(57)【要約】本発明は、投与時に、予想外に強化された治療効果を及ぼす少なくとも１つの複合体および１つ以上の化学療法剤の組み合わせを包含する。組み合わせの治療有効性は、複合体単独または複合体を含まない薬物の１つ以上の投与を上回る。また、本発明は、少なくとも１つの複合体および化学療法剤の少なくとも１つ以上を含む組成物と、少なくとも１つの複合体および化学療法剤の少なくとも１つ以上を使用して癌を処置する方法とを対象とする。また、本発明は、１つ以上の化学療法剤および少なくとも１つの複合体の治療的に有効な量を投与することによって、癌細胞等の選択された細胞集団の成長を調節する方法も提供する。各事例において、このような組み合わせは、単独の抗癌剤よりも、治療相乗効果を有し、癌の処置における治療指数を改善する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つの化学療法剤および少なくとも１つの免疫複合体の相乗的組み合わせを含む医薬組成物であって、前記免疫複合体は、少なくとも１つの細胞結合剤および少なくとも１つの抗有糸分裂薬剤を含む、医薬組成物。
【請求項２】
第３の薬剤をさらに含み、前記第３の薬剤は、コルチコステロイドである、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記化学療法剤は、プロテアソーム阻害剤、免疫調節剤もしくは血管新生阻害剤、ＤＮＡアルキル化剤、またはそれらのうちの２つ以上の混合物である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記化学療法剤は、ラパマイシン、ベバシズマブ、ボルテゾミブ、サリドマイド、レナリドマイド、メルファラン、シクロホスファミド、またはそれらのうちの２つ以上の混合物である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記化学療法剤は、ボルテゾミブ、サリドマイド、レナリドマイド、メルファラン、またはそれらのうちの２つ以上の混合物である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記細胞結合剤は、前記標的細胞に結合する抗体、単鎖抗体、抗体フラグメント、前記標的細胞に結合するモノクローナル抗体、単鎖モノクローナル抗体、もしくはモノクローナル抗体フラグメント、前記標的細胞に結合するキメラ抗体、キメラ抗体フラグメント、前記標的細胞に結合するドメイン抗体、ドメイン抗体フラグメント、リンホカイン、ホルモン、ビタミン、成長因子、コロニー刺激因子、または栄養素輸送分子である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記抗体は、表面再処理抗体、表面再処理単鎖抗体、またはその表面再処理抗体フラグメントである、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記抗体は、モノクローナル抗体、単鎖モノクローナル抗体、またはそのモノクローナルフラグメントである、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記抗体は、キメラ抗体、キメラ抗体フラグメント、ドメイン抗体、またはそのドメイン抗体フラグメントである、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記抗体は、ヒト抗体、ヒト化抗体もしくは表面再処理抗体、ヒト化単鎖抗体、またはそのヒト化抗体フラグメントである、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記抗体は、Ｍｙ９−６、Ｂ４、Ｃ２４２、Ｎ９０１、ＤＳ６、ＥｐＣＡＭ、ＥｐｈＡ２、ＣＤ３８、ＩＧＦ−ＩＲ、ＣＮＴＯ  ９５、Ｂ−Ｂ４、トラスツズマブ、ビバツズマブ、シブロツツマブ、ペルツズマブ、またはリツキシマブである、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記細胞結合剤は、腫瘍細胞、ウイルス感染細胞、微生物感染細胞、寄生虫感染細胞、自己免疫細胞、活性化細胞、骨髄性細胞、活性化Ｔ細胞、Ｂ細胞、またはメラニン細胞から選択される標的細胞；ＩＧＦ−ＩＲ、ＣａｎＡｇ、ＥＧＦＲ、ＥｐｈＡ２、ＭＵＣｌ、ＭＵＣ１６、ＶＥＧＦ、ＴＦ、ＭＹ９、抗Ｂ４、ＥｐＣＡＭ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ１１、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２６、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ７９、ＣＤ１０５、ＣＤ１３８、ＥｐｈＡ、ＥｐｈＢ、ＥＧＦｒ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＨＥＲ３、メソテリン、クリプト、αｖβ３インテグリン、αｖβ５インテグリン、αｖβ６インテグリン、Ａｐｏ２、またはＣ２４２抗原のうちの１つ以上を発現する細胞；およびインスリン成長因子受容体、上皮成長因子受容体、または葉酸受容体を発現する細胞に結合する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記増殖性疾患は、癌、自己免疫疾患、移植片拒絶、移植片対宿主病、ウイルス感染、および寄生虫感染から成る群から選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記癌は、乳癌細胞、前立腺癌細胞、卵巣癌細胞、結腸直腸癌細胞、多発性骨髄腫細胞、卵巣癌細胞、神経芽腫細胞、神経内分泌癌細胞、胃癌細胞、扁平上皮癌細胞、小細胞肺癌細胞、または精巣癌細胞から選択される、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記抗有糸分裂薬剤は、メイタンシノイド、ＣＣ−１０６５類似体、モルホリノドキソルビシン、タキサン、カリケアマイシン、オーリスタチン、ピロロベンゾジアゼピン２量体、ｓｉＲＮＡ、またはそれらの組み合わせ、および上記のうちのいずれかの医薬的に許容可能な塩、酸、または誘導体から選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記免疫複合体は、以下の式の少なくとも１つのメイタンシノイド化合物を含み、
【化１】
2011524421.tif 000010
式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４はＨ、ＣＨ３またはＣＨ２ＣＨ３であり、同一または異なってもよく；ｍは、０、１、２、または３であり；ｍａｙは、メイタンシノイドである、
請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
（ｉ）ボルテゾミブ、サリドマイド、レナリドマイド、メルファラン、シクロホスファミド、またはそれらのうちの２つ以上の混合物から成る群から選択される少なくとも１つの化学療法剤と、（ｉｉ）乳癌細胞、前立腺癌細胞、卵巣癌細胞、結腸直腸癌細胞、多発性骨髄腫細胞、神経芽腫細胞、神経内分泌癌細胞、胃癌細胞、扁平上皮癌細胞、小細胞肺癌細胞、または精巣癌細胞により発現される抗原に結合するメイタンシノイドおよびヒト化モノクローナル抗体またはそのフラグメントを含む免疫複合体との相乗的組み合わせを含む医薬組成物。
【請求項１８】
第３の薬剤をさらに含み、前記第３の薬剤は、コルチコステロイドである、請求項１７に記載の組成物。
【請求項１９】
前記メイタンシノイドは、以下の式の化合物であり、
【化２】
2011524421.tif 000011
式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４はＨ、ＣＨ３またはＣＨ２ＣＨ３であり、同一または異なってもよく；ｍは、０、１、２、または３であり；ｍａｙは、メイタンシノイドである、
請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前記コルチコステロイドは、デキサメタゾンまたはプレドニゾンから選択される、請求項２または１８に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
請求項１または１７に定義された相乗的組成物；および医薬的に許容可能な担体を含む、医薬組成物。
【請求項２２】
選択された細胞集団の成長を処置または調節するための方法であって、請求項１または１７に記載の組成物の治療的に有効な量を前記選択された細胞集団に投与するステップを含む、方法。
【請求項２３】
コルチコステロイドの治療的に有効な量を投与するステップをさらに含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記選択された細胞集団は、癌、自己免疫疾患、移植片拒絶、移植片対宿主病、ウイルス感染、および寄生虫感染から成る群から選択される細胞を含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２５】
前記癌は、乳癌細胞、前立腺癌細胞、卵巣癌細胞、結腸直腸癌細胞、多発性骨髄腫細胞、神経芽腫細胞、神経内分泌癌細胞、胃癌細胞、扁平上皮癌細胞、小細胞肺癌細胞、または精巣癌細胞のうちの１つ以上を含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２６】
請求項１から１９のうちの１つに記載の組成物と、医薬的に許容可能な担体とを含む薬物。
【請求項２７】
付加的にコルチコステロイドを含むことを特徴とする、請求項１または１７に記載の薬物。
【請求項２８】
増殖性疾患の処置のための薬物の調製のための、請求項１から１９のうちの１つに記載の組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
［０１］  出願は、２００８年６月１６日に出願された米国仮出願第６１／０６１，８８６号の便益を主張し、その開示の全体は、参照により本明細書に明示的に組み込まれる。
【０００２】
技術分野
［０２］  本発明は、抗癌組み合わせ、それを含む医薬組成物、および癌の処置におけるその使用に関する。具体的には、本発明は、コルチコステロイド（例えば、デキサメタゾン）の任意選択のさらなる添加を含む、少なくとも１つの細胞結合剤薬物複合体（例えば、免疫複合体）と、プロテアソーム阻害剤（例えば、ボルテゾミブ）、免疫調節剤／血管新生阻害剤（例えば、サリドマイドまたはレナリドマイド）、ＤＮＡアルキル化剤（例えば、メルファラン）から選択される１つ以上の化学療法剤とを含む組み合わせの投与が、単独の抗癌剤よりも、治療相乗効果を有するか、または癌の処置における治療指数を改善するという発見に基づく。また、本発明は、このような組み合わせの治療的に有効な量を投与することによって、癌細胞等の選択された細胞集団の成長を調節する方法も提供する。
【背景技術】
【０００３】
［０３］  前臨床的に、抗癌剤の組み合わせの効果は、細胞株に関して体外で、または異なる腫瘍モデルにより生体内で研究することができる。典型的には、異なる死滅機序を有し、すなわち、細胞において異なる標的を有する抗癌剤を組み合わせる。このような実験系では、独立した標的（相互に排他的な薬物）を含む２つの抗癌剤が、相加的、相乗的、または拮抗的のいずれかで作用することが認められた。ＣｈｏｕおよびＴａｌａｌａｙ（Ａｄｖ．  Ｅｎｚｙｍｅ  Ｒｅｇｕｌ．  １９８４，  ２２：２７−５５）は、実験的発見を質的および量的に正確に説明することができる数学的方法を開発した。相互に排他的な薬物では、その数学的方法により、一般化等効果方程式が、任意の程度の効果に適用されることが示された（ＣｈｏｕおよびＴａｌａｌａｙにおける５２ページ参照）。等効果またはアイソボログラムは、同程度の効果を有する２つの薬物の全ての用量組み合わせのグラフ表現であり、例えば、２つの細胞毒性薬の組み合わせは、２０％または５０％の細胞死滅等の同程度の細胞死滅に影響を及ぼす。方程式は、任意の程度の効果に有効であり、グラフ表現は、同一形状を有し（ＣｈｏｕおよびＴａｌａｌａｙにおける５４ページ、第１行）、これは、図１１Ｄ（ＣｈｏｕおよびＴａｌａｌａｙにおける５ページ）に提示される。アイソボログラムにおいて、直線は、相加効果を示し、凹曲線（直線の下の曲線）は、相乗効果を表わし、凸曲線（直線の上の曲線）は、拮抗効果を表わす。また、これらの曲線によって、２つの相互に排他的な薬物の組み合わせが、全濃度領域において同種の効果を示し、その組み合わせが相加的、相乗的、または拮抗的のいずれかであることが示される。大部分の薬物組み合わせは、相加効果を示す。しかしながら、場合によっては、組み合わせは、相加効果を下回るまたは上回る効果を示す。これらの組み合わせは、それぞれ拮抗的または相乗的と呼ばれる。拮抗効果または相乗効果は、予測不可能であり、予期しないの実験的発見である。組み合わせは、その最適用量で使用する構成物質のうちの１つ以上よりも治療的に優れている場合に、治療相乗効果を明示する。Ｔ．Ｈ．Ｃｏｒｂｅｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  Ｒｅｐｏｒｔｓ，６６，１１８７（１９８２）を参照されたい。また、Ｔａｌｌａｒｉｄａ  ＲＪ（Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ．２００１  Ｓｅｐ；２９８（３）：８６５−  ７２）は、「明らかに類似する効果を生成する２つの薬物は、場合により、同時に使用すると、増大または減少した効果をもたらす。これらの事例を単純な相加作用と区別するために量的評価が必要とされる。」と言及している。
【０００４】
［０４］  拮抗効果または相乗効果の予測不可能性が、当業者に十分周知であることは、Ｋｎｉｇｈｔら等によるいくつかの他の研究において実証されている。ＢＭＣ  Ｃａｎｃｅｒ  ２００４，４：８３を参照されたい。本研究では、著者は、乳癌、結腸直腸癌、食道癌および卵巣癌、原発部位不明の癌、皮膚およびブドウ膜黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、ならびに肉腫を含む多種多様の固形腫瘍に対する、ゲフィチニブ（イレッサとしても既知である）の作用を単独で、または異なる細胞毒性薬（シスプラチン、ゲムシタビン、オキサリプラチン、およびトレオスルファン）と組み合わせて測定した。
【０００５】
［０５］  著者は、単一薬剤のゲフィチニブに対する腫瘍について試験した時に認められた腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）の程度に不均一性が存在することを発見した。腫瘍の７％（６／８６）において、著しい腫瘍成長阻害が認められたが、大部分が、より控えめな反応を示し、低度のＴＧＩとなった。興味深いことに、ゲフィチニブは、異なる細胞毒性薬と組み合わせて使用する場合に、プラスとマイナスの両方の効果を有した。被検腫瘍の５９％（４５／７６）において、ゲフィチニブの相加が現れ、細胞毒性薬または組み合わせの効果が促進された（これらのうち、１１％（５／４５）は、その指数ＳＵＭについて５０％を上回って減少した）。腫瘍の３８％（２９／７６）において、ＴＧＩは、ゲフィチニブと細胞毒性薬との組み合わせを使用した場合に、単独の細胞毒性薬に比べて減少した。残りの３％（２／７６）において、変化は認められなかった。
【０００６】
［０６］  著者は、異なる細胞毒性薬（シスプラチン；ゲムシタビン；オキサリプラチン；トレオスルファンおよびトレオスルファン＋ゲムシタビン）と組み合わせたゲフィチニブが、両刀の剣であること、つまり、成長速度に対するその効果によって、いくつかの腫瘍は、併用細胞毒性化学療法に対してより耐性を有し、一方、サイトカイン媒介細胞生存（抗アポトーシス）機序に対するその効果は、他の個体からの腫瘍における同一の薬物に対する感受性を促進し得るという結論を下す。７ページの結論を参照されたく、また、Ｋｎｉｇｈｔ  ｅｔ  ａｌ．，ＢＭＣ  Ｃａｎｃｅｒ  ２００４，４：８３．の図３も参照されたい。
【０００７】
［０７］  したがって、本研究により、同一の目的に有用であることで知られている２つの化合物で、其の目的用に組み合わされてあるが、同一の目的を必ずしも実行しない場合があることが証明される。
【０００８】
［０８］  しかしながら、活性薬剤の高度に有効な組み合わせ、すなわち、相乗混合物を発見することは、困難である。薬剤の潜在的な組み合わせの数が莫大であるため、セレンディピティは有効な手段ではない。例えば、５０００個の潜在的な薬剤の比較的小さいパレットであっても何兆個の可能な５倍の組み合わせが存在する。また、機序の知識から潜在的な組み合わせを推測する他の通常の発見戦略も、生体の多くの生物学的評価項目が複数の経路によって影響を受けることから、その潜在性が制限される。これらの経路は、多くの場合不明であり、既知であっても、経路が相互作用して生物学的評価項目を生成する方式は、多くの場合不明である。
【０００９】
［０９］  以前、我々は、モノクローナル抗体に連結されるメイタンシノイド化合物を含むメイタンシノイド免疫複合体と、タキサン化合物、エポチロン化合物、白金化合物、エピポドフィロトキシン化合物、およびカンプトテシン化合物のそれとの相乗組み合わせについて実証している。
【００１０】
［１０］  以前に実証された場合であっても、薬物の組み合わせの相乗使用によって、新しい相乗組み合わせを探索する必要性が除去されず、これは、相乗効果が予測不可能であるため、およびこれらが不測の実験的発見であるためである。例えば、高活性抗レトロウイルス療法（ＨＡＡＲＴ）に関連した後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）の処置において、ＨＩＶ−Ｉウイルスの逆転写酵素（ＲＴ）およびウイルスのプロテアーゼ（ＰＲ）の阻害剤のカクテル療法が、ウイルス複製の相乗阻害を示すことが考えられた。その後、興味深いことに、２種類のＲＴ阻害剤内において相乗効果が認められ、すなわち、ヌクレオシドＲＴ阻害剤（ＮＲＴＩ）は、ＰＲ阻害剤の非存在下において、非ヌクレオシドＲＴ阻害剤（ＮＮＲＴＩ）との相乗効果を示した。例えば、ＮＲＴＩ、ＡＺＴ（ジドブジン）、およびＮＮＲＴＩ、ネビラピンは、組み合わせて投与される場合に相乗効果を示す（Ｂａｓａｖａｐａｔｈｒｕｎｉ  Ａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．２７９，Ｉｓｓｕｅ  ８，６２２１−６２２４，Ｆｅｂｒｕａｒｙ  ２０，  ２００４）。したがって、相乗効果を示し、かつ癌等の衰弱性疾患の処置および予防に有効に使用され得る薬物組み合わせを発見する必要が依然として存在する。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１１】
［１１］  本発明は、以下本明細書において「複合体」と呼ばれる少なくとも１つの細胞結合剤薬物複合体（例えば、免疫複合体）と、プロテアソーム阻害剤（例えば、ボルテゾミブ）、免疫調節剤／血管新生阻害剤（例えば、サリドマイドまたはレナリドマイド）、およびＤＮＡアルキル化剤（例えば、メルファラン）から選択される少なくとも１つの化学療法剤とを含み、任意選択によりコルチコステロイド（例えば、デキサメタゾン）とさらに組み合わせられる組み合わせの投与が、免疫複合体を単独で使用するよりも、または免疫複合体を添加せずに化学療法剤を単独で使用するか、もしくは別の化学療法剤と組み合わせて使用するよりも、治療相乗効果を有するか、または癌の処置における治療指数を改善するという発見に基づく。
【００１２】
［１２］  好適な実施形態では、複合体および化学療法剤は、デキサメタゾン等のコルチコステロイドと組み合わせて投与される。例えば、ヒト化抗体Ｎ９０１−メイタンシノイド複合体（ｈｕＮ９０１−ＤＭｌ）等の免疫複合体は、サリドマイド／デキサメタゾン、レナリドマイド／デキサメタゾン、またはボルテゾミブ／デキサメタゾンと組み合わせて投与され、このような組み合わせは、免疫複合体を単独で使用するよりも、免疫複合体を添加せずに化学療法剤を単独で使用するか、または別の化学療法剤と組み合わせて使用するよりも、治療相乗効果を有するか、または癌の処置における治療指数を改善する。
【００１３】
［１３］  別の実施形態では、２つ以上の化学療法剤は、免疫複合体と組み合わせて使用される。例えば、ボルテゾミブおよびレナリドマイドは、デキサメタゾン等のコルチコステロイドの存在下または非存在下で、ｈｕＮ９０１メイタンシノイド複合体と組み合わせて使用され、このような組み合わせは、免疫複合体を単独で使用するよりも、免疫複合体を添加せずに化学療法剤を単独で使用するか、または別の化学療法剤と組み合わせて使用するよりも、治療相乗効果を有するか、または癌の処置における治療指数を改善する。
【００１４】
［１４］  用語の「治療相乗効果」は、本明細書において使用する際、複合体および／または１つ以上の化学療法剤の組み合わせが追加的効果を上回る治療効果を有する複合体および１つ以上の化学療法剤の組み合わせを意味する。
【００１５】
［１５］  本発明の別の目的は、コルチコステロイド（例えば、デキサメタゾン）の任意選択のさらなる添加を含む、少なくとも１つの複合体（例えば、免疫複合体）および１つ以上の化学療法剤（例えば、プロテアソーム阻害剤、免疫調節剤／血管新生阻害剤、またはＤＮＡアルキル化剤）の治療的に有効な量を患者に投与することによって、それを必要とする患者における癌を改善または処置する方法であって、その組み合わせが、免疫複合体を添加せずに抗癌剤を単独または組み合わせて使用するよりも、治療相乗効果を有するか、または癌の処置における治療指数を改善するようにする方法について説明する。
【００１６】
［１６］  さらなる態様では、本発明は、任意選択により医薬的に許容可能な担体を含む、複合体（例えば、免疫複合体）および化学療法剤（例えば、プロテアソーム阻害剤、免疫調節剤／血管新生阻害剤、またはＤＮＡアルキル化剤）のうちの１つ以上の有効量を含む医薬組成物を提供する。
【００１７】
［１７］  本発明は、癌または細胞の異常増殖により引き起こされる任意の疾患の処置において、同時、順次、または別々の投与による組み合わせ療法のための薬物の調製のために、コルチコステロイドの任意選択の添加を含む、複合体（例えば、免疫複合体）および化学療法剤（例えば、プロテアソーム阻害剤、免疫調節剤／血管新生阻害剤、またはＤＮＡアルキル化剤）の使用をまたさらに提供する。例えば、複合体および薬物は、薬剤毎の最適投与スケジュールを使用して、同一の日または異なる日に投与することができる。例えば、一実施形態では、２つの化合物を、１０日以内に相互に投与することができ、別の実施形態では、５日以内に相互に投与することができ、さらに別の実施形態では、相互に２４時間以内に投与することができ、または同時に投与することができる。代替として、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１、化学療法剤、コルチコステロイド、または任意のそれらの組み合わせを、１日おき、隔日、週１回、または０日から７日の間の範囲（例えば、０、１、２、３、４、５、６、または７日目）もしくは０週から４週の間の範囲（例えば、０、１、２、３、または４週目、１週以上の間に追加され得る日を含む）の期間に投与することができる。場合によっては、化学療法剤を最初に投与し、その後、複合体を投与することが好適であり得る。例えば、ボルテゾミブを０日目に投与し、その後、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１を３日目に投与する、薬物投与は、臨床状況を根拠に当業者により決定することができる。
【００１８】
［１８］  また、本発明は、コルチコステロイドの任意選択の添加を含む、少なくとも１つの複合体（例えば、免疫複合体）および１つ以上の化学療法剤（例えば、プロテアソーム阻害剤、免疫調節剤／血管新生阻害剤、またはＤＮＡアルキル化剤）の治療的に有効な量を投与することによって、癌細胞等の選択された細胞集団の成長を調節する方法であって、その組み合わせが、免疫複合体を添加せずに抗癌剤を単独または組み合わせて使用するよりも、治療相乗効果を有するか、または癌の処置における治療指数を改善するようにする方法について説明する。複合体は、選択された細胞集団を死滅させるための細胞結合剤および少なくとも１つの治療剤を含むことができる。
【００１９】
［１９］  本発明のこれらの態様および他の態様について本明細書に詳述する。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１Ａ】［２０］図１Ａは、Ｍｏｌｐ−８多発性骨髄腫異種移植片における、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１のメルファランとの組み合わせを示す。
【図１Ｂ】図１Ｂは、データを示す表（表１）である。
【図２Ａ】［２１］図２Ａは、Ｍｏｌｐ−８多発性骨髄腫異種移植片における、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１のサリドマイドとの組み合わせを示す。
【図２Ｂ】図２Ｂは、データを示す表（表２）である。
【図３Ａ】［２２］図３Ａは、ＯＰＭ２多発性骨髄腫異種移植片における、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１のボルテゾミブとの組み合わせを示す。
【図３Ｂ】図３Ｂは、データを示す表（表３）である。
【図４Ａ】［２３］図４Ａは、大きいＨ９２９多発性骨髄腫異種移植片におけるｈｕＮ９０１−ＤＭ１のボルテゾミブ（低用量）との組み合わせを示す。
【図４Ｂ】図４Ｂは、データを示す表（表４ａ）である。
【図４Ｃ】［２４］図４Ｃは、大きいＨ９２９多発性骨髄腫異種移植片におけるｈｕＮ９０１−ＤＭ１のボルテゾミブ（高用量）との組み合わせを示す。
【図４Ｄ】図４Ｄは、データを示す表（表４ｂ）である。
【図５Ａ】［２５］図５Ａは、ＯＰＭ２多発性骨髄腫異種移植片におけるｈｕＮ９０１−ＤＭ１のレナリドマイドとの組み合わせを示す。
【図５Ｂ】図５Ｂは、データを示す表（表５）である。
【図６】［２６］図６は、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１とボルテゾミブとの抗腫瘍活性のスケジュール依存性を示す。
【図７Ａ】［２７］図７Ａは、ＭＯＬＰ−８多発性骨髄腫異種移植片における、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１のレナリドマイドとの低用量デキサメタゾンを加えた三重組み合わせを示す。
【図７Ｂ】図７Ｂは、データを示す表（表７ａ）である。
【図８Ａ】［２８］図８Ａは、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１のレナリドマイドとの低用量デキサメタゾンを加えた３重組み合わせによる処置後の、ＭＯＬＰ−８多発性骨髄腫異種移植片におけるアポトーシスマーカ、カスパーゼ−３の免疫組織化学的分析を示す。
【図８Ｂ】［２９］図８Ｂは、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１のレナリドマイドとの低用量デキサメタゾンを加えた３重組み合わせにより処置されたＭＯＬＰ−８多発性骨髄腫異種移植片における腫瘍細胞アポトーシスの統計的に顕著な相乗的増加を、別々のいずれかの療法による処置と比較して示す。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
［３０］  本発明は、コルチコステロイド（デキサメタゾン）の任意選択のさらなる添加を含む、少なくとも１つの複合体（例えば、免疫複合体）と、少なくとも１つの化学療法剤（例えば、プロテアソーム阻害剤、免疫調節剤／血管新生阻害剤、またはＤＮＡアルキル化剤）との投与が、単独の免疫複合体よりも、免疫複合体を添加せずに化学療法剤を単独で使用するか、もしくは別の化学療法剤と組み合わせて使用するよりも、治療相乗効果を有するか、または癌の処置における治療指数を改善するという予想外の発見に基づく。
【００２２】
複合体
［３１］  本発明の複合体は、細胞結合剤に連結される選択された細胞集団を死滅させるための少なくとも１つの治療剤を含む。
【００２３】
［３２］  選択された細胞集団を死滅させるための治療剤は、好ましくは、当技術分野において既知である抗有糸分裂薬剤であり、これは、チューブリン重合、ひいては微小管形成を阻害することによって細胞を死滅させる。例えば、メイタンシノイド、ビンカアルカロイド、ドラスタチン、オーリスタチン、クリプトフィシン、ツブリシン、および／またはチューブリン重合を阻害することによって細胞を死滅させる任意の他の薬剤を含む、当技術分野において既知である任意の抗有糸分裂薬剤を、本発明において使用することができる。好ましくは、抗有糸分裂薬剤は、メイタンシノイドである。
【００２４】
［３３］  細胞結合剤は、典型的にはおよび好ましくは、動物細胞（例えば、ヒト細胞）である細胞に結合する任意の適切な薬剤であることができる。細胞結合剤は、好ましくは、ペプチドまたはポリペプチドである。適切な細胞結合剤には、例えば、抗体（例えば、モノクローナル抗体およびそのフラグメント）、リンホカイン、ホルモン、成長因子、栄養素輸送分子（例えば、トランスフェリン）が含まれる。選択された細胞集団を死滅させるための治療剤および免疫複合体の一部になり得る細胞結合剤について、より詳細に後述する。
【００２５】
メイタンシノイド
［３４］  本発明において使用され得るメイタンシノイドは、当技術分野において周知であり、既知の方法に従って天然源から単離され得るか、または既知の方法に従って合成的に調製され得る。
【００２６】
［３５］  適切なメイタンシノイドの例として、メイタンシノールおよびメイタンシノール類似体が挙げられる。適切なメイタンシノール類似体の例として、修飾された芳香環を有するもの、および他の位置に修飾を有するものが挙げられる。
【００２７】
［３６］  修飾された芳香環を有するメイタンシノールの適切な類似体の具体的な例として以下のものが挙げられる。
（１）Ｃ−１９−デクロロ（米国特許第４，２５６，７４６号）（アンサミトシンＰ−２のＬＡＨ還元により調製される）；
（２）Ｃ−２０−ヒドロキシ（またはＣ−２０−デメチル）＋／−Ｃ−１９−デクロロ（米国特許第４，３６１，６５０号および第４，３０７，０１６号）（ストレプトミセスまたはアクチノミセスを使用する脱メチル化もしくはＬＡＨを使用する脱塩素化により調製される）；および
（３）Ｃ−２０−デメトキシ、Ｃ−２０−アシルオキシ（−ＯＣＯＲ）、＋／−デクロロ（米国特許第４，２９４，７５７号）（塩化アシルを使用するアシル化により調製される）
［３７］  他の位置に修飾を有するメイタンシノールの適切な類似体の具体的な例として、以下のものが挙げられる。
（１）Ｃ−９−ＳＨ（米国特許第４，４２４，２１９号）（メイタンシノールのＨ２ＳまたはＰ２Ｓ５との反応により調製される）；
（２）Ｃ−１４−アルコキシメチル（デメトキシ／ＣＨ２ＯＲ）（米国特許第４，３３１，５９８号）；
（３）Ｃ−１４−ヒドロキシメチルまたはアシルオキシメチル（ＣＨ２ＯＨまたはＣＨ２ＯＡｃ）（米国特許第４，４５０，２５４号）（ノカルジアから調製される）；
（４）Ｃ−１５−ヒドロキシ／アシルオキシ（米国特許第４，３６４，８６６号）（ストレプトミセスによるメイタンシノールの転化により調製される）；
（５）Ｃ−１５−メトキシ（米国特許第４，３１３，９４６号および第４，３１５，９２９号）（トレウィアヌドロフローラより単離される）；
（６）Ｃ−１８−Ｎ−デメチル（米国特許第４，３６２，６６３号および第４，３２２，３４８号）（ストレプトミセスによるメイタンシノールの脱メチル化により調製される）；および、
（７）４，５−デオキシ（米国特許第４，３７１，５３３号）（メイタンシノールの３塩化チタン／ＬＡＨ還元により調製される）
［３８］  本発明において有用なチオール含有メイタンシノイドの合成は、米国特許第５，２０８，０２０号、第５，４１６，０６４号、第６，３３３，４１０号、第７，２７６．４９７号、および第７．３０１．０１９号）において完全に開示される。
【００２８】
［３９］  Ｃ３位、Ｃ１４位、Ｃ１５位、またはＣ２０位においてチオール部分を含むメイタンシノイドは、全て有用であると考えられる。Ｃ３位が好ましく、メイタンシノールのＣ３位は特に好ましい。また、Ｎ−メチル−アラニン含有Ｃ３チオール部分メイタンシノイド、およびＮ−メチル−システイン含有Ｃ３チオール部分メイタンシノイド、ならびに各々の類似体も好ましい。
【００２９】
［４０］  本発明において有用なＮ−メチル−アラニン含有Ｃ３チオール部分メイタンシノイド誘導体の具体的な例は、分子式Ｍ１、Ｍ２、Ｍ３、Ｍ６、およびＭ７によって表わされる。
【００３０】
【化１】
2011524421.tif 000002
【００３１】
式中、
ｌは、１から１０までの整数であり、
ｍａｙは、メイタンシノイドである。
【００３２】
【化２】
2011524421.tif 000003
【００３３】
式中、
Ｒ１およびＲ２は、Ｈ、ＣＨ３、またはＣＨ２ＣＨ３であり、同一または異なってもよく、
ｍは、０、１、２、または３であり、
ｍａｙは、メイタンシノイドである。
【００３４】
【化３】
2011524421.tif 000004
【００３５】
式中、
ｎは、３から８までの整数であり、
ｍａｙは、メイタンシノイドである。
【００３６】
【化４】
2011524421.tif 000005
【００３７】
式中、
ｌは、１、２、または３であり、
Ｙ０は、Ｃ１またはＨであり、
Ｘ３は、ＨまたはＣＨ３である。
【００３８】
【化５】
2011524421.tif 000006
【００３９】
式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は、Ｈ、ＣＨ３またはＣＨ２ＣＨ３であり、同一または異なってもよく、
ｍは、０、１、２、または３であり、
ｍａｙは、メイタンシノイドである。
【００４０】
［４１］  本発明において有用なＮ−メチル−システイン含有Ｃ３チオール部分メイタンシノイド誘導体の具体的な例は、分子式Ｍ４およびＭ５によって表わされる。
【００４１】
【化６】
2011524421.tif 000007
【００４２】
式中、
ｏは、１、２、または３であり、
ｐは、０から１０の整数であり、
ｍａｙは、メイタンシノイドである。
【００４３】
【化７】
2011524421.tif 000008
【００４４】
式中、
ｏは、１、２、または３であり、
ｑは、０から１０までの整数であり、
Ｙ０は、Ｃ１またはＨであり、
Ｘ３は、ＨまたはＣＨ３である。
【００４５】
［４２］  好適なメイタンシノイドは、米国特許第５，２０８，０２０号、第５，４１６，０６４号、第６，３３３，４１０号、第６，４４１，１６３号、第６，７１６，８２１号、第ＲＥ３９，１５１号、および第７，２７６，４９７号に説明されるものである。
【００４６】
［４３］  ビンカアルカロイド化合物（例えば、ビンクリスチン）、ドラスタチン化合物、およびクリプトフィシン化合物は、国際公開第ＷＯ０１／２４７６３に詳述される。オーリスタチンには、オーリスタチンＥ、オーリスタチンＥＢ（ＡＥＢ）、オーリスタチンＥＦＰ（ＡＥＦＰ）、モノメチルオーリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）が含まれ、米国特許第５，６３５，４８３号、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｏｎｃｏｌ．１５：３６７−７２（１９９９）；Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，ｖｏｌ．３，Ｎｏ．８，ｐｐ．９２１−９３２（２００４）；米国出願第１１／１３４８２６号、米国公開第２００６００７４００８号、第２００６０２２９２５に説明される。ツブリシン化合物は、米国公開第２００５０２４９７４０号に説明される。この表題に列挙される薬剤の多くは、意向があれば、化学療法剤としても使用可能である。
【００４７】
細胞結合剤
［４４］  本発明において使用する細胞結合剤は、癌細胞上の標的抗原に特異的に結合するタンパク質（例えば、免疫グロブリンおよび非免疫グロブリンタンパク質）である。これらの細胞結合剤には、以下が含まれる。
−以下を含む抗体：
−表面再処理抗体（米国特許第５，６３９，６４１号）；
−ヒト化抗体または完全なヒト抗体（ヒト化抗体または完全なヒト抗体は、ｈｕＭｙ９−６、ｈｕＢ４、ｈｕＣ２４２、ｈｕＮ９０１、ＤＳ６、ＣＤ３８、ＩＧＦ−ＩＲ、ＣＮＴＯ  ９５、Ｂ−Ｂ４、トラスツズマブ、ビバツズマブ、シブロツツマブ、ペルツズマブ、およびリツキシマブから選択されるが、これらに限定されない（例えば、米国特許第５，６３９，６４１号、第５，６６５，３５７号、および第７，３４２，１１０号；米国仮特許出願第６０／４２４，３３２号、国際特許出願第ＷＯ０２／１６，４０１号、米国特許公開第２００６００４５８７７号、米国特許公開第２００６０１２７４０７号、米国特許公開第２００５０１１８１８３号、Ｐｅｄｅｒｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９４）Ｊ．ＭｏＩ．Ｂｉｏｌ．２３５，９５９−９７３，Ｒｏｇｕｓｋａ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９４）Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌ９１，９６９−９７３、Ｃｏｌｏｍｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｖｅｓｔ．，１９：４９−５６（２００１），Ｈｅｉｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，３１Ａ：２３８５−２３９１（１９９５）、Ｗｅｌｔ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ  Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ，１２：１１９３−１２０３（１９９４）、およびＭａｌｏｎｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，９０：２１８８−２１９５（１９９７）を参照されたい）；および
−Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ、およびＦ（ａｂ’）２等の抗体のエピトープ結合フラグメント（Ｐａｒｈａｍ，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３１：２８９５−２９０２（１９８３）；Ｓｐｒｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１３：４７０−４７８（１９７４）；Ｎｉｓｏｎｏｆｆ  ｅｔ  ａｌ，Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．８９：２３０−２４４（１９６０））。
【００４８】
［４５］  追加の細胞結合剤には、以下により例示化されるが、これらに限定されない他の細胞結合タンパク質およびポリペプチドを含む。
−アンキリン反復タンパク質（ＤＡＲＰｉｎｓ；Ｚａｈｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２８１，４６，３５１６７−３５１７５，（２００６）；Ｂｉｎｚ，Ｈ．Ｋ．，Ａｍｓｔｕｔｚ，Ｐ．＆Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ，Ａ．（２００５）Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２３，１２５７−１２６８）または、例えば、米国特許公開第２００７０２３８６６７号；米国特許第７，１０１，６７５号；国際公開第ＷＯ／２００７／１４７２１３号；および国際公開第ＷＯ／２００７／０６２４６６に説明されるアンキリン様反復タンパク質もしくは合成ペプチド）；
−インターフェロン（例えば、α、β、γ）；
−ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−６等のリンホカイン；
−インスリン、ＴＲＨ（甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン）、ＭＳＨ（メラニン細胞刺激ホルモン）、アンドロゲンおよびエスゴロゲン等のステロイドホルモン、および
−ＥＧＦ、ＴＧＦ−α、ＩＧＦ−１、Ｇ−ＣＳＦ、Ｍ−ＣＳＦ、およびＧＭ−ＣＳＦ等の成長因子およびコロニー刺激因子（Ｂｕｒｇｅｓｓ，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｔｏｄａｙ  ５：１５５−１５８（１９８４））。
【００４９】
［４６］  細胞結合剤が抗体（例えば、単鎖抗体、標的細胞に結合する抗体フラグメント、モノクローナル抗体、単鎖モノクローナル抗体、またはそのモノクローナル抗体フラグメント、キメラ抗体、そのキメラ抗体フラグメント、ドメイン抗体、そのドメイン抗体フラグメント、表面再処理抗体、表面再処理単鎖抗体、またはその表面再処理抗体フラグメント、ヒト抗体またはそのヒト抗体フラグメント、ヒト化抗体または表面再処理抗体、ヒト化単鎖抗体、またはそのヒト化抗体フラグメント）である場合、細胞結合剤は、ポリペプチドである抗原に結合し、成長因子等の膜貫通分子（例えば、受容体）またはリガンドであり得る。例示的抗原には、レニン等の分子；ヒト成長ホルモンおよびウシ成長ホルモンを含む成長ホルモン；成長ホルモン放出因子；副甲状腺ホルモン；甲状腺刺激ホルモン；リポタンパク質；α−１−抗トリプシン；インスリンＡ鎖；インスリンＢ鎖；プロインスリン；卵胞刺激ホルモン；カルシトニン；黄体形成ホルモン；グルカゴン；ｖｍｃ因子、第ＩＸ因子、組織因子（ＴＦ）、およびフォンヴィレブランド因子等の凝固因子；タンパク質Ｃ等の抗凝固因子；心房性ナトリウム利尿因子；肺表面活性剤；ウロキナーゼまたはヒト尿または組織型プラスミノーゲン活性化因子（ｔ−ＰＡ）等のプラスミノーゲン活性化因子；ボンベシン；トロンビン；造血性成長因子；腫瘍壊死因子−αおよびβ；エンケファリナーゼ；ＲＡＮＴＥＳ（通常Ｔ細胞が発現および分泌する活性の調節）、ヒトマクロファージ炎症タンパク質（ＭＩＰ−１−α）；ヒト血清アルブミン等の血清アルブミン；ミュラー阻害物質；リラキシンＡ鎖；リラキシンＢ鎖；プロリラキシン；マウスゴナドトロピン会合ペプチド；β−ラクタマーゼ等の微生物タンパク質、ＤＮａｓｅ；ＩｇＥ；ＣＴＬＡ−４等の細胞傷害性Ｔリンパ球会合抗原（ＣＴＬＡ）；インヒビン；アクチビン；血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）；ホルモンまたは成長因子の受容体；タンパク質ＡまたはＤ；リウマチ因子；骨由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）、ニューロトロフィン−３、−４、−５、または−６（ＮＴ−３、ＮＴ−４、ＮＴ−５、またはＮＴ−６）等の神経栄養因子、またはＮＧＦ−β等の神経成長因子；血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）；ａＦＧＦおよびｂＦＧＦ等の線維芽細胞成長因子；上皮成長因子（ＥＧＦ）；ＴＧＦ−αおよび、ＴＧＦ−β１、ＴＧＦ−β２、ＴＧＦ−β３、ＴＧＦ−β４、またはＴＧＦ−β５を含むＴＧＦ−β等の形質転換成長因子（ＴＧＦ）；インスリン様成長因子Ｉおよび−ＩＩ（ＩＧＦ−ＩおよびＩＧＦ−ＩＩ）；デス（１−３）−ＩＧＦ−１（脳ＩＧＦ−Ｉ）；インスリン様成長因子結合タンパク質；ＥｐＣＡＭ、ＧＤ３、ＦＬＴ３、ＰＳＭＡ、ＰＳＣＡ、ＭＵＣｌ、ＭＵＣ１６、ＳＴＥＡＰ、ＣＥＡ、ＴＥＮＢ２、ＥｐｈＡ受容体、ＥｐｈＢ受容体、葉酸受容体、ＦＯＬＲ１、メソテリン、クリプト、αｖβ６、インテグリン、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦＲ、トランスフェリン受容体、ＩＲＴＡ１、ＩＲＴＡ２、ＩＲＴＡ３、ＩＲＴＡ４、ＩＲＴＡ５；ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ８、ＣＤ１１、ＣＤ１４、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ２５、ＣＤ２６、ＣＤ２８、ＣＤ３０、���Ｄ３３、ＣＤ３６、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５２、ＣＤ５５、ＣＤ５６、ＣＤ５９、ＣＤ７０、ＣＤ７９、ＣＤ８０、ＣＤ８１、ＣＤ１０３、ＣＤ１０５、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ１３８、ＣＤ１５２等のＣＤタンパク質；エリスロポエチン；骨誘導因子；抗毒素；骨形成タンパク質（ＢＭＰ）；インターフェロン−α、−β、および−γ等のインターフェロン；例えば、Ｍ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、およびＧ−ＣＳＦのコロニー刺激因子（ＣＳＦ）；例えば、ＩＬ−１からＩＬ−１０のインターロイキン（ＩＬ）；スーパーオキシドジスムターゼ；Ｔ細胞受容体；表面膜タンパク質；崩壊促進因子；例えば、ＨＩＶエンベロープの一部分等のウイルス抗原；輸送タンパク質；ホーミング受容体；アドレシン；調節タンパク質；ＣＤ１１ａ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１８、ＩＣＡＭ、ＶＬＡ−４、およびＶＣＡＭ等のインテグリン；ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、またはＨＥＲ４受容体等の腫瘍会合抗原；ならびに上記に列挙したポリペプチド、抗体模倣体アドネクチン（米国出願第２００７００８２３６５号）、または参照によりその全体が組み込まれる米国公開第２００８０１７１０４０号もしくは米国公開第２００８０３０５０４４号に開示される１つ以上の腫瘍会合抗原もしくは細胞表面受容体に結合する抗体のいずれかのフラグメントが含まれる。
【００５０】
［４７］  加えて、骨髄細胞に結合するＧＭ−ＣＳＦは、急性骨髄性白血病由来の罹患細胞への細胞結合剤として使用することができる。活性化Ｔ細胞に結合するＩＬ−２は、移植片拒絶の予防、移植片対宿主病の治療および予防、ならびに急性Ｔ細胞白血病の処置のために使用することができる。メラニン細胞に結合するＭＳＨは、メラノーマの処置に使用することができる。葉酸は、卵巣および他の腫瘍上に発現される葉酸受容体を標的化するために使用することができる。上皮成長因子は、肺および頭頸部等の扁平上皮癌を標的化するために使用することができる。ソマトスタチンは、神経芽細胞腫および他の腫瘍の種類を標的化するために使用することができる。
【００５１】
［４８］  乳癌および精巣癌は、それぞれ細胞結合剤としてのエストロゲン（またはエストロゲン類似体）またはアンドロゲン（またはアンドロゲン類似体）により、成功裏に標的化され得る。
【００５２】
［４９］  本発明が包含する抗体の好適な抗原には、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ８、ＣＤ１１、ＣＤ１４、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２５、ＣＤ２６、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３６、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５２、ＣＤ５５、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ７９、ＣＤ８０、ＣＤ８１、ＣＤ１０３、ＣＤ１０５、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ１３８、およびＣＤ１５２等のＣＤタンパク質；ＥＧＦ受容体、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、またはＨＥＲ４受容体等のＥｒｂＢ受容体群のメンバー；ＬＦＡ−１、Ｍａｃ１、ｐ１５０．９５、ＶＬＡ−４、ＩＣＡＭ−１、ＶＣＡＭ、ＥｐＣＡＭ、α４／β７インテグリン、およびそのαまたはβのいずれかのサブユニットを含むαｖ／β３インテグリン（例えば、抗ＣＤ１１ａ、抗ＣＤ１８、または抗ＣＤ１１ｂ抗体）等の細胞接着分子；ＶＥＧＦ等の成長因子；組織因子（ＴＦ）；ＴＧＦ−β．；αインターフェロン（α−ＩＦＮ）；ＩＬ−８等のインターロイキン；ＩｇＥ；血液型抗原Ａｐｏ２、死受容体；ｆｌｋ２／ｆｌｔ３受容体；肥満（ＯＢ）受容体；ｍｐｌ受容体；ＣＴＬＡ−４；タンパク質Ｃ等が含まれる。本明細書において最も好適な標的物は、ＩＧＦ−ＩＲ、ＣａｎＡｇ、ＥｐｈＡ２、ＭＵＣ１、ＭＵＣ１６、ＶＥＧＦ、ＴＦ、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ１３８、ＣＡ６、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、ＥｐＣＡＭ、クリプト（ヒト乳癌癌細胞の大部分において上昇レベルで生成されるタンパク質）、ダルピン、αｖ／β３インテグリン、αｖ／β５インテグリン、αｖ／β６インテグリン、ＴＧＦ−β、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１８、Ａｐｏ２およびＣ２４２、または参照によりその全体が組み込まれる米国公開第２００８０１７１０４０号もしくは米国公開第２００８０３０５０４４号に開示される１つ以上の腫瘍会合抗原もしくは細胞表面受容体に結合する抗体である。
【００５３】
［５０］  また、本発明が包含する抗体の好適な抗原には、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ３４、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４６、ＣＤ５６、およびＣＤ１３８等のＣＤタンパク質；ＥＧＦ受容体、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、またはＨＥＲ４受容体等のＥｒｂＢ受容体群のメンバー；ＬＦＡ−１、Ｍａｃ１、ｐ１５０．９５、ＶＬＡ−４、ＩＣＡＭ−１、ＶＣＡＭ、ＥｐＣＡＭ、α４／β７インテグリン、およびそのαまたはβのいずれかのサブユニットを含むαｖ／β３インテグリン（例えば、抗ＣＤ１１ａ、抗ＣＤ１８、または抗ＣＤ１１ｂ抗体）等の細胞接着分子；ＶＥＧＦ等の成長因子；組織因子（ＴＦ）；ＴＧＦ−β．；αインターフェロン（α−ＩＦＮ）；ＩＬ−８等のインターロイキン；ＩｇＥ；血液型抗原Ａｐｏ２、死受容体；ｆｌｋ２／ｆｌｔ３受容体；肥満（ＯＢ）受容体；ｍｐｌ受容体；ＣＴＬＡ−４；タンパク質Ｃ等も含まれる。本明細書において最も好適な標的物は、ＩＧＦ−ＩＲ、ＣａｎＡｇ、ＥＧＦ−Ｒ、ＥｐｈＡ２、ＭＵＣｌ、ＭＵＣ１６、ＶＥＧＦ、ＴＦ、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ１３８、ＣＡ６、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、クリプト（ヒト乳癌癌細胞の大部分において上昇レベルで生成されるタンパク質）、αｖ／β３インテグリン、αｖ／β５インテグリン、ＴＧＦ−β、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１８、Ａｐｏ２、ＥｐＣＡＭ、およびＣ２４２である。
【００５４】
［５１］  モノクローナル抗体法によって、モノクローナル抗体の形式で、特異的な細胞結合剤の生成が可能になる。特に当技術分野において周知の技法は、マウス、ラット、ハムスター、または任意の他の哺乳類を、無傷の標的細胞、標的細胞から単離された抗原、ウイルス全体、弱毒化したウイルス全体、およびウイルスコートタンパク質等のウイルスタンパク質などの対象の抗原により免疫化することによって生成されるモノクローナル抗体を作成する技法である。また、感作ヒト細胞を使用することもできる。モノクローナル抗体を作成する別の方法として、ｓＦｖ（単鎖可変領域）、具体的にはヒトｓＦｖのファージライブラリを使用することが挙げられる（例えば、Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓら、米国特許第５，８８５，７９３；ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、国際公開第ＷＯ９２／０１０４７；Ｌｉｍｉｎｇら、国際公開第ＷＯ９９／０６５８７）。
【００５５】
［５２］  適切な細胞結合剤の選択は、標的化される特定の細胞集団に依存する選択事項であるが、一般に、適切なものが利用可能であるならば、モノクローナル抗体およびそのエピトープ結合フラグメントが好ましい。
【００５６】
［５３］  例えば、モノクローナル抗体Ｍｙ９は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）細胞上に見られるＣＤ３３抗原に特異的なマウスのＩｇＧ２ａ抗体であり（Ｒｏｙ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｌｏｏｄ７７：２４０４−２４１２（１９９１））、かつＡＭＬ患者の処置に使用することができる。同様に、モノクローナル抗体抗Ｂ４は、マウスのＩｇＧ１であり、これはＢ細胞上のＣＤ１９抗原に結合し（Ｎａｄｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １３１：２４４−２５０（１９８３））、かつ標的細胞がＢ細胞または非ホジキン性リンパ腫もしくは慢性リンパ芽球性白血病等においてこの抗原を発現する罹患細胞である場合に使用することができる。抗体Ｎ９０１は、マウスモノクロナールＩｇＧ１抗体であり、これは、小細胞肺癌細胞および神経内分泌源の他の腫瘍の細胞上に見られるＣＤ５６に結合し（Ｒｏｙ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｎａｔ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．８８：１１３６−１１４５  （１９９６））；ｈｕＣ２４２は、ＣａｎＡｇ抗原に結合する抗体であり；トラスツズマブは、ＨＥＲ２／ｎｅｕに結合する抗体であり；抗ＥＧＦ受容体抗体は、ＥＧＦ受容体に結合する。
【００５７】
化学療法剤
［５４］  本発明において使用され得る薬物は、化学療法剤を含む。「化学療法剤」は、癌の処置に有用である化合物である。化学療法剤の好適な例として、プロテアソーム阻害剤、免疫調節剤、血管新生阻害剤、アルキル化剤、またはそれらの組み合わせが挙げられる。
【００５８】
プロテアソーム阻害剤
［５５］  プロテアソーム阻害剤は、プロテアソーム、つまりタンパク質を分解する細胞複合体の作用を阻害する薬物である。本発明の一実施形態では、プロテアソーム阻害剤は、ａ）Ｃ末端エポキシ（エキスポキシ）ケトン構造を有するペプチド誘導体、β−ラクトン−誘導体、アクラシノマイシンＡ、ラクタシスチン、クラストラクタシステインを含む自然発生のプロテアソーム阻害剤；ｂ）Ｎ−カルボベンゾキシ−Ｌ−ロイシニル−Ｌ−ロイシニル−Ｌ−ロイシナール（ＭＧ１３２またはｚＬＬＬとも呼ばれる）等の修飾されたペプチドアルデヒド、またはＭＧ２３２のボロン酸誘導体、Ｎ−カルボベンゾキシ−Ｌｅｕ−Ｎｖａ−Ｈ（ＭＧ１１５とも呼ばれる）、Ｎ−アセチル−Ｌ−ロイシニル−Ｌ−ロイシニル−Ｌ−ノルロイシナール（ＬＬｎＬとも呼ばれる）、Ｎ−カルボベンゾキシ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｈ（ＰＳ１とも呼ばれる）を含む合成プロテアソーム阻害剤；ｃ）α、β-エポキシケトン−構造、カルボベンゾキシ−Ｌ−ロイシニル−Ｌ−ロイシニル−Ｌ−ロイシン−ビニル−スルホンまたは４−ヒドロキシ−５−ヨード−３−ニトロフェニルアセチル−Ｌ−ロイシニル−Ｌ−ロイシニル−Ｌ−ロイシン−ビニル−スルホン（ＮＬＶＳ）等のビニル−スルホンを含むペプチド；ｄ）ピラジル−ＣＯＮＨ（ＣＨＰｈｅ）ＣＯＮＨ（ＣＨイソブチル）Ｂ（ＯＨ）２およびジペプチジルホウ酸誘導体等のグリオキサル酸またはホウ酸残基；ｅ）ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）−Ｌｅｕ−Ｌｅｕｂｏｒｏ−Ｌｅｕ−ピナコール−エステル等のピナコール−エステルを含む群から選択される。また、Ａｍ  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｐａｔｈｏｌ  １１６（５）：６３７−６４６，  ２００１または米国出願第１０／５２２７０６号（２００３年７月３１日出願）に説明されるプロテアソーム阻害剤も、本発明の構想内に包含される。好適な実施形態では、プロテアソーム阻害剤は、ＰＳ−３４１／ボルテゾミブ（ＶｅｌｃａｄｅＴＭである。
【００５９】
免疫調節剤
［５６］  「免疫調節薬物または薬剤」は、例えば、免疫系における細胞、例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、マクロファージ、もしくは抗原提示細胞（ＡＰＣ）の細胞活性を刺激もしくは抑制することによって、または免疫系の外部の成分に作用して、免疫系、例えば、ホルモン、受容体作用薬もしくは拮抗薬、および神経伝達物質を刺激、抑制、または調節することによって、例えば、免疫系に直接的または間接的に作用する薬剤を意味し；免疫調節剤は、例えば、免疫抑制剤または免疫刺激剤であることができる。「抗炎症剤」は、例えば、炎症反応、すなわち、損傷に対する組織反応を処置する薬剤、例えば、免疫系、血管系、またはリンパ系を処置する薬剤を意味する。
【００６０】
［５７］  本発明における使用に適切な抗炎症または免疫調節の薬物または薬剤には、インターフェロン誘導体、例えば、ベタセロン、β−インターフェロン；プロスタン誘導体、例えば、ＰＣＴ／ＤＥ９３／００１３に開示される化合物、例えば、イロプロスト、シカプロスト；グルココルチコイド、例えば、コルチゾール、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン；免疫抑制薬、例えば、シクロスポリンＡ、ＦＫ−５０６、メトキサレン、サリドマイド、スルファサラジン、アザチオプリン、メトトレキサート；リポキシゲナーゼ阻害剤、例えば、ジレウトン、ＭＫ−８８６、ＷＹ−５０２９５、ＳＣ−４５６６２、ＳＣ−４１６６１Ａ、ＢＩ−Ｌ−３５７；ロイコトリエン拮抗薬、例えば、ＤＥ  ４００９１１７１、ドイツ特許出願第Ｐ  ４２  ４２  ３９０．２号；国際公開第ＷＯ９２０１６７５に開示されている化合物；ＳＣ−４１９３０；ＳＣ−５０６０５；ＳＣ−５１１４６；ＬＹ  ２５５２８３（Ｄ．Ｋ．Ｈｅｒｒｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＦＡＳＥＢ  Ｊ．２：Ａｂｓｔｒ．４７２９，１９８８）；ＬＹ  ２２３９８２（Ｄ．Ｍ．Ｇａｐｉｎｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３３：２７９８−２８１３，１９９０）；例えば、Ｊ．Ｍｏｒｒｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．２９：１４３−１４６，１９８８、Ｃ．Ｅ．Ｂｕｒｇｏｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．３０：５０８１−５０８４，１９８９；Ｂ．Ｍ．Ｔａｙｌｏｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎｓ  ４２：２１１−２２４，１９９１に説明されるＵ−７５３０２および類似体；米国特許第５，０１９，５７３号に開示される化合物；例えば、Ｋ．Ｋｉｓｈｉｋａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｖ．Ｐｒｏｓｔａｇｌ．Ｔｈｏｍｂｏｘ．Ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅ  Ｒｅｓ．２１：４０７−４１０，１９９０；Ｍ．Ｋｏｎｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｖ．Ｐｒｏｓｔａｇｌ．Ｔｈｒｏｍｂｏｘ．  Ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅ  Ｒｅｓ．２１：４１１−４１４，１９９０に説明される化合物；例えば、米国特許第４，９６３，５８３号に開示されるＷＦ−１１６０５および類似体；国際公開第ＷＯ９１１８６０１号、国際公開第ＷＯ９１１８８７９号；国際公開第ＷＯ９１１８８８０号、国際公開第ＷＯ９１１８８８３号に開示される化合物；抗炎症性物質、例えば、Ｌ．Ｎｏｒｏｎｈａ−Ｂｌａｂ．ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １０２  （Ｓｕｐｐｌ．）：Ａ  ６７２，１９９２に説明されるＮＰＣ  １６５７０、ＮＰＣ  １７９２３；Ｒ．Ｍ．Ｂｕｒｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８８：３５５−３５９，１９９１；Ｓ．Ｐｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４５：２１２３−２１２７，１９９３に説明されるＮＰＣ  １５６６９および類似体；ペプチド誘導体、例えば、ＡＣＴＨおよび類似体；可溶性ＴＮＦ−受容体；ＴＮＦ−抗体；インターロイキン、他のサイトカイン、Ｔ細胞−タンパク質の可溶性受容体；インターロイキン、他のサイトカイン、およびＴ細胞−タンパク質の受容体に対する抗体が含まれるが、これらに限定されない。免疫調節剤のさらなる例として、メトトレキサート、レフルノミド��シクロホスファミド、シクロスポリンＡ、およびマクロライド抗生物質（例えば、ＦＫ５０６（タクロリムス））、メチルプレドニゾロン（ＭＰ）、コルチコステロイド、ステロイド、ミコフェノール酸モフェチル、ラパマイシン（シロリムス）、ミゾリビン、デオキシスパガリン、ブレキナル、マロノニトリロアミド類（例えば、レフルナミド）、Ｔ細胞受容体調節剤、およびサイトカイン受容体調節剤が挙げられるが、これらに限定されない。Ｔ細胞受容体調節剤およびサイトカイン受容体調節剤の分類については、第３．１項を参照されたい。Ｔ細胞受容体調節剤の例として、抗Ｔ細胞受容体抗体（例えば、抗ＣＤ４モノクローナル抗体、抗ＣＤ３モノクローナル抗体、抗ＣＤ８モノクローナル抗体、抗ＣＤ４０リガンドモノクローナル抗体、抗ＣＤ２モノクローナル抗体）およびＣＴＬＡ４−免疫グロブリンが挙げられるが、これらに限定されない。サイトカイン受容体調節剤の例として、可溶性サイトカイン受容体（例えばＴＮＦ−α受容体またはそのフラグメントの細胞外領域、ＩＬ−１β受容体またはそのフラグメントの細胞外領域、およびＩＬ−６受容体またはそのフラグメントの細胞外領域）、サイトカインまたはそのフラグメント（例えば、インターロイキン（ＩＬ）−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−ＩＯ、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＴＮＦ−α、インターフェロン（ＩＦＮ）−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ、およびＧＭ−ＣＳＦ）、抗サイトカイン受容体抗体（例えば、抗ＩＬ−２受容体抗体、抗ＩＬ−４受容体抗体、抗ＩＬ−６受容体抗体、抗ＩＬ−１０受容体抗体、および抗ＩＬ−１２受容体抗体）、抗サイトカイン抗体（例えば、抗ＩＦＮ抗体、抗ＴＮＦ−α抗体、抗ＩＬ−１β抗体、抗ＩＬ−６抗体、および抗ＩＬ−１２抗体）が挙げられるが、これらに限定されない。米国特許出願第１１／４５４５５９号（２００６年６月１６日出願）に列挙される薬剤。好適な免疫調節薬物は、多発性骨髄腫、血液、血漿、または骨関連の癌の処置に有効であるものである。好適な実施形態では、免疫調節剤は、サリドマイド（Ｔｈａｌｏｍｉｄ）およびレナリドマイド（Ｒｅｖｌｉｍｉｄ）から選択される。
【００６１】
血管新生阻害剤
［５８］  血管新生阻害剤には、米国特許出願第１１／６１２７４４号（２００６年１２月１９日出願）または第１０／４４３２５４号（２００３年５月２２日出願）にさらに詳述される受容体チロシンキナーゼ阻害剤（ＲＴＫｉ）；血管新生抑制コルチゼン；ＭＭＰ阻害剤；インテグリン阻害剤；ＰＤＧＦ拮抗薬；抗増殖剤；ＨＩＦ−１阻害剤；線維芽細胞成長因子阻害剤；上皮成長因子阻害剤；ＴＩＭＰ阻害剤；インスリン様成長因子阻害剤；ＴＮＦ阻害剤；アンチセンスオリゴヌクレオチド；抗ＶＥＧＦ抗体、ＶＥＧＦトラップ、ＮＳＡＩＤ、ステロイド、ＳｉＲＮＡ等、および前述の薬剤のいずれかのプロドラックが含まれるが、これらに限定されない。本発明の組成物および方法に有用である他の薬剤には、抗ＶＥＧＦ抗体（すなわち、ベバシズマブまたはラニビズマブ）；ＶＥＧＦトラップ；ｓｉＲＮＡ分子、またはそれらの混合物であって、チロシンキナーゼ受容体のうちの少なくとも２つを標的とするもの；グルココルチコイド（すなわち、デキサメタゾン、フルオロメトロン、メドリゾン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、リアムシノロンアセトニド、プレドニゾン、プレドニゾロン、ヒドロコルチゾン、リメキソロン、および医薬的に許容可能なそれらの塩、プレドニカルベート、デフラザコート、ハロメタゾン、チキソコルトール、プレドニリデン（２１−ジエチルアミノアセタート）、プレドニバル、パラメタゾン、メチルプレドニゾロン、メプレドニゾン、マジプレドン、イソフルプレドン、ハロプレドンアセテート、ルシノニド、ホルモコータル、フルランドレノリド、フルプレドニゾロン、フルプレドニデンアセテート、フルペロロンアセテート、フルオコルトロン、フルオコルチンブチル、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、フルニソリド、フルメタゾン、フルドロコルチゾン、フルクロニド、エノキソロン、ジフルプレドナート、ジフルコルトロン、２酢酸ジフロラゾン、デスオキシメタゾン（デスオキシメタゾン）、デソニド、デスシノロン、コルチバゾール、コルチコステロン、コーチゾン、クロプレドノール、クロコルトロン、クロベタゾン、クロベタゾール、クロロプレドニゾン、カフェストール、ブデソニド、ベクロメタゾン、アムシノニド、アロプレグナンアセトニド、アルクロメタゾン、２１−アセトキシプレグネノロン、トラロニド、ジフロラゾンジアセテート、デアセチルコルチバゾール、ＲＵ−２６９８８、ブデソニド、およびデアセチルコルチバゾールオキセタノン）；ナフトヒドロキノン抗生物質（すなわち、リファマイシン）；ならびにＮＳＡＩＤ（すなわち、ネパフェナク、アンフェナク）が含まれる。好適な実施形態では、血管新生阻害剤は、サリドマイド（Ｔｈａｌｏｍｉｄ）およびレナリドマイド（Ｒｅｖｌｉｍｉｄ）から選択される。また、レナリドマイドおよびサリドマイド等の血管新生阻害剤の多くは、免疫調節剤としても作用し、つまり、作用の２重機序を有する。
【００６２】
アルキル化剤
［５９］  アルキル化剤またはＤＮＡアルキル化剤は、本明細書において使用する際、ＤＮＡに損傷を与えることによって機能する。ＤＮＡ損傷は、任意の以下の機序のうちのいずれか１つによって達成され得る。第１の機序では、アルキル化剤は、アルキル基をＤＮＡ塩基に付着させる。この改変により、ＤＮＡは、アルキル化塩基を置換しようとして、修復酵素によってフラグメント化される。アルキル化剤がＤＮＡ損傷を引き起こす第２の機序は、架橋、つまり、ＤＮＡにおける原子間の結合の形成である。本過程におおいて、２つの塩基は、２つのＤＮＡ結合部位を有するアルキル化剤によってまとめて連結される。架橋連結は、ＤＮＡが合成または転写するために分離することを防止する。アルキル化剤の作用の第３の機序によって、突然変異をもたらすヌクレオチドの誤対合が引き起こされる。
【００６３】
［６０］  ナイトロジェンマスタード；エチレニミン；アルカンスルホン酸塩；トリアゼン；ピペラジン；およびニトロスレアスの６つの群のアルキル化剤が存在する。アルキル化剤の例として、チオテパおよびシクロホスファミド（ＣＹＴＯＸＡＮＴＭ）；ブスルファン、インプロスルファン、およびピポスルファン等のスルホン酸アルキル；ベンゾドーパ、カルボコン、カルムスチン、メツレドーパ、およびウレドーパ等のアジリジン；アルトレタミ、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホラミド、およびトトリメチローロメラミンを含むエチレンイミンおよびメチラメラミン；アセトゲニン（特に、ブラタシンおよびブラタシノン）；カンプトテシン（合成類似体トポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシン、およびビゼレシンの合成類似体を含む）；クリプトフィシン（特に、クリプトフィシン１およびクリプトフィシン８）が挙げられる。好適なアルキル化剤は、メルファランおよびシクロホスファミドから選択される。
【００６４】
コルチコステロイド
［６１］  コルチコステロイドは、コルチゾール、つまり副腎皮質（副腎の外層）において自然に生成されるホルモンに密接に関連する薬物である。コルチコステロイド薬物には、ベタメタゾン（Ｃｅｌｅｓｔｏｎｅ）、ブデソニド（Ｅｎｔｏｃｏｒｔ  ＥＣ）、コーチゾン（Ｃｏｒｔｏｎｅ）、デキサメタゾン（Ｄｅｃａｄｒｏｎ）、ヒドロコルチゾン（Ｃｏｒｔｅｆ）、メチルプレドニゾロン（Ｍｅｄｒｏｌ）、プレドニゾロン（Ｐｒｅｌｏｎｅ）、プレドニゾン（Ｄｅｌｔａｓｏｎｅ）、およびトリアムシノロン（Ｋｅｎａｃｏｒｔ、Ｋｅｎａｌｏｇ）が含まれる。好適なコルチコステロイドは、デキサメタゾン（デキサメタゾンリン酸ナトリウムおよびデキサメタゾンアセレート等を含むがこれらに限定されない誘導体を含む）である。コルチコステロイドは、経口投与、静脈注射または筋肉注射、皮膚への局部的塗布、直接注射（例えば、炎症関節へ）することができる。コルチコステロイドは、他の薬物と併用して使用することができ、短期使用および長期使用に処方される（例えば、パルス用量による投与、短時間で投与される用量、設定間隔での繰り返し）。コルチコステロイドの推奨用量は、例えば、０．５ｍｇ／日から１００ｍｇ／日の範囲であってもよく、例えば、デキサメタゾンは、最初の４治療周期について、各２８日周期の１日目から４日目、９日目から１２日目、および１７日目から２０日目等の同じ日または異なる日に投与するために、０．５ｍｇ／日から１００ｍｇ／日の間の範囲、より好ましくは、１０ｍｇ／日から８０ｍｇ／日の間の範囲、さらにより好ましくは、１５ｍｇ／日から７０ｍｇ／日の範囲、または最も好ましくは、２０ｍｇ／日から６０ｍｇ／日の範囲、次いで、２８日毎の１日目から４日目に経口により４０ｍｇ／日で推奨され得る。投与は、臨床所見および検査所見に基づいて、継続または修正することができる。例えば、用量は、最初に極めて多く、次いで、徐々に少なくなるか、もしくはその反対であり、または、推奨されるよりも多いもしくは少ない用量で開始してもよく、処置対象の哺乳類（例えば、ヒト）の体重に依存してもよい。
【００６５】
［６２］  薬物複合体は、生化学的方法によって調製され得る。薬物またはプロドラックを抗体に連結するために、連結基を使用する。適切な連結基は、本技術分野において周知であり、ジスルフィド基、酸不安定基、光解離性基、ペプチターゼ解離性基、チオエーテル基、およびエステラーゼ解離性基を含む。好適な連結基は、ジスルフィド基およびチオエーテル基である。例えば、複合体は、適切に修飾された抗体と薬物またはプロドラックとの間のジスルフィド交換反応を使用して、またはチオール含有薬剤と、マレイミド基を含有するように修飾された抗体との反応によって、構築され得る。代替として、薬物は、マレイミド基を含有し、抗体は、チオール部分を含有し得る。複合体の調製のための方法は、当技術分野において説明されている（米国特許第５，２０８，０３０号；第５，４１６，０６４号；第６，３３３，４１０号；第６，４４１，１６３号；第６，７１６，８２１号；第６，９１３，７４８号；第７，２７６，４９７号、および米国出願第２００５／０１６９９３３号参照）。また、薬物分子は、血清アルブミン等の中間担体分子を介して、細胞結合剤にも連結され得る。
【００６６】
［６３］  本発明によると、細胞結合剤は、２官能性架橋試薬を細胞結合剤と反応させることによって修飾され、これによって、リンカー分子の細胞結合剤への共有結合がもたらされる。本明細書において使用する際、「２官能性架橋試薬」は、細胞結合剤を、本明細書に説明する薬物等の薬物に共有連結する任意の化学的部分である。本発明の好適な実施形態では、連結部分の一部分は、薬物によって提供される。この点において、薬物は、細胞結合剤を薬物に結合するのに使用される、より大きいリンカー分子の一部である連結部分を含む。例えば、メイタンシノイドＤＭ１またはＤＭ４を形成するために、メイタンシンのＣ３位におけるエステル測鎖は、米国特許第５，２０８，０２０号；第６，３３３，４１０号；第７，２７６，４９７号に説明するように、遊離スルフヒドリル基（ＳＨ）を有するように修飾される。メイタンシンのこのチオール化された形式は、修飾された細胞結合剤と反応して複合体を形成することができる。ゆえに、最終のリンカーは、２つの成分から組み立てられ、そのうちの１つは、架橋試薬によって提供され、他方は、ＤＭ１またはＤＭ４からの側鎖によって提供される。
【００６７】
［６４］  リンカー試薬が治療、例えば、細胞毒性の保持、ならびに薬物および細胞結合剤のそれぞれの標的特徴用に提供する限り、任意の適切な２官能性架橋試薬を本発明に関連して使用することができる。好ましくは、リンカー分子は、薬物および細胞結合剤が相互に化学的に連結（例えば、共有連結）されるように、化学結合によって薬物を細胞結合剤に結合する（上述のように）。好ましくは、連結試薬は、開裂可能リンカーである。より好ましくは、リンカーは、温和な条件下で、すなわち、薬物の活性が影響されない細胞内における条件下で開裂される。適切な開裂可能リンカーの例として、ジスルフィドリンカー、酸不安定リンカー、光解離性リンカー、ペプチターゼ解離性リンカー、およびエステラーゼ解離性リンカーが挙げられる。ジスルフィド含有リンカーは、生理学的条件下で発生し得るジスルフィド交換により開裂可能なリンカーである。酸不安定リンカーは、酸性ｐＨにおいて開裂可能なリンカーである。例えば、エンドソームおよびリソソーム等の一定の細胞内区画は、酸性ｐＨ（ｐＨ４〜５）を有し、酸不安定リンカーの開裂に適切な条件を提供する。光解離性リンカーは、光にアクセス可能な体表および多くの体腔において有用である。さらに、赤外光は、組織を貫通することができる。ペプチターゼ解離性リンカーは、細胞内部または外部の一定のペプチドを開裂するために使用され得る（例えば、Ｔｒｏｕｅｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７９：６２６−６２９（１９８２）、およびＵｍｅｍｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，４３：６７７−６８４（１９８９））。
【００６８】
［６５］好ましくは、薬物は、ジスルフィド結合またはチオエーテル結合を介して細胞結合剤に連結される。リンカー分子は、細胞結合剤と反応し得る反応化学基を含む。細胞結合剤との反応に好適な反応化学基は、Ｎ−サクシニミジルエステルおよびＮ−スルホスクシンイミジルエステルである。加えて、リンカー分子は、反応化学基、好ましくは、薬物と反応してジスルフィド結合を形成し得るジチオピリジル基を含む。特に好適なリンカー分子には、例えば、Ｎ−サクシニミジル３−（２−ピリジルジチオ）プロピオン酸塩（ＳＰＤＰ）（例えば、Ｃａｒｌｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｊ．，１７３：７２３−７３７（１９７８）参照）、Ｎ−サクシニミジル４−（２−ピリジルジチオ）ブタノエート（ＳＰＤＢ）（例えば、米国特許第４，５６３，３０４号参照）、Ｎ−サクシニミジル４−（２−ピリジルジチオ）ペンタノエート（ＳＰＰ）（例えば、ＣＡＳ登録番号３４１４９８−０８−６参照）、および参照によりその全体が本明細書に組み込まれる米国特許第６，９１３，７４８号に説明される他の反応架橋剤が含まれる。
【００６９】
［６６］  開裂可能リンカーは、好ましくは、本発明の方法に使用されるが、非開裂可能リンカーを使用して、上述の複合体を生成することもできる。非開裂可能リンカーは、メイタンシノイド、ビンカアルカロイド、ドラスタチン、オーリスタチン、またはクリプトフィシン等の薬物を細胞結合剤に安定共有結合して連結することができる任意の化学的部分である。したがって、非開裂可能リンカーは、薬物または細胞結合剤が活性を保持する条件において、酸誘導開裂、光誘導開裂、ペプチターゼ誘導開裂、エステラーゼ誘導開裂、およびジスルフィド結合開裂に実質的に抵抗性を有する。
【００７０】
［６７］  薬物と細胞結合剤との間の非開裂可能リンカーを形成する適切な架橋試薬は、当技術分野において周知である。非開裂可能リンカーの例として、細胞結合剤と反応するためのＮ−サクシニミジルエステルまたはＮ−スルホサクシニミジルエステル部分、ならびに薬物と反応するためのマレイミドベースまたはハロアセチルベースの部分を有するリンカーを含む。マレイミドベースの部分を含む架橋試薬には、Ｎ−サクシニミジル４−（マレイミドメチル）シクロヘキサンカルボン酸メチル（ＳＭＣＣ）、ＳＭＣＣ（ＬＣ−ＳＭＣＣ）の「長鎖」類似体であるＮ−サクシニミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）−シクロヘキサン−１−カルボキシ−（６−カプロン酸アミド）、κ−マレイミドウンデカン酸Ｎ−サクシニミジルエステル（ＫＭＵＡ）、γ−マレイミド酪酸Ｎ−サクシニミジルエステル（ＧＭＢＳ）、ε−マレイミドカプロン酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＥＭＣＳ）、ｍ−マレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＭＢＳ）、Ｎ−（α−マレイミドアセトキシ）−スクシンイミドエステル（ＡＭＡＳ）、サクシニミジル−６−（β−マレイミドプロピオンアミド）ヘキサン酸塩（ＳＭＰＨ）、Ｎ−サクシニミジル４−（ｐ−マレイミドフェニル）−酪酸塩（ＳＭＰＢ）、およびＮ−（ｐ−マレイミドフェニル）イソシアン酸塩（ＰＭＰＩ）が含まれる。ハロアセチルベースの部分を含む架橋試薬には、Ｎ−サクシニミジル−４−（ヨードアセチル）−アミノ安息香酸塩（ＳＩＡＢ）、Ｎ−サクシニミジルヨード酢酸（ＳＩＡ）、Ｎ−サクシニミジルブロモ酢酸（ＳＢＡ）、およびＮ−サクシニミジル３−（ブロモアセトアミド）プロピオン酸塩（ＳＢＡＰ）が含まれる。
【００７１】
［６８］  また、非開裂可能リンカーを形成する硫黄原子を欠く他の架橋試薬も、本発明の方法に使用することができる。このようなリンカーは、ジカルボキシ酸ベースの部分由来であることができる。適切なジカルボキシ酸ベースの部分には、一般式（ＩＸ）：
【００７２】
【化８】
2011524421.tif 000009
【００７３】
のα、ω−ジカルボン酸が含まれるが、これらに限定されない。
［６９］  式中、Ｘは、２から２０個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキル、アルケニル、またはアルキニル基である。Ｙは、３から１０個の炭素原子を有するシクロアルキルまたはシクロアルケニル基である。Ｚは、６から１０個の炭素原子を有する置換もしくは非置換芳香族基であるか、または置換もしくは非置換複素環基であり、この場合、ヘテロ原子は、Ｎ、Ｏ、またはＳから選択され、ｌ、ｍ、およびｎの各々は、ｌ、ｍ、およびｎが全て同時にゼロでないと仮定すると、０または１である。
【００７４】
［７０］  本明細書に開示される非開裂可能リンカーの多くは、米国特許出願第１０／９６０，６０２号に詳述されている。本発明において使用され得る他のリンカーは、荷電リンカーまたは親水性リンカーを含み、米国特許出願第１２／４３３，６０４号および第１２／４３３，６６８号のそれぞれにおいて説明される。
【００７５】
［７１］  代替として、米国特許第６，４４１，１６３  Ｂ１号に開示されるように、薬物は、まず、細胞結合剤との反応に適切な反応エステルを導入するように修飾され得る。活性化リンカー部分を含有するこれらのメイタンシノイドの細胞結合剤との反応によって、開裂可能または非開裂可能細胞結合剤メイタンシノイド複合体を生成する別の方法が提供される。
【００７６】
［７２］  本発明の免疫複合体および化学療法剤は、例えば、肺、血液、血漿、乳房、結腸、前立腺、腎臓、膵臓、脳、骨、卵巣、精巣、およびリンパ系器官の癌；全身性エリテマトーデス、リウマチ性関節炎、および多発性硬化症等の自己免疫疾患；腎移植拒絶反応、肝移植拒絶反応、肺移植拒絶反応、心移植拒絶反応、および骨髄移植拒絶反応等の移植片拒絶反応；移植片対宿主病；ＣＭＶ感染症、ＨＩＶ感染症、およびＡＩＤＳ等のウイルス感染症；ならびに、ランブル鞭毛虫症、アメーバ症、住血吸虫症、およびその同等物等の寄生体感染症等を含む、患者を処置するために、および／または選択された細胞集団の成長を調節するために、体外、生体内、および／または生体外で投与することができる。好ましくは、本発明の免疫複合体および化学療法剤は、例えば、血液、血漿、肺、乳房、結腸、前立腺、腎臓、膵臓、脳、骨、卵巣、精巣、およびリンパ系器官の癌を含む、患者における癌を処置するために、および／または癌細胞の成長を調節するために、体外、生体内、および／または生体外で投与することができ；好ましくは、癌細胞は、乳癌細胞、前立腺癌細胞、卵巣癌細胞、結腸直腸癌細胞、多発性骨髄腫細胞、卵巣癌細胞、神経芽腫細胞、神経内分泌癌細胞、胃癌細胞、扁平上皮癌細胞、小細胞肺癌細胞、または精巣癌細胞、あるいはそれらの組み合わせである。
【００７７】
［７３］  「選択された細胞集団の成長を調節すること」は、より多くの細胞を生成する為の分裂による、選択された多発性骨髄腫細胞集団（例えば、ＭＯＬＰ−８細胞、ＯＰＭ２細胞、Ｈ９２９細胞、およびその同等物）の増殖を阻害すること；例えば、未処置細胞と比較して、細胞分裂の増加率を低下させること；選択された細胞集団を死滅させること；および／または、選択された細胞集団（癌細胞等）の転移を防止することを含む。選択された細胞集団の成長は、体外、生体内、または生体外において調節することができる。
【００７８】
［７４］  本発明の方法では、免疫複合体および化学療法剤は、体外、生体内、または生体外において別々にまたは同じ組成物の成分として投与することができる。混合投与は、別々の製剤または単一の医薬製剤を使用する同時投与と、いずれかの順番での連続投与とを含み、この場合、好ましくは、両方（または全ての）活性薬剤が同時にその生物学的活性を及ぼす時間が存在する。好ましくは、このような混合治療により、相乗治療効果がもたらされる。投与され得る抗癌剤には、コルチコステロイドデキサメタゾンを併用する、メルファラン等のＤＮＡアルキル化剤；ボルテゾミブ（Ｖｅｌｃａｄｅ）等のプロテアソーム阻害剤；ならびにサリドマイドおよびレナリドマイド（Ｒｅｖｌｉｍｉｄ）等の免疫調節剤または血管新生阻害剤が含まれる。したがって、例えば、抗体−メイタンシノイド複合体は、上記に列挙する化学療法剤のうちの１つだけ、または上記に列挙する２つ以上の化学療法剤の組み合わせと組み合わせられ得る。例えば、抗体−メイタンシノイド複合体は、添加デキサメタゾンを含んで、または含まずに、ボルテゾミブおよびレナリドマイドまたはサリドマイドと組み合わせられ得る。同様に、抗体−メイタンシノイド複合体は、添加デキサメタゾンを含んで、または含まずに、メルファランおよびボルテゾミブまたはレナリドマイドと組み合わせられ得る。各薬剤の投与順および用量は、個々の薬剤について認可された投与スケジュールを使用して当業者により容易に判断される（例えば、Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ，（ＰＤＲ）２００６は、サリドマイド（ｐ９７９〜９８３）、Ｖｅｌｃａｄｅ（ｐ  ２１０２〜２１０６）、およびメルファラン（ｐ９７６〜９７９）の好適な処置用量および投与スケジュールについて開示するため、参照された）。
【００７９】
［７５］  免疫複合体および化学療法剤は、周知である適切な医薬的に許容可能な担体、希釈剤、および／または賦形剤とともに使用することができ、かつ当業者は臨床状況を根拠に判断することができる。適切な担体、希釈剤、および／または賦形剤の例として、（１）ダルベッコのリン酸緩衝生理食塩水、ｐＨ約６．５、これは約１ｍｇ／ｍｌ〜２５ｍｇ／ｍｌのヒト血清アルブミンを含有、（２）０．９％生理食塩水（０．９％ｗ／ｖ  ＮａＣｌ）、および（３）５％（ｗ／ｖ）デキストロースを含む。
【００８０】
［７６］  本明細書に説明する化合物および組成物は、適切な形式、好ましくは非経口投与、より好ましくは静脈投与することができる。非経口投与では、化合物または組成物は、水性または非水性の滅菌溶液、懸濁剤、または乳剤であることができる。プロピレングリコール、植物油、およびオレイン酸エチル等の注射可能な有機エステルを、溶剤またはビヒクルとして使用することができる。また、組成物は、アジュバント、乳化剤、または分散剤を含有することもできる。
【００８１】
［７７］  また、組成物は、滅菌水または他の注射可能な滅菌媒質中に溶解または分散され得る滅菌固形組成物の形状であることもできる。
［７８］  本明細書に説明する化学療法剤および免疫複合体の「治療的に有効な量」は、選択された細胞集団の増殖の阻害および／または患者の疾患の治療のための投与計画を言及し、かつこれは、患者の年齢、体重、性別、食事、および健康状態、疾患の重症度、投与経路、ならびに使用する特定の化合物の活性、有効性、薬物動態学、および毒性プロファイル等の薬学的考察を含む多種多様の要因に従って選択される。また、「治療有効量」は、Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  ２００４等の標準的な医学書を参照して決定することができる。患者は、好ましくは動物であり、より好ましくは哺乳類であり、最も好ましくはヒトである。患者は、男性または女性であり、かつ幼児、小児、または成人であることができる。
【００８２】
［７９］  適切な免疫複合体投与プロトコルの例として、以下のものが挙げられる。免疫複合体は、約５日間のそれぞれの日の静脈内ボーラスとして、または約５日間の連続注入としてのいずれかで、約５日間毎日投与することができる。
【００８３】
［８０］  代替として、これらは、６週間以上の間、週１回投与することができる。別の代替として、これらは、２週間または３週間毎に１回投与することができる。ボーラス用量は、約５ｍｌから約１０ｍｌのヒト血清アルブミンを添加可能な約５０ｍｌから約４００ｍｌの通常の生理食塩水中に入れて投与される。連続注入は、約２５ｍｌから約５０ｍｌのヒト血清アルブミンを添加可能な約２５０ｍｌから約５００ｍｌの通常の生理食塩水中に入れて、２４時間毎に投与される。投与量は、静脈内に１人につき約１０ｐｇから約１０００ｍｇ／ｋｇ（約１００ｎｇから約１０ｍｇ／ｋｇの範囲）である。
【００８４】
［８１］  処置後約１週間から約４週間で、患者は２回目の処置を受けることができる。投与経路、賦形剤、希釈剤、投与量、および時間に関する具体的な臨床プロトコルは、臨床状況を根拠に当業者によって決定することができる。
【００８５】
［８２］  また、本発明は、１つ以上の免疫複合体および１つ以上の化学療法剤を含む、本発明の医薬化合物および／または組成物の１つ以上の成分が充填された１つ以上の容器を備える、医薬キットも提供する。また、このようなキットは、例えば、他の化合物および／または組成物、化合物および／または組成物を投与するためのデバイス、ならびに医薬品または生物学的製品の製造、使用、または販売を規制している政府当局により指定された様式の添付文書も含むことができる。
【００８６】
［８３］  癌治療およびその投与量、投与経路、および推奨使用は、当技術分野において既知であり、Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ（ＰＤＲ）等の文献に説明されている。ＰＤＲは、種々の癌の処置に使用されている薬剤の投与量を開示する。治療的に有効であるこれらの上述の化学療法剤の投与計画および投与量は、処置される特定の癌、疾患の程度、および当技術分野の医師に精通する他の要因に依存し、医師によって決定することができる。ＰＤＲの内容は、参照によりその全体が本明細書に明示的に組み込まれる。Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ（ＰＤＲ）の２００６版は、サリドマイド（ｐ  ９７９〜９８３）、Ｖｅｌｃａｄｅ（ｐ２１０２〜２１０６）、およびメルファラン（ｐ９７６〜９７９）の作用機序ならびに好適な処置用量および投与スケジュールについて開示する。ＰＤＲの内容は、参照によりその全体が本明細書に明示的に組み込まれる。当業者は、本発明の教示に従って使用され得る化学療法剤および複合体の投与計画および投与量を判断するために、以下のパラメータのうちの１つ以上を使用して、ＰＤＲを見直すことができる。
１．  総合索引
ａ）製造者毎
ｂ）製品（会社または商標薬物名毎）
ｃ）カテゴリ索引（例えば、「プロテアソーム阻害剤」、「ＤＮＡアルキル化剤」、「メルファラン」等）
ｄ）ジェネリック／化学的索引（非商標の一般的な薬物名）
２．  薬物のカラー画像
３．  ＦＤＡラベルと一致する製品情報
ａ）化学的情報
ｂ）機能／作用
ｃ）適応および禁忌
ｄ）試験研究、副作用、警告
類似体および誘導体
［８４］  細胞毒性薬または化学療法剤等の治療剤に関する当業者は、本明細書に説明するこのような薬剤の各々を、結果として生じる化合物が依然として出発化合物の特異性および／または活性を保持するように、修正してもよいことを容易に理解する。また、当業者は、これらの化合物の多くを、本明細書に説明する治療剤の代わり使用してもよいことも理解する。したがって、本明細書の治療剤は、本明細書に説明する化合物の類似体および誘導体を含む。
【００８７】
［８５］  本明細書および以下の実施例において引用する全ての文献は、参照によりその全体が明示的に組み込まれる。
【実施例】
【００８８】
［８６］  次に、本発明について、非制限的な例を参照して説明する。別途記載のない限り、全ての割合および比率は、体積による。
［８７］  ヒト多発性骨髄腫腫瘍細胞株をマウスに接種し、処置前にマウスを確立可能にした（約１００ｍｍ３の平均腫瘍サイズ）。複合体投与は、ＤＭ１濃度に基づいて説明される。有効性は、対照に対する処置対象の腫瘍成長の％（％Ｔ／Ｃ）と、腫瘍倍増時間および処置による腫瘍成長遅延から決定される殺細胞数の対数（ＬＣＫ）との両方として報告される。４２％未満のパーセントのＴ／Ｃ値および／または０．５以上のＬＣＫ値は、活性であると考えられ、１０％未満のパーセントのＴ／Ｃ値は、高度に活性であると考えられる（Ｂｉｓｓｅｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ，５１：４８４５−４８５２（１９９１）。
【００８９】
実施例１．  ｈｕＮ９０１−ＤＭｌおよびメルファランによるヒト多発性骨髄腫（ＭＯＬＰ−８）異種移植片の組み合わせ療法の抗腫瘍効果
［８８］  多発性骨髄腫の確立した皮下異種移植片モデルにおいて、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１およびメルファランの組み合わせの抗腫瘍効果について評価した。Ｂａｌｂ／ｃヌードマウス（２０匹）に、ＭＯＬＰ−８ヒト多発性骨髄腫細胞（１×１０７細胞／匹）を接種し、マウスの右肩に皮下注射した。腫瘍が約１５０ｍｍ３のサイズに到達した時に（腫瘍細胞接種後２１日目）、マウスを４つの群にランダムに分割した（群毎に５匹）。第１の群のマウスを、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１によって処置し（腫瘍細胞接種後２２日目に、２００μｇ／ｋｇのＤＭ１用量の単回注射）、静脈内投与した。第２の群の動物を、メルファランによって処置し（腫瘍細胞接種後２３日目に、１２ｍｇ／ｋｇの単回注射）、腹腔内投与した。第３の群のマウスは、群１および群２と同一の用量、スケジュール、および投与経路を使用して、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１およびメルファランの組み合わせを受けた。対照群の動物は、群１および群２と同一のスケジュールおよび投与経路を使用して、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）を受けた。１週間に２回腫瘍サイズを測定することによって、腫瘍成長を監視した。長さ×幅×高さ×１／２の公式で腫瘍サイズを計算した。
【００９０】
［８９］  腫瘍成長データを図１Ａに示す。対照群の動物では、腫瘍は、約３３日で１０００ｍｍ３に成長した。単独のｈｕＮ９０１−ＤＭ１またはメルファランによる処置により、それぞれ１１日および１４日の腫瘍成長遅延がもたらされた。一方、メルファランおよびｈｕＮ９０１−ＤＭ１の組み合わせによる処置により、３５日の腫瘍成長遅延がもたらされ、ＮＣＩ標準にしたがって高度に活性であった（Ｔ／Ｃ＝４％、表１（図１Ｂ）参照）。
【００９１】
［９０］  組み合わせ処置の殺細胞数の対数（ＬＣＫ）は２．１であり、これは、個々の薬物のＬＣＫ値の合計を上回り、相乗活性が示された。
実施例２．  ｈｕＮ９０１−ＤＭ１およびサリドマイドによるヒト多発性骨髄腫（ＭＯＬＰ−８）異種移植片の組み合わせ療法の抗腫瘍効果
［９１］  多発性骨髄腫の確立した皮下異種移植片モデルにおいて、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１およびサリドマイドの組み合わせの抗腫瘍効果について評価した。ＳＣＩＤマウス（３６匹）に、ＭＯＬＰ−８ヒト多発性骨髄腫細胞（１×１０７細胞／匹）を接種し、マウスの右肩に皮下注射した。腫瘍が約１５０ｍｍ３のサイズに到達した時に（腫瘍細胞接種後１５日目）、マウスを６つの群にランダムに分割した（群毎に６匹）。２つの群のマウスを、それぞれ１００μｇ／ｋｇおよび２５０μｇ／ｋｇのＤＭ１用量で、単一薬剤のｈｕＮ９０１−ＤＭ１によって処置し（腫瘍細胞接種後１６日目および２３日目に、ｌｑｗ×２）、静脈内投与した。第３の群のマウスを、２００ｍｇ／ｋｇの用量で、単一薬剤のサリドマイドによって処置し（腫瘍細胞接種後１６日目、１８〜２２日目、および２５〜２９日目に、合計１１回の用量）、ＰＢＳ中の１％のカルボキシメチルセルロースの懸濁液として腹腔内投与した。２つの群を、単一薬剤処置群に使用した同一の用量、スケジュール、および投与経路を使用して、ｈｕＮ９０１−ＤＭｌ（１００μｇ／ｋｇまたは２５０μｇ／ｋｇ）にサリドマイドを加えた組み合わせによって処置した。対照群の動物は、静脈内投与でＰＢＳを受けた（ｌｑｗ×２、腫瘍細胞接種後１６日目および２３日目）。１週間に２回腫瘍サイズを測定することによって、腫瘍成長を監視した。長さ×幅×高さ×１／２の公式で腫瘍サイズを計算した。
【００９２】
［９２］  腫瘍成長データを図２Ａに示す。ｈｕＮ９０１−ＤＭ１にサリドマイドを加えた組み合わせは、ＭＯＬＰ−８異種移植片において活性であり、相乗活性に対して相加的であった（表２（図２Ｂ））。単一薬剤として不活性であった用量でのｈｕＮ９０１−ＤＭ１およびサリドマイドの組み合わせ（１００μｇ／ｋｇのｈｕＮ９０１−ＤＭ１、２００ｍｇ／ｋｇのサリドマイド）は、ＮＣＩ標準に従って活性であった（Ｔ／Ｃ＝２６％；表２（図２Ｂ））．
［９３］  ｈｕＮ９０１−ＤＭ１（２５０μｇ／ｋｇ）にサリドマイド（２００ｍｇ／ｋｇ）を加えた組み合わせは、高度に活性な組み合わせをもたらし（Ｔ／Ｃ＝７％）、殺細胞数の対数（ＬＣＫ）は１．０であり、これは、個々の薬物用のＬＣＫ値の合計を上回る。
【００９３】
実施例３．  ｈｕＮ９０１−ＤＭ１およびボルテゾミブによるヒト多発性骨髄腫（ＯＰＭ２）異種移植片の組み合わせ療法の抗腫瘍効果
［９４］  多発性骨髄腫の確立した皮下異種移植片モデルにおいて、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１およびボルテゾミブ（Ｖｅｌｃａｄｅ，Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）の組み合わせの抗腫瘍効果について評価した。ＳＣＩＤマウス（３６匹）にＯＰＭ２ヒト多発性骨髄腫細胞（１×１０７細胞／匹）を接種し、マウスの右肩に皮下注射した。腫瘍が約７０ｍｍ３のサイズに到達した時に（腫瘍細胞接種後１２日目）、マウスを６つの群にランダムに分割した（群毎に６匹）。２つの群のマウスを、それぞれ１００μｇ／ｋｇおよび２００μｇ／ｋｇのＤＭ１用量で、単一薬剤のｈｕＮ９０１−ＤＭ１によって処置し（腫瘍細胞接種後１２日目）、静脈内投与した。第３の群のマウスを、１ｍｇ／ｋｇの用量で、単一薬剤のボルテゾミブによって処置し（腫瘍細胞接種後１３日目および１６日目）、静脈内投与した。２つの群を、単一薬剤処置群に使用した同一の用量、スケジュール、および投与経路を使用して、ｈｕＮ９０１−ＤＭｌ（１００μｇ／ｋｇまたは２００μｇ／ｋｇ）にボルテゾミブを加えた組み合わせによって処置した。対照群の動物は、静脈内投与でＰＢＳを受けた（腫瘍細胞接種後１２日目）。１週間に２回腫瘍サイズを測定することによって、腫瘍成長を監視した。長さ×幅×高さ×１／２の公式で腫瘍サイズを計算した。
【００９４】
［９５］  ｈｕＮ９０１−ＤＭ１にボルテゾミブを加えた組み合わせは、ＯＰＭ２異種移植片において高度に活性であり、両方の用量組み合わせについて相乗活性がもたらされた。ｈｕＮ９０１−ＤＭ１単独による処置により、１００μｇ／ｋｇの用量と２００μｇ／ｋｇの用量とのそれぞれについて、９１日目に腫瘍の無いマウスが６匹中１匹および６匹中３匹がもたらされた（表３（図３Ｂ）参照）。この時点で、ボルテゾミブの単一薬剤群に腫瘍の無いマウスは存在しなかった。ｈｕＮ９０１−ＤＭ１にボルテゾミブ（１ｍｇ／ｋｇ）を加えた両方の組み合わせにより、６匹のマウスのうち６匹に完全な腫瘍退縮がもたらされ、腫瘍測定の最終日である９１日目までにマウスの腫瘍は無腫状態であった。腫瘍成長曲線を図３Ａに示す。
【００９５】
［９６］  ｈｕＮ９０１−ＤＭ１にボルテゾミブを加えた組み合わせは、相乗的である高度に活性な組み合わせをもたらした。
実施例４．  ｈｕＮ９０１−ＤＭ１およびボルテゾミブによるヒト多発性骨髄腫（Ｈ９２９）の大きな腫瘍異種移植片の組み合わせ療法の抗腫瘍効果
［９７］  多発性骨髄腫の確立した皮下異種移植片モデルにおいて、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１およびボルテゾミブの組み合わせの抗腫瘍効果について評価した。ＳＣＩＤマウス（５４匹）にＨ９２９ヒト多発性骨髄腫細胞（１×１０７細胞／匹）を接種し、マウスの右肩に皮下注射した。腫瘍が約３００ｍｍ３のサイズに到達した時に（腫瘍細胞接種後３４日目）、マウスを１１つの群にランダムに分割した（群毎に６匹）。２つの群のマウスを、それぞれ５０μｇ／ｋｇおよび１００μｇ／ｋｇのＤＭ１用量で、単一薬剤のｈｕＮ９０１−ＤＭ１によって処置し（腫瘍細胞接種後３４日目）、静脈内投与した。２つの群のマウスを、０．５ｍｇ／ｋｇの低用量および１ｍｇ／ｋｇの高用量で、単一薬剤のボルテゾミブによって処置し（腫瘍細胞接種後３５日目および３８日目）、静脈内投与した。単一薬剤処置群に使用した同一のスケジュールを使用して、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１の各用量に低用量または高用量のボルテゾミブを加えた組み合わせによる、４つの組み合わせ群について評価した。対照群の動物は、静脈内投与でＰＢＳを受けた（腫瘍細胞接種後３４日目）。１週間に２回腫瘍サイズを測定することによって、腫瘍成長を監視した。長さ×幅×高さ×１／２の公式で腫瘍サイズを計算した。
【００９６】
［９８］  Ｈ９２９腫瘍におけるｈｕＮ９０１−ＤＭ１と低用量ボルテゾミブとの組み合わせは、相乗的であった。単一薬剤として不活性であった用量でのｈｕＮ９０１−ＤＭ１およびボルテゾミブの組み合わせ（５０μｇ／ｋｇのｈｕＮ９０１−ＤＭ１、０．５ｍｇ／ｋｇのボルテゾミブ）は、ＮＣＩ標準に従って活性であった（Ｔ／Ｃ＝３８％；表４ａ（図４Ｂ））。また、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１（１００μｇ／ｋｇ）に０．５ｍｇ／ｋｇのボルテゾミブを加えた組み合わせも、活性組み合わせをもたらした（Ｔ／Ｃ＝１７％、１１９日目の研究の終了時に６匹中１匹に腫瘍の無いマウス；図４Ａ参照）．
［９９］  Ｈ９２９腫瘍におけるｈｕＮ９０１−ＤＭ１と高用量ボルテゾミブとの組み合わせも、相乗的であった。高用量ボルテゾミブ（１．０ｍｇ／ｋｇ）は、Ｈ９２９の大きい腫瘍モデルにおける単一薬剤として活性である（Ｔ／Ｃ＝１１％、１１９日目に６匹中１匹に腫瘍の無いマウス；表４ｂ（図４Ｄ）参照）。高用量ボルテゾミブと、５０μｇ／ｋｇおよび１００μｇ／ｋｇによるｈｕＮ９０１−ＤＭ１との組み合わせ処置は、高度に活性であり、それぞれ７％および０％である低いＴ／Ｃ値によって示した；、後者の組み合わせは、１１９日目に６匹中５匹の腫瘍の無いマウスをもたらした（図４Ｃ参照）。ｈｕＮ９０１−ＤＭ１にボルテゾミブを加えた組み合わせにより、相乗的である高度に活性な組み合わせがもたらされた。
【００９７】
実施例５．  ｈｕＮ９０１−ＤＭ１およびレナリドマイドによるヒト多発性骨髄腫（ＯＰＭ２）異種移植片の組み合わせ療法の抗腫瘍効果
［１００］  多発性骨髄腫の確立した皮下異種移植片モデルにおいて、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１およびレナリドマイドの組み合わせの抗腫瘍効果について評価した。ＳＣＩＤマウス（２０匹）にＯＰＭ２ヒト多発性骨髄腫細胞（１×１０７細胞／匹）を接種し、マウスの右肩に皮下注射した。腫瘍が約１３０ｍｍ３のサイズに到達した時に（腫瘍細胞接種後１６日目）、マウスを４つの群にランダムに分割した（群毎に５匹）。１つの群のマウスを、単一薬剤のｈｕＮ９０１−ＤＭ１により処理し（腫瘍細胞接種後１６日目に、２００μｇ／ｋｇ）、静脈内投与した。第２の群のマウスを、単一薬剤のレナリドマイドにより処置し（１００ｍｇ／ｋｇ、腫瘍細胞接種後１６〜２０、２２〜２６日目）、腹腔内注射により１％のカルボキシチルセルロース／ＰＢＳ中の懸濁液として投与した。単一薬剤処置群に使用した同一の用量、スケジュール、および投与経路を使用して、第３の群を、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１にレナリドマイドを加えた組み合わせにより処置した。対照群の動物は、静脈内投与でＰＢＳを受けた（腫瘍細胞接種後１６日目）。１週間に２回腫瘍サイズを測定することによって、腫瘍成長を監視した。長さ×幅×高さ×１／２の公式で腫瘍サイズを計算した。
【００９８】
［１０１］  ｈｕＮ９０１−ＤＭ１（２００μｇ／ｋｇ、１６日目）の単回注射による処置は、ＯＰＭ２多発性骨髄腫異種移植片に対して活性であり（Ｔ／Ｃ＝２６％、ＬＣＫ＝０．９；表５（図５Ｂ）参照）；単一薬剤としてのレナリドマイド（１００ｍｇ／ｋｇ、１６〜２０日目、２３〜２７日目）の活性は、同程度であった（Ｔ／Ｃ＝２８％、ＬＣＫ＝０．９）。ｈｕＮ９０１−ＤＭ１にレナリドマイドを加えた組み合わせは、高度に活性であり（Ｔ／Ｃ＝１．４％、ＬＣＫ＝１．７）、研究の終了時に５匹中１匹の腫瘍の無いマウスがもたらされた；ｈｕＮ９０１−ＤＭ１またはレナリドマイド／デキサメタゾンのいずれかの処置群における腫瘍の無い生存は存在しなかった。この研究の結果により、組み合わせ処置が相乗的であることが示され、単一薬剤としての薬物を上回る活性が示される。腫瘍成長データを表５（図５Ｂおよび図５Ａ）に示す。
【００９９】
実施例６．  ｈｕＮ９０１−ＤＭ１のボルテゾミブとの組み合わせの抗腫瘍効果のスケジュール依存性
［１０２］  多発性骨髄腫の確立した皮下異種移植片モデルにおいて、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１およびボルテゾミブの組み合わせの抗腫瘍効果について評価した。本研究の目的は、組み合わせ療法に最適なスケジュールを決定することにあった。ＳＣＩＤマウス（１８匹）にＯＰＭ２ヒト多発性骨髄腫細胞（１×１０７細胞／匹）を接種し、マウスの右肩に皮下注射した。腫瘍が約７０ｍｍ３のサイズに到達した時に（腫瘍細胞接種後１２日目）、マウスを３つの群にランダムに分割した（群毎に６匹）。まず、第１の群のマウスを、０日目および３日目に１ｍｇ／ｋｇの用量のボルテゾミブにより処置し、その後、３日目に１３ｍｇ／ｋｇの用量のｈｕＮ９０１−ＤＭ１により処置した。代替スケジュールでは、第２の群のマウスを、まず、０日目に１３ｍｇ／ｋｇの用量のｈｕＮ９０１−ＤＭ１により処置し、その３日目後（３日目および６日目）に１ｍｇ／ｋｇの用量のボルテゾミブにより処置した。対照群の動物は、静脈内投与でＰＢＳを受けた（腫瘍細胞接種後１２日目）。１週間に２回腫瘍サイズを測定することによって、腫瘍成長を監視した。長さ×幅×高さ×１／２の公式で腫瘍サイズを計算した。
【０１００】
［１０３］  予想外に、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１にボルテゾミブを加えた組み合わせは、ボルテゾミブを最初に投与した時にだけ、ＯＰＭ２異種移植片において高度に活性であった（図６参照）。したがって、本スケジュールによって、完全な腫瘍の退縮がもたらされ、６匹中５匹のマウスが、１２０日目に腫瘍が無くなった。ボルテゾミブを２回目に投与した場合（すなわち、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１の投与後）、処置により、軽度の腫瘍成長遅延だけがもたらされ、３０日目であっても腫瘍の無い動物は存在しなかった。本データによって、ボルテゾミブおよび免疫複合体の組み合わせ療法において、投与スケジュールが決定的に重要であることが提案される。ボルテゾミブによる前処置が、免疫複合体ｈｕＮ９０１-ＤＭ１による死滅に対して腫瘍細胞を感作し得ることが考えられる。
【０１０１】
実施例７．  ｈｕＮ９０１−ＤＭ１およびレナリドマイドに低用量デキサメタゾンを加えた、ヒト多発性骨髄腫（ＭＯＬＰ−８）異種移植片の３重組み合わせ療法の抗腫瘍効果
［１０４］  多発性骨髄腫の確立した皮下異種移植片モデルにおいて、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１およびレナリドマイドに低用量デキサメタゾンを加えた３重組み合わせの抗腫瘍効果について評価した。ＳＣＩＤマウスにＭＯＬＰ−８ヒト多発性骨髄腫細胞（１．５×１０７細胞／匹）を接種し、マウスの右肩に皮下注射した。腫瘍が約１００ｍｍ３のサイズに到達した時に（腫瘍細胞接種後１３日目）、２４匹のマウスを４つの群にランダムに分割した（群毎に６匹）。処置は、接種後１３日目に開始し、処置の１日目と示された。１つの群のマウスを、単一薬剤のｈｕＮ９０１−ＤＭ１で処置した（１５０μｇ／ｋｇ、１日目および８日目に静脈内投与）。第２の群のマウスを、レナリドマイド／低用量デキサメタゾンの組み合わせで処置した（１００ｍｇ／ｋｇのレナリドマイド、１〜５日目、８〜１２日目に腹腔内注射により１％のカルボキシチルセルロース／ＰＢＳ中の懸濁液として投与；１．５ｍｇ／ｋｇのデキサメタゾン、１日目および８日目に皮下注射により投与）。個々の処置群に使用した同一の用量、スケジュール、および投与経路を使用して、第３の群を、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１にレナリドマイド／デキサメタゾンを加えた３重組み合わせにより処置した。対照群の動物は、静脈内投与でＰＢＳを受けた（１日目および８日目）。１週間に２回腫瘍サイズを測定することによって、腫瘍成長を監視した。長さ×幅×高さ×１／２の公式で腫瘍サイズを計算した。
【０１０２】
［１０５］  ｈｕＮ９０１−ＤＭ１（１５０μｇ／ｋｇ、ｑｗ×２）またはレナリドマイドにデキサメタゾンを加えた処置は、ＭＯＬＰ−８腫瘍に対して同等に活性であった（Ｔ／Ｃ＝３３％、ＬＣＫ＝０．５；表７（図７ｂ）参照）。ｈｕＮ９０１-ＤＭ１／レナリドマイド／デキサメタゾンの３重組み合わせは、高度に活性であり（Ｔ／Ｃ＝０％、ＬＣＫ＝１．４）、マウスの全て（６匹中６匹）に部分退縮が認められ、６匹中４匹のマウスに完全腫瘍退縮が認められ、それに比べ、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１またはレナリドマイド／デキサメタゾンのいずれかの処置群では退縮は認められなかった。腫瘍成長データを表７（図７ｂ）および図７Ａに示す。
【０１０３】
［１０６］  ＭＯＬＰ−８腫瘍を持ったマウスの衛星処置群（群毎に３匹）を、有効性研究と並行して処置して、３日目に殺し（処置の４８時間後）、開裂カスパーゼ−３に対する抗体による免疫組織化学のために腫瘍を採取し、アポトーシスを評価した。ｈｕＮ９０１−ＤＭ１／レナリドマイド／デキサメタゾンの３重組み合わせにより処置したマウスからの腫瘍は、対照に対してカスパーゼ−３染色の著しい増加を示し、単一療法処置群は、基準値または基準値付近でアポトーシスレベルを有した（データを図８Ａに示す）。３重組み合わせによるアポトーシスのこの急増は、腫瘍体積の任意の変化を抗腫瘍活性研究で検出する前に、処置段階早期に明白である。
【０１０４】
［１０７］  これらの研究の結果により、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１／レナリドマイド／デキサメタゾンによる３重組み合わせ処置が、相乗的であることが示され、別々の療法としての薬剤を上回る抗腫瘍活性および腫瘍細胞アポトーシスの著しい増加が示された。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図４Ｄ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８Ｂ】
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【図８Ａ】
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【国際調査報告】
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