(57)【要約】本発明は、グリコシド化合物、かかる化合物を調製する方法、かかる化合物を含む医薬組成物、および同一のものを用いた過剰増殖性疾患の治療のための方法を提供する。一実施形態において、本発明は、本明細書に記載の治療有効量のグリコシド化合物（または同一物を含む医薬組成物）を、癌の治療を必要とする被験者に投与することを含む、癌の治療を必要とする被験者の癌を治療する方法を提供する。別の実施形態において、該グリコシドは、式（Ｉ）からなるものである。
2011530535.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物
【化５５】
2011530535.tif 000058
またはその医薬上許容されるエステル、複合体、水和物、プロドラッグ、溶媒和物、もしくは塩であって、式中、Ｒ１は、
【化５６】
2011530535.tif 000059
からなる群から選択され、
Ｒ２およびＲ３はそれぞれ、水素であるか、あるいは、Ｒ２およびＲ３は、その結合した炭素と一緒になって、炭素−炭素間の二重結合を示し、
Ｒ４は、
【化５７】
2011530535.tif 000060
ならびにそれらのエピマーおよび配座異性体からなる群から選択され、
Ｘは、ＯまたはＮＲ５であり、式中、Ｒ５は、水素、メチル、エチル、またはプロピルである、化合物またはその医薬上許容されるエステル、複合体、水和物、プロドラッグ、溶媒和物、もしくは塩。
【請求項２】
式Ｉの化合物であって、式中、Ｘ＝ＮＭｅである場合、Ｒ１は、
【化５８】
2011530535.tif 000061
であり、
Ｒ２およびＲ３は、その結合した炭素と一緒になって、炭素−炭素間の二重結合を示し、
Ｒ４は、
【化５９】
2011530535.tif 000062
ならびにそれらのエピマーおよび配座異性体からなる群から選択される、化合物。
【請求項３】
請求項１に記載の化合物であって、式中、Ｘ＝Ｏである場合、Ｒ１は、
【化６０】
2011530535.tif 000063
からなる群から選択され、
Ｒ２およびＲ３はそれぞれ、水素であり、Ｒ４は、
【化６１】
2011530535.tif 000064
ならびにそれらのエピマーおよび配座異性体からなる群から選択される。
【請求項４】
請求項３に記載の化合物であって、式中、
Ｒ１は、
【化６２】
2011530535.tif 000065
であり、Ｒ４は、
【化６３】
2011530535.tif 000066
およびそのエピマーおよび配座異性体から選択される。
【請求項５】
請求項３に記載の化合物であって、式中、
Ｒ１は、
【化６４】
2011530535.tif 000067
であり、Ｒ４は、
【化６５】
2011530535.tif 000068
およびそのエピマーおよび配座異性体から選択される。
【請求項６】
請求項１〜５のうちのいずれか１項に記載の化合物および少なくとも１つの医薬上許容される賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項７】
前記少なくとも１つの医薬上許容される賦形剤は、シクロデキストリンである、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
治療を必要とする被験者における過剰増殖性疾患を治療する方法であって、前記被験者に、請求項１〜５のうちのいずれか１項に記載の治療有効量の化合物を投与することを含む、方法。
【請求項９】
治療を必要とする被験者における過剰増殖性疾患を治療する方法であって、前記被験者に対して、請求項６に記載の治療有効量の医薬組成物を投与することを含む、方法。
【請求項１０】
請求項８および９のいずれか１項に記載の方法であって、前記過剰増殖性疾患は、アレルギー性血管炎および肉芽腫症（チャーグ・ストラウス病）、石綿肺症、喘息、萎縮性胃炎、良性前立腺肥大症、水疱性類天疱瘡、セリアック病、慢性気管支炎および慢性閉塞性気道疾患、慢性副鼻腔炎、クローン病、脱髄性ニューロパチー、皮膚筋炎、アトピー性皮膚炎を含む湿疹、耳管疾患、巨細胞性動脈炎、移植片拒絶反応、過敏性肺炎、過敏性血管炎（ヘノッホ・シェーンライン紫斑病）、刺激性皮膚炎、炎症性溶血性貧血、炎症性好中球減少症、炎症性腸疾患、川崎病、多発性硬化症、心筋炎、筋炎、鼻ポリープ、鼻涙管疾患、腫瘍性脈管炎、膵臓炎、尋常性天疱瘡、原発性糸球体腎炎、乾癬、歯周病、多発性嚢胞腎、結節性多発動脈炎、多発性血管炎オーバーラップ症候群、原発性硬化性胆管炎、リウマチ性関節炎、血清病、外科的癒着、狭窄もしくは再狭窄、強膜炎、強皮症、胆管狭窄、（十二指腸、小腸、および結腸の）狭窄、珪肺症および他の形態の塵肺症、１型糖尿病、潰瘍性大腸炎、潰瘍性直腸炎、結合組織病に関連する脈管炎、補体系の先天性欠損に関連する脈管炎、中枢神経系の脈管炎、ならびにウェゲナー肉芽腫症からなる群から選択される。
【請求項１１】
前記過剰増殖性疾患は、乾癬、多発性硬化症、リウマチ性関節炎、再狭窄、および良性前立腺肥大症から選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記過剰増殖性疾患は、癌である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記癌は、結腸直腸癌、非小細胞癌、肺癌、卵巣癌、乳癌、結腸癌、中枢神経系の癌、肝臓癌、および腎臓癌から選択される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
過剰増殖性疾患の治療のための医薬の製造における、請求項１〜５のうちのいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項１５】
前記過剰増殖性疾患は、癌である、請求項１４に記載の使用。
【請求項１６】
前記癌は、結腸直腸癌、非小細胞癌、肺癌、卵巣癌、乳癌、結腸癌、中枢神経系の癌、肝臓癌、肺癌、および腎臓癌から選択される、請求項１５に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
強心配糖体は、遅くとも１９９９年には、潜在的な抗癌剤として認識されており（非特許文献１）、早くも２００１年には、ヒト癌細胞においてそれらの細胞毒性の広範な研究を実行していた（非特許文献２）。強心配糖体の標的(動物細胞の細胞膜内に見出された変力性Ｎａ，Ｋ−ＡＴＰａｓｅ)の阻害の機序にたいする関心から、数多くの研究がなされた（非特許文献３）。強心配糖体のステロイドおよび糖部分の化学修飾を通してさらに強力な、毒性の少ない強心配糖体を見出すことを目的とする、広範な医薬品化学調査も、行われている（非特許文献４、非特許文献５、非特許文献６）。多くの異なる類似体の合成にもかかわらず（非特許文献４、非特許文献７）、これらのいくつかは、ジギトキシンネオグリコシド類似体（非特許文献８）、およびプロシラリジン類似体（非特許文献９）における研究によって例示される、抗癌剤のような特定の強心配糖体の合成を含むが、恐らくは、強心配糖体が、心臓および神経組織への著しい毒性を伴わずに、治療的に癌に対して使用することができないと広く考えられているため、強心配糖体は、現在ほとんど臨床開発されていない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００２】
【非特許文献１】Ｈａｕｘ，Ｍｅｄ  Ｈｙｐｏｔｈｅｓｅｓ．５３：５４３−８，１９９９
【非特許文献２】Ｊｏｈａｎｓｓｏｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇｓ．１２：４７５−８３，２００１
【非特許文献３】Ｍｉｊａｔｏｖｉｃ，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｉｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ａｃｔａ．１７７６：３２−５７，２００７
【非特許文献４】Ｒｅｐｋｅ，Ｋ．Ｒ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｉｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．３０：１３５−２０２，１９９３
【非特許文献５】Ｍｕｄｇｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｉｒｃ  Ｒｅｓ．４３：８４７−５４，１９７８
【非特許文献６】Ｒｅｐｋｅ，Ｋ．Ｒ．Ｈ．，Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｏｄａｙ．２：１１０−１６，１９９７
【非特許文献７】Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ  ａｎｄ  Ｗｏｌｆｌｉｎｇ，Ｃｕｒｒ  Ｏｒｇ  Ｃｈｅｍ．８：１３８１−４０３，２００４
【非特許文献８】Ｌａｎｇｅｎｈａｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｄ  Ｕ  Ｓ  Ａ．１０２：１２３０５−１０，２００５
【非特許文献９】Ｇａｒｄｉｎｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，ＵＳＰＴＯ．Ａｌ：１−６７，２００９
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
一態様において、本発明は、以下の式（Ｉ）および式（ＩＩ）の構造の新規グリコシド化合物を提供する。様々な実施形態において、これらの化合物は、ＣＥＮ０８−１７７、ＣＥＮ０８−１７８、ＣＥＮ０８−１９３、ＣＥＮ０８−２４３、およびＣＥＮ０８−２４４からなる群から選択される。別の態様において、本発明は、本明細書に記載の化合物、特に、式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物を作製する方法を提供する。別の態様において、本発明は、かかる化合物および少なくとも１つ医薬上許容できる賦形剤を含む医薬組成物を提供する。また別の態様において、本発明は、本明細書に記載の治療有効量の化合物または医薬組成物を、それを必要とする被験者に投与することによって、過剰増殖性疾患を治療する方法を提供する。
【０００４】
一実施形態において、本発明は、本明細書に記載の治療有効量のグリコシド化合物（または同一物を含む医薬組成物）を、癌の治療を必要とする被験者に投与することを含む、癌の治療を必要とする被験者の癌を治療する方法を提供する。別の実施形態において、該グリコシドは、以下の式（Ｉ）からなるものである。さらに別の実施形態において、該グリコシド化合物は、以下の式（Ｉ）からなるものである。さらなる実施形態において、該グリコシドは、ＣＥＮ０８−１７７、ＣＥＮ０８−１７８、ＣＥＮ０８−１９３、ＣＥＮ０８−２４３、ＣＥＮ０８−２４４、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される。
【０００５】
さらなる実施形態において、本発明は、式（Ｉ）および式（ＩＩ）のグリコシドを調製するための方法を提供する。一実施形態において、該グリコシドは、ＣＥＮ０８−１７７、ＣＥＮ０８−１７８、ＣＥＮ０８−１９３、ＣＥＮ０８−２４３、ＣＥＮ０８−２４４からなる群から選択される。
【０００６】
本発明のこれらのおよび他の実施形態は、本明細書の以下にさらに詳細に記載されている。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】現在、臨床試験中の強心配糖体の構造を含む、様々な強心配糖体構造を示す。
【図２】ジギトキシンまたはジゴキシンから作製されたネオグリコシド類似体の合成および構造を示す。
【図３】ジギトキシンから作製されたＯ−グリコシド類似体の合成および構造を示す。
【図４】プロシラリジン類似体から作製されたネオグリコシドおよびＯ−グリコシド類似体の合成および構造を示す。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
本発明は、様々な形態において具体化することができる一方、いくつかの実施形態の下記の説明は、本発明を例示的に示したものであって、記載の特定の実施形態に対して本発明を制限するものではない。表題は、便宜のためにのみ与えられており、本発明を制限するものと解釈すべきものではない。いかなる表題の下で例示される実施形態も、いかなる他の表題の下で例示される実施形態と組み合わせてもよい。
【０００９】
本明細書で指定される様々な定量値における数値の使用は、別様に明白に示されない限り、言及された範囲内の最小および最大値の両方で、「約」という語が頭に付く場合、近似値として言及され、読み取られるべきである。また、範囲の開示は、列挙された最小値と最大値の間の全ての値、ならびにかかる値によって形成され得るいかなる範囲を含む、連続範囲として意図されている。また、開示された数値を任意の他の開示された数値で除算することによって形成され得る任意のおよび全ての比（および任意のかかる比の範囲）も、本明細書に開示される。したがって、当業者は、多くのこのような比、範囲、および比の範囲が、本明細書に示される数値から明らかに算出され、全ての例において、比、範囲、比の範囲等は、本発明の様々な実施形態を示すことを理解されたい。
【００１０】
一態様において、本発明は、式（Ｉ）のグリコシド化合物、ならびにその医薬上許容できるエステル、誘導体、複合体、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、およびそれらの塩、または前述のいずれかの混合物を提供し、
【００１１】
【化１】
2011530535.tif 000003
ここで、ステロイド環は、飽和であるか、不飽和であるか、またはそれらの組み合わせであり、
【００１２】
【化２】
2011530535.tif 000004
Ｒａは、ＣＨ３であり、
Ｒｂは、ＣＨ３、ＣＨ２ＯＨ、またはＣＨＯであり、
Ｒｃは、Ｈ、ＯＨ、またはＣＨ３ＣＯＯであり、
Ｒｄは、Ｈ、ＯＨ、またはＣＨ３ＣＯＯであり、
Ｒｅは、Ｈであるか、または基がなく、
Ｒｆは、Ｈ、ＯＨであるか、あるいはＲｅがＨであるか、もしくはＲｅ、Ｒｆ、およびＲｇに接合した原子間でＣ＝Ｃが存在する場合、Ｒｆは、基がなく、
Ｒｇは、Ｈであるか、あるいはＲｅがＨであるか、もしくはＲｅ、Ｒｆ、およびＲｇに接合した原子間でＣ＝Ｃが存在する場合、Ｒｇは、基がなく、
Ｒｈは、ＨまたはＯＨであり、
Ｘは、ＯまたはＮ（ＯＲ′）であり、
Ｒ′は、アルキルまたはアリール基であり、
糖は、ＤもしくはＬのヘキソース、ペントース、デオキシヘキソース、デオキシペントース、デオキシ−ハロヘキソース、デオキシ−ハロペントース、デオキシ−アミノペントース、デオキシ−アミノヘキソース、テトラオース、ヘテロ糖、カルボキシ糖、前述の糖の誘導体、前述の糖の少なくとも１つから得られる二糖類、または前述の糖類の少なくとも１つから得られる多糖類である。好適な糖類には、例えば、Ｌ−リボース、Ｄ−リボース、Ｌ−フコース、Ｄ−フコース、２−デオキシ−Ｄ−ガラクトース、３−デオキシ−Ｄ−グルコース、６−デオキシ−Ｄ−グルコース、２−デオキシ−２−フルオロ−Ｄ−グルコース、６−デオキシ−６−フルオロ−Ｄ−グルコース、Ｌ−リキソース、Ｄ−リキソース、Ｌ−ラムノース、Ｌ−アロース、Ｄ−アロース、Ｌ−アルトロース、Ｄ−アルトロース、Ｌ−ガラクトース、Ｄ−ガラクトース、Ｌ−キシロース、Ｄ−キシロース、Ｄ−グロース、Ｌ−マンノース、Ｄ−マンノース、Ｌ−イドース、Ｄ−イドース、Ｌ−ミカロース、６−ケト−Ｄ−ガラクトース、Ｌ−アラビニース、Ｄ−アラビニース、Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミノース、メリビオース、ラクトース、マルトース、Ｄ−ガラクトウロノース、Ｌ−タロース、Ｄ−タロース、６−デオキシ−６−アゾ−Ｄ−マンノース、Ｌ−グルコース、Ｄ−グルコース、およびこれらの混合物が含まれる。
【００１３】
別の実施形態において、本発明は、式（ＩＩ）のグリコシド化合物、ならびにその医薬上許容できるエステル、誘導体、複合体、水和物、プロドラッグ、溶媒和物、およびそれらの塩、ならびに前述のいずれかの混合物を提供し、
【００１４】
【化３】
2011530535.tif 000005
式中、Ｒ１は、
【００１５】
【化４】
2011530535.tif 000006
からなる群から選択され、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立して、水素であるか、あるいは、Ｒ２およびＲ３は、その結合した炭素と一緒になって、炭素−炭素間の二重結合を示し、
Ｒ４は、
【００１６】
【化５】
2011530535.tif 000007
ならびにそれらのエピマーおよび配座異性体からなる群から選択され、Ｘは、ＯまたはＮＲ５であり、式中、Ｒ５は、水素、メチル、エチル、イソプロピル、およびプロピルから選択される。
【００１７】
また別の実施形態において、本発明は、式（ＩＩ）の化合物を提供し、式中、Ｘ＝ＮＭｅである場合、Ｒ１は、
【００１８】
【化６】
2011530535.tif 000008
であり、Ｒ２およびＲ３は、その結合した炭素と一緒になって、炭素−炭素間の二重結合を示し、Ｒ４は、
【００１９】
【化７】
2011530535.tif 000009
ならびにそれらのエピマーおよび配座異性体からなる群から選択される。
【００２０】
他の実施形態において、式ＩＩの化合物が、提供され、式中、Ｘ＝Ｏである場合、Ｒ１は、
【００２１】
【化８】
2011530535.tif 000010
からなる群から選択され、Ｒ２およびＲ３はそれぞれ、水素であり、Ｒ４は、
【００２２】
【化９】
2011530535.tif 000011
ならびにそれらのエピマーおよび配座異性体からなる群から選択される。
【００２３】
別の実施形態において、本発明は、式（ＩＩ）の化合物を提供し、式中、Ｘ＝Ｏであり、Ｒ１は、
【００２４】
【化１０】
2011530535.tif 000012
であり、Ｒ４は、
【００２５】
【化１１】
2011530535.tif 000013
およびそのエピマーおよび配座異性体である。
【００２６】
さらに別の実施形態において、本発明は、式（ＩＩ）のグリコシド化合物を提供し、式中、Ｘ＝Ｏであり、Ｒ１は、
【００２７】
【化１２】
2011530535.tif 000014
であり、Ｒ４は、
【００２８】
【化１３】
2011530535.tif 000015
およびそのエピマーおよび配座異性体から選択される。
【００２９】
また別の実施形態において、本発明は、式（ＩＩ）のグリコシド化合物を提供し、
式中、Ｘ＝ＮＭｅであり、Ｒ１は、
【００３０】
【化１４】
2011530535.tif 000016
であり、Ｒ２およびＲ３は、その結合した炭素と一緒になって、炭素−炭素間の二重結合を示し、Ｒ４は、
【００３１】
【化１５】
2011530535.tif 000017
およびそのエピマーおよび配座異性体から選択される。
【００３２】
また別の実施形態において、本発明は、式（ＩＩ）のグリコシド化合物を提供し、
式中、Ｘ＝ＮＭｅであり、Ｒ１は、
【００３３】
【化１６】
2011530535.tif 000018
であり、Ｒ２およびＲ３は、その結合した炭素と一緒になって、炭素−炭素間の二重結合を示し、Ｒ４は、
【００３４】
【化１７】
2011530535.tif 000019
およびそのエピマーおよび配座異性体から選択される。
【００３５】
一実施形態において、該グリコシド化合物は、ＣＥＮ０８−１７８（３−０−ジギトキシゲニン−Ｌ−リボシド）、ＣＥＮ０８−１９３（３−Ｏ−イソジギトキシゲニン−Ｌ−キシロシド）、ＣＥＮ０８−２４３（（３Ｓ）−３−Ｎ−メトキシアミノ−シラレニン−Ｌ−ネオ−４−アミノ−４−デオキシキシロシド）、またはＣＥＮ０８−２４４（（３Ｓ）−３−Ｎ−メトキシアミノ−シラレニン−Ｌ−ネオ−４−アミノ−４−デオキシリボシド）を含む。
【００３６】
前述の化合物のいずれかを合成するためのプロセスは、本発明のさらなる実施形態を示す。
【００３７】
医薬組成物
別の態様において、本発明は、式（Ｉ）または（ＩＩ）の１つもしくは複数のグリコシド化合物、および少なくとも１つの医薬上許容できる賦形剤を含む医薬組成物を提供する。一実施形態において、該組成物は、１つもしくは複数の投薬単位として製剤化される。本明細書の「単位用量」または「投薬単位」という用語は、治療効果を得るために単一投与に適している治療剤の一回分の量を含有する医薬組成物の一部分を指す。かかる投薬単位は、１日当たり１回〜複数回（例えば、２回、３回、４回、または５回）、または治療反応を引き出すのに必要とされる回数を投与され得る。
【００３８】
一実施形態において、本明細書に開示されるように、投薬単位は、約０．１ｍｇ〜約１ｇ、約０．５ｍｇ〜約７５０ｍｇ、または約１ｍｇ〜約５００ｍｇ、例えば、約０．１ｍｇ、約０．５ｍｇ、約１ｍｇ、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約５０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１５０ｍｇ、約２５０ｍｇ、約３００ｍｇ、約４００ｍｇ、約５００ｍｇ、約６００ｍｇ、または約７００ｍｇの量で、式（Ｉ）または（ＩＩ）のグリコシド化合物を含む。
【００３９】
別の実施形態において、本発明の組成物は、静脈内および経口で送達可能である。本明細書の「経口で送達可能な」または「経口投与」という用語は、被験者への治療剤またはその組成物の送達の任意の形態を含み、該製剤または組成物を飲み込むか否かにかかわらず、該製剤または組成物を、該被験者の口に入れるか、または通過させる。したがって、「経口投与」は、口腔および舌下、ならびに食道および肺投与を含む。他の実施形態において、本発明の組成物は、直腸内に、非経口的に（例えば、筋肉注射で、または皮下で）、大槽内に（ｉｎｔｒａｃｉｓｔｅｒｎａｌｌｙ）、腹腔内に、局所的に（例えば、粉末剤、軟膏もしくはドロップ）、局所的に（ｔｏｐｉｃａｌｌｙ）、または鼻腔で投与することができる。
【００４０】
いくつかの実施形態において、本発明の組成物は、固体剤形の形態である。好適な固体剤形の限定されない例には、錠剤（例えば、懸濁錠剤、咬合懸濁錠剤、迅速分散錠剤、チュアブル錠剤、溶解型錠剤、発砲型錠剤、二重層錠剤等）、カプレット、カプセル剤（例えば、固体および／または液体で充填された軟または硬ゼラチンカプセル）、粉末剤（例えば、包装された粉末、欠失可能な粉末、または発砲粉末）、薬用キャンディ、サシェ剤、カシェ剤、トローチ剤、ペレット、顆粒、微粒剤、カプセル型微粒剤、粉末エアロゾル製剤、または経口投与用に合理的に適合された任意の他の固体剤形が含まれる。
【００４１】
他の実施形態において、本発明の組成物は、液体または半固体の剤形または投薬単位の形態である。好適な液体／半固体の剤形の限定されない例には、溶液、懸濁液、エリキシル剤、シロップ、液体エアロゾル製剤、塗布薬、ローション、水中油型乳剤または油中水乳剤（クリーム、軟膏、またはペースト剤）等が含まれる。
【００４２】
一実施形態において、水を含む液体組成物が調製され得る。別の実施形態において、本発明の組成物は、被験者に投与する前に、液体ビヒクル中で分散されるか、懸濁されるか、あるいは溶解され得る、懸濁または注射用の粉末の形のものである。再構成用の粉末自体は、本発明の固体剤形であり得るが、液体中で分散されるか、懸濁されるか、あるいは溶解される該粉末は、本発明の液体実施形態も含む。
【００４３】
本発明の医薬組成物は、任意に、１つもしくは複数の医薬上許容できる賦形剤を含む。「医薬上許容できる賦形剤」という用語は、治療剤自体ではなく、被験者への治療剤の送達用の担体またはビヒクルとして使用されるか、あるいは、その取り扱いもしくは保管特性を改善する、または組成物の投薬単位の製剤化を可能にする、もしくは促進するために医薬組成物に添加し、組成物において、許容できない毒性もしくは他の構成成分との相互作用を生じない、任意の物質を指す。
【００４４】
一実施形態において、本発明の組成物は、少なくとも１つの医薬上許容できる溶媒、共溶媒、および／または可溶化剤（集合的に、本明細書で可溶化剤（ｓｏｌｕｂｉｌｉｚｅｒ）と称する）を含む。適切な可溶化剤の限定されない例には、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、エタノール、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、プロピレングリコール、シクロデキストリン、およびこれらの混合物が含まれる。
【００４５】
本発明の組成物に用いるために適しているシクロデキストリンは、α−シクロデキストリンまたはβ−シクロデキストリン（本明細書でβ−ＣＤとも称する）であり得る。
【００４６】
一実施形態において、シクロデキストリンは、部分的にエーテル化したβ−シクロデキストリンであり、実質的に、式（ＩＩＩ）のＭｕｌｌｅｒらによる米国特許第６，４０７，０７９号に記載される通りであり（ここで、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる）、
（β−ＣＤ）−（ＯＲ）２１（ＩＩＩ）
式中、Ｒ基は独立して、水素、ヒドロキシアルキル、またはアルキル（例えば、メチル、エチル、およびプロピル）から選択され、式中、少なくとも１つＲ基は、ヒドロキシアルキル（例えば、ヒドロキシエチル、ヒドロキシプロピル、またはジヒドロキシプロピル）である。
【００４７】
β−シクロデキストリンは、７つの無水グルコース単位からなる環状構造を有する化合物であり、それは、シクロヘプタアミロースとも称される。７つのグルコース環のそれぞれは、２位、３位、および６位に３つのヒドロキシ基を含有し、これらは、エーテル化され得る。したがって、１シクロデキストリン分子当たり合計２１個のヒドロキシ基が、エーテル化に使用可能である。本発明に適している部分的にエーテル化されたβ−シクロデキストリン誘導体において、これらの使用可能なヒドロキシ基の一部分のみが、ヒドロキシアルキル基でエーテル化される。任意に、これらの使用可能なヒドロキシ基の一部分は、アルキル基でエーテル化される。本発明に従って使用されるβ−シクロデキストリンのヒドロキシアルキルエーテルにおいて、ヒドロキシアルキル基を有する平均置換度（ＤＳ）は、１シクロデキストリン分子当たり、約０．５〜約２０、約２〜約１８、または約３〜約１６である。
【００４８】
ヒドロキシアルキル基に加えて、アルキル基を含む、部分的にエーテル化されたβ−シクロデキストリンは、任意に、１つのシクロデキストリン分子当たり、約０．３５〜約１６または約１．４〜約１５の置換度を有する。
【００４９】
別の実施形態において、シクロデキストリンは、ヒドロキシエチルエーテルシクロデキストリン、ヒドロキシプロピルエーテルシクロデキストリン、およびジヒドロキシプロピルエーテルシクロデキストリン、それらに対応する混合エーテル、ならびにメチル基もしくはエチル基とエーテルを更に混合したエーテル、例えば、β−シクロデキストリンのメチル−ヒドロキシエチルエーテル、メチル−ヒドロキシプロピルエーテル、エチル−ヒドロキシエチルエーテル、およびエチル−ヒドロキシプロピルエーテル等である。
【００５０】
β−シクロデキストリンのヒドロキシアルキルエーテルの調製は、任意の好適な方法、例えば、Ｇｒａｍｅｒａらによる米国特許第３，４５９，７３１号に記載の方法を用いて実行することができ、これによって、その全体が本明細書に組み込まれる。
【００５１】
別の実施形態において、β−シクロデキストリンは、部分的にアルキル化されたβ−シクロデキストリン、例えば、部分的にメチル化もしくは部分的にジメチル化されたβ−シクロデキストリンである。部分的にアルキル化されたβ−シクロデキストリンは、好ましくは、１シクロデキストリン分子当たり約０．５〜約２０個、約２〜約１８個または約３〜約１６個、例えば、約１４個のアルキル基を有する平均置換度（ＤＳ）を有する。
【００５２】
別の実施形態において、シクロデキストリンは、米国特許第５，１３４，１２７号に記載されるものから選択され、式（ＩＶ）によって表される構造を有し、
【００５３】
【化１８】
2011530535.tif 000020
式中、
ｎは、４、５、または６であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９は、それぞれ独立して、Ｏ−またはＯ−Ｃ２−６−アルキレン）−ＳＯ３−基であり、式中、Ｒ１およびＲ２のうちの少なくとも１つは独立して、Ｏ−（Ｃ２−６−アルキレン）−ＳＯ３−基であるか、あるいはＯ−（ＣＨ２）ｍＳＯ３−基であり、式中、ｍは、２〜６または２〜４であり（例えば、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−またはＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−）、Ｓ１、Ｓ２、Ｓ３、Ｓ４、Ｓ５、Ｓ６、Ｓ７、Ｓ８、およびＳ９は、それぞれ独立して、例えば、Ｈ＋、アルカリ金属（例えば、Ｌｉ＋、Ｎａ＋、Ｋ＋）、アルカリ土類金属（例えば、Ｃａ＋２、Ｍｇ＋２）、アンモニウムイオン、およびアミンカチオン（Ｃ１−６アルキルアミン、ピペリジン、ピラジン、Ｃ１−６アルカノールアミン、およびＣ４−８シクロアルカノールアミン）を含む、医薬上許容できるカチオンである。
【００５４】
一実施形態において、Ｒ１は、Ｏ−（Ｃ２６−アルキレン）−ＳＯ３−基であるか、あるいはＯ−（ＣＨ２）ｍＳＯ３−基（例えば、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−またはＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３）であり、式中、ｍは、２〜６または２〜４であり、
Ｒ２〜Ｒ９は、Ｏ−であり、
Ｓ１〜Ｓ９は、それぞれ独立して、医薬上許容できるカチオンである。
【００５５】
別の実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、それぞれ独立して、Ｏ−（Ｃ２−６−アルキレン）−ＳＯ３−基であるか、あるいはＯ−（ＣＨ２）ｍＳＯ３−基であり（例えば、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−またはＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−）であり、式中、ｍは、２〜６または２〜４であり、
Ｒ４〜Ｒ９は、Ｏ−であり、
Ｓ１〜Ｓ９は、それぞれ独立して、医薬上許容できるカチオンである。
【００５６】
また別の実施形態において、Ｒ１〜Ｒ３は、それぞれ独立して、Ｏ−（Ｃ２−６−アルキレン）−ＳＯ３−基であり、
Ｒ４、Ｒ６、およびＲ８のうちの少なくとも１つは、Ｏ−（Ｃ２−６−アルキレン）−ＳＯ３−基、例えば、Ｏ−（ＣＨ２）ｍＳＯ３−基であり、式中、ｍは、２〜６または２〜４であり（例えば、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−またはＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−）、
Ｒ５、Ｒ７、およびＲ９は、Ｏ−であり、
Ｓ１〜Ｓ９は、それぞれ独立して、医薬上許容できるカチオンである。
【００５７】
別の実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、およびＲ８は、それぞれ独立して、Ｏ−（Ｃ２−６−アルキレン）−ＳＯ３−基、例えば、Ｏ−（ＣＨ２）ｍＳＯ３−基であり、式中、ｍは、２〜６または２〜４であり（例えば、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−またはＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−）、
Ｒ５、Ｒ７、およびＲ９は、Ｏ−であり、
Ｓ１〜Ｓ９は、それぞれ独立して、医薬上許容できるカチオンである。
【００５８】
別の実施形態において、シクロデキストリンは、スルホアルキルエーテル−β−シクロデキストリン、例えば、約４〜約８または約５〜約７の平均置換を有するスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、例えば、約６．４スルホブチルエーテル連結（即ち、スルホブチルエーテル６．４−β−シクロデキストリン）である。
【００５９】
１つもしくは複数のシクロデキストリンは、必要に応じて、少なくとも約２．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも約５％（ｗ／ｖ）、少なくとも約７．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも約１０％（ｗ／ｖ）、少なくとも約１２．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも約１５％（ｗ／ｖ）、または少なくとも約２０％（ｗ／ｖ）の量で、本発明の組成物中に存在する。実例的に、シクロデキストリンは、約５％〜約９５％（ｗ／ｖ）、約５％〜約８０％（ｗ／ｖ）、約７．５％〜約７５％（ｗ／ｖ）、約１０％〜約６０％（ｗ／ｖ）、約１５％〜約５０％（ｗ／ｖ）、または約２０％〜約５０％（ｗ／ｖ）の全量で、存在する。
【００６０】
本発明の組成物は、任意に、賦形剤として、１つもしくは複数の医薬上許容できる希釈剤を含む。具体的に、好適な希釈剤には、個々で、あるいは組み合わせのいずれかで、無水ラクトースおよびラクトース一水和物を含むラクトース；直接圧縮可能なデンプンおよび加水分解されたデンプンを含むデンプン（例えば、Ｃｅｌｕｔａｂ（商標）およびＥｍｄｅｘ（商標））；マンニトール；ソルビトール；キシリトール；デキストロース（例えば、Ｃｅｒｅｌｏｓｅ（商標）２０００）およびデキストロース一水和物；第二リン酸カルシウム二水和物；スクロースベースの希釈剤；粉砂糖；第一硫酸カルシウム一水和物（ｍｏｎｏｂａｓｉｃ  ｃａｌｃｉｕｍ  ｓｕｌｆａｔｅ  ｍｏｎｏｈｙｄｒａｔｅ）；硫酸カルシウム二水和物；粒状乳酸カルシウム三水和物；デキストレート；イノシトール；加水分解された穀類固体；アミロース；微結晶性セルロースおよびα−セルロースおよび非結晶セルロースの食品用源（例えば、Ｒｅｘｃｅｌ（商標））および粉末セルロースを含むセルロース；炭酸カルシウム；グリシン；ベントナイト；ポリビニルピロリドン；注射用蒸留水；リンガー溶液；生理食塩液；合成モノおよびジグリセリド等の固定油等が含まれる。かかる希釈剤は、存在する場合、組成物の全重量の全約５％〜約９９％、約１０％〜約８５％、または約２０％〜約８０％を占める。
【００６１】
本発明の組成物は、任意に、賦形剤として、１つもしくは複数の医薬上許容できる崩壊剤を含む。好適な崩壊剤には、個々で、あるいは組み合わせのいずれかで、グリコールデンプンナトリウム（例えば、ＰｅｎＷｅｓｔのＥｘｐｌｏｔａｂ（商標））および予備ゼラチン化コーンスターチ（例えば、Ｎａｔｉｏｎａｌ（商標）１５５１、Ｎａｔｉｏｎａｌ（商標）１５５０、およびＣｏｌｏｃｏｒａ（商標）１５００）、粘土（例えば、Ｖｅｅｇｕｍ（商標）ＨＶ）を含むデンプン、精製セルロース、微結晶性セルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースおよびカルボキシメチルセルロースのナトリウム塩等のセルロース、クロスカルメロースナトリウム（例えば、ＦＭＣのＡｃ−Ｄｉ−Ｓｏｌ（商標））、アルギン酸塩、クロスポビドン、ならびに寒天、グアー、キサンタン、イナゴマメ、カラヤ、ペクチン、およびトラガカントゴム等のゴムが含まれる。かかる崩壊剤は、存在する場合、組成物の全重量の全約０．２％〜約３０％、約０．２％〜約１０％、または約０．２％〜約５％を含む。
【００６２】
本発明の組成物は、任意に、１つもしくは複数の酸化防止剤または抗菌剤を含む。具体的な酸化防止剤には、アスコルビン酸ナトリウムおよびビタミンＥ（トコフェロール）が含まれる。具体的な抗菌剤には、パラベン、クロロブタノール、フェノール、およびソルビン酸が含まれる。１つもしくは複数の酸化防止剤または抗菌剤は、存在する場合、一般に、約０．００１重量％〜約５重量％、約０．００５重量％〜約２．５重量％、または約０．０１重量％〜約１重量％の量で、本発明の組成物に存在する。
【００６３】
本発明の組成物は、任意に、賦形剤として、１つもしくは複数の医薬上許容できる結合剤または接着剤を含む。かかる結合剤および接着剤は、大きさ、潤滑、圧縮、および包装等の通常の処理操作を可能にするために錠剤にされる粉末に十分な結合を与えることができるが、さらに摂取後直ちに錠剤が崩壊し、組成物が吸収されることを可能にする。好適な結合剤および接着剤には、個々で、あるいは組み合わせのいずれかで、アカシア；トラガカントゴム；スクロース；ゼラチン；ブドウ糖；ゼラチン化デンプン（例えば、Ｎａｔｉｏｎａｌ（商標）１５１１およびＮａｔｉｏｎａｌ（商標）１５００）等であるが、これらに限定されないデンプン；メチルセルロースおよびカルメロースナトリウム（例えば、Ｔｙｌｏｓｅ（商標））等であるが、これらに限定されないセルロース；アルギン酸およびアルギン酸塩；ケイ酸アルミウニムマグネシウム；ＰＥＧ；グアールゴム；多糖類酸；ベントナイト；ポビドン（例えば、ポビドンＫ−１５、Ｋ−３０およびＫ−２９／３２）；ポリメタクリル酸；ＨＰＭＣ；ヒドロキシプロピルセルロース（例えば、Ｋｌｕｃｅｌ（商標））；ならびにエチルセルロース（例えば、Ｅｔｈｏｃｅｌ（商標））が含まれる。かかる結合剤および接着剤は、存在する場合、組成物の全重量の全約０．５％〜約２５％、約０．７５％〜約１５％、または約１％〜約１０％を占める。
【００６４】
本発明の組成物は、任意に、賦形剤として、１つもしくは複数の医薬上許容できる湿潤剤を含む。本発明の組成物において湿潤剤として使用することができる界面活性剤の限定されない例には、第四アンモニウム化合物（例えば、塩化ベンズアルコニウム、塩化ベンゼトニウム、および塩化セチルピリジニウム）、スルホコハク酸ジオクチルナトリウム、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル（例えば、ノノキシノール９、ノノキシノール１０、およびオクトキシノール９）、ポロキサマー（ポリオキシエチレンおよびポリオキシプロピレンブロックコポリマー）、ポリオキシエチレン脂肪酸グリセリドおよび油（例えば、ポリオキシエチレン（８）カプリル酸／カプリン酸モノおよびジグリセリド（例えば、ＧａｔｔｅｆｏｓｓｅのＬａｂｒａｓｏｌ（商標））、ポリオキシエチレン（３５）ヒマシ油ならびにポリオキシエチレン（４０）水素添加ヒマシ油）；ポリオキシエチレンアルキルエーテル（例えば、ポリオキシエチレン（２０）セトステアリルエーテル）、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル（例えば、ステアリン酸ポリオキシエチレン（４０））、ポリオキシエチレンソルビタンエステル（例えば、ポリソルベート２０およびポリソルベート８０（例えば、ＩＣＩのＴｗｅｅｎ（商標）８０））、プロピレングリコール脂肪酸エステル（例えば、ラウリン酸プロピレングリコール（例えば、ＧａｔｔｅｆｏｓｓｅのＬａｕｒｏｇｌｙｃｏｌ（商標）））、ラウリル硫酸ナトリウム、脂肪酸およびその酸（例えば、オレイン酸、オレイン酸ナトリウム、およびオレイン酸トリエタノールアミン）、グリセリル脂肪酸エステル（例えば、モノステアリン酸グリセリン）、ソルビタンエステル（例えば、ソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノオレエート、ソルビタンモノパルミテート、およびソルビタンモノステアレート）、チロキサポール、ならびにそれらの混合物が含まれる。かかる湿潤剤は、存在する場合、組成物の全重量の全約０．２５％〜約１５％、約０．４％〜約１０％、または約０．５％〜約５％を占める。
【００６５】
本発明の組成物は、任意に、賦形剤として、１つもしくは複数の医薬上許容できる潤滑剤（抗被着剤および／または流動促進剤を含む）を含む。好適な潤滑剤には、個々で、あるいは組み合わせのいずれかで、グリセリルベハペート（例えば、Ｃｏｍｐｒｉｔｏｌ（商標）８８８）；マグネシウム（ステアリン酸マグネシウム）、カルシウムおよびステアリン酸ナトリウム等を含むステアリン酸およびその塩；水素化植物油（例えば、Ｓｔｅｒｏｔｅｘ（商標））；コロイドシリカ；タルク；ワックス；ホウ酸；安息香酸ナトリウム；酢酸ナトリウム；フマル酸ナトリウム；塩化ナトリウム；ＤＬ−ロイシン；ＰＥＧ（例えば、Ｃａｒｂｏｗａｘ（商標）４０００およびＣａｒｂｏｗａｘ（商標）６０００）；オレイン酸ナトリウム；ラウリル硫酸ナトリウム；ならびにラウリル硫酸マグネシウムが含まれる。かかる潤滑剤は、存在する場合、組成物の全重量の全約０．１％〜約１０％、約０．２％〜約８％、または約０．２５％〜約５％を占める。
【００６６】
好適な抗被着剤は、タルク、コーンスターチ、ＤＬ−ロイシン、ラウリル硫酸ナトリウム、およびステアリン酸金属塩が含まれる。タルクは、例えば、器具の表面に固着している調製物を減少し、さらに混合物内の静電気を減少するために用いられる好ましい抗被着剤つまり流動促進剤である。タルクは、存在する場合、組成物の全重量の約０．１％〜約１０％、約０．２５％〜約５％、または約０．５％〜約２％を占める。流動促進剤は、固形剤の粉末の流動を促進するために用いることができる。好適な流動促進剤には、コロイド状二酸化ケイ素、デンプン、タルク、第三リン酸カルシウム、粉末セルロース、および三ケイ酸マグネシウムが含まれる。
【００６７】
本発明の組成物は、任意に、懸濁化剤を含む。好適な懸濁化剤の限定されない具体例には、二酸化ケイ素、ベントナイト、水酸化ケイ酸アルミニウム（例えば、カオリン）、およびそれらの混合物が含まれる。１つもしくは複数の懸濁化剤は、任意に、約０．０１重量％〜約３．０重量％、約０．１重量％〜約２．０重量％、または約０．２５重量％〜約１．０重量％の全量で、本発明の組成物中に存在する。
【００６８】
前述の賦形剤は、当該技術分野において既知であるように、複数の役割を担う。例えば、デンプンは、充填剤、ならびに崩壊剤としての機能を果たすことができる。上記の賦形剤の分類は、あらゆる方法において限定されるものとして解釈されるべきではない。あらゆる方法において分類される賦形剤はまた、当業者によって容易に理解されるように、賦形剤の様々な異なる分類下で、操作され得る。
【００６９】
別の実施形態において、密閉容器内に、室温、または冷蔵（例えば、約５〜１０℃）温度、または冷凍温度で約１ヶ月間、６ヶ月間、もしくは１２ヶ月間もしくはそれ以上の期間維持され、保存されると、本明細書に開示される医薬組成物は、元のグリコシド（一つまたは複数）の少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または少なくとも約９９％が医薬組成物内に存在することを示す。
【００７０】
治療方法
一実施形態において、本発明は、結腸直腸癌、非小細胞癌、肺癌、卵巣癌、乳癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、肝臓癌、肺癌、および腎臓癌を含む、様々な癌を治療または予防する方法を提供する。これらの方法は、本明細書に開示されるように、治療有効量のグリコシド化合物（または、このような化合物を含む医薬組成物）を、それを必要とする被験者に投与することを含む。本明細書に使用される、「治療有効量」、「予防有効量」、「有効量」、または「治療に対して効果的な量」という関連用語は、特定の治療コンテキストの必要に応じて、必要とされるまたは所望の治療的および／または予防的反応を導くために十分なグリコシドの量を指す。
【００７１】
既定の疾患または疾病に関して「治療する」という用語としては、該疾患または疾病を阻害すること、例えば、該疾患または疾病の発症を停止させること；該疾患または疾病を緩和すること、例えば、該疾患または疾病の退縮を引き起こすこと；または、該疾患または疾病によって引き起こされる、もしくはそれらに起因する状態を緩和すること、例えば、該疾患または疾病の症状を緩和すること、予防すること、もしくは治療することが挙げられるが、これらに限定されない。
【００７２】
既定の疾患または疾病に関して「予防」という用語は、何も発症していない場合、疾病の発症の兆候を予防すること、該疾患または疾病に感染しやすい傾向があるが、該疾患または疾病に罹患しているとまだ診断されていない被験者において、該疾患または疾病を発症するのを予防すること、および／または既に存在する場合、該疾患／疾病の発症を予防することを意味する。
【００７３】
一実施形態において、本明細書に開示されるように、医薬組成物は、約０．１ｍｇ〜約１０ｇ、約１ｍｇ〜約５ｇ、または約２５ｍｇ〜約２．５ｇ、例えば、約０．１ｍｇ、約０．５、約１ｍｇ、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約５０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１５０ｍｇ、約２５０ｍｇ、約５００ｍｇ、約７５０ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１５００ｍｇ、約２０００ｍｇ、約２５００ｍｇ、約５０００ｍｇ、約７５００ｍｇ、または約９０００ｍｇの毎日のグリコシド化合物用量を提供するのに十分な量で治療を必要とする被験者に投与される。
【００７４】
別の実施形態において、本明細書に開示されるように、医薬組成物は、体重１キログラム（ｋｇ）当たり約０．０１マイクログラム（μｇ）（μｇ／ｋｇ）〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重（ｍｇ／ｋｇ）、約０．０１μｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１μｇ／ｋｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇ、約０．１μｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ、または約１μｇ／ｋｇ〜約５ｍｇ／ｋｇの毎日のグリコシド化合物用量を提供するのに十分な量で治療を必要とする被験者に投与される。
【００７５】
本明細書に開示される医薬組成物は、上記の毎日のグリコシド化合物用量に達するために、１日当たり１回から少数の回数、被験者に投与することができる。本明細書の「少数の回数（ｓｍａｌｌ  ｐｌｕｒａｌｉｔｙ）」という用語は、１回を超えるが約５回未満を意味する。例えば、本文脈の少数の回数は、具体的に、約２回または３回を示す。
【００７６】
上記に開示されたものに対して同等のグリコシド化合物の投薬量は、約２時間おき、約８時間おき、約１２時間おき、約２４時間おき、約４８時間おき、約７２時間おき、約１週間おき、約２週間おき、約３週間おき、約１ヶ月おき、および約２ヶ月おきが挙げられるが、これらに限定されない、様々な期間にわたり投与され得る。
【００７７】
本明細書に開示されるグリコシド化合物は、標的細胞に、標的細胞を含む組織に、標的細胞に接触する体液に、または、標的細胞に拡散する、もしくは運搬され得る体の部位に、直接投与されるか否かは重要ではない。グリコシドが、ある量で、またはある経路によって患者に投与され、それによって、十分な量のグリコシドが、標的細胞（一つまたは複数）で直接的または間接的に到達することが十分である。最低量は、投与されるグリコシドの固有性によって異なる。一実施形態において、有用な最低量は、約１０−９モル〜約１０−５モル、またはさらに約１０−７モル〜約１０−５モルである。
【００７８】
一実施形態において、本発明の化合物は、従来の抗癌剤を吸収しない腫瘍の治療に有用である。かかる腫瘍は、低酸素領域を有する固体腫瘍、および従来の抗癌剤を用いた療法に耐性を示す任意の腫瘍であり得る。
【００７９】
癌の治療への使用に加えて、本発明の化合物は、嚢胞性線維症の治療に使用することができる。非毒性濃度で、本明細書に開示される化合物は、嚢胞性線維症の肺細胞によるＩＬ−８の分泌を阻害し、嚢胞性線維症におけるＣＦＴＲタンパク質欠損のイオン輸送機能を部分的に回復させると考えられ、これは、本疾病の治療のために安全かつ有効な新薬として大きな潜在的可能性を与える。
【００８０】
本明細書に開示される化合物はまた、Ｎａ，Ｋ＋流動をほとんど生じない、または阻害を生じない治療有効用量で該化合物を投与することができるため、カルシウム変動によって引き起こされる疾病の治療に有用である。これらの変動は、血清枯渇によって誘導されたアポトーシスから腎臓細胞を保護することができるいくつかの抗アポトーシス遺伝子の発現を介在する、カルシウム依存性転写因子ＮＦ−κＢを活性化することができる。異常カルシウムの恒常性は、多くの疾病の病原と関連があり、本発明の方法に従って、強心配糖体は、カルシウム関連の病原に対する新療法として投与されている（Ａｐｅｒｉａ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．２６１：４４−５２，２００７）。
【００８１】
本発明の化合物はまた、他の強心配糖体が、虚血再かん流傷害からラットの心臓を保護することができることが知られているので、ＣＮＳにおいて、神経保護薬として機能を果たすように投与することもできる（Ｐｒａｓｓａｓ  ａｎｄ  Ｄｉａｍａｎｄｉｓ，Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．７：９２６−３５，２００８）。したがって、本発明は、治療有効量の本発明の化合物または医薬組成物を、脳梗塞および心臓虚血の治療を必要とする被験者に投与することによって、脳梗塞および心臓虚血を治療するための方法を提供する。
【００８２】
本発明はまた、細胞の過剰増殖性（例えば、細胞増殖の速度つまり量の異常な増加）によって特徴付けられる癌でない他の過剰増殖性疾患の治療の方法を提供する。一実施形態において、本発明の方法に従って治療される過剰増殖性疾患は、アレルギー性血管炎および肉芽腫症（チャーグ・ストラウス病）、石綿肺症、喘息、萎縮性胃炎、良性前立腺肥大症、水疱性類天疱瘡、セリアック病、慢性気管支炎および慢性閉塞性気道疾患、慢性副鼻腔炎、クローン病、脱髄性ニューロパチー、皮膚筋炎、アトピー性皮膚炎を含む湿疹、耳管疾患、巨細胞性動脈炎、移植片拒絶反応、過敏性肺炎、過敏性血管炎（ヘノッホ・シェーンライン紫斑病）、刺激性皮膚炎、炎症性溶血性貧血、炎症性好中球減少症、炎症性腸疾患、川崎病、多発性硬化症、心筋炎、筋炎、鼻ポリープ、鼻涙管疾患、腫瘍性脈管炎、膵臓炎、尋常性天疱瘡、原発性糸球体腎炎、乾癬、歯周病、多発性嚢胞腎、結節性多発動脈炎、多発性血管炎オーバーラップ症候群、原発性硬化性胆管炎、リウマチ性関節炎、血清病、外科的癒着、狭窄もしくは再狭窄、強膜炎、強皮症、胆管狭窄、（十二指腸、小腸、および結腸の）狭窄、珪肺症および他の形態の塵肺症、１型糖尿病、潰瘍性大腸炎、潰瘍性直腸炎、結合組織病に関連する脈管炎、補体系の先天性欠損に関連する脈管炎、中枢神経系の脈管炎、ならびにウェゲナー肉芽腫症からなる群から選択される。前述の疾病のあらゆる疾病を治療するための医薬の製造における、本発明の化合物の使用がまた、本発明によって提供される。
【００８３】
本発明のいくつかの実施形態において、本発明の化合物は、乾癬、多発性硬化症、リウマチ性関節炎、再狭窄、および良性前立腺肥大症からなる群から選択される過剰増殖性疾患を治療するために投与される。一実施形態において、治療される過剰増殖性疾患は、皮膚上に蓄積し、隆起した、鱗屑性病変を形成する、ケラチン生成細胞の細胞過剰増殖性によって特徴付けられる疾病である、乾癬である。別の実施形態において、治療される過剰増殖性疾患は、脳での進行性脱髄によって特徴付けられる疾病である、多発性硬化症である。別の実施形態において、治療される過剰増殖性疾患は、罹患した関節の破壊を引き起こし得る、マルチシステムの慢性の、再発する、炎症性疾患である、リウマチ性関節炎である。別の実施形態において、本発明の化合物は、本発明の化合物を含有する組成物でプロテーゼを被覆することによって、被験者内に埋め込まれたプロテーゼにおける細胞増殖に起因する過剰増殖性疾患を予防するために投与される。別の実施形態において、治療される過剰増殖性疾患は、前立腺上皮細胞が、異常に増殖し、それによって、尿の流れが遮断される疾患である、良性前立腺肥大症である。
【００８４】
上述の治療方法に加えて、本明細書に開示のグリコシドはまた、他の用途（例えば、診断もしくは研究手段としてのものを含む）、および他の生物活性化合物の発見で用いるのに適している。前述の疾病のあらゆる疾病を治療するための医薬の製造における、本発明の化合物の使用がまた、本発明によって提供される。
【００８５】
併用療法
本明細書に開示されるグリコシドは、単独治療剤として、他のグリコシドと併用して、または１つもしくは複数の他の医薬活性化合物と併用して投与することができる。併用剤は、グリコシドが治療する疾患と同一の疾患を治療するために、または異なる疾患を治療するために、選択することができる。被験者が、複数の医薬活性化合物を受けることになっている、または受けている場合、これらの化合物は、同時に、実質的に同時に、または任意の順序で連続して投与することができる。これらの化合物はまた、同一のまたは異なる投薬単位、同一のまたは異なる剤形で（例えば、錠剤の形態で少なくとも１つの化合物を送達すること、および注射の形態で、もしくは経口で送達されるシロップの形態で、第２の化合物を送達すること）、ならびに／または同一のもしくは異なる投与経路（例えば、経口送達経路による１つの薬剤および静脈内送達経路による第２の薬剤）で投与することができる。
【００８６】
一実施形態において、グリコシドが、癌の治療のため、および／または転移の形成を阻害するための追加の抗増殖剤（一つまたは複数）と併用して投与される場合、かかる抗増殖剤（一つまたは複数）には、本明細書の以下に開示されるこれらの薬剤が含まれ得るが、これらの薬剤に限定されない。
【００８７】
一実施形態において、本発明のグリコシド化合物は、既存の臨床的レジメン（例えば、乳癌の治療用のパクリタキセル）に添加される。別の実施形態において、既存の臨床的レジメンへのグリコシドの添加は、１つもしくは複数の以下の利益を提供するのに役立つ。（ａ）１つまたは両方の薬剤の最小有効用量を軽減すること；（ｂ）１つまたは両方の薬剤の拒絶反応または副作用を軽減すること；（ｃ）１つまたは両方の薬剤の有効性を向上すること；（ｄ）治療する被験者の寿命を延ばすこと、および／または（ｅ）治癒率を向上すること。
【００８８】
かかる併用療法の実施形態において、グリコシドおよび追加の抗増殖剤（一つまたは複数）の投与の投薬および回数は、独立して、制御することができる。例えば、１つの化合物は、１日３回経口投与され得るが、第２の化合物は、１日１回静脈投与され得る。これらの化合物はまた、１つの投薬単位が、両方の化合物を含有するように、製剤化され得る。
【００８９】
投与されるべきグリコシドおよび追加の抗増殖剤（一つまたは複数）の典型的な投薬は、疾病のタイプおよび重篤度、患者の全体的な健康状態、選択された抗増殖剤（一つまたは複数）の治療指数、およびそれらの投与経路によって異なり得る。標準臨床試験は、本発明の任意の特定の併用に対して用量および投与回数を最適化するために使用され得る。
【００９０】
アルキル化剤
ナイトロジェンマスタード。メクロレタミン（ホジキン病、非ホジキンリンパ腫）；シクロホスファミド、イホスファミド（急性および慢性リンパ球性白血病、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、神経芽細胞腫、胸部、卵巣、肺、ウィルムス腫瘍、頸部、精巣、軟組織、肉腫）；メルファラン（多発性骨髄腫、胸部、卵巣）；クロラムブシル（慢性リンパ球性白血病、原発性マクログロブリン血症、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫）；ウラシルマスタード（白血病）；エストラムスチン（固形腫瘍）
エチレンイミンおよびメチルメラミン。マイトマイシンＣ（結腸直腸、眼）；ＡＺＱ（原発性脳腫瘍）；チオテパ（膀胱、胸部、卵巣）
スルホン酸アルキル。ブスルファン、ヘプスルファン（慢性骨髄性白血病）
ニトロソウレア。カルムスチン（ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、原発性脳腫瘍、多発性骨髄腫、悪性黒色腫）；ロムスチン（ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、原発性脳腫瘍、小細胞肺）；セムスチン（原発性脳腫瘍、胃、結腸）；ストレプトゾシン（悪性膵臓インスリノーマ、悪性カルチノイド）
トリアジン。ダカルバジン（悪性黒色腫、ホジキン病、軟部組織肉腫）
白金錯体。シスプラチン、カルボプラチン（精巣、卵巣、膀胱、頭頸部、肺、甲状腺、頸部、子宮内膜、神経芽細胞腫、骨肉腫）
メチルヒドラジン誘導体。プロカルバジン（ホジキン病）
代謝拮抗物質
葉酸アンタゴニスト。メトトレキサート、トリメトレキサート（急性リンパ性白血病、絨毛腫、菌状息肉腫、胸部、頭頸部、肺、骨肉腫）
ピリミジンアンタゴニスト。フルオロウラシル、フロクスウリジン（胸部、結腸、胃、膵臓、卵巣、頭頸部、膀胱、皮膚、腺癌）；シタラビン（急性骨髄性白血病および急性リンパ性白血病）；リン酸フルダラビン（リンパ増殖性疾患）；カペシタビン（胸部、腎細胞、前立腺）；アザシチジン（急性白血病）
プリンアンタゴニスト。チオグアニン（急性骨髄性白血病、急性リンパ性および慢性骨髄性白血病）；メルカプトプリン（急性リンパ性、急性骨髄性白血病および慢性骨髄性白血病）；アロプリン（白血病）；クラドリビン（ヘアリー細胞白血病）；ゲムシタビン（膵臓、軟部組織癌）；ペントスタチン（ヘアリー細胞白血病、菌状息肉腫；慢性リンパ球性白血病）
抗分裂剤
ビンブラスチン（ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、胸部、精巣）；ビンクリスチン（急性リンパ性白血病、神経芽細胞腫、ウィルムス腫瘍、横紋筋肉腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、小細胞肺）
ＤＮＡトピイソメラーゼＩＩ阻害剤
Ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ，テニポシド（精巣、小細胞肺、燕麦細胞肺、胸部、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、急性骨髄性白血病、カポジ肉腫）
ＤＮＡトピイソメラーゼＩ阻害剤
トポテカン、イリノテカンカンプトセシン、９−アミノ−カンプトセシン（卵巣、結腸直腸）
タキサン
パクリタキセル、ドセタキセル（胸部）
ＤＮＡ挿入剤
ダウノルビシン（急性骨髄性白血病および急性リンパ性白血病）；ドキソルビシン（筋肉腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、急性白血病、多発性骨髄腫、胸部、非尿生殖器、甲状腺、肺、卵巣、子宮内膜、精巣、胃、神経芽細胞腫）；ダクチノマイシン（絨毛腫、ウィルムス腫瘍、横紋筋肉腫、精巣、カポジ肉腫）；イダルビシン（急性骨髄性白血病）；プリカマイシン（精巣癌）；マイトマイシン（扁平上皮細胞癌腫、膀胱、乳頭腫腺癌、膵臓、肺、結腸、胃、頸部、胸部、頭頸部）；アムサクリン（急性骨髄性白血病、卵巣癌、リンパ腫）；ブレオマイシン（精巣、頭頸部、皮膚、食道、扁平上皮細胞、結腸直腸、肺、尿生殖路、頸部、卵巣、胸部、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫）
ホルモン剤
アロマターゼ阻害剤。アミノグルテチミドアナストロゾール（胸部）
５−α−レダクターゼ阻害剤。フィナステライド、ケトコナゾール（前立腺）
エストロゲンおよびアンドロゲン阻害剤。タモキシフェン（胸部）；フルタミド（前立腺）
ゴナドトロピン放出ホルモンアゴニスト。ロイプロリド、ゴセレリン（前立腺）
チロシンキナーゼ阻害剤
ＡＢＬ阻害剤。グリーベック（慢性骨髄性白血病または急性リンパ芽球性白血病）
ＰＤＧＦＲ阻害剤。レフルノミド、ＳＵ５４１６、ＳＵ６６６８、ＰＴＫ７８７（消化管間質腫瘍、小細胞肺癌、多形性膠芽腫、および前立腺癌）
ＥＧＦＲ阻害剤。イレッサ、タルセバ、トラスツズマブ、エルビタックス、ＰＫ１１６６、ＧＷ２０１６、ＥＫＢ−５０９、ＥＫＢ−５６９、ＭＤＸ−Ｈ２１０、２Ｃ４、ＭＤＸ−４４７、ＡＢＸ−ＥＧＦ、ＣＩ−１０３３（非小細胞肺癌、乳癌、卵巣癌、膀胱癌、前立腺癌、唾液腺癌、膵臓癌、子宮内膜癌、結腸直腸癌、腎臓癌、頭頸部癌、多形性膠芽腫）
ＶＥＧＦＲ阻害剤。アバスチン、ＩＭＣ−ＩＣＩＩ、ＺＤ４１９０、ＺＤ６４７４（いかなる固形腫瘍）
Ｔｒｋ阻害剤。ＣＥＰ−７０１、ＣＥＰ−７５１（前立腺癌、膵臓癌）
Ｆｌｔ−３阻害剤。ＭＬＮ５１８、ＰＫＣ４１２（急性骨髄性白血病）
レチノイン酸誘導体
１３−シス−レチノイン酸、イソトレチノイン、トレチニルパルミテート、４−（ヒドロキシカルボフェニル）レチナミド（急性前骨髄球性白血病、頭頸部扁平上皮細胞癌腫）
低酸素症選択細胞毒素
ミソニダゾール（頭頸部）；ニトラクリン（胸部）
種々の薬剤
ミトキサントロン（急性骨髄性白血病、非ホジキンリンパ腫、胸部）；ヒドロキシウレア（慢性骨髄性白血病、真性赤血球増加症、本態性血小板増多症、悪性黒色腫）；Ｌ−アスパラギン（急性リンパ性白血病）；インターフェロンα（ヘアリー細胞白血病、カポジ肉腫、黒色腫、カルチノイド、腎細胞、卵巣、膀胱、非ホジキンリンパ腫、菌状息肉腫、多発性骨髄腫、慢性骨髄性白血病）；ラパマイシン、ＣＣＩ−７７９（多形性膠芽腫、腎細胞癌腫）；ミトタン（副腎癌）
以下の実施例は、例示目的のものであり、いかなる方法において、本発明を制限するものとして解釈されるべきではない。
【実施例】
【００９１】
実施例１：イソジギトキシゲニングリコシドの合成
【００９２】
【化１９】
2011530535.tif 000021
ジギトキシゲニン１：ジギトキシン（１０ｇ、１３．０７ｍｍｏｌ）をメタノール（３００ｍＬ）中で懸濁し、ｐ−トルエンスルホン酸（１．０２ｇ、１．３１ｍｍｏｌ）を添加し、室温で一晩撹拌した。メタノールを、減圧下で除去し、残渣物をアセトン中で溶解し、ヘキサンで沈殿し、濾過し、白色固体としてジギトキシゲニン１（３．８６ｇ、収率７９％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：５．８７（ＡＢＸのＸ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ），４．９９（ＡＢＸのＡ，Ｊ＝１８．１，１．５Ｈｚ，１Ｈ），４．８０（ＡＢＸのＢ，Ｊ＝１８．１，１．５Ｈｚ，１Ｈ），４．１３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），２．７８（ｍ，１Ｈ），２．２３−２．０６（ｍ，２Ｈ），１．９８−１．１４（ｍ，２０Ｈ），０．９６（ｓ，３Ｈ），０．８８（ｓ，３Ｈ）
【００９３】
【化２０】
2011530535.tif 000022
フラン２：ジギトキシゲニン１（２．５０ｇ、６．６８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ中で溶解し、−５℃まで冷却した。ＤＩＢＡＬ（ＴＨＦ中６０．１ｍＬの１Ｍ溶液、６０．１ｍｍｏｌ）を追加の漏斗を介して滴下した。１０％Ｈ２ＳＯ４に注ぎ入れる際、この溶液を１．５時間撹拌した。ＥｔＯＡｃを添加し、水層を酢酸エチルで洗浄した。混合した有機層を、飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。粗生成物をジオキサン／Ｈ２Ｏ／ＡｃＯＨ（２０ｍＬ／４ｍＬ／２ｍＬ）中で溶解し、ＭｎＯ２（５．８１ｇ、６６．８ｍｍｏｌ）を添加した。この溶液を８Ｏ℃まで加熱し、２．５時間撹拌した。この溶液を、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）で濾過し、濃縮した。粗固体をジクロロメタン中で溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。収率、２＝１．７６ｇ（７４％）：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．３１（ｄｄ，Ｊ＝１．５，１．５Ｈｚ，１Ｈ），７．２０（ｄｄ，Ｊ＝０．７３，０，７３Ｈｚ，１Ｈ），６．４６（ｄｄ，Ｊ＝１．８，０．７３Ｈｚ，１Ｈ），４．１４（ｍ，１Ｈ），２．７４（ｄｄ，Ｊ＝９．５，５．９Ｈｚ，１Ｈ），１．１−２．１（ｍ，２１Ｈ），０．９５（ｓ，３Ｈ），０．７１（ｓ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）δ１４２．７，１３９．９，１２９．８，１１２．３，８６．１，６７．２，４８．３，４７．２，４２．７，４０．８，３６．５，３６．０，３５．８，３３．７，３３．０，３０．０，２９．８，２８．３，２６．９，２４．１，２１．８，２１．７，１６．８。
【００９４】
【化２１】
2011530535.tif 000023
イソジギトキシゲニン３：フラン２（６００ｍｇ、１．６７ｍｍｏｌ）を、ジオキサン／Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ、２０：１）中で溶解した。酢酸ナトリウム（１９２ｍｇ、２．３４ｍｍｏｌ）およびＮＢＳ（３２８ｍｇ、１．８４ｍｍｏｌ）を添加した。この溶液を、１．５時間撹拌し、次いで、クロロホルムおよび飽和ＮａＨＣＯ３を添加した。該層を分割し、水層をクロロホルムで抽出した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。粗固体を、酢酸（５ｍＬ）中で溶解し、１５０ｍｇの亜鉛末を添加した。濾過し、酢酸エチルで洗浄した際、懸濁液を、３０分間撹拌した。この溶液を、濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（１：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ〜２：１  ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）で精製した。生成物を、ＥｔＯＡｃ中で溶解し、１Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３で６回洗浄し、スクシンイミドを除去した。収率３＝４３２ｍｇ（６９％）：１Ｒ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．２６（ｍ，１Ｈ），４．７９（ｍ，２Ｈ），４．１３（ｍ，１Ｈ），２．７７（ｄｄ，Ｊ＝７．３，７．３Ｈｚ，１Ｈ），１．１−２．１（ｍ，２１Ｈ），０．９５（ｓ，３Ｈ），０．８２（ｓ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）δ１７５．８，１４７．７，１３７．３，８５．６，７０．４，６７．１，４９．１，４７．４，４１．７，４１．１，３６．３，３５．６，３５．６，３３．６，３３．１，２９．９，２８．１，２７．１，２６．８，２４．０，２１．７，２１．６，１５．９。
【００９５】
【化２２】
2011530535.tif 000024
ベンゾイル化イソジギトキシゲニンキシロシド５：イソジギトキシゲニン３（７．１３ｇ、１９．９ｍｍｏｌ）およびＺｎ（ＯＴｆ）２（３６１ｍｇ、０．９９ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（７０ｍＬ）と分子篩とを備えた丸底フラスコに入れ、次いで、０〜５℃まで冷却した。イミダート１６（１４．４８ｇ、２３．８６ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（５０ｍＬ）中で溶解し、滴下した。酢酸エチルおよび飽和ＮａＨＣＯ３を添加した際、溶液を、３時間撹拌した。該溶液を分割し、有機層を食塩水で洗浄した。次いで、有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。粗生成物を、シリカゲルクロマトグラフィー（２０：１  ＤＣＭ：アセトン）で精製した。収率５＝１０．６７ｇ（６６％）イソ−ジギトキシンキシロシド＋１．２ｇ  イソジギトキシゲニン：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．９９（ｍ，６Ｈ），７．５１（ｍ，３Ｈ），７．３６（ｍ，６Ｈ），７．２５（ｍ，１Ｈ），５．７６（ｄｄ，Ｊ＝７．３，７．３Ｈｚ，１Ｈ），５．３９（ｄｄ，Ｊ＝７．０，５．５Ｈｚ，１Ｈ），５．３０（ｄｄｄ，Ｊ＝７．０，７．０，４．４Ｈｚ，１Ｈ），４．８７（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ），４．７８（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），４．４４（ｄｄ，Ｊ＝１２．０，４．０Ｈｚ，１Ｈ），４．０７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），３．６９（ｄｄ，Ｊ＝１２．０，７．３Ｈｚ，１Ｈ），２．７４（ｍ，１Ｈ），２．１−１．０（ｍ，２２Ｈ），０．７８（ｓ，３Ｈ），０．６３（ｓ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）δ１７５．９，１６５．９，１６５．８，１６５．５，１４７．６，１３７．５，１３３．７，１３３．７，１３３．５，１３０．２，１３０．２，１３０．１，１２９．７，１２９．５，１２９．４，１２８．７，１２８．７，１２８．６，９８．０，８５．８，７３．７，７０．８，７０．７，７０．５，６９．６，６１．５，４９．１，４７．４，４１．９，４１．０，３６．７，３５．９，３５．３，３３．２，３２．４，２９．９，２７．３，２６．９，２４．１，２３．７，２１．８，２１．６，１５．９。
【００９６】
【化２３】
2011530535.tif 000025
イソジギトキシゲニンキシロシド６：トリベンゾエート５（５０ｍｇ、０．０６１ｍｍｏｌ）を、メタノール／ＴＨＦ（６０ｍＬ  ＭｅＯＨ：２０  ｍＬ  ＴＨＦ）中で懸濁し、ＮａＯＭｅ（０．２９ｍＬの２５％  溶液）を添加した。アンバーライト酸性樹脂を添加した際、該溶液を、４時間撹拌した。該樹脂を濾過し、該溶液を濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（９：１  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ）で精製した。収率６＝４．８３ｇ（７６％）：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，３００ＭＨｚ）δ７．４７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），４．８７（ｍ，２Ｈ），４．２９（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），４．０３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），３．８５（ｄｄ，Ｊ＝１１．３，５．１Ｈｚ，１Ｈ），３．４７（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．２，８．８，５．１  Ｈｚ，１Ｈ），３．３０（ｍ，１Ｈ），３．１６（ｍ，２Ｈ），２．７０（ｍ，１Ｈ），２．２−１．１（ｍ，２２Ｈ），０．９４（ｓ，３Ｈ），０．７９（ｓ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）δ１７６．１，１４９．０，１３７．３，１０２．７，８５．０，７７．５，７４．２，７３．６，７１．２，７０．５，６６．５，４９．１，４６．４，４１．９，４１．９，３６．９，３５．９，３５．７，３３．０，３２．６，３０．５，２８．９，２７．４，２４．７，２４．５，２２．０，２１．９，１６．５。
【００９７】
実施例２：ジギトキシゲニンＯ−グリコシドの合成
【００９８】
【化２４】
2011530535.tif 000026
ジギトキシゲニン  トリ−ベンゾイル−Ｏ−Ｌ−リボシド７：ジギトキシゲニン１（９．４６ｇ、２５．３ｍｍｏｌ）を、４Ａ分子篩を含むＤＣＭ（１５０ｍＬ）中で溶解し、アルゴン雰囲気下で、０℃にした。この溶液に、α／β−１−トリクロロアセトイミダート−２，３，４−トリ−ベンゾイル−Ｌ−リボース（１６．８６ｇ、２７．８ｍｍｏｌ）を添加し、５分間撹拌し、次いで、トリメチルシリルトリフルオロメタンスルホン酸（２２８μＬ、１．２６ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を、０℃で１５分間撹拌し、次いで、濾過し、篩をＤＣＭ（１００ｍＬ）で洗浄し、溶媒を真空内で除去した。反応混合物を、フラッシュクロマトグラフィー（８：２  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ〜ＥｔＯＡｃ）で精製し、白色発泡体として７（１７．０ｇ、２０．７ｍｍｏｌ、８２％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ８．０２（ｄｄｄ，Ｊ＝１３．５，７．６，１，１Ｈｚ，４Ｈ），７．８９（ｄｄ，Ｊ＝７．６，１．１，２Ｈ），７．５８−７．４６（ｍ，３Ｈ），７．３７−７．２５（ｍ，６Ｈ），５．９１−５．８３（ｍ，２Ｈ），５．６３（ｑ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ），５．４９（ｔ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ），５．２２（ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），５．０２（ＡＢＸのＡ，Ｊ＝１８．３，１．１Ｈｚ，１Ｈ），４．８０（ＡＢＸのＢ，Ｊ＝１８．３，１．１Ｈｚ，１Ｈ），４．３６−４．０３（ｍ，３Ｈ），２．８５−２．７１（ｍ，１Ｈ），２．２１−１．１３（ｍ，２２Ｈ），０．９３（ｓ，３Ｈ），０．８７（ｓ，３Ｈ）１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）：δ１７５．２７，１７４．８４，１６６．３９，１６６．２３，１６５．５４，１３３．４８，１３３．３７，１３０．１６，１３０．１０，１３０．０１，１２９．９０，１２９．６６，１２８．５８，１２８．５５，１１７．６７，９６．３６，８５．４７，７３．７２，７２．８３，６９．６３，６８．０３，６６．８５，６１．４８，５１．１８，４９．８８，４１．８７，３６．８４，３５．８７，３５．４３，３３．２３，３２．１６，３０．１９，２７．１０，２３．９８，２３．８７，２１．５２，２１．８３，１５．９７。
【００９９】
【化２５】
2011530535.tif 000027
ジギトキシゲニン  Ｏ−Ｌ−リボシド８：ジギトキシゲニン  トリ−ベンゾイル−Ｏ−Ｌ−リボシド７（９．０ｇ、１１．０ｍｍｏｌ）を、室温で、３：１  メタノール：ＴＨＦ（３００ｍＬ）中で溶解した。ナトリウムメトキシド（２５０ｕＬの２５％  溶液）を添加し、３時間撹拌した。酢酸（７０μＬ）を添加し、１分間撹拌し、次いで、溶媒を真空内で除去した。得られた残渣物を、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ〜９：１  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ）で精製し、白色固体として８（４．５ｇ、８．８９ｍｍｏｌ、８０％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６／ＣＤ３ＯＤ，３００ＭＨｚ）：δ５．８５（ＡＢＸのＸ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），４．９４（ＡＢＸのＡ，Ｊ＝１８．５，１．６Ｈｚ，１Ｈ），４．８３（ＡＢＸのＢ，Ｊ＝１８．５，１．６Ｈｚ，１Ｈ），４．６１（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），３．８４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），３．６６（ｔ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ），３．６２−３．５４（ｍ，２Ｈ），３．４７（ｄｄ，Ｊ＝１２．０，６．０Ｈｚ５，１Ｈ），３．３３（ｄｄ，Ｊ＝４．２，２．９Ｈｚ，１Ｈ），２．７０（ｍ，１Ｈ），２．１１−１．９３（ｍ，２Ｈ），１．９１−０．９９（ｍ，２０Ｈ），０．８５（ｓ，３Ｈ），０．７５（ｓ，３Ｈ）１３Ｃ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６／ＣＤ３ＯＤ，７５ＭＨｚ）：δ１７７．０８，１７４．５４，１１６．８８，９９．２１，８４．４，７３．７８，７２．１９，７１．７８，６９．３６，６７．５６，６４．３３，５０．９２，５０．０５，４１．６０，３７．０５，３５．５１，３５．４６，３２．７８，３２．２６，３０．４７，２７．０６（ｂｒ），２４．１８，２１．６４，２１．４６，１６．４０。
【０１００】
実施例３：シラレニンネオ−グリコシドの合成
【０１０１】
【化２６】
2011530535.tif 000028
シラレニン９：プロシラリジン（３ｇ、５．６ｍｍｏｌ）を、撹拌しながら、４０℃で、エタノール（５７ｍＬ）中で溶解し、この溶液に、４０℃で、１７１ｍＬの酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ＝４、０．０２Ｍ）、次いで、ナリジナーゼ（１．０３ｇ）を添加した。反応物を、２４時間撹拌し、エタノール（２００ｍＬ）を添加し、溶媒を真空内で除去した際、さらに１００ｍＬのエタノールを添加し、溶媒を真空内で除去した。物質を、フラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ〜９：１  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ）で精製し、オフホワイトの固体として９（１．９ｇ、４．９ｍｍｏｌ、９０％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：７．８９（ｄｄ，Ｊ＝９．７，２．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２６（ｄｄ，Ｊ＝２．６，０．９Ｈｚ，１Ｈ），６．２７（ｄｄ，Ｊ＝９．７，０．９，１Ｈ），５．３１（ｓ，１Ｈ），４．３１（ｍ，１Ｈ），２．４７（ｄｄ，Ｊ＝９．３，６．２Ｈｚ，１Ｈ），２．２５−０．９８（ｍ，１９Ｈ），１．０４（ｓ，３Ｈ），０．７３（ｓ，３Ｈ）１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣ１３，７５ＭＨｚ）：１６３．２８，１４８．７７，１４７．５９，１４６．４２，１２３．９０，１２３．３５，１１５．２２，８５．０１，６７．６５，５１．２０，５０．３８，４８．４６，４２．６５，４０．８２，３７．５８，３５．７１，３２．６５，３２．３６，２９．１７，２８．８９，２８．７６，２１．４３，１９．１０，１６．６９。
【０１０２】
【化２７】
2011530535.tif 000029
３−ケト−シラレニン１０：シラレニン（１．９ｇ、４．９ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下で、ＤＣＭ（２５ｍＬ）中で溶解し、４A分子篩、次いで、ＮＭＯ（１．１６ｇ、９．９ｍｍｏｌ）、およびＴＰＡＰ（８５ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、混合物を、室温で３０分間撹拌した。次いで、物質を、シリカゲル（ＥｔＯＡｃ）の栓を通して溶出し、粗物１０（２．１ｇ、５．５ｍｍｏｌ）を得た。
【０１０３】
【化２８】
2011530535.tif 000030
シラレニンオキシム１１：粗物１０（２．１ｇ、５．５ｍｍｏｌ）を、３：１  エタノール：ＴＨＦ（５０ｍＬ）中で溶解し、得られた溶液に、塩酸メトキシアミン（２．３ｇ、２７．５ｍｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（１．３５ｇ、１６．５ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を、室温で３０分間撹拌した。溶媒を真空内で除去し、残渣物を、フラッシュクロマトグラフィー（４：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ〜３５：６５  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）で精製し、白色固体としてオキシム１１の混合物（１．３９ｇ、３．３７ｍｍｏｌ、６１％）を得た。
【０１０４】
【化２９】
2011530535.tif 000031
シラレニンメトキシアミン１２：シラレニンオキシム１１（１．３９ｇ、３．３７ｍｍｏｌ）を、撹拌しながら、２５ｍＬのジクロロエタン中で溶解した。ＮａＢＨ３ＣＮ（２．１ｇ、３３．７ｍｍｏｌ）および酢酸（１．９３ｍＬ、３３．７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を、４５分間撹拌し、この時点で、飽和ＮａＨＣＯ３（２０ｍＬ）の溶液を添加した。ジクロロメタン（３００ｍＬ）を添加し、有機層を、飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）および食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、真空内で濃縮した。残渣物を、フラッシュクロマトグラフィー（３：２  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ〜２：３  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）で精製し、白色の発泡体として、１２（５５６ｍｇ、１３．５ｍｍｏｌ、４０％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：７．８３（ｄｄ，Ｊ＝９．７，２．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２３（ｄｄ，Ｊ＝２．６，０．９Ｈｚ，１Ｈ），６．２６（ｄｄ，Ｊ＝９．７，０．９Ｈｚ，１Ｈ），５．３０（ｓ，１Ｈ），３．５８−３．４７（ｍ，４Ｈ），２．４６（ｄｄ，Ｊ＝９．５，６．４Ｈｚ，１Ｈ），２．２７−０．９７（ｍ，１９Ｈ），１．０３（ｓ，３Ｈ），０．７３（ｓ，３Ｈ）。
【０１０５】
【化３０】
2011530535.tif 000032
シラレニン  ネオ−４−（Ｎ−トリフルオロアセチル）−アミノ−４−デオキシ−Ｌ−リボピラノシド１３。４−（Ｎ−トリフルオロアセチル）−アミノ−４−デオキシ−Ｌ−リボピラノシド３２（１０９ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）およびシラレニンメトキシアミン１２（９２ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ／ＡｃＯＨ（３．１ｍＬ、３：１）中で溶解した。反応混合物を、３５℃で３日間撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。残渣物を、フラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９５：５）で精製し、黄色の発泡体として、シラレニンネオ−４−（Ｎ−トリフルオロアセチル）−アミノ−４−デオキシ−Ｌ−リボピラノシド１３（８０ｍｇ、５６％）Ｒｆ  ０．３０（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９０：１０）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，Ｃ５Ｄ５Ｎ）δ０．９５（ｓ，６Ｈ，ＣＨ３），１．００−２．４８（ｍ，１８Ｈ），３．９４（ｓ，３Ｈ，ＮＯＣＨ３），４．１９（ｍ，２Ｈ），４．４５（ｍ，１Ｈ），４．７５（ｍ，２Ｈ），４．９６（ｍ，２Ｈ），５．０６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），５．４１（ｓ，１Ｈ），５．８４（ｓ，１Ｈ），６，３８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．７Ｈｚ），７．４８（ｓ，１Ｈ），８．２５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２，１，９．３Ｈｚ）。
【０１０６】
【化３１】
2011530535.tif 000033
シラレニン  ネオ−４−アミノ−４−デオキシ−Ｌ−リボピラノシド１４。シラレニンネオ−４−（Ｎ−トリフルオロアセチル）−アミノ−４−デオキシ−Ｌ−リボピラノシド１３（８１０ｍｇ、１．２６ｍｍｏｌ）を、３０％  ＮＨ３／ＭｅＯＨ（１５：８５）水溶液中で溶解した。反応混合物を、一晩撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。残渣物を、フラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ３、９４．８：５：０．２〜８９．８：１０：０．２）で精製し、黄色固体として、１４（４３０ｍｇ、６２％）Ｒｆ０．１３（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ３、８９．８：１０：０．２）を得た。
【０１０７】
【化３２】
2011530535.tif 000034
シラレニン  ネオ−４−アミノ−４−デオキシ−Ｌ−キシロシド１５：シラレニンメトキシアミン１２（３０ｍｇ、０．０７２ｍｍｏｌ）および４−アミノ−４−デオキシ−Ｌ−キシロース３７（２５．４ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を、３：１  ＤＭＦ：ＡｃＯＨ（１．０ｍＬ）中で溶解し、４０℃で３６時間反応させた。溶媒を真空内で除去し、残渣物を、シリカゲル栓を通して９５：４．５：０．５  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨで溶出し、次いで、蒸発させ、未反応の糖を除去し、得られた残渣物を、９：１  ＴＨＦ：水（１ｍＬ）中で溶解した。該溶液に、トリフェニルホスフィン（３８．０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を、室温で６時間撹拌した。溶媒を真空内で除去し、残渣物を、フラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（９５：４．５：０．５  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ〜８０：１９：１  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ）で精製し、白色固体として、１５（４．４ｍｇ、０．００８ｍｍｏｌ、１１％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，３００ＭＨｚ）：δ７．８５（ｄｄ，Ｊ＝９．７，２．５Ｈｚ，１Ｈ），７．２４（ｄｄ，Ｊ＝２．５，０．７Ｈｚ，１Ｈ），６．２７（ｄｄ，Ｊ＝９．７，０．７，１Ｈ），５．４０（ｓ，１Ｈ），３．９９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），３．９５（ｄｄ，Ｊ＝１１．３，５．０Ｈｚ，１Ｈ），３．７８−３．５９（ｍ，５Ｈ），３．２９（ｔ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），３．０９（ｔ，Ｊ＝１１．３Ｈｚ，１Ｈ），２．９２（ｄｄｄ，Ｊ＝１１．３，８．８，５．０Ｈｚ，１Ｈ），２．４７（ｄｄ，Ｊ＝９．３，６．３Ｈｚ，１Ｈ），２．２３−０．９９（ｍ，１９Ｈ），１．０３（ｓ，３Ｈ），０．７３（ｓ，３Ｈ）。
【０１０８】
実施例４：糖の合成
【０１０９】
【化３３】
2011530535.tif 000035
テトラ−ベンゾイル−Ｌ−キシロース１６：Ｌ−キシロース（５．０ｇ、３３．３ｍｍｏｌ）を、０℃でピリジン（４５ｍＬ、５５６ｍｍｏｌ）中で懸濁し、塩化ベンゾイル（３０．９ｍＬ、２６．６ｍｍｏｌ）を、１５分間にわたり添加し、さらに３０分間撹拌した。溶媒を真空内で除去し、残渣物を、ジクロロメタン（３００ｍＬ）中で溶解し、溶液を、２００ｍＬの１Ｍ  ＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ３（１５０ｍＬ）、食塩水（１５０ｍＬ）で３回洗浄し、次いで、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、真空内で濃縮し、濃厚な黄色油として、１６（１８．０３ｇ、３１．８ｍｍｏｌ、９５％）を得た。物質は、さらに精製せずに使用した。
【０１１０】
【化３４】
2011530535.tif 000036
１−ブロモ−２，３，４−トリ−ベンゾイル−Ｌ−キシロース１７：粗物テトラ−ベンゾイル−Ｌ−キシロース１６（１８ｇ、３１．７ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下で、Ｏ℃で、ジクロロメタン（１７５ｍＬ）中で溶解した。この溶液に、ＡｃＯＨ（３４．５ｍＬ、１９０．２ｍｍｏｌのＨＢｒ）中の３３％  ＨＢｒを添加し、反応物を、Ｏ℃で３０分間撹拌し、次いで、３０分間室温にした。ジクロロメタン（１００ｍＬ）を添加し、次いで、混合物を、１２５ｍＬの冷水で洗浄し、低濃度のＮａＨＣＯ３で洗浄し、飽和ＮａＨＣＯ３で２回洗浄し、食塩水で洗浄し、次いで、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、真空内で濃縮し、オフホワイトの固体として、１６（１４．１ｇ、２６．８ｍｍｏｌ、８５％）を得た。この物質は、さらに精製せずに使用した。
【０１１１】
【化３５】
2011530535.tif 000037
２，３，４−トリ−ベンゾイル−Ｌ−キシロース１８：粗物１−ブロモ−２，３，４−トリ−ベンゾイル−Ｌ−キシロース１７（１４．１ｇ、２６．８ｍｍｏｌ）を、０℃で、アセトン（１５０ｍＬ）および水（５ｍＬ、２７７ｍｍｏｌ）中で溶解した。炭酸銀（６．６１ｇ、２４．０ｍｍｏｌ）を５分間にわたり添加し、反応物を、１５分後、室温にし、さらに３０分間撹拌した。固体は、濾過により除去し、アセトン（１００ｍＬ）で洗浄し、濾液を、真空内で濃縮し、水は、エタノールおよびトルエンを用いて、共沸蒸留を介して除去し、残渣物を、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（４：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ〜ＥｔＯＡｃ）で精製し、白色固体として、１８（９．１ｇ、１９．６ｍｍｏｌ、７４％）を得た。
【０１１２】
【化３６】
2011530535.tif 000038
α／β−ｌ−トリクロロアセトイミダート−２，３，４−トリ−ベンゾイル−Ｌ−キシロース１９：  ２，３，４−トリ−ベンゾイル−Ｌ−キシロース１８（１．０ｇ、２．２ｍｍｏｌ）を、０℃で、１５ｍＬのジクロロメタン中で溶解し、この溶液に、トリクロロアセトニトリル（２．６ｍＬ、２５．９ｍｍｏｌ）およびＤＢＵ（１．６μＬ、０．１１ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を、０℃で、３０分間撹拌し、次いで、真空内で濃縮し、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ）で精製し、白色固体として、１９（１．２ｇ、１．９８ｍｍｏｌ、９２％）を得た。
【０１１３】
【化３７】
2011530535.tif 000039
テトラ−ベンゾイル−Ｌ−リボース２０：Ｌ−リボース（４．８ｇ、３１．９ｍｍｏｌ）を、０℃で、ピリジン（４５ｍＬ、５５６ｍｍｏｌ）中で懸濁し、塩化ベンゾイル（２９．７ｍＬ、２５．６ｍｍｏｌ）を、１５分間にわたり添加し、反応物を、さらに３０分間撹拌した。溶媒を、真空内で除去し、残渣物を、ジクロロメタン（３００ｍＬ）中で溶解し、２００ｍＬの１Ｍ  ＨＣｌで３回、飽和ＮａＨＣＯ３（１５０ｍＬ）、および食塩水（１５０ｍＬ）で洗浄し、次いで、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、真空内で濃縮し、濃厚な黄色油として、２０（１７．０ｇ、３０．０ｍｍｏｌ、９４％）を得た。この物質は、さらに精製せずに使用した。
【０１１４】
【化３８】
2011530535.tif 000040
１−ブロモ−２，３，４−トリ−ベンゾイル−Ｌ−リボース２１：粗物テトラ−ベンゾイル−Ｌ−リボース２０（１７．０ｇ、３０．０ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下で、０℃で、ジクロロメタン（１５０ｍＬ）中で溶解した。この溶液に、ＡｃＯＨ（３２．６ｍＬ、１８０．０ｍｍｏｌのＨＢｒ）中の３３％  ＨＢｒを添加し、反応物を、０℃で３０分間撹拌し、次いで、３０分間室温にした。ジクロロメタン（１５０ｍＬ）を添加し、反応混合物を、１２５ｍＬの冷水で洗浄し、低濃度のＮａＨＣＯ３で洗浄し、飽和ＮａＨＣＯ３で２回、および食塩水で洗浄し、次いで、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、真空内で濃縮し、オフホワイトの固体として、２１（１３．３ｇ、２５．３ｍｍｏｌ、８４％）を得た。この物質は、さらに精製せずに使用した。
【０１１５】
【化３９】
2011530535.tif 000041
２，３，４−トリ−ベンゾイル−Ｌ−リボース２２：粗物１−ブロモ−２，３，４−トリ−ベンゾイル−Ｌ−リボース２１（１３．３ｇ、２５．３ｍｍｏｌ）を、０℃で、アセトン（１５０ｍＬ）および水（５ｍＬ、２７７ｍｍｏｌ）中で溶解した。炭酸銀（６．２８ｇ、２２．７ｍｍｏｌ）を、５分間にわたり添加した。反応物を、１５分後、室温にし、さらに３０分間撹拌した。固体を、濾過により除去し、アセトン（１００ｍＬ）で洗浄し、濾液を真空内で濃縮した。水は、エタノールおよびトルエンを用いて、共沸蒸留を介して除去し、残渣物を、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（４：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ〜ＥｔＯＡｃ）で精製し、白色固体として、２２（９．８ｇ、２１．２ｍｍｏｌ、８５％）を得た。
【０１１６】
【化４０】
2011530535.tif 000042
α／β−１−トリクロロアセトイミダート−２，３，４−トリ−ベンゾイル−Ｌ−リボース２３：２，３，４−トリ−ベンゾイル−Ｌ−リボース２２（１．０ｇ、２．２ｍｍｏｌ）を、０℃で、１５ｍＬのジクロロメタン中で溶解し、この溶液に、トリクロロアセトニトリル（２．６ｍＬ、２５．９ｍｍｏｌ）およびＤＢＵ（１．６μＬ、０．１１ｍｍｏｌ）を添加した。この溶液を、０℃で３０分間撹拌し、次いで、真空内で濃縮し、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ）で精製し、白色固体として、２３（１．２５ｇ、２．０６ｍｍｏｌ、９５％）を得た。
【０１１７】
【化４１】
2011530535.tif 000043
１−アリル−Ｄ−リキソピラノシド２４。アリルアルコール（５００ｍＬ）中のＤ−リキソース（５０ｇ、３３３ｍｍｏｌ）およびＮａ２ＳＯ４（５０ｇ）の懸濁液に、０℃で、Ｈ２ＳＯ４（５．２ｍＬ）を滴下した。反応物を、８５℃で加熱し、１２時間撹拌した。混合物を濾過し、減圧下で濃縮した。粗物質を、フラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９５：５〜８０：２０）で精製し、茶色の油として、１−アリル−Ｄ−リキソピラノシド２４（５０ｇ、７８％）Ｒｆ０．２（ＣＨ２Ｃｌ２ＭｅＯＨ、９：１）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ３．４４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．６，８．４Ｈｚ，Ｈ−５），３．６０−３．７１（ｍ，４Ｈ，Ｈ−２，Ｈ−３，Ｈ−４，Ｈ−５），３．９９（ｄｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝１２．９，６．３，１．５Ｈｚ，ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ２），４．１８（ｄｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝１２．９，５．６，１．５Ｈｚ，ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ２），４．７１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，Ｈ−１），５．１７（ｄｑ，１Ｈ，Ｊ＝１０．２，１．２Ｈｚ，ＣＨ２＝ＣＨ），５，２８（ｄｑ，１Ｈ，Ｊ＝１７．１，１．５Ｈｚ，ＣＨ２＝ＣＨ），５．９３（ｄｄｄｄ，Ｊ＝１６．８，１０．５，６．３，５．７Ｈｚ，ＣＨ２＝ＣＨ）；１３Ｃ−ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ６３．０（Ｃ−５），６７．３（Ｃ−４），６８．０（ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ２），７０．５，７１．６（Ｃ−２，Ｃ−３），９９．９（Ｃ−１），１１６．２（ＣＨ２＝ＣＨ），１３４．３（ＣＨ２＝ＣＨ）。
【０１１８】
【化４２】
2011530535.tif 000044
１−アリル−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リキソピラノシド２５。１−アリル−Ｄ−リキソピラノシド２４（５０ｇ、２６２ｍｍｏｌ）を、４−A分子篩（７３ｇ）を含む、２，２−ジメトキシプロパン／アセトン（４００ｍＬ、１：１）中で溶解した。０℃で、ＩＲ１２０＋（１３ｇ）を添加し、混合物を、室温で２４時間撹拌した。反応混合物を、セライトのパッドを通して濾過し、減圧下で濃縮した。残渣物を、フラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、３：２）で精製し、オフホワイトの固体として、１−アリル−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リキソピラノシド２５（３３ｇ、５５％）Ｒｆ０．６（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１：１）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．３６（ｓ，３Ｈ），１．５１（ｓ，３Ｈ），３．６７−３．７６（ｍ，１Ｈ，Ｈ−５），３．７８−３．８７（ｍ，２Ｈ，Ｈ−４，Ｈ−５），４．０７（ｄｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝１２．８，６．２，１．３Ｈｚ，ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ２），４．１７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．２，２．７Ｈｚ，Ｈ−２），４．２３−４．３３（ｍ，２Ｈ，Ｈ−３，ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ２），４．８１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，Ｈ−１），５．２３（ｄｑ，１Ｈ，Ｊ＝１０．５，１．５Ｈｚ，ＣＨ２＝ＣＨ），５．３２（ｄｑ，１Ｈ，Ｊ＝１７．３，１．６Ｈｚ，ＣＨ２＝ＣＨ）；１３Ｃ−ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ２５．７（ＣＨ３），２７．７（ＣＨ３），６３．３（Ｃ−５），６７．５（Ｃ−４），６９．０（ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ２），７４．６（Ｃ−２），７６．４（Ｃ−３），９７，８（Ｃ−１），１０９，７（Ｃ（ＣＨ３）２），１１８．３（ＣＨ２＝ＣＨ），１３３．６（ＣＨ２＝ＣＨ）。
【０１１９】
【化４３】
2011530535.tif 000045
１−アリル−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−４−トリフルオロメタンスルホン酸−Ｄ−リキソピラノシド２６。１−アリル−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リキソピラノシド２５（３３ｇ、１４３ｍｍｏｌ）を、無水ジクロロメタン（３００ｍＬ）およびピリジン（４６ｍＬ）中で溶解した。トリフルオロメタンスルホン酸無水物（２９ｍＬ、１７２ｍｍｏｌ）を、０℃で１５分間滴下した。反応物を、０℃で２０分間撹拌した。反応混合物を、ＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、１Ｎ  ＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液および食塩水で洗浄した。有機層を、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮し、橙色油として、１−アリル−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−４−トリフルオロメタンスルホン酸−Ｄ−リキソピラノシド２６を得た。粗物質は、さらに精製せずに使用した。Ｒｆ０．７（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１：１）。
【０１２０】
【化４４】
2011530535.tif 000046
１−アリル−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−４−アジド−４−デオキシ−Ｌ−リボピラノシド２７。粗物１−アリル−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−４−トリフルオロメタンスルホン酸−Ｄ−リキソピラノシド２６を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２５０ｍＬ）中で溶解した。ＮａＮ３を添加し、混合物を、室温で一晩撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、得られた残渣物を、ジクロロメタン中で溶解し、水で洗浄した。該有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗物を、フラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、８５：１５〜３：１）で精製し、黄色の油として、１−アリル−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−４−アジド−４−デオキシ−Ｌ−リボピラノシド２７（２６．３ｇ、７２％）Ｒｆ０．５（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、４：１）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．４０（ｓ，３Ｈ），１．５７（ｓ，３Ｈ），３．７２−４．４１（ｍ，６Ｈ，Ｈ−５），３．７８−３．８７（ｍ，２Ｈ，Ｈ−４，Ｈ−５），４．５６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．２，３．６Ｈｚ），４．６７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．７Ｈｚ，Ｈ−１），５．１８−５．３９（ｍ，２Ｈ），５．８３−５．９９（ｍ，１Ｈ）；１３Ｃ−ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ２５．６（ＣＨ３），２６．９（ＣＨ３），５４．９（Ｃ−４），６０．３（Ｃ−５），６９．３（ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ２），７３．０（Ｃ−３），７５．４（Ｃ−２），９８．６（Ｃ−１），１１０．８（Ｃ（ＣＨ３）２），１１８．０（ＣＨ２＝ＣＨ），１３３．８（ＣＨ２＝ＣＨ）。
【０１２１】
【化４５】
2011530535.tif 000047
１−アリル−２，３−０−イソプロピリデン−４−アミノ−４−デオキシ−Ｌ−リボピラノシド２８。１−アリル−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−４−アジド−４−デオキシ−Ｌ−リボピラノシド２７（４，３ｇ、１６，８ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（６０ｍＬ、９：１）中で溶解し、ＰＰｈ３を添加し、反応混合物を、室温で２時間撹拌し、５０℃で２０分間反応を完了させた。溶媒を減圧下で除去し、粗物質は、さらに精製せずに使用した。
【０１２２】
【化４６】
2011530535.tif 000048
１−アリル−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−４−（Ｎ−トリフルオロアセチル）−アミノ−４−デオキシ−Ｌ−リボピラノシド２９。粗物１−アリル−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−４−アミノ−４−デオキシ−Ｌ−リボピラノシド２８を、ジクロロメタン（６０ｍＬ）中で溶解した。０℃で、ピリジンを滴下し、次いで、（ＣＦ３ＣＯ）２Ｏを滴下した。０℃で２時間撹拌した後、反応混合物を、ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液に注ぎ入れた。有機層をＨ２Ｏ、食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣物を、フラッシュクロマトグラフィー（軽石油エーテル／ＥｔＯＡｃ、８５：１５〜８０：２０）で精製し、オフホワイトの発泡体として、１−アリル−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−４−（Ｎ−トリフルオロアセチル）−アミノ−４−デオキシ−Ｌ−リボピラノシド２９（４．２ｇ、７７％）Ｒｆ０．４（軽石油／ＥｔＯＡｃ、４：１）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．３７（ｓ，３Ｈ），１．５２（ｓ，３Ｈ），３．５０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．５，１０．７Ｈｚ，Ｈ−５），３．８７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．１，１０．８Ｈｚ，Ｈ−５），４．０６（ｄｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝１２．９，６．３，１．２Ｈｚ，ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ２），４．１５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．５，６．４Ｈｚ，Ｈ−２），４．８（ｄｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝１２．９，５．１，１．４Ｈｚ，ＣＨ２−ＣＨ−ＣＨ２），４．４３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．３，４．３Ｈｚ，Ｈ−３），４．５６（ｄｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．５，７．５，４．５，５．０Ｈｚ，Ｈ−４），４．７０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，Ｈ−１），５．２２（ｄｑ，１Ｈ，Ｊ＝１０．４，１．２Ｈｚ，ＣＨ２＝ＣＨ），５．３２（ｄｑ，１Ｈ，Ｊ＝１７．２，１．６Ｈｚ，ＣＨ２＝ＣＨ），５．９０（ｄｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１７．０，１１．４，６．３，５．１Ｈｚ，ＣＨ２＝ＣＨ）；１３Ｃ−ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ２５．４（ＣＨ３），２６．９（ＣＨ３），４５．３（Ｃ−４），６０．１（Ｃ−５）；６９．２（ＣＨ２−ＣＨ−ＣＨ２），７１．６（Ｃ−３），７５．０（Ｃ−２），９８．０（Ｃ−１），１１０．６（Ｃ（ＣＨ３）２），１１８．２（ＣＨ２＝ＣＨ），１３３．７（ＣＨ２＝ＣＨ），１５７．１（ＣＦ３ＣＯ）。
【０１２３】
【化４７】
2011530535.tif 000049
１−アリル−４−（Ｎ−トリフルオロアセチル）−アミノ−４−デオキシ−Ｌ−リボピラノシド３０。１−アリル−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−４−（Ｎ−トリフルオロアセチル）−アミノ−４−デオキシ−Ｌ−リボピラノシド２９（４．２ｇ、１２．９ｍｍｏｌ）を、ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ（３０ｍＬ、８０：２０）中で溶解した。反応混合物を、室温で１０分間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、得られた残渣物を、フラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９５：５）で精製し、オフホワイトの発泡体として、１−アリル−４−（Ｎ−トリフルオロアセチル）−アミノ−４−デオキシ−Ｌ−リボピラノシド３０（３．６８ｇ、１００％）Ｒｆ０．２３（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９５：５）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ３．６４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１２．０，４．１Ｈｚ，Ｈ−５），３．８４（ｍ，１Ｈ，Ｈ−２），３，９２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．２，１２．０Ｈｚ，Ｈ−５），４．０−４．０６（ｍ，１Ｈ，ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ２），４．１１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，Ｈ−３），４．２１−４．２９（ｍ，２Ｈ，Ｈ−４，ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ２），４．８３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，Ｈ−１），５．２２−５．３４（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２＝ＣＨ），５．８３−５．９７（ｍ，１Ｈ，ＣＨ２＝ＣＨ）；１３Ｃ−ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ４９．８（Ｃ−４），６１．５（Ｃ−５），６５．６（Ｃ−３），６９．１（ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ２），７０．６（Ｃ−２），９９．２（Ｃ−１），１１８．３（ＣＨ２＝ＣＨ），１３３．５（ＣＨ２−ＣＨ），１５７．１（ＣＦ３ＣＯ）。
【０１２４】
【化４８】
2011530535.tif 000050
４−（Ｎ−トリフルオロアセチル）−アミノ−４−デオキシ−Ｌ−リボピラノシド３１。１−アリル−４−（Ｎ−トリフルオロアセチル）−アミノ−４−デオキシ−Ｌ−リボピラノシド３０を、ジクロロメタン／メタノール（４０ｍＬ、９０：１０）中で溶解し、ＰｄＣｌ２（０．５ｇ、２．６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を、室温で一晩撹拌した。混合物を、セライトのパッドを通して濾過し、減圧下で濃縮した。残渣物を、フラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２ＭｅＯＨ、９０：１０〜８０：２０）で精製し、茶色粘土として、４−（Ｎ−トリフルオロアセチル）−アミノ−４−デオキシ−Ｌ−リボピラノシド３１（２．８４ｇ、９０％）Ｒｆ０．１２（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９０：１０）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）δ３．６２−３．６７（ｍ，２Ｈ），４．００（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．７，２．８Ｈｚ），４．０４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．５Ｈｚ），４．０８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．５Ｈｚ），５．０１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，Ｈ−１）。
【０１２５】
【化４９】
2011530535.tif 000051
１−アリル−Ｄ−アラビノース３２：Ｄ−アラビノース（１００ｇ、６６６ｍｍｏｌ）およびＮａ２ＳＯ４（１００ｇ、７０３ｍｍｏｌ）を、室温で、アリルアルコール（１Ｌ、１４．６５ｍｏｌ）中で懸濁し、この懸濁液に、濃縮したＨ２ＳＯ４（１０．４ｍＬ、１８７ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を、８５℃で１２時間撹拌し、濾過し、沈殿物を、アリルアルコール（３００ｍＬで２回）で洗浄した。併合した濾液を、真空内で濃縮し、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ〜４：１  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ）で精製し、オフホワイトの固体として、３２（７５ｇ、３９４ｍｍｏｌ、６０％）を得た。
【０１２６】
【化５０】
2011530535.tif 000052
１−アリル−２，３−ジベンゾイル−Ｄ−アラビノース３３：１−アリル−Ｄ−アラビノース３２（７５ｇ、３９４ｍｍｏｌ）を、０℃で、ピリジン（８００ｍＬ）中で溶解し、塩化ベンゾイル（１０１ｍＬ、８６７ｍｍｏｌ）を、添加漏斗により２時間にわたり添加し、室温まで１６時間温めながら、反応物を撹拌した。溶媒を真空内で除去し、得られた残渣物を、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（４：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ〜３：２  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）で精製し、濃厚油として、３３（４５ｇ、１１３ｍｍｏｌ、２９％）を得た。
【０１２７】
【化５１】
2011530535.tif 000053
１−アリル−２，３−ジベンゾイル−４−トリフルオロメタンスルホネート−Ｄ−アラビノース３４：１−アリル−２，３−ジベンゾイル−Ｄ−アラビノース３３（２０．０ｇ、５０ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（１００ｍＬ）およびピリジン（１６．２ｍＬ、２００ｍｍｏｌ）中で溶解し、次いで、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（１０．６ｍＬ、６２．７ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を、０℃で１５分間撹拌した。該反応物に、ＤＣＭ（５００ｍＬ）を添加し、有機層を、冷却１Ｍ  ＨＣｌ（２００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（２００ｍＬ）、および食塩水（２００ｍＬ）で洗浄し、次いで、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。混合物を、真空内で濃縮し、黄色油として、３４を得た。粗物質は、さらに精製せずに使用した。
【０１２８】
【化５２】
2011530535.tif 000054
１−アリル−２，３−ジベンゾイル−４−アジド−４−デオキシ−Ｌ−キシロース３５：粗物１−アリル−２，３−ジベンゾイル−４−トリフルオロメタンスルホネート−Ｄ−アラビノース３４を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１００ｍＬ）中で溶解し、アジ化ナトリウムを、添加（６．３７ｇ、９８ｍｍｏｌ）し、反応物を、室温で１８時間撹拌した。溶媒を真空内で除去し、得られた残渣物を、ＤＣＭ（７５０ｍＬ）中で溶解し、有機層を、水（２００ｍＬで２回）、食塩水（２００ｍＬ）で洗浄し、次いで、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、真空内で濃縮した。粗物質を、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（４：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ〜３：２  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）で精製し、濃厚無色油として、３５（１７．５ｇ、４１．３ｍｍｏｌ、８４％）を得た。
【０１２９】
【化５３】
2011530535.tif 000055
１−アリル−４−アジド−４−デオキシ−Ｌ−キシロース３６：１−アリル−２，３−ジベンゾイル−４−アジド−４−デオキシ−Ｌ−キシロース３５（１２．０ｇ、２８．３ｍｍｏｌ）を、５：１  メタノール：ＴＨＦ（７０ｍＬ）中で溶解し、この溶液に、ナトリウムメトキシド（６５０μＬの２５％  溶液、２．８３ｍｍｏｌ）を添加した。この溶液を５時間撹拌し、次いで、それに、酢酸（１７５μＬ、３．１１ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を１分間撹拌した。溶媒を真空内で除去し、濃厚油として、３６を得た。該物質は、さらに精製せずに使用した。
【０１３０】
【化５４】
2011530535.tif 000056
４−アジド−４−デオキシ−Ｌ−キシロース３７：１−アリル−４−アジド−４−デオキシ−Ｌ−キシロース３６（４９６ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）を、９９：１  メタノール：水（１０ｍＬ）中で溶解し、次いで、塩化パラジウム（ＩＩ）（８１．７ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を、室温で２４時間撹拌し、次いで、メタノール洗浄（１００ｍＬ）で、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドを通して濾過した。併合した濾液を、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ〜９：１  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ）で精製し、黄色油として、３７（２４９ｍｇ、１．４２ｍｍｏｌ、６２％）を得た。
【０１３１】
実施例５：癌細胞の細胞毒性アッセイ
本発明の化合物および比較化合物を、細胞毒性活性を確認し、その後のアッセイで用いるために、および濃度の範囲を設定するために、３つの癌細胞株においてアッセイした。全ての細胞株は、１０％（ｗｔ／ｖｏｌ）ウシ胎仔血清およびペニシリン−ストレプトマイシン（１００ｕｎｉｔｓ／ｍＬおよび１００μｇ／ｍＬ）を補充したＲＰＭＩ培地１６４０で維持した。細胞は、通常、微生物またはマイコプラズマ汚染の検査を行い、必要に応じて、置き換えた。細胞は、０．２５％  トリプシンおよび０．１％  ＥＤＴＡを用いた、トリプシン処理によって収穫し、次いで、アッセイ用プレートを希釈する前後に、繰り返してＶｉＣｅｌｌ  ＸＲコールターカウンタで計数した。４つ〜９つの異なるタイプのヒト癌細胞を、それぞれの９６ウェル黒色組織培養処理されたマイクロタイタープレートの１ウェル当たり１０，０００〜１５，０００細胞の密度で、播種し、次いで、加湿されたインキュベーター内で５％ＣＯ２／９５％空気を用いて、３７℃で１時間増殖させ、化合物を添加する前に、細胞を付着させた。化合物ストック（１００Ｘ）を、９６ウェルのＶ底ポリプロピレンマイクロタイタープレートに調製した。５回の連続（１：２）希釈を、アッセイに使用された１００倍の最終濃度で無水ＤＭＳＯを用いて行なった。化合物を含有する３８４ウェルプレート中の個々のウェルを、完了した細胞培養培地を用いて、１：１０で希釈し、１０倍の（１０μＬ）ストックをそれぞれのプレート中の９０μＬの細胞に添加し、９６ウェルヘッドを備えるＢｉｏｍｅｋ  ＦＸ液体操作装置を用いることによって、培養培地とのストックの完全な混合を確保した。ドキソルビシンは、それぞれの細胞株の挙動を監視するための対照として使用した。細胞は、蛍光発光およびルミネセンスを読み込みする前に、３〜４日間、化合物を用いてインキュベートした。試験プレートは、インキュベーターから取り出し、無菌ＰＢＳ中で１回洗浄し、カルシウムエステラーゼを含有する血清を除去した。カルセインＡＭ（アセトキシメチルエステル）試薬を添加し、該細胞を、３７℃で３０分間インキュベートした。フルオレセインフィルター（励起４８５ｎｍ、蛍光５３５ｎｍ）を使用することによって、プレートからの蛍光を、読み込んだ。等容積（３０μＬ）のＣｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ−Ｇｌｏ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｉｎｃ．）を添加し、細胞を溶解させるために、優しく攪拌しながら、室温で１０分間インキュベートした。それぞれのプレートからルミネセンスを再度読み込み、細胞の生存の測定として、蛍光カルシウムＡＭアッセイにおいて観察された阻害を確認した。癌細胞の細胞毒性アッセイは、５つ以上の異なる薬物濃度を用いて、三重で行い、データを分析して、薬物効果における２以上の対数の差異に基づいて、統計的有意性および細胞増殖の阻害に対する有効なＩＣ５０値を設定した。
【０１３２】
実施例６
４つ〜５つの異なるヒト癌細胞株において決定されるような、本発明の様々な化合物および比較化合物の癌細胞の細胞毒性（実施例５の方法に従って実質的に決定される）を、表１に示す。列挙された化合物の構造は、図２〜４に見出される。表１に示されるように、ＣＥＮ０８−１７８、ＣＥＮ０８−１９３、ＣＥＮ０８−２４３、およびＣＥＮ０８−２４４は、８０ｎＭ未満（および、一般には、１１ｎＭを下回る）のＩＣ５０値に反映されるように、著しく高い有効性を有し、したがって、様々な比較化合物よりも優れている。
【０１３３】
【表１】
2011530535.tif 000057
１ＩＣ５０値（ｎＭ）は、本明細書に記載のプロトコルを用いて、異なるアッセイのセットにおいて、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｓｍａｌｌ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅ  Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ  Ｆａｃｉｌｉｔｙで決定した。
２Ｌａｎｇｅｎｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ２００５，１０２（３５），１２３０５−１０からのデータ
３ＣＥＮ０７−１１７および−１２１と同時に決定されたデータ
４ＣＥＮ０８−１７７および−１７８と同時に決定されたデータ
５ＣＥＮ０８−１９３と同時に決定されたデータ
６ＣＥＮ０８−２４３および−２４４と同時に決定されたデータ
７ＣＥＮ０８−１８０と同時に決定されたデータ
実施例７
ＣＥＮ０８−１７８、ＣＥＮ０８−１９３、ＣＥＮ０８−２４３、およびＣＥＮ０８−２４４のＰＫ特性を、ヌードマウスにおいて評価した。それぞれの化合物は、ＭＴＤ（＜３０〜５０ｍｇ／ｋｇ）での経口経路によって、非近交系の雌ヌードマウスに投与し、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（３〜５ｍｇ／ｍＬ）として製剤化された、約１００μＬの試料を、０、１５、３０、および６０分で、ＥＤＴＡキャピラリーまたはバイアルへの後眼窩静脈叢からの採血によって採取し、＞２００μＬの試料を、２、４、８、および２４時間で、ＥＤＴＡバイアルへの末端心穿刺によって採取する。同様に、それぞれの化合物は、２５％のＭＴＤ（＜８ｍｇ／ｋｇ）での静脈経路によって投与され、約１００μＬの試料を、０、１５、３０、および６０分で、ＥＤＴＡキャピラリーまたはバイアルへの後眼窩静脈叢からの採血によって採取し、＞２００μＬの試料を、２、４、８、および２４時間で、ＥＤＴＡバイアルへの末端心穿刺によって採取する。標準曲線の流れに従う単一のアッセイにおいて、ＬＣ−ＭＳまたはＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって分析されるまで、血漿試料は、−８０℃で凍結する。濃度−時間データを、決定し、ＰＫパラメータは、投与のそれぞれの経路に対する単一のコンパートメントモデルに基づいて計算する。
【０１３４】
実施例８
ｃｏｌｏ２０５マウス異種移植モデルにおけるＣＥＮ０８−１７８、ＣＥＮ０８−１９３、ＣＥＮ０８−２４３、およびＣＥＮ０８−２４４の抗癌アッセイを行い、スケジュール依存を設定する。本アッセイにＣＥＮ０７−Ｗ−１０１を含有することは、本発明の化合物のパラメータとその抗癌有効性パラメータ（上記参照）との比較を可能にさせた。ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（３〜５ｍｇ／ｍＬ）として製剤化された、ＣＥＮ０７−Ｗ−１０１を、試験全体の１０％の全身腫瘍組織量内である、１００〜１５０ｍｇの平均腫瘍組織量を有するｃｏｌｏ２０５皮下腫瘍に罹患した８匹の雌ヌードマウスの群に、１０、５、および２．５ｍｇ／ｋｇ／注射で静脈経路によってＱＤｘ１４投与する。同様の試験を、第１の試験と同一の１群当たりの全用量、およびＰＫ特性に基づく１用量当たり同様の薬物曝露を達成するように調整された用量（ｍｇ／ｋｇ／注射）を用いて、静脈経路の投与によって、Ｑ１２Ｈｘ２、ＱＤｘ１４、およびＱ４Ｄｘ４で実行する。ビヒクルのみが対照である。動物は、臨床的兆候について、毎日、観察し、個々の体重および腫瘍組織量は、１週間に２回記録する。明らかに苦痛のあるまたは瀕死状態である動物、および推定される腫瘍組織量が、２ｇ超の動物はすべて、殺処分する。これらの試験は、腫瘍増殖の遅延を可能にするために継続する。腫瘍回帰、腫瘍のない生存者、およびＴ／Ｃ値は、二次エンドポイントである。結果を、統計的に分析し、異なるスケジュール間のＭＴＤおよび低用量での抗癌の有効性の比較を可能にする。
【０１３５】
ＣＥＮ０７−Ｗ−１０１についての最適スケジュールは、抗癌の有効性（最小有効量）対ＭＴＤ、腫瘍進行の遅延、および完全縮小および寛解の割合に基づいて選択し、それぞれの薬物のＭＴＤ、０．６２ｘＭＴＤ、０．３８ｘＭＴＤ、および０．２４ｘＭＴＤでの静脈経路の投与を用いて、ｃｏｌｏ２０５マウス異種移植モデルにおける、ＣＥＮ０８−１７８、ＣＥＮ０８−１９３、ＣＥＮ０８−２４３、およびＣＥＮ０８−２４４のその後の抗癌の有効性に対する基準として使用する。そのＭＴＤおよびビヒクルのみで、ＣＥＮ０７−Ｗ−１０１は、対照である。試験パラメータおよびエンドポイントは、上記と同様である。
【０１３６】
実施例９
Ａ５４９およびＨ２３  ＮＳＣＬＣマウス異種移植モデルにおける、ＣＥＮ０８−１７８、ＣＥＮ０８−１９３、ＣＥＮ０８−２４３、およびＣＥＮ０８−２４４の抗癌アッセイを行う。この試験は、Ａ５４９  ＮＳＣＬＣ皮下異種移植に罹患したＳＣＩＤ雌マウスおよびＨ２３  ＮＳＣＬＣ皮下異種移植に罹患した雌ヌードマウスを用いて、実施例８で設定した最適スケジュールによって実行する。試験パラメータおよびエンドポイントは、実施例７と同一である。本発明の化合物は、実施例８で設定されたものと同様の抗癌特性を示すことが予想されるが、これらの化合物のより大きな有効性のため、より低い有効量を有する。
【０１３７】
実施例１０
本発明の化合物のＭＴＤは、Ｎａ３Ｋ−ＡＴＰａｓｅ  α１β１イソ型が、正常マウスにおけるこの酵素の高抵抗を克服するために、遺伝子の部位特異的な突然変異によって、本発明の化合物を含む、強心配糖体に対して感受性がある状態にされた遺伝子導入マウスにおいて、決定される（Ｄｏｓｔａｎｉｃ−Ｌａｒｓｏｎ，ｅｔ  ａｌ，Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｒｅｇｕｌ  Ｉｎｔｅｇｒ  Ｃｏｍｐ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．２９０：Ｒ５２４−８，２００６、Ｄｏｓｔａｎｉｃ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．２７９：５４０５３−６１，２００４）。感受性イソ型を有する５〜８匹のマウスの群に対し、０．５、１、３、６ｍｇ／ｋｇの濃度で、ＣＥＮ０８−１７８、ＣＥＮ０８−１９３、ＣＥＮ０８−２４３、およびＣＥＮ０８−２４４の溶液（１ｍｇ／ｍＬで、１５％  ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン：水として製剤化された）を用いて、さらに、比較として以下の２つの薬物、０．５、１、３、６ｍｇ／ｋｇの濃度でＣＥＮ０７−Ｗ−１０２を、ならびに０．２５、０．５、１、および３ｍｇ／ｋｇの濃度で、ジギトキシンを後眼窩静脈叢に注射する。同様の遺伝的血統であるが、耐性があるＮａ５Ｋ−ＡＴＰａｓｅ  α１β１イソ型の正常マウスでは、同一の薬物を、かかるマウスにおける既知のＭＴＤ値と一致した高濃度で、注射する。ビヒクルのみを注射した、Ｎａ５Ｋ−ＡＴＰａｓｅ  α１β１イソ型の感受性のある１群および耐性があるα１β１イソ型の正常マウスの１群を、対照群として使用する。驚くほどの、肢の伸張、震えつまりけいれん、呼吸困難、立ち直り反射の欠損、ならびに動物の体重を含む、毒性の観察されたパラメータを、７日間、毎日、測定する。ＭＴＤは、動物に死をもたらすことなく、初めの２４時間、観察された毒性の兆候を生じさせる薬物用量である。
【図１】
2011530535.tif 000069
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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