、体積、またはサイズの増加が阻害または防止されるか、上記新形成、腫瘍、癌、または転移の進行または悪化が阻害されるか、転移の細胞溶解またはアポトーシスが刺激されるか、転移の成長、増殖、または生存が阻害、軽減、または減少される、項目３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
・（項目５２）
上記被験体の寿命を延長または長期化する、項目３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
・（項目５３）
上記被験体が、抗新生物処置もしくは治療、抗腫瘍処置もしくは治療、抗癌処置もしくは治療、抗転移処置もしくは治療、または免疫促進処置もしくは治療の候補であるか、それを受けているか、それを受けていた、項目３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
・（項目５４）
抗細胞増殖処置もしくは治療または免疫促進処置もしくは治療を上記被験体に施す工程をさらに含む、項目３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
・（項目５５）
上記処置またはは治療が、外科的切除、照射療法、放射線療法、化学療法、免疫療法、または温熱療法を含む、項目５４に記載の方法。
・（項目５６）
上記抗細胞増殖処置または治療が、アルキル化剤、代謝拮抗物質、植物抽出物、植物性アルカロイド、ニトロソ尿素、ホルモン、ヌクレオシド、またはヌクレオチドアナログを含む、項目５４に記載の方法。
・（項目５７）
上記抗細胞増殖処置または治療が、シクロホスファミド、アザチオプリン、シクロスポリンＡ、プレドニゾロン、メルファラン、クロラムブシル、メクロレタミン、ブスルファン、メトトレキサート、６−メルカプトプリン、チオグアニン、５−フルオロウラシル、シトシンアラビノシド、ＡＺＴ、５−アザシチジン（５−ＡＺＣ）および５−アザシチジン関連化合物、ブレオマイシン、アクチノマイシンＤ、ミトラマイシン、マイトマイシンＣ、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、ストレプトゾトシン、ヒドロキシ尿素、シスプラチン、ミトタン、プロカルバジン、ダカルバジン、タキソール、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ドキソルビシン、およびジブロモマンニトールから選択される、項目５４に記載の方法。
・（項目５８）
上記免疫促進処置または治療が、リンパ球、形質細胞、マクロファージ、樹状細胞、ＮＫ細胞、またはＢ細胞を含む、項目５４に記載の方法。
・（項目５９）
上記免疫促進処置または治療が、抗体、細胞成長因子、細胞生存因子、細胞分化因子、サイトカイン、またはケモカインを含む、項目５４に記載の方法。
・（項目６０）
上記免疫促進処置または治療が、ＩＬ−２、ＩＬ−１α、ＩＬ−１β、ＩＬ−３、ＩＬ−６、ＩＬ−７、顆粒球−マクロファージ−コロニー刺激因子（ＧＭＣＳＦ）、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−１２、ＴＮＦ−α、ＴＮＦβ、ＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−１β、ＲＡＮＴＥＳ、ＳＤＦ−１、ＭＣＰ−１、ＭＣＰ−２、ＭＣＰ−３、ＭＣＰ−４、エオタキシン、エオタキシン−２、Ｉ−３０９／ＴＣＡ３、ＡＴＡＣ、ＨＣＣ−１、ＨＣＣ−２、ＨＣＣ−３、ＬＡＲＣ／ＭＩＰ−３α、ＰＡＲＣ、ＴＡＲＣ、ＣＫβ、ＣＫβ６、ＣＫβ７、ＣＫβ８、ＣＫβ９、ＣＫβ１１、ＣＫβ１２、Ｃ１０、ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＥＮＡ−７８、ＧＣＰ−２、ＰＢＰ／ＣＴＡＰＩＩＩβ−ＴＧ／ＮＡＰ−２、Ｍｉｇ、ＰＢＳＦ／ＳＤＦ−１、およびリンホタクチンから選択される、項目５４に記載の方法。
・（項目６１）
ＰＭ−２抗体または機能的フラグメントを、上記抗細胞増殖処置もしくは治療または免疫促進処置もしくは治療を施す前、それと実質的に同時、またはその後に投与する、項目５４に記載の方法。
・（項目６２）
上記被験体が哺乳動物である、項目３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
・（項目６３）
上記被験体がヒトである、項目６２に記載の方法。
・（項目６４）
上記被験体が、新形成、腫瘍、癌、または転移の処置または治療を受けているか、またはそれを受けていた、項目３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
・（項目６５）
上記抗体またはその機能的フラグメントが、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列と少なくとも７０％同一の重鎖配列および軽鎖配列を含む、項目３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
・（項目６６）
上記抗体またはその機能的フラグメントが、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列の１つまたは複数のＣＤＲと少なくとも８０％同一の１つまたは複数のＣＤＲを有する重鎖配列および軽鎖配列を含む、項目３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
・（項目６７）
上記抗体またはその機能的フラグメントが、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列の１つまたは複数のＣＤＲと少なくとも９０％同一の１つまたは複数のＣＤＲを有する重鎖配列および軽鎖配列を含む、項目３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
・（項目６８）
上記抗体またはその機能的フラグメントが、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列の１つまたは複数のＣＤＲと少なくとも１００％同一の１つまたは複数のＣＤＲを有する重鎖配列および軽鎖配列を含む、項目３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
・（項目６９）
上記抗体またはその機能的フラグメントが、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合するエピトープまたは抗体に結合する、項目１から８または３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
・（項目７０）
上記抗原が、ＢＸＰＣ−３細胞、ＭＫＮ細胞、またはＣＲＬ細胞上で発現される約１１５ｋＤａのタンパク質抗原を含む、項目６９に記載の方法。
・（項目７１）
上記抗体またはその機能的フラグメントが、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＨＴ−２９細胞、ＣＡＣＯ−２細胞、ＣＯＬＯ−３２０細胞、ＣＯＬＯ−２０６Ｆ細胞、ＡＳＰＣ−１細胞、ＢＸＰＣ−３細胞、またはＡ５４９細胞への結合について競合する、項目１から８または３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
・（項目７２）
上記抗体またはその機能的フラグメントが、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体が結合するエピトープに結合し、当該エピトープが、ＢＸＰＣ−３細胞、ＭＫＮ細胞、またはＣＲＬ細胞上で発現される約１１５ｋＤａのタンパク質抗原上に存在する、項目１から８または３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
・（項目７３）
上記抗体またはその機能的フラグメントが、細胞株ＤＳＭＺ寄託番号ＤＳＭ  ＡＣＣ  ２６００によって産生されるか、配列番号１および２に示した重鎖配列および軽鎖配列によって表されるＰＭ−２抗体とＢＸＰＣ−３細胞、ＭＫＮ細胞、またはＣＲＬ細胞上で発現される約１１５ｋＤａのタンパク質抗原上に存在するエピトープへの結合について競合する、項目１から８または３３から４０のいずれか１項に記載の方法。
【国際調査報告】
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