(57)【要約】  本発明は、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容できるその塩、その合成、および増殖性疾患、たとえば癌の治療におけるＨＳＰ−９０阻害剤としてのその使用を対象とする。    【化１】2011530580.tif 000073
2011530580.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物
【化１】
2011530580.tif 000065
または薬学的に許容できるその塩
（式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ６アルキル、１〜２個の塩素および６個までのフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、ならびにフッ素、塩素、およびＣ１〜Ｃ３アルキルから選択される１〜６個の基で置換されているＣ３〜Ｃ８シクロアルキルからなる群から選択され、
Ｒ２およびＲ３は、塩素、フッ素、−ＣＮ、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシル、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、および１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ３アルキルからなる群からそれぞれ独立に選択され、
Ｒ４は、水素、フッ素、塩素、臭素、−ＣＮ、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、および１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ３アルキルからなる群から選択され、
Ｒ５およびＲ６は、水素、フッ素、塩素、臭素、−ＣＮ、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、および１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ３アルキルからなる群からそれぞれ独立に選択され、
但し、
（１）Ｒ４、Ｒ５およびＲ６がすべて水素であるとき、Ｒ２およびＲ３は、同時に塩素ではなく、
（２）式Ｉの化合物は、以下の化合物
【化２】
2011530580.tif 000066
のいずれでもない）。
【請求項２】
Ｒ４が水素であり、Ｒ５が水素であり、Ｒ６が水素であり、Ｒ３が、フッ素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、および１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ３アルキルからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物または塩。
【請求項３】
Ｒ４が水素であり、Ｒ５が水素であり、Ｒ６が水素であり、Ｒ２が、フッ素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、および１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ３アルキルからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物または塩。
【請求項４】
Ｒ４が、フッ素、塩素、Ｃ２〜Ｃ３アルキル、および１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ３アルキルから選択される、請求項１に記載の化合物または塩。
【請求項５】
Ｒ４がフッ素または塩素であり、Ｒ５が水素であり、Ｒ６が水素である、請求項１に記載の化合物または塩。
【請求項６】
Ｒ４がフッ素または塩素であり、Ｒ５が水素であり、Ｒ６が水素であり、Ｒ２がメチルまたは塩素であり、Ｒ３がメチルまたは塩素である、請求項１に記載の化合物または塩。
【請求項７】
Ｒ５が、１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ３アルキルである、請求項１に記載の化合物または塩。
【請求項８】
Ｒ６が、１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ３アルキルである、請求項１に記載の化合物または塩。
【請求項９】
Ｒ１が、シクロプロピル、シクロブチル、ビシクロ［１．１．１］ペント−１−イル、および１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択される、請求項１から８のいずれかに記載の化合物または塩。
【請求項１０】
Ｒ１が、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、またはフッ素、塩素、およびＣ１〜Ｃ３アルキルから選択される１〜６個の基で置換されているＣ３〜Ｃ８シクロアルキルである、請求項１から８のいずれかに記載の化合物または塩。
【請求項１１】
Ｒ１が、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ６アルキル、または１〜２個の塩素および６個までのフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ６アルキルである、請求項１から８のいずれかに記載の化合物または塩。
【請求項１２】
Ｒ２が塩素であり、Ｒ３が塩素である、請求項１および４から１１のいずれかに記載の化合物または塩。
【請求項１３】
Ｒ２が塩素であり、Ｒ３がＣ１〜Ｃ３アルキルである、請求項１、２、および４から１１のいずれかに記載の化合物または塩。
【請求項１４】
【化３−１】
2011530580.tif 000067
【化３−２】
2011530580.tif 000068
【化３−３】
2011530580.tif 000069
【化３−４】
2011530580.tif 000070
【化３−５】
2011530580.tif 000071
からなる群から選択される化合物またはこれらの薬学的に許容できる塩。
【請求項１５】
次式の化合物
【化４】
2011530580.tif 000072
または薬学的に許容できるその塩。
【請求項１６】
請求項１から１５のいずれかに記載の化合物または薬学的に許容できるその塩と、薬学的に許容できる担体とを含む医薬組成物。
【請求項１７】
癌治療のための医薬の調製における、請求項１から１５のいずれかに記載の化合物または薬学的に許容できるその塩の使用。
【請求項１８】
細胞を、請求項１から１５のいずれかに記載の化合物または薬学的に許容できるその塩と接触させることを含む、ＨＳＰ−９０の活性をモジュレートする方法。
【請求項１９】
請求項１に記載の化合物または塩と別の治療薬の組合せ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２００８年８月１３日出願の米国仮特許出願第６１／０８８，５９９号の利益を主張するものであり、その出願の開示を全体として参照により本明細書に援用する。
【０００２】
本発明は、化合物、薬学的に許容できるその塩および溶媒和物、その合成、ならびにＨＳＰ−９０のモジュレーターまたは阻害剤としてのその使用を対象とする。本発明の化合物は、ＨＳＰ−９０活性をモジュレート（たとえば阻害）し、またＨＳＰ−９０によって媒介される疾患または状態、たとえば、癌などの異常細胞成長に関連する病態を治療するのに有用である。
【背景技術】
【０００３】
分子シャペロンは、合成時のタンパク質の適正なフォールディング、ならびに変性ストレス条件下でのそのリフォールディングが確実になされるようにすることにより、細胞機能において重要な役割を果たす。タンパク質の合成と分解のバランスを調節することにより、分子シャペロンは、ストレスに対する細胞応答の重要な一環をなす。さらに、様々な細胞タンパク質の適正なフォールディングを調節することにより、シャペロンは、細胞増殖やアポトーシスなどの細胞機能の調節において重要な役割を果たす（たとえば、Ｊｏｌｌｙら、Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．９２：１５６４〜１５７２（２０００）を参照されたい）。熱ショックタンパク質（ＨＳＰ）は、熱ショック、酸化ストレス、またはアルコールもしくは重金属の存在などの様々な環境ストレスに呼応して細胞中に蓄積される部類のシャペロンである。そのような環境ストレスから細胞を保護する際のその役割に加えて、ＨＳＰは、ストレスのない条件下でも、様々な細胞タンパク質のシャペロンとして重要な役割を果たし得る。ＨＳＰファミリーの仲間は、その分子量に従って分類される（たとえば、ＨＳＰ−２７、ＨＳＰ−７０、およびＨＳＰ−９０）。腫瘍進行の種々の段階でＨＳＰが示差的に発現されるという証拠からは、ＨＳＰが癌において重要な役割を担っていることが示唆される（たとえば、Ｍａｒｔｉｎら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６０：２２３２〜２２３８（２０００）を参照されたい）。
【０００４】
ＨＳＰ−９０は、ＡＴＰａｓｅ活性を有するホモ二量体であり、様々な基質タンパク質との一連の複雑な相互作用において機能する（Ｙｏｕｎｇら、Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１５４：２６７〜２７３（２００１））。しかし、ＨＳＰ−９０は、その既知の基質タンパク質の大部分がシグナル伝達タンパク質であるので、他のシャペロンと比べて独特である。したがって、ＨＳＰ−９０は、細胞のシグナル伝達ネットワークの調節において不可欠な役割を果たす（たとえば、Ｘｕら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ  ９０：７０７４〜７０７８（１９９３）を参照されたい）。特に、ＨＳＰ−９０の基質タンパク質としては、ｐ５３、Ｂｃｒ−Ａｂ１キナーゼ、Ｒａｆ−１キナーゼ、Ａｋｔキナーゼ、Ｎｐｍ−Ａｌｋキナーゼｐ１８５ＥｒｂＢ２膜貫通型キナーゼ、Ｃｄｋ４、Ｃｄｋ６、Ｗｅｅ１（細胞周期依存性キナーゼ）、ＨＥＲ２／Ｎｅｕ（ＥｒｂＢ２）、低酸素誘発因子１α（ＨＩＦ−１α）などの、癌との関連が示唆される、突然変異または過剰発現した多くのタンパク質が挙げられる。したがって、ＨＳＰ−９０を阻害すると、アポトーシス、細胞増殖、および細胞周期調節に関与するこれらの重要なシグナル伝達タンパク質が選択的に分解される（Ｈｏｌｓｔｅｉｎら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６１：４００３〜４００９（２００１））。これらシグナル伝達タンパク質は、癌などの、異常細胞成長が関与する病態において重要な役割を果たしているので、したがってＨＳＰ−９０は、魅力的な治療標的である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
したがって、癌などの、異常細胞成長に関連した病態に罹患している患者に治療上の利益をもたらすことのできる、ＨＳＰ−９０活性の新しい阻害剤を発見し開発することが望ましい。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
一実施形態では、本発明は、式（Ｉ）の化合物
【０００７】
【化１】
2011530580.tif 000003
または薬学的に許容できるその塩を提供する。
式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ６アルキル、１〜２個の塩素および６個までのフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、ならびにフッ素、塩素、およびＣ１〜Ｃ３アルキルからそれぞれ独立に選択される１〜６個の基で置換されているＣ３〜Ｃ８シクロアルキルからなる群から選択され、
Ｒ２およびＲ３はそれぞれ、塩素、フッ素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、および１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ３アルキルからなる群からそれぞれ独立に選択され、
Ｒ４は、水素、フッ素、塩素、臭素、−ＣＮ、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、および１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ３アルキルからなる群から選択され、
Ｒ５およびＲ６はそれぞれ、水素、フッ素、塩素、臭素、−ＣＮ、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、および１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ３アルキルからなる群からそれぞれ独立に選択され、
但し、
（１）Ｒ４、Ｒ５およびＲ６がすべて水素であるとき、Ｒ２およびＲ３は、同時に塩素ではなく、
（２）式Ｉの化合物は、以下の化合物のいずれでもない。
【０００８】
【化２】
2011530580.tif 000004
【０００９】
この実施形態の好ましい態様では、また矛盾しない他のいずれかの好ましい態様との組合せにおいて、Ｒ４は水素であり、Ｒ５は水素であり、Ｒ６は水素であり、Ｒ３は、フッ素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、および１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ３アルキルからなる群から選択される。Ｒ３は、Ｃ１〜Ｃ３アルキルであることが好ましい。
【００１０】
この実施形態の好ましい別の態様では、また矛盾しない他のいずれかの好ましい態様との組合せにおいて、Ｒ４は水素であり、Ｒ５は水素であり、Ｒ６は水素であり、Ｒ２は、フッ素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、および１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ３アルキルからなる群から選択される。
【００１１】
この実施形態の好ましい別の態様では、また矛盾しない他のいずれかの好ましい態様との組合せにおいて、Ｒ４は、フッ素、塩素、Ｃ２〜Ｃ３アルキル、および１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ３アルキルから選択される。Ｒ４は、フッ素および塩素から選択されることが好ましい。より好ましくは、Ｒ４はフッ素である。
【００１２】
この実施形態の好ましい別の態様では、また矛盾しない他のいずれかの好ましい態様との組合せにおいて、Ｒ４はフッ素または塩素であり、Ｒ５は水素であり、Ｒ６は水素である。Ｒ４はフッ素であり、Ｒ５およびＲ６は両方とも水素であることが好ましい。
【００１３】
この実施形態の好ましい別の態様では、また矛盾しない他のいずれかの好ましい態様との組合せにおいて、Ｒ４はフッ素または塩素であり、Ｒ５は水素であり、Ｒ６は水素であり、Ｒ２はメチルまたは塩素であり、Ｒ３はメチルまたは塩素である。
【００１４】
この実施形態の好ましい別の態様では、また矛盾しない他のいずれかの好ましい態様との組合せにおいて、Ｒ５は、１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ３アルキルである。
【００１５】
この実施形態の好ましい別の態様では、また矛盾しない他のいずれかの好ましい態様との組合せにおいて、Ｒ６は、１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ３アルキルである。
【００１６】
この実施形態の好ましい別の態様では、また矛盾しない他のいずれかの好ましい態様との組合せにおいて、Ｒ１は、シクロプロピル、シクロブチル、ビシクロ［１．１．１］ペント−１−イル、および１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択される。
【００１７】
この実施形態の好ましい別の態様では、また矛盾しない他のいずれかの好ましい態様との組合せにおいて、Ｒ１は、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、またはフッ素、塩素、およびＣ１〜Ｃ３アルキルから選択される１〜６個の基で置換されているＣ３〜Ｃ８シクロアルキルである。
【００１８】
この実施形態の好ましい別の態様では、また矛盾しない他のいずれかの好ましい態様との組合せにおいて、Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ６アルキル、または１〜２個の塩素および６個までのフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【００１９】
この実施形態の好ましい別の態様では、また矛盾しない他のいずれかの好ましい態様との組合せにおいて、Ｒ２は塩素であり、Ｒ３は塩素である。
【００２０】
この実施形態の好ましい別の態様では、また矛盾しない他のいずれかの好ましい態様との組合せにおいて、Ｒ２は塩素であり、Ｒ３はＣ１〜Ｃ３アルキルである。この実施形態の好ましい別の態様では、また矛盾しない他のいずれかの好ましい態様との組合せにおいて、Ｒ４はフッ素または塩素であり、Ｒ５は水素であり、Ｒ６は水素であり、Ｒ２はメチルまたは塩素であり、Ｒ３はメチルまたは塩素であり、Ｒ１は、シクロプロピル、シクロブチル、ビシクロ［１．１．１］ペント−１−イル、および１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択される。Ｒ４はフッ素であり、Ｒ２は塩素であり、Ｒ３は塩素であることが好ましい。より好ましくは、Ｒ４はフッ素であり、Ｒ２は塩素であり、Ｒ３はメチルである。
【００２１】
別の実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物
【００２２】
【化３】
2011530580.tif 000005
（式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ６アルキル、１〜２個の塩素および６個までのフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、ならびにフッ素、塩素、およびＣ１〜Ｃ３アルキルからそれぞれ独立に選択される１〜６個の基で置換されているＣ３〜Ｃ８シクロアルキルからなる群から選択され、
Ｒ２およびＲ３はそれぞれ、塩素、フッ素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、および１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ３アルキルからなる群からそれぞれ独立に選択され、
Ｒ４は、フッ素、塩素、Ｃ２〜Ｃ３アルキル、および１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ３アルキルから選択される。Ｒ４は、フッ素および塩素から選択されることが好ましい。より好ましくは、Ｒ４はフッ素である。
Ｒ５およびＲ６はそれぞれ、水素、フッ素、塩素、臭素、−ＣＮ、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ３アルキルからなる群からそれぞれ独立に選択される）
または薬学的に許容できるその塩を提供する。
【００２３】
この実施形態の好ましい一態様では、また矛盾しない他のいずれかの好ましい態様との組合せにおいて、Ｒ４はフッ素または塩素であり、Ｒ５は水素であり、Ｒ６は水素である。Ｒ４はフッ素であり、Ｒ５およびＲ６は両方とも水素であることがより好ましい。
【００２４】
この実施形態の好ましい別の態様では、また矛盾しない他のいずれかの好ましい態様との組合せにおいて、Ｒ４はフッ素または塩素であり、Ｒ５は水素であり、Ｒ６は水素であり、Ｒ２はメチルまたは塩素であり、Ｒ３はメチルまたは塩素である。
【００２５】
この実施形態の好ましい別の態様では、また矛盾しない他のいずれかの好ましい態様との組合せにおいて、Ｒ５は、１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ３アルキルである。
【００２６】
この実施形態の好ましい別の態様では、また矛盾しない他のいずれかの好ましい態様との組合せにおいて、Ｒ６は、１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ３アルキルである。
【００２７】
この実施形態の好ましい別の態様では、また矛盾しない他のいずれかの好ましい態様との組合せにおいて、Ｒ１は、シクロプロピル、シクロブチル、ビシクロ［１．１．１］ペント−１−イル、および１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択される。
【００２８】
この実施形態の好ましい別の態様では、また矛盾しない他のいずれかの好ましい態様との組合せにおいて、Ｒ１は、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、またはフッ素、塩素、およびＣ１〜Ｃ３アルキルからそれぞれ独立に選択される１〜６個の基で置換されているＣ３〜Ｃ８シクロアルキルである。
【００２９】
この実施形態の好ましい別の態様では、また矛盾しない他のいずれかの好ましい態様との組合せにおいて、Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ６アルキル、１〜２個の塩素および６個までのフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【００３０】
この実施形態の好ましい別の態様では、また矛盾しない他のいずれかの好ましい態様との組合せにおいて、Ｒ２は塩素であり、Ｒ３は塩素である。
【００３１】
この実施形態の好ましい別の態様では、また矛盾しない他のいずれかの好ましい態様との組合せにおいて、Ｒ２は塩素であり、Ｒ３はＣ１〜Ｃ３アルキルである。この実施形態の好ましい別の態様では、また矛盾しない他のいずれかの好ましい態様との組合せにおいて、Ｒ４はフッ素または塩素であり、Ｒ５は水素であり、Ｒ６は水素であり、Ｒ２はメチルまたは塩素であり、Ｒ３はメチルまたは塩素であり、Ｒ１は、シクロプロピル、シクロブチル、ビシクロ［１．１．１］ペント−１−イル、および１〜６個のフッ素で置換されているＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択される。Ｒ４はフッ素であり、Ｒ２は塩素であり、Ｒ３は塩素であることが好ましい。より好ましくは、Ｒ４はフッ素であり、Ｒ２は塩素であり、Ｒ３はメチルである。
【００３２】
別の実施形態では、本発明は、
【００３３】
【化４−１】
2011530580.tif 000006
【００３４】
【化４−２】
2011530580.tif 000007
【００３５】
【化４−３】
2011530580.tif 000008
【００３６】
【化４−４】
2011530580.tif 000009
【００３７】
【化４−５】
2011530580.tif 000010
からなる群から選択される化合物または薬学的に許容できるこれらの塩を提供する。
【００３８】
別の実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物または薬学的に許容できるその塩と、薬学的に許容できる担体とを含む医薬組成物を提供する。
【００３９】
別の実施形態では、本発明は、医薬の調製における式Ｉの化合物または薬学的に許容できるその塩の使用を提供する。
【００４０】
別の実施形態では、本発明は、癌治療のための医薬の調製における式Ｉの化合物または薬学的に許容できるその塩の使用を提供する。
【００４１】
別の実施形態では、本発明は、細胞を、式Ｉの化合物または薬学的に許容できるその塩と接触させることを含む、ＨＳＰ−９０の活性をモジュレートする方法を提供する。
【００４２】
別の実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物または塩と別の治療薬との組合せを提供する。この実施形態の一態様では、組合せは、異常細胞成長、好ましくは癌の治療に使用する。
【００４３】
本発明はまた、ヒトを含めた哺乳動物において異常細胞成長を治療する方法であって、前記哺乳動物に、異常細胞成長の治療において有効な量の、上記で規定した式Ｉの化合物または薬学的に許容できるその塩もしくは溶媒和物を投与することを含む方法に関する。
【００４４】
この方法の一実施形態では、異常細胞成長は、限定はしないが、中皮腫、肝胆道系（肝臓および胆道）、原発性もしくは続発性のＣＮＳ腫瘍、原発性もしくは続発性の脳腫瘍、肺癌（ＮＳＣＬＣおよびＳＣＬＣ）、骨癌、膵臓癌、皮膚癌、頭頸部癌、皮膚もしくは眼内の黒色腫、卵巣癌、結腸癌、直腸癌、肛門部の癌、胃癌、胃腸（胃、結腸直腸、および十二指腸）、乳癌、子宮癌、卵管癌、子宮内膜癌、子宮頚癌、膣癌、外陰癌、ホジキン病、食道癌、小腸癌、内分泌系の癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、副腎癌、軟部組織肉腫、尿道癌、陰茎癌、前立腺癌、精巣癌、慢性もしくは急性白血病、慢性骨髄性白血病、リンパ球性リンパ腫、膀胱癌、腎臓もしくは尿管の癌、腎細胞癌、腎盂癌、中枢神経系（ＣＮＳ）の新生物、原発性ＣＮＳリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、脊髄軸腫瘍（ｓｐｉｎａｌ  ａｘｉｓ  ｔｕｍｏｒ）、脳幹神経膠腫、下垂体腺腫、副腎皮質癌、胆嚢癌、多発性骨髄腫、胆管癌、線維肉腫、神経芽細胞腫、および網膜芽細胞腫、または前述の癌の１つまたは複数の組合せを含めた癌である。
【００４５】
前記方法の別の実施形態では、前記異常細胞成長は、限定はしないが、乾癬、良性前立腺肥大症、および再狭窄を含めた、良性の増殖性疾患である。
【００４６】
本発明の好ましい実施形態では、癌は、肺癌（ＮＳＣＬＣおよびＳＣＬＣ）、頭頸部癌、卵巣癌、結腸癌、直腸癌、肛門部の癌、胃癌、乳癌、腎臓もしくは尿管の癌、腎細胞癌、腎盂癌、中枢神経系（ＣＮＳ）の新生物、原発性ＣＮＳリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、および脊髄軸腫瘍、または前述の癌の１つまたは複数の組合せから選択される。
【００４７】
本発明の別の好ましい実施形態では、癌は、肺癌（ＮＳＣＬＣおよびＳＣＬＣ）、卵巣癌、結腸癌、直腸癌、および肛門部の癌、または前述の癌の１つまたは複数の組合せから選択される。
【００４８】
本発明のより好ましい実施形態では、癌は、肺癌（ＮＳＣＬＣおよびＳＣＬＣ）、卵巣癌、結腸癌、および直腸癌、または前述の癌の１つまたは複数の組合せから選択される。
【００４９】
前記方法の別の実施形態では、前記異常細胞成長は、限定はしないが、乾癬、良性前立腺肥大症、および再狭窄を含めた、良性の増殖性疾患である。
【００５０】
本発明はまた、異常細胞成長の治療において有効な量の、上で規定した式Ｉの化合物または薬学的に許容できるその塩と、薬学的に許容できる担体とを含む、ヒトを含めた哺乳動物において異常細胞成長を治療するための医薬組成物に関する。前記組成物の一実施形態では、前記異常細胞成長は、限定はしないが、中皮腫、肝胆道系（肝臓および胆道）、原発性もしくは続発性のＣＮＳ腫瘍、原発性もしくは続発性の脳腫瘍、肺癌（ＮＳＣＬＣおよびＳＣＬＣ）、骨癌、膵臓癌、皮膚癌、頭頸部癌、皮膚もしくは眼内の黒色腫、卵巣癌、結腸癌、直腸癌、肛門部の癌、胃癌、胃腸（胃、結腸直腸、および十二指腸）、乳癌、子宮癌、卵管癌、子宮内膜癌、子宮頚癌、膣癌、外陰癌、ホジキン病、食道癌、小腸癌、内分泌系の癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、副腎癌、軟部組織肉腫、尿道癌、陰茎癌、前立腺癌、精巣癌、慢性もしくは急性白血病、慢性骨髄性白血病、リンパ球性リンパ腫、膀胱癌、腎臓もしくは尿管の癌、腎細胞癌、腎盂癌、中枢神経系（ＣＮＳ）の新生物、原発性ＣＮＳリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、脊髄軸腫瘍、脳幹神経膠腫、下垂体腺腫、副腎皮質癌、胆嚢癌、多発性骨髄腫、胆管癌、線維肉腫、神経芽細胞腫、および網膜芽細胞腫、または前述の癌の１つまたは複数の組合せを含めた癌である。前記医薬組成物の別の実施形態では、前記異常細胞成長は、限定はしないが、乾癬、良性前立腺肥大症、および再狭窄を含めた、良性の増殖性疾患である。
【００５１】
本明細書では、記号［
【００５２】
【化５】
2011530580.tif 000011
］は、置換基の化学構造に組み込まれているとき、［
【００５３】
【化６】
2011530580.tif 000012
］の付いた原子が、その置換基の別の分子上のある位置への結合点であることを意味する。たとえば、仮定的な分子ＣＨ３ＣＨ２−Ｘにおいて、Ｘが、
【００５４】
【化７】
2011530580.tif 000013
であると規定されるとする。この場合、任意に番号を振った位置Ｃ−１に付いた［
【００５５】
【化８】
2011530580.tif 000014
］の配置は、フェニル環のＣ−１がこのメチレン炭素に結合していることを意味する。
【００５６】
ｍが１〜１９の整数であり、ｎが２〜２０の整数であり、ｎ＞ｍである「Ｃｍ〜Ｃｎアルキル」とは、ｍ〜ｎ個の炭素原子を有し、ｎは２〜２０の整数である、直鎖または分枝状の飽和炭化水素基を指す。Ｃｍ〜Ｃｎアルキル基の例として、限定はしないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｉｓｏ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ｎｅｏ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチルなどが挙げられ、これらの置換された形態も含める。さらに、用語「アルキル」とは、炭素原子が１〜２０個、または炭素原子が１〜１２個、または炭素原子が１〜８個、または炭素原子が１〜６個、または炭素原子が１〜４個の、直鎖または分枝状の飽和炭化水素基を指す。アルキルは、無置換でも、または少なくとも１個の置換基でさらに置換されていてもよい。
【００５７】
ｍが３〜１９の整数であり、ｎが４〜２０の整数であり、ｎ＞ｍである「Ｃｍ〜Ｃｎシクロアルキル」とは、ｍ〜ｎ個の炭素原子を有する環状の飽和炭化水素基を指す。シクロアルキル基は、単環式でもよいし、許容し得る場合は二環式または多環式でもよい。シクロアルキルは、スピロ環式でもよい。シクロアルキルの例示的な例は、限定はしないが、以下の式から生じるものである。
【００５８】
【化９】
2011530580.tif 000015
【００５９】
「Ｃｍ〜Ｃｎアルコキシ」または「Ｃｍ〜Ｃｎアルコキシル」とは、−Ｏ−（Ｃｍ〜Ｃｎアルキル）を指し、（Ｃｍ〜Ｃｎアルキル）は、この節で前に定義したとおりである。
【００６０】
「アミノ」とは、−ＮＨ２を指す。
【００６１】
基が、何らかの置換基で「置換されていてもよい」または「さらに置換されていてもよい」とき、この基の炭素または窒素原子において、１個または複数個の水素原子がこの炭素または窒素原子に結合しており、その炭素または窒素原子が、何らかの他の置換基で置換されていてもよいことを意味する。たとえば、「Ｒは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、またはフェニルであり、Ｒは、−Ｆ、オキソ、およびＣ１〜Ｃ３ペルフルオロアルキルから選択される１〜３個の基でさらに置換されていてもよい」とは、Ｒが、１）Ｈ（ＲがＨであるとき、Ｒはさらに置換されることはない）、２）−Ｆ、オキソ、およびＣ１〜Ｃ３ペルフルオロアルキルから選択される１〜３個の基でさらに置換されていてもよいＣ１〜Ｃ３アルキル、さらに３）−ＦおよびＣ１〜Ｃ３ペルフルオロアルキルから選択される１〜３個の基でさらに置換されていてもよいフェニル、であることを意味する。オキソによるフェニルの任意選択の置換は、オキソ、すなわち＝Ｏ結合によって置換される２個の水素原子を有するフェニル基の単一原子がないため、Ｒがフェニルであるときは当てはまらない。基が、「−（Ｃ１〜Ｃ４アルキレン）−」でさらに置換されているとき、「−（Ｃ１〜Ｃ４アルキレン）−」は、「Ｃ１〜Ｃ４アルキレン」が結合している基の窒素原子または炭素原子と一緒になって、炭素スピロ環またはヘテロスピロ環を形成することを意味する。
【００６２】
「医薬組成物」とは、本明細書に記載の化合物または生理的／薬学的に許容できるその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグの１種または複数と、生理的／薬学的に許容できる担体および賦形剤などの他の化学的成分との混合物を指す。医薬組成物の目的は、ヒトを含めた哺乳動物などの生物への化合物の投与を容易にすることである。
【００６３】
本明細書では、「生理的／薬学的に許容できる担体」とは、ヒトを含めた哺乳動物などの生物に著しい刺激を与えず、投与される化合物の生物活性および特性を損なわない担体または希釈剤を指す。
【００６４】
「薬学的に許容できる賦形剤」とは、化合物の投与をさらに容易にするために医薬組成物に加えられる不活性物質を指す。限定はしないが、賦形剤の例として、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、様々なタイプの糖およびデンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、植物油、およびポリエチレングリコールが挙げられる。
【００６５】
本明細書では、用語「薬学的に許容できる塩」とは、親化合物の生物学的有効性および特性を保持する塩を指す。そのような塩としては、以下のものが挙げられる。
（１）親化合物の遊離塩基を、塩酸、臭化水素酸、硝酸、リン酸、硫酸、過塩素酸などの無機酸、または酢酸、シュウ酸、（Ｄ）もしくは（Ｌ）リンゴ酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸、マロン酸などの有機酸と反応させて得ることのできる酸付加塩、または
（２）親化合物中に存在する酸性プロトンが、金属イオン、たとえば、アルカリ金属イオン、アルカリ土類イオン、もしくはアルミニウムイオンと入れ替わるとき、またはエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、Ｎ−メチルグルカミンなどの有機塩基と配位するときに生成する塩。
【００６６】
「接触させること」とは、化合物が直接、すなわちキナーゼ自体との相互作用によって、または間接的に、すなわちキナーゼの触媒活性を左右する別の分子との相互作用によって、ＰＫの触媒活性に影響を及ぼし得るような形で、本教示の化合物と標的ＰＫを引き合わせることを指す。このような「接触させること」は、「ｉｎ  ｖｉｔｒｏで」、すなわち、試験管、ペトリ皿などにおいて実現することができる。試験管では、接触させることは、化合物と対象とするＰＫのみが関わる場合もあり、または全細胞が関わる場合もある。細胞を細胞培養皿で維持するか成長させ、その環境で化合物と接触させてもよい。この状況において、特定の化合物がＰＫ関連障害に影響を及ぼし得る能力、すなわち化合物のＩＣ５０を求めることができる。生物体の外の細胞については、限定はしないが、直接細胞マイクロインジェクションおよび数多くの膜貫通担体技術を含めて、ＰＫを化合物と接触させるいくつもの方法が存在し、当業者に知られている。
【００６７】
「ＰＫ関連障害」、「ＰＫによって引き起こされる障害」、および「異常なＰＫ活性」はすべて、不適切な、すなわち過少または過剰なＰＫ触媒活性を特徴とする状態を指し、ここで、特定のＰＫは、ＲＴＫ、ＣＴＫ、またはＳＴＫであってよい。不適切な触媒活性は、（１）通常はＰＫを発現しない細胞におけるＰＫ発現、（２）望ましくない細胞増殖、分化、および／もしくは成長をもたらすＰＫ発現の増加、または（３）細胞増殖、分化、および／もしくは成長の望ましくない低下をもたらすＰＫ発現の減少のために生じ得る。ＰＫの過剰活性とは、細胞増殖、分化、および／もしくは成長障害と相関し得る（すなわち、ＰＫのレベルが増大するにつれて、細胞性障害による症状の１つまたは複数の重症度が増大する）、特定のＰＫをコードする遺伝子の増幅またはＰＫ活性レベルの生成のいずれかを指す。過少活性は、細胞性障害による１つまたは複数の症状の重症度が、ＰＫ活性のレベルが低下するにつれて増大するものである。
【００６８】
「治療する」、「治療すること」、および「治療」とは、ＰＫによって媒介される細胞性障害および／またはその付随症状を緩和または解消する方法を指す。癌に関して、これらの用語は、癌に罹患している個体の余命が延長されること、または疾患の症状の１つまたは複数が軽減されることを意味する。
【００６９】
「生物」とは、少なくとも１個の細胞からなる、任意の生命体を指す。生物は、たとえば単一の真核細胞のように単純な場合もあれば、ヒトを含めた哺乳動物のように複雑な場合もある。
【００７０】
「治療有効量」とは、治療する障害の症状の１つまたは複数をある程度軽減する、投与される化合物の量を指す。癌の治療に関して、治療有効量とは、以下の効果の少なくとも１つを有する量を指す。
（１）腫瘍の大きさを縮小する、
（２）腫瘍転移を抑制する（すなわち、ある程度遅くする、好ましくは止める）、
（３）腫瘍成長をある程度抑制する（すなわち、ある程度遅くする、好ましくは止める）、および
（４）癌に関連する１つまたは複数の症状をある程度軽減する（または、好ましくは解消する）。
【００７１】
用語「立体異性体」とは、同一の化学構造を有するが、その原子または基の空間的配置に関しては異なる化合物を指す。詳細には、用語「鏡像異性体」は、重ね合わせることのできない互いの鏡像である、化合物の２つの立体異性体を指す。用語「ラセミ」または「ラセミ混合物」とは、本明細書では、特定の化合物の鏡像異性体の１：１混合物を指す。一方、用語「ジアステレオ異性体」は、２つ以上の不斉中心を含み、互いの鏡像ではない、一対の立体異性体間の関係を指す。
【発明を実施するための形態】
【００７２】
本発明の化合物、すなわち式Ｉの化合物は、実施例１〜１６の方法に従って生成することができる。以下の反応スキーム１〜３は、当業者による式Ｉの化合物の生成を可能にするものである。
【００７３】
【化１０】
2011530580.tif 000016
【００７４】
【化１１】
2011530580.tif 000017
【００７５】
【化１２】
2011530580.tif 000018
【００７６】
スキーム１は、式Ｉの化合物の生成に使用する中間体Ｉ（Ｃ）の合成を図示するものである。β−ケトエステルＩ（Ａ）は、知られている手順に基づいて調製することができる（たとえば、ＶｉｓｃｏｎｔｉｎｉおよびＢｕｈｌｅｒ、Ｈｅｌｖｅｔｉｃａ  Ｃｈｉｍｉｃａ  Ａｃｔａ、５０（５）：１２８９〜９３（１９６７）；Ｒｏｓｏｗｓｋｙら、Ｊ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍ．、２６：５０９〜１６（１９８９）を参照されたい）。窒素保護基であるＰＧ１は、後続の化学現象と適合するように選択することができる。保護基およびその使用についての概論は、Ｔ．ＧｒｅｅｎｅおよびＰ．Ｗｕｔｓ、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、第３版、１９９９、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓに記載されており、当業者によく知られている。化合物Ｉ（Ａ）をグアニジンと縮合させて、化合物Ｉ（Ｂ）を得る。これは通常、化合物Ｉ（Ａ）をプロトン性溶媒中にてグアニジンまたはグアニジン相当物と共に加熱することにより実行できる。典型的な反応条件では、化合物Ｉ（Ａ）を、溶媒としてのｔｅｒｔ−ブタノール中にて炭酸グアニジンと共に還流させることになる。化合物Ｉ（Ｂ）のヒドロキシル基をクロロまたはヨードに変換すると、Ｉ（Ｃ）が得られる。これは通常、化合物Ｉ（Ｂ）を非プロトン性溶媒中にてＰＯＣｌ３と共に加熱することにより実行できる。典型的な反応条件では、化合物Ｉ（Ｂ）を、そのまま、または溶媒としての無水アセトニトリル中にて、過剰のＰＯＣｌ３と共に還流させることになる。
【００７７】
スキーム２は、式Ｉの化合物を中間体Ｉ（Ｃ）から生成することのできる経路を図示するものである。スキーム２では、化合物Ｉ（Ｃ）のクロロ／ヨード基を三置換フェニル基と交換して、化合物ＩＩ（Ａ）を得る。化合物ＩＩ（Ａ）を得るための、化合物Ｉ（Ｃ）のクロロ脱離基の三置換フェニル基による置換は、鈴木、スティル、根岸、または同様の条件を利用するクロスカップリング法を使用して実施することができる。化合物Ｉ（Ｃ）を化合物ＩＩ（Ａ）に変換する典型的なクロスカップリング反応では、水と１，４−ジオキサンなどの溶媒混合物中にて、炭酸ナトリウムなどの塩基およびＰｄ（０）触媒の存在下、化合物Ｉ（Ｃ）をボロン酸またはボロン酸エステルで処理して、化合物ＩＩ（Ａ）を得ることになる。次いで、化合物ＩＩ（Ａ）の窒素保護基ＰＧ１を除去して、化合物ＩＩ（Ｂ）を得る。ＰＧ１がエチルカルバメート保護基を形成するとき、ＰＧ１の除去は通常、化合物ＩＩ（Ａ）をＣＨ３ＣＮなどの溶媒中にてトリメチルシリルヨージドと共に還流することにより実行できる。別法として、酢酸中ＨＢｒまたはイソプロパノール中ＫＯＨをエチルカルバメート保護基の除去に使用することもできる。ＰＧ１がｔｅｒｔ−ブチルカルバメート保護基であるとき、ＰＧ１の除去は、化合物ＩＩ（Ａ）を１，４−ジオキサンなどの溶媒中にて塩化水素で処理することにより実行できる。化合物ＩＩ（Ａ）を化合物ＩＩ（Ｂ）に変換する典型的な条件は、化合物ＩＩ（Ａ）をＴＭＳＩ（１０〜２０当量、４Ｍ  １，４−ジオキサン溶液）で処理して、化合物ＩＩ（Ｂ）を得ることである。次いで、化合物ＩＩ（Ｂ）のジヒドロピロロアミノ部分が、求電子性のＲ１−ＮＨ−ＣＯ部分との反応で求核試薬として働いて、化合物Ｉが得られる。この求核反応は、アシル化、および第二級アルキルアミンに適用可能な他の反応でよい。典型的なアシル化反応条件は、化合物ＩＩ（Ｂ）をＴＥＡの存在下でＲ１イソシアネートまたはイソシアネート相当物部分と反応させて、化合物Ｉを尿素として得ることである。イソシアネート相当物の調製方法は、種々のアミンとのＣＤＩ（１，１’−カルボニルジイミダゾール）付加物を生成することである。次いで、ＣＤＩ付加物を、ＤＭＦ中にてＴＥＡの存在下、高温で化合物ＩＩ（Ｂ）と反応させて、化合物Ｉを得ることができる。
【００７８】
スキーム３は、式Ｉの化合物を中間体Ｉ（Ｃ）から生成することのできる別の経路を図示するものである。スキーム３では、ＰＧ１がエチルカルバメート保護基であるとき、化合物Ｉ（Ｃ）のＰＧ１を、クロロからヨードへの変換と同時に１ステップで除去する。これは通常、化合物Ｉ（Ｃ）を、非プロトン性溶媒中にて高温でＴＭＳＩによって、または室温で塩化水素によって処理することにより実行できる。典型的な反応条件は、化合物Ｉ（Ｃ）をＣＨ３ＣＮ中にて５当量のＴＭＳＩと共に還流させることである。メタノールで失活させた後、化合物ＩＩＩ（Ａ）がＨＩ塩として得られる。次いで、化合物ＩＩＩ（Ａ）のジヒドロピロロアミノ部分を、求核試薬として、求電子性のＲ１部分と反応させて、化合物ＩＩＩ（Ｂ）を得る。この求核反応は、アシル化、および第二級アルキルアミンに適用可能な他の反応でよい。典型的なアシル化反応条件は、化合物ＩＩＩ（Ａ）を、ＴＥＡの存在下でＲ１イソシアネートまたはイソシアネート相当物部分と反応させて、化合物ＩＩＩ（Ｂ）を尿素として得ることである。イソシアネート相当物の調製方法は、種々のアミンとのＣＤＩ（１，１’−カルボニルジイミダゾール）付加物を生成することである。次いでＣＤＩ付加物を、ＤＭＦ中にてＴＥＡの存在下、高温で化合物ＩＩ（Ｂ）と反応させて、化合物Ｉを得ることができる。次いで化合物ＩＩＩ（Ｂ）のヨード基を、クロスカップリング法を使用しながら三置換フェニル部分によって置換して、化合物Ｉを得る。この反応は通常、鈴木、スティル、根岸、または同様の条件を使用して実施することができる。化合物ＩＩＩ（Ｂ）を化合物Ｉに変換する典型的なクロスカップリング反応では、水と１，４−ジオキサンなどの溶媒混合物中にて、炭酸ナトリウムなどの塩基およびＰｄ（０）触媒の存在下、化合物ＩＩＩ（Ｂ）をボロン酸またはボロン酸エステルで処理して、化合物Ｉを得ることになる。
【００７９】
本発明の化合物は、不斉炭素原子を有する場合もある。本発明の化合物の炭素−炭素結合は、本明細書では、実線（
【００８０】
【化１３】
2011530580.tif 000019
）、くさび形実線（
【００８１】
【化１４】
2011530580.tif 000020
）、またはくさび形破線（
【００８２】
【化１５】
2011530580.tif 000021
）を使用して表記することができる。不斉炭素原子への結合を表記するための実線の使用は、その炭素原子で考えられるすべての立体異性体（たとえば、特定の鏡像異性体、ラセミ混合物など）が含まれることを示すものである。不斉炭素原子への結合を表記するためのくさび形実線またはくさび形破線の使用は、示した立体異性体のみが含まれることを意味することを示すものとする。本発明の化合物が２個以上の不斉炭素原子を含んでいる場合も考えられる。そうした化合物において、不斉炭素原子への結合を示す実線の使用は、考えられるすべての立体異性体が含まれることを意味することを示すものである。たとえば、別段記述しない限り、本発明の化合物は、鏡像異性体およびジアステレオ異性体として、またはそのラセミ体および混合物として存在し得るものとする。本発明の化合物中の１個または複数の不斉炭素原子への結合を表記するための実線の使用、および同じ化合物中の他の不斉炭素原子への結合を表記するためのくさび形実線またはくさび形破線の使用は、ジアステレオ異性体の混合物が存在することを示すものとする。
【００８３】
個々の鏡像異性体を調製／単離するための従来の技術としては、光学的に純粋な適切な前駆体からのキラル合成、または、たとえばキラル高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を使用するラセミ体の分割が挙げられる。別法として、ラセミ体（またはラセミ前駆体）を、光学活性のある適切な化合物、たとえばアルコールと、または、本発明の化合物が酸性もしくは塩基性部分を含んでいる場合、酒石酸や１−フェニルエチルアミンなどの酸もしくは塩基と反応させることもできる。得られるジアステレオ異性体混合物は、クロマトグラフィーおよび／または分別結晶によって分離し、ジアステレオ異性体の一方または両方を、当業者によく知られている手段によって、対応する純粋な（１種または複数の）鏡像異性体に変換することができる。本発明のキラルな化合物（およびそのキラルな前駆体）は、０〜５０％、典型的には２〜２０％のイソプロパノール、および０〜５％のアルキルアミン、典型的には０．１％のジエチルアミンを含有する炭化水素、典型的にはヘプタンまたはヘキサンからなる移動相を用いる不斉樹脂でのクロマトグラフィー、典型的にはＨＰＬＣを使用して、鏡像異性体富化された形で得ることもできる。溶出液を濃縮すると、濃縮された混合物が得られる。立体異性体の集合体は、当業者に知られている従来の技術によって分離することができる。たとえば、その開示が全体として参照により本明細書に援用される、Ｅ．Ｌ．Ｅｌｉｅｌによる「Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ」（Ｗｉｌｅｙ、ニューヨーク、１９９４）を参照されたい。
【００８４】
本発明の化合物がアルケニル基またはアルケニレン基を含んでいる場合、幾何的なシス／トランス（またはＺ／Ｅ）異性体が考えられる。シス／トランス異性体は、当業者によく知られている従来の技術、たとえば、クロマトグラフィーおよび分別結晶によって分離することができる。構造異性体が低いエネルギー障壁で相互変換可能な場合、互変異性体の異性（「互変異性」）が存在し得る。互変異性は、たとえばイミノ、ケト、またはオキシム基を含んでいる本発明の化合物ではプロトン互変異性、または芳香族部分を含んでいる化合物ではいわゆる原子価互変異性の形をとり得る。要するに、単一化合物が複数種の異性を示す場合もあるということである。本発明の範囲内には、複数種の異性を示す化合物を含めて、本発明の化合物のすべての立体異性体、幾何異性体、および互変異性体形態、ならびにこれらの１種または複数の混合物が含まれる。
【００８５】
本発明の塩は、当業者に知られている方法に従って調製することができる。塩の例として、限定はしないが、酢酸塩、アクリル酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩（クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩など）、炭酸水素塩、硫酸水素塩、亜硫酸水素塩、酒石酸水素塩、ホウ酸塩、臭化物、ブチン−１，４−二酸塩、エデト酸カルシウム塩、カムシル酸塩、炭酸塩、塩化物、カプロン酸塩、カプリル酸塩、クラブラン酸塩、クエン酸塩、デカン酸塩、二塩酸塩、リン酸二水素塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストール酸塩（ｅｓｔｏｌａｔｅ）、エシル酸塩、エチルコハク酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコール酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキシン−１，６−二酸塩、ヘキシルレソルシン酸塩、ヒドラバミン、臭化水素酸塩、塩酸塩、γ−ヒドロキシ酪酸塩、ヨウ化物、イソ酪酸塩、イソチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、メタリン酸塩、メタン−スルホン酸塩、メチル硫酸塩、リン酸一水素塩、粘液酸塩、ナプシル酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩（エンボン酸塩）、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、フェニル酢酸塩、フェニル酪酸塩、フェニルプロピオン酸塩、フタル酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、プロパンスルホン酸塩、プロピオン酸塩、プロピオル酸塩、ピロリン酸塩、ピロ硫酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、次酢酸塩、スベリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、スルホン酸塩、亜硫酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシル酸塩、トリエチオドード（ｔｒｉｅｔｈｉｏｄｏｄｅ）、および吉草酸塩が挙げられる。
【００８６】
塩基性である本発明の化合物は、様々な無機酸および有機酸と多種多様な塩を形成することができる。そのような塩は、動物への投与について薬学的に許容できるものでなければならないが、実際には、最初に本発明の化合物を反応混合物から薬学的に許容されない塩として単離し、次いでこれをアルカリ試薬での処理によって遊離塩基化合物に再び単純に変換し、引き続いてこの遊離塩基を薬学的に許容できる酸付加塩に変換することが望ましい場合が多い。本発明の塩基化合物の酸付加塩は、塩基化合物を、水性溶媒またはメタノールやエタノールなどの適切な有機溶媒中にて、選択した実質的に等量の鉱酸または有機酸で処理することにより調製できる。溶媒を蒸発させると、所望の固体の塩が得られる。所望の酸の塩は、遊離塩基の有機溶媒溶液から、溶液に適切な鉱酸または有機酸を加えることにより沈殿させることもできる。
【００８７】
酸性である本発明の化合物は、薬理学的に許容できる様々なカチオンと塩基塩を形成することができる。そのような塩の例として、アルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩、特にナトリウム塩およびカリウム塩が挙げられる。こうした塩はすべて、従来の技術によって調製される。本発明の薬学的に許容できる塩基の塩を調製するために試薬として使用される化学塩基は、本発明の酸性化合物と非毒性の塩基塩を形成するものである。そのような非毒性の塩基塩には、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどの薬理学的に許容できるカチオンから得られる塩が含まれる。こうした塩は、任意の適切な方法、たとえば、遊離酸をアミン（第一級、第二級、または第三級）、アルカリ金属水酸化物、アルカリ土類金属水酸化物などの無機塩基または有機塩基で処理する方法によって調製することができる。適切な塩の例示的な例として、グリシンやアルギニンなどのアミノ酸、アンモニア、第一級、第二級、および第三級アミン、ピペリジン、モルホリン、ピペラジンなどの環式アミンから得られる有機塩、ならびにナトリウム、カルシウム、カリウム、マグネシウム、マンガン、鉄、銅、亜鉛、アルミニウム、およびリチウムから得られる無機塩が挙げられる。これらの塩は、対応する酸性化合物を、薬理学的に許容できる所望のカチオンを含有する水溶液で処理し、次いで、得られる溶液を、好ましくは減圧下で蒸発させて乾燥させることにより調製してもよい。別法として、酸性化合物の低級アルカノール溶液と所望のアルカリ金属アルコキシドを混合し、次いで、得られる溶液を、前述と同じようにして蒸発乾燥させることにより調製してもよい。いずれの場合でも、確実に反応を完了させ、所望の最終生成物の収率を最大にするために、化学量論量の試薬を用いることが好ましい。
【００８８】
本発明の化合物が塩基である場合、所望の薬学的に許容できる塩は、当技術分野で利用可能な任意の適切な方法、たとえば、遊離塩基を、無機酸、たとえば塩化水素酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などで、または有機酸、たとえば、酢酸、マレイン酸、コハク酸、マンデル酸、フマル酸、マロン酸、ピルビン酸、シュウ酸、グリコール酸、サリチル酸、グルクロン酸やガラクツロン酸などのピラノシジル酸、クエン酸や酒石酸などのα−ヒドロキシ酸、アスパラギン酸やグルタミン酸などのアミノ酸、安息香酸やケイ皮酸などの芳香族酸、ｐ−トルエンスルホン酸やエタンスルホン酸などのスルホン酸などで処理する方法によって調製することができる。
【００８９】
固体である化合物の場合において、本発明の化合物および塩が、種々の結晶もしくは多形形態で、または非晶質形態で存在してもよいことが当業者に理解され、そのすべてが本発明の範囲内にあるものとする。
【００９０】
本発明は、１個または複数の原子が、原子番号は同じであるが原子質量または質量数が自然界で通常見られる原子質量または質量数とは異なる原子と入れ替わっている、同位体標識された本発明の化合物も包含する。本発明の化合物に含めるのに適する同位体の例として、２Ｈや３Ｈなどの水素、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃなどの炭素、３６Ｃｌなどの塩素、１８Ｆなどのフッ素、１２３Ｉや１２５Ｉなどのヨウ素、１３Ｎや１５Ｎなどの窒素、１５Ｏ、１７Ｏ、１８Ｏなどの酸素、３２Ｐなどのリン、３５Ｓなどの硫黄の同位体が挙げられる。特定の同位体標識された本発明の化合物、たとえば、放射性同位体が組み込まれている本発明の化合物は、薬物および／または基質の組織分布調査において有用である。放射性同位体トリチウム、すなわち３Ｈ、およびカーボン１４、すなわち１４Ｃは、組み込みやすく、検出手段が迅速であることから、この目的のために特に有用である。重水素、すなわち２Ｈなどのより重い同位体での置換は、代謝安定性がより高いために生じる特定の治療上の利点、たとえば、ｉｎ  ｖｉｖｏ半減期の延長または投与必要量の減少をもたらす場合もあり、したがって状況によっては好ましいこともある。１１Ｃ、１８Ｆ、１５Ｏ、１３Ｎなどの陽電子放射同位体での置換は、陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）調査において基質受容体占有率を調べるのに有用となり得る。
【００９１】
同位体標識された本発明の化合物は一般に、当業者に知られている従来の技術によって、またはそうでない場合に用いられる標識されていない試薬の代わりに適切な同位体標識された試薬を使用する、本明細書に記載の手順と類似した手順によって調製することができる。
【００９２】
本発明の化合物は、溶媒和していない形態および溶媒和した形態の両方で存在し得る。用語「溶媒和物」は、本明細書では、本発明の化合物と一定量の１種または複数の薬学的に許容できる溶媒分子とを含む分子複合体について述べるのに使用する。用語「水和物」は、前記溶媒が水であるときに用いる。溶媒和物形態の例として、限定はしないが、本発明の化合物が、水、イソプロパノール、エタノール、メタノール、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、酢酸エチル、酢酸、エタノールアミン、またはこれらの混合物と会合したものが挙げられる。本発明では、水和物のように、１個の溶媒分子が１分子の本発明の化合物と会合し得ることを特に企図する。
【００９３】
さらに、本発明では、二水和物のように、２個以上の溶媒分子が１分子の本発明の化合物と会合し得ることを特に企図する。加えて、本発明では、半水和物のように、１個未満の溶媒分子が１分子の本発明の化合物と会合し得ることも特に企図する。さらにまた、本発明の溶媒和物は、本発明の化合物の水和物でない形の生物学的有効性を保持している、該化合物の溶媒和物として企図される。
【００９４】
本明細書に記載の化合物のプロドラッグも、本発明の範囲内である。すなわち、本発明の化合物の特定の誘導体は、それ自体は薬理活性をほとんどまたはまったくもたないこともあるが、体内または体表に投与されると、たとえば加水分解による切断によって、所望の活性を有する本発明の化合物に変換され得る。そのような誘導体を「プロドラッグ」と呼ぶ。プロドラッグの使用についてのこれ以上の情報は、「Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ  ａｓ  Ｎｏｖｅｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ」、第１４巻、ＡＣＳ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ（Ｔ．ＨｉｇｕｃｈｉおよびＷ．Ｓｔｅｌｌａ）、および「Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ」、Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ、１９８７（Ｅ．Ｂ．Ｒｏｃｈｅ編、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）で見ることができる。
【００９５】
本発明によるプロドラッグは、たとえば、本発明の化合物中に存在する適切な官能基を、たとえば、Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄによる「Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ」（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ、１９８５）に記載のとおりに、当業者に「プロ部分」として知られている特定の部分と交換することにより生成することができる。
【００９６】
本発明によるプロドラッグのいくつかの例として、以下のものが挙げられる。
（ｉ）本発明の化合物がカルボン酸官能基（−ＣＯＯＨ）を含んでいる場合、化合物のカルボン酸官能基の水素が（Ｃ１〜Ｃ８）アルキルと交換されて、対応するエステルを形成しているプロドラッグ化合物、
（ｉｉ）本発明の化合物がアルコール官能基（−ＯＨ）を含んでいる場合、化合物のアルコール官能基の水素が（Ｃ１〜Ｃ６）アルカノイルオキシメチルと交換されて、対応するエーテルを形成しているプロドラッグ化合物、および
（ｉｉｉ）本発明の化合物が第一級または第二級アミノ官能基（−ＮＨ２または−ＮＨＲ（Ｒ≠Ｈ））を含んでいる場合、化合物Ｉのアミノ官能基の、場合により一方または両方の水素が（Ｃ１〜Ｃ１０）アルカノイルと交換されて、対応するアミドを形成しているプロドラッグ化合物。
【００９７】
前述の例による交換基の別の例および他のプロドラッグタイプの例は、上述の参照文献で見ることができる。さらに、本発明の特定の化合物は、それ自体が他の本発明の化合物のプロドラッグとして働く場合もある。
【００９８】
本発明の範囲内には、本発明の化合物の代謝産物、すなわち、薬物が投与されるとｉｎ  ｖｉｖｏで生成される化合物も含まれる。本発明による代謝産物のいくつかの例として、以下のものが挙げられる。
（ｉ）本発明の化合物がメチル基を含んでいる場合、そのヒドロキシメチル誘導体（たとえば、−ＣＨ３→−ＣＨ２ＯＨ）、
（ｉｉ）本発明の化合物がアルコキシ基を含んでいる場合、そのヒドロキシ誘導体（たとえば、−ＯＲ→−ＯＨ）、
（ｉｉｉ）本発明の化合物が第三級アミノ基を含んでいる場合、その第二級アミノ誘導体（たとえば、−ＮＲ１Ｒ２→−ＮＨＲ１または−ＮＨＲ２）、
（ｉｖ）本発明の化合物が第二級アミノ基を含んでいる場合、その第一級誘導体（たとえば、−ＮＨＲ１→−ＮＨ２）、
（ｖ）本発明の化合物がフェニル部分を含んでいる場合、そのフェノール誘導体（たとえば、−Ｐｈ→−ＰｈＯＨ）、および
（ｖｉ）本発明の化合物がアミド基を含んでいる場合、そのカルボン酸誘導体（たとえば、−ＣＯＮＨ２→ＣＯＯＨ）。
【００９９】
医薬としての使用を目的とした本発明の化合物は、結晶性もしくは非晶質の製品、またはその混合物として投与することができる。そうした本発明の化合物は、たとえば、沈殿、結晶化、凍結乾燥、噴霧乾燥、蒸発乾燥などの方法によって、固体充填物、粉末、またはフィルムとして得ることができる。マイクロ波乾燥または高周波乾燥をこの目的のために使用してもよい。
【０１００】
化合物は、単独で、または１種または複数の他の本発明の化合物と組み合わせて、または１種または複数の他の薬物と組み合わせて（またはこれらの任意の組合せとして）投与することができる。一般に、化合物は、１種または複数の薬学的に許容できる賦形剤を伴って、製剤として投与される。用語「賦形剤」は、本明細書では、本発明の（１種または複数の）化合物以外の任意の成分について述べるのに使用する。賦形剤の選択は、特定の投与方式、賦形剤が溶解性および安定性に及ぼす影響、剤形の種類などの要素によるところが大きい。
【０１０１】
本発明の化合物の送達に適する医薬組成物およびその調製方法は、当業者には容易に明らかとなろう。そのような組成物およびその調製方法は、たとえば、その開示を全体として参照により本明細書に援用する、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」、第１９版（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、１９９５）で見ることができる。
【０１０２】
経口投与
本発明の化合物は、経口投与することができる。経口投与は、化合物が消化管に入るように嚥下するものでもよいし、または化合物が口から直接血流に入る頬側もしくは舌下投与を用いてもよい。
【０１０３】
経口投与に適する製剤としては、固体製剤、たとえば、錠剤；微粒子、液体、または粉末を含有するカプセル剤；ロゼンジ（液体充填型を含める）、咀嚼剤、多粒子およびナノ粒子、ゲル、固溶体、リポソーム、フィルム（粘膜付着型を含める）、腔坐剤、スプレー、ならびに液体製剤が挙げられる。
【０１０４】
液体製剤には、懸濁液、溶液、シロップ、およびエリキシルが含まれる。このような製剤は、軟または硬カプセルの充填剤として使用することができ、通常は、担体、たとえば、水、エタノール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、メチルセルロース、または適切な油と、１種または複数の乳化剤および／または懸濁化剤を含む。液体製剤は、たとえばサシェから固体を再構成して調製することもできる。
【０１０５】
本発明の化合物は、その開示を全体として参照により本明細書に援用する、ＬｉａｎｇおよびＣｈｅｎによるＥｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｐａｔｅｎｔｓ、１１（６）、９８１〜９８６（２００１）に記載のものなどの、急速溶解型、急速崩壊型の剤形にして使用することもできる。
【０１０６】
錠剤剤形では、薬物は、用量に応じて、剤形の１重量％〜８０重量％、より典型的な例では剤形の５重量％〜６０重量％を占めてよい。薬物に加えて、錠剤は一般に、崩壊剤も含有する。崩壊剤の例としては、デンプングリコール酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、微結晶性セルロース、低級アルキル置換されたヒドロキシプロピルセルロース、デンプン、α化デンプン、およびアルギン酸ナトリウムが挙げられる。一般に、崩壊剤は、剤形の１重量％〜２５重量％、好ましくは５重量％〜２０重量％を占める。
【０１０７】
結合剤は一般に、錠剤製剤に粘着性の性質を付与するのに使用する。適切な結合剤としては、微結晶性セルロース、ゼラチン、糖、ポリエチレングリコール、天然および合成のゴム、ポリビニルピロリドン、α化デンプン、ヒドロキシプロピルセルロース、およびヒドロキシプロピルメチルセルロースが挙げられる。錠剤は、ラクトース（一水和物、噴霧乾燥一水和物、無水物など）、マンニトール、キシリトール、デキストロース、スクロース、ソルビトール、微結晶性セルロース、デンプン、第二リン酸カルシウム二水和物などの希釈剤も含有してよい。
【０１０８】
錠剤は、ラウリル硫酸ナトリウムやポリソルベート８０などの界面活性剤、および二酸化ケイ素やタルクなどの滑剤も場合により含んでよい。存在するとき、界面活性剤の量は、錠剤の０．２重量％〜５重量％であり、滑剤は、錠剤の０．２重量％〜１重量％である。
【０１０９】
錠剤は一般に、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸亜鉛、フマル酸ステアリルナトリウム、ステアリン酸マグネシウムとラウリル硫酸ナトリウムの混合物などの滑沢剤も含有する。滑沢剤は一般に、錠剤の０．２５重量％〜１０重量％、好ましくは０．５重量％〜３重量％の量で存在する。
【０１１０】
他の従来の成分として、抗酸化剤、着色剤、着香剤、保存剤、および矯味剤が挙げられる。
【０１１１】
例となる錠剤は、約８０％までの薬物、約１０重量％〜約９０重量％の結合剤、約０重量％〜約８５重量％の希釈剤、約２重量％〜約１０重量％の崩壊剤、および約０．２５重量％〜約１０重量％の滑沢剤を含有する。
【０１１２】
錠剤ブレンドを直接またはローラーによって圧縮して、錠剤を形成することができる。別法として、錠剤ブレンドまたはブレンドの一部を、湿式、乾式、もしくは溶融造粒、溶融凝固、または押出し成形の処理にかけた後に打錠することもできる。最終製剤は、１つまたは複数の層を含んでよく、コーティングされていてもされていなくてもよく、またはカプセル封入されていてもよい。
【０１１３】
錠剤の製剤については、その開示を全体として参照により本明細書に援用する、Ｈ．ＬｉｅｂｅｒｍａｎおよびＬ．Ｌａｃｈｍａｎによる「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ：Ｔａｂｌｅｔｓ，Ｖｏｌ．１」、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ、ニューヨーク州ニューヨーク、１９８０（ＩＳＢＮ  ０−８２４７−６９１８−Ｘ）に詳細に論述されている。
【０１１４】
経口投与用の固体製剤は、即時型および／または調節型の放出となるように製剤することもできる。調節型放出製剤としては、遅延放出、持続放出、パルス放出、制御放出、標的放出、およびプログラム放出が挙げられる。
【０１１５】
適切な調節型放出製剤は、米国特許第６，１０６，８６４号に記載されている。高エネルギー分散や浸透性粒子および被覆粒子などの他の適切な放出技術の詳細は、Ｖｅｒｍａら、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｏｎ−ｌｉｎｅ、２５（２）、１〜１４（２００１）で見ることができる。制御放出を実現するためのチューインガムの使用は、ＷＯ００／３５２９８に記載されている。これらの参照文献の開示を全体として参照により本明細書に援用する。
【０１１６】
非経口投与
本発明の化合物は、血流中、筋肉中、または内臓に直接投与することもできる。非経口投与に適する手段としては、静脈内、動脈内、腹腔内、くも膜下腔内、脳室内、尿道内、胸骨内、頭蓋内、筋肉内、および皮下が挙げられる。非経口投与に適する装置としては、（微細針を含めた）針注射器、無針注射器、および注入技術が挙げられる。
【０１１７】
非経口製剤は通常、塩、炭水化物、（好ましくはｐＨ３〜９にするための）緩衝剤などの賦形剤を含有してもよい水溶液であるが、一部の適用例では、無菌の非水性溶液として、または発熱物質を含まない無菌水などの適切な媒体と共に使用される乾燥形態として、より適切に製剤することもできる。
【０１１８】
たとえば凍結乾燥法による、無菌条件下での非経口製剤の調製は、当業者によく知られている標準の製薬技術を使用して容易に実現することができる。
【０１１９】
非経口溶液の調製で使用する本発明の化合物の溶解性は、溶解性改善剤を混ぜるなどの適切な製剤技術を使用して向上させることができる。
【０１２０】
非経口投与用の製剤は、即時型および／または調節型の放出がなされるように製剤することもできる。調節型放出製剤としては、遅延放出、持続放出、パルス放出、制御放出、標的放出、およびプログラム放出が挙げられる。したがって、本発明の化合物は、活性化合物の調節型放出をもたらす移植デポー剤として投与するための固体、半固体、または揺変性液体として製剤することができる。そのような製剤の例として、薬物でコートしたステントおよびＰＧＬＡマイクロスフェアが挙げられる。
【０１２１】
局所投与
本発明の化合物は、皮膚または粘膜に局所的に、すなわち皮膚投与または経皮投与することもできる。この目的のための典型的な製剤としては、ゲル、ヒドロゲル、ローション、溶液、クリーム、軟膏、散粉剤、包帯剤、フォーム、フィルム、皮膚パッチ、ウェーハ、植込錠、スポンジ、繊維、絆創膏、およびマイクロエマルジョンが挙げられる。リポソームを使用してもよい。典型的な担体としては、アルコール、水、鉱油、流動パラフィン、白色ワセリン、グリセリン、ポリエチレングリコール、およびプロピレングリコールが挙げられる。浸透性改善剤を混ぜてもよい。たとえば、ＦｉｎｎｉｎおよびＭｏｒｇａｎによるＪ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ、８８（１０）、９５５〜９５８（１９９９年１０月）を参照されたい。他の局所投与手段としては、電気穿孔、イオン導入法、音波泳動法、超音波導入法、ならびに微細針または無針（たとえばＰｏｗｄｅｒｊｅｃｔ（商標）、Ｂｉｏｊｅｃｔ（商標）など）注射による送達が挙げられる。これら参照文献の開示を全体として参照により本明細書に援用する。
【０１２２】
局所投与用の製剤は、即時型および／または調節型の放出がなされるように製剤することもできる。調節型放出製剤としては、遅延放出、持続放出、パルス放出、制御放出、標的放出、およびプログラム放出が挙げられる。
【０１２３】
吸入投与／鼻腔内投与
本発明の化合物は、通常は（単独で、たとえばラクトースとの乾燥ブレンドにした混合物として、またはたとえばホスファチジルコリンなどのリン脂質と混合した混合成分粒子としての）乾燥粉末の形で乾燥粉末吸入器から、または１，１，１，２−テトラフルオロエタンや１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロプロパンなどの適切な噴射剤を使用してもしくは使用せずに、加圧容器、ポンプ、スプレー、アトマイザー（好ましくは、電気流体力学を使用して微細な霧を生成するアトマイザー）、もしくはネブライザーからエアロゾルスプレーとして、鼻腔内にまたは吸入によって投与することもできる。鼻腔内の使用では、粉末は、生体接着剤、たとえばキトサンまたはシクロデキストリンを含んでもよい。
【０１２４】
加圧容器、ポンプ、スプレー、アトマイザー、またはネブライザーは、たとえば、エタノール、エタノール水溶液、または活性物を分散させ、可溶化し、もしくはその放出を延長するのに適する別の物質と、溶媒としての（１種または複数の）噴射剤と、トリオレイン酸ソルビタン、オレイン酸、オリゴ乳酸などの任意選択の界面活性剤とを含む、（１種または複数の）本発明の化合物の溶液または懸濁液を含有する。
【０１２５】
乾燥粉末または懸濁液製剤にして使用する前に、薬物製品は、吸入による送達に適する大きさ（通常は５ミクロン未満）に微粉化する。これは、スパイラルジェット粉砕、流動床ジェット粉砕、ナノ粒子を生成するための超臨界流体処理、高圧ホモジナイズ、噴霧乾燥などの任意の適切な粉砕法によって実現することができる。
【０１２６】
吸入器または注入器に入れて使用するカプセル（たとえば、ゼラチンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース製のもの）、ブリスター、およびカートリッジは、本発明の化合物の混合粉末、ラクトースやデンプンなどの適切な粉末基剤、およびｌ−ロイシン、マンニトール、ステアリン酸マグネシウムなどの性能改質剤を含有するように製剤することができる。ラクトースは、無水でも一水和物の形でもよいが、後者であることが好ましい。他の適切な賦形剤としては、デキストラン、グルコース、マルトース、ソルビトール、キシリトール、フルクトース、スクロース、およびトレハロースが挙げられる。
【０１２７】
電気流体力学を使用して微細な霧を生成するアトマイザーでの使用に適する溶液製剤は、１回の作動あたり１μｇ〜２０ｍｇの本発明の化合物を含有してよく、作動体積は１μＬ〜１００μＬと様々でよい。典型的な製剤は、本発明の化合物、プロピレングリコール、滅菌水、エタノール、および塩化ナトリウムを含むものでよい。プロピレングリコールの代わりに使用することのできる別の溶媒としては、グリセロールおよびポリエチレングリコールが挙げられる。
【０１２８】
メントールやｌ−メントールなどの適切な着香剤、またはサッカリンやサッカリンナトリウムなどの甘味剤を、吸入投与／鼻腔内投与を目的とする本発明の製剤に加えてもよい。
【０１２９】
吸入投与／鼻腔内投与用の製剤は、たとえば、ＤＬ−乳酸−グリコール酸共重合体（ＰＧＬＡ）を使用して、即時型および／または調節型の放出がなされるように製剤することもできる。調節型放出製剤としては、遅延放出、持続放出、パルス放出、制御放出、標的放出、およびプログラム放出が挙げられる。
【０１３０】
乾燥粉末吸入器およびエアロゾルの場合では、投与量単位は、計量された量を送達する弁によって決定される。本発明による単位は通常、所望の量の本発明の化合物を含有する計量された用量または「ひと吹き（ｐｕｆｆ）」を投与するように構成される。全体としての１日用量を、１回で、またはより一般には、１日かけて数回に分けて投与することができる。
【０１３１】
直腸／膣内投与
本発明の化合物は、たとえば坐剤、膣坐剤、または浣腸の形で、直腸または膣に投与することができる。カカオ脂が伝統的な坐剤基剤であるが、様々な代替品を適宜使用してもよい。
【０１３２】
直腸／経膣投与用の製剤は、即時型および／または調節型の放出がなされるように製剤することもできる。調節型放出製剤としては、遅延放出、持続放出、パルス放出、制御放出、標的放出、およびプログラム放出が挙げられる。
【０１３３】
眼への投与
本発明の化合物は、通常はｐＨ調整された等張性無菌食塩水中の微粒子化懸濁液または溶液の液滴の形で、眼または耳に直接に投与することもできる。眼および耳への投与に適する他の製剤としては、軟膏、生分解性（たとえば、吸収性のゲルスポンジ、コラーゲン）および非生分解性（たとえばケイ素樹脂）の植込錠、ウェーハ、レンズ、ならびにニオソームやリポソームなどの微粒子系またはベシクル系が挙げられる。架橋ポリアクリル酸、ポリビニルアルコール、ヒアルロン酸などのポリマー、セルロース系ポリマー、たとえばヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、もしくはメチルセルロース、またはヘテロ多糖体ポリマー、たとえばゲランガムを、塩化ベンザルコニウムなどの保存剤と共に組み込んでもよい。このような製剤は、イオン導入法によって送達することもできる。
【０１３４】
眼／耳への投与用の製剤は、即時型および／または調節型の放出がなされるように製剤することもできる。調節型放出製剤としては、遅延放出、持続放出、パルス放出、制御放出、標的放出、またはプログラム放出が挙げられる。
【０１３５】
他の技術
本発明の化合物は、上述の投与方式のいずれかにおいて使用するため、その溶解性、溶解速度、矯味、バイオアベイラビリティ、および／または安定性を向上させるために、シクロデキストリンおよびその適切な誘導体やポリエチレングリコール含有ポリマーなどの可溶性の高分子物質と組み合わせることができる。
【０１３６】
たとえば、薬物−シクロデキストリン複合体は、一般にほとんどの剤形および投与経路に有用であることがわかっている。包接複合体および非包接複合体の両方を使用することができる。薬物との直接の複合体形成に代わるものとして、シクロデキストリンを、補助添加剤として、すなわち担体、希釈剤、または可溶化剤として使用することもできる。そうした目的で最も一般的に使用されるのは、α、βおよびγシクロデキストリンであり、その例は、ＰＣＴ出願第ＷＯ９１／１１１７２号、第ＷＯ９４／０２５１８号、および第ＷＯ９８／５５１４８号で見ることができ、これらの開示を全体として参照により本明細書に援用する。
【０１３７】
活性化合物の投与量は、治療を受ける対象、障害または状態の重症度、投与速度、化合物の性質、および処方する医師の裁量に応じて決まることになる。しかし、有効な投与量は通常、単一用量または分割用量で、体重１ｋｇあたり１日あたり約０．００１〜約１００ｍｇ、好ましくは約０．０１〜約３５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲にある。７０ｋｇのヒトでは、これが約０．０７〜約７０００ｍｇ／日、好ましくは約０．７〜約２５００ｍｇ／日の量になるはずである。場合によっては、前述の範囲の下限を下回る投与量レベルで十分となる場合もあれば、有害な副作用を少しも引き起こすことなく、さらに多い用量を使用することができる場合もあり、そうしたより多い用量は通常、数回分の小用量に分割されて、１日かけて投与される。
【０１３８】
本発明はまた、哺乳動物において異常細胞成長を治療する方法であって、前記哺乳動物に、異常細胞成長の治療に有効な量の本発明の化合物またはその塩もしくは溶媒和物を、有糸分裂阻害剤、アルキル化剤、代謝拮抗薬、挿入用抗生物質（ｉｎｔｅｒｃａｌａｔｉｎｇ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ）、成長因子阻害剤、細胞周期阻害剤、酵素、トポイソメラーゼ阻害剤、生体応答修飾物質、抗体、細胞傷害剤、抗ホルモン薬、および抗アンドロゲン薬からなる群から選択される抗腫瘍薬と組み合わせて投与することを含む方法に関する。
【０１３９】
本発明の一実施形態では、本発明の化合物および本明細書に記載の医薬組成物と共に使用する抗腫瘍薬は、抗血管新生薬、キナーゼ阻害剤、汎キナーゼ阻害剤（ｐａｎ  ｋｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）、または成長因子阻害剤である。好ましい汎キナーゼ阻害剤としては、米国特許第６，５７３，２９３号（Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．、米国ニューヨーク州）に記載のＳｕｔｅｎｔ（商標）（スニチニブ）が挙げられる。抗血管新生薬としては、限定はしないが、以下の薬剤、ＥＧＦ阻害剤、ＥＧＦＲ阻害剤、ＶＥＧＦ阻害剤、ＶＥＧＦＲ阻害剤、ＴＩＥ２阻害剤、ＩＧＦ１Ｒ阻害剤、ＣＯＸ−ＩＩ（シクロオキシゲナーゼＩＩ）阻害剤、ＭＭＰ−２（マトリックスメタロプロテイナーゼ２）阻害剤、およびＭＭＰ−９（マトリックスメタロプロテイナーゼ９）阻害剤などが挙げられる。
【０１４０】
好ましいＶＥＧＦ阻害剤としては、たとえば、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．（カリフォルニア州Ｓｏｕｔｈ  Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ）の抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体であるＡｖａｓｔｉｎ（ベバシズマブ）が挙げられる。その他のＶＥＧＦ阻害剤として、ＣＰ−５４７，６３２（Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ．、米国ニューヨーク州）、ＡＧ１３７３６（Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ．）、ＺＤ−６４７４（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、ＡＥＥ７８８（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＡＺＤ−２１７１、ＶＥＧＦ  Ｔｒａｐ（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ／Ａｖｅｎｔｉｓ）、バタラニブ（ＰＴＫ−７８７、ＺＫ−２２２５８４としても知られる：Ｎｏｖａｒｔｉｓ＆Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  ＡＧ）、Ｍａｃｕｇｅｎ（ペガプタニブオクタナトリウム、ＮＸ−１８３８、ＥＹＥ−００１、Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ．／Ｇｉｌｅａｄ／Ｅｙｅｔｅｃｈ）、ＩＭ８６２（Ｃｙｔｒａｎ  Ｉｎｃ．、米国ワシントン州カークランド）、Ｒｉｂｏｚｙｍｅ（コロラド州ボールダー）およびＣｈｉｒｏｎ（カリフォルニア州Ｅｍｅｒｙｖｉｌｌｅ）の合成リボザイムであるアンジオザイム（ａｎｇｉｏｚｙｍｅ）、ならびにこれらの組合せが挙げられる。
【０１４１】
本発明を実施する際に有用なＶＥＧＦ阻害剤は、米国特許第６，５３４，５２４号および第６，２３５，７６４号に記載されており、両特許をすべての目的のために全体として本明細書に援用する。その他のＶＥＧＦ阻害剤は、たとえば、ＷＯ９９／２４４４０、ＷＯ９５／２１６１３、ＷＯ９９／６１４２２、米国特許第５，８３４，５０４号、ＷＯ９８／５０３５６、米国特許第５，８８３，１１３号、米国特許第５，８８６，０２０号、米国特許第５，７９２，７８３号、米国特許第６，６５３，３０８号、ＷＯ９９／１０３４９、ＷＯ９７／３２８５６、ＷＯ９７／２２５９６、ＷＯ９８／５４０９３、ＷＯ９８／０２４３８、ＷＯ９９／１６７５５、およびＷＯ９８／０２４３７に記載されており、これらすべてを全体として参照により本明細書に援用する。
【０１４２】
他の抗血管新生化合物としては、アシトレチン、フェンレチニド、サリドマイド、ゾレドロン酸、アンジオスタチン、アプリジン、シレングチド（ｃｉｌｅｎｇｔｉｄｅ）、コンブレタスタチンＡ−４、エンドスタチン、ハロフジノン、レビマスタット（ｒｅｂｉｍａｓｔａｔ）、レモバブ（ｒｅｍｏｖａｂ）、Ｒｅｖｌｉｍｉｄ、スクアラミン、ウクライン、Ｖｉｔａｘｉｎ、およびこれらの組合せが挙げられる。
【０１４３】
本発明の化合物と組み合わせて使用することのできる他の増殖抑制剤として、米国特許第６，０８０，７６９号、米国特許第６，１９４，４３８号、米国特許第６，２５８，８２４号、米国特許第６，５８６４４７号、米国特許第６，０７１，９３５号、米国特許第６，４９５，５６４号、および米国特許第６，１５０，３７７号、米国特許第６，５９６，７３５号、米国特許第６，４７９，５１３号、ＷＯ０１／４０２１７、米国出願第２００３−０１６６６７５号において開示され、特許請求されている化合物を含めて、酵素ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼの阻害剤および受容体チロシンキナーゼＰＤＧＦｒの阻害剤が挙げられる。前述の特許および特許出願はそれぞれ、全体として参照により本明細書に援用される。
【０１４４】
ＰＤＧＲｒ阻害剤としては、限定はしないが、国際特許出願公開第ＷＯ０１／４０２１７号および第ＷＯ２００４／０２０４３１号で開示されているものが挙げられ、これら特許文献の内容は、すべての目的のために全体として本明細書に援用される。好ましいＰＤＧＦｒ阻害剤として、ＰｆｉｚｅｒのＣＰ−６７３，４５１ならびにＣＰ−８６８，５９６およびその塩が挙げられる。
【０１４５】
好ましいＧＡＲＦ阻害剤として、ＰｆｉｚｅｒのＡＧ−２０３７（ペリトレキソールおよびその塩）が挙げられる。本発明を実施する際に有用なＧＡＲＦ阻害剤は、米国特許第５，６０８，０８２号で開示されており、この特許文献を、すべての目的のために全体として本明細書に援用する。
【０１４６】
本明細書に記載の式（Ｉ）の化合物および医薬組成物と共に使用することのできる有用なＣＯＸ−ＩＩ阻害剤の例としては、ＣＥＬＥＢＲＥＸ（商標）（セレコキシブ）、パレコキシブ、デラコキシブ、ＡＢＴ−９６３、ＭＫ−６６３（エトリコキシブ）、ＣＯＸ−１８９（ルミラコキシブ）、ＢＭＳ３４７０７０、ＲＳ５７０６７、ＮＳ−３９８、Ｂｅｘｔｒａ（バルデコキシブ）、パラコキシブ（ｐａｒａｃｏｘｉｂ）、Ｖｉｏｘｘ（ロフェコキシブ）、ＳＤ−８３８１、４−メチル−２−（３，４−ジメチルフェニル）−１−（４−スルファモイル−フェニル）−１Ｈ−ピロール、２−（４−エトキシフェニル）−４−メチル−１−（４−スルファモイルフェニル）−１Ｈ−ピロール、Ｔ−６１４、ＪＴＥ−５２２、Ｓ−２４７４、ＳＶＴ−２０１６、ＣＴ−３、ＳＣ−５８１２５、およびＡｒｃｏｘｉａ（エトリコキシブ）が挙げられる。さらに、ＣＯＸ−ＩＩ阻害剤は、米国特許出願ＵＳ２００５−０１４８６２７およびＵＳ２００５−０１４８７７７にも記載されており、これら特許文献の内容を、すべての目的のために全体として本明細書に援用する。
【０１４７】
特定の実施形態では、抗腫瘍薬は、セレコキシブ（米国特許第５，４６６，８２３号）、バルデコキシブ（米国特許第５，６３３，２７２号）、パレコキシブ（米国特許第５，９３２，５９８号）、デラコキシブ（米国特許第５，５２１，２０７号）、ＳＤ−８３８１（米国特許第６，０３４，２５６号、実施例１７５）、ＡＢＴ−９６３（ＷＯ２００２／２４７１９）、ロフェコキシブ（ＣＡＳ番号１６２０１１−９０−７）、ＷＯ１９９８／０３４８４に記載のＭＫ−６６３（またはエトリコキシブ）、ＷＯ１９９９／１１６０５に記載のＣＯＸ−１８９（ルミラコキシブ）、ＢＭＳ−３４７０７０（米国特許第６，１８０，６５１号）、ＮＳ−３９８（ＣＡＳ１２３６５３−１１−２）、ＲＳ５７０６７（ＣＡＳ１７９３２−９１−３）、４−メチル−２−（３，４−ジメチルフェニル）−１−（４−スルファモイル−フェニル）−１Ｈ−ピロール、２−（４−エトキシフェニル）−４−メチル−１−（４−スルファモイルフェニル）−１Ｈ−ピロール、またはメロキシカムである。
【０１４８】
本発明の化合物および本明細書で開示する医薬組成物と組み合わせて使用する抗腫瘍薬としての他の有用な阻害剤として、アスピリン、ならびに限定はしないが以下のもの、すなわち、サルサラート（Ａｍｉｇｅｓｉｃ）、ジフルニサル（Ｄｏｌｏｂｉｄ）、イブプロフェン（Ｍｏｔｒｉｎ）、ケトプロフェン（Ｏｒｕｄｉｓ）、ナブメトン（Ｒｅｌａｆｅｎ）、ピロキシカム（Ｆｅｌｄｅｎｅ）、ナプロキセン（Ａｌｅｖｅ、Ｎａｐｒｏｓｙｎ）、ジクロフェナク（Ｖｏｌｔａｒｅｎ）、インドメタシン（Ｉｎｄｏｃｉｎ）、スリンダク（Ｃｌｉｎｏｒｉｌ）、トルメチン（Ｔｏｌｅｃｔｉｎ）、エトドラク（Ｌｏｄｉｎｅ）、ケトロラク（Ｔｏｒａｄｏｌ）、オキサプロジン（Ｄａｙｐｒｏ）、およびこれらの組合せを含めた、プロスタグランジンを生成する酵素（シクロオキシゲナーゼＩおよびＩＩ）を阻害して、プロスタグランジンのレベルを低下させる非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）が挙げられる。
【０１４９】
好ましいＣＯＸ−Ｉ阻害剤として、イブプロフェン（Ｍｏｔｒｉｎ）、ニュープリン（ｎｕｐｒｉｎ）、ナプロキセン（Ａｌｅｖｅ）、インドメタシン（Ｉｎｄｏｃｉｎ）、ナブメトン（Ｒｅｌａｆｅｎ）、およびこれらの組合せが挙げられる。
【０１５０】
本発明の化合物および本明細書で開示する医薬組成物と組み合わせて使用する標的薬としては、ＥＧＦｒ阻害剤、たとえば、Ｉｒｅｓｓａ（ゲフィチニブ、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、Ｔａｒｃｅｖａ（エルロチニブまたはＯＳＩ−７７４、ＯＳＩ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｉｎｃ．）、Ｅｒｂｉｔｕｘ（セツキシマブ、Ｉｍｃｌｏｎｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、Ｉｎｃ．）、ＥＭＤ−７２００（Ｍｅｒｃｋ  ＡＧ）、ＡＢＸ−ＥＧＦ（Ａｍｇｅｎ  Ｉｎｃ．およびＡｂｇｅｎｉｘ  Ｉｎｃ．）、ＨＲ３（キューバ政府）、ＩｇＡ抗体（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｅｒｌａｎｇｅｎ−Ｎｕｒｅｍｂｅｒｇ）、ＴＰ−３８（ＩＶＡＸ）、ＥＧＦＲ融合タンパク質、ＥＧＦワクチン、抗ＥＧＦｒイムノリポソーム（Ｈｅｒｍｅｓ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．）、およびこれらの組合せが挙げられる。好ましいＥＧＦｒ阻害剤として、Ｉｒｅｓｓａ、Ｅｒｂｉｔｕｘ、Ｔａｒｃｅｖａ、およびこれらの組合せが挙げられる。
【０１５１】
他の抗腫瘍薬としては、ｐａｎ  ｅｒｂ受容体阻害剤またはＥｒｂＢ２受容体阻害剤、たとえば、ＣＰ−７２４，７１４（Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．）、ＣＩ−１０３３（カネルチニブ、Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．）、Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（トラスツズマブ、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ  Ｉｎｃ．）、Ｏｍｉｔａｒｇ（２Ｃ４、ペルツズマブ、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ  Ｉｎｃ．）、ＴＡＫ−１６５（武田）、ＧＷ−５７２０１６（ロナファーニブ、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、ＧＷ−２８２９７４（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、ＥＫＢ−５６９（Ｗｙｅｔｈ）、ＰＫＩ−１６６（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ｄＨＥＲ２（ＨＥＲ２ワクチン、ＣｏｒｉｘａおよびＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、ＡＰＣ８０２４（ＨＥＲ２ワクチン、Ｄｅｎｄｒｅｏｎ）、抗ＨＥＲ２／ｎｅｕ二重特異性抗体（Ｄｅｃｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｎｔｅｒ）、Ｂ７．ｈｅｒ２．ＩｇＧ３（Ａｇｅｎｓｙｓ）、ＡＳ  ＨＥＲ２（Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｆｏｒ  Ｒａｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ＆Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）、三官能性二重特異性抗体（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｍｕｎｉｃｈ）、ｍＡＢ  ＡＲ−２０９（Ａｒｏｎｅｘ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｉｎｃ）およびｍＡＢ  ２Ｂ−１（Ｃｈｉｒｏｎ）、ならびにこれらの組合せから選択されるものが挙げられる。
【０１５２】
好ましいｅｒｂ選択的抗腫瘍薬として、Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ、ＴＡＫ−１６５、ＣＰ−７２４，７１４、ＡＢＸ−ＥＧＦ、ＨＥＲ３、およびこれらの組合せが挙げられる。好ましいｐａｎ  ｅｒｂｂ受容体阻害剤として、ＧＷ５７２０１６、ＣＩ−１０３３、ＥＫＢ−５６９、Ｏｍｉｔａｒｇ、およびこれらの組合せが挙げられる。
【０１５３】
その他のｅｒｂＢ２阻害剤として、ＷＯ９８／０２４３４、ＷＯ９９／３５１４６、ＷＯ９９／３５１３２、ＷＯ９８／０２４３７、ＷＯ９７／１３７６０、ＷＯ９５／１９９７０、米国特許第５，５８７，４５８号、および米国特許第５，８７７，３０５号に記載のものが挙げられ、これら特許文献をそれぞれ、全体として参照により本明細書に援用する。本発明において有用なＥｒｂＢ２受容体阻害剤は、米国特許第６，４６５，４４９号および第６，２８４，７６４号ならびにＷＯ２００１／９８２７７でも開示されており、これら特許文献をそれぞれ、全体として参照により本明細書に援用する。
【０１５４】
さらに、以下の薬剤、ＢＡＹ−４３−９００６（Ｏｎｙｘ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｉｎｃ．）、Ｇｅｎａｓｅｎｓｅ（アウグメロセン（ａｕｇｍｅｒｏｓｅｎ）、Ｇｅｎｔａ）、パニツムマブ（Ａｂｇｅｎｉｘ／Ａｍｇｅｎ）、Ｚｅｖａｌｉｎ（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ）、Ｂｅｘｘａｒ（Ｃｏｒｉｘａ／ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、Ａｂａｒｅｌｉｘ、Ａｌｉｍｔａ、ＥＰＯ９０６（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ディスコデルモリド（ＸＡＡ−２９６）、ＡＢＴ−５１０（Ａｂｂｏｔｔ）、Ｎｅｏｖａｓｔａｔ（Ａｅｔｅｒｎａ）、エンザスタウリン（Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙ）、コンブレスタチンＡ４Ｐ（Ｃｏｍｂｒｅｓｔａｔｉｎ  Ａ４Ｐ）（Ｏｘｉｇｅｎｅ）、ＺＤ−６１２６（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、フラボピリドール（Ａｖｅｎｔｉｓ）、ＣＹＣ−２０２（Ｃｙｃｌａｃｅｌ）、ＡＶＥ−８０６２（Ａｖｅｎｔｉｓ）、ＤＭＸＡＡ（Ｒｏｃｈｅ／Ａｎｔｉｓｏｍａ）、Ｔｈｙｍｉｔａｑ（Ｅｘｉｍｉａｓ）、Ｔｅｍｏｄａｒ（テモゾロミド、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  Ｐｌｏｕｇｈ）、およびＲｅｖｉｌｉｍｄ（Ｃｅｌｅｇｅｎｅ）、ならびにこれらの組合せから、他の抗腫瘍薬を選択することもできる。
【０１５５】
他の抗腫瘍薬は、以下の薬剤、ＣｙＰａｔ（酢酸シプロテロン）、Ｈｉｓｔｅｒｅｌｉｎ（酢酸ヒストレリン）、Ｐｌｅｎａｉｘｉｓ（アバレリックスデポー）、アトラセンタン（ＡＢＴ−６２７）、サトラプラチン（ＪＭ−２１６）、Ｔｈａｌｏｍｉｄ（サリドマイド）、Ｔｈｅｒａｔｏｐｅ、テミリフェン（ｔｅｍｉｌｉｆｅｎｅ）（ＤＰＰＥ）、ＡＢＩ−００７（パクリタキセル）、Ｅｖｉｓｔａ（ラロキシフェン）、アタメスタン（Ｂｉｏｍｅｄ−７７７）、Ｘｙｏｔａｘ（ポリグルタメート化パクリタキセル）、Ｔａｒｇｅｔｉｎ（ベキサロチン（ｂｅｘａｒｏｔｉｎｅ））、およびこれらの組合せから選択してもよい。
【０１５６】
さらに、以下の薬剤、Ｔｒｉｚａｏｎｅ（チラパザミン）、Ａｐｏｓｙｎ（エキシスリンド）、Ｎｅｖａｓｔａｔ（ＡＥ−９４１）、Ｃｅｐｌｅｎｅ（ヒスタミン二塩酸塩）、Ｏｒａｔｈｅｃｉｎ（ルビテカン）、Ｖｉｒｕｌｉｚｉｎ、Ｇａｓｔｒｉｍｍｕｎｅ（Ｇ１７ＤＴ）、ＤＸ−８９５１ｆ（メシル酸エキサテカン）、Ｏｎｃｏｎａｓｅ（ランプリナーゼ（ｒａｎｐｉｒｎａｓｅ））、ＢＥＣ２（ミツモアブ（ｍｉｔｕｍｏａｂ））、Ｘｃｙｔｒｉｎ（モテクサフィンガドリニウム）、およびこれらの組合せから他の抗腫瘍薬を選択することもできる。
【０１５７】
以下の薬剤、ＣｅａＶａｃ（ＣＥＡ）、ＮｅｕＴｒｅｘｉｎ（グルクロン酸トリメトレサート（ｔｒｉｍｅｔｒｅｓａｔｅ  ｇｌｕｃｕｒｏｎａｔｅ））、およびこれらの組合せから、別の抗腫瘍薬を選択することもできる。その他の抗腫瘍薬は、以下の薬剤、ＯｖａＲｅｘ（オレゴボマブ）、Ｏｓｉｄｅｍ（ＩＤＭ−１）、およびこれらの組合せから選択することができる。その他の抗腫瘍薬は、以下の薬剤、Ａｄｖｅｘｉｎ（ＩＮＧ  ２０１）、Ｔｉｒａｚｏｎｅ（チラパザミン）、およびこれらの組合せから選択することもできる。その他の抗腫瘍薬は、以下の薬剤、ＲＳＲ１３（エファプロキシラル）、Ｃｏｔａｒａ（１３１Ｉ  ｃｈＴＮＴ  １／ｂ）、ＮＢＩ−３００１（ＩＬ−４）、およびこれらの組合せから選択することもできる。その他の抗腫瘍薬は、以下の薬剤、Ｃａｎｖａｘｉｎ、ＧＭＫワクチン、ＰＥＧ  Ｉｎｔｅｒｏｎ  Ａ、Ｔａｘｏｐｒｅｘｉｎ（ＤＨＡ／パシルタキセル（ｐａｃｉｌｔａｘｅｌ））、およびこれらの組合せから選択することもできる。
【０１５８】
他の抗腫瘍薬として、ＰｆｉｚｅｒのＭＥＫ１／２阻害剤ＰＤ３２５９０１、Ａｒｒａｙ  ＢｉｏｐｈａｒｍのＭＥＫ阻害剤ＡＲＲＹ−１４２８８６、Ｂｒｉｓｔｏｌ  ＭｙｅｒｓのＣＤＫ２阻害剤ＢＭＳ−３８７，０３２、ＰｆｉｚｅｒのＣＤＫ阻害剤ＰＤ０３３２９９１、およびＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａのＡＸＤ−５４３８、ならびにこれらの組合せが挙げられる。
【０１５９】
さらに、ＣＣＩ−７７９（Ｗｙｅｔｈ）やラパマイシン誘導体のＲＡＤ００１（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）およびＡＰ−２３５７３（Ａｒｉａｄ）などのｍＴＯＲ阻害剤、ＨＤＡＣ阻害剤、ＳＡＨＡ（Ｍｅｒｃｋ  Ｉｎｃ．／Ａｔｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ならびにこれらの組合せも利用することができる。その他の抗腫瘍薬として、オーロラ２阻害剤ＶＸ−６８０（Ｖｅｒｔｅｘ）、およびＣｈｋ１／２阻害剤ＸＬ８４４（Ｅｘｉｌｉｘｉｓ）が挙げられる。
【０１６０】
以下の細胞傷害剤、たとえば、エピルビシン（Ｅｌｌｅｎｃｅ）、ドセタキセル（Ｔａｘｏｔｅｒｅ）、パクリタキセル、Ｚｉｎｅｃａｒｄ（デクスラゾキサン）、リツキシマブ（Ｒｉｔｕｘａｎ）、メシル酸イマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ）、およびこれらの組合せからなる群から選択される１種または複数を、本発明の化合物および本明細書で開示する医薬組成物と組み合わせて使用することもできる。
【０１６１】
本発明は、限定はしないが、エキセメスタン（Ａｒｏｍａｓｉｎ、Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ．）、リュープロレリン（ＬｕｐｒｏｎまたはＬｅｕｐｌｉｎ、ＴＡＰ／Ａｂｂｏｔｔ／Ｔａｋｅｄａ）、アナストロゾール（Ａｒｉｍｉｄｅｘ、Ａｓｔｒａｚｅｎｅｃａ）、ゴスレリン（ｇｏｓｒｅｌｉｎ）（Ｚｏｌａｄｅｘ、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、ドキセルカルシフェロール、ファドロゾール、ホルメスタン、クエン酸タモキシフェン（タモキシフェン、Ｎｏｌｖａｄｅｘ、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、Ｃａｓｏｄｅｘ（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、Ａｂａｒｅｌｉｘ（Ｐｒａｅｃｉｓ）、Ｔｒｅｌｓｔａｒ、およびこれらの組合せを含めたホルモン療法と同時の本発明の化合物の使用も企図する。
【０１６２】
本発明はまた、限定はしないが、フルベストラント、トレミフェン、ラロキシフェン、ラソフォキシフェン、レトロゾール（Ｆｅｍａｒａ、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）を含めた抗エストロゲン薬、ビカルタミド、フルタミド、ミフェプリストン、ニルタミド、Ｃａｓｏｄｅｘ（商標）（４’−シアノ−３−（４−フルオロフェニルスルホニル）−２−ヒドロキシ−２−メチル−３’−（トリフルオロメチル）プロピオンアニリド、ビカルタミド）などの抗アンドロゲン薬、およびこれらの組合せなどのホルモン療法剤と同時の本発明の化合物の使用に関する。
【０１６３】
さらに、本発明は、本発明の化合物を、単独で、または１種または複数の支持療法製品、たとえば、フィルグラスチム（Ｎｅｕｐｏｇｅｎ）、オンダンセトロン（Ｚｏｆｒａｎ）、Ｆｒａｇｍｉｎ、Ｐｒｏｃｒｉｔ、Ａｌｏｘｉ、Ｅｍｅｎｄ、またはこれらの組合せからなる群から選択される製品と組み合わせて提供する。
【０１６４】
特に好ましい細胞傷害剤としては、Ｃａｍｐｔｏｓａｒ、Ｅｒｂｉｔｕｘ、Ｉｒｅｓｓａ、Ｇｌｅｅｖｅｃ、Ｔａｘｏｔｅｒｅ、およびこれらの組合せが挙げられる。
【０１６５】
以下のトポイソメラーゼＩ阻害剤、すなわち、カンプトテシン、イリノテカンＨＣｌ（Ｃａｍｐｔｏｓａｒ）、エドテカリン、オラセシン（Ｓｕｐｅｒｇｅｎ）、エキサテカン（第一）、ＢＮ−８０９１５（Ｒｏｃｈｅ）、およびこれらの組合せを、抗腫瘍薬として利用することもできる。特に好ましいトポイソメラーゼＩＩ阻害剤としては、エピルビシン（Ｅｌｌｅｎｃｅ）が挙げられる。
【０１６６】
アルキル化剤としては、限定はしないが、窒素マスタードＮ−オキシド、シクロホスファミド、イホスファミド、メルファラン、ブスルファン、ミトブロニトール、カルボコン、チオテパ、ラニムスチン、ニムスチン、テモゾロミド、ＡＭＤ−４７３、アルトレタミン、ＡＰ−５２８０、アパジコン、ブロスタリシン、ベンダムスチン、カルムスチン、エストラムスチン、ホテムスチン、グルフォスファミド、イホスファミド、ＫＷ−２１７０、マホスファミド、およびミトラクトールが挙げられ、白金錯体アルキル化化合物としては、限定はしないが、シスプラチン、Ｐａｒａｐｌａｔｉｎ（カルボプラチン）、エプタプラチン、ロバプラチン、ネダプラチン、Ｅｌｏｘａｔｉｎ（オキサリプラチン、Ｓａｎｏｆｉ）、またはサトラプラチン（ｓａｔｒｐｌａｔｉｎ）、およびこれらの組合せが挙げられる。特に好ましいアルキル化剤として、Ｅｌｏｘａｔｉｎ（オキサリプラチン）が挙げられる。
【０１６７】
代謝拮抗薬としては、限定はしないが、メトトレキサート、６−メルカプトプリンリボシド、メルカプトプリン、単独もしくはロイコボリンと組み合わせた５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、テガフール、ＵＦＴ、ドキシフルリジン、カルモフール、シタラビン、シタラビンオクホスファート、エノシタビン、Ｓ−１、Ａｌｉｍｔａ（ぺメトレキセド二ナトリウム、ＬＹ２３１５１４、ＭＴＡ）、Ｇｅｍｚａｒ（ゲムシタビン、Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙ）、フルダラビン、５−アザシチジン、カペシタビン、クラドリビン、クロファラビン、デシタビン、エフロルニチン、エチニルシチジン、シトシンアラビノシド、ヒドロキシ尿素、ＴＳ−１、メルファラン、ネララビン、ノラトレキセド（ｎｏｌａｔｒｅｘｅｄ）、オクホスファート、二ナトリウムプレメトレキセド、ペントスタチン、ペリトレキソール（ｐｅｌｉｔｒｅｘｏｌ）、ラルチトレキセド、トリアピン（ｔｒｉａｐｉｎｅ）、トリメトレキセート、ビダラビン、ビンクリスチン、ビノレルビン、またはたとえば、Ｎ−（５−［Ｎ−（３，４−ジヒドロ−２−メチル−４−オキソキナゾリン−６−イルメチル）−Ｎ−メチルアミノ］−２−テノイル）−Ｌ−グルタミン酸などの、欧州特許出願第２３９３６２号に記載の好ましい代謝拮抗薬のうちの１種、ならびにこれらの組合せが挙げられる。
【０１６８】
抗生物質としては、挿入用抗生物質が挙げられ、限定はしないが、アクラルビシン、アクチノマイシンＤ、アムルビシン、アンナマイシン（ａｎｎａｍｙｃｉｎ）、アドリアマイシン、ブレオマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エルサミトルシン（ｅｌｓａｍｉｔｒｕｃｉｎ）、エピルビシン、ガラルビシン（ｇａｌａｒｕｂｉｃｉｎ）、イダルビシン、マイトマイシンＣ、ネモルビシン（ｎｅｍｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ネオカルチノスタチン、ペプロマイシン、ピラルビシン、レベッカマイシン、スチマラマー、ストレプトゾシン、バルルビシン、ジノスタチン、およびこれらの組合せが含まれる。
【０１６９】
植物由来の抗腫瘍物質としては、たとえば、有糸分裂阻害剤、たとえば、ビンブラスチン、ドセタキセル（Ｔａｘｏｔｅｒｅ）、パクリタキセル、およびこれらの組合せから選択されるものが挙げられる。
【０１７０】
細胞傷害性トポイソメラーゼ阻害剤としては、アクラルビシン、アモノアフィド（ａｍｏｎａｆｉｄｅ）、ベロテカン（ｂｅｌｏｔｅｃａｎ）、カンプトテシン、１０−ヒドロキシカンプトテシン、９−アミノカンプトテシン、ジフロモテカン（ｄｉｆｌｏｍｏｔｅｃａｎ）、イリノテカンＨＣｌ（Ｃａｍｐｔｏｓａｒ）、エドテカリン、エピルビシン（Ｅｌｌｅｎｃｅ）、エトポシド、エキサテカン、ギマテカン（ｇｉｍａｔｅｃａｎ）、ルルトテカン（ｌｕｒｔｏｔｅｃａｎ）、ミトキサントロン、ピラルビシン、ピクサントロン、ルビテカン、ソブゾキサン、ＳＮ−３８、タフルポシド（ｔａｆｌｕｐｏｓｉｄｅ）、トポテカン、およびこれらの組合せからなる群から選択される１種または複数の薬剤が挙げられる。
【０１７１】
好ましい細胞傷害性トポイソメラーゼ阻害剤として、カンプトテシン、１０−ヒドロキシカンプトテシン、９−アミノカンプトテシン、イリノテカンＨＣｌ（Ｃａｍｐｔｏｓａｒ）、エドテカリン、エピルビシン（Ｅｌｌｅｎｃｅ）、エトポシド、ＳＮ−３８、トポテカン、およびこれらの組合せらなる群から選択される１種または複数の薬剤が挙げられる。
【０１７２】
免疫剤としては、インターフェロンおよび他の数多くの免疫強化薬が挙げられる。インターフェロンには、インターフェロンα、インターフェロンα２ａ、インターフェロンα２ｂ、インターフェロンβ、インターフェロンγ１ａ、インターフェロンγ１ｂ（Ａｃｔｉｍｍｕｎｅ）、またはインターフェロンγｎ１、およびこれらの組合せが含まれる。他の薬剤には、フィルグラスチム、レンチナン、シゾフィラン、ＴｈｅｒａＣｙｓ、ウベニメクス、ＷＦ−１０、アルデスロイキン、アレムツズマブ、ＢＡＭ−００２、ダカルバジン、ダクリズマブ、デニロイキン、ゲムツズマブオゾガマイシン、イブリツモマブ、イミキモド、レノグラスチム、レンチナン、メラノーマワクチン（Ｃｏｒｉｘａ）、モルグラモスチム、ＯｎｃｏＶＡＸ−ＣＬ、サルグラモスチム、タソネルミン、テクロイキン（ｔｅｃｌｅｕｋｉｎ）、チマラシン（ｔｈｙｍａｌａｓｉｎ）、トシツモマブ、Ｖｉｒｕｌｉｚｉｎ、Ｚ−１００、エピラツズマブ、ミツモマブ（ｍｉｔｕｍｏｍａｂ）、オレゴボマブ、ペムツモマブ（ｐｅｍｔｕｍｏｍａｂ）（Ｙ−ｍｕＨＭＦＧ１）、Ｐｒｏｖｅｎｇｅ（Ｄｅｎｄｒｅｏｎ）、およびこれらの組合せが含まれる。
【０１７３】
生体応答修飾物質は、組織細胞の生存、成長、または分化などの、生物の防御機構または生体応答を修飾して、抗腫瘍活性をもたせる作用物質である。このような物質として、クレスチン、レンチナン、シゾフィラン、Ｐｉｃｉｂａｎｉｌ、ウベニメクス、およびこれらの組合せが挙げられる。
【０１７４】
本発明の化合物と組み合わせて使用することのできる他の抗癌剤としては、アリトレチノイン、アムプリゲン（ａｍｐｌｉｇｅｎ）、アトラセンタンベキサロテン、ボルテゾミブ、ボセンタン、カルシトリオール、エキシスリンド、フィナステリド、ホテムスチン、イバンドロン酸、ミルテホシン、ミトキサントロン、ｌ−アスパラギナーゼ、プロカルバジン、ダカルバジン、ヒドロキシカルバミド、ペグアスパラガーゼ、ペントスタチン、タザロトン（ｔａｚａｒｏｔｎｅ）、Ｔｅｌｃｙｔａ（ＴＬＫ−２８６、Ｔｅｌｉｋ  Ｉｎｃ．）、Ｖｅｌｃａｄｅ（ボルテマジブ（ｂｏｒｔｅｍａｚｉｂ）、Ｍｉｌｌｅｎｉｕｍ）、トレチノイン、およびこれらの組合せが挙げられる。
【０１７５】
白金錯体化合物には、限定はしないが、シスプラチン、カルボプラチン、ネダプラチン、オキサリプラチン、およびこれらの組合せが含まれる。
【０１７６】
カンプトテシン誘導体には、限定はしないが、カンプトテシン、１０−ヒドロキシカンプトテシン、９−アミノカンプトテシン、イリノテカン、ＳＮ−３８、エドテカリン、トポテカン、およびこれらの組合せが含まれる。
【０１７７】
他の抗腫瘍薬には、ミトキサントロン、ｌ−アスパラギナーゼ、プロカルバジン、ダカルバジン、ヒドロキシカルバミド、ペントスタチン、トレチノイン、およびこれらの組合せが含まれる。
【０１７８】
ＣＴＬＡ４（細胞傷害性リンパ球抗原４）抗体などの、抗腫瘍免疫応答を強化することのできる抗腫瘍薬、およびＣＴＬＡ４をブロックすることのできる他の薬剤、たとえば、ＭＤＸ−０１０（Ｍｅｄａｒｅｘ）、および米国特許第６，６８２，７３６号で開示されているＣＴＬＡ４化合物；ならびに他のファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ阻害剤、たとえば、ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ阻害剤などの増殖抑制剤を利用してもよい。さらに、本発明の化合物と組み合わせて使用することのできる特異的ＣＴＬＡ４抗体として、米国特許第６，６８２，７３６号および第６，６８２，７３６号で開示されているものが挙げられ、これら両方の特許文献を全体として参照により本明細書に援用する。
【０１７９】
本発明の組合せ法で使用することのできる特異的ＩＧＦ１Ｒ抗体としては、ＷＯ２００２／０５３５９６で開示されているものが挙げられ、この特許文献を全体として参照により本明細書に援用する。
【０１８０】
本発明で使用することのできる特異的ＣＤ４０抗体としては、ＷＯ２００３／０４０１７０で開示されているものが挙げられ、この特許文献を全体として参照により本明細書に援用する。
【０１８１】
放射線療法に応答してＴＮＦαを発現するＴＮＦｅｒａｄｅ（ＧｅｎｅＶｅｃ）などの遺伝子療法薬も、抗腫瘍薬として用いることができる。
【０１８２】
本発明の一実施形態では、本発明の化合物およびその医薬組成物と組み合わせてスタチンを使用してもよい。スタチン（ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤）は、アトルバスタチン（Ｌｉｐｉｔｏｒ（商標）、Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ．）、プロバスタチン（ｐｒｏｖａｓｔａｔｉｎ）（Ｐｒａｖａｃｈｏｌ（商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ロバスタチン（Ｍｅｖａｃｏｒ（商標）、Ｍｅｒｃｋ  Ｉｎｃ．）、シンバスタチン（Ｚｏｃｏｒ（商標）、Ｍｅｒｃｋ  Ｉｎｃ．）、フルバスタチン（Ｌｅｓｃｏｌ（商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、セリバスタチン（Ｂａｙｃｏｌ（商標）、Ｂａｙｅｒ）、ロスバスタチン（Ｃｒｅｓｔｏｒ（商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、ロボスタチン（ｌｏｖｏｓｔａｔｉｎ）とナイアシン（Ａｄｖｉｃｏｒ（商標）、Ｋｏｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、これらの誘導体および組合せからなる群から選択されるものでよい。
【０１８３】
好ましい実施形態では、スタチンは、アトルバスタチンおよびロバスタチン、これらの誘導体および組合せからなる群から選択される。抗腫瘍薬として有用な他の薬剤として、Ｃａｄｕｅｔが挙げられる。
【０１８４】
たとえば特定の疾患または状態を治療する目的で、活性化合物の組合せを投与することが望ましい場合もあるので、その少なくとも１種が本発明による化合物を含有する２種以上の医薬組成物を、組成物の共投与に適するキットの形で好都合に組み合わせてもよいことは、本発明の範囲内である。したがって、本発明のキットは、その少なくとも１種が本発明の化合物を含有する２種以上の別個の医薬組成物と、容器、分割されたボトル、または分割されたホイル製袋などの、前記組成物を別々に保持する手段とを含む。このようなキットの例は、錠剤、カプセル剤などの包装に使用されるよく知られたブリスターパックである。
【０１８５】
本発明のキットは、たとえば経口用と非経口用の、異なる剤形を投与する、別個の組成物を異なる投与間隔で投与する、または組成物の用量を互いに用量設定するのに特に適する。服薬遵守を援助するために、キットは、通常は投与の説明書を含み、記憶補助を備えていてもよい。
【実施例】
【０１８６】
以下の実施例において、単一のキラル中心を有する分子は、別段の指摘または構造式もしくは化学名による表記がない限り、ラセミ混合物として存在する。２つ以上のキラル中心を有する分子は、別段の指摘または構造式もしくは化学名による表記がない限り、ジアステレオ異性体のラセミ混合物として存在する。単一の鏡像異性体／ジアステレオ異性体は、当業者に知られている方法によって得ることができる。
【０１８７】
１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、３００ＭＨｚまたは４００ＭＨｚで作動させたＢｒｕｋｅｒ製機器で記録し、１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルは、７５ＭＨｚで作動させて記録した。
【０１８８】
本明細書では、以下の略語を使用する場合がある：Ｅｔ２Ｏ（ジエチルエーテル）、ＤＭＦ（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド）、ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）、ＤＣＭ（ジクロロ−メタン）、ＤＭＡ（ジメチルアセタール）、ＤＢＵ（１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン）、ＬｉＨＭＤＳまたはＬＨＭＤＳ（リチウムヘキサメチルジシラジド）、ＴＢＭＥ（ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル）、ＬＤＡ（リチウムジイソプロピルアミド）、ＤＭＳＯまたはｄｍｓｏ（ジメチルスルホキシド）、ＭｅＯＨ（メタノール）、ＥｔＯＨ（エタノール）、ＢｕＯＨ（ブタノール）、ＥｔＯＡｃ（酢酸エチル）、ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）、Ａｃ（アセチル）、Ｍｅ（メチル）、Ｅｔ（エチル）、Ｐｈ（フェニル）、ＴＭＳＩ（トリメチルシリルヨージド）、ＤＳＣ（Ｎ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカーボネート）、ＣＤＩ（１，１’−カルボニルジイミダゾール）、Ｂｏｃ（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）、ｎＢｕＬｉ（ｎ−ブチルリチウム）、ＥＤＣ（１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩）、ＨＯＢｔ（Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物）、ＤＭＥ（１，２−ジメトキシエタン）、Ｐｄ（ｄｂａ）２（ビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０））、およびＲＴまたはｒｔ（室温）。
【０１８９】
（実施例１）
２−アミノ−Ｎ−ビシクロ［１．１．１］ペント−１−イル−４−｛２，４−ジクロロ−６−［２−（４−クロロ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エトキシ］フェニル｝−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
化合物１ａ（５１ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液に、化合物１ｂの（３ｍＬのＤＭＦ）溶液およびＴＥＡ（１ｍＬ、７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を７０℃で３時間加熱した。反応液を室温に冷却した。反応混合物に水（２０ｍＬ）を加え、ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）を加えて、水溶液を抽出した。有機層を合わせて乾燥させ、濾過し、濃縮して、黄褐色の油状物を得た。分取ＨＰＬＣによって単離すると、化合物１（２３ｍｇ、０．０４３ｍｍｏｌ）が白色の固体として収率３９％で得られた。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.94 (s, 6 H), 2.35 (s, 1 H), 3.72 (d,
J=13.14 Hz, 1 H), 3.96 (d, J=13.14 Hz, 1 H), 4.27 - 4.33 (m, 2 H), 4.33 - 4.48
(m, 4 H), 6.78 (s, 2 H), 6.90 (s, 1 H), 7.28 (d, J=1.77 Hz, 1 H), 7.35 (d,
J=1.52 Hz, 1 H), 7.36 (s, 1 H), 7.49 (s, 1 H).  LCMS (M+H)+
535.  
元素分析：C23H22Cl3N7O2・1 H2Oの計算値: C, 49.97; H, 4.38; N, 17.73.  実測値:  C, 50.36; H, 4.23; N, 17.40.
【０１９０】
【化１６】
2011530580.tif 000022
【０１９１】
化合物１ａ：４−｛２，４−ジクロロ−６−［２−（４−クロロ−ピラゾール−１−イル）−エトキシ］−フェニル｝−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−２−イルアミン
化合物１ｃ（５５．７ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）溶液に、塩化水素（０．５ｍＬ、２ｍｍｏｌ、４Ｍジオキサン溶液）を加えた。混合物を室温で１２時間撹拌し、ＬＣ／ＭＳによってモニターした。溶媒を蒸発させて、化合物１ａを淡黄色の固体として得た。この未精製残渣をそれ以上精製せずに化合物１の合成に使用した。
【０１９２】
【化１７】
2011530580.tif 000023
【０１９３】
化合物１ｂ：イミダゾール−１−カルボン酸ビシクロ［１．１．１］ペント−１−イルアミド
ビシクロ［１．１．１］−ペンタン−１−アミン塩酸塩（１９ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）および１、１’−カルボニルジイミダゾール（３２ｍｇ、０．１９２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶かした溶液に、トリエチルアミン（０．１ｍＬ、０．５ｍｍｏｌ）を加えた（透明な溶液が懸濁液になった）。化合物１ｂの単離をそれ以上行わずに、この懸濁液を化合物１の合成に使用した。
【０１９４】
化合物１ｃ：２−アミノ−４−｛２，４−ジクロロ−６−［２−（４−クロロ−ピラゾール−１−イル）−エトキシ］−フェニル｝−５，７−ジヒドロ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
化合物１ｄ（９８ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液に、炭酸カリウム（１００ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）および化合物１ｅ（１２０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を順次加えた。混合物を１２０℃で４０分間マイクロ波装置にかけた。反応混合物に水（１０ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）を加えて、撹拌した。有機層を収集し、乾燥させ、濾過し、濃縮して、黄色がかった油状物を得た。この油状物残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（勾配溶離  ５０→６０％のＥｔＯＡｃヘキサン溶液）によって精製して、化合物１ｃ（６２．７ｍｇ、収率４８．３％）を油状物として得た。この油状物を凍結乾燥して、白色の固体とした。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.38 - 1.48 (m, 9 H), 3.63 (t, J=13.89
Hz, 1 H), 3.91 (dd, J=24.00, 13.39 Hz, 1 H), 4.28 - 4.34 (m, 2 H), 4.40 (d,
J=3.54 Hz, 4 H), 6.81 (br. s., 2 H), 7.27 (s, 1 H), 7.32 - 7.34 (m, 1 H), 7.39
(s, 1 H), 7.55 (s, 1 H).  LCMS (M+H)+ 527.
【０１９５】
【化１８】
2011530580.tif 000024
【０１９６】
化合物１ｄ：２−アミノ−４−（２，４−ジクロロ−６−ヒドロキシ−フェニル）−５，７−ジヒドロ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
化合物１ｇ（７７０ｍｇ、３．７ｍｍｏｌ）および化合物１ｆ（１０００ｍｇ、２．７ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（４５ｍＬ）に混ぜた混合物に、炭酸ナトリウム（１．２ｇ、１１ｍｍｏｌ）の入った５．６ｍＬのＨ２Ｏを加えた。混合物を窒素で数回パージし、次いでテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（２７０ｍｇ）を加えた。反応混合物および得られる溶液を１２時間８０℃に加熱した。反応混合物に水（５０ｍＬ）を加えて、反応を失活させた。次いでＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）を加えて、水溶液を抽出した。有機層を合わせて乾燥させ、濾過し、濃縮して、褐色の油状物を得た。この油状物残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（勾配溶離  ３０→４０％のＥｔＯＡｃヘキサン）溶液によって精製して、化合物１ｄ（５９０ｍｇ、収率４０％）を淡褐色の泡沫として得た。この油状物を凍結乾燥して、白色の固体とした。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.37 - 1.47 (m, J=12.88 Hz, 9 H), 4.07
- 4.24 (m, 2 H), 4.42 (d, J=7.58 Hz, 2 H), 6.82 (s, 2 H), 6.95 (d, J=1.77 Hz, 1
H), 7.08 - 7.21 (m, 1 H), 10.67 (s, 1 H).  LCMS (M+H)+
398.  元素分析：C17H18Cl2N4O3・0.5 CH2Cl2の計算値: C, 49.80; H, 4.36; N, 12.74.  実測値:  C, 47.41; H, 4.46; N, 12.71.
【０１９７】
【化１９】
2011530580.tif 000025
【０１９８】
化合物１ｅ：メタンスルホン酸２−（４−クロロ−ピラゾール−１−イル）−エチルエステル
４−クロロピラゾール（３４２ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液に、Ｎ２中で水素化ナトリウム（１３６ｍｇ、３．４ｍｍｏｌ、６０％鉱油中分散液）を加えた。混合物を室温で１時間撹拌した。反応液をシリンジで、メタンスルホン酸２−ブロモ−エチルエステル（８２０ｍｇ、４ｍｍｏｌ、以下の文献手順に従って調製、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９８３、２６（８）、ｐ１１６８）中に移した。混合物を７０℃で３時間撹拌した。混合物に水（３０ｍＬ）を加え、ＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）を加えて、水溶液を抽出した。有機層を合わせて乾燥させ、濾過し、濃縮して、褐色の油状物を得た。この油状物残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（勾配溶離  ２０→３０％のＥｔＯＡｃヘキサン溶液）によって精製して、化合物１ｅ（５９ｍｇ、収率８％）を褐色の油状物として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm 2.89 (s, 3 H), 4.38 - 4.43 (m, 2 H),
4.55 - 4.61 (m, 2 H), 7.49 (s, 1 H), 7.49 (s, 1 H).
【０１９９】
化合物１ｆ：２−アミノ−４−ヨード−５，７−ジヒドロ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
エチル２−アミノ−４−クロロ−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート（化合物Ｉ（Ｃ）、ＰＧ１はＥｔＯＣ（Ｏ）−であり、ＸはＣｌである）（３０．６ｇ、１２６ｍｍｏｌ、１．０当量）を７５０ｍＬのアセトニトリルに懸濁させた懸濁液に、ヨードトリメチルシラン（１００ｍＬ、７０３ｍｍｏｌ、５．６当量）を加え、得られる反応混合物を４時間加熱還流した。周囲温度に冷却した後、反応混合物をＭｅＯＨ（２７ｍＬ）で失活させ、真空中で濃縮して乾燥させた。トルエン（１５０ｍＬ）との同時蒸発によって微量ＭｅＯＨを除去した。得られる残渣をＥｔ２Ｏ（２００ｍＬ）で処理し、沈殿を濾過し、Ｅｔ２Ｏで洗浄した。次いで、未精製の褐色粉末を、還流状態にあるＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）中で撹拌し、周囲温度に冷却し、固体を濾過によって収集し、酢酸エチルで洗浄して、所望の生成物を褐色の粉末（５２．２ｇ、約７９％）として得た。この材料をそれ以上精製せずに次のステップの反応に使用した。1H NMR (300 MHz, DMSO-D6) δ ppm 9.47 (br s, 2H), 4.37 (s, 2H), 4.25
(s, 2H). LCMS (M+H)+:  263.2.
【０２００】
上記褐色粉末（５２．２ｇ、約１００ｍｍｏｌ）をジオキサン（１５０ｍＬ）および水（１５０ｍＬ）に溶解させた。さらに、ジイソプロピルエチルアミン（６９．７ｍＬ、４００ｍｍｏｌ）およびＢｏｃ２Ｏ（４３．６ｇ、２００ｍｍｏｌ）を加え、混合物を４５℃に温めた。混合物を周囲温度で撹拌した後、さらに１．５時間ＮＭＲにかけた。生成物をＥｔＯＡｃ（３．０Ｌ）および飽和ＮａＨＣＯ３（水溶液）（１．０Ｌ）中に注ぎ、層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（１．０Ｌ）でもう一度洗浄した。有機層を合わせて乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。ＥｔＯＡｃ（３Ｌ）を溶離液として使用しながら、生成物をシリカで濾過したが、生成物は完全に純粋ではなかった。ＥｔＯＡｃ（２Ｌ）を使用しながらシリカプラグで濾過すると、化合物１ｆ（８ｇ、２２％）が黄褐色の固体として得られた。1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm 1.44 (d, J=4.80 Hz, 9 H), 4.25 (d,
J=13.14 Hz, 2 H), 4.42 (d, J=8.34 Hz, 2 H), 7.06 (s, 2 H). LCMS (M+H)+:
348.2.
【０２０１】
【化２０】
2011530580.tif 000026
【０２０２】
化合物Ｉ（Ｃ）の調製：
【０２０３】
【化２１】
2011530580.tif 000027
ステップ１．エチルＮ−（エトキシカルボニル）−β−アラニネート（ｃ）
アクリル酸エチル（ａ）（５０ｍＬ、４６０ｍｍｏｌ、１．１当量）、グリシンエチルエステル塩酸塩（ｂ）（５８．４ｇ、４１８ｍｍｏｌ、１当量）、およびトリエチルアミン（５８．３ｍＬ、４１８ｍｍｏｌ、１当量）の入った無水ＥｔＯＨ（９６０ｍＬ）を周囲温度で約７２時間撹拌した。反応が完了した後、真空中で揮発性物質成分を除去し、未精製の中間体（ｃ）をそのまま続けて使用した。
【０２０４】
ステップ２．エチルＮ−（エトキシカルボニル）−Ｎ−（２−エトキシ−２−オキソエチル）−β−アラニネート（ｅ）
未精製中間体（ｃ）（４１８ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（２７５ｍＬ）に溶解させ、トリエチルアミン（５８．３ｍＬ、４１８ｍｍｏｌ）を加えた後、クロロギ酸エチル（ｄ）（３９．８ｍＬ、４１８ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を周囲温度で約２４時間撹拌した。反応が完了した後、真空中で揮発性物質成分を除去した。次いで粗生成物を真空中（約５ｍｍＨｇ）で蒸留し、ＥｔＯＡｃに溶解させ、それを飽和ＫＨＳＯ４で３回、ブラインで１回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。濾過した後、真空中で揮発性物質成分を除去して、中間体（ｅ）を透明な油状物（７４．８ｇ、２７２ｍｍｏｌ）として、２ステップで６５％の収率で得た。
【０２０５】
ステップ３．ジエチル４−オキソピロリジン−１，３−ジカルボキシレート（ｆ）
氷浴で冷却したＮａＯＥｔ（３２．６ｍＬ）の無水ＥｔＯＨ（４１．７ｍＬ）溶液（ＥｔＯＨ中２１重量％）に、窒素雰囲気中で中間体（ｅ）（１８．０ｇ、６５．２ｍｍｏｌ）を加えた。氷浴を取り外し、ＴＬＣによる観察で縮合が完了するまで、混合物を８０℃で約１２時間加熱した。混合物を氷／水上に注ぎ、ＥｔＯＡｃで抽出した。溶媒をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、蒸発して、未精製中間体（ｆ）をオフホワイトの固体（１４．０５ｇ）として得、これを精製せずに続けて使用した。
【０２０６】
ステップ４．エチル２−アミノ−４−ヒドロキシ−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート（ｈ）
中間体（ｆ）（１４．０５ｇ）および炭酸グアニジン（ｇ）（１６．６ｇ、９１．９ｍｍｏｌ）の懸濁液をｔ−ブタノール（１４７ｍＬ）中で約６時間還流させた。混合物を約２時間かけて周囲温度に冷ました。真空中で揮発性物質成分を除去し、水を加えた。ＫＨＳＯ４を使用してｐＨを約６〜７に調整した。得られるスラリーを濾過して固体を収集し、これを水で洗浄した後、ＥｔＯＡｃで洗浄した。固体を真空乾燥して、中間体（ｈ）をクリーム色の固体（１１．９ｇ、５３．１ｍｍｏｌ）として収率８７％で得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm 11.01 (s, 1H), 6.97 (s, 0.5H, 互変異性体の可能性), 6.70 (s, 2H), 4.25 (s, 4H), 4.13-4.03
(m, 2H), 1.22 (t, 3H). LCMS (M+H)+: 225.2.
【０２０７】
ステップ５．エチル２−アミノ−４−クロロ−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレートＩ（Ｃ）
中間体（ｈ）（１１ｇ、４９ｍｍｏｌ）を２回トルエンと共沸させた。無水アセトニトリル（２５０ｍＬ）およびＰＯＣｌ３（２５ｍＬ、２７０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を約２．５時間還流させた。追加のＰＯＣｌ３（５０ｍＬ）を加え、混合物をさらに２時間還流させた。揮発性物質成分を真空中にて４０℃で濃縮して、赤色の溶液を得た。溶液の移し換えが容易になるまで最小量の無水アセトニトリルを加え、その後これを大型ビーカー中の氷上に注いだ。フラスコを少量のアセトニトリルでさらにすすぎ、これを氷に加えた。氷混合物に水（約５０ｍＬ）を加えて、撹拌を容易にした。氷スラリー混合物が強塩基性になるまで、濃ＮＨ４ＯＨ（２５ｍＬ）を撹拌しながらゆっくりと加え、次いで、まだ撹拌している氷のスラリーに５０％ＮａＯＨ水溶液（２５ｍＬ）も加えた。氷をさらに加えた。氷スラリーとして約５分間撹拌した後、ＥｔＯＡｃを加えた。ビーカーでさらに数分撹拌した後、水を加えて氷の融解を促進した。混合物を分液漏斗に注ぎ、層を分配した。水層をＥｔＯＡｃで３回抽出した。ＥｔＯＡｃ抽出物を合わせて飽和したＫＨＳＯ４水溶液で２回、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で２回、ブラインで１回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、蒸発させて、淡いピンク色の粉末を得、これを酢酸エチルでトリチュレートして、化合物Ｉ（Ｃ）を淡いピンク色の固体（６．８ｇ、２８ｍｍｏｌ）として収率５７％で得た。ＨＰＬＣ／ＬＣＭＳ純度は、９０％より高かった。1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm 7.20 (s, 2H), 4.48 (s, 2H), 4.45 (s,
2H), 4.17-4.08 (m, 2H), 1.24 (t, 3H). LCMS (M+H)+: 243.2, 245.2.
【０２０８】
化合物１ｇの調製：２，４−ジクロロ−６−ヒドロキシフェニルボロン酸
【０２０９】
【化２２】
2011530580.tif 000028
化合物ａの調製：
３，５−ジクロロ−フェノール（７０ｇ、０．４３ｍｏｌ）の無水トルエン（１Ｌ）溶液に、Ｎ２雰囲気中にて０℃でＮａＨ（５１．５ｇ、１．２９ｍｏｌ）を少量ずつ加えた。加えた後、得られる混合物を室温に温め、２０分間撹拌した。次いで懸濁液を再び０℃に冷却し、ヨウ素（２５３．８１ｇ、９１．５ｍｏｌ）をゆっくりと加えた。次いで反応混合物を室温で終夜撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル／ＣＨ２Ｃｌ２  １：１）によって、出発材料が完全に消費されたことが示された。反応混合物を１Ｎ  ＨＣｌ（１Ｌ）で失活させ、エーテル（１Ｌ）で希釈した。分離した有機層をブライン（５００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮して、未精製の化合物２を得、これを、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル、石油エーテル／ＣＨ２Ｃｌ２  ５：１〜１：１）によって精製して、純粋な化合物ａ（８５ｇ、収率：６８％）を白色の固体として得た。
【０２１０】
化合物ｂの調製：
化合物ａ（６７ｇ、０．２３ｍｏｌ）、クロロメトキシ−エタン（３１．８ｇ、０．２９ｍｏｌ）、およびＣｓ２ＣＯ３（６３．７ｇ、０．２ｍｏｌ）をＤＭＦ（６００ｍＬ）に混ぜた混合物を、室温で２時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ  ２：１）によって、化合物ａが完全に消費されたことが示された。反応混合物をＨ２Ｏ（５００ｍＬ×３）およびブライン（５００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮して、未精製の化合物３を得、これを、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン  １：５０）によって精製して、純粋な化合物ｂ（８０ｇ、１００％）を黄色の固体として得た。
【０２１１】
化合物ｃの調製：
化合物ｂ（７７ｇ、０．２２ｍｏｌ）、４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン（５７ｇ、０．４４ｍｏｌ）、およびＥｔ３Ｎ（９２ｍＬ、０．６６ｍｏｌ）をジオキサン（５００ｍＬ）に溶かした溶液を、３０分間Ｎ２でパージした。次いで、得られる混合物に、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（２．７ｇ、０．０１１ｍｏｌ）およびビフェニル−２−イル−ジシクロヘキシル−ホスファン（８．５ｇ、０．０２２ｍｏｌ）を加えた。加えた後、反応混合物を８０℃で１．５時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ  ３０：１）によって、化合物ｂが完全に消費されたことが示された。得られる混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（５００ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（５００ｍＬ）、およびブライン（５００ｍＬ）で順次洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮して、未精製の化合物ｃを得、これを、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ  ５：１〜１：１）によって精製して、純粋な化合物ｃ（３５ｇ、収率：４５％）を褐色の固体として得た。
【０２１２】
化合物１ｇの調製：
化合物ｃ（３５ｇ、０．１ｍｏｌ）を無水ＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍＬ）に溶かした撹拌した溶液に、Ｎ２雰囲気中にて０℃でＢＢｒ３（１２５ｇ、０．５ｍｏｌ）を滴下した。２０分間撹拌した後、反応混合物を氷水中に注ぎ、３Ｎ  ＮａＯＨ（１００ｍＬ）によってｐＨ約１０に塩基性化し、有機層を分離した。分離した水層を１Ｎ  ＨＣｌ（５００ｍＬ）でｐＨ約３に調整し、ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ×３）で抽出し、有機層を合わせてブライン（１．０Ｌ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮して、化合物１ｇ（３９．７ｇ、収率：８０％）を白色の固体として得た。1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 6.875-6.878 (d, 1H), 6.727-6.737 (d, 1H).
【０２１３】
（実施例２）
２−アミノ−Ｎ−シクロプロピル−４−｛２，４−ジクロロ−６−［２−（４−クロロ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エトキシ］フェニル｝−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
化合物２ａ（４２ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）溶液に、炭酸カリウム（４６ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）、化合物２ｂ、および化合物２ｃ（８２ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を順次加えた。混合物をマイクロ波装置に入れて１２０℃で４０分間加熱した。反応混合物に水（１０ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）を加え、撹拌した。有機層を収集し、乾燥させ、濾過し、濃縮して、黄色がかった油状物を得た。この油状物残渣を、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物２（３１．５ｍｇ、収率５６％）を白色の固体として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.35 - 0.45 (m, 2 H), 1.84 (s, 1 H),
3.69 (d, J=13.39 Hz, 1 H), 3.95 (dd, J=13.01, 1.39 Hz, 1 H), 4.13 - 4.47 (m, 6
H), 6.36 (s, 1 H), 6.77 (s, 2 H), 7.27 (d, J=1.77 Hz, 1 H), 7.33 (d, J=1.77 Hz,
1 H), 7.35 (s, 1 H), 7.48 (s, 1 H).  LCMS (M+H)+ 510.  
元素分析：C21H20Cl3N7O2・1.25 H2Oの計算値: C, 47.47; H, 4.27; N, 18.45.  実測値:  C, 47.13; H, 4.01; N, 18.72.
【０２１４】
【化２３】
2011530580.tif 000029
【０２１５】
化合物２ａ：２−アミノ−４−（２，４−ジクロロ−６−ヒドロキシ−フェニル）−５，７−ジヒドロ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸シクロプロピルアミド
化合物１ｇ（６６８ｇ、３．２ｍｍｏｌ）および化合物ＩＩＩ（Ｂ）−１（１．１ｇ、３．１ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（３０ｍＬ）に溶かした溶液に、炭酸ナトリウム溶液（７．８ｍＬ、２Ｍ、９．２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１５分間Ｎ２でパージし、次いでテトラキス（トリフェニルホスフィノ）パラジウム（０）（３５５ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）を加えた。得られる混合物を８０℃で１２時間撹拌した。反応混合物をＣｅｌｉｔｅパッドで濾過し、ＭｅＯＨで十分に洗浄した。濾液を減圧によって濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ（２×５００ｍＬ）とブライン（１００ｍＬ）とに分配した。有機層を乾燥させ、濾過し、濃縮して、黄色の油状物を得た。この黄色の油状物をＣＨ２Ｃｌ２およびヘキサンで処理し、沈殿を収集し、ヘキサンで十分に洗浄して、化合物２ａ（１．１ｇ、９７％）を得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.33 - 0.44 (m, 2 H), 0.46 - 0.59 (m, 2 H), 0.80 - 0.91 (m, 1
H), 4.11 (br. s., 2 H), 4.39 (s, 2 H), 6.45 (d, J=2.78 Hz, 1 H), 6.74 - 6.84
(m, 2 H), 6.91 - 7.00 (m, 1 H), 7.14 (d, J=1.77 Hz, 1 H), 10.64 (br. s., 1 H).
LCMS (M+H)+: 380.
【０２１６】
【化２４】
2011530580.tif 000030
【０２１７】
化合物ＩＩＩ（Ｂ）−１：２−アミノ−４−ヨード−５，７−ジヒドロ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸シクロプロピルアミド
化合物Ｉ（Ｃ）（８．３６ｇ、２４．７ｍｍｏｌ）のＡＣＮ（２００ｍＬ）懸濁液に、室温でヨードトリメチルシラン（２５ｍＬ、１７６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を９０℃で３時間還流させた。反応混合物を室温に冷却し、次いでＭｅＯＨ（１０ｍＬ）で失活させ、減圧により濃縮した。残渣をＥｔ２Ｏ（１００ｍＬ）で処理し、沈殿を濾過によって収集し、エーテルで十分に洗浄して、４−ヨード−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−２−イルアミンのＨＩ塩を褐色の固体（１４．４ｇ、８１％）として得た。この粗生成物は、それ以上精製せずに次の反応にすぐに使用することができた。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 4.25 (t, J=4.80 Hz, 1 H), 4.29 - 4.47
(m, 3 H), 6.02 (br. s., 2 H), 9.42 (br. s., 1 H). LCMS (M+H)+: 263.
【０２１８】
４−ヨード−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−２−イルアミンＨＩ塩（２５９０ｍｇ、５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液に、化合物１０ａの（５ｍＬのＤＭＦ）溶液およびＴＥＡ（２．８ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を６５℃で２時間加熱した。反応液を室温に冷却した。反応混合物に水（５０ｍＬ）を加え、ＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）を加えて、水溶液を抽出した。有機層を合わせて乾燥させ、濾過し、濃縮して、黄褐色の油状物を得た。この油状物残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（勾配溶離  ０→１０％のＣＨ３ＯＨジクロロメタン溶液）によって精製して、化合物ＩＩＩ（Ｂ）−１を淡黄色の固体（１．１ｇ、収率６２％）として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.38 - 0.48 (m, 2 H), 0.51 - 0.64 (m,
2 H), 2.53 - 2.59 (m, 1 H), 4.24 (s, 2 H), 4.36 - 4.44 (m, 2 H), 6.56 (d,
J=2.78 Hz, 1 H), 6.96 - 7.10 (m, 2 H). LCMS (M+H)+: 346.0.
【０２１９】
【化２５】
2011530580.tif 000031
【０２２０】
化合物２ｂおよび２ｃの調製：４−クロロ−１−（２−ブロモ−エチル）−１Ｈ−ピラゾールおよび４−クロロ−１−（２−クロロ−エチル）−１Ｈ−ピラゾール
クロロピラゾール（５００ｍｇ、４．９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（８ｍＬ）溶液に、室温で水素化ナトリウム（２９３ｍｇ、７．３ｍｍｏｌ、６０％の鉱油中分散液）を加えた。混合物を室温で４０分間撹拌した。次いで、混合物にカニューレで１−ブロモ−２−クロロエタン（８５６ｍｇ、５．９ｍｍｏｌ、ＤＭＦ（１ｍＬ）溶液）を加えた。混合物を１２時間６０℃に加熱した。反応混合物に水（２０ｍＬ）を加え、ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）を加えて、水溶液を抽出した。有機層を合わせて乾燥させ、濾過し、濃縮して、蝋状の油状物残渣を得た。ＬＣ／ＭＳおよび１Ｈ−ＮＭＲによって、これが化合物２ｂと化合物２ｃの２種の生成物の混合物であることが示された（４９８ｍｇ、収率６１．９％）。
【０２２１】
（実施例３）
２−アミノ−Ｎ−ビシクロ［１．１．１］ペント−１−イル−４−｛２，４−ジクロロ−６−［２−（４−クロロ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エトキシ］フェニル｝−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
化合物３ａ（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液に、化合物１ｂの（３ｍＬのＤＭＦ）溶液およびＴＥＡ（１ｍＬ、７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を７０℃で３時間加熱した。反応液を室温に冷却した。反応混合物に水（２０ｍＬ）を加え、ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）を加えて、水溶液を抽出した。有機層を合わせて乾燥させ、濾過し、濃縮して、黄褐色の油状物を得た。分取ＨＰＬＣによって単離すると、化合物２（３４ｍｇ、０．０７２ｍｍｏｌ）が白色の固体として収率６３％で得られた。1H NMR (400 MHz, dmso-d6) δ ppm 1.89 - 1.97 (m, 6 H), 1.99 (s, 3 H), 2.26 - 2.39 (m, 1 H), 3.49
(d, J=12.38 Hz, 1 H), 3.82 (dd, J=12.76, 1.89 Hz, 1 H), 4.19 - 4.46 (m, 6 H),
6.01 (t, J=2.02 Hz, 1 H), 6.67 (s, 2 H), 6.82 (s, 1 H), 6.99 (s, 1 H), 7.02 (d,
J=1.52 Hz, 1 H), 7.19 (d, J=2.02 Hz, 1 H), 7.30 (d, J=1.26 Hz, 1 H).  LCMS
(M+H)+ 481.  
【０２２２】
【化２６】
2011530580.tif 000032
【０２２３】
化合物３ａ：４−［４−クロロ−２−メチル−６−（２−ピラゾール−１−イル−エトキシ）−フェニル］−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−２−イルアミン（１１０６４６−５４５）
化合物３ｂ（５８ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）溶液に、塩化水素（０．５ｍＬ、２ｍｍｏｌ、４Ｍジオキサン溶液）を加えた。混合物を室温で１２時間撹拌し、ＬＣ／ＭＳによってモニターした。溶媒を蒸発させて、化合物３ａを淡黄色の固体残渣として得た。この未精製残渣をそれ以上精製せずに化合物１の合成に使用した。
【０２２４】
【化２７】
2011530580.tif 000033
【０２２５】
化合物３ｂ：２−アミノ−４−［２，４−ジクロロ−６−（２−ピラゾール−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，７−ジヒドロ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
化合物３ｃ（９６ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液に、炭酸カリウム（１００ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）および１−（２−ブロモ−エチル）−１Ｈ−ピラゾール（文献の手順に従って調製：Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔｅｒｓ、２００６、８（１０）、ｐ．２０４３）（６７ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）を順次加えた。混合物を１２０℃で４０分間マイクロ波装置にかけた。反応混合物に水（１０ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）を加えて撹拌した。有機層を収集し、乾燥させ、濾過し、濃縮して、黄色がかった油状物を得た。油状物残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（勾配溶離  １００％のＥｔＯＡｃ）によって精製して、化合物３ｂ（６９．３ｍｇ、収率５８％）を油状物として得た。この油状物を凍結乾燥して、白色の固体とした。
1H NMR
(400 MHz, dmso-d6) δ
ppm 1.46 (s, 9 H), 1.99 (s, 3 H), 3.39 - 3.59 (m, 1 H), 3.77 (d, J=22.48 Hz, 1
H), 4.20 - 4.28 (m, 1 H), 4.29 - 4.34 (m, 3 H), 4.34 - 4.45 (m, 2 H), 6.03 (q,
J=2.02 Hz, 1 H), 6.70 (s, 2 H), 6.98 (s, 1 H), 7.03 (s, 1 H), 7.24 (dd, J=4.80,
2.02 Hz, 1 H), 7.31 (dd, J=15.92, 1.52 Hz, 1 H).  LCMS (M+H)+
472.
【０２２６】
【化２８】
2011530580.tif 000034
【０２２７】
化合物３ｃ：２−アミノ−４−（２，４−ジクロロ−６−ヒドロキシ−フェニル）−５，７−ジヒドロ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
化合物３ｄ（３００ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）および化合物１ｆ（５８３ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）に混ぜた混合物に、炭酸ナトリウム（５１２ｍｇ、４．８ｍｍｏｌ）の入った２．４ｍＬのＨ２Ｏを加えた。混合物を数回窒素でパージし、次いでテトラキス（トリフェニルホスフィノ）パラジウム（０）（１１６ｍｇ）を加えた。反応混合物および得られる溶液を、マイクロ波装置に入れて１２０℃で４０分間加熱した。反応混合物に水（５０ｍＬ）を加えて、反応を失活させた。次いでＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）を加えて、水溶液を抽出した。有機層を合わせて乾燥させ、濾過し、濃縮して、褐色の油状物を得た。この油状物残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（勾配溶離  ６０→７０％のＥｔＯＡｃヘキサン溶液）によって精製して、化合物３ｃ（３６１ｍｇ、収率５９％）を淡褐色の泡沫として得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.38 - 1.46 (m, 9 H), 2.03 (s, 3 H),
4.05 - 4.48 (m, 4 H), 6.71 (s, 2 H), 6.80 (s, 1 H), 6.82 (s, 1 H), 10.07 (s, 1
H).  LCMS (M+H)+ 378.
【０２２８】
【化２９】
2011530580.tif 000035
【０２２９】
化合物３ｄ：５−クロロ−２，３−ジメチル−フェノールボロン酸
【０２３０】
【化３０】
2011530580.tif 000036
ステップ＃１手順：氷−ＮａＣｌ浴に浸した、出発材料（ＳＭ）（５．４６ｍＬ、４５ｍｍｏｌ、１．０当量）をＤＣＭ（３００ｍＬ）に溶かした透明な溶液に、Ｉｐｙ２ＢＦ４（２０．３ｇ、５３．４ｍｍｏｌ、１．２０当量）を加えた。得られた溶液を、浴が０℃の状態で撹拌し、次いでゆっくりと室温に温めた。反応液は、橙色の溶液から橙色の懸濁液へとゆっくりと変わった。次いで反応液を室温で終夜撹拌した。反応液をＤＣＭ（２００ｍＬ）で希釈し、飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液で洗浄した。有機層を収集し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムにかけて、１０．５０ｇの所望の生成物を褐色の固体として収率８８％で得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm 4.05 (br. s., 2 H), 7.02 (d, J=2.27
Hz, 1 H), 7.50 (d, J=2.27 Hz, 1 H).
【０２３１】
ステップ＃２手順：出発材料（１．００ｇ、３．７４ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＣｕＩ（７３ｍｇ、０．３７４ｍｍｏｌ、０．１０当量）、１，１０−フェナントロリン（１３９ｍｇ、０．７４８ｍｍｏｌ、０．２０当量）、Ｃｓ２ＣＯ３（２．４９ｇ、７．４８ｍｍｏｌ、２．０当量）、ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）の混合物を、マイクロ波条件下（１２０℃、２時間、撹拌）で反応させた。ＬＣ−ＭＳによって、反応が完了しており、化合物の大半が所望の生成物であることが示された。各回を１グラムの規模にして、反応を１０回繰り返した。これら４つのすべての反応液を合わせ、ＭｅＯＨおよびＥｔＯＡｃで希釈した。混合物をセライトに通して、不溶性物質を除去した。黒色の濾液を減圧下で濃縮した。残渣を、９：１〜４：１のヘプタン／ＥｔＯＡｃを使用しながらシリカゲルのカラムにかけて、４．０ｇ（全４回）の所望の生成物を褐色の固体として収率６２．３％で得た。
【０２３２】
ステップ＃３手順：０℃で、出発材料（２．６８ｇ、１５．６ｍｍｏｌ、１．０当量）を２５ｍＬの濃ＨＣｌ（３７％）に懸濁させた懸濁液に、ＮａＮＯ２（２．２７ｇ、３１．２ｍｍｏｌ、２．０当量）を２５ｍＬの水に溶かした溶液を加えた。０℃で１０分間撹拌した後、橙色の懸濁液が得られ、ジアゾニウム塩化合物が生成した。ジアゾニウム塩にＫＩ（１０．４ｇ、６２．５ｍｍｏｌ、４．０当量）の水（５０ｍＬ）溶液を加えた。加えている間、多量の固体材料が生成した。次いで反応液を室温で終夜撹拌した。室温で終夜撹拌した後、反応液を３００ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈した。有機層を収集し、１．０ＭのＮａ２Ｓ２Ｏ３で洗浄した。次いで有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をＩＳＣＯのカラムにかけて（１０％のＥｔＯＡｃヘプタン溶液）、３．３０ｇの所望の生成物を収率７５％で黄色の固体として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm 2.45 (s, 3 H), 3.88 (s, 3 H), 6.64 (d,
J=1.76 Hz, 1 H), 6.91 (d, J=1.76 Hz, 1 H).
【０２３３】
ステップ＃４手順：マイクロ波対応２０ｍＬ容バイアルに、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（３９．７ｍｇ、０．１７７ｍｍｏｌ、０．１０当量）、出発材料（５００ｍｇ、１．７７ｍｍｏｌ、１．０当量）、ジオキサン（１２ｍＬ）、ピナコールボラン（０．５１４ｍＬ、３．５４ｍｍｏｌ、２．０当量）、Ｅｔ３Ｎ（０．７４ｍＬ、５．３１ｍｍｏｌ、３．０当量）、およびホスフィン配位子（１２４ｍｇ、０．３５４ｍｍｏｌ、０．２０当量）を加えた。混合物をＮ２でパージし、マイクロ波装置に入れて１２０℃で３０分間反応させた。反応液をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、セライトで濾過した。濾液をブライン（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ、濃縮した。残渣を、１０％のＥｔＯＡｃ／ヘプタンを使用しながらＩＳＣＯのカラムにかけて、４．００ｇの所望の生成物を収率８０％で黄白色の固体として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm 1.38 (s, 12 H), 2.32 (s, 3 H), 3.76
(s, 3 H), 6.64 (d, J=1.51 Hz, 1 H), 6.76 (d, J=1.01 Hz, 1 H).
【０２３４】
ステップ＃５手順：出発材料（１．５０ｇ、５．０２ｍｍｏｌ）を２０の無水のジクロロメタンに溶かした０℃の溶液に、三臭化ホウ素（１２．６ｍＬ、１２．６ｍｍｌ、２．５当量、１．０Ｍ  ＤＣＭ溶液）を５分間かけてゆっくりと加えた。０℃で１５分間撹拌した後、ＨＰＬＣによれば反応が完了し、２０ｍＬの氷水中に注いだ。二相性の混合物を激しく撹拌し、１ＭのＮａＯＨ（１０ｍＬ）を用いて水相をｐＨ＝約１０とした。有機層を分離し、廃棄した。水相を１ＭのＨＣｌでｐＨ＝約３に酸性化し、白色の沈殿を発生させ、濾過し、室内真空下にて６０℃で乾燥させて、５００ｍｇ（収率５３％）の所望の生成物を白色の固体として得た。
【０２３５】
（実施例４）
２−アミノ−Ｎ−ビシクロ［１．１．１］ペント−１−イル−４−｛２，４−ジクロロ−６−［２−（４−フルオロ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エトキシ］フェニル｝−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
化合物４ａ（２００ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、化合物１ｂの（３ｍＬのＤＭＦ）溶液およびＴＥＡ（１ｍＬ、７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を７０℃で３時間加熱した。反応液を室温に冷却した。反応混合物に水（３０ｍＬ）を加え、ＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）を加えて、水溶液を抽出した。有機層を合わせて乾燥させ、濾過し、濃縮して、黄褐色の油状物を得た。この油状物残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（勾配溶離  ０→１０％のＣＨ３ＯＨ  ＥｔＯＡｃ溶液）によって精製して、化合物４（１６１ｍｇ、収率６３．５％）を油状物として得た。この油状物を凍結乾燥して、白色の固体とした。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.94 (s, 6 H), 2.34 (s, 1 H), 3.65 (d,
J=13.14 Hz, 1 H), 3.93 (d, J=13.14 Hz, 1 H), 4.20 - 4.28 (m, 2 H), 4.30 - 4.43
(m, 4 H), 6.79 (s, 2 H), 6.89 (br. s., 1 H), 7.23 - 7.29 (m, 2 H), 7.34 (d,
J=1.77 Hz, 1 H), 7.36 (d, J=4.55 Hz, 1 H).  LCMS (M+H)+
519.  
元素分析：C23H22Cl2FN7O2・1 H2Oの計算値: C, 51.50; H, 4.51; N, 18.28.  実測値:  C, 51.81; H, 4.34; N, 18.02.
【０２３６】
【化３１】
2011530580.tif 000037
【０２３７】
化合物４ａ：４−｛２，４−ジクロロ−６−［２−（４−フルオロ−ピラゾール−１−イル）−エトキシ］−フェニル｝−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−２−イルアミン
化合物４ｂ（２４９ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＯＨ（１０ｍＬ）溶液に、塩化水素（２．４ｍＬ、９．８ｍｍｏｌ、４Ｍジオキサン溶液）を加えた。混合物を室温で１２時間撹拌し、ＬＣ／ＭＳによってモニターした。溶媒を蒸発させて、化合物４ａを淡黄色の固体残渣として得た。この未精製残渣をそれ以上精製せずに化合物１の合成に使用した。
【０２３８】
【化３２】
2011530580.tif 000038
【０２３９】
化合物４ｂ：２−アミノ−４−｛２，４−ジクロロ−６−［２−（４−フルオロ−ピラゾール−１−イル）−エトキシ］−フェニル｝−５，７−ジヒドロ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
化合物１ｄ（２７０ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（８ｍＬ）溶液に、炭酸カリウム（２８２ｍｇ、２ｍｍｏｌ）および化合物４ｃ（６７４ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）を順次加えた。混合物をマイクロ波装置に入れて１２０℃で４０分間加熱した。反応混合物に水（２０ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）を加えて撹拌した。有機層を収集し、乾燥させ、濾過し、濃縮して、黄色がかった油状物を得た。この油状物残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（勾配溶離  ９０→１００％のＥｔＯＡｃヘキサン溶液）によって精製して、化合物４ｂ（１９４ｍｇ、収率５６％）を淡黄色の泡沫として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.34 - 1.50 (m, 9 H), 3.48 - 3.64 (m,
J=6.06 Hz, 1 H), 3.79 - 3.97 (m, 1 H), 4.21 - 4.31 (m, 2 H), 4.30 - 4.50 (m, 4
H) 6.83 (s, 2 H), 7.27 (s, 1 H), 7.30 - 7.38 (m, 2 H), 7.42 (dd, J=10.86, 4.55
Hz, 1 H).  LCMS (M+H)+ 509.
【０２４０】
【化３３】
2011530580.tif 000039
【０２４１】
化合物４ｃおよび４ｄの合成：４−フルオロ−１−（２−ブロモ−エチル）−１Ｈ−ピラゾールおよび４−フルオロ−１−（２−クロロ−エチル）−１Ｈ−ピラゾール
フルオロピラゾール（１０００ｍｇ、１１．６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（７ｍＬ）溶液に、室温で水素化ナトリウム（７００ｍｇ、１７．４ｍｍｏｌ、６０％の鉱油中分散液）を加えた。混合物を室温で４０分間撹拌した。次いで混合物にカニューレで１−ブロモ−２−クロロエタン（２０００ｍｇ、１３．９ｍｍｏｌ、ＤＭＦ（１ｍＬ）溶液）を加えた。混合物を１２時間６０℃に加熱した。反応混合物に水（５０ｍＬ）を加え、ＴＨＦ（２×２００ｍＬ）を加えて、水溶液を抽出した。有機層を合わせて乾燥させ、濾過し、濃縮して、蝋状の油状物残渣を得た。ＬＣ／ＭＳおよび１Ｈ−ＮＭＲによって、これが化合物４ｃと化合物４ｄの２種の生成物の混合物であることが示された（１０００ｍｇ、収率５７．４％）。
【０２４２】
フルオロピラゾールの合成：フルオロピラゾールは、Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  １９９５、３、ｐ２３９に記載の方法の変法によって調製および単離した。
【０２４３】
【化３４】
2011530580.tif 000040
ステップ＃１手順：
化合物１（７５０ｇ、５．７ｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（９４８ｍＬ、６．８１６ｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（２Ｌ）に溶かした溶液に、０℃でＴｓＣｌ（１２９５．４ｇ、６．８ｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られる混合物を室温で終夜撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝５：１）によって反応の完了が示された。ブライン（５Ｌ）を加え、混合物をＣＨ２Ｃｌ２（３×１０Ｌ）で抽出した。有機層を合わせてブライン（２×５Ｌ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮して、粗生成物を得、これを、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ  ２０：１〜５：１）によって精製して、化合物２（１５００ｇ、９２％）を白色の固体として得た。
【０２４４】
ステップ＃２手順：
化合物２（１００ｇ、０．３５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１．５Ｌ）溶液に、−８５℃でｎ−ＢｕＬｉ（３３６ｍｌ、０．８ｍｏｌ）を滴下添加した。次いで混合物を−８５℃でもう１０分間撹拌した。反応混合物を３Ｎ  ＨＣｌ水溶液（３００ｍＬ）で失活させ、室温に温めた。混合物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液でｐＨ＝７に塩基性化し、Ｅｔ２Ｏ（３×５Ｌ）で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮して、化合物３（５３．８４ｇ、５８％）を褐色の固体として得、これをそのまま次のステップに使用した。
【０２４５】
ステップ＃３手順：
ＮＨＥｔ２（５０ｇ、０．７ｍｏｌ）、ＴＢＡＦ（５６．３ｍＬ、０．０５６３９ｍｏｌ）、およびＥｔ３Ｎ（７８ｍＬ、０．６ｍｏｌ）をＣＨ３ＣＮ（３００ｍＬ）に溶かした溶液に、０℃で化合物３（１５０ｇ、０．５６３９ｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（５００ｍＬ）溶液を加えた。得られる溶液を室温で終夜撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝１：１）によって反応の完了が示された。混合物をブライン（３００ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を合わせてＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮して、粗生成物を得、これをカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝１：１）によって精製して、化合物４（６０ｇ、７３％）を褐色の油状物として得た。
【０２４６】
ステップ＃４手順：
化合物４（１００ｇ、０．７ｍｏｌ）およびＮＨ２ＮＨ２．２ＨＣｌ（７９．６ｇ、０．８ｍｏｌ）をＥｔＯＨ（２００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１５０ｍＬ）に混ぜた混合物を７８℃で４時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝１：１）によって反応の完了が示された。反応混合物を室温に冷ました。混合物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液でｐＨ＝７に塩基性化し、ＥｔＯＡｃ（３×２Ｌ）で抽出した。有機層を合わせてＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮して、粗生成物を得、これをカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝１：１）によって精製して、フルオロピラゾール（３６．２５ｇ、６１％）を褐色の固体として得た。
1H NMR
(400 MHz, dmso-d6) δ
ppm 7.64 (br. s., 2 H), 12.61 (br. s., 1 H).
【０２４７】
（実施例５）
２−アミノ−Ｎ−ビシクロ［１．１．１］ペント−１−イル−４−｛２，４−ジクロロ−６−［２−（４−フルオロ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エトキシ］フェニル｝−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
化合物４ａ（１９５ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４ｍＬ）溶液に、化合物５ａの（３ｍＬのＤＭＦ）溶液およびＴＥＡ（１ｍＬ、７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を７０℃で３時間加熱した。反応液を室温に冷却した。反応混合物に水（３０ｍＬ）を加え、ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）を加えて、水溶液を抽出した。有機層を合わせて乾燥させ、濾過し、濃縮して、黄褐色の油状物を得た。油状物残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（勾配溶離  ０→１０％のＣＨ３ＯＨ  ＥｔＯＡｃ溶液）によって精製して、化合物５（１９２ｍｇ、収率７５．５％）を油状物として得た。この油状物を凍結乾燥して、白色の固体とした。1H NMR (400 MHz, dmso-d6) δ ppm 3.66 (d, J=13.14 Hz, 1 H), 3.82 (br.
s., 2 H), 3.98 (d, J=12.63 Hz, 1 H), 4.26 (d, J=4.04 Hz, 2 H), 4.30 - 4.38 (m,
2 H), 4.42 (br. s., 2 H), 6.83 (s, 2 H), 6.99 (s, 1 H), 7.23 (d, J=4.29 Hz, 1
H), 7.29 (d, J=1.52 Hz, 1 H), 7.35 (d, J=1.77 Hz, 1 H), 7.37 (d, J=4.55 Hz, 1
H).  LCMS (M+H)+ 534.  
元素分析：C20H17Cl2F4N7O2・0.25 H2Oの計算値: C, 44.58; H, 3.27; N, 18.20.  実測値:  C, 44.87; H, 3.34; N, 17.86.
【０２４８】
【化３５】
2011530580.tif 000041
【０２４９】
化合物５ａ：１−［（Ｚ）−メチルイミノメチル］−３−（２，２，２−トリフルオロ−エチル）−１−ビニル−尿素
２，２，２−トリフルオロエチルアミン（７２ｍｇ、１ｍｍｏｌ）および１、１’−カルボニルジイミダゾール（１３５ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（４ｍＬ）に溶かした溶液（無色透明な溶液）に、ＴＥＡ（１．３ｍＬ、０．８ｍｍｏｌ）を加えた。化合物５ａをさらに単離せずに、この溶液を化合物５の合成に使用した。
【０２５０】
（実施例６）
２−アミノ−Ｎ−ビシクロ［１．１．１］ペント−１−イル−４−｛２，４−ジクロロ−６−［２−（４−フルオロ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エトキシ］フェニル｝−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
化合物６ａ（７１ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）溶液に、炭酸カリウム（１２０ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）および化合物６ｂ（８９ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）を順次加えた。混合物をマイクロ波装置に入れて１００℃で６０分間加熱した。反応混合物に水（２０ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）を加えて撹拌した。有機層を収集し、乾燥させ、濾過し、濃縮して、黄色がかった油状物を得た。この油状物残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物６（３０ｍｇ、収率３３％）を白色の固体として得た。
1H NMR
(400 MHz, DMSO-d6) δ
ppm 1.56 (t, J=18.95 Hz, 3 H), 3.43 - 3.55 (m, 2 H), 3.69 (d, J=13.14 Hz, 1 H),
4.00 (d, J=12.88 Hz, 1 H), 4.20 - 4.28 (m, 2 H), 4.31 - 4.37 (m, 2 H), 4.40 -
4.47 (m, 2 H), 6.69 (s, 1 H), 6.81 (s, 2 H), 7.26 (d, J=4.29 Hz, 1 H), 7.28 (d,
J=1.77 Hz, 1 H,) 7.34 (d, J=1.77 Hz, 1 H), 7.36 (d, J=4.80 Hz, 1 H).  LCMS
(M+H)+ 530.  元素分析：C21H20Cl2F3N7O2・1.75 H2Oの計算値: C, 44.89; H, 4.22; N, 17.45.  実測値:  C, 45.22; H, 3.90; N, 17.12. 
【０２５１】
【化３６】
2011530580.tif 000042
【０２５２】
化合物６ａ：２−アミノ−４−（２，４−ジクロロ−６−ヒドロキシ−フェニル）−５，７−ジヒドロ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸（２，２−ジフルオロプロピル）−アミド
化合物１ｇ（１．０７ｇ、５．１７ｍｍｏｌ）および化合物ＩＩＩ（Ｂ）−２（１．９８ｇ、５．１７ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（２５ｍＬ）に溶かした溶液に、炭酸ナトリウム溶液（７．８ｍＬ、２Ｍ、１５．５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１５分間Ｎ２でパージし、次いでテトラキス（トリフェニルホスフィノ）パラジウム（０）（５９７ｍｇ、０．５１７ｍｍｏｌ）を加えた。得られる混合物を８５℃で３時間撹拌した。反応混合物をＣｅｌｉｔｅパッドで濾過し、ＭｅＯＨで十分に洗浄した。濾液を減圧によって濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ（２×５００ｍＬ）とブライン（１００ｍＬ）とに分配した。有機層を乾燥させ、濾過し、濃縮して、褐色の油状物を得た。分取ＨＰＬＣによって単離して、化合物６ａを白色の固体（３０５ｍｇ、収率１４％）として得た。
1H NMR
(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.54 (t, J=19.07 Hz, 3 H), 3.46 (br. s., 2 H), 4.21 (br. s., 2
H), 4.47 (s, 2 H), 6.73 - 6.84 (m, 2 H), 6.84 - 6.89 (m, 1 H), 6.97 (d, J=1.77
Hz, 1 H), 7.16 (d, J=2.02 Hz, 1 H), 10.69 (br. s., 1 H). LCMS (M+H)+:
418.0, 420.0.
【０２５３】
【化３７】
2011530580.tif 000043
【０２５４】
化合物ＩＩＩ（Ｂ）−２：２−アミノ−４−ヨード−５，７−ジヒドロ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸（２，２−ジフルオロ−プロピル）−アミド
化合物Ｉ（Ｃ）（８．３６ｇ、２４．７ｍｍｏｌ）のＡＣＮ（２００ｍＬ）懸濁液に、室温でヨードトリメチルシラン（２５ｍＬ、１７６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を９０℃で３時間還流させた。反応混合物を室温に冷却し、次いでＭｅＯＨ（１０ｍＬ）で失活させ、減圧によって濃縮した。残渣をＥｔ２Ｏ（１００ｍＬ）で処理し、沈殿を濾過によって収集し、エーテルで十分に洗浄して、４−ヨード−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−２−イルアミンのＨＩ塩を褐色の固体（１４．４ｇ、８１％）として得た。この粗生成物は、それ以上精製せずに次の反応にすぐに使用することができた。
1H NMR
(400 MHz, DMSO-d6) δ
ppm 4.25 (t, J=4.80 Hz, 1 H), 4.29 - 4.47 (m, 3 H), 6.02 (br. s., 2 H), 9.42
(br. s., 1 H). LCMS (M+H)+: 263.0.
【０２５５】
４−ヨード−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−２−イルアミンＨＩ塩（５９０ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、化合物９ａの（２ｍＬのＤＭＦ）溶液およびＴＥＡ（０．６ｍＬ、４．６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を６５℃で２時間加熱した。反応液を室温に冷却した。反応混合物に水（５０ｍＬ）を加え、ＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）を加えて、水溶液を抽出した。有機層を合わせて乾燥させ、濾過し、濃縮して、黄褐色の油状物を得た。この油状物残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（勾配溶離  ０→１００％のＥｔＯＡｃジクロロメタン溶液）によって精製して、化合物ＩＩＩ（Ｂ）−２を白色の固体（１９５ｍｇ、収率８２％）として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.50 - 1.60 (m, 3 H), 3.51 (br. s., 2
H), 4.32 (s, 2 H), 4.46 (d, J=6.06 Hz, 2 H). LCMS (M+H)+: 384.0.
【０２５６】
【化３８】
2011530580.tif 000044
【０２５７】
化合物６ｂ：メタンスルホン酸２−（４−フルオロ−ピラゾール−１−イル）−エチルエステル
化合物６ａ（１３．４ｇ、９８ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルアミン（３４．３ｍＬ、１９６ｍｍｏｌ）、および４−（ジメチルアミノ）−ピリジン（１．２ｇ、９．７８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２４５ｍＬ）に溶かした、氷浴中の溶液に、塩化メタンスルホニル（１６．８ｇ、１１．４ｍＬ、１４７ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温に温め、室温で２時間撹拌した。水（５０ｍＬ）を加えて反応を失活させた。有機層を乾燥させ、濾過し、濃縮して、褐色の油状物を得た。この油状物残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（０→６０％のＥｔＯＡｃヘキサン溶液）によって精製して、化合物６ｂ（１９．５ｇ、収率９６％）を黄色がかった油状物として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm 2.89 (s, 3 H), 4.33 - 4.38 (m, 2 H),
4.53 - 4.59 (m, 2 H), 7.38 (d, J=1.52 Hz, 1 H), 7.40 (d, J=1.01 Hz, 1 H).
【０２５８】
【化３９】
2011530580.tif 000045
【０２５９】
化合物６ｃの調製：２−（４−フルオロ−ピラゾール−１−イル）−エタノール
フルオロピラゾール（２０ｇ、０．２３ｍｏｌ）のＤＭＦ（２００ｍＬ）溶液に、０℃で水素化ナトリウム（１３．８ｇ、０．３５ｍｏｌ、６０％鉱油中分散液）を加えた。混合物を室温で１時間撹拌し、次いで２−ブロモ−エタノール（４３ｇ、０．３５ｍｏｌ）を０℃で滴下した。得られる混合物を４０℃で１２時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝１：１）によって反応の完了が示された。混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（２００ｍＬ）で失活させた。次いで真空中でＤＭＦを除去し、残渣をＥｔ２Ｏ（１０００ｍＬ）とＨ２Ｏ（１０００ｍＬ）とに分配した。水層をさらなるＥｔ２Ｏ（４×１Ｌ）で抽出した。有機層を合わせてＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮して、化合物６ｃ（２０ｇ、６６％）を黄色の油状物として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.69 (t, J=5.56 Hz, 2 H), 4.04 (t,
J=5.56 Hz, 2 H), 4.90 (br. s., 1 H), 7.43 (d, J=4.29 Hz, 1 H), 7.81 (d, J=4.55
Hz, 1 H).
【０２６０】
【化４０】
2011530580.tif 000046
【０２６１】
（実施例７）
２−アミノ−Ｎ−ビシクロ［１．１．１］ペント−１−イル−４−｛４−クロロ−２−［２−（４−フルオロ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エトキシ］−６−メチルフェニル｝−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
化合物７ａ（１８６ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、化合物１ｂの（３ｍＬのＤＭＦ）溶液およびＴＥＡ（１ｍＬ、７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を７０℃で３時間加熱した。反応液を室温に冷却した。反応混合物に水（５０ｍＬ）を加え、ＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）を加えて、水溶液を抽出した。有機層を乾燥させ、濾過し、濃縮して、黄褐色の油状物を得た。この油状物残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（勾配溶離  ０→１０％のＣＨ３ＯＨ  ＥｔＯＡｃ溶液）によって精製して、化合物７（１９５ｍｇ、収率８２％）を油状物として得た。この油状物を凍結乾燥して、白色の固体とした。1H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 2.05 (s, 6 H), 2.06 (s, 3 H),
2.37 (s, 1 H), 3.71 (d, J=12.63 Hz, 1 H), 3.96 (dd, J=13.01, 1.39 Hz, 1 H,)
4.23 - 4.36 (m, 4 H), 4.43 - 4.55 (m, 2 H), 6.97 (s, 1 H), 6.98 (s, 1 H), 7.24
(d, J=4.55 Hz, 1 H), 7.26 (d, J=4.29 Hz, 1 H).  LCMS (M+H)+
499.
元素分析：C24H25ClFN7O2・0.25 H2Oの計算値: C, 57.89; H, 5.06; N, 19.69.  実測値:  C, 57.31; H, 5.11; N, 19.44.
【０２６２】
【化４１】
2011530580.tif 000047
【０２６３】
化合物７ａ：４−｛４−クロロ−２−［２−（４−フルオロ−ピラゾール−１−イル）−エトキシ］−６−メチル−フェニル｝−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−２−イルアミン
化合物７ｂ（２３４ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＯＨ（１０ｍＬ）溶液に、塩化水素（２．４ｍＬ、９．５ｍｍｏｌ、４Ｍジオキサン溶液）を加えた。混合物を室温で１２時間撹拌し、ＬＣ／ＭＳによってモニターした。溶媒を蒸発させて、化合物７ａを淡黄色の固体残渣として得た。この未精製残渣をそれ以上精製せずに化合物７の合成に使用した。
【０２６４】
【化４２】
2011530580.tif 000048
【０２６５】
化合物７ｂ：２−アミノ−４−｛４−クロロ−２−［２−（４−フルオロ−ピラゾール−１−イル）−エトキシ］−６−メチル−フェニル｝−５，７−ジヒドロ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
化合物３ｃ（８４ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液に、炭酸カリウム（１５４ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）および化合物６ｂ（１２０ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を順次加えた。混合物をマイクロ波装置に入れて１００℃で４０分間加熱した。反応混合物に水（１０ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）を加えて撹拌した。有機層を収集し、乾燥させ、濾過し、濃縮して、黄色がかった油状物を得た。この油状物残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（９０→１００％  ＥｔＯＡｃヘキサン溶液）によって精製して、化合物７ｂ（６６ｍｇ、収率６０％）を淡黄色の泡沫として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.44 (s, 9 H), 2.00 (s, 3 H), 3.50
(dd, J=23.49, 13.39 Hz, 1 H), 3.83 (dd, J=25.52, 12.88 Hz, 1 H), 4.17 - 4.31
(m, 4 H), 4.33 - 4.41 (m, 2 H), 6.70 (s, 2 H), 6.99 (s, 1 H), 7.04 (s, 1 H),
7.28 (dd, J=18.44, 4.29 Hz, 1 H), 7.42 (dd, J=10.74, 4.42 Hz, 1 H).  LCMS
(M+H)+ 489.元素分析：C23H26ClFN6O3・0.5 H2O・0.25 CH3CO2CH2CH3の計算値: C, 55.44; H, 5.62; N, 16.16.  実測値:  C, 55.78; H, 5.49; N, 15.93.
【０２６６】
【化４３】
2011530580.tif 000049
【０２６７】
（実施例８）
２−アミノ−４−｛４−クロロ−２−［２−（４−フルオロ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エトキシ］−６−メチルフェニル｝−Ｎ−（２，２，２−トリフルオロエチル）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
化合物７ａ（５０４ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、化合物５ａの（５ｍＬのＤＭＦ）溶液およびＴＥＡ（２ｍＬ、１４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を７０℃で３時間加熱した。反応液を室温に冷却した。反応混合物に水（５０ｍＬ）を加え、ＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）を加えて、水溶液を抽出した。有機層を合わせて乾燥させ、濾過し、濃縮して、黄褐色の油状物を得た。この油状物残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（勾配溶離  ０→１０％のＣＨ３ＯＨ  ＥｔＯＡｃ溶液）によって精製して、化合物８（４７０ｍｇ、収率７０％）を油状物として得た。この油状物を凍結乾燥して、白色の固体とした。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.01 (s, 3 H), 3.61 (d, J=12.88 Hz, 1
H), 3.75 - 3.85 (m, 2 H), 3.91 (d, J=12.63 Hz, 1 H), 4.26 (dd, J=12.88, 3.79
Hz, 4 H), 4.36 - 4.44 (m, 2 H), 6.73 (s, 2 H), 6.92 (s, 1 H), 7.01 (s, 1 H),
7.06 (s, 1 H), 7.23 (d, J=4.04 Hz, 1 H), 7.37 (d, J=4.55 Hz, 1 H).  LCMS
(M+H)+ 514.
元素分析：C21H20ClF4N7O2・1 H2Oの計算値: C, 47.42; H, 4.17; N, 18.43.  実測値:  C, 47.54; H, 3.85; N, 18.13.
【０２６８】
【化４４】
2011530580.tif 000050
【０２６９】
（実施例９）
２−アミノ−４−｛４−クロロ−２−［２−（４−フルオロ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エトキシ］−６−メチルフェニル｝−Ｎ−（２，２−ジフルオロプロピル）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
化合物７ａ（１３６ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、化合物９ａの（３ｍＬのＤＭＦ）溶液およびジイソプロピルエチルアミン（１ｍＬ）を加えた。混合物を７５℃で２時間加熱した。反応液を室温に冷却した。反応混合物に水（５０ｍＬ）を加え、ＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）を加えて、水溶液を抽出した。有機層を合わせて乾燥させ、濾過し、濃縮して、黄褐色の油状物を得た。この油状物残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（勾配溶離  ０→１０％のＣＨ３ＯＨ  ＥｔＯＡｃ溶液）によって精製して、化合物９（１７１ｍｇ、収率９６％）を油状物として得た。この油状物を凍結乾燥して、白色の固体とした。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.56 (t, J=18.95 Hz, 3 H), 2.01 (s, 3
H), 3.40 - 3.52 (m, 2 H), 3.65 (d, J=13.14 Hz, 1 H), 3.92 (d, J=12.63 Hz, 1 H),
4.26 (dd, J=11.62, 3.28 Hz, 4 H), 4.37 - 4.45 (m, 2 H) 6.66 (s, 1 H), 6.70 (s,
2 H) 7.01 (s, 1 H), 7.06 (s, 1 H), 7.26 (d, J=4.04 Hz, 1 H), 7.36 (d, J=4.55
Hz, 1 H).  LCMS (M+H)+ 511.
元素分析：C22H23ClF3N7O2・0.25 H2Oの計算値: C, 51.37; H, 4.60; N, 19.06.  実測値:  C, 51.34; H, 4.65; N, 18.70.
【０２７０】
【化４５】
2011530580.tif 000051
【０２７１】
化合物９ａ：イミダゾール−１−カルボン酸（２，２−ジフルオロ−プロピル）−アミド
２，２−ジフルオロプロピルアミン塩酸塩（８２ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）および１，１’−カルボニルジイミダゾール（１１４ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３ｍＬ）に溶かした溶液（無色透明な溶液）に、ＴＥＡ（１．３ｍＬ、０．８ｍｍｏｌ）を加えた。化合物９をさらに単離せずに、この溶液を化合物５の合成に使用した。
【０２７２】
（実施例１０）
２−アミノ−Ｎ−シクロプロピル−４−｛２，４−ジクロロ−６−［２−（４−フルオロ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エトキシ］フェニル｝−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
化合物１０は、イミダゾール−１−カルボン酸（２，２−ジフルオロ−プロピル）−アミド（化合物９ａ）の代わりにイミダゾール−１−カルボン酸シクロプロピルアミド（１０ａ）を用いたことを除き、実施例９と同様にして調製した。化合物１０は、白色の固体（２６ｍｇ、４０％）として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.36 - 0.44 (m, 2 H), 0.49 - 0.63 (m,
2 H), 1.19 - 1.28 (m, 1 H), 3.65 (d, J=13.14 Hz, 1 H), 3.93 (d, J=13.14 Hz, 1
H), 4.21 - 4.28 (m, 2 H), 4.29 - 4.44 (m, 4 H), 6.35 (s, 1 H), 6.78 (s, 2 H),
7.20 - 7.29 (m, 2 H), 7.33 (d, J=1.77 Hz, 1 H), 7.35 (d, J=4.55 Hz, 1 H). 
LCMS (M+H)+ 493.
元素分析：C21H20Cl2FN7O2・1.25 H2O・0.25 CH3COOHの計算値: C, 48.74; H, 4.47; N, 18.50.  実測値:  C, 48.75; H, 4.08; N, 18.24.
【０２７３】
【化４６】
2011530580.tif 000052
【０２７４】
（実施例１１）
２−アミノ−４−｛２，４−ジクロロ−６−［２−（４−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エトキシ］フェニル｝−Ｎ−（２，２−ジフルオロプロピル）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
６ａ（１４７ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（４００ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ（３ｍＬ）に混ぜた混合物に、化合物１１ｂ（１３６ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）を加えた。得られる混合物を９０℃で１２時間加熱した。混合物に飽和炭酸ナトリウム溶液（５０ｍＬ）を加え、ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）を加えて、水溶液を抽出した。有機層を合わせて乾燥させ、濾過し、濃縮して、褐色の油状物を得た。分取ＨＰＬＣによって単離すると、化合物１１（１８ｍｇ、２０％）が得られた。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.56 (t, J=19.07 Hz, 3 H), 3.48 (d,
J=6.06 Hz, 1 H), 3.67 (br. s., 1 H), 3.92 - 4.08 (m, 2 H), 4.36 - 4.50 (m, 6
H), 6.70 (d, J=2.02 Hz, 1 H), 6.78 (s, 2 H), 7.31 (d, J=1.77 Hz, 1 H), 7.34 (d,
J=1.77 Hz, 1 H), 7.81 (s, 1 H), 8.19 (s, 1 H).  LCMS (M+H)+
537.
【０２７５】
【化４７】
2011530580.tif 000053
【０２７６】
化合物１１ｂ：１−（２−クロロ−エチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル
化合物１１ｃ（１６０ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（４ｍＬ）懸濁液に、約０℃（氷／水浴）で塩化チオニル（０．１４ｍＬ、１．８４ｍｍｏｌ）を加えた。得られる混合物を０℃で撹拌し、９０分間室温に温め、その間に懸濁液は黄色がかった溶液になった。反応混合物を減圧によって濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）と飽和ＮａＨＣＯ３溶液（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）とに分配した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧により濃縮して、化合物１１ｂを黄色のグリース（１４０ｍｇ、９８％）として得た。この固体をそれ以上精製せずに次のステップの反応に使用した。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.96 - 4.08 (m, 2 H), 4.47 -
4.56 (m, 2 H), 8.12 (s, 1 H), 8.64 (s, 1 H).
【０２７７】
【化４８】
2011530580.tif 000054
【０２７８】
化合物１１ｃの調製：１−（２−クロロ−エチル）−４−ニトロソメチル−１Ｈ−ピラゾール
化合物１１ｄ（１６６ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（１７４ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ（４ｍＬ）に溶かした溶液に、ヒドロキシアミン塩酸塩（１１４ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）を加えた。得られる混合物を９０℃で９０分間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）とＨ２Ｏ（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）とに分配した。有機層を乾燥させ、濾過し、濃縮して、化合物１１ｃを白色の固体（１６４ｍｇ、９０％）として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6) δ ppm 4.00 (t, J=5.68 Hz, 2 H), 4.49 (t,
J=5.68 Hz, 2 H), 7.36 (s, 1 H), 7.85 (s, 1 H), 8.33 (s, 1 H), 11.26 (s, 1 H).
LCMS (M+H)+: 174
【０２７９】
化合物１１ｄの調製：１−（２−クロロ−エチル）−４−ニトロソメチル−１Ｈ−ピラゾール
化合物１１ｄは、実施例４の４−フルオロピラゾールの代わりに４−カルバルデヒドピラゾールを用いたことを除き、化合物４ｃおよび４ｄと同様にして調製した。
【０２８０】
（実施例１２）
２−アミノ−４−｛２−［２−（４−ブロモ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エトキシ］−４，６−ジクロロフェニル｝−Ｎ−シクロプロピル−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
化合物１２ａ（１４２ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（２６５ｍｇ、１．９２ｍｍｏｌ）、およびＫＩ（１０６ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶かした溶液に、４−ブロモピラゾール（１４１ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を加えた。得られる混合物をマイクロ波装置に入れて１３０℃で１時間加熱した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）とＨ２Ｏ（５０ｍＬ）とに分配した。有機層を乾燥させ、濾過し、濃縮して、褐色の油状物を得た。分取ＨＰＬＣによって単離すると、化合物１２が白色の固体（８５ｍｇ、４８％）として得られた。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.34 - 0.46 (m, 2 H), 0.48 - 0.59 (m,
2 H), 2.53 - 2.57 (m, 1 H), 3.73 (d, J=11.12 Hz, 1 H), 3.96 (dd, J=13.14, 2.02
Hz, 1 H), 4.26 - 4.50 (m, 6 H), 6.37 (br. s., 1 H), 6.78 (s, 2 H), 7.27 (d,
J=1.77 Hz, 1 H), 7.33 - 7.35 (m, 1 H), 7.38 (s, 1 H), 7.48 - 7.55 (m, 1 H).
LCMS (M+H)+: 552.
【０２８１】
【化４９】
2011530580.tif 000055
【０２８２】
【化５０】
2011530580.tif 000056
【０２８３】
化合物１２ａ：２−アミノ−４−［２，４−ジクロロ−６−（２−クロロ−エトキシ）−フェニル］−５，７−ジヒドロ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸シクロプロピルアミド
化合物２ａ（８００ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（８７２ｍｇ、６．３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（８ｍＬ）に溶かした溶液に、１−ブロモ−２−クロロエタン（０．４ｍＬ、４．２ｍｍｏｌ）を加えた。得られる混合物を５０℃で１２時間加熱した。反応混合物を濾過して炭酸塩を除去し、ＥｔＯＡｃで十分に洗浄した。次いで濾液をＥｔＯＡｃ（２００ｍｌ）と飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍｌ）およびブライン（５０ｍｌ）とに分配した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、次いで減圧によって濃縮した。この油状物残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（勾配溶離  ０→１０％のＣＨ３ＯＨジクロロメタン溶液）によって精製して、化合物１２ａ（７８６ｍｇ、８５％）を得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d
ppm 0.32 - 0.43 (m, 2 H), 0.47 - 0.58 (m, 2 H), 3.69 - 3.86 (m, 1 H), 4.00 -
4.12 (m, 2 H), 4.19 (d, J=13.14 Hz, 2 H), 4.23 - 4.31 (m, 2 H), 4.32 - 4.45 (m,
2 H), 6.42 (d, J=2.78 Hz, 1 H), 6.80 (s, 2 H), 7.38 (d, J=1.77 Hz, 1 H), 7.96
(s, 1 H). LCMS (M+H)+  444.
【０２８４】
【化５１】
2011530580.tif 000057
【０２８５】
実施例１３〜１６は、上記実施例に記載の方法と同様の方法を使用して調製した。
【０２８６】
【表１−１】
2011530580.tif 000058
【０２８７】
【表１−２】
2011530580.tif 000059
【０２８８】
ＨＳＰ−９０生化学アッセイ
ＳＰＡ（シンチレーション近接アッセイ）競合結合アッセイを使用して、本発明の化合物のＨＳＰ−９０に対する効力を評価した。そのＣ末端上に６−Ｈｉｓタグを含んでいる全長またはＮ末端ＨＳＰ−９０は、Ｈｉｓタグを介して銅担持ケイ酸イットリウムシンチラントビーズに結合する。以下に構造を示す、トリチウム標識プロピル−ゲルダナマイシン（ｐＧＡ）は、ゲルダナマイシンと呼ばれる、ＨＳＰ−９０の天然阻害剤の類似体である。＃１７位に付加されたトリチウム標識プロピル−アミン基を含んでいるトリチウム標識ｐＧＡは、ＨＳＰ−９０に結合し、同位体をビーズと近接させる。１７−ｎ−プロピルアミノ−ゲルダナマイシンは、参照により本明細書に援用される米国特許第４，２６１，９８９号に記載のとおりに調製することができる。このアッセイで同じく使用することのできる第二のトリチウム標識化合物を以下に示し、化合物Ａと称する。
【０２８９】
【化５２】
2011530580.tif 000060
【０２９０】
上記化合物Ａの構造中の「Ｔ」は、標識トリチウム化水素原子の位置を示す。この化合物は、Ｋｄが４０ｎＭであり、以下のように調製することができる。化合物Ａは、化合物Ａの親化合物（Ｎ−アリル−２−（５−クロロ−２，４−ジヒドロキシベンゾイル）イソインドリン−１−カルボキサミド）から、以下に記載するとおりに調製することができる。Ｂｏｃ（Ｒ，Ｓ）−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドールカルボン酸（２６３ｍｇ、１ｍｍｏｌｅ）、ジイソプロピルエチルアミン（０．９ｍＬ、５ｍｍｏｌ）、およびＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムリン五フッ化物（ＨＡＴＵ）（４２０ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を５ｍＬのＤＭＦに溶かした溶液に、窒素雰囲気中でアリルアミン（２．５ｍＬ、５ｍｍｏｌ、２Ｍ  ＴＨＦ溶液）を加えた。反応液を室温で１２時間撹拌した。反応混合物に飽和ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）を加えて、反応を失活させた。次いでＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）を加えて、水溶液を抽出した。ＥｔＯＡｃ層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させる。Ｎａ２ＳＯ４を濾別し、濾液を蒸発させて、褐色の油状物残渣を得た。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（勾配溶離  ４０→５０％のＥｔＯＡｃヘキサン溶液）によって精製して、所望の中間体生成物（３２１ｍｇ、定量的収率）であるｔｅｒｔ−ブチル１−［（アリルアミノ）カルボニル］−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−カルボキシレートを得た。
【０２９１】
ｔｅｒｔ−ブチル１−［（アリルアミノ）カルボニル］−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−カルボキシレート（１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）溶液に、室温で塩化水素（３ｍＬ、１２ｍｍｏｌ；４Ｍジオキサン溶液）を加えた。反応液を室温で１２時間加熱、撹拌した。反応混合物を蒸発させて、油状物残渣を得た。残渣（Ｎ−アリルイソインドリン−１−カルボキサミド）をそれ以上精製せずに次のステップの反応に使用した。
【０２９２】
次いで、５−クロロ−２，４−ビス（メトキシメトキシ）安息香酸（ＷＯ２００６／１１７６６９で示されているとおりに調製できる）（３４０ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）、４−メチルモルホリン（２．２ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（４６０ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）、および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（３３０ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）を１２ｍＬのＤＭＦに溶かした溶液に、窒素雰囲気中でＮ−アリルイソインドリン−１−カルボキサミド（１ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温で１２時間撹拌した。反応混合物にＨ２Ｏ（５０ｍＬ）を加えて、反応を失活させた。次いでＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）を加えて、水溶液を抽出した。ＥｔＯＡｃ層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させる。Ｎａ２ＳＯ４を濾別し、濾液を蒸発させて、褐色の油状物残渣を得た。残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（勾配溶離  ５０→６０％のＥｔＯＡｃヘキサン溶液）によって精製して、所望の中間体生成物（４２３ｍｇ、収率９１．８％）であるＮ−アリル−２−［５−クロロ−２，４−ビス（メトキシメトキシ）ベンゾイル］イソインドリン−１−カルボキサミドを得た。
【０２９３】
Ｎ−アリル−２−［５−クロロ−２，４−ビス（メトキシメトキシ）ベンゾイル］イソインドリン−１−カルボキサミド（３９２ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）溶液に、塩化水素（４ｍＬ、１６ｍｍｏｌ；４Ｍジオキサン溶液）を加えた。反応液を室温で１２時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（水溶液）で中和し、ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて乾燥させ、濾過し、蒸発させて、親化合物（Ｎ−アリル−２−（５−クロロ−２，４−ジヒドロキシベンゾイル）イソインドリン−１−カルボキサミド）としての所望の最終生成物を白色の固体（２２１ｍｇ、収率６９．７％）として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.57 (d, J=79.33 Hz, 2 H), 4.65 - 4.93
(m, 1 H), 4.97 - 5.19 (m, 1 H), 5.42 - 5.70 (m, 1 H), 5.68 - 5.95 (m, 1 H),
6.40 - 6.71 (m, 1 H), 6.92 (s, 1 H), 7.15 - 7.67 (m, 4 H), 8.28 (s, 1 H), 10.06
(s, 1 H), 10.40 (s, 1 H).  元素分析：C19H17ClN2O4の計算値: C, 61.21; H, 4.60; N, 7.51.  実測値:  C, 61.02; H, 4.63; N, 7.36.
【０２９４】
親化合物を生成したら、トリチウムガスを用い、標準の水素化方法を使用して、化合物Ａを調製した。
【０２９５】
同位体から放射されるβシグナルは、シンチラントを励起し、それによって、測定可能なシグナルが生成される。アッセイ混合物に競合的化合物を加えると、競合的化合物は、ＨＳＰ−９０のＮ末端上のＡＴＰ結合部位で、結合しているトリチウム標識ｐＧＡまたは化合物Ａと競合する。化合物によって、標識されたｐＧＡまたは化合物Ａが外されると、シグナルは減少する（β粒子はすでにビーズと近接していない）。このシグナルの減少を使用して、阻害剤／化合物がｐＧＡまたは化合物Ａに対してどの程度競合的であるかを定量化する。
【０２９６】
ＨＳＰ−９０への３Ｈ−ｐＧＡ（Ｇ１と示す）および化合物Ａ（Ｇ２と示す）結合についてのＳＰＡアッセイは、９６ウェル平底白色プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ  ＃３６０４）で実施した。Ｇ１では、典型的な反応溶液は、結合緩衝液（１００ｍＭのＨｅｐｅｓ、ｐＨ７．５、および１５０ｍＭのＫＣｌ）中に３０ｎＭのＨＳＰ−９０および２００ｎＭの３Ｈ−ｐＧＡを含有するものであった。Ｇ２では、典型的な反応溶液は、５ｎＭのＨＳＰ−９０および５０ｎＭの化合物Ａを含有するものであった。Ｇ１については、３Ｈ−ｐＧＡをまず、合成および精製した未標識ｐＧＡで３３％標識に希釈して、最終濃度を２００ｎＭとした。Ｇ２については、標識された化合物Ａを未標識の化合物Ａで希釈して、標識：未標識の比率を１：２として、最終濃度を５０ｎＭとした。ＨＳＰ−９０／３Ｈ−ｐＧＡ（またはＨＳＰ−９０／化合物Ａ）溶液に、Ｋｉを求めるための１１段階の異なる濃度で阻害剤を加えた。阻害剤濃度の範囲は、固体サンプルでは１００μＭまたは適切な範囲、標的のライブラリ化合物では１０μＭ、および４ｍＭの保存液とした。阻害パーセントを求めるために、化合物を１μＭおよび１０μＭで試験した。サンプル中の最終ＤＭＳＯは４％とした。結合緩衝液中に希釈してある銅−Ｙｓｉビーズ（Ａｍｅｒｓｈａｍ、＃ＲＰＮＱ００９６）を各ウェルに加えて、最終濃度を１００μｇ／ウェルとした。プレートをシールし、箔で覆ったふたをかぶせ、室温で３０分間振盪した。ビーズを３０分間沈降させ、その後Ｐａｃｋａｒｄ  ＴｏｐＣｏｕｎｔ  ＮＸＴ計測器を使用して、プレートをカウントした。Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｂｉｏｍｅｋ  ＦＸを使用して、この手順を中間の処理量にも適合させた。Ｋｉの値を確実に正確なものにするために、サンプルは２連で実験し、かつ実験日を２日に分けた。
【０２９７】
Ｋｉを求めるために、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して、補正したｃｐｍ（実際のｃｐｍ−バックグラウンド）を阻害剤濃度に対してプロットした。データをＩＣ５０一般式、すなわちＹ＝ＹＩ／（１＋［Ｘ］／ＩＣ５０）［ここで、ＹＩ＝Ｙ切片であり、［Ｘ］は、競合リガンド／阻害剤である］に適合させた。次いでこのＩＣ５０を使用して、Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ式：
【０２９８】
【数１】
2011530580.tif 000061
［ここで、ｃｌ＝冷リガンド濃度（変化する）であり、［ｈｌ］＝熱リガンドの濃度（２００ｎＭまたは５０ｎＭ）であり、Ｋｄ｛ｈｌ｝＝（３Ｈ−ｐＧＡでは）２４０ｎＭまたは（化合物Ａでは）４０ｎＭである］を用いることにより、Ｋｉを算出した。誤差は、以下のように算出した。すなわち、ＩＣ５０誤差／ＩＣ５０値＝端数誤差（ｆｒａｃｔｉｏｎａｌ  ｅｒｒｏｒ）、および端数誤差＊Ｋｉ値＝Ｋｉ誤差。
【０２９９】
阻害剤がＨＳＰ−９０に緊密に結合するあまり、遊離阻害剤分子の集団が、酵素−阻害剤複合体の形成により著しく消耗されるようになる場合には、上記式はもはや有効でない。これは通常、観察されるＩＣ５０がＨＳＰ−９０濃度とほとんど同じであるときに当てはまる。緊密に結合する阻害剤については、以下の式を適用することができる。
【０３００】
【数２】
2011530580.tif 000062
ここで、
【０３０１】
【数３】
2011530580.tif 000063
であり、ＥＬおよびＥＬｏは、それぞれ阻害剤の存在下および非存在下の放射リガンド−ＨＳＰ−９０複合体である。ＥＬ／ＥＬｏは、阻害剤存在下での微量シグナル（ｆｒａｃｔｉｏｎａｌ  ｓｉｇｎａｌ）を表す。Ｉｏ、Ｅｏ、およびＬｏは、それぞれ、阻害剤、ＨＳＰ−９０、および放射リガンドの濃度である。ＫＩは、リガンドの阻害定数であり、ＫＬは、酵素（ＨＳＰ−９０）とリガンド間の結合親和性定数である。
【０３０２】
実施例１〜１６の化合物１〜１６のＫｉアッセイデータを、以下の表２に記載する。
【０３０３】
【表２】
2011530580.tif 000064
【国際調査報告】
2011530580.tif 000074
2011530580.tif 000075