(57)【要約】  式(I)【化１】2011510009.tif 000113                                            (I)の化合物を含む化合物又はその医薬上許される塩もしくはプロドラッグが開示される。式中、Ｙ、Ａ、Ｒ、Ｄ、及びｎは記載されたとおりである。緑内障、炎症性腸疾患の治療、毛髪成長の刺激、及び硬毛への軟毛の変換の刺激に有益な化合物が本明細書に開示される。
2011510009.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の式の化合物又はその医薬上許される塩もしくはプロドラッグ。
【化１】
2011510009.tif 000100
［式中、破線は共有結合の存在又は不在を表し、
Ｙは下記の式の基であり、
【化２】
2011510009.tif 000101
Ａは-(CH2)6-、シス-CH2CH=CH-(CH2)3-、又は-CH2C≡C-(CH2)3-（これらの場合、１個又は２個の炭素原子がＳ又はＯで置換されていてもよい）であり、又はＡは-(CH2)m-Ar-(CH2)o-（式中、Arは置換又は未置換フェニル又は単環式ヘテロアリールであり、ｍ及びｏの合計が１から４までであり、かつ１個のCH2がＳ又はＯで置換されていてもよい）であり、
ＸはＳ又はＯであり、
Ｒは１個から12個までの炭素原子を含むヒドロカルビル又はヒドロキシヒドロカルビル部分であり、
Ｄは独立に１個から６個までの非水素原子を含む部分であり、かつ
ｎは０から４までの整数である］
【請求項２】
ｎが０である、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒが６個から９個までの炭素原子及び環状構造を含む、請求項１記載の化合物。
【請求項４】
式
【化３】
2011510009.tif 000102
の請求項３記載の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグ。
【請求項５】
式
【化４】
2011510009.tif 000103
の請求項３記載の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグ。
【請求項６】
式
【化５】
2011510009.tif 000104
の請求項１記載の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグ。
【請求項７】
式
【化６】
2011510009.tif 000105
の請求項１記載の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグ。
【請求項８】
Ａが-(CH2)6-、シス-CH2CH=CH-(CH2)3-、又は-CH2C≡C-(CH2)3-である、請求項１記載の化合物。
【請求項９】
式
【化７】
2011510009.tif 000106
の請求項２記載の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグ。
【請求項１０】
式
【化８】
2011510009.tif 000107
（式中、R3、R4、及びR5 が独立にＨ又はC1-6 アルキルである）
の請求項２記載の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグ。
【請求項１１】
R4及びR5 がメチルである、請求項１０記載の化合物。
【請求項１２】
式
【化９】
2011510009.tif 000108
の請求項１１記載の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグ。
【請求項１３】
Ａが-(CH2)m-Ar-(CH2)o- （式中、Arがフェニルであり、ｍ及びｏの合計が１から４までであり、かつ１個のCH2がＳ又はＯで置換されていてもよい）である、請求項２記載の化合物。
【請求項１４】
式
【化１０】
2011510009.tif 000109
【化１１】
2011510009.tif 000110
の請求項１記載の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグ。
【請求項１５】
請求項１記載の化合物を緑内障又は眼の高血圧の治療のために哺乳類に投与することを特徴とする方法。
【請求項１６】
請求項１記載の化合物を含む組成物であって、前記組成物が眼に許される液体である組成物。
【請求項１７】
請求項１記載の化合物を禿頭症の治療のために哺乳類に投与することを特徴とする方法。
【請求項１８】
請求項１記載の化合物を脱毛症の治療のために哺乳類に投与することを特徴とする方法。
【請求項１９】
式
【化１２】
2011510009.tif 000111
の請求項１記載の化合物又はその医薬上許される塩もしくはプロドラッグ。
【請求項２０】
式
【化１３】
2011510009.tif 000112
の請求項１記載の化合物又はその医薬上許される塩もしくはプロドラッグ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
この出願は2008年１月18日に出願された米国仮特許出願第61/022,172号、及び2009年１月13日に出願された米国特許出願第12/352,903号（これらの両方がそのまま本明細書に含まれる）の優先権を主張する。
【背景技術】
【０００２】
眼の血圧降下剤は種々の眼の高血圧症状、例えば、術後及びレーザートラベクレクトミー後の眼の高血圧エピソード、緑内障の治療に、また手術前の佐剤として有益である。
緑内障は増大された眼内圧を特徴とする眼の疾患である。その病因に基づいて、緑内障は一次又は二次と分類されていた。例えば、成人の一次緑内障（先天性緑内障）は開放隅角又は急性もしくは慢性の閉鎖隅角であってもよい。二次緑内障は既存の眼の疾患、例えば、ブドウ膜炎、眼内腫瘍又は拡大白内障から生じる。
一次緑内障の基礎となる原因は未だ知られていない。増大された眼内緊張は水性体液流出の閉鎖のためである。慢性開放隅角緑内障では、前室及びその解剖学的構造が明らかに正常であるが、水性体液の排出が阻害される。急性又は慢性の閉鎖隅角緑内障では、前室が浅く、濾過角が狭くされ、虹彩がシュレンム管の入口で肉柱の網を閉塞するかもしれない。瞳孔の拡張がその角に対して前方に虹彩の根を押しやることがあり、瞳孔遮断を生じることがあり、こうして急の発作を早めることがある。狭い前室角を有する眼は種々の重度の急性閉鎖隅角緑内障発作にかかりやすくされる。
二次緑内障は後室から前室、続いてシュレンム管への水性体液の流れによる干渉により生じられる。前セグメントの炎症性疾患が完全な後癒着を膨隆虹彩中に生じることにより水の逃げを妨げることがあり、滲出液で排出溝を詰まらせるかもしれない。その他の普通の原因は眼内腫瘍、拡大白内障、中央網膜静脈閉鎖、眼の外傷、手術処置及び眼内出血である。
【０００３】
全ての型を一緒に考えると、緑内障は40才以上の年齢の全てのヒトの約２％で生じ、視力の迅速な喪失に進行する前の何年にもわたって無症候であるかもしれない。手術が指示されない場合には、局所β-アドレナリン受容体アンタゴニストが従来緑内障を治療するためのえり抜きの薬物であった。
或る種のエイコサノイド及びそれらの誘導体が緑内障処置における使用のために現在市販されている。エイコサノイド及び誘導体として、プロスタグランジン及びそれらの誘導体の如き多くの生物学的に重要な化合物が挙げられる。プロスタグランジンは下記の構造式を有するプロスタン酸の誘導体として記載し得る。
【０００４】
【化１】
2011510009.tif 000003
【０００５】
種々の型のプロスタグランジンが、プロスタン酸骨格の脂環式環の構造及びその環に有される置換基に応じて、知られている。更なる分類はプロスタグランジンの一般の型の後の下に書かれた数字により示される側鎖中の不飽和結合の数［例えば、プロスタグランジンE1（PGE1）、プロスタグランジンE2（PGE2）］、及びα又はβにより示される脂環式環の置換基の配置［例えば、プロスタグランジンF2α（PGF2β）］に基づいている。
【０００６】
以下に示されるプロスタグランジンＥ類似体が下記の書類（参考として本明細書に明らかに含まれる）に開示されている：米国特許第5,462,968号、同第5,698,598号、及び同第6,090,847号。
【０００７】
【化２】
2011510009.tif 000004
【０００８】
その他のEP2選択的アゴニストが2004年12月10日に出願された、米国特許出願第11/009298号（2006年８月15日に発行された現在の米国特許第7,091,231号）に開示されている。プロスタグランジンEP2選択的アゴニストは幾つかの医療上の使用を有すると考えられる。例えば、米国特許第6,437,146号は“関節及び筋肉の炎症及び痛み（例えば、慢性関節リウマチ、リウマチ様脊椎炎、骨関節炎、痛風関節炎、若年性関節炎、等）、炎症性皮膚症状（例えば、日焼け、火傷、湿疹、皮膚炎、等）、炎症性の眼の症状（例えば、結膜炎、等）、炎症が関係する肺疾患（例えば、喘息、気管支炎、ハト愛好者疾患、農夫肺、等）、炎症と関連する胃腸道の症状（例えば、アフタ性潰瘍、クローン病、萎縮性胃炎、バリアロフォルム胃炎、潰瘍性大腸炎、腹腔疾患、限局性回腸炎、刺激性腸症候群、等）、歯肉炎、手術又は外傷後の炎症、痛み及び腫脹、発熱、炎症と関連する痛み及びその他の症状、アレルギー性疾患、全身性エリテマトーデス、硬皮症、多発性筋炎、腱炎、滑液のう炎、結節性関節周囲炎、リウマチ熱、シェーグレン症候群、ベーチェット病、甲状腺炎、型Ｉ糖尿病、糖尿病合併症（糖尿病性微小血管障害、糖尿病性網膜症、糖尿病性神経障害、等）、ネフローゼ症候群、再生不良性貧血、重症筋無力症、ブドウ膜接触皮膚炎、乾癬、カワサキ病、サルコイドーシス、ホジキン病、アルツハイマー病、腎臓機能不全（腎炎、腎炎症候群、等）、肝臓機能不全（肝炎、肝硬変、等）、胃腸機能不全（下痢、炎症性腸症候群、等）、ショック、異常な骨代謝を特徴とする骨疾患、例えば、骨多孔症（特に、閉経後の骨多孔症）、高カルシウム血、上皮小体機能亢進、パジェット骨疾患、骨溶解、骨転移を伴ない、又は伴なわない悪性の高カルシウム血、リウマチ様関節炎、歯周炎、骨関節炎、骨痛、骨減少症、癌性悪液質、結石症、結石症（特に、尿石症）、充実性癌腫、糸球体間質の増殖性腎炎、浮腫（例えば、心臓浮腫、脳浮腫、等）、高血圧、例えば、悪性高血圧等、月経前緊張、尿結石、乏尿症、例えば、急性又は慢性の不全により生じた乏尿症、過リン酸塩尿症、等を治療又は予防するための”プロスタグランジンEP2選択的アゴニストの使用を教示している。
【０００９】
米国特許第6,710,072号は“骨多孔症、便秘、腎臓疾患、性的機能不全、禿頭症（はげ、毛髪の脱落）、糖尿病、癌並びに免疫調節の障害...急性心筋梗塞、血管の血栓症、高血圧、肺高血圧、虚血性心臓疾患、うっ血性心不全、及び狭心症を含む種々の病態生理学的疾患”の治療又は予防のためのEP2アゴニストの使用を教示している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
緑内障、炎症性腸疾患の治療、毛髪成長の刺激、及び軟毛（vellus hair）から硬毛（terminal hair）の変換の刺激に有益な化合物が本明細書に開示される。化合物それら自体が以下に開示される。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
下記の化学式の化合物又はこれらの医薬上許される塩もしくはプロドラッグが本明細書に開示される。
【００１２】
【化３】
2011510009.tif 000005
【００１３】
式中、破線は共有結合の存在又は不在を表し、
Ｙは下記の式の基であり、
【００１４】
【化４】
2011510009.tif 000006
【００１５】
Ａは-(CH2)6-、シス-CH2CH=CH-(CH2)3-、又は-CH2C≡C-(CH2)3-（これらの場合、１個又は２個の炭素原子がＳ又はＯで置換されていてもよい）であり、又はＡは-(CH2)m-Ar-(CH2)o-（式中、Arは置換又は未置換フェニル又は単環式ヘテロアリールであり、ｍ及びｏの合計が１から４までであり、かつ１個のCH2がＳ又はＯで置換されていてもよい）であり、
ＸはＳ又はＯであり、
Ｒは１個から12個までの炭素原子を含むヒドロカルビル又はヒドロキシヒドロカルビル部分であり、
Ｄは独立に１個から６個までの非水素原子を含む部分であり、かつ
ｎは０から４までの整数である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
これらの化合物の炭素原子の幾つかはキラル中心である。本発明の範囲を限定することを何ら意図しておらず、また理論により束縛されることを何ら意図していないが、以下に示される立体化学を有する多くの化合物及びこれらの医薬活性塩又はプロドラッグが特に有益であると考えられる。
【００１７】
【化５】
2011510009.tif 000007
【００１８】
当業者は陰影付きのくさび／中実のくさび構造の特徴と関連する立体化学の意味を理解する。例えば、入門書の有機化学書籍（Francis A. Carey著Organic Chemistry, New York: McGraw-Hill Book Company 1987, 63頁）は“くさびが見る人に向かって紙の平面から現れる結合を示し、また陰影付きのくさびが見る人から遠のいていく結合を表す”と記述している。
【００１９】
本明細書に表された化学構造中に開示されているＡの同定に関して、その最も広い意味で、Ａは-(CH2)6-、シス-CH2CH=CH-(CH2)3-、又は-CH2C≡C-(CH2)3-（これらの場合、１個又は２個の炭素原子がＳ又はＯで置換されていてもよい）であり、又はＡは-(CH2)m-Ar-(CH2)o-（式中、Arは置換又は未置換フェニル又は単環式ヘテロアリールであり、ｍ及びｏの合計が１から３までであり、かつ１個のCH2がＳ又はＯで置換されていてもよい）である。
換言すれば、限定であると意図しないが、Ａは-(CH2)6-、シス-CH2CH=CH-(CH2)3-、又は-CH2C≡C-(CH2)3-であってもよい。
また、Ａはいずれかの炭素がＳ又はＯで置換されている点でこれらの三つの部分の一つに関する基であってもよい。例えば、本発明の範囲を限定することを何ら意図しないが、ＡはＳ置換部分、例えば、下記の一つ等であってもよい。
【００２０】
【化６】
2011510009.tif 000008
【００２１】
また、本発明の範囲を限定することを何ら意図しないが、ＡはＯ置換部分、例えば、下記の一つ等であってもよい。
【００２２】
【化７】
2011510009.tif 000009
【００２３】
また、本発明の範囲を限定することを何ら意図しないが、Ａはその鎖中に置換されたＯ及びＳの両方、例えば、下記の一つ等を有してもよい。
【００２４】
【化８】
2011510009.tif 000010
【００２５】
また、本発明の範囲を限定することを何ら意図しないが、或る実施態様において、Ａが-(CH2)m-Ar-(CH2)o- であり、式中、Arが置換又は未置換フェニル又は単環式ヘテロアリールであり、ｍ及びoの合計が１から４までであり、かつ１個のCH2がＳ又はＯで置換されていてもよい。換言すれば、本発明の範囲を限定することを何ら意図しないが、Ａが１個から４個までのCH2部分及びAr、例えば、-CH2-Ar-、-(CH2)2-Ar-、-CH2-ArCH2-、-CH2Ar(CH2)2-、 -(CH2)2-Ar(CH2)2-、等を含み、又はＡがＯ、０個から３個までのCH2部分、及びAr、例えば、-O-Ar-、Ar-CH2-O-、-O-Ar-(CH2)2-、-O-CH2-Ar-、-O-CH2-Ar-(CH2)2、等を含み、又はＡがＳ、０個から３個までのCH2部分、及びAr、例えば、-S-Ar-、Ar-CH2-S-、-S-Ar-(CH2)2-、-S-CH2-Ar-、-S-CH2-Ar-(CH2)2、等を含む。
Arは置換もしくは未置換フェニル又は置換もしくは未置換単環式ヘテロアリールである。一実施態様において、Arが置換又は未置換フェニル、チエニル、フリル、又はピリジニルである。別の実施態様において、Arがフェニル (Ph)である。別の実施態様において、Ａが-(CH2)2-Phである。本発明の範囲を限定することを何ら意図しないが、置換基が４個以下の重い原子、即ち換言すれば、非水素原子を有してもよい。特別な置換基に必要とされる幾つかの数の水素原子がまた含まれるであろう。こうして、置換基はC4 以下のヒドロカルビル［メチル、エチル、プロピル異性体（イソプロピルを含む）、ブチル異性体（t-ブチルを含む）を含むC4 以下のアルキル、及びアルケニル、アルキニル、等を含む］；アルコキシ、例えば、メトキシ、エトキシ、等を含むC3以下のヒドロカルビルオキシ; CF3; ハロ、例えば、Ｆ、Cl、又はBr; ヒドロキシル; NH2 及びC3 までのアルキルアミン官能基；その他のＮ又はＳ含有置換基；等であってもよい。
一実施態様において、Ａが-(CH2)m-Ar-(CH2)o- であり、式中、Arがフェニルであり、ｍ及びｏの合計が１から３までであり、かつ１個のCH2がＳ又はＯで置換されていてもよい。
別の実施態様において、Ａが-CH2-Ar-OCH2-である。別の実施態様において、Ａが-CH2-Ar-OCH2- であり、かつArがフェニルである。別の実施態様において、例えば、Ａが以下に示される構造を有する場合には、Arが１位及び３位で結合されている。
【００２６】
【化９】
2011510009.tif 000011
【００２７】
別の実施態様において、Ａが-(CH2)6-、シス-CH2CH=CH-(CH2)3-、又は-CH2C≡C-(CH2)3-であり、この場合、１個もしくは２個の炭素原子がＳもしくはＯで置換されていてもよく、又はＡが-(CH2)2-Ph- であり、この場合、１個のCH2がＳもしくはＯで置換されていてもよい。
別の実施態様において、Ａが-(CH2)6-、シス-CH2CH=CH-(CH2)3-、又は-CH2C≡C-(CH2)3-であり、この場合、１個もしくは２個の炭素原子がＳもしくはＯで置換されていてもよく、又はＡが-(CH2)2-Ph-である。
Ｄは１個から６個までの非水素原子を含む部分であり、換言すれば、水素ではない１個から６個までの原子、及び完全な置換基を形成するのに必要な数の水素原子がある。例えば、メチル置換基は１個の炭素原子及び３個の水素原子を有する。その他の例の置換基として、アルキル、例えば、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル及びその異性体、ペンチル及びその異性体、ヘキシル及びその異性体を含む１個から６個までの炭素原子を含むその他のヒドロカルビル部分；１〜６個の炭素原子を有する環状ヒドロカルビル及び不飽和ヒドロカルビル；CO2H及びその塩；C5 までのアルコキシ、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ異性体、又はペントキシ異性体；カルボン酸エステル；CN; NO2; CF3; F; Cl; Br; I; スルホニルエステル; SO3H 及びその塩、等が挙げられる。Ｄはフェニル環のあらゆる妥当な位置にあってもよい。
或る化合物では、ｎが０である。その他の化合物では、ｎが１であり、その他の化合物では、ｎが２であり、またその他の化合物では、ｎが３である。
ヒドロカルビル部分は炭素及び水素のみからなる部分を表す。本発明の範囲を限定することを何ら意図しないが、ヒドロカルビル部分の異なる型の例は以下のとおりである。
【００２８】
ヒドロカルビルは炭素及び水素のみからなる部分であり、アルキル、アルケニル、アルキニル、等、そして或る場合には、アリール、並びにこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
アルキルは二重結合又は三重結合を有しないヒドロカルビルであり、下記の基を含む：
線状アルキル、例えば、メチル、エチル、プロピル、n-ブチル、n-ペンチル、n-ヘキシル、等；
分岐アルキル、例えば、イソプロピル、分岐ブチル異性体（即ち、sec-ブチル、tert-ブチル、等）、分岐ペンチル異性体（即ち、イソペンチル、等）、分岐ヘキシル異性体、及び高級分岐アルキルフラグメント；
【００２９】
シクロアルキル、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、等；並びに環状成分及び非環状成分の両方からなるアルキルフラグメント（これらは線状又は分岐を問わず、またこれらは末端、内部、又は環の炭素原子を含むあらゆる利用できる位置で分子の残部に結合されてもよい）。
アルケニルは１個以上の二重結合を有するヒドロカルビルであり、線状アルケニル、分岐アルケニル、環状アルケニル、及びアルキルと同様にこれらの組み合わせを含む。
アルキニルは１個以上の三重結合を有するヒドロカルビルであり、線状アルキニル、分岐アルキニル、環状アルキニル、及びアルキルと同様にこれらの組み合わせを含む。
アリールは未置換又は置換芳香族環又は環系、例えば、フェニル、ナフチル、ビフェニル、等である。アリールはそれがヘテロ原子を含む置換基を有するか否かに応じて、ヒドロカルビルであってもよく、又はヒドロキシルでなくてもよい。
【００３０】
アリールアルキルはアリールで置換されているアルキルである。換言すれば、アルキルがアリールをその分子の残りの部分に連結する。例は-CH2-フェニル、-CH2-CH2-フェニル、等である。アリールアルキルは、それがヘテロ原子を含む置換基を有するか否かに応じて、ヒドロカルビルであってもよく、またヒドロカルビルでなくてもよい。
ヒドロカルビルの別の型はalk（ポリ）エンイルであり、これは一つより多い二重結合が存在する以外は、アルケニルと同様である。
ヒドロカルビルの別の型はアルキニル又はalk（ポリ）インイルであり、これは一つより多い三重結合が存在する以外は、アルケニル又はalk（ポリ）インイルと同様である。
環状構造を含むヒドロカルビル部分はシクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキル（ポリ）エンイル、シクロアルキル（ポリ）インイル、アリール、等を含み、環のみからなってもよく、又は環と一つ以上の線状、分岐、もしくは環状ヒドロカルビルフラグメントの組み合わせであってもよく、又は縮合多環式構造であってもよい。
【００３１】
上記の組み合わせがまた可能である。
更に、当業者に想像し得るあらゆる様式の上記のいずれかの組み合わせがまたヒドロカルビルである。
本明細書に開示された化合物につき、環を有しないヒドロカルビルは12個以下の炭素原子を有し、また一つ以上の環を有するヒドロカルビルは18個以下の炭素原子を有する。
ヒドロキシヒドロカルビル部分はヒドロカルビル部分とヒドロキシル基の組み合わせからなる。換言すれば、ヒドロカルビル部分の水素原子がヒドロキシル基で置換されている。そのヒドロキシヒドロカルビル部分は炭素原子の位置でその分子の残部に結合する。
こうして、本発明の範囲を限定することを何ら意図しないが、Ｒは１個から12個までの原子を含むヒドロカルビル部分又はヒドロキシヒドロカルビル部分であるので、先にリストされたヒドロカルビル部分又はヒドロキシヒドロカルビル部分のいずれかとしてＲを有する実施態様が特別に本明細書に意図されている。Ｒはまた本明細書に示された記載に従ってヒドロカルビル又はヒドロキシヒドロカルビルと考えられてもよい異なる部分であってもよい。
【００３２】
その他の実施態様において、Ｒはメチル、エチルではない。
その他の実施態様において、Ｒは４個から12個までの炭素原子を含む。
或る化合物では、Ｒは炭素原子（これはまたその分子の残部に結合されている）に結合されたヒドロキシル基を有するヒドロキシヒドロカルビルである。換言すれば、ヒドロキシル基とその分子の残部がヒドロカルビル部分のジェミナル位置にある。この型のヒドロキシヒドロカルビル部分が本明細書で1-ヒドロキシヒドロカルビル部分と称される。非線状ヒドロキシヒドロカルビルはそのヒドロカルビル部分が線状ではなく、即ち、それが分岐及び／又は環を有するヒドロキシヒドロカルビルである。
【００３３】
その他の化合物では、Ｒはヒドロキシル基をその分子の残りの部分に連結する２個の炭素原子がある、ヒドロキシヒドロカルビルである。これらの特別なヒドロキシヒドロカルビルが本明細書で2-ヒドロキシヒドロカルビルと称される。例えば、-CH2CH2OH 及び-C(CH3)2CH2OH が2-ヒドロキシヒドロカルビルである。本発明の範囲を限定することを何ら意図しないが、Ｒが2-ヒドロキシルである構造の例が以下に示される。
【００３４】
【化１０】
2011510009.tif 000012
【００３５】
本明細書に示される全てのその他の構造について、これらの構造により表される化合物の医薬上許される塩及びプロドラッグがまた意図されている。
上記構造に関する一実施態様において、R3、R4、及びR5は独立にＨ又はC1-6 アルキルである。破線は結合の存在又は不在を示すので、R4及びR5は二つの別の部分であってもよい。例えば、限定することを意図しないが、R4 及びR5はメチルであってもよく、結合は破線により示される場合に存在しないであろう。また、本発明の範囲を限定することを何ら意図しないが、R4及びR5が環を形成してもよい。換言すれば、以下に示される化合物の如き化合物が可能であり、式中、ｘは１から６までである。
【００３６】
【化１１】
2011510009.tif 000013
【００３７】
これらの構造により示される化合物の医薬上許される塩及びプロドラッグがまた意図されている。
【００３８】
或る化合物では、Ｒが６個から９個までの炭素原子及び環状構造を含む。その他の化合物では、Ｒが１個から５個までの炭素原子を含む。或る化合物では、Ｒが１個から５個までの炭素原子を有するヒドロキシアルキルである。その他の化合物では、Ｒが６個から９個までの炭素原子及び環状構造を含む1-ヒドロキシヒドロカルビル部分である。その他の化合物では、Ｒが６個から９個までの炭素原子及び4-7個の炭素原子を含む環状構造を含む1-ヒドロキシヒドロカルビル部分である。換言すれば、Ｒの環状構造部分がシクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、又はシクロヘプチルフラグメントである。Ｒの環状構造部分はまたシクロアルケニル又はシクロアルキニルフラグメント、例えば、シクロペンテン又はシクロヘキセンであってもよい。その他の化合物では、Ｒが１個から５個までの炭素原子を含むヒドロカルビル部分である。換言すれば、Ｒがメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル異性体、例えば、t-ブチル、又はペンチル異性体である。或る化合物では、Ｒがt-ブチルである。
【００３９】
或るＲ基が本明細書で特に意図されている。これらが以下に示され、式中、PRは分子の残りの部分を表す。
【００４０】
【化１２】
2011510009.tif 000014
【００４１】
【化１３】
2011510009.tif 000015
【００４２】
【化１４】
2011510009.tif 000016
【００４３】
【化１５】
2011510009.tif 000017
【００４４】
【化１６】
2011510009.tif 000018
【００４５】
Ｒとフェニル環の間に破線があるので、フェニル環の２個の炭素原子を有する環状構造が可能である。本発明の範囲を限定することを何ら意図しないが、以下の構造により表される化合物の如き化合物がそれ故可能である。
【００４６】
【化１７】
2011510009.tif 000019
【００４７】
これらの医薬上許される塩及びプロドラッグがまた意図されている。
その他の有益な化合物は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【００４８】
【化１８】
2011510009.tif 000020
【００４９】
或る有益な化合物は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【００５０】
【化１９】
2011510009.tif 000021
【００５１】
化合物のその他の有益な例は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【００５２】
【化２０】
2011510009.tif 000022
【００５３】
その他の化合物は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【００５４】
【化２１】
2011510009.tif 000023
【００５５】
その他の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。式中、破線は結合の存在又は不在を示す。
【００５６】
【化２２】
2011510009.tif 000024
【００５７】
その他の化合物は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩もしくはプロドラッグを含む。
【００５８】
【化２３】
2011510009.tif 000025
【００５９】
その他の化合物は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩もしくはプロドラッグを含む。
【００６０】
【化２４】
2011510009.tif 000026
【００６１】
式中、R6は３個から10個までの炭素原子を含むシクロアルキルである。
その他の化合物は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩もしくはプロドラッグを含む。
【００６２】
【化２５】
2011510009.tif 000027
【００６３】
式中、R6は３個から10個までの炭素原子を含む分岐アルキルである。
その他の化合物は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩もしくはプロドラッグを含む。
【００６４】
【化２６】
2011510009.tif 000028
【００６５】
その他の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩もしくはプロドラッグを含む。
【００６６】
【化２７】
2011510009.tif 000029
【００６７】
式中、ｍは０から３までの値を有する整数である。
当業者は小分子についての原子、部分、等の数を表すあらゆる値が整数、即ち、０、１、２、３、等であることを理解する。
その他の化合物は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩もしくはプロドラッグを含む。
【００６８】
【化２８】
2011510009.tif 000030
【００６９】
その他の化合物は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩もしくはプロドラッグを含む。
【００７０】
【化２９】
2011510009.tif 000031
【００７１】
その他の有益な化合物は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩もしくはプロドラッグを含む。
【００７２】
【化３０】
2011510009.tif 000032
【００７３】
その他の化合物は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩もしくはプロドラッグを含む。
【００７４】
【化３１】
2011510009.tif 000033
【００７５】
その他の有益な実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩もしくはプロドラッグを含む。
【００７６】
【化３２】
2011510009.tif 000034
【００７７】
その他の化合物は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩もしくはプロドラッグを含む。
【００７８】
【化３３】
2011510009.tif 000035
【００７９】
その他の化合物は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩もしくはプロドラッグを含む。
【００８０】
【化３４】
2011510009.tif 000036
【００８１】
下記の式の化合物が有益な化合物の例である。
【００８２】
【化３５】
2011510009.tif 000037
【００８３】
【化３６】
2011510009.tif 000038
【００８４】
これらの化合物の医薬上許される塩又はプロドラッグがまた有益である。
“医薬上許される塩”は親化合物の活性を保持し、かつそれが親化合物と較べて投与される状況でそれが投与される対象に付加的な有害又は不利な作用を与えないあらゆる塩である。医薬上許される塩はまた酸、別の塩、又はプロドラッグ（これは塩に変換される）の投与の結果として生体内で生成し得るあらゆる塩を表す。
【００８５】
酸性官能基の医薬上許される塩は有機又は無機の塩基から誘導されてもよい。塩はモノイオン又はポリイオンを含んでもよい。無機イオン、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、及びマグネシウムが特に重要である。有機塩はアミン、特にアンモニウム塩、例えば、モノアルキルアミン、ジアルキルアミン及びトリアルキルアミン又はエタノールアミンでつくられてもよい。塩はまたカフェイン、トロメタミン及び同様の分子で生成されてもよい。塩酸又は幾つかのその他の医薬上許される酸が塩基性基、例えば、アミン又はピリジン環を含む化合物と塩を生成し得る。
【００８６】
“プロドラッグ”は投与後に治療活性化合物に変換される化合物であり、その用語は一般に当業界で理解されているように本明細書では広く解されるべきである。本発明の範囲を限定することを意図しないが、変換がエステル基又は幾つかのその他の生物学的に不安定な基の加水分解により生じ得る。一般に、しかし必ずではなく、プロドラッグはそれが変換される治療活性化合物よりも不活性であり、又は一層小さい活性である。
本明細書に開示された化合物は哺乳類の緑内障もしくは眼の高血圧の予防もしくは治療、又は緑内障又は眼の高血圧の治療のための薬物の製造に有益である。
【００８７】
本明細書に開示された化合物はまた哺乳類の毛髪成長の刺激もしくは硬毛への軟毛の変換の刺激、又は毛髪成長の刺激もしくは硬毛への軟毛の変換の刺激のための薬物の製造に有益であり得る。
本明細書に開示された化合物は選択的EP2 アゴニストであろう。それ故、それらはまたプロスタグランジンEP2 アゴニスト、例えば、先にリストされたアゴニストによる治療を受けやすいと当業界で開示されたこれらの疾患の治療に有益である。
【００８８】
眼への適用
当業者は薬物の投与又は製造のために本明細書に開示された化合物が医薬上許される賦形剤（それら自体が当業界で公知である）と混合し得ることを直ぐに理解するであろう。詳しくは、全身投与すべき薬物は粉末、ピル、錠剤等、又は経口もしくは非経口投与もしくは吸入に適した溶液、エマルション、懸濁液、エアロゾル、シロップもしくはエリキシル剤として調製されてもよい。
【００８９】
固体投薬形態又は薬物について、無毒性固体担体として、マンニトール、ラクトース、澱粉、ステアリン酸マグネシウム、ナトリウムサッカリン、ポリアルキレングリコール、滑石、セルロース、グルコース、蔗糖及び炭酸マグネシウムの医薬銘柄が挙げられるが、これらに限定されない。固体投薬形態は被覆されなくてもよく、又はそれらは胃腸道中の崩壊及び吸収を遅延し、それにより一層長い期間にわたって持続された作用を与えるために既知の技術により被覆されてもよい。例えば、時間遅延物質、例えば、モノステアリン酸グリセリル又はジステアリン酸グリセリルが使用されてもよい。それらはまた制御放出のための浸透圧治療錠剤を形成するために米国特許第4,256,108号、同第4,166,452号、及び同第4,265,874号に記載された技術により被覆されてもよい。液体医薬投与可能な投薬形態は、例えば、担体、例えば、水、食塩水、水性デキストロース、グリセロール、エタノール等（それにより溶液又は懸濁液を生成するため）中に一種以上の現在有益な化合物及び任意の医薬アジュバントの溶液又は懸濁液を含み得る。所望により、投与すべき医薬組成物はまた少量の無毒性の助剤物質、例えば、湿潤剤もしくは乳化剤、pH緩衝剤等を含んでもよい。このような助剤の典型例は酢酸ナトリウム、ソルビタンモノラウレート、トリエタノールアミン、酢酸ナトリウム、トリエタノールアミンオレエート、等である。このような投薬形態の実際の調製方法が当業者に知られており、又は明らかであろう。例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, Mark Publishing Company, Easton, Pa, 第16編, 1980を参照のこと。投与すべき製剤の組成物は、いずれにしても、所望の治療効果を与えるのに必要な量の一種以上の現在有益な化合物を含む。
【００９０】
非経口投与は一般に皮下、筋肉内又は静脈内の注射を特徴とする。注射液は通常の形態で、液体の溶液又は懸濁液、注射前の液体中の溶解又は懸濁に適した固体形態、或いはエマルションとして調製し得る。好適な賦形剤は、例えば、水、食塩水、デキストロース、グリセロール、エタノール等である。加えて、所望により、投与すべき注射可能な医薬組成物はまた少量の無毒性の助剤物質、例えば、湿潤剤又は乳化剤、pH緩衝剤等を含んでもよい。
【００９１】
投与される現在有益な一種以上の化合物の量は、勿論、所望される一つ以上の治療効果、治療される特別な哺乳類、哺乳類の症状の重度及び性質、投与の様式、使用される一種以上の特別な化合物の効力及び薬力学、及び処方する医師の判断に依存する。一種以上の現在有効な化合物の治療有効用量は約0.5又は約１〜約100mg/kg/日の範囲であることが好ましい。
【００９２】
眼に許される液体はそれが眼に局所投与し得るように製剤化される。快適さができるだけ最大にされるべきであるが、しばしば製剤化上の考慮事項（例えば、薬物安定性）が最適の快適さよりも少なく必要であるかもしれない。快適さが最大にし得ない場合には、液体は液体が局所の眼の使用について患者に寛容し得るように製剤化されるべきである。更に、眼に許される液体は単一使用のためにパッケージにされるべきであり、又は多くの使用にわたって汚染を防止するために防腐剤を含むべきである。
【００９３】
眼への適用のために、溶液又は薬物はしばしば生理食塩水溶液を主要ビヒクルとして使用して調製される。眼用の溶液は適当な緩衝剤系で快適なpHに維持されることが好ましい。製剤はまた通常の、医薬上許される防腐剤、安定剤及び表面活性剤を含んでもよい。
【００９４】
本発明の医薬組成物中に使用し得る防腐剤として、塩化ベンザルコニウム、クロロブタノール、チメロサール、フェニル酢酸水銀及びフェニル硝酸水銀が挙げられるが、これらに限定されない。有益な表面活性剤は、例えば、トゥイーン80である。同様に、種々の有益なビヒクルが本発明の眼用製剤中に使用されてもよい。これらのビヒクルとして、ポリビニルアルコール、ポビドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポロキサマー、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース及び精製水が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９５】
張度調節剤が必要により、又は便利に添加されてもよい。それらとして、塩、特に塩化ナトリウム、塩化カリウム、マンニトール及びグリセリン、又はあらゆるその他の好適な眼に許される張度調節剤が挙げられるが、これらに限定されない。
得られる製剤が眼に許される限り、種々の緩衝剤及びpHを調節するための手段が使用されてもよい。従って、緩衝剤として、酢酸塩緩衝剤、クエン酸塩緩衝剤、リン酸塩緩衝剤及びホウ酸塩緩衝剤が挙げられる。酸又は塩基が必要によりこれらの製剤のpHを調節するために使用されてもよい。
【００９６】
同様の手法で、本発明における使用のための眼に許される酸化防止剤として、メタ重亜硫酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、アセチルシステイン、ブチル化ヒドロキシアニソール及びブチル化ヒドロキシトルエンが挙げられるが、これらに限定されない。
眼用製剤中に含まれてもよいその他の賦形剤成分はキレート剤である。有益なキレート剤はエデト酸二ナトリウムであるが、その他のキレート剤がまた代わりに、又はそれと連係して使用されてもよい。
【００９７】
成分は下記の量で通常使用される。
成分 量（％w/v）
活性成分          約0.001-5
防腐剤            0-0.10
ビヒクル          0-40
張度調節剤        1-10
緩衝剤            0.01-10
pH調節剤          pH 4.5-7.5にするのに充分な量
酸化防止剤        必要に応じて
表面活性剤        必要に応じて
精製水            100％にするのに必要とされる量
局所使用のために、本明細書に開示された化合物を含む、クリーム、軟膏、ゲル、溶液又は懸濁液等が使用される。局所製剤は一般に医薬担体、補助溶媒、乳化剤、浸透増進剤、防腐剤系、及び皮膚軟化薬を含んでもよい。
本発明の活性化合物の実際の用量は特別な化合物、及び治療すべき症状に依存する。適当な用量の選択は当業者の知識の中に良くある。
【００９８】
毛髪成長を刺激するための適用
一実施態様において、本明細書に開示された化合物は禿頭症及び／又は脱毛症（hair loss）の治療に有益であり得る。脱毛症(alopecia)（禿頭症、はげ）は正常又は異常な毛髪の欠乏であり、主としてヒトの化粧上の問題である。それは硬毛、すぐに見られる広い直径の、着色された毛髪の欠乏である。しかしながら、所謂はげのヒトでは、硬毛の認められる不在があるが、皮膚は軟毛を含み、これはその存在を測定するために顕微鏡検査を必要とし得る微細な無色の毛髪である。この軟毛が硬毛の前駆体である。
本明細書に開示された化合物は、例えば、硬毛としての成長への軟毛の変換だけでなく、硬毛の成長の速度の増大を刺激するのに使用し得る。毛髪成長の刺激のための本明細書に記載された化合物の実用性が以下のように発見された。
【００９９】
緑内障を有する患者の治療の過程においては、治療が片目のみにおいて適切であってもよい。日常の診療過程において、プロスタグランジン類似体である、ビマトプロストで治療されていた患者は治療されていない眼よりも治療された眼で一層長く、濃く、しかも充分である睫毛を発生することが発見された。検査すると、その差が極めて顕著であることがわかった。睫毛は治療された眼で一層長く、しかも一層充分な、稠密な外観を有していた。治療された眼のまぶたの睫毛外観はそれが両側あるいは左右対称の現象であった場合に非常に魅力的なようであった。その非対称の性質の結果として、一つの側の長い睫毛は化粧上の観点から乱れと見なし得る。非対称現象の結果として系統的検査が行なわれた。この変化した外観は単独の知見ではないことがやがて明らかになった。一つの眼のみにビマトプロストを服用していた患者のまぶたの比較が数人の患者におけるビマトプロスト治療された側の睫毛及び隣接毛髪の微妙な変化を明らかにした。明確な差が６ヶ月よりも長きにわたって一側基準でその薬物を服用していた全ての患者の睫毛及び隣接毛髪に種々の程度で同定し得た。
【０１００】
この問題に注意が一旦向けられると、数人の患者で肉眼検査で睫毛の変化が明らかとなった。明るく着色された毛髪及び睫毛を有するものでは、差がスリットランプ生体顕微鏡の高倍率及び照明能の助けでのみ容易に見られた。緑内障追跡検査の経過中に、注意が一般に眼それ自体に直ぐに集中される。必要とされる高出力倍率の結果として、一つの眼のみが或る時点で見られ、眼は睫毛が集中されていない高い充分な出力で見られる。これらの高出力では、二つの眼の間の睫毛非対称は二つの眼のまぶたの睫毛及び隣接毛髪の慎重な系統的比較による以外はおそらく認められない。
【０１０１】
一層強大な毛髪成長がプロスタグランジン類似体の投与後に治療領域で生じたという結論をもたらす観察パラメーターは多重的であった。それらとして、睫毛の増大された長さ、正常な睫毛ラインに沿っての睫毛の増大された数、睫毛の増大された濃さ及び光沢、正常な睫毛成長の領域に隣接する遷移領域における増大された補助睫毛のような硬毛、中間及び横の眼角部領域における増大された補助睫毛のような硬毛、睫毛の増大された色素沈着、増大された数、増大された長さだけでなく、隣接まぶたの皮膚の微細な毛髪の増大された光沢、及び濃さ、そして最後に、睫毛及び睫毛のような硬毛の増大された垂直の角度が挙げられた。こうして、毛髪成長がプロスタグランジン類似体、例えば、ビマトプロストにより刺激されるという結論は単一パラメーターの差の証明によらずに支持されるが、多くの対象で治療領域対対照領域における毛髪外観の多重パラメーターに基づいている。
【０１０２】
本明細書に記載された化合物はプロスタグランジン類似体であり、それ故、ビマトプロストと同様の活性を有し、構造類似性を含み、それ故、毛髪成長を刺激し、硬毛への軟毛の変換を刺激すると予想される。一実施態様において、本明細書に記載された化合物及びそれらのプロドラッグは毛髪成長の刺激に使用し得る。本明細書に使用される毛髪成長は頭皮、まゆ、まぶた、ひげ、及び動物の皮膚のその他の領域と関連する毛髪を含む。
【０１０３】
一実施態様において、化合物が皮膚に適合性のビヒクル又は担体と混合される。ビヒクル（これは本明細書に記載された組成物を調製するのに使用されてもよい）は、例えば、水溶液、例えば、生理食塩水、油溶液、又は軟膏を含んでもよい。更に、ビヒクルは皮膚に適合性の防腐剤、例えば、塩化ベンザルコニウム、例えば、ポリソルベート80のような表面活性剤、リポソーム又はポリマー、例えば、メチルセルロース、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン及びヒアルロン酸を含んでもよい。これらは増粘に使用されてもよい。更に、薬物が投与される場合に可溶性又は不溶性の薬物インサートを使用することがまた可能である。
【０１０４】
一実施態様において、皮膚組成物が有効毛髪成長刺激量の先に特定された一種以上の化合物及び皮膚に適合性の担体を含む毛髪成長の刺激のための局所治療のために製剤化し得る。活性化合物の有効量は当業者により決められてもよいが、使用される化合物、適用の頻度及び所望の結果に応じて変化するであろう。化合物は一般に皮膚組成物の約0.0000001質量％から約50質量％までの範囲であろう。好ましくは、化合物は全皮膚組成物の約0.001質量％から約50質量％まで、更に好ましくはその組成物の約0.1質量％から約30質量％までの範囲であろう。
【０１０５】
一実施態様において、毛髪成長の刺激のための本化合物の適用はヒト及び動物の両方を含む、哺乳類種に適用がある。ヒトでは、本明細書に記載された化合物が、例えば、頭皮、顔のひげ、頭部、恥骨領域、上唇、まゆ、及びまぶたに適用し得る。それらの毛皮のために育てられた動物、例えば、ミンクでは、本明細書に記載された化合物が商業上の理由のために全体の毛皮を改善するために体の全表面にわたって適用し得る。その方法はまた動物で商業上の理由のために使用でき、例えば、ダニ症又は或る程度の脱毛(alopecia)を生じるその他の疾患のためにはげた班を有するイヌ及びネコの皮膚に適用し得る。
【０１０６】
毛髪成長の刺激に意図される医薬組成物として、局所作用に適した医薬組成物が挙げられる。本明細書に使用される“局所”という用語は好適な医薬担体に混入され、局所作用の発揮のために薄い毛髪又は禿頭症の部位に適用される、本明細書に記載された、化合物の使用に関する。それ故、このような局所組成物として、その化合物が治療すべき皮膚との直接の接触により外部適用されるこれらの医薬形態が挙げられる。この目的のための通常の医薬形態として、軟膏、リニメント、クリーム、シャンプー、ローション、ペースト、ゼリー、スプレー、エアロゾル、等が挙げられ、治療すべき体の部分に応じてパッチ又は含浸包帯中で適用されてもよい。“軟膏”という用語は油性、水溶性及びエマルション型のベース、例えば、ワセリン、ラノリン、ポリエチレングリコールだけでなく、これらの混合物を有する製剤（クリームを含む）を含む。
【０１０７】
典型的には、化合物が治療すべき体の部分、例えば、まぶた、まゆ、皮膚又は頭皮に時間の持続された期間にわたって繰り返し局所適用し得る。好ましい投薬養生法は一般に少なくとも１ヶ月、更に好ましくは少なくとも３ヶ月、最も好ましくは少なくとも６ヶ月の治療の期間にわたって規則的な、例えば、毎日の投与を伴なうであろう。
【０１０８】
まぶた又はまゆへの局所使用のために、活性化合物は医薬上許される緩衝剤及び塩の添加により水溶液、クリーム、軟膏、又は生理学上許されるモル浸透圧濃度を示す油中で製剤化し得る。このような製剤は、分配器に応じて、防腐剤、例えば、塩化ベンザルコニウム、クロルヘキシジン、クロロブタノール、パラヒドロキシ安息香酸及びフェニル水銀塩、例えば、硝酸塩、塩化物、酢酸塩、及びホウ酸塩、又は酸化防止剤だけでなく、添加剤としてEDTA、ソルビトール、ホウ酸等のような添加剤を含んでもよく、また含まなくてもよい。更に、特に水溶液は増粘剤、例えば、多糖、例えば、メチルセルロース、ムコ多糖、例えば、ヒアルロン酸及びコンドロイチン硫酸塩、又はポリアルコール、例えば、ポリビニルアルコールを含んでもよい。種々の徐放性ゲル及びマトリックスだけでなく、例えば、ゲルをその場で生成する物質をベースとする、可溶性及び不溶性の接眼インサートがまた使用されてもよい。使用すべき実際の製剤及び化合物に応じて、種々の量の薬物及び異なる投薬養生法が使用されてもよい。典型的には、まぶたの治療のための化合物の毎日の用量はまぶた当り約0.1ng〜約100mgであってもよい。
【０１０９】
皮膚及び頭皮への局所使用のために、化合物は軟膏、クリーム、リニメント又はパッチを活性成分の担体として使用して有利に製剤化し得る。また、これらの製剤は分配器及び使用の性質に応じて、防腐剤を含んでもよく、また含まなくてもよい。このような防腐剤として、先に挙げられたもの、及びメチル-、プロピル-、又はブチル-パラヒドロキシ安息香酸、ベタイン、クロルヘキシジン、塩化ベンザルコニウム、等が挙げられる。徐放送出のための種々のマトリックスがまた使用されてもよい。典型的には、頭皮に適用すべき用量は化合物及び製剤に応じて毎日約0.1ng〜約100mg、更に好ましくは毎日約1ng〜約10mg、最も好ましくは毎日約10ng〜約1mgの範囲である。製剤に応じて薬物の毎日の量を得るために、化合物は酸化防止剤を用いて、又は用いずに毎日１回又は数回投与されてもよい。
【０１１０】
特別に意図される実施態様
本明細書に開示されたあらゆるその他の実施態様に加えて、下記の実施態様が特別に意図される。
【０１１１】
化合物実施態様
下記の式の化合物又はその医薬上許される塩もしくはプロドラッグ。
【０１１２】
【化３７】
2011510009.tif 000039
【０１１３】
式中、破線は共有結合の存在又は不在を表し、
Ｙは下記の式の基であり、
【０１１４】
【化３８】
2011510009.tif 000040
【０１１５】
Ａは-(CH2)6-、シス-CH2CH=CH-(CH2)3-、又は-CH2C≡C-(CH2)3-（これらの場合、１個又は２個の炭素原子がＳ又はＯで置換されていてもよい）であり、又はＡは-(CH2)m-Ar-(CH2)o-（式中、Arは置換又は未置換フェニル又は単環式ヘテロアリールであり、ｍ及びｏの合計が１から４までであり、かつ１個のCH2がＳ又はＯで置換されていてもよい）であり、
ＸはＳ又はＯであり、
Ｒは１個から12個までの炭素原子を含むヒドロカルビル又はヒドロキシヒドロカルビル部分であり、
Ｄは独立に１個から６個までの非水素原子を含む部分であり、かつ
ｎは０から４までの整数である。
別の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグである。
【０１１６】
【化３９】
2011510009.tif 000041
【０１１７】
式中、Ｙ、Ａ、及びＲは先に記載されたとおりである。
別の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグである。
【０１１８】
【化４０】
2011510009.tif 000042
【０１１９】
別の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグである。
【０１２０】
【化４１】
2011510009.tif 000043
【０１２１】
式中、Ａ及びＹは先に記載されたとおりである。
別の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグである。
【０１２２】
【化４２】
2011510009.tif 000044
【０１２３】
式中、Ｙ及びＲは先に記載されたとおりである。
別の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグである。
【０１２４】
【化４３】
2011510009.tif 000045
【０１２５】
式中、Ｙは先に記載されたとおりであり、かつ
Ｒは３個から６個までの炭素原子を有するアルキルである。
別の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグである。
【０１２６】
【化４４】
2011510009.tif 000046
【０１２７】
式中、Ｙは先に記載されたとおりであり、かつ
R6は３個から10個までの炭素原子を含むシクロアルキルである。
別の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグである。
【０１２８】
【化４５】
2011510009.tif 000047
【０１２９】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグである。
【０１３０】
【化４６】
2011510009.tif 000048
【０１３１】
式中、Ｙは先に記載されたとおりであり、かつ
ｍは０から３までの値を有する整数である。
別の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグである。
【０１３２】
【化４７】
2011510009.tif 000049
【０１３３】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグである。
【０１３４】
【化４８】
2011510009.tif 000050
【０１３５】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグである。
【０１３６】
【化４９】
2011510009.tif 000051
【０１３７】
別の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグである。
【０１３８】
【化５０】
2011510009.tif 000052
【０１３９】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグである。
【０１４０】
【化５１】
2011510009.tif 000053
【０１４１】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグである。
【０１４２】
【化５２】
2011510009.tif 000054
【０１４３】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグである。
【０１４４】
【化５３】
2011510009.tif 000055
【０１４５】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグである。
【０１４６】
【化５４】
2011510009.tif 000056
【０１４７】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグである。
【０１４８】
【化５５】
2011510009.tif 000057
【０１４９】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグである。
【０１５０】
【化５６】
2011510009.tif 000058
【０１５１】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグである。
【０１５２】
【化５７】
2011510009.tif 000059
【０１５３】
式中、R3、R4、及びR5は独立にＨ又はC1-6 アルキルである。
別の実施態様において、R4及びR5が上記構造中でメチルである。
別の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグである。
【０１５４】
【化５８】
2011510009.tif 000060
【０１５５】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグである。
【０１５６】
【化５９】
2011510009.tif 000061
【０１５７】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグである。
【０１５８】
【化６０】
2011510009.tif 000062
【０１５９】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグである。
【０１６０】
【化６１】
2011510009.tif 000063
【０１６１】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグである。
【０１６２】
【化６２】
2011510009.tif 000064
【０１６３】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグである。
【０１６４】
【化６３】
2011510009.tif 000065
【０１６５】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の化合物は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０１６６】
【化６４】
2011510009.tif 000066
【０１６７】
別の化合物は下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０１６８】
【化６５】
2011510009.tif 000067
【０１６９】
別の実施態様において、ｎが先に示された構造中で０である。
別の実施態様において、Ｒが先に示された構造中で６個から９個までの炭素原子及び環状構造を含む。
別の実施態様において、Ｒが先に示された構造中で1-ヒドロキシヒドロカルビル部分である。
別の実施態様において、Ｒが先に示された構造中で１個から５個までの炭素原子を含む。
別の実施態様において、Ｒが先に示された構造中でt-ブチルからなる。
別の実施態様において、Ｒが先に示された構造中で1-ヒドロキシアルキルである。
別の実施態様において、Ａが先に示された構造中で-(CH2)6-、シス-CH2CH=CH-(CH2)3-、又は-CH2C≡C-(CH2)3-である。
別の実施態様において、Ａが先に示された構造中で-(CH2)m-Ar-(CH2)o- （式中、Arがフェニルであり、ｍ及びｏの合計が１から４までであり、かつ１個のCH2 がＳ又はＯで置換されていてもよい）である。
別の実施態様において、Ａが先に示された構造中で-CH2-Ar-O-CH2- である。
別の実施態様において、Ａが先に示された構造中で2-ヒドロキシヒドロカルビルである。
【０１７０】
治療方法の実施態様
緑内障又は眼の高血圧
化合物について述べられた夫々の実施態様について、相当する実施態様が化合物を緑内障又は眼の高血圧の治療のために哺乳類に投与することについて述べられると意図される。
【０１７１】
炎症性腸疾患
化合物について述べられた夫々の実施態様について、相当する実施態様が化合物を炎症性腸疾患の治療のために哺乳類に投与することについて述べられると意図される。
別の実施態様において、前記炎症性腸疾患が大腸炎である。
別の実施態様において、前記炎症性腸疾患がクローン病である。
【０１７２】
禿頭症又は脱毛症
化合物について述べられた夫々の実施態様について、相当する実施態様が化合物を毛髪成長の刺激又は硬毛への軟毛の変換の刺激のために哺乳類に投与することについて述べられると意図される。
【０１７３】
薬物の製造方法の実施態様
緑内障又は眼の高血圧
化合物について述べられた夫々の実施態様について、相当する実施態様が緑内障の治療のための薬物の製造における化合物の使用について述べられると意図される。
【０１７４】
炎症性腸疾患
一実施態様は炎症性腸疾患の治療のための薬物の製造における化合物の使用である。
【０１７５】
禿頭症又は脱毛症
一実施態様は毛髪成長の刺激又は硬毛への軟毛の変換の刺激のための薬物の製造における化合物の使用である。
一実施態様において、前記化合物が緑内障の治療、炎症性腸疾患の治療、及び／又は毛髪成長の刺激もしくは硬毛への軟毛の変換の刺激のための薬物の製造に使用でき、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩もしくはプロドラッグを含む。
【０１７６】
【化６６】
2011510009.tif 000068
【０１７７】
式中、破線は共有結合の存在又は不在を表し、
Ｙは下記の式の基であり、
【０１７８】
【化６７】
2011510009.tif 000069
【０１７９】
Ａは-(CH2)6-、シス-CH2CH=CH-(CH2)3-、又は-CH2C≡C-(CH2)3-（これらの場合、１個又は２個の炭素原子がＳ又はＯで置換されていてもよい）であり、又はＡは-(CH2)m-Ar-(CH2)o-（式中、Arは置換又は未置換フェニル又は単環式ヘテロアリールであり、ｍ及びｏの合計が１から４までであり、かつ１個のCH2がＳ又はＯで置換されていてもよい）であり、
ＸはＳ又はＯであり、
Ｒは１個から12個までの炭素原子を含むヒドロカルビル又はヒドロキシヒドロカルビル部分であり、
Ｄは１個から６個までの非水素原子を含む部分であり、かつ
ｎは０から４までの整数である。
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０１８０】
【化６８】
2011510009.tif 000070
【０１８１】
式中、Ｙ、Ａ、及びＲは先に記載されたとおりである。
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０１８２】
【化６９】
2011510009.tif 000071
【０１８３】
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０１８４】
【化７０】
2011510009.tif 000072
【０１８５】
式中、Ａ及びＹは先に記載されたとおりである。
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０１８６】
【化７１】
2011510009.tif 000073
【０１８７】
式中、Ｙ及びＲは先に記載されたとおりである。
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０１８８】
【化７２】
2011510009.tif 000074
【０１８９】
式中、Ｙは先に記載されたとおりであり、かつ
Ｒは３個から６個までの炭素原子を有するアルキルである。
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０１９０】
【化７３】
2011510009.tif 000075
【０１９１】
式中、Ｙは先に記載されたとおりであり、かつ
R6は３個から10個までの炭素原子を含むシクロアルキルである。
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０１９２】
【化７４】
2011510009.tif 000076
【０１９３】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０１９４】
【化７５】
2011510009.tif 000077
【０１９５】
式中、Ｙは先に記載されたとおりであり、かつ
ｍは０から３までの値を有する整数である。
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０１９６】
【化７６】
2011510009.tif 000078
【０１９７】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０１９８】
【化７７】
2011510009.tif 000079
【０１９９】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０２００】
【化７８】
2011510009.tif 000080
【０２０１】
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０２０２】
【化７９】
2011510009.tif 000081
【０２０３】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０２０４】
【化８０】
2011510009.tif 000082
【０２０５】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０２０６】
【化８１】
2011510009.tif 000083
【０２０７】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０２０８】
【化８２】
2011510009.tif 000084
【０２０９】
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０２１０】
【化８３】
2011510009.tif 000085
【０２１１】
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０２１２】
【化８４】
2011510009.tif 000086
【０２１３】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０２１４】
【化８５】
2011510009.tif 000087
【０２１５】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０２１６】
【化８６】
2011510009.tif 000088
【０２１７】
式中、R3、R4、及びR5は独立にＨ又はC1-6 アルキルである。
別の実施態様において、R4及びR5が上記構造中でメチルである。
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０２１８】
【化８７】
2011510009.tif 000089
【０２１９】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０２２０】
【化８８】
2011510009.tif 000090
【０２２１】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０２２２】
【化８９】
2011510009.tif 000091
【０２２３】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０２２４】
【化９０】
2011510009.tif 000092
【０２２５】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０２２６】
【化９１】
2011510009.tif 000093
【０２２７】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０２２８】
【化９２】
2011510009.tif 000094
【０２２９】
式中、Ｙは先に記載されたとおりである。
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０２３０】
【化９３】
2011510009.tif 000095
【０２３１】
別の実施態様において、前記化合物が下記の式の化合物又はその医薬上許される塩、もしくはプロドラッグを含む。
【０２３２】
【化９４】
2011510009.tif 000096
【０２３３】
別の実施態様において、ｎが先に示された構造中で０である。
別の実施態様において、Ｒが先に示された構造中で６個から９個までの炭素原子及び環状構造を含む。
別の実施態様において、Ｒが先に示された構造中で1-ヒドロキシヒドロカルビル部分である。
別の実施態様において、Ｒが先に示された構造中で１個から５個までの炭素原子を含む。
別の実施態様において、Ｒが先に示された構造中でt-ブチルからなる。
別の実施態様において、Ｒが先に示された構造中で1-ヒドロキシアルキルである。
別の実施態様において、Ａが先に示された構造中で-(CH2)6-、シス-CH2CH=CH-(CH2)3-、又は-CH2C≡C-(CH2)3-である。
別の実施態様において、Ａが先に示された構造中で-(CH2)m-Ar-(CH2)o- （式中、Arがフェニルであり、ｍ及びｏの合計が１から４までであり、かつ１個のCH2 がＳ又はＯで置換されていてもよい）である。
別の実施態様において、Ａが先に示された構造中で-CH2-Ar-O-CH2- である。
別の実施態様において、Ａが先に示された構造中で2-ヒドロキシヒドロカルビルである。
別の実施態様において、前記炎症性腸疾患が大腸炎である。
別の実施態様において、前記炎症性腸疾患がクローン病である。
【０２３４】
組成物実施態様
化合物について述べられた夫々の実施態様について、前記化合物を含む組成物について述べられた相当する実施態様があり、前記組成物が眼に許される液体である。
【実施例】
【０２３５】
合成操作
本明細書に開示された化合物が調製し得る多くの方法があるが、一つの方法（スキーム１）では、アルドリッチから市販されている、ビニルベンズアルデヒドを適当なアルキルメタレート、例えば、リチエートで処理してアルキル化アルコールを生成する。次いで得られるアルコールを保護することができ、得られるスチレン誘導体をForro 及びFulop (Tetrahedron: Assymmetry 12 (2001) 2351-2358) により記載されたように処理して鏡像体上純粋なβ-ラクタムを生成することができた。次いで当業界で知られている操作、例えば、米国特許出願公開第20030207925号、同第20030120079号、及び米国特許第6,747,054号に記載された操作を採用することによりそのα鎖を付加し得る。
【０２３６】
【化９５】
2011510009.tif 000097
【０２３７】
スキーム１
また（スキーム２）、ビニル置換ベンジルアルコールをβ-ラクタム生成反応で基質として使用することができた。β-ラクタム生成及びα鎖の導入（先に説明された操作による）に続いて、ベンジルアルコールを脱保護し、アルデヒドに酸化し、これをグリニヤール試薬の如き求核試薬により反応させてω鎖を完成し、所望の化合物を生成し得る。この方法の例について、2004年12月10日に出願された、米国特許出願第11/009298号を参照のこと。
【０２３８】
【化９６】
2011510009.tif 000098
【０２３９】
スキーム２
合成の別法はスキーム３の方法を伴なう。下記の化合物１の合成は先に概説された操作を伴なう。α鎖の導入（先に説明された操作による）はメチル5-(3-ブロモプロピル)チオフェン-2-カルボキシレート（WO94/13295に記載された合成）の付加を伴なう。次いでそのメチルエステルをエステル加水分解によりカルボン酸に変換して、化合物１を生成する。
【０２４０】
【化９７】
2011510009.tif 000099
【０２４１】
化合物２
トリエチルアミン（15μL）及びエチルクロロホルメート（15μL）を室温のCH2Cl2 (0.2 mL) 中の化合物１（10.5mg）の溶液に連続して添加する。2.5時間後に、トリエチルアミン（15μL）及びエチレングリコール（200μL）を添加する。室温で一夜撹拌した後、その反応混合物をH2O (5 mL) とCH2Cl2 (5 mL)の間に分配する。相を分離し、水相をCH2Cl2 (2x5 mL)で抽出する。合わせた有機相を1 N HCl (5 mL) で洗浄し、次いで乾燥させ (MgSO4) 、濾過し、真空で濃縮する。残渣をシリカゲルによるフラッシュカラムクロマトグラフィー (10% CH3OH / CH2Cl2) により精製して標題化合物２ 2.5mg（22％）を得る。
【０２４２】
化合物３
トリエチルアミン（6.5μL）及びエチルクロロホルメート（7μL）を室温のCH2Cl2 (0.47 mL) 中の化合物１（20mg）の溶液に連続して添加する。2.5時間後に、トリエチルアミン（6.5μL）及び4-(2-ヒドロキシエチル)-モルヒネ（58μL）を添加する。室温で一夜撹拌した後、その反応混合物をH2O (5 mL) とCH2Cl2 (5 mL)の間に分配する。相を分離し、水相をCH2Cl2 (2x5 mL)で抽出する。合わせた有機相を1 N HCl (5 mL) で洗浄し、次いで乾燥させ (MgSO4) 、濾過し、真空で濃縮する。残渣をシリカゲルによるフラッシュカラムクロマトグラフィー (10% CH3OH / CH2Cl2) により精製して標題化合物３ 5.1mg（20％）を得る。
【０２４３】
In Vivo 実施例
先からの標題化合物２及び３をin vivo試験して眼内圧を低下するその能力を測定する。化合物２を正常血圧のイヌで試験する。眼内圧（IOP）が基準線から低下する。また、この化合物をレーザー誘発高血圧のサルで試験し、IOPが基準線から低下する。
化合物３を正常血圧のイヌで試験する。眼内圧（IOP）が基準線から低下する。また、この化合物をレーザー誘発高血圧のサルで試験し、IOPが基準線から低下する。
【０２４４】
生物学的活性
本明細書に開示された化合物の活性を下記の操作に従って試験する。
ラジオリガンド結合
EP1、EP2、EP4及びFP受容体を安定に発現する細胞
ヒトもしくはネコFP受容体、又はEP1、EP2、もしくはEP4受容体を安定に発現するHEK-293細胞をTME緩衝液で洗浄し、フラスコの底からこすり取り、Brinkman PT 10/35 ポリトロンを使用して30秒間均一にする。TME緩衝液を添加して遠心分離管中の最終の40ml容量を得る（TMEの組成は100 mM TRIS 塩基、20 mM MgCl2、2M EDTAである; 10N HCl を添加して7.4のpH を得る）。
【０２４５】
Beckman Ti-60ローターを使用して細胞ホモジネートを20分間にわたって４℃で19000 r.p.m. で遠心分離する。得られるペレットをTME緩衝液中で再度懸濁させて、Biorad アッセイにより測定して、最終の1mg/mlのタンパク質濃度を得る。ラジオリガンド結合競合アッセイvs. [3H-]17 -フェニル PGF2α (5 nM) を100μlの容積で60分間にわたって行なう。原形質膜フラクションを添加することにより結合反応を開始する。その反応を氷冷TRIS-HCl 緩衝液4mlの添加及びBrandel細胞回収装置を使用するガラス繊維GF/B フィルターによる迅速な濾過により停止する。フィルターを氷冷緩衝液で３回洗浄し、１時間にわたってオーブン乾燥する。非特異的結合を10 uM 未標識17 -フェニル PGF2αで測定する。
【０２４６】
[3H-] PGE2 (5 nM; 比活性180 Ci ミリモル) をEP受容体のラジオリガンドとして使用する。EP1、EP2、EP3、EP4 を使用する結合研究を少なくとも３回の別々の実験で２回反復で行なう。200μlのアッセイ容積を使用する。インキュベーションを25℃で60分間行ない、4mlの氷冷50 mM TRIS-HClの添加、続いてWhatman GF/B フィルターによる迅速な濾過そして細胞回収装置 (Brandel)中の３回の追加の4ml洗浄により停止する。非特異的結合を10-5M の未標識PGE2で測定する。
【０２４７】
FLIPRＴＭ 研究のための方法
(a) 細胞培養
組換えヒトプロスタグランジン受容体（発現されるプロスタグランジン受容体: hDP/Gqs5; hEP1; hEP2/Gqs5; hEP3A/Gqi5; hEP4/Gqs5; hFP; hIP; hTP）の一種のタイプ又はサブタイプを安定に発現する、HEK-293(EBNA)細胞を、10％のウシ胎児血清、2 mM l-グルタミン、250 μg/ml のゲネチシン(G418) 及び選択マーカーとしての200 μg/ml ヒグロマイシンB 、並びに100 単位/ml のペニシリンG、100 μg/ml のストレプトマイシン及び0.25 μg/ml のアンホテリシンBを含む高グルコースDMEM培地中で100mmの培養皿中で培養する。
【０２４８】
(b) FLIPRTM についてのカルシウムシグナル研究
細胞をウェル当り5x104 細胞の密度でBiocoat（登録商標） ポリ-D-リシン被覆黒色壁、透明底の96ウェルプレート (Becton-Dickinson) に接種し、一夜にわたってインキュベーター中で37℃で付着させる。次いでDenley Cellwash プレート洗浄機 (Labsystems)を使用して細胞をHBSS-HEPES 緩衝液(重炭酸塩及びフェノールレッドを含まないハンクス平衡塩溶液、20 mM HEPES, pH 7.4) で２回洗浄する。カルシウム感受性色素Fluo-4 AM を2 μMの最終濃度で使用する、暗所での45分の色素ローディング後に、プレートをHBSS-HEPES 緩衝液で４回洗浄して過剰の色素を除去して夫々のウェル中に100μLを残す。プレートを37℃で数分にわたって再度平衡にする。
【０２４９】
細胞をアルゴンレーザーで488nmで励起し、発光を510-570 nm のバンド幅の発光フィルター (FLIPRTM, Molecular Devices, Sunnyvale, CA)により測定する。薬物溶液を50μlの容積で夫々のウェルに添加して所望の最終濃度を得る。蛍光強さのピーク増大を夫々のウェルについて記録する。夫々のプレートで、四つのウェルが夫々陰性対照 (HBSS-HEPES緩衝液) 及び陽性対照 (標準アゴニスト: 受容体に応じて、BW245C (hDP); PGE2 (hEP1; hEP2/Gqs5; hEP3A/Gqi5; hEP4/Gqs5); PGF2α (hFP); カルバサイクリン(hIP); U-46619 (hTP))として利用できる。次いで夫々の薬物を含むウェル中のピーク蛍光変化を対照に対して現す。
【０２５０】
化合物をハイスループット(HTS)フォーマット又は濃度-応答（CoRe）フォーマットで試験する。HTSフォーマットでは、プレート当り44種の化合物を10-5 Mの濃度で２回反復で調べる。濃度-応答曲線を生じるために、プレート当り４種の化合物を10-5〜10-11 Mの濃度範囲で２回反復で試験する。２回反復値を平均する。HTSフォーマット又はCoReフォーマットのいずれかで、異なる継代からの細胞を使用して夫々の化合物を少なくとも３つの別々のプレートで試験して３以上のｎを得る。
【０２５１】
以上の記載は本発明を実施するのに使用でき、かつ意図される最良の形態に相当する特定の方法及び組成物を詳述する。しかしながら、所望の薬理学的性質を有する更なる化合物が同様の様式で調製し得ること、及び開示された化合物がまた異なる化学反応により異なる出発化合物から得られることが当業者に明らかである。同様に、異なる医薬組成物が実質的に同じ結果で調製され、使用し得る。こうして、詳細な以上の記載が明細書に現れ得るが、それは本発明の全範囲を限定すると見なされるべきではない。むしろ、本発明の範囲は特許請求の範囲の法的構成のみにより支配されるべきである。
【国際調査報告】
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