(57)【要約】  経口で生物利用可能な医薬組成物は少なくとも４０％（ｗ／ｗ）ヴァンコマイシン；０．１〜１０．０％（ｗ／ｗ）のポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルを含む浸透エンハンサー成分；及び上記浸透エンハンサー成分が吸着される粒状担体を含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）少なくとも４０％（ｗ／ｗ）ヴァンコマイシン；
ｂ）０．１〜１０．０％（ｗ／ｗ）のポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルを含む５０％（ｗ／ｗ）未満の浸透エンハンサー成分；及び
ｃ）上記浸透エンハンサー成分を吸着する粒状担体
を含む経口で生物利用可能な医薬組成物であって、上記浸透エンハンサー成分がｉｎ  ｖｉｔｒｏ  Ｕｓｓｉｎｇシステムで計測される粘膜から漿膜方向におけるラット空腸組織を介するヴァンコマイシンの見かけの浸透係数を少なくとも２５％増加させる、医薬組成物。
【請求項２】
上記担体がデンプン、炭酸マグネシウム、カオリン、コロイド状シリカ、二酸化シリコン、クロスリンクポリビニルピローリドン及び炭酸カルシウムから成る群から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
上記浸透エンハンサー成分が１〜２０％（ｗ／ｗ）ｄ−アルファ−トコフェリールポリエチレングリコール１０００琥珀酸塩（ＴＰＧＳ）及び０．１〜１０％（ｗ／ｗ）キニジンから選択されるＰ−糖タンパク質阻害剤をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
上記浸透エンハンサー成分が１〜２０％（ｗ／ｗ）マクロゴルグリセリドをさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
上記浸透エンハンサー成分がラウロイルマクロゴルグリセリド、カプリロカプロイルマクロゴルグリセリド、及びステアロイルマクロゴルグリセリドから成る群から選択される１〜２０％（ｗ／ｗ）マクロゴルグリセリドをさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
上記浸透エンハンサー成分がデカン酸ナトリウム、ラウリン酸ナトリウム、カプリル酸ナトリウムから成る群から選択される０．１〜１５％（ｗ／ｗ）の中鎖脂肪酸をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
上記浸透エンハンサー成分が糖コール酸ナトリウム、デオキシコール酸ナトリウム、タウロコール酸ナトリウム、フシジン酸ナトリウム、糖デオキシコール酸ナトリウム、及びタウロジヒドロフシジン酸ナトリウムから成る群から選択される０．５〜２．０％（ｗ／ｗ）の胆汁酸塩をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
腸溶性コーティングされた単位投与形態中の請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
上記腸溶性コーティングが約６．０以上のｐＨで溶解する、腸溶性コーティングされた単位投与形態中の請求項１に記載の組成物。
【請求項１０】
カプセル又は錠剤中の請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】
哺乳類における病理微生物感染の治療方法であって、上記哺乳類に有効な量の請求項１に記載の組成物を経口投与することを含む方法。
【請求項１２】
上記投与段階前に、上記哺乳類がヴァンコマイシンのＰ−糖タンパク質仲介流出を阻害するために有効な量のＰ−糖タンパク質阻害剤を投与される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
請求項１に記載の組成物を含むキット。
【請求項１４】
上記組成物とは別々の投与形態中のＰ−糖タンパク質阻害剤をさらに含む請求項１９に記載のキット。
【請求項１５】
経口投与形態中の医薬組成物であって、少なくとも４０％（ｗ／ｗ）ヴァンコマイシン；及び５〜３０％（ｗ／ｗ）胆汁酸塩を含み、哺乳類に経口投与されたとき少なくとも４０％のヴァンコマイシンバイオアベイラビリティを有する、医薬組成物。
【請求項１６】
上記胆汁酸塩が吸着されている粒状担体をさらに含む、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
ヴァンコマイシンのＰ−糖タンパク質仲介流出を阻害するために有効な量のＰ−糖タンパク質阻害剤をさらに含む、請求項１５に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
連邦政府後援研究についての申告
本発明はＮａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ａｌｌｅｒｇｙ  ａｎｄＩｎｆｅｃｔｉｏｕｓ  Ｄｉｓｅａｓｅｓにより認められた契約番号Ｎ０１−ＡＩ−０５４１４の下に政府の支持でなされた。政府は本発明においてある権利を有している。
発明の分野はヴァンコマイシンのための経口生物利用可能調剤である。
【背景技術】
【０００２】
ヴァンコマイシン（ＶＣＭ）は分子式Ｃ66Ｈ74ＣＩＮ9Ｏ24の三環状糖ペプチド抗生物質である。それは比較的高い分子量（約１５００ダルトン）を有する。注射又は点滴により投与されるとき、ＶＣＭはペニシリンアレルギー患者及びペニシリン又はセファロスポリンを含む他の薬物を受けることができない又は他の薬物に応答することができなかった患者のために、メチシリン抵抗性（ベータ−ラクタム抵抗性）ブドウ球菌の影響されやすい株により引き起こされる深刻な又は重篤な感染の治療のために、及び他の抗菌薬に抵抗性であるＶＣＭに影響されやすい生物により引き起こされる感染のために用いられる。ＶＣＭは腸感染、詳細にはクロストリジウムディフィシル（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）により引き起こされる偽膜性腸炎及びブドウ球菌腸炎を治療するために経口によってもまた与えられる。
【０００３】
浸透性の低い薬物の全身吸収及び／又はバイオアベイラビリティを高めることは浸透エンハンサー又は他の策を用いることによりそれらの胃腸腔を介する上皮貫通及び／又は細胞近傍浸透を増加させることにより達成されうる（例えば、Ａｕｎｇｓｔ，  Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ（２０００）８９：４２９−４２；  Ｃｏｒｎａｉｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｔ  Ｊ  Ｐｈａｒｍ  （２００４）  ２７８：１１９−３１；  Ａｕｎｇｓｔ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｒｅｌｅａｓｅ（１９９６）４１：１９−３１を参照のこと）。ＶＣＭは水に可溶であり、そして吸収エンハンサー又は酵素阻害剤の添加なしではラットにおいて５％未満の絶対バイオアベイラビリティの乏しい経口吸収性を有する（Ｇｅａｒｙ  ａｎｄ  Ｓｃｈｌａｍｅｕｓ（１９９３）Ｊ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ２３：６５−７４）。浸透エンハンサー又は界面活性剤を含むＶＣＭ調剤がラット腸及び結腸の切片に直接的にｉｎ  ｓｉｔｕで投与されたとき、ＶＣＭ吸収の増加が下部腸切片及び結腸において報告されている（Ｇｅａｒｙ  ａｎｄ  Ｓｃｈｌａｍｅｕｓ  ｅｔ  ａｌ．，  上記；  Ｋａｊｉｔａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ  （２０００）８９：１２４３−５２；及びＰｒａｓａｄ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｐｈａｒｍ（２００３）２５０：１８１−９０）。約３０％の絶対バイオアベイラビリティが、ＶＣＭが多重エマルジョンの内部水相内に組み込まれている水中の油中の水（ｗ／ｏ／ｗ）エマルジョンの経口投与後のラットにおけるｉｎ  ｖｉｖｏ研究においてもまた報告されている（Ｓｈｉｖｅｌｙ  ａｎｄ  Ｔｈｏｍｐｓｏｎ  Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｐｈａｒｍ（１９９５）  １１７：１１９−２２）。
【発明の概要】
【０００４】
発明の要約
本発明の１の局面は：ａ）少なくとも４０％（ｗ／ｗ）ヴァンコマイシン；ｂ）０．１〜１０．０％（ｗ／ｗ）のポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルを含む浸透エンハンサー成分；及びｃ）上記浸透エンハンサー成分を吸着する粒状担体を含む経口生物利用可能医薬組成物であり、ここで上記浸透エンハンサー成分はｉｎ  ｖｉｔｒｏ  Ｕｓｓｉｎｇシステムにおいて計測されるように粘膜から漿膜方向におけるラット空腸組織を介するヴァンコマイシンの見かけの浸透係数を少なくとも２５％増加させる。
【０００５】
さまざまな態様において、上記担体はデンプン、炭酸マグネシウム、カオリン、コロイド状シリカ、二酸化シリコン、クロスリンクポリビニルピローリドン及び炭酸カルシウムから成る群から選択される。
【０００６】
１つの態様において、上記浸透エンハンサー成分は１〜２０％（ｗ／ｗ）ｄ−アルファ−トコフェリールポリエチレングリコール１０００コハク酸塩（ＴＰＧＳ）及び０．１〜１０％（ｗ／ｗ）キニジンから選択されるＰ−糖タンパク質阻害剤をさらに含む。
他の態様において、上記浸透エンハンサー成分はラウロイルマクロゴルグリセリド、ステアロイルマクロゴルグリセリド又はカプリロカプロイルマクロゴルグリセリドの如き、１〜２０％（ｗ／ｗ）マクロゴルグリセリドをさらに含む。
【０００７】
１つの態様において、上記浸透エンハンサー成分はデカン酸ナトリウム、ラウリン酸ナトリウム、カプリル酸ナトリウムから成る群から選択される０．１〜１５％（ｗ／ｗ）の中鎖脂肪酸をさらに含む。
【０００８】
他の態様において、上記浸透エンハンサー成分は糖コール酸ナトリウム、デオキシコール酸ナトリウム、タウロコール酸ナトリウム、フシジン酸ナトリウム、糖デオキシコール酸ナトリウム、及びタウロジヒドロフシジン酸ナトリウムから成る群から選択される０．５〜２．０％（ｗ／ｗ）の胆汁酸塩をさらに含む。
【０００９】
本発明に係る組成物は好ましくは腸溶性コーティングされた単位投与形態であり、ここで上記腸溶性コーティングは好ましくは約６．０以上のｐＨで溶解する。
【００１０】
本発明の他の局面は経口投与形態の医薬組成物であり、前記組成物は少なくとも４０％（ｗ／ｗ）ヴァンコマイシン；及び５〜３０％（ｗ／ｗ）胆汁酸塩を含み、ここで上記組成物は哺乳類に経口投与されるとき少なくとも４０％のヴァンコマイシンバイオアベイラビリティを有する。
【００１１】
本発明の他の局面は哺乳類における病理微生物感染の治療方法であり、上記方法は有効な量の本発明に係る組成物を哺乳類に経口投与することを含む。
１つの態様において、上記投与段階前に、上記哺乳類はヴァンコマイシンのＰ−糖タンパク質仲介流出を阻害するために有効な量のＰ−糖タンパク質阻害剤を投与される。
本発明の他の局面は任意に上記組成物とは別々の投与形態中のＰ−糖タンパク質阻害剤を伴う、本発明に係る組成物を含むキットである。
【００１２】
発明の詳細な説明
本発明はブドウ球菌感染及びヴァンコマイシンでの全身性治療に影響を受けやすい他の状態の経口治療のための組成物、キット、及び方法を提供する。本発明の１つの局面はヴァンコマイシン、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルを含む浸透エンハンサー成分、及び上記浸透エンハンサー成分が吸着されている粒状担体を含む組成物であり、ここで上記浸透エンハンサー成分は空腸組織を介するヴァンコマイシンの見かけの浸透係数を増加させる。ヴァンコマイシンについての本明細書中の引用文献はヴァンコマイシン及びその医薬として許容される塩（例えば、塩酸ヴァンコマイシン等）を含むと意図される。上記組成物は好ましくは少なくとも２５％のヴァンコマイシン、そして好ましくは少なくとも３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％又は７５％のヴァンコマイシンを含む。上記浸透エンハンサー成分は好ましくは上記組成物の５０％未満、そしてより好ましくは上記組成物の４５％、４０％、３５％、３０％、２５％又は２０％未満を構成する。最も好ましくは、上記ヴァンコマイシンは上記組成物の少なくとも４０％を構成し、そして上記浸透エンハンサー成分は上記組成物の２０％未満を構成する。本明細書中で使用されるとき、上記組成物のうちの割合（％）は別段の定めなき限り、重量％（「％（ｗ／ｗ）」とも略書きされる）をいう。上記浸透エンハンサー成分は空腸組織を介するヴァンコマイシンの見かけの浸透係数（Ｐapp）を少なくとも２５％、そして好ましくは少なくとも３０％、３５％、４０％、４５％又は５０％増加させる。上記浸透係数は実施例１中に示されている方法及び計算を用いてｉｎ  ｖｉｔｒｏ  Ｕｓｓｉｎｇシステムで計測されるように粘膜から漿膜方向においてラット空腸組織を介して決定される。
【００１３】
上記組成物の浸透エンハンサー成分は好ましくは０．１〜１０．０％、そしてより好ましくは０．１〜５％の量のポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルを含む。好適なポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルはポリオキシエチレン２０ソルビタンモノラウリン酸塩（ポリソルベート２０）、ポリオキシエチレン２０ソルビタンモノパルミチン酸塩（ポリソルベート４０）、ポリオキシエチレン２０ソルビタンモノステアリン酸塩（ポリソルベート６０）、及びポリオキシエチレン２０ソルビタンモノオレイン酸塩（ポリソルベート８０）を含む。
【００１４】
上記浸透エンハンサー成分はヴァンコマイシンバイオアベイラビリティをさらに増加させる１又は複数の追加の成分を含みうる。好適なエンハンサーは中鎖グリセリド（例えば、モノオレイン酸グリセリル、モノリノール酸グリセリル等）、マクロゴルグリセリド、ポリグリコール、脂肪酸のグリセロールエステル、脂肪酸のＰＥＧ付加アルコールエステル、グリセリルモノエステル、プロピレングリコールモノエステル、中鎖脂肪酸、キトサン及びキトサン誘導体（例えば、Ｃａｎｏ−Ｃｅｂｒｉａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｕｒｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．（２００５）２：９−２２を参照のこと）、及びそれらの混合物から選択される。
【００１５】
好ましい態様において、上記浸透エンハンサー成分は１〜２０％、そして好ましくは２〜１０％のマクロゴルグリセリドをさらに含む。特に好ましいマクロゴルグリセリドはそれぞれＧＥＬＵＣＩＲＥ（商標）４４／１４及びＧＥＬＵＣＩＲＥ（商標）５０／１３（Ｇａｔｔｅｆｏｓｓｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，  Ｐａｒａｍｕｓ，  ＮＪ）として販売されている、ラウロイルマクロゴル−３２グリセリド及びステロイルマクロゴルグリセリドである。使用されうる他のマクロゴルグリセリドはＬＡＢＲＡＳＯＬ（商標）（Ｇａｔｔｅｆｏｓｓｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，  Ｐａｒａｍｕｓ，  ＮＪ）として販売されている、カプリロカプロイルマクロゴル−８グリセリドである。好ましい態様において、上記浸透エンハンサー成分は１〜２０％、２〜１０％又は４〜６％ラウロイルマクロゴルグリセリドを含む。
【００１６】
他の好ましい態様において、上記浸透エンハンサー成分は０．１〜１５％、そして好ましくは１〜１０％又は２〜５％の中鎖脂肪酸をさらに含む。本明細書中で使用されるとき、用語中鎖脂肪酸はデカン酸ナトリウム（カプリン酸ナトリウムとしても知られる）、ラウリン酸ナトリウム、カプリル酸ナトリウム、Ｎ−［８−（２−ヒドロキシベンゾイル）アミノ］カプリル酸ナトリウム（例えば、Ｈｅｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ．（２００５）２５：３０７−１２）等の如き、塩及びその誘導体を含む。デカン酸ナトリウム及びカプリル酸ナトリウムは特に好ましい。
他の態様において、上記浸透エンハンサー成分は０．１〜１０％、好ましくは０．２〜５％、そしてより好ましくは０．５〜２．０％の胆汁酸塩をさらに含む。好適な胆汁酸塩の例は糖コール酸ナトリウム、デオキシコール酸ナトリウム、タウロコール酸ナトリウム、フシジン酸ナトリウム、糖デオキシコール酸ナトリウム、及びタウロジヒドロフシジン酸ナトリウムを含む。
【００１７】
ポリソルベート８０の如き、あるポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルは薬物のＰ−糖タンパク質仲介流出を阻害することが報告されている（例えば、Ｃｏｒｎａｉｒｅ  ｅｔ  ａｌ．  Ａｒｚｎｅｉｍ−Ｆｏｒｓｃｈ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓ（２０００）５０：５７６−９を参照のこと）。好ましい態様において、上記組成物は例えば、ｄ−アルファ−トコフェリールポリエチレングリコール１０００コハク酸塩（ＴＰＧＳ）、キニジン、及びヴェラパミルの如き、追加のＰ−糖タンパク質阻害剤をさらに含む。１つの態様において、上記Ｐ−糖タンパク質阻害剤は１〜２０％、そして好ましくは２〜１０％の量のＴＰＧＳである。他の態様において、上記Ｐ−糖タンパク質阻害剤は０．１〜１０％、そして好ましくは０．５〜５％の量のキニジンである。上記追加のＰ−糖タンパク質阻害剤は上記浸透エンハンサー成分に組み込まれ、そして上記粒状担体上に吸着されうる。あるいは、それは、以下にさらに示されているように、腸を通るその吸収が上記組成物のヴァンコマイシン成分の前に開始するように調合されうる。
【００１８】
上記組成物の浸透エンハンサー成分は医薬として許容される粒状担体上に吸着される。典型的に、上記粒状担体は上記組成物の５〜４０  ｗ／ｗ％を構成する。好適な担体はデンプン、炭酸マグネシウム、カオリン、コロイド状シリカ、二酸化シリコン、クロスリンクポリビニルピローリドン、及び炭酸カルシウムを含む。固体投与調剤を得る目的で液体を粒状担体上に吸着するための好適な方法は以前に示されている（例えば、Ｆｒｉｅｄｒｉｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｂｉｏｐｈａｒｍ．  （２００６）６２：１７１−７、及びその中に引用される引用文献を参照のこと）。１つの例示的な方法において、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル及び上記浸透エンハンサー成分のいずれかの他の成分を含む溶液を、配合及びこねを伴うゆっくりとした一滴ずつの添加により上記担体上に吸着させる。上記浸透エンハンサー／担体混合物をオーブン内で乾燥させ、そして粉砕して配合可能な粉末にする。上記エンハンサー−担体粉末を追加のプロセッシング添加物を含む好適な配合手順を用いてヴァンコマイシンと混合し（Ｃｏｔｅ  Ｐ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｈａｒｍ  Ｄｅｖ  Ｔｅｃｈｎｏｌ．（２００６）１１：２９−４５）、そして圧縮して錠剤にする又はカプセル又は他の好適な固体経口投与形態に充填する。
【００１９】
標的化放出技術は小腸の空腸部位での上記投与形態からのヴァンコマイシンの放出を促進するために使用されることができ、ここで上記空腸部位は胃腸腔内でのその優先的な吸収部位であることがわかっている。好ましい態様において、上記投与形態は上記空腸内での薬物放出を最大限にするために、約６．０以上のｐＨで溶解する外部腸溶性コーティングを有する。好適な腸溶性コーティングはＥＵＤＲＡＧＩＴ（商標）Ｌ１００（Ｄｅｇｕｓｓａ  Ｐｈａｒｍａ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ，  Ｇｅｒｍａｎｙから入手可能）の如き、メタクリル酸及びメチルメタクリル酸塩に基づいた陰イオン性共重合体を含む。
【００２０】
さらなる態様において、上記投与形態は上記組成物の浸透エンハンサー成分中にも含まれうるＰ−糖タンパク質阻害剤を含み、それは上記投与形態が溶解されるとき即座に腸に放出される。１つの上記態様において、上記組成物のヴァンコマイシン／浸透エンハンサー成分は上記投与形態の内部核を形成し、そして上記Ｐ−糖タンパク質阻害剤は上記内部核を囲む外部殻又はコーティング中に存在している。これは二相性放出を許容し、ここでＰ−糖タンパク質阻害剤がはじめに放出され、続いてヴァンコマイシンが遅れて放出される。上記外部殻は本質的にＰ−糖タンパク質阻害剤から成りうる又は上記外部殻が浸食又は加水分解により溶解される速度を制御する高分子量重合体と混合されたＰ−糖タンパク質阻害剤を含みうる。好適な高分子量重合体はゼラチン、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリカプロラクトン及びそれらの組み合わせを含む。
【００２１】
本発明に係る他の経口生物利用可能ヴァンコマイシン組成物は少なくとも４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％又は７５％ヴァンコマイシン及び５〜３０％又は好ましくは１０〜２５％胆汁酸塩を含む。好ましい胆汁酸塩は上記に示されている。上記調剤は液体として経口で投与されうる又は固体経口投与形態に調合されうる。上記調剤は上記に示されているようにヴァンコマイシンのＰ−糖タンパク質仲介流出を阻害するために有効な量のＰ−糖タンパク質阻害剤をさらに含みうる。
【００２２】
本発明に係る組成物は、哺乳類に経口投与されるとき、少なくとも２０％、そして好ましくは少なくとも３０％、４０％又は５０％のヴァンコマイシンバイオアベイラビリティを作出する。経口バイオアベイラビリティはビーグル犬又は同等のモデルを用いて評価されることができ、ここで経口投与組成物からの血漿ヴァンコマイシン値は計算：ＢＡ＝ＡＵＣPO×用量iv／ＡＵＣiv×用量POを用いてｉ．ｖ．投与後に得られる値と比較され、ここでＢＡ＝バイオアベイラビリティ、そしてＡＵＣ＝血漿濃度−時間曲線下領域である。
【００２３】
上記組成物はメチシリン耐性（ベータ−ラクタム耐性）ブドウ球菌の影響されやすい株により引き起こされる深刻な又は重篤な感染の治療のためのように、ヴァンコマイシンでの全身治療に影響を受けやすい状態を有する哺乳類に経口投与される。特定の態様において、上記哺乳類はヒトである。他の態様において、上記哺乳類は家畜動物（ウマ、ウシ、ブタ等）又はペット動物（例えば、イヌ、ネコ等）でありうる。成人について、吸収されるヴァンコマイシンの１日の用量は約２グラムである。小児投与については、１日の用量は約１０ｍｇ／ｋｇである。
【００２４】
ある態様において、別々に調合されるＰ−糖タンパク質阻害剤は上記ヴァンコマイシン組成物の前に又は上記ヴァンコマイシン組成物と共に投与される。上記組成物は適切な投与についての説明書を伴うキットで提供されうる。例えば、上記組成物は１又は複数の単位投与形態がブリスター内に含まれるブリスターパックキットで提供されうる。上記ブリスター包装は適切な投与時間を表示するためのブリスターの隣の又はブリスターの列又は行の隣の記載を含みうる。上記キットは別々に調合されたＰ−糖タンパク質阻害剤をさらに含みうる。
【実施例】
【００２５】
実施例１：薬物輸送研究
私たちはラット腸及び結腸の単離切片を水平な改変Ｕｓｓｉｎｇチャンバー間に載せることにより、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでのラット腸及び結腸のさまざまな切片を介するヴァンコマイシン（ＶＣＭ）の浸透における領域変化を調査した。ＶＣＭ浸透に対する薬物濃度の及び調合添加物としてのＰ−糖タンパク質阻害剤又は浸透エンハンサー（単数又は複数）の添加の効果についてもまたラット空腸の切片を用いてｉｎ  ｖｉｔｒｏで研究した。
【００２６】
材料：塩酸ヴァンコマイシン（Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ，  ＣＡ）；４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルフォン酸（ＨＥＰＥＳ）緩衝液（ＶＷＲ，Ｂｒｉｓｂａｎｅ，ＣＡ）；胆汁酸塩、キニジン、及びデカン酸ナトリウム（全てＳｉｇｍａ，  Ｓｔ．  Ｌｏｕｉｓ，  ＭＯから）；ポリソルベート−８０（Ｆｌｕｋａ  Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，  Ｓｔ．  Ｌｏｕｉｓ，  ＭＯ）；Ｇａｔｔｅｆｏｓｓｅ，  Ｐａｒａｍｕｓ，  ＮＪからのＬａｂｒａｓｏｌ（商標）（カプリロカプロイルマクロゴルグリセリド）及びＧｅｌｕｃｉｒｅ（商標）４４／１４（ラウロイルマクロゴルグリセリド）；Ｅａｓｔｍａｎ，  ＮＪからのビタミンＥ  ＴＰＧＳ（ｄ−α−トコフェリールポリエチレングリコール１０００コハク酸塩）。
【００２７】
方法：８セットのチャンバーを有する改変Ｕｓｓｉｎｇシステム（Ｅａｓｙ  ｍｏｕｎｔ  Ｕｓｓｉｎｇ  ｓｙｓｔｅｍ，  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｉｎｃ．，  ＣＡ，  Ｉｔｅｍ＃  ＥＭ−ＣＳＹＳ−８）を全てのｉｎ  ｖｉｔｒｏ研究について使用した；各セットは２の並行拡散チャンバー、温度制御のための加熱ブロック、気体流調節及び気体混合のための針バルブ、及び上皮を介する電圧を計測するための及び電流を流すためのＡｇ／ＡｇＣｌ電圧及び電流電極から成っていた。
必要とされる雄ラットの小腸又は結腸切片の回収を文献（Ｇｏｔｏｈ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｂｉｏｍｏｌ  Ｓｃｒｅｅｎ（２００５）１０：５１７−２３）中に示されている実験手順を用いて行った。回収された小腸又は結腸切片を改変Ｕｓｓｉｎｇシステムの２の水平チャンバー間に置かれたスライダー上に載せた。
ＶＣＭを薬物及び添加物（単数又は複数）の事前に決定された濃度を得るために、１００％  Ｏ2で事前に飽和させたＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７．４（表１）又は浸透エンハンサー（単数又は複数）及び／又は流出輸送阻害剤（表２）から選択される添加物を含むＨＥＰＥＳ緩衝液中に溶解した。
【００２８】
表１：ＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．４）の組成
【表１】
2011502144.tif 000002
【００２９】
粘膜から漿膜（Ｍ−ｔｏ−Ｓ）方向における、回収されたラット小腸及び結腸切片の上皮膜を介する薬物輸送を改変Ｕｓｓｉｎｇチャンバーを用いて研究した。等分のＨＥＰＥＳ緩衝液（５ｍｌ）を粘膜及び漿膜チャンバーの両方にはじめに添加し、そして２０分間平衡化させた。粘膜チャンバー中のＨＥＰＥＳ緩衝液をＨＥＰＥＳ緩衝液中にＶＣＭ単独又はＶＣＭ及び選択された添加物（単数又は複数）を含む研究サンプル、例えば、１０％  ｗ／ｗ  Ｌａｂｒａｓｏｌ（商標）を含むＨＥＰＥＳ緩衝液中に溶解された５ｍｇ／ｍＬのＶＣＭと置き換えた。等分の０．５ｍＬ緩衝液を漿膜チャンバーから定期的に除去し、そして１００％  Ｏ2で事前に飽和させた等容量の新しい温かい（３７±２℃）ＨＥＰＥＳ緩衝液と置き換えた。漿膜チャンバー中の添加物（すなわち、キニジン及びデカン酸ナトリウム）の効果を研究するために、選択添加物を含むＨＥＰＥＳ緩衝液を漿膜チャンバー中に入れ、そしてサンプリング中に同じ緩衝液組成物と置き換えた。
【００３０】
時間機能としての上皮を介する短回路電流（マイクロアンペア）及び膜抵抗（オーム）における変化を、それぞれ組織生存力及び薬物浸透性のインジケーターとしてはたらかせるためにｉｎ  ｖｉｔｒｏ研究中連続してモニターした。受容チャンバーからの緩衝液サンプルを高圧液体クロマトグラフ（ＨＰＬＣ；Ｈｅｗｌｅｔｔ  Ｐａｃｋａｒｄ  Ｍｏｄｅｌ  １１００シリーズ）上でＶＣＭ内容量について分析した。
ＶＣＭサンプルの分析を、逆相勾配ＨＰＬＣ法を用いてＨｙｐｅｒｓｉｌ  ＢＤＳ  Ｃ１８カラム、５μｍ、１５０×４．６ｍｍ、１ｍｌ／分の流速の溶媒Ａとして水中の５ｍＭ一塩基リン酸カリウム（ｐＨ３）及び溶媒Ｂとしてアセトニトリルから成る移動相で行った（Ｆａｒｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｂｉｏｍｅｄ  Ａｎａｌ（１９９８）１８：３６７−７２）。上記溶離物をＵＶ／ダイオードアレイ検出器により２８０ｎｍでモニターした。
【００３１】
異なるｉｎ  ｖｉｔｒｏ実験から得られたデータを比較するために、見かけの浸透係数を式：
【数１】
2011502144.tif 000003
を用いて計算した。ここでｄＱ／ｄｔはレシーバー区画中の量の直線状の見かけの速度であり、Ｃ0はドナー区画中のはじめの溶質濃度であり、そしてＡは表面領域である（Ｌｕｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ  Ｄｉｓｐｏｓ（２００２）３０：７６３−７０）。
【００３２】
結果。ＶＣＭの浸透における領域の差は胃腸腔（ｇ．ｉ．ｔ．）のさまざまな切片にわたり観察された。ｉｎ  ｖｉｔｒｏデータを用いて計算されたＰapp値に基づいて、ＶＣＭのＭ−ｔｏ−Ｓ輸送の速度は空腸で最も高く、続いて結腸及び回腸、そして十二指腸において最も低いことがわかった。時間機能としての受容区画に輸送されたＶＣＭの累積平均値は表３中に示されており、そして各Ｐapp値は表２中に示されている。
表２：ラット腸及び結腸の異なる切片を介するエンハンサーの存在下及び不在下での、及びさまざまな添加物の存在下での空腸を介する、５ｍｇ／ｍｌ塩酸ヴァンコマイシンについてのｉｎ  ｖｉｔｒｏ輸送研究についての見かけの浸透係数（Ｐapp）値。値は各データ点での４回の繰返しの平均である。
【表２】
2011502144.tif 000004
表３：ラット腸及び結腸の異なる切片を介する、粘膜から漿膜方向におけるヴァンコマイシン輸送（ＨＥＰＥＳ緩衝液中の５ｍｇ／ｍｌヴァンコマイシン；全部で２５ｍｇ）
【表３】
2011502144.tif 000005
結果はＶＣＭについてのｉｎ  ｓｉｔｕ研究からの観察と一致し、ここでラット小腸（空腸、回腸）及び結腸の下部切片は吸収に有利な部位であることが報告されている（Ｇｅａｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，  上記；  Ｙｕｇｉ，  Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ  Ｔｅｃｈｎｏｌ，  Ｊｐｎ，  （１９９９）５９：１０３−１２）。時間機能としての上皮を介する短回路電流（マイクロアンペア）における変化は生存可能な組織にとって許容可能な範囲内であり、一方で上皮を介する膜抵抗性（オーム）における変化又は上記２のチャンバーにわたる可能性のある差は薬物輸送の速度と相関した；これらの発見は繰返しのうちで一致した。
粘膜（ドナー）チャンバー中の薬物濃度を増加させることは、表２及び４中に示されているように、用量依存的様式でＶＣＭのＭ−ｔｏ−Ｓ輸送を増加させた。
【００３３】
表４：ラット空腸を介する粘膜から漿膜方向におけるヴァンコマイシン輸送に対する薬物濃度の効果（エンハンサーを伴わないＨＥＰＥＳ緩衝液中）
【表４】
2011502144.tif 000006
【００３４】
キニジンが粘膜又は漿膜チャンバーに添加されたとき、ＶＣＭのＭ−ｔｏ−Ｓ輸送の増加がｉｎ  ｖｉｔｒｏで観察された。漿膜チャンバーへの、既知のＰ−糖タンパク質阻害剤である０．１５ｍＭキニジンの添加はＶＣＭのＭ−ｔｏ−Ｓ輸送における劇的な（３倍）増加を引き起こした。粘膜チャンバーへの０．１５ｍＭキニジンの添加もまたＶＣＭのＭ−ｔｏ−Ｓ輸送を増加させたが、より少ない程度であった。上記データは表５中に示されており、そして各Ｐapp値は表２中に示されている。これらの観察は、ＶＣＭのＭ−ｔｏ−Ｓ輸送がヴェラパミル及びシクロスポリン−Ａの存在下で増加され、一方でテトラエチルアンモニウム及びグアニジンは効果がなかった（Ｙｕｇｉ  ｅｔ  ａｌ．，  上記）というｉｎ  ｓｉｔｕ研究から報告された観察ともまた一致する。
【００３５】
表５：ラット空腸を介する粘膜から漿膜方向におけるヴァンコマイシン輸送に対する粘膜チャンバー（ＭＣ）又は漿膜チャンバー（ＳＣ）中の０．１５ｍＭキニジンの効果（ＨＥＰＥＳ緩衝液中の５ｍｇ／ｍｌヴァンコマイシン；組織スライダー領域＝０．５ｃｍ2）
【表５】
2011502144.tif 000007
【００３６】
本研究において使用される調合添加物は新規乳化剤であるＬａｂｒａｓｏｌ（商標）（カプリロカプロイルマクロゴル−８−グリセリド）；共に脂質性両親媒性担体であるビタミンＥ  ＴＰＧＳ（商標）（α−トコフェリールポリエチレングリコール１０００琥珀酸塩）及びＧｅｌｕｃｉｒｅ（商標）４４／１４（グリセロール及び長鎖脂肪酸のＰＥＧ１５００エステルの混合物）；及び医薬乳化剤及び可溶化剤であるポリソルベート８０を含む。ＶＣＭ単独での及び上記エンハンサーの存在下のＶＣＭでの受容区画へ輸送されるＶＣＭの累積平均値は表６中に示されている。Ｐapp値は表２中に示されている。
【００３７】
表６：ラット空腸を介する粘膜から漿膜方向におけるヴァンコマイシン輸送に対するさまざまな浸透エンハンサーの効果
【表６】
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計算されたＶＣＭのＰapp値に基づいて、それぞれ５％  ｗ／ｗのポリソルベート８０及びＧｅｌｕｃｉｒｅ（商標）４４／１４はラット空腸を介するＶＣＭのＭ−ｔｏ−Ｓ輸送を高めた。５％  ｗ／ｗ  Ｇｅｌｕｃｉｒｅ（商標）４４／１４との組み合わせの５％  ｗ／ｗ  Ｌａｂｒａｓｏｌ（商標）については、Ｐapp値はＶＣＭ単独のそれよりわずかに高い。５％  ｗ／ｗビタミンＥ  ＴＰＧＳ（商標）又はポリソルベート８０との組み合わせの５％  ｗ／ｗ  Ｌａｂｒａｓｏｌ（商標）については、わずかに減少したＭ−ｔｏ−Ｓ方向におけるＶＣＭ輸送が観察された。ＶＣＭ単独又は上記研究において使用された他の医薬賦形剤の存在下と比較されるとき、ＶＣＭ輸送は１０％  ｗ／ｗ  Ｌａｂｒａｓｏｌ（商標）の存在下で最も低く、０．３６×１０-6ｃｍ／秒のＰapp値であった。溶解性の低い薬物の可溶化を促進することに加えて、ビタミンＥ  ＴＰＧＳ（商標）、Ｇｅｌｕｃｉｒｅ（商標）４４／１４、及びポリソルベート８０はＰ−糖タンパク質仲介流出輸送を調節し、そしてしたがってパクリタクセル、ヴィンブラスチン、ローダミン１２３、及びジゴキシンの如きＰ−糖タンパク質基質のバイオアベイラビリティを増加させることもまた報告されている（Ｄｉｎｔａｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｈａｒｍ  Ｒｅｓ（１９９９）１６：１５５０−６；Ｃｏｒｎａｉｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，  上記；Ｓａｃｈｓ−Ｂａｒｒａｂｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ  Ｓｃｉ，  （２００７）１０：３１９−３３１）。
【００３８】
粘膜チャンバーへの２０％  ｗ／ｗの高濃度胆汁酸塩の添加はｉｎ  ｖｉｔｒｏでＶＣＭのＭ−ｔｏ−Ｓ輸送を多いに高めた。胆汁酸塩が胃腸上皮膜を介する溶質の輸送に影響する機構は複雑であるように見え、そして多くの先行研究の主題である。調査中の薬物の生理化学的特性及び生理学的環境における胆汁酸塩の上記薬物及び上皮細胞膜との相互作用に因り、上記機構はミセル形成及び／又は細胞膜、粘液層又はかたい接合点のバリア機能の変化を含みうる（Ａｕｎｇｓｔ（１９９６）上記；Ｋａｋｅｍｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍ  Ｂｕｌｌ（１９７０）１８：２７５−８０；Ａｍｉｄｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ  １９８２；７１（１）：７７−８４；Ｍｕｒａｎｉｓｈｉ，  Ｐｈａｒｍ  Ｒｅｓ（１９８５）３：１０８−１８；Ｏ’Ｒｅｉｌｌｙ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｔ  Ｊ  Ｐｈａｒｍ（１９９４）１０９：１４７−５４；Ｙａｍａｓｈｉｔａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ（１９９０）７９：５７９−８３；Ｗｅｒｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｈａｒｍ  Ｒｅｓ（１９９６）１３：１２１９−２７）。
【００３９】
表７：ラット空腸を介する粘膜から漿膜方向におけるヴァンコマイシン輸送に対する２０％胆汁酸塩の効果（ＨＥＰＥＳ緩衝液中の５ｍｇ／ｍｌ  ヴァンコマイシン；組織スライダー領域＝０．５ｃｍ2）
【表７】
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【００４０】
いずれかの粘膜チャンバー中のＨＥＰＥＳ緩衝液中のＶＣＭへのデカン酸ナトリウム、１．０ｍＭの添加はＶＣＭの浸透性を増加させる。漿膜チャンバーへのデカン酸ナトリウムの添加はＶＣＭのｉｎ  ｖｉｔｒｏ浸透に対して最小限の効果しか有さなかったが、粘膜チャンバーへの添加はもっとより大きな効果を有した。
【００４１】
表８：ラット空腸を介する粘膜から漿膜方向におけるヴァンコマイシン輸送に対する粘膜チャンバー（ＭＣ）又は漿膜チャンバー（ＳＣ）中に入れられた１．０ｍＭデカン酸ナトリウム（ＳＤ）の効果
【表８】
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【国際調査報告】
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