(57)【要約】  本発明は、新規な式（Ｉ）の化合物、これらの化合物を含んでなる医薬組成物、並びに体重増加、２型糖尿病及び脂質異常症に伴う症状に対する医薬の調製におけるレプチン受容体修飾因子模倣剤としての、これらの化合物の使用に関する。
2011522813.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式（Ｉ）：
【化１】
2011522813.tif 000046
［式中：
Ａは、ピリジニル及びピペラジニルから選択され、これらのそれぞれは、１以上のＣ１−４−アルキル基で場合により置換されていてもよく；
Ｙは、Ｏ、Ｎ（Ｒ６）及びＣＨ２から選択され；
Ｒ１は、水素及びＣ１−４−アルキルから選択され；
Ｒ２は、水素及びＣ１−４−アルキルから選択され；
Ｒ３は、Ｃ１−４−アルキル、ヒドロキシ−Ｃ１−４−アルキル及びフェニル−Ｃ１−４−アルキルから選択され、ここにおいて、フェニルは、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ＣＦ３、Ｃ１−４−アルキル及びＣ１−４−アルコキシから独立に選択される１以上の置換基で場合により置換されていてもよく；
Ｒ４は、水素及びＣ１−４−アルキルから選択され；
Ｒ５は、Ｃ１−６−アルキル（オキソ及びフルオロから独立に選択される１以上の置換基で場合により置換されていてもよい）、フェニル−Ｃ１−６−アルキル（ここにおいて、フェニルは、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ＣＦ３、Ｃ１−６−アルキル及びＣ１−６−アルコキシから独立に選択される１以上の置換基で場合により置換されていてもよい）及びヘテロシクリル−Ｃ１−６−アルキルから選択されるか；或いは
Ｒ４及びＲ５は、これらが結合している窒素原子と一緒に、飽和の複素環を形成し、これは、１以上のＣ１−４−アルキル基で場合により置換されていてもよく；
Ｒ６は、水素及びＣ１−４−アルキルから選択され；そして
ｎは、１、２又は３であり；
但し、前記化合物が：
・Ｎ，３−ジメチル−２−［［［メチル（２−ピリジニルメチル）アミノ］カルボニル］アミノ］ブタンアミド；及び
・Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［［（１Ｓ）−１−（１，３−ジオキソラン−２−イル）−３−メチルブチル］アミノ］カルボニル］−２−メチルプロピル］−３−ピリジンプロパンアミド；
からは選択されないことを条件とする］
の化合物、或いは医薬的に受容可能なその塩、溶媒和物、水和物、幾何異性体、互変異性体、光学異性体又はＮ−オキシド。
【請求項２】
Ｙが、Ｏである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ｎが、１又は２である、請求項１又は２のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項４】
以下の化合物：
・｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−２−［メチル（３−メチルブチル）−アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸２−ピペラジン−１−イルエチル；
・［（１Ｓ）−２−［ベンジル（メチル）アミノ］−１−（４−ヒドロキシベンジル）−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸２−ピペラジン−１−イルエチル；
・｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−２−［メチル（２−フェニルエチル）−アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸２−ピペラジン−１−イルエチル；
・｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−［（３−メチルブチル）−アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸２−ピペラジン−１−イルエチル；
・［（１Ｓ）−２−［ベンジル（メチル）アミノ］−１−（４−ヒドロキシベンジル）−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−２−［メチル（２−フェニルエチル）アミノ］−２−オキソ−エチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−２−［メチル（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・（（１Ｓ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）−１−｛［メチル（２−フェニルエチル）アミノ］−カルボニル｝プロピル）カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛（１Ｓ）−１−（ヒドロキシメチル）−２−［メチル（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛（１Ｓ）−１−メチル−２−［メチル（２−フェニルエチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛（１Ｓ）−１−ベンジル−２−［メチル（２−フェニルエチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・［（１Ｓ）−１−ベンジル−２−（ジメチルアミノ）−２−オキソエチル］カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛（１Ｓ）−１−ベンジル−２−［（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛（１Ｓ）−１−ベンジル−２−［イソプロピル（メチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛（１Ｓ）−１−ベンジル−２−［（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）アミノ］−２−オキソ−エチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛（１Ｓ）−１−ベンジル−２−［（２，２−ジフルオロエチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・（（１Ｓ）−１−ベンジル−２−オキソ−２−｛［（２Ｓ）−テトラヒドロフラン−２−イルメチル］−アミノ｝エチル）カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・（（１Ｓ）−１−ベンジル−２−オキソ−２−｛［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イルメチル］−アミノ｝エチル）カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・［（１Ｓ）−１−ベンジル−２−モルホリン−４−イル−２−オキソエチル］カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−［（３−メチルブチル）−アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・［（１Ｓ）−２−（ベンジルアミノ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・（（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−オキソ−２−｛［（１Ｓ）−１−フェニル−エチル］アミノ｝エチル）カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−［メチル（２−フェニル−エチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛（１Ｓ）−１−ベンジル−１−メチル−２−［（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソ−エチル｝−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛１，１−ジメチル−２−［（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛１，１−ジメチル−２−［（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソ−エチル｝カルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル；
・｛１，１−ジメチル−２−［メチル（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル；
・（１，１−ジメチル−２−モルホリン−４−イル−２−オキソエチル）−カルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル；
・｛２−［（２Ｒ，６Ｓ）−２，６−ジメチルモルホリン−４−イル］−１，１−ジメチル−２−オキソエチル｝カルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル；
・｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−［（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル；及び
・［（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−モルホリノ−４−イル−２−オキソエチル］カルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル；
から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
活性成分として、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物を、医薬的に受容可能な希釈剤又は担体との組み合わせで含有する医薬製剤。
【請求項６】
治療において使用するための、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項７】
体重増加に伴う症状又は疾病の治療或いは予防において使用するための、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項８】
前記症状又は疾病が、肥満症、２型糖尿病、リポジストロフィー、インスリン抵抗性、メタボリックシンドローム、高血糖症、高インスリン血症、脂質異常症、脂肪肝、過食症、高血圧、高トリグリセリド血症、不妊症、体重増加に伴う皮膚疾患又は黄斑変性症である、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
重度の体重減少、月経困難症、無月経症、女性不妊症又は免疫不全症の治療又は予防、或いは創傷治癒の治療において使用するための、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１０】
炎症性症状又は疾病、肥満症及び過剰の血漿レプチンに伴う軽度の炎症、アテローマ性動脈硬化症、１型又は２型糖尿病の大血管若しくは微小血管合併症、網膜症、腎症、自律神経障害、又は虚血若しくはアテローマ性動脈硬化症によって起こされる血管損傷の治療或いは予防において使用するための、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１１】
血管新生の阻害において使用するための、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１２】
体重増加に伴う症状又は疾病の治療或いは予防のための医薬の製造における、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項１３】
前記症状又は疾病が、肥満症、２型糖尿病、リポジストロフィー、インスリン抵抗性、メタボリックシンドローム、高血糖症、高インスリン血症、脂質異常症、脂肪肝、過食症、高血圧、高トリグリセリド血症、不妊症、体重増加に伴う皮膚疾患又は黄斑変性症である、請求項１２に記載の使用。
【請求項１４】
重度の体重減少、月経困難症、無月経症、女性不妊症又は免疫不全症の治療又は予防、或いは創傷治癒の治療のための医薬の製造における、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項１５】
炎症性症状又は疾病、肥満症及び過剰の血漿レプチンに伴う軽度の炎症、アテローマ性動脈硬化症、１型又は２型糖尿病の大血管若しくは微小血管合併症、網膜症、腎症、自律神経障害、又は虚血若しくはアテローマ性動脈硬化症によって起こされる血管損傷の治療或いは予防のための医薬の製造における、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項１６】
血管新生の阻害のための医薬の製造における、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項１７】
体重増加に伴う症状又は疾病の治療或いは予防のための方法であって、それを必要とするヒトを含む動物に、有効な量の請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物を投与することを含んでなる、前記方法。
【請求項１８】
前記症状又は疾病が、肥満症、２型糖尿病、リポジストロフィー、インスリン抵抗性、メタボリックシンドローム、高血糖症、高インスリン血症、脂質異常症、脂肪肝、過食症、高血圧、高トリグリセリド血症、不妊症、体重増加に伴う皮膚疾患又は黄斑変性症である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
重度の体重減少、月経困難症、無月経症、女性不妊症又は免疫不全症の治療又は予防、或いは創傷治癒の治療のための方法であって、このような治療を必要とするヒトを含む哺乳動物に、有効な量の請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物を投与することを含んでなる、前記方法。
【請求項２０】
炎症性症状又は疾病、肥満症及び過剰の血漿レプチンに伴う軽度の炎症、アテローマ性動脈硬化症、１型又は２型糖尿病の大血管若しくは微小血管合併症、網膜症、腎症、自律神経障害、又は虚血若しくはアテローマ性動脈硬化症によって起こされる血管損傷の治療或いは予防のための方法であって、このような治療を必要とするヒトを含む哺乳動物に、有効な量の請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物を投与することを含んでなる、前記方法。
【請求項２１】
血管新生の阻害のための方法であって、このような治療を必要とするヒトを含む哺乳動物に、有効な量の請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物を投与することを含んでなる、前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、新規なピリジン及びピペラジン誘導体、これらの化合物を含んでなる医薬組成物並びに体重増加、２型糖尿病及び脂質異常症に伴う症状に対する医薬の調製におけるレプチン受容体修飾因子模倣剤としてのこれらの化合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
肥満症の有病率は、先進世界において増加している。典型的には、治療の第一線は、彼らの食事の脂肪含有率を減少し、そして彼らの身体活動性を増加することのような食事及び生活態度の助言を患者に提案することである。然しながら、ある患者は、前述の食事及び生活態度の変化を適用することから得られる有益な結果を維持するために、更に薬物療法を受ける必要がある。
【０００３】
レプチンは、脂肪細胞中で合成されるホルモンであり、食物摂取及び体重を減少するために視床下部中で作用することが信じられている（例えば、Ｂｒｙｓｏｎ，Ｊ．Ｍ．（２０００）Ｄｉａｂｅｔｅｓ，Ｏｂｅｓｉｔｙ  ａｎｄ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ２：８３−８９を参照されたい）。
【０００４】
肥満体のヒトにおいて、脳脊髄液中のレプチンの循環レプチンとの比が減少していることが示されている（Ｋｏｉｓｔｉｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９８）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．２８：８９４−８９７）。これは、脳へのレプチン運搬の能力が、肥満状態において欠損していることを示唆している。実際に、肥満症の動物モデル（ＮＺＯマウス及びＫｏｌｅｔｓｋｙラット）において、レプチン運搬の欠損が、減少した脳のレプチン含有量をもたらすことを示している（Ｋａｓｔｉｎ，Ａ．Ｊ．（１９９９）Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ２０：１４４９−１４５３；Ｂａｎｋｓ，Ｗ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，（２００２）Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．９５０：１３０−１３６）。食餌誘発性肥満体の齧歯類に関係する研究において（ヒトの肥満に更に密接に似ていると信じられる齧歯類モデル、例えば、Ｖａｎ  Ｈｅｅｋ  ｅｔ  ａｌ．（１９９７）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９９：３８５−３９０を参照されたい）、末梢的に投与された過剰のレプチンが、食物摂取及び体重を減少することにおいて無効であり、一方脳に直接注射されたレプチンは、食物摂取及び体重を減少することにおいて有効であることが示されている。過剰の循環レプチンを持つ肥満体のヒトにおいて、シグナル伝達系が、レプチン受容体の連続した刺激に対して脱感作されることも更に示されている（Ｍａｎｔｚｏｒｏｓ，Ｃ．Ｓ．（１９９９）Ａｎｎ．Ｉｎｔｅｒｎ．Ｍｅｄ．１３０：６７１−６８０）。
【０００５】
Ａｍｇｅｎは、組換えメチオニルヒトレプチンによる臨床治験を行っている。これらの治験からの結果は、高い血漿濃度のレプチンの存在にもかかわらず雑多であり、体重の損失は変化し、そして試験された患者のコホート中の平均体重の減少は比較的小さかった（Ｏｂｅｓｉｔｙ  Ｓｔｒａｔｅｇｉｃ  Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅ，Ｄａｔａｍｏｎｉｔｏｒ，２００１）。
【０００６】
レプチン遺伝子コード配列の発見以来、活性な断片を見出すことに対する幾つかの試みが文献中に報告されている。一つの例は、Ｓａｍｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９６）Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．１３７：５１８２−５１８５によるものであり、これは、Ｎ−末端における活性な断片を記載している（２２から５６まで）。この配列は、ＩＣＶに注射された場合、食物摂取を減少することが示され、一方Ｃ−末端で採取された配列は、いずれの影響も有しないことを示した。レプチン断片は、更に国際特許出願ＷＯ９７／４６５８５中にも開示されている。
【０００７】
配列のＣ−末端部を調査した他の報告は、１１６−１３０断片による黄体形成ホルモン産生の可能性のある刺激（Ｇｏｎｚａｌｅｚ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９９）Ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ７０：２１３−２２０）、及びＧＨＲＨ投与後のＧＨ産生に対する影響（１２６−１４０断片）（Ｈａｎｅｗ（２００３）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎ．１４９：４０７−４１２）を報告していた。
【０００８】
レプチンは、最近炎症に伴っている。循環レプチンのレベルが、細菌感染及び炎症において上昇することが報告されている（Ｏｔｅｒｏ，Ｍ  ｅｔ  ａｌ．（２００５）ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．５７９：２９５−３０１及びその中の参考文献を参照されたい）。レプチンは、更に炎症細胞からの前炎症性サイトカインＴＮＦ及びＩＬ−６の放出を向上することによって炎症を増加するためにも作用することができる（Ｚａｒｋｅｓｈ−Ｅｓｆａｈａｎｉ，Ｈ．ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６７：４５９３−４５９９）。これらの薬剤は、同様にインスリン受容体シグナル伝達の効力を減少することによる肥満症患者において普通にみられるインスリン抵抗性に寄与することができる（Ｌｙｏｎ，Ｃ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．（２００３）Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．４４：２１９５−２２００）。持続性の軽度の炎症は、肥満症に伴うと信じられている（インスリン抵抗性及びＩＩ型糖尿病の存在及び非存在において）（Ｂｒｏｗｎｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ５３：８９９−９０３，Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｍａｒｋｅｒｓ  ｅｌｅｖａｔｅｄ  ｉｎ  ｂｌｏｏｄ  ｏｆ  ｏｂｅｓｅ  ｗｏｍｅｎ；Ｍａｎｇｇｅ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｅｘｐ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ  １１２：３７８−３８２，Ｊｕｖｅｎｉｌｅ  ｏｂｅｓｉｔｙ  ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ  ｗｉｔｈ  ｓｅｒｕｍ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｍａｒｋｅｒ  Ｃ−ｒｅａｃｔｉｖｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ；Ｍａａｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｉｎｔ．Ｊ．Ｏｂｅｓ．Ｒｅｌａｔ．Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓｏｒｄ．２８：９９３−９９７，Ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ｌｏｗ  ｇｒａｄｅ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｏｂｅｓｅ  ｐｅｏｐｌｅ）。レプチンは、マクロファージ及び内皮障害への脂質取込みを促進し、従って動脈硬化性プラークの形成を促進することによって、更にアテローム発生の過程にも関係している（Ｌｙｏｎ，Ｃ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．（２００３）Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．１４４：２１９５−２２００を参照されたい）。
【０００９】
レプチンは、更に脂肪組織の成長に関係する過程である新しい血管の形成（血管新生）を促進することが示されている（Ｂｏｕｌｏｕｍｉｅ  Ａ，ｅｔ  ａｌ．（１９９８）Ｃｉｒｃ．Ｒｅｓ．８３：１０５９−１０６６）。血管新生は、更に糖尿病性網膜症にも関係している（Ｓｕｇａｎａｍｉ，Ｅ．ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｄｉａｂｅｔｅｓ．５３：２４４３−２４４８）。
【００１０】
血管新生は、更に異常な腫瘍細胞を養う新しい血管の成長にも関係していると信じられている。上昇したレプチンレベルは、多くの癌、特にヒトの乳房、前立腺及び胃腸癌に伴う（Ｓｏｍａｓｕｎｄａｒ  Ｐ．ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｊ．Ｓｕｒｇ．Ｒｅｓ．１１６：３３７−３４９）。
【００１１】
レプチン受容体アゴニストは、更に創傷治癒を促進するための医薬の製造おいて使用することもできる（Ｇｏｒｄｅｎ，Ｐ．ａｎｄ  Ｇａｖｒｉｌｏｖａ，Ｏ．（２００３）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ３：６５５−６５９）。
【００１２】
更に、脳の上昇したレプチンシグナル伝達が、鬱病性疾患の治療のための方法を与えることができることが示されている（Ｌｕ，Ｘｉｎ−Ｙｕｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００６）ＰＮＡＳ  １０３：１５９３−１５９８）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１３】
【特許文献１】国際特許出願ＷＯ９７／４６５８５。
【非特許文献】
【００１４】
【非特許文献１】Ｂｒｙｓｏｎ，Ｊ．Ｍ．（２０００）Ｄｉａｂｅｔｅｓ，Ｏｂｅｓｉｔｙ  ａｎｄ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ２：８３−８９
【非特許文献２】Ｋｏｉｓｔｉｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９８）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．２８：８９４−８９７
【非特許文献３】Ｋａｓｔｉｎ，Ａ．Ｊ．（１９９９）Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ２０：１４４９−１４５３
【非特許文献４】Ｂａｎｋｓ，Ｗ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，（２００２）Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．９５０：１３０−１３６
【非特許文献５】Ｖａｎ  Ｈｅｅｋ  ｅｔ  ａｌ．（１９９７）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９９：３８５−３９０
【非特許文献６】Ｍａｎｔｚｏｒｏｓ，Ｃ．Ｓ．（１９９９）Ａｎｎ．Ｉｎｔｅｒｎ．Ｍｅｄ．１３０：６７１−６８０
【非特許文献７】Ｏｂｅｓｉｔｙ  Ｓｔｒａｔｅｇｉｃ  Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅ，Ｄａｔａｍｏｎｉｔｏｒ，２００１
【非特許文献８】Ｓａｍｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９６）Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．１３７：５１８２−５１８５
【非特許文献９】Ｇｏｎｚａｌｅｚ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９９）Ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ７０：２１３−２２０
【非特許文献１０】Ｈａｎｅｗ（２００３）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎ．１４９：４０７−４１２
【非特許文献１１】Ｏｔｅｒｏ，Ｍ  ｅｔ  ａｌ．（２００５）ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．５７９：２９５−３０１  ａｎｄ  ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ  ｔｈｅｒｅｉｎ
【非特許文献１２】Ｚａｒｋｅｓｈ−Ｅｓｆａｈａｎｉ，Ｈ．ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６７：４５９３−４５９９
【非特許文献１３】Ｌｙｏｎ，Ｃ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．（２００３）Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．４４：２１９５−２２００
【非特許文献１４】Ｂｒｏｗｎｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ５３：８９９−９０３，Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｍａｒｋｅｒｓ  ｅｌｅｖａｔｅｄ  ｉｎ  ｂｌｏｏｄ  ｏｆ  ｏｂｅｓｅ  ｗｏｍｅｎ
【非特許文献１５】Ｍａｎｇｇｅ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｅｘｐ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ  １１２：３７８−３８２，Ｊｕｖｅｎｉｌｅ  ｏｂｅｓｉｔｙ  ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ  ｗｉｔｈ  ｓｅｒｕｍ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｍａｒｋｅｒ  Ｃ−ｒｅａｃｔｉｖｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ
【非特許文献１６】Ｍａａｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｉｎｔ．Ｊ．Ｏｂｅｓ．Ｒｅｌａｔ．Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓｏｒｄ．２８：９９３−９９７，Ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ｌｏｗ  ｇｒａｄｅ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｏｂｅｓｅ  ｐｅｏｐｌｅ
【非特許文献１７】Ｌｙｏｎ，Ｃ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．（２００３）Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．１４４：２１９５−２２００
【非特許文献１８】Ｂｏｕｌｏｕｍｉｅ  Ａ，ｅｔ  ａｌ．（１９９８）Ｃｉｒｃ．Ｒｅｓ．８３：１０５９−１０６６
【非特許文献１９】Ｓｕｇａｎａｍｉ，Ｅ．ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｄｉａｂｅｔｅｓ．５３：２４４３−２４４８
【非特許文献２０】Ｓｏｍａｓｕｎｄａｒ  Ｐ．ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｊ．Ｓｕｒｇ．Ｒｅｓ．１１６：３３７−３４９
【非特許文献２１】Ｇｏｒｄｅｎ，Ｐ．ａｎｄ  Ｇａｖｒｉｌｏｖａ，Ｏ．（２００３）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ３：６５５−６５９
【非特許文献２２】Ｌｕ，Ｘｉｎ−Ｙｕｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００６）ＰＮＡＳ  １０３：１５９３−１５９８。
【発明の概要】
【００１５】
式（Ｉ）の化合物が、齧歯類の体重及び食物摂取を減少することにおいて有効であることが驚くべきことに見出された。いかなる理論にも束縛されることを望むものではないが、式Ｉの化合物が、レプチン受容体のシグナル伝達を調節することが提案される。
【００１６】
ある態様において、レプチン受容体アゴニスト様の特性を持つ化合物は、レプチンのシグナル伝達に関連する疾患、並びに肥満症のような体重増加に伴う症状の治療のために有用であることができる。本発明人等は、低分子のＣＮＳ浸透性レプチン模倣剤が、制約された脳への取込み系をバイパスすることが可能であるものであると仮定する。更に、この状況がヒトの肥満症状を反映すると仮定した場合、本発明人等は、比較的長い作用の時間を持つＣＮＳ浸透性レプチノイド（ｌｅｐｔｉｎｏｉｄ）が、肥満症状及びその付随する合併症、特に（制約するものではないが）糖尿病のための有効な療法となるものであると信じる。
【００１７】
他の態様において、レプチン受容体アゴニスト様特性を持つ化合物は、炎症、アテローマ性動脈硬化症、糖尿病性網膜症及び腎症の治療のために有用であることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】図１は、それぞれ暗期及び明期中のマウスの体重増加及び体重減少を例示する略図である。グラフは、２４時間にわたる比較的小さい体重変化に対する大きい夜間の体重増加を例示する。
【図２】図２は、暗期の始まり及び明期の始まり間（午後−午前）のマウスの体重に対する実施例１９の影響を示す。
【図３】図３は、暗期の始まり及び明期の始まり間（午後−午前）のマウスの体重に対する実施例２５の影響を示す。
【図４】図４は、レプチンに対するＪＥＧ−３細胞による［３Ｈ］チミジン組込みにおける濃度依存の増加を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
第１の側面において、本開示は、以下の式（Ｉ）：
【００２０】
【化１】
2011522813.tif 000003
【００２１】
の化合物、或いは医薬的に受容可能なその塩、溶媒和物、水和物、幾何異性体、互変異性体、光学異性体又はＮ−オキシドに関し、式中：
Ａは、ピリジニル及びピペラジニルから選択され、これらのそれぞれは、１以上のＣ１−４−アルキル基で場合により置換されていてもよく；
Ｙは、Ｏ、Ｎ（Ｒ６）及びＣＨ２から選択され；
Ｒ１は、水素及びＣ１−４−アルキルから選択され；
Ｒ２は、水素及びＣ１−４−アルキルから選択され；
Ｒ３は、Ｃ１−４−アルキル、ヒドロキシ−Ｃ１−４−アルキル及びフェニル−Ｃ１−４−アルキルから選択され、ここにおいて、フェニルは、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ＣＦ３、Ｃ１−４−アルキル及びＣ１−４−アルコキシから独立に選択される１以上の置換基で場合により置換されていてもよく；
Ｒ４は、水素及びＣ１−４−アルキルから選択され；
Ｒ５は、Ｃ１−６−アルキル（オキソ及びフルオロから独立に選択される１以上の置換基で場合により置換されていてもよい）、フェニル−Ｃ１−６−アルキル（ここにおいて、フェニルは、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ＣＦ３、Ｃ１−６−アルキル及びＣ１−６−アルコキシから独立に選択される１以上の置換基で場合により置換されていてもよい）及びヘテロシクリル−Ｃ１−６−アルキルから選択されるか；或いは
Ｒ４及びＲ５は、これらが結合している窒素原子と一緒に、飽和の複素環を形成し、これは、１以上のＣ１−４−アルキル基で場合により置換されていてもよく；
Ｒ６は、水素及びＣ１−４−アルキルから選択され；そして
ｎは、１、２又は３であり；
但し、前記化合物が：
・Ｎ，３−ジメチル−２−［［［メチル（２−ピリジニルメチル）アミノ］カルボニル］アミノ］ブタンアミド；及び
・Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［［（１Ｓ）−１−（１，３−ジオキソラン−２−イル）−３−メチルブチル］アミノ］カルボニル］−２−メチル−プロピル］−３−ピリジンプロパンアミド；
からは選択されないことを条件とする。
【００２２】
好ましい態様において、Ｙは、Ｏである。
Ｒ１は、好ましくは水素である。
Ｒ２は、好ましくは水素又はメチルである。
【００２３】
Ｒ３は、好ましくはメチル、ヒドロキシメチル、ベンジル、ｐ−ヒドロキシベンジル又は（ｐ−ヒドロキシフェニル）−エチルである。
Ｒ４は、好ましくは水素又はメチルである。
【００２４】
Ｒ５は、好ましくはメチル、イソプロピル、３−メチルブチル、２，２−ジフルオロエチル、３，３−ジメチル−２−オキソブチル、ベンジル、１−フェニルエチル、２−フェニルエチル又はテトラヒドロフラン−２−イルメチルであるか；或いは
Ｒ４及びＲ５が、これらが結合している窒素原子と一緒に複素環を形成している場合、前記の環は、飽和の複素環を形成し、前記の環は、好ましくはモルホリン又は２，６−ジメチルモルホリンである。
【００２５】
ｎは、好ましくは１又は２である。
本開示による具体的な好ましい化合物は：
・｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−２−［メチル（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸２−ピペラジン−１−イルエチル；
・［（１Ｓ）−２−［ベンジル（メチル）アミノ］−１−（４−ヒドロキシベンジル）−２−オキソエチル］−カルバミン酸２−ピペラジン−１−イルエチル；
・｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−２−［メチル（２−フェニルエチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸２−ピペラジン−１−イルエチル；
・｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−［（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸２−ピペラジン−１−イルエチル；
・［（１Ｓ）−２−［ベンジル（メチル）アミノ］−１−（４−ヒドロキシベンジル）−２−オキソエチル］−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−２−［メチル（２−フェニルエチル）アミノ］−２−オキソ−エチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−２−［メチル（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソ−エチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・（（１Ｓ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）−１−｛［メチル（２−フェニルエチル）アミノ］−カルボニル｝プロピル）カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛（１Ｓ）−１−（ヒドロキシメチル）−２−［メチル（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソ−エチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛（１Ｓ）−１−メチル−２−［メチル（２−フェニルエチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛（１Ｓ）−１−ベンジル−２−［メチル（２−フェニルエチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・［（１Ｓ）−１−ベンジル−２−（ジメチルアミノ）−２−オキソエチル］−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛（１Ｓ）−１−ベンジル−２−［（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛（１Ｓ）−１−ベンジル−２−［イソプロピル（メチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛（１Ｓ）−１−ベンジル−２−［（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛（１Ｓ）−１−ベンジル−２−［（２，２−ジフルオロエチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・（（１Ｓ）−１−ベンジル−２−オキソ−２−｛［（２Ｓ）−テトラヒドロフラン−２−イルメチル］アミノ｝エチル）カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・（（１Ｓ）−１−ベンジル−２−オキソ−２−｛［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イルメチル］アミノ｝−エチル）カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・［（１Ｓ）−１−ベンジル−２−モルホリン−４−イル−２−オキソエチル］カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−［（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・［（１Ｓ）−２−（ベンジルアミノ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−オキソエチル］−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・（（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−オキソ−２−｛［（１Ｓ）−１−フェニル−エチル］アミノ｝エチル）カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−［メチル（２−フェニルエチル）−アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛（１Ｓ）−１−ベンジル−１−メチル−２−［（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛１，１−ジメチル−２−［（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル；
・｛１，１−ジメチル−２−［（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソ−エチル｝カルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル；
・｛１，１−ジメチル−２−［メチル（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル；
・（１，１−ジメチル−２−モルホリン−４−イル−２−オキソエチル）カルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル；
・｛２−［（２Ｒ，６Ｓ）−２，６−ジメチルモルホリン−４−イル］−１，１−ジメチル−２−オキソエチル｝カルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル；
・｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−［（３−メチル−ブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル；及び
・［（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−モルホリノ−４−イル−２−オキソエチル］カルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル；
からなる群から選択されるものである。
【００２６】
本発明の開示のもう一つの側面は、治療において使用するための式（Ｉ）の化合物である。
更なる側面において、本発明は、本明細書中に記載される疾患又は症状のいずれもの治療或いは予防において使用するための式（Ｉ）の化合物に関する。
【００２７】
なお更なる側面において、本発明は、本明細書中に記載される疾患又は症状のいずれもの治療或いは予防のための医薬の製造における式（Ｉ）の化合物の使用に関する。
ある態様において、前記の化合物は、レプチン受容体による選択的作用によって予防、治療、又は回復される症状の治療又は予防のために使用することができる。
【００２８】
ある態様において、式（Ｉ）の化合物は、体重増加に伴う症状（特に、代謝症状）の治療又は予防のために使用することができる。体重増加に伴う症状は、肥満症又は過体重の患者において増加した発生率を有する疾病、疾患、或いは他の症状を含む。例は：リポジストロフィー、ＨＩＶリポジストロフィー、糖尿病（２型）、インスリン抵抗性、メタボリックシンドローム、高血糖症、高インスリン血症、脂質異常症、脂肪肝、過食症、高血圧症、高トリグリセリド血症、不妊症、体重増加に伴う皮膚疾患、黄斑変性症を含む。ある態様において、本発明の化合物は、更に患者の体重減少を維持するための医薬の製造において使用することができる。
【００２９】
ある態様において、レプチン受容体アゴニスト模倣剤である式（Ｉ）の化合物は、更に創傷治癒を促進するためにも使用することができる。
ある態様において、レプチン受容体アゴニスト模倣剤である式（Ｉ）の化合物は、更に循環レプチンの濃度の減少、並びに免疫及び生殖系の結果としての機能不全を起こす症状の治療又は予防のためにも使用することができる。このような症状及び機能不全の例は、重度の体重減少、月経困難症、無月経症、女性不妊症、免疫不全症及び低テストステロンレベルに伴う症状を含む。
【００３０】
ある態様において、レプチン受容体アゴニスト模倣剤である式（Ｉ）の化合物は、レプチン欠乏、或いはレプチン又はレプチン受容体の変異の結果として起こる症状の治療又は予防のためにも更に使用することができる。
【００３１】
ある他の態様において、レプチン受容体アンタゴニスト模倣剤である式（Ｉ）の化合物は、炎症性症状又は疾病の治療又は予防のために、肥満症及び過剰の血漿レプチンに伴う軽度の炎症並びにアテローム性動脈硬化症を含む肥満症に伴う他の合併症を減少することにおいて、そしてメタボリックシンドローム及び糖尿病においてみられるインスリン抵抗性の修正のために使用することができる。
【００３２】
ある態様において、レプチン受容体アンタゴニスト模倣剤である式（Ｉ）の化合物は：癌（白血病、リンパ腫、細胞腫、大腸癌、乳癌、肺癌、膵臓癌、肝細胞細胞腫、腎臓癌、黒色腫、肝臓、肺、乳房、及び前立腺転移、等のような）；自己免疫性疾病（器官移植拒絶、紅斑性狼瘡、移植片対宿主拒絶、同種移植片拒絶、多発性硬化症、リウマチ様関節炎、糖尿病に導く膵島の破壊及び糖尿病の炎症性後遺症を含むＩ型糖尿病のような）；自己免疫性障害（多発性硬化症、ギランバレー症候群、重症筋無力症を含む）；不良な組織潅流及び炎症に伴う心血管の症状（アテローム、アテローマ性動脈硬化症、脳卒中、虚血−再灌流損傷、跛行、脊髄損傷、鬱血性心不全、血管炎、出血性ショック、くも膜下出血後の血管攣縮、心血管事故後の血管攣縮、胸膜炎、心膜炎、糖尿病の心血管合併症のような）；虚血−再灌流損傷、虚血及び随伴炎症、血管形成術及び炎症性動脈瘤後の再狭窄；癲癇、神経変性（アルツハイマー病を含む）、関節炎（リウマチ様関節炎、骨関節炎、リウマチ性脊椎炎、痛風性関節炎のような）、線維症（例えば肺、皮膚及び肝臓の）、多発性硬化症、敗血症、敗血症性ショック、脳炎、感染性関節炎、ヤーリッシュ−ヘルクスハイマー反応、帯状疱疹、毒素ショック、脳性マラリア、ライム病、内毒素ショック、グラム陰性ショック、出血性ショック、肝炎（組織損傷及びウイルス感染の両方から起こる）、深部静脈血栓症、痛風；呼吸困難に伴う症状（例えば慢性閉塞性肺炎、妨害及び閉塞された気道、気管支収縮、肺血管収縮、妨害された呼吸、慢性肺炎症性疾病、珪肺、肺サルコイドーシス（ｓａｒｃｏｓｉｓ）、嚢胞性線維症、肺性高血圧症、肺血管狭窄、肺気腫、気管支アレルギー及び／又は炎症、喘息、枯草病、鼻炎、春季カタル及び成人呼吸促迫症候群）；皮膚の炎症に伴う症状（乾癬、湿疹、潰瘍、接触性皮膚炎を含む）；大腸の炎症に伴う症状（クローン病、潰瘍性大腸炎及びピレシス（ｐｙｒｅｓｉｓ）、過敏性大腸症候群、炎症性大腸炎を含む）；ＨＩＶ（特にＨＩＶ感染）、脳性マラリア、細菌性髄膜炎、骨粗鬆症及び他の骨再吸収疾患、骨関節炎、子宮内膜症からの不妊症、感染による発熱及び筋肉痛、並びに過剰の抗炎症性細胞（好中球、好酸球、マクロファージ及びＴ細胞を含む）活性によって仲介される他の症状によって起こされる、又はそれに伴う炎症の治療或いは予防のために使用することができる。
【００３３】
ある態様において、レプチン受容体アンタゴニスト模倣剤である式（Ｉ）の化合物は、１又は２型糖尿病の大血管若しくは微小血管の合併症、網膜症、腎症、自立神経性腎症、或いは虚血又はアテローム性動脈硬化症によって起こされる血管の損傷の治療又は予防のために使用することができる。
【００３４】
ある態様において、レプチン受容体アンタゴニスト模倣剤である式（Ｉ）の化合物は、血管新生を阻害するために使用することができる。血管新生を阻害する化合物は、肥満症又は肥満症に伴う合併症の治療或いは予防のために使用することができる。血管新生を阻害する化合物は、炎症性糖尿病の網膜症、或いは腫瘍の成長、特に乳房、前立腺又は胃腸癌に伴う合併症の治療或いは予防のために使用することができる。
【００３５】
更なる側面において、本発明は、本明細書中に記載されるいずれもの疾患又は症状の治療或いは予防のための方法に関し、これは、患者（例えば、それを必要とする患者、例えば、哺乳動物）に有効な量の式Ｉの化合物を投与することを含む。
【００３６】
本明細書中に記載される方法は、患者が特別に記述された治療を必要とすると確認されたものを含む。このような治療を必要とする患者の確認は、患者又は医療専門家の判定であることができ、そして主観的（例えば所見）又は客観的（例えば試験又は診断法によって測定可能）であることができる。
【００３７】
他の側面において、本明細書中の方法は、更に治療管理に対する患者の反応をモニターすることを含んでなるものを含む。このようなモニタリングは、治療管理の標識又は指標としての患者の組織、体液、検体、細胞、タンパク質、化学標識、遺伝子物質、等の定期的試料採取を含むことができる。他の方法において、患者は、このような治療に対する適合性の関連する標識又は指標に対する評価によって、このような治療の必要性に関して予備選別又は確認される。
【００３８】
一つの態様において、本発明は、治療の進行をモニターする方法を提供する。この方法は、本明細書中に記載される疾患又はその症状に罹った又はそれに敏感な患者において診断標識（マーカー）（例えば、本明細書中の化合物によって修飾された本明細書中に記載されたいずれもの標的又は細胞種）又は診断測定（例えば、スクリーニング、アッセイ）のレベルを決定する段階を含み、ここにおいて、患者は、疾病又はその症状を治療するために十分な治療的量の本明細書中の化合物を投与されている。この方法で決定されるマーカーのレベルは、健康な正常な対照又は他の罹病した患者のいずれかにおけるマーカーの既知のレベルと比較して、患者の疾病の状態を確立することができる。好ましい態様において、患者のマーカーの第２のレベルは、第１のレベルの決定より後の時点で決定され、そして二つのレベルは、疾病の経過又は治療の有効性をモニターするために比較される。ある好ましい態様において、患者のマーカーの治療前レベルは、本発明による治療の開始前に決定される；次いでこのマーカーの治療前レベルは、治療開始後の患者のマーカーのレベルと比較して、治療の有効性を決定することができる。
【００３９】
ある方法の態様において、患者のマーカーのレベル又はマーカーの活性は、少なくとも一回決定される。マーカーレベルの、例えば以前に、或いは同じ患者、もう一人の患者、又は正常な対象からその後に得られたマーカーレベルのもう一つの測定値との比較は、本開示による治療が所望の効果を有するか否かを決定することにおいて有用であり、そしてこれによって投与量レベルが適当であるように調節することを可能にすることができる。マーカーレベルの決定は、当技術において既知の又は本明細書中に記載されるいずれもの適した試料採取／発現アッセイ法を使用して行うことができる。好ましくは、組織又は体液の試料が、先ず患者から取出される。適した試料の例は、血液、尿、組織、口又は頬細胞、及び毛根を含有する毛髪の試料を含む。他の適した試料は、当業者にとって既知であるものである。試料中のタンパク質レベル及び／又はｍＲＮＡレベル（例えば、マーカーレベル）の決定は、制約されるものではないが、酵素免疫アッセイ、ＥＬＩＳＡ、放射線標識／アッセイ技術、染色／化学発光法、リアルタイムＰＣＲ、等を含む当技術において既知のいずれもの適した技術を使用して行うことができる。
【００４０】
ある態様において、式（Ｉ）の化合物が、中枢神経系に浸透することが可能であれば好都合である。他の態様において、式（Ｉ）の化合物が、ＣＮＳに浸透することが可能でなければ好都合である。一般的に、これらの化合物がＣＮＳに浸透することができれば、レプチン受容体アゴニスト模倣剤である化合物は、肥満症、インスリン抵抗性、又は糖尿病（特に対糖能障害）の治療又は予防のために特に有用であることができることが予想される。当業者は、化合物がＣＮＳに浸透することができるか否かを、容易に決定することができる。使用することができる適した方法は、生物学的方法の節に記載されている。
【００４１】
レプチン受容体の反応は、いずれもの適した方法で測定することができる。Ｉｎ  ｖｉｔｒｏでは、これは、レプチン受容体のシグナル伝達を測定することによって行うことができる。例えば、レプチン又は本発明の化合物のレプチン受容体への結合に反応する、Ａｋｔ、ＳＴＡＴ３、ＳＴＡＴ５、ＭＡＰＫ、ｓｈｐ２又はレプチン受容体のリン酸化を測定することができる。Ａｋｔ、ＳＴＡＴ３、ＳＴＡＴ５、ＭＡＰＫ、ｓｈｐ２又はレプチン受容体のリン酸化の程度は、例えばウェスタンブロッティング又はＥＬＩＳＡによって決定することができる。別の方法として、ＳＴＡＴレポーターアッセイ、例えばＳＴＡＴ誘発ルシフェラーゼ発現を使用することができる。レプチン受容体を発現している細胞系を、このようなアッセイのために使用することができる。Ｉｎ  ｖｉｖｏにおいて、レプチン受容体の反応は、レプチン又は式（Ｉ）の化合物の投与後の食物摂取及び体重の減少を決定することによって測定することができる。
【００４２】
以下の生物学的方法は、式（Ｉ）の化合物が、レプチン受容体アゴニスト模倣剤であるか、又はレプチン受容体アンタゴニスト模倣剤であるかを決定するために使用することができるアッセイ及び方法を説明する。
【００４３】
式（Ｉ）の化合物は、他の治療剤と共に、又はそれを伴わずに投与することができる。例えば、炎症を軽減することが所望される場合、化合物は、抗炎症剤（例えば、メトトレキセート、スルファサラジン及びサイトカイン不活性化薬剤、ステロイド、ＮＳＡＩＤ、カンナビノイド、タキキニン修飾因子、又はブラジキニン修飾因子のような疾病を改変する抗リウマチ剤）と共に投与することができる。抗腫瘍性効果を得ることが所望される場合、化合物は、細胞障害性薬剤（例えば、メトトレキセート、シクロフォスファミド）又は他の抗腫瘍性薬物と共に投与することができる。
【００４４】
式（Ｉ）の化合物は、受容体置換研究又は受容体画像化のような、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ又はｉｎ  ｖｉｖｏの適用のために放射線標識（例えばトリチウム又は放射性ヨウ素で）することができる。
【００４５】
定義
以下の定義は、本明細書及び付属する特許請求の範囲を通して適用されるものである。
他に記述されるか又は示されない限り、用語“Ｃ１−６−アルキル”は、１〜６個の炭素原子を有する直鎖又は分枝鎖のアルキル基を意味する。前記Ｃ１−６−アルキルの例は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、イソ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、並びに直鎖及び分枝鎖のペンチル及びヘキシルを含む。“Ｃ１−６−アルキル”の範囲の部分のために、Ｃ１−５−アルキル、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−３−アルキル、Ｃ１−２−アルキル、Ｃ２−６−アルキル、Ｃ２−５−アルキル、Ｃ２−４−アルキル、Ｃ２−３−アルキル、Ｃ３−６−アルキル、Ｃ４−５−アルキル等のようなその全ての下位群が意図されている。
【００４６】
他に記述されるか又は示されない限り、用語“Ｃ１−４−アルコキシ”は、１〜４個の炭素原子を有する直鎖又は分枝鎖のアルコキシ基を意味する。前記のＣ１−４−アルコキシの例は、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ及びｔ−ブトキシを含む。“Ｃ１−４−アルコキシ”の範囲の部分のために、Ｃ１−３−アルコキシ、Ｃ１−２−アルコキシ、Ｃ２−４−アルコキシ、Ｃ２−３−アルコキシ及びＣ３−４−アルコキシのようなその全ての下位群が意図されている。
他に記述されるか又は示されない限り、用語“ヒドロキシ−Ｃ１−４−アルキル”は、ＯＨで置換されたその水素原子を有する、直鎖又は分枝鎖のＣ１−４−アルキルを意味する。前記のヒドロキシ−Ｃ１−４−アルキルの例は、ヒドロキシメチル及び２−ヒドロキシエチルを含む。
他に記述されるか又は示されない限り、用語“フェニル−Ｃ１−６−アルキル”は、フェニルで置換されたその水素原子を有する、直鎖又は分枝鎖のＣ１−６−アルキル基を意味する。前記のフェニル−Ｃ１−６−アルキルの例は、フェニルメチル（即ち、ベンジル）、１−フェニルエチル及び２−フェニルエチルを含む。
他に記述されるか又は示されない限り、用語“ヘテロシクリル−Ｃ１−６−アルキル”は、少なくとも一つのＯ、Ｎ、又はＳのような異種原子を伴い、そして残りの環の原子が炭素である、３〜８個の環の原子を有する完全に飽和、又は部分的に不飽和の単環式環で置換されたその水素原子を有する、直鎖又は分枝鎖のＣ１−６−アルキルを意味する。前記のヘテロシクリル−Ｃ１−６−アルキルの例は、テトラヒドロフラン−２−イルメチル、ピロリジン−２−イルメチル及びピペラジン−１−イルメチルを含む。
【００４７】
本明細書中に記載される置換基Ｒ４及びＲ５が、これらが結合している窒素原子と一緒に、飽和の複素環を形成する場合、前記の環は、５〜７員の環であることができ、そしてＯ、Ｓ及びＮから選択される１以上の更なる異種原子を場合により含有していてもよい。このような複素環の例は、ピペリジン、ピペラジン及びモルホリンを含む。
【００４８】
用語“オキソ”は、以下の式：
【００４９】
【化２】
2011522813.tif 000004
【００５０】
を意味する。
“ハロゲン”は、フッ素、塩素、臭素又はヨウ素を指す。
“ヒドロキシ”は、−ＯＨラジカルを指す。
【００５１】
“シアノ”は、−ＣＮラジカルを指す。
“場合による”又は“場合により”は、その後に記載される現象又は状況が、起こることができるか、或いは起こる必要がなく、そして記載は、現象又は状況が起こる事例及びそれが起こらない事例を含むことを意味する。
【００５２】
用語“哺乳動物”は、マウス、ラット、ウシ、ヒツジ、ブタ、ウサギ、ヤギ、及びウマ、サル、イヌ、ネコを含む生物を、そして好ましくはヒトを含む。患者は、ヒト又は非ヒトの動物、特にイヌのようなの飼い慣らされた動物の患者であることができる。
【００５３】
“医薬的に受容可能”は、医薬組成物を調製することにおいて有用であること、即ち、一般的に安全で非毒性であり、そして生物学的に又は他の点のいずれでも望ましいことを意味し、そして獣医学の使用、並びにヒトの医薬的使用のために有用であることを含む。
【００５４】
“治療”は、本明細書中で使用される場合、指名された疾患又は症状の予防、或いはそれが確定した後の疾患の回復又は排除を含む。
“有効な量”は、治療される患者に対して治療的効果（例えば、疾病、疾患、或いはその症状又は徴候の治療、制御、回復、予防、発症の遅延、又は発症の危険度の減少）を与える化合物の量を指す。治療的効果は、客観的（即ち、幾つかの試験又は標識によって測定可能）又は主観的（即ち、患者が効果の指標を与えるか又はそれを感じる）であることができる。
【００５５】
“プロドラッグ”は、生理学的条件下で、又は加溶媒分解によって式（Ｉ）の生物学的に活性な化合物に転換することができる化合物を指す。プロドラッグは、それを必要とする患者に投与された時点で不活性であるが、しかしｉｎ  ｖｉｖｏで活性な式（Ｉ）の化合物に転換することができる。プロドラッグは、典型的にはｉｎ  ｖｉｖｏで急速に転換されて、例えば血液中の加水分解によって親化合物を得る。プロドラッグ化合物は、通常哺乳類生物中の溶解性、組織適合性又は遅延放出の利益を提供する（Ｓｉｌｖｅｒｍａｎ，Ｒ．Ｂ．，Ｔｈｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｃｔｉｏｎ，２ｎｄ  Ｅｄ．，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ（２００４），ｐｐ．４９８−５４９を参照されたい）。プロドラッグは、式（Ｉ）の化合物中に存在するヒドロキシ、アミノ又はメルカプト基のような官能基を、修飾が、日常的処置又はｉｎ  ｖｉｖｏのいずれかで親化合物に開裂されるような方法で、修飾することによって調製することができる。プロドラッグの例は、制約されるものではないが、ヒドロキシ官能基の酢酸、ギ酸及びコハク酸誘導体、又はアミノ官能基のフェニルカルバミン酸誘導体を含む。
【００５６】
本明細書及び付属する特許請求の範囲を通して、与えられる化学式又は名称は、更に全てのその塩、水和物、溶媒和物、Ｎ−オキシド及びプロドラッグの形態を包含するものである。更に、与えられる化学式又は名称は、その全ての互変異性体及び立体異性体の形態を包含するものである。立体異性体は、鏡像異性体及びジアステレオ異性体を含む。鏡像異性体は、その純粋な形態で、或いは二つの鏡像異性体のラセミの（等量）又は不均等な混合物として存在することができる。ジアステレオ異性体は、その純粋な形態で、又はジアステレオ異性体の混合物として存在することができる。ジアステレオ異性体は、更に幾何異性体を含み、これは、これらの純粋なｃｉｓ又はｔｒａｎｓの形態で、或いはこれらの混合物として存在することができる。
【００５７】
式（Ｉ）の化合物は、そのままで、又は適当な場合、その薬理学的に受容可能な塩（酸又は塩基付加塩）として使用することができる。以下に記述される薬理学的に受容可能な付加塩は、化合物が形成することが可能な、治療的に活性な非毒性の酸及び塩基付加塩の形態を含んでなることを意味する。塩基性の特質を有する化合物は、塩基の形態を、適当な酸で処理することによって、その医薬的に受容可能な酸付加塩に転換することができる。例示的な酸は、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、リン酸のような無機酸；及びギ酸、酢酸、プロパン酸、ヒドロキシ酢酸、乳酸、ピルビン酸、グルコール酸、マレイン酸、マロン酸、シュウ酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸ン、メタンスルホン酸、トリフルオロ酢酸、フマル酸、コハク酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、サリチル酸、ｐ−アミノサリチル酸、パモ酸、安息香酸、アスコルビン酸等のような有機酸を含む。例示的な塩基付加塩の形態は、ナトリウム、カリウム、カルシウム塩、及び例えば、アンモニア、アルキルアミン、ベンザチン、並びに例えばアルギニン及びリシンのようなアミノ酸のような医薬的に受容可能なアミンとの塩である。用語、付加塩は、本明細書中で使用される場合、更に化合物及びその塩が形成することが可能な、例えば、水和物、アルコール和物等のような溶媒和物を含んでなる。
【００５８】
組成物
臨床使用のために、式（Ｉ）の化合物は、各種の投与の方法のために医薬製剤に処方される。化合物が、生理学的に受容可能な担体、賦形剤、又は希釈剤と一緒に投与することができることは認識されるものである。医薬組成物は、いずれもの適した経路によって、好ましくは経口、直腸、鼻腔、局所（頬側及び舌下を含む）、舌下、経皮、クモ膜下腔内、粘膜経由又は非経口投与（皮下、筋肉内、静脈内及び皮膚内を含む）によって投与することができる。
【００５９】
他の製剤は、単位剤形、例えば錠剤及び持続放出カプセル、並びにリポソーム中で都合よく与えることができ、そして薬学の分野において公知のいずれもの方法によって調製することができる。医薬製剤は、活性物質、又は医薬的に受容可能なその塩を、慣用的な医薬的に受容可能な担体、希釈剤又は賦形剤と混合することによって通常調製される。賦形剤の例は、水、ゼラチン、アラビアゴム、ラクトース、微結晶セルロース、デンプン、グリコール酸デンプンナトリウム、リン酸水素カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、コロイド状二酸化ケイ素、等である。このような製剤は、更に他の薬理学的に活性な薬剤、並びに安定剤、湿潤剤、乳化剤、芳香剤、緩衝剤、等のような慣用的な添加剤を含有することもできる。通常、活性化合物の量は、製剤の０．１−９５重量％間、好ましくは非経口使用の製剤において０．２−２０重量％間、そして更に好ましくは経口投与のための製剤において１−５０重量％間である。
【００６０】
製剤は、更に顆粒化、圧縮、マイクロカプセル化、噴霧被覆、等のような既知の方法によって調製することができる。製剤は、錠剤、カプセル、顆粒、粉末、シロップ、懸濁液、座薬又は注射の剤形に、慣用的な方法によって調製することができる。液体の製剤は、活性物質を、水又は他の適したベヒクル中に溶解或いは懸濁することによって調製することができる。錠剤及び顆粒は、慣用的な方法で被覆することができる。治療的に有効な血漿濃度を長時間維持するために、化合物は、徐放製剤中に組込むことができる。
【００６１】
具体的な化合物の投与の投与量レベル及び頻度は、使用される具体的な化合物の効力、その化合物の代謝安定性及び作用の長さ、患者の年齢、体重、一般的健康状態、性別、食事、投与の方法及び時間、排出の速度、薬物の組合せ、治療される症状の重篤度、並びに患者が受けている治療を含む各種の因子によって変化するものである。日量は、例えば、体重のｋｇ当たり約０．００１ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲の投与量で、例えばそれぞれ約０．０１ｍｇ〜約２５ｍｇで、一回又は複数回投与される。通常このような投与は、経口的に与えられるが、非経口投与も更に選択することができる。
【００６２】
本発明の化合物の調製
上記の式（Ｉ）の化合物は、慣用的な方法によって、又はそれと類似して調製することができる。ウレタン及びアミド連結基の形成が、式（Ｉ）の化合物の調製中の重要な合成工程である。多数の活性化試薬、例えばアルコールのクロロギ酸塩を形成するためのホスゲン、又はイミダゾールカルボン酸塩を形成するためのカルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）をウレタン連結基の形成に使用することができる。典型的には、式（Ｉ）の化合物に組込まれるウレタン連結基は、トリホスゲン又は炭酸ビス−（４−ニトロフェニル）を活性剤として使用して合成されている。アミド連結基の形成のために使用することができる活性化剤は、塩化チオニル、炭酸Ｎ，Ｎ’−ジスクシンイミジル（ＤＳＣ）、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、ＰｙＢｒＯＰ、ＨＢＴＵ、ＴＢＴＵ及びＨＣＴＵを含む。典型的には、式（Ｉ）の化合物に組込まれるアミド連結基は、活性化剤としてＰｙＢｒＯＰ、ＨＢＴＵ又はＨＣＴＵを使用して合成されている。本発明の実施例による中間体及び化合物の調製は、特に以下のスキーム１−３によって例示することができる。本明細書中のスキーム中の構造中の可変基の定義は、本明細書中に記載された式中の対応する位置のものと同一基準である。
【００６３】
Ａがピペラジニルであり、そしてＹがＯである式（Ｉ’）の化合物は、以下のスキーム１：
【００６４】
【化３】
2011522813.tif 000005
【００６５】
に示すような僅かな工程のみで容易に調製することができる。第１の工程において、式（ＩＩ）の適当に保護されたアルコール誘導体を、トリホスゲンで、塩基（ＤＭＡＰのような）の存在中で、非プロトン性溶媒（ＤＣＭのような）中で活性化して、対応する式（ＩＩＩ）のクロロギ酸塩を得る。次いでクロロギ酸塩中間体（ＩＩＩ）を、その後、式（ＩＶ）の適当なアミンで、塩基（ＤＭＡＰのような）の存在中で、非プロトン性溶媒（ＤＣＭのような）中で処理し、所望のウレタン連結基の形成をもたらして、式（Ｖ）の化合物を得る。ウレタンの形成は、典型的には二工程の方法であるが、しかしこれは、更にｉｎ  ｓｉｔｕにおける活性化された中間体の形成によってワンポット反応で行うこともできる。保護基Ｒ８の除去により、対応する式（ＶＩ）のカルボン酸を得る。（ＶＩ）の活性化剤（ＰｙＢｒＯＰ又はＨＢＴＵ）による処理、及びその後の式（ＶＩＩ）の適当なアミンの、塩基（ＤＩＰＥＡ）のようなの存在中の、非プロトン性溶媒（ＤＭＦのような）中の付加により、式（ＶＩＩＩ）の化合物中に存在するアミド連結基を得る。最終段階において、保護基Ｒ７が除去され、所望の式（Ｉ’）の化合物の形成をもたらす。
【００６６】
以下のスキーム２：
【００６７】
【化４】
2011522813.tif 000006
【００６８】
は、Ａがピリジニルであり、そしてＹがＯである式（Ｉ”）の化合物の調製のための関連する方法を示す。第１の工程において、式（ＩＸ）のアルコール誘導体を、炭酸ビス−（４−ニトロフェニル）で、塩基（ＮＭＭのような）の存在中で、非プロトン性溶媒（ＤＣＭのような）中で処理して、対応する式（Ｘ）の炭酸塩を得る。ウレタン連結基の形成は、炭酸塩中間体（Ｘ）の、式（ＩＶ）の適当なアミンによる、塩基（ＤＩＰＥＡのような）及び活性化剤（ＤＭＡＰのような）の存在中の、非プロトン性溶媒（ＤＭＦのような）中の処理によって達成されて、式（ＸＩ）の化合物をもたらす。ウレタンの形成は、典型的には二工程の方法であるが、しかしこれは、更にｉｎ  ｓｉｔｕにおける活性化された中間体の形成によってワンポット反応で行うこともできる。次いで保護基Ｒ８の除去により、式（ＸＩＩ）の対応するカルボン酸を得る。カルボン酸（ＸＩＩ）の、活性化試薬（ＰｙＢｒＯＰ、ＴＢＴＵ、ＨＣＴＵ又はＨＢＴＵのような）による処理、及びその後の式（ＶＩＩ）の適当なアミン及び塩基（ＤＩＰＥＡのような）の、非プロトン性溶媒（ＤＭＦのような）中の付加は、最終的に所望の式（Ｉ”）の化合物の形成をもたらす。
【００６９】
別の方法として、Ａがピリジニルであり、そしてＹがＯである式（Ｉ”）の化合物は、以下のスキーム３：
【００７０】
【化５】
2011522813.tif 000007
【００７１】
に示すように先ずアミド連結基を、そして次いでウレタン連結基を形成することによって容易に調製することができる。第１の工程において、式（ＸＩＩＩ）の適当に保護された化合物を、活性化剤（ＰｙＢｒＯＰ又はＴＢＴＵのような）で処理し、続いて式（ＶＩＩ）の適当なアミンを、塩基（ＤＩＰＥＡのような）の存在中で、非プロトン性溶媒（ＤＭＦのような）中で付加して、式（ＸＩＶ）のアミド中間体の形成をもたらす。次いで保護基Ｒ９の除去により、対応する式（ＸＶ）のアミン中間体を得る。その後の（ＸＶ）の炭酸塩中間体（Ｘ）による、塩基（ＤＩＰＥＡのような）及び活性化剤（ＤＭＡＰのような）の存在中の、非プロトン性溶媒（ＤＭＦのような）中の処理により、ウレタン連結基の形成をもたらして、式（Ｉ”）の化合物を得る。
【００７２】
式（Ｉ）の化合物を調製するために必要な出発物質は、商業的に入手可能であるか、又は当技術において既知の方法によって調製することができるかのいずれかである。
以下の実験の節中で記載される方法は、本発明の化合物を、遊離塩基の形態で又は酸付加塩として得るために行うことができる。医薬的に受容可能な酸付加塩は、遊離塩基を適した有機溶媒中に溶解し、そして塩基化合物から酸付加塩を調製するための慣用的な方法によって、溶液を酸で処理することによって得ることができる。付加塩を形成する酸の例は上述してある。
【００７３】
式（Ｉ）の化合物は、１以上のキラル炭素原子を保有することができ、そして従ってこれらは、光学異性体の形態で、例えば、純粋な光学異性体、又は鏡像異性体の混合物（ラセミ体）、或いはジアステレオ異性体を含有する混合物として得ることができる。純粋な鏡像異性体を得るための光学異性体の混合物の分離は、当技術において公知であり、そして例えば、光学的に活性な（キラル）酸による塩の分別結晶化又はキラルカラムのクロマトグラフ的分離によって達成することができる。
【００７４】
本明細書中に記載される合成経路において使用される化学薬品は、例えば、溶媒、試薬、触媒、並びに保護基及び脱保護基試薬を含むことができる。保護基の例は、ｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ベンジル及びトリチル（トリフェニルメチル）である。先に記載した方法は、更に、最終的に化合物の合成を可能にするために、適した保護基を加える又は除去する工程を、具体的に本明細書中に記載した工程の前又は後のいずれかに、付加的に含むことができる。更に、各種の合成工程を、所望の化合物を得るために別の配列又は順序で行うことができる。出願可能な化合物を合成することにおいて有用な合成化学の転換及び保護基の方法論（保護及び脱保護）は、当技術において既知であり、そして例えば、Ｒ．Ｌａｒｏｃｋ，Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ，ＶＣＨ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ（１９８９）；Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，３ｒｄ  Ｅｄ．，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ（１９９９）；Ｌ．Ｆｉｅｓｅｒ  ａｎｄ  Ｍ．Ｆｉｅｓｅｒ，Ｆｉｅｓｅｒ  ａｎｄ  Ｆｉｅｓｅｒ’ｓ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ（１９９４）；ａｎｄ  Ｌ．Ｐａｑｕｅｔｔｅ，ｅｄ．，Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ（１９９５）及びこれらのその後の版中に記載されているものを含む。
【００７５】
以下の略語が使用されている：
ａｑ          水性
Ｂｏｃ        ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
ＤＣＭ        ジクロロメタン
ＤＩＰＥＡ    Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡＰ      Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン
ＤＭＦ        Ｎ，Ｎ−ジメチルホルミアミド
ＥＳ＋        エレクトロスプレー
Ｅｔ２Ｏ      ジエチルエーテル
ＥｔＯＡｃ    酢酸エチル
ＨＩＶ        ヒト免疫不全ウイルス
ＨＢＴＵ      ヘキサフルオロリン酸２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルアミニウム
ＨＣＴＵ      ヘキサフルオロリン酸２−（６−クロロ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルアミニウム
ＨＰＬＣ      高性能液体クロマトグラフィー
ＩＣＶ        脳室内
ＬＣＭＳ      液体クロマトグラフィー質量分光法
Ｍ            モル
［ＭＨ］＋        プロトン化分子イオン
ＮＥｔ３            トリエチルアミン
ＮＭＭ        Ｎ−メチルモルホリン
ＰｙＢｒＯＰ  ヘキサフルオロリン酸ブロモ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウム
ＲＰ          逆相
ｓａｔ．      飽和
ｒ．ｔ．      室温
ｔｅｒｔ      第三
ＴＦＡ        トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ        テトラヒドロフラン
ＴＢＴＵ      テトラフルオロホウ酸２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルアミニウム。
【００７６】
本開示の態様は、付属する図面を参照して、以下の実施例中に記載される。
本明細書において、可変基の任意の定義における化学基のリストの記載は、いずれか一つの基、または列記した基の組み合わせとしての該可変基の定義を含む。本明細書において、実施態様の記載は、いずれか一つの実施態様、または別のいずれかの実施多様またはその部分との組み合わせとしての実施多様を含む。
【実施例】
【００７７】
実施例及び中間体化合物
実験方法
全ての試薬は商用級であり、そして他に規定しない限り、受領したままで更なる精製無しに使用した。商業的に入手可能な無水の溶媒を、不活性雰囲気下で行われる反応のために使用した。他に規定しない限り、全てのその他の場合には試薬級溶媒を使用した。分析用ＬＣＭＳは、Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００ＨＰＬＣ装置に接続されたＷａｔｅｒｓのＺＱ質量分光器で行った。分析用ＨＰＬＣは、Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００装置又はＳｃｈｉｍａｄｚｕ  ＣＬＡＳＳ−ＶＰ装置で行った。高分解能質量スペクトル（ＨＲＭＳ）は、Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  ＨＰＬＣ装置に接続されたＡｇｉｌｅｎｔ  ＭＳＤ−ＴＯＦで得た。分析中に、較正を二つの質量によって点検し、そして必要な場合、自動的に補正した。スペクトルは、正のエレクトロスプレー法で取得した。取得した質量の範囲は、ｍ／ｚで１００−１１００であった。質量ピークのプロファイル検出を使用した。正常相クロマトグラフィーは、２０ｇのＳｔｒａｔａ  ＳＩ−１シリカのギガチューブを備えたＦｌａｓｈ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｐｅｒｓｏｎａｌ装置で行った。逆相クロマトグラフィーは、Ｍｅｒｃｋ  ＬｉＣｈｏｐｒｅｐ（登録商標）ＲＰ−１８（４０−６３μｍ）の４６０×２６ｍｍカラムを備えたＧｉｌｓｏｎ装置で、３０ｍＬ／分で、水中の０％から１００％迄のメタノールの勾配で行った。分離用ＨＰＬＣは、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｈｙｄｒｏ  ＲＰの１５０×２０ｍｍを備えたＧｉｌｓｏｎ装置で、２０  ｍＬ／分で、水中の０％から１００％までのアセトニトリルの勾配で行った。化合物は、ＡＣＤ  ６．０．を使用して自動的に命名した。
【００７８】
分析用ＨＰＬＣ及びＬＣＭＳデータは：
システムＡ：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  Ｈｙｄｒｏ  ＲＰ（５０×４．６ｍｍ、４μｍ）、Ｈ２Ｏ（＋０．１％ＨＣＯ２Ｈ）中の５−１００％ＣＨ３ＣＮの勾配、１．０ｍＬ／分、勾配時間３分、２００−３００ｎｍ、２５℃；
システムＢ：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  Ｈｙｄｒｏ  ＲＰ（１５０×４．６ｍｍ、４μｍ）、Ｈ２Ｏ（＋０．１％  ＨＣＯ２Ｈ）中の５−１００％ＣＨ３ＣＮの勾配、１．０ｍＬ／分、勾配時間８、２５℃；
システムＣ：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  Ｈｙｄｒｏ  ＲＰ（１５０×４．６ｍｍ、４μｍ）、Ｈ２Ｏ（＋０．１％  ＴＦＡ）中の５−１００％ＣＨ３ＣＮ（＋０．０８５％ＴＦＡ）の勾配、１．０  ｍＬ／分、勾配時間７分、２５℃；
システムＤ：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  Ｈｙｄｒｏ  ＲＰ（１５０×４．６ｍｍ、４μｍ）、Ｈ２Ｏ（＋０．１％ＴＦＡ）中の５−１００％ＣＨ３ＣＮ（＋０．０８５％ＴＦＡ）の勾配、１．５  ｍＬ／分、勾配時間１０分、２００−３００ｎｍ、２５℃；  
システムＥ：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  Ｈｙｄｒｏ  ＲＰ（１５０×４．６ｍｍ、４μｍ）、Ｈ２Ｏ（＋０．１％ＴＦＡ）中の５−１００％ＣＨ３ＣＮ（＋０．０８５％ＴＦＡ）の勾配、１．５  ｍＬ／分、勾配時間７分、２００−３００ｎｍ、３０℃；
により得た。
【００７９】
炭酸４−ニトロフェニル（ピリジン−４−イル）メチルは、Ｖｅｂｅｒ，Ｄ．Ｆ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９７７，４２，３２８０によって記載されている方法によって調製した。実施例３２の（Ｓ）−２−（４−ヒドロキシ−３，５−ジヨードベンジル）−２−アミノ−Ｎ−イソペンチルプロパンアミドを、最後のトリチル化化合物（Ｓ）−２−（イソペンチルカルバモイル）−１−（３，５−ジトリチウム−４−ヒドロキシフェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチルに転換する最後の二工程は、Ｔｒｉｔｉｕｍ  Ｃｕｓｔｏｍ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ  Ｇｒｏｕｐ，Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｔｈｅ  Ｍａｙｎａｒｄ  Ｃｅｎｔｒｅ，Ｆｏｒｅｓｔ  Ｆａｒｍ  Ｅｓｔａｔｅ，Ｗｈｉｔｃｈｕｒｃｈ，Ｃａｒｄｉｆｆ，ＣＦ１４  ７ＹＴによって行った。
【００８０】
中間体１
（Ｓ）−１−（カルボキシ）−２−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシ−フェニル）エチルカルバミン酸２−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）エチル
【００８１】
【化６】
2011522813.tif 000008
【００８２】
工程１：４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
１−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン（５１．７ｇ、３９８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５００ｍＬ）中の溶液に、ＮＥｔ３（７０．０ｍＬ、５２６ｍｍｏｌ）及び二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（８０．０ｇ、３６７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を一晩室温で撹拌し、そして次いで１ＭのＮａ２ＣＯ３水溶液（２×３００ｍＬ）で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、そして真空中で濃縮して、４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（６６．０ｇ、７２％）を、無色の油状物として得た。
【００８３】
工程２：（Ｓ）−１−（メトキシカルボニル）−２−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシフェニル）エチルカルバミン酸２−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）エチル
トリホスゲン（６１８ｍｇ、２．０８ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（３０ｍＬ）中に溶解し、そして４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．４３ｇ、６．２１ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（７５０ｍｇ、６．１５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）中の溶液を加えた。反応混合物を室温で４時間撹拌した。２−アミノ−３−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシフェニル）プロパン酸（Ｓ）−メチル塩酸塩（１．７９ｇ、６．２２ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（１．５０ｇ、１２．３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）中の溶液を加えた。反応混合物を一晩撹拌し、次いで飽和のＮａＨＣＯ３水溶液（１００ｍＬ）に注ぎ、そしてＤＣＭ（３×１００ｍＬ）で抽出した。混合した有機層を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、そして真空中で濃縮した。残渣を正常相クロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０％から５％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）によって精製して、（Ｓ）−１−（メトキシカルボニル）−２−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシフェニル）−エチルカルバミン酸２−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）エチル（２．３８ｇ、７６％）を、無色の油状物として得た。
【００８４】
工程３：（Ｓ）−１−（カルボキシ）−２−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシ−フェニル）エチルカルバミン酸２−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）エチル
前の工程からの（Ｓ）−１−（メトキシカルボニル）−２−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシ−フェニル）エチルカルバミン酸２−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）エチル（２．３８ｇ、４．７ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（５０ｍＬ）中に溶解し、そしてＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（５８０ｍｇ、１３．８ｍｍｏｌ）の水（１５ｍＬ）中の溶液で処理した。反応混合物を６時間激しく撹拌し、そして次いで一晩静置したまま放置した。反応混合物を水（１００ｍＬ）上に注ぎ、そしてＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で抽出した。水層を希ＨＣｌ水溶液でｐＨ４に酸性化し、塩化ナトリウムで飽和し、そしてＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。混合した有機層を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、そして真空中で濃縮して、（Ｓ）−１−（カルボキシ）−２−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシフェニル）エチルカルバミン酸２−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−ピペラジン−１−イル）エチル（１．９８ｇ、８５％）を得た。
【００８５】
中間体２
（Ｓ）−１−（カルボキシ）−２−（４−ヒドロキシフェニル）エチルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル
【００８６】
【化７】
2011522813.tif 000009
【００８７】
工程１：（Ｓ）−１−（メトキシカルボニル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）エチルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル
炭酸４−ニトロフェニル（ピリジン−４−イル）メチル（８３５ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−チロシンメチルエステル（５０８ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．５０ｍＬ、２．９ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（２０ｍｇ）を、ＤＭＦ（２０ｍＬ）中に溶解し、そして１８時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮した。残渣を飽和のＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍＬ）中に懸濁し、そしてＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出した。混合した有機層を飽和のＮａＨＣＯ３水溶液（５×５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、そして真空中で濃縮した。残渣を正常相のクロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０％から５％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）によって精製して、（Ｓ）−１−（メトキシカルボニル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）エチルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（８１７ｍｇ、９６％）を、白色の泡状物として得た。
【００８８】
工程２：（Ｓ）−１−（カルボキシ）−２−（４−ヒドロキシフェニル）エチルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル
（Ｓ）−１−（メトキシカルボニル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）エチルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（８１７ｍｇ、２．４７ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（３０ｍＬ）中に溶解し、そしてＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（３００ｍｇ、７．１ｍｍｏｌ）の水（６ｍＬ）中の溶液で処理し、そして一晩激しく撹拌した。反応混合物を水（５０ｍＬ）中に注ぎ、そして層を分離した。水層を０．２ＭのＨＣｌ及びＡｃＯＨでｐＨ約４に酸性化し、そして次いでＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出した。混合した有機層を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、そして真空中で濃縮して、（Ｓ）−１−（カルボキシ）−２−（４−ヒドロキシフェニル）エチルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル化合物（６１５ｍｇ、７８％）を、白色の固体として得た。
【００８９】
中間体３
（Ｓ）−１−（カルボキシ）−２−フェニルエチルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル
【００９０】
【化８】
2011522813.tif 000010
【００９１】
フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩（４．００ｇ、１８．５ｍｍｏｌ）、炭酸４−ニトロフェニル（ピリジン−４−イル）メチル（４．６２ｇ、１６．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（５．８７ｍＬ、３３．７ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（触媒的量）を、ＤＭＦ（７０ｍＬ）中に溶解した。反応混合物を室温で２６時間撹拌し、そして次いで真空中で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）中に溶解し、そして１ＭのＮａ２ＣＯ３水溶液で洗浄した。ＥｔＯＡｃ相を真空中で濃縮し、そして残渣を正常相クロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０％から５％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）によって精製して、（Ｓ）−１−（メトキシカルボニル）−２−フェニルエチルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（４．２９ｇ、８１％）を、黄色の油状物として得た。この物質の全て（４．２９ｇ、１３．６ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（９０ｍＬ）中に溶解し、そしてＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（１．７２ｇ、４１．０ｍｍｏｌ）の水（３０ｍＬ）中の溶液を加えた。反応物を室温で４時間撹拌し、そして次いで１ＭのＨＣｌ（４１．０ｍＬ、４１．０ｍｍｏｌ）クエンチした。ＴＨＦを真空中で除去し、そして白色の固体を水層から結晶させた。固体を濾過によって収集し、そして真空中で乾燥して、（Ｓ）−１−（カルボキシ）−２−フェニルエチルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（３．４０ｇ、８３％）を、白色の結晶質の固体として得た。
【００９２】
中間体４
（Ｓ）−２−（カルボキシ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル
【００９３】
【化９】
2011522813.tif 000011
【００９４】
２−（４−ヒドロキシベンジル）−２−アミノプロパン酸（Ｓ）−メチル塩酸塩（０．５９ｇ、２．４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１５ｍＬ）中の溶液に、ＤＩＰＥＡ（１．２６ｍｌ、７．２ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（３０ｍｇ）を、そして次いで炭酸４−ニトロフェニル（ピリジン−４−イル）メチル（０．６５ｇ、２．４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を一晩室温で撹拌した。ＤＭＦを真空中で除去し、そして残渣をＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）中に溶解し、１ＭのＮａ２ＣＯ３水溶液（６×４０ｍＬ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、そして乾燥状態まで蒸発した。残渣を正常相クロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０％から４％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）によって精製して、（Ｓ）−２−（メトキシカルボニル）−１−（４−ヒドロキシフェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（３７９ｍｇ、４６％）を、透明な油状物として得て、これは、静置により固化した。この物質の全て（３７９ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（１３ｍＬ）中に溶解し、そして１ＭのＬｉＯＨの水溶液（３．３ｍＬ、３．３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を一晩撹拌した。揮発性物質の蒸発後、残渣を水（３０ｍＬ）中に溶解し、そしてＤＣＭ（３×２０ｍＬ）で洗浄した。次いで塩基性の水層を５ＭのＨＣｌでｐＨ４に酸性化し、そしてＥｔＯＡｃ（６×３０ｍＬ）で抽出した。混合したＥｔＯＡｃ抽出物を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、そして真空中で濃縮して、（Ｓ）−２−（カルボキシ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（０．２４ｇ、６６％）を、白色の固体として得た。
【００９５】
中間体５
２−（カルボキシ）プロパン−２−イルカルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル
【００９６】
【化１０】
2011522813.tif 000012
【００９７】
工程１：炭酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル４−ニトロフェニル
（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）−メタノール（９．１４ｇ、６６．７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（４０ｍＬ）中の懸濁液を、続いてＮＭＭ（７．３４ｍＬ）を、炭酸ビス−４−ニトロフェニル（２０．２８ｇ、６６．７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２００ｍＬ）中の溶液に加えた。反応混合物を一晩撹拌し、そして次いで飽和のＮａＨＣＯ３水溶液（５×１００ｍＬ）で洗浄した。ＤＣＭ相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、そして真空中で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ（約２５ｍＬ）から再結晶させて、炭酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル４−ニトロフェニル（１１．５ｇ、５７％）を、オフホワイト色の固体として得た。結晶化からの濾液を真空中で濃縮し、そして残渣を１滴のヘプタンを伴うＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ）から再結晶させて、炭酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル４−ニトロフェニルの更なる部分（４．７６ｇ、２４％収率−８１％合計収率）を、オフホワイト色の固体として得た。
【００９８】
工程２：２−（メトキシカルボニル）プロパン−２−イルカルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル
炭酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル４−ニトロフェニル（５．６２ｇ、１８．６ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（９．７２ｍＬ、５５．８ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（１０ｍｇ）のＤＭＦ（５０ｍＬ）中の溶液に、アミノイソ酪酸メチルエステル塩酸塩（３．００ｇ、１９．５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２０時間撹拌し、そして次いで真空中で蒸発した。残渣をＥｔＯＡｃ（８０ｍＬ）中に溶解し、そして１ＭのＮａ２ＣＯ３水溶液の多数のアリコートで、水層が無色になるまで洗浄した。有機層を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、そして乾燥状態まで蒸発して、白色の固体を得た。ＥｔＯＡｃから再結晶させて、２−（メトキシカルボニル）プロパン−２−イルカルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル（２．５８ｇ、４９％）を、白色の固体として得た。
【００９９】
工程３：２−（カルボキシ）プロパン−２−イルカルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル
２−（メトキシカルボニル）プロパン−２−イルカルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル（２．５８ｇ、９．２ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（６０ｍＬ）中に溶解し、そして１ＭのＬｉＯＨの水溶液（２７．６ｍＬ、２７．６ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を３時間撹拌してから、１ＭのＨＣｌ水溶液（２７．６ｍＬ、２７．６ｍｍｏｌ）でクエンチした。揮発性物質の蒸発後、残渣をＤＣＭ（９８ｍＬ）及びＭｅＯＨ（２ｍＬ）の混合物に加え、そして濾過した。濾液を真空中で乾燥して、２−（カルボキシ）プロパン−２−イルカルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル（１．５０ｇ、６１％）を、白色の固体として得た。
【０１００】
中間体６
（Ｓ）−２−（カルボキシ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル
【０１０１】
【化１１】
2011522813.tif 000013
【０１０２】
工程１：Ｎ，Ｏ−ビス｛［（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メトキシ］カルボニル｝−α−メチル−Ｌ−チロシンメチル
炭酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル４−ニトロフェニル（１１．５ｇ、３８．０ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１３．０ｍＬ、７４．６ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（１０ｍｇ）のＤＭＦ（８０ｍＬ）中の撹拌された溶液に、アルファ−メチル−チロシンメチルエステル塩酸塩（４．９１ｇ、２０．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で２０時間撹拌し、そして次いで真空中で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ（８０ｍＬ）中に溶解し、、１ＭのＮａ２ＣＯ３水溶液の多数のアリコートで、水層が無色になるまで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、そして乾燥状態まで蒸発した。残渣をＥｔＯＡｃから再結晶させて、Ｎ，Ｏ−ビス｛［（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メトキシ］カルボニル｝−α−メチル−Ｌ−チロシンメチル（１．８０ｇ、１７％）を、淡黄色の固体として得た。
【０１０３】
工程２：（Ｓ）−２−（カルボキシ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル
Ｎ，Ｏ−ビス｛［（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メトキシ］カルボニル｝−α−メチル−Ｌ−チロシンメチル（１．８０ｇ、３．４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４０ｍＬ）中の溶液に、１ＭのＬｉＯＨ水溶液（１７．０ｍＬ、１７．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を一晩撹拌し、１ＭのＨＣｌ水溶液（１７．０ｍＬ、１７．０ｍｍｏｌ）でクエンチし、そして真空中で乾燥して、（Ｓ）−２−（カルボキシ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル（１．０７ｇ、８９％）を得た。
【０１０４】
実施例１
｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−２−［メチル（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸２−ピペラジン−１−イルエチル二塩酸塩
【０１０５】
【化１２】
2011522813.tif 000014
【０１０６】
（Ｓ）−１−（カルボキシ）−２−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシフェニル）−エチルカルバミン酸２−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）エチル（中間体１；４１５ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルイソアミルアミン（８５ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．４０ｍＬ、２．３０ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１０ｍＬ）中に溶解し、そして次いで氷水浴中で冷却した。ＰｙＢｒＯＰ（４００ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃で６時間撹拌し、そして次いで室温まで一晩で温まらせた。反応混合物を真空中で濃縮した。残渣を０．２ＭのＨＣｌ水溶液（５０ｍＬ）中に懸濁し、そしてＤＣＭ（３×５０ｍＬ）で抽出した。混合したＤＣＭ抽出物を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、真空中で濃縮し、そして逆相クロマトグラフィーによって精製して、（Ｓ）−１−（Ｎ−イソペンチル−Ｎ−メチルカルバモイル）−２−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシヒドロキシフェニル）エチルカルバミン酸２−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）エチル（２６２ｍｇ、５４％）を、黄色のゴム状物として得た。この物質の全て（２６２ｍｇ、０．４５５ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０ｍＬ）中に溶解し、そしてチオアニソール（０．４ｍＬ）で、続いてＴＦＡ（３．０ｍＬ）で処理した。反応混合物を一晩撹拌し、そして次いで真空中で濃縮した。残渣を酢酸中の０．２ＭのＨＣｌ（１０ｍＬ）中に溶解し、そして真空中で濃縮した。この方法を繰返して、全てのＴＦＡを確実に除去した。残渣をＥｔ２Ｏで摩砕して、白色の固体を得て、これを分離用ＨＰＬＣ（水中の５％から１００％迄のアセトニトリルによる勾配溶出）によって精製して、表題化合物（１１５ｍｇ、５１％）を白色の泡状物として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度９８．４％（システムＤ、ＲＴ＝５．９６分）；分析用ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ、ＲＴ＝２．４０分）、ＥＳ＋：４２２．０［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ２２Ｈ３６Ｎ４Ｏ４に対する計算値：４２０．２７３７、実測値４２０．２７４４。
【０１０７】
実施例２
［（１Ｓ）−２−［ベンジル（メチル）アミノ］−１−（４−ヒドロキシベンジル）−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸２−ピペラジン−１−イルエチル二塩酸塩
【０１０８】
【化１３】
2011522813.tif 000015
【０１０９】
（Ｓ）−１−（カルボキシ）−２−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシフェニル）−エチルカルバミン酸２−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）エチル（中間体１；３７８ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルベンジルアミン（９５ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）、ＰｙＢｒＯＰ（３６０ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．４０ｍＬ、２．３０ｍｍｏｌ）を、氷水で冷却されたＤＭＦ（１０ｍＬ）中に溶解した。反応混合物を一晩撹拌し、そして次いで真空中で濃縮した。残渣を６％のＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍＬ）中に懸濁し、そしてＤＣＭ（３×５０ｍＬ）で抽出した。混合したＤＣＭ抽出物を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、そして真空中で濃縮した。残渣を正常相クロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０％から１０％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）によって、続いて逆相クロマトグラフィーによって精製して、（Ｓ）−１−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルカルバモイル）−２−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシフェニル）エチルカルバミン酸２−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）エチル（１６４ｍｇ、３５％）を、黄色のゴム状物として得た。この物質のこの全て（１６４ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（１０ｍＬ）中に溶解し、そしてチオアニソール（０．５ｍＬ）で、続いてＴＦＡ（３ｍＬ）で処理した。反応混合物を一晩撹拌し、そして次いで真空中で濃縮した。残渣を酢酸中の０．２ＭのＨＣｌ（１０ｍＬ）中に溶解し、そして真空中で濃縮した。この方法を繰返して、全てのＴＦＡを確実に除去した。残渣をＥｔ２Ｏで摩砕して、白色の固体を得て、これを逆相クロマトグラフィーによって精製して、表題化合物（８２ｍｇ、５９％）を、白色の固体として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度９９．０％（システムＤ、ＲＴ＝５．７５分）；分析用ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＢ、ＲＴ＝３．７７分）、ＥＳ＋：４４１．８［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ２４Ｈ３２Ｎ４Ｏ４に対する計算値：４４０．２４２４、実測値４４０．２４３５。
【０１１０】
実施例３
｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−２−［メチル（２−フェニルエチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸２−ピペラジン−１−イルエチル二塩酸塩
【０１１１】
【化１４】
2011522813.tif 000016
【０１１２】
（Ｓ）−１−（カルボキシ）−２−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシフェニル）−エチルカルバミン酸２−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）エチル（中間体１；４０４ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルフェネチルアミン（１２０ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）、ＰｙＢｒＯＰ（３９０ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．４ｍＬ、２．３ｍｍｏｌ）を、氷水浴で冷却されたＤＭＦ（１０ｍＬ）中に溶解した。反応混合物を一晩撹拌し、そして次いで真空中で濃縮した。残渣を６％のＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍＬ）中に懸濁し、そしてＤＣＭ（３×５０ｍＬ）で抽出した。混合したＤＣＭ抽出物を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、そして真空中で濃縮した。残渣を逆相クロマトグラフィーによって精製して、（Ｓ）−１−（Ｎ−メチル−Ｎ−フェニルカルバモイル）−２−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシフェニル）エチルカルバミン酸２−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）エチル（２５７ｍｇ、５１％）を、黄色のゴム状物として得た。この物質の全て（２５７ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０ｍＬ）中に溶解し、チオアニソール（０．５ｍＬ）で、続いてＴＦＡ（３ｍＬ）によって処理し、一晩撹拌し、そして真空中で濃縮した。残渣を酢酸中の０．２ＭのＨＣｌ（１０ｍｌ）中に溶解し、そして真空中で濃縮した。この方法を繰返して、全てのＴＦＡを確実に除去した。残渣をＥｔ２Ｏで摩砕して、白色の固体を得て、これを分離用ＨＰＬＣ（水中の５％から１００％迄のアセトニトリルによる勾配溶出）によって精製して、表題化合物（１０１ｍｇ、４１％）を、白色の固体として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度９８．１％（システムＤ、ＲＴ＝６．１４分）；分析用ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＢ、ＲＴ＝３．９０分）、ＥＳ＋：４５５．７［ＭＨ］＋．ＨＲＭＳ  Ｃ２５Ｈ３４Ｎ４Ｏ４に対する計算値：４５４．２５８０、実測値４５４．２５８６。
【０１１３】
実施例４
｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−［（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸２−ピペラジン−１−イルエチル二塩酸塩
【０１１４】
【化１５】
2011522813.tif 000017
【０１１５】
工程１：２−（４−ヒドロキシベンジル）−２−アミノプロパン酸（Ｓ）−メチル塩酸塩
塩化チオニル（５．６０ｍＬ、７６．８ｍｍｏｌ）を、（Ｓ）−２−（４−ヒドロキシベンジル）−２−アミノプロパン酸（５．００ｇ、２５．６ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１００ｍＬ）中の０℃の撹拌された懸濁液に、滴下により加えた。反応物を室温まで温まらせ、そして出発物質が完全にメチルエステルに転換されるまで、３週間静置したまま放置した。反応物を真空中で乾燥して、２−（４−ヒドロキシベンジル）−２−アミノプロパン酸（Ｓ）−メチル塩酸塩（５．１３ｇ、８２％）を、白色の固体として得た。
【０１１６】
工程２：（Ｓ）−２−（メトキシカルボニル）−１−（４−ヒドロキシフェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸２−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）エチル
トリホスゲン（５９４ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）中の０℃の撹拌された溶液に、４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．３８ｇ、６．０ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（７３２ｍｇ、６．０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）中の溶液を、滴下により１０分かけて加えた。反応混合物を２時間撹拌し、そして次いで周囲温度まで温まらせた。２−（４−ヒドロキシベンジル）−２−アミノプロパン酸（Ｓ）−メチル塩酸塩（１．４７ｇ、６．０ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（２．１２ｍｇ、１８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３０ｍＬ）中の溶液を、１０分かけて加えた。反応混合物を２１時間撹拌し、そして次いで水、０．２ＭのＨＣｌ水溶液（２×）、食塩水、ＮａＨＣＯ３水溶液（２×）及び食塩水で洗浄した。有機層を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、そして溶媒を真空中で除去した。残渣を逆相クロマトグラフィー（２５０×２６ｍｍカラム、水中の０％から１００％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）及び正常相クロマトグラフィー（１０ｇのＲｅｄｉＳｅｐカラム、ＤＣＭ中の０％から５％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）によって精製して、（Ｓ）−２−（メトキシカルボニル）−１−（４−ヒドロキシフェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸２−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）エチル（８０ｍｇ）を得た。上記の水及び０．２ＭのＨＣｌ洗液を混合し、ＮａＨＣＯ３を加えて、ｐＨを約７に調節し、そして次いでＥｔＯＡｃ（３×７５ｍＬ）で抽出した。混合したＥｔＯＡｃ抽出物を真空中で蒸発し、そして残渣を逆相及び正常相クロマトグラフィーによって精製して、更なる２９６ｍｇの生成物を得た。表題化合物の合計収量は、３７６ｍｇ（１４％）であった。
【０１１７】
工程３：（Ｓ）−２−（カルボキシ）−１−（４−ヒドロキシ−フェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸２−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）エチル
（Ｓ）−２−（メトキシカルボニル）−１−（４−ヒドロキシフェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸２−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）エチル（３７６ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）のジオキサン（２０ｍＬ）中の溶液に、ＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（８４ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）の水（１０ｍＬ）中の溶液を加えた。反応混合物を週末にかけて撹拌した。１ＭのＨＣｌ（２．０ｍＬ、２．０ｍｍｏｌ）を加え、そして次いで真空中で濃縮した。残渣を逆相クロマトグラフィー（２５０×２６ｍｍカラム、水中の０％から１００％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）によって精製した。純粋な画分を混合し、そして真空中で乾燥して、（Ｓ）−２−（カルボキシ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸２−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）エチル（２６６ｍｇ、７３％）を得た。
【０１１８】
工程４：（Ｓ）−２−（イソペンチルカルバモイル）−１−（４−ヒドロキシフェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸２−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）エチル
（Ｓ）−２−（カルボキシ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸２−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）エチル（２６６ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）中の溶液に、ＨＢＴＵ（２２４ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（１０３μＬ、０．５９ｍｍｏｌ）を、続いて３−メチルブチルアミン（８２μＬ、０．７１ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（１２３μＬ、０．７１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を一晩撹拌し、そして次いで真空中で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）中に溶解し、そして希クエン酸（２×３０ｍＬ）、食塩水（３０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（３×３０ｍＬ）及び食塩水（３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、そして真空中で濃縮した。残渣を逆相クロマトグラフィーによって精製し、そして真空中で乾燥して、（Ｓ）−２−（イソペンチルカルバモイル）−１−（４−ヒドロキシフェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸２−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）エチル（２１７ｍｇ、７１％）を、白色の泡状物として得た。
【０１１９】
工程５：｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−［（３−メチルブチル）−アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸２−ピペラジン−１−イルエチル二塩酸塩
（Ｓ）−２−（イソペンチルカルバモイル）−１−（４−ヒドロキシ−フェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸２−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）エチル（２１７ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（１０ｍＬ）中に溶解し、そしてチオアニソール（０．５ｍＬ）で、続いてＴＦＡ（３ｍＬ）で処理した。溶液を２時間撹拌し、そして次いで真空中で濃縮した。残渣を酢酸中の０．２ＭのＨＣｌ（１０ｍＬ）中に溶解し、そして真空中で濃縮した。この方法を繰返して、全てのＴＦＡを確実に除去した。残渣をＥｔ２Ｏで摩砕して、白色の固体を得た。この固体を分離用ＨＰＬＣ（水中の５％から１００％迄のアセトニトリルによる勾配溶出）によって精製して、表題化合物（１０７ｍｇ、５２％）を、白色の固体として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度９８．９％（システムＤ、ＲＴ＝６．７２分）；分析用ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＢ、ＲＴ＝４．１８分）、ＥＳ＋：４２１．１［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ２２Ｈ３６Ｎ４Ｏ４に対する計算値：４２０．２７３７、実測値４２０．２７４８。
【０１２０】
実施例５
［（１Ｓ）−２−［ベンジル（メチル）アミノ］−１−（４−ヒドロキシベンジル）−２−オキソエチル］−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル
【０１２１】
【化１６】
2011522813.tif 000018
【０１２２】
（Ｓ）−１−（カルボキシ）−２−（４−ヒドロキシフェニル）エチルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチルの一部（中間体２；３０９ｍｇ、０．９８ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１５ｍＬ）中に溶解し、そしてＮ−メチルベンジルアミン（１４５ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．４０ｍＬ、２．３０ｍｍｏｌ）及びＰｙＢｒＯＰ（４７０ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）で、撹拌しながら０℃で連続して処理した。反応混合物を０℃で５時間保ち、そして次いで室温まで一晩で温まらせた。反応混合物を真空中で濃縮し、そして残渣を逆相クロマトグラフィーによって精製して、［（１Ｓ）−２−［ベンジル（メチル）アミノ］−１−（４−ヒドロキシベンジル）−２−オキソエチル］−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル（１６５ｍｇ、４０％）を、白色の固体として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度９８．２％（システムＤ、ＲＴ＝６．７０分）；分析用ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＢ、ＲＴ＝４．６６分）、ＥＳ＋：４２０．１［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ２４Ｈ２５Ｎ３Ｏ４に対する計算値：４１９．１８４５、実測値４１９．１８５３。
【０１２３】
実施例６
｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−２−［メチル（２−フェニルエチル）アミノ］−２−オキソ−エチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル
【０１２４】
【化１７】
2011522813.tif 000019
【０１２５】
（Ｓ）−１−（カルボキシ）−２−（４−ヒドロキシフェニル）エチルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（中間体２；２９１ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルフェネチルアミン（１４９ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）、ＰｙＢｒＯＰ（４５７ｍｇ、０．９８ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．４０ｍＬ、２．３０ｍｍｏｌ）を、氷水浴中で冷却されたＤＭＦ（１５ｍＬ）中に溶解し、そして一晩撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮した。残渣を６％のＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍＬ）中に懸濁し、そしてＤＣＭ（３×５０ｍＬ）で抽出した。混合した有機層を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、そして真空中で濃縮した。残渣を逆相クロマトグラフィーによって精製して、｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−２−［メチル（２−フェニルエチル）アミノ］−２−オキソ−エチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル（２２１ｍｇ、５５％）を、白色の泡状物として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度９８．４％（システムＤ、ＲＴ＝７．１１分）；分析用ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＢ、ＲＴ＝４．８０分）、ＥＳ＋：４３４．１［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ２５Ｈ２７Ｎ３Ｏ４に対する計算値：４３３．２００２、実測値４３３．２０１２。
【０１２６】
実施例７
｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−２−［メチル（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソ−エチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩
【０１２７】
【化１８】
2011522813.tif 000020
【０１２８】
工程１：（Ｓ）−１−（Ｎ−イソペンチル−Ｎ−メチルカルバモイル）−２−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシフェニル）エチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｏ−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−チロシン（８０５ｍｇ、２．３９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）中の溶液に、Ｎ−メチルイソアミルアミン（２５６ｍｇ、２．５３ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．８５ｍＬ、４．９０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を氷水浴中で冷却し、そしてＰｙＢｒＯＰ（１．１１ｇ、２．４０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃で５時間撹拌し、そして次いで室温まで一晩かけて温まらせた。反応混合物を真空中で濃縮した。残渣を０．２ＭのＨＣｌ水溶液（５０ｍＬ）中に懸濁し、そしてＤＣＭ（３×５０ｍＬ）で抽出した。混合したＤＣＭ抽出物を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、そして真空中で濃縮して、（Ｓ）−１−（Ｎ−イソペンチル−Ｎ−メチルカルバモイル）−２−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシフェニル）エチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（８３２ｍｇ、８３％）を、無色のゴム状物として得た。
【０１２９】
工程２：（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−ヒドロキシフェニル）−Ｎ−イソペンチル−Ｎ−メチルプロパンアミドトリフルオロ酢酸
（Ｓ）−１−（Ｎ−イソペンチル−Ｎ−メチルカルバモイル）−２−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシフェニル）エチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（８３２ｍｇ、１．９８ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（２０ｍＬ）中に溶解し、チオアニソール（１ｍＬ）で、続いてＴＦＡ（５ｍＬ）で処理し、一晩撹拌し、そして次いで真空中で濃縮した。残渣を逆相クロマトグラフィーによって精製し、そして真空中で乾燥して、（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−ヒドロキシフェニル）−Ｎ−イソペンチル−Ｎ−メチルプロパンアミドトリフルオロ酢酸（６４３ｍｇ、８６％）を、淡黄色の固体として得た。
【０１３０】
工程３：｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−２−［メチル（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩
炭酸４−ニトロフェニル（ピリジン−４−イル）メチル（３３７ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−ヒドロキシフェニル）−Ｎ−イソペンチル−Ｎ−メチルプロパンアミドトリフルオロ酢酸（３５９ｍｇ、０．９５ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．４０ｍＬ、２．３０ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（１０ｍｇ）を、ＤＭＦ（１０ｍＬ）中に溶解し、そして室温で一晩撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）中に溶解し、そして飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５×５０ｍＬ）で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、そして真空中で濃縮した。残渣を正常相クロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０％から１０％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）によって、続いて分離用ＨＰＬＣ（水中の５％から１００％迄のアセトニトリルによる勾配溶出）によって精製して、白色の固体を得た。固体をＤＣＭ（１０ｍＬ）中に溶解し、Ｅｔ２Ｏ中の２ＭのＨＣｌ（２ｍＬ）で処理し、そして真空中で乾燥して、表題化合物（１２１ｍｇ、２９％）を、白色の粉末として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度９９．４％（システムＤ、ＲＴ＝６．８０分）；分析用ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＢ、ＲＴ＝４．３６分）、ＥＳ＋：４００．８［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ２２Ｈ２９Ｎ３Ｏ４に対する計算値：３９９．２１５８、実測値３９９．２１７０。
【０１３１】
実施例８
（（１Ｓ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）−１−｛［メチル（２−フェニルエチル）アミノ］−カルボニル｝プロピル）カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩
【０１３２】
【化１９】
2011522813.tif 000021
【０１３３】
工程１：（Ｓ）−１−（メトキシカルボニル）−３−（４−ヒドロキシフェニル）プロピル−カルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル
ホモチロシンメチルエステル塩酸塩（０．２９ｇ、１．１０ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解してから、ＤＩＰＥＡ（０．５７ｍＬ、３．２９ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（３０ｍｇ）を加えた。反応混合物を室温で５分間撹拌し、そして次いで炭酸４−ニトロフェニル（ピリジン−４−イル）メチル（３１６ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を一晩撹拌し、そして次いで真空中で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）中に取込み、そして１ＭのＮａ２ＣＯ３水溶液で、水相の黄色い色が消失するまで洗浄した。有機層を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、そして乾燥状態まで蒸発した。得られた油状物を正常相クロマトグラフィー（１０ｇのシリカカートリッジ、ＤＣＭ中の０％から５％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）によって精製して、（Ｓ）−１−（メトキシカルボニル）−３−（４−ヒドロキシフェニル）プロピルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（２１３ｍｇ、５６％）を得た。
【０１３４】
工程２：（Ｓ）−１−（カルボキシ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）プロピルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル
（Ｓ）−１−（メトキシカルボニル）−３−（４−ヒドロキシフェニル）プロピルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（２１１ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（６ｍＬ）中に溶解し、そしてＬｉＯＨの水中の１Ｍの溶液（１．８４ｍＬ、１．８４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を一晩撹拌した。１ＭのＨＣｌの水溶液（１．８４ｍＬ、１．８４ｍｍｏｌ）を加え、そして反応混合物を真空中で乾燥して、（Ｓ）−１−（カルボキシ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）プロピルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（１３７ｍｇ、６８％）を得た。
【０１３５】
工程３：（（１Ｓ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）−１−｛［メチル（２−フェニルエチル）アミノ］−カルボニル｝プロピル）カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩
（Ｓ）−１−（カルボキシ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）プロピルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（１３７ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルフェネチルアミン（０．１０ｍＬ、０．６９ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．２１ｍＬ、１．２２ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（７．５ｍＬ）中に溶解し、そして０℃に冷却した。ＨＣＴＵ（２６８ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）を加え、そして反応混合物を０℃で２時間、そして次いで室温で４８時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）中に取込み、そして０．２ＭのＨＣｌ水溶液（３×２０ｍＬ）及び食塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、そして真空中で濃縮した。残渣を分離用ＨＰＬＣによって精製した（三回のバッチで）。生成物を含有する画分を混合し、そして分離用ＨＰＬＣによって更に精製した。生成物をＭｅＯＨ（１ｍＬ）中に溶解し、Ｅｔ２Ｏ中の２ＭのＨＣｌ（０．０４ｍＬ、０．０８）で処理し、そして真空中で濃縮して、表題化合物（３５ｍｇ、８％）を、白色の固体として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度９９．８％（システムＥ、ＲＴ＝４．５９分）；分析用ＬＣＭＳ：純度＞９９％（システムＢ、ＲＴ＝４．９７分）、ＥＳ＋：４４８．２［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ２６Ｈ２９Ｎ３Ｏ４に対する計算値：４４７．２１５８、実測値４４７．２１６７。
【０１３６】
実施例９
｛（１Ｓ）−１−（ヒドロキシメチル）−２−［メチル（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソ−エチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル
【０１３７】
【化２０】
2011522813.tif 000022
【０１３８】
工程１：｛（１Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−［メチル（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソ−エチル｝カルバミン酸９Ｈ−フルオレン−９−イルメチル
｛（１Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソ−２−［（４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン−３（４Ｈ）−イル）オキシ］エチル｝カルバミン酸９Ｈ−フルオレン−９−イルメチル（２．１１ｇ、４．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）中の撹拌された溶液に、Ｎ−メチルイソアミルアミン（４４４ｍｇ、４．４ｍｍｏｌ）を加えた。２４時間後、溶媒を真空中で除去した。残渣をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）中に取込み、そして５％のクエン酸の水溶液（５０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（３×５０ｍＬ）及び食塩水（５０ｍＬ）で洗浄した。ＥｔＯＡｃを乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、そして真空中で濃縮した。残渣を逆相クロマトグラフィー、正常相クロマトグラフィー（３５ｇのＲｅｄｉＳｅｐカラム、ＤＣＭ中の０％から５％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）、そして次いで逆相クロマトグラフィーによって精製した。ＨＰＬＣ分析による純度＞９０％の画分を混合し、蒸発し、そして真空中で乾燥して、｛（１Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−［メチル（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸９Ｈ−フルオレン−９−イルメチル（３４５ｍｇ、３５％）を得た。
【０１３９】
工程２：（２Ｓ）−２−アミノ−２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−（３−メチルブチル）アセトアミド
｛（１Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−［メチル（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−カルバミン酸９Ｈ−フルオレン−９−イルメチル（３４５ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）を、ピペリジン（５ｍＬ）及びＤＭＦ（２０ｍＬ）中に溶解し、そして一晩室温で撹拌した。溶媒混合物を真空中で除去した。残渣を逆相クロマトグラフィーによって精製し、そして真空中で乾燥して、（２Ｓ）−２−アミノ−２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−（３−メチルブチル）アセトアミド（１３２ｍｇ、７３％）を得た。
【０１４０】
工程３：｛（１Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−［メチル（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソ−エチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル
（２Ｓ）−２−アミノ−２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−（３−メチルブチル）アセトアミド（１２２ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）及び炭酸４−ニトロフェニル（ピリジン−４−イル）メチル（１３７ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）中の撹拌された溶液に、ＤＭＡＰ（６１ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌し、そして次いで真空中で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）中に取込み、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（６×１００ｍＬ）及び食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、そして真空中で濃縮した。残渣を逆相クロマトグラフィーによって精製し、そして真空中で乾燥して、｛（１Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−［メチル（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル（１７５ｍｇ、９２％）を得た。
【０１４１】
工程４：｛（１Ｓ）−１−（ヒドロキシメチル）−２−［メチル（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩
｛（１Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−［メチル（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル（１７５ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（８ｍＬ）中の溶液に、ＴＦＡ（４ｍＬ）を加えた。反応混合物を一晩室温で撹拌し、そして次いで真空中で濃縮した。残渣をＥｔ２Ｏ中の２ＭのＨＣｌ（２．０ｍＬ、４．０ｍｍｏｌ）及び酢酸（１０ｍＬ）中に溶解し、そして次いで真空中で乾燥した。ＨＣｌ及び酢酸混合物の添加及びその後の蒸発を繰返した。残渣を逆相クロマトグラフィーで、そして次いで分離用ＨＰＬＣによって精製した。純粋な画分を混合し、そして真空中の４５℃で１週間乾燥して、表題化合物（７０ｍｇ、４７％）を、白色の結晶質の固体として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度９９．１％（システムＥ、ＲＴ＝３．７１分）；分析用ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＢ、ＲＴ＝４．２８分）、ＥＳ＋：３２３．９［ＭＨ］＋。
【０１４２】
実施例１０
｛（１Ｓ）−１−メチル−２−［メチル（２−フェニルエチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩
【０１４３】
【化２１】
2011522813.tif 000023
【０１４４】
工程１：｛（１Ｓ）−１−メチル−２−［メチル（２−フェニルエチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アラニン（５８３ｍｇ、３．０８ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルフェネチルアミン（０．５０ｍＬ、３．４４ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．６０ｍＬ、３．４５ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（２５ｍＬ）中に溶解し、そして氷水浴で冷却した。ＰｙＢｒＯＰ（１．４７ｇ、３．１５ｍｍｏｌ）を加え、そして反応混合物を５時間冷たく保ち、そして次いで室温まで一晩で温まらせた。反応混合物を真空中で濃縮し、そして残渣を逆相クロマトグラフィーによって精製して、｛（１Ｓ）−１−メチル−２−［メチル（２−フェニルエチル）アミノ］−２−オキソ−エチル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（７９１ｍｇ、８４％）を、無色の油状物として得た。
【０１４５】
工程２：Ｎ−メチル−Ｎ−（２−フェニルエチル）−Ｌ−アラニンアミド
｛（１Ｓ）−１−メチル−２−［メチル（２−フェニルエチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（７９１ｍｇ、２．５８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）中の溶液を、ＴＦＡ（５ｍＬ）で処理し、そして２．５時間室温で撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮した。残渣を２ＭのＮａＯＨ水溶液（５０ｍＬ）中に溶解し、そしてＤＣＭ（３×５０ｍＬ）で抽出した。混合したＤＣＭ抽出物を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、そして真空中で濃縮して、Ｎ−メチル−Ｎ−（２−フェニルエチル）−Ｌ−アラニンアミド（５０６ｍｇ、９５％）を、淡黄色の油状物として得た。
【０１４６】
工程３：｛（１Ｓ）−１−メチル−２−［メチル（２−フェニルエチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩
Ｎ−メチル−Ｎ−（２−フェニルエチル）−Ｌ−アラニンアミド（５０６ｍｇ、２．４５ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１０ｍＬ）中に溶解し、そしてＤＩＰＥＡ（０．５０ｍＬ、２．８８ｍｍｏｌ）、炭酸４−ニトロフェニル（ピリジン−４−イル）メチル（６８６ｍｇ、２．５０ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（１０ｍｇ）で処理した。反応混合物を４日間撹拌し、そして次いで真空中で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）中に溶解し、１ＭのＮａ２ＣＯ３水溶液（５×２５ｍＬ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、そして真空中で濃縮した。残渣を正常相クロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０％から５％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）で、そして次いで分離用ＨＰＬＣ（三回のバッチで）によって精製して、無色の油状物を得た。この油状物をＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、Ｅｔ２Ｏ中の２ＭのＨＣｌ（１ｍＬ）を加えることによってＨＣｌ塩を調製し、そして真空中で乾燥して、表題化合物（１９７ｍｇ、２１％）を、白色の粉末として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度１００％（システムＥ、ＲＴ＝４．２０分）；分析用ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＢ、ＲＴ＝４．７０分）、ＥＳ＋：３４１．９［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ１９Ｈ２３Ｎ３Ｏ３に対する計算値：３４１．１７３９、実測値３４１．１７５４。
【０１４７】
実施例１１
｛（１Ｓ）−１−ベンジル−２−［メチル（２−フェニルエチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩
【０１４８】
【化２２】
2011522813.tif 000024
【０１４９】
（Ｓ）−１−（カルボキシ）−２−フェニルエチルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（中間体３；０．２４ｇ、０．８０ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（８ｍＬ）中に溶解し、そして０℃に冷却した。ＤＩＰＥＡ（０．２８ｍＬ、１．６０ｍｍｏｌ）及びＨＣＴＵ（０．３３ｇ、０．８０ｍｍｏｌ）を、続いてＮ−メチルフェネチルアミン（１１６μＬ、０．８０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温まで温まらせ、そして２２時間撹拌してから、真空中で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）中に取込み、そして１Ｍのクエン酸水溶液（３×１０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（３×１０ｍＬ）及び食塩水（１０ｍＬ）で洗浄した。ＥｔＯＡｃ相を真空中で濃縮し、そして残渣を逆相クロマトグラフィーによって精製した。得られた無色の油状物をＤＣＭ（５ｍＬ）及びＥｔ２Ｏ中の２ＭのＨＣｌ（０．０９ｍＬ、０．１８ｍｍｏｌ）中に溶解した。溶液を真空中で乾燥状態まで蒸発して、｛（１Ｓ）−１−ベンジル−２−［メチル（２−フェニルエチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩（０．０７９ｇ、２２％）を、吸湿性の白色の固体として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度９９．６％（システムＥ、ＲＴ＝５．００分）；分析用ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＢ、ＲＴ＝５．５１分）、ＥＳ＋：４１８．２［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ２５Ｈ２７Ｎ３Ｏ３に対する計算値：４１７．２０５２、実測値４１７．２０５８。
【０１５０】
実施例１２
［（１Ｓ）−１−ベンジル−２−（ジメチルアミノ）−２−オキソエチル］カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩
【０１５１】
【化２３】
2011522813.tif 000025
【０１５２】
（Ｓ）−１−（カルボキシ）−２−フェニルエチルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（中間体３；０．３０ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．３５ｍＬ、２．０ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（２ｍＬ）中に溶解し、そして０℃に撹拌しながら冷却した。ＨＣＴＵ（ＤＭＦ中の０．２Ｍ、５．０ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）を加え、続いてジメチルアミン（０．０５３ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）を５分後に加えた。反応混合物を２２時間室温で撹拌してから、真空中で濃縮した。残渣をＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、そして水（５ｍＬ）及び飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５ｍＬ）で洗浄した。ＤＣＭを真空中で除去し、そして粗製の生成物を正常相カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０％から５％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）及び逆相クロマトグラフィーによって精製した。得られた無色の油状物をアセトニトリル（５ｍＬ）、及びＥｔ２Ｏ中の２ＭのＨＣｌ（０．２５ｍＬ、０．５０ｍｍｏｌ）中に溶解した。溶液を真空中で濃縮して、［（１Ｓ）−１−ベンジル−２−（ジメチルアミノ）−２−オキソエチル］カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩（０．１６１ｇ、４４％）を、白色の固体として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度９９．４％（システムＥ、ＲＴ＝３．９８分）；分析用ＬＣＭＳ：純度９９％（システムＢ、ＲＴ＝４．３９分）、ＥＳ＋：３２８．９［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ１８Ｈ２１Ｎ３Ｏ３に対する計算値：３２７．１５８３、実測値３２７．１５９３。
【０１５３】
実施例１３
｛（１Ｓ）−１−ベンジル−２−［（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩
【０１５４】
【化２４】
2011522813.tif 000026
【０１５５】
（Ｓ）−１−（カルボキシ）−２−フェニルエチルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（中間体３；０．３０ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．３５ｍＬ、２．０ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（５ｍＬ）中に溶解し、そして０℃に撹拌しながら冷却した。ＴＢＴＵ（０．３２ｇ、１．０ｍｍｏｌ）を加え、続いてイソアミルアミン（０．１１６ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）を５分後に加えた。反応混合物を２２時間室温で撹拌してから、真空中で濃縮した。残渣をＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、そして水（５ｍＬ）及び飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５ｍＬ）で洗浄した。ＤＣＭを真空中で除去し、そして粗製の生成物を正常相カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０％から５％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）によって精製した。純粋な画分を混合し、そして真空中で濃縮した。得られた白色の固体をアセトニトリル（５ｍＬ）及びＥｔ２Ｏ中の２ＭのＨＣｌ（０．２８ｍＬ、０．６ｍｍｏｌ）中に溶解した。溶液を真空中で濃縮して、｛（１Ｓ）−１−ベンジル−２−［（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩（２１８ｍｇ、５４％）を、白色の固体として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度９９．７％（システムＥ、ＲＴ＝４．７６分）；分析用ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＢ、ＲＴ＝５．２５分）、ＥＳ＋：３７０．２［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ２１Ｈ２７Ｎ３Ｏ３に対する計算値：３６９．２０５２、実測値３６９．２０６２。
【０１５６】
実施例１４
｛（１Ｓ）−１−ベンジル−２−［イソプロピル（メチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩
【０１５７】
【化２５】
2011522813.tif 000027
【０１５８】
（Ｓ）−１−（カルボキシ）−２−フェニルエチルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（中間体３；０．３０ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．３５ｍＬ、２．０ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（５ｍＬ）中に溶解し、そして０℃に撹拌しながら冷却した。ＨＣＴＵ（０．４１３ｇ、１．０ｍｍｏｌ）を加え、続いてＮ−メチルイソプロピルアミン（０．１０４ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）を５分後に加えた。反応混合物を２２時間室温で撹拌してから、真空中で濃縮した。残渣をＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、そして水（５ｍＬ）及び飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５ｍＬ）で洗浄した。ＤＣＭを真空中で除去し、そして残渣を正常相クロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０％から５％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）及び逆相クロマトグラフィーによって精製した。純粋な画分を混合し、そして真空中で濃縮した。得られた白色の固体をアセトニトリル（５ｍＬ）及びＥｔ２Ｏ中の２ＭのＨＣｌ（０．２ｍＬ、０．４ｍｍｏｌ）中に溶解した。溶液を真空中で濃縮して、｛（１Ｓ）−１−ベンジル−２−［イソプロピル−（メチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩（１５８ｍｇ、４０％）を、白色の固体として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度９９．２％（システムＥ、ＲＴ＝４．４５分）；分析用ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＢ、ＲＴ＝４．９６分）、ＥＳ＋：３５６．９［Ｍ＋２Ｈ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ２０Ｈ２５Ｎ３Ｏ３に対する計算値：３５５．１８９６、実測値３５５．１９０８。
【０１５９】
実施例１５
｛（１Ｓ）−１−ベンジル−２−［（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩
【０１６０】
【化２６】
2011522813.tif 000028
【０１６１】
（Ｓ）−１−（カルボキシ）−２−フェニルエチルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（中間体３；０．３０ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．３５ｍＬ、２．０ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（５ｍＬ）中に溶解し、そして０℃に撹拌しながら冷却した。ＴＢＴＵ（０．３２ｇ、１．０ｍｍｏｌ）を加え、続いて１−アミノ−３，３−ジメチル−ブタン−２−オン（０．１１５ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を５分後に加えた。反応混合物を２２時間室温で撹拌してから、真空中で濃縮した。残渣をＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、そして水（５ｍＬ）及び飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５ｍＬ）で洗浄した。ＤＣＭを真空中で除去し、そして粗製の生成物を正常相カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０％から５％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）によって精製した。純粋な画分を混合し、そして真空中で濃縮した。得られた白色の固体をアセトニトリル（５ｍＬ）及びＥｔ２Ｏ中の２ＭのＨＣｌ（０．３ｍｌ、０．６ｍｍｏｌ）中に溶解した。溶液を真空中で濃縮して、｛（１Ｓ）−１−ベンジル−２−［（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩（１６２ｍｇ、３７％）を、白色の固体として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度９９．０％（システムＥ、ＲＴ＝４．５１分）；分析用ＬＣＭＳ：純度９９％（システムＢ、ＲＴ＝５．０１分）、ＥＳ＋：３９８．２［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ２２Ｈ２７Ｎ３Ｏ４に対する計算値：３９７．２００２、実測値３９７．２０１４。
【０１６２】
実施例１６
｛（１Ｓ）−１−ベンジル−２−［（２，２−ジフルオロエチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩
【０１６３】
【化２７】
2011522813.tif 000029
【０１６４】
（Ｓ）−１−（カルボキシ）−２−フェニルエチルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（中間体３；０．３０ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．３５ｍＬ、２．０ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（５ｍＬ）中に溶解し、そして０℃に撹拌しながら冷却した。ＴＢＴＵ（ＤＭＦ中の０．２Ｍ、５．０ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）を加え、続いて２，２−ジフルオロエチルアミン（０．０８１ｇ、１．０ｍｍｏｌ）を５分後に加えた。反応混合物を２２時間室温で撹拌してから、真空中で濃縮した。残渣をＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、そして水（５ｍＬ）及び飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５ｍＬ）で洗浄した。ＤＣＭを真空中で除去し、そして粗製の生成物を正常相カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０％から５％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）によって精製した。純粋な画分を混合し、そして真空中で濃縮した。得られた白色の固体をアセトニトリル（５ｍＬ）及びＥｔ２Ｏ中の２ＭのＨＣｌ（０．２４ｍＬ、０．４８ｍｍｏｌ）中に溶解した。溶液を真空中で濃縮して、｛（１Ｓ）−１−ベンジル−２−［（２，２−ジフルオロエチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩（０．１９２ｇ、４８％）を、白色の結晶質の固体として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度９７．７％（システムＥ、ＲＴ＝４．０５分）；分析用ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＢ、ＲＴ＝４．５９分）、ＥＳ＋：３６４．１［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ１８Ｈ１９Ｆ２Ｎ３Ｏ３に対する計算値：３６３．１３９４、実測値３６３．１４０６。
【０１６５】
実施例１７
（（１Ｓ）−１−ベンジル−２−オキソ−２−｛［（２Ｓ）−テトラヒドロフラン−２−イルメチル］アミノ｝−エチル）カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩
【０１６６】
【化２８】
2011522813.tif 000030
【０１６７】
（Ｓ）−１−（カルボキシ）−２−フェニルエチルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（中間体３；０．３０ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．３５ｍＬ、２．０ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（５ｍＬ）中に溶解し、そして０℃に撹拌しながら冷却した。ＴＢＴＵ（ＤＭＦ中の０．２Ｍ、５．０ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）を加え、続いて（Ｓ）−（＋）−テトラヒドロフルフリルアミン（０．１０３ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）を５分後に加えた。反応混合物を２２時間室温で撹拌してから、真空中で濃縮した。残渣をＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、そして水（５ｍＬ）及び飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５ｍＬ）で洗浄した。ＤＣＭを真空中で除去し、そして粗製の生成物を正常相カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０％から５％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）によって精製した。純粋な画分を混合し、そして真空中で濃縮した。得られた白色の固体をアセトニトリル（５ｍＬ）及びＥｔ２Ｏ中の２ＭのＨＣｌ（０．１２ｍＬ、０．２４ｍｍｏｌ）中に溶解した。溶液を真空中で濃縮して、（（１Ｓ）−１−ベンジル−２−オキソ−２−｛［（２Ｓ）−テトラヒドロフラン−２−イルメチル］アミノ｝エチル）カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩（０．０９１ｇ、２２％）を、白色の結晶質の固体として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度１００％（システムＥ、ＲＴ＝３．９８分）；分析用ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＢ、ＲＴ＝４．４７分）、ＥＳ＋：３８４．２［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ２１Ｈ２５Ｎ３Ｏ４に対する計算値：３８３．１８４５、実測値３８３．１８５５。
【０１６８】
実施例１８
（（１Ｓ）−１−ベンジル−２−オキソ−２−｛［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イルメチル］アミノ｝エチル）カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩
【０１６９】
【化２９】
2011522813.tif 000031
【０１７０】
（Ｓ）−１−（カルボキシ）−２−フェニルエチルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（中間体３；０．３０ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．３５ｍＬ、２．０ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（５ｍＬ）中に溶解し、そして０℃に撹拌しながら冷却した。ＴＢＴＵ（０．３２ｇ、１．０ｍｍｏｌ）を加え、続いて（Ｒ）−（−）−テトラヒドロフルフリルアミン（０．１０３ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）を５分後に加えた。反応混合物を２２時間室温で撹拌してから、真空中で濃縮した。残渣をＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、そして水（５ｍＬ）及び飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５ｍＬ）で洗浄した。ＤＣＭを真空中で除去し、そして残渣を正常相クロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０％から５％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）及び逆相クロマトグラフィーによって精製した。純粋な画分を混合し、そして真空中で濃縮した。得られた白色の固体をアセトニトリル（５ｍＬ）及びＥｔ２Ｏ中の２ＭのＨＣｌ（０．２２ｍＬ、０．４４ｍｍｏｌ）中に溶解した。溶液を真空中で濃縮して、（（１Ｓ）−１−ベンジル−２−オキソ−２−｛［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イルメチル］アミノ｝エチル）カルバミン酸塩酸塩（１７５ｍｇ、４２％）を、白色の固体として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度９９．７％（システムＥ、ＲＴ＝４．０１分）；分析用ＬＣＭＳ：純度９９％（システムＢ、ＲＴ＝４．４４分）、ＥＳ＋：３８４．９［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ２１Ｈ２５Ｎ３Ｏ４に対する計算値：３８３．１８４５、実測値３８３．１８５３。
【０１７１】
実施例１９
［（１Ｓ）−１−ベンジル−２−モルホリン−４−イル−２−オキソエチル］カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩
【０１７２】
【化３０】
2011522813.tif 000032
【０１７３】
（Ｓ）−１−（カルボキシ）−２−フェニルエチルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（中間体３；０．３０ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．３５ｍＬ、２．０ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（５ｍＬ）中に溶解し、そして０℃に撹拌しながら冷却した。ＨＣＴＵ（ＤＭＦ中の０．２Ｍ、５．０ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）を加え、続いてモルホリン（０．０８７ｍＬ、１ｍｍｏｌ）を５分後に加えた。反応混合物を２２時間室温で撹拌してから、真空中で濃縮した。残渣をＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、そして水（５ｍＬ）及び飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５ｍＬ）で洗浄した。ＤＣＭを真空中で除去し、そして残渣を正常相クロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０％から５％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）及び分離用ＨＰＬＣによって精製した。得られた無色の油状物をアセトニトリル（５ｍＬ）及びＥｔ２Ｏ中の２ＭのＨＣｌ（０．１３ｍＬ、０．２６ｍｍｏｌ）中に溶解した。溶液を真空中で濃縮して、［（１Ｓ）−１−ベンジル−２−モルホリン−４−イル−２−オキソエチル］カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩（０．１０６ｇ、２６％）を、白色の固体として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度１００％（システムＥ、ＲＴ＝３．９０分）；分析用ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＢ、ＲＴ＝４．３９分）、ＥＳ＋：３７０．９［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ２０Ｈ２３Ｎ３Ｏ４に対する計算値：３６９．１６８９、実測値３６９．１７０４。
【０１７４】
実施例２０
｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−［（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩
【０１７５】
【化３１】
2011522813.tif 000033
【０１７６】
（Ｓ）−２−（カルボキシ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（中間体４；４．４５ｇ、１３．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１００ｍＬ）中の撹拌された溶液に、固体のＴＢＴＵ（４．３３ｇ、１３．５ｍｍｏｌ）を、続いてＤＩＰＥＡ（２．３５ｍＬ、１３．５ｍｍｏｌ）を加えた。透明な溶液が得られた時点で、３−メチルブチルアミン（１．８８ｍＬ、１６．２ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡの更なる部分（２．８２ｍＬ、１６．２ｍｍｏｌ）を加えた。一晩周囲温度で撹拌した後、溶媒を真空中で除去した。残渣をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）中に取込み、そして食塩水（１００ｍＬ）で、強烈な黄色い色が治まるまで飽和ＫＨＣＯ３水溶液（５×１５０ｍＬ）で、そして食塩水（１００ｍＬ）で連続して洗浄した。有機層を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、そして真空中で濃縮した。所望の生成物をＥｔＯＡｃから結晶させ、そして濾過、それに続く真空中の乾燥により、（Ｓ）−２−（イソペンチルカルバモイル）−１−（４−ヒドロキシフェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（４．１０ｇ、７６％）を、白色の固体として得た。濾液を正常相クロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０％から５％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）によって精製した。生成物をＥｔＯＡｃから再結晶させ、そして真空中で乾燥して、更なる（Ｓ）−２−（イソペンチルカルバモイル）−１−（４−ヒドロキシフェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（０．８５ｇ、１６％）を、白色の固体（合計収率９２％）として得た。
【０１７７】
（Ｓ）−２−（イソペンチルカルバモイル）−１−（４−ヒドロキシフェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（１０．８５ｇ、２７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５００ｍＬ）及びＭｅＯＨ（１００ｍＬ）中の激しく撹拌された溶液に、Ｅｔ２Ｏ中の２ＭのＨＣｌ（２０ｍＬ、４０ｍｍｏｌ、過剰）を加えた。得られた透明な溶液を真空中で濃縮して、｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−［（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩（１１．９ｇ、定量的）を、白色の泡状物として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度１００％（システムＥ、ＲＴ＝４．３３分）；分析用ＬＣＭＳ：純度９９．７％（システムＢ、ＲＴ＝４．８１分）、ＥＳ＋：４００．６［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ２２Ｈ２９Ｎ３Ｏ４に対する計算値：３９９．２１５８、実測値３９９．２１７５。
【０１７８】
実施例２１
［（１Ｓ）−２−（ベンジルアミノ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−オキソエチル］−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル
【０１７９】
【化３２】
2011522813.tif 000034
【０１８０】
（Ｓ）−２−（カルボキシ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（中間体４；１００ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（５２μＬ、０．３０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）中の撹拌された溶液に、固体のＨＢＴＵ（１１４ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）を、続いてベンジルアミン（３９μＬ、０．３６ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（６３μＬ、０．３６ｍｍｏｌ）を加えた。一晩室温で撹拌した後、ＤＭＦを真空中で除去した。残渣をＥｔＯＡｃ中に取込み、そして希クエン酸（×２）、食塩水、Ｎａ２ＣＯ３水溶液（×２）、食塩水で洗浄した。ＥｔＯＡｃ相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、そして真空中で濃縮した。残渣を正常相クロマトグラフィー（１０ｇのＲｅｄｉＳｅｐカラム、１５ｍＬ／分のＤＣＭ中の０％から５％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）及び逆相クロマトグラフィーによって精製した。純粋な画分を混合し、そして真空中で乾燥して、［（１Ｓ）−２−（ベンジルアミノ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−オキソエチル］カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル（６４ｍｇ、５０％）を、無色のガラス状物として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度１００％（システムＤ、ＲＴ＝５．９２分）；分析用ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＢ、ＲＴ＝４．５３分）、ＥＳ＋：４２０．１［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  に対する計算値Ｃ２４Ｈ２５Ｎ３Ｏ４：４１９．１８４５、実測値４１９．１８４６。
【０１８１】
実施例２２
（（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−オキソ−２−｛［（１Ｓ）−１−フェニル−エチル］アミノ｝エチル）カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩
【０１８２】
【化３３】
2011522813.tif 000035
【０１８３】
（Ｓ）−２−（カルボキシ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（中間体４；０．１８９ｇ、０．５７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（６．５ｍｍｏｌ）中の撹拌された溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．２００ｍＬ、１．１４ｍｍｏｌ）を、続いて（Ｓ）−メチルベンジルアミン（０．０７７ｍＬ、０．６０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃に冷却し、続いてＨＢＴＵ（０．２１７ｇ、０．５７ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を０℃で３時間、そして次いで一晩室温で撹拌したまま放置した。揮発性物質を真空中で除去し、そして得られた残渣をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）中に取込み、そして０．２ＭのＨＣｌ水溶液（３×２０ｍＬ）及び食塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、そして乾燥状態まで蒸発して、黄色の油状物を得て、これを分離用ＨＰＬＣによって精製した。生成物をＭｅＯＨ（１ｍＬ）中に溶解し、そしてＥｔ２Ｏ中の２ＭのＨＣｌ（１ｍＬ）を加えた。得られた透明な溶液を真空中で濃縮し、そして真空オーブン中で４５℃で乾燥して、（（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−オキソ−２−｛［（１Ｓ）−１−フェニルエチル］アミノ｝エチル）カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩（０．０５２ｇ、１９％）を、白色の固体として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度１００％（システムＥ、ＲＴ＝４．３５分）；分析用ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＢ、ＲＴ＝４．７９分）、ＥＳ＋：４３４．２［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ２５Ｈ２７Ｎ３Ｏ４に対する計算値：４３３．２００２、実測値４３３．２０１１。
【０１８４】
実施例２３
｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−［メチル（２−フェニルエチル）−アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル
【０１８５】
【化３４】
2011522813.tif 000036
【０１８６】
（Ｓ）−２−（カルボキシ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（中間体４；０．２４ｇ、０．７２ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルフェネチルアミン（０．１２５ｍＬ、０．８６ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．３７ｍＬ、２．１６ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１０ｍＬ）中に溶解し、そして０℃に冷却し、続いてＰｙＢｒＯＰ（３３５ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃に５時間保ち、そして室温に一晩で温まらせたまま放置した。揮発性物質を真空中で除去した。黄色の残渣をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）中に取込み、そして０．５ＭのＨＣｌ水溶液（３×２０ｍＬ）及び食塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、そして真空中で濃縮して、黄色の油状物を得た。油状物を正常相クロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０％から４％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）及び逆相クロマトグラフィーによって精製して、｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−［メチル（２−フェニルエチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル（４４ｍｇ、１４％）を、白色の固体として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度９９．６％（システムＥ、ＲＴ＝４．５２分）；分析用ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＢ、ＲＴ＝４．９６分）、ＥＳ＋：４４８．１［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ２６Ｈ２９Ｎ３Ｏ４に対する計算値：４４７．２１５８、実測値４４７．２１６４。
【０１８７】
実施例２４
｛（１Ｓ）−１−ベンジル−１−メチル−２−［（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩
【０１８８】
【化３５】
2011522813.tif 000037
【０１８９】
工程１：（２Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−３−フェニルプロパン酸メチル塩酸塩
（２Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−３−フェニルプロパン酸（１．４５ｇ、８．１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中の懸濁液に、塩化チオニル（１．８０ｍＬ、２４．７ｍｍｏｌ）を注意深く加えた。反応物を３週間室温で撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮して、（２Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−３−フェニルプロパン酸メチル塩酸塩（１．８６ｇ、１００％）を、橙褐色の固体として得た。
【０１９０】
工程２：（Ｓ）−２−（メトキシカルボニル）−１−フェニルプロパン−２−イルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル
（２Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−３−フェニルプロパン酸メチル塩酸塩（０．５３６ｇ、２．３５ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（１．０ｍＬ、５．７６ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１５ｍＬ）中に溶解してから、炭酸４−ニトロフェニル（ピリジン−４−イル）メチル（０．６４ｇ、２．３５ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（１０ｍｇ）を加えた。反応物を一晩室温で撹拌し、そして次いで真空中で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）中に溶解し、そして１ＭのＮａ２ＣＯ３水溶液（５×２５ｍＬ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、そして乾燥状態まで蒸発した。得られた油状物を正常相クロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０％から５％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）によって精製して、（Ｓ）−２−（メトキシカルボニル）−１−フェニルプロパン−２−イルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（５３８ｍｇ、１．６４ｍｍｏｌ、６８％）を、淡黄色の油状物として得た。
【０１９１】
工程３：（Ｓ）−２−（カルボキシ）−１−フェニルプロパン−２−イルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル
（Ｓ）−２−（メトキシカルボニル）−１−フェニルプロパン−２−イルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（５２８ｍｇ、１．６１ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（２０ｍＬ）中に溶解し、そしてＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（３００ｍｇ、７．１４ｍｍｏｌ）の水（５ｍＬ）中の溶液を加えた。反応物を一晩撹拌したまま放置してから、酢酸（１ｍＬ）を加えた。混合物を真空中で濃縮し、そして残渣を逆相クロマトグラフィーによって精製して、（Ｓ）−２−（カルボキシ）−１−フェニルプロパン−２−イルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（２６７ｍｇ、５３％）を、白色の固体として得た。
【０１９２】
工程４：｛（１Ｓ）−１−ベンジル−１−メチル−２−［（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩
（Ｓ）−２−（カルボキシ）−１−フェニルプロパン−２−イルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル（２６７ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．２５ｍＬ、１．４４ｍｍｏｌ）及び３−メチルブチルアミン（０．１３５ｍＬ、１．１７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）中の撹拌された溶液に、固体のＴＢＴＵ（３００ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）を加えた。一晩室温で撹拌した後、溶媒を真空中で除去した。残渣を逆相クロマトグラフィーによって精製し、そして真空中で乾燥した。残渣をＥｔ２Ｏ（５ｍＬ）中に溶解し、そしてＥｔ２Ｏ中の２ＭのＨＣｌ（１ｍＬ）で処理して、表題化合物（２７５ｍｇ、７６％）を、白色の固体として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度９９．６％（システムＥ、ＲＴ＝４．８５分）；分析用ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＢ、ＲＴ＝５．４０分）、ＥＳ＋：３８４．１［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ２２Ｈ２９Ｎ３Ｏ３に対する計算値：３８３．２２０９、実測値３８３．２２１４。
【０１９３】
実施例２５
｛１，１−ジメチル−２−［（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩
【０１９４】
【化３６】
2011522813.tif 000038
【０１９５】
工程１：２−（イソペンチルカルバモイル）プロパン−２−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−メチルアラニン（１．５３ｇ、７．５ｍｍｏｌ）、３−メチルブチルアミン（１．０ｍＬ、８．６ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（１．５ｍＬ、８．６ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（２５ｍＬ）中に溶解した。ＴＢＴＵ（２．４１ｇ、７．５ｍｍｏｌ）を加え、そして反応混合物を一晩撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮し、そして残渣を逆相クロマトグラフィーによって精製して、２−（イソペンチルカルバモイル）プロパン−２−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．８９ｇ、９２％）を、白色の固体として得た。
【０１９６】
工程２：２−アミノ−Ｎ−イソペンチル−２−メチルプロパンアミド
２−（イソペンチルカルバモイル）プロパン−２−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．８９ｇ、６．９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５０ｍＬ）中の溶液に、ＴＦＡ（１０ｍＬ）を加え、そして３時間室温で撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮し、そして残渣を１ＭのＮａ２ＣＯ３水溶液（５０ｍＬ）中に溶解し、そしてＤＣＭ（３×５０ｍＬ）で抽出した。混合した有機層を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、そして真空中で濃縮して、２−アミノ−Ｎ−イソペンチル−２−メチルプロパンアミド（１．０６ｇ、８９％）を、淡オレンジ色の油状物として得た。
【０１９７】
工程３：｛１，１−ジメチル−２−［（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸ピリジン−４−イルメチル塩酸塩
２−アミノ−Ｎ−イソペンチル−２−メチルプロパンアミドの一部（２７３ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（５ｍＬ）中に溶解し、そしてＤＩＰＥＡ（０．３５ｍＬ、２．０ｍｍｏｌ）、炭酸４−ニトロフェニル（ピリジン−４−イル）メチル（４９３ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（１０ｍｇ）で処理した。反応混合物を３日間撹拌してから、真空中で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）中に溶解し、１ＭのＮａ２ＣＯ３水溶液（５×２５ｍＬ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、そして真空中で濃縮した。残渣を正常相クロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０％から５％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）によって精製して、無色の油状物を得た。この油状物をＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、Ｅｔ２Ｏ中の２ＭのＨＣｌ（１ｍＬ）で処理し、そして真空中で濃縮して、表題化合物（３０７ｍｇ、５６％）を、白色の粉末として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度９９．３％（システムＥ、ＲＴ＝３．８６分）；分析用ＬＣＭＳ：純度９８．５％（システムＢ、ＲＴ＝４．３２分）、ＥＳ＋：３０８．０［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ１６Ｈ２５Ｎ３Ｏ３に対する計算値：３０７．１８９６、実測値３０７．１８９７。
【０１９８】
実施例２６
｛１，１−ジメチル−２−［（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソ−エチル｝カルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル塩酸塩
【０１９９】
【化３７】
2011522813.tif 000039
【０２００】
２−（カルボキシ）プロパン−２−イルカルバミン酸２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル（中間体５；３００ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．５２ｍＬ、３．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）中の０℃の撹拌された溶液に、イソアミルアミン（０．１１６ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）及び固体のＴＢＴＵ（３２１ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を加えた。一晩室温で撹拌した後、ＤＭＦを真空中で除去した。残渣をＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、そして水（５ｍＬ）及び飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５ｍＬ）で洗浄した。有機相を真空中で濃縮し、そして残渣を正常相クロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０％から２％のＭｅＯＨによる勾配溶出）及び分離用ＨＰＬＣによって精製した。純粋な画分を混合し、そして真空中で濃縮した。得られた白色の固体をＭｅＯＨ（３ｍＬ）中に溶解し、Ｅｔ２Ｏ中の２ＭのＨＣｌ（０．２５ｍＬ、０．５ｍｍｏｌ）を加え、そして溶液を真空中で濃縮して、｛１，１−ジメチル−２−［（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル塩酸塩（６３ｍｇ、１７％）を、白色の固体として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度９９．８％（システムＥ、ＲＴ＝４．０６分）；分析用ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＣ、ＲＴ＝５．６５分）、ＥＳ＋：３３６．５［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ１８Ｈ２９Ｎ３Ｏ３に対する計算値：３５５．２２０９、実測値３５５．２２１２。
【０２０１】
実施例２７
｛１，１−ジメチル−２−［メチル（３−メチルブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル塩酸塩
【０２０２】
【化３８】
2011522813.tif 000040
【０２０３】
２−（カルボキシ）プロパン−２−イルカルバミン酸２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル（中間体５；３００ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．５２ｍＬ、３．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）中の０℃の撹拌された溶液に、Ｎ−メチルイソアミルアミン（１０１ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）及び固体のＨＢＴＵ（３７９ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を加えた。一晩周囲温度で撹拌した後、ＤＭＦを真空中で除去した。残渣をＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、そして水（５ｍＬ）及び飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５ｍＬ）で洗浄した。有機相を真空中で濃縮し、そして残渣を正常相クロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０％から２％のＭｅＯＨによる勾配溶出）及び分離用ＨＰＬＣによって精製した。得られた無色の油状物をＤＣＭ（３ｍＬ）中に溶解し、Ｅｔ２Ｏ中の２ＭのＨＣｌ（０．５ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）を加え、そして溶液を真空中で濃縮して、｛１，１−ジメチル−２−［メチル（３−メチルブチル）−アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル塩酸塩（１２９ｍｇ、３３％）を、白色の固体として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度１００％（システムＥ、ＲＴ＝４．２６分）；分析用ＬＣＭＳ：純度９７．９％（システムＣ、ＲＴ＝５．８０分）、ＥＳ＋：３５０．５［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ１９Ｈ３１Ｎ３Ｏ３に対する計算値：３４９．２３６５、実測値３４９．２３６４。
【０２０４】
実施例２８
（１，１−ジメチル−２−モルホリン−４−イル−２−オキソエチル）−カルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル塩酸塩
【０２０５】
【化３９】
2011522813.tif 000041
【０２０６】
２−（カルボキシ）プロパン−２−イルカルバミン酸２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル（中間体５；３００ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．５２ｍＬ、３．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）中の０℃の撹拌された溶液に、モルホリン（０．０８７ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）及び固体のＨＢＴＵ（３７９ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を加えた。一晩室温で撹拌した後、ＤＭＦを真空中で除去した。残渣をＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、そして水（５ｍＬ）及び飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５ｍＬ）で洗浄した。有機相を真空中で濃縮し、そして残渣を正常相クロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０％から５％のＭｅＯＨによる勾配溶出）及び分離用ＨＰＬＣによって精製した。得られた無色の油状物をＭｅＯＨ（３ｍＬ）中に溶解し、Ｅｔ２Ｏ中の２ＭのＨＣｌ（０．２５ｍＬ、０．５ｍｍｏｌ）を加え、そして溶液を真空中で濃縮して、（１，１−ジメチル−２−モルホリン−４−イル−２−オキソエチル）カルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル塩酸塩（２１ｍｇ、６％）を、白色の固体として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度９９．８％（システムＥ、ＲＴ＝３．０９分）；分析用ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＣ、ＲＴ＝４．６５分）、ＥＳ＋：３３６．４［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  に対する計算値Ｃ１７Ｈ２５Ｎ３Ｏ４：３３５．１８４５、実測値３３５．１８５４。
【０２０７】
実施例２９
｛２−［（２Ｒ，６Ｓ）−２，６−ジメチルモルホリン−４−イル］−１，１−ジメチル−２−オキソエチル｝カルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル
【０２０８】
【化４０】
2011522813.tif 000042
【０２０９】
２−（カルボキシ）プロパン−２−イルカルバミン酸２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル（中間体５；６０４ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（１．０ｍＬ、６．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）中の０℃の撹拌された溶液に、ｃｉｓ−２，６−ジメチルモルホリン（０．２４６ｍＬ、２．０ｍｍｏｌ）及び固体のＨＣＴＵ（８２７ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）を加えた。一晩室温で撹拌した後、ＤＭＦを真空中で除去し、そして残渣を正常相クロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０％から５％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）及び逆相クロマトグラフィーによって精製した。純粋な画分を混合し、そして真空中で濃縮して、｛２−［（２Ｒ，６Ｓ）−２，６−ジメチル−モルホリン−４−イル］−１，１−ジメチル−２−オキソエチル｝カルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル（１７４ｍｇ、２４％）を、白色の固体として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度９９．５％（システムＥ、ＲＴ＝３．４７分）；分析用ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＣ、ＲＴ＝５．０８分）、ＥＳ＋：３６４．５［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  に対する計算値Ｃ１９Ｈ２９Ｎ３Ｏ４：３６３．２１５８、実測値３６３．２１６９。
【０２１０】
実施例３０
｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−［（３−メチル−ブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル塩酸塩
【０２１１】
【化４１】
2011522813.tif 000043
【０２１２】
（Ｓ）−２−（カルボキシ）−１−（４−ヒドロキシ−フェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル（中間体６；３５８ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．３４８ｍｌ、２．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）中の０℃の撹拌された溶液に、イソアミルアミン（０．２３２ｍＬ、２．０ｍｍｏｌ）及び固体のＴＢＴＵ（３２１ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を加えた。一晩室温で撹拌した後、ＤＭＦを真空中で除去した。残渣をＤＣＭ（７ｍＬ）中に溶解し、そして水（５ｍＬ）及び飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５ｍＬ）で洗浄した。ＤＣＭを真空中で除去し、そして残渣を正常相クロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０％から５％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）及び逆相クロマトグラフィーによって精製した。得られた淡黄色の固体をＭｅＯＨ（４ｍＬ）中に溶解し、Ｅｔ２Ｏ中の２ＭのＨＣｌ（０．７ｍＬ、１．４ｍｍｏｌ）を加え、そして溶液を真空中で濃縮して、｛（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−［（３−メチル−ブチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル塩酸塩（２８１ｍｇ、６１％）を、白色の固体として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度９９．８％（システムＥ、ＲＴ＝４．４９分）；分析用ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＣ、ＲＴ＝６．０４分）、ＥＳ＋：４２８．５［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ２４Ｈ３３Ｎ３Ｏ４に対する計算値：４２７．２４７１、実測値４２７．２４８９。
【０２１３】
実施例３１
［（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−モルホリノ−４−イル−２−オキソエチル］カルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル塩酸塩
【０２１４】
【化４２】
2011522813.tif 000044
【０２１５】
（Ｓ）−２−（カルボキシ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル（中間体６；３５８ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．３４８ｍｌ、１．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）中の０℃の撹拌された溶液に、モルホリン（０．１７４ｍＬ、２．０ｍｍｏｌ）及び固体のＨＢＴＵ（３７９ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を加えた。一晩室温で撹拌した後、ＤＭＦを真空中で除去した。残渣をＤＣＭ（７ｍＬ）中に溶解し、そして水（５ｍＬ）及び飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５ｍＬ）で洗浄した。ＤＣＭを真空中で除去し、そして残渣を正常相クロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０％から５％迄のＭｅＯＨによる勾配溶出）及び逆相クロマトグラフィーによって精製した。得られた白色の固体をＭｅＯＨ（３ｍＬ）中に溶解し、Ｅｔ２Ｏ中の２ＭのＨＣｌ（０．４ｍＬ、０．８ｍｍｏｌ）を加え、そして溶液を真空中で濃縮して、［（１Ｓ）−１−（４−ヒドロキシベンジル）−１−メチル−２−モルホリノ−４−イル−２−オキソエチル］カルバミン酸（２，６−ジメチルピリジン−４−イル）メチル塩酸塩（１７３ｍｇ、３７％）を、白色の固体として得た。
分析用ＨＰＬＣ：純度９９．７％（システムＥ、ＲＴ＝３．５４分）；分析用ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＣ、ＲＴ＝５．１１分）ＥＳ＋：４２８．５［ＭＨ］＋；ＨＲＭＳ  Ｃ２３Ｈ２９Ｎ３Ｏ５に対する計算値：４２７．２１０７、実測値４２７．２１１８。
【０２１６】
実施例３２
（Ｓ）−２−（イソペンチルカルバモイル）−１−（３，５−ジトリチウム−４−ヒドロキシフェニル）−プロパン−２−イルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチルトリフルオロ酢酸塩
【０２１７】
【化４３】
2011522813.tif 000045
【０２１８】
工程１：（Ｓ）−２−（４−ヒドロキシベンジル）−２−アミノ−Ｎ−イソペンチルプロパンアミド
（Ｓ）−２−（イソペンチルカルバモイル）−１−（４−ヒドロキシフェニル）プロパン−２−イルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチル塩酸塩（実施例２０；０．８７ｇ、２．０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（８ｍＬ）中の懸濁液を、アルゴンで置換した。パラジウム黒（触媒量）を加え、そして装置をアルゴンで置換してから、１，４−シクロヘキサジエン（１．９ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を温水浴を使用して２５−３０℃で２時間撹拌した。反応混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）を通して濾過し、そして残渣をＭｅＯＨ（５０ｍＬ）で洗浄した。混合した濾液を真空中で蒸発して、明るい黄色の油状物を得て、これを逆相クロマトグラフィーによって精製した。純粋な画分を混合し、そして真空中で濃縮して、（Ｓ）−２−（４−ヒドロキシベンジル）−２−アミノ−Ｎ−イソペンチルプロパンアミド（３６０ｍｇ、６８％）を、無色の油状物として得た。
【０２１９】
工程２：（Ｓ）−２−（４−ヒドロキシ−３，５−ジヨードベンジル）−２−アミノ−Ｎ−イソペンチルプロパンアミド
（Ｓ）−２−（４−ヒドロキシベンジル）−２−アミノ−Ｎ−イソペンチルプロパンアミド（０．１５０ｇ、０．５７ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル（１０ｍＬ）中に溶解し、そしてＮａＩ（０．１７ｇ、１．１４ｍｍｏｌ）を加え、そして反応混合物をアルゴンで三回置換した。反応混合物を０℃に冷却し、そしてクロラミンＴ（０．２６ｇ、１．１４ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１５ｍＬ）中の溶液を加えた。反応物を０℃で２０分間撹拌し、そして次いで室温まで一晩で温まらせた。溶媒を真空中で除去し、そして残渣をＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）中に溶解し、そして１０％のＮａ２Ｓ２Ｏ３水溶液（３×３０ｍＬ）で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、そして真空中で濃縮して、残渣を得て、これを逆相クロマトグラフィーによって精製して、（Ｓ）−２−（４−ヒドロキシ−３，５−ジヨードベンジル）−２−アミノ−Ｎ−イソペンチル−プロパンアミド（４８ｍｇ、１６％）を、白色の固体として得た。
【０２２０】
工程３：（Ｓ）−２−（３，５−ジトリチウム−４−ヒドロキシ−ベンジル）−２−アミノ−Ｎ−イソペンチルプロパンアミド
（Ｓ）−２−（４−ヒドロキシ−３，５−ジヨードベンジル）−２−アミノ−Ｎ−イソペンチルプロパンアミド（２１．１ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）、炭素上の１０％パラジウム（１７ｍｇ）及びＤＩＰＥＡ（０．１ｍＬ）のＤＭＡＰ（１．４ｍＬ）中の溶液を、１０Ｃｉのトリチウムガス下で２時間撹拌した。溶液を濾過し、乾燥状態まで蒸発し、そして不安定なトリチウムをエタノールから乾燥状態までの繰返した蒸発によって除去した。収率＝２．３Ｃｉ。ＴＬＣ（シリカ、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：アンモニア（９０：１０：１））による分析は、（Ｓ）−２−（３，５−ジトリチウム−４−ヒドロキシ−ベンジル）−２−アミノ−Ｎ−イソペンチルプロパンアミドに対応する単一の主要生成物を示し、従って物質を更なる精製無しに次の工程で直接使用した。
【０２２１】
工程４：（Ｓ）−２−（イソペンチルカルバモイル）−１−（３，５−ジトリチウム−４−ヒドロキシ−フェニル）−プロパン−２−イルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチルトリフルオロ酢酸塩
（Ｓ）−２−（３，５−ジトリチウム−４−ヒドロキシ−ベンジル）−２−アミノ−Ｎ−イソペンチルプロパンアミド（１．１５Ｃｉ）を、乾燥状態まで蒸発し、そしてＫ２ＣＯ３（３．２８ｍｇ）を含有するＤＭＦ（０．７５ｍＬ）中に溶解した。これを室温のアルゴン下で撹拌し、そして炭酸４−ニトロフェニル（ピリジン−４−イル）メチル（５．８７ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）を加えた。アルゴン下の室温で２．５時間撹拌を続けた。ＴＬＣ分析が決定的でなかったので、この段階で乾燥状態まで蒸発し、そしてＨＰＬＣによる精製のために水：アセトニトリル：ＴＦＡ中に溶解することによって、反応物を仕上げた。この物質を水：アセトニトリル：ＴＦＡの勾配系を使用する逆相ＨＰＬＣによって精製した。表題化合物を収集し、乾燥状態まで蒸発し、そしてエタノール中に溶解した。
【０２２２】
（Ｓ）−２−（イソペンチルカルバモイル）−１−（３，５−ジトリチウム−４−ヒドロキシ−フェニル）−プロパン−２−イルカルバミン酸（ピリジン−４−イル）メチルトリフルオロ酢酸塩の分析：
・ＬＣ−ＭＳ：４０４．４［ＭＨ＋］
・ＭＳによって決定した比放射能：１．７８ＴＢｑ／ｍｍｏｌ（４８Ｃｉ／ｍｍｏｌ）
・この比放射能におけるＭＷ：４０３ｇ／ｍｏｌ
・放射能濃度：７４．０ＭＢｑ／ｍｌ（２ｍＣｉ／ｍｌ）
・ＨＰＬＣによる放射化学的純度：９８．３％。
【０２２３】
生物学的試験
オスのＣ５７ｂｌ／６マウスにおける一晩の体重変化の測定
このモデルは、有効領域を最大化するために、午後−午前間の体重増加に対する化合物の影響を研究する。典型的には、図１に示すように、マウスは、暗期中に約１ｇの体重を得て、そして次いで明期中にこの体重増加の殆どを失う。いずれもの２４時間間の体重差は非常に小さいが、一方暗期の始まり及び明期の始まり（午後−午前）間の体重差は最大である。
【０２２４】
暗期中の体重変化を測定することは重要である。マウスに二日連続して活性化合物を投与し、そして体重の変化を最初の投与後の４８時間記録した場合、有意な影響は観察されない。然しながら、暗期中の体重変化のみが考慮された場合、有意な、そして強い影響が見られる。これは、マウスが、暗期中の体重増加の不足を相殺するために明期中にリバウンドするためである。非常に活性な長時間継続性の化合物は、更にこのリバウンドを減少し、そして４８時間中の体重を減少する。
【０２２５】
Ｃ５７ｂｌ＼６のオスのマウスにおける連続した日中の体重変化
暗期の始まり及び明期の始まり間（午後−午前）の体重差は、２日の連続した午後及び午後間に測定された体重差より大きい。従って、午後−午前の差に対する化合物の影響を、有効な領域を最大にするために研究した。
【０２２６】
Ｃ５７ｂｌ／６マウスをグループにし（ケージ当たり５匹）、そして順化のために５日間放置した。一回の腹腔内的に（ｉｐ）投与される投与量（６０ｍｇ／ｋｇ）を、暗期の直前に与えた。化合物は、水溶性であるか、又は３％迄のクレモフォア中に溶解されるか（この場合ベヒクルは、更にクレモフォアを含有していた）のいずれかであった。ｐＨを、化合物の特質によって最低５．５から最大８迄で調節した。
図２及び３に示すように、式（Ｉ）の化合物は、マウスの体重を減少するために有用である。
【０２２７】
非組換え系におけるレプチンアッセイ
組換え系（例えばＯｂＲｂで形質移入されたＨＥＫ２９３細胞）においては十分に特徴づけされているが、レプチンが、ＳＴＳＴ３リン酸化において非常に顕著な増加を誘発する場合、これらの系は、レプチン受容体に対する試験化合物の活性の正確な測定値を得ることにしばしば失敗している。これは、受容体の過剰発現（並びに、レプチンのその受容体との会合によって誘発されるシグナル伝達経路の異なった部分に作用する異なった薬物に対する可能性）が、殆どの場合試験される薬物の活性の非存在においてもたらされるように見受けられる。
【０２２８】
非組換え系におけるレプチン受容体の発現は、しばしば変動し、そしてシグナルの安定性が実験の範囲に留まる系を確認することに注意を払わなければならない。このような系を使用して、レプチン受容体アンタゴニスト模倣剤は、レプチンに対するその作用を評価することによって確認することができる（以下を参照されたい）。
【０２２９】
レプチンは、主として脂肪細胞中で産生されるが、しかしヒトにおいて、レプチンをコードするｍＲＮＡは、更に胎盤中にも存在する。ここで、レプチンは、微小血管中で重要な増殖性の役割を演じることができる。この仮定を天然の細胞系において使用することに対する可能性を評価した。
【０２３０】
ＪＥＧ−３プロトコル
ＪＥＧ−３細胞（絨毛癌細胞系）において、レプチンは、増殖を３倍まで刺激することが可能である（Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．（２００７）７６：２０３−１０）。レプチンは、更にＪＥＧ−３細胞における［３Ｈ］−チミジン組込みの濃度依存性増加を起こす（図４、１００ｎＭにおいて最大効果（ＥＣ５０＝２．１ｎＭ））。細胞によって組込まれた放射能は、その増殖活性の指標であり、そして液体シンチレーションベータカウンターにより毎分のカウント数（ＣＰＭ）で測定される。
【０２３１】
この発見は、化合物が、細胞増殖におけるレプチンの影響を再現するか（レプチン受容体アゴニスト模倣剤）（即ち、与えられた化合物は、細胞により組込まれる［３Ｈ］−チミジンの増加を起こすものである）、又はレプチンにより仲介される［３Ｈ］−チミジン組込みの増加を防止することによってレプチンの影響を阻害する（アンタゴニスト的影響）かのいずれかが可能であるか否かの試験に適用することができる。
【０２３２】
この方法は、非組換え系を使用する利益を有し、そして妥当な再現性及び堅固さを有する。
脳浸透の測定
試験種（齧歯類）に、研究中の基質のボーラス投与を、通常静脈内（ＩＶ）又は経口（ＰＯ）経路により与える。適当な時点で血液試料を採取し、そして得られた血漿を抽出し、そして基質濃度及び、適当な場合、代謝産物濃度に対して分析する。同時点で、もう一つのグループの動物を犠牲にし、脳を単離し、そして脳表面を清浄にする。次いで脳試料をホモジナイズし、抽出し、そして基質濃度及び、適当な場合、代謝産物濃度に対して分析する。別の方法として、試験種の１以上の脳の領域に微小透析のプローブを移植し、そしてその後の分析のために適当な時点で試料を収集する。この方法は、細胞外基質濃度のみを測定する利益を有する。次いで血漿及び脳の濃度を比較し、そして個々の時点において平均した濃度の比較、又は濃度−時間プロットの曲線下面積（ＡＵＣ）の計算のいずれかによって比を計算する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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