(57)【要約】  本発明は、隣接する少なくとも２つのキラル中心を有する、エナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富むエステルまたはチオエステルの製造方法であって、第二アルコールまたは第二チオール部分を形成する第１キラル中心を、１個の水素置換基を有する第２キラル中心に対してベータ位に含む構造を有する第二アルコールまたはチオールの立体異性体混合物を、エピマー化触媒および立体選択的アシル化触媒の存在下にアシル供与体と反応させる方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１対の２個の隣接キラル中心を有する、エナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富むエステルまたはチオエステルの製造方法であって、第二アルコールまたは第二チオール部分を形成する第１キラル中心を、１個の水素置換基を有し、かつ第二アルコール部分を形成しない第２キラル中心に対してベータ位に含む構造を有する第二アルコールまたはチオールの立体異性体混合物を、エピマー化触媒および立体選択的アシル化触媒の存在下にアシル供与体と反応させる方法。
【請求項２】
第二アルコールまたはチオールは、２対以上の隣接キラル中心を含み、各対は、第二アルコールまたはチオール部分を形成する第１キラル中心を、請求項１に記載したような１個の水素置換基を有する第２キラル中心に対してベータ位に有する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
第２キラル中心が、アミン部分、アルキル部分または第２チオール部分を形成する、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
第１キラル中心の第二アルコールまたはチオールがアシル供与体と反応する前または反応する間、第２キラル中心のアミン部分または第２チオール部分が保護され、反応後に脱保護される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
第２キラル中心が３個の炭素原子と結合している、請求項１または２に記載の方法。
【請求項６】
第１キラル中心および第２キラル中心が、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキルまたはヘテロシクロアルケニル部分の一部である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
第１および第２キラル中心が、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、ピロリジル、ピペリジニルまたはテトラヒドロフリル部分である、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
エピマー化触媒が、周期律表の第３、８、９、１０、１３族またはランタニド族の金属をベースとしており、その金属は酸化状態が１以上である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
エピマー化触媒が、ルテニウム、イリジウム、アルミニウム、サマリウムおよびスカンジウムの群から選択される金属をベースとしている、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
立体選択的アシル化触媒が、加水分解酵素、好ましくはカルボン酸エステラーゼ、チオエステルヒドロラーゼおよびペプチドヒドロラーゼの群から選択される加水分解酵素、より好ましくはカンジダ・アンタルクチカ（Ｃａｎｄｉｄａ  Ａｎｔａｒｃｔｉｃａ）リパーゼＢ（ＣＡＬ−Ｂ）、ブルクホルデリア・セパシア（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｃｅｐａｃｉａ）リパーゼおよびサブチリシンから選択される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
立体異性体の混合物が、１個の水素置換基を有し、カルボニルまたはチオカルボニル部分に対してアルファ位にあるキラル中心を有するケトンまたはチオンをその場で還元することによって調製される、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
隣接する少なくとも２つのキラル中心を有する、エナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富む第２アルコールまたはチオールの製造方法であって、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法で得られたエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富むエステルまたはチオエステルを、好ましくは加水分解、エステル交換またはアミド化により、より好ましくは加水分解により、第２アルコールまたはチオールに変換する方法。
【請求項１３】
エナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富むエステルまたはチオエステルが立体選択的に変換される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法で得られた、少なくとも２つのキラル中心を有する、エナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富むエステルまたはチオエステル、あるいは、請求項１２または１３に記載の方法で得られた、少なくとも２つのキラル中心を有する、エナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富む第２アルコールまたはチオールの、液晶、農薬、食品もしくは飼料用添加物、芳香剤、化粧品成分または医薬品成分の製造における使用。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、隣接する少なくとも２つのキラル中心を有する、エナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富むエステルまたはチオエステルの製造方法に関する。本発明は、さらに、そのようにして得られたエステルもしくはチオエステル、または、それぞれのアルコールもしくはチオールの、他の製品を製造するための使用に関する。
【０００２】
Ｓ．Ｌｉｕら（Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．、２００７、４６、７５０６）は、ラセミ体ケトンのＲｕ−触媒不斉水素化による、エナンチオマー過剰率（ｅ．ｅ）およびジアステレオマー過剰率（ｄ．ｅ）が大きい、１，２−アミノアルコールの合成について記載しているが、この技術を用いて、ｃｉｓ−ジアステレオマーのみが入手可能である。さらに、この方法では第３アミンのみが製造される。
【０００３】
Ｉ．Ｓｃｈｉｆｆｅｒｓら（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００６、７１、２３２０）は、古典的な分割法（例えば、ジアステレオアイソマー塩沈殿法により沈殿させる、ジアステレオアイソマー塩の製造など）に基づいた、光学的に純粋なｔｒａｎｓ−２−アミノ−１−シクロヘキサノール誘導体の製造について記載しているが、これは理論的最大収率が５０％に過ぎないという欠点を有する。
【０００４】
Ｋ．Ａｒａｉら（Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２００７、４６、９５５）およびＦ．Ｃａｒｒｅｅら（Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．２００５、７（６）、１０２３）は、アニリンによるエポキシドのエナンチオ選択的開環によるｅ．ｅおよびｄ．ｅが大きい１，２−アミノアルコールの合成について記載しているが、この方法はｍｅｓｏ−エポキシドにのみ適用することができ、かつ、この方法ではトランス−ジアステレオマーのみが入手可能である。
【０００５】
本発明の目的は、それらに代わる、少なくとも２つの隣接したキラル中心を有する、エナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富むエステルまたはチオエステルの製造方法、特に、それらの欠点の１つ以上を解決する製造方法を提供することにある。
【０００６】
本発明によれば、動的速度論的分割（ＤＫＲ）を使用することにより、２つ以上の隣接したキラル中心を有する、エナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富むエステルもしくはチオエステル、または、それぞれのアルコールもしくはチオールを製造できることが、今や明らかとなった。隣接したとは、キラル中心が、１，２ジオールで水酸基が結合している炭素原子、１−アミノ−２−ヒドロキシ化合物でアミノ基または水酸基がそれぞれ結合している炭素原子のような、直接隣り合った炭素原子であることを意味する。
【０００７】
したがって、本発明は、少なくとも１対の２個の隣接キラル中心を有する、エナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富むエステルまたはチオエステルの製造方法であって、エピマー化触媒および立体選択的アシル化触媒の存在下、１個の水素置換基を有する第２キラル中心のベータ位に第二アルコールまたはチオール部分を形成する第１キラル中心を含む構造を有する、第二アルコールまたはチオールの立体異性体混合物を、アシル供与体と反応させる方法に関する。
【０００８】
本発明は、また、少なくとも１対の２個の隣接キラル中心を有する、エナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富むエステルまたはチオエステルから、アルコールまたはチオールを製造する方法に関する。
【０００９】
本発明の方法の利点は、必要に応じて、ワンポット法またはワンポット法に近い方法で、少なくとも２個の隣接キラル中心を有する生成物を、エナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富む形態で製造できる点にある。本発明では、対応する立体異性体を任意の相対量で含有する混合物を、初めに存在する立体異性体の相対量から予測される収率より高い収率で分割することができる。
【００１０】
本発明の目的のためには、「ＤＫＲ」は、残留エナンチオマー基質のｉｎ−ｓｉｔｕラセミ化と組み合わされる速度論的分割を意味する。ＤＫＲは、例えば、Ｐｅｒｓｓｏｎら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９９、１２１、１６４５−１６５０で、知られている。この刊行物には、１個のキラル中心を有するあるラセミ体第二アルコールから、それらのエナンチオマーに富むエステルへの転換について記載されているが、エナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富むキラルエステルまたはキラル第二アルコールの製造において、ＤＫＲにより、少なくとも１対の２個の隣接キラル中心を構成する例は示されていない。
【００１１】
発明者らは、立体選択的アシル化触媒により、立体異性体混合物からエナンチオマー的および／またはジアステレオマー的に高純度の１つの立体異性体を選択的に分割できることを見出した。したがって、そのような２個の隣接キラル中心（または、複数対の隣接キラル中心）を含むＤＫＲを、「タンデムＤＫＲ」（ＴＤＫＲ）と称する。
【００１２】
以下、特に明記しなければ、アシル化触媒によりアシル化する特定のアルコールまたはチオールの立体異性体を「基質」と呼ぶ。
【００１３】
本発明は、富化すべき立体異性体の選択に関して高い柔軟性を有している。
【００１４】
さらに、本発明は、所望の立体異性体を高収率で製造できるという利点を有している。
【００１５】
有利なことに、本発明においては、アルコールまたはチオール基質を、それぞれ対応するケトン／チオンから、その場で生成することができる。これにより、本発明の方法においては、ケトン／チオン、あるいは、それぞれのアルコールもしくはチオール、またはそれらの混合物の使用に対して、高い柔軟性が与えられる。
【００１６】
アルコールまたはチオール基質のそれぞれの取り得る立体異性体の組成が、原理上は、エナンチオマーおよび／またはジアステレオマーの過剰率に関するＴＤＫＲの結果に影響を及ぼさないことも、本発明の利点である。
【００１７】
本発明により得られる、エステルもしくはチオエステル、または、アルコールもしくはチオールの各生成物は、エナンチオマーに富み、かつ／または、ジアステレオマーに富む。以下、これを「立体富化生成物」と呼ぶ。
【００１８】
「エナンチオマーに富む」とは、エナンチオマーの一方が、他方のエナンチオマーより多く、場合により他方のエナンチオマーを含まずにさえ、生成されることを意味する。
【００１９】
「ジアステレオマーに富む」とは、立体異性体の１つが他の立体異性体より多く、場合により他の立体異性体を含まずにさえ、生成されることを意味する。
【００２０】
「ジアステレオマーに富み、かつエナンチオマーに富む」とは、生成物中の立体異性体の１つが、他の立体異性体より多く、場合により他の立体異性体の１つ以上を含まずにさえ、生成されることを意味する。
【００２１】
本発明の目的では、「立体異性体」は、同じ分子式および同じ共有結合原子配列を有するが、これらの原子の立体的配置が異なる化合物を意味する。
【００２２】
本発明の目的では、「キラル中心」は、中心原子と識別可能な共有結合原子からなり、そのような共有結合原子の任意の２つの原子を交換することにより立体異性体が形成されるような原子団を意味する。典型的には、キラル中心は４個の異なる共有結合原子を有する炭素原子である。
【００２３】
本発明の目的では、「エナンチオマー」は、互いに重ね合わせることができない完全な鏡像である立体異性体を意味する。
【００２４】
本発明の目的では、「ジアステレオアイソマー」（または「ジアステレオマー」）は、エナンチオマーではない立体異性体を意味する。
【００２５】
本発明の目的では、「エピマー化」は、１つ以上のキラル中心が構造的に不安定であるために、２つ以上のキラル中心を有する立体異性体が相互変換することを意味し、それにより多数の立体異性体が熱力学的安定性を反映した割合で生成する。
【００２６】
本発明においては、エピマー化触媒は、本発明の方法でアシル化される特定の立体異性体を少なくとも含有する立体異性体の混合物が、本発明の方法で適用される条件下で生成されるように選択される。例えば、対称面を持たない分子が、エピマー化される２つのキラル中心を有する場合、そのようなエピマー化プロセスにより、一般に、４種の立体異性体：２つのジアステレオマー対のエナンチオマーが生成される。しかしながら、例えばエナンチオマーの他方のジアステレオマー対が熱力学的に生成され難いときには、例外的に、１対のエナンチオマーのみの生成もあり得る。以下、適切なエピマー化触媒についてさらに詳細に説明する。
【００２７】
本発明の方法では、第１キラル中心のアルコールまたはチオール部分は、第２キラル中心に対してベータ位にある。すなわち、２つのキラル炭素原子は隣接している。ＤＫＲ条件下で、隣接キラル中心がエピマー化されるＤＫＲ法を使用できることを理解したのは、本発明者らが最初である。
【００２８】
本発明によれば、１対以上の隣接キラル中心をエピマー化することができる。３つの連続したキラル中心をエピマー化し得る可能性もあると思われる。
【００２９】
［基質］
第二アルコールまたはチオール基質の選択は、所望する生成物に応じて決定される。また、異なる第二アルコールの混合物または異なるチオールの混合物を使用してもよい。第二アルコールまたはチオールは、例えば、次式（１）で示される。
【化１】
2011502471.tif 000002
式中、＊１は第１キラル中心を表し、＊２は第２キラル中心を表し、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３はＨではない。
【００３０】
Ｒ１およびＲ２は、特に、それぞれ独立して有機部分を表し、より特には、例えば１〜２０個のＣ原子、好ましくは１〜６個のＣ原子を有する、場合により置換されていてもよい線状もしくは分岐アルキル基、例えば２〜２０個のＣ原子、好ましくは２〜６個のＣ原子を有する、場合により置換されていてもよい線状もしくは分岐アルケニル基、例えば２〜２０個のＣ原子、好ましくは２〜６個のＣ原子を有する、場合により置換されていてもよい線状もしくは分岐アルキニル基、例えば３〜２０個のＣ原子、好ましくは３〜７個のＣ原子を有する、場合により置換されていてもよいシクロアルキル基、または、例えば４〜２０個のＣ原子、好ましくは５〜１０個のＣ原子を有する、場合により置換されていてもよいアリール基を表す。アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基またはアリール基は、場合により１つ以上のヘテロ原子、特には１つ以上のＯ、ＳもしくはＮの原子を含んでいてもよい。あるいは、Ｒ１およびＲ２は一緒に、例えばＣ原子が３〜２０個の、場合により置換されていてもよい飽和もしくは不飽和の環構造を形成していてもよく、この環構造は、１つ以上のヘテロ原子、例えばＯ、ＳもしくはＮを含んでいてもよい。
【００３１】
Ｒ１およびＲ２のアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基もしくはアリール基、またはそれぞれの環構造は、反応系において不活性な置換基を含んでいてもよい。適切な置換基としては、例えば、アルキル基、アリール基、アルコキシ基、アルケニル基、アシル化反応に不活性な、場合により置換されていてもよいアミン基、ハロゲン、ニトリル基、ニトロ基、アシル基、アロイル基、カルボキシル基、カルバモイル基、またはスルホネート基が挙げられる。置換基は、例えば、０〜１９個のＣ原子、特に０〜１０個のＣ原子を含んでいてもよく、１個もしくそれ以上のヘテロ原子、特に１個以上のＯ、ＳまたはＮの原子を含んでいてもよい。
【００３２】
第二アルコールまたは第二チオールの特別のクラスは、式（１）のキラル中心＊１および＊２がシクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキルまたはヘテロシクロアルケニル部分の１部となるように、Ｒ１およびＲ２が一緒に環構造を形成するクラスである。
【００３３】
Ｒ１およびＲ２が一緒に環構造を形成する第二アルコールまたは第二チオールの好ましい例としては、式（１）のキラル中心＊１および＊２が、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、ピロリジル、ピペリジニルまたはテトラヒドロフリル部分の一部を構成する第二アルコールまたは第二チオールが挙げられる。
【００３４】
一実施態様においては、式（１）の置換基Ｒ３は電子吸引基を表す。そのような基は、特に、第一、第二もしくは第三アミン部分、第二アルコール部分、第二チオール部分、ホスフィン部分、またはニトリル部分から選択し得るが、それらの中でも第１アミンおよびアルコールが好ましい。そのようなＲ３置換基は、場合により、第１キラル中心の第二アルコールまたはチオールがアシル供与体と反応する前または反応する間保護され、反応後に脱保護される。
【００３５】
一実施態様においては、本発明は、少なくとも１対の隣接キラル中心を有する、エナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富むエステルまたはチオエステルの製造方法であって、第二アルコールまたは第二チオール部分を形成する第１キラル中心を、１個の水素置換基を有し、かつ第二アルコール部分を形成しない第２キラル中心に対してベータ位に含む構造を有する第二アルコールまたはチオールの立体異性体混合物を、エピマー化触媒および立体選択的アシル化触媒の存在下にアシル供与体と反応させる方法に関する。
【００３６】
Ｍ．Ｅｄｉｎら（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ：Ａｓｙｍｍｅｔｒｙ  ２００６、１７（４）、７０８）は、分子内アシル基移動とルテニウムを触媒としたエピマー化反応とを組み合わせたリパーゼを触媒とした位置選択的反応速度論的分割による、４種のジオール異性体混合物からジアセテートへのエナンチオ選択的転換について記載している。Ｅｄｉｎらは、第２のアルコール部分の酵素による直接アシル化が、第１のアルコール部分の酵素によるアシル化に比べ、はるかに低い程度でしか生じないことを教示している。Ｅｄｉｎらの動的速度論的不斉転換プロセスは、ｓｙｎ−ジオールモノアセテートのアシル基移動がａｎｔｉ−ジオールモノアセテートのアシル基移動より速いことを利用している。対照的に、本発明ではそのようなメカニズムは起こり得ない。意外なことに、第２キラル中心が第二アルコール部分を形成しないプロセスでも富化が生じている。
【００３７】
一実施態様においては、置換基Ｒ３は、有機部分、特に、例えば１〜２０個のＣ原子、好ましくは１〜６個のＣ原子を有する、場合により置換されていてもよい線状もしくは分岐アルキル基、例えば１〜２０個のＣ原子、好ましくは１〜６個のＣ原子を有する、場合により置換されていてもよい線状もしくは分岐アルコキシ基、例えば２〜２０個のＣ原子、好ましくは２〜６個のＣ原子を有する、場合により置換されていてもよい線状もしくは分岐アルケニル基、例えば２〜２０個のＣ原子、好ましくは２〜６個のＣ原子を有する、場合により置換されていてもよい線状もしくは分岐アルキニル基、または場合により置換されていてもよいアリール基を表す。置換基は、例えば、４〜２０個のＣ原子、好ましくは５〜１０個のＣ原子を含んでいてもよく、場合により、１個もしくそれ以上のヘテロ原子、特に１個以上のＯ、ＳまたはＮの原子を含んでいてもよい。
【００３８】
Ｒ３のアルキル基、アルコキシ基、アルケニル基およびアリール基は、反応系で不活性な置換基を含んでいてもよい。適切な置換基としては、例えば、アルキル基、アリール基、アルコキシ基、アルケニル基、アシル化反応に不活性な、場合により置換されていてもよいアミン基、ハロゲン、ニトリル基、ニトロ基、アシル基、アロイル基、カルボキシル基、カルバモイル基、またはスルホネート基が挙げられる。置換基は、例えば、０〜１９個のＣ原子、特に０〜１０個のＣ原子を含んでいてもよく、また、１個もしくそれ以上のヘテロ原子、特に１個以上のＯ、ＳまたはＮの原子を含んでいてもよい。
【００３９】
特別の場合には、第二アルコールまたはチオールの第２キラル中心は３個の炭素原子に結合している。そのような場合、式（１）中の置換基Ｒ３は、アルキルまたはアリール基であることが好ましく、メチル、エチル、プロピル、ブチル、フェニルまたはベンジル基であることがより好ましい。
【００４０】
本発明の方法において基質として使用し得る特定の第二アルコールまたはチオールは、２対以上のキラル中心を含み、各対は、第二アルコールまたはチオール部分を形成する第１キラル中心を、１個の水素置換基を有する第２キラル中心に対してベータ位に有する、すなわち、その第二アルコールまたはチオールは、エピマー化され得る少なくとも２対の隣接キラル中心を有し、例えば、１，４−ジヒドロキシ−２−メチル−５−ｔ−ブチル−シクロヘキサンが挙げられる。
【００４１】
［アシル供与体］
アルコールまたはチオール基質をアシル供与体と反応させる。アシル供与体は、アシル供与体自身が触媒によるエピマー化反応を阻害しないよう選択することが好ましい。
【００４２】
本発明の方法において使用し得るアシル供与体は、例えば、Ｅｎｚｙｍｅ  Ｃａｔａｌｙｓｉｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ．Ａ  ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ、全面改訂増補第２版、（Ｋ．ＤｒａｕｚおよびＨ．Ｗａｌｄｍａｎｎ編）、第ＩＩ巻、２００２、４７２、５４４、Ｗｉｌｅｙ−ＶＨＳ、およびそこで引用された文献、並びに、Ｕ．Ｔ．ＢｏｍｓｃｈｅｕｅｒおよびＲ．Ｊ．ＫａｚｌａｕｓｋａｓによるハンドブックＨｙｄｒｏｌａｓｅｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ−Ｒｅｇｉｏ−ａｎｄ  Ｓｔｅｒｅｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  Ｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ、１９９９、Ｗｉｌｅｙ−ＶＨＳ、第４．２．３章に記載されているような、よく知られたアシル供与体である。例えば、アシル供与体は、カルボン酸エステル、アミドおよび無水物の群、好ましくは、カルボン酸エステルの群から選択され得る。特に好適なアシル供与体としては、Ｃ１〜Ｃ２０のカルボン酸エステルおよびＣ１〜Ｃ７のアルコールエステルが挙げられ、より特には、Ｃ１〜Ｃ２０のカルボン酸とＣ１〜Ｃ７のアルコールとのエステルが挙げられる。そのようなアシル供与体としては、イソプロピルアセテート、イソプロペニルアセテート、イソブチルアセテート、ビニルアセテート、エチルアセテート、イソプロピルラウレート、イソプロピルブチレート、イソプロピルオクタノエート、イソプロピルミリステートおよびイソプロペニルラウレートの群から選択されるアシル供与体が挙げられる。
【００４３】
アシル供与体は、アシル供与体自身は反応条件下で低揮発性であり、アシル供与体残渣は高揮発性であり、かつアシル供与体残渣の酸化が反応条件下で可能な限り起こらないものを選択することが好ましい。そのようなアシル供与体の好ましい例は、１〜４個のＣ原子を有するアルコールと４〜２０個のＣ原子を有するカルボン酸とのカルボン酸エステルである。これらの中でも、イソプロピルブチレート、イソプロピルラウレート、イソプロピルオクタノエート、イソプロピルミリステート、イソプロペニルアセテートおよびイソプロペニルラウレートが特に好適である。アセトンおよびイソプロピルアルコールは、高揮発性アシル供与体残渣の好ましい例である。アセトンまたはイソプロピルアルコールを生成する好ましいアシル供与体は、イソプロピルラウレート、イソプロピルオクタノエート、イソプロピルミリステートおよびイソプロペニルアセテートである。
【００４４】
アシル供与体残渣は反応混合物から除去することが好ましく、例えば、アシル供与体および他の反応成分とは別の相へ選択的に移すことにより、連続的に除去することがより好ましい。これは、物理的もしくは化学的方法により、またはそれらの組み合わせにより達成することができる。立体選択的アシル化反応が生じている相からアシル供与体残渣を除去し得る物理的方法の例としては、選択的結晶化、気化、蒸留、抽出、不溶性複合体の生成、吸収および吸着が挙げられる。
【００４５】
アシル供与体残渣を除去するために、減圧を使用することができる。圧力は（所与の温度で）、混合物が還流するよう、または還流に近づくように選択することが好ましい。さらに、混合物の沸点は、混合物の共沸組成とすることにより低下させることができる。これを達成する好適な手段は、当該技術分野では公知である。除去の化学的方法の例としては、共有結合、化学的誘導体化または酵素的誘導体化が挙げられる。
【００４６】
［触媒−概要］
本発明のＴＤＫＲにおいては、エピマー化触媒および立体選択的アシル化触媒を使用する。これらは互いに両立できるよう選択することが好ましく、これは、それらが、直接的または間接的に互いを、少なくとも許容されない程度には、失活させないことを意味する。当業者であれば、周知の一般的知識と、場合により行うルーチンの実験と、本明細書中に開示された情報により、いかなるエピマー化触媒およびアシル化触媒の組み合わせが、特定の立体異性に富む生成物を得るのに特に適しているかを確立することができる。
【００４７】
アシル化触媒の必要量は、使用するエピマー化触媒の量に関係し、アシル化触媒の量は、反応全体が効率的に連続して進行するように、すなわち、エピマー化反応に対して、アシル化触媒の基質として働いている立体異性体が、アシル化触媒による立体選択性が許容されるのに十分な量で存在するような速度で、アシル化反応が進行するように調節することが好ましい。所与の反応／触媒系におけるエピマー化触媒とアシル化触媒の好適な比は、周知の一般的知識と本明細書中に開示された情報を基に、通常の実験的手段により決定することができる。通常、アシル化触媒の量（エピマー化触媒に対して）は、アシル化されるアルコールまたはチオールの立体異性体基質の相対的な量（混合物中の立体異性体の全量に対して）が、アシル化反応が十分な速度で進行するのに十分な量に維持されるよう選択される。さらに、アシル化触媒の量は、通常、目的とするアシル化反応に関与しないアルコールまたはチオールの立体異性体の相対量が、目的とするエステルまたはチオエステルのエナンチオマー過剰率またはジアステレオマー過剰率が悪影響を受けないか、または、少なくとも許容されない範囲にならないような十分に少ない量に維持されるよう選択される。経験からいって、目的のエステルまたはチオエステルに対するアシル化触媒のエナンチオ選択性が高いほど、反応を良好に進めるために、目的としないアルコールまたはチオールの立体異性体の最大相対量は多くなる。
【００４８】
［エピマー化触媒］
エピマー化触媒は、不均一系触媒の形態であっても、均一系触媒の形態であってもよい。
【００４９】
エピマー化触媒は、酵素、金属酵素、有機触媒、または金属をベースとする触媒であってよい。
【００５０】
好ましいエピマー化触媒としては（遷移）金属化合物をベースとする触媒が挙げられる。金属は、特に、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｐｈｙｓｉｃｓ）、第８２版、ＣＲＣ  ｐｒｅｓｓ、２００１−２００２のカバーに印刷された表に示されているような、新ＩＵＰＡＣ版周期律表の３、８、９、１０、１３族またはランタニド金属から選択することができる。金属は、鉄、コバルト、ニッケル、ルテニウム、ロジウム、イリジウム、オスミウム、パラジウム、白金またはサマリウム（これらの組み合わせを含む）の群から選択することが好ましい。これらの中でも、ルテニウム、イリジウム、アルミニウム、サマリウムおよびスカンジウムの群から選択される金属が非常に好ましい。特に好ましい方法では、金属は、ルテニウム、イリジウムおよびアルミニウムの群から選択される。好ましい金属の選択は、以下に記載するように、使用するアルコールまたはチオールに依存する。
【００５１】
好適な遷移金属化合物は、例えば、Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｏｍｅｔａｌｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  「Ｔｈｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｏｍｅｔａｌｌｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ」、編集者：Ｓｉｒ  Ｇｅｏｆｆｒｅｙ  Ｗｉｌｋｉｎｓｏｎ、ＦＲＳ、副編集者：Ｆ．Ｇｏｒｄｏｎ  Ａ．Ｓｔｏｎｅ、ＦＲＳ、編集主幹：Ｅｄｗａｒｄ  Ｗ．Ａｂｅｌの第１〜９巻、好ましくは、第４、５、６および８巻、並びに、Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｏｍｅｔａｌｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  「Ａ  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｌｉｔｅｒａｔｕｒｅ  １９８２−１９９４」、編集長：Ｅｄｗａｒｄ  Ｗ．Ａｂｅｌ、Ｇｅｏｆｆｒｅｙ  Ｗｉｌｋｉｎｓｏｎ、Ｆ．Ｇｏｒｄｏｎ  Ａ．Ｓｔｏｎｅ、好ましくは、第４巻（Ｓｃａｎｄｉｕｍ，Ｙｔｔｒｉｕｍ，Ｌａｎｔｈａｎｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ａｃｔｉｎｉｄｅｓ，ａｎｄ  Ｔｉｔａｎｉｕｍ  Ｇｒｏｕｐ）、第７巻（Ｉｒｏｎ，Ｒｕｔｈｅｎｉｕｍ，ａｎｄ  Ｏｓｍｉｕｍ）、第８巻（Ｃｏｂａｌｔ，Ｒｈｏｄｉｕｍ，ａｎｄ  Ｉｒｉｄｉｕｍ）、第９巻（Ｎｉｃｋｅｌ，Ｐａｌｌａｄｉｕｍ，ａｎｄ  Ｐｌａｔｉｎｕｍ）、第１１巻（Ｍａｉｎ−ｇｒｏｕｐ  Ｍｅｔａｌ  Ｏｒｇａｎｏｍｅｔａｌｌｉｃｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）および第１２巻（Ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ  Ｍｅｔａｌ  Ｏｒｇａｎｏｍｅｔａｌｌｉｃｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）に記載されている。
【００５２】
特に、金属をベースとするエピマー化触媒は、１つ以上の中性配位子、例えば、１つ以上の転換されるべき化合物（アルコール、チオール、ケトン、チオン）または得られたエステルもしくはチオエステルが錯体を作る金属中心を有する。そして、この金属中心にはアニオン型の配位子が結合する。触媒は、得られたエステルまたはチオエステルが触媒と錯体を形成しないか、または、少なくとも、アルコールまたはチオール基質に比べて、金属に対する親和性が低い（錯体生成定数が小さい）ように選択することが好ましい。好適なエピマー化触媒は、特に、式（２）で示すことができる。
ＬｍＭｎｐＸｑＹｒＳｔ                    （２）
【００５３】
各Ｍは独立して酸化状態ｎの金属を表す。整数ｎは≧１である。特に、Ｍは先に特定した金属から選択することができる。
【００５４】
整数ｐは触媒中の金属原子の数を表し、≧１である。ｐは１以上のいずれかの値をとり得、例えば、ｐは１００までの値をとり得る。ｐ＞１のとき、触媒はクラスターの形態にある。そのようなクラスターは、多くの、例えば１００個までの金属原子を含有することができる。実際、多くの場合、１〜１０個である。アルミニウムアルコキシド触媒のクラスターについては、例えば、（ａ）Ｊｅｒｏｍｅら「Ｃａｔａｌｙｔｉｃ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ａｌｕｍｉｎｕｍ  ｉｓｏｐｒｏｐｏｘｉｄｅ  ｉｎ  ｏｒｇａｎｉｃ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｃｈａｔｔｅｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．、Ｃｈａｔｔｅｎｏｏｇａ、テネシー州（ＴＮ）、米国（ＵＳＡ）、（ｂ）Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ（Ｄｅｋｋｅｒ）（２００３）、８９（Ｃａｔａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ）、９７−１１４、およびこれらが引用している文献に記載されている。エピマー化触媒の活性種は、例えばＭＰＶ触媒について記載されているような、当該技術分野で知られた方法、例えば、（ａ）Ｙａｍａｍｏｔｏ，Ｈ．；Ｏｒｇａｎｏｍｅｔａｌｌｉｃｓ  ｉｎ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ａ  Ｍａｎｕａｌ、第２版（Ｍａｎｆｒｅｄ  Ｓｃｈｌｏｓｓｅｒ（編）、２００２、５３５−５７７、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ  Ｌｔｄ．）、およびそこで引用されている文献、並びに、（ｂ）Ｅｉｓｃｈ．Ｊ．Ｊ；Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｏｍｅｔａｌｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ＩＩ、ａ  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｌｉｔｅｒａｔｕｒｅ  １９８２−１９９４（Ｗｉｌｋｉｎｓｏｎ，Ｇ．、Ｓｔｏｎｅ，Ｇ．Ｇ．Ａ．、Ａｂｅｌ，Ｅ．Ｗ．編）、第１巻、１９９５、４３１−５０２、Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ、オックスフォード（Ｏｘｆｏｒｄ）に記載されているような方法で調製することができる。活性化が必要ならば、エピマー化触媒の活性化は、別の場で、またはその場で行うことができる。
【００５５】
Ｌ、Ｘ、ＹおよびＳは配位子を表し、これらは個々の分子（少なくとも金属に結合する前には）であるか、または、金属に対して２つ以上の結合部位を有するより大きな分子（すなわち、多座配位子、例えば、２座配位子、３座配位子、４座配位子など）の１部を形成し得る。
【００５６】
各Ｌは独立して中性の配位子を表す。Ｌは特にケトンまたはアルコールであり、変換される１つ以上の化合物を含んでいてもよい。
【００５７】
整数ｍは≧０であり、プロセスの過程で変動し得る。整数ｍは任意の値、例えば１００までの値をとり得る。
【００５８】
各Ｘは独立してアニオン性配位子を表す。Ｘの好適な例としては、水素化物；テトラフルオロボレート；ハロゲン化物（特に、Ｃｌ−またはＢｒ−）；例えば１〜１２個のＣ原子を有するアルキル基（例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル（ｎＰｒ）基またはｉ−ブチル（ｉＢｕ）基など）；例えば１〜１２個のＣ原子を有するアルコキシ基（例えば、ｎ−ペントキシ基、ｉ−プロポキシ基、ｔ−ブトキシ基など）；例えば１〜１２個のＣ原子を有するアルカノエート基（例えば、エタノエート基、ｎ−ブタノエート基、ｎ−ペンタノエート基、ｎ−オクタノエート基など）；アミド、アミノ酸アミド、アミノ酸、アミノアミド、アミノアルコールまたはアミンから誘導されるアニオン；ＣＮ−基；アニオン性芳香族配位子（特に、シクロペンタジエニル（Ｃｐ）、ペンタメチルシクロペンタジエニル（Ｃｐ＊）またはインデニル）が挙げられる。上記アルコキシ基は、第二アルコールから誘導されるものであることが好ましい。
【００５９】
整数ｑは配位子Ｘの数を表し、≧１であるが、任意の値、例えば１００までの値をとり得る。
【００６０】
各Ｙは独立していわゆるスペクテーター配位子、すなわち、金属との結合に利用できる３個以上のπ電子を有する中性の配位子（例えば、芳香族もしくはアリル化合物、または少なくとも２個のＣ＝Ｃ結合を有するオレフィンなど）を表す。芳香族化合物の例としては、ベンゼン、トルエン、キシレン、クメン、シメン、ナフタレン、アニソール、クロロベンゼン、インデン、シクロペンタジエニル誘導体、テトラフェニルシクロペンタジエノン、ジヒドロインデン、テトラヒドロナフタレン、没食子酸、安息香酸およびフェニルグリシンが挙げられる。オレフィンの例としては、ジエン（特に、ノルボルナジエン、１，５シクロオクタジエンおよび１，５−ヘキサジエン）が挙げられる。
【００６１】
Ｙが配位子Ｓおよび／またはＸと共有結合することも可能である。
【００６２】
整数ｒは配位子Ｙの数を表し、≧０、例えば１００までの値である。
【００６３】
各Ｓは独立して中性配位子を表す。特に、Ｓは、他の配位子との交換が比較的容易な孤立電子対供与体とすることができる。Ｓは、例えば、ホスフィン（特に、ＰＰｈ３もしくはＰＣｙ３）、ニトリル、ＣＯもしくは配位性溶剤分子（特に、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ））、水、アセトニトリル、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、アルコール、ピリジン、Ｎ−メチルピロリドンまたはアミン（特に、Ｅｔ３Ｎなどの第３アミン）であってよい。配位子Ｓは、オレフィン、水素分子、または、架橋形成において第２金属中心に孤立電子対結合を形成して、２量体または多量体の金属化合物を作るＸタイプの架橋配位子などの、単一のπ−またはσ−結合供与体であってよい。
【００６４】
整数ｔは配位子Ｓの数を表し、≧０、例えば１００までの値である。
【００６５】
必要ならば、エピマー化触媒は、例えば、中性配位子Ｓを別の配位子Ｓ’と交換する（これにより、式（２）で示される金属錯体は、式（３）
ＬｍＭｎｐＸｑＹｒＳｔ−ｉＳ’ｉ                （３）
で示されるものに変わる）か、あるいは、遷移金属化合物を配位子Ｓ’と錯体化させることによって得ることができる。金属錯体（２）と配位子Ｓ’とをベースとする触媒は、一方が金属錯体（２）で他方が配位子Ｓ’という別々の成分の形態で加えてもよく、あるいは、例えば式（３）で示されるもののように、既にＳ’を含む錯体の形態で加えてもよい。好適なエピマー化触媒を生成するＳ’の例としては、例えば、第一もしくは第二アミン、アルコール、ジオール、アミノアルコール、ジアミン、モノ−アシル化ジアミン、Ｏ−アシル化アミノアルコール、モノ−トシル化ジアミン、モノ−トシル化アミノアルコール、アミノ酸、アミノ酸アミド、アミノ−チオエーテル、ホスフィン、ビスホスフィン、アミノホスフィンが挙げられ、好ましくは、アミノアルコール、モノ−アシル化ジアミン、モノ−トシル化ジアミン、アミノ酸、アミノ酸アミド、アミノチオエーテルまたはアミノホスフィンである。
【００６６】
第８、９および１０族の金属に対して特に適した配位子類は、ＥＰ−Ａ−９１６６３７号明細書およびＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ：Ａｓｙｍｍｅｔｒｙ  １０（１９９９）２０４５−２０６１に記載されている（但し、記載されている光学活性配位子との錯体化は必ずしも起こらない。しかし、それに対応するラセミ化合物とは場合により起こる）。配位子は、金属に対して０．５〜８当量、特に、１〜３当量の量で使用することが好ましい。２座配位子の場合には、０．３〜８、特に０．５〜３当量で使用することが好ましい。
【００６７】
周期律表の第８、９または１０族の金属をベースとするエピマー化触媒で特に適したＸおよび／またはＳの配位子類としては、例えば、式（４）で示されるアミノ酸アミド類が挙げられる。
【化２】
2011502471.tif 000003
ここで、Ｒ４およびＲ７はそれぞれ独立してＨ、または、例えば１〜９個のＣ原子を有する置換もしくは非置換のアルキルもしくはアリール基を表し；Ｒ５およびＲ６はそれぞれ独立してＨ、または、例えば１〜９個のＣ原子を有する置換もしくは非置換のアルキルもしくはアリール基を表す。２つのＲ基は、環、特に５〜１２員環を形成していてもよい。例えば、Ｒ４およびＲ５が一緒に、それらが結合するＮおよびＣ原子を含む環を形成していてもよく、Ｒ５およびＲ６が一緒に、それらがそれぞれ結合するＮ原子を含む環を形成していてもよく、あるいは、Ｒ４およびＲ７が一緒に環を形成していてもよい。
【００６８】
第３、１３族およびランタニド金属に対して特に適した配位子類としては、例えば、アリールアルコール、特に、２座配位子のアリールアルコールが挙げられる。
【００６９】
殆どの場合、エピマー化触媒、例えば、遷移金属化合物と配位子との錯体化により得られた触媒の活性化は、例えば、遷移金属化合物または遷移金属化合物と配位子との錯体を別の工程で塩基（例えば、ＫＯＨ、ＫＯｔＢｕなど）により処理し、その後、塩基、および塩基の添加により生成した塩を除去することにより、あるいは、遷移金属化合物または遷移金属と配位子との錯体を、アシル化／エピマー化が生じるときにその場で、温和な塩基（例えば、不均一系塩基、特に、ＫＨＣＯ３もしくはＫ２ＣＯ３、または均一系塩基、特に、トリエチルアミンなどの有機アミン）で活性化させることにより行うことができる。遷移金属化合物を還元剤（例えば、Ｈ２、ギ酸およびその塩、Ｚｎ、並びにＮａＢＨ４など）を使用して活性化することも可能である。
【００７０】
特に、式（１）で示される第二アルコールまたはチオールの第２キラル中心が３個の炭素原子と結合している場合、エピマー化触媒は第３、１３族、またはランタニド族の金属をベースとするものが好ましい。アルミニウム、スカンジウムまたはサマリウムをベースとする触媒が特に好ましい。
【００７１】
特に、式（１）中のＲ３がアミン部分、第二アルコール部分または第二チオール部分を表す場合、エピマー化触媒は第８、９または１０族の金属（特に、イリジウム、ルテニウムまたはロジウム）をベースとするものが好ましい。
【００７２】
特に、Ｒ３が、例えば（置換）ベンジルまたは（置換）ベンジリデン部分などのＮ−保護基により保護されているアミン部分を表す場合、あるいは、Ｒ３が保護されていないアルコール部分を表す場合、ＴＤＫＲは、第８、９または１０族の金属（特に、イリジウム、ルテニウムまたはロジウム、好ましくはイリジウム）をベースとするエピマー化触媒を使用することにより有利に実施することができる。
【００７３】
使用するエピマー化触媒の相対的な量は、特に重要というものではなく、コスト、活性、所望する反応速度、生成物の所望する（光学的）純度などを考慮して選択することができる。適用される相対的な量は、エピマー化反応開始時において、アルコールまたはチオールの立体異性体混合物に対して計算すると、一般に、少なくとも０．００１モル％、特には、少なくとも０．０１モル％、少なくとも０．１モル％、少なくとも０．５モル％、または少なくとも１モル％である。適用される相対量は、アルコールまたはチオールの立体異性体混合物に対して、一般に、１００モル％未満、特には、５０モル％未満、２０モル％未満、１０モル％未満、または５モル％未満である。
【００７４】
第８、９または１０族の金属（特に、ルテニウムまたはイリジウム）をベースとする触媒は、エピマー化反応開始時において、アルコールまたはチオールの立体異性体混合物に対して、好ましくは０．０１〜５モル％、より特には０．１〜１モル％の相対量で使用される。
【００７５】
第３、１３族またはランタニドの金属をベースとする触媒、特に、アルミニウム、スカンジウムまたはサマリウムをベースとする触媒は、エピマー化反応開始時において、アルコールまたはチオールの立体異性体混合物に対して、好ましくは０．１〜５０モル％、特には１〜２０モル％、より特には５〜１０モル％の濃度で使用される。
【００７６】
［アシル化触媒］
第二アルコールまたは第二チオールから対応するエステルまたはチオエステルへの立体選択的変換は、公知の立体選択的アシル化触媒、例えば、クリスティン・イー・ギャレット（Ｃｈｒｉｓｔｉｎｅ  Ｅ  Ｇａｒｒｅｔ）ら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１２０、（１９９８）７４７９−７４８３、およびそこで引用されている文献、並びに、Ｇｒｅｇｏｒｙ  Ｃ．Ｆｕ、Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ／１月号、２０００、３−５に記載されているような触媒を用いて行うことができる。
【００７７】
好ましくは、第二アルコールまたは第二チオールから対応するエステルまたはチオエステルへの立体選択的変換は、酵素を用いて行うことが好ましい。
【００７８】
本発明の方法で使用することができる好適な酵素は、例えば、エステルまたはチオエステルからそれぞれ第二アルコールまたはチオールへの加水分解反応において、加水分解活性と高い立体選択性を有し、かつ、有機環境においても活性である公知の酵素である。
【００７９】
好適な酵素は、特に、加水分解酵素（Ｅ．Ｃ．３）の群から特に選択することができ、例えば、リパーゼまたはエステラーゼ活性を有する酵素、あるいは、アシル供与体としてアミドが使用される場合は、アミダーゼ活性と、エステラーゼまたはリパーゼ活性とを有する酵素を使用することができる。
【００８０】
特に好ましい方法においては、立体選択的アシル化触媒は、カルボン酸エステラーゼ（Ｅ．Ｃ．３．１．１）、チオエステルヒドロラーゼ（Ｅ．Ｃ．３．１．２）およびペプチドヒドロラーゼ（Ｅ．Ｃ．３．４）の群から選択される加水分解酵素である。
【００８１】
酵素は、特に、シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、特にシュードモナス・フルオレセンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）、シュードモナス・フラギ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｆｒａｇｉ）；ブルクホルデリア属（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ）、例えばブルクホルデリア・セパシア（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｃｅｐａｃｉａ）；クロモバクテリウム属（Ｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、特にクロモバクテリウム・ビスコスム（Ｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｖｉｓｃｏｓｕｍ）；バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、特にバチルス・サーモカテヌラトゥス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｅｒｍｏｃａｔｅｎｕｌａｔｕｓ）、バチルス・リケニフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）；アルカリゲネス属（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）、特にアルカリゲネス・ファエカリス（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ）；アスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、特にアスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）；カンジダ属（Ｃａｎｄｉｄａ）、特にカンジダ・アンタルクチカ（Ｃａｎｄｉｄａ  ａｎｔａｒｃｔｉｃａ）、カンジダ・ルゴサ（Ｃａｎｄｉｄａ  ｒｕｇｏｓａ）、カンジダ・リポリチカ（Ｃａｎｄｉｄａ  ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）、カンジダ・シリンドラケア（Ｃａｎｄｉｄａ  ｃｙｌｉｎｄｒａｃｅａ）；ゲオトリクム属（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ）、特にゲオトリクム・カンジドゥム（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｃａｎｄｉｄｕｍ）；フミコラ属（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）、特にフミコラ・ラヌギノサ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ  ｌａｎｕｇｉｎｏｓａ）；ペニシリウム属（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）、特にペニシリウム・シクロピウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃｙｃｌｏｐｉｕｍ）、ペニシリウム・ロックフォルティ（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｒｏｑｕｅｆｏｒｔｉｉ）、ペネシリウム・カメンベルティ（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃａｍｅｍｂｅｒｔｉｉ）；リゾムコル属（Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ）、特にリゾムコル・ジャバニクス（Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ  ｊａｖａｎｉｃｕｓ）、リゾムコル・ミエヘイ（Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ  ｍｉｅｈｅｉ）；ムコル属（Ｍｕｃｏｒ）、特にムコル・ジャバニクス（Ｍｕｃｏｒ  ｊａｖａｎｉｃｕｓ）；リゾプス属（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）、特にリゾプス・オリザエ（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）、リゾプス・アルヒズス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ  ａｒｒｈｉｚｕｓ）、リゾプス・デレマール（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ  ｄｅｌｅｍａｒ）、リゾプス・ニベウス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ  ｎｉｖｅｕｓ）、リゾプス・ジャポニクス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ  ｊａｐｏｎｉｃｕｓ）、リゾプス・ジャバニクス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ  ｊａｖａｎｉｃｕｓ）に由来するもの、ブタ膵臓リパーゼ、小麦胚芽リパーゼ、ウシ膵臓リパーゼ、ブタ肝臓エステラーゼであってよい。
【００８２】
シュードモナス・セパシア（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｃｅｐａｃｉａ）、シュードモナス種（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｓｐ．）、ブルクホルデリア・セパシア（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｃｅｐａｃｉａ）、ブタ膵臓、リゾムコル・ミエヘイ（Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ  ｍｉｅｈｅｉ）、フミコラ・ラヌギノサ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ  ｌａｎｕｇｉｎｏｓａ）、カンジダ・ルゴサ（Ｃａｎｄｉｄａ  ｒｕｇｏｓａ）またはカンジダ・アンタルクチカ（Ｃａｎｄｉｄａ  ａｎｔａｒｃｔｉｃａ）由来の酵素を使用することが好ましい。
【００８３】
非常に好ましくは、カンジダ・アンタルクチカ（Ｃａｎｄｉｄａ  Ａｎｔａｒｃｔｉｃａ）リパーゼＢ（ＣＡＬ−Ｂ）、ブルクホルデリア・セパシア（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｃｅｐａｃｉａ）リパーゼおよびサブチリシンの群から選択される酵素である。サブチリシンの中では、サブチリシン・カールスバーグ（Ｃａｒｌｓｂｅｒｇ）が特に好ましい。
【００８４】
例えば、カンジダ・アンタルクチカ（Ｃａｎｄｉｄａ  ａｎｔａｒｃｔｉｃａ）由来の、Ｒ−選択性酵素を使用する場合は、Ｒ−エステルの１つが生成物として得られる。例えば、サブチリシン・カールスバーグなどの、Ｓ−選択性酵素を使用する場合は、Ｓ−エステルの１つが生成する。可能な２つのＲ−またはＳ−エステルのいずれが生成するかは、Ｒ−またはＳ−選択性酵素の選択によって決まる。そのような酵素は、商業的に入手可能であるか、または一般に知られた技術により得ることができる。１つの実施態様では、使用可能な酵素は、由来する細胞から分離される。１つの実施態様では、所望の活性を有する（透過性および／または固定化）細胞、または、そのような活性を有する細胞ホモジネートが使用され得る。酵素は、また、固定化形態でも、または化学的に修飾された形態でも使用することができる。本発明の枠組みでは、遺伝子組み換え微生物由来の酵素を使用することも可能である。
【００８５】
［アシル化の反応条件］
必要に応じて、基質として使用する第二アルコールまたはチオールは、対応するケトンまたはチオンから、還元助剤を使用して別の工程（原理上は、立体選択性である必要はない）で予め生成することができる。還元はエピマー化触媒により触媒されることが好ましい。揮発性アルコール、またはギ酸の揮発性塩、好ましくはそのアンモニウム塩を還元助剤として使用することが好ましい。すなわち、非立体選択的（移動）水素化によるものである。還元剤として水素を使用することも可能である。
【００８６】
立体異性体の混合物は、必要に応じて、対応するケトン／チオンから還元助剤を使用してその場で生成することができる。それぞれアルコールまたはチオールをその場でケトン／チオンから生成させる場合は、水素分子または水素供与体もまた助剤として添加される。助剤として、第二アルコールまたはチオールを反応混合物に加えることが好ましい。それらは、ケトン／チオンのアルコールまたはチオールへの変換を加速するが、それ自身はアシル化触媒により変換されることはない。助剤は、（１）アシル供与体残渣を除去するのと同じ除去方法で反応混合物から除去されず、（２）この助剤はアシル化触媒によってアシル化されず、かつ（３）ケトン／チオンに比べ、レドックス平衡を達成するための十分な還元能力を有するように選択することが好ましい。当然ながら、アルコール／チオール以外の還元剤も助剤として使用することができる。いかなる化合物がこの反応系に助剤として使用するのに適しているかは、当業者であれば、実験的手段によって容易に決定することができる。
【００８７】
上述したように、当業者であれば、周知の一般的知識と、場合により行うルーチンの実験と、本明細書中に開示された情報により、いかなるエピマー化−アシル化触媒の組み合わせがこの特定の系に特に適しているかを決定することができる。
【００８８】
そのような組み合わせで使用する温度は、基本的には、酵素が十分な活性を示す限り、特に重要というものではない。一般に、温度は、０℃以上、特に１５℃以上とし得る。必要な最高温度は酵素に依存する。一般に、そのような最高温度は当該技術分野では知られており、例えば、商業的に入手可能な酵素の場合には製品データシートに示されているか、または、周知の一般的知識と、本明細書中に開示された情報に基づき、ルーチン的に決定することができる。通常、温度は７０℃以下であり、特に６０℃以下または５０℃以下である。特に好熱性加水分解酵素を使用する場合には、温度は比較的高く、例えば４０〜１００℃、あるいは４０〜９０℃の範囲に設定される。
【００８９】
当業者であれば、周知の一般的知識と本明細書中に開示された情報を基にルーチンの実験を行うことにより、エピマー化触媒およびアシル化触媒の特定の組み合わせに対する適切な温度条件を決定することができる。例えば、サブチリシン、特にサブチリシン・カールスバーグ（例えば、アルカラーゼ（Ａｌｃａｌａｓｅ）中）では、温度は２５〜６０℃の範囲が有利であろう。
【００９０】
アルコールまたはチオールの濃度は、特に重要というものではない。反応は、比較的高濃度、例えば、０．４Ｍ以上、特に０．８Ｍ以上の濃度で行うことが適切である。好ましくは、アルコールまたはチオールの濃度は、１Ｍ以上、例えば２Ｍ以上である。
【００９１】
特に、周期率表の第８、９および１０族の金属をベースとするエピマー化触媒を活性化するために、比較的極性の大きいアルコールまたはチオールを不均一系塩基と組み合わせて使用する場合、得られる反応混合物の極性が比較的小さいことが好ましい。極性が小さい場合、不均一系塩基が過剰溶解する結果、副反応が低く抑えられ、場合により、生じることさえない。当業者であれば、ルーチンの実験と、周知の一般的知識と、本明細書中に開示された情報から、この要求を満たす条件を決定することができる。
【００９２】
特に、第３族、第１３族またはランタニドの金属をベースとするエピマー化触媒を使用する場合は、エピマー化過程における水の濃度は低くすることが望ましい。そのような触媒を使用する場合、エピマー化およびアシル化がワンポット法で行われ、アシル化触媒が十分な活性を有するならば、エピマー化は基本的に無水条件下で行うことが好ましい。
【００９３】
特に、水の濃度は、少なくともエピマー化およびアシル化が主に生じる液相に対して４重量％未満とすることができる。ある１つの方法は、実質的に所望のアシル化触媒の活性を維持し、かつ望ましくない加水分解を少なく、または検知できない程度にも維持しながら、２重量％未満の水、特に１重量％以下の水、さらには０．５重量％以下の水、０．２重量％以下の水、０．１重量％以下の水、例えば、約０．０５重量％以下の水、または約０．０１重量％以下の水を含有する相で実施されることが有利である。
【００９４】
アシル化触媒が良好な活性を示すためには、特にアシル化触媒が酵素である場合、酵素にも依るが、微量の水、例えば、液相に対して少なくとも０．００５重量％、または少なくとも０．０１重量％の水を存在させることが望ましい。特に、（微量の）水の存在が好ましいアシル化触媒を使用する場合、アシル化活性を高めるため、水の濃度は、液相に対して少なくとも０．０２重量％、または少なくとも０．０５重量％とすることができる。
【００９５】
反応時間は特に重要というものではない。それは、一般に、触媒および反応物質の相対量と、所望する転化率に依る。
【００９６】
得られたエステル生成物は、その後、エステルの性質に応じた一般的な分離技術の方法、例えば、抽出、蒸留、クロマトグラフィまたは結晶化により、反応混合物から分離することができる。生成物が結晶化によって分離される場合は、さらに、立体異性体濃縮物を得ることができる。必要に応じて、上澄み液（反応に関与するそれぞれアルコールもしくはチオール、エステルもしくはチオエステルおよび／またはケトン／チオンを含有する）を、非立体選択的還元、例えば（移動）水素化過程へ、あるいは、アルコールまたはチオールの立体異性体混合物をそれぞれエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富むエステルまたはチオエステルへ変換する過程へ、リサイクルすることができる。通常、不純物の蓄積を防止するために、リサイクル前に上澄み液から固体を除去し、一般的方法により、パージを行う。必要に応じて、エナンチオマーおよびジアステレオマー過剰率に悪影響を及ぼすことのないよう、最初に上澄み液中のエステルまたはチオエステルを加水分解させることができる。
【００９７】
本発明の方法によれば、エナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富むエステルまたはチオエステルを、場合により行われる（再）結晶化後において、８０％超、好ましくは９０％超、より好ましくは９５％超、より一層好ましくは９８％超、特には９９％超のエナンチオマー過剰率（ｅ．ｅ．）で得ることができる。
【００９８】
本発明の方法によれば、エナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富むエステルまたはチオエステルを、場合により行われる（再）結晶化後において、８０％超、好ましくは９０％超、より好ましくは９５％超、より一層好ましくは９８％超、特に９９％超のジアステレオマー過剰率（ｄ．ｅ．）で得ることができる。
【００９９】
得られたエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富むエステルまたはチオエステルは、そのまま使用するか、または、例えば、対応するアルコールもしくはチオールに変換させることができる。
【０１００】
［エステル／チオエステルの用途］
エステルまたはチオエステルは、必要に応じて対応する第二アルコールまたは第二チオールへ変換（詳細は後述する）した後、例えば、液晶、農薬、食品もしくは飼料用添加物、芳香剤、化粧品成分または医薬品成分の製造に使用することができる。エステルまたはチオエステルをそれぞれアルコールまたはチオールへ変換する適切な方法は、当該技術分野では一般に知られており、加水分解、エステル交換、アミド化およびアルコール分解などが挙げられる。
【０１０１】
［アルコールまたはチオールを調製するための反応条件］
アルコールまたはチオールが所望する生成物ならば、エナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富むエステルまたはチオエステルを、その後、公知の手順により、対応するエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富むアルコールまたはチオールへそれぞれ変換することができる。これは、例えば、酸、塩基または酵素により触媒される変換により行うことができる。立体選択的酵素を使用する場合は、アルコールまたはチオール生成物それぞれのエナンチオマーまたはジアステレオマー過剰率を増加させることができる。本発明の立体選択的アシル化を、酵素を使用して行った場合には、エナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富むエステルまたはチオエステルをエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富むアルコールまたはチオールにそれぞれ変換するのに、その同じ酵素を使用することが非常に好ましい。アルコールまたはチオールを調製することが最終の目的であるならば、アシル供与体およびアシル供与体残渣の物理的または化学的特性が、アシル供与体残渣の除去および反応混合物の処理に適したものであるように、アシル供与体を自由に選択することができる。
【０１０２】
本発明の方法においては、必要に応じて再結晶化および／または立体選択的酵素による加水分解を行った後、エナンチオマー過剰率が、９５％超、好ましくは９８％超、より好ましくは９９％超のエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富むアルコール／チオールを得ることができる。
【０１０３】
本発明の方法においては、必要に応じて再結晶化および／または立体選択的酵素、特に立体選択的加水分解酵素を用いるエステルまたはチオエステルのアルコールまたはチオールそれぞれへの変換を行った後、ジアステレオマー過剰率が、９５％超、好ましくは９８％超、より好ましくは９９％超のエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富むアルコール／チオールを得ることができる。
【０１０４】
［アルコール／チオールの用途］
本発明は、また、得られたエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富むエステルまたはチオエステルからの、エナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに富むそれぞれのアルコールまたはチオールの調製に関する。こうして得られたアルコールまたはチオールは、例えば、液晶、農薬、食品もしくは飼料用添加物、芳香剤、化粧品成分、または医薬品成分の製造に使用することができる。
【０１０５】
本発明を実施例により説明する。
【０１０６】
［実施例］
［概要］
特に明記しない限り、薬品は商業的販売元から入手したものであり、さらに精製は行わずに使用した。タンデムＤＫＲ反応に直接使用した全ての物質は、シュレンクチューブ中、真空下で乾燥させた。
【０１０７】
反応混合物を脱気する場合には、真空中、室温で穏やかに還流させた後、窒素によるパージ（５回）を行った。
【０１０８】
［実施例Ｉ−ｔｒａｎｓ−およびｃｉｓ−２−メチルシクロヘキサノールのラセミ体混合物のタンデムＤＫＲ］
［エピマー化触媒１の調製］
【化３】
2011502471.tif 000004
使用した触媒１（メールワイン・ポンドルフ・バーレイ（Ｍｅｅｒｗｅｉｎ−Ｐｏｎｄｏｒｆｆ−Ｖｅｒｌｅｙ）シリーズから）は、ＡｌＭｅ３および２，２’−ビフェノールから調製した。磁気攪拌子を備えた５０ｍＬのシュレンクチューブ中で、内部標準ヘキサメチルベンゼン（５６．２ｍｇ、０．３４６ｍｍｏｌ）をトルエン（２０ｍＬ）に溶解させ、この溶液の脱気を行った。続いて、トルエン（０．５ｍＬ、１ｍｍｏｌ）および２，２’−ビフェノール（１８６．４ｍｇ、１ｍｍｏｌ）中にＡｌＭｅ３を溶解した２Ｍの溶液を加え、メタンガスを放出させた。反応混合物を７０℃で１５分間加熱し、室温にまで冷却した。
【０１０９】
［タンデムＤＫＲ］
【化４】
2011502471.tif 000005
微量の水を除去するために、ノボザイム（Ｎｏｖｏｚｙｍ）（登録商標）４３５（５ｇ）を、イソプロペニルアセテート（５ｇ、０．０５ｍｍｏｌ）のトルエン（１００ｍＬ）溶液中、７０℃で１時間攪拌した。続いて、固体酵素をろ過により分離し、Ｎ２雰囲気下で乾燥させた。
【０１１０】
ｔｒａｎｓおよびｃｉｓ（ｔｒａｎｓ／ｃｉｓ＝４．０）−２−メチルシクロヘキサノール混合物２（０．５７ｇ、５ｍｍｏｌ）（トランス／シス＝４．０）を触媒溶液（上述のように調製）に溶解し、メタンを発生させた。ガスの発生が終わった後、２−メチルシクロヘキサノン３（５ｍｍｏｌ）およびイソプロピルオクタノエート（２０ｍｍｏｌ、２当量）を加えた。続いて、乾燥させたノボザイム（登録商標）４３５（１００ｍｇ）を加え、７０℃まで徐々に昇温させた。７０℃の一定温度で、圧力を約１８０ｍｂａｒまで６時間かけて徐々に低下させた（イソプロパノールおよびアセトンを除去するため）。反応をさらに１８時間行い、ＣＰ−Ｃｈｉｒａｓｉｌ−Ｄｅｘ  ＣＢカラム（長さ２５ｍ）（２５０ｂａｒ、流量３．８ｍＬ／分）およびＦＩＤ検出器を使用したキラルＧＣによりモニターした。次の温度勾配を使用した：１００℃で１３分、２０℃／分で１００℃から１５０℃へ、１５０℃で８．５分。内部標準としてヘキサメチルベンゼンを使用した。保持時間：（Ｓ）−３（３．２９分）、（Ｒ）−３（３．３７分）、トランス−２（５．２３分）、シス−２（５．９８分）、（Ｓ，Ｓ）−４（２２．２８分）、（Ｒ，Ｒ）−４（２２．４４分）、（Ｒ，Ｓ）−（２２．１５分）、（Ｓ，Ｒ）−４（２２．０２分）、ヘキサメチルベンゼン（１７．４６分）。
【０１１１】
２と３の量は、２の４つの立体異性体および３の２つの立体異性体のピーク面積（内部標準に対して）をタンデムＤＫＲ開始時の値と比較することにより算出した。４の量は、２および３の転化率から算出した。結果を下表に示す。
【０１１２】
【表１】
2011502471.tif 000006
【０１１３】
これらの結果から結論できるように、２の４つのジアステレオマー混合物およびラセミ体３は、基本的に４の１つの立体異性体に高い率（７３％）で変換されている。
【０１１４】
［実施例ＩＩ−ｔｒａｎｓ−Ｎ−ベンジル−２−アミノ−シクロヘキサノール（５）のタンデムＤＫＲ］
【化５】
2011502471.tif 000007
温度計、蒸留ユニットおよび磁気攪拌子を備えた１００ｍＬの３首丸底フラスコ中で、［ＲｕＣｌ２シメン］２（３０．６ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）および（Ｒ，Ｓ）−２−フェニル−２−アミノプロピオンアミド（３２．８ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）をトルエン（２０ｍＬ）に溶解した。混合物をＮ２雰囲気下、７０℃で１５分間加熱し、部分的に溶解した黄色の錯体を得た。続いて、ラセミ体ｔｒａｎｓ−Ｎ−ベンジル−２−アミノ−シクロヘキサノール（５）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｃｏｍｍ．，３１（２１），２００１，３２９５−３３０２により調製；２．０５ｇ、１０ｍｍｏｌ）を加え、錯体を完全に溶解した。
【０１１５】
その後、イソプロペニルアセテート（２．０ｇ、２０ｍｍｏｌ）、ノボザイム（登録商標）４３５（１５０ｍｇ）および乾燥Ｋ２ＣＯ３（１ｇ）を加えた。ＧＣ分析用にヘキサメチルベンゼン（８０ｍｇ、０．４９４ｍｍｏｌ）を内部標準として加えた。反応混合物を脱気し、大気圧、７０℃で２時間加熱した。この条件下では、イソプロペニルアセテートによるアセチル化で生成したアセトンが反応混合物中に蓄積された。続いて、圧力を約２６０ｍｂａｒまで徐々に減圧した（アセトンを除去するため）。２６０ｍｂａｒ、７０℃で反応を２６時間継続し、サンプリングした。
【０１１６】
転化率を、ＣＰ−Ｓｉｌ５−ＣＢコーティング（ＤＦ１．２μｍ）を施したＷＣＯＴヒューズドシリカカラム（長さ２５ｍ、内径０．３２ｍｍ）およびＦＩＤ検出器を使用したＧＣにより測定した。次の温度勾配を使用した：５０℃で３分、１５℃／分で５０℃から２５０℃へ、２５０℃で１５分。内部標準としてヘキサメチルベンゼンを使用した。保持時間は次のようであった：ヘキサメチルベンゼン（１４．２６分）、５（１６．９５分）、ｃｉｓ−６（１７．６８分）、ｔｒａｎｓ−６（１７．８５分）、７（２０．７４分）、８（２２．１８分）。
【０１１７】
キラルＧＣにより、ｔｒａｎｓ−６のｅ．ｅ．を測定した。この目的のために、反応混合物のアリコット約２０μＬをＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）で希釈し、コーティングしたＣＰ−Ｃｈｉｒａｓｉｌ−Ｄｅｘ  ＣＢカラム（長さ２５ｍ、ＤＦ＝０．２５）に注入した。次の温度勾配を使用した：１２０℃で３０分、２０℃／分で１２０℃から２００℃へ、２００℃で６分。保持時間は次のようであった：（Ｓ，Ｓ）−６  ３１．６分、（Ｒ，Ｒ）−６  ３１．９６分。
【０１１８】
出発物質の９１％が主に対応する生成物（１Ｒ，２Ｒ）−６に変換されたことが観察された（ｅ．ｅ．＞９９％）。また、７および８も生成した。
【０１１９】
生成物をＳｉＯ２でろ過し、固体分をエチルアセテート（２５ｍＬ）で洗浄し、ろ液はまとめて真空下で濃縮し、粗生成物（２．３４ｇ）を得た。
【０１２０】
［実施例ＩＩＩ−ｔｒａｎｓ−Ｎ−ベンジル−２−アミノ−シクロヘキサノール（５）のタンデムＤＫＲ］
【化６】
2011502471.tif 000008
温度計、蒸留ユニットおよび磁気攪拌子を備えた５０ｍＬの３首丸底フラスコ中で、［ＲｕＣｌ２シメン］２（１５．３ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）および（Ｒ，Ｓ）−２−フェニル−２−アミノプロピオンアミド（１６．４ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）をトルエン（２０ｍＬ）に溶解した。混合物を７０℃で１５分間加熱し、部分的に溶解した黄色の錯体沈殿物を得た。イソプロパノール（３ｍＬ）を加え、錯体を完全に溶解し、得られた均一な黄色溶液を７０℃で３０分間攪拌した。続いて、ヘキサメチルベンゼン（８０ｍｇ；ＧＣ用内部標準）およびラセミ体ｔｒａｎｓ−Ｎ−ベンジル−２−アミノシクロヘキサノール（５）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  ｃｏｍｍ．，３１（２１），２００１，３２９５−３３０２により調製；１．０３ｇ、５ｍｍｏｌ）を反応混合物に溶解させ、７０℃、減圧下でトルエン／イソプロパノールを完全に蒸留した。得られた残渣をトルエン（１０ｍＬ）に再溶解させ、サンプルはＧＣにより分析した。
【０１２１】
続いて、イソプロペニルアセテート（１０ｍｍｏｌ）、ノボザイム（登録商標）４３５（４０ｍｇ）およびＫ２ＣＯ３（０．５ｇ、３．６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を脱気し、圧力を２６５ｍｂａｒまで徐々に低下させた。反応混合物を７０℃、２６５ｍｂａｒで１８時間攪拌した。その後、ノボザイム（登録商標）４３５（２０ｍｇ）を新たに加え、反応混合物を７０℃、２６５ｍｂａｒでさらに４８時間攪拌した。得られた最終混合物をＧＣにより分析した。下記の表を参照されたい。
【０１２２】
【表２】
2011502471.tif 000009
【０１２３】
反応混合物をＳｉＯ２でろ過し、固体分をＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で洗浄した。ろ液はまとめて真空下で濃縮し、残渣を６Ｎ−ＨＣｌ水溶液（５０ｍＬ）中、９０℃で２４時間の加水分解に供した。これにより、それぞれ８４％および６２％のｅ．ｅ．のｔｒａｎｓ−およびｃｉｓ−５の混合物を得た。
【０１２４】
５および７のｅ．ｅ．は、Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤカラム（２５０×４．６ｍｍ）を使用し、ｎ−ヘプタン／メタノール／エタノール／ジエチルアミン（９０／３／２／０．０５、ｖ／ｖ／ｖ／ｖ）を溶離液とし、カラム温度５０℃、流量０．８ｍＬ／分で、キラルＨＰＬＣにより測定した。検出はＵＶ（２１０ｎｍ）によって行った。注入量は５μＬ（サンプルを溶離液に溶解した溶液）とした。保持時間：（１Ｒ，２Ｓ）−５および（１Ｓ，２Ｒ）−５（いずれもｃｉｓ−５エナンチオマー）７．２７および８．０４分；（１Ｓ，２Ｓ）−５および（１Ｒ，２Ｒ）−５（いずれもｔｒａｎｓ−５エナンチオマー）９．０９および９．８０分；（１Ｓ，２Ｓ）−７および（１Ｒ，２Ｒ）−７（いずれもｔｒａｎｓ−７エナンチオマー）１７．８４および２２．９７分。
【０１２５】
［実施例ＩＶ−ｔｒａｎｓ−Ｎ−ベンジル−２−アミノ−シクロヘキサノール（５）のタンデムＤＫＲ
【化７】
2011502471.tif 000010
温度計、蒸留ユニットおよび磁気攪拌子を備えた５０ｍＬの３首丸底フラスコ中で、［ＲｕＣｌ２シメン］２（１５．３ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）、（Ｒ，Ｓ）−２−フェニル−２−アミノプロピオンアミド（１６．４ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）およびヘキサメチルベンゼン（８０ｍｇ；内部標準）をトルエン（１７ｍＬ）およびイソプロパノール（３ｍＬ）に溶解した。混合物を窒素雰囲気下、７０℃で１５分間加熱し、透明な黄色溶液を得た。続いて、ラセミ体ｔｒａｎｓ−Ｎ−ベンジル−２−アミノシクロヘキサノール（５）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  ｃｏｍｍ．，３１（２１），２００１，３２９５−３３０２により調製；１．０３ｇ、５ｍｍｏｌ）を反応混合物に溶解させ、７０℃、減圧下でトルエン／イソプロパノールを完全に蒸留した。得られた残渣をトルエン（１０ｍＬ）に再溶解させ、サンプルをＧＣにより分析した。
【０１２６】
その後、イソプロペニルアセテート（１０ｍｍｏｌ）、ノボザイム（登録商標）４３５（５０ｍｇ）およびＫ２ＣＯ３（０．５ｇ、３．６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を脱気し、７０℃、大気圧で３時間攪拌した。この間に、色は黄色からオレンジ色に変化した。蓄積したアセトンを、圧力を徐々に低下（約３００ｍｂａｒに）させて除去し、これにより色は深赤色に変化した。反応混合物を７０℃、３００ｍｂａｒで５時間攪拌し、追加分のイソプロペニルアセテート（１０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を７０℃、３００ｍｂａｒでさらに１８時間攪拌し、ＧＣにより分析した（実施例ＩＩで記載したように）。結果を下表に示す。５および７のｅ．ｅ．はキラルＨＰＬＣにより測定した（実施例ＩＩＩで記載したように）。
【０１２７】
【表３】
2011502471.tif 000011
【０１２８】
［実施例Ｖ−ｔｒａｎｓ−Ｎ−ベンジリデン−２−アミノ−シクロヘキサノール（９）のタンデムＤＫＲ］
【化８】
2011502471.tif 000012
【０１２９】
［タンデムＤＫＲ］
温度計、蒸留ユニットおよび磁気攪拌子を備えた２５０ｍＬの３首丸底フラスコ中で、［ＩｒＣｐ＊Ｃｌ２］２（ジクロロ（ペンタメチルシクロペンタジエニル）イリジウム（ＩＩＩ）ダイマー；２００ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）および２−メチル−２−アミノプロピオンアミド（６２ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（５０ｍＬ）に溶解した。混合物を７０℃で１５分間加熱した後、Ｋ２ＣＯ３（５．４ｇ、０．０３９ｍｏｌ）を加え、７０℃でさらに１５分間加熱した。その間に色が黄色から赤色に変化した。減圧下でアセトニトリルを完全に蒸留除去し、残渣にトルエン（６０ｍＬ）を加え、不均一混合物を得た。続いて、標準物質としてヘキサメチルベンゼン（０．４ｇ）を加えた。減圧下、７０℃でトルエン（１０ｍＬ）を部分的に蒸留除去し、微量のアセトニトリルを除去した。得られた溶液にラセミ体ｔｒａｎｓ−９（０．１ｍｏｌ）を溶解させ、混合物のサンプルをＧＣにより分析した。
【０１３０】
反応混合物を７０℃で２時間加熱し（エピマー化）、その後、イソプロペニルアセテート（２０ｇ、０．２ｍｏｌ）およびノボザイム（登録商標）４３５（２５０ｍｇ）を加えた。生成したアセトンを除去するために、温度を７０℃に維持しながら１６５ｍｂａｒまで徐々に減圧した。５、２３および２６時間後、ノボザイム（登録商標）４３５を新たに、それぞれ２５０ｍｇ、１００ｍｇおよび１００ｍｇ部加えた。２９時間後、追加分のイソプロペニルアセテート（１０ｇ、０．１ｍｏｌ）を加えた。ＧＣおよびＨＰＬＣ（下記参照）により反応過程をモニターした。結果を下表に示す。
【０１３１】
【表４】
2011502471.tif 000013
【０１３２】
［ＧＣおよびＨＰＬＣ分析］
実施例ＩＩで記載したＧＣ条件で、内部標準にヘキサメチルベンゼンを使用し、ＧＣにより、反応過程をモニターした。保持時間：ヘキサメチルベンゼン（１４．２２分）、ｃｉｓ−９（１６．６９分）、ｔｒａｎｓ−９（１６．７９分）、ｃｉｓ−１０（１７．４４分）、ｔｒａｎｓ−１０（１７．５９分）。
【０１３３】
ｃｉｓ−およびｔｒａｎｓ−９のｅ．ｅ．は、３本のカラム：２本の５０×４．６ｍｍ内径Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ  ＯＤカラム、および１本の２５０×４．６ｍｍ内径Ｌｉｃｈｒｏｓｐｈｅｒｅ  Ｄｉｏｌカラムを直列に使用したキラルＨＰＬＣにより測定した。溶離液はｎ−ヘプタン／２−プロパノール９０／１０（ｖ／ｖ）、カラム温度は４０℃、流量は１．０ｍＬ／分とした。検出にはＵＶ（２１０ｎｍ）を使用した。サンプルは、２０μｌの反応混合物を溶離液（１ｍＬ）で希釈して調製した。注入量は５μＬとした。保持時間は次のようであった：（１Ｒ，２Ｓ）−９および（１Ｓ，２Ｒ）−９（いずれもｃｉｓ−９エナンチオマー）１２．２および１５．１分；（１Ｒ，２Ｒ）−９および（１Ｓ，２Ｓ）−９（いずれもｔｒａｎｓ−９エナンチオマー）で１３．３および１５．３分。
【０１３４】
分離した（Ｒ，Ｒ）−２−アミノシクロヘキサノールのＨＣｌ塩のｅ．ｅ．を、同じキラルＨＰＬＣ法により測定したが、次のサンプル調製法を使用した：固体生成物（７６ｍｇ）をアセトニトリル（２ｍＬ）、Ｋ２ＣＯ３（２７６ｍｇ）およびベンズアルデヒド（４２ｍｇ）の混合物中、７０℃で１５分間加熱した。得られた溶液のうち２０μＬを溶離液（１ｍＬ）に溶解させた。
【０１３５】
［生成物の分離および脱保護］
Ｋ２ＣＯ３および酵素をろ過により反応混合物から除去し、水（２０ｍＬ）および濃ＨＣｌ水溶液（３７重量％）（１０ｍＬ）をろ液に加え、混合物を７０℃で数時間加熱した。加水分解反応をＧＣによりモニターし、中間体のＯ−アセチル−２−アミノシクロヘキサノールがすべて最終生成物の２−アミノシクロヘキサノールに変換されるまで実施した。水性層をトルエン（３×５０ｍＬ）で洗浄し、真空下で濃縮して茶色の粘凋な油性残渣（１５．５ｇ）を得た。イソプロパノール（５０ｍＬ）を使用し、共沸蒸留により微量の水を除去し、茶色の固体（１３．５ｇ）を得た。これをアセトニトリル（１００ｍＬ）中で攪拌して白色乃至灰色の固体残渣を得た。固体をろ過により分離し、アセトニトリル（３×２５ｍＬ）で洗浄し、Ｎ２下で乾燥させた。この結果、オフホワイト色の固体として、所望の（Ｒ，Ｒ）−２−アミノシクロヘキサノールのＨＣｌ塩（１０．４２ｇ、０．０６９ｍｏｌ）が得られ、これはラセミ体ｔｒａｎｓ−９に対して６９％の収率に相当した。ｅ．ｅ．は＞９９％であった。
【０１３６】
［実施例ＶＩ−ｔｒａｎｓ−Ｎ−ベンジリデン−２−アミノ−シクロヘキサノール（９）のタンデムＤＫＲ］
【化９】
2011502471.tif 000014
【０１３７】
［タンデムＤＫＲ］
温度計、蒸留ユニットおよび磁気攪拌子を備えた１００ｍＬの丸底フラスコ中で、［ＩｒＣｐ＊Ｃｌ２］２（１９．９ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）、２−メチル−２−アミノプロピオンアミド（７．１ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）をイソプロパノール（５ｍＬ）およびトルエン（１０ｍＬ）に溶解し、この溶液を７０℃で１５分間加熱した。揮発分を減圧下で除去して黄色の固体を得、これにヘキサメチルベンゼン（内部標準；８０ｍｇ）、トルエン（１０ｍＬ）、イソプロペニルアセテート（２０ｍｍｏｌ）、ラセミ体ｔｒａｎｓ−９（５ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（０．５ｇ、０．００３６ｍｏｌ）およびリパーゼＡＫ（２００ｍｇ）を室温で加えた。反応混合物を脱気し、大気圧下、７０℃で１時間加熱した後、圧力を２７０ｍｂａｒまで連続的に減じた。２２時間後、リパーゼＡＫの別の１部（１００ｍｇ）を反応混合物に加え、反応を８時間継続した。
【０１３８】
反応混合物を室温まで冷却し、ＳｉＯ２でろ過して固体を除去し、トルエン（３×１０ｍＬ）で洗浄した。黄色のろ液をまとめて真空下で濃縮して残渣（１．１５ｇ）を得、それをメタノール（１０ｍＬ）および１Ｎ−ＨＣｌ水溶液（１０ｍＬ）に再溶解させて、１７時間の還流を行った。真空下で濃縮した後、残渣を水（１０ｍＬ）に再溶解させ、トルエン（２×１０ｍＬ）で洗浄した。水性の層を真空下で濃縮し、微量の水をイソプロパノール（２×１０ｍＬ）との共沸蒸留により除去した。得られた残渣をアセトニトリル（１０ｍＬ）中で攪拌し、結晶化させた。ろ過により固体を分離し、窒素中で乾燥させて僅かに黄色味を帯びた（Ｒ，Ｒ）−２−アミノ−シクロヘキサノール生成物の結晶（０．５１ｇ）を得た。これはラセミ体ｔｒａｎｓ−９に対して６７％の収率に相当した。ｅ．ｅ．は＞９９％であり、ｔｒａｎｓ／ｓｉｓ比は１７であった。
【０１３９】
反応は、実施例Ｖに従ってキラルＨＰＬＣおよびＧＣによりモニターした。サンプル調製およびそれに続く分離生成物のｅ．ｅ．の測定も、実施例Ｖと同様に行った。結果を下表に示す。
【０１４０】
【表５】
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【国際調査報告】
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