(57)【要約】  本発明は、活性成分としてカホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物を含有する新しい栄養補給食品組成物に関する。「栄養補給食品」という用語は、ここでの用法では、栄養、製薬、および獣医学分野の用途における有用性を表す。組成物は、学習、記憶、および精神的敏捷性などの認知機能の改善、精神病安定性および維持に有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
認知機能を改善する量のカホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物を投与するステップを含んでなる、動物またはヒトにおいて認知機能および／または心理的健康を改善する方法。
【請求項２】
カホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物を、長期増強を誘発するのに効果的な量で投与するステップを含んでなる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記認知機能および／または心理的健康が、良好な認知性およびバランスの維持、学習、言語処理、問題解決、知的機能、心理社会的負担に対処する能力、注意力および集中力、記憶、想起能力、精神的敏捷性、精神的覚醒状態、精神的疲労、精神的状態の安定化、ストレス緩和剤、作業過負荷ストレス、ストレス関連疲労および／または燃え尽き、およびリラクセーション促進からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
認知機能を改善する量のカホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物を含んでなる、動物またはヒトにおいて認知機能を改善するための栄養補給食品または薬剤を製造するのに使用される組成物。
【請求項５】
前記組成物がカホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物を、長期増強を誘発するのに効果的な量で含んでなる、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
前記認知機能が、良好な認知性およびバランスの維持、学習、言語処理、問題解決、知的機能、心理社会的負担に対処する能力、注意力および集中力、記憶、想起能力、精神的敏捷性、精神的覚醒状態、精神的疲労、精神的状態の安定化、ストレス緩和剤、作業過負荷ストレス、ストレス関連疲労および／または燃え尽き、およびリラクセーション促進からなる群から選択される、請求項４に記載の組成物。
【請求項７】
カホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）の全果抽出物を含んでなる栄養補給食品。
【請求項８】
果実および果皮を水に曝して水性抽出物を得るステップと、
水を除去して水性抽出残留物を得るステップと、
前記水性抽出残留物を有機溶剤で再抽出するステップ
によって調製される、カホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）の全果抽出物。
【請求項９】
前記有機溶剤がメタノールおよびメチル−ｔｅｒｔ−ブチルエーテルである、請求項８に記載の抽出物。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
［技術分野］
本発明は、学習、記憶、および精神的敏捷性などの認知機能を改善し、ならびに心理社会的圧力を緩和するための、活性成分としてカホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果（すなわち果実および果皮）抽出物を含んでなる新しい栄養補給食品組成物または食品添加剤に関する。
【０００２】
［背景技術］
記憶、学習、および敏捷性は、中脳内の、特に情報が処理されて記憶が固定される海馬内の神経回路に依存する。精神能力および学習は、シナプスの柔軟性、すなわち新しい受容体の動員による神経結合の強化、新しいシナプスの形成、および最終的に新しい神経結合の発生に依存する。
【０００３】
（長期）記憶の形成および脳の効率的な機能は、ニューロン間の伝達強度を強化するための新しいタンパク質の合成に依存する。シナプス強化に充てられる新しいタンパク質の生成は、ニューロン内の化学および電気信号によって始動される。
【０００４】
長期増強（ＬＴＰ）は、短い馴化シナプス前電気的刺激バースト（およそ１００Ｈｚで１秒間）に続いて中枢神経系（ＣＮＳ）内の特定のシナプスで生じる、シナプス伝達の持続性の増強（生体外では数時間、生体内では数日間または数週間）について述べるのに使用される用語である。この現象は、それによって記憶が形成されて脳内に保存される主要機序の１つであると広く見なされる。ＬＴＰは、生体外および生きている動物の双方で観察されている。実験条件下では、一連の短い高周波数の電気的刺激をシナプスに与えることで、化学シナプス強度を数分から数時間にわたり増強できる。最も重要なことには、ＬＴＰは、生きている動物においてシナプスの柔軟性に寄与し、高度に適応できる神経系の基礎を提供する。
【０００５】
２つの異なる受容体タイプ、すなわちＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）受容体複合体およびα−アミノ−３−ヒドロキシ−５−メチル−４−イソオキサゾールプロピオン酸（ＡＭＰＡ）受容体が、ＬＴＰ過程に主に関与する。ＬＴＰ中に、主要な興奮性神経伝達物質グルタメートがシナプス前ニューロンから放出され、シナプス後膜上のＡＭＰＡ受容体に結合して活性化し、その脱分極を引き起こす。静止膜電位では、ＮＭＤＡ受容体チャネルはマグネシウムイオンによってブロックされるが、シナプス後膜の脱分極がこのブロックを除去し、ＮＭＤＡ受容体の活性化と引き続くカルシウムの細胞内への侵入を可能にする。この細胞内カルシウムの上昇はタンパク質キナーゼを活性化すると考えられ、遺伝子転写および強化タンパク質の構築を引き起こし（Ｎｉｅｈｏｆｆ（２００５年）、Ｔｈｅ  Ｌａｎｇｕａｇｅ  ｏｆ  Ｌｉｆｅ：Ｈｏｗ  Ｃｅｌｌｓ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｅ  ｉｎ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｄｉｓｅａｓｅ，２１０〜２２３）、ＡＭＰＡ受容体の強化された感受性をもたらし、ひいては神経伝達とＬＴＰ維持をさらに促進する。
【０００６】
ＮＭＤＡ受容体はＮＲ１−およびＮＲ２−サブユニットのアセンブリーから構成され、グルタメート結合領域はこれらのサブユニットの接合部に形成される。グルタメートに加えて、ＮＭＤＡ受容体は、受容体機能を調節するために共作動薬グリシンを必要とする。グリシン結合部位がＮＲ１サブユニット上に見られるのに対し、ＮＲ２サブユニットは、ＮＭＤＡ受容体の機能を調節する制御分子であるポリアミンのための結合部位を保有する。
【０００７】
高齢者および若年者の双方、学生、建設労働者、運転手、パイロット、医師、販売員、重役、主婦、「高度専門職」をはじとする毎日の仕事において特に高い記憶および注意力を必要とする個人、および精神的ストレスおよび日々のストレスを受けている人々、ならびに統合失調症などの精神医学的不安定性を起こしやすい人々において、学習、記憶および敏捷性を改善するのに使用してもよい化合物、ならびに栄養補給食品組成物の開発に対する関心の高まりがある。
【０００８】
したがってＮＭＤＡ受容体機能を増強し、学習、記憶、および敏捷性を改善できる化合物または栄養補給食品組成物が、高度に望ましいであろう。
【０００９】
国際公開第０３０３９５７０号パンフレットには、脳細胞を保護し、記憶を改善するための川椒（Ｐｅｒｉｃａｒｐｉｕｍ  ｚａｎｔｈｏｘｙｌｉ）（具体的にはカホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）乾燥果実の皮）抽出物の使用が開示されている。抽出物は、有機溶剤／水の混合物を用いた抽出によって、好ましくは低級アルコール（１〜４個の炭素原子）、アセトン、クロロホルム、塩化メチレン、エーテル、酢酸エチル、またはそれらの混合物を用いた抽出によって調製される。本発明の抽出物は国際公開第０３０３９５７０号パンフレットで開示されるものとは異なり、本発明では、果実全体から調製された水抽出物を利用し、それを次にアルコール／エーテル混合物で再抽出する。
【００１０】
米国特許第６，４１９，９５０号明細書（Ｂｏｍｂａｒｄｅｌｌｉら）にはまた、様々な鎮痛剤および美容用途のための、カホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）の果皮抽出物の使用について述べてられている。本発明の抽出物はＢｏｍｂａｒｄｅｌｌｉらで開示されるものとは異なり、本発明では、果実全体から調製された水抽出物を利用し、それを次にアルコール／エーテル混合物で再抽出する。また本抽出物の用途はＢｏｍｂａｒｄｅｌｌｉらの抽出物とは異なる。
【００１１】
［発明の詳細な説明］
本発明によれば、カホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）の果実全体（すなわち果皮と果実）の抽出物が、記憶形成および記憶の固定において重要なＬＴＰを誘導する能力を有することが分かった。したがってカホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物は、認知機能を高めるのに有用である。
【００１２】
したがって本発明の一態様は、認知機能を高めるためのカホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物を含んでなる、新しい栄養補給食品組成物である。
【００１３】
カホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）の全果抽出物もまた、本発明の一態様である。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１ａ】飛び降り試験における誤り率を示すグラフである。ａ：休薬期間における、ビヒクル処置して年齢をマッチさせた同腹子との有意差。
【図１ｂ】飛び降り行動試験における電気ショックを回避するまでの遅延時間を示すグラフである。ａ：休薬期間における、ビヒクル処置して年齢をマッチさせた同腹子との有意差。ｂ：休薬期間における、イチョウ処置陽性対照との有意差。
【図２】訓練期間におけるモーリス水迷路中の隠された踏み台を見つけ出すまでの遅延時間を示すグラフである。
【００１５】
［カホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）抽出物］
サンショウ属（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ）のいくつかの種の果実の果皮は、一般に花椒（ＳｉｃｈｕａｎまたはＳｚｅｃｈｕａｎ  ｐｅｐｐｅｒ）として知られており、チベット、ブータン、ネパール、日本、およびその他のアジア諸国に加えて、特に中国四川省で香味料として広く使用されている。通常使用されるこれらの種としては、カホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）Ｍａｘ．（中国）、サンショウ（Ｚ．ｐｉｐｅｒｉｔｕｍ）ＤＣ＝サンショウ（Ｚ．ｓａｎｓｈｏ）（中国中央部／東部、日本、韓国）、トウザンショウ（Ｚ．ｓｉｍｕｌａｎｓ  Ｈａｎｃｅ）＝ツルザンショウ（Ｚ．ｂｕｎｇｅｉ）（中国、台湾）、およびイヌザンショウ（Ｚ．ｓｃｈｉｎｉｆｏｌｉｕｍ  Ｓｉｅｂ．ｅｔ  Ｚｕｃｃ．）（中国、韓国）が挙げられる。関連種としては、テリハザンショウ（Ｚ．ｎｉｔｉｄｕｍ  Ｒｏｘｂ．）（ＤＣ）（中国、東南アジア半島部）、ザントキシラム・レツァ（Ｚ．ｒｈｅｔｓａ  Ｐｉｅｒｒｅ）バドランガ変種（ｖａｒ．ｂｕｄｒａｎｇａ  Ｐｉｅｒ．）＝Ｚ．リモネラ（ｌｉｍｏｎｅｌｌａ）（インド北西部、東南アジア半島部）、フユザンショウ（Ｚ．ａｒｍａｔｕｍ  ＤＣ）＝フユザンショウ（Ｚ．ａｌａｔｕｍ  Ｒｏｘｂ．）（ヒマラヤ、東南アジア半島部、東アジア）、鷹不泊（Ｚ．ａｖｉｃｅｎｎａｅ（Ｌａｍｋ）ＤＣ）＝Ｚ．チドレンス（ｔｉｄｏｒｅｎｓｅ）（中国、東南アジア半島部、インドネシア）、および毛刺花椒（Ｚ．ａｃａｎｔｈｏｐｏｄｉｕｍ  ＤＣ）（ヒマラヤ東部、中国、東南アジア半島部、スマトラ、インドネシア）がさらに挙げられる（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｕｎｉ−ｇｒａｚ．ａｔ／〜ｋａｔｚｅｒ／ｅｎｇｌ／Ｚａｎｔ＿ｐｉｐ．ｈｔｍｌ参照）。
【００１６】
明細書および特許請求の範囲全体を通じた用法で、「カホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物」という用語は、果皮および全果実の双方を含んでなる抽出物を意味する。
【００１７】
カホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物は、動物またはヒト消費用栄養補給食品組成物における使用のために許容可能でなくてはならない。したがって再抽出工程で使用される溶剤は、様々な規制当局により意図される用途について認可されなくてはならない。
【００１８】
溶剤抽出法によって調製される典型的なカホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物は、例えばβ−ピネン、１，８−テルピネン、ｃｉｓ−ピペリトールアセテート、オレイン酸、パルミチン酸、４−テルピネオール、α−サンショール、γ−サンショール、ヒドロキシ−α−サンショール、ヒドロキシ−β−サンショール、ヒドロキシ−γ−サンショール、α−ピネン、サビネン、ミルセン、β−フェランドレン、リナロール、イソプレゴール、テルピネン−４−オール、α−テルピネオール、ピペリトン、α−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシアセトフェノン、コクサギン、スキンミアニン、ハプロピン、ヘルニアリン、ｎ−ノナコサン、ｏ−シメン、キサントキシリン、ヒペリン、クエルシトリン、ケルセチン、イソクエルシトリン、ルチン、ミレシチン、ミリシトリン、ケンペロール、ルテオリンを含有する。
【００１９】
好ましい抽出では、果実および果皮は破砕され熱水抽出され、引き続いて蒸発または噴霧乾燥のどちらかによって乾燥される。次に得られた抽出物をメタノールなどのアルコールを使用して再抽出する。この方法によって作られるこの抽出物もまた、本発明の一態様である。
【００２０】
［本発明により改善される状態］
本発明の文脈で「処置」とはまた、共同処置ならびに予防、症状を軽減し、発症時期を延ばし、重症度を低下させることを包含する。予防はまた、健康状態の維持に関係する。
【００２１】
明細書および特許請求の範囲全体を通じて、「改善された認知機能」という用語は、次のような良好な認知性およびバランスをサポートし維持する状態を指すことを意図する。
●次をはじめとする強化された学習
○言語処理
○問題解決
○知的機能
●心理社会的負担に対処する能力
●強化された注意力および集中力
●強化された記憶および想起能力、特に短期記憶
●強化された精神的敏捷性および精神的覚醒状態、精神的疲労の低減
●次をはじめとする精神的状態の安定化
○分娩後の病状の緩和
○パートナー、子供との離別、愛する人の死亡、または結婚生活の問題に起因する心理的負担の緩和
○転居、転職または類似した出来事に付随する問題の緩和
○交通事故に続くストレスの多い状態またはその他のネガティブな社会的圧力の緩和
●次をはじめとするストレス緩和
○作業過負荷、疲労および／または燃え尽きに関連した症状の治療、予防、および軽減
○ストレスに対する抵抗性または耐性の増大
○健常人におけるリラクセーションのサポートおよび促進
●次をはじめとする「状態改善」
○過敏および倦怠感の低減
○肉体的および精神的疲労の低減、予防または軽減
○病人または健常人における良質な睡眠の促進、すなわち不眠症および睡眠障害への対抗、およびエネルギーのより概括的な増大
【００２２】
本発明の好ましい一態様では、特に、強化された認知機能および／または心理社会的サポートに対する特別な必要性を感じる人々のために、組成物を栄養補給剤として使用してもよい。強化された認知機能から恩恵を受けるであろう人々の非総記的一覧には、次が含まれる。
高齢者、
学生または試験準備中の人々、
多大な学習をしている子供、すなわち乳児、幼児、就学前児童、および就学児童、
建設労働者、または潜在的に危険な機械類を操作する人々、
トラック運転手、パイロット、鉄道運転士、またはその他の運輸専門職、
航空管制官、
販売員、重役、およびその他の「高度専門職」、
警察官および兵士、
主婦、
またはスポーツ競技者、チェス競技者、ゴルファー、（俳優、音楽家などの）職業的パフォーマーなどの毎日の仕事において多量のストレスに曝されるあらゆる人々、または毎日の仕事において特に高度な注意力／集中力／高い精神的および心理的能力を必要とする人々。
【００２３】
これらの改善を達成するために、数日間（例えば少なくとも６または１０日間）にわたる投与が推奨され、数週間にわたる毎日の投与が一般に好ましい。
【００２４】
ヒトへの応用の他に、本発明の組成物は獣医学界における追加的用途を有する。強化された認知機能から恩恵を受ける動物としては、ストレスの多い状況に置かれる動物が挙げられる。このような状態は、例えば捕獲または輸送後に起き、または畜舎環境（居住場所または飼い主の変更）に起因するかもしれず、動物が類似性障害を発生し、苦痛を感じ、または攻撃的であり、または常同行為、または不安および強迫行動を示す場合に生じる。ストレスを被る動物としては、競技用動物（例えばイヌ、ウマ、ラクダ）、または様々なスポーツで使用される動物、芸当する動物（サーカス動物、および舞台、テレビまたは映画に出演する動物など）、および馬場馬術およびその他の高度に訓練された動作を演じるウマもまた挙げられる。
【００２５】
好ましい「動物」は、ペットまたはコンパニオンアニマルおよび家畜である。ペットの例は、イヌ、ネコ、鳥、観賞魚、モルモット、（ジャック）ウサギ、ノウサギ、およびフェレットである。家畜の例は、水産養殖魚、ブタ、ウマ、反芻動物（畜牛、ヒツジ、およびヤギ）、および家禽である。
【００２６】
［栄養補給食品の用途／調合／投薬］
「栄養補給食品」という用語は、ここでの用法では、栄養および製薬分野用途の双方における有用性を表す。したがって新しい栄養補給食品組成物は、食品および飲料に対する栄養補給剤として、そしてカプセルや錠剤などの固形製剤、または溶液や懸濁液などの液剤であってもよい、経腸的または非経口用途のための医薬製剤として使用できる。
【００２７】
本発明による栄養補給食品組成物は、保護親水コロイド（ガム、タンパク質、加工デンプンなど）、バインダー、塗膜形成剤、封入剤／材、壁／シェル材料、マトリックス化合物、コーティング、乳化剤、表面活性剤、可溶化剤（油、脂肪、ワックス、レシチンなど）、吸着材、キャリア、充填材、共化合物、分散剤、湿潤剤、加工助剤（溶剤）、流動化剤、味覚マスキング材、増量剤、ゼリー化剤、ゲル形成剤、抗酸化剤、および抗菌剤をさらに含有してもよい。
【００２８】
さらに本発明の栄養補給食品組成物にマルチビタミン剤およびミネラル補給剤を添加して、食生活によっては欠けている適量の必須栄養素を得てもよい。マルチビタミン剤およびミネラル補給剤はまた、疾患予防と、生活習慣パターンに起因する栄養損失および欠乏症からの保護のためにも有用である。
【００２９】
本発明による栄養補給食品組成物は、例えば食品または飼料（のための添加剤／栄養補給剤）、食品または飼料プレミックス、強化食品または飼料、錠剤、丸薬、顆粒、糖衣丸、カプセル、および粉末および錠剤などの発泡性調合物などの固形形態の、または例えば飲料、ペースト、および油性懸濁液などの溶液、エマルジョンまたは懸濁液などの液体形態の、特に経口投与に標準的なあらゆる形態である、身体に投与するのに適したあらゆるガレヌス製剤形態であってもよい。ペーストは硬質または軟質シェルカプセルに組み込まれてもよく、カプセルは例えば（魚、ブタ、家禽、ウシ）ゼラチン、植物タンパク質またはリグニンスルホネートのマトリックスを特徴とする。その他の使用形態の例は、経皮、非経口または注射投与のためのものである。食餌および医薬組成物は、制御（遅延）放出製剤の形態であってもよい。
【００３０】
食品および酪農製品の例としては、例えばマーガリン、スプレッド、バター、およびチーズが挙げられる。
【００３１】
強化食品の例は、シリアルバー、およびケーキやクッキーなどのベーカリー製品、およびポテトチップである。
【００３２】
飲料は、非アルコールおよびアルコール飲料、ならびに飲用水および液体食品に添加するための液体調製品を包含する。非アルコール飲料は、例えば清涼飲料、スポーツドリンク、果汁、レモネード、茶、およびミルクベースの飲料である。液体食品は、例えばスープおよび酪農製品である。カホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物を含有する栄養補給食品組成物は、成人が１食当たり好ましくは１０〜３０００ｍｇ、より好ましくは５０〜２０００ｍｇ、最も好ましくは１００〜１０００ｍｇのカホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物を消費するように、清涼飲料、エネルギーバー、またはキャンディに添加されてもよい。
【００３３】
栄養補給食品組成物が医薬製剤であれば、組成物は、薬学的に許容できる賦形剤、希釈剤またはアジュバントをさらに含有する。それらの調合のために、例えばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第２０版、Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，ＰＡ，ＵＳＡで開示されるような標準技術を使用してもよい。経口投与のためには、好ましくは錠剤およびカプセルが使用され、それは例えばゼラチンまたはポリビニルピロリドンなどの適切な結合剤、例えば乳糖またはデンプンなどの適切な充填材、例えばステアリン酸マグネシウムなどの適切な潤滑剤、および任意にさらなる添加剤を含有する。好ましいのは投与単位当たり、例えば錠剤またはカプセル当たり２．５〜１０００ｍｇ、より好ましくは１２．５〜７５０ｍｇ、最も好ましくは２５〜５００ｍｇのカホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物誘導体を含有する調合物である。
【００３４】
本発明をより良く例証するために、以下の制限を意図しない例を提示する。
【００３５】
［実施例１］
［カホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物の調製］
水抽出物原液を陝西嘉禾植物化工有限責任公司（中国西安市７１００７５）から購入した。次にカホクザンショウ（Ｚ．ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果の水抽出物を蒸発または噴霧乾燥によって乾燥させ（１０：１の原料および抽出物比）、アルコール／エーテル混合物（例えばメタノールおよびメチル−ｔｅｒｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ））で再抽出し、本発明で使用される特定の抽出物を得た。
【００３６】
［実施例２］
［海馬切片培養］
ギロチンを使用して７日齢のウィスター系ラットを断頭した。１分未満内に開頭して大脳半球を分離して取り出し、双方の海馬を切り出して、１３７ｍＭ  ＮａＣｌ、５ｍＭ  ＫＣｌ、０．８５ｍＭ  Ｎａ２ＨＰＯ４、１．５ｍＭ  ＣａＣｌ２、０．６６ｍＭ  ＫＨ２ＰＯ４、０．２８ｍＭ  ＭｇＳＯ４、１ｍＭ  ＭｇＣｌ２、２．７ｍＭ  ＮａＨＣＯ３、１ｍＭキヌレン酸、および０．６％Ｄ−グルコースを含有する氷冷緩衝液に入れた。
【００３７】
同一緩衝液中で、振動刃ミクロトーム（ＶＴ１２００Ｓ）；Ｌｅｉｃａ  Ｍｉｃｒｏｓｙｓｔｅｍｓ（Ｓｃｈｗｅｉｚ）ＡＧ，Ｈｅｅｒｂｒｕｇｇ，スイス国）を使用して、海馬の横断切片（４００μｍ）を調製した。海馬切片を膜インサート（Ｍｉｌｌｉｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｐｌａｔｅ  Ｉｎｓｅｒｔｓ、０．４μｍ）に個別にのせて、３５℃、５％ＣＯ２、湿度９５％で、２５％熱不活性化ウマ血清、１×ＧｌｕｔａＭＡＸ、１×ペニシリン／ストレプトマイシン、０．６％グルコース、および１ｍＭキヌレン酸を含有する、ＢＭＥおよびＭＥＭ（どちらもインビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）から）の１：１混合物を含有する培養液中で培養した（Ｓｔｏｐｐｉｎｉ，ＢｕｃｈｓおよびＭｕｌｌｅｒ（１９９１年），Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，３７（２），１７３〜８２）。
【００３８】
４８時間の培養後に、１４０ｍＭ  ＮａＣｌ、５ｍＭ  ＫＣｌ、１．３ｍＭ  ＣａＣｌ２、２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．３）、３３ｍＭ  Ｄ−グルコース、および０．０２ｍＭビククリンメチオダイド中で１５分間にわたり、カホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物の添加によってシナプスのＮＭＤＡ受容体を活性化した。サルコシン（１００μＭ）およびＡＬＸ５４０７（２０ｎＭ）を陽性対照として慣例的に使用した。追加的な陽性対照は、姉妹培養物への２００μＭのグリシンの添加を含んでなった。処置後に切片を洗浄して、免疫組織化学的検査のために固定した。常態では長期増強と関連付けられている強化されたシナプス活性のマーカーを定量化し、学習および記憶の生体外モデルとした（下の表１参照）。
【００３９】
【表１】
2011505397.tif 000002
【００４０】
海馬培養物のカホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物による処置は、ＬＴＰに典型的な生化学的マーカーを誘発した（ｐＣＲＥＢ：ｃＡＭＰ応答要素結合タンパク質の活性化型；ＧｌｕＲ１：ＡＭＰＡ受容体１の細胞表面存在）。ｐＭＡＰＫ（マイトジェン活性化タンパク質キナーゼの活性化型）は、カホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物により活性化されなかった。
【００４１】
［実施例３］
［２つの伝統的な齧歯類の学習および記憶モデルにおけるサンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ）全果抽出物の効果：１−飛び降り試験］
連合学習および記憶パラダイムである飛び降り試験をマウスに実施した。反応ボックスの底に３６Ｖの電気格子を装着し、マウスを個別に反応ボックスに入れた。動物が電気ショックを受けた際、それらの正常な反応は絶縁踏み台上に飛び上がって疼痛刺激を避けることである。格子上に飛び降りて戻った動物の大部分は、電気ショックを受けると迅速に飛び上がり踏み台に戻った。動物は５分間にわたり訓練され、各マウスがショックを受けた回数、または誤りを犯した回数を記録した。このデータは学習データを構成した。２４時間（訓練日）および４８時間（試験日）に再試験を行い、これらの試行は記憶力テストの役割を果たした。各群でショックを受けた動物数、踏み台から飛び降りるまでの時間、および最初の３分間の誤り回数を記録した。８日目の訓練終結の５日後に、記憶の減退を試験した（休薬試験）。
【００４２】
試験は３つの試験群（各群当たりｎ＝１２）を含んだ。全てのマウスは、研究全体を通じて、毎日経口胃管栄養法を通じて試験物質またはビヒクルを投与された（１０ｍｌ／ｋｇ）。イチョウ（Ｇｉｎｋｇｏ  ｂｉｌｏｂａ）の処置用量は１００ｍｇ／ｋｇ体重であり、サンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ）抽出物は３種の用量（５０（低用量）、１５０（中用量）、４５０（高用量）ｍｇ／ｋｇ体重）で試験された。ロリプラムは試験の３０分前に腹腔内注射によって投与された（０．１ｍｇ／ｋｇ体重）。
【００４３】
ビヒクル処置同腹子（陰性対照）と比較すると、サンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ）処置動物は、試験および記憶期中に、および休薬期間後に有意により良い学習および記憶能力を示した。
【００４４】
図１ａは飛び降り試験における誤り率を示す。ａ：休薬期間における、ビヒクル処置して年齢をマッチさせた同腹子との有意差。これらの結果は、全ての動物が課題を同様に良好に学習したことを示すが、サンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ）処置マウスは対照動物よりも顕著により長く記憶を保った。
【００４５】
図１ｂは、飛び降り行動試験における、電気ショック回避までの遅延時間の長さを示す。ａ：休薬期間における、ビヒクル処置して年齢をマッチさせた同腹子との有意差。ｂ：休薬期間における、イチョウ処置陽性対照との有意差。ここでもサンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ）処置マウスは、その他の群よりも顕著により長く記憶を保った。
【００４６】
結論として、サンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ）全果抽出物で処置されたマウスは、それらの年齢をマッチさせた対照よりも顕著により良い記憶能力を示した。サンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ）処置マウスは、年齢をマッチさせた対照だけでなくイチョウ処置陽性対照よりもまた成績が良かった。
【００４７】
［実施例４］
［２つの伝統的な齧歯類の学習および記憶モデルにおけるサンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ）全果抽出物の効果：２−モーリス水迷路］
モーリス水迷路は、齧歯類において空間記憶を試験するための最も良く認められたパラダイムの１つである。マウスは丸いプール内で泳がなくてはならず、隠れた踏み台を探し出さなくてはならない。方向付けの助けとして、それらは実験室内の視覚的手がかりを使用する。
【００４８】
この実験で本発明者らは、時計の１０時方向の境界から１０ｃｍに位置する隠れた踏み台（１０ｃｍ×１０ｃｍ）がある、直径＝１．５ｍのモーリス水迷路を使用した。０日目にマウスを順応させて、踏み台に向かって泳ぐように２回訓練した。
【００４９】
１〜４日目にはマウスを毎日２回訓練し、踏み台を探し出すまでの時間を記録した。毎日２回の試験の平均時間を計算した。さらに踏み台横断回数もまた記録した。最初の３日間のスコアを訓練スコアとした。４日目の２回の試験を試験スコアとした。
【００５０】
訓練セッション中、低および中濃度のサンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ）を投与された群のみが、成績が顕著に良かった。プローブトライアルが実施された４日目には、中濃度サンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ）群が、年齢をマッチさせた対照動物と比較して顕著に短い遅延時間を示し、サンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ）抽出物による処置が、動物の学習および記憶能力の双方に影響を与えることが示唆された。
【００５１】
結果は図２に示され、訓練期間中にモーリス水迷路内の隠れた踏み台を探し出すまでの遅延時間が示される。ａ：初日における、ビヒクル処置して年齢をマッチさせた同腹子との有意差は、低用量サンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ）抽出物での処置が動物の学習能力を顕著に改善することを強調する。中用量では、サンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ）処置は、イチョウ処置動物で観察されたのよりも学習行動をさらに改善した。４日目のプローブトライアル中には、中用量サンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ）群とビヒクル処置して年齢をマッチさせた同腹子との間に有意差が観察され、ここでもサンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ）抽出物が動物の記憶能力を顕著に改善することが示された。
【００５２】
［実施例５］
［軟質ゼラチンカプセルの調製］
次の成分を含んでなる軟質ゼラチンカプセル（２００ｍｇ）を調製してもよい。
【００５３】
【表２】
2011505397.tif 000003
【００５４】
成人に３ヶ月間にわたり毎日２個のカプセルを投与してもよい。認知機能、敏捷性、記憶および作業集中能力が改善される。
【００５５】
［実施例６］
［強化ノンベークドシリアルバーの調製］
【００５６】
【表３】
2011505397.tif 000004
【００５７】
カホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物を脱脂粉乳と予混合して、遊星形ボールミキサーに入れる。コーンフレークおよびライスクリスピーを添加して、全てを穏やかに混合する。次に乾燥カットリンゴを添加する。１つの調理鍋中で、砂糖、水、および塩を上掲の量で混合する（溶液１）。第２の調理鍋中で、グルコース、転化糖シロップ、およびソルビトールシロップを上掲の量で混合する（溶液２）。脂肪相はベーキング油脂、パーム核油、レシチン、および乳化剤の混合物から構成される。溶液１を１１０℃に加熱する。溶液２を１１３℃に加熱して、次に冷水浴中で冷却する。引き続いて溶液１および２を合わせる。脂肪相を水浴中で７５℃で溶解し、次に溶液１および２を合わせた混合物に添加する。リンゴ香料およびクエン酸を液体糖／脂肪ミックスに添加する。液塊を乾燥成分に添加して、遊星形ボールミキサー内で良く混合する。塊を大理石板上にのせて、所望の厚さに伸ばす。塊を室温に冷却して裁断する。ノンベークドシリアルバーは、一食（３０ｇ）当たり約２９ｍｇのカホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物を含有する。総体的健康および元気づけのために、１日当たり１〜２個のシリアルバーを摂食してもよい。
【００５８】
［実施例７］
［カホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物被覆ポテトチップの調製］
ジャガイモを非常に薄くスライスしてオリーブ油を振りかけ、オーブン（４２５°Ｆ）内で褐色になりパリッとするまで焼く（約３０分間）。代案としては、薄いスライスを植物油中（３５０〜３７５°Ｆ）でパリッとするまで揚げる。引き続いて、ポテトチップを、海塩およびカホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物を含んでなる組成物で被覆する。
【００５９】
［実施例８］
［カホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物を含有する乾燥ドッグフード］
市販のイヌ用基礎食（例えばＭＥＲＡ−Ｔｉｅｒｎａｈｒｕｎｇ  ＧｍｂＨ，Ｍａｒｉｅｎｓｔｒａｓｓｅ  ８０−８４，Ｄ−４７６２５  Ｋｅｖｅｌａｅｒ−Ｗｅｔｔｅｎ，ＧｅｒｍａｎｙからのＭｅｒａ  Ｄｏｇ「Ｂｒｏｃｋｅｎ」）に、ビタミンＣ（例えばスイス国カイザーアウグスト（Ｋａｉｓｅｒａｕｇｓｔ）のＤＳＭ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｌｔｄ．からのＲＯＶＩＭＩＸ（登録商標）Ｃ−ＥＣ）およびその誘導体、すなわち一リン酸アスコルビルナトリウム（例えばスイス国カイザーアウグストのＤＳＭ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｌｔｄ．からのＳＴＡＹ−Ｃ（登録商標）５０）またはＬ−アスコルビン酸ナトリウム／カルシウムの三リン酸、二リン酸、および一リン酸エステルの混合物（例えばスイス国カイザーアウグストのＤＳＭ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｌｔｄ．からのＲＯＶＩＭＩＸ（登録商標）ＳＴＡＹ−Ｃ（登録商標）３５）などの抗酸化剤と共に、体重１ｋｇ当たり５ｍｇのカホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物の１日量をイヌに投与するのに十分な量で、カホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物を含有するコーンオイル懸濁液を噴霧する。約９０重量％の乾燥物質を含有するように、食品組成物を乾燥させる。１日当たりおよそ２００ｇの乾燥ドッグフードを消費する体重１０ｋｇの平均的なイヌでは、ドッグフードは１ｋｇ当たりおよそ２５０ｍｇのカホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物を含有する。より体重の重いイヌでは、飼料混合物を適宜調製する。イヌのストレス、恐怖、および攻撃性の低減のために、動物保護施設のイヌにドッグフードを定期的に与えることができる。動物病院の受診、または動物病院への滞在、または休暇中の別離前には、少なくとも１週間前、ストレス性の事象の最中、そしてその後１週間、ドッグフードを与えることができる。
【００６０】
［実施例９］
［カホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物を含有する湿潤キャットフード］
市販のネコ用基礎食（例えばＨａｐｐｙ  Ｃａｔ「Ａｄｕｌｔ」，Ｔｉｅｒｆｅｉｎｎａｈｒｕｎｇ，Ｓｕｅｄｌｉｃｈｅ  Ｈａｕｐｔｓｔｒａｓｓｅ  ３８，Ｄ−８６５１７  Ｗｅｈｒｉｎｇｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）に、ビタミンＣ（例えばスイス国カイザーアウグストのＤＳＭ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｌｔｄ．からのＲＯＶＩＭＩＸ（登録商標）Ｃ−ＥＣ）およびその誘導体、すなわち一リン酸アスコルビルナトリウム（例えばスイス国カイザーアウグストのＤＳＭ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｌｔｄ．からのＳＴＡＹ−Ｃ（登録商標）５０）またはＬ−アスコルビン酸ナトリウム／カルシウムの三リン酸、二リン酸、および一リン酸エステルの混合物（例えばスイス国カイザーアウグストのＤＳＭ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｌｔｄ．からのＲＯＶＩＭＩＸ（登録商標）ＳＴＡＹ−Ｃ（登録商標）３５）などの抗酸化剤と共に、体重１ｋｇ当たり１０ｍｇのカホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物の１日量をネコに投与するのに十分な量で、カホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物を含有するコーンオイル懸濁液を混合する。およそ４００ｇの湿潤キャットフードを消費する体重５ｋｇの平均的なネコでは、キャットフードは１ｋｇ当たりおよそ１２５ｍｇのカホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物を含有する。約９０重量％の乾燥物質を含有するように、食品組成物を乾燥させる。ネコのストレス、恐怖、および攻撃性の低減のために、動物保護施設のネコにキャットフードを定期的に与えることができる。動物病院の受診、または動物病院への滞在前には、少なくとも１週間前、ストレス性の事象の最中、そしてその後１週間、キャットフードを与えることができる。
【００６１】
［実施例１０］
［カホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物を含有するイヌのおやつ］
市販のイヌのおやつ（例えばＭＥＲＡ−Ｔｉｅｒｎａｈｒｕｎｇ  ＧｍｂＨ，Ｍａｒｉｅｎｓｔｒａｓｓｅ  ８０−８４，４７６２５  Ｋｅｖｅｌａｅｒ−Ｗｅｔｔｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙが供給するイヌ用Ｍｅｒａ  Ｄｏｇ「Ｂｉｓｃｕｉｔ」）に、ビタミンＣ（例えばスイス国カイザーアウグストのＤＳＭ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｌｔｄ．からのＲＯＶＩＭＩＸ（登録商標）Ｃ−ＥＣ）およびその誘導体、すなわち一リン酸アスコルビルナトリウム（例えばスイス国カイザーアウグストのＤＳＭ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｌｔｄ．からのＳＴＡＹ−Ｃ（登録商標）５０）またはＬ−アスコルビン酸ナトリウム／カルシウムの三リン酸、二リン酸、および一リン酸エステルの混合物（例えばスイス国カイザーアウグストのＤＳＭ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｌｔｄ．からのＲＯＶＩＭＩＸ（登録商標）ＳＴＡＹ−Ｃ（登録商標）３５）などの抗酸化剤と共に、おやつ１ｇ当たり０．５〜５ｍｇのカホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物をおやつに投与するのに十分な量で、カホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物を含有するコーンオイル懸濁液を噴霧する。約９０重量％の乾燥物質を含有するように、食品組成物を乾燥させる。恐怖および緊張を低下させるために、日中ドッグフードに加えて、または給餌が保証されない場合、すなわち旅行中に毎日５回まで、おやつを与えることができる。
【００６２】
［実施例１１］
［カホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物を含有するネコのおやつ］
市販のネコのおやつ（例えばＷｈｉｓｋａｓ，Ｍａｓｔｅｒｆｏｏｄｓ  ＧｍｂＨ，Ｅｉｔｚｅｒ  Ｓｔｒ．２１５，２７２８３  Ｖｅｒｄｅｎ／Ａｌｌｅｒ，Ｇｅｒｍａｎｙが供給するネコ用Ｗｈｉｓｋａｓ  Ｄｅｎｔａｂｉｔｓ）に、ビタミンＣ（例えばスイス国カイザーアウグストのＤＳＭ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｌｔｄ．からのＲＯＶＩＭＩＸ（登録商標）Ｃ−ＥＣ）およびその誘導体、すなわち一リン酸アスコルビルナトリウム（例えばスイス国カイザーアウグストのＤＳＭ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｌｔｄ．からのＳＴＡＹ−Ｃ（登録商標）５０）またはＬ−アスコルビン酸ナトリウム／カルシウムの三リン酸、二リン酸、および一リン酸エステルの混合物（例えばスイス国カイザーアウグストのＤＳＭ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｌｔｄ．からのＲＯＶＩＭＩＸ（登録商標）ＳＴＡＹ−Ｃ（登録商標）３５）などの抗酸化剤と共に、おやつ１ｇ当たり０．５〜５ｍｇのカホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物をおやつに投与するのに十分な量で、カホクザンショウ（Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ  ｂｕｎｇｅａｎｕｍ）全果抽出物を含有するコーンオイル懸濁液を噴霧する。約９０重量％の乾燥物質を含有するように、食品組成物を乾燥させる。恐怖および緊張を低下させるために、日中キャットフードに加えて、または給餌が保証されない場合、すなわち旅行中に毎日５回まで、おやつを与えることができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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