(57)【要約】  ４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸の新規な結晶形態；また、１１βＨＳＤ１の阻害におけるそれらの使用、それらの調製方法およびそれらを含む医薬組成物も記載されている。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＣｕＫａ照射を用いて測定した次の２−シータ値：１８．０および１７．７°にピークを持つＸ線回折パターンを有する、４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸の結晶形態。
【請求項２】
ＣｕＫａ照射を用いて測定した次の２−シータ値：１８．０、１７．７、１８．４および８．９°にピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する、請求項１に記載の結晶性化合物。
【請求項３】
ＣｕＫａ照射を用いて測定した次の２−シータ値：１８．０、１７．７、１８．４、８．９および２０．５°にピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する、請求項１に記載の化合物の結晶形態。
【請求項４】
ＣｕＫａ照射を用いて測定した次の２−シータ値：１８．０、１７．７、１８．４、８．９、２０．５、１０．４、２１．９、１３．４、２７．６および１６．７°にピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する、請求項１に記載の化合物の結晶形態。
【請求項５】
ＣｕＫａ照射を用いた、図１に示すものと実質的に同一のＸ線回折パターンを有する、請求項１に記載の結晶性化合物。
【請求項６】
約３０９．９℃（開始）の融点を有する、４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸の結晶形態。
【請求項７】
ＣｕＫａ照射を用いて測定した次の２−シータ値：１８．７および１１．７°にピークを持つＸ線回折パターンを有する、４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸の結晶形態。
【請求項８】
ＣｕＫａ照射を用いて測定した次の２−シータ値：１８．７、１１．７および１９．２°にピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する、請求項７に記載の結晶性化合物。
【請求項９】
ＣｕＫａ照射を用いて測定した次の２−シータ値：１８．７、１１．７、１９．２、７．８、１４．１、１４．９および９．４°にピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する、請求項７に記載の化合物の結晶形態。
【請求項１０】
ＣｕＫａ照射を用いて測定した次の２−シータ値：１８．７、１１．７、１９．２、７．８、１４．１、１４．９、９．４、１５．６、１６．１および９．６°にピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する、請求項７に記載の化合物の結晶形態。
【請求項１１】
ＣｕＫａ照射を用いた、図３に示すものと実質的に同一のＸ線回折パターンを有する、請求項７に記載の結晶性化合物。
【請求項１２】
約３０９．３℃（開始）の融点を有する、４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸の結晶形態。
【請求項１３】
ＣｕＫａ照射を用いて測定した次の２−シータ値：１６．２および２０．６°にピークを持つＸ線回折パターンを有する、４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸の結晶形態。
【請求項１４】
ＣｕＫａ照射を用いて測定した次の２−シータ値：１６．２、２０．６および１７．７°にピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する、請求項１３に記載の結晶性化合物。
【請求項１５】
ＣｕＫａ照射を用いて測定した次の２−シータ値：１６．２、２０．６、１７．７、１０．８および１５．５°にピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する、請求項１３に記載の化合物の結晶形態。
【請求項１６】
ＣｕＫａ照射を用いて測定した次の２−シータ値：１６．２、２０．６、１７．７、１０．８、１５．５、２０．９、２６．１、１１．６および２６．７にピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する、請求項１３に記載の化合物の結晶形態。
【請求項１７】
ＣｕＫａ照射を用いた、図６に示すものと実質的に同一のＸ線回折パターンを有する、請求項１３に記載の結晶性化合物。
【請求項１８】
約３１２．０℃（開始）の融点を有する、４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸の結晶形態。
【請求項１９】
請求項１、７および１３のいずれか一項に記載の化合物を、薬学的に許容される希釈剤または担体と共に含む、医薬組成物。
【請求項２０】
ヒトなどの温血動物の予防的または治療的処置方法における使用のための、請求項１、７および１３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２１】
医薬として使用するための、請求項１、７および１３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２２】
ヒトなどの温血動物での１１βＨＳＤ１阻害作用の発現に使用される医薬の製造における、請求項１、７および１３のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項２３】
請求項１、７および１３のいずれか一項に記載の化合物の有効量を、１１βＨＳＤ１阻害作用を発現させるような治療を必要としている哺乳動物に投与することによって、１１βＨＳＤ１阻害作用を発現させる方法。
【請求項２４】
前記１１βＨＳＤ１阻害作用が２型糖尿病を治療するためのものである、請求項２３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸（本薬剤）の新規な結晶形態に関する。本薬剤は、ヒト１１−β−ヒドロキシステロイド脱水素酵素１型（１１βＨＳＤ１）阻害活性を有し、したがってメタボリック症候群などの病態の治療において価値があり、ヒトなどの温血動物の治療方法において有用である。また本発明は、本薬剤の結晶形態の製造工程、それらを含有する医薬組成物、およびヒトなどの温血動物において１１βＨＳＤ１を阻害する医薬の製造におけるこれらの使用にも関する。
【０００２】
本薬剤は下記の式（Ｉ）で示される。
【０００３】
【化１】
2011510966.tif 000002
【背景技術】
【０００４】
グルココルチコイド（ヒトのコルチゾール、げっ歯類のコルチコステロン）は対抗制御的ホルモンである。すなわち、グルココルチコイドはインスリンの作用に対抗する（Dallman MF, Strack AM, Akana SF et al. 1993; Front Neuroendocrinol 14, 303-347）。グルココルチコイドは、糖新生に関与する肝酵素の発現を調節するとともに、脂肪組織からグリセロールを遊離し（脂肪分解の増加）筋組織からアミノ酸を遊離する（タンパク質合成の減少とタンパク質分解の増加）ことによって、基質の供給を高める。またグルココルチコイドは、トリグリセリドを蓄えることのできる成熟脂肪細胞への前駆脂肪細胞の分化において重要である（Bujalska IJ et al. 1999; Endocrinology 140, 3188-3196）。「ストレス」によって誘発されたグルココルチコイドが中心性肥満（それ自体が２型糖尿病、高血圧症および心疾患の強力な危険因子である）と関連している病態においては、このことは重大な意味を持ち得る（Bjorntorp P & Rosmond R 2000; Int. J. Obesity 24, S80-S85）。
【０００５】
グルココルチコイド活性が、コルチゾールの分泌だけで制御されているのではなく、組織レベルにおいては、１１−βヒドロキシステロイド脱水素酵素である１１βＨＳＤ１（コルチゾンを活性化する）と１１βＨＳＤ２（コルチゾールを不活性化する）による活性コルチゾールと不活性コルチゾンの細胞内相互変換によって制御されている、ということは現在十分に証明されている（Sandeep TC & Walker BR 2001 Trends in Endocrinol & Metab. 12, 446-453）。このメカニズムがヒトにおいて重要であり得るということは、カルベノキソロン（１１βＨＳＤ１および２の両方を阻害する抗潰瘍薬）治療を用いてまず示された（Walker BR et al. 1995; J. Clin. Endocrinol. Metab. 80, 3155-3159）。この治療はインスリン感受性の増加につながり、それによって、活性グルココルチコイドの組織レベルを低下させることによって１１βＨＳＤ１がインスリンの作用を調節している可能性がある、ということが示されている（Walker BR et al. 1995; J. Clin. Endocrinol. Metab. 80, 3155-3159）。
【０００６】
臨床的には、クッシング症候群にはコルチゾールの過剰が関与しており、さらにその過剰には、耐糖能低下、中心性肥満（この貯蔵所における前駆脂肪細胞の分化の刺激に起因）、脂質異常症および高血圧症が関与している。クッシング症候群には、メタボリック症候群との明確な類似点が数多く見られる。メタボリック症候群には、通常、過剰の血中コルチゾール濃度は関与していないが（Jessop DS et al. 2001; J. Clin. Endocrinol. Metab. 86, 4109-4114）、組織中の１１βＨＳＤ１活性が異常に高いと、同様の影響があることが予想される。肥満したヒトでは、血漿コルチゾール濃度は痩型対照群と同じかまたはそれよりも低いにもかかわらず、皮下脂肪中の１１βＨＳＤ１活性が大きく増進されることが示された（Rask E et al. 2001; J. Clin. Endocrinol. Metab. 1418-1421）。さらに、メタボリック症候群に関与している中心性脂肪は、皮下脂肪よりもはるかに高いレベルの１１βＨＳＤ１活性を示す（Bujalska IJ et al. 1997; Lancet 349, 1210-1213）。このように、グルココルチコイド、１１βＨＳＤ１およびメタボリック症候群の間には関連性があるように思われる。
【０００７】
１１βＨＳＤ１ノックアウトマウスでは、グルココルチコイドに誘導される糖新生酵素の活性化が絶食に応じて減衰し、血漿グルコース濃度がストレスまたは肥満に応じて低下することが示されるが（Kotelevtsev Y et al. 1997; Proc. Natl. Acad. Sci USA 94, 14924-14929）、このことは、１１βＨＳＤ１を阻害することが、２型糖尿病において血漿グルコースおよび肝糖産生を低下させる際に有用であることを示している。さらに、これらのマウスは、低トリグリセリド、高ＨＤＬコレステロールおよび高アポリポタンパク質ＡＩ濃度を示す、抗アテローム発生性リポタンパク質プロフィールを発現する（Morton NM et al. 2001; J. Biol. Chem. 276, 41293-41300）。この表現型は、脂肪異化酵素およびＰＰＡＲαの肝での発現の増加によるものである。このこともまた、１１βＨＳＤ１の阻害がメタボリック症候群の脂質異常症の治療において有用であることを示している。
【０００８】
１１βＨＳＤ１を過剰発現しているトランスジェニックマウスにおける最近の研究が、メタボリック症候群と１１βＨＳＤ１との間の関連性を最も説得力をもって実証している（Masuzaki H et al. 2001; Science 294, 2166-2170）。脂肪特異的プロモーターの制御下で発現した場合、１１βＨＳＤ１トランスジェニックマウスは、コルチコステロンの脂肪中濃度が高く、中心性肥満、インスリン抵抗性糖尿病、高脂血症および過食症を発症する。最も重要なことは、これらのマウスの脂肪中の１１βＨＳＤ１活性の上昇レベルが、肥満した被験者と同等であることである。肝性１１βＨＳＤ１活性および血漿コルチコステロン濃度は正常であったが、肝門脈コルチコステロン濃度は３倍に上昇しており、これが肝臓における代謝作用の原因であると考えられる。
【０００９】
全体的に見ると、肥満したヒトと同等のレベルの１１βＨＳＤ１を脂肪のみに過剰発現させるだけで、マウスでメタボリック症候群を完全に再現できることは、もはや明らかである。
【００１０】
１１βＨＳＤ１は組織内に広く分布しており、グルココルチコイド受容体の分布と重なっている。したがって、１１βＨＳＤ１を阻害することによって、数多くの生理学的／病理学的役割におけるグルココルチコイドの作用が妨害される可能性がある。１１βＨＳＤ１はヒト骨格筋に存在しており、タンパク質の代謝回転およびグルコース代謝に対するインスリンの同化作用をグルココルチコイドが妨害することは、十分に立証されている（Whorwood CB et al. 2001; J. Clin. Endocrinol. Metab. 86, 2296-2308）。したがって、骨格筋は１１βＨＳＤ１に基づく治療の重要な標的になるはずである。
【００１１】
グルココルチコイドはインスリン分泌も低下させるが、これによってグルココルチコイドに誘導されるインスリン抵抗性の作用が激化する可能性がある。膵島は１１βＨＳＤ１を発現し、カルベノキソロンはインスリン放出に対する１１−デヒドロコルチコステロンの作用を阻害することができる（Davani B et al. 2000; J. Biol. Chem. 275, 34841-34844）。このように、糖尿病の治療においては、１１βＨＳＤ１阻害剤はインスリン抵抗性に対して組織レベルで作用するだけでなく、インスリンの分泌自体を増加させることができる。
【００１２】
骨格の発育および骨の機能もまた、グルココルチコイドの作用によって調節されている。１１βＨＳＤ１はヒト破骨細胞および骨芽細胞中に存在しており、健常ボランティアをカルベノキソロンで処置すると、骨吸収マーカーは減少したが、骨形成マーカーには変化は見られなかった（Cooper MS et al 2000; Bone 27, 375-381）。骨中の１１βＨＳＤ１活性の阻害は、骨粗しょう症治療における防御機構として使用することができる。
【００１３】
グルココルチコイドは緑内障などの眼病に関与している可能性もある。１１βＨＳＤ１は、ヒトにおいて眼圧に影響を与えることが示されており、１１βＨＳＤ１を阻害することによって、緑内障に伴う眼圧の上昇を緩和させることが期待される（Rauz S et al. 2001; Investigative Opthalmology & Visual Science 42, 2037-2042）。
【００１４】
げっ歯類およびヒトの両方において、１１βＨＳＤ１とメタボリック症候群との間には確実な関連性があると思われる。２型肥満糖尿病患者において１１βＨＳＤ１を特異的に阻害する薬が、肝糖新生を減少させることによって血糖を下げ、中心性肥満を軽減し、アテローム発生性リポタンパク質表現型を改善し、血圧を下げ、かつインスリン抵抗性を低減するということを示唆する証拠がある。筋組織でのインスリンの作用は増強され、膵島ベータ細胞からのインスリン分泌も増加し得る。
【００１５】
現在、メタボリック症候群の定義として主に２つのものが認識されている。
１）米国高脂血症治療ガイドライン（Ｔｈｅ  Ａｄｕｌｔ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  Ｐａｎｅｌ（ＡＴＰ  ＩＩＩ  ２００１  ＪＭＡ））の定義では、患者が次の症状のうち３つ以上を有する場合、メタボリック症候群であるとしている。
男性の場合、腹囲４０インチ（１０２ｃｍ）以上、女性の場合、３５インチ（８８ｃｍ）以上；
血清トリグリセリド濃度１５０ｍｇ／ｄｌ（１．６９ｍｍｏｌ／ｌ）以上；
男性の場合、ＨＤＬコレステロール濃度４０ｍｇ／ｄｌ（１．０４ｍｍｏｌ／ｌ）未満、女性の場合、５０ｍｇ／ｄｌ（１．２９ｍｍｏｌ／ｌ）未満；
血圧１３５／８０ｍｍＨｇ以上；および／または血糖（血清グルコース）１１０ｍｇ／ｄｌ（６．１ｍｍｏｌ／ｌ）以上。
２）ＷＨＯ協議会は、因果関係を意味するものではなく、適当な時期にさらに改善することもできる実践的な定義として提案されている、次の定義を推奨している。
患者が、次の症状：耐糖能低下、耐糖能異常（ＩＧＴ）もしくは糖尿病、および／またはインスリン抵抗性のうちの少なくとも１つを有し、かつ、次のうちの２つ以上を有する。
動脈圧の上昇；
血漿トリグリセリドの上昇；
中心性肥満；
微量アルブミン尿症。
【発明の概要】
【００１６】
本発明者らは、本薬剤またはその薬学的に許容される塩は、有効な１１βＨＳＤ１阻害剤であり、したがってメタボリック症候群に関連する病態の治療において価値があることを見出した。また本発明者らは、本発明の化合物は改良された特性を有し、それによって、医薬品として使用するためのより良い候補となることを見出した。
【００１７】
本発明者らは、本薬剤のさらなる結晶形態を見出した。これらの形態は、形態２、形態３および形態４と称される。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】図１は、形態２のＸ線粉末回折パターンである。
【図２】図２は、形態２のＤＳＣ温度記録図である。
【図３】図３は、形態３のＸ線粉末回折パターンである。
【図４】図４は、形態３のＤＳＣ温度記録図である。
【図５】図５は、形態４のＸ線粉末回折パターンである。
【図６】図６は、形態４のＤＳＣ温度記録図である。
【図７】図７は、形態４のＸＲＤパターンおよび面間隔ｄスペクトルである。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
したがって本発明の一態様は、およそ２−シータ＝１８．０の少なくとも１つの特異的ピークを有する測定したＸ線回折パターンを有する、４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸の結晶形態（形態２）に関する。
【００２０】
２−シータ（θ）値はＣｕＫａ照射を用いて測定した。
本発明によれば、およそ２−シータ＝１８．０°および１７．７°に少なくとも２つの特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態２、が提供される。
【００２１】
本発明によれば、およそ２−シータ＝１８．０、１７．７および１８．４°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態２、が提供される。
本発明によれば、およそ２−シータ＝１８．０、１７．７、１８．４、８．９および２０．５°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態２、が提供される。
【００２２】
本発明によれば、およそ２−シータ＝１８．０、１７．７、１８．４、８．９、２０．５、１０．４、２１．９、１３．４、２７．６および１６．７°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態２、が提供される。
【００２３】
本発明によれば、ＣｕＫａ照射を用いた、図１に示されるＸ線粉末回折パターンと実質的に同一のＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態２、が提供される。
本発明によれば、２−シータ＝１８．０°プラスマイナス０．５°２−シータに少なくとも１つの特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態２、が提供される。
【００２４】
本発明によれば、２−シータ＝１８．０°および１７．７°に少なくとも２つの特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態２、が提供される。ここで、前記値はプラスマイナス０．５°２−シータであってよい。
【００２５】
本発明によれば、２−シータ＝１８．０、１７．７および１８．４°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態２、が提供される。ここで、前記値はプラスマイナス０．５°２−シータであってよい。
【００２６】
本発明によれば、２−シータ＝１８．０、１７．７、１８．４、８．９および２０．５°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態２、が提供される。ここで、前記値はプラスマイナス０．５°２−シータであってよい。
【００２７】
本発明によれば、２−シータ＝１８．０、１７．７、１８．４、８．９、２０．５、１０．４、２１．９、１３．４、２７．６および１６．７°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態２、が提供される。ここで、前記値はプラスマイナス０．５°２−シータであってよい。
【００２８】
本発明によれば、２−シータ＝１８．０°に少なくとも１つの特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態２、が提供される。
本発明によれば、２−シータ＝１８．０および１７．７°に少なくとも２つの特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態２、が提供される。
【００２９】
本発明によれば、２−シータ＝１８．０、１７．７および１８．４°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態２、が提供される。
本発明によれば、２−シータ＝１８．０、１７．７、１８．４、８．９および２０．５°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態２、が提供される。
【００３０】
本発明によれば、２−シータ＝１８．０、１７．７、１８．４、８．９、２０．５、１０．４、２１．９、１３．４、２７．６および１６．７°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態２、が提供される。
【００３１】
本発明によれば、ＣｕＫａ照射を用いた、図１に示されるＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態２、が提供される。
【００３２】
【表１】
2011510966.tif 000003
【００３３】
ＤＳＣ分析から、形態２は３０９．９℃で融解を開始する高融点の固体であることがわかる。ＤＳＣ温度記録図を図２に示す。
本発明によれば、およそ２−シータ＝１８．７°にピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する、本薬剤の結晶形態、形態３が提供される。
【００３４】
２−シータ（θ）値はＣｕＫａ照射を用いて測定した。
本発明によれば、およそ２−シータ＝１８．７°および１１．７°に少なくとも２つの特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態３、が提供される。
【００３５】
本発明によれば、およそ２−シータ＝１８．７、１１．７および１９．２°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態３、が提供される。
本発明によれば、およそ２−シータ＝１８．７、１１．７、１９．２、７．８、１４．１、１４．９および９．４°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態３、が提供される。
【００３６】
本発明によれば、およそ２−シータ＝１８．７、１１．７、１９．２、７．８、１４．１、１４．９、９．４、１５．６、１６．１および９．６°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態３、が提供される。
【００３７】
本発明によれば、ＣｕＫａ照射を用いた、図３に示されるＸ線粉末回折パターンと実質的に同一のＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態３、が提供される。
本発明によれば、２−シータ＝１８．７°プラスマイナス０．５°２−シータに少なくとも１つの特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態３、が提供される。
【００３８】
本発明によれば、２−シータ＝１８．７°および１１．７°に少なくとも２つの特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態３、が提供される。ここで、前記値はプラスマイナス０．５°２−シータであってよい。
【００３９】
本発明によれば、２−シータ＝１８．７、１１．７および１９．２°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態３、が提供される。ここで、前記値はプラスマイナス０．５°２−シータであってよい。
【００４０】
本発明によれば、２−シータ＝１８．７、１１．７、１９．２、７．８、１４．１、１４．９および９．４°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態３、が提供される。ここで、前記値はプラスマイナス０．５°２−シータであってよい。
【００４１】
本発明によれば、２−シータ＝１８．７、１１．７、１９．２、７．８、１４．１、１４．９、９．４、１５．６、１６．１および９．６°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態３、が提供される。ここで、前記値はプラスマイナス０．５°２‐シータであってよい。
【００４２】
本発明によれば、２−シータ＝１８．７°に少なくとも１つの特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態３、が提供される。
本発明によれば、２−シータ＝１８．７および１１．７°に少なくとも２つの特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態３、が提供される。
【００４３】
本発明によれば、２−シータ＝１８．７、１１．７および１９．２°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態３、が提供される。
本発明によれば、２−シータ＝１８．７、１１．７、１９．２、７．８、１４．１、１４．９、９．４°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態３、が提供される。
【００４４】
本発明によれば、２−シータ＝１８．７、１１．７、１９．２、７．８、１４．１、１４．９、９．４、１５．６、１６．１および９．６°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態３、が提供される。
【００４５】
本発明によれば、ＣｕＫａ照射を用いた、図３に示されるＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態３、が提供される。
【００４６】
【表２】
2011510966.tif 000004
【００４７】
ＤＳＣ分析から、形態３は３０９．３℃で融解を開始することがわかる。ＤＳＣ温度記録図を図４に示す。
本発明によれば、およそ２−シータ＝１６．２にピークを持つＸ線回折パターンを有する、本薬剤の結晶形態、形態４が提供される。
【００４８】
２−シータ（θ）値はＣｕＫａ照射を用いて測定された。
本発明によれば、およそ２−シータ＝１６．２°および２０．６°に少なくとも２つの特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態４、が提供される。
【００４９】
本発明によれば、およそ２−シータ＝１６．２、２０．６および１７．７°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態４、が提供される。
本発明によれば、およそ２−シータ＝１６．２、２０．６、１７．７、１０．８および１５．５°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態４、が提供される。
【００５０】
本発明によれば、およそ２−シータ＝１６．２、２０．６、１７．７、１０．８、１５．５、２０．９、２６．１、１１．６、２６．７および１８．１°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態４、が提供される。
【００５１】
本発明によれば、ＣｕＫａ照射を用いた、図５に示されるＸ線粉末回折パターンと実質的に同一のＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態４、が提供される。
本発明によれば、２−シータ＝１６．２°プラスマイナス０．５°２−シータに少なくとも１つの特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態４、が提供される。
【００５２】
本発明によれば、２−シータ＝１６．２°および２０．６°に少なくとも２つの特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態４、が提供される。ここで、前記値はプラスマイナス０．５°２−シータであってよい。
【００５３】
本発明によれば、２−シータ＝１６．２、２０．６および１７．７°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態４、が提供される。ここで、前記値はプラスマイナス０．５°２−シータであってよい。
【００５４】
本発明によれば、２−シータ＝１６．２、２０．６、１７．７、１０．８および１５．５°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態４、が提供される。ここで、前記値はプラスマイナス０．５°２−シータであってよい。
【００５５】
本発明によれば、２−シータ＝１６．２、２０．６、１７．７、１０．８、１５．５、２０．９、２６．１、１１．６、２６．７および１８．１°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態４、が提供される。ここで、前記値はプラスマイナス０．５°２‐シータであってよい。
【００５６】
本発明によれば、２−シータ＝１６．２°に少なくとも１つの特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態４、が提供される。
本発明によれば、２−シータ＝１６．２および２０．６°に少なくとも２つの特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態４、が提供される。
【００５７】
本発明によれば、２−シータ＝１６．２、２０．６および１７．７°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態４、が提供される。
本発明によれば、２−シータ＝１６．２、２０．６、１７．７、１０．８および１５．５°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態４、が提供される。
【００５８】
本発明によれば、２−シータ＝１６．２、２０．６、１７．７、１０．８、１５．５、２０．９、２６．１、１１．６および２６．７°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態４、が提供される。
【００５９】
本発明によれば、ＣｕＫａ照射を用いた、図５に示されるＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態４、が提供される。
【００６０】
【表３】
2011510966.tif 000005
【００６１】
形態４のＤＳＣ分析から、初期事象は２５４．０℃に開始し、ピークは２６２．０℃で、その後３１２．０℃で融解を開始することがわかる。したがって形態４の融解開始は約３１２．０℃である。ＤＳＣ温度記録図を図６に示す。
【００６２】
形態４の別のより純粋なサンプルから、図７に示すＸＲＤパターンおよび面間隔ｄスペクトルが得られた。２‐シータ値の位置および面間隔ｄをそれぞれ表Ｄおよび表Ｅに示す。
【００６３】
【表４】
2011510966.tif 000006
【００６４】
【表５】
2011510966.tif 000007
【００６５】
表Ｃおよび表Ｄ中の２−シータ値の僅かなばらつきは、後述のＸ線粉末ディフラクトグラムにおける回折角の測定誤差が原因と考えられる。
したがって、測定誤差を考慮に入れた本発明の別の態様においては、２−シータ＝１６．１および２０．５°に少なくとも２つの特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態４、が提供される。
【００６６】
本発明によれば、２−シータ＝１６．１、２０．５および１７．６°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態４、が提供される。
本発明によれば、２−シータ＝１６．１、２０．５、１７．６、１０．８および１５．４°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態４、が提供される。
【００６７】
本発明によれば、２−シータ＝１６．１、２０．５、１７．６、１０．８、１５．４、２０．９および２６．１°に特異的ピークを持つＸ線粉末回折パターンを有する本薬剤の結晶形態、形態４、が提供される。
【００６８】
本発明は形態２、３および４の結晶形態に関する、と述べられている場合、結晶化度は、都合良くは約６０％より大きく、より都合良くは約８０％より大きく、好ましくは約９０％より大きく、より好ましくは約９５％より大きい。最も好ましくは、結晶化度は約９８％よりも大きい。
【００６９】
別の態様においては、本発明は結晶形態２としての本薬剤に関する。
別の態様においては、本発明は結晶形態３としての本薬剤に関する。
別の態様においては、本発明は結晶形態４としての本薬剤に関する。
【００７０】
別の態様においては、本発明は結晶形態１を実質的に含まない本薬剤の結晶形態２に関する。
別の態様においては、本発明は結晶形態１を実質的に含まない本薬剤の結晶形態３に関する。
【００７１】
別の態様においては、本発明は結晶形態１を実質的に含まない本薬剤の結晶形態４に関する。
形態１を実質的に含まない結晶形態とは、形態１を３０％未満しか有さない結晶形態を意味する。別の態様においては、「実質的に含まない」とは形態１を２０％未満しか有さないことを意味する。別の態様においては、「実質的に含まない」とは形態１を１０％未満しか有さないことを意味する。さらに別の態様においては、「実質的に含まない」とは形態１を５％未満しか有さないことを意味する。さらに別の態様においては、「実質的に含まない」とは形態１を１％未満しか有さないことを意味する。
【００７２】
形態２、３および４は、図１、２および３に示したＸ線粉末回折パターンと実質的に同一のＸ線粉末回折パターンを提供し、表Ａ、ＢおよびＣに示した最も顕著な１０のピーク（角度２−シータ値）を実質的に有している。Ｘ線粉末回折パターンの２−シータ値は、機器によって、または試料によってわずかに異なることがあるので、引用された値が絶対的なものと解釈すべきではない、ということが理解されるであろう。
【００７３】
測定条件（使用する装置または機器など）によっては、１つまたは複数の測定誤差を有するＸ線粉末回折パターンが得られることがある、ということは公知である。特に、Ｘ線粉末回折パターンの強度は測定条件によって変動し得るということは、一般的に知られている。したがって、本発明の形態２、３および４は図１、２および３に示したＸ線粉末回折パターンと同一のＸ線粉末回折パターンを提供する結晶に限定されるわけではなく、図１、２および３に示したＸ線粉末回折パターンと実質的に同一のＸ線粉末回折パターンを提供するいずれの結晶も本発明の範囲内に含まれることを理解すべきである。Ｘ線粉末回折の当業者であれば、Ｘ線粉末回折パターンの実質的な同一性を判断することが可能である。
【００７４】
Ｘ線粉末回折の当業者であれば、ピークの相対強度が、例えば、試料の分析にも影響し得る、３０ミクロンを超える大きさの粒子および非ユニタリーアスペクト比に影響されることがある、ということは理解されるであろう。該当業者は、反射の位置が、回折計に置かれた試料の正確な高さ、および回折計のゼロ較正によって影響されることがある、ということも理解するであろう。試料の表面平面性もわずかに影響する場合がある。ゆえに、示された回折パターンデータが絶対的な値であると解釈すべきではない。（Jenkins, R & Snyder, R.L. ‘Introduction to X-Ray Powder Diffractometry’ John Wiley & Sons 1996; Bunn, C.W. (1948), Chemical Crystallography, Clarendon Press, London; Klug, H. P. & Alexander, L. E. (1974), X-Ray Diffraction Procedures）。
【００７５】
一般に、Ｘ線粉末回折における回折角の測定誤差は、約５％以下、特にプラスマイナス０．５°２−シータである。典型的にはプラスマイナス０．２°２−シータである。図１、２、３および４のＸ線粉末回折パターンについて検討する場合や表Ａ、Ｂ、ＣおよびＤを読む場合には、こうした程度の測定誤差を考慮に入れておくべきである。さらに、実験条件および試料調製（優先配向）によって強度が変動する可能性があることを理解すべきである。
【００７６】
使用した技術の詳細
Ｘ線粉末回折
【００７７】
【表６】
2011510966.tif 000008
【００７８】
分析機器：シーメンスD5000
Ｘ線粉末回折スペクトルは、結晶材料の試料をシーメンスのシリコン単結晶（ＳＳＣ）ウェハマウントに載せ、該試料を、顕微鏡用スライドで広げて薄層にすることによって決定した。試料を毎分３０回転で回転させ（計数統計を改善するため）、１．５４０６オングストロームの波長で、４０ｋＶおよび４０ｍＡで作動させた銅製ロングファインフォーカス管（ｌｏｎｇ−ｆｉｎｅ  ｆｏｃｕｓ  ｔｕｂｅ）によって発生させたＸ線を照射した。平行Ｘ線源はＶ２０に設定された自動可変発散スリットを通過し、反射した放射線は２ｍｍの散乱線除去スリット（ａｎｔｉｓｃａｔｔｅｒ  ｓｌｉｔ）と０．２ｍｍの検出器スリットを通って方向づけられた。試料を、シータ−シータモードで２度から４０度の２−シータ範囲にわたって、０．０２度の２−シータ増加分あたり１秒間暴露した（連続スキャンモード）。稼働時間は３１分４１秒であった。機器には検出器としてシンチレーション計数管が備えられていた。制御およびデータ収集には、Diffract+ソフトウェアで作動する、デルOptiplex 686 NT 4.0 Workstationを用いた。Ｘ線粉末回折の当業者であれば、ピークの相対強度が、例えば、試料の分析にも影響し得る、３０ミクロンを超える大きさの粒子および非ユニタリーアスペクト比に影響されることがある、ということは理解するであろう。該当業者は、反射の位置が、回折計に置かれた試料の正確な高さ、および回折計のゼロ較正によって影響されることがある、ということも理解するであろう。試料の表面平面性もわずかに影響する場合がある。ゆえに、示された回折パターンデータが絶対的な値であると解釈すべきではない。
【００７９】
示差走査熱量測定
分析機器：ティー・エイ・インスツルメントQ1000 DSC
典型的には、蓋を取り付けた４０μｌのアルミ製の鍋に入った５ｍｇ未満の材料を、２５℃〜３２５℃の温度範囲にわたって、１分間当たり１０℃の一定の加熱速度で加熱した。窒素を使用したパージガスを用いた（流速１００ｍｌ／分）。
【００８０】
形態２、３および４は形態１からの競合スラリー化（competitive slurring）または播種によって調製することができる。
形態２はアセトニトリル中での競合スラリー化によって都合よく調製することができる。特にこれは４５〜５５℃の温度範囲、例えば約５０℃で行われる。
【００８１】
形態３はメタノール中での競合スラリー化によって都合よく調製することができる。特にこれは１５〜３０℃の温度範囲、例えば周囲温度近辺で行われる。
形態４は酢酸エチル中での競合スラリー化によって都合よく調製することができる。特にこれは１５〜３０℃の温度範囲、例えば周囲温度近辺で行われる。また、形態４は高温のアセトンまたはアセトニトリル中での競合スラリー化によって調製することができる。
【００８２】
上述したように、本薬剤は１１βＨＳＤ１阻害活性を有する。この特性は、以下のアッセイによって評価することができる。
アッセイ
１１βＨＳＤ１の酸化還元酵素（ｏｘｏ−ｒｅｄｕｃｔａｓｅ）活性による、コルチゾンのその活性型ステロイドであるコルチゾールへの変換は、競合均一時間分解蛍光アッセイ（ＨＴＲＦ）（セイエス  ビオ  アンテルナスィオナル（CisBio International）、研究開発、 管理および欧州事務所、インビトロテクノロジー（In Vitro Technologies）―HTRF（登録商標）/Bioassays BP 84175, ３０２０４  バニョル／セーズ  Ｃｅｄｅｘ、フランス。Cortisol bulk HTRF kit: Cat No. 62CORPEC）によって測定することができる。
【００８３】
本明細書に記載の化合物の評価は、Ｎ−末端に６−Ｈｉｓタグを有する全長ヒト１１βＨＳＤ１酵素（＊１）を発現したバキュロウイルスを使用して行った。該酵素は、銅キレートカラムを用いて、洗剤で可溶化した細胞溶解物から精製した。１１βＨＳＤ１の阻害剤はコルチゾンのコルチゾールへの変換を低減させるが、そのことは、上記アッセイにおいてシグナルの増加によって同定される。
【００８４】
被験化合物を、１０ｍＭになるようにジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中に溶解させ、さらに１％ＤＭＳＯ含有アッセイ緩衝液で最終アッセイ濃度である１０倍まで希釈した。次に、希釈化合物を黒３８４ウェルプレート（マトリックス（Matrix）、ハドソン、ニューハンプシャー州、米国）にまいた。
【００８５】
アッセイは、コルチゾン（シグマ、プール、ドーセット州、英国、１６０ｎＭ）、グルコース−６−リン酸（ロシュ・ダイアグノスティックス、１ｍＭ）、ＮＡＤＰＨ（シグマ、プール、ドーセット州、英国、１００μＭ）、グルコース−６−リン酸脱水素酵素（ロシュ・ダイアグノスティックス、１２．５μｇ／ｍｌ）、ＥＤＴＡ（シグマ、プール、ドーセット州、英国、１ｍＭ）、アッセイ緩衝液（Ｋ２ＨＰＯ４／ＫＨ２ＰＯ４、１００ｍＭ）ｐＨ７．５、組換え１１βＨＳＤ１および試験化合物からなる全量２０μｌ中で（実行可能なアッセイウィンドウを得るために適切な希釈溶液を用いて−好適な希釈溶液の例としては、ストック酵素の１０００倍希釈溶液がある）行った。アッセイプレートを３７℃で２５分間インキュベートし、その後、１０μｌの０．５ｍＭのグリセルレチン酸、および抱合型コルチゾール（ＸＬ６６５またはＤ２）を添加して反応を停止した。次に、１０μｌの抗−コルチゾールクリプテートを添加し、プレートを密封して、室温で６時間インキュベートした。６６５ｎｍおよび６２０ｎｍでの蛍光を測定し、６６５ｎｍ：６２０ｎｍの比をＥｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダーを用いて算出した。
【００８６】
次に、これらのデータを使って、各化合物のＩＣ５０値（Origin 7.5、マイクロカルソフトウェア（Ｍｉｃｒｏｃａｌ  ｓｏｆｔｗａｒｅ）、ノーサンプトン、マサチューセッツ州、米国）および／または３０μＭの化合物における阻害率（％）を算出した。
＊１ The Journal of Biological Chemistry, Vol. 26, No 25, pp16653-16658
次の結果が得られた：参考例１  ＩＣ５０  ０．００８μＭ
本発明の化合物の経口バイオアベイラビリティは、次のように試験することができる。
【００８７】
ＰＫ試験におけるバイオアベイラビリティの決定
化合物を、２５％ＨＰＢＣＤを含有するｐＨ５．５ソレンソン緩衝液（ｓｏｒｒｅｎｓｏｎｓ ｂｕｆｆｅｒ）製剤に入れ、２ｍｇ／ｋｇ（２ｍｌ／ｋｇ）を静脈投与、５ｍｇ／ｋｇ（５ｍｌ／ｋｇ）を経口投与する。両方の経路について、血液サンプル（２００μｌ）を、投与前、投与後０．２５、０．５、１、２、３、４、５、６、８および２４時間に採取し、遠心分離により血漿を調製する。血漿サンプルを下記のように分析する。ＰＫパラメーター（クリアランス、分布容積、バイオアベイラビリティ、吸収率など）を、適切なＰＫソフトウェア（WinNon-Lin）を使用して標準ＰＫ法により算出する。
【００８８】
血漿サンプルの生物分析
以下に説明するのは、ＤＭＰＫ解析に使用されるすべてのＰＫ試験種に対して研究対象化合物を単一化合物投与またはカセット投与した後に、血漿サンプルを手作業で調製するための指針である。オープンアクセス（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）またはマニュアル手法（ＬＣ−ＭＳ）による分析について説明する。
【００８９】
内容
１．材料
２．一般的抽出方法
３．一般的プレート配置による実施例サンプルリスト
４．オープンアクセスのバッチサブミッションとシステムチェック
５．バッチパスの許容基準
１．材料
溶媒：メタノール、アセトニトリルおよびＤＭＳＯ
水：精製またはＨＰＬＣグレード
１ｍｌ浅型９６ウェルプレートまたはエッペンドルフチューブ
２ｍｌ深型９６ウェルプレートおよび蓋
ブランク（対照）血漿
２．一般的抽出方法
化合物（１種または複数）を、塩係数も考慮に入れながら、ＤＭＳＯを用いて可溶化し１ｍｇ／ｍｌとする。このＤＭＳＯストック（１種または複数）を用いて、すべての検量線および品質管理（ＱＣ）サンプルを作成することができる。
２．ｉ  単一化合物分析
２．ｉ．ａ  検量線およびＱＣサンプルの作成：
１．標準溶液を以下のように調製する。
【００９０】
【表７】
2011510966.tif 000009
【００９１】
２．５０μｌのブランク血漿を１ｍｌの９６ウェルプレート（浅型ウェル）の１つのウェルに移す。
３．５μｌの各標準溶液を該プレートの他のウェルに移す。
【００９２】
４．５０μｌのブランク血漿をこれらの各ウェルに加える。
５．ＱＣサンプルを生成するために、１００ｎｇ／ｍｌ、１,０００ｎｇ／ｍｌ、および１０，０００ｎｇ／ｍｌの各標準溶液について、各５μｌを該プレートに加える（各濃度につきＱＣは３回）。
【００９３】
６．５０μｌのブランク血漿をこれらのウェルのそれぞれに加える。
７．５０μｌの各ＰＫサンプルを１ｍｌの９６ウェルプレートに移す。
８．５μｌのメタノール（−化合物）を各ＰＫサンプルに加える。
【００９４】
９．すべての投与製剤がボルテックス混合で十分に混和しているか確認する。
１０．予測濃度の静脈内（ＩＶ）および経口（ＰＯ）投与用の製剤を１０μｇ／ｍｌとなるようにメタノールで希釈する（例えば、予測濃度が２ｍｇ／ｍｌとなるように調製された製剤は、１：２００に希釈して１０μｇ／ｍｌの溶液とする）。
【００９５】
１１．血漿を５０μｌずつ（×６）プレートに加える。そのうちの３個のウェルに希釈ＩＶ製剤５μｌを加え、残りの３個のウェルにはＰＯ製剤を同様に加える。
１２．研究関連内部標準（１μｇ／ｍｌ）を含有する１００μｌのアセトニトリルを、すべての検量線、ＱＣ、ＰＫおよび製剤サンプルに加えることによって、タンパク質を沈殿させる。
【００９６】
１３．プレートをボルテックス混合後、４、０００ｇで１０分間遠心分離する。
１４．１００μｌの上清を２ｍのｌ９６ウェルプレートの各ウェル（下記のプレートマップ参照）に移す。ペレットを乱さないように注意する。
【００９７】
１５．５０：５０のメタノール：水、約１．５ｍｌを後者のウェルに加える。
１６．トリプルクワッド（ｔｒｉｐｌｅ ｑｕａｄ）システムでの分析用に、４００μｌの水（ＨＰＬＣグレード）を各サンプルに加え、静かに混合する。
【００９８】
１７．２ｍｌプレートに、１００，０００ｎｇ／ｍｌの各標準溶液のストック１００μｌを加え、次いで水９００μｌを加える。次に、他の一つのウェルに内部標準のサンプルを加える（プレートマップ参照）。これらは化合物調整のために行う（プレートマップ上に溶液調整と表示）。
【００９９】
１８．プラットフォームシステムでの分析用に、１００μｌの水（ＨＰＬＣグレード）を各サンプルに加え、静かに混合する。
１９．調製した化合物溶液を用いて、全化合物を手作業で５，０００ｎｇ／ｍｌに調整する（５０，０００ｎｇ／ｍｌ標準溶液１００μｌを９００μｌの水に添加する）。
２．ｉｉ  カセット投与分析
２．ｉｉａ  検量線およびＱＣサンプルの作成:
注記：カセット投与では、１ｍｇ／ｍｌのストックを希釈するために必要なメタノールの量は、存在する化合物の数にしたがって調整する。
【０１００】
１．バイアルに、必要とされる各１ｍｇ／ｍｌのストック１００μｌを入れる。
２．必要量のメタノールを加え、全量１ｍｌとする。
３．単一化合物の分析の場合と同様、以降の工程（上記工程２〜１６）をすべて行う。
２．ｉｉｉ  ＰＫサンプルが定量上限（ＵＬＯＱ）を超える場合。
【０１０１】
１．上記（工程１〜６）と同様にさらなる検量線およびＱＣサンプルを作成する。
２．５０μｌ未満（例えば２５μｌ）のＵＬＯＱを超えるＰＫサンプルを移す。
３．これらのサンプルに十分なコントロール血漿を加え、最終血漿量を５０μｌとする。行った希釈を記録しておく。
【０１０２】
４．残りの全てのＰＫサンプルをそれぞれ５０μｌ移す。
５．上記と同様（工程８〜１６）、すべての製剤サンプルを調製し、すべてのサンプルを抽出する。
注記：検量線作成に使用する上限濃度は見直してもよいが、ＨＰＬＣカラムまたはＭＳ機器が飽和しないように注意しなければいけない。これはＰＫサンプルの希釈が推奨されているためである。
２．ｉｖ  感度が低い（定量下限（ＬＬＯＱ）が高い）場合。
注記：血漿濃度の大部分が定量下限以下であるか、ＬＬＯＱが１０ｎｇ／ｍｌより高い場合を高ＬＬＯＱとする。これらのいずれかに当てはまる場合には、下記の方法を適用する。
【０１０３】
本発明のさらなる態様によれば、薬学的に許容される希釈剤または担体といっしょに、上記で定義したような、本薬剤、またはその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物が提供される。
【０１０４】
本発明の組成物は、経口使用（例えば、錠剤、ロゼンジ剤、硬もしくは軟カプセル剤、水性もしくは油性の懸濁剤、乳剤、分散性粉剤もしくは顆粒剤、シロップ剤またはエリキシル剤として）、局所使用（例えば、クリーム剤、軟膏剤、ゲル剤、水性もしくは油性の液剤または懸濁剤として）、吸入投与（例えば、微粉または液体エアゾールとして）、通気投与（例えば、微粉として）、または非経口投与（例えば、静脈内、皮下、筋肉内、もしくは筋肉内投与用の無菌性の水性もしくは油性液剤として、または直腸投与用坐薬として）に適した形態であってよい。一般に、経口使用に適した形態の組成物が好ましい。
【０１０５】
本発明の組成物は、当技術分野において周知である、従来の医薬用賦形剤を使用する従来の手順により得ることができる。したがって、経口使用のための組成物は、例えば、１種または複数の着色剤、甘味剤、賦香剤、および／または防腐剤を含有していてもよい。
【０１０６】
錠剤用の好適な薬学的に許容される賦形剤としては、例えば、乳糖、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウムまたは炭酸カルシウムなどの不活性希釈剤、コーンスターチまたはアルゲン酸などの造粒剤および崩壊剤、澱粉などの結合剤、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはタルクなどの滑沢剤、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルまたはｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピルなどの防腐剤、およびアスコルビン酸などの抗酸化剤が挙げられる。錠剤は、消化管内での崩壊およびそれに続く活性成分の吸収を加減するため、または錠剤の安定性および／もしくは外見を改良するために、コーティングされていなくてもされていてもよいが、いずれの場合においても、当技術分野において周知の従来のコーティング剤および手順を用いる。
【０１０７】
経口使用のための組成物は、活性成分が、炭酸カルシウム、リン酸カルシウムもしくはカオリンなどの不活性な固形希釈剤と混合されている、硬ゼラチンカプセル剤の形態、または活性成分が、水、またはピーナッツ油、流動パラフィンもしくはオリーブ油などの油と混合されている、軟ゼラチンカプセル剤の形態であってよい。
【０１０８】
水性懸濁剤は通常、微粉化した形態の活性成分ともに、１種または複数の、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニル−ピロリドン、トラガカントゴムおよびアラビアゴムなどの懸濁剤、レシチン、またはアルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物（例えば、ステアリン酸ポリオキシエチレン）、もしくはエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物（例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール）、もしくはエチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトールに由来する部分エステルとの縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンソルビトールモノオレアート）、もしくはエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物（例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール）、もしくはエチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトールに由来する部分エステルとの縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンソルビトールモノオレアート）、もしくはエチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトール無水物に由来する部分エステルとの縮合生成物（例えば、ポリエチレンソルビタンモノオレアート）などの分散剤または湿潤剤を含有する。また水性懸濁剤は、１種または複数の防腐剤（例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルまたはｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル）、抗酸化剤（例えば、アスコルビン酸）、着色剤、賦香剤、および／または甘味剤（例えば、ショ糖、サッカリン、またはアスパルテーム）を含有していてもよい。
【０１０９】
油性懸濁剤は、活性成分を植物油（例えば、ラッカセイ油、オリーブ油、ゴマ油もしくはココナツ油）または鉱油（例えば、流動パラフィン）に懸濁させることによって製剤化することができる。また油性懸濁剤は、ミツロウ、固形パラフィンまたはセチルアルコールなどの増粘剤を含有していてもよい。口当たりのよい経口剤とするために、上述したような甘味剤、および賦香剤を添加してもよい。これらの組成物は、アスコルビン酸などの抗酸化剤を添加することによって保存することができる。
【０１１０】
水の添加による水性懸濁剤の調製に好適な分散性粉剤および顆粒剤は通常、活性成分とともに、分散剤または湿潤剤、懸濁剤、および１種または複数の防腐剤を含有する。好適な分散剤または湿潤剤、および懸濁剤は、すでに上述したものが代表的である。甘味剤、賦香剤および着色剤などの賦形剤がさらに存在してもよい。
【０１１１】
本発明の医薬組成物は、水中油型乳剤の形態であってもよい。油相は、オリーブ油やラッカセイ油などの植物油、流動パラフィンなどの鉱油、またはこれらのいずれかの混合物であってよい。好適な乳化剤は、例えば、アラビアゴムやトラガカントゴムなどの天然ゴム、大豆、レシチンなどの天然リン脂質、脂肪酸およびヘキシトール無水物に由来するエステルまたは部分エステル（例えば、ソルビタンモノオレアート）、ならびに該部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレアート）であってよい。乳剤は、甘味剤、賦香剤および防腐剤を含有していてもよい。
【０１１２】
シロップ剤およびエリキシル剤は、グリセロール、プロピレングリコール、ソルビトール、アスパルテームまたはショ糖などの甘味剤とともに製剤化することができ、粘滑剤、防腐剤、賦香剤および／または着色剤を含有していてもよい。
【０１１３】
医薬組成物は、滅菌注射用の水性または油性懸濁液の形態であってもよく、上述した適当な分散剤または湿潤剤、および懸濁剤のうちの1種または複数を用いて、公知の手順に従って製剤化することができる。滅菌注射用の製剤は、無毒性で非経口的に許容される希釈剤もしくは溶剤中の滅菌注射用の溶液または懸濁液（例えば、１，３−ブタンジオール中の溶液）であってもよい。
【０１１４】
吸入投与用の組成物は、超微粒子状の固体小滴または液体小滴のいずれかを含有するエアゾールとして活性成分を調合するように調整された、従来の加圧エアゾールの形態であってよい。揮発性のフッ素化炭化水素や炭化水素などの従来のエアゾール噴射剤を使用することができ、エアゾール装置は、定量の活性成分を調合するように調整されると都合が良い。
【０１１５】
製剤に関するさらなる情報については、Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board), Pergamon Press 1990の第５巻、２５．２章を参照されたい。
【０１１６】
単一剤形を製造するために１種または複数の賦形剤と組み合わされる活性成分の量は、被治療者および具体的な投与経路によって必然的に異なってくる。例えば、ヒトに経口投与するための製剤は、例えば、組成物全体の約５から約９８重量％の間で異なり得る適切かつ使いやすい量の賦形剤と混合された、０．５ｍｇ〜２ｇの活性成分を通常含有する。投与単位剤形は、約１ｍｇ〜約５００ｍｇの活性成分を通常含有する。投与経路および投与法に関するさらなる情報については、Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board), Pergamon Press 1990の第５巻、２５．３章を参照されたい。
【０１１７】
本発明者らは、本薬剤、またはその薬学的に許容される塩は、有効な１１βＨＳＤ１阻害剤であり、したがってメタボリック症候群に関連する病態の治療において価値があることを見出した。
【０１１８】
当然のことながら、本明細書で「メタボリック症候群」という語を使用する場合は、１）および／もしくは２）の定義、またはこの症候群について認められているその他のあらゆる定義のメタボリック症候群に関する。当技術分野で使用される「メタボリック症候群」の同義語としては、リーベン症候群、インスリン抵抗性症候群および症候群Ｘが挙げられる。当然のことながら、本明細書で「メタボリック症候群」という語を使用する場合は、リーベン症候群、インスリン抵抗性症候群および症候群Ｘのことも指している。
【０１１９】
本発明のさらなる態様によれば、ヒトなどの温血動物の予防的または治療的処置方法における使用のための、上記に定義したような本薬剤、またはその薬学的に許容される塩が提供される。
【０１２０】
したがって、本発明のこの態様によれば、医薬として使用するための本薬剤、またはその薬学的に許容される塩がある。
本発明の別の特徴によれば、ヒトなどの温血動物での１１βＨＳＤ１阻害作用の発現に使用される医薬の製造における、本薬剤、またはその薬学的に許容される塩の使用が提供される。
【０１２１】
１１βＨＳＤ１阻害作用の発現、または１１βＨＳＤ１阻害作用を発現させることに言及する場合、好適には、メタボリック症候群の治療を指す。また、１１βＨＳＤ１阻害作用の発現に言及する場合は、糖尿病、肥満、高脂血症、高血糖症、高インスリン血症または高血圧症の治療を指し、特に２型糖尿病および肥満の治療を指す。あるいは、１１βＨＳＤ１阻害作用の発現に言及する場合は、緑内障、骨粗しょう症、結核、痴呆、認知障害または鬱病の治療を指す。
【０１２２】
また、１１βＨＳＤ１阻害作用の発現に言及する場合は、例えば、言語流暢性、言語記憶もしくは論理的記憶の改善による個人の認知能力の改善といった認知障害の治療、または軽度の認知障害の治療を指す。例えば、国際公開第０３／０８６４１０号およびそれに含まれる参考文献、ならびにProceedings of National Academy of Sciences (PNAS), 2001, 98(8), 4717-4721を参照のこと。
【０１２３】
また、１１βＨＳＤ１阻害作用の発現に言及する場合は、アテローム性動脈硬化症の治療、その発症の遅延、および／またはそのリスクの低減を指す。例えば、J. Experimental Medicine, 2005, 202(4), 517-527を参照のこと。
【０１２４】
また、１１βＨＳＤ１阻害作用の発現に言及する場合は、アルツハイマー病および／または神経変性障害の治療を指す。
本発明のこの態様のさらなる特徴によれば、１１βＨＳＤ１阻害作用を発現する治療を必要としているヒトなどの温血動物において１１βＨＳＤ１阻害作用を発現する方法であって、該動物に、有効な量の式（１）の化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む方法が提供される。
【０１２５】
治療薬におけるそれらの使用に加えて、本薬剤、またはその薬学的に許容される塩は、新しい治療薬の探索の一環として、ネコ、イヌ、ウサギ、サル、ラットおよびマウスなどの実験動物における１１βＨＳＤ１阻害剤の効果を評価するための、インビトロおよびインビボ試験系の開発および標準化における薬理学的手段としても有用である。
【０１２６】
本明細書に記載の１１βＨＳＤ１の阻害は、単一療法として適用してもよいか、または、本発明の主題に加えて、１種または複数の他の物質および／もしくは治療を伴ってもよい。そのような共同治療（conjoint treatment）は、治療の個々の成分を、同時に、順次、または別々に投与することにより行うことができる。同時の治療は、単一の錠剤または別々の錠剤で行ってよい。例えば、１１βＨＳＤ１阻害剤、特に本発明の１１βＨＳＤ１阻害剤と同時投与できる薬剤としては、治療別に大きく分けた以下のものが挙げられる。
１）インスリンおよびインスリン類似体；
２）スルホニル尿素薬などのインスリン分泌促進薬（例えば、グリベンクラミド、グリピジド）、食後血糖調節薬（例えば、レパグリニド、ナテグリニド）、グルカゴン様ペプチド１作動薬（ＧＬＰ１作動薬）（例えば、エクセナチド、リラグルチド）およびジペプチジルペプチダーゼＩＶ阻害剤（ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤）；
３）ＰＰＡＲγ作動薬などのインスリン増感剤（例えば、ピオグリタゾンおよびロシグリタゾン）；
４）肝糖産生を抑制する薬剤（例えば、メトホルミン）；
５）腸からのグルコースの吸収を抑えるように設計された薬剤（例えば、アカルボース）；
６）持続性高血糖症の合併症を治療するように設計された薬剤；例えば、アルドース還元酵素阻害剤
７）リン酸化チロシンホスファターゼ阻害剤、グルコース−６−ホスファターゼ阻害剤、グルカゴン受容体拮抗剤、グルコキナーゼ活性化剤、グリコーゲンホスホリラーゼ阻害剤、フルクトース１，６ビスホスファターゼ阻害剤、グルタミン：フルクトース−６−リン酸アミドトランスフェラーゼ阻害剤などのその他の抗糖尿病剤；
８）抗肥満剤（例えば、シブトラミンおよびオルリスタット）；
９）ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤（プラバスタチンなどのスタチン類）；ＰＰＡＲα作動薬（ゲムフィブロジルなどのフィブラート類）；胆汁酸金属イオン封鎖剤（コレスチラミン）；コレステロール吸収阻害剤（植物スタノール、合成阻害剤）；回腸胆汁酸吸収阻害剤（ＩＢＡＴｉ）、コレステロールエステル転送タンパク質阻害剤、ならびにニコチン酸および類似体（ナイアシンおよび徐放性製剤）などの抗脂質異常症薬；
１０）β遮断剤（例えば、アテノロール、インデラル）；ＡＣＥ阻害剤（例えば、リシノプリル）；カルシウム拮抗剤（例えば、ニフェジピン）；アンジオテンシン受容体拮抗剤（例えば、カンデサルタン）、α拮抗剤および利尿剤（例えば、フロセミド、ベンズチアジド）などの抗高血圧剤；
１１）抗血栓剤、繊維素溶解活性化剤および抗血小板剤；トロンビン拮抗剤；因子Ｘａ阻害剤；因子ＶＩＩａ阻害剤；抗血小板剤（例えば、アスピリン、クロピドグレル）；抗凝固剤（ヘパリンおよび低分子量類似体、ヒルジン）ならびにワルファリンなどの止血調節剤；
１２）非ステロイド系抗炎症薬（例えば、アスピリン）およびステロイド系抗炎症薬（例えば、コルチゾン）などの抗炎症剤；および
１３）腎臓によるグルコースの再吸収を防ぐ薬剤（ＳＧＬＴ阻害剤）。
【実施例】
【０１２７】
次に、本発明を下記の実施例により説明するが、特に断りがない限り、
（ｉ）温度は摂氏（℃）で表し、操作は、室温または周囲温度、すなわち１８〜２５℃の温度範囲で、かつアルゴンなどの不活性ガス雰囲気下で行った。
（ｉｉ）溶媒の留去は、ロータリーエバポレーターを用いて、減圧下（６００〜４０００Ｐａ；４．５〜３０ｍｍＨｇ）、６０℃以下の浴温で行った。
（ｉｉｉ）クロマトグラフィーは、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーを意味する。
（ｉｖ）通常、反応の経過はＴＬＣにより追跡し、反応時間は例示のためにのみ示す。
（ｖ）収率は例示のためにのみ示し、必ずしも入念な過程開発によって得ることができるものではない。さらに物質が必要な場合には、調製を繰り返した。
（ｖｉ）ＮＭＲデータ（１Ｈ）は、示されている場合、特に断りがない限りは、溶媒として重水素化ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ−ｄ６）を用いて（特に断りがない限り）３００または４００ＭＨｚで測定し、テトラメチルシラン（ＴＭＳ）に対する百万分率（ｐｐｍ）で示した、主要な診断プロトンのデルタ値の形態である。ピークの多重度は次のように示す。ｓ、シングレット；ｄ、ダブレット；ｄｄ、ダブル−ダブレット；ｄｔ、ダブル−トリプレット；ｄｍ、ダブル−マルチプレット；ｔ、トリプレット；ｍ、マルチプレット；ｂｒ、ブロード。
（ｖｉｉ）化学記号は通常の意味を有し、ＳＩ単位系および記号を用いる。
（ｖｉｉｉ）溶媒の割合は体積：体積（ｖ／ｖ）で表す。
（ｉｘ）質量スペクトル（ＭＳ）は、直接暴露プローブを用いて、化学イオン化（ＣＩ）モードにおいて７０電子ボルトの電子エネルギーで実施した。イオン化は、示されている場合、電子衝撃（ＥＩ）、高速原子衝撃（ＦＡＢ）または電子スプレー（ＥＳＰ）により行った。ｍ／ｚの値を示し、通常は、親質量を示すイオンのみを報告する。
（ｘ）相対量（rel vol）とは、重要中間体の量と比較した相対的な量である。相対量は通常溶媒の量を指すのに用いられる。例えば重要中間体が１００ｇで１０００ｍｌの溶媒を使用した場合、これは１０相対量の溶媒と呼ばれる。
（ｘｉ）下記の略語を、以下において、または上記の工程の箇所で使用することがある。
【０１２８】
Ｅｔ２Ｏ  ジエチルエーテル
ＤＭＦ  ジメチルホルムアミド
ＤＣＭ  ジクロロメタン
ＴＨＦ  テトラヒドロフラン
ＤＭＳＯ  ジメチルスルホキシド
ＥｔＯＡｃ  酢酸エチル
ＭＴＢＥ  メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル
ＤＳＣ  示差走査熱量測定
参考例１
４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸
【０１２９】
【化２】
2011510966.tif 000010
【０１３０】
２Ｍの水酸化ナトリウム水溶液（５１．７ｍＬ、１０３．３２ｍｍｏｌ）をメタノール（１００ｍＬ）中の４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸メチル（中間体＃１）（４．５ｇ、１０．３３ｍｍｏｌ）に加えた。混合物を７０℃で１時間攪拌し、次いで、周囲温度まで冷却し、減圧下で濃縮し、水（１００ｍＬ）で希釈した。反応混合物を２ＭのＨＣｌでｐＨ３に調節した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で抽出し、水（２×１００ｍＬ）および飽和ブライン（５０ｍＬ）で連続して洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、エバポレートし、淡黄色の固体を得た。固体をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で洗浄し、濾過により収集し、真空下で乾燥させ、４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸（３．８９ｇ、８９％）を、クリーム色の結晶性固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００．１３ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．１９（９Ｈ、ｓ）、１．４９（２Ｈ、ｄ）、１．７０−１．９６（１０Ｈ、ｍ）、２．０９（２Ｈ、ｄ）、３．９８−４．０１（１Ｈ、ｍ）、７．４９−７．５３（２Ｈ、ｍ）、７．６１（１Ｈ、ｓ）、８．０６−８．０９（２Ｈ、ｍ）、８．２０（１Ｈ、ｄ）、１３．３０（１Ｈ、ｓ）
ｍ／ｚ（ＥＳＩ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２２
ｍ．ｐ．３０８．８℃（開始）。
【０１３１】
参考例１は次のように調製することもできる。
水酸化ナトリウム水溶液（２Ｍ）（２．５当量）を、２０℃のメタノール（１０容量）中の４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸メチル（中間体＃１）（１．０当量）の攪拌懸濁液に、５分間かけて少しずつ加えた（発熱２０〜２７℃）。得られた懸濁液を１時間、７０℃（ジャケット温度）に加熱した（バッチ還流約６０〜６５℃）（ＬＣＭＳにより完了）。オレンジ色の反応混合物を２０℃まで冷却し（溶液にはわずかに混濁が残った）、セライトを通して濾過し少量の固体を除去した。次いで、濾液をフランジフラスコに注ぎ込み、水（２５容量）を加えた。次いで、混合物を２ＭのＨＣｌ（約８００〜８５０ｍｌ）でｐＨ３に調節した（非常に濃くなる）。次いで水層を濾過し、淡黄色の固体を水で洗浄し、一晩吸引乾燥し、アセトニトリルおよび最後に１：１のアセトニトリル／ジエチルエーテルで洗浄し、真空下、５０℃で７２時間（週末）乾燥させて、４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸（８０％）を固体として得た。
【０１３２】
中間体＃２：４−ヒドラジニル安息香酸メチル塩酸塩
【０１３３】
【化３】
2011510966.tif 000011
【０１３４】
ジオキサン中の４Ｍの塩化水素（１００ｍＬ、３９９．６０ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（２００ｍＬ）中の４−ヒドラジノ安息香酸（１５．２ｇ、９９．９０ｍｍｏｌ）に加えた。得られた懸濁液を９０℃で５時間攪拌した。２０℃まで冷却した後、沈殿物を濾過により収集し、Ｅｔ２Ｏ（１００ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥させ、２−（４−（メトキシカルボニル）フェニル）ヒドラジニウムクロリド（１６．５０ｇ、８２％）をクリーム色の結晶性固体として得た。
ｍ／ｚ（ＥＳＩ−）（Ｍ−Ｈ）−＝１６５；ＨＰＬＣｔＲ＝１．１２分
１Ｈ  ＮＭＲ（４００.１３ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ３．８１（３Ｈ、ｓ）、６．９９−７．０２（２Ｈ、ｍ）、７．８６−７．９０（２Ｈ、ｍ）、８．９８（１Ｈ、ｓ）、１０．４７（３Ｈ、ｓ）。
【０１３５】
中間体＃２は次のように調製することもできる。
メタノール性塩酸溶液（４Ｍ）（４当量、新たに調製）を、窒素下で、メタノール（１２．６容量）中の４−ヒドラジノ安息香酸懸濁液（１当量）に加えた。混合物を還流下で３時間攪拌し、次いで１５℃未満まで冷却した。濾過により固体を収集し、ＭＴＢＥ（６．５容量）で洗浄し、風乾し、生成物を固体として得た。
ＴＬＣ  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、９：１、生成物Ｒｆ０．８７
ｍｐ  ２３３．８〜２３４．６℃。
【０１３６】
中間体＃３：Ｎ−（２−アダマンチル）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミド
【０１３７】
【化４】
2011510966.tif 000012
【０１３８】
ＴＨＦ中のリチウムビス（トリメチルシリル）アミド溶液の１Ｍ溶液（２２．８４ｍｌ、２２．８４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２５ｍＬ）に加え、窒素下で−７８℃まで冷却した。ＴＨＦ（２５ｍＬ）中の３，３−ジメチル−２−ブタノン（２．２８７ｇ、２２．８４ｍｍｏｌ）の溶液を５分間にわたって滴下した。得られた溶液を、窒素下、−７８℃で１５分間攪拌した。ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の２−イソシアナトアダマンタン（R.Reck & C.Jochims Chem. Ber. 115(1982) p864の方法によって２−アダマンチルアミン塩酸塩から調製）（３．６８ｇ、２０．７６ｍｍｏｌ）の溶液を５分間にわたって加えた。得られた溶液を−７８℃で１時間攪拌した後、１時間かけて２０℃まで昇温させた。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（１５０ｍＬ）に注ぎ込み、ＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で抽出した。有機層を水（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、エバポレートし、黄色の油を得た。粗生成物をフラッシュシリカクロマトグラフィー（溶出勾配：イソヘキサン中の０〜５０％ＥｔＯＡｃ）によって精製した。精製画分を蒸発乾固し、Ｎ−（２−アダマンチル）−４,４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミド（４．６４ｇ、８１％）を白色固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００．１３ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．０８−１．０９（９Ｈ、ｍ）、１．５０（２Ｈ、ｄ）、１．６６−１．８９（１０Ｈ、ｍ）、１．９５−２．００（２Ｈ、ｍ）、３．５３（１．４Ｈ、ｓ）、３．８０−３．９４（１Ｈ、ｍ）、５．３０（０．３Ｈ、ｓ）、７．７７−７．８７（１Ｈ、ｍ）、１４．４３（０．３Ｈ、ｓ）（ケト型とエノール型の２：１混合物）
ｍ／ｚ（ＥＳＩ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７８。
【０１３９】
中間体＃３は次のように調製することもできる。
水酸化ナトリウム水溶液（３Ｍ）（５容量）を水（５容量）中の２−アダマンチルアミン塩酸塩（１当量）の攪拌懸濁液に加えた。ＤＣＭ（５容量）を得られた濃厚な懸濁液に加え、相を分離した。水層をＤＣＭ（４×５容量）で抽出し、合わせた有機層を濃縮し、遊離アミンを白色固体として得た。
【０１４０】
エチルピバロイルアセテート（１当量）を、窒素下で、キシレン（６．５容量）中の遊離アミンの懸濁液に加え、混合物を還流下で６.５時間攪拌した。バッチを室温まで冷却し、濃縮乾固した。残留物を、トルエン（３×１容量）、次いでヘキサン（３×１容量）でパージした。得られた固体を５０℃で５分間ヘキサン中で攪拌し、その後室温まで冷却した。白色固体を濾過し、ヘキサン（２容量）で洗浄し風乾させた。
ＴＬＣ  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、１：１、生成物Ｒｆ０．６６
ｍｐ  １２４．５〜１２５．１℃。
【０１４１】
中間体＃４：（２）−Ｎ−（２−アダマンチル）−２−（ジメチルアミノメチリデン）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミド
【０１４２】
【化５】
2011510966.tif 000013
【０１４３】
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（３．０２ｍＬ、２２．７１ｍｍｏｌ）を、窒素下で、１，４−ジオキサン（５０ｍＬ）中のＮ−（２−アダマンチル）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミド（中間体＃３）（５．２５ｇ、１８．９３ｍｍｏｌ）の攪拌懸濁液に加えた。得られた混合物を１００℃で２時間攪拌した。反応混合物を蒸発乾固し、得られた淡いクリーム色の固体を真空下で乾燥させ、（２）−Ｎ−（２−アダマンチル）−２−（ジメチルアミノメチリデン）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミド（５．８３ｇ、９３％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００．１３ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．１３（９Ｈ、ｓ）、１．４７（２Ｈ、ｄ）、１．６９−１．８３（１０Ｈ、ｍ）、２．０３（２Ｈ、ｄ）、２．９２（６Ｈ、ｓ）、３．９０（１Ｈ、ｄ）、７．２４（１Ｈ、ｓ）、７．９４（１Ｈ、ｄ）
ｍ／ｚ（ＥＳＩ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３３。
【０１４４】
中間体＃４は次のように調製することもできる。
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（１．２当量）を、窒素下で、１，４−ジオキサン（９．６容量）中のＮ−（２−アダマンチル）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミド（中間体＃３）（１当量）の溶液に加えた。混合物を還流下で５時間加熱し、その後室温まで冷却した。溶媒を真空下で除去し、淡黄色の固体を次の工程でそのまま使用した。
ＴＬＣ  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、１：１、生成物Ｒｆ０．９４（不純物：Ｒｆ０．０６＋０．６６）
ｍｐ  １４３．６〜１４７．６℃。
【０１４５】
中間体＃１：４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸メチル
【０１４６】
【化６】
2011510966.tif 000014
【０１４７】
４−ヒドラジニル安息香酸メチル塩酸塩（中間体＃２）（３．０４ｇ、１５．００ｍｍｏｌ）を、エタノール（１００ｍＬ）中の（２）−Ｎ−（２−アダマンチル）−２−（ジメチルアミノメチリデン）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミド（中間体＃４）（４．９９ｇ、１５ｍｍｏｌ）に一度に加えた。酢酸を５滴添加し、得られた溶液を８０℃で２時間攪拌した。反応混合物を濃縮し、ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で希釈し、水（２００ｍＬ）および飽和ブライン（２００ｍＬ）で連続して洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、エバポレートし、粗生成物を得た。
【０１４８】
該粗生成物をフラッシュシリカクロマトグラフィー（溶出勾配：イソヘキサン中の０〜５０％ＥｔＯＡｃ）によって精製した。精製画分を蒸発乾固し、４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸メチル（４．６６ｇ、７１．３％）を黄色の固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００．１３ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．１９（９Ｈ、ｓ）、１．５０（２Ｈ、ｄ）、１．６９−１．９５（１０Ｈ、ｍ）、２．０９（２Ｈ、ｄ）、３．９１（３Ｈ、ｓ）、３．９９（１Ｈ、ｄ）、７．５３−７．５６（２Ｈ、ｍ）、７．６２（１Ｈ、ｓ）、８．０９−８．１２（２Ｈ、ｍ）、８．２０（１Ｈ、ｄ）
ｍ／ｚ（ＥＳＩ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３６。
【０１４９】
中間体＃１は次のように調製することもできる。
２−（４−（メトキシカルボニル）フェニル）ヒドラジニウムクロリド（中間体＃２）（１当量）、次いで酢酸（０．０２３当量）を、窒素下で、メタノール（２００容量）中の（２Ｚ）−Ｎ−（２−アダマンチル）−２−（ジメチルアミノ−メチリデン）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミド（中間体＃４）（１当量）の溶液に加えた。混合物を還流下で１．５時間攪拌し、冷却し、３．５容量未満まで濃縮し、得られた懸濁液を酢酸エチル（９６容量）で希釈した。該懸濁液を水（３４．４容量）で洗浄して溶液を得、その溶液をブライン（３４．４容量）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濃縮乾固した。粗生成物をＭＴＢＥ（９容量）中でスラリー状にし、１５分間攪拌した。淡黄色の固体を濾過し、ＭＴＢＥ（１１．４容量）で洗浄し、真空下、６０℃で乾燥させた。
ＴＬＣ  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、９：１、生成物Ｒｆ０．８６（微量の不純物Ｒｆ０．６８）
ｍｐ  １９３．６〜１９４．５℃。
【０１５０】
４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸は次のように調製することもできる。
塩酸（３４．５％ｗ／ｗ、１５．８８ｇ、５．４８ｇ＠１００．０％、０．１５０４モル、１．０モル当量）および水（７０ｍｌ、１．４相対量）をメタノール（１２５０ｍｌ、１２．５相対量）中の４−ヒドラジノ安息香酸（２３．３５ｇ、２２．８８ｇ＠１００．０％、０．１５０４モル、１．０モル当量）の懸濁液に加えた。得られた懸濁液を２０〜２５℃で３０分間攪拌し、メタノール（２５０ｍｌ、５．０相対量）中の、２０〜２５℃のＮ−（２−アダマンチル）−２−（ジメチルアミノメチリデン）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミド（中間体＃４）（５３．４７ｇ、５０．０ｇ＠１００．０％、４モル中０．１５０、１．０モル当量）の溶液を２０分間かけて加え、次いで塩酸（３４．５％ｗ／ｗ、２．３８ｇ、０．８２ｇ＠１００．０％、０．０２２６４モル、０．１５モル当量）および水（７０．０ｍｌ、１．４相対量）を加えた。反応物の温度を６２〜６５℃まで上げ、９０．０分間維持した。後処理として、残り６．０相対量（約３００．０ｍｌ）となるまでメタノール溶液を大気中で濃縮した。得られた懸濁液を２０〜２５℃まで冷却し１．０時間攪拌した。生成物を濾過し、酢酸エチル（２００．０ｍｌ、４．０相対量）で洗浄し、３０分間吸引乾燥した。生成物を５０℃で８時間、真空下（１００ｍｂａｒ）で乾燥させ、未精製の４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸（４７．０ｇ、７３．０％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００．１３ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．１９（９Ｈ、ｓ）、１．４９（２Ｈ、ｄ）、１．７０−１．９６（１０Ｈ、ｍ）、２．０９（２Ｈ、ｄ）、３．９８−４．０１（１Ｈ、ｍ）、７．４９−７．５３（２Ｈ、ｍ）、７．６１（１Ｈ、ｓ）、８．０６−８．０９（２Ｈ、ｍ）、８．２０（１Ｈ、ｄ）、１３．３０（１Ｈ、ｓ）
ｍ／ｚ（ＥＳＩ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２２
ｍ．ｐ．３０８．８℃（開始）。
クロマトグラフィー条件：［ＨＰＬＣ］
Zorbax SB-Aq、１５０×４．６ｍｍ、５μ。使用する移動相は有機溶媒としてアセトニトリルを用いるギ酸緩衝液、流量１．０ｍＬ／分、注入量は２０μＬ、実行時間は１８分で、ＵＶ検出器の波長は２２０、３２０ｎｍを使用する。
保持時間［ＨＰＬＣ］
４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸：（相対保持時間：０．７７分）
（２）−Ｎ−（２−アダマンチル）−２−（ジメチルアミノメチリデン）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミド（保持時間：１４．２分）。
【０１５１】
１０．０％ｗ／ｗ水酸化ナトリウム水溶液（１０９．１ｇ、１０．９１ｇ＠１００．０％、０．２７２７モル、１．１５モル当量）を、未精製４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸（１１０．０ｇ、１００．０ｇ＠１００．０％、０．２３７２モル、１．０モル当量）の水（１０００．０ｍｌ、１０．０相対量）中の懸濁液に加え、１５．０分間攪拌した。不溶解生成物を濾過した。得られた透明な水溶液（濾液）にトルエン（６００．０ｍｌ、６．０相対量）を加え、３０．０分間攪拌した。相分離のために反応物を１．０時間静置した。水層を分離し、セライト床を通して濾過した。水層にメタノール（３００．０ｍｌ、３．０相対量）を加えた。水層のｐＨを、希塩酸（３．８％ｗ／ｗ、２６１．６ｇ、９．９４＠１００．０％、０．２７２７モル、１．１５モル当量）で２．２５〜２．７５に徐々に調節した。得られた懸濁液を１．５〜２．０時間攪拌し、生成物を濾過し、２５．０％ｖ／ｖメタノール水溶液［５００．０ｍｌ、５．０相対量（メタノール１２５ｍｌと水４７５ｍｌの混合物）］で洗浄した。生成物を５０〜６０℃で１６．０時間、真空下（１００ｍｂａｒ）で乾燥させ、４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸（８５．０ｇ、８５．０％）（形態１）を得た。
【０１５２】
中間体＃３
Ｎ−（２−アダマンチル）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミド
【０１５３】
【化７】
2011510966.tif 000015
【０１５４】
中間体＃３は次のように調製することもできる。トルエン（４００．０ｍｌ、４．０相対量）を、２−アダマンタンアミン塩酸塩（１００．０ｇ、９８．０ｇ＠１００％、０．５２２１モル、１．００モル当量）の水（５００．０ｍｌ、５．０相対量）中の溶液に加えた。１０．０％ｗ／ｗの水酸化ナトリウム水溶液（２６１．０２ｇ、２６．１ｇ＠１００．０％、０．６５２６モル、１．２５モル当量）を上記溶液に加え、１５分間攪拌した。有機層を水層から分離し、５．０％ｗ／ｗ塩化ナトリウム溶液（３００．０ｍｌ、３．０相対量）で洗浄した。エチルピバロイルアセテート（１１５．９ｇ、０．６５２６モル、１．２５モル当量）を有機層に一度に加えた。反応物を加熱還流し、温度を１１０℃に維持しながら、トルエンを３〜３．５時間共沸して回収した（５５０．０ｍｌ、５．５相対量）。反応物を７０〜８０℃まで冷却し、ｎ−ヘプタン（１０００．０ｍｌ、１０．０相対量）を１５分間かけて加えた。反応物をさらに２５℃まで冷却し、得られた懸濁液を１．０時間攪拌した。懸濁した固体を濾過により回収し、ｎ−ヘプタン（４００．０ｍｌ、４．０相対量）で洗浄し、生成物を５０〜５５℃で６．０時間、真空下（１００ｍｂａｒ）で乾燥させ、Ｎ−（２−アダマンチル）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミド（１１３．０ｇ、７５．８％）を白色結晶性固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００．１３ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．０８−１．０９（９Ｈ、ｍ）、１．５０（２Ｈ、ｄ）、１．６６−１．８９（１０Ｈ、ｍ）、１．９５−２．００（２Ｈ、ｍ）、３．５３（１．４Ｈ、ｓ）、３．８０−３．９４（１Ｈ、ｍ）、５．３０（０．３Ｈ、ｓ）、７．７７−７．８７（１Ｈ、ｍ）、１４．４３（０．３Ｈ、ｓ）（ケト型とエノール型の２：１混合物）
ｍ／ｚ（ＥＳＩ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７８。
クロマトグラフィー条件：−（ＧＣ）
ＨＰ−５ＭＳカラム、キャリヤーガスとしてヘリウム、流量１．０ｍＬ／分、溶媒遅延最大１．５分、オーブン温度は、初期温度５０℃で２分間維持、その後２０℃／分で２８０℃まで上昇、注入量は１．０μＬとする。
保持時間（ＧＣ）
２−アダマンタンアミン塩酸塩（保持時間：８．１分）
Ｎ−（２−アダマンチル）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミド（相対保持時間：１．６１７分）。
【０１５５】
中間体＃４
（２）−Ｎ−（２−アダマンチル）−２−（ジメチルアミノメチリデン）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミド
【０１５６】
【化８】
2011510966.tif 000016
【０１５７】
中間体＃４は次のように調製することもできる。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（６９．２５ｇ、６３．０２ｇ＠１００．０％、０．５２８８モル、１．５モル当量）を、Ｎ−（２−アダマンチル）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミド（中間体３）（１００ｇ、９７．８ｇ＠１００．０％、０．３５２５モル、１．０モル当量）のｎ−ヘプタン（８００．０ｍｌ、８．２０相対量）およびトルエン（３５０．０ｍｌ、３．５８相対量）中の懸濁液に加えた。反応物の温度を９０〜９５℃まで上げ５．０時間維持した後、８０℃まで冷却し、ｎ−ヘプタン（４００．０ｍｌ、４．０９相対量）を加えた。反応物温度をさらに２５℃まで下げ、得られた懸濁液を濾過により回収し、ｎ−ヘプタン（４００．０ｍｌ、４．０９相対量）で洗浄し、生成物を３０分間吸引乾燥した。生成物を周囲温度（２０〜２５℃）で３．０時間、真空下（１００ｍｂａｒ）で乾燥させ、（２）−Ｎ−（２−アダマンチル）−２−（ジメチルアミノメチリデン）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミド（１００ｇ、７９．７％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００．１３ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．１３（９Ｈ、ｓ）、１．４７（２Ｈ、ｄ）、１．６９−１．８３（１０Ｈ、ｍ）、２．０３（２Ｈ、ｄ）、２．９２（６Ｈ、ｓ）、３．９０（１Ｈ、ｄ）、７．２４（１Ｈ、ｓ）、７．９４（１Ｈ、ｄ）。
ｍ／ｚ（ＥＳＩ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３３。
クロマトグラフィー条件：（ＨＰＬＣ）−
Sunfire C18、１５０×４．６ｍｍ、５μ。使用する移動相は有機溶媒としてメタノールを用いるリン酸水素二ナトリウム緩衝液、流量１．０ｍＬ／分、注入量は２０μＬ、実行時間は２０分で、示差屈折率検出器を使用する。
保持時間（ＨＰＬＣ）：
Ｎ−（２−アダマンチル）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミド（保持時間：１１．０分）
（２）−Ｎ−（２−アダマンチル）−２−（ジメチルアミノメチリデン）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミド（相対保持時間：１．１８分）。
【０１５８】
参考例２
（２）−Ｎ−（２−アダマンチル）−２−（ジメチルアミノメチリデン）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミドの合成
【０１５９】
【化９】
2011510966.tif 000017
【０１６０】
２−アダマンタンアミン塩酸塩（２５．０ｇ、０．１３モル）の水（７５．０ｍｌ、３．０相対量）中の懸濁液に、トルエン（１００．０ｍｌ、４．０相対量）を加えた。１０．０％ｗ／ｗ水酸化ナトリウム水溶液（１．２５モル当量）を上記溶液に入れ、１０〜１５分間攪拌した。有機層を分離し、水層をトルエン（７５．０ｍｌ、３．０相対量）で再抽出し、分離した有機層と合わせた。合わせた有機層を５．０％ｗ／ｗ塩化ナトリウム溶液（７５ｍｌ、３．０相対量）で洗浄し分離した。エチルピバロイルアセテート（２６．０１ｇ、０．１５モル）を有機層に加え、反応物を１１０〜１１２℃で加熱還流した。溶媒（４〜５相対量）を４〜５時間かけて共沸して回収した。反応物を４０〜４５℃まで冷却し、３５〜４０℃でｎ−ヘプタン（２００．０ｍｌ、８．０相対量）を加え、次いで３０〜３５℃でＤＭＦ−ＤＭＡ（２６．４５ｇ、０．２０モル）およびトリエチルアミン（１３．４８ｇ、０．１３モル）を加えた。反応物の温度を９０〜９３℃まで上げ２〜３時間維持した。副生成物として生成したメタノールを反応の間共沸して回収した。反応物を２０〜２５℃まで冷却し、その温度で１．０時間攪拌した。沈殿生成物を濾過し、床をｎ−ヘプタン（１００．０ｍｌ、４．０相対量）で洗浄し、生成物を３５〜４０℃で３〜４時間、真空下（５０〜１００ｍｂａｒ）で乾燥させ、（２）−Ｎ−（２−アダマンチル）−２−（ジメチルアミノメチリデン）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミドを得た（収率、８６％）。室温では不安定であったため、生成物を窒素雰囲気下で充填し、１０℃未満で貯蔵した。
【０１６１】
別の方法として、（２）−Ｎ−（２−アダマンチル）−２−（ジメチルアミノメチリデン）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミドは次のように調製することができる。
【０１６２】
２−アダマンタンアミン塩酸塩（２５．０ｇ、０．１３モル）の水（７５．０ｍｌ、３．０相対量）中の懸濁液に、トルエン（１００．０ｍｌ、４．０相対量）を加えた。１０．０％ｗ／ｗ水酸化ナトリウム水溶液（１．２５モル当量）を上記溶液に入れ、１０〜１５分間攪拌した。有機層を分離し、水層をトルエン（７５．０ｍｌ、３．０相対量）で再抽出し、分離した有機層と合わせた。合わせた有機層を５．０％ｗ／ｗ塩化ナトリウム溶液（７５ｍｌ、３．０相対量）で洗浄し分離した。エチルピバロイルアセテート（２６．０１ｇ、０．１５モル）を有機層に加え、反応物を１１０〜１１２℃で加熱還流した。溶媒（４〜５相対量）を４〜５時間かけて共沸して回収した。反応物を４０〜４５℃まで冷却し、３５〜４０℃でｎ−ヘプタン（２００．０ｍｌ、８．０相対量）を加え、次いで同じ温度でＤＭＦ−ＤＭＡ（２６．４５ｇ、０．２０モル）を加えた。反応物の温度を８５〜９０℃まで上げ４〜５時間維持した。副生成物として生成したメタノールを反応の間共沸して回収した。反応物を２０〜２５℃まで冷却し、その温度で１．０時間攪拌した。沈殿生成物を濾過し、床をｎ−ヘプタン（１００．０ｍｌ、４．０相対量）で洗浄し、生成物を３５〜４０℃で３〜４時間、真空下（５０〜１００ｍｂａｒ）で乾燥させ、（２）−Ｎ−（２−アダマンチル）−２−（ジメチルアミノメチリデン）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミドを得た（収率、７２％）。室温では不安定であったため、生成物を窒素雰囲気下で充填し、１０℃未満で貯蔵した。
クロマトグラフィー条件：−
Sunfire C18、１５０×４．６ｍｍ、５μ。使用する移動相は有機溶媒としてメタノールを用いるリン酸水素二ナトリウム緩衝液、流量１．０ｍＬ／分、注入量は２０μＬ、実行時間は２０分で、示差屈折率検出器を使用する。
保持時間：
Ｎ−（２−アダマンチル）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミド  保持時間：１１．０分
（２）−Ｎ−（２−アダマンチル）−２−（ジメチルアミノメチリデン）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミド  相対保持時間：１．１８分
１Ｈ  ＮＭＲ（４００．１３ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．１３（９Ｈ、ｓ）、１．４７（２Ｈ、ｄ）、１．６９−１．８３（１０Ｈ、ｍ）、２．０３（２Ｈ、ｄ）、２．９２（６Ｈ、ｓ）、３．９０（１Ｈ、ｄ）、７．２４（１Ｈ、ｓ）、７．９４（１Ｈ、ｄ）
ｍ／ｚ（ＥＳＩ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３３。
【０１６３】
必要であれば該Ｎ−（２−アダマンチル）−４，４−ジメチル−３オキソ−ペンタンアミド中間体は単離することができる：
クロマトグラフィー条件：−
ＨＰ−５ＭＳカラム、キャリヤーガスとしてヘリウム、流量１．０ｍＬ／分、溶媒遅延最大１．５分、オーブン温度は、初期温度５０℃で２分間維持、その後２０℃／分で２８０℃まで上昇、注入量は１．０μＬとする。
保持時間：
２−アダマンタンアミン塩酸塩  保持時間８．１分
Ｎ−（２−アダマンチル）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミド  相対保持時間：１．６１７分
１Ｈ  ＮＭＲ（４００．１３ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．０８−１．０９（９Ｈ、ｍ）、１．５０（２Ｈ、ｄ）、１．６６−１．８９（１０Ｈ、ｍ）、１．９５−２．００（２Ｈ、ｍ）、３．５３（１．４Ｈ、ｓ）、３．８０−３．９４（１Ｈ、ｍ）、５．３０（０．３Ｈ、ｓ）、７．７７−７．８７（１Ｈ、ｍ）、１４．４３（０．３Ｈ、ｓ）（ケト型とエノール型の２：１混合物）
ｍ／ｚ（ＥＳＩ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７８。
【０１６４】
４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸（形態−１）の合成
【０１６５】
【化１０】
2011510966.tif 000018
【０１６６】
４−ヒドラジノ安息香酸塩酸塩（１４．１１ｇ、０．０７５モル）、および（２）−Ｎ−（２−アダマンチル）−２−（ジメチルアミノメチリデン）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミド（２５．０ｇ、０．０７５モル）をジャケット付き反応器に入れ、次いでイソプロピルアルコール（３１５ｍｌ、１２．６相対量）および水（３５ｍｌ、１．４相対量）を入れた。反応物を２０〜２５℃で約４５〜６０分間攪拌した。内容物を７８〜８０℃で加熱還流し、その温度で９０分間維持した。反応物を５０〜５５℃まで冷却し、次いで同じ温度で水（１５０ｍｌ、６相対量）を加えた。内容物をさらに周囲温度（２０〜２５℃）まで冷却し、同じ温度で１．０時間攪拌した。沈殿生成物を濾過し、次いでイソプロピルアルコールと水（１：１）の混合物（２５０ｍｌ、１０．０相対量）で洗浄し、４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸を得た。生成物を５０〜５５℃で４〜５時間、真空下で乾燥させ、さらに精製することなく用いた（収率：８０％）。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００．１３ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．１９（９Ｈ、ｓ）、１．４９（２Ｈ、ｄ）、１．７０−１．９６（１０Ｈ、ｍ）、２．０９（２Ｈ、ｄ）、３．９８−４．０１（１Ｈ、ｍ）、７．４９−７．５３（２Ｈ、ｍ）、７．６１（１Ｈ、ｓ）、８．０６−８．０９（２Ｈ、ｍ）、８．２０（１Ｈ、ｄ）、１３．３０（１Ｈ、ｓ）
ｍ／ｚ（ＥＳＩ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２２
ｍ．ｐ．３０８．８℃（開始）。
クロマトグラフィー条件：−
Zorbax SB-Aq、１５０×４．６ｍｍ、５μ。使用する移動相は有機溶媒としてアセトニトリルを用いるギ酸緩衝液、流量１．０ｍＬ／分、注入量は２０μＬ、実行時間は１８分で、ＵＶ検出器の波長は２２０、３２０ｎｍを使用する。
保持時間：
［（（２）−Ｎ−（２−アダマンチル）−２−（ジメチルアミノメチリデン）−４，４−ジメチル−３−オキソ−ペンタンアミド  保持時間１４．２分
４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸  相対保持時間０．７７分（１０．０分）
中間体  相対保持時間０．７９（１１．２分）。
【０１６７】
実施例１
４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸（形態２）
上記（参考例１−形態１）で調製した４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸約５０ｍｇを磁気攪拌子入りのバイアルに入れ、アセトニトリル約２ｍｌを加えた。次いでバイアルを蓋できつく密封した。次いでスラリーを、磁気攪拌能力を有する加熱攪拌ブロック中、５０℃で攪拌させた。３日後、試料をプレートより取り出し、蓋を外し、スラリーを周囲条件で乾燥させてから、ＸＲＰＤおよびＤＳＣで分析した。この形態（形態２）は、ＸＲＰＤによって結晶性であることが確認され、先の形態とは異なっていることがわかった。この物質の融点は３１０．９℃（開始）であった。この物質は、ＣｕＫａ照射を用いて測定される２シータのピークを１８．０および１７．７°に有していた。後にＤＳＣを用いて融点を測定すると３０９．９℃であった。
【０１６８】
実施例２
４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸（形態３）
４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸（形態１）約２０ｍｇを磁気攪拌子入りのバイアルに入れ、メタノール約２ｍｌを加え、次いでバイアルを蓋できつく密封し、マグネチックスターラープレート上で攪拌させた。３日後、試料をプレートより取り出し、蓋を外し、スラリーを周囲条件で乾燥させてから、ＸＲＰＤおよびＤＳＣで分析した。この形態（形態３）は、ＸＲＰＤによって結晶性であることが確認され、先に見られた形態とは異なっていることがわかった。この物質の融点は３０９．４℃（開始）であった。この物質は、ＣｕＫａ照射を用いて測定される２シータのピークを１８．７および１１．７°に有していた。後にＤＳＣを用いて融点を測定すると３０９．３℃であった。
【０１６９】
実施例３
４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸（形態４）
形態１の４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸約２０ｍｇおよび形態３の物質２０ｍｇを磁気攪拌子入りのバイアルに入れ、酢酸エチル約２ｍｌを加え、次いでバイアルを蓋できつく密封し、マグネチックスターラープレート上で攪拌させた。３日後、試料をプレートより取り出し、蓋を外し、スラリーを周囲条件で乾燥させてから、ＸＲＰＤおよびＤＳＣで分析した。この形態（形態４）は、ＸＲＰＤによって結晶性であることが確認され、先に見られた形態とは異なっていることがわかった。この物質（形態４）の融点は３０９．１℃（開始）であった。この物質は、ＣｕＫａ照射を用いて測定される２シータのピークを１６．２および２０．６°に有していた。後にＤＳＣを用いて融点を測定すると３１２．０℃であった。
【０１７０】
別の方法として、高温においては溶媒としてアセトニトリルを用いてもよい。アセトニトリル（８００ｍｌ、８．０相対量）を、乾燥純粋生成物（（４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸、形態１（８０．０ｇ）に加え、スラリーを７５〜７８℃まで加熱した。反応物を７２．０時間７５〜７８℃に維持し、次いで２０〜２５℃まで冷却し、２０〜２５℃で１．０時間攪拌した。生成物を濾過し吸引乾燥した。次いでアセトニトリル（２４０．０ｍｌ、３．０相対量）で洗浄し、３０．０分間吸引乾燥した。次いで生成物を５０℃で１６．０時間、真空下（１００ｍｂａｒ）で乾燥させ、４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸、形態−４（７２．０ｇ、９０．０％）を得た。形態−４の物質（５０ｍｇ、１％ｗ／ｗ、種）を、（４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸（形態１）５．０ｇのアセトニトリル５０．０ｍｌ中の懸濁液に加え、１２〜１８時間、７５〜７８℃まで加熱した。反応物を２０〜２５℃まで冷却し、２０〜２５℃で１．０時間攪拌した。生成物を濾過し吸引乾燥した。次いでアセトニトリル（１５ｍｌ）で洗浄し、５〜１０．０分間吸引乾燥した。次いで生成物を５０℃で１６．０時間、真空下（１００ｍｂａｒ）で乾燥させ、４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸、形態−４（４．５ｇ、８９〜９０．０％）を得た。上記のように調製された４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸（形態１）をアセトニトリル（７容量）中に懸濁させ、（形態４）を５ｇ播種し、３日間還流でスラリー状にした（ジャケット温度８５℃）。サンプルを採取しＤＳＣでチェックした（ピークを２つ示す）。このサンプルをさらに３日間（週末）還流で攪拌し、２０℃まで冷却し、濾過し、アセトニトリル、次いでジエチルエーテルで十分に洗浄し、吸引乾燥し、５０℃で４８時間真空下で乾燥させて、淡黄色の固体（形態４）を得た（９０％）。
【０１７１】
別の方法としては：
テトラヒドロフラン（９．０相対量）および水（０．５相対量）を４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸、形態１（２０．０ｇ、０．０４７モル）に加え、混合物を１５分間攪拌した後、濾紙を通して濾過した。残留物をテトラヒドロフラン（１．０相対量）で洗浄し、合わせた濾液を反応器に移し、反応温度を５８〜６２℃まで上げた。反応を５５〜６５℃に維持しながらアセトニトリル（２０．０相対量）を加えた。反応温度を６８±２℃まで上げ、２２時間その温度を維持し、その後２０〜２５℃まで冷却し２時間攪拌した。生成物を濾過し、床をアセトニトリル（５．０相対量）で洗浄した。ウエットケーキを４５〜５０℃で４時間、真空下（５０〜１００ｍｂａｒ）で乾燥させ、多形４を得て（収率８０％）、ＸＲＰＤで確認した。
【０１７２】
別の方法としては：
テトラヒドロフラン（１０．０相対量）を４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸、形態１（５．０ｇ、０．０１２モル）に加え、温度を５８〜６２℃まで上げた。反応を５５〜６５℃に維持しながらアセトニトリル（２０．０相対量）を加えた。反応温度は２０時間６８±２℃で維持した。内容物を２０〜２５℃まで冷却し２時間攪拌した。生成物を濾過し、ウエットケーキをアセトニトリル（５．０相対量）で洗浄した後、４５〜５０℃で４時間、真空オーブン（５０〜１００ｍｂａｒ）内で乾燥させ、多形４を得て（収率９０％）、ＸＲＰＤおよび固体ＮＭＲで確認した。
【０１７３】
別の方法としては：
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０相対量）およびアセトニトリル（５．０相対量）を４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸、形態１（５．０ｇ、０．０１２モル）に加え、反応温度を６０〜６５℃まで上げた。温度を５５〜６５℃に維持しながらアセトニトリル（１５．０相対量）を加えた。反応温度を７５〜７８℃まで上げ、２０時間その温度を維持した。内容物を２０〜２５℃まで冷却し２時間攪拌した。生成物を濾過し、床をアセトニトリル（５．０相対量）で洗浄した後、４５〜５０℃で４時間、真空オーブン（５０〜１００ｍｂａｒ）内で乾燥させ、多形４を得て（収率８８％）、ＸＲＰＤで確認した。
【０１７４】
別の方法としては：
酢酸（１０．０相対量）を４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸、形態１（５．０ｇ、０．０１２モル）に加え、温度を７５〜７８℃まで上げた。温度を７０〜７８℃に維持しながらアセトニトリル（２０．０相対量）を加えた。混合物を７５〜７８℃で攪拌し、２２時間その温度を維持した。内容物を２０〜２５℃まで冷却し２時間攪拌した。生成物を濾過し、床をアセトニトリル（５．０相対量）で洗浄した後、４５〜５０℃で４時間、真空オーブン（５０〜１００ｍｂａｒ）内で乾燥させ、多形４を得て（収率６６％）、ＸＲＰＤで確認した。
【０１７５】
別の方法としては：
２−メチル−ＴＨＦ（１０．０相対量）を４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸、形態１（５．０ｇ、０．０１２モル）に加え、温度を７０〜７５℃まで上げた。温度を７０〜７５℃に維持しながらアセトニトリル（２０．０相対量）を加えた後、７５〜７８℃で２３時間攪拌させた。内容物を２０〜２５℃まで冷却し２時間攪拌した。生成物を濾過し、床をアセトニトリル（５．０相対量）で洗浄した後、４５〜５０℃で４時間、真空オーブン（５０〜１００ｍｂａｒ）内で乾燥させ、多形４を得て（収率９３％）、ＸＲＰＤで確認した。
【０１７６】
別の方法としては：
４−［４−（２−アダマンチルカルバモイル）−５−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラゾル−１−イル］安息香酸（形態１−参考例２のように調製）（２０．０ｇ、０．０４７モル）、次いでテトラヒドロフラン（９．０相対量）および水（０．５相対量）を好適なジャケット付き反応器に加えた。内容物を１５分間攪拌し、濾紙を通して濾過し、テトラヒドロフラン（１．０相対量）で洗浄した。合わせた濾液を反応器に移し、反応物の温度を５８〜６２℃まで上げた。温度を５５〜６５℃に維持しながらアセトニトリル（２０．０相対量）を加えた。反応物の温度を６８±２℃に上げ、２２時間その温度を維持した。内容物を２０〜２５℃まで冷却し２時間攪拌した。生成物を濾過し、床をアセトニトリル（５．０相対量）で洗浄した。ウエットケーキを４５〜５０℃で４時間、真空下（５０〜１００ｍｂａｒ）で乾燥させ、多形形態４を得た（８０％）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【国際調査報告】
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