(57)【要約】本発明のクラスの化合物は、式（Ｉ）で表すことができ、式中、Ｘは、Ｏ、Ｓ、またはＮとすることができる。Ｒ１およびＲ２は独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アリール、アリールアルキル、またはアルキルアリールである。Ｒ３およびＲ４は独立に、Ｈ、４から６個の炭素原子を有する、アリール基、ヘテロアリール基、およびヘテロ環式環基であり、アリール、ヘテロアリール、およびヘテロ環式の部分は、本明細書で定義する第１の置換基の１つまたは複数で場合によっては置換されている。別の実施形態において、Ｒ３およびＲ４は、結合している原子および結合と共に、環構造内に少なくとも１個の窒素原子を有する場合によって置換されている５〜７員環を形成する。
2011521978.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次式を含む化合物：
【化９９】
2011521978.tif 000109
［式中、Ｘは、Ｏ、Ｓ、およびＮからなる群から選択されるヘテロ原子からなり、
Ｒ１およびＲ２は独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アリール、アリールアルキル、およびアルキルアリールからなる群から選択され、
Ｒ３およびＲ４は独立に、水素、または４〜６個の炭素原子を有する置換もしくは非置換の環の環員である、ただし、Ｒ３およびＲ４は、両方が水素であることはないこと、さらにＲ３およびＲ４は、共に水素でない場合、同じ４〜６個の炭素原子を有する置換もしくは非置換の環の環員であることを条件とする］。
【請求項２】
Ｘが、酸素または硫黄からなる、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ３が水素であり、Ｒ４が、それぞれ４から６個の炭素原子を有する、置換または非置換アリール基、置換または非置換ヘテロアリール基、および置換または非置換ヘテロ環式環基からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ４が、ハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル基、−ＯＲ５、−ＳＲ５、−ＣＮ、−ＣＯＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６、−ＣＯＮＨＲ７、およびシクロアルキルまたはヘテロ環式環からなる群から選択される第１の置換基の１つまたは複数で置換されており、前記第１の置換基のシクロアルキルまたはヘテロ環式環は、場合によっては芳香族であり、Ｒ４の隣接する２個の原子に場合によっては縮合しており、Ｒ５からなる少なくとも１つの置換基で場合によっては置換されており、
Ｒ５は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、アリール、アルキルアリール、アリールアルキルからなる群から選択され、ハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル基、およびＣ１〜Ｃ３ハロアルコキシ基からなる群から選択される第２の置換基の１つまたは複数で場合によっては置換されており、
Ｒ６は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル基からなり、Ｒ７は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アリル基、モルホリン、ピペラジン、Ｒ５でＮ置換されたピペラジン、およびＮ、Ｏ、Ｓ、またはそれらの任意の組合せを含む５員または６員のヘテロ環からなる群から選択される、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ３が水素からなり、Ｒ４が、前記第１の置換基の１つまたは複数で場合によっては置換されているアリール基からなる、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ３およびＲ４が、結合している原子および結合と共に、環構造内に少なくとも１個の窒素原子を有する置換または非置換の５〜７員ヘテロ環式環を形成する、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
前記５〜７員ヘテロ環式環が、ハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル基、−ＯＲ５、−ＳＲ５、−ＣＮ、−ＣＯＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６、−ＣＯＮＨＲ７、およびシクロアルキルまたはヘテロ環式環からなる群から選択される第１の置換基の１つまたは複数で置換されており、前記第１の置換基のシクロアルキルまたはヘテロ環式環は、場合によっては芳香族であり、５〜７員ヘテロ環式環上の隣接する２個の原子に場合によっては縮合しており、Ｒ５からなる少なくとも１つの置換基で場合によっては置換されており、
Ｒ５は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、アリール、アルキルアリール、アリールアルキルからなる群から選択され、ハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル基、およびＣ１〜Ｃ３ハロアルコキシ基からなる群から選択される第２の置換基の１つまたは複数で場合によっては置換されており、
Ｒ６は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル基からなり、Ｒ７は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アリル基、モルホリン、ピペラジン、Ｒ５でＮ−置換されたピペラジン、およびＮ、Ｏ、Ｓ、またはそれらの任意の組合せを含む５員または６員のヘテロ環からなる群から選択される、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
前記５〜７員ヘテロ環式環が、環構造内に少なくとも２個の窒素原子を有する、請求項６に記載の化合物。
【請求項９】
前記５〜７員ヘテロ環式環が、２個の窒素原子を有する６員環からなる、請求項６に記載の化合物。
【請求項１０】
前記２個の窒素原子が、互いにパラ位に存在する、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ１が、直鎖または分枝鎖のＣ６〜Ｃ８アルキル基からなる、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ１が、直鎖または分枝鎖のＣ８アルキル基からなる、請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ２が、直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ３アルキル基からなる、請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ２がメチル基からなる、請求項１に記載の化合物。
【請求項１５】
下記からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【化１００】
2011521978.tif 000110
【化１０１】
2011521978.tif 000111
【請求項１６】
次式を含む化合物：
【化１０２】
2011521978.tif 000112
［式中、Ｒ１およびＲ２は独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アリール、アリールアルキル、およびアルキルアリールからなる群から選択され、
Ｒ３およびＲ４は独立に、水素、または４〜６個の炭素原子を有する置換もしくは非置換の環の環員である、ただし、Ｒ３およびＲ４は、両方が水素であることはないこと、さらにＲ３およびＲ４は、共に水素でない場合、同じ４〜６個の炭素原子を有する置換もしくは非置換の環の環員であることを条件とする］。
【請求項１７】
Ｒ３が水素であり、Ｒ４が、それぞれ４から６個の炭素原子を有する、置換または非置換アリール基、置換または非置換ヘテロアリール基、および置換または非置換ヘテロ環式環基からなる群から選択される、請求項１６に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｒ４が、ハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル基、−ＯＲ５、−ＳＲ５、−ＣＮ、−ＣＯＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６、−ＣＯＮＨＲ７、およびシクロアルキルまたはヘテロ環式環からなる群から選択される第１の置換基の１つまたは複数で置換されており、前記第１の置換基のシクロアルキルまたはヘテロ環式環は、場合によっては芳香族であり、Ｒ４の隣接する２個の原子に場合によっては縮合しており、Ｒ５からなる少なくとも１つの置換基で場合によっては置換されており、
Ｒ５は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、アリール、アルキルアリール、アリールアルキルからなる群から選択され、ハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル基、およびＣ１〜Ｃ３ハロアルコキシ基からなる群から選択される第２の置換基の１つまたは複数で場合によっては置換されており、
Ｒ６は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル基からなり、Ｒ７は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アリル基、モルホリン、ピペラジン、Ｒ５でＮ−置換されたピペラジン、およびＮ、Ｏ、Ｓ、またはそれらの任意の組合せを含む５員または６員のヘテロ環からなる群から選択される、請求項１７に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｒ３が水素からなり、Ｒ４が、前記第１の置換基の１つまたは複数で場合によっては置換されているアリール基からなる、請求項１８に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒ３およびＲ４が、結合している原子および結合と共に、環構造内に少なくとも１個の窒素原子を有する置換または非置換の５〜７員ヘテロ環式環を形成する、請求項１６に記載の化合物。
【請求項２１】
前記５〜７員ヘテロ環式環が、ハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル基、−ＯＲ５、−ＳＲ５、−ＣＮ、−ＣＯＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６、−ＣＯＮＨＲ７、およびシクロアルキルまたはヘテロ環式環からなる群から選択される第１の置換基の１つまたは複数で置換されており、前記第１の置換基のシクロアルキルまたはヘテロ環式環は、場合によっては芳香族であり、前記５〜７員ヘテロ環式環の隣接する２個の原子に場合によっては縮合しており、Ｒ５からなる少なくとも１つの置換基で場合によっては置換されており、
Ｒ５は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、アリール、アルキルアリール、アリールアルキルからなる群から選択され、ハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル基、およびＣ１〜Ｃ３ハロアルコキシ基からなる群から選択される第２の置換基の１つまたは複数で場合によっては置換されており、
Ｒ６は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル基からなり、Ｒ７は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アリル基、モルホリン、ピペラジン、Ｒ５でＮ置換されたピペラジン、およびＮ、Ｏ、Ｓ、またはそれらの任意の組合せを含む５員または６員のヘテロ環からなる群から選択される、請求項２０に記載の化合物。
【請求項２２】
Ｒ３およびＲ４が、結合している原子および結合と共に、２個の窒素原子を有する６員環を形成する、請求項２０に記載の化合物。
【請求項２３】
前記２個の窒素原子が、互いにパラ位に存在する、請求項２２に記載の化合物。
【請求項２４】
Ｒ１が、直鎖または分枝鎖のＣ６〜Ｃ８アルキル基からなる、請求項１６に記載の化合物。
【請求項２５】
Ｒ１が、直鎖または分枝鎖のＣ８アルキル基からなる、請求項１６に記載の化合物。
【請求項２６】
Ｒ２が、直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ３アルキル基からなる、請求項１６に記載の化合物。
【請求項２７】
Ｒ２がメチル基からなる、請求項１６に記載の化合物。
【請求項２８】
下記からなる群から選択される、請求項１６に記載の化合物。
【化１０３】
2011521978.tif 000113
【化１０４】
2011521978.tif 000114
【請求項２９】
次式を含む化合物：
【化１０５】
2011521978.tif 000115
［式中、Ｒ１およびＲ２は独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アリール、アリールアルキル、およびアルキルアリールからなる群から選択され、
Ｒ３およびＲ４は独立に、水素、または４〜６個の炭素原子を有する置換もしくは非置換の環の環員である、ただし、Ｒ３およびＲ４は、両方が水素であることはないこと、さらにＲ３およびＲ４は、共に水素でない場合、同じ４〜６個の炭素原子を有する置換もしくは非置換の環の環員であることを条件とする］。
【請求項３０】
Ｒ３が水素であり、Ｒ４が、それぞれ４から６個の炭素原子を有する、置換または非置換アリール基、置換または非置換ヘテロアリール基、および置換または非置換ヘテロ環式環基からなる群から選択される、請求項２９に記載の化合物。
【請求項３１】
Ｒ４が、ハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル基、−ＯＲ５、−ＳＲ５、−ＣＮ、−ＣＯＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６、−ＣＯＮＨＲ７、およびシクロアルキルまたはヘテロ環式環からなる群から選択される第１の置換基の１つまたは複数で置換されており、前記第１の置換基のシクロアルキルまたはヘテロ環式環は、場合によっては芳香族であり、Ｒ４の隣接する２個の原子に場合によっては縮合しており、Ｒ５からなる少なくとも１つの置換基で場合によっては置換されており、
Ｒ５は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、アリール、アルキルアリール、アリールアルキルからなる群から選択され、ハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル基、およびＣ１〜Ｃ３ハロアルコキシ基からなる群から選択される第２の置換基の１つまたは複数で場合によっては置換されており、
Ｒ６は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル基からなり、Ｒ７は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アリル基、モルホリン、ピペラジン、Ｒ５でＮ置換されたピペラジン、およびＮ、Ｏ、Ｓ、またはそれらの任意の組合せを含む５員または６員のヘテロ環からなる群から選択される、請求項３０に記載の化合物。
【請求項３２】
Ｒ３が水素からなり、Ｒ４が、前記第１の置換基の１つまたは複数で場合によっては置換されているアリール基からなる、請求項３１に記載の化合物。
【請求項３３】
Ｒ３およびＲ４が、結合している原子および結合と共に、環構造内に少なくとも１個の窒素原子を有する置換または非置換の５〜７員ヘテロ環式環を形成する、請求項２９に記載の化合物。
【請求項３４】
前記５〜７員ヘテロ環式環が、ハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル基、−ＯＲ５、−ＳＲ５、−ＣＮ、−ＣＯＮＨ２、ＳＯ２ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６、−ＣＯＮＨＲ７、およびシクロアルキルまたはヘテロ環式環からなる群から選択される第１の置換基の１つまたは複数で置換されており、前記第１の置換基のシクロアルキルまたはヘテロ環式環は、場合によっては芳香族であり、前記５〜７員ヘテロ環式環の隣接する２個の原子に場合によっては縮合しており、Ｒ５からなる少なくとも１つの置換基で場合によっては置換されており、
Ｒ５は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、アリール、アルキルアリール、アリールアルキルからなる群から選択され、ハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル基、およびＣ１〜Ｃ３ハロアルコキシ基からなる群から選択される第２の置換基の１つまたは複数で場合によっては置換されており、
Ｒ６は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル基からなり、Ｒ７は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アリル基、モルホリン、ピペラジン、Ｒ５でＮ置換されたピペラジン、およびＮ、Ｏ、Ｓ、またはそれらの任意の組合せを含む５員または６員のヘテロ環からなる群から選択される、請求項３３に記載の化合物。
【請求項３５】
Ｒ３およびＲ４が、結合している原子および結合と共に、２個の窒素原子を有する６員環を形成する、請求項３３に記載の化合物。
【請求項３６】
前記２個の窒素原子が、互いにパラ位に存在する、請求項３５に記載の化合物。
【請求項３７】
Ｒ１が、直鎖または分枝鎖のＣ６〜Ｃ８アルキル基からなる、請求項２９に記載の化合物。
【請求項３８】
Ｒ１が、直鎖または分枝鎖のＣ８アルキル基からなる、請求項２９に記載の化合物。
【請求項３９】
Ｒ２が、直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ３アルキル基からなる、請求項２９に記載の化合物。
【請求項４０】
Ｒ２がメチル基からなる、請求項２９に記載の化合物。
【請求項４１】
次の構造：
【化１０６】
2011521978.tif 000116
を含む、請求項２９に記載の化合物。
【請求項４２】
次式を含む化合物：
【化１０７】
2011521978.tif 000117
［式中、Ｘは、Ｏ、Ｓ、またはＮからなり、
Ｒ１およびＲ２は独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アリール、アリールアルキル、およびアルキルアリールからなる群から選択され、
Ｒ８およびＲ８’は独立に、構造に存在することがなく、あるいはハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル基、−ＯＲ５、−ＳＲ５、−ＣＮ、−ＣＯＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６、−ＣＯＮＨＲ７、およびシクロアルキルまたはヘテロ環式環からなる群から選択される第１の置換基からなり、前記第１の置換基のシクロアルキルまたはヘテロ環式環は、場合によっては芳香族であり、アリール基の隣接する２個の原子に場合によっては縮合しており、またはＲ５からなる少なくとも１つの置換基で場合によっては置換されており、
Ｒ５は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、アリール、アルキルアリール、アリールアルキルからなる群から選択され、ハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル基、およびＣ１〜Ｃ３ハロアルコキシ基からなる群から選択される第２の置換基の１つまたは複数で場合によっては置換されており、
Ｒ６は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル基からなり、Ｒ７は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アリル基、モルホリン、ピペラジン、Ｒ５でＮ置換されたピペラジン、およびＮ、Ｏ、Ｓ、またはそれらの任意の組合せを含む５員または６員のヘテロ環からなる群から選択される］。
【請求項４３】
Ｘが、次式の化合物：
【化１０８】
2011521978.tif 000118
を形成する酸素または硫黄からなる、請求項４２に記載の化合物。
【請求項４４】
Ｒ８’が構造に存在することがなく、Ｒ８が、ハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル基、−ＯＲ５、−ＳＲ５、−ＣＮ、−ＣＯＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６、−ＣＯＮＨＲ７、およびシクロアルキルまたはヘテロ環式環からなる群から選択され、前記第１の置換基のシクロアルキルまたはヘテロ環式環は、場合によっては芳香族であり、アリール基の隣接する２個の原子に場合によっては縮合しており、Ｒ５からなる少なくとも１つの置換基で場合によっては置換されている、請求項４２に記載の化合物。
【請求項４５】
Ｒ８’が構造に存在することがなく、Ｒ８が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル基、およびＯＲ５からなる群から選択される、請求項４２に記載の化合物。
【請求項４６】
Ｒ８がＯＲ５であり、Ｒ５はＣ１〜Ｃ３ハロアルキル基である、請求項４５に記載の化合物。
【請求項４７】
Ｒ１が、直鎖または分枝鎖のＣ６〜Ｃ８アルキル基からなる、請求項４２に記載の化合物。
【請求項４８】
Ｒ１が、直鎖または分枝鎖のＣ８アルキル基からなる、請求項４２に記載の化合物。
【請求項４９】
Ｒ２が、直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ３アルキル基からなる、請求項４２に記載の化合物。
【請求項５０】
Ｒ２がメチル基からなる、請求項４２に記載の化合物。
【請求項５１】
下記からなる群から選択される、請求項４２に記載の化合物。
【化１０９】
2011521978.tif 000119
【化１１０】
2011521978.tif 000120
【請求項５２】
次式を含む化合物：
【化１１１】
2011521978.tif 000121
［式中、Ｘは、Ｏ、Ｓ、またはＮからなり、
Ｒ１およびＲ２は独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アリール、アリールアルキル、およびアルキルアリールからなる群から選択され、
Ｒ５は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、アリール、アルキルアリール、アリールアルキルからなる群から選択され、ハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル基、およびＣ１〜Ｃ３ハロアルコキシ基からなる群から選択される置換基の１つまたは複数で場合によっては置換されている］。
【請求項５３】
Ｘが、次式の化合物：
【化１１２】
2011521978.tif 000122
を形成する酸素または硫黄からなる、請求項５２に記載の化合物。
【請求項５４】
下記からなる群から選択される、請求項５２に記載の化合物。
【化１１３】
2011521978.tif 000123
【請求項５５】
医薬賦形剤、ならびに請求項１、１６、２９、４２、および５２のいずれか一項に記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項５６】
前記化合物が、下記からなる群から選択される、請求項５５に記載の医薬組成物。
【化１１４】
2011521978.tif 000124
【化１１５】
2011521978.tif 000125
【請求項５７】
前記化合物が、下記からなる群から選択される、請求項５５に記載の医薬組成物。
【化１１６】
2011521978.tif 000126
【請求項５８】
有効量の請求項５５に記載の医薬組成物を被験体に投与することを含む、被験体における癌を治療する方法。
【請求項５９】
前記被験体が動物である、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
前記被験体がヒトである、請求項５８に記載の方法。
【請求項６１】
前記医薬組成物が、下記からなる群から選択される１つまたは複数の化合物を含む、請求項５８に記載の方法。
【化１１７】
2011521978.tif 000127
【化１１８】
2011521978.tif 000128
【請求項６２】
前記医薬組成物が、下記からなる群から選択される１つまたは複数の化合物を含む、請求項５８に記載の方法。
【化１１９】
2011521978.tif 000129
【請求項６３】
有効量の請求項５５に記載の医薬組成物を被験体に投与することを含む、被験体における脂肪酸シンターゼ活性を阻害する方法。
【請求項６４】
前記被験体が動物である、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
前記被験体がヒトである、請求項６３に記載の方法。
【請求項６６】
前記医薬組成物が、下記からなる群から選択される１つまたは複数の化合物を含む、請求項６３に記載の方法。
【化１２０】
2011521978.tif 000130
【化１２１】
2011521978.tif 000131
【請求項６７】
前記医薬組成物が、下記からなる群から選択される１つまたは複数の化合物を含む、請求項６３に記載の方法。
【化１２２】
2011521978.tif 000132
【請求項６８】
有効量の請求項５５に記載の医薬組成物を被験体に投与することを含む、被験体における体重減少を誘導する方法。
【請求項６９】
前記被験体が動物である、請求項６８に記載の方法。
【請求項７０】
前記被験体がヒトである、請求項６８に記載の方法。
【請求項７１】
前記医薬組成物が、下記からなる群から選択される１つまたは複数の化合物を含む、請求項６８に記載の方法。
【化１２３】
2011521978.tif 000133
【化１２４】
2011521978.tif 000134
【請求項７２】
前記医薬組成物が、下記からなる群から選択される１つまたは複数の化合物を含む、請求項６８に記載の方法。
【化１２５】
2011521978.tif 000135
【請求項７３】
有効量の請求項５５に記載の医薬組成物を被験体に投与することを含む、被験体における侵襲性微生物細胞の増殖を阻害する方法。
【請求項７４】
前記被験体が動物である、請求項７３に記載の方法。
【請求項７５】
前記被験体がヒトである、請求項７３に記載の方法。
【請求項７６】
前記医薬組成物が、下記からなる群から選択される１つまたは複数の化合物を含む、請求項７３に記載の方法。
【化１２６】
2011521978.tif 000136
【化１２７】
2011521978.tif 000137
【請求項７７】
前記医薬組成物が、下記からなる群から選択される１つまたは複数の化合物を含む、請求項７３に記載の方法。
【化１２８】
2011521978.tif 000138
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連する出願との相互参照）
本出願は、参照により本明細書中に援用される米国仮特許出願第６１／１２９，０４４号（２００８年６月２日出願）および米国仮特許出願第６１／１９３，１２７号（２００８年１０月３０日出願）に対する優先権を主張する。
【０００２】
本発明は、新規化合物、それを含む医薬組成物、および酵素の脂肪酸シンターゼ（ＦＡＳ）を標的にすることによって脂肪酸合成経路を阻害するための使用方法に関する。このような化合物、組成物、および方法は、ＦＡＳ遺伝子を発現または過剰発現させる癌性細胞の治療、肥満の治療、およびＦＡＳ遺伝子またはその相同体を発現または過剰発現する侵襲性微生物の処置を含むがこれらに限定されない種々の治療上有益な用途を有する。
【背景技術】
【０００３】
癌と闘う新規化合物が求められていることは周知である。化学療法に使用される薬物として使用される化合物は、様々な基準を満たさなければならない。第１に、これらは、十分に細胞毒性であり、非癌性細胞に対しては十分に非毒性でなければならない。これらは、プロセシング可能（processible）であり、生物学的に利用可能でもなければならない。関連のない領域では、代謝疾患および（肥満のような）関連病態の治療を補助する新規化合物も求められている。最後に、侵襲性微生物の処置を補助する新規化合物も求められている。本発明は、各標的細胞型内で認められる脂肪酸合成経路を標的にすることによってこれらの用途のそれぞれに有用な化合物を提供する。
【０００４】
脂肪酸には、細胞の生理機能において主要な３つの役割がある。第１に、脂肪酸は生体膜の構成要素（building block）である。第２に、脂肪酸誘導体は、ホルモンおよび細胞内メッセンジャーとして機能する。第３に、本発明にとって特に重要なことには、脂肪酸は、中性脂肪としても公知であるトリアシルグリセロールとして脂肪組織に貯蔵され得る燃料分子である。
【０００５】
脂肪酸合成経路には、主に脂肪酸シンターゼ（ＦＡＳ）、アルキニルＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）、リンゴ酸酵素、およびクエン酸リアーゼの４種類の酵素が関与する。主要な酵素であるＦＡＳは、前駆体であるマロニル−ＣｏＡおよびアルキニル−ＣｏＡのＮＡＤＰＨ依存性縮合を触媒して、脂肪酸を産生する。ＮＡＤＰＨは、一般にＦＡＳの反応サイクルの２か所で重要な電子供与体として機能する還元剤である。残りの３種類の酵素（すなわち、ＡＣＣ、リンゴ酸酵素、およびクエン酸リアーゼ）は必要な前駆体を産生する。他の酵素、例えばＮＡＤＰＨを産生する酵素も、脂肪酸合成に関与する。
【０００６】
脂肪酸合成経路における４種類の酵素のうち、ＦＡＳは、阻害のための好ましい標的である。というのは、ＦＡＳは脂肪酸への経路内でしか作用しないが、残りの３種類の酵素は他の細胞機能に関係するからである。したがって、残りの３種類の酵素のうちの１つを阻害すると、正常細胞に影響を及ぼす可能性がある。
【０００７】
ＦＡＳは、ＥＣ（Enzyme Commission）番号２．３．１．８５であり、脂肪酸シンテターゼ、脂肪酸リガーゼ、およびその系統名であるアシル−ＣｏＡ：マロニル−ＣｏＡ  Ｃ−アシルトランスフェラーゼ（脱炭酸、オキソアシルおよびエノイル還元、ならびにチオエステル加水分解）としても公知である。ＦＡＳが触媒する脂肪酸合成には、アルキニルトランスアシラーゼ、マロニルトランスアシラーゼ、β−ケトアシルシンテターゼ（縮合酵素）、β−ケトアシルレダクターゼ、β−ヒドロキシアシルデヒドラーゼ、エノイルレダクターゼ、およびチオエステラーゼの異なる７種類の酵素または触媒ドメインが関与する。（非特許文献１）。これら７種類の酵素すべてがまとまって、ＦＡＳをなす。
【０００８】
ＦＡＳによって行われる７つの酵素工程のうち、縮合酵素（すなわち、β−ケトアシルシンテターゼ）およびエノイルレダクターゼが触媒する工程が、脂肪酸合成を低下または停止させる阻害物質の最もよくみられる候補である。ＦＡＳ複合体の縮合酵素は、構造および機能の点からよく特徴付けられている。縮合酵素の活性部位には、クリティカルなシステインのチオールが含まれており、これは、例えば阻害物質であるセルレニンなど、抗高脂血症試剤の標的である。
【０００９】
ＦＡＳ阻害物質は、化合物が精製ＦＡＳの酵素活性を阻害する能力によって同定することができる。ＦＡＳ活性は、例えばマロニルＣｏＡの存在下でＮＡＤＰＨの酸化を測定するなど、当技術分野で公知である多数の手段で検定することができる（非特許文献２）。化合物がＦＡＳ阻害物質であるかどうかの決定に関する他の情報は、特許文献１で見ることができ、その開示内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【００１０】
公知の縮合酵素阻害物質としては、アルキル化剤、オキシダント、およびジスルフィド交換を受けることができる試剤を含めて、広範囲の化学物質が挙げられる。酵素の結合ポケットは、長鎖Ｅ，Ｅジエンが好ましい。その場合、原理的に、チオレートアニオンとの反応性を示す基および側鎖ジエンを含む試剤が、良好な縮合酵素阻害物質であり得る。セルレニン［（２Ｓ，３Ｒ）−２，３−エポキシ−４−オキソ−７，１０ドデカジエノイルアミド］が、このような化合物の一例であり、以下の構造を有する。
【００１１】
【化１】
2011521978.tif 000003
セルレニンは、脂肪酸シンターゼの縮合酵素の活性部位におけるクリティカルなシステインのチオール基と共有結合し、この重要な酵素工程を不活性化する（非特許文献３）。セルレニンは、他の活性を有することが知られているが、これらは、ヒト細胞の関連モデルではあり得ない微生物において起こり（例えば、真菌におけるコレステロール合成の阻害、非特許文献４；またはウイルスにおけるＲＮＡ合成の低下、非特許文献５）、実質的により高い薬物濃度で起こり（５ｍｇ／ｍｌでのウイルスＨＩＶプロテアーゼの阻害、非特許文献６）、または内因性脂肪酸合成の阻害の直接的結果であり得る（Ｂリンパ球およびマクロファージにおける抗原プロセシングの阻害、非特許文献７）。一部のデータから、セルレニンは、タンパク質のミリストイル化を特異的に阻害するものではないということが示唆される（非特許文献８）。
【００１２】
様々な他の化合物が、脂肪酸シンターゼ（ＦＡＳ）を阻害することがわかった。ＦＡＳ阻害物質は、化合物が精製ＦＡＳの酵素活性を阻害する能力によって同定することができる。ＦＡＳ活性は、放射性標識前駆体（すなわち、アルキニル−ＣｏＡまたはマロニル−ＣｏＡ）の脂肪酸への取り込みを測定することまたはＮＡＤＰＨの酸化を分光測定することによって検定することができる。（非特許文献９）。好ましくは、本発明による阻害物質は、ＦＡＳ阻害のＩＣ５０はＬＤ５０より低いことを示すことによって適切な治療係数、安全性プロファイル、および有効性を示す。より好ましくは、ＬＤ５０は、ＩＣ５０より少なくとも１桁高い。
【００１３】
以下に示す表１に、当技術分野で公知であるＦＡＳ阻害物質を列挙する。
【００１４】
【表１】
2011521978.tif 000004
ＦＡＳ阻害物質は、特許文献２および１９９４年１月２４日出願のそのＣＩＰにも開示され、その開示内容は、参照により本明細書に組み込まれる。脂肪酸シンターゼ、クエン酸リアーゼ、ＣｏＡカルボキシラーゼ、およびリンゴ酸酵素の阻害物質も含まれている。
【００１５】
Ｔｏｍｏｄａおよび同僚（非特許文献１０；非特許文献１１）によって、Streptomycessp.SK-1894の生成物である天然アシル−ＣｏＡシンテターゼ阻害物質であるトリアクシンＣ（ＷＳ−１２２８Ａと呼ばれることもある）も記載されている。トリアクシンＣの化学構造は、１−ヒドロキシ−３−（Ｅ，Ｅ，Ｅ−２’，４’，７’−ウンデカトリエニリジン）トリアゼンである。トリアクシンＣは、ラット肝臓アシル−ＣｏＡシンテターゼの５０％阻害を８．７μＭで引き起こす。関連化合物であるトリアクシンＡは、長鎖脂肪酸と競合する機序によってアシルＣｏＡ−シンテターゼを阻害する。アシル−ＣｏＡシンテターゼの阻害は、動物細胞に対して毒性がある。Ｔｏｍｏｄａら（非特許文献１２）によって、トリアクシンＣはＲａｊｉ細胞における増殖阻害を引き起こすものであり、またＶｅｒｏ細胞およびＨｅｌａ細胞の増殖を阻害することもわかったことがさらに教示されている。Ｔｏｍｏｄａらによって、アシル−ＣｏＡシンテターゼが動物細胞において必要不可欠であり、酵素の阻害が致死効果を及ぼすことも教示されている。
【００１６】
特許文献１および特許文献３（それらの開示内容は、参照により本明細書に組み込まれる）に、γ置換−α−メチレン−β−カルボキシ−γ−ブチロラクトンが、脂肪酸合成の阻害物質として開示された。これを使用して、脂肪細胞塊を系統的に小型化することによって腫瘍細胞の増殖を阻害し、体重減少を誘導することができる。これらの化合物は、天然物のセルレニンに比べて、治療への応用について以下の利点を有することがさらに開示された。（１）セルレニンの極めて反応性の高いエポキシド基を含まず、（２）水溶液中で安定であり、可溶であり、（３）２ステップの合成反応で製造することができ、したがって大量生産が容易であり、（４）生化学および薬理学的分析のため高比活性にトリチウム標識することが容易である。
【００１７】
ＦＡＳ阻害物質として有用な新規クラスのチオフェンも、以下の一般構造を有するものとして特許文献４に開示され、その開示内容は、参照により組み込まれる。
【００１８】
【化２】
2011521978.tif 000005
しかし、例示された各化合物において、Ｒ２位は実施形態のある種のサブセットに限定されており、本出願における化合物と重複するものでも、それを開示するものでもない。
【００１９】
ＦＡＳ阻害に有用な新規クラスのチオフェンは、上記と同じ式を有するものとして特許文献５にも開示され、その開示内容は、参照により組み込まれる。やはり、例示された化合物は、本出願における化合物と特にＲ２位において重複するものでも、さもなければそれを開示するものでもない。
【００２０】
ＦＡＳ阻害物質として使用するための他のクラスの新規化合物が、特許文献６；特許文献７；特許文献８；特許文献９内に開示されている。やはり、これらの出願は、下記に開示する化合物のいずれかを開示するものでも、例示するものでもない。
【００２１】
したがって、本発明は、ＦＡＳ発現ガン腫の治療、肥満の治療、または微生物感染の治療に使用することができるＦＡＳ阻害物質として有用な新規化合物が当技術分野で求められていることに対処するものである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２２】
【特許文献１】米国特許第５，９８１，５７５号明細書
【特許文献２】米国特許出願公開第０８／０９６，９０８号明細書
【特許文献３】米国特許第５，７５９，８３７号明細書
【特許文献４】国際公開第２００４／００５２７７号
【特許文献５】国際公開第２００８／０５７５８５号
【特許文献６】国際公開第２００７／０１４２４９号
【特許文献７】国際公開第２００７／０１４２４７号
【特許文献８】国際公開第２００５／１１７５９０号
【特許文献９】国際公開第２００４／００６８３５号
【非特許文献】
【００２３】
【非特許文献１】Ｗａｋｉｌ，Ｓ．Ｊ．、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２８巻：４５２３〜４５３０頁、１９８９年
【非特許文献２】Ｄｉｌｓ，Ｒ．およびＣａｒｅｙ，Ｅ．Ｍ．、「Ｆａｔｔｙ  ａｃｉｄ  ｓｙｎｔｈａｓｅ  ｆｒｏｍ  ｒａｂｂｉｔ  ｍａｍｍａｒｙ  ｇｌａｎｄ」、Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ、３５巻：７４〜８３頁、１９７５年
【非特許文献３】Ｆｕｎａｂａｓｈｉら、Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、１０５巻：７５１〜７５５頁、１９８９年
【非特許文献４】Ｏｍｕｒａ（１９７６年）、Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．Ｒｅｖ．、４０巻：６８１〜６９７頁
【非特許文献５】Ｐｅｒｅｚら（１９９１年）、ＦＥＢＳ、２８０巻：１２９〜１３３頁
【非特許文献６】Ｍｏｅｌｌｉｎｇら（１９９０年）、ＦＥＢＳ、２６１巻：３７３〜３７７頁
【非特許文献７】Ｆａｌｏら（１９８７年）、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１３９巻：３９１８〜３９２３頁
【非特許文献８】Ｓｉｍｏｎら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２６７巻：３９２２〜３９３１頁、１９９２年
【非特許文献９】Ｄｉｌｓら、Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．、３５巻：７４〜８３頁
【非特許文献１０】Ｔｏｍｏｄａら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔ、９２１巻：５９５〜５９８頁、１９８７年
【非特許文献１１】Ｏｍｕｒａら、Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ、３９巻：１２１１〜１２１８頁、１９８６年
【非特許文献１２】Ｔｏｍｏｄａら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２６６巻：４２１４〜４２１９頁、１９９１年
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００２４】
本発明は、ＦＡＳ阻害物質として有用な新規化合物に関する。この目的のために、本発明の新規化合物は、脂肪酸合成の酵素工程の１つまたは複数を阻害する。このような化合物は、ＦＡＳ遺伝子を発現または過剰発現する癌性細胞の治療、肥満の治療、およびＦＡＳ遺伝子またはその相同体を発現または過剰発現する侵襲性微生物の処置を含むがこれらに限定されない種々の治療上有益な用途を有する。
【００２５】
本発明のクラスの化合物は、式Ｉ：
【００２６】
【化３】
2011521978.tif 000006
で表すことができ、式中、Ｘは、Ｏ、Ｓ、またはＮのいずれか１つから選択することができるヘテロ原子からなる。Ｒ１およびＲ２は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アリール、アリールアルキル、またはアルキルアリールから独立に選択される。Ｒ３およびＲ４は独立に、水素原子であり、または４〜６個の炭素原子を有する置換もしくは非置換の環の環員である。一実施形態において、Ｒ３およびＲ４は、両方が水素であることはない。別の実施形態において、Ｒ３およびＲ４は、共に水素でない場合、一緒になって、場合によって置換されている４〜６個の炭素原子を有する環構造を形成する。別の実施形態において、Ｒ３は水素であり、Ｒ４は、４から６個の炭素原子を有する、アリール基、ヘテロアリール基、またはヘテロ環式環基からなり、それらはいずれも、ハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル基、−ＯＲ５、−ＳＲ５、−ＣＮ、−ＣＯＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６、−ＣＯＮＨＲ７、または５員もしくは６員のシクロアルキル環もしくはヘテロ環式環のうちの１つまたは複数で場合によっては置換されている。後者の５員もしくは６員のシクロアルキル環もしくはヘテロ環式環は、場合によっては、Ｒ４の隣接する原子に場合によっては縮合している芳香族であり、かつ／またはＲ５で場合によっては置換されている。
【００２７】
Ｒ５は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、アリール、アルキルアリール、アリールアルキルのいずれか１つからなり、それらは、１つまたは複数のハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル基、またはＣ１〜Ｃ３ハロアルコキシ基で場合によっては置換されていてもよい。Ｒ６は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル基からなる。Ｒ７は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アリル基、モルホリン、ピペラジン、Ｒ５でＮ置換されたピペラジン、またはＮ、Ｏ、Ｓ、もしくはそれらの任意の組合せを含む５員もしくは６員のヘテロ環からなる。
【００２８】
別の実施形態において、Ｒ３およびＲ４は、結合している原子および結合と共に、環構造内に少なくとも１個の窒素原子を有する５〜７員環を形成し、それは、本明細書で定義する１つまたは複数の置換基で場合によっては置換されている。
【００２９】
上記に基づいて、本明細書で考えられる剤形および投与経路またはさもなければ当技術分野で公知である剤形および投与経路を使用して、本発明の１つまたは複数の化合物を単独でまたは別の活性成分と組み合わせて、治療組成物として合成および投与することができる。用法（dosaging）および期間は、本明細書に記載される因子および当業者によって普通考慮される因子にさらに依存する。この目的のために、治療上有効量の決定は、特に本明細書に記載されている詳細な開示および実施例を考慮して、十分当業者の能力の範囲内である。
【図面の簡単な説明】
【００３０】
【図１】図１は、本発明の化合物、特にＣ３１を製造する方法の一実施形態を示す。
【図２】図２は、化合物Ｃ１５７を製造するための図１のプロセスの代替ステップを示す。
【図３】図３は、本発明の化合物、特にＣ３１のＳ型エナンチオマーを調製する方法の一実施形態を示す。
【図４】図４は、本発明の化合物、特にＣ３１のＲ型エナンチオマーを調製する方法の一実施形態を示す。
【図５】図５は、本発明の化合物、特にＣ３１を製造する方法の代替実施形態を示す。
【図６】図６は、本発明の化合物を精製する代替方法を示す。
【発明を実施するための形態】
【００３１】
定義
本明細書では、「アルキル基」は、１個または複数の炭素原子を有する直鎖炭素鎖と分枝炭素鎖とを表すが、個々の基、具体的には「プロピル」などの言葉は、その直鎖基しか包含せず、「イソプロピル」などの分枝鎖異性体は、分枝鎖基だけを具体的に指す。
【００３２】
本明細書では、「置換アルキル」は、上記に定義したアルキル基であり、アルキル基の１個または複数の水素が、本明細書で別に定義される１つまたは複数の置換基で置換されている。
【００３３】
本明細書では、「ハロアルキル」は、上記に定義したアルキル基を指し、アルキル基の１個または複数の水素が、１個または複数のハロゲン原子で置換されている。
【００３４】
本明細書では、「アルコキシ基」は、式アルキル−Ｏ−の基を指し、式中、アルキルは本明細書に定義する通りである。
【００３５】
本明細書では、「置換アルコキシ」は、置換アルキル−Ｏ−基を指し、アルキル基は、上記に定義するように置換されている。
【００３６】
本明細書では、「ハロアルコキシ」は、上記に定義したアルコキシ基を指し、アルキル基の１個または複数の水素が、１個または複数のハロゲン原子で置換されている。
【００３７】
本明細書では、「アルケニル」は、本明細書に定義するように、１つまたは複数の炭素−炭素二重結合を含む飽和または不飽和のアルキル基を指す。
【００３８】
本明細書では、「アリール基」は、炭素原子しか含まない芳香族環に由来する構造を表す。例としては、フェニルまたはベンジル基およびそれらの誘導体が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００３９】
本明細書では、「アリールアルキル」は、アリール基の結合点でない位置に１つまたは複数のアルキル基を有するアリール基を表す。
【００４０】
本明細書では、「アルキルアリール」は、結合点にアルキル基を有するアリール基を表す。
【００４１】
本明細書では、「ヘテロアリール」は、炭素および少なくとも１個の非炭素原子からなる５または６個の環原子を含む単環の芳香族環を包含し、非炭素原子は、以下のうちの１つまたは複数とすることができるが、これらに限定されるものではない：窒素、酸素、硫黄、リン、ホウ素、塩素、臭素、またはヨウ素。
【００４２】
本明細書では、「ヘテロ環式」は、少なくとも１個のヘテロ原子、いくつかの実施形態においては１から４個のヘテロ原子を含む１価の飽和または部分不飽和の環式非芳香族炭素環基を指し、ヘテロ原子は、以下のうちの１つまたは複数とすることができるが、これらに限定されるものではない：窒素、酸素、硫黄、リン、ホウ素、塩素、臭素、またはヨウ素。別の非限定的な実施形態において、ヘテロ環式（hetercyclic）環は、１から１０個の炭素原子からなることがある。
【００４３】
本明細書では、「シクロアルキル」は、環構造にすべての炭素原子を含む１価または多環式の飽和または部分不飽和の環式非芳香族基を指し、本明細書で定義する１つまたは複数の置換基で置換されていてもよい。非限定的ないくつかの実施形態において、シクロアルキル基を含む炭素数は、３〜７個とすることができる。
【００４４】
本発明は、ＦＡＳタンパク質の酵素活性を阻害し、したがって脂肪酸合成の酵素工程の１つまたは複数を阻害するのに有用な新規クラスの化合物に関する。このような化合物は、ＦＡＳ遺伝子を発現または過剰発現する癌性細胞の治療、肥満の治療、およびＦＡＳ遺伝子またはその相同体を発現または過剰発現する侵襲性微生物の処置を含むがこれらに限定されない種々の治療上有益な用途を有する。
【００４５】
一実施形態において、本発明のクラスの化合物は、式Ｉ：
【００４６】
【化４】
2011521978.tif 000007
で表すことができ、式中、Ｘは、Ｏ、Ｓ、またはＮのいずれか１つから選択することができるヘテロ原子からなる。Ｒ１およびＲ２は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アリール、アリールアルキル、またはアルキルアリールから独立に選択される。Ｒ３およびＲ４は独立に、水素原子であり、または４〜６個の炭素原子を有する置換もしくは非置換の環の環員である。一実施形態において、Ｒ３およびＲ４は、両方が水素であることはない。別の実施形態において、Ｒ３およびＲ４は、共に水素でない場合、一緒になって、場合によって置換されている４〜６個の炭素原子を有する環構造を形成する。
【００４７】
別の実施形態において、Ｒ３は水素からなり、Ｒ４は、水素、４から６個の炭素原子を有する、アリール基、ヘテロアリール基、またはヘテロ環式環基からなり、Ｒ４の環部分は、ハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル基、−ＯＲ５、−ＳＲ５、−ＣＮ、−ＣＯＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６、−ＣＯＮＨＲ７、または５員もしくは６員のシクロアルキル環もしくはヘテロ環式環のうちの１つまたは複数で場合によっては置換されている。後者の５員もしくは６員のシクロアルキル環もしくはヘテロ環式環は、場合によっては芳香族であり、Ｒ４の隣接する２個の原子に場合によっては縮合しており、かつ／または１つもしくは複数のＲ５置換基で場合によっては置換されている。
【００４８】
代替実施形態において、以下にさらに詳細に述べるように、Ｒ３およびＲ４は一緒になって、結合している原子および結合と共に、環構造内に少なくとも１個の窒素原子を有する５〜７員ヘテロ環式環を形成する。
【００４９】
Ｒ５は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、アリール、アルキルアリール、アリールアルキルのいずれか１つからなり、それらは、１つまたは複数のハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル基、またはＣ１〜Ｃ３ハロアルコキシ基で場合によっては置換されていてもよい。
【００５０】
Ｒ６は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル基からなる。Ｒ７は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アリル基、モルホリン、ピペラジン、Ｒ５でＮ置換されたピペラジン、またはＮ、Ｏ、Ｓ、もしくはそれらの任意の組合せを含む５員もしくは６員のヘテロ環からなる。
【００５１】
別の実施形態において、本発明の化合物は、式Ｉで定義されるＸ位において酸素または硫黄からなることがある。この目的のために、これらの実施形態は、下記の式ＩＩａおよびＩＩｂ：
【００５２】
【化５】
2011521978.tif 000008
によって定義することができ、式中、Ｒ１〜Ｒ４はそれぞれ、上記の実施形態内で定義される。
【００５３】
別の実施形態において、Ｒ３は水素からなる。Ｒ４は、下記の式ＩＩＩ：
【００５４】
【化６】
2011521978.tif 000009
で示されるようにＲ８および／またはＲ８’で場合によっては置換されていてもよいアリール基からなり、式中、Ｒ１〜Ｒ２はそれぞれ、上記の実施形態内で定義される。Ｒ８およびＲ８’は独立に、構造に存在することがなく、あるいはハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル基、−ＯＲ５、−ＳＲ５、−ＣＮ、−ＣＯＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６、−ＣＯＮＨＲ７、または５員もしくは６員のシクロアルキル環もしくはヘテロ環式環からなる。後者の５員もしくは６員のシクロアルキル環もしくはヘテロ環式環は、場合によっては、Ｒ４位におけるアリール環の隣接する２個の炭素原子に場合によっては縮合している芳香族であり、かつ／またはＲ５で場合によっては置換されている。Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７は、本明細書で定義する実施形態のいずれかである。
【００５５】
式ＩＩＩの別の実施形態において、Ｘは、以下の通り：
【００５６】
【化７】
2011521978.tif 000010
ＳまたはＯからなることができ、式中、Ｒ１〜Ｒ２、Ｒ８およびＲ８’は、本明細書に定義する通りである。
【００５７】
別の実施形態において、Ｒ３およびＲ４は、結合している原子および結合と共に、環構造内に少なくとも１個の窒素原子を有する５〜７員環を形成する。いくつかの実施形態において、５〜７員環は、少なくとも２個の窒素原子を有することができる。さらに別の実施形態において、Ｒ３およびＲ４は、結合している原子および結合と共に、互いにパラ位に２個の窒素原子を有する６員環を形成する。前述の実施形態のいずれかにおいて、ヘテロ環式環の構造は、Ｒ５または本明細書で記載される他の何らかの置換基で場合によっては置換されていてもよい。この目的のために、前述の実施形態は、下記の式ＩＶの構造：
【００５８】
【化８】
2011521978.tif 000011
で表すことができ、式中、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ５は、上記に定義する実施形態のいずれかである。
【００５９】
式ＩＶの別の実施形態において、Ｘは、以下の通り：
【００６０】
【化９】
2011521978.tif 000012
ＳまたはＯからなることができ、式中、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ５は、上記に定義する実施形態のいずれかである。
【００６１】
本発明の非限定的ないくつかの実施形態において、Ｒ１は、直鎖または分枝鎖のＣ６〜Ｃ８アルキル基からなる。非限定的な別の実施形態において、Ｒ１は、直鎖または分枝鎖のＣ８アルキル基からなる。非限定的なさらに別の実施形態において、Ｒ１は、式−（ＣＨ２）７ＣＨ３で表すことができる。
【００６２】
本発明の非限定的ないくつかの実施形態において、Ｒ２は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ３アルキル基からなる。非限定的なさらに別の実施形態において、Ｒ２はメチル基からなる。
【００６３】
上記に基づいて、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、およびＩＶの構造は、以下の通り改変することができる。
【００６４】
【化１０】
2011521978.tif 000013
いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、以下の構造を有する化合物からなることができる（以降、「Ｃ３１」と称する）。
【００６５】
【化１１】
2011521978.tif 000014
いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、以下の構造を有する化合物からなることができる（以降、「Ｃ１５７」と称する）。
【００６６】
【化１２】
2011521978.tif 000015
いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、以下の構造を有する化合物からなることができる（以降、「Ｃ１４４」と称する）。
【００６７】
【化１３】
2011521978.tif 000016
いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、以下の構造を有する化合物からなることができる（以降、「Ｃ１４５」と称する）。
【００６８】
【化１４】
2011521978.tif 000017
いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、以下の構造を有する化合物からなることができる（以降、それぞれ「Ｃ１９３」、「Ｃ１３８」、「Ｃ１３９」、「Ｃ１４１」、「Ｃ１４２」、「Ｃ１７８」、および「Ｃ１８１」と称する）。
【００６９】
【化１５】
2011521978.tif 000018
いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、以下の化合物のいずれか１つとすることができる。
【００７０】
【化１６】
2011521978.tif 000019
【００７１】
【化１７】
2011521978.tif 000020
前述の化合物の使用の可能な範囲を限定しようとすることなく、想定される臨床的な治療適応（clinical therapeutic indications）としては、細胞が脂肪酸シンターゼを過剰発現させる多くの組織で発生する癌を含めて、様々なタイプの癌の治療が挙げられるが、これに限定されるものではない。本発明の１つまたは複数の低分子、またはその薬剤塩を、標的ＦＡＳ活性および脂肪酸合成の阻害によって肥満を治療および／または予防するために使用される組成物として合成および投与することができる。最後に、本発明の１つまたは複数の化合物を、ＦＡＳタンパク質またはその相同体を発現する侵襲性有機体による微生物感染を治療するために使用される組成物として合成および投与することができる。このような微生物としては、ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉおよびｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｉが挙げられるが、これらに限定されるものではない。本発明の化合物は、当技術分野で公知である方法または本明細書で別に指定する方法で合成することができる。
【００７２】
別段の指定のない限り、本発明の特定の化合物の言葉は、化合物のすべての異性体を包含し、それらのジアステレオマー、互変異性体、エナンチオマー、ラセミ体および／または他の混合物がすべて含まれる。別段の指定のない限り、特定の化合物の言葉は、そのイオン、塩、溶媒和物（例えば、水和物）、保護された形、およびプロドラッグも包含する。この目的のために、活性化合物の対応する塩、例えば薬剤として許容される塩を調製、精製、および／もしくは取り扱うことが好都合であり、または望ましいことがある。薬剤として許容される塩の例は、Ｂｅｒｇｅら、１９７７年、「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ  Ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ  Ｓａｌｔｓ」、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．、６６巻、１〜１９頁に述べられており、その内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【００７３】
上記に基づいて、本発明の１つまたは複数の化合物を単独でまたは別の活性成分と組み合わせて、治療組成物として合成および投与することができる。本発明の組成物は、ヒトおよび他の動物に投与するために、錠剤、カプセル剤、丸剤、散剤、顆粒剤、非経口無菌液剤または懸濁剤、経口液剤または懸濁剤、適量の化合物を含有する水中油型および油中水型乳剤、坐剤などの単位剤形、ならびに流動性懸濁剤または液剤で提供することができる。この目的のために、医薬組成物は、選択された投与経路に適合するように製剤化することができ、投与経路に特異的な材料を含有することができる。このような医薬組成物の投与経路は、通常５つの一般群に分けられる：吸入、経口、経皮、非経口、および坐剤。一実施形態において、本発明の医薬組成物は、静脈内、皮内、筋肉内、髄腔内、または皮下注射などの注射によって非経口投与するのに適するものであり得る。あるいは、本発明の組成物を、本明細書に記載する経口投与またはさもなければ当技術分野で公知である経口投与のために製剤化することができる。
【００７４】
本明細書で使用されるように、「医薬賦形剤」および「医薬キャリア」という用語は、同じ意味を有する。経口投与には、固体または流体単位剤形を調製することができる。錠剤などの固体組成物を調製するには、化合物を、医薬賦形剤またはキャリアとしてタルク、ステアリン酸マグネシウム、第二リン酸カルシウム、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、硫酸カルシウム、デンプン、ラクトース、アカシア、メチルセルロース、および機能的に同様の材料など通常の材料と混合することができる。化合物を不活性医薬賦形剤と混合し、混合物を適切なサイズの硬ゼラチンカプセルに充填することによって、カプセル剤が調製される。化合物のスラリーを許容できる植物油、軽質液状ワセリン、または他の不活性油と機械カプセル化することによって、軟ゼラチンカプセル剤が調製される。
【００７５】
シロップ剤、エリキシル剤、懸濁剤などの経口投与用の流体単位剤形を調製することができる。剤形を砂糖または別の甘味剤、芳香性着香剤、および保存剤と共に水性ビヒクルに溶解して、シロップ剤を生成することができる。懸濁剤は、水性ビヒクルを用いて、アカシア、トラガカント、メチルセルロースなどの懸濁化剤の助けによって調製することができる。
【００７６】
非経口投与には、化合物および無菌ビヒクルを利用して、流体単位剤形を調製することができる。液剤を調製する際に、化合物を注射用水に溶解し、適切なバイアルまたはアンプルに充填し、密封する前に濾過滅菌することができる。局所麻酔薬、保存剤、および緩衝剤などのアジュバントをビヒクルに溶解することができる。組成物をバイアルに充填した後凍結し、水を真空下で除去することができる。次いで、凍結乾燥した粉末をバイアルで計量し、使用前に水で戻すことができる。
【００７７】
治療の用量および期間は、（１）患者の年齢、体重、および臓器機能（例えば、肝機能および腎機能）；（２）治療対象の疾患過程の性質および程度、ならびに著しい任意の既存併存疾患および服用中の併用薬物、（３）投与経路、治療をもたらすのに必要な投与頻度および投与期間、ならびに薬物の治療係数など、薬物に関連したパラメーターを含めて、種々の因子に依存する。一般に、用量は、標的部位において有効濃度約１μｇ／ｍｌ〜１０μｇ／ｍｌを達成することを目的に、血清レベル１ｎｇ／ｍｌ〜１００ｎｇ／ｍｌを実現するように選択される。このような因子を用いて、癌性細胞、肥満、もしくは侵襲性微生物感染、またはそれらに関連した疾患の標的症状を改善し、かつ／あるいは癌性細胞、肥満、もしくは侵襲性微生物感染、またはそれらに関連した疾患を治療または予防するように、治療上有効量を投与することができる。治療上有効量の決定は、特に本明細書に記載されている詳細な開示および実施例を考慮して、十分当業者の能力の範囲内である。
【実施例】
【００７８】
（実施例１）−図１に示すＣ３１の合成
ステップＡ−トリフル酸オクチル（１）。−４０℃に冷却したＣＨ２Ｃｌ２（２１２ｍＬ）中オクタノール（４．６ｇ、３５．３ｍｍｏｌ）に、ピリジン（ＣａＨ２から新たに蒸留、３．２８ｍＬ、４０．６ｍｍｏｌ）、およびトリフル酸無水物（６．４１ｍＬ、３８．１ｍｍｏｌ）を添加し、溶液を−４０℃で２０分間撹拌させておいた。次いで、反応混合物を、室温まで３時間かけてゆっくりと温まらせた。次いで、白色固体をセライトに通して濾過し、ペンタン（２回×７０ｍＬ）で洗浄した。溶媒の大部分は蒸発して、約５〜１０ｍＬの溶媒が残存し、白色沈殿物が存在した。熱ペンタン（７０ｍＬ）を添加し、この混合物を濾過して、いずれの残留ピリジン塩も除去した。濾液を再び蒸発させて、薄橙色透明油１（ＴＬＣにより定量的、ｒｆ＝０．６４、１０％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）が得られ、直ちに使用した。
【００７９】
ステップＢ−２，２，４−トリメチル−［１，３］オキサチオラン−５−オン（２）。０℃に冷却したチオ乳酸（１４．０ｇ、１３２．０ｍｍｏｌ）に、滴下漏斗を使用して２−メトキシプロペン（５０．５ｍＬ、５２８ｍｍｏｌ）を滴下した。溶液を室温まで温まらせ、次いで４８時間加熱還流した。室温に冷却した後、Ｅｔ２Ｏ（２００ｍＬ）を添加し、この混合物をＮａ２ＣＯ３（１Ｎ、３回×１５０ｍＬ）で抽出し、塩水（２回×１００ｍＬ）で洗浄した。有機物を合わせて、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させて、粗黄色油を得た。これを、８０〜９５℃で蒸留（Ｈ２Ｏアスピレーター圧、２５〜３５トール）して、純粋な２を得た（９．９ｇ、５２％）。
【００８０】
【化１８】
2011521978.tif 000021
ステップＣ−２，２，５−トリメチル−５−オクチル−［１，３］−オキサチオラン−４−オン（３）。−７８℃のＴＨＦ（４７ｍＬ）中ＬｉＨＭＤＳ（３１．７ｍＬ、３１．７ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中１Ｍ）の混合物に、ＴＨＦ（４７ｍＬ）中２（４．３ｇ、２９．４ｍｍｏｌ）をカニューレによって滴下し、得られた黄色溶液を−７８℃で３０分間撹拌した。次いで、ペンタン（８ｍＬ）中トリフル酸オクチル１（９．０ｇ、３５ｍｍｏｌ）を、室温で、カニューレによって−７８℃のエノラートの溶液にゆっくりと添加した。−７８℃で２時間撹拌した後、１Ｎ  ＨＣｌ（２００ｍＬ）を添加し、溶液をＥｔ２Ｏ（３回×７５ｍＬ）で抽出した。有機物を合わせて、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（２％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類）によって、純粋な３（５．４５ｇ、７２％）が得られた。
【００８１】
【化１９】
2011521978.tif 000022
ステップＤ−２−アセチルスルファニル−２−メチル−デカン酸エチルエステル（４）。ＥｔＯＨ（無水、１４．６ｍＬ）中３（５．３３ｇ、２０．６ｍｍｏｌ）に、ＮａＯＥｔ（２．１Ｍ、１２．７ｍＬ、２６．９ｍｍｏｌ）［ＥｔＯＨ（２４ｍＬ）中Ｎａ金属（１．２４ｇ、５４ｍｍｏｌ）から新たに調製］を添加し、溶液を室温で撹拌させておいた。３０分後、溶液をＮＨ４Ｃｌ（飽和）／１Ｎ  ＨＣｌ（１００ｍＬ、３：２）に注ぎ込み、Ｅｔ２Ｏ（３回×７５ｍＬ）で抽出した。次いで、有機物を合わせて、Ｈ２Ｏで十分に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させ、ＣＨ２Ｃｌ２（１２９ｍＬ）に再溶解した。この予冷した溶液（０℃）に、ＮＥｔ３（４．３ｍＬ、３０．９ｍｍｏｌ）および塩化アセチル（３．２ｍＬ、４１．２ｍｍｏｌ）を添加した。０℃で４０分経過した後、ＮＨ４Ｃｌ（飽和）（２００ｍＬ）を添加し、溶液をＣＨ２Ｃｌ２（３回×７０ｍＬ）で抽出した。有機物を合わせて、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類）によって、純粋な４（３．１ｇ、５４％）が得られた。
【００８２】
【化２０】
2011521978.tif 000023
ＩＲ（ＮａＣｌ）  ３４３０，１８６８，１６９３，１６４４ｃｍ−１；分析値（Ｃ１５Ｈ２８Ｏ３Ｓ）Ｃ，Ｈ。
【００８３】
ステップＥ−４−ヒドロキシ−５−メチル−５−オクチル−５−Ｈ−チオフェン−２−オン（５）。−７８℃のＴＨＦ（１５５ｍＬ）中４（３．１１ｇ、１０．８ｍｍｏｌ）に、ＬｉＨＭＤＳ（１３．４ｍＬ、１３．４ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中１．０Ｍ）を添加し、溶液を、−５℃まで２時間かけてゆっくりと温まらせ、次いで−５℃でさらに２０分間維持した。次いで、溶液を１Ｎ  ＨＣｌ（２００ｍＬ）に注ぎ込み、Ｅｔ２Ｏ（３回×１００ｍＬ）で抽出した。有機物を合わせて、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（２０％ＥｔＯＡｃ／２％ＣＨ３ＣＯ２Ｈ／ヘキサン類）によって、５（１．２ｇ、４６％）が得られた。
【００８４】
【化２１】
2011521978.tif 000024
ＩＲ（ＮａＣｌ）  ３４２２，１５９３ｃｍ−１；分析値（Ｃ１３Ｈ２２Ｏ２Ｓ），Ｃ，Ｈ。
【００８５】
ステップＦ−５−メチル−５−オクチル−２−オキソ−チオフェン−４−イルオキシ）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（７）。−４０℃に冷却したＤＭＦ（２３ｍＬ）中５（１．４ｇ、５．８ｍｍｏｌ）に、ＮａＨ（３２６ｍｇ、８．１５ｍｍｏｌ、鉱油中６０％）を添加し、溶液を温まらせ、０℃で３０分間撹拌した。次いで、ブロモ酢酸ｔ−ブチル６（１．２９ｍＬ、８．７３ｍｍｏｌ）を直接添加し、混合物を温まらせ、室温で３時間撹拌した。ＮＨ４Ｃｌ（飽和）／１Ｎ  ＨＣｌ（６：１、１００ｍＬ）を添加し、溶液をＥｔ２Ｏ（３回×７０ｍＬ）で抽出した。有機物を合わせて、Ｈ２Ｏで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類）によって、純粋な７（１．７ｇ、８２％）が得られた。
【００８６】
【化２２】
2011521978.tif 000025
分析値（Ｃ１９Ｈ３２Ｏ４Ｓ）Ｃ，Ｈ。
【００８７】
ステップＧ−５−メチル−５−オクチル−２−オキソ−チオフェン−４−イルオキシ）−酢酸（８）。ＣＨ２Ｃｌ２（３２ｍＬ）に溶解した７（１．７ｇ、４．７ｍｍｏｌ）に、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）（９．１ｍＬ）を添加し、溶液を室温で４〜５時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、粗材料をクロマトグラフィーにかけて（４０％ＥｔＯＡｃ／２％ＣＨ３ＣＯ２Ｈ／ヘキサン類）、純粋な８（１．１、７７％）を得た。
【００８８】
【化２３】
2011521978.tif 000026
ＩＲ（ＮａＣｌ）  ３４４２，１６４５ｃｍ−１；分析値（Ｃ１５Ｈ２４Ｏ４Ｓ）Ｃ，Ｈ。
【００８９】
ステップＨ−Ｎ−（４−クロロフェニル）−（５−メチル−５−オクチル−２−オキソ−チオフェン−４−イルオキシ）−アセトアミド（９）。０℃に冷却した８（１．１６５ｇ、３．９ｍｍｏｌ、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２溶液に、ＥＤＣ（１．１９６ｇ、６．２４ｍｍｏｌ、１．６当量）、ＤＭＡＰ（７１．３ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ、０．１５当量）、および４−クロロアニリン（６９７ｍｇ、５．４６ｍｍｏｌ、１．４当量）を添加し、溶液を０℃で１時間撹拌させておいた。反応を室温までゆっくりと温まらせ、１２時間撹拌した。混合物を、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液：１Ｎ  ＨＣｌ（４：１）に注ぎ込み、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機物を合わせて、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（３０％ＥｔＯＡｃ−４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって、純粋な化合物（１．１３２ｇ、収率７１％）が白色粉末として得られた。次いで、化合物をエーテル：クロロホルム（９：１）で再結晶して、白色結晶固体が得られた。
【００９０】
【化２４】
2011521978.tif 000027
（実施例２）−Ｃ１５７の合成
Ｃ１５７を作製するために、第２のステップで、図２に示すように、乳酸をチオ乳酸の代わりに使用する点以外は、図１に示すＣ３１を作製するのに使用したプロセスと同じプロセスを使用することができる。
【００９１】
（実施例３）−化合物精製の一般手順
冷却した８（０．２ｍｍｏｌ、１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（３．０ｍＬ）溶液（０℃）に、１−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）（０．３２ｍｍｏｌ、１．６当量）、アニリン誘導体（０．２２ｍｍｏｌ、１．１当量）、およびＤＭＡＰ（０．０３ｍｍｏｌ、０．１５当量）を添加した。混合物を０℃で３０分間撹拌し、次いで室温まで温め、４時間撹拌した。溶液を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１０ｍｌ）に注ぎ込み、ＣＨ２Ｃｌ２（３回×１０ｍｌ）で抽出した。有機物を合わせて、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させて、粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィー（３０％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）によって、純粋な生成物が得られた。
【００９２】
【化２５】
2011521978.tif 000028
２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−Ｎ−フェニルアセトアミド（１０）。８（４５．０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）およびアニリン（１７．０Ｌ、０．１８ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物１０（５０．０ｍｇ、６７％）が油として得られた。
【００９３】
【化２６】
2011521978.tif 000029
【００９４】
【化２７】
2011521978.tif 000030
２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−Ｎ−ｐ−トリル−アセトアミド（１１）。８（４５．０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）および４−メチルアニリン（１９．２ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物１１（５１．０ｍｇ、６５％）が固体として得られた。
【００９５】
【化２８】
2011521978.tif 000031
融点：９６℃。
【００９６】
【化２９】
2011521978.tif 000032
Ｎ−（２−トリフルオロメチル−フェニル）−２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−アセトアミド（１２）。８（４５．０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）および２−トリフルオロメチルアニリン（２１．０μＬ、０．１６ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物１２（３０．０ｍｇ、４５％）が得られた。
【００９７】
【化３０】
2011521978.tif 000033
【００９８】
【化３１】
2011521978.tif 000034
Ｎ−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−アセトアミド（１３）。８（４５．０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）および３−トリフルオロメチルアニリン（２１．０μＬ、０．１６ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物１３（５４．３ｍｇ、８２％）が得られた。
【００９９】
【化３２】
2011521978.tif 000035
【０１００】
【化３３】
2011521978.tif 000036
２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−Ｎ−（４トリフルオロメチル−フェニル）−アセトアミド（１４）。８（６０．０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）および４−トリフルオロメチルアニリン（３０．０μＬ、０．２４ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物１４（４８．０ｍｇ、５４％）が固体として得られた。
【０１０１】
【化３４】
2011521978.tif 000037
融点：８７℃。
【０１０２】
【化３５】
2011521978.tif 000038
Ｎ−（２−トリフルオロメトキシ−フェニル）−２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−アセトアミド（１５）。８（４５．０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）および２−トリフルオロメトキシアニリン（２３．０μＬ、０．１７ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物１５（４０．０ｍｇ、５８％）が得られた。
【０１０３】
【化３６】
2011521978.tif 000039
【０１０４】
【化３７】
2011521978.tif 000040
Ｎ−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−アセトアミド（１６）。８（４５．０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）および３−トリフルオロメトキシアニリン（２２．０μＬ、０．１７ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物１６（５４．４ｍｇ、７９％）が得られた。
【０１０５】
【化３８】
2011521978.tif 000041
【０１０６】
【化３９】
2011521978.tif 000042
２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−Ｎ−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−アセトアミド（１７）。８（６０．０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）および４−トリフルオロメトキシアニリン（２９．５μＬ、０．２４ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物１７（６２．０ｍｇ、６８％）が固体として得られた。
【０１０７】
【化４０】
2011521978.tif 000043
融点：８７℃。
【０１０８】
【化４１】
2011521978.tif 000044
Ｎ−（４−メトキシ−フェニル）−２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−アセトアミド（１８）。８（６０．０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）および４−メトキシアニリン（２９．５ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物１８（６４．０ｍｇ、７９％）が固体として得られた。
【０１０９】
【化４２】
2011521978.tif 000045
融点：９９℃。
【０１１０】
【化４３】
2011521978.tif 000046
２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−Ｎ−（４−オクチルオキシ−フェニル）−アセトアミド（１９）。８（６０．０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）および４−オクチルオキシアニリン（５３．０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物１９（７６．０ｍｇ、７５％）が固体として得られた。
【０１１１】
【化４４】
2011521978.tif 000047
融点：６４℃。
【０１１２】
【化４５】
2011521978.tif 000048
２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−Ｎ−（２−メチルスルファニル−フェニル）−アセトアミド（２０）。８（４５．０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）および２−メチルチオアニリン（２０．０μＬ、０．１６ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物２０（５０．０ｍｇ、７９％）が得られた。
【０１１３】
【化４６】
2011521978.tif 000049
【０１１４】
【化４７】
2011521978.tif 000050
２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−Ｎ−（４−メチルスルファニル−フェニル）−アセトアミド（２１）。８（４５．０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）および３−トリフルオロメトキシアニリン（２２．０μＬ、０．１７ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物２１（２１．０ｍｇ、４９％）が得られた。
【０１１５】
【化４８】
2011521978.tif 000051
【０１１６】
【化４９】
2011521978.tif 000052
Ｎ−ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル−２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−アセトアミド（２２）。８（４５．０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）およびベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イルアミン（２４．７ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物２２（５１．０ｍｇ、６１％）が固体として得られた。
【０１１７】
【化５０】
2011521978.tif 000053
融点：１０２℃。
【０１１８】
【化５１】
2011521978.tif 000054
Ｎ−［４−（４−クロロ−フェノキシ）−フェニル］−２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−アセトアミド（２３）。８（６０．０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）および４−（４−クロロ−フェノキシ）−フェニルアミン（５２．５ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物２３（８１．０ｍｇ、８１％）が固体として得られた。
【０１１９】
【化５２】
2011521978.tif 000055
融点：８３℃。
【０１２０】
【化５３】
2011521978.tif 000056
２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−Ｎ−（４−チオフェン−２−イルフェニル）−アセトアミド（２４）。８（６０．０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）および４−（２−チオフェニル）−アニリン（４２．０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物２４（８２．０ｍｇ、９０％）が固体として得られた。
【０１２１】
【化５４】
2011521978.tif 000057
融点：１３０℃。
【０１２２】
【化５５】
2011521978.tif 000058
２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−Ｎ−（２−モルホリン−４−イル−フェニル）−アセトアミド（２５）。８（４５．０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）および２−モルホリノアニリン（３２．０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物２５（６２．０ｍｇ、６７％）が油として得られた。
【０１２３】
【化５６】
2011521978.tif 000059
【０１２４】
【化５７】
2011521978.tif 000060
Ｎ−（４−クロロ−２−トリフルオロメチル−フェニル）−２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−アセトアミド（２６）。８（４５．０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）および４−クロロ−２−トリフルオロメチルアニリン（２６．０μＬ、０．１８ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物２６（２４．０ｍｇ、２５％）が得られた。
【０１２５】
【化５８】
2011521978.tif 000061
【０１２６】
【化５９】
2011521978.tif 000062
Ｎ−（４−フルオロ−フェニル）−２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−アセトアミド（２７）。８（１００．０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）および４−フルオロアニリン（４４．０μＬ、０．４７ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物２７（１２７．０ｍｇ、９８％）が得られた。
【０１２７】
【化６０】
2011521978.tif 000063
【０１２８】
【化６１】
2011521978.tif 000064
４−［２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−アセチルアミノ］−安息香酸メチルエステル（２８）。８（１００．０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）および４−アミノ安息香酸メチル（７０．０ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物２８（９８．０ｍｇ、６９％）が得られた。
【０１２９】
【化６２】
2011521978.tif 000065
【０１３０】
【化６３】
2011521978.tif 000066
Ｎ−（４−ブロモ−フェニル）−２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−アセトアミド（３２）。８（３００．０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）および４−ブロモアニリン（１７２ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物３２（２２７．０ｍｇ、５０％）が固体として得られた。
【０１３１】
【化６４】
2011521978.tif 000067
【０１３２】
【化６５】
2011521978.tif 000068
２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−Ｎ−［４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−フェニル］−アセトアミド（３３）。８（６００．０ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）および４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−フェニルアミン（４３８ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物３３（６５１．０ｍｇ、６５％）が固体として得られた。
【０１３３】
【化６６】
2011521978.tif 000069
【０１３４】
【化６７】
2011521978.tif 000070
４−［２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−アセチルアミノ］−ベンズアミド（３４）。８（１１４．０ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）および４−アミノベンズアミド（５２ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物３４（１０３．０ｍｇ、６５％）が固体として得られた。
【０１３５】
【化６８】
2011521978.tif 000071
【０１３６】
【化６９】
2011521978.tif 000072
２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−Ｎ−（４−スルファモイル−フェニル）−アセトアミド（３５）。８（１０５．０ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）および４−アミノ−ベンゼンスルホンアミド（６０ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物３５（３７．０ｍｇ、２４％）が固体として得られた。
【０１３７】
【化７０】
2011521978.tif 000073
【０１３８】
【化７１】
2011521978.tif 000074
Ｎ−（４−シアノ−フェニル）−２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−アセトアミド（３６）。８（１０７．０ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）および４−アミノ−ベンゾニトリル（４１ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物３６（１０６．０ｍｇ、７６％）が固体として得られた。
【０１３９】
【化７２】
2011521978.tif 000075
【０１４０】
【化７３】
2011521978.tif 000076
５−メチル−５−オクチル−４−｛２−オキソ−２−［４−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−エトキシ｝−５Ｈ−チオフェン−２−オン（３７）。８（１００．０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）および１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−ピペラジン（７７ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物３７（６６．０ｍｇ、３９％）が固体として得られた。
【０１４１】
【化７４】
2011521978.tif 000077
【０１４２】
【化７５】
2011521978.tif 000078
４−｛２−［４−（４−クロロ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−オキソ−エトキシ｝−５−メチル−５−オクチル−５Ｈ−チオフェン−２−オン（３８）。８（１００．０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）および１−（４−クロロフェニル（cholorphenyl））−ピペラジン（６５ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物３８（７３．０ｍｇ、４６％）が固体として得られた。
【０１４３】
【化７６】
2011521978.tif 000079
【０１４４】
【化７７】
2011521978.tif 000080
４−｛２−［４−（４−メトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−オキソ−エトキシ｝−５−メチル−５−オクチル−５Ｈ−チオフェン−２−オン（３９）。８（１０５．０ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）および１−（４−メトキシフェニル）−ピペラジン（６７ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物３９（１１３．０ｍｇ、６８％）が固体として得られた。
【０１４５】
【化７８】
2011521978.tif 000081
【０１４６】
【化７９】
2011521978.tif 000082
４−｛２−［４−（４−メトキシ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−２−オキソ−エトキシ｝−５−メチル−５−オクチル−５Ｈ−チオフェン−２−オン（４０）。８（１１６．０ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）および１−（４−メトキシ−ベンジル）−ピペラジン（７８ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ａに従って、化合物４０（１３７．０ｍｇ、７４％）が固体として得られた。
【０１４７】
【化８０】
2011521978.tif 000083
【０１４８】
【化８１】
2011521978.tif 000084
Ｎ−（４−クロロ−フェニル）−２−（２，２−ジヘキシル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−アセトアミド（４１）。８（４５．０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）および２−ブロモ−Ｎ−（４−クロロ−フェニル）−アセトアミド（４１ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ｂに従って、化合物４１（４８．０ｍｇ、６７．４％）が固体として得られた。
【０１４９】
【化８２】
2011521978.tif 000085
（実施例４）−カップリング反応：一般手順
火力乾燥したフラスコに、ブロモ化合物３２（１．０当量）とフェニルボロン酸（１．１当量）、Ｃｓ２ＣＯ３（１．５当量）、およびＤＭＦ中Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（０．２当量）を加え、アルゴン中１００℃で２４時間加熱した。冷却した後、反応混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液に注ぎ込み、エーテルで抽出し、水および塩水で洗浄した。次いで、粗生成物をカラムクロマトグラフィーにかけて、所望の生成物を得た。
【０１５０】
【化８３】
2011521978.tif 000086
２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−Ｎ−（４’−トリフルオロメチル−ビフェニル−４−イル）−アセトアミド（４２）。（ＫＳ−ＩＩ−９４）：３３（１３０．０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）と１−ヨード−４−トリフルオロメチル−ベンゼン（４６μｌ、０．３１ｍｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（１２６ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）、およびＰｄ（ＰＰｈ３）４（２９ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ｃに従って、化合物４２（９４．０ｍｇ、７３％）が固体として得られた。
【０１５１】
【化８４】
2011521978.tif 000087
【０１５２】
【化８５】
2011521978.tif 000088
２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−Ｎ−（４’−トリフルオロメトキシ−ビフェニル−４−イル）−アセトアミド（４３）。（ＫＳ−ＩＩ−９５）：３３（１１６．０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と１−ヨード−４−トリフルオロメトキシ−ベンゼン（４３μＬ、０．２７ｍｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（１１２ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）、およびＰｄ（ＰＰｈ３）４（２６．５ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ｃに従って、化合物４３（８０．０ｍｇ、６５％）が固体として得られた。
【０１５３】
【化８６】
2011521978.tif 000089
【０１５４】
【化８７】
2011521978.tif 000090
Ｎ−ビフェニル−４−イル−２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−アセトアミド（４４）。３２（１１０．０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）とフェニルボロン酸（３２ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（１２６ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）、およびＰｄ（ＰＰｈ３）４（５５．４ｍｇ、０．０５２ｍｍｏｌ）に対して、一般手順Ｃに従って、化合物４４（４４．０ｍｇ、４１％）が固体として得られた。
【０１５５】
【化８８】
2011521978.tif 000091
（実施例５）−Ｃ３１のＲ型およびＳ型エナンチオマーを調製するプロセス
図３に示すＳ型エナンチオマーの合成
ステップＡ−２−ｔｅｒｔ−ブチル−４−メチル−［１，３］オキサチオラン−５−オン（１）。Ａｒ雰囲気中、火力乾燥したフラスコに、（Ｒ）−チオ乳酸（２．５ｇ、２３．５ｍｍｏｌ）と、続いてペンタン（２０ｍＬ）、およびピバルアルデヒド（２．８２ｍＬ、２５．９ｍｍｏｌ）、およびトリフルオロ酢酸数滴を加えた。反応にディーンスターク装置を装備して、水を除去した。次いで、溶液を４８時間（５５℃）加熱還流し、同時に水を連続的に除去した。室温に冷却した後、溶媒を完全に蒸発させた。粗生成物を−７８℃でペンタン：エーテル（５：１）から再結晶した。白色固体材料をるつぼに通して濾過して、生成物１２（１．０４ｇ、収率：２５．４％）を得た。
【０１５６】
【化８９】
2011521978.tif 000092
ステップＢ−トリフル酸オクチル（２）。−４０℃に冷却したＣＨ２Ｃｌ２（２１２ｍＬ）中オクタノール（４．６ｇ、３５．３ｍｍｏｌ）に、ピリジン（ＣａＨ２から新たに蒸留、３．２８ｍＬ、４０．６ｍｍｏｌ）およびトリフル酸無水物（６．４１ｍＬ、３８．１ｍｍｏｌ）を添加し、溶液を−４０℃で２０分間撹拌させておいた。次いで、反応混合物を、室温まで３時間かけてゆっくりと温まらせた。次いで、白色固体をセライトに通して濾過し、ペンタン（２回×７０ｍＬ）で洗浄した。溶媒の大部分は蒸発して、約５〜１０ｍＬの溶媒が残存し、白色沈殿物が存在した。熱ペンタン（７０ｍＬ）を添加し、この混合物を濾過して、いずれの残留ピリジン塩も除去した。濾液を再び蒸発させて、透明薄橙色油２（ＴＬＣにより定量的、ｒｆ＝０．６４、１０％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）が得られ、直ちに使用した。
【０１５７】
ステップＣ−２−ｔｅｒｔ−ブチル−４−メチル−４−オクタ−１，３，５，７−テトライニル−［１，３］オキサチオラン−５−オン（３）。−７８℃のＴＨＦ（４７ｍＬ）中ＬｉＨＭＤＳ（１３．８ｍＬ、１３．８ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中１Ｍ）の混合物に、ＴＨＦ（１５ｍＬ）中１（２．０９ｇ、１２．０ｍｍｏｌ）をカニューレによって滴下し、得られた黄色溶液を−７８℃で３０分間撹拌した。次いで、ペンタン（８ｍＬ）中トリフル酸オクチル２（３．４８ｇ、１３．２ｍｍｏｌ）を、室温で、カニューレによって−７８℃のエノラートの溶液にゆっくりと添加した。−７８℃で２時間撹拌した後、１Ｎ  ＨＣｌ（２００ｍＬ）を添加し、溶液をＥｔ２Ｏ（３回×７５ｍＬ）で抽出した。有機物を合わせて、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（２％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類）によって、純粋な３（２．４２ｇ、７５％）が得られた。
【０１５８】
【化９０】
2011521978.tif 000093
ステップＤ−（Ｓ）−２−アセチルスルファニル−２−メチル−デカ−３，５，７，９−テトライン酸エチルエステル（４）：ＥｔＯＨ（無水、１４．６ｍＬ）中３（１．４３ｇ、５．０ｍｍｏｌ）に、ＮａＯＥｔ（１２．５ｍｍｏｌ）［ＥｔＯＨ（１５ｍＬ）中Ｎａ金属（３００ｍｇ、１２．５ｍｍｏｌ）から新たに調製］を添加し、溶液を室温で撹拌させておいた。３０分後、溶液をＮＨ４Ｃｌ（飽和）／１Ｎ  ＨＣｌ（２５ｍＬ、３：２）に注ぎ込み、Ｅｔ２Ｏ（３回×２５ｍＬ）で抽出した。次いで、有機物を合わせて、Ｈ２Ｏで十分に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させて、中間体（Ｉ）を得た。次いで、これをＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）に再溶解した。この予冷した溶液（０℃）に、ＮＥｔ３（０．８３ｍＬ、６．０ｍｍｏｌ）および塩化アセチル（０．３９ｍＬ、５．５ｍｍｏｌ）を添加した。０℃で４０分経過した後、ＮＨ４Ｃｌ（飽和）（５０ｍＬ）を添加し、溶液をＣＨ２Ｃｌ２（３回×２０ｍＬ）で抽出した。有機物を合わせて、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類）によって、純粋な４（１．０ｇ、７０．６％）が得られた。
【０１５９】
【化９１】
2011521978.tif 000094
ステップＥ−（Ｓ）−５−メチル−５−オクタ−１，３，５，７−テトライニル−チオフェン−２，４−ジオン（５）（ＫＳ−ＩＩ−６１）。−７８℃のＴＨＦ（１５ｍＬ）中４（０．９２２ｇ、３．２ｍｍｏｌ）に、ＬｉＨＭＤＳ（４．８ｍＬ、４．８ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中１．０Ｍ）を添加し、溶液を、−５℃まで２時間かけてゆっくりと温まらせ、次いで−５℃でさらに２０分間維持した。次いで、溶液を１Ｎ  ＨＣｌ（２０ｍＬ）に注ぎ込み、Ｅｔ２Ｏ（３回×２０ｍＬ）で抽出した。有機物を合わせて、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（２０％ＥｔＯＡｃ／２％ＣＨ３ＣＯ２Ｈ／ヘキサン類）によって、５（０．５１ｇ、６５．６％）が得られた。
【０１６０】
【化９２】
2011521978.tif 000095
ステップＦ−（Ｓ）−Ｎ−（４−クロロ−フェニル）−２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−アセトアミド（７）（ＫＳ−ＩＩ−６２）。２５ｍＬの丸底フラスコに、窒素雰囲気中で５−メチル−５−オクタ−１，３，５，７−テトライニル−チオフェン−２，４−ジオン５（８５．０ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）、Ｎ−（４−クロロフェニル）−２−ブロモアセトアミド６（９１．０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（９７．０ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ、窒素雰囲気中で火力乾燥および冷却）、およびＤＭＦ（３．０ｍＬ）を加えた。混合物を７０℃で２〜３時間加熱した（ＴＬＣでモニターした）。固体材料を濾別し、ジエチルエーテルで洗浄した。次いで、溶液をエーテル（３０ｍＬ）で希釈し、水（３回×１５ｍＬ）で洗浄し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（２回×１０ｍＬ）および塩水で洗浄した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させて、粗生成物を半固体として得た。次いで、粗生成物をジエチルエーテル：ヘキサン（１：１）から再結晶して、白色粉末を得た（基本的に粉砕されている）。次いで、生成物を濾過し、エーテル：ヘキサン（１：１）で洗浄した。濾液を濃縮し、再びエーテル：ヘキサン（１：１）で再結晶して、白色粉末を得た。白色粉末を合わせて、真空乾燥して、収率６１．５％で生成物７（８８．０ｇ）を得た。
【０１６１】
【化９３】
2011521978.tif 000096
図４に示すＲ型エナンチオマーの合成
ステップＡ−（Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブチル−４−メチル−［１，３］オキサチオラン−５−オン（８）。Ａｒ雰囲気中、火力乾燥したフラスコに、（Ｓ）−チオ乳酸（４．１７ｇ、３９．３ｍｍｏｌ）と、続いてペンタン（８０ｍＬ）、およびピバルアルデヒド（４．４８ｍＬ、４１．３ｍｍｏｌ）、およびトリフルオロ酢酸数滴を加えた。反応にディーンスターク装置を装備して、水を除去した。次いで、溶液を４８時間（５５℃）加熱還流し、同時に水を連続的に除去した。室温に冷却した後、溶媒を完全に蒸発させた。次いで、粗生成物を−７８℃でペンタン：エーテル（５：１）から再結晶した。白色固体材料をるつぼに通して濾過して、生成物８２（３．２３ｇ、収率：４７．３％）を得た。
【０１６２】
【化９４】
2011521978.tif 000097
ステップＢ−（Ｒ）−２−ｔｅｒｔ−ブチル−４−メチル−４−オクタ−１，３，５，７−テトライニル−［１，３］オキサチオラン−５−オン（３）。−７８℃のＴＨＦ（４７ｍＬ）中ＬｉＨＭＤＳ（１６．０ｍＬ、１６．０ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中１Ｍ）の混合物に、ＴＨＦ（１５ｍＬ）中８（２．４２ｇ、１３．９ｍｍｏｌ）をカニューレによって滴下し、得られた黄色溶液を−７８℃で３０分間撹拌した。次いで、ペンタン（８ｍＬ）中トリフル酸オクチル２（３．８５ｇ、１４．６ｍｍｏｌ）を、室温で、カニューレによって−７８℃のエノラートの溶液にゆっくりと添加した。−７８℃で２時間撹拌した後、１Ｎ  ＨＣｌ（２００ｍＬ）を添加し、溶液をＥｔ２Ｏ（３回×７５ｍＬ）で抽出した。有機物を合わせて、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（２％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類）によって、純粋な９（２．５４ｇ、６４％）が得られた。
【０１６３】
【化９５】
2011521978.tif 000098
ステップＣ−（Ｒ）−２−アセチルスルファニル−２−メチル−デカ−３，５，７，９−テトライン酸エチルエステル（１０）：ＥｔＯＨ（無水、１４．６ｍＬ）中９（１．４３ｇ、５．０ｍｍｏｌ）に、ＮａＯＥｔ（１２．５ｍｍｏｌ）［ＥｔＯＨ（１５ｍＬ）中Ｎａ金属（３００ｍｇ、１２．５ｍｍｏｌ）から新たに調製］を添加し、溶液を室温で撹拌させておいた。３０分後、溶液をＮＨ４Ｃｌ（飽和）／１Ｎ  ＨＣｌ（２５ｍＬ、３：２）に注ぎ込み、Ｅｔ２Ｏ（３回×２５ｍＬ）で抽出した。次いで、有機物を合わせて、Ｈ２Ｏで十分に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させて、中間体（ＩＩ）を得た。次いで、これをＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）に再溶解した。この予冷した溶液（０℃）に、ＮＥｔ３（０．８３ｍＬ、６．０ｍｍｏｌ）および塩化アセチル（０．３９ｍＬ、５．５ｍｍｏｌ）を添加した。０℃で４０分経過した後、ＮＨ４Ｃｌ（飽和）（５０ｍＬ）を添加し、溶液をＣＨ２Ｃｌ２（３回×２０ｍＬ）で抽出した。有機物を合わせて、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類）によって、純粋な１０（１．２９ｇ、９０．０％）が得られた。
【０１６４】
【化９６】
2011521978.tif 000099
ステップＤ−（Ｒ）−５−メチル−５−オクタ−１，３，５，７−テトライニル−チオフェン−２，４−ジオン（１１）。−７８℃のＴＨＦ（１５ｍＬ）中１０（１．２３ｇ、４．２７ｍｍｏｌ）に、ＬｉＨＭＤＳ（６．４ｍＬ、６．４ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中１．０Ｍ）を添加し、溶液を、−５℃まで２時間かけてゆっくりと温まらせ、次いで−５℃でさらに２０分間維持した。次いで、溶液を１Ｎ  ＨＣｌ（２０ｍＬ）に注ぎ込み、Ｅｔ２Ｏ（３回×２０ｍＬ）で抽出した。有機物を合わせて、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（２０％ＥｔＯＡｃ／２％ＣＨ３ＣＯ２Ｈ／ヘキサン類）によって、１１（３５２．０ｍｇ、３４％）が得られた。
【０１６５】
【化９７】
2011521978.tif 000100
ステップＥ−（Ｒ）−Ｎ−（４−クロロ−フェニル）−２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−アセトアミド（７）（ＫＳ−ＩＩ−６２）：２５ｍＬの丸底フラスコに、窒素雰囲気中で（Ｒ）−５−メチル−５−オクタ−１，３，５，７−テトライニル−チオフェン−２，４−ジオン１１（１９５．０ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ）、Ｎ−（４−クロロフェニル）−２−ブロモアセトアミド６（２０９．０ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（２２０．０ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ、窒素雰囲気中で火力乾燥および冷却）、およびＤＭＦ（３．０ｍＬ）を加えた。混合物を７０℃で２〜３時間加熱した（ＴＬＣでモニターした）。固体材料を濾別し、ジエチルエーテルで洗浄した。次いで、溶液をエーテル（３０ｍＬ）で希釈し、水（３回×１５ｍＬ）で洗浄し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（２回×１０ｍＬ）および塩水で洗浄した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させて、粗生成物を半固体として得た。次いで、粗生成物をジエチルエーテル：ヘキサン（１：１）から再結晶して、白色粉末を得た（基本的に粉砕されている）。次いで、生成物を濾過し、エーテル：ヘキサン（１：１）で洗浄した。濾液を濃縮し、再びエーテル：ヘキサン（１：１）で再結晶して、白色粉末を得た。白色粉末を合わせて、真空乾燥して、収率６３．０％で生成物１２（２０６．０ｇ）を得た。
【０１６６】
【化９８】
2011521978.tif 000101
（実施例６）−図５に示すＯ−酢酸ヒドラジドを有する化合物の代替合成方法
ステップＡ−トリフル酸オクチル（１）。乾燥した３Ｌの３ツ口丸底フラスコに、メカニカルスターラー、温度計、および窒素パージ用入口を装備した。フラスコに、ジクロロメタン（１０５０ｍＬ）中オクタノール（１５０ｇ、１．１５ｍｏｌ）を加え、−４０℃に冷却し、続いてピリジン（１０７ｍＬ）を添加した。この冷溶液に、−４０℃から−２０℃でトリフル酸無水物（２０９ｍＬ、１．０８当量）を４５分かけて添加した。反応を室温まで温まらせた。室温で１．５時間撹拌した後、次いで白色固体をセライトに通して濾過し、ペンタン（２回×１００ｍＬ）で洗浄した。濾液を＜３０℃で減圧濃縮して、溶媒の大半を除去した。熱ペンタン（１，０００ｍＬ）を添加し、この混合物を濾過して、いずれの残留ピリジン塩も除去した。濾液を＜３０℃でほぼ乾固するまで減圧濃縮して、無色透明油（２５７．７ｇ、８５．３％）が得られ、直ちに使用した。
【０１６７】
ステップＢ−２，２，４−トリメチル−［１，３］オキサチオラン−５−オン（２）。１２Ｌの３ツ口丸底フラスコに、窒素でパージした雰囲気中でメカニカルスターラー、温度計、およびディーンスタークトラップを装備した。フラスコに、チオ乳酸（１，０００ｇ、９．４ｍｏｌ）と、続いてアセトン（１２．２５ｍｏｌ、１．３当量）、ｐ−トルエンスルホン酸（１７．９ｇ、０．０９ｍｏｌ、０．０１当量）、およびベンゼン（２，４００ｍＬ）を加えた。混合物を４７時間加熱還流し、同時に水を連続的に除去した。約１９０ｍＬの水を回収した。溶液を室温に冷却し、ジエチルエーテル（３，５００ｍＬ）で希釈し、２Ｎ  Ｎａ２ＣＯ３（２回×２，０００ｍＬ）と、続いて水（２，０００ｍＬ）および飽和塩化ナトリウム（２，０００ｍＬ）で洗浄した。溶液を硫酸塩で乾燥し、濾過し、減圧濃縮すると、油が得られた。次いで、粗生成物を真空蒸留して、生成物２（９６７．６ｇ、７０．２％）を無色油として得た。沸点＝７０．５℃〜７３℃（７２６ｍｍＨｇ）。
【０１６８】
ステップＣ−２，２，４−トリメチル−４−オクチル−［１，３］−オキサチオラン−５−オン（３）。乾燥した５Ｌの３ツ口丸底フラスコに、メカニカルスターラー、温度計、および窒素パージ用入口を装備した。−７８℃のＴＨＦ（３５０ｍＬ）中ＬｉＨＭＤＳ（８３１ｍＬ、ＴＨＦ中１．０Ｍ）の混合物に、２（１１０．５ｇ、０．７６ｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２２１ｍＬ）溶液を４０分かけて滴下した。溶液を−７８℃で１時間撹拌した後、温度を−６０℃未満に維持してトリフル酸オクチル（２５７．７ｇ、０．９８ｍｏｌ、１．３当量）を５０分かけて滴下した。−７８℃で４時間撹拌した（ＴＬＣでモニターした）後、２Ｎ  ＨＣｌ（８００ｍＬ）を添加し、溶液を酢酸エチル（２回×６００ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、脱イオン水（３回×１，０００ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮して、粗油を得た。粗生成物を真空蒸留して、化合物３（１８５．９ｇ、９５．３％）を無色油として得た。沸点＝１１０℃〜１１６℃（７２６ｍｍＨｇ）。
【０１６９】
ステップＤ−２−アセチルスルファニル−２−メチル−デカン酸エチルエステル（４）。３Ｌの３ツ口丸底フラスコに、メカニカルスターラーおよび窒素パージ用入口を装備した。フラスコに、エタノール（３７０ｍＬ）を添加し、続いてナトリウム金属（２１．５ｇ、０．９３ｍｏｌ、１．３当量）を少量ずつ添加した。透明な溶液を２０〜２５℃に冷却し、続いてエタノール（３１５ｍＬ）中３（１８５ｇ、０．７２ｍｏｌ）を添加した。２時間撹拌した（ＴＬＣでモニターした）後、溶液をＮＨ４Ｃｌ（飽和）／１Ｎ  ＨＣｌ（２，２００ｍＬ、３：２）に注ぎ込み、酢酸エチル（２回×１，０００ｍＬ）で抽出した。次いで、有機物を合わせて、Ｈ２Ｏ（２回×１，０００ｍＬ）、塩水で十分に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させ（１８２．１ｇの淡黄色油）、ＣＨ２Ｃｌ２（１，１００ｍＬ）に再溶解した。この予冷した溶液（０℃）に、ＮＥｔ３（１３７ｇ、１．３５ｍｏｌ）および塩化アセチル（８４．３ｇ、１．０７ｍｏｌ）を添加した。０℃で１時間経過した（ＴＬＣでモニターした）後、ＮＨ４Ｃｌ（飽和）（２，０００ｍＬ）を添加し、溶液をＣＨ２Ｃｌ２（５００ｍＬ）で抽出した。有機物を合わせて、水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。次いで、粗生成物を減圧留去で精製して、４（１８７．６ｇ、９０．７％）を得た。沸点＝１１５℃〜１２７℃（７２６ｍｍＨｇ）。
【０１７０】
ステップＥ−４−ヒドロキシ−５−メチル−５−オクチル−５−Ｈ−チオフェン−２−オン（５）。６Ｌの３ツ口丸底フラスコに、メカニカルスターラーおよび窒素パージ用入口を装備した。フラスコに、４（１８７ｇ、０．７７ｍｏｌ）と、続いてテトラヒドロフラン（１，８７０ｍＬ）を加え、次いで−７８℃に冷却した。冷溶液に、テトラヒドロフラン中ＬｉＨＭＤＳ（８０５ｍＬ、１．２４当量）を５０分かけて滴下した。反応混合物を、−７０℃から−５０℃で１時間、続いて−５０℃から−４０℃で２時間、−４０℃で１時間撹拌し、次いで室温までゆっくり温めた。反応をＴＬＣでモニターした。溶液を２Ｎ  ＨＣｌ（１，０００ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（１，５００ｍＬ）で抽出した。水層を酢酸エチル５００ｍＬで抽出した。有機相を合わせて、脱イオン水（２回×２，０００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮した。粗生成物を冷蔵庫に終夜貯蔵した。結晶生成物５を濾過で単離し（４４ｇ）、ヘキサンで洗浄した。溶媒を除去することなく、濾液を再び冷蔵庫に入れた。さらにいくらかの固体が単離された。さらに結晶化しなくなるまで操作を繰り返した。５の全単離収量：６５ｇ、４１．４％。
【０１７１】
（実施例７）−代替精製プロセス：
抽出が行われると、有機層を飽和重炭酸ナトリウムで（２回）洗浄した。次いで、水層を１Ｎ  ＨＣｌ溶液で（ｐＨ約３〜４に）酸性化した。次いで、水層をエーテルで（３回）抽出し、水、塩水で洗浄し、乾燥し、濃縮して、清浄な生成物を得た。これを、ＮＭＲで確認した。
【０１７２】
（反応からの）元の有機層を水、塩水で洗浄し、乾燥し、蒸発させて、スルファニル−２−メチルデカン酸エチルエステルＩを得た。次いで、この材料を、図６に示すように化合物４の合成にリサイクルした。
【０１７３】
（実施例８）−精製手順Ｂ
Ｎ−（４−クロロ−フェニル）−２−（２−メチル−２−オクチル−５−オキソ−２，５−ジヒドロ−チオフェン−３−イルオキシ）−アセトアミド（９）：２５０ｍＬの丸底フラスコに、窒素雰囲気中で４−ヒドロキシ−５−メチル−５−オクチル−５Ｈ−チオフェン−２−オン５（９．３２ｇ、３８．５ｍｍｏｌ）、Ｎ−（４−クロロフェニル）−２−ブロモアセトアミド２７（９．９８ｇ、４０．４ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（１０．６２ｇ、７７．０ｍｍｏｌ、窒素雰囲気中で火力乾燥および冷却）、およびＤＭＦ（９６．０ｍＬ）を加えた。混合物を７０℃で２〜３時間加熱した（ＴＬＣでモニターした）。固体材料を濾別し、ジエチルエーテルで洗浄した。次いで、溶液をエーテル（３００ｍＬ）で希釈し、水（３回×１００ｍＬ）で洗浄し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（２回×１００ｍＬ）および塩水で洗浄した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させて、粗生成物を半固体として得た。次いで、粗生成物をジエチルエーテル：ヘキサン（１：１）から再結晶して、白色粉末を得た（基本的に粉砕されている）。次いで、生成物を濾過し、エーテル：ヘキサン（１：１）で洗浄した。濾液を濃縮し、再びエーテル：ヘキサン（１：１）で再結晶して、白色粉末を得た。白色粉末を合わせて、真空乾燥して、収率７４％で生成物９（１１．６６ｇ）を得た。
【０１７４】
（実施例９）：生物学的および生化学的方法
本発明による化合物を、以下に記載する様々な生物学的試験にかけた。
【０１７５】
ＺＲ−７５−１ヒト乳癌細胞由来のＦＡＳの精製。Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから入手した培養ＺＲ−７５−１ヒト乳癌細胞から、ヒトＦＡＳを精製した。Ｌｉｎｎら、１９８１年およびＫｕｈａｊｄａら、１９９４年を改変した手順で、低張溶解（hypotonic lysis）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）による連続沈殿（successivepolyethyleneglycol (PEG) precipitation）、およびアニオン交換クロマトグラフィーを利用する。ＺＲ−７５−１細胞を、ＲＰＭＩ培地（１０％ウシ胎仔血清、ペニシリン、およびストレプトマイシンを含む）中で５％ＣＯ２雰囲気下、３７℃で培養した。
【０１７６】
１０本のＴ１５０フラスコのコンフルエント細胞を、１．５ｍｌの溶解バッファー（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ  ７．５、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．１ｍＭ  フェニルメタンスルホニルフルオリド（ＰＭＳＦ）、０．１％Ｉｇｅｐａｌ  ＣＡ−６３０）で溶解し、氷上で２０ストロークしてダウンスホモジナイズする（bouncehomogenized）。ＪＡ−２０ローター（Ｂｅｃｋｍａｎ）を使用して、溶解産物を２０，０００ｒｐｍで３０分間、４℃で遠心し、上清を溶解バッファーで４２ｍｌにする。５０％ＰＥＧ  ８０００の溶解バッファー溶液を、上清にゆっくりと添加して、最終濃度を７．５％にする。４℃で６０分間振盪した後、ＪＡ−２０ローター（Ｂｅｃｋｍａｎ）を使用して、溶液を１５，０００ｒｐｍで３０分間、４℃で遠心する。次いで、固体のＰＥＧ  ８０００を上清に添加して、最終濃度を１５％にする。振盪および遠心を上記のように繰り返した後、ペレットを１０ｍｌの緩衝液Ａ（２０ｍＭ  Ｋ２ＨＰＯ４、ｐＨ  ７．４）に４℃で終夜再懸濁する。０．４５μＭ濾過の後、タンパク質溶液をＭｏｎｏ  Ｑ  ５／５アニオン交換カラム（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）にアプライした。カラムを緩衝液Ａで１ｍｌ／分にて１５分間洗浄し、結合している材料を、６０分かけて６０ｍｌで１Ｍ  ＫＣｌへのリニアグラジエントで溶出する。ＦＡＳ（ＭＷ：約２７０ｋＤ）は、典型的には４〜１５％のＳＤＳ−ＰＡＧＥを使用して、Ｃｏｏｍａｓｓｉｅ  Ｇ２５０染色剤（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）で同定して、０．２５Ｍ  ＫＣｌにて３つの０．５ｍｌ分画で溶出する。ＦＡＳタンパク質濃度は、Ｃｏｏｍａｓｓｉｅ  Ｐｌｕｓ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ａｓｓａｙ  Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｐｉｅｒｃｅ）を製造業者の仕様書に従って使用し、ＢＳＡを標準物質として用いて決定する。この手順によって、Ｃｏｏｍａｓｓｉｅ染色ゲルで判断して実質的に純粋（＞９５％）なＦＡＳ調製物が生じる。
【０１７７】
ＦＡＳ酵素活性の測定および化合物のＩＣ５０の決定。９６ウェルプレートでＮＡＤＰＨのマロニル−ＣｏＡ依存性酸化をＯＤ３４０にて分光測定することによって、ＦＡＳ活性を求める（ＤｉｌｓらおよびＡｒｓｌａｎｉａｎら、１９７５年）。各ウェルには、２μｇの精製ＦＡＳ、１００ｍＭ  Ｋ２ＨＰＯ４、ｐＨ  ６．５、１ｍＭ  ジチオスレイトール（Ｓｉｇｍａ）、および１８７．５μＭ  β−ＮＡＤＰＨ（Ｓｉｇｍａ）が含まれている。阻害物質のストック溶液は、ＤＭＳＯ中２、１、および０．５ｍｇ／ｍｌで調製され、１ウェル当たり１μｌのストックを添加すると、最終濃度が２０、１０、および５μｇ／ｍｌになる。各実験について、セルレニン（Ｓｉｇｍａ）を正の対照として、ＤＭＳＯ対照、阻害物質、およびブランク（ＦＡＳ酵素なし）と共にデュプリケートで実施する。
【０１７８】
アッセイは、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ  ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ  Ｐｌｕｓ分光光度計で行われる。ＦＡＳ、緩衝液、阻害物質、および対照を含有するプレートを、３７℃に加熱された分光光度計に入れる。カイネティックスプロトコルを使用して、これらのウェルは、１００μｌの１００ｍＭ  Ｋ２ＨＰＯ４、ｐＨ  ６．５を含むデュプリケートウェルをブランクとし、プレートをＯＤ３４０について１０秒間隔で５分間読み取り、ＮＡＤＰＨのマロニル−ＣｏＡ非依存性酸化を測定する。プレートを分光光度計から取り出し、マロニル−ＣｏＡ（６７．４μＭ、１ウェル当たりの最終濃度）およびアルキニル−ＣｏＡ（６１．８μＭ、１ウェル当たりの最終濃度）を、ブランクを除く各ウェルに添加する。カイネティックスプロトコルを用いて、プレートを、再び上記のように読み取って、マロニル−ＣｏＡ依存性のＮＡＤＰＨ酸化を測定する。マロニル−ＣｏＡ依存性のＮＡＤＰＨ酸化のΔＯＤ３４０と非マロニル−ＣｏＡ依存性のＮＡＤＰＨ酸化のΔＯＤ３４０の差は、比ＦＡＳ活性（specific FAS activity）である。ＦＡＳ調製物の純度のため、非マロニル−ＣｏＡ依存性のＮＡＤＰＨ酸化は無視できる。
【０１７９】
ＦＡＳに対するＩＣ５０は、試験された各阻害物質濃度のΔＯＤ３４０をプロットし、線形回帰を行い、回帰直線（best-fit line）、ｒ２値、および９５％信頼区間を算出することによって決定される。ＦＡＳの５０％阻害を示す化合物濃度がＩＣ５０である。各化合物濃度について、ＳＯＦＴｍａｘ  ＰＲＯソフトウェア（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）でΔＯＤ３４０対時間のグラフをプロットする。線形回帰のコンピューター処理、回帰直線、ｒ２、および９５％信頼区間の算出は、Ｐｒｉｓｍ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ３．０（Ｇｒａｐｈ  Ｐａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を使用して行われる。
【０１８０】
総脂質への［１４Ｃ］アセテートの取り込みの測定および化合物のＩＣ５０の決定。このアッセイは、総脂質への［１４Ｃ］アセテートの取り込みを測定し、インビトロでの脂肪酸合成経路活性の尺度である。これは、脂肪酸合成の阻害をインビトロで測定するのに利用される。
【０１８１】
上記のように培養されたＭＣＦ−７ヒト乳癌細胞を、２４ウェルプレートに１ウェル当たり５×１０４個の細胞で播種する。終夜インキュベートした後、被検化合物をＤＭＳＯに可溶化し、５、１０、および２０μｇ／ｍｌにてトリプリケートで添加し、必要ならより低い濃度で試験する。ビヒクル対照として、ＤＭＳＯをトリプリケートウェルに添加する。Ｃ７５を正の対照として５および１０μｇ／ｍｌにてトリプリケートで実施する。４時間インキュベートした後、０．２５μＣｉの［１４Ｃ］アセテート（体積１０μｌ）を各ウェルに添加する。
【０１８２】
さらに２時間インキュベートした後、培地をウェルから吸引し、８００μｌのクロロホルム：メタノール（２：１）および７００μｌの４ｍＭＭｇＣｌ２を各ウェルに添加する。各ウェルの内容物を１．５ｍｌのエッペンドルフ型チューブに移し、高速Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ  Ｍｉｃｒｏｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅ  ５４１５Ｄで、２分間全速で回転させる。水層（上層）を除去した後、さらに７００μｌのクロロホルム：メタノール（２：１）および５００μｌの４ｍＭ  ＭｇＣｌ２を各チューブに添加し、次いで上記のように１分間遠心する。パスツールピペットを使用して、水層を除去し、廃棄する。さらに４００μｌのクロロホルム：メタノール（２：１）および２００μｌの４ｍＭ  ＭｇＣｌ２を各チューブに添加し、次いで遠心し、水層を廃棄する。下相（有機相）をシンチレーションバイアルに移し、Ｎ２ガス中４０℃で乾燥する。乾燥すると、３ｍｌのシンチラント（ＡＰＢ  ＃ＮＢＣ５１０４）を添加し、バイアルを１４Ｃについて計数を行う。Ｂｅｃｋｍａｎシンチレーションカウンターによって、トリプリケートの平均ｃｐｍ値を算出する。
【０１８３】
化合物のＩＣ５０は、対照に比べて脂質への［１４Ｃ］アセテートの取り込みを５０％低下させる薬物濃度と定義される。これは、試験された各阻害物質濃度の平均ｃｐｍをプロットし、線形回帰を行い、回帰直線、ｒ２値、および９５％信頼区間を算出することによって決定される。各化合物濃度について、平均ｃｐｍ値をＢｅｃｋｍａｎシンチレーションカウンター（モデルＬＳ６５００）で算出する。線形回帰のコンピューター処理、回帰直線、ｒ２、および９５％信頼区間の算出は、Ｐｒｉｓｍ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ３．０（Ｇｒａｐｈ  Ｐａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を使用して行われる。
【０１８４】
脂肪酸酸化の測定および化合物のＳＣ１５０の決定。このアッセイは、［１４Ｃ］パルミテートの酸可溶性生成物への分解を測定し、インビトロでの脂肪酸酸化経路活性の尺度である。これは、インビトロで脂肪酸酸化を測定するのに利用される。
【０１８５】
上記のように培養されたＭＣＦ−７ヒト乳癌細胞を、２４ウェルプレートに１ウェル当たり２．５×１０５個の細胞で播種する。終夜インキュベートした後、被検化合物をＤＭＳＯに可溶化し、０．９８、０．３９、１．５６、６．２５、２５、および１００μｇ／ｍｌにてトリプリケートで添加し、必要ならより低い濃度で試験する。ビヒクル対照として、ＤＭＳＯをトリプリケートウェルに添加する。Ｃ７５を正の対照として５および１０μｇ／ｍｌにてトリプリケートで実施する。１時間インキュベートした後、培地を除去し、シクロデキストラン中１００μＭの［１４Ｃ］パルミテートおよび無血清培地中２００μＭのカルニチン（体積２５０μｌ）を各ウェルに添加する。
【０１８６】
さらに３０分間インキュベートした後、２．６Ｎ  ＨＣｌＯ４を添加することによって、反応を停止する。各ウェルの内容物を１．５ｍｌのエッペンドルフ型チューブに移し、４Ｎ  ＫＯＨを添加する。チューブを６０℃で３０分間インキュベートした。１Ｍ  酢酸Ｎａおよび３Ｎ  Ｈ２ＳＯ４を各チューブに添加し、ボルテックスする。チューブを１０００ｒｐｍで５分間、室温で遠心する。２５０μｌの上清を２ｍｌのエッペンドルフ型チューブに移す。各チューブに、９３８μｌのクロロホルム：メタノール（１：１）、４６８μｌのクロロホルムおよび２８１μｌの脱イオン水を添加する。チューブをボルテックスし、１０００ｒｐｍで５分間、室温で遠心する。７５０μｌの上相をシンチレーションバイアルに移し、５ｍｌのシンチラントを添加し、バイアルを１４Ｃについて１分間計数を行う。Ｂｅｃｋｍａｎシンチレーションカウンターによって、トリプリケートの平均ｃｐｍ値を算出する。
【０１８７】
化合物のＳＣ１５０は、無処置対照に比べて［１４Ｃ］パルミテートの酸可溶性生成物の産生を１５０％上昇させる薬物濃度と定義される。これは、試験された各阻害物質濃度の平均ｃｐｍをプロットし、線形回帰を行い、回帰直線、ｒ２値、および９５％信頼区間を算出することによって決定される。各化合物濃度について、平均ｃｐｍ値をＢｅｃｋｍａｎシンチレーションカウンター（モデルＬＳ６５００）で算出する。線形回帰のコンピューター処理、回帰直線、ｒ２、および９５％信頼区間の算出は、Ｐｒｉｓｍ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ３．０（Ｇｒａｐｈ  Ｐａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を使用して行われる。化合物がこの１５０％閾値を実現できない場合、陰性とみなされる。実現した最大値（ＦＡＯ  Ｍａｘ）も報告する。
【０１８８】
ＸＴＴ細胞毒性アッセイ。ＸＴＴアッセイは、［５１Ｃｒ］放出細胞毒性アッセイの非放射性代替法である。ＸＴＴは、代謝活性のある生細胞によってのみホルマザン色素に還元されるテトラゾリウム塩である。ＸＴＴの還元は、ＯＤ４９０−ＯＤ６５０として分光測定される。
【０１８９】
癌性細胞に対する特定化合物の細胞毒性を測定するために、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから入手したＭＣＦ−７ヒト乳癌細胞（表に「（Ｍ）」で示す）を、９６ウェルプレートに１ウェル当たり９×１０３個で、１０％ウシ胎仔血清、インスリン、ペニシリン、およびストレプトマイシンを含むＤＭＥＭ培地を用いて播種する。３７℃で５％ＣＯ２中終夜培養した後、被検化合物をＤＭＳＯに溶解し、体積１μｌで以下の濃度：８０、４０、２０、１０、５、２．５、１．２５、および０．６２５μｇ／ｍｌにてトリプリケートでウェルに添加する。必要に応じて、別の濃度を試験する。１μｌのＤＭＳＯをトリプリケートウェルに添加したものが、ビヒクル対照である。Ｃ７５を、正の対照として４０、２０、１０、１５、１２．５、１０、および５μｇ／ｍｌにてトリプリケートで実施する。
【０１９０】
７２時間インキュベートした後、細胞をＸＴＴ試薬（Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  Ｋｉｔ  １１（ＸＴＴ）Ｒｏｃｈｅ）と共に、製造業者の指示書に従って４時間インキュベートする。Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ  ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ  Ｐｌｕｓ分光光度計で、プレートをＯＤ４９０およびＯＤ６５０について読み取る。ＸＴＴ試薬を含有するが細胞を含まない３つのウェルは、プレートブランクとする。ＸＴＴデータはＯＤ４９０−ＯＤ６５０として報告される。ＳＯＦＴｍａｘ  Ｐｒｏソフトウェア（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｙｎａｍｉｃｓ）を使用して、平均値および平均値の標準誤差を算出する。
【０１９１】
化合物のＩＣ５０は、対照に比べてＯＤ４９０−ＯＤ６５０を５０％低下させる薬物濃度と定義される。各化合物濃度について、ＳＯＦＴｍａｘ  ＰＲＯソフトウェア（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）でＯＤ４９０−ＯＤ６５０を算出する。ＩＣ５０は、線形回帰で、対照に対するＦＡＳ活性（％）対薬物濃度をプロットことによって算出する。Ｐｒｉｓｍ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ３．０（Ｇｒａｐｈ  Ｐａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を使用して、線形回帰、回帰直線、ｒ２、および９５％信頼区間を決定する。
【０１９２】
ＯＶＣＡＲ３細胞（「ＯＶ」）およびＨＣＴ１１６細胞（「Ｈ」）に対しても、試験を実施した。
【０１９３】
体重減少スクリーン。Ｂａｌｂ／Ｃマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｓ）を初期体重減少スクリーニングに用いる。動物を、温度および１２時間の昼／夜サイクル室に収容し、マウス用飼料および水を自由に摂餌させる。１実験当たりトリプリケートでビヒクル対照を含む各被検化合物について、３匹マウスを用いた。実験では、マウスは、それぞれの被検化合物ごとに別々に、３匹のマウスを１つのケージに収容する。化合物をＤＭＳＯに１０ｍｇ／ｍｌで希釈し、マウスに、ＤＭＳＯ約１００μｌ中６０ｍｇ／ｋｇ、またはビヒクル単独を腹腔内注射する。マウスを毎日観察し、計量する。Ｅｘｃｅｌ（Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ）を使用して、平均体重および標準誤差を算出する。処置動物が処置前の体重に到達するまで、実験を継続する。
【０１９４】
抗菌性。微量液体希釈アッセイを用いて、化合物の抗菌活性を評価する。化合物を２倍段階希釈して試験し、目に見える増殖を阻害する濃度（対照の１０％におけるＯＤ６００）をＭＩＣと定義する。被検微生物としては、Staphylococcus aureus（ＡＴＣＣ＃２９２１３）、Enterococcus faecalis（ＡＴＣＣ＃２９２１２）、Pseudomonasaeruginosa（ＡＴＣＣ＃２７８５３）、およびEscherichia coli（ＡＴＣＣ＃２５９２２）が挙げられる。アッセイは、Ｍｕｅｌｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎ  ＢｒｏｔｈおよびＴｒｙｐｔｉｃａｓｅ  Ｓｏｙ  Ｂｒｏｔｈの２種類の増殖培地で行う。
【０１９５】
血液（Ｔｓｏｙ／５％ヒツジ血液）寒天板に、１０％グリセロールを含有するＴ  ｓｏｙブロス中で維持される凍結ストックから接種し、３７℃で終夜インキュベートする。コロニーを、濁度が０．５マクファーランド標準液の濁度と一致するように無菌ブロスに懸濁する。接種物を１：１０で無菌ブロス（Ｍｕｅｌｌｅｒ  ＨｉｎｔｏｎまたはＴｒｙｐｔｉｃａｓｅ  ｓｏｙ）に希釈し、９６ウェルプレート１ウェル当たり１９５μｌを分注する。被検化合物をＤＭＳＯに溶解し、体積５μｌで以下の濃度：２５、１２．５、６．２５、３．１２５、１．５６、および０．７８μｇ／ｍｌにてデュプリケートでウェルに添加する。必要に応じて、別の濃度を試験する。５μｌのＤＭＳＯをトリプリケートウェルに添加したものが、ビヒクル対照である。正の対照用化合物であるバンコマイシン（E. faecalisおよびS. aureus）およびトブラマイシン（E. coliおよびP. aeruginosa）の段階希釈物が、各実施に含まれる。
【０１９６】
３７℃で２４時間インキュベートした後、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ  ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ  Ｐｌｕｓ分光光度計で、プレートをＯＤ６００について読み取る。ＳＯＦＴｍａｘ  Ｐｒｏソフトウェア（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）を使用して、平均ＯＤ６００値を算出し、Ｐｒｉｓｍ  ｖｅｒｓｉｏｎ  ３．０２（Ｇｒａｐｈ  Ｐａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ）を使用して、ＭＩＣ値を線形回帰分析で決定する。ＭＩＣは、ビヒクル対照の指示値の１０％に等しいＯＤ６００指示値を生じるのに必要とされた化合物濃度と定義される。
【０１９７】
生物学的試験の結果
【０１９８】
【表２】
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【０１９９】
【表３】
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【０２００】
【表４】
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【０２０１】
【表５】
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【０２０２】
【表６】
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【０２０３】
【表７】
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【０２０４】
【表８】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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