(57)【要約】本発明は、両親媒性スペーサーまたは両親媒性ポリマー上に治療薬を含む抗酸化、神経保護、および抗腫瘍ナノ粒子に関する。両親媒性スペーサーまたは両親媒性ポリマー上に治療薬を含む抗酸化、神経保護、および抗腫瘍ナノ粒子を生成するための、カンプトテシンの抗酸化剤誘導体およびカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体、ＮＳＡＩＤおよびスタチン系薬剤の合成、自然乳化、またはそのナノ沈殿（ｎａｎｏｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ）の方法、ならびに癌疾患の治療におけるその使用方法も提供する。本発明のさらなる態様は、他の医薬品および／または薬物の送達デバイスを調製するためのこれらの神経保護および抗腫瘍ナノ粒子の使用である。【選択図】図４ｂ
2014523924.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
トコフェロールと、
親水性スペーサー、疎水性スペーサー、両親媒性スペーサー、もしくは両親媒性ポリマーに抱合される治療薬または造影剤と、
を含む、ナノ球体。
【請求項２】
癌の治療を必要とする対象において、癌を治療する方法であって、
請求項１に記載のナノ球体を提供することと、
前記癌を治療するために、前記対象に治療有効量の前記ナノ球体を投与することと、
を含む、方法。
【請求項３】
癌の検出または診断を必要とする対象において、癌を検出する、または診断する方法であって、
請求項１に記載のナノ球体を提供することと、
前記対象に有効量の前記ナノ球体を投与することと、
前記癌を検出する、または診断するために、前記対象を撮像することと、
を含む、方法。
【請求項４】
式Ａ−Ｉａ
【化２０１】
2014523924.tif 000191
を有する抗酸化剤α−リポ酸含有疎水性化合物をさらに含み、
式中、Ｘが、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖からなる群から選択され、任意に、ヘテロ原子を含有し得、Ｙが、分枝状および非分枝状のアルキル基、分枝状および非分枝状のアルケニル基、分枝状および非分枝状のアルキニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルケニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキニル基、アリール基、環式脂肪族基、環式芳香族基、複素環式基、および芳香族複素環式基からなる群から選択され、ｎが、少なくとも１の整数である、請求項１に記載のナノ球体。
【請求項５】
式Ｉａにおけるジチオラン部分が、α−リポ酸であり、式Ａ−ＩＩａ
【化２０２】
2014523924.tif 000192
によって表される、請求項４に記載のナノ球体。
【請求項６】
癌の治療を必要とする対象において、癌を治療する方法であって、
請求項４に記載のナノ球体を提供することと、
前記癌を治療するために、前記対象に治療有効量の前記ナノ球体を投与することと、
を含む、方法。
【請求項７】
癌の検出または診断を必要とする対象において、癌を検出する、または診断する方法であって、
請求項４に記載のナノ球体を提供することと、
前記対象に有効量の前記ナノ球体を投与することと、
前記癌を検出する、または診断するために、前記対象を撮像することと、
を含む、方法。
【請求項８】
式Ｂ−Ｉ
【化２０３】
2014523924.tif 000193
を有する疎水性非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）誘導体をさらに含み、式中、Ａが、分枝状および非分枝状のアルキル基、分枝状および非分枝状のアルケニル基、分枝状および非分枝状のアルキニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルケニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキニル基、アリール基、環式脂肪族基、環式芳香族基、複素環式基、および芳香族複素環式基からなる群から選択され、ｎが、少なくとも２の整数である、請求項１に記載のナノ球体。
【請求項９】
癌の治療を必要とする対象において、癌を治療する方法であって、
請求項８に記載のナノ球体を提供することと、
前記癌を治療するために、前記対象に治療有効量の前記ナノ球体を投与することと、
を含む、方法。
【請求項１０】
癌の検出または診断を必要とする対象において、癌を検出する、または診断する方法であって、
請求項８に記載のナノ球体を提供することと、
前記対象に有効量の前記ナノ球体を投与することと、
前記癌を検出する、または診断するために、前記対象を撮像することと、
を含む、方法。
【請求項１１】
式Ｂ−ＩＩ
【化２０４】
2014523924.tif 000194
を有する非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）の疎水性抗酸化剤および抗炎症誘導体をさらに含み、式中、Ｘ が、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖からなる群から選択され、任意に、ヘテロ原子を含有し得、Ａが、分枝状および非分枝状のアルキル基、分枝状および非分枝状のアルケニル基、分枝状および非分枝状のアルキニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキル、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルケニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキニル基、アリール基、環式脂肪族基、環式芳香族基、複素環式基、および芳香族複素環式基からなる群から選択され、ｎが、少なくとも１の整数であり、ｍが、少なくとも１の整数である、請求項１に記載のナノ球体。
【請求項１２】
ＮＳＡＩＤの前記疎水性抗酸化剤および抗炎症誘導体が、式Ｂ−ＩＩＩ
【化２０５】
2014523924.tif 000195
であり、式中、ＡＬＡが、α−リポ酸を表す、請求項１１に記載のナノ球体。
【請求項１３】
癌の治療を必要とする対象において、癌を治療する方法であって、
請求項１１に記載のナノ球体を提供することと、
前記癌を治療するために、前記対象に治療有効量の前記ナノ球体を投与することと、
を含む、方法。
【請求項１４】
癌の検出、診断を必要とする対象において、癌を検出、診断する方法であって、
請求項１１に記載のナノ球体を提供することと、
前記対象に有効量の前記ナノ球体を投与することと、
前記癌を検出する、または診断するために、前記対象を撮像することと、
を含む、方法。
【請求項１５】
式Ｄ−Ｉ、Ｄ−ＩＩ、Ｄ−ＩＩＩ、Ｄ−ＩＶ、Ｄ−Ｖ、またはＤ−ＶＩを有するスタチンラクトン誘導体をさらに含み、
【化２０６】
2014523924.tif 000196
式中、ＡおよびＢが、独立して、―ＯＣ（Ｏ）―、―ＯＣ（Ｏ）Ｏ―、および―ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）―からなる群から選択され、式中、Ｒが、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり、任意に、ヘテロ原子を含み得、ＸおよびＹが、リンカーであり、それぞれ、独立して、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖を含み、任意に、ヘテロ原子を含み得、ＳＬが、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなる群からのスタチンラクトンから選択され、
【化２０７】
2014523924.tif 000197
式中、Ａが、―ＯＣ（Ｏ）―、―ＯＣ（Ｏ）Ｏ―、および―ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）―からなる群から選択され、式中、Ｒが、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり、任意に、ヘテロ原子を含み得、Ｐが、―ＯＣ（Ｏ）―および―Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）―からなる群から選択され、式中、Ｒが、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり、任意に、ヘテロ原子を含み得、Ｘが、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖を含むリンカーであり、任意に、ヘテロ原子を含み得、ＳＬが、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなる群からのスタチンラクトンから選択され、
【化２０８】
2014523924.tif 000198
式中、Ｌ１が、ジオール上の２つのエステル化が可能な遊離ヒドロキシル基のエステル化によって形成される部分であり、ＳＬが、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなる群からのスタチンラクトンから選択され、
【化２０９】
2014523924.tif 000199
式中、Ｌ２が、前記スタチンラクトン誘導体を生成するプロセスにおいて、前記リンカーとしてジアミンを使用することによって形成される部分であり、ＳＬが、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなる群からのスタチンラクトンから選択され、
【化２１０】
2014523924.tif 000200
式中、Ｌ３が、前記スタチンラクトン誘導体を生成するプロセスにおいて、リンカーとしてアミノアルコールを使用することによって形成される部分であり得、ＳＬが、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなる群からのスタチンラクトンから選択され、
【化２１１】
2014523924.tif 000201
式中、ＡおよびＰが、独立して、―ＯＣ（Ｏ）―、―ＯＣ（Ｏ）Ｏ―、および―ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）―からなる群から選択され、式中、Ｒが、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり、任意に、ヘテロ原子を含み得、Ｘが、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖を含むリンカーであり、任意に、ヘテロ原子を含み得、ＳＬ１およびＳＬ２が、独立して、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなる群からのスタチンラクトンから選択される、請求項１に記載のナノ球体。
【請求項１６】
前記スタチンラクトン誘導体が、
化合物Ｄ−４７
【化２１２】
2014523924.tif 000202
化合物Ｄ−４８
【化２１３】
2014523924.tif 000203
化合物Ｄ−４９
【化２１４】
2014523924.tif 000204
化合物Ｄ−５０
【化２１５】
2014523924.tif 000205
化合物Ｄ−５１
【化２１６】
2014523924.tif 000206
化合物Ｄ−５２
【化２１７】
2014523924.tif 000207
化合物Ｄ−５３
【化２１８】
2014523924.tif 000208
化合物Ｄ−５４
【化２１９】
2014523924.tif 000209
化合物Ｄ−５５
【化２２０】
2014523924.tif 000210
化合物Ｄ−５６
【化２２１】
2014523924.tif 000211
化合物Ｄ−５７
【化２２２】
2014523924.tif 000212
化合物Ｄ−５８
【化２２３】
2014523924.tif 000213
化合物Ｄ−５９
【化２２４】
2014523924.tif 000214
化合物Ｄ−６０
【化２２５】
2014523924.tif 000215
化合物Ｄ−６１
【化２２６】
2014523924.tif 000216
化合物Ｄ−６２
【化２２７】
2014523924.tif 000217
化合物Ｄ−６３
【化２２８】
2014523924.tif 000218
化合物Ｄ−６４
【化２２９】
2014523924.tif 000219
化合物Ｄ−６５
【化２３０】
2014523924.tif 000220
化合物Ｄ−６６
【化２３１】
2014523924.tif 000221
化合物Ｄ−６７
【化２３２】
2014523924.tif 000222
化合物Ｄ−６８
【化２３３】
2014523924.tif 000223
化合物Ｄ−６９
【化２３４】
2014523924.tif 000224
化合物Ｄ−７０
【化２３５】
2014523924.tif 000225
化合物Ｄ−１３
【化２３６】
2014523924.tif 000226
化合物Ｄ−１４
【化２３７】
2014523924.tif 000227
化合物Ｄ−１５
【化２３８】
2014523924.tif 000228
化合物Ｄ−１６
【化２３９】
2014523924.tif 000229
化合物Ｄ−１７
【化２４０】
2014523924.tif 000230
化合物Ｄ−１８
【化２４１】
2014523924.tif 000231
化合物Ｄ−１９
【化２４２】
2014523924.tif 000232
化合物Ｄ−２０
【化２４３】
2014523924.tif 000233
化合物Ｄ−２１
【化２４４】
2014523924.tif 000234
化合物Ｄ−２２
【化２４５】
2014523924.tif 000235
化合物Ｄ−２３
【化２４６】
2014523924.tif 000236
化合物Ｄ−２４
【化２４７】
2014523924.tif 000237
化合物Ｄ−２５
【化２４８】
2014523924.tif 000238
化合物Ｄ−２６
【化２４９】
2014523924.tif 000239
化合物Ｄ−２７
【化２５０】
2014523924.tif 000240
化合物Ｄ−２８
【化２５１】
2014523924.tif 000241
化合物Ｄ−２９
【化２５２】
2014523924.tif 000242
化合物Ｄ−３０
【化２５３】
2014523924.tif 000243
化合物Ｄ−３１
【化２５４】
2014523924.tif 000244
化合物Ｄ−３２
【化２５５】
2014523924.tif 000245
からなる群から選択される、請求項１５に記載のナノ球体。
【請求項１７】
コレステロールレベルの低下、心臓血管疾患の可能性の低下、または心臓血管疾患の治療を必要とする対象において、それらを行う方法であって、
請求項１５に記載のナノ球体を提供することと、
前記コレステロールレベルを低下させる、前記心臓血管疾患の可能性を低下させる、または心臓血管疾患を治療するために、前記対象に治療有効量の前記ナノ球体を投与することと、
を含む、方法。
【請求項１８】
癌の検出または診断を必要とする対象において、癌を検出する、または診断する方法であって、
請求項１５に記載のナノ球体を提供することと、
前記対象に有効量の前記ナノ球体を投与することと、
前記癌を検出する、または診断するために、前記対象を撮像することと、
を含む、方法。
【請求項１９】
カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体をさらに含む、請求項１に記載のナノ球体。
【請求項２０】
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、
【化２５６】
2014523924.tif 000246
であり、式中、ＡおよびＢが、独立して、―ＯＣ（Ｏ）―、―ＯＣ（Ｏ）Ｏ―、および―ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）―からなる群から選択され、式中、Ｒが、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり、
ＸおよびＹが、リンカーであり、それぞれ、独立して、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖を含み、任意に、ヘテロ原子を含み得、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が、それぞれ、独立して、水素、アルキル、アリール、脂環式、およびアラルキルからなる群から選択され、任意に、それぞれ、ヘテロ原子を含有し得る、請求項１９に記載のナノ球体。
【請求項２１】
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、
【化２５７】
2014523924.tif 000247
であり、式中、Ｌ１が、ジオール上の２つのエステル化が可能な遊離ヒドロキシル基のエステル化によって形成される部分である、請求項２０に記載のナノ球体。
【請求項２２】
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、
式Ｃ−Ｖ
【化２５８】
2014523924.tif 000248
式Ｃ−ＶＩ
【化２５９】
2014523924.tif 000249
式Ｃ−ＶＩＩ
【化２６０】
2014523924.tif 000250
式Ｃ−ＶＩＩＩ
【化２６１】
2014523924.tif 000251
式Ｃ−ＩＸ
【化２６２】
2014523924.tif 000252
式Ｃ−Ｘ
【化２６３】
2014523924.tif 000253
式Ｃ−ＸＬＶＩ
【化２６４】
2014523924.tif 000254
からなる群から選択される、請求項２１に記載のナノ球体。
【請求項２３】
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、
【化２６５】
2014523924.tif 000255
であり、式中、Ａが、独立して、―ＯＣ（Ｏ）―、―ＯＣ（Ｏ）Ｏ―、および―ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）―からなる群から選択され、式中、Ｒが、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり、
Ｐが、―ＯＣ（Ｏ）―および―Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）―からなる群から選択され、式中、Ｒが、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり、
Ｘが、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖を含むリンカーであり、任意に、ヘテロ原子を含み得、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が、それぞれ、独立して、水素、アルキル、アリール、脂環式、およびアラルキルからなる群から選択され、任意に、それぞれ、ヘテロ原子を含有し得る、請求項２０に記載のナノ球体。
【請求項２４】
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、式Ｃ−ＸＩ
【化２６６】
2014523924.tif 000256
であり、式中、Ｌ２が、前記化合物を生成するプロセスにおいて、前記リンカーとしてジアミンを使用することによって形成される部分である、請求項２３に記載のナノ球体。
【請求項２５】
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、
式Ｃ−ＸＩＩ
【化２６７】
2014523924.tif 000257
式Ｃ−ＸＩＩＩ
【化２６８】
2014523924.tif 000258
式Ｃ−ＸＩＶ
【化２６９】
2014523924.tif 000259
式Ｃ−ＸＶ
【化２７０】
2014523924.tif 000260
式Ｃ−ＸＶＩ
【化２７１】
2014523924.tif 000261
式Ｃ−ＸＶＩＩ
【化２７２】
2014523924.tif 000262
式Ｃ−ＸＬＶＩＩ
【化２７３】
2014523924.tif 000263
からなる群から選択される、請求項２３に記載のナノ球体。
【請求項２６】
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、式Ｃ−ＸＶＩＩＩ
【化２７４】
2014523924.tif 000264
であり、式中、Ｌ３が、前記化合物を生成するプロセスにおいて、前記リンカーとしてアミノアルコールを使用することによって形成される部分である、請求項２３に記載のナノ球体。
【請求項２７】
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、
式Ｃ−ＸＩＸ
【化２７５】
2014523924.tif 000265
式Ｃ−ＸＸ
【化２７６】
2014523924.tif 000266
式Ｃ−ＸＸＩ
【化２７７】
2014523924.tif 000267
式Ｃ−ＸＸＩＩ
【化２７８】
2014523924.tif 000268
式Ｃ−ＸＸＩＩＩ
【化２７９】
2014523924.tif 000269
式Ｃ−ＸＸＩＶ
【化２８０】
2014523924.tif 000270
式Ｃ−ＸＬＶＩＩＩ
【化２８１】
2014523924.tif 000271
からなる群から選択される、請求項２６に記載のナノ球体。
【請求項２８】
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、α−リポ酸と、カンプトテシンまたは無水コハク酸もしくは無水グルタル酸と反応させることによって修飾されるカンプトテシン類似体との抱合により生成される化合物であり、前記カンプトテシン類似体が、式Ｃ−Ｉ
【化２８２】
2014523924.tif 000272
によって表され、式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が、それぞれ、独立して、水素、アルキル、アリール、脂環式、およびアラルキルからなる群から選択され、任意に、ヘテロ原子を含有し得る、請求項１９に記載のナノ球体。
【請求項２９】
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、
式Ｃ−ＸＸＶ
【化２８３】
2014523924.tif 000273
式Ｃ−ＸＸＶＩ
【化２８４】
2014523924.tif 000274
式Ｃ−ＸＸＶＩＩ
【化２８５】
2014523924.tif 000275
式Ｃ−ＸＸＶＩＩＩ
【化２８６】
2014523924.tif 000276
式Ｃ−ＸＸＩＸ
【化２８７】
2014523924.tif 000277
式Ｃ−ＸＸＸ
【化２８８】
2014523924.tif 000278
式Ｃ−ＸＸＸＩ
【化２８９】
2014523924.tif 000279
式Ｃ−ＸＸＸＩＩ
【化２９０】
2014523924.tif 000280
式Ｃ−ＸＸＸＩＩＩ
【化２９１】
2014523924.tif 000281
式Ｃ−ＸＸＸＩＶ
【化２９２】
2014523924.tif 000282
式Ｃ−ＸＸＸＶ
【化２９３】
2014523924.tif 000283
式Ｃ−ＸＸＶＩ
【化２９４】
2014523924.tif 000284
式Ｃ−ＸＸＸＶＩＩ
【化２９５】
2014523924.tif 000285
式Ｃ−ＸＸＸＶＩＩＩ
【化２９６】
2014523924.tif 000286
式Ｃ−ＸＸＸＩＸ
【化２９７】
2014523924.tif 000287
式Ｃ−ＸＬ
【化２９８】
2014523924.tif 000288
式Ｃ−ＸＬＩ
【化２９９】
2014523924.tif 000289
式Ｃ−ＸＬＩＩ
【化３００】
2014523924.tif 000290
式Ｃ−ＸＬＩＩＩ
【化３０１】
2014523924.tif 000291
式Ｃ−ＸＬＩＶ
【化３０２】
2014523924.tif 000292
式Ｃ−ＸＬＶ
【化３０３】
2014523924.tif 000293
からなる群から選択され、式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が、それぞれ、独立して、水素、アルキル、アリール、脂環式、およびアラルキルからなる群から選択され、任意に、それぞれ、ヘテロ原子を含有し得る、請求項１９に記載のナノ球体。
【請求項３０】
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、
化合物Ｃ−２３
【化３０４】
2014523924.tif 000294
化合物Ｃ−１
【化３０５】
2014523924.tif 000295
化合物Ｃ−２
【化３０６】
2014523924.tif 000296
化合物Ｃ−１０
【化３０７】
2014523924.tif 000297
化合物Ｃ−３
【化３０８】
2014523924.tif 000298
化合物Ｃ−４
【化３０９】
2014523924.tif 000299
化合物Ｃ−５
【化３１０】
2014523924.tif 000300
化合物Ｃ−１１
【化３１１】
2014523924.tif 000301
化合物Ｃ−６
【化３１２】
2014523924.tif 000302
化合物Ｃ−７
【化３１３】
2014523924.tif 000303
化合物Ｃ−８
【化３１４】
2014523924.tif 000304
化合物Ｃ−１２
【化３１５】
2014523924.tif 000305
化合物Ｃ−９
【化３１６】
2014523924.tif 000306
化合物Ｃ−１３
【化３１７】
2014523924.tif 000307
化合物Ｃ−１４
【化３１８】
2014523924.tif 000308
化合物Ｃ−１５
【化３１９】
2014523924.tif 000309
化合物Ｃ−１６
【化３２０】
2014523924.tif 000310
化合物Ｃ−１７
【化３２１】
2014523924.tif 000311
化合物Ｃ−１８
【化３２２】
2014523924.tif 000312
化合物Ｃ−１９
【化３２３】
2014523924.tif 000313
化合物Ｃ−２０
【化３２４】
2014523924.tif 000314
化合物Ｃ−２１
【化３２５】
2014523924.tif 000315
化合物Ｃ−２２
【化３２６】
2014523924.tif 000316
からなる群から選択される、請求項１９に記載のナノ球体。
【請求項３１】
癌の治療を必要とする対象において、癌を治療する方法であって、
請求項１９に記載のナノ球体を提供することと、
前記癌を治療するために、前記対象に治療有効量の前記ナノ球体を投与することと、
を含む、方法。
【請求項３２】
前記癌が、脳癌である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
癌の検出または診断を必要とする対象において、癌を検出する、または診断する方法であって、
請求項１９に記載のナノ球体を提供することと、
前記対象に有効量の前記ナノ球体を投与することと、
前記癌を診断するために、前記対象を撮像することと、
を含む、方法。
【請求項３４】
前記治療薬が、化学療法剤、スタチン、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、エリスロポエチン、ペプチド、アンチセンス核酸、ＤＮＡ、ＲＮＡ、タンパク質、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１に記載のナノ球体。
【請求項３５】
前記治療薬が、パクリタキセル、ドキソルビシン、テモゾロミド、５−フルオロウラシル、カンプトテシン、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１に記載のナノ球体。
【請求項３６】
前記造影剤が、蛍光染料、癌において過剰発現されたタンパク質に対する抗体、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１に記載のナノ球体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、両親媒性スペーサーまたは両親媒性ポリマー上に治療薬を含む抗酸化および抗腫瘍ナノ粒子に関する。
【背景技術】
【０００２】
本明細書における全ての刊行物は、それぞれの個々の刊行物または特許出願が、参照により組み込まれることが具体的かつ個別に示されるかのように、同程度に参照により組み込まれる。以下の説明は、本発明の理解に有用であり得る情報を含む。本明細書に提供される情報のいずれも、先行技術である、もしくは本明細書に主張される発明に関するか、または具体的にもしくは暗黙的に参照される任意の刊行物が先行技術であることを認めるものではない。
【０００３】
カンプトテシンの抗腫瘍作用
カンプトテシンは、カンレンボク（Ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃａ  ａｃｕｍｉｎａｔｅ）（Ｎｙｓｓａｃｅａｅ）の木および樹皮から最初に単離された植物アルカロイドであり、ＤＮＡトポイソメラーゼＩによるＤＮＡ弛緩の阻害によりその抗腫瘍作用を呈する。しかしながら、カンプトテシンは、本質的に、水に不溶性であり、したがって、水溶性を増加させるために、多くの誘導体が開発されてきた（非特許文献１、非特許文献２）。
【０００４】
カンプトテシンは、分子の抗腫瘍作用に必須である、Ｅ環にラクトンを有する５員環構造からなる。薬物の主な形質転換および脱離経路はラクトンの加水分解および尿排泄を含むことが示されてきた。実際、ラクトン形態は、投与３０分後に、５０％が開環に加水分解される。ナトリウム塩は、ｐＨ７．４で、不活性形態（開環）がラクトン活性形態（閉環）上で優勢であるため、カンプトテシンより低い活性を示した。
【０００５】
非ステロイド性抗炎症薬
非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）は、痛み、熱、および炎症の治療に広く使用される。ＮＳＡＩＤがその抗炎症活性を発揮する主なメカニズムは、胃腸（ＧＩ）粘膜の刺激および潰瘍形成等の有害な副作用にも関与するシクロオキシゲナーゼ由来のプロスタグランジン合成の阻害である（Ｗｈｉｔｔｌｅ，２００３）。２種類のＣＯＸ酵素、すなわち、ＣＯＸ−１およびＣＯＸ−２がある。ＣＯＸ−１は、多くの組織において恒常的に発現し、一方で、ＣＯＸ−２は、炎症の部位でのみ発現する（Ｓ．Ｋａｒｇａｎ  ｅｔ  ａｌ．ＧＡＳＴＲＯＥＮＴＥＲＯＬ．，１１１：４４５-４５４，１９９６）。生成がＣＯＸ−１によって媒介されるプロスタグランジンは、胃粘膜の一体性の維持に関与する。よって、ＧＩ副作用は、一般的に、ＮＳＡＩＤ中の遊離カルボキシル基によって生じる刺激、およびＧＩ管におけるプロスタグランジン生合成の遮断の混合作用に起因すると考えられている（Ｄａｎｎｈａｒｄｔ  ａｎｄ  Ｋｉｅｆｅｒ，２００１）。シクロオキシゲナーゼの活性に対するその阻害作用に起因する副作用に加え、これらのＮＳＡＩＤの酸性部分も、これらの薬物に応答して観察される胃腸副作用の一因となる（Ｔａｍｍａｒａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３）。
【０００６】
疫学研究は、ＮＳＡＩＤの一部がアルツハイマー病（ＡＤ）のリスクを減少させることを示した。ＡＤにおけるＮＳＡＩＤの有効性は、抗炎症または抗アミロイド形成活性のいずれかに起因し得る。イブプロフェン、インドメタシン、およびスリンダク硫化物が、ＣＯＸ活性とは関係なく、高度にアミロイド形成Ａβ４２ペプチドを減少させることが報告された（ＮＡＴＵＲＥ，４１４：２１２−２１６（２００１））。
【０００７】
ＮＳＡＩＤは、内皮細胞に対する直接作用を通して血管新生を阻害することも示された。
【０００８】
ミエロペルオキシダーゼ（ＭＰＯ）−Ｈ２Ｏ２／Ｃｌ-系によって発生する炎症性酸化体次亜塩素酸（ＨＯＣｌ）は、感染に対して宿主防御の重要なメカニズムを含むが、過剰生成および細胞外で発生するＨＯＣｌは、細胞毒性であり、神経変性障害、粥状動脈硬化、慢性炎症性状態、および癌を含む多くの疾患の病変形成に関わると考えられている（Ｍａｌｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，ＢＲ  Ｊ  ＰＨＡＲＭＡＣＯＬ  ２００７：１-１７）。
【０００９】
次亜塩素酸は、多くの生体分子と反応することができる強力な酸化剤である。生理学的濃度の塩化イオンの存在下で、Ｈ２Ｏ２は、ヘム酵素ＭＰＯによって効率的にハロゲン化されて、活性化された食細胞によって発生する極めて大量の酸化体の次亜塩素酸をもたらす（Ｋｒａｓｏｗｓｋａ  ｅｔ  ａｌ．，ＢＲＡＩＮ  ＲＥＳ．９９７：１７６-１８４（２００４））。次亜塩素酸は、細胞質タンパク質および核ＤＮＡ塩基を塩素処理し、リン脂質およびリポタンパク質において脂質過酸化を誘発することができる（Ｓｐｉｃｋｅｔｔ  ＣＭ．，ＰＨＡＲＭＡＣＯＬ  ＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣＳ１１５：４００-４０９（２００７））。重要なことに、ＨＯＣｌによって細胞内グルタチオンおよびタンパク質チオールに生じる損傷は不可逆性であり、再合成によってしか交換することができない（Ｄａｌｌｅ−Ｄｏｎｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，ＦＲＥＥ  ＲＡＤＩＣ  ＢＩＯＬ  ＭＥＤ３２（９）：９２７-９３７（２００２））。さらに、ＨＯＣｌは、ヒドロキシルラジカルの損傷に変換され得る（Ｃａｎｄｅｉａｓ  ｅｔ  ａｌ．，ＦＥＢＳ  ＬＥＴＴ３３３（１，２）：１５１-１５３  （１９９３））。大半のＮＳＡＩＤは、水性環境において、次亜塩素酸を除去することができ、一部のＮＳＡＩＤは、酵素との直接的な相互作用によって、ＭＰＯを阻害する（Ｎｅｖｅ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＵＲＯＰＥＡＮ  Ｊ  ＰＨＡＲＭＡＣＯＬ４１７：３７−４３（２００１））。
【００１０】
ＮＳＡＩＤの抗癌作用
いくつかの疫学研究、臨床試験、および動物研究は、ＮＳＡＩＤがある癌の防止および治療に有効であり得ることを示してきた（Ｋｅｌｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍｏｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ  ｕｓｉｎｇ  ＮＳＡＩＤｓ  ａｎｄ  ＣＯＸ−２  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ．ＣＡＮＣＥＲ  ＢＩＯＬ  ＴＨＥＲ（２００３）２：Ｓ１４０-９、Ｇｕｐｔａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ  ｃａｎｃｅｒ  ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｂｙ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ−２．  ＮＡＴ  ＲＥＶ  ＣＡＮＣＥＲ（２００１）１：１１-２１、Ｕｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ＣＯＸ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ  ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｔｈｅｒａｐｙ．ＡＭ  Ｊ  ＣＬＩＮ  ＯＮＣＯＬ（２００３）２６：Ｓ４８-５７、Ｈａｒｒｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｓｐｉｒｉｎ，  ｉｂｕｐｒｏｆｅｎ，ａｎｄ  ｏｔｈｅｒ  ｎｏｎ−ｓｔｅｒｏｉｄａｌ  ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｄｒｕｇｓ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ  ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ：ａ  ｃｒｉｔｉｃａｌ  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｎｏｎｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ＣＯＸ−２  ｂｌｏｃｋａｄｅ［ｒｅｖｉｅｗ］．ＯＮＣＯＬ  ＲＥＰ２００５；１３：５５９-８３）。あるＮＳＡＩＤの長期使用が結腸直腸癌、乳癌、および卵巣癌のリスクを減少させることも示唆されてきた。Ｔａｋｅｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ−２  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｅｓｉｓ．Ｊ  ＮＡＴＬ  ＣＡＮＣＥＲ  ＩＮＳＴ（１９９８）９０：１５２９-３６、Ｓａｎｄｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ａ  ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ  ｔｒｉａｌ  ｏｆ  ａｓｐｉｒｉｎ  ｔｏ  ｐｒｅｖｅｎｔ  ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ  ａｄｅｎｏｍａｓ．Ｎ  ＥＮＧＬ  Ｊ  ＭＥＤ（２００３）３４８：８９１-９、Ｓａｊｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｎｏｖｅｌ  ｓｅｎｓｉｔｉｚｉｎｇ  ａｇｅｎｔｓ：ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  ｏｆ  ＣＯＸ−２  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｆｏｒ  ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ．ＢＲＥＡＳＴ  ＣＡＮＣＥＲ（２００４）１１：１２９-３３．
【００１１】
ＮＳＡＩＤが抗腫瘍作用を呈する分子メカニズムは、十分に理解されず、徹底的な調査をするかの問題である。ＮＳＡＩＤの化学予防作用および抗腫瘍作用は、一部、アポトーシスの誘発、続くＣＯＸ−２の阻害に起因する。Ｌｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｈｅ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ−２  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ．ＣＬＩＮ  ＰＲＯＳＴＡＴＥ  ＣＡＮＣＥＲ（２００３）２：１１９-２６、Ｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ−２  ａｎｄ  ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｃａｎｃｅｒ．ＣＡＮＣＥＲ  Ｊ（２００４）１０：１４５-５２、Ｂａｓｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｏｎｓｔｅｒｏｉｄａｌ  ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ−２  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｆｏｒ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｈｅｍｏｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ．Ｊ  ＵＲＯＬ２００４；１７１：  Ｓ５９-６２；  ｄｉｓｃｕｓｓｉｏｎ  Ｓ６２-５３、Ｓａｂｉｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，ＣＯＸ−２  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ａｎｄ  ｏｔｈｅｒ  ｎｏｎｓｔｅｒｏｉｄａｌ  ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｄｒｕｇｓ  ｉｎ  ｇｅｎｉｔｏｕｒｉｎａｒｙ  ｃａｎｃｅｒ．ＳＥＭＩＮ  ＯＮＣＯＬ２００４；３１：３６-４４。
【００１２】
様々な研究は、ＮＳＡＩＤによって誘発されたアポトーシスがＣＯＸ−２を阻害するその能力と常に相関しないため、ＣＯＸ−２に依存しないメカニズムも関係し得ることも示唆してきた。Ｃｈｕａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，ＣＯＸ−２  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｉｓ  ｎｅｉｔｈｅｒ  ｎｅｃｅｓｓａｒｙ  ｎｏｒ  ｓｕｆｆｉｃｉｅｎｔ  ｆｏｒ  ｃｅｌｅｃｏｘｉｂ  ｔｏ  ｓｕｐｐｒｅｓｓ  ｔｕｍｏｒ  ｃｅｌｌ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｆｏｃｕｓ  ｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ．ＭＯＬ  ＣＡＮＣＥＲ（２００８）７：３８、Ｍａｒｘ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ｒｅｓｅａｒｃｈ；Ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｉｅｓ  ｉｎｈｉｂｉｔ  ｃａｎｃｅｒ  ｇｒｏｗｔｈ−ｂｕｔ  ｈｏｗ？  ＳＣＩＥＮＣＥ  ２００１；２９１：５８１-２、Ｅｌｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｐｏｐｔｏｔｉｃ  ｃｅｌｌ  ｄｅａｔｈ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅｓ  ｂｙ  ａ  ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ−２（ＣＯＸ−２）−ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｎｏｎｓｔｅｒｏｉｄａｌ  ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｄｒｕｇ：ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｃｅ  ｆｒｏｍ  ＣＯＸ−２  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．ＣＡＲＣＩＮＯＧＥＮＥＳＩＳ（２００１）２２：１７-２５、Ｊｉａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｕｂｔｒａｃｔｉｏｎ  ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ  ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｓ  ａ  ｎｏｖｅｌ  ｍｅｌａｎｏｍａ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｇｅｎｅ，ｍｄａ−７，ｍｏｄｕｌａｔｅｄ  ｄｕｒｉｎｇ  ｈｕｍａｎ  ｍｅｌａｎｏｍａ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ，ｇｒｏｗｔｈ  ａｎｄ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ．ＯＮＣＯＧＥＮＥ（１９９５）１１：２４７７-８６。
【００１３】
α−リポ酸の抗酸化作用
ジチオラン部分を含有する分子は、その抗酸化性質により広く調査される。その分子にジチオラン環を有するα−リポ酸（チオクト酸、１，２−ジチオラン−３−ペンタン酸）は、本来は成長因子として発見された、広く分布する天然物質である。生理学的には、α−ケトカルボン酸（例えばピルビン酸）の酸化脱炭酸の補酵素として、および抗酸化剤として作用し、ビタミンＣ、ビタミンＥ、グルタチオン、および補酵素Ｑ１０を再生することができる。病的状態において、リポ酸は、糖尿病性多発神経障害、肝硬変、および金属中毒の治療に適用される。
【化１】
2014523924.tif 000003
【００１４】
リポ酸およびジヒドロリポ酸は、脂質および水性環境の両方において、いくつかのラジカルを捕獲することができる。リポ酸およびジヒドロリポ酸は、直接ラジカルを捕獲する、および／または金属をキレート化するだけでなく、他の抗酸化剤（例えばビタミンＣ、ビタミンＥ）を再利用する、および同時にビタミンＥを再利用するグルタチオンを減少させることによって抗酸化剤として作用する。［１，２］−ジチオラン環系に存在する２つのチオール基は、それに独特の抗酸化の可能性を付与する。リポ酸等の環式５員環を有するジスルフィドは、シスチンまたはグルタチオン等の開鎖誘導体よりも還元的および／または求核攻撃においてより有効であることが分かった。
【００１５】
化合物の抗酸化の可能性は、（１）遊離ラジカル除去の特異性、（２）他の抗酸化剤との相互作用、（３）金属キレート化活性、（４）遺伝子発現に対する作用、（５）吸収および生物学的利用能、（６）位置（水性ドメインもしくは膜ドメインまたはその両方における）、および（７）酸化的損傷を修復する能力等の性質に基づき評価され得る（Ｐａｃｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＦＲＥＥ  ＲＡＤＩＣＡＬ  ＢＩＯＬＯＧＹ&ＭＥＤＩＣＩＮＥ．１９（２）：２２７−２５０，１９９５）。上記の基準により、リポ酸／ジヒドロリポ酸酸化還元系を含有する［１，２］−ジチオランは、汎用抗酸化剤とみなされてきた。
【００１６】
抗酸化活性を有するリポ酸誘導体または複合体を開発するための多くの試みがなされてきた。米国特許第６，０９０，８４２号、第６，０１３，６６３号、第６，１１７，８９９号、第６，１２７，３９４号、第６，１５０，３５８号、第６，２０４，２８８号、第６，２３５，７７２号、第６，２８８，１０６号、第６，３５３，０１１号、第６，３６９，０９８号、第６，３８７，９４５号、第６，６０５，６３７号、第６，８８７，８９１号、第６，９００，３３８号、および第６，９３６，７１５号は、一部の例である。
【００１７】
多くの他の米国特許において、天然および合成のリポ酸誘導体およびその代謝物が、皮膚老化の防止、および遊離ラジカル媒介疾患（炎症性、増殖性、神経変性、代謝性、および感染性疾患を含む）の治療に使用するために開示される。
【００１８】
ＮＯシンターゼに対する阻害活性および反応性酸素種（ＲＯＳ）の捕獲
様々な状態または疾患状態は、その生理病理学における一酸化窒素（ＮＯ）、およびＲＯＳ、ならびにグルタチオンの代謝の潜在的な機能を示した。一酸化窒素およびグルタチオンの代謝ならびにチオール基の酸化還元状態が関与する状態または疾患状態は、心血管および脳血管障害（例えば、粥状動脈硬化、偏頭痛、動脈性血圧上昇、敗血性ショック、虚血性もしくは出血性の心臓または脳梗塞、虚血、および血栓症）、中枢もしくは末梢神経系（例えば、神経変性神経系）の障害、神経変性疾患（脳梗塞、くも膜下出血、老化、老年性痴呆（例えばアルツハイマー病）、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、プリオン病（例えば、クロイツフェルトヤコブ病）、筋萎縮性側索硬化症、痛み、脳および脊髄外傷を含む）、増殖性および炎症性疾患（例えば粥状動脈硬化）、アミロイド症、および胃腸管系の炎症、臓器移植、糖尿病およびその合併症（例えば、網膜症、腎症、および多発性神経炎、多発性硬化症、筋症）、癌、常染色体性遺伝性疾患（例えばウンフェルリヒトルントボルグ病）、中毒に関連する神経疾患（例えばカドミウム中毒、ｎ−ヘキサンの吸入、殺虫剤、除草剤）、治療に関連する中毒（例えば放射線療法）、または遺伝的原因の障害（例えばウィルソン病）、ならびに糖尿病と関係があるインポテンスを含むが、これらに限定されない。
【００１９】
これらの状態および疾患状態は、一酸化窒素および／またはグルタチオンの代謝ならびにチオール基の酸化還元状態の過剰生成または機能不全を特徴とする（Ｄｕｎｃａｎ  ａｎｄ  Ｈｅａｌｅｓ，Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  ａｎｄ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ，ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＡＳＰＥＣＴＳ  ＯＦ  ＭＥＤＩＣＩＮＥ．２６：６７-９６，２００５、Ｋｅｒｗｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ：Ａ  Ｎｅｗ  Ｐａｒａｄｉｇｍ  Ｆｏｒ  Ｓｅｃｏｎｄ  Ｍｅｓｓｅｎｇｅｒｓ，Ｊ．  ＭＥＤ．ＣＨＥＭ．３８：４３４３−４３６２，１９９５、Ｐａｃｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＦＲＥＥ  ＲＡＤＩＣＡＬ  ＢＩＯＬＯＧＹ&ＭＥＤＩＣＩＮＥ．１９：２２７−２５０，１９９５）。米国特許第６，６０５，６３７号、第６，８８７，８９１号、および第６，９３６，７１５号は、リポ酸誘導体が一酸化窒素ＮＯを生成するＮＯシンターゼ酵素の活性を阻害し、ＲＯＳを捕獲し、チオール基の酸化還元状態においてより一般的な様式で介在する内因性抗酸化剤を再生することを開示する。米国特許第５，６９３，６６４号、第５，９４８，８１０号、および第６，８８４，４２０号は、Ｉ型およびＩＩ型の真性糖尿病の治療用の薬物合成のためのラセミα−リポ酸、またはその代謝物、塩、アミド、もしくはエステルの使用を開示する。米国特許第５，９２５，６６８号は、抗酸化活性を有する化合物が１，２−ジチオラン、還元された、または酸化された形態を含有する、遊離ラジカル媒介疾患を治療する、および／またはそのような疾患に関連する症状を減少させる方法を開示する。米国特許第６，２５１，９３５号は、ラセミα−リポ酸、鏡像異性体、およびその薬学的に許容される塩、アミド、エステル、またはチオエステルからなる群から選択される活性成分の投与を含む、偏頭痛を防止する、または治療するための方法を開示する。米国特許第６，４７２，４３２号および第６，５８６，４７２号は、リポ酸および／またはリポ酸誘導体を含有する組成物の適用による慢性炎症性障害の酒さの治療を開示する。リポ酸およびジヒドロリポ酸の神経保護作用が、抗酸化および遊離ラジカル除去メカニズムによって媒介される強い証拠がある（Ｐａｃｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＦＲＥＥ  ＲＡＤＩＣＡＬ  ＢＩＯＬＯＧＹ&ＭＥＤＩＣＩＮＥ．２２：３５９−３７８，１９９７）。
【００２０】
スタチン系薬剤の神経保護作用および神経回復作用
スタチン系薬剤は、コレステロールレベルを低下させるために使用されるコレステロール生合成阻害剤である。スタチン系薬剤は、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）および脳卒中の動物モデルにおいて、神経保護および神経回復の利点も示す（Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ  Ｎｅｕｒｏｌ  ５３（６），７４３-７５１，２００３、Ｊｅｓｓｂｅｒｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｌｅａｒｎ  Ｍｅｍ  １６（２），１４７-１５４，２００９、Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ  ８１（４），２８８-２９８，２００７、Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｃｅｒｅｂ  Ｂｌｏｏｄ  Ｆｌｏｗ  Ｍｅｔａｂ  ２５（２），２８１-２９０，２００５、Ｌｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｎｅｕｒｏｔｒａｕｍａ，２１（１），２１-３２，２００４、Ｌｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ，１０１（５）：８１３-８２１，２００４、Ｗｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ，１０９（４）：６９１-６９８，２００８）。脳卒中および外傷によって生じる外傷性脳損傷は、世界的な主な健康問題である。虚血も、ＴＢＩの病変形成に重要な役割を果たす。スタチン系薬剤は、ＴＢＩ後の機能回復を強化する、神経機能の欠損を大幅に減少させる、および神経生存を増加させる（Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ  Ｎｅｕｒｏｌ，５３（６），７４３-７５１，２００３、Ｌｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｎｅｕｒｏｔｒａｕｍａ，２４（７）：１１３２-１１４６，２００７、Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｘｐ  Ｎｅｕｒｏｌ，２０６（１），５９-６９，２００７）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００２１】
【非特許文献１】Ｔｈｏｍａｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎ：Ｃｕｒｒｅｎｔ  ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ．ＢＩＯＯＲＧ．ＭＥＤ．ＣＨＥＭ．，１２，  ２００４，１５８５−１６０４
【非特許文献２】Ｐｉｚｚｏｌａｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｈｅ  Ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎ．ＴＨＥ  ＬＡＮＣＥＴ，３６１，２００３，２２３５−２２４２
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００２２】
以下の実施形態およびその態様は、例示的および図示的であり、範囲を制限することを意味しない組成物および方法と共に説明および図示される。
【００２３】
本発明の様々な実施形態は、トコフェロールと、親水性スペーサー、疎水性スペーサー、両親媒性スペーサー、または両親媒性ポリマーに抱合される治療薬または造影剤とを含むナノ球体を提供する。
【００２４】
様々な実施形態では、ナノ球体は、本明細書に記載される式Ａ−Ｉａを有する抗酸化剤α−リポ酸含有疎水性化合物をさらに含み、式中、Ｘは、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖からなる群から選択され得、任意に、ヘテロ原子を含有し得、Ｙは、分枝状および非分枝状のアルキル基、分枝状および非分枝状のアルケニル基、分枝状および非分枝状のアルキニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルケニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキニル基、アリール基、環式脂肪族基、環式芳香族基、複素環式基、および芳香族複素環式基からなる群から選択され得、ｎは、少なくとも１の整数であり得る。様々な実施形態では、式Ｉａのジチオラン部分は、α−リポ酸であり得、本明細書に記載される式Ａ−ＩＩａによって表される。
【００２５】
様々な実施形態では、ナノ球体は、本明細書に記載される式Ｂ−Ｉを有する疎水性非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）誘導体をさらに含み、式中、Ａは、分枝状および非分枝状のアルキル基、分枝状および非分枝状のアルケニル基、分枝状および非分枝状のアルキニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルケニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキニル基、アリール基、環式脂肪族基、環式芳香族基、複素環式基、および芳香族複素環式基からなる群から選択され得、ｎは、少なくとも２の整数であり得る。
【００２６】
様々な実施形態では、ナノ球体は、本明細書に記載される式Ｂ−ＩＩを有する非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）の疎水性抗酸化剤および抗炎症誘導体をさらに含み、式中、Ｘは、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖からなる群から選択され得、任意に、ヘテロ原子を含有し得、Ａは、分枝状および非分枝状のアルキル基、分枝状および非分枝状のアルケニル基、分枝状および非分枝状のアルキニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルケニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキニル基、アリール基、環式脂肪族基、環式芳香族基、複素環式基、および芳香族複素環式基からなる群から選択され得、ｎは、少なくとも１の整数であり得、ｍは、少なくとも１の整数であり得る。様々な実施形態では、ＮＳＡＩＤの疎水性抗酸化剤および抗炎症誘導体は、本明細書に記載される式Ｂ−ＩＩＩであり、式中ＡＬＡは、α−リポ酸を表す。
【００２７】
様々な実施形態では、ナノ球体は、カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体をさらに含む。
【００２８】
様々な実施形態では、カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体は、本明細書に記載される式Ｃ−ＩＩであり得、式中、ＡおよびＢは、独立して、―ＯＣ（Ｏ）―、―ＯＣ（Ｏ）Ｏ―、および―ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）―からなる群から選択され得、式中、Ｒは、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり得、ＸおよびＹは、リンカーであり得、それぞれ、独立して、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖を含み、任意に、ヘテロ原子を含み得、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、それぞれ、独立して、水素、アルキル、アリール、脂環式、およびアラルキルからなる群から選択され得、それぞれ、任意に、ヘテロ原子を含有し得る。
【００２９】
様々な実施形態では、カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体は、本明細書に記載される式Ｃ−ＩＶであり得、式中、Ｌ１は、ジオール上の２つのエステル化が可能な遊離ヒドロキシル基のエステル化によって形成される部分であり得、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、それぞれ、独立して、水素、アルキル基、アリール基、脂環式基、およびアラルキル基からなる群から選択され得、任意に、ヘテロ原子を含有し得る。
【００３０】
様々な実施形態では、カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体は、本明細書に記載される式Ｃ−Ｖ、式Ｃ−ＶＩ、式Ｃ−ＶＩＩ、式Ｃ−ＶＩＩＩ、式Ｃ−ＩＸ、式Ｃ−Ｘ、および式Ｃ−ＸＬＶＩからなる群から選択され得る。
【００３１】
様々な実施形態では、カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体は、本明細書に記載される式Ｃ−ＩＩＩであり得、式中、Ａは、―ＯＣ（Ｏ）―、―ＯＣ（Ｏ）Ｏ―、および―ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）―からなる群から選択され得、式中、Ｒは、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり得、Ｐは、―ＯＣ（Ｏ）―および―Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）―からなる群から選択され得、式中、Ｒは、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり得、Ｘは、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖を含むリンカーであり得、任意に、ヘテロ原子を含有し得、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、それぞれ、独立して、水素、アルキル、アリール、脂環式、およびアラルキルからなる群から選択され得、任意に、ヘテロ原子を含有し得る。
【００３２】
様々な実施形態では、カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体は、本明細書に記載される式Ｃ−ＸＩであり得、式中、Ｌ２は、化合物を生成するプロセスにおいて、リンカーとしてジアミンを使用することによって形成される部分であり得、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、それぞれ、独立して、水素、アルキル基、アリール基、脂環式基、およびアラルキル基からなる群から選択され得、任意に、ヘテロ原子を含有し得る。
【００３３】
様々な実施形態では、カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体は、本明細書に記載される式Ｃ−ＸＩＩ、式Ｃ−ＸＩＩＩ、式Ｃ−ＸＩＶ、式Ｃ−ＸＶ、式Ｃ−ＸＶＩ、式Ｃ−ＸＶＩＩ、および式Ｃ−ＸＬＶＩＩからなる群から選択され得る。
【００３４】
様々な実施形態では、カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体は、本明細書に記載される式Ｃ−ＸＶＩＩＩであり得、式中、Ｌ３は、化合物を生成するプロセスにおいて、リンカーとしてアミノアルコールを使用することによって形成される部分であり得、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、それぞれ、独立して、水素、アルキル、アリール、脂環式、およびアラルキルからなる群から選択され得、それぞれ、ヘテロ原子を含有し得る。
【００３５】
様々な実施形態では、カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体は、本明細書に記載される式Ｃ−ＸＩＸ、式Ｃ−ＸＸ、式Ｃ−ＸＸＩ、式Ｃ−ＸＸＩＩ、式Ｃ−ＸＸＩＩＩ、式Ｃ−ＸＸＩＶ、および式Ｃ−ＸＬＶＩＩＩからなる群から選択され得る。
【００３６】
様々な実施形態では、カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体は、α−リポ酸と、カンプトテシンまたは無水コハク酸もしくは無水グルタル酸と反応させることによって修飾されるカンプトテシン類似体との抱合によって生成される化合物であり得、カンプトテシン類似体は、本明細書に記載される式Ｃ−Ｉによって表され、式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、それぞれ、独立して、水素、アルキル、アリール、脂環式、およびアラルキルからなる群から選択され得、任意に、ヘテロ原子を含有し得る。
【００３７】
様々な実施形態では、カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体は、本明細書に記載される式Ｃ−ＸＸＶ、式Ｃ−ＸＸＶＩ、式Ｃ−ＸＸＶＩＩ、式Ｃ−ＸＸＶＩＩＩ、式Ｃ−ＸＸＩＸ、式Ｃ−ＸＸＸ、式Ｃ−ＸＸＸＩ、式Ｃ−ＸＸＸＩＩ、式Ｃ−ＸＸＸＩＩＩ、式Ｃ−ＸＸＸＩＶ、式Ｃ−ＸＸＸＶ、式Ｃ−ＸＸＶＩ、式Ｃ−ＸＸＸＶＩＩ、式Ｃ−ＸＸＸＶＩＩＩ、式Ｃ−ＸＸＸＩＸ、式Ｃ−ＸＬ、式Ｃ−ＸＬＩ、式Ｃ−ＸＬＩＩ、式Ｃ−ＸＬＩＩＩ、式Ｃ−ＸＬＩＶ、および式Ｃ−ＸＬＶからなる群から選択され得る。
【００３８】
様々な実施形態では、カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体は、本明細書に記載される化合物Ｃ−２３、化合物Ｃ−１、化合物Ｃ−２、化合物Ｃ−１０、化合物Ｃ−３、化合物Ｃ−４、化合物Ｃ−５、化合物Ｃ−１１、化合物Ｃ−６、化合物Ｃ−７、化合物Ｃ−８、化合物Ｃ−１２、化合物Ｃ−９、化合物Ｃ−１３、化合物Ｃ−１４、化合物Ｃ−１５、化合物Ｃ−１６、化合物Ｃ−１７、化合物Ｃ−１８、化合物Ｃ−１９、化合物Ｃ−２０、化合物Ｃ−２１、および化合物Ｃ−２２からなる群から選択され得る。
【００３９】
本発明の様々な実施形態は、本明細書に記載されるナノ球体を提供することと、癌を治療するために、対象に治療有効量のナノ球体を投与することと、を含む、癌の治療を必要とする対象において、癌を治療する方法を提供する。様々な実施形態では、癌は、脳癌であり得る。
【００４０】
様々な実施形態では、治療薬は、化学療法剤、スタチン、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、エリスロポエチン、ペプチド、アンチセンス核酸、ＤＮＡ、ＲＮＡ、タンパク質、およびそれらの組み合わせからなる群から選択され得る。様々な実施形態では、治療薬は、パクリタキセル、ドキソルビシン、テモゾロミド、５−フルオロウラシル、カンプトテシン、およびそれらの組み合わせからなる群から選択され得る。
【００４１】
本発明の様々な実施形態は、本明細書に記載されるナノ球体を提供することと、対象に有効量のナノ球体を投与することと、癌を診断するために、対象を撮像することとを含む、癌の診断を必要とする対象において、癌を診断する方法を提供する。様々な実施形態では、造影剤は、蛍光染料、癌において過剰発現されたタンパク質に対する抗体、およびそれらの組み合わせからなる群から選択され得る。
【００４２】
様々な実施形態では、ナノ球体は、本明細書に記載される式Ｄ−Ｉ、Ｄ−ＩＩ、Ｄ−ＩＩＩ、Ｄ−ＩＶ、Ｄ−Ｖ、またはＤ−ＶＩを有するスタチンラクトン誘導体をさらに含み得る。
【００４３】
様々な実施形態では、スタチンラクトン誘導体は、本明細書に記載される化合物Ｄ−４７、化合物Ｄ−４８、化合物Ｄ−４９、化合物Ｄ−５０、化合物Ｄ−５１、化合物Ｄ−５２、化合物Ｄ−５３、化合物Ｄ−５４、化合物Ｄ−５５、化合物Ｄ−５６、化合物Ｄ−５７、化合物Ｄ−５８、化合物Ｄ−５９、化合物Ｄ−６０、化合物Ｄ−６１、化合物Ｄ−６２、化合物Ｄ−６３、化合物Ｄ−６４、化合物Ｄ−６５、化合物Ｄ−６６、化合物Ｄ−６７、化合物Ｄ−６８、化合物Ｄ−６９、化合物Ｄ−７０、化合物Ｄ−１３、化合物Ｄ−１４、化合物Ｄ−１５、化合物Ｄ−１６、化合物Ｄ−１７、化合物Ｄ−１８、化合物Ｄ−１９、化合物Ｄ−２０、化合物Ｄ−２１、化合物Ｄ−２２、化合物Ｄ−２３、化合物Ｄ−２４、化合物Ｄ−２５、化合物Ｄ−２６、化合物Ｄ−２７、化合物Ｄ−２８、化合物Ｄ−２９、化合物Ｄ−３０、化合物Ｄ−３１、および化合物Ｄ−３２からなる群から選択され得る。
【００４４】
本発明の様々な実施形態様々な実施形態は、本明細書に記載されるナノ球体を提供することと、コレステロールレベルを低下させる、心臓血管疾患の可能性を低下させる、または心臓血管疾患を治療するために、対象に治療有効量のナノ球体を投与することとを含む、コレステロールレベルの低下、心臓血管疾患の可能性の低下、または心臓血管疾患の治療を必要とする対象において、それらを行う方法を提供する。
【００４５】
様々な実施形態は、本明細書に記載されるナノ球体を提供することと、対象に有効量のナノ球体を投与することと、癌を診断するために、対象を撮像することとを含む、癌の診断を必要とする対象において、癌を診断する方法を提供する。様々な実施形態では、造影剤は、蛍光染料、癌において過剰発現されたタンパク質に対する抗体、およびそれらの組み合わせからなる群から選択され得る。
【００４６】
本発明の他の特徴および利点は、例として、本発明の実施形態の様々な特徴を図示する添付の図面と共に、以下の詳細な説明から明らかになるだろう。
【図面の簡単な説明】
【００４７】
例示的な実施形態は、参照の図面に図示される。本明細書に開示される実施形態および図面は、限定的ではなく、むしろ図示的であると考えられることが意図される。
【００４８】
【図１】本発明の様々な実施形態による両親媒性スペーサーを含む、抗酸化および抗腫瘍ナノ粒子の合成ステップの図式的表示を示す。
【図２】本発明の様々な実施形態による両親媒性スペーサーを含む、抗酸化および抗腫瘍ナノ粒子の合成ステップの別の図式的表示を示す。
【図３】本発明の様々な実施形態による両親媒性スペーサーを含む、抗酸化および抗腫瘍ナノ粒子の図式的表示を示す。
【図４ａ】本発明の様々な実施形態による両親媒性スペーサーに抱合される治療薬を含む、抗酸化および抗腫瘍ナノ粒子の図式的表示を示す。（ａ）コアナノ粒子は、ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡを含むトコフェロールから調製された、（ｂ）コアナノ粒子は、ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡなしのトコフェロールから調製された、そして（ｃ）コアナノ粒子は、ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡなしのトコフェロールから調製された。スペーサーは、スルフヒドリル（−ＳＨ）の代わりに一級アミン（−ＮＨ２）を含有する。
【図４ｂ】同上。
【図４ｃ】同上。
【図５】本発明の様々な実施形態による両親媒性ポリマーを含む、抗酸化および抗腫瘍ナノ粒子の図式的表示を示す。
【図６ａ】本発明の様々な実施形態による両親媒性ポリマー上に治療薬を含む、抗酸化および抗腫瘍ナノ粒子の図式的表示を示す。（ａ）コアナノ粒子は、ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡを有するトコフェロールから調製された、（ｂ）コアナノ粒子は、ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡなしのトコフェロールから調製された。
【図６ｂ】同上。
【図７】本発明の様々な実施形態によるスペーサー上に治療薬または造影剤を含む、抗酸化トコフェロールナノ粒子の図式的表示を示す。
【図８】本発明の様々な実施形態によるスペーサー上に治療薬または造影剤を含む、抗酸化および神経保護スタチン／トコフェロールナノ粒子の図式的表示を示す。
【図９】本発明の様々な実施形態によるスペーサー上に治療薬または造影剤を含む、抗酸化および神経保護ＮＳＡＩＤ／スタチン／トコフェロールナノ粒子の図式的表示を示す。
【図１０】本発明の様々な実施形態によるカンプトテシンナノプロドラッグの図式的表示を示す。ａ、α−リポ酸（ＡＬＡ）およびテトラ（エチレングリコール）（ＴＥＧ）と共にプロドラッグＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ内に組み込まれた遊離カンプトテシン（ＣＰＴ）。ｂ、プロドラッグおよびα−トコフェロールはＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ／Ｔｏｃｏナノプロドラッグへの自然乳化を受ける。ｃ、１−オクタデカンチオールのチオール部分への抱合によって組み込まれたＣｙ５．５。
【図１１】本発明の様々な実施形態によるカンプトテシンナノプロドラッグの特徴を示す。ａ、ナノ粒子追跡分析（ＮＴＡ）から得たＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ／Ｔｏｃｏナノプロドラッグ（Ｉ）およびＴｏｃｏナノ懸濁液（ＩＩ）の可視化。ｂ、共焦点レーザー顕微鏡によって決定される、Ｃｙ５．５官能化ナノプロドラッグの蛍光検出による、ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ／ＴｏｃｏナノプロドラッグのＵ８７ＭＧ膠腫細胞内への生体外取り込みの可視化。スケールバー、低倍率においては１００μｍ、高倍率においては２０μｍ。ｃ、分解したカンプトテシン（Ｐ１）、酸化したＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡプロドラッグ（Ｐ２）、および無傷ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡプロドラッグ（Ｐ３）のクロマトグラム。クロマトグラムＩは、新しく調製され、部分的に酸化したナノプロドラックから得た。クロマトグラムＩＩは、本明細書に記載されるように調製された細胞可溶化物から得た。
【図１２−１】本発明の様々な実施形態によるＣｙ５．５−蛍光ナノプロドラッグＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ／Ｔｏｃｏの腫瘍特異的局在化を示す。ａ、皮下Ｕ８７ＭＧ膠腫異種移植片を有するマウス、および蛍光ナノプロドラッグの静脈内注射７２時間後に回収された臓器の代表的な蛍光画像。ｂ、蛍光ナノプロドラッグの静脈内注射９６時間後の皮下Ｕ８７ＭＧ膠腫異種移植片におけるＣｙ５．５−蛍光ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ／Ｔｏｃｏナノプロドラッグ（Ｉ）および遊離Ｃｙ５．５（ＩＩ）の蓄積の比較。ｃ、腫瘍組織学。Ｕ８７ＭＧ皮下異種移植片腫瘍切片（１０μｍ）は、Ｈ＆Ｅで染色されたか、Ｃｙ５．５−蛍光ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ／Ｔｏｃｏナノプロドラッグについて蛍光撮像されたか、またはＣＤ３１で免疫染色された。黒および白の矢印、腫瘍脈管構造。スケールバー、２０μｍ。
【図１２−２】ｄ、Ｃｙ５．５−蛍光ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ／Ｔｏｃｏナノプロドラッグの静脈内注射３時間後および５時間後に回収した脳および臓器の蛍光。ｅ、蛍光ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ／Ｔｏｃｏナノプロドラッグの静脈内注射４８時間後に回収した脳および臓器の蛍光画像（Ｌ）、脳の両側の画像（Ｍ）、およびＯＣＴブロックにおける縦断脳切片（Ｒ）。ｆ、Ｕ８７ＭＧ頭蓋内異種移植片を含有する脳切片の組織学、蛍光撮像、および免疫染色。蛍光ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ／Ｔｏｃｏナノプロドラッグの注射４８時間後にマウスを屠殺し、直ぐに脳を分離し、ドライアイス上で凍結させ、凍結切片した。ＨＥ染色は、健康な領域と腫瘍領域との間に明確なバリアを呈する。代表的なＣｙ５．５蛍光写真は、Ｕ８７ＭＧ頭蓋内腫瘍内に特異的に局在化されたＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ／Ｔｏｃｏナノプロドラッグを示す。最も高い蓄積は、腫瘍脈管構造付近および腫瘍周辺部で観察された。代表的なＣＤ３１免疫染色は、腫瘍領域において、強い異常な血管形成を示す。Ｋｉ６７免疫染色の代表的な写真は、腫瘍領域において、腫瘍細胞の増殖を示す。
【図１３】本発明の様々な実施形態によるＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ／Ｔｏｃｏナノプロドラッグの抗腫瘍作用を示す。ａ、ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ／Ｔｏｃｏナノプロドラッグ、イリノテカン、α−トコフェロールナノ懸濁液、および生理食塩水で処置した後のマウスの皮下Ｕ８７ＭＧヒト腫瘍異種移植片の体積。統計的有意性は、ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ／Ｔｏｃｏナノプロドラッグおよび生理食塩水対照の最後３回の測定のスチューデントのｔ検定によって推定された。ポイントは１群当たり６匹の動物の平均値、バーはＳＤ。ｂ、カプラン・マイヤー生存曲線は、頭蓋内Ｕ８７ＭＧ腫瘍異種移植片を有する動物に対する、ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ／Ｔｏｃｏナノプロドラッグの生存利益を示す。図は、ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ／Ｔｏｃｏナノプロドラッグ、イリノテカン、α−トコフェロールナノ懸濁液、または生理食塩水で処置した後のマウスの生存率を示す。統計的有意性は、生理食塩水対照と比較した、ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ／Ｔｏｃｏナノプロドラッグの対数順位法によって推定された。
【図１４ａ】本発明の様々な実施形態による薬物作用の提案されるメカニズムを示す。ａ、脳腫瘍の酸化環境におけるナノプロドラッグ活性の図式的表示。カンプトテシンプロドラッグのα−リポ酸部分は、酸化腫瘍微小環境においてＲＯＳを除去し、ナノプロドラッグ表面の侵食を加速する。これは、プロドラッグの加水分解または酵素分解を容易にする。赤の矢印は、加水分解の部位を示す。
【図１４ｂ】ｂ、脳腫瘍組織におけるＥＰＲ作用を介したナノプロドラッグの蓄積。Ｃｙ５．５蛍光画像は、Ｕ８７ＭＧ頭蓋内腫瘍内の腫瘍血管の周囲に特異的に局在化したＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ／Ｔｏｃｏナノプロドラッグを示す。健康な脳組織からの蛍光シグナルは、無視できるほどである。ＣＤ３１免疫染色は、腫瘍領域において強い異常な脈管構造、および正常な脳組織において微小血管を示す。ナノプロドラッグは、黒い点として示される。
【発明を実施するための形態】
【００４９】
本明細書に引用される全ての参照文献は、完全に記載されているかのように、参照によりその全体が組み込まれる。特に定義されない限り、本明細書で使用される技術的および科学的用語は、本発明が属する当業者によって通常理解されるのと同じ意味を有する。Ｓｉｎｇｌｅｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ３ｒｄ  ｅｄ．，Ｊ．Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ  ２００１）、Ｍａｒｃｈ，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ５ｔｈ  ｅｄ．，Ｊ．Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ２００１）、およびＳａｍｂｒｏｏｋ  ａｎｄ  Ｒｕｓｓｅｌ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ  ３ｒｄ  ｅｄ．，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ  ２００１）は、当業者に本明細書で使用される用語の多くに対して一般的な手引書を提供する。
【００５０】
当業者は、本発明の実践に使用することができる、本明細書に記載されるものに類似するまたは同等の多くの方法および材料を認識するだろう。実際、本発明は、記載される方法および材料を決して限定するものではない。本発明の目的に関して、次の語が以下に定義される。
【００５１】
本明細書で使用される、略記「ＣＰＴ」とは、以下に示される、カンプトテシン｛（Ｓ）−４−エチル−４−ヒドロキシ−１Ｈ−ピラノ−［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４（４Ｈ，１２Ｈ）−ジオン｝を指す。本化合物は、多くの供給元、例えばＳｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏ）から商業的に入手可能である。
【化２】
2014523924.tif 000004
本明細書で使用される、「カンプトテシン類似体」とは、式Ｃ−Ｉ
【化３】
2014523924.tif 000005
の化合物を指し、式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、それぞれ、独立して、水素、またはアルキル基、アリール基、脂環式基、およびアラルキル基から選択される置換基から選択され得、飽和または不飽和され得、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄、ハロゲン等）を含有し得る。
【００５２】
本明細書で使用される、「カンプトテシンの抗酸化剤誘導体」および「抗酸化剤カンプトテシン誘導体」とは、抗酸化剤［１，２］−ジチオラン環を含有するカンプトテシンの誘導体を指す。
【００５３】
本明細書で使用される、「カンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体」および「抗酸化剤カンプトテシン類似体誘導体」とは、抗酸化剤［１，２］−ジチオラン環を含有するカンプトテシン類似体の誘導体を指す。
【００５４】
本明細書で使用される、「カンプトテシンナノ球体」および「カンプトテシンナノ球体プロドラッグ」とは、カンプトテシンの抗酸化剤誘導体またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体を含むナノ球体を指す。ナノ球体は、複数のα−リポ酸含有疎水性化合物、α−トコフェロール、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）誘導体、またはそれらの組み合わせをさらに含み得る。
【００５５】
「癌」および「癌性」とは、典型的に、未制御の細胞成長を特徴とする、哺乳類における生理学的状態を指すか、または説明する。癌の例としては、乳癌、結腸癌、肺癌、前立腺癌、肝細胞癌、胃癌、膵癌、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、泌尿器の癌、甲状腺癌、腎癌、細胞癌、メラノーマ、頭頚部癌、および脳癌（膠腫、神経膠芽腫、多形神経膠芽腫（ＧＢＭ）、乏突起神経膠腫、原始神経外胚葉性腫瘍、低度、中程度、および高度な星状細胞腫、上衣腫（例えば、粘液乳頭状上衣腫、乳頭状上衣腫、上衣下腫、未分化上衣腫）、乏突起神経膠腫、髄芽腫、髄膜腫、下垂体癌、神経芽細胞腫、および頭蓋咽頭腫を含むが、これらに限定されない）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５６】
本明細書で使用される「哺乳類」とは、哺乳類鋼のいずれかのメンバーを指し、ヒト、ならびにチンパンジーおよび他の類人猿、ならびにサル種等のヒト以外の霊長類、ウシ、ヒツジ、ブタ、ヤギ、およびウマ等の農場動物、犬およびネコ等の家畜、マウス、ラット、およびモルモット等のゲッ齒類を含む実験動物を含むが、これらに限定されない。本用語は、特定の年齢および性別を示さない。よって、成人および新生児の対象ならびに胎児は、男または女に関わらず、本用語の範囲内に含まれることが意図される。
【００５７】
本明細書に記載される、「ナノ球体」とは、少なくとも一寸法が約１０ｎｍ〜約１０００ｎｍの大きさの粒子を指し、またナノエマルションも含み得る。
【００５８】
「ナノプロドラッグ」は、本明細書を通して「ナノ球体」と交換可能に使用される。
【００５９】
本明細書で使用される、「非ステロイド性」は、類似する抗炎症作用を有するステロイドと抗炎症薬を区別する。
【００６０】
本明細書で使用される、「ＮＳＡＩＤ誘導体」とは、少なくとも１つのＮＳＡＩＤ分子が、例えばエステル化を通してポリオールに結合される化合物を指す。
【００６１】
本明細書で使用される、「ポリオール」とは、少なくとも２つのエステル化が可能な遊離ヒドロキシル基を含有する化合物を指す。
【００６２】
本明細書で使用される、「治療薬」とは、疾患もしくは障害の治療、治癒、防止、減速、または緩和が最終的にうまくいかない場合でも、疾患もしくは障害を治療する、治癒する、防止する、減速させる、または緩和するための薬として内部的もしく外部的に使用される任意の物質を指す。
【００６３】
本明細書で使用される、「治療有効量」とは、治療が求められる状態もしくは疾患状態を有する患者において、有益な結果を達成することができる量を指す。治療有効量は、個々の基準に対して決定され得、少なくとも一部、哺乳類の生理学的特性、送達系の種類、または使用される治療法、および疾患の進行に対する投与時間の配慮に基づくだろう。
【００６４】
本明細書で使用される、「治療」および「治療する」とは、治療上の処置および予防もしくは防止措置の両方を指し、目的は、治療が最終的にうまくいかない場合でも、疾患もしくは疾患状態を防止する、減速させる、および／または緩和することである。
【００６５】
頭蓋内膠腫の化学療法は、血液脳関門（ＢＢＢ）を通る治療薬の限られた送達によって妨げられる。最適な化学療法剤は、選択的に血液腫瘍関門を横断し、腫瘍に蓄積し、腫瘍内から非侵害性プロドラッグにより活性化される。ここで、発明者は、カンプトテシン（ＣＰＴ）が化学的に結合して、酸化ストレスの存在下で活性され、放出されるプロドラッグを形成する、抗癌プロドラッグ（ナノプロドラッグ）のナノメートルの大きさのアセンブリを示す。この酸化刺激応答ナノプロドラッグは、血液脳関門を通過し、多形神経膠芽腫（ＧＢＭ）に特異的に蓄積するが、健康な組織および臓器には蓄積しない。細胞内分析は、酸化したプロドラッグおよびカンプトテシンの放出を示した。ナノプロドラッグは、皮下および頭蓋内腫瘍の阻害に有効であり、ヒトＧＢＭを有する免疫不全の動物において、大幅な生存期間の延長をもたらした。
【００６６】
神経膠芽腫は、成人において最も一般的であり、攻撃型の悪性原発性脳腫瘍である。脳神経外科介入、放射線療法、および化学療法の進歩にも関わらず、神経膠芽腫の生存中央値は、診断後１５ヶ月未満にとどまる１，２。腫瘍は、通常、化学放射線療法開始の６ヶ月以内に再発する。頭蓋内膠腫の治療は、化学療法剤を有効レベルで腫瘍部位に送達することができないため制限される３。血液脳関門（ＢＢＢ）は、脳の微小血管内皮細胞によって形成される循環血液と脳組織との間の厳密に調節された接合点である。ＢＢＢは、高感度の中枢神経系（ＣＮＳ）の恒常性を維持し、末梢循環系に見られる神経毒性物質から脳を保護する４。ＢＢＢは、小さく、無電荷の脂質可溶性であるものを除き、治療薬を含む大抵の外来分子の自由な拡散を防止する５。これは、脳内への薬物送達の主な障害となっている。しかしながら、ＢＢＢの一体性は、脳腫瘍、神経変性疾患、および外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を含む、脳における多くの疾患によって大幅に妨げられる６-８。活発な腫瘍成長は、未制御の血管新生の誘発をもたらし、大きな細孔および高透過性の不完全な脈管構造をもたらす。これは、ある巨大分子およびナノ粒子がＢＢＢを通り腫瘍内に貫通し、リンパ排出の欠如により、治療レベルに蓄積することを可能にする９。この現象は、強化された透過性および保持（ＥＰＲ）作用と呼ばれ、巨大分子薬物およびナノキャリアによる受動的な腫瘍特異的標的の機会を与える１０。
【００６７】
ナノ構造材料を用いた癌療法の分野における研究は、正確な標的、改善された忍容性、および薬物の有効性に関するその可能性により、製薬業界からかなり注目を受けてきた１１。ナノ構造材料の別の利点は、安定したナノ構造内に組み込まれるとき、非水溶性治療薬が水性の生理学的環境においてより効率的に輸送され得ることである１２。カンプトテシンを用いて遭遇する主な問題は、水性環境におけるその極めて低い溶解度である。そのカルボキシレート形態はより水溶性であるが、ラクトン形態の欠如は、その抗癌作用の欠如をもたらした１３。発明者は、構造、ＲＯＳ除去能、酵素活性、放出速度論、およびＵ８７ＭＧ膠腫細胞に対する生体外抗癌有効性に関して、ＣＰＴプロドラッグ（ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ）およびα−トコフェロール（Ｔｏｃｏ）から調製されるナノプロドラッグを特徴付けた１４。本明細書に記載されるように、発明者は、ヒト皮下および頭蓋内膠腫を有する実験マウスモデルにおいて、ＣＰＴナノプロドラッグの細胞取り込み、腫瘍特異的標的、および抗腫瘍有効性を示す。
【００６８】
カンプトテシンプロドラッグは、生分解性炭酸塩およびエステル結合を導入することによって合成された（図１０）。生分解性結合は、プロドラッグ分子がエステラーゼによって加水分解により、または酵素的に分解されることを確実にする。プロドラッグおよびα−トコフェロールのナノプロドラッグへの自然乳化は、高度に疎水性プロドラッグの自由な送達に関連する問題を軽減する。プロドラッグ分子間の疎水性相互作用は、ナノ構造の一体性を維持する水性環境において、ナノプロドラッグを安定させる。さらに、ナノプロドラッグへの形質転換は、プロドラッグが生体分子と接触するとき活性化される豊富な反応表面領域を発生させ、これは、プロドラッグの活性化の速度を増加し、よって治療有効性を改善する１５。図１１ａは、ナノ粒子追跡分析（ＮＴＡ）１６によって計算されたナノプロドラッグＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ／Ｔｏｃｏの平均の大きさが、α−トコフェロールから調製されるナノ懸濁液よりわずかに大きいことを示す。このナノプロドラッグ戦略は、薬物を生分解性プロドラッグに変換し、それらをナノプロドラッグに形質転換することによる、治療用ナノ粒子を開発する多角的な方法である。
【００６９】
ナノプロドラッグの細胞取り込みを可視化するために、発明者は、Ｃｙ５．５標識されたナノプロドラッグを調製した。図１１ｂに示されるように、Ｕ８７ＭＧ膠腫細胞は、インキュベーション５時間以内で有効な細胞取り込みを示した。発明者は、α−リポ酸部分が効率的にＲＯＳを除去し、ナノプロドラッグの不安定化の加速、およびプロドラッグ活性化の増加をもたらしたことを前に示した１７。これは、ナノプロドラッグが高炎症性腫瘍組織を含む酸化環境において、より好ましく活性化されることを示唆する。ＲＯＳは、慢性炎症と癌との間の関連性に直接関与していることが報告されてきた。炎症は、豊富なＲＯＳを発生させる炎症性細胞を動員し、刺激するという理由で、腫瘍の進行、生存、および転位の重要な構成要素であることが広く認識されている１８，１９。動物モデルおよびヒトにおいて、ＲＯＳが腫瘍形成開始および進行に主な役割を果たす相当な証拠がある２０，２１。腫瘍微小環境において炎症を低減することにより、マウスモデルにおいて腫瘍の進行を阻害することが報告された２２。細胞取り込み時のＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡプロドラッグの分解を示すために、ナノプロドラッグの存在下で細胞をインキュベートし、細胞可溶化物を分析した。酸化形態のＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ（Ｐ２）およびカンプトテシン（Ｐ１）のみが細胞可溶化物において検出され（図１１ｃ）、プロドラッグの酸化がプロドラッグの活性化に先行したことを示す。
【００７０】
生体内ヒトＧＢＭ腫瘍に対するＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ／Ｔｏｃｏナノプロドラッグの標的能を解明するために、ｎｕ／ｎｕマウスは、Ｕ８７ＭＧ腫瘍異種移植片の皮下移植片を受けた。ナノプロドラッグの蓄積は腫瘍組織で生じたが、脳、肝臓、肺、心臓、および脾臓では生じなかった（図１２ａ）。図１２ｂは、ＥＰＲ作用に起因する特性である、遊離Ｃｙ５．５染料と比較したナノプロドラッグの蓄積を示す。図１２ｃは、ＣＤ３１で免疫染色された異常な腫瘍脈管構造および管周辺の明るいＣｙ５．５蛍光を示し、腫瘍血管の高度に透過性の壁を通るナノプロドラッグの血管外漏出の増加を示唆する。標的蓄積は、Ｕ８７ＭＧ膠腫の頭蓋内異種移植片においてさらに示された。脳腫瘍における蓄積は、薬物注射後３〜５時間以内に生じた（図１２ｄ）。腎臓および肝臓からの強い蛍光シグナルは、薬物注射４８時間後に消失し（図１２ｅ）、一方、脳腫瘍からのシグナルは増強し、脳腫瘍におけるナノプロドラッグの選択蓄積を示唆する。注目すべきは、ナノプロドラッグは腫瘍にのみ限定されたが、正常な脳組織には限定されなかった。この特徴は、ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ／Ｔｏｃｏナノプロドラッグが腫瘍領域のＢＢＢを通るが、腫瘍を包囲する健康な脳組織のＢＢＢを通らない能力を強調する。切開された脳腫瘍組織における蛍光分布のパターン（図１２ｆ）は、その理想的な標的特性（腫瘍床に限定された強い蓄積、隣接する健康な組織では検出されない、および高度に活性な蛇行腫瘍境界における最大局在化）を示す。Ｋｉ６７陽性細胞は腫瘍の周辺に局在化し、腫瘍が外側に向かって健康な組織内に増殖する既知の傾向を確認した。これらの領域は、強いＣＤ３１陽性細胞の領域にも関連し、強化されたナノプロドラッグ蓄積が、好ましくは、異常な腫瘍脈管構造を伴う迅速に増殖する腫瘍領域において生じたことを示唆した。
【００７１】
発明者は、侵襲性Ｕ８７ＭＧ細胞の皮下腫瘍成長に対するナノプロドラッグの有効性を検証した（図１３ａ）。統計分析は、生理食塩水およびα−トコフェロール対照群と比較して、治療群において腫瘍体積の大幅な減少を示し、一方、モル当量の臨床的に使用されたＣＰＴ類似体イリノテカンを使用したとき、大幅な減少はなかった。ナノプロドラッグは、治療２１日後、約２５０ｍｍ３に腫瘍成長を阻害し、これは、対照治療（１３５０ｍｍ３）と比較して、８０％を超える減少である。頭蓋内に移植されたＵ８７ＭＧ細胞のより臨床的に関連する正所性モデルにおいて有効であるか否かは、興味深かった。図１３ｂは、頭蓋内ＧＢＭ異種移植片を有するマウスの生存研究の結果を表す。平均生存時間は、ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ／Ｔｏｃｏナノプロドラッグ、イリノテカン、生理食塩水、およびα−トコフェロールナノ懸濁液に関して、それぞれ、７２．５日、４１．０日、４０．５日、および４１．５日であった。ナノプロドラッグは、モル当量のイリノテカンよりかなり有効であった。ナノプロドラッグ群においてのみ長期生存者がいた（対数順位、ｐ＝０．００１５）。
【００７２】
腫瘍組織におけるナノプロドラッグの高度に特異的な蓄積、続く効率的な細胞内取り込みは、多剤耐性（ＭＤＲ）と呼ばれる抗癌治療薬に対する耐性を発達させる癌の治療に関して重要なものであり得る。Ｐ糖タンパク質（Ｐｇｐ）によって媒介されるＭＤＲは、脳腫瘍において最も良く特徴付けされたＭＤＲのメカニズムである。Ｐｇｐは、脳腫瘍細胞の細胞膜および新しく形成された脳腫瘍血管の内皮細胞において発現することが分かった２３，２４。この統合膜輸送タンパク質は、薬物取り込みを阻害し、薬物の排出を促進するによって、細胞内薬物レベルを減少させる２５。飲食作用によって細胞に進入するナノ粒子の使用は、Ｐｇｐ媒介ＭＤＲを克服すると示唆されてきた。ナノ粒子がＰｇｐ媒介ＭＤＲを回避する正確なメカニズムは、まだ明らかではない。Ｐｇｐは、原形質膜に存在するときに疎水性薬物を認識するが、既に細胞質にあるときには認識しないことが示唆されてきた２６。したがって、薬物を放出することなく飲食作用によって細胞に進入するナノ粒子は、Ｐｇｐ媒介ＭＤＲを克服し得る。イリノテカンと比較した、カンプトテシンナノプロドラッグの優れた抗癌有効性は、腫瘍組織におけるナノプロドラッグの受動的蓄積（ＥＰＲ作用）および飲食作用による効率的な細胞取り込みの組み合わせによって達成される、細胞における治療薬のレベルの増加に起因し得る。この組み合わされた作用は、ナノプロドラッグに関してＰｇｐ媒介ＭＤＲを克服する一因となり得、細胞質における薬物蓄積を可能にし、一方、イリノテカンおよびその活性代謝物ＳＮ３８の両方はＰｇｐの基質である２７，２８。
【００７３】
α−リポ酸含有プロドラッグの酸化は、ナノプロドラッグの不安定化をもたらした１４，１７。この不安定化は、ナノプロドラッグの表面上の酸化したプロドラッグの親水性の増加に起因した。酸化した親水性プロドラッグは水性環境に押し出され、プロドラッグの酵素分解を可能にする（図１４ａ）。このようにして、より多くのプロドラッグは、腫瘍微小環境のナノプロドラッグの表面上で生じる酸化として、エステラーゼによって加速された様式で分解される。酸化不安定化と酵素プロドラッグ活性化との間のこの独特の相互作用は、酸化刺激応答ナノプロドラッグを特徴付ける。
【００７４】
血管新生は、腫瘍の加速された代謝的必要性に合致するために生じ、大きな細孔および高浸透性を有する欠陥脈管構造をもたらす。ＥＰＲ作用は、本質的に原発性および転移性の両方を含む大半のヒト固形腫瘍に関して明らかに記録されてきた９。機能障害性脳腫瘍脈管構造を考えると、いかなる特定の理論に拘束されるわけではないが、発明者は、膠腫モデルにおけるナノ粒子の蓄積は大半の固形腫瘍モデルの様にＥＰＲ作用に起因し得ると考える。同様に、ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ／Ｔｏｃｏナノプロドラッグは、ＥＰＲ作用を介して、脳腫瘍組織の受動的標的を可能にし得る（図１４ｂ）。増殖するときに脳軟組織内に浸潤する多形神経膠芽腫の性質により、最も活発に分割し、侵入し、血管新生を誘発する腫瘍領域は縁部であり、一方、壊死は膠腫の中心で見られる２９。脈管構造のこの進行は、腫瘍塊と健康な細胞との間の縁部の高ＣＤ３１＋蛍光によって確認される（図１２ｆ）。ナノプロドラッグの蛍光は、最適な有効性をもたらす、腫瘍が活発に拡大する新しい血管新生の領域で増加する。癌幹細胞は血管周囲の適所に存在することが示され、この送達パターンはこの毒性のある腫瘍細胞のサブセットを特異的に標的とし得る３０。
【００７５】
要約すると、発明者は、皮下および頭蓋内膠腫の両方のモデルにおいて、膠腫異種移植片における血管の増加した透過性が粒子状の治療用のカンプトテシンのナノプロドラッグに血管を通過させ、選択的にそれを蓄積させることを示した。発明者は、モル当量の現在使用される臨床形態のＣＰＴであるイリノテカンと比較して、このナノプロドラッグの増加した腫瘍特異的送達および有効性を示した。化学療法剤のＲＯＳ感受性放出のこのプラットフォームは、非常に安全なプロファイルを可能にし得る。発明者は、他の化学療法剤ならびに他の治療薬をこのナノプロドラッグプラットフォーム内に操作した。このプラットフォームは、炎症に関連する酸化環境における部位特異的放出用の多くの薬剤に適応する。
【００７６】
本発明の様々な実施形態は、両親媒性スペーサー上に治療薬または診断薬を含む様々なナノ球体を提供する。本発明の他の実施形態は、両親媒性ポリマー上に治療薬または診断薬を含むナノ球体を提供する。
【００７７】
ナノ球体
様々な実施形態では、ナノ球体は、抗酸化ナノ球体である。
【００７８】
ある実施形態では、ナノ球体は、トコフェロールを用いて形成される。よって、ある実施形態では、ナノ球体はトコフェロールを含む。
【００７９】
α−リポ酸含有ナノ球体
ある実施形態では、ナノ球体は、抗酸化剤α−リポ酸含有疎水性化合物を用いて形成される。よって、ある実施形態では、ナノ球体は、抗酸化剤α−リポ酸含有疎水性化合物を含む。これらの化合物は、米国仮出願第６１／０１８，７４９号（２００８年１月３日出願）、および国際出願公開第ＷＯ２００９／０８６５４７号（２００８年１２月３０日出願）に開示され、完全に記載されるかのように、参照によりその全体が組み込まれる。これらの抗酸化剤α−リポ酸含有疎水性化合物の例としては、これに限定されないが、次の
式Ａ−Ｉａ
【化４】
2014523924.tif 000006
によって表される抗酸化剤α−リポ酸含有疎水性化合物が挙げられ、式中、Ｘは、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖からなる群から選択され得、任意に、ヘテロ原子を含有し得、Ｙは、分枝状および非分枝状のアルキル基、分枝状および非分枝状のアルケニル基、分枝状および非分枝状のアルキニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルケニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキニル基、アリール基、環式脂肪族基、環式芳香族基、複素環式基、および芳香族複素環式基からなる群から選択され得、ｎは、少なくとも１の整数であり得る。特定の実施形態では、ｎは、１〜４の整数であり得、Ｘは、非置換、非分枝状の１〜６個の炭素原子の鎖であり得る。
【００８０】
一実施形態では、式Ｉａのジチオラン部分は、α−リポ酸であり得、式Ａ−ＩＩａ
【化５】
2014523924.tif 000007
によって表される。
【００８１】
様々な実施形態では、Ｙは、ポリオールのヒドロキシル基のエステル化によって形成される部分であり得る。様々な実施形態では、ポリオールは、
【化６】
2014523924.tif 000008
（式中、ｎは、１〜４の整数である）、および
【化７】
2014523924.tif 000009
（式中、ｎは、３〜１６の整数である）からなる群から選択され得る。
【００８２】
特に有用な複数のα−リポ酸含有疎水性化合物の一例は、次の
【化８】
2014523924.tif 000010
として表される。
【００８３】
ＮＳＡＩＤナノ球体
ある実施形態では、ナノ球体は、疎水性ＮＳＡＩＤ誘導体を用いて形成される。よって、ある実施形態では、ナノ球体は、疎水性ＮＳＡＩＤ誘導体を含む。ある実施形態では、ナノ球体は、ＮＳＡＩＤの疎水性抗酸化剤および抗炎症誘導体を用いて形成される。よって、ある実施形態では、ナノ球体は、ＮＳＡＩＤの疎水性抗酸化剤および抗炎症誘導体を含む。
【００８４】
国際出願公開第ＷＯ２００９／１４８６９８号は、ＮＳＡＩＤの疎水性ＮＳＡＩＤ誘導体ならびに疎水性抗酸化剤および抗炎症誘導体の例を提供し、その全体が完全に記載されるかのように、参照により本明細書に組み込まれる。
【００８５】
ＮＳＡＩＤ誘導体およびナノ球体
本発明の様々な実施形態は、ＮＳＡＩＤの疎水性誘導体（「ＮＳＡＩＤ誘導体」）を含むＮＳＡＩＤナノ球体を使用する。一実施形態では、本発明のＮＳＡＩＤナノ球体は、長期間の間ＮＳＡＩＤ誘導体を放出することができ、よって、ＮＳＡＩＤによって生じる有害な胃腸副作用を減少させる。
【００８６】
ＮＳＡＩＤナノ球体は、ＮＳＡＩＤの誘導体（「ＮＳＡＩＤ誘導体」）を含む。本発明の疎水性ＮＳＡＩＤ誘導体は、式Ｂ−Ｉ
【化９】
2014523924.tif 000011
によって表すことができ、式中、Ａは、分枝状および非分枝状のアルキル基、分枝状および非分枝状のアルケニル基、分枝状および非分枝状のアルキニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルケニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキニル基、アリール基、環式脂肪族基、環式芳香族基、複素環式基、および芳香族複素環式基からなる群から選択され、ｎは、少なくとも２の整数であり、特定の実施形態では、ｎは、２〜４の整数であり得る。様々な実施形態では、Ａは、ポリオール上の少なくとも２つのエステル化が可能な遊離ヒドロキシル基のエステル化によって形成される部分である。
【００８７】
様々な実施形態では、本発明において有用であるポリオールは、次の商業的に入手可能なジオールを含む。
【化１０】
2014523924.tif 000012
（式中、ｎは、１〜６の整数である）
【化１１】
2014523924.tif 000013
（式中、ｎは、３〜１６の整数である）。
【００８８】
他の実施形態では、ポリオールは、下に示す商業的に入手可能なポリオールから選択され得る。
【表１−１】
2014523924.tif 000014
【表１−２】
2014523924.tif 000015
【表１−３】
2014523924.tif 000016
【００８９】
ＮＳＡＩＤは、カルボン酸を含有する非ステロイド性抗炎症薬であり得る。ＮＳＡＩＤは当該技術分野において周知であり、当業者は、過度の実験なしにＮＳＡＩＤを容易に選択することができるだろう。ＮＳＡＩＤのカルボキシル基は、加水分解性結合を介して一時的に遮蔽され、したがって、プロドラッグとして機能し得、副作用を減らし、薬物の制御放出および持続放出においても利点を有する。
【００９０】
ＮＳＡＩＤの例としては、アスピリン、イブプロフェン、フルルビプロフェン、ケトプロフェン、フェノプロフェン、フェンブフェン、ナプロキセン、インドメタシン、ジクロフェナク、ケトロラク、トルメチン、フルフェナム酸、メフェナム酸、トルフェナム酸、メクロフェナム酸、ニフルミン酸、スリンダク、およびスリンダク硫化物が挙げられるが、これらに限定されない。
【化１２】
2014523924.tif 000017
【００９１】
そのようなものとして、特に有用なＮＳＡＩＤの疎水性誘導体の例は、次の式によって表される。
エチレングリコール（アスピリン）２
【化１３】
2014523924.tif 000018
１，６−ヘキサンジオール（アスピリン）２
【化１４】
2014523924.tif 000019
ジエチレングリコール（アスピリン）２
【化１５】
2014523924.tif 000020
１，１２−ドデカンジオール（アスピリン）２
【化１６】
2014523924.tif 000021
テトラエチレングリコール（アスピリン）２
【化１７】
2014523924.tif 000022
テトラエチレングリコール（イブプロフェン）２
【化１８】
2014523924.tif 000023
テトラエチレングリコール（ナプロキセン）２
【化１９】
2014523924.tif 000024
テトラエチレングリコール（インドメタシン）２
【化２０】
2014523924.tif 000025
テトラエチレングリコール（フルフェナム酸）２
【化２１】
2014523924.tif 000026
テトラエチレングリコール（スリンダク）２
【化２２】
2014523924.tif 000027
テトラエチレングリコール（スリンダク硫化物）２
【化２３】
2014523924.tif 000028
テトラエチレングリコール（フルルビプロフェン）２
【化２４】
2014523924.tif 000029
［１，４−ビス（２−ヒドロキシエチル）−ピペラジン］（アスピリン）２
【化２５】
2014523924.tif 000030
１，４−シクロヘキサンジオール（アスピリン）２
【化２６】
2014523924.tif 000031
トリエタノールアミン（アスピリン）３
【化２７】
2014523924.tif 000032
【００９２】
複数のＮＳＡＩＤ含有疎水性化合物の合成のための一般スキームおよびＮＳＡＩＤナノ球体の調製は、後の実施例において記載される。ナノ球体は、エステラーゼによる酵素加水分解時に遊離ＮＳＡＩＤの持続放出を示した。
【００９３】
抗酸化剤および抗炎症誘導体ならびにナノ球体
本発明の様々な実施形態は、抗酸化剤およびＮＳＡＩＤナノ球体を使用する。一実施形態では、抗酸化剤およびＮＳＡＩＤナノ球体は、長期間の間、ＮＳＡＩＤを放出することができる。
【００９４】
本発明の疎水性抗酸化剤およびＮＳＡＩＤの抗炎症誘導体は、式Ｂ−ＩＩ
【化２８】
2014523924.tif 000033
によって表すことができ、式中、Ｘは、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖からなる群から選択され、任意に、ヘテロ原子を含有し得、Ａは、分枝状および非分枝状のアルキル基、分枝状および非分枝状のアルケニル基、分枝状および非分枝状のアルキニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルケニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキニル基、アリール基、環式脂肪族基、環式芳香族基、複素環式基、および芳香族複素環式基からなる群から選択され、ｎは、少なくとも１の整数であり、ｍは、少なくとも１の整数である。一実施形態では、Ｘは、非置換、非分枝状の４個の炭素原子の鎖であり得る。様々な実施形態では、Ａは、ポリオール上の少なくとも２つのエステル化が可能な遊離ヒドロキシル基のエステル化によって形成される部分である。ポリオールは、当該技術分野において既知の任意のポリオールであり得、上述される通りである。ＮＳＡＩＤは、当該技術分野において既知の任意のＮＳＡＩＤであり得、上述される通りである。
【００９５】
一実施形態では、［１，２］−ジチオラン部分は、α−リポ酸（「ＡＬＡ」）からであり、よって、本発明の抗酸化剤およびＮＳＡＩＤ誘導体は、式Ｂ−ＩＩＩ
【化２９】
2014523924.tif 000034
によって表すことができる。したがって、抗酸化剤およびＮＳＡＩＤナノ球体は、ＮＳＡＩＤの誘導体およびα−リポ酸を含む。
【００９６】
特に有用な疎水性抗酸化剤およびＮＳＡＩＤ誘導体の例は、次の式によって表される。
（α−リポ酸）−ジエチレングリコール（イブプロフェン）
【化３０】
2014523924.tif 000035
（α−リポ酸）−ジエチレングリコール（ナプロキセン）
【化３１】
2014523924.tif 000036
（α−リポ酸）−ジエチレングリコール（スリンダク）
【化３２】
2014523924.tif 000037
（α−リポ酸）−ジエチレングリコール（スリンダク硫化物）
【化３３】
2014523924.tif 000038
（α−リポ酸）−ジエチレングリコール（フルルビプロフェン）
【化３４】
2014523924.tif 000039
（α−リポ酸）−ジエチレングリコール（イブプロフェン）
【化３５】
2014523924.tif 000040
（α−リポ酸）−ジエチレングリコール（フルフェナム酸）
【化３６】
2014523924.tif 000041
（α−リポ酸）−テトラエチレングリコール（ナプロキセン）
【化３７】
2014523924.tif 000042
（α−リポ酸）−テトラエチレングリコール（スリンダク）
【化３８】
2014523924.tif 000043
（α−リポ酸）−テトラエチレングリコール（スリンダク硫化物）
【化３９】
2014523924.tif 000044
（α−リポ酸）−テトラエチレングリコール（フルルビプロフェン）
【化４０】
2014523924.tif 000045
【００９７】
α−リポ酸およびＮＳＡＩＤ含有疎水性化合物の合成の一般スキームおよび本発明の抗酸化剤およびＮＳＡＩＤナノ球体の調製は、後の実施例において記載される。ナノ球体の抗酸化活性は、ＨＯＣｌ除去アッセイによって示された。
【００９８】
ＣＰＴナノ球体
ある実施形態では、ナノ球体は、カンプトテシンの抗酸化剤誘導体またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体を用いて形成される。よって、ある実施形態では、ナノ球体は、カンプトテシンの誘導体またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体を含む。
【００９９】
一実施形態では、カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体は、式Ｃ−ＩＩ
【化４１】
2014523924.tif 000046
によって、表すことができ、式中、ＡおよびＢは、独立して、―ＯＣ（Ｏ）―、―ＯＣ（Ｏ）Ｏ―、および―ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）―からなる群から選択され得、式中、Ｒが、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり得、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄等）を含有し得、ＸおよびＹは、それぞれ、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖であり得るリンカーであり得、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄等）含有し得、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、それぞれ、独立して、水素、またはアルキル基、アリール基、脂環式基、およびアラルキル基から選択される置換基から選択され得、飽和または不飽和され得、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄、ハロゲン等）を含有し得る。
【０１００】
一実施形態では、カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体は、カンプトテシンまたはカンプトテシン類似体とα−リポ酸との抱合によって調製され、式Ｃ−ＩＩＩ
【化４２】
2014523924.tif 000047
によって表され、式中、Ａは、―ＯＣ（Ｏ）―、―ＯＣ（Ｏ）Ｏ―、および―ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）―からなる群から選択され得、式中、Ｒは、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり得、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄等）を含み得、Ｐは、―ＯＣ（Ｏ）―および―Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）―からなる群から選択され得、式中、Ｒは、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり得、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄等）を含み得、Ｘは、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖であり得るリンカーであり得、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄等）を含み得、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、それぞれ、独立して、水素、またはアルキル基、アリール基、脂環式基、およびアラルキル基から選択される置換基から選択され得、飽和または不飽和され得、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄、ハロゲン等）を含有し得る。
【０１０１】
別の実施形態では、カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体は、ジオールを介して、カンプトテシンまたはカンプトテシン類似体とα−リポ酸との抱合によって調製され、式Ｃ−ＩＶ
【化４３】
2014523924.tif 000048
によって表され、式中、Ｌ１は、ジオール上の２つのエステル化が可能な遊離ヒドロキシル基のエステル化によって形成される部分であり得、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、それぞれ、独立して、水素、またはアルキル基、アリール基、脂環式基、およびアラルキル基から選択される置換基から選択され得、飽和または不飽和され得、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄、ハロゲン等）を含有し得る。
【０１０２】
様々な実施形態では、本発明に有用であるジオールは、次の式
【化４４】
2014523924.tif 000049
によって表すことができ、式中、Ｗは、炭化水素基、例えば、アルキル基、アリール基、脂環式基、またはアラルキル基であり得、飽和または不飽和され得る。Ｗは、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄等）も含有し得る。
【０１０３】
ジオールのさらなる例としては、表１０のものである。本発明に有用であるジオールのさらなる例としては、次の商業的に入手可能であるものが挙げられるが、これらに限定されない。
【化４５】
2014523924.tif 000050
（式中、ｎは、１〜１００の整数である）
【化４６】
2014523924.tif 000051
（式中、ｎは、２〜１２の整数である）
１，４−ビス（２−ヒドロキシエチル）−ピペラジン
【化４７】
2014523924.tif 000052
１，３−シクロペンタンジオール
【化４８】
2014523924.tif 000053
１，４−シクロヘキサンジオール
【化４９】
2014523924.tif 000054
【０１０４】
本実施形態の特に有用なカンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体の例は、次の式
式Ｃ−Ｖ
【化５０】
2014523924.tif 000055
式Ｃ−ＶＩ
【化５１】
2014523924.tif 000056
式Ｃ−ＶＩＩ
【化５２】
2014523924.tif 000057
式Ｃ−ＶＩＩＩ
【化５３】
2014523924.tif 000058
式Ｃ−ＩＸ
【化５４】
2014523924.tif 000059
式Ｃ−Ｘ
【化５５】
2014523924.tif 000060
によって表され、式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、それぞれ、独立して、水素、またはアルキル基、アリール基、脂環式基、およびアラルキル基から選択される置換基から選択され得、飽和または不飽和され得、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄、ハロゲン等）を含有し得る。
【０１０５】
例示的な一化合物およびその合成を下に示す。
【化５６】
2014523924.tif 000061
【０１０６】
別の実施形態では、カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体は、ジアミンを介して、カンプトテシンまたはカンプトテシン類似体とα−リポ酸との抱合によって調製され、式Ｃ−ＸＩ
【化５７】
2014523924.tif 000062
によって表され、式中、Ｌ２は、抗酸化剤カンプトテシン誘導体または抗酸化剤カンプトテシン類似体誘導体を生成するプロセスにおいて、リンカーとしてジアミンを使用することによって形成される部分であり得、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は、それぞれ、独立して、水素、またはアルキル基、アリール基、脂環式基、およびアラルキル基から選択される置換基から選択され得、飽和または不飽和され得、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄、ハロゲン等）を含有し得る。
【０１０７】
一実施形態では、本発明に有用であるジアミンは、次の式
【化５８】
2014523924.tif 000063
によって表すことができ、式中、Ｘは、炭化水素基、例えば、アルキル基、アリール基、脂環式基、またはアラルキル基であり得、飽和または不飽和され得る。Ｘは、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄等）も含有し得る。
【０１０８】
他の実施形態では、本発明の化合物に有用であるジアミンは、次の商業的に入手可能なものを含むが、これらに限定されない。
【化５９】
2014523924.tif 000064
（式中、ｎは１〜１００の整数である）
【化６０】
2014523924.tif 000065
（式中、ｎは、２〜１２の整数である）
【０１０９】
本実施形態の特に有用なカンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体の例は、次の式
式Ｃ−ＸＩＩ
【化６１】
2014523924.tif 000066
式Ｃ−ＸＩＩＩ
【化６２】
2014523924.tif 000067
式Ｃ−ＸＩＶ
【化６３】
2014523924.tif 000068
式Ｃ−ＸＶ
【化６４】
2014523924.tif 000069
式Ｃ−ＸＶＩ
【化６５】
2014523924.tif 000070
式Ｃ−ＸＶＩＩ
【化６６】
2014523924.tif 000071
によって表され、式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、それぞれ、独立して、水素、またはアルキル基、アリール基、脂環式基、およびアラルキル基から選択される置換基から選択され得、飽和または不飽和され得、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄、ハロゲン等）を含有し得る。
【０１１０】
例示的な一化合物およびその合成を下に示す。
【化６７】
2014523924.tif 000072
【０１１１】
別の実施形態では、カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体は、アミノアルコールを介して、カンプトテシンまたはカンプトテシン類似体とα−リポ酸との抱合によって調製され、式Ｃ−ＸＶＩＩＩ
【化６８】
2014523924.tif 000073
によって表され、式中、Ｌ３は、抗酸化剤カンプトテシン誘導体または抗酸化剤カンプトテシン類似体誘導体を生成するプロセスにおいて、リンカーとしてアミノアルコールを使用することによって形成される部分であり得、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、それぞれ、独立して、水素、またはアルキル基、アリール基、脂環式基、およびアラルキル基から選択される置換基から選択され得、飽和または不飽和され得、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄、ハロゲン等）を含有し得る。
【０１１２】
本発明に有用であるアミノアルコールは、次の式
【化６９】
2014523924.tif 000074
によって表すことができ、式中、Ｙは、炭化水素基、例えば、アルキル基、アリール基、脂環式基、またはアラルキル基であり得、飽和または不飽和され得る。Ｙは、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄等）も含有し得る。
【０１１３】
本発明の化合物に有用であるアミノアルコールの例としては、次の商業的に入手可能であるものが挙げられるが、これらに限定されない。
【化７０】
2014523924.tif 000075
（式中、ｎは、１〜１００の整数である）
【化７１】
2014523924.tif 000076
（式中、ｎは、２〜１２の整数である）
【０１１４】
本実施形態の特に有用なカンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体の例は、次の式
式Ｃ−ＸＩＸ
【化７２】
2014523924.tif 000077
式Ｃ−ＸＸ
【化７３】
2014523924.tif 000078
式Ｃ−ＸＸＩ
【化７４】
2014523924.tif 000079
式Ｃ−ＸＸＩＩ
【化７５】
2014523924.tif 000080
式Ｃ−ＸＸＩＩＩ
【化７６】
2014523924.tif 000081
式Ｃ−ＸＸＩＶ
【化７７】
2014523924.tif 000082
によって表され、式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、それぞれ、独立して、水素、またはアルキル基、アリール基、脂環式基、およびアラルキル基から選択される置換基から選択され得、飽和または不飽和され得、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄、ハロゲン等）を含有し得る。
【０１１５】
例示的な一化合物およびその合成を下に示す。
【化７８】
2014523924.tif 000083
【０１１６】
本発明のさらなる実施形態は、次の化合物
化合物Ｃ−１３
【化７９】
2014523924.tif 000084
化合物Ｃ−１４
【化８０】
2014523924.tif 000085
化合物Ｃ−１５
【化８１】
2014523924.tif 000086
化合物Ｃ−１６
【化８２】
2014523924.tif 000087
化合物Ｃ−１７
【化８３】
2014523924.tif 000088
化合物Ｃ−１８
【化８４】
2014523924.tif 000089
化合物Ｃ−１９
【化８５】
2014523924.tif 000090
化合物Ｃ−２０
【化８６】
2014523924.tif 000091
化合物Ｃ−２１
【化８７】
2014523924.tif 000092
化合物Ｃ−２２
【化８８】
2014523924.tif 000093
を提供する。
【０１１７】
別の実施形態では、カンプトテシン類似体は、無水コハク酸または無水グルタル酸と反応させることによって修飾され、カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体は、α−リポ酸と修飾されたカンプトテシンまたはカンプトテシン類似体との抱合によって調製される。例示的な一化合物およびその合成を下に示す。
【化８９】
2014523924.tif 000094
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、それぞれ、独立して、水素、またはアルキル基、アリール基、脂環式基、およびアラルキル基から選択される置換基から選択され得、飽和または不飽和され得、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄、ハロゲン等）を含有し得る。
【０１１８】
特に有用なカンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体のさらなる例は、次の式
式Ｃ−ＸＸＶＩ
【化９０】
2014523924.tif 000095
式Ｃ−ＸＸＶＩＩ
【化９１】
2014523924.tif 000096
式Ｃ−ＸＸＶＩＩＩ
【化９２】
2014523924.tif 000097
式Ｃ−ＸＸＩＸ
【化９３】
2014523924.tif 000098
式Ｃ−ＸＸＸ
【化９４】
2014523924.tif 000099
式Ｃ−ＸＸＸＩ
【化９５】
2014523924.tif 000100
式Ｃ−ＸＸＸＩＩ
【化９６】
2014523924.tif 000101
式Ｃ−ＸＸＸＩＩＩ
【化９７】
2014523924.tif 000102
式Ｃ−ＸＸＸＩＶ
【化９８】
2014523924.tif 000103
式Ｃ−ＸＸＸＶ
【化９９】
2014523924.tif 000104
式Ｃ−ＸＸＶＩ
【化１００】
2014523924.tif 000105
式Ｃ−ＸＸＸＶＩＩ
【化１０１】
2014523924.tif 000106
式Ｃ−ＸＸＸＶＩＩＩ
【化１０２】
2014523924.tif 000107
式Ｃ−ＸＸＸＩＸ
【化１０３】
2014523924.tif 000108
式Ｃ−ＸＬ
【化１０４】
2014523924.tif 000109
式Ｃ−ＸＬＩ
【化１０５】
2014523924.tif 000110
式Ｃ−ＸＬＩＩ
【化１０６】
2014523924.tif 000111
式Ｃ−ＸＬＩＩＩ
【化１０７】
2014523924.tif 000112
式Ｃ−ＸＬＩＶ
【化１０８】
2014523924.tif 000113
式Ｃ−ＸＬＶ
【化１０９】
2014523924.tif 000114
によって表され、式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、それぞれ、独立して、水素、またはアルキル基、アリール基、脂環式基、およびアラルキル基から選択される置換基から選択され得、飽和または不飽和され得、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄、ハロゲン等）を含有し得る。
【０１１９】
特定の一実施形態では、上述の式および／または化合物のＲ１〜Ｒ５のそれぞれは、Ｈであり、下に示される。
【化１１０】
2014523924.tif 000115
【０１２０】
カンプトテシンの抗酸化剤誘導体およびカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体の合成の一般スキームならびに抗酸化剤−抗腫瘍ナノ球体の調製は、後の実施例において記載される。合成手順は、単純でもあり、用途も広く、大きさおよび疎水性が様々なカンプトテシンの抗酸化剤誘導体およびカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体の合成をもたらす。
【０１２１】
スタチン誘導体およびナノ球体
ある実施形態では、ナノ球体は、スタチン誘導体を用いて形成される。よって、ある実施形態では、ナノ球体は、スタチン系薬剤の誘導体を含む。
【０１２２】
一実施形態では、スタチン誘導体は、式Ｄ−Ｉ
【化１１１】
2014523924.tif 000116
によって表すことができ、ＡおよびＢは、独立して、―ＯＣ（Ｏ）―、―ＯＣ（Ｏ）Ｏ―、および―ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）―からなる群から選択され得、式中、Ｒは、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり得、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄等）を含有し得、ＸおよびＹは、それぞれ、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖であり得るリンカーであり得、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄等）含有し得、ＳＬは、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなる群からのスタチンラクトンから選択され得る。
【化１１２】
2014523924.tif 000117
【０１２３】
一実施形態では、スタチン誘導体は、スタチンとα−リポ酸との抱合によって調製され、式Ｄ−ＩＩ
【化１１３】
2014523924.tif 000118
によって表され、式中、Ａは、―ＯＣ（Ｏ）―、―ＯＣ（Ｏ）Ｏ―、および―ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）―からなる群から選択され得、式中、Ｒは、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり得、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄等）を含み得、Ｐは、―ＯＣ（Ｏ）―および―Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）―からなる群から選択され得、式中、Ｒは、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり得、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄等）を含み得、Ｘは、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖であり得るリンカーであり得、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄等）を含み得、ＳＬは、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなる群からのスタチンラクトンから選択され得る。
別の実施形態では、スタチンの抗酸化剤誘導体は、ジオールを介して、スタチンラクトンとα−リポ酸との抱合によって調製され、式Ｄ−ＩＩＩ
【化１１４】
2014523924.tif 000119
によって表され、式中、Ｌ１は、ジオール上の２つのエステル化が可能な遊離ヒドロキシル基のエステル化によって形成される部分であり得、ＳＬは、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなる群からのスタチンラクトンから選択され得る。
【０１２４】
様々な実施形態では、本発明に有用であるジオールは、次の式
【化１１５】
2014523924.tif 000120
によって表すことができ、式中、Ｗは、炭化水素基、例えば、アルキル基、アリール基、脂環式基、またはアラルキル基であり得、飽和または不飽和され得る。Ｗは、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄等）も含有し得る。
【０１２５】
ジオールのさらなる例としては、表１０のものである。さらに、本発明に有用であるジオールの例としては、次の商業的に入手可能であるものが挙げられるが、これらに限定されない。
【化１１６】
2014523924.tif 000121
（式中、ｎは、１〜１００の整数である）
【化１１７】
2014523924.tif 000122
（式中、ｎは、２〜１２の整数である）
１，４−ビス（２−ヒドロキシエチル）−ピペラジン
【化１１８】
2014523924.tif 000123
１，３−シクロペンタンジオール
【化１１９】
2014523924.tif 000124
１，４−シクロヘキサンジオール
【化１２０】
2014523924.tif 000125
【０１２６】
本実施形態のスタチン系薬剤の特に有用な誘導体の例は、ロバスタチンを使用する次の式によって表される。
化合物Ｄ−４７
【化１２１】
2014523924.tif 000126
化合物Ｄ−４８
【化１２２】
2014523924.tif 000127
化合物Ｄ−４８
【化１２３】
2014523924.tif 000128
化合物Ｄ−５０
【化１２４】
2014523924.tif 000129
化合物Ｄ−５１
【化１２５】
2014523924.tif 000130
化合物Ｄ−５２
【化１２６】
2014523924.tif 000131
【０１２７】
別の実施形態では、スタチン誘導体は、ジアミンを介して、スタチンラクトンとα−リポ酸との抱合によって調製され、式Ｄ−ＩＶ
【化１２７】
2014523924.tif 000132
によって表され、式中、Ｌ２は、スタチンラクトンの誘導体を生成するプロセスにおいて、リンカーとしてジアミンを使用することによって形成される部分であり得、ＳＬは、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなるスタチンラクトンから選択され得る。
【０１２８】
一実施形態では、本発明に有用であるジアミンは、次の式
【化１２８】
2014523924.tif 000133
によって表すことができ、式中、Ｘは、炭化水素基、例えば、アルキル基、アリール基、脂環式基、またはアラルキル基であり得、飽和または不飽和され得る。Ｘは、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄等）も含有し得る。
【０１２９】
他の実施形態では、本発明の化合物に有用であるジアミンは、次の商業的に入手可能なものを含むが、これらに限定されない。
【化１２９】
2014523924.tif 000134
（式中、ｎは、１〜１００の整数である）
【化１３０】
2014523924.tif 000135
（式中、ｎは、２〜１２の整数である）
【０１３０】
本実施形態のスタチンラクトンの特に有用な誘導体の例は、ロバスタチンを使用する次の化合物によって表される。
化合物Ｄ−５３
【化１３１】
2014523924.tif 000136
化合物Ｄ−５４
【化１３２】
2014523924.tif 000137
化合物Ｄ−５５
【化１３３】
2014523924.tif 000138
化合物Ｄ−５６
【化１３４】
2014523924.tif 000139
化合物Ｄ−５７
【化１３５】
2014523924.tif 000140
化合物Ｄ−５８
【化１３６】
2014523924.tif 000141
【０１３１】
別の実施形態では、スタチンラクトンの誘導体は、アミノアルコールを介して、スタチンラクトンとα−リポ酸との抱合によって調製され、式Ｄ−Ｖ
【化１３７】
2014523924.tif 000142
によって表され、式中、Ｌ３は、スタチンラクトン誘導体を生成するプロセスにおいて、リンカーとしてアミノアルコールを使用することによって形成される部分であり得、ＳＬは、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなる群からのスタチンラクトンから選択され得る。
【０１３２】
一実施形態では、本発明に有用であるアミノアルコールは、次の式
【化１３８】
2014523924.tif 000143
によって表すことができ、式中、Ｙは、炭化水素基、例えば、アルキル基、アリール基、脂環式基、またはアラルキル基であり得、飽和または不飽和され得る。Ｙは、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄等）も含有し得る。
【０１３３】
本発明の化合物に有用であるアミノアルコールの例としては、次の商業的に入手可能であるものが挙げられるが、これらに限定されない。
【化１３９】
2014523924.tif 000144
（式中、ｎは、１〜１００の整数である）
【化１４０】
2014523924.tif 000145
（式中、ｎは、２〜１２の整数である）
【０１３４】
本実施形態のスタチンラクトンの特に有用な誘導体の例は、次の化合物によって表される。
化合物Ｄ−５９
【化１４１】
2014523924.tif 000146
化合物Ｄ−６０
【化１４２】
2014523924.tif 000147
化合物Ｄ−６１
【化１４３】
2014523924.tif 000148
化合物Ｄ−６２
【化１４４】
2014523924.tif 000149
化合物Ｄ−６３
【化１４５】
2014523924.tif 000150
化合物Ｄ−６４
【化１４６】
2014523924.tif 000151
化合物Ｄ−６５
【化１４７】
2014523924.tif 000152
化合物Ｄ−６６
【化１４８】
2014523924.tif 000153
化合物Ｄ−６７
【化１４９】
2014523924.tif 000154
化合物Ｄ−６８
【化１５０】
2014523924.tif 000155
化合物Ｄ−６９
【化１５１】
2014523924.tif 000156
化合物Ｄ−７０
【化１５２】
2014523924.tif 000157
【０１３５】
本発明のさらなる実施形態は、次の化合物
化合物Ｄ−１３
【化１５３】
2014523924.tif 000158
化合物Ｄ−１４
【化１５４】
2014523924.tif 000159
化合物Ｄ−１５
【化１５５】
2014523924.tif 000160
化合物Ｄ−１６
【化１５６】
2014523924.tif 000161
化合物Ｄ−１７
【化１５７】
2014523924.tif 000162
化合物Ｄ−１８
【化１５８】
2014523924.tif 000163
を提供する。
【０１３６】
別の実施形態では、スタチン誘導体は、スタチンラクトンおよびスペーサー分子の抱合によって調製され、式Ｄ−ＶＩ
【化１５９】
2014523924.tif 000164
によって表され、式中、ＡおよびＰは、独立して、―ＯＣ（Ｏ）―、―ＯＣ（Ｏ）Ｏ―、および―ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）―からなる群から選択され得、式中、Ｒは、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり得、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄等）を含有し得、Ｘは、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖であり得るリンカーであり得、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄等）を含有し得、ＳＬ１およびＳＬ２は、独立して、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなる群からのスタチンラクトンから選択され得る。
【０１３７】
本実施形態のスタチンラクトンの特に有用な誘導体の例は、次の式によって表される。
化合物Ｄ−１９
【化１６０】
2014523924.tif 000165
化合物Ｄ−２０
【化１６１】
2014523924.tif 000166
化合物Ｄ−２１
【化１６２】
2014523924.tif 000167
化合物Ｄ−２２
【化１６３】
2014523924.tif 000168
化合物Ｄ−２３
【化１６４】
2014523924.tif 000169
化合物Ｄ−２４
【化１６５】
2014523924.tif 000170
化合物Ｄ−２５
【化１６６】
2014523924.tif 000171
化合物Ｄ−２６
【化１６７】
2014523924.tif 000172
化合物Ｄ−２７
【化１６８】
2014523924.tif 000173
化合物Ｄ−２８
【化１６９】
2014523924.tif 000174
化合物Ｄ−２９
【化１７０】
2014523924.tif 000175
化合物Ｄ−３０
【化１７１】
2014523924.tif 000176
化合物Ｄ−３１
【化１７２】
2014523924.tif 000177
化合物Ｄ−３２
【化１７３】
2014523924.tif 000178
【０１３８】
スタチンの誘導体の合成の一般スキームおよびナノ球体の調製は、後の実施例において記載される。合成手順は、単純でもあり、用途も広く、大きさおよび疎水性が様々なスタチン系薬剤の誘導体の合成をもたらす。
【０１３９】
治療薬
様々な実施形態では、治療薬は、化学療法剤またはスタチンである。化学療法剤は、パクリタキセル、ドキソルビシン、テモゾロミド、５−フルオロウラシル、カンプトテシン、およびそれらの組み合わせからなる群から選択され得、スタチンは、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなるスタチンラクトンから選択され得る。様々な実施形態では、治療薬は、ペプチド、アンチセンス核酸、ＤＮＡ、ＲＮＡ、タンパク質、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される。外傷性脳損傷を治療するための特定の実施形態では、治療薬は、ＮＳＡＩＤ、スタチン、エリスロポエチン、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【０１４０】
両親媒性スペーサー
本開示に使用される親水性または疎水性スペーサーは、１つの分子に親水性または疎水性部分を含む分子であり、治療薬、診断薬、または治療薬、診断薬もしくは別のスペーサー分子でそれを抱合することによる別のスペーサーの担体として使用され得る一端または両端上の化学的に活性の官能基をさらに含む。
【０１４１】
本開示に使用される両親媒性スペーサーは、１つの分子中に親水性部分および疎水性部分の両方を含む分子であり、親水性部分は、治療薬もしくは診断薬でそれを抱合することにより、治療薬または診断薬の担体として使用され得る化学的に活性の官能基をさらに含む。様々な実施形態では、化学的に活性の官能基は、チオール、アミン、カルボン酸、カルボン酸ＮＨＳエステル、マレイミド、ヒドラジン、ケトン、およびアルデヒドからなる群から選択され得る。本開示に使用される両親媒性スペーサーは、親水性スペーサーを疎水性スペーサーで抱合することによって作製することもできる。親水性部分の端部は、治療薬もしくは診断薬でそれを抱合することにより、治療薬または診断薬の担体として使用され得る化学的に活性の官能基をさらに含む。
【０１４２】
様々な実施形態では、両親媒性スペーサーは、疎水性部分および親水性部分を含む。様々な実施形態では、両親媒性スペーサーの疎水性部分は、分枝状および非分枝状のアルキル基、分枝状および非分枝状のアルケニル基、分枝状および非分枝状のアルキニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルケニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキニル基、アリール基、環式脂肪族基、環式芳香族基、複素環式基、および芳香族複素環式基、ならびにそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【０１４３】
様々な実施形態では、両親媒性スペーサーの親水性部分は、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルケニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキニル基、アリール基、環式脂肪族基、環式芳香族基、複素環式基、および芳香族複素環式基からなる群から選択される分子と、チオール、アミン、カルボン酸、カルボン酸ＮＨＳエステル、マレイミド、ヒドラジン、ケトン、アレデヒド（ａｌｅｄｅｈｙｄｅ）、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される化学的に活性の基とを含む。
【０１４４】
両親媒性ポリマー
様々な実施形態では、両親媒性ポリマーは、ポリマー主鎖、ポリマーの親水性部分、およびポリマーの疎水性部分を含む。様々な実施形態では、ポリマー主鎖は、天然のポリマー、修飾された天然のポリマー、合成ポリマー、およびそれらの組み合わせであり得る。
【０１４５】
様々な実施形態では、ポリマー主鎖は、ポリ酸無水物、ポリエステル、ポリオルトエステル、ポリエステルアミド、ポリアセタール、ポリケタル、ポリカーボネート、ポリホスホエステル、ポリホスファゼン、ポリビニルピロリドン、ポリジオキサノン、ポリ（リンゴ酸）、ポリ（アミノ酸）、Ｎ−２−（ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）のポリマー、Ｎ−イソプロピルアクリルアミド（ＮＩＰＡＡｍ）のポリマー、ポリグリコシド、ポリアクチド、グリコリドとラクチドのコポリマー、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【０１４６】
様々な実施形態では、両親媒性ポリマーの疎水性部分は、分枝状および非分枝状のアルキル基、分枝状および非分枝状のアルケニル基、分枝状および非分枝状のアルキニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルケニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキニル基、アリール基、環式脂肪族基、環式芳香族基、複素環式基、および芳香族複素環式基、ならびにそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【０１４７】
様々な実施形態では、両親媒性ポリマーの親水性部分は、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルケニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキニル基、アリール基、環式脂肪族基、環式芳香族基、複素環式基、および芳香族複素環式基からなる群から選択される分子と、チオール、アミン、カルボン酸、カルボン酸ＮＨＳエステル、マレイミド、ヒドラジン、ケトン、アレデヒド（ａｌｅｄｅｈｙｄｅ）、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される化学的に活性の基とを含む。
【０１４８】
したがって、様々な実施形態では、ナノ球体は、トコフェロールと、親水性、疎水性、または両親媒性スペーサーに抱合される治療薬または診断薬とを含む。
【０１４９】
ある実施形態では、ナノ球体は、トコフェロールと、抗酸化剤α−リポ酸含有疎水性化合物と、親水性、疎水性、または両親媒性スペーサーに抱合される治療薬または診断薬とを含む。
【０１５０】
ある実施形態では、ナノ球体は、トコフェロールと、疎水性ＮＳＡＩＤ誘導体と、両親媒性スペーサーに抱合される治療薬または診断薬とを含む。ある実施形態では、ナノ球体は、トコフェロールと、ＮＳＡＩＤの疎水性抗酸化剤および抗炎症誘導体と、親水性、疎水性、または両親媒性スペーサーに抱合される治療薬または診断薬とを含む。
【０１５１】
ある実施形態では、ナノ球体は、トコフェロールと、スタチンラクトンの誘導体と、親水性、疎水性、または両親媒性スペーサーに抱合される治療薬または診断薬とを含む。
【０１５２】
ある実施形態では、ナノ球体は、トコフェロールと、カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体と、親水性、疎水性、または両親媒性スペーサーに抱合される治療薬または診断薬とを含む。
【０１５３】
様々な実施形態では、ナノ球体は、トコフェロールと、両親媒性ポリマーに抱合される治療薬または診断剤とを含む。    
【０１５４】
ある実施形態では、ナノ球体は、トコフェロールと、抗酸化剤α−リポ酸含有疎水性化合物と、両親媒性ポリマーに抱合される治療薬または診断薬とを含む。
【０１５５】
ある実施形態では、ナノ球体は、トコフェロールと、疎水性ＮＳＡＩＤ誘導体と、両親媒性ポリマーに抱合される治療薬または診断薬とを含む。ある実施形態では、ナノ球体は、トコフェロールと、ＮＳＡＩＤの疎水性抗酸化剤および抗炎症誘導体と、両親媒性ポリマーに抱合される治療薬または診断薬とを含む。
【０１５６】
ある実施形態では、ナノ球体は、トコフェロールと、スタチンラクトンの誘導体と、両親媒性ポリマーに抱合される治療薬または診断薬とを含む。
【０１５７】
ある実施形態では、ナノ球体は、トコフェロールと、カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体と、両親媒性ポリマーに抱合される治療薬または診断薬とを含む。
【０１５８】
様々な実施形態は、癌を治療する方法を提供する。本方法は、治療薬が親水性スペーサー、疎水性スペーサー、両親媒性スペーサー、または両親媒性ポリマーに抱合される本発明のナノ球体を提供することと、それを必要とする対象にナノ球体を投与することとを含み得る。
【０１５９】
様々な実施形態は、癌を撮像し、診断する方法を提供する。本方法は、造影剤および／または診断薬が親水性スペーサー、疎水性スペーサー、両親媒性スペーサー、または両親媒性ポリマーに抱合される、癌を標的とする本発明のナノ球体を提供することと、それを必要とする対象にナノ球体を投与することと、癌を検出するために対象を撮像することとを含み得る。様々な実施形態では、造影剤および／または診断薬は、蛍光染料、ならびに成長因子（内皮成長因子および線維芽細胞成長因子、胎盤成長因子およびケラチノサイト成長因子を含むがこれらに限定されない）、および成長因子受容体（内皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）およびＨＥＲ−２および血小板由来成長因子受容体等の受容体チロシンキナーゼを含むがこれらに限定されない）等の、癌において過剰発現されるタンパク質に対する抗体を含み得るが、これらに限定されない。
【０１６０】
様々な実施形態では、本発明は、治療有効量の本発明のナノ球体と共に、薬学的に許容される賦形剤を含む薬学的組成物を提供する。「薬学的に許容される賦形剤」とは、一般的に安全であり、非毒性であり、かつ望ましい薬学的組成物の調製に有用である賦形剤を意味し、獣医学的使用ならびにヒトの薬学的使用に許容可能である賦形剤を含む。そのような賦形剤は、固形、液体、半固形、またはエアゾール組成物の場合、気体であり得る。
【０１６１】
様々な実施形態では、本発明による薬学的組成物は、任意の投与経路を介して送達するために製剤化され得る。「投与経路」とは、エアゾール、鼻、経口、経粘膜、経皮、非経口、腸内、または眼球を含むが、これらに限定されない当該技術分野において既知の任意の投与経路を指すことができる。「経皮」投与は、局所クリームもしくは軟膏を使用して、または経皮パッチの手段によって達成することができる。「非経口」とは、一般的に、眼窩内、点滴、動脈内、関節内、心臓内、皮内、筋肉内、腹腔内、肺内、脊髄内、胸骨内、くも膜下腔内、子宮内、静脈内、くも膜下、嚢下、皮下、経粘膜、または経気管を含む注射に関連する投与経路を指す。非経口経路を介しては、組成物は、点滴もしくは注射用の溶液または懸濁液の形態であるか、あるいは凍結乾燥した粉末としてであり得る。腸内経路を介しては、薬学的組成物は、制御放出を可能にする錠剤、ゲルカプセル、糖衣錠剤、シロップ、懸濁液、溶液、粉末、顆粒、エマルジョン、小球体もしくはナノ球体、または脂質小胞もしくはポリマー小胞の形態であり得る。非経口経路を介しては、組成物は、点滴もしくは注射用の溶液または懸濁液の形態であり得る。局所投与を介しては、本発明による化合物に基づく薬学的組成物は、皮膚および粘膜を治療するために製剤化され得、軟膏、クリーム、乳剤、油薬、粉末、含浸パッド、溶液、ゲル、スプレー、ローション、または懸濁液の形態である。それらはまた、制御放出を可能にする小球体もしくはナノ球体、または脂質小胞もしくはポリマー小胞、またはポリマーパッチおよびヒドロゲルの形態でもあり得る。これらの局所経路組成物は、臨床適応により、無水形態か水性形態のいずれかであり得る。眼球経路を介しては、それらは点眼液の形態であり得る。
【０１６２】
本発明による薬学的組成物は、任意の薬学的に許容される担体を含むことができる。本明細書で使用される、「薬学的に許容される担体」とは、１つの組織、臓器、または身体の一部から別の組織、臓器、または身体の一部に関心の化合物の運搬または輸送に関与する、薬学的に許容される材料、組成物、またはビヒクルを指す。例えば、担体は、液体であるか、あるいは固形充填剤、希釈剤、賦形剤、溶剤、もしくは封入材料、またはそれらの組み合わせであり得る。担体のそれぞれの構成成分は、製剤の他の成分と適合しなければならないという点で、「薬学的に許容され」なければならない。これは、接触し得る任意の組織または臓器との接触の使用にも適切でなければならない、つまり、毒性、刺激、アレルギー反応、免疫原性、またはその治療利益を過剰に上回る任意の他の合併症のリスクを保持してはならないということである。
【０１６３】
本発明による薬学的組成物はまた、経口投与用に封入される、錠剤化される、またはエマルジョンもしくはシロップにも調製され得る。薬学的に許容される固形または液体の担体は、組成物を強化する、もしくは安定させるため、または組成物の調製を容易にするために添加され得る。液体担体は、シロップ、ピーナッツ油、オリーブ油、グリセリン、生理食塩水、アルコール、および水を含む。固形担体は、デンプン、ラクトース、硫酸カルシウム、二水和物、白土、ステアリン酸マグネシウム、もしくはステアリン酸、タルク、ペクチン、アカシア、寒天、またはゼラチンを含む。担体は、単独で、またはワックスと共に、グリセリルモノステアレートまたはグリセリルジステアレート等の持続放出材料も含み得る。
【０１６４】
医薬調製物は、錠剤形態用に、必要であれば、粉砕、混合、造粒、および圧縮を伴う、または硬ゼラチンカプセル形態用に粉砕、混合、および充填を伴う、薬学の従来の技法に従い作製される。液体担体が使用されるとき、調製物は、シロップ、エリキシル剤、エマルジョン、または水性もしくは非水性懸濁液の形態である。そのような液体製剤は、直接ｐ．ｏ．投与されるか、または軟ゼラチンカプセル内に充填され得る。
【０１６５】
本発明による薬学的組成物は、治療有効量で送達され得る。正確な治療有効量は、所与の対象における治療の有効性に関して、最も有効な結果をもたらす組成物の量である。この量は、治療化合物の特性（活性、薬物動態、薬力学、および生物学的利用能を含む）、対象の生理学的状態（年齢、性別、疾患の種類および段階、一般的な健康状態、所与の投薬量に対する応答性、および薬物治療の種類を含む）、製剤中の薬学的に許容される担体もしくは複数の担体の性質、および投与経路を含むがこれらに限定されない様々な因子により変動する。臨床および薬理分野の者は、例えば化合物の投与に対する対象の応答を監視する、およびそれに応じて投薬量を調節することによって、日常的な実験を通して治療有効量を決定することができるだろう。さらなる手引きに関しては、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  （Ｇｅｎｎａｒｏ  ｅｄ．２０ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ  ＰＡ，ＵＳＡ）（２０００）を参照。
【０１６６】
有効量のカンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／もしくはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体、またはカンプトテシンナノ球体プロドラッグの典型的な投薬量は、既知の治療化合物が使用される製造者によって推奨される、および生体外応答または動物モデルにおける応答によって当業者に示される範囲であり得る。そのような投薬量は、典型的に、濃度において最大約１０倍、または関連する生物活性を失わない量まで減少させることができる。よって、実際の投薬量は、医師の判断、患者の状態、および例えば関連する一次培養細胞、もしくは生検悪性腫瘍等の組織培養組織サンプルの生体外応答性、または前述の適切な動物モデルにおいて観察された応答に基づく治療方法の有効性に依存する。
【０１６７】
本発明は、癌を治療するためのキットも目的とする。本キットは、本発明の組成物のうちの少なくとも１つを含む材料または構成成分の集合体である。よって、いくつかの実施形態では、キットは、上述の本発明のナノ球体を含む組成物を含む。
【０１６８】
本発明のキットにおいて構成される構成成分の正確な性質は、その意図される目的による。例えば、いくつかの実施形態は、癌を治療する目的のために構成される。一実施形態では、キットは、特に哺乳類の対象を治療する目的のために構成される。別の実施形態では、キットは、特にヒト対象を治療する目的のために構成される。さらなる実施形態では、キットは、これらに限定されないが、農場動物、家畜、および実験動物等の対象を治療する獣医用途のために構成される。他の実施形態では、キットは、特に、例えば癌を診断する診断目的のために構成される。
【０１６９】
使用説明書はキットに含まれ得る。「使用説明書」は、典型的に、癌を治療する等の所望の成果をもたらすようにキットの構成成分を使用するのに採用される技法を説明する実体的な表現を含む。任意に、キットは、当業者によって容易に認識される、希釈剤、緩衝剤、薬学的に許容される担体、シリンジ、カテーテル、アプリケータ、分注器具もしくは測定器具、または他の有用な用具等の有用な構成成分も含む。
【０１７０】
その運用性および汎用性を維持する任意の簡便かつ好適な方法で保存される、キットにまとめられた材料または構成成分が実地者に提供され得る。例えば、構成成分は、溶解、脱水、または凍結乾燥形態であり得、室温、冷蔵温度、または凍結温度で提供され得る。構成成分は、典型的に、好適なパッケージ材料（複数可）に含まれる。本明細書で採用される、「パッケージ材料」とは、本発明の組成物等のキットの内容物を収容するために使用される１つ以上の物理的構造を指す。パッケージ材料は、好ましくは減菌の汚染物質を含まない環境を提供する周知の方法によって構築される。本明細書で使用される、用語「パッケージ」とは、固体マトリックス、または個々のキットの構成成分を保持することができるガラス、プラスチック、紙、箔等の材料を指す。よって、例えば、パッケージは、親水性スペーサー、疎水性スペーサー、両親媒性スペーサー、または両親媒性ポリマーに抱合される治療薬もしくは造影剤を含む、好適な量の本発明のナノ球体を含有するために使用されるガラスバイアルであり得る。パッケージ材料は、一般的に、内容物および／もしくはキットの目的ならびに／またはその構成成分を示す外部ラベルを有する。
【実施例】
【０１７１】
以下の実施例は、主張される本発明をより良く図示するために提供され、本発明の範囲を制限するものと解釈されない。特定の材料が記述される場合においては、単に図示の目的であり、本発明を制限することが意図されない。当業者は、本発明の能力を訓練することなく、また本発明の範囲から逸脱することなく、同等の手段または反応物質を発達させることができる。
【０１７２】
実施例１
ｃｙ３／ｃｙ５／ｃｙ５．５標識された抗酸化剤−抗腫瘍ナノ球体を調製するために、抗酸化−抗腫瘍ナノ球体は、０．１〜２ｍｇの１−オクタデカンチオール（Ａｌｄｒｉｃｈ、コードＯ１８５８）が自然乳化の前に有機相に添加されたことを除き、下の実施例Ａ〜実施例Ｄに記載される同一の手順を使用して調製された（図１のＡ）。
【０１７３】
３ｍＬの１−オクタデカンチオール含有抗酸化剤−抗腫瘍ナノ球体の懸濁液に、５００μＬの１０×ＰＢＳおよび１．５モル当量のＣｙ３／Ｃｙ５／Ｃｙ５．５マレイミドを添加した（図１のＢ）。図１のＣが示すように、この中間体は、マレイミド基を有するように修飾される担体薬物に対して使用され得る。
【０１７４】
図２に示されるように、ＳＨ−マレイミド対は、ＮＨ２−ＮＨＳ対またはその他によって置換され得る。
【０１７５】
実施例Ａ−抗酸化剤−抗腫瘍ナノ球体の調製
ナノ球体は、わずかに修飾された自然乳化を使用する方法により調製された。簡潔に、１５ｍｇの化合物（カンプトテシン誘導体およびＡＬＡ２（１，１２−ドデカンジオール）の混合物）を、アセトン（５ｍＬ、０．１％ポリソルベート８０）に溶解した。適度の攪拌下、磁気プレート上で、有機溶液を、２５ｍｇのプルロニックＦ６８を１０ｍＬの再蒸留水（０．２５％ｗ／ｖ）に溶解することによって調製された水相に注いだ。１５分の磁気攪拌後、減圧下、室温でアセトンを除去した。ナノ球体は、０．８μｍの親水性シリンジフィルタを通して濾過され、４℃で保管された。ナノ球体の水力学的大きさ測定および大きさ分布は、Ｃｏｕｌｔｅｒ  Ｎ４−Ｐｌｕｓ  Ｓｕｂｍｉｃｒｏｎ  Ｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｓｉｚｅｒ（Ｃｏｕｌｔｅｒ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｍｉａｍｉ，ＦＬ）を使用して、動的光散乱（ＤＬＳ）により実施された。
【０１７６】
加えて、２５ｍｇの化合物（抗酸化剤カンプトテシン誘導体、化合物を含有する複数のα−リポ酸、およびα−トコフェロールの混合物）をアセトン（５ｍＬ、０．１％ポリソルベート８０）に溶解した。適度の攪拌下、磁気プレート上で、有機溶液を、２５ｍｇのプルロニックＦ６８を１０ｍＬの再蒸留水（０．２５％ｗ／ｖ）に溶解することによって調製された水相に注いだ。１５分の磁気攪拌後、減圧下、室温でアセトンを除去した。ナノ球体は、０．８μｍの親水性シリンジフィルタを通して濾過され、４℃で保管された。ナノ球体の水力学的大きさ測定および大きさ分布は、Ｃｏｕｌｔｅｒ  Ｎ４−Ｐｌｕｓ  Ｓｕｂｍｉｃｒｏｎ  Ｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｓｉｚｅｒ（Ｃｏｕｌｔｅｒ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｍｉａｍｉ，ＦＬ）を使用して、動的光散乱（ＤＬＳ）により実施された。対照ナノ球体は、カンプトテシン誘導体不在下で、化合物を含有する複数のα−リポ酸およびα−トコフェロールから調製された。
【０１７７】
表１．大きさおよび多分散指数（Ｐ．Ｉ．）：
抗酸化剤−抗腫瘍ナノ球体Ｉ
【表１Ａ】
2014523924.tif 000179
【０１７８】
実施例Ｂ−抗酸化剤−抗腫瘍ナノ球体の調製
ナノ球体は、実施例５に記載される方法により、自然乳化を使用して、２５ｍｇの化合物（カンプトテシン誘導体およびα−トコフェロールの混合物）から調製された。対照ナノ球体は、カンプトテシン誘導体不在下で、α−トコフェロールまたはＩｂｕ２ＴＥＧから調製された。
【０１７９】
表２．大きさおよび多分散指数（Ｐ．Ｉ．）：
抗酸化剤−抗腫瘍ナノ球体ＩＩ
【表２】
2014523924.tif 000180
【０１８０】
実施例Ｃ−抗炎症−抗腫瘍ナノ球体の調製
ナノ球体は、実施例５に記載される方法により、自然乳化を使用して、２５ｍｇの化合物（カンプトテシン誘導体、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）の誘導体、およびα−トコフェロールの混合物）から調製された。対照ナノ球体は、α−トコフェロールまたはカンプトテシン不在下で、α−トコフェロールおよびＮＳＡＩＤの誘導体の混合物から調製された。
【０１８１】
表３．大きさおよび多分散指数（Ｐ．Ｉ．）：抗炎症−抗腫瘍ナノ球体
【表３】
2014523924.tif 000181
【０１８２】
実施例Ｄ−カンプトテシン誘導体を含むナノ球体の抗癌作用および抗増殖作用
Ｕ８７−ＭＧヒト膠腫細胞系は、アメリカ培養細胞系統保存機関（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）（ＡＴＣＣ）（Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，Ｍａｒｙｌａｎｄ，ＵＳＡ）から得た。細胞を成長させ、抗生物質（１００Ｕ／ｍＬのペニシリン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）および１００μｇ／ｍＬのストレプトマイシン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ））を含有し、１０％のウシ胎児血清（ＦＢＳ）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で補足された最小必須培地（ＭＥＭ）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中で維持した。５％のＣＯ２を含む加湿雰囲気中で、細胞を３７℃に維持した。
【０１８３】
ナノ球体は、化合物Ｃ−１０（１ｍｇ）、α−トコフェロール（２５ｍｇ）、および化合物（ＡＬＡ）３グリセロールを含有する複数のα−リポ酸の混合物、または化合物Ｃ−１０（１ｍｇ）およびα−トコフェロール（２５ｍｇ）の混合物、または化合物Ｃ−１０（１ｍｇ）、α−トコフェロール（２５ｍｇ）、およびＮＳＡＩＤ誘導体Ｉｂｕ２ＴＥＧの混合物から調製され、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中で一晩透析された。ヒト膠腫細胞（Ｕ８７−ＭＧ）を、１０５細胞／ウェルで、６ウェルフラスコに播種し、２４時間成長させた。培地を交換し、化合物Ｃ−１０に関して、０．１〜２μＭの範囲の最終濃度のナノ球体で細胞を処理した。４日間処理した後、培地を除去し、細胞をＰＢＳで洗浄し、細胞を剥離するために、１ｍＬの０．２５％トリプシン／ＥＤＴＡ（Ｇｉｂｃｏ）を添加した。血球計数器で直ぐに細胞を数えた。ナノ球体不在下の対照培養物を成長させた。
【０１８４】
実施例２
α−リポ酸誘導体ＡＬＡ２（１，１２−ドデカンジオール）の合成
分子ふるい（６０A、１０〜２０メッシュビーズ）の存在下、室温で１０分間、２０ｍＬの無水ジクロロメタン（ＤＣＭ）中のα−リポ酸（２．４８ｇ、１２ｍｍｏｌ、１．２当量）および１，１２−ドデカンジオール（１０ｍｍｏ１  ＯＨ、１．０当量）を、４−（ジメチルアミノ）−ピリジン（ＤＭＡＰ、１．４７ｇ、１２ｍｍｏｌ、１．２当量）と反応させた。Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ、２．３ｇ、１２ｍｍｏｌ、１．２当量）を、１０分にわたって少量ずつ添加し、反応混合物を、暗所で、室温で１２時間攪拌し、濾過し、次に真空下で濃縮して、体積を減らした。さらに調製することなく、カラム上に直接充填することにより、得られた反応混合物をシリカゲルを使用して精製した。減圧下で溶媒を除去し、生成物を得た。化合物の１Ｈ  ＮＭＲおよび１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルを提供する。
【０１８５】
完全に記述されるかのように、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる米国仮出願第６１／０１８，７４９号（２００８年１月３日出願）および国際出願公開第ＷＯ２００９／０８６５４７号（２００８年１２月３０日）は、本発明に使用されるα−リポ酸を合成するさらなる例を提供する。
【化１７４】
2014523924.tif 000182
【０１８６】
実施例３
α−リポ酸のニ官能性誘導体およびＮＳＡＩＤの合成
分子ふるい（Ｆｌｕｋａ、３A、１０〜２０メッシュビーズ）の存在下、室温で１０分間、５０ｍｌの無水ジクロロメタン（ＤＣＭ）中のα−リポ酸（ＡＬＡ、１０ｍｍｏｌ）およびテトラエチレングリコール（ＴＥＧ、３０ｍｍｏｌ）を、４−（ジメチルアミノ）−ピリジン（ＤＭＡＰ、１５ｍｍｏｌ）と反応させた。Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ、１０ｍｍｏｌ）を、１０分にわたって少量ずつ添加し、反応混合物を、暗所で、室温で５時間攪拌し、濾過し、次に真空下で濃縮して、体積を減らした。事前調製することなく、カラム上に濃縮した反応混合物を充填することにより、カラムクロマトグラフィーを使用して、生成物ＡＬＡ−ＴＥＧ−ＯＨおよび２量体副産物ＡＬＡ−ＴＥＧ−ＡＬＡを精製し、上述のように特徴付けした。分子ふるいの存在下、室温で１０分間、２０ｍｌの無水ＤＣＭ中のＴＥＧ（３．８ｍｍｏｌ）のモノＡＬＡ誘導体およびＮＳＡＩＤ（４．１ｍｍｏｌ、インドメタシン：Ｉｎｄ、イブプロフェン：Ｉｂｕ、ナプロキセン：Ｎｐｘ）をＤＭＡＰ（４．１ｍｍｏｌ）と反応させた。ＥＤＣＩ（４．１ｍｍｏｌ）を、１０分にわたって少量ずつ添加し、反応混合物を、暗所で、室温で５時間攪拌し、濾過し、次に室温で、真空下で濃縮した。カラムクロマトグラフィーを使用して生成物を精製し、上述のように特徴付けした。
ＡＬＡ−ＴＥＧ−ＯＨ：シリカゲル（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ  ５０：１）上のカラムクロマトグラフィーにより、黄色の油状物として化合物を得た（６３％）。ＴＬＣ（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ  ５０：０．５）Ｒｆ  ０．１９；１Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝１．４７（ｍ，２×Ｈ，Ｈａ），１．６８（ｍ，４×Ｈ，Ｈｂ），１．９１（ｍ，１×Ｈ，Ｈｃ），２．３６（ｔ，２×Ｈ，Ｈｄ），２．４６（ｍ，１×Ｈ，Ｈｅ），２．６１（ｓ，１×Ｈ，−ＯＨ），３．１１（ｍ，１×Ｈ，Ｈｆ），３．１８（ｍ，１×Ｈ，Ｈｇ），３．５６（ｍ，１×Ｈ，Ｈｈ），３．６１（ｍ，２×Ｈ，ＨＥ），３．６７（ｓ，８×Ｈ，ＨＡ），３．７１（ｍ，４×Ｈ，ＨＢ），４．２４（ｍ，２×Ｈ，ＨＤ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝２４．５５，２８．６７，３３．８６，３４．５４，３８．４５，４０．１９，５６．３１，６１．６，６３．３７，６９．１１，７０．１９，７０．４３，７０．４５，７０．５６，１７３．４７。
ＡＬＡ−ＴＥＧ−ＡＬＡ：シリカゲル（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ  ９０：１）上のカラムクロマトグラフィーにより、黄色の油状物として化合物を得た。ＴＬＣ（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ  １００：０．５）Ｒｆ０．１２；１Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝１．４７（ｍ，４Ｈ，２×ａ），１．６８（ｍ，８Ｈ，２×Ｈｂ），１．９１（ｍ，２Ｈ，２×Ｈｃ），２．３５（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，４Ｈ，２×Ｈｄ），２．４６（ｍ，２Ｈ，２×Ｈｅ），３．１５（ｍ，４Ｈ，２×Ｈｆ＋Ｈｇ），３．５７（ｍ，２Ｈ，２×Ｈｈ），３．６５（ｓ，８Ｈ，Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ），３．７０（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，４Ｈ，２×Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＯＣＯ），４．２３（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，４Ｈ，２×ＣＯ−Ｏ−ＣＨ２−）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝２４．５６，２８．７１，３３．９４，３４．５６，３８．５，４０．２２，５６．３３，６３．４４，６９．１６，７０．５６，１７３．３６。
ＡＬＡ−ＴＥＧ−Ｉｎｄ：シリカゲル（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ  １００：０．５）上のカラムクロマトグラフィーにより、黄色の油状物として化合物を得た（７３％）。ＴＬＣ（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ  ５０：０．５）Ｒｆ０．３３；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝１．４８（ｍ，２×Ｈ，Ｈａ），１．６９（ｍ，４×Ｈ，Ｈｂ），１．９２（ｍ，１×Ｈ，Ｈｃ），２．３３−２．４３（ｍ，５×Ｈ，Ｈ８＋Ｈｄ），２．４７（ｍ，１×Ｈ，Ｈｅ），３．１５（ｍ，２×Ｈ，Ｈｆ＋Ｈｇ），３．５４−３．７５（ｍ，１５×Ｈ，Ｈ７＋ＨＡ＋ＨＢ＋Ｈｈ），３．８６（ｓ，３×Ｈ，Ｈ６），４．２７（ｍ，４×Ｈ，ＨＤ＋ＨＥ），６．６８（ｑ，１×Ｈ，Ｈ５），６．９５（ｄ，１×Ｈ，Ｈ４），６．９９（ｄ，１×Ｈ，Ｈ３），７．４９（ｍ，２×Ｈ，Ｈ２），７．６８（ｍ，２×Ｈ，Ｈ１）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝１３．４，２４．６，２８．７，３０．２，３３．９，３４．６，３８．５，４０．２，５５．７１，５６．３，６３．４，６４．１，６９．１，６９．１６，７０．５３，７０．５８，１０１．３９，１１１．５９，１１２．５０，１１４．９２，１２９．１２，１３０，６５，１３０．７８，１３１．１８，１３３．９１，１３５．９８，１３９．２０，１５６．０３，１６８．２４，１７０．７７，１７３．４１。
ＡＬＡ−ＴＥＧ−Ｉｂｕ：シリカゲル（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ  １００：０．５）上のカラムクロマトグラフィーにより、黄色の油状物として化合物を得た（６９％）。ＴＬＣ（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ  ５０：０．５）Ｒｆ  ０．３７；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝０．８６（ｄ，６×Ｈ，Ｈ７），１．３７−１．４８（ｍ，５×Ｈ，Ｈ６＋Ｈａ），１．６４（ｍ，４×Ｈ，Ｈｂ），１．８５−１．９５（ｍ，２×Ｈ，Ｈ５＋Ｈｃ），２．３２（ｔ，２×Ｈ，Ｈｄ），２．３８−２．４５（ｍ，３×Ｈ，Ｈ４＋Ｈｅ），３．０４−３．１８（ｍ，２×Ｈ，Ｈｇ＋Ｈｆ）３．５０−３．７３（ｍ，１４×Ｈ，Ｈ３＋ＨＡ＋ＨＢ＋Ｈｈ），４．２０（ｍ，４×Ｈ，ＨＤ＋ＨＥ），７．０５（ｄ，２×Ｈ，Ｈ２），７．１８（ｄ，２×Ｈ，Ｈ１）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝１８．５９，２２．４１，２４．６，２８．７１，３０．１６，３３．９１，３４．５８，３８．４７，４０．２０，４４．９８，４５．０１，５６．３１，６３．４３，６３．８５，６９．０５，６９．１６，７０．５４，７０．５９，１２７．１８，１２９．２７，１３７．６７，１４０．４４，１７３．３８，１７４．６２。
ＡＬＡ−ＴＥＧ−Ｎｐｘ：シリカゲル（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ  １００：０．５）上のカラムクロマトグラフィーにより、黄色の油状物として化合物を得た（６５％）。ＴＬＣ（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ  ５０：０．５）Ｒｆ  ０．３３；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝１．４４（ｍ，２×Ｈ，Ｈａ），１．５４−１．７１（ｍ，７×Ｈ，Ｈ５＋Ｈｂ），１．８８（ｍ，１×Ｈ，Ｈｃ），２．３３（ｔ，２×Ｈ，Ｈｄ），２．４３（ｍ，１×Ｈ，Ｈｅ），３．０５−３．１９（ｍ，２×Ｈ，Ｈｆ＋Ｈｇ），３．３９−３．６７（ｍ，１３×Ｈ，ＨＡ＋ＨＢ＋Ｈｈ），３．８８（ｍ，４×Ｈ，Ｈ４），４．２１（ｍ，４×Ｈ，ＨＤ＋ＨＥ），７．１２（ｍ，２×Ｈ，Ｈ３），７．４０（ｑ，１×Ｈ，  Ｈ２），７．６８（ｍ，３×Ｈ，Ｈ１）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝１８．５７，２４．６１，２８．７３，３３．９３，３４．５７，３８．４８，４０．１２，４５．３３，５５．３２，５６．３３，６３．４４，６３．９６，６９．０３，６９．１４，７０．５３，１０５．５７，１１８．９７，１２５．９９，１２６．２８，１２７．１１，１２８．９１，１２９．２８，１３３．６８，１３５．６３，１５７．６３，１７３．４４，１７４．５９。
【化１７５】
2014523924.tif 000183
【０１８７】
テトラエチレングリコールの代わりにジエチレングリコールが使用されたことを除き、同じ手順が次の化合物の合成に使用された。
【表４−１】
2014523924.tif 000184
【表４−２】
2014523924.tif 000185
【０１８８】
実施例４
ＮＳＡＩＤの２量体誘導体の合成
分子ふるいの存在下、室温で１０分間、４０ｍｌの無水ＤＣＭ中のＮＳＡＩＤ（６ｍｍｏｌ）およびＴＥＧ（２．５ｍｍｏｌ）をＤＭＡＰ（６ｍｍｏｌ）と反応させた。ＥＤＣＩ（６ｍｍｏｌ）を、１０分にわたって少量ずつ添加し、反応混合物を、暗所で、室温で５時間攪拌し、濾過し、次に真空下で濃縮した。生成物を精製し（カラムクロマトグラフィー、１００：０．５  ＣＨ３Ｃｌ：ＭｅＯＨ）、上述のように特徴付けした。
Ｉｎｄ２ＴＥＧ：シリカゲル（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ  １００：０．５）上のカラムクロマトグラフィーにより、黄色の油状物として化合物を得た（７８％）。ＴＬＣ（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ  ５０：０．５）Ｒｆ  ０．２５；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝２．３５（ｓ，６×Ｈ，Ｈ８），３．５６（ｍ，８×Ｈ，ＨＡ），３．６４−３．７０（ｍ，８×Ｈ，Ｈ７＋ＨＢ），３．８０（ｓ，６×Ｈ，Ｈ６），４．２５（ｔ，４×Ｈ，ＨＤ＋ＨＥ），６．６４（ｑ，２×Ｈ，Ｈ５），６．８６（ｄ，２×Ｈ，Ｈ４），６．９５（ｄ，２×Ｈ，Ｈ３），７．４３（ｍ，４×Ｈ，Ｈ２），７．６２（ｍ，４×Ｈ，Ｈ１）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝１３．４，３０．１９，５５．６９，６４．１３，６９．０７，７０．５２，７０．５７，１０１．４，１１１．５８，１１２．５１，１１４．９３，１２９．１１，１３０．６６，１３０．７９，１３１．１８，１３３．９３，１３５．９８，１３９．１８，１５６．０４，１６８．２２，１７０．７７。
Ｉｂｕ２ＴＥＧ：シリカゲル（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ  １００：０．５）上のカラムクロマトグラフィーにより、無色の油状物として化合物を得た（８３％）。ＴＬＣ（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ  ５０：０．５）Ｒｆ  ０．５４；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣＬ３）：δ＝０．９０（ｄ，１２×Ｈ，Ｈ７），１．４９（ｄ，６×Ｈ，Ｈ６），１．８４（ｍ，２×Ｈ，Ｈ５），２．４４（ｄ，４×Ｈ，Ｈ４），３．５５（ｍ，８×Ｈ，ＨＡ），３．６３（ｍ，４×Ｈ，ＨＢ），３．７３（ｑ，２×Ｈ，Ｈ３），４．２２（ｍ，４×Ｈ，ＨＤ＋ＨＥ），７．０８（ｍ，４×Ｈ，Ｈ２），７．２１（ｍ，４×Ｈ，Ｈ１）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝１８．６０，２２．４２，３０．１９，４５．０２，４５．０４，６３．８７，６９．０８，７０．５７，７０．６１，１２７．２０，１２９．２９，１３７．７０，１４０．４８，１７４．６７。
Ｎｐｘ２ＴＥＧ：シリカゲル（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ  １００：０．５）上のカラムクロマトグラフィーにより、無色の油状物として化合物を得た（７５％）。ＴＬＣ（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ  ５０：０．５）Ｒｆ  ０．４６；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝１．５８（ｄ，６×Ｈ，Ｈ５），３．４４（ｍ，８×Ｈ，ＨＡ），３．６０（ｍ，４×Ｈ，ＨＢ），３．９０（ｍ，８×Ｈ，Ｈ４），４．２２（ｍ，４×Ｈ，ＨＤ＋ＨＥ），７．１２（ｍ，４×Ｈ，Ｈ３），７．４１（ｑ，２×Ｈ，Ｈ２），７．６８（ｍ，６×Ｈ，Ｈ１）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝１８．５６，４５．３３，５５．２９，６３．９５，６９．０２，７０．４４，７０．４７，１０５．５６，１１８．９６，１２５．９６，１２６．２７，１２７．１１，１２８．９１，１２９．２７，１３３．６８，１３５．６２，１５７．６３，１７４．６０。
【化１７６】
2014523924.tif 000186
【０１８９】
実施例５
自然乳化
ナノプロドラッグは、自然乳化を使用する方法により調製された（Ｂｏｕｃｈｅｍａｌ  ｅｔ  ａｌ．，２００４ｂ）。簡潔に、２５ｍｇの化合物を、ポリソルベート８０（０．１％ｗ／ｖ）を含有するアセトン（５ｍｌ）に溶解した。適度の攪拌下、磁気プレート上で、有機溶液を、２５ｍｇのプルロニックＦ６８を１０ｍＬの蒸留水（０．２５％ｗ／ｖ）に溶解することによって調製された水相に注いだ。１５分の磁気攪拌後、減圧下、室温でアセトンを除去した。０．８μｍの親水性シリンジフィルタ（Ｃｏｒｎｉｎｇ、部品番号４３１２２１、Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｃｏ．，Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ，ＰＡ，ＵＳＡ）を通して懸濁液を濾過し、４℃で保管した。
【０１９０】
実施例６
抗酸化剤化合物の合成
分子ふるい（６０A、１０〜２０メッシュビーズ）の存在下、室温で１０分間、２０ｍＬの無水ジクロロメタン（ＤＣＭ）中のα−リポ酸（２．４８ｇ、１２ｍｍｏｌ、１．２当量）および２つのヒドロキシル基を含有する化合物（１，１２−ドデカンジオール（「１，１２−ＤＤ」））（１０ｍｍｏ１  ＯＨ、１．０当量）を、４−（ジメチルアミノ）−ピリジン（ＤＭＡＰ、１．４７ｇ、１２ｍｍｏｌ、１．２当量）と反応させた。Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ、２．３ｇ、１２ｍｍｏｌ、１．２当量）を、１０分にわたって少量ずつ添加し、反応混合物を、暗所で、室温で１２時間攪拌し、濾過し、次に真空下で濃縮して、体積を減らした。さらに調製することなく、カラム上に直接充填することにより、得られた反応混合物をシリカゲルを使用して精製した。減圧下で溶媒を除去し、生成物を得た。完全に記述されているかのように、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ０８／８８５４１号も参照。
【化１７７】
2014523924.tif 000187
【０１９１】
実施例７
疎水性ＮＳＡＩＤ誘導体およびポリ（ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）の混合物からのナノ球体の調製
ナノ球体は、自然乳化を使用する上述の方法により、ＮＳＡＩＤの疎水性誘導体（２５ｍｇ）とＰＬＧＡ（１００ｍｇ）（Ｓｉｇｍａ，Ｐ２１９１，ラクチド：グリコリド５０：５０ｍｏｌ．重量４０，０００〜７５，０００）、α−トコフェロール（２５ｍｇ）の混合物から調製された。
表５．大きさおよび多分散指数（Ｐ．Ｉ．）
【表５】
2014523924.tif 000188
【０１９２】
実施例８
濃度を増加させるために複数ステップの自然乳化を使用することによる抗酸化剤−抗腫瘍ナノ球体の調製
高濃度の抗酸化剤−抗腫瘍ナノ球体を調製するために、複数ステップの自然乳化を適用した。一般的に、２５〜１００ｍｇの化合物（抗酸化剤カンプトテシン誘導体、化合物を含有する複数のα−リポ酸、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）の誘導体、およびα−トコフェロールの混合物）を、アセトン（５ｍＬ、０．１％のポリソルベート８０）に溶解した。適度の攪拌下、磁気プレート上で、有機溶液を、２５ｍｇのプルロニックＦ６８を１０ｍＬの再蒸留水（０．２５％ｗ／ｖ）に溶解することによって調製された水相に注いだ。１５分の磁気攪拌後、減圧下、室温でアセトンを除去した。同じ水性懸濁液を使用して、自然乳化およびアセトン除去の混合プロセスを最大５回繰り返した。
【０１９３】
懸濁液は、一晩、セルロース膜チューブ（Ｓｉｇｍａ、コードＤ９７７７）において透析され、０．４５μｍの親水性シリンジフィルタ（Ｓｉｇｍａ、コードＣＬＳ４３１２２０）を通して濾過され、４℃で保管された。ナノ球体の水力学的大きさ測定および大きさ分布は、Ｃｏｕｌｔｅｒ  Ｎ４−Ｐｌｕｓ  Ｓｕｂｍｉｃｒｏｎ  Ｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｓｉｚｅｒ（Ｃｏｕｌｔｅｒ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｍｉａｍｉ，ＦＬ）を使用して、動的光散乱（ＤＬＳ）により実施された。
【０１９４】
実施例９
蛍光標識された抗酸化剤−抗腫瘍ナノ球体の調製
生体外細胞培養における細胞内取り込み、動物体における分布、および抗酸化剤−抗腫瘍ナノ球体の腫瘍内蓄積を示すために、我々は、疎水性染料クマリン６（Ｓｉｇｍａ、コード４４２６３１）または親水性染料ｃｙ３／ｃｙ５／ｃｙ５．５（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）で標識された抗酸化剤−抗腫瘍ナノ球体を調製した。クマリン６標識された抗酸化剤−抗腫瘍ナノ球体は、自然乳化前に５０μｇの染料が有機相に添加されたことを除き、実施例５〜実施例８に記載される同一の手順を使用して調製された。組み込まれたクマリン６は、一晩の透析の間、抗酸化剤−抗腫瘍ナノ球体との関連を維持する。
【０１９５】
ｃｙ３／ｃｙ５／ｃｙ５．５標識された抗酸化剤−抗腫瘍ナノ球体を調製するために、抗酸化−抗腫瘍ナノ球体は、０．１〜２ｍｇの１−オクタデカンチオール（Ａｌｄｒｉｃｈ、コードＯ１８５８）が自然乳化の前に有機相に添加されたことを除き、実施例５〜実施例８に記載される同一の手順を使用して調製された。抗酸化剤−抗腫瘍ナノ球体は、一晩透析され、チオール基の濃度は、次のように決定された：Ａｌｄｒｉｔｈｉｏｌ−２（Ｓｉｇｍａ、コード１４３０４９）をエタノール（１００ｍＭ）に溶解し、１０μＬの溶液を抗酸化剤−抗腫瘍ナノ球体（８０μＬ）の懸濁液に添加した。１０μＬの１０×ＰＢＳの添加後、混合物を３７℃で３０分間インキュベートした。解放された２−チオピリドンは、実施例１に記載される５０％アセトニトリルを用いたＲＰ−ＨＰＬＣを使用して分離され、３４１ｎｍでＵＶ検出器により検出された。解放された２−チオピリドンを決定するための標準曲線は、既知量のＡｌｄｒｉｔｈｉｏｌ−２およびＤＴＴの反応から発生した２−チオピリドンを測定することによって作製された。
【０１９６】
３ｍＬの抗酸化剤−抗腫瘍ナノ球体を含有する１−オクタデカンチオールの懸濁液に、５００μＬの１０×ＰＢＳおよび１．５モル当量のＣｙ３／Ｃｙ５／Ｃｙ５．５マレイミドを添加した。反応混合物を室温で一晩インキュベートし、少なくとも６時間透析して、未結合のｃｙ５．５マレイミドを懸濁液から除去し、０．４５μｍの親水性シリンジフィルタ（Ｓｉｇｍａ、コードＣＬＳ４３１２２０）を通して濾過し、４℃で保管した。
【０１９７】
実施例１０
スタチンラクトンおよびα−リポ酸誘導体Ａの合成
分子ふるい（６０A、１０〜２０メッシュビーズ）の存在下、室温で１０分間、５０ｍＬの無水ジクロロメタン（ＤＣＭ）中のα−リポ酸（ＡＬＡ、２．０６ｇ、１０ｍｍｏｌ．）およびジオール化合物（テトラエチレングリコール、ＴＥＧ）（３０ｍｍｏｌ）を、４−（ジメチルアミノ）−ピリジン（ＤＭＡＰ、１５ｍｍｏｌ）と反応させた。Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ、２．３ｇ、１２ｍｍｏｌ）を、１０分にわたって少量ずつ添加し、反応混合物を、暗所で、室温で５時間攪拌し、濾過し、次に真空下で濃縮して、体積を減らした。さらに調製することなくL'81Aカラム上に直接充填することにより、得られた反応混合物をシリカゲルを使用して精製した。減圧下で溶媒を除去し、生成物を得た。
【０１９８】
無水ＤＣＭ中のスタチンラクトン（０．４ｍｍｏｌ）、トリホスゲン（０．１５ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（１．３ｍｍｏｌ）を１０分間攪拌した。モノ−ＡＬＡ−ＴＥＧ（０．４ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を２４時間攪拌した。反応混合物を真空下で濃縮して、体積を減らした。さらに調製することなく、カラム上に直接充填することにより、得られた反応混合物をシリカゲルを使用して精製した。減圧下で溶媒を除去し、生成物を得た。（スキーム５を参照）。
【化１７８】
2014523924.tif 000189
【０１９９】
実施例１１
スタチンラクトンおよびα−リポ酸誘導体Ｂの合成
無水ＤＣＭ中のスタチンラクトン（０．４ｍｍｏｌ）、トリホスゲン（０．１５ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（１．３ｍｍｏｌ）を１０分間攪拌した。ＴＥＧ（０．２ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を２４時間攪拌した。反応混合物を真空下で濃縮して、体積を減らした。さらに調製することなく、カラム上に直接充填することにより、得られた反応混合物をシリカゲルを使用して精製した。減圧下で溶媒を除去し、生成物を得た。（スキーム６を参照）。
【化１７９】
2014523924.tif 000190
【０２００】
実施例１２
表面上に治療薬を坦持する抗酸化剤−抗腫瘍ナノ球体を調製するために、両親媒性スペーサーまたは両親媒性ポリマーで修飾された抗酸化剤−抗腫瘍ナノ球体表面は、０．１〜５ｍｇの両親媒性スペーサーまたは両親媒性ポリマーが自然乳化の前に有機相に添加されたことを除き、上記の実施例Ａ〜実施例Ｄに記載される同一の手順を使用して調製された（図３および５）。両親媒性スペーサーまたは両親媒性ポリマーの親水性の反応性化学基は、ナノ球体の表面に方向付けされる。図４および６に示されるように、表面修飾されたナノ球体は、ナノ球体の表面上の両親媒性スペーサーまたは両親媒性ポリマーの化学基と反応する化学基を含有する担体治療薬に対して使用され得る。
図１および２に示されるように、ＳＨ−マレイミド対は、ＮＨ２−ＮＨＳ対またはその他によって置換され得る。
【０２０１】
実施例１３
カンプトテシンプロドラッグの合成およびナノプロドラッグの調製
カンプトテシンプロドラッグＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡは、記載されるように、生分解性エステルおよび炭酸塩結合を導入することにより合成された１４。ナノプロドラッグは、複数ステップの修飾を伴う自然乳化１４、１７を使用する方法により調製された。単一ステップ手順に関して、７ｍｇのＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡおよび５０ｍｇのα−トコフェロールをポリソルベート８０（０．１％ｗ／ｖ）を含有するアセトン（５ｍｌ）に溶解した。適度の攪拌下、磁気プレート上で、有機溶液を、２５ｍｇのプルロニックＦ６８を１０ｍＬの蒸留水（０．２５％ｗ／ｖ）に溶解することによって調製された水相に注いだ。１５分の攪拌後、減圧下でアセトンを除去した。複数ステップ手順に関して、乳化／蒸発サイクルを３回繰り返した。最初のサイクルから得たナノプロドラッグ（ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ／Ｔｏｃｏ）懸濁液は、第２の乳化等の水相として使用された。懸濁液は、一晩、蒸留水中セルロース膜チューブ（Ｓｉｇｍａ）において透析され、０．８、０．４５、および０．２μｍの親水性シリンジフィルタ（Ｃｏｒｎｉｎｇ）を通して連続して濾過され、４℃で保管された。α−トコフェロール対照ナノ懸濁液は、カンプトテシンプロドラッグを省いたことを除き、同じ手順を使用して調製された。ナノプロドラッグの可視化のために、ナノ粒子追跡分析（ＮＴＡ）は、デジタル顕微鏡ＬＭ１０システム１６を使用して実施された。
【０２０２】
実施例１４
蛍光標識
蛍光撮像のために、Ｃｙ５．５はナノプロドラッグの中に組み込まれた。Ｃｙ５．５標識されたナノプロドラッグは、２ｍｇの１−オクタデカンチオール（Ａｌｄｒｉｃｈ）が自然乳化の前に有機相に添加されたことを除き、上述の単一ステップ手順を使用して調製された。２ｍＬの１−オクタデカンチオール含有ナノプロドラッグの懸濁液に、５００μＬの１０×ＰＢＳおよびモル当量のＣｙ５．５マレイミド（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を添加した。反応混合物を光保護下で、室温で一晩インキュベートした。未結合のＣｙ５．５マレイミドを除去するために、懸濁液を、０．１５ＭのＮａＣｌを含む２０ｍＭのクエン酸ナトリウム緩衝液で平衡化されたＧ−２５  Ｓｅｐｈａｄｅｘカラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）上で精製した３３。標識されたナノプロドラッグを濾過し、上述のように保管した。結合Ｃｙ５．５の濃度を次のように決定した：２００μＬのナノプロドラッグ懸濁液を８００μＬのアセトニトリルと混合し、吸光度を６７５ｎｍで測定した。濃度は、Ｃｙ５．５マレイミドを用いて作製された標準曲線を使用して計算された。
【０２０３】
実施例１５
生体外細胞培養およびナノプロドラッグの細胞取り込み
ヒト神経膠芽腫細胞系Ｕ８７ＭＧは、アメリカ培養細胞系統保存機関（ＡＴＣＣ）から得た。抗生物質（ペニシリン（１００Ｕ／ｍＬ）およびストレプトマイシン（１００μｇ／ｍＬ））を含有し、１０％のウシ胎児血清（ＦＢＳ，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で補足された最小必須培地（ＭＥＭ，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中で、加湿空気中５％のＣＯ２の雰囲気で、細胞を３７℃で成長させた。細胞内取り込みおよびナノプロドラッグの分解を示すために、７５ｃｍ２培養フラスコ中で、最大約７０％のコンフルエント密度に細胞を成長させ、ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ／Ｔｏｃｏナノプロドラッグ（５μＭ）で３日間処理した。細胞をＰＢＳで３回洗浄し、遊離ナノプロドラッグを除去し、トリプシン処理した。遠心分離により細胞を収集し、ペレットをＰＢＳ中に再懸濁した。３回の再懸濁／遠心分離サイクル後、約８０００万個の細胞を、３７℃で１５分間、１ｍＬの溶解緩衝液（１％のＴｒｉｔｏｎＸ−１００、１０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．４）で処理した。可溶化液をアセトニトリル（３ｍＬ）と混合し、１０，０００×ｇで１０分間遠心分離した。上清を収集し、乾燥状態に蒸発させた。残留物を５００μＬのアセトニトリルに溶解し、２０，０００×ｇで１５分間、遠心分離した。記載するように、上清をＲＰ−ＨＰＬＣで分析した１４。蛍光ナノプロドラッグの細胞内取り込みを示すために、細胞を蛍光標識されたナノプロドラッグの存在下でインキュベートした。４つのチャンバ培養スライド（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）は、Ｕ８７ＭＧ細胞で播種され、細胞を２４時間付着させた。培地中、１．０ｍＬの新しく調製した蛍光標識されたナノプロドラッグ（１μＭ  Ｃｙ５．５）の懸濁液で培地を交換し、チャンバスライドを５時間インキュベートした。細胞をＰＢＳで３回洗浄し、遊離ナノプロドラッグを除去し、４’，  ６−ジアミジノ−２−フェニルインドール（ＤＡＰＩ）を含む１滴の封入剤（Ｐｒｏｌｏｎｇ  Ｇｏｌｄ，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を添加し、次にカバースライドを設置した。顕微鏡分析のために、蛍光顕微鏡を有するデジタルカメラ（Ｍｏｄｅｌ  Ｕｐｒｉｇｈｔ  Ｚｅｉｓｓ）を備えた共焦点レーザー走査顕微鏡（Ｌｅｉｃａ  Ｍｉｃｒｏｓｙｓｔｅｍ  ＳＰ５）を使用した。
【０２０４】
実施例１６
動物モデル
全ての動物実験は、Ｃｅｄａｒｓ−Ｓｉｎａｉ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅのプロトコルに従い実施された。全ての実験に関して、雌の６〜８週齢の胸腺欠損ｎｕ／ｎｕマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を使用した。皮下腫瘍モデルに関して、マウスは、ＰＢＳ（１００  ｕＬ）に懸濁された１０７  Ｕ８７ＭＧヒト膠腫細胞を右側腹部に注射された。頭蓋内腫瘍モデルに関して、マウスは、Ｕ８７ＭＧ細胞の頭蓋内定位移植を受けた。マウスは、単一腹腔内注射としてケタミンおよびデクスメデトミジンの組み合わせを使用して麻酔された。ハミルトンシリンジを使用して、２μｌのＰＢＳに懸濁された１０５のＵ８７ＭＧ細胞を脳の右前領域に移植した。動物は、デクスメデトミジンの作用を反転させるために、アチパメゾールの腹腔内注射を受けた。ブプレノルフィンの単一皮下注射は、痛み緩和のために投与された。
【０２０５】
実施例１７
ナノプロドラッグの生体内抗腫瘍作用
ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ／Ｔｏｃｏナノプロドラッグの抗腫瘍作用は、マウスにおいて、Ｕ８７ＭＧ腫瘍の皮下および頭蓋内異種移植片に対して試験された。皮下モデルでは、処置は、腫瘍の大きさが直径約０．５〜１．０ｃｍに達したときに開始された。動物（ｎ＝６）は、５日間毎日、ナノプロドラッグの静脈内（尾静脈）注射（４ｍｇ／ｋｇ／日ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ）を受けた。腫瘍の２つの垂直な直径が測定され、体積は式：Ｖ（ｍｍ３）＝Ｌ（ｍｍ）×Ｗ２（ｍｍ２）／２によって計算され、式中、Ｌは最長直径であり、ＷはＬに垂直な直径である。頭蓋内モデルでは、動物（ｎ＝８）は、腫瘍移植７日後に開始されるナノプロドラッグの静脈内（尾静脈）注射（１６ｍｇ／ｋｇ／日ＣＰＴ−ＴＥＧ−ＡＬＡ）を、４週間の間３日毎に受けた。動物が重度の不全片麻痺を顕在化したとき、または食餌、水へのアクセス不可能、発作活性、衰弱、麻痺を呈したとき、動物は屠殺された。対照として、動物は、イリノテカン、α−トコフェロールナノ懸濁液、および生理食塩水を受けた。
【０２０６】
実施例１８
光学撮像
皮下モデルでは、腫瘍の大きさが＞１ｃｍに達した後、１００μＬの蛍光ナノプロドラッグ（１０μＭ  Ｃｙ５．５）が尾静脈注射を介して注射された。頭蓋内モデルでは、蛍光ナノプロドラッグは、著しい神経性障害の徴候があったときに注射された。生存動物および回収した臓器の蛍光撮像は、Ｘｅｎｏｇｅｎ２００撮像システム（Ｃａｌｉｐｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して実施された。臓器（脳、心臓、肝臓、腎臓、脾臓、および肺）が動物から回収され、ナノプロドラッグの蓄積を決定するために、直ぐに撮像された。撮像は、体全体（皮下モデルのみ）、ならびにＯＣＴ化合物に埋め込まれ、凍結された単離された臓器、および腫瘍切片に対して行われた。蛍光共焦点顕微鏡に関して、腫瘍は凍結切片（１０μｍ）され、ＤＡＰＩ（Ｐｒｏｌｏｎｇ  Ｇｏｌｄ，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を含む１滴の封入剤が添加され、次にカバースライドが設置された。顕微鏡分析のために、蛍光顕微鏡を有するデジタルカメラ（Ｍｏｄｅｌ  Ｕｐｒｉｇｈｔ  Ｚｅｉｓｓ）を備えた共焦点レーザー走査顕微鏡（Ｌｅｉｃａ  Ｍｉｃｒｏｓｙｓｔｅｍ  ＳＰ５）を使用した。
【０２０７】
実施例１９
組織学および免疫組織化学検査
動物を屠殺した直後に全脳を回収し、ＯＣＴ化合物に凍結し、凍結切片（１０μｍ）し、ヘマトキシリンおよびエオシンで染色した。免疫組織化学検査に関して、切片は、５分間、４％のＰＦＡに固定された。腫瘍の血管新生を示すために、凍結した切片をラット抗マウスＣＤ３１（１：１００；ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、次にＦＩＴＣ抱合されたヤギ抗ラット（Ｓｉｇｍａ）で処理した。増殖活性を検出するために、切片をウサギ抗ヒトＫｉ−６７、次にＦＩＴＣ抱合されたヤギ抗ウサギＩｇＧ（Ｓｉｇｍａ）で処理した。ＤＡＰＩ（Ｐｒｏｌｏｎｇ  Ｇｏｌｄ，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を含む１滴の封入剤を添加することにより、全ての切片をＤＡＰＩで対比染色した。共焦点顕微鏡分析は、上述のように実施された。
【０２０８】
実施例２０
統計分析
生存試験以外に、結果を分析し、平均±標準偏差（Ｓ．Ｄ．）として表した。結果の統計分析は、スチューデントのｔ検定を使用して行われた。マウス生存試験に関して、対数順位統計分析を実施した。全ての試験に関して、差は、Ｐ＜０．０５で統計的に有意であると考えられた。
【０２０９】
参考文献
１．Ｋｒｅｘ，Ｄ．ｅｔ  ａｌ．  Ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ  ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｗｉｔｈ  ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ  ｍｕｌｔｉｆｏｒｍｅ．Ｂｒａｉｎ  １３０，２５９６-２６０６（２００７）．
２．Ｙａｎｇ，Ｉ．＆Ａｇｈｉ，Ｍ．Ｋ．Ｎｅｗ  ａｄｖａｎｃｅｓ  ｔｈａｔ  ｅｎａｂｌｅ  ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ  ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅ．  Ｎａｔ．Ｒｅｖ．  Ｃｌｉｎ．  Ｏｎｃｏｌ．  ６，６４８-６５７（２００９）．
３．Ｃｅｃｃｈｅｌｌｉ，Ｒ．  ｅｔ  ａｌ．Ｍｏｄｅｌｌｉｎｇ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｂｌｏｏｄ−ｂｒａｉｎ  ｂａｒｒｉｅｒ  ｉｎ  ｄｒｕｇ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ａｎｄ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃ．  ６，６５０-６６１（２００７）．
４．Ｈａｗｋｉｎｓ，Ｂ．Ｔ．＆Ｄａｖｉｓ，Ｔ．Ｐ．Ｔｈｅ  ｂｌｏｏｄ−ｂｒａｉｎ  ｂａｒｒｉｅｒ／ｎｅｕｒｏｖａｓｃｕｌａｒ  ｕｎｉｔ  ｉｎ  ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  ｄｉｓｅａｓｅ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｒｅｖ．  ５７，１７３-１８５（２００５）．
５．Ｊｕｉｌｌｅｒａｔ−Ｊｅａｎｎｅｒｅｔ，Ｌ．  Ｔｈｅ  ｔａｒｇｅｔｅｄ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  ｃａｎｃｅｒ  ｄｒｕｇｓ  ａｃｒｏｓｓ  ｔｈｅ  ｂｌｏｏｄ−ｂｒａｉｎ  ｂａｒｒｉｅｒ：  ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｄｒｕｇｓ  ｏｒ  ｄｒｕｇ−ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ？  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．  Ｔｏｄａｙ  １３，１０９９-１１０６（２００８）．
６．Ｗｏｌｂｕｒｇ，Ｈ．ｅｔ  ａｌ．Ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｌａｕｄｉｎ−３  ｉｎ  ｔｉｇｈｔ  ｊｕｎｃｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｂｌｏｏｄ−ｂｒａｉｎ  ｂａｒｒｉｅｒ  ｉｓ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅｌｙ  ｌｏｓｔ  ｄｕｒｉｎｇ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｅｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ  ａｎｄ  ｈｕｍａｎ  ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ  ｍｕｌｔｉｆｏｒｍｅ．  Ａｃｔａ  Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ．  １０５，５８６-５９２（２００３）．
７．Ｚｌｏｋｏｖｉｃ，Ｂ．Ｖ．Ｔｈｅ  ｂｌｏｏｄ−ｂｒａｉｎ  ｂａｒｒｉｅｒ  ｉｎ  ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ  ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ．Ｎｅｕｒｏｎ  ５７，１７８-２０１（２００８）．
８．Ｓｈｌｏｓｂｅｒｇ，Ｄ．，Ｂｅｎｉｆｌａ，Ｍ．，Ｋａｕｆｅｒ，Ｄ．＆Ｆｒｉｅｄｍａｎ，Ａ．Ｂｌｏｏｄ−ｂｒａｉｎ  ｂａｒｒｉｅｒ  ｂｒｅａｋｄｏｗｎ  ａｓ  ａ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｔａｒｇｅｔ  ｉｎ  ｔｒａｕｍａｔｉｃ  ｂｒａｉｎ  ｉｎｊｕｒｙ．Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｌ．６，３９３-４０３（２０１０）．
９．Ｉｙｅｒ，Ａ．Ｋ．，Ｋｈａｌｅｄ，Ｇ．，Ｆａｎｇ，Ｊ．＆Ｍａｅｄａ，Ｈ．Ｅｘｐｌｏｉｔｉｎｇ  ｔｈｅ  ｅｎｈａｎｃｅｄ  ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ  ｅｆｆｅｃｔ  ｆｏｒ  ｔｕｍｏｒ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ．Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．Ｔｏｄａｙ  １１，８１２-８１８（２００６）．
１０．Ｍａｅｄａ，Ｈ．Ｔｈｅ  ｅｎｈａｎｃｅｄ  ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ（ＥＰＲ）ｅｆｆｅｃｔ  ｉｎ  ｔｕｍｏｒ  ｖａｓｃｕｌａｔｕｒｅ：  ｔｈｅ  ｋｅｙ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｔｕｍｏｒ−ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｄｒｕｇ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ．  Ａｄｖ．  Ｅｎｚｙｍｅ  Ｒｅｇｕｌ．  ４１，１８９-２０７（２００１）．
１１．Ｆｅｒｒａｒｉ，Ｍ．Ｃａｎｃｅｒ  ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ：ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓ  ａｎｄ  ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ．Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ  ５，１６１-１７１（２００５）．
１２．Ｋｕｏ，Ｆ．ｅｔ  ａｌ．Ｎａｎｏｅｍｕｌｓｉｏｎｓ  ｏｆ  ａｎ  ａｎｔｉ−ｏｘｉｄａｎｔ  ｓｙｎｅｒｇｙ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ  ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ｇａｍｍａ  ｔｏｃｏｐｈｅｒｏｌ  ｈａｖｅ  ｅｎｈａｎｃｅｄ  ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ．Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．  ３６３，２０６-２１３（２００８）．
１３．Ｐｉｚｚｏｌａｔｏ，Ｊ．Ｆ．＆Ｓａｌｔｚ，Ｌ．Ｂ．Ｔｈｅ  ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎｓ．  Ｔｈｅ  Ｌａｎｃｅｔ．３６１，２２３５-２２４２（２００３）．
１４．Ｌｅｅ，Ｂ．Ｓ．ｅｔ  ａｌ．Ｏｘｉｄａｔｉｖｅ  ｓｔｉｍｕｌｉ−ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ  ｎａｎｏｐｒｏｄｒｕｇ  ｏｆ  ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎ  ｋｉｌｌｓ  ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ  ｃｅｌｌｓ．Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．  Ｌｅｔｔ．２０，５２６２-５２６８（２０１０）．
１５．Ｓｈａｆｉｑ，Ｓ．ｅｔ  ａｌ．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ａｎｄ  ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ  ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  ｏｆ  ｒａｍｉｐｒｉｌ  ｎａｎｏｅｍｕｌｓｉｏｎ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａ．Ｂｉｏｐｈａｒｍ．６６，２２７-２４３（２００７）．
１６．Ｆｉｌｉｐｅ，Ｖ．，Ｈａｗｅ，Ａ．＆Ｊｉｓｋｏｏｔ，  Ｗ．Ｃｒｉｔｉｃａｌ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ  ｔｒａｃｋｉｎｇ  ａｎａｌｙｓｉｓ  （ＮＴＡ）  ｂｙ  ＮａｎｏＳｉｇｈｔ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ  ａｎｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ａｇｇｒｅｇａｔｅｓ．Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．２７，７９６-８１０（２０１０）．
１７．Ｌｅｅ，Ｂ．Ｓ．ｅｔ  ａｌ．Ｓｔｉｍｕｌｉ−ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ  ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ  ｎａｎｏｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｏｆ  ＮＳＡＩＤｓ．Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．３７２，１１２-１２４（２００９）．
１８．Ｏｈｓｈｉｍａ，Ｈ．＆Ｂａｒｔｓｃｈ，Ｈ．Ｃｈｒｏｎｉｃ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ｐｒｏｃｅｓｓ  ａｓ  ｃａｎｃｅｒ  ｒｉｓｋ  ｆａｃｔｏｒｓ：  ｐｏｓｓｉｂｌｅ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ  ｉｎ  ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ．Ｍｕｔａｔ．Ｒｅｓ．３０５，２５３-２６４（１９９４）．
１９．Ｗｅｉｔｚｍａｎ，Ｓ．Ａ．＆Ｇｏｒｄｏｎ，Ｌ．Ｉ．Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃａｎｃｅｒ：  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｐｈａｇｏｃｙｔｅ−ｇｅｎｅｒａｔｅｄ  ｏｘｉｄａｎｔｓ  ｉｎ  ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ．  Ｂｌｏｏｄ  ７６，６５５-６６３（１９９０）．
２０．Ｔｒｕｓｈ，Ｍ．Ａ．＆Ｋｅｎｓｌｅｒ，Ｔ．Ｗ．Ａｎ  ｏｖｅｒｖｉｅｗ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｏｘｉｄａｔｉｖｅ  ｓｔｒｅｓｓ  ａｎｄ  ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ．Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．１０，２０１-２０９（１９９１）．
２１．Ｃｅｒｕｔｔｉ，Ｐ．Ａ．Ｐｒｏｏｘｉｄａｎｔ  ｓｔａｔｅｓ  ａｎｄ  ｔｕｍｏｒ  ｐｒｏｍｏｔｉｏｎ．  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２７，３７５-３８１（１９８５）．
２２．Ｂｕｎｔ，Ｓ．Ｋ．ｅｔ  ａｌ．Ｒｅｄｕｃｅｄ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｔｕｍｏｒ  ｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ  ｄｅｌａｙｓ  ｔｈｅ  ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｙｅｌｏｉｄ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ  ｃｅｌｌｓ  ａｎｄ  ｌｉｍｉｔｓ  ｔｕｍｏｒ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６７，１００１９-１００２６（２００７）．
２３．Ｈｅｎｓｏｎ，Ｊ．Ｗ．，Ｃｏｒｄｏｎ−Ｃａｒｄｏ，  Ｃ．  ＆  Ｐｏｓｎｅｒ，Ｊ．Ｂ．Ｐ−ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ｂｒａｉｎ  ｔｕｍｏｒｓ．  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｏｎｃｏｌ．１４，３７-４３（１９９２）．
２４．  Ｓａｗａｄａ，Ｔ．，Ｋａｔｏ，Ｙ．，Ｓａｋａｙｏｒｉ，Ｎ．，Ｔａｋｅｋａｗａ，Ｙ．＆Ｋｏｂａｙａｓｈｉ，Ｍ．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  Ｐ−ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ（Ｐｇｐ，  ＭＤＲ−１）  ｂｙ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｃｅｌｌｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｎｅｏｖａｓｃｕｌａｔｕｒｅ  ｉｎ  ｃｅｎｔｒａｌ  ｎｅｒｖｏｕｓ  ｓｙｓｔｅｍ  ｔｕｍｏｒｓ．  Ｂｒａｉｎ  Ｔｕｍｏｒ  Ｐａｔｈｏｌ．１６，２３-２７（１９９９）．
２５．Ｂｒｅｄｅｌ，Ｍ．＆Ｚｅｎｔｎｅｒ，Ｊ．Ｂｒａｉｎ−ｔｕｍｏｕｒ  ｄｒｕｇ  ｒｅｓｉｓｔｅｎｃｅ：  ｔｈｅ  ｂａｒｅ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｓ．Ｌａｎｃｅｔ  Ｏｎｃｏｌ．３，３９７-４０６（２００２）．
２６．Ｓｈａｐｉｒｏ，Ａ．Ｂ．，Ｃｏｒｄｅｒ，Ａ．Ｂ．，＆Ｌｉｎｇ，Ｖ．Ｐ−ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  Ｈｏｅｃｈｓｔ  ３３３４２  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  ｏｕｔ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｌｉｐｉｄ  ｂｉｌａｙｅｒ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２５０，１１５-１２１（１９９７）．
２７．Ｉｙｅｒ，Ｌ．ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｌｉａｒｙ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  ｏｆ  ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ  ａｎｄ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ  ｉｎ  ｎｏｒｍａｌ  ａｎｄ  Ｐ−ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ−ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ  ｍｉｃｅ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４９，３３６-４１（２００２）．
２８．Ｓｅｎ，Ｗ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．ＣＰＴ−１１  ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  ｒｅｌａｔｉｏｎ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｐ１７０−ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ  ａｎｄ  ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ．Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ７７，３５９-６５（１９９８）．
２９．Ｗａｎｇ，Ｍ．，Ｗａｎｇ，Ｔ．，Ｌｉｕ，Ｓ．，Ｙｏｓｈｉｄａ，Ｄ．＆Ｔｅｒａｍｏｔｏ，Ａ．Ｔｈｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ−２  ａｎｄ  −９  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｇｌｉｏｍａｓ  ｏｆ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ  ｇｒａｄｅｓ．  Ｂｒａｉｎ  Ｔｕｍｏｒ  Ｐａｔｈｏｌ．２０，６５-７２（２００３）．
３０．Ｇｉｌｂｅｒｔｓｏｎ，Ｒ．Ｊ．＆Ｒｉｃｈ，Ｊ．Ｎ．Ｍａｋｉｎｇ  ａ  ｔｕｍｏｕｒ’ｓ  ｂｅｄ：ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｖａｓｃｕｌａｒ  ｎｉｃｈｅ．Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ  ７，７３３-７３６（２００７）．
【０２１０】
本発明の様々な実施形態が発明を実施するための形態において上述される。これらの説明は上の実施形態を直接説明するが、当業者は、本明細書に示され、説明される特定の実施形態に対して修正および／または変形を考案することができることを理解する。本説明の範囲内に入る任意のそのような修正または変形も、本明細書に含まれることが意図される。特に記載されない限り、本明細書および特許請求の範囲における用語および句は、関係する分野（複数可）の者に通常の意味および慣れている意味を与えることが、発明者の意図である。
【０２１１】
本願の出願時に出願者に既知の本発明の様々な実施形態の先の説明は、図示および説明の目的のために提示され、またそのためである。本説明は、開示された正確な形態に本発明を網羅することも制限することも意図せず、多くの修正および変形が上記の教示の観点から可能である。記載される実施形態は、本発明の原理およびその実際の用途を説明し、当業者が様々な実施形態において、そして想定される特定の使用に適するように様々な修正を加えて本発明を利用することを可能とするのに役立つ。したがって、本発明は、本発明を行うために開示される特定の実施形態に制限されないものとする。
【０２１２】
本発明の特定の実施形態が示され、説明されてきたが、本明細書の教示に基づき、変更および修正は本発明およびその広義の態様から逸脱することなく行うことができ、したがって、付属の特許請求の範囲は、本発明の真の趣旨および範囲内であるように、その範囲内に全てのそのような変更および修正を包含することは当業者には明らかであろう。一般に、本明細書で使用される用語は、一般的に、「開放」用語である（例えば、用語「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」は、「含むが〜に限定されない」と解釈されるべきであり、用語「有する」は、「少なくとも〜を有する」と解釈されるべきであり、用語「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」は、「含むが〜に限定されない」と解釈されるべきである）ことが意図されることを、当業者は理解するだろう。
【図１】
2014523924.tif 000317
【図２】
2014523924.tif 000318
【図３】
2014523924.tif 000319
【図４ａ】
2014523924.tif 000320
【図４ｂ】
2014523924.tif 000321
【図４ｃ】
2014523924.tif 000322
【図５】
2014523924.tif 000323
【図６ａ】
2014523924.tif 000324
【図６ｂ】
2014523924.tif 000325
【図７】
2014523924.tif 000326
【図８】
2014523924.tif 000327
【図９】
2014523924.tif 000328
【図１０】
2014523924.tif 000329
【図１１】
2014523924.tif 000330
【図１２−１】
2014523924.tif 000331
【図１２−２】
2014523924.tif 000332
【図１３】
2014523924.tif 000333
【図１４ａ】
2014523924.tif 000334
【図１４ｂ】
2014523924.tif 000335
【手続補正書】
【提出日】平成26年4月1日(2014.4.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
トコフェロールと、
親水性スペーサー、疎水性スペーサー、両親媒性スペーサー、もしくは両親媒性ポリマーに抱合される治療薬または造影剤と、
カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体と、
を含む、ナノ球体。
【請求項２】
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、
【化２５６】
2014523924.tif 000336
であり、式中、ＡおよびＢが、独立して、―ＯＣ（Ｏ）―、―ＯＣ（Ｏ）Ｏ―、および―ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）―からなる群から選択され、式中、Ｒが、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり、
ＸおよびＹが、リンカーであり、それぞれ、独立して、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖を含み、任意に、ヘテロ原子を含み得、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が、それぞれ、独立して、水素、アルキル、アリール、脂環式、およびアラルキルからなる群から選択され、任意に、それぞれ、ヘテロ原子を含有し得る、請求項１に記載のナノ球体。
【請求項３】
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、
【化２５７】
2014523924.tif 000337
であり、式中、Ｌ１が、ジオール上の２つのエステル化が可能な遊離ヒドロキシル基のエステル化によって形成される部分である、請求項２に記載のナノ球体。
【請求項４】
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、
式Ｃ−Ｖ
【化２５８】
2014523924.tif 000338
式Ｃ−ＶＩ
【化２５９】
2014523924.tif 000339
式Ｃ−ＶＩＩ
【化２６０】
2014523924.tif 000340
式Ｃ−ＶＩＩＩ
【化２６１】
2014523924.tif 000341
式Ｃ−ＩＸ
【化２６２】
2014523924.tif 000342
式Ｃ−Ｘ
【化２６３】
2014523924.tif 000343
式Ｃ−ＸＬＶＩ
【化２６４】
2014523924.tif 000344
からなる群から選択される、請求項３に記載のナノ球体。
【請求項５】
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、
【化２６５】
2014523924.tif 000345
であり、式中、Ａが、独立して、―ＯＣ（Ｏ）―、―ＯＣ（Ｏ）Ｏ―、および―ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）―からなる群から選択され、式中、Ｒが、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり、
Ｐが、―ＯＣ（Ｏ）―および―Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）―からなる群から選択され、式中、Ｒが、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり、
Ｘが、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖を含むリンカーであり、任意に、ヘテロ原子を含み得、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が、それぞれ、独立して、水素、アルキル、アリール、脂環式、およびアラルキルからなる群から選択され、任意に、それぞれ、ヘテロ原子を含有し得る、請求項２に記載のナノ球体。
【請求項６】
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、式Ｃ−ＸＩ
【化２６６】
2014523924.tif 000346
であり、式中、Ｌ２が、前記化合物を生成するプロセスにおいて、前記リンカーとしてジアミンを使用することによって形成される部分である、請求項５に記載のナノ球体。
【請求項７】
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、
式Ｃ−ＸＩＩ
【化２６７】
2014523924.tif 000347
式Ｃ−ＸＩＩＩ
【化２６８】
2014523924.tif 000348
式Ｃ−ＸＩＶ
【化２６９】
2014523924.tif 000349
式Ｃ−ＸＶ
【化２７０】
2014523924.tif 000350
式Ｃ−ＸＶＩ
【化２７１】
2014523924.tif 000351
式Ｃ−ＸＶＩＩ
【化２７２】
2014523924.tif 000352
式Ｃ−ＸＬＶＩＩ
【化２７３】
2014523924.tif 000353
からなる群から選択される、請求項５に記載のナノ球体。
【請求項８】
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、式Ｃ−ＸＶＩＩＩ
【化２７４】
2014523924.tif 000354
であり、式中、Ｌ３が、前記化合物を生成するプロセスにおいて、前記リンカーとしてアミノアルコールを使用することによって形成される部分である、請求項５に記載のナノ球体。
【請求項９】
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、
式Ｃ−ＸＩＸ
【化２７５】
2014523924.tif 000355
式Ｃ−ＸＸ
【化２７６】
2014523924.tif 000356
式Ｃ−ＸＸＩ
【化２７７】
2014523924.tif 000357
式Ｃ−ＸＸＩＩ
【化２７８】
2014523924.tif 000358
式Ｃ−ＸＸＩＩＩ
【化２７９】
2014523924.tif 000359
式Ｃ−ＸＸＩＶ
【化２８０】
2014523924.tif 000360
式Ｃ−ＸＬＶＩＩＩ
【化２８１】
2014523924.tif 000361
からなる群から選択される、請求項８に記載のナノ球体。
【請求項１０】
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、α−リポ酸と、カンプトテシンまたは無水コハク酸もしくは無水グルタル酸と反応させることによって修飾されるカンプトテシン類似体との抱合により生成される化合物であり、前記カンプトテシン類似体が、式Ｃ−Ｉ
【化２８２】
2014523924.tif 000362
によって表され、式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が、それぞれ、独立して、水素、アルキル、アリール、脂環式、およびアラルキルからなる群から選択され、任意に、ヘテロ原子を含有し得る、請求項１に記載のナノ球体。
【請求項１１】
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、
式Ｃ−ＸＸＶ
【化２８３】
2014523924.tif 000363
式Ｃ−ＸＸＶＩ
【化２８４】
2014523924.tif 000364
式Ｃ−ＸＸＶＩＩ
【化２８５】
2014523924.tif 000365
式Ｃ−ＸＸＶＩＩＩ
【化２８６】
2014523924.tif 000366
式Ｃ−ＸＸＩＸ
【化２８７】
2014523924.tif 000367
式Ｃ−ＸＸＸ
【化２８８】
2014523924.tif 000368
式Ｃ−ＸＸＸＩ
【化２８９】
2014523924.tif 000369
式Ｃ−ＸＸＸＩＩ
【化２９０】
2014523924.tif 000370
式Ｃ−ＸＸＸＩＩＩ
【化２９１】
2014523924.tif 000371
式Ｃ−ＸＸＸＩＶ
【化２９２】
2014523924.tif 000372
式Ｃ−ＸＸＸＶ
【化２９３】
2014523924.tif 000373
式Ｃ−ＸＸＶＩ
【化２９４】
2014523924.tif 000374
式Ｃ−ＸＸＸＶＩＩ
【化２９５】
2014523924.tif 000375
式Ｃ−ＸＸＸＶＩＩＩ
【化２９６】
2014523924.tif 000376
式Ｃ−ＸＸＸＩＸ
【化２９７】
2014523924.tif 000377
式Ｃ−ＸＬ
【化２９８】
2014523924.tif 000378
式Ｃ−ＸＬＩ
【化２９９】
2014523924.tif 000379
式Ｃ−ＸＬＩＩ
【化３００】
2014523924.tif 000380
式Ｃ−ＸＬＩＩＩ
【化３０１】
2014523924.tif 000381
式Ｃ−ＸＬＩＶ
【化３０２】
2014523924.tif 000382
式Ｃ−ＸＬＶ
【化３０３】
2014523924.tif 000383
からなる群から選択され、式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が、それぞれ、独立して、水素、アルキル、アリール、脂環式、およびアラルキルからなる群から選択され、任意に、それぞれ、ヘテロ原子を含有し得る、請求項１に記載のナノ球体。
【請求項１２】
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、
化合物Ｃ−１０
【化３０７】
2014523924.tif 000384
化合物Ｃ−２
【化３０６】
2014523924.tif 000385
化合物Ｃ−１
【化３０５】
2014523924.tif 000386
化合物Ｃ−２３
【化３０４】
2014523924.tif 000387
化合物Ｃ−３
【化３０８】
2014523924.tif 000388
化合物Ｃ−４
【化３０９】
2014523924.tif 000389
化合物Ｃ−５
【化３１０】
2014523924.tif 000390
化合物Ｃ−１１
【化３１１】
2014523924.tif 000391
化合物Ｃ−６
【化３１２】
2014523924.tif 000392
化合物Ｃ−７
【化３１３】
2014523924.tif 000393
化合物Ｃ−８
【化３１４】
2014523924.tif 000394
化合物Ｃ−１２
【化３１５】
2014523924.tif 000395
化合物Ｃ−９
【化３１６】
2014523924.tif 000396
化合物Ｃ−１３
【化３１７】
2014523924.tif 000397
化合物Ｃ−１４
【化３１８】
2014523924.tif 000398
化合物Ｃ−１５
【化３１９】
2014523924.tif 000399
化合物Ｃ−１６
【化３２０】
2014523924.tif 000400
化合物Ｃ−１７
【化３２１】
2014523924.tif 000401
化合物Ｃ−１８
【化３２２】
2014523924.tif 000402
化合物Ｃ−１９
【化３２３】
2014523924.tif 000403
化合物Ｃ−２０
【化３２４】
2014523924.tif 000404
化合物Ｃ−２１
【化３２５】
2014523924.tif 000405
化合物Ｃ−２２
【化３２６】
2014523924.tif 000406
からなる群から選択される、請求項１に記載のナノ球体。
【請求項１３】
癌の治療を必要とする対象において、癌を治療するための組成物であって、
請求項１に記載のナノ球体を含む、組成物。
【請求項１４】
前記癌が、脳癌である、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
トコフェロールと、
親水性スペーサー、疎水性スペーサー、両親媒性スペーサー、もしくは両親媒性ポリマーに抱合される治療薬または造影剤と、
式Ｂ−Ｉ
【化２０３】
2014523924.tif 000407
を有する疎水性非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）誘導体と、
含むナノ球体であって、式中、Ａが、分枝状および非分枝状のアルキル基、分枝状および非分枝状のアルケニル基、分枝状および非分枝状のアルキニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルケニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキニル基、アリール基、環式脂肪族基、環式芳香族基、複素環式基、および芳香族複素環式基からなる群から選択され、ｎが、少なくとも２の整数である、ナノ球体。
【請求項１６】
癌の治療を必要とする対象において、癌を治療するための組成物であって、
請求項１５に記載のナノ球体を含む、組成物。
【請求項１７】
癌の検出または診断を必要とする対象において、癌を撮像する、検出する、または診断するための組成物であって、
前記組成物は、請求項１５に記載のナノ球体を含み、
前記対象は、前記組成物の投与後に撮像されることによって、前記癌が検出される、または診断されることを特徴とする、
組成物。
【請求項１８】
トコフェロールと、
親水性スペーサー、疎水性スペーサー、両親媒性スペーサー、もしくは両親媒性ポリマーに抱合される治療薬または造影剤と、
式Ｂ−ＩＩ
【化２０４】
2014523924.tif 000408
を有する非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）の疎水性抗酸化剤および抗炎症誘導体と、
を含むナノ球体であって、式中、Ｘ が、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖からなる群から選択され、任意に、ヘテロ原子を含有し得、Ａが、分枝状および非分枝状のアルキル基、分枝状および非分枝状のアルケニル基、分枝状および非分枝状のアルキニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキル、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルケニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキニル基、アリール基、環式脂肪族基、環式芳香族基、複素環式基、および芳香族複素環式基からなる群から選択され、ｎが、少なくとも１の整数であり、ｍが、少なくとも１の整数である、ナノ球体。
【請求項１９】
ＮＳＡＩＤの前記疎水性抗酸化剤および抗炎症誘導体が、式Ｂ−ＩＩＩ
【化２０５】
2014523924.tif 000409
であり、式中、ＡＬＡが、α−リポ酸を表す、請求項１８に記載のナノ球体。
【請求項２０】
癌の治療を必要とする対象において、癌を治療するための組成物であって、
請求項１８に記載のナノ球体を含む、組成物。
【請求項２１】
癌の検出、診断を必要とする対象において、癌を撮像、検出、診断するための組成物であって、
前記組成物は、請求項１８に記載のナノ球体を含み、
前記対象は、前記組成物の投与後に撮像されることによって、前記癌が検出される、または診断されることを特徴とする、
組成物。
【請求項２２】
トコフェロールと、
親水性スペーサー、疎水性スペーサー、両親媒性スペーサー、もしくは両親媒性ポリマーに抱合される治療薬または造影剤と、
式Ｄ−Ｉ、Ｄ−ＩＩ、Ｄ−ＩＩＩ、Ｄ−ＩＶ、Ｄ−Ｖ、またはＤ−ＶＩを有するスタチンラクトン誘導体と、
【化２０６】
2014523924.tif 000410
を含むナノ球体であって、式中、ＡおよびＢが、独立して、―ＯＣ（Ｏ）―、―ＯＣ（Ｏ）Ｏ―、および―ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）―からなる群から選択され、式中、Ｒが、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり、任意に、ヘテロ原子を含み得、ＸおよびＹが、リンカーであり、それぞれ、独立して、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖を含み、任意に、ヘテロ原子を含み得、ＳＬが、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなる群からのスタチンラクトンから選択され、
【化２０７】
2014523924.tif 000411
式中、Ａが、―ＯＣ（Ｏ）―、―ＯＣ（Ｏ）Ｏ―、および―ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）―からなる群から選択され、式中、Ｒが、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり、任意に、ヘテロ原子を含み得、Ｐが、―ＯＣ（Ｏ）―および―Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）―からなる群から選択され、式中、Ｒが、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり、任意に、ヘテロ原子を含み得、Ｘが、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖を含むリンカーであり、任意に、ヘテロ原子を含み得、ＳＬが、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなる群からのスタチンラクトンから選択され、
【化２０８】
2014523924.tif 000412
式中、Ｌ１が、ジオール上の２つのエステル化が可能な遊離ヒドロキシル基のエステル化によって形成される部分であり、ＳＬが、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなる群からのスタチンラクトンから選択され、
【化２０９】
2014523924.tif 000413
式中、Ｌ２が、前記スタチンラクトン誘導体を生成するプロセスにおいて、前記リンカーとしてジアミンを使用することによって形成される部分であり、ＳＬが、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなる群からのスタチンラクトンから選択され、
【化２１０】
2014523924.tif 000414
式中、Ｌ３が、前記スタチンラクトン誘導体を生成するプロセスにおいて、リンカーとしてアミノアルコールを使用することによって形成される部分であり得、ＳＬが、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなる群からのスタチンラクトンから選択され、
【化２１１】
2014523924.tif 000415
式中、ＡおよびＰが、独立して、―ＯＣ（Ｏ）―、―ＯＣ（Ｏ）Ｏ―、および―ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）―からなる群から選択され、式中、Ｒが、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり、任意に、ヘテロ原子を含み得、Ｘが、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖を含むリンカーであり、任意に、ヘテロ原子を含み得、ＳＬ１およびＳＬ２が、独立して、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなる群からのスタチンラクトンから選択される、ナノ球体。
【請求項２３】
前記スタチンラクトン誘導体が、
化合物Ｄ−４７
【化２１２】
2014523924.tif 000416
化合物Ｄ−４８
【化２１３】
2014523924.tif 000417
化合物Ｄ−４９
【化２１４】
2014523924.tif 000418
化合物Ｄ−５０
【化２１５】
2014523924.tif 000419
化合物Ｄ−５１
【化２１６】
2014523924.tif 000420
化合物Ｄ−５２
【化２１７】
2014523924.tif 000421
化合物Ｄ−５３
【化２１８】
2014523924.tif 000422
化合物Ｄ−５４
【化２１９】
2014523924.tif 000423
化合物Ｄ−５５
【化２２０】
2014523924.tif 000424
化合物Ｄ−５６
【化２２１】
2014523924.tif 000425
化合物Ｄ−５７
【化２２２】
2014523924.tif 000426
化合物Ｄ−５８
【化２２３】
2014523924.tif 000427
化合物Ｄ−５９
【化２２４】
2014523924.tif 000428
化合物Ｄ−６０
【化２２５】
2014523924.tif 000429
化合物Ｄ−６１
【化２２６】
2014523924.tif 000430
化合物Ｄ−６２
【化２２７】
2014523924.tif 000431
化合物Ｄ−６３
【化２２８】
2014523924.tif 000432
化合物Ｄ−６４
【化２２９】
2014523924.tif 000433
化合物Ｄ−６５
【化２３０】
2014523924.tif 000434
化合物Ｄ−６６
【化２３１】
2014523924.tif 000435
化合物Ｄ−６７
【化２３２】
2014523924.tif 000436
化合物Ｄ−６８
【化２３３】
2014523924.tif 000437
化合物Ｄ−６９
【化２３４】
2014523924.tif 000438
化合物Ｄ−７０
【化２３５】
2014523924.tif 000439
化合物Ｄ−１３
【化２３６】
2014523924.tif 000440
化合物Ｄ−１４
【化２３７】
2014523924.tif 000441
化合物Ｄ−１５
【化２３８】
2014523924.tif 000442
化合物Ｄ−１６
【化２３９】
2014523924.tif 000443
化合物Ｄ−１７
【化２４０】
2014523924.tif 000444
化合物Ｄ−１８
【化２４１】
2014523924.tif 000445
化合物Ｄ−１９
【化２４２】
2014523924.tif 000446
化合物Ｄ−２０
【化２４３】
2014523924.tif 000447
化合物Ｄ−２１
【化２４４】
2014523924.tif 000448
化合物Ｄ−２２
【化２４５】
2014523924.tif 000449
化合物Ｄ−２３
【化２４６】
2014523924.tif 000450
化合物Ｄ−２４
【化２４７】
2014523924.tif 000451
化合物Ｄ−２５
【化２４８】
2014523924.tif 000452
化合物Ｄ−２６
【化２４９】
2014523924.tif 000453
化合物Ｄ−２７
【化２５０】
2014523924.tif 000454
化合物Ｄ−２８
【化２５１】
2014523924.tif 000455
化合物Ｄ−２９
【化２５２】
2014523924.tif 000456
化合物Ｄ−３０
【化２５３】
2014523924.tif 000457
化合物Ｄ−３１
【化２５４】
2014523924.tif 000458
化合物Ｄ−３２
【化２５５】
2014523924.tif 000459
からなる群から選択される、請求項２２に記載のナノ球体。
【請求項２４】
コレステロールレベルの低下、心臓血管疾患の可能性の低下、または心臓血管疾患の治療を必要とする対象において、それらを行うための組成物であって、
請求項２２に記載のナノ球体を含む、組成物。
【請求項２５】
癌の検出または診断を必要とする対象において、癌を撮像する、検出する、または診断するための組成物であって、
前記組成物は、請求項２２に記載のナノ球体を含み、
前記対象は、前記撮像するの投与後に撮像されることによって、前記癌が検出される、または診断されることを特徴とする、
組成物。
【請求項２６】
トコフェロールと、
親水性スペーサー、疎水性スペーサー、両親媒性スペーサー、もしくは両親媒性ポリマーに抱合される治療薬または造影剤と、
式Ａ−Ｉａ
【化２０１】
2014523924.tif 000460
を有する抗酸化剤α−リポ酸含有疎水性化合物と、
を含むナノ球体であって、
式中、Ｘが、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖からなる群から選択され、任意に、ヘテロ原子を含有し得、Ｙが、分枝状および非分枝状のアルキル基、分枝状および非分枝状のアルケニル基、分枝状および非分枝状のアルキニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルケニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキニル基、アリール基、環式脂肪族基、環式芳香族基、複素環式基、および芳香族複素環式基からなる群から選択され、ｎが、少なくとも１の整数である、ナノ球体。
【請求項２７】
式Ｉａにおけるジチオラン部分が、α−リポ酸であり、式Ａ−ＩＩａ
【化２０２】
2014523924.tif 000461
によって表される、請求項２６に記載のナノ球体。
【請求項２８】
癌の治療を必要とする対象において、癌を治療するための組成物であって、
請求項２６に記載のナノ球体を含む、組成物。
【請求項２９】
癌の検出または診断を必要とする対象において、癌を撮像する、検出する、または診断するための組成物であって、
前記組成物は、請求項２６に記載のナノ球体を含み、
前記対象は、前記組成物の投与後に撮像されることによって、前記癌が検出される、または診断されることを特徴とする、
組成物。
【請求項３０】
トコフェロールと、
親水性スペーサー、疎水性スペーサー、両親媒性スペーサー、もしくは両親媒性ポリマーに抱合される治療薬または造影剤と、
を含む、ナノ球体。
【請求項３１】
癌の治療を必要とする対象において、癌を治療するための組成物であって、
請求項３０に記載のナノ球体を含む、組成物。
【請求項３２】
癌の検出または診断を必要とする対象において、癌を撮像する、検出する、または診断するための組成物であって、
前記組成物は、請求項３０に記載のナノ球体を含み、
前記対象が、前記組成物の投与後に撮像されることによって、前記癌が検出される、または診断されることを特徴とする、
組成物。
【請求項３３】
癌の検出または診断を必要とする対象において、癌を撮像する、検出する、または診断するための組成物であって、
前記組成物は、請求項１に記載のナノ球体を含み、
前記対象が、前記組成物の投与後に撮像されることによって、前記癌が検出される、または診断されることを特徴とする、
組成物。
【請求項３４】
前記治療薬が、化学療法剤、スタチン、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、エリスロポエチン、ペプチド、アンチセンス核酸、ＤＮＡ、ＲＮＡ、タンパク質、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項３０に記載のナノ球体。
【請求項３５】
前記治療薬が、パクリタキセル、ドキソルビシン、テモゾロミド、５−フルオロウラシル、カンプトテシン、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項３０に記載のナノ球体。
【請求項３６】
前記造影剤が、蛍光染料、癌において過剰発現されたタンパク質に対する抗体、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項３０に記載のナノ球体。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２２】
本発明は、例えば、以下を提供する： 
（項目１）
トコフェロールと、
親水性スペーサー、疎水性スペーサー、両親媒性スペーサー、もしくは両親媒性ポリマーに抱合される治療薬または造影剤と、
を含む、ナノ球体。
（項目２）
癌の治療を必要とする対象において、癌を治療する方法であって、
項目１に記載のナノ球体を提供することと、
前記癌を治療するために、前記対象に治療有効量の前記ナノ球体を投与することと、を含む、方法。
（項目３）
癌の検出または診断を必要とする対象において、癌を検出する、または診断する方法であって、
項目１に記載のナノ球体を提供することと、
前記対象に有効量の前記ナノ球体を投与することと、
前記癌を検出する、または診断するために、前記対象を撮像することと、
を含む、方法。
（項目４）
式Ａ−Ｉａ
【化２０１】
2014523924.tif 000462
を有する抗酸化剤α−リポ酸含有疎水性化合物をさらに含み、
式中、Ｘが、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖からなる群から選択され、任意に、ヘテロ原子を含有し得、Ｙが、分枝状および非分枝状のアルキル基、分枝状および非分枝状のアルケニル基、分枝状および非分枝状のアルキニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルケニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキニル基、アリール基、環式脂肪族基、環式芳香族基、複素環式基、および芳香族複素環式基からなる群から選択され、ｎが、少なくとも１の整数である、項目１に記載のナノ球体。
（項目５）
式Ｉａにおけるジチオラン部分が、α−リポ酸であり、式Ａ−ＩＩａ
【化２０２】
2014523924.tif 000463
によって表される、項目４に記載のナノ球体。
（項目６）
癌の治療を必要とする対象において、癌を治療する方法であって、
項目４に記載のナノ球体を提供することと、
前記癌を治療するために、前記対象に治療有効量の前記ナノ球体を投与することと、を含む、方法。
（項目７）
癌の検出または診断を必要とする対象において、癌を検出する、または診断する方法であって、
項目４に記載のナノ球体を提供することと、
前記対象に有効量の前記ナノ球体を投与することと、
前記癌を検出する、または診断するために、前記対象を撮像することと、
を含む、方法。
（項目８）
式Ｂ−Ｉ
【化２０３】
2014523924.tif 000464
を有する疎水性非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）誘導体をさらに含み、式中、Ａが、分枝状および非分枝状のアルキル基、分枝状および非分枝状のアルケニル基、分枝状および非分枝状のアルキニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルケニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキニル基、アリール基、環式脂肪族基、環式芳香族基、複素環式基、および芳香族複素環式基からなる群から選択され、ｎが、少なくとも２の整数である、項目１に記載のナノ球体。
（項目９）
癌の治療を必要とする対象において、癌を治療する方法であって、
項目８に記載のナノ球体を提供することと、
前記癌を治療するために、前記対象に治療有効量の前記ナノ球体を投与することと、を含む、方法。
（項目１０）
癌の検出または診断を必要とする対象において、癌を検出する、または診断する方法であって、
項目８に記載のナノ球体を提供することと、
前記対象に有効量の前記ナノ球体を投与することと、
前記癌を検出する、または診断するために、前記対象を撮像することと、
を含む、方法。
（項目１１）
式Ｂ−ＩＩ
【化２０４】
2014523924.tif 000465
を有する非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）の疎水性抗酸化剤および抗炎症誘導体をさらに含み、式中、Ｘ が、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖からなる群から選択され、任意に、ヘテロ原子を含有し得、Ａが、分枝状および非分枝状のアルキル基、分枝状および非分枝状のアルケニル基、分枝状および非分枝状のアルキニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキル、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルケニル基、ヘテロ原子を含有する分枝状および非分枝状のアルキニル基、アリール基、環式脂肪族基、環式芳香族基、複素環式基、および芳香族複素環式基からなる群から選択され、ｎが、少なくとも１の整数であり、ｍが、少なくとも１の整数である、項目１に記載のナノ球体。
（項目１２）
ＮＳＡＩＤの前記疎水性抗酸化剤および抗炎症誘導体が、式Ｂ−ＩＩＩ
【化２０５】
2014523924.tif 000466
であり、式中、ＡＬＡが、α−リポ酸を表す、項目１１に記載のナノ球体。
（項目１３）
癌の治療を必要とする対象において、癌を治療する方法であって、
項目１１に記載のナノ球体を提供することと、
前記癌を治療するために、前記対象に治療有効量の前記ナノ球体を投与することと、を含む、方法。
（項目１４）
癌の検出、診断を必要とする対象において、癌を検出、診断する方法であって、
項目１１に記載のナノ球体を提供することと、
前記対象に有効量の前記ナノ球体を投与することと、
前記癌を検出する、または診断するために、前記対象を撮像することと、
を含む、方法。
（項目１５）
式Ｄ−Ｉ、Ｄ−ＩＩ、Ｄ−ＩＩＩ、Ｄ−ＩＶ、Ｄ−Ｖ、またはＤ−ＶＩを有するスタチンラクトン誘導体をさらに含み、
【化２０６】
2014523924.tif 000467
式中、ＡおよびＢが、独立して、―ＯＣ（Ｏ）―、―ＯＣ（Ｏ）Ｏ―、および―ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）―からなる群から選択され、式中、Ｒが、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり、任意に、ヘテロ原子を含み得、ＸおよびＹが、リンカーであり、それぞれ、独立して、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖を含み、任意に、ヘテロ原子を含み得、ＳＬが、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなる群からのスタチンラクトンから選択され、
【化２０７】
2014523924.tif 000468
式中、Ａが、―ＯＣ（Ｏ）―、―ＯＣ（Ｏ）Ｏ―、および―ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）―からなる群から選択され、式中、Ｒが、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり、任意に、ヘテロ原子を含み得、Ｐが、―ＯＣ（Ｏ）―および―Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）―からなる群から選択され、式中、Ｒが、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり、任意に、ヘテロ原子を含み得、Ｘが、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖を含むリンカーであり、任意に、ヘテロ原子を含み得、ＳＬが、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなる群からのスタチンラクトンから選択され、
【化２０８】
2014523924.tif 000469
式中、Ｌ１が、ジオール上の２つのエステル化が可能な遊離ヒドロキシル基のエステル化によって形成される部分であり、ＳＬが、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなる群からのスタチンラクトンから選択され、
【化２０９】
2014523924.tif 000470
式中、Ｌ２が、前記スタチンラクトン誘導体を生成するプロセスにおいて、前記リンカーとしてジアミンを使用することによって形成される部分であり、ＳＬが、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなる群からのスタチンラクトンから選択され、
【化２１０】
2014523924.tif 000471
式中、Ｌ３が、前記スタチンラクトン誘導体を生成するプロセスにおいて、リンカーとしてアミノアルコールを使用することによって形成される部分であり得、ＳＬが、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなる群からのスタチンラクトンから選択され、
【化２１１】
2014523924.tif 000472
式中、ＡおよびＰが、独立して、―ＯＣ（Ｏ）―、―ＯＣ（Ｏ）Ｏ―、および―ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）―からなる群から選択され、式中、Ｒが、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり、任意に、ヘテロ原子を含み得、Ｘが、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖を含むリンカーであり、任意に、ヘテロ原子を含み得、ＳＬ１およびＳＬ２が、独立して、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンからなる群からのスタチンラクトンから選択される、項目１に記載のナノ球体。
（項目１６）
前記スタチンラクトン誘導体が、
化合物Ｄ−４７
【化２１２】
2014523924.tif 000473
化合物Ｄ−４８
【化２１３】
2014523924.tif 000474
化合物Ｄ−４９
【化２１４】
2014523924.tif 000475
化合物Ｄ−５０
【化２１５】
2014523924.tif 000476
化合物Ｄ−５１
【化２１６】
2014523924.tif 000477
化合物Ｄ−５２
【化２１７】
2014523924.tif 000478
化合物Ｄ−５３
【化２１８】
2014523924.tif 000479
化合物Ｄ−５４
【化２１９】
2014523924.tif 000480
化合物Ｄ−５５
【化２２０】
2014523924.tif 000481
化合物Ｄ−５６
【化２２１】
2014523924.tif 000482
化合物Ｄ−５７
【化２２２】
2014523924.tif 000483
化合物Ｄ−５８
【化２２３】
2014523924.tif 000484
化合物Ｄ−５９
【化２２４】
2014523924.tif 000485
化合物Ｄ−６０
【化２２５】
2014523924.tif 000486
化合物Ｄ−６１
【化２２６】
2014523924.tif 000487
化合物Ｄ−６２
【化２２７】
2014523924.tif 000488
化合物Ｄ−６３
【化２２８】
2014523924.tif 000489
化合物Ｄ−６４
【化２２９】
2014523924.tif 000490
化合物Ｄ−６５
【化２３０】
2014523924.tif 000491
化合物Ｄ−６６
【化２３１】
2014523924.tif 000492
化合物Ｄ−６７
【化２３２】
2014523924.tif 000493
化合物Ｄ−６８
【化２３３】
2014523924.tif 000494
化合物Ｄ−６９
【化２３４】
2014523924.tif 000495
化合物Ｄ−７０
【化２３５】
2014523924.tif 000496
化合物Ｄ−１３
【化２３６】
2014523924.tif 000497
化合物Ｄ−１４
【化２３７】
2014523924.tif 000498
化合物Ｄ−１５
【化２３８】
2014523924.tif 000499
化合物Ｄ−１６
【化２３９】
2014523924.tif 000500
化合物Ｄ−１７
【化２４０】
2014523924.tif 000501
化合物Ｄ−１８
【化２４１】
2014523924.tif 000502
化合物Ｄ−１９
【化２４２】
2014523924.tif 000503
化合物Ｄ−２０
【化２４３】
2014523924.tif 000504
化合物Ｄ−２１
【化２４４】
2014523924.tif 000505
化合物Ｄ−２２
【化２４５】
2014523924.tif 000506
化合物Ｄ−２３
【化２４６】
2014523924.tif 000507
化合物Ｄ−２４
【化２４７】
2014523924.tif 000508
化合物Ｄ−２５
【化２４８】
2014523924.tif 000509
化合物Ｄ−２６
【化２４９】
2014523924.tif 000510
化合物Ｄ−２７
【化２５０】
2014523924.tif 000511
化合物Ｄ−２８
【化２５１】
2014523924.tif 000512
化合物Ｄ−２９
【化２５２】
2014523924.tif 000513
化合物Ｄ−３０
【化２５３】
2014523924.tif 000514
化合物Ｄ−３１
【化２５４】
2014523924.tif 000515
化合物Ｄ−３２
【化２５５】
2014523924.tif 000516
からなる群から選択される、項目１５に記載のナノ球体。
（項目１７）
コレステロールレベルの低下、心臓血管疾患の可能性の低下、または心臓血管疾患の治療を必要とする対象において、それらを行う方法であって、
項目１５に記載のナノ球体を提供することと、
前記コレステロールレベルを低下させる、前記心臓血管疾患の可能性を低下させる、または心臓血管疾患を治療するために、前記対象に治療有効量の前記ナノ球体を投与することと、
を含む、方法。
（項目１８）
癌の検出または診断を必要とする対象において、癌を検出する、または診断する方法であって、
項目１５に記載のナノ球体を提供することと、
前記対象に有効量の前記ナノ球体を投与することと、
前記癌を検出する、または診断するために、前記対象を撮像することと、
を含む、方法。
（項目１９）
カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体をさらに含む、項目１に記載のナノ球体。
（項目２０）
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、
【化２５６】
2014523924.tif 000517
であり、式中、ＡおよびＢが、独立して、―ＯＣ（Ｏ）―、―ＯＣ（Ｏ）Ｏ―、および―ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）―からなる群から選択され、式中、Ｒが、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり、
ＸおよびＹが、リンカーであり、それぞれ、独立して、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖を含み、任意に、ヘテロ原子を含み得、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が、それぞれ、独立して、水素、アルキル、アリール、脂環式、およびアラルキルからなる群から選択され、任意に、それぞれ、ヘテロ原子を含有し得る、項目１９に記載のナノ球体。
（項目２１）
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、
【化２５７】
2014523924.tif 000518
であり、式中、Ｌ１が、ジオール上の２つのエステル化が可能な遊離ヒドロキシル基のエステル化によって形成される部分である、項目２０に記載のナノ球体。
（項目２２）
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、
式Ｃ−Ｖ
【化２５８】
2014523924.tif 000519
式Ｃ−ＶＩ
【化２５９】
2014523924.tif 000520
式Ｃ−ＶＩＩ
【化２６０】
2014523924.tif 000521
式Ｃ−ＶＩＩＩ
【化２６１】
2014523924.tif 000522
式Ｃ−ＩＸ
【化２６２】
2014523924.tif 000523
式Ｃ−Ｘ
【化２６３】
2014523924.tif 000524
式Ｃ−ＸＬＶＩ
【化２６４】
2014523924.tif 000525
からなる群から選択される、項目２１に記載のナノ球体。
（項目２３）
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、
【化２６５】
2014523924.tif 000526
であり、式中、Ａが、独立して、―ＯＣ（Ｏ）―、―ＯＣ（Ｏ）Ｏ―、および―ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）―からなる群から選択され、式中、Ｒが、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり、
Ｐが、―ＯＣ（Ｏ）―および―Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）―からなる群から選択され、式中、Ｒが、水素原子であるか、または置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状の炭素原子の鎖であり、
Ｘが、置換、非置換、分枝状、または非分枝状の炭素原子の鎖を含むリンカーであり、任意に、ヘテロ原子を含み得、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が、それぞれ、独立して、水素、アルキル、アリール、脂環式、およびアラルキルからなる群から選択され、任意に、それぞれ、ヘテロ原子を含有し得る、項目２０に記載のナノ球体。
（項目２４）
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、式Ｃ−ＸＩ
【化２６６】
2014523924.tif 000527
であり、式中、Ｌ２が、前記化合物を生成するプロセスにおいて、前記リンカーとしてジアミンを使用することによって形成される部分である、項目２３に記載のナノ球体。
（項目２５）
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、
式Ｃ−ＸＩＩ
【化２６７】
2014523924.tif 000528
式Ｃ−ＸＩＩＩ
【化２６８】
2014523924.tif 000529
式Ｃ−ＸＩＶ
【化２６９】
2014523924.tif 000530
式Ｃ−ＸＶ
【化２７０】
2014523924.tif 000531
式Ｃ−ＸＶＩ
【化２７１】
2014523924.tif 000532
式Ｃ−ＸＶＩＩ
【化２７２】
2014523924.tif 000533
式Ｃ−ＸＬＶＩＩ
【化２７３】
2014523924.tif 000534
からなる群から選択される、項目２３に記載のナノ球体。
（項目２６）
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、式Ｃ−ＸＶＩＩＩ
【化２７４】
2014523924.tif 000535
であり、式中、Ｌ３が、前記化合物を生成するプロセスにおいて、前記リンカーとしてアミノアルコールを使用することによって形成される部分である、項目２３に記載のナノ球体。
（項目２７）
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、
式Ｃ−ＸＩＸ
【化２７５】
2014523924.tif 000536
式Ｃ−ＸＸ
【化２７６】
2014523924.tif 000537
式Ｃ−ＸＸＩ
【化２７７】
2014523924.tif 000538
式Ｃ−ＸＸＩＩ
【化２７８】
2014523924.tif 000539
式Ｃ−ＸＸＩＩＩ
【化２７９】
2014523924.tif 000540
式Ｃ−ＸＸＩＶ
【化２８０】
2014523924.tif 000541
式Ｃ−ＸＬＶＩＩＩ
【化２８１】
2014523924.tif 000542
からなる群から選択される、項目２６に記載のナノ球体。
（項目２８）
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、α−リポ酸と、カンプトテシンまたは無水コハク酸もしくは無水グルタル酸と反応させることによって修飾されるカンプトテシン類似体との抱合により生成される化合物であり、前記カンプトテシン類似体が、式Ｃ−Ｉ
【化２８２】
2014523924.tif 000543
によって表され、式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が、それぞれ、独立して、水素、アルキル、アリール、脂環式、およびアラルキルからなる群から選択され、任意に、ヘテロ原子を含有し得る、項目１９に記載のナノ球体。
（項目２９）
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、
式Ｃ−ＸＸＶ
【化２８３】
2014523924.tif 000544
式Ｃ−ＸＸＶＩ
【化２８４】
2014523924.tif 000545
式Ｃ−ＸＸＶＩＩ
【化２８５】
2014523924.tif 000546
式Ｃ−ＸＸＶＩＩＩ
【化２８６】
2014523924.tif 000547
式Ｃ−ＸＸＩＸ
【化２８７】
2014523924.tif 000548
式Ｃ−ＸＸＸ
【化２８８】
2014523924.tif 000549
式Ｃ−ＸＸＸＩ
【化２８９】
2014523924.tif 000550
式Ｃ−ＸＸＸＩＩ
【化２９０】
2014523924.tif 000551
式Ｃ−ＸＸＸＩＩＩ
【化２９１】
2014523924.tif 000552
式Ｃ−ＸＸＸＩＶ
【化２９２】
2014523924.tif 000553
式Ｃ−ＸＸＸＶ
【化２９３】
2014523924.tif 000554
式Ｃ−ＸＸＶＩ
【化２９４】
2014523924.tif 000555
式Ｃ−ＸＸＸＶＩＩ
【化２９５】
2014523924.tif 000556
式Ｃ−ＸＸＸＶＩＩＩ
【化２９６】
2014523924.tif 000557
式Ｃ−ＸＸＸＩＸ
【化２９７】
2014523924.tif 000558
式Ｃ−ＸＬ
【化２９８】
2014523924.tif 000559
式Ｃ−ＸＬＩ
【化２９９】
2014523924.tif 000560
式Ｃ−ＸＬＩＩ
【化３００】
2014523924.tif 000561
式Ｃ−ＸＬＩＩＩ
【化３０１】
2014523924.tif 000562
式Ｃ−ＸＬＩＶ
【化３０２】
2014523924.tif 000563
式Ｃ−ＸＬＶ
【化３０３】
2014523924.tif 000564
からなる群から選択され、式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５が、それぞれ、独立して、水素、アルキル、アリール、脂環式、およびアラルキルからなる群から選択され、任意に、それぞれ、ヘテロ原子を含有し得る、項目１９に記載のナノ球体。
（項目３０）
前記カンプトテシンの抗酸化剤誘導体および／またはカンプトテシン類似体の抗酸化剤誘導体が、
化合物Ｃ−２３
【化３０４】
2014523924.tif 000565
化合物Ｃ−１
【化３０５】
2014523924.tif 000566
化合物Ｃ−２
【化３０６】
2014523924.tif 000567
化合物Ｃ−１０
【化３０７】
2014523924.tif 000568
化合物Ｃ−３
【化３０８】
2014523924.tif 000569
化合物Ｃ−４
【化３０９】
2014523924.tif 000570
化合物Ｃ−５
【化３１０】
2014523924.tif 000571
化合物Ｃ−１１
【化３１１】
2014523924.tif 000572
化合物Ｃ−６
【化３１２】
2014523924.tif 000573
化合物Ｃ−７
【化３１３】
2014523924.tif 000574
化合物Ｃ−８
【化３１４】
2014523924.tif 000575
化合物Ｃ−１２
【化３１５】
2014523924.tif 000576
化合物Ｃ−９
【化３１６】
2014523924.tif 000577
化合物Ｃ−１３
【化３１７】
2014523924.tif 000578
化合物Ｃ−１４
【化３１８】
2014523924.tif 000579
化合物Ｃ−１５
【化３１９】
2014523924.tif 000580
化合物Ｃ−１６
【化３２０】
2014523924.tif 000581
化合物Ｃ−１７
【化３２１】
2014523924.tif 000582
化合物Ｃ−１８
【化３２２】
2014523924.tif 000583
化合物Ｃ−１９
【化３２３】
2014523924.tif 000584
化合物Ｃ−２０
【化３２４】
2014523924.tif 000585
化合物Ｃ−２１
【化３２５】
2014523924.tif 000586
化合物Ｃ−２２
【化３２６】
2014523924.tif 000587
からなる群から選択される、項目１９に記載のナノ球体。
（項目３１）
癌の治療を必要とする対象において、癌を治療する方法であって、
項目１９に記載のナノ球体を提供することと、
前記癌を治療するために、前記対象に治療有効量の前記ナノ球体を投与することと、を含む、方法。
（項目３２）
前記癌が、脳癌である、項目３１に記載の方法。
（項目３３）
癌の検出または診断を必要とする対象において、癌を検出する、または診断する方法であって、
項目１９に記載のナノ球体を提供することと、
前記対象に有効量の前記ナノ球体を投与することと、
前記癌を診断するために、前記対象を撮像することと、
を含む、方法。
（項目３４）
前記治療薬が、化学療法剤、スタチン、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、エリスロポエチン、ペプチド、アンチセンス核酸、ＤＮＡ、ＲＮＡ、タンパク質、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、項目１に記載のナノ球体。
（項目３５）
前記治療薬が、パクリタキセル、ドキソルビシン、テモゾロミド、５−フルオロウラシル、カンプトテシン、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、項目１に記載のナノ球体。
（項目３６）
前記造影剤が、蛍光染料、癌において過剰発現されたタンパク質に対する抗体、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、項目１に記載のナノ球体。
以下の実施形態およびその態様は、例示的および図示的であり、範囲を制限することを意味しない組成物および方法と共に説明および図示される。
【国際調査報告】
2014523924.tif 000588
2014523924.tif 000589
2014523924.tif 000590