(57)【要約】【課題】過剰な或いは異常な細胞増殖を特徴とする疾患の治療に適する薬剤を提供する。【解決手段】一般式(1)(式中、A、B、R1-R3、Rx及びnは、請求項1のように定義される)の化合物を用いる。上述の特性を有する薬剤を調製するためのそれらの使用を包含する。【化１】2011505407.tif 000058【選択図】図１
2011505407.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式(1)の化合物、その互変異性体、ラセミ体、エナンチオマー、ジアステレオマー又はこれらの混合物、或いはその薬理的に許容され得る酸付加塩の形であってもよい化合物：
【化１】
2011505407.tif 000057
(式中、Aは、1つ以上のR1によって置換されていてもよい、C6-15アリール及び5-12員ヘテロアリールより選ばれる基を示し;
Bは、1つ以上のR2によって置換されていてもよい、C6-15アリール及び5-12員ヘテロアリールより選ばれる基を示し;
R1、R2及びRxは、相互に各々独立して、水素であるか、或いはRa、Rb及び同一又は異なる１以上のRc及び/又はRbによって置換されたRaより選ばれる基を示し;
R3は、F、Cl、-CN、-NO2、ORc、-C(O)Rc、C1-4アルキル、C1-4ハロアルキル、C3-10シクロアルキル、C4-16シクロアルキルアルキル及び3-8員ヘテロシクロアルキルより選ばれる基を示し;
Raは、相互に各々独立して、C1-6アルキル、C3-10シクロアルキル、C4-16シクロアルキルアルキル、C6-10アリール、C7-16アリールアルキル、2-6員ヘテロアルキル、3-8員ヘテロシクロアルキル、4-14員ヘテロシクロアルキルアルキル、5-12員ヘテロアリール及び6-18員ヘテロアリールアルキルより選ばれ; 
Rbは、各々適切な基であり、各々独立して、=O、-ORc、C1-3ハロアルキルオキシ、-OCF3、=S、-SRc、=NRc、=NORc、=NNRcRc、=NN(Rg)C(O)NRcRc、-NRcRc、-ONRcRc、-N(ORc)Rc、N(Rg)NRcRc、ハロゲン、-CF3、-CN、-NC、-OCN、-SCN、-NO、-NO2、=N2、-N3、-S(O)Rc、-S(O)ORc、-S(O)2Rc、-S(O)2ORc、-S(O)NRcRc、-S(O)2NRcRc、-OS(O)Rc、-OS(O)2Rc、-OS(O)2ORc、-OS(O)NRcRc、-OS(O)2NRcRc、-C(O)Rc、-C(O)ORc、-C(O)SRc、-C(O)NRcRc、-C(O)N(Rg)NRcRc、-C(O)N(Rg)ORc、-C(NRg)NRcRc、-C(NOH)Rc、-C(NOH)NRcRc、-OC(O)Rc、-OC(O)ORc、-OC(O)SRc、-OC(O)NRcRc、-OC(NRg)NRcRc、-SC(O)Rc、-SC(O)ORc、-SC(O)NRcRc、-SC(NRg)NRcRc、-N(Rg)C(O)Rc、-N[C(O)Rc]2、-N(ORg)C(O)Rc、-N(Rg)C(NRg)Rc、-N(Rg)N(Rg)C(O)Rc、-N[C(O)Rc]NRcRc、-N(Rg)C(S)Rc、-N(Rg)S(O)Rc、-N(Rg)S(O)ORc、-N(Rg)S(O)2Rc、-N[S(O)2Rc]2、-N(Rg)S(O)2ORc、-N(Rg)S(O)2NRcRc、-N(Rg)[S(O)2]2Rc、-N(Rg)C(O)ORc、-N(Rg)C(O)SRc、-N(Rg)C(O)NRcRc、-N(Rg)C(O)NRgNRcRc、-N(Rg)N(Rg)C(O)NRcRc、-N(Rg)C(S)NRcRc、-[N(Rg)C(O)]2Rc、-N(Rg)[C(O)]2Rc、-N{[C(O)]2Rc}2、-N(Rg)[C(O)]2ORc、-N(Rg)[C(O)]2NRcRc、-N{[C(O)]2ORc}2、-N{[C(O)]2NRcRc}2、-[N(Rg)C(O)]2ORc、-N(Rg)C(NRg)ORc、-N(Rg)C(NOH)Rc、-N(Rg)C(NRg)SRc及び-N(Rg)C(NRg)NRcRcより選ばれ、
Rcは、相互に各々独立して、水素であるか、或いは同一又は異なる１以上のRd及び/又はReによって置換されていてもよいC1-6アルキル、C3-10シクロアルキル、C4-11シクロアルキルアルキル、C6-10アリール、C7-16アリールアルキル、2-6員ヘテロアルキル、3-8員ヘテロシクロアルキル、4-14員ヘテロシクロアルキルアルキル、5-12員ヘテロアリール及び6-18員ヘテロアリールアルキルより選ばれる基を示し;
Rdは、各々適切な基であり、各々独立して、=O、-ORe、C1-3ハロアルキルオキシ、-OCF3、=S、-SRe、=NRe、=NORe、=NNReRe、=NN(Rg)C(O)NReRe、-NReRe、-ONReRe、-N(Rg)NReRe、ハロゲン、-CF3、-CN、-NC、-OCN、-SCN、-NO、-NO2、=N2、-N3、-S(O)Re、-S(O)ORe、-S(O)2Re、-S(O)2ORe、-S(O)NReRe、-S(O)2NReRe、-OS(O)Re、-OS(O)2Re、-OS(O)2ORe、-OS(O)NReRe、-OS(O)2NReRe、-C(O)Re、-C(O)ORe、-C(O)SRe、-C(O)NReRe、-C(O)N(Rg)NReRe、-C(O)N(Rg)ORe、-C(NRg)NReRe、-C(NOH)Re、-C(NOH)NReRe、-OC(O)Re、-OC(O)ORe、-OC(O)SRe、-OC(O)NReRe、-OC(NRg)NReRe、-SC(O)Re、-SC(O)ORe、-SC(O)NReRe、-SC(NRg)NReRe、-N(Rg)C(O)Re、-N[C(O)Re]2、-N(ORg)C(O)Re、-N(Rg)C(NRg)Re、-N(Rg)N(Rg)C(O)Re、-N[C(O)Re]NReRe、-N(Rg)C(S)Re、-N(Rg)S(O)Re、-N(Rg)S(O)ORe、-N(Rg)S(O)2Re、-N[S(O)2Re]2、-N(Rg)S(O)2ORe、-N(Rg)S(O)2NReRe、-N(Rg)[S(O)2]2Re、-N(Rg)C(O)ORe、-N(Rg)C(O)SRe、-N(Rg)C(O)NReRe、-N(Rg)C(O)NRgNReRe、-N(Rg)N(Rg)C(O)NReRe、-N(Rg)C(S)NReRe、-[N(Rg)C(O)]2Re、-N(Rg)[C(O)]2Re、-N{[C(O)]2Re}2、-N(Rg)[C(O)]2ORe、-N(Rg)[C(O)]2NReRe、-N{[C(O)]2ORe}2、-N{[C(O)]2NReRe}2、-[N(Rg)C(O)]2ORe、-N(Rg)C(NRg)ORe、-N(Rg)C(NOH)Re、-N(Rg)C(NRg)SRe及び-N(Rg)C(NRg)NReReより選ばれ、
Reは、相互に各々独立して、水素であるか、或いは同一又は異なる１以上のRf及び/又はRgによって置換されていてもよいC1-6アルキル、C3-8シクロアルキル、C4-11シクロアルキルアルキル、C6-10アリール、C7-16アリールアルキル、2-6員ヘテロアルキル、3-8員ヘテロシクロアルキル、4-14員ヘテロシクロアルキルアルキル、5-12員ヘテロアリール及び6-18員ヘテロアリールアルキルより選ばれる基を示し;
Rfは、各々適切な基であり、各々独立して、ハロゲン及び-CF3より選ばれ;
Rgは、相互に各々独立して、水素、C1-6アルキル、C3-8シクロアルキル、C4-11シクロアルキルアルキル、C6-10アリール、C7-16アリールアルキル、2-6員ヘテロアルキル、3-8員ヘテロシクロアルキル、4-14員ヘテロシクロアルキル、5-12員ヘテロアリール又は6-18員ヘテロアリールアルキルを示し、
nは、1、2又は3でありえるが、このようにして形成されたアルキル鎖は、分枝していてもよい;
但し、Bがオルト位に-CF3置換基をもたず且つBがイミダゾールである場合には、式（1）の化合物は少なくとも1つの置換基R2を含む)。
【請求項２】
Bが、フェニル及び5-6員ヘテロアリールより選ばれる基である、請求項1に記載の化合物。
【請求項３】
Aが、フェニル及び5-10員ヘテロアリールより選ばれる基である、請求項1又は2に記載の化合物。
【請求項４】
Aがフェニルである、請求項3に記載の化合物。
【請求項５】
R3が、F、Cl、-CF3及びC1-4ハロアルキルより選ばれる基である、請求項1〜4のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項６】
R3が、-CF3である、請求項5に記載の化合物。
【請求項７】
Rxが水素である、請求項1〜6のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項８】
薬剤として用いられる請求項1〜7のいずれか1項に記載の化合物又はその医薬的に有効な塩。
【請求項９】
抗増殖活性及び/又はアポトーシス促進活性を有する薬剤を調製するための請求項1〜7のいずれか1項に記載の化合物又はその医薬的に有効な塩。
【請求項１０】
活性物質として請求項1〜7に記載の一般式(1)の1つ以上の化合物又はその生理的に許容され得る塩を含有し、慣用の賦形剤及び/又は担体と組み合わせて含有してもよい医薬製剤。
【請求項１１】
癌、感染症、炎症及び自己免疫疾患の治療及び/又は予防用の薬剤を調製するための請求項1〜7のいずれか1項に記載の一般式(1)の化合物の使用。
【請求項１２】
請求項1〜7のいずれか1項に記載の一般式(1)の化合物と、式(1)と異なる少なくとも1つの他の細胞増殖抑制活性物質又は細胞毒性活性物質とを含み、式(1)の化合物の互変異性体、ラセミ体、エナンチオマー、ジアステレオマー又はその混合物、或いはその薬理的に許容され得る酸付加塩の形で含んでいてもよい医薬製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、下記一般式(1)
【０００２】
【化１】
2011505407.tif 000003
【０００３】
(式中、基A、B、R1-R3、Rx及びnは、請求項及び明細書に示される意味を有する)
の新規な2,4-ジアミノピリミジン、その異性体、これらのピリミジンの調製方法及び薬剤としてそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００４】
浸潤と転移の特性を獲得する腫瘍細胞は、特定の生存シグナルを必要とする。これらのシグナルは、なかでも、細胞接着の低下が引き金となる特殊なアポトーシス機序(アノイキス)を克服することを可能にする。この過程において、焦点接着キナーゼ(FAK/PTK2)は、一方ではいわゆる‘焦点接着’による細胞マトリックス相互作用を制御し、もう一方ではアノイキス抵抗を与える不可欠なシグナル分子の1つである。PTK2を阻止することによりこれらの機序を妨害すると、腫瘍細胞のアポトーシス細胞死につながるとともに腫瘍の浸潤性と転移性の増殖が制限されることになる。更に、焦点接着キナーゼは、腫瘍関連内皮細胞の増殖、移動及び生存にとって主な意味がある。それ故、抗血管新生活性は、PTK2を阻止することによって達成させることができる。
ピリミジンは、キナーゼの阻害剤として一般に知られる。従って、例えば、国際特許出願公開第WO 02/096888号、同第WO 03/030909号、同第WO 2004/04118号及び同第WO 2004/048343号には、4位に非芳香族基で置換されたピリミジンが抗癌活性を有する有効成分として記載されている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の目的は、過剰な或いは異常な細胞増殖を特徴とする疾患の予防及び/又は治療に使用し得る新規な活性物質を示すことである。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
驚くべきことに、一般式(1)(式中、基A、B、R1-R3、Rx及びnは、以下に示される意味を有する)の化合物が特定のチロシンキナーゼの阻害剤として作用することがわかった。従って、本発明の化合物は、例えば、特定のチロシンキナーゼの活性と関連があり且つ過剰な或いは異常な細胞増殖を特徴とする疾患を治療するのに用いることができる。
本発明は、下記一般式(1)の化合物、場合により、その互変異性体、ラセミ体、エナンチオマー、ジアステレオマー又はこれらの混合物、又は場合によりその薬理的に許容され得る酸付加塩の形であってもよい化合物に関する
【０００７】
【化２】
2011505407.tif 000004
【０００８】
(式中、Aは、1つ以上のR1によって置換されていてもよい、C6-15アリール及び5-12員ヘテロアリールより選ばれる基を示し;
Bは、1つ以上のR2によって置換されていてもよい、C6-15アリール及び5-12員ヘテロアリールより選ばれる基を示し;
R1、R2及びRxは、相互に各々独立して、水素であるか、或いはRa、Rb及び同一又は異なる１以上のRc及び/又はRbによって置換されたRaより選ばれる基を示し;
R3は、F、Cl、-CN、-NO2、ORc、-C(O)Rc、C1-4アルキル、C1-4ハロアルキル、C3-10シクロアルキル、C4-16シクロアルキルアルキル及び3-8員ヘテロシクロアルキルより選ばれる基を示し;
Raは、相互に各々独立して、C1-6アルキル、C3-10シクロアルキル、C4-16シクロアルキルアルキル、C6-10アリール、C7-16アリールアルキル、2-6員ヘテロアルキル、3-8員ヘテロシクロアルキル、4-14員ヘテロシクロアルキルアルキル、5-12員ヘテロアリール及び6-18員ヘテロアリールアルキルより選ばれ; 
Rbは、各々適切な基であり、各々独立して、=O、-ORc、C1-3ハロアルキルオキシ、-OCF3、=S、-SRc、=NRc、=NORc、=NNRcRc、=NN(Rg)C(O)NRcRc、-NRcRc、-ONRcRc、-N(ORc)Rc、N(Rg)NRcRc、ハロゲン、-CF3、-CN、-NC、-OCN、-SCN、-NO、-NO2、=N2、-N3、-S(O)Rc、-S(O)ORc、-S(O)2Rc、-S(O)2ORc、-S(O)NRcRc、-S(O)2NRcRc、-OS(O)Rc、-OS(O)2Rc、-OS(O)2ORc、-OS(O)NRcRc、-OS(O)2NRcRc、-C(O)Rc、-C(O)ORc、-C(O)SRc、-C(O)NRcRc、-C(O)N(Rg)NRcRc、-C(O)N(Rg)ORc、-C(NRg)NRcRc、-C(NOH)Rc、-C(NOH)NRcRc、-OC(O)Rc、-OC(O)ORc、-OC(O)SRc、-OC(O)NRcRc、-OC(NRg)NRcRc、-SC(O)Rc、-SC(O)ORc、-SC(O)NRcRc、-SC(NRg)NRcRc、-N(Rg)C(O)Rc、-N[C(O)Rc]2、-N(ORg)C(O)Rc、-N(Rg)C(NRg)Rc、-N(Rg)N(Rg)C(O)Rc、-N[C(O)Rc]NRcRc、-N(Rg)C(S)Rc、-N(Rg)S(O)Rc、-N(Rg)S(O)ORc、-N(Rg)S(O)2Rc、-N[S(O)2Rc]2、-N(Rg)S(O)2ORc、-N(Rg)S(O)2NRcRc、-N(Rg)[S(O)2]2Rc、-N(Rg)C(O)ORc、-N(Rg)C(O)SRc、-N(Rg)C(O)NRcRc、-N(Rg)C(O)NRgNRcRc、-N(Rg)N(Rg)C(O)NRcRc、-N(Rg)C(S)NRcRc、-[N(Rg)C(O)]2Rc、-N(Rg)[C(O)]2Rc、-N{[C(O)]2Rc}2、-N(Rg)[C(O)]2ORc、-N(Rg)[C(O)]2NRcRc、-N{[C(O)]2ORc}2、-N{[C(O)]2NRcRc}2、-[N(Rg)C(O)]2ORc、-N(Rg)C(NRg)ORc、-N(Rg)C(NOH)Rc、-N(Rg)C(NRg)SRc及び-N(Rg)C(NRg)NRcRcより選ばれ、
Rcは、相互に各々独立して、水素であるか、或いは同一又は異なる１以上のRd及び/又はReによって置換されていてもよいC1-6アルキル、C3-10シクロアルキル、C4-11シクロアルキルアルキル、C6-10アリール、C7-16アリールアルキル、2-6員ヘテロアルキル、3-8員ヘテロシクロアルキル、4-14員ヘテロシクロアルキルアルキル、5-12員ヘテロアリール及び6-18員ヘテロアリールアルキルより選ばれる基を示し;
【０００９】
Rdは、各々適切な基であり、各々独立して、=O、-ORe、C1-3ハロアルキルオキシ、-OCF3、=S、-SRe、=NRe、=NORe、=NNReRe、=NN(Rg)C(O)NReRe、-NReRe、-ONReRe、-N(Rg)NReRe、ハロゲン、-CF3、-CN、-NC、-OCN、-SCN、-NO、-NO2、=N2、-N3、-S(O)Re、-S(O)ORe、-S(O)2Re、-S(O)2ORe、-S(O)NReRe、-S(O)2NReRe、-OS(O)Re、-OS(O)2Re、-OS(O)2ORe、-OS(O)NReRe、-OS(O)2NReRe、-C(O)Re、-C(O)ORe、-C(O)SRe、-C(O)NReRe、-C(O)N(Rg)NReRe、-C(O)N(Rg)ORe、-C(NRg)NReRe、-C(NOH)Re、-C(NOH)NReRe、-OC(O)Re、-OC(O)ORe、-OC(O)SRe、-OC(O)NReRe、-OC(NRg)NReRe、-SC(O)Re、-SC(O)ORe、-SC(O)NReRe、-SC(NRg)NReRe、-N(Rg)C(O)Re、-N[C(O)Re]2、-N(ORg)C(O)Re、-N(Rg)C(NRg)Re、-N(Rg)N(Rg)C(O)Re、-N[C(O)Re]NReRe、-N(Rg)C(S)Re、-N(Rg)S(O)Re、-N(Rg)S(O)ORe、-N(Rg)S(O)2Re、-N[S(O)2Re]2、-N(Rg)S(O)2ORe、-N(Rg)S(O)2NReRe、-N(Rg)[S(O)2]2Re、-N(Rg)C(O)ORe、-N(Rg)C(O)SRe、-N(Rg)C(O)NReRe、-N(Rg)C(O)NRgNReRe、-N(Rg)N(Rg)C(O)NReRe、-N(Rg)C(S)NReRe、-[N(Rg)C(O)]2Re、-N(Rg)[C(O)]2Re、-N{[C(O)]2Re}2、-N(Rg)[C(O)]2ORe、-N(Rg)[C(O)]2NReRe、-N{[C(O)]2ORe}2、-N{[C(O)]2NReRe}2、-[N(Rg)C(O)]2ORe、-N(Rg)C(NRg)ORe、-N(Rg)C(NOH)Re、-N(Rg)C(NRg)SRe及び-N(Rg)C(NRg)NReReより選ばれ、
Reは、相互に各々独立して、水素であるか、或いは同一又は異なる１以上のRf及び/又はRgによって置換されていてもよいC1-6アルキル、C3-8シクロアルキル、C4-11シクロアルキルアルキル、C6-10アリール、C7-16アリールアルキル、2-6員ヘテロアルキル、3-8員ヘテロシクロアルキル、4-14員ヘテロシクロアルキルアルキル、5-12員ヘテロアリール及び6-18員ヘテロアリールアルキルより選ばれる基を示し;
Rfは、各々適切な基であり、各々独立して、ハロゲン及び-CF3より選ばれ;
Rgは、相互に各々独立して、水素、C1-6アルキル、C3-8シクロアルキル、C4-11シクロアルキルアルキル、C6-10アリール、C7-16アリールアルキル、2-6員ヘテロアルキル、3-8員ヘテロシクロアルキル、4-14員ヘテロシクロアルキル、5-12員ヘテロアリール又は6-18員ヘテロアリールアルキルを示し、
nは、1、2又は3でありえるが、このようにして形成されたアルキル鎖は、場合により分枝されていてもよい;
但し、Bがオルト位に-CF3置換基をもたず且つBがイミダゾールである場合には、式（1）の化合物は少なくとも1つの置換基R2を含む)。
【００１０】
一態様において、本発明は、一般式(1)(式中、Bは、フェニル及び5-6員ヘテロアリールより選ばれる基である)の化合物に関する。
他の態様において、本発明は、一般式(1)(式中、Aは、フェニル及び5-10員ヘテロアリールより選ばれる基である)の化合物に関する。
他の態様において、本発明は、一般式(1)(式中、Aは、フェニルである)の化合物に関する。
他の態様において、本発明は、一般式(1)(式中、R3は、F、Cl、-CF3及びC1-4ハロアルキルより選ばれる基である)の化合物に関する。
他の態様において、本発明は、一般式(1)(式中、R3は、-CF3である)の化合物に関する。
他の態様において、本発明は、一般式(1)(式中、Rxは、水素である)の化合物に関する。
本発明は、薬剤として用いられる一般式(1)の化合物、又はその医薬的に有効な塩に関する。
他の態様において、本発明は、抗増殖活性及び/又はアポトーシス促進活性（pro-apoptotic activity）を有する薬剤を調製するための一般式(1)の化合物又はその医薬的に有効な塩に関する。
本発明は、活性物質として一般式(1)の1つ以上の化合物又はその生理的に許容され得る塩を含有し、慣用の賦形剤及び/又は担体と組み合わせて含有してもよい医薬製剤に関する。
他の態様において、本発明は、癌、感染症、炎症又は自己免疫疾患の治療及び/又は予防用の薬剤を調製するための一般式(1)の化合物の使用に関する。
他の態様において、本発明は、一般式(1)の化合物及び式(1)と異なる少なくとも1つの細胞増殖抑制活性物質又は細胞毒性活性物質を更に含み、式(1)の化合物の互変異性体、ラセミ体、エナンチオマー、ジアステレオマー及びこれらの混合物、又はその薬理的に許容され得る酸付加塩の形で含んでいてもよい、医薬製剤に関する。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
定義
特にことわらない限り、本明細書に用いられる以下の定義が適用される:
アルキルは、下位基の飽和炭化水素鎖と不飽和炭化水素鎖から構成され、後者は、更に、二重結合(アルケニル)を有する炭化水素鎖と三重結合(アルキニル)を有する炭化水素鎖に分けることができる。アルケニルは、少なくとも1つの二重結合を含有し、アルキニルは、少なくとも1つの三重結合を含有する。炭化水素鎖が少なくとも1つの二重結合と少なくとも1つの三重結合の双方をもつ場合には、定義上は、アルキニル下位基に属する。上述したすべての下位基は、更に、直鎖(非分枝鎖)と分枝鎖に分けることができる。アルキルが置換される場合には、置換は、すべての水素をもつ炭素原子で、相互に各々独立してモノ又はポリ置換されてもよい。
個々の下位基の代表例を以下に記載する。
直鎖(非分枝鎖)又は分枝鎖飽和炭化水素鎖:
メチル; エチル; n-プロピル;イソプロピル(1-メチルエチル); n-ブチル; 1-メチルプロピル; イソブチル(2-エチルプロピル); sec-ブチル(1-メチルプロピル); tert-ブチル(1,1-ジメチルエチル); n-ペンチル; 1-メチルブチル; 1-エチルプロピル; イソペンチル(3-メチルブチル); ネオペンチル(2,2-ジメチルプロピル); n-ヘキシル; 2,3-ジメチルブチル; 2,2-ジメチルブチル; 3,3-ジメチルブチル; 2-メチルペンチル; 3-メチルペンチル; n-ヘプチル; 2-メチルヘキシル; 3-メチルヘキシル; 2,2-ジメチルペンチル; 2,3-ジメチルペンチル; 2,4-ジメチルペンチル; 3,3-ジメチルペンチル; 2,2,3-トリメチルブチル; 3-エチルペンチル; n-オクチル; n-ノニル; n-デシル等。
直鎖(非分枝鎖)又は分枝鎖アルケニル:
ビニル(エテニル); プロパ-1-エニル; アリル(プロパ-2-エニル); イソプロペニル; ブタ-1-エニル; ブタ-2-エニル; ブタ-3-エニル; 2-メチルプロパ-2-エニル; 2-メチルプロパ-1-エニル; 1-メチルプロパ-2-エニル; 1-メチルプロパ-1-エニル; 1-メチリデンプロピル; ペンタ-1-エニル; ペンタ-2-エニル; ペンタ-3-エニル; ペンタ-4-エニル; 3-メチルブタ-3-エニル; 3-メチルブタ-2-エニル; 3-メチルブタ-1-エニル; ヘキサ-1-エニル; ヘキサ-2-エニル; ヘキサ-3-エニル; ヘキサ-4-エニル; ヘキサ-5-エニル; 2,3-ジメチルブタ-3-エニル; 2,3-ジメチルブタ-2-エニル; 2-メチリデン-3-メチルブチル; 2,3-ジメチルブタ-1-エニル; ヘキサ-1,3-ジエニル; ヘキサ-1,4-ジエニル; ペンタ-1,4-ジエニル; ペンタ-1,3-ジエニル; ブタ-1,3-ジエニル; 2,3-ジメチルブタ-1,3-ジエン等。
【００１２】
直鎖(非分枝鎖)又は分枝鎖アルキニル:
エチニル; プロパ-1-イニル; プロパ-2-イニル; ブタ-1-イニル; ブタ-2-イニル; ブタ-3-イニル; 1-メチルプロパ-2-イニル等。
用語プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル等は、更に定義することなく、炭素原子の対応する数を有する飽和炭化水素基を意味し、すべての異性体が含まれる。
用語プロペニル、ブテニル、ペンテニル、ヘキシニル、ヘプテニル、オクテニル、ノネニル、デセニル等は、更に定義することなく、炭素原子の対応する数と二重結合を有する不飽和炭化水素基を意味し、適用できる場合に、すべての異性体、即ち、(Z)/(E)異性体が含まれる。
用語ブタジエニル、ペンタジエニル、ヘキサジエニル、ヘプタジエニル、オクタジエニル、ノナジエニル、デカジエニル等は、更に定義することなく、炭素原子の対応する数を有する不飽和炭化水素基と2つの二重結合を意味し、適用できる場合に、すべての異性体、即ち、(Z)/(E)異性体が含まれる。
用語プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニル、ヘプチニル、オクチニル、ノニニル、デシニル等は、更に定義することなく、炭素原子の対応する数を有する不飽和炭化水素基と三重結合を意味し、すべての異性体が含まれる。
用語ヘテロアルキルは、炭化水素鎖において、基-CH3の1つ以上が相互に独立して基-OH、-SH又は-NH2によって置き換えられるか、基-CH2-の1つ以上が相互に独立して基-O-、-S-又は-NH-によって置き換えられるか、下記基
【００１３】
【化３】
2011505407.tif 000005
【００１４】
の1つ以上が下記基
【００１５】
【化４】
2011505407.tif 000006
【００１６】
によって置き換えられるか、基=CH-の1つ以上が基=N-によって置き換えられるか、基=CH2の1つ以上が基=NHによって置き換えられるか、又は基≡CHの1つ以上が基≡Nによって置き換えられる場合には、最も広い意味で上で定義したアルキルから誘導され得る基を意味し、全体としてヘテロアルキルにおいて最高3つのヘテロ原子しかありえないが、少なくとも1つの炭素原子が2つの酸素原子の間に、2つの硫黄原子の間に又は1つの酸素と1つの硫黄原子との間になければならず、全体として基は化学的に安定でなければならない。
ヘテロアルキルがヘテロ原子(1つ以上)を有する下位基飽和炭化水素鎖、ヘテロアルケニル及びヘテロアルキニルから構成されることはアルキルからの間接的定義/誘導から直ちに明らかであり、更に、直鎖(非分枝鎖)や分枝鎖に細分されてもよい。ヘテロアルキルが置換される場合には、置換は、すべての水素をもつ酸素原子、硫黄原子、窒素原子及び/又は炭素原子で相互に各々独立してモノ又はポリ置換される。ヘテロアルキル自体は、炭素原子とヘテロ原子いずれによっても置換基として分子に結合され得る。
典型例を以下に記載する:
ジメチルアミノメチル; ジメチルアミノエチル(1-ジメチルアミノエチル; 2-ジメチルアミノエチル); ジメチルアミプロピル(1-ジメチルアミノプロピル、2-ジメチルアミノプロピル、3-ジメチルアミノプロピル); ジエチルアミノメチル; ジエチルアミノエチル(1-ジエチルアミノエチル、2-ジエチルアミノエチル); ジエチルアミノプロピル(1-ジエチルアミノプロピル、2-ジエチルアミノプロピル、3-ジエチルアミノプロピル); ジイソプロピルアミノエチル(1-ジイソプロピルアミノエチル、2-ジイソプロピルアミノエチル); ビス-2-メトキシエチルアミノ; [2-(ジメチルアミノエチル)エチルアミノ]メチル; 3-[2-(ジメチルアミノエチル)エチルアミノ]プロピル; ヒドロキシメチル; 2-ヒドロキシエチル; 3-ヒドロキシプロピル; メトキシ; エトキシ; プロポキシ; メトキシメチル; 2-メトキシエチル等。
【００１７】
ハロゲンは、フッ素、塩素、臭素及び/又はヨウ素原子を示す。
ハロアルキルは、炭化水素鎖の1つ以上の水素原子が同じか又は異なってもよいハロゲン原子によって相互に独立して置き換えられる場合、上文に最も広い意味で定義したアルキルから誘導される。ハロアルキルが下位基飽和ハロ炭化水素鎖、ハロアルケニル及びハロアルキニルから構成されることは、アルキルからの間接的定義/誘導から直ちに明らかであり、更に、直鎖(非分枝鎖)や分枝鎖に細分することができる。ハロアルキルが置換される場合には、置換は、すべての水素をもつ炭素原子で、相互に各々独立してモノ又はポリ置換されてもよい。
典型例としては、-CF3; -CHF2; -CH2F; -CF2CF3; -CHFCF3; CH2CF3; -CF2CH3; -CHFCH3; -CF2CF2CF3; -CF2CH2CH3; -CF=CF2; -CCl=CH2; CBr=CH2; -CI=CH2; -C≡C-CF3; -CHFCH2CH3; 及び-CHFCH2CF3が挙げられる。
シクロアルキルは、下位基単環式炭化水素環、二環式炭化水素環及びスピロ炭化水素環から構成され、各下位基は、更に、飽和及び不飽和(シクロアルケニル)に細分することができる。用語不飽和は、問題の環系において、少なくとも1つの二重結合があるが、芳香族系が形成されないことを意味する。二環式炭化水素環において、少なくとも2つの炭素原子を共通してもつように2つの環が結合される。スピロ炭化水素環において、1つの炭素原子(スピロ原子)は、2つの環によって共有される。シクロアルキルが置換される場合には、置換は、すべての水素をもつ炭素原子で、相互に各々独立してモノ又はポリ置換されてもよい。シクロアルキル自体は、環系の適切ないかなる位置によっても置換基として分子に結合することができる。
【００１８】
個々の下位基の典型例を以下に記載する。
単環式飽和炭化水素環:
シクロプロピル; シクロブチル; シクロペンチル; シクロヘキシル; シクロヘプチル等。
単環式不飽和炭化水素環:
シクロプロパ-1-エニル; シクロプロパ-2-エニル; シクロブタ-1-エニル; シクロブタ-2-エニル; シクロペンタ-1-エニル; シクロペンタ-2-エニル; シクロペンタ-3-エニル; シクロヘキサ-1-エニル; シクロヘキサ-2-エニル; シクロヘキサ-3-エニル; シクロヘプタ-1-エニル; シクロヘプタ-2-エニル; シクロヘプタ-3-エニル; シクロヘプタ-4-エニル; シクロブタ-1,3-ジエニル; シクロペンタ-1,4-ジエニル; シクロペンタ-1,3-ジエニル; シクロペンタ-2,4-ジエニル; シクロヘキサ-1,3-ジエニル; シクロヘキサ-1,5-ジエニル; シクロヘキサ-2,4-ジエニル; シクロヘキサ-1,4-ジエニル; シクロヘキサ-2,5-ジエニル等。
飽和及び不飽和二環式炭化水素環:
ビシクロ[2.2.0]ヘキシル; ビシクロ[3.2.0]ヘプチル; ビシクロ[3.2.1]オクチル; ビシクロ[2.2.2]オクチル; ビシクロ[4.3.0]ノニル(オクタヒドロインデニル); ビシクロ[4.4.0]デシル(デカヒドロナフタレン); ビシクロ[2,2,1]ヘプチル(ノルボルニル); (ビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2,5-ジエニル(ノルボルナ-2,5-ジエニル); ビシクロ[2,2,1]ヘプタ-2-エニル(ノルボルネニル); ビシクロ[4.1.0]ヘプチル(ノルカラニル); ビシクロ[3.1.1]ヘプチル(ピナニル)等。
飽和及び不飽和スピロ炭化水素環:
スピロ[2.5]オクチル、スピロ[3.3]ヘプチル、スピロ[4.5]デカ-2-エン等。
シクロアルキルアルキルは、最も広い意味で各々上で定義した基アルキルとシクロアルキルの組み合わせを示す。置換基としてのアルキル基は、分子に直接結合され、次にシクロアルキル基によって置換される。アルキルとシクロアルキルは、このために適切ないかなる炭素原子を介しても双方の基に結合することができる。アルキルとシクロアルキルのそれぞれの下位基は、2つの基の組み合わせにも含まれる。
【００１９】
アリールは、少なくとも1つの芳香環を有する単環、二環又は三環式炭素環を示す。アリールが置換される場合には、置換は、すべての水素をもつ炭素原子で、相互に各々独立してモノ又はポリ置換されてもよい。アリール自体は、環系の適切ないかなる位置を介しても置換基として分子に結合することができる。典型例としては、フェニル、ナフチル、インダニル(2,3-ジヒドロインデニル)、1,2,3,4-テトラヒドロナフチル及びフルオレニルが挙げられる。
アリールアルキルは、最も広い意味で各々上文に定義した基アルキルとアリールの組み合わせを示す。置換基としてのアルキル基は、分子に直接結合され、次にアリール基によって置換される。アルキルとアリールは、このために適切ないかなる炭素原子を介しても双方の基に結合することができる。アルキルとアリールのそれぞれの下位基は、2つの基の組み合わせにも含まれる。
典型例としては、ベンジル; 1-フェニルエチル; 2-フェニルエチル; フェニルビニル; フェニルアリル等が挙げられる。
ヘテロアリールは、対応するアリール又はシクロアルキルと比較して、1つ以上の炭素原子の代わりに、窒素、硫黄及び酸素より相互に独立して選ばれる同一又は異なる１以上のヘテロ原子を含有する少なくとも1つの芳香環を有する単環式芳香環又は多環式環を示し、得られた基は化学的に安定でなければならない。ヘテロアリールが置換される場合には、置換は、すべての水素をもつ炭素及び/又は窒素原子で相互に各々独立してモノ又はポリ置換であってもよい。置換基としてのヘテロアリール自体は、炭素と窒素いずれも環系の適切ないずれの位置を介しても分子に結合することができる。
【００２０】
典型例を以下に記載する。
単環式ヘテロアリール:
フリル; チェニル; ピロリル; オキサゾリル; チアゾリル; イソキサゾリル; イソチアゾリル; ピラゾリル; イミダゾリル; トリアゾリル; テトラゾリル; オキサジアゾリル; チアジアゾリル; ピリジル; ピリミジル; ピリダジニル; ピラジニル; トリアジニル; ピリジル-N-オキシド; ピロリル-N-オキシド; ピリミジニル-N-オキシド; ピリダジニル-N-オキシド; ピラジニル-N-オキシド; イミダゾリル-N-オキシド; イソキサゾリル-N-オキシド; オキサゾリル-N-オキシド; チアゾリル-N-オキシド; オキサジアゾリル-N-オキシド; チアジアゾリル-N-オキシド; トリアゾリル-N-オキシド; テトラゾリル-N-オキシド等。
多環式ヘテロアリール:
インドリル; イソインドリル; ベンゾフリル; ベンゾチエニル; ベンゾキサゾリル; ベンゾチアゾリル; ベンズイソキサゾリル; ベンズイソチアゾリル; ベンズイミダゾリル; インダゾリル; イソキノリニル; キノリニル; キノキサリニル; シンノリニル; フタラジニル; キナゾリニル; ベンゾトリアジニル; インドリジニル; オキサゾロピリジル; イミダゾピリジル; ナフチリジニル; インドリニル; イソクロマニル; クロマニル; テトラヒドロイソキノリニル; イソインドリニル; イソベンゾテトラヒドロフリル; イソベンゾテトラヒドロチエニル; イソベンゾチエニル; ベンゾキサゾリル; ピリドピリジル; ベンゾテトラヒドロフリル; ベンゾテトラヒドロチエニル; プリニル; ベンゾジオキソリル; フェノキサジニル; フェノチアジニル; プテリジニル; ベンゾチアゾリル; イミドアゾピリジル; イミドアゾチアゾリル; ジヒドロベンズイソキサジニル; ベンズイソキサジニル; ベンゾキサジニル; ジヒドロベンズイソチアジニル; ベンゾピラニル; ベンゾチオピラニル; クマリニル;イソクマリニル; クロモニル; クロマノニル; テトラヒドロキノリニル; ジヒドロキノリニル; ジヒドロキノリノニル; ジヒドロイソキノリノニル; ジヒドロクマリニル; ジヒドロイソクマリニル; イソインドリノニル; ベンゾジオキサニル; ベンゾキサゾリノニル; キノリニル-N-オキシド; インドリル-N-オキシド; インドリニル-N-オキシド; イソキノリル-N-オキシド; キナゾリニル-N-オキシド; キノキサリニル-N-オキシド; フタラジニル-N-オキシド; インドリジニル-N-オキシド; インダゾリル-N-オキシド; ベンゾチアゾリル-N-オキシド; ベンズイミダゾリル-N-オキシド; ベンゾチオピラニル-S-オキシド; ベンゾチオピラニル-S,S-ジオキシド等。
【００２１】
ヘテロアリールアルキル基は、最も広い意味で各々上文に定義したアルキル基とヘテロアリール基の組み合わせを示す。置換基としてのアルキル基は、分子に直接結合され、次にテロアリール基によって置換される。このために適切な炭素原子を介してアルキル側に、また、このために適切な炭素原子又は窒素原子によってヘテロアリール側にアルキルとヘテロアリールの結合が達成されることができる。アルキルとヘテロアリールのそれぞれの下位基は、2つの基の組み合わせにも含まれる。
用語ヘテロシクロアルキルは、炭化水素環において基-CH2-の1つ以上が相互に独立して基-O-、-S-又は-NH-によって置き換えられるか又は基=CH-の1つ以上が基=N-によって置き換えられる上文に定義したシクロアルキルから誘導される基を意味し、全体で5つ以下のヘテロ原子が存在してもよく、2つの酸素原子との間と2つの硫黄原子との間に又は1つの酸素と1つの硫黄原子との間には少なくとも1つの炭素原子がなければならず、全体として基は化学的に安定でなければならない。ヘテロ原子は、同時にすべての可能な酸化段階(硫黄→スルホキシド-SO-、スルホン-SO2-; 窒素→N-オキシド)に存在することができる。ヘテロシクロアルキルが下位基単環式ヘテロ環、二環式ヘテロ環及びスピロヘテロ環から構成されることは、シクロアルキルからの間接的定義/誘導から直ちに明らかであり、各下位基は、更に、飽和及び不飽和(ヘテロシクロアルケニル)に細分され得る。用語不飽和は、問題の環系において、少なくとも1つの二重結合があるが、芳香族系が形成されないことを意味する。二環式ヘテロ環において、少なくとも2つの炭素原子を共通してもつように2つの環が結合される。スピロヘテロ環において、1つの炭素原子(スピロ原子)は、2つの環によって共有される。ヘテロシクロアルキルが置換される場合には、置換は、すべての水素をもつ炭素原子で、相互に各々独立してモノ又はポリ置換されてもよい。ヘテロシクロアルキル自体は、環系の適切ないかなる位置によっても置換基として分子に結合することができる。
【００２２】
個々の下位基の典型例を以下に記載する。
単環式ヘテロ環(飽和及び不飽和):
テトラヒドロフリル; ピロリジニル; ピロリニル; イミダゾリジニル; チアゾリジニル; イミダゾリニル; ピラゾリジニル; ピラゾリニル; ピペリジニル; ピペラジニル;オキシラニル; アジリジニル; アゼチジニル; 1,4-ジオキサニル; アゼパニル; ジアゼパニル; モルホリニル; チオモルホリニル; ホモモルホリニル; ホモピペリジニル; ホモピペラジニル; ホモチオモルホリニル; チオモルホリニル-S-オキシド; チオモルホリニル-S,S-ジオキシド; 1,3-ジオキソラニル; テトラヒドロピラニル; テトラヒドロチオピラニル; [1,4]-オキサゼパニル; テトラヒドロチエニル; ホモチオモルホリニル-S,S-ジオキシド; オキサゾリジノニル;ジヒドロピラゾリル; ジヒドロピロリル; ジヒドロピラジニル; ジヒドロピリジル; ジヒドロピリミジニル; ジヒドロフリル;ジヒドロピラニル; テトラヒドロチエニル-S-オキシド; テトラヒドロチエニル-S,S-ジオキシド; ホモチオモルホリニル-S-オキシド; 2,3-ジヒドロアゼト; 2H-ピロリル; 4H-ピラニル; 1,4-ジヒドロピリジニル等。
二環式ヘテロ環(飽和及び不飽和):
8-アザビシクロ[3.2.1]オクチル; 8-アザビシクロ[5.1.0]オクチル; 2-オキサ-5-アザビシクロ[2.2.1]ヘプチル; 8-オキサ-3-アザビシクロ[3.2.1]オクチル; 3,8-ジアザビシクロ[3.2.1]オクチル; 2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプチル; 1-アザ-ビシクロ[2.2.2]オクチル; 3,8-ジアザビシクロ[3.2.1]オクチル; 3,9-ジアザビシクロ[4.2.1]ノニル; 2,6-ジアザビシクロ[3.2.2]ノニル; ヘキサヒドロフロ[3,2-b]フリル等。
スピロヘテロ環(飽和及び不飽和):
1,4-ジオキサスピロ[4.5]デシル; 1-オキサ-3,8-ジアザスピロ[4.5]デシル; 2,6-ジアザスピロ[3.3]ヘプチル; 2,7-ジアザスピロ[4.4]ノニル; 2,6-ジアザスピロ[3.4]オクチル; 3,9-ジアザスピロ[5.5]ウンデシル; 2,8-ジアザスピロ[4.5]デシル等。
ヘテロシクロアルキルアルキルは、最も広い意味で各々、上文に定義したアルキル基とヘテロシクロアルキル基の組み合わせを示す。置換基としてのアルキル基は、分子に直接結合され、次にヘテロシクロアルキル基によって置換される。このために適切ないかなる炭素原子介してもアルキル側に、また、このために適切ないかなる炭素原子又は窒素原子を介してもヘテロシクロアルキル側にアルキルとヘテロシクロアルキルの結合を達成させることができる。アルキルとヘテロシクロアルキルのそれぞれの下位基は、2つの基の組み合わせにも含まれる。
用語“適切な置換基”は、一方では原子価のために適合し、一方では化学安定性を有する系につながる置換基を意味する。
【００２３】
“プロドラッグ”は、前駆物質代謝物の形の活性物質を意味する。部分的にマルチパートの担体-プロドラッグ系と生体内変換系との間に違いが生じることがありえる。後者は、化学的代謝或いは生物学的代謝を必要とする形の活性物質を含有する。当業者には、この種類のプロドラッグ系はよく知られている(Sloan, Kenneth B.; Wasdo, Scott C. The role of prodrugs in penetration enhancement. Percutaneous Penetration Enhancers (2nd Edition) (2006).51-64; Lloyd, Andrew W. Prodrugs. Smith and Williams' Introduction to the Principles of Drug Design and Action (4th Edition) (2006), 211-232; Neervannan, Seshadri. Strategies to impact solubility and dissolution rate during drug lead optimization: salt selection and prodrug design approaches. American Pharmaceutical Review (2004), 7(5), 108.110-113)。適切なプロドラッグは、例えば、酵素によって切断可能なリンカー(例えば、カルバメート基、ホスフェート基、N-グリコシド基又はジスルフィド基)を介して溶解改善物質(例えば、テトラエチレングリコール、サッカリド、アミノ酸)に結合される一般式の物質を含有する。担体-プロドラッグ系は、起こりうる最も単純な制御可能な機序によって切断され得るマスキング基に結合されるような活性物質を含有する。本発明の化合物において本発明のマスキング基の機能は、細胞取り込みを改善するための電荷を中和することである。本発明の化合物がマスキング基と用いられる場合には、これらは、他の薬理学的パラメーター、例えば、経口バイオアべイラビリティ、組織分布、薬物動態及び非特異的ホスファターゼに対する安定性にも影響することがありえる。活性物質の遅延放出は、徐放性作用も含むことになる。更に、修飾代謝が生じるので、活性物質のより高い効率又は有機特異性が得られることになる。プロドラッグ製剤の場合、マスキング基又はマスキング基を活性物質に結合するリンカーは、プロドラッグが血清に溶解されるのに充分に親水性であり、活性部位に達するのに充分な化学的及び酵素的安定性を有し、拡散制御された膜輸送に適切であることを確実にするのに充分に親水性であるように選ばれる。更にまた、妥当な期間内に活性物質の化学的に又は酵素的に誘導された放出を可能にしなければならず、放出される補助成分が非毒性でなければならないことは言うまでもない。しかしながら、本発明の範囲内のマスク又はリンカーのない化合物とマスクは、まず第一に酵素的プロセスと生化学的プロセスによって取り込まれた化合物から細胞内で調製されなければならないプロドラッグとみなすことができる。
【００２４】
略語のリスト
abs.  絶対、無水
Ac  アセチル
Bn  ベンジル
Boc  tert-ブチルオキシカルボニル
Bu  ブチル
c  濃度
chex  シクロヘキサン
d  日間
TLC  薄層クロマトグラフィー
DCM  ジクロロメタン
DEA  ジエチルアミン
DIPEA  N-エチル-N,N-ジイソプロピルアミン(ヒーニッヒの塩基)
DMF  N,N-ジメチルホルムアミド
DMSO  ジメチルスルホキシド
EE  酢酸エチル(エチルアセテート)
eq  当量
ESI  電子スプレーイオン化
Et  エチル
EtOH  エタノール
h  時間
HATU  O-(7-アザベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウムテトラフルオロホスフェート
hex  ヘキシル
HPLC  高性能液体クロマトグラフィー
【００２５】
i  イソ
IR  赤外分光法
cat.  触媒、触媒の
conc.  濃縮された
b.p.  沸点
LC  液体クロマトグラフィー
soln.  溶液
Me  メチル
MeOH  メタノール
min  分
MPLC  中圧液体クロマトグラフィー
MS  質量分析
NMP  N-メチルピロリドン
NP  正常な相
n.a.  該当しない
Ph  フェニル
Pr  プロピル
Py  ピリジン
rac  ラセミ体
Rf(Rf)  保持因子
RP  逆相
RT  周囲温度
TBTU  O-(ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート
temp.  温度
tert.  第三
TFA  トリフルオロ酢酸
THF  テトラヒドロフラン
tRet.  保持時間(HPLC)
UV  紫外部
【００２６】
本発明の特徴と利点は、本発明の範囲を限定することなく、一例として本発明の基本を示す以下の詳細な実施例から明らかになる:
本発明の化合物の調製
全般
すべての反応は、特にことわらない限り、化学研究室において慣用的に用いられる方法を用いて市販で入手できる装置で行われる。空気感受性及び/又は水分感受性の出発材料は、保護ガス下に保存され、それらを用いる対応する反応及び操作を保護ガス(窒素又はアルゴン)下に行われる。
マイクロ波反応は、好ましくは撹拌しながら、密封容器(好ましくは2、5又は20mL)内でBiotage製のイニシエータ又はCEM製のエクスプローラにおいて行われる。
クロマトグラフィー
分取用中圧クロマトグラフィ(MPLC、正常相)についてはMillipore(商品名: Granula Silica Si-60A 35-70μm)製のシリカゲル又はMacherey Nagel(商品名: Polygoprep 100-50 C18)製のC-18 RP-シリカゲル(RP-相)が用いられる。薄層クロマトグラフィーは、Merck製の既製のシリカゲル60TLCプレート/ガラス(蛍光指示薬F-254と共に)で行われる。
分取用高圧力クロマトグラフィ(HPLC)は、Waters(商品名: XTerra Prep. MS C18、5μM、30×100mm又はXTerra Prep. MS C18、5μm、50×100mm OBD又はSymmetrie C18、5μm、19×100mm又はSunfire C18 OBD、19×100mm、5μm又はSunfire Prep C 10μm OBD 50×150mm又はX-Bridge Prep C18 5μm OBD 19×50mm、Agilent(商品名: Zorbax SB-C8 5μm PrepHT 21.2×50mm)及びPhenomenex(商品名: Gemini C18 5μm AXIA 21.2×50mm又はGemini C18 10μm 50×150mm)製のカラムを用いて行われ、分析用HPLC(反応制御)は、Agilent(商品名: Zorbax SB-C8、5μm、21.2×50mm又はZorbax SB-C8 3.5μm 2.1×50mm)及びPhenomenex(商品名: Gemini C18 3μm 2×30mm)製のカラムによって行われる。
【００２７】
HPLC質量分析/UV分光分析
例に特性を与えるための保持時間/MS-ESI+は、Agilent製のHPLC-MS装置(質量検出器を備える高性能液体クロマトグラフィー)を用いて得られる。注入ピークで溶離する化合物は、保持時間tRet. = 0.00を示す。
方法A:
カラム:  Waters、Xterra MS C18、2.5μm、2.1×30mm、Part.No. 186000592
溶離液:  A: 0.1% HCOOHを有するH2O; B:アセトニトリル(HPLCグレード)
検出:  MS: 正負モード
質量範囲:  120 - 900m/z
フラグメンター:  120
ゲインEMV:  1; 閾値: 150; ステップサイズ: 0.25; UV: 254nm; バンド幅: 1
注入:  注入容量5μL
分離:  フロー1.10mL/分
カラム温度:  40℃
勾配:  0.00分: 5%溶媒B
0.00 - 2.50分: 5%→95%溶媒B
2.50 - 2.80分: 95%溶媒B
2.81 - 3.10分: 95%→5%溶媒B
方法B:
カラム:  Waters、Xterra MS C18、2.5μm、2.1×50mm、Part.No. 186000594
溶離液:  A: 0.1% HCOOHを有するH2O; B: 0.1% HCOOHを有するアセトニトリル
検出:  MS: 正負モード
質量範囲:  100 - 1200m/z
フラグメンター:  70
ゲインEMV:  閾値: 1mAU; ステップサイズ: 2nm; UV: 230nm及び254nm
注入:  標準1μL
フロー:  0.6mL/分
カラム温度:  35℃
勾配:  0.00分: 5%溶媒B
0.00 - 2.50分: 5%→95 %溶媒B
2.50 - 4.00分: 95%溶媒B
4.00 - 4.50分: 95%→5 %溶媒B
4.50 - 6.00分: 95%溶媒A
【００２８】
方法C:
カラム:  Waters、X-Bridge C18、3.5μm、2.1×50mm、
溶離液:  A: 10mM NH3を有するH2O; B: 10nM NH3を有するアセトニトリル
検出: MS:  正負モード
質量範囲:  100 - 800m/z
フラグメンター:  70
ゲインEMV:  閾値: 1mAU; ステップサイズ: 2nm; UV: 220-320nm
注射:  標準1μL
フロー:  0.8mL/分
カラム温度:  25℃
勾配:  0.00分: 2%溶媒B
0.00 - 4.00分: 2%→98 %溶媒B
4.00 - 6.00分: 98%溶媒B
方法D:
カラム:  Waters、X-Bridge C18、3.5μm、2.1×50mm、
溶離液:  A: 0.1% HCOOHを有するH2O; B: 0.1% HCOOHを有するアセトニトリル
検出:  MS: 正負モード
質量範囲:  100 - 800m/z
フラグメンター:  70
ゲインEMV:  閾値: 1mAU; ステップサイズ: 2nm; UV: 220-320nm
注入:  標準1μL
フロー:  0.8mL/分カラム温度: 35℃
勾配:  0.00分: 2%溶媒B
0.00 - 4.00分: 2%→98 %溶媒B
4.00 - 6.00分: 98%溶媒B
【００２９】
方法E:
カラム:  Phenomenex Gemini C18、3.0μm、2.0×50mm、
溶離液:  A: 10mM NH3を有するH2O; B: 10nM NH3を有するアセトニトリル
検出:  MS: 正負モード
質量範囲:  100 - 800m/z
フラグメンター:  70
ゲインEMV:  閾値shold: 1mAU; ステップサイズ: 2nm; UV: 220-320nm
注入:  標準1μL
フロー:  1.0mL/分カラム温度: 35℃
勾配:  0.00分: 2%溶媒B
0.00 - 3.50分: 2%→98 %溶媒B
3.50 - 6.00分: 98%溶媒B
方法F:
カラム:  Phenomenex Gemini C18、3.0μm、2.0×50mm、
溶離液:  A: 0.1% HCOOHを有するH2O; B: 0.1% HCOOHを有するアセトニトリル
検出:  MS: 正負モード
質量範囲: 100 - 800m/z
フラグメンター:  70
ゲインEMV:  閾値: 1mAU; ステップサイズ: 2nm; UV: 220-320nm
注入:  標準1μL
フロー:  1.0mL/分
カラム温度:  35℃
勾配: 0.00分: 2%溶媒B
0.00 - 3.50分: 2%→98 %溶媒B
3.50 - 6.00分: 95%溶媒B
【００３０】
本発明の化合物は以下に記載される合成方法によって調製され、一般式の置換基は上文に指定された意味を有する。これらの方法は、本発明をそれらの内容に限定するか或いは特許請求された化合物の範囲をこれらの実施例に制限することなく示すことを意図する。出発化合物の調製が記載されていない場合、これらは市販で入手できるか又は既知の化合物もしくは本明細書に記載される方法と同様にして調製することができる。文献に記載される物質は、発表された合成法に従って調製される。
反応スキームA
【００３１】
【化５】
2011505407.tif 000007
【００３２】
タイプIの実施例化合物は、R3-置換2,4-ジクロロピリミジンA-1から1つ以上のアミンRyNH2とRzNH2を用いる求核芳香族置換によって調製される。置換の順序は、用いられるアミン、反応条件(酸性又は塩基性反応条件及びルイス酸の添加)及び置換基R3に非常に大きく左右される。Ry及びRzは、各々、実施例化合物を得るのに適切な基である。
A-1、A-2及びA-3での求核芳香族置換は共通の溶媒、例えば、THF、DCM、NMP、DMSO又はDMF中で塩基、例えば、DIPEA又はK2CO3、又は酸、例えばHClを用いて文献から既知の方法に従って行われる。用いられるアミン、RyNH2とRzNH2は、市販で入手できるか又は文献から既知の方法に従って合成される。次に、これらの方法によって直接得ることができるタイプIのジアミノピリミジンは、更に、文献から既知か又は同様の方法でRy及びRzに変更されて、更にタイプIのジアミノピリミジンを形成することができる。このようにして、例えば、カルボン酸-、スルホン酸-、ハロゲン-又はアミノ-置換アリール又はヘテロアリールからなるタイプIの直接入手できるジアミノピリミジンの基Ry及びRzは、置換(ヘテロアリール自体で)、アルキル化、アシル化、アミノ化又は添加の反応によって変性することができる。
出発化合物の調製
特にことわらない限り、すべての出発材料は市販の供給業者から購入され、合成に直接用いられる。文献に記載される物質は、発表された合成法によって調製される。
a)  2,4-ジクロロ-5-トリフルオロメチルピリミジンA-1aを合成するための手順
【００３３】
【化６】
2011505407.tif 000008
【００３４】
水分を排除しつつ、トリフルオロメチルウラシル(48.0g、267ミリモル)を210mLのオキシ塩化リン(POCl3)に懸濁させる。この懸濁液にジエチルアニリン(47.7g、320ミリモル)を温度が25℃〜30℃に維持されるようにゆっくりと添加される。添加が終わった後、この混合物を水浴中で更に5 - 10分間撹拌し、この混合物を80 - 90℃で水分を排除しつつ5 - 6h加熱する。氷水と混合した約1200gの硫酸に撹拌することによって過剰量のPOCl3を破壊し、水相を直ちに各々500mLのジエチルエーテル又はtert.-ブチルメチルエーテルで3×抽出する。合わせたエーテル抽出液を氷水(約0.1M)と冷食塩水と混合した300mLの硫酸で2×洗浄し、硫酸ナトリウムに直ちに乾燥させる。乾燥剤をろ別し、溶媒を減圧下で除去する。残留物を短カラム(20cm)(ヘッド温度: 65 - 70℃)によって減圧下(10mbar)で蒸留して、無色の液体を得、瓶に入れられ、アルゴン下に保存される。
TLC: Rf = 0.83(chex:EE = 3:1)
この手順と同様にして、更に、対応する中間体/遊離体又は対応する市販で入手できる遊離体からピリミジンA-1が得られる。
b)  2-クロロ-4-ベンジルアミノ-5-トリフルオロメチル-ピリミジンA-2a及び4-クロロ-2-ベンジルアミノ-5-トリフルオロメチルピリミジンA-3aを合成するための手順
【００３５】
【化７】
2011505407.tif 000009
【００３６】
2,4-ジクロロ-5-トリフルオロメチルピリミジン(100μL、0.72ミリモル)を5mLのTHFに懸濁させ、この反応混合物を0℃に冷却する。次に、5mLのTHF中のベンジルアミン(77mg、0.72ミリモル)とDIPEA(148μL、0.86mmol)の溶液を添加し、混合物を一晩撹拌する。次に、これをジクロロメタンで希釈し、1N HClで3×洗浄する。有機相は、硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧に蒸発させる。残留物をDMFに溶解し、分取用HPLCで精製する。A-2aの生成物含有画分 HPLC-MS: tRet. = 2.09分; MS(M+H)+ = 288)及びA-3a HPLC-MS: tRet. = 2.20分; MS(M+H)+ = 288)を凍結乾燥する。
c)  N-{3-[(2,5-ジクロロピリミジン-4-イルアミノ)メチル]ピリジン-2-イル}-N-メチルメタンスルホンアミドA-2bを合成するための手順
【００３７】
【化８】
2011505407.tif 000010
【００３８】
2,4,5-トリクロロピリミジン(1.0g、5.45ミリモル)を20mLのDCMに懸濁させ、この反応混合物を0℃に冷却する。次に、10mLのDCM中のN-(3-アミノメチルピリジン-2-イル)-N-メチルメタンスルホンアミド(1.17g、5.45ミリモル)及びDIPEA(1.95mL、10.9ミリモル)の溶液を添加し、この混合物を一晩撹拌する。この反応混合物をDCMで希釈し、1N NH4Cl溶液で3×洗浄する。有機相を硫酸マグネシウムに乾燥し、減圧下で蒸発させる。粗生成物A-2b(HPLC-MS: tRet. = 2.00分; MS(M+H)+ = 362)を精製せずに連続反応に用いる。
d)  I-1を合成するための手順
【００３９】
【化９】
2011505407.tif 000011
【００４０】
ピリミジンA-2a(45mg、0.16mmol)と4-(ジメチルカルバミル)アニリンを1-ブタノール(1mL)に懸濁させ、ジオキサン(12μL、0.05ミリモル)中でHClと合わせ、反応混合物を70℃に加熱する。反応が終った後、すべての揮発性成分を減圧下で除去し、反応混合物をDMFと合わせ、分取用HPLCによって精製する。I-1(HPLC-MS: tRet. = 2.18分; MS(M+H)+ = 416)の生成物含有画分を凍結乾燥する。
e)  I-3を合成するための手順
【００４１】
【化１０】
2011505407.tif 000012
【００４２】
ピリミジンI-2(80mg、0.15ミリモル)とHATU(58mg、0.15ミリモル)をDMF(500μL)に懸濁させ、DIPEA(78μL、0.46ミリモル)と合わせ、この反応混合物をRTで15分間撹拌する。次に、イソプロピルアミン(27mg、0.46ミルモル)を添加し、この反応混合物を一晩撹拌する。この反応混合物をろ過し、分取用HPLCによって精製する。I-3(HPLC MS: tRet. = 2.09分; MS(M+H)+ = 568)の生成物含有画分を凍結乾燥する。
市販で入手できるか又は文献から既知の方法によって調製される対応する前駆物質から、実施例I-1とI-3を合成するために上記反応手順a)〜e)と同様にして、以下の実施例I-2〜I-220(表1)又は匹敵する他の実施例を得ることができる。
【００４３】
【表１】
2011505407.tif 000013
【００４４】
【表２】
2011505407.tif 000014
【００４５】
【表３】
2011505407.tif 000015
【００４６】
【表４】
2011505407.tif 000016
【００４７】
【表５】
2011505407.tif 000017
【００４８】
【表６】
2011505407.tif 000018
【００４９】
【表７】
2011505407.tif 000019
【００５０】
【表８】
2011505407.tif 000020
【００５１】
【表９】
2011505407.tif 000021
【００５２】
【表１０】
2011505407.tif 000022
【００５３】
【表１１】
2011505407.tif 000023
【００５４】
【表１２】
2011505407.tif 000024
【００５５】
【表１３】
2011505407.tif 000025
【００５６】
【表１４】
2011505407.tif 000026
【００５７】
【表１５】
2011505407.tif 000027
【００５８】
【表１６】
2011505407.tif 000028
【００５９】
【表１７】
2011505407.tif 000029
【００６０】
【表１８】
2011505407.tif 000030
【００６１】
【表１９】
2011505407.tif 000031
【００６２】
【表２０】
2011505407.tif 000032
【００６３】
【表２１】
2011505407.tif 000033
【００６４】
【表２２】
2011505407.tif 000034
【００６５】
【表２３】
2011505407.tif 000035
【００６６】
【表２４】
2011505407.tif 000036
【００６７】
【表２５】
2011505407.tif 000037
【００６８】
【表２６】
2011505407.tif 000038
【００６９】
【表２７】
2011505407.tif 000039
【００７０】
【表２８】
2011505407.tif 000040
【００７１】
【表２９】
2011505407.tif 000041
【００７２】
【表３０】
2011505407.tif 000042
【００７３】
【表３１】
2011505407.tif 000043
【００７４】
【表３２】
2011505407.tif 000044
【００７５】
【表３３】
2011505407.tif 000045
【００７６】
【表３４】
2011505407.tif 000046
【００７７】
【表３５】
2011505407.tif 000047
【００７８】
【表３６】
2011505407.tif 000048
【００７９】
【表３７】
2011505407.tif 000049
【００８０】
【表３８】
2011505407.tif 000050
【００８１】
【表３９】
2011505407.tif 000051
【００８２】
【表４０】
2011505407.tif 000052
【００８３】
【表４１】
2011505407.tif 000053
【００８４】
【表４２】
2011505407.tif 000054
【００８５】
【表４３】
2011505407.tif 000055
【００８６】
【表４４】
2011505407.tif 000056
【００８７】
以下の実施例は、本発明をこれらの実施例に限定することなく本発明の化合物の生物活性を記載するものである。
PTK2酵素試験
この試験は、キナーゼ基質として活性PTK2酵素(Invitrogen Code PV3832)とポリ-Glu-Tyr(4:1、Sigma P-0275)を用いる。キナーゼ活性は、DELFIATM分析において基質のリン酸化によって検出される。リン酸化基質は、ユウロピウム標識ホスホチロシン抗体PY20(Perkin Elmer、No.: AD0038)で検出される。
PTK2-阻害剤による濃度-活性曲線を求めるために化合物を10% DMSO/H2Oに連続希釈し、96ウェルマイクロタイタプレート(透明なU型のベースプレート、Greiner No. 650101)に1ウェルに対して10μLの各希釈液が分配され(阻害剤は、2回の実験で試験される)、10μL/ウェルのPTK2キナーゼ(0.01μg/ウェル)と混合する。従って、PTK2キナーゼを予めキナーゼ希釈バッファ(20mM TRIS/HCl pH 7.5、0.1mM EDTA、0.1mM EGTA、0.286mMオルトバナジン酸ナトリウム、新たに調製されたBSA(画分V 1mg/mL)を添加した10%グリセロール及びDTT(1mM))で希釈する。試験化合物とPTK2キナーゼを、RTで1hプレインキュベートし、500 rpmで振盪する。次に、20μLのATPミックス(30mM TRIS/HCl pH 7.5、0.02% Brij、0.2mMオルトバナジン酸ナトリウム、10mM酢酸マグネシウム、0.1mM EGTA、1×ホスファターゼインヒビター混液1(Sigma、No.: P2850)、50μM ATP(Sigma、No.、: A3377; 15mM原液))を添加する。10μL/ウェルのポリ(Glu,Tyr)基質(25μg/ウェルのポリ(Glu、Tyr)、250mM TRIS/HCl pH 7.5に溶解した0.05μg/ウェルビオチン化ポリ(Glu,Tyr)、9mM DTT)の添加によって反応を開始する-DMSOの最終濃度は2%である。1hのキナーゼ反応(プレートを500rpmで振盪する)の後、12μL/ウェルの100mM EDTA、pH 8を添加によってこの反応を停止する。RT(500U/分)で更に5分間振盪する。
55μLの反応混合液を、ストレプトアビジンプレート(Roche、No.: 11989685001製)のStrepta Well High Bind(透明、96ウェル)に移し、RTで1hインキューベートする(500rpmで振盪する)。次に、マイクロタイタプレートを、200μL/ウェルD-PBS(Invitrogen、No.: 14190)で3回洗浄する。次に、100μLの1:2000に希釈されたDELFIA Eu-N1 Anti-Phosphotyrosine PY20抗体(Perkin Elmer、No.: AD0038、DELFIA試験バッファ(Perkin Elmer、No.: 1244-111)に1:2000に希釈)を添加し、RTで1hインキューベートする(500rpmで振盪する)。次に、プレートを200μL/ウェルのDELFIA洗浄バッファ(Perkin Elmer、No.: 1244-114)で3回洗浄し、200μL/ウェルの強化溶液(Perkin Elmer、No.: 1244-105)を添加し、全体をRTで10分間インキューベートする(300rpmで振盪する)。
次に、時間遅延ユウロピウム蛍光を、マイクロタイタプレートリーダー(Victor、Perkin Elmer)で測定する。正の対照は、溶媒対照(2% DMSO/試験バッファ)を含有し且つ抑制されないキナーゼ活性を示すウェルからなる。酵素の代わりに試験バッファを含有するウェルは、バックグラウンドキナーゼ活性の対照として作用する。IC50値は、濃度-活性分析から可変ヒル係数によるシグモイド曲線分析アルゴリズム(FIFTY、GraphPAD Prism Version 3.03に基づく)を用いた反復計算によって求められる。
【００８８】
軟寒天分析
軟寒天においてPC-3前立腺癌細胞の増殖(‘接着非依存性増殖’)に関するPTK2-阻害剤の影響を求めるためにこの細胞試験を用いる。2週間のインキュベーション時間の後、Alamar Blue(resazurin)染色によって細胞の生存が示される。
PC-3細胞(ATCC CRL-1435)を、10%胎児ウシ血清(Invitrogen、No.: 16000-044)で補足されたF12 Kaighn's培地(Gibco、No.: 21127)を有する細胞培養フラスコ(175cm2)中で増殖させる。培養物を、37℃及び5% CO2のインキュベータにおいてインキューベートし、1週間に2回実験する。試験は、マイクロタイタのプレート(Greiner、No.: 655 185)において行われ、1.2%アガロース(Invitrogen、4%アガロースゲル1×液体40mL、No.: 18300-012)を有する90μLの培養液から構成される下層からなり、60μL培養液と0.3%アガロースが続き、最後に試験化合物(アガロースを添加せずに)を含有する30μLの培養液を含む最上層が続く。下層を調製するために、4%アガロースを10×D-PBS(Gibco、No.: 14200)とH2Oと煮沸するので、1×D-PBS中の3%アガロースで予め希釈される。後者を、培養培地(F12 Kaighn's/10% FCS)とFCSで10% FCSを有するF12 Kaighn's培地中の1.2%アガロースの最後の希釈液に調整する。マイクロタイタプレートの各ウェルを、下層用の90μLの懸濁液で供給し、RTまで1h冷却する。細胞層については、PC-3細胞をトリプシン(Gibco、0.05%; No.: 25300)を用いて分離し、計数し、0.3%アガロース(37℃)を添加して60μLのF12 Kaighn's(10%  FCS)に播種する。RTまで1h冷却した後、試験化合物(連続希釈から30μL)を4回の測定のために添加する。試験化合物の濃度は、通常10μM〜0.3nMの試験範囲を対象とする。化合物(原液: 10mM/100% DMSO)を、F12 Kaighn's培地 + 6% DMSOに予め希釈し、1% DMSOの最終濃度を得る。細胞を、水蒸気飽和雰囲気中37℃及び5% CO2で14日間インキューベートする。次に、生きている細胞の代謝活性が染料Alamar Blue(AbD Serotec、No.: BUF012B)によって示される。これを行うために、18μL/ウェルのAlamar Blue懸濁液を添加し、全体を37℃のインキュベータにおいて約8hインキューベートする。正の対照は、高圧滅菌によって減少した180μLのAlamar Blueと180μLのF12 Kaighn's培地(10% FCS)の混合物で充填される空のウェルからなる。蛍光強度は、蛍光分光計(SpectraMAX GeminiXS、Molecular Devices)によって求められる。励起波長は530nmであり、発光波長は590nmである。
EC50値は、濃度-活性分析から可変ヒル係数によるシグモイド曲線分析アルゴリズム(FIFTY、GraphPAD Prism Version 3.03に基づく)を用いた反復計算によって求められる。
【００８９】
Phospho-PTK2(pY397)分析
この細胞試験は、チロシン397(pY397)におけるPTK2-リン酸化の状態に対するPTK2-阻害剤の影響を求めるために用いられる。
10%胎児ウシ血清(Invitrogen、No.: 16000-044)を添加したF12 Kaighn's培地(Gibco、No.: 21127)を有する細胞培養フラスコ(175cm2)中でPC-3細胞(前立腺癌、ATCC CRL-1435)を増殖させる。培養物を、37℃及び5% CO2のインキュベータにおいてインキューベートし、1週間につき2回実験する。
試験のために、2×104細胞プロウェル/90μL培地を96穴マイクロタイタプレート(Costar, No.: 3598)に平板培養し、37℃及び5% CO2のインキュベータにおいて一晩インキューベートする。試験化合物(連続希釈から10μL)を翌日添加する。試験化合物の濃度は、通常50μM〜0.8nMの範囲を対象とする。最終濃度が1% DMSOであるように試験化合物(原液: 10mM/100% DMSO)を培地/培地10% DMSOに希釈する。次に、細胞は、37℃及び5% CO2のインキュベータにおいて2hインキューベートする。次に、培養上清を取り出し、細胞をD-PBS中150μLの4%ホルムアルデヒドでRTにおいて20分間を固定する。細胞ローンを各々D-PBS中の200μLの0.1%トリトンX-100で5分間5回洗浄し、次に、ブロッキングバッファ(5%脱脂粉乳(Maresi Fixmilch)/TBST(25mMトリス/HCl、pH 8.0、150mM NaCl、0.05%トゥイーン20)と90分間インキューベートする。ブロッキングバッファを、1:200/ブロッキングバッファに希釈されている50μLの一次抗体アンチホスホPTK2[pY397]ウサギモノクローナル(Invitrogen/Biosource、No.: 44-625G)で置き換える。対照のために、代わりに、ブロッキングバッファに1:400に希釈されたPTK2[全]抗体(クローン4.47のマウスモノクローナル、Upstate、No.: 05-537)を用いる。このインキュベーションは4℃で一晩行われる。次に、細胞ローンを各々D-PBS中の100μLの0.1%トゥイーンで5分間5回洗浄し、50μL/ウェルの二次抗体を添加する。結合したホスホPTK2[pY397]抗体を検出するために、ホースラディッシュペルオキシダーゼ(Dako、No.: P0448; 1:500希釈液/ブロッキングバッファ)とカップリングしたヤギ抗ウサギ抗体を用いる。結合したPTK2[全]抗体を検出するために、ウサギ抗マウス抗体を用い、これもホースラディッシュペルオキシダーゼ(Dako、No.: PO161; 1:1000希釈液/ブロッキングバッファ)とカップリングされている。このインキュベーションは、弱く振盪しながらRTで1h行われる。次にまた、細胞ローンを、各々D-PBS中100μLの0.1%トゥイーンで5分間5回洗浄する。ペルオキシダーゼ染色は、100μLの染色溶液(TMBペルオキシダーゼ基質(KPL、No.: 50-76-02)とペルオキシダーゼ溶液B(H2O2)(KPL、No.: 50-65-02)の1:1混合物)を添加することによって行われる。染色の発色は、暗所で10 - 30分間行われる。100μL/ウェルの1Mリン酸溶液を添加することによって反応を停止する。吸収測定デバイス(VICTOR3 PerkinElmer)により450nmにおける吸収を光度分析的に求める。アンチホスホPTK2[pY397]免疫染色の阻止を用いて、EC50値を求める。抗PTK2[全]抗体による染色は、対照のためであり、阻害剤の影響下に一定のままでなければならない。EC50値は、可変ヒル係数によるシグモイド曲線分析アルゴリズム(FIFTY、GraphPAD Prism Version 3.03に基づく)を用いた反復計算によって濃度-活性分析から求められる。
【００９０】
試験されるすべての実施例は、10μM未満、通常は1μM未満のEC50値(PC-3)を有する。
本発明の物質は、PTK2-キナーゼ阻害剤である。これらの生物学的性質からみて、一般式(1)の新規な化合物、その異性体及びその生理的に許容され得る塩は、過剰な又は異常な細胞増殖を特徴とする疾患の治療に適切である。
このような疾患の例としては、例えば、ウイルス感染症(例えば、HIV、カポジ肉腫); 炎症性疾患及び自己免疫疾患(例えば、大腸炎、関節炎、アルツハイマー病、腎炎、創傷治癒); 細菌、真菌及び／又は寄生虫感染症; 白血病、リンパ腫及び固形腫瘍(例えば、癌腫、肉腫); 皮膚疾患(例えば、乾癬); 細胞の数の増加を特徴とする過形成に基づく疾患(例えば、繊維芽細胞、肝細胞、骨や骨髄細胞、軟骨細胞又は平滑筋細胞又は上皮細胞(例えば、子宮内膜過形成)); 骨疾患及び心血管疾患(例えば、再狭窄や肥大)が挙げられる。
【００９１】
例えば、下記の癌が本発明の化合物で治療され得るが、これらに限定されない:
脳腫瘍、例えば、聴神経鞘腫、星状細胞腫、例えば、原線維性星状細胞腫、原形質性星状細胞腫、大円形細胞性星状細胞腫、未分化星状細胞腫、毛様細胞性星状細胞腫、グリア芽細胞腫、神経膠肉腫、多形性黄色星状膠細胞腫、上衣下大細胞巨細胞星状細胞腫、癒着性小児型星状細胞腫; 脳リンパ腫、脳転移、下垂体腫瘍、例えば、プロラクチノーマ、HGH(ヒト成長ホルモン)産生腺腫や副腎皮質刺激腺腫、頭蓋咽頭腫、髄芽細胞腫、髄膜腫、乏突起膠腫; 神経腫瘍、例えば、植物性神経系の腫瘍、例えば、神経芽細胞腫、神経節細胞腫、傍神経節腫(褐色細胞腫、クロム親和性細胞腫)、頚動脈小体腫瘍、末梢神経系の腫瘍、例えば、切断神経腫、神経繊維腫、神経線維腫症(神経鞘腫、シュワン鞘腫)、悪性シュワン鞘腫、中枢神経系、例えば、脳や骨髄の腫瘍; 腸癌、例えば、直腸、結腸、肛門、十二指腸の癌腫; 眼瞼腫瘍(眼瞼器の基底細胞腫又は腺癌); 網膜芽腫; 膵臓の癌腫; 膀胱の癌腫; 肺癌(気管支癌-小細胞肺癌(SCLC)、非小細胞肺癌(NSCLC)、例えば、紡錘細胞扁平上皮癌、腺癌(腺房、乳頭、細気管支肺胞上皮)、大細胞気管支癌(巨細胞癌、明細胞癌)); 乳癌、例えば、腺管癌、小葉癌、粘液癌又は管状腺癌、パジェット病; 非ホジキンリンパ腫(Bリンパ腫又はTリンパ腫NHL)、例えば、有毛細胞白血病、バーキットリンパ腫又は菌状息肉腫瘍; ホジキン病; 子宮癌(子宮体癌又は子宮内膜癌); CUP症候群(未知の原発性の癌); 卵巣癌(卵巣癌腫-粘液性又は卵巣嚢胞、子宮内膜性腫瘍、明細胞腫瘍、ブレンナー腫瘍); 胆嚢癌；胆管癌、例えば、クラッキン腫瘍; 精巣癌(胚芽細胞又は非精胚芽細胞腫瘍); 喉頭癌、例えば、声帯の腫瘍、声門上、声門及び声門下の腫瘍; 骨の癌、例えば、骨軟骨腫、軟骨腫、軟骨芽細胞腫、軟骨粘液線維腫、軟骨肉腫、骨腫、類骨骨腫、骨芽細胞腫、骨肉腫、非骨化性線維腫、骨線維腫、線維形成性線維腫、骨の線維肉腫、悪性線維性組織球腫、骨巨細胞腫又は巨細胞腫、ユーイング肉腫、形質細胞腫; 頭頚部腫瘍(HNO腫瘍)、唇の腫瘍、口腔(唇、舌、口腔の癌腫)、鼻咽頭癌(鼻の腫瘍、リンパ上皮腫)、咽頭癌、口腔咽頭癌、扁桃(扁桃悪性腫瘍口腔)や舌根の癌腫、下咽頭癌、喉頭癌(喉頭の癌)、副鼻腔や鼻腔の腫瘍、唾液腺や耳の腫瘍; 肝細胞癌(肝細胞癌(HCC); 白血病、例えば、急性白血病、例えば、急性リンパ性/リンパ芽球性白血病(ALL)、急性骨髄性白血病(AML); 慢性リンパ性白血病(CLL)、慢性骨髄性白血病(CML); 胃癌(乳頭状腺癌、管状腺癌又は粘液性腺癌、印環細胞癌腫、扁平上皮癌又は未分化癌; 悪性黒色腫、例えば、表層拡大型黒色腫(SSM)、結節型黒色腫(NMM)、悪性黒子型黒色腫(LMM)、末端黒子型黒色腫(ALM)又は無色素性黒色腫(AMM); 腎臓癌癌、例えば、腎細胞癌(副腎腫又はグラビッツ腫瘍); 食道癌; 陰茎癌; 前立腺癌; 膣癌又は腟上皮内癌; 甲状腺癌、例えば、乳頭癌、濾胞腺癌、髄様癌又は未分化甲状腺癌; 胸腺癌(胸腺腫); 尿道癌(尿道(尿道腺癌)及び外陰癌。
【００９２】
新規な化合物は、上述の疾患の予防、短期又は長期の治療に用いることができ、場合により、放射線治療又は他の“最新技術の”化合物、例えば、細胞増殖抑制性物質又は細胞毒性物質、細胞増殖阻害剤、抗血管新生物質、ステロイド又は抗体と組み合わせて用いてもよい。
一般式(1)の化合物は、それ自体で又は本発明の他の活性物質と組み合わせて用いることができ、場合により、他の薬理的に活性な物質と組み合わせて用いてもよい。
本発明の化合物と組み合わせて投与することができる化学療法剤としては、ホルモン、ホルモン類似体及び抗ホルモン(例えば、タモキシフェン、トレミフェン、ラロキシフェン、フルベストラント、メゲストロールアセテート、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、アミノグルテチミド、シプロテロンアセテート、フィナステリド、ブセレリンアセテート、フルドロコルチンゾン、フルオキシメステロン、メドロキシプロゲステロン、オクトレオチド)、アロマターゼインヒビター(例えば、アナストロゾール、レトロゾール、リアロゾール、ボロゾール、エキセメスタン、アタメスタン)、LHRHアゴニスト及びアンタゴニスト(例えば、ゴセレリンアセテート、ルプロリド)、成長因子阻害剤(成長因子、例えば、“血小板由来成長因子”や“肝細胞成長因子”、阻害剤は、例えば、“成長因子”抗体、“成長因子受容体”抗体、チロシンキナーゼインヒビター、例えば、ゲフィチニブ、ラパチニブ、トラスツズマブである); シグナル伝達阻害剤(例えば、イマチニブやソラフェニブ); 代謝拮抗物質(例えば、メトトレキセート、プレメトレキセド、ラルチトレキセドのような抗葉酸剤、5-フルオロウラシル、カペシタビン、ゲムシタビンのようなピリミジン類似体、メルカプトプリン、チオグアニン、クラドリビン、ペントスタチン、シタラビン、フルダラビンのようなプリンやアデノシン類似体); 抗腫瘍抗生物質(例えば、ドキソルビシン、ダウノルビシン、エピルビシン、イダルビシンのようなアントラサイクリン、マイトマイシンC、ブレオマイシン、ダクチノマイシン、プリカマイシン、ストレプトゾシン); 白金誘導体(例えば、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン); アルキル化剤(例えば、エストラムスチン、メクロレタミン、メルファラン、クロラムブシル、ブスルファン、ダカルバジン、シクロホスファミド、イフォスファミド、テモゾロミド、ニトロソウレア、例えば、カルムスチンやロムスチン、チオテパ); 抗有糸分裂剤(例えば、ビンカアルカロイド、例えば、ビンブラスチン、ビンデシン、ビノレルビン、ビンクリスチン; パクリタキセル、ドセタキセルのようなタキサン); トポイソメラーゼ阻害剤(例えば、エピポドフィロトキシン、例えば、エトポシドやエトポフォス、テニポシド、アムサクリン、トポテカン、イリノテカン、ミトキサントロン)及びアミホスチン、アナグレリド、クロドロナト、フィルグラスチン、インターフェロンアルファ、ロイコボリン、リツキシマブ、プロカルバジン、レバミソール、メスナ、ミトタン、パミドロネート、ポルフィマーのような種々の化学療法剤が挙げられるがこれらに限定されない。
【００９３】
適切な製剤としては、例えば、錠剤、カプセル剤、坐薬、液剤、-特に注射用(s.c.、i.v.、i.m.)や注入用の液剤-エリキシル剤、乳剤又は分散性散剤が挙げられる。1つ又は複数の医薬的に活性な化合物の含量は、全体として組成物の0.1〜90wt％、好ましくは0.5〜50wt％の範囲、即ち、以下に指定される用量範囲を得るのに充分な量でなければならない。指定された用量は、場合により、1日数回投与されてもよい。
適切な錠剤は、例えば、1つ又は複数の活性物質を既知の賦形剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム又はラクトースのような不活性希釈剤、コーンスターチ又はアルギン酸のような崩壊剤、デンプン又はゼラチンのような結合剤、ステアリン酸マグネシウム又はタルクのような滑沢剤及び/又はカルボキシメチルセルロース、セルロースアセテートフタレート、又はポリ酢酸ビニルのような放出遅延剤と混合することにより得られてもよい。錠剤は数層を含んでもよい。
錠剤と同様にして製造されたコアを通常錠剤コーティングに用いられる物質、例えば、コリドン又はセラック、アラビアゴム、タルク、二酸化チタン又は糖で被覆することにより被覆錠剤を調製することができる。遅延放出を達成するか又は配合禁忌を防止するために、コアは多くの層をからなってもよい。同様に、錠剤コーティングも遅延放出を得るために多くの層からなってもよく、場合により錠剤について上述された賦形剤を用いてもよい。
本発明の活性物質又はこれらの組み合わせを含有するシロップ剤又はエリキシル剤は、更に、サッカリン、シクラメート、グリセロール又は糖のような甘味剤及び香味増強剤、例えば、バニリン又はオレンジエキスのような香味剤を含有してもよい。これらは、また、懸濁補助剤又は増粘剤、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、湿潤剤、例えば、脂肪アルコールとエチレンオキシドの縮合生成物、又はp-ヒドロキシベンゾエートのような防腐剤を含有してもよい。
注射用及び注入用の液剤は、通常の方法で、例えば、等張剤、p-ヒドロキシベンゾエートのような防腐剤、又はエチレンジアミン四酢酸のアルカリ金属塩のような安定剤を添加して調製され、場合により、乳化剤及び／又は分散剤を用いてもよく、水が希釈剤として用いられる場合には、例えば、場合により、有機溶媒が溶媒和剤又は溶解助剤として用いられ、注射用のバイアルもしくはアンプル又は注入びんに移されてもよい。
【００９４】
1つ以上の活性物質又は活性物質の組み合わせを含有するカプセル剤は、例えば、活性物質をラクトース又はソルビトールのような不活性担体と混合し、これをゼラチンカプセルに充填することにより調製することができる。
適切な坐薬は、例えば、このために準備された担体、例えば、中性脂肪又はポリエチレングリコール又はその誘導体と混合することにより製造することができる。
用いることができる賦形剤としては、例えば、水、パラフィン(例えば、石油留分)、植物油(例えば、落花生油又はゴマ油)、一官能性又は多官能性アルコール(例えば、エタノール又はグリセロール)のような医薬的に許容され得る有機溶媒、担体、例えば、天然鉱物粉末(例えば、カオリン、クレー、タルク、チョーク)、合成鉱物粉末(例えば、高度に分散されたケイ酸やケイ酸塩)、糖(例えば、蔗糖、ラクトース、グルコース)、乳化剤(例えば、リグニン、使用済み亜硫酸塩溶液、メチルセルロース、デンプン、ポリビニルピロリドン)及び滑沢剤(例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ステアリン酸、ラウリル硫酸ナトリウム)が挙げられる。
製剤は通常の方法で、好ましくは経口経路又は経皮経路、特に好ましくは経口経路により投与される。経口投与については、錠剤は、勿論、上述の担体とは別に、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、リン酸二カルシウムのような添加剤を、デンプン、好ましくはジャガイモデンプン、ゼラチン等の種々の添加剤と一緒に含有してもよい。更に、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、タルクのような滑沢剤が打錠プロセスに同時に用いられてもよい。水性懸濁液の場合、活性物質が上述の賦形剤に加えて種々の香味増強剤又は着色剤と組み合わされてもよい。非経口使用については、活性物質と適切な液体担体との溶液が用いられてもよい。
静脈内使用の用量は、時間当り1-1000mg、好ましくは時間当り5-500mgである。
しかしながら、体重、投与経路、薬剤に対する個々の応答、その製剤の種類及び薬剤が投与される時間又は間隔によっては指定された量から逸脱することがしばしば必要でありえる。従って、場合によっては、上で示された最少用量より少ない量を用いることが充分である場合があるが、他の場合には上限を超えなければならない場合もある。多量を投与する場合は、その日にわたって広げられる多くのより少ない用量に分けることが妥当であることがありえる。
以下の製剤実施例は本発明を具体的に説明するものであるが、本発明の範囲を限定するものではない:
【００９５】
医薬製剤の実施例
A)
錠剤                               一錠当たり
式(1)の活性物質                      100mg
ラクトース                           140mg
コーンスターチ                       240mg
ポリビニルピロリドン                  15mg
ステアリン酸マグネシウム               5mg
500mg
【００９６】
微粉末の活性物質、ラクトース及びコーンスターチの一部を一緒に混合する。この混合物を篩過し、次に水中のポリビニルピロリドンの溶液で湿らせ、混錬し、湿式造粒し、乾燥させる。顆粒、残りのコーンスターチ及びステアリン酸マグネシウムを篩過し、一緒に混合する。この混合物を圧縮して、適切な形状とサイズの錠剤を製造する。
【００９７】
B)
錠剤                                一錠当たり
式(1)の活性物質                        80mg
ラクトース                             55mg
コーンスターチ                        190mg
ミクロクリスタリンセルロース           35mg
ポリビニルピロリドン                   15mg
カルボキシメチルデンプンナトリウム     23mg
ステアリン酸マグネシウム                2mg
400mg
【００９８】
微粉末の活性化合物、コーンスターチの一部、ラクトース、ミクロクリスタリンセルロース及びポリビニルピロリドンを一緒に混合し、この混合物を篩過し、残りのコーンスターチと水で処理して、顆粒を形成し、これを乾燥させ、篩過する。カルボキシメチルデンプンナトリウムとステアリン酸マグネシウムを添加し、混合し、この混合物を圧縮して、適切なサイズの錠剤を形成する。
C)
アンプル溶液
式(1)の活性物質                         50mg
塩化ナトリウム                          50mg
注射用水                                 5ml
【００９９】
活性物質を水にそれ自体のpH又は場合によりpH5.5〜6.5で溶解し、塩化ナトリウムを添加して、等張にする。得られた溶液をろ過して発熱物質を除き、ろ液を無菌条件下でアンプルに移し、次にこれを滅菌し、溶融により密封する。アンプルは5mg、25mg及び50mgの活性物質を含有する。
【国際調査報告】
2011505407.tif 000059
2011505407.tif 000060
2011505407.tif 000061