(57)【要約】  式（Ia）又は式（Ib）で表される式を有する新規[1.2.4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン及びイミダゾ[1,2-a]ピラジン化合物を開示する。本化合物は医薬組成物として調製でき、非限定的な例としては疼痛、炎症、その他を含む、ヒトを含む哺乳動物における様々な状態の予防及び治療について使用できる。【化１】2011519897.tif 000209【選択図】なし
2011519897.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式 Iaによる化合物、又はその医薬として許容し得る塩；又は当該化合物の溶媒和物又はその医薬として許容し得る塩；並びに、その立体異性体、同位体異型及び互変異性体：
【化１】
2011519897.tif 000176
式中：
W、W'、Y及びY'の各々は独立にCR2a又はNであり；但し、W、W'、Y及びY'の2つ以下が同時にNであり得ることを条件とし；
XはN又はCHであり；
Lは、単結合、-CO-、-SO-、-SO2-、-N(R2c)CO-、及び-N(R2c)SO2-から選択され；
環Pは置換又は非置換であり：
【化２】
2011519897.tif 000177
R1は、H、又は置換若しくは非置換のC1-C6アルキルであり；
各R2aは、H、置換若しくは非置換のC1-C6アルキル、非置換のC1-C6ハロアルキル、置換若しくは非置換のC1-C6アルコキシ、シアノ及びハロから独立に選択され；
各R2cは、H及びC1-C6アルキルから独立に選択され；
R2dは、H、C3-C8シクロアルキル、又はハロ、アミド若しくはC3-C8シクロアルキルで任意に置換されたC1-C6アルキルであり；
各m1、m2及びm3は独立に1又は2であり；かつ、
R3は、置換若しくは非置換のアリール、及び置換若しくは非置換のヘテロアリールから選択される。
【請求項２】
式 Ibによる化合物：又はその医薬として許容し得る塩；又は当該化合物の溶媒和物又はその医薬として許容し得る塩：
【化３】
2011519897.tif 000178
式中：
W、W'、Y及びY'の各々は、独立にCR2a又はNであり；但し、W、W'、Y及びY'の2つ以下が同時にNであり得ることを条件とし；
XはN又はCHであり；
Lは、単結合、-CO-、-SO-、-SO2-、-N(R2c)CO-、及び-N(R2c)SO2-から選択され；
環Pは置換又は非置換であり：
【化４】
2011519897.tif 000179
R1は、H、又は置換若しくは非置換のC1-C6アルキルであり；
各R2aは、H、置換若しくは非置換のC1-C6アルキル、非置換のC1-C6ハロアルキル、置換若しくは非置換のC1-C6アルコキシ、シアノ、及びハロから独立に選択され；
各R2cは、H及びC1-C6アルキルから独立に選択され；
R2dは、H、C3-C8シクロアルキル、又はハロ、アミド若しくはC3-C8シクロアルキルで任意に置換されたC1-C6アルキルであり；
各m1、m2及びm3は独立に1又は2であり；
R3は、置換若しくは非置換のアリール、及び置換若しくは非置換のヘテロアリールから選択される。
【請求項３】
Lが、単結合、-CO-、又は-N(R2c)CO-である、請求項1又は2記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項４】
R1が、Me、Et、n-Pr、又はi-Prである、請求項1〜3のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項５】
R1がHである、請求項1〜3のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項６】
前記化合物が、式IIa、IIb、IIc、又はIIdによる化合物である、請求項1記載の化合物又は医薬として許容し得る塩：
【化５】
2011519897.tif 000180
式中、L及び環Pが請求項1に記載されるものであり；各R2aが、H、置換若しくは非置換のC1-C6アルキル、置換若しくは非置換のC1-C6アルコキシ、シアノ、及びハロから独立に選択され；かつ、R3が、置換若しくは非置換のアリール、及び置換若しくは非置換のヘテロアリールから独立に選択される。
【請求項７】
前記化合物が、式IIe、IIf、又はIIgによる化合物である、請求項2記載の化合物又は医薬として許容し得る塩：
【化６】
2011519897.tif 000181
式中、L及び環Pは請求項1に記載されるものであり；各R2aは、H、置換若しくは非置換のC1-C6アルキル、置換若しくは非置換のC1-C6アルコキシ、シアノ、及びハロから独立に選択され；かつ、R3は、置換若しくは非置換のアリール、及び置換若しくは非置換のヘテロアリールから独立に選択される。
【請求項８】
環Pが置換又は非置換であり：
【化７】
2011519897.tif 000182
式中、R2d及びm1が請求項1に記載されるものである、請求項1〜7のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項９】
R2aが、H、非置換のC1-C6アルキル、非置換のC1-C6ハロアルキル、非置換のC1-C6アルコキシ、シアノ、又はハロである、請求項1〜8のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項１０】
R2aが、Me、Et、Pr、イソ-Pr、Cl、F、CN、OMe、又はCF3である、請求項9記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項１１】
R2aがHである、請求項1〜8のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項１２】
R3が、置換若しくは非置換のアリールから選択される、請求項1〜11のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項１３】
R3が、ハロ、シアノ、非置換のC1-C6アルキルで任意に置換されたアミド、又は非置換のC1-C6アルコキシで任意に置換されたフェニルである、請求項1〜11のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項１４】
R3が、F、Cl、Br、シアノ、OMe、OEt、O-n-Pr、O-i-Pr、又はMe、Et、n-Pr若しくはi-Prで任意に置換されたアミドにより任意に置換されたフェニルである、請求項1〜11のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項１５】
R3が、置換若しくは非置換のヘテロアリールから選択される、請求項1〜11のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項１６】
R3が、フェニル、ピリジル、インドリル、イソインドリル、ピロリル、フラニル、チエニル、ピラゾリル、オキサゾリル及びチアゾリルから選択され、その各々が、非置換であり得るか、又はヒドロキシル、シアノ、ハロ、若しくは非置換のC1-C6アルキルで任意に置換されたアミドで置換され得る、請求項1〜11のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項１７】
R3が、フェニル、ピリジル、インドリル、イソインドリル、ピロリル、フラニル、チエニル、ピラゾリル、オキサゾリル及びチアゾリルから選択され、その各々が、非置換であり得るか、又はヒドロキシル、シアノ、F、Cl、Br、又はMe、Et、n-Pr若しくはi-Prで任意に置換されたアミドで置換され得る、請求項1〜11のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項１８】
R3が、
【化８】
2011519897.tif 000183
であり、A1、A2及びA3の各々がS、O、N、NR3a及びCR3aから独立に選択され；R3aの各々が独立に、H又は置換若しくは非置換のC1-C6アルキルであり；かつ、R3bがCONH2、CONHMe又はCNである、請求項1〜11のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項１９】
R3が
【化９】
2011519897.tif 000184
である、請求項1〜11のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項２０】
R3が、
【化１０】
2011519897.tif 000185
である、請求項1〜11のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項２１】
R3が、
【化１１】
2011519897.tif 000186
である、請求項1〜11のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項２２】
R3が
【化１２】
2011519897.tif 000187
であり、式中、下つき添字mは0、1、2、3、及び4から選択され；かつ、各R3dは独立に置換若しくは非置換のC1-C6アルキル又はハロである、請求項1〜11のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項２３】
R3が
【化１３】
2011519897.tif 000188
であり、式中、下つき添字mは0、1、2、3、及び4から選択され；かつ、各R3dは独立に置換若しくは非置換のC1-C6アルキル又はハロである、請求項1〜11のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項２４】
R3が
【化１４】
2011519897.tif 000189
であり、式中、下つき添字mは0、1、2、又は3から選択され；かつ、各R3dは独立に置換若しくは非置換のC1-C6アルキル又はハロである、請求項1〜11のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項２５】
mが1又は2であり；かつ、各R3dが独立にMe、Cl又はFである、請求項22〜24のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項２６】
mが0である、請求項22〜24のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項２７】
前記化合物が、式IIIa、IIIb又はIIIcによる化合物であって：
【化１５】
2011519897.tif 000190
Xが請求項1に記載されるものであり；Lが単結合、-CO-、又は-NHCO-であり；環Pが
【化１６】
2011519897.tif 000191
であり、かつR2dが、H、C3-C8シクロアルキル、又はハロ、アミド若しくはC3-C8シクロアルキルで任意に置換されたC1-C6アルキルである、請求項1記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項２８】
前記化合物が、式IIId又はIIIeによる化合物であって： 
【化１７】
2011519897.tif 000192
Xが請求項1に記載されるものであり；Lが、単結合、-CO-、又は-NHCO-であり；環Pが
【化１８】
2011519897.tif 000193
であり、かつR2dが、H、C3-C8シクロアルキル、又はハロ、アミド若しくはC3-C8シクロアルキルで任意に置換されたC1-C6アルキルである、請求項2記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項２９】
前記化合物が、式IVa、IVb又はIVcによる化合物であって： 
【化１９】
2011519897.tif 000194
Xが請求項1に記載されるものであり；Lが、単結合、-CO-、又は-NHCO-であり；環Pが
【化２０】
2011519897.tif 000195
であり、かつR2dが、H、C3-C8シクロアルキル、又はハロ、アミド若しくはC3-C8シクロアルキルで任意に置換されたC1-C6アルキルである、請求項1記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項３０】
前記化合物が、式IVd又はIVeによる化合物であって： 
【化２１】
2011519897.tif 000196
Xが請求項1に記載されるものであり；Lが、単結合、-CO-、又は-NHCO-であり；環Pが
【化２２】
2011519897.tif 000197
であり、かつR2dが、H、C3-C8シクロアルキル、又はハロ、アミド若しくはC3-C8シクロアルキルで任意に置換されたC1-C6アルキルである、請求項2記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項３１】
前記化合物が、式Va、Vb又はVcによる化合物であって： 
【化２３】
2011519897.tif 000198
Xが請求項1に記載されるものであり；Lが、単結合、-CO-、又は-NHCO-であり；環Pが
【化２４】
2011519897.tif 000199
であり、かつR2dが、H、C3-C8シクロアルキル、又はハロ、アミド若しくはC3-C8シクロアルキルで任意に置換されたC1-C6アルキルである、請求項1記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項３２】
前記化合物が、式Vd又はVeによる化合物であって： 
【化２５】
2011519897.tif 000200
Xが請求項1に記載されるものであり；Lが、単結合、-CO-、又は-NHCO-であり；環Pが
【化２６】
2011519897.tif 000201
であり、かつR2dが、H、C3-C8シクロアルキル、又はハロ、アミド若しくはC3-C8シクロアルキルで任意に置換されたC1-C6アルキルである、請求項2記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項３３】
前記化合物が、式VIa、VIb又はVIcによる化合物であって： 
【化２７】
2011519897.tif 000202
Xが請求項1に記載されるものであり；Lが、単結合、-CO-、又は-NHCO-であり；環Pが
【化２８】
2011519897.tif 000203
であり、かつR2dが、H、C3-C8シクロアルキル、又はハロ、アミド若しくはC3-C8シクロアルキルで任意に置換されたC1-C6アルキルである、請求項1記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項３４】
前記化合物が、式VId又はVIeによる化合物であって： 
【化２９】
2011519897.tif 000204
Xが請求項1に記載されるものであり；Lが、単結合、-CO-、又は-NHCO-であり；環Pが
【化３０】
2011519897.tif 000205
であり、かつR2dが、H、C3-C8シクロアルキル、又はハロ、アミド若しくはC3-C8シクロアルキルで任意に置換されたC1-C6アルキルである、請求項2記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項３５】
Lが単結合である、請求項1〜34のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項３６】
Lが-CO-である、請求項1〜34のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項３７】
Lが-NHCO-である、請求項1〜34のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項３８】
R2dが、H、Me、i-Pr、t-Bu、CH2CONH2、シクロプロピルメチル、又はCH2CF3である請求項1〜37のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項３９】
R2dがHである、請求項1〜37のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項４０】
R2dがi-Prである、請求項1〜37のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項４１】
R2dがt-Buである、請求項1〜37のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項４２】
R2dがシクロプロピルメチルである、請求項1〜37のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項４３】
Lが、単結合であり；環Pが
【化３１】
2011519897.tif 000206
である、請求項1〜34のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項４４】
Lが、単結合であり；環Pが
【化３２】
2011519897.tif 000207
である、請求項1〜34のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項４５】
Lが、単結合であり；環Pが
【化３３】
2011519897.tif 000208
である、請求項1〜34のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項４６】
XがCHである、請求項1〜45のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項４７】
XがNである、請求項1〜45のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項４８】
前記化合物が以下から選択されるものである、請求項1記載の化合物又は医薬として許容し得る塩、又は当該化合物の溶媒和物又はその医薬として許容し得る塩、並びにその立体異性体、同位体異型及び互変異性体：
5-(8-(4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル)イソインドリン-1-オン；
4-(8-(4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル)フラン-2-カルボキサミド；
4-(8-(4-((1S,4R)-5-tert-ブチル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル)フラン-2-カルボキサミド；
4-(8-(4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)イミダゾ[1,2-a]ピラジン-5-イル)フラン-2-カルボキサミド；
5-{8-(4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-1H-ピラゾール-3-カルボン酸アミド；
4-{8-(4-((1S,4S)-5-tert-ブチル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)-フェニルアミノ)イミダゾ[1,2-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボン酸アミド；
4-{8-(6-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)ピリジン-3-イルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボン酸アミド；
4-{8-(4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)イミダゾ[1,2-a]ピラジン-5-イル}-1H-ピリジン-2-オン；
4-{8-(4-(5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.2]オクタン-2-イル)フェニルアミノ)[1,2,4]-トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボン酸アミド；
4-{8-(4-(5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.2]オクタン-2-イル)フェニルアミノ)-イミダゾ[1,2-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボン酸アミド；
4-{8-(4-(3-イソプロピル-3,8-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-8-イル)フェニルアミノ)-イミダゾ[1,2-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボン酸アミド；
4-{8-(4-(8-イソプロピル-3,8-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-3-イル)フェニルアミノ)[1,2,4]-トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボン酸アミド；
4-{8-(4-(3-イソプロピル-3,8-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-8-イル)フェニルアミノ)[1,2,4]-トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボン酸アミド；
4-{8-(4-(8-イソプロピル-3,8-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-3-イル)フェニルアミノ)-イミダゾ[1,2-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボン酸アミド；
5-{8-(6-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)ピリジン-3-イルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-1H-ピラゾール-3-カルボン酸アミド；
5-{8-(4-((1S,4S)-5-tert-ブチル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ-[1,5-a]ピラジン-5-イル}-2,3-ジヒドロ-イソインドール-1-オン；
5-{8-(4-((1S,4S)-5-tert-ブチル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-1H-ピラゾール-3-カルボン酸アミド；及び、
5-{8-(6-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)ピリジン-3-イルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-2,3-ジヒドロ-イソインドール-1-オン。
【請求項４９】
前記化合物が以下から選択されるものである、請求項2記載の化合物又は医薬として許容し得る塩、又は当該化合物の溶媒和物又はその医薬として許容し得る塩、並びにその立体異性体、同位体異型及び互変異性体：
4-(8-(3-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル)フラン-2-カルボキサミド；
4-(8-(3-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)イミダゾ[1,2-a]ピラジン-5-イル)フラン-2-カルボキサミド；及び、
5-(8-(3-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル)イソインドリン-1-オン。
【請求項５０】
医薬として許容し得る担体、及び請求項1〜49のいずれか1項記載の化合物又が医薬として許容し得る塩の医薬的有効量を含む、医薬組成物。
【請求項５１】
前記担体が非経口担体である、請求項50記載の医薬組成物。
【請求項５２】
前記担体が経口担体である、請求項50記載の医薬組成物。
【請求項５３】
前記担体が局所担体である、請求項50記載の医薬組成物。
【請求項５４】
ECM分解で特徴づけられる状態の予防又は治療のための医薬の製造における請求項1〜49のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩の使用。
【請求項５５】
炎症が関与する疾患から選択される状態の予防又は治療のための医薬の製造における請求項1〜49のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩の使用。
【請求項５６】
前記疾患が関節リウマチである、請求項50記載の化合物又は医薬として許容し得る塩の使用。
【請求項５７】
マイトジェン活性化プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ5の阻害剤の投与により予防され、改善され、又は解消される状態の治療又は予防のための医薬の製造における請求項1〜50のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩の使用。
【請求項５８】
異常なマトリクスメタロプロテイナーゼ活性により特徴づけられる状態の治療方法であって、治療上有効量の請求項1〜50のいずれか1項記載のマトリクスメタロプロテイナーゼ阻害化合物又は医薬として許容し得る塩を投与することを含む、前記方法。
【請求項５９】
細胞外マトリクスの分解が関与する疾患から選択される状態の治療方法であって、治療上有効量の請求項1〜50のいずれか1項記載のマトリクスメタロプロテイナーゼ阻害化合物又は医薬として許容し得る塩を投与することを含む、前記方法。
【請求項６０】
異常なMMP1の細胞性発現が関与する疾患から選択される状態の治療方法であって、治療上有効量の請求項1〜50のいずれか1項記載のマトリクスメタロプロテイナーゼ阻害化合物又は医薬として許容し得る塩を投与することを含む、前記方法。
【請求項６１】
炎症性疾患の治療又は予防方法であって、治療上有効量の請求項1〜50のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩を、その必要のある対象に投与することを含む、前記方法。
【請求項６２】
関節リウマチの治療又は予防方法であって、治療上有効量の請求項1〜50のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩を、その必要のある対象に投与することを含む、前記方法。
【請求項６３】
マイトジェン活性化プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ5の阻害剤の投与により予防され、改善され、又は解消される状態の治療又は予防における使用のための請求項1〜50のいずれか1項記載の化合物又は医薬として許容し得る塩。
【請求項６４】
前記状態が、細胞外マトリクスの分解が関与する疾患、MMP1の異常な細胞性発現が関与する疾患、及び炎症性疾患から選択される、請求項63記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
(発明の分野)
本発明は、セリン/スレオニンキナーゼの活性部位に結合し得る融合ピラジン化合物のクラスに関し、該発現は、細胞外マトリクス（ECM）の分解、関節の変性、及びそのような分解及び／又は炎症が関与する疾患を生じる経路に関与する。
【０００２】
細胞外マトリクスの分解が関与する疾患には、乾癬性関節炎、若年性関節炎、初期の関節炎、反応関節炎、骨関節炎、関節リウマチ、強直性脊椎炎、骨粗鬆症、腱炎及び歯周疾患のような筋骨格の疾患（muskulo skeletal disease）、癌転移、気道疾患（COPD、喘息）、腎臓及び肝臓線維形成、アテローム硬化及び心不全のような心血管疾患、並びに神経炎症及び多発硬化のような神経学的な疾患を含むが、これらに限定されない。主に関節変性が関与する疾患には、乾癬性関節炎、若年性関節炎、初期の関節炎、反応関節炎、関節リウマチ、骨関節炎及び強直性脊椎炎を含むが、これらに限定されない。
【０００３】
関節リウマチ（RA）は慢性関節変性疾患であり、炎症及び関節構造の破壊により特徴づけられる。該疾患は検査されない場合、関節機能の喪失に起因する実質的な障害及び苦痛、及び早死にさえもたらす。従って、RA療法の目的は、該疾患を遅延させるのではなく、関節破壊を止めるために寛解を達成することである。該疾患結果の重篤性の他、RAの高い罹患率（世界的に成人の0.8%が罹患している）は、高い社会経済的衝撃を意味する。（RAの総説に関し、出願人は、Smolen及びSteinerの文献 (2003); Lee及びWeinblattの文献(2001); Choy及びPanayiの文献(2001); O'Dell (2004) 及びFiresteinの文献(2003)を引用する。）
【０００４】
RAは自己免疫疾患であることが広く認められるにもかかわらず、該疾患の「開始段階」を駆動させる正確な機構に関してはコンセンサスが存在しない。公知であることは、第1の誘発が、罹患傾向宿主において、様々な細胞型（B細胞、T細胞、マクロファージ、線維芽細胞、内皮細胞、樹状細胞、その他）の活性化をもたらす事象のカスケードを媒介することである。付随して、様々なサイトカインの産生増加が、関節及び関節を取り巻く組織において観測される（例えばTNF-α、IL-6、IL-1、IL-15、IL-18、その他）。該疾患が進行するとき、細胞活性化及びサイトカイン産生カスケードは自己永続的となる。この初期段階で、関節構造の破壊は、既にきわめて明白である。患者の30％は診断時に骨浸食のX線撮影証拠があり、この割合は2年後に60％にまで増加する。
【０００５】
RA患者の関節の組織学的分析は、明らかにRA関連性分解プロセスに関与する機構を明示する。この分析は、RA関連性関節変性の原因である主要エフェクタがパンヌスであることを示し、そこにおいて、滑膜線維芽細胞は、多様なタンパク質分解酵素を産生することによる、軟骨及び骨浸食の主要な駆動因子である。関節は、古典的には、軟骨層に関節をなす2本の隣接する骨を含み、これらは滑膜及び関節嚢により取り囲まれている。進行したRA患者において、滑膜線維芽細胞の増殖並びにT細胞、B細胞、単球、マクロファージ及び好中球などの単核細胞の浸潤により、関節の滑膜は大きさが増大し、パンヌスを形成する。パンヌスは隣接する軟骨の変性を媒介して関節空間の狭小化を引き起こし、隣接する骨及び軟骨に侵入する可能性を有する。骨及び軟骨組織はそれぞれ主にコラーゲンI型又はIIから構成されるので、パンヌスの破壊的かつ浸潤的特性は、コラーゲン溶解性プロテアーゼ、主にマトリクスメタロプロテイナーゼ（MMP）の分泌により媒介される。軟骨の下でかつ隣接する骨の浸食はRAプロセスの一部でもあり、骨及びパンヌスの界面で、主に破骨細胞の存在からも生じる。破骨細胞は、骨組織に接着すると閉区画を形成する多核細胞であり、その中で破骨細胞は骨組織を分解するプロテアーゼ（カテプシンK、MMP9）を分泌する。関節における破骨細胞集団は、活性化SF及びT細胞によるNFκBリガンド（RANKL）の受容体活性化因子の分泌により誘導される前駆細胞からの骨芽細胞形成によって、異常に増加する。
【０００６】
様々なコラーゲン型は、細胞外マトリクス（ECM）の安定性を規定するのに主要な役割を有する。例えば、コラーゲンI型及びコラーゲン型IIは、それぞれ骨及び軟骨の主成分である。コラーゲンタンパク質は、典型的には、コラーゲン原線維と呼ばれる多重結合構造に組織化する。天然コラーゲン原線維は、タンパク分解性開裂にきわめて抵抗性である。少数の型のECM分解タンパク質のみが、天然コラーゲンを分解する能力を有することが報告されており、該タンパク質とはMMP及びカテプシンである。カテプシンのうち、主に破骨細胞において活性であるカテプシンKが最もよく特徴づけられている。MMPのうち、MMP1、MMP2、MMP8 MMP13及びMMP14は、コラーゲン溶解性特性を有することが公知である。滑膜線維芽細胞（SF）によるMMP1の発現増加と関節炎疾患の進行との間の相関はよく確立されており、関節侵食的プロセスの予兆である（Cunnaneらの文献、2001）。従って、RAの文脈において、MMP1は、高度に関連するコラーゲン分解タンパク質を表す。インビトロにおいて、RA病理学に関連するサイトカイン（例えばTNF-α及びIL1β）での培養SFの処理は、該細胞によるMMP1の発現を増加させる（Andreakosらの文献、2003）。従って、SFにより発現されるMMP1のレベルをモニタすることは、インビボにおいて軟骨変性の原因となる侵食的表現型へのSFの活性化の指標であるので、RAの分野における関連する読み出しである。SFによるMMP1発現の阻害は、RAの治療への有益な治療的アプローチを表す。
【０００７】
また、ECM分解タンパク質の活性は、原因であり得、又は例えば関節の変性を含む他の疾患のようなRAとは異なる様々な疾患の進行と相関し得る。これらの疾患には、乾癬性関節炎、若年性関節炎、初期の関節炎、反応関節炎、骨関節炎及び強直性脊椎炎を含むが、これらに限定されない。本明細書中に記載されているように、本発明により同定された化合物で治療可能であり得、MMPの発現に関与する標的を使用し得る他の疾患は、骨粗鬆症、腱炎及び歯周疾患のような筋骨格の疾患（Gapskiらの文献、2004）、癌転移（Coussensらの文献、2002）、気道疾患（COPD、喘息）（Suzukiらの文献、2004）、肺、腎臓線維形成（Schanstraらの文献、2002）、慢性C型肝炎と関連する肝臓線維形成（Reiffらの文献、2005）、アテローム硬化及び心不全のような心血管疾患（Creemersらの文献、2001）、並びに神経炎症及び多発硬化のような神経学的な疾患（Rosenbergの文献、2002）である。このような疾患を患っている患者は、（分解から保護することにより）ECMを安定させることから利益を得ることができる。
【０００８】
マイトジェン活性化プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ5（MAPKAPK5又はPRAK）として同定される471アミノ酸のセリン/スレオニンキナーゼは、広いパネルの組織において発現される。該タンパク質は、そのN末端にその触媒領域を含み、そのC末端に核移行シグナル（NLS）及び核外移行シグナル（NES）の両方を含む。内因性MAPKAPK5は原形質に主に存在するが、ストレス又は細胞のサイトカイン活性化が核へのその転移を媒介する（Newらの文献、2003）。この事象は、MAPKAPK5のリン酸化に依存している。Thr182は、MAPKAPK5の制御性リン酸化部位である。p38αキナーゼは過剰発現設定のMAPKAPK5をリン酸化できるにもかかわらず、内因性MAPKAPK5を用いた実験は、この仮説を支持しない（Shiらの文献、2003）。生存可能でかつ稔性のMAPKAPK5ノックアウトマウスが作成されている。これらのマウスの表現型は、MAPKAPK2、すなわちp38αにより制御されるMAPKAPK5関連キナーゼを欠損したマウスの表現型とは大きく異なる（Shiらの文献、2003）。これは、各タンパク質の機能が明瞭であり、かついずれのキナーゼもその他の活性を補償することができないことを示す。考え合わせると、MAPKAPK5及びMAPKAPK2は、非重複的役割を有する異なる標的を表す。MAPK6（ERK3とも呼ばれる）は、MAPKAPK5に対し生理的に関連する基質として最近同定され、これは新規シグナル伝達経路を規定する（Seternesらの文献、2004）。
【背景技術】
【０００９】
（本発明の背景）
NSAIDS（非ステロイド性抗炎症薬）は、RAと関連する苦痛を減少させ、患者の生活の質を改善するために使用される。しかしながら、これらの薬剤は、RA関連性関節破壊を止めない。
【００１０】
コルチコステロイドは、X線撮影で検出されるRAの進行を減少させることが見出され、RA患者の一部（30〜60%）を治療するために低用量で使用される。しかしながら、重篤な副作用が長期のコルチコステロイドの使用に関連する（皮膚薄化、骨粗鬆症、白内障、高血圧症及び高脂血症）。
【００１１】
合成DMARD（疾患緩和抗リウマチ薬）（例えばメトトレキセート、レフルノミド、スルファサラジン）は、主にRAの免疫炎症性成分に対処する。主な不利益点として、これらの薬剤は、限られた有効性を有するだけである（DMARDによって、疾患進歩が長期的に続くように関節破壊が遅延させるだけであり、阻止しない）。効力の欠如は、平均して患者の30%のみが、メトトレキセートを用いた24ヵ月の治療後にACR50スコアを達成するという事実により示される。これは、米国リウマチ学会によると、患者の30%のみが、それらの症状の50%改善を達成することを意味する（O'Dellらの文献、1996）。加えて、DMARDの正確な作用機構は、しばしば不明である。
【００１２】
生物学的DMARD（インフリキシマブ、エタネルセプト、アダリムマブ、リツキシマブ、アバタセプト）は、サイトカイン（例えばTNF-α）又はRA病態生理学において重要な役割を有する細胞（例えばB細胞又はT細胞）を不活化する治療タンパク質である（Kremerらの文献, 2003; Edwardsらの文献, 2004）。TNF-α-遮断薬（インフリキシマブ、エタネルセプト、アダリムマブ）及びメトトレキセート併用療法は現在利用可能な最も有効なRA治療であるが、この療法さえ12ヵ月の療法後に50〜60%の患者の病徴において50%改善（ACR50）を達成するだけであることは注目に値する（St Clairらの文献、2004）。抗-TNF-α薬剤についていくつかの有害事象警告が存在し、この型の薬剤に関連する副作用に光を投じる。感染（結核）、血液学的事象及び脱髄性障害についての危険率の増加がTNF-α遮断薬について記載されている（Gomez-Reinoらの文献（2003）も参照されたい）。重篤な副作用の他、TNF-α遮断薬は生物学的クラスの治療の一般的な不利益点も共有し、該不利益点とは不快な投与方法（注入部位反応を伴う頻繁な注入）及び高い生産コストである。後期開発段階にある新規薬剤は、IL-6、T細胞共刺激分子及びB細胞などのサイトカインを標的とする。これらの薬剤の有効性は、TNF-α遮断薬の有効性と類似していると予測される。様々な標的治療が、類似するものの限定的な有効性を有するという事実は、RAについて多数の病原因子が存在することを示唆する。これはまた、RAに関連する病原性事象の我々の理解の不足を示すものである。
【００１３】
RAについての現在の療法は、限られた有効性のため（患者の30%について適切な療法が存在しない）満足のいくものではない。これは、寛解を達成するために更なる戦略を要求する。寛解は、後遺疾患が進行性の関節損傷、及びそれゆえ進行性の障害のリスクを負った時から、要求される。RA治療のために現在使用される薬剤の主標的を表すRA病の免疫炎症性成分を阻害することは、該疾患の主要な特質である関節変性の遮断を生じない。
【００１４】
米国の2005/0009832は、MAPKAPK5を含むプロテインキナーゼのモジュレータとして置換イミダゾ[1,2-a]ピラジン-8-イルアミンを記載する。WO02/056888は、特定のサイトカインの発現を制御することが可能なTNFモジュレータとしてMAPKAPK5の阻害剤を記載する。これらの先行技術文献はいずれも、本明細書において以下に記載される化合物のクラスの範囲内のいずれの化合物をも開示しない。
【発明の概要】
【００１５】
（本発明の要旨）
本発明は、MAPKAPK5がMMP1の発現を生じる経路において機能し、かつ本発明の化合物などのMAPKAPK5活性の阻害剤がMMP活性の異常に高い発現に関与する疾患の治療に有用であるという発見に基づく。
【００１６】
本発明の化合物は、全般的に、アリール又はヘテロアリール基により5位で、及びヘテロアリールアミノ基により8位で置換された[1.2.4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン及びイミダゾ[1,2-a]ピラジンとして記載できる。
【００１７】
本発明の化合物は、より少ない毒性、良好な吸収、良好な半減期、良好な溶解性、低タンパク結合能、より少ない薬剤-薬剤相互作用、及び良好な代謝安定性を示すことができる。特定の態様において、本発明の化合物は、薬理特性、特に改善された効力及び改善された許容度において、予想外の顕著な向上を呈する。
【００１８】
より具体的には、本発明は、式(Ia)又は(Ib)による本発明の化合物に関する：
【化１】
2011519897.tif 000003
(式中、
W、W'、Y及びY'の各々は、独立にCR2a又はNであり；但し、W、W'、Y及びY'の2つ以下が同時にNであり得ることを条件とし；
Xは、N又はCHであり；
Lは、単結合、-CO-、-SO-、-SO2-、-N(R2c)CO-、及び-N(R2c)SO2-から選択され；
環Pは、置換又は非置換であり：
【化２】
2011519897.tif 000004
R1は、H、又は置換若しくは非置換のC1-C6アルキルであり；
各R2aは、H、置換若しくは非置換のC1-C6アルキル、C1-C6アルコキシ、シアノ及びハロから独立に選択され；
各R2cは、H及びC1-C6アルキルから選択され；
R2dは、H、C3-C8シクロアルキル、又はハロ、アミド若しくはC3-C8シクロアルキルにより任意に置換されたC1-C6アルキルであり；
各m1、m2及びm3は、独立に1又は2であり；かつ
R3は、置換若しくは非置換のC1-C6アルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、及び置換若しくは非置換のヘテロアリールから選択される。
【００１９】
一実施態様において、式I又はIbによる本発明の化合物に関して、R1は、H、Me、Et、i-Pr又はCF3である。
【００２０】
一実施態様において、式 Ia又はIbによる本発明の化合物に関して、R1は、Hである。
【００２１】
別の実施態様において、式 Ia又はIbによる本発明の化合物に関して、R3は、置換若しくは非置換のフェニルから選択される。
【００２２】
別の実施態様において、式 Ia又はIbによる本発明の化合物に関して、R3は、置換若しくは非置換のピリジルから選択される。
【００２３】
別の実施態様において、式 Ia又はIbによる本発明の化合物に関して、R3はフェニル、インドリル、イソインドリル、ピロリル、フラニル、チエニル、ピラゾリル、オキサゾリル及びチアゾリルから選択され、そのそれぞれは置換若しくは非置換であってよい。
【００２４】
好ましい実施態様において、式 Ia又はIbによる本発明の化合物に関して、R3は、置換若しくは非置換のフラニルである。
【００２５】
更なる態様において、本発明は、本発明の化合物及び医薬担体、賦形剤又は希釈剤を含む医薬組成物を提供する。本発明の本態様において、医薬組成物は、本明細書に記載される本発明の化合物の1以上を含むことができる。さらに、本明細書に開示される医薬組成物に有用な本発明の化合物及び治療方法は、調製され、使用されるように、全て医薬として許容し得るものである。
【００２６】
別の本発明の態様は、炎症、コラーゲン分解が関与する疾患、特に異常なマトリクスメタロプロテアーゼ(MMP1)及び／又はマイトジェン活性化プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ5(MAPKAPK5)活性に特徴を有する疾患の治療に有用な治療法、医薬組成物及びこのような組成物の製造における本発明の化合物の使用に関し、関節リウマチ(RA)はそのような疾患の具体的なものである。本発明は、本発明の化合物の生産方法にも関する。
【００２７】
他の目的及び利点は、以下の詳細な説明を、以下の実例的図面と併せて考慮することにより、当業者に明らかとなろう。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】この線図は、健康な関節とRA患者の関節との間の著しい組織学的相違を示す。
【００２９】
【図２】この図表は、関節リウマチ病理学に関与するサイトカインで誘発される滑膜線維芽細胞でのMMP1の発現増加を示す。
【００３０】
【図３】このグラフは、公知の抗炎症化合物によるSFによるMMP1の「TNF-αに基づく誘発」誘導性発現の用量依存的阻害を示す。
【００３１】
【図４】このゲルは、MAPKAPK5を標的とするAd-siRNAウイルスでの細胞の感染によるSFにおけるMAPKAPK5の発現のタンパク質レベルでの減少を示す。
【００３２】
【図５】この図表は、MAPKAPK5を標的とするAd-siRNAウイルスによるSFによるMMP1発現の「複合誘発」誘導性のレベルの減少を示す。
【００３３】
【図６Ａ】このグラフは、本発明の化合物で実施される許容度研究の結果を示し、該測定された効果は総体重に対するものであった。
【００３４】
【図６Ｂ】このグラフは、比較の化合物に対する許容度研究の結果を示す。
【００３５】
【図７】このグラフは、敗血症において胆汁うっ滞を引き起こすことが公知であるLPS(細菌性リポ多糖)注入の後に本発明の化合物によって得られたTNFα放出の阻害割合を示す。ここでの基準は、周知のデキサメタゾン(100%阻害)(DEX)である。
【発明を実施するための形態】
【００３６】
(発明の詳細な説明)
(定義)
以下の用語は、それとともに以下に提示される意味を有することを意図し、本発明の記載及び意図する範囲を理解するのに有用である。
【００３７】
本発明を記載する場合、化合物、当該化合物を含んでいる医薬組成物、並びに当該化合物及び組成物を使用する方法を含むことができ、以下の用語は、存在する場合、他に示さない限り、以下の意味を有する。本明細書に記載される場合、以後以下に定義される任意の部分を多様な置換基で置換できること、及びそれぞれの定義が以下に記載されるそれらの範囲内でこのような置換部分を含むことを意図することも、理解されるべきである。他に明記しない限り、用語「置換」は、以下に記載されるように定義されたものである。本明細書に使用される場合、用語「基」及び「ラジカル」が交換可能であるとみなし得ることは、更に理解されるべきである。
【００３８】
冠詞「a」及び「an」は、本明細書において、1又は2以上(すなわち、少なくとも1)の該冠詞の文法上の対象をいうのに使用できる。例として、「類似体（an analogue）」は、1の類似体又は2以上の類似体を意味する。
【００３９】
「アシル」又は「アルカノイル」はラジカル-C(O)R20をいい、式中R20は、本明細書で定義する、水素、C1-C8アルキル、C3-C10シクロアルキル、C3-C10シクロアルキルメチル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、アリール、アリールアルキル、5〜10員のヘテロアリール又はヘテロアリールアルキルである。代表例には、ホルミル、アセチル、シクロヘキシルカルボニル、シクロヘキシルメチルカルボニル、ベンゾイル及びベンジルカルボニルを含むが、これらに限定されない。例示的な「アシル」基は、-C(O)H、-C(O)-C1-C8アルキル、-C(O)-(CH2)t(C6-C10アリール)、-C(O)-(CH2)t(5〜10員ヘテロアリール)、-C(O)-(CH2)t(C3-C10シクロアルキル)、及び-C(O)-(CH2)t(4〜10員ヘテロシクロアルキル)であり、式中、tは0〜4の整数である。
【００４０】
「置換アシル」又は「置換アルカノイル」はラジカル-C(O)R21をいい、式中、R21は独立に以下のものである：
・ハロ又はヒドロキシで置換されたC1-C8アルキル；又は、
・その各々が非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシで置換されている、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、アリールアルキル、5〜10員のヘテロアリール又はヘテロアリールアルキル。
【００４１】
「アシルアミノ」は、ラジカル-NR22C(O)R23をいい、式中R22は、本明細書で定義する、水素、C1-C8アルキル、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、アリールアルキル、5〜10員のヘテロアリール又はヘテロアリールアルキルであり、R23は水素、C1-C8アルキル、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、アリールアルキル、5〜10員のヘテロアリール又はヘテロアリールアルキルである。例示的な「アシルアミノ」には、ホルミルアミノ、アセチルアミノ、シクロヘキシルカルボニルアミノ、シクロヘキシルメチル-カルボニルアミノ、ベンゾイルアミノ及びベンジルカルボニルアミノを含むが、これらに限定されない。例示的な「アシルアミノ」基は、-NR21'C(O)-C1-C8アルキル、-NR21'C(O)-(CH2)t(C6-C10アリール)、-NR21'C(O)-(CH2)t(5〜10員ヘテロアリール)、-NR21'C(O)-(CH2)t(C3-C10シクロアルキル)、及び-NR21'C(O)-(CH2)t(4〜10員ヘテロシクロアルキル)であり、式中tは0〜4の整数であり；各R21'は独立にH又はC1-C8アルキルを表す。
【００４２】
「置換アシルアミノ」とは、ラジカル-NR24C(O)R25をいい、式中： 
R24は独立に、
・H、又はハロ若しくはヒドロキシで置換されたC1-C8アルキル；又は
・その各々が非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシで置換されている、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、アリールアルキル、5〜10員のヘテロアリール又はヘテロアリールアルキル；であり、かつ、
R25は独立に、
・H、又はハロ若しくはヒドロキシで置換されたC1-C8アルキル；又は、
・その各々が非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシルで置換されている、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、アリールアルキル、5〜10員のヘテロアリール又はヘテロアリールアルキル；であり、
但し、少なくとも1つのR24及びR25は、H以外である。
【００４３】
「アルコキシ」とは、R26がC1-C8アルキルである、基-OR26をいう。特定のアルコキシ基は、メトキシ、エトキシ、n-プロポキシ、イソプロポキシ、n-ブトキシ、tert-ブトキシ、sec-ブトキシ、n-ペントキシ、n-ヘキソキシ及び1,2-ジメチルブトキシである。特定のアルコキシ基は低級アルコキシ、すなわち1〜6の炭素原子を有するものである。更に特定のアルコキシ基は、1〜4の炭素原子を有する。
【００４４】
「置換アルコキシ」は、本明細書の「置換」の定義において列挙される1以上の基で置換されたアルコキシ基をいい、特に、アミノ、置換アミノ、C6-C10アリール、-O-アリール、カルボキシル、シアノ、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、ハロゲン、5〜10員のヘテロアリール、ヒドロキシル、ニトロ、チオアルコキシ、チオ-O-アリール、チオール、アルキル-S(O)-、アリール-S(O)-、アルキル-S(O)2-及びアリール-S(O)2-からなる群から選択される1以上の置換基、例えば1〜5の置換基、及び特に1〜3の置換基、特に1の置換基を有するアルコキシ基をいう。例示的な「置換アルコキシ」基は、-O-(CH2)t(C6-C10アリール)、-O-(CH2)t(5〜10員ヘテロアリール)、-O-(CH2)t(C3-C10シクロアルキル)、及び-O-(CH2)t(4〜10員ヘテロシクロアルキル)であり、式中、tは0〜4の整数であり、かつ存在する任意のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル基は、非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシにより、それ自身置換されてよい。具体的かつ例示的な「置換アルコキシ」基は、OCF3、OCH2CF3、OCH2Ph、OCH2-シクロプロピル、OCH2CH2OH、OCH2CH2NMe2である。
【００４５】
「アルコキシカルボニル」とはラジカル-C(O)-OR27をいい、式中R27は、本明細書で定義する、C1-C8アルキル、C3-C10シクロアルキル、C3-C10シクロアルキルアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキルアルキル、アラルキル又は5〜10員のヘテロアリールアルキルを表す。例示的な「アルコキシカルボニル」基は、C(O)O-C1-C8アルキル、-C(O)O-(CH2)t(C6-C10アリール)、-C(O)O-(CH2)t(5〜10員ヘテロアリール)、-C(O)O-(CH2)t(C3-C10シクロアルキル)、及び-C(O)O-(CH2)t(4〜10員ヘテロシクロアルキル)であり、式中、tは1〜4の整数である。
【００４６】
「置換アルコキシカルボニル」とはラジカル-C(O)-OR28をいい、式中R28は以下を表す：
・その各々がハロ、置換若しくは非置換のアミノ、又はヒドロキシで置換された、C1-C8アルキル、C3-C10シクロアルキル、C3-C10シクロアルキルアルキル、又は4〜10員のヘテロシクロアルキルアルキル；又は
・その各々が非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシルで置換された、C6-C10アラルキル又は5〜10員のヘテロアリールアルキル。
【００４７】
「-O-アリールカルボニル」とはラジカル-C(O)-OR29をいい、式中R29は、本明細書で定義するC6-C10アリールを表す。例示的な「-O-アリールカルボニル」基は-C(O)O-(C6-C10アリール)である。
【００４８】
「置換-O-アリールカルボニル」とはラジカル-C(O)-OR30をいい、式中R30は以下を表す：
・非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシルで置換された、C6-C10アリール。
【００４９】
「ヘテロ-O-アリールカルボニル」とはラジカル-C(O)-OR31をいい、式中R31は本明細書で定義する5〜10員のヘテロアリールを表す。
【００５０】
「置換へテロ-O-アリールカルボニル」とはラジカル-C(O)-OR32をいい、式中R32は以下を表す：
・非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシルで置換された、5〜10員のヘテロアリール。
【００５１】
「アルキル」は、1〜20の炭素原子を有する直鎖又は分枝の脂肪族炭化水素を意味する。特定のアルキルは、1〜12の炭素原子を有する。より具体的には、1〜6の炭素原子を有する低級アルキルである。更に特定の基は、1〜4の炭素原子を有する。例示的な直鎖基には、メチル、エチルn-プロピル及びn-ブチルを含む。分枝とは、メチル、エチル、プロピル又はブチルなどの1以上の低級アルキル基が直鎖アルキル鎖に結合することを意味し、例示的な分枝鎖にはイソプロピル、イソブチル、t-ブチル及びイソアミルを含む。
【００５２】
「置換アルキル」とは、本明細書の「置換」の定義において列挙した1以上の基で置換された先に定義したアルキル基をいい、特に、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ(-O-アシル又は-OC(O)R20)、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルコキシカルボニルアミノ(-NR''-アルコキシカルボニル、又は-NH-C(O)-OR27)、アミノ、置換アミノ、アミノカルボニル(カルバモイル又はアミド又は-C(O)-NR"2)、アミノカルボニルアミノ(-NR''-C(O)-NR"2)、アミノカルボニルオキシ(-O-C(O)-NR"2)、アミノスルホニル、スルホニルアミノ、アリール、-O-アリール、アジド、カルボキシル、シアノ、シクロアルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、ヘテロアリール、ニトロ、チオール、-S-アルキル、-S-アリール、-S(O)-アルキル、-S(O)-アリール、-S(O)2-アルキル及び-S(O)2-アリールからなる群から選択される1以上の置換基、例えば1〜5の置換基、及び特に1〜3の置換基、特に1の置換基を有するアルキル基をいう。特定の態様において、「置換アルキル」とは、ハロ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、アジド、-NR'''SO2R''、-SO2NR"R'''、-C(O)R''、-C(O)OR''、-OC(O)R''、-NR'''C(O)R''、-C(O)NR"R'''、-NR"R'''、又は-(CR'''R'''')mOR''' で置換されたC1-C8アルキル基をいい；式中、各R''は独立に、H、C1-C8アルキル、-(CH2)t(C6-C10アリール)、-(CH2)t(5〜10員ヘテロアリール)、-(CH2)t(C3-C10シクロアルキル)、及び-(CH2)t(4〜10員ヘテロシクロアルキル) から選択され、式中、tは0〜4の整数であり、かつ存在する任意のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル基は、非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシにより、それ自身置換されてよい。R'''及びR'''' の各々は独立に、H又はC1-C8アルキルを表す。
【００５３】
「アミノ」とは、ラジカル-NH2をいう。
【００５４】
「置換アミノ」とは、本明細書の「置換」の定義において列挙した1以上の基で置換されたアミノ基をいい、具体的には基-N(R33)2をいい、式中、各R33は以下から独立に選択される：
・水素、C1-C8アルキル、C6-C10アリール、5〜10員のヘテロアリール、4〜10員のヘテロシクロアルキル、又はC3-C10シクロアルキル；又は、
・ハロ又はヒドロキシで置換されたC1-C8アルキル；又は、
・-(CH2)t(C6-C10アリール)、-(CH2)t(5〜10員ヘテロアリール)、-(CH2)t(C3-C10シクロアルキル)又は-(CH2)t(4〜10員ヘテロシクロアルキル)であって、式中、tは0〜8の整数であり、その各々は非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシで置換されている；又は、
・両方のR33基は結合してアルキレン基を形成する。
両方のR33基が水素である場合、-N(R33)2はアミノ基である。例示的な「置換アミノ」基は、-NR33'-C1-C8アルキル、-NR33'-(CH2)t(C6-C10アリール)、-NR33'-(CH2)t(5〜10員ヘテロアリール)、-NR33'-(CH2)t(C3-C10シクロアルキル)、及び-NR33'-(CH2)t(4〜10員ヘテロシクロアルキル)であり、式中tは0〜4の整数であり、各R33'は独立にH又はC1-C8アルキルを表し；かつ、存在する任意のアルキル基は、ハロ、置換若しくは非置換のアミノ又はヒドロキシにより、それ自身置換されてよく；かつ、存在する任意のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル基は、非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシにより、それ自身置換されてよい。誤解を避けるため、以下に定義されるように、用語「置換アミノ」には、アルキルアミノ、置換アルキルアミノ、アルキルアリールアミノ、置換アルキルアリールアミノ、アリールアミノ、置換アリールアミノ、ジアルキルアミノ及び置換ジアルキルアミノ基を含む。
【００５５】
「アルキルアミノ」とは、R34がC1-C8アルキルである基-NHR34をいう。
【００５６】
「置換アルキルアミノ」とは、R35がC1-C8アルキルである基-NHR35をいい；該アルキル基は、ハロ、置換若しくは非置換のアミノ、ヒドロキシ、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、5〜10員のヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルで置換されており；かつ、存在する任意のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル基は、非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシにより、それ自身置換されてよい。
【００５７】
「アルキルアリールアミノ」とは、R36がC6-C10アリールであり、かつR37がC1-C8アルキルである基-NR36R37をいう。
【００５８】
「置換アルキルアリールアミノ」とは、R38がC6-C10アリールであり、かつR39がC1-C8アルキルである基-NR38R39をいい；該アルキル基は、ハロ、置換若しくは非置換のアミノ、ヒドロキシ、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、5〜10員のヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルで置換されており；かつ、存在する任意のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル基は、非置換のC1-C4アルキル、ハロ、シアノ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシにより、それ自身置換されてよい。
【００５９】
「アリールアミノ」とはラジカル-NHR40を意味し、式中R40は本明細書で定義されるC6-C10アリール及び5〜10員のヘテロアリールから選択される。
【００６０】
「置換アリールアミノ」とは基-NHR41をいい、式中R41は独立にC6-C10アリール及び5〜10員のヘテロアリールから選択され；かつ、存在する任意のアリール又はヘテロアリール基は、非置換のC1-C4アルキル、ハロ、シアノ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシにより、それ自身置換されてよい。
【００６１】
「ジアルキルアミノ」とは基-NR42R43をいい、式中R42及びR43の各々は独立にC1-C8アルキルから選択される。
【００６２】
「置換ジアルキルアミノ」とは基-NR44R45をいい、式中R44及びR45の各々は独立にC1-C8アルキルから選択され；該アルキル基は独立に、ハロ、ヒドロキシ、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、5〜10員のヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキルで置換され；かつ、存在する任意のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル基は、非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシにより、それ自身置換されてよい。
【００６３】
「ジアリールアミノ」とは基-NR46R47をいい、R46及びR47の各々は独立にC6-C10アリールから選択される。
【００６４】
「アミノスルホニル」又は「スルホンアミド」とは、ラジカル-S(O2)NH2をいう。
【００６５】
「置換アミノスルホニル」又は「置換スルホンアミド」とは-S(O2)N(R48)2などのラジカルをいい、式中、各R48は以下から独立に選択される：
・H、C1-C8アルキル、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、アラルキル、5〜10員のヘテロアリール、及びヘテロアラルキル；又は、
・ハロ又はヒドロキシで置換されたC1-C8アルキル；又は、
・非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシで置換された、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、アラルキル、5〜10員のヘテロアリール、又はヘテロアラルキル；
但し、少なくとも1つのR48は、H以外である。
【００６６】
例示的な「置換アミノスルホニル」又は「置換スルホンアミド」基は、-S(O2)N(R48')-C1-C8アルキル、-S(O2)N(R48')-(CH2)t(C6-C10アリール)、-S(O2)N(R48')-(CH2)t(5〜10員ヘテロアリール)、-S(O2)N(R48')-(CH2)t(C3-C10シクロアルキル)、及び-S(O2)N(R48')-(CH2)t(4〜10員ヘテロシクロアルキル)であり、式中、tは0〜4の整数であり；各R48'は独立にH又はC1-C8アルキルを表し；かつ、存在する任意のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル基は、非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシにより、それ自身置換されてよい。
【００６７】
「アラルキル」又は「アリールアルキル」とは、先に定義した1以上のアリール基で置換された先に定義したアルキル基をいう。特定のアラルキル又はアリールアルキル基は、1つのアリール基で置換されたアルキル基である。
【００６８】
「置換アラルキル」又は「置換アリールアルキル」とは、先に定義した、1以上のアリール基で置換されたアルキル基をいい；存在する任意のアリール基のうちの少なくとも1つは、非置換のC1-C4アルキル、ハロ、シアノ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシにより、それ自身置換されてよい。
【００６９】
「アリール」とは、親芳香族環系の1の炭素原子から1つの水素原子の除去により誘導される一価の芳香族炭化水素基をいう。特に、アリールは、5〜12員環、より一般的には6〜10員環を含む芳香族環系、単環系又は多環系をいう。アリール基が単環系である場合、それは優先的に6つの炭素原子を含む。典型的なアリール基には、アセアントリレン、アセナフチレン、アセフェナントリレン、アントラセン、アズレン、ベンゼン、クリセン、コロネン、フルオランテン、フルオレン、ヘキサセン、ヘキサフェン、ヘキサレン、as-インダセン、s-インダセン、インダン、インデン、ナフタレン、オクタセン、オクタフェン、オクタレン、オバレン、ペンタ-2,4-ジエン、ペンタセン、ペンタレン、ペンタフェン、ペリレン、フェナレン、フェナントレン、ピセン、プレイアデン、ピレン、ピラントレン、ルビセン、トリフェニレン及びトリナフタレンから誘導される基を含むがこれらに限定されない。特にアリール基には、フェニル、ナフチル、インデニル及びテトラヒドロナフチルを含む。
【００７０】
「置換アリール」とは、本明細書の「置換」の定義において列挙した1以上の基で置換されたアリール基をいい、特に1以上の置換基、例えば1〜5の置換基、特に1〜3の置換基、特に1の置換基で任意に置換されてよいアリール基をいう。特に、「置換アリール」とは、ハロ、C1-C8アルキル、C1-C8ハロアルキル、C1-C8ハロアルコキシ、シアノ、ヒドロキシ、C1-C8アルコキシ及びアミノから選択される1以上の基で置換されたアリール基をいう。
【００７１】
代表的な置換アリールの例には、以下を含む
【化３】
2011519897.tif 000005
。
【００７２】
これらの式において、R49及びR50のうちの1つは水素でよく、並びに少なくとも1つのR49及びR50は各々独立にC1-C8アルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、アルカノイル、C1-C8アルコキシ、ヘテロ-O-アリール、アルキルアミノ、アリールアミノ、ヘテロアリールアミノ、NR51COR52、NR51SOR52NR51SO2R52、COOアルキル、COOアリール、CONR51R52、CONR51OR52、NR51R52、SO2NR51R52、S-アルキル、SOアルキル、SO2アルキル、Sアリール、SOアリール、SO2アリールから選択され；又は、R49及びR50は結合して、N、O又はS基から選択される1以上のヘテロ原子を任意に含む5〜8原子の環(飽和又は不飽和)を形成できる。R51及びR52は独立に、水素、C1-C8アルキル、C1-C4ハロアルキル、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、置換アリール、5〜10員のヘテロアリールである。
【００７３】
「アリールアルキルオキシ」とは-O-アルキルアリールラジカルをいい、式中アルキルアリールは本明細書で定義したとおりである。
【００７４】
「置換アリールアルキルオキシ」とは- O-アルキルアリールラジカルをいい、式中アルキルアリールは本明細書で定義したとおりであり；存在する任意のアリール基は、非置換のC1-C4アルキル、ハロ、シアノ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシにより、それ自身置換されてよい。
【００７５】
「アジド」とは、ラジカル-N3をいう。
【００７６】
「カルバモイル又はアミド」とは、ラジカル-C(O)NH2をいう。
【００７７】
「置換カルバモイル又は置換アミド」とはラジカル-C(O)N(R53)2をいい、式中、各R53は独立に以下のものである：
・H、C1-C8アルキル、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、アラルキル、5〜10員のヘテロアリール、及びヘテロアラルキル；又は、
・ハロ又はヒドロキシで置換されたC1-C8アルキル；又は、
・その各々が非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシで置換された、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、アラルキル、5〜10員のヘテロアリール、又はヘテロアラルキル；
但し、少なくとも1つのR53がH以外であることを条件とする。例示的な「置換アミド／カルバモイル」基は、-C(O)NR53'-C1-C8アルキル、-C(O)NR53'-(CH2)t(C6-C10アリール)、-C(O)N53'-(CH2)t(5〜10員ヘテロアリール)、-C(O)NR53'-(CH2)t(C3-C10シクロアルキル)、及び-C(O)NR53'-(CH2)t(4〜10員ヘテロシクロアルキル)であり、式中tは0〜4の整数であり；各R53'は独立にH又はC1-C8アルキルを表し、かつ、存在する任意のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル基は、非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシにより、それ自身置換されてよい。
【００７８】
「カルボキシ」とは、ラジカル-C(O)OHをいう。
【００７９】
「シクロアルキル」とは、3〜10の炭素原子を有している環式の非芳香族ヒドロカルビル基をいう。そのようなシクロアルキル基には、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル及びシクロオクチルなどの単環系を含む。
【００８０】
「置換シクロアルキル」とは、本明細書の「置換」の定義において列挙した1以上の基で置換された先に定義したシクロアルキル基をいい、特に1以上の置換基、例えば1〜5の置換基、及び特に1〜3の置換基、特に1の置換基を有するシクロアルキル基をいう。
【００８１】
「シアノ」とは、ラジカル-CNをいう。
【００８２】
「ハロ」又は「ハロゲン」とは、フルオロ(F)、クロロ(Cl)、ブロモ(Br)及びヨード(I)をいう。特定のハロ基は、フルオロ又はクロロのいずれかである。
【００８３】
「ヘテロ」は、化合物又は化合物に存在する基を説明するのに使用される場合、該化合物又は基における1以上の炭素原子が窒素、酸素又は硫黄ヘテロ原子で置換されていることを意味する。ヘテロは、上記のヒドロカルビル基のいずれか、例えば、アルキル、例えばヘテロアルキル、シクロアルキル、例えばヘテロシクロアルキル、アリール、例えばヘテロアリール、シクロアルケニル、例えばシクロヘテロアルケニル、及び1〜5、特に1〜3のヘテロ原子を有するものに適用できる。
【００８４】
「ヘテロアリール」は、1以上のヘテロ原子、及び5〜12員環、より一般的には5〜10員環を含む、芳香族環系、単環系又は多環系を意味する。ヘテロアリール基は、例えば、5員若しくは6員の単環、又は5員環及び6員環を縮合することで形成された二環系、又は2つの縮合した6員環から形成された二環系、又はさらなる例示の目的で2つの縮合した5員環から形成された二環系であり得る。各環は、典型的には、窒素、硫黄及び酸素から選択される最高4つのヘテロ原子を含むことができる。典型的には、ヘテロアリール環は、最高4つのヘテロ原子、より典型的には最高3つのヘテロ原子、より一般的には最高2つ、例えば1つのヘテロ原子を含む。一実施態様において、ヘテロアリール環は、少なくとも1つの環窒素原子を含む。ヘテロアリール環における窒素原子は、イミダゾール若しくはピリジンの場合の様に塩基性であってよく、又はインドール若しくはピロール窒素の場合の様に基本的に非塩基性であってよい。一般に、環の任意のアミノ基置換基を含むヘテロアリール基に存在する塩基性窒素原子の数は5未満である。5員の単環式ヘテロアリール基の例には、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、フラザン、オキサゾール、オキサジアゾール、オキサトリアゾール、イソオキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、ピラゾール、トリアゾール及びテトラゾール基を含むが、これらに限定されない。6員の単環式ヘテロアリール基の例には、ピリジン、ピラジン、ピリダジン、ピリミジン及びトリアジンを含むが、これらに限定されない。別の5員環に縮合された5員環を含む二環式ヘテロアリール基の特定の例には、イミドアゾチアゾール及びイミドアゾイミダゾールを含むが、これらに限定されない。5員環に縮合された6員環を含む二環式ヘテロアリール基の特定の例には、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、ベンゾイミダゾール、ベンゾオキサゾール、イソベンゾオキサゾール、ベンゾイソオキサゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾイソチアゾール、イソベンゾフラン、インドール、イソインドール、イソインドロン、インドリジン、インドリン、イソインドリン、プリン(例えば、アデニン、グアニン)、インダゾール、ピラゾロピリミジン、トリアゾロピリミジン、ベンゾジオキソール及びピラゾロピリジン基を含むが、これらに限定されない。2つの縮合6員環を含む二環式ヘテロアリール基の特定の例には、キノリン、イソキノリン、クロマン、チオクロマン、クロメン、イソクロメン、クロマン、イソクロマン、ベンゾジオキサン、キノリジン、ベンゾオキサジン、ベンゾジアジン、ピリドピリジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、フタラジン、ナフチリジン及びプテリジン基を含むが、これらに限定されない。特定のヘテロアリール基は、チオフェン、ピロール、ベンゾチオフェン、ベンゾフラン、インドール、ピリジン、キノリン、イミダゾール、オキサゾール及びピラジンから誘導されるものである。
【００８５】
置換を含むヘテロ原子を有する代表的なアリールの例には、以下を含む：
【化４】
2011519897.tif 000006
式中、各Wは、C(R54)2、NR54、O及びSから選択され；かつ、各Yは、カルボニル、NR54、O及びSから選択され；かつ、R54は独立に、水素、C1-C8アルキル、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、及び5〜10員のヘテロアリールである。
【００８６】
代表的なヘテロアリールの例には、以下を含む：
【化５】
2011519897.tif 000007
式中、各Yは、カルボニル、N、NR55、O及びSから選択され；かつ、R55は独立に、水素、C1-C8アルキル、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、及び5〜10員のヘテロアリールである。
【００８７】
本明細書において使用する用語「ヘテロシクロアルキル」とは、4〜10員の安定な複素環式非芳香環、及び／又はそれに縮合されたN、O及びSから独立に選択される1以上のヘテロ原子を含む環を含むものをいう。縮合複素環系には炭素環を含むことができ、かつ1つの複素環を含めばよい。複素環の例には、モルフォリン、ピペリジン(例えば1-ピペリジニル、2-ピペリジニル、3-ピペリジニル及び4-ピペリジニル)、ピロリジン(例えば1-ピロリジニル、2-ピロリジニル及び3-ピロリジニル)、ピロリドン、ピラン(2H-ピラン又は4H-ピラン)、ジヒドロチオフェン、ジヒドロピラン、ジヒドロフラン、ジヒドロチアゾール、テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン、ジオキサン、テトラヒドロピラン(例えば4-テトラヒドロピラニル)、イミダゾリン、イミダゾリジノン、オキサゾリン、チアゾリン、2-ピラゾリン、ピラゾリジン、ピペラジン、及びN-メチルピペラジンなどのN-アルキルピペラジンを含むが、これらに限定されない。更なる例には、チオモルホリン及びそのS-オキシド及びS,S-二酸化物(特にチオモルホリン)を含む。なお更なる例には、アゼチジン、ピペリドン、ピペラゾン、及びN-メチルピペリジンなどのN-アルキルピペリジンを含む。ヘテロシクロアルキル基の特定の例は、以下の図例に示される：
【化６】
2011519897.tif 000008
式中、各Wは、CR56、C(R56)2、NR56、O及びSから選択され；かつ、各Yは、NR56、O及びSから選択され；かつ、R56は独立に、水素、C1-C8アルキル、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、5〜10員のヘテロアリールである。これらのヘテロシクロアルキル環は、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ(-O-アシル又は-OC(O)R20)、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルコキシカルボニルアミノ(-NR''-アルコキシカルボニル、又は-NH-C(O)-OR27)、アミノ、置換アミノ、アミノカルボニル(アミド、又は-C(O)-NR"2)、アミノカルボニルアミノ(-NR''-C(O)-NR"2)、アミノカルボニルオキシ(-OC(O)-NR"2)、アミノスルホニル、スルホニルアミノ、アリール、-O-アリール、アジド、カルボキシル、シアノ、シクロアルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、チオール、-S-アルキル、-S-アリール、-S(O)-アルキル、-S(O)-アリール、-S(O)2-アルキル、及び-S(O)2-アリールからなる群から選択される1以上の基で任意に置換できる。置換基には、例えば、ラクタム及び尿素誘導体を与えるカルボニル又はチオカルボニルを含む。
【００８８】
「ヒドロキシ」とは、ラジカル-OHをいう。
【００８９】
「ニトロ」とは、ラジカル-NO2をいう。
【００９０】
「置換」とは、1以上の水素原子が、同じ又は異なる置換基で各々独立に置換された基をいう。典型的な置換基は、以下からなる群から選択できる：ハロゲン、-R57、-O-、=O、-OR57、-SR57、-S-、=S、-NR57R58、=NR57、-CCl3、-CF3、-CN、-OCN、-SCN、-NO、-NO2、=N2、-N3、-S(O)2O-、-S(O)2OH、-S(O)2R57、-OS(O2)O-、-OS(O)2R57、-P(O)(O-)2、-P(O)(OR57)(O-)、-OP(O)(OR57)(OR58)、-C(O)R57、-C(S)R57、-C(O)OR57、-C(O)NR57R58、-C(O)O-、-C(S)OR57、-NR59C(O)NR57R58、-NR59C(S)NR57R58、-NR60C(NR59)NR57R58及び-C(NR59)NR57R58；式中、R57、R58、R59及びR60の各々は、独立に以下のものである：
・水素、C1-C8アルキル、C6-C10アリール、アリールアルキル、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、5〜10員のヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル；又は、
・ハロ又はヒドロキシで置換したC1-C8アルキル；又は、
・非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシで置換された、C6-C10アリール、5〜10員のヘテロアリール、C6-C10シクロアルキル又は4〜10員のヘテロシクロアルキル。
特定の実施態様において、置換基は、1以上の置換基、特に1〜3の置換基、特に1の置換基で置換されている。
【００９１】
更に特定の実施態様において、置換基又は基は、以下から選択される：ハロ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、アジド、-NR'''SO2R''、-SO2NR"R'''、-C(O)R''、-C(O)OR''、-OC(O)R''、-NR'''C(O)R''、-C(O)NR"R'''、-NR"R'''、-(CR'''R''')mOR'''であって、各R''はH、C1-C8アルキル、-(CH2)t(C6-C10アリール) 、-(CH2)t(5〜10員ヘテロアリール)、-(CH2)t(C3-C10シクロアルキル)、及び-(CH2)t(4〜10員ヘテロシクロアルキル) から独立に選択され、式中tは0〜4の整数であり；かつ、
・存在する任意のアルキル基は、ハロ又はヒドロキシにより、それ自身置換されてよく；かつ、
・存在する任意のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル基は、非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシにより、それ自身置換されてよい。各R''は独立に、H又はC1-C6アルキルを表す。
【００９２】
「置換スルファニル」とは基-SR61をいい、式中R61は以下から選択される：
・C1-C8アルキル、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、アラルキル、5〜10員のヘテロアリール、及びヘテロアラルキル；又は、
・ハロ、置換若しくは非置換のアミノ、又はヒドロキシで置換されたC1-C8アルキル；又は、
・その各々が非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシで置換された、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、アラルキル、5〜10員のヘテロアリール、又はヘテロアラルキル。
【００９３】
例示的な「置換スルファニル」基は、-S-(C1-C8アルキル)、並びに-S-(C3-C10シクロアルキル)、-S-(CH2)t(C6-C10アリール)、-S-(CH2)t(5〜10員ヘテロアリール)、-S-(CH2)t(C3-C10シクロアルキル)、及び-S-(CH2)t(4〜10員ヘテロシクロアルキル)であり、式中tは0〜4の整数であり、かつ存在する任意のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル基は、非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシにより、それ自身置換されてよい。用語「置換スルファニル」には、以下に定義する、「アルキルスルファニル」基又は「アルキルチオ」基、「置換アルキルチオ」基又は「置換アルキルスルファニル」基、「シクロアルキルスルファニル」基又は「シクロアルキルチオ」基、「置換シクロアルキルスルファニル」基又は「置換シクロアルキルチオ」基、「アリールスルファニル」基又は「アリールチオ」基、及び「ヘテロアリールスルファニル」基又は「ヘテロアリールチオ」基を含む。
【００９４】
「アルキルチオ」又は「アルキルスルファニル」とはラジカル- SR62をいい、式中R62は本明細書で定義されるC1-C8アルキル又は基である。代表例には、メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ及びブチルチオを含むが、これらに限定されない。
【００９５】
「置換アルキルチオ」又は「置換アルキルスルファニル」とは基-SR63をいい、式中R63は、ハロ、置換若しくは非置換のアミノ、又はヒドロキシで置換されたC1-C8アルキルである。
【００９６】
「シクロアルキルチオ」又は「シクロアルキルスルファニル」とはラジカル-SR64をいい、式中R64は本明細書で定義されるC3-C10シクロアルキル又は基である。代表例には、シクロプロピルチオ、シクロヘキシルチオ、及びシクロペンチルチオを含むが、これらに限定されない。
【００９７】
「置換シクロアルキルチオ」又は「置換シクロアルキルスルファニル」とは基-SR65をいい、式中R65はハロ、置換若しくは非置換のアミノ、又はヒドロキシで置換されたC3-C10シクロアルキルである。
【００９８】
「アリールチオ」又は「アリールスルファニル」とはラジカル-SR66をいい、式中R66は本明細書で定義されるC6-C10アリール基である。
【００９９】
「ヘテロアリールチオ」又は「ヘテロアリールスルファニル」とはラジカル-SR67をいい、式中R67は本明細書で定義される5〜10員のヘテロアリール基である。
【０１００】
「置換スルフィニル」とは基-S(O)R68をいい、式中R68は以下から選択される：
・C1-C8アルキル、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、アラルキル、5〜10員のヘテロアリール、及びヘテロアラルキル；又は、
・ハロ、置換若しくは非置換のアミノ、又はヒドロキシで置換されたC1-C8アルキル；又は、
・非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシで置換された、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、アラルキル、5〜10員のヘテロアリール、又はヘテロアラルキル。
【０１０１】
例示的な「置換スルフィニル」基は、-S(O)-(C1-C8アルキル)、並びに-S(O)-(C3-C10シクロアルキル)、-S(O)-(CH2)t(C6-C10アリール)、-S(O)-(CH2)t(5〜10員ヘテロアリール)、-S(O)-(CH2)t(C3-C10シクロアルキル)、及び-S(O)-(CH2)t(4〜10員ヘテロシクロアルキル)であり、式中tは0〜4の整数であり、存在する任意のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル基は、非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシにより、それ自身置換されてよい。用語置換スルフィニルには、本明細書で定義される基「アルキルスルフィニル」、「置換アルキルスルフィニル」、「シクロアルキルスルフィニル」、「置換シクロアルキルスルフィニル」、「アリールスルフィニル」及び「ヘテロアリールスルフィニル」を含む。
【０１０２】
「アルキルスルフィニル」とはラジカル-S(O)R69をいい、式中R69は本明細書で定義されるC1-C8アルキル基である。代表例には、メチルスルフィニル、エチルスルフィニル、プロピルスルフィニル及びブチルスルフィニルを含むが、これらに限定されない。
【０１０３】
「置換アルキルスルフィニル」とはラジカル-S(O)R70をいい、式中R70は、ハロ、置換若しくは非置換のアミノ、又はヒドロキシで置換された本明細書で定義されるC1-C8アルキル基である。
【０１０４】
「シクロアルキルスルフィニル」とはラジカル-S(O)R71をいい、式中R71は本明細書で定義されるC3-C10シクロアルキル又は基である。代表例には、シクロプロピルスルフィニル、シクロヘキシルスルフィニル、及びシクロペンチルスルフィニルを含むが、これらに限定されない。
【０１０５】
「置換シクロアルキルスルフィニル」とは基-S(O)R72をいい、式中R72は、ハロ、置換若しくは非置換のアミノ、又はヒドロキシで置換されたC3-C10シクロアルキルである。
【０１０６】
「アリールスルフィニル」とはラジカル-S(O)R73をいい、式中R73は本明細書で定義されるC6-C10アリール基である。
【０１０７】
「ヘテロアリールスルフィニル」とはラジカル-S(O)R74をいい、式中R74は本明細書で定義される5〜10員のヘテロアリール基である。
【０１０８】
「置換スルホニル」とは基-S(O)2R75をいい、式中R75は以下から選択される： 
・C1-C8アルキル、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、アラルキル、5〜10員のヘテロアリール、及びヘテロアラルキル；又は、
・ハロ、置換若しくは非置換のアミノ、又はヒドロキシで置換されたC1-C8アルキル；又は、
・その各々が非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシで置換された、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、アラルキル、5〜10員のヘテロアリール、又はヘテロアラルキル。
【０１０９】
例示的な「置換スルホニル」基は、-S(O)2-(C1-C8アルキル)、並びに-S(O)2-(C3-C10シクロアルキル)、-S(O)2-(CH2)t(C6-C10アリール)、-S(O)2-(CH2)t(5〜10員ヘテロアリール)、-S(O)2-(CH2)t(C3-C10シクロアルキル)、及び-S(O)2-(CH2)t(4〜10員ヘテロシクロアルキル)であり、式中tは0〜4の整数であり、かつ存在する任意のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル基は、非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシにより、それ自身置換されてよい。用語置換スルホニルには、アルキルスルホニル基、置換アルキルスルホニル基、シクロアルキルスルホニル基、置換シクロアルキルスルホニル基、アリールスルホニル基及びヘテロアリールスルホニル基を含む。
【０１１０】
「アルキルスルホニル」とはラジカル-S(O)2R76をいい、式中R76は本明細書で定義されるC1-C8アルキル基である。代表例には、メチルスルホニル、エチルスルホニル、プロピルスルホニル及びブチルスルホニルを含むが、これらに限定されない。
【０１１１】
「置換アルキルスルホニル」とはラジカル-S(O)2R77をいい、式中R77は、ハロ、置換若しくは非置換のアミノ、又はヒドロキシで置換された本明細書で定義されるC1-C8アルキル基である。
【０１１２】
「シクロアルキルスルホニル」とはラジカル-S(O)2R78をいい、式中R78は本明細書で定義されるC3-C10シクロアルキル又は基である。代表例には、シクロプロピルスルホニル、シクロヘキシルスルホニル及びシクロペンチルスルホニルを含むが、これらに限定されない。
【０１１３】
「置換シクロアルキルスルホニル」とは基-S(O)2R79をいい、式中R79は、ハロ、置換若しくは非置換のアミノ、又はヒドロキシで置換されたC3-C10シクロアルキルである。
【０１１４】
「アリールスルホニル」とはラジカル-S(O)2R80をいい、式中R80は本明細書で定義されるC6-C10アリール基である。
【０１１５】
「ヘテロアリールスルホニル」とはラジカル-S(O)2R81をいい、式中R81は本明細書で定義される5〜10員のヘテロアリール基である。
【０１１６】
「スルホ」又は「スルホン酸」とは、-SO3Hなどのラジカルをいう。
【０１１７】
「置換スルホ」又は「スルホン酸エステル」とは基-S(O)2OR82をいい、式中R82は以下から選択される：
・C1-C8アルキル、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、アラルキル、5〜10員のヘテロアリール、及びヘテロアラルキル；又は、
・ハロ、置換若しくは非置換のアミノ、又はヒドロキシで置換されたC1-C8アルキル；又は、
・その各々が非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシで置換された、C3-C10シクロアルキル、4〜10員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、アラルキル、5〜10員のヘテロアリール、又はヘテロアラルキル。
【０１１８】
例示的な「置換スルホ」又は「スルホン酸エステル」基は、-S(O)2-O-(C1-C8アルキル)、並びに-S(O)2-O-(C3-C10シクロアルキル)、-S(O)2-O-(CH2)t(C6-C10アリール)、-S(O)2-O-(CH2)t(5〜10員ヘテロアリール)、-S(O)2-O-(CH2)t(C3-C10シクロアルキル)、及び-S(O)2-O-(CH2)t(4〜10員ヘテロシクロアルキル)であり、式中tは0〜4の整数であり、かつ存在する任意のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル基は、非置換のC1-C4アルキル、ハロ、非置換のC1-C4アルコキシ、非置換のC1-C4ハロアルキル、非置換のC1-C4ヒドロキシアルキル、又は非置換のC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシにより、それ自身置換されてよい。
【０１１９】
「チオール」とは、基-SHをいう。
【０１２０】
有機合成の分野における当業者は、安定で化学的に実現可能な複素環におけるヘテロ原子の最大数が、芳香族又は非芳香族化合物にかかわらず、環のサイズ、不飽和度、及びヘテロ原子の価により決定されることを認識するであろう。一般に、複素環は、芳香族複素環が化学的に実現可能でかつ安定である限り、1〜4のヘテロ原子を有することができる。
【０１２１】
「医薬として許容し得る」とは、連邦政府若しくは州政府の監督機関又は米国以外の国の対応機関により承認されたか又は承認され得ることを意味し、動物及びより具体的にはヒトにおける使用のための米国薬局方又は他の公認された薬局方に収載されていることを意味する。
【０１２２】
「医薬として許容し得る塩」とは、医薬として許容することができ、かつ親化合物の所望の薬理活性を有する、本発明の化合物の塩をいう。特に、そのような塩は無毒性であり、無機又は有機の酸付加塩及び塩基付加塩であり得る。具体的には、このような塩には、以下を含む：(1)塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、その他などの無機酸で形成された酸付加塩；酢酸、プロピオン酸、ヘキサン酸、シクロペンタンプロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、3-(4-ヒドロキシベンゾイル)安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、1,2-エタンジスルホン酸、2-ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、4-クロロベンゼンスルホン酸、2-ナフタレンスルホン酸、4-トルエンスルホン酸、カンファスルホン酸、4-メチルビシクロ[2.2.2]-オクト-2-エン-1-カルボン酸、グルコヘプトン酸、3-フェニルプロピオン酸、トリメチル酢酸、三級ブチル酢酸、ラウリル硫酸、グルコン酸、グルタミン酸、ヒドロキシナフトエ酸、サリチル酸、ステアリン酸、ムコン酸、その他などの有機酸で形成された酸付加塩；又は、(2)酸性プロトンが親化合物に存在する場合に、そのいずれかが金属イオン、例えば、アルカリ金属イオン、アルカリ土類イオン又はアルミニウムイオンにより置換されて形成された塩；又はエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、N-メチルグルカミン、その他などの有機塩基と配位する塩。塩は、例えば、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、テトラアルキルアンモニウム、その他などのみ；及び、化合物が塩基的な官能性を含む場合、塩酸塩、臭化水素酸塩、酒石酸塩、メシル酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、シュウ酸塩、その他などの無毒の有機又は無機酸の塩；を更に含む。用語「医薬として許容し得るカチオン」とは、酸性官能基の許容可能なカチオン性対イオンをいう。そのようなカチオンは、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、テトラアルキルアンモニウムカチオン、その他などにより例示される。
【０１２３】
「医薬として許容し得るビヒクル」とは、本発明の化合物と共に投与される希釈剤、補助剤、賦形剤又は担体をいう。
【０１２４】
「プロドラッグ」とは、切断可能基を有し、加溶媒分解により、又は生理学的条件下で、インビボにおいて薬学的に活性である本発明の化合物になる、本発明の化合物の誘導体を含む化合物をいう。そのような例には、コリンエステル誘導体及びその同類、N-アルキルモルフォリンエステル及びその同類を含むが、これらに限定されない。
【０１２５】
「溶媒和物」とは、通常、加溶媒分解反応によって溶媒と会合する化合物の形態をいう。この物理的会合には、水素結合を含む。従来型の溶媒には、水、エタノール、酢酸などを含む。本発明の化合物は、例えば結晶形で調製でき、溶媒和できるか又は水和できる。適切な溶媒和物には、水和物などの医薬として許容し得る溶媒和物を含み、化学量論的溶媒和物及び非化学量論的溶媒和物の両方を更に含む。特定の例において、溶媒和物は、例えば1以上の溶媒分子が結晶質固体の結晶格子に取り込まれる場合に、単離できる。「溶媒和物」とは、液相及び単離可能な溶媒和物の両方を包含する。代表的な溶媒和物には、水和物、エタノラート及びメタノラートを含む。
【０１２６】
「対象」には、ヒトを含む。用語「ヒト」、「患者」及び「対象」は、本明細書において互換的に使用される。
【０１２７】
「治療上有効量」とは、疾患を治療するために対象へ投与される場合に、該疾患のそのような治療を発効させるのに十分である本発明の化合物の量を意味する。「治療上有効量」は、化合物、疾患及びその重篤性、並びに治療される対象の年齢、体重などに応じて、変化し得る。
【０１２８】
「予防する（preventing）」又は「予防（prevention）」とは、疾患又は障害を得るか又は発現するリスク、すなわち該疾患の臨床症状のうちの少なくとも1つを引き起こすリスクの減少をいい、疾患原因物質に曝露されている可能性がある対象、又は疾患の発症に先立って該疾患に罹りやすい可能性のある対象において発現させないことをいう。
【０１２９】
用語「予防（prophylaxis）」は「予防（prevention）」に関連し、その目的が疾患を治療又は治癒することよりも予防することにある測定又は措置をいう。予防措置の非限定的な例には、ワクチンの投与；例えば不動化に起因する血栓症のリスクのある患者に対する低分子量ヘパリンの投与；及び、マラリアが風土性である、又はマラリアになるリスクが高い地理的領域への訪問に先立つクロロキンなどの抗マラリア薬の投与；を含むことができる。
【０１３０】
任意の疾患又は障害の「治療する（treating）」又は「治療（treatment）」とは、一実施態様において、疾患又は障害を回復させること、すなわち該疾患を抑止するか又はその臨床症状のうちの少なくとも1つ徴候、範囲又は重篤度を減少させることをいう。別の実施態様において、「治療する」又は「治療」とは、少なくとも1つの物理的パラメータを回復させることをいい、これは対象によって認識できなくてもよい。さらに別の実施態様において、「治療する」又は「治療」とは、物理的に、(例えば、認識可能な症状の安定化)、生理的に、(例えば、物理的パラメータの安定化)、又はその両方のいずれかで、疾患又は障害を変調させることをいう。さらなる実施態様において、「治療する」又は「治療」とは、疾患の進行を減速させることに関する。
【０１３１】
本明細書において使用する用語「本発明の化合物」及び等価な表現は、本明細書に記載する式(e)の任意の1つに従う化合物を包含することを意味し、文脈が許す場合、その表現には、医薬として許容し得る塩、該化合物の溶媒和物、及び医薬として許容し得る塩の溶媒和物、例えば、水和物を含む。同様に、中間体への言及は、文脈が許す場合、それらがそれ自身特許請求されているか否かに関わらず、それらの塩及び溶媒和物を包含することを意味する。
【０１３２】
本明細書において範囲が言及される場合、限定されるものではないが、例えばC1-C8アルキルの言及範囲は、前記範囲の各メンバーの表現とみなすべきである。
【０１３３】
本発明の化合物の他の誘導体は、それらの酸及び酸誘導体形態の両方の活性を有することができるが、該酸感受性形態ではしばしば、哺乳動物において溶解性、組織適合性又は遅延放出の利点を付与する(Bundgard, H.の文献, 「プロドラッグの設計（Design of Prodrugs）」, pp. 7-9, 21-24, Elsevier, Amsterdam 1985を参照されたい)。プロドラッグには、当業者に周知の酸誘導体、例えば、親酸と適切なアルコールとの反応により調製されるエステル、又は親酸化合物と置換若しくは非置換のアミンとの反応により調製されるアミン、又は酸無水物、又は混合無水物などを含む。本発明の化合物上に存在する酸性基から誘導される単純な脂肪族又は芳香族エステル、アミド及び無水物は、特に有用なプロドラッグである。場合によっては、(アシルオキシ)アルキルエステル又は((アルコキシカルボニル)オキシ)アルキルエステルなどの二重エステル型プロドラッグを調製することが望ましい。特定のそのようなプロドラッグは、本発明の化合物のC1〜C8アルキル、C2-C8アルケニル、アリール、C7-C12置換アリール、及びC7-C12アリールアルキルエステルである。
【０１３４】
本明細書において使用する用語「同位体異型」とは、当該化合物を構成する1以上の原子で不自然な同位体比率を含む化合物をいう。例えば、化合物の「同位体異型」には、例えば、重水素(2H又はD)、炭素-13(13C)、窒素-15(15N)、その他などの1以上の非放射性同位体を含むことができる。そのような同位体的置換がなされる化合物において、存在する場合、以下の原子は変更でき、その結果、例えば、任意の水素は2H/Dであり得、任意の炭素は13Cであり得、又は任意の窒素は15Nであり得、そのような原子の存在及び配置は当業者により決定できることができることが理解されよう。同様に、本発明は、例示のための例において、放射性同位体を有する同位体異型の調製を含むことができ、ここでその結果として生じる化合物は、薬剤及び／又は基質組織分布研究のために使用できる。放射性同位体トリチウム(すなわち3H)及び炭素-14(すなわち14C)は、それらの取込みの容易さ、及び検出手段の調製の観点から本目的に特に有用である。更に、11C、18F、15O及び13Nなどの陽電子放出核種で置換され、基質受容体占有を検討するための陽電子放出組織分布(PET)研究に有用であり得る化合物を調製できる。
【０１３５】
本明細書に提供される本発明の化合物の全ての同位体異型は、放射性であるか否かに関わらず、本発明の範囲内に包含されることを意図する。
【０１３６】
同じ分子式を有するが、性質において、又はそれらの原子の結合の配列において、又は空間的にそれらの原子の配置において異なる化合物を「異性体」と称することも理解されるべきである。空間的にそれらの原子の配置において異なる異性体は、「立体異性体」と称される。
【０１３７】
互いの鏡像でない立体異性体は「ジアステレオマー」と称され、互いの重ね合わせることのできない鏡像である立体異性体は「鏡像異性体」と称される。化合物が不斉中心を有する場合、例えば、それが4つの異なる基に結合する場合、対の鏡像異性体が可能である。鏡像異性体はその不斉中心の絶対配置により特徴づけることができ、カーン及びプレローグのR-及びS-配列法則により、又は該分子が偏光の平面を回転させ、右旋性若しくは左旋性として(すなわち、それぞれ(+)又は(-)-異性体として)指定される様式により、記載される。キラル化合物は、個々の鏡像異性体として、又はその混合としての」いずれかで存在できる。等しい比率の鏡像異性体を含む混合は、「ラセミ混合物」と呼ばれる。
【０１３８】
「互変異性体」とは、特定の化合物構造の互換的形態であり、かつ水素原子及び電子の置換において異なる化合物をいう。従って、2つの構造は、π電子及び原子(通常、H)の動きを介して平衡であり得る。例えば、エノール及びケトンは、酸又は塩基のいずれかを用いた処理により迅速に相互変換するので、互変異性体である。平衡異性の別の例には、フェニルニトロメタンのアシ-及びニトロ-形態であり、これらは酸又は塩基の処理により同様に形成される。そのような互変異性体には、本明細書に開示される本発明の化合物の範囲内に適切に包含される。
【０１３９】
互変異性型は、関心対象の化合物の最適な化学反応性の実現及び生物活性に関連し得る。
【０１４０】
本発明の化合物は、1以上の不斉中心を有することができ；従って、そのような化合物は、個々の(R)-若しくは(S)-立体異性体として、又はその混合物として、生産し得る。
【０１４１】
他に示さない限り、明細書及び特許請求の範囲の特定の化合物の記載又は名称は、個々の鏡像異性体及び混合物の両方、又はそうでない場合にはそのラセミ体を含むことを意図する。立体化学の決定及び立体異性体の分離のための方法は周知技術である。
【０１４２】
（化合物）
本発明は、MAPKAPK5がMMP1の発現を生じる経路において機能すること、及び本発明の化合物などのMAPKAPK5活性の阻害剤が、MMP活性の異常に高い発現が関与する疾患の治療に有用であるという発見に基づく。
【０１４３】
本発明の化合物は、全般的に、アリール又はヘテロアリール基により5-位で、及びヘテロアリールアミノ基により8-位で置換された[1.2.4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン及びイミダゾ[1,2-a]ピラジンとして記載できる。
【０１４４】
本発明の化合物は、より少ない毒性、良好な吸収、良好な半減期、良好な溶解性、低タンパク結合能、より少ない薬剤-薬剤相互作用、及び良好な代謝安定性を示すことができる。特定の態様において、本発明の化合物は、薬理特性、特に改善された効力及び改善された許容度において、予想外の顕著な向上を呈する。
【０１４５】
より具体的には、本発明は、式 Ia又はIbによる本発明の化合物に関する：
【化７】
2011519897.tif 000009
式中、
W、W'、Y及びY'の各々は、独立にCR2a又はNであり；
但し、W、W'、Y及びY'の2つ以下が同時にNであり得ることを条件とし；
Xは、N又はCHであり；
Lは、単結合、-CO-、-SO-、-SO2-、-N(R2c)CO-、及び-N(R2c)SO2-から選択され；
環Pは、置換又は非置換であり；
【化８】
2011519897.tif 000010
R1は、H、又は置換若しくは非置換のC1-C6アルキルであり；
各R2aは、H、置換若しくは非置換のC1-C6アルキル、C1-C6アルコキシ、シアノ、及びハロから独立に選択され；
各R2cは、H及びC1-C6アルキルから選択され；
R2dは、H、C3-C8シクロアルキル、又はハロ、アミド若しくはC3-C8シクロアルキルにより任意に置換されたC1-C6アルキルであり；
各m1、m2及びm3は、独立に1又は2であり；かつ、
R3は、置換若しくは非置換のC1-C6アルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、及び置換若しくは非置換のヘテロアリールから選択される。
【０１４６】
一実施態様において、式 Ia又はIbによる本発明の化合物に関して、R1は、H、Me、Et、i-Pr又はCF3である。
【０１４７】
一実施態様において、式 Ia又はIbによる本発明の化合物に関して、R1は、Hである。
【０１４８】
一実施態様において、式 Ia又はIbによる本発明の化合物に関して、Lは、単結合、-CO-、又は-N(R2c)CO-である。
【０１４９】
ある特定の実施態様において、式 Ia又はIbによる本発明の化合物に関して、Lは、単結合である。
【０１５０】
一実施態様において、式 Ia又はIbによる本発明の化合物に関して、R1は、Me、Et、n-Pr又はi-Prである。
【０１５１】
一実施態様において、式 Ia又はIbによる本発明の化合物に関して、W、W'、Y及びY'の各々は、独立にCR2aである。
【０１５２】
一実施態様において、式 Ia又はIbによる本発明の化合物に関して、W、W'、Y及びY'のうち1つはNであり、その残りは独立にCR2aである。
【０１５３】
一実施態様において、式 Ia又はIbによる本発明の化合物に関して、W、W'、Y及びY'の2つはNであり、その残りは独立にCR2aである。
【０１５４】
ある特定の実施態様において、式 Ia又はIbによる本発明の化合物に関して、W、W'、Y及びY'の各々は、独立にCHである。
【０１５５】
一実施態様において、式 Ia又はIbによる本発明の化合物に関して、W、W'及びYの各々は、独立にCHであり；かつ、Y'は、Nである。
【０１５６】
一実施態様において、式 Ia又はIbによる本発明の化合物に関して、W及びW'の各々は、独立にCHであり；かつ、Y及びY'の各々は、Nである。
【０１５７】
一実施態様において、式 Iaによる本発明の化合物に関して、該化合物は、式 IIa、IIb、IIc又はIIdによるものであり：
【化９】
2011519897.tif 000011
式中、X、L及び環Pは、式 Iaについて定義されたものであり；各R2aは、H、置換若しくは非置換のC1-C6アルキル、置換若しくは非置換のC1-C6アルコキシ、シアノ、及びハロから独立に選択され；かつ、R3は、置換若しくは非置換のアリール、及び置換若しくは非置換のヘテロアリールから独立に選択される。
【０１５８】
さらなる態様において、式 Ibによる本発明の化合物に関して、該化合物は、式 IIe、IIf又はIIgによるものであり：
【化１０】
2011519897.tif 000012
式中、L及び環Pは、式 Ibについて定義されたものであり；各R2aは、H、置換若しくは非置換のC1-C6アルキル、置換若しくは非置換のC1-C6アルコキシ、シアノ、及びハロから独立に選択され；かつ、R3は、置換若しくは非置換のアリール、及び置換若しくは非置換のヘテロアリールから独立に選択される。
【０１５９】
一実施態様において、式Ia-IIgの任意の1つによる本発明の化合物に関して、各R2aは、Hである。
【０１６０】
一実施態様において、式I-IIgの任意の1つによる本発明の化合物に関して、各R2aは、Me、Et、Pr、イソ-Pr、Cl、F、CN、OMe及びCF3から選択される。
【０１６１】
一実施態様において、式Ia-IIgの任意の1つによる本発明の化合物に関して、Lは、単結合である。
【０１６２】
一実施態様において、式Ia-IIgの任意の1つによる本発明の化合物に関して、Lは、-CO-又は-NHCO-である。
【０１６３】
一実施態様において、式Ia-IIgの任意の1つによる本発明の化合物に関して、環Pは、置換又は非置換であり：
【化１１】
2011519897.tif 000013
かつ、R2d及びm1は、式Iについて定義されたものである。
【０１６４】
一実施態様において、式Ia-IIgの任意の1つによる本発明の化合物に関して、R2aは、H、非置換のC1-C6アルキル、非置換のC1-C6ハロアルキル、非置換のC1-C6アルコキシ、シアノ、又はハロである。
【０１６５】
別の更なる実施態様において、式Ia-IIgの任意の1つによる本発明の化合物に関して、1つのR2aは、Me、Et、Pr、イソ-Pr、Cl、F、CN、OMe、及びCF3から選択され、その他はHである。
【０１６６】
一実施態様において、式Ia-IIgの任意の1つによる本発明の化合物に関して、W、W'、Y、及びY''、X、L、環P、R1、R2a、R2c及びR2dの各々は、先の段落の任意の1つに記載されており、かつR3は置換若しくは非置換のアリールから選択される。
【０１６７】
一実施態様において、式Ia-IIgの任意の1つによる本発明の化合物に関して、W、W'、Y及びY'、X、L、環P、R1、R2a、R2c及びR2dの各々は、先の段落の任意の1つに記載されており、かつR3は、ハロ、シアノ、非置換のC1-C6アルコキシ、若しくは非置換のC1-C6アルキルで任意に置換されたアミドにより任意に置換されたフェニルである。
【０１６８】
さらなる態様において、式Ia-IIgの任意の1つによる本発明の化合物に関して、W、W'、Y及びY'、X、L、環P、R1、R2a、R2c及びR2dの各々は先の段落の任意の1つに記載されており、かつR3はF、Cl、Br、シアノ、OMe、OEt、On-Pr、Oi-Pr又はMe、Et、n-Pr若しくはi-Prで任意に置換されたアミドにより任意に置換されたフェニルである。
【０１６９】
別の実施態様において、式Ia-IIgの任意の1つによる本発明の化合物に関して、W、W'、Y及びY'、X、L、環P、R1、R2a、R2c及びR2dの各々は先の段落の任意の1つに記載されており、かつR3は置換若しくは非置換のヘテロアリールから選択される。
【０１７０】
更なる実施態様において、式Ia-IIgの任意の1つによる本発明の化合物に関して、W、W'、Y及びY'、X、L、環P、R1、R2a、R2c及びR2dの各々は先の段落の任意の1つに記載されており、かつR3はフェニル、ピリジル、インドリル、イソインドリル、ピロリル、フラニル、チエニル、ピラゾリル、オキサゾリル及びチアゾリルから選択され、その各々は非置換であり得、又はヒドロキシル、シアノ、ハロ、若しくは任意に非置換のC1-C6アルキルにより置換されたアミドで置換できる。
【０１７１】
別の更なる実施態様において、式Ia-IIgの任意の1つによる本発明の化合物に関して、W、W'、Y及びY'、X、L、環P、R1、R2a、R2c及びR2dの各々は先の段落の任意の1つに記載されており、かつR3はフェニル、ピリジル、インドリル、イソインドリル、ピロリル、フラニル、チエニル、ピラゾリル、オキサゾリル及びチアゾリルから選択され、その各々は非置換であり得るか、又はヒドロキシル、シアノ、F、Cl、Br、若しくはMe、Et、n-Pr、i-Prで任意に置換されたアミドで置換できる。
【０１７２】
一実施態様において、式Ia-IIgの任意の1つによる本発明の化合物に関して、W、W'、Y及びY'、X、L、環P、R1、R2a、R2c及びR2dの各々は先の段落の任意の1つに記載されており、かつR3は
【化１２】
2011519897.tif 000014
であり、かつA1、A2及びA3の各々は、S、O、N、NR3a及びCR3aから独立に選択され；R3aの各々は独立に、H、又は置換若しくは非置換のC1-C6アルキルであり；かつ、R3bは、CONH2、CONHMe、又はCNである。
【０１７３】
一実施態様において、式Ia-IIgの任意の1つによる本発明の化合物に関して、W、W'、Y及びY'、X、L、環P、R1、R2a、R2c及びR2dの各々は先の段落の任意の1つに記載されており、かつR3は
【化１３】
2011519897.tif 000015
である。
【０１７４】
一実施態様において、式Ia-IIgの任意の1つによる本発明の化合物に関して、W、W'、Y及びY'、X、L、環P、R1、R2a、R2c及びR2dの各々は先の段落の任意の1つに記載されており、かつR3は
【化１４】
2011519897.tif 000016
である。
【０１７５】
一実施態様において、式Ia-IIgの任意の1つによる本発明の化合物に関して、W、W'、Y及びY'、X、L、環P、R1、R2a、R2c及びR2dの各々は先の段落の任意の1つに記載されており、かつR3は
【化１５】
2011519897.tif 000017
から選択される。
【０１７６】
一実施態様において、式Ia-IIgの任意の1つによる本発明の化合物に関して、W、W'、Y及びY'、X、L、環P、R1、R2a、R2c及びR2dの各々は先の段落の任意の1つに記載されており、かつR3は
【化１６】
2011519897.tif 000018
であり、式中、下つき添字mは0、1、2、3、及び4から選択され、かつ各R3dは独立に置換若しくは非置換のC1-C6アルキル又はハロである。
【０１７７】
一実施態様において、式Ia-IIgの任意の1つによる本発明の化合物に関して、W、W'、Y及びY'、X、L、環P、R1、R2a、R2c及びR2dの各々は先の段落の任意の1つに記載されており、かつR3は
【化１７】
2011519897.tif 000019
であり、式中、下つき添字mは0、1、2、3、及び4から選択され、かつ各R3dは独立に置換若しくは非置換のC1-C6アルキル又はハロである。
【０１７８】
一実施態様において、式Ia-IIgの任意の1つによる本発明の化合物に関して、W、W'、Y及びY'、X、L、環P、R1、R2a、R2c及びR2dの各々は先の段落の任意の1つに記載されており、かつR3は
【化１８】
2011519897.tif 000020
であり、式中、下つき添字mは0、1、2、又は3から選択され、かつ各R3dは独立に置換若しくは非置換のC1-C6アルキル又はハロである。
【０１７９】
一実施態様において、式Ia-IIgの任意の1つによる本発明の化合物に関して、W、W'、Y及びY'、X、L、環P、R1、R2a、R2c、R2d及びR3の各々は、先の段落の任意の1つにて説明したものであり；mは、1又は2であり；かつ、各R3dは、Me、Cl又はFである。
【０１８０】
ある種の実施態様において、式Ia-IIgの任意の1つによる本発明の化合物に関して、W、W'、Y及びY'、X、L、環P、R1、R2a、R2c、R2d及びR3の各々は先の段落の任意の1つにて説明したものであり、かつR3aはC1-C6アルキルである。別の実施態様において、R3aは、C1-C4アルキルである。
【０１８１】
ある種の実施態様において、式Ia-IIgの任意の1つによる本発明の化合物に関して、W、W'、Y及びY'、X、L、環P、R1、R2a、R2c、R2d及びR3の各々は先の段落の任意の1つにて説明したものであり、かつR3dはC1-C6アルキルである。別の実施態様において、R3dは、C1-C4アルキルである。
【０１８２】
一実施態様において、C1-C6アルキル基は、ハロ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、アジド、-NR10SO2R9、-SO2NR9R10、-C(O)R9、-C(O)OR9、-OC(O)R9、-NR10C(O)R9、-C(O)NR9R10、-NR9R10、-(CR10R11)mOR10から独立に選択される1以上の基(1〜3の置換基、特に1の置換基など)で任意に置換されており、かつ式中、mは1〜5の整数である。
【０１８３】
一実施態様において、各R9は、H、C1-C8アルキル、-(CH2)t(C6-C10アリール)、-(CH2)t(C5-C10ヘテロアリール)、-(CH2)t(C3-C10シクロアルキル)、及び-(CH2)t(C5-C10ヘテロシクロアルキル) から独立に選択され、式中、tは0〜4の整数である。
【０１８４】
一実施態様において、各R9は先に記載したものであり、かつC1-C6アルキル基はハロにより任意に置換でき、及び任意にO、S及び-N(R12)-から選択される1つ又は2つのヘテロ部分を含み、但し2つのO原子、2つのS原子、又はO及びS原子が互いに直接結合していないことを条件とする。
【０１８５】
一実施態様において、各R9は先に記載したものであり、かつアリール、ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル基のいずれかはそれ自身、C1-C4アルキル、ハロ、C1-C4アルコキシ、C1-4ハロアルキル、C1-C4ヒドロキシアルキル又はC1-C4ハロアルコキシ若しくはヒドロキシで置換されてよい。
【０１８６】
一実施態様において、各R9は先に記載したものであり、かつR10及びR11の各々は独立にH又はC1-C6アルキルを表す。
【０１８７】
一実施態様において、各R9は先に記載したものであり、かつR12及びR13の各々は独立にH又はC1-C4アルキルを表す。
【０１８８】
一実施態様において、R10及びR11の各々は独立にH又はC1-C6アルキルを表す。
【０１８９】
一実施態様において、各R9は、H以外である。
【０１９０】
ある種の実施態様において、式Ia-IIgの任意の1つによる本発明の化合物に関して、R2aは、C1-C6アルコキシであり；かつ、該アルコキシ基は-OR9であり；かつ、R9は、上記実施態様の任意の1つにおいて記載したものであり；但し、R9は、H以外である。
【０１９１】
一実施態様において、式 Iaによる本発明の化合物に関して、該化合物は、式IIIa、IIIb又はIIIcによるものであり：
【化１９】
2011519897.tif 000021
Xは、CH又はNであり；Lは、単結合、-CO-、又は-NHCO-であり；環Pは
【化２０】
2011519897.tif 000022
であり；かつ、R2dは、H、C3-C8シクロアルキル、又はハロ、アミド若しくはC3-C8シクロアルキルにより任意に置換されたC1-C6アルキルである。
【０１９２】
さらなる実施態様において、式 Ibによる本発明の化合物に関して、該化合物は、式 IIId又はIIIeによるものであり：
【化２１】
2011519897.tif 000023
Xは、CH又はNであり；Lは、単結合、-CO-、又は-NHCO-であり；環Pは
【化２２】
2011519897.tif 000024
であり；かつ、R2dは、H、C3-C8シクロアルキル、又はハロ、アミド若しくはC3-C8シクロアルキルにより任意に置換されたC1-C6アルキルである。
【０１９３】
ある特定の実施態様において、式 IIIa-IIIeの任意の1つによる本発明の化合物に関して、Lは、単結合である。
【０１９４】
一実施態様において、式 Iaによる本発明の化合物に関して、該化合物は、式 IVa、IVb又はIVcによるものであり：
【化２３】
2011519897.tif 000025
Xは、CH又はNであり；Lは、単結合、-CO-、又は-NHCO-であり；環Pは
【化２４】
2011519897.tif 000026
であり；かつ、R2dは、H、C3-C8シクロアルキル、又はハロ、アミド若しくはC3-C8シクロアルキルにより任意に置換されたC1-C6アルキルである。
【０１９５】
一実施態様において、式 Ibによる本発明の化合物に関して、該化合物は、式 IVd又はIVeによるものであり：
【化２５】
2011519897.tif 000027
Xは、請求項１に記載のものであり；Lは、単結合、-CO-、又は-NHCO-であり；環Pは
【化２６】
2011519897.tif 000028
であり、かつR2dは、H、C3-C8シクロアルキル、又はハロ、アミド若しくはC3-C8シクロアルキルにより任意に置換されたC1-C6アルキルである。
【０１９６】
ある特定の実施態様において、式 IVa-IVeによる本発明の化合物に関して、Lは、単結合である。
【０１９７】
一実施態様において、式 Iaによる本発明の化合物に関して、該化合物は、式 Va、Vb又はVcによるものであり：
【化２７】
2011519897.tif 000029
Xは、CH又はNであり；Lは、単結合、-CO-、又は-NHCO-であり；環Pは
【化２８】
2011519897.tif 000030
であり；かつ、R2dはR2dは、H、C3-C8シクロアルキル、又はハロ、アミド若しくはC3-C8シクロアルキルにより任意に置換されたC1-C6アルキルである。
【０１９８】
一実施態様において、式 Ibによる本発明の化合物に関して、該化合物は、式 Vd又はVeによるものであり：
【化２９】
2011519897.tif 000031
Xは、CH又はNであり；Lは、単結合、-CO-、又は-NHCO-であり；環Pは
【化３０】
2011519897.tif 000032
であり；かつ、R2dはR2dは、H、C3-C8シクロアルキル、又はハロ、アミド若しくはC3-C8シクロアルキルにより任意に置換されたC1-C6アルキルである。
【０１９９】
ある特定の実施態様において、式 Va-Veの任意の1つによる本発明の化合物に関して、Lは、単結合である。
【０２００】
一実施態様において、式 Iaによる本発明の化合物に関して、該化合物は、式 VIa、VIb又はVIcによるものであり：
【化３１】
2011519897.tif 000033
Xは、CH又はNであり；Lは、単結合、-CO-、又は-NHCO-であり；環Pは
【化３２】
2011519897.tif 000034
であり；かつ、R2dはR2dは、H、C3-C8シクロアルキル、又はハロ、アミド若しくはC3-C8シクロアルキルにより任意に置換されたC1-C6アルキルである。
【０２０１】
一実施態様において、式 Ibによる本発明の化合物に関して、該化合物は、式 VId又はVIeによるものであり：
【化３３】
2011519897.tif 000035
Xは、CH又はNであり；Lは、単結合、-CO-、又は-NHCO-であり；環Pは
【化３４】
2011519897.tif 000036
であり；かつ、R2dはR2dは、H、C3-C8シクロアルキル、又はハロ、アミド若しくはC3-C8シクロアルキルにより任意に置換されたC1-C6アルキルである。
【０２０２】
ある特定の実施態様において、式 VIa-VIeの任意の1つによる本発明の化合物に関して、Lは、単結合である。
【０２０３】
一実施態様において、式 Ia-VIeの任意の1つによる本発明の化合物に関して、Lは、単結合である。
【０２０４】
一実施態様において、式 Ia-VIeの任意の1つによる本発明の化合物に関して、Lは-CO-である。
【０２０５】
一実施態様において、式 Ia-VIeの任意の1つによる本発明の化合物に関して、Lは-NHCO-である。
【０２０６】
一実施態様において、式 Ia-VIeの任意の1つによる本発明の化合物に関して、R2dは、H、Me、Et、i-Pr、t-Bu、シクロプロピルメチル又はCH2CF3である。
【０２０７】
一実施態様において、式I-VIeの任意の1つによる本発明の化合物に関して、R2dは、H、Me、i-Pr、t-Bu、CH2CONH2、シクロプロピルメチル、又はCH2CF3である。
【０２０８】
一実施態様において、式 Ia-VIeの任意の1つによる本発明の化合物に関して、R2dは、Hである。
【０２０９】
一実施態様において、式 Ia-VIeの任意の1つによる本発明の化合物に関して、R2dは、i-Prである。
【０２１０】
一実施態様において、式 Ia-VIeの任意の1つによる本発明の化合物に関して、R2dは、t-Buである。
【０２１１】
一実施態様において、式 Ia-VIeの任意の1つによる本発明の化合物に関して、R2dは、シクロプロピルメチルである。
【０２１２】
一実施態様において、式 Ia-VIeの任意の1つによる本発明の化合物に関して、環Pは
【化３５】
2011519897.tif 000037
である。
【０２１３】
一実施態様において、式 Ia-VIeの任意の1つによる本発明の化合物に関して、環Pは
【化３６】
2011519897.tif 000038
である。
【０２１４】
一実施態様において、式 Ia-VIeの任意の1つによる本発明の化合物に関して、環Pは
【化３７】
2011519897.tif 000039
である。
【０２１５】
一実施態様において、式 Ia-VIeの任意の1つによる本発明の化合物に関して、Xは、CHである。
【０２１６】
一実施態様において、式 Ia-VIeの任意の1つによる本発明の化合物に関して、Xは、Nである。
【０２１７】
一実施態様において、式 Ia又はIbによる本発明の化合物に関して、該化合物は、表1に収載される化合物から選択される。
【０２１８】
一実施態様において、式 Iaによる本発明の化合物に関して、該化合物は、以下から選択される：
5-(8-(4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル)イソインドリン-1-オン；
4-(8-(4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル)フラン-2-カルボキサミド；
4-(8-(4-(1S,4R)-5-tert-ブチル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル)フラン-2-カルボキサミド；
4-(8-(4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)イミダゾ[1,2-a]ピラジン-5-イル)フラン-2-カルボキサミド；
5-{8-(4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-1H-ピラゾール-3-カルボン酸アミド；
4-{8-(4-((1S,4S)-5-tert-ブチル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)-フェニルアミノ)イミダゾ[1,2-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボン酸アミド；
4-{8-(6-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)ピリジン-3-イルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボン酸アミド；
4-{8-(4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)イミダゾ[1,2-a]ピラジン-5-イル}-1H-ピリジン-2-オン；
4-{8-(4-(5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.2]オクタン-2-イル)フェニルアミノ)[1,2,4]-トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボン酸アミド；
4-{8-(4-(5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.2]オクタン-2-イル)フェニルアミノ)-イミダゾ[1,2-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボン酸アミド；
4-{8-(4-(3-イソプロピル-3,8-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-8-イル)フェニルアミノ)-イミダゾ[1,2-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボン酸アミド；
4-{8-(4-(8-イソプロピル-3,8-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-3-イル)フェニルアミノ)[1,2,4]-トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボン酸アミド；
4-{8-(4-(3-イソプロピル-3,8-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-8-イル)フェニルアミノ)[1,2,4]-トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボン酸アミド；
4-{8-(4-(8-イソプロピル-3,8-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-3-イル)フェニルアミノ)-イミダゾ[1,2-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボン酸アミド；
5-{8-(6-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)ピリジン-3-イルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-1H-ピラゾール-3-カルボン酸アミド；
5-{8-(4-((1S,4S)-5-tert-ブチル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ-[1,5-a]ピラジン-5-イル}-2,3-ジヒドロ-イソインドール-1-オン；
5-{8-(4-((1S,4S)-5-tert-ブチル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-1H-ピラゾール-3-カルボン酸アミド；及び、
5-{8-(6-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)ピリジン-3-イルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-2,3-ジヒドロ-イソインドール-1-オン。
【０２１９】
別の実施態様において、式 Ibによる本発明の化合物に関して、該化合物は、以下から選択される：
4-(8-(3-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル)フラン-2-カルボキサミド；
4-(8-(3-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)イミダゾ[1,2-a]ピラジン-5-イル)フラン-2-カルボキサミド；
5-(8-(3-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル)イソインドリン-1-オン。
【０２２０】
一態様において、本明細書に記載される実施態様の任意の1つによる本発明の化合物は、遊離塩基として存在する。
【０２２１】
一態様において、本明細書に記載される実施態様の任意の1つによる本発明の化合物は、医薬として許容し得る塩である。
【０２２２】
一態様において、本明細書に記載される実施態様の任意の1つによる本発明の化合物は、本発明の化合物の溶媒和物である。
【０２２３】
一態様において、本明細書に記載される実施態様の任意の1つによる本発明の化合物は、本発明の化合物の医薬として許容し得る塩の溶媒和物である。
【０２２４】
実施態様ごとに特定された基は、通常、個別的に上記に収載されているが、本発明の化合物には、上記の式並びに本明細書に提示される他の式におけるいくつかの又は各々の実施態様が各変更体についてそれぞれ指定される1以上の特定のメンバー又は基から選択されるものを含む。従って、本発明は、その範囲内でそのような実施態様の全ての組合せを含むことを意図する。
【０２２５】
特定の態様において、本発明は、上記の式による本発明の化合物のプロドラッグ及び誘導体を提供する。プロドラッグは、代謝的に切断可能な基を有し、かつ加溶媒分解により、又は生理学的条件の下で、インビボにおいて薬学的に活性である本発明の化合物になる、本発明の化合物の誘導体である。プロドラッグは、対象に投与されるときに不活性であり得るが、インビボで本発明の活性化合物に変換される。本明細書で使用される「医薬として許容し得るプロドラッグ」とは、本発明に有用な化合物のプロドラッグをいい、信頼できる医学的判断の範囲内で、合理的な利益/リスク率に相応した過度の毒性、刺激、アレルギー反応を有する患者の組織との接触使用に適しており、かつ本発明の化合物の意図される使用に有効である。用語「プロドラッグ」とは、インビボで変換され、本発明に有用な有効な化合物又はその医薬として許容し得る塩、水和物若しくは溶媒和物を生じる化合物を意味する。変換は、血液中での加水分解を介してなどの様々な機構により発生し得る。代謝的に切断可能な基を有する化合物は、該代謝的に切断可能な基の存在により親化合物に付与された溶解性及び／又は吸収速度の向上の結果として生物学的利用能の向上を呈することができ、このようにして当該化合物はプロドラッグとして機能する。
徹底した考察は、「プロドラッグの設計（Design of Prodrugs）」, H. Bundgard編, Elsevier (1985); Methods in Enzymology; K. Widderら編, Academic Press, 42, 309-396 (1985); 「薬剤設計及び開発のテキストブック（A Textbook of Drug Design and Development）」, Krogsgaard-Larsen及びH. Bundgard編, 第5章;「プロドラッグの設計及び適用（Design and Applications of Prodrugs）」113-191 (1991); Advanced Drug Delivery Reviews, H. Bundgardの文献, 8 , 1-38, (1992); J. Pharm. Sci., 77,285 (1988); Chem. Pharm. Bull., N. Nakeyaらの文献, 32, 692 (1984);「新規送達系としてのプロドラッグ（Pro-drugs as Novel Delivery Systems）」, T. Higuchi及びV. Stellaの文献, 14 A.C.S. Symposium Series、並びに「薬剤設計における生体可逆担体（Bioreversible Carriers in Drug Design）」, E.B. Roche編, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987に提供されており、これらは引用により本明細書に組み込まれる。そのような例には、コリンエステル誘導体及びその同類、N-アルキルモルフォリンエステル及びその同類を含むが、これらに限定されない。
【０２２６】
本発明の化合物の他の誘導体は、それらの酸及び酸誘導体形態の両方において活性を有するが、酸感受性形態はしばしば、哺乳動物において溶解性、組織適合性又は遅延放出の利益を与える(Bundgard, H., 「プロドラッグの設計（Design of Prodrugs）」, pp. 7-9, 21-24, Elsevier, Amsterdam 1985を参照されたい)。プロドラッグには、例えば、親酸と適切なアルコールとの反応により調製されるエステル、又は親酸化合物と置換若しくは非置換のアミンとの反応により調製されるアミド、又は酸無水物、又は混合無水物などの当業者に周知の酸誘導体を含む。本発明の化合物上に存在する酸性基から誘導される単純な脂肪族又は芳香族エステル、アミド及び無水物は、好ましいプロドラッグである。場合によっては、(アシルオキシ)アルキルエステル又は((アルコキシカルボニル)オキシ)アルキルエステルなどの二重エステル型プロドラッグを調製することが望ましい。本発明の化合物のC1〜C8アルキル、C2-C8アルケニル、アリール、C7-C12置換アリール及びC7-C12アリールアルキルエステルが好ましい。
【０２２７】
（医薬組成物）
医薬として使用される場合、本発明の化合物は、典型的には医薬組成物の形態で投与される。そのような組成物は、医薬分野において周知の様式で調製でき、少なくとも1つの活性化合物を含むことができる。
【０２２８】
通常、本発明の化合物は、医薬的有効量で投与される。実際に投与される化合物の量は、典型的には、治療される状態、選択した投与経路、実際に投与される化合物、個々の患者の年齢、体重及び反応、患者の症状の重篤度などを含む関連した状況に照らして、医師により決定される。
【０２２９】
本発明の医薬組成物は、経口経路；直腸経路；経皮経路；皮下経路；静脈経路；筋肉内経路及び鼻腔内経路を含む様々な経路により投与できる。意図された送達経路に応じて、本発明の化合物は、好ましくは、注射可能若しくは経口組成物として、若しくは塗剤として、又は全て経皮投与のためにローション剤として、若しくはパッチとして、製剤化される。
【０２３０】
経口投与用組成物は、バルク溶液若しくは懸濁液、又はバルク粉末の形態をとり得る。しかしながら、より一般的には、本組成物は単位用量形態で提供し、正確な投与を容易にする。用語「単位投与形態」とは、ヒト被験者及び他の哺乳動物への単位投与量として適切な物理的に個別の単位をいい、各単位は適切な医薬賦形剤と共に、所望の治療効果を提供するように算出された既定量の活性物質を含む。固体組成物の場合、典型的な単位用量形態には、液体組成物又はピル、錠剤、カプセル等の予め充填され、予め計測されたアンプル又はシリンジを含む。そのような組成物において、フランスルホン酸化合物は、通常、微量成分(約0.1〜約50重量％又は好ましくは約1〜約40重量％)であり、その残りは様々なビヒクル又は担体及び所望の用量形態を形成するのを補助する加工助剤である。
【０２３１】
経口投与に適している液体形態には、緩衝液、懸濁液及び予製剤、着色剤、香料などを有する適切な水性又は非水性の溶媒を含むことができる。固体形態には、例えば、以下の成分のいずれか又は類似の性質の化合物を含むことができる：微結晶性セルロース、トラガカントガム又はゼラチンなどの結合剤；デンプン又はラクトースなどの賦形剤、アルギン酸、プリモゲル又はコーンスターチなどの崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤；コロイド状二酸化ケイ素などの流動促進剤；スクロース又はサッカリンなどの甘味剤；又は、ハッカ、サリチル酸メチル又はオレンジ香料などの香料。
【０２３２】
注射可能組成物は、典型的には、当該技術分野において公知の注射可能な無菌の食塩水若しくはリン酸緩衝食塩水又は他の注射可能な担体に基づく。前記のように、そのような組成物における活性化合物は、典型的には微量成分であり、しばしば約0.05〜10重量％であり、その残りは注射可能な担体などである。
【０２３３】
経皮組成物は、典型的には、一般に約0.01〜約20重量％、好ましくは約0.1〜約20重量％、好ましくは約0.1〜約10重量％、及びより好ましくは約0.5〜約15重量％にわたる量で活性成分を含む、局所用軟膏又はクリームとして製剤化される。軟膏として製剤化される場合、活性成分は、典型的には、パラフィン性又は水混和性軟膏基剤のいずれかと混合される。あるいは、活性成分は、例えば水中油クリーム基剤と共にクリーム中に配合できる。そのような経皮製剤は当該技術分野において周知であり、安定的な活性成分又は製剤の真皮浸透を促進するために一般的には添加成分を含む。全てのそのような公知の経皮製剤及び成分は、本発明の範囲内に含まれる。
【０２３４】
本発明の化合物は、経皮装置により投与することもできる。したがって、経皮投与は、貯蔵若しくは多孔膜型の又は固体マトリクス多様体のいずれかのパッチを使用して達成できる。
【０２３５】
経口投与可能な、注射可能な、又は局所的に投与可能な組成物のための上記成分は、単に代表するものである。他の材料並びに加工技術その他は、「レミントンの薬学（Remington's Pharmaceutical Sciences）」、第17版, 1985, Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvaniaのパート８に記載され、これは引用により本明細書に組み込まれる。
【０２３６】
本発明の化合物は、徐放性形態で、又は徐放性製剤送達系から投与することもできる。代表的な徐放物質の説明は、レミントンの薬学に見出すことができる。
【０２３７】
以下の製剤例は、本発明に従って調製できる代表的な医薬組成物を説明する。本発明は、しかしながら、以下の医薬組成物に限定されない。
【０２３８】
（製剤1-錠剤）
本発明の化合物は、およそ1:2の重量比で乾燥ゼラチン結合剤を有する乾燥粉末として混合できる。微量のステアリン酸マグネシウムは、潤滑剤として加えられる。混合物は、錠剤成形機で240〜-270mgの錠剤(錠剤当たりの80〜90mgの活性アミド化合物)に成形される。
【０２３９】
（製剤2-カプセル）
本発明の化合物は、およそ1:1の重量比でデンプン希釈剤を有する乾燥粉末として混合できる。該混合物は、250mgのカプセル(カプセル当たり125mgの活性アミド化合物)に充填される。
【０２４０】
（製剤3-液剤）
本発明の化合物(125mg)は、スクロース(1.75g) 及びキサンタンガム(4mg)と混合でき、その結果として生じる混合物はNo.10メッシュ米国篩を通して混合でき、その後、水中で微結晶性セルロース及びカルボキシメチルセルロースナトリウム(11：89、50mg)の溶液を作製する前に混合し得る。安息香酸ナトリウム(10mg)、香料及び着色料を水で希釈し、撹拌しながら加える。それから、充分な水を添加し、5mLの総容積を作製できる。
【０２４１】
（製剤4-錠剤）
本発明の化合物は、およそ1:2の重量比で乾燥ゼラチン結合剤を有する乾燥粉末として混合できる。微量のステアリン酸マグネシウムは、潤滑剤として加えられる。該混合物は、錠剤成形機で450〜900mgの錠剤(150〜300mgの活性アミド化合物)に成形される。
【０２４２】
（製剤5-注射製剤）
本発明の化合物は、緩衝化無菌食塩水の注射可能水溶媒中、およそ5mg/mlの濃度に、溶解させ又は懸濁できる。
【０２４３】
（製剤6-局所製剤）
ステアリルアルコール(250g)及び白色ワセリン(250g)を約75℃で溶かすことができ、その後、水(約370g)に溶けた本発明(50g)の化合物、メチルパラベン(0.25g)、プロピルパラベン(0.15g)、ドデシル硫酸ナトリウム(10g)及びプロピレングリコール(120g)の混合物を添加でき、その結果生じた混合物を凝結するまで撹拌する。
【０２４４】
（治療方法）
本発明の化合物は、MMP1及び／又はMAPKAPK5の異常な活性に原因として関連する又は起因する哺乳動物の状態の治療のための治療剤として使用できる。したがって、本発明及びその医薬組成物の化合物には、ヒトを含む哺乳動物の炎症性疾患を予防及び／又は治療するための治療剤としての使用を認める。従って、及び先に記載したとおり、本発明は、列挙した治療方法、並びにそのような方法における使用のための化合物、及びそのような方法に有用な医薬の製造方法をその範囲内に含み、及びそれらにまで及ぶ。
【０２４５】
治療態様の方法において、本発明は、細胞外マトリクス(ECM)分解と関連する状態、特に関節炎、及びより具体的には関節リウマチに罹患し易い又はそれに苦しんでいる哺乳動物の治療方法を提供し、該方法には、有効量の本発明の化合物又はその医薬組成物を投与することを含む。
【０２４６】
治療態様の別の方法において、本発明は、MMP1の異常な細胞性発現と関連する状態に罹患し易い又はそれに苦しんでいる哺乳動物の治療方法を提供し、該方法には、治療上有効量の本発明の化合物又はその医薬組成物を投与することを含む。
【０２４７】
治療態様の別の方法において、本発明は、異常なマトリクスメタロプロテイナーゼ活性により特徴づけられる状態の治療又は予防の方法を提供し、該方法にはマトリクスメタロプロテイナーゼを阻害する治療上有効量の本発明の化合物又はその医薬組成物を投与することを含む。
【０２４８】
治療態様のさらに別の方法において、本発明は、例えば、関節リウマチ及び骨関節炎などの炎症、心筋梗塞、様々な自己免疫疾患及び障害、ブドウ膜炎及びアテローム硬化；例えば、乾癬などのかゆみ／掻痒；及び腎臓障害により媒介される、又はそれらにおいて生じる疾患及び障害に罹患し易い又は苦しんでいる哺乳動物の治療方法を提供し、該方法には、状態治療又は状態予防に有効な量の本発明の化合物又はその医薬組成物を投与することを含む。
【０２４９】
また本発明は、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ5の阻害剤の投与により予防され、改善され、若しくは解消される状態、又は異常なコラゲナーゼ活性により特徴づけられる状態、又はECM分解と関連する状態、又は炎症が関与する疾患から選択される状態の治療又は予防、最も好ましくは関節リウマチの治療のための医薬の製造における本発明の化合物の使用に関する。
【０２５０】
本発明の更なる態様として、上述した状態及び疾患の治療又は予防における特に医薬としての使用のための本発明の化合物を提供する。また本明細書に提供するのは、上述した状態及び疾患のうち1の治療又は予防のための医薬の製造における本発明の化合物の使用である。
【０２５１】
更なる態様において、本発明は、MMP1及び／又はMAPKAPK5の異常な活性に原因として関連する又は起因する哺乳動物の状態の予防又は治療における使用のための本発明の化合物を提供する。特に、本発明は、ヒトを含む哺乳動物の炎症性疾患の治療又は予防における使用のための本発明の化合物及び／又はその医薬組成物を提供する。
【０２５２】
更なる態様において、本発明は、細胞外マトリクス(ECM)分解と関連する状態、特に関節炎、及びより具体的には関節リウマチの予防又は治療における使用のための本発明の化合物を提供する。
【０２５３】
更なる態様において、本発明は、MMP1の異常な細胞性発現と関連する状態の予防又は治療における使用のための本発明の化合物を提供する。
【０２５４】
更なる態様において、本発明は、異常なマトリクスメタロプロテイナーゼ活性により特徴づけられる状態の予防又は治療における使用のための本発明の化合物を提供する。
【０２５５】
更なる態様において、本発明は、例えば、関節リウマチ及び骨関節炎などの炎症、心筋梗塞、様々な自己免疫疾患及び障害、ブドウ膜炎及びアテローム硬化；例えば乾癬などのかゆみ／掻痒；及び腎臓障害により媒介されるか又はそれらにおいて生じる疾患及び障害の予防又は治療における使用のための本発明の化合物を形成する。
【０２５６】
本方法の好ましい療法には、細胞外マトリクス分解により特徴づけられる疾患状態を患っている対象に、本発明の化合物のマトリクスメタロプロテアーゼを阻害するのに有効な量を、該患者における異常なレベルの細胞外マトリクス分解を減少させ、かつ好ましくは前記分解の原因である自己永続的プロセスを終結させるのに十分な時間、投与することを含む。本方法の特別な実施態様には、関節リウマチの進行に罹患している又は罹患し易い対象患者に、前記患者の関節におけるコラーゲン及び骨分解をそれぞれ減少させ若しくは予防し、かつ好ましくは前記分解の原因である自己永続的プロセスを終結させるのに十分な時間、本発明の化合物のマトリクスメタロプロテアーゼを阻害するのに有効な量を投与することを含む。
【０２５７】
本発明の化合物は、より少ない毒性、良好な吸収、良好な半減期、良好な溶解性、低タンパク結合能、より少ない薬剤-薬剤相互作用、及び良好な代謝安定性を示すことができる。特定の態様において、本発明の化合物は、薬理特性、特に改善された効力及び改善された許容度において予想外の顕著な向上を呈する。化合物がこれらの改善の任意の1以上を呈する場合、これは本明細書に記載される状態におけるそれらの使用に効果を有し得る。例えば、化合物が改善された有効性を呈する場合、該化合物を低用量で投与でき、それゆえ任意の可能性がある望ましくない副作用の発生を減少させ得ることが期待される。同様に、化合物が増加した許容度を呈する場合、これは、該化合物が不必要な副作用をもたらすことなく高濃度で投与されることを可能にするであろう。有効性又は許容度におけるそのような変更には、本発明の前記化合物のための改善された治療的ウインドウを生じることが期待されるであろう。同様に、上記の他の特性における改善はまた、該化合物の潜在的使用において利点を与える。
【０２５８】
注入用量レベルは、約1〜約120時間及び特に24〜96時間の全てについて、約0.1mg/kg/時〜少なくとも10mg/kg/時にわたる。また、約0.1mg/kg〜約10mg/kg又はこれを超える予充填ボーラスは、妥当な定常状態レベルを達成するために投与することもできる。最大の全用量は、40〜80kgのヒト患者について約2g/日を超えるとは予想されない。
【０２５９】
炎症などの状態及び自己免疫状態の長期の予防又は治療のために、治療のための療法は、通常、数ヶ月又は数年に渡って延びる。したがって、経口投与が患者便宜及び許容度のために好ましい。経口投与につき、1日あたり1〜5回、及び特に2〜4回、及び典型的には3回の経口投与が代表的療法である。これらの投与パターンを使用して、各投与は、本発明の化合物の約0.01〜約20mg/kgを提供し、各々約0.1〜約10mg/kg及び特に約1〜約5mg/kgを提供する投与が好ましい。
【０２６０】
経皮用量は、一般に、注入用量を使用して達成されるのと同等又はそれよりも低い血液レベルを提供するように選択される。
【０２６１】
炎症性状態の発症を予防するために使用する場合、本発明の化合物は、典型的にはアドバイスで、かつ医師の管理下で、上記の投与量レベルにて、該状態が進行する危険性のある患者に投与される。特定の状態を進行する危険性のある患者には、一般に、該状態の家族歴を有する者、又は特に該状態を進行し易い遺伝的試験若しくはスクリーニングにより同定された者を含む。
【０２６２】
本発明の化合物は、唯一の活性薬剤として投与でき、又は同じ又は類似の治療活性を示し、かつ併用投与に安全かつ有効であることが決定された他の治療剤との組合せで投与できる。特定の実施態様において、2つの(又はそれより多い)薬剤の同時投与は、各々に使用され、それにより見られる副作用を減少させる、顕著に低い用量を可能にする。
【０２６３】
一実施態様において、本発明の化合物は、炎症を含む疾患の治療及び／又は予防のための別の治療剤と同時投与され；具体的な薬剤には、免疫調節性薬剤、例えば、アザチオプリン、コルチコステロイド、シクロホスファミド、シクロスポリンA、FK506、ミコフェノール酸モフェチル、OKT-3及びATGを含むが、これらに限定されない。
【０２６４】
一実施態様において、本発明の化合物は、関節リウマチの治療及び／又は予防のための別の治療剤と同時投与され；具体的な薬剤には、鎮痛薬、非ステロイド性抗炎症薬(NSAIDS)、ステロイド、合成DMARD(例えば、以下に限定されないが、メトトレキセート、レフルノミド、スルファサラジン、オーラノフィン、金チオリンゴ酸ナトリウム、ペニシラミン、クロロキン、ヒドロキシクロロキン、アザチオプリン及びシクロスポリン)、及び生物学的DMARD(例えば、以下に限定されないが、インフリキシマブ、エタネルセプト、アダリムマブ、リツキシマブ及びアバタセプト)を含むが、これらに限定されない。
【０２６５】
当業者に明らかであるように、同時投与により、同じ療法の一部として2以上の治療剤を患者に送達する任意の手段が含まれる。2以上の薬剤は単一製剤で同時に投与できるので、これは必要不可欠ではない。該薬剤は、異なる製剤で、及び異なる時間にて、投与できる。
【０２６６】
（一般的合成手順）
本発明のトリアゾロピラジン及びイミドアゾピラジン化合物は、以下の一般的方法及び手順を使用して容易に利用できる出発物質から調製できる。典型的な又は好ましいプロセス条件(すなわち、反応温度、時間、反応物のモル比、溶媒、圧力、その他)が与えられる場合、他のプロセス条件も他に明記しない限り使用することができる。最適な反応条件は、使用する具体的な反応物又は溶媒により変更できるが、そのような条件は、ルーチン最適化手順によって当業者により決定できる。
【０２６７】
加えて、当業者には明らかであるように、従来型の保護基は、特定の官能基が望ましくない反応を受けることを阻止するのに必要であり得る。特定の官能基のための適切な保護基並びに保護及び脱保護のための適切な条件の選択は、周知技術である。例えば、多数の保護基及びそれらの導入及び除去は、T. W. Greene及びP. G. M. Wutsの文献, 「有機合成における保護基（Protecting Groups in Organic Synthesis）」, 第2版, Wiley, New York, 1991及びその中の引用された文献に記載されている。
【０２６８】
以下の方法は、先に収載されている代表的な二環式ヘテロアリールの調製に関して、詳細に提示されている。本発明の化合物は、有機合成の当業者により公知の又は市販の出発物質及び試薬から調製できる。
【０２６９】
全ての試薬は市販の等級であり、他に明記しない限り、更なる精製なく入手したものとして使用した。市販の無水溶媒は、不活性雰囲気下で実施される反応のために使用した。他に特に明記しない限り、試薬等級溶媒を他の全ての場合において使用した。カラムクロマトグラフィをシリカゲル60(35〜70μm)で実施した。薄層クロマトグラフィは、予め被覆したシリカゲルF-254プレート(0.25mm厚)を使用して実施した。1H NMRスペクトルは、Bruker DPX 400核磁気共鳴分光計(400MHz)に記録した。1H NMRスペクトルの化学シフト(δ)は、内部標準としてのテトラメチルシラン(δ 0.00)又は適切な残留溶媒ピーク、すなわちCHCl3（δ 7.27）に相対的な百万分率(ppm)で報告される。多重度は、一重(s)、二重(d)、三重(t)、四重(q)、多重(m)及びブロード(br)として与えられる。結合定数(J)は、Hzで与えられる。エレクトロスプレーMSスペクトルは、マイクロマスプラットフォームLC/MSスペクトロメータで得られた。全てのLCMS分析のために使用したカラムは以下のものである：Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7μm、2.1mm ID×50mm L(Part No.186002350)。調製HPLC：Waters XBridge Prep C18 5μm ODB 19mm ID×100mm L(Part No.186002978)。全ての方法には、MeCN/H2O勾配を使用している。H2Oには、0.1% TFA又は0.1% NH3のいずれかを含む。
（実験の節において使用する省略形のリスト）
【表１】
2011519897.tif 000040
（本発明の化合物の合成的製造）
（中間体の合成）
【０２７０】
中間体1a：3,6-ジブロモ-ピラジン-2-イルアミンの製造
一般反応スキーム：
【化３８】
2011519897.tif 000041
工程1：一般的反応スキームにて説明した化合物(B)の合成；3,6-ジブロモ-ピラジン-2-カルボン酸。
LiOH(655mg、27mmol)をTHF:水:MeOH (18:4.5:4.5 mL)中の3,6-ジブロモ-ピラジン-2-カルボン酸メチルエステル(A) (J. Med. Chem. 1969, 12, 285-87)(2.7mL、9mmol)の溶液に添加する。反応物を30分間の5℃で撹拌し、真空で濃縮し、DCMに回収し、1N HClで洗浄する。有機相を無水MgSO4で乾燥させ、真空濃縮して、化合物(B)を得る。1H NMR (250MHz, CDCl3) δ(ppm) 8.70 (s, 1H)。
【０２７１】
工程2：一般的反応スキームにて説明した化合物(C)の合成；3,6-ジブロモ-ピラジン-2-イルアミン。
ジフェニルホスホリラジン(2.59mL、12mmol)及びトリエチルアミン(1.67mL、12mmol)を、t-ブタノール(90mL)中の3,6-ジブロモ-ピラジン-2-カルボン酸(3.52g、12mmol)の溶液に添加する。反応物を、還流で18時間加熱する。反応物を水でクエンチした後、真空濃縮し、DCMに回収する。有機溶液を水及び1N NaOHで洗浄し、MgSO4で乾燥させ、真空濃縮する。結果として生じる固体は、EtOAcを使用してシリカのパッドに濾通し、それから濃縮し、TFA:DCM (4:1, 12 mL)を該固体に添加し、30分間撹拌する。該溶液を真空濃縮した後、1N NaOHで中性化し、DCMで抽出する。有機層を無水MgSO4で乾燥させ、真空濃縮して生成物を得る。
【化３９】
2011519897.tif 000042
【０２７２】
中間体1b：3-クロロ-6-ブロモ-ピラジン-2-イルアミンの調製
代替的に、3-クロロ-6-ブロモピラジン-2-イル-アミンは、3,6-ジブロモ-ピラジン-2-イルアミンの代わりに使用でき、以下のスキームに従って調製される：
【化４０】
2011519897.tif 000043
【０２７３】
工程1：一般的反応スキームにて説明した化合物(A')の合成；2-クロロ-3,5-ジブロモ-ピラジン
0℃に冷却したDCM(20mL)中の2-アミノ-3,5-ジブロモピラジン(3.21g、12.692mmol)のよく撹拌した溶液に、1部のTiCl4(2.41g、12.692mmol、1.00当量)を添加し、このようにして暗赤色スラリーを与える。それから亜硝酸t-ブチル(2.62g、25.385mmol、2.00当量)を滴加することにより、該溶液が明るい黄色に変わる。氷浴をその後取り除き、反応をそれから室温で進行させる。より多くのTiCl4(1.50g、1.2当量)を添加し、混合物を更に1時間撹拌する。オレンジ溶液が生じた時点で、LC-MSは、出発物質の、非常に不十分にイオン化した所望の生成物への完全な転換を示す。水(100mL)を該反応物に添加し、エマルジョンを形成させる。DCM(50mL)を添加し、DCM層を分離し、該DCM層が無色になるまで水層をDCM(3×50mL)で更に抽出する。DCM層を集め、鹹水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、溶媒除去後にオレンジ油として化合物A' (2.81g、82%)を生成し、これを次の工程などにおいて使用する。
【０２７４】
工程2：一般的反応スキームにて説明した化合物(B')の合成；3-クロロ-6-ブロモピラジン-2-イルアミン
先の工程に記載されている化合物A'(9.5g、37.55mmol)を濃縮NH4OH(60mL)に懸濁し、結果として生じる混合物を圧力加圧蒸気滅菌器で典型的には終夜、80℃に加熱する。容器をそれからゆっくり室温に冷却させ、その後、氷浴で更に冷却し、所望の物質の沈殿をもたらす。固体を濾過により分離し、シクロヘキサンで洗浄し、乾燥後に位置異性体（regiosiomers）の83/17混成として表題化合物B' (5g)を得る。該混合物をそれからカラムクロマトグラフィにより精製する。M+H+、m/z = 209
【０２７５】
中間体2：5,8-ジブロモ-イミダゾ[1,2-a]ピラジン
【化４１】
2011519897.tif 000044
ブロモアセトアルデヒドジエチルアセタール(49mL、326mmol)及び48% 臭化水素酸を還流しながら1.5時間加熱し、それからプロパン-2-オール(600mL)に注入し、NaHCO3でクエンチする。濾過の後、3,6-ジブロモピラジン-2-イルアミン(41.34g、163mmol)を溶液に添加し、還流で終夜加熱する。反応物を冷却し、溶媒を真空で除去した後、NaHCO3水溶液を添加し、EtOAcで抽出する。有機相を無水MgSO4で乾燥させて濾過し、真空で濃縮して茶色の固体を得る。
【化４２】
2011519897.tif 000045
【０２７６】
中間体3：5,8-ジブロモ-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン
【化４３】
2011519897.tif 000046
一般的スキーム：
【化４４】
2011519897.tif 000047
工程1：N'-(3,6-ジブロモ-ピラジン-2-イル)-N,N-ジメチルホルムアミジン(D)
【化４５】
2011519897.tif 000048
3,6-ジブロモ-ピラジン-2-イルアミン(15.37g、60.80mmol)及びN,N-ジメチルホルムアミドジメチルアセタール(10.1mL、76.00mmol)をエタノール(150mL)に懸濁した混合物を2時間還流する。反応混合物を真空で蒸発させ、表題化合物を得る。
【化４６】
2011519897.tif 000049
【０２７７】
工程2：N-(3,6-ジブロモ-ピラジン-2-イル)-N'-ヒドロキシホルムアミジン(E)
【化４７】
2011519897.tif 000050
メタノール(200mL)中のN'-(3,6-ジブロモ-ピラジン-2-イル)-N,N-ジメチルホルムアミジン(18.6g、60.80mmol)溶液に、塩酸ヒドロキシルアミン(5.91g、85.12mmol)を1部添加する。反応物を、室温で16時間撹拌する。溶媒を蒸発させ、固体残渣を冷(氷冷)水で処理し、濾過により回収する。沈殿物を水及び石油エーテルで2回洗浄し、真空で乾燥させ、表題化合物を得る。
【化４８】
2011519897.tif 000051
【０２７８】
工程3：5,8-ジブロモ-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン(F)
【化４９】
2011519897.tif 000052
N-(3,6-ジブロモ-ピラジン-2-イル)-N'-ヒドロキシホルムアミジン(17.4mg、58.80mmol)をポリリン酸(150g)を用いて50℃で1時間、その後70℃で1.75時間処理する。室温に冷却後、水を反応混合物に添加する。結果として生じる懸濁液は、少量部の固体NaHCO3の慎重な添加によりpH 8にする。形成される沈殿物を濾過により回収し、1N NaOHで1回、水で3回洗浄し、真空で乾燥させる。残渣を酢酸エチルと1N NaOHの間で分配し、有機相は1N NaOHでさらに1回、及び鹹水で1回洗浄する。有機相を無水MgSO4で乾燥させて濾過し、蒸発させ、白色固体として表題化合物(10.15g)を与える。
【化５０】
2011519897.tif 000053
【０２７９】
中間体4：5-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-2,3-ジヒドロ-イソインドール-1-オン
【化５１】
2011519897.tif 000054
工程1：4-ブロモ-2-ブロモメチル-安息香酸メチルエステル
【化５２】
2011519897.tif 000055
4-ブロモ-2-メチル安息香酸(4.6g、21.39mmol)を2M HClのMeOH溶液に溶かし、3時間還流する。溶媒を蒸発させ、4-ブロモ-2-メチル安息香酸メチルエステル(4.24g、86%)を与える。この中間体(18.51mmol)を四塩化炭素(100mL)に溶かし、N‐ブロモスクシンイミド(5.57g、24.06mmol)を添加する。AIBN(122mg、740μmol)をそれから添加し、該混合物を窒素で5分間パージする。反応混合物をそれから4時間還流する。室温に冷却した後に、反応混合物を濾過し、濾液を蒸発させる。残渣をフラッシュクロマトグラフィ(シリカゲル、2:1の石油エーテル/酢酸エチル)により精製し、表題化合物(3.42g、60%)を与える。
【０２８０】
工程2：5-ブロモ-2,3-ジヒドロ-イソインドール-1-オン
【化５３】
2011519897.tif 000056
4-ブロモ-2-ブロモメチル-安息香酸メチルエステル(0.5g、16.2mmol)をメタノール性アンモニア(10mL、7N NH3のMeOH溶液)で5分間、90℃で処理する。室温に冷却した後、形成される沈殿物を濾過して取り除き、少量のメタノールで洗浄して、無色固体として表題化合物(224mg、65%)を得る。
【０２８１】
【化５４】
2011519897.tif 000057
【０２８２】
工程3：5-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-2,3-ジヒドロ-イソインドール-1-オン
【化５５】
2011519897.tif 000058
5-ブロモ-2,3-ジヒドロ-イソインドール-1-オン(230mg、1.08mmol)、ビス(ピナコラト)二ホウ素(300mg、1.18mmol)、PdCl2dppf(25mg、31μmol)及びKOAc(320mg、3.26mmol)をジオキサン(4ml)に懸濁し、5分間窒素でパージし、それから85℃で終夜加熱する。溶媒を真空で除去し、残渣を酢酸エチルと水との間で分配する。水層を酢酸エチルで3回抽出し、混合した有機相を鹹水で1回洗浄し、無水MgSO4で濾過し、蒸発させる。固体残渣をヘキサンで粉末化し、真空で乾燥させ、灰色の固体として表題化合物(185mg、66%)を提供する。
【０２８３】
【化５６】
2011519897.tif 000059
【０２８４】
中間体5：4-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-フラン-2-カルボン酸アミド
【化５７】
2011519897.tif 000060
工程1：4-ブロモ-フラン-2-カルボン酸アミド
【化５８】
2011519897.tif 000061
NH4OH(100mL)中の4,5-ジブロモ-フラン-2-カルボン酸(12.5g、46.32mmol)の(冷水浴を使用する)冷却溶液に、少量部の亜鉛粉末(活性、粉末(2M HCl、水、MeOH、CH2Cl2で洗浄)4.54g、65.39mmol)を添加する。反応混合物を室温で10分間撹拌した後、セライトで濾過し、水で洗浄する。濾液を-10℃まで冷却し(氷/塩水浴)、濃HClを使用してゆっくりとpH 1に酸性化する。水層をすぐに酢酸エチル(４×)で抽出する。有機相を鹹水で洗浄し、無水MgSO4で乾燥させて濾過し、真空で濃縮して油(4.96g)を与え、これを立てた状態で固化して白色固体を与え、これを更なる精製なく使用する。
【０２８５】
該固体(4.93g、25.81mmol)を塩化チオニル(44.2mL)に溶解し、1時間還流する。真空で溶媒を除去した後、残渣をジクロロメタン(75mL)に溶かし、ジオキサン中の0.5M NH3溶液(52mL)を添加する。反応混合物を室温で1時間撹拌した後、33% NH3水溶液(5mL) を添加し、該反応物をさらに2時間撹拌する。溶媒を真空で除去し、残渣を飽和NaHCO3溶液で回収する。該塩基性溶液を酢酸エチル(3×)を使用して抽出し、混合した有機層を無水MgSO4で乾燥させ、真空濃縮する。酢酸エチル：石油エーテル：酢酸の混合物(50：49：1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによる精製により表題化合物(1.2g、22%)を得る。
【０２８６】
工程2：4-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-フラン-2-カルボン酸アミド
【化５９】
2011519897.tif 000062
4-ブロモ-フラン-2-カルボン酸アミド(1.2g、6.32mmol)、ビス(ピナコラト)二ホウ素(1.76g、6.94mmol)、PdCl2dppf(0.154g、0.189mmol)及びKOAc(1.85g、18.94mmol)をジオキサン(20mL)に懸濁し、窒素で5分間パージし、それから85℃で終夜加熱する。溶媒を真空で除去し、残渣を酢酸エチルと鹹水との間で分配する。水層を酢酸エチルで4回抽出し、無水MgSO4で濾過し、蒸発させる。固体残渣をヘキサンで粉末化し、真空で乾燥させ、固体として表題化合物を得る(0.984g、66%)。化合物は、通常、1H-NMRで50〜60%純粋であることに注意されたい。
【０２８７】
中間体5への代替経路：
【化６０】
2011519897.tif 000063
3-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-フラン(5.0g、25.77mmol)を乾燥アセトニトリル(30mL)に溶解する。乾燥アセトニトリル中のクロロスルホニルイソシアナート(5.47g、38.65mmol、1.5当量)溶液(20mL)を1部室温でフランに添加してピンク色の溶液を得、これを終夜沈降させ、黄色になる。結果として生じる溶液を氷浴で冷却し、水(5mL)を添加し、発熱をもたらす。結果として生じる混合物をDCM(100mL)と水(30mL)との間で分配する。水層をDCM(50mL)で更に3回抽出した後、有機層を回収し、鹹水(10mL)で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、最後に溶媒を真空下で除去する。油状残渣をDCM(3mL)に溶かし、超音波処理し、結晶質固体の懸濁液を得る。該固体を濾過で分離し、該ケークを極少量のDCMで、その後ジエチルエーテルで洗浄し、吸入下で乾燥させ、白色粉体として3gの表題化合物を得る。
【０２８８】
中間体6：2-エトキシピリジル-4-ボロン酸ピナコールエステル
【化６１】
2011519897.tif 000064
2-エトキシ-4-ブロモピリジン(2.5g、12.4mmol)、ビス-ピナコラト二ホウ素(3.4g、13.7mmol)及び酢酸カリウム(3.64g、37.20mmol)を1,4-ジオキサン(40ml)に溶かし、窒素で15分間脱気する。PdCl2dppf(3mol%、0.37mmol、0.3g)をそれから添加し、該混合物を90℃の密封容器で16時間加熱する。水を添加し、該混合物をEtOAcで抽出した。該有機物を鹹水で洗浄し、無水MgSO4で乾燥させた後、真空で濃縮する。粗生成物をシリカ上フラッシュクロマトグラフィで精製し(ガソリンからガソリン中10% EtOAc)、薄い色の油として2-エトキシピリジル-4-ボロン酸ピナコールエステルを与える(2.58g、83%)。
【０２８９】
【化６２】
2011519897.tif 000065
【０２９０】
中間体7：4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル)-フェニルアミン
工程1：((1S,4S)-5-(4-ニトロフェニル)-2,5-ジアザ-ビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-カルボン酸tert-ブチルエステル
【化６３】
2011519897.tif 000066
4-フルオロニトロフェニル(4.00g、28.348mmol)、DiPEA(5.89mL、60.667mmol、2.14当量)、及び((1S,4S)-2-BOC-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン(6.02g、30.333mmol、1.07当量)をアセトニトリル(20mL)に混合する。結果として生じる溶液を加熱して終夜還流し、その後、完全な転換が生じた。溶媒を真空下で除去し、固体の黄色残渣をシクロヘキサン(50mL)中で0.25時間撹拌した後、落ち着かせ、該上清を捨てる。該プロセスを2回繰り返す。3回目に、該固体を濾過で分離し、吸入下で乾燥させ、きれいな黄色の固体として表題化合物(8.8g)を得る。
【０２９１】
工程2：((1S,4S)-2-(4-ニトロフェニル)-2,5-ジアザ-ビシクロ[2.2.1]ヘプタン
【化６４】
2011519897.tif 000067
先の工程で得られた固体(8.2g)を、DCM(12mL)及びTFA(12mL)中の混合物に溶かす。反応物を室温で2時間進行させ、その時点で完全な脱保護が生じる。揮発性物質を真空下で除去し、結果として生じる未精製の固体を更なる処理なくそのように使用する。
【０２９２】
工程3：((1S,4S)-2-イソプロピル-5-(4-ニトロフェニル)-2,5-ジアザ-ビシクロ[2.2.1]ヘプタン
【化６５】
2011519897.tif 000068
先の工程で得られた未精製の化合物(6.22g、28.356mmol)をアセトニトリル(70mL)に溶解する。K2CO3(19.59g、141.770mmol、5.00当量)、その後ヨウ化i-プロピル(9.64g、56.708mmol、2.00当量)を添加し、結果として生じる懸濁液を加熱して撹拌しながら3時間還流し、その時点で完全な転換が生じる。反応混合物をDCM(100mL)と水(50mL)中との間で分配する。有機層を、水(50mL)、鹹水（25mL）で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させて濾過し、真空で蒸発させ、黄色の固体として表題化合物(9.90g)を与える。
【０２９３】
工程4：4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル)-フェニルアミン
【化６６】
2011519897.tif 000069
先の工程で得られた化合物(3.30g、9.35mmol)をEtOH(107mL)に溶解する。該系を窒素下で脱気し、配置する。Pd/C 10%(0.50g、5mol%)、次いでヒドラジン35% 水溶液(4.3mL、46.75mmol、5当量)を添加し、完全な転換が生じるまで(典型的には1時間)、該反応を100℃で進行させる。反応物をそれから冷却させ、セライトで濾過し、該濾液を真空で蒸発させ、ピンク色の油として表題化合物(2.07g)を得る。
【０２９４】
中間体8：((1S,4S)-5-tert-ブチル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル)-フェニルアミン
工程1：(2S,4R)-4-ヒドロキシ-1-(4-ニトロフェニル)-ピロリジン-2-カルボン酸メチルエステル
【化６７】
2011519897.tif 000070
(2S,4R)-L-プロリノールメチルエステル(4.7g、25.878mmol)をアセトニトリル(10mL)及びDiPEA(13.5mL、77.635、3当量)に溶解する。その後4-フルオロニトロベンゼンを反応混合物に添加し、終夜50℃に加熱する。溶媒除去の後、真空下で、オレンジ色の油状残渣をDCM(50mL)と水pH 4(50mL)中との間で分配する。水層をDCM(4×50 mL)で更に抽出し、混合した有機層を鹹水で洗浄し、無水MgSO4で乾燥させ、オレンジ色の油として表題化合物を得る。
【０２９５】
工程2：(3R,5S)-5-ヒドロキシメチル-1-(4-ニトロフェニル)-ピロリジン-3-オール
【化６８】
2011519897.tif 000071
先の工程で得られた化合物(6.89g、25.878mmol)をTHF(50mL) に溶かし、LiBH4 (51.756mmol、1.13g、2.00当量)を結果として生じる溶液に1部ずつ加えて沸騰させる。結果として生じる混合物を、完全な転換が生じるまで室温で反応させる。その後、反応を1M HClでpH 7にしてクエンチし、結果として生じる溶液をDCM(100mL)と水(50mL)中との間で分配する。水層をそれからDCM(4×50mL)で抽出する。有機層を集め、鹹水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、黄色の油(3.2g)として表題化合物を得、これをそのまま次の工程で使用する。
【０２９６】
工程3：(3R,5S)-3-トシルオキシ-5-トシルオキシメチル-1-(4-ニトロフェニル)-ピロリジン
【化６９】
2011519897.tif 000072
先の工程で得られたジオール(6.2g、25.878mmol)をピリジン(31mL)に可溶化し、0℃に冷却する。トシルクロリド(14.8g、77.734mmol、3当量)をそれから1部添加し、該混合物をその温度で撹拌し、必要があるまでフリーザ内に置く。
【０２９７】
工程4：((1S,4S)-2-tert-ブチル-5-(4-ニトロフェニル)-2,5-ジアザ-ビシクロ[2.2.1]ヘプタン
【化７０】
2011519897.tif 000073
先の工程で得られたジトシル化物質(1g、1.829mmol)を圧力管中トルエン(3mL)に溶かし、t-ブチルアミン(0.67g、9.147mmol、5当量)を添加して、赤紫色の溶液を与える。該管を封止して終夜110℃に加熱し、その時点で出発物質の完全な転換が生じる。該未精製混合物を室温に冷却させ、DCM(20mL)で希釈し、それから3M HCl(2×10mL)で抽出する。酸性水層を回収し、DCM(5mL)で洗浄し、10% NaOHの添加でpHを12〜13に塩基性化する。結果として生じる塩基性層をDCM(4×20mL)で抽出し、有機層を集め、鹹水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、溶媒除去及び溶出剤としてDCM/MeOH 96/4を使用するシリカクロマトグラフィの後、黄色の油として表題化合物を得る。
【０２９８】
工程5：4-((1S,4S)-5-tert-ブチル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル)-フェニルアミン
【化７１】
2011519897.tif 000074
この化合物は、中間体7、工程4について記載したのと同じ手順に従って調製する。
【０２９９】
中間体9：4-(5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.2]オクタン-2-イル)アニリン
【化７２】
2011519897.tif 000075
この化合物は、2,5-ジアザビシクロ[2.2.2]オクタン二塩酸塩(J. Heterocycl. Chem, 1974, 11, 449-451)を使用して、中間体7について記載したのと同じ手順に従って調製する。
【０３００】
中間体10：4-(8-イソプロピル-3,8-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-3-イル)アニリン
【化７３】
2011519897.tif 000076
この化合物は、8-(tert-ブトキシカルボニル)-3,8-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン(J. Med.Chem., 1998, 41, 674-681)を使用して、中間体7について記載したのと同じ手順に従って調製する。
【０３０１】
中間体11：4-(8-イソプロピル-3,8-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-3-イル)アニリン
工程1：3-(tert-ブトキシカルボニル)-8-イソプロピル-3,8-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン
【化７４】
2011519897.tif 000077
メタノール(25mL)中の8-(tert-ブトキシカルボニル)-3,8-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン(J. Med.Chem., 1998, 41, 674-681)(1.54g、7.25mmol)中の溶液に、酢酸ナトリウム(595.0mg、7.25mmol)、酢酸(415μL、7.25mmol)及びアセトン(2.66mL、36.25mmol)を添加する。反応混合物を40℃で1時間撹拌した後、シアノ水素化ホウ素ナトリウム(912.0mg、14.50mmol)を添加する。反応物を40℃で18時間加熱し、真空で濃縮し、DCMに回収し、NaHCO3水溶液で洗浄する。有機相を無水MgSO4で乾燥させ、真空濃縮して3-(tert-ブトキシカルボニル)-8-イソプロピル-3,8-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン(1.51g、82%)を得る。
【０３０２】
工程2：8-イソプロピル-3,8-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン
【化７５】
2011519897.tif 000078
この化合物は、中間体7、工程2について記載したのと同じ手順に従って調製する。
【０３０３】
工程3：8-イソプロピル-3-(4-ニトロフェニル)-3,8-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン
【化７６】
2011519897.tif 000079
この化合物は、中間体7、工程3について記載したのと同じ手順に従って調製する。
【０３０４】
工程4：4-(8-イソプロピル-3,8-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-3-イル)アニリン
【化７７】
2011519897.tif 000080
この化合物は、中間体7、工程4について記載したのと同じ手順に従って調製する。
【０３０５】
中間体12：6-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)ピリジン-3-アミン
【化７８】
2011519897.tif 000081
この化合物は、2-クロロ-5-ニトロピリジンを使用して、中間体7について記載したのと同じ手順に従って調製する。
【０３０６】
中間体13：3-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミン
工程1：((1S,4S)-2-イソプロピル-5-(3-ニトロフェニル)-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン
【化７９】
2011519897.tif 000082
トルエン(120mL)中のBINAP(0.47g、0.75mmol)及びトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)(0.34g、0.37mmol)の溶液を窒素下で15分間90℃に加熱した。反応混合物を40℃に冷却した後、1-ブロモ-3-ニトロベンゼン(1.89g、9.37mmol)、((1S,4S)-2-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン二塩酸塩(2.0g、9.37mmol)及びナトリウムtert-ブトキシド(3.14g、32.74mmol)を加えた。反応物を、窒素下で18時間、90℃に加熱した。室温に戻した後、反応物を酢酸エチルで希釈し、セライトに濾過した。濾液を減圧下で濃縮した。残渣を、メタノール中DCM/7N NH3(96/4)の混合物で溶出するシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィで精製し、表題化合物(1.92g、78%)を得た。
工程2：3-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミン
【化８０】
2011519897.tif 000083
先の工程で得た化合物(1.92g、7.34mmol)をEtOH(50mL)に溶かした。該系を窒素下で脱気し、配置した。活性炭上Pd(OH)2(10%、0.2g)を加え、結果として生じる懸濁液を水素雰囲気下で18時間、室温にて撹拌した。反応物をそれからセライトに濾過し、濾液を真空で蒸発させ、茶色の油として表題化合物(1.89g、98%)を得た。
【０３０７】
中間体14：2-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル)-ピリミジン-5-イルアミン
【化８１】
2011519897.tif 000084
上記の型の中間体は、DiMauroらの文献（J. Med. Chem.,2008, 51, 1681-1694）により記載されている手順で生産できる。2-クロロ-5-ニトロピリミジンの((1S,4S)-2-BOC-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタンとの開始反応に続く中間体7の手順の適用は、本発明の化合物の封入に適する中間体を与えるであろう。
【０３０８】
中間体15：(4-アミノフェニル)-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル)-メタノン
【化８２】
2011519897.tif 000085
上記の型の中間体は、WO 2007/138072に記載されている方法を使用して生産できる。4-ニトロ安息香酸の((1S,4S)-2-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタンとの開始反応に続くニトロ基の還元は、本発明の化合物の封入に適する中間体を与えるであろう。
【０３０９】
中間体16：((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザ-ビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-カルボン酸(4-アミノフェニル)-アミド
【化８３】
2011519897.tif 000086
上記の型の中間体をBioorg. Med Chem Lett, 2008; 4838-4843に記載されている方法を使用して生産できる。1-イソシアナート-4-ニトロベンゼンの((1S,4S)-2-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタンとの開始反応に続くニトロ基の還元は、本発明の化合物の封入に適する中間体を与えるであろう。
【０３１０】
中間体17：(1R,4R)-2-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタンジヒドロブロミド
【化８４】
2011519897.tif 000087
工程1：(2R,4R)-4-ヒドロキシ-ピロリジン-2-カルボン酸エチルエステル(1)
無水エタノール(20mL)中のシス-4-ヒドロキシ-ピロリジン-2-カルボン酸(1g、7.6mmol)の撹拌溶液に、窒素雰囲気の下、0℃で塩化チオニル(0.67mL、9.15mmol)を滴加する。反応混合物をそれから窒素下で約2時間還流する。該混合物を室温に冷却し、全ての溶媒を減圧下で除去する。白色沈殿物を濾過し、ジエチルエーテル(1×25mL)で洗浄して、白色固体として化合物(1)を得る。
【化８５】
2011519897.tif 000088
【０３１１】
工程2：(2R,4R)-1-(トルエン-4-スルホニル)-4-(トルエン-4-スルホニルオキシ)-ピロリジン-2-カルボン酸エチルエステル(2)
ピリジン(14mL)中の4-ヒドロキシ-ピロリジン-2-カルボン酸エチルエステル(1)(1.4g、7.1mmol) 及びトリエチルアミン(0.998mL、7.1mmol)の冷却溶液（-5℃）に、4-トルエンスルホニルクロライド(3.42g、17.9mmol)を1部ずつ添加した。冷却溶液をそれから0℃で1時間撹拌し、冷蔵庫に終夜保存した。その後、該混合物を室温で5時間更に撹拌し、氷水(10mL)に注入した。分離した沈殿物を濾過し、水で洗浄し(2×5mL)、乾燥させ、白色固体として化合物(2)を与えた。
【０３１２】
【化８６】
2011519897.tif 000089
【０３１３】
工程3：(2R,4S)-4-アセトキシ-1-(トルエン-4-スルホニル)-ピロリジン-2-カルボン酸エチルエステル(3)
無水DMF(25mL)中の1-(トルエン-4-スルホニル)-4-(トルエン-4-スルホニルオキシ)-ピロリジン-2-カルボン酸エチルエステル(2)(1g、2.14mmol)の撹拌溶液に、酢酸カリウム(0.314g、3.21mmol)を1部添加する。反応混合物をそれから60℃で4時間加熱する。水(50mL)を反応混合物に添加し、酢酸エチル(2×75mL)で抽出し、混合した有機層を水(2×50mL)で洗浄し、乾燥させて(Na2SO4)、濾過し、減圧下で濃縮して未精製の化合物を与える。未精製の化合物を、溶出剤として15% 酢酸エチル-ヘキサンを使用するシリカゲル(100-200のメッシュ)でのカラムクロマトグラフィで精製し、化合物(3)を与える。
【０３１４】
【化８７】
2011519897.tif 000090
【０３１５】
工程4：(3S,5R)-5-ヒドロキシメチル-1-(トルエン-4-スルホニル)-ピロリジン-3-オール(4)
THF(10mL)中の4-アセトキシ-1-(トルエン-4-スルホニル)-ピロリジン-2-カルボン酸エチルエステル(3)(0.65g、1.83mmol)の氷冷溶液に、LiAlH4(0.135g、3.66mmol)を1部ずつ添加する。その後、反応混合物を室温で1時間撹拌する。反応の完了後、0℃に冷却した後、6N HCl(0.65mL)を加えることにより反応混合物のpHを3に調整する。混合物を濃縮し、残渣を水(8mL)で粉末化し、沈殿した固体を濾過し、冷水(2×4mL)で洗浄し、減圧下で乾燥させて白色固体として化合物(4)を与える。
【０３１６】
【化８８】
2011519897.tif 000091
【０３１７】
工程5：(2R,4S)-1-(4-トリルスルホニル)-2-[[(4-トリルスルホニル)オキシ]-メチル]-4-[(4-トリルスルホニル)オキシ]-ピロリジン(5)
ピリジン(3mL)中の5-ヒドロキシメチル-1-(トルエン-4-スルホニル)-ピロリジン-3-オール(4)(0.45g、1.66mmol)の氷冷溶液に、4-トルイルスルホニルクロライド(1.11g、5.81mmol)を1部の添加する。温度を50℃に上げた後、反応混合物を10℃に冷却し、さらに2時間その温度に維持し、それから終夜室温で放置する。混合物を2N HCl(13mL)に注入する。冷却して化合物を沈殿させ、濾過で分離し、冷水(2×5mL)で洗浄し、減圧下で乾燥させて白色固体として化合物(5)を与える。
【０３１８】
【化８９】
2011519897.tif 000092
【０３１９】
工程6：(1R,4R)-2-イソプロポイル-5-(トルエン-4-スルホニル)-2,5-ジアザ-ビシクロ[2.2.1]ヘプタン(6)
無水トルエン(3mL)中(2R,4S)-1-(4-トリルスルホニル)-2-[[(4-トリルスルホニル)オキシ]-メチル]-4-[(4-トリルスルホニル)オキシ]ピロリジン(5)(0.5g、0.93mmol)及びイソプロピルアミン(0.3mL、0.33mmol)の混合物を110℃で10時間加熱する。該混合物をそれから室温に冷却し；固体を分け、濾過で分離し、トルエン(1×15mL)で洗浄する。混合した有機層をNa2SO4で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して粗生成物を与え、溶出剤として1% トリエチルアミン-酢酸エチルを使用するシリカゲル(100〜200メッシュ)でのカラムクロマトグラフィで精製し、白色固体として化合物(6)を得る。
【０３２０】
【化９０】
2011519897.tif 000093
【０３２１】
工程7：(1R,4R)-2-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタンジヒドロブロミド
70℃の33% HBr(0.5mL)及び酢酸(3mL) 溶液に、(1R,4R)-2-イソプロポイル-5-(トルエン-4-スルホニル)-2,5-ジアザ-ビシクロ[2.2.1]ヘプタン(6)(0.24g、0.000816mol)を添加する。該混合物をそれから同じ温度で12時間撹拌する。該混合物を10℃に冷却し、白色沈殿物を生じ、濾過し、ジイソプロピルエーテル(1×5mL)及び酢酸エチル(1×5mL)で洗浄し、減圧下で乾燥させ、白色固体として中間体17を得る。
【０３２２】
【化９１】
2011519897.tif 000094
【０３２３】
中間体18：2-カルボキサミド-4-フランボロン酸
【化９２】
2011519897.tif 000095
15gの3-フランボロン酸ピナコールエステル(77.3mmol、1.0当量)を120mLのアセトニトリルに溶かし、10.2mLのイソシアン酸クロロスルホニル(116mmol、1.5当量)を1部添加する。終夜撹拌を続ける。完全な転換をLCMSで測定する。30mLのH2Oをゆっくり添加して反応をクエンチする。溶液を濃縮し、100mLのIPAを添加する。この手順を繰り返し、反応混合物を120mLのH2O及び8mLのIPAを加えて希釈し、2時間撹拌する。このプロセスの間に形成される沈殿を濾過して取り除き、30mLのH2Oで洗浄する。乾燥後、該固体を120mLのIPA及び6mLのH2Oから再結晶化する。結晶を30mLのIPAで洗浄し、99+%純度で単離する。
【０３２４】
（本発明の化合物の具体例）
化合物1：5-{8-[4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル)-フェニルアミノ]-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-2,3-ジヒドロ-イソインドール-1-オン
【化９３】
2011519897.tif 000096
この化合物は、上記の対応する中間体を使用して、化合物2について記載したのと同じ手順に従って調製できる。
【０３２５】
【化９４】
2011519897.tif 000097
【０３２６】
化合物2：4-{8-[4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル)-フェニルアミノ]-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボキサミド
工程1：(5-ブロモ-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-8-イル)-[4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル)-フェニル]-アミン
【化９５】
2011519897.tif 000098
5,8-ジブロモ-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン(2.26g、8.14mmol)、4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル)-フェニルアミン(2.07g、8.95mmol、1.10当量)及びDiPEA(4.3mL、24.42mmol、3.00当量)を窒素下においてイソプロパノール(28mL)中で混合する。該反応物は、反応が完了するまで(典型的には5時間)、85℃に加熱する。溶媒を真空下で除去し、残渣を60mLの水性リン酸ナトリウム緩衝液(pH 7)と200mLのDCMとの間で分配し、該有機層を60mLの飽和NaClで洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、濾過し、真空で蒸発させ、緑黒色の泡状固体として表題化合物(3.67g)を生じる。
【０３２７】
工程2：4-{8-[4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル)-フェニルアミノ]-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボキサミド
【化９６】
2011519897.tif 000099
先の工程で得られた化合物(3.25g、7.59mmol)を、4-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-フラン-2-カルボン酸アミド(2.70g、11.40mmol、1.50当量)、PdCl2dppf.DCM(0.310g、0.38mmol、5mol%)、DiPEA(2.65mL、15.20mmol、2.00当量)と1,4-ジオキサン(51mL)及び水(13mL)中で混合する。該系を封止し、真空/N2でパージし、6時間110℃に加熱し、その時点で完全な転換が生じている。反応混合物をDCM(60mL)及びMeOH(60mL)で希釈し、セライトで濾過する。濾液を蒸発させ、濁茶色の残渣を生じる。この残渣をEtOH(50mL)、MeOH(25mL)及びDCM(20mL)で処理し、蒸発して乾燥させ、さらに1時間40℃で真空のままにし、できるだけ多くの水分及びアルコールを除去するよう努める。該乾燥残渣をDCM(100mL)に懸濁し、約1時間超音波処理し、全ての固体小片を分散させる。微細固体の懸濁液が得られる。それを0℃に冷却し、ブフナーで濾過し、該固体をDCM(30mL)で洗浄し、真空下で乾燥させた。
【０３２８】
残渣を1MのKOH(40mL)で処理し、固体が十分に分散するまで超音波処理し、焼結ガラス漏斗で濾過する。最後に、該固体をDCM(450mL)及びMeOH(50mL)に溶かし、飽和水性NaF(250mL)、水(500mL)及びiPrOH(250mL)の混合物で洗浄する。有機層を無水Na2SO4で乾燥させて濾過し、真空で蒸発させ、黄褐色の固体として4-{8-[4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル)-フェニルアミノ]-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボン酸アミド(2.34g)を生じる。
【化９７】
2011519897.tif 000100
【０３２９】
化合物3：4-{8-[4-((1S,4S)-5-tert-ブチル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル)-フェニルアミノ]-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボキサミド
【化９８】
2011519897.tif 000101
この化合物は、上記の対応する中間体を使用して、上記化合物2について記載したのと同じ手順に従って調製できる。
【化９９】
2011519897.tif 000102
【０３３０】
化合物4：4-{8-[4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル)-フェニルアミノ]-イミダゾ[1,2-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボキサミド
【化１００】
2011519897.tif 000103
この化合物は、上記の対応する中間体を使用して、化合物2について記載したのと同じ手順に従って調製できる。
【０３３１】
【化１０１】
2011519897.tif 000104
【０３３２】
化合物5：5-{8-(4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-1H-ピラゾール-3-カルボキサミド
工程1：エチル5-(8-(4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル)-1H-ピラゾール-3-カルボキシラート
【化１０２】
2011519897.tif 000105
THF(3mL)中のエチル5-(トリブチルスタンニル)-1H-ピラゾール-3-カルボキシラート(109.0mg、0.25mmol)(Heterocyles、1992、813-818)、(5-ブロモ-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-8-イル)-[4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル)-フェニル]アミン(163.0mg、0.38mmol)及びPd(PPh3)2Cl2(27.0mg、0.04mmol)中の混合物を18時間還流する。室温に戻した後、溶媒を減圧下で除去する。メタノール中DCM/7N NH3(97/3)混合物で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによる残渣の精製により表題化合物(35.0mg、28%)を得る。
【０３３３】
工程2：5-{8-(4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]-トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-1H-ピラゾール-3-カルボキサミド
【化１０３】
2011519897.tif 000106
メタノール(12mL)中、先の工程で得られた化合物(30.0mg、0.06mmol)、塩化アンモニウム(200mg)及び水酸化アンモニウム(2mL)の混合物を85℃で18時間加熱する。室温に戻した後、溶媒を減圧下で除去する。メタノール中DCM/7N NH3(95/5)の混合物でを溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによる精製により表題化合物(20.0mg、71%)を得る。
【化１０４】
2011519897.tif 000107
【０３３４】
化合物6：4-{8-(4-((1S,4S)-5-tert-ブチル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)-フェニルアミノ)イミダゾ[1,2-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボキサミド
【化１０５】
2011519897.tif 000108
この化合物は、上記の対応する中間体を使用して、化合物2について記載したのと同じ手順に従って調製できる。
【化１０６】
2011519897.tif 000109
【０３３５】
化合物7：4-{8-(6-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)ピリジン-3-イルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボキサミド
【化１０７】
2011519897.tif 000110
この化合物は、上記の対応する中間体を使用して、化合物2について記載したのと同じ手順に従って調製できる。
【化１０８】
2011519897.tif 000111
【０３３６】
化合物8：4-{8-(4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)イミダゾ[1,2-a]ピラジン-5-イル}-1H-ピリジン-2-オン
工程1：5-(2-エトキシピリジン-4-イル)-N-(4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニル)イミダゾ[1,2-a]ピラジン-8-アミン
【化１０９】
2011519897.tif 000112
この化合物は、上記の対応する中間体を使用して、化合物2について記載したのと同じ手順に従って調製できる。
【０３３７】
工程2：4-{8-(4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)イミダゾ-[1,2-a]-ピラジン-5-イル}-1H-ピリジン-2-オン
【化１１０】
2011519897.tif 000113
先の工程で得られた化合物(135.0mg、0.29mmol)及びピリジン塩酸塩(332.0mg、2.90mmol)の混合物を18時間、120℃に加熱する。室温に戻した後、該粗生成物をメタノールに溶かし、シリカに供して乾燥させる。メタノール中DCM/7N NH3(96/4)の混合物で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィでの精製により表題化合物(46.0mg、36%)を得る。
【化１１１】
2011519897.tif 000114
【０３３８】
化合物9：4-{8-(4-(5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.2]オクタン-2-イル)フェニルアミノ)[1,2,4]-トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボキサミド
【化１１２】
2011519897.tif 000115
この化合物は、上記の対応する中間体を使用して、化合物2について記載したのと同じ手順に従って調製する。
【化１１３】
2011519897.tif 000116
【０３３９】
化合物10：4-{8-(4-(5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.2]オクタン-2-イル)フェニルアミノ)-イミダゾ[1,2-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボキサミド
【化１１４】
2011519897.tif 000117
この化合物は、上記の対応する中間体を使用して、化合物2について記載したのと同じ手順に従って調製する。
【化１１５】
2011519897.tif 000118
【０３４０】
化合物11：4-{8-(4-(3-イソプロピル-3,8-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-8-イル)フェニルアミノ)-イミダゾ[1,2-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボキサミド
【化１１６】
2011519897.tif 000119
この化合物は、上記の対応する中間体を使用して、化合物2について記載したのと同じ手順に従って調製する。
【化１１７】
2011519897.tif 000120
【０３４１】
化合物12：4-{8-(4-(8-イソプロピル-3,8-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-3-イル)フェニルアミノ)[1,2,4]-トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボキサミド
【化１１８】
2011519897.tif 000121
この化合物は、上記の対応する中間体を使用して、化合物2について記載したのと同じ手順に従って調製する。
【化１１９】
2011519897.tif 000122
【０３４２】
化合物13：4-{8-(4-(3-イソプロピル-3,8-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-8-イル)フェニルアミノ)[1,2,4]-トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボキサミド
【化１２０】
2011519897.tif 000123
この化合物は、上記の対応する中間体を使用して、化合物2について記載したのと同じ手順に従って調製する。
【化１２１】
2011519897.tif 000124
【０３４３】
化合物14：4-{8-(4-(8-イソプロピル-3,8-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-3-イル)フェニルアミノ)-イミダゾ[1,2-a]ピラジン-5-イル}-フラン-2-カルボキサミド
【化１２２】
2011519897.tif 000125
この化合物は、上記の対応する中間体を使用して、化合物2について記載したのと同じ手順に従って調製する。
【化１２３】
2011519897.tif 000126
【０３４４】
化合物15：5-{8-(6-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)ピリジン-3-イルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-1H-ピラゾール-3-カルボン酸アミド
【化１２４】
2011519897.tif 000127
この化合物は、上記の対応する中間体を使用して、化合物2について記載したのと同じ手順に従って調製する。
【化１２５】
2011519897.tif 000128
【０３４５】
化合物16：5-{8-(4-((1S,4S)-5-tert-ブチル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ-[1,5-a]ピラジン-5-イル}-2,3-ジヒドロ-イソインドール-1-オン
【化１２６】
2011519897.tif 000129
この化合物は、上記の対応する中間体を使用して、化合物2について記載したのと同じ手順に従って調製する。
【化１２７】
2011519897.tif 000130
【０３４６】
化合物17：5-{8-(4-((1S,4S)-5-tert-ブチル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-1H-ピラゾール-3-カルボン酸アミド
【化１２８】
2011519897.tif 000131
この化合物は、上記の対応する中間体を使用して、化合物2について記載したのと同じ手順に従って調製する。
【化１２９】
2011519897.tif 000132
【０３４７】
化合物18：5-{8-(6-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)ピリジン-3-イルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル}-2,3-ジヒドロ-イソインドール-1-オン
【化１３０】
2011519897.tif 000133
この化合物は、上記の対応する中間体を使用して、化合物2について記載したのと同じ手順に従って調製する。
【化１３１】
2011519897.tif 000134
【０３４８】
化合物19：5-(2-エトキシピリジン-4-イル)-N-(4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニル)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-8-アミン
【化１３２】
2011519897.tif 000135
この化合物は、上記の対応する中間体を使用して、化合物2について記載したのと同じ手順に従って調製する。
【化１３３】
2011519897.tif 000136
【０３４９】
化合物20：4-(8-(4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル)ピリジン-2(1H)-オン
【化１３４】
2011519897.tif 000137
この化合物は、上記の対応する中間体を使用して、化合物2について記載したのと同じ手順に従って調製する。
【化１３５】
2011519897.tif 000138
【０３５０】
化合物21：エチル5-(8-(4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル)-1H-ピラゾール-3-カルボキシラート
【化１３６】
2011519897.tif 000139
この化合物の調製は、工程1において上記の対応する中間体を使用する化合物5に関して記載されている。
【化１３７】
2011519897.tif 000140
【０３５１】
化合物22：4-{8-(4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)イミダゾ[1,2-a]ピラジン-5-イル}-1H-ピリジン-2-オン
【化１３８】
2011519897.tif 000141
この化合物の調製は、工程1において上記の対応する中間体を使用する化合物8に関して記載されている。
【化１３９】
2011519897.tif 000142
【０３５２】
化合物23：3-(8-(4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-カルボキサミド
工程1：8-(4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ-[1,5-a]ピラジン-5-カルボニトリル
【化１４０】
2011519897.tif 000143
(5-ブロモ-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-8-イル)-[4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル)フェニルアミン(化合物2、工程1)(0.30g、0.70mmol)、フェロシアン化カリウム(0.13g、0.35mmol)、炭酸ナトリウム(0.037g、0.35mmol)、ヨウ化カリウム(0.058g、0.35mmol)、テトラフルオロホウ酸銅(II)水和物(0.36g、1.05mmol)、DMA(5mL)及びN,N-ジメチルエチレンジアミン(340μL、3.15mmol)で封管を充填する。反応混合物を85℃で18時間加熱する。室温に戻した後、反応物を、酢酸エチルと水との間で分配する。水相を酢酸エチルで2回抽出する。混合した有機相を水で洗浄し、MgSO4で乾燥させて濾過し、蒸発させる。メタノール中DCM/7N NH3(99/1)の混合物で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィでの残渣の精製により表題化合物を得る。
【０３５３】
工程2：3-(8-(4-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル)-1,2,4-オキサジアゾール-5-カルボキサミド
【化１４１】
2011519897.tif 000144
エタノール(300μL)中の先の工程で得られた化合物(26.0mg、0.07mmol)、DIPEA(12μL、0.07mmol)及び塩酸ヒドロキシルアミン(5mg、0.07mmol)の混合物を85℃で18時間加熱する。室温に戻した後、溶媒を蒸発させて乾燥し、残渣をピリジン(400μL)に溶解する。該溶液を0℃まで冷却し、エチル塩化オキサリル(24μL、0.21mmol)を添加し、該反応物を2時間、70℃に加熱する。室温に戻した後、氷水を添加し、30分撹拌し続ける。DCM(5mL)を添加し、水相を2回抽出する。混合した有機相をMgSO4で乾燥させて濾過し、蒸発させる。メタノール中DCM/7N NH3(99/1〜98/2)の混合物で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィでの残渣の精製により表題化合物を得る。
【化１４２】
2011519897.tif 000145
【０３５４】
化合物24：4-(8-(3-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル)フラン-2-カルボキサミド
【化１４３】
2011519897.tif 000146
この化合物は、上記の対応する中間体を使用する、化合物2について記載したのと同じ手順に従って調製した。
【化１４４】
2011519897.tif 000147
【０３５５】
化合物25：4-(8-(3-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)イミダゾ[1,2-a]ピラジン-5-イル)フラン-2-カルボキサミド
【化１４５】
2011519897.tif 000148
この化合物は、上記の対応する中間体を使用する、化合物2について記載したのと同じ手順に従って調製した。
【化１４６】
2011519897.tif 000149
【０３５６】
化合物26：5-(8-(3-((1S,4S)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)フェニルアミノ)-[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル)イソインドリン-1-オン
【化１４７】
2011519897.tif 000150
この化合物は、上記の対応する中間体を使用して、上記化合物2について記載したのと同じ手順に従って調製した。
【化１４８】
2011519897.tif 000151
【０３５７】
化合物27：4-[8-({4-[(1R,4R)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]フェニル}アミノ)[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]ピラジン-5-イル]-2-フラミド
【化１４９】
2011519897.tif 000152
【化１５０】
2011519897.tif 000153
工程1：(1R,4R)-2-イソプロピル-5-(4-ニトロフェニル)-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン(3)
(1R,4R)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタンジヒドロブロミド(2); 3.0 g; 9.9 mmol)、4-クロロニトロベンゼン(1.7 g; 11 mmol)、ジメチルスルホキシド(6.2mL)及び水道水(2.5mL) の混合物に、固体K2CO3である（1.7 g; mmol;気体発生)を添加する。結果として生じる懸濁液を50℃に加熱し、その後に2-MeTHF(0.5mL)及び追加の固体K2CO3(1.9 g; mmol)を添加する。反応温度を125℃に上げ、反応器内容物を終夜この温度で保つ。反応混合物を周囲温度に冷却し、その後水道水(25mL)を添加する。酢酸エチル(3×30 mL)での水性混合物の抽出、及び混合した有機抽出液の真空濃縮は固体残渣を与え、これを熱いMTBE(300mL)に再溶解する。該熱い溶液を濾過して残渣固体を取り除き、真空濃縮して粗生成物(2)を供給する。精製を酢酸エチル(70mL)と希塩酸(pH 1; 250 mL)との間で粗製物質を分配すること、層を分離すること、酢酸エチル(2×50及び2×100 mL)で水相を洗浄すること、希塩酸(pH 1; 100 mL)での混合した有機層の抽出、10N NaOH水溶液での混合した水層のpH 10への塩基性化、MTBE(2×200 mL)及び酢酸エチル(2×200 mL)でのアルカリ性水層の抽出、Na2SO4での乾燥、及び真空濃縮により精製が達成され、白色固体を与える。この固体をヘプタン/MTBE 1:1 v/v(20mL) において再スラリー化し、結果として生じる懸濁液を濾過し、濾過したケークをヘプタン/MTBE 1:1 v/v(20mL)で洗浄して風乾し、白色固体として(3)を与える。LC純度：99.3面積%。
【０３５８】
工程2：4-[(1R,4R)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]アニリン(4)
2-MeTHF(25mL)中の3の溶液(1.6 g; 6.1 mmol)を、1気圧の水素雰囲気下、Pd/C触媒(10% デグッサ型E101NE/W; 0.1 g)の存在下、30℃で3時間で撹拌する。触媒をDicalite 478の層で濾過して取り除き、濾過したケークを2-MeTHF(2×10 mL)で洗浄する。濾液を25mL量まで真空濃縮し、その結果として生じる溶液を次の工程でそのまま使用する。
【０３５９】
工程3：5-ブロモ-N-{4-[(1R,4R)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]フェニル}[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]-ピラジン-8-アミン(5)
工程2から得られる溶液に、5,8-ジブロモ[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]-ピラジン(1.6 g; 5.8 mmol)、及びトリエチルアミン(3.4mL)を添加する。結果として生じる混合物を70時間還流で加熱し、その後反応器の内容物を冷却し、濾過して固体を取り除く。濾過したケークを2-MeTHF(2×5 mL) で洗浄し、該濾液をそのまま次の工程で使用した。
【０３６０】
工程4：化合物27  4-[8-({4-[(1R,4R)-5-イソプロピル-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]フェニル}アミノ)[1,2,4]トリアゾロ[1,5-a]-ピラジン-5-イル]-2-フラミド(6)
工程3から得られる溶液に、2-MeTHF(5mL)、水道水(6.5mL)、[5-(アミノカルボニル)-3-フリル]ボロン酸(1.3 g; 8.6 mmol)、及びPd(dppf)2Cl2(0.26 g; 0.3 mmol) を添加する。結果として生じる混合物を真空/窒素パージサイクルで5回脱気し、80℃で6時間加熱する。該反応器の内容物をそれから周囲温度に冷却し、1,2-ジアミノプロパン(2mL)を添加し、結果として生じる懸濁液を濾過し(ゆっくりと！)、濾過したケークを2-MeTHF(6×5 mL)で洗浄し、緑色固体として未精製の化合物27を得る。該未精製物質をメタノール(15mL)において再スラリー化し、濾過し、濾過したケークをメタノール(5mL)で洗浄する。濾過したケークをそれから水/酢酸と混合し(pH 1；約50mL)、結果として生じる懸濁液を透明な濾液が得られるまで濾過し、濾過したケークを水で洗浄液が無色になるまで洗浄する。混合した濾液及び洗浄液は50℃で真空濃縮して水を除去し、残渣を2-プロパノール(2回)及びトルエン(3回)で取り除き、その後メタノール(70mL)及びトルエン(5mL)に回収する。結果として生じる懸濁液に1,2-ジアミノプロパン(2mL)及びdppe(0.08 g; 0.2 mmol)を添加し、その後終夜撹拌を続ける。精製された生成物を濾過で分離し、濾過したケークを洗浄液が淡黄色に変わるまでメタノールで洗浄した後、酢酸エチルで洗浄し、40℃で真空乾燥させ、黄色の固体として化合物27を得る。LC純度 98.6面積%。LC-MS：m/z = 459 (100)[M+H]+。
【０３６１】
（精製条件及び特徴づけ）
日常的に、合成後全ての化合物を、ギルソン調製HPLC該系(322台のポンプ、155台のUV/VIS検出器、215台の液体処理機)を使用する逆相HPLCを使用して、純化できる。ギルソン215は、オートサンプラ及びフラクションコレクタの両方として作用する。化合物をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィで精製することもできる。
【０３６２】
化合物は、エレクトロスプレー源を有する単一四重極測定器を使用する質量分析により特徴づける。
【０３６３】
（生物学的実施例）
(実施例１)：MAPKAP-K5アッセイ
MAPKAP-K5反応は、30分間室温でインキュベートした0.1又は0.2μCi 33P-ATP、0.6μM ATP、1mU MAPKAP-K5、3μM MAPKAP-K5ペプチド基質を使用してフラッシュプレート形式で実施する。
【０３６４】
（フラッシュプレートアッセイ）:
MAPKAP-K5キナーゼ反応を384ウェルのポリプロピレンプレート(Matrix Technologies)で実施し、それからストレプトアビジンで被覆した384ウェルのフラッシュプレート(Perkin-Elmer)に移す。ハイドラ（Hydra）(Robbins Scientific)を使用して、2μLの試験化合物又は標準阻害剤を含むウェルに、13μLの酵素混合物若しくは希釈剤を添加する。マルチドロップ(Thermo-Labsystems)を使用して10μL の[2.5×]基質カクテルを添加することにより反応を開始し、該アッセイにおける終濃度を以下のとおりに与える：
1mU MAPKAP-K5 
3μM MAPKAP-K5ペプチド基質
0.6μM ATP 
0.004μCi[33P]-γ-ATP/μL 
1×反応緩衝液
【０３６５】
プレートを30分間室温でインキュベートする。該反応は、Micro-fill (Biotek)を使用して各ウェルに25μL EDTA（50mM）を添加することにより終結させる。該反応物を、Zymarkロボットシステムを使用して、ストレプトアビジン被覆フラッシュプレートに移す。プレートを室温で60分間インキュベートする。全てウェルは、Tecanプレート洗浄機を使用し、100μlのリン酸緩衝食塩水で3回洗浄する。放射能は、パッカードトップカウント（Packard TopCount）でのフラッシュプレート(空ウェル)中のシンチレーション計数により決定する。
酵素混合物：
酵素
50mM トリスHcl(pH 7.5)
0.1mM EGTA
2mM DTT
1mg/mL BSA
反応緩衝液：
50mM トリスHcl(pH 7.5)
0.1mM EGTA 
10mM 酢酸マグネシウム
2mM DTT
【０３６６】
(実施例２)活性な初代滑膜線維芽細胞によるMMP1の発現の制御因子の同定のためのアッセイの開発
細胞のECM分解活性を減少させる化合物を同定するために、細胞のECM分解活性を誘導することで当該活性の適切な検出を可能にし、かつより明瞭な読み出しを達成することができる。RAの文脈において、選択される細胞は哺乳動物の滑膜線維芽細胞であり、ECM分解活性を誘導するために使用できる誘発因子は関節炎の領域に関連するサイトカインであり：例えば、TNF-α、IL1β、IL6、OSM、IL17及びMIF1-αである。このリストは、RA病因に潜在的に関与するサイトカインが多すぎることに起因して包括的なものではない（Smolen及びSteinerの文献, 2003）。病理学の複雑さにできるだけ近いインビトロアッセイを設計するために、適用する誘発因子は、関節炎の領域に関連するサイトカイン産生細胞、例えば単球、マクロファージ、T細胞及びB細胞を誘発因子と接触させることで生じる因子の混合物であるべきである。サイトカイン産生細胞は、複合的かつ偏りのない因子混合物を産生することにより、接触に応答する。使用されるサイトカイン産生細胞がパンヌスにも見出される場合、及びこの誘発因子を産生させるために適用するサイトカインが関節リウマチ患者の滑液において見出される場合、最終的に産生される因子の混合物は、関節炎患者の関節に存在する因子の一部を含む。
【０３６７】
（「MMPアッセイ」の原理）
マトリクスメタロプロテアーゼ(MMP)は、例えば他のプロテアーゼの成熟、成長因子、及び細胞外マトリクス成分の分解のような、様々な生理的役割を備えている。MMP1は、天然コラーゲン、すなわち骨及び軟骨の主成分を分解できるMMPファミリーのメンバーの1つである。滑膜線維芽細胞(SF)によるMMP1の発現増加は、関節炎疾患の進行のための診断であり、関節中の侵食プロセスについて予示的である(Cunnaneらの文献、2001)。SFによるMMP1の発現は、TNF-α又はIL1βのようなサイトカインとして関節リウマチに関連する誘発因子でのSFの活性化により増加し得る(Andreakosらの文献、2003)。考え合わせると、活性化SFにより産生されるMMP1のレベルの測定は、この事象がパンヌスにおいて見られるような侵食的表現型にSFの活性化のレベルを反映するので、RAの内容において高度に関連性の読み出しである。活性化SFの候補薬剤標的の発現減少が当該細胞によるMMP1発現の減少をもたらす場合、該薬剤標的はその後、MMP1発現の制御に関与することが証明され、このようにしてRAの治療にかかる治療戦略の開発についての関連性が認められる。
【０３６８】
以下の実施例において、アッセイ、さらにいうと「MMPアッセイ」の開発は、多様な活性化誘発因子(実施例2.1)に応答しての滑膜線維芽細胞(SF)によるMMP1産生をモニタする。このアッセイの使用はそれから、RA療法(実施例2.2)の開発のための薬剤標的と考えられる遺伝子産物の検証について記載される。薬剤標的の検証は、RNAi(RNA干渉)に基づく機構(WO 03/020931を参照されたい)により標的遺伝子の発現レベルを減少させるshRNAの細胞における発現を媒介する組換えアデノウイルス、さらにいうとノックダウンウイルス又はAd-siRNAを使用して実施される。検証された薬剤標的の活性を調節する化合物の同定は、後の表3に記載されている。同定した薬剤標的の活性を調節する化合物の試験のための「MMPアッセイ」の使用を更に以下に記載する。
【０３６９】
（アッセイ実施例）
（使用したコントロールウイルス）
これらの研究において使用するコントロールウイルスを以下に収載する。WO99/64582に記載されるように、dE1/dE2Aアデノウイルスは、PER.E2Aパッケージング細胞におけるヘルパープラスミドpWEAd5AflII-rITR.dE2Aの同時トランスフェクションにより、これらのアダプタプラスミドから産生される。
（ネガティブコントロールウイルス）
Ad5-eGFP_KD：標的配列：
【化１５１】
2011519897.tif 000154
WO03/020931に記載されたように産生されるベクター及びウイルスにSap1-部位を使用してクローン化される。
Ad5-Luc_v13_KD：標的配列
【化１５２】
2011519897.tif 000155
WO03/020931に記載されたように産生されるベクター及びウイルスにSap1-部位を使用してクローン化される。
Ad5-M6PR_v1_KD：標的配列
【化１５３】
2011519897.tif 000156
WO03/020931に記載されたように産生されるベクター及びウイルスにSap1-部位を使用してクローン化される。
（ポジティブコントロールウイルス）
Ad5-MMP1_v10_KD：標的配列
【化１５４】
2011519897.tif 000157
WO03/020931に記載されたように産生されるベクター及びウイルスにSap1-部位を使用してクローン化される。
（標的の検証のために使用するウイルス）
Ad5-MAPKAPK5_v13_KD：標的配列
【化１５５】
2011519897.tif 000158
WO03/020931に記載されたように産生されるベクター及びウイルスにSap1-部位を使用してクローン化される。
Ad5-MAPKAPK5_v12_KD：標的配列
【化１５６】
2011519897.tif 000159
WO03/020931に記載されたように産生されるベクター及びウイルスにSap1-部位を使用してクローン化される。
【０３７０】
（実施例2.1）：MMPアッセイの開発
MMP1の測定のための384ウェル形式のELISAを開発する。様々なELISAプロトコルと同様に、様々な一次抗体を試験する。以下のプロトコルを開発し、384ウェルのプレートのSF上清においてMMP1レベルを測定することを検証する：白色のLumitrac 600 384ウェルプレート(Greiner)を、2μg/mLの抗MMP1抗体MAB1346(Chemicon)で被覆する。該抗体を、緩衝液40(milliQ水1L中1.21g トリス塩基(Sigma)、0.58g NaCl(Calbiochem)及び5ml 10% NaN3(Sigma)をpH 8.5に調整)で希釈する。4℃で一晩のインキュベーション後、プレートをPBS (milliQ 10L中80g NaCl、2g KCl(Sigma)、11.5g Na2HPO4.7H2O及び2g KH2PO4；pH 7.4) で洗浄し、100μL/ウェルのカゼイン緩衝液（PBS中2%カゼイン（VWR International））でブロックする。翌日、カゼイン緩衝液をELISAプレートから取り除き、50μL/ウェルのEC緩衝液 (milliQ 1L中、4g カゼイン、2.13g Na2HPO4(Sigma)、2g ウシアルブミン(Sigma)、0.69g NaH2PO4.H2O(Sigma)、0.5g CHAPS(Roche)、23.3g NaCl、4mlの0,5 M EDTA pH 8(Invitrogen)、5ml 10% NaN3；pH 7.0に調整) で置換する。0.25ｍM DTT(Sigma)を解凍したサンプルプレートに添加する。EC緩衝液の除去後、試料の20μLをELISAプレートに移す。4℃で一晩の培養後、プレートをPBSで2回、PBST(0.05% Tween-20(Sigma)含有PBS)で2回洗浄し、35μL/ウェルのビオチン化抗MMP1抗体溶液(R&D)でインキュベートする。この二次抗体を緩衝液C(milliQ 2L中、0.82 g NaH2PO4.H2O、4.82g Na2HPO4、46.6g NaCl、20g ウシアルブミン、及び4mL 0,5M EDTA pH 8；pH 7.0調整) で5μg/mLの濃度に希釈する。室温で2時間のインキュベーション後、プレートを先に記載したように洗浄し、50μL/ウェルのストレプトアビジン-HRP抱合体(Biosource)でインキュベートする。ストレプトアビジン-HRP抱合体を緩衝液Cで0.25μg/mLの濃度に希釈する。45分後、プレートを先に記載したように洗浄し、50μL/ウェルのBM Chem ELISA基質（Roche）で5分間インキュベートする。読み出しは、200ミリ秒の集積時間を有する、又はEnvision reader (Perkin Elmer)を有するLuminoscan Ascent Luminometer(Labsystems)で実施する。
【０３７１】
RA(TNF-α、IL1β及びOSM)又はそれらの組み合わせの領域に関連するサイトカインで治療したSFによるMMP1発現の増加を白い棒として図2に示す。この実験のために、SFを96ウェルプレート(3,000細胞/ウェル)に播種する。24時間後、培地を1% FBS補充M199培地に交換する。培地交換の翌日にサイトカイン又はそれらの組み合わせを培地に添加し、各サイトカインは25ng/mLの終濃度で添加される。サイトカイン添加の72時間後、上清を回収し、上記で与えたプロトコルに記載したMMP1 ELISAで処理する。この実験と平行して、SFは、同じプロトコルを使用して、M199培地+ 1% FBSで48時間同じサイトカイン若しくはサイトカインの組合せで処理したTHP1細胞(M199+ 1% FBSで2倍希釈)の上清で誘発させる。これらの試料のMMP1レベルを灰色の棒として図2に示す。TNF-α処理THP1細胞の上清で誘発されたSFによるMMP1発現の誘導は、組換えTNF-α単独(3倍の誘導)で誘発されるSFに比較してより強く(4.5倍超の誘導)、3種の精製サイトカイン (TNF-α、IL1βb、OSM) の混合物で得られる5倍の誘導にほぼ等しい。この結果は、TNF-α誘導性のTHP1細胞の上清が、TNF-αの他に、MMP1発現にSFを活性化させる更なる炎症誘導性因子を含むことを示す。RA病因におけるTNF-αの役割が検証され(インフリキシマブ及びエタネルセプトなどのTNF-α-遮断薬はRA患者の治療において相当の有効性を示す)、かつTHP-1細胞がRA患者の関節に存在する単球/マクロファージの代表であるので、THP-1細胞をTNF-αと接触させることで調製されるTNF-αに基づく誘発因子混合物は、RA患者の関節に存在する因子を含み、後にRAに関連する。このTNF-αに基づく複合誘発因子は、更に「複合誘発因子」ともいい、「MMPアッセイ」の基礎として更に使用される。
【０３７２】
「複合誘発因子」によるSFの活性化の阻害は、齧歯動物においてコラーゲン誘導性関節炎を強力に減少させもする強力な抗炎症薬であるデキサメタゾンを使用して示される(Yangらの文献、2004) (図3)。デキサメタゾンは、複合誘発因子活性化SFにより産生されるMMP1の量を用量依存的に減少させることを示す。SFを96ウェルプレートに3000細胞/ウェルの密度で播種する。播種の24時間後、デキサメタゾンの濃度を増加させて細胞に添加する。一晩のインキュベーション後、全てのウェルの培地を、TNF-α(M199+0.5%FBSで希釈される50%)及びその前日に添加したのと同じ濃度のデキサメタゾンで処理したTHP-1細胞の上清に交換する。処理の48時間後、上清を収集し、上記のMMP1 ELISAに供する。デキサメタゾンの添加は、約1nMのIC50値でSFによるMMP1発現を明らかに減少させた(図3を参照されたい)。これらのデータは、活性化SFによるMMP1発現が、生理的に関連した阻害剤の添加により減少し、「MMPアッセイ」の原理の証明を表し得ることを示す。
【０３７３】
（実施例2.2）：MAPKAPK5はSF「複合誘発因子」-誘導性MMP1発現を調節する
(A)Ad-siRNAウイルスはMAPKAPK5発現をノックダウンするのに機能する
MAPKAPK5及びeGFPを標的化するsiRNAの発現を媒介する組換えアデノウイルスは、WO03/020931に記載されている手順に従って産生される。組換えアデノウイルスにおいて使用される標的配列は以下の通りである：
【化１５７】
2011519897.tif 000160
及び
【化１５８】
2011519897.tif 000161
。組換えアデノウイルスにおいて使用されるeGFP mRNA内の標的配列は以下の通りである：
【化１５９】
2011519897.tif 000162
。これらの配列はSap1部位を使用してアダプタプラスミドにクローン化される。dE1/dE2Aアデノウイルスは、WO99/64582に記載されるように、PER.E2Aパッケージング細胞におけるヘルパープラスミドpWEAd5AflII-rITR.dE2Aの同時トランスフェクションにより、これらのアダプタプラスミドから産生される。
【０３７４】
MAPKAPK5を標的化するアデノウイルスの機能性は以下の通りに試験する。これらのアデノウイルスを使用して、以下の通りにペトリ皿で培養された初代ヒトSFを感染させる。1日目に、ペトリ皿当たり500.000個のSFを播種する。翌日、細胞を4000MOI (Q-rt-PCRによりウイルスについて規定される力価(mL当たりのウイルス粒子の数)に基づく)のAd5-MAPKAPK5-v13_KD(1.6E9 VP/mL)又はAd5-eGFP-v5_KD(1.3E10 VP/mL)で感染させる。7日目に、細胞をトリプシンEDTA溶液を使用する標準手順に従ってペトリ皿から剥離させる。トリプシンをその後、10%FBS補充DMEM細胞増殖培地の添加で中和する。細胞をそれから遠心工程(1000回転数／分、5分)で回収する。ペレットを100μLの新鮮RIPA緩衝液(50ｍM トリスpH7.5、150ｍM NaCl、1% デオキシコール酸塩、1% TritonX100、0.1% SDS)に溶解する。試料をそれから10秒間超音波処理する。試料のタンパク質濃度はそれから、提供元により記載されているように標準としてBSAを使用するBCAキット(Pierce、カタログ番号23227)を使用して、決定する。RIPA緩衝液で19.5μlに希釈した30μgの細胞可溶化物に対し、3.5μLの還元剤(NuPage還元剤N°10、Invitrogen NP0004)及び7.5μLのサンプルバッファー(NuPage LDSサンプルバッファー、Invitrogen NP0007)を添加する。次いで、30μLの試料を5分間煮沸し、10%ポリアクリルアミドゲル(Invitrogen NP0301)に供する。タンパク質ノックダウンのレベルの推定を可能にするために、15μg、7.5μg及び3.75μgのAd5-eGFP-v5_KD感染細胞可溶化物もゲルに供する。次いで、ゲルを1×MOPS/SDS NuPageランニングバッファー(Invitrogen NP001)にて100Vで2時間泳動する。10μlのSeablue Plus前染色標準(Invitrogen LC5925)を使用して、ゲル上のタンパク質サイズを推定する。次いで、ゲル上のタンパク質を、100ml Nupage転写バッファー20*(NP0006-1)、400mLメタノール、及び1500mL Milli Q水を混合することによって調製した転写緩衝液を使用する湿式ブロッティング手順により、PVDF膜(Invitrogen LC2002)に転写させる。転写前に、膜を最初にメタノール及び転写緩衝液に浸漬する。転写は100Vで90分間にわたり実施する。次いで、膜は、PBST(0.1% Tween20補充PBS(Sigma、P1379))で調製したブロッキング緩衝液(2%ブロッキングパウダー(Amersham、RPN2109)に30分間浸すことによってブロックする。ブロッキングの後、ブロッキング緩衝液で250倍に希釈したMAPKAPK5に対するマウスモノクローナル抗体(BD Bioscience、カタログ番号612080)を使用して免疫検出を実施する。この一次抗体とともに一晩インキュベートした後、該膜をPBSTで3回洗浄し、ブロッキング緩衝液で50000倍に希釈した二次抗体((ポリクローナルヤギ抗マウスIg、HRP抱合(DAKO P0447)とともに1時間インキュベートする。次いで、該ブロットをPBSTで3回洗浄し、製造元の説明書に従ってKodakimagerにてECLアドバンス(RPN2109、Amersham)を用い検出を実施する。ウェスタンブロッティングにより、Ad5-MAPKAPK5-v13_KD感染細胞におけるMAPKAPK5の発現レベルは、Ad5-eGFP-v5_KDネガティブコントロールウイルスで感染させた細胞と比較して低いことが明らかになった。希釈したAd5-eGFP-v5_KD感染試料を用いた比較は、発現が1/2に減少することを推定することを可能にした。「剥離手順」(PBSTで膜を5分間煮沸)によってMAPKAPK5抗体を除去した後のβ-アクチンの免疫検出により、30μgの試料と同等の泳動が証明される。β-アクチンの免疫検出はMAPKAPK5検出について記載した方法に従って実施するが、一次抗体として1000倍希��のβ-アクチンに対するヤギポリクローナル抗体(Santa Cruz、カタログ番号SC-1615)及び二次抗体として50000倍希釈のウサギ抗ヤギ抗体を使用する。この実験の結果を図4に与える。考え合わせると、この実験は、Ad-siRNAウイルスの機能性が初代ヒトSFにおけるMAPKAPK5発現レベルの減少をもたらすことを実証した。
【０３７５】
(B)MAPKAPK5ノックダウンAd-siRNAはSF誘導性MMP1発現を減少させる
「MMPアッセイ」でAd5-MAPKAPK5-v13_KDウイルスの有効性を以下の通りに試験する。1日目に、SF(継代9〜10)を、完全滑膜細胞増殖培地(Cell Applications)中3000細胞/ウェルの密度で96ウェルプレートに播種する。翌日、細胞を漸増量(3、6、9、12又は15μL)の下記ウイルスで感染させる：Ad5-eGFP-v5_KD、Ad5-MAPKAPK5-v12_KD、Ad5-MAPKAPK5-v13_KD、Ad5-MMP1-v10_KD。中性ウイルスAd5-Luc-v13_KDを添加することによってウイルス充填量を補正し、細胞上の最終ウイルス容量を全てのウェルにおいて15μLとする。この補正は、観測される効果が、細胞に適用されるウイルス充填量に起因しないことを保証するものである。次いで、活性化工程の前に細胞を5日間インキュベートする。この工程には、全てのウェルにおける、25μLの「複合誘発因子」を補充した75μLのM199培地での細胞増殖培地の置換を含む。活性化工程の48時間後に上清を回収し、実施例1に記載したMMP1 ELISAに供する。実験結果を図5に示す。実験の品質は、MMP1自体を標的化するAd-siRNAウイルスの有効性により実証される。このポジティブコントロールウイルスはSFによりMMP1発現を強力に減少させるが、ルシフェラーゼの発現を標的化するよう設計されたネガティブコントロールウイルスはMMP1発現のレベルに影響しない。MAPKAPK5標的を検証するために使用する2つのウイルス(Ad5-MAPKAPK5-v12_KD及びAd5-MAPKAPK5-v13)は、初代ヒトSFによる複合誘発因子誘導性のMMP1発現の明らかな減少ももたらす。この実験から、MAPKAPK5がSFにおけるMMP1発現を調節することを示す有益な薬剤標的を表すと結論できる。同様に、小分子化合物によるMAPKAPK5酵素活性の阻害は、「MMPアッセイ」において「複合サイトカイン」誘導性のMMP1発現を減少させることが予測される。小分子化合物によるMAPKAPK5酵素活性の阻害も、RAと関連する関節の変性を減少させることが予測される。
【０３７６】
(C)MAPKAPK5を阻害する化合物のインビトロ「MMPアッセイ」試験
生化学アッセイ(すなわち、精製された酵素を使用する無細胞)においてMAPKAPK5活性を阻害する化合物を、以下のプロトコルに従う「MMPアッセイ」で試験する。
【０３７７】
化合物マスターストック(全て100% DMSO中10ｍM 濃度)を、水(蒸留水、GIBCO、DNAse及びRNAse不含)で10倍希釈し、10% DMSOで1ｍM中間ワークストックを得る。この中間ワークストックを更に10%DMSOで3倍(又は10倍)希釈し、それぞれ10% DMSO中333μM(又は100μM)濃度の中間ワークストックを得る。該1ｍM並びに333μM(又は100μM)の中間ワークストックをそれから更に1.1% DMSOで10倍希釈し、2% DMSO中100μM及び33.3μM(又は10μM)濃度の10×ワークストックを得る。その後、この10×ワークストックを1%FBS補充M199培地で10倍希釈し、10μM及び3.33μM（又は1μM）の化合物並びに0.2% DMSOを含む最終的な「1×化合物調製物」を得る。これらは、該化合物が細胞において試験される最終的な条件である。平行して、10×ワークストックを「複合誘発因子」(すなわち、実施例1に記載されたように産生されるTNF-α処理したTHP1細胞の上清)で10倍希釈し、これを1% FBS補充M199で2倍希釈して「50% 複合誘発因子調製の1×化合物」を産生する。
【０３７８】
1日目に、RASFを、完全滑膜細胞増殖培地(細胞Applications)中3000細胞/ウェルの密度で96ウェルプレート(平底、組織培養処理、Greiner)に播種する。5日目に、化合物を以下の通りに培養細胞に添加する。培地を細胞から完全に除去し、1%FBSを補充したM199培地に10μM又は3.33μM(又は1μM)で化合物及び0.2%DMSOを含む75μLの「1×化合物調製物」で置換する。化合物が平衡になり、細胞に侵入することを可能にする2時間のインキュベーションの後、25μLの「50%複合誘発因子調製物中1×化合物」を、対応する化合物を対応する濃度で含むウェル内の「1×化合物調製物」上のウェルに添加する。このようにして、最終的に8倍希釈した複合誘発因子を細胞に適用する。次いで、48時間のインキュベーションを実施した後、20μlの細胞上清を上記のようにMMP1 ELISAで処理して、生データ(RLU：相対発光単位)を送出する。以下の対照が実験に含まれる。細胞が複合誘発因子で活性化されるが、0.2%DMSO媒体のみが添加される(それゆえ、化合物不含)、最大シグナル対照。この対照は、該試験において達成し得るMMP1の最大レベルを示す。最小シグナル対照もこれらの実験に含まれる。ここでは細胞を誘発させない。細胞の培地はその後、5日目に100μlの1% FBS補充M199培地に変更する。この対照は、RASFにより産生される基底MMP1レベルを戻す。当該化合物で達成されるMMP1発現の％阻害は、その後、下記式を用いてELISAにより返されるRLUデータに基づいて算出される：
[[(最大MMP1レベル−最小MMP1レベル)−(濃度Y のMMP1レベル化合物X−最小MMP1レベル)]／(最大MMP1レベル−最小MMP1レベル)]×100。
【０３７９】
化合物の毒性を以下の通りに評価する。1日目に、SFを、白色の組織培養処理した96ウェルプレートに、100μLの完全滑膜細胞増殖培地中3000細胞/ウェルの密度で播種する。化合物操作、細胞への化合物の添加並びに細胞の活性化は、MMP1レベルを測定するためにこの実施例の先に記載したように更に実施する。48時間のインキュベーション後、培地をウェルから除去し、50μLの新鮮な1%FBS補充M199培地で置換する。次いで、50μLの基質(Promega Celltiter Glow細胞生存率キット)をウェルに添加する。10分間のインキュベーション後、発光シグナルを測定する。最大対照ウェルに比較した場合における50%超の発光シグナルの減少は、有意な毒性を反映すると考えられる。「MMPアッセイ」で試験した化合物について毒性は観察されない。
【０３８０】
様々な化合物の細胞浸透能力差等の要因が、インビトロ生化学アッセイと細胞MMPアッセイの化合物の活性の相違に寄与し得ることは理解されるべきである。
【０３８１】
(実施例３)：ヒトPBMCによるサイトカイン放出における化合物の効果を評価するためのアッセイ
ヒト末梢血単核細胞(PBMC)は、基本的にBoyum(1984)の方法に従って単離した健常ボランティアの血液から調製した「バフィーコート」から分離する。手短にいうと、バフィーコートを1×PBS (Gibco)で1:1希釈し、その30mLを50mLファルコン管中の20mLのリンホプレップ（Lymphoprep（商標））(Lucron Bioproducts)上に注意深く置く。遠心(35分、400g、18℃)の後、単核細胞を白い中間層から回収し、1×PBSで再懸濁及び遠心(10分、200g)することにより3回洗浄する。単離されたPBMCは最終的に、10%の熱不活化FBS(Hyclone)で補充されたRPMI 1640(カタログ番号21875、Gibco)に再懸濁する。
【０３８２】
アッセイのために、PBMCを96ウェルプレート(Nunc)に160μL中2.5E6 cells/mLで播種する。はじめにDMSO(Sigma)で試験化合物を段階希釈し、その後、1%の熱不活化FBSを含むM199培地(Gibco)で50倍希釈する。化合物を更にアッセイプレートで1/10希釈し、0.2%の最終DMSO濃度を得る。細胞を37℃、5% CO2で1時間、化合物とプレインキュベートする。その後、細胞を20μL量で終濃度1μg/mLに添加されるLPS(大腸菌抗原型026：B6 カタログ番号L2654、Sigma)で刺激し、細胞を24時間更に培養する。プレートを遠心分離し、上清を回収し、ELISAでの適切な希釈の分析まで-80℃で保存する。
.
【０３８３】
以下の384ウェル化学発光ELISAプロトコルは、上清のTNFΑレベルを測定するために開発した：白色のLumitrac 600 384-ウェルプレート(Greiner)を、1×PBS(Gibco)で1μg/mLに希釈した抗TNFα捕捉抗体(カタログ番号551220、BD Pharmingen) (40μL/ウェル)で被覆する。4℃で一晩のインキュベート後、プレートを1×PBS(10LのmilliQ中80g NaCl、2g KCl(Sigma)、11.5g Na2HPO4.7H2O及び2g KH2PO4;pH7.4)で洗浄し、100μL/ウェルの緩衝液B(1% BSA(Sigma)、5%ショ糖(Sigma)及び0.05% NaN3(Sigma)を含有する1×PBS)でブロックする。室温で4時間のインキュベート後、ブロッキングバッファーを除去し、プレートをPBST(0.05% Tween-20含有1×PBS(Sigma))で1回洗浄する。次いで、40μLの試料をELISAプレートに移し、プレートを4℃でインキュベートする。翌日、プレートを3回(PBSTで2回、PBSで1回)洗浄し、最初に緩衝液D(1% BSA含有1×PBS)で250ng/mlの濃度に希釈された35μL/ウェルのビオチン化抗TNFα抗体(カタログ番号554511、BD Pharmingen)を添加する。室温で2時間のインキュベート後、プレートを上記のように洗浄し、緩衝液Dで1/2000希釈したストレプトアビジン-HRP抱合体(カタログ番号SNN2004、Biosource)35μL/ウェルを添加する。45分後、プレートを上記のように洗浄し、50μL/ウェルのBM化学発光ELISA基質POD(Roche)とともに5分間インキュベートする。読取りは、積算時間が100ミリ秒のLuminoscan Ascent Luminometer(Labsystems)で実施し、生データ(RLU:相対発光単位)を送出する。以下の対照、すなわち細胞がLPSによって活性化されるが、0.2%DMSO媒体のみが添加される(すなわち、化合物不含)、最大シグナル対照が実験に含まれる。この対照は、該試験で達成され得るTNFαの最大レベルを示す。最小シグナル対照も当該実験に含まれる。ここでは細胞を誘発させない。この対照をPBMCにより産生される基底TNFαレベルを戻す。その後、該化合物で達成されるTNFα放出の阻害割合(PIN)を、下記式を用いてELISAにより返されるRLUデータに基づいて算出する：100−[((濃度YのTNFαレベルの化合物X−最小TNFαレベル)／(最大TNFαレベル−最小TNFレベル))×100]。化合物を8種の濃度(1/3の段階希釈)で試験する場合、EC50値は、各試験濃度の化合物について達成されたPINデータの平均値のカーブフィッティングにより算出できる。
【０３８４】
LPS刺激したPBMC培養物によるIL1及びIL6の放出における化合物の効果をアッセイするために、適切に希釈した該上清を、先に記載したのと同じELISAプロトコルを使用して測定できる。IL1及びIL6 ELISAに対する適合対抗体(全てR&D Systems製)を以下のように使用できる：0.5μg/mLで使用される抗IL1捕捉抗体(カタログ番号MAB601) 、50ng/mLで使用されるビオチン化抗IL1検出抗体(カタログ番号BAF201)；1μg/mLで使用される抗IL6捕捉抗体(カタログ番号MAB206)；50ng/mLで使用されるビオチン化抗IL6検出抗体(カタログ番号BAF206)。
【０３８５】
(実施例４)：MMP13アッセイ
MMP13 ELISAのプロトコルを4.1節に記載し、次いでSW1353軟骨肉腫細胞株IL-1/OSM駆動MMP13発現の放出における化合物の試験を4.2節に記載する。
【０３８６】
（4.1 MMP13 ELISAプロトコル）
MMP13の測定のための384ウェル形式のELISAを開発した。様々なELISAプロトコルと同様に、様々な一次抗体を試験した。以下のプロトコルを開発し、384ウェルプレートにおける細胞培養上清のMMP13レベルを測定することを検証する。
【０３８７】
黒色のmaxisorb 384ウェルプレート(Nunc 460518)を、1.5μg/mLの抗MMP13抗体MAB511(R&D systems) を含む緩衝化溶液35μlで被覆する。該抗体を炭酸塩-重炭酸塩被覆緩衝液(1LのMilliQ水中1.59g Na2CO3(Sigma S-7795)及び2.93g NaHCO3（Sigma S-5761）、pH 9.6に調整)で希釈する。4℃で一晩のインキュベーション後、ウェルを100μLのPBST(10LのmilliQ水中80g NaCl、2g KCl(Sigma)、11.5g Na2HPO4.7H2O及び2g KH2PO4；pH 7.4 + 0.05% Tween-20(Sigma))で2回洗浄し、100μL/ウェルのブロッキングバッファー(PBS中5% 脱脂粉ミルク)でブロックする。4℃で一晩のインキュベーション後、ウェルを100μLのPBSTで2回洗浄する。PBSTを除去し、35μLの試料をELISAプレートに移す。室温で4時間のインキュベーション後、プレートをPBSTで2回洗浄し、35μL/ウェルの1.5ｍM APMA溶液と37℃で1時間インキュベートする。10ｍM APMAストック溶液は、前日に調製し(10mLの0.1M NaOH(Merck 1.06469.1000)中35.18mgのAPMA(Sigma A-9563)、4℃で保存する。使用前に、10ｍM APMAストック溶液を1×APMA緩衝液（10×APMA緩衝液：500ｍM トリス(Roche 708976)、50ｍM CaCl2(Sigma C-5080)、500 μM ZnCl2(Sigma Z-0173)、1.5M NaCl(Calbiochem 567441)、0.5% Brij35(Sigma 430 AG-6) 、pH 7.0に調整）で1.5ｍMに希釈する。APMAによるMMP13の活性化の後、プレートを100μLのPBST/ウェルで再び2回洗浄し、35μLの基質溶液を各ウェルに添加する。基質溶液を以下の通りに調製する：OmniMMP Fluorescent基質(Biomol P-126)ストック溶液(DMSO中2ｍM、-20℃で保存)を1×OmniMMP緩衝液(10×OmniMMP緩衝液：500ｍM Hepes(Sigma H4034)、100ｍM CaCl2(Sigma C5080)、0.5% Brij35(Sigma 430 AG-6；pH 7.0に調整)で終濃度0.01ｍMに希釈する。37℃で一晩のインキュベーション後、試料中の活性MMP13は基質を切断し、蛍光を放出する。読み出しは、320nm励起/405nm発光フィルタを使用して、EnVision(Perkin Elmer)で実施する。
【０３８８】
（4.2 SW1353細胞でのサイトカイン駆動MMP13発現における化合物の効果の評価）
ヒト軟骨肉腫細胞株SW1353をATCCから得て、10% 熱不活化FBS及び1×ペニシリン/ストレプトマイシン(Invitrogen)補充DMEM中、37℃で5% CO2の加湿インキュベータで培養した。細胞の一定分量を凍らせ、液体窒素において低温保存した。低温保存された一定分量から開始し、細胞をトリプシン処理で週2回、1/5-1/8の比率で二次培養することにより、更に培養する。
【０３８９】
化合物マスターストック(全て100% DMSO中10ｍM 濃度)から開始し、100% DMSO中96ウェルプレートにおいて3倍の段階希釈をする。その後、プレートを1% 熱不活化FBS補充M199培地で更に50倍希釈し、中間ワークストックを得る。
【０３９０】
1日目に、SW1353細胞を96ウェルプレート(平底、組織培養処理、Greiner)に120μLの細胞増殖培地中15000細胞/ウェルの密度で播種する。その翌日、中間ワークストックから15μLの化合物を添加する。化合物が平衡化し、細胞に入ることを可能にする60分のインキュベーション後、細胞を15μL量で添加するIL-1β及びOSMの混合物で刺激し、終濃度1ng/mlのIL-1β及び25ng/mlのOSMを得る。そのために、IL-1(10μg/ml)及びOSM(25μg/ml)(両方ともPeproTech)のストックをそれぞれ1% FBS補充M199培地で10ng/ml及び250ng/mlに希釈した。48時間のインキュベーション後、細胞上清を集め、適切な希釈剤を先に記載したMMP13 ELISAで処理し、生データ(RFU：相対蛍光単位)を送出した。以下の対照が該実験に含まれる：細胞が、IL1-β/OSMサイトカイン混合物により活性化されるが、0.2% DMSO媒体のみ添加される(すなわち、化合物不含)、最大シグナル対照。この対照は、該試験において達成し得る最大MMP13レベルを示した。細胞が0.2% DMSO媒体のみを受け、誘発因子が存在しない、最小シグナル対照も含まれる。この対照は、SW1353細胞により産生される基底MMP13レベルを戻す。該化合物で達成されるMMP13発現の阻害割合をそれから、以下の式を用いてELISAにより返されるRFUデータに基づいて算出する：[[(最大MMP13レベル−最小MMP13レベル)−(濃度Y のMMP13レベル化合物X−最小MMP13レベル)]／(最大MMP13レベル−最小MMP13レベル)]×100。阻害割合対Log(モル濃度)及びカーブフィッティングのプロットに基づき、具体的な化合物のIC50値を算出できる。
【０３９１】
以下の化合物は、上記の合成方法に従って調製されているか又は調製できる。下記の表1について、実施例1に記載されているMAPKAPK5アッセイ法を使用して決定できる各化合物の活性は、以下のように表現される：
++++   MAPKAPK5の IC50が0.01〜100nMを呈した化合物
+++    MAPKAPK5の IC50が101〜500nMを呈した化合物
++     MAPKAPK5の IC50が501〜1000nMを呈した化合物
+      MAPKAPK5の IC50が1000nM超を呈した化合物
【０３９２】
【表２】
2011519897.tif 000163
2011519897.tif 000164
2011519897.tif 000165
2011519897.tif 000166
2011519897.tif 000167
2011519897.tif 000168
2011519897.tif 000169
2011519897.tif 000170
2011519897.tif 000171
(MMP1データ)
§§    MMP1の IC50が1〜1000nMを呈した化合物
§      MMP1の IC50が1000nM超を呈した化合物
【表３】
2011519897.tif 000172
2011519897.tif 000173
【０３９３】
（MMP13データ）
***    MMP13の IC50が1〜500nMを呈した化合物
**     MMP13の IC50が500〜1000nMを呈した化合物
*      MMP13の IC50が1000nM超を呈した化合物
【表４】
2011519897.tif 000174
【０３９４】
（インビボ研究）
(実施例５)：化合物の許容度
このプロトコルは、健常DBA/1Jマウスにおける本発明の化合物の許容度を評価し、有効用量(マウス治療的コラーゲン誘導性関節炎モデル)と中毒用量の間の用量範囲で定義される「治療的ウインドウ」を決定するように設計されている。
【０３９５】
(5.1 動物)
DBA/1Jヌードマウスを使用する(CERJ (France))。該マウスは10〜11週齢であり、約20g体重を有した。
【０３９６】
（5.2 化合物の調製）
化合物は、マウスの標準注入量0.1mL/10g(10mg/1mLに等しい)において、100mg/kg/日、po、遊離塩基の投与計画のために調製する。溶液製剤のために、該化合物を週1回、0.5% メチルセルロース及び1% DMSOに溶かした。
【０３９７】
（5.3 実験群）
群を体重に基づいてランダム化し、最長2週間処理する。各群は5匹のマウスを含み、マウス当たり200μLの日用量に基づき、100mg/kgの試験化合物、100mg/kg/日の比較化合物(化合物A)、又はビヒクルのいずれかを受けた。
【化１６０】
2011519897.tif 000175
【０３９８】
（5.4 動物のモニタリング(臨床徴候及び体重)）
潜在的薬毒性は、毎日の観測及び週3回体重を減量について記録することによりモニタする。全ての統計解析は、スチューデントt検定を使用して実施した。
【０３９９】
治療の一般的許容度を評価するために、総体重を研究経過全体にわたって追う。図6Aは総体重における化合物1及び化合物2の効果を示し、図6Bは比較化合物A(構造については下記を参照されたい)の効果を示す。データは、架橋された化合物が非架橋された化合物よりも良好に許容されることを示す。特に、ビヒクルと比較し、100mg/kg/日にて化合物1又は2で処理した動物の体重間の統計的有意差はなかった。
【０４００】
(実施例６)：CIAモデル
完全フロイントアジュバント/コラーゲンII(CFA/Coll IIウシ)を実験開始時に尾部(皮内)に注入する(1mg/mL、動物につき100μL)。不完全フロイントアジュバント/コラーゲンII(IFA/Coll II)をCFA/ Coll II注入の21日後、同じレベル(1mg/mL、動物につき100μL)で尾部に注入する。
【０４０１】
その後、動物をスコアに基づいてランダム化し、治療群が異なる群のスコアにおいて等しい分布を保証するよう割り当てる。
【０４０２】
試験化合物(1mg/kg/日、3mg/kg/日又は30mg/kg/日)、ポジティブコントロール(エンブレル、10mg/kg/3週、腹腔内)、又はビヒクル(メチルセルロース、1%DMSO)のいずれかでの処理を、IFA/Coll II-ブースト後8日目(すなわち、実験28日目)に開始する。
【０４０３】
動物に、14日間、該試験化合物、ポジティブコントロール、又はビヒクルを毎日投与する。動物を臨床症状について毎日記録し、スコアリングを個々の足について報告する。治療期間中、動物の体重をモニタする。骨保護をX線撮像で分析する。
【０４０４】
本発明の選択化合物は、3又は30mg/kd/日で有効であった。
【０４０５】
(実施例７)：敗血症性ショックモデル
リポ多糖(LPS)の注入は、可溶性腫瘍壊死因子(TNF-α)の迅速な放出を末梢に誘導する。このモデルを使用して、インビボでのTNF放出の見込みのある遮断薬を分析する。
【０４０６】
群につき6匹のBALB/cJ雌マウス(20g)を意図する1回の投与(po)で処理する。30分後、LPS(15μg/kg；大腸菌抗原型0111：B4)を静脈注射する。90分後、マウスを安楽死させ、血液を回収する。循環TNFαレベルを市販のELISAキットを使用して測定する。デキサメタゾン(5μg/kg)を対照抗炎症化合物として使用する。本発明の選択化合物は、3、10及び20mg/kg(po)で有効であった。
【０４０７】
(実施例８)：マウスコラーゲン抗体誘導性関節炎(CAIA)モデル(マウスモノクローナル抗体(MAB)モデルともいう)
群につき8匹のBALB/cJ雌マウス(20g)を意図する1回の投与(po)で処理する。同日に、4種のモノクローナル抗体の2mg/マウスのカクテル(MDBiosciences；参照:CIA-MAB-50)を静脈注射する。3日後、LPS(50μg/マウス；大腸菌抗原型55：B5)を腹腔内投与する。試験化合物、ポジティブコントロール(エンブレル、10mg/kg/3週、腹腔内、又はデキサメタゾン、1mg/kg、毎日、経口)、又はビヒクル(メチルセルロース、1%DMSO)での処理を、抗体注入の日に始める。動物に、最長10日間、該試験化合物、ポジティブコントロール又はビヒクルを毎日投与する。動物を臨床症状について記録し、スコアリングを個々の足について報告する。治療期間中、動物の体重をモニタする。
【０４０８】
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J.M. Keithらの文献., Bioorg. Med Chem Lett, 2008; 4838-4843
【０４０９】
上記の説明が事実上典型的かつ説明的であって、本発明及びその好ましい実施態様を例示すことを意図することは当業者により認められる。ルーチン試験により、当業者は、本発明の精神を逸脱しない範囲でなし得る明らかな修飾及び変更を認識するであろう。従って、本発明は、上記記載によってではなく、以下の特許請求の範囲及びそれらの均等物で規定されることを意図する。
【０４１０】
上記記載から、本発明の組成物及び方法の様々な修飾及び変更が当業者に生じるであろう。添付の特許請求の範囲の範囲内にある全ての当該修飾は、本件出願に含まれることを意図する。
【０４１１】
様々な化合物の示差的な細胞浸透能などの因子がインビトロ生化学アッセイにおける化合物活性と細胞アッセイにおける化合物活性との間の相違に関与し得ることは、理解されるべきである。
【０４１２】
特許及び特許出願を含むがこれらに限定されない本明細書に引用された全ての刊行物は、個々の刊行物が完全に記載されているかのように引用により本明細書に組み込まれるように具体的かつ個別的に示されているかのように、引用により本明細書に組み込まれる。
【０４１３】
本件出願に与えられ、かつ記載される本発明の化合物の化学名の少なくともいくつかは、市販の化学命名ソフトウエアプログラムの使用により自動化されたものに基づいて提供されている場合があり、独立に検証していない場合がある。この機能を発揮する代表的なプログラムには、Open Eyeソフトウェア社により販売されるLexichem命名ツール及びMDL社により販売されるAutonomソフトウェアツールを含む。示された化学名及び表された構造が異なる場合、該表された構造が基準となる。
【０４１４】
本明細書に示した化学構造は、ChemDraw（登録商標）又はISIS（登録商標）/DRAWのいずれかを使用して作成された。本明細書中の構造における炭素、酸素又は窒素原子に現れている任意の開いた原子価は、水素原子の存在を示す。構造中にキラル中心が存在するが、該キラル中心について具体的な立体化学が示されない場合、該キラル構造と関連する両方の鏡像異性体が該構造により包含される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６Ａ−Ｂ】
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【図７】
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【配列表】
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【手続補正書】
【提出日】平成23年2月22日(2011.2.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
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【国際調査報告】
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