(57)【要約】【課題】アディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制剤、及びアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制用飲食品、飼料の提供。【解決手段】ストレプトコッカス属乳酸菌（Streptococcus）、ラクトバチルス属乳酸菌（Lactobacillus）、プロピオン酸菌、酵母、ロイコノストック属乳酸菌（Leuconostoc）及びラクトコッカス属乳酸菌（Lactococcus）の培養上清を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制剤、アディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制用飲食品ならびに飼料。【選択図】なし
2011516402.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ストレプトコッカス属乳酸菌（Streptococcus）の培養上清を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制剤。
【請求項２】
ストレプトコッカス属乳酸菌（Streptococcus）の培養上清を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制用飲食品。
【請求項３】
ストレプトコッカス属乳酸菌（Streptococcus）の培養上清を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制用飼料。
【請求項４】
ラクトバチルス属乳酸菌（Lactobacillus、但しラクトバチルス・ガセリ SBT-2055（Lactobacillus gasseri SBT-2055）を除く）の培養上清を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制剤。
【請求項５】
ラクトバチルス属乳酸菌（Lactobacillus、但しラクトバチルス・ガセリ SBT-2055（Lactobacillus gasseri SBT-2055）を除く）の培養上清を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制用飲食品。
【請求項６】
ラクトバチルス属乳酸菌（Lactobacillus、但しラクトバチルス・ガセリ SBT-2055（Lactobacillus gasseri SBT-2055）を除く）の培養上清を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制用飼料。
【請求項７】
プロピオン酸菌の菌体及び／又は培養物及び／又は培養上清を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制剤。
【請求項８】
プロピオン酸菌の菌体及び／又は培養物及び／又は培養上清を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制用飲食品。
【請求項９】
プロピオン酸菌の菌体及び／又は培養物及び／又は培養上清を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制用飼料。
【請求項１０】
酵母の菌体及び／又は培養物及び／又は培養上清を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制剤。
【請求項１１】
酵母の菌体及び／又は培養物及び／又は培養上清を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制用飲食品。
【請求項１２】
酵母の菌体及び／又は培養物及び／又は培養上清を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制用飼料。
【請求項１３】
ロイコノストック属乳酸菌（Leuconostoc）の培養上清を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制剤。
【請求項１４】
ロイコノストック属乳酸菌（Leuconostoc）の培養上清を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制用飲食品。
【請求項１５】
ロイコノストック属乳酸菌（Leuconostoc）の培養上清を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制用飼料。
【請求項１６】
ラクトコッカス属乳酸菌（Lactococc
us）の培養上清を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制剤。
【請求項１７】
ラクトコッカス属乳酸菌（Lactococcus）の培養上清を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制用飲食品。
【請求項１８】
ラクトコッカス属乳酸菌（Lactococcus）の培養上清を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制用飼料。
【請求項１９】
プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii）T004406株 (CNCM I-3931)、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）T001985株(CNCM I-3935)、サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T株、及びクリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T株からなる群から選択される微生物の培養液及び／又は菌体を有効成分として含む、アディポネクチン濃度の増加及び／又は減少抑制促進剤。
【請求項２０】
ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）T004593株（CNCM I-3934）、ラクトバチルス・サブスピーシーズ（Lactobacillus ssp.）T003769株（CNCM I-3932）、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii）T004406株（CNCM I-3931）、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）T001985株（CNCM I-3935）、ロイコノストック・サブスピーシーズ（Leuconostoc ssp.）T003986株（CNCM I-3933）、ラクトコッカス・ラクチス（Lactococcus lactis）T004455株（CNCM I-3930）、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)T003658株（CNCM I-4090）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）T003766株(CNCM I-4091)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-0274株(BP-11039)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-2056株(BP-11038)、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）SBT-2062株（BP-11075）、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)SBT-2558株（BP-11076）、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）JCM-1059T株、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）JCM-1149株、サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T株、及びクリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T株からなる群から選択される微生物の培養上清を有効成分として含む、アディポネクチン濃度の増加及び／又は減少抑制促進剤。
【請求項２１】
ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）T004593株（CNCM I-3934）、ラクトバチルス・サブスピーシーズ（Lactobacillus ssp.）T003769株（CNCM I-3932）、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii）T004406株（CNCM I-3931）、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）T001985株（CNCM I-3935）、ロイコノストック・サブスピーシーズ（Leuconostoc ssp.）T003986株（CNCM I-3933）、ラクトコッカス・ラクチス（Lactococcus lactis）T004455株（CNCM I-3930）、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)T003658株（CNCM I-4090）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）T003766株(CNCM I-4091)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-0274株(BP-11039)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-2056株(BP-11038)、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）SBT-2062株（BP-11075）、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)SBT-2558株（BP-11076）、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）JCM-1059T株、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）JCM-1149株、サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T株、及びクリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T株からなる群から選択される微生物の培養上清を有効成分として含む、アディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制食品。
【請求項２２】
ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）T004593株（CNCM I-3934）、ラクトバチルス・サブスピーシーズ（Lactobacillus ssp.）T003769株（CNCM I-3932）、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii）T004406株（CNCM I-3931）、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）T001985株（CNCM I-3935）、ロイコノストック・サブスピーシーズ（Leuconostoc ssp.）T003986株（CNCM I-3933）、ラクトコッカス・ラクチス（Lactococcus lactis）T004455株（CNCM I-3930）、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)T003658株（CNCM I-4090）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）T003766株(CNCM I-4091)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-0274株(BP-11039)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-2056株(BP-11038)、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）SBT-2062株（BP-11075）、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)SBT-2558株（BP-11076）、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）JCM-1059T株、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）JCM-1149株、サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T株、及びクリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T株からなる群から選択される微生物の培養上清を有効成分として含む、アディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制飼料。
【請求項２３】
プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii）T004406株 (CNCM I-3931)、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）T001985株(CNCM I-3935)、サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T株、及びクリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T株からなる群から選択される微生物の培養液及び／又は菌体を有効成分として含む、アディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制食品。
【請求項２４】
プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii）T004406株 (CNCM I-3931)、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）T001985株(CNCM I-3935)、サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T株、及びクリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T株からなる群から選択される微生物の培養液及び／又は菌体を有効成分として含む、アディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制飼料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ストレプトコッカス属乳酸菌（Streptococcus）、ラクトバチルス属乳酸菌（Lactobacillus）、プロピオン酸菌、酵母、ロイコノストック属乳酸菌（Leuconostoc）及びラクトコッカス属乳酸菌（Lactococcus）の培養上清を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制剤、アディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制作用を賦与した新規な飲食品、及び、アディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制作用を賦与した新規な飼料に関する。本発明のアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制剤は、これを摂取することで脂肪組織からのアディポネクチン分泌を促進及び／又は減少を抑制することができる。アディポネクチンの分泌低下は、高血圧、高脂血症、糖尿病等が複合して起こるメタボリックシンドロームの発症・増悪の原因とされており、本発明はその予防・治療に有効である。
【背景技術】
【０００２】
脂肪細胞が肥大して内臓脂肪が過剰に蓄積すると、高血圧や高脂血症、糖尿病等の病態が複合的に発症するきっかけとなる。これらの病態は総合してメタボリックシンドロームと呼ばれ、近年、国民の健康において大きな問題であり、その対策が急務となっている。
内臓脂肪組織は、アディポネクチン、プラスミノーゲンアクチベーターインヒビター、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α）、レプチン等の内分泌因子を分泌し、生体のホメオスタシスの維持に寄与している。しかし、脂肪細胞が肥大すると、これらの因子の分泌に異常を来たし、過剰、あるいは過小に分泌されるようになる。このバランスの破綻が、メタボリックシンドロームの発症や増悪に深く関与していることが、近年の研究から明らかになってきた。中でも、アディポネクチンの分泌異常がもっとも大きく影響していると考えられている（例えば非特許文献1参照）。
【０００３】
アディポネクチンは244個のアミノ酸からなる分子で、脂肪組織から分泌され、インスリン抵抗性改善効果等のほかに、肝臓や筋肉における脂肪燃焼を促進する効果が示されている。また、アディポネクチンには血液中のブドウ糖と脂肪酸が細胞内に取り込まれるのを促進する働きがあることが明らかにされている。筋肉や肝臓等に脂肪がたまると、糖分の取り込みが悪くなり糖尿病につながる。しかし、通常、アディポネクチンは、一時的に過剰となった脂肪や糖分を分解することで、体内の栄養バランスを保つとみられ、肥満が進むと、アディポネクチンを分泌する脂肪細胞の働きが弱くなり、体内の栄養バランスが崩れてしまうといわれている。このように、アディポネクチン分泌の正常化には、高血圧や脂質代謝異常、糖尿病といったメタボリックシンドロームの諸症状を、総合的に改善する効果が期待される。
【０００４】
アディポネクチン上昇効果を有する薬物や人工化合物の探索も行われているが、副作用を伴う危険性もあることから、食生活を通じて病状の進展をできるだけ抑制するような機能をもった食品成分の研究が注目されている。血中においてアディポネクチン濃度の増加を促進する物質についてはりんご抽出物（例えば特許文献1参照）、ホップ苞抽出物（例えば特許文献２参照）、緑茶カテキン（例えば特許文献３参照）、米ぬか抽出物（例えば特許文献４参照）、ウコン根茎抽出物（例えば特許文献５参照）等植物由来の抽出物が多く開示されている。しかし、これらは抽出条件が複雑なものや、抽出原料の入手に制約があるもの、食品に添加した場合に風味の低下を来たすものがあり、製剤や飲食品配合原料としての応用性に懸念がある。
【０００５】
一方、乳酸菌による発酵を応用した食品は、チーズやヨーグルト、漬け物を始め多岐にわたり、比較的安価に供給できる上、その高い嗜好性から世界中で古くから大量に生産されている。また、プロピオン酸菌と酵母は古くからチーズや種々の食品の製造に利用されており、特徴的な香味の醸成に寄与している（例えば非特許文献２参照）。これらの乳酸菌、プロピオン酸菌、及び酵母は、発酵によって多くの分解物や代謝産物を産生し、その中から多くの健康機能性成分が見出されつつあるが、いまだ機能未知の成分も多い。
本発明者らは、乳酸菌熟成チーズから分離した乳たんぱく質由来のペプチドがアディポネクチン産生促進効果を有することを見出した（例えば特許文献６参照）。また、本出願人は、脱脂乳培地を用いた乳酸菌培養物、特にラクトバチルス・ガセリ（Lactobacillus gasseri）もしくはラクトバチルス・ヘルベチカス（Lactobacillus helveticus）の培養物及び／又は菌体に、血中アディポネクチン濃度増加促進及び／又は減少抑制効果があることを見出した（特願２００６‐２４４３７７号）。
【０００６】
乳酸菌には、病原体感染防御作用（例えば特許文献７参照）、炎症性腸疾患及び過敏性腸症候群予防作用（例えば特許文献８参照）、骨吸収抑制作用（例えば特許文献９参照）、免疫増強作用（例えば特許文献１０参照）に加え、糖尿病合併症予防作用（例えば特許文献１１参照）や血清コレステロール上昇抑制作用（例えば特許文献１２参照）が知られている。しかしながら、乳酸菌のみならず、プロピオン酸菌及び酵母などの微生物についても、その培養物から乳たんぱく質沈殿や菌体成分を除去した液体成分であるところの培養上清が、単独でアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制効果を有することは知られていない。
【０００７】
発酵によって凝固した乳たんぱく質沈殿や菌体成分は、乳製品の風味に大きな影響を及ぼし、時には品質を劣化させ、商品価値の低下を来たす。乳発酵物から沈殿物を除く技術も開発が進んでおり（例えば特許文献１３参照）、食品に良好な風味と高い嗜好性を与える乳発酵物の培養上清は、食品原料として産業上の応用性が極めて高い。
【特許文献１】特開２００６−１９３５０２号公報
【特許文献２】特開２００６−１９３５０１号公報
【特許文献３】特開２００６−１３１５１２号公報
【特許文献４】特開２００５−６８１３２号公報
【特許文献５】特開２００５−６０３０８号公報
【特許文献６】特開２００７-２５４４４８号公報
【特許文献７】特開平８−２６８８９９号公報
【特許文献８】特開２００３−９５９６３号公報
【特許文献９】特開２００４−３１５４７７号公報
【特許文献１０】特開２００６−６９９９３号公報
【特許文献１１】特開２００３−２５２７７０号公報
【特許文献１２】特開２００３−３０６４３６号公報
【特許文献１３】特開平６−３１９４４７号公報
【非特許文献１】J. Clin. Invest., 116:1784-1792
【非特許文献２】P. F. Fox, P. L. H. McSweeney, T. M. Cogan and T. P. Guinee, "CHEESE: Chemistry, Physics and Microbiology Third Edition Volume 1 General Aspects", Academic Press (2004)
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、食品原料として優れた応用性と汎用性を有し、なおかつ生体においてアディポネクチンの分泌を促進させることにより、メタボリックシンドロームの予防・治療に有効なストレプトコッカス属乳酸菌（Streptococcus）、ラクトバチルス属乳酸菌（Lactobacillus）、プロピオン酸菌、酵母、ロイコノストック属乳酸菌（Leuconostoc）及びラクトコッカス属乳酸菌（Lactococcus）の培養上清を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、ストレプトコッカス属乳酸菌（Streptococcus）、ラクトバチルス属乳酸菌（Lactobacillus）、プロピオン酸菌、酵母、ロイコノストック属乳酸菌（Leuconostoc）及びラクトコッカス属乳酸菌（Lactococcus）の培養上清が、極めて高いアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制効果を示すことを明らかにし、本発明を完成するに至った。
【００１０】
したがって、本発明は、下記の構成からなる発明である。
（１）ストレプトコッカス属乳酸菌（Streptococcus）、ラクトバチルス属乳酸菌（Lactobacillus）、プロピオン酸菌、酵母、ロイコノストック属乳酸菌（Leuconostoc）、ラクトコッカス属乳酸菌（Lactococcus）のいずれかの培養上清を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制剤。
（２）ストレプトコッカス属乳酸菌（Streptococcus）、ラクトバチルス属乳酸菌（Lactobacillus）、プロピオン酸菌、酵母、ロイコノストック属乳酸菌（Leuconostoc）、ラクトコッカス属乳酸菌（Lactococcus）のいずれかの培養上清を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制用飲食品。
（３）ストレプトコッカス属乳酸菌（Streptococcus）、ラクトバチルス属乳酸菌（Lactobacillus）、プロピオン酸菌、酵母、ロイコノストック属乳酸菌（Leuconostoc）、ラクトコッカス属乳酸菌（Lactococcus）のいずれかの培養上清を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制用飼料。
（４）プロピオン酸菌、酵母のいずれかの培養液及び／又は菌体を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制剤。
（５）プロピオン酸菌、酵母のいずれかの培養液及び／又は菌体を有効成分とするアディポネクチンの分泌を促進及び／又は減少を抑制する飲食品。
（６）プロピオン酸菌、酵母のいずれかの培養液及び／又は菌体を有効成分とするアディポネクチンの分泌を促進及び／又は減少を抑制する飼料。
【発明の効果】
【００１１】
本発明のアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制剤、及びアディポネクチン分泌進及び減少抑制作用を賦与した飲食品、飼料は、血中アディポネクチンの低下により発症するといわれるメタボリックシンドロームの予防・治療に有効である。また、本発明のアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制剤、及びアディポネクチン分泌促進及び減少抑制作用を賦与した飲食品もしくは飼料は、ストレプトコッカス属乳酸菌（Streptococcus）、ラクトバチルス属乳酸菌（Lactobacillus）、プロピオン酸菌、酵母、ロイコノストック属乳酸菌（Leuconostoc）、ラクトコッカス属乳酸菌（Lactococcus）のいずれかの培養上清を使用するので、純度の高い食品素材として優れた応用性と汎用性を有し、比較的安価に大量供給が可能であり、なおかつ極めて安全性が高いという特徴を有している。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】アディポネクチン濃度の測定結果を示す。（試験例１）
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
本発明者等は、乳製品やヒト由来の数多くの乳酸菌、プロピオン酸菌、及び酵母のうち、食品に適用した際に香味や物性も優れている菌株の選定を進めてきた。さらに、その培養上清がアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制効果を示すという条件を設定して選定を進め、ストレプトコッカス属乳酸菌（Streptococcus）としてストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）を、ラクトバチルス属乳酸菌（Lactobacillus）としてラクトバチルス・サブスピーシーズ（Lactobacillus spp.）を、プロピオン酸菌としてプロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ（Propionibacterium freude
nreichii）を、酵母としてクリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）、ロイコノストック属乳酸菌（Leuconostoc）としてロイコノストック・サブスピーシーズ（Leuconostocssp.）を、ラクトコッカス属乳酸菌（Lactococcus）としたラクトコッカス・ラクチス（Lactococcus lactis）を選択した。そして、さらに活性の高い菌株の選定を進めた結果、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）の中からT004593株（CNCM I-3934）を、ラクトバチルス・サブスピーシーズ（Lactobacillus ssp.）の中からT003769株(CNCM I-3932）を、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii）からT004406株 (CNCM I-3931)を、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）の中からT001985株(CNCM I-3935)を、ロイコノストック・サブスピーシーズ（Leuconostoc ssp.）からT003986株（CNCM I-3933）を、ラクトコッカス・ラクチス（Lactococcus lactis）からT004455株（CNCM I-3930）、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)からT003658株（CNCM I-4090）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）の中からT003766株(CNCM I-4091)、ラクトバチルス・ガセリ（Lactobacillus gasseri)の中からSBT-0274株(BP-11039)、SBT-2056(11038)、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）の中からSBT-2062株（BP-11075）、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)の中からSBT-2558株（BP-11076）、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）の中からATCC-19258T株、サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）の中からJCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）の中からDSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）の中からNBRC-1090T株、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）の中からJCM-1059T株、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）の中からJCM-1149株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）の中からDSM-4902T、クリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）の中からJCM-1630T株を選択することができた。
【００１４】
これらのCNCM株は、国際寄託機関であるフランス国のパスツール研究所に寄託され、AP株は国際寄託機関である日本国の独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター（IPOD）に寄託された。他の標準的な株は、米国菌培養収集所（ATCC）または独立行政法人理化学研究所（JCM）またはドイツ微生物細胞培養コレクション（DSMZ）またはNITEバイオテクノロジー本部生物遺伝資源部門（NBRC）などの公的な菌株保存機関から入手することができる。
【００１５】
ストレプトコッカス属乳酸菌（Streptococcus）、ラクトバチルス属乳酸菌（Lactobacillus）、プロピオン酸菌、酵母、ロイコノストック属乳酸菌（Leuconostoc）及びラクトコッカス属乳酸菌（Lactococcus）が、その菌体を除いた培養上清のみでこのようなアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制効果を示すことは全く知られておらず、本発明者等によって初めて明らかにされた。
プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii）T004406株 (CNCM I-3931)、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）T001985株(CNCM I-3935)、サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T株、及びクリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T株の培養物及び／又は菌体が、アディポネクチンの分泌促進及び／又は減少抑制の効果を示すことは全く知られておらず、本発明者等によって初めて明らかにされた。
【００１６】
次に、これらの乳酸菌、プロピオン酸菌、及び酵母の培養方法を示す。培地には、乳培地又は乳成分を含む培地、これを含まない半合成培地等種々の培地を用いることができるが、乳成分としてホエイ粉末を添加した培地が特に好ましい。培養法は静置培養又はｐＨを一定にコントロールした中和培養で行うが、菌が良好に生育する条件であれば特に培養法に制限はない。得られた培養物から、遠心分離、濾過操作等の方法を用いて、乳たんぱく質沈殿や菌体成分を除去することにより、培養上清を得ることができる。
【００１７】
本発明のアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制剤は、上述のようにして得られる培養上清を有効成分とする。得られた培養上清はそのまま用いてもよいし、また乾燥した粉末を有効成分としてもよい。乾燥方法に特に制限はないが、成分の変質を抑制できる凍結乾燥法が好ましい。これらの粉末は乳糖等の適当な賦形剤と混合し、粉剤、錠剤、丸剤、カプセル剤又はシロップ剤等として製剤化することができる。これらは経口投与されることが望ましい。
【００１８】
また、本発明は、上述のようにして得られる培養上清を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制機能を賦与した飲食品である。飲食品としてはどのような飲食品でも良く、培養上清自体であっても良いし、培養上清自体を配合した飲食品としても良い。培養上清又はその乾燥物は、喫食時にどのような飲食品に添加しても良く、飲食品の製造工程中に製品に添加しても良いし、原料に配合しても良い。飲食品の例として、乳飲料、発酵乳、果汁飲料、ゼリー、キャンディー、マヨネーズ等の卵加工品、バターケーキ等の菓子、パン類等の食品を挙げることができる。また、各種粉乳のほか、乳幼児及び低出生体重児等を対象とする栄養組成物に配合したものを例示することができる。
【００１９】
さらに、本発明は、上述のようにして得られる培養上清を有効成分とするアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制機能を賦与した飼料である。家畜用飼料として、前記飲食品と同様に、培養上清又はその乾燥物は、どのような飼料に配合しても良く、その製造工程中に原料に添加しても良い。
【００２０】
本発明において、アディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制作用を発揮させるためには、通常成人の場合、ストレプトコッカス属乳酸菌（Streptococcus）、ラクトバチルス属乳酸菌（Lactobacillus）、プロピオン酸菌、酵母、ロイコノストック属乳酸菌（Leuconostoc）、ラクトコッカス属乳酸菌（Lactococcus）の培養上清を一日当たり、10〜200ｇ、あるいは乾燥物として0.5〜50ｇ摂取できるように、投与量や配合量等を調整すればよい。
【００２１】
以下に、実施例及び試験例を示し、本発明についてより詳細に説明するが、これらは単に例示するのみであり、本発明はこれらによって何ら限定されるものではない。
【実施例１】
【００２２】
（培養上清の調製１）
還元ホエイ培地（13重量％ホエイ粉、0.5重量％酵母エキス含有）を95℃で30分間殺菌した後、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）T004593株（CNCM I-3934）、ラクトバチルス・サブスピーシーズ（Lactobacillus ssp.）T003769株（CNCM I-3932）、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii）T004406株（CNCM I-3931）、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyceslactis）T001985株（CNCM I-3935）、ロイコノストック・サブスピーシーズ（Leuconostoc ssp.）T003986株（CNCM I-3933）、ラクトコッカス・ラクチス（Lactococcus lactis）T004455株（CNCM I-3930）、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)T003658株（CNCM I-4090）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）T003766株(CNCM I-4091)、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）SBT-2062株（BP-11075）、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)SBT-2558株（BP-11076）、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-0274株(BP-11039)、ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-2056株(BP-11038)、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）ATCC-19258T株、サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）JCM-1059T株、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）JCM-1149株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T、クリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T株のそれぞれを接種し、37℃で16時間(ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)T003658株（CNCM I-4090）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）T003766株(CNCM I-4091)、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）SBT-2062株（BP-11075）、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)SBT-2558株（BP-11076）、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-0274株(BP-11039)、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）ATCC-19258T株、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）JCM-1059T株、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）JCM-1149株）、又は、30℃で16時間（サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T株、及びクリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T株）培養し、得られた培養物を3,500回転で20分間遠心して、沈殿物を除いた培養上清を得た。これらの培養上清は、そのまま本発明のアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制剤として使用し得る。
【実施例２】
【００２３】
（培養上清の調製２）
還元脱脂乳培地（13重量％脱脂粉乳、0.5重量％酵母エキス含有）を95℃で30分間殺菌した後、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）T004593株（CNCM I-3934）、ラクトバチルス・サブスピーシーズ（Lactobacillus ssp.）T003769株（CNCM I-3932）、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii）T004406株（CNCM I-3931）、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）T001985株（CNCM I-3935）、ロイコノストック・サブスピーシーズ（Leuconostoc ssp.）T003986株（CNCM I-3933）、ラクトコッカス・ラクチス（Lactococcus lactis）T004455株（CNCM I-3930）、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)T003658株（CNCM I-4090）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）T003766株(CNCM I-4091)、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）SBT-2062株（BP-11075）、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)SBT-2558株（BP-11076）、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-0274株(BP-11039)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-2056株(BP-11038)、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）ATCC-19258T株、サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）JCM-1059T株、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）JCM-1149株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T、クリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T株のそれぞれを接種し、37℃で16時間(ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)T003658株（CNCM I-4090）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）T003766株(CNCM I-4091)、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）SBT-2062株（BP-11075）、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)SBT-2558株（BP-11076）、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-0274株(BP-11039)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-2056株(BP-11038)、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）ATCC-19258T株、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）JCM-1059T株、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）JCM-1149株）、又は、30℃で16時間（サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T株、及びクリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T株)培養し、得られた培養物を3,500回転で20分間遠心して、沈殿物を除いた培養上清を得た。これらの培養上清は、そのまま本発明のアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制剤として使用し得る。
【００２４】
〔試験例１〕
（脂肪細胞投与実験）
実施例１で得られた各菌株のそれぞれの培養上清について、初代培養内臓脂肪細胞への投与実験を行った。ラットの初代培養内臓脂肪細胞（VAC01、株式会社プライマリーセル）及び内臓脂肪細胞分化誘導培地（株式会社プライマリーセル）を用いて実験を行った。株式会社プライマリーセルのプロトコルに従って凍結保存した細胞を融解し、24穴プレートに播種した日をday０とし、アディポネクチン分泌が活発になるday５に、還元ホエイ培地培養上清を培地中に添加した。比較対照として、還元ホエイ培地を添加したものを用意した。37℃、二酸化炭素分圧0.5％の条件下で、細胞を２時間培養し、培地を回収した。
培地中に分泌されたアディポネクチン濃度の測定は、アディポネクチンELISAキット（大塚製薬株式会社）を用いた。測定結果は、各ウエルから抽出したDNA量で標準化した。
【００２５】
（脂肪細胞投与実験結果）
ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）T004593株（CNCM I-3934）、ラクトバチルス・サブスピーシーズ（Lactobacillus ssp.）T003769株（CNCM I-3932）、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii）T004406株（CNCM I-3931）、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）T001985株（CNCM I-3935）、ロイコノストック・サブスピーシーズ（Leuconostoc ssp.）T003986株（CNCM I-3933）、ラクトコッカス・ラクチス（Lactococcus lactis）T004455株（CNCM I-3930）、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)T003658株（CNCM I-4090）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）T003766株(CNCM I-4091)、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）SBT-2062株（BP-11075）、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)SBT-2558株（BP-11076）、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-0274株(BP-11039)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-2056株(BP-11038)、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）ATCC-19258T株、サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）JCM-1059T株、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）JCM-1149株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T、クリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T株をそれぞれ還元ホエイ培地を用いて培養し、その上清を脂肪細胞に添加した場合に産生されたアディポネクチン濃度の測定結果を図１に示す。脂肪細胞に還元ホエイ培地のみを添加したときのアディポネクチン産生量に比べ、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）T004593株（CNCM I-3934）の培養上清は1.43倍、ラクトバチルス・サブスピーシーズ（Lactobacillus ssp.）T003769株（CNCM I-3932）の培養上清は1.21倍、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii）T004406株（CNCM I-3931）の培養上清は1.22倍、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）T001985株（CNCM I-3935）の培養上清は1.36倍、ロイコノストック・サブスピーシーズ（Leuconostoc ssp.）T003986株（CNCM I-3933）の培養上清は1.05倍、ラクトコッカス・ラクチス（Lactococcus lactis）T004455株（CNCM I-3930）の培養上清は1.11倍、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)T003658株（CNCM I-4090）の培養上清は1.21倍、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）T003766株(CNCM I-4091) の培養上清は1.30倍、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）SBT-2062株（BP-11075）は1.20倍、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)SBT-2558株（BP-11076）の培養上清は1.18倍、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-0274株(BP-11039) の培養上清は1.27倍、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-2056株(BP-11038) の培養上清は1.11倍、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）ATCC-19258T株の培養上清は1.50倍、��ッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株の培養上清は1.20倍、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株の培養上清は1.26倍、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株の培養上清は1.23倍、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）JCM-1059T株の培養上清は1.09倍、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）JCM-1149株の培養上清は1.08倍、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902Tの培養上清は1.23倍、クリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T株の培養上清は1.17倍に増加した。
【００２６】
以上のことから、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）T004593（CNCM I-3934）株（CNCM I-3934）、ラクトバチルス・サブスピーシーズ（Lactobacillus ssp.）T003769（CNCM I-3932）株（CNCM I-3932）、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii）T004406株（CNCM I-3931）、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）T001985株（CNCM I-3935）、ロイコノストック・サブスピーシーズ（Leuconostoc ssp.）T003986（CNCM I-3933）株、ラクトコッカス・ラクチス（Lactococcus lactis）T004455 （CNCM I-3930）株（CNCM I-3930）、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)T003658株（CNCM I-4090）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）T003766株(CNCM I-4091)、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）SBT-2062株（BP-11075）、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)SBT-2558株（BP-11076）、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-0274株(BP-11039)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-2056株(BP-11038)、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）ATCC-19258T株、サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）JCM-1059T株、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）JCM-1149株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T、クリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T株の培養上清に、脂肪細胞に対してアディポネクチン分泌を顕著に促進する作用があることが認められ、なおかつその効果は還元ホエイ培地によるものではなく、それぞれの微生物から産生された成分によるものであることが示唆された。
【実施例３】
【００２７】
（錠剤の製造）
還元ホエイ培地（13重量％ホエイ粉、0.5重量％酵母エキス配合）を95℃で30分間殺菌した後、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）T004593 （CNCM I-3934）株（CNCM I-3934）、ラクトバチルス・サブスピーシーズ（Lactobacillus ssp.）T003769（CNCM I-3932）株（CNCM I-3932）、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii）T004406株（CNCM I-3931）、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）T001985株（CNCM I-3935）、ロイコノストック・サブスピーシーズ（Leuconostoc ssp.）T003986株（CNCM I-3933）、ラクトコッカス・ラクチス（Lactococcus lactis）T004455株（CNCM I-3930）、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)T003658株（CNCM I-4090）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）T003766株(CNCM I-4091)、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）SBT-2062株（BP-11075）、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)SBT-2558株（BP-11076）、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-0274株(BP-11039)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-2056株(BP-11038)、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）ATCC-19258T株、サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）JCM-1059T株、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）JCM-1149株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T、クリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T株をそれぞれ接種し、37℃で16時間（ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)T003658株（CNCM I-4090）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）T003766株(CNCM I-4091)、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）SBT-2062株（BP-11075）、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)SBT-2558株（BP-11076）、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-0274株(BP-11039)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-2056株(BP-11038)、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）ATCC-19258T株、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）JCM-1059T株、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）JCM-1149株）、又は、30℃で16時間（サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacte
rium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T株、及びクリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T株）培養した。得られた培養物を3,500回転で20分間遠心して、沈殿物を除いた培養上清を得た。これを凍結乾燥処理して培養上清粉末を得た。この培養上清粉末各１部に脱脂粉乳4部をそれぞれ混合し、この混合粉末を打錠機により1ｇずつ常法により打錠して、本発明のストレプトコッカス属乳酸菌（Streptococcus）、ラクトバチルス属乳酸菌（Lactobacillus）、プロピオン酸菌、酵母、ロイコノストック属乳酸菌（Leuconostoc）、ラクトコッカス属乳酸菌（Lactococcus）の培養上清200ｍｇをそれぞれ含むアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制錠剤を調製した。
【実施例４】
【００２８】
（散剤の製造）
ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）T004593株（CNCM I-3934）、ラクトバチルス・サブスピーシーズ（Lactobacillus ssp.）T003769株（CNCM I-3932）、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii）T004406株（CNCM I-3931）、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）T001985株（CNCM I-3935）、ロイコノストック・サブスピーシーズ（Leuconostoc ssp.）T003986株（CNCM I-3933）、ラクトコッカス・ラクチス（Lactococcus lactis）T004455株（CNCM I-3930）、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)T003658株（CNCM I-4090）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）T003766株(CNCM I-4091)、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）SBT-2062株（BP-11075）、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)SBT-2558株（BP-11076）、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-0274株(BP-11039)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-2056株(BP-11038)、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）ATCC-19258T株、サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）JCM-1059T株、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）JCM-1149株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T、クリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T株を、それぞれ還元ホエイ培地５Ｌに接種後、37℃、16時間（ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)T003658株（CNCM I-4090）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）T003766株(CNCM I-4091)、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）SBT-2062株（BP-11075）、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)SBT-2558株（BP-11076）、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-0274株(BP-11039)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-2056株(BP-11038)、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）ATCC-19258T株、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）JCM-1059T株、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）JCM-1149株）、又は、30℃で16時間（サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T株、及びクリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T株)静置培養を行った。培養終了後、7,000回転で15分間遠心して、沈殿物を除いた培養上清を得た。次いで、この培養上清を、脱脂粉乳10重量％、グルタミン酸ソーダ１重量％を配合した分散媒とそれぞれ同量混合し、ｐＨ７に調整後、凍結乾燥を行った。得られた凍結��燥物を60メッシュのフルイで整粒化し、培養上清凍結乾燥物を製造した。第１３改正日本薬局方解説書製剤総則「散剤」の規定に準拠し、この培養上清凍結乾燥物各１ｇにラクトース（日局）400ｇ、バレイショデンプン（日局）600ｇをそれぞれ加えて均一に混合し、本発明のアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制剤を得た。
【実施例５】
【００２９】
（カプセル剤の製造）
ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）T004593株（CNCM I-3934）、ラクトバチルス・サブスピーシーズ（Lactobacillus ssp.）T003769株（CNCM I-3932）、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii）T004406株（CNCM I-3931）、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）T001985株（CNCM I-3935）、ロイコノストック・サブスピーシーズ（Leuconostoc ssp.）T003986株（CNCM I-3933）、ラクトコッカス・ラクチス（Lactococcus lactis）T004455株（CNCM I-3930）、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)T003658株（CNCM I-4090）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）T003766株(CNCM I-4091)、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）SBT-2062株（BP-11075）、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)SBT-2558株（BP-11076）、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-0274株(BP-11039)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-2056株(BP-11038)、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）ATCC-19258T株、サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）JCM-1059T株、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）JCM-1149株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T、クリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T株を、それぞれ還元ホエイ培地５Ｌに接種後、37℃、16時間（ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)T003658株（CNCM I-4090）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）T003766株(CNCM I-4091)、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）SBT-2062株（BP-11075）、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)SBT-2558株（BP-11076）、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-0274株(BP-11039)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-2056株(BP-11038)、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）ATCC-19258T株、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）JCM-1059T株、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）JCM-1149株）、又は、30℃で16時間（サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T株、及びクリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T株）静置培養を行った。培養終了後、7,000回転で15分間遠心して、沈殿物を除いた培養上清を得た。次いで、この培養上清を、脱脂粉乳10重量％、グルタミン酸ソーダ１重量％を配合した分散媒とそれぞれ同量混合し、ｐＨ７に調整後、凍結乾燥を行った。得られた凍結乾燥物を60メッシュのフルイで整粒化し、培養上清凍結乾燥物を製造した。表1に示した配合により原料を混合し、造粒した後、カプセルに充填して、本発明のアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制用カプセル剤を製造した。
【００３０】
【表１】
2011516402.tif 000003
【実施例６】
【００３１】
（スティック状健康食品の製造）
ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）T004593 （CNCM I-3934）株、ラクトバチルス・サブスピーシーズ（Lactobacillus ssp.）T003769株（CNCM I-3932）、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii）T004406株（CNCM I-3931）、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）T001985株（CNCM I-3935）、ロイコノストック・サブスピーシーズ（Leuconostoc ssp.）T003986株（CNCM I-3933）、ラクトコッカス・ラクチス（Lactococcus lactis）T004455株（CNCM I-3930）、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)T003658株（CNCM I-4090）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）T003766株(CNCM I-4091)、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）SBT-2062株（BP-11075）、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)SBT-2558株（BP-11076）、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-0274株(BP-11039)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-2056株(BP-11038)、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）ATCC-19258T株、サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）JCM-1059T株、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）JCM-1149株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T、クリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T株をそれぞれＭＲＳ液体培地（Difco社）５Ｌに接種後、37℃、16時間（ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)T003658株（CNCM I-4090）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）T003766株(CNCM I-4091)、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）SBT-2062株（BP-11075）、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)SBT-2558株（BP-11076）、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-0274株(BP-11039)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-2056株(BP-11038)、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）ATCC-19258T株、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）JCM-1059T株、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）JCM-1149株）、又は、30℃で16時間（サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T株、及びクリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T株）静置培養を行った。培養終了後、7,000回転で15分間遠心して、沈殿物を除いた培養上清を得た。次いで、この培養上清を、脱脂粉乳10重量％、グルタミン酸ソーダ１重量％を配合した分散媒とそれぞれ同量混合し、ｐＨ７に調整後、凍結乾燥を行った。得られた凍結乾燥物を60メッシュのフルイで整粒化し、培養上清凍結乾燥物を製造した。このストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）T004593株（CNCM I-3934）、ラクトバチルス・サブスピーシーズ（Lactobacillus ssp.）T003769株（CNCM I-3932）、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii）
T004406株（CNCM I-3931）、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）T001985株（CNCM I-3935）、ロイコノストック・サブスピーシーズ（Leuconostoc ssp.）T003986株 （CNCM I-3933）、ラクトコッカス・ラクチス（Lactococcus lactis）T004455株（CNCM I-3930）の培養上清物粉末30ｇに、ビタミンＣとクエン酸の等量混合物40ｇ、グラニュー糖100ｇ、コーンスターチと乳糖の等量混合物60ｇをそれぞれ加えて混合した。混合物をスティック状袋に詰め、本発明のアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制用スティック状健康食品を製造した。
【実施例７】
【００３２】
（飲料の製造）
ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）T004593株（CNCM I-3934）、ラクトバチルス・サブスピーシーズ（Lactobacillus ssp.）T003769株（CNCM I-3932）、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii）T004406株（CNCM I-3931）、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）T001985株（CNCM I-3935）、ロイコノストック・サブスピーシーズ（Leuconostoc ssp.）T003986株（CNCM I-3933）、ラクトコッカス・ラクチス（Lactococcus lactis）T004455株（CNCM I-3930）、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)T003658株（CNCM I-4090）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）T003766株(CNCM I-4091)、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）SBT-2062株（BP-11075）、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)SBT-2558株（BP-11076）、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-0274株(BP-11039)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-2056株(BP-11038)、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）ATCC-19258T株、サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）JCM-1059T株、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）JCM-1149株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T、クリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T)をそれぞれ還元ホエイ培地５Ｌに接種後、37℃、16時間（ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)T003658株（CNCM I-4090）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）T003766株(CNCM I-4091)、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）SBT-2062株（BP-11075）、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)SBT-2558株（BP-11076）、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-0274株(BP-11039)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-2056株(BP-11038)、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）ATCC-19258T株、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）JCM-1059T株、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）JCM-1149株）、又は、30℃で16時間（サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T株、及びクリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T株)静置培養を行った。培養終了後、7,000回転で15分間遠心分離して、沈殿物を除いた培養上清を得た表２に示した配合により原料をそれぞれ混合し、容器に充填した後、加熱殺菌して、本発明のアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制用飲料を製造した。
【００３３】
【表２】
2011516402.tif 000004
【実施例８】
【００３４】
（ヨーグルトの製造）
ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）T004593株（CNCM I-3934）、ラクトバチルス・サブスピーシーズ（Lactobacillus ssp.）T003769株（CNCM I-3932）、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii）T004406株（CNCM I-3931）、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）T001985株（CNCM I-3935）、ロイコノストック・サブスピーシーズ（Leuconostoc ssp.）T003986株（CNCM I-3933）、ラクトコッカス・ラクチス（Lactococcus lactis）T004455株（CNCM I-3930）、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)T003658株（CNCM I-4090）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）T003766株(CNCM I-4091)、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）SBT-2062株（BP-11075）、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)SBT-2558株（BP-11076）、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-0274株(BP-11039)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-2056株(BP-11038)、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）ATCC-19258T株、サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）JCM-1059T株、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）JCM-1149株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T、クリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T)をそれぞれＭＲＳ液体培地（Difco社）にて培養した。対数増殖期にある各培養液を、0.5％の酵母エキスを添加した13％還元ホエイ培地（115℃、20分滅菌）にそれぞれ１％接種し、マザーカルチャーを作成した。得られた培養物を3,500回転で20分間遠心して、沈殿物を除いた培養上清を得た。
100℃にて10分間加熱して冷却したヨーグルトミックスに、スターター3％と、得られたそれぞれの培養上清を2.5％添加後、37℃で発酵を行い、乳酸酸度0.85に到達した時点で冷却し、発酵を終了させ、本発明のアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制用ヨーグルトを得た。
【実施例９】
【００３５】
（ドリンクヨーグルトの製造）
実施例８で得られたヨーグルト各43ｋｇにグラニュー糖4ｋｇ、水3ｋｇ、ペクチン0.15ｋｇを加えた後に均質化して、本発明のアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制用ドリンクヨーグルト50ｋｇを得た。このドリンクヨーグルトはマイルドな好ましい風味を有し、ｐHは３．６であった。
【実施例１０】
【００３６】
（イヌ飼育用飼料の製造）
ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）T004593株（CNCM I-3934）、ラクトバチルス・サブスピーシーズ（Lactobacillus ssp.）T003769株（CNCM I-3932）、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii）T004406株（CNCM I-3931）、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）T001985株（CNCM I-3935）、ロイコノストック・サブスピーシーズ（Leuconostoc ssp.）T003986株（CNCM I-3933）、ラクトコッカス・ラクチス（Lactococcus lactis）T004455株（CNCM I-3930）、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)T003658株（CNCM I-4090）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）T003766株(CNCM I-4091)、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）SBT-2062株（BP-11075）、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)SBT-2558株（BP-11076）、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-0274株(BP-11039)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-2056株(BP-11038)、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）ATCC-19258T株、サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）JCM-1059T株、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）JCM-1149株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T、クリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T)をＭＲＳ液体培地（Difco社）各0.5Ｌに接種後、37℃、16時間（ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)T003658株（CNCM I-4090）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）T003766株(CNCM I-4091)、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）SBT-2062株（BP-11075）、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)SBT-2558株（BP-11076）、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-0274株(BP-11039)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-2056株(BP-11038)、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）ATCC-19258T株、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）JCM-1059T株、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）JCM-1149株）、又は、30℃で16時間（サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T株、及びクリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T株)静置培養を行った。培養終了後、7,000回転で15分間遠心して、沈殿物を除いた培養上清を得た。次いで、これらの培養上清を、脱脂粉乳10重量％、グルタミン酸ソーダ１重量％を配合した分散媒と同量混合し、ｐＨ７に調整後、凍結乾燥を行った。得られた凍結乾燥��を60メッシュのフルイで整粒化し、凍結乾燥培養上清を製造した。表３に示した配合により原料を混合し、本発明のアディポネクチン分泌促進及び／又は減少抑制用イヌ飼育用飼料を製造した。
【実施例１１】
【００３７】
（ナチュラルチーズの製造）
ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）T004593株（CNCM I-3934）、ラクトバチルス・サブスピーシーズ（Lactobacillus ssp.）T003769株（CNCM I-3932）、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii）T004406株（CNCM I-3931）、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）T001985株（CNCM I-3935）、ロイコノストック・サブスピーシーズ（Leuconostoc ssp.）T003986株（CNCM I-3933）、ラクトコッカス・ラクチス（Lactococcus lactis）T004455株（CNCM I-3930）、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)T003658株（CNCM I-4090）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）T003766株(CNCM I-4091)、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）SBT-2062株（BP-11075）、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)SBT-2558株（BP-11076）、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-0274株(BP-11039)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-2056株(BP-11038)、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）ATCC-19258T株、サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）JCM-1059T株、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）JCM-1149株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T、クリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T)をＭＲＳ液体培地（Difco社）5Ｌに接種後、37℃、16時間（ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシズ・ブルガリクス(Lactobacillus delbreuckii subsp. bulgaricus)T003658株（CNCM I-4090）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）T003766株(CNCM I-4091)、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）SBT-2062株（BP-11075）、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)SBT-2558株（BP-11076）、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-0274株(BP-11039)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)SBT-2056株(BP-11038)、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）ATCC-19258T株、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）JCM-1059T株、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）JCM-1149株）、又は、30℃で16時間（サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cervisiae）JCM7255T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・フロイデンライヒ（Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii）DSM-20271T株、クリベロマイセス・ラクチス（Kluyveromyces lactis）NBRC-1090T株、プロピオニバクテリウム・フロイデンライヒ・サブスピーシズ・シェルマニ（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii）DSM-4902T株、及びクリベロマイセス・マルキシアヌス（Kluyveromyces marxianus）JCM-1630T株)静置培養を行った。培養終了後、7,000回転で15分間遠心して、沈殿物を除いた培養上清を得た。脂肪割合が調製された原料乳を75℃で15秒間プレート式殺菌に供した。原料乳を30℃にまで冷やした後、塩化カルシウム（0.01%）を加えた。商業的に入手可能な乳酸菌スタータ���（クリスチャンハンセン製）（1.7%）及び得られた培養上清を原料乳（2.5%）に加えた。レンネット（0.003%）を加えて乳を凝固させた後に、得られた産物をカットした。カットした産物をｐHが6.1から6.2になるまで撹拌し、ホエイを排出してカードを得た。カードは型に入れ圧搾した。得られた産物に塩を加え、血中アディポネクチン濃度増加促進及び／又は減少抑制用ナチュラルチーズを得た。
【００３８】
【表３】
2011516402.tif 000005
［寄託生物材料への言及］
（１）
イ  当該生物材料を寄託した寄託機関の名称及び住所
パスツール研究所
フランス国  ７５７２４  パリ・セデュ・１５、リュー・デュ・ドクトール・ルー、２５
ロ  イの寄託機関に生物材料を寄託した日付
２００８年３月３日
ハ  イの寄託機関が寄託について付した寄託番号
ＣＮＣＭ  Ｉ−３９３０
（２）
イ  当該生物材料を寄託した寄託機関の名称及び住所
パスツール研究所
フランス国  ７５７２４  パリ・セデュ・１５、リュー・デュ・ドクトール・ルー、２５
ロ  イの寄託機関に生物材料を寄託した日付
２００８年３月３日
ハ  イの寄託機関が寄託について付した寄託番号
ＣＮＣＭ  Ｉ−３９３１
（３）
イ  当該生物材料を寄託した寄託機関の名称及び住所
パスツール研究所
フランス国  ７５７２４  パリ・セデュ・１５、リュー・デュ・ドクトール・ルー、２５
ロ  イの寄託機関に生物材料を寄託した日付
２００８年３月３日
ハ  イの寄託機関が寄託について付した寄託番号
ＣＮＣＭ  Ｉ−３９３２
（４）
イ  当該生物材料を寄託した寄託機関の名称及び住所
パスツール研究所
フランス国  ７５７２４  パリ・セデュ・１５、リュー・デュ・ドクトール・ルー、２５
ロ  イの寄託機関に生物材料を寄託した日付
２００８年３月３日
ハ  イの寄託機関が寄託について付した寄託番号
ＣＮＣＭ  Ｉ−３９３３
（５）
イ  当該生物材料を寄託した寄託機関の名称及び住所
パスツール研究所
フランス国  ７５７２４  パリ・セデュ・１５、リュー・デュ・ドクトール・ルー、２５
ロ  イの寄託機関に生物材料を寄託した日付
２００８年３月３日
ハ  イの寄託機関が寄託について付した寄託番号
ＣＮＣＭ  Ｉ−３９３４
（６）
イ  当該生物材料を寄託した寄託機関の名称及び住所
パスツール研究所
フランス国  ７５７２４  パリ・セデュ・１５、リュー・デュ・ドクトール・ルー、２５
ロ  イの寄託機関に生物材料を寄託した日付
２００８年３月３日
ハ  イの寄託機関が寄託について付した寄託番号
ＣＮＣＭ  Ｉ−３９３５
（７）
イ  当該生物材料を寄託した寄託機関の名称及び住所
パスツール研究所
フランス国  ７５７２４  パリ・セデュ・１５、リュー・デュ・ドクトール・ルー、２５
ロ  イの寄託機関に生物材料を寄託した日付
２００８年１１月２５日
ハ  イの寄託機関が寄託について付した寄託番号
ＣＮＣＭ  Ｉ−４０９０
（８）
イ  当該生物材料を寄託した寄託機関の名称及び住所
パスツール研究所
フランス国  ７５７２４  パリ・セデュ・１５、リュー・デュ・ドクトール・ルー、２５
ロ  イの寄託機関に生物材料を寄託した日付
２００８年１１月２５日
ハ  イの寄託機関が寄託について付した寄託番号
ＣＮＣＭ  Ｉ−４０９１
（９）
イ  当該生物材料を寄託した寄託機関の名称及び住所
独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター
茨城県つくば市東１丁目１番地１ 中央第６
ロ  イの寄託機関に生物材料を寄託した日付
１９８６年４月２２日(原寄託日)
２００８年１０月９日(ブダペスト条約に基づく国際寄託への変換日)
ハ  イの寄託機関が寄託について付した寄託番号
ＦＥＲＭ  ＢＰ−１１０３８
（１０）
イ  当該生物材料を寄託した寄託機関の名称及び住所
独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター
茨城県つくば市東１丁目１番地１ 中央第６
ロ  イの寄託機関に生物材料を寄託した日付
２０００年３月１５日(原寄託日)
２００８年１０月９日(ブダペスト条約に基づく国際寄託への変換日)
ハ  イの寄託機関が寄託について付した寄託番号
ＦＥＲＭ  ＢＰ−１１０３９
（１１）
イ  当該生物材料を寄託した寄託機関の名称及び住所
独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター
茨城県つくば市東１丁目１番地１ 中央第６
ロ  イの寄託機関に生物材料を寄託した日付
１９８９年５月１８日(原寄託日)
２００８年１２月１５日(ブダペスト条約に基づく国際寄託への変換日)
ハ  イの寄託機関が寄託について付した寄託番号
ＦＥＲＭ  ＢＰ−１１０７５
（１２）
イ  当該生物材料を寄託した寄託機関の名称及び住所
独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター
茨城県つくば市東１丁目１番地１ 中央第６
ロ  イの寄託機関に生物材料を寄託した日付
１９９０年１２月２０日(原寄託日)
２００８年１２月１５日(ブダペスト条約に基づく国際寄託への変換日)
ハ  イの寄託機関が寄託について付した寄託番号
ＦＥＲＭ  ＢＰ−１１０７６
【図１】
2011516402.tif 000006
【国際調査報告】
2011516402.tif 000007
2011516402.tif 000008
2011516402.tif 000009
2011516402.tif 000010
2011516402.tif 000011