(57)【要約】  本出願は、ＣＢ２アゴニストおよびＣＢ１アンタゴニストまたはＣＢ１インバースアゴニストでありうるＣＢ１リガンドを対象に投与することを含む組合せ療法を用いる、ＣＢ１媒介性服作用の軽減を伴う、ＣＢ２カンナビノイド受容体アゴニストで治療可能な状態を治療するための方法を記載する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療効果を得るのに有効な量の選択的ＣＢ２受容体アゴニストと、該ＣＢ２受容体アゴニストの治療効果を拮抗しないがいずれかのＣＢ１受容体媒介副作用を阻止するのに有効な量のＣＢ１カンナビノイド受容体リガンドとを対象に投与することを含む組合せ療法を用いて、選択的ＣＢ２カンナビノイド受容体アゴニストで治療可能な状態に罹患した対象を治療するための方法。
【請求項２】
該選択的ＣＢ１カンナビノイド受容体リガンドがＣＢ１受容体アンタゴニストである、請求項１記載の方法。
【請求項３】
該選択的ＣＢ１カンナビノイド受容体リガンドがＣＢ１受容体インバースアゴニストである、請求項１記載の方法。
【請求項４】
該状態が、神経因性疼痛、侵害受容性疼痛および炎症性疼痛を含む群から選ばれる、請求項１記載の方法。
【請求項５】
該状態が、炎症性障害、免疫障害、神経障害、免疫系の癌、呼吸障害、肥満、糖尿病および心血管障害を含む群から選ばれる、請求項１記載の方法。
【請求項６】
該ＣＢ２受容体アゴニストおよび該ＣＢ１受容体リガンドを、医薬上許容される担体を含む別々の医薬組成物として投与する、請求項１記載の組合せ療法。
【請求項７】
該ＣＢ２受容体アゴニストおよび該ＣＢ１受容体リガンドを、医薬上許容される担体を含む１つの医薬組成物として一緒に投与する、請求項１記載の組合せ療法。
【請求項８】
選択的ＣＢ２アゴニストを投与すること、および該ＣＢ２アゴニストの治療効果を拮抗しないが望ましくない副作用を阻止するのに有効な量のＣＢ１リガンドを対象に投与することを含んでなる、選択的ＣＢ２アゴニストで治療可能な状態に罹患した対象におけるＣＢ２カンナビノイド受容体アゴニストの望ましくないＣＢ１媒介性副作用を軽減する方法。
【請求項９】
該ＣＢ１カンナビノイド受容体リガンドがＣＢ１受容体アンタゴニストである、請求項８記載の方法。
【請求項１０】
該ＣＢ１カンナビノイド受容体リガンドがＣＢ１受容体インバースアゴニストである、請求項８記載の方法。
【請求項１１】
該状態が、神経因性疼痛、侵害受容性疼痛および炎症性疼痛を含む群から選ばれる、請求項８記載の方法。
【請求項１２】
該状態が、炎症性障害、免疫障害、神経障害、免疫系の癌、呼吸障害、肥満、糖尿病および心血管障害を含む群から選ばれる、請求項８記載の方法。
【請求項１３】
治療効果を得るのに有効な量の選択的ＣＢ２受容体アゴニスト、該ＣＢ２アゴニストの治療効果を拮抗しないが、該ＣＢ２アゴニストにより生じる望ましくない副作用を拮抗するのに有効な量のＣＢ１受容体リガンド、および医薬上許容される担体を含んでなる組成物。
【請求項１４】
該ＣＢ１受容体リガンドがＣＢ１受容体アンタゴニストである、請求項１３記載の組成物。
【請求項１５】
該ＣＢ１受容体リガンドがＣＢ１受容体インバースアゴニストである、請求項１３記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、治療効果を得るのに有効な量のＣＢ２カンナビノイド受容体アゴニストと、該カンナビノイド受容体アゴニストの治療効果を拮抗しないが副作用を阻止するのに有効な量のＣＢ１カンナビノイド受容体リガンドとよりなる対象に対する組合せ療法（併用療法）を含む、ＣＢ２カンナビノイド受容体アゴニストの治療的使用から生じる副作用の軽減を伴う、疼痛状態の治療方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
マリファナの主要精神活性成分である（−）−Δ９−テトラヒドロカンナビノール（Δ９−ＴＨＣ）は、２つのカンナビノイド（ＣＢ）受容体サブタイプであるＣＢ１およびＣＢ２とのその相互作用により、広範な生物学的作用を示す。ＣＢ１受容体は中枢神経系において高度に発現され、それより低度ではあるが心臓血管および胃腸系の種々の組織における末梢においても発現される。これとは対照的に、ＣＢ２受容体は、脾臓、胸腺、扁桃、骨髄、膵臓およびマスト細胞を含む複数のリンパ系器官および免疫系の細胞において最も豊富に発現される。
【０００３】
Δ９−ＴＨＣおよび他の非選択的ＣＢアゴニストにより引き起こされる向精神作用はＣＢ１受容体により媒介される。ＣＢ１アゴニストの投与によるＣＢ１受容体の活性化は多数の望ましくない生理的および行動的作用を引き起こす。中枢神経系においては、ＣＢ１受容体の活性化は多幸、鎮静、カタレプシー、パラノイア、パニックおよび不安のような種々の向精神作用を引き起こしうる。ＣＢ１活性化はまた、認知機能に負の影響を及ぼして、短期記憶の喪失、実行能力の低下および学習障害を招く。ＣＢ１活性化は、低体温、心拍数増加、血圧低下および口腔乾燥のような、中枢神経系以外で現れる生理作用をも引き起こす。ＣＢ１活性化により引き起こされる望ましくない作用は、ＣＢ１受容体を活性化する何らかの能力を示すいずれかの投薬の、患者にとっての有用性に負の影響を及ぼしうる。ＣＢ１アゴニストでのＣＢ１受容体の活性化から生じる望ましくない作用は選択的アンタゴニストまたはインバースアゴニストの投与により遮断、抑制または妨害されうる。
【０００４】
鎮痛においてＣＢ２受容体が何らかの役割を果たしているという主張を幾つかの証拠が裏付けている。例えば、Ｚｉｍｍｅｒらは、非選択的カンナビノイドアゴニストΔ９−ＴＨＣがＣＢ１受容体ノックアウトマウスにおいて何らかの鎮痛効力を保有していることを報告している（Ｚｉｍｍｅｒ，Ａ．ら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ，１９９９，９６，５７８０−５７８５）。ＨＵ３０８は、持続性疼痛のラットホルマリンモデルにおいて抗侵害応答を惹起する、特定された最初の高選択的ＣＢ２アゴニストの１つである（Ｈａｎｕｓ，Ｌ．ら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，１９９９，９６，１４２２８−１４２３３）。ＣＢ２選択的カンナビノイドリガンドＡＭ−１２４１は、急性熱性疼痛（Ｍａｌａｎ，Ｔ．Ｐ．ら，Ｐａｉｎ，２００１，９３，２３９−２４５；Ｉｂｒａｈｉｍ，Ｍ．Ｍ．ら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，２００５，１０２（８），３０９３−３０９８）、持続性疼痛（Ｈｏｈｍａｎｎ，Ａ．Ｇ．ら，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，２００４，３０８，４４６−４５３）、炎症性疼痛（Ｎａｃｋｌｅｙ，Ａ．Ｇ．ら，Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，２００３，１１９，７４７−７５７；Ｑｕａｒｔｉｌｈｏ，Ａ．ら，Ａｎｅｓｔｈｅｓｉｏｌｏｇｙ，２００３，９９，９５５−６０）および神経因性疼痛（Ｉｂｒａｈｉｍ，Ｍ．Ｍ．ら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，２００３，１００，１０５２９−１０５３３）の動物モデルにおいて、確固たる鎮痛効力を示す。Ｌ７６８２４２としても公知のＣＢ２選択的半アゴニストＧＷ４０５８３３は神経因性疼痛、切開疼痛ならびに慢性および急性の療法の炎症性疼痛のげっ歯類モデルにおいて有効である（Ｖａｌｅｎｚａｎｏ，Ｋ．Ｊ．ら，Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２００５，４８，６５８−６７２およびＣｌａｙｔｏｎ，Ｎ．ら，Ｐａｉｎ，２００２，９６，２５３−２６０）。これらのＣＢ２選択的リガンドにより誘導される鎮痛作用はＣＢ２受容体アンタゴニストによっては遮断されるが、ＣＢ１受容体アンタゴニストによっては遮断されない。
【０００５】
ＣＢ２受容体は、免疫機能に関連した組織および細胞型に存在し、ＣＢ２受容体ｍＲＮＡはヒトＢ細胞、ナチュラルキラー細胞、単球、好中球およびＴ細胞により発現される（Ｇａｌｉｅｇｕｅら，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９９５，２３２，５４−６１）。ＣＢ２ノックアウトマウスでの研究は免疫系のモジュレーションにおけるＣＢ２受容体の役割を示唆している（Ｂｕｃｋｌｅｙ，Ｎ．Ｅ．ら，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０００，３９６，１４１−１４９）。免疫細胞の発生および分化はノックアウト動物と野生型動物とで類似しているが、ＣＢ２受容体ノックアウトマウスにおいてはΔ９−ＴＨＣの免疫抑制作用が認められず、これは免疫モジュレーション（免疫調節）におけるＣＢ２受容体の関与の証拠となる。したがって、選択的ＣＢ２アゴニストは、多発性硬化症、慢性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、重症筋無力症、Ｉ型糖尿病、過敏性腸症候群、乾癬、乾癬性関節炎および肝炎（これらに限定されるものではない）を含む自己免疫疾患ならびに臓器移植における組織拒絶、グルテン感受性腸症（セリアック病）、喘息、慢性閉塞性肺疾患、気腫、気管支炎、急性呼吸窮迫症候群、アレルギー、アレルギー性鼻炎、皮膚炎およびシェーグレン症候群（これらに限定されるものではない）を含む免疫関連障害の治療に有用でありうる。
【０００６】
小グリア細胞は中枢神経系（ＣＮＳ）の免疫細胞であり、ＣＮＳにおいてそれは免疫応答の開始および進行を調節すると考えられている。それは、ＣＮＳが健常である限り、静止および休止状態であり、分枝状の形態を有する。小グリアは、それがＣＮＳを探査し病的事象に応答するのを可能にする種々の受容体を発現する。ＣＮＳに対する傷害または損傷は小グリア細胞の活性化を引き起こし、これは、該病変に対する応答を可能にする種々の形態学的変化により特徴づけられる。分枝は引っ込み、小グリアは、貪食機能を有するアメーバ様細胞に変換される。それは増殖し、損傷部位へ迅速に遊走し、サイトカイン、ケモカインおよび補体成分を産生し放出する（Ｗａｔｋｉｎｓ  Ｌ．Ｒ．ら，Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，２００１，２４（８），４５０；Ｋｒｅｕｔｚｂｅｒｇ，Ｇ．Ｗ．，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，１９９６，１９，３１２−３１８）。小グリア上のＣＢ２受容体発現は炎症状態に依存し、感作され増殖しており遊走している小グリアにおいては、休止している又は完全に活性化された小グリアより高いレベルのＣＢ２が見出される（Ｃａｒｌｉｓｌｅ，Ｓ．Ｊ．ら，Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．，２００２，２，６９）。神経炎症は小グリア細胞形態における多数の変化を誘導し、ＣＢ２受容体およびエンドカンナビノイド系の他の成分のアップレギュレーションが生じる。ＣＢ２受容体は、神経炎症中、薬理学的作用に対して、より感受性でありうると考えられる（Ｗａｌｔｅｒ，Ｌ．，Ｓｔｅｌｌａ，Ｎ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２００４，１４１，７７５−７８５）。神経炎症は幾つかの神経変性疾患において生じ、小グリアＣＢ２受容体の誘導が観察されている（Ｃａｒｒｉｅｒ，Ｅ．Ｊ．ら，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔｓ−ＣＮＳ＆Ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ，２００５，４，６５７−６６５）。したがって、ＣＢ２リガンドは神経炎症の治療に臨床的に有用でありうる。
【０００７】
ＣＢ２受容体発現は健常ヒト小脳内の血管周囲小グリア細胞において検出されている（Ｎｕｎｅｚ，Ｅ．ら，Ｓｙｎａｐｓｅ，２００４，５８，２０８−２１３）。血管周囲細胞は、ＣＮＳ血管に隣接して位置する免疫調節細胞であり、実質小グリアおよび星状細胞と共に、それはＣＮＳ恒常性および血液脳関門機能の維持において極めて重要な役割を果たしている（Ｗｉｌｌｉａｍｓ，Ｋ．ら，Ｇｌｉａ，２００１，３６，１５６−１６４）。ＣＢ２受容体発現は、血液脳関門の主要成分を代表する脳微小血管内皮細胞上でも検出されている（Ｇｏｌｅｃｈ，Ｓ．Ａ．ら，Ｍｏｌ．Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．，２００４，１３２，８７−９２）。最近の報告は、サル免疫不全ウイルス誘発性脳炎を有するマカクの脳においてＣＢ２受容体発現がアップレギュレーションされることを示した（Ｂｅｎｉｔｏ，Ｃ．ら，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２００５，２５（１０），２５３０−２５３６）。したがって、ＣＢ２シグナリングに影響を及ぼす化合物は血液脳関門を保護し、神経炎症および種々の神経炎症性障害、例えば、ＣＮＳにおけるヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染で生じるレトロウイルス脳炎の治療において臨床的に有用でありうる。
【０００８】
多発性硬化症は、インパルスを伝えるニューロンの能力が脱髄および軸索損傷により損なわれる、ＣＮＳの一般的な免疫媒介性疾患である。脱髄は慢性炎症の結果として生じ、最終的には、予測不可能な様態で変動し一般には年齢と共に悪化する広範な臨床症状を招く。これらには、疼痛性筋痙攣、振戦、運動失調、運動虚弱、括約筋機能不全および発話困難が含まれる（Ｐｅｒｔｗｅｅ，Ｒ．Ｇ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．２００２，９５，１６５−１７４）。ＣＢ２受容体は実験的自己免疫脳脊髄炎（ＥＡＥ）において活性化小グリア細胞上でアップレギュレーションされる（Ｍａｒｅｓｚ，Ｋ．ら，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．２００５，９５，４３７−４４５）。ＣＢ２受容体の活性化はＣＮＳへの炎症細胞（例えば、白血球）のリクルートメントを妨げ（Ｎｉ，Ｘ．ら，Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，２００４，１０，１５８−１６４）、多発性硬化症の発生における決定的特徴である実験的な進行性脱髄における防御的役割を果たしている（Ａｒｅｖａｌｏ−Ｍａｒｔｉｎ，Ａ．ら，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，２００３，２３（７），２５１１−２５１６）。したがって、ＣＢ２受容体アゴニストは脱髄病理に対する特有の治療をもたらしうる。
【０００９】
アルツハイマー病は、高齢者の痴呆の最も一般的な形態である慢性神経変性障害である。最近の研究は、アルツハイマー病患者の脳からの神経炎性斑関連小グリアにおいてはＣＢ２受容体発現がアップレギュレーションされることを明らかにしている（Ｂｅｎｉｔｏ，Ｃら，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，２００３，２３（３５），１１１３６−１１１４１）。インビトロでは、ＣＢ２アゴニストＪＷＨ−１３３での治療はβ−アミロイド誘発性小グリア活性化および神経毒性を阻害したが、これらの作用はＣＢ２アンタゴニストＳＲ１４４５２８により遮断されうる（Ｒａｍｉｒｅｚ，Ｂ．Ｇ．ら，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２００５，２５（８），１９０４−１９１３）。したがって、抗炎症作用および神経保護作用の両方を有するＣＢ２アゴニストは神経炎症の治療およびアルツハイマー病の発生に関連した神経保護の提供における臨床的有用性を有しうる。
【００１０】
上皮ＣＢ２受容体発現のレベルの増加がヒト炎症腸疾患組織において観察されている（Ｗｒｉｇｈｔ，Ｋ．ら，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２００５，１２９，４３７−４５３）。内毒素炎症が誘発された後、ＣＢ２受容体の活性化は正常な胃腸通過を再確立した（Ｍａｔｈｉｓｏｎ，Ｒ．ら，Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２００４，１４２，１２４７−１２５４）。ヒト結腸上皮細胞系におけるＣＢ２受容体活性化はＴＮＦα誘発性インターロイキン８（ＩＬ−８）放出を抑制した（Ｉｈｅｎｅｔｕ，Ｋ．ら，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２００３，４５８，２０７−２１５）。上皮から放出されるケモカイン、例えば好中球誘引物質ＩＬ−８は、炎症性腸疾患においてアップレギュレーションされる（Ｗａｒｈｕｒｓｔ，Ａ．Ｃ．ら，Ｇｕｔ，１９９８，４２，２０８−２１３）。したがって、ＣＢ２受容体アゴニストの投与は、胃腸管の炎症および障害（限定的なものではないが、炎症性腸疾患、過敏性腸症候群、分泌性下痢症、潰瘍性大腸炎、クローン病および胃食道逆流疾患（ＧＥＲＤ）を含む）の治療のための新規アプローチに相当する。
【００１１】
肝線維症は慢性肝損傷に対する応答として生じ、最終的には肝硬変を招き、これは、門脈高圧症、肝不全および肝細胞癌の重篤な付随性合併症のため、重大な世界的な健康問題である（Ｌｏｔｅｒｓｚｔａｊｎ，Ｓ．ら，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ，２００５，４５，６０５−６２８）。正常なヒト肝臓においてはＣＢ２受容体は検出不能であったが、肝硬変患者からの肝生検標本においてはＣＢ２受容体が発現された。培養肝筋線維芽細胞におけるＣＢ２受容体の活性化は強力な抗線維形成誘導作用をもたらした（Ｊｕｌｉｅｎ，Ｂ．ら，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２００５，１２８，７４２−７５５）。また、ＣＢ２ノックアウトマウスは、野生型マウスと比較して、四塩化炭素の慢性的投与の後、増強された肝線維症を発生した。ＣＢ２受容体アゴニストの投与は肝線維症の治療に対する特有のアプローチに相当する。
【００１２】
ＣＢ２受容体は、インターロイキン１受容体アンタゴニスト（ＩＬ−１ｒａ）により誘導される神経保護および抗炎症メカニズムに関与している（Ｍｏｌｉｎａ−Ｈｏｌｇａｄｏ，Ｆ．ら，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，２００３，２３（１６），６４７０−６４７４）。ＩＬ−１ｒａは、虚血性、エクサイトキシン性および外傷性脳傷害を保護する重要な抗炎症サイトカインである。ＣＢ２受容体はこれらの神経保護作用の媒介において或る役割を果たしており、このことは、ＣＢ２アゴニストが、外傷性脳損傷、卒中の治療において及び脳損傷の緩和において有用でありうることを示している。
【００１３】
咳は、喘息、慢性閉塞性肺疾患、ウイルス感染および肺線維症を含む多数の炎症性肺疾患の主要かつ持続的な症状である（Ｐａｔｅｌ，Ｈ．Ｊ．ら，Ｂｒｉｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，２００３，１４０，２６１−２６８）。最近の研究は気道におけるニューロンＣＢ２受容体の存在に関する証拠を提供しており、咳の抑制におけるＣＢ２受容体活性化の役割を示している（Ｐａｔｅｌ，Ｈ．Ｊ．ら，Ｂｒｉｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，２００３，１４０，２６１−２６８およびＹｏｓｈｉｈａｒａ，Ｓ．ら，Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．，２００４，１７０，９４１−９４６）。外因性カンナビノイドリガンドおよび内因性カンナビノイドリガンドは共に、ＣＢ２受容体を介したＣ−線維の活性化を抑制し、気道組織における神経原性炎症反応を軽減する（Ｙｏｓｈｉｈａｒａ，Ｓ．ら，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．２００５，９８（１），７７−８２；Ｙｏｓｈｉｈａｒａ，Ｓ．ら，Ａｌｌｅｒｇｙ  ａｎｄ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２００５，１３８，８０−８７）。したがって、ＣＢ２選択的アゴニストは、肺炎症、慢性咳および種々の気道炎症疾患、例えば喘息、慢性閉塞性肺疾患および肺線維症（これらに限定されるものではない）の治療のための鎮咳剤としての有用性を有しうる。
【００１４】
アテローム性動脈硬化症は慢性炎症疾患であり、心疾患および卒中の主要原因である。ＣＢ２受容体はヒトおよびマウスの両方のアテローム硬化斑において検出されている。アポリポタンパク質Ｅノックアウトマウスにおける低用量のＴＨＣの投与はアテローム硬化性病変の進行を遅らせ、これらの効果は選択的アンタゴニストＳＲ１４４５２８により抑制された（Ｓｔｅｆｆｅｎｓ，Ｓ．ら，Ｎａｔｕｒｅ，２００５，４３４，７８２−７８６）。したがって、ＣＢ２受容体における活性を有する化合物はアテローム性動脈硬化症の治療のために臨床的に有用でありうる。
【００１５】
ＣＢ２受容体は免疫系の悪性細胞上で発現され、アポトーシスを誘導するためにＣＢ２受容体を標的化することは、免疫系の悪性疾患を治療するための新規アプローチとなりうる。選択的ＣＢ２アゴニストは悪性神経膠腫（Ｓａｎｃｈｅｚ，Ｃ．ら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，２００１，６１，５７８４−５７８９）、皮膚癌（Ｃａｓａｎｏｖａ，Ｍ．Ｌ．ら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，２００３，１１１，４３−５０）およびリンパ腫（ＭｃＫａｌｌｉｐ，Ｒ．Ｊ．ら，Ｂｌｏｏｄ，２００２，１５（２），６３７−６３４）の退縮を誘導する。したがって、ＣＢ２アゴニストは免疫由来の腫瘍に対する抗癌剤としての有用性を有しうる。
【００１６】
この証拠を考慮すれば、ＣＢ１受容体に対してよりもＣＢ２受容体に対して選択的なアゴニストである化合物は、炎症性疼痛、炎症性障害、免疫障害、神経障害、神経変性、癌、呼吸障害、心血管障害、骨粗鬆症、肥満および糖尿病を含む種々の障害の治療のための潜在的治療用物質である。
【００１７】
疼痛の軽減は、ＣＢ１受容体活性化に関連した望ましくない作用を引き起こさない又は非常に限られた度合でしか引き起こさないＣＢ２選択的アゴニスト用量で生じる。しかし、より高い用量では、運動失調およびカタレプシーを引き起こすＣＢ２選択的物質の幾らかの弱い残存ＣＢ１活性のため、ＣＢ２選択的アゴニストの薬物濃度は、ＣＢ１受容体を活性化し始めるのに十分な程度に高いレベルに到達しうる（Ｖａｌｅｎｚａｎｏら，Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．４８，ｐ．６５８−６７２，２００５）。したがって、より高い用量のＣＢ２選択的アゴニストは、残存ＣＢ１活性化のため、前記の望ましくない作用を示し始めうる。
【００１８】
前記証拠を考慮すれば、ＣＢ２選択的アゴニストとＣＢ１選択的アンタゴニストまたはインバースアゴニストとを共投与する組合せ療法は、ＣＢ１受容体の弱い残存活性化による望ましくない副作用を同時に予防しつつ、ＣＢ２受容体の活性化により疼痛を軽減する治療利益をもたらしうる。この組合せ療法は、乱用傾向の頻度の低下を伴う、より安全で、より許容される、より有効な、疼痛またはＣＢ２受容体により媒介されるいずれかの他の障害の治療方法を提供する。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１９】
【非特許文献１】Ｚｉｍｍｅｒ，Ａ．ら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ，１９９９，９６，５７８０−５７８５
【非特許文献２】Ｈａｎｕｓ，Ｌ．ら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，１９９９，９６，１４２２８−１４２３３
【非特許文献３】Ｍａｌａｎ，Ｔ．Ｐ．ら，Ｐａｉｎ，２００１，９３，２３９−２４５；Ｉｂｒａｈｉｍ，Ｍ．Ｍ．ら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，２００５，１０２（８），３０９３−３０９８
【非特許文献４】Ｈｏｈｍａｎｎ，Ａ．Ｇ．ら，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，２００４，３０８，４４６−４５３
【非特許文献５】Ｎａｃｋｌｅｙ，Ａ．Ｇ．ら，Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，２００３，１１９，７４７−７５７
【非特許文献６】Ｑｕａｒｔｉｌｈｏ，Ａ．ら，Ａｎｅｓｔｈｅｓｉｏｌｏｇｙ，２００３，９９，９５５−６０
【非特許文献７】Ｉｂｒａｈｉｍ，Ｍ．Ｍ．ら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，２００３，１００，１０５２９−１０５３３
【非特許文献８】Ｖａｌｅｎｚａｎｏ，Ｋ．Ｊ．ら，Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２００５，４８，６５８−６７２
【非特許文献９】Ｃｌａｙｔｏｎ，Ｎ．ら，Ｐａｉｎ，２００２，９６，２５３−２６０
【非特許文献１０】Ｇａｌｉｅｇｕｅら，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９９５，２３２，５４−６１
【非特許文献１１】Ｂｕｃｋｌｅｙ，Ｎ．Ｅ．ら，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０００，３９６，１４１−１４９
【非特許文献１２】Ｗａｔｋｉｎｓ  Ｌ．Ｒ．ら，Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，２００１，２４（８），４５０
【非特許文献１３】Ｋｒｅｕｔｚｂｅｒｇ，Ｇ．Ｗ．，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，１９９６，１９，３１２−３１８
【非特許文献１４】Ｃａｒｌｉｓｌｅ，Ｓ．Ｊ．ら，Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．，２００２，２，６９
【非特許文献１５】Ｗａｌｔｅｒ，Ｌ．，Ｓｔｅｌｌａ，Ｎ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２００４，１４１，７７５−７８５
【非特許文献１６】Ｃａｒｒｉｅｒ，Ｅ．Ｊ．ら，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔｓ−ＣＮＳ＆Ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ，２００５，４，６５７−６６５
【非特許文献１７】Ｎｕｎｅｚ，Ｅ．ら，Ｓｙｎａｐｓｅ，２００４，５８，２０８−２１３
【非特許文献１８】Ｗｉｌｌｉａｍｓ，Ｋ．ら，Ｇｌｉａ，２００１，３６，１５６−１６４
【非特許文献１９】Ｇｏｌｅｃｈ，Ｓ．Ａ．ら，Ｍｏｌ．Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．，２００４，１３２，８７−９２
【非特許文献２０】Ｂｅｎｉｔｏ，Ｃ．ら，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２００５，２５（１０），２５３０−２５３６
【非特許文献２１】Ｐｅｒｔｗｅｅ，Ｒ．Ｇ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．２００２，９５，１６５−１７４
【非特許文献２２】Ｍａｒｅｓｚ，Ｋ．ら，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．２００５，９５，４３７−４４５
【非特許文献２３】Ｎｉ，Ｘ．ら，Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，２００４，１０，１５８−１６４
【非特許文献２４】Ａｒｅｖａｌｏ−Ｍａｒｔｉｎ，Ａ．ら，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，２００３，２３（７），２５１１−２５１６
【非特許文献２５】Ｂｅｎｉｔｏ，Ｃら，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，２００３，２３（３５），１１１３６−１１１４１
【非特許文献２６】Ｒａｍｉｒｅｚ，Ｂ．Ｇ．ら，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２００５，２５（８），１９０４−１９１３
【非特許文献２７】Ｗｒｉｇｈｔ，Ｋ．ら，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２００５，１２９，４３７−４５３
【非特許文献２８】Ｍａｔｈｉｓｏｎ，Ｒ．ら，Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２００４，１４２，１２４７−１２５４
【非特許文献２９】Ｉｈｅｎｅｔｕ，Ｋ．ら，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２００３，４５８，２０７−２１５
【非特許文献３０】Ｗａｒｈｕｒｓｔ，Ａ．Ｃ．ら，Ｇｕｔ，１９９８，４２，２０８−２１３
【非特許文献３１】Ｌｏｔｅｒｓｚｔａｊｎ，Ｓ．ら，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ，２００５，４５，６０５−６２８
【非特許文献３２】Ｊｕｌｉｅｎ，Ｂ．ら，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２００５，１２８，７４２−７５５
【非特許文献３３】Ｍｏｌｉｎａ−Ｈｏｌｇａｄｏ，Ｆ．ら，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，２００３，２３（１６），６４７０−６４７４
【非特許文献３４】Ｐａｔｅｌ，Ｈ．Ｊ．ら，Ｂｒｉｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，２００３，１４０，２６１−２６８
【非特許文献３５】Ｙｏｓｈｉｈａｒａ，Ｓ．ら，Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．，２００４，１７０，９４１−９４６
【非特許文献３６】Ｙｏｓｈｉｈａｒａ，Ｓ．ら，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．２００５，９８（１），７７−８２
【非特許文献３７】Ｙｏｓｈｉｈａｒａ，Ｓ．ら，Ａｌｌｅｒｇｙ  ａｎｄ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２００５，１３８，８０−８７
【非特許文献３８】Ｓｔｅｆｆｅｎｓ，Ｓ．ら，Ｎａｔｕｒｅ，２００５，４３４，７８２−７８６
【非特許文献３９】Ｓａｎｃｈｅｚ，Ｃ．ら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，２００１，６１，５７８４−５７８９
【非特許文献４０】Ｃａｓａｎｏｖａ，Ｍ．Ｌ．ら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，２００３，１１１，４３−５０
【非特許文献４１】ＭｃＫａｌｌｉｐ，Ｒ．Ｊ．ら，Ｂｌｏｏｄ，２００２，１５（２），６３７−６３４
【非特許文献４２】Ｖａｌｅｎｚａｎｏら，Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．４８，ｐ．６５８−６７２，２００５
【発明の概要】
【００２０】
発明の詳細な説明
本出願は、治療効果を得るのに有効な量のＣＢ２受容体アゴニストと、該ＣＢ２選択的受容体アゴニストの治療効果を拮抗しないがいずれかのＣＢ１媒介副作用を阻止するのに有効な量のＣＢ１受容体リガンドとを対象に投与することを含む組合せ療法を用いて、ＣＢ２選択的受容体アゴニストで治療可能な状態に罹患した対象を治療するための方法を請求するものである。該選択的ＣＢ１カンナビノイド受容体リガンドはＣＢ１受容体アンタゴニストまたはＣＢ１受容体インバースアゴニストでありうると意図される。また、該ＣＢ２カンナビノイド受容体アゴニストと該ＣＢ１受容体リガンドとを含む組合せ療法は、該選択的ＣＢ２カンナビノイド受容体アゴニストを含有する医薬組成物と該ＣＢ１受容体リガンドを含有する医薬組成物との別々の投与（各医薬組成物は更に、治療上許容される担体を含む）により代表されうる。一方、該ＣＢ２カンナビノイド受容体アゴニストと該ＣＢ１受容体リガンドとを含む組合せ療法は、両方の化合物と治療上許容される担体とを含む単一の医薬組成物（ここで、該ＣＢ１受容体リガンドはＣＢ１受容体アンタゴニストまたはＣＢ１受容体インバースアゴニストでありうる）により代表されうる。
【００２１】
本発明はまた、選択的ＣＢ２受容体アゴニストを投与すること、および該ＣＢ２受容体アゴニストの治療効果を拮抗しないが望ましくない副作用を阻止するのに有効な量のＣＢ１受容体リガンドを対象に投与することを含む、ＣＢ２受容体アゴニストで治療可能な状態に罹患した対象におけるＣＢ２受容体アゴニストの望ましくない副作用を軽減する方法に関する。該選択的ＣＢ１受容体リガンドはＣＢ１受容体アンタゴニストまたはＣＢ１受容体インバースアゴニストでありうる。
【００２２】
ＣＢ２選択的アゴニストとＣＢ１選択的リガンド（アンタゴニストまたはインバースアゴニスト）との投与を含む本発明の組合せ療法で治療可能な状態には、疼痛、特に、神経因性疼痛、侵害受容性疼痛または炎症性疼痛が含まれる。本発明の他の治療可能な状態には、炎症性障害、免疫障害、神経障害、免疫系の癌、呼吸障害、肥満、糖尿病および心血管障害が含まれるが、これらに限定されるものではない。前記請求を裏付ける証拠が本明細書に記載されている。
【００２３】
ＣＢ２受容体が種々の細胞および組織に関連しており、ＣＢ２受容体の選択的アゴニストを多種多様な障害に対する重要な治療用物質にする多数の生理的メカニズムにおける或る役割を有するという主張を、幾つかの証拠が裏付けている。
【００２４】
選択的ＣＢ２アゴニストにより誘導される鎮痛作用はＣＢ２受容体アンタゴニストによっては遮断されるが、ＣＢ１受容体アンタゴニストによっては遮断されない。ＣＢ２アゴニストは、癌、ＨＩＶ、多発性硬化症、糖尿病性神経障害、ヘルペス後神経痛、関節炎、骨関節症、慢性関節リウマチ、外科的手法などのような障害から生じた神経因性疼痛、炎症性疼痛または侵害受容性疼痛を含む疼痛状態の治療において有用である。幾らかの残存ＣＢ１受容体活性化は運動失調、カタレプシーおよび多幸症のような望ましくない副作用を誘発しうる。選択的ＣＢ１受容体アンタゴニスト／インバースアゴニストとの選択的ＣＢ２受容体アゴニストの投与または組合せは、とりわけ、耐性、依存性、嗜癖、鎮静、多幸、神経不安、記憶障害、幻覚、うつ状態、口腔乾燥、心拍数増加、眩暈および頭痛を含む望ましくない副作用の傾向を伴うことなく、鎮痛を誘発するための方法を提供する。
【００２５】
ＣＢ１選択的アンタゴニストおよびインバースアゴニスト分子は当業者によく知られている。代表的なＣＢ１選択的アンタゴニストおよびインバースアゴニスト分子の具体例は以下の参考文献中に見出されうる：Ｍｕｃｃｉｏｌｉ，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔ．（２００６）１６，ｐｐ１４０５−１４２３；Ｂａｒｔｈ，Ａｎｎ．Ｒｅｐ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２００５），４０，ｐｐ１０３−１１８；Ｈｅｒｔｚｏｇ，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．  Ｔｈｅｒ．  Ｐａｔ．（２００４）１４，ｐｐ１４３５−１４５２。前記引用文献に含まれる具体例はＣＢ１選択的アンタゴニストおよびインバースアゴニストを例示するものであり、本発明の一部と想定されるＣＢ１選択的アンタゴニストおよびインバースアゴニストの範囲を限定するものではない。
【００２６】
ＳＲ１４１７１６Ａおよび５−（４−クロロフェニル）−１−（２，４−ジクロロフェニル）−４−メチル−Ｎ−（ピペリジン−１−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミドとしても公知のリモナバント（ｒｉｍｏｎａｂａｎｔ）は、本発明の一部と想定される特定のＣＢ１アンタゴニスト／インバースアゴニストである。
【００２７】
【化１】
2011500721.tif 000002
【００２８】
ＭＫ−０３６４およびＮ−［（１Ｓ，２Ｓ）−３−（４−クロロフェニル）−２−（３−シアノフェニル）−１−メチルプロピル］−２−メチル−２−｛［５−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］オキシ｝プロパンアミドとしても公知のタラナバント（ｔａｒａｎａｂａｎｔ）は、本発明の一部と想定される特定のＣＢ１アンタゴニスト／インバースアゴニストである。
【００２９】
【化２】
2011500721.tif 000003
【００３０】
ＣＢ２アゴニスト分子は当業者によく知られている。代表的なＣＢ２アゴニストの具体例は以下の参考文献中に見出されうる：Ｃｈｅｎｇ，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｒｕｇｓ  Ｖｏｌ．１６，ｐ．９５１−９６５（２００７）。本発明の目的においては、科学文献中で公知であるそのようなＣＢ２選択的アゴニストの具体例には、ＡＭ１２４１、ＨＵ３０８、ＪＷＨ−１３３、ＧＷ４０５８３３、（Ｚ）−Ｎ−（５−ｔｅｒｔ−ブチル−３−ブチルチアゾール−２（３Ｈ）−イリデン）−５−クロロ−２−メトキシベンズアミドおよび（Ｚ）−Ｎ−（３−（２−メトキシエチル）−４，５−ジメチルチアゾール−２（３Ｈ）−イリデン）−２，２，３，３−テトラメチルシクロプロパンカルボキサミドが含まれるが、これらに限定されるものではない。前記具体例はＣＢ２選択的アゴニストを例示するものであり、本発明の一部と想定されるＣＢ２選択的アゴニストの範囲を限定するものではない。
【００３１】
ＣＢ２アゴニストは、本明細書においては、ＣＢ２受容体に結合し、そのような受容体の活性化を検出するよう設計された１以上のアッセイにおいて測定される受容体の活性化を引き起こす分子と定義される。そのようなアッセイはインビトロアッセイまたはインビボアッセイでありうる。ＣＢ２受容体活性化を測定するための典型的なインビトロアッセイには、サイクリックＡＭＰ蓄積の測定（Ｍｕｋｈｅｒｊｅｅ，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｖｏｌ．５０５，ｐ．１−９，２００４）、蛍光測定イメージングプレートリーダーを使用するＣａ２＋フラックスの測定（Ｍｕｋｈｅｒｊｅｅ，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｖｏｌ．５０５，ｐ．１−９，２００４）、ＧＴＰγＳ結合の測定（ＭａｃＬｅｎｎａｎら，Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｖｏｌ．１２４  ｐ．６１９−６２２，１９９８））およびＥＲＫまたはＭＡＰキナーゼの測定（Ｙａｏ，Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｖｏｌ．１４９，ｐ．１４５−１５４，２００６）が含まれるが、これらに限定されるものではない。ＣＢ２受容体活性化を検出するためのインビボアッセイには、試験化合物の投与の際の疼痛モデルにおける活性の測定が含まれ、該活性はＣＢ２選択的アンタゴニストまたはインバースアゴニストでの前処理により逆転される。このプロトコールは当業者によく知られており、以下に挙げる参考文献中で見出されうる：Ｃｌａｙｔｏｎ，Ｐａｉｎ  Ｖｏｌ．９６，ｐ．２５３−２６０，２００２；Ｉｂｒａｈｉｍ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｖｏｌ．１００，ｐ．１０５２９−１０５３３，２００３；ＬａＢｕｄａ，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｖｏｌ．５２７．ｐ．１７２−１７４，２００５。ＣＢ２受容体活性化を検出するために用いる疼痛モデルは、本明細書に記載されているもの又は当業者に公知のもののうちのいずれかでありうる。本明細書中で定義されているＣＢ２アゴニストはインビトロおよびインビボアッセイの両方でＣＢ２受容体活性化を示す必要はないが、そのような活性を測定するよう設計された少なくとも１つのインビトロまたはインビボアッセイにおいて活性を示す必要がある。ある人工的アッセイ条件下、ＡＭ１２４１のようなＣＢ２受容体アゴニストはインビトロではＣＢ２受容体を活性化しないようであるが（Ｙａｏ，Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｖｏｌ．１４９，ｐ．１４５−１５４，２００６）、前記のインビボアッセイの１つを用いて測定すると、それはインビボでは尚もＣＢ２受容体を活性化しうる。
【００３２】
ＣＢ２アゴニストは、生物学的アッセイにおいて測定された場合、ＣＢ１受容体における活性に対する種々の度合の選択性を有しうる。本明細書においては、ＣＢ２選択的アゴニストは、それがＣＢ１受容体に結合する又はそれを活性化する効力の少なくとも約１００倍またはそれ以上の効力でＣＢ２受容体に結合する又はそれを活性化するリガンドと定義される。ＣＢ２選択的アゴニストであるためには、分子は結合アッセイおよび機能（活性化）アッセイの両方において選択的であるとみなされる必要はない。結合効力は、通常、Ｋｉとして表され、Ｋｉ値が低くなるほど効力は大きくなる。したがって、ＣＢ２選択的アゴニストは、その少なくともＣＢ１結合Ｋｉの約１００倍またはそれ以上であるＣＢ２結合Ｋｉを有する。また、受容体を活性化する効力は、通常、ＥＣ５０として表され、ＥＣ５０値が低くなるほど効力は大きくなる。ＥＣ５０値は、参照標準と比較して、アッセイにおける測定された最大応答（効能）に関連づけられる。ＣＰ５５，９４０が、ＣＢ２およびＣＢ１受容体において一般に使用される参照標準アゴニストであり、その最大応答は１００％と定められる。したがって、試験化合物はＣＰ５５，９４０に対する完全、部分または無実効効能を示しうる。完全効能は約７０％以上の応答を表す。部分効能は約２０〜７０％の応答を表す。実質的無効能は約２０％未満の応答を表す。ＥＣ５０値は、特定の試験物質に関する最大値に対する５０％応答を与えるおよその濃度であるため、より低い固有効能を有する試験物質は、より高い固有効能を有する物質と比較した場合、より低いＥＣ５０値を与えうる。ＣＢ２およびＣＢ１受容体における実質的に異なる固有効能を有する試験物質を扱う場合、ＣＢ２選択性の度合の確定は、ＥＣ５０値を単に比較することによっては不可能かもしれない。なぜなら、これらのそれぞれは、実質的に異なる最大値に基づいている可能性があるからである。したがって、ＣＢ２選択性の有意義な数学的計算は、ＣＢ２受容体を完全効能で強力に活性化しＣＢ１受容体を無実効効能で弱く活性化する代表的試験物質に関するＣＢ２およびＣＢ１  ＥＣ５０を比較することによっては行われ得ない。しかし、そのような化合物は、一般に、ＣＢ２選択的アゴニストとして当業者に認識されるであろう。したがって、ＣＢ２選択的アゴニストは、ＣＰ５５，９４０のような参照標準アゴニストと比較して、ＣＢ１受容体の実質的に同じ度合の活性化を惹起する濃度より少なくとも１００倍以上低い濃度において、ＣＢ２受容体の特定の度合の活性化をもたらす。換言すれば、ＣＢ２受容体を活性化する濃度は、ＣＢ１受容体を活性化する等有効濃度より少なくとも約１００倍低い。等有効濃度は、ＣＢ２受容体活性化の場合と実質的に同じ度合のＣＢ１受容体活性化をもたらす濃度を意味し、この場合、活性化のこの度合は２０％〜１００％の範囲となりうるであろう。また、ＣＢ２受容体を部分的または完全に活性化しＣＢ１受容体を実質的に活性化しない化合物はＣＢ２選択的アゴニストとみなされる。
【００３３】
本発明の目的においては、ＣＢ２選択的アゴニストは、１００ｎＭ以下、好ましくは１０ｎＭ以下のＣＢ２結合性Ｋｉ、およびＣＢ１受容体に対して１００以上の選択性比を有する。
【００３４】
また、本発明のＣＢ２選択的アゴニストは、１０ｎＭ以下のＣＢ２結合性Ｋｉ、およびＣＢ１受容体に対して１０００以上の選択性比を有する。
【００３５】
本発明の目的においては、ＣＢ２選択的アゴニストは、１ｎＭ以下のＣＢ２結合性Ｋｉ、およびＣＢ１受容体に対して１００以上、好ましくは１０００以上、より好ましくは１０，０００以上の選択性比を有する。
【００３６】
ＣＢ２受容体に関する、ＣＢ２受容体に対する本出願の化合物の選択性（Ｋｉ）を決定するためには、本明細書に記載されている放射リガンド結合アッセイを行う。
【００３７】
ＣＢ２放射リガンド結合アッセイの場合には、ヒトＣＢ２受容体を安定に発現するＨＥＫ２９３細胞を、コンフルエントな単層が形成するまで増殖させた。簡潔に説明すると、該細胞を集め、ＴＥバッファー（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，１ｍＭ  ＭｇＣｌ２および１ｍＭ  ＥＤＴＡ）中、プロテアーゼインヒビターの存在下、２×１０秒のバーストでポリトロンを使用してホモジナイズし、ついで４５，０００×ｇで２０分間遠心分離した。最終膜ペレットを保存バッファー（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，１ｍＭ  ＭｇＣｌ２および１ｍＭ  ＥＤＴＡおよび１０％  スクロース）中で再ホモジナイズし、使用するまで−７８℃で凍結した。アッセイバッファー（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ，２．５ｍＭ  ＥＤＴＡ，５ｍＭ  ＭｇＣｌ２および０．５ｍｇ／ｍＬ  脂肪酸非含有ＢＳＡ，ｐＨ７．４）中の［３Ｈ］ＣＰ−５５，９４０（１２０Ｃｉ／ｍｍｏｌ；Ｔｏｃｒｉｓから商業的に入手可能な非選択的ＣＢアゴニスト）を含有する深ウェルプレートのウェル内に膜調製物（ヒトＣＢ２の場合には５μｇ／ウェルのタンパク質濃度）を加えることにより、飽和結合反応を開始させた。３０℃で９０分間のインキュベーションの後、３００μｌ／ウェルの非放射能アッセイバッファーを加え、ついでＵｎｉＦｉｌｔｅｒ−９６  ＧＦ／Ｃフィルタープレート（１ｍｇ／ｍＬ  ＢＳＡ中に２時間予備浸漬されたもの）で急速真空濾過を行うことにより、結合反応を終結させた。Ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ−２０を使用するＴｏｐＣｏｕｎｔにおいて、結合活性を計数した。０．０１から８ｎＭまでの［３Ｈ］ＣＰ−５５，９４０の１２種類の濃度で飽和実験を行った。０．５ｎＭ［３Ｈ］ＣＰ−５５，９４０、および０．０１ｎＭ〜１０μＭの範囲から選択された５種類の濃度の置換リガンドを使用して、競合実験を行った。１０μＭ  未標識ＣＰ−５５，９４０（Ｔｏｃｒｉｓ，Ｅｌｌｉｓｖｉｌｌｅ，ＭＯ）の添加により、非特異的結合を評価した。
【００３８】
ＣＢ１放射リガンド結合アッセイの場合には、ＨＥＫ２９３ヒトＣＢ１膜をＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒから購入した。［３Ｈ］ＣＰ−５５，９４０（１２０Ｃｉ／ｍｍｏｌ，Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）および合計容量を２５０μＬにするための十分な容量のアッセイバッファー（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ，２．５ｍＭ  ＥＤＴＡ，５ｍＭ  ＭｇＣｌ２および０．５ｍｇ／ｍＬ  脂肪酸非含有ＢＳＡ，ｐＨ７．４）を含有するウェル（Ｓｃｉｅｎｃｅｗａｒｅ  ９６ウェルＤｅｅｐ  Ｗｅｌｌプレート，ＶＷＲ，Ｗｅｓｔ  Ｃｈｅｓｔｅｒ，ＰＡ）内に膜（８〜１２μｇ／ウェル）を加えることにより、結合を開始させた。インキュベーション（３０℃で９０分間）後、３００μＬ／ウェルの非放射能アッセイバッファーを加え、ＵｎｉＦｉｌｔｅｒ−９６  ＧＦ／Ｃフィルタープレート（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）（０．３％  ＰＥＩ中に少なくとも３時間予備浸漬されたもの）で急速真空濾過（ＦｉｌｔｅｒＭａｔｅ  Ｃｅｌｌ  Ｈａｒｖｅｓｔｅｒ，Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）を行い、ついで非放射能アッセイバッファーで５回洗浄することにより、結合を終結させた。Ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ−２０を使用するＴｏｐＣｏｕｎｔ（共にＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡからのもの）において、結合活性を計数した。１ｎＭ［３Ｈ］ＣＰ−５５，９４０、および５種類の濃度（１ｎＭ〜１０μＭ）の置換リガンドを使用して、競合実験を行った。１０μＭ  未標識ＣＰ−５５，９４０（Ｔｏｃｒｉｓ，Ｅｌｌｉｓｖｉｌｌｅ，ＭＯ）の添加により、非特異的結合を評価した。
【００３９】
本出願の実施例において使用した化合物は、好ましくは、ＣＢ２受容体に結合し、したがって、該受容体のそれぞれに関するＫｉの相対値により示されるとおり、ＣＢ２受容体に対する選択的リガンドである。ＣＢ２選択的アゴニストである（Ｚ）−Ｎ−（５−ｔｅｒｔ−ブチル−３−ブチルチアゾール−２（３Ｈ）−イリデン）−５−クロロ−２−メトキシベンズアミド（化合物Ａ）はＣＢ２受容体に対しては１．８ｎＭのＫｉを、そしてＣＢ１受容体に対しては３６７０ｎＭのＫｉを有する。本出願において使用するもう一方のＣＢ２選択的アゴニストである（Ｚ）−Ｎ−（３−（２−メトキシエチル）−４，５−ジメチルチアゾール−２（３Ｈ）−イリデン）−２，２，３，３−テトラメチルシクロプロパンカルボキサミド（化合物Ｂ）はＣＢ２受容体に対しては０．６ｎＭのＫｉを、そしてＣＢ１受容体に対しては２７３ｎＭのＫｉを有する。
【００４０】
有効性に関しては、本発明のＣＢ２選択的アゴニストは、本明細書中に定義されているとおり、ＣＢ２受容体を部分的または完全に活性化すると意図される。
【００４１】
有効性に関しては、本発明のＣＢ２選択的アゴニストは、１００ｎＭ以下、好ましくは１０ｎＭ以下のＣＢ２  ＥＣ５０を有し、１０，０００ｎＭ以上のＥＣ５０でＣＢ１受容体を完全に活性化すると意図される。また、本発明のＣＢ２選択的アゴニストは、１０ｎＭ以下のＣＢ２  ＥＣ５０を有し、１，０００ｎＭ以上のＥＣ５０でＣＢ１受容体を完全に活性化する。
【００４２】
本発明のＣＢ２選択的アゴニストは、１ｎＭ以下のＣＢ２  ＥＣ５０を有し、１００ｎＭ以上、好ましくは１０００ｎＭ以上、より好ましくは１０，０００ｎＭ以上のＥＣ５０でＣＢ１受容体を完全に活性化すると意図される。
【００４３】
また、本発明のＣＢ２選択的アゴニストは、１００ｎＭ以下のＣＢ２  ＥＣ５０を有し、ＣＢ１受容体を部分的に活性化し、ここで、ＣＢ１受容体を活性化する等有効濃度は、ＣＢ２受容体を活性化する等有効濃度より少なくとも１００倍高い。また、１０ｎＭ以下のＣＢ２  ＥＣ５０を有するＣＢ２選択的アゴニスト、およびＣＢ１受容体を部分的に活性化するＣＢ２選択的アゴニストも本発明に含まれ、ここで、ＣＢ１受容体を活性化する等有効濃度は、ＣＢ２受容体を活性化する等有効濃度より少なくとも１００〜１０００倍高い。
【００４４】
本発明の１つの実施形態においては、ＣＢ２選択的アゴニストは、１ｎＭ以下のＣＢ２  ＥＣ５０を有し、ＣＢ１受容体を部分的に活性化し、ここで、ＣＢ１受容体を活性化する等有効濃度は、ＣＢ２受容体を活性化する等有効濃度より少なくとも１００倍、好ましくは少なくとも１，０００倍、より好ましくは少なくとも１０，０００倍高い。本発明の目的においては、ＣＢ２選択的アゴニストは、１００ｎＭ以下、好ましくは１０ｎＭ以下、より好ましくは１０ｎＭ以下、より好ましくは１ｎＭ以下のＣＢ２  ＥＣ５０を有し、インビトロでＣＢ１受容体を実質的に活性化しない。
【００４５】
本発明の目的においては、ＣＢ２選択的アゴニストはインビボ疼痛モデルにおける３０％以上の応答を与える。該応答はＣＢ２選択的アンタゴニストまたはＣＢ２選択的インバースアゴニストによっては抑制されうるが、ＣＢ１アンタゴニストによってもＣＢ１インバースアゴニストによっても抑制され得ない。
【００４６】
ＣＢ１選択的アンタゴニストまたはＣＢ１選択的インバースアゴニストは、本明細書においては、ＣＢ１受容体の活性化を抑制する又はＣＢ１受容体の活性の基礎レベルを減少させる分子と定義される。ＣＢ１アンタゴニストおよびインバースアゴニスト活性を検出するためのアッセイは当業者によく知られており、そのようなアッセイの一覧は以下の参考文献中に見出される：Ｐｅｒｔｗｅｅ，Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．Ｖｏｌ．．７６，ｐ．１３０７−１３２４，２００５；Ｍｕｃｃｉｏｌｉ，Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｖｏｌ．１２．ｐ．１３６１−１３９４，２００５。
【００４７】
ＣＢ２選択的アンタゴニストまたはＣＢ２選択的インバースアゴニストは、本明細書においては、ＣＢ２受容体の活性化を抑制する又はＣＢ２受容体の活性の基礎レベルを減少させる分子と定義される。ＣＢ２アンタゴニストおよびインバースアゴニスト活性を検出するためのアッセイは当業者によく知られており、そのようなアッセイは以下の参考文献中で見出され又は言及されてる：Ｒｉｎａｌｄｉ−Ｃａｒｍｏｎａ，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．Ｖｏｌ．２８４，ｐ．６４４−６５０，１９９８；Ｍｕｃｃｉｏｌｉ，Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔ．Ｖｏｌ．１６，ｐ．１４０５−１４２３，２００６；Ｒａｉｔｉｏ，Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｖｏｌ．１２，ｐ．１２１７−１２３７，２００５。
【００４８】
インビボでのＣＢ２受容体活性化を示すために使用されうる典型的なＣＢ２アンタゴニスト／インバースアゴニストには、｛Ｎ−［（１Ｓ）−エンド−１，３，３−トリメチルビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−イル］−５−（４−クロロ−３−メチルフェニル）−１−（４−メチルベンジル）−ピラゾール−３−カルボキサミド｝としても公知のＳＲ１４４５２８および（６−ヨード−２−メチル−１−（２−モルホリノエチル）−１Ｈ−インドール−３−イル）（４−メトキシフェニル）メタノンとしても公知のＡＭ６３０が含まれる。
【００４９】
疼痛の緩和における化合物の効能を試験するためには、幾つかの方法が利用可能であり、それらのうち、術後疼痛の切開モデル（Ｉｎｃｉｓｉｏｎ  Ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  Ｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅ  Ｐａｉｎ）、神経因性疼痛の脊髄神経結紮モデル（Ｓｐｉｎａｌ  Ｎｅｒｖｅ  Ｌｉｇａｔｉｏｎ  Ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃ  Ｐａｉｎ）およびカプサイシン誘発性二次的機械的過敏症（Ｃａｐｓａｉｃｉｎ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｓｅｃｏｎｄａｒｙ  ｍｅｃｈａｎｉｃａｌ  ｈｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ）が挙げられる。
【００５０】
成体雄Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（体重２５０〜３００ｇ、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｐｏｒｔａｇｅ，ＭＩ）を使用した。動物の取り扱いおよび実験プロトコールはＡｂｂｏｔｔ  ＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓにおけるＩｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ（ＩＡＣＵＣ）により承認された。全ての外科的方法のために、動物をハロタン麻酔（誘導のために４％、維持のために２％）下で維持し、手術の前および後に１０％  ポビドン−ヨウ素溶液を使用して切開部位を滅菌した。
【００５１】
術後疼痛の皮膚切開モデルは、Ｂｒｅｎｎａｎら，１９９６，Ｐａｉｎ，６４，４９３に記載されている方法を用いて得た。全てのラットを、鼻円錐を経由して運搬されるイソフランで麻酔した。滅菌操作後、右後脚切開を行った。左後脚の足底部を無菌プラスチックドレープ内の孔に通して配置した。踵の近位末端から０．５ｃｍの位置から爪先に向かって伸びる、後脚の足底部の皮膚および筋膜に１ｃｍの縦方向の切開を入れ、足底筋を持ち上げ、縦方向に切開し、このとき、筋起始部および挿入点を無傷のまま残した。ついで皮膚を２つのマットレス縫合（５−０ナイロン）で閉じた。手術後、ついで動物を２時間回復させ、その時点で、後記で説明されているとおりに触覚異疼痛を評価した。抗侵害受容作用を評価するために、皮膚切開の９０分後にビヒクルまたは試験化合物を動物に腹腔内投与し、典型的には、化合物投与の３０分後に触覚異疼痛を評価した。
【００５２】
Ｃｈａｐｌａｎ，Ｓ．Ｒ．，Ｆ．Ｗ．Ｂａｃｈ，Ｊ．Ｗ．Ｐｏｒｇｒｅｌ，Ｊ．Ｍ．ＣｈｕｎｇおよびＴ．Ｌ．Ｙａｋｓｈ，１９９４，Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ  ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  ｏｆ  ｔａｃｔｉｌｅ  ａｌｌｏｄｙｎｉａ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｒａｔ  ｐａｗ，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，５３，５５に記載されているとおりに、校正されたフォン・フライ・フィラメント（Ｓｔｏｅｌｔｉｎｇ，Ｗｏｏｄ  Ｄａｌｅ，ＩＬ）を使用して、触覚異疼痛を測定した。ラットを、懸垂金網格子上の逆さになった個別のプラスチック籠（２０×１２．５×２０ｃｍ）内に配置し、該試験室に２０分間順応させた。該フォン・フライ・フィラメントを、該籠の下から該金網床内の開口部を通して、該切開から１〜３ｍｍ（直に隣接した）の領域に直接的に垂直に適用し、ついで、該フィラメントの若干の曲がりを引き起こすのに十分な力で、この位置で約８秒間維持した。陽性応答は、該刺激による後脚の突然の引っ込め、または該刺激の除去の直後の尻込み挙動を含むものであった。Ｄｉｘｏｎ，Ｗ．Ｊ．，１９８０，Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｓ，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．，２０，４４１に記載されている上げ下げ法を用いて、５０％引っ込め閾値を決定した。ビヒクル対照と比較した場合の試験化合物の脚引っ込め潜時に対する効果は、異疼痛を軽減する該試験化合物の能力を表す。脚引っ込め潜時の増加は抗異疼痛効果（すなわち、疼痛の軽減）を表す。
【００５３】
脊髄神経結紮誘発性（ＳＮＬモデル）神経因性疼痛はＫｉｍおよびＣｈｕｎｇ（Ｋｉｍ，Ｓ．Ｈ．およびＪ．Ｍ．Ｃｈｕｎｇ，Ｐａｉｎ  Ｖｏｌ．５０，ｐ．３５５，１９９２）により最初に記載されたものであり、本出願の化合物を試験するためにも用いられうる。ラットの左Ｌ５およびＬ６脊髄神経を脊柱に隣接させて単離し、ＤＲＧの遠位で５−０絹糸できつく結紮し、Ｌ４脊髄神経の損傷を避けるよう留意する。模擬動物には、神経結紮を行うことなく同じ操作を行った。触覚異疼痛の評価の前の少なくとも１週間かつ３週間以下の期間にわたって全ての動物を回復させた。４．２５ｇ未満のベースライン閾値スコアを有する動物のみをこの研究で使用し、運動欠損を示す動物を除外する。また、未実験、模擬手術および食塩水注入動物を含む幾つかの対照群において、ならびに神経損傷動物の対側脚において、触覚異疼痛閾値を評価する。
【００５４】
カプサイシン誘発性二次的機械的過敏症アッセイにおいては、右後脚の中央への足底内注射により、１０μｌのビヒクル（１０％  エタノールおよび２−ヒドロキシプロピルシクロデキストリン）中の１０μｇのカプサイシンを動物に投与する。カプサイシン投与の１８０分後に注射部位の反対側の踵において二次的機械的過敏症を測定する（Ｊｏｓｈｉら  ２００６，Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  １４３，５８７−５９６）。試験の３０分前（カプサイシン投与の１５０分後）に化合物を注射（腹腔内）する。前記のとおりに、触覚異疼痛を測定する。
【００５５】
副作用は握力（Ｇｒｉｐ  Ｆｏｒｃｅ）（ＧＦ）挙動の測定により評価されうる。後脚握力の測定は、商業的に入手可能な握力測定系（Ｃｏｌｕｍｂｕｓ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｃｏｌｕｍｂｕｓ，ＯＨ）における後脚ひずみゲージ装置にかかる最大圧縮力を記録することにより行われる。試験中、動物を、その胸郭周囲をつかむことにより穏やかに拘束し、ついで、ひずみゲージに接続された金網枠（１０×１２ｃｍ２）を握らせる。ついで、握りが壊れるまで、実験者は吻側−尾側方向に該動物を移動させる。各動物を約２〜３分間隔で連続的に２回試験して、生平均握力（ＣＦｍａｘ）を得る。今度はこの生平均握力データを各動物ごとに最大後脚圧縮力（ＣＦｍａｘ）（グラム力）／ｋｇ体重に変換する。ＣＦｍａｘ／ｋｇ体重に関する群平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ．を計算する。年齢を釣り合わせた未処理動物の群を各実験に加え、試験している各化合物または化合物の組合せごとの異なる投与群から得られたデータを未処理群（１００％正常であるものとして割り当てられたもの）と比較する。ビヒクルの効果と比較した場合の試験化合物に関する後脚握力の減少は副作用の尺度であり、握力の減少が大きければ大きいほど、副作用も大きくなる。このモデルにおける薬物効果を評価する全ての実験は、無作為盲検法で行う。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を用いて、統計分散分析（ＡＮＯＶＡ）を行う。事後比較として、ボンフェローニの複数比較検定を行う。
【００５６】
副作用は運動活動の測定（Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｌｏｃｏｍｏｔｏｒ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ）によっても測定されうる。薄暗い照明の試験室内で、赤外センサー（ＡｃｃｕＳｃａｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｉｎｃ．，Ｃｏｌｕｍｂｕｓ，ＯＨ）をそれぞれが備えているＶｅｒｓａｍａｘ／Ｄｉｇｉｓｃａｎモニターの内部に位置する開放環境（４２（長さ）×４２（基部）×４０ｃｍ（高さ）；Ｐｉｐｅｒ  Ｐｌａｓｔｉｃｓ，Ｌｉｂｅｒｔｙｖｉｌｌｅ，ＩＬ）において、自発的活動を評価する。試験化合物またはビヒクル対照の投与の後、ラットを個別に該試験室内に配置し、水平（運動）活動を３０分間記録する。ビヒクルの効果と比較した場合の、試験化合物に関する水平運動活動の低下は、副作用の尺度であり、活動の低下が大きいほど、副作用も大きい。データをＡＮＯＶＡにより分析し、ついで事後比較としてフィッシャーの保護（Ｐｒｏｔｅｃｔｅｄ）最小有意差（ＰＬＳＤ）分析を行う（ＪＭＰ統計データベース；ＳＡＳ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｉｎｃ．，Ｃａｒｙ，ＮＣ）。ｐ＜０．０５が有意とみなされた。
【００５７】
本出願の主要実施形態は、治療効果を得るのに十分な量のＣＢ２選択的アゴニストと、該ＣＢ２選択的アゴニストの治療効果を低下させないがＣＢ２選択的アゴニストからのいずれかの残存副作用を阻止するのに十分な量のＣＢ１アンタゴニストとの組合せを投与することを含む、ＣＢ２選択的受容体アゴニストで治療可能な状態に罹患した対象を治療するための方法である。この組合せ療法は、それらの２つの化合物のそれぞれを、所望の治療効果を得るのに用量で、同時に、または一方の直後に他方を、別々に投与することにより有効でありうる。この組合せ療法は、所望の治療効果を得るのに有効な量で、同一医薬組成物において両方の化合物を組合せることによっても有効でありうる。
【００５８】
もう１つの実施形態においては、本出願は、本発明の化合物を含む医薬組成物を提供する。該医薬組成物は、単独で又は１以上の無毒性の医薬上許容される担体と共に製剤化された本発明の化合物を含む。本発明の医薬組成物は、経口的、直腸、非経口的、槽内、膣内、局所（散剤、軟膏剤または滴剤により）、頬側投与により、または経口もしくは鼻スプレーとして、ヒトおよび他の哺乳動物に投与されうる。本明細書中で用いる「非経口」なる語は、静脈内、筋肉内、腹腔内、槽内、皮下および関節内注射および注入を含む投与方法を意味する。
【００５９】
本明細書中で用いる「医薬上許容される」担体なる語は、任意のタイプの無毒性の不活性固体、半固体もしくは液体の充填剤、希釈剤、カプセル化物質または製剤化補助物質を意味する。医薬上許容される担体として使用されうる物質の幾つかの具体例としては、糖、限定的なものではないが例えばラクトース、グルコースおよびスクロース；デンプン、限定的なものではないが例えばコーンスターチおよびジャガイモデンプン；セルロースおよびその誘導体、限定的なものではないが例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロース；粉末化トラガカント；麦芽；ゼラチン；タルク；賦形剤、限定的なものではないが例えばカカオ脂および坐剤用ロウ；油、限定的なものではないが例えばラッカセイ油、綿実油、サフラワー油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油およびダイズ油；グリコール、例えばプロピレングリコール；エステル、限定的なものではないが例えばオレイン酸エチルおよびラウリン酸エチル；寒天；緩衝剤、限定的なものではないが例えば水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウム；アルギン酸；発熱物質非含有水；等張食塩水；リンガー液；エチルアルコールおよびリン酸緩衝溶液が挙げられる。また、製剤化する者の判断に従い、他の無毒性の許容される滑沢剤、限定的なものではないが例えばラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウム、ならびに着色剤、放出剤、コーティング剤、甘味剤、香味剤および香料、保存剤および抗酸化剤も該組成物中に存在しうる。
【００６０】
非経口注射用の本発明の医薬組成物は、医薬上許容される無菌の水性または非水性の溶液、分散液、懸濁液または乳濁液、および使用直前に無菌の注射可能な溶液または分散液に再構成（還元）される無菌の散剤を含む。適当な水性および非水性の担体、希釈剤、溶媒またはビヒクルの具体例には、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）、植物油（例えば、オリーブ油）、注射可能な有機エステル（例えば、オレイン酸エチル）およびそれらの適当な混合物が含まれる。例えば、レシチンのようなコーティング物質を使用することにより、また、分散液の場合には必要な粒径を維持することにより、また、界面活性剤を使用することにより、適当な流動性が維持されうる。
【００６１】
また、これらの組成物は、保存剤、湿潤剤、乳化剤および分散剤のような補助剤を含有しうる。種々の抗細菌および抗真菌剤、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノールソルビン酸などを含有させることにより、微生物の作用の予防が保証されうる。また、糖、塩化ナトリウムなどのような等張化剤を含有させることも望ましいかもしれない。注射用医薬形態の持続的吸収は、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンのような吸収遅延物質を含有させることにより達成されうる。
【００６２】
幾つかの場合には、該薬物の効果を持続させるために、皮下または筋肉内注射からの該薬物の吸収を遅らせることが望ましい。これは、低い水溶性を有する結晶性または非晶質物質の液体懸濁液の使用により、あるいは該薬物を油ビヒクルに溶解または懸濁させることにより達成されうる。
【００６３】
注射可能なデポ形態は、ポリラクチド−ポリグリコリドのような生分解性重合体中で該薬物のマイクロカプセルマトリックスを形成させることにより製造される。薬物と重合体との比率および使用する特定の重合体の性質に応じて、薬物放出の速度が制御されうる。他の生分解性重合体の具体例には、ポリ（オルトエステル）およびポリ（無水物）が含まれる。デポ注射剤は、身体組織に適合性であるリポソームまたはマイクロエマルション中に該薬物を取り込ませることによっても製造される。
【００６４】
経口投与用の固体剤形には、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤および顆粒剤が含まれる。そのような固体剤形の場合、少なくとも１つの医薬上許容される不活性な担体または賦形剤、例えばクエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウム、および／またはａ）充填剤または増量剤、例えばデンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトールおよびケイ酸；ｂ）結合剤、例えばカルボキシメチルセルロース、アルギナート、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロースおよびアカシア；ｃ）湿潤剤、例えばグリセロール；ｄ）崩壊剤、例えば寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモまたはタピオカデンプン、アルギン酸、ある種のシリカートおよび炭酸ナトリウム；ｅ）溶解遅延剤、例えばパラフィン；ｆ）吸収促進剤、例えば第四級アンモニウム化合物；ｇ）湿潤剤、例えばセチルアルコールおよびグリセロールモノステアラート；ｈ）吸収剤、例えばカオリンおよびベントナイトクレー；およびｉ）滑沢剤、例えばタルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムおよびそれらの混合物と、該活性化合物とを混合することが可能である。カプセル剤、錠剤および丸剤の場合には、該剤形は緩衝剤をも含みうる。
【００６５】
また、ラクトースまたは乳糖、および高分子量ポリエチレングリコールなどの担体を使用して、軟および硬充填ゼラチンカプセル中の充填剤として、同様のタイプの固体組成物が使用されうる。
【００６６】
錠剤、糖剤、カプセル剤、丸剤および顆粒剤の固体剤形は、コーティングおよび外皮（例えば、腸溶性コーティングおよび医薬製剤化の技術分野でよく知られている他のコーティング）を施して製造されうる。該剤形は、混濁化剤を含有することが可能であり、専ら又は優先的に腸管の或る部分において、場合によっては遅延様態で、有効成分を放出するような組成物の剤形でありうる。使用されうる包埋組成物には、高分子物質およびロウが含まれる。
【００６７】
また、該活性化合物は、適当な場合には、前記の担体の１以上を含有するマイクロカプセル形態でありうる。
【００６８】
経口投与用の液体剤形には、医薬上許容される乳剤、溶液（水剤）、懸濁剤、シロップ剤およびエリキシル剤が含まれる。該液体剤形は、該活性化合物の他に、当技術分野で一般に使用される不活性な希釈剤、例えば、水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例えばエチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油（特に、綿実油、アメリカホドイモ油、トウモロコシ胚油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール、およびソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにそれらの混合物を含有しうる。該経口組成物は、不活性希釈剤の他に、湿潤剤、乳化剤、懸濁化剤、甘味剤、香味剤および香料のような補助物質を含みうる。
【００６９】
本発明の化合物の局所投与用剤形には、散剤、スプレー剤、軟膏剤および吸入剤が含まれる。該活性化合物は、医薬上許容される担体、および要求されうる任意の必要な保存剤、バッファーまたはプロペラントと無菌条件下で混合されうる。眼科用製剤、点眼剤、散剤および溶液（水剤）も本発明の範囲内であると意図される。
【００７０】
本出願の医薬組成物中の有効成分の実際の投与量レベルは、個々の化合物、投与経路、治療される状態の重症度ならびに治療される患者の状態およびこれまでの病歴に左右される。
【００７１】
前記または他の治療において使用される場合、本発明の化合物の１つの治療的有効量は、純粋な形態で、あるいはそのような形態が存在する場合には、医薬上許容される塩、エステルまたはプロドラッグ形態で使用されうる。本発明の化合物の「治療的有効量」は、いずれかの医学的治療に適用されうる合理的な利益／リスク比で障害を治療するのに十分な該化合物の量を意味する。しかしながら、本発明の化合物および組成物の１日の合計使用量は妥当な医学的判断の範囲内で担当医師により決定されると理解されるであろう。個々のいずれかの患者に対する具体的な治療的有効用量レベルは、治療される障害および該障害の重症度；使用される具体的な化合物の活性；使用される具体的な組成物；患者の年齢、体重、全身健康状態、性別および食事；使用される具体的な化合物の投与時間、投与経路および排泄速度；治療の継続期間；使用される具体的な化合物と組合されて又は同時に使用される薬物；医学分野でよく知られている要因などの種々の要因に左右されるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００７２】
【図１Ａ】図１Ａは、ＣＢ２選択的アゴニストである（Ｚ）−Ｎ−（５−ｔｅｒｔ−ブチル−３−ブチルチアゾール−２（３Ｈ）−イリデン）−５−クロロ−２−メトキシベンズアミドの、皮膚切開疼痛モデルにおける効果を示す。
【図１Ｂ】図１Ｂは、ＣＢ２選択的アゴニストである（Ｚ）−Ｎ−（３−（２−メトキシエチル）−４，５−ジメチルチアゾール−２（３Ｈ）−イリデン）−２，２，３，３−テトラメチルシクロプロパンカルボキサミドの、皮膚切開疼痛モデルにおける効果を示す。
【図２】図２は、ＣＢ２アゴニストである（Ｚ）−Ｎ−（５−ｔｅｒｔ−ブチル−３−ブチルチアゾール−２（３Ｈ）−イリデン）−５−クロロ−２−メトキシベンズアミド（３０μｍｏｌ／ｋｇ、腹腔内）とリモナバント（ｒｉｍｏｎａｂａｎｔ）（３０μｍｏｌ／ｋｇ、腹腔内）との共投与の、皮膚切開疼痛モデルに対する効果を示す。
【図３】図３は、ＣＢ２選択的アゴニストである（Ｚ）−Ｎ−（３−（２−メトキシエチル）−４，５−ジメチルチアゾール−２（３Ｈ）−イリデン）−２，２，３，３−テトラメチルシクロプロパンカルボキサミド（μｍｏｌ／ｋｇ、腹腔内）とリモナバント（３０μｍｏｌ／ｋｇ、腹腔内）との共投与の、運動活性に対する効果を示す。
【図４】図４は、ＣＢ２選択的アゴニストである（Ｚ）−Ｎ−（５−ｔｅｒｔ−ブチル−３−ブチルチアゾール−２（３Ｈ）−イリデン）−５−クロロ−２−メトキシベンズアミド（３０μｍｏｌ／ｋｇ、腹腔内）とリモナバント（３０μｍｏｌ／ｋｇ、腹腔内）との共投与の、運動活性に対する効果を示す。
【図５】図５は、ＣＢ２選択的アゴニストである（Ｚ）−Ｎ−（３−（２−メトキシエチル）−４，５−ジメチルチアゾール−２（３Ｈ）−イリデン）−２，２，３，３−テトラメチルシクロプロパンカルボキサミド（３０μｍｏｌ／ｋｇ、腹腔内）とリモナバント（３０μｍｏｌ／ｋｇ、腹腔内）との共投与の、握力に対する効果を要約している。
【図６】図６は、ＣＢ２選択的アゴニストである（Ｚ）−Ｎ−（３−（２−メトキシエチル）−４，５−ジメチルチアゾール−２（３Ｈ）−イリデン）−２，２，３，３−テトラメチルシクロプロパンカルボキサミド（１ｍｇ／ｋｇ、静脈内）とリモナバント（３．２ｍｇ／ｋｇ、静脈内）との共投与の後の平均動脈圧に対する効果を示す。
【図７】図７は、ＣＢ２選択的アゴニストである（Ｚ）−Ｎ−（５−ｔｅｒｔ−ブチル−３−ブチルチアゾール−２（３Ｈ）−イリデン）−５−クロロ−２−メトキシベンズアミドの単独の場合およびリモナバントと組合せた場合の効力および副作用の比較を示す。皮膚切開は術後皮膚切開疼痛モデルを意味する。ＬＭＡは運動活動モデルを意味する。
【００７３】
以下の実施例は本出願の範囲を例示するものであり、それを限定するものではない。
【実施例１】
【００７４】
皮膚切開モデルにおいて有効なＣＢ２選択的アゴニスト
術後疼痛の皮膚切開モデルを用いて、化合物Ａ、すなわち、ＣＢ２アゴニスト（Ｚ）−Ｎ−（５−ｔｅｒｔ−ブチル−３−ブチルチアゾール−２（３Ｈ）−イリデン）−５−クロロ−２−メトキシベンズアミドの、異疼痛に対する効果を、手術の２時間後に評価した。図１Ａは、該切開脚に関する引っ込め閾値が１０および３０μｍｏｌ／ｋｇのＣＢ２アゴニストＡの腹腔内投与後に回復したことを示している。図１Ｂは、化合物Ｂ、すなわち、ＣＢ２アゴニスト（Ｚ）−Ｎ−（３−（２−メトキシエチル）−４，５−ジメチルチアゾール−２（３Ｈ）−イリデン）−２，２，３，３−テトラメチルシクロプロパンカルボキサミドでの同様の結果を示しており、１０および３０μｍｏｌ／ｋｇ  ｉ．ｐ．（腹腔内）における引っ込め閾値を再確立している。これらの結果は、このラット疼痛モデルにおいてＣＢ２アゴニストで得られた強力な効果を示している。
【実施例２】
【００７５】
皮膚切開モデルにおける鎮痛に対するＣＢ２アゴニストおよびＣＢ１アンタゴニストの効果
術後疼痛の皮膚切開モデルを用いて、ビヒクルまたはＣＢ１アンタゴニストであるリモナバント（ｒｉｍｏｎａｂａｎｔ）の投与の後にＣＢ２アゴニストＡの効果を評価した。この効果を、ビヒクルまたはＣＢ１アンタゴニストであるリモナバントの投与の後のビヒクルの投与と比較した。ＣＢ１アンタゴニストであるリモナバント（３０μｍｏｌ／ｋｇ  ｉ．ｐ．）またはビヒクル（５％  ＤＭＳＯ／ＰＥＧ）よりなる第１用量を、ＣＢ２アゴニストＡ（３０μｍｏｌ／ｋｇ  ｉ．ｐ．）またはビヒクルの投与よりなる第２用量の投与の１５分前に投与した。ＣＢ２アゴニストＡまたはビヒクルのいずれかの第２用量の投与の３０分後に、異疼痛試験を行った。図２は、２回のビヒクルの投与、またはＣＢ１アンタゴニストであるリモナバントの投与の１５分後のビヒクルの投与が、手術されたラットにおける触覚異疼痛を改善しなかったことを示している。図２はまた、ビヒクルまたはＣＢ１アンタゴニストであるリモナバントの投与の後で投与されたＣＢ２アゴニストＡがこのモデルにおいて鎮痛を誘導し得なかったことを示している。これらの結果は、該ＣＢ２アゴニストにより誘導される鎮痛のレベルがＣＢ１アンタゴニストの前投与によっては影響されなかったことを示している。
【実施例３】
【００７６】
自発的運動活動に対するＣＢ１アンタゴニストおよびＣＢ２アゴニストＢの効果
図３は、ＣＢ２アゴニストＢが、３０および４５μｍｏｌ／ｋｇ  ｉ．ｐ．（実線）でラットに投与された場合に自発的運動活動を有意に低下させることを示している。この低下は、ＣＢ２アゴニストＢの投与の１５分前に３０μｍｏｌ／ｋｇ  ｉ．ｐ．のＣＢ１アンタゴニストであるリモナバントが投与されると消失した。全ての試験は、ＣＢ２アゴニストＢの投与の３０分後に行った。これらの結果は、より高い用量のＣＢ２アゴニストＢが、ＣＢ１アンタゴニストと共に投与された場合には、ラットの自発的活動を低下させなかったことを示している。これらの効果はまた、ＣＢ２アゴニストＢによる運動活動の低下がＣＢ１受容体のその残存活性化から生じることを示している。したがって、ＣＢ２アゴニストＢとＣＢ１アンタゴニストであるリモナバントとの共投与は該副作用を有意に低下させた。
【実施例４】
【００７７】
自発的運動活動に対するＣＢ１アンタゴニストおよびＣＢ２アゴニストＡの効果
運動活動アッセイを用いて、ビヒクルまたはＣＢ１アンタゴニストであるリモナバントの投与の後、ＣＢ２アゴニストＡの効果を評価した。この効果を、ビヒクルまたはＣＢ１アンタゴニストであるリモナバントの投与の後のビヒクルの投与と比較した。ＣＢ１アンタゴニストであるリモナバント（３０μｍｏｌ／ｋｇ  ｉ．ｐ．）またはビヒクル（５％  ＤＭＳＯ／ＰＥＧ）よりなる第１用量を、ＣＢ２アゴニストＡ（３０μｍｏｌ／ｋｇ  ｉ．ｐ．）またはビヒクルの投与よりなる第２用量の投与の１５分前に投与した。ＣＢ２アゴニストＡまたはビヒクルのいずれかの第２用量の投与の３０分後に、運動試験を行った。図４は、ＣＢ１アンタゴニストであるリモナバントがビヒクルの水平運動活動に影響を及ぼさなかったことを示している。ビヒクルの投与後に投与されたＣＢ２アゴニストＡは水平運動活動を９１％低下させた。ＣＢ１アンタゴニストであるリモナバントは、ＣＢ２アゴニストＡの投与の１５分前に投与された場合、該低下を阻止することが可能であった。これらの効果は、ＣＢ２アゴニストＡによる運動活動の低下がＣＢ１受容体のその残存活性化から生じることを示している。図４は、ＣＢ１アンタゴニストおよびＣＢ２アゴニストの投与が、該ＣＢ２アゴニストの残存ＣＢ１活性により誘発される望ましくない副作用を消失させることを示している。
【実施例５】
【００７８】
握力挙動に対するＣＢ１アンタゴニストおよびＣＢ２アゴニストの効果
握力挙動アッセイを用いて、ビヒクルまたはＣＢ１アンタゴニストであるリモナバントの投与の後、ＣＢ２アゴニストＢの効果を評価した。この効果を、ビヒクルまたはＣＢ１アンタゴニストであるリモナバントの投与の後のビヒクルの投与と比較した。ＣＢ１アンタゴニストであるリモナバント（３０μｍｏｌ／ｋｇ  ｉ．ｐ．）またはビヒクル（５％  ＤＭＳＯ／ＰＥＧ）よりなる第１用量を、ＣＢ２アゴニストＢ（３０μｍｏｌ／ｋｇ  ｉ．ｐ．）またはビヒクルの投与よりなる第２用量の投与の１５分前に投与した。ＣＢ２アゴニストＢまたはビヒクルのいずれかの第２用量の投与の３０分後に、握力挙動試験を行った。図５は、ＣＢ２アゴニストＢ（３０μｍｏｌ／ｋｇ  ｉ．ｐ．）が４２％の握力の低下を誘発したことを示している。この効果は、ＣＢ１アンタゴニストであるリモナバントの前投与により完全に阻止された。図５に示すとおり、リモナバントは、ビヒクルの投与の前に投与された場合には握力に全く影響を及ぼさなかった。これらの効果は、ＣＢ２アゴニストＢによる握力の低下がＣＢ１受容体のその残存活性化から生じることを示している。図５は、ＣＢ１アンタゴニストおよびＣＢ２アゴニストの投与が、該ＣＢ２アゴニストの残存ＣＢ１活性により誘発される望ましくない副作用を消失させることを示している。
【実施例６】
【００７９】
平均動脈圧（ＭＡＰ）および心拍数（ＨＲ）に対するＣＢ１アンタゴニストおよびＣＢ２アゴニストの共投与の効果
オスＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットを、長期作用性バルビツレートであるイナクチン（Ｉｎａｃｔｉｎ）で麻酔した。ＭＡＰおよびＨＲの測定のために、カテーテルを大腿動脈内に配置した。化合物の投与および水分補給を維持するための食塩水の注入のために、追加的なカテーテルを大腿静脈内に配置した。３０分間の調整時間の後、ビヒクル（ＰＥＧ−４００）、化合物Ｂ（ビヒクル：ＰＥＧ４００；２ｍｌ／ｋｇ）またはＣＢ２アゴニストＢ（ビヒクル：ＰＥＧ４００；２ｍｌ／ｋｇ）＋ＣＢ１アンタゴニストであるリモナバント（ビヒクル：ＰＥＧ４００；１ｍｌ／ｋｇ）を３０分間の注入により静脈内投与した。化合物Ｂおよびリモナバントを同時に投与する場合、別々のシリンジを使用して、それらを別々に注入した。試験した用量は化合物Ｂでは１．０ｍｇ／ｋｇ、そしてリモナバントでは３．２ｍｇ／ｋｇであった。データは３匹のラットからの平均±ｓｅｍとして表されている。図６は、ビヒクル、化合物Ｂのみ、および化合物Ｂとリモナバントとの組合せの投与の、平均動脈圧（ＭＡＰ）に対する効果を示す。化合物Ｂとリモナバントとの組合せ治療は、ビヒクルの場合と比べて、血圧に対する効果を欠き、一方、化合物Ｂでの治療は、血圧を低下させる効果を有することを、これらの結果は示している。これらの効果は、ＣＢ２アゴニストＢによる血圧の低下がＣＢ１受容体のその残存活性化から生じることを示している。図６は、ＣＢ１アンタゴニストおよびＣＢ２アゴニストの投与が、該ＣＢ２アゴニストの残存ＣＢ１活性により誘発される望ましくない副作用を消失させることを示している。
【実施例７】
【００８０】
ＣＢ２アゴニストのみ及びＣＢ１アンタゴニストと共に投与されたＣＢ２アゴニストに関する効能および副作用の比較
図７は、ＣＢ２アゴニスト化合物Ａおよび化合物Ａ＋ＣＢ１アンタゴニスト  リモナバントに関する皮膚切開疼痛モデルおよび運動副作用アッセイにおける効果を示し、データは、これらのアッセイにおいて得られうる最大可能効果として表されている。皮膚切開疼痛モデルにおいては、化合物Ａ、およびリモナバントと共投与された化合物Ａは、同等の効能を示している。運動アッセイにおいては、化合物Ａ＋リモナバントは、化合物Ａの単独投与と比べて遥かに低下した副作用を示している。化合物Ａは３０μｍｏｌ／ｋｇ  ｉ．ｐ．の用量で投与し、リモナバントは化合物Ａの投与の１５分前に３０μｍｏｌ／ｋｇ  ｉ．ｐ．の用量で投与した。
【図１Ａ】
2011500721.tif 000004
【図１Ｂ】
2011500721.tif 000005
【図２】
2011500721.tif 000006
【図３】
2011500721.tif 000007
【図４】
2011500721.tif 000008
【図５】
2011500721.tif 000009
【図６】
2011500721.tif 000010
【図７】
2011500721.tif 000011
【国際調査報告】
2011500721.tif 000012
2011500721.tif 000013
2011500721.tif 000014