(57)【要約】  本発明はブラジキニンＢ１の選択的拮抗剤である式（Ｉ）のＲ１−Ｒ５、ＱおよびＺが請求項で定義される新規非ペプチド誘導体、およびその光学異性体またはラセミ体および／または塩および／または水和物および／または溶媒和物、これらの化合物を製造するためのプロセス、それらを含む薬理学的組成物および痛みおよび炎症状態の治療または予防におけるそれらの利用に関するものである。2011500782.tif 000071【選択図】なし
2011500782.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ブラジキニンＢ１受容体拮抗剤である式（Ｉ）の非ペプチド誘導体で、
【化１】
2011500782.tif 000048
ここで
Ｒ１は水素原子またはＣ１−Ｃ４アルキル基である、
Ｒ２は（１）  水素原子、（２）  Ｃ１−Ｃ６の直鎖または分岐アルキル基、（３）  −（ＣＨ２）ｎ−ＮＨ２、（４）  −（ＣＨ２）ｎ−ＯＨ、（５）  −（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ−ＮＨ２、（６）  −（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＲｃ、（７）  １つまたはそれ以上の水酸基あるいはハロゲン原子で任意に置換されたベンジルから選ばれる、あるいは
Ｒ１、Ｒ２およびそれらがともに付く炭素原子が３−７員環シクロアルキルを形成する、
Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は互いに独立に水素原子、ハロゲン原子、シアノ、ニトロ、アミノまたは１つまたはそれ以上のＣ１−Ｃ４アルキル基で置換されたアミノ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４アルコキシカルボニル、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、または水酸基である、
Ｑは（１）酸素原子、（２）硫黄原子から選ばれる、
Ｚは
（１）  −（ＣＨ２）ｍ−ＯＨ基または−（ＣＨ２）ｎ−Ｘ−Ｐ基で任意に置換した
【化２】
2011500782.tif 000049
（２）  １つまたはそれ以上のＣ１−Ｃ４アルキル基、１つまたはそれ以上のハロゲン原子、−（ＣＨ２）ｍ−ＯＨ基、−（ＣＨ２）ｍ−ＮＨ２基、−（ＣＨ２）ｍ−ＣＯ−ＮＨ２基、トリフルオロメチル基、オキソ基、−（ＣＨ２）ｍ−ＣＮ基、−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）基、−ＮＨ−ＳＯ２−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）基、−（ＣＨ２）ｍ−ＣＯＯＲｃ基、−ＣＯ−ＮＲｃＲｄ基、−（Ｃ１−Ｃ４アルコキシ）基、−ＮＨ−ＣＯ−（ＣＨ２）ｍ−ＣＦ３基、−ＮＨ−ＳＯ２−ＣＨ２−ＣＦ３基で任意に置換した
【化３】
2011500782.tif 000050
（３）
【化４】
2011500782.tif 000051
基
（４）オキソ基、−ＳＯ２−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）基、Ｃ１−Ｃ４アルキル基、−ＣＯ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）基、−（ＣＨ２）ｍ−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−ＯＨ基、−（ＣＨ２）ｍ−ＯＨ基、−ＳＯ２−ＮＲｃＲｄ基、−ＣＯ−ＮＲｃＲｄ基で任意に置換した
【化５】
2011500782.tif 000052
（５）
【化６】
2011500782.tif 000053
基
（６）
【化７】
2011500782.tif 000054
または
【化８】
2011500782.tif 000055
または
【化９】
2011500782.tif 000056
基
（７）
【化１０】
2011500782.tif 000057
または
【化１１】
2011500782.tif 000058
基
（８）−（ＣＨ２）ｍ−ＯＨ基で任意に置換した
【化１２】
2011500782.tif 000059
または
【化１３】
2011500782.tif 000060
（９）
【化１４】
2011500782.tif 000061
基
（１０）
【化１５】
2011500782.tif 000062
または
【化１６】
2011500782.tif 000063
基
（１１）
【化１７】
2011500782.tif 000064
基
（１２）  −ＮＨ−（ＣＨ２）ｎ−Ｐ基、
（１３）  −ＮＨ−（ＣＨ２）ｑ−ＮＲａＲｂ基から選ばれる、
Ｙは（１）  −（ＣＨ２）ｎ−ＮＲａＲｂ、（２）  −（ＣＨ２）ｎ−Ｘ−Ｐ基から選ばれる、
ｎは０から６の整数、
ｍは０から３の整数、
ｑは１から６の整数、
Ｘは（１）  一重結合、（２）  酸素原子、（３）  −ＣＯ−ＮＲｃ基、（４）  ＣＯまたはＳＯ２基から選ばれる、
Ｐは  （１）  １つまたはそれ以上のハロゲン原子、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、［１，４’］ビピペリジニル−１’−イルまたはＣ１−Ｃ４アルキル基で任意に置換されたフェニル基、  （２）  Ｏ、Ｓ、ＳＯ２およびＮから選ばれる１−３個のへテロ原子を含む飽和、部分不飽和または芳香族の４−７員環で、１つまたはそれ以上のハロゲン原子、オキソ、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、ピペリジン−１−イルまたはＣ１−Ｃ４アルキル基で任意に置換された４−７員環、（３）  −（ＣＨ２）ｍ−ＮＲａＲｂ基で任意に置換されたＣ５−Ｃ８シクロアルキル基から選ばれる、
ＲａおよびＲｂは（１）  ＲａおよびＲｂは同時に水素原子であることはできないという条件で、水素原子、（２）  直鎖または分岐Ｃ１−Ｃ６アルキル基、（３）  Ｒａ、Ｒｂおよびそれらの両方がともに付く窒素原子がＯ、Ｓ、ＳＯ２およびＮから選ばれる０−３個のヘテロ原子（ＲａおよびＲｂが付く窒素原子に加えて）を含む飽和、部分不飽和または芳香族４−７員環をつくり、前記の環は１つまたはそれ以上のハロゲン原子、オキソ、シアノ、ヒドロキシまたはＣ１−Ｃ４アルキル基で任意に置換された４−７員環、
Ｒｃは水素原子またはＣ１−Ｃ４アルキル基、
Ｒｄは水素原子、Ｃ１−Ｃ４アルキル基、Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルキル基、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル基、
Ｒｅは水素原子、Ｃ１−Ｃ４アルキル基、ベンジル基、
Ａは（１）  Ｃ４−Ｃ７シクロアルキル環、（２）  Ｏ、Ｓ、ＳＯ２およびＮから選ばれるＷ１を含む０−４個のヘテロ原子を含む飽和、部分不飽和または芳香族５−７員環で、１つまたはそれ以上のハロゲン原子、オキソ、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、フェニルまたはＣ１−Ｃ４アルキル基で任意に置換された５−７員環、
ＢはＯ、Ｓ、ＳＯ２およびＮから選ばれる１−３個のヘテロ原子を含む飽和、部分不飽和または芳香族４−７員環で、１つまたはそれ以上のハロゲン原子、オキソ、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、フェニルまたはＣ１−Ｃ４アルキル基で任意に置換された４−７員環、
Ｗ１は炭素原子、窒素原子またはＣＨ基、
Ｗ２は酸素原子、硫黄原子、ＮＨ、ＣＨ２またはＳＯ２基、
であることを特徴とする式（Ｉ）の新規非ペプチド誘導体およびその光学異性体またはラセミ体および／または塩および／または水和物および／または溶媒和物。
【請求項２】
化合物が（Ｒ）−Ｎ−｛１−メチル−２−オキソ−２−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペリジン−１−イル］−エチル｝−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド、Ｎ−｛２−オキソ−２−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペリジン−１−イル］−エチル｝−４−（２−フェニルスルファニル−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド、Ｎ−［２−オキソ−２−（４−ピロリジン−１−イル−ピペリジン−１−イル）−エチル］−４−（２−フェニルスルファニル−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド、Ｎ−｛２−［４−（２−ジメチルアミノ−エチル）−ピペラジン−１−イル］−２−オキソ−エチル｝−４−（２−フェニルスルファニル−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド、Ｎ−｛２−オキソ−２−［４−（３−ピロリジン−１−イル−プロピル）−ピペラジン−１−イル］−エチル｝−４−（２−フェニルスルファニル−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド、Ｎ−｛２−［４−（３−ジメチルアミノ−プロピル）−ピペラジン−１−イル］−２−オキソ−エチル｝−４−（２−フェニルスルファニル−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド、Ｎ−｛２−オキソ−２−［４−（３−ピロリジン−１−イル−プロピル）−［１，４］ジアゼパン−１−イル］−エチル｝−４−（２−フェニルスルファニル−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド、Ｎ−｛２−［４−（１−メチル−ピペリジン−３−イルメチル）−ピペラジン−１−イル］−２−オキソ−エチル｝−４−（２−フェニルスルファニル−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド、Ｎ−｛２−［４−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−ピペラジン−１−イル］−２−オキソ−エチル｝−４−（２−フェニルスルファニル−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド、（Ｓ）−Ｎ−｛１−メチル−２−オキソ−２−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペリジン−１−イル］−エチル｝−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド、（Ｒ）−Ｎ−｛１−ヒドロキシメチル−２−オキソ−２−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペリジン−１−イル］−エチル｝−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド、（Ｒ）−Ｎ−［１−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−２−（４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−２−オキソ−エチル］−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド、（Ｒ）−Ｎ−［１−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−２−（４−ヒドロキシメチル−ピペリジン−１−イル）−２−オキソ−エチル］−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド、（Ｒ）−Ｎ−｛１−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−２−オキソ−２−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペリジン−１−イル］−エチル｝−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド、（Ｓ）−Ｎ−｛１−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−２−オキソ−２−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペリジン−１−イル］−エチル｝−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド、（Ｓ）−Ｎ−［１−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−２−オキソ−２−（４−ピロリジン−１−イル−ピペリジン−１−イル）−エチル］−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド、（Ｓ）−Ｎ−［１−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−２−（４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−２−オキソ−エチル］−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド、（Ｓ）−Ｎ−｛１−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−２−［４−（２−ヒドロキシ−エチル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−エチル｝−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド、（Ｓ）−Ｎ−｛１−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−２−［４−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−ピペラジン−１−イル］−２−オキソ−エチル｝−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド、４−（２−フェニルスルファニル−フェニルスルファモイル）−Ｎ−｛［（ピペリジン−４−イルメチル）−カルバモイル］−メチル｝−ベンズアミド塩酸のグループから選ばれることを特徴とする請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物を調製するプロセスで、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＱが上記の式（Ｉ）と同様の意味をもつ式（ＩＩ）のアミン誘導体を
【化１８】
2011500782.tif 000065
を式（ＩＩＩ）の塩化スルホニルと反応し
【化１９】
2011500782.tif 000066
ついでそのようにして得られたＲ３、Ｒ４、Ｒ５およびＱが上記の式（Ｉ）と同様の意味をもつ式（ＩＶ）のフェニルスルファモイル安息香酸誘導体を
【化２０】
2011500782.tif 000067
Ｒ１およびＲ２が上記の式（Ｉ）と同様の意味をもちＲがＣ１−Ｃ４アルキルである式（Ｖ）のアミノ酸と反応し
【化２１】
2011500782.tif 000068
そのようにして得られたＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、ＲおよびＱの意味は上で定義した通りである式（ＶＩ）の化合物を
【化２２】
2011500782.tif 000069
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＱの意味は上で定義した通りである式（ＶＩＩ）の酸誘導体を与えるように加水分解し
【化２３】
2011500782.tif 000070
最後に式（ＶＩＩ）の酸誘導体をアミン誘導体Ｚと反応し式（Ｉ）の非ペプチド誘導体またはその光学異性体またはラセミ体および／または薬学的に許容される塩および／または水和物および／または溶媒和物を得ることからなるプロセス。
【請求項４】
請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物の調製のためのプロセスで、式（Ｉ）の化合物を新しい置換基の導入および／または存在する置換基の修飾または除去、および／または塩形成および／または塩からの化合物の遊離によって別の式（Ｉ）の化合物に変換することからなるプロセス。
【請求項５】
請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその光学異性体またはラセミ体または薬学的に許容される塩または水和物または溶媒和物の治療上有効な量と１つまたはそれ以上の薬学的に許容される賦形剤からなる薬剤組成物。
【請求項６】
請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその光学異性体またはラセミ体または薬学的に許容される塩または水和物または溶媒和物のブラジキン受容体の阻害を必要とする状態の予防および／または治療のための医薬製造への利用。
【請求項７】
ブラジキン受容体がブラジキニンＢ１受容体であることを特徴とする請求項６に記載の利用。
【請求項８】
ブラジキニン受容体の阻害を必要とする状態の治療および／または予防の方法で、それを必要とする患者に請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその光学異性体またはラセミ体または薬学的に許容される塩または水和物または溶媒和物の有効量を投与することからなる方法。
【請求項９】
ブラジキン受容体がブラジキニンＢ１受容体であることを特徴とする請求項８に記載の治療および／または予防の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は痛みおよび炎症の進行の治療あるいは予防に有用な式（Ｉ）で表す新規非ペプチド誘導体およびその光学異性体またはラセミ体および／またはその塩および／またはその水和物および／またはその溶媒和物に関する。本発明はまた式（Ｉ）の化合物の製造プロセスおよびそれを含む薬理学的組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
キニン類は血漿および抹消組織で組織傷害あるいは感染に反応してカリクレイン酵素によるキニノーゲンの触媒的開裂に続いて作られる内因性のペプチドである。キニン類は痛みと炎症を伴う病態生理学的プロセスにおいて重要な役割をもつ。それらの生理学的作用はＢ１およびＢ２で示される膜受容体に結合したＧ−タンパクによって媒介される。Ｂ１およびＢ２受容体はともにクローン化されていて［Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ｒｅｓ．  Ｃｏｍｍｕｎ．，  １８４  （１９９２）  ２６０−２６８  およびＪ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．，  ２６９  （１９９４）  ２１５８３−２１５８６］その発現調節機構、自己保持およびシグナル伝達機能は集中的に研究中である［Ｍｏｌ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，  ５６  （１９９９）  ３２５−３３３およびＪ．  Ｃｅｌｌ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  １９３  （２００２）  ２７５−２８６］。
【０００３】
キニン類の最初のセット、ブラジキニン（ＢＫ）とカリジン（ＬｙｓＢＫ）は多くの組織に広く分布し構成的に発現され急速に脱感作するＢ２受容体の刺激を通して選択的に作用する。一方、それらの活性カルボキシペプチダーゼ代謝物、キニン類の第２のセット、ｄｅｓＡｒｇ９ＢＫ（ＤＡＢＫ）およびＬｙｓｄｅｓＡｒｇ９ＢＫ（ＬｙｓＤＡＢＫ）は誘導性かつ非脱感作性で非病態条件下では殆ど発現されないＢ１受容体を活性化する。一般にＢ１受容体は種々の性質の傷害（組織外傷、感染など）の後に急速に現れる。このようにＢ１受容体の発現上昇は種々のタイプの傷害に対する組織の初期および後期の反応で重要な役割をもつことがよく知られている酵素、受容体、オータコイド、サイトカインおよびケモカインの局所での共発現（最終的には発現上昇）を含む全身反応の一部として現れる。
【０００４】
動物モデルにおいて慢性炎症状態で支配的機能のＢ２からＢ１へのスイッチがあることが示されている。Ｂ２受容体は炎症および痛みの反応の急性期に関係するが、一方Ｂ１受容体はこの反応の慢性期に関与する。炎症および痛みの伝達におけるキニン受容体の関与はブラジキニンＢ１受容体欠損マウスについての研究結果によって支持されてきた。Ｂ１受容体欠損マウスは感覚機能において野生型と異なり、侵害性の化学および熱刺激に対する鎮痛閾値の増大を示し、また炎症部位での多形核白血球の集積の著しい低下を示す［ＰＮＡＳ，  ９７  （２０００）  ８１４０−８１４５およびＮｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ４１  （２００１）  １００６−１０１２］。さらにＢ１受容体欠損マウスでの最大の独自の発見はＢ１受容体ノックアウトマウスに見られる痛覚鈍麻は部分的に脊髄における中枢性感作の低下によることを示唆するという痛覚における中枢キニン受容体の役割に対する直接的な証拠であった。しかしながら、上記の変化は別としてＢ１ノックアウトマウスは外見上いかなる病理的変化もなく見かけ上正常であった。
【０００５】
抹消におけるＢ１受容体の基本的発現の証拠とは別に、近年ますます多くの証拠がＢ１受容体は脊髄および同様にいくつかの高次構造を含むいくつかの神経要素で‘中枢性’に構成的に発現していることを示している。これらの受容体の機能は不明確であるがそれらは痛みの伝達および痛覚過敏に関係すると見なされてきた。それゆえ、Ｂ１受容体拮抗剤は末梢部位を介して痛みの緩和に有用であるのみならず、もしそれらが中枢性Ｂ１受容体も同様にブロックするならばおそらくより広い鎮痛効果スペクトルも持つと考えられる［ＮｅｕｒｏＲｅｐｏｒｔ  １１  （２０００）  ４００３−４００５；  ＮｅｕｒｏＲｅｐｏｒｔ，  １２  （２００１）  ２３１１−２３１３；  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  １０７  （２００１）  ６６５−６７３およびＮｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ２９４  （２０００）  １７５−１７８］。
【０００６】
科学的データに基づきブラジキニン受容体はいくつかのやり方で痛みおよび痛覚過敏の媒介に関与している。Ｂ１受容体拮抗剤は多様な作用機序を持つだろう。それらは（１）他の発痛メディエーターの放出阻害による侵害受容器への間接的（‘末梢性’）効果を持つ。炎症誘導において感覚神経に近接する細胞（マクロファージ、繊維芽細胞または内皮細胞）上に現れるＢ１受容体は侵害受容器を感作または活性化するメディエーター（プロスタグランジン、サイトカインおよび一酸化窒素）の放出に関与することに注意、（２）Ｂ１受容体を発現している（構成的に）侵害受容器または誘導への直接的（‘末梢性’）効果および（３）脊髄の浅後角における痛みの処理に対する‘中枢性’効果、を持つ。
【０００７】
それゆえ、経口で活性のある非ペプチドブラジキニンＢ１受容体拮抗剤は慢性の炎症性の痛みの治療の有力な治療剤となり得るだろう。
【０００８】
いくつかの特許および特許出願が異なる化学構造を持つブラジキニンＢ１受容体拮抗剤について述べている。そのような文書は例えば次の国際特許出願である：
国際公開第２０００７５１０７号パンフレット、国際公開第０２０７６９６４号パンフレット、国際公開第０４０５４５８４号パンフレット、国際公開第０２０９９３８８号パンフレット、国際公開第０５００４８１０号パンフレット。
【発明の概要】
【０００９】
我々はブラジキニンＢ１受容体に対し高い親和性をもちブラジキニンＢ２受容体を超える選択性を持つ非ペプチド誘導体のクラスを見出した。選択性は化合物の望ましくない副作用がより顕著でないので特に重要である。
【００１０】
本発明は式（Ｉ）の新規非ペプチド誘導体に関するもので、
【化１】
2011500782.tif 000003
ここで
Ｒ１は水素原子またはＣ１−Ｃ４アルキル基である、
Ｒ２は（１）  水素原子、（２）  Ｃ１−Ｃ６の直鎖または分岐アルキル基、（３）  −（ＣＨ２）ｎ−ＮＨ２、（４）  −（ＣＨ２）ｎ−ＯＨ、（５）  −（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ−ＮＨ２、（６）  −（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＲｃ、（７）  １つまたはそれ以上の水酸基あるいはハロゲン原子で任意に置換されたベンジルから選ばれる、あるいは
Ｒ１、Ｒ２およびそれらがともに付く炭素原子が３−７員環シクロアルキルを形成する、
Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は互いに独立に水素原子、ハロゲン原子、シアノ、ニトロ、アミノまたは１つまたはそれ以上のＣ１−Ｃ４アルキル基で置換されたアミノ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４アルコキシカルボニル、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、または水酸基である、
Ｑは（１）酸素原子、（２）硫黄原子、から選ばれる、
Ｚは（１）−（ＣＨ２）ｍ−ＯＨ基または−（ＣＨ２）ｎ−Ｘ−Ｐ基で任意に置換した
【化２】
2011500782.tif 000004
（２）１つまたはそれ以上のＣ１−Ｃ４アルキル基、１つまたはそれ以上のハロゲン原子、−（ＣＨ２）ｍ−ＯＨ基、−（ＣＨ２）ｍ−ＮＨ２基、−（ＣＨ２）ｍ−ＣＯ−ＮＨ２基、トリフルオロメチル基、オキソ基、−（ＣＨ２）ｍ−ＣＮ基、−ＮＨ−ＣＯ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）基、−ＮＨ−ＳＯ２−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）基、−（ＣＨ２）ｍ−ＣＯＯＲｃ基、−ＣＯ−ＮＲｃＲｄ基、−（Ｃ１−Ｃ４アルコキシ）基、−ＮＨ−ＣＯ−（ＣＨ２）ｍ−ＣＦ３基、−ＮＨ−ＳＯ２−ＣＨ２−ＣＦ３基で任意に置換した
【化３】
2011500782.tif 000005
（３）
【化４】
2011500782.tif 000006
基
（４）オキソ基、−ＳＯ２−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）基、Ｃ１−Ｃ４アルキル基、−ＣＯ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）基、−（ＣＨ２）ｍ−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−ＯＨ基、−（ＣＨ２）ｍ−ＯＨ基、−ＳＯ２−ＮＲｃＲｄ基、−ＣＯ−ＮＲｃＲｄ基で任意に置換した
【化５】
2011500782.tif 000007
（５）
【化６】
2011500782.tif 000008
基
（６）
【化７】
2011500782.tif 000009
または
【化８】
2011500782.tif 000010
または
【化９】
2011500782.tif 000011
基
（７）
【化１０】
2011500782.tif 000012
または
【化１１】
2011500782.tif 000013
基
（８）−（ＣＨ２）ｍ−ＯＨ基で任意に置換した
【化１２】
2011500782.tif 000014
または
【化１３】
2011500782.tif 000015
（９）
【化１４】
2011500782.tif 000016
基
（１０）
【化１５】
2011500782.tif 000017
または
【化１６】
2011500782.tif 000018
基
（１１）
【化１７】
2011500782.tif 000019
基
（１２）−ＮＨ−（ＣＨ２）ｎ−Ｐ基、
（１３）−ＮＨ−（ＣＨ２）ｑ−ＮＲａＲｂ基から選ばれる、
Ｙは（１）−（ＣＨ２）ｎ−ＮＲａＲｂ、（２）−（ＣＨ２）ｎ−Ｘ−Ｐ基から選ばれる、
ｎは０から６の整数、
ｍは０から３の整数、
ｑは１から６の整数、
Ｘは（１）一重結合、（２）酸素原子、（３）−ＣＯ−ＮＲｃ基、（４）ＣＯまたはＳＯ２基から選ばれる、
Ｐは（１）１つまたはそれ以上のハロゲン原子、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、［１，４’］ビピペリジニル−１’−イルまたはＣ１−Ｃ４アルキル基で任意に置換されたフェニル基、（２）Ｏ、Ｓ、ＳＯ２およびＮから選ばれる１−３個のへテロ原子を含む飽和、部分不飽和または芳香族の４−７員環で、１つまたはそれ以上のハロゲン原子、オキソ、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、ピペリジン−１−イルまたはＣ１−Ｃ４アルキル基で任意に置換された４−７員環、（３）−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲａＲｂ基で任意に置換されたＣ５−Ｃ８シクロアルキル基、から選ばれる、
ＲａおよびＲｂは（１）ＲａおよびＲｂは同時に水素原子であることはできないという条件で、水素原子、（２）直鎖または分岐Ｃ１−Ｃ６アルキル基、（３）Ｒａ、Ｒｂおよびそれらの両方がともに付く窒素原子がＯ、Ｓ、ＳＯ２およびＮから選ばれる０−３個のヘテロ原子（ＲａおよびＲｂが付く窒素原子に加えて）を含む飽和、部分不飽和または芳香族４−７員環をつくり、前記の環は１つまたはそれ以上のハロゲン原子、オキソ、シアノ、ヒドロキシまたはＣ１−Ｃ４アルキル基で任意に置換された４−７員環、
Ｒｃは水素原子またはＣ１−Ｃ４アルキル基、
Ｒｄは水素原子、Ｃ１−Ｃ４アルキル基、Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルキル基、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル基、
Ｒｅは水素原子、Ｃ１−Ｃ４アルキル基、ベンジル基、
Ａは（１）Ｃ４−Ｃ７シクロアルキル環、（２）Ｏ、Ｓ、ＳＯ２およびＮから選ばれるＷ１を含む０−４個のヘテロ原子を含む飽和、部分不飽和または芳香族５−７員環で、１つまたはそれ以上のハロゲン原子、オキソ、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、フェニルまたはＣ１−Ｃ４アルキル基で任意に置換された５−７員環、
ＢはＯ、Ｓ、ＳＯ２およびＮから選ばれる１−３個のヘテロ原子を含む飽和、部分不飽和または芳香族４−７員環で、１つまたはそれ以上のハロゲン原子、オキソ、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、フェニルまたはＣ１−Ｃ４アルキル基で任意に置換された４−７員環、
Ｗ１は炭素原子、窒素原子またはＣＨ基、
Ｗ２は酸素原子、硫黄原子、ＮＨ、ＣＨ２またはＳＯ２基、
である式（Ｉ）の新規非ペプチド誘導体およびその光学異性体またはラセミ体および／または塩および／または水和物および／または溶媒和物に関する。
【００１１】
本発明はまた式（Ｉ）の化合物またはその光学異性体またはラセミ体または塩または水和物または溶媒和物を活性成分として含む薬剤組成物に関する。
【００１２】
さらに本発明の目的は式（Ｉ）の化合物の合成であり、またこれらの化合物を含む薬剤の化学的および薬学的製造であり、同様にこれらの化合物による治療法であり、それは治療すべき哺乳類（ヒトを含む）へ有効量の本発明の式（Ｉ）の化合物をそれ自体または薬剤として投与することを意味する。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明は式（Ｉ）の新規ブラジキニンＢ１受容体拮抗剤である非ペプチド誘導体に関するもので
【化１８】
2011500782.tif 000020
ここで
Ｒ１は水素原子またはＣ１−Ｃ４アルキル基である、
Ｒ２は（１）水素原子、（２）Ｃ１−Ｃ６の直鎖または分岐アルキル基、（３）−（ＣＨ２）ｎ−ＮＨ２、（４）−（ＣＨ２）ｎ−ＯＨ、（５）−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ−ＮＨ２、（６）−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＲｃ、（７）１つまたはそれ以上の水酸基あるいはハロゲン原子で任意に置換されたベンジルから選ばれる、あるいは
Ｒ１、Ｒ２およびそれらがともに付く炭素原子が３−７員環シクロアルキルを形成する、
Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は互いに独立に水素原子、ハロゲン原子、シアノ、ニトロ、アミノまたは１つまたはそれ以上のＣ１−Ｃ４アルキル基で置換されたアミノ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４アルコキシカルボニル、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、または水酸基である、
Ｑは（１）酸素原子、（２）硫黄原子から選ばれる、
Ｚは
（１）−（ＣＨ２）ｍ−ＯＨ基または−（ＣＨ２）ｎ−Ｘ−Ｐ基で任意に置換した
【化１９】
2011500782.tif 000021
（２）１つまたはそれ以上のＣ１−Ｃ４アルキル基、１つまたはそれ以上のハロゲン原子、−（ＣＨ２）ｍ−ＯＨ基、−（ＣＨ２）ｍ−ＮＨ２基、−（ＣＨ２）ｍ−ＣＯ−ＮＨ２基、トリフルオロメチル基、オキソ基、−（ＣＨ２）ｍ−ＣＮ基、−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）基、−ＮＨ−ＳＯ２−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）基、−（ＣＨ２）ｍ−ＣＯＯＲｃ基、−ＣＯ−ＮＲｃＲｄ基、−（Ｃ１−Ｃ４アルコキシ）基、−ＮＨ−ＣＯ−（ＣＨ２）ｍ−ＣＦ３基、−ＮＨ−ＳＯ２−ＣＨ２−ＣＦ３基で任意に置換した
【化２０】
2011500782.tif 000022
（３）
【化２１】
2011500782.tif 000023
基、
（４）オキソ基、−ＳＯ２−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）基、Ｃ１−Ｃ４アルキル基、−ＣＯ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）基、−（ＣＨ２）ｍ−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−ＯＨ基、−（ＣＨ２）ｍ−ＯＨ基、−ＳＯ２−ＮＲｃＲｄ基、−ＣＯ−ＮＲｃＲｄ基で任意に置換した
【化２２】
2011500782.tif 000024
（５）
【化２３】
2011500782.tif 000025
基、
（６）
【化２４】
2011500782.tif 000026
または
【化２５】
2011500782.tif 000027
または
【化２６】
2011500782.tif 000028
基、
（７）
【化２７】
2011500782.tif 000029
または
【化２８】
2011500782.tif 000030
基、
（８）−（ＣＨ２）ｍ−ＯＨ基で任意に置換した
【化２８】
2011500782.tif 000031
または
【化２９】
2011500782.tif 000032
（９）
【化３０】
2011500782.tif 000033
基、
（１０）
【化３１】
2011500782.tif 000034
または
【化３２】
2011500782.tif 000035
基、
（１１）
【化３３】
2011500782.tif 000036
基、
（１２）−ＮＨ−（ＣＨ２）ｎ−Ｐ基、
（１３）−ＮＨ−（ＣＨ２）ｑ−ＮＲａＲｂ基から選ばれる、
Ｙは（１）−（ＣＨ２）ｎ−ＮＲａＲｂ、（２）−（ＣＨ２）ｎ−Ｘ−Ｐ基から選ばれる、
ｎは０から６の整数、
ｍは０から３の整数、
ｑは１から６の整数、
Ｘは（１）一重結合、（２）酸素原子、（３）−ＣＯ−ＮＲｃ基、（４）ＣＯまたはＳＯ２基から選ばれる、
Ｐは（１）１つまたはそれ以上のハロゲン原子、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、［１，４’］ビピペリジニル−１’−イルまたはＣ１−Ｃ４アルキル基で任意に置換されたフェニル基、（２）Ｏ、Ｓ、ＳＯ２およびＮから選ばれる１−３個のへテロ原子を含む飽和、部分不飽和または芳香族の４−７員環で、１つまたはそれ以上のハロゲン原子、オキソ、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、ピペリジン−１−イルまたはＣ１−Ｃ４アルキル基で任意に置換された４−７員環、（３）−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲａＲｂ基で任意に置換されたＣ５−Ｃ８シクロアルキル基から選ばれる、
ＲａおよびＲｂは（１）ＲａおよびＲｂは同時に水素原子であることはできないという条件で、水素原子、（２）直鎖または分岐Ｃ１−Ｃ６アルキル基、（３）Ｒａ、Ｒｂおよびそれらの両方がともに付く窒素原子がＯ、Ｓ、ＳＯ２およびＮから選ばれる０−３個のヘテロ原子（ＲａおよびＲｂが付く窒素原子に加えて）を含む飽和、部分不飽和または芳香族４−７員環をつくり、前記の環は１つまたはそれ以上のハロゲン原子、オキソ、シアノ、ヒドロキシまたはＣ１−Ｃ４アルキル基で任意に置換された４−７員環、
Ｒｃは水素原子またはＣ１−Ｃ４アルキル基、
Ｒｄは水素原子、Ｃ１−Ｃ４アルキル基、Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルキル基、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル基、
Ｒｅは水素原子、Ｃ１−Ｃ４アルキル基、ベンジル基、
Ａは（１）Ｃ４−Ｃ７シクロアルキル環、（２）Ｏ、Ｓ、ＳＯ２およびＮから選ばれるＷ１を含む０−４個のヘテロ原子を含む飽和、部分不飽和または芳香族５−７員環で、１つまたはそれ以上のハロゲン原子、オキソ、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、フェニルまたはＣ１−Ｃ４アルキル基で任意に置換された５−７員環、
ＢはＯ、Ｓ、ＳＯ２およびＮから選ばれる１−３個のヘテロ原子を含む飽和、部分不飽和または芳香族４−７員環で、１つまたはそれ以上のハロゲン原子、オキソ、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、フェニルまたはＣ１−Ｃ４アルキル基で任意に置換された４−７員環、
Ｗ１は炭素原子、窒素原子またはＣＨ基、
Ｗ２は酸素原子、硫黄原子、ＮＨ、ＣＨ２またはＳＯ２基、
である式（Ｉ）の新規非ペプチド誘導体およびその光学異性体またはラセミ体および／または塩および／または水和物および／または溶媒和物に関する。
【００１４】
本発明はまた式（Ｉ）の化合物またはその光学異性体またはラセミ体または塩または水和物または溶媒和物を活性成分として含む薬剤組成物に関する。
【００１５】
さらに本発明の目的は式（Ｉ）の化合物の合成であり、またこれらの化合物を含む薬剤の化学的および薬学的製造であり、同様にこれらの化合物による治療法であり、それは治療すべき哺乳類（ヒトを含む）へ有効量の本発明の式（Ｉ）の化合物をそれ自体または薬剤として投与することを意味する。
【００１６】
用語“ハロゲン”置換基はフッ素、塩素。臭素またはヨウ素原子を意味する。本説明で用いる用語“Ｃ１−Ｃ４アルキル基”はメチル、エチル、ノルマル−およびイソプロピルおよび種々のブチル基を意味する。これらのＣ１−Ｃ４アルキル基はＣ１−Ｃ４アルコキシ基およびＣ１−Ｃ４ヒドロキシアルキル基におけるものでもよい。
【００１７】
ＲａおよびＲｂの意味における４−７員複素環は例えばピペリジン、ピロリジン、ピペラジン、ホモピペラジン、モルホリン、チオモルホリンおよび同様のものでよい。
【００１８】
ＰおよびＢの意味における４−７員複素環は例えばイミダゾール、トリアゾール、オキサゾール、チアゾール、テトラゾール、フラン、テトラヒドロフラン、ピリミジン、ピリジン、ピペリジン、ピロリジン、ピラジン、ピペラジン、ホモピペラジン、モルホリン、チオモルホリンおよび同様のものでよい。
【００１９】
Ａの意味における飽和、部分不飽和または芳香族５−７員複素環は例えばイミダゾール、トリアゾール、オキサゾール、チアゾール、テトラゾール、ピリミジン、ピリジン、ピペリジン、ピロリジン、ピラジン、ピペラジン、ホモピペラジン、モルホリン、チオモルホリンおよび同様のものでよい。
【００２０】
本発明はまた酸または塩基で生じる式（Ｉ）の化合物の塩に関する。
【００２１】
有機および無機酸とも酸付加塩の生成のために用いられる。適する無機酸は例えば塩酸、硫酸および燐酸である。１価の有機酸の代表は例えばギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸および種々のブタン酸、吉草酸およびカプリン酸である。２価の有機酸の代表は例えばシュウ酸、マロン酸、マレイン酸、フマル酸およびコハク酸である。例えばクエン酸、酒石酸などのヒドロキシ酸、あるいは例えば安息香酸またはサリチル酸などの芳香族カルボン酸、同様に例えばメタンスルホン酸およびｐ−トルエンスルホン酸などの脂肪族および芳香族スルホン酸のような他の有機酸もまた使うことができる。特に価値のある酸付加塩のグループはそこで酸成分自身は投与量で治療効果を有せずあるいは活性成分の効果に好ましくない影響を持たないものである。これらの酸付加塩は薬学的に許容される酸付加塩である。なぜ薬学的に許容される酸付加塩に属さない酸付加塩が本発明に属するかの理由は、ある場合にはそれらは望ましい化合物の精製および単離に有益だからである。
【００２２】
塩基で生成する塩の中で特に重要なのは例えばナトリウム、カリウムのようなアルカリ金属、例えばカルシウムおよびマグネシウムのようなアルカリ土類金属、同様にアンモニアまたは有機アミンで生成する塩である。後者の塩基はさらに例えば生成物の溶解度および処理に影響する例えばヒドロキシまたはアミノ基のような置換基をもってもよい。塩基で生成する塩は薬学的に許容しうる塩基付加塩である。
【００２３】
本発明に従い式（Ｉ）の化合物はＲ３、Ｒ４、Ｒ５およびＱが上記の式（Ｉ）と同様の意味をもつ式（ＩＩ）のアミン誘導体を
【化３４】
2011500782.tif 000037
を式（ＩＩＩ）の塩化スルホニルと反応し
【化３５】
2011500782.tif 000038
ついでそのようにして得られたＲ３、Ｒ４、Ｒ５およびＱが上記の式（Ｉ）と同様の意味をもつ式（ＩＶ）のフェニルスルファモイル安息香酸誘導体を
【化３６】
2011500782.tif 000039
Ｒ１およびＲ２が上記の式（Ｉ）と同様の意味をもちＲがＣ１−Ｃ４アルキルである式（Ｖ）のアミノ酸と反応し
【化３７】
2011500782.tif 000040
そのようにして得られたＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、ＲおよびＱの意味は上で定義した通りである式（ＶＩ）の化合物を
【化３８】
2011500782.tif 000041
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＱの意味は上で定義した通りである式（ＶＩＩ）のカルボン酸誘導体を与えるように加水分解し
【化３９】
2011500782.tif 000042
最後に後者をアミン誘導体Ｚと反応し、得られた式（Ｉ）の非ペプチド誘導体はある場合には新しい置換基の導入および／または存在する置換基の修飾または除去、および／または塩形成および／または化合物の塩からの遊離によって他の式（Ｉ）の化合物に変換することができる。
【００２４】
スルホニル化反応は好ましくは適切な溶媒中で、好ましくは塩基の存在下で行われる。反応に引き続き薄層クロマトグラフにかける。必要な反応時間は６−２０時間である。反応混合物の検査は種々の方法で行うことができる。
【００２５】
ａ）  反応混合物を濃縮し生成物を結晶化または抽出により単離する。粗成生物が十分純粋でない場合は、ついでその精製のためにカラムクロマトグラフィーが用いられる。カラムクロマトグラフィーは吸着剤としてキーゼルゲル６０を用い例えばｎ−ヘキサン／酢酸エチル、クロロホルム／メタノール、ジクロロメタン／酢酸エチルまたはクロロホルム／アセトンのような種々の溶媒システムを溶離液とした順相でも、ＹＭＣ−Ｐａｃｋ  ＯＤＳ−ＡＱタイプの充填剤（ＹＭＣによって製造された）を用いアセトニトリル／水／トリフルオロ酢酸またはアセトニトリル／水／酢酸を溶離液とした逆相でも行われる。
【００２６】
ｂ）  反応混合物を氷水中に注ぎ生成物を濾過または抽出によって単離する。粗生成物を結晶化あるいは上述のようにカラムクロマトグラフィーによって精製する。生成物の構造はＩＲ、ＮＭＲおよび質量分析によって決定される。
【００２７】
式（ＶＩ）の化合物の加水分解は例えば水酸化アルカリ金属、好ましくは水酸化ナトリウムまたはリチウムを用いるか、あるいは例えば有機酸、好ましくはトリフルオロ酢酸を用いて行うことができる。
【００２８】
アミド結合の形成は好ましくは式（ＩＶ）または（ＶＩＩ）のカルボン酸からの活性誘導体を作ることによって行われ、それはそれぞれ式（Ｖ）のアミノ酸またはアミンＺと好ましくは塩基の存在下で反応される。
【００２９】
カルボン酸の活性誘導体への変換は適切な溶媒（例えばジメチルホルムアミド、アセトニトリル、塩素化炭化水素あるいは炭化水素またはそれらの混合）中でアミド結合の形成中にインサイツで行われる。活性誘導体は酸クロライド（例えばカルボン酸とチオニルクロライドから作られる）、混合無水物（例えばトリエチルアミンのような塩基の存在下でカルボン酸とイソブチルクロロホルメートから作られる）、活性エステル（例えばカルボン酸とヒドロキシベンズトリアゾール（ＨＯＢｔ）およびジシクロヘキシル−カルボジイミド（ＤＣＣ）から、または例えばトリエチルアミンのような塩基の存在下でＯ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）から作られる）でよい。活性誘導体は０℃から室温の範囲の温度で作ることができる。式（Ｖ）の適切なアミノ酸またはアミンＺを塩基としてあるいは無機酸との塩として、アミンの遊離のために必要な例えばトリエチルアミンのような塩基の存在下で、得られた溶液または懸濁液に加える。縮合反応の後に薄層クロマトグラフにかける。必要な反応時間は６−２０時間である。反応混合物の検査は種々の方法で行うことができる。
【００３０】
ａ）  反応混合物を濃縮し、残渣を結晶化または適切な有機溶媒で抽出しある場合にはカラムクロマトグラフィーで精製する。カラムクロマトグラフィーは吸着剤としてキーゼルゲル６０を、溶離液として例えばトルエン／メタノール、クロロホルム／メタノールあるいはトルエン／アセトンのような種々の溶媒システムを用いた順相で、あるいはＹＭＣ−Ｐａｃｋ−ＯＤＳ−ＡＱタイプの充填材（ＹＭＣによって製造された）と溶離液としてアセトニトリル／水／トリフルオロ酢酸あるいはアセトニトリル／水／酢酸を用いた逆相で行われる。
【００３１】
ｂ）  反応混合物を純粋な生成物を得るために直接上述のようにカラムクロマトグラフィーによって精製する。
【００３２】
生成物の構造はＩＲ、ＮＭＲおよび質量分析によって決定される。
【００３３】
得られた式（Ｉ）の非ペプチド誘導体は（調整法と関係なしに）ある場合にはさらなる置換基の導入および／または存在する置換基の修飾および／または除去によって、および／または酸との塩の形成および／または得られた酸付加物からの塩基処理による式（Ｉ）の非ペプチド誘導体の遊離によって他の式（Ｉ）の化合物に変換でき、および／または式（Ｉ）のフリーのスルホンアミド誘導体を塩基処理によって塩に変換できる。
【００３４】
例えばＮ−ベンジル基からベンジル基、それはＲｅを表す、の切断は例えば接触水素化または適切な溶媒中クロロエチルクロロホルメートで行うことができる。フリーの水酸基を含む式（Ｉ）の化合物は種々のアシル化またはスルホニル化剤でアシルオキシまたはスルホキシ誘導体へ変換できる。反応は例えば塩素化炭化水素中でアシル化剤として酸クロライドまたは無水酸を用いて塩基（例えばトリエチルアミンまたは炭酸ナトリウム）の存在下で行うことができる。ニトロ基を含む式（Ｉ）のスルホンアミド誘導体は還元によってアミンに変換でき、アミンはさらに水酸基のアシル化に対して述べたように酸アミドを与えるように反応できあるいはカルバメート誘導体が合成できる。エステル基は加水分解できて得られるフリーのカルボン酸は適切なアミン誘導体と反応することによってアミドに変換できる。Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）基は有機または無機酸（例えばトリフルオロ酢酸または塩酸）によって切断できる。シアノ基はアミド、Ｎ−ヒドロキシアミジンまたはＮ−を含む種々の複素環基に変換できる。
【００３５】
殆どの式（Ｖ）のアミノ酸およびアミンＺは市販品を入手可能かまたは種々の既知の方法によって合成できる。いくつかの新規アミンＺの合成は実施例で述べる。これらの手順に従って他のアミンＺも作られる。
【００３６】
本発明の化合物はそれらの薬学的に許容される塩または水和物または溶媒和物も同様にそれ自身あるいは薬剤組成物の形で用いることができる。これらの組成物（薬剤）は固体、液体または半流動体の形でよく、担体、賦形剤、稀釈剤、安定剤、湿潤剤または乳化剤、ｐＨ−および浸透圧調節剤、香味料、着香料、同様に製剤促進または製剤準備添加物のような一般に実用されている薬剤補助剤および補助物質を加えてもよい。
【００３７】
治療効果を発揮するために必要な用量は広範囲に変わり、病気のステージ、治療される患者の状態および体重、同様に活性成分に対する患者の感受性、投与経路および１日の治療回数によって各々の特定のケースにおける個々の要求に適合される。用いられる活性成分の実際の用量は治療される患者について熟練した技術、知識を持つ担当医によって安全に決められる。
【００３８】
本発明による活性成分を含む薬剤組成物は通常１用量単位に０．０１から１００ｍｇの活性成分を含む。もちろん、ある組成物中の活性成分の量は上で定めた上限または下限を超えることは可能である。
【００３９】
薬剤組成物の固体の形は例えば錠剤、糖衣錠、カプセル、丸薬または注射剤に有用な凍結乾燥粉末アンプルでよい。液体組成物は注射および点滴ができる組成物、液体医薬、液体充填剤、液滴である。半流動体組成物は軟膏、バルサム、クリーム、振とう混合物および坐薬でよい。
【００４０】
単純な投薬のために薬剤組成物が活性成分の一度に投与される量、あるいは数度分またはその１／２，１／３または１／４を含む用量単位からなることが適している。そのような用量単位は例えば活性成分の要求量を正確に投与するために半分または１／４にしやすくする溝で粉末化できる錠剤である。
【００４１】
錠剤は胃を出た後に活性成分含量の放出を確かにするために酸溶解層で被覆できる。そのような錠剤は腸溶性である。同様な効果はまた活性成分のカプセル化で達成できる。
【００４２】
経口投与のための薬剤組成物は例えば賦形剤として乳糖または澱粉、結合剤あるいは造粒剤としてカルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ポリビニルピロリドンまたは澱粉ペーストを含んでもよい。じゃがいも澱粉または微結晶セルロースが崩壊剤として加えられるが、ウルトラアミロペクチンまたはホルムアルデヒドカゼインもまた用いられる。タルカム、コロイド状珪酸、ステアリン、ステアリン酸カルシウムまたはマグネシウムは抗凝集剤および潤滑剤として用いられる。
【００４３】
錠剤は例えば湿式造粒とそれに続く圧縮によって製造できる。混合された活性成分と賦形剤、ある場合には崩壊剤の一部も同様に適切な装置中で結合剤の水溶液、アルコール溶液またはアルコール水溶液とともに造粒し、ついで顆粒を乾燥する。乾燥した顆粒に他の崩壊剤、潤滑剤および抗粘着剤を加え、混合物を圧縮して錠剤にする。ある場合には錠剤に投与が容易なように二分溝が作られる。
【００４４】
錠剤は活性成分と適切な補助剤の混合物から圧縮によって直接作ることができる。ある場合には、錠剤は例えば砂糖、セルロース誘導体（メチル−またはエチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムなど）、ポリビニルピロリドン、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、食用着色剤、食用酒、芳香剤、酸化鉄顔料などの安定剤、香味料、着色剤のような薬剤の実務で一般に用いられる添加物を用いることによって被覆できる。カプセルの場合、活性成分と補助剤の混合物がカプセルに詰められる。
【００４５】
例えば懸濁シロップ、エリキシル剤のような液体組成物は水、グリコール、オイル、アルコール、着色および香味料を用いて作られる。
【００４６】
直腸投与のために組成物は坐薬または浣腸剤に処方される。坐薬は活性成分のほかに担体、いわゆるアデプス  プロ  サポジトリーを含んでもよい。担体は水素化植物油、Ｃ１２−Ｃ１８脂肪酸トリグリセリド（好ましくは商品名Ｗｉｔｅｐｓｏｌの担体）のような植物油でよい。活性成分は融かしたアデプス  プロ  サポジトリーと均一に混ぜられ坐薬が形作られる。
【００４７】
非経口投与のために組成物は注射用溶液として処方される。注射用溶液を製造するため活性成分は蒸留水および／またはグリコールエーテルのような種々の有機溶剤に溶かされ、ある場合には例えばポリオキシエチレンソルビタン−モノラウレート、−モノオレエート、またはモノステアレート（ツイーン２０、ツイーン６０、ツイーン８０）のような溶解剤の存在下で溶かされる。注射用溶液はまた例えばエチレンジアミンテトラアセテートのような保存剤、同様にｐＨ調整剤および緩衝液およびある場合にはリドカインのような局所麻酔剤、のような種々の補助剤を含んでもよい。本発明の活性成分を含む注射用溶液はアンプルに詰める前に濾過され、充填後に殺菌される。
【００４８】
活性成分が吸湿性の場合は、凍結乾燥によって安定化することができる。
【００４９】
有用性
本発明の化合物はブラジキニン受容体拮抗剤、特に選択的ブラジキニンＢ１受容体拮抗剤であり、その結果痛みと炎症の進行の治療および予防に有用である。化合物は例えば慢性疼痛、特に炎症性疼痛、痛覚過敏、骨および関節痛（変形性関節症）、反復運動痛、筋膜痛（筋肉傷害、線維筋痛）、内臓痛（潰瘍性大腸炎、膵臓塩、膀胱炎、ブドウ膜炎）、周術期痛（一般外科、婦人科）、術後痛（手術後疼痛症候群）、外傷後の痛み（例えば捻挫または骨折）、神経因性疼痛（ヘルペス後神経痛、神経障害、幻肢痛、単神経炎、多発神経炎）、歯痛、および癌疼痛を含む痛みの治療に有効である。さらに狭心症、月経、糖尿病性血管障害、膵頭炎に伴う毛細血管後抵抗または糖尿病性症候群（例えば高血糖症、多尿、タンパク尿および尿中亜硝酸およびカリクレイン排泄の増加）、糖尿病性痛覚過敏に伴う痛みの治療に有効である。さらに化合物は血管浮腫、動脈硬化症、例えば抗血液量減少および／または抗低血圧剤、および敗血症のような敗血症ショックの治療に用いられる。それらは消化管または子宮の痙攣の治療のための平滑筋弛緩薬として用いられる。さらに、本発明の化合物は乾癬および湿疹、および火傷および日焼け（ＵＶ−紅斑および疼痛）を含む皮膚傷害のような炎症性皮膚疾患の治療に用いられる。化合物は様々な原因の炎症性疼痛（例えば慢性関節リウマチ、リウマチ性疾患、腱鞘炎、肝疾患、過敏性大腸症候群、炎症性大腸炎。クローン病、腎炎、アレルギー性鼻炎、血管運動性鼻炎、ブドウ膜炎、歯肉炎）、アレルギーの治療に用いられる。そのような化合物は例えば慢性閉塞性肺疾患、成人呼吸促迫症候群、気管支炎、肺炎、喘息のような炎症性気道疾患を治療するため治療上用いられる。それらは喘息における気道の過敏反応を制御、制限または逆転するため、アレルギー性喘息（アトピー性または非アトピー性）を含む内因性および外因性の喘息、職業性喘息、ウィルスまたは細菌で憎悪した喘息、他の非アレルギー性喘息、乳児喘鳴症候群、同様に運動誘発気管支収縮を治療するために用いられる。それらはアルミニウム肺症、アントラコーシス、アスベスト肺症、珪肺症、羽毛肺塵症、鉄症、珪粉症、煙草粉肺症および綿肺症を含む塵肺症に対し有効である。さらに、それらは例えば多発性硬化症、アルツハイマー病、癲癇、脳浮腫、群発性頭痛を含む頭痛、予防および急性の使用を含む偏頭痛、同様に閉鎖性頭部外傷にも有効である。
【００５０】
生物学的評価
機能評価
組換ヒトＢ１またはＢ２受容体発現細胞におけるプレート読み取り蛍光光度計での細胞質カルシウムイオン濃度測定によるインビトロＢ１およびＢ２受容体拮抗作用強度の評価
【００５１】
細胞培養
組換ヒトＢ１（ＣＨＯ−Ｂ１、ユーロスクリーン）またはＢ２（ＣＨＯ−Ｂ２、パーキン−エルマー）受容体を安定して発現するチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞を１０％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）、１００Ｕ／ｍｌペニシリン、０．１ｍｇ／ｍｌストレプトマイシン、０．２５μｇ／ｍｌアンホテリシンＢ、１％イーグル最小必須培地（ＭＥＭ）、非必須アミノ酸溶液、６００μｇ／ｍｌＧ４１８、１％ピルベート（Ｂ２細胞株に対して）を含むダルベッコーの修飾イーグル培地（ＤＭＥＭ）で培養した。細胞を加湿したインキュベーター中で５％ＣＯ２／９５％空気の雰囲気で３７℃に保ち週３回１：４で継代した。細胞を１．５−２．５ｘ１０４細胞／ウェルで標準９６穴マイクロプレートに蒔き、プレーティング１−２日後に細胞質カルシウムイオン濃度（［Ｃａ２＋］ｉ）を測定した。
【００５２】
細胞質カルシウムイオン濃度の蛍光光度測定
ヒトＢ１およびＢ２受容体をそれぞれ安定して発現するＣＨＯ−Ｂ１およびＣＨＯ−Ｂ２細胞について［Ｃａ２＋］ｉ測定を行った。細胞は標準９６穴マイクロプレート中で増殖し測定前にカルシウム感受性蛍光染料、フルオ−４／ＡＭ（２μＭ）を負荷した：培養培地を除去した後染料を細胞に加え（測定用緩衝液：１４５  ｍＭ  ＮａＣｌ、５  ｍＭ  ＫＣｌ、２  ｍＭ  ＭｇＣｌ２、２  ｍＭ  ＣａＣｌ２、１０  ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、２０  ｍＭ  Ｄ−グルコース、２  ｍＭ  プロベネシド、１００  μｌ／ウェルに溶解）細胞を３７℃で加湿インキュベーター中５％ＣＯ２／９５％空気の雰囲気で４０−１２０分間培養した。染料負荷を止めるため細胞を測定用緩衝液で２回洗浄した。洗浄後、種々の濃度の試験化合物（ＤＭＳＯストック溶液からの細胞外培養液で稀釈、最終ＤＭＳＯ濃度＜０．１％）または緩衝液を実験構成に依って各ウェルに加えた。３７℃で２０−２５分間培養後、［Ｃａ２＋］ｉのベースラインおよびアゴニスト誘起変化をプレート読取蛍光光度計（Ｆｌｕｏｒｏｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔ，  Ｌａｂｓｙｓｔｅｍｓ）でカラム毎に測定した。励起および発光検出はプレートの底から行った。フルオ−４で用いたフィルター−４８５ｎｍ、発光フィルター−５３８ｎｍ。測定の全過程は３７℃で行い通例のソフトウェアによって制御した。試験化合物の阻害強度は種々の濃度の化合物の存在下でのアゴニスト誘起［Ｃａ２＋］ｉ上昇の低下の測定によって評価した。アゴニストはＣＨＯ−Ｂ１細胞に対しＬｙｓＤＡＢＫ、ＣＨＯ−Ｂ２細胞に対しブラジキニンであった。アゴニストはＥＣ８０濃度で適用し、ＥＣ８０値は毎日測定した用量反応曲線から導いた。蛍光データはΔＦ／Ｆ（ベースラインに対して正規化した蛍光変化）として表した。１枚のプレートについての全ての処理を複数のウェルで測定した。同じ処理をしたすべてのウェルからのデータを平均して、平均値を分析に用いた。１つの濃度点での化合物の阻害強度は対照アゴニスト反応のパーセント阻害率で表した。Ｓ字型の濃度−阻害曲線をデータに合わせ（少なくとも３回の独立した実験から導いた）、化合物による最大阻害の１／２を生じる濃度としてＩＣ５０値を決定した。
【００５３】
機能および結合試験で測定した試験参照化合物は以下の通りである：
１）  ４−｛２−［（２，２−ジフェニル−エチル）−アミノ］−５−｛４−［４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）−カルボニル］−１−ピペリジニル］−スルホニル｝−ベンゾイル｝−モルホリン（ＮＶＰ−ＳＡＡ１６４，  Ｂｒ．  Ｊ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  １４４  （２００５）  ８８９−８９９）；  Ｋｉ  ８ｎＭ；  ＩＣ５０：  ３３ｎＭ；
２）  （Ｒ）−Ｎ−［２，３−ジヒドロ−２−オキソ−５−（２−フェニル−エチル）−１−プロピル−１Ｈ−１，４−ベンゾジアゼピン−３−イル］−Ｎ’−｛４−［４−（４−ピリジニル）−１−ピペラジニル］−フェニル｝−ウレア（Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ４６  （２００３）  １８０３−１８０６）；  Ｋｉ  ０．５９ｎＭ；  ＩＣ５０  １．９ｎＭ；
３）  Ｎ−［４−（４’−ビピペリジン）−１’−イルフェニル］−Ｎ’−［（３Ｒ）−２，３−ジヒドロ−５−（４−メチル−フェニル）−２−オキソ−１−プロピル−１Ｈ−１，４−ベンゾジアゼピン−３−イル）−ウレア（Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ４６  （２００３）  １８０３−１８０６）；  Ｋｉ  １３．４ｎＭ；  ＩＣ５０  ６４．５ｎＭ
【００５４】
参照化合物に対して我々が測定した  ＫｉおよびＩＣ５０データは文献で与えられたデータとよく一致した。
【００５５】
表Ｉに機能評価で測定した本発明の最も効果のある化合物を掲げた。
【００５６】
【表１】
2011500782.tif 000043
【００５７】
受容体結合試験
１．ヒト組換ブラジキニンＢ１受容体結合
結合試験はヒト組換ブラジキニン受容体（ＣＨＯ細胞に発現）についてユーロスクリーンのテクニカルデータシートに従って行った（Ｃａｔ．  Ｎｏ．  ：  ＥＳ−０９１）。２０μｇタンパク／チューブを放射性リガンドとしての［３，４−プロリル−３，４−３Ｈ（Ｎ）］−［Ｄｅｓ−Ａｒｇ１０］カリジンとともに培養した。非特異的結合は１０μＭのＬｙｓ−ｄｅｓ−Ａｒｇ９−ブラジキニンの存在下で測定した。最終培養容積は２５０μｌとした。試料を１５分間２５℃で培養しついで少なくとも１時間０．５％ＰＥＩに予め浸漬したＧＦ／Ｂフィルターを通して急速に真空濾過した。放射活性は液体シンチレーションスペクトロスコピーによって測定した。
【００５８】
表ＩＩに結合試験で測定した本発明の最も効果のある化合物を掲げた。
【００５９】
【表２】
2011500782.tif 000044
【００６０】
２．ヒト組換ブラジキニンＢ２受容体結合試験
結合試験はヒト組換ブラジキン２受容体（ＣＨＯ細胞に発現）についてレセプター  バイオロジーのテクニカルデータシート（Ｃａｔ．  Ｎｏ．  ：ＲＢＨＢ２Ｍ）に従い僅かに変更して行った。８．４μｇタンパク／チューブを放射性リガンドとしての［２，３−プロリル−３，４−３Ｈ（Ｎ）］−ブラジキンとともに培養した。非特異的結合は５μＭのブラジキニンの存在下で測定した。最終培養容積は２００μｌとした。試料を９０分間＋４℃で培養しついで少なくとも１時間０．５％ＰＥＩに予め浸漬したＧＦ／Ｂフィルターを通して急速に真空濾過した。放射活性は液体シンチレーションスペクトロスコピーによって測定した。
【００６１】
化合物は機能および結合の両試験によってヒトＢ１受容体に対しヒトＢ２受容体を超える高い親和性と選択性（＞５０倍）を示した。
【実施例】
【００６２】
本発明による化合物および薬剤組成物の合成をそれに限定されるものではないが以下の実施例で例示する。
【００６３】
参考例１
トランス−４−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−シクロヘキシルアミン二塩酸
ａ）  トランス−２−｛１−［４−（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−アミノ］−シクロヘキシル｝−エタノール
トランス−２−｛１−［４−（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−アミノ］−シクロヘキシル｝−酢酸メチルエステル［Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ４３  （２０００）  １８７８−１８８５］（２８．５ｇ、１０５．２ｍｍｏｌ）の無水テトラヒドロフラン（５００ｍＬ）溶液を−２℃に冷却し、水素化リチウムアルミニウム（５．４ｇ、１４２ｍｍｏｌ）を滴下して混合物を−２℃で６０分間攪拌した。反応混合物を−１０℃に冷却して酢酸エチル（１５ｍＬ）でクエンチし、ついで混合物に０℃で塩水（４３ｍＬ）をゆっくり加えた。沈殿した塩を濾過し、酢酸エチルで洗浄した。濾液を真空で乾燥した。残渣をジイソプロピルエーテル（１００ｍＬ）から再結晶して白色粉末として標記化合物２３．７ｇ（９３％）を得た。
【００６４】
ｂ）  メタンスルホン酸トランス−２−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−シクロヘキシル）−エチルエステル
トランス−２−｛１−［４−（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−アミノ］−シクロヘキシル｝−エタノール（１５ｇ、６２ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１０．５ｍＬ、７５ｍｍｏｌ）の攪拌している無水ジクロロメタン（１５０ｍＬ）溶液にメタンスルホニルクロリド（５．７ｍＬ、７３．４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２５ｍＬ）溶液を０℃で滴下した。０℃で３０分間攪拌した後、溶液を水で３回抽出した。有機溶液を硫酸ナトリウム上で乾燥し真空で濃縮して標記化合物１３．０ｇ（６５％）を得た。
【００６５】
ｃ）  トランス−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−シクロヘキシル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
アセトニトリル（４０ｍＬ）中でメタンスルホン酸トランス−２−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−シクロヘキシル）−エチルエステル（３．２ｇ、１０ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（１．４ｇ、１０ｍｍｏｌ）およびピロリジン（１．２５ｍＬ、１５ｍｍｏｌ）の混合物を６０℃で２時間攪拌した。混合物を室温に冷却し水（２００ｍＬ）に注いだ。沈殿した白色結晶を濾別し水で洗浄して１．９ｇ（６４％）の標記化合物を得た。
【００６６】
ｄ）  トランス−４−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−シクロヘキシルアミン二塩酸
トランス−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−シクロヘキシル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２．５ｇ、８．４６ｍｍｏｌ）、無水ジオキサン（２０ｍＬ）およびジオキサン（４０ｍＬ）中の６．５Ｎ塩酸の混合物を室温で一夜撹拌し、ついでジエチルエーテルで稀釈し０℃で１時間撹拌した。沈殿した結晶を濾別し、ジエチルエーテルで洗浄して乾燥し、白色に近い固体として標記化合物２．２５ｇ（９９％）を得た。
【００６７】
参考例２
（３−［１，４’］ビピペリジニル−１’−イル）−プロピルアミン三塩酸
ａ）  （３−［１，４’］ビピペリジニル−１’−イル−プロピル）−カルバミン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル
４−ピペリジノピペリジン（Ａｌｄｒｉｃｈ）（２．０ｇ、１１．８８ｍｍｏｌ）、（３−ブロモ−プロピル）−カルバミン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル［Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  Ｃｈｉｍ．  Ｔｈｅｒ．  ３７  （２００２）  ５７３−５８４］  （３．９６ｇ，１６．６３ｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（１３０ｍＬ）および炭酸カリウム（１．６４ｇ、１１．８８ｍｍｏｌ）の混合物を室温で一夜攪拌し、ついで真空で乾燥した。残渣を水（１５０ｍＬ）に溶解し、ジクロロメタン（３ｘ１５０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を塩水（１５０ｍＬ）で洗い、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過して濃縮した。粗製生物を吸着剤としてキーゼルゲル６０（０．０４０−０．０６３ｍｍ）（Ｍｅｒｃｋ）、溶出液としてクロロホルム：メタノール：水酸化アンモニウム＝１０：１：０．１を用いたカラムクロマトグラフィーにかけて油状の標記化合物２．２７ｇ（５９％）を得た。
【００６８】
ｂ）  （３−［１，４’］ビピペリジニル−１’−イル）−プロピルアミン三塩酸
（３−［１，４’］ビピペリジニル−１’−イル−プロピル）−カルバミン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２．１５ｇ、６．６ｍｍｏｌ）、無水ジオキサン（４０ｍＬ）およびジオキサン（２２ｍＬ）中の６．５Ｎ塩酸の混合物を室温で一夜攪拌し、ついでジエチルエーテルで稀釈して０℃で１時間攪拌した。沈殿した結晶を濾別し、ジエチルエーテルで洗い乾燥してベージュ色の固体として標記化合物２．０３ｇ（９２％）を得た。
【００６９】
［実施例１］
（Ｒ）−Ｎ−｛１−メチル−２−オキソ−２−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペリジン−１−イル］−エチル｝−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド
ａ）  ４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）安息香酸
アルゴン雰囲気下で氷冷した２−フェノキシ−フェニルアミン（Ａｌｄｒｉｃｈ）（４９．７６ｇ、２６８．６５ｍｍｏｌ）の無水ピリジン（２９０ｍＬ）溶液に４−クロロスルホニル安息香酸（５９．４２ｇ、２６９．３２ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた。反応混合物を室温で一夜撹拌した。混合物を真空で蒸発し、残渣を１Ｎ塩酸（３００ｍＬ）で処理した。合わせた有機層を１Ｎ塩酸、水および塩水で洗い、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し真空濃縮した。残渣をトルエンで処理し、得られた結晶生成物を濾過してトルエンで洗い淡桃色固体として標記化合物８４．８６ｇ（８５．５％）を得た。ＭＳ（ＥＩ）３７０．２（ＭＨ＋）。
【００７０】
ｂ）  （Ｒ）−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸メチルエステル
４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゼン（２．５ｇ、６．７６ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１．５ｍＬ、１０．８ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ［Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｃｈｅｍ．  Ｔｅｃｈ．）］（２．９ｇ、７．６４ｍｍｏｌ）の無水ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）溶液を室温で５分間撹拌後、（Ｒ）−２−アミノ−プロピオン酸メチルエステル（０．９５ｇ、６．８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物のｐＨをトリエチルアミンの添加によって８に調整し、そのようにして得られた混合物を室温で一夜撹拌し、ついで真空濃縮した。残渣を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（５０ｍＬ）で処理し、酢酸エチル（３ｘ５０ｍＬ）で抽出し、有機層を合わせて飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水および塩水で洗い、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過して濃縮した。残渣を吸着材としてキーゼルゲル６０（０．０４０−０．０６３ｍｍ）（Ｍｅｒｃｋ）、溶出液としてトルエン：アセトン＝６：１を用いたカラムクロマトグラフィーによって精製して、淡黄色の非結晶性固体として標記化合物２．４ｇ（７８％）を得た。ＭＳ（ＥＩ）４５５．３（ＭＨ＋）。
【００７１】
ｃ）  （Ｒ）−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸
（Ｒ）−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸メチルエステル（０．２ｇ、０．４４ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１．０ｍＬ）、水（０．５ｍＬ）およびメタノール（０．５ｍＬ）の混合溶液中に撹拌しながら水酸化リチウム一水和物（０．０９３ｇ、２．２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で２時間撹拌した。混合物を濃縮し、残渣を水に溶かし、１Ｍ塩酸で酸性にして、沈殿した固体を濾別して、水で洗い乾燥して白色に近い固体として標記化合物０．１５８ｇ（８１．５％）を得た。ＭＳ（ＥＩ）４４１．３（ＭＨ＋）。
【００７２】
ｄ）  （Ｒ）−Ｎ−｛１−メチル−２−オキソ−２−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペリジン−１−イル］−エチル｝−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド
（Ｒ）−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸（３７ｍｇ、０．０８５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２ｍＬ）およびジメチルホルムアミド（０．２ｍＬ）の混合溶液中に撹拌しながら１−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペラジン（ＥＭＫＡ−Ｃｈｅｍｉｅ）（１８ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（４６ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（６０μＬ、０．４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で２４時間撹拌し、ついで吸着材としてキーゼルゲル６０（０．０１５−０．０４０ｍｍ）（Ｍｅｒｃｋ）、溶出剤を１００％Ａで始め７０％Ａおよび３０％Ｂまで１５分間で変える（溶出剤Ａ：  クロロホルム、溶出剤Ｂ：  ５％水酸化アンモニウムを含むメタノール）勾配溶出カラムクロマトグラフィーによって精製して、標記化合物３８．５ｍｇ（７５％）を得た。ＭＳ（ＥＩ）６０５．６（ＭＨ＋）。
【００７３】
［実施例２］
Ｎ−｛２−オキソ−２−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペリジン−１−イル］−エチル｝−４−（２−フェニルスルファニル−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド
ａ）  ４−（２−フェニルスルファニル−フェニルスルファモイル）−安息香酸
標記化合物を２−フェニルスルファニル−フェニルアミン［Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．；  １８  （１９７５）  ３８６−３９１］から実施例１／ａに記載の方法に従って調製した。ＭＳ（ＥＩ）３８６．２（ＭＨ＋）。
【００７４】
ｂ）  ［４−（２−フェニルスルファニル−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−酢酸エチルエステル
標記化合物を４−（２−フェニルスルファニル−フェニルスルファモイル）−安息香酸とグリシンエチルエステル塩酸から実施例１／ｂに記載の方法に従って調製した。
【００７５】
ｃ）  ［４−（２−フェニルスルファニル−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−酢酸
標記化合物を［４−（２−フェニルスルファニル−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−酢酸エチルエステルから実施例１／ｃに記載の方法に従って調製した。ＭＳ（ＥＩ）４４３．２（ＭＨ＋）。
【００７６】
ｄ）  Ｎ−｛２−オキソ−２−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペリジン−１−イル］−エチル｝−４−（２−フェニルスルファニル−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド
標記化合物を［４−（２−フェニルスルファニル−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−酢酸と１−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペラジン（ＥＭＫＡ−Ｃｈｅｍｉｅ）から実施例１／ｄに記載の方法に従って調製した。ＭＳ（ＥＩ）６０７．５（ＭＨ＋）。
【００７７】
表Ｉの化合物を［４−（２−フェニルスルファニル−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−酢酸（実施例２／ｃ）から実施例１／ｄに記載の方法に従って調製した。
【００７８】
【表３−１】
2011500782.tif 000045
【００７９】
【表３−２】
2011500782.tif 000046
【００８０】
［実施例２６］
（Ｓ）−Ｎ−｛１−メチル−２−オキソ−２−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペリジン−１−イル］−エチル｝−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド
ａ）  （Ｓ）−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸ベンジルエステル
標記化合物を４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−安息香酸（実施例１／ａ）と（Ｓ）−２−アミノ−プロピオン酸ベンジルエステル塩酸から実施例１／ｂに記載の方法に従って調製した。ＭＳ（ＥＩ）５３１．６（ＭＨ＋）。
【００８１】
ｂ）  （Ｓ）−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸
標記化合物を（Ｓ）−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸ベンジルエステルから実施例１／ｃに記載の方法に従って調製した。ＭＳ（ＥＩ）４４１．３（ＭＨ＋）。
【００８２】
ｃ）  （Ｓ）−Ｎ−｛１−メチル−２−オキソ−２−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペリジン−１−イル］−エチル｝−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド
標記化合物を（Ｓ）−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸と１−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペラジン（ＥＭＫＡ−Ｃｈｅｍｉｅ）から実施例１／ｄに記載の方法に従って調製した。ＭＳ（ＥＩ）６０５．５（ＭＨ＋）。
【００８３】
［実施例２７］
（Ｒ）−Ｎ−｛１−ヒドロキシメチル−２−オキソ−２−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペリジン−１−イル］−エチル｝−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド
ａ）  （Ｒ）−３−ヒドロキシ−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸メチルエステル
標記化合物を４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−安息香酸（実施例１／ａ）と（Ｒ）−２−アミノ−３−ヒドロキシ−プロピオン酸メチルエステルから実施例１／ｂに記載の方法に従って調製した。ＭＳ（ＥＩ）４７１．３（ＭＨ＋）。
【００８４】
ｂ）  （Ｒ）−３−ヒドロキシ−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸
標記化合物を（Ｒ）−３−ヒドロキシ−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸メチルエステルから実施例１／ｃに記載の方法に従って調製した。ＭＳ（ＥＩ）４５７．３（ＭＨ＋）。
【００８５】
ｃ）  （Ｒ）−Ｎ−｛１−ヒドロキシメチル−２−オキソ−２−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペリジン−１−イル］−エチル｝−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド
標記化合物を（Ｒ）−３−ヒドロキシ−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸と１−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペラジン（ＥＭＫＡ−Ｃｈｅｍｉｅ）から実施例１／ｄに記載の方法に従って調製した。ＭＳ（ＥＩ）６２１．５（ＭＨ＋）。
【００８６】
［実施例２８］
（Ｓ）−Ｎ−｛１−ヒドロキシメチル−２−オキソ−２−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペリジン−１−イル］−エチル｝−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド
ａ）  （Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸メチルエステル
標記化合物を４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−安息香酸（実施例１／ａ）と（Ｓ）−２−アミノ−３−ヒドロキシ−プロピオン酸メチルエステルから実施例１／ｂに記載の方法に従って調製した。ＭＳ（ＥＩ）４７１．３（ＭＨ＋）。
【００８７】
ｂ）  （Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸
標記化合物を（Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸メチルエステルから実施例１／ｃに記載の方法に従って調製した。ＭＳ（ＥＩ）４５７．３（ＭＨ＋）。
【００８８】
ｃ）  （Ｓ）−Ｎ−｛１−ヒドロキシメチル−２−オキソ−２−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペリジン−１−イル］−エチル｝−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド
標記化合物を（Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸と１−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペラジン（ＥＭＫＡ−Ｃｈｅｍｉｅ）から実施例１／ｄに記載の方法に従って調製した。ＭＳ（ＥＩ）６２１．５（ＭＨ＋）。
【００８９】
［実施例２９］
（Ｒ）−Ｎ−［１−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−２−（４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−２−オキソ−エチル］−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド
ａ）  （Ｒ）−３−（４ヒドロキシ−フェニル）−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸メチルエステル
標記化合物を４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−安息香酸（実施例１／ａ）と（Ｒ）−２−アミノ−３−（４−ヒドロキシ−フェニル）−プロピオン酸メチルエステルから実施例１／ｂに記載の方法に従って調製した。ＭＳ（ＥＩ）５４７．４（ＭＨ＋）。
【００９０】
ｂ）  （Ｒ）−３−（４−ヒドロキシ−フェニル）−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸
標記化合物を（Ｒ）−３−（４−ヒドロキシ−フェニル）−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸メチルエステルから実施例１／ｃに記載の方法に従って調製した。ＭＳ（ＥＩ）５３３．３（ＭＨ＋）。
【００９１】
ｃ）  （Ｒ）−Ｎ−［１−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−２−（４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−２−オキソ−エチル］−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド
標記化合物を（Ｒ）−３−（４−ヒドロキシ−フェニル）−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸と４−ヒドロキシピペリジンから実施例１／ｄに記載の方法に従って調製した。ＭＳ（ＥＩ）６１６．５（ＭＨ＋）。
【００９２】
［実施例３０］
（Ｒ）−Ｎ−［１−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−２−（４−ヒドロキシメチル−ピペリジン−１−イル）−２−オキソ−エチル］−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド
標記化合物を（Ｒ）−３−（４−ヒドロキシ−フェニル）−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸（実施例３０／ｂ）とピペリジン−４−イル−メタノールから実施例１／ｄに記載の方法に従って調製した。ＭＳ（ＥＩ）６３０．６（ＭＨ＋）。
【００９３】
［実施例３１］
（Ｒ）−Ｎ−｛１−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−２−オキソ−２−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペリジン−１−イル］−エチル｝−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド
標記化合物を（Ｒ）−３−（４−ヒドロキシ−フェニル）−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸（実施例３０／ｂ）と１−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペラジン（ＥＭＫＡ−Ｃｈｅｍｉｅ）から実施例１／ｄに記載の方法に従って調製した。ＭＳ（ＥＩ）６９７．５（ＭＨ＋）。
【００９４】
［実施例３２］
（Ｓ）−Ｎ−｛１−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−２−オキソ−２−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペリジン−１−イル］−エチル｝−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド
ａ）  （Ｓ）−３−（４−ヒドロキシ−フェニル）−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸メチルエステル
標記化合物を４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−安息香酸（実施例１／ａ）と（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−ヒドロキシ−フェニル）−プロピオン酸メチルエステルから実施例１／ｂに記載の方法に従って調製した。ＭＳ（ＥＩ）５４７．４（ＭＨ＋）。
【００９５】
ｂ）  （Ｓ）−３−（４−ヒドロキシ−フェニル）−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸
標記化合物を（Ｓ）−３−（４−ヒドロキシ−フェニル）−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸メチルエステルから実施例１／ｃに記載の方法に従って調製した。ＭＳ（ＥＩ）５３３．３（ＭＨ＋）。
【００９６】
ｃ）  （Ｓ）−Ｎ−｛１−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−２−オキソ−２−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペリジン−１−イル］−エチル｝−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド
標記化合物を（Ｓ）−３−（４−ヒドロキシ−フェニル）−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸と１−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペラジン（ＥＭＫＡ−Ｃｈｅｍｉｅ）から実施例１／ｄに記載の方法に従って調製した。ＭＳ（ＥＩ）６９７．６（ＭＨ＋）。
【００９７】
表２の化合物を（Ｓ）−３−（４−ヒドロキシ−フェノキシ）−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸（実施例３３／ｂ）から実施例１／ｄに記載の方法に従って調製した。
【００９８】
【表４】
2011500782.tif 000047
【００９９】
［実施例３８］
Ｎ−｛１，１−ジメチル−２−オキソ−２−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペリジン−１−イル］−エチル｝−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド
ａ）  ２−メチル−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸メチルエステル
標記化合物を４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−安息香酸（実施例１／ａ）とα−アミノ−イソ酪酸メチルエステル塩酸［Ｃｏｌｌｅｃｔ．  Ｃｚｅｃｈ．  Ｃｈｅｍ．  Ｃｏｍｍｕｎ．；  ６３  （１９９８）  ８５−９３］から実施例１／ｂに記載の方法によって調製した。ＭＳ（ＥＩ）４６９．１（ＭＨ＋）。
【０１００】
ｂ）  ２−メチル−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸
標記化合物を２−メチル−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸メチルエステルから実施例１／ｃに記載の方法によって調製した。ＭＳ（ＥＩ）４５５．１（ＭＨ＋）。
【０１０１】
ｃ）  Ｎ−｛１，１−ジメチル−２−オキソ−２−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペリジン−１−イル］−エチル｝−４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンズアミド
標記化合物を２−メチル−２−［４−（２−フェノキシ−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−プロピオン酸と１−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ピペラジン（ＥＭＫＡ−Ｃｈｅｍｉｅ）から実施例１／ｄに記載の方法によって調製した。ＭＳ（ＥＩ）５８８．３（ＭＨ＋）。
【０１０２】
［実施例３９］
４−（２−フェニルスルファニル−フェニルスルファモイル）−Ｎ−｛［（ピペリジン−４−イルメチル）−カルバモイル］−メチル｝−ベンズアミド塩酸
［４−（２−フェニルスルファニル−フェニルスルファモイル）−ベンゾイルアミノ］−酢酸（実施例２／ｃ）（３７．６ｍｇ、０．０８５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２ｍＬ）およびジメチルホルムアミド（０．２ｍＬ）および４−アミノメチル−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２１．４ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合溶液に、撹拌しながらＨＢＴＵ（４６ｍｇ、０．１２ｍｏｌ）およびトリエチルアミン（３０μＬ、０．２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で２４時間撹拌し、ついで吸着材としてキーゼルゲル６０（０．０１５−０．０４０ｍｍ）（Ｍｅｒｃｋ）を用い、溶出剤を１００％Ａではじめて２０分間で１００％Ｂに変える勾配溶出カラムクロマトグラフィー（溶出剤Ａ：  ｎ−ヘキサン；  溶出剤Ｂ：  酢酸エチル）によって精製した。精製した化合物を酢酸エチル（０．５ｍＬ）に溶解して酢酸エチル（２．０ｍＬ）中２．５Ｍの塩酸を加え、混合物を室温で２４時間撹拌した。沈殿した生成物を濾別し、ジエチルエーテルで洗い、真空乾燥して標記化合物３０ｍｇ（６２％）を得た。ＭＳ（ＥＩ）５３９．４（ＭＨ＋）。
【０１０３】
［実施例４０］
薬剤組成物の調製：
ａ）  錠剤：
式（Ｉ）の活性成分０．０１−５０％、乳糖１５−５０％、ジャガイモ澱粉１５−５０％、ポリビニルピロリドン５−１５％、タルク１−５％、ステアリン酸マグネシウム０．０１−３％、コロイド状二酸化珪素１−３％およびウルトラアミロペクチン２−７％を混合し、ついで湿式造粒により顆粒化し加圧して錠剤とした。  
【０１０４】
ｂ）  糖衣錠、フィルムコート錠：
上記の方法によってつくった錠剤を腸溶または胃腸溶フィルム、あるいは砂糖またはタルクで被覆した。糖衣錠を蜜蝋およびカルナバ蝋で艶出しした。
【０１０５】
ｃ）  カプセル：
式（Ｉ）の活性成分０．０１−５０％、ラウリル硫酸ナトリウム１−５％、澱粉１５−５０％、乳糖１５−５０％、コロイド状二酸化珪素１−３％およびステアリン酸マグネシウム０．０１−３％を完全に混合し、混合物を篩に通してハードゼラチンカプセルに充填した。
【０１０６】
ｄ）  懸濁剤：
成分：式（Ｉ）の活性成分０．０１−１５％、水酸化ナトリウム０．１−２％、クエン酸０．１−３％、ニパギン（メチル４−ヒドロキシ安息香酸ナトリウム）０．０５−０．２％、ニパゾール０．００５−０．０２％、カルボポール（ポリアクリル酸）０．０１−０．５％、９６％エタノール０．１−５％、香味料０．１−１％、ソルビトール（７０％水溶液）２０−７０％および蒸留水３０−５０％。
【０１０７】
ニパギンとクエン酸の２０ｍＬ蒸留水溶液に、カルボポールを少量ずつ激しく攪拌しながら加え、溶液を１０−１２時間静置した。ついで蒸留水１ｍＬ中の水酸化ナトリウム、ソルビトール水溶液および最後にラズベリー風味のエタノール液を攪拌しながら加えた。この担体に活性成分を少量ずつ加え浸漬ホモジナイザーで懸濁した。最後に懸濁液を蒸留水で所望の最終容積に満たし、懸濁シロップをコロイド粉砕装置に通した。
【０１０８】
ｅ）  坐薬：
各坐薬に対して式（Ｉ）の活性成分０．０１−１５％および乳糖１−２０％を完全に混合し、ついで
５０−９５％のアデプス  プロ  サポジトリー（例えばＷｉｔｅｐｓｏｌ  ４）を融解、３５℃に冷却し、その中に活性成分と乳糖の混合物をホモジナイザーで混合した。得られた混合物を冷却した型で成型した。
【０１０９】
ｆ）  凍結乾燥粉末アンプル組成物：
注射用に２回蒸留した水でマンニトールまたは乳糖の５％溶液をつくり、溶液を無菌溶液を得るために濾過した。式（Ｉ）の化合物の０．０１−５％溶液もまた注射用に２回蒸留した水でつくり、この溶液を無菌溶液を得るために濾過した。これら２つの溶液を無菌条件下で混合し、１ｍｌずつアンプルに詰め、アンプルの内容物を凍結乾燥し、窒素下でアンプルを封じた。アンプルの内容物は投与前に滅菌水または０．９％（生理的）滅菌食塩水に溶解した。
【国際調査報告】
2011500782.tif 000072
2011500782.tif 000073
2011500782.tif 000074