(57)【要約】  本発明は自己免疫性疾患の診断及び治療に関与する方法及び材料に関する。詳細には、本発明は自己免疫性疾患の予防投与、予防及び／又は治療に好適な薬剤の識別に関与する方法及び材料に関する。本発明は更に、細胞におけるＳｌｃ３８Ａ１（溶質キャリアファミリー３８、メンバー１）のようなアミノ酸輸送体の障害によって引き起こされるアミノ酸の細胞内取り込み量の減少を伴う関節炎、多発性硬化症および炎症性腸疾患のような自己免疫性疾患の診断に関与する方法及び材料に関する。本発明は又、細胞におけるアミノ酸輸送体の障害に付随する自己免疫性疾患の診断、治療、予防、又は発症の遅延及び症状の改善に関与する方法及び材料に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
自己免疫性疾患の予防投与、予防及び／又は治療に好適な薬剤を識別する方法であって、
（ａ）アミノ酸輸送体を含む生化学的アッセイ又は細胞アッセイを用意する工程と、
（ｂ）テスト薬剤の存在下のアミノ酸輸送体の活性レベルを決定する工程と、
（ｃ）前記レベルがアミノ酸輸送体活性の対照レベルより大であるかどうかを決定する工程であって、前記対照レベルは、前記テスト薬剤の不在下のアミノ酸輸送体活性の量である、工程と、
（ｄ）前記レベルが対照レベルよりも大である場合には、前記薬剤が自己免疫性疾患の予防投与、予防及び／又は治療に好適である可能性があると識別する工程と、
を含む方法。
【請求項２】
前記アミノ酸輸送体が、ＳＬＣ１Ａ１、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ１Ａ３、ＳＬＣ１Ａ４、ＳＬＣ１Ａ５、ＳＬＣ１Ａ６、ＳＬＣ１Ａ７；ＳＬＣ２Ａ１、ＳＬＣ２Ａ２、ＳＬＣ２Ａ３、ＳＬＣ２Ａ４、ＳＬＣ２Ａ５、ＳＬＣ２Ａ６、ＳＬＣ２Ａ７、ＳＬＣ２Ａ８、ＳＬＣ２Ａ９、ＳＬＣ２Ａ１０、ＳＬＣ２Ａ１１、ＳＬＣ２Ａ１２、ＳＬＣ２Ａ１３、ＳＬＣ２Ａ１４、ＳＬＣ７Ａ１、ＳＬＣ７Ａ２、ＳＬＣ７Ａ３、ＳＬＣ７Ａ４、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＬＣ７Ａ６、ＳＬＣ７Ａ７、ＳＬＣ７Ａ８、ＳＬＣ７Ａ９、ＳＬＣ７Ａ１０、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ１３、ＳＬＣ７Ａ１４、ＳＬＣ３６Ａ１、ＳＬＣ３６Ａ２、ＳＬＣ３６Ａ３、ＳＬＣ３６Ａ４；ＳＬＣ３８Ａ１、ＳＬＣ３８Ａ２、ＳＬＣ３８Ａ３、ＳＬＣ３８Ａ４、ＳＬＣ３８Ａ４、ＳＬＣ３８Ａ５、ＳＬＣ３８Ａ６；ＳＬＣ４３Ａ１、ＳＬＣ４３Ａ２、又はＳＬＣ４３Ａ３から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記アミノ酸輸送体がＳＬＣ３８Ａ１である、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
アミノ酸輸送体活性の前記レベルが、アミノ酸類、好ましくはグルタミン、アラニン、アスパラギン、ヒスチジン、セリン、及び／又はシステインの細胞内取り込み量の測定によって決定される、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
前記薬剤が自己免疫性疾患の症状を改善するか又は発症を遅らせるかどうかを決定するための薬剤を選別する方法であって、
（ａ）アミノ酸輸送体の機能障害を有する非ヒト哺乳動物を用意する工程と、
（ｂ）前記薬剤を前記非ヒト哺乳動物に投与する工程と、
（ｃ）前記非ヒト哺乳動物に自己免疫性疾患を誘発させる工程と、
（ｄ）前記薬剤が前記非ヒト哺乳動物における自己免疫性疾患の発症を遅延させるかどうかを決定する工程と、を含む方法。
【請求項６】
前記アミノ酸輸送体の機能障害が変異ポリペプチドに起因する、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記変異ポリペプチドが、ＳＬＣ１Ａ１、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ１Ａ３、ＳＬＣ１Ａ４、ＳＬＣ１Ａ５、ＳＬＣ１Ａ６、ＳＬＣ１Ａ７；ＳＬＣ２Ａ１、ＳＬＣ２Ａ２、ＳＬＣ２Ａ３、ＳＬＣ２Ａ４、ＳＬＣ２Ａ５、ＳＬＣ２Ａ６、ＳＬＣ２Ａ７、ＳＬＣ２Ａ８、ＳＬＣ２Ａ９、ＳＬＣ２Ａ１０、ＳＬＣ２Ａ１１、ＳＬＣ２Ａ１２、ＳＬＣ２Ａ１３、ＳＬＣ２Ａ１４、ＳＬＣ７Ａ１、ＳＬＣ７Ａ２、ＳＬＣ７Ａ３、ＳＬＣ７Ａ４、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＬＣ７Ａ６、ＳＬＣ７Ａ７、ＳＬＣ７Ａ８、ＳＬＣ７Ａ９、ＳＬＣ７Ａ１０、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ１３、ＳＬＣ７Ａ１４、ＳＬＣ３６Ａ１、ＳＬＣ３６Ａ２、ＳＬＣ３６Ａ３、ＳＬＣ３６Ａ４；ＳＬＣ３８Ａ１、ＳＬＣ３８Ａ２、ＳＬＣ３８Ａ３、ＳＬＣ３８Ａ４、ＳＬＣ３８Ａ５、ＳＬＣ３８Ａ６；ＳＬＣ４３Ａ１、ＳＬＣ４３Ａ２、又はＳＬＣ４３Ａ３、のポリペプチドから選択される、請求項６に記載の方法。  
【請求項８】
前記変異ポリペプチドがＳｌｃ３８Ａ１ポリペプチドである、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
哺乳動物の自己免疫性疾患を発症する感受性を査定する方法であって、
（ａ）前記哺乳動物から得た細胞サンプルのアミノ酸輸送体の活性レベルを決定する工程と、
（ｂ）前記レベルがアミノ酸輸送体活性の対照レベル未満であるかどうかを決定する工程であって、前記対照レベルは、健康な哺乳動物の集団由来の対照細胞のアミノ酸輸送体の平均量であり、かつ前記健康な哺乳動物は前記哺乳動物と同一種由来である、工程と、
（ｃ）前記レベルが前記対照レベル未満である場合に、前記哺乳動物は、自己免疫性疾患を発症しやすいと識別する工程と、
を含む方法。
【請求項１０】
前記アミノ酸輸送体の活性レベルが、アミノ酸類の、好ましくはグルタミン、アラニン、アスパラギン、ヒスチジン、セリン、及び／又はシステインの細胞内取り込み量の測定によって決定される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
哺乳動物の自己免疫性疾患を発症する感受性を査定する方法であって、
（ａ）前記哺乳動物から得たサンプルにおけるアミノ酸輸送体活性を反映する血液、組織又は滑液成分の前記レベルを決定する工程と、
（ｂ）前記レベルが対照レベル未満であるかどうかを決定する工程であって、前記対照レベルは、健康な哺乳動物の集団由来の対照サンプルにおける前記成分の平均量であり、かつ前記健康な哺乳動物は前記哺乳動物と同一種由来である、工程と、
（ｃ）前記レベルが前記対照レベル未満である場合に、前記哺乳動物は、自己免疫性疾患を発症しやすいと識別する工程と、
を含む方法。
【請求項１２】
哺乳動物の自己免疫性疾患を発症する感受性を査定する方法であって、前記方法は、哺乳動物がアミノ酸輸送体の一部である変異ポリペプチドを含むかどうかを決定する工程を含み、前記変異ポリペプチドの存在は、前記哺乳動物が自己免疫性疾患を発症しやすいことを示す、方法。
【請求項１３】
前記変異ポリペプチドが、ＳＬＣ１Ａ１、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ１Ａ３、ＳＬＣ１Ａ４、ＳＬＣ１Ａ５、ＳＬＣ１Ａ６、ＳＬＣ１Ａ７；ＳＬＣ２Ａ１、ＳＬＣ２Ａ２、ＳＬＣ２Ａ３、ＳＬＣ２Ａ４、ＳＬＣ２Ａ５、ＳＬＣ２Ａ６、ＳＬＣ２Ａ７、ＳＬＣ２Ａ８、ＳＬＣ２Ａ９、ＳＬＣ２Ａ１０、ＳＬＣ２Ａ１１、ＳＬＣ２Ａ１２、ＳＬＣ２Ａ１３、ＳＬＣ２Ａ１４、ＳＬＣ７Ａ１、ＳＬＣ７Ａ２、ＳＬＣ７Ａ３、ＳＬＣ７Ａ４、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＬＣ７Ａ６、ＳＬＣ７Ａ７、ＳＬＣ７Ａ８、ＳＬＣ７Ａ９、ＳＬＣ７Ａ１０、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ１３、ＳＬＣ７Ａ１４、ＳＬＣ３６Ａ１、ＳＬＣ３６Ａ２、ＳＬＣ３６Ａ３、ＳＬＣ３６Ａ４；ＳＬＣ３８Ａ１、ＳＬＣ３８Ａ２、ＳＬＣ３８Ａ３、ＳＬＣ３８Ａ４、ＳＬＣ３８Ａ５、ＳＬＣ３８Ａ６；ＳＬＣ４３Ａ１、ＳＬＣ４３Ａ２、又はＳＬＣ４３Ａ３、のポリペプチドから選択される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記変異ポリペプチドがＳｌｃ３８Ａ１ポリペプチドである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
自己免疫性疾患を有する哺乳動物において、自己免疫性疾患がアミノ酸輸送体の機能障害によって引き起こされると診断する方法であって、
（ａ）前記哺乳動物から得られた細胞サンプルのアミノ酸輸送体の活性レベルを決定する工程と、
（ｂ）前記レベルが、アミノ酸輸送体活性の対照レベル未満であるかどうかを決定する工程であって、前記対照レベルは、健康な哺乳動物の集団由来の対照細胞のアミノ酸輸送体活性の平均量であり、かつ前記健康な哺乳動物は前記哺乳動物と同一種由来である、工程と、
（ｃ）前記レベルが前記対照レベル未満である場合に、前記哺乳動物は、アミノ酸輸送体の機能障害によって引き起こされる自己免疫性疾患を有すると識別する工程と、
を含む方法。
【請求項１６】
自己免疫性疾患を有する哺乳動物において、自己免疫性疾患がアミノ酸輸送体の機能障害によって引き起こされると診断する方法であって、前記方法は、前記哺乳動物がＳＬＣ１Ａ１、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ１Ａ３、ＳＬＣ１Ａ４、ＳＬＣ１Ａ５、ＳＬＣ１Ａ６、ＳＬＣ１Ａ７；ＳＬＣ２Ａ１、ＳＬＣ２Ａ２、ＳＬＣ２Ａ３、ＳＬＣ２Ａ４、ＳＬＣ２Ａ５、ＳＬＣ２Ａ６、ＳＬＣ２Ａ７、ＳＬＣ２Ａ８、ＳＬＣ２Ａ９、ＳＬＣ２Ａ１０、ＳＬＣ２Ａ１１、ＳＬＣ２Ａ１２、ＳＬＣ２Ａ１３、ＳＬＣ２Ａ１４、ＳＬＣ７Ａ１、ＳＬＣ７Ａ２、ＳＬＣ７Ａ３、ＳＬＣ７Ａ４、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＬＣ７Ａ６、ＳＬＣ７Ａ７、ＳＬＣ７Ａ８、ＳＬＣ７Ａ９、ＳＬＣ７Ａ１０、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ１３、ＳＬＣ７Ａ１４、ＳＬＣ３６Ａ１、ＳＬＣ３６Ａ２、ＳＬＣ３６Ａ３、ＳＬＣ３６Ａ４；ＳＬＣ３８Ａ１、ＳＬＣ３８Ａ２、ＳＬＣ３８Ａ３、ＳＬＣ３８Ａ４、ＳＬＣ３８Ａ５、ＳＬＣ３８Ａ６；ＳＬＣ４３Ａ１、ＳＬＣ４３Ａ２、又はＳＬＣ４３Ａ３、のポリペプチドから選択されるアミノ酸輸送体の一部である変異ポリペプチドを含むかどうかを決定する工程を含み、かつ前記変異ポリペプチドの存在は、前記哺乳動物がアミノ酸輸送体の機能障害によって引き起こされる自己免疫性疾患を有することを示す、方法。
【請求項１７】
前記自己免疫性疾患が、関節炎、多発性硬化症及び炎症性腸疾患から選択される、請求項１〜１６のいずれかに記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は自己免疫性疾患の診断及び治療に関与する方法及び材料にかかわる。具体的には、本発明は自己免疫性疾患の予防投与、予防及び／又は治療に好適な薬剤の識別に関与する方法及び材料にかかわる。更には、本発明はＳｌｃ３８Ａ１（ファミリー３８の溶質キャリア、メンバー１）（Ｓｏｌｕｔｅ  ｃａｒｒｉｅｒ  ｆａｍｉｌｙ  ３８，ｍｅｍｂｅｒ  １）のような細胞のアミノ酸輸送体の障害により引き起こされるアミノ酸の細胞内取り込み量の減少に付随した関節炎、多発性硬化症及び炎症性腸疾患などの自己免疫性疾患の診断に関与する方法及び材料にかかわる。本発明は、細胞のアミノ酸輸送体の障害に付随する自己免疫性疾患の診断、治療、予防、又は発症遅延及び症状改善に関与する方法及び材料にかかわる。
【背景技術】
【０００２】
自己免疫性疾患は、哺乳動物の免疫システムが自身の組織に対する反応を開始する症状である。このような症状には、限定されるものではないが、関節炎、例えばリウマチ性関節炎（ＲＡ）、多発性硬化症、炎症性腸疾患、全身性エリテマトーデス、自己免疫性ブドウ膜炎、１型糖尿病、気管支喘息、ブドウ球菌細胞又は連鎖球菌によって誘発される化膿性関節炎及び血管炎を包含する心血管疾患が挙げられる。
【０００３】
リウマチ性関節炎は関節部の慢性自己免疫疾患であり、人口の０．５〜１％が発症し３：１で女性の方が多い。幅広い研究の取り組みにもかかわらずＲＡの病因は未だほとんど不明である。ＲＡは多数の遺伝子並びに環境因子によって影響を受ける複雑な疾患である。  ヒトＲＡにおける感受性遺伝子はこれまで、疾患経路に大きな影響を与える遺伝子及びＲＡがかかわる経路又は別の自己免疫疾患での役割を背景として提案されてきた候補物などの僅かと予想されるものに限定されていた。
【０００４】
ヒト疾患の動物モデルにおける疾患遺伝子のマッピング法は、その独特な可能性を活かして仮説フリーなマッピングから疾患の機序についての洞察力を得て、それらに候補物関連研究の威力を組み入れる。
【０００５】
コラーゲン誘発関節炎（ＣＩＡ）は、マウスにおいて最も広範に検討されたＲＡのモデルである。アジュバント中で乳化したコラーゲンの皮下注射によって免疫化した後、マウスは、Ｔ及びＢ細胞依存性の末梢関節炎を発症するが、このことは自己抗体の産生を含めてヒトＲＡの多くの特徴を模倣する。
ＴＯＫＵＨＩＲＯらは２００３年に、日本人集団におけるリウマチ性関節炎と有機カチオン輸送体遺伝子ＳＬＣ２２Ａ４との関連性を報告した（ネイチャー・ジェネティクス（Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）３５巻、３４１−８頁）。ＲＵＮＸ１との関連性も報告され、２つの遺伝子の間の上位性効果（ｅｐｉｓｔａｔｉｃ  ｅｆｆｅｃｔ）が指摘された。しかしながら、その後の研究では、ＴＯＫＵＨＩＲＯらの研究結果を確認できなかった（ＫＵＷＡＨＡＲＡら、２００５年、  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ  ５２巻、２９４７−８頁；オロスコ（Ｏｒｏｚｃｏ）ら、２００６年、Ｊ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ  ３３巻、１２３５−９頁；マルティネス（Ｍａｒｔｉｎｅｚ）ら、２００６年、Ｊ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ  ３３巻、８４２−６頁；ニューマン（Ｎｅｗｍａｎ）ら、２００５年、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ  ５２巻、４２５−９頁；バートン（Ｂａｒｔｏｎ）ら、２００５年、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ  ５２巻、７５２−８頁）。
【０００６】
ＰＥＬＴＥＫＯＶらは２００４年に、５ｑ３１におけるＩＢＤ５遺伝子座中に存在する有機カチオン輸送体ＯＣＴＮ１（Ｓｌｃ２２ａ４）とＯＣＴＮ２（Ｓｌｃ２２ａ５）の機能的変異とクローン病に対する感受性との間に強い関連性があることを報告した（ネイチャー・ジェネティクス（Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）  ３６巻、４７１−５頁）。
これらの研究知見の重要性がさらに研究されてきた（例えば以下を参照、トローク（Ｔｏｒｏｋ）ら、２００５年、Ｇｕｔ  ５４巻、１４２１−７頁；ウォーラー（Ｗａｌｌｅｒ）ら、２００５年、Ｇｕｔ  ５４巻、８０９−１４頁；ラッセル（Ｒｕｓｓｅｌｌ）ら、２００６年、Ｇｕｔ  ５５巻、１１４−２３頁；バブスクマール（Ｂａｂｕｓｕｋｕｍａｒ）ら、２００６年、Ａｍ  Ｊ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  １０１巻、１３５４−６１頁；ベーネ（Ｂｅｎｅ）ら、２００６年、Ｂｒ  Ｊ  Ｎｕｔｒ  ９８巻、３４５−５０頁；  トルクビスト（Ｔｏｒｋｖｉｓｔ）ら、２００７年、Ｓｃａｎｄ  Ｊ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  ４２巻、２００−６頁；シルババーグ（Ｓｉｌｖｅｒｂｅｒｇ）ら、２００７年、  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｈｕｍ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  １５巻、３２８−３５頁）。これらの更なる研究の結果は、Ｓｌｃ２２ａ５及びＳｌｃａ２２ａ５の変異がＩＢＤ５遺伝子座における原因遺伝子変異体であるかどうかの疑問を更に提起している。
【０００７】
バジェホ（Ｖａｌｌｅｊｏ）−Ｉｌｌａｒｒａｍｅｎｄｉら（２００６年、Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ  Ｄｉｓ  ２１巻、１５４−６４頁）は、ＭＳ（多発性硬化症）におけるグルタミン酸輸送体ＥＡＡＴ１（Ｓｌｃ１ａ３）及びＥＡＡＴ２（Ｓｌｃ１ａ２）の発現と活性度が増加したことを報告した。このことは、炎症及び神経変性期間中のＣＮＳ（中枢神経系）におけるグリア細胞のグルタミン酸エステルの毒性レベルに対する調節反応となると結論付けた。
【０００８】
米国特許２００７／００５９７１７Ａ１の全体的遺伝子発現プロファイルを使用して、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）患者で異なって発現される３００４遺伝子のリストが得られる。これら遺伝子の一つがＳｌｃ３８Ａ１であり、ＳＬＥ患者においてはこれが減数調節されていると分かり、このことは更に、ＳＬＥの診断を目的とする発現プロファイルに組み込まれることを示唆する。しかしながら、このことはＳＬＥプロファイルに組み込まれると示唆される３００４遺伝子の中の一つに過ぎない。これら遺伝子の絶対的多数は、疾患の二次的影響として異なって発現されやすく、従って治療法の開発に向けた標的候補にはふさわしくない。その上、異なって発現すると識別される遺伝子の比率が高いという注釈がつく。従って、この研究によってＳｌｃ３８Ａ１のような溶質キャリアの単一な発現差異がＳＬＥ疾患の発症原因であるとし、それ故に薬剤標的としてふさわしいとする可能性は実質的に無い。
【０００９】
以前、本発明者らは、Ｂ  １０．ＱとＤＢＡ／１のマウスの交配種において、染色体１５上のＣｉａ３６を含む幾つかのＣＩＡ調節遺伝子座を識別した。Ｃｉａ３６遺伝子座におけるＤＢＡ／１アレル（対立遺伝子）は、免疫化の後では抗Ｃ−１１抗体の産生を減少させ、Ｃｉａ３６コンジェニックマウスをＢ  １０．Ｑマウスと比較してＣＩＡ発現に敏感でないようにする（アークヴィスト（Ａｈｌｑｖｉｓｔ）ら、２００７年、Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １７８巻、３０８４−９０頁）。Ｃｉａ３６が識別された研究では、その遺伝子座は余りにも複雑であり、余りにも多くの遺伝子を含有していて個々の関節炎の原因である遺伝子多型に関して結論は少しも得られなかった。加えて、単一の関節炎調節遺伝子の識別のためには、他の遺伝子座からの強い相互作用及び隣接する遺伝子を分離する必要性により、より小さいコンジェニックフラグメント及び疾患に関するより明確な作用が必要とされる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らは新規の関節炎感受性遺伝子、Ｓｌｃ３８Ａ１を識別するためにコラーゲン誘発関節炎モデルを使用し、それによりアミノ酸輸送における変化が自己免疫疾患の原因に成り得る事を立証した。
【００１１】
本発明は、自己免疫疾患、特にリウマチ性関節炎（ＲＡ）に対する新規の感受性遺伝子の識別について記述する。本発明者らは、コンジェニック系統を使用し５遺伝子を含有する１Ｍｂｐ領域に対するＣｉａ３６遺伝子座領域を削減することに成功した。これらの遺伝子の一つであるＳｌｃ３８Ａ１は、使用した菌株の間で遺伝子多型を変化させる蛋白質を有することが実証された。Ｓｌｃ３８Ａ１はグルタミンに対する優先性を有する脂肪族アミノ酸のアミノ酸輸送体である。Ｓｌｃ３８Ａ１の発現は自己免疫疾患に対して高度な関連性を有するリンパ組織の中で測定し、発現は脾臓、リンパ腺、胸腺、Ｂ−細胞及びＴ−細胞で実証できた。Ｃｉａ３６コンジェニック系統の膵細胞はグルタミンの取り込み量が増加したことが示された。従ってこのことは、Ｓｌｃ３８Ａ１はマウスにおいて事実上の関節炎調節遺伝子であると結論付ける。続いて本発明者らは、ヒトＲＡ患者における候補関連付けの研究を進め、オーソロガスな（ｏｒｔｈｏｌｏｇｏｕｓ）ヒト遺伝子、ＳＬＣ３８Ａ１も同様に、抗シトルリン化抗体陽性（抗−ＣＣＰ＋）及びリウマチ因子陽性（ＲＦ＋）の男性患者における関節炎と顕著に関連していることを確認できた。興味深いことに、その遺伝子座は、マウス及びヒトの両方で男性優勢であった。
【００１２】
Ｓｌｃ３８Ａ１は、グルタミン、アラニン、アスパラギン、ヒスチジン、セリン及びシステインに対する優先性を有する脂肪族アミノ酸のアミノ酸輸送体である（アルベルス（Ａｌｂｅｒｓ）ら、Ｐｆｉｕｇｅｒｓ  Ａｒｃｈ．２００１年１０月、４４３（１）巻、９２−１０１頁；チャウドリー（Ｃｈａｕｄｒｙ）ら、Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．  ２００２年１月、２２（１）巻、６２−７２頁；マッケンジー（Ｍａｃｋｅｎｚｉｅ）ら、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．２００３年６月、２７８（２６）巻、２３７２０−３０頁）。Ｓｌｃ３８Ａ１の防御的対立遺伝子（ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ａｌｌｅｌｅ）は、脾臓細胞のグルタミン取り込み量の増加と関連していた。発症感受性は、Ｓｌｃ３８Ａ１が属するシステムＡ輸送体の特定ブロッカーを使用するアミノ酸輸送のブロックによって増加できることを同様に示すことができた。Ｓｌｃ３８Ａ１のようなアミノ酸輸送体が自己免疫疾患の発症及び調節に重要な役割を果すと示すことができた事によって、本発明者らは、ＲＡのような自己免疫障害を識別し診断する手段として、変更したアミノ酸輸送によって発症される自己免疫疾患を有する患者のサブグループを識別し診断する手段として、並びにまた自己免疫疾患の予防及び治療の手段として活性化化合物を用いてこれらのアミノ酸輸送体の機能を変更するために、そのようなアミノ酸輸送体を使用する可能性を確認する。
【００１３】
本発明は、関節炎、多発性硬化症、ＲＡ、炎症性腸疾患などの自己免疫性疾患の診断及び治療に関する方法及び材料を提供し、それら症状には、クローン病及び潰瘍性大腸炎、全身性エリテマトーデス、自己免疫性ブドウ膜炎、１型糖尿病、気管支喘息、ブドウ球菌及びレンサ球菌により誘発された化膿性関節炎、並びに血管炎を含む心臓血管疾患が挙げられる。具体的には、本発明は、Ｓｌｃ３８Ａ１のような、アミノ酸輸送体、好ましくはグルタミン、アラニン、アスパラギン、ヒスチジン、セリン及び／又はシステインに対して優先性を有するアミノ酸輸送体において、変更した機能に付随している自己免疫性疾患の診断に関与する方法及び材料を提供する。本発明は更に、アミノ酸輸送体の機能減少に付随した自己免疫性疾患の治療、予防、症状の重症度改善及び／又は発症の遅延に関与する方法並びに材料を提供し、並びにアミノ酸輸送体活性の作用材料及び拮抗材料の識別に関与する方法及び材料を提供する。
【００１４】
アミノ酸輸送体機能に障害を有するような自己免疫性疾患の患者の診断は、臨床医がこれらの患者の適切な治療法を決定するのに役立つことができる。例えば、アミノ酸輸送体の機能に障害を有するような患者を診断する臨床医は、患者の自己免疫性疾患とアミノ酸輸送体機能との両方を改善する薬剤を用いてその患者を治療できる。ある場合には、単一の薬剤を使用して患者のアミノ酸輸送体機能の活性レベルを、患者の自己免疫の症状を低下させるか又は緩和させるように改善できる。従って、アミノ酸輸送体機能に障害を有する患者を細胞のアミノ酸輸送体機能の調節によって、例えば、自己免疫性疾患に伴う病状及び症状の重症度の減少、又は自己免疫性疾患の開始を遅らせることによって治療することは、その患者の健康及び生活の質を改善できる。
【００１５】
加えて、アミノ酸輸送体機能の作用材料及び拮抗材料などの変調剤の識別は、臨床医と患者の両方に役立つことができる。例えば、本明細書に記述した方法及び材料を用いて、アミノ酸輸送体の機能障害を有する患者の治療が成功できるように、アミノ酸輸送体機能を増加させる薬剤を識別できる。  
本発明は、関節炎がアミノ酸輸送体の機能障害によって引き起こされ、悪化させられることの発見に基づいている。例えば、関節炎の動物モデルにおける関節炎の重篤な症状の発現はＳｌｃ３８Ａ１のようなアミノ酸輸送体の機能が低いことに依存され得る。本発明は又、関節炎の感受性に関与するアミノ酸輸送体機能の低減が、Ｓｌｃ３８Ａ１のようなアミノ酸輸送体における配列変異によって引き起こされることの発見に基づいている。更に、本発明は、関節炎を発症する傾向がある哺乳動物が、これらの哺乳動物のアミノ酸輸送体機能のレベルを正常化することによって防護され得ることの発見に基づいている。例えば、重篤な関節炎症状を発症する傾向があるモデル動物は、その動物のｌｃ３８Ａ１のようなアミノ酸輸送体の機能を完全に機能するようにしてやることによって救助できる。
【００１６】
概略的には、本発明は哺乳動物の自己免疫性疾患発症の感受性を査定する方法を提供し、その方法は、（ａ）前記哺乳動物から得られる細胞サンプルにおけるアミノ酸輸送体の活性レベルを決定する工程と、（ｂ）そのレベルがアミノ酸輸送体活性の対照レベル未満であるかどうかを決定する工程であって、その対照レベルは健康な哺乳動物集団由来の対照細胞のアミノ酸輸送体活性の平均量であり、健康な哺乳動物はその哺乳動物と同種由来である、工程と、（ｃ）そのレベルが対照レベル未満である場合には、その哺乳動物は、自己免疫性疾患を発症しやすいと識別する工程とを含む。
【００１７】
アミノ酸輸送体の活性レベルは、グルタミン、アラニン、アスパラギン、ヒスチジン、セリン又はシステインのようなアミノ酸の細胞内取り込み量を測定することによって決定できる。その集団は少なくとも１０の健康な哺乳動物を含むことができる。工程（ｂ）は、そのレベルが対照レベルより５〜７５％少ないかどうかの決定を含むことができ、この場合工程（ｃ）は、そのレベルが対照レベルより５〜７５％少ない時には、その哺乳動物は自己免疫性疾患を発症しやすいと識別することを含む。工程（ｂ）は、そのレベルが対照レベルより２５〜５５％少ないかどうかの決定を含むことができ、この場合工程（ｃ）は、そのレベルが対照レベルより２５〜５５％少ない時には、その哺乳動物は自己免疫性疾患を発症しやすいと識別することを含む。
【００１８】
本発明は、哺乳動物の自己免疫性疾患発症の感受性を査定する方法を更に提供し、その方法は、（ａ）前記哺乳動物から得られたサンプルにおいて、血液、細胞組織又は滑液成分のアミノ酸輸送体活性を反映するレベルを決定する工程と、（ｂ）そのレベルが対照レベル未満であるかどうかを決定する工程であって、その対照レベルは健康な哺乳動物集団由来の対照サンプルにおけるその成分の平均量であり、その健康な哺乳動物はその哺乳動物と同種由来である、工程と、（ｃ）そのレベルが対照レベル未満である場合には、その哺乳動物は自己免疫性疾患を発症しやすいと識別する工程とを含む。
【００１９】
本発明は、哺乳動物の自己免疫性疾患発症の感受性を査定する方法を更に提供し、その方法は、哺乳動物がアミノ酸輸送体の変異ポリペプチドを含有するかどうかを決定する工程を含む方法をさらに提供し、その変異ポリペプチドの存在は、哺乳動物が自己免疫性疾患を発症しやすいことを示す。
【００２０】
上記方法を使用して、限定されるものではないが、関節炎、ＲＡ、多発性硬化症、炎症性腸疾患、全身性エリテマトーデス、自己免疫性ブドウ膜炎、１型糖尿病、気管支喘息、ブドウ球菌及びレンサ球菌により誘発された化膿性関節炎、並びに血管炎を含む心臓血管疾患から選択できる自己免疫性疾患の発症感受性を決定できる。好ましくは、その自己免疫性疾患は、ＲＡなどの関節炎、多発性硬化症、又は炎症性腸疾患である。最も好ましくは、その自己免疫性疾患はＲＡなどの関節炎である。  
本発明は、自己免疫性疾患を有する哺乳動物におけるアミノ酸輸送体の機能障害によって引き起こされると自己免疫性疾患を診断する方法を更に提供し、その方法は、（ａ）前記哺乳動物から得られた細胞サンプルのアミノ酸輸送体の活性レベルを決定する工程と、（ｂ）そのレベルがアミノ酸輸送体活性の対照レベル未満であるかどうかを決定する工程であって、その対照レベルは健康な哺乳動物集団由来の対照細胞のアミノ酸輸送体活性の平均量であり、その健康な哺乳動物はその哺乳動物と同種由来である、工程と、（ｃ）そのレベルが対照レベル未満である場合にはその哺乳動物は、アミノ酸輸送体の機能障害によって引き起こされた自己免疫性疾患を有すると識別する工程とを含む。
【００２１】
アミノ酸輸送体の活性レベルは、グルタミン、アラニン、アスパラギン、ヒスチジン、セリン又はシステインなどのアミノ酸の細胞内取り込み量を測定することにより決定できる。その集団は少なくとも１０の健康な哺乳動物を含むことができる。工程（ａ）は、その細胞サンプルをアミノ酸輸送体活性化剤に接触させることを含むことができる。工程（ｂ）は、そのレベルが対照レベルより５〜７５％少ないかどうかの決定を含むことができ、この場合工程（ｃ）は、そのレベルが対照レベルより５〜７５％少ない時には、その哺乳動物は自己免疫性疾患を発症しやすいと識別することを含む。工程（ｂ）は、そのレベルが対照レベルより２５〜５５％少ないかどうかの決定を含むことができ、この場合工程（ｃ）は、そのレベルが対照レベルより２５〜５５％少ない時には、その哺乳動物は自己免疫性疾患を発症しやすいと識別することを含む。
【００２２】
本発明は、自己免疫性疾患を有する哺乳動物において、自己免疫性疾患が、アミノ酸輸送体の機能障害によって引き起こされると診断する方法を更に提供し、その方法は、（ａ）前記哺乳動物から得られたサンプルにおいて、血液、細胞組織又は滑液成分のアミノ酸輸送体活性を反映するレベルを決定する工程と、（ｂ）そのレベルが対照レベル未満であるかどうかを決定する工程であって、その対照レベルは健康な哺乳動物集団由来の対照サンプルにおけるその成分の平均量であり、健康な哺乳動物はその哺乳動物と同種由来である、工程と、（ｃ）そのレベルが対照レベル未満である場合には、その哺乳動物は、アミノ酸輸送体の機能障害によって引き起こされた自己免疫性疾患を有すると識別する工程とを含む。
【００２３】
本発明は、自己免疫性疾患を有する哺乳動物において、アミノ酸輸送体の機能障害によって引き起こされる自己免疫性疾患を診断する方法を更に提供し、その方法は、その哺乳動物がアミノ酸輸送体の変異ポリペプチドを有するかどうかを決定することを含み、そこでは、その変異ポリペプチドの存在は、その哺乳動物がアミノ酸輸送体の機能障害によって引き起こされた自己免疫性疾患を有することを示す。
【００２４】
上記方法は、限定されるものではないが、関節炎、ＲＡ、多発性硬化症、炎症性腸疾患、全身性エリテマトーデス、自己免疫性ブドウ膜炎、１型糖尿病、気管支喘息、ブドウ球菌及びレンサ球菌により誘発された化膿性関節炎、並びに血管炎を含む心臓血管疾患から選択できる自己免疫性疾患の発症を診断するために使用できる。好ましくは、その自己免疫性疾患は、ＲＡなどの関節炎、多発性硬化症、又は炎症性腸疾患である。最も好ましくは、その自己免疫性疾患はＲＡなどの関節炎である。
【００２５】
本発明の別の態様は、自己免疫性疾患の予防投与、予防及び／又は治療に好適な薬剤を識別する方法を提供する。その方法は、（ａ）アミノ酸輸送体を含む生化学的アッセイ又は細胞アッセイを用意する工程と、（ｂ）テスト薬剤の存在下でアミノ酸輸送体の活性レベルを決定する工程と、（ｃ）そのレベルがアミノ酸輸送体活性の対照レベルより大であるかどうかを決定する工程であって、その対照レベルは、テスト薬剤が存在しない時のアミノ酸輸送体活性の量である、工程と、（ｄ）そのレベルが対照レベルより大きい場合には、その薬剤は、自己免疫性疾患の予防投与、予防及び／又は治療に好適である可能性があると識別する工程とを含む。アミノ酸輸送体の活性レベルは、グルタミン、アラニン、アスパラギン、ヒスチジン、セリン及びシステインのようなアミノ酸の細胞内取り込み量を測定することによって決定できる。
【００２６】
本発明による方法によって識別された薬剤で治療される自己免疫性疾患は、限定されるものではないが、関節炎、ＲＡ、多発性硬化症、炎症性腸疾患、全身性エリテマトーデス、自己免疫性ブドウ膜炎、１型糖尿病、気管支喘息、ブドウ球菌及びレンサ球菌により誘発された化膿性関節炎、並びに血管炎を含む心臓血管疾患から選択できる。好ましくは、その自己免疫性疾患は、ＲＡなどの関節炎、多発性硬化症、又は炎症性腸疾患である。最も好ましくは、その自己免疫性疾患はＲＡなどの関節炎である。
【００２７】
別の実施形態では、本発明は、細胞中におけるアミノ酸輸送体活性を高める薬剤を識別する方法を提供し、その方法は、（ａ）試験細胞を形成するために、その細胞をアミノ酸輸送体活性化剤及びテスト薬剤と接触させる工程と、（ｂ）その試験細胞中のアミノ酸輸送体の活性レベルを決定する工程と、（ｃ）そのレベルがアミノ酸輸送体活性の対照レベルより大であるかどうかを決定する工程であって、そこでは、対照レベルは、テスト薬剤が存在しない活性化剤で処理した対照細胞中におけるアミノ酸輸送体活性の量である、工程と、（ｄ）そのレベルが対照レベルより大きい場合には、その薬剤はアミノ酸輸送体活性を高めると識別する工程とを含む。アミノ酸輸送体の活性レベルは、グルタミン、アラニン、アスパラギン、ヒスチジン、セリン及びシステインのようなアミノ酸の細胞内取り込み量の測定によって決定される。
【００２８】
別の実施形態では、本発明は、アミノ酸輸送体の機能障害によって引き起こされた自己免疫性疾患を有する哺乳動物を治療する方法を提供し、その方法は、哺乳動物にアミノ酸輸送体活性を高める薬剤を投与することを含む。その薬剤は、経口投与又は非経口投与であってもよい。
【００２９】
更に別の実施形態では、本発明は、アミノ酸輸送体の機能障害によって引き起こされる自己免疫性疾患の治療のために、医薬製造分野の薬剤を使用することを特徴とし、その薬剤は哺乳動物におけるアミノ酸輸送体活性を高める。
【００３０】
別段の定義がない限り、本明細書に使用される全ての技術的及び科学的用語は、本発明が属する技術分野の技術者により一般に理解されるのと同じ意味をもつ。本明細書に記述されるものと同一又は等価な方法及び材料が本発明の実施又は試験に使用できるが、好適な方法及び材料が以下に記述される。本明細書で言及した、全ての出版物、特許出願、特許及びその他の参照文献は、参照によりその全体が本明細書に記載されているものとみなす。矛盾する場合には、定義を含めて、本出願に従うものとする。加えて、その材料、方法、及び実施例は例示のみを目的とするもので、限定するものではない。
【００３１】
本発明の他の特徴および利点は、以下の詳細な記載および特許請求の範囲から明らかであろう。
【図面の簡単な説明】
【００３２】
【図１】関節炎重症度と、アミノ酸輸送体遺伝子Ｓｌｃ３８Ａ１を調節する関節炎識別物を含有するＣｉａ３６  ＱＴＬとの間の関連性を示すグラフである。ヘテロ接合コンジェニックのマウス（三角）は、非−コンジェニックマウス（円）よりも顕著に低い平均関節炎スコアを有した。Ｐ＝０．０３、ｎ（ＢＱ）＝２８、ｎ（Ｃｉａ３６ｈｅｔ）＝３１。誤差棒はＳＥＭ（標準誤差）（ｓｔａｎｄａｒｄ  ｅｒｒｏｒ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｍｅａｎ））を示す。
【図２】Ｂ１０．Ｑマウス及びＣｉａ３６コンジェニックマウス由来の脾臓細胞におけるグルタミンの細胞内取り込み量を示すグラフである。Ｐ＝０．００７、ｎ＝１０。
【図３】システムＡ輸送体（Ｓｌｃ３８Ａ１を含む）をブロックすることの、      （Ａ）関節炎平均スコア  及び  （Ｂ）抗コラーゲン抗体産生      に対する影響を示すグラフである。Ｐ＝＜０．０５、ｎ＝２０。
【発明を実施するための形態】
【００３３】
本発明は、自己免疫性疾患の診断及び治療に関連する方法及び材料を提供する。具体的には、本発明は自己免疫性疾患を発症しやすく、アミノ酸輸送体の機能障害を有する哺乳動物の診断に関与する方法及び材料を提供する。更に、本発明は自己免疫性疾患を発症しやすく、アミノ酸輸送体の機能障害を有する哺乳動物の治療に関与する方法及び材料を提供する。更に、本発明はアミノ酸輸送体の機能活性のための作用材料及び拮抗材料の識別に関与する方法及び材料を提供する。
１．自己免疫性疾患を発症しやすい哺乳動物の診断
本発明は、哺乳動物の自己免疫性疾患発症の感受性を査定する方法を提供する。哺乳動物は、ヒト、猿、ヤギ、馬、牛、豚、犬、猫、マウス、又はラットであってもよい。手短に言えば、哺乳動物の自己免疫性疾患発症の感受性は、哺乳動物の細胞中に存在するアミノ酸輸送体の活性レベルを調べることによって決定できる。このアミノ酸輸送体の活性レベルを対照レベルと比較でき、以下で更に説明するように、哺乳動物の細胞におけるアミノ酸輸送体の活性レベルが対照レベル未満である場合には、その哺乳動物は自己免疫性疾患を発症しやすいと分類できる。
【００３４】
哺乳動物細胞におけるアミノ酸輸送体の活性レベルは、いかなる既知の方法を用いて決定してもよい。例えば、アミノ酸輸送体活性は、グルタミン、アラニン、アスパラギン、ヒスチジン、セリン、及びシステインのようなアミノ酸の細胞内取り込み量を測定して査定できる。
【００３５】
哺乳動物細胞中にあるアミノ酸輸送体の活性レベルを決定すると、アミノ酸輸送体活性のこのレベルを、その特別の種に対するアミノ酸輸送体活性の対照レベルと比較できる。その特別の種に対するアミノ酸輸送体活性の対照レベルは、その特別の種に由来する集団の健康なメンバー由来の細胞で測定したアミノ酸輸送体活性の平均レベルである。ヒトの場合では、アミノ酸輸送体活性の対照レベルは、健康なヒト５、１０、２０、３０、４０、５０人、またはそれ以上の人に由来する細胞におけるアミノ酸輸送体活性の平均レベルであってもよい。ある哺乳動物細胞のアミノ酸輸送体活性のレベルがその対照レベルよりも低い場合には、その哺乳動物は自己免疫性疾患を発症しやすいと分類できる。例えば、ある哺乳動物が、対照レベルの約８５％未満、例えば７５、６５、５５、４５、３５、２５、１５、５％、又はそれ以下の％を有する時は、自己免疫性疾患を発症しやすいと分類できる。
【００３６】
いかなるタイプのサンプルを使用しても、哺乳動物細胞のアミノ酸輸送体の活性レベルを決定できる。例えば、そのサンプルは、関連するアミノ酸輸送体を有する血液、細胞滑液、又は末梢血単球（ＰＢＭＣ）のような細胞を含むリンパ液であってもよい。アミノ酸輸送体活性を有する細胞には、限定されるものではないが、全血液リンパ球、脾細胞、マクロファージ、好中球、顆粒球、多核白血球、及び単核細胞が挙げられる。標準的な方法を使用して、哺乳動物からそのようなサンプルを得ることができる。例えば、血液サンプルは静脈穿刺によって得られる。そのサンプルは、アミノ酸輸送体活性を査定する前に、必要な標準的前処理操作を施すことができる。例えば、細胞を含む血液サンプルは、遠心分離操作及び／又は洗浄操作を施して細胞を分離し、その細胞からアミノ酸輸送体の活性レベルを測定できる。
【００３７】
別の実施形態では、哺乳動物の自己免疫疾患発症の感受性は、その哺乳動物内の一つのアミノ酸輸送体のポリペプチドのアミノ酸配列の少なくとも一部を調査することによって決定できる。ポリペプチドのアミノ酸配列を決定するには、いかなる方法も使用してよい。例えば、標準的なアミノ酸配列決定法を使用して、精製されたアミノ酸輸送体のポリペプチド調整物のアミノ酸配列を決定できる。或いは、そのポリペプチドをコードしている核酸は、標準的な核酸配列決定法を使用して配列決定できる。一旦核酸配列が決定されると、コードされたポリペプチドのアミノ酸配列を推定できる。  
調査する哺乳動物が変異ポリペプチドを含有する場合には、比較可能な対照ポリペプチドと比較し、次にその哺乳動物を、自己免疫性疾患を発症しやすいと分類できる。比較可能な対照ポリペプチドと比較する際に、変異ポリペプチドは、アミノ酸の付加部分、サブトラクション部分、置換部分、又はそれらの組み合わせを含んだポリペプチドであってもよい。比較可能な対照ポリペプチドと比較する際に、例えば、変異ポリペプチドは、いかなる数のアミノ酸差異、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１２５、１５０、１７５、２００、またはそれ以上のアミノ酸の付加部分、サブトラクション部分、置換部分、を有するポリペプチドであってもよい。
【００３８】
従って、一実施形態では、対照人のアミノ酸配列と比較する際に、ある人が、一つ又はそれ以上の、例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、又はそれ以上のアミノ酸の置換部分を備えたアミノ酸配列を有するアミノ酸輸送体ポリペプチドを有する場合には、その人は自己免疫性疾患を発症しやすいと分類できる。
【００３９】
特別の哺乳動物が自己免疫性疾患を発症しやすいかどうかを決定するためには、変異ポリペプチドの存在を利用することの他に、アミノ酸輸送体の一部であるポリペプチドの発現性を制御する調節配列、例えば、プロモーター、エンハンサー、及びサイレンサーを調査できる。例えば、アミノ酸輸送体ポリペプチドの発現を制御するプロモーター配列は、健康な人における正常なアミノ酸輸送体ポリペプチドの発現を促進するこれらのプロモーター配列と比較できる。この場合、変異した制御プロモーター配列を有する人は、自己免疫性疾患を発症しやすいと分類できる。  
２．アミノ酸輸送体の機能障害によって引き起こされた自己免疫性疾患を有する哺乳動物の診断  
本発明は、哺乳動物が特定のタイプの自己免疫性疾患を有するかどうかを決定する方法を提供する。具体的には、哺乳動物が、（１）自己免疫状態の臨床症状を有し、かつ（２）アミノ酸輸送体の活性レベルが対照値未満であるかそれとも損なわれた機能を有する細胞を有する場合、その哺乳動物は、アミノ酸輸送体の機能障害によって引き起こされる自己免疫性疾患を有すると診断できる。更に、哺乳動物が、（１）自己免疫状態の臨床症状を有し、かつ（２）アミノ酸輸送体中で機能し、本明細書で記述したような比較可能な参照ポリペプチドと比較した際に変異を含有するポリペプチドを有する場合、その哺乳動物は、アミノ酸輸送体の機能障害によって引き起こされる自己免疫性疾患を有すると診断できる。
【００４０】
例えば、関節炎の場合、関節炎の臨床症状には、限定されるものではないが、腱、靭帯、関節、又は骨などの炎症が挙げられる。関節炎の症状には又、四肢における疼痛、腫脹、及び硬直などがあり、それらは、哺乳動物において衰弱、運動機能の喪失、及び変形をもたらす。関節炎の例には、限定されるものではないが、細菌性関節炎、変形性関節炎、リウマチ性関節炎（ＲＡ）、コラーゲン−誘発関節炎（ＣＩＡ）、ヘキサデカン−誘発関節炎（ＨＩＡ）、プリスタン−誘発関節炎（ＰＩＡ）、アブリジン誘発関節炎、アジュバント誘発関節炎、スクアレン誘発関節炎及び油剤誘発関節炎（ＯＩＡ）が挙げられる。
【００４１】
哺乳動物細胞内のアミノ酸輸送体の活性レベルは、本明細書に記述されるように査定できる。同様に、本明細書に記述された方法及び材料を使用して、哺乳動物がアミノ酸輸送体の一部である変異ポリペプチドを含有するかどうかを決定できる。
３．  自己免疫性疾患の治療
本発明は、関節炎のような自己免疫性疾患、例えば、哺乳動物におけるアミノ酸輸送体の機能障害によって引き起こされる自己免疫性疾患を治療するための方法及び材料を提供する。アミノ酸輸送体の機能障害によって引き起こされる自己免疫性疾患を治療するための方法には、哺乳動物におけるアミノ酸輸送体の活性レベルを増加させる薬剤の投与が挙げられる。
【００４２】
アミノ酸輸送体活性を増加させる薬剤は、任意の標準的方法を使用する任意の標準形態で投与できる。例えば、アミノ酸輸送体の活性を増加させる薬剤は、錠剤、又はカプセル、例えば、持続放出カプセルの形態であってもよく、それらは内服される。代わりに、薬剤は液体形態であってもよく、内服又は注射による投与ができる。薬剤は又、座薬の形態であってもよい。更に、アミノ酸輸送体活性を増加させる薬剤は、クリーム、ジェル、及び皮膚に適用できる泡の形態であってもよい。更に、薬剤は経鼻的に適用される吸入剤であってもよい。薬剤は、経口的に、鼻腔内的に、局所的に又は非経口的に投与できる。
【００４３】
アミノ酸輸送体活性を増加させる薬剤は、低活性を有する細胞内のアミノ酸輸送体活性を増加させるに充分な任意の投薬量で投与できる。このような投薬量を何年かの期間にわたって取り入れて、関節炎の進行を予防したり及び／又は遅延させたり、又は反転させたりできる。投薬量は、標準的な薬理学技術を使用する特定薬剤の有効性及び毒性に基づいて選定できる。  
４．アミノ酸輸送体活性を変更する薬剤の識別
本発明は、アミノ酸輸送体活性を調節する薬剤を識別する方法及び材料を提供する。アミノ酸輸送体活性を調節する薬剤は、アミノ酸輸送体活性を増加又は減少できる。
【００４４】
アミノ酸輸送体活性を増加又は減少する薬剤を識別するために、テスト薬剤はアミノ酸輸送体活性を有する細胞を含有するサンプルと混合できる。そのような細胞は、ヒト、例えば健康な人又は自己免疫性疾患を有する患者由来、若しくは動物、例えば健康な動物又は関節炎を誘発しやすいものなどの自己免疫性疾患にかかりやすい動物由来であってもよい。動物が誘発剤、例えば、コラーゲン又はプリスタンなどでの処理に応答して関節炎症状を発症する場合、その動物は関節炎誘発を受けやすい。そのような動物には、コラーゲン誘発関節炎（ＣＩＡ）、プリスタン−誘発関節炎（ＰＩＡ）、ヘキサデカン−誘発関節炎（ＨＩＡ）、及び油剤誘発関節炎（ＯＩＡ）を受けやすいものが挙げられる。非ヒトの動物は、限定されるものではないが、サル、例えば、チンパンジー、馬、ヤギ、牛、豚、及びげっ歯動物、例えばマウス及びラットを包含する任意のタイプの動物であってもよい。
【００４５】
テスト薬剤で処理してから、アミノ酸輸送体の活性レベルが決定できる。サンプルはアミノ酸輸送体活性を有する細胞を含有する任意のタイプのサンプルであってもよい。サンプルは血液、細胞、リンパ液、又は滑液であってもよい。細胞は脾細胞、全血リンパ球、精製リンパ球、顆粒球、好中球、又はマクロファージであってもよい。サンプルは又、アミノ酸輸送の指標のために産生されたバイオケミカルシステムであってもよい。
【００４６】
テスト薬剤の存在下で測定されたアミノ酸輸送体活性は、そのテスト薬剤がない場合に測定されたアミノ酸輸送体活性と比較できる。アミノ酸輸送体活性を増加させる薬剤は、アミノ酸輸送体のアッセイ混合物中に存在する場合、テスト薬剤がない場合に測定されたアミノ酸輸送体の活性レベルと比較して、例えば、５、１０、２０、３０、４０、５０、７５、１００、１２５、１５０、２００％、又はそれ以上の％増加のような任意の量で、アミノ酸輸送体活性の増加をもたらすものである。アミノ酸輸送体活性を減少させる薬剤は、アミノ酸輸送体のアッセイ混合物中に存在する場合、テスト薬剤がない場合に測定されたアミノ酸輸送体の活性レベルと比較して、例えば、５、１０、２０、３０、４０、５０、７５％、又はそれ以上の％減少のような任意の量で、アミノ酸輸送体活性の減少をもたらす。
【００４７】
別の実施形態では、アミノ酸輸送体活性を増加又は減少させる作用材料が、アミノ酸輸送体、活性化剤、及びテスト薬剤を含むアッセイ混合物中で確認できる。これらの実施形態では、活性化剤及びテスト薬剤の存在下で測定されるアミノ酸輸送体の活性が、テスト薬剤の存在しなく活性化剤の存在下で測定されたアミノ酸輸送体活性と比較できる。本明細書に記述したように、アミノ酸輸送体の活性を増加させる薬剤は、テスト薬剤の不在時に観察されるアミノ酸輸送体活性のレベルと比較すると、アミノ酸輸送体のアッセイ混合物中に存在する時には、アミノ酸輸送体活性を、５、１０、２０、３０、４０、５０、７５、１００、１２５、１５０、２００％、又はそれ以上の％増加のような任意の量の増加をもたらすようなものであり、一方、アミノ酸輸送体の活性を減少させる薬剤は、テスト薬剤の不在時に観察されるアミノ酸輸送体の活性レベルと比較すると、アミノ酸輸送体のアッセイ混合物中に存在する時には、アミノ酸輸送体活性を、５、１０、２０、３０、４０、５０、７５％、又はそれ以上の％減少のような任意の量の減少をもたらすようなものである。
５．アミノ酸輸送体の機能障害を有する非ヒト哺乳動物
本発明の別の態様は、アミノ酸輸送体機能が損なわれている非ヒト哺乳動物を提供する方法及び材料を特徴とし、その非ヒト哺乳動物は自己免疫性疾患の徴候を示す。哺乳動物は、猿、ヤギ、馬、牛、豚、犬、猫、ねずみ又はラットであってよい。自己免疫性疾患は、関節炎、多発性硬化症、狼瘡、自己免疫性ブドウ膜炎、１型糖尿病、気管支喘息、ブドウ球菌若しくはレンサ球菌で誘発された化膿性関節炎、又は血管炎を含む心臓血管疾患であってよい。例えば、非ヒト哺乳動物は、関節炎の症状を示す可能性がある。関節炎は、当技術分野で知られている標準的技法で誘発され、例えば、アジュバンド誘発関節炎、コラーゲン誘発関節炎、プリスタン誘発関節炎、ヘキサデカン誘発関節炎、アブリジン誘発関節炎、スクアレン誘発関節炎又は油剤誘発関節炎であってよい。
【００４８】
非ヒト哺乳動物におけるアミノ酸輸送体の機能障害は、アミノ酸輸送体の活性低下で示され得る。
６．  自己免疫性疾患を遅延、治療、又は予防するための薬剤の選別
別の実施形態では、本発明は、その薬剤が自己免疫性疾患の発症を遅らせるか又は、自己免疫性疾患の病状を改善するかどうかを決定する薬剤を選別する方法を提供する。その方法には、（ａ）アミノ酸輸送体機能に障害のある非ヒト哺乳動物を準備する工程、（ｂ）非ヒト哺乳動物に薬剤を投与する工程、（ｃ）非ヒト哺乳動物に自己免疫性疾患を誘発させる工程、及び（ｄ）その薬剤が、非ヒト哺乳動物の自己免疫性疾患に関して改善又は予防する特性を有するかどうかを決定する工程、が含まれる。
【００４９】
選別される薬剤は、細胞アッセイ中で活性を調節するアミノ酸輸送体を有すると識別できるものであることが好ましい。細胞アッセイ中での薬剤の識別は、培養細胞又は哺乳動物由来の血液からの細胞若しくは細胞組織サンプルにおける、グルタミン、アラニン、アスパラギン、ヒスチジン、セリン、及びシステインなどのアミノ酸の細胞内取り込み量を測定して実施できる。
【００５０】
アミノ酸輸送体機能に障害のある哺乳動物は、以前述べたようにして得られる。
【００５１】
一例として、薬剤が関節炎に関して改善又は予防する特性を有するかどうかの決定には、（ａ）非ヒト哺乳動物に対する関節炎の発症の日又は重症度の値を測定する工程、及び（ｂ）前記非ヒト哺乳動物に対する関節炎の発症の日又は重症度の値を対照関節炎の値と比較する工程、のような工程が含まれる。関節炎の発症及び重症度は、顕微鏡による採点法を用いてモニタリングでき、腫脹した又は赤色の足指には各々１点、腫脹した足中部、指、又は指関節には各々１点、及び腫脹したくるぶしには５点を与え、最高値は肢当たり１５点、合計で６０点をもたらす。点数は平均点数、加法点数、又は最高点数であってよい。哺乳動物は、関節炎を誘発してから、週に１〜４回で１〜２ヶ月間モニタリングされる。発症の制御日及び関節炎重症度の値は、薬剤が投与されていない対照の非ヒト哺乳動物に対する関節炎の重症度及び発症日を測定して決定できる。関節炎は多くの常套手段で誘発されてよく、アジュバンド誘発関節炎、コラーゲン誘発関節炎、プリスタン誘発関節炎、ヘキサデカン誘発関節炎、アブリジン誘発関節炎、スクアレン誘発関節炎、及び油剤誘発関節炎であってよい。
【００５２】
本発明は又、薬剤が自己免疫性疾患を治療するかどうかを決定する薬剤の選別方法を提供する。その方法には、（ａ）アミノ酸輸送体の機能障害を有する非ヒト哺乳動物を用意する工程であって、その非ヒト哺乳動物が自己免疫性疾患の徴候を示す、工程と、（ｂ）非ヒト哺乳動物に薬剤を投与する工程と、（ｃ）その薬剤が非ヒト哺乳動物において自己免疫性疾患を治療しているかどうかを決定する工程とが含まれる。
【００５３】
例としての関節炎の場合では、そのような決定工程には、（ａ）非ヒト哺乳動物における関節炎スコアを計算する工程と（ｂ）その関節炎スコアを対照物の関節炎スコアと比較する工程とを含んでもよい。関節炎の症状があり、アミノ酸輸送体の機能障害を有する哺乳動物は、前記のようにして得られる。対照物の関節炎スコアは、その薬剤が投与されていない、対照とする非ヒト哺乳動物に対する関節炎スコアを計算して求められる。関節炎スコアは、前述の肉眼的評点システムを用いて決定され、平均点数、加法点数、又は最高点数であってもよい。非ヒト動物における関節炎スコアが対照の関節炎スコアよりも少ない場合には、その薬剤は関節炎を治療していると決定できる。
【００５４】
別の実施形態では、薬剤が自己免疫性疾患を予防するかどうかを決定する薬剤の選別方法が提供される。その方法には、（ａ）アミノ酸輸送体の機能障害を有する非ヒト哺乳動物を用意する工程と、（ｂ）その非ヒト哺乳動物に薬剤を投与する工程と、（ｃ）非ヒト哺乳動物に自己免疫性疾患を誘発すると知られているある化合物を投与する工程と、（ｄ）非ヒト哺乳動物において、その薬剤が、その化合物により誘発される自己免疫性疾患を予防するかどうかを決定する工程と、が含まれる。
【００５５】
一例としての関節炎の場合には、薬剤が関節炎を予防するかどうかの決定する工程には、前記非ヒト哺乳動物の関節炎の症状を評価する工程が含まれてもよい。そのような評価は、一期間、例えば、２０日まで、３０日まで、５０日まで、又は７０日までの期間で生じてもよい。薬剤が関節炎を防止するかどうかの決定には、関節炎のあらゆる症状およびそれらの開始日を、前記薬剤が投与されていないままの対照の非ヒト哺乳動物についての症状及び開始日と比較する工程が含まれる。上記の肉眼的評点システムをその評価及び比較に用いてよい。関節炎を誘発すると知られている化合物は、アジュバント、コラーゲン、プリスタン、ヘキサデカン、アブリジン、スクアレン、又は油剤であってもよい。コラーゲンは、  タイプＩＩコラーゲンであってよく、油剤はフロイント不完全アジュバント（ｉｎｃｏｍｐｌｅｔｅ  Ｆｒｅｕｎｄ’ｓ  ａｄｊｕｖａｎｔ）であってもよく、そのアジュバントは抗酸菌由来であってもよい。
定義
用語「アミノ酸輸送体」は、限定されるものではないが、アミノ酸を輸送する可能性を有する溶質キャリアファミリー（ｓｏｌｕｔｅ  ｃａｒｒｉｅｒ  ｆａｍｉｌｙ）を含むことを意味する。溶質キャリアの名前は、ヒトゲノム機構によって提出されている命名法に従って与えられる。
【００５６】
本発明による方法に使用され得るアミノ酸輸送体の例は以下の溶質キャリアファミリーのメンバーである：
（Ａ）高親和性グルタメート及び中性アミノ酸輸送体であって、ＳＬＣ１Ａ１、ＳＬＣ１Ａ２、ＡＬＣ１Ａ３、ＳＬＣ１Ａ４、ＳＬＣＡ１Ａ５、ＳＬＣ１Ａ６、ＳＬＣ１Ａ７を含む；
（Ｂ）促通性（ｆａｃｉｌｉｔａｔｉｖｅ）ＧＬＵＴ輸送体であって、ＳＬＣ２Ａ１、ＳＬＣ２Ａ２、ＳＬＣ２Ａ３、ＳＬＣ２Ａ４、ＳＬＣ２Ａ５、ＳＬＣ２Ａ６、ＳＬＣ２Ａ７、ＳＬＣ２Ａ８、ＳＬＣ２Ａ９、ＳＬＣ２Ａ１０、ＳＬＣ２Ａ１１、ＳＬＣ２Ａ１２、ＳＬＣ２Ａ１３、ＳＬＣ２Ａ１４を含む；
（Ｃ）ヘテロメリックアミノ酸輸送体の重サブユニット（ｈｅａｖｙ  ｓｕｂｕｎｉｔ）であって、ＳＬＣ３Ａ１、ＳＬＣ３Ａ２を含む；
（Ｄ）重炭酸塩輸送体であって、ＳＬＣ４Ａ１、ＳＬＣ４Ａ２、ＳＬＣ４Ａ３、ＳＬＣ４Ａ５、ＳＬＣ４Ａ６、ＳＬＣ４Ａ７、ＳＬＣ４Ａ８、ＳＬＣ４Ａ９、ＳＬＣ４Ａ１０、ＳＬＣ４Ａ１１を含む；
（Ｅ）ナトリウム・グルコース共輸送体（ｃｏｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ）、ＳＬＣ５Ａ１、ＳＬＣ５Ａ２、ＳＬＣ５Ａ３、ＳＬＣ５Ａ４、ＳＬＣ５Ａ５、ＳＬＣ５Ａ６、ＳＬＣ５Ａ７、ＳＬＣ５Ａ８、ＳＬＣ５Ａ９、ＳＬＣ５Ａ１０、ＳＬＣ５Ａ１１、ＳＬＣ５Ａ１２；
（Ｆ）ナトリウム−及びクロライド−依存性の神経伝達材料輸送体（ｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ）であって、ＳＬＣ６Ａ１、ＳＬＣ６Ａ２、ＳＬＣ６Ａ３、ＳＬＣ６Ａ４、ＳＬＣ６Ａ５、ＳＬＣ６Ａ６、ＳＬＣ６Ａ７、ＳＬＣ６Ａ８、ＳＬＣ６Ａ９、ＳＬＣ６Ａ１０、ＳＬＣ６Ａ１１、ＳＬＣ６Ａ１２、ＳＬＣ６Ａ１３、ＳＬＣ６Ａ１４、ＳＬＣ６Ａ１５、ＳＬＣ６Ａ１６、ＳＬＣ６Ａ１７、ＳＬＣ６Ａ１８、ＳＬＣ６Ａ１９、ＳＬＣ６Ａ２０を含む；
（Ｇ）カチオン性アミノ酸輸送体／糖タンパク質関連であって、ＳＬＣ７Ａ１、ＳＬＣ７Ａ２、ＳＬＣ７Ａ３、ＳＬＣ７Ａ４、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＬＣ７Ａ６、ＳＬＣ７Ａ７、ＳＬＣ７Ａ８、ＳＬＣ７Ａ９、ＳＬＣ７Ａ１０、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ１３、ＳＬＣ７Ａ１４を含む；
（Ｈ）Ｎａ＋／Ｃａ＋交換体であって、ＳＬＣ８Ａ１、ＳＬＣ８Ａ２、ＳＬＣ８Ａ３を含む；
（Ｉ）Ｎａ＋／Ｈ＋交換体であって、ＳＬＣ９Ａ１、ＳＬＣ９Ａ２、ＳＬＣ９Ａ３、ＳＬＣ９Ａ４、ＳＬＣ９Ａ５、ＳＬＣ９Ａ６、ＳＬＣ９Ａ７、ＳＬＣ９Ａ８、ＳＬＣ９Ａ９、ＳＬＣ９Ａ１０、ＳＬＣ９Ａ１１を含む；
（Ｊ）有機カチオン／アニオン／双性イオン輸送体であって、ＳＬＣ２２Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ２、ＳＬＣ２２Ａ３、ＳＬＣ２２Ａ４、ＳＬＣ２２Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ６、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ２２Ａ８、ＳＬＣ２２Ａ９、ＳＬＣ２２Ａ１０、ＳＬＣ２２Ａ１１、ＳＬＣ２２Ａ１２、ＳＬＣ２２Ａ１３、ＳＬＣ２２Ａ１４、ＳＬＣ２２Ａ１５、ＳＬＣ２２Ａ１６、ＳＬＣ２２Ａ１７、ＳＬＣ２２Ａ１８、ＳＬＣ２２Ａ１９、ＳＬＣ２２Ａ２０を含む；
（Ｋ）Ｎａ＋／（Ｃａ２＋−Ｋ＋）交換体であって、ＳＬＣ２４Ａ１、ＳＬＣ２４Ａ２、ＳＬＣ２４Ａ３、ＳＬＣ２４Ａ４、ＳＬＣ２４Ａ５、ＳＬＣ２４Ａ６を含む；
（Ｌ）多機能アニオン交換体であって、ＳＬＣ２６Ａ１、ＳＬＣ２６Ａ２、ＳＬＣ２６Ａ３、ＳＬＣ２６Ａ４、ＳＬＣ２６Ａ５、ＳＬＣ２６Ａ６、ＳＬＣ２６Ａ７、ＳＬＣ２６Ａ８、ＳＬＣ２６Ａ９、ＳＬＣ２６Ａ１０、ＳＬＣ２６Ａ１１を含む；
（Ｍ）Ｈ＋／アミノ酸共輸送体（ｓｙｍｐｏｒｔｅｒ）であって、ＳＬＣ３６Ａ１、ＳＬＣ３６Ａ２、ＳＬＣ３６Ａ３、ＳＬＣ３６Ａ４を含む；
（Ｎ）システムＡ及びＮ、ナトリウム共役（ｓｏｄｉｕｍ−ｃｏｕｐｌｅｄ）中性アミノ酸輸送体であって、ＳＬＣ３８Ａ１、ＳＬＣ３８Ａ２、ＳＬＣ３８Ａ３、ＳＬＣ３８Ａ４、ＳＬＣ３８Ａ５、ＳＬＣ３８Ａ６を含む；及び
（Ｏ）Ｎａ＋非依存、システム−Ｌ様（ｓｙｓｔｅｍ−Ｌ  ｌｉｋｅ）アミノ酸輸送体であって、ＳＬＣ４３Ａ１、ＳＬＣ４３Ａ２、ＳＬＣ４３Ａ３を含む。
【００５７】
好ましいアミノ酸輸送体であって、本発明による方法において使用できるものは以下である：
（Ａ）高親和性グルタミン酸及び中性アミノ酸輸送体であって、ＳＬＣ１Ａ１、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ１Ａ３、ＳＬＣ１Ａ４、ＳＬＣ１Ａ５、ＳＬＣ１Ａ６、ＳＬＣ１Ａ７を含む；
（Ｂ）促通性ＧＬＵＴ輸送体であって、ＳＬＣ２Ａ１、ＳＬＣ２Ａ２、ＳＬＣ２Ａ３、ＳＬＣ２Ａ４、ＳＬＣ２Ａ５、ＳＬＣ２Ａ６、ＳＬＣ２Ａ７、ＳＬＣ２Ａ８、ＳＬＣ２Ａ９、ＳＬＣ２Ａ１０、ＳＬＣ２Ａ１１、ＳＬＣ２Ａ１２、ＳＬＣ２Ａ１３、ＳＬＣ２Ａ１４を含む；
（Ｇ）カチオン性アミノ酸輸送体／糖タンパク質関連であって、ＳＬＣ７Ａ１、ＳＬＣ７Ａ２、ＳＬＣ７Ａ３、ＳＬＣ７Ａ４、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＬＣ７Ａ６、ＳＬＣ７Ａ７、ＳＬＣ７Ａ８、ＳＬＣ７Ａ９、ＳＬＣ７Ａ１０、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ１３、ＳＬＣ７Ａ１４を含む；
（Ｍ）Ｈ＋／アミノ酸共輸送体であって、ＳＬＣ３６Ａ１、ＳＬＣ３６Ａ２、ＳＬＣ３６Ａ３、ＳＬＣ３６Ａ４を含む；  
（Ｎ）システムＡ及びＮ、ナトリウム共役中性アミノ酸輸送体であって、ＳＬＣ３８Ａ１、ＳＬＣ３８Ａ２、ＳＬＣ３８Ａ３、ＳＬＣ３８Ａ４、ＳＬＣ３８Ａ５、ＳＬＣ３８Ａ６を含む；及び
（Ｏ）Ｎａ＋非依存、システム−Ｌ様アミノ酸輸送体であって、ＳＬＣ４３Ａ１、ＳＬＣ４３Ａ２、ＳＬＣ４３Ａ３を含む。  
さらにより好ましいアミノ酸輸送体であって、本発明による方法において使用できるものは、システムＡ及びＮ、ナトリウム共役中性アミノ酸輸送体であって、ＳＬＣ３８Ａ１、ＳＬＣ３８Ａ２、ＳＬＣ３８Ａ３、ＳＬＣ３８Ａ４、ＳＬＣ３８Ａ５、ＳＬＣ３８Ａ６を含む。
【００５８】
さらにより好ましいアミノ酸輸送体であって、本発明による方法において使用できるものは、システムＡナトリウム共役中性アミノ酸輸送体であって、ＳＬＣ３８Ａ１、ＳＬＣ３８Ａ２、ＳＬＣ３８Ａ４を含む。
【００５９】
最も好ましいアミノ酸輸送体であって、本発明による方法において使用できるものは、ＳＬＣ３８Ａ１輸送体である。
【００６０】
用語「ＳＬＣポリペプチド」は、その対応する遺伝子によってコードされたポリペプチドを意味し、例えば、ＳＬＣ３８Ａ１ポリペプチドはＳＬＣ３８Ａ１遺伝子によってコードされたＳＬＣ３８Ａ１ポリペプチドを意味する。ＳＬＣポリペプチドはまた、当業界では当業者によって認知されている別の名称で知られ、例えば、ＳＬＣ３８Ａ１ポリペプチドは、当業界ではＡＴＡ１、ＧｌｎＴ、ＮＡＴ２、ＳＡ２、又はＳＡＴ１としても知られている。
【００６１】
本発明による方法で試験される「薬剤」は、少なくとも２個のアミノ酸、例えば、２〜６個のアミノ酸、７〜１２個のアミノ酸、２〜２０個のアミノ酸、又は５０個若しくはそれ以上のアミノ酸などの２０個より多くのアミノ酸、のポリペプチドであってもよい。医薬の選別目的での好ましい薬剤は、低分子量の化学化合物である。例えば、化合物は、重量で、８００、６００、又は４００ダルトン未満のような、約１０００ダルトン未満の分子量であることができる。所望であれば、化学化合物は化学ライブラリのメンバーであってよい。ライブラリは、個別メンバーのいかなる数、例えば、好適化合物の数十〜数百、〜数千、〜数１００万を含んでもよい。代表的化合物には、限定されるものではないが、ペプチド、ペプトイド及びその他のオリゴマー化合物（環式又は直鎖）、及びテンプレートベースの低分子が挙げられる。例えば、ベンゾジアゼピン類、ヒダントイン類、ビアリール類、炭素環式で多環式の化合物（例えば、ナフタレン類、フェノチアジン類、アクリジン類、ステロイド類等）、炭水化物及びアミノ酸誘導体類、ジヒドロピリジン類、ベンズヒドリル類及び複素環類（例えば、トリアジン類、インドール類、チアゾリジン類等）であってもよい。好適な化学ライブラリには、低分子量で有力な治療剤の化学化合物が含まれる。
【００６２】
本発明は、以下の実施例でさらに説明されるが、それらは請求項に記載した本発明の範囲を制限するものではない。
【実施例１】
【００６３】
Ｃｉａ３６遺伝子座が疾患に及ぼす影響の再確認
関節炎感受性のＢＱマウスと、アミノ酸輸送体遺伝子Ｓｌｃ３８Ａ１を含む防御的Ｃｉａ３６遺伝子座を含むマウスとの間の関節炎発症の差異を図１に示す。ヘテロ接合コンジェニックのマウス（三角）は、非−コンジェニックマウス（円）よりも顕著に低い関節炎平均スコアを有した。
【実施例２】
【００６４】
グルタミン取り込み
Ｃｉａ３６マウスはグルタミン輸送能力を増加した。  
Ｓｌｃ３８Ａ１（以前の表示はＮＡＴ２）及びＳｌｃ３８Ａ２（以前の表示はＡＴＡ２）は、グルタミン、システイン及びアラニン、アスパラギン、ヒスチジン、セリンに選好性を有する中性アミノ酸の輸送体である。（グー（Ｇｕ）等、２００１年  、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７６巻、２４１３７ー４４頁）。Ｃｉａ３６コンジェニックマウスがアミノ酸輸送システムの機能変更を有するかどうかを確認するため、本発明者らは細胞のグルタミン取り込み能力を試験し、Ｃｉａ３６フラグメントの単一コピーが、インビトロ（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）の脾細胞によりグルタミン取り込み量を顕著に増加することを見出した。結果を図２に示す。グルタミンの取り込み量はＣｉａ３６コンジェニックマウス由来の脾細胞において顕著に増加した。
【実施例３】
【００６５】
輸送のブロッキング効果
システムＡの特殊ブロッカーであるＭｅＡ１Ｂを使用する輸送ブロッキングは、マウスにおける関節炎感受性を増加させる。このことは、疾患感受性が輸送体の活性増加及び活性減少の両方で変更できることを裏付ける。
【実施例４】
【００６６】
Ｃｉａ３６領域のＳｌｃ３８Ａ１遺伝子における遺伝子多型
表現型の差を説明できる２つの系統の間の遺伝子多型を同定する目的で、本発明者らは、ＢｌＯ．Ｑ及びＤＢＡ／１における全部で５つの候補遺伝子の転写領域を配列決定した。Ｓｌｃ３８Ａ１は、２つの非同期コーディングＳＮＰ及び１つのスプライス部位変異を含む、数個の遺伝子多型を有する高度多型性であった（表１）。  
Ｃｉａ３６領域における多型
【００６７】
【表１】
2011504749.tif 000002
【実施例５】
【００６８】
ＳＬＣ３８Ａ１におけるＳＮＰはヒトＲＡと関連する
オーソロガス遺伝子がヒトＲＡに重要であるかどうかを研究するために、本発明者らは、１５００の症例群及び対照群を含むスウェーデン関節炎コホートにおいて、ＳＬＣ３８Ａ１領域に位置している２０個のＳＮＰについて遺伝的関連性を調査した。本発明者らはその患者達を性別及び自己免疫状態、すなわち患者がＲＦ又は抗−ＣＣＰ免疫の陽性であるかどうか、に応じて４つの群に層別化した。アレル頻度の解析によって、本発明者らはＳＬＣ３８Ａ１遺伝子中で９個のＳＮＰがＲＡと関連していることを見出した。最も強い関連性は自己免疫が陽性のグループに検出され、ＳＮＰは、イントロン１１からＵＴＲ３’領域を横断して広がっている２４ｋｂ領域にクラスタ化される。２つのＳＮＰは、試験したＳＮＰの数を補正した後でも有意のままである；すなわち、ｒｓ２２８９７６８、Ｐ＝０．００２、ＯＲ：０．５８，９５％ＣＩ：０．４４−０．７６と、ｒｓｌ２３６８９７０；Ｐ＝０．０２、ＯＲ：０．６０、９５％ＣＩ：０．４５−０．８１である。これらの両方とも、自己免疫陽性のオスにおいてそれらの最も強い関連性を有する。興味深いことに、ＵＣＳＣゲノムブラウザを使用する領域のゲノム解析は、ｒｓ２２８９７６８ＳＮＰが、高度に保護され、かつ制御力を有する領域内のエクソン１２の近くに位置していることを明らかにした（表２）。
ＲＡと関連するヒトＳＬＣ３８Ａ１遺伝子におけるＳＮＰ
【００６９】
【表２】
2011504749.tif 000003
ＭＡＦ＝劣性アレル（対立遺伝子）頻度、１；劣性アレル（対立遺伝子）が最初、２；補正したＰ値
その他の実施形態
本発明がその詳細な説明とともに記述されたが、前述のものは例示を意図し、特許請求の範囲で規定される本発明の範囲を制限するものではないことを理解すべきである。その他の態様、利点、及び変更事項は、以下の特許請求の範囲内である。
【図１】
2011504749.tif 000004
【図２】
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【図３】
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【手続補正書】
【提出日】平成21年12月21日(2009.12.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
関節炎の予防投与、予防及び／又は治療に好適な薬剤を識別する方法であって、
（ａ）アミノ酸輸送体を含む生化学的アッセイ又は細胞アッセイを用意する工程と、
（ｂ）テスト薬剤の存在下のアミノ酸輸送体の活性レベルを決定する工程と、
（ｃ）前記レベルがアミノ酸輸送体活性の対照レベルより大であるかどうかを決定する工程であって、前記対照レベルは、前記テスト薬剤の不在下のアミノ酸輸送体活性の量である、工程と、
（ｄ）前記レベルが対照レベルよりも大である場合には、前記薬剤が関節炎の予防投与、予防及び／又は治療に好適である可能性があると識別する工程と、
を含む方法。
【請求項２】
前記アミノ酸輸送体が、ＳＬＣ１Ａ１、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ１Ａ３、ＳＬＣ１Ａ４、ＳＬＣ１Ａ５、ＳＬＣ１Ａ６、ＳＬＣ１Ａ７；ＳＬＣ２Ａ１、ＳＬＣ２Ａ２、ＳＬＣ２Ａ３、ＳＬＣ２Ａ４、ＳＬＣ２Ａ５、ＳＬＣ２Ａ６、ＳＬＣ２Ａ７、ＳＬＣ２Ａ８、ＳＬＣ２Ａ９、ＳＬＣ２Ａ１０、ＳＬＣ２Ａ１１、ＳＬＣ２Ａ１２、ＳＬＣ２Ａ１３、ＳＬＣ２Ａ１４、ＳＬＣ７Ａ１、ＳＬＣ７Ａ２、ＳＬＣ７Ａ３、ＳＬＣ７Ａ４、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＬＣ７Ａ６、ＳＬＣ７Ａ７、ＳＬＣ７Ａ８、ＳＬＣ７Ａ９、ＳＬＣ７Ａ１０、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ１３、ＳＬＣ７Ａ１４、ＳＬＣ３６Ａ１、ＳＬＣ３６Ａ２、ＳＬＣ３６Ａ３、ＳＬＣ３６Ａ４；ＳＬＣ３８Ａ１、ＳＬＣ３８Ａ２、ＳＬＣ３８Ａ３、ＳＬＣ３８Ａ４、ＳＬＣ３８Ａ５、ＳＬＣ３８Ａ６；ＳＬＣ４３Ａ１、ＳＬＣ４３Ａ２、又はＳＬＣ４３Ａ３から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記アミノ酸輸送体がＳＬＣ３８Ａ１である、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
アミノ酸輸送体活性の前記レベルが、アミノ酸類、好ましくはグルタミン、アラニン、アスパラギン、ヒスチジン、セリン、及び／又はシステインの細胞内取り込み量の測定によって決定される、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
哺乳動物の関節炎を発症する感受性を査定する方法であって、
（ａ）前記哺乳動物から得た細胞サンプルのアミノ酸輸送体の活性レベルを決定する工程と、
（ｂ）前記レベルがアミノ酸輸送体活性の対照レベル未満であるかどうかを決定する工程であって、前記対照レベルは、健康な哺乳動物の集団由来の対照細胞のアミノ酸輸送体の平均量であり、かつ前記健康な哺乳動物は前記哺乳動物と同一種由来である、工程と、  （ｃ）前記レベルが前記対照レベル未満である場合に、前記哺乳動物は、関節炎を発症しやすいと識別する工程と、
を含む方法。
【請求項６】
前記アミノ酸輸送体がＳＬＣ３８Ａ１である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記アミノ酸輸送体の活性レベルが、アミノ酸類、好ましくはグルタミン、アラニン、アスパラギン、ヒスチジン、セリン、及び／又はシステインの細胞内取り込み量の測定によって決定される、請求項５又は６に記載の方法。
【請求項８】
哺乳動物の関節炎を発症する感受性を査定する方法であって、前記方法は、哺乳動物がアミノ酸輸送体の一部である変異ポリペプチドを含むかどうかを決定する工程を含み、前記変異ポリペプチドの存在は、前記哺乳動物が関節炎を発症しやすいことを示す、方法。
【請求項９】
前記変異ポリペプチドが、ＳＬＣ１Ａ１、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ１Ａ３、ＳＬＣ１Ａ４、ＳＬＣ１Ａ５、ＳＬＣ１Ａ６、ＳＬＣ１Ａ７；ＳＬＣ２Ａ１、ＳＬＣ２Ａ２、ＳＬＣ２Ａ３、ＳＬＣ２Ａ４、ＳＬＣ２Ａ５、ＳＬＣ２Ａ６、ＳＬＣ２Ａ７、ＳＬＣ２Ａ８、ＳＬＣ２Ａ９、ＳＬＣ２Ａ１０、ＳＬＣ２Ａ１１、ＳＬＣ２Ａ１２、ＳＬＣ２Ａ１３、ＳＬＣ２Ａ１４、ＳＬＣ７Ａ１、ＳＬＣ７Ａ２、ＳＬＣ７Ａ３、ＳＬＣ７Ａ４、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＬＣ７Ａ６、ＳＬＣ７Ａ７、ＳＬＣ７Ａ８、ＳＬＣ７Ａ９、ＳＬＣ７Ａ１０、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ１３、ＳＬＣ７Ａ１４、ＳＬＣ３６Ａ１、ＳＬＣ３６Ａ２、ＳＬＣ３６Ａ３、ＳＬＣ３６Ａ４；ＳＬＣ３８Ａ１、ＳＬＣ３８Ａ２、ＳＬＣ３８Ａ３、ＳＬＣ３８Ａ４、ＳＬＣ３８Ａ５、ＳＬＣ３８Ａ６；ＳＬＣ４３Ａ１、ＳＬＣ４３Ａ２、又はＳＬＣ４３Ａ３、のポリペプチドから選択される、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記変異ポリペプチドがＳＬＣ３８Ａ１ポリペプチドである、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
関節炎を有する哺乳動物において、関節炎がアミノ酸輸送体の機能障害によって引き起こされると診断する方法であって、
（ａ）前記哺乳動物から得られた細胞サンプルのアミノ酸輸送体の活性レベルを決定する工程と、
（ｂ）前記レベルが、アミノ酸輸送体活性の対照レベル未満であるかどうかを決定する工程であって、前記対照レベルは、健康な哺乳動物の集団由来の対照細胞のアミノ酸輸送体活性の平均量であり、かつ前記健康な哺乳動物は前記哺乳動物と同一種由来である、工程と、
（ｃ）前記レベルが前記対照レベル未満である場合に、前記哺乳動物は、アミノ酸輸送体の機能障害によって引き起こされる関節炎を有すると識別する工程と、
を含む方法。
【請求項１２】
前記アミノ酸輸送体がＳＬＣ３８Ａ１である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
関節炎を有する哺乳動物において、関節炎がアミノ酸輸送体の機能障害によって引き起こされると診断する方法であって、前記方法は、前記哺乳動物がＳＬＣ１Ａ１、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ１Ａ３、ＳＬＣ１Ａ４、ＳＬＣ１Ａ５、ＳＬＣ１Ａ６、ＳＬＣ１Ａ７；ＳＬＣ２Ａ１、ＳＬＣ２Ａ２、ＳＬＣ２Ａ３、ＳＬＣ２Ａ４、ＳＬＣ２Ａ５、ＳＬＣ２Ａ６、ＳＬＣ２Ａ７、ＳＬＣ２Ａ８、ＳＬＣ２Ａ９、ＳＬＣ２Ａ１０、ＳＬＣ２Ａ１１、ＳＬＣ２Ａ１２、ＳＬＣ２Ａ１３、ＳＬＣ２Ａ１４、ＳＬＣ７Ａ１、ＳＬＣ７Ａ２、ＳＬＣ７Ａ３、ＳＬＣ７Ａ４、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＬＣ７Ａ６、ＳＬＣ７Ａ７、ＳＬＣ７Ａ８、ＳＬＣ７Ａ９、ＳＬＣ７Ａ１０、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ１３、ＳＬＣ７Ａ１４、ＳＬＣ３６Ａ１、ＳＬＣ３６Ａ２、ＳＬＣ３６Ａ３、ＳＬＣ３６Ａ４；ＳＬＣ３８Ａ１、ＳＬＣ３８Ａ２、ＳＬＣ３８Ａ３、ＳＬＣ３８Ａ４、ＳＬＣ３８Ａ５、ＳＬＣ３８Ａ６；ＳＬＣ４３Ａ１、ＳＬＣ４３Ａ２、又はＳＬＣ４３Ａ３、のポリペプチドから選択されるアミノ酸輸送体の一部である変異ポリペプチドを含むかどうかを決定する工程を含み、前記変異ポリペプチドの存在は、前記哺乳動物がアミノ酸輸送体の機能障害によって引き起こされる関節炎を有することを示す、方法。
【請求項１４】
前記変異ポリペプチドがＳＬＣ３８Ａ１ポリペプチドである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
前記関節炎がリウマチ性関節炎である、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【国際調査報告】
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