(57)【要約】モジュレーター、すなわち、腸アルカリホスファターゼ（ＩＡＰ）のアクチベーターおよびインヒビターを開示する。ＩＡＰアクチベーターを使用した、腸管の細菌感染の処置方法および腸管の健康状態を維持する方法も開示する。ＩＡＰインヒビターを使用した、痩せ衰えた患者および脂肪吸収が減少したかまたは無視できるほどの患者の体重増加を補助する方法をさらに開示する。アクチベーターを、経腸的栄養補給中に消化管粘膜萎縮を抑制し、それにより、管腔の微生物および毒素に対する障壁として腸粘膜を維持する方法として使用することができる。ＩＡＰアクチベーターはまた、消化管中の細菌コロニー形成の抑制に有用である。アクチベーターにより、さらに、細菌リポ多糖（ＬＰＳ）の解毒方法を得ることができる。
2011521916.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効量の腸アルカリホスファターゼ（ＩＡＰ）モジュレーターを被験体に投与する工程を含む、前記被験体において胃腸細菌侵入を予防する方法。
【請求項２】
有効量の腸アルカリホスファターゼ（ＩＡＰ）モジュレーターを胃腸粘膜に投与する工程を含む、前記粘膜上のグラム陰性菌作用によって引き起こされるかまたは悪化する疾患または病状を処置または予防する方法。
【請求項３】
前記ＩＡＰモジュレーターがＩＡＰアクチベーターである、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記ＩＡＰモジュレーターが、式：
【化１６５】
2011521916.tif 000194
（式中、
ＲおよびＲ１は以下からそれぞれ独立して選択される：
（ｉ）水素、
（ｉｉ）置換または非置換のＣ６、Ｃ１０、またはＣ１４アリール、または
（ｉｉｉ）−Ｃ（Ｏ）Ｒ４、ここで、Ｒ４はヒドロカルビル単位であり、
Ｒ２は、
（ｉ）水素、
（ｉｉ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖、分枝、または環状アルキル
であり、
ＲおよびＲ２は共に式：
【化１６６】
2011521916.tif 000195
を有する縮合環系を形成することができるか、あるいは
Ｒ１およびＲ２は共に式：
【化１６７】
2011521916.tif 000196
を有する縮合環系を形成することができ、
Ｒ３は水素またはＣ１〜Ｃ４直鎖アルキルであり、
Ａは、３〜１４個の炭素原子および酸素、窒素、硫黄、またはその組み合わせから選択される１〜５個のヘテロ原子を有する１つまたは複数の置換または非置換のシクロアルキル環、アリール環、複素環、またはヘテロアリール環である）を有する１つまたは複数の化合物を含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項５】
前記化合物が、式：
【化１６８】
2011521916.tif 000197
（式中、
ＲおよびＲ１は以下から選択される：
（ｉ）置換または非置換のＣ６、Ｃ１０、またはＣ１４アリール、または
（ｉｉ）−Ｃ（Ｏ）Ｒ４、
（ｉｉｉ）ここで、Ｒ４は以下から選択される：
（ａ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｂ）−ＯＲ５、ここで、Ｒ５は以下から選択される：
（ｉ）水素、
（ｉｉ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖または分枝アルキル、
各置換は以下から選択される：
（ｉ）ハロゲン、および
（ｉｉ）−［Ｃ（Ｒ７ａ）（Ｒ７ｂ）］ｗＣ（Ｏ）Ｒ６、
Ｒ６はヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルコキシ、または−Ｎ（Ｒ８ａ）（Ｒ８ｂ）であり、各Ｒ８ａおよびＲ８ｂは、水素またはＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、もしくは環状アルキルから独立して選択され、
（ｉｉｉ）−［Ｃ（Ｒ７ａ）（Ｒ７ｂ）］ｗＮ（Ｒ９ａ）（Ｒ９ｂ）、
各Ｒ９ａおよびＲ９ｂは、水素またはＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、もしくは環状アルキルから独立して選択されるか、あるいは、Ｒ９ａおよびＲ９ｂは共に３〜７個の原子を有する環を形成することができ、
各Ｒ７ａおよびＲ７ｂは独立して水素またはＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキルであり、添え字ｗは０〜５の整数であり、
Ａは６員のアリール環、複素環、またはヘテロアリール環であり、
各Ｒａは水素の置換であり、各Ｒａは以下から独立して選択される：
（ｉ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｉｉ）Ｃ２〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルケニル、
（ｉｉｉ）Ｃ２〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖または分枝アルキニル、
（ｉｖ）Ｃ６またはＣ１０置換または非置換アリール、
（ｖ）Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、
（ｖｉ）Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリール、
（ｖｉｉ）−［Ｃ（Ｒ２４ａ）（Ｒ２４ｂ）］ｘＯＲ１０、
Ｒ１０は以下から選択される：
（ａ）−Ｈ、
（ｂ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｃ）Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリールまたはアルキレンアリール、
（ｄ）Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、
（ｅ）Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリール、
（ｖｉｉｉ）−［Ｃ（Ｒ２４ａ）（Ｒ２４ｂ）］ｎＮ（Ｒ１１ａ）（Ｒ１１ｂ）、
Ｒ１１ａおよびＲ１１ｂは以下からそれぞれ独立して選択される：
（ａ）−Ｈ、
（ｂ）−ＯＲ１２、
Ｒ１２は水素またはＣ１〜Ｃ４直鎖アルキルであり、
（ｃ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｄ）Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、
（ｅ）Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、
（ｆ）Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリール、または
（ｇ）Ｒ１１ａおよびＲ１１ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
（ｉｘ）−［Ｃ（Ｒ２４ａ）（Ｒ２４ｂ）］ｎＣ（Ｏ）Ｒ１３、
Ｒ１３は以下である：
（ａ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｂ）−ＯＲ１４、
Ｒ１４は、水素、置換または非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであり、
（ｃ）−Ｎ（Ｒ１５ａ）（Ｒ１５ｂ）、
Ｒ１５ａおよびＲ１５ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであるか、あるいは、Ｒ１５ａおよびＲ１５ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
（ｘ）−［Ｃ（Ｒ２４ａ）（Ｒ２４ｂ）］ｎＯＣ（Ｏ）Ｒ１６、
Ｒ１６は以下である：
（ａ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｂ）−Ｎ（Ｒ１７ａ）（Ｒ１７ｂ）、
Ｒ１７ａおよびＲ１７ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであるか、あるいは、Ｒ１７ａおよびＲ１７ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
（ｘｉ）−［Ｃ（Ｒ２４ａ）（Ｒ２４ｂ）］ｎＮＲ１８Ｃ（Ｏ）Ｒ１９、
Ｒ１８は以下である：
（ａ）−Ｈ、または
（ｂ）Ｃ１〜Ｃ４置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
Ｒ１９は以下である：
（ａ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｂ）−Ｎ（Ｒ２０ａ）（Ｒ２０ｂ）、
Ｒ２０ａおよびＲ２０ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであるか、あるいは、Ｒ２０ａおよびＲ２０ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
（ｘｉｉ）−［Ｃ（Ｒ２４ａ）（Ｒ２４ｂ）］ｎＣＮ、
（ｘｉｉｉ）−［Ｃ（Ｒ２４ａ）（Ｒ２４ｂ）］ｎＮＯ２、
（ｘｉｖ）−［Ｃ（Ｒ２４ａ）（Ｒ２４ｂ）］ｎＲ２１、
Ｒ２１は、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、または−Ｉから選択される１〜２１個のハロゲン原子に置換されたＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、または環状アルキルであり、
（ｘｖ）−［Ｃ（Ｒ２４ａ）（Ｒ２４ｂ）］ｎＳＯ２Ｒ２２、
Ｒ２２は、水素、ヒドロキシル、置換もしくは非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキル、置換もしくは非置換のＣ６、Ｃ１０、もしくはＣ１４アリール、Ｃ７〜Ｃ１５アルキレンアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換もしくは非置換の複素環、またはＣ１〜Ｃ１１置換もしくは非置換のヘテロアリールであり、
（ｘｖｉ）同一炭素原子上の２個のＲａ単位は共に＝Ｏ、＝Ｓ、または＝ＮＲ２３から選択される単位を形成することができ、
Ｒ２３は、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキル、またはＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルコキシであり、
Ｒ２４ａおよびＲ２４ｂは、それぞれ独立して、水素またはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、
添え字ｘは０〜１４の整数であり、
添え字ｎは０〜５の整数であり、
各Ｒｂは以下から独立して選択される水素の置換である：
（ｉ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｉｉ）Ｃ２〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルケニル、
（ｉｉｉ）Ｃ２〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖または分枝アルキニル、
（ｉｖ）Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、
（ｖ）Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、
（ｖｉ）Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリール、
（ｖｉｉ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＯＲ２５、
Ｒ２５は以下から選択される：
（ａ）−Ｈ、
（ｂ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｃ）Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリールまたはアルキレンアリール、
（ｄ）Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、
（ｅ）Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリール、
（ｖｉｉｉ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＮ（Ｒ２６ａ）（Ｒ２６ｂ）、
Ｒ２６ａおよびＲ２６ｂは以下からそれぞれ独立して選択される：
（ａ）−Ｈ、
（ｂ）−ＯＲ２７、
Ｒ２７は水素またはＣ１〜Ｃ４直鎖アルキルであり、
（ｃ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｄ）Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、
（ｅ）Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、
（ｆ）Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリール、または
（ｇ）Ｒ２６ａおよびＲ２６ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
（ｉｘ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＣ（Ｏ）Ｒ２８、
Ｒ２８は以下である：
（ａ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｂ）−ＯＲ２９、
Ｒ２９は、水素、置換または非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであり、
（ｃ）−Ｎ（Ｒ３０ａ）（Ｒ３０ｂ）、
Ｒ３０ａおよびＲ３０ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであるか、あるいは、Ｒ３０ａおよびＲ３０ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
（ｘ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＯＣ（Ｏ）Ｒ３１、
Ｒ３１は以下である：
（ａ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｂ）−Ｎ（Ｒ３２ａ）（Ｒ３２ｂ）、
Ｒ３２ａおよびＲ３２ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであるか、あるいは、Ｒ３２ａおよびＲ３２ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
（ｘｉ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＮＲ３３Ｃ（Ｏ）Ｒ３４、
Ｒ３３は以下である：
（ａ）−Ｈ、または
（ｂ）Ｃ１〜Ｃ４置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
Ｒ３４は以下である：
（ａ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｂ）−Ｎ（Ｒ３５ａ）（Ｒ３５ｂ）、
Ｒ３５ａおよびＲ３５ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであるか、あるいは、Ｒ３５ａおよびＲ３５ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
（ｘｉｉ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＣＮ、
（ｘｉｉｉ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＮＯ２、
（ｘｉｖ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＲ３６、
Ｒ３６は、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、または−Ｉから選択される１〜２１個のハロゲン原子に置換されたＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、または環状アルキルであり、
（ｘｖ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＳＯ２Ｒ３７、
Ｒ３７は、水素、ヒドロキシル、置換もしくは非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキル、置換もしくは非置換のＣ６、Ｃ１０、もしくはＣ１４アリール、Ｃ７〜Ｃ１５アルキレンアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換もしくは非置換の複素環、またはＣ１〜Ｃ１１置換もしくは非置換のヘテロアリールであり、
（ｘｖｉ）同一炭素原子上の２個のＲｂ単位は共に＝Ｏ、＝Ｓ、または＝ＮＲ３８から選択される単位を形成することができ、
Ｒ３８は、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキル、またはＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルコキシであり、
Ｒ３９ａおよびＲ３９ｂは、それぞれ独立して、水素またはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、
添え字ｙは０〜１４の整数であり、
添え字ｍは０〜５の整数である）を有する、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
ＲａおよびＲｂ置換の水素の置換が、以下：
（ｉ）Ｃ１〜Ｃ１２直鎖、分枝、または環状アルキル、アルケニル、およびアルキニル、
（ｉｉ）置換または非置換のＣ６またはＣ１０アリール、
（ｉｉｉ）置換または非置換のＣ６またはＣ１０アルキレンアリール、
（ｉｖ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ９複素環、
（ｖ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ９ヘテロアリール環、
（ｖｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＯＲ１０１、
（ｖｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＣ（Ｏ）Ｒ１０１、
（ｖｉｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＣ（Ｏ）ＯＲ１０１、
（ｉｘ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０１）２、
（ｘ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＮ（Ｒ１０１）２、
（ｘｉ）ハロゲン、
（ｘｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＣＮ、
（ｘｉｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＮＯ２、
（ｘｉｖ）−ＣＨｊＸｋ、ここで、Ｘはハロゲンであり、添え字ｊは０〜２の整数であり、ｊ＋ｋ＝３、
（ｘｖ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＳＲ１０１、
（ｘｖｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＳＯ２Ｒ１０１、および
（ｘｖｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＳＯ３Ｒ１０１、
（式中、各Ｒ１０１は、独立して、水素、置換または非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖、分枝、または環状アルキル、フェニル、ベンジル、複素環、またはヘテロアリールであるか、あるいは、２個のＲ１０１単位は共に３〜７個の原子を含む環を形成することができ、Ｒ１０２ａおよびＲ１０２ｂはそれぞれ独立して水素またはＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキルであり、添え字ｚは０〜４である）からそれぞれ独立して選択される有機ラジカルである、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記化合物が、式：
【化１６９】
2011521916.tif 000198
（式中、
Ｒ４は以下から選択される：
（ｉ）水素、
（ｉｉ）Ｃ１〜Ｃ４直鎖または分枝アルキル、または
（ｉｉｉ）−［ＣＨ２］ｗＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８ａ）（Ｒ８ｂ）、
各Ｒａは以下から選択される：
（ｉ）Ｃ１〜Ｃ４直鎖または分枝アルキル、
（ｉｉ）Ｃ１〜Ｃ４直鎖または分枝アルコキシ、
（ｉｉｉ）−ＯＨ、
（ｉｖ）−Ｆ、
（ｖ）−Ｃｌ、
（ｖｉ）−Ｂｒ、
（ｖｉｉ）−ＮＯ２、
（ｖｉｉｉ）−ＮＨ２、および
（ｉｘ）−ＣＦ３、
添え字ｗは０〜３の整数であり、添え字ｘは０〜５の整数である）を有する、請求項４に記載の方法。
【請求項８】
前記化合物が、式：
【化１７０】
2011521916.tif 000199
（式中、
Ｒ４は以下から選択される：
（ｉ）水素、
（ｉｉ）Ｃ１〜Ｃ４直鎖または分枝アルキル、または
（ｉｉｉ）−［ＣＨ２］ｗＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８ａ）（Ｒ８ｂ）、
各Ｒａは以下から選択される：
（ｉ）Ｃ１〜Ｃ４直鎖または分枝アルキル、
（ｉｉ）Ｃ１〜Ｃ４直鎖または分枝アルコキシ、
（ｉｉｉ）−ＯＨ、
（ｉｖ）−Ｆ、
（ｖ）−Ｃｌ、
（ｖｉ）−Ｂｒ、
（ｖｉｉ）−ＮＯ２、
（ｖｉｉｉ）−ＮＨ２、および
（ｉｘ）−ＣＦ３、
添え字ｗは０〜３の整数であり、添え字ｘは０〜５の整数である）を有する、請求項４に記載の方法。
【請求項９】
前記化合物が、式：
【化１７１】
2011521916.tif 000200
（式中、
２個の隣接するＲａ単位は共に以下から選択される置換または非置換の縮合環を形成する：
（ｉ）シクロアルキル、
（ｉｉ）アリール、
（ｉｉｉ）複素環、または
（ｉｖ）ヘテロアリール、
前記縮合環は６〜１２個の炭素原子、酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜４個のヘテロ原子を有し、
添え字ｘは０〜５の整数である）を有する、請求項４に記載の方法。
【請求項１０】
前記縮合環が、以下：
（ｉ）Ｃ１〜Ｃ１２直鎖、分枝、または環状アルキル、アルケニル、およびアルキニル、
（ｉｉ）置換または非置換のＣ６またはＣ１０アリール、
（ｉｉｉ）置換または非置換のＣ６またはＣ１０アルキレンアリール、
（ｉｖ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ９複素環、
（ｖ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ９ヘテロアリール環、
（ｖｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＯＲ１０１、
（ｖｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＣ（Ｏ）Ｒ１０１、
（ｖｉｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＣ（Ｏ）ＯＲ１０１、
（ｉｘ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０１）２、
（ｘ）ハロゲン、
（ｘｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＣＮ、
（ｘｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＮＯ２、
（ｘｉｉｉ）−ＣＨｊＸｋ、ここで、Ｘはハロゲンであり、添え字ｊは０〜２の整数であり、ｊ＋ｋ＝３、
（ｘｉｖ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＳＲ１０１、
（ｘｖ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＳＯ２Ｒ１０１、および
（ｘｖｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＳＯ３Ｒ１０１、
（式中、各Ｒ１０１は、独立して、水素、置換または非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖、分枝、または環状アルキル、フェニル、ベンジル、複素環、またはヘテロアリールであるか、あるいは、２個のＲ１０１単位は共に３〜７個の原子を含む環を形成することができ、Ｒ１０２ａおよびＲ１０２ｂはそれぞれ独立して水素またはＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキルであり、添え字ｚは０〜４である）からそれぞれ独立して選択される１〜１４個の水素の置換を有する、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記化合物が、式：
【化１７２】
2011521916.tif 000201
（式中、
ＲおよびＲ１は式−Ｃ（Ｏ）Ｒ４を有し、ここで、Ｒ４は以下から選択される：
（ａ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｂ）−ＯＲ５、ここで、Ｒ５は以下から選択される：
（ｉ）水素、
（ｉｉ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖または分枝アルキル、
各置換は以下から選択される：
（ａ）ハロゲン、および
（ｂ）−［Ｃ（Ｒ７ａ）（Ｒ７ｂ）］ｗＣ（Ｏ）Ｒ６、
Ｒ６はヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルコキシ、または−Ｎ（Ｒ８ａ）（Ｒ８ｂ）であり、各Ｒ８ａおよびＲ８ｂは、水素またはＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、もしくは環状アルキルから独立して選択され、
（ｃ）−［Ｃ（Ｒ７ａ）（Ｒ７ｂ）］ｗＮ（Ｒ９ａ）（Ｒ９ｂ）、
各Ｒ９ａおよびＲ９ｂは、水素またはＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、もしくは環状アルキルから独立して選択されるか、あるいは、Ｒ９ａおよびＲ９ｂは共に３〜７個の原子を有する環を形成することができ、
各Ｒ７ａおよびＲ７ｂは独立して水素またはＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキルであり、添え字ｗは０〜５の整数である）を有する、請求項４に記載の方法。
【請求項１２】
前記化合物が、式：
【化１７３】
2011521916.tif 000202
【化１７４】
2011521916.tif 000203
（式中、
各Ｒｂは以下から独立して選択される水素の置換である：
（ｉ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｉｉ）Ｃ２〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルケニル、
（ｉｉｉ）Ｃ２〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖または分枝アルキニル、
（ｉｖ）Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、
（ｖ）Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、
（ｖｉ）Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリール、
（ｖｉｉ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＯＲ２５、
Ｒ２５は以下から選択される：
（ａ）−Ｈ、
（ｂ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｃ）Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリールまたはアルキレンアリール、
（ｄ）Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、
（ｅ）Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリール、
（ｖｉｉｉ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＮ（Ｒ２６ａ）（Ｒ２６ｂ）、
Ｒ２６ａおよびＲ２６ｂは以下からそれぞれ独立して選択される：
（ａ）−Ｈ、
（ｂ）−ＯＲ２７、
Ｒ２７は水素またはＣ１〜Ｃ４直鎖アルキルであり、
（ｃ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｄ）Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、
（ｅ）Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、
（ｆ）Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリール、または
（ｇ）Ｒ２６ａおよびＲ２６ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
（ｉｘ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＣ（Ｏ）Ｒ２８、
Ｒ２８は以下である：
（ａ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｂ）−ＯＲ２９、
Ｒ２９は、水素、置換または非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであり、
（ｃ）−Ｎ（Ｒ３０ａ）（Ｒ３０ｂ）、
Ｒ３０ａおよびＲ３０ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであるか、あるいは、Ｒ３０ａおよびＲ３０ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
（ｘ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＯＣ（Ｏ）Ｒ３１、
Ｒ３１は以下である：
（ａ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｂ）−Ｎ（Ｒ３２ａ）（Ｒ３２ｂ）、
Ｒ３２ａおよびＲ３２ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであるか、あるいは、Ｒ３２ａおよびＲ３２ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
（ｘｉ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＮＲ３３Ｃ（Ｏ）Ｒ３４、
Ｒ３３は以下である：
（ａ）−Ｈ、または
（ｂ）Ｃ１〜Ｃ４置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
Ｒ３４は以下である：
（ａ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｂ）−Ｎ（Ｒ３５ａ）（Ｒ３５ｂ）、
Ｒ３５ａおよびＲ３５ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであるか、あるいは、Ｒ３５ａおよびＲ３５ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
（ｘｉｉ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＣＮ、
（ｘｉｉｉ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＮＯ２、
（ｘｉｖ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＲ３６、
Ｒ３６は、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、または−Ｉから選択される１〜２１個のハロゲン原子に置換されたＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、または環状アルキルであり、
（ｘｖ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＳＯ２Ｒ３７、
Ｒ３７は、水素、ヒドロキシル、置換もしくは非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキル、置換もしくは非置換のＣ６、Ｃ１０、もしくはＣ１４アリール、Ｃ７〜Ｃ１５アルキレンアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換もしくは非置換の複素環、またはＣ１〜Ｃ１１置換もしくは非置換のヘテロアリールであり、
（ｘｖｉ）同一炭素原子上の２個のＲｂ単位は共に＝Ｏ、＝Ｓ、または＝ＮＲ３８から選択される単位を形成することができ、
Ｒ３８は、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキル、またはＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルコキシであり、
Ｒ３９ａおよびＲ３９ｂは、それぞれ独立して、水素またはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、
添え字ｙは０〜１４の整数であり、
添え字ｍは０〜５の整数であり、
各Ｒｃは以下から独立して選択される：
（ｉ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｉｉ）Ｃ２〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルケニル、
（ｉｉｉ）Ｃ２〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖または分枝アルキニル、
（ｉｖ）Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、
（ｖ）Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、
（ｖｉ）Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリール、
（ｖｉｉ）−［Ｃ（Ｒ５４ａ）（Ｒ５４ｂ）］ｑＯＲ４０、
Ｒ４０は以下から選択される：
（ａ）−Ｈ、
（ｂ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｃ）Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリールまたはアルキレンアリール、
（ｄ）Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、
（ｅ）Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリール、
（ｖｉｉｉ）−［Ｃ（Ｒ５４ａ）（Ｒ５４ｂ）］ｑＮ（Ｒ４１ａ）（Ｒ４１ｂ）、
Ｒ４１ａおよびＲ４１ｂは以下からそれぞれ独立して選択される：
（ａ）−Ｈ、
（ｂ）−ＯＲ４２、
Ｒ４２は水素またはＣ１〜Ｃ４直鎖アルキルであり、
（ｃ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｄ）Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、
（ｅ）Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、
（ｆ）Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリール、または
（ｇ）Ｒ４１ａおよびＲ４１ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
（ｉｘ）−［Ｃ（Ｒ５４ａ）（Ｒ５４ｂ）］ｑＣ（Ｏ）Ｒ４３、
Ｒ４３は以下である：
（ａ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｂ）−ＯＲ４４、
Ｒ４４は、水素、置換または非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであり、
（ｃ）−Ｎ（Ｒ４５ａ）（Ｒ４５ｂ）、
Ｒ４５ａおよびＲ４５ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであるか、あるいは、Ｒ４５ａおよびＲ４５ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
（ｘ）−［Ｃ（Ｒ５４ａ）（Ｒ５４ｂ）］ｑＯＣ（Ｏ）Ｒ４６、
Ｒ４６は以下である：
（ａ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｂ）−Ｎ（Ｒ４７ａ）（Ｒ４７ｂ）、
Ｒ４７ａおよびＲ４７ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであるか、あるいは、Ｒ４７ａおよびＲ４７ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
（ｘｉ）−［Ｃ（Ｒ５４ａ）（Ｒ５４ｂ）］ｑＮＲ４８Ｃ（Ｏ）Ｒ４９、
Ｒ４８は以下である：
（ａ）−Ｈ、または
（ｂ）Ｃ１〜Ｃ４置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
Ｒ４９は以下である：
（ａ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｂ）−Ｎ（Ｒ５０ａ）（Ｒ５０ｂ）、
Ｒ５０ａおよびＲ５０ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであるか、あるいは、Ｒ５０ａおよびＲ５０ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
（ｘｉｉ）−［Ｃ（Ｒ５４ａ）（Ｒ５４ｂ）］ｑＣＮ、
（ｘｉｉｉ）−［Ｃ（Ｒ５４ａ）（Ｒ５４ｂ）］ｑＮＯ２、
（ｘｉｖ）−［Ｃ（Ｒ５４ａ）（Ｒ５４ｂ）］ｑＲ５１、
Ｒ５１は、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、または−Ｉから選択される１〜２１個のハロゲン原子に置換されたＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、または環状アルキルであり、
（ｘｖ）−［Ｃ（Ｒ５４ａ）（Ｒ５４ｂ）］ｑＳＯ２Ｒ５２、
Ｒ５２は、水素、ヒドロキシル、置換もしくは非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキル、置換もしくは非置換のＣ６、Ｃ１０、もしくはＣ１４アリール、Ｃ７〜Ｃ１５アルキレンアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換もしくは非置換の複素環、またはＣ１〜Ｃ１１置換もしくは非置換のヘテロアリールであり、
（ｘｖｉ）同一炭素原子上の２個のＲｂ単位は共に＝Ｏ、＝Ｓ、または＝ＮＲ５３から選択される単位を形成することができ、
Ｒ５３は、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキル、またはＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルコキシであり、
Ｒ５４ａおよびＲ５４ｂは、それぞれ独立して、水素またはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、
添え字ｐは０〜１４の整数であり、
添え字ｑは０〜５の整数である）を有する、請求項４に記載の方法。
【請求項１３】
前記化合物が、式：
【化１７５】
2011521916.tif 000204
【化１７６】
2011521916.tif 000205
を有する、請求項４に記載の方法。
【請求項１４】
前記化合物が、式：
【化１７７】
2011521916.tif 000206
（式中、
Ｒ６０は以下から選択される：
（ｉ）水素、
（ｉｉ）置換または非置換のＣ６またはＣ１０アリール、
（ｉｉｉ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ９ヘテロアリール、または
（ｉｖ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ９複素環、
Ｒ６１およびＲ６２は共に以下から選択される環を形成する：
（ｉ）飽和または不飽和のシクロアルキル、
（ｉｉ）飽和または不飽和のビシクロアルキル、または
（ｉｉｉ）アリール、
Ｌは１〜５個の炭素原子を有する結合単位であり、
添え字ｋは０または１である）を有する、請求項４に記載の方法。
【請求項１５】
前記化合物が、式：
【化１７８】
2011521916.tif 000207
を有する、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
Ｒ６０がフェニルである、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
Ｒ６０が、
【化１７９】
2011521916.tif 000208
【化１８０】
2011521916.tif 000209
【化１８１】
2011521916.tif 000210
（式中、任意の環水素原子をヒドロカルビル単位と置換することができる）から選択される式を有する置換または非置換のＣ１、Ｃ２、Ｃ３、またはＣ４ヘテロアリールまたは複素環式の５員環である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
Ｒ６０が、
【化１８２】
2011521916.tif 000211
【化１８３】
2011521916.tif 000212
から選択される式を有する置換または非置換のＣ１、Ｃ２、Ｃ３、またはＣ４ヘテロアリール５員環である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
Ｒ６０が、式：
【化１８４】
2011521916.tif 000213
を有する、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
Ｒ６０が、
【化１８５】
2011521916.tif 000214
【化１８６】
2011521916.tif 000215
（式中、任意の環水素原子をヒドロカルビル単位と置換することができる）から選択される式を有する置換または非置換のＣ３、Ｃ４、またはＣ５ヘテロアリールまたは複素環式の６員環である、請求項１５に記載の方法。
【請求項２１】
Ｒ６０が、
【化１８７】
2011521916.tif 000216
から選択される式を有する置換または非置換のＣ３、Ｃ４、またはＣ５ヘテロアリール６員環である、請求項１５に記載の方法。
【請求項２２】
Ｒ６０が式：
【化１８８】
2011521916.tif 000217
を有する、請求項１５に記載の方法。
【請求項２３】
Ｒ６０が、
【化１８９】
2011521916.tif 000218
（式中、任意の環水素原子をヒドロカルビル単位と置換することができる）から選択される式を有する縮合した置換または非置換のＣ７またはＣ８ヘテロアリールまたは複素環である、請求項１５に記載の方法。
【請求項２４】
Ｌが、
（ｉ）−ＣＨ２−、
（ｉｉ）−ＣＨ２ＣＨ２−、
（ｉｉｉ）−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、
（ｉｖ）−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、
（ｖ）−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２−、または
（ｖｉ）−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２−
から選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項２５】
Ｌが−ＣＨ２−または−ＣＨ２ＣＨ２−である、請求項１５に記載の方法。
【請求項２６】
添え字ｋが０である、請求項１５に記載の方法。
【請求項２７】
前記化合物が、式：
【化１９０】
2011521916.tif 000219
を有する、請求項１４に記載の方法。
【請求項２８】
Ｒ６０がフェニルである、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
Ｒ６０が、
【化１９１】
2011521916.tif 000220
【化１９２】
2011521916.tif 000221
【化１９３】
2011521916.tif 000222
（式中、任意の環水素原子をヒドロカルビル単位と置換することができる）から選択される式を有する置換または非置換のＣ１、Ｃ２、Ｃ３、またはＣ４ヘテロアリールまたは複素環式の５員環である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３０】
Ｒ６０が、
【化１９４】
2011521916.tif 000223
【化１９５】
2011521916.tif 000224
から選択される式を有する置換または非置換のＣ１、Ｃ２、Ｃ３、またはＣ４ヘテロアリール５員環である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
Ｒ６０が、式：
【化１９６】
2011521916.tif 000225
を有する、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
Ｒ６０が、
【化１９７】
2011521916.tif 000226
【化１９８】
2011521916.tif 000227
（式中、任意の環水素原子をヒドロカルビル単位と置換することができる）
から選択される式を有する置換または非置換のＣ３、Ｃ４、またはＣ５ヘテロアリールまたは複素環式の６員環である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３３】
Ｒ６０が、
【化１９９】
2011521916.tif 000228
【化２００】
2011521916.tif 000229
から選択される式を有する置換または非置換のＣ３、Ｃ４、またはＣ５ヘテロアリールまたは複素環式の６員環である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３４】
Ｒ６０が、式：
【化２０１】
2011521916.tif 000230
を有する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
Ｒ６０が、
【化２０２】
2011521916.tif 000231
（式中、任意の環水素原子をヒドロカルビル単位と置換することができる）
から選択される式を有する縮合した置換または非置換のＣ７またはＣ８ヘテロアリールまたは複素環である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３６】
Ｌが、
（ｉ）−ＣＨ２−、
（ｉｉ）−ＣＨ２ＣＨ２−、
（ｉｉｉ）−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、
（ｉｖ）−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、
（ｖ）−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２−、または
（ｖｉ）−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２−
から選択される、請求項２７に記載の方法。
【請求項３７】
Ｌが−ＣＨ２−または−ＣＨ２ＣＨ２−である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３８】
添え字ｋが０である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３９】
前記化合物が、式：
【化２０３】
2011521916.tif 000232
（式中、
ＢおよびＣは以下から独立して選択される環である：
（ｉ）Ｃ６またはＣ１０アリール、または
（ｉｉ）Ｃ１〜Ｃ９ヘテロアリール、
ＲｅおよびＲｆは１〜９個の水素の置換であり、各ＲｅおよびＲｆは以下から独立して選択される：
（ｉ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、または環状アルキル、
（ｉｉ）置換または非置換のＣ２〜Ｃ１０直鎖、分枝、または環状アルケニル、
（ｉｉｉ）置換または非置換のＣ２〜Ｃ１０直鎖または分枝アルキニル、
（ｉｖ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、または環状アルコキシ、
（ｖ）置換または非置換のＣ２〜Ｃ１０直鎖、分枝、または環状アルケノキシ、
（ｖｉ）置換または非置換のＣ２〜Ｃ１０直鎖または分枝アルキノキシ、または
（ｖｉｉ）ハロゲン、
添え字ｓは０〜９の整数であり、添え字ｔは０〜９の整数である）を有する、請求項４に記載の方法。
【請求項４０】
Ｂが置換または非置換のＣ６またはＣ１０アリールである、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
ＢがＣ６アリールである、請求項３９に記載の方法。
【請求項４２】
Ｂが置換または非置換のＣ１〜Ｃ９ヘテロアリールである、請求項３９に記載の方法。
【請求項４３】
Ｂが、
【化２０４】
2011521916.tif 000233
【化２０５】
2011521916.tif 000234
から選択される式を有する置換または非置換のＣ１、Ｃ２、Ｃ３、またはＣ４ヘテロアリール５員環である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４４】
Ｂが、
【化２０６】
2011521916.tif 000235
から選択される式を有するＣ３、Ｃ４、またはＣ５ヘテロアリール６員環である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４５】
Ｂが置換または非置換のＣ６またはＣ１０アリールである、請求項３９に記載の方法。
【請求項４６】
ＣがＣ６アリールである、請求項３９に記載の方法。
【請求項４７】
Ｃが置換または非置換のＣ１〜Ｃ９ヘテロアリールである、請求項３９に記載の方法。
【請求項４８】
Ｃが、
【化２０７】
2011521916.tif 000236
【化２０８】
2011521916.tif 000237
から選択される式を有する置換または非置換のＣ１、Ｃ２、Ｃ３、またはＣ４ヘテロアリール５員環である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４９】
Ｃが、
【化２０９】
2011521916.tif 000238
から選択される式を有するＣ３、Ｃ４、またはＣ５ヘテロアリール６員環である、請求項３９に記載の方法。
【請求項５０】
被験体において胃腸細菌侵入を予防する方法であって、
エチル５−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート、
３，３−ジメチル−２−オキソブチル５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート、
１−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−１−オキソプロパン−２−イル５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート、
３−（２−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸、
３−（４−イソプロピルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸、
メチル３−（２，４−ジクロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシラート、
メチル３−（２，４−ジメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシラート、
３−（４−メトキシフェニル）−４−メチルピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６（１Ｈ）−オン、
３−（４−メトキシフェニル）−４−メチルピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６−オール、
４−メチル−３−フェニルピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６−オール、
２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）−ヘキサヒドロ−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン、
２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）−３ａ，４，７，７ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン、
Ｎ−［５−（４−ブロモベンジルチオ）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）アセトアミド、および
４−［（１−メチル−４Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル］−Ｎ−フェニル−１，３，５−トリアジン−２−アミン
から選択される有効量の１つまたは複数の化合物を前記被験体に投与する工程を含む、方法。
【請求項５１】
インビボ、インビトロ、およびエクスビボで細胞中の腸アルカリホスファターゼ量を増加させる方法であって、細胞を、
エチル５−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート、
３，３−ジメチル−２−オキソブチル５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート、
１−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−１−オキソプロパン−２−イル５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート、
３−（２−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸、
３−（４−イソプロピルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸、
メチル３−（２，４−ジクロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシラート、
メチル３−（２，４−ジメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシラート、
３−（４−メトキシフェニル）−４−メチルピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６（１Ｈ）−オン、
３−（４−メトキシフェニル）−４−メチルピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６−オール、
４−メチル−３−フェニルピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６−オール、
２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）−ヘキサヒドロ−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン、
２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）−３ａ，４，７，７ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン、
Ｎ−［５−（４−ブロモベンジルチオ）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）アセトアミド、および
４−［（１−メチル−４Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル］−Ｎ−フェニル−１，３，５−トリアジン−２−アミン
から選択される有効量の１つまたは複数の化合物と接触させる工程を含む、方法。
【請求項５２】
被験体の腸アルカリホスファターゼを活性化する方法であって、
エチル５−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート、
３，３−ジメチル−２−オキソブチル５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート、
１−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−１−オキソプロパン−２−イル５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート、
３−（２−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸、
３−（４−イソプロピルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸、
メチル３−（２，４−ジクロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシラート、
メチル３−（２，４−ジメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシラート、
３−（４−メトキシフェニル）−４−メチルピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６（１Ｈ）−オン、
３−（４−メトキシフェニル）−４−メチルピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６−オール、
４−メチル−３−フェニルピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６−オール、
２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）−ヘキサヒドロ−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン、
２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）−３ａ，４，７，７ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン、
Ｎ−［５−（４−ブロモベンジルチオ）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）アセトアミド、および
４−［（１−メチル−４Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル］−Ｎ−フェニル−１，３，５−トリアジン−２−アミン
から選択される有効量の１つまたは複数の化合物を前記被験体に投与する工程を含む、方法。
【請求項５３】
被験体のアルカリホスファターゼ量を増加させる方法であって、
エチル５−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート、
３，３−ジメチル−２−オキソブチル５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート、
１−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−１−オキソプロパン−２−イル５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート、
３−（２−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸、
３−（４−イソプロピルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸、
メチル３−（２，４−ジクロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシラート、
メチル３−（２，４−ジメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシラート、
３−（４−メトキシフェニル）−４−メチルピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６（１Ｈ）−オン、
３−（４−メトキシフェニル）−４−メチルピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６−オール、
４−メチル−３−フェニルピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６−オール、
２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）−ヘキサヒドロ−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン、
２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）−３ａ，４，７，７ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン、
Ｎ−［５−（４−ブロモベンジルチオ）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）アセトアミド、および
４−［（１−メチル−４Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル］−Ｎ−フェニル−１，３，５−トリアジン−２−アミン
から選択される有効量の１つまたは複数の化合物を被験体に投与する工程を含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（連邦政府によって支援された研究についての申告）
本発明は、国立衛生研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ）によって与えられたＧｒａｎｔ  ＲＯＩ  ＤＥ  ０１２８８９のもとで政府支援によってなされた。政府は本発明において一定の権利を有する。
【０００２】
（分野）
モジュレーター、すなわち、腸アルカリホスファターゼ（ＩＡＰ）のアクチベーターおよびインヒビターを開示する。ＩＡＰアクチベーターを使用した、腸管の細菌感染の処置方法および腸管の健康状態を維持する方法も開示する。ＩＡＰインヒビターを使用した、痩せ衰えた患者および脂肪吸収が減少したかまたは無視できるほどの患者の体重増加を補助する方法をさらに開示する。
【背景技術】
【０００３】
（背景）
哺乳動物消化管粘膜は、管腔の微生物および毒素に対する障壁となる一方で、生存に不可欠な食事性栄養素の消化および吸収を可能にしている。消化管粘膜障害は、しばしば、重篤な結果を招きうる。飢餓および疾患の条件下では、腸障壁が損傷し得、このことは、病的状態および死亡さえも引き起こし得る。胃腸管の疾患および外傷は、しばしば、腸障壁を著しく損なわせる。神経性疾患、筋疾患、および糖尿病は、腸内の異常な筋肉活動を引き起こし得、このことは、細菌過剰増殖および胃腸管の炎症を引き起こし得る。物理的腸閉塞を引き起こす外傷（瘢痕など）もまた、腸障壁を損ない得る。クローン病は、特に消耗性の胃腸疾患の一例であり、北米のみでも４００，０００人〜６００，０００人を侵している。クローン病患者は、フィステル、直腸出血、便秘、発熱、リウマチ性疾患、および栄養失調症を患い得る。クローン病は胃腸管を著しく損傷し得るので、この疾患は、小腸がんおよび大腸がんなどの致命的疾病を引き起こし得る。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
したがって、障壁機能障害を有する消化管粘膜を保護するための組成物および方法が必要である。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
（簡潔な概要）
本発明の目的によれば、本明細書中で具体化され、広範に記載されるように、本発明は、腸アルカリホスファターゼのモジュレーターに関する。アクチベーターを、経腸的栄養補給中に消化管粘膜萎縮を抑制し、それにより、管腔の微生物および毒素に対する障壁として腸粘膜を維持する方法として使用することができる。ＩＡＰアクチベーターはまた、消化管中の細菌コロニー形成の抑制に有用である。アクチベーターにより、さらに、細菌リポ多糖（ＬＰＳ）の解毒方法を得ることができる。インヒビターを、脂肪吸収の増加を必要とする患者の消化管中の脂肪吸収を増加させる方法として使用することができる。さらに、インヒビターを使用して、腸管中で発現したＩＡＰを有する哺乳動物の脂肪吸収を増加させ得、それにより、体重を増加させることができる。
【０００６】
開示の方法および組成物のさらなる利点を以下の説明中に一部記載し、この記載からさらなる利点が一部理解される。あるいは、開示の方法および組成物の実施によってさらなる利点を習得することができる。開示の方法および組成物の利点は、添付の特許請求の範囲で特に指摘された要素および組み合わせを用いて実現および達成される。上記の一般的な説明および以下の詳細な説明は共に例示および説明のみを目的とし、特許請求の範囲に記載の本発明を制限しないと理解すべきである。
【０００７】
（図面の簡単な説明）
本明細書中に組み込まれ、且つ本明細書の一部を構成する添付の図面は、開示の方法および組成物のいくつかの実施形態を示し、その説明と共に、開示の方法および組成物の原理を説明するのに役立つ。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】図１は、マウスアルカリホスファターゼ（ＡＰ）遺伝子座のゲノム構成を示す。マウス組織非特異的ＡＰ（ＴＮＡＰ）遺伝子（Ａｋｐ２）は、４番染色体中の４Ｄ３に位置する。これは５５ｋｂにわたり、１２個のエキソンおよび１１個のイントロン（エキソン１ａの約３０ｋｂ下流に位置する選択的エキソン（エキソン１ｂ）が含まれる）からなる。マウス組織特異的ＡＰ（ＴＳＡＰ）遺伝子（Ａｋｐ３、Ａｋｐ５、Ａｋｐ６、およびＡｋｐ−ｐｓ１偽遺伝子）は、１番染色体中の１Ｃ５部位で密接に連結している。各ＴＳＡＰ遺伝子のサイズは約３．５ｋｂであり、１１個のエキソンおよび１０個のイントロンを含む。Ａｋｐ３遺伝子およびＡｋｐ−ｐｓ１偽遺伝子の方向は、Ａｋｐ５およびＡｋｐ６遺伝子の方向と逆である。活性ＡＰ遺伝子では、エキソン２中のＡＴＰ部位から翻訳が開始され、エキソン１１内の終止コドンで終結する。各遺伝子の真下に示した配列番号は、染色体中の実際の位置である。
【図２】図２は、普通食および高脂肪食でのマウス消化管中のＡｋｐ３、Ａｋｐ５、およびＡｋｐ６の発現を示す。Ａｋｐ３、Ａｋｐ５、およびＡｋｐ６  ｍＲＮＡ発現についての、写真中に示すように単離した各腸セグメントのノーザンブロット分析を示す。Ａｋｐ３は、もっぱら、十二指腸中に発現される。Ａｋｐ５は、十二指腸（ｄｕｏｄｅｍｕｍ）、空腸、および回腸中に発現し、その発現は、高脂肪食に影響されない。Ａｋｐ６発現は十二指腸で強く、空腸（ｊｅｊｕｍｕｍ）および回腸でも検出可能である。空腸−回腸発現は、トウモロコシ油投与後または長期高脂肪食後のＡｋｐ３−／−動物で特に増加する。
【図３】図３は、マウス消化管内のＡｋｐ３、Ａｋｐ５、およびＡｋｐ６  ｍＲＮＡの出生後発現を示す。全ＲＮＡを、示すように、２日目〜２８日目の出生後ＷＴマウスの全小腸から抽出し、ノーザンブロットを行った。マウスを１８日目に離乳させた。
【図４】図４は、空腸中のｇＩＡＰおよびＥＡＰの翻訳後修飾がこれらの腸ホスファターゼの触媒特性をさらに改変することを示す。２〜１０日齢の野生型マウスの小腸を、４つのセグメント（上部から下部、セグメント１、２、３、および４）に分割し、ｅ１８．５胚の場合、全小腸を使用した。タンパク質抽出物（５０μｇ）を、８〜１６％アクリルアミドトリス−グリシンゲルの各レーンにロードした。同量の組換え型ｇＩＡＰを、抗ｇＩＡＰ抗体で染色した２ブロットの間に標準としてロードした。Ａｋｐ５−／−マウスおよびＷＴマウス由来の回腸（ｉｌｌｅｕｍ）サンプルおよび組換え型ＥＡＰタンパク質を、同一条件を使用してロードした。酵素免疫アッセイ（ＥＩＡ）を、表示のように各腸セグメント由来のブタノール抽出物に対して行った。セグメント１由来の抽出物を、エンド−β−ガラクトシダーゼを使用して処理した。
【図５Ａ】図５Ａは、ＩＡＰがＬＰＳ活性化ＮＦ−κＢ核移行を遮断することを示す。ＨＴ−２９親細胞、空のベクターを用いたトランスフェクタント、およびＩＡＰ過剰発現細胞をＬＰＳ（＋または−）に曝露し、次いで、免疫蛍光研究のために固定および染色した。ＲｅｌＡ／ｐ６５（核内に移行されるＮＦ−κＢ複合体の一部）の抗体およびＤＡＰＩ（細胞核）での染色。ＩＡＰ発現細胞のみがＬＰＳの影響を遮断し、ＮＦ−κＢ核移行を防ぐことができた。
【図５Ｂ】図５Ｂは、ＩＡＰがＬＰＳ曝露から細胞を防御することを示す。親細胞およびＩＡＰ発現ＩＥＣ−６細胞を、種々の濃度のＬＰＳに曝露した。ＮＦ−κＢ−Ｌｕｃ活性を、ＬＰＳの細胞への影響についての読み取りとして決定した。データは平均±ＳＤをいう。
【図５Ｃ】図５Ｃは、ＩＡＰがＥＩＣ−６細胞中のＮＦ−κＢ経路のＬＰＳ活性化を特異的に遮断することを示す。ウェスタンブロッティングを、ＩκＢαリン酸化（ＮＦ−κＢ経路中の重要な工程）に特異的な抗体を使用して行った。ＬＰＳに曝露されたＩＡＰ過剰発現細胞の場合、ＩκＢαはリン酸化されていなかった。β−アクチン染色を使用して、各サンプル中のタンパク質の相対量を確認した。
【図６Ａ】図６は、ＬＰＳ／マラカイトグリーンアッセイによって測定したＬＰＳ脱リン酸化活性を示す。図６Ａは、生物学的活性がトランスフェクトされた細胞中に存在するが、親ＨＴ−２９細胞中に存在しないことを示し、その程度は細胞溶解物＞膜＞培地の順に高くなる（全て有意、ｐ＜０．０１）。サイトゾルにおいて形質転換体と親細胞との間のＬＰＳ脱リン酸化活性に統計学的有意差は認められなかった。図６Ｂは、ＬＰＳ脱リン酸化活性を内因性（ブチラート処理）条件および異所性産生（トランスフェクトされた細胞）条件において比較したことを示す。溶解物中の増加は、ブチラート曝露の１２時間後および２４時間後に、ならびに培地中では２４時間後に有意になった（ｐ＜０．０１）。データを平均±ＳＤとして示す。
【図６Ｂ】図６は、ＬＰＳ／マラカイトグリーンアッセイによって測定したＬＰＳ脱リン酸化活性を示す。図６Ａは、生物学的活性がトランスフェクトされた細胞中に存在するが、親ＨＴ−２９細胞中に存在しないことを示し、その程度は細胞溶解物＞膜＞培地の順に高くなる（全て有意、ｐ＜０．０１）。サイトゾルにおいて形質転換体と親細胞との間のＬＰＳ脱リン酸化活性に統計学的有意差は認められなかった。図６Ｂは、ＬＰＳ脱リン酸化活性を内因性（ブチラート処理）条件および異所性産生（トランスフェクトされた細胞）条件において比較したことを示す。溶解物中の増加は、ブチラート曝露の１２時間後および２４時間後に、ならびに培地中では２４時間後に有意になった（ｐ＜０．０１）。データを平均±ＳＤとして示す。
【図７Ａ】図７ＡはｐＮＰＰａｓｅアッセイを示す。摂食（ｎ＝５）、絶食（２日間飢餓、ｎ−５）、および再摂食（２日間飢餓、ｎ＝４）したＷＴマウスおよびＡｋｐ３−／−マウス由来の十二指腸粘膜溶解物を、アルカリホスファターゼ活性について測定した。飢餓により、ＷＴ動物においてＡｋｐ３−／−マウスと類似のレベルまで有意に減少する。再摂取により、ＷＴマウスにおいてＩＡＰ発現が刺激される。飢餓および再摂食は、Ａｋｐ３−／−マウスにおいてＩＡＰ発現に最小の影響しか及ぼさないようである。有意性：＊は、ｐ＜０．０５であり、これは、絶食ＷＴ動物を摂食および再摂食のＷＴ動物と比較している。ノックアウト動物におけるＡＰレベルは、ＷＴ動物のＡＰレベルより有意に低かった。
【図７Ｂ】図７ＢはＬＰＳ／マラカイトグリーンアッセイを示す。摂食、絶食、および再摂食ＷＴ群およびノックアウト群を使用して、ＬＰＳ脱リン酸化活性における類似のパターンが認められた。飢餓により、ＷＴ型動物のＬＰＳ脱リン酸化能力が劇的に減少した一方で、再摂取によって、この能力が正常レベルまで回復した。有意性：＊は、ｐ＜０．０５であり、これは、絶食ＷＴマウスを摂食および再摂食のＷＴマウスと比較している。Ａｋｐ３−／−におけるホスフェートレベルは、ＷＴ動物におけるレベルより有意に低い。
【図８】図８は、ＩＡＰ、ＡＫＰ３、ＡＫＰ５、およびＡＫＰ６阻害についての化合物ＭＬＳ−００９１９６８（Ｆ５）の用量応答曲線を示す。正の数字は正の阻害を意味することに留意のこと。
【図９】図９は、ＩＡＰ、ＡＫＰ３、ＡＫＰ５、およびＡＫＰ６阻害についての化合物ＭＬＳ−００６７１４２（Ｆ８）の用量応答曲線を示す。正の数字は正の阻害を意味することに留意のこと。
【図１０】図１０は、ＩＡＰ、ＡＫＰ３、ＡＫＰ５、およびＡＫＰ６阻害についての化合物ＭＬＳ−００９１９７６（Ｆ１）の用量応答曲線を示す。正の数字は正の阻害を意味することに留意のこと。
【図１１】図１１は、ＩＡＰ、ＡＫＰ３、ＡＫＰ５、およびＡＫＰ６阻害についての化合物ＭＬＳ−０１１１６３２（Ｂ２）の用量応答曲線を示す。正の数字は正の阻害を意味することに留意のこと。
【図１２】図１２は、ＩＡＰ、ＡＫＰ３、ＡＫＰ５、およびＡＫＰ６阻害についての化合物ＭＬＳ−０１１１５８１（Ｅ４）の用量応答曲線を示す。正の数字は正の阻害を意味することに留意のこと。
【図１３】図１３は、ＣＤＰ−Ｓｔａｒを使用したＩＡＰアッセイ手順を示す。
【図１４】図１４は、ＩＡＰアクチベーターの同定のためのスクリーニングストラテジーを示す。
【図１５】図１５は、ＩＡＰがマウスを消化管細菌転移から防御することを示す。（Ａ）直接的消化管Ｉ／Ｒ。ＷＴマウスおよびＩＡＰ  ＫＯマウスを、４５分間の上腸間膜結紮クランプへ供し、その後の種々の時間の再灌流を行った。偽開腹術（ｓｈａｍ  ｌａｐａｒｏｔｏｍｙ）および非介入をコントロールとして使用した。腸間膜組織を採取し、節中の細菌数を決定した。データは、複数回繰り返した実験に基づく（手術なし、偽開腹術、Ｏ時間群、および４時間群についてはｎ＝４、２４時間群、４８時間群、および１２０時間群についてはｎ＝７）。＊は、値を前の時点と比較して、Ｐ＜０．０５。＊＊は、ＫＯをＷＴマウスと比較して、Ｐ＜０．０５。（Ｂ）遠位外傷。後肢Ｉ／Ｒ後、腸間膜組織を採取し、節中の細菌数を決定した。偽マウスを、全実験においてコントロールの目的で使用した。＊は、ＫＯをＷＴマウスと比較して、Ｐ＜０．０５。この図中においてデータは、平均±ＳＥＭとして示す。
【図１６】図１６は結腸炎関連がん様式を示す。ＡＯＭおよびＤＳＳの構造の下に時間的経過（週）を示す。
【図１７】図１７は、ＡＯＭ／ＤＳＳ処置から９週間後の肉眼で見える結腸腫瘍を示す。ＡＡはＥｔｓ２Ａ７２／Ａ７２マウスを示す。エラーバーは標準偏差を示す。Ｔ検定による差は非常に有意であった（Ｐ＝０．００３）。
【図１８】図１８はＡＯＭ／ＤＳＳ処置後の腫瘍の発症を示す。（Ａ）ＡＯＭ注射から１９週間後に分析した第２の試験由来の腫瘍発生。（Ｂ）平均腫瘍数／マウス、（Ｃ）平均腫瘍重量。腫瘍重量の差は有意でなかった（Ｐ＝０．０９７）。両試験における腫瘍数／マウスの差は、非常に有意であった。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
（詳細な説明）
開示の方法および組成物を、本明細書に含まれる、以下の特定の実施形態の詳細な説明および実施例ならびに図面およびその前後の説明を参照することにより、より容易に理解することができる。
【００１０】
開示の方法および組成物のために使用することができるか、これらと併せて使用することができるか、これらの調製で使用することができるか、またはこれらの生成物である材料、組成物、および成分を開示する。これらおよび他の材料を本明細書中に開示し、これらの材料の組み合わせ、サブセット、相互作用物、群などを開示するが、これらの化合物の種々の各個および集合的な組み合わせおよび置換物への特定の言及を明確に開示することができない場合、それぞれは具体的に意図され、本明細書に記載されると理解される。例えば、化合物を開示および考察し、化合物を含む多数の分子へと作製され得る多数の修飾物を考察する場合、具体的に否定されない限り、可能な化合物および修飾物のそれぞれおよびあらゆる組み合わせおよび置換物が具体的に意図される。したがって、分子クラスＡ、Ｂ、およびＣ、同様に分子クラスＤ、Ｅ、およびＦならびに組み合わせ分子の例（Ａ−Ｄ）を開示する場合、各々を個別に説明していない場合でさえも、各々は個別および集合的に意図される。したがって、この例では、各組み合わせＡ−Ｅ、Ａ−Ｆ、Ｂ−Ｄ、Ｂ−Ｅ、Ｂ−Ｆ、Ｃ−Ｄ、Ｃ−Ｅ、およびＣ−Ｆが具体的に意図され、（Ａ、Ｂ、およびＣ）、（Ｄ、Ｅ、およびＦ）、ならびに例示的組み合わせＡ−Ｄの開示から開示されると見なすべきである。同様に、これらの任意のサブセットまたは組み合わせも具体的に意図および開示される。したがって、例えば、Ａ−Ｅ、Ｂ−Ｆ、およびＣ−Ｅの亜群が具体的に意図され、（Ａ、Ｂ、およびＣ）、（Ｄ、Ｅ、およびＦ）、ならびに例示的組み合わせＡ−Ｄの開示から開示されると見なすべきである。この概念は、本出願の全ての態様（開示の組成物の作製および使用方法における工程が含まれるが、これに限定されない）に適用する。したがって、実施することができる種々のさらなる工程が存在する場合、これらのさらなる各工程を開示の方法の任意の特定の実施形態または実施形態の組み合わせを使用して行うことができ、かかる各組み合わせが具体的に意図され、開示されると見なすべきであると理解される。
【００１１】
当業者は、通常の実験しか使用せずに、本明細書中に記載の方法および組成物の特定の実施形態の多数の等価物を認識するか、または確認することができる。かかる等価物は、以下の特許請求の範囲に含まれることが意図される。
【００１２】
開示の方法および組成物は、変動し得るので、記載の特定の方法論、プロトコール、および試薬に制限されないと理解される。本明細書中で使用される専門用語は特定の実施形態のみを説明することを目的とし、本発明の範囲を制限することを意図せず、添付の特許請求の範囲によってのみ制限されるとも理解すべきである。
【００１３】
（Ａ．組成物）
本出願は、２００７年３月２８日出願の米国特許出願第１１／５７６，２５１号（その内容が本明細書中に参照によって援用される）の主題に関する。
【００１４】
（１．ＩＡＰモジュレーター）
例えば、細菌侵入に対する粘膜防御として使用することができる腸アルカリホスファターゼ（ＩＡＰ）のモジュレーターを本明細書中に提供する。いくつかの態様では、ＩＡＰはヒトＩＡＰである。表１
【００１５】
【表１】
2011521916.tif 000003
は、本明細書中に開示の異なるアルカリホスファターゼアイソザイムの用語を示す。
【００１６】
本開示の腸アルカリホスファターゼモジュレーターを、処方者が本明細書中に明確に例示していないアナログの調製のために合理的合成ストラテジーを適用するのを補助するためにいくつかのカテゴリーに整理する。カテゴリーへの整理は、本明細書中に記載の任意の腸アルカリホスファターゼモジュレーターの効能の向上または低下を意味しない。
【００１７】
腸アルカリホスファターゼモジュレーターの１つのカテゴリーは、式：
【００１８】
【化１】
2011521916.tif 000004
（式中、ＲおよびＲ１は以下からそれぞれ独立して選択される：
ｉ）水素、
ｉｉ）置換または非置換のＣ６、Ｃ１０、またはＣ１４アリール、または
ｉｉｉ）−Ｃ（Ｏ）Ｒ４、ここで、Ｒ４はヒドロカルビル単位であり、
ＲおよびＲ２は共に式：
【００１９】
【化２】
2011521916.tif 000005
を有する縮合環系を形成することができるか、あるいは
Ｒ１およびＲ２は共に式：
【００２０】
【化３】
2011521916.tif 000006
を有する縮合環系を形成することができ、Ａは、３〜１４個の炭素原子および酸素、窒素、硫黄、またはその組み合わせから選択される１〜５個のヘテロ原子を有する１つまたは複数の置換または非置換のシクロアルキル環、アリール環、複素環、またはヘテロアリール環である）を有する化合物に関する。
【００２１】
本カテゴリーの１つの態様は、式：
【００２２】
【化４】
2011521916.tif 000007
（式中、Ｒは式−Ｃ（Ｏ）Ｒ４を有する単位であり、Ｒ１は置換または非置換のＣ６アリール（フェニル）であるか、あるいは、Ｒ１は式−Ｃ（Ｏ）Ｒ４を有する単位であり、Ｒは置換または非置換のＣ６アリール（フェニル）である）を有する腸アルカリホスファターゼモジュレーターに関する。本態様の１つの実施形態は、式：
【００２３】
【化５】
2011521916.tif 000008
（式中、Ｒ４は以下から選択される：
ａ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｂ）−ＯＲ５、ここで、Ｒ５は以下から選択される：
ｉ）水素、
ｉｉ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖または分枝アルキル、ここで、アルキル鎖上の各置換は以下から独立して選択される：
ｉ）ハロゲン、および
ｉｉ）−［Ｃ（Ｒ７ａ）（Ｒ７ｂ）］ｗＣ（Ｏ）Ｒ６、Ｒ６はヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルコキシ、または−Ｎ（Ｒ８ａ）（Ｒ８ｂ）であり、各Ｒ８ａおよびＲ８ｂは、水素またはＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、もしくは環状アルキルから独立して選択され、
ｉｉｉ）−［Ｃ（Ｒ７ａ）（Ｒ７ｂ）］ｗＮ（Ｒ９ａ）（Ｒ９ｂ）、各Ｒ９ａおよびＲ９ｂは、水素またはＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、もしくは環状アルキルから独立して選択されるか、あるいは、Ｒ９ａおよびＲ９ｂは共に３〜７個の原子を有する環を形成することができ、各Ｒ７ａおよびＲ７ｂは独立して水素またはＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキルであり、添え字ｗは０〜５の整数である）を有するモジュレーターに関する。
【００２４】
各Ｒａは１〜５個の任意選択的に存在するフェニル環上の水素原子の置換を示し、そのようなものとして、添え字ｘは０〜５の整数である。各Ｒａは以下から独立して選択される：
ｉ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｉｉ）Ｃ２〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルケニル、
ｉｉｉ）Ｃ２〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖または分枝アルキニル、
ｉｖ）Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、
ｖ）Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、
ｖｉ）Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリール、
ｖｉｉ）−［Ｃ（Ｒ２６ａ）（Ｒ２６ｂ）］ｘＯＲ１０、Ｒ１０は以下から選択される：
ａ）−Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｃ）Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリールまたはアルキレンアリール、
ｄ）Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、
ｅ）Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリール、
ｖｉｉｉ）−［Ｃ（Ｒ２６ａ）（Ｒ２６ｂ）］ｎＮ（Ｒ１１ａ）（Ｒ１１ｂ）、Ｒ１１ａおよびＲ１１ｂは以下からそれぞれ独立して選択される：
ａ）−Ｈ、
ｂ）−ＯＲ１２、Ｒ１２は水素またはＣ１〜Ｃ４直鎖アルキルであり、
ｃ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｄ）Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、
ｅ）Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、
ｆ）Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリール、または
ｇ）Ｒ１１ａおよびＲ１１ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
ｉｘ）−［Ｃ（Ｒ２６ａ）（Ｒ２６ｂ）］ｎＣ（Ｏ）Ｒ１３、Ｒ１３は以下である：
ａ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｂ）−ＯＲ１４、Ｒ１４は、水素、置換または非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであり、
ｃ）−Ｎ（Ｒ１５ａ）（Ｒ１５ｂ）、Ｒ１５ａおよびＲ１５ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであるか、あるいは、Ｒ１５ａおよびＲ１５ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
ｘ）−［Ｃ（Ｒ２４ａ）（Ｒ２４ｂ）］ｎＯＣ（Ｏ）Ｒ１６、Ｒ１６は以下である：
ａ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｂ）−Ｎ（Ｒ１７ａ）（Ｒ１７ｂ）、Ｒ１７ａおよびＲ１７ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであるか、あるいは、Ｒ１７ａおよびＲ１７ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
ｘｉ）−［Ｃ（Ｒ２４ａ）（Ｒ２４ｂ）］ｎＮＲ１８Ｃ（Ｏ）Ｒ１９、Ｒ１８は以下である：
ａ）−Ｈ、または
ｂ）Ｃ１〜Ｃ４置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
Ｒ１９は以下である：
ａ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｂ）−Ｎ（Ｒ２０ａ）（Ｒ２０ｂ）、Ｒ２０ａおよびＲ２０ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであるか、あるいは、Ｒ２０ａおよびＲ２０ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
ｘｉｉ）−［Ｃ（Ｒ２４ａ）（Ｒ２４ｂ）］ｎＣＮ、
ｘｉｉｉ）−［Ｃ（Ｒ２４ａ）（Ｒ２４ｂ）］ｎＮＯ２、
ｘｉｖ）−［Ｃ（Ｒ２４ａ）（Ｒ２４ｂ）］ｎＲ２１、Ｒ２１は、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、または−Ｉから選択される１〜２１個のハロゲン原子に置換されたＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、または環状アルキルであり、
ｘｖ）−［Ｃ（Ｒ２４ａ）（Ｒ２４ｂ）］ｎＳＯ２Ｒ２２、Ｒ２２は、水素、ヒドロキシル、置換もしくは非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキル、置換もしくは非置換のＣ６、Ｃ１０、もしくはＣ１４アリール、Ｃ７〜Ｃ１５アルキレンアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換もしくは非置換の複素環、またはＣ１〜Ｃ１１置換もしくは非置換のヘテロアリールであり、
ｉｉ）同一炭素原子上の２個のＲａ単位は共に＝Ｏ、＝Ｓ、または＝ＮＲ２３から選択される単位を形成することができ、Ｒ２３は、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキル、またはＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルコキシであり、Ｒ２４ａおよびＲ２４ｂは、それぞれ独立して、水素またはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、添え字ｎは０〜５の整数である。
【００２５】
本明細書中に開示のＲａ単位を、以下から独立して選択される１つまたは複数の有機ラジカルとさらに置換することができる：
ｉ）Ｃ１〜Ｃ１２直鎖、分枝、または環状アルキル、アルケニル、およびアルキニル、
ｉｉ）置換または非置換のＣ６またはＣ１０アリール、
ｉｉｉ）置換または非置換のＣ６またはＣ１０アルキレンアリール、
ｉｖ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ９複素環、
ｖ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ９ヘテロアリール環、
ｖｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＯＲ１０１、
ｖｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＣ（Ｏ）Ｒ１０１、
ｖｉｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＣ（Ｏ）ＯＲ１０１、
ｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０１）２、
ｉｘ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＮ（Ｒ１０１）２、
ｘｉ）ハロゲン、
ｘｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＣＮ、
ｘｉｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＮＯ２、
ｘｉｖ）−ＣＨｊＸｋ、ここで、Ｘはハロゲンであり、添え字ｊは０〜２の整数であり、ｊ＋ｋ＝３、
ｘｖ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＳＲ１０１、
ｘｖｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＳＯ２Ｒ１０１、および
ｘｖｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＳＯ３Ｒ１０１、
（式中、各Ｒ１０１は、独立して、水素、置換または非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖、分枝、または環状アルキル、フェニル、ベンジル、複素環、またはヘテロアリールであるか、あるいは、２個のＲ１０１単位は共に３〜７個の原子を含む環を形成することができ、Ｒ１０２ａおよびＲ１０２ｂはそれぞれ独立して水素またはＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキルであり、添え字ｚは０〜４である）。
【００２６】
本実施形態によるＲ単位の非限定的な例には、以下から選択される単位が含まれる：
ｉ）−ＣＯ２Ｈ、
ｉｉ）−ＣＯ２ＣＨ３、
ｉｉｉ）−ＣＯ２ＣＨＣＨ３、
ｉｖ）−ＣＯ２ＣＦ３、
ｖ）−ＣＯＮＨＣＨ３、および
ｖｉ）−ＣＯＮ（ＣＨ３）２。
【００２７】
本実施形態によるＲ１単位の非限定的な例には、以下が含まれる。
【００２８】
ハロゲン置換フェニル（例えば、２−フルオロフェニル、３−フルオロフェニル、４−フルオロフェニル、２，３−ジフルオロフェニル、２，４−ジフルオロフェニル、２，５−ジフルオロフェニル、２，６−ジフルオロフェニル、３，４−ジフルオロフェニル、３，５−ジフルオロフェニル、２−クロロフェニル、３−クロロフェニル、４−クロロフェニル、２，３−ジクロロフェニル、２，４−ジクロロフェニル、２，５−ジクロロフェニル、２，６−ジクロロフェニル、３，４−ジクロロフェニル、３，５−ジクロロフェニル、２−ブロモフェニル、３−ブロモフェニル、４−ブロモフェニル、２，３−ジブロモフェニル、２，４−ジブロモフェニル、２，５−ジブロモフェニル、２，６−ジブロモフェニル、３，４−ジブロモフェニル、および３，５−ジブロモフェニル）。
【００２９】
アルキル置換フェニル（例えば、２−メチルフェニル、３−メチルフェニル、４−メチルフェニル、２，３−ジメチルフェニル、２，４−ジメチルフェニル、２，５−ジメチルフェニル、２，６−ジメチルフェニル、３，４−ジメチルフェニル、３，５−ジメチルフェニル、２−エチルフェニル、３−エチルフェニル、４−エチルフェニル、２，３−ジエチルフェニル、２，４−ジエチルフェニル、２，５−ジエチルフェニル、２，６−ジエチルフェニル、３，４−ジエチルフェニル、３，５−ジエチルフェニル、２−ｎ−プロピルフェニル、３−ｎ−プロピルフェニル、４−ｎ−プロピルフェニル、２，３−ジ−ｎ−プロピルフェニル、２，４−ジ−ｎ−プロピルフェニル、２，５−ジ−ｎ−プロピルフェニル、２，６−ジ−ｎ−プロピルフェニル、３，４−ジ−ｎ−プロピルフェニル、３，５−ジ−ｎ−プロピルフェニル、２−イソ−プロピルフェニル、３−イソ−プロピルフェニル、４−イソ−プロピルフェニル、２，３−ジ−イソ−プロピルフェニル、２，４−ジ−イソ（ｄｉｉ−ｓｏ）−プロピルフェニル、２，５−ジ−イソ−プロピルフェニル、２，６−ジ−イソ−プロピルフェニル、３，４−ジ−イソ−プロピルフェニル、および３，５−ジ−イソ−プロピルフェニル）。
【００３０】
アルコキシ置換フェニル（例えば、２−メトキシフェニル、３−メトキシフェニル、４−メトキシフェニル、２，３−ジメトキシフェニル、２，４−ジメトキシフェニル、２，５−ジメトキシフェニル、２，６−ジメトキシフェニル、３，４−ジメトキシフェニル、３，５−ジメトキシフェニル、２−エトキシフェニル、３−エトキシフェニル、４−エトキシフェニル、２，３−ジエトキシフェニル、２，４−ジエトキシフェニル、２，５−ジエトキシフェニル、２，６−ジエトキシフェニル、３，４−ジエトキシフェニル、３，５−ジエトキシフェニル、２−プロポキシフェニル、３−プロポキシフェニル、４−プロポキシフェニル、２，３−ジプロポキシフェニル、２，４−ジプロポキシフェニル、２，５−ジプロポキシフェニル、２，６−ジプロポキシフェニル、３，４−ジプロポキシフェニル、および３，５−ジプロポキシフェニル）。
【００３１】
ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、チオール、およびアミノ置換フェニル（例えば、２−ヒドロキシフェニル、３−ヒドロキシフェニル、４−ヒドロキシフェニル、２，３−ジヒドロキシフェニル、２，４−ジヒドロキシフェニル、２，５−ジヒドロキシフェニル、２，６−ジヒドロキシフェニル、３，４−ジヒドロキシフェニル、３，５−ジヒドロキシフェニル、２−ニトロフェニル、３−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、２，３−ジニトロフェニル、２，４−ジニトロフェニル、２，５−ジニトロフェニル、２，６−ジニトロフェニル、３，４−ジニトロフェニル、３，５−ジニトロフェニル、２−シアノフェニル、３−シアノフェニル、４−シアノフェニル、２，３−ジシアノフェニル、２，４−ジシアノフェニル、２，５−ジシアノフェニル、２，６−ジシアノフェニル、３，４−ジシアノフェニル、３，５−ジシアノフェニル、２−チオフェニル、３−チオフェニル、４−チオフェニル、２，３−ジチオフェニル、２，４−ジチオフェニル、２，５−ジチオフェニル、２，６−ジチオフェニル、３，４−ジチオフェニル、３，５−ジチオフェニル、２−アミノフェニル、３−アミノフェニル、４−アミノフェニル、２，３−ジアミノフェニル、２，４−ジアミノフェニル、２，５−ジアミノフェニル、２，６−ジアミノフェニル、３，４−ジアミノフェニル、および３，５−ジアミノフェニル）。
【００３２】
トリフルオロメチルおよびスルホキシ置換フェニル（例えば、２−トリフルオロメチルフェニル、３−トリフルオロメチルフェニル、４−トリフルオロメチルフェニル、２，３−ジトリフルオロメチルフェニル、２，４−ジトリフルオロメチルフェニル、２，５−ジトリフルオロメチルフェニル、２，６−ジトリフルオロメチルフェニル、３，４−ジトリフルオロメチルフェニル、３，５−ジトリフルオロメチルフェニル、２−スルホキシフェニル、３−スルホキシフェニル、４−スルホキシフェニル、２，３−ジスルホキシフェニル、２，４−ジスルホキシフェニル、２，５−ジスルホキシフェニル、２，６−ジスルホキシフェニル、３，４−ジスルホキシフェニル、および３，５−ジスルホキシフェニル）。
【００３３】
本実施形態の１つの繰り返しは、以下の式：
【００３４】
【化６】
2011521916.tif 000009
（式中、Ｒ４は−ＯＲ５であり、Ｒ５は以下から選択される：
ｉ）水素、または
ｉｉ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖または分枝アルキル、各置換は以下から独立して選択される：
ａ）−［Ｃ（Ｒ７ａ）（Ｒ７ｂ）］ｗＣ（Ｏ）Ｒ６、Ｒ６はヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルコキシ、または−Ｎ（Ｒ８ａ）（Ｒ８ｂ）であり、各Ｒ８ａおよびＲ８ｂは、水素またはＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、もしくは環状アルキルから独立して選択され、
ｂ）−［Ｃ（Ｒ７ａ）（Ｒ７ｂ）］ｗＮ（Ｒ９ａ）（Ｒ９ｂ）、各Ｒ９ａおよびＲ９ｂは、水素またはＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、もしくは環状アルキルから独立して選択されるか、あるいは、Ｒ９ａおよびＲ９ｂは共に３〜７個の原子を有する環を形成することができ、各Ｒ７ａおよびＲ７ｂは独立して水素またはＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキルであり、添え字ｗは０〜５の整数であり、各Ｒａは以下から選択される：
ｉ）Ｃ１〜Ｃ４直鎖または分枝アルキル、
ｉｉ）Ｃ１〜Ｃ４直鎖または分枝アルコキシ、
ｉｉｉ）−ＯＨ、
ｉｖ）−Ｆ、
ｖ）−Ｃｌ、
ｖｉ）−Ｂｒ、
ｖｉｉ）−ＮＯ２、
ｖｉｉｉ）−ＮＨ２、および
ｉｘ）−ＣＦ３、
添え字ｘは０〜５の整数であり、整数ｗは０〜２である）を有する化合物に関する。
【００３５】
本繰り返しの非限定的な例には、以下の一般式を有するモジュレーターが含まれる。
ｉ）２−オキソアルキル５−（置換または非置換フェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート：
【００３６】
【化７】
2011521916.tif 000010
（式中、Ｒ６は、メチル（Ｃ１）、エチル（Ｃ２）、ｎ−プロピル（Ｃ３）、イソ−プロピル（Ｃ３）、ｎ−ブチル（Ｃ４）、ｓｅｃ−ブチル（Ｃ４）、イソ−ブチル（Ｃ４）、およびｔｅｒｔ−ブチル（Ｃ４）から選択される。例えば、以下の式を有する化合物：
ａ）２−オキソプロピル５−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート
【００３７】
【化８】
2011521916.tif 000011
ｂ）２−オキソプロピル５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート
【００３８】
【化９】
2011521916.tif 000012
ｃ）３−メチル−２−オキソブチル５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート
【００３９】
【化１０】
2011521916.tif 000013
および
ｄ）３，３−ジメチル−２−オキソブチル５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート
【００４０】
【化１１】
2011521916.tif 000014
である）。
ｉｉ）Ｎ−アルキルアミノ−オキソアルキル５−（置換または非置換フェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート：
【００４１】
【化１２】
2011521916.tif 000015
（式中、Ｒ７ａは水素、メチル（Ｃ１）、またはエチル（Ｃ２）から選択され、Ｒ７ｂは水素であり、Ｒ８ｂは水素であり、Ｒ８ａは、水素、メチル（Ｃ１）、エチル（Ｃ２）、ｎ−プロピル（Ｃ３）、イソ−プロピル（Ｃ３）、シクロプロピル（Ｃ３）、ｎ−ブチル（Ｃ４）、ｓｅｃ−ブチル（Ｃ４）、イソ−ブチル（Ｃ４）、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｃ４）、シクロブチル（Ｃ４）、シクロペンチル（Ｃ５）、またはシクロヘキシル（Ｃ６）から選択される。例えば、以下の式を有する化合物：
ａ）１−（メチルアミノ）−１−オキソプロパン−２−イル５−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート
【００４２】
【化１３】
2011521916.tif 000016
ｂ）２−（メチルアミノ）−２−オキソエチル５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート
【００４３】
【化１４】
2011521916.tif 000017
ｃ）２−（メチルアミノ）−２−オキソエチル５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート
【００４４】
【化１５】
2011521916.tif 000018
および
ｄ）１−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−１−オキソプロパン−２−イル５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート
【００４５】
【化１６】
2011521916.tif 000019
である）。
ｉｉｉ）Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノ−オキソアルキル５−（置換または非置換フェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート：
【００４６】
【化１７】
2011521916.tif 000020
（式中、Ｒ７ａは水素、メチル（Ｃ１）、またはエチル（Ｃ２）から選択され、Ｒ７ｂは水素であり、Ｒ８ａおよびＲ８ｂは、水素、メチル（Ｃ１）、エチル（Ｃ２）、ｎ−プロピル（Ｃ３）、イソ−プロピル（Ｃ３）、シクロプロピル（Ｃ３）、ｎ−ブチル（Ｃ４）、ｓｅｃ−ブチル（Ｃ４）、イソ−ブチル（Ｃ４）、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｃ４）、シクロブチル（Ｃ４）、シクロペンチル（Ｃ５）、またはシクロヘキシル（Ｃ６）からそれぞれ独立して選択される。例えば、以下の式を有する２−［シクロヘキシル（メチル）−アミノ］−２−オキソエチル５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート：
【００４７】
【化１８】
2011521916.tif 000021
である）。
【００４８】
本実施形態の非限定的な例には、以下：
ｉ）５−（２−クロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸
【００４９】
【化１９】
2011521916.tif 000022
ｉｉ）５−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸
【００５０】
【化２０】
2011521916.tif 000023
ｉｉｉ）５−（２−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸
【００５１】
【化２１】
2011521916.tif 000024
ｉｖ）５−（４−クロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸
【００５２】
【化２２】
2011521916.tif 000025
ｖ）５−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸
【００５３】
【化２３】
2011521916.tif 000026
ｖｉ）５−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸
【００５４】
【化２４】
2011521916.tif 000027
ｖｉｉ）５−（４−アミノフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸
【００５５】
【化２５】
2011521916.tif 000028
ｖｉｉｉ）エチル５−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート
【００５６】
【化２６】
2011521916.tif 000029
ｉｘ）メチル５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート
【００５７】
【化２７】
2011521916.tif 000030
ｘ）メチル５−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート
【００５８】
【化２８】
2011521916.tif 000031
ｘｉ）メチル５−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート
【００５９】
【化２９】
2011521916.tif 000032
ｘｉｉ）メチル５−（４−ニトロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート
【００６０】
【化３０】
2011521916.tif 000033
ｘｉｉｉ）２−［シクロヘキシル（メチル）アミノ］−２−オキソエチル５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート
【００６１】
【化３１】
2011521916.tif 000034
ｘｉｖ）３，３−ジメチル−２−オキソブチル５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート
【００６２】
【化３２】
2011521916.tif 000035
および
ｘｖ）１−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−１−オキソプロパン−２−イル５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシラート
【００６３】
【化３３】
2011521916.tif 000036
が含まれる。
【００６４】
表Ａ
【表Ａ−１】
2011521916.tif 000037
【００６５】
【表Ａ−２】
2011521916.tif 000038
【００６６】
【表Ａ−３】
2011521916.tif 000039
【００６７】
は、本カテゴリーによる腸アルカリホスファターゼアクチベーターおよびインヒビターの非限定的な例を示す。
【００６８】
＊ｎはヒル係数を示す。この係数は、式：
【００６９】
【数１】
2011521916.tif 000040
（式中、
【００７０】
【数１０】
2011521916.tif 000041
はリガンド結合部位の充填率（ｆｒａｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｌｉｇａｎｄ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｓｉｔｅｓ  ｆｉｌｌｅｄ）であり、Ｌはインヒビター濃度であり、Ｋａはリガンド結合部位の半分を占めるインヒビター濃度であり、ｎはヒル係数である）を有するヒル式から導かれる。表Ｂ〜Ｈを通して、ヒル係数ｎは本明細書中に定義の通りである。好ましいアクチベーターは、負の数のヒル係数を有する（例えば、−０．０２３、−４、および−２３．９）。好ましいインヒビターは、正の数のヒル係数を有する（例えば、０．０１、２．４、および７）。
【００７１】
本態様の別の実施形態は、式：
【００７２】
【化３４】
2011521916.tif 000042
（式中、Ｒ４およびＲａは上記定義の通りである）を有するモジュレーターに関する。
【００７３】
本実施形態によるＲ単位の非限定的な例には、以下から選択される単位が含まれる：
ｉ）−ＣＯ２Ｈ、
ｉｉ）−ＣＯ２ＣＨ３、
ｉｉｉ）−ＣＯ２ＣＨＣＨ３、
ｉｖ）−ＣＯ２ＣＦ３、
ｖ）−ＣＯＮＨＣＨ３、および
ｖｉ）−ＣＯＮ（ＣＨ３）２。
【００７４】
本実施形態によるＲ１単位の非限定的な例には、以下が含まれる。
【００７５】
ハロゲン置換フェニル（例えば、２−フルオロフェニル、３−フルオロフェニル、４−フルオロフェニル、２，３−ジフルオロフェニル、２，４−ジフルオロフェニル、２，５−ジフルオロフェニル、２，６−ジフルオロフェニル、３，４−ジフルオロフェニル、３，５−ジフルオロフェニル、２−クロロフェニル、３−クロロフェニル、４−クロロフェニル、２，３−ジクロロフェニル、２，４−ジクロロフェニル、２，５−ジクロロフェニル、２，６−ジクロロフェニル、３，４−ジクロロフェニル、３，５−ジクロロフェニル、２−ブロモフェニル、３−ブロモフェニル、４−ブロモフェニル、２，３−ジブロモフェニル、２，４−ジブロモフェニル、２，５−ジブロモフェニル、２，６−ジブロモフェニル、３，４−ジブロモフェニル、および３，５−ジブロモフェニル）。
【００７６】
アルキル置換フェニル（例えば、２−メチルフェニル、３−メチルフェニル、４−メチルフェニル、２，３−ジメチルフェニル、２，４−ジメチルフェニル、２，５−ジメチルフェニル、２，６−ジメチルフェニル、３，４−ジメチルフェニル、３，５−ジメチルフェニル、２−エチルフェニル、３−エチルフェニル、４−エチルフェニル、２，３−ジエチルフェニル、２，４−ジエチルフェニル、２，５−ジエチルフェニル、２，６−ジエチルフェニル、３，４−ジエチルフェニル、３，５−ジエチルフェニル、２−ｎ−プロピルフェニル、３−ｎ−プロピルフェニル、４−ｎ−プロピルフェニル、２，３−ジ−ｎ−プロピルフェニル、２，４−ジ−ｎ−プロピルフェニル、２，５−ジ−ｎ−プロピルフェニル、２，６−ジ−ｎ−プロピルフェニル、３，４−ジ−ｎ−プロピルフェニル、３，５−ジ−ｎ−プロピルフェニル、２−イソ−プロピルフェニル、３−イソ−プロピルフェニル、４−イソ−プロピルフェニル、２，３−ジ−イソ−プロピルフェニル、２，４−ジ−イソ（ｄｉｉ−ｓｏ）−プロピルフェニル、２，５−ジ−イソ−プロピルフェニル、２，６−ジ−イソ−プロピルフェニル、３，４−ジ−イソ−プロピルフェニル、および３，５−ジ−イソ−プロピルフェニル）。
【００７７】
アルコキシ置換フェニル（例えば、２−メトキシフェニル、３−メトキシフェニル、４−メトキシフェニル、２，３−ジメトキシフェニル、２，４−ジメトキシフェニル、２，５−ジメトキシフェニル、２，６−ジメトキシフェニル、３，４−ジメトキシフェニル、３，５−ジメトキシフェニル、２−エトキシフェニル、３−エトキシフェニル、４−エトキシフェニル、２，３−ジエトキシフェニル、２，４−ジエトキシフェニル、２，５−ジエトキシフェニル、２，６−ジエトキシフェニル、３，４−ジエトキシフェニル、３，５−ジエトキシフェニル、２−プロポキシフェニル、３−プロポキシフェニル、４−プロポキシフェニル、２，３−ジプロポキシフェニル、２，４−ジプロポキシフェニル、２，５−ジプロポキシフェニル、２，６−ジプロポキシフェニル、３，４−ジプロポキシフェニル、および３，５−ジプロポキシフェニル）。
【００７８】
ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、チオール、およびアミノ置換フェニル（例えば、２−ヒドロキシフェニル、３−ヒドロキシフェニル、４−ヒドロキシフェニル、２，３−ジヒドロキシフェニル、２，４−ジヒドロキシフェニル、２，５−ジヒドロキシフェニル、２，６−ジヒドロキシフェニル、３，４−ジヒドロキシフェニル、３，５−ジヒドロキシフェニル、２−ニトロフェニル、３−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、２，３−ジニトロフェニル、２，４−ジニトロフェニル、２，５−ジニトロフェニル、２，６−ジニトロフェニル、３，４−ジニトロフェニル、３，５−ジニトロフェニル、２−シアノフェニル、３−シアノフェニル、４−シアノフェニル、２，３−ジシアノフェニル、２，４−ジシアノフェニル、２，５−ジシアノフェニル、２，６−ジシアノフェニル、３，４−ジシアノフェニル、３，５−ジシアノフェニル、２−チオフェニル、３−チオフェニル、４−チオフェニル、２，３−ジチオフェニル、２，４−ジチオフェニル、２，５−ジチオフェニル、２，６−ジチオフェニル、３，４−ジチオフェニル、３，５−ジチオフェニル、２−アミノフェニル、３−アミノフェニル、４−アミノフェニル、２，３−ジアミノフェニル、２，４−ジアミノフェニル、２，５−ジアミノフェニル、２，６−ジアミノフェニル、３，４−ジアミノフェニル、および３，５−ジアミノフェニル）。
【００７９】
トリフルオロメチルおよびスルホキシ置換フェニル（例えば、２−トリフルオロメチルフェニル、３−トリフルオロメチルフェニル、４−トリフルオロメチルフェニル、２，３−ジトリフルオロメチルフェニル、２，４−ジトリフルオロメチルフェニル、２，５−ジトリフルオロメチルフェニル、２，６−ジトリフルオロメチルフェニル、３，４−ジトリフルオロメチルフェニル、３，５−ジトリフルオロメチルフェニル、２−スルホキシフェニル、３−スルホキシフェニル、４−スルホキシフェニル、２，３−ジスルホキシフェニル、２，４−ジスルホキシフェニル、２，５−ジスルホキシフェニル、２，６−ジスルホキシフェニル、３，４−ジスルホキシフェニル、および３，５−ジスルホキシフェニル）。
【００８０】
本実施形態の１つの繰り返しは、式：
【００８１】
【化３５】
2011521916.tif 000043
（式中、Ｒ４は以下から選択される：
ｉ）水素、
ｉｉ）Ｃ１〜Ｃ４直鎖または分枝アルキル、または
ｉｉｉ）−［ＣＨ２］ｗＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８ａ）（Ｒ８ｂ）、
各Ｒａは以下から選択される：
ｉ）Ｃ１〜Ｃ４直鎖または分枝アルキル、
ｉｉ）Ｃ１〜Ｃ４直鎖または分枝アルコキシ、
ｉｉｉ）−ＯＨ、
ｉｖ）−Ｆ、
ｖ）−Ｃｌ、
ｖｉ）−Ｂｒ、
ｖｉｉ）−ＮＯ２、
ｖｉｉｉ）−ＮＨ２、
ｉｘ）−ＣＦ３、
ｘ）２つの隣接するＲａ単位は共に縮合環を形成することができ、ここで、Ｒは８〜１２個の原子を含み、添え字ｘは０〜５の整数であり、整数ｗは０〜２である）を有する化合物に関する。
【００８２】
本実施形態の非限定的な例には、以下：
ｉ）３−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸
【００８３】
【化３６】
2011521916.tif 000044
ｉｉ）３−（２−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸
【００８４】
【化３７】
2011521916.tif 000045
ｉｉｉ）３−（４−イソプロピルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸
【００８５】
【化３８】
2011521916.tif 000046
ｉｖ）３−（４−フルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸
【００８６】
【化３９】
2011521916.tif 000047
ｖ）３−（３−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸
【００８７】
【化４０】
2011521916.tif 000048
ｖｉ）３−（４−エチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸
【００８８】
【化４１】
2011521916.tif 000049
ｖｉｉ）３−（２，４−ジメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸
【００８９】
【化４２】
2011521916.tif 000050
ｖｉｉｉ）３−（３，４−ジメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸
【００９０】
【化４３】
2011521916.tif 000051
ｉｘ）３−（４−エトキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸
【００９１】
【化４４】
2011521916.tif 000052
ｘ）３−（２，４−ジエトキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸
【００９２】
【化４５】
2011521916.tif 000053
ｘｉ）３−（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシイン−６−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸
【００９３】
【化４６】
2011521916.tif 000054
ｘｉｉ）メチル３−（２，４−ジクロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシラート
【００９４】
【化４７】
2011521916.tif 000055
ｘｉｉｉ）メチル３−（２，４−ジメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシラート
【００９５】
【化４８】
2011521916.tif 000056
ｘｉｖ）メチル３−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシラート
【００９６】
【化４９】
2011521916.tif 000057
ｘｖ）メチル３−（４−ブトキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシラート
【００９７】
【化５０】
2011521916.tif 000058
ｘｖｉ）エチル３−（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシイン−６−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシラート
【００９８】
【化５１】
2011521916.tif 000059
および
ｘｖｉｉ）エチル３−（４−クロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシラート
【００９９】
【化５２】
2011521916.tif 000060
が含まれる。
【０１００】
表Ｂ
【表Ｂ−１】
2011521916.tif 000061
【０１０１】
【表Ｂ−２】
2011521916.tif 000062
【０１０２】
【表Ｂ−３】
2011521916.tif 000063
【０１０３】
【表Ｂ−４】
2011521916.tif 000064
【０１０４】
は、本カテゴリーによる腸アルカリホスファターゼアクチベーターおよびインヒビターの非限定的な例を示す。
【０１０５】
本カテゴリーのさらなる態様は、式：
【０１０６】
【化５３】
2011521916.tif 000065
（式中、Ｒは式−Ｃ（Ｏ）Ｒ４を有する単位であり、Ｒ１は置換または非置換のＣ１０アリール（ナフタレニル）であるか、または、Ｒ１は式−Ｃ（Ｏ）Ｒ４を有する単位であり、Ｒは置換または非置換のＣ１０アリール（ナフタレニル）である）を有する腸アルカリホスファターゼモジュレーターに関する。本態様の１つの実施形態は、式：
【０１０７】
【化５４】
2011521916.tif 000066
（式中、各Ｒａは上記定義の通りであり、添え字ｘは０〜４である）を有するモジュレーターに関する。Ｒ４は以下から選択される：
ａ）水素、
ｂ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｃ）−ＯＲ５、ここで、Ｒ５は以下から選択される：
ｉ）水素、
ｉｉ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖または分枝アルキル、ここで、アルキル鎖上の各置換は以下から独立して選択される：
ａ）ハロゲン、および
ｂ）−［Ｃ（Ｒ７ａ）（Ｒ７ｂ）］ｗＣ（Ｏ）Ｒ６、Ｒ６はヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルコキシ、または−Ｎ（Ｒ８ａ）（Ｒ８ｂ）であり、各Ｒ８ａおよびＲ８ｂは、水素またはＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、もしくは環状アルキルから独立して選択され、
ｃ）−［Ｃ（Ｒ７ａ）（Ｒ７ｂ）］ｗＮ（Ｒ９ａ）（Ｒ９ｂ）、各Ｒ９ａおよびＲ９ｂは、水素またはＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、もしくは環状アルキルから独立して選択されるか、あるいは、Ｒ９ａおよびＲ９ｂは共に３〜７個の原子を有する環を形成することができ、各Ｒ７ａおよびＲ７ｂは、独立して、水素またはＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキルであり、添え字ｗは０〜５の整数である。
【０１０８】
本態様の別の実施形態は、式：
【０１０９】
【化５５】
2011521916.tif 000067
（式中、各Ｒａは上記定義の通りであり、添え字ｘは０〜４である）を有するモジュレーターに関する。Ｒ４は以下から選択される：
ａ）水素、
ｂ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｃ）−ＯＲ５、ここで、Ｒ５は以下から選択される：
ｉ）水素、
ｉｉ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖または分枝アルキル、ここで、アルキル鎖上の各置換は以下から独立して選択される：
ａ）ハロゲン、および
ｂ）−［Ｃ（Ｒ７ａ）（Ｒ７ｂ）］ｗＣ（Ｏ）Ｒ６、Ｒ６はヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルコキシ、または−Ｎ（Ｒ８ａ）（Ｒ８ｂ）であり、各Ｒ８ａおよびＲ８ｂは、水素またはＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、もしくは環状アルキルから独立して選択され、
ｃ）−［Ｃ（Ｒ７ａ）（Ｒ７ｂ）］ｗＮ（Ｒ９ａ）（Ｒ９ｂ）、各Ｒ９ａおよびＲ９ｂは、水素またはＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、もしくは環状アルキルから独立して選択されるか、あるいは、Ｒ９ａおよびＲ９ｂは共に３〜７個の原子を有する環を形成することができ、各Ｒ７ａおよびＲ７ｂは、独立して、水素またはＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキルであり、添え字ｗは０〜５の整数である。
【０１１０】
表Ｃ
【表Ｃ】
2011521916.tif 000068
【０１１１】
は、本カテゴリーによる腸アルカリホスファターゼアクチベーターおよびインヒビターの非限定的な例を示す。
【０１１２】
本カテゴリーのさらなる態様は、式：
【０１１３】
【化５６】
2011521916.tif 000069
（式中、Ｒは式−Ｃ（Ｏ）Ｒ４を有する単位であり、Ｒ１は置換または非置換のＣ６アリール（フェニル）であるか、あるいは、Ｒ１は式−Ｃ（Ｏ）Ｒ４を有する単位であり、Ｒは置換または非置換のＣ６アリール（フェニル）であり、Ｒ２はメチルであり、Ｒ、Ｒ１、およびＲ４は上記定義の通りである）を有する腸アルカリホスファターゼモジュレーターに関する。
【０１１４】
本態様によるモジュレーターの非限定的な例には、式：
【０１１５】
【化５７】
2011521916.tif 000070
を有する４−メチル−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸が含まれる。
【０１１６】
本カテゴリーのなおさらなる態様は、式：
【０１１７】
【化５８】
2011521916.tif 000071
（式中、Ｒは式−Ｃ（Ｏ）Ｒ４を有する単位であり、Ｒ１は置換または非置換のＣ６アリール（フェニル）であるか、あるいは、Ｒ１は式−Ｃ（Ｏ）Ｒ４を有する単位であり、Ｒは置換または非置換のＣ６アリール（フェニル）であり、Ｒ３はメチルであり、Ｒ、Ｒ１、およびＲ４は上記定義の通りである）を有する腸アルカリホスファターゼモジュレーターに関する。
【０１１８】
本態様によるモジュレーターの非限定的な例には、
ｉ）３−（４−フルオロフェニル）−１−メチル１Ｈ−ピラゾール−５カルボン酸：
【０１１９】
【化５９】
2011521916.tif 000072
および
ｉｉ）５−（４−フルオロフェニル）−１−メチル１Ｈ−ピラゾール−３カルボン酸：
【０１２０】
【化６０】
2011521916.tif 000073
が含まれる。
【０１２１】
表Ｄ
【表Ｄ】
2011521916.tif 000074
【０１２２】
は、本カテゴリーによる腸アルカリホスファターゼアクチベーターおよびインヒビターの非限定的な例を示す。
【０１２３】
本カテゴリーの別の態様は、式：
【０１２４】
【化６１】
2011521916.tif 000075
（式中、Ａは、３〜１４個の炭素原子および酸素、窒素、硫黄、またはその組み合わせから選択される１〜５個のヘテロ原子を有する１つまたは複数の置換または非置換のシクロアルキル環、アリール環、複素環、またはヘテロアリール環である）を有する腸アルカリホスファターゼモジュレーターに関する。
【０１２５】
本態様の第１の実施形態は、式：
【０１２６】
【化６２】
2011521916.tif 000076
【０１２７】
【化６３】
2011521916.tif 000077
（式中、Ｗ１、Ｗ２、Ｗ３、Ｗ４、Ｘ、およびＹは、以下からそれぞれ独立して選択される：
ｉｉ）−ＣＨ＝、
ｉｉｉ）−ＣＨ２−、
ｉｖ）−Ｎ＝、
ｖ）−ＮＨ−、
ｖｉ）−Ｓ−、および
ｖｉｉ）−Ｏ−、
ここで、Ｗ１、Ｗ２、Ｗ３、Ｗ４、Ｘ、およびＹの水素原子はＲｃ単位と置換することができ、ＺはＯ、Ｓ、またはＮＨである）を有する縮合環に関する。
【０１２８】
各Ｒｂは１〜５個の任意選択的に存在する環上の水素原子の置換を示し、そのようなものとして、添え字ｙは０〜５の整数である。各Ｒａは以下から独立して選択される：
ｉ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｉｉ）Ｃ２〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルケニル、
ｉｉｉ）Ｃ２〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖または分枝アルキニル、
ｉｖ）Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、
ｖ）Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、
ｖｉ）Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリール、
ｖｉｉ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＯＲ２５、Ｒ２５は以下から選択される：
ａ）−Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｃ）Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリールまたはアルキレンアリール、
ｄ）Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、
ｅ）Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリール、
ｖｉｉｉ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＮ（Ｒ２６ａ）（Ｒ２６ｂ）、Ｒ２６ａおよびＲ２６ｂは以下からそれぞれ独立して選択される：
ａ）−Ｈ、
ｂ）−ＯＲ２７、Ｒ２７は水素またはＣ１〜Ｃ４直鎖アルキルであり、
ｃ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｄ）Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、
ｅ）Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、
ｆ）Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリール、または
ｇ）Ｒ２６ａおよびＲ２６ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
ｉｘ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＣ（Ｏ）Ｒ２８、Ｒ２８は以下である：
ａ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｂ）−ＯＲ２９、Ｒ２９は、水素、置換または非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであり、
ｃ）−Ｎ（Ｒ３０ａ）（Ｒ３０ｂ）、Ｒ３０ａおよびＲ３０ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであるか、あるいは、Ｒ３０ａおよびＲ３０ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
ｘ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＯＣ（Ｏ）Ｒ３１、Ｒ３１は以下である：
ａ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｂ）−Ｎ（Ｒ３２ａ）（Ｒ３２ｂ）、Ｒ３２ａおよびＲ３２ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであるか、あるいは、Ｒ３２ａおよびＲ３２ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
ｘｉ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＮＲ３３Ｃ（Ｏ）Ｒ３４、Ｒ３３は以下である：
ａ）−Ｈ、または
ｂ）Ｃ１〜Ｃ４置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
Ｒ３４は以下である：
ａ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｂ）−Ｎ（Ｒ３５ａ）（Ｒ３５ｂ）、Ｒ３５ａおよびＲ３５ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであるか、Ｒ３５ａおよびＲ３５ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
ｘｉｉ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＣＮ、
ｘｉｉｉ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＮＯ２、
ｘｉｖ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＲ３６、Ｒ３６は、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、または−Ｉから選択される１〜２１個のハロゲン原子に置換されたＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、または環状アルキルであり、
ｘｖ）−［Ｃ（Ｒ３９ａ）（Ｒ３９ｂ）］ｍＳＯ２Ｒ３７、Ｒ３７は、水素、ヒドロキシル、置換もしくは非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキル、置換もしくは非置換のＣ６、Ｃ１０、もしくはＣ１４アリール、Ｃ７〜Ｃ１５アルキレンアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換もしくは非置換の複素環、またはＣ１〜Ｃ１１置換もしくは非置換のヘテロアリールであり、
ｉｉｉ）同一炭素原子上の２個のＲｂ単位は共に＝Ｏ、＝Ｓ、または＝ＮＲ３８から選択される単位を形成することができ、Ｒ３８は、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキル、またはＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルコキシであり、Ｒ３９ａおよびＲ３９ｂは、それぞれ独立して、水素またはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、添え字ｙは０〜５の整数である。
【０１２９】
各Ｒｃは１〜５個の任意選択的に存在する環上の水素原子の置換を示し、そのようなものとして、添え字ｐは０〜５の整数である。各Ｒｃは、以下から独立して選択される：
ｉ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｉｉ）Ｃ２〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルケニル、
ｉｉｉ）Ｃ２〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖または分枝アルキニル、
ｉｖ）Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、
ｖ）Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、
ｖｉ）Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリール、
ｖｉｉ）−［Ｃ（Ｒ５４ａ）（Ｒ５４ｂ）］ｑＯＲ４０、Ｒ４０は以下から選択される：
ａ）−Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｃ）Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリールまたはアルキレンアリール、
ｄ）Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、
ｅ）Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリール、
ｖｉｉｉ）−［Ｃ（Ｒ５４ａ）（Ｒ５４ｂ）］ｑＮ（Ｒ４１ａ）（Ｒ４１ｂ）、Ｒ４１ａおよびＲ４１ｂは以下からそれぞれ独立して選択される：
ａ）−Ｈ、
ｂ）−ＯＲ４２、Ｒ４２は水素またはＣ１〜Ｃ４直鎖アルキルであり、
ｃ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｄ）Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、
ｅ）Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、
ｆ）Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリール、または
ｇ）Ｒ４１ａおよびＲ４１ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
ｉｘ）−［Ｃ（Ｒ５４ａ）（Ｒ５４ｂ）］ｑＣ（Ｏ）Ｒ４３、Ｒ４３は以下である：
ａ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｂ）−ＯＲ４４、Ｒ４４は、水素、置換または非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであり、
ｃ）−Ｎ（Ｒ４５ａ）（Ｒ４５ｂ）、Ｒ４５ａおよびＲ４５ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであるか、あるいは、Ｒ４５ａおよびＲ４５ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
ｘ）−［Ｃ（Ｒ５４ａ）（Ｒ５４ｂ）］ｑＯＣ（Ｏ）Ｒ４６、Ｒ４６は以下である：
ａ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｂ）−Ｎ（Ｒ４７ａ）（Ｒ４７ｂ）、Ｒ４７ａおよびＲ４７ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであるか、あるいは、Ｒ４７ａおよびＲ４７ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
ｘｉ）−［Ｃ（Ｒ５４ａ）（Ｒ５４ｂ）］ｑＮＲ４８Ｃ（Ｏ）Ｒ４９、Ｒ４８は以下である：
ａ）−Ｈ、または
ｂ）Ｃ１〜Ｃ４置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
Ｒ４９は以下である：
ａ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｂ）−Ｎ（Ｒ５０ａ）（Ｒ５０ｂ）、Ｒ５０ａおよびＲ５０ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであるか、Ｒ５０ａおよびＲ５０ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
ｘｉｉ）−［Ｃ（Ｒ５４ａ）（Ｒ５４ｂ）］ｑＣＮ、
ｘｉｉｉ）−［Ｃ（Ｒ５４ａ）（Ｒ５４ｂ）］ｑＮＯ２、
ｘｉｖ）−［Ｃ（Ｒ５４ａ）（Ｒ５４ｂ）］ｑＲ５１、
Ｒ５１は、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、または−Ｉから選択される１〜２１個のハロゲン原子に置換されたＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、または環状アルキルであり、
ｘｖ）−［Ｃ（Ｒ５４ａ）（Ｒ５４ｂ）］ｑＳＯ２Ｒ５２、Ｒ５２は、水素、ヒドロキシル、置換もしくは非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキル、置換もしくは非置換のＣ６、Ｃ１０、もしくはＣ１４アリール、Ｃ７〜Ｃ１５アルキレンアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換もしくは非置換の複素環、またはＣ１〜Ｃ１１置換もしくは非置換のヘテロアリールであり、
ｉｖ）同一炭素原子上の２個のＲｃ炭素は共に＝Ｏ、＝Ｓ、または＝ＮＲ５３から選択される単位を形成することができ、Ｒ５３は、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキル、またはＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルコキシであり、Ｒ５４ａおよびＲ５４ｂは、それぞれ独立して、水素またはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、添え字ｐは０〜５の整数である。
【０１３０】
本明細書中に開示のＲｂ単位およびＲｃ単位を、以下から独立して選択される１つまたは複数の有機ラジカルとさらに置換することができる：
ｉ）Ｃ１〜Ｃ１２直鎖、分枝、または環状アルキル、アルケニル、およびアルキニル、
ｉｉ）置換または非置換のＣ６またはＣ１０アリール、
ｉｉｉ）置換または非置換のＣ６またはＣ１０アルキレンアリール、
ｉｖ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ９複素環、
ｖ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ９ヘテロアリール環、
ｖｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＯＲ１０１、
ｖｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＣ（Ｏ）Ｒ１０１、
ｖｉｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＣ（Ｏ）ＯＲ１０１、
ｉｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０１）２、
ｉｘ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＮ（Ｒ１０１）２、
ｘｉ）ハロゲン、
ｘｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＣＮ、
ｘｉｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＮＯ２、
ｘｉｖ）−ＣＨｊＸｋ、ここで、Ｘはハロゲンであり、添え字ｊは０〜２の整数であり、ｊ＋ｋ＝３、
ｘｖ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＳＲ１０１、
ｘｖｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＳＯ２Ｒ１０１、および
ｘｖｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＳＯ３Ｒ１０１、
（式中、各Ｒ１０１は、独立して、水素、置換または非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖、分枝、または環状アルキル、フェニル、ベンジル、複素環、またはヘテロアリールであるか、あるいは、２個のＲ１０１単位は共に３〜７個の原子を含む環を形成することができ、Ｒ１０２ａおよびＲ１０２ｂはそれぞれ独立して水素またはＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキルであり、添え字ｚは０〜４である）。
【０１３１】
本態様の非限定的な例は、以下の式
ｉ）２，４−ジヒドロクロメノ［３，４−ｃ］ピラゾール−３−カルボン酸
【０１３２】
【化６４】
2011521916.tif 000078
ｉｉ）（２，４−ジヒドロクロメノ［３，４−ｃ］ピラゾール−３−イル）（ピロリジン−１−イル）メタノン
【０１３３】
【化６５】
2011521916.tif 000079
ｉｉｉ）エチル２，４−ジヒドロクロメノ［３，４−ｃ］ピラゾール−３−カルボキシラート
【０１３４】
【化６６】
2011521916.tif 000080
ｉｖ）３−（４−メトキシフェニル）−４−メチルピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６（１Ｈ）−オン
【０１３５】
【化６７】
2011521916.tif 000081
ｖ）３−（４−メトキシフェニル）−４−メチルピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６−オール
【０１３６】
【化６８】
2011521916.tif 000082
ｖｉ）４−メチル−３−フェニルピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６−オール
【０１３７】
【化６９】
2011521916.tif 000083
および
ｖｉｉ）４−（２−ヒドロキシエチル）−３−フェニルピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６（１Ｈ）−オン
【０１３８】
【化７０】
2011521916.tif 000084
を有するモジュレーターである。
【０１３９】
表Ｅ
【表Ｅ−１】
2011521916.tif 000085
【０１４０】
【表Ｅ−２】
2011521916.tif 000086
【０１４１】
は、本カテゴリーによる腸アルカリホスファターゼアクチベーターおよびインヒビターの非限定的な例を示す。
【０１４２】
腸アドレナリンホスファターゼモジュレーターの別のカテゴリーは、以下の式：
【０１４３】
【化７１】
2011521916.tif 000087
（式中、Ｒ６０は以下から選択される：
ｉ）水素、
ｉｉ）置換または非置換のＣ６またはＣ１０アリール、
ｉｉｉ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ９ヘテロアリール、または
ｉｖ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ９複素環、
Ｒ６１およびＲ６２は共に以下から選択される環を形成する：
ｉ）飽和または不飽和のシクロアルキル、
ｉｉ）飽和または不飽和のビシクロアルキル、または
ｉｉｉ）アリール、
Ｌは１〜５個の炭素原子を有する結合単位であり、添え字ｋは０または１である）を有する。
【０１４４】
１つの実施形態中のＲ６０は水素である。Ｒ６０の本実施形態による開示のモジュレーターは以下の式：
【０１４５】
【化７２】
2011521916.tif 000088
を有する。
【０１４６】
別の実施形態では、Ｒ６０は置換または非置換のフェニル（Ｃ６アリール）、置換または非置換のナフタレン−１−イル（Ｃ１０アリール）、あるいは置換または非置換のナフタレン−２−イル（Ｃ１０アリール）である。Ｒ６０の本実施形態による開示のモジュレーターは以下の式：
【０１４７】
【化７３】
2011521916.tif 000089
を有する。
【０１４８】
さらなる実施形態では、Ｒ６０は置換または非置換のＣ１〜Ｃ９ヘテロアリール、あるいは置換または非置換のＣ１〜Ｃ９複素環である。Ｒ６０の本実施形態による開示のモジュレーターは以下の式：
【０１４９】
【化７４】
2011521916.tif 000090
（式中、Ａは置換または非置換のＣ１〜Ｃ９ヘテロアリール環、あるいは置換または非置換のＣ１〜Ｃ９複素環である）を有する。
【０１５０】
各Ｒｄは１〜５個の任意選択的に存在する環上の水素原子の置換を示し、そのようなものとして、添え字ｊは０〜５の整数である。各Ｒｄは以下から独立して選択される：
ｉ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｉｉ）Ｃ２〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルケニル、
ｉｉｉ）Ｃ２〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖または分枝アルキニル、
ｉｖ）Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、
ｖ）Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、
ｖｉ）Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリール、
ｖｉｉ）−［Ｃ（Ｒ６９ａ）（Ｒ６９ｂ）］ｕＯＲ５５、Ｒ５５は以下から選択される：
ａ）−Ｈ、
ｂ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｃ）Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリールまたはアルキレンアリール、
ｄ）Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、
ｅ）Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリール、
ｖｉｉｉ）−［Ｃ（Ｒ６９ａ）（Ｒ６９ｂ）］ｕＮ（Ｒ５６ａ）（Ｒ５６ｂ）、Ｒ５６ａおよびＲ５６ｂは以下からそれぞれ独立して選択される：
ａ）−Ｈ、
ｂ）−ＯＲ５７、Ｒ５７は水素またはＣ１〜Ｃ４直鎖アルキルであり、
ｃ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｄ）Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、
ｅ）Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、
ｆ）Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリール、または
ｇ）Ｒ５６ａおよびＲ５６ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
ｉｘ）−［Ｃ（Ｒ６９ａ）（Ｒ６９ｂ）］ｕＣ（Ｏ）Ｒ５８、Ｒ５８は以下である：
ａ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｂ）−ＯＲ５９、Ｒ５９は、水素、置換または非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであり、
ｃ）−Ｎ（Ｒ６０ａ）（Ｒ６０ｂ）、Ｒ６０ａおよびＲ６０ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであるか、Ｒ６０ａおよびＲ６０ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
ｘ）−［Ｃ（Ｒ６９ａ）（Ｒ６９ｂ）］ｕＯＣ（Ｏ）Ｒ６１、Ｒ６１は以下である：
ａ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｂ）−Ｎ（Ｒ６２ａ）（Ｒ６２ｂ）、Ｒ６２ａおよびＲ６２ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであるか、Ｒ６２ａおよびＲ６２ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
ｘｉ）−［Ｃ（Ｒ６９ａ）（Ｒ６９ｂ）］ｕＮＲ６３Ｃ（Ｏ）Ｒ６４、Ｒ６３は以下である：
ａ）−Ｈ、または
ｂ）Ｃ１〜Ｃ４置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
Ｒ６４は以下である：
ａ）Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｂ）−Ｎ（Ｒ６５ａ）（Ｒ６５ｂ）、Ｒ６５ａおよびＲ６５ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２置換または非置換の直鎖、分枝、または環状アルキル、Ｃ６またはＣ１０置換または非置換のアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換または非置換の複素環、Ｃ１〜Ｃ１１置換または非置換のヘテロアリールであるか、Ｒ６５ａおよびＲ６５ｂは共に３〜１０個の炭素原子および酸素、窒素、および硫黄から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する置換または非置換の環を形成することができ、
ｘｉｉ）−［Ｃ（Ｒ６９ａ）（Ｒ６９ｂ）］ｕＣＮ、
ｘｉｉｉ）−［Ｃ（Ｒ６９ａ）（Ｒ６９ｂ）］ｕＮＯ２、
ｘｉｖ）−［Ｃ（Ｒ６９ａ）（Ｒ６９ｂ）］ｕＲ６６、Ｒ６６は、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、または−Ｉから選択される１〜２１個のハロゲン原子に置換されたＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、または環状アルキルであり、
ｘｖ）−［Ｃ（Ｒ６９ａ）（Ｒ６９ｂ）］ｕＳＯ２Ｒ６７、Ｒ６７は、水素、ヒドロキシル、置換もしくは非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキル、置換もしくは非置換のＣ６、Ｃ１０、もしくはＣ１４アリール、Ｃ７〜Ｃ１５アルキレンアリール、Ｃ１〜Ｃ９置換もしくは非置換の複素環、またはＣ１〜Ｃ１１置換もしくは非置換のヘテロアリールであり、
ｖ）同一炭素原子上の２個のＲｄ単位は共に＝Ｏ、＝Ｓ、または＝ＮＲ６８から選択される単位を形成することができ、Ｒ６８は、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキル、またはＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルコキシであり、
Ｒ６９ａおよびＲ６９ｂは、それぞれ独立して、水素またはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、
添え字ｊは０〜５の整数である。
【０１５１】
本明細書中に開示のＲｄ単位を、以下から独立して選択される１つまたは複数の有機ラジカルとさらに置換することができる：
ｉ）Ｃ１〜Ｃ１２直鎖、分枝、または環状アルキル、アルケニル、およびアルキニル、
ｉｉ）置換または非置換のＣ６またはＣ１０アリール、
ｉｉｉ）置換または非置換のＣ６またはＣ１０アルキレンアリール、
ｉｖ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ９複素環、
ｖ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ９ヘテロアリール環、
ｖｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＯＲ１０１、
ｖｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＣ（Ｏ）Ｒ１０１、
ｖｉｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＣ（Ｏ）ＯＲ１０１、
ｉｖ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０１）２、
ｉｘ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＮ（Ｒ１０１）２、
ｘｉ）ハロゲン、
ｘｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＣＮ、
ｘｉｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＮＯ２、
ｘｉｖ）−ＣＨｊＸｋ、ここで、Ｘはハロゲンであり、添え字ｊは０〜２の整数であり、ｊ＋ｋ＝３、
ｘｖ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＳＲ１０１、
ｘｖｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＳＯ２Ｒ１０１、および
ｘｖｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＳＯ３Ｒ１０１、
（式中、各Ｒ１０１は、独立して、水素、置換または非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖、分枝、または環状アルキル、フェニル、ベンジル、複素環、またはヘテロアリールであるか、あるいは、２個のＲ１０１単位は共に３〜７個の原子を含む環を形成することができ、Ｒ１０２ａおよびＲ１０２ｂはそれぞれ独立して水素またはＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキルであり、添え字ｚは０〜４である）。
【０１５２】
Ｒ６０の本実施形態の１つの繰り返しは、置換または非置換のＣ１、Ｃ２、Ｃ３、またはＣ４ヘテロアリールまたは複素環式の５員環であるＲ６０単位に関する。Ｒ６０単位の非限定的な例は以下：
ｉ）以下の式を有するピロリジニル環：
【０１５３】
【化７５】
2011521916.tif 000091
ｉｉ）以下の式を有するピロリル環：
【０１５４】
【化７６】
2011521916.tif 000092
ｉｉｉ）以下の式を有する４，５−ジヒドロイミダゾリル環：
【０１５５】
【化７７】
2011521916.tif 000093
ｉｖ）以下の式を有するピラゾリル環：
【０１５６】
【化７８】
2011521916.tif 000094
ｖ）以下の式を有するイミダゾリル環：
【０１５７】
【化７９】
2011521916.tif 000095
ｖｉ）以下の式を有する［１，２，３］トリアゾリル環：
【０１５８】
【化８０】
2011521916.tif 000096
ｖｉｉ）以下の式を有する［１，２，４］トリアゾリル環：
【０１５９】
【化８１】
2011521916.tif 000097
ｖｉｉｉ）以下の式を有するテトラゾリル環：
【０１６０】
【化８２】
2011521916.tif 000098
ｉｘ）以下の式を有する［１，３，４］または［１，２，４］オキサジアゾリル環：
【０１６１】
【化８３】
2011521916.tif 000099
ｘ）以下の式を有するピロリジノニル環：
【０１６２】
【化８４】
2011521916.tif 000100
ｘｉ）以下の式を有するイミダゾリジノニル環：
【０１６３】
【化８５】
2011521916.tif 000101
ｘｉｉ）以下の式を有するイミダゾール−２−オニル環：
【０１６４】
【化８６】
2011521916.tif 000102
ｘｉｉｉ）以下の式を有するオキサゾリル環：
【０１６５】
【化８７】
2011521916.tif 000103
ｘｉｖ）以下の式を有するイソオキサゾリル環：
【０１６６】
【化８８】
2011521916.tif 000104
ｘｖ）以下の式を有するジヒドロチアゾリル環：
【０１６７】
【化８９】
2011521916.tif 000105
ｘｖｉ）以下の式を有するフラニル（ｆｕｒａｎｌｙ）環：
【０１６８】
【化９０】
2011521916.tif 000106
または
ｘｖｉｉ）以下の式を有するチオフェニル：
【０１６９】
【化９１】
2011521916.tif 000107
である。
【０１７０】
本繰り返しの非限定的な例には、式：
【０１７１】
【化９２】
2011521916.tif 000108
を有する化合物が含まれる。
【０１７２】
Ｒ６０の本実施形態の別の繰り返しは、置換または非置換のＣ３、Ｃ４、またはＣ５複素環またはヘテロアリール６員環であるＲ６０単位に関する。Ｒ６０単位の非限定的な例は以下：
ｉ）以下の式を有するモルホリニル環：
【０１７３】
【化９３】
2011521916.tif 000109
ｉｉ）以下の式を有するピペリジニル環：
【０１７４】
【化９４】
2011521916.tif 000110
ｉｉｉ）以下の式を有するピリジニル環：
【０１７５】
【化９５】
2011521916.tif 000111
ｉｖ）以下の式を有するピリミジニル環：
【０１７６】
【化９６】
2011521916.tif 000112
ｖ）以下の式を有するピペラジニル環：
【０１７７】
【化９７】
2011521916.tif 000113
および
ｖｉ）以下の式を有するトリアジニル環：
【０１７８】
【化９８】
2011521916.tif 000114
である。
【０１７９】
本繰り返しの非限定的な例には、式：
【０１８０】
【化９９】
2011521916.tif 000115
を有する化合物が含まれる。
【０１８１】
Ｒ６０の本実施形態の別の繰り返しは、置換または非置換のＣ７、Ｃ８、またはＣ９複素環またはヘテロアリール縮合環であるＲ６０単位に関する。Ｒ６０単位の非限定的な例は以下：
ｉ）以下の式を有するベンゾイミダゾリル環：
【０１８２】
【化１００】
2011521916.tif 000116
ｉｉ）以下の式を有するベンゾチアゾリル環：
【０１８３】
【化１０１】
2011521916.tif 000117
ｉｉｉ）以下の式を有するベンゾオキサゾリル環：
【０１８４】
【化１０２】
2011521916.tif 000118
ｉｖ）以下の式を有するキナゾリニル環：
【０１８５】
【化１０３】
2011521916.tif 000119
ｖ）以下の式を有する２，３−ジヒドロベンゾ［１，４］ジオキシニル環：
【０１８６】
【化１０４】
2011521916.tif 000120
および
ｖｉ）以下の式を有するテトラヒドロキノリニル環：
【０１８７】
【化１０５】
2011521916.tif 000121
である。
【０１８８】
本繰り返しの非限定的な例には、式：
【０１８９】
【化１０６】
2011521916.tif 000122
を有する化合物が含まれる。
【０１９０】
Ｒ６１およびＲ６２は共に以下から選択される環を形成する：
ｉｉ）４〜８個の炭素原子を有する飽和または不飽和のシクロアルキル、
ｉｉｉ）６〜８個の炭素原子を有する飽和または不飽和のビシクロアルキル、または
ｉｖ）Ｃ６またはＣ１０アリール。
【０１９１】
１つの実施形態では、Ｒ６１およびＲ６２は共に飽和シクロアルキル環を形成する。Ｒ６１およびＲ６２の本実施形態による開示のモジュレーターは以下の式：
【０１９２】
【化１０７】
2011521916.tif 000123
を有する。
【０１９３】
別の実施形態では、Ｒ６１およびＲ６２は共に不飽和シクロアルキル環を形成する。Ｒ６１およびＲ６２の本実施形態による開示のモジュレーターの非限定的な例は以下の式：
【０１９４】
【化１０８】
2011521916.tif 000124
【０１９５】
【化１０９】
2011521916.tif 000125
を有する。
【０１９６】
さらなる実施形態では、Ｒ６１およびＲ６２は共に飽和シクロアルキル環を形成する。Ｒ６１およびＲ６２の本実施形態による開示のモジュレーターは以下の式：
【０１９７】
【化１１０】
2011521916.tif 000126
を有する。
【０１９８】
Ｌが存在する場合、Ｌは１〜５個の炭素原子を有する結合単位である。Ｌが存在する場合、添え字ｋは１である。Ｌが存在しない場合、添え字ｋは０である。
【０１９９】
Ｌ単位の１つの実施形態は、以下：
ｉ）−ＣＨ２−、
ｉｉ）−ＣＨ２ＣＨ２−、
ｉｉｉ）−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、
ｉｖ）−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、
ｖ）−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２−、または
ｖｉ）−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２−
から選択される直鎖および分枝のアルキレン単位に関する。
【０２００】
本実施形態の１つの繰り返しは、メチレン（−ＣＨ２−）単位であるＬ単位に関し、それにより、式：
【０２０１】
【化１１１】
2011521916.tif 000127
を有する腸アルカリホスファターゼモジュレーターを提供する。
【０２０２】
本実施形態の別の繰り返しは、エチレン（−ＣＨ２ＣＨ２−）単位であるＬ単位に関し、それにより、式：
【０２０３】
【化１１２】
2011521916.tif 000128
を有する腸アルカリホスファターゼモジュレーターを提供する。
【０２０４】
Ｌ単位の別の実施形態は、以下：
ｉ）−ＣＨ＝ＣＨ−、
ｉｉ）−ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ−、
ｉｉｉ）−ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−
ｉｖ）−ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ２−、
ｖ）−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ−、または
ｖｉ）−ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−
から選択される直鎖および分枝のアルケニレン単位に関する。
【０２０５】
本実施形態の１つの繰り返しは、エチレン（−ＣＨ２ＣＨ２−）単位であるＬ単位に関し、それにより、式：
【０２０６】
【化１１３】
2011521916.tif 000129
を有する腸アルカリホスファターゼモジュレーターを提供する。
【０２０７】
結合単位Ｌが存在しない場合、アルカリホスファターゼモジュレーターは式：
【０２０８】
【化１１４】
2011521916.tif 000130
を有する。
【０２０９】
腸アドレナリンホスファターゼモジュレーターのこのカテゴリーの１つの態様は、飽和環を有する化合物（例えば、式：
【０２１０】
【化１１５】
2011521916.tif 000131
を有するイソインドリン−１，３−ジオニル化合物）に関する。
【０２１１】
本態様による化合物の非限定的な例には、以下：
ｉ）２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）−ヘキサヒドロ−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン
【０２１２】
【化１１６】
2011521916.tif 000132
ｉ）２−（３−ベンジル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）−ヘキサヒドロ−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン
【０２１３】
【化１１７】
2011521916.tif 000133
および
ｉｉ）２−（３−フェネチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）−ヘキサヒドロ−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン
【０２１４】
【化１１８】
2011521916.tif 000134
が含まれる。
【０２１５】
腸アドレナリンホスファターゼモジュレーターの本カテゴリーの別の態様は、不飽和環を有する化合物（例えば、式：
【０２１６】
【化１１９】
2011521916.tif 000135
を有するイソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオニル化合物）に関する。
【０２１７】
ｉ）２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）−３ａ，４，７，７ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン
【０２１８】
【化１２０】
2011521916.tif 000136
ｉｉ）２−（３−フェニル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）−３ａ，４，７，７ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン
【０２１９】
【化１２１】
2011521916.tif 000137
ｉｉｉ）２−［３−（フラン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−３ａ，４，７，７ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン
【０２２０】
【化１２２】
2011521916.tif 000138
ｉｖ）２−［３−（ピリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）−３ａ，４，７，７ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン
【０２２１】
【化１２３】
2011521916.tif 000139
ｖ）２−（３−ベンジル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）−３ａ，４，７，７ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン
【０２２２】
【化１２４】
2011521916.tif 000140
および
ｖｉ）２−（３−フェネチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）−３ａ，４，７，７ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン
【０２２３】
【化１２５】
2011521916.tif 000141
。
【０２２４】
さらに、本カテゴリーの化合物は、二環式の環を含むことができる（例えば、式：
【０２２５】
【化１２６】
2011521916.tif 000142
を有する化合物）。
【０２２６】
腸アドレナリンホスファターゼモジュレーターの本カテゴリーのさらなる態様は、不飽和環を有する化合物（例えば、式：
【０２２７】
【化１２７】
2011521916.tif 000143
を有するイソインドリン−１，３−ジオニル化合物）に関する。
【０２２８】
本態様の非限定的な例には、式：
【０２２９】
【化１２８】
2011521916.tif 000144
を有する２−（３−ベンジル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）イソインドリン−１，３−ジオンが含まれる。
【０２３０】
本カテゴリーによる化合物のさらなる例には、Ｎ−アリール置換１Ｈ−１，２，４−トリアゾール（例えば、式：
【０２３１】
【化１２９】
2011521916.tif 000145
を有する２−（５−アミノ−１−フェニル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−３ａ，４，７，７ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン）が含まれる。
【０２３２】
表Ｆ
【表Ｆ−１】
2011521916.tif 000146
【０２３３】
【表Ｆ−２】
2011521916.tif 000147
【０２３４】
【表Ｆ−３】
2011521916.tif 000148
【０２３５】
は、本カテゴリーによる腸アルカリホスファターゼアクチベーターおよびインヒビターの非限定的な例を示す。
【０２３６】
腸アルカリホスファターゼモジュレーターのさらなるカテゴリーは、式：
【０２３７】
【化１３０】
2011521916.tif 000149
（式中、ＢおよびＣは以下から独立して選択される環である：
ｉ）Ｃ６またはＣ１０アリール、または
ｉｉ）Ｃ１〜Ｃ９ヘテロアリール、
ＲｅおよびＲｆは、それぞれＢ環およびＣ環上の水素の１〜９個の置換を示し、各ＲｅおよびＲｆは以下から独立して選択される：
ｉ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、または環状アルキル、
ｉｉ）置換または非置換のＣ２〜Ｃ１０直鎖、分枝、または環状アルケニル、
ｉｉｉ）置換または非置換のＣ２〜Ｃ１０直鎖または分枝アルキニル、
ｉｖ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ１０直鎖、分枝、または環状アルコキシ、
ｖ）置換または非置換のＣ２〜Ｃ１０直鎖、分枝、または環状アルケノキシ、
ｖｉ）置換または非置換のＣ２〜Ｃ１０直鎖または分枝アルキノキシ、
ｖｉｉ）ハロゲン、または
ｖｉｉｉ）ヒドロキシ、
添え字ｓは０〜９の整数であり、添え字ｔは０〜９の整数である）を有するモジュレーターに関する。添え字ｓまたはｔは０であり、対応する環上の水素の置換は存在しない。
【０２３８】
Ｂ環およびＣ環の１つの態様は、Ｃ１〜Ｃ９ヘテロアリール環に関する。本態様の第１の実施形態は、以下
【０２３９】
【化１３１】
2011521916.tif 000150
【０２４０】
【化１３２】
2011521916.tif 000151
から選択される式を有する置換または非置換のＣ１、Ｃ２、Ｃ３、またはＣ４ヘテロアリール５員環に関する。
【０２４１】
さらなる実施形態は、以下
【０２４２】
【化１３３】
2011521916.tif 000152
【０２４３】
【化１３４】
2011521916.tif 000153
から選択される式を有するＣ３、Ｃ４、またはＣ５ヘテロアリール６員環に関する。
【０２４４】
Ｂ環の第１の態様は、Ｂが置換または非置換のＣ６アリール（フェニル）またはＣ１０アリール（ナフタレン−１−イルまたはナフタレン−２−イル）である化合物に関する。本態様の１つの実施形態は、非置換Ｃ６（フェニル）であるＢ環に関し、それにより、式：
【０２４５】
【化１３５】
2011521916.tif 000154
を有する化合物を提供する。
【０２４６】
以下
ｉ）置換または非置換のＮ−（フェニル）ベンゼンスルホンアミド：
【０２４７】
【化１３６】
2011521916.tif 000155
ｉｉ）置換または非置換のＮ−（ピリジン−３−イル）ベンゼンスルホンアミド：
【０２４８】
【化１３７】
2011521916.tif 000156
ｉｉｉ）置換または非置換のＮ−（ピラジン−２−イル）ベンゼンスルホンアミド：
【０２４９】
【化１３８】
2011521916.tif 000157
および
ｉｖ）置換または非置換のＮ−（キノリン−３−イル）ベンゼンスルホンアミド：
【０２５０】
【化１３９】
2011521916.tif 000158
は、本実施形態による化合物の非限定的な繰り返しである。
【０２５１】
以下
【０２５２】
【化１４０】
2011521916.tif 000159
は、本態様による化合物の非限定的な例である。
【０２５３】
本態様の別の実施形態は、置換または非置換のフェニルであるＢ環に関する。Ｂフェニル環上の置換の非限定的な例には、以下が含まれる：
ｉ）Ｃ１〜Ｃ６直鎖、分枝、または環状アルキル、アルケニル、およびアルキニル（例えば、メチル（Ｃ１）、エチル（Ｃ２）、エテニル（Ｃ２）、エチニル（Ｃ２）、ｎ−プロピル（Ｃ３）、イソ−プロピル（Ｃ３）、シクロプロピル（Ｃ３）、３−プロペニル（Ｃ３）、１−プロペニル（２−メチルエテニルも）（Ｃ３）、イソプロペニル（２−メチルエテン−２−イルも）（Ｃ３）、プロプ−２−イニル（プロパルギルも）（Ｃ３）、プロピン−１−イル（Ｃ３）、ｎ−ブチル（Ｃ４）、ｓｅｃ−ブチル（Ｃ４）、イソ−ブチル（Ｃ４）、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｃ４）、シクロブチル（Ｃ４）、ブテン−４−イル（Ｃ４）、シクロペンチル（Ｃ５）、およびシクロヘキシル（Ｃ６））、
ｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＯＲ１０１（例えば、−ＯＨ、−ＣＨ２ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＣＨ２ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、および−ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、および
ｉｉｉ）ハロゲン（−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、および−Ｉ）、
（式中、各Ｒ１０１は、独立して、水素、置換または非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖、分枝、または環状アルキル、フェニル、ベンジル、複素環、またはヘテロアリールであるか、あるいは、２個のＲ１０１単位は共に３〜７個の原子を含む環を形成することができ、Ｒ１０２ａおよびＲ１０２ｂはそれぞれ独立して水素またはＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキルであり、添え字ｚは０〜４である）。
【０２５４】
以下：
ｉ）置換または非置換のＮ−（フェニル）（置換）ベンゼンスルホンアミド：
【０２５５】
【化１４１】
2011521916.tif 000160
ｉｉ）置換または非置換のＮ−（ピリジン−３−イル）（置換）ベンゼンスルホンアミド：
【０２５６】
【化１４２】
2011521916.tif 000161
ｉｉｉ）置換または非置換のＮ−（ピラジン−２−イル）（置換）ベンゼンスルホンアミド：
【０２５７】
【化１４３】
2011521916.tif 000162
および
ｉｖ）置換または非置換のＮ−（キノリン−３−イル）（置換）ベンゼンスルホンアミド：
【０２５８】
【化１４４】
2011521916.tif 000163
は、本実施形態による化合物の非限定的な繰り返しである。
【０２５９】
本実施形態による化合物の非限定的な例には、以下：
ｉ）５−ブロモ−２−メトキシ−Ｎ−（ピリジン−３−イル）ベンゼンスルホンアミド：
【０２６０】
【化１４５】
2011521916.tif 000164
ｉｉ）５−ブロモ−２−メトキシ−Ｎ−（キノリン−３−イル）ベンゼンスルホンアミド：
【０２６１】
【化１４６】
2011521916.tif 000165
ｉｉｉ）５−ブロモ−２−メトキシ−Ｎ−（キノキサリン−２−イル）ベンゼンスルホンアミド：
【０２６２】
【化１４７】
2011521916.tif 000166
ｉｖ）２，５−ジメトキシ−Ｎ−（ピラジン−２−イル）ベンゼンスルホンアミド：
【０２６３】
【化１４８】
2011521916.tif 000167
ｖ）２，５−ジメトキシ−Ｎ−（キノリン−３−イル）ベンゼンスルホンアミド：
【０２６４】
【化１４９】
2011521916.tif 000168
ｖｉ）２，５−ジメトキシ−Ｎ−（キノキサリン−２−イル）ベンゼンスルホンアミド：
【０２６５】
【化１５０】
2011521916.tif 000169
ｖｉｉ）５−クロロ−２−エトキシ−Ｎ−（キノキサリン−２−イル）ベンゼンスルホンアミド：
【０２６６】
【化１５１】
2011521916.tif 000170
ｖｉｉｉ）５−クロロ−２−エトキシ−Ｎ−（ピリジン−３−イル）ベンゼンスルホンアミド：
【０２６７】
【化１５２】
2011521916.tif 000171
ｉｘ）５−クロロ−２−エトキシ−Ｎ−（キノキサリン−２−イル）ベンゼンスルホンアミド：
【０２６８】
【化１５３】
2011521916.tif 000172
ｘ）２−メチル−Ｎ−（ピリジン−３−イル）ベンゼンスルホンアミド：
【０２６９】
【化１５４】
2011521916.tif 000173
ｘｉ）２−メチル−Ｎ−（キノリン−３−イル）ベンゼンスルホンアミド：
【０２７０】
【化１５５】
2011521916.tif 000174
ｘｉｉ）２−メチル−Ｎ−（キノキサリン−３−イル）ベンゼンスルホンアミド：
【０２７１】
【化１５６】
2011521916.tif 000175
ｘｉｉｉ）２−メトキシ−４−メチル−５−クロロ−Ｎ−（ピリジン−３−イル）ベンゼンスルホンアミド：
【０２７２】
【化１５７】
2011521916.tif 000176
ｘｉｖ）２−メトキシ−４−メチル−５−クロロ−Ｎ−（キノリン−３−イル）ベンゼンスルホンアミド：
【０２７３】
【化１５８】
2011521916.tif 000177
ｘｖ）２−メトキシ−４−メチル−５−クロロ−Ｎ−（キノキサリン−２−イル）ベンゼンスルホンアミド：
【０２７４】
【化１５９】
2011521916.tif 000178
が含まれる。
【０２７５】
表Ｇ
【表Ｇ−１】
2011521916.tif 000179
【０２７６】
【表Ｇ−２】
2011521916.tif 000180
【０２７７】
は、本カテゴリーによる腸アルカリホスファターゼアクチベーターおよびインヒビターの非限定的な例を示す。
【０２７８】
表Ｈ
【表Ｈ−１】
2011521916.tif 000181
【０２７９】
【表Ｈ−２】
2011521916.tif 000182
【０２８０】
は、腸アルカリホスファターゼアクチベーターおよびインヒビターのさらなる非限定的な例を示す。
【０２８１】
（２．処方物）
１つまたは複数の開示の化合物を含む組成物（例えば、有効量の１つまたは複数の本明細書中に開示の腸アルカリホスファターゼモジュレーターおよび薬学的に許容可能なキャリアを含む組成物）を本明細書中に開示する。
【０２８２】
有効量の１つまたは複数の本明細書中に開示の腸アルカリホスファターゼアクチベーターおよび薬学的に許容可能なキャリアを含む組成物をさらに開示する。
【０２８３】
有効量の１つまたは複数の本明細書中に開示の腸アルカリホスファターゼインヒビターおよび薬学的に許容可能なキャリアを含む組成物も開示する。
【０２８４】
当業者は、本説明および本明細書中に開示のアッセイによって同定された任意の所与のインヒビターの性質に基づいて、その治療有効用量の決定方法を理解する。
【０２８５】
薬学的組成物を、任意の適切な手段を使用して（例えば、従来の混合、溶解、顆粒化、糖衣錠作製、糊状化、乳化、カプセル化、捕捉、または凍結乾燥過程によって）製造することができる。
【０２８６】
したがって、本開示にしたがってって使用される薬学的組成物を、薬学的に使用することができる調製物への活性化合物の処理を容易にする賦形剤および助剤を含む１つまたは複数の生理学的または薬学的に許容可能なキャリア（ビヒクルまたは希釈剤）を使用した従来の様式で処方することができる。適切な処方物は、選択される投与経路に依存する。
【０２８７】
被験体に薬学的組成物を投与する任意の適切な方法を、開示の処置方法で使用することができる（注射、経粘膜、経口、吸入、眼、直腸、長時間作用性埋め込み、リポソーム、乳剤、または徐放の手段が含まれる）。
【０２８８】
注射のために、開示の薬剤を、水溶液、好ましくは、生理学的に適合可能な緩衝液（ハンクス液、リンゲル液、または生理食塩水の緩衝液など）中に処方することができる。経粘膜投与のために、透過すべき障壁に適切な浸透剤を、処方で使用する。かかる浸透剤は、一般に当該分野で公知である。
【０２８９】
経口投与のために、化合物を、活性化合物を当該分野で周知の薬学的に許容可能なキャリアと組み合わせることによって容易に処方することができる。かかるキャリアにより、開示の化合物を、治療される患者による経口摂取のための錠剤、丸薬、糖衣錠、カプセル、液剤、ゲル、シロップ、スラリー、および懸濁物などとして処方することができる。経口用薬学的調製物を固体賦形剤として得ることができ、任意選択的に得られた混合物を粉砕し、顆粒混合物を処理し、必要に応じて適切な助剤を添加後、錠剤または糖衣錠のコアを得ることができる。適切な賦形剤には、充填剤（糖（ラクトース、スクロース、マンニトール、またはソルビトールが含まれる）など）、セルロース調製物（例えば、トウモロコシデンプン、コムギデンプン、コメデンプン、ポテトデンプンなど）、ゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチル−セルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および／またはポリビニル−ピロリドン（ＰＶＰ）が含まれる。必要に応じて、崩壊剤（架橋ポリビニルピロリドン、寒天、またはアルギン酸もしくはその塩（アルギン酸ナトリウムなど）など）を添加することができる。
【０２９０】
適切なコーティングを使用して糖衣錠コアが得られる。この目的のために、濃縮糖液を使用することができる。この濃縮糖液は、任意選択的に、アラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、カルボポールゲル、ポリエチレングリコール、および／または二酸化チタン、ラッカー液、および適切な有機溶媒または溶媒混合物を含むことができる。染料または色素を、活性化合物の用量の識別または異なる組み合わせの特徴付けのために錠剤または糖衣錠のコーティングに添加することができる。
【０２９１】
経口で使用することができる薬学的調製物には、ゼラチン製の押し込み式カプセル、ゼラチンおよび可塑剤（グリセロールまたはソルビトールなど）から作製された密封された軟カプセルが含まれる。押し込み式カプセルは、充填剤（ラクトースなど）、結合剤（デンプンなど）、および／または潤滑剤（タルクまたはステアリン酸マグネシウムなど）、および任意選択的に安定剤との混合物中に有効成分を含むことができる。軟カプセルでは、活性化合物を、適切な液体（脂肪油、流動パラフィン、または液体ポリエチレングリコールなど）に溶解または懸濁することができる。さらに、安定剤を添加することができる。経口投与用の全ての処方物は、かかる投与に適切な投与量であるべきである。
【０２９２】
頬側投与のために、組成物は、従来の様式で処方した錠剤またはロゼンジの形態をとることができる。
【０２９３】
吸入による投与のために、開示の化合物を、適切な噴射剤（例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、または他の適切な気体）を使用した加圧パックまたは噴霧器からのエアゾールスプレーの形態で都合良く送達させることができる。加圧エアゾールの場合、投薬単位を、定量を送達させるための弁の準備によって決定することができる。例えば、化合物の粉末ミックスおよび適切な粉末基剤（ラクトースまたはデンプンなど）を含む吸入器または注入器で用いるための、例えばゼラチンのカプセルおよびカートリッジを処方することができる。
【０２９４】
化合物を、注射（例えば、ボーラス注射または連続注入）による非経口投与のために処方することができる。注射用処方物は、単位投薬形態（例えば、防腐剤を添加したアンプルまたは複数用量容器）で提供することができる。組成物は、油性または水性ビヒクルを含む懸濁物、溶液、または乳濁液などの形態をとることができ、処方剤（懸濁剤、安定剤、および／または分散剤など）を含むことができる。
【０２９５】
非経口投与のための薬学的処方物には、水溶性形態の活性化合物の水溶液が含まれる。さらに、活性化合物の懸濁物を、適切な油性注射用懸濁物として調製することができる。適切な親油性の溶媒またはビヒクルには、脂肪油（ゴマ油など）または合成脂肪酸エステル（オレイン酸エチルまたはトリグリセリドなど）、またはリポソームが含まれる。水性注射用懸濁物は、懸濁物の粘度を増大させる物質（カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール、またはデキストランなど）を含むことができる。任意選択的に、懸濁物はまた、適切な安定剤または化合物の溶解性を増加させて高濃度の溶液を調製することを可能にする薬剤を含むことができる。
【０２９６】
あるいは、有効成分は、使用前に適切なビヒクル（無菌の無発熱物質水など）を使用して構築するための粉末形態であり得る。
【０２９７】
化合物を、例えば、従来の座剤の基剤（カカオバターまたは他のグリセリドなど）を含む直腸組成物（座剤または停留浣腸など）中に処方することもできる。
【０２９８】
前述の処方物に加えて、化合物をデポー調製物として処方することもできる。かかる長時間作用性処方物を、埋め込み（例えば、皮下または筋肉内）または筋肉内注射によって投与することができる。したがって、例えば、化合物を、適切なポリマーもしくは疎水性の材料（例えば、許容可能な油中の乳濁液として）またはイオン交換樹脂を使用して、または可溶性が乏しい誘導体として（例えば、可溶性が乏しい塩として）処方することができる。
【０２９９】
疎水性化合物のための１つの薬学的キャリアの型は、ベンジルアルコール、非極性界面活性剤、水混和性有機ポリマー、および水相を含む共溶媒系である。
【０３００】
共溶媒系は、ＶＰＤ共溶媒系であり得る。ＶＰＤは、３％ｗ／ｖベンジルアルコール、８％ｗ／ｖの非極性界面活性剤ポリソルベート８０、および６５％ｗ／ｖポリエチレングリコール３００を含み、無水エタノールで必要体積にした溶液である。ＶＰＤ共溶媒系（ＶＰＤ：５Ｗ）は、５％デキストロース水溶液で１：１に希釈したＶＰＤからなる。この共溶媒系は、疎水性化合物を十分に溶解し、それ自体で全身投与の際の毒性を低くする。当然、共溶媒系の比率を、その溶解性を損なったり毒性の特性を持つことなくかなり変化させることができる。さらに、共溶媒成分の独自性を変化させることができる。例えば、他の毒性の低い非極性界面活性剤を、ポリソルベート８０の代わりに使用することができ、ポリエチレングリコールの分画サイズを変化させることができ、他の生体適合性ポリマーをポリエチレングリコールに代えることができ（例えば、ポリビニルピロリドン）、他の糖またはポリサッカリドをデキストロースの代わりに用いることができる。
【０３０１】
あるいは、疎水性薬学的化合物のための他の送達系を使用することができる。リポソームおよび乳濁液は、疎水性薬物のための送達ビヒクルまたはキャリアの周知の例である。一定の有機溶媒（ジメチルスルホキシドなど）も使用することができる。
【０３０２】
さらに、化合物を、任意の適切な徐放系（治療薬を含む固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスなど）を使用して送達させることができる。種々の徐放材料が確立されており、当業者に周知である。徐放カプセルは、その化学的性質に応じて、化合物を長期間にわたって放出することができる。治療試薬の化学的性質および生物学的安定性に応じて、さらなるタンパク質安定化ストラテジーを使用することができる。
【０３０３】
薬学的組成物はまた、適切な固相またはゲル相のキャリアまたは賦形剤を含むことができる。かかるキャリアまたは賦形剤の例には、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、種々の糖、デンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、およびポリマー（ポリエチレングリコールなど）が含まれるが、これらに限定されない。
【０３０４】
開示の薬剤の多数を、薬学的に許容可能な対イオンとの塩として提供することができる。塩は、対応する遊離塩基形態よりも水性または他のプロトン性溶媒に高い溶解性を示す傾向がある。
【０３０５】
哺乳動物に本明細書中に開示の薬学的組成物を投与する工程を含む哺乳動物の病状または疾患を処置する方法も開示する。
【０３０６】
本開示の特定の実施形態を例示および記載してきたが、本開示の精神および範囲を逸脱することなく種々の他の変更形態および修正形態を得ることができることが当業者に自明である。したがって、本開示の範囲内であるかかる変更形態および修正形態の全てが添付の特許請求の範囲で対象とされることが意図される。
【０３０７】
開示のＩＡＰモジュレーターを、インヒビターの投与、送達、または他の態様および使用を補助するためのキャリアおよび他の組成物と共にまたはこれらに組み合わせるか、結合体化するか、またはカップリングすることができる。便宜上、かかる組成物を本明細書中でキャリアという。キャリアは、例えば、小分子、調合薬、脂肪酸、検出可能なマーカー、結合体化タグ、ナノ粒子、または酵素であり得る。
【０３０８】
開示の組成物を、薬学的に許容可能なキャリアと組み合わせて治療的に使用することができる。「薬学的に許容可能な」は、生物学的またはその他の点で望ましくないわけではない材料を意味する。すなわち、その材料を、任意の望ましくない生物学的影響を引き起こさず、含まれる薬学的組成物の任意の他の成分と有害な様式で相互作用させずに、組成物とともに被験体に投与することができる。キャリアは、当然、当業者に周知であるように、有効成分の任意の分解を最小にし、被験体における任意の有害な副作用も最小にするように選択される。
【０３０９】
適切なキャリアおよびその処方は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（１９ｔｈ  ｅｄ．）ｅｄ．Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ  １９９５に記載されている。典型的には、処方物を等張にするための適量の薬学的に許容可能な塩を処方物中で使用する。薬学的に許容可能なキャリアの例には、生理食塩水、リンゲル液、およびデキストロース溶液が含まれるが、これらに限定されない。溶液のｐＨは、好ましくは、約５〜約８、より好ましくは約７〜約７．５である。さらなるキャリアには、抗体を含む固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスなどの徐放調製物が含まれ、このマトリックスは成型品（例えば、フィルム、リポソーム、または微粒子）の形態である。一定のキャリアが、例えば、投与される組成物の投与経路および濃度に応じて、より好ましくなり得ることが当業者に明らかである。
【０３１０】
薬学的キャリアは当業者に公知である。これらのほとんどは、典型的には、ヒトへの投薬に標準的なキャリアである（滅菌水、生理食塩水、生理学的ｐＨでの緩衝液などの溶液が含まれる）。組成物を、筋肉内または皮下に投与することができる。他の化合物を、当業者によって使用されている標準的手順にしたがってって投与することができる。
【０３１１】
薬学的組成物は、最適な分子に加えて、キャリア、増粘剤、希釈剤、緩衝液、防腐剤、および表面活性剤などを含むことができる。薬学的組成物はまた、１つまたは複数の有効成分（抗菌薬、抗炎症剤、および麻酔薬など）を含むことができる。
【０３１２】
非経口投与用調製物は、無菌の水溶液または非水性溶液、懸濁物、および乳濁液を含む。非水性溶媒の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油（オリーブ油など）、および注射可能有機エステル（オレイン酸エチルなど）である。水性キャリアには、水、アルコール／水溶液、乳濁液、または懸濁物（生理食塩水および緩衝化媒質が含まれる）が含まれる。非経口ビヒクルには、塩化ナトリウム溶液、リンゲルデキストロース、デキストロースおよび塩化ナトリウム、乳酸加リンゲル液、または固定油が含まれる。静脈内ビヒクルには、流体および栄養補給剤、および電解質補給剤（リンゲルデキストロースに基づく補給剤など）などが含まれる。防腐剤および他の添加物も存在し得る（例えば、抗菌剤、抗酸化剤、キレート剤、および不活性ガスなど）。
【０３１３】
局所投与用処方物には、軟膏、ローション、クリーム、ゲル、ドロップ、座剤、スプレー、液体、および粉末が含まれ得る。従来の薬学的キャリア、水性、粉末、または油性の基剤、および増粘剤などが必要である場合、または望ましい場合がある。
【０３１４】
経口投与用組成物には、粉末または顆粒、水または非水性媒質の懸濁物または溶液、カプセル、サシェ（ｓａｃｈｅｔ）、または錠剤が含まれる。増粘剤、矯味矯臭薬、希釈剤、乳化剤、分散助剤、または結合剤が望ましい場合がある。
【０３１５】
いくつかの組成物を、無機酸（塩酸、臭化水素酸、過塩素酸、硝酸、チオシアン酸、硫酸、およびリン酸など）および有機酸（ギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、およびフマル酸など）との反応または無機塩基（水酸化ナトリウム、水酸化アンモニウム、水酸化カリウムなど）および有機塩基（モノアルキル、ジアルキル、トリアルキルおよびアリールアミンおよび置換エタノールアミンなど）との反応によって形成される薬学的に許容可能な酸付加塩または塩基付加塩として潜在的に投与することができる。
【０３１６】
材料は、（例えば、微粒子、リポソーム、または細胞に組み込まれた）溶液、懸濁物中に存在し得る。これらを、抗体、受容体、または受容体リガンドを介して特定の細胞型にターゲティングすることができる。以下のリファレンスは、特異的タンパク質を腫瘍組織にターゲティングするためのこのテクノロジーの使用例である（Ｓｅｎｔｅｒら，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．，２：４４７−４５１，（１９９１）；Ｂａｇｓｈａｗｅ，Ｋ．Ｄ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，６０：２７５−２８１，（１９８９）；Ｂａｇｓｈａｗｅら，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，５８：７００−７０３，（１９８８）；Ｓｅｎｔｅｒら，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．，４：３−９，（１９９３）；Ｂａｔｔｅｌｌｉら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．，３５：４２１−４２５，（１９９２）；Ｐｉｅｔｅｒｓｚ  ａｎｄ  ＭｃＫｅｎｚｉｅ，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇ．Ｒｅｖｉｅｗｓ，１２９：５７−８０，（１９９２）；およびＲｏｆｆｌｅｒら，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，４２：２０６２−２０６５，（１９９１））。ビヒクル（「ステルス（ｓｔｅａｌｔｈ）」および他の抗体結合体化リポソーム（結腸癌をターゲティングする脂質媒介薬物が含まれる）など）、細胞特異的リガンドによるＤＮＡの受容体媒介ターゲティング、リンパ球指示腫瘍ターゲティング（ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ  ｄｉｒｅｃｔｅｄ  ｔｕｍｏｒ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ）、およびインビボでのマウス神経膠腫細胞の高特異的治療レトロウイルスターゲティング。以下のリファレンスは、特異的タンパク質を腫瘍組織にターゲティングするためのこのテクノロジーの使用例である（Ｈｕｇｈｅｓら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，４９：６２１４−６２２０，（１９８９）；およびＬｉｔｚｉｎｇｅｒおよびＨｕａｎｇ，Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ  ｅｔ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ  Ａｃｔａ，１１０４：１７９−１８７，（１９９２））。一般に、受容体は、構成的またはリガンド誘導性のエンドサイトーシス経路に関連する。クラスリン被覆ピット中のこれらの受容体クラスターは、クラスリン被覆小胞を介して細胞に侵入し、酸性化エンドソームを通過し、ここで受容体が分類され、次いで、細胞表面に再利用されるか、細胞内に貯蔵されるようになるか、あるいは、リソソーム中で分解される。内在化経路は、種々の機能（栄養素の取り込み、活性化タンパク質の除去、高分子のクリアランス、ウイルスおよび毒素の日和見性侵入、リガンドの解離および分解、および受容体レベルの調節など）を果たす。多数の受容体は、細胞型、受容体濃度、リガンド型、リガンド結合価、およびリガンド濃度に応じて１つを超える細胞内経路にしたがう。受容体媒介エンドサイトーシスの分子機構および細胞機構は概説されている（ＢｒｏｗｎおよびＧｒｅｅｎｅ，ＤＮＡ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １０：６，３９９−４０９（１９９１））。
【０３１７】
用語「ナノ粒子」は、ナノメートルで測定されるサイズを有するナノスケールの粒子（例えば、少なくとも１つの寸法が約１００ｎｍ未満のナノスケールの粒子）をいう。ナノ粒子の例には、常磁性ナノ粒子、超常磁性ナノ粒子、金属ナノ粒子、フラーレン様材料、無機ナノチューブ、デンドリマー（例えば、共有結合した金属キレートなどを有する）、ナノ繊維、ナノホーン、ナノオニオン、ナノロッド、ナノロープ、および量子ドットが含まれる。ナノ粒子は、例えば、光子（ラジオ周波数および可視光子が含まれる）の吸収および／または放出ならびにプラズモン共鳴によって検出可能なシグナルを生成することができる。
【０３１８】
ミクロスフェア（または微小気泡）もまた本明細書中に開示の方法と共に使用することができる。発色団を含むミクロスフェアは、広範な種々の適用（フォトニック結晶、生物学的標識、および微小流体チャネルにおける流れの視覚化が含まれる）で使用されている。例えば、Ｙ．Ｌｉｎら，Ａｐｐｌ．Ｐｈｙｓ  Ｌｅｔｔ．２００２，８１，３１３４；Ｄ．Ｗａｎｇら，Ｃｈｅｍ．Ｍａｔｅｒ．２００３，１５，２７２４；Ｘ．Ｇａｏら，Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｏｐｔ．２００２，７，５３２；Ｍ．Ｈａｎら，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．２００１，１９，６３１；Ｖ．Ｍ．Ｐａｉら，Ｍａｇ．＆  Ｍａｇｎｅｔｉｃ  Ｍａｔｅｒ．１９９９，１９４，２６２（それぞれその全体が参照によって援用される）を参照のこと。発色団の光安定性およびミクロスフェアの単分散度の両方が重要であり得る。
【０３１９】
ナノ粒子（例えば、シリカナノ粒子、金属ナノ粒子、金属酸化物ナノ粒子、または半導体ナノ結晶など）を、ミクロスフェア中に組み込むことができる。ナノ粒子の光学的、磁気的、および電気的な性質により、ミクロスフェアに会合しながらナノ粒子を観察可能であり、ミクロスフェアを同定し、空間的にモニタリングすることが可能である。例えば、コロイド状に合成された半導体ナノ結晶の高光安定性、良好な蛍光効率、および広い放出同調性により、このナノ結晶は、優れた発色団となり得る。有機色素と異なり、異なる色（すなわち、異なる波長）を発するナノ結晶を、単一光源で同時に励起することができる。コロイド状に合成された半導体ナノ結晶（例えば、コア−シェルＣｄＳｅ／ＺｎＳおよびＣｄＳ／ＺｎＳナノ結晶など）をミクロスフェアに組み込むことができる。ミクロスフェアは、単分散性シリカミクロスフェアであり得る。
【０３２０】
ナノ粒子は、金属ナノ粒子、金属酸化物ナノ粒子、または半導体ナノ結晶であり得る。金属ナノ粒子または金属酸化物ナノ粒子の金属には、チタン、ジルコニウム、ハフニウム、バナジウム、ニオブ、タンタル、クロム、モリブデン、タングステン、マンガン、テクネチウム、レニウム、鉄、ルテニウム、オスミウム、コバルト、ロジウム、イリジウム、ニッケル、パラジウム、白金、銅、銀、金、亜鉛、カドミウム、スカンジウム、イットリウム、ランタン、ランタニド系列またはアクチニド系列の元素（例えば、セリウム、プラセオジム、ネオジム、プロメチウム、サマリウム、ユーロピウム、ガドリニウム、テルビウム、ジスプロシウム、ホルミウム、エルビウム、ツリウム、イッテルビウム、ルテチウム、トリウム、プロトアクチニウム、およびウラン）、ホウ素、アルミニウム、ガリウム、インジウム、タリウム、ケイ素、ゲルマニウム、スズ、鉛、アンチモン、ビスマス、ポロニウム、マグネシウム、カルシウム、ストロンチウム、およびバリウムが含まれ得る。一定の実施形態では、金属は、鉄、ルテニウム、コバルト、ロジウム、ニッケル、パラジウム、白金、銀、金、セリウム、またはサマリウムであり得る。金属酸化物は、任意のこれらの材料または材料の組み合わせの酸化物であり得る。例えば、金属が、金であり得るか、あるいは金属酸化物が、酸化鉄、酸化コバルト、酸化亜鉛、酸化セリウム、または酸化チタンであり得る。金属および金属酸化物のナノ粒子の調製は、例えば、米国特許第５，８９７，９４５号および同第６，７５９，１９９号（それぞれその全体が参照によって援用される）に記載されている。
【０３２１】
例えば、開示の化合物を、シリカナノ粒子（ＳＮＰ）上に固定することができる。ＳＮＰは、その好ましい表面積対体積比、容易な製造、ならびに蛍光標識、磁性ナノ粒子（Ｙａｎｇ，Ｈ．Ｈ．ら，２００５）、および半導体ナノ結晶（Ｌｉｎ，Ｙ．Ｗ．ら，２００６）への結合可能性のためにバイオセンシングおよび触媒への適用のために広く使用されている。
【０３２２】
ナノ粒子はまた、例えば、発熱ナノシェルであり得る。本明細書中で使用する場合、「ナノシェル」は、１つまたは複数の伝導性シェル層に囲まれた個別の誘電性または半導体のコア部分を有するナノ粒子である。米国特許第６，５３０，９４４号は、金属ナノシェルの作製および使用方法の教示のためその全体が本明細書中に参照によって援用される。
【０３２３】
ターゲティング分子を、開示の組成物および／またはキャリアに結合させることができる。例えば、ターゲティング分子は、抗体またはそのフラグメント、特異的受容体のためのリガンド、またはターゲティングされるべき細胞表面に特異的に結合する他のタンパク質であり得る。
【０３２４】
本明細書中で使用する場合、「リポソーム」は、内部水性空間を囲む外側の脂質二重膜または多層膜を含む構造をいう。リポソームを使用して、細胞への送達のために任意の生物学的に活性な薬剤をパッケージすることができる。
【０３２５】
リポソーム形成のための材料および手順は当業者に周知である。適切な媒質中での分散の際、広範な種々のリン脂質が膨張し、水和し、脂質二重層を分離する水媒体層を有する多層の同心円状の二重層小胞を形成する。これらの系を多層リポソームまたは多層脂質小胞（「ＭＬＶ」）といい、１０ｎｍ〜１００μｍの範囲内の直径を有する。これらのＭＬＶは、Ｂａｎｇｈａｍら，Ｊ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１３：２３８−２５２（１９６５）によって最初に記載された。一般に、脂質または親油性物質は、有機溶媒に溶解する。例えば、ロータリーエバポレーションによって真空下で、溶媒を除去した場合、脂質残渣は容器の壁面に薄膜を形成する。次いで、典型的には電解質または親水性の生物学的に活性な材料を含む水溶液を薄膜に添加する。撹拌に際し巨大なＭＬＶが生成される。より小さなＭＬＶが望ましい場合、大きな小胞を、超音波処理、漸減的な細孔径のフィルターによる連続的濾過に供するか、または他の機械的せん断形態によって小さくする。ＭＬＶのラメラ（ｌａｍｅｌｌａｅ）のサイズおよび数を減少させることができる技術も存在する（例えば、加圧押し出し成形（Ｂａｒｅｎｈｏｌｚら，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．９９：２１０−２１４（１９７９）））。
【０３２６】
リポソームはまた、単層（ｕｎｉｌａｍｎｅｌｌａｒ）小胞の形態を取ることができる。これは、ＭＬＶのより徹底的な超音波処理によって調製され、水溶液を囲む単一の球状脂質二重層からなる。２０〜２００ｎｍの範囲内の直径を有する単層小胞（「ＵＬＶ」）は小さなＵＬＶであり得る一方で、より大きなＵＬＶの直径は２００ｎｍ〜２μｍの範囲内であり得る。単層小胞を作製するためのいくつかの周知の技術が存在する。Ｐａｐａｈａｄｊｏｐｏｕｌｏｓら，Ｂｉｏｃｈｉｍ  ｅｔ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ａｃｔａ  １３５：６２４−２３８（１９６８）では、リン脂質の水分散液の超音波処理により、水溶液を囲む脂質二重層を有する小さなＵＬＶが生成される。Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒの米国特許第４，０８９，８０１号は、超音波処理によるリポソーム前駆体の形成およびその後の両親媒性化合物を含む水媒体の添加および遠心分離による生体分子脂質層系の形成を記載している。
【０３２７】
小さなＵＬＶを、Ｂａｔｚｒｉら，Ｂｉｏｃｈｉｍ  ｅｔ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ａｃｔａ  ２９８：１０１５−１０１９（１９７３）によって記載されたエタノール注入技術およびＤｅａｍｅｒら，Ｂｉｏｃｈｉｍ  ｅｔ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ａｃｔａ  ４４３：６２９−６３４（１９７６）のエーテル注入技術によって調製することもできる。これらの方法は、緩衝液への脂質の有機溶液の迅速な注入を含み、それにより、単層リポソームが迅速に形成される。別のＵＬＶ作製技術は、「Ｌｉｐｏｓｏｍｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ」，ｅｄ．Ｇ．Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ  Ｉｎｃ．，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，Ｆｌａ．，Ｖｏｌ．Ｉ，Ｃｈａｐｔｅｒ  ７，ｐｇ．７９−１０７（１９８４）において、Ｗｅｄｅｒらよって教示されている。この界面活性剤除去法は、撹拌または超音波処理によって界面活性剤を使用して脂質および添加物を可溶化し、所望の小胞を生成する工程を含む。
【０３２８】
Ｐａｐａｈａｄｊｏｐｏｕｌｏｓらの米国特許第４，２３５，８７１号は、脂質を含む有機溶媒およびカプセル化すべき薬物を含む水性緩衝液の油中水滴型乳濁液の形成を含む逆相蒸発技術による巨大ＵＬＶの調製を記載している。有機溶媒を加圧下で除去して、水媒体中での撹拌または分散の際に巨大ＵＬＶに変換される混合物を得る。Ｓｕｚｕｋｉらの米国特許第４，０１６，１００号は、薬剤および脂質の水性リン脂質分散液の凍結融解による単層小胞への薬剤の別のカプセル化方法を記載している。
【０３２９】
ＭＬＶおよびＵＬＶに加えて、リポソームはまた多小胞体であり得る。Ｋｉｍら，Ｂｉｏｃｈｉｍ  ｅｔ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ａｃｔａ  ７２８：３３９−３４８（１９８３）に記載のように、これらの多小胞体リポソームは球状であり、内部顆粒構造を含む。外膜は脂質二重層であり、内部領域は二重隔膜によって分離された区画を含む。なおさらなる別のリポソーム型はオリゴラメラー小胞（ｏｌｉｇｏｌａｍｅｌｌａｒ  ｖｅｓｉｃｌｅ「ＯＬＶ」）であり、これは、いくつかの周縁の脂質層に囲まれた巨大な中心区画を有する。直径２〜１５μｍのこれらの小胞は、Ｃａｌｌｏら，Ｃｒｙｏｂｉｏｌｏｇｙ  ２２（３）：２５１−２６７（１９８５）に記載されている。
【０３３０】
Ｍｅｚｅｉらの米国特許第４，４８５，０５４号および同第４，７６１，２８８号はまた、脂質小胞の調製方法を記載している。最近になって、Ｈｓｕの米国特許第５，６５３，９９６号はエアゾール化を使用したリポソームの調製方法を記載しており、Ｙｉｏｕｒｎａｓらの米国特許第５，０１３，４９７号は高速せん断混合チャンバーを使用したリポソームの調製方法を記載している。ＵＬＶ（Ｗａｌｌａｃｈらの米国特許第４，８５３，２２８号）またはＯＬＶ（Ｗａｌｌａｃｈの米国特許第５，４７４，８４８号および同第５，６２８，９３６号）を生成するための特定の出発物質を使用する方法も記載されている。
【０３３１】
全ての上記脂質小胞およびその調製方法の包括的概説は、「Ｌｉｐｏｓｏｍｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ」，ｅｄ．Ｇ．Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ  Ｉｎｃ．，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，Ｆｌａ．，Ｖｏｌ．Ｉ，ＩＩ  ＆  ＩＩＩ（１９８４）に記載されている。本明細書中での使用に適切な種々の脂質小胞を記載したこの参考文献および上記参考文献は、本明細書中に参照によって援用される。
【０３３２】
提供した組成物に結合体化することができる脂肪酸（すなわち、脂質）には、プロタンパク質コンバターゼインヒビターをリポソームに有効に組み込むことが可能な脂肪酸が含まれる。一般に、脂肪酸は極性脂質であり得る。したがって、脂肪酸はリン脂質であり得る。提供した組成物は、天然のリン脂質または合成のリン脂質のいずれかを含むことができる。リン脂質を、飽和または不飽和の一置換または二置換脂肪酸およびその組み合わせを含むリン脂質から選択することができる。これらのリン脂質は、ジオレオイルホスファチジルコリン、ジオレオイルホスファチジルセリン、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン、ジオレオイルホスファチジルグリセロール、ジオレオイルホスファチジン酸、パルミトイルオレオイルホスファチジルコリン、パルミトイルオレオイルホスファチジルセリン、パルミトイルオレオイルホスファチジルエタノールアミン、パルミトイルオレオイルホスファチジルグリセロール、パルミトイルオレオイルホスファチジン酸、パルミテライドイルオレオイルホスファチジルコリン、パルミテライドイルオレオイルホスファチジルセリン、パルミテライドイルオレオイルホスファチジルエタノールアミン、パルミテライドイルオレオイルホスファチジルグリセロール、パルミテライドイルオレオイルホスファチジン酸、ミリストレオイルオレオイルホスファチジルコリン、ミリストレオイルオレオイルホスファチジルセリン、ミリストレオイルオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ｅｔｈａｎｏａｍｉｎｅ）、ミリストレオイルオレオイルホスファチジルグリセロール、ミリストレオイルオレオイルホスファチジン酸、ジリノレオイルホスファチジルコリン、ジリノレオイルホスファチジルセリン、ジリノレオイルホスファチジルエタノールアミン、ジリノレオイルホスファチジルグリセロール、ジリノレオイルホスファチジン酸、パルミチックリノレオイルホスファチジルコリン、パルミチックリノレオイルホスファチジルセリン、パルミチックリノレオイルホスファチジルエタノールアミン、パルミチックリノレオイルホスファチジルグリセロール、パルミチックリノレオイルホスファチジン酸であり得る。これらのリン脂質はまた、ホスファチジルコリン（リゾホスファチジルコリン（ｌｙｓｏｐｈｏｐｈａｔｉｄｙｌｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ））、ホスファチジルセリン（リゾホスファチジルセリン）、ホスファチジルエタノールアミン（リゾホスファチジルエタノールアミン）、ホスファチジルグリセロール（リゾホスファチジルグリセロール）、およびホスファチジン酸（リゾホスファチジン酸）のモノアシル化誘導体であり得る。これらのリゾホスファチジル誘導体中のモノアシル鎖は、パルミトイル、オレオイル、パルミトレオイル、リノレオイル、ミリストイル、またはミリストレオイルであり得る。リン脂質はまた合成リン脂質であり得る。合成リン脂質は、種々の供給元（ＡＶＡＮＴＩ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ（Ａｌｂａｓｔｅｒ，Ａｌａ．）；Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏ．）など）から容易に購入可能である。これらの合成化合物は異なっていてよく、天然に存在するリン脂質で見出されないその脂肪酸側���において変化があり得る。脂肪酸は、ＰＳまたはＰＣのいずれかまたは両方中にＣ１４、Ｃ１６、Ｃ１８、またはＣ２０鎖長を有する不飽和脂肪酸側鎖を有することができる。合成リン脂質は、構成要素としてジオレオイル（１８：１）−ＰＳ；パルミトイル（１６：０）−オレオイル（１８：１）−ＰＳ、ジミリストイル（１４：０）−ＰＳ；ジパルミトレオイル（１６：１）−ＰＣ、ジパルミトイル（１６：０）−ＰＣ、ジオレオイル（１８：１）−ＰＣ、パルミトイル（１６：０）−オレオイル（１８：１）−ＰＣ、およびミリストイル（１４：０）−オレオイル（１８：１）−ＰＣを有することができる。したがって、例として、提供した組成物は、パルミトイル１６：０を含むことができる。
【０３３３】
（Ｂ．方法）
（１．ＩＡＰの調整）
腸アルカリホスファターゼ（ＩＡＰ）活性の調整方法を本明細書中に開示する。開示の方法は、腸アルカリホスファターゼの活性化および腸アルカリホスファターゼの阻害を含む。
【０３３４】
腸アルカリホスファターゼ（ＩＡＰ）の欠乏もしくはレベルの低下が原因になるか、またはそれに起因する種々の病状、症候群、もしくは疾患の処置方法を本明細書中に開示する。したがって、有効量の１つまたは複数の本明細書中に開示の化合物を処置を必要とする被験体に投与する工程を含む、被験体のＩＡＰレベルを増加させる方法を開示する。いくつかの態様では、病状、症候群、または疾患は、毒素産生作用因子を含む。したがって、いくつかの態様では、病状、症候群、または疾患は、過剰増殖細菌由来のＬＰＳを含む。
【０３３５】
リポ多糖（ＬＰＳ）は、共有結合した脂質およびポリサッカリド（炭水化物）からなる巨大分子である。ＬＰＳは、グラム陰性菌外膜の主成分であり、細菌の構造的完全性に大きく寄与し、および膜をある種の化学的攻撃から防御する。ＬＰＳは内毒素であり、正常な動物免疫系由来の強い応答を誘導する。ＬＰＳを保有する唯一のグラム陽性菌はＬｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ（低温殺菌していないミルク中の一般的な感染体）である。ＬＰＳはプロトタイプの内毒素として作用する。なぜなら、ＬＰＳはＣＤ１４／ＴＬＲ４／ＭＤ２受容体複合体に結合し、このことが多数の細胞型、特に、マクロファージにおいてプロ炎症性（ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ）サイトカインの分泌を促進するからである。免疫学における「ＬＰＳチャレンジ」は、毒素として作用することができるＬＰＳへの被験体の曝露である。ＬＰＳはまた、細胞膜の負電荷を増加させ、膜構造全体の安定化を助ける。ＬＰＳは、さらに、外因性発熱物質（外部発熱誘導性化合物）である。
【０３３６】
腸アルカリホスファターゼ（ＩＡＰ）は、ＬＰＳ炭水化物上に見出される２個のリン酸基の除去によってＬＰＳを解毒することができる。これは、通常は小腸中に見出されるグラム陰性菌の潜在的な有毒作用を宿主が管理するのを補助するための適応機構として機能することができる。
【０３３７】
しかし、ＩＡＰレベルは栄養失調症の間に減少する。それ自体で、毒素産生作用因子、特に、細菌リポ多糖（ＬＰＳ）に対するこの酵素によって得られる粘膜防御は損なわれる。さらに、他の毒素を産生する管腔微生物は、ＩＡＰが十分に存在しないときは容易に成長することができる。
【０３３８】
したがって、重篤な栄養失調症に起因する細菌感染の処置または予防方法を本明細書中に開示する。栄養失調症は、飢餓、貧困、消化器系疾患、吸収不良、鬱病、神経性食欲不振、神経性大食症、絶食、または昏睡の結果であり得る。
【０３３９】
経腸栄養（ｅｎｔｅｒｎａｌ  ｆｅｅｄｉｎｇ）と組み合わせた細菌感染の処置または予防方法も本明細書中に開示する。栄養性（ｔｒｏｐｉｃ）経腸栄養（ｅｎｔｅｒｎａｌ  ｆｅｅｄｉｎｇ）は、一般に、乳幼児、乳児、または長期にわたって処置されている成人患者（例えば、昏睡、大手術、または外傷）に施される。これらの補給はチューブによって施され、最低限量の食物または液体を含む。これらの補給は、胃腸系の活動停止を予防するために重要である。栄養補給（ｔｒｏｐｉｃ  ｆｅｅｄｉｎｇ）は、これらの患者の腸が少なくとも最小の能力で機能し続けるのを保証するのに重要である。
【０３４０】
セプシスの処置または予防方法も本明細書中に開示する。セプシスは、感染によって引き起こされる全身炎症状態によって特徴付けられる重篤な医学的病状である。セプシスは、血中または組織中の種々の膿形成生物および他の病原性生物の存在、またはその毒素の存在と広く定義されている。用語セプシスは敗血症（血液中毒）をいうために頻繁に使用されるが、敗血症はセプシスの１つの型である。菌血症は、特に血流中の細菌の存在をいう（ウイルス血症および真菌血症はウイルスおよび真菌の類義語である）。
【０３４１】
胃腸炎の処置または予防方法も本明細書中に開示する。胃腸炎は、胃腸管（胃および小腸の両方を含む）の炎症（胃炎および腸炎も参照のこと）をいい、急性下痢を引き起こす。炎症は、ほとんどの場合、一定のウイルス感染、細菌感染、もしくはその毒素、寄生生物、または食事もしくは薬中の何かに対する有害反応によって引き起こされる。多数の種々の細菌は胃腸炎を引き起こすことができ、この細菌には、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ、Ｓｈｉｇｅｌｌａ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、およびＹｅｒｓｉｎｉａなどが含まれる。いくつかの感染源は、不適切に調理された食物、再加熱した肉料理、魚介類、乳製品、およびベーカリー製品である。各生物は、わずかに異なる症状を引き起こすが、全て下痢になる。結腸炎、大腸の炎症も存在し得る。
【０３４２】
炎症性腸疾患（ＩＢＤ）を伴う細菌感染の処置または予防方法も本明細書中に開示する。ＩＢＤは、大腸、いくつかの場合、小腸の炎症状態の一群である。ＩＢＤの主な形態はクローン病および潰瘍性大腸炎（ＵＣ）である。危険因子は、不適切に調理された食物または汚染した水の消費および衛生状態が不良な地域への旅行または居住である。発生率は１０００人に１人である。
【０３４３】
別の実施形態は、有効量の１つまたは複数の本明細書中に開示の化合物を処置を必要とする被験体に投与する工程を含む、被験体に粘膜防御を提供する方法に関する。
【０３４４】
さらなる実施形態は、有効量の１つまたは複数の本明細書中に開示の化合物を処置を必要とする被験体に投与する工程を含む、インビボ、インビトロ、またはエクスビボで腸アルカリホスファターゼの放出を上方制御する方法に関する。
【０３４５】
管腔段階は、分泌された消化酵素および胆汁によって食事性脂肪、タンパク質、および炭水化物を加水分解および可溶化する段階である。粘膜段階は、管腔から細胞に消化物を輸送するための腸上皮細胞の刷子縁膜の完全性に依存する。吸収後段階では、再アセンブルされた脂質および他の重要な栄養素は、上皮細胞から身体の他の部分へリンパ管および門脈循環を介して輸送される。これらの段階のいずれかにおける疾患プロセスによる混乱により、頻繁に吸収不良が起こり、それにより、脂肪便を生じる。
【０３４６】
腸における脂肪の吸収不良によって引き起こされるか、またはそれに起因する種々の病状、症候群、および疾患の処置方法を本明細書中に開示する。
【０３４７】
薬の作製で用いる本明細書中に開示のアクチベーターの使用をさらに開示する。
【０３４８】
ヒトまたは哺乳動物の腸管の防御で用いる本明細書中に開示のアクチベーターの使用も開示する。
【０３４９】
微生物によって放出された毒素からのヒトまたは哺乳動物の腸管の防御で用いる本明細書中に開示のアクチベーターの使用も開示する。
【０３５０】
本明細書中に提供した任意の方法は、ＩＡＰペプチドを被験体に投与する工程をさらに含むことができる。
【０３５１】
ＩＡＰをＩＡＰアクチベーターと接触させる工程を含むＩＡＰのピロホスファターゼ活性を増強する方法も提供する。理論に拘束されることを望まないが、開示のＩＡＰアクチベーターは、活性部位からの無機ピロホスフェート（ＰＰｉ）の放出を容易にし得、それにより、有効ＰＰｉ加水分解率を増加させることができる。
【０３５２】
提供した方法のＩＡＰアクチベーターは、ポリマーなどの高分子であり得る。提供した方法のＩＡＰアクチベーターは小分子であり得る。したがって、ＩＡＰアクチベーターは、本明細書中に開示の化合物であり得る。ＩＡＰアクチベーターは、さらに、本明細書中に開示のように同定された化合物であり得る。
【０３５３】
本明細書中で使用する場合、用語「有効量」は、「所望の結果または治療結果を達成するために必要な投与量および期間で有効な１つまたは複数の化合物の量」を意味する。有効量は、当該分野で公知の要因（処置を受けるヒトまたは動物の疾患状態、年齢、性別、および体重など）にしたがって変化し得る。特定の投薬レジメンが本明細書中の実施例に記載され得るが、当業者は、最適な治療応答を得るためにその投薬レジメンを変化させることができると認識する。例えば、いくつかの分割用量を毎日投与してもよく、または治療状況の緊急性によって示されるように用量を比例的に減少させてもよい。さらに、本開示の組成物を、治療量を達成するのに必要な頻度で投与することができる。
【０３５４】
（２．併用療法）
本明細書中に開示のＩＡＰモジュレーターおよび消化管粘膜に投与することができる任意の公知または新たに発見された物質を含む組成物を本明細書中に提供する。例えば、提供した組成物は、１つまたは複数の以下のクラスをさらに含むことができる：抗生物質（例えば、アミノグリコシド、セファロスポリン、クロラムフェニコール、クリンダマイシン、エリスロマイシン、フルオロキノロン、マクロライド、アゾリド、メトロニダゾール、ペニシリン、テトラサイクリン、トリメトプリム−スルファメトキサゾール、バンコマイシン）、ステロイド（例えば、アンドラン（例えば、テストステロン）、コレスタン（例えば、コレステロール）、コール酸（例えば、コール酸）、コルチコステロイド（例えば、デキサメタゾン）、エストラン（Ｅｓｔｒａｅｎｅ）（例えば、エストラジオール）、プレグナン（例えば、プロゲステロン）、麻酔性および非麻酔性鎮痛薬（例えば、モルヒネ、コデイン、ヘロイン、ヒドロモルホン、レボルファノール、メペリジン、メタドン、オキシドン（Ｏｘｙｄｏｎｅ）、プロポキシフェン、フェンタニル、メタドン、ナロキソン、ブプレノルフィン、ブトルファノール、ナルブフィン、ペンタゾシン）、抗炎症剤（例えば、アルクロフェナック、ジプロピオン酸アルクロメタゾン、アルゲストンアセトニド、αアミラーゼ、アムシナファル、アムシナフィド、アンフェナックナトリウム、塩酸アミプリロース、アナキンラ、アニロラク、アニトラザフェン、アパゾン、バルサラジド二ナトリウム、ベンダザック、ベノキサプロフェン、塩酸ベンジダミン、ブロメライン、ブロペラモール、ブデソニド、カルプロフェン、シクロプロフェン、シンタゾン、クリプロフェン、プロピオン酸クロベタゾール、酪酸クロベタゾン、クロピラック、プロピオン酸クロチカソン、酢酸コルメタソン、コルトドキソン、デカノアート、デフラザコート、デラテストリル、デポ−テストステロン、デソニド、デスオキシメタゾン、ジプロピオン酸デキサメタゾン、ジクロフェナックカリウム、ジクロフェナックナトリウム、ジフロラゾンジアセタート、ジフルミドンナトリウム、ジフルニサル、ジフルプレドナート、ジフタロン、ジメチルスルホキシド、ドロシノニド、エンドリソン、エンリモマブ、エノリカムナトリウム、エピリゾール、エトドラク、エトフェナメート、フェルビナク、フェナモール、フェンブフェン、フェンクロフェナック、フェンクロラック、フェンドサール、フェンピパロン、フェンチアザク、フラザロン、フルアザコート、フルフェナム酸、フルミゾール、酢酸フルニソリド、フルニキシン、フルニキシンメグルミン、フルオコルチンブチル、酢酸フルオロメトロン、フルクアゾン、フルルビプロフェン、フルレトフェン、プロピオン酸フルチカゾン、フラプロフェン、フロブフェン、ハルシノニド、プロピオン酸ハロベタソール、酢酸ハロプレドン、イブフェナック、イブプロフェン、イブプロフェンアルミニウム、イブプロフェンピコノール、イロニダップ、インドメタシン、インドメタシンナトリウム、インドプロフェン、インドキソール、イントラゾール、酢酸イソフルプレドン、イソキセパック、イソキシカム、ケトプロフェン、塩酸ロフェミゾール、ロモキシカム、エ���ボン酸ロテプレドノール、メクロフェナム酸ナトリウム、メクロフェナム酸、メクロリゾンジブチレート、メフェナム酸、メサラミン、メセクラゾン、メステロロン、メタンドロステノロン、メテノロン、酢酸メテノロン、スレプタン酸メチルプレドニゾロン、モルニフルマート（Ｍｏｍｉｆｌｕｍａｔｅ）、ナブメトン、ナンドロロン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、ナプロキソール、ニマゾン、オルサラジンナトリウム、オルゴテイン、オルパノキシン、オキサンドロラン、オキサプロジン、オキシフェンブタゾン、オキシメトロン、塩酸パラニリン、ペントサンポリ硫酸ナトリウム、フェンブタゾンナトリウムグリセラート、ピルフェニドン、ピロキシカム、桂皮酸ピロキシカム、ピロキシカムオラミン、ピルプロフェン、プレドナザート、プリフェロン、プロドール酸、プロカゾン、プロキサゾール、クエン酸プロキサゾール、リメキソロン、ロマザリット、サルコレックス、サルナセジン、サルサラート、塩化サンギナリウム、セクラゾン、セルメタシン（Ｓｅｒｍｅｔａｃｉｎ）、スタノゾロール、スドキシカム、スリンダク、スプロフェン、タルメタシン、タルニフルマート、タロサラート、テブフェロン、テニダップ、テニダップナトリウム、テノキシカム、テシカム、テシミド、テストステロン、テストステロンブレンド、テトリダミン、チオピナック、ピバル酸チキソコルトール、トルメチン、トルメチンナトリウム、トリクロニド、トリフルミダート、ジドメタシン、ゾメピラックナトリウム）、または抗ヒスタミン剤（例えば、エタノールアミン（ジフェンヒドラミン（ｄｉｐｈｅｎｈｙｄｒｍｉｎｅ）、カルビノキサミンなど）、エチレンジアミン（トリペレナミン、ピリラミンなど）、アルキルアミン（クロルフェニラミン、デクスクロルフェニラミン、ブロムフェニラミン、トリプロリジンなど）、他の抗ヒスタミン（アステミゾール、ロラタジン、フェキソフェナジン、ブロフェニラミン、クレマスチン、アセトアミノフェン、プソイドエフェドリン、トリプロリジンなど）。
【０３５５】
（３．投与）
開示の化合物および組成物を、任意の適切な様式で投与することができる。投与様式を、例えば、局所処置または全身処置のいずれが望ましいのか、および処置されるべき領域に基づいて選択することができる。例えば、組成物を、経口、非経口（例えば、静脈内注射、皮下注射、腹腔内注射、または筋肉内注射）、吸入、体外、または局所（経皮、眼、膣、直腸、鼻内が含まれる）などで投与することができる。
【０３５６】
本明細書中で使用する場合、「局所鼻内投与」は、外鼻孔の一方または両方を介した鼻および鼻道への組成物の送達を意味し、噴霧機構または液滴機構によるか、核酸またはベクターのエアゾール化を介した送達を含むことができる。吸入剤による組成物の投与は、噴霧機構または液滴機構による送達を介した鼻または口を介した投与であり得る。挿管法によって呼吸器系の任意の領域（例えば、肺）に直接送達させることもできる。
【０３５７】
組成物の非経口投与は、使用する場合、一般に、注射によって特徴付けられる。注射可能物（ｉｎｊｅｃｔａｂｌｅ）を、従来の形態で（液体溶液または懸濁物、注射前に液体中の懸濁物の溶液にするのに適切な固体形態、または乳濁液のいずれかとして）調製することができる。最近になって修正された非経口投与のためのアプローチは、一定の投与量が維持されるような遅延放出系または徐放系の使用を含む。例えば、米国特許第３，６１０，７９５号（本明細書中に参照によって援用される）を参照のこと。
【０３５８】
組成物の正確な必要量は、被験体の種、年齢、体重、および全身状態、治療を受けるアレルギー性障害の重症度、使用される特定の核酸またはベクター、およびその投与様式などに応じて被験体によって異なり得る。したがって、あらゆる組成物の正確な量を明記することは不可能である。しかし、当業者は、本明細書中に教示した通常の実験のみを使用して適量を決定することができる。したがって、組成物投与に有効な投与量およびスケジュールを経験的に決定することができ、かかる決定は当業者の能力の範囲内である。組成物投与のための投与量範囲は、所望の効果（障害の症状が影響を受ける）を得るのに十分な範囲である。投与量は、有害な副作用（望ましくない交差反応およびアナフィラキシー反応など）の引き起こすほど多量であるべきでない。一般に、投与量は、患者の年齢、病状、性別、および疾患の程度、投与経路、またはレジメンに他の薬物が含まれるかどうかによって変化し得、当業者が投与量を決定することができる。任意の反対適応症（ｃｏｕｎｔｅｒ  ｉｎｄｉｃａｔｉｏｎ）の場合には、投与量を各医師が調整することができる。投与量を変えることができ、毎日１用量または複数用量の投与を１日または数日間行うことができる。所与の医薬品クラスに適切な投与量についてのガイダンスを文献中に見出すことができる。
【０３５９】
例えば、単独で使用される本明細書中に開示のＩＡＰモジュレーターの典型的な１日投与量は、上記要因に応じて、約１μｇ／ｋｇから１００ｍｇ／ｋｇ体重／日までまたはそれを超える範囲であり得る。
【０３６０】
消化管粘膜感染の処置、阻害、または予防のための開示の組成物の投与後、治療ＩＡＰモジュレーターの効能を、当業者に周知の種々の方法で評価することができる。
【０３６１】
本明細書中に開示のＩＡＰモジュレーターを、消化管粘膜感染リスクがあるか、または消化管粘膜感染と新規に診断された患者または被験体に予防的に投与することができる。
【０３６２】
開示の組成物および方法を、例えば、種々の胃腸関連疾患のための新規の薬物候補を単離および試験するためのツールとして使用することもできる。
【０３６３】
（４．スクリーニング法）
ＩＡＰアクチベーターを同定するための化合物のスクリーニング法を本明細書中に開示する。一般に、本方法は、ＡＰ基質の脱リン酸化の検出を含む。例えば、本方法は、基質脱リン酸化の化学発光的検出方法であり得る。
【０３６４】
（ｉ．基質）
ＡＰ基質は、例えば、１，２−ジオキセタン化合物であり得る。１，２−ジオキセタン酵素基質は、広範な種々の酵素免疫アッセイ型で用いる高効率の化学発光レポーター分子として十分に確立されている。これらのアッセイにより、放射性同位体、フルオロフォア、複雑な変色、および二次反応などに依存する従来のアッセイの代替法が得られる。この目的のために開発されたジオキセタンには、米国特許第４，９７８，６１４号および同第５，１１２，９６０号に開示のジオキセタンが含まれる。米国特許第４，９７８，６１４号は、特に、３−（２’−スピロアダマンタン）４−メトキシ−４−（３’’−ホスホリルオキシ）フェニル−１，２−ジオキセタン（商標名ＡＭＰＰＤで市販されている）を開示する。米国特許第５，１１２，９６０号は、ジオキセタン化合物を開示している。この化合物は、アダマンチル安定化環がいずれかの橋頭位置で種々の置換基（ヒドロキシおよびハロゲンなどが含まれる）と置換され、このことは、他の静的または受動的なアダマンチル安定化基をジオキセタン環の分解動態に関与する活性基に変換する。ＣＳＰＤは、アダマンチル基上に塩素置換基を有するスピロアダマンチルジオキセタンフェニルホスフェートである。
【０３６５】
ＡＰ基質は、ＣＳＰＤ（登録商標）（３−（４−メトキシスピロ｛１，２−ジオキセタン−３，２’−（５’−クロロ（ｈｌｏｒｏ））トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン｝−４−イル）フェニルホスフェート二ナトリウム）またはＣＤＰ−Ｓｔａｒ（登録商標）（２−クロロ−５−（４−メトキシスピロ｛１，２−ジオキセタン−３，２’−（５’−クロロ）−トリシクロ（ｒｉｃｙｃｌｏ）［３．３．１．１３，７］デカン｝−４−イル）−１−フェニルホスフェート二ナトリウム）基質（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、Ｂｅｄｆｏｒｄ、ＭＡ）であり得る。ＣＳＰＤ（登録商標）およびＣＤＰ−Ｓｔａｒ（登録商標）基質はＡＰによって活性化された際に発光シグナルを生じる。ＡＰは、基質を脱リン酸化してアニオンを生じ、これが最終的に分解されて発光する。化学分解に起因する光生成は、最初に遅延を示した後に発光（ｇｌｏｗ）が持続し、この発光は遊離基質が利用可能である限り持続する。発光シグナルは、シグナル強度が低い場合は何時間もまたは数日間も持続し得る。非常に高い強度のシグナルは数時間しか持続できない。ＣＳＰＤ（登録商標）基質の場合、ピーク発光は、溶液アッセイにおいて１０〜２０分間で得られるか、またはナイロン膜上では約４時間で得られる。ＣＤＰ−Ｓｔａｒ（登録商標）基質は、ＣＳＰＤ（登録商標）基質に類似する溶液動態を示すが、たった１〜２時間で膜上においてピーク発光に到達する。しかし、これらはピークシグナル強度までの時間が長いが、標準的なＸ線フィルムを用いたＸ線フィルム露光は通常１５秒間〜１５分間しか必要としない。両基質は、検出感度が高く、Ｘ線フィルム露光が迅速であり、バンド解像度および発光動態が優れており、複数のフィルム露光の取得が可能であり、自動試薬インジェクターを使用することなく照度計を使用することが可能である。ＣＤＰ−Ｓｔａｒ（登録商標）基質は、より明るいシグナル（５〜１０倍）を示し、膜上でのピーク発光までの時間がより早く、デジタルシグナル取得システムで膜を画像化する場合にＣＤＰ−Ｓｔａｒ（登録商標）基質を選択することが好ましい。
【０３６６】
ＡＰ基質は、アルカリ性の疎水性環境にあり得る。したがって、基質処方物は、アルカリ性緩衝液中に存在し得る。
【０３６７】
ＡＰ基質を、増強剤（ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ  ａｇｅｎｔ）と結合体化させて使用することができる。増強剤には、天然および合成の水溶性高分子が含まれ、これは、米国特許第５，１４５，７７２号に詳細に開示されている。増強剤の例には、水溶性ポリマー第四級アンモニウム塩（ポリ（ビニルベンジルトリメチルアンモニウムクロリド）（ＴＭＱ）、ポリ（ビニルベンジルトリブチルアンモニウムクロリド）（ＴＢＱ）、およびポリ（ビニルベンジルジメチルベンジルアンモニウムクロリド）（ＢＤＭＱ）など）が含まれる。これらの増強剤は、ジオキセタンが隔離された疎水性環境を提供することによってジオキセタンレポーター分子の化学発光シグナルを改善する。体液の使用に起因する水（ほとんどのアッセイの不可避の態様）は、ジオキセタン化学発光の天然の「消光剤」である。増強分子は、ジオキセタン分子または少なくとも励起状態のエミッター（ｅｍｉｔｔｅｒ）種が存在する微環境から水を排除して化学発光を増強することができる。増強剤−ジオキセタン相互作用に関連する他の効果はまた、化学発光の増強に寄与し得る。
【０３６８】
選択された膜（膜ベースのアッセイのための類似の疎水性表面が得られるナイロン膜および処理済みニトロセルロースならびに記載の増強剤型ポリマーでコーティングした他の膜が含まれる）の使用によってさらなる利点を確保することができる。
【０３６９】
開示の反応は、以前より使用されている比色アッセイより２桁、３桁、または４桁感度が高いが（ＡＩＰ濃度の減少が可能な質）、１／５、１／６、１／７、１／８、１／９、または１／１０の濃度のジエタノールアミン（ＤＥＡ）の存在下でスクリーニング可能なことがより重要である。発光シグナルは、２桁、３桁、または４桁範囲のＡＩＰ濃度にわたって直線的であり得る。
【０３７０】
開示の発光アッセイを、ＡＩＰを活性化する化合物に対して最大の感度を確保するようにさらに至適化することができる。例えば、ＤＥＡ緩衝液を、任意のアルコールホスホアクセプター（ｐｈｏｓｐｈｏａｃｃｅｐｔｏｒ）を含まないＣＡＰＳと置換することができる。インビボ条件により関連し得るリン酸基転移活性と対照的に、このアッセイにより、ホスファターゼ活性をより正確に測定することができる。
【０３７１】
ＣＤＰ−ｓｔａｒ（登録商標）濃度を２５ｕＭ（約Ｋｍ）に固定して、ＣＤＰ−ｓｔａｒ（登録商標）基質と競合する化合物についてさえも十分な感度を得ることができる。
【０３７２】
最大半量活性化は１２７ｍＭ  ＤＥＡに相当し得る。最大活性化により、活性がＤＥＡの非存在下の９．４倍になり得る。６００ｍＭ  ＤＥＡ（ｐＨ９．８）（例えば、２％ＤＭＳＯ中）を、ＡＩＰ活性化スクリーニングのためのポジティブコントロールとして選択することができる。アッセイのパフォーマンスを、ＤＥＡの存在下および非存在下で試験することができる。
【０３７３】
比色アッセイ系がリン酸ベースの基質を使用する、比色アッセイ系を使用したＡＩＰのモジュレーターのスクリーニング方法も開示する。スクリーニングを、飽和濃度のジエタノールアミンの存在下で行うことができる。ホスフェートは、ｐ−ニトロフェニルホスフェートまたはジオキセタン−ホスフェートであり得る。
【０３７４】
ＡＩＰ活性化についてスクリーニングすべき化合物を選択する工程、スクリーニングすべき各化合物の存在下および非存在下にてインビトロアッセイでＡＩＰ活性を決定する工程、およびスクリーニングすべき化合物の存在下および非存在下でＡＩＰの活性を比較して、動物中でＡＩＰ活性を活性化することができる化合物を同定する工程を含む、動物においてＡＩＰ活性を活性化することができる化合物を同定する方法も開示する。
【０３７５】
本方法では、化合物は、ＡＩＰのピロホスファターゼ活性を活性化することができる。化合物を、動物における骨粗鬆症の処置のために単独でさらに投与することができる。あるいは、化合物を、動物における骨粗鬆症の処置のために組換え型ＡＩＰと共に投与することができる。同様に、化合物を、動物における低ホスファターゼ血症の影響を軽減するために単独または組換え型ＡＩＰと共に投与することができる。化合物により、組換え型ＡＩＰ投与を漸減することができる。化合物は、遺伝性骨障害の処置のための酵素代償療法と併せてＡＩＰ活性の上方制御手段としての機能を果たすことができる。あるいは、化合物は、骨粗鬆症に罹患した動物において酵素代償療法を使用せずにＡＩＰ活性の上方制御手段としての機能を果たすことができる。化合物はまた、ＡＩＰ活性の上方制御によるより高い骨ミネラル密度の誘導手段または石灰化インヒビターの軽減によるより高い骨ミネラル密度の誘導手段としての機能を果たすことができる。
【０３７６】
（ｉｉ．化合物）
化合物のライブラリー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｌｉｂｒａｒｉｅｓ  Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ  Ｃｅｎｔｅｒ  Ｎｅｔｗｏｒｋ（ＭＬＳＣＮ）の化合物など）を、ＩＡＰの強力なアクチベーターである化合物の検索において開示のアッセイを使用してスクリーニングすることができる。一般に、候補薬剤を、当該分野で公知の方法にしたがってって、天然生成物または合成（または半合成）抽出物の巨大なライブラリーまたは化学的ライブラリーから同定することができる。薬物探査および開発の分野の業者は、試験抽出物または試験化合物の正確な供給源が本発明のスクリーニング手順に重要でないと理解する。したがって、実質的に任意数の化学的抽出物または化合物を、本明細書中に記載の例示的方法を使用してスクリーニングすることができる。かかる抽出物または化合物の例には、植物、真菌、原核生物、または動物をベースとする抽出物、発酵ブロス、および合成化合物、ならびに既存の化合物の修飾物が含まれるが、これらに限定されない。任意数の化合物（サッカリド、脂質、ペプチド、ポリペプチド、および核酸をベースとする化合物が含まれるが、これらに限定されない）の無作為または定方向の合成（例えば、半合成または全合成）を行うための多数の方法も利用可能である。合成化合物ライブラリーは、例えば、Ｂｒａｎｄｏｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ（Ｍｅｒｒｉｍａｃｋ，ＮＨ）およびＡｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ（Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，ＷＩ）から市販されている。あるいは、細菌、真菌、植物、および動物の抽出物の形態の天然化合物のライブラリーは、多数の供給元（Ｂｉｏｔｉｃｓ（Ｓｕｓｓｅｘ，ＵＫ）、Ｘｅｎｏｖａ（Ｓｌｏｕｇｈ，ＵＫ）、Ｈａｒｂｏｒ  Ｂｒａｎｃｈ  Ｏｃｅａｎｇｒａｐｈｉｃｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（Ｆｔ．Ｐｉｅｒｃｅ，Ｆｌａ．）、およびＰｈａｒｍａＭａｒ，Ｕ．Ｓ．Ａ．（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，Ｍａｓｓ．）が含まれる）から市販されている。さらに、天然および合成のライブラリーを、必要に応じて、当該分野で公知の方法にしたがってって（例えば、標準的な抽出および分画方法によって）生成する。さらに、必要に応じて、任意のライブラリーまたは化合物を、標準的な化学的方法、物理的方法、または生化学的方法を使用して容易に修飾する。さらに、薬物探査および開発の業者は、複製除去（ｄｅｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ）方法（例えば、分類学的複製除去、生物学的複製除去、および化学的複製除去、またはその任意の組み合わせ）または、ＡＩＰ活性への影響について既知である材料の複製物または反復物の排除方法を可能ならいつでも使用すべきであることを容易に理解する。
【０３７７】
粗抽出物が所望の活性を有することが見出された場合、認められた影響を担う化学成分を単離するために陽性リード抽出物のさらなる分画が必要である。したがって、抽出過程、分画過程、および精製過程の目的は、粗抽出物内のＡＩＰを刺激または阻害する活性を有する化学物質の慎重な特徴付けおよび同定である。化合物の混合物中の活性の検出のための本明細書中に記載の同一のアッセイを使用して、活性成分を精製し、その誘導体を試験することができる。かかる異成分からなる抽出物の分画および精製方法は当該分野で公知である。必要に応じて、処置に有用な薬剤であることを示す化合物を、当該分野で公知の方法にしたがってって化学修飾する。次いで、治療的価値があると同定された化合物を、動物モデルを使用してＡＩＰ活性を調節または模倣するのが望ましい疾患または病状について分析することができる。
【０３７８】
（Ｃ．組成物の作製方法）
他で特に記載しない限り、本明細書中に開示の組成物および開示の方法を実施するために必要な組成物を、特定の試薬または化合物のための当業者に公知の任意の方法を使用して作製することができる。
【０３７９】
（Ｄ．定義）
他で定義しない限り、本明細書中で使用される全ての技術用語および科学用語は、開示の方法および組成物が属する業者によって一般に理解されている意味を有する。本明細書中に記載の方法および材料に類似するか等価な任意の方法および材料を本発明の方法および組成物の実施または試験で使用することができるが、特に有用な方法、デバイス、および材料は記載の通りである。本明細書中に引用した刊行物および刊行物が引用される資料は、特に本明細書中に参照によって援用される。本発明が先行発明によるかかる開示に先行する権利を持たないと承認すると解釈されない。いかなる参考文献も先行技術を構成すると承認されない。引用文献の考察には、著者の主張を記載し、本出願人は、引用した文書の正確さおよび適切性に異議を申し立てる権利を留保する。
【０３８０】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用する場合、文脈中で明確に別なように示されない限り、単数形の「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」には複数形が含まれることに注意しなければいけない。したがって、例えば、「ａ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ」という言及には複数のかかる組成物が含まれ、「ｔｈｅ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ」は１つまたは複数の組成物および当業者に公知のその等価物などについて言及する。
【０３８１】
「任意選択的な」または「任意選択的に」は、その後に記載される事象、環境、または材料が起こっても起こらなくてもよいか、または存在しても存在しなくてもよいことを意味し、この記載にはこの事象、環境、または材料が起こるかまたは存在する例、および起こらないかまたは存在しない例が含まれることを意味する。
【０３８２】
範囲を、本明細書中で「約」１つの特定の値から、および／または「約」別の特定の値までと示すことができる。かかる範囲を示す場合、別の実施形態は、１つの特定の値からおよび／または他の特定の値までを含む。同様に、前に「約」を使用することによって値を近似値として示す場合、特定の値が別の実施形態を形成すると理解される。各範囲の終点が共に他の終点と関連して有意であり、且つ他の終点と無関係に有意であることがさらに理解される。多数の数値が本明細書中に開示されており、各値は本明細書中で値自体に加えて、「約」特定の値としても開示されることも理解される。例えば、値「１０」が開示される場合、「約１０」も開示される。当業者によって適切に理解されるように、値をその値「以下」と開示する場合、「その値以上」およびその値の間の可能な範囲も開示されることも理解される。例えば、値「１０」を開示する場合、「１０以下」および「１０以上」も開示される。本出願を通して、データを多数の異なる形式で提供し、このデータは終点および起点ならびにデータポイントの任意の組み合わせの範囲を示すことも理解される。例えば、特定のデータポイント「１０」および特定のデータポイント１５を開示する場合、１０および１５を超えるか、１０および１５以上、１０および１５未満、１０および１５以下、ならびに１０および１５が、１０と１５との間を開示すると見なされると理解される。２つの特定の単位の間の各単位も開示されることも理解される。例えば、１０および１５を開示する場合、１１、１２、１３、および１４も開示される。
【０３８３】
本明細書の説明および特許請求の範囲を通して、用語「ｃｏｍｐｒｉｓｅ」およびこの用語の異型（「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」および「ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ」など）は、「〜が含まれるが、これらに限定されない」を意味し、例えば、他の添加物、成分、整数、または工程を排除することを意図しない。
【０３８４】
以下の化学的階層を、開示の化合物の範囲を説明するか可能にするため、および開示の化合物を含む単位を特に指摘し、明確に主張するために明細書を通して使用するが、他で特に定義しない限り、本明細書中で使用される用語は当業者が使用する用語と同一である。用語「ヒドロカルビル」は、任意の炭素原子ベースの単位（有機分子）を表し、この単位は、任意選択的に、１つまたは複数の有機官能基を含み、無機原子を含む塩、とりわけ、カルボン酸塩、第四級アンモニウム塩が含まれる。ヒドロカルビル単位を環状および非環状クラスに分類するために使用される用語「非環式ヒドロカルビル」および「環状ヒドロカルビル」の両クラスは、用語「ヒドロカルビル」の広義の範囲内である。
【０３８５】
以下の定義に関する場合、「環状ヒドロカルビル」単位は、環内に炭素原子のみを含むことができるか（炭素環およびアリール環）、または、環内に１つまたは複数のヘテロ原子を含むことができる（複素環およびヘテロアリール）。「炭素環式の」環について、環内の炭素原子の最小数は３個である（シクロプロピル）。「アリール」環について、環内の炭素原子の最小数は６個である（フェニル）。「複素環」について、環内の炭素原子の最小数は１個である（ジアジリニル）。エチレンオキシドは２個の炭素原子を含み、且つＣ２複素環である。「ヘテロアリール」環について、環内の炭素原子の最小数は１個である（１，２，３，４−テトラゾリル）。以下は、本明細書中で使用される用語「非環式ヒドロカルビル」および「環状ヒドロカルビル」の制限されない説明である。
【０３８６】
（Ａ．置換および非置換の非環式ヒドロカルビル）
本明細書中で使用する場合、用語「置換および非置換の非環式ヒドロカルビル」は、以下の３つの単位カテゴリーを含む：
１）直鎖または分枝アルキル。その非限定的な例には、メチル（Ｃ１）、エチル（Ｃ２）、ｎ−プロピル（Ｃ３）、イソ−プロピル（Ｃ３）、ｎ−ブチル（Ｃ４）、ｓｅｃ−ブチル（Ｃ４）、イソ−ブチル（Ｃ４）、およびｔｅｒｔ−ブチル（Ｃ４）などが含まれる。置換直鎖または分枝アルキル。その非限定的な例には、ヒドロキシメチル（Ｃ１）、クロロメチル（Ｃ１）、トリフルオロメチル（Ｃ１）、アミノメチル（Ｃ１）、１−クロロエチル（Ｃ２）、２−ヒドロキシエチル（Ｃ２）、１，２−ジフルオロエチル（Ｃ２）、および３−カルボキシプロピル（Ｃ３）などが含まれる。
２）直鎖または分枝アルケニル。その非限定的な例には、エテニル（Ｃ２）、３−プロペニル（Ｃ３）、１−プロペニル（２−メチルエテニルも）（Ｃ３）、イソプロペニル（２−メチルエテン−２−イルも）（Ｃ３）、およびブテン−４−イル（Ｃ４）などが含まれる。置換直鎖または分枝アルケニル。その非限定的な例には、２−クロロエテニル（２−クロロビニルも）（Ｃ２）、４−ヒドロキシブテン−１−イル（Ｃ４）、７−ヒドロキシ−７−メチルオクト−４−エン−２−イル（Ｃ９）、および７−ヒドロキシ−７−メチルオクト−３，５−ジエン−２−イル（Ｃ９）などが含まれる。
３）直鎖または分枝アルキニル。その非限定的な例には、エチニル（Ｃ２）、プロプ−２−イニル（プロパルギルも）（Ｃ３）、プロピン−１−イル（Ｃ３）、および２−メチル−ヘクス−４−イン−１−イル（Ｃ７）が含まれる。置換直鎖または分枝アルキニル。その非限定的な例には、５−ヒドロキシ−５−メチルヘクス−３−イニル（Ｃ７）、６−ヒドロキシ−６−メチルヘプト−３−イン−２−イル（Ｃ８）、および５−ヒドロキシ−５−エチルヘプト−３−イニル（Ｃ９）などが含まれる。
【０３８７】
（Ｂ．置換および非置換の環状ヒドロカルビル）
本明細書中で使用する場合、用語「置換および非置換の環状ヒドロカルビル」は、以下の５つの単位カテゴリーを含む：
１）用語「炭素環」は、本明細書中で、「３〜２０個の炭素原子を含む環を含み、この環が含む原子は炭素原子に制限されず、さらに各環は１つまたは複数の水素原子を置換することができる１つまたは複数の部分で独立して置換され得る」と定義される。以下は、以下の単位カテゴリーを含む「置換および非置換の炭素環」の非限定的な例である。
ｉ）単一の置換または非置換の炭化水素環を含む炭素環。その非限定的な例には、シクロプロピル（Ｃ３）、２−メチル−シクロプロピル（Ｃ３）、シクロプロペニル（Ｃ３）、シクロブチル（Ｃ４）、２，３−ジヒドロキシシクロブチル（Ｃ４）、シクロブテニル（Ｃ４）、シクロペンチル（Ｃ５）、シクロペンテニル（Ｃ５）、シクロペンタジエニル（Ｃ５）、シクロヘキシル（Ｃ６）、シクロヘキセニル（Ｃ６）、シクロヘプチル（Ｃ７）、シクロオクタニル（Ｃ８）、デカリニル（Ｃ１０）、２，５−ジメチルシクロペンチル（Ｃ５）、３，５−ジクロロシクロヘキシル（Ｃ６）、４−ヒドロキシシクロヘキシル（Ｃ６）、および３，３，５−トリメチルシクロヘクス−１−イル（Ｃ６）が含まれる。
ｉｉ）２個以上の置換または非置換の縮合炭化水素環を有する炭素環。その非限定的な例には、オクタヒドロペンタレニル（Ｃ８）、オクタヒドロ−１Ｈ−インデニル（Ｃ９）、３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−イル（Ｃ９）、デカヒドロアズレニル（Ｃ１０）が含まれる。
ｉｉｉ）置換または非置換の二環式炭化水素環である炭素環。その非限定的な例には、ビシクロ−［２．１．１］ヘキサニル、ビシクロ［２．２．１］ヘプタニル、ビシクロ［３．１．１］ヘプタニル、１，３−ジメチル［２．２．１］ヘプタン−２−イル、ビシクロ［２．２．２］オクタニル、およびビシクロ［３．３．３］ウンデカニルが含まれる。
２）用語「アリール」を、本明細書中で、「少なくとも１つのフェニル環またはナフチル環を含み、フェニル環またはナフチル環に縮合したヘテロアリール環または複素環が存在せず、さらに、各環は１つまたは複数の水素原子を置換することができる１つまたは複数の部分で独立して置換され得る単位」と定義する。以下は、以下の単位カテゴリーを含む「置換および非置換のアリール環」の非限定的な例である。
ｉ）Ｃ６またはＣ１０置換または非置換アリール環；置換または非置換のフェニル環およびナフチル環。その非限定的な例には、フェニル（Ｃ６）、ナフチレン−１−イル（Ｃ１０）、ナフチレン−２−イル（Ｃ１０）、４−フルオロフェニル（Ｃ６）、２−ヒドロキシフェニル（Ｃ６）、３−メチルフェニル（Ｃ６）、２−アミノ−４−フルオロフェニル（Ｃ６）、２−（Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ）フェニル（Ｃ６）、２−シアノフェニル（Ｃ６）、２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル（Ｃ６）、３−メトキシフェニル（Ｃ６）、８−ヒドロキシナフチレン−２−イル（Ｃ１０）、４，５−ジメトキシナフチレン−１−イル（Ｃ１０）、および６−シアノ−ナフチレン−１−イル（Ｃ１０）が含まれる。
ｉｉ）１個または２個の飽和環と縮合したＣ６またはＣ１０アリール環。その非限定的な例には、ビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエニル（Ｃ８）、およびインダニル（Ｃ９）が含まれる。
３）用語「複素環（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ）」および／または「複素環（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅ）」を、本明細書中で、「３〜２０個の原子を有する１つまたは複数の環を含み、少なくとも１つの環内の少なくとも１つの原子が窒素（Ｎ）、酸素（Ｏ）、または硫黄（Ｓ）、またはＮ、Ｏ、およびＳの混合物から選択されるヘテロ原子であり、さらに、ヘテロ原子を含む環も芳香環ではない単位」と定義する。以下は、以下の単位カテゴリーを含む「置換および非置換の複素環」の非限定的な例である。
ｉ）１つまたは複数のヘテロ原子を含む単一の環を有する複素環単位。その非限定的な例には、ジアジリニル（Ｃ１）、アジリジニル（Ｃ２）、ウラゾリル（Ｃ２）、アゼチジニル（Ｃ３）、ピラゾリジニル（Ｃ３）、イミダゾリジニル（Ｃ３）、オキサゾリジニル（Ｃ３）、イソキサゾリニル（Ｃ３）、イソキサゾリル（Ｃ３）、チアゾリジニル（Ｃ３）、イソチアゾリル（Ｃ３）、イソチアゾリニル（Ｃ３）、オキサチアゾリジノニル（Ｃ３）、オキサゾリジノニル（Ｃ３）、ヒダントイニル（Ｃ３）、テトラヒドロフラニル（Ｃ４）、ピロリジニル（Ｃ４）、モルホリニル（Ｃ４）、ピペラジニル（Ｃ４）、ピペリジニル（Ｃ４）、ジヒドロピラニル（Ｃ５）、テトラヒドロピラニル（Ｃ５）、ピペリジン−２−オニル（バレロラクタム）（Ｃ５）、２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−アゼピニル（Ｃ６）、２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール（Ｃ８）、および１，２，３，４−テトラヒドロ−キノリン（Ｃ９）が含まれる。
ｉｉ）２個以上の環を有し、そのうちの１個が複素環である複素環単位。その非限定的な例には、ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロリジニル（Ｃ７）、３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾリル（Ｃ７）、３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−インドリル（Ｃ８）、１，２，３，４−テトラヒドロキノリニル（Ｃ９）、およびデカヒドロ−１Ｈ−シクロオクタ［ｂ］ピロリル（Ｃ１０）が含まれる。
４）用語「ヘテロアリール」は、本明細書中で、「５〜２０個の原子を含む１つまたは複数の環を含み、少なくとも１つの環内の少なくとも１つの原子が窒素（Ｎ）、酸素（Ｏ）、または硫黄（Ｓ）、またはＮ、Ｏ、およびＳの混合物から選択されるヘテロ原子であり、さらに、ヘテロ原子を含む環の少なくとも１つが芳香環である」と定義される。以下は、以下の単位カテゴリーを含む「置換および非置換の複素環」の非限定的な例である。
ｉ）単一の環を含むヘテロアリール環。その非限定的な例には、１，２，３，４−テトラゾリル（Ｃ１）、［１，２，３］トリアゾリル（Ｃ２）、［１，２，４］トリアゾリル（Ｃ２）、トリアジニル（Ｃ３）、チアゾリル（Ｃ３）、１Ｈ−イミダゾリル（Ｃ３）、オキサゾリル（Ｃ３）、フラニル（Ｃ４）、チオフェニル（Ｃ４）、ピリミジニル（Ｃ４）、２−フェニルピリミジニル（Ｃ４）、ピリジニル（Ｃ５）、３−メチルピリジニル（Ｃ５）、および４−ジメチルアミノピリジニル（Ｃ５）が含まれる。
ｉｉ）２個以上の縮合環を含み、そのうちの１個がヘテロアリール環であるヘテロアリール環。その非限定的な例には、７Ｈ−プリニル（Ｃ５）、９Ｈ−プリニル（Ｃ５）、６−アミノ−９Ｈ−プリニル（Ｃ５）、５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジニル（Ｃ６）、７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジニル（Ｃ６）、ピリド［２，３−ｄ］ピリミジニル（Ｃ７）、２−フェニルベンゾ［ｄ］チアゾリル（Ｃ７）、１Ｈ−インドリル（Ｃ８）、４，５，６，７−テトラヒドロ−１−Ｈ−インドリル（Ｃ８）、キノキサリニル（Ｃ８）、５−メチルキノキサリニル（Ｃ８）、キナゾリニル（Ｃ８）、キノリニル（Ｃ９）、８−ヒドロキシ−キノリニル（Ｃ９）、およびイソキノリニル（Ｃ９）が含まれる。
５）Ｃ１〜Ｃ６アルキレン単位を介して分子の別の部分、単位、またはコアに連結したＣ１〜Ｃ６係留（ｔｅｔｈｅｒｅｄ）環状ヒドロカルビル単位（炭素環単位、Ｃ６またはＣ１０アリール単位、複素環単位、またはヘテロアリール単位のいずれか）。係留環状ヒドロカルビル単位の非限定的な例には、式：
【０３８８】
【化１６０】
2011521916.tif 000183
（式中、Ｒａは、任意選択的に、独立して選択される１つまたは複数の水素の置換である）を有するベンジルＣ１〜（Ｃ６）が含まれる。さらなる例には、他のアリール単位、とりわけ、（２−ヒドロキシフェニル）ヘキシルＣ６〜（Ｃ６）；ナフタレン−２−イルメチルＣ１〜（Ｃ１０）、４−フルオロベンジルＣ１〜（Ｃ６）、２−（３−ヒドロキシ−フェニル）エチルＣ２〜（Ｃ６）、ならびに置換および非置換のＣ３〜Ｃ１０アルキレンカルボサイクリック単位（例えば、シクロプロピルメチルＣ１〜（Ｃ３）、シクロペンチルエチルＣ２〜（Ｃ５）、シクロヘキシルメチルＣ１〜（Ｃ６））が含まれる。置換および非置換のＣ１〜Ｃ１０アルキレン−ヘテロアリール単位（例えば、式：
【０３８９】
【化１６１】
2011521916.tif 000184
（式中、Ｒａは上記定義の通りである）を有する２−ピコリルＣ１〜（Ｃ６）単位）は本カテゴリーに含まれる。さらに、Ｃ１〜Ｃ１２係留環状ヒドロカルビル単位には、Ｃ１〜Ｃ１０アルキレンへテロサイクリック単位およびアルキレン−ヘテロアリール単位が含まれる。その非限定的な例には、アジリジニルメチルＣ１〜（Ｃ２）およびオキサゾール−２−イルメチルＣ１〜（Ｃ３）が含まれる。
【０３９０】
本明細書中で使用する場合、炭素環はＣ３〜Ｃ２０であり、アリール環はＣ６またはＣ１０であり、複素環はＣ１〜Ｃ９であり、ヘテロアリール環はＣ１〜Ｃ９である。
【０３９１】
当業者は別の特徴付けを行うことができるが、本明細書中で使用する場合、単一のヘテロ原子を含む、縮合環単位、同様にスピロ環、および二環式の環などは本明細書中で特徴付けられ、これらは、ヘテロ原子含有環に対応する環ファミリーに含まれると見なされる。例えば、式：
【０３９２】
【化１６２】
2011521916.tif 000185
を有する１，２，３，４−テトラヒドロキノリンは複素環単位と見なされる。式：
【０３９３】
【化１６３】
2011521916.tif 000186
を有する６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタピリミジンはヘテロアリール単位と見なされる。縮合環単位が飽和環（複素環）およびアリール環（ヘテロアリール環）の両方にヘテロ原子を含む場合、アリール環は本明細書中で環が割り当てられるカテゴリー型において顕著であり、且つこの型を決定することができる。例えば、式：
【０３９４】
【化１６４】
2011521916.tif 000187
を有する１，２，３，４−テトラヒドロ−［１，８］ナフチリジンをヘテロアリール単位と見なす。
【０３９５】
用語「置換」を、本明細書を通して使用する。用語「置換」を、「置換単位または部分は、以下に定義の１つの置換基またはいくつかの置換基で置換された１つまたは複数の水素原子を有する非環式または環状のヒドロカルビル単位または部分である」と本明細書中に記載の単位に適用する。水素原子を置換する場合、単位は、ヒドロカルビル部分の１個の水素原子、２個の水素原子、または３個の水素原子を同時に置換することができる。さらに、これらの置換基は、２個の隣接する炭素上の２個の水素原子を置換して、置換基、新規の部分、または単位を形成することができる。例えば、１水素原子置換が必要な置換単位には、ハロゲンおよびヒドロキシルなどが含まれる。２水素原子置換には、カルボニルおよびオキシイミノなどが含まれる。隣接炭素原子由来の２水素原子置換には、エポキシなどが含まれる。３水素置換には、シアノなどが含まれる。用語、置換を、ヒドロカルビル部分、とりわけ、芳香環、アルキル鎖が置換基によって置換される１つまたは複数の水素原子を有することができることを示すために本明細書中を通して使用する。１個の部分が「置換された」と記載される場合、任意数の水素原子が置換され得る。例えば、４−ヒドロキシフェニルは「置換芳香族炭素環（アリール環）」であり、（Ｎ，Ｎ−ジメチル−５−アミノ）オクタニルは「置換Ｃ８直鎖アルキル単位」であり、３−グアニジノプロピルは「置換Ｃ３直鎖アルキル単位」であり、２−カルボキシピリジニルは「置換ヘテロアリール単位」である。
【０３９６】
以下は、炭素環、アリール、複素環、またはヘテロアリール単位上の水素原子を置換することができる単位の非限定的な例である。
ｉ）Ｃ１〜Ｃ１２直鎖、分枝、または環状アルキル、アルケニル、およびアルキニル；メチル（Ｃ１）、エチル（Ｃ２）、エテニル（Ｃ２）、エチニル（Ｃ２）、ｎ−プロピル（Ｃ３）、イソ−プロピル（Ｃ３）、シクロプロピル（Ｃ３）、３−プロペニル（Ｃ３）、１−プロペニル（２−メチルエテニルも）（Ｃ３）、イソプロペニル（２−メチルエテン−２−イルも）（Ｃ３）、プロプ−２−イニル（プロパルギルも）（Ｃ３）、プロピン−１−イル（Ｃ３）、ｎ−ブチル（Ｃ４）、ｓｅｃ−ブチル（Ｃ４）、イソ−ブチル（Ｃ４）、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｃ４）、シクロブチル（Ｃ４）、ブテン−４−イル（Ｃ４）、シクロペンチル（Ｃ５）、シクロヘキシル（Ｃ６）、
ｉｉ）置換または非置換のＣ６またはＣ１０アリール（例えば、フェニル、ナフチル（本明細書中でナフチレン−１−イル（Ｃ１０）またはナフチレン−２−イル（Ｃ１０）ともいう））、
ｉｉｉ）置換または非置換のＣ６またはＣ１０アルキレンアリール（例えば、ベンジル、２−フェニルエチル、ナフチレン−２−イルメチル）、
ｉｖ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ９複素環（下記）、
ｖ）置換または非置換のＣ１〜Ｃ９ヘテロアリール環（下記）、
ｖｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＯＲ１０１（例えば、−ＯＨ、−ＣＨ２ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＣＨ２ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、および−ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、
ｖｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＣ（Ｏ）Ｒ１０１（例えば、−ＣＯＣＨ３、−ＣＨ２ＣＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＯＣＨ２ＣＨ３、−ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、および−ＣＨ２ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、
ｖｉｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＣ（Ｏ）ＯＲ１０１（例えば、−ＣＯ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＯ２ＣＨ３、−ＣＯ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＯ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＯ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、および−ＣＨ２ＣＯ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、
ｉｘ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０１）２（例えば、−ＣＯＮＨ２、−ＣＨ２ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨＣＨ３、−ＣＨ２ＣＯＮＨＣＨ３、−ＣＯＮ（ＣＨ３）２、および−ＣＨ２ＣＯＮ（ＣＨ３）２）、
ｘ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＮ（Ｒ１０１）２（例えば、−ＮＨ２、−ＣＨ２ＮＨ２、−ＮＨＣＨ３、−ＣＨ２ＮＨＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２、および−ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２）
ｘｉ）ハロゲン（−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、および−Ｉ）、
ｘｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＣＮ、
ｘｉｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＮＯ２、
ｘｉｖ）−ＣＨｊＸｋ、ここで、Ｘはハロゲンであり、添え字ｊは０〜２の整数であり、ｊ＋ｋ＝３（例えば、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨＦ２、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、または−ＣＢｒ３）、
ｘｖ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＳＲ１０１（−ＳＨ、−ＣＨ２ＳＨ、−ＳＣＨ３、−ＣＨ２ＳＣＨ３、−ＳＣ６Ｈ５、および−ＣＨ２ＳＣ６Ｈ５）、
ｘｖｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＳＯ２Ｒ１０１（例えば、−ＳＯ２Ｈ、−ＣＨ２ＳＯ２Ｈ、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＯ２Ｃ６Ｈ５、および−ＣＨ２ＳＯ２Ｃ６Ｈ５）、および
ｘｖｉｉ）−（ＣＲ１０２ａＲ１０２ｂ）ｚＳＯ３Ｒ１０１（例えば、−ＳＯ３Ｈ、−ＣＨ２ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ３ＣＨ３、−ＣＨ２ＳＯ３ＣＨ３、−ＳＯ３Ｃ６Ｈ５、および−ＣＨ２ＳＯ３Ｃ６Ｈ５）
（式中、各Ｒ１０１は、独立して、水素、置換または非置換のＣ１〜Ｃ４直鎖、分枝、または環状アルキル、フェニル、ベンジル、複素環、またはヘテロアリールであるか、あるいは２個のＲ１０１単位は共に３〜７個の原子を含む環を形成することができ、Ｒ１０２ａおよびＲ１０２ｂはそれぞれ独立して水素またはＣ１〜Ｃ４直鎖もしくは分枝アルキルであり、添え字ｚは０〜４である）。
【０３９７】
本開示の目的のために、用語「化合物」、「アナログ」、および「物質の組成物」は、本明細書中に記載の腸アルカリホスファターゼ（ＡＩＰ）アクチベーターまたはインヒビター（全ての鏡像異性体、ジアステレオマー、および塩などが含まれる）を同等に表し、用語「化合物」、「アナログ」、および「物質の組成物」を、本明細書を通して交換可能に使用する。
【０３９８】
本明細書中に開示の化合物には、全ての塩形態（例えば、塩基性基（とりわけ、アミン）および酸性基（とりわけ、カルボン酸）の両方の塩）が含まれる。以下は、塩基性基と塩を形成することができるアニオンの非限定的な例である：クロライド、ブロマイド、ヨージド、硫酸、重硫酸、炭酸、重炭酸、リン酸、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、ピルビン酸、乳酸、シュウ酸、マロン酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、フマル酸、およびクエン酸など。以下は、酸性基と塩を形成することができるカチオンの非限定的な例である：ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、およびビスマスなど。
【０３９９】
本出願を通して、種々の刊行物を参照している。これらの刊行物の全開示は、本出願に関連する最新技術をより完全に説明するために本出願に参照によって援用される。開示のリファレンスはまた、リファレンスに依存する文中で考察される、リファレンス中に含まれる材料について、個別且つ具体的に本明細書中に参照によって援用される。
【実施例】
【０４００】
（Ｅ．実施例）
以下の実施例は、特許請求の範囲に記載の化合物、組成物、製品、デバイス、および／または方法の作製および評価方法の完全な開示および説明をを当業者に提供するために記載する。この実施例は、純粋に例示を意図し、開示を制限することを意図しない。数値（例えば、量、温度など）の精度を保証するように努めたが、いくらかの誤差および偏差が存在するはずである。他で示さない限り、部は重量部であり、温度は℃であるか周囲温度であり、圧力は大気圧であるかほぼ大気圧である。
【０４０１】
（１．実施例１：Ａｋｐ３ノックアウトマウスの腸内でＡｋｐ６が上方制御される）
マウス小腸上皮は、２つの腸特異的ＡＰ遺伝子（Ａｋｐ３およびＡｋｐ６）を発現し、腸特異的でないＡｋｐ５を低レベルで発現する（Ｎａｒｉｓａｗａら，２００７）。これらの遺伝子のゲノム構成を図１に示す。Ａｋｐ３、Ａｋｐ５、およびＡｋｐ６によってコードされるＡＰタンパク質を、それぞれ、十二指腸ＩＡＰ（すなわちｄＩＡＰ）、胚ＡＰ（すなわちＥＡＰ）、および大域ＩＡＰ（すなわちｇＩＡＰ）と指定した。ｄＩＡＰおよびｇＩＡＰのペプチド配列は８７％相同である一方で、ＥＡＰは他に対しわずかに低い配列同一性を示す。３つの遺伝子によってコードされる組換え型タンパク質を使用した動態研究により、
【０４０２】
【表２】
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ｄＩＡＰは、最も高いＫｍ値を有し、アルカリ性ｐＨで人工基質ｐ−ニトロフェニルホスフェート（ｐＮＰＰ）を使用して、少なくともインビトロで最も有効な酵素のようであることを示した（表２）。
【０４０３】
ノーザンブロット分析およびウェスタンブロット分析は、Ａｋｐ３（ｄＩＡＰ）はもっぱら十二指腸に発現する一方で、Ａｋｐ６（ｇＩＡＰ）は小腸全体に発現することを示す。着床前胚および精巣において最初に同定されたＡｋｐ５（ＥＡＰ）（Ｈａｈｎｅｌら，１９９０，Ｎａｒｉｓａｗａら，１９９２）はまた、小腸全体に低レベルで発現する。遺伝子特異的プローブを使用したノーザンブロット（図２）は、遠位小腸中のＡｋｐ６発現がＡｋｐ３−／−マウスで上方制御されること、ならびに、トウモロコシ油を強制的に与えたか、または高脂肪食を与えた野生型マウスおよびＡｋｐ３ヌルマウスの両方は空腸および回腸中のＡｋｐ６  ｍＲＮＡレベルが増加することを示す。
【０４０４】
ノーザンブロットによって示されるように、Ａｋｐ３発現は生後約１５日目から開始される一方で、Ａｋｐ５およびＡｋｐ６は全生後段階で発現される（図３）。抗体を、Ａｋｐ３、Ａｋｐ５、およびＡｋｐ６配列から推定される特異的ペプチドに対して作製した。ウェスタン分析により、十二指腸サンプル中に８０〜７５ｋＤａの広域バンド（高グリコシル化タンパク質に典型的なパターン）としてｄＩＡＰタンパク質を同定した（還元条件下でのＳＤＳ−ＰＡＧＥ）。ｇＩＡＰが小腸全体に検出され、分子量は約７５ｋＤａであった。興味深いことに、離乳前の段階の腸は、ｇＩＡＰについて以下の少なくとも２つの異なる分子サイズを示した：約７５ｋＤａおよび約５５ｋＤａ。小さい方の種は、非修飾ＧＰＩアンカーｇＩＡＰポリペプチドの推定分子量（５４，５２６Ｄａ）に対応する（図４中の２日目および１０日目）。腸セグメント４（遠位２５％）中で認められた大きい方のバンドは、成体の腸で検出されたｇＩＡＰと同一サイズのようである。これらのｇＩＡＰイソ型の触媒性を試験するために、２日齢ＷＴマウス由来の４つの腸セグメント（近位から遠位のそれぞれ２５％）を、０．１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００を含むトリス緩衝液（ｐＨ８．９）中でホモジナイズし、ｎ−ブチルアルコールで抽出した。抽出物（タンパク質濃度１．５ｍｇ／ｍｌ）を、抗ｇＩＡＰ抗体（＃３７６６）でコーティングした９６ウェルプレート中でインキュベートした。特異的に結合したｇＩＡＰタンパク質の酵素活性を、連続濃度の基質（２０、１０、５、２．５、１．２５、および０ｍＭ  ｐＮＰＰ）を使用して測定した。腸セグメント３（空腸に対応）は、セグメント１（十二指腸；０．８６±０．１３ｍＭ）またはセグメント４（回腸；１．００±０．４４ｍＭ）より低いＫｍ値（０．７７±０．２０ｍＭ）を示した。酵素活性もセグメント３でより低かった（図４の左下）。分子量の変化が特にポリラクトサミンによるＮ結合グリコシル化（Ｆｕｋｕｄａ  ＭＮ，１９９２）に関連するかどうかを評価するために、２日齢マウス由来のセグメント１のブタノール抽出物を、抗ｇＩＡＰ抗体コーティング９６ウェルプレート上に結合させた。洗浄後、ウェルを０．００３単位のエンド−β−ガラクトシダーゼで１６時間処理した。エンド−β−ガラクトシダーゼは、ポリラクトサミン中のβ−ガラクトシド結合を特異的に切断する。この酵素処理により、ｇＩＡＰ活性がセグメント３に匹敵するレベルまで減少した。これは、ポリラクトサミンの変化がｇＩＡＰの触媒特性を調整することを示す。ＥＡＰについて類似の変化を認めた（図４の右下）。これらのデータは、新生児消化管の空腸の一部中の腸細胞がこれらの糖タンパク質を完全にグリコシル化することができないことを示し、このことは、出生後消化管におけるガラクトシル−トランスフェラーゼの発育上の発現と一致する（Ｏｚａｋｉら，１９８９）。近位および遠位の腸内の活性なｇＩＡＰ酵素は、新生動物の口腔および大腸由来の病原性細菌を無毒化するのに有利であり得る。出生後早期において任意の活性なＩＡＰを欠く腸粘膜領域の存在もまた、免疫系に、完全な／リン酸化ＬＰＳを有する一定の細菌に対する耐性を生じさせ得、将来的に成体段階で腸内��菌叢との共生／片利共生関係を確立することができる。
【０４０５】
（２．実施例２：腸アルカリホスファターゼは経腸栄養によって維持される消化管粘膜防御因子である）
（ｉ．組換え型ＩＡＰを過剰発現する細胞におけるＬＰＳシグナル伝達に及ぼすＩＡＰ発現の影響）
細菌に対する腸障壁系におけるＩＡＰの役割を評価するために、組換え型ヒトＩＡＰを発現する安定にトランスフェクトされた腸細胞株を産生した。ＩＡＰを発現しない親細胞（結腸直腸がん細胞株，ＨＴ−２９）をＬＰＳに曝露した場合、ＬＰＳシグナル伝達が活性化され、Ｒｅｌ／ｐ６５複合体が核に移行した一方で、ＩＡＰを過剰発現する形質転換体細胞中のシグナル伝達は遮断された（図５Ａ）。ＩＡＰを過剰発現するラット腸細胞株ＩＥＣ−６およびＩＥＣ−６細胞を、Ｒｅｎｉｌｌａルシフェラーゼを発現する標準化プラスミド（デュアル−ルシフェラーゼレポーター系，Ｐｒｏｍｅｇａ）と共に、ＮＦ−κＢ応答エレメントの調節下のホタルルシフェラーゼレポーター遺伝子でトランスフェクトした。種々のＬＰＳ濃度への細胞の曝露により、親細胞のみにおいてＮＦ−κＢ応答エレメント由来のホタルルシフェラーゼが活性化され、ＩＡＰ過剰発現細胞においては活性化を検出しなかった（図５Ｂ）。細胞をＬＰＳ（１μｇ／ｍＬ）またはビヒクルに０〜３０分間曝露して、ＬＰＳシグナル伝達状態を分析した。ウェスタンブロット分析を、Ｐｉｅｒｃｅ（Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ）のＮＥ−ＰＥＲ核および細胞質抽出試薬キットを使用して調製したホールセル（ｗｈｏｌｅ−ｃｅｌｌ）溶解物に対して行い、サイトゾルシグナル伝達タンパク質（リン酸化ＩκＢα）に特異的な抗体で調べた。ＩＡＰを発現するＩＥＣ−６細胞は、ＩκＢαリン酸化の増加を示さず、このことは、ＬＰＳシグナル伝達が遮断されたことを示した（図５Ｃ）。
【０４０６】
（ｉｉ．ＩＡＰ過剰発現細胞由来の抽出物のＬＰＳ脱リン酸化活性）
親ＨＴ−２９細胞、ＨＴ−２９／ＩＡＰトランスフェクタント、および５ｍＭ酪酸ナトリウムで処理したＨＴ−２９細胞（酪酸ナトリウムは、核ＤＮＡのメチル化の変化によって内因性ＩＡＰを誘導する）を使用して、ＬＰＳ脱リン酸化活性を測定した。Ｍｅｍ−ＰＥＲ真核生物膜タンパク質抽出キット（Ｐｉｅｒｃｅ）を使用して、細胞を最初にサイトゾルと膜に分離した。ＭＡＰＫ活性を、サイトゾルコントロールとして使用した。ＬＰＳ（５ｍｇ／ｍＬ）を溶解物に２時間添加し、次いで、マラカイトグリーン溶液（０．０１％マラカイトグリーン、１６％硫酸、１．５％モリブデン酸アンモニウム、および０．１８％Ｔｗｅｅｎ−２０）を添加し、１０分間インキュベートした（Ｂａｙｋｏｖら，１９８８）。次いで、バックグラウンドの読み取りを考慮して分光光度的定量によって活性を決定し、結果を６３０ｎｍの吸光度で示した。ＨＴ−２９／ＩＡＰ細胞の未分画の全溶解物は高活性を示し、組換え型ＩＡＰがＧＰＩアンカーを含むため、膜画分は活性のほとんどを含んでいた（図６Ａ）。内因性ヒトＩＡＰを、酪酸ナトリウム処理によってＨＴ−２９親細胞中に誘導し、２４時間誘導由来のサンプルは、形質転換体細胞と同レベルのＬＰＳ脱リン酸化活性を示した（図６Ｂ）。この結果は、内因性ＩＡＰおよび組換え型ＩＡＰ（細胞膜上に発現）が基質としてＬＰＳを脱リン酸化することができることを示す。
【０４０７】
（ｉｉｉ．ＷＴマウスおよびＡｋｐ３−／−マウス由来の十二指腸サンプルのＬＰＳ脱リン酸化活性）
ＷＴおよびＡｋｐ３−／−同腹仔マウス由来の十二指腸粘膜を抽出し、ＬＰＳ脱リン酸化活性を、上記と同一の手順を使用して試験した。マウス十二指腸は、ｄＩＡＰを強く発現し、加えて、ｇＩＡＰおよびＥＡＰをより低いレベルで発現する。基質としてｐＮＰＰを使用した十二指腸抽出物中のＡＰ活性を図７Ａに示す。Ａｋｐ３−／−十二指腸中の残存活性のほとんどは、ｇＩＡＰおよび非常に少量のＥＡＰの発現に起因する。絶食によってｄＩＡＰ発現が減少したが、再摂取により、ＷＴマウスにおけるｄＩＡＰ発現が回復した。同一サンプルのＬＰＳ脱リン酸化活性を図７Ｂに示す。ＷＴ十二指腸は、ノックアウトマウスと比較して有意により高いＬＰＳ脱リン酸化活性を示し、再摂取後に活性が戻った。したがって、ｄＩＡＰサイレンシングにより、宿主自身を管腔ＬＰＳ曝露から防御する宿主の能力が損なわれ得る。ＷＴとＡｋｐ３−／−との間のｐＮＰＰａｓｅ活性の相違（図７Ａ）は、ＬＰＳ脱リン酸化活性の相違より大きい（図７Ｂ）。このデータは、ｄＩＡＰおよびｇＩＡＰの両方がインビトロでＬＰＳを脱リン酸化することができることを示す。組換え型ｄＩＡＰは、ｐＮＰＰアッセイにおいてｇＩＡＰよりもはるかに高い活性を有する（Ｋｍ；ｄＩＡＰ対ｇＩＡＰ：１．１±０．３４対０．７９±０．１７）。このことは、ｐＮＰＰａｓｅアッセイで認められた相違を説明することができる。
【０４０８】
（３．実施例３：ＩＡＰの酵素活性を特異的に調整する小分子を同定するための包括的化学ライブラリーのスクリーニング）
（ｉ．方法）
（ａ．酵素の産生）
ヒトＩＡＰ、ＴＮＡＰ、ＰＬＡＰ、ＧＣＡＰ、マウスＴＮＡＰ、ｄＩＡＰ、ＥＡＰ、またはｇＩＡＰ（分泌形態）（ＦＬＡＧタグ化）のｃＤＮＡを含む発現ベクターｐＣＭＶ−Ｓｃｒｉｐｔを、標準的なエレクトロポレーション法を使用して、一時的発現のためにＣＯＳ−１細胞にトランスフェクトする。ＧＰＩアンカー部位をＦＬＡＧ配列と置換して、培地に分泌されるタンパク質を作製し、抗ＦＬＡＧ抗体によって固定された形態でその動態を試験した（Ｎａｒｉｓａｗａら，２００７）。２４時間後に培地を無血清培地Ｏｐｔｉ−ＭＥＭ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）に変更し、エレクトロポレーションから６６時間後に分泌したタンパク質を含む培地を収集した。２μｍ酢酸セルロース膜で濾過した改良培地に０．１％ＢＳＡを補い、等分し、−８０℃で保存した。
【０４０９】
一次ハイスループットスクリーニングで使用すべきヒトＩＡＰを大量に産生する。最大で２００，０００ウェルについて（各プレート中にブランクおよびネガティブコントロールを含む）、およそ１６００ｍｌの組換え型ヒトＩＡＰワーキング溶液（８μｌ／ウェル×２００，０００）を使用する。ワーキング溶液は５分間のｐＮＰＰ比色アッセイでΔＯＤ４０５（速度）約３００を示すＡＰ活性を有するストック溶液の、８０倍希釈液である。したがって、最少で２０ｍｌのストック溶液（１６００÷８０）が必要である。酵素ストックを、１００μｇプラスミドＤＮＡを使用してＣＯＳ−１細胞の１０の１５ｃｍφプレートから調製する［１０プレート×（１０μｇＤＮＡ／１×１０７細胞／１５ｃｍφプレート）］。
【０４１０】
（ｂ．アッセイプロトコール）
化合物アリコート（１００μＭの１０％ＤＭＳＯを４μＬ）を、アッセイ緩衝液（２５０ｍＭ  ＤＥＡ（ｐＨ９．８）、−２．５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、−０．０５μＭ  ＺｎＣｌ２）で８０倍に希釈したヒトＩＡＰストック溶液の８μＬのヒトＩＡＰワーキング溶液に添加する。基質ＣＤＰ−Ｓｔａｒ（２−クロロ−５−（４−メトキシスピロ｛１，２−ジオキセタン−３，２’（５’−クロロ）−トリシクロ［３．３．１．１］３，７デカン｝−４−イル）−１−フェニルホスフェート二ナトリウム（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｂｉｏｌａｂｓ））の溶液（水中１２５μＭの８μＬ）を各ウェルに添加する。基質としてｐＮＰＰを使用した古典的な比色アッセイではなく一次スクリーニングのためにＣＤＰ−Ｓｔａｒ系を選択する。なぜなら、ＣＤＰ−Ｓｔａｒとの化学発光反応はより高い感度を有し、ライブラリー中および／または組織抽出物のいくつかの化合物の内因性の吸光度に影響を受けないからである。ＣＤＰ−Ｓｔａｒの最終濃度（４４２．５μＭ）は、アッセイ緩衝液中で決定したＫｍ値に等しい。ヒトＩＡＰワーキング溶液およびＣＤＰ−Ｓｔａｒの分注を、ＷｅｌｌＭａｔｅバルクディスペンサー（Ｍａｔｒｉｘ）を使用して処理する。プレート（白色３８４ウェル少量Ｇｒｅｉｎｅｒ  ７８４０７５）を室温で３０分間インキュベートし、発光シグナルをＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  ＥｎＶｉｓｉｏｎマルチモードプレートリーダーを使用して測定する。Ｌ−フェニルアラニン（１ｍＭ最終濃度）および２％ＤＭＳＯを、それぞれ、阻害コントロールおよびブランクとして使用する。データ分析を、ＣＢＩＳソフトウェア（ＣｈｅｍＩｎｎｏｖａｔｉｏｎｓ，Ｉｎｃ）を使用して処理する。手順を図１３にまとめている。
【０４１１】
（ｃ．アクチベーターを同定するためのストラテジー）
化学ライブラリースクリーニングのために使用されるデータ分析ソフトウェアを、「インヒビター」を同定するためにデザインする。したがって、分析由来の正の数は「正の阻害」を意味する一方で、負の数は「酵素反応の増加／活性化」を示す。負の値を示した各化合物を、一次スクリーニングにおいて手作業で試験して、偽シグナル／人為的結果の可能性を排除する。
【０４１２】
ＣＤＰ−Ｓｔａｒ系を使用した用量依存性アッセイを、手作業の試験で再現性のある結果が得られた化合物のために使用する。化合物を希釈し（１００ｍＭ〜０．０３ｍＭ）、基質添加前にヒトＩＡＰ酵素と３０分間インキュベートする。同時に、ヒトＴＮＡＰ、ヒトＰＬＡＰ、ヒトＧＣＡＰ、マウスＴＮＡＰ、マウスｄＩＡＰ、マウスＥＡＰ、およびマウスｇＩＡＰを試験して、酵素特異性を決定する。各酵素量を、３０分間の反応について約０．５ΔＯＤ４０５（速度）を与えるＡＰ活性に正規化し、０ｍＭ化合物を使用したオリジナル値からの％変化として最終データをプロットする。
【０４１３】
（ｄ．解釈）
酵素インヒビターは、しばしば、アロステリック、競合的、非競合的（ｕｎｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ）、または非競合的（ｎｏｎｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ）と分類されるが、酵素および基質に対する酵素アクチベーターの相互作用は、インヒビターとは異なり得る。インビボで作用する分子を同定することが望ましい。したがって、ｐＨ９．８およびｐＨ７．５での動態を比較する。中性ｐＨでのアッセイは、より有効にインビボ状況を示す（Ｎａｒｉｓａｗａら，２００７）。中性ｐＨでの感度はロボットシステムで使用するには低すぎるので、アルカリ性ｐＨを一次スクリーニングのために使用する。したがって、この工程での得られたアクチベーターの挙動を、中性ｐＨで試験することができる。スクリーニングストラテジーのまとめを図１４に示す。
【０４１４】
（４．実施例４：インビトロでのＬＰＳ脱リン酸化活性に及ぼす影響）
（ｉ．方法）
（ａ．組換え型ＩＡＰを使用したインビトロでのＬＰＳ脱リン酸化活性に及ぼす影響）
組換え型酵素、ＦＬＡＧタグ化ヒトＩＡＰ、マウスｄＩＡＰ、マウスＥＡＰ、およびマウスｇＩＡＰの溶液を、５分間のｐＮＰＰ比色アッセイについて約０．５ΔＯＤ４０５（速度）を与えるＡＰ活性に正規化し、抗ＦＬＡＧ抗体（Ｓｉｇｍａ）でコーティングした９６ウェルプレート中でインキュベートする。プレートを、ＴＢＳ−０．１％Ｔｗｅｅｎ２０で洗浄する。２０ｍＭ  ＴｒｉｓＨＣｌ（ｐＨ７．５）−１５０ｍＭ  ＮａＣｌ−１ｍＭ  ＭｇＣｌ２−２０μＭ  ＺｎＣｌ２中で調製した５．０ｍｇ／ｍｌのＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ由来のＬＰＳ（０１１１：Ｂ４、Ｆｌｕｋａ）と共に濃度０、３．３、１０、３０μＭのアクチベーターをウェル中で２時間インキュベートする。Ｂｉｏｍｏｌ  Ｇｒｅｅｎ試薬（マラカイトグリーン／モリブデン酸アンモニウム液、Ｂａｙｋｏｖら  １９８８）を添加して放出Ｐｉを測定する。全ポイントを三連で行う。酵素を含まないウェルを、差し引くべきバックグラウンドとして使用する。
【０４１５】
（ｂ．腸サンプルを使用したインビトロでのＬＰＳ脱リン酸化活性に及ぼす影響）
８〜１６週齢のＷＴマウスおよびＡｋｐ３−／−マウス（各対は性別が適合した同腹仔に由来する）を、ＣＯ２ガスで安楽死させる。直ちに小腸を切開し、氷冷ＴＢＳ（２０ｍＭ  ＴｒｉｓＨＣｌ（ｐＨ７．５）−１５０ｍＭ  ＮａＣｌ）中で長手方向に開いて栄養物を除去する。腸を４つのセグメント（それぞれ近位から遠位に２５％の長さ；セグメント１、２、３、４）に分割する。セグメント１は十二指腸を示し、セグメント２および３は主に空腸であり、セグメント４はほとんどが回腸である。各セグメントを、２ｍｌ抽出緩衝液（５０ｍＭ  ＴｒｉｓＨＣｌ（ｐＨ８．９）−１ｍＭ  ＭｇＣｌ２−２０μＭ  ＺｎＣｌ２−０．１％  ＴｒｉｔｏｎＸ−１００）および２ｍｌのｎ−ブタノールを含むチューブにいれる。短時間のボルテックスおよび１５分間の回転後、チューブを１，０００ｇで１０分間スピンする。腸絨毛から放出されたアルカリホスファターゼ含む水相を、１００Ｋｇで１５分間さらに遠心分離して破片を除去する。タンパク質濃度を、ＢＣＡ（Ｐｉｅｒｃｅ）によって決定し、全サンプルを抽出緩衝液で１．５ｍｇ／ｍｌに調整する。組換え型ｇＩＡＰに対して作製されたが、ｄＩＡＰと交差反応するウサギ抗体（＃３７７６）でコーティングした９６ウェルプレートのウェル中でサンプルをインキュベートする（Ｎａｒｉｓａｗａら，２００７）。プレートをＴＢＳ−０．１％  Ｔｗｅｅｎ２０で洗浄し、５．０ｍｇ／ｍｌのＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ由来のＬＰＳ（０１１１：Ｂ４、Ｆｌｕｋａ）をウェル中で２時間インキュベートする。Ｂｉｏｍｏｌ  Ｇｒｅｅｎ試薬（マラカイトグリーン／モリブデン酸アンモニウム液、Ｂａｙｋｏｖら，１９８８）を添加して放出Ｐｉを測定する。全ポイントを三連で行う。ネガティブコントロールウェル（腸ブタノール抽出物なし、アクチベーターなし）を、差し引くべきバックグラウンドとして使用する。予備アッセイでＬＰＳ脱リン酸化活性が得られる腸サンプルを、Ｂｉｏｍｏｌアッセイの前に５．０ｍｇ／ｍｌ  ＬＰＳと共に０、３．３、１０、３０μＭの各アクチベーターと２時間インキュベートする。
【０４１６】
（ｃ．解釈）
ＬＰＳは中性ｐＨの緩衝液中で調製されるので、組換え型ＩＡＰを使用したＬＰＳアッセイに及ぼすアクチベーターの影響は、上記の中性ｐＨでのＣＤＰ−Ｓｔａｒアッセイから得た結果と同等であり得る。腸抽出物を使用したＬＰＳアッセイにおけるアクチベーターを使用しないアッセイは、ｄＩＡＰおよびｇＩＡＰがＬＰＳを脱リン酸化するために同じ能力を有するかどうかを決定することができる。ＷＴマウス由来のセグメント１（十二指腸）抽出物はｄＩＡＰおよびｇＩＡＰの両方を含み、セグメント２、３、４抽出物はｇＩＡＰを含む一方で、Ａｋｐ３−／−マウス由来の全サンプルはｇＩＡＰを含む。ＷＴマウス由来のセグメント１のみがＬＰＳ脱リン酸化活性を示す場合、ｄＩＡＰがＬＰＳの主要な解毒物質（ｄｅｔｏｘｉｆｉｅｒ）である。ＷＴおよびＡｋｐ３−／−由来の他のセグメントが有意な値を示し、他のマウスＡＰに対して交差反応性を持たないｄＩＡＰに対するウサギ抗体（＃８９３３）を使用した独立したアッセイが負の値を示す場合、ｇＩＡＰがＬＰＳの解毒で役割を果たし得る。抗体＃８９３３を使用した空腸および回腸サンプルは、ネガティブコントロールとしての機能を果たし得る。ネガティブコントロール（Ａｋｐ３−／−マウス）が依然として有意な活性を示す場合、ＥＡＰを試験し得る。サンプルを抗ＥＡＰ抗体（＃８９３６）とインキュベートし、Ａｋｐ５−／−マウス（Ｎａｒｉｓａｗａら，１９９７）をネガティブコントロールとして使用した。
【０４１７】
（５．実施例５：ＬＰＳに曝露した野生型マウスおよびＡｋｐ３−／−マウスの腸に及ぼすアクチベーターの影響）
（ｉ．方法）
（ａ．吸収、分布、代謝、および排除（ＡＤＭＥ）パラメーター）
分子のＡＤＭＥプロフィールの評価により、生物学的利用能およびインビボ効能に関する最適な潜在的問題の発見手段が得られる。以下のアッセイおよびスクリーニングを使用して、最適な予想されるインビボでの特徴を有する新規の薬物候補に優先順序をつける。
【０４１８】
ミクロソーム安定性：ミクロソーム安定性アッセイは、肝臓によって代謝される化合物の潜在性に関する不可欠な情報を得るために特異的肝臓ミクロソームを使用する。これを行うために、化合物溶液を種特異的肝臓ミクロソームと３７℃で４５分間までインキュベートする。内部標準を含むメタノールの添加によって、５つの時点で反応を停止させる。タンパク質の沈殿および遠心分離後、サンプルをＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって分析する。
【０４１９】
シトクロムＰ４５０阻害：シトクロムＰ４５０阻害アッセイは、薬学的化合物が重要なシトクロムＰ４５０酵素を阻害する範囲を定量する。これらの酵素の阻害により、潜在的な薬物−薬物相互作用を予想することができる。この手順のために、化合物を、特異的シトクロムＰ４５０プローブ基質の存在下でミクロソームおよびＮＡＤＰＨとインキュベートする。インキュベーション後、内部標準を含むメタノールを添加して反応を停止させる。種々のイソ型（ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｃ１９、ＣＹＰ２Ｄ６、およびＣＹＰ３Ａ４）について、代謝産物をＬＣ−ＭＳ／ＭＳを使用してモニタリングする。ビヒクルコントロールと比較した代謝産物形成の減少を使用して、ＩＣ５０値を計算する。既知の選択的Ｐ４５０インヒビターを、試験化合物と共に結果の有効性を評価するためのコントロール反応物として含める。
【０４２０】
透過性：並行人工膜透過アッセイ（ＰＡＭＰＡ）は、人工ヘキサデカン膜を介した試験化合物の受動拡散を測定する。プロトコールを、薬物物質の受動的な経細胞透過を予想するようにデザインした。化合物溶液（緩衝液中、最少のＤＭＳＯ）を、プレートのドナー区画への添加前に濾過する。予め調製した人工膜を介したレシーバー（ｒｅｃｅｉｖｅｒ）区画への透過を、室温で５時間のインキュベーション後に測定する。濾過した試験化合物溶液から分析標準を調製する。化合物を、サンプルの適切な希釈物を使用し、５点較正を使用してＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析によって定量する。各化合物についての４つまでの見かけ上の透過性係数を、実験回収率と共に計算する。
【０４２１】
（ｂ．短時間インビボ試験）
アクチベーターを、０．２ｍｌ  ＰＢＳならびに０、３、および９ｍｇ／ｋｇ体重で調製し、経管栄養（ｇａｖａｇｅ）によって与える。Ｌ−フェニルアラニン（公知のＩＡＰインヒビター）を、ネガティブコントロール群に投与する（４０ｍｇ／ｋｇ）。１０分後、０．２ｍｌ  ＰＢＳ中に溶解したＬＰＳ（０１１１：Ｂ４、Ｆｌｕｋａ）を、２０ｍｇ／ｋｇ体重で経管栄養によってアクチベーター処置マウスに投与する。２時間後にマウスをＡｖｅｒｔｉｎ（ＩＰ、１５μｌ／ｇ）で麻酔して、心穿刺によって血液および腸組織を収集する。腸セグメントをウェスタンブロットによって分析し、リン酸化ＩκＢαおよびリン酸化ＮＦ−κＢ／ｐ６５に対する抗体を使用して、ＬＰＳシグナル伝達の活性化を試験する。腸セグメントの一部を４％パラホルムアルデヒドで固定し、これを免疫組織化学のために使用してｐ６５の核移行を比較する（ＤｅＰｌａｅｎら，２０００）。血清中の活性ＬＰＳレベルを、カブトガニアメーバ様細胞溶解物ベースのＬＰＳ検出キットであるＰｙｒｏｃｈｒｏｍｅ色素形成試験キット（Ｃａｐｅ  Ｃｏｄ，Ｉｎｃ．）によって測定する。全経管栄養実験を、８〜１６週齢のＷＴマウスおよびＡｋｐ３−／−マウスの３つの対（各対は性別が適合した同腹仔に由来する）で行う。
【０４２２】
（ｃ．２４時間インビボ試験）
マウスを、アクチベーター化合物（０、１００、または３００μｇ／ｍｌ）を含む給水器（ｗａｔｅｒ  ｂｏｔｔｌｅ）と共に収容する。体重が３０ｇの１匹のＣ５７Ｂｌ／６マウスが２４時間に約８ｍｌの水を摂取するので、２４時間のアクチベーターの全取り込みは約０、０．８、または２．４ｍｇのはずである（Ｂａｃｈｍａｎｏｖら，２００２）。ＰＢＳ中に調製したＬＰＳを経管栄養（２０ｍｇ／ｋｇ）によって投与し、同時に、アクチベーターを含む給水器を新しくする。２４時間後、アクチベーターを飲んだマウスをＡｖｅｒｔｉｎ（ＩＰ、１５μｌ／ｇ）で麻酔し、血液および腸組織を収集する。サンプルを、ＬＰＳ測定、ウェスタンブロット、および免疫組織化学、ならびに短期間インビボ試験のために処理する。
【０４２３】
【表３】
2011521916.tif 000189
全経管栄養実験を、８〜１６週齢のＷＴマウスおよびＡｋｐ３−／−マウスの３つの対（各対は性別が適合した同腹仔に由来する）で行う。
【０４２４】
（ｄ．解釈）
短期間試験は、高濃度のアクチベーターがＬＰＳ曝露時に十二指腸中などに存在する場合のＩＡＰ活性化の影響を示す。アクチベーターを使用しないＷＴマウスよりもアクチベーターを使用したＷＴマウスで、血清中の活性ＬＰＳレベルおよびＬＰＳシグナル伝達レベルの低下が認められる一方で、アクチベーターを使用するＡｋｐ３−／−マウスおよび使用しないＡｋｐ３−／−マウスでこれらが増加する場合、このアクチベーターはｄＩＡＰのＬＰＳ解毒を補助している。２４時間試験は、腸全体で長期間起こるＬＰＳ曝露に及ぼすＩＡＰアクチベーターの影響を観察することである。２４時間試験は比較的低濃度で長期間効能を維持することを示すので、２４時間試験および短期間試験で正の結果を示すアクチベーターは望ましい分子である。
【０４２５】
ＷＴ動物におけるＬＰＳシグナル伝達を予防／軽減するが、Ａｋｐ３−／−動物において効果がないアクチベーターは、十二指腸中で発現したｄＩＡＰを活性化すると解釈することができる。ＷＴ動物およびＡｋｐ３−／−動物の両方がアクチベーターの使用でＬＰＳシグナル伝達の減少を示す一方で、Ｌ−フェニルアラニンを使用したＷＴマウスおよびＡｋｐ３−／−マウスがＬＰＳシグナル伝達の増加を示す場合、この化合物は、小腸全体に発現したｇＩＡＰ／ＥＡＰを活性化することができ、ＬＰＳ脱リン酸化を促進することができる。この場合、ｇＩＡＰのみを含むＡｋｐ５−／−動物由来の回腸サンプルを試験し得る。
【０４２６】
（６．実施例６：細菌傷害および腫瘍発生からの胃腸管の防御）
哺乳動物腸粘膜の重要な機能は、栄養を消化および吸収する一方で、管腔の微生物および毒素に対する障壁を提供することである。飢餓および／または疾患の条件下で腸障壁が損なわれるようになり、有意な罹患率および死亡率を導くことが明らかである（Ｍｕｌｌｅｒら，２００５  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ  ６２：１２９７−１３０）。腸アルカリホスファターゼ（ＩＡＰ）（刷子縁酵素）は、絨毛関連腸細胞中にもっぱら発現する。ＩＡＰ発現は絶食によって下方制御される一方で、栄養性（ｔｒｏｐｉｃ）経腸栄養はＩＡＰ発現を回復する（Ｈｏｄｉｎら，１９９４，Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  ２６６：Ｇ８３−Ｇ８９）。いくつかの研究により、ＩＡＰは、その内毒素効果の主な供給源である脂質Ａ構造の脱リン酸化を介して、細菌リポ多糖（ＬＰＳ）（グラム陰性菌の細胞壁の主成分）を解毒することができることが示されている（Ｐｏｅｌｓｔｒａら，１９９７  Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ：１５６７−１５７２；Ｂｅｎｔａｌａら，２００２，Ｓｈｏｃｋ  １８：５６１−５６６）。ＬＰＳ曝露はＩＡＰ発現を誘導する（Ｋａｐｏｊｏｓら，２００３，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｅｘｐ．Ｐａｔｈｏｌ．８４：１３５−１４４）。以前の研究では、離乳前に新生児型から成体型に腸内細菌叢の集団が劇的に変化する場合にＩＡＰ発現が開始され、ＩＡＰは細菌侵入に対する粘膜防御因子として作用することが示されている（Ｎａｒｉｓａｗａら，２００７，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．２３：７５２５−７５３０；Ｂａｔｅｓら，２００７，Ｃｅｌｌ  Ｈｏｓｔ  ａｎｄ  Ｍｉｃｒｏｂｅ  ２：３７１−３８２；Ｇｏｌｄｂｅｒｇら，２００８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １０５：３５５１−３５５６）。ＩＡＰ−／−マウスでは、細菌侵入が虚血／再灌流後に重篤であり（炎症を伴う腸損傷の臨床的に関連するモデル）、重病で観察される栄養性（ｔｒｏｐｉｃ）経腸栄養の有利な影響はＩＡＰ機能の維持の結果であるという概念が支持される（Ｇｏｌｄｂｅｒｇら，２００８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １０５：３５５１−３５５６）。さらに、消化管中の高レベルのＬＰＳと炎症性腸疾患（ＩＢＤ）発症との間の関連は十分に確立されており（Ｌｏｆｔｕｓら，２００２，Ａｌｉｍｅｎｔａｒｙ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ＆  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  １６：５１−６０）、ＩＡＰ投与はＩＢＤ処置として提案されている（Ｐｏｅｌｓｔｒａら，１９９７，Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１５１：１１６３−１１６９；Ｂｅｕｍｅｒら，２００２，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．３０７：７３７−７４４）。
【０４２７】
結腸直腸がん（頻繁な悪性腫瘍）は、西半球における主要な死因であり、自発的に発症するか、またはクローン病、潰瘍性大腸炎、およびＩＢＤなどにおける慢性腸炎の長期合併症として発症する（ＸｉｅおよびＩｔｚｋｏｗｉｔｚ，２００８，Ｗｏｒｌｄ  Ｊ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．１４：３７８−３８９）。結腸直腸がんを、結腸炎関連がん（すなわち、ヒトにおける結腸直腸がんと酷似するアゾキシメタン（ＡＯＭ）誘導性結腸指向性（ｃｏｌｏｎｏｔｒｏｐｉｃ）発癌）のマウスモデルを使用して研究することができる。アゾキシメタン（ＡＯＭ）は、ＤＮＡのアルキル化、それによる塩基の誤対合の促進によって癌を開始させることができる化学薬品である（Ｐａｐａｎｉｋｏｌａｕら，１９９８，Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ  ２１：１５６７−１５７２）。ＡＯＭ自体は最終的な発癌性代謝産物を示さず、段階的に活性化され（肝臓内のシトクロムＰ４５０によって媒介されるヒドロキシル化工程が含まれる）（Ｓｏｈｎら，２００１，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６１：８４３５−８４４０）、胆汁内分泌後、結腸細菌叢によってさらに代謝される（Ｆｉａｌａら，１９７７，Ｃａｎｃｅｒ  ４０，２４３６−２４４５；Ｒｅｄｄｙら，１９７４，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．３４：２３６８−２３７２）。ＡＯＭのみの反復投与によって自発的腫瘍形成を駆動することができる一方で、腫瘍形成は、プロ炎症薬であるデキストラン硫酸ナトリウム（ＤＳＳ）によって非常に促進される（Ｔａｎａｋａら，２００３，Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｃｉ．９４：９６５−９７３；Ｎｅｕｆｅｒｔら，２００７，Ｎａｔｕｒｅ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ８：１９９８−２００１）。単回ＡＯＭ注射およびＤＳＳの組み合わせにより、結腸炎関連腫瘍発症モデルを作製する。ヒトにおける双生児研究により、胃腸管炎症性疾患および腫瘍発症に対する感受性のための強い遺伝子成分が、胃腸管上皮の完全性の喪失および宿主の遺伝的背景によって許容される特定の細菌集団プロフィールに起因する炎症に同様に関連することが示されている（Ｄｅ  ｌａ  Ｃｈａｐｅｌｌｅ，２００４）。ＩＡＰは、毒素代謝を変えることによって、または上皮完全性を損なうことによって引き起こされる炎症に対する感受性を変えることよって、結腸癌の発症リスクを変化させることができる。
【０４２８】
本明細書中に示すように、ＩＡＰレベルは、細菌傷害および結腸直腸がんの開始に関与している。結果は、ＩＡＰレベルの減少によって胃腸管内の細菌傷害レベルが増加し、結腸直腸がんリスクも増加することを示す。
【０４２９】
（ｉ．方法）
ＩＡＰノックアウトマウスモデルは、以前に開発および特徴付けられている（Ｎａｒｉｓａｗａら，２００３，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．２３：７５２５−７５３０）。さらに、マウス消化管中のＩＡＰ発現は離乳直前（胃腸内細菌叢の変化と一致する時期）に開始されると以前に決定された（Ｎａｒｉｓａｗａら，２００７，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ．Ｌｉｖｅｒ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．２９３：１０６８−１０７７）。内因性管腔細菌／毒素に対する粘膜防御を崩壊させることが公知の虚血性傷害中にＩＡＰ−／−マウスの感受性をまた研究した（Ｇｏｌｄｂｅｒｇら，２００８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １０５：３５５１−３５５６）。
【０４３０】
（ｉｉ．結果）
（ａ．ＷＴマウスおよびＫＯマウス中の細菌数）
ＷＴ動物およびＫＯ動物の両方を、標準的な上腸間膜動脈結紮技術およびその後の再灌流である虚血／再灌流（Ｉ／Ｒ）モデルを使用して研究した（Ｈｉｎｎｅｂｕｓｃｈら，２００２，Ｊ  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ  Ｓｕｒｇ  ６：４０３−４０９）。ＷＴマウスおよびＩＡＰ  ＫＯマウスを、４５分間の上腸間膜動脈結紮クランプおよびその後の種々の時間の再灌流に供した。偽開腹手術および介入なしをコントロールとして使用した。腸間膜組織を収集し、節内の細菌数を決定した。偽マウスを、全実験においてコントロール目的のために使用した。ＩＡＰが消化管細菌転移からマウスを防御することがデータから明らかである。腸障壁がＷＴ動物およびＫＯ動物の両方で破壊されるようになったにもかかわらず、ＩＡＰの存在は、多数の細菌が粘膜障壁を交差して腸間膜リンパ節に侵入するのを予防していた。（図１５を参照のこと）。
【０４３１】
（ｂ．ＷＴマウスおよびＥｔｓ２Ａ７２／Ａ７２マウスで使用した９週目のＡＯＭ／ＤＳＳ腫瘍モデル）
ＡＯＭ／ＤＳＳ腫瘍モデルを使用して、マウスにおけるＩＡＰの影響および腫瘍形成を決定した。ＡＯＭをＷＴマウスおよびＥｔｓ２Ａ７２／Ａ７２マウスの両方に投与し、その後にＤＳＳを５日間投与し、その後に回復期があった。６〜８週齢のＩＡＰ  Ｅｔｓ２Ａ７２／Ａ７２およびＷＴ同胞コントロールマウスに、１２．５ｍｇ／ｋｇのＡＯＭまたはＰＢＳ（ビヒクルのみ）を腹腔内に（ｉ．ｐ．）投与した。５日後、マウスを、飲料水中２．５％デキストラン硫酸ナトリウム（ＤＳＳ）を５日間およびその後に通常の水を１６日間のサイクルに供した。サイクルをもう一度繰り返した。最終サイクルでは、マウスに２％ＤＳＳを４日間投与し、その後に通常の水を１０日間投与した（図１６を参照のこと）。処置中、マウスを毎日秤量し、下痢および直腸出血について視覚的に検査する。実験終了時、組織学的試験のために、全マウスを屠殺し、結腸、脾臓、および腸間膜リンパ節を収集した。下痢および時折の直腸出血は結腸炎の結果であり、これらのパラメーターをモニタリングして疾患の開始および進行を検出した。マウスは、典型的には、ＤＳＳ後３〜４日間体重が減少し続けるが、その後に回復する。脱水が認められる全動物を、皮下乳酸加リンゲル液で処置した。
【０４３２】
６９％（９／１３）のＷＴマウスが肉眼で見える腺腫を発症した。Ｅｔｓ２Ａ７２／Ａ７２マウスでは、９２％（１３／１４）の動物が９週目までに腫瘍を発症した。これは、ＷＴと比較してＥｔｓ２Ａ７２／Ａ７２動物での腫瘍形成の３３％増加である。さらに、Ｅｔｓ２Ａ７２／Ａ７２動物は、ＷＴ動物と比較して動物あたり３倍の腫瘍数を発症した（図１７を参照のこと）。組織学的分析により、腫瘍が腺腫であることを確認した。
【０４３３】
（ｃ．ＷＴマウスおよびＥｔｓ２Ａ７２／Ａ７２マウスで使用した１９週目のＡＯＭ／ＤＳＳ腫瘍モデル）
上記と同一のＡＯＭ／ＤＳＳ腫瘍モデルを使用して、マウスにおけるＩＡＰの影響および腫瘍形成を決定した。ＡＯＭをＷＴマウスおよびＥｔｓ２Ａ７２／Ａ７２マウスの両方に投与し、その後にＤＳＳを５日間投与し、その後に回復期があった。このサイクルを３回繰り返し（９週間）、動物にさらに１０週間腫瘍を発症させ、その後に動物を屠殺し、器官を採取した。
【０４３４】
７０％のＥｔｓ２Ａ７２／Ａ７２（ＡＡ）動物が癌を発症した一方で、３０％未満のコントロール動物が腫瘍を発症した（図１８Ａ）。また、動物あたりの平均腫瘍数は、Ｅｔｓ２Ａ７２／Ａ７２マウスにおいてはるかに多かった。各Ｅｔｓ２Ａ７２／Ａ７２マウスは約５個の腫瘍を有していた一方で、ＷＴマウスはほぼ１個の腫瘍しか有していなかった（図１８Ｂを参照のこと）。しかし、２つのマウス型の平均腫瘍サイズが有意に異なることはなかった（図１８Ｃ）。
【０４３５】
Ｅｔｓ２Ａ７２／Ａ７２マウスと比較してＷＴマウスで腫瘍数が減少する場合でさえも、各腫瘍サイズは類似するようである。これは、Ｅｔｓ２欠損マウスの結腸腫瘍形成に対する感受性が腫瘍成長ではなく初期形質転換事象に起因し得ることを示す。
【０４３６】
（ｉｉｉ．考察）
ＡＯＭ／ＤＳＳ腫瘍モデルをまたＷＴマウスおよびＩＡＰ−／−マウスのために使用して、ＩＡＰが有意なメディエーターまたは腫瘍形成であるかどうかを決定することができる。研究を、修正することなく上記のように行うことができる。炎症性腸疾患（ＩＢＤ）はＩＡＰに関与し、ＩＢＤは結腸直腸がんに関与する。このことは、ＩＡＰレベルが結腸直腸がん開始に直接関与し得ることを示す。したがって、ＩＡＰレベルを増加させる本発明化合物の発見により、ＩＢＤおよび結腸直腸がんのリスクを軽減可能である。
【０４３７】
ＩＡＰ活性を「活性化」／増強することができる小分子化合物の検索におけるＨＴＳに適切な堅調なＬＰＳ−脱リン酸化アッセイを開発することができる。本アッセイは、治療薬として将来開発するのに有用であり得る「アクチベーター」を確保するためのスクリーニングのためにヒトＩＡＰを使用することができる。二次スクリーニングでは、一次ヒットをマウスＩＡＰも活性化する能力について試験する。このことは、ＡＯＭ／ＤＳＳマウスモデルにおける追跡研究を可能にする。ヒトおよびマウスの組換え型酵素のグリコシル化パターンが腸細胞中で見出されるパターンと必ず異なり、可変性がＩＡＰの触媒活性に影響を及ぼすことが公知であるので、エクスビボ確認スクリーニングを第３の例で使用することもできる（Ｎａｒｉｓａｗａら，２００７，Ｌｉｖｅｒ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．２９３：１０６８−１０７７）。
【０４３８】
ヒトおよびマウスＩＡＰの両方を活性化させる同定された化合物を実験マウスモデルで評価することができる一方で、化合物を最小の遅延で臨床試験のためにさらに至適にする。インビトロアッセイでＬＰＳ脱リン酸化の有意な活性化を示す化合物を、ＷＴマウスおよびＩＡＰ−／−マウスの胃腸管セグメントを使用したエクスビボ研究のために選択する。なぜなら、ＷＴマウス由来の胃腸管中のＬＰＳ脱リン酸化活性が以前に確立されており、ＩＡＰ−／−十二指腸中で活性が非常に減少することが見出されていたからである（Ｇｏｌｄｂｅｒｇら，２００８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １０５：３５５１−３５５６）。小分子アクチベーターは、ＩＡＰ活性を発現するＷＴ動物由来の検体でＬＰＳ解毒を増強する一方で、ＩＡＰ機能を欠くマウスでは影響は認められない。
【０４３９】
（Ｆ．参考文献）
【０４４０】
【数２】
2011521916.tif 000190
【０４４１】
【数３】
2011521916.tif 000191
【０４４２】
【数４】
2011521916.tif 000192
【０４４３】
【数５】
2011521916.tif 000193
【図１】
2011521916.tif 000239
【図２】
2011521916.tif 000240
【図３】
2011521916.tif 000241
【図４】
2011521916.tif 000242
【図５Ａ】
2011521916.tif 000243
【図５Ｂ】
2011521916.tif 000244
【図５Ｃ】
2011521916.tif 000245
【図６Ａ】
2011521916.tif 000246
【図６Ｂ】
2011521916.tif 000247
【図７Ａ】
2011521916.tif 000248
【図７Ｂ】
2011521916.tif 000249
【図８】
2011521916.tif 000250
【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
2011521916.tif 000260
【国際調査報告】
2011521916.tif 000261