(57)【要約】本発明は、ＭＥＫ阻害剤及びオーロラキナーゼ阻害剤を含んでなる組合せ治療薬、並びに患者における抗癌効果の産生のための、従って患者の癌の治療において有用である方法に関する。更に具体的には、本発明は：ＭＥＫ阻害剤及びオーロラキナーゼ阻害剤を含んでなる組合せ治療薬；ＭＥＫ阻害剤及びオーロラキナーゼ阻害剤を含んでなる組合せ製品、ＭＥＫ阻害剤及びオーロラキナーゼ阻害剤を含んでなるキット；組合せ治療薬、組合せ製品、又はキットの癌の治療における使用；組合せ治療薬、組合せ製品、又はキットを患者に投与することを含んでなる癌を治療する方法に関する。この組合せ及び本発明の方法は、更にＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状の治療においても有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及び
オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩
を組合せてなる治療薬。
【請求項２】
ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及び
オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩
を、医薬的に受容可能なアジュバント、希釈剤又は担体を伴って含む、組合せ製品。
【請求項３】
以下の構成要素：
医薬的に受容可能なアジュバント、希釈剤又は担体を伴う、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩；及び
医薬的に受容可能なアジュバント、希釈剤又は担体を伴う、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩；
を含んでなるキットであって、ここにおいて前記構成要素は、逐次、別個及び／又は同時投与のために適した形態で提供される、前記キット。
【請求項４】
前記ＭＥＫ阻害剤が、６−（４−ブロモ−２−クロロ−フェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシ−エトキシ）−アミド、又は医薬的に受容可能なその塩である、請求項１に記載の組合せ治療薬、請求項２に記載の組合せ製品、又は請求項３に記載のキット。
【請求項５】
前記ＭＥＫ阻害剤が、２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）−１，５−ジメチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキシアミド、又は医薬的に受容可能なその塩である、請求項１に記載の組合せ治療薬、請求項２に記載の組合せ製品、又は請求項３に記載のキット。
【請求項６】
前記ＭＥＫ阻害剤が、４−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）−１，５−ジメチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリダジン−３−カルボキシアミド、又は医薬的に受容可能なその塩である、請求項１に記載の組合せ治療薬、請求項２に記載の組合せ製品、又は請求項３に記載のキット。
【請求項７】
前記オーロラキナーゼ阻害剤が、リン酸二水素２−｛［３−（｛４−［（５−｛２−［（３−フルオロフェニル）アミノ］−２−オキソエチル｝−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ］キナゾリン−７−イル｝オキシ）プロピル］（エチル）アミノ｝エチル、又は医薬的に受容可能なその塩である、請求項１に記載の組合せ治療薬、請求項２に記載の組合せ製品又は請求項３に記載のキット。
【請求項８】
前記ＭＥＫ阻害剤が、６−（４−ブロモ−２−クロロ−フェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシ−エトキシ）−アミド、又は医薬的に受容可能なその塩であり、そして前記オーロラキナーゼ阻害剤が、リン酸二水素２−｛［３−（｛４−［（５−｛２−［（３−フルオロフェニル）アミノ］−２−オキソエチル｝−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ］キナゾリン−７−イル｝オキシ）プロピル］（エチル）アミノ｝エチル、又は医薬的に受容可能なその塩である、請求項１に記載の組合せ治療薬、請求項２に記載の組合せ製品、又は請求項３に記載のキット。
【請求項９】
オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩と組合わせたＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の治療用に有効な量を、癌を有する、又は有すると疑われる患者に投与することを含む、癌を治療する方法。
【請求項１０】
オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量が、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量の投与に先だって投与される、請求項９に記載の癌を治療する方法。
【請求項１１】
オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量の投与、及びＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量の投与との間に間隔をおく、請求項１０に記載の癌を治療する方法。
【請求項１２】
前記間隔が２４時間である、請求項１１に記載の癌を治療する方法。
【請求項１３】
前記癌が、肺癌、黒色腫、結腸直腸癌、乳癌、卵巣癌、甲状腺癌、膵臓癌、前立腺癌、肝臓癌、急性骨髄性白血病又は多発性骨髄腫から選択される、請求項９から１２のいずれか１項に記載の癌を治療する方法。
【請求項１４】
ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩と組合わせた、医薬の製造における使用。
【請求項１５】
ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩と組合わせた、癌の治療のための医薬の製造における使用。
【請求項１６】
オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回又はそれより多い服用量が、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回又はそれより多い服用量の投与に先だって投与される、請求項１５に記載の使用。
【請求項１７】
オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量の投与、及びＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量の投与との間に間隔をおく、請求項１６に記載の使用。
【請求項１８】
前記間隔が２４時間である、請求項１７に記載の使用。
【請求項１９】
前記癌が、肺癌、黒色腫、結腸直腸癌、乳癌、卵巣癌、甲状腺癌、膵臓癌、前立腺癌、肝臓癌、急性骨髄性白血病又は多発性骨髄腫から選択される、請求項１５ないし１８のいずれか１項に記載の使用。
【請求項２０】
ＭＥＫ阻害剤又は医薬的に受容可能なその塩、及びオーロラキナーゼ阻害剤又は医薬的に受容可能なその塩を組合せてなる、医薬として使用するための治療用組合せ。
【請求項２１】
ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及びオーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩を組合せてなる、癌の治療において使用するための治療用組合せ。
【請求項２２】
オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量が、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量の投与に先だって投与される、請求項２１に記載の治療用組合せ。
【請求項２３】
オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量与の投与、及びＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量の投与との間に間隔をおく、請求項２２に記載の治療用組合わせ。
【請求項２４】
前記間隔が２４時間である、請求項２３に記載の治療用組合せ。
【請求項２５】
前記癌が、肺癌、黒色腫、結腸直腸癌、乳癌、卵巣癌、甲状腺癌、膵臓癌、前立腺癌、肝臓癌、急性骨髄性白血病又は多発性骨髄腫から選択される、請求項２１ないし２４のいずれか１項に記載の治療用組合せ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＭＥＫ阻害剤及びオーロラキナーゼ阻害剤を含んでなる治療用の組合せ、並びに患者における抗癌効果の産生のための、従って患者の癌の治療において有用である方法に関する。更に具体的には、本発明は：ＭＥＫ阻害剤及びオーロラキナーゼ阻害剤を含んでなる組合せ治療薬（治療用組合せ、therapeutic combination）；ＭＥＫ阻害剤及びオーロラキナーゼ阻害剤を含んでなる組合せ製品(combination product)、ＭＥＫ阻害剤及びオーロラキナーゼ阻害剤を含んでなるキット(kit of parts)；組合せ治療薬、組合せ製品、又はキットの癌の治療における使用；組合せ治療薬、組合せ製品、又はキットを患者に投与することを含んでなる癌を治療する方法に関する。この組合せ物及び本発明の方法は、更にＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状の治療においても有用である。
【背景技術】
【０００２】
細胞周期は、細胞がそのＤＮＡを複製し、そしてそれを二つの娘細胞に等しく分離する細胞分裂の過程を説明する。染色体分離の最終段階は、有糸分裂と呼ばれる。有糸分裂中に、染色体は凝縮し、そしてこれらが分裂する前に姉妹染色分体が整列させられて、それぞれの新生細胞は、遺伝子物質の完全な補体を受領する。これは、繊維質構造、即ち微小管ポリマーによって構成されるいわゆる紡錘体によって達成される。有糸分裂、そして特に紡錘体は、ビンカアルカロイド及びタキサンのような化合物による薬物標的として臨床的に確認されている。これらは、微小管の動態を妨げ、そして従って有糸分裂の進行を停止させ、細胞の死に導く。チューブリンが、多くの他の生理学的過程において役割を演じるために、これらの薬剤の毒性は考慮に値する。標的の第二世代の有糸分裂剤は、現在開発中である。これらの薬剤は、有糸分裂の調節に特異的に関係する酵素及び分子を阻害し、そして従ってより低い毒性を伴うことができる。更にこれらの標的は、しばしば癌細胞中で過剰発現することが見出されている。例は、オーロラキナーゼファミリーのメンバーのファミリー、オーロラＡ及びＢ、ｐｏｌｏ様キナーゼ−１、並びにキネシン様モータータンパク質Ｅｇ５（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＪＲ  ｅｔ  ａｌ．“Ｔａｒｇｅｔｅｄ  ａｎｔｉ  ｍｉｔｏｔｉｃ  ｔｈｅｒａｐｉｅｓ：ｃａｎ  ｗｅ  ｉｍｐｒｏｖｅ  ｏｎ  ｔｕｂｕｌｉｎ  ａｇｅｎｔｓ？”Ｎａｔｕｒｅ  ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｃａｎｃｅｒ  ２００７（７）  ｐｐ  １０７−１１７）；を含む。
【０００３】
Ｒａｓ、Ｒａｆ、ＭＡＰタンパク質キナーゼ／細胞外シグナルで制御されるキナーゼキナーゼ（ＭＥＫ）、細胞外シグナルで制御されるキナーゼ（ＥＲＫ）経路は、細胞の増殖、分化、生存、不死化、浸潤及び血管新生を含む細胞状況に依存する各種の細胞機能の調節において中心的役割を演じている（Ｐｅｙｓｓｏｎｎａｕｘ  ａｎｄ  Ｅｙｃｈｅｎｅ，Ｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｃｅｌｌ，２００１，９３，３−６２中で概説）。実際に、ｒａｓ依存性ｒａｆ−ＭＥＫ−ＭＡＰＫカスケードは、細胞の発現及び細胞の運命において変化をもたらす細胞表面から核への分裂促進及び浸潤シグナルの両方を伝達することの原因である鍵となるシグナル伝達経路の一つである。
【０００４】
Ｒａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ経路は、不死化、増殖因子非依存性増殖、増殖阻害シグナルに対する非感受性、浸潤及び転移する能力、血管新生を刺激すること、並びにアポトーシスの阻害を導入することによって腫瘍原生の表現型に寄与することが報告されている（Ｋｏｌｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｘｐ．Ｒｅｖ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．，２００２，２５  Ａｐｒｉｌ，ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｅｘｐｅｒｔｒｅｖｉｅｗｓ．ｏｒｇ／０２００４３８６ｈ．ｈｔｍ中で概説）。実際、ＥＲＫリン酸化は、全てのヒトの腫瘍の概略３０％において亢進されている（Ｈｏｓｈｉｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，１９９９，１８，８１３−８２２）。これは、ＲＡＳ及びＢＲＡＦ遺伝子を含む経路の鍵となるメンバーの過剰発現及び／又は変異の一つの結果であることができる。
【０００５】
従って、ＭＡＰＫキナーゼ経路のタンパク質の阻害剤が、増殖性又は浸潤性疾病の封じ込め及び／又は治療において使用するための抗増殖性、アポトーシス促進性及び抗浸潤性剤として両方の価値がある筈であることが認識される。
【０００６】
更に、有糸分裂を含む細胞周期による細胞の発育を制御する細胞経路は、更に、癌のような細胞増殖の正常な調節が喪失された時に起こる制御されない細胞増殖によって特徴づけられる過剰増殖性疾病においても重要であると考えられる。
【０００７】
真核生物において、タンパク質リン酸化の秩序あるカスケードが細胞周期による細胞の発育を制御すると考えられる。このカスケードにおいて重要な役割を演じるタンパク質キナーゼのいくつかのファミリーが確認されている。多くのこれらのキナーゼの活性は、正常な組織と比較した場合、ヒトの腫瘍において増加している。これは、タンパク質の発現の増加したレベル（例えば遺伝子増幅の結果として）、或いは活性化補助因子又は阻害タンパク質の発現の変化のいずれかによって起こることができる。
【０００８】
有糸分裂を調節し、そして従って細胞周期において重要な役割を演じ、そして更に発癌においても重要であると見受けられるタンパク質キナーゼは、Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ  ａｕｒｏｒａ及びＳ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ  Ｉｐｌ１タンパク質のヒト同族体を含む。これらの遺伝子の三つのヒト同族体、オーロラ−Ａ、オーロラ−Ｂ及びオーロラ−Ｃ（更にそれぞれオーロラ２、オーロラ１及びオーロラ３としても知られる）は、細胞周期で調節されるセリン−トレオニンタンパク質キナーゼをコードする（Ａｄａｍｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，２００１，１１（２）：４９−５４中に要約）。これらは、細胞周期中のＧ２及び有糸分裂を通して発現及びキナーゼ活性のピークを示す。いくつかの観察は、癌におけるヒトオーロラタンパク質の関与を意味づける。
【０００９】
オーロラＡのＤＮＡは増幅され、そしてｍＲＮＡは原発性ヒト直腸結腸癌の５０％より多くで過剰発現し、ここにおいて、オーロラＡタンパク質のレベルは、隣接する正常な組織と比較して非常に増加しているように見受けられる。更に、齧歯類線維芽細胞のヒトオーロラＡによる形質移入は、形質転換に導き、軟質寒天中で増殖する能力を与え、そしてヌードマウスにおいて腫瘍を形成する（Ｂｉｓｃｈｏｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｈｅ  ＥＭＢＯ  Ｊｏｕｒｎａｌ，１９９８，１７（１１），３０５２−３０６５）。他の研究は、ヒト腫瘍細胞系のアンチセンスオリゴヌクレオチド治療によるオーロラＡの発現及び機能の抑止（ＷＯ９７／２２７０２及びＷＯ９９／３７７８８）が、細胞周期の停止に導き、そしてこれらの腫瘍細胞系における抗増殖効果を発揮することを証明している。
【００１０】
オーロラＢは、癌細胞中で過剰発現し、そしてオーロラＢの増加したレベルは、直腸結腸癌の進行した段階と相関することが示されている（Ｋａｔａｙａｍａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｎａｔｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．，１９９９，９１，１１６０）。更に、オーロラＢの過剰発現が、異数性を誘導し、そしてオーロラＢを過剰発現している細胞が転移を発生する更に高悪性度の腫瘍を形成することが報告されている（Ｏｔａ  Ｔ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，２００２，６２，５１６８−５１７７）。
【００１１】
オーロラＣに関して、これの発現は、各種の癌系で過剰発現することが見出されているが、精巣に限られていると考えられている（Ｋａｔａｙａｍａ  Ｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  ａｎｄ  Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ  Ｒｅｖｉｅｗｓ，２００３，２２：４５１−４６４）。
【００１２】
更に、オーロラＡ及びオーロラＢの小分子阻害剤は、ｓｉＲＮＡ治療によるオーロラＢの発現の単独の選択的抑止を有する（Ｄｉｔｃｈｆｉｅｌｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，２００３，１６１（２），２６７−２８０）ように、ヒト腫瘍細胞において抗増殖効果を有することが証明されている（Ｋｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．２００１，Ｐｏｓｔｅｒ  ＃２４５５，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｎｕａｌ  ｍｅｅｔｉｎｇ）。これは、オーロラＡ及び／又はオーロラＢの機能の阻害が、ヒトの腫瘍及び他の過剰増殖性疾病の治療において有用であることができる抗増殖効果を有するものであることを示す。
【００１３】
有糸分裂及び細胞周期は、全ての腫瘍細胞の増殖において内因性の役割を演じる。従って、癌のような過剰増殖性疾病の治療用方法のような、有糸分裂、そして従って細胞周期の阻害が、増殖性の腫瘍細胞において活性であるものであることが認識されている。ＭＥＫのような具体的なシグナル伝達分子を指向する方法は、Ｒａｆ−ＭＥＫ−ＭＡＰＫカスケードを発現し、そしてそれに少なくとも部分的に依存する腫瘍細胞のサブセットにおいて有効であることが期待されるものである。
【００１４】
培養された腫瘍細胞中のＭＥＫ１／２の阻害は、しばしば細胞周期のＧ１相における停止を起こし、そしてこれは、時間と共に細胞周期の他の相における細胞の、未処理の細胞に対するパーセントの減少となる。これらの細胞周期の他の相は、Ｓ相（ＤＮＡの合成が起こる時期）及び有糸分裂（細胞分裂が起こる時期）である。ＭＥＫ阻害剤が培養培地から除去されたとき、細胞周期のＧ１相で停止された細胞は、Ｓ相に、そして次いで有糸分裂に、ＭＥＫ阻害からの解放後のある時期において、同期された様式で細胞周期のＳ相及び有糸分裂における細胞の、未処理の細胞に対するパーセントの増加があるように動き始める。従って、ＭＥＫ阻害に続くＭＥＫ阻害からの解放は、有糸分裂中のものの細胞固体数を、そして従ってオーロラキナーゼ阻害剤のような有糸分裂阻害剤に対して感受性であるものを富化する潜在性を有する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１５】
【特許文献１】国際特許出願公開ＷＯ９７／２２７０２。
【特許文献２】国際特許出願公開ＷＯ９９／３７７８８。
【非特許文献】
【００１６】
【非特許文献１】Ｊａｃｋｓｏｎ  ＪＲ  ｅｔ  ａｌ．“Ｔａｒｇｅｔｅｄ  ａｎｔｉ  ｍｉｔｏｔｉｃ  ｔｈｅｒａｐｉｅｓ：ｃａｎ  ｗｅ  ｉｍｐｒｏｖｅ  ｏｎ  ｔｕｂｕｌｉｎ  ａｇｅｎｔｓ？”Ｎａｔｕｒｅ  ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｃａｎｃｅｒ  ２００７（７）  ｐｐ  １０７−１１７。
【非特許文献２】Ｐｅｙｓｓｏｎｎａｕｘ  ａｎｄ  Ｅｙｃｈｅｎｅ，Ｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｃｅｌｌ，２００１，９３，３−６２。
【非特許文献３】Ｋｏｌｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｘｐ．Ｒｅｖ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．，２００２，２５  Ａｐｒｉｌ，ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｅｘｐｅｒｔｒｅｖｉｅｗｓ．ｏｒｇ／０２００４３８６ｈ．ｈｔｍ。
【非特許文献４】Ｈｏｓｈｉｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，１９９９，１８，８１３−８２２。
【非特許文献５】Ａｄａｍｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，２００１，１１（２）：４９−５４。
【非特許文献６】Ｂｉｓｃｈｏｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｈｅ  ＥＭＢＯ  Ｊｏｕｒｎａｌ，１９９８，１７（１１），３０５２−３０６５。
【非特許文献７】Ｋａｔａｙａｍａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｎａｔｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．，１９９９，９１，１１６０。
【非特許文献８】Ｏｔａ  Ｔ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，２００２，６２，５１６８−５１７７。
【非特許文献９】Ｋａｔａｙａｍａ  Ｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  ａｎｄ  Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ  Ｒｅｖｉｅｗｓ，２００３，２２：４５１−４６４。
【非特許文献１０】Ｄｉｔｃｈｆｉｅｌｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，２００３，１６１（２），２６７−２８０。
【非特許文献１１】Ｋｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．２００１，Ｐｏｓｔｅｒ  ＃２４５５，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｎｕａｌ  ｍｅｅｔｉｎｇ。
【発明の概要】
【００１７】
本発明は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及びオーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩を含んでなる治療用組合せ（therapeutic combination, 組合せ治療薬または手段）に関する。治療用組合せは、患者における抗癌効果の産生のための方法において有用であり、従ってこれは、患者の癌の治療において有用である。
【００１８】
治療用組合せは、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及びオーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩を含んでなる組合せ製品（combination product, 物）の形態であることができる。治療用組合せは、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及びオーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の別個の製剤を含む複数の部品からなるキット（kit of parts, キット）を含むことができる。ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及びオーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の別個の製剤は、逐次的に、別個に及び／又は同時に投与することができる。ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及びオーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の別個の製剤を、同時に（所望により繰返して）投与することができることは当業者にとって明白であるものである。ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及びオーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の別個の製剤を、逐次的に（所望により繰返して）投与することができることも更に当業者にとって明白であるものである。ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及びオーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の別個の製剤を、別個に（所望により繰返して）投与することができることも更に当業者にとって明白であるものである。当業者は、更にＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及びオーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の別個の製剤が、逐次的に又は連続的に投与される場合、これが、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、それに続くオーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の投与によるか、或いはオーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、それに続くＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の投与によることができることを理解するものである。更に、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及びオーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の別個の製剤は、別の投与パターンで投与することができる。ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及びオーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の別個の製剤が逐次的に又は別個に投与される場合、第二の製剤の投与の遅れは、治療用組合せの有益な効果を喪失するようなものであってはならない。従って、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及びオーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩を含んでなる治療用組合せは、癌の治療において逐次的に、別個に及び／又は同時に使用することができる。
【００１９】
本発明の一つの側面において、
ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及び
オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩
を含んでなる治療用組合せが提供される。
【００２０】
本発明の一つの態様において、
ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及び
オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩を、医薬的に受容可能なアジュバント、希釈剤又は担体を伴って含んでなる治療用組合せが提供される。
【００２１】
本発明の一つの態様において、
医薬的に受容可能なアジュバント、希釈剤又は担体を伴う、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及び
医薬的に受容可能なアジュバント、希釈剤又は担体を伴う、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩
を含んでなる治療用組合せが提供される。
【００２２】
驚くべきことに、本出願人等は、オーロラキナーゼの阻害、それに続くＭＥＫの逐次阻害が特に有益であり、そして単独のオーロラキナーゼの阻害又はＭＥＫの阻害と比較して、ｉｎ  ｖｉｖｏにおける腫瘍細胞の増殖の相乗的阻害が得られることを見出した。オーロラキナーゼの阻害、それに続くＭＥＫの逐次阻害も、更に、単独のオーロラキナーゼ又はＭＥＫのいずれかの阻害により達成されるものであるものより大きい腫瘍細胞の増殖の阻害に導くものであることを提案する。
【００２３】
本発明の特別な側面において、
ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及び
オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩
を含んでなる治療用組合せが提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量（dose）は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量の投与に先だって、或いはそれと同時に投与される。
【００２４】
本発明のもう一つの態様において：
ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及び
オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩
を含んでなる治療用組合せが提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量の投与に先だって、或いはそれと同時に投与される。
【００２５】
本発明のもう一つの態様において：
ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及び
オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩
を含んでなる治療用組合せが提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与に先だって、或いはそれと同時に投与される。
【００２６】
本発明のもう一つの態様において：
ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及び
オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩
を含んでなる治療用組合せが提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量の投与に先だって、或いはそれと同時に投与される。
【００２７】
本発明のもう一つの態様において：
ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及び
オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩
を含んでなる治療用組合せが提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与に先だって、或いはそれと同時に投与される。
【００２８】
本発明の特別な態様において、
ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及び
オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩
を含んでなる治療用組合せが提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量の投与に先だって投与される。
【００２９】
本発明のもう一つの態様において：
ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及び
オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩
を含んでなる治療用組合せが提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量の投与に先だって投与される。
【００３０】
本発明のもう一つの態様において：
ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及び
オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩
を含んでなる治療用組合せが提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与に先だって投与される。
【００３１】
本発明のもう一つの態様において：
ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及び
オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩
を含んでなる治療用組合せが提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量の投与に先だって投与される。
【００３２】
本発明のもう一つの態様において：
ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及び
オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩
を含んでなる治療用組合せが提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与に先だって投与される。
【００３３】
本発明のもう一つの側面において、医薬的に受容可能なアジュバント、希釈剤又は担体を伴う、
ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及び
オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩
を含んでなる組合せ製品が提供される。
【００３４】
組合せ製品は、
医薬的に受容可能なアジュバント、希釈剤又は担体を伴う、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及び
医薬的に受容可能なアジュバント、希釈剤又は担体を伴うオーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩
の別個の製剤を含んでなることができる。あるいは、組合せ製品は、医薬的に受容可能なアジュバント、希釈剤又は担体を伴う
ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及び
オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩
の組合せ製剤を含んでなることができる。
【００３５】
本発明の特別の態様において、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量の投与に先だって、或いはそれと同時に投与される。
【００３６】
本発明のもう一つの態様において、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量の投与に先だって、或いはそれと同時に投与される。
【００３７】
本発明のもう一つの態様において、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与に先だって、或いはそれと同時に投与される。
【００３８】
本発明のもう一つの態様において、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量の投与に先だって、或いはそれと同時に投与される。
【００３９】
本発明のもう一つの態様において、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与に先だって、或いはそれと同時に投与される。
【００４０】
本発明の特別の態様において、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量の投与に先だって投与される。
【００４１】
本発明のもう一つの態様において、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量の投与に先だって投与される。
【００４２】
本発明のもう一つの態様において、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与に先だって投与される。
【００４３】
本発明のもう一つの態様において、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量の投与に先だって投与される。
【００４４】
本発明のもう一つの態様において、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与に先だって投与される。
【００４５】
もう一つの側面において、以下の構成要素：
医薬的に受容可能なアジュバント、希釈剤又は担体を伴う、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩；及び
医薬的に受容可能なアジュバント、希釈剤又は担体を伴う、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩；
を含んでなるキットが提供される。
【００４６】
本発明の一つの態様において、以下の構成要素
医薬的に受容可能なアジュバント、希釈剤又は担体を伴う、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩；及び
医薬的に受容可能なアジュバント、希釈剤又は担体を伴う、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩；
を含んでなるキットが提供され、
ここにおいて、構成要素は、逐次、別個及び／又は同時投与のために適した形態で提供される。
【００４７】
一つの態様において、キットは、
医薬的に受容可能なアジュバント、希釈剤又は担体を伴う、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩を含んでなる第１の容器；及び
医薬的に受容可能なアジュバント、希釈剤又は担体を伴う、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩を含んでなる第２の容器；並びに
前記の第１及び第２の容器を含有するための容器手段；
を含んでなる。
【００４８】
一つの態様において、キットは、更に構成要素を逐次、別個及び／又は同時に投与するための説明書を含んでなる。適当には、説明書は、本明細書中で記載したような投与順序を記載する。特別な態様において、説明書は、治療用組合せが、癌の治療において使用することができることを示す。一つの態様において、説明書は、治療用組合せが、ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状の治療において使用することができることを示す。
【００４９】
本発明のもう一つの側面において、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩との組合わせたＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の治療用に有効な量を、癌を有する、又は有すると疑われる患者に投与することを含んでなる、
癌、又は
ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状
の治療の方法が提供される。
【００５０】
本発明のもう一つの側面において、本明細書中で先に定義したとおりの治療用組合せ、組合せ製品又はキットの治療用に有効な量を、癌を有する、又は有すると疑われる患者に投与することを含んでなる、癌の治療の方法が提供される。
【００５１】
本発明のもう一つの側面において、本明細書中で先に定義したとおりの治療用組合せ、組合せ製品又はキットの治療用に有効な量の患者への投与を含んでなる、ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状の治療の方法が提供される。
【００５２】
一つの態様において、
癌、又は
ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状
の、治療の方法が提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い投与は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い投与の投与に先だって、或いはそれと同時に投与される。
【００５３】
一つの態様において、
癌、又は
ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状
の、治療の方法が提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量の投与に先だって、或いはそれと同時に投与される。
【００５４】
一つの態様において、
癌、又は
ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状
の、治療の方法が提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与に先だって、或いはそれと同時に投与される。
【００５５】
一つの態様において、
癌、又は
ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状
の、治療の方法が提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量の投与に先だって、或いはそれと同時に投与される。
【００５６】
一つの態様において、
癌、又は
ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状
の、治療の方法が提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与に先だって、或いはそれと同時に投与される。
【００５７】
一つの態様において、治療の方法は、更にＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が必要な患者を選択することを含んでなる。
一つの態様において、治療の方法は、更に癌のための治療が必要な患者を選択することを含んでなる。
【００５８】
先に上記で記載したように、癌、又はＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状の治療の方法は、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回の服用量を、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与に先だって、或いはそれと同時に投与する段階を含んでなる場合に有益である。癌、又はＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状の治療の方法は、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回又はそれより多い服用量を、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回又はそれより多い服用量の投与に先だって投与する段階を含んでなる場合に特に有益である。一つの態様において、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量を、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与中に（しかしその開始後に）投与することができる。もう一つの態様において、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量を、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回又はそれより多い服用量の投与の終了の直後に投与することができる。もう一つの態様において、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回又はそれより多い服用量の投与及びＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回又はそれより多い服用量の投与間に間隔をおくことができる。
【００５９】
本発明のもう一つの側面において、医薬の製造における、本明細書中で先に定義したとおりの治療用組合せ、組合せ製品又はキットの使用が提供される。
本発明のもう一つの側面において、医薬の製造における、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩と組合せたＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の使用が提供される。
【００６０】
一つの態様において、癌の治療のための医薬の製造における、本明細書中で先に定義したとおりの治療用組合せ、組合せ製品又はキットの使用が提供される。
一つの態様において、癌の治療のための医薬の製造における、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩と組合せたＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の使用が提供される。
【００６１】
本発明のもう一つの側面において、ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状の治療のための医薬の製造における、本明細書中で先に定義したとおりの治療用組合せ、組合せ製品又はキットの使用が提供される。
【００６２】
一つの態様において、ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状の治療のための医薬の製造における、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩と組合せたＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の使用が提供される。
【００６３】
一つの態様において、
癌、又は
ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状
の治療のための医薬の製造における、本明細書中で先に定義したとおりの治療用組合せ、組合せ製品又はキットの使用が提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量の投与に先だって、或いはそれと同時に投与される。
【００６４】
一つの態様において、
癌、又は
ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状
の治療のための医薬の製造における、本明細書中で先に定義したとおりの治療用組合せ、組合せ製品又はキットの使用が提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量の投与に先だって、或いはそれと同時に服用量される。
【００６５】
一つの態様において、
癌、又は
ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状
の治療のための医薬の製造における、本明細書中で先に定義したとおりの治療用組合せ、組合せ製品又はキットの使用が提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与に先だって、或いはそれと同時に投与される。
【００６６】
一つの態様において、
癌、又は
ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状
の治療のための医薬の製造における、本明細書中で先に定義したとおりの治療用組合せ、組合せ製品又はキットの使用が提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量の投与に先だって、或いはそれと同時に投与される。
【００６７】
一つの態様において、
癌、又は
ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状
の治療のための医薬の製造における、本明細書中で先に定義したとおりの治療用組合せ、組合せ製品又はキットの使用が提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与に先だって、或いはそれと同時に投与される。
【００６８】
一つの態様において、
癌、又は
ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状
の治療のための医薬の製造における、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩と組合せたＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の使用が提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量の投与に先だって、或いはそれと同時に投与される。
【００６９】
一つの態様において、
癌、又は
ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状
の治療のための医薬の製造における、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩と組合せたＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の使用が提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量の投与に先だって、或いはそれと同時に投与される。
【００７０】
一つの態様において、
癌、又は
ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状
の治療のための医薬の製造における、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩と組合せたＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の使用が提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与に先だって、或いはそれと同時に投与される。
【００７１】
一つの態様において、
癌、又は
ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状
の治療のための医薬の製造における、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩と組合せたＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の使用が提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量の投与に先だって、或いはそれと同時に投与される。
【００７２】
一つの態様において、
癌、又は
ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状
の治療のための医薬の製造における、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩と組合せたＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の使用が提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与に先だって、或いはそれと同時に投与される。
【００７３】
一つの態様において、使用は、更にＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が必要な患者を選択することを含んでなる。
一つの態様において、使用は、更に癌のための治療が必要な患者を選択することを含んでなる。
【００７４】
本発明のもう一つの側面において、医薬として使用するための、本明細書中で先に記載したとおりの治療用組合せ、組合せ製品又はキットが提供される。
本発明のもう一つの側面において、医薬として使用するための、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及びオーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩を含んでなる治療用組合せが提供される。
【００７５】
本発明のもう一つの側面において、癌の治療において使用するための、本明細書中で先に記載したとおりの治療用組合せ、組合せ製品又はキットが提供される。
本発明のもう一つの側面において、癌の治療において使用するための、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及びオーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩を含んでなる治療用組合せが提供される。
【００７６】
本発明のもう一つの側面において、ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状の治療において使用するための、本明細書中で先に記載したとおりの治療用組合せ、組合せ製品又はキットが提供される。
【００７７】
一つの態様において、
癌、又は
ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状
の治療において使用するための、本明細書中で先に定義したとおりの治療用組合せ、組合せ製品又はキットが提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量の投与に先だって投与される。
【００７８】
一つの態様において、
癌、又は
ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状
の治療において使用するための、本明細書中で先に定義したとおりの治療用組合せ、組合せ製品又はキットが提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量の投与に先だって投与される。
【００７９】
一つの態様において、
癌、又は
ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状
の治療において使用するための、本明細書中で先に定義したとおりの治療用組合せ、組合せ製品又はキットが提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与に先だって投与される。
【００８０】
一つの態様において、
癌、又は
ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状
の治療において使用するための、本明細書中で先に定義したとおりの治療用組合せ、組合せ製品又はキットが提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の多数回服用量の投与に先だって投与される。
【００８１】
一つの態様において、
癌、又は
ＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が有益である症状
の治療において使用するための、本明細書中で先に定義したとおりの治療用組合せ、組合せ製品又はキットが提供され、
ここにおいて、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与に先だって投与される。
【００８２】
一つの態様において、使用は、更にＭＥＫ及び／又はオーロラキナーゼの阻害が必要な患者を選択することを含んでなる。
一つの態様において、使用は、更に癌のための治療が必要な患者を選択することを含んでなる。
【００８３】
一つの態様において、患者がＭＥＫ阻害に対して抵抗性ではない、本明細書中で先に記載したとおりの方法又は使用が提供される。
一つの態様において、患者がオーロラキナーゼ阻害に対して抵抗性ではない、本明細書中で先に記載したとおりの方法又は使用が提供される。
【００８４】
一つの態様において、患者の腫瘍が、ＢＲａｆ変異又は複数の変異、ＫＲａｓ変異又は複数の変異、ＮＲａｓ変異又は複数の変異、及び／又はＨＲａｆ変異又は複数の変異のいずれか一つ又はそれより多くを保有する、本明細書中で先に記載したとおりの方法又は使用が提供される。
【００８５】
疑義の回避のために、“先だって投与される”によって、本出願人等は、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量の投与が、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量の投与の前に開始されることを意味する。従って、表現“先だって投与される”は、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量が先ず投与され、そしてこれに続いてＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量が投与される状況を包含する。ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量は、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与中に（しかしその開始後に）投与することができる。別の方法として、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量は、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量の投与の終了の直後に投与することができる。更に、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量の投与、及びＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量の投与間に間隔をおくことができる。間隔は、阻害剤の抗癌効果を最適化し、そして阻害剤間の好ましくない相互作用を最小化するように計算することができる。阻害剤間の好ましくない相互作用は、単独で使用されたいずれかの阻害剤と比較して減少した効力、又は単独で使用されたいずれかの阻害剤と比較して増加した毒性であることができる。
【００８６】
“同時に”によって、本出願人等は、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量が、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与と同時に投与されることを意味する。
【００８７】
本発明の特別な態様において、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量の投与、及びＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与間の間隔は、０時間ないし２週間、例えば１２時間、２４時間、１日、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３又は１４日である。
【００８８】
更なる態様において、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量の投与、及びＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与間の間隔は、０．５ないし５日である。
【００８９】
更なる態様において、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量の投与、及びＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与間の間隔は、１日である。
【００９０】
更なる態様において、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量の投与、及びＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与間の間隔は、２４時間である。
【００９１】
オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量の投与、及びＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくはそれより多い服用量の投与は、治療管理中に多くの回数繰返すことができることは認識されるものである。
【００９２】
従って、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回若しくは多数回服用量の投与後に、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩を、再び、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量に先だって、或いはそれと同時に投与することができる。一つの態様において、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩のこの事後投与は、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与に直ちに続く。別の態様において、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の事後投与に先立つＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与後に、間隔がおかれる。一つの態様において、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の投与、及びオーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩の一回服用量の事後投与の間の間隔は、１日より大きい。
【００９３】
一つの態様において、ＭＥＫ阻害剤は、低分子量化合物である。一つの態様において、ＭＥＫ阻害剤は、ＡＴＰ競合的ＭＥＫ阻害剤、非ＡＴＰ競合的ＭＥＫ阻害剤、又はＡＴＰ非競合的ＭＥＫ阻害剤のいずれか一つから選択される。国際特許出願公開ＷＯ２００３／０７７９１４は、化合物６−（４−ブロモ−２−クロロ−フェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシ−エトキシ）−アミドを開示し、これは本明細書中でＡＺＤ６２４４と呼ばれる。一つの態様において、ＭＥＫ阻害剤は、ＡＺＤ６２４４、２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）−１，５−ジメチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキシアミド、４−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）−１，５−ジメチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリダジン−３−カルボキシアミド、ＰＤ−０３２５９０１（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＰＤ−１８４３５２（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＸＬ−５１８（Ｅｘｅｌｉｘｉｓ）、ＡＲ−１１９（Ａｒｄｅａ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖａｌｅａｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＡＳ−７０１１７３（Ｍｅｒｃｋ  Ｓｅｒｏｎｏ）、ＡＳ−７０１２５５（Ｍｅｒｃｋ  Ｓｅｒｏｎｏ）、３６０７７０−５４−３（Ｗｙｅｔｈ）のいずれか一つから選択される。一つの態様において、ＭＥＫ阻害剤は、ＡＺＤ６２４４、２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）−１，５−ジメチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキシアミド又は４−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）−１，５−ジメチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリダジン−３−カルボキシアミドから以下に記載するように選択される。
【００９４】
一つの態様において、ＭＥＫ阻害剤は、ＡＺＤ６２４４、４−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）−１，５−ジメチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリダジン−３−カルボキシアミド又は２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）−１，５−ジメチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキシアミドから以下に記載するように選択される。
【００９５】
一つの態様において、ＭＥＫ阻害剤は、ＡＺＤ６２４４又は医薬的に受容可能なその塩から選択される。一つの態様において、ＭＥＫ阻害剤は、ＡＺＤ６２４４硫酸水素塩である。ＡＺＤ６２４４硫酸水素塩は、国際特許出願公開ＷＯ２００７／０７６２４５に記載されている方法によって合成することができる。
【００９６】
一つの態様において、ＭＥＫ阻害剤は、６−（４−ブロモ−２−クロロ−フェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシ−エトキシ）−アミド又は医薬的に受容可能なその塩から選択される。一つの態様において、ＭＥＫ阻害剤は、６−（４−ブロモ−２−クロロ−フェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシ−エトキシ）−アミド硫酸水素塩である。６−（４−ブロモ−２−クロロ−フェニルアミノ）−７−フルオロ−３−メチル−３Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（２−ヒドロキシ−エトキシ）−アミド硫酸水素塩は、国際特許出願公開ＷＯ２００７／０７６２４５に記載されている方法によって合成することができる。
【００９７】
もう一つの態様において、ＭＥＫ阻害剤は、遺伝子の発現を、例えばｍＲＮＡの安定性又は翻訳に干渉することによって阻害することができる。一つの態様において、ＭＥＫ阻害剤は、時に短鎖干渉ＲＮＡ又はサイレンシングＲＮＡとして知られる低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、或いは時に低分子ヘアピン型ＲＮＡとして知られる短鎖ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）から選択される。
【００９８】
一つの態様において、オーロラキナーゼ阻害剤は、ＭＬＮ８０５４（Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ）、ＭＬＮ−８２３７（Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ）、ＥＮＭＤ−９８１６９３（ＥｎｔｒｅＭｅｄ）、ＭＰ２３５＋（Ｍｏｎｔｉｇｅｎ）、ＭＰ５２９（Ｍｏｎｔｉｇｅｎ）、ＡＸ３９４５９（ＧＰＣ／ＡＸＸＩＭＡ）、Ａｕｒ  Ａ（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ａｒｉｚｏｎａ）、Ａｕｒ  Ａ（Ａｖｅｎｔｉｓ）、Ａｕｒ  Ｂ（Ｉｎｐｌｏｉｄ／ＮＣＥ／Ｗｏｌｆｓｏｎ）、Ａｕｒ  Ｂ（ＧＳＫ）、Ａｕｒ  Ｂ（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、ＰＨ７３９３５８（Ｎｅｒｖｉａｎｏ）、ＭＫ０４５７／ＶＸ−６８０（Ｍｅｒｃｋ／Ｖｅｒｔｅｘ）、ＡＴ９２８３（Ａｓｔｅｘ）、Ｒ７６３（Ｒｉｇｅｌ／Ｓｅｒｏｎｏ、ＭＫ６５９２／ＶＸ−６６７（Ｍｅｒｃｋ／Ｖｅｒｔｅｘ）、ＣＹＣ１１６（Ｃｙｃｌａｃｅｌ）、ＳＮＳ−３１４（Ｓｕｎｅｓｉｓ）、ＡＫＩ−００１（Ｒｏｃｈｅ，Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、ＡＫＩ（Ｅｌａｒａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＡＫＩ（Ａｖａｌｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、Ａ−６０／ＥＡ−１９／Ｅ２Ｂ８（Ｔｅｌｉｋ  Ｉｎｃ．）、ＢＭＳ−７３９５６２（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＡＫＩ（Ｓａｒｅｍ  Ｈｏｌｄｉｎｇｓ）、ＧＳＫ−１０７０９１６Ａ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、Ｓ−０８１／Ｓ−０９１（Ｓｅｎｔｉｎｅｌ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ）、ＭＫ−６１５（Ｊａｐｏｎ  Ａｐｒｉｃｏｔ）、ＰＦ−３８１４７３５（Ｐｆｉｚｅｒ）、ダヌセルチブ（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＥＮ−６４０４０２（Ａｍｇｅｎ）、ＴＴＰ−６０７（ＴｒａｎｓＴｅｃｈ  Ｐｈａｒｍａ）、ＶＸ−６８９（Ｖｅｒｔｅｘ）、ＶＥ−４６５（Ｖｅｒｔｅｘ）、ＳＵ−６６６８、ＳＧＩ−５２９（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ａｒｉｚｏｎａ）、ＫＷ−２４４９（Ｋｙｏｗａ−Ｈａｋｋｏ）、ＸＬ  ２２８（Ｅｘｅｌｉｘｉｓ）．ＡＢ−０３８（Ａｍｂｉｔ）、ＢＩ  ８１１２８３（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、ＣＨＲ３５２０（Ｃｈｒｏｍａ）及びＲＯ４６１２９１０（Ｒｏｃｈｅ）のいずれか一つから選択される。
【００９９】
一つの態様において、オーロラキナーゼ阻害剤は、国際特許出願公開ＷＯ２００３／０５５４９１、ＷＯ２００４／０５８７８１、ＷＯ２００４／０５８７８１及びＷＯ２００６／１２９０６４中に記載されているオーロラキナーゼの阻害剤のいずれか一つから選択される。ＷＯ２００４／０５８７８１は、特に、本明細書中でＡＺＤ１１５２と呼ばれる化合物リン酸二水素２−｛［３−（｛４−［（５−｛２−［（３−フルオロフェニル）アミノ］−２−オキソエチル｝−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ］キナゾリン−７−イル｝オキシ）プロピル］（エチル）アミノ｝エチルを開示している。ＡＺＤ１１５２は、本明細書中でＡＺＤ１１５２ＨＱＰＡと呼ばれる、次の式２−｛３−［（７−｛３−［エチル（２−ヒドロキシエチル）アミノ］プロポキシ｝キナゾリン−４−イル）アミノ］−１Ｈ−ピラゾール−５−イル｝−Ｎ−（３−フルオロフェニル）アセトアミドを保有する活性分子に急速に、そして完全に転換される（ヒト血漿中で）プロドラッグである。ＡＺＤ１１５２ＨＱＰＡは、オーロラＡ、Ｂ−ＩＮＣＥＮＰ及びＣ−ＩＮＣＥＮＰに対する強力な活性を持つオーロラキナーゼのＡＴＰ競合的及び可逆的阻害剤である（Ｋｉはそれぞれ１３６９±４１９．２ｎＭ、０．３５９±０．３８６ｎＭ及び１７．０３±１２．２ｎＭ）。ＡＺＤ１１５２は、一団のヒト直腸結腸（ＳＷ６２０、ＨＣＴ１１６、Ｃｏｌｏ２０５）及び肺（Ａ５４９、Ｃａｌｕ−６）腫瘍の異種移植片における腫瘍の増殖を、統計的有意性を伴って阻害することが見出されている。ＡＺＤ１１５２のマレイン酸共結晶は、国際特許出願公開ＷＯ２００７／１３２２２７中に記載されている。
【０１００】
一つの態様において、オーロラキナーゼ阻害剤は、ＡＺＤ１１５２、又は医薬的に受容可能なその塩である。
一つの態様において、オーロラキナーゼ阻害剤は、リン酸二水素２−｛［３−（｛４−［（５−｛２−［（３−フルオロフェニル）アミノ］−２−オキソエチル｝−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ］キナゾリン−７−イル｝オキシ）プロピル］（エチル）アミノ｝エチル、又は医薬的に受容可能なその塩である。
【０１０１】
一つの態様において、オーロラキナーゼ阻害剤は、ＡＺＤ１１５２のマレイン酸共結晶である。ＡＺＤ１１５２のマレイン酸共結晶は、ＷＯ２００７／１３２２２７中に記載されている方法によって合成することができる。
【０１０２】
一つの態様において、オーロラキナーゼ阻害剤は、リン酸二水素２−｛［３−（｛４−［（５−｛２−［（３−フルオロフェニル）アミノ］−２−オキソエチル｝−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ］キナゾリン−７−イル｝オキシ）プロピル］（エチル）アミノ｝エチルのマレイン酸共結晶である。リン酸二水素２−｛［３−（｛４−［（５−｛２−［（３−フルオロフェニル）アミノ］−２−オキソエチル｝−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ］キナゾリン−７−イル｝オキシ）プロピル］（エチル）アミノ｝エチルのマレイン酸共結晶は、ＷＯ２００７／１３２２２７中に記載されている方法によって合成することができる。
【０１０３】
もう一つの態様において、オーロラキナーゼ阻害剤は、遺伝子の発現を、例えばｍＲＮＡの安定性又は翻訳に干渉することによって阻害することができる。一つの態様において、オーロラキナーゼ阻害剤は、例えばｓｉＲＮＡ又はｓｈＲＮＡから選択される。
【０１０４】
阻害剤の対応する塩、例えば医薬的に受容可能な塩を調製、精製、及び／又は取り扱うことは、好都合又は好ましいものであることができる。ＭＥＫ阻害剤又はオーロラキナーゼ阻害剤の適した医薬的に受容可能な塩は、例えば十分に塩基性である酸付加塩、例えば無機又は有機酸との酸付加塩であることができる。このような酸付加塩は、制約されるものではないが、フマル酸塩、メタンスルホン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、クエン酸及びマレイン酸塩、並びにリン酸及び硫酸と共に形成された塩を含む。ＭＥＫ阻害剤又はオーロラキナーゼ阻害剤の適した医薬的に受容可能な塩は、例えば十分に酸性である塩、例えばアルカリ又はアルカリ土類金属塩であることができる。このようなアルカリ又はアルカリ土類金属塩は、制約されるものではないが、アルカリ金属、例えばナトリウム又はカリウム塩、アルカリ土類金属塩、例えばカルシウム又はマグネシウム塩、或いは有機アミン塩、例えばトリエチルアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、モルホリン、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ−エチルピペリジン、ジベンジルアミン又はリシンのようなアミノ酸の塩を含む。
【０１０５】
一つの態様において、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩は、オーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩に結合していることができる。
本発明の治療用組合せ、組合せ製品又はキットは、患者における抗癌効果の産生により相乗的又は有益な効果を産生し、従ってこれは、患者の癌の治療において有用であることが期待される。有益な効果は、例えば反応の程度、反応速度、疾病進行の時間又は生存期間によって測定される効果が、組合せ治療の構成要素のその慣用的服用量における一方又は他方の服用によって達成可能なものに対して、治療用に優れている場合に達成される。有益な効果は、組合せ効果が、ＭＥＫ阻害剤又はオーロラキナーゼ阻害剤で達成可能な個々の効果の合計に対して、治療用に優れている場合に相乗的であることができる。更に、有益な効果は、効果が、単独のＭＥＫ阻害剤又はオーロラキナーゼ阻害剤の生物学的活性のアンタゴニストに対して反応しない（又は反応が不良である）患者の群において達成された場合に得られる。更に、効果は、構成要素の一つがその慣用的な服用量で投与され、そして他の構成要素（類）が減少した服用量で投与され、そして例えば、反応の程度、反応速度、疾病進行の時間又は生存期間によって測定される治療効果が、組合せ治療の構成要素の慣用的な量を投与することによって達成可能なものと同等である場合に有益な効果が得られたと定義される。特に、有益な効果は、ＭＥＫ阻害剤又はオーロラキナーゼ阻害剤の慣用的な服用量が、反応の程度、反応速度、疾病進行の時間及び生存データの一つ又はそれより多くに損失をもたらさずに、特に、反応の期間に損失をもたらさずに減少することができ、しかしそれぞれの構成要素の慣用的な服用量が使用された場合に起こるものより少ない及び／又はより困難ではない副作用を伴う場合に達成されたと見做される。
【０１０６】
抗癌効果、従って患者の癌の治療において有用であるものは、制約されるものではないが、抗腫瘍効果、反応速度、疾病進行の時間及び生存率を含む。本発明の治療の方法の抗腫瘍効果は、制約されるものではないが、腫瘍増殖の阻害、腫瘍増殖の遅延、腫瘍の退行、腫瘍の縮小、治療の休止における腫瘍の再増殖に対する増加した時間、疾病進行の緩徐化を含む。本発明の治療用組合せ、組合せ製品又はキットが、癌のための治療を必要とする患者に投与された場合、前記治療用組合せ、組合せ製品又はキットが、例えば、抗癌効果の程度、反応速度、疾病進行の時間及び生存率の一つ又はそれより多くによって測定されるような効果を産生するものであることが期待される。抗癌効果は、予防的治療、並びに既往疾病の治療を含む。
【０１０７】
阻害剤を、医薬的に受容可能なアジュバント、希釈剤又は担体と共に含んでなる本発明の医薬的に受容可能な組成物は、経口使用（例えば錠剤、カプセル、水性又は油性懸濁液、乳液或いは分散性粉末又は顆粒として）、局所使用（例えばクリーム、軟膏、ゲル、或いは水性又は油性溶液若しくは懸濁液として；例えば経皮貼布内の使用）、非経口投与（例えば静脈内、皮下、筋肉内又は血管内投与のための滅菌水性又は油性溶液若しくは懸濁液として）のために、又は直腸投与のための座薬として適した形態であることができる。他の態様において、組成物は、内視鏡的、気管内、病巣内、経皮的、静脈内、皮下、腹腔内又は腫瘍組織内的に放出することができる。一般的に、本明細書中に記載される組成物は、当技術において公知である慣用的な賦形剤又は担体を使用して、慣用的な方法で調製することができる。
【０１０８】
本発明の医薬的に受容可能な組成物は、当技術において公知である慣用的な医薬的に受容可能なアジュバント、希釈剤又は担体を使用して慣用的な方法によって得ることができる。
【０１０９】
錠剤の製剤のための適した医薬的に受容可能な希釈剤又は担体は、例えば、ラクトース、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム又は炭酸カルシウムのような不活性希釈剤、コーンスターチ又はアルギン酸のような顆粒化及び崩壊剤；ゼラチン又はデンプンのような結合剤；ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸又はタルクのような潤滑剤；ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル又はプロピルのような保存剤、及びアスコルビン酸のような抗酸化剤を含む。錠剤の製剤は、被覆されていないか、或いはその崩壊及び胃腸管内の活性成分のその後の吸収を改変するために、又はその安定性及び／又は外観の改良するためにのいずれかのために、いずれの場合も慣用的な被覆剤及び当技術において公知の方法を使用して被覆されている。
【０１１０】
経口使用のための医薬的に受容可能な組成物は、活性成分が不活性の固体希釈剤、例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウム又はカオリンと混合されている硬質ゼラチンカプセル、或いは活性成分が水或いはピーナッツ油、液体パラフィン又はオリーブ油のような油と混合された軟質ゼラチンカプセルの形態であることができる。
【０１１１】
任意の患者のためのＭＥＫ阻害剤及び／又はオーロラキナーゼ阻害剤の投与量は、疾病の重篤度及び種類、体重、性別、食事、投与の時間及び経路、他の医薬、並びに他の関連する臨床的因子を含む薬物の作用を改変することが知られた各種の因子を考慮して担当医によって決定されるものである。治療用に有効な投与量は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ又はｉｎ  ｖｉｖｏのいずれかの方法によって決定することができる。
【０１１２】
ＭＥＫ阻害剤及びオーロラキナーゼ阻害剤の逐次投与は、両方の阻害剤を単一使用のために意図した投与量で投与することを可能にすることにおいて、いずれか又は両方の阻害剤の投与量が恐らくは減少されなければならないものである同時投与と比較して、好都合であることができる。
【０１１３】
使用される本明細書中に記載されたとおりのＭＥＫ阻害剤又はオーロラキナーゼ阻害剤の治療用に有効な量は、例えば治療の対象、投与の経路、及び患者の症状に依存するものである。従って、治療専門家にとって、最適な治療効果を得るために必要なように、投与量を漸増し、そして投与の経路を改変することが好ましい。ＭＥＫ阻害剤の典型的な日量は、上述の因子によるが、約１ｍｇないし２５０ｍｇ又はそれより多くまでの範囲であることができる。ＡＺＤ１１５２、又は医薬的に受容可能なその塩の典型的な日量は、約１ｍｇないし４５０ｍｇ又はそれより多くまでの範囲であることができ、そして投与の計画及び上述の他の因子に依存するものである。典型的には、臨床医は、治療用組合せ、組合せ製品又はキットを、所望の効果を達成する服用量に達するまで投与するものである。別個の医薬的に受容可能な組成物が投与される場合、ＭＥＫ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及びオーロラキナーゼ阻害剤、又は医薬的に受容可能なその塩を投与することができるシーケンス（即ち逐次投与が行われるか否か、そして如何なる時点で行われるか）は、医師又は当業者によって決定されることができる。
【０１１４】
本明細書中に記載された投与量及び計画は、特別な疾病状態及び患者の全体的な症状によって変更することができる。例えば、毒性を減少するために、組合せ治療の構成要素の上述の服用量を減少することが必要又は好ましいことであり得る。服用量及び計画は、更に、本発明の治療用組合せ、組合せ製品又は治療のキットに加えて、一つ又はそれより多い化学療法剤が使用される場合、変更することができる。計画は、いずれもの特定の患者を治療している開業医によって、その専門的技術及び知識を使用して決定することができる。
【０１１５】
本発明の治療用組合せ、組合せ製品又はキットは、制約されるものではないが、白血病のような非固形腫瘍、例えば急性骨髄性白血病、多発性骨髄腫、血液系腫瘍又はリンパ腫、そして更に黒色腫、非小細胞肺癌、神経膠腫、肝細胞（肝臓）癌腫、神経膠芽腫、甲状腺、胆管細胞癌、胆管、骨、胃、脳／ＣＮＳ、頭頚部、肝臓、胃、前立腺、乳房、直腸、精巣、卵巣、子宮頚部、皮膚、子宮頚部、肺、筋肉、神経細胞、食道、膀胱、肺、子宮、外陰部、子宮内膜、腎臓、腸、直腸結腸、膵臓、胸膜／腹膜、唾液腺の癌腫のような固形腫瘍並びにその転移、類表皮腫瘍及び血液系腫瘍を含む癌を持つ患者の治療のために特別に有用であることが期待される。
【０１１６】
本明細書中で先に記載したとおりの治療用組合せ、組合せ製品又はキットは、肺癌、黒色腫、結腸直腸癌、乳癌、卵巣癌、甲状腺癌、膵臓癌、前立腺癌、肝臓癌、及びこれらの転移を持つ患者の治療のために、そして更に急性骨髄性白血病、又は多発性骨髄腫のような白血病を持つ患者の治療のために特に有用であることが期待される。本発明の治療用組合せ、組合せ製品又はキットは、更にＲａｓ−Ｒａｆ−ＭＥＫ−ＥＲＫ経路に伴うか、或いはＲａｓ−Ｒａｆ−ＭＥＫ−ＥＲＫ経路の生物学的活性に単独で、又は部分的に依存する腫瘍を持つ患者の治療のために特別に有用であることが期待される。
【０１１７】
本発明の治療用組合せ、組合せ製品又はキットは、更にＭＥＫに伴うか、或いはＭＥＫの生物学的活性に単独で、又は部分的に依存する腫瘍を持つ患者の治療のために特別に有用であることが期待される。
【０１１８】
本発明の治療用組合せ、組合せ製品又はキットは、更にオーロラキナーゼに伴うか、或いはオーロラキナーゼの生物学的活性に単独で、又は部分的に依存する腫瘍を持つ患者の治療のために特別に有用であることが期待される。
【０１１９】
本発明の治療用組合せ、組合せ製品又はキットは、単独の療法として使用することができるか、或いはそれに加えて外科手術又は放射線療法、或いは更なる化学療法剤又は治療抗体を含むことができる。
【０１２０】
このような化学療法剤は、抗腫瘍剤の以下の分類：
（ｉ）アルキル化剤（例えばシス−プラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、シクロホスファミド、ナイトロジェンマスタード、メルファラン、クロラムブシル、ブスルファン、テモゾロミド（ｔｅｍｏｚｏｌａｍｉｄｅ）及びニトロソ尿素）；代謝拮抗剤（例えばゲムシタビン並びに５−フルオロウラシル及びテガフールのようなフルオロピリミジン、ラルチトレキセド、メトトレキセートのような葉酸代謝拮抗剤、シトシンアラビノシド並びにヒドロキシ尿素）；抗腫瘍性抗生物質（例えばアドリアマイシン、ブレオマイシン、ドキソルビシン、ダウノマイシン、エピルビシン、イダルビシン、マイトマイシン−Ｃ、ダクチノマイシン及びミトラマイシンのようなアントラサイクリン）；有糸分裂阻害剤（例えばビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシン及びビノレルビンのようなビンカアルカロイド並びにタキソール及びタキソテールのようなタキソイド並びにポロキナーゼ阻害剤）；及びトポイソメラーゼ阻害剤（例えばエトポシド及びテニポシドのようなエピポドフィロトキシン、アムサクリン、トポテカン並びにカンプトテシン）；のような、腫瘍内科学において使用されているような他の抗増殖性／抗悪性腫瘍性薬物及びこれらの組合せ；
（ｉｉ）抗エストロゲン剤（例えばタモキシフェン、フルベストラント、トレミフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン及びイドキシフェン（ｉｏｄｏｘｙｆｅｎｅ））、抗アンドロゲン剤（例えばビカルタミド、フルタミド、ニルタミド及び酢酸シプロテロン）、ＬＨＲＨアンタゴニスト又はＬＨＲＨアゴニスト（例えばゴセレリン、リュープロレリン及びブセレリン）、プロゲストーゲン（例えば酢酸メゲストロール）、アロマターゼ阻害剤（例えばアナストロゾール、レトロゾール、ボロゾール（ｖｏｒａｚｏｌｅ）及びエキセメスタン）並びにフィナステリドのような５α−レダクターゼの阻害剤のような、細胞分裂阻害剤；
（ｉｉｉ）抗浸潤剤（例えば４−（６−クロロ−２，３−メチレンジオキシアニリノ）−７−［２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エトキシ］−５−テトラヒドロピラン−４−イルオキシキナゾリン（ＡＺＤ０５３０；国際特許出願ＷＯ０１／９４３４１）、Ｎ−（２−クロロ−６−メチルフェニル）−２−｛６−［４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−イル］−２−メチルピリミジン−４−イルアミノ｝チアゾール−５−カルボキシアミド（ダサチニブ、ＢＭＳ−３５４８２５；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２００４，４７，６６５８−６６６１）及びボスチニブ（ＳＫＩ−６０６）のようなｃ−Ｓｒｃキナーゼファミリーの阻害剤、並びにマリマスタットのようなメタロプロテイナーゼ阻害剤、ウロキナーゼ型プラスミノーゲン活性化因子受容体機能の阻害剤又はヘパラナーゼの抗体）；
（ｉｖ）増殖因子機能の阻害剤：例えばこのような阻害剤は、増殖因子抗体及び増殖因子受容体抗体（例えば抗ｅｒｂＢ２抗体トラスツズマブ［ハーセプチンＴＭ］、抗ＥＧＦＲ抗体パニツムマブ、抗ｅｒｂＢ１抗体セツキシマブ［エルビタックス、Ｃ２２５］及びＳｔｅｒｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｒｉｔｉｃａｌ  ｒｅｖｉｅｗｓ  ｉｎ  ｏｎｃｏｌｏｇｙ／ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｙ，２００５，Ｖｏｌ．５４，ｐｐ１１−２９によって開示されたいずれもの増殖因子又は増殖因子受容体抗体）を含む；このような阻害剤は、更にチロシンキナーゼ阻害剤、例えば上皮増殖因子ファミリーの阻害剤（例えばＮ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−７−メトキシ−６−（３−モルホリノプロポキシ）キナゾリン−４−アミン（ゲフィチニブ、ＺＤ１８３９）、Ｎ−（３−エチニルフェニル）−６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）キナゾリン−４−アミン（エルロチニブ、ＯＳＩ−７７４）及び６−アクリルアミド−Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−７−（３−モルホリノプロポキシ）−キナゾリン−４−アミン（ＣＩ１０３３）のようなＥＧＦＲファミリーのチロシンキナーゼ阻害剤、ラパチニブのようなｅｒｂＢ２チロシンキナーゼ阻害剤）；肝細胞増殖因子ファミリーの阻害剤；インスリン増殖因子ファミリーの阻害剤；イマチニブ及び／又はニロチニブ（ＡＭＮ１０７）のような血小板由来増殖因子ファミリーの阻害剤；セリン／トレオニンキナーゼの阻害剤（例えばファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤のようなＲａｓ／Ｒａｆシグナル伝達阻害剤、例えばソラフェニブ（ＢＡＹ４３−９００６）、ティピファーニブ（Ｒ１１５７７７）及びロナファーニブ（ＳＣＨ６６３３６））、ＭＥＫ及び／又はＡＫＴキナーゼによる細胞のシグナル伝達の阻害剤、ｃ−ｋｉｔ阻害剤、ａｂｌキナーゼ阻害剤、ＰＩ３キナーゼ阻害剤、Ｐｌｔ３キナーゼ阻害剤、ＣＳＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤、ＩＧＦ受容体（インスリン様増殖因子）キナーゼ阻害剤；オーロラキナーゼ阻害剤（例えばＡＺＤ１１５２、ＰＨ７３９３５８、ＶＸ−６８０、ＭＬＮ８０５４、Ｒ７６３、ＭＰ２３５、ＭＰ５２９、ＶＸ−５２８及びＡＸ３９４５９）並びにＣＤＫ２及び／又はＣＤＫ４阻害剤のようなサイクリン依存性キナーゼ阻害剤を含む；
（ｖ）血管内皮増殖因子の影響を阻害するもの［例えば抗血管内皮増殖因子抗体ベバシズマブ（アバスチンＴＭ）、及び例えばバンデタニブ（ＺＤ６４７４）、バタラニブ（ＰＴＫ７８７）、スニチニブ（ＳＵ１１２４８）、アキシチニブ（ＡＧ−０１３７３６）、パゾパニブ（ＧＷ７８６０３４）及び４−（４−フルオロ−２−メチルインドール−５−イルオキシ）−６−メトキシ−７−（３−ピロリジン−１−イルプロポキシ）キナゾリン（ＡＺＤ２１７１；ＷＯ００／４７２１２内の実施例２４０）のようなＶＥＧＦ受容体型チロシンキナーゼ阻害剤、国際特許出願ＷＯ９７／２２５９６、ＷＯ９７／３００３５、ＷＯ９７／３２８５６及びＷＯ９８／１３３５４中に開示されているもののような化合物、並びに他の機構によって作用する化合物（例えばリノマイド、インテグリンαｖβ３機能の阻害剤及びアンジオスタチン）］のような、抗血管新生剤；
（ｖｉ）コンブレタスタチンＡ４並びに国際特許出願ＷＯ９９／０２１６６、ＷＯ００／４０５２９、ＷＯ００／４１６６９、ＷＯ０１／９２２２４、ＷＯ０２／０４４３４及びＷＯ０２／０８２１３中で開示されている化合物のような、血管傷害剤；
（ｖｉｉ）エンドセリン受容体アンタゴニスト、例えばジボテンタン（ＺＤ４０５４）又はアトラセンタン；
（ｖｉｉｉ）アンチセンス療法、例えば抗ｒａｓアンチセンスＩＳＩＳ  ２５０３のような上記に収載した標的を指向するもの；
（ｉｘ）例えば、異常ｐ５３或いは異常ＢＲＣＡ１又はＢＲＣＡ２のような異常遺伝子を置換える方法、シトシンデアミナーゼ、チミジンキナーゼ又は細菌性ニトロレダクターゼ酵素使用するもののようなＧＤＥＰＴ（遺伝子指向性酵素プロドラッグ療法）法、及び多剤耐性遺伝子療法のような化学療法又は放射線量法に対する患者の許容性を増加するための方法を含む、遺伝子療法的方法；並びに
（ｘ）例えば、インターロイキン２、インターロイキン４又は顆粒球マクロファージコロニー刺激因子のようなサイトカインによる形質移入のような患者の腫瘍細胞の免疫原性を増加するためのｅｘ−ｖｉｖｏ及びｉｎ−ｖｉｖｏの方法、Ｔ細胞アネルギーを減少するための方法、サイトカインで形質移入された樹状細胞のような形質移入された免疫細胞を使用する方法、サイトカインで形質移入された腫瘍細胞系を使用する方法、及び抗イディオタイプ抗体を使用する方法を含む、免疫療法的方法；
の一つ又はそれより多くを含むことができる。
【０１２１】
このような併用治療は、治療の個々の構成要素の同時、逐次又は別個投与によって達成することができる。投与が逐次又は別個である場合、更なる化学療法剤又は治療用抗体の投与の遅延は、組合せの有益な効果を喪失するようなものであってはならない。
【０１２２】
以下の用語は、他に示さない限り、以下の意味を有すると理解されるべきである：
阻害剤は、ポリペプチド、核酸、炭水化物、脂質、低分子量化合物、オリゴヌクレオチド、オリゴペプチド、ｓｉＲＮＡ、アンチセンス、組換えタンパク質、抗体、ぺプチボディ（ｐｅｐｔｉｂｏｄｙ）、或いはこれらの接合体又は融合タンパク質であることができる。ｓｉＲＮＡの概説については、Ｍｉｌｈａｖｅｔ  Ｏ，Ｇａｒｙ  ＤＳ，Ｍａｔｔｓｏｎ  ＭＰ．（Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｒｅｖ．２００３  Ｄｅｃ；５５（４）：６２９−４８を参照されたい。アンチセンスの概説については、Ｏｐａｌｉｎｓｋａ  ＪＢ，Ｇｅｗｉｒｔｚ  ＡＭ．Ｓｃｉ  ＳＴＫＥ．２００３  Ｏｃｔ  ２８；２００３（２０６）：ｐｅ４７を参照されたい。
【０１２３】
低分子量化合物は、２０００ダルトン、１０００ダルトン、７００ダルトン又は５００ダルトンより少ない分子量を持つ化合物を指す。
患者は、ヒトのようないずれもの温血動物である。
【０１２４】
用語、治療は、治療的及び／又は予防的処置を含む。
オーロラキナーゼ阻害剤は、オーロラキナーゼ阻害活性を、そして特にオーロラＡ及び／又はオーロラＢキナーゼ阻害活性を保有する。
【０１２５】
ＭＥＫ阻害剤ＡＺＤ６２４４は、国際特許出願公開ＷＯ２００３／０７７９１４に記載されている方法によって、特に実施例１０に記載されている方法によって調製することができる。ＡＺＤ６２４４硫酸水素塩は、国際特許出願公開ＷＯ２００７／０７６２４５に記載されている方法によって調製することができる。
【０１２６】
ＭＥＫ阻害剤４−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）−１，５−ジメチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリダジン−３−カルボキシアミドは、以下の方法によって調製することができる：
工程Ａ：  ２−（２−メチルヒドラゾノ）マロン酸ジエチルの調製：ケトマロン酸ジエチル（９５ｇ、５４６ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（６００ｍＬ）中の溶液（熱電対、Ｎ２管路、凝縮器及び機械式撹拌器を備えた２Ｌの三口フラスコ）に、ＭｅＮＨＮＨ２（３２ｍＬ、６００ｍｍｏｌ）を室温で一度に加えた。反応混合物を６０℃（内部温度、加熱マントルによって加熱）に温め、そして６時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、そして一晩攪拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して、粗製の物質を固体の沈殿物と共に得て、これをシリカゲルのプラグ（３：２のヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、８１ｇ（７４％）の所望の生成物を得た。
【０１２７】
工程Ｂ：  ２−（２−メチル−２−プロピオニルヒドラゾノ）マロン酸ジエチルの調製：２−（２−メチルヒドラゾノ）マロン酸ジエチル（１００ｇ、４９４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１Ｌ）中の０℃の溶液に、ＬｉＨＭＤＳ（６４３ｍＬ、６４３ｍｍｏｌ）を滴下漏斗によって４５分かけて加えた。反応混合物を４５分間０℃で攪拌した。塩化プロピオニル（５１．６ｍＬ、５９３ｍｍｏｌ）を一度に加えた。得られた混合物を室温に温め、そして２０時間攪拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（８５ｍＬ）及び水（８５ｍＬ）でクエンチした。反応混合物を減圧下で濃縮し、そして更なる水（３００ｍＬ）を加えた。得られた混合物をＥｔＯＡｃ（３×２５０ｍＬ）で抽出した。混合した有機層を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２×２５０ｍＬ）で、続いてブライン（２５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮して、１１２ｇ（８８％）の粗製の生成物を得て、これを更なる精製無しに次の工程で直接使用した。
【０１２８】
工程Ｃ：  ４−ヒドロキシ−１，５−ジメチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリダジン−３−カルボン酸の調製：ＬｉＨＭＤＳ（３３１ｍＬ、３３１ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中の１Ｍ）のＴＨＦ（４３０ｍＬ）中の−７８℃の溶液に、２−（２−メチル−２−プロピオニルヒドラゾノ）マロン酸塩（２１．４０ｇ、８２．８６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）中の溶液を加えた。得られた混合物を−４０℃に１時間かけてゆっくりと温め、そして１．５時間−４０℃で攪拌した。反応混合物に、水（５００ｍＬ）を−４０℃で加えた。反応混合物を室温に温め、そして３時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、６ＮのＨＣｌで０℃でクエンチし、そしてｐＨ１ないし２に酸性化した。得られた混合物を１６時間室温で攪拌した。沈澱物を濾過して取出し、そしてＣＨ２Ｃｌ２で摩砕して、７．２１ｇ（４７％）の所望の生成物を得た。濾液をＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。混合した有機層を水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮して、粗製の物質を得て、これをＣＨ２Ｃｌ２で摩砕して、更なる３．５６ｇ（２３％）の所望の生成物を得た。水層を再びＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。混合した有機層を水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮して、粗製の物質を得て、これをＣＨ２Ｃｌ２で摩砕して、更なる１．３２ｇ（９％）の所望の生成物を得た。合計１２．０９ｇ（７９％）の所望の生成物を得た。
【０１２９】
工程Ｄ：  ４−クロロ−１，５−ジメチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリダジン−３−カルボン酸の調製：４−ヒドロキシ−１，５−ジメチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリダジン−３−カルボン酸（３５．４ｇ、１９２ｍｍｏｌ）、触媒量のＤＭＦ（３滴）、及びＰＯＣｌ３（１７８ｍＬ、１．９２ｍｏｌ）の混合物を、２日間９０℃で加熱し、そして次いでＰＯＣｌ３を減圧下で除去した。粗製の物質を氷でクエンチし、そして反応混合物を２時間室温で攪拌した。溶液から形成された沈澱物を濾過して取出し、そしてエーテルで洗浄した。収集した沈澱物をエーテルで摩砕して、１１．７ｇ（３０％）の所望の生成物を得た。濾液をＥｔＯＡｃ（２×）で抽出した。混合した有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮して、粗製の生成物を得て、これをエーテルで摩砕し、そして減圧下で乾燥して、更なる９．５６ｇ（２４％）の所望の生成物を得た。合計２１．２９ｇ（５５％）の所望の生成物を得た。
【０１３０】
工程Ｅ：  ４−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−１，５−ジメチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリダジン−３−カルボン酸の調製：４−ブロモ−２−フルオロアニリン（２２．６ｇ、１１６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１６５ｍＬ）中の−７８℃の溶液に、ＬｉＨＭＤＳ（１７４ｍＬ、１７４ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中の１Ｍ溶液）の溶液をゆっくりと加えた。得られた混合物を１時間−７８℃で攪拌した。この混合物に４−クロロ−１，５−ジメチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリダジン−３−カルボン酸（１１．０ｇ、５４．４ｍｍｏｌ）を固体として−７８℃で加えた。反応混合物を室温にゆっくりと温め、そして２１時間攪拌した。反応をクエンチし、そして１０％のＨＣｌ水溶液（２５０ｍＬ）で０℃で酸性化した。この混合物に水（１００ｍＬ）、ＥｔＯＡｃ（３５０ｍＬ）、及びブライン（５０ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温に温め、そして３０分間攪拌した。有機層を分離し、そして酸性の水層をＥｔＯＡｃ（２×３００ｍＬ）で抽出した。混合した有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮して、粗製の物質を得て、これをエーテル（５×）で摩砕し、濾過し、エーテルで洗浄し、そして減圧下で乾燥して、１４．５１ｇ（７５％）の所望の生成物を得た。
【０１３１】
工程Ｆ：  ４−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−１，５−ジメチル−６−オキソ−Ｎ−（２−（ビニルオキシ）エトキシ）−１，６−ジヒドロピリダジン−３−カルボキシアミドの調製：４−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−１，５−ジメチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリダジン−３−カルボン酸（１４．５１ｇ、４０．７４ｍｍｏｌ）及びＨＯＢｔ（１１．０１ｇ、８１．４８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１６５ｍＬ）中の懸濁液に、ＥＤＣＩ（１５．６２ｇ、８１．４８ｍｍｏｌ）を室温で加えた。得られた混合物を１．５時間撹拌した。Ｏ−（２−（ビニルオキシ）エチル）ヒドロキシルアミン（８．３６ｍＬ、８１．４８ｍｍｏｌ）及びＴＥＡ（１１．３６ｍＬ、８１．４８ｍｍｏｌ）を活性化されたエステルに室温で加えた。１．５時間攪拌した後、反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、そして飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液、ブライン、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２×）、及びブラインで洗浄した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮して、粗製の生成物を得て、これを更なる精製無しに直接使用した。
【０１３２】
工程Ｇ：  ４−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）−１，５−ジメチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリダジン−３−カルボキシアミドの調製：４−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−１，５−ジメチル−６−オキソ−Ｎ−（２−（ビニルオキシ）エトキシ）−１，６−ジヒドロピリダジン−３−カルボキシアミド（１７．９８ｇ、４０．７５ｍｍｏｌ）及び６ＮのＨＣｌ水溶液（１３．５８ｍＬ、８１．５０ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ／ＴＨＦ（５０ｍＬ／５０ｍＬ）中の混合物を、３時間室温で攪拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、そして水（５０ｍＬ）で希釈した。得られた混合物をＥｔＯＡｃ（２×）で抽出した。混合した有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮して、粗製の生成物を得て、これをシリカゲルのフラッシュカラムクロマトグラフィー（１００％ＣＨ２Ｃｌ２からＣＨ２Ｃｌ２中の２．５％ＭｅＯＨまで）によって精製して、９．４１ｇ（２工程で５６％）の所望の生成物を得た。ＭＳ  ＡＰＣＩ（−）ｍ／ｚ  ４１３，４１５（Ｍ−１，Ｂｒパターン）を検出；-１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ  ７．３８（ｄｄ，１Ｈ），７．２７（ｄ，１Ｈ），６．７９（ｔ，１Ｈ），３．９９（ｔ，２Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），３．７４（ｔ，２Ｈ），１．７７（ｓ，３Ｈ）。
【０１３３】
ＭＥＫ阻害剤２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）−１，５−ジメチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキシアミドは、以下の方法によって調製することができる
工程Ａ．  ２−クロロ−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリジン−３−カルボン酸の調製：２−クロロ−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリジン−３−カルボン酸を、ジクロロニコチン酸（３．００ｇ、１５．６ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ）から、米国特許第３，６８２，９３２号に記載されている方法によって調製して、１．３１ｇ（４８％）の所望の生成物を得た。
【０１３４】
工程Ｂ．  ２−クロロ−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリジン−３−カルボン酸メチルエステルの調製：２−クロロ−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリジン−３−カルボン酸（０．６４４ｇ、３．７１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）中の溶液に、水素化リチウム（９５％、０．０７８ｇ、９．２８ｍｍｏｌ）を加え、そして反応混合物を４０分間Ｎ２下で攪拌した。次いでヨウ化メチル（０．５０８ｍＬ、１．１６ｇ、８．１６ｍｍｏｌ）を加え、そして反応混合物を更に４５分間攪拌した。反応混合物を２ＭのＨＣｌでｐＨが６−７になるまでクエンチした。反応混合物をＥｔＯＡｃ及び飽和ＮａＣｌで希釈し、そして層を分離した。水層をＥｔＯＡｃ（１×）で逆抽出した。混合した有機層を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、そして減圧下で濃縮して、粗製の黄色の固体を得た。ＨＰＬＣ分析は４：１の比の二つの生成物を示し、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン／ＥｔＯＡＣ、１５：１から１０：１まで）によって分離して、０．４６６ｇ（６２％）の純粋な所望の生成物を、白色の結晶質の固体として得た。
【０１３５】
工程Ｃ．  ５−ブロモ−２−クロロ−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボン酸メチルの調製：２−クロロ−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボン酸メチル（０．１００ｇ、０．４９６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）中の溶液に、Ｎ−ブロモスクシンイミド（０．１７７ｇ、０．９９２ｍｍｏｌ）を加え、そして反応混合物を４時間Ｎ２下の室温で攪拌した。反応混合物を飽和重炭酸ナトリウムでクエンチし、そして次いでＥｔＯＡｃ及びＨ２Ｏで希釈し、そして層を分離した。水層をＥｔＯＡｃ（２×）で逆抽出した。混合した有機層を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、そして減圧下で濃縮して、黄色の固体を定量的収率で得た。
【０１３６】
工程Ｄ．  ２−クロロ−１，５−ジメチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボン酸メチルの調製：５−ブロモ−２−クロロ−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボン酸メチル（０．４００ｇ、１．４３ｍｍｏｌ）及び１，１’−ビス（ジュフェニルホスフィノ）フェロセンジクロロパラジウム（ＩＩ）（０．０５８７ｇ、０．０７１３ｍｍｏｌ）のジオキサン（８ｍＬ）中のＮ２下の０℃の懸濁液に、ジメチル亜鉛（０．７１３ｍＬ、１．４３ｍｍｏｌ、トルエン中の２Ｍ溶液）を加えた。反応混合物を直ちに１００℃で３０分間加熱した。反応混合物を０℃に冷却し、そしてＭｅＯＨ（０．８００ｍＬ）でクエンチした。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、そして１ＭのＨＣｌで洗浄した。水層をＥｔＯＡｃ（１×）で逆抽出した。混合した有機層を飽和ＮａＣｌで洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、そして暗黄色のゴム状物まで減圧下で濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン／ＥｔＯＡｃ、１５：１）による精製により、０．１６４ｇ（５３％）の純粋な所望の生成物を、黄色の結晶質の固体として得た。
【０１３７】
工程Ｅ：−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−１，５−ジメチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボン酸メチルの調製：２−フルオロ−４−ヨードベンゼンアミン（０．０５８ｇ、０．３１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２ｍＬ）中のＮ２下の−７８℃の溶液に、リチウムビス（トリメチルシリル）アミド（０．５６ｍＬ、０．５６ｍｍｏｌ、ヘキサン中の１Ｍ溶液）を滴下により加えた。反応混合物を１時間−７８℃で攪拌した。次いで２−クロロ−１，５−ジメチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボン酸メチル（０．０６０ｇ、０．２８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１ｍＬ）中の溶液として滴下により加え、そして反応混合物を２５分間−７８℃で攪拌した。反応混合物をＨ２Ｏの添加によってクエンチし、そしてｐＨを０．１ＭのＨＣｌで調節し、そして次いでＥｔＯＡｃ及び飽和ＮａＣｌで希釈し、そして層を分離した。水層をＥｔＯＡｃ（１×）で逆抽出した。混合したＥｔＯＡｃ層を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、そして減圧下で濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン／ＥｔＯＡｃ、２０：１）による精製により、０．０８６ｇ（８４％）の純粋な所望の生成物を、白色の結晶質の固体として得た。ＭＳ  ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ  ４１７（Ｍ＋１）を検出；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ９．５６（ｓ，１Ｈ），７．７９（ｓ，１Ｈ），７．４９（ｄ，１Ｈ），７．３６（ｄ，１Ｈ），６．４３（ｔ，１Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ），３．３０（ｓ，３Ｈ），２．１５（ｓ，３Ｈ）。
【０１３８】
工程Ｆ．  ２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−１，５−ジメチル−６−オキソ−Ｎ−（２−（ビニルオキシ）エトキシ）−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキシアミドの調製：２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−１，５−ジメチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボン酸メチル（０．５００ｇ、１．２０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６０ｍＬ）中の溶液に、Ｏ−（２−ビニルオキシ−エチル）−ヒドロキシルアミン（０．１４９ｇ、１．４４ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を０℃に冷却し、そしてリチウムビス（トリメチルシリル）アミド（４．８１ｍｌ、４．８１ｍｍｏｌ）（ヘキサン中の１Ｍ溶液）を滴下により加えた。反応混合物を室温に温めた。１０分間攪拌した後、反応混合物を１ＭのＨＣｌの添加によってクエンチし、そしてＥｔＯＡｃ及び飽和ＮａＣｌ間に分配した。層を分離し、そして有機層を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、そして減圧下で濃縮して、粗製の黄色の固体を得て、これを精製無しに次の工程で使用した。
【０１３９】
工程Ｇ：  ２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）−１，５−ジメチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキシアミドの調製：粗製の２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−１，５−ジメチル−６−オキソ−Ｎ−（２−（ビニルオキシ）エトキシ）−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキシアミド（０．５８５ｇ、１．２０ｍｍｏｌ）のエタノール（１０ｍＬ）中の溶液に、２ＭのＨＣｌの水溶液（３ｍＬ）を加えた。反応混合物を４５分間室温で攪拌した。反応混合物のｐＨを１ＭのＮａＯＨでｐＨ７に調節した。反応混合物をＥｔＯＡｃ及びＨ２Ｏで希釈した。有機層を分離し、そして飽和ＮａＣｌで洗浄した。混合した有機層をＥｔＯＡｃ（１×）で逆抽出した。混合した有機層を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、そして減圧下で濃縮した。シリカゲルのフラッシュカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン／ＭｅＯＨ、１５：１）による精製により、２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）−１，５−ジメチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキシアミド（０．４２１ｇ；二工程で７６％）を、淡黄色の固体として得た。ＭＳ  ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ  ４６２（Ｍ＋１）パターンを検出；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ９．７７（ｓ，１Ｈ），８．５０（ｓ，１Ｈ），７．４７（ｄ，１Ｈ），７．３６（ｄ，１Ｈ），６．４３（ｔ，１Ｈ），４．０４（ｂｒｓ，２Ｈ），３．８５（ｂｒｓ，１Ｈ），３．７４（ｂｒｓ，２Ｈ），３．２９（ｓ，３Ｈ），２．１４（ｓ，３Ｈ）．ＭＳ  ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ  ４６２（Ｍ＋１）パターンを検出。
【図面の簡単な説明】
【０１４０】
【図１】図１は、メスのヌードマウスにおけるＣａｌｕ−６腫瘍の増殖に対するＡＺＤ１１５２及びＡＺＤ６２４４の組合せシーケンスの効果；マウスの腫瘍接種後の日数において測定された平均腫瘍体積（ｃｍ３）を示す。
【図２】図２は、ＡＺＤ１１５２とそれに続くＡＺＤ６２４４の投与シーケンスの投与後のＧ２−Ｍ相（Ｇ２Ｍ）、倍数性（ＰＰ）及び細胞死（Ｓｕｂ  Ｇ１）中の細胞の比率に対する効果を評価するための、腫瘍の流動細胞計測分析である。
【図３】図３は、ＡＺＤ６２４４とそれに続くＡＺＤ１１５２の投与シーケンスの投与後のＧ２−Ｍ相（Ｇ２Ｍ）、倍数性（ＰＰ）及び細胞死（Ｓｕｂ  Ｇ１）中の細胞の比率に対する効果を評価するための、腫瘍の流動細胞計測分析である。
【発明を実施するための形態】
【０１４１】
本発明は、ここに以下の非制約的実施例によって例証されるものであり、これらは、例証目的のみのために提供され、そして本明細書中の教示を制約すると解釈されるべきではなく、ここにおいて：
図１は、メスのヌードマウスにおけるＣａｌｕ−６腫瘍の増殖に対するＡＺＤ１１５２及びＡＺＤ６２４４の組合せシーケンスの効果；マウスの腫瘍接種後の日数において測定された平均腫瘍体積（ｃｍ３）を示す。黒の菱型は対照を表し；黒の四角は単独のＡＺＤ１１５２を表し；白の三角は単独のＡＺＤ６２４４を表し；白の丸はＡＺＤ１１５２とそれに続くＡＺＤ６２４４の投与を表し；バツ印は、ＡＺＤ６２４４とそれに続くＡＺＤ１１５２の投与を表す。
【０１４２】
図２は、ＡＺＤ１１５２とそれに続くＡＺＤ６２４４の投与シーケンスの投与後のＧ２−Ｍ相（Ｇ２Ｍ）、倍数性（ＰＰ）及び細胞死（Ｓｕｂ  Ｇ１）中の細胞の比率に対する効果を評価するための、腫瘍の流動細胞計測分析である。データの棒は、対照グループと比較したパラメータの増加の倍数を表す。それぞれの３本の棒のグループにおいて、左の棒はＧ２Ｍを表し、中央の棒はＰＰを表し、そして右の棒はＳｕｂ  Ｇ１を表す。Ａ＝対照；Ｂ＝ＡＺＤ１１５２；Ｃ＝ＡＺＤ１１５２とそれに続く２４時間の回復期；Ｄ＝ＡＺＤ１１５２とそれに続く２４時間の回復期、それに続くＡＺＤ６２４４；Ｅ＝ＡＺＤ６２４４である。
【０１４３】
図３は、ＡＺＤ６２４４とそれに続くＡＺＤ１１５２の投与シーケンスの投与後のＧ２−Ｍ相（Ｇ２Ｍ）、倍数性（ＰＰ）及び細胞死（Ｓｕｂ  Ｇ１）中の細胞の比率に対する効果を評価するための、腫瘍の流動細胞計測分析である。データの棒は、対照グループと比較したパラメータの増加の倍数を表す。それぞれの３本の棒のグループにおいて、左の棒はＧ２Ｍを表し、中央の棒はＰＰを表し、そして右の棒はＳｕｂ  Ｇ１を表す。Ａ＝対照；Ｂ＝ＡＺＤ６２４４；Ｃ＝ＡＺＤ６２４４とそれに続く２４時間の回復期；Ｄ＝ＡＺＤ６２４４とそれに続く２４時間の回復期と、それに続くＡＺＤ１１５２；Ｅ＝ＡＺＤ１１５２である。
【０１４４】
実施例１：  Ｃａｌｕ−６ヒト肺癌異種移植モデルにおけるＡＺＤ１１５２及びＡＺＤ６２４４のｉｎ  ｖｉｖｏの組合せ研究
Ｃａｌｕ−６ヒト肺異種移植モデルにおけるＡＺＤ１１５２及びＡＺＤ６２４４の組合せ治療のｉｎ  ｖｉｖｏの効力を証明するために、メスの胸腺欠損マウス（Ｓｗｉｓｓ  ｎｕ／ｎｕ遺伝子型、≧生後６週間）で実験を行った。Ｃａｌｕ−６ヒト肺腫瘍異種移植を、１×１０６細胞（５０％のＭａｔｒｉｇｅｌ（登録商標）を含有する１００μｌの体積）を背側の側腹部に皮下的に注射することによってマウスに確立した。腫瘍の体積を、両側のノギス測定を使用し、そして長さを腫瘍の最長の直径、そして幅を対応する垂直として取った、式（長さ×幅）×√（長さ×幅）×（π／６）を使用して計算して、少なくとも週二回評価した。平均腫瘍体積が概略０．２ｃｍ３に達した時点で、マウスを四つの治療グループ（１０匹／グループ）にランダム化した。ランダム化の後、マウスを、以下に記載する治療計画によって、ＡＺＤ１１５２又はＡＺＤ６２４４対する薬物ベヒクル、ＡＺＤ１１５２、ＡＺＤ６２４４、或いはＡＺＤ１１５２プラスＡＺＤ６２４４の組合せで治療した：
計画Ａ：
連続的な皮下注入として投与される、ＡＺＤ１１５２に対する薬物ベヒクル（ｐＨ９の０．３ＭのＴｒｉｓ緩衝液）又はＡＺＤ１１５２（１５０ｍｇ／ｋｇ／日）のいずれかを、２日間マウスに投与した。ＡＺＤ１１５２投与の終了後、２４時間の期間を経過させ、その後、ＡＺＤ６２４４に対する薬物ベヒクル（Ｈ．Ｐ．Ｍ．Ｃ．（０．５重量／容量％のＭｅｔｈｏｃｅｌ／０．１重量／容量％のＴｗｅｅｎ８０））又はＡＺＤ６２４４（２５ｍｇ／ｋｇを一日二回投与）のいずれかを経口的に１４日間投与した。
【０１４５】
計画Ｂ：
ＡＺＤ６２４４に対する薬物ベヒクル（Ｈ．Ｐ．Ｍ．Ｃ．（０．５重量／容量％のＭｅｔｈｏｃｅｌ／０．１重量／容量％のＴｗｅｅｎ８０））又はＡＺＤ６２４４（２５ｍｇ／ｋｇを経口的に一日二回投与）のいずれかを１４日間マウスに投与した。ＡＺＤ６２４４投与の終了後、２４時間の期間を経過させ、その後、連続的な皮下注入として投与される、ＡＺＤ１１５２に対する薬物ベヒクル（ｐＨ９の０．３ＭのＴｒｉｓ緩衝液）又はＡＺＤ１１５２（１５０ｍｇ／ｋｇ／日）のいずれかを２日間投与した。
【０１４６】
腫瘍増殖の阻害を、研究の３５日目における対照及び治療グループ間の腫瘍体積の差の比較によって評価した。組合せ治療シーケンスの効果を、ＡＺＤ１１５２及びＡＺＤ６２４４を投与されたマウスのグループの腫瘍の増殖に対する効果を、単一の薬物治療のみを投与したマウスのグループにおける腫瘍の増殖と比較することによって評価した。サブグループのマウスを、ＡＺＤ１１５２、ＡＺＤ６２４４又は組合せ投与の終了においてそれぞれの治療グループから犠牲にして、腫瘍に対する薬力学的効果を流動細胞計測法を使用して評価した。
【０１４７】
ＡＺＤ１１５２及びＡＺＤ６２４４は、単独療法として投与された場合、ベヒクルを投与されたグループと比較して有意なＣａｌｕ−６腫瘍の増殖阻害を産生した（それぞれ９４．７％、ｐ＜０．０００５及び５７．８％、ｐ＜０．００５）。組合せで投与された場合、二つの療法は、ベヒクルを投与されたグループと比較して、腫瘍増殖の阻害を産生した（ＡＺＤ１１５２＋ＡＺＤ６２４４シーケンスにおいて１０５．１％、ｐ＜０．０００５及びＡＺＤ６２４４＋ＡＺＤ１１５２シーケンスにおいて７４．４％；ｐ＜０．０００５）（図１）。更に、ＡＺＤ１１５２＋ＡＺＤ６２４４シーケンスは、ＡＺＤ１１５２単独療法と比較して増加した抗腫瘍効力を示し（１９５．５７％；ｐ＜０．００５）、そしてＡＺＤ６２４４＋ＡＺＤ１１５２シーケンスは、ＡＺＤ６２４４単独療法と比較して増加した抗腫瘍効力を示した（３９．２４％；ｐ＜０．０５）。最初にＡＺＤ１１５２と、それに続くＡＺＤ６２４４は、最初にＡＺＤ６２４４と、それに続くＡＺＤ１１５２のシーケンスより大きい腫瘍増殖の阻害を産生した（１１４．８％；ｐ＜０．０００５）。
【０１４８】
要約すると、ＡＺＤ６２４４の前にＡＺＤ１１５２を投与すると、ＡＺＤ１１５２の前にＺＡＤ６２４４を投与することと比較して、より大きい抗腫瘍反応を示した。
流動細胞計測分析は、ＡＺＤ１１５２が最初に投与された組合せグループにおいて、ＡＺＤ６２４４が最初に投与された組合せグループと比較して、Ｓｕｂ  Ｇ１相（アポトーシスのレベルの表示）におけるより大きい細胞の比率を示した（対照グループと比較して、それぞれ５．１３及び１．９５倍の増加があった）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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