(57)【要約】  本発明は、少なくとも１つの新規ヒト抗アミロイド抗体に関し、これには、少なくとも１つの抗アミロイド抗体をコードする単離核酸、アミロイド、ベクター、宿主細胞、トランスジェニック動物又は植物、並びにそれらの製造及び使用の方法（治療用組成物、方法及びデバイスが挙げられる）が含まれる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号４８Ａ〜Ｉ及び配列番号４９Ａ〜Ｍの少なくとも１つの、少なくとも１本の重鎖及び少なくとも１本の軽鎖を含む、少なくとも１つの可変領域を含む、少なくとも１つの単離ヒトアミロイド抗体。
【請求項２】
（ｉ）配列番号４２〜４４の少なくとも１つの、少なくとも２つの重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）アミノ酸配列、又は（ｉｉ）配列番号４５〜４７の少なくとも１つの、少なくとも２つの軽鎖ＣＤＲアミノ酸配列のいずれかを含み、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、若しくはＣＨ４から選択される少なくとも１つの重鎖又は軽鎖定常領域断片を更に含む、少なくとも１つのヒト単離ヒトアミロイド抗体。
【請求項３】
配列番号４８Ａ及び配列番号Ｉ〜４９Ａ〜Ｍの少なくとも１つのアミノ酸配列を有する、少なくとも１つの重鎖又は軽鎖ＣＤＲを含む、少なくとも１つの単離ヒトアミロイド抗体。
【請求項４】
配列番号４２〜４７の少なくとも１つのアミノ酸配列を有する、少なくとも１つの重鎖又は軽鎖ＣＤＲを含み、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、若しくはＣＨ４から選択される、少なくとも１つのヒト重鎖又は軽鎖定常領域断片を更に含む抗体と同じアミロイドポリペプチドの領域に結合する、少なくとも１つの単離ヒトアミロイド抗体。
【請求項５】
配列番号４８Ｉ及び４９Ｍの少なくとも１本の重鎖及び少なくとも１本の軽鎖を含む少なくとも１つの可変領域を含み、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、若しくはＣＨ４から選択される少なくとも１つのヒト重鎖又は軽鎖定常領域断片を更に含む、少なくとも１つの単離ヒトアミロイド抗体。
【請求項６】
前記抗体が、少なくとも１０-9Ｍ、少なくとも１０-10Ｍ、少なくとも１０-11Ｍ、又は少なくとも１０-12Ｍから選択される少なくとも１つの親和性でアミロイドに結合する、請求項１〜５のいずれか一項に記載のアミロイド抗体。
【請求項７】
前記抗体が、少なくとも１つのアミロイドポリペプチドの少なくとも１種の活性を実質的に調節する、請求項１〜５のいずれか一項に記載のアミロイド抗体。
【請求項８】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の少なくとも１つの単離ヒトアミロイド抗体をコードする、単離核酸。
【請求項９】
請求項８に記載の単離核酸を含む、単離核酸ベクター。
【請求項１０】
請求項８に記載の単離核酸を含む、原核又は真核宿主細胞。
【請求項１１】
前記核酸が、配列番号５１〜５２から選択される、請求項８に記載の核酸。
【請求項１２】
前記アミロイド抗体が検出可能又は回収可能な量発現するように、インビトロ、インビボ、又はインサイチュ条件下で、請求項８に記載の核酸を翻訳することを含む、少なくとも１つのアミロイド抗体を生成する方法。
【請求項１３】
少なくとも１つのヒトＣＤＲを有する請求項１〜５のいずれか一項に記載の少なくとも１つの単離ヒトアミロイド抗体であって、少なくとも１〜３を含む少なくとも１つのエピトープを、配列番号５０のアミノ酸配列全体に特異的に結合させる抗体と、少なくとも１つの製薬上許容できる担体又は希釈剤と、を含む組成物。
【請求項１４】
検出可能な標識又はリポーター、ＴＮＦ拮抗薬、抗感染薬、循環器（ＣＶ）系薬、中枢神経系（ＣＮＳ）薬、自律神経系（ＡＮＳ）薬、呼吸器薬、胃腸（ＧＩ）管薬、ホルモン薬、体液又は電解質平衡薬、血液作用薬、抗腫瘍薬、免疫調整薬、眼、耳若しくは鼻用薬、局所薬、栄養薬、サイトカイン、又はサイトカイン拮抗薬の少なくとも１つから選択される、少なくとも１つの化合物又はポリペプチドを更に含む、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の少なくとも１つのアミロイド抗体に特異的に結合する、抗イディオタイプ抗体又は断片。
【請求項１６】
細胞、組織、器官、又は動物の、アミロイド関連症状を診断又は治療する方法であって、
（ａ）前記細胞、組織、器官、又は動物に、有効量の請求項１〜５のいずれか一項に記載の少なくとも１つの抗体を含む組成物を接触させる又は投与することを含む、方法。
【請求項１７】
前記有効量が、前記細胞、組織、器官又は動物１キログラム当たり０．００１〜５０ｍｇである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記接触又は前記投与が、非経口、皮下、筋肉内、静脈内、関節内、気管支内、腹内、関節包内、軟骨内、洞内、腔内、小脳内、脳室内、結腸内、頚管内、胃内、肝臓内、心筋内、骨内、骨盤内、心膜内、腹腔内、胸膜内、前立腺内、肺臓内、直腸内、腎臓内、網膜内、脊髄内、滑液嚢内、胸郭内、子宮内、膀胱内、病巣内、ボーラス、膣内、直腸、口腔内、舌下、鼻腔内、又は経皮から選択される少なくとも１つの方式による、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
検出可能な標識又はリポーター、抗感染薬、循環器（ＣＶ）系薬、中枢神経系（ＣＮＳ）薬、自律神経系（ＡＮＳ）薬、呼吸器薬、胃腸（ＧＩ）管薬、ホルモン薬、体液又は電解質平衡薬、血液作用薬、抗腫瘍薬、免疫調節薬、眼、耳、若しくは鼻用薬、局所薬、栄養薬、サイトカイン、又はサイトカイン拮抗薬の少なくとも１つから選択される、少なくとも１つの化合物又はポリペプチドの有効量を含む少なくとも１つの組成物を、前記（ａ）接触又は投与前に、同時に、又は後に投与することを更に含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項２０】
非経口、皮下、筋肉内、静脈内、関節内、気管支内、腹内、関節包内、軟骨内、洞内、腔内、小脳内、脳室内、結腸内、頸管内、胃内、肝臓内、心筋内、骨内、骨盤内、心膜内、腹腔内、胸膜内、前立腺内、肺臓内、直腸内、腎臓内、網膜内、脊髄内、滑液嚢内、胸郭内、子宮内、膀胱内、病巣内、ボーラス、膣内、直腸、口腔内、舌下、鼻腔内又は経皮から選択される少なくとも１つの方式により、前記少なくとも１つのアミロイド抗体を接触させる又は投与するのに好適な、請求項１〜５のいずれか一項に記載の少なくとも１つのアミロイド抗体を含む、医療デバイス。
【請求項２１】
溶液又は凍結乾燥形態の、請求項１〜５のいずれか一項に記載の少なくとも１つのアミロイド抗体を含む、包装材及び容器を含む、ヒトの製薬又は診断用途向けの製品。
【請求項２２】
前記容器が、非経口、皮下、筋肉内、静脈内、関節内、気管支内、腹内、関節包内、軟骨内、洞内、腔内、小脳内、脳室内、結腸内、頚管内、胃内、肝臓内、心筋内、骨内、骨盤内、心膜内、腹腔内、胸膜内、前立腺内、肺臓内、直腸内、腎臓内、網膜内、脊髄内、滑液嚢内、胸郭内、子宮内、膀胱内、病巣内、ボーラス、膣内、直腸、口腔内、舌下、鼻腔内、又は経皮的送達デバイス又は系の構成要素である、請求項２１に記載の製品。
【請求項２３】
前記抗体を回収可能な量発現することができる宿主細胞又はトランスジェニック動物、又はトランスジェニック植物若しくは植物細胞を提供することを含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の少なくとも１つの単離ヒトアミロイド抗体を生成する方法。
【請求項２４】
請求項２３に記載の方法により生成される、少なくとも１つのアミロイド抗体。
【請求項２５】
本明細書に記載されたいずれかの発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本出願は、２００７年１０月１５日出願の米国仮特許出願第６０／９７９，９５４号に対する優先権を主張し、全文を参照により組み込む。
【０００２】
（発明の分野）
本発明は、少なくとも１つのベータ−アミロイド（アミロイド）タンパク質又はその断片に特異的な抗体（特異的部分又は変異体を含む）、並びに抗イディオタイプ抗体、及びこのような抗アミロイド抗体をコードする核酸、相補的核酸、ベクター、宿主細胞、並びにこれらの製造及び使用方法（治療用製剤、投与及びデバイスを含む）に関する。
【背景技術】
【０００３】
（関連技術）
アルツハイマー病（ＡＤ）は、徐々に激しい精神機能低下を導き、最終的には死をもたらす、記憶、認知、論理的思考、判断力、及び情動安定性の進行性喪失を臨床的特徴とする、退行性脳障害である。ＡＤは高齢者の進行性精神機能不全（認知症）の非常に一般的な原因であり、米国では４番目に多い死亡の医学的原因を表すと考えられている。ＡＤは世界中の人種及び民族で観察され、現在及び未来の主たる公衆衛生の問題を提示する。この疾患には現在、米国だけで約２〜３百万の個体が罹患していると推定される。ＡＤは現時点では不治である。ＡＤを効果的に防止する、又はその症状及び過程を逆行させる治療法は現在知られていない。
【０００４】
ＡＤ個体の脳は、老人性（又はアミロイド）斑、アミロイド血管症（血管のアミロイド沈着）及び神経原線維もつれ（neurofibrillary tangle）と名付けられた特徴的な病変を呈する。これらの病変の大多数、特にアミロイド斑及び神経原線維もつれは、一般にＡＤ患者の記憶及び認知機能に重要なヒトの脳のいくつかの領域で見られる。より限定された解剖学的分布では、より少ない数のこれらの病変が、臨床的にはＡＤではない大部分の高齢者の脳でも見られる。アミロイド斑及びアミロイド血管症は、２１トリソミー（ダウン症候群）、びまん性レヴィー小体病、及びオランダ型のアミロイドーシス（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）を伴う遺伝性脳出血の個体の脳でも特徴的である。
【０００５】
アミロイド斑の主成分は、β−アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の切断により生成される種々のアミロイド−ベータ（Ａβ）ペプチドである。過去には斑及びもつれが原因であるのか、又は単にアルツハイマー病の結果であるのかについて重要な科学的論争が行われたが、現在の知見はアミロイド斑が原因となる前駆体又は因子であることを示している。具体的には、Ａβペプチドの生成はアミロイド前駆体タンパク質（正常にプロセッシングされた時、Ａβペプチドを生成しないタンパク質）をコードする遺伝子の突然変異から生じ得ることが発見された。家族性、若年性アルツハイマー病を引き起こすアミロイド前駆体タンパク質遺伝子中の突然変異の同定は、アミロイド代謝がこの疾患の基にある病理プロセスの中心的事象である最も強力な証拠である。現在、ＡＰＰタンパク質の正常な（非病原性）プロセッシングは、タンパク質内のＡβペプチド領域のアミノ酸１６と１７との間を切断する「アルファ−セクレターゼ」による切断を介して起こると考えられている。更に病原性プロセッシングの一部は、前駆体タンパク質内のＡβペプチド領域のアミノ末端を切断する「ベータ−セクレターゼ」を介して起こると考えられている。ベータアミロイドタンパク質はまた、潜在的に、他の神経学的及びいくつかの心臓血管疾患に関連するとも考えられる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
したがって、これらの問題の１つ以上を克服する抗アミロイド抗体又は断片、並びに既知の抗体又はその断片に対する改善を提供することが必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、当該技術分野において既知のものと組み合せた形で、本明細書に記載され、可能になった通り、単離ヒト、若しくはキメラ、ヒト化及び／又はＣＤＲ移植抗アミロイド抗体、免疫グロブリン、断片、切断産物、並びにそれらの他の特異的部分及び変異体、並びに抗アミロイド抗体組成物、コード核酸又は相補的核酸、ベクター、宿主細胞、組成物、製剤、デバイス、トランスジェニック動物、トランスジェニック植物、並びにその製造及び使用方法を提供する。
【０００８】
本発明はまた、本明細書に記載のように、少なくとも１つの単離抗アミロイド抗体を提供する。本発明による抗体としては、免疫グロブリン分子の少なくとも一部分を含む任意のタンパク質又はペプチド含有分子が挙げられ、この免疫グロブリン分子としては、例えば少なくとも１つのリガンド結合部（ＬＢＰ）が挙げられるが、これに限定されず、このＬＢＰとしては、例えば本発明の抗体に組み込むことができる、重鎖若しくは軽鎖の相補性決定領域（ＣＤＲ）（例えば、配列番号４２〜４７の少なくとも１つを含む）若しくはそのリガンド結合部、重鎖若しくは軽鎖可変領域（例えば、配列番号１〜３０の少なくとも１つの１０〜１２５の隣接アミノ酸、又は表１に記載のようなＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、ＦＲ４の少なくとも１つ、若しくはこれらの断片の少なくとも１つを含み、更に所望により、２００４年６月１７日出願のＰＣＴ出願第ＵＳ０４／１９７８３号の図１〜４１に提供されているような、少なくとも１つの置換、挿入又は欠失を含む）、重鎖若しくは軽鎖定常領域（例えば、配列番号３１〜４１の少なくとも１つの１０〜３８４の隣接アミノ酸、又は表１に記載のようなＣＨ１、ヒンジ１、ヒンジ２、ヒンジ３、ヒンジ４、ＣＨ２、ＣＨ３の少なくとも１つ、若しくはこれらの断片の少なくとも１つを含み、更に所望により、２００４年６月１７日出願のＰＣＴ出願第ＵＳ０４／１９７８３号の図１〜４１に提供されているような、少なくとも１つの置換、挿入又は欠失を含む）、フレームワーク領域、又はこれらの任意の部分が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の抗体は、ヒト、マウス、ウサギ、ラット、げっ歯類、霊長類、又はこれらの任意の組み合わせ等であるが、これらに限定されない任意の哺乳類を含んでもよく、又はこれらに由来してもよい。
【０００９】
本発明は、１つの態様において、少なくとも１つの特異的配列、ドメイン、部分又はその変異体を含む特異的抗アミロイド抗体をコードするポリヌクレオチドを含む、それに対して相補的である、又はそれにハイブリダイズする単離核酸分子を提供する。本発明は更に、前記抗アミロイド抗体核酸分子を含む組み換えベクター、このような核酸及び／又は組み換えベクターを含有する宿主細胞、並びにこのような抗体核酸、ベクター及び／又は宿主細胞の製造及び／又は使用方法も提供する。
【００１０】
本発明はまた、少なくとも１種のアミロイド結合配列、及び少なくとも配列番号１〜４１の少なくとも１つの１０〜３８４の隣接アミノ酸、又は表１に記載のようなＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、ＦＲ４、ＣＨ１、ヒンジ１、ヒンジ２、ヒンジ３、ヒンジ４、ＣＨ２、ＣＨ３の少なくとも１つ、若しくはこれらの断片の少なくとも１つを含み、更に所望により、２００４年６月１７日出願のＰＣＴ出願第ＵＳ０４／１９７８３号の図１〜４１に提供されているような、又は当該技術分野において既知であるような、少なくとも１つの置換、挿入又は欠失を含む、少なくとも１つの抗アミロイド抗体又は特異的部若しくは変異体も提供する。好ましくは、このような抗体は、Ｏ−結合グリコシル化部位（Ｖａｌ−Ｘａａ−Ｓｅｒが挙げられるが、これに限定されない）をＮ−結合グリコシル化部位（Ａｓｎ−Ｘａａ−Ｓｅｒ又はＧｌｎ−Ｘａａ−Ｓｅｒが挙げられるが、これらに限定されない）に変えることにより、発現、精製、及び／又は安定性が改善される。本発明は、このような抗体に対するこのような改善（例えば、アラニン）を提供する、又は好ましい可能性があるとき、例えば、配列一覧に提示された以下の残基（Ｖａｌ−Ｘａａ−Ｓｅｒ（Ｏ−グリコシル化部位）がＮ−グリコシル化部位Ａｓｎ−Ｘａａ−Ｓｅｒに変わる）、若しくは本明細書に開示されるような、若しくは当該技術分野において既知であるような任意の他の好適な位置で行われるとき、配列Ｖａｌ−Ｘａａ−Ｓｅｒ等であるが、これらに限定されないｏ−グリコシル化部位を、Ａｓｎ−Ｘａａ−Ｓｅｒ若しくはＧｌｎ−Ｘａａ−Ｓｅｒ等であるが、これらに限定されないＮ−グリコシル化部位に置換することができる。
【００１１】
本発明の少なくとも１つの抗体は、少なくとも１つのアミロイドタンパク質、サブユニット、断片、部分又はこれらの任意の組み合せに特異的な、少なくとも１つの特異的エピトープに結合する。この少なくとも１つのエピトープは、前記タンパク質の少なくとも一部分を含む少なくとも１つの抗体結合領域を含むことができ、このエピトープは好ましくは、前記タンパク質の少なくとも１つの機能的、細胞外、可溶性、親水性、外部又は細胞質ドメイン又はその任意の部分等であるが、これらに限定されない、その少なくとも一部分の少なくとも１〜５個のアミノ酸を含む。
【００１２】
少なくとも１つの抗体は、所望により、少なくとも１つの相補性決定領域（ＣＤＲ）（例えば、重鎖又は軽鎖可変領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、又はＣＤＲ３）の少なくとも１つの特異的部分を含んでもよく、所望により少なくとも１つの定常若しくは可変フレームワーク領域又はこれらの任意の一部を更に含む。少なくとも１つの抗体のアミノ酸配列は、所望により、本明細書に記載のような又は当該技術分野において既知のような、少なくとも１つの特定の置換、挿入又は欠失を更に含み得る。
【００１３】
本発明はまた、本明細書に記載のような少なくとも１つの単離抗アミロイド抗体を提供し、この抗体は、既知のアミロイドタンパク質アッセイ等であるが、これらに限定されないアッセイである、少なくとも１種の活性を有する。このように抗アミロイド抗体は、既知の方法に従って、アミロイドタンパク質に対する少なくとも１種の生物学的活性等であるが、これらに限定されない、対応する活性によってスクリーニングすることができる。
【００１４】
本発明は更に、本発明の少なくとも１つのアミロイド抗体に対する少なくとも１つのアミロイド抗イディオタイプ抗体を提供する。抗イディオタイプ抗体は、本発明の抗体の中に取り込むことのできる、重鎖若しくは軽鎖の相補性決定領域（ＣＤＲ）又はそのリガンド結合部、重鎖若しくは軽鎖可変領域、重鎖若しくは軽鎖定常領域、フレームワーク領域、又はその任意の部分等であるが、これらに限定されない少なくとも１つのリガンド結合部（ＬＢＰ）等であるが、これらに限定されない、免疫グロブリン分子の少なくとも一部分を含む、任意のタンパク質又はペプチド含有分子を含む。本発明の抗体は、ヒト、マウス、ウサギ、ラット、げっ歯類、霊長類等であるが、これらに限定されない任意の哺乳類を含んでもよく、又はこれらに由来してもよい。
【００１５】
本発明は、１つの態様において、少なくとも１つの特異的配列、ドメイン、部分又はその変異体を含む、少なくとも１つのアミロイド抗イディオタイプ抗体をコードするポリヌクレオチドを含む、それに対して相補的である、又はそれにハイブリダイズする単離核酸分子を提供する。本発明は、核酸分子をコードする前記アミロイド抗イディオタイプ抗体を含む組み換えベクター、このような核酸及び／又は組み換えベクターを含有する宿主細胞、並びにこのような抗イディオタイプ抗体核酸、ベクター及び／又は宿主細胞の製造及び／又は使用方法を更に提供する。
【００１６】
本発明はまた、少なくとも１つの抗アミロイド抗体が、検出可能及び／又は回収可能な量発現する条件下で、本明細書に記載のような宿主細胞を培養することを含む、宿主細胞中で少なくとも１つの抗アミロイド抗体又はアミロイド抗イディオタイプ抗体を発現させるための少なくとも１つの方法も提供する。
【００１７】
本発明はまた、（ａ）本明細書に記載のような核酸及び／又は抗体をコードする単離抗アミロイド抗体と；（ｂ）好適な担体又は希釈剤と、を含む少なくとも１つの組成物も提供する。担体又は希釈剤は所望により製薬上許容できるものであってよく、既知の担体又は希釈剤に準じる。組成物は所望により、少なくとも１つの更なる化合物、タンパク質又は組成物を更に含むことができる。
【００１８】
本発明は、当該技術分野で既知のような及び／若しくは本明細書に記載のような関連症状の前、後若しくはその間に、並びに／又は、細胞、組織、器官、動物若しくは患者における少なくとも１つのアミロイド関連症状を調節又は治療するために治療的に有効な量を投与するための、少なくとも１つの抗アミロイド抗体方法又は組成物を更に提供する。
【００１９】
本発明はまた、本発明による治療的又は予防的に有効な量の少なくとも１つの抗アミロイド抗体を送達する、少なくとも１つの組成物、デバイス及び／又は方法も提供する。
【００２０】
本発明は、当該技術分野で既知のような及び／若しくは本明細書に記載のような関連症状の前、後若しくはその間に、並びに／又は、細胞、組織、器官、動物若しくは患者における少なくとも１つのアミロイド関連症状を診断するための、少なくとも１つの抗アミロイド抗体方法又は組成物を更に提供する。
【００２１】
本発明はまた、本発明による少なくとも１つの抗アミロイド抗体を診断するための少なくとも１つの送達用組成物、デバイス及び／又は方法も提供する。
【００２２】
１つの態様では、本発明は、配列番号４８Ａ〜Ｉ及び／又は４９Ａ〜Ｍの少なくとも１つを含む少なくとも１つの可変領域を含む、少なくとも１つの単離哺乳類抗アミロイド抗体を提供する。
【００２３】
別の態様では、本発明は（ｉ）配列番号４２〜４４の重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）アミノ酸配列の全て；又は（ｉｉ）配列番号４５〜４７の軽鎖ＣＤＲアミノ酸配列の全て、のいずれかを含む、少なくとも１つの単離哺乳類抗アミロイド抗体を提供する。
【００２４】
別の態様では、本発明は、配列番号４２〜４７の少なくとも１つのアミノ酸配列を有する重鎖又は軽鎖ＣＤＲを少なくとも１つ含む、少なくとも１つの単離哺乳類抗アミロイド抗体を提供する。
【００２５】
１つの態様では、本発明は、配列番号５９又は６０を含む少なくとも１つの可変領域を含む、少なくとも１つの単離哺乳類抗アミロイド抗体を提供する。
【００２６】
別の態様では、本発明は（ｉ）配列番号５３〜５５の重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）アミノ酸配列の全て；又は（ｉｉ）配列番号５６〜５８の軽鎖ＣＤＲアミノ酸配列の全て、のいずれかを含む、少なくとも１つの単離哺乳類抗アミロイド抗体を提供する。
【００２７】
別の態様では、本発明は、配列番号５３〜５８の少なくとも１つのアミノ酸配列を有する重鎖又は軽鎖ＣＤＲを少なくとも１つ含む、少なくとも１つの単離哺乳類抗アミロイド抗体を提供する。
【００２８】
１つの態様では、本発明は、配列番号５０のアミノ酸２〜７、３〜８、３３〜４２、又は３４〜４０から選択される少なくとも１つのエピトープに特異的に結合する、少なくとも１つのヒトＣＤＲを含む、少なくとも１つの単離哺乳類抗アミロイド抗体を提供する。
【００２９】
別の態様では、本発明は、少なくとも１〜３を含む少なくとも１つのエピトープを、配列番号５０のアミノ酸配列全体に特異的に結合させる、少なくとも１つのヒトＣＤＲを含む、少なくとも１つの単離哺乳類抗アミロイド抗体を提供する。
【００３０】
少なくとも１つの抗体は所望により、（ｉ）少なくとも１０-9Ｍ、少なくとも１０-10Ｍ、少なくとも１０-11Ｍ、又は少なくとも１０-12Ｍから選択される少なくとも１つの親和性でアミロイドに結合すること、及び／又は、（ｉｉ）少なくとも１つのアミロイドタンパク質の少なくとも１つの活性を実質的に中和すること、から選択される少なくとも１つの特徴を更に含んでもよい。また、少なくとも１つの単離哺乳類抗アミロイド抗体をコードする単離核酸；単離核酸を含む単離核酸ベクター、及び／又は単離核酸を含む原核若しくは真核生物宿主細胞を提供する。宿主細胞は、所望により、ＣＯＳ−１、ＣＯＳ−７、ＨＥＫ２９３、ＢＨＫ２１、ＣＨＯ、ＢＳＣ−１、Ｈｅｐ  Ｇ２、６５３、ＳＰ２／０、２９３、ＨｅＬａ、骨髄腫若しくはリンパ腫細胞、又は任意の誘導体、それらの不死化若しくは形質転換細胞から選択される、少なくとも１つのものであり得る。また、アミロイド抗体が検出可能又は回収可能な量で発現するように、インビトロ、インビボ又はインサイチュ条件下で抗体をコードする核酸を翻訳することを含む、少なくとも１つの抗アミロイド抗体の生成方法を提供する。
【００３１】
また、少なくとも１つの単離哺乳類抗アミロイド抗体と、少なくとも１つの製薬上許容できる担体又は希釈剤とを含む組成物を提供する。組成物は、所望により、検出可能な標識又はレポーター、抗感染薬、循環器（ＣＶ）系薬、中枢神経系（ＣＮＳ）薬、自律神経系（ＡＮＳ）薬、呼吸器薬、胃腸（ＧＩ）管薬、ホルモン薬、体液又は電解質平衡薬、血液作用薬、抗腫瘍薬、免疫調節薬、眼、耳、若しくは鼻用薬、局所薬、栄養薬等、ＴＮＦ拮抗薬、抗リウマチ剤、筋弛緩剤、睡眠薬、非ステロイド抗炎症薬（ＮＴＨＥ）、鎮痛剤、麻酔薬、鎮静剤、局所麻酔薬、神経筋遮断薬、抗菌剤、乾癬治療薬、コルチコステロイド、アナボリックステロイド、エリスロポエチン、免疫化剤、免疫グロブリン、免疫抑制剤、成長ホルモン、ホルモン補充薬、放射性医薬品、抗うつ薬、抗精神病薬、興奮剤、ぜんそく治療薬、ベータ作動薬、吸入ステロイド、エピネフリン若しくは類似体、サイトカイン、又はサイトカイン拮抗薬の少なくとも１つから選択される少なくとも１つの化合物又はタンパク質を有効量更に含んでもよい。
【００３２】
本発明は、本発明の少なくとも１つの単離哺乳類抗アミロイド抗体に特異的に結合する抗イディオタイプ抗体又は断片を更に提供する。
【００３３】
また、細胞、組織、器官、又は動物の、アミロイド関連症状を診断又は治療する方法であって、
（ａ）有効量の本発明の少なくとも１つの単離哺乳類抗アミロイド抗体を含む組成物を、細胞、組織、器官、又は動物と接触させる又はそれらに投与することを含む方法も提供する。方法は、所望により、１〜２４時間、１〜７日間、１〜５２週間、１〜２４ヶ月、１〜３０年（又はこの中の任意の範囲若しくは値）あたり、０．００１〜５０ｍｇ／キログラム（細胞、組織、器官又は動物）の有効量を用いることを更に含んでもよい。方法は、所望により、非経口、皮下、筋肉内、静脈内、関節内、気管支内、腹内、関節包内、軟骨内、洞内、腔内、小脳内、脳室内、結腸内、頚管内、胃内、肝臓内、心筋内、骨内、骨盤内、心膜内、腹腔内、胸膜内、前立腺内、肺臓内、直腸内、腎臓内、網膜内、脊髄内、滑液嚢内、胸郭内、子宮内、膀胱内、病巣内、ボーラス、膣内、直腸、口腔内、舌下、鼻腔内、又は経皮から選択される少なくとも１つの方式による接触又は投与を用いることを更に含んでもよい。方法は、所望により、（ａ）抗感染薬、循環器（ＣＶ）系薬、中枢神経系（ＣＮＳ）薬、自律神経系（ＡＮＳ）薬、呼吸器薬、胃腸（ＧＩ）管薬、ホルモン薬、体液又は電解質平衡薬、血液作用薬、抗腫瘍薬、免疫調節薬、眼、耳若しくは鼻用薬、局所薬、栄養薬等の少なくとも１つから選択される、少なくとも１つの化合物又はタンパク質を有効量含む少なくとも１つの組成物を、接触又は投与する前、同時、又は後に投与することを更に含んでもよい。方法は、所望により、（ａ）検出可能な標識又はレポーター、ＴＮＦ拮抗薬、抗リウマチ剤、筋弛緩剤、睡眠薬、非ステロイド抗炎症薬（ＮＴＨＥ）、鎮痛剤、麻酔薬、鎮静剤、局所麻酔薬、神経筋遮断薬、抗菌剤、乾癬治療薬、コルチコステロイド、アナボリックステロイド、エリスロポエチン、免疫化剤、免疫グロブリン、免疫抑制剤、成長ホルモン、ホルモン補充薬、放射性医薬品、抗うつ薬、抗精神病薬、興奮剤、ぜんそく治療薬、ベータ作動薬、吸入ステロイド、エピネフリン若しくは類似体、サイトカイン、又はサイトカイン拮抗薬の少なくとも１つから選択される、有効量の少なくとも１つの化合物又はタンパク質を含む少なくとも１つの組成物を、接触又は投与する前、同時、又は後に投与することを更に含んでもよい。
【００３４】
また、本発明の少なくとも１つの単離哺乳類抗アミロイド抗体を含む医療デバイスであって、非経口、皮下、筋肉内、静脈内、関節内、気管支内、腹内、関節包内、軟骨内、洞内、腔内、小脳内、脳室内、結腸内、頸管内、胃内、肝臓内、心筋内、骨内、骨盤内、心膜内、腹腔内、胸膜内、前立腺内、肺臓内、直腸内、腎臓内、網膜内、脊髄内、滑液嚢内、胸郭内、子宮内、膀胱内、病巣内、ボーラス、膣内、直腸、口腔内、舌下、鼻腔内、又は経皮から選択された少なくとも１つの方式により、少なくとも１つの抗アミロイド抗体を接触させる又は投与するのに好適な医療デバイスを提供する。
【００３５】
また、本発明の少なくとも１つの単離哺乳類抗アミロイド抗体の溶液、又は凍結乾燥形態を含む包装材料及び容器を含む、ヒトの製薬学的又は診断用途の製品を提供する。製品は、所望により、非経口、皮下、筋肉内、静脈内、関節内、気管支内、腹内、関節包内、軟骨内、洞内、腔内、小脳内、脳室内、結腸内、頚管内、胃内、肝臓内、心筋内、骨内、骨盤内、心膜内、腹腔内、胸膜内、前立腺内、肺臓内、直腸内、腎臓内、網膜内、脊髄内、滑液嚢内、胸郭内、子宮内、膀胱内、病巣内、ボーラス、膣内、直腸、口腔内、舌下、鼻腔内、若しくは経皮的送達デバイス又はシステムの構成要素として容器を有することを含んでもよい。
【００３６】
同様に提供されているのは、抗体を回収可能な量発現することができる宿主細胞又はトランスジェニック動物又はトランスジェニック植物若しくは植物細胞を提供することを含む、本発明の少なくとも１つの単離哺乳類抗アミロイド抗体の生成方法である。本発明においては、上述の方法により生成された少なくとも１つの抗アミロイド抗体を更に提供する。
【００３７】
本発明は、本明細書に記載する任意の発明を更に提供する。
【発明を実施するための形態】
【００３８】
本発明は、単離、組み換え及び／又は合成の、抗アミロイドヒト抗体、霊長類抗体、げっ歯類抗体、哺乳類抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、若しくはＣＤＲ移植抗体、及びそれらに対するアミロイド抗イディオタイプ抗体、並びに少なくとも１つの抗アミロイド抗体又は抗イディオタイプ抗体をコードする少なくとも１つのポリヌクレオチドを含む組成物及びコード核酸分子を提供する。本発明は、診断用及び治療用組成物、方法及びデバイスを含む、このような核酸並びに抗体及び抗イディオタイプ抗体の製造及び使用方法を更に含むが、これらに限定されない。
【００３９】
本明細書で使用するとき、「抗ベータ−アミロイド抗体」、「抗アミロイド抗体」、「抗アミロイド抗体部分」、又は「抗アミロイド抗体断片」及び／又は「抗アミロイド抗体変異体」等は、本発明の抗体の中に取り込むことのできる、免疫グロブリン分子の少なくとも一部分を含むあらゆるタンパク質又はペプチド含有分子を含み、これには例えば、重鎖若しくは軽鎖の少なくとも１つの相補性決定領域（ＣＤＲ）又はそのリガンド結合部、重鎖若しくは軽鎖可変領域、重鎖若しくは軽鎖定常領域、フレームワーク領域若しくはその任意の一部分、又はアミロイド受容体若しくは結合タンパク質の少なくとも一部分が挙げられるが、これらに限定されない。このような抗体は所望により、更に、特異的リガンドに影響を及ぼし、例えばかかる抗体は、インビトロ、インサイチュ及び／又はインビボで、少なくとも１つのアミロイドの活性若しくは結合、又はアミロイド受容体の活性若しくは結合を、調節、低減、増大、拮抗、作動、軽減、緩和、遮断、阻害、無効化、及び／又は干渉するが、これらに限定されない。非限定的な例としては、本発明の好適な抗アミロイド抗体、その特異的部分、又は変異体は、少なくとも１つのアミロイド又はその特異的部分、変異体、又はドメインに結合することができる。好適な抗アミロイド抗体、特異的部分、又は変異体はまた、所望により、ＲＮＡ、ＤＮＡ、又はタンパク質合成、アミロイド放出、アミロイド受容体シグナル伝達、膜アミロイド切断、アミロイド活性、アミロイド生成及び／又は合成等であるが、これらに限定されない、アミロイド活性又は機能の少なくとも１つに影響を及ぼすことができる。
【００４０】
抗体は、少なくとも１つのＣＤＲ、少なくとも１つの可変領域、少なくとも１つの定常領域、少なくとも１本の重鎖（例えば、γ1、γ2、γ3、γ4、μ、α1、α2、δ、ε）、少なくとも１本の軽鎖（例えば、κ及びλ）、又はこれらの任意の部分若しくは断片のうち１つ以上を含んでもよく、鎖間及び鎖内ジスルフィド結合、ヒンジ領域、ヒンジ領域により分離され得るグリコシル化部位、並びに重鎖及び軽鎖を更に含んでもよい。軽鎖は、典型的には、約２５Ｋｄの分子量を有し、重鎖は、典型的には、５０Ｋ〜７７Ｋｄの範囲である。軽鎖は、２つの異なる形態又はアイソタイプ、カッパ（κ）及びラムダ（λ）で存在することができ、これらは任意の種類の重鎖と結合できる。全ての軽鎖は、少なくとも１つの可変領域及び少なくとも１つの定常領域を有する。ＩｇＧ抗体は典型的な抗体構造であると考えられ、軽鎖に２つの（１つは可変領域に、１つは定常領域に）、重鎖に４つの鎖内ジスルフィド結合を有し、このような結合は鎖内に約１１０アミノ酸の「ドメイン」を含む約６０〜７０アミノ酸のペプチドループを包含する。ＩｇＧ抗体は、４つのクラス、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４に分類することができる。各免疫グロブリンクラスは異なる一連の機能を有する。以下の表は、各免疫グロブリンクラス及びサブクラスの物理化学的特性の報告されている例を要約したものである。
【００４１】
【表１】
2011500059.tif 000002
【００４２】
以下の表は、ヒト抗体クラス及びサブクラスの抗体エフェクター機能の非限定的な例を要約したものである。
【００４３】
【表２】
2011500059.tif 000003
【００４４】
したがって、抗体又はその断片の種類は、血清半減期、血管内分布、補体結合等が挙げられるが、これらに限定されない、特定の治療又は診断用途にとって望ましい所望の特徴及び機能に基づいて、本発明に従った使用に対して選択することができる。
【００４５】
抗体の多様性は、少なくとも５つの機序により生じ、その機序は（１）抗体の一部をコードする複数の遺伝子の使用；（２）体細胞突然変異、例えば異なるＢ細胞クローンで異なるＶ遺伝子を生成するための、Ｂ細胞の個体発生中の始原Ｖ遺伝子の突然変異；（３）体細胞組み換え、例えば、Ｂ細胞の個体発生中、遺伝子セグメントＪ１−Ｊｎを組み換えて、Ｖ領域遺伝子の主な部分に連結する；（４）多数の偽Ｖ領域のＤＮＡセクションがＶ領域にコピーされて、ＤＮＡ配列を改変し得る遺伝子変換；及び（５）ヌクレオチド付加、例えばＶ及びＪ領域が連結前に切断され、外来ヌクレオチドが挿入されて、付加アミノ酸をコードする、を含む。非限定的な例としては、（ｉ）カッパ鎖を生じさせるための生殖系からＢ細胞クローンへのＶκ、Ｊ、及びＣκ領域の選択／組み換え；（ｉｉ）ラムダ鎖を生じさせるための生殖系からＢ細胞クローンへのＶλ、Ｊ、及びＣλ領域の選択／組み換え；（ｉｉｉ）重鎖可変領域をコードする機能性ＶＤＪ遺伝子を形成するためのＶH、Ｄ１〜Ｄ３０、及びＪH１〜ＪH６遺伝子の選択／組み換えが挙げられるが、これらに限定されない。上記機序は、協調的様式で作用して、抗体の多様性及び特異性を生じさせる。
【００４６】
用語「抗体」は、更に、抗体、その消化断片、特異的部分及び変異体を包含することを意図し、これには抗体模倣物が挙げられ、又は抗体の構造及び／若しくは機能を模倣する抗体の部分若しくはその特異的断片若しくは一部を含み、これには単鎖抗体及びその断片が挙げられる。機能断片としては、哺乳類のアミロイドに結合する抗原結合断片が挙げられる。例えば、Ｆａｂ（例えば、パパイン消化による）、Ｆａｂ’（例えば、ペプシン消化及び部分的還元による）、及びＦ（ａｂ’）2（例えば、ペプシン消化による）、ｆａｃｂ（例えば、プラスミン消化による）、ｐＦｃ’（例えば、ペプシン又はプラスミン消化による）、Ｆｄ（例えば、ペプシン消化、部分的還元、及び再集合による）、Ｆｖ又はｓｃＦｖ（例えば、分子生物学的技術による）断片が挙げられるが、これらに限定されない、アミロイド又はその一部に結合できる抗体断片が、本発明に包含される（例えば、コリガン（Colligan）、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、上記を参照のこと）。
【００４７】
このような断片は、当該技術分野において既知であるような、及び／又は本明細書に記載のような、酵素的切断、合成又は組み換え技術により生成できる。抗体はまた、１つ以上の終止コドンが天然の終止部位の上流に導入されている抗体遺伝子を用いて、種々の切頭型（truncatedform）で生成できる。例えば、Ｆ（ａｂ’）2重鎖部をコードする遺伝子の組み合わせは、重鎖のＣＨ1ドメイン及び／又はヒンジ領域をコードするＤＮＡ配列を含むよう設計することができる。抗体の種々の部分を従来の技術により化学的に連結でき、又は遺伝子工学技術を用いて隣接タンパク質として調製できる。
【００４８】
本明細書で使用するとき、用語「ヒト抗体」とは、ほんの少しの配列変化又は変異を含む、タンパク質の実質的に全ての部分（例えば、ＣＤＲ、フレームワーク、ＣL、ＣHドメイン（例えば、ＣH１、ＣH２、ＣH３）、ヒンジ（ＶL、ＶH））が、ヒトにおいて実質的に非免疫原性である抗体を指す。同様に、霊長類（サル、ヒヒ（babboon）、チンパンジー等）、げっ歯類（マウス、ラット、ウサギ、モルモット、ハムスター等）及び他の哺乳類を指定した抗体は、このような種、亜属、属、亜科、科特異的抗体を指定する。更に、本発明のキメラ抗体は、上記の任意の組み合わせを含んでもよい。このような変化又は変異は、所望によりかつ好ましくは、非改変抗体に比べて、ヒト又は他の種における免疫原性が保持されている又は低下している。このように、ヒト抗体は、キメラ又はヒト化抗体とは区別される。ヒト抗体は、機能的に再構成されたヒト免疫グロブリン（例えば重鎖及び／又は軽鎖）遺伝子を発現することができる非ヒト動物又は原核若しくは真核細胞により生成され得るということが指摘されている。更に、ヒト抗体が１本鎖抗体であるとき、これは天然（native）のヒト抗体の中に見出されないリンカーペプチドを含む可能性がある。例えば、Ｆｖは、重鎖の可変領域及び軽鎖の可変領域を接続する２〜約８個のグリシン又はその他のアミノ酸残基などのリンカーペプチドを含み得る。このようなリンカーペプチドはヒト起源のものと見なされる。
【００４９】
また、少なくとも２種の抗原に対して結合特異性を有するモノクローナル、好ましくはヒト又はヒト化抗体である、二重特異的、異種特異的、異種結合性（heteroconjugate）又は類似の抗体を用いてもよい。この場合では、結合特異性のうち一方は少なくとも１種のアミロイドタンパク質に対するものであり、他方は任意の他の抗原に対するものである。二重特異的抗体の製造方法は、当該技術分野において既知である。伝統的に、二重特異的抗体の組み換え体生成は、２種の免疫グロブリン重鎖−軽鎖対の共発現に基づき、ここで２本の重鎖は異なる特異性を有する（ミルスタイン（Milstein）及びクエロ（Cuello）、Ｎａｔｕｒｅ、３０５巻、５３７頁（１９８３年））。免疫グロブリン重鎖及び軽鎖のランダムな組み合わせのために、これらのハイブリドーマ（クアドローマ）は１０種の異なる抗体分子の可能な混合物を生成し、これらのうち１種のみが正しい二重特異的構造を有する。正しい分子の精製（通常アフィニティクロマトグラフィー工程により行われる）は、かなり面倒であり、生成物の収率は低い。類似の手順が、例えば、当該技術分野において周知であるような、国際公開第９３／０８８２９号、米国特許第６２１０６６８号、同第６１９３９６７号、同第６１３２９９２号、同第６１０６８３３号、同第６０６０２８５号、同第６０３７４５３号、同第６０１０９０２号、同第５９８９５３０号、同第５９５９０８４号、同第５９５９０８３号、同第５９３２４４８号、同第５８３３９８５号、同第５８２１３３３号、同第５８０７７０６号、同第５６４３７５９号、同第５６０１８１９号、同第５５８２９９６号、同第５４９６５４９号、同第４６７６９８０号、国際公開第９１／００３６０号、同第９２／００３７３号、欧州特許第０３０８９号、トラウネッカー（Traunecker）ら、ＥＭＢＯ  Ｊ．、１０巻、３６５５頁（１９９１年）、スレッシュ（Suresh）ら、Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、１２１巻、２１０頁（１９８６年）に開示されている。
【００５０】
本発明の方法及び組成物で有用な抗アミロイド抗体（アミロイド抗体とも呼ばれる）は、所望により、アミロイドに結合する高い親和性を特徴とする場合があり、所望によりかつ好ましくは毒性が低い。具体的には、可変領域、定常領域、及びフレームワークのような個々の構成要素が、個々に及び／又は集合的に、所望によりかつ好ましくは低い免疫原性を有する、本発明の抗体、特異的断片、又は変異体が、本発明で有用である。本発明で用いることのできる抗体は、所望により、長期間測定可能な程度症状を緩和する、患者を治療する能力、並びに低い及び／又は許容できる毒性を特徴とする。低い若しくは許容できる免疫原性、及び／又は高い親和性、並びに他の好適な特性は、得られる治療結果に寄与することができる。「低い免疫原性」は、本明細書では、治療される患者の約７５％未満、若しくは好ましくは約５０％未満で有意にＨＡＨＡ、ＨＡＣＡ若しくはＨＡＭＡ応答が増加する、及び／又は、治療される患者において低い力価（二重抗原酵素免疫アッセイで測定したとき約３００未満、好ましくは約１００未満）が増加することとして定義される（エリオット（Elliott）ら、ランセット（Lancet）、３４４巻、１１２５〜１１２７頁（１９９４年）、及び当該技術分野において周知であるように）。
【００５１】
有用性
本発明の単離核酸を、少なくとも１つの抗アミロイド抗体又はその特定の変異体の生成に用いることができ、これを用いて細胞、組織、器官、又は動物（哺乳類及びヒトを含む）で測定し、又は効果を及ぼして、免疫疾患若しくは疾病、循環器疾患若しくは疾病、感染性、悪性、及び／又は神経性疾患若しくは疾病、又は他の既知の若しくは特定のアミロイド関連症状の少なくとも１種から選択されるが、これらに限定されない、少なくとも１種のアミロイド症状を診断する、モニタする、調節する、治療する、軽減する、発生を予防するのを助ける、又は症状を低減することができる。
【００５２】
このような方法は、症状を調節、治療、軽減、予防、若しくは低減する効果、又は機序を必要としている細胞、組織、器官、動物、又は患者に、少なくとも１つの抗アミロイド抗体を含む組成物又は医薬組成物を有効量投与することを含んでもよい。有効量は、本明細書に記載のように、又は関連分野で既知のように、既知の方法を用いて行う及び決定するとき、単回（例えば、ボーラス）、複数回、若しくは連続投与あたり約０．００１〜５００ｍｇ／ｋｇの量、又は単回、複数回、若しくは連続投与あたり０．０１〜５０００μｇ／ｍＬ血清濃度の血清濃度を達成する量、又はこの中の任意の範囲若しくは値を含んでもよい。
【００５３】
引用文献
本明細書で引用される全ての刊行物又は特許は、本発明の時点の当該技術分野の状態を示すため、当該技術分野において周知であり、及び／又は本発明の説明及び使用可能性を提供する。刊行物とは、任意の科学的又は特許刊行物、又は全ての記録、電子、又は印刷形式を含む任意のメディア形式で入手可能な任意の他の情報を意味する。以下の参考文献は、当該技術分野において周知である：オースベル（Ausubel）ら編、「分子生物学の最新プロトコル（Current Protocols in Molecular Biology）」、ジョン・ワイリー＆サンズ社（John Wiley & Sons, Inc.）（ニューヨーク州ニューヨーク）、（１９８７〜２００１年）；サムブルック（Sambrook）ら、「分子クローニング：実験室マニュアル（Molecular Cloning: A Laboratory Manual）」第２版、コールド・スプリング・ハーバー（Cold Spring Harbor）、ニューヨーク、（１９８９年）；ハーロー（Harlow）及びレーン（Lane）、「抗体、実験室マニュアル（antibodies, a Laboratory Manual）」、コールド・スプリング・ハーバー（Cold Spring Harbor）、ニューヨーク、（１９８９年）；コリガン（Colligan）ら編、「免疫学の最新プロトコル（Current Protocols in Immunology）」、ジョン・ワイリー＆サンズ社（John Wiley & Sons, Inc.）ニューヨーク（１９９４〜２００１年）；コリガン（Colligan）ら、「タンパク質科学の最新プロトコル（Current Protocols in Protein Science）」、ジョン・ワイリー＆サンズ社（John Wiley & Sons, Inc.）（ニューヨーク州ニューヨーク）（１９９７〜２００１年）。
【００５４】
本発明の抗体
本発明の少なくとも１つの抗アミロイド抗体は、所望により、当該技術分野において周知の細胞株、混合細胞株、不死化細胞又は不死化細胞のクローン集団によって生成され得る。例えば、当該技術分野において周知であるような、オースベル（Ausubel）ら編、「分子生物学の最新プロトコル（Current Protocols in Molecular Biology）」、ジョン・ワイリー＆サンズ社（John Wiley & Sons, Inc.）（ニューヨーク州ニューヨーク）、（１９８７〜２００１年）；サムブルック（Sambrook）ら、「分子クローニング：実験室マニュアル（Molecular Cloning: A Laboratory Manual）」第２版、コールド・スプリング・ハーバー（Cold Spring Harbor）、ニューヨーク、（１９８９年）；ハーロー（Harlow）及びレーン（Lane）、「抗体、実験室マニュアル（antibodies, a Laboratory Manual）」、コールド・スプリング・ハーバー（Cold Spring Harbor）、ニューヨーク、（１９８９年）；コリガン（Colligan）ら編、「免疫学の最新プロトコル（Current Protocols in Immunology）」、ジョン・ワイリー＆サンズ社（John Wiley & Sons, Inc.）ニューヨーク（１９９４〜２００１年）；コリガン（Colligan）ら、「タンパク質科学の最新プロトコル（Current Protocols in Protein Science）」、ジョン・ワイリー＆サンズ社（John Wiley & Sons, Inc.）（ニューヨーク州ニューヨーク）（１９９７〜２００１年）を参照のこと。
【００５５】
ヒトアミロイドタンパク質又はその断片に特異的なヒト抗体は、例えば、配列番号５０のアミノ酸１〜７、１〜４０、３１〜４２、及び３６〜４０の少なくとも１つであるが、これらに限定されない、単離及び／若しくはアミロイドタンパク質又はその一部のような適切な免疫原性抗原（合成ペプチドのような合成分子を含む）に対して産生され得る。他の特異的又は普遍的（general）哺乳類抗体を同様に産生することもできる。免疫原性抗原の調製、及びモノクローナル抗体の生成は、任意の好適な技術を用いて実施することができる。
【００５６】
１つのアプローチにおいて、適切な不死細胞株（例えばＳｐ２／０、Ｓｐ２／０−ＡＧ１４、ＮＳＯ、ＮＳ１、ＮＳ２、ＡＥ−１、Ｌ．５、＞２４３、Ｐ３Ｘ６３Ａｇ８．６５３、Ｓｐ２  ＳＡ３、Ｓｐ２  ＭＡＩ、Ｓｐ２  ＳＳ１、Ｓｐ２  ＳＡ５、Ｕ９３７、ＭＬＡ  １４４、ＡＣＴ  ＩＶ、ＭＯＬＴ４、ＤＡ−１、ＪＵＲＫＡＴ、ＷＥＨＩ、Ｋ−５６２、ＣＯＳ、ＲＡＪＩ、ＮＩＨ  ３Ｔ３、ＨＬ−６０、ＭＬＡ  １４４、ＮＡＭＡＩＷＡ、又はＮＥＵＲＯ  ２Ａ等であるが、これらに限定されない骨髄腫細胞株）若しくはヘテロ骨髄腫、その融合産物、又はそれらに由来する任意の細胞若しくは融合細胞、又は当該技術分野において既知の任意の他の適切な細胞株を融合させることによって、ハイブリドーマが生成される。例えば、単離若しくはクローニングされた脾臓、末梢血、リンパ液、扁桃腺、又はその他の免疫細胞若しくはＢ細胞含有細胞、又は、内因性若しくは異種核酸のいずれかとしての、又は、組み換え若しくは内因性のいずれかとしての、ウイルス、細菌、藻類、原核生物、両生類、昆虫、爬虫類、魚類、哺乳類、げっ歯類、ウマ、ヒツジ類、ヤギ、ヒツジ、霊長類、真核生物、ゲノムＤＮＡ、ｃＤＮＡ、ｒＤＮＡ、ミトコンドリアＤＮＡ若しくはＲＮＡ、葉緑体ＤＮＡ若しくはＲＮＡ、ｈｎＲＮＡ、ｍＲＮＡ、ｔＲＮＡ、１本鎖、２本鎖若しくは３本鎖、ハイブリダイズされたもの等の重鎖若しくは軽鎖の、定常若しくは可変若しくはフレームワーク若しくはＣＤＲ配列を発現するあらゆるその他の細胞、又はこれらの組み合せ等であるが、これらに限定されない、抗体生成細胞について、ｗｗｗ．ａｔｃｃ．ｏｒｇ、又はｗｗｗ．ｌｉｆｅｔｅｃｈ．ｃｏｍ等を参照されたい。例えば、オースベル（Ausubel）、上記、及びコリガン（Colligan）、免疫学（Immunology）、上記、第２章を参照のこと、これらは当該技術分野において周知である。
【００５７】
抗体生成細胞は、関心抗原で免疫化されたヒト若しくは他の適切な動物の末梢血液、又は好ましくは脾臓若しくはリンパ節から入手することもできる。本発明の抗体、特異的断片、又はその変異体をコードする異種又は内因性核酸を発現させるために、他の任意の適切な宿主細胞を使用することも可能である。選択的培養条件又はその他の適切な既知の方法を用いて、融合細胞（ハイブリドーマ）又は組み換え細胞を単離し、限界希釈法若しくは細胞選別、又はその他の既知の方法によりクローニングすることができる。望ましい特異性をもつ抗体を生成する細胞を、適切なアッセイ（例えばＥＬＩＳＡ）により選択することができる。
【００５８】
ペプチド又はタンパク質ライブラリ（例えば、限定されないが、バクテリオファージ、リボソーム、オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ、又はｃＤＮＡ等のディスプレイライブラリ；例えば、ケンブリッジ・アンタイボディー・テクノロジーズ（Cambridge antibody Technologies）、英国、ケンブリッジシャー（Cambridgeshire）；モーフォシス（MorphoSys）、マルティンスライト／プラネック（Martinsreid/Planegg）、デラウェア州；バイオベーション（Biovation）、英国、スコットランド・アバディーン（Aberdeen）；バイオインベント（BioInvent）、スウェーデン、ルント（Lund）；ダイアックス（Dyax Corp.）、エンゾン（Enzon）、アフィマックス／バイオサイト（Affymax/Biosite）；エクソマ（Xoma）、カリフォルニア州バークレー（Berkeley）；イクシス（Ixsys）から入手可能）から組み換え抗体を選択する方法が挙げられるが、これらに限定されない、必要な特異性を有する抗体を生成する又は単離する、他の好適な方法を用いることができる。例えば、欧州特許第３６８，６８４号、国際出願第ＰＣＴ／ＧＢ９１／０１１３４号；同第ＰＣＴ／ＧＢ９２／０１７５５号；同第ＰＣＴ／ＧＢ９２／００２２４０号；同第ＰＣＴ／ＧＢ９２／００８８３号；同第ＰＣＴ／ＧＢ９３／００６０５号；米国特許出願公開０８／３５０２６０号（５／１２／９４）；国際出願第ＰＣＴ／ＧＢ９４／０１４２２号；同第ＰＣＴ／ＧＢ９４／０２６６２号；同第ＰＣＴ／ＧＢ９７／０１８３５号；（ＣＡＴ／ＭＲＣ）；国際公開第９０／１４４４３号；同第９０／１４４２４号；同第９０／１４４３０号；国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ９４／１２３４号；国際公開第９２／１８６１９号；同第９６／０７７５４号（スクリップス（Scripps））；同第９６／１３５８３号；同第９７／０８３２０号（モーフォシス（MorphoSys））；国際公開第９５／１６０２７号（バイオインベント（BioInvent））；同第８８／０６６３０号；同第９０／３８０９号（ダイアックス（Dyax））；米国特許第４，７０４，６９２号（エンゾン（Enzon））；国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ９１／０２９８９号（アフィマックス（Affymax））；国際公開第８９／０６２８３号；欧州特許第３７１  ９９８号；同第５５０  ４００号；（エクソマ（Xoma））；同第２２９  ０４６号；国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ９１／０７１４９号（イクシス（Ixsys））；又は化学量論的に生成されたペプチド若しくはタンパク質−米国特許第５７２３３２３号、同第５７６３１９２号、同第５８１４４７６号、同第５８１７４８３号、同第５８２４５１４号、同第５９７６８６２号、国際公開第８６／０５８０３号、欧州特許第５９０６８９（イクシス（Ixsys）、現在アプライド・モレキュラー・エボリューション（Applied Molecular Evolution）（ＡＭＥ）、当該技術分野におい周知であるような）、又は当該技術分野で既知であるような、及び／若しくは本明細書に記載のようなヒト抗体のレパートリーを生成することが可能である、トランスジェニック動物の免疫化に依存するもの（例えば、ＳＣＩＤマウス、グエン（Nguyen）ら、Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第４１号、９０１〜９０７頁（１９９７年）；サンドゥ（Sandhu）ら、Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．、１６巻、９５〜１１８頁（１９９６年）；エレン（Eren）ら、Ｉｍｍｕ��ｏｌ．、第９３号、１５４〜１６１頁（１９９８年）、並びに当該技術分野、及び関連特許及び出願において周知であるもの）を参照のこと。このような技術としては、リボソームディスプレイ（ヘインズ（Hanes）ら、米国科学アカデミー紀要（Proc. Natl. Acad. Sci.）、９４巻、４９３７〜４９４２頁（１９９７年５月）；（ヘインズ（Hanes）ら、米国科学アカデミー紀要（Proc. Natl. Acad. Sci.）、９５巻、１４１３０〜１４１３５頁（１９９８年１１月））；単一細胞抗体産生技術（例えば、選択リンパ球抗体方法（ＳＬＡＭ）（米国特許第５，６２７，０５２号、ウェン（Wen）ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第１７号、８８７〜８９２頁（１９８７年）；バブコック（Babcook）ら、米国科学アカデミー紀要（Proc. Natl. Acad. Sci.）、９３巻、７８４３〜７８４８頁（１９９６年））；ゲル微小滴とフローサイトメトリー（gel microdroplet and flow cytometry）（パウエル（Powell）ら、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．、第８号、３３３〜３３７頁（１９９０年）；ワンセルシステムズ（One Cell Systems）（マサチューセッツ州ケンブリッジ）；グレイ（Gray）ら、Ｊ．Ｉｍｍ．Ｍｅｔｈ．、１８２巻、１５５〜１６３頁（１９９５年）；ケニー（Kenny）ら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌ．、１３巻、７８７〜７９０頁（１９９５年））；Ｂ細胞選択（B-cell selection）（スティーンバッカーズ（Steenbakkers）ら、Ｍｏｌｅｃ．Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｏｒｔｓ、１９巻、１２５〜１３４頁（１９９４年）；ジョナック（Jonak）ら、Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈ、５巻、ハイブリドーマ技術におけるインビトロ免疫（In Vitro Immunization in Hybridoma Technology）、ボレベック（Borrebaeck）編、エルゼビア・サイエンス出版（Elsevier Science Publishers B.V.）、アムステルダム（Amsterdam）、オランダ（１９８８年））が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５９】
非ヒト抗体又はヒト抗体を改変又はヒト化するための方法も同様に使用でき、当該技術分野において周知である。一般に、ヒト化又は改変された抗体は、例えばマウス、ラット、ウサギ、非ヒト霊長類又はその他の哺乳類等であるがこれらに限定されないヒト以外の供給源からの１つ以上のアミノ酸残基を有する。これらのヒトアミノ酸残基は、しばしば「インポート」残基と呼ばれ、典型的には既知のヒト配列の「インポート」可変、定常又はその他のドメインから取られる。
【００６０】
非ヒト抗体又はヒト抗体を改変又はヒト化するための方法も同様に使用でき、当該技術分野において周知である。一般に、ヒト化又は改変された抗体は、例えばマウス、ラット、ウサギ、非ヒト霊長類又はその他の哺乳類等であるがこれらに限定されないヒト以外の供給源からの１つ以上のアミノ酸残基を有する。これらのヒトアミノ酸残基は、しばしば「インポート」残基と呼ばれ、典型的には既知のヒト配列の「インポート」可変、定常又はその他のドメインから取られる。
【００６１】
「ヒト化抗体」とは、非ヒト相補性決定領域（ＣＤＲ）を有する抗体の配列を変化させることにより、ヒト抗体生殖系に由来するアミノ酸配列から部分的に又は全体的に構成される抗体を意味する。最も単純なこのような変更は、単純にマウスの定常領域をヒト抗体の定常領域に置き換えることから成り、それにより医薬用途に許容できるほど十分低い免疫原性を有することができるヒト／マウスキメラを得ることができる。
【００６２】
しかしながら、好ましくは、抗体の可変領域及び更にはＣＤＲさえまた、現在当該技術分野において周知である技術によりヒト化される。可変領域のフレームワーク領域は、非ヒトＣＤＲを実質的に未変化のまま残して対応するヒトフレームワーク領域に置き換えられ、又は更にはＣＤＲさえヒトゲノムに由来する配列に置き換えられる。免疫系が、ヒト免疫系に対応するよう改変されている遺伝的に改変されたマウスで、全体的にヒトの抗体が生成される。上述のように、単鎖型を表す断片を含む、抗体の免疫的に特異的な断片を使用することは、本発明の方法で用いるのに十分である。
【００６３】
再び、ヒト化抗体とは、ヒトフレームワーク、少なくとも１つの非ヒト抗体由来のＣＤＲを含む抗体を指し、ここで存在する任意の定常領域は、ヒト免疫グロブリン定常領域と実質的に同一である、すなわち、少なくとも約８５〜９０％、好ましくは少なくとも９５％同一である。したがって、恐らくＣＤＲを除いたヒト化抗体の全ての部分は、１種以上の天然ヒト免疫グロブリン配列の対応する部分と実質的に同一である。例えば、ヒト化免疫グロブリンは、典型的には、キメラマウス可変領域／ヒト定常領域抗体を包含しない。
【００６４】
ヒト化抗体は、ヒトの治療で用いるために、非ヒト及びキメラ抗体に対して、少なくとも３つの潜在的利点を有する。
１）エフェクター部分がヒトであるため、ヒト免疫系の他の部分とよりよく相互作用することができる（例えば、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）又は抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）により、標的細胞をより効率的に破壊する）。
２）ヒト免疫系はヒト化抗体のフレームワーク又はＣ領域を異物として認識すべきではなく、それ故このような注入された抗体に対する抗体反応は、全体的に異物である非ヒト抗体又は部分的に異物であるキメラ抗体に対する反応よりも少ないはずである。
３）注入された非ヒト抗体は、ヒト抗体の半減期より非常に短い、ヒト循環における半減期を有することが報告されている。注入されたヒト化抗体は、天然ヒト抗体と本質的に同一である半減期を有し、これにより投与量が少なく、投与頻度も低くなる。
【００６５】
既知のヒトＩｇ配列は開示されており、例えば、当該技術分野において周知である、
ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｅｎｔｒｅｚ／ｑｕｅｒｙ．ｆｃｇｉ；ｗｗｗ．ａｔｃｃ．ｏｒｇ／ｐｈａｇｅ／ｈｄｂ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｓｃｉｑｕｅｓｔ．ｃｏｍ／；
ｗｗｗ．ａｂｃａｍ．ｃｏｍ／；ｗｗｗ．ａｎｔｉｂｏｄｙｒｅｓｏｕｒｃｅ．ｃｏｍ／ｏｎｌｉｎｅｃｏｍｐ．ｈｔｍｌ；
ｗｗｗ．ｐｕｂｌｉｃ．ｉａｓｔａｔｅ．ｅｄｕ／〜ｐｅｄｒｏ／ｒｅｓｅａｒｃｈ＿ｔｏｏｌｓ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｍｇｅｎ．ｕｎｉ−ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ．ｄｅ／ＳＤ／ＩＴ／ＩＴ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｗｈｆｒｅｅｍａｎ．ｃｏｍ／ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ／ＣＨ０５／ｋｕｂｙ０５．ｈｔｍ；
ｗｗｗ．ｌｉｂｒａｒｙ．ｔｈｉｎｋｑｕｅｓｔ．ｏｒｇ／１２４２９／Ｉｍｍｕｎｅ／Ａｎｔｉｂｏｄｙ．ｈｔｍｌ；
ｗｗｗ．ｈｈｍｉ．ｏｒｇ／ｇｒａｎｔｓ／ｌｅｃｔｕｒｅｓ／１９９６／ｖｌａｂ／；ｗｗｗ．ｐａｔｈ．ｃａｍ．ａｃ．ｕｋ／〜ｍｒｃ７／ｍｉｋｅｉｍａｇｅｓ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ａｎｔｉｂｏｄｙｒｅｓｏｕｒｃｅ．ｃｏｍ／；
ｍｃｂ．ｈａｒｖａｒｄ．ｅｄｕ／ＢｉｏＬｉｎｋｓ／Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．ｈｔｍｌ．ｗｗｗ．ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙｌｉｎｋ．ｃｏｍ／；
ｐａｔｈｂｏｘ．ｗｕｓｔｌ．ｅｄｕ／〜ｈｃｅｎｔｅｒ／ｉｎｄｅｘ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｂｉｏｔｅｃｈ．ｕｆｌ．ｅｄｕ／〜ｈｃｌ／；
ｗｗｗ．ｐｅｂｉｏ．ｃｏｍ／ｐａ／３４０９１３／３４０９１３．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｎａｌ．ｕｓｄａ．ｇｏｖ／ａｗｉｃ／ｐｕｂｓ／ａｎｔｉｂｏｄｙ／；
ｗｗｗ．ｍ．ｅｈｉｍｅ−ｕ．ａｃ．ｊｐ／〜ｙａｓｕｈｉｔｏ／Ｅｌｉｓａ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｂｉｏｄｅｓｉｇｎ．ｃｏｍ／ｔａｂｌｅ．ａｓｐ；
ｗｗｗ．ｉｃｎｅｔ．ｕｋ／ａｘｐ／ｆａｃｓ／ｄａｖｉｅｓ／ｌｉｎｋｓ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｂｉｏｔｅｃｈ．ｕｆｌ．ｅｄｕ／〜ｆｃｃｌ／ｐｒｏｔｏｃｏｌ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｉｓａｃ−ｎｅｔ．ｏｒｇ／ｓｉｔｅｓ＿ｇｅｏ．ｈｔｍｌ；ａｘｉｍｔ１．ｉｍｔ．ｕｎｉ−ｍａｒｂｕｒｇ．ｄｅ／〜ｒｅｋ／ＡＥＰＳｔａｒｔ．ｈｔｍｌ；ｂａｓｅｒｖ．ｕｃｉ．ｋｕｎ．ｎｌ／〜ｊｒａａｔｓ／ｌｉｎｋｓ１．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｒｅｃａｂ．ｕｎｉ−ｈｄ．ｄｅ／ｉｍｍｕｎｏ．ｂｍｅ．ｎｗｕ．ｅｄｕ／；ｗｗｗ．ｍｒｃ−ｃｐｅ．ｃａｍ．ａｃ．ｕｋ／ｉｍｔ−ｄｏｃ／ｐｕｂｌｉｃ／ＩＮＴＲＯ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｉｂｔ．ｕｎａｍ．ｍｘ／ｖｉｒ／Ｖ＿ｍｉｃｅ．ｈｔｍｌ；ｉｍｇｔ．ｃｎｕｓｃ．ｆｒ：８１０４／；ｗｗｗ．ｂｉｏｃｈｅｍ．ｕｃｌ．ａｃ．ｕｋ／〜ｍａｒｔｉｎ／ａｂｓ／ｉｎｄｅｘ．ｈｔｍｌ；ａｎｔｉｂｏｄｙ．ｂａｔｈ．ａｃ．ｕｋ／；
ａｂｇｅｎ．ｃｖｍ．ｔａｍｕ．ｅｄｕ／ｌａｂ／ｗｗｗａｂｇｅｎ．ｈｔｍｌ；
ｗｗｗ．ｕｎｉｚｈ．ｃｈ／〜ｈｏｎｅｇｇｅｒ／ＡＨＯｓｅｍｉｎａｒ／Ｓｌｉｄｅ０１．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｃｒｙｓｔ．ｂｂｋ．ａｃ．ｕｋ／〜ｕｂｃｇ０７ｓ／；
ｗｗｗ．ｎｉｍｒ．ｍｒｃ．ａｃ．ｕｋ／ＣＣ／ｃｃａｅｗｇ／ｃｃａｅｗｇ．ｈｔｍ；
ｗｗｗ．ｐａｔｈ．ｃａｍ．ａｃ．ｕｋ／〜ｍｒｃ７／ｈｕｍａｎｉｓａｔｉｏｎ／ＴＡＨＨＰ．ｈｔｍｌ；
ｗｗｗ．ｉｂｔ．ｕｎａｍ．ｍｘ／ｖｉｒ／ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ／ｓｔａｔ＿ａｉｍ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｂｉｏｓｃｉ．ｍｉｓｓｏｕｒｉ．ｅｄｕ／ｓｍｉｔｈｇｐ／ｉｎｄｅｘ．ｈｔｍｌ；
ｗｗｗ．ｃｒｙｓｔ．ｂｉｏｃ．ｃａｍ．ａｃ．ｕｋ／〜ｆｍｏｌｉｎａ／Ｗｅｂ−ｐａｇｅｓ／Ｐｅｐｔ／ｓｐｏｔｔｅｃｈ．ｈｔｍｌ；
ｗｗｗ．ｊｅｒｉｎｉ．ｄｅ／ｆｒ＿ｐｒｏｄｕｃｔｓ．ｈｔｍ；ｗｗｗ．ｐａｔｅｎｔｓ．ｉｂｍ．ｃｏｍ／ｉｂｍ．ｈｔｍｌ．カバット（Kabat）ら、免疫学的関心タンパク質の配列（Sequences of Proteins of Immunological Interest）、Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．Ｈｅａｌｔｈ（１９８３年）、である。
【００６６】
このようなインポートされた配列は、免疫原性を減少させるために、又は、当該技術分野において既知のように、結合、親和性、オン速度、オフ速度、結合活性、特異性、半減期、又はその他の適切な任意の特性を低減、増強又は改変するために使用することができる。一般に、可変領域及び定常領域の非ヒト配列がヒト又はその他のアミノ酸に置き換えられている一方で、非ヒト又はヒトＣＤＲ配列の一部分又は全てが維持されている。抗体は、所望により、抗原に対する高い親和性及びその他の有利な生物学的特性を保持しながら、ヒト化することもできる。この目的を達成するため、所望により、ヒト化抗体を、親配列及びヒト化配列の３次元モデルを使用して、親配列及び様々な概念的ヒト化産物の分析プロセスによって調製することが可能である。３次元免疫グロブリンモデルが一般的に利用可能であり、当業者によく知られている。選択された候補の免疫グロブリン配列について、可能性の高い３次元立体構造を図示及び表示するコンピュータプログラムが利用可能である。これらの表示を調べることにより、候補の免疫グロブリン配列の機能における残基の役割として可能性の高いものの分析、すなわち候補の免疫グロブリンがその抗原に結合する能力に影響を及ぼす残基の分析が可能となる。このようにして、標的抗原に対する親和性の増大等、望ましい抗体特性が達成されるように、共通配列及びインポート配列から、ＦＲ残基を選択し組み合せることができる。一般に、ＣＤＲ残基は抗原結合に対する影響において、直接的に、かつ最も実質的に関与している。本発明の抗体のヒト化又は改変は、任意の既知の方法を使用して実施することができ、例えば、当該技術分野において周知であり、本明細書に参考文献として含まれる、ウインター（Winter）（ジョーンズ（Jones）ら、Ｎａｔｕｒｅ、３２１巻、５２２頁（１９８６年）；リースマン（Riechmann）ら、Ｎａｔｕｒｅ、３３２巻、３２３頁（１９８８年）；バーホーエン（Verhoeyen）ら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２３９巻、１５３４頁（１９８８年））、シムズ（Sims）ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１５１巻、２２９６頁（１９９３年）；ソーシャ（Chothia）及びレスク（Lesk）、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、第１９６号、９０１頁（１９８７年）、カーター（Carter）ら、米国科学アカデミー紀要（Proc. Natl. Acad. Sci.）、８９巻、４２８５頁（１９９２年）；プレスタ（Presta）ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第１５１号、２６２３頁（１９９３年）、米国特許第５７２３３２３号、同第５９７６８６２、同第５８２４５１４号、同第５８１７４８３号、同第５８１４４７６号、同第５７６３１９２号、同第５７２３３２３号、同第５，７６６８８６号、同第５７１４３５２号、同第６２０４０２３号、同第６１８０３７０号、同第５６９３７６２号、同第５５３０１０１号、同第５５８５０８９号、同第５２２５５３９号、同第４８１６５６７号、国際出願ＰＣＴ／ＵＳ９８／１６２８０号、同第ＵＳ９６／１８９７８号、同第ＵＳ９１／０９６３０号、同第ＵＳ９１／０５９３９号、同第ＵＳ９４／０１２３４号、同第ＧＢ８９／０１３３４号、同第ＧＢ９１／０１１３４号、同第ＧＢ９２／０１７５５号、国際公開第９０／１４４４３号、同第９０／１４４２４号、同第９０／１４４３０号、欧州特許第２２９２４６号に記載されている方法が挙げられるが、これらに限定されない。
【００６７】
本発明の抗体のモノマーＣＨ３−ＣＨ２−ヒンジ−ＣＨ１配列は、Ｃｙｓ−Ｃｙｓジスルフィド結合が挙げられるが、これに限定されない、対合又は共有結合により他のモノマーに結合することができる。抗体の種々の部分は、当該技術分野において既知であるものと併せて、本明細書に記載のように多様であってもよい。
【００６８】
抗体断片のＣＨ３−ＣＨ２−ヒンジ−ＣＨ１の一部分又はヒンジ−ＣＨ１領域を広範に改変して、本発明に従って変異体を形成することができるが、但しサルベージ（salvage）受容体への結合は維持される。このような変異体では、本発明の融合分子に必須ではない構造的特徴又は機能活性を提供する１つ以上の天然部位を除去してもよい。例えば、残基を置換する若しくは欠失させる、その部位に残基を挿入する、又はその部位を含む部分を切頭することにより、これらの部位を除去してもよい。挿入された又は置換された残基はまた、ペプチド模倣薬又はＤ−アミノ酸のような改変されたアミノ酸であってもよい。ＣＨ３−ＣＨ２−ヒンジの変異体は、（１）ジスルフィド結合の形成、（２）選択された宿主細胞との不適応性、（３）選択された宿主細胞内で発現するときの異種性、（４）グリコシル化、（５）補体との相互作用、（６）サルベージ受容体以外のＦｃ受容体への結合、又は（７）抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）に影響を及ぼす又は関与する１つ以上の天然部位又は残基を欠いてもよい。代表的なＣＨ３−ＣＨ２−ヒンジ−ＣＨ１変異体としては、以下のような分子及び配列が挙げられる：１．ジスルフィド結合の形成に関与する部位が除去されている。このような除去により、本発明の分子を生成するために用いられる宿主細胞中に存在する他のシステイン含有タンパク質との反応を避けることができる。この目的のために、システイン残基を欠失させてもよく、又は他のアミノ酸（例えば、アラニル、セリル）に置換してもよい。システイン残基が除去されたときでさえ、単鎖ＣＨ３−ＣＨ２−ヒンジ−ＣＨ１ドメインは、非共有的に保持された二量体ＣＨ３−ＣＨ２−ヒンジ−ＣＨ１ドメインを形成することができる。；２．選択された宿主細胞に、より適応させるためにＣＨ３−ＣＨ２−ヒンジ−ＣＨ１領域が改変されている。例えば、分子が大腸菌のような細菌細胞内で組み換えで発現しているとき、ヒンジ中のＰＡ配列を除去してもよく、この配列はプロリンイミノペプチダーゼのような大腸菌の消化酵素により認識され得る。；３．選択された宿主細胞内で発現しているとき、異種性を妨げるためにヒンジ領域の一部が欠失している、又は他のアミノ酸に置換されている。；４．１つ以上のグリコシル化部位が除去される。典型的にグリコシル化されている残基（例えば、バリン又はアスパラギン）は、細胞溶解反応を与えることができる。このような残基を欠失させてもよく、又は非グリコシル化残基（例えば、アラニン）に置換してもよく、又は、好ましい場合があるとき、例えば以下の配列一覧：Ｖａｌ−Ｘａａ−Ｓｅｒ（Ｏ−グリコシル化部位）に提示されている以下の残基で行われるとき、配列Ｖａｌ−Ｘａａ−Ｓｅｒが挙げられるが、これらに限定されないｏ−グリコシル化部位を、Ａｓｎ−Ｘａａ−Ｓｅｒ若しくはＧｌｎ−Ｘａａ−ＳｅｒのようなＮ−グリコシル化部位に置換してもよい：本明細書に開示されている若しくは当該技術分野において既知であるようなこの又は任意の他の好適な位置で、ｏ−グリコシル化部位が、Ｎ−グリコシル化部位Ａｓｎ−Ｘａａ−Ｓｅｒに変化する。；５．Ｃ１ｑ結合部位のような、補体との相互作用に関与する部位が除去される。補体の補充��recruitment）は本発明の分子にとって有利ではない場合があり、よってこのような変異体では避けられる場合がある。；６．サルベージ受容体以外のＦｃ受容体への結合に影響を及ぼす部位が除去される。ＣＨ３−ＣＨ２−ヒンジ−ＣＨ１領域は、本発明の融合分子に必須ではなく、よって除去されてもよい、特定の白血球と相互作用するための部位を有してもよい。；７．ＡＤＣＣ部位が除去される。ＡＤＣＣ部位は当該技術分野において既知であり、例えば、ＩｇＧ１のＡＤＣＣ部位に関しては、Ｍｏｌｅｃ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、２９（５）、６３３〜９頁（１９９２年）を参照のこと。これらの部位は同様に、本発明の融合分子に必須ではなく、よって除去されてもよい。抗アミロイド抗体はまた、所望により、本明細書に記載及び／又は当該技術分野において既知であるように、ヒト抗体のレパートリーを生成することができるトランスジェニック動物（例えば、マウス、ラット、ハムスター、非ヒト霊長類等）の免疫化により生じる場合もある。ヒト抗アミロイド抗体を生成する細胞を、このような動物から単離し、本明細書に記載の方法のような、好適な方法を用いて不死化してもよい。
【００６９】
ヒト抗原に結合するヒト抗体のレパートリーを生成できるトランスジェニックマウスは、既知の方法で生産可能である（例えば、米国特許第５，７７０，４２８号、同第５，５６９，８２５号、同第５，５４５，８０６号、同第５，６２５，１２６号、同第５，６２５，８２５号、同第５，６３３，４２５号、同第５，６６１，０１６号、及び同第５，７８９，６５０号（ロンバーグ（Lonberg）ら）；ジェイコビッツ（Jakobovits）ら、国際公開第９８／５０４３３号、ジェイコビッツら、国際公開第９８／２４８９３号、ロンバーグら、国際公開第９８／２４８８４号、ロンバーグら、国際公開第９７／１３８５２号、ロンバーグら、国際公開第９４／２５５８５号、クーヘルレパート（Kucherlapate）ら、国際公開第９６／３４０９６号、クーヘルレパートら、欧州特許第０４６３  １５１（Ｂ１）号、クーヘルレパートら、欧州特許公開第０７１０  ７１９（Ａ１）号、スラーニ（Surani）ら、米国特許第５，５４５，８０７号、ブリュッゲマン（Bruggemann）ら、国際公開第９０／０４０３６号、ブリュッゲマンら、欧州特許第０４３８  ４７４（Ｂ１）号、ロンバーグら、欧州特許公開第０８１４  ２５９（Ａ２）号、ロンバーグら、英国特許公開第２  ２７２  ４４０（Ａ）号、ロンバーグら、Ｎａｔｕｒｅ、第３６８号、８５６〜８５９頁（１９９４）、テイラー（Taylor）ら、Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、６（４）、５７９〜５９１頁（１９９４年）、グリーン（Green）ら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ、７巻、１３〜２１頁（１９９４年）、メンデス（Mendez）ら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ、１５巻、１４６〜１５６頁（１９９７年）、テイラー（Taylor）ら、Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、２０（２３）、６２８７〜６２９５頁（１９９２年）、ツュアイヨン（Tuaillon）ら、米国科学アカデミー紀要（Proc. Natl. Acad. Sci.）、９０（８）、３７２０〜３７２４頁（１９９３年）、ロンバーグら、Ｉｎｔ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ、１３（１）、６５〜９３頁（１９９５年）及びフィッシュワルド（Fishwald）ら、Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ、１４（７）、８４５〜８５１頁（１９９６年）が挙げられるが、これらに限定されない、これらは当該技術分野において周知である）。一般に、これらのマウスは、機能的に再構成されているか、又は機能的に再構成され得る、少なくとも１つのヒト免疫グロブリン遺伝子座からのＤＮＡを含む少なくとも１つの導入遺伝子を含む。このようなマウスの内因性免疫グロブリン遺伝子座を分断又は欠失させて、内因性遺伝子によりコードされた抗体を生成する動物の能力をなくすことができる。
【００７０】
類似タンパク質又は断片への特異的結合に関する抗体のスクリーニングは、ペプチドディスプレイライブラリを使用して、便利に達成することができる。この方法は、望ましい機能又は構造をもつ個々のメンバーについてペプチドの大規模コレクションをスクリーニングすることを含む。ペプチドディスプレイライブラリの抗体スクリーニングは、当該技術分野において周知である。ディスプレイされたペプチド配列の長さは、３〜５０００個又はそれ以上のアミノ酸、しばしば５〜１００個のアミノ酸、更にしばしば約８〜２５個のアミノ酸であり得る。ペプチドライブラリを作製するための直接的な化学合成方法に加えて、いくつかの組み換えＤＮＡ方法も記述されている。１つのタイプには、バクテリオファージ又は細胞の、表面上のペプチド配列のディスプレイが関与している。各バクテリオファージ又は細胞は、特定のディスプレイされたペプチド配列をコードするヌクレオチド配列を含有する。このような方法は、国際公開第９１／１７２７１号、同第９１／１８９８０号、同第９１／１９８１８号、及び同第９３／０８２７８号に記載されている。ペプチドのライブラリを作製するための他のシステムは、インビトロ化学合成及び組み換え方法の両方の局面を有する。国際公開第９２／０５２５８号、同第９２／１４８４３号、及び同第９６／１９２５６号を参照のこと。米国特許第５，６５８，７５４号及び同第５，６４３，７６８号も参照のこと。ペプチドディスプレイライブラリ、ベクター及びスクリーニングキットはインビトロゲン（Invitrogen）（カリフォルニア州カールスバッド（Carlsbad））及びケンブリッジ・アンチボディー・テクノロジーズ（Cambridge antibody Technologies）（英国、ケンブリッジシャー（Cambridgeshire））のような供給元から市販されている。例えば、米国特許第４７０４６９２号、同第４９３９６６６号、同第４９４６７７８号、同第５２６０２０３号、同第５４５５０３０号、同第５５１８８８９号、同第５５３４６２１号、同第５６５６７３０号、同第５７６３７３３号、同第５７６７２６０号、同第５８５６４５６号（エンゾン（Enzon））；米国特許第５２２３４０９号、同第５４０３４８４号、同第５５７１６９８号、同第５８３７５００号（ダイアックス（Dyax））；米国特許第５４２７９０８号、同第５５８０７１７（アフィマックス（Affymax））；米国特許第５８８５７９３号（ケンブリッジ・アンチボディー・テクノロジーズ（Cambridge antibody Technologies））；米国特許第５７５０３７３号（ジェネンテック（Genentech））；米国特許第５６１８９２０号、同第５５９５８９８号、同第５５７６１９５号、同第５６９８４３５号、同第５６９３４９３号、同第５６９８４１７号（エクソマ（Xoma））；コリガン（Colligan）、上記；オースベル（Ausubel）、上記；又はサムブルック（Sambrook）、上記を参照のこと、上述の特許及び刊行物のそれぞれは、当該技術分野において周知である。
【００７１】
本発明の抗体は、乳汁中でこのような抗体を生成するヤギ、ウシ、ウマ、ヒツジ等のトランスジェニック動物又は哺乳類を提供するために、少なくとも１つの抗アミロイド抗体をコードする核酸を使用して調製することができる。かかる動物は、周知の方法を使用して提供され得る。例えば、限定されないが、米国特許第５，８２７，６９０号、同第５，８４９，９９２号、同第４，８７３，３１６号、同第５，８４９，９９２号、同第５，９９４，６１６号、同第５，５６５，３６２号、同第５，３０４，４８９等を参照のこと、これらのそれぞれは当該技術分野において周知である。
【００７２】
本発明の抗体は、更に、植物の一部又はそれから培養される細胞中でかかる抗体、特異的部分又は変異体を生成する、トランスジェニック植物及び培養植物細胞（例えば、限定するものではないが、タバコ及びトウモロコシ）を提供するために、少なくとも１つの抗アミロイド抗体をコードする核酸を使用して調製することができる。非限定的な例として、組み換えタンパク質を発現するトランスジェニックタバコ葉は、例えば、誘導性プロモーターを使用して、大量の組み換えタンパク質を提供するためにうまく使用されている。例えばクラマー（Cramer）ら、Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐ．Ｍｉｃｒｏｂｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、２４０巻、９５〜１１８頁（１９９９年）、及びその中で引用された参考文献を参照のこと。またトランスジェニックトウモロコシを用いて、他の組み換え系において生成されるか、又は天然源から精製されるものと同等の生物活性を有する哺乳類タンパク質を、商業生産レベルで発現させている。例えばフッド（Hood）ら、Ａｄｖ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．、４６４巻、１２７〜１４７頁（１９９９年）及びその中に引用されている参考文献を参照のこと。単鎖抗体（ｓｃＦＶ’ｓ）のような抗体断片を含む抗体はまた、タバコ種子及びジャガイモ塊茎を含む、トランスジェニック植物の種子から大量に生成されている。例えばコンラッド（Conrad）ら、Ｐｌａｎｔ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、３８巻、１０１〜１０９頁（１９９８年）及びその中で引用された参考文献を参照のこと。したがって、本発明の抗体は、既知の方法に基づいて、トランスジェニック植物を使用して生成することもできる。例えばフィッシャー（Fischer）ら、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、第３０号、９９〜１０８頁（１９９９年１０月）、マ（Ma）ら、Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．、第１３号、５２２〜７頁（１９９５年）；マ（Ma）ら、Ｐｌａｎｔ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．、第１０９号、３４１〜６頁（１９９５年）；ホワイトラム（Whitelam）ら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓ．、第２２号、９４０〜９４４頁（１９９４年）；及びその中で引用された参考文献を参照されたい。また、限定されないが、抗体の植物発現に関して一般的なものを参照のこと。上記参考文献はそれぞれ当該技術分野において周知である。
【００７３】
本発明の抗体は、広範な親和性（ＫD）を持つヒトアミロイドに結合することができる。好適な実施形態においては、本発明の少なくとも１つのヒトｍＡｂは、所望により、ヒトアミロイドと高い親和性で結合することができる。例えば、ヒトｍＡｂは、約１０-7Ｍ以下のＫDで、ヒトアミロイドと結合することができ、例えば０．１〜９．９（又はその中の任意の範囲若しくは値）×１０-7、１０-8、１０-9、１０-10、１０-11、１０-12、１０-13又はその中の任意の範囲若しくは値等であるが、これらに限定されない。
【００７４】
抗原に対する抗体の親和性又は結合活性は、任意の適切な方法を用いて実験的に決定可能である。（例えば、ベルゾフスキー（Berzofsky）ら、「抗体−抗原相互作用（Antibody-Antigen Interactions）」、基礎免疫学（Fundamental Immunology）、ポール（Paul），Ｗ．Ｅ．編、レイブン・プレス（Raven Press）、ニューヨーク州ニューヨーク（１９８４年）；カビー，ジャニス（Kuby, Janis）、「免疫学（Immunology）」Ｗ．Ｈ．フリーマン社（W.H. Freeman and Company）ニューヨーク州ニューヨーク（１９９２年）；及び本明細書に記載されている方法を参照されたい）。異なる条件（例えば、塩濃度、ｐＨ）下で測定される場合、特定の抗体抗原相互作用の測定される親和性は異なる場合がある。したがって、親和性及び他の抗原結合パラメータ（例えば、ＫD、Ｋa、Ｋd）の測定は、好ましくは、抗体及び抗原の標準化溶液、及び本明細書で記載される緩衝剤等の標準化緩衝剤を用いて行われる。
【００７５】
核酸分子
配列番号４２〜４９及び／又は５３〜６０の少なくとも１つの隣接アミノ酸の少なくとも７０〜１００％をコードするヌクレオチド配列等の、本明細書で提供される情報を使用して、特異的断片、その変異体若しくは共通配列、又はこれらの配列の少なくとも１つを含む蓄積した（deposited）ベクター、少なくとも１つの抗アミロイド抗体をコードする本発明の核酸分子は、本明細書に記載の方法又は当該技術分野において既知の方法を用いて得ることができる。
【００７６】
本発明の核酸分子は、ｍＲＮＡ、ｈｎＲＮＡ、ｔＲＮＡ若しくは任意の他の形態のようなＲＮＡ、又はクローニングにより得られる若しくは合成的に生成されるｃＤＮＡ及びゲノムＤＮＡが挙げられるがこれらに限定されないＤＮＡの形態、又はこれらの任意の組み合わせであってもよい。ＤＮＡは、三本鎖、二本鎖、若しくは一本鎖、又はこれらの任意の組み合わせであってもよい。ＤＮＡ又はＲＮＡの少なくとも１本の鎖の任意の部分は、センス鎖としても知られるコード鎖であってもよく、又はアンチセンス鎖と呼ばれる、非コード鎖であってもよい。
【００７７】
本発明の単離核酸分子は、本明細書に記載のように、及び／又は当該技術分野において既知のように、所望により１つ以上のイントロンを有するオープン・リーディング・フレーム（ＯＲＦ）を含む核酸分子（例えば、少なくとも１つの重鎖（例えば配列番号４２〜４４、５３〜５５）又は軽鎖（例えば配列番号４５〜４７、５６〜５８）のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及び／又はＣＤＲ３といった少なくとも１つのＣＤＲの少なくとも１つの特異的部分であるが、これらに限定されない）；配列番号５１、５２、６１、及び６２が挙げられるがこれらに限定されない抗アミロイド抗体又は可変領域（例えば、配列番号４８Ａ〜Ｉ、４９Ａ〜Ｍ、５９、６０）のコード配列を含む核酸分子；及び、上記に説明されているものとは実質的に異なるヌクレオチド配列を含むが、遺伝コードの縮重に起因して、更に少なくとも１つの抗アミロイド抗体をコードする核酸分子を含んでもよい。当然のことながら、遺伝コードは、当該技術分野においてよく知られている。したがって、当業者には、本発明の特異的な抗アミロイド抗体をコードする、これらの変性核酸変異体を作製することは、日常的である。例えば上記のオースベル（Ausubel）らを参照されたく、かかる核酸変異体は、本発明に含まれる。
【００７８】
本明細書に記載のように、抗アミロイド抗体をコードする核酸を含む本発明の核酸分子としては、単独で抗体断片のアミノ酸配列をコードするもの；全抗体又はその一部分についてのコード配列；抗体、断片又は一部分についてのコード配列並びに付加的配列、例えばスプライシング及びポリアデニル化シグナルを含む（例えばリボソーム結合及びｍＲＮＡの安定性）、転写、ｍＲＮＡプロセッシングにおいてある役割を果たす転写された非翻訳配列といった非コーディング５’及び３’配列が挙げられるが、これらに限定されない、付加的な非コード配列を伴う、少なくとも１つのイントロン等の、前述の付加的なコード配列を有する又は有しない、少なくとも１つのシグナルリーダー又は融合ペプチドのコード配列；付加的なアミノ酸（例えば付加的な機能を提供するもの等）をコードする付加的なコード配列を挙げることができるが、これらに限定されない。したがって、抗体をコードする配列は、抗体断片又は部分を含む融合した抗体の精製を促進するペプチドをコードする配列等のマーカー配列に融合することができる。
【００７９】
本明細書に記載のようなポリヌクレオチドに選択的にハイブリダイズするポリヌクレオチド
本発明は、本明細書で開示されるポリヌクレオチドに対して、選択的なハイブリダイゼーション条件下でハイブリダイズする単離核酸を提供する。したがって、本実施形態のポリヌクレオチドは、このようなポリヌクレオチドを含む核酸を単離、検出、及び／又は定量するために使用することができる。例えば、本発明のポリヌクレオチドを使用して、蓄積されたライブラリにおける部分又は完全長クローンを同定、単離、又は増幅することができる。いくつかの実施形態においては、ポリヌクレオチドは、単離された、又はそうでなければヒト若しくは哺乳類の核酸ライブラリからのｃＤＮＡに相補的な、ゲノム配列又はｃＤＮＡ配列である。
【００８０】
好ましくは、ｃＤＮＡライブラリは完全長配列の少なくとも８０％、好ましくは完全長配列の少なくとも８５％又は９０％、より好ましくは完全長配列の少なくとも９５％を含む。ｃＤＮＡライブラリは、稀な配列の発現量を増大させるために正規化してもよい。相補的な配列に対して低い配列同一性をもつ配列とともに使用される、ストリンジェンシーが低度又は中程度のハイブリダイゼーション条件が典型的であるが、排他的ではない。ストリンジェンシーが中程度及び高度の条件は、所望により、より高い同一性をもつ配列に対して使用することができる。低ストリンジェンシー条件は、約７０％の配列同一性をもつ配列の選択的ハイブリダイゼーションを可能にし、オルソロガス又はパラロガス配列を同定するために利用できる。
【００８１】
所望により、本発明のポリヌクレオチドは本明細書に記載されているポリヌクレオチドによってコードされる抗体の少なくとも１つの部分をコードする。本発明のポリヌクレオチドは、本発明の抗体をコードするポリヌクレオチドに対する選択的ハイブリダイゼーションのために利用可能な核酸配列を包含する。例えば、当該技術分野において周知であるような、オースベル（Ausubel）、上記；コリガン（Colligan）、上記を参照のこと。
【００８２】
核酸のコンストラクション
本発明の単離核酸は、当該技術分野において周知であるように、（ａ）組み換え方法、（ｂ）合成技術、（ｃ）精製技術、又はそれらの組み合わせを使用して作製することができる。
【００８３】
核酸は、本発明のポリヌクレオチドに加えて、便利に配列を含むことができる。例えば、１つ以上のエンドヌクレアーゼ制限酵素認識部位を含むマルチクローニングサイトを、核酸に挿入して、ポリヌクレオチドの単離に役立てることができる。また、翻訳可能な配列を挿入して、本発明の翻訳されたポリヌクレオチドの単離に役立てることができる。例えば、ヘキサヒスチジンマーカー配列は、本発明のタンパク質を精製するための便利な手段を提供する。本発明の核酸（コード配列を除く）は、所望により、本発明のポリヌクレオチドのクローニング及び／又は発現のためのベクター、アダプター、又はリンカーである。
【００８４】
追加の配列をかかるクローニング及び／又は発現配列に付加して、クローニング及び／又は発現におけるそれらの機能を最適化し、ポリヌクレオチドの単離に役立てることができるか、又は細胞へのポリヌクレオチドの導入を改善することができる。クローニングベクター、発現ベクター、アダプター、及びリンカーの使用は、当該技術分野において周知である（例えば、オースベル（Ausubel）、上記；又はサムブルック（Sambrook）、上記を参照のこと）。
【００８５】
核酸を構築するための組み換え方法
例えば、ＲＮＡ、ｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ、又はこれらの任意の組み合せのような本発明の単離核酸組成物は、当業者に既知の任意の数のクローニング手順を用いて生物源から得ることができる。いくつかの実施形態において、本発明のポリヌクレオチドに対してストリンジェントな条件下で選択的にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドプローブが、ｃＤＮＡ又はゲノムＤＮＡライブラリ内の望ましい配列を同定するために使用される。ＲＮＡの単離、及びｃＤＮＡ及びゲノムライブラリの構築は、当業者にとって周知である（例えば、オースベル（Ausubel）、上記；又はサムブルック（Sambrook）、上記を参照されたい）。
【００８６】
核酸のスクリーニング及び単離方法
本明細書で開示されているような、本発明のポリヌクレオチドの配列に基づいたプローブを用いて、ｃＤＮＡ又はゲノムライブラリをスクリーニングすることができる。プローブを使用して、同じ又は異なる生体内の相同遺伝子を単離するため、ゲノムＤＮＡ又はｃＤＮＡ配列にハイブリダイズさせることができる。当業者であれば、アッセイ中でさまざまな度合のハイブリダイゼーションストリンジェンシーを用いることができ、ハイブリダイゼーション又は洗浄媒質のいずれかがストリンジェントであり得るということは明らかだろう。ハイブリダイゼーションのための条件がストリンジェントになるにつれて、二重鎖形成が生じるための、プローブと標的の間に必要な相補性の程度は大きくなるはずである。ストリンジェンシーの程度は、温度、イオン強度、ｐＨ、及びホルムアミドのような部分的に変性溶媒の存在のうちの、１つ又はそれ以上によって制御され得る。例えば、ハイブリダイゼーションのストリンジェンシーは、例えば０％〜５０％の範囲内のホルムアミド濃度の操作を通して反応溶液の極性を変えることにより都合良く変更される。検出可能な結合のために必要な相補性（配列同一性）の程度は、ハイブリダイゼーション媒質及び／又は洗浄媒質のストリンジェンシーに応じて変化する。相補の程度は、最適には１００％、又は７０〜１００％、又はその中の任意の範囲若しくは値である。しかしながら、プローブ及びプライマー内のわずかな配列変動は、ハイブリダイゼーション及び／又は洗浄媒質のストリンジェンシーを低下させることで補償できるということを理解すべきである。
【００８７】
ＲＮＡ又はＤＮＡの増幅方法は、当該技術分野において周知であり、本明細書で紹介する教示及び指針に基づいて、過度の実験なしに、本発明に従って使用可能である。
【００８８】
既知のＤＮＡ又はＲＮＡ増幅方法としては、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）及び関連する増幅プロセス（例えば、米国特許第４，６８３，１９５号、同第４，６８３，２０２号、同第４，８００，１５９号、同第４，９６５，１８８号（マリス（Mullis）ら）；同第４，７９５，６９９号、及び同第４，９２１，７９４号（タボール（Tabor）ら）；同第５，１４２，０３３号（イニス（Innis））；同第５，１２２，４６４号（ウィルソン（Wilson）ら）；同第５，０９１，３１０号（イニス）；同第５，０６６，５８４号（ギレンステン（Gyllensten）ら）；同第４，８８９，８１８号（ゲルファンド（Gelfand）ら）；同第４，９９４，３７０号（シルバー（Silver）ら）；同第４，７６６，０６７号（ビスワス（Biswas））；同第４，６５６，１３４号（リンゴールド（Ringold））及び二本鎖ＤＮＡ合成のためのテンプレートとして標的配列に対するアンチセンスＲＮＡを用いるＲＮＡ媒介増幅（米国特許第５，１３０，２３８号（マレック（Malek）ら）、商標ＮＡＳＢＡ）が挙げられるがこれらに限定されず、これらの参考文献の全内容は参照により本明細書に組み込まれる。（例えば、オースベル（Ausubel）、上記；又はサムブルック（Sambrook）、上記を参照されたい）。
【００８９】
例えば、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）技術を用いて、ゲノムＤＮＡ又はｃＤＮＡライブラリから直接、本発明のポリヌクレオチド及び関連する遺伝子の配列を増幅することができる。ＰＣＲ及び他のインビトロ増幅方法はまた、例えば、発現すべきタンパク質をコードする核酸配列をクローン化する、サンプル中の所望のｍＲＮＡの存在を検出するため、核酸の配列決定のため、又は他の目的のためのプローブとして用いるための核酸を作製するのに有用である場合がある。インビトロ増幅方法を通して当業者を導くのに十分な技術の例は、ベルガー（Berger）、上記、サムブルック（Sambrook）、上記、及びオースベル（Ausubel）、上記、並びにマリス（Mullis）ら、米国特許第４，６８３，２０２号（１９８７年）；及びイニス（Innis）ら、ＰＣＲプロトコル方法及び用途への手引き（PCR Protocols A Guide to Methods and Applications）編、アカデミック・プレス（Academic Press Inc.）、カリフォルニア州サンディエゴ（San Diego）、（１９９０年）中に見られる。ゲノムＰＣＲ増幅用の市販キットは当該技術分野において既知である。例えば、アドバンテージ−ＧＣゲノミックＰＣＲキット（Advantage-GC Genomic PCR Kit）（クローンテック（Clontech））を参照のこと。更に、例えば、Ｔ４遺伝子３２タンパク質（ベーリンガー・マンハイム（Boehringer Mannheim））を用いて、長いＰＣＲ産物の収率を改善することができる。
【００９０】
核酸を構築するための合成方法
本発明の単離核酸は、既知の方法による直接化学合成によっても調製可能である（例えば、オースベル（Ausubel）ら、上記を参照）。化学合成は、一般に、相補的配列とのハイブリダイゼーション、又は１本鎖をテンプレートとして使用するＤＮＡポリメラーゼでの重合によって、２本鎖ＤＮＡに変換可能な１本鎖オリゴヌクレオチドを生成する。当業者であれば、ＤＮＡの化学合成が約１００以上の塩基の配列に限定され得る一方で、より長い配列は、より短い配列のライゲーションによって得られ得ることを認識するであろう。
【００９１】
組み換え発現カセット
本発明は、本発明の核酸を含む組み換え発現カセットを更に提供する。本発明の核酸配列、例えば本発明の抗体をコードするｃＤＮＡ又はゲノム配列を用いて、少なくとも１種の所望の宿主細胞に導入できる組み換え発現カセットを構築することができる。組み換え発現カセットは、典型的には、意図される宿主細胞においてポリヌクレオチドの転写を導く、転写開始調節配列に機能的に連結される、本発明のポリヌクレオチドを含む。異種及び非異種（すなわち、内因性）プロモーターの両方を使用して、本発明の核酸の発現を導くことができる。
【００９２】
いくつかの実施形態では、プロモーター、エンハンサー、又は他の構成要素として機能する単離核酸を、本発明のポリヌクレオチドの発現を上方又は下方調節するために、本発明のポリヌクレオチドの非異種形の適切な位置（上流、下流、又はイントロン内）に導入することができる。例えば、内因性プロモーターを、突然変異、欠失、及び／又は置換により、インビボ又はインビトロで改変することができる。
【００９３】
ベクター及び宿主細胞
本発明は、本発明の単離核酸分子を含むベクター、組み換えベクターで遺伝子組み換えされている宿主細胞、及び当該技術分野において周知であるような組み換え技術による少なくともつの抗アミロイド抗体の生成にも関連する。例えば、当該技術分野におい周知である、サムブルック（Sambrook）ら、上記；オースベル（Ausubel）ら、上記を参照のこと。
【００９４】
ポリヌクレオチドは、所望により、宿主の増殖についての選択マーカーを含有するベクターに連結することができる。一般に、プラスミドベクターは、リン酸カルシウム沈殿物のような沈殿物内、又は荷電脂質との複合体内に導入される。ベクターがウイルスである場合は、適切なパッケージング細胞株を用いてインビトロでこれをパッケージングし、その後、宿主細胞内に形質導入することができる。
【００９５】
ＤＮＡ挿入物は、適切なプロモーターに機能的に連結されるべきである。発現コンストラクトは更に、転写開始、終結のための部位、及び転写された領域に、翻訳のためのリボソーム結合部位を含む。コンストラクトにより発現する成熟した転写産物のコード部分は、好ましくは、翻訳されるべきｍＲＮＡの最後に適切に位置する開始及び終止コドン（例えば、ＵＡＡ、ＵＧＡ、又はＵＡＧ）で始まる翻訳を含み、哺乳類又は真核生物細胞の発現ではＵＡＡ及びＵＡＧが好ましい。
【００９６】
発現ベクターは、好ましくは少なくとも１つの選択可能なマーカーを含むが、これは任意である。このようなマーカーとしては、例えば、メトトレキサート（ＭＴＸ）、ジヒドロ葉酸還元酵素（ＤＨＦＲ、米国特許第４，３９９，２１６号；同第４，６３４，６６５号；同第４，６５６，１３４号；同第４，９５６，２８８号；同第５，１４９，６３６号；同第５，１７９，０１７号）、アンピシリン、ネオマイシン（Ｇ４１８）、ミコフェノール酸、又は真核細胞培養に耐性のあるグルタミン合成酵素（ＧＳ、米国特許第５，１２２，４６４号；同第５，７７０，３５９号；同第５，８２７，７３９号）、並びに、大腸菌及び他の細菌又は原核生物において培養するためのテトラサイクリン又はアンピシリン耐性遺伝子が挙げられるが、これらに限定されない（上記の特許は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。上記の宿主細胞に対して適切な培養培地及び条件は、当該技術分野において既知である。適切なベクターは、当事者にとって容易に明白となる。ベクターコンストラクトの宿主細胞への導入は、リン酸カルシウムトランスフェクション、ＤＥＡＥ−デキストラン媒介トランスフェクション、カチオン性脂質媒介トランスフェクション、エレクトロポレーション、形質導入、感染、又は他の既知の方法により影響を受ける場合がある。このような方法については、サムブルック（Sambrook）、上記、第１〜４及び１６〜１８章；オースベル（Ausubel）、上記、第１、９、１３、１５、１６章等のように、当該技術分野において記述されている。
【００９７】
本発明の少なくとも１つの抗体は、融合タンパク質等の改変された形態で発現することができ、分泌シグナルだけでなく、追加の異種機能領域も含み得る。例えば、付加アミノ酸の領域、特に荷電アミノ酸を抗体のＮ末端に付加して、精製中又は次の処理及び保存中に、宿主細胞における安定性及び持続性を改善することができる。また、ペプチド部分を本発明の抗体に追加して、精製を促進することもできる。抗体又は少なくとも１つのその断片の最終調製前に、かかる領域を除去することができる。このような方法は、サムブルック（Sambrook）、上記、１７．２９〜１７．４２及び１８．１〜１８．７４章、オースベル（Ausubel）、上記、１６、１７及び１８章のような、多くの標準的な実験室マニュアルに記載されている。
【００９８】
当業者であれば、本発明のタンパク質をコードする核酸の発現に利用可能な多数の発現系について精通している。
【００９９】
別の方法としては、本発明の核酸は、本発明の抗体をコードする内因性ＤＮＡを含む宿主細胞内で、（操作により）作動させることにより、宿主細胞中で発現させることができる。このような方法は、当該技術分野において周知であるように、例えば米国特許第５，５８０，７３４号、同第５，６４１，６７０号、同第５，７３３，７４６号、及び同第５，７３３，７６１号に記載されているように、当該技術分野において周知である。
【０１００】
抗体、その特異的部分又は変異体の生成にとって有用な細胞培養の一例としては哺乳類細胞がある。哺乳類細胞系は、しばしば単層の細胞の形をとるが、哺乳類細胞の懸濁液又はバイオリアクターも使用可能である。無傷なグリコシル化タンパク質を発現可能な多数の適切な宿主細胞株が当該技術分野において開発されており、これにはＣＯＳ−１（例えばＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １６５０）、ＣＯＳ−７（例えばＡＴＣＣ  ＣＲＬ−１６５１）、ＨＥＫ２９３、ＢＨＫ２１（例えばＡＴＣＣ  ＣＲＬ−１０）、ＣＨＯ（例えばＡＴＣＣ  ＣＲＬ１６１０）及びＢＳＣ−１（例えばＡＴＣＣ  ＣＲＬ−２６）細胞株、Ｃｏｓ−７細胞、ＣＨＯ細胞、ｈｅｐ  Ｇ２細胞、Ｐ３Ｘ６３Ａｇ８．６５３、ＳＰ２／０−Ａｇ１４、２９３細胞、ＨｅＬａ細胞等が挙げられ、これらは例えば、アメリカ培養細胞系統保存機関（American Type Culture Collection）、バージニア州マナッサス（Manassas）、（ｗｗｗ．ａｔｃｃ．ｏｒｇ）から容易に入手できる。宿主細胞には、骨髄腫及びリンパ腫細胞等のリンパ系起源の細胞を含む。宿主細胞はＰ３Ｘ６３Ａｇ８．６５３細胞（ＡＴＣＣ寄託番号ＣＲＬ−１５８０）及びＳＰ２／０−Ａｇ１４細胞（ＡＴＣＣ寄託番号ＣＲＬ−１８５１）である。特に好ましい実施形態では、組み換え細胞は、Ｐ３Ｘ６３Ａｂ８．６５３又はＳＰ２／０−Ａｇ１４細胞である。
【０１０１】
これらの細胞の発現ベクターは、以下の発現制御配列の１つ以上を含んでよく、例えば、複製起点；プロモーター（例えば、後期又は早期ＳＶ４０プロモーター、ＣＭＶプロモーター（米国特許第５，１６８，０６２号、同第５，３８５，８３９号）、ＨＳＶｔｋプロモーター、ｐｇｋ（ホスホグリセリン酸キナーゼ）プロモーター、ＥＦ−１αプロモーター（米国特許第５，２６６，４９１号）、少なくとも１つのヒト免疫グロブリンプロモーター；エンハンサー、並びに／又はリボソーム結合部位、ＲＮＡスプライス部位、ポリアデニル化部位（例えば、ＳＶ４０大型ＴＡｇポリＡ追加部位）、及び転写終結配列等の、プロセッシング情報部位を含むが、これらに限定されない。例えば、オースベル（Ausubel）ら、上記；サムブルック（Sambrook）ら、上記を参照のこと。本発明の核酸又はタンパク質の生成に有用な他の細胞は既知であり、及び／又は、例えば、アメリカ培養細胞系統保存機関（American Type Culture Collection）の細胞株及びハイブリドーマのカタログ（ｗｗｗ．ａｔｃｃ．ｏｒｇ）若しくは他の既知の若しくは商業的供給源から入手可能である。
【０１０２】
真核宿主細胞が利用されるとき、典型的には、ベクター内にポリアデニル化又は転写終結配列が組み込まれる。終結配列の一例は、ウシ成長ホルモン遺伝子からのポリアデニル化配列である。転写の正確なスプライシングのための配列も、同様に含めることができる。スプライシング配列の一例は、ＳＶ４０由来のＶＰ１イントロンである（スプラージ（Sprague）ら、Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．、第４５号、７７３〜７８１頁（１９８３年））。更に、宿主細胞内の複製を制御するための遺伝子配列を、当該技術分野において既知の通りに、ベクター内に組み込むことができる。
【０１０３】
抗体の精製
抗アミロイド抗体は、プロテインＡ精製、硫酸アンモニウム又はエタノール沈殿、酸抽出、アニオン又はカチオン交換クロマトグラフィー、ホスホセルロースクロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、親和性クロマトグラフィー、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィー、及びレクチンクロマトグラフィーを含むが、これらに限定されない、周知の方法により、組み換え細胞培養から回収し精製することができる。高速液体クロマトグラフィー（「ＨＰＬＣ」）を精製に利用することもできる。例えば、当該技術分野において周知であるように、コリガン（Colligan）、「免疫学の最新プロトコル（Current Protocols in Immunology）」、又は「タンパク質科学の最新プロトコル（Current Protocols in Protein Science）」ジョン・ワイリー＆サンズ社（John Wiley & Sons, Inc.）（ニューヨーク州ニューヨーク）（１９９７〜２００１年）の、例えば１、４、６、８、９、１０章を参照のこと。
【０１０４】
本発明の抗体には、天然に精製された産物、化学合成手順の産物、及び例えば酵母、高等植物、昆虫及び哺乳類細胞を含む真核生物宿主から組み換え技術により生成された産物が含まれる。組み換え生成手順において利用される宿主に応じて、本発明の抗体は、グリコシル化されていてもよく、又はグリコシル化されていなくてもよいが、グリコシル化されていることが好ましい。このような方法については数多くの標準的な実験室マニュアル、例えばサムブルック（Sambrook）、上記、第１７．３７〜１７．４２章；オースベル（Ausubel）、上記、第１０、１２、１３、１６、１８、及び２０章、コリガン「タンパク質の科学（Protein Science）」、上記、第１２〜１４章の中で記載されており、これらは当該技術分野において周知である。
【０１０５】
抗アミロイド抗体
本発明の単離された抗体は、任意の適切なポリヌクレオチドによってコードされた本明細書で開示されている抗体アミノ酸配列、又は任意の単離若しくは調製された抗体を含む。好ましくは、ヒト抗体又は抗原結合断片はヒトアミロイドと結合し、これにより、部分的又は実質的に、このタンパク質の少なくとも１つの生物活性を中和する。少なくとも１つのアミロイドタンパク質又は断片の少なくとも１つの生物活性を、部分的に又は好ましくは実質的に中和する抗体又はその特異的部分若しくはそれらの変異体は、このタンパク質又は断片に結合し、これによりアミロイドのアミロイド受容体に対する結合を通して、又はその他のアミロイド依存性又は媒介型機序を通して、媒介される活性を阻害することができる。本明細書で使用するとき、「中和抗体」という用語は、アッセイに応じて約２０〜１２０％、好ましくは少なくとも約１０、２０、３０、４０、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００％又はそれ以上、アミロイド依存性活性を阻害できる抗体を意味する。アミロイド依存性活性を阻害する抗アミロイド抗体の能力は、好ましくは、本明細書に記載のように及び／又は当該技術分野において既知のように、少なくとも１つの適切なアミロイドタンパク質又は受容体アッセイによって評価される。本発明のヒト抗体は、いずれのクラス（ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＤ等）又はアイソタイプのものであってもよく、カッパ又はラムダ軽鎖を含み得る。一実施形態においては、ヒト抗体は、ＩｇＧ重鎖又は定義された断片、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４の、少なくとも１つのアイソタイプを含む。この種の抗体は、本明細書に記載のように及び／又は当該技術分野において既知であるように、少なくとも１本のヒト軽鎖（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＡ、及びＩｇＭ（例えば、γ１、γ２、γ３、γ４）導入遺伝子を含む、トランスジェニックマウス又は他のトランスジェニック非ヒト哺乳類を使用することにより調製できる。別の実施形態において、抗ヒトアミロイドヒト抗体はＩｇＧ１重鎖及びＩｇＧ１軽鎖を含む。
【０１０６】
本発明の少なくとも１つの抗体は、少なくともつのアミロイドタンパク質、そのサブユニット、断片、一部分又はそれらの任意の組み合せに特異的な、少なくとも１つの特異的エピトープと結合する。この少なくとも１つのエピトープは、タンパク質の少なくとも一部分を含む少なくとも１つの抗体結合領域を含むことが可能であり、このエピトープは好ましくは、タンパク質の少なくとも１つの細胞外、可溶性、親水性、外部、又は細胞質部分から構成されている。少なくとも１つの特異的エピトープは、配列番号５０の隣接アミノ酸の少なくとも１〜３のアミノ酸から特異的部分全体の少なくとも１つのアミノ酸配列の任意の組み合わせを含んでもよい。非限定的な例として、本発明の抗体は、配列番号５０のアミノ酸２〜７、３〜８、３３〜４２、及び／又は３４〜４０の結合を示した。
【０１０７】
一般に、本発明のヒト抗体又は抗原結合断片は、少なくとも１つの重鎖可変領域の少なくとも１つのヒト相補性決定領域（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３）、又は変異体及び少なくとも１つの軽鎖可変領域の少なくとも１つのヒト相補性決定領域（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３）、又は変異体を含む抗原結合領域を含むようになる。非限定的な例として、抗体若しくは抗原結合部又は変異体は、配列番号４４のアミノ酸配列を有する重鎖ＣＤＲ３、及び／又は配列番号４７のアミノ酸配列を有する軽鎖ＣＤＲ３のうち少なくとも１つを含んでもよい。特定の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は、対応するＣＤＲ１、２及び／又は３のアミノ酸配列（例えば配列番号４２、４３及び／又は４４；５３、５３、及び／又は５５）を有する少なくとも１つの重鎖ＣＤＲ（すなわちＣＤＲ１、ＣＤＲ２及び／又はＣＤＲ３）の少なくとも一部分を含む抗原結合領域を有することができる。別の特定の実施形態において、抗体若しくは抗原結合部分又は変異体は、対応するＣＤＲ１、２及び／又は３のアミノ酸配列（例えば配列番号４５、４６及び／又は４７；５６、５７及び／又は５８）を有する少なくとも１つの軽鎖ＣＤＲ（すなわちＣＤＲ１、ＣＤＲ２及び／又はＣＤＲ３）の少なくとも一部分を含む抗原結合領域を有することができる。好ましい実施形態では、抗体又は抗原結合断片の３つの重鎖ＣＤＲ及び３つの軽鎖ＣＤＲは、本明細書に記載のような、ｍＡｂ  Ｃ７０６（ＣＮＴＯ２１２５）の少なくとも１つの対応するＣＤＲのアミノ酸配列を有する。かかる抗体は、組み換えＤＮＡ技術の従来技術を使用して抗体をコードする（すなわち、１つ以上の）核酸分子を調製する及び発現させることによって、又は任意の他の適切な方法を使用することによって、従来技術を使用して、抗体の様々な部分（例えば、ＣＤＲ、フレームワーク部分）を一緒に化学的に連結させることにより調製できる。
【０１０８】
抗アミロイド抗体は、画定されたアミノ酸配列を有する重鎖又は軽鎖可変領域のうちの少なくとも１つを含み得る。例えば、任意のサブクラス又は任意の組み合わせ又はその断片に由来する、任意の好適なＩｇ可変配列を用いることができる。このような配列は、当技術分野にて周知である。
【０１０９】
非限定的な例として、代表的な可変配列としては、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＭ等に由来するものが挙げられ、例えば配列番号４８Ａ〜Ｉ、４９Ａ〜Ｍ、及び５９〜６０に提示されているような、Ｉｇサブクラスの任意の組み合わせからの、ＨＣ及びＬＣ、ＦＲ１、ＦＲ２、並びに／又はＦＲ３配列である。
【０１１０】
更に非限定的な例として、好ましい実施形態において、抗アミロイド抗体は、所望により配列番号４８Ａ〜Ｉの少なくとも１つのアミノ酸配列を有する少なくとも１つの重鎖可変領域、及び／又は、所望により配列番号４９Ａ〜Ｍのアミノ酸配列を有する少なくとも１つの軽鎖可変領域のうち、少なくとも１つを含む。別の好ましい実施形態において、抗アミロイド抗体は、所望により配列番号５９のアミノ酸配列を有する少なくとも１つの重鎖可変領域、及び／又は、所望により配列番号６０のアミノ酸配列を有する少なくとも１つの軽鎖可変領域のうち、少なくとも１つを含む。
【０１１１】
ヒトアミロイドに結合し、定義された重鎖又は軽鎖可変領域を含む抗体は、当該技術分野において既知である及び／又は本明細書に記載の、ファージディスプレイ（カツベ（Katsube）Ｙ．ら、Ｉｎｔ  Ｊ  Ｍｏｌ．Ｍｅｄ、１（５）、８６３〜８６８頁（１９９８年））のような好適な方法又はトランスジェニック動物を使用する方法を用いて調製可能である。例えば、機能的に再構成されたヒト免疫グロブリン重鎖導入遺伝子、及び機能的再構成を受けることのできるヒト免疫グロブリン軽鎖遺伝子座からのＤＮＡを含む導入遺伝子を含む、トランスジェニックマウスは、ヒトアミロイド又はその断片で免疫され、抗体の生成を誘発することができる。所望により、本明細書に記載のように、及び／又は当該技術分野において既知のように、抗体生成細胞を単離することができ、ハイブリドーマ又はその他の不死化抗体生成細胞を調製することができる。別の方法として、抗体、特異的部分、又は変異体は、適切な宿主細胞内で、コード核酸又はその一部分を用いて発現することができる。
【０１１２】
本発明はまた、本明細書に記載のアミノ酸配列と実質的に同じである配列内のアミノ酸を含む抗体、抗原結合断片、免疫グロブリン鎖及びＣＤＲに関する。好ましくは、このような鎖又はＣＤＲを含むこのような抗体又は抗原結合断片及び抗体は、高い親和性（例えばＫDが約１０-9Ｍ以下）で、ヒトアミロイドに結合することができる。本明細書に記載の配列と実質的に同じであるアミノ酸配列は、保存的アミノ酸置換、並びにアミノ酸欠失及び／又は挿入を含む、配列を含む。保存的アミノ酸置換とは、第１のアミノ酸のものに類似した化学的及び／又は物理的特性（例えば電荷、構造、極性、疎水性／親水性）をもつ第２のアミノ酸で、第１のアミノ酸を置換することを意味する。保存的置換としては、あるアミノ酸を、リジン（Ｋ）、アルギニン（Ｒ）及びヒスチジン（Ｈ）；アスパラギン酸（Ｄ）及びグルタミン酸（Ｅ）；アスパラギン（Ｎ）、グルタミン（Ｑ）、セリン（Ｓ）、スレオニン（Ｔ）、チロシン（Ｙ）、Ｋ、Ｒ、Ｈ、Ｄ及びＥ；アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）、ロイシン（Ｌ）、イソロイシン（Ｉ）、プロリン（Ｐ）、フェニルアラニン（Ｆ）、トリプトファン（Ｗ）、メチオニン（Ｍ）、システイン（Ｃ）及びグリシン（Ｇ）；Ｆ、Ｗ及びＹ；Ｃ、Ｓ及びＴという群の中の別のアミノ酸に置換することが挙げられる。
【０１１３】
アミノ酸コード
本発明の抗アミロイド抗体を構成するアミノ酸は、略記されることが多い。アミノ酸表記は、１文字コード、３文字コード、名称、又は３つのヌクレオチドのコドンによりアミノ酸を表記することにより示すことができ、当該技術分野においてよく理解されている（アルバーツ（Alberts）Ｂ．ら、細胞の分子生物学（Molecular Biology of The Cell）、第３版、ガーランド・パブリッシング（Garland Publishing, Inc.）、ニューヨーク、１９９４年を参照のこと）。
【０１１４】
【表３】
2011500059.tif 000004
【０１１５】
本発明の抗アミロイド抗体は、本明細書で特定されるように、自然変異又はヒトによる操作のいずれかによる、１つ以上のアミノ酸の置換、欠失、又は付加を含むことができる。
【０１１６】
無論、当業者が行い得るアミノ酸置換の数は、上記のものを含む数多くの要因に依存する。一般的に言えば、任意の所与の抗アミロイド抗体、断片又は変異体について、そのアミノ酸置換、挿入又は欠失の数は、本明細書で特定されるように、例えば１〜３０又はその中の任意の範囲若しくは値といったように、４０、３０、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、１を超えない。
【０１１７】
機能上不可欠である本発明の抗アミロイド抗体内のアミノ酸は、部位特異的突然変異誘発又はアラニンスキャニング突然変異誘発等の、当該技術分野において既知の方法により同定可能である（例えば、オースベル（Ausubel）、上記、第８、１５章；カニンガム（Cunningham）及びウェルズ（Wells）、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４４巻、１０８１〜１０８５頁（１９８９年））。後者の手順は、分子内の全ての残基において単一アラニン突然変異を導入する。次いで、得られた突然変異分子を、例えば少なくとも１つのアミロイド中和活性等であるが、これらに限定されない生物活性について試験する。抗体結合にとってきわめて重要である部位もまた、結晶化、核磁気共鳴又は光親和性標識等の構造分析によって同定することができる（スミス（Smith）らＪ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２４巻、８９９〜９０４頁（１９９２年）、及びドゥヴォス（de Vos）ら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２５５巻、３０６〜３１２頁（１９９２年））。
【０１１８】
本発明の抗アミロイド抗体は、配列番号４２〜４７又は５３〜５８のうち少なくとも１つの、隣接アミノ酸のうち、５個ないし全てのアミノ酸から選択された、少なくとも１つの部分、配列又は組み合せを含みうるが、これらに限定されない。
【０１１９】
抗アミロイド抗体は、所望により更に、配列番号４８Ａ〜Ｉ、４９Ａ〜Ｍ、５９、及び６０のうち少なくとも１つの、隣接アミノ酸の７０〜１００％の少なくとも１つのポリペプチドを含んでもよい。
【０１２０】
１つの実施形態では、免疫グロブリン鎖又はその一部（例えば、可変領域、ＣＤＲ）のアミノ酸配列は、配列番号４８Ａ〜Ｉ、４９Ａ〜Ｍ、５９、及び６０の少なくとも１つの対応する鎖のアミノ酸配列と、約７０〜１００％の同一性（例えば、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、又はこの中の任意の範囲若しくは値）を有する。例えば、軽鎖可変領域のアミノ酸配列は、配列番号４９Ａ〜Ｍ、６０、７０、若しくは８０の配列と比較してもよく、又は重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列は、配列番号４８Ａ〜Ｉ若しくは５９と比較してもよい。好ましくは、７０〜１００％のアミノ酸同一性（すなわち、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、又はこの中の任意の範囲若しくは値）は、当該技術分野において既知であるような、好適なコンピュータアルゴリズムを用いて決定される。
【０１２１】
代表的な重鎖及び軽鎖可変領域の配列は、配列番号４８Ａ〜Ｉ、４９Ａ〜Ｍ、５９、及び６０に提供される。本発明の抗体又はその特定の変異体は、本発明の抗体に由来する任意の数の隣接アミノ酸残基を含んでもよく、その数は抗アミロイド抗体中の隣接残基の数の１０〜１００％からなる整数の群から選択される。任意で、隣接アミノ酸のこの部分配列は、少なくとも約１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、又はそれ以上のアミノ酸長であるか、又はその中の任意の範囲若しくは値である。更に、かかる部分配列の数は、少なくとも２、３、４、又は５等の、１〜２０からなる群から選択される任意の整数であり得る。
【０１２２】
当業者には明らかなように、本発明には、本発明の少なくとも１つの生物的に活性である抗体が含まれる。生物的に活性である抗体は、天然（非合成）、内因性又は関連する、及び既知の抗体のものの、少なくとも２０％、３０％、又は４０％、好ましくは少なくとも５０％、６０％、又は７０％、最も好ましくは少なくとも８０％、９０％又は９５％〜１０００％の比活性を有する。酵素活性及び基質特異性のアッセイ及び定量測定の方法は、当業者にとって周知である。
【０１２３】
改変抗体
別の態様において、本発明は、有機部分の共有結合により改変される、本明細書に記載のような、ヒト抗体及び抗原結合断片に関する。このような改変は、改善された薬物動態特性（例えば、インビボでの血清半減期の増加）を持つ抗体又は抗原結合断片を生成することができる。この有機部分は、直線状又は分岐した親水性ポリマー基、脂肪酸基、又は脂肪酸エステル基であり得る。特定の実施形態においては、親水性ポリマー基は、約８００〜約１２０，０００ダルトンの分子量を有してもよく、ポリアルカングリコール（例えばポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ））、炭水化物ポリマー、アミノ酸ポリマー又はポリビニルピロリドンであってもよく、脂肪酸又は脂肪酸エステル基は、約８〜約４０の炭素原子を含んでもよい。
【０１２４】
本発明の改変された抗体及び抗原結合断片は、直接又は間接的に抗体に共有結合する、１つ又はそれ以上の有機部分を含み得る。本発明の抗体又は抗原結合断片に結合しているそれぞれの有機部分は、独立に、親水性ポリマー基、脂肪酸基、又は脂肪酸エステル基であり得る。本明細書で使用されている「脂肪酸」という用語は、モノカルボン酸及びジカルボン酸を包含する。本明細書で使用されている「親水性ポリマー基」という用語は、オクタンに対するよりも水に対する溶解度が高い有機ポリマーを意味する。例えばポリリシンは、オクタンよりも水に対する溶解度が高い。よって、ポリリシンの共有結合により改変された抗体は、本発明に包含される。本発明の抗体を改変するために適切な親水性ポリマーは、直線状又は分岐状であり得、例えば、ポリアルカングリコール（例えばＰＥＧ、モノメトキシ−ポリエチレングリコール（ｍＰＥＧ）、ＰＰＧ等）、炭水化物（例えばデキストラン、セルロース、オリゴ糖、多糖類等）、親水性アミノ酸のポリマー（例えば、ポリリシン、ポリアルギニン、ポリアスパラギン酸塩等）、ポリアルカンオキシド（例えば、ポリエチレンオキシド、ポリプロピレンオキシド等）、及びポリビニルピロリドンが挙げられる。好ましくは、本発明の抗体を改変する親水性ポリマーは、個別の分子体として、約８００〜約１５０，０００ダルトンの分子量を有する。例えば、ＰＥＧ5000及びＰＥＧ20,000を使用することができ、ここで下付き文字はポリマーの平均分子量（ダルトン）である。親水性ポリマー基は、１〜約６個の、アルキル基、脂肪酸基、又は脂肪酸エステル基と置換され得る。脂肪酸又は脂肪酸エステル基に置換された親水性ポリマーは、適切な方法を利用することによって調製できる。例えば、アミン基を含むポリマーを、脂肪酸又は脂肪酸エステルのカルボン酸塩にカップリングさせることができ、脂肪酸又は脂肪酸エステル上の活性化カルボン酸塩（例えばＮ，Ｎ−カルボニルジイミダゾールで活性化されている）をポリマー上のヒドロキシル基にカップリングさせることができる。
【０１２５】
本発明の抗体を改変するのに適した脂肪酸及び脂肪酸エステルは飽和状態であり得、又は、１個又はそれ以上の不飽和単位を含有し得る。本発明の抗体を改変するために適切な脂肪酸は、例えば、ｎ−ドデカノエート（Ｃ12、ラウレート）、ｎ−テトラデカノエート（Ｃ14、ミリステート）、ｎ−オクタデカノエート（Ｃ18、ステアレート）、ｎ−エイコサノエート（Ｃ20、アラキデート）、ｎ−ドコサノエート（Ｃ22、ベヘネート）、ｎ−トリアコンタノエート（Ｃ30）、ｎ−テトラコンタノエート（Ｃ40）、ｃｉｓ−Δ９−オクタデカノエート（Ｃ18、オレエート）、全てのｃｉｓ−Δ５、８、１１、１４−エイコサテトラエノエート（Ｃ20、アラキドネート）、オクタンニ酸、テトラデカン二酸、オクタデカン二酸、ドコサン二酸等を含む。適切な脂肪酸エステルは、直鎖状又は分枝状の低級アルキル基を含む、ジカルボン酸のモノエステルを含む。低級アルキル基は、１〜約１２個、好ましくは１〜約６個の炭素原子を含み得る。
【０１２６】
改変したヒト抗体及び抗原結合断片は、１つ又はそれ以上の改変剤との反応等、適切な方法を使用して調製することができる。本明細書で使用されるとき、用語「改変剤」は、活性化基を含む適切な有機基（例えば親水性ポリマー、脂肪酸、脂肪酸エステル）を意味する。「活性化基」とは、適切な条件下で第２の化学基と反応し、これにより改変剤と第２の化学基との間に共有結合を形成することのできる、化学部分又は官能基である。例えば、アミン反応性活性化基は、トシレート、メシラート、ハロ（クロロ、ブロモ、フルオロ、ヨード）等の求電子性基、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル（ＮＨＳ）等を含む。チオール類と反応できる活性化基は、例えば、マレイミド、ヨードアセチル、アクリロリル、ピリジルジスルフィド、５−チオール−２−ニトロ安息香酸チオール（ＴＮＢ−チオール）等を含む。アルデヒド官能基は、アミン又はヒドラジド含有分子とカップリングすることができ、アジド基は、三価リン基と反応して、ホスホルアミド化又はホスホルイミド結合を形成することができる。分子中に活性基を導入するための適切な方法は、当該技術分野において既知である（例えばハーマンソン（Hermanson）、Ｇ．Ｔ．、「バイオコンジュゲート技法（Bioconjugate Techniques）」、アカデミック・プレス（Academic Press）、カリフォルニア州サンディエゴ（San Diego）（１９９６年））。活性化基は、有機基（例えば親水性ポリマー、脂肪酸、脂肪酸エステル）に対して直接、又はリンカー部分（例えば二価のＣ1〜Ｃ12基、ここで１個又はそれ以上の炭素原子を酸素、窒素又は硫黄等のヘテロ原子に置換可能）を介して、結合することができる。適切なリンカー部分としては例えば、テトラエチレングリコール、−（ＣＨ2）3−、−ＮＨ−（ＣＨ2）6−ＮＨ−、−（ＣＨ2）2−ＮＨ−及び−ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ−ＮＨ−が挙げられる。リンカー部分を含む改変剤は例えば、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）の存在下で、モノ−Ｂｏｃ−アルキルジアミン（例えばモノ−Ｂｏｃ−エチレンジアミン、モノ−Ｂｏｃ−ジアミノへキサン）を脂肪酸と反応させて、遊離アミンと脂肪酸カルボキシレートとの間にアミド結合を形成することによって、生成可能である。Ｂｏｃ保護基を、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）処理により生成物から除去し、記載されているように別のカルボン酸塩にカップリングし得る一級アミンを露出させることができ、又は、これを無水マレイン酸と反応させ、結果として得られた生成物を環化させて脂肪酸の活性化マレイミド誘導体を生成することができる（例えばトンプソン（Thompson）ら、国際公開第９２／１６２２１号を参照されたい。参照によりこの教示の全体が本明細書に組み込まれる）。
【０１２７】
本発明の改変された抗体は、ヒト抗体又は抗原結合断片を改変剤と反応させることによって生成することができる。例えば、有機部分は、アミン反応性改変剤、例えば、ＰＥＧのＮＨＳエステルを利用することによって、非部位特異的方式で抗体に結合させることができる。抗体又は抗原結合断片のジスルフィド結合（例えば鎖内ジスルフィド結合）を還元することによって、改変されたヒト抗体又は抗原結合断片を調製することもできる。次いで、還元された抗体又は抗原結合断片をチオール反応性改変剤と反応させて、本発明の改変された抗体を生成することが可能である。本発明の抗体の特異的部位に結合した有機部分を含む改変されたヒト抗体及び抗原結合断片を、逆タンパク質分解（フィッシュ（Fisch）ら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．、第３号、１４７〜１５３頁（１９９２年）；ワーレン（Werlen）ら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．、第５号、４１１〜４１７頁（１９９４年）；クマラン（Kumaran）ら、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉ、第６（１０）号、２２３３〜２２４１頁（１９９７年）；イトウ（Itoh）ら、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、２４（１）、５９〜６８頁（１９９６年）；カペラス（Capellas）ら、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．、５６（４）、４５６−４６３頁（１９９７年））、及びハーマンソン（Hermanson）Ｇ．Ｔ．、「バイオコンジュゲート技法（Bioconjugate Techniques）」、アカデミック・プレス（Academic Press）、カリフォルニア州サンディエゴ（１９９６年）に記載の手法のような好適な方法を用いて調製することができる。
【０１２８】
抗アミロイド抗体組成物に対する抗イディオタイプ抗体
モノクローナル又はキメラの抗アミロイド抗体に加えて、本発明は、本発明のこのような抗体に特異的な抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体も目的としている。抗Ｉｄ抗体は、一般的に、別の抗体の抗原結合領域と結びつく、ユニークな決定基を認識する抗体である。抗Ｉｄは、抗体又はそのＣＤＲ含有領域を伴うＩｄ抗体の供給源と同じ種及び遺伝子型の動物（例えばマウス株）を免疫することによって調製可能である。免疫された動物は、免疫された抗体のイディオタイプ決定基を認識してこれに反応し、抗Ｉｄ抗体を生成する。抗Ｉｄ抗体は同様に、更に別の動物において免疫反応を誘導するための「免疫原」としても使用可能であり、いわゆる抗−抗−Ｉｄ抗体を生成する。
【０１２９】
アミロイド抗体組成物
本発明はまた、非天然組成物、混合物、又は形態で提供される、本明細書に記載のような、及び／又は当該技術分野において既知であるような、少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つ、又はそれ以上の抗アミロイド抗体を含む、少なくとも１つの抗アミロイド抗体組成物を提供する。このような組成物は、配列番号４２〜４９、５３〜６０、又はその特定の断片、ドメイン、若しくは変異体の隣接アミノ酸の７０〜１００％からなる群から選択される抗アミロイド抗体アミノ酸配列の、完全長、Ｃ−及び／又はＮ−末端が欠失した変異体、ドメイン、断片、又は特定の変異体の少なくとも１つ又は２つを含む、非天然組成物を含む。好ましい抗アミロイド抗体組成物は、配列番号４２〜４７、５３〜５８、又はその特定の断片、ドメイン、若しくは変異体の７０〜１００％の抗アミロイド抗体配列の少なくとも１つのＣＤＲ又はＬＢＰ含有部として、完全長、断片、ドメイン、又は変異体の少なくとも１つ又は２つを含む。更に好ましい組成物は、配列番号４２〜４７、５３〜５８、又はその特定の断片、ドメイン、若しくは変異体の７０〜１００％のうち少なくとも１つの４０〜９９％を含む。このような組成物の百分率は、当該技術分野において既知であるように、又は本明細書に記載のように、重量、体積、濃度、容量モル濃度、又は液体若しくは乾燥溶液、混合物、懸濁液、エマルション、粒子、粉末、又はコロイドとしての容量モル濃度によるものである。
【０１３０】
組成物は、所望により更に、抗感染薬、循環器（ＣＶ）系薬、中枢神経系（ＣＮＳ）薬、自律神経系（ＡＮＳ）薬、呼吸器薬、胃腸（ＧＩ）管薬、ホルモン薬、体液又は電解質平衡薬、血液作用薬、抗腫瘍薬、免疫調節薬、眼、耳若しくは鼻用薬、局所薬、栄養薬、スタチン等のうち、少なくとも１つから選択される、少なくとも１つの化合物又はタンパク質を有効量含むことができる。このような薬物は、本明細書に提示されているそれぞれについての処方、適応症、用量決定及び投与を含め、当該技術分野において周知である（例えば、看護２００１薬物ハンドブック（Nursing 2001 Handbook of Drugs）、第２１版、スプリングハウス社（Springhouse Corp.）、ペンシルバニア州スプリングハウス（Springhouse）、２００１年；医療専門家の薬物ガイド２００１（Ｈｅａｌｔｈ  Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ'ｓ  Ｄｒｕｇ  Ｇｕｉｄｅ  ２００１、シャノン（Shannon）、ウィルソン（Wilson）、スタング（Stang）編、プレンティス−ホール（Prentice-Hall, Inc.）、ニュージャージー州アッパーサドルリバー（Upper Saddle River）；薬物療法ハンドブック（Pharmcotherapy Handbook）、ウェルス（Wells）ら編、アップルトン＆ランゲ（Appleton&Lange）、コネチカット州スタンフォード（Stamford）を参照のこと、これらは当該技術分野において周知である）。
【０１３１】
ＣＮＳ薬は、非麻薬性鎮痛薬から選択される少なくとも１種、又は解熱薬、非ステロイド性抗炎症薬、麻薬性若しくは少なくとも１種のオピオイド鎮痛薬、鎮静睡眠薬、抗痙攣薬、抗うつ薬、抗不安薬、抗精神病薬、中枢神経系刺激薬、抗パーキンソン病薬及び雑多な中枢神経系薬から選択される少なくとも１種であり得る。ＡＮＳ薬は、コリン作動薬（副交感神経刺激薬）、抗コリン作動薬、アドレナリン作動薬（交感神経刺激薬）、アドレナリン遮断薬（交感神経遮断薬）、骨格筋弛緩薬、神経筋遮断薬から選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の非麻薬性鎮痛薬又は解熱薬は、アセトアミノフェン、アスピリン、コリンマグネシウムトリサリチル酸、ジフルニサル、サリチル酸マグネシウムから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の非ステロイド性抗炎症薬は、セレコキシブ、ジクロフェナクカリウム、ジクロフェナクナトリウム、エトドラク、フェノプロフェンカルシウム、フルルビプロフェン、イブプロフェン、インドメタシン、インドメタシンナトリウム三水和物、ケトプロフェン、ケトロラクトロメタミン、ナブメトン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、オキサプロジン、ピロキシカム、ロフェコキシブ、スリンダクから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の麻薬性若しくはオピオイド鎮痛薬は、塩酸アルフェンタニル、塩酸ブプレノルフィン、酒石酸ブトルファノール、リン酸コデイン、硫酸コデイン、クエン酸フェンタニル、フェンタニル経皮系、フェンタニル経粘膜、塩酸ヒドロモルホン、塩酸メペリジン、塩酸メサドン、塩酸モルヒネ、硫酸モルヒネ、酒石酸モルヒネ、塩酸ナルブフィン、塩酸オキシコドン、ペクチン酸オキシコドン、塩酸オキシモルホン、塩酸ペンタゾシン、塩酸ペンタゾシン及び塩酸ナロキソン、乳酸ペンタゾシン、塩酸プロポキシフェン、ナプシル酸プロポキシフェン、塩酸レミフェンタニル、クエン酸スフェンタニル、塩酸トラマドールから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の鎮静睡眠薬は、抱水クロラール、エスタゾラム、塩酸フルラゼパム、ペントバルビタール、ペントバルビタールナトリウム、フェノバルビタールナトリウム、セコバルビタールナトリウム、テマゼパム、トリアゾラム、ザレプロン、酒石酸ゾルピデムから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の抗痙攣薬は、アセタゾラミドナトリウム、カルバマゼピン、クロナゼパム、クロラゼプ酸二カリウム、ジアゼパム、ジバルプロエクスナトリウム、エトスクシムド、ホスフェニトインナトリウム、ギャバペンチン、ラモトリジン、硫酸マグネシウム、フェノバルビタール、フェノバルビタールナトリウム、フェニトイン、フェニトインナトリウム、フェニトインナトリウム（徐放性（extended））、プリミドン、塩酸タイアガビン、トピラメート、バルプロ酸ナトリウム、バルプロ酸から選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の抗うつ薬は、塩酸アミトリプチリン、パモ酸アミトリプチリン、アモキサピン、塩酸ブプロピオン、臭化水素酸シタロプラム、塩酸クロミプラミン、塩酸デシプラミン、塩酸ドキセピン、塩酸フルオキセチン、塩酸イミプラミン、パモ酸イミプラミン、ミルタザピン���塩酸ネファゾドン、塩酸ノルトリプチリン、塩酸パロキセチン、硫酸フェネルジン、塩酸セルトラリン、硫酸トラニルシプロミン、マレイン酸トリミプラミン、塩酸ベンラファキシンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の抗不安薬は、アルプラゾラム、塩酸ブスピロン、クロルジアゼポキシド、塩酸クロルジアゼポキシド、クロラゼプ酸二カリウム、ジアゼパム、塩酸ドキセピン、エンボン酸ヒドロキシジン、塩酸ヒドロキシジン、パモ酸ヒドロキシジン、ロラゼパム、メフロバメート、塩酸ミダゾラム、オキサゼパムから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の抗精神病薬は、塩酸クロルプロマジン、クロザピン、デカン酸フルフェナジン、エナント酸フルエフェナジン、塩酸フルフェナジン、ハロペリドール、デカン酸ハロペリドール、乳酸ハロペリドール、塩酸ロキサピン、コハク酸ロキサピン、ベシル酸メソリダジン、塩酸モリンドン、オランザピン、ペルフェナジン、ピモジド、プロクロルペラジン、フマル酸ケチアピン、リスペリドン、塩酸チオリダジン、チオチキセン、塩酸チオチキセン、塩酸トリフルオペラジンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の中枢神経系刺激薬は、硫酸アンフェタミン、カフェイン、硫酸デキストロアンフェタミン、塩酸ドキサプラム、塩酸メタンフェタミン、塩酸メチルフェニデート、モダフィニル、ペモリン、塩酸フェンテルミンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の抗パーキンソン病薬は、塩酸アマンタジン、メシル酸ベンズトロピン、塩酸ビペリデン、乳酸ビペリデン、メシル酸ブロモクリプチン、カルビドパ−レボドパ、エンタカポン、レボドパ、メシル酸ペルゴリド、塩酸プラミペキソール、塩酸ロピニロール、塩酸セレギリン、トルカポン、塩酸トリヘキシフェニジルから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の雑多な中枢神経系薬は、リルゾール、塩酸ブプロピオン、塩酸ドネペジル、ドロペリドール、マレイン酸フルボキサミン、炭酸リチウム、クエン酸リチウム、塩酸ナラトリプタン、ニコチンポラクリレックス、ニコチン経皮系、プロポフォール、安息香酸リザトリプタン、塩酸シブトラミン一水和物、コハク酸スマトリプタン、塩酸タクリン、ゾルミトリプタンから選択される少なくとも１種であり得る（例えば、看護２００１薬物ハンドブック（Nursing 2001 Handbook of Drugs）の３３７〜５３０頁を参照されたい）。
【０１３２】
少なくとも１種のコリン作動薬（例えば副交感神経刺激薬）は、塩化ベタネコール、塩化エドロホニウム、臭化ネオスチグミン、メチル硫酸ネオスチグミン、サリチル酸フィゾスチグミン、臭化ピリドスチグミンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の抗コリン作動薬は、硫酸アトロピン、塩酸ジシクロミン、グリコピロール酸、ヒヨスチアミン、硫酸ヒヨスチアミン、臭化プロパンテリン、スコポラミン、ブチル臭化スコポラミン、臭化水素酸スコポラミンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種のアドレナリン作動薬（交感神経刺激薬）は、塩酸ドブタミン、塩酸ドーパミン、酒石酸水素メタラミノール、酒石酸水素ノルエピネフリン、塩酸フェニレフリン、塩酸偽エフェドリン、硫酸偽エフェドリンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種のアドレナリン遮断薬（交感神経遮断薬）は、メシル酸ジヒドロエルゴタミン、酒石酸エルゴタミン、マレイン酸メチセルギド、塩酸プロプラノロールから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の骨格筋弛緩薬は、バクロフェン、カリソプロドール、クロルゾキサゾン、塩酸シクロベンザプリン、ダントロレンナトリウム、メトカルバモール、塩酸チザニジンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の神経筋遮断薬は、ベシル酸アトラクリウム、ベシル酸シサトラクリウム、塩化ドキサクリウム、塩化ミバクリウム、臭化パンクロニウム、臭化ピペクロニウム、臭化ラパクロニウム、臭化ロクロニウム、塩化スクシニルコリン、塩化ツボクラリン、臭化ベクロニウムから選択される少なくとも１種であり得る（例えば、看護２００１薬物ハンドブック（Nursing 2001 Handbook of Drugs）の５３１〜８４頁を参照されたい）。
【０１３３】
抗感染薬は、殺アメーバ薬又は少なくとも１種の抗原虫薬、駆虫薬、抗真菌薬、抗マラリア薬、抗結核薬又は少なくとも１種の抗らい薬、アミノグリコシド、ペニシリン、セファロスポリン、テトラサイクリン、スルホンアミド、フルオロキノロン、抗ウイルス薬、マクロライド抗感染薬及び雑多な抗感染薬から選択される少なくとも１種であり得る。ＣＶ薬は、変力薬、抗不整脈薬、抗狭心症薬、降圧薬、抗高脂血症薬、雑多な循環器薬から選択される少なくとも１種であり得る。ＣＮＳ薬は、非麻薬性鎮痛薬から選択される少なくとも１種、又は解熱薬、非ステロイド性抗炎症薬、麻薬性若しくは少なくとも１種のオピオイド鎮痛薬、鎮静睡眠薬、抗痙攣薬、抗うつ薬、抗不安薬、抗精神病薬、中枢神経系刺激薬、抗パーキンソン病薬、雑多な中枢神経系薬から選択される少なくとも１種であり得る。ＡＮＳ薬は、コリン作動薬（副交感神経刺激薬）、抗コリン作動薬、アドレナリン作動薬（交感神経刺激薬）、アドレナリン遮断薬（交感神経遮断薬）、骨格筋弛緩薬、神経筋遮断薬から選択される少なくとも１種であり得る。呼吸器薬は、抗ヒスタミン薬、気管支拡張薬、去痰薬又は少なくとも１種の鎮咳薬、雑多な呼吸器薬から選択される少なくとも１種であり得る。ＧＩ管薬は、制酸剤、又は少なくとも１種の吸着剤、又は少なくとも１種の抗鼓腸薬、消化酵素、又は少なくとも１種の胆石溶解剤、止瀉薬、緩下剤、制吐剤、抗潰瘍薬から選択される少なくとも１種であり得る。ホルモン薬は、コルチコステロイド、アンドロゲン、又は少なくとも１種のアナボリックステロイド、エストロゲン、又は少なくとも１種のプロゲスチン、ゴナドトロピン、抗糖尿病薬、又は少なくとも１種のグルカゴン、甲状腺ホルモン、甲状腺ホルモン拮抗薬、下垂体ホルモン、副甲状腺様薬物から選択される少なくとも１種であり得る。体液及び電解質平衡薬は、利尿薬、電解質、又は少なくとも１種の補充液（replacement solution）、酸性化薬、又は少なくとも１種のアルカリ性化薬から選択される少なくとも１種であり得る。血液作用薬は造血剤、抗凝固薬、血液誘導体、血栓溶解酵素から選択される少なくとも１種であり得る。抗腫瘍薬は、アルキル化剤、代謝拮抗薬、抗生物質性抗腫瘍薬、ホルモンバランスを変える抗腫瘍薬、雑多な抗腫瘍薬から選択される少なくとも１種であり得る。免疫調節薬は、免疫抑制薬、ワクチン、又は少なくとも１種の類毒素、抗毒素、又は少なくとも１種の抗蛇毒、免疫血清、生物学的応答調節剤から選択される少なくとも１種であり得る。眼、耳及び鼻用薬は、眼の抗感染薬、眼の抗炎症薬、縮瞳薬、散瞳薬、眼血管収縮薬、雑多な眼、耳、鼻用薬から選択される少なくとも１種であり得る。局所薬は、局所抗感染薬、抗疥癬薬、又は少なくとも１種の殺シラミ薬、局所コルチコステロイドから選択される少なくとも１種であり得る。栄養薬はビタミン、ミネラル、又はカロリーから選択される少なくとも１種であり得る。例えば、看護２００１薬物ハンドブック（Nursing 2001 Handbook of Drugs）の内容、上記を参照されたい。
【０１３４】
少なくとも１種の殺アメーバ薬又は抗原虫薬は、アトバクオン、塩酸クロロキン、リン酸クロロキン、メトロニダゾール、塩酸メトロニダゾール、イセチオン酸ペンタミジンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の駆虫薬はメベンダゾール、パモ酸ピランテル、チアベンダゾールから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の抗真菌薬は、アンホテリシンＢ、アンホテリシンＢ硫酸コレステリル複合体、アンホテリシンＢ脂質複合体、アンホテリシンＢリポソーム製剤、フルコナゾール、フルシトシン、グリセオフルビン微粒子（microsize）、グリセオフルビン超微粒子（ultramicrosize）、イトラコナゾール、ケトコナゾール、ナイスタチン、塩酸テルビナフィンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の抗マラリア薬は、塩酸クロロキン、リン酸クロロキン、ドキシサイクリン、硫酸ヒドロキシクロロキン、塩酸メフロキン、リン酸プリマキン、ピリメタミン、スルファドキシンを伴うピリメタミンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の抗結核薬又は抗らい薬は、クロファジミン、シクロセリン、ダプソン、塩酸エタンブトール、イソニアジド、ピラジナミド、リファブチン、リファンピン、リファペンチン、硫酸ストレプトマイシンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種のアミノグリコシドは、硫酸アミカシン、硫酸ゲンタマイシン、硫酸ネオマイシン、硫酸ストレプトマイシン、硫酸トブラマイシンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種のペニシリンは、アモキシシリン／クラブラン酸カリウム、アモキシシリン三水和物、アンピシリン、アンピシリンナトリウム、アンピシリン三水和物、アンピシリンナトリウム／スルバクタムナトリウム、クロキサシリンナトリウム、ジクロキサシリンナトリウム、メズロシリンナトリウム、ナフシリンナトリウム、オキサシリンナトリウム、ペニシリンＧベンザチン、ペニシリンＧカリウム、ペニシリンＧプロカイン、ペニシリンＧナトリウム、ペニシリンＶカリウム、ピペラシリンナトリウム、ピペラシリンナトリウム／タゾバクタムナトリウム、チカルシリン二ナトリウム、チカルシリン二ナトリウム／クラブラン酸カリウムから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種のセファロスポリンは、セファクロル、セファドロキシル、セファゾリンナトリウム、セフジニル、塩酸セフェピム、セフィキシム、セフメタゾールナトリウム、セフォニシドナトリウム、セフォペラゾンナトリウム、セフォタキシムナトリウム、セフォテタン二ナトリウム、セフォキシチンナトリウム、セフポドキシムプロキセチル、セフプロジル、セフタジジム、セフチブテン、セフチゾキシムナトリウム、セフトリアキソンナトリウム、セフロキシムアキセチル、セフロキシムナトリウム、塩酸セファレキシン、セファレキシン一水和物、セフラジン、ロラカルベフの少なくとも１種から選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種のテトラサイクリンは、塩酸デメクロサイクリン、ドキシサイクリンカルシウム、ドキシサイクリンヒクラート（hyclate）、塩酸ドキシサイクリン、ドキシサイクリン一水和物、塩酸ミノサイクリン、塩酸テトラサイクリンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種のスルホンアミドは、コトリモキサゾール（co-trimoxazole）、スルファジアジン、スルファメトキサゾール、スルフイソキサゾール、アセチルスルフイソキサゾールから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種のフルオロキノロンは、メシル酸アラトロフロキサシン、シプロフロキサシン、エノキサシン、レボフロキサシン、塩酸ロメフロキサシン、ナリジクス酸、ノルフロキサシン、オフロキサシン、スパルフロキサシン、メシル酸トロバフロキサシンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種のフルオロキノロンは、メシル酸アラトロフロキサシン、シプロフロキサシン、エノキサシン、レボフロキサシン、塩酸ロメフロキサシン、ナリジクス酸、ノルフロキサシン、オフロキサシン、スパルフロキサシン、メシル酸トロバフロキサシンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の抗ウイルス薬は、硫酸アバカビル、アシクロビルナトリウム、塩酸アマンタジン、アンプレナビル、シドフォビル、メシル酸デラビルジン、ジダノシン、エファビレンズ、ファムシクロビル、フォミビルセンナトリウム、ホスカルネットナトリウム、ガンシクロビル、硫酸インジナビル、ラミブジン、ラミブジン／ジドブジン、メシル酸ネルフィナビル、ネビラピン、リン酸オセルタミビル、リバビリン、塩酸リマンタジン、リトナビル、サキナビル、メシル酸サキナビル、スタブジン、塩酸バラシクロビル、ザルシタビン、ザナミビル、ジドブジンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種のマクロライン抗感染薬は、アジトロマイシン、クラリスロマイシン、ジリトロマイシン、エリスロマイシン基剤（base）、エリスロマイシンエストレート、エチルコハク酸エリスロマイシン、ラクトビオン酸エリスロマイシン、ステアリン酸エリスロマイシンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の雑多な抗感染薬は、アズトレオナム、バシトラシン、コハク酸クロラムフェニコールナトリウム、塩酸クリンダマイシン、塩酸パルミチン酸クリンダマイシン、リン酸クリンダマイシン、イミペネム及びシラスタチンナトリウム、メロペネム、ニトロフラントイン大結晶（macrocrystal）、ニトロフラントイン微結晶、キヌプリスチン／ダルホプリスチン、塩酸スペクチノマイシン、トリメトプリム、塩酸バンコマイシンから選択される少なくとも１種であり得る（例えば、看護２００１薬物ハンドブック（Nursing 2001 Handbook of Drugs）の２４〜２１４頁を参照されたい）。
【０１３５】
少なくとも１種の変力薬は、乳酸アムリノン、ジゴキシン、乳酸ミルリノンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の抗不整脈薬は、アデノシン、塩酸アミオダロン、硫酸アトロピン、トシル酸ブレチリウム、塩酸ジルチアゼム、ジソピラミド、リン酸ジソピラミド、塩酸エスモロール、酢酸フレカイニド、フマル酸イブチリド、塩酸リドカイン、塩酸メキシレチン、塩酸モリシジン、フェニトイン、フェニトインナトリウム、塩酸プロカインアミド、塩酸プロパフェノン、塩酸プロプラノロール、硫酸水素キニジン、グルコン酸キニジン、ポリガラクツロン酸キニジン、硫酸キニジン、ソタロール、塩酸トカイニド、塩酸ベラパミルから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の抗狭心症薬は、ベシル酸アムロジピン、亜硝酸アミル、塩酸ベプリジル、塩酸ジルチアゼム、硝酸イソソルビド、一硝酸イソソルビド、ナドロール、塩酸ニカルジピン、ニフェジピン、ニトログリセリン、塩酸プロプラノロール、ベラパミル、塩酸ベラパミルから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の降圧薬は、塩酸アセブトロール、ベシル酸アムロジピン、アテノロール、塩酸ベナゼプリル、塩酸ベタキソロール、フマル酸ビソプロロール、カンデサルタンシレキセチル、カプトプリル、塩酸カルテオロール、カルベジロール、クロニジン、塩酸クロニジン、ジアゾキシド、塩酸ジルチアゼム、メシル酸ドキサゾシン、エナラプリラート、マレイン酸エナラプリル、メシル酸エプロサルタン、フェロジピン、メシル酸フェノルドパム、ホシノプリルナトリウム、酢酸グアナベンズ、硫酸グアナドレル、塩酸グアンファシン、塩酸ヒドララジン、イルベサルタン、イスラジピン、塩酸ラベタロール、リシノプリル、ロサルタンカリウム、メチルドパ、塩酸メチルドペート（methyldopate）、コハク酸メトプロロール、酒石酸メトプロロール、ミノキシジル、塩酸モエキシプリル、ナドロール、塩酸ニカルジピン、ニフェジピン、ニソルジピン、ニトロプルシドナトリウム、硫酸ペンブトロール、ペリンドプリルエルブミン、メシル酸フェントラミン、ピンドロール、塩酸プラゾシン、塩酸プロプラノロール、塩酸キナプリル、ラミプリル、テルミサルタン、塩酸テラゾシン、マレイン酸チモロール、トランドラプリル、バルサルタン、塩酸ベラパミルから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の抗高脂血症薬は、アトルバスタチンカルシウム、セリバスタチンナトリウム、コレスチラミン、塩酸コレスチポール、フェノフィブラート（微粒子化）、フルバスタチンナトリウム、ゲムフィブロジル、ロバスタチン、ナイアシン、プラバスタチンナトリウム、シンバスタチンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の雑多なＣＶ薬は、アブシキシマブ、アルプロスタジル、塩酸アルブタミン、シロスタゾール、重硫酸クロピドグレル、ジピリダモール、エプチフィバチド、塩酸ミドドリン、ペントキシフィリン、塩酸チクロピジン、塩酸チロフィバンから選択される少なくとも１種であり得る（例えば、看護２００１薬物ハンドブック（Nursing 2001 Handbook of Drugs）の２１５〜３３６頁を参照されたい）。
【０１３６】
少なくとも１種の抗ヒスタミン薬は、マレイン酸ブロムフェニラミン、塩酸セチリジン、マレイン酸クロルフェニラミン、フマル酸クレマスチン、塩酸シプロヘプタジン、塩酸ジフェンヒドラミン、塩酸フェキソフェナジン、ロラタジン、塩酸プロメタジン、テオクル酸プロメタジン、塩酸トリプロリジンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の気管支拡張薬は、アルブテロール、硫酸アルブテロール、アミノフィリン、硫酸アトロピン、硫酸エフェドリン、エピネフリン、酒石酸水素エピネフリン、塩酸エピネフリン、臭化イプラトロピウム、イソプロテレノール、塩酸イソプロテレノール、硫酸イソプロテレノール、塩酸レバルブテロール、硫酸メタプロテレノール、オキシトリフィリン、酢酸ピルブテロール、キシナホ酸サルメテロール、硫酸テルブタリン、テオフィリンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の去痰薬若しくは鎮咳薬は、ベンゾナテート、リン酸コデイン、硫酸コデイン、臭化水素酸デキストラメトルファン、塩酸ジフェンヒドラミン、グアイフェネシン、塩酸ヒドロモルホンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の雑多な呼吸器薬は、アセチルシステイン、ジプロピオン酸ベクロメタゾン、ベラクタント、ブデソニド、カルファクタント、クロモリンナトリウム、ドルナーゼアルファ、エポプロステノールナトリウム、フルニソリド、プロピオン酸フルチカゾン、モンテルカストナトリウム、ネドクロミルナトリウム、パリビズマブ、トリアムシノロンアセトニド、ザフィルルカスト、ジロートンから選択される少なくとも１種であり得る（例えば、看護２００１薬物ハンドブック（Nursing 2001 Handbook of Drugs）の５８５〜６４２頁を参照されたい）。
【０１３７】
少なくとも１種の制酸剤、吸着剤若しくは抗鼓腸薬は、炭酸アルミニウム、水酸化アルミニウム、炭酸カルシウム、マガルドラート、水酸化マグネシウム、酸化マグネシウム、ジメチコン、炭酸水素ナトリウムから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の消化酵素若しくは胆石溶解剤は、パンクレアチン、パンクレリパーゼ、ウルソジオールから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の止瀉薬は、アタパルジャイト、次サリチル酸ビスマス、カルシウムポリカルボフィル、塩酸ジフェノキシレート又は硫酸アトロピン、ロペラミド、酢酸オクトレオチド、アヘンチンキ、アヘンチンキ（カンファー入り（camphorated））から選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の緩下剤は、ビサコジル、カルシウムポリカルボフィル、カスカラサグラダ、カスカラサグラダ芳香流エキス、カスカラサグラダ流エキス、ヒマシ油、ドキュセートカルシウム、ドキュセートナトリウム、グリセリン、ラクツロース、クエン酸マグネシウム、水酸化マグネシウム、硫酸マグネシウム、メチルセルロース、鉱物油、ポリエチレングリコール又は電解質溶液、オオバコ、センナ、リン酸ナトリウムから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の制吐剤は、塩酸クロルプロマジン、ジメンヒドリナート、メシル酸ドラセトロン、ドロナビノール、塩酸グラニセトロン、塩酸メクリジン、塩酸メトクロプロアミド、塩酸オンダンセトロン、ペルフェナジン、プロクロルペラジン、エジシル酸プロクロルペラジン、マレイン酸プロクロルペラジン、塩酸プロメタジン、スコポラミン、マレイン酸チエチルペラジン、塩酸トリメトベンズアミドから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の抗潰瘍薬は、シメチジン、塩酸シメチジン、ファモチジン、ランソプラゾール、ミソプロストール、ニザチジン、オメプラゾール、ラベプラゾールナトリウム、ランチジンクエン酸ビスマス、塩酸ラニチジン、スクラルファートから選択される少なくとも１種であり得る（例えば、看護２００１薬物ハンドブック（Nursing 2001 Handbook of Drugs）の６４３〜９５頁を参照されたい）。少なくとも１種のコルチコステロイドは、ベタメタゾン、酢酸ベタメタゾン又はリン酸ベタメタゾンナトリウム、リン酸ベタメタゾンナトリウム、酢酸コルチゾン、デキサメサゾン、酢酸デキサメサゾン、リン酸デキサメサゾンナトリウム、酢酸フルドロコルチゾン、ヒドロコルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、シピオン酸ヒドロコルチゾン、リン酸ヒドロコルチゾンナトリウム、コハク酸ヒドロコルチゾンナトリウム、メチルプレドニゾロン、酢酸メチルプレドニゾロン、コハク酸メチルプレドニゾロンナトリウム、プレドニゾロン、酢酸プレドニゾロン、リン酸プレドニゾロンナトリウム、テブト酸プレドニゾロン、プレドニゾン、トリアムシノロン、トリアムシノロンアセトニド、酢酸トリアムシノロンから選択される少なくとも１種であり得る。
【０１３８】
少なくとも１種のアンドロゲン又はアナボリックステロイドは、ダナゾール、フルオキシメステロン、メチルテストステロン、デカン酸ナンドロロン、フェンプロピオン酸ナンドロロン、テストステロン、シピオン酸テストステロン、エナント酸テストステロン、プロピオン酸テストステロン、テストステロン経皮系から選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種のエストロゲン又はプロゲスチンは、エステル化エストロゲン、エストラジオール、シピオン酸エストラジオール、エストラジオール／酢酸ノルエチンドロン経皮系、吉草酸エストラジオール、エストロゲン（抱合）、エストロピペート、エチニルエストラジオール、エチニルエストラジオール及びデソゲストレル、エチニルエストラジオール及び二酢酸エチノジオール、エチニルエストラジオール及びデソゲストレル、エチニルエストラジオール及び二酢酸エチノジオール、エチニルエストラジオール及びレボノルゲストレル、エチニルエストラジオール及びノルエチンドロン、エチニルエストラジオール及び酢酸ノルエチンドロン、エチニルエストラジオール及びノルゲスチメート、エチニルエストラジオール及びノルゲストレル、エチニルエストラジオール及びノルエチンドロン並びに酢酸及びフマル酸鉄、レボノルゲストレル、酢酸メドロキシプロゲステロン、メストラノール及びノルエチンドロン、ノルエチンドロン、酢酸ノルエチンドロン、ノルゲストレル、プロゲステロンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種のゴナドロプトロピンは、酢酸ガニレリックス、酢酸ゴナドレリン、酢酸ヒストレリン、メノトロピンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の抗糖尿病薬又はグルカオンは、アカルボース、クロルプロパミド、グリメピリド、グリピジド、グルカゴン、グリブリド、インスリン、塩酸メトフォルミン、ミグリトール、塩酸ピオグリタゾン、レパグリニド、マレイン酸ロシグリタゾン、トログリタゾンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の甲状腺ホルモンは、レボチロキシンナトリウム、リオチロニンナトリウム、リオトリックス、甲状腺製剤（thyroid）から選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の甲状腺ホルモン拮抗薬は、メチマゾール、ヨウ化カリウム、ヨウ化カリウム（飽和溶液）、プロピルチオウラシル、放射活性ヨウ素（ヨウ化ナトリウム131Ｉ）、濃ヨウ素溶液から選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の下垂体ホルモンは、コルチコトロピン、コシントロピン、酢酸デスモフレシン、酢酸ロイプロリド、リポジトリコルチコトロピン、ソマトレム、ソマトロピン、バソプレシンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の副甲状腺様薬は、カルシフェジオール、カルシトニン（ヒト）、カルシトニン（サケ）、カルシトリオール、ジヒドロタキステロール、エチドロン酸ナトリウムから選択される少なくとも１種であり得る（例えば、看護２００１薬物ハンドブック（Nursing 2001 Handbook of Drugs）の６９６〜７９６頁を参照されたい）。
【０１３９】
少なくとも１種の利尿薬は、アセタゾラミド、アセタゾラミドナトリウム、塩酸アミロリド、ブメタニド、クロルタリドン、エタクリン酸ナトリウム、エタクリン酸、フロセミド、ヒドロクロロチアジド、インダパミド、マンニトール、メトラゾン、スピロノラクトン、トルセミド、トリアムテレン、尿素から選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の電解質又は補充液は、酢酸カルシウム、炭酸カルシウム、塩化カルシウム、クエン酸カルシウム、グルビオナートカルシウム、グルセプト酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、乳酸カルシウム、リン酸カルシウム（二塩基性）、リン酸カルシウム（三塩基性）、デキストラン（高分子量）、デキストラン（低分子量）、ヘタスターチ、塩化マグネシウム、硫酸マグネシウム、酢酸カリウム、炭酸水素カリウム、塩化カリウム、グルコン酸カリウム、リンゲル液、リンゲル液（乳酸加）、塩化ナトリウムから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の酸性化剤又はアルカリ性化剤は、炭酸水素ナトリウム、乳酸ナトリウム、トロメタミンから選択される少なくとも１種であり得る（例えば、看護２００１薬物ハンドブック（Nursing 2001 Handbook of Drugs）の７９７〜８３３頁を参照されたい）。
【０１４０】
少なくとも１種の造血剤は、フマル酸鉄、グルコン酸鉄、硫酸鉄、硫酸鉄（乾燥）、鉄デキストラン、鉄ソルビトール、多糖−鉄複合体、グルコン酸第二鉄複合体から選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の抗凝固薬は、アルデパリンナトリウム、ダルテパリンナトリウム、ダナパロイドナトリウム、エノキサパリンナトリウム、ヘパリンカルシウム、ヘパリンナトリウム、ワルファリンナトリウムから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の血液誘導体は、アルブミン５％、アルブミン２５％、抗血友病因子、抗阻害剤血液凝固剤（anti-inhibitor coagulant）複合体、アンチトロンビンＩＩＩ（ヒト）、第ＩＸ因子（ヒト）、第ＩＸ因子複合体、血漿タンパク質画分から選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の血栓溶解酵素は、アルテプラーゼ、アニストレプラーゼ、レテプラーゼ（組み換え）、ストレプトキナーゼ、ウロキナーゼから選択される少なくとも１種であり得る（例えば、看護２００１薬物ハンドブック（Nursing 2001 Handbook of Drugs）の８３４〜６６頁を参照されたい）。
【０１４１】
少なくとも１種のアルキル化剤は、ブスルファン、カルボプラチン、カルムスチン、クロラムブシル、シスプラチン、シクロホスファミド、イホスファミド、ロムスチン、塩酸メクロレタミン、メルファラン、塩酸メルファラン、ストレプトゾシン、テモゾロミド、チオテパから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の代謝拮抗薬は、カペシタビン、クラドリビン、シタラビン、フロクスウリジン、リン酸フルダラビン、フルオロウラシル、ヒドロキシ尿素、メルカプトプリン、メトトレキサート、メトトレキサートナトリウム、チオグアニンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の抗生物質性抗腫瘍薬は、硫酸ブレオマイシン、ダクチノマイシン、クエン酸ダウノルビシンリポソーム製剤、塩酸ダウノルビシン、塩酸ドキソルビシン、塩酸ドキソルビシンリポソーム製剤、塩酸エピルビシン、塩酸イダルビシン、マイトマイシン、ペントスタチン、プリカマイシン、バルルビシンから選択される少なくとも１種であり得る。ホルモンバランスを変える少なくとも１種の抗腫瘍薬は、アナストロゾール、ビカルタミド、リン酸エストラムスチンナトリウム、エキセメスタン、フルタミド、酢酸ゴセレリン、レトロゾール、酢酸ロイプロリド、酢酸メゲストロール、ニルタミド、クエン酸タモキシフェン、テストラクトン、クエン酸トレミフェンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の雑多な抗腫瘍薬は、アスパラギナーゼ、カルメット−ゲラン桿菌（ＢＣＧ）（生菌、膀胱内）、ダカルバジン、ドセタキセル、エトポシド、リン酸エトポシド、塩酸ゲムシタビン、塩酸イリノテカン、ミトタン、塩酸ミトキサントロン、パクリタキセル、ペグアスパラガーゼ、ポルフィマーナトリウム、塩酸プロカルバジン、リツキシマブ、テニポシド、塩酸トポテカン、トラスツズマブ、トレチノイン、硫酸ビンブラスチン、硫酸ビンクリスチン、酒石酸ビノレルビンから選択される少なくとも１種であり得る（例えば、看護２００１薬物ハンドブック（Nursing 2001 Handbook of Drugs）の８６７〜９６３頁を参照されたい）。
【０１４２】
少なくとも１種の免疫抑制薬は、アザチオプリン、バシリキシマブ、シクロスポリン、ダクリズマブ、リンパ球免疫グロブリン、ムロモマブ−ＣＤ３、ミコフェノール酸モフェチル、塩酸ミコフェノール酸モフェチル、シロリムス、タクロリムスから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種のワクチン又は類毒素は、ＢＣＧワクチン、コレラワクチン、ジフテリア及び破傷風類毒素（吸着）、ジフテリア及び破傷風類毒素及び無細胞百日咳ワクチン吸着、ジフテリア及び破傷風類毒素及び全細胞百日咳ワクチン、血友病ｂ複合ワクチン、Ａ型肝炎ワクチン（不活化）、Ｂ型肝炎ワクチン（組み換え）、インフルエンザウイルスワクチン１９９９〜２０００年三価Ａ＆Ｂ型（精製表面抗原）、インフルエンザウイルスワクチン１９９９〜２０００年三価Ａ＆Ｂ型（サブビリオン又は精製サブビリオン）、インフルエンザウイルスワクチン１９９９〜２０００年三価Ａ＆Ｂ型（全ビリオン）、日本脳炎ウイルスワクチン（不活化）、ライム病ワクチン（組み換えＯｓｐＡ）、麻疹及び流行性耳下腺炎及び風疹ウイルスワクチン（生）、麻疹及び流行性耳下腺炎及び風疹ウイルスワクチン（生、弱毒化）、麻疹ウイルスワクチン（生、弱毒化）、髄膜炎菌多糖ワクチン、流行性耳下腺炎ウイルスワクチン（生）、ペストワクチン、肺炎球菌ワクチン（多価）、ポリオウイルスワクチン（不活化）、ポリオウイルスワクチン（生、経口、三価）、狂犬病ワクチン（吸着）、狂犬病ワクチン（ヒト二倍体細胞）、風疹及び流行性耳下腺炎ウイルスワクチン（生）、風疹ウイルスワクチン（生、弱毒化）、破傷風類毒素（吸着）、破傷風類毒素（液体）、腸チフスワクチン（経口）、腸チフスワクチン（非経口）、腸チフスＶｉ多糖ワクチン、水痘ウイルスワクチン、黄熱病ワクチンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の抗毒素又は抗蛇毒は、クロゴケグモ抗蛇毒、マムシ科（Crotalidae）抗蛇毒（多価）、ジフテリア抗毒素（ウマ）、アメリカサンゴヘビ（Micrurus fulvius）抗蛇毒から選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の免疫血清は、サイトメガロウイルス免疫グロブリン（静脈内）、Ｂ型肝炎免疫グロブリン（ヒト）、免疫グロブリン筋肉内、免疫グロブリン静脈内、狂犬病免疫グロブリン（ヒト）、呼吸器合胞体ウイルス免疫グロブリン静脈内（ヒト）、Ｒｈ0（Ｄ）免疫グロブリン（ヒト）、Ｒｈ0（Ｄ）免疫グロブリン静脈内（ヒト）、破傷風免疫グロブリン（ヒト）、水痘−帯状ヘルペス免疫グロブリンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の生物学的応答調節物質は、アルデスロイキン、エポエチンアルファ、フィルグラスチム、注射用酢酸グラチラマー、インターフェロンアルファコン−１、インターフェロンアルファ−２ａ（組み換え）、インターフェロンアルファ−２ｂ（組み換え）、インターフェロンベータ−１ａ、インターフェロンベータ−１ｂ（組み換え）、インターフェロンガンマ−１ｂ、塩酸レバミソール、オプレルベキン、サルグラモスチムから選択される少なくとも１種であり得る（例えば、看護２００１薬物ハンドブック（Nursing 2001 Handbook of Drugs）の９６４〜１０４０頁を参照されたい）。
【０１４３】
少なくとも１種の眼の抗感染薬は、バシトラシン、クロラムフェニコール、塩酸シプロフロキサシン、エリスロマイシン、硫酸ゲンタマイシン、オフロキサシン０．３％、硫酸ポリミキシンＢ、スルファセタミドナトリウム１０％、スルファセタミドナトリウム１５％、スルファセタミドナトリウム３０％、トブラマイシン、ビダラビンから選択され得る。少なくとも１種の眼の抗炎症薬は、デキサメサゾン、リン酸デキサメサゾンナトリウム、ジクロフェナクナトリウム０．１％、フルオロメトロン、フルルビプロフェンナトリウム、ケトロラクトロメタミン、酢酸プレドニゾロン（懸濁液）リン酸プレドニゾロンナトリウム（溶液）から選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の縮瞳薬は、塩化アセチルコリン、カルバコール（眼内）、カルバコール（局所）、ヨウ化エコチオファート、ピロカルピン、塩酸ピロカルピン、硝酸ピロカルピンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の散瞳薬は、硫酸アトロピン、塩酸シクロペントラート、塩酸エピネフリン、ホウ酸エピネフリル、臭化水素酸ホマトロピン、塩酸フェニレフリン、臭化水素酸スコポラミン、トロピカミドから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の眼血管収縮薬は、塩酸ナファゾリン、塩酸オキシメタゾリン、塩酸テトラヒドロゾリンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の雑多な眼科用薬は、塩酸アプラクロニジン、塩酸ベタキソロール、酒石酸ブリモニジン、塩酸カルテオロール、塩酸ジピベフリン、塩酸ドルゾラミド、フマル酸エメダスチン、フルオレセインナトリウム、フマル酸ケトチフェン、ラタノプロスト、塩酸レボブノロール、塩酸メチプラノロール、塩化ナトリウム（高張）、マレイン酸チモロールから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の耳用薬は、ホウ酸、過酸化カルバミド、クロラムフェニコール、オレイン酸トリエタノールアミンポリペプチド縮合物（triethanolamine polypeptide oleate-condensate）から選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の鼻用薬は、ジプロピオン酸ベクロメタゾン、ブデソニド、硫酸エフェドリン、塩酸エピネフリン、フルニソリド、プロピオン酸フルチカゾン、塩酸ナファゾリン、塩酸オキシメタゾリン、塩酸フェニレフリン、塩酸テトラヒドロゾリン、トリアムシノロンアセトニド、塩酸キシロメタゾリンから選択される少なくとも１種であり得る（例えば、看護２００１薬物ハンドブック（Nursing 2001 Handbook of Drugs）の１０４１〜９７頁を参照されたい）。
【０１４４】
少なくとも１種の局所抗感染薬は、アシクロビル、アンホテリシンＢ、アゼライン酸クリーム、バシトラシン、硝酸ブトコナゾール、リン酸クリンダマイシン、クロトリマゾール、硝酸エコナゾール、エリスロマイシン、硫酸ゲンタマイシン、ケトコナゾール、酢酸マフェニド、メトロニダゾール（局所）、硝酸ミコナゾール、ムピロシン、塩酸ナフチフィン、硫酸ネオマイシン、ニトロフラゾン、ナイスタチン、スルファジアジン銀、塩酸テルビナフィン、テルコナゾール、塩酸テトラサイクリン、チオコナゾール、トルナフテートから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の抗疥癬薬若しくは殺シラミ薬は、クロタミトン、リンダン、ペルメトリン、ピレトリンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の局所コルチコステロイドは、ジプロピオン酸ベタメタゾン、吉草酸ベタメタゾン、プロピオン酸クロベタゾール、デソニド、デスオキシメタゾン、デキサメサゾン、リン酸デキサメサゾンナトリウム、酢酸ジフロラゾン、フルオシノロンアセトニド、フルオシノニド、フルランドレノリド、プロピオン酸フルチカゾン、ハルシオニド、ヒドロコルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、酪酸ヒドロコルチゾン、吉草酸ヒドロコルチゾン、フロ酸モメタゾン、トリアムシノロンアセトニドから選択される少なくとも１種であり得る（例えば、看護２００１薬物ハンドブック（Nursing 2001 Handbook of Drugs）の１０９８〜１１３６頁を参照されたい）。
【０１４５】
少なくとも１種のビタミン又はミネラルは、ビタミンＡ、ビタミンＢ複合体、シアノコバラミン、葉酸、ヒドロキソコバラミン、ロイコボリンカルシウム、ナイアシン、ナイアシンアミド、塩酸ピリドキシン、リボフラビン、塩酸チアミン、ビタミンＣ、ビタミンＤ、コレカルシフェロール、エルゴカルシフェロール、ビタミンＤ類似体、ドキセルカルシフェロール、パリカルシトール、ビタミンＥ、ビタミンＫ類似体、フィトナジオン、フッ化ナトリウム、フッ化ナトリウム（局所）、微量元素、クロム、銅、ヨウ素、マンガン、セレン、亜鉛から選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種のカロリーは、アミノ酸輸液（結晶）、ブドウ糖中アミノ酸輸液、電解質を含むアミノ酸輸液、ブドウ糖中電解質を含むアミノ酸輸液、肝不全のためのアミノ酸輸液、高代謝性侵襲のためのアミノ酸輸液、腎不全のためのアミノ酸輸液、ブドウ糖、脂肪乳剤、中鎖トリグリセリドから選択される少なくとも１種であり得る（例えば、看護２００１薬物ハンドブック（Nursing 2001 Handbook of Drugs）の１１３７〜６３頁を参照されたい）。
【０１４６】
本発明の抗アミロイド抗体組成物は、このような調節、治療、又は療法を必要としている細胞、組織、器官、動物、又は患者へ、少なくとも１つの抗アミロイド抗体を含む任意の好適かつ有効な量の組成物又は医薬品組成物の少なくとも１つを更に含んでもよく、所望により、少なくとも１種のＴＮＦ拮抗薬（例えば、限定されるものでないがＴＮＦの化学物質又はタンパク質拮抗薬、ＴＮＦのモノクローナル若しくはポリクローナル抗体又は断片、可溶性ＴＮＦ受容体（例えばｐ５５、ｐ７０又はｐ８５）又は断片、それらの融合ポリペプチド、又は小分子ＴＮＦ拮抗薬、例えばＴＮＦ結合タンパク質Ｉ若しくはＩＩ（ＴＢＰ−１又はＴＢＰ−ＩＩ）、ネレリモンマブ、インフリキシマブ、エンテラセプト、ＣＤＰ−５７１、ＣＤＰ−８７０、アフェリモマブ、レネルセプト等）、抗リウマチ薬（例えばメトトレキサート、オーラノフィン、アウロチオグルコース、アザチオプリン、エタネルセプト、金チオリンゴ酸ナトリウム、硫酸ヒドロキシクロロキン、レフルノミド、スルファサルジン）、筋弛緩薬、睡眠薬、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、鎮痛薬、麻酔薬、鎮静薬、局所麻酔薬、神経筋遮断薬、抗菌薬（例えばアミノグリコシド、抗真菌薬、抗寄生虫薬、抗ウイルス薬、カルバペネム、セファロスポリン、フルロルキノロン、マクロライド、ペニシリン、スルホンアミド、テトラサイクリン、別の抗菌薬）、抗乾癬薬、コルチコステロイド、アナボリックステロイド、糖尿病関連薬、ミネラル、栄養薬、甲状腺薬、ビタミン、カルシウム関連ホルモン、止瀉薬、鎮咳薬、制吐剤、抗潰瘍薬、緩下剤、抗凝固薬、エリスロピエチン（erythropieitin）（例えばエポエチンアルファ）、フィルグラスチム（例えばＧ−ＣＳＦ、ニューポジェン）、サルグラモスチム（ＧＭ−ＣＳＦ、Ｌｅｕｋｉｎｅ）、免疫化、免疫グロブリン、免疫抑制薬（例えばバシリキシマブ、シクロスポリン、ダクリズマブ）、成長ホルモン、ホルモン補充薬、エストロゲン受容体調節物質、散瞳薬、毛様筋調節薬、アルキル化剤、代謝拮抗薬、有糸分裂阻害剤、放射性医薬品、抗うつ薬、抗躁薬、抗精神病薬、抗不安薬、睡眠薬、交感神経刺激薬、興奮剤、ドネペジル、タクリン、喘息医薬品、ベータアゴニスト、吸入ステロイド、ロイコトリエン阻害剤、メチルキサンチン、クロモリン、エピネフリン又は類似体、ドルナーゼアルファ（パルモザイム）、サイトカイン又はサイトカイン拮抗薬から選択される少なくとも１種を更に含む。このようなサイトカインの、非限定的な例としては、ＩＬ−１〜ＩＬ−２３のいずれかが含まれ、これらに限定されない。適切な投与量は、当該技術分野において周知である。例えばウェルズ（Wells）ら編、「薬理学治療ハンドブック（Pharmacotherapy Handbook）」、第２版、アップルトン・アンド・ランゲ（Appleton and Lange）、コネチカット州スタンフォード（Stamford）（２０００年）；「ＰＤＲ薬局方、タラスコン・ポケット薬局方２０００（PDR Pharmacopoeia, Tarascon Pocket Pharmacopoeia 2000）」、豪華版、タラスコン・パブリッシング（Tarascon Publishing）、カリフォルニア州ロマリンダ（Loma Linda）（２０００年）を参照されたい。これらの参考文献はそれぞれ、当該技術分野において周知である。
【０１４７】
このような抗癌剤又は抗感染薬はまた、本発明の少なくとも１つの抗体に関連、結合、同時処方、又は同時投与される毒素分子も含むことができる。毒素は任意に作用して、病原性細胞又は組織を選択的に死滅させることができる。病原細胞は、癌細胞又は他の細胞であり得る。このような毒素は、限定されないが、例えば、リシン、ジフテリア毒、ヘビ毒、又は細菌毒の少なくとも１つから選択される、毒素の少なくとも１つの機能的細胞毒性ドメインを含む、精製若しくは組み換え毒素又は毒素断片であり得る。毒素という用語は、ヒト及び他の哺乳類において、死に至り得る毒素性ショックを含む、任意の病態をもたらし得る任意の自然発生するか、突然変異若しくは組み換え細菌又はウイルスによって生成される内毒素及び外毒素の両方を含む。かかる毒素には、腸管毒素原性大腸菌の熱に不安定なエンテロトキシン（ＬＴ）、熱安定エンテロトキシン（ＳＴ）、赤痢菌細胞毒素、アエロモナス属エンテロトキシン、毒素性ショック症候群毒素−１（ＴＳＳＴ−１）、ブドウ球菌エンテロトキシンＡ（ＳＥＡ）、Ｂ（ＳＥＢ）、又はＣ（ＳＥＣ）、連鎖球菌エンテロトキシン等を含み得るが、それらに限定されない。かかる細菌は、腸管毒素原性大腸菌（ＥＴＥＣ）、腸管出血性大腸菌（例えば、セロタイプ０１５７：Ｈ７の株）、ブドウ球菌種（例えば、黄色ブドウ球菌、化膿ブドウ球菌）、赤痢菌種（例えば、シゲラ・ディゼンテリエ、シゲラ・フレックスネリ、シゲラ・ボイディ、及びシゲラ・ソネイ）、サルモネラ種（例えば、サルモネラ・チフィ、サルモネラ・コレラ−スイ、サルモネラ・エンテリティディス）、クロストリジウム種（例えば、クロストリジウム・パーフリンジェンス、クロストリジウム・ジフィシル、クロストリジウム・ボツリヌム）、カンピロバクター種（例えば、カンピロバクター・ジェジュニ、カンピロバクター・フィータス）、ヘリコバクター種（例えば、ヘリコバクター・ピロリ）、アエロモナス種（例えば、アエロモナス・ソブリア、アエロモナス・ヒドロフィラ、アエロモナス・キャビア）、Ｐｌｅｉｓｏｍｏｎａｓ  ｓｈｉｇｅｌｌｏｉｄｅ、エルシニア・エンテロコリチカ、ビブリオ種（例えば、コレラ菌、腸炎ビブリオ）、クレブシエラ種、緑膿菌、及び連鎖球菌の株を含むが、それらに限定されない。例えば、ステイン（Stein）編、「内科学（INTERNAL MEDICINE）」、第３版、１〜１３頁、、リトル，ブラウン・アンド・カンパニー（Little, Brown and Co.）、ボストン（Boston）、（１９９０年）；エバンス（Evans）ら編、「ヒトの細菌感染：疫学及び制御（Bacterial Infections of Humans: Epidemiology and Control）」、第２版、２３９〜２５４頁、プレナム・メディカル・ブック社（Plenum Medical Book Co.）、ニューヨーク（１９９１年）；マンデル（Mandell）ら、「感染症の原理と実践（Principles and Practice of Infectious Diseases）」、第３版、チャーチル・リビングストン（Churchill Livingstone）、ニューヨーク（１９９０年）；バーコウ（Berkow）ら編、「メルクマニュアル（The Merck Manual）」第１６版、メルク・アンド・カンパニー（Merck and Co.）、ニュージャージー州ローウェイ（Rahway）、１９９２年；ウッド（Wood）ら、ＦＥＭＳ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、７６巻、１２１〜１３４頁（１９９１年）；マラック（Marrack）ら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４８巻、７０５〜７１１頁（１９９０年）を参照されたい。参照により、これら参考文献の内容は全て本明細書に組み込まれる。
【０１４８】
本発明の抗アミロイド抗体化合物、組成物又は組み合せは更に、希釈剤、結合剤、安定剤、緩衝剤、塩、親油性溶媒、保存剤、アジュバント等のような（ただしこれらに限定されない）任意の適切な助剤のうちの少なくとも１つを含み得る。製薬上許容できる助剤が好ましい。かかる滅菌溶液を調製する非限定的な例及び方法は、当該技術分野において周知であり、例えば、ジェンナーロ（Gennaro）編、レミントンの薬学（Remington's Pharmaceutical Sciences）、第１８版、、マック出版（Mack Publishing Co.）（ペンシルバニア州イーストン（Easton））１９９０年等であるが、それに限定されない。当該技術分野において周知であるような、又は本明細書に記載のような抗アミロイド抗体、断片、若しくは変異体組成物の投与方式、溶解性及び／又は安定性が適している製薬上許容できる担体は、日常的に選択できる。
【０１４９】
本組成物において有用な医薬賦形剤及び添加剤としては、タンパク質、ペプチド、アミノ酸、脂質、及び炭水化物（例えば、糖には、単糖類、二糖類、三糖類、四糖類、及びオリゴ糖等の糖；アルジトール、アルドン酸、エステル化糖等の誘導化糖類、及び多糖類又は糖ポリマーが挙げられる）が挙げられるが、これらに限定されず、これらは単独又は組み合わせで存在することができ、単独、又は１〜９９．９９重量％又は体積％での組み合わせを含む。代表的なタンパク質賦形剤には、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）等の血清アルブミン、組み換えヒトアルブミン（ｒＨＡ）、ゼラチン、カゼイン等が挙げられる。緩衝能においても機能し得る代表的なアミノ酸／抗体構成成分には、アラニン、グリシン、アルギニン、ベタイン、ヒスチジン、グルタミン酸、アスパラギン酸、システイン、リジン、ロイシン、イソロイシン、バリン、メチオニン、フェニルアラニン、アスパルテーム等が挙げられる。好ましいアミノ酸の１つはグリシンである。
【０１５０】
本発明における使用に適した炭水化物賦形剤には、例えば、フルクトース、マルトース、ガラクトース、グルコース、Ｄ−マンノース、ソルボース等の単糖類、ラクトース、スクロース、トレハロース、セロビオース等の二糖類、ラフィノース、メレジトース、マルトデキストリン、デキストラン、デンプン等の多糖類、及びマンニトール、キシリトール、マルチトール、ラクチトール、キシリトール、ソルビトール（グルシトール）、ミオイノシトール等のアルジトールが挙げられる。本発明における使用に適した炭水化物賦形剤は、マンニトール、トレハロース、及びラフィノースである。
【０１５１】
抗アミロイド抗体組成物はまた、緩衝剤又はｐＨ調整剤も含み得る。典型的には、緩衝剤は有機酸又は塩基から調製された塩である。代表的な緩衝剤には、クエン酸、アスコルビン酸、グルコン酸、炭酸、酒石酸、コハク酸、酢酸、又はフタル酸の塩等の有機酸塩；トリス、塩酸トロメタミン、又はリン酸緩衝剤が挙げられる。本組成物における使用に適した緩衝剤は、クエン酸塩等の有機酸塩である。
【０１５２】
更に、本発明の抗アミロイド抗体組成物は、ポリビニルピロリドン、フィコール（ポリマー糖）、デキストレート（例えば、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン等のシクロデキストリン）、ポリエチレングリコール、着香剤、抗菌剤、甘味料、抗酸化剤、帯電防止剤、界面活性剤（例えば「ＴＷＥＥＮ  ２０」及び「ＴＷＥＥＮ  ８０」等のポリソルベート）、脂質（例えばリン脂質、脂肪酸）、ステロイド（例えばコレステロール）、及びキレート剤（例えばＥＤＴＡ）等のポリマー賦形剤／添加剤を含むことができる。
【０１５３】
本発明による抗アミロイド抗体、部分又は変異体組成物における使用に適するこれら及び追加の既知の医薬賦形剤及び／又は添加剤は、当該技術分野において既知であり、例えば、「レミントン（Remington）：薬学の科学及び実用（The Science & Practice of Pharmacy）」第１９版、ウイリアムズ・アンド・ウイリアムズ（Williams & Williams）（１９９５年）及び「医師の卓上参考書（Physician's Desk Reference）」第５２版、メディカル・エコノミクス（Medical Economics）、ニュージャージー州モントベール（Montvale）、（１９９８年）に一覧記載されている。これらの開示は、当該技術分野において周知である。好適な担体又は賦形剤材料は、炭水化物（例えば単糖類及びアルジトール）及び緩衝剤（例えばクエン酸塩）又はポリマー剤である。
【０１５４】
製剤
上記のとおり、本発明は、好ましくは、生理食塩水又は選択された塩を含むリン酸緩衝剤である安定した製剤、並びに保存剤を含有する保存溶液及び製剤、並びに製薬上許容できる製剤中の少なくとも１つの抗アミロイド抗体を含む医薬又は獣医薬使用に適した多用途保存製剤を提供する。保存製剤は、水性希釈剤中に、少なくとも１種の既知の、又は所望により少なくとも１種のフェノール、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール、ｏ−クレゾール、クロロクレゾール、ベンジルアルコール、硝酸フェニル水銀、フェノキシエタノール、ホルムアルデヒド、クロロブタノール、塩化マグネシウム（例えば六水和物）、アルキルパラベン（メチル、エチル、プロピル、ブチル等）、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、デヒドロ酢酸ナトリウム及びチメロサール又はそれらの混合物からなる群から選択される保存剤を含有する。限定されるものでないが、０．００１、０．００３、０．００５、０．００９、０．０１、０．０２、０．０３、０．０５、０．０９、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２．０、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３．０、３．１、３．２、３．３、３．４、３．５、３．６、３．７、３．８、３．９、４．０、４．３、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９又はその中のいずれかの範囲若しくは値を挙げることができる、０．００１〜５％又はその中のいずれかの範囲若しくは値のような、当該技術分野で既知のところのいかなる適する濃度又は混合物も使用し得る。非限定的な例は、保存剤なし、０．１〜２％のｍ−クレゾール（例えば０．２、０．３．０．４、０．５、０．９、１．０％）、０．１〜３％のベンジルアルコール（例えば０．５、０．９、１．１、１．５、１．９、２．０、２．５％）、０．００１〜０．５％のチメロサール（例えば０．００５、０．０１）、０．００１〜２．０％のフェノール（例えば０．０５、０．２５、０．２８、０．５、０．９、１．０％）、０．０００５〜１．０％のアルキルパラベン（１種又は複数）（例えば０．０００７５、０．０００９、０．００１、０．００２、０．００５、０．００７５、０．００９、０．０１、０．０２、０．０５、０．０７５、０．０９、０．１、０．２、０．３、０．５、０．７５、０．９、１．０％）等を含む。
【０１５５】
上述の通り、本発明は、包装材及び所望により水性希釈剤中の規定の緩衝剤及び／又は保存剤を伴う少なくとも１つの抗アミロイド抗体の溶液を含む少なくとも１つのバイアルを含む製品を提供し、前記包装材は、このような溶液を１、２、３、４、５、６、９、１２、１８、２０、２４、３０、３６、４０、４８、５４、６０、６６、７２時間以上の期間にわたり保持できることを記したラベルを含む。本発明は、包装材、凍結乾燥された少なくとも１つの抗アミロイド抗体を含む第１のバイアル、及び規定の緩衝剤又は保存剤の水性希釈剤を含む第２のバイアルを含む製品を更に含み、前記包装材は、水溶性希釈剤中で少なくとも１つの抗アミロイド抗体を再構成して、２４時間以上の期間にわたって保持できる溶液を形成するように患者に指示するラベルを含む。
【０１５６】
本発明に従って用いられる少なくとも１つの抗アミロイド抗体は、本明細書に記載のように、又は当該技術分野において既知であるように、哺乳類細胞又はトランスジェニック調製物から生成することを含む、組み換え手段により生成することができるか、又は他の生物源から精製することができる。
【０１５７】
本発明の製品における少なくとも１つの抗アミロイド抗体の範囲は、再構成時に得られる量、湿／乾システムの場合には、約１．０μｇ／ｍＬ〜約１０００ｍｇ／ｍＬの濃度を含むが、これより低い濃度及び高い濃度が実施可能であり、意図される送達ビヒクルに依存する。例えば溶液製剤は、経皮パッチ、肺、経粘膜、又は浸透圧性若しくはマイクロポンプ方法とは異なる。
【０１５８】
好ましくは、水性希釈剤は所望により、更に、製薬上許容できる保存剤を含む。好ましい保存剤には、フェノール、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール、ｏ−クレゾール、クロロクレゾール、ベンジルアルコール、アルキルパラベン（メチル、エチル、プロピル、ブチル等）、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、デヒドロ酢酸ナトリウム及びチメロサール又はそれらの混合物からなる群から選択されるものが含まれる。製剤中で使用される保存剤の濃度は、抗菌効果を生み出すのに十分な濃度である。このような濃度は選択された保存剤に依存して、当業者により容易に決定される。
【０１５９】
他の賦形剤、例えば、等張剤、緩衝剤、抗酸化剤、保存剤エンハンサーは、所望によりかつ好ましくは希釈剤に添加することができる。グリセリン等の等張剤が、既知の濃度で一般に使用される。好ましくは、生理学的に許容される緩衝剤を添加して、改善されたｐＨ制御を提供する。製剤は、約ｐＨ４〜約ｐＨ１０のような広範なｐＨ、好ましくは約ｐＨ５〜約ｐＨ９の範囲、最も好ましくは約６．０〜約８．０の範囲を網羅することができる。好ましくは、本発明の製剤は、約６．８〜約７．８のｐＨを有する。好適な緩衝剤には、リン酸緩衝剤を含み、最も好ましくは、リン酸ナトリウム、特にリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を含む。
【０１６０】
他の添加剤、例えばＴｗｅｅｎ  ２０（ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート）、Ｔｗｅｅｎ  ４０（ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノパルミテート）、Ｔｗｅｅｎ  ８０（ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート）、プルロニック（Pluronic）Ｆ６８（ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンブロックコポリマー）、及びＰＥＧ（ポリエチレングリコール）等の、製薬上許容できる可溶化剤、又は、ポリソルベート２０若しくは８０又はポロキサマー１８４若しくは１８８、プルロニック（登録商標）ポリル等の非イオン性界面活性剤、その他のブロックコポリマー、並びにＥＤＴＡ及びＥＧＴＡ等のキレート剤を、所望により製剤又は組成物に凝集を低減するために添加することができる。これらの添加物は、製剤を投与するためにポンプ又はプラスチック容器が使用される場合に特に有用である。製薬上許容できる界面活性剤の存在により、タンパク質の凝集の傾向が軽減される。
【０１６１】
本発明の製剤は、少なくとも１つの抗アミロイド抗体と、フェノール、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール、ｏ−クレゾール、クロロクレゾール、ベンジルアルコール、アルキルパラベン（メチル、エチル、プロピル、ブチル等）、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、デヒドロ酢酸ナトリウム及びチメロサール又はこれらの混合物からなる群から選択される保存剤を水性希釈剤中で混合することを含むプロセスにより調製できる。少なくとも１つの抗アミロイド抗体及び保存剤を水性希釈剤中で混合することは、従来の溶解及び混合手順を使用して実施する。適する製剤を調製するため、例えば、緩衝溶液中の測定された量の少なくとも１つの抗アミロイド抗体を、所望の濃度のタンパク質及び保存剤を提供するのに十分な量の緩衝溶液中で所望の保存剤と組み合わせる。当業者は、このプロセスの変化形態を認識する。例えば、構成要素の添加順序、付加的な添加剤を使用するか否か、製剤が調製される温度及びｐＨは、全て、使用する投与濃度及び手段について最適化され得る因子である。
【０１６２】
特許請求される製剤は、透明な溶液として、又は、水、保存剤、及び／若しくは賦形剤、好ましくはリン酸緩衝剤及び／若しくは生理食塩水、並びに選択された塩を水溶性希釈剤内に含む第２のバイアルで再構成される、少なくとも１つの凍結乾燥した抗アミロイド抗体のバイアルを含む、二重バイアルとして、患者に提供することができる。単一溶液バイアル又は再構成を必要とする二重バイアルはいずれも複数回再利用することができ、更に、患者治療の単一又は複数サイクルを満たすことができ、したがって、現在使用できるよりも便利な治療レジメンを提供することができる。
【０１６３】
特許請求される本製品は、即時から、２４時間以上の期間にわたる投与に有用である。したがって、本発明により特許請求される製品は、患者に著しい利益を提供する。本発明の製剤は、所望により約２〜約４０℃の温度で安全に保管し、長期間タンパク質の生物活性を保持することができ、したがってパッケージラベルは、溶液が６、１２、１８、２４、３６、４８、７２、若しくは９６時間以上にわたって保持及び／又は使用され得ることを示すことができる。保存されている希釈剤を使用する場合には、このようなラベルに最高１〜１２ヵ月、半年、１年半及び／又は２年までの使用を含むことができる。
【０１６４】
本発明の少なくとも１つの抗アミロイド抗体溶液は、少なくとも１つの抗体を水性希釈剤中で混合することを含むプロセスにより調製し得る。混合することは従来の溶解及び混合手順を使用して実施する。適する希釈剤を調製するため、例えば、水又は緩衝剤中の測定された量の少なくとも１つの抗体を、所望の濃度のタンパク質及び場合によっては保存剤又は緩衝剤を提供するのに十分な量で組み合わせる。当業者は、このプロセスの変化形態を認識し得る。例えば、構成成分の添加順序、付加的な添加剤を使用するか否か、製剤が調製される温度及びｐＨは、全て、使用する投与濃度及び手段について最適化され得る因子である。
【０１６５】
特許請求される製品は、透明な溶液として、又は水性希釈剤を収容している第２のバイアルで再構成される少なくとも１つの凍結乾燥した抗アミロイド抗体のバイアルを含む二重バイアルとして、患者に提供し得る。単一溶液バイアル又は再構成を必要とする二重バイアルはいずれも複数回再利用することができ、更に、患者治療の単一又は複数サイクルを満たすことができ、したがって、現在使用できるよりも便利な治療レジメンを提供する。
【０１６６】
特許請求される製品は、透明溶液、又は、水性希釈剤を収容している第２のバイアルを用いて再構成される凍結乾燥した少なくとも１つの抗アミロイド抗体のバイアルを含む二重バイアルを、薬局、診療所又はその他のこのような機関及び施設に提供することによって、患者に対し間接的に提供され得る。この場合、透明溶液は最高１リットル又は更にはそれ以上のサイズであってよく、これは、そこからより小さなバイアルに移すために少なくとも１つの抗体溶液のより少ない部分を１回又は多数回取り出して、薬局若しくは診療所が、顧客及び／又は患者に提供することができる大きな容器を提供する。
【０１６７】
これらの単一バイアルシステムを含む認定されたデバイスとしては、例えばＢＤペンズ（BD Pens）、ＢＤオートジェクター（BD Autojector）（登録商標）、ヒューマジェクト（Humaject）（登録商標）、ノボペン（NovoPen）（登録商標）、Ｂ−Ｄ（登録商標）ペン、オートペン（AutoPen）（登録商標）、及びオプティペン（OptiPen）（登録商標）、ジェノトロピンペン（GenotropinPen）（登録商標）、ジェノトロノームペン（Genotronorm Pen）（登録商標）、ヒューマトロペン（Humatro Pen）（登録商標）、レコペン（Reco-Pen）（登録商標）、ロフェロンペン（Roferon Pen）（登録商標）、バイオジェクタ（Biojector）（登録商標）、イジェクト（Iject）（登録商標）、Ｊ−ｔｉｐ無針注射（登録商標）、イントラジェクト（Intraject）（登録商標）、メディジェクト（Medi-Ject）（登録商標）、等の溶液の送達用ペンインジェクタデバイスが挙げられ、これらは例えば、ベクトン・ディッキンソン（Becton Dickensen）（ニュージャージー州フランクリンレイクス（Franklin Lakes）、ｗｗｗ．ｂｅｃｔｏｎｄｉｃｋｅｎｓｏｎ．ｃｏｍ）、ディセトロニック（Disetronic）（スイス、ブルクドルフ（Burgdorf）、ｗｗｗ．ｄｉｓｅｔｒｏｎｉｃ．ｃｏｍ；バイオジェクト（Bioject）（オレゴン州ポートランド（Portland）、ｗｗｗ．ｂｉｏｊｅｃｔ．ｃｏｍ）；ナショナル・メディカル・プロダクツ（National Medical Products）ウェストン・メディカル（Weston Medical ）（英国、ピーターバラ（Peterborough）、ｗｗｗ．ｗｅｓｔｏｎ−ｍｅｄｉｃａｌ．ｃｏｍ）、メディジェクト社（Medi-Ject Corp）（ミネソタ州ミネアポリス（Minneapolis）、ｗｗｗ．ｍｅｄｉｊｅｃｔ．ｃｏｍ）によって製造又は開発されたものである。二重バイアルシステムを含む認定されたデバイスは、乾燥凍結された薬物を、ヒューマトロペン（HumatronPen）（登録商標）等の再構成溶液の送達用カートリッジ内で再構成するためのペンインジェクタシステムを含む。
【０１６８】
今回特許請求される製品は、包装材を含む。包装材は、規制当局によって必要とされる情報に加えて、製品を使用できる条件を提供する。本発明の包装材は、患者に、水溶性希釈剤中で少なくとも１つの抗アミロイド抗体を再構成し溶液を形成する、及び２つのバイアル湿／乾製品の場合には、２〜２４時間又はそれ以上にわたって溶液を使用する、という指示を提供する。単一バイアルの溶液製品の場合、ラベルは、このような溶液を２〜２４時間又はそれ以上にわたって使用できることを示す。今回特許請求される製品は、ヒト医薬製品用途に有用である。
【０１６９】
本発明の製剤は、少なくとも１つの抗アミロイド抗体及び選択された緩衝剤、好ましくは生理的食塩水又は選択された塩を含有するリン酸緩衝剤を混合することを含むプロセスにより調製し得る。少なくとも１つの抗アミロイド抗体及び緩衝剤を水性希釈剤中で混合することは、従来の溶解及び混合手順を使用して実施する。適する製剤を調製するため、例えば、水又は緩衝剤中の測定された量の少なくとも１つの抗アミロイド抗体を、所望の濃度のタンパク質及び緩衝剤を提供するのに十分な量の水中の所望の緩衝剤と組み合わせる。当業者は、このプロセスの変化形態を認識し得る。例えば、構成成分の添加順序、付加的な添加剤を使用するか否か、製剤が調製される温度及びｐＨは、全て、使用する投与濃度及び手段について最適化され得る因子である。
【０１７０】
特許請求される安定又は保存製剤は、透明な溶液として、又は、水性希釈剤中に保存剤若しくは緩衝剤及び賦形剤を収容する第２のバイアルを用いて再構成される凍結乾燥した少なくとも１つの抗アミロイド抗体のバイアルを含む二重バイアルとして、患者に提供することができる。単一溶液バイアル又は再構成を必要とする二重バイアルはいずれも複数回再利用することができ、更に、患者治療の単一又は複数サイクルを満たすことができ、したがって、現在使用できるよりも便利な治療レジメンを提供する。
【０１７１】
抗アミロイド抗体を安定化するその他の製剤又は方法は結果として、前記抗体を含む凍結乾燥粉末の透明な溶液以外のものをもたらし得る。非透明溶液としては、微粒子懸濁液を含む製剤があり、このような微粒子は、ミクロスフェア、微小粒子、ナノ粒子、ナノスフェア又はリポソーム等のさまざまな形で知られる、寸法可変の構造内に、抗アミロイド抗体を含有する組成物である。活性剤を含有するこうした比較的均質な本質的に球状の微粒子製剤は、米国特許第４，５８９，３３０号に教示されるとおり、活性物質及びポリマーを含有する水相と非水相とを接触させ、次いで非水相を蒸発させて水相からの粒子の合着を引き起こすことにより形成し得る。多孔性微粒子は、米国特許第４，８１８，５４２号に教示されるとおり、連続溶媒中に分散された活性物質及びポリマーを含有する第１相を使用し、凍結乾燥又は希釈−抽出−沈殿により懸濁液から前記溶媒を除去して調製し得る。こうした調製に好ましいポリマーは、ゼラチン寒天、デンプン、アラビノガラクタン、アルブミン、コラーゲン、ポリグリコール酸、ポリ乳酸（polylactic aced）、グリコリド−Ｌ（−）ラクチドポリ（エプシロン−カプロラクトン、ポリ（エプシロン−カプロラクトン−ＣＯ−乳酸）、ポリ（エプシロン−カプロラクトン−ＣＯ−グリコール酸）、ポリ（β−ヒドロキシ酪酸）、ポリエチレンオキシド、ポリエチレン、ポリ（アルキル−２−シアノアクリレート）、ポリ（ヒドロキシエチルメタクリレート）、ポリアミド、ポリ（アミノ酸）、ポリ（２−ヒドロキシエチルＤＬ−アスパルトアミド）、ポリ（エステル尿素）、ポリ（Ｌ−フェニルアラニン／エチレングリコール／１，６−ジイソシアナトヘキサン）及びポリ（メチルメタクリレート）からなる群から選択される、天然若しくは合成のコポリマー又はポリマーである。特に好ましいポリマーは、ポリグリコール酸、ポリ乳酸（polylactic aced）、グリコリド−Ｌ（−）ラクチドポリ（エプシロン−カプロラクトン）、ポリ（エプシロン−カプロラクトン−ＣＯ−乳酸）、及びポリ（エプシロン−カプロラクトン−ＣＯ−グリコール酸）等のポリエステルである。ポリマー及び／又は活性物質を溶解させるのに有用な溶媒としては水、ヘキサフルオロイソプロパノール、塩化メチレン、テトラヒドロフラン、へキサン、ベンゼン、又はヘキサフルオロアセトンセスキ水和物がある。第２相に活性物質を含有する相を分散させるプロセスには、ノズル内のオリフィスに前記第１相を圧力で強制的に通過させて液滴形成に作用する工程を含むことができる。
【０１７２】
乾燥粉末製剤は、例えば水性又は非水性溶媒を除去するための１つ以上の工程が後続する、噴霧乾燥、又は蒸発若しくは結晶質組成物の沈殿による溶媒抽出等の、凍結乾燥以外のプロセスの結果として得ることもできる。噴霧乾燥抗体製剤の調製は米国特許第６，０１９，９６８号に教示される。抗体ベースの乾燥粉末組成物は、抗体の溶液又はスラリー、及び所望により、呼吸用乾燥粉末を提供するための条件下で賦形剤を溶媒中で噴霧乾燥させることによって生成可能である。溶媒には、容易に乾燥可能な、例えば水及びエタノール等の極性化合物を含むことができる。抗体安定性は、例えば窒素ブランケット下において、又は乾燥用気体として窒素を使用することによって、酸素不在下で噴霧乾燥手順を実施することで増強させることができる。別の比較的乾燥した製剤は、国際公開第９９１６４１９号中で教示されているような、典型的にヒドロフルオロアルカン噴射剤を含む懸濁培地中に分散した、複数の有孔微細構造の分散物である。安定化された分散物は、定量吸入器を用いて患者の肺に投与できる。噴霧乾燥された薬剤の商業的製造において有用な機器は、ビュッヒ社（Buchi Ltd.）又はナイロ社（Niro Corp.）により製造されている。
【０１７３】
本明細書に記載の、安定製剤若しくは保存製剤、又は溶液の、いずれかにおける少なくとも１つの抗アミロイド抗体は、本発明に従って、ＳＣ若しくはＩＭ注射、経皮、肺、経粘膜、移植、浸透圧ポンプ、カートリッジ、マイクロポンプ、又は当業者に理解される他の手段を含む多様な送達方法を介して、当該技術分野において周知のように、患者に投与することができる。
【０１７４】
治療適用
本発明はまた、当該技術分野において既知のように、又は本明細書に記載のように、本発明の少なくとも１つのアミロイド抗体を用いて、細胞、組織、器官、動物、又は患者における少なくとも１つのアミロイド関連疾患を調節又は治療するための方法を提供する。
【０１７５】
本発明はまた、細胞、組織、器官、動物、又は患者における、肥満、免疫関連疾患、循環器疾患、感染症、悪性疾患、又は神経学的疾患のうち少なくとも１つを含むが、これらに限定されない少なくとも１つのアミロイド関連疾患を、調節又は治療するための方法も提供する。このようなアミロイド関連疾患としては、任意のアミロイド症、全身性アミロイド症、アルツハイマー病（ＡＤ）、散発性アルツハイマー病、家族性アルツハイマー病、レヴィー小体変異アルツハイマー病、プリオン病、原発性全身性アミロイド症、続発性全身性アミロイド症、高密度（dense）全身性アミロイド症、モノクローナルタンパク質全身性アミロイド症、反応性全身性アミロイド症、遺伝性ａｐｏＡ１アミロイド症、遺伝性リゾチームアミロイド症、インスリン関連アミロイド、家族性アミロイド症フィンランド型、家族性角膜上皮下アミロイド、家族性アミロイド多発性神経障害、家族性非神経障害性アミロイド症、家族性英国型認知症、遺伝性大脳アミロイド血管障害、血液透析関連アミロイド症、家族性アミロイド多発性神経障害、家族性アミロイド性多発性神経障害、成人発症型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、遺伝性腎臓アミロイド症、下垂体アミロイド症、注入−局在アミロイド症、髄様癌、甲状腺の髄様癌、心房アミロイド症、孤立性心房アミロイド症、遺伝性脳アミロイド血管障害、遺伝性フィブリノゲンアルファ鎖アミロイド症、パーキンソン病、ハンチントン病、海綿状脳症、プリオン関連海綿状脳症、プリオン関連伝播性海綿状脳症、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、家族性筋萎縮性側索硬化症、慢性閉塞性肺疾患等を挙げることができるが、これらに限定されない。
【０１７６】
本発明は、神経変性疾患、多発性硬化症、偏頭痛、ＡＩＤＳ認知症症候群、多発性硬化症及び急性横断脊髄炎のような脱髄性疾患；皮質脊髄系の病変のような錐体外路及び小脳の障害；基底核の障害又は小脳の障害；ハンチントン舞踏病及び老年舞踏病のような運動亢進性運動障害；ＣＮＳのドーパミン受容体を遮断する薬物により誘発されるもののような薬物誘発性運動障害：パーキンソン病のような運動低下性運動障害；進行性核上性麻痺；小脳の構造的病変；脊髄性運動失調、フリートライヒ運動失調、小脳皮質変性、多系統変性（メンセル、デジェリーヌ−トーマス、シャイ−ドレーガー及びマシャド−ヨーゼフ）のような脊髄小脳変性；全身障害（レフサム病、無β−リポ蛋白血症、運動失調、末梢血管拡張症及びミトコンドリアの多系統障害）；多発性硬化症、急性横断脊髄炎のような脱髄核（demyelinating core）障害；並びに、神経原性筋萎縮症（筋萎縮性側索硬化症、乳児の脊髄性筋萎縮症及び若年性脊髄性筋萎縮症のような前角細胞変性）のような運動単位の障害；アルツハイマー病；中年のダウン症候群；びまん性レヴィー小体病；レヴィー小体型の老年認知症；ウェルニッケ−コルサコフ症候群；慢性アルコール症；クロイツフェルト−ヤコブ病；亜急性硬化性汎脳炎、ハレルフォルデン−シュパッツ症候群；及びボクサー認知症等の少なくとも１種が挙げられるが、これらに限定されない細胞、組織、器官、動物、又は患者での少なくとも１種の神経系又はアミロイド関連疾患の調節又は治療方法もまた提供する。このような方法は、所望により、少なくとも１つのＴＮＦ抗体又は特異的部分又は変異体を含む有効量の組成物又は医薬組成物を、このような調節、治療又は療法を必要としている細胞、組織、器官、動物、又は患者に対し投与することを含むことができる。例えば、メルクマニュアル（Merck Manual）第１６版、メルク社（Merck & Company）ニュージャージー州ローウェイ（Rahway）、（１９９２年）を参照のこと。
【０１７７】
本発明は、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、全身発症型若年性関節リウマチ、乾癬性関節炎、強直性脊椎炎、胃潰瘍、血清陰性の関節症、変形性関節症、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、全身性エリテマトーデス、抗リン脂質症候群、虹彩毛様体炎／ブドウ膜炎／視神経炎、特発性肺線維症、全身性血管炎／ヴェゲナー肉芽腫症、サルコイドーシス、精巣炎／精管切除復帰処置、アレルギー／アトピー疾患、喘息、アレルギー性鼻炎、湿疹、アレルギー性接触皮膚炎、アレルギー性結膜炎、過敏性肺炎、移植、臓器移植拒絶、移植片対宿主病、全身性炎症応答症候群、敗血症症候群、グラム陽性敗血症、グラム陰性敗血症、培養陰性敗血症、真菌性敗血症、好中球減少熱、尿路性敗血症、髄膜炎菌血症、外傷／出血、火傷、イオン化放射被曝、急性膵炎、成人呼吸窮迫症候群、関節リウマチ、アルコール誘発性肝炎、慢性炎症の病状、サルコイドーシス、クローンの病状、鎌状赤血球貧血、糖尿病、ネフローゼ、アトピー疾患、過敏反応、アレルギー性鼻炎、花粉症、通年性鼻炎、結膜炎、子宮内膜症、喘息、蕁麻疹、全身性アナフィラキシー、皮膚炎、悪性貧血、溶血性疾患、血小板減少症、いずれかの臓器又は組織の移植拒絶、腎移植拒絶、心移植拒絶、肝移植拒絶、膵移植拒絶、肺移植拒絶、骨髄移植（ＢＭＴ）拒絶、皮膚同種移植拒絶、軟骨移植拒絶、骨移植片拒絶、小腸移植拒絶、胎児胸腺移植片拒絶、副甲状腺移植拒絶、いずれかの臓器又は組織の異種移植拒絶、同種移植拒絶、抗受容体過敏反応、グレーヴズ病、レイノー病、Ｂ型インスリン抵抗性糖尿病、喘息、重症筋無力症、抗体媒介性細胞傷害、ＩＩＩ型過敏反応、全身性エリテマトーデス、ＰＯＥＭＳ症候群（多発性神経炎、臓器巨大症、内分泌異常症、単一クローン性高γグロブリン血症、及び皮膚病変症候群）、多発性神経炎、臓器巨大症、内分泌異常症、単一クローン性高γグロブリン血症、皮膚病変症候群、抗リン脂質症候群、天疱瘡、強皮症、混合型結合組織疾患、特発性アジソン病、真性糖尿病、慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、白斑、血管炎、心筋梗塞後心切開症候群、ＩＶ型過敏症、接触皮膚炎、過敏性肺炎、同種移植拒絶、細胞内生物体による肉芽腫、薬物過敏症、代謝性／特発性、ウィルソン病、ヘモクロマトーシス、α−１−アンチトリプシン欠乏症、糖尿病性網膜症、橋本甲状腺炎、骨粗鬆症、視床下部−下垂体−副腎系の評価、原発性胆汁性肝硬変、甲状腺炎、脳脊髄炎、悪液質、嚢胞性線維症、新生児の慢性肺疾患、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、家族性血球貪食性リンパ組織球症、皮膚科的状態、乾癬、脱毛症、ネフローゼ症候群、腎炎、糸球体腎炎、急性腎不全、血液透析、尿毒症、毒性、子癇前症、ｏｋｔ３療法、抗ｃｄ３療法、サイトカイン療法、化学療法、放射線治療（例えば、限定されるものでないが無力症、貧血、悪液質等を挙げることができる）、慢性サリチル酸中毒等の少なくとも１種が挙げられるが、これらに限定されない、細胞、組織、器官、動物又は患者での少なくとも１種の免疫又はアミロイド関連疾患の調節又は治療方法もまた提供する。例えば、「メルクマニュアル（Merck Manual）」第１２〜１７版、メルク・アンド・カンパニー（Merck & Company）、ニュージャージー州ローウェイ（Rahway）（１９７２年、１９７７年、１９８２年、１９８７年、１９９２年、１９９９年）、「薬理学治療ハンドブック（Pharmacotherapy Handbook）」、ウェルズ（Wells）ら編、第２版、アップルトン・アンド・ランゲ（Appleton and Lange）、コネチカット州スタンフォード（Stamford）（１９９８年）を参照されたい。これらは当該技術分野において周知である。
【０１７８】
本発明はまた、心原性失神症候群、心筋梗塞、うっ血性心不全、卒中、虚血性卒中、出血、動脈硬化症、アテローム硬化症、再狭窄、糖尿病性動脈硬化性疾患、高血圧症、動脈高血圧症、腎血管系性高血圧症、失神、ショック、循環器系の梅毒、心不全、肺性心、原発性肺高血圧症、心不整脈、動脈の異所性収縮、心房粗動、心房細動（持続性又は発作性）、灌流後症候群、心肺バイパス炎症応答、無秩序又は多病巣性心房性頻脈、規則的狭（regular narrow）ＱＲＳ頻脈、特異的不整脈、心室細動、Ｈｉｓ束不整脈、房室ブロック、脚ブロック、心筋虚血性障害、冠動脈疾患、狭心症、心筋梗塞、心筋症、拡張型うっ血性心筋症、拘束型心筋症、弁膜心疾患、心内膜炎、心膜疾患、心腫瘍、大動脈及び末梢動脈瘤、大動脈解離、大動脈の炎症、腹部大動脈及びその側枝の閉塞、末梢血管障害、閉塞性動脈障害、末梢アテローム硬化性（atherlosclerotic）疾患、閉塞性血栓性血管炎、機能的末梢動脈障害、レイノー現象及びレイノー病、肢端チアノーゼ、肢端紅痛症、静脈疾患、静脈血栓症、静脈瘤、動静脈瘻、リンパ水腫、脂肪性浮腫、不安定型狭心症、再灌流傷害、ポンプ後症候群、虚血−再灌流傷害等の少なくとも１種が挙げられるが、これらに限定されない、細胞、組織、器官、動物又は患者での少なくとも１種の循環器又はアミロイド関連疾患の調節又は治療方法も提供する。このような方法は、少なくとも１つの抗アミロイド抗体を含む有効量の組成物又は医薬組成物を、かかる調節、治療又は療法を必要とする、細胞、組織、器官、動物、又は患者に対して投与することを、所望により含むことができる。
【０１７９】
本発明は、急性又は慢性細菌感染、細菌、ウイルス、及び菌感染を含む急性及び慢性寄生又は感染プロセス、ＨＩＶ感染／ＨＩＶ神経障害、髄膜炎、肝炎（例えば、Ａ、Ｂ、又はＣ等）、敗血症性関節炎、腹膜炎、肺炎、喉頭蓋炎、大腸菌０１５７：ｈ７、溶血性尿毒症症候群／塞栓性血小板減少性紫斑病、マラリア、デング出血熱、リーシュマニア症、ハンセン病、中毒性ショック症候群、連鎖球菌筋炎、ガス壊疽、ヒト型結核菌、トリ型結核菌、ニューモシスティス・カリニ肺炎、骨盤感染症、精巣炎／精巣上体炎、レジオネラ、ライム病、Ａ型インフルエンザ、エプスタイン・バーウイルス、ウイルス関連血球貪食症候群、ウイルス性脳炎／無菌性髄膜炎等の少なくとも１種が挙げられるが、これらに限定されない、細胞、組織、器官、動物、又は患者での少なくとも１つの感染又はアミロイド関連疾患を調節又は治療するための方法も提供する。
【０１８０】
本発明は、白血病、急性白血病、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性リンパ球性白血病、Ｂ細胞、Ｔ細胞又はＦＡＢ  ＡＬＬ、急性骨髄性（myeloid）白血病（ＡＭＬ）、急性骨髄性（myelogenous）白血病、慢性骨髄性（myelocytic）白血病（ＣＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、ヘアリーセル白血病、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、リンパ腫、ホジキン病、悪性リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、多発性骨髄腫、カポジ肉腫、結腸直腸癌、膵癌、上咽頭癌、悪性組織球増殖症、新生物随伴症候群／悪性の高カルシウム血症、充実性腫瘍、膀胱癌、乳癌、結腸直腸癌、子宮内膜癌、頭部癌、頚部癌、遺伝性非ポリポーシス癌、ホジキンリンパ腫、肝癌、肺癌、非小細胞肺癌、卵巣癌、膵癌、前立腺癌、腎細胞癌、睾丸癌、腺癌、肉腫、悪性黒色腫、血管腫、転移性疾患、癌関連の骨吸収、癌関連の骨痛等の少なくとも１種が挙げられるが、これらに限定されない、細胞、組織、器官、動物、又は患者での少なくとも１つの悪性又はアミロイド関連疾患の調節又は治療するための方法もまた提供する。本発明のあらゆる方法が、このような調節、治療又は療法を必要としている細胞、組織、器官、動物又は患者に対して、少なくとも１つの抗アミロイド抗体を含む有効量の組成物又は医薬組成物を投与することを含むことができる。こうした方法は所望により、前記少なくとも１つの抗アミロイド抗体、その特異的部分又は変異体の投与が、少なくとも１種のＴＮＦ拮抗薬（例えば、限定されるものでないがＴＮＦの化学物質又はタンパク質拮抗薬、ＴＮＦのモノクローナル若しくはポリクローナル抗体又は断片、可溶性ＴＮＦ受容体（例えばｐ５５、ｐ７０又はｐ８５）又は断片、それらの融合ポリペプチド、又は小分子ＴＮＦ拮抗薬、例えばＴＮＦ結合タンパク質Ｉ又はＩＩ（ＴＢＰ−Ｉ又はＴＢＰ−ＩＩ）、ネレリモンマブ、インフリキシマブ、エタネルセプト、ＣＤＰ−５７１、ＣＤＰ−８７０、アフェリモマブ、レネルセプト等を挙げることができる）、抗リウマチ薬（例えばメトトレキサート、オーラノフィン、金チオグルコース、アザチオプリン、金チオリンゴ酸ナトリウム、硫酸ヒドロキシクロロキン、レフルノミド、サルファサルジン）、筋弛緩薬、睡眠薬、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、鎮痛薬、麻酔薬、鎮静薬、局所麻酔薬、神経筋遮断薬、抗菌薬（例えば、アミノグリコシド、抗真菌薬、駆虫薬、抗ウイルス薬、カルバペネム、セファロスポリン、フルロルキノロン、マクロライド、ペニシリン、スルホンアミド、テトラサイクリン、別の抗菌薬）、抗乾癬薬、コルチコステロイド、アナボリックステロイド、糖尿病関連薬、ミネラル、栄養薬、甲状腺薬、ビタミン、カルシウム関連ホルモン、止瀉薬、鎮咳薬、制吐薬、抗潰瘍薬、緩下剤、抗凝固薬、エリスロポエチン（例えばエポエチンアルファ）、フィルグラスチム（例えばＧ−ＣＳＦ、ニューポジェン）、サルグラモスチム（ＧＭ−ＣＳＦ、Ｌｅｕｋｉｎｅ）、免疫化、免疫グロブリン、免疫抑制薬（例えばバシリキシマブ、シクロスポリン、ダクリズマブ）、成長ホルモン、ホルモン補充薬、エストロゲン受容体調節物質、散瞳薬、毛様体筋麻痺薬、アルキル化薬、代謝拮抗薬、分裂阻害剤、放射性医薬品、抗うつ薬、抗躁薬、抗精神病薬、抗不安薬、睡眠薬、交感神経刺激薬、興奮剤、ドネペジル、タクリン、喘息医薬品、ベータアゴニスト、吸入ステロイド、ロイコトリエン阻害剤、メチルキサンチン、クロモリン、エピネフリン又は類似体、ドルナーゼアルファ（パルモザイム）、サイトカイン又はサイトカイン拮抗薬から選択される少なくとも１種の前に、同時に及び／又は後に投与することを更に含む、こうした疾患又は障害を治療するための共投与又は併用療法を更に含み得る。適する投薬量は当該技術分野で周知である。例えば、ウェルス（Wells）ら編、薬物療法ハンドブック（Pharmacotherapy Handbook）、第２版、アップルトン・アンド・ランゲ（Appleton and Lange）、コネチカット州スタンフォード（Stamford）（２０００年）；ＰＤＲ薬局方（PDR Pharmacopoeia）、タラスコン・ポケット薬局方（Tarascon Pocket Pharmacopoeia）２０００、豪華版、タラスコン出版（Tarascon Publishing）、カリフォルニア州ロマリンダ（Loma Linda）（２０００年）；看護２００１薬物ハンドブック（Nursing 2001 Handbook of Drugs）、第２１版、スプリングハウス社（Springhouse Corp.）、ペンシルバニア州スプリングハウス（Springhouse）、２００１年；医療専門家の薬物ガイド２００１（Health Professional's Drug Guide 2001）、シャノン（Shannon）、ウィルソン（Wilson）、スタング（Stang）編、プレンティス−ホール（Prentice-Hall, Inc.）、ニュージャージー州アッパーサドルリバー（Upper Saddle River）を参照されたい、これらの参考文献は当該技術分野において周知である。
【０１８１】
本発明の組成物、併用療法、共投与、デバイス及び／又は方法（更に、本発明の、少なくとも１つの抗体、その特異的部分及び変異体を含む）に好適なＴＮＦ拮抗薬としては、抗ＴＮＦ抗体、その抗原結合断片、及びＴＮＦに特異的に結合する受容体分子；ＴＮＦ合成、ＴＮＦ放出若しくはサリドマイド、テニダップ（tenidap）、ホスホジエステラーゼ阻害剤（例えば、ペントキシフィリン及びロリプラム）、Ａ２ｂアデノシン受容体作用薬及びＡ２ｂアデノシン受容体エンハンサーのような標的細胞への作用を、妨げる及び／又は阻害する化合物；マイトジェン活性化タンパク質（ＭＡＰ）キナーゼ阻害剤のようなＴＮＦ受容体シグナル伝達を妨げる及び／又は阻害する化合物；メタプロテイナーゼ阻害剤のような膜ＴＮＦ切断を遮断及び／又は阻害する化合物；アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤（例えば、カプトプリル）のようなＴＮＦ活性を遮断及び／又は阻害する化合物；並びに、ＭＡＰキナーゼ阻害剤のような、ＴＮＦ生成及び／又は合成を遮断及び／又は阻害する化合物が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１８２】
本明細書で使用するとき、「腫瘍壊死因子抗体」、「ＴＮＦ抗体」、「ＴＮＦα抗体」又は断片等は、インビトロ、インサイチュ及び／又は好ましくはインビボでのＴＮＦα活性を低下させる、遮断する、阻害する、抑止する又は干渉する。例えば、本発明の好適なＴＮＦヒト抗体はＴＮＦαと結合することができ、抗ＴＮＦ抗体、その抗原結合断片、及びＴＮＦαに特異的に結合するその特定の突然変異体又はドメインが挙げられる。好適なＴＮＦ抗体又は断片はまた、ＴＮＦのＲＮＡ、ＤＮＡ又はタンパク質合成、ＴＮＦ放出、ＴＮＦ受容体シグナル伝達、膜ＴＮＦ切断、ＴＮＦ活性、ＴＮＦ生成及び／又は合成を低下させる、遮断する、抑止する、干渉する、妨げる及び／又は阻害することもできる。
【０１８３】
キメラ抗体ｃＡ２は、高親和性中和マウス抗ヒトＴＮＦαＩｇＧ１抗体の抗原結合可変領域、指定されたＡ２、及びヒトＩｇＧ１の定常領域、カッパ免疫グロブリンからなる。ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域は、同種抗原エフェクター機能を改善し、循環血清半減期を増大させ、抗体の免疫原性を低下させる。キメラ抗体ｃＡ２の結合活性及びエピトープ特異性は、マウス抗体Ａ２の可変領域に由来する。特定の実施形態では、マウス抗体Ａ２の可変領域をコードする核酸の好ましい起源は、Ａ２ハイブリドーマ細胞株である。
【０１８４】
キメラＡ２（ｃＡ２）は、用量依存的な方法で、天然及び組み換えヒトＴＮＦαの両方の細胞傷害性効果を中和する。キメラ抗体ｃＡ２及び組み換えヒトＴＮＦαの結合アッセイから、キメラ抗体ｃＡ２の親和定数は、１．０４×１０10Ｍ-1と算出された。拮抗阻害によるモノクローナル抗体の特異性及び親和性を決定する好ましい方法は、ハーロー（Harlow）ら、抗体：実験室マニュアル（antibodies: A Laboratory Manual）、コールドスプリングハーバー出版（Cold Spring Harbor Laboratory Press）、コールドスプリングハーバー（Cold Spring Harbor）、ニューヨーク、１９８８年；コリガン（Colligan）ら編、免疫学の最新プロトコル（Current Protocols in Immunology）、グリーン出版社（Greene Publishing Assoc.）及びワイリーインターサイエンス社（Wiley Interscience）ニューヨーク（１９９２〜２０００年）；コズボー（Kozbor）ら、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｏｄａｙ、４巻：７２〜７９頁（１９８３年）；オースベル（Ausubel）ら編、分子生物学の最新プロトコル（Current Protocols in Molecular Biology）、ワイリーインターサイエンス社（Wiley Interscience）ニューヨーク（１９８７〜２０００年）；及びミューラー（Muller）、Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．、９２巻、５８９〜６０１頁（１９８３年）に見られ、これらの参考文献は当該技術分野において周知である。
【０１８５】
特定の実施形態では、マウスのモノクローナル抗体Ａ２は、ｃ１３４Ａと呼ばれる細胞株により生成される。キメラ抗体ｃＡ２は、ｃ１６８Ａと呼ばれる細胞株により生成される。
【０１８６】
本発明で用いることができるモノクローナル抗ＴＮＦ抗体の追加例は、当該技術分野において記述されている（例えば、米国特許第５，２３１，０２４号；モラー（Moller），Ａ．ら、Ｃｙｔｏｋｉｎｅ、２巻３号：１６２〜１６９頁（１９９０年）；米国特許出願第０７／９４３，８５２号（１９９２年９月１１日出願）；ラスジェン（Rathjen）ら、国際公開第９１／０２０７８号（１９９１年２月２１日公開）；ルビン（Rubin）ら、欧州特許公開第０  ２１８  ８６８号（１９８７年４月２２日公開）；ヨン（Yone）ら、欧州特許公開第０  ２８８  ０８８号（１９８８年１０月２６日）；リャン（Liang）ら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．、１３７巻：８４７〜８５４頁（１９８６年）；ミーガー（Meager）ら、Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ、６巻：３０５〜３１１頁（１９８７年）；フェンドリー（Fendly）ら、Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ、６巻：３５９〜３６９頁（１９８７年）；ブリングマン（Bringman）ら、Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ、６巻：４８９〜５０７頁（１９８７年）；及びヒライ（Hirai）ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．、９６巻、５７〜６２頁（１９８７年）を参照のこと、これらの参考文献は当該技術分野において周知である）。
【０１８７】
ＴＮＦ受容体分子
本発明で有用な好ましいＴＮＦ受容体分子は、高親和性でＴＮＦαと結合し（例えば、フェルドマン（Feldmann）ら、国際公開第９２／０７０７６号（１９９２年４月３０日公開）；シャル（Schall）ら、Ｃｅｌｌ、６１巻：３６１〜３７０頁（１９９０年）及びロエッシャー（Loetscher）ら、Ｃｅｌｌ、６１巻：３５１〜３５９頁（１９９０年）を参照のこと、これらの参考文献は当該技術分野において周知である）、所望により低い免疫原性を有するものである。具体的には、５５ｋＤａ（ｐ５５  ＴＮＦ−Ｒ）及び７５ｋＤａ（ｐ７５  ＴＮＦ−Ｒ）ＴＮＦ細胞表面受容体が、本発明で有用である。受容体又はその機能部分の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）を含む、これらの受容体の切頭型（例えば、コーコラン（Corcoran）ら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、２２３巻：８３１〜８４０頁（１９９４年）を参照のこと）もまた、本発明で有用である。ＥＣＤを含む、ＴＮＦ受容体の切頭型は、３０ｋＤａ及び４０ｋＤａのＴＮＦα阻害結合タンパク質として、尿及び血清中で検出されている（エングルマン（Engelmann），Ｈ．ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２６５巻：１５３１〜１５３６頁（１９９０年））。ＴＮＦ受容体多量体分子及びＴＮＦ免疫受容体融合分子、並びにその誘導体及び断片又は一部は、本発明の方法及び組成物で有用なＴＮＦ受容体分子の追加例である。本発明で用いることができるＴＮＦ受容体分子は、症状を緩和する力が良好〜優良であり、かつ毒性の低い、長期間患者を治療する能力を特徴とする。低い免疫原性及び／又は高い親和性、並びに他の不確定な特性が、得られる治療結果に寄与する場合がある。
【０１８８】
本発明で有用なＴＮＦ受容体多量体分子は、１つ又はそれ以上のポリペプチドリンカー又はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）のような他の非ペプチドリンカーを介して結合した、２つ以上のＴＮＦ受容体のＥＣＤの全て又は機能部分を含む。多量体分子は、更に、分泌されたタンパク質のシグナルペプチドを含んで、多量体分子の発現を導くことができる。これらの多量体分子及びその生成方法は、米国特許出願第０８／４３７，５３３号（１９９５年５月９日出願）に記載されており、その内容は当該技術分野において周知である。
【０１８９】
本発明の方法及び組成物で有用なＴＮＦ免疫受容体融合分子は、１つ以上の免疫グロブリン分子の少なくとも一部及び１つ以上のＴＮＦ受容体の全て又は機能部分を含む。これらの免疫受容体融合分子は、モノマー、又はヘテロ若しくはホモマルチマーとして集合することができる。免疫受容体融合分子はまた、一価又は多価であることができる。このようなＴＮＦ免疫受容体融合分子の例は、ＴＮＦ受容体／ＩｇＧ融合タンパク質である。ＴＮＦ免疫受容体融合分子及びその生成方法は、当該技術分野において記述されている（レスラー（Lesslauer）ら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、２１巻：２８８３〜２８８６頁（１９９１年）；アシュケナージ（Ashkenazi）ら、米国科学アカデミー紀要（Proc. Natl. Acad. Sci.）、８８巻：１０５３５〜１０５３９頁（１９９１年）；ペップル（Peppel）ら、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．、１７４巻：１４８３〜１４８９頁（１９９１年）；コルス（Kolls）ら、米国科学アカデミー紀要（Proc. Natl. Acad. Sci.）、９１巻：２１５〜２１９頁（１９９４年）；バトラー（Butler）ら、Ｃｙｔｏｋｉｎｅ、６巻６号：６１６〜６２３頁（１９９４年）；ベイカー（Baker）ら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、２４巻：２０４０〜２０４８頁（１９９４年）；ボイトラー（Beutler）ら、米国特許第５，４４７，８５１号；及び米国特許出願第０８／４４２，１３３号（１９９５年５月１６日出願）、これらはそれぞれ、当該技術分野において周知である）。免疫受容体融合分子を生成する方法はまた、カポン（Capon）ら、米国特許第５，１１６，９６４号；カポン（Capon）ら、米国特許第５，２２５，５３８号；及びカポン（Capon）ら、Ｎａｔｕｒｅ、３３７巻：５２５〜５３１頁（１９８９年）にも見い出すことができ、これらの参考文献は当該技術分野において周知である。
【０１９０】
ＴＮＦ受容体分子の機能的等価物、誘導体、断片又は領域は、ＴＮＦ受容体分子の一部、又はＴＮＦ受容体分子をコードしているＴＮＦ受容体分子配列の一部を指し、これは本発明で用いることができるＴＮＦ受容体分子に機能的に類似するのに十分な大きさ及び配列を有する（例えば、高親和性でＴＮＦαと結合し、低い免疫原性を有する）。ＴＮＦ受容体分子の機能的等価物はまた、本発明で用いることができるＴＮＦ受容体分子に機能的に類似する、修飾されたＴＮＦ受容体分子を含む（例えば、高親和性でＴＮＦαと結合し、低い免疫原性を有する）。例えば、ＴＮＦ受容体分子の機能的等価物は、「サイレント（SILENT）」コドン又は１つ以上のアミノ酸置換、欠失又は付加を含有することができる（例えば、１つの酸性アミノ酸を別のアミノ酸に置換する；又は、同じ若しくは異なる疎水性アミノ酸をコードする１つのコドンを疎水性アミノ酸をコードする別のコドンに置換する）。例えば、オースベル（Ausubel）ら、分子生物学の最新プロトコル（Current Protocols in Molecular Biology）、グリーン出版社（Greene Publishing Assoc. ）及びワイリーインターサイエンス社（Wiley-Interscience）、ニューヨーク、（１９８７〜２０００年）を参照のこと。
【０１９１】
サイトカインはいかなる既知のサイトカインも包含する。例えばＣｏｐｅｗｉｔｈＣｙｔｏｋｉｎｅｓ．ｃｏｍを参照されたい。サイトカイン拮抗薬は、限定されるものでないが、任意の抗体、断片若しくは模倣物、任意の可溶性の受容体、断片若しくは模倣物、任意の小分子拮抗薬、又はそれらの任意の組み合せも挙げることができる。
【０１９２】
治療的処置  本発明の任意の方法は、このような調節、治療又は療法を必要とする細胞、組織、器官、動物又は患者に対して少なくとも１つの抗アミロイド抗体を含む有効量の組成物又は医薬組成物を投与することを含む、アミロイド媒介型障害を治療するための方法を含み得る。
【０１９３】
こうした方法は、所望により、こうした疾患若しくは障害を治療するための共投与又は併用療法を更に含んでもよく、前記少なくとも１つの抗アミロイド抗体、その特異的部分若しくは変異体の投与は、更に、抗感染薬、循環器（ＣＶ）系薬、中枢神経系（ＣＮＳ）薬、自律神経系（ＡＮＳ）薬、呼吸器薬、胃腸（ＧＩ）管薬、ホルモン薬、体液又は電解質平衡薬、血液作用薬、抗腫瘍薬、免疫調節薬、目、耳若しくは鼻用薬、局所薬、栄養薬等、少なくとも１種のＴＮＦ拮抗薬（例えば、限定されるものでないが、ＴＮＦ抗体若しくは断片、可溶性ＴＮＦ受容体若しくは断片、それらの融合タンパク質、又は小分子ＴＮＦ拮抗薬）、抗リウマチ薬（例えばメトトレキサート、オーラノフィン、金チオグルコース、アザチオプリン、エタネルセプト、金チオリンゴ酸ナトリウム、硫酸ヒドロキシクロロキン、レフルノミド、サルファサルジン）、筋弛緩薬、睡眠薬、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、鎮痛薬、麻酔薬、鎮静薬、局所麻酔薬、神経筋遮断薬、抗菌薬（例えば、アミノグリコシド、抗真菌薬、駆虫薬、抗ウイルス薬、カルバペネム、セファロスポリン、フルロルキノロン、マクロライド、ペニシリン、スルホンアミド、テトラサイクリン、別の抗菌薬）、抗乾癬薬、コルチコステロイド、アナボリックステロイド、糖尿病関連薬、ミネラル、栄養薬、甲状腺薬、ビタミン、カルシウム関連ホルモン、止瀉薬、鎮咳薬、制吐薬、抗潰瘍薬、緩下剤、抗凝固薬、エリスロポエチン（例えばエポエチンアルファ）、フィルグラスチム（例えばＧ−ＣＳＦ、ニューポジェン）、サルグラモスチム（ＧＭ−ＣＳＦ、Ｌｅｕｋｉｎｅ）、免疫化、免疫グロブリン、免疫抑制薬（例えばバシリキシマブ、シクロスポリン、ダクリズマブ）、成長ホルモン、ホルモン補充薬、エストロゲン受容体調節物質、散瞳薬、毛様体筋麻痺薬、アルキル化薬、代謝拮抗薬、分裂阻害剤、放射性医薬品、抗うつ薬、抗躁薬、抗精神病薬、抗不安薬、睡眠薬、交感神経刺激薬、興奮剤、ドネペジル、タクリン、喘息医薬品、ベータアゴニスト、吸入ステロイド、ロイコトリエン阻害剤、メチルキサンチン、クロモリン、エピネフリン又は類似体、ドルナーゼアルファ（パルモザイム）、サイトカイン又はサイトカイン拮抗薬から選択される少なくとも１種の前に、同時に、及び／又は後に投与することを含む。このような薬物は、本明細書に提示されているそれぞれについての製剤、適応症、用量決定及び投与を含め、当該技術分野において周知である（例えば、看護２００１薬物ハンドブック（Nursing 2001 Handbook of Drugs）、第２１版、スプリングハウス社（Springhouse Corp.）、ペンシルバニア州スプリングハウス（Springhouse）、２００１年；医療専門家の薬物ガイド２００１（Health Professional's Drug Guide 2001）、シャノン（Shannon）、ウィルソン（Wilson）、スタング（Stang）編、プレンティス−ホール（Prentice-Hall, Inc.）、ニュージャージー州アッパーサドルリバー（Upper Saddle River）；薬物療法ハンドブック（Pharmcotherapy Handbook）、ウェルス（Wells）ら編、アップルトン＆ランゲ（Appleton&Lange）、コネチカット州スタンフォード（Stamford）を参照のこと、これらは当該技術分野において周知である）。
【０１９４】
典型的には、病的状態の治療は、組成物の中に含まれているものの比活性に応じて合計で、平均して、１用量あたり患者の体重１ｋｇあたり少なくとも約０．０１〜５００ミリグラムの範囲の少なくとも１つの抗アミロイド抗体組成物、好ましくは単回又は複数回投与あたり患者の体重１ｋｇにつき少なくとも約０．１〜１００ミリグラムの抗体を、有効量又は投薬量投与することによって達成される。代替としては、有効な血清濃度は、単一又は複数投与あたり０．１〜５０００μｇ／ｍＬ血清濃度を含み得る。適切な用量は、医療実践者には周知であり、当然のことながら、具体的な疾患状態、投与される組成物の比活性、及び治療を受けている具体的な患者に依存する。場合によっては、望ましい治療量に達するために、反復投与、すなわち特定の監視された量又は計量された量の反復個別投与を提供することが必要となる場合があり、この場合、個別投与は、望ましい日用量又は効果が得られるまで繰り返される。
【０１９５】
好ましい用量としては、所望により、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９及び／又は１００〜５００ｍｇ／ｋｇ／投与、又はその任意の範囲、値若しくは分散、又は単回若しくは複数回投与あたり、０．１、０．５、０．９、１．０、１．１、１．２、１．５、１．９、２．０、２．５、２．９、３．０、３．５、３．９、４．０、４．５、４．９、５．０、５．５、５．９、６．０、６．５、６．９、７．０、７．５、７．９、８．０、８．５、８．９、９．０、９．５、９．９、１０、１０．５、１０．９、１１、１１．５、１１．９、２０、１２．５、１２．９、１３．０、１３．５、１３．９、１４．０、１４．５、４．９、５．０、５．５、５．９、６．０、６．５、６．９、７．０、７．５、７．９、８．０、８．５、８．９、９．０、９．５、９．９、１０、１０．５、１０．９、１１、１１．５、１１．９、１２、１２．５、１２．９、１３．０、１３．５、１３．９、１４、１４．５、１５、１５．５、１５．９、１６、１６．５、１６．９、１７、１７．５、１７．９、１８、１８．５、１８．９、１９、１９．５、１９．９、２０、２０．５、２０．９、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９６、１００、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、１５００、２０００、２５００、３０００、３５００、４０００、４５００及び／又は５０００μｇ／ｍＬの血清濃度を達成するための用量又はその任意の範囲、値又は分散が含まれ得る。
【０１９６】
あるいは、投与される用量は、具体的な薬剤の薬力学的特性等の既知の因子、並びにその投与方式及び投与経路、レシピエントの年齢、健康、及び体重、症候の性質及び程度、現行治療の種類、治療の頻度、並びに所望の効果に応じて異なり得る。活性成分の用量は、通常、体重１キログラム当たり約０．１〜１００ミリグラムであり得る。通常、０．１〜５０、好ましくは０．１〜１０ミリグラム／キログラム／投与、又は徐放性形態が、望ましい結果を得るために有効である。
【０１９７】
非限定的な例としては、ヒト又は動物の治療は、単回用量、注入量又は反復用量を用いて、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９又は４０日目のうちの少なくとも１つの日に、又は、別の方法として若しくは更に１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１又は５２週目のうちの少なくとも１つの週、又は、別の方法として若しくは更に１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０年のうちの少なくとも１つの年、又はその任意の組み合せで、１日あたり０．５、０．９、１．０、１．１、１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０又は１００ｍｇ／ｋｇといった０．１〜１００ｍｇ／ｋｇの１回又は周期的用量の本発明の少なくとも１つの抗体として、提供可能である。
【０１９８】
体内投与に適した剤形（組成物）は、一般に、１単位又は容器あたり約０．００１ミリグラム〜約５００ミリグラムの活性成分を含む。これらの医薬組成物において、活性成分は、組成物の総重量に基づいて、通常、約０．５〜９９．９９９重量％の量で存在する。
【０１９９】
非経口投与のために、抗体は、製薬上許容できる非経口ビヒクルと合わせた状態の、又は別途供給される状態の、溶液、懸濁液、エマルション、粒子、粉末、若しくは凍結乾燥された粉末として、処方され得る。このようなビヒクルの例は、水、生理食塩水、リンゲル液、デキストロース溶液、及び１〜１０％ヒト血清アルブミンである。リポソーム及び固定油等の非水性ビヒクルを使用することもできる。ビヒクル又は凍結乾燥粉末は、等張性（例えば塩化ナトリウム、マンニトール）及び化学安定性（例えば緩衝剤及び保存剤）を維持する添加剤を含有することができる。製剤は、既知の又は適切な技術によって滅菌される。
【０２００】
適切な製薬学的担体は、この分野での標準的参考テキストである「レミントンの薬学科学（Remington 's Pharmaceutical Sciences）」Ａ．オーソル（A. Osol）の最新版の中で記載されている。
【０２０１】
代替的投与
本発明に従った少なくとも１つの抗アミロイド抗体を製薬学的に有効な量だけ投与するために、本発明に従って数多くの既知の及び開発された方式を使用することができる。下記の記述では経肺投与が使用されているが、本発明に従ってその他の投与方式を使用して、適切な結果を得ることもできる。
【０２０２】
本発明のアミロイド抗体は、担体中で、溶液、エマルション、コロイド、若しくは懸濁液として、又は乾燥粉末として、吸入によるか、又は、本明細書に記載の若しくは当該技術分野において既知であるその他の方式による投与に適した様々なデバイス及び方法のいずれかを用いて、送達可能である。
【０２０３】
非経口製剤及び投与
非経口投与のための製剤は、一般的な賦形剤として滅菌水又は生理食塩水、ポリアルキレングリコール（例えばポリエチレングリコール）、植物性油、水素化ナフタレン等を含有し得る。注射用の水性又は油性懸濁液は、既知の方法に従って、適切な乳化剤又は加湿剤及び懸濁剤を使用することによって調製可能である。注入剤は、例えば水溶液又は溶媒中の無菌注射溶液若しくは懸濁液等の非毒性で経口投与不能の希釈剤であり得る。使用可能なビヒクル又は溶媒としては、水、リンゲル液、等張食塩水等が許容され、通常の溶媒又は懸濁溶媒としては、無菌不揮発性油を使用することができる。これらの目的では、天然又は合成若しくは半合成の、脂肪油又は脂肪酸；天然又は合成若しくは半合成の、モノグリセリド又はジグリセリド又はトリグリセリドを含む、あらゆる種類の不揮発性油及び脂肪酸を使用することができる。非経口投与は当該技術分野において既知であり、従来の注射手段、米国特許第５，８５１，１９８号に記載のようなガス加圧式無針注入デバイス、及び米国特許第５，８３９，４４６号に記載のようなレーザー穿孔機デバイスが挙げられるが、これらに限定されず、これらは当該技術分野において周知である。
【０２０４】
代替的送達
本発明は更に、非経口、皮下、筋肉内、静脈内、関節内、気管支内、腹内、関節包内、軟骨内、洞内、腔内、小脳内、脳室内、結腸内、頚管内、胃内、肝臓内、心筋内、骨内、骨盤内、心膜内、腹腔内、胸膜内、前立腺内、肺臓内、直腸内、腎臓内、網膜内、脊髄内、滑液嚢内、胸郭内、子宮内、膀胱内、病巣内、ボーラス、膣内、直腸、口腔内、舌下、鼻腔内、又は経皮手段による少なくとも１つの抗アミロイド抗体の投与に関する。少なくとも１つの抗アミロイド抗体組成物を、特に液体溶液又は懸濁液の形で、非経口（皮下、筋肉内、又は静脈内）又はその他のあらゆる投与に使用するため；クリーム及び座薬といった（ただしこれらに限定されない）特に半固体形態での膣内又は直腸内投与で使用するため；錠剤又はカプセルの形での（ただしこれらに限定されない）口腔内又は舌下投与のため；又は、粉末、点鼻薬、若しくはエアロゾル、又は特定の薬剤の形で（ただしこれらに限定されない）経鼻的に；又は皮膚構造を修飾するか又は経皮パッチ内の薬物濃度を増大させるためジメチルスルホキンドといったような化学的エンハンサーを伴ったゲル、軟膏、ローション、懸濁液、又はパッチ送達系のように（ただしこれらに限定されない）経皮的に（ユンギンガー（Junginger）ら、「薬剤浸透強化（Drug Permeation Enhancement）」；シェイ（Hsieh），Ｄ．Ｓ．編、５９〜９０頁（マーセル・デッカー社（Marcel Dekker, Inc.）、ニューヨーク、１９９４年、これは当該技術分野において周知である）又は皮膚上へのタンパク質及びペプチドを含有する製剤の塗布を可能にする酸化剤とともに（国際公開第９８／５３８４７号）、又は電気穿孔といった過渡的輸送経路を作り出すか、若しくはイオントフォレシス等の皮膚を通して荷電薬物の易動性を増大させるための電界の適用、又はソノフォレシス等の超音波の適用（米国特許第４，３０９，９８９号及び同第４，７６７，４０２号）（上記刊行物及び特許は当該技術分野において周知である）のために調製できる。
【０２０５】
経肺／鼻腔内投与
経肺投与のためには、好ましくは少なくとも１つの抗アミロイド抗体組成物が、肺の下気道又は洞に達するのに有効な粒径で送達される。本発明に従って、少なくとも１つの抗アミロイド抗体は、吸入される治療薬の投与のため当該技術分野において既知のさまざまな吸入又は鼻腔内デバイスのいずれかにより送達可能である。患者の洞腔又は肺胞内にエアロゾル化した製剤を被着させる能力のあるこれらのデバイスとしては、定量吸入器、ネブライザー、乾燥粉末発生器、噴霧器等が挙げられる。当該技術分野においては、抗体の肺又は鼻腔内投与を導くのに適したその他のデバイスも知られている。このようなデバイスは全てエアロゾル中の抗体を分配するための投与に適した製剤を使用することができる。このようなエアロゾルは、溶液（水性及び非水性の両方）又は固体粒子のいずれかで構成され得る。ベントリン（Ventolin）（登録商標）定量吸入器のような定量吸入器は典型的には噴射ガスを使用し、吸息中の作動を必要とする（例えば、国際公開第９４／１６９７０号、国際公開第９８／３５８８８号を参照されたい）。ターブハーラー（Turbuhaler）（商標）（アストラ（Astra））、ロタハーラー（Rotahaler）（登録商標）（グラクソ（Glaxo））、ディスカス（Diskus）（登録商標）（グラクソ）、スピラーズ（Spiros）（商標）吸入器（デュラ（Dura））、インヘイル・セラピティクス（Inhale Therapeutics）により販売されているデバイス、及びスピンハーラー（Spinhaler）（登録商標）粉末吸入器（ファイソンズ（Fisons））のような乾燥粉末吸入器は、混合粉末の呼吸起動を使用する（米国特許第４６６８２１８号アストラ、欧州特許第２３７５０７号アストラ、国際公開第９７／２５０８６号グラクソ、国際公開第９４／０８５５２号デュラ、米国特許第５４５８１３５号インヘイル、国際公開第９４／０６４９８号ファイソンズ（当該技術分野において周知である））。ＡＥＲｘ（商標）アラダイム（Aradigm）、ウルトラベント（Ultravent）（登録商標）ネブライザー（マリンクロット（Mallinckrodt））及びＡｃｏｒｎ  ＩＩ（登録商標）ネブライザー（マークエスト・メディカル・プロダクツ（Marquest Medical Products））（米国特許第５４０４８７１号アラダイム、国際公開第９７／２２３７６号）のようなネブライザー（上の参考文献は当該技術分野において周知である）は溶液からエアゾールを生成するが、一方、計量式吸入器、乾燥粉末吸入器等は小粒子エアゾールを生じさせる。市販の吸入デバイスのこれらの具体例は、本発明の実施に適した具体的デバイスを代表するものとして意図されており、本発明の範囲を制限するものとして意図されているものではない。好ましくは、少なくとも１つの抗アミロイド抗体を含む組成物は、乾燥粉末吸入器又は噴霧器によって送達される。本発明の少なくとも１つの抗体を投与するための吸入デバイスには、いくつかの望ましい特徴が存在する。例えば、吸入デバイスによる送達は、有利に信頼性が高く、再現可能であり、かつ正確である。吸入デバイスは所望により、うまく呼吸できるように、例えば約１０μｍ未満、好ましくは約１〜５μｍの小さな乾燥粒子を送達することができる。
【０２０６】
アミロイド抗体組成物のスプレー剤としての投与
アミロイド抗体組成物を含むスプレーは、少なくとも１つの抗アミロイド抗体の懸濁液又は溶液を加圧下でノズルを通させることにより生成することができる。ノズルの大きさ及び構成、適用される圧並びに液体供給速度は、所望の出力及び粒径を達成するように選定することができる。例えばキャピラリー又はノズルフィードとともに電界により電気スプレーを生成することができる。有利には、噴霧器により送達される少なくとも１つの抗アミロイド抗体組成物の粒子は、約１０μｍ未満、好ましくは約１μｍ〜約５μｍ、最も好ましくは約２μｍ〜約３μｍの範囲の粒径を有する。
【０２０７】
噴霧器での使用に適する少なくとも１つの抗アミロイド抗体組成物の製剤は、典型的に、溶液１ｍＬあたり約０．１ｍｇ〜約１００ｍｇの少なくとも１つの抗アミロイド抗体組成物若しくはｍｇ／ｇｍ、又はその中のいずれかの範囲若しくは値の濃度で水性溶液中に抗体組成物を含み、例えば、．１、．２、．３、．４、．５、．６、．７、．８、．９、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０若しくは１００ｍｇ／ｍＬ又はｍｇ／ｇｍであるが、これらに限定されない。製剤は、賦形剤、緩衝剤、等張剤、保存剤、界面活性剤及び好ましくは亜鉛のような剤を包含し得る。製剤は、緩衝剤、還元剤、バルクタンパク質、又は炭水化物のような、抗体組成物の安定化のための賦形剤又は剤もまた包含し得る。抗体組成物の処方において有用なバルクタンパク質はアルブミン、プロタミン等を包含する。抗体組成物の処方において有用な典型的な炭水化物としては、ショ糖、マンニトール、乳糖、トレハロース、ブドウ糖等が挙げられる。抗体組成物製剤はまた、エアゾールの形成における溶液の霧化により引き起こされる抗体組成物の表面誘発性の凝集を低下又は予防し得る界面活性剤を含んでもよい。ポリオキシエチレン脂肪酸エステル及びアルコール、並びにポリオキシエチレンソルビトール脂肪酸エステルのような多様な従来の界面活性剤を使用し得る。量は、一般に製剤の０．００１〜１４重量％の範囲にわたる。本発明の目的上とりわけ好ましい界面活性剤は、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート、ポリソルベート８０、ポリソルベート２０等である。アミロイド抗体又は特異的部分若しくは変異体のようなタンパク質の製剤のための当該技術分野において既知の付加的な剤もまた製剤中に含んでもよい。
【０２０８】
ネブライザーによるアミロイド抗体組成物の投与
抗体組成物は、ジェットネブライザー又は超音波ネブライザーのようなネブライザーにより投与し得る。典型的には、ジェットネブライザー中では、オリフィスを通して高速の空気ジェットを作り出すのに圧縮空気供給源を使用する。ガスがノズルを超えて膨脹する際に低圧領域が作り出され、それが液体リザーバに接続された毛細管を通して抗体組成物の溶液を引き出す。毛細管からの液体流は、それが管を出る際に不安定な糸状体及び液滴に剪断されてエアゾールを作り出す。ある範囲の構成、流速及びバッフル型を、所定のジェットネブライザーから所望の性能の特徴を達成するのに使用し得る。超音波ネブライザーにおいては、高周波電気エネルギーを使用して、典型的には圧電変換器を使用して、振動性の機械的エネルギーを作り出す。このエネルギーが、直接又はカップリング液を通じてのいずれかで抗体組成物の製剤に伝播されて、抗体組成物を含むエアゾールを作り出す。有利には、ネブライザーにより送達される抗体組成物の粒子は、約１０μｍ未満、好ましくは約１μｍ〜約５μｍ、最も好ましくは約２μｍ〜約３μｍの範囲の粒径を有する。
【０２０９】
ジェット又は超音波いずれかのネブライザーでの使用に適する少なくとも１つの抗アミロイド抗体の製剤は、典型的には、溶液１ｍＬあたり約０．１ｍｇ〜約１００ｍｇの少なくとも１つの抗アミロイド抗体タンパク質の濃度を含む。製剤は、賦形剤、緩衝剤、等張剤、保存剤、界面活性剤、及び好ましくは亜鉛のような剤を包含し得る。製剤は、緩衝剤、還元剤、バルクタンパク質、又は炭水化物のような、少なくとも１つの抗アミロイド抗体組成物の安定化のための賦形剤又は剤もまた包含し得る。少なくとも１つの抗アミロイド抗体組成物の処方において有用なバルクタンパク質はアルブミン、プロタミン等を包含する。少なくとも１つの抗アミロイド抗体の処方において有用な典型的な炭水化物としては、ショ糖、マンニトール、乳糖、トレハロース、ブドウ糖等が挙げられる。少なくとも１つの抗アミロイド抗体製剤はまた、エアゾールの形成において溶液の霧化により引き起こされる少なくとも１つの抗アミロイド抗体の表面誘発性の凝集を低下又は予防し得る界面活性剤を含んでもよい。ポリオキシエチレン脂肪酸エステル及びアルコール、並びにポリオキシエチレンソルビタル脂肪酸エステルのような多様な従来の界面活性剤を使用し得る。量は、一般に製剤の０．００１〜４重量％の範囲にわたる。本発明の目的上とりわけ好ましい界面活性剤は、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート、ポリソルベート８０、ポリソルベート２０等である。抗体タンパク質のようなタンパク質の製剤について当該技術分野において既知の付加的な剤もまた製剤中に含んでもよい。
【０２１０】
計量式吸入器によるアミロイド抗体組成物の投与
計量式吸入器（ＭＤＩ）では、噴射剤、少なくとも１つの抗アミロイド抗体、及び任意の賦形剤又は他の添加剤が、液化圧縮ガスを包含する混合物としてキャニスター中に収容される。計量バルブの起動により、約１０μｍ未満、好ましくは約１μｍ〜約５μｍ、最も好ましくは約２μｍ〜約３μｍの範囲の大きさの粒子を含有するエアゾールとして混合物が放出される。所望のエアゾール粒子径は、ジェットミル粉砕、噴霧乾燥、臨界点凝縮等が挙げられる当業者に既知の多様な方法により生成される抗体組成物の製剤を使用することにより得ることができる。好ましい計量式吸入器としては、３Ｍ又はグラクソにより製造されかつヒドロフルオロカーボン噴射剤を使用するものが挙げられる。
【０２１１】
計量式吸入デバイスでの使用のための少なくとも１つの抗アミロイド抗体の製剤は、一般に、少なくとも１つの抗アミロイド抗体を、例えば界面活性剤の助けを借りて噴射剤中に懸濁した非水性溶媒中の懸濁液として含有する微粉を含む。噴射剤は、トリクロロフルオロメタン、ジクロロジフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタノール及び１，１，１，２−テトラフルオロエタン、ＨＦＡ−１３４ａ（ヒドロフルオロアルカン−１３４ａ）、ＨＦＡ−２２７（ヒドロフルオロアルカン−２２７）等が挙げられる、クロロフルオロカーボン、ヒドロクロロフルオロカーボン、ヒドロフルオロカーボン、又は炭化水素のような本目的上使用される任意の従来の物質であってもよい。好ましくは噴射剤はヒドロフルオロカーボンである。界面活性剤は、少なくとも１つの抗アミロイド抗体を噴射剤中の懸濁液として安定化させる、活性剤を化学的分解に対して保護する等のために選定することができる。適する界面活性剤はソルビタントリオレエート、ダイズレシチン、オレイン酸等が挙げられる。いくつかの場合には、エタノールのような溶媒を使用する溶液エアゾールが好ましい。タンパク質のようなタンパク質の製剤のための当該技術分野で既知の付加的な剤もまた製剤に含んでもよい。
【０２１２】
当業者は、本発明の方法を、本明細書に記述されないデバイスを介する少なくとも１つの抗アミロイド抗体組成物の経肺投与により達成し得ることを認識するであろう。
【０２１３】
経口製剤及び投与
経口投与のための製剤は、腸壁の浸透性を人工的に増大させるためのアジュバント（例えば、レゾルシノール、並びにポリオキシエチレンオレイルエーテル及びｎ−ヘキサデシルポリエチレンエーテルのような非イオン性界面活性剤）の共投与、並びに、酵素的分解を阻害するための酵素阻害剤（例えば、膵トリプシン阻害剤、ジイソプロピルフルオロリン酸（ＤＦＦ）及びトラシロール）の共投与に頼る。経口、口腔内、粘膜、鼻、肺、膣経膜、又は直腸投与を意図する、タンパク質及び抗体並びに少なくとも２種の界面活性剤の組み合せを包含する親水性の剤の送達のための製剤が、米国特許第６，３０９，６６３号に教示されている。経口投与のための固体型剤形の活性成分化合物を、ショ糖、乳糖、セルロース、マンニトール、トレハロース、ラフィノース、マルチトール、デキストラン、デンプン、寒天、アルギン酸塩、キチン、キトサン、ペクチン、トラガカントガム、アラビアゴム、ゼラチン、コラーゲン、カゼイン、アルブミン、合成又は半合成ポリマー、及びグリセリドを含む、少なくとも１種の添加物と混合し得る。これらの剤形は、他の種類（１種又は複数）の添加剤、例えば、不活性希釈剤、ステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤、パラベン、ソルビン酸、アスコルビン酸、α−トコフェロールのような保存剤、システインのような抗酸化剤、崩壊剤、結合剤、増粘剤、緩衝剤、甘味剤、着香剤、香料等もまた含有し得る。
【０２１４】
錠剤及び丸剤は腸溶コーティング調製物に更に加工し得る。経口投与のための液体製剤は、医学的用途に許容できる乳剤、シロップ剤、エリキシル剤、懸濁剤及び溶液調製物を含む。これらの製剤は、前記分野で通例に使用される不活性希釈剤、例えば水を含有し得る。リポソームはインスリン及びヘパリンの薬物送達系としてもまた記述されている（米国特許第４，２３９，７５４号）。より最近、混合アミノ酸の人工的ポリマーのミクロスフェア（プロテイノイド）が、医薬品を送達するために使用されている（米国特許第４，９２５，６７３号）。更に、米国特許第５，８７９，６８１号及び同第５，５，８７１，７５３号に記述され、生物学的に活性な成分を経口で送達するのに使用される担体化合物が、当該技術分野において既知である。
【０２１５】
粘膜製剤及び投与
生じるマイクロカプセルの適正な大きさにより、消化管を通過した剤による有効を失わず、別名で動物の「パイエル板」又は「ＧＡＬＴ」として知られる集合リンパ小節に達し、それにより取り込まれる剤をもたらすマイクロカプセルを供給する、１種以上の生物適合性ポリマー又はコポリマー賦形剤、好ましくは生物分解性ポリマー又はコポリマーにカプセル化された、生物活性の剤を経口投与するための製剤。類似の集合リンパ小節は気管支（broncheitube）（ＢＡＬＴ）及び大腸に見出し得る。上述された組織は一般に粘膜関連リンパ組織（ＭＡＬＴ）と称される。粘膜表面を通る吸収のため、少なくとも１つの抗アミロイド抗体の組成物及び投与方法は、複数のサブミクロン粒子、粘膜付着性巨大分子、生物活性ペプチド、及びエマルション粒子の粘膜付着を達成することにより粘膜表面を通る吸収を促進する水性連続相を含むエマルション（米国特許第５，５１４，６７０号）を含む。本発明のエマルションの適用に適する粘膜表面は、角膜、結膜、口腔内、舌下、鼻、膣、肺、胃、腸及び直腸投与経路を含んでもよい。膣又は直腸投与のための製剤、例えば坐剤は、賦形剤として、例えばポリアルキレングリコール、ワセリン、カカオバター等を含有し得る。鼻内投与のための製剤は固体であってもよく、賦形剤として例えば乳糖を含有し得るか、又は点鼻薬の水性若しくは油性溶液であり得る。口腔内投与のためには、賦形剤は、糖、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、前ゼラチン化（pregelinatined）デンプン等を包含する（米国特許第５，８４９，６９５号）。
【０２１６】
経皮製剤及び投与
経皮投与のためには、少なくとも１つの抗アミロイド抗体を、リポソーム、又はポリマーナノ粒子、微小粒子、マイクロカプセル若しくはミクロスフェア（特に明示しない限り集合的に微小粒子と称する）のような送達デバイス中にカプセル化する。ポリ乳酸、ポリグリコール酸及びそれらのコポリマーのようなポリヒドロキシ酸、ポリオルトエステル、ポリ無水物、並びにポリホスファゼンのような合成ポリマー、並びにコラーゲン、ポリアミノ酸、アルブミン及び他のタンパク質、アルギン酸塩並びに他の多糖類のような天然のポリマー、並びにそれらの組み合せから作製される微小粒子を包含する多数の適するデバイスが既知である（米国特許第５，８１４，５９９号）。
【０２１７】
長時間投与及び製剤
本発明の化合物を、単一投与から、長時間にわたり、例えば１週〜１年間、被験体に送達することが望ましいことがあり得る。多様な徐放、デポー又は埋め込み剤形を利用し得る。例えば、剤形は、体液中で低い程度の溶解性を有する化合物の製薬上許容できる非毒性の塩、例えば（ａ）リン酸、硫酸、クエン酸、酒石酸、タンニン酸、パモ酸、アルギン酸、ポリグルタミン酸、ナフタレンモノ又はジスルホン酸、ポリガラクツロン酸等のような多塩基性酸との酸付加塩；（ｂ）亜鉛、カルシウム、ビスマス、バリウム、マグネシウム、アルミニウム、銅、コバルト、ニッケル、カドミウム等のような多価金属陽イオン、又は例えばＮ，Ｎ’−ジベンジル−エチレンジアミン若しくはエチレンジアミンから形成される有機陽イオンとの塩；又は（ａ）及び（ｂ）の組み合せ、例えば亜鉛タンニン酸塩を含有し得る。加えて、本発明の化合物、又は好ましくはたった今記述されたもののような比較的不溶性の塩を、注入に適する例えばゴマ油とともにゲル、例えばモノステアリン酸アルミニウムゲル中で処方し得る。とりわけ好ましい塩は、亜鉛塩、亜鉛タンニン酸塩、パモ酸塩等である。注入のための別の種類の徐放デポー製剤は、例えば米国特許第３，７７３，９１９号に記述されるところのポリ乳酸／ポリグリコール酸ポリマーのようなゆっくりと分解する非毒性の非抗原性ポリマー中にカプセル化のため分散された化合物又は塩を含有する。化合物、又は好ましくは上述されたもののような比較的不溶性の塩は、とりわけ動物での使用のためコレステロールマトリックスのシラスティックペレット中でもまた処方し得る。付加的な徐放、デポー又は埋め込み製剤、例えば気体又は液体リポソームが文献で既知である（米国特許第５，７７０，２２２号、及び「持続放出及び制御放出薬物送達系（Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems）」、Ｊ．Ｒ．ロビンソン（Robinson）編、マーシャルデッカー社（Marcel Dekker, Inc.）、ニューヨーク、１９７８年）。
【０２１８】
本発明を全般的に記述したので、それは、具体的説明として提供されかつ制限することを意図していない以下の実施例を参照してより容易に理解されるであろう。
【実施例】
【０２１９】
実施例１：哺乳類細胞におけるアミロイド抗体のクローニング及び発現
典型的な哺乳類の発現ベクターは、少なくとも１つのプロモータエレメント（既知の定常領域のコード配列に隣接する重鎖及び軽鎖可変領域をコードする、抗体のコード配列の転写開始を媒介する）及び転写終結及び転写産物のポリアデニル化に必要なシグナルを含む。付加的なエレメントとしては、エンハンサー、コザック配列、及びＲＮＡスプライシングのためのドナー及びアクセプター部位に隣接する介在配列が挙げられる。高効率の転写は、ＳＶ４０からの初期及び後期プロモーター、レトロウイルスからの長末端反復（ＬＴＲＳ）、例えばＲＳＶ、ＨＴＬＶＩ、ＨＩＶＩ、及びサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）の初期プロモーターで達成可能である。しかしながら、細胞エレメントも同様に使用可能である（例えばヒトアクチンプロモーター）。本発明を実践する上で使用するための適切な発現ベクターとしては例えば、ｐＩＲＥＳ１ｎｅｏ、ｐＲｅｔｒｏ−Ｏｆｆ、ｐＲｅｔｒｏ−Ｏｎ、ＰＬＸＳＮ、又はｐＬＮＣＸ（クローンテック・ラボ（Clonetech Labs）、カリフォルニア州パロアルト（Palo Alto））、ｐｃＤＮＡ３．１（＋／−）、ｐｃＤＮＡ／Ｚｅｏ（＋／−）又はｐｃＤＮＡ３．１／Ｈｙｇｒｏ（＋／−）（インビトロゲン（Invitrogen））、ＰＳＶＬ及びＰＭＳＧ（ファルマシア（Pharmacia）、スウェーデン、ウプサラ（Uppsala））、ｐＲＳＶｃａｔ（ＡＴＣＣ  ３７１５２）、ｐＳＶ２ｄｈｆｒ（ＡＴＣＣ  ３７１４６）及びｐＢＣ１２ＭＩ（ＡＴＣＣ  ６７１０９）といったベクターが含まれる。用いることができる哺乳類の宿主細胞としては、ヒトＨｅｌａ２９３、Ｈ９、及びジャーカット細胞、マウスＮＩＨ３Ｔ３及びＣ１２７細胞、Ｃｏｓ１、Ｃｏｓ７、及びＣＶ１、ウズラＱＣ１−３細胞、マウスＬ細胞、及びチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞が挙げられる。
【０２２０】
別の方法としては、染色体内に組み込まれた遺伝子を含む安定した細胞株において、遺伝子を発現させることができる。ｄｈｆｒ、ｇｐｔ、ネオマイシン又はハイグロマイシン等の選択可能なマーカーとのコトランスフェクションにより、トランスフェクトされた細胞の同定及び単離が可能となる。
【０２２１】
トランスフェクトされた遺伝子はまた増幅されて、コードされた抗体を大量に発現することができる。ＤＨＦＲ（ジヒドロ葉酸レダクターゼ）マーカーは、関心遺伝子の数百又は数千ものコピーを擁する細胞株を開発するのに有用である。もう１つの有用な選択マーカーは、酵素グルタミンシンターゼ（ＧＳ）である（マーフィー（Murphy）ら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．、第２２７号、２７７〜２７９頁（１９９１年）；ベビングトン（Bebbington）ら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１０巻、１６９〜１７５頁（１９９２年））。これらのマーカーを用いて、哺乳類細胞を選択培地内で増殖させ、最高の耐性を有する細胞を選択する。これらの細胞株は、染色体内に組み込まれた増幅遺伝子を含有する。抗体の生成には、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）及びＮＳＯ細胞がしばしば用いられる。
【０２２２】
発現ベクターｐＣ１及びｐＣ４は、ラウス肉腫ウイルスの強力なプロモーター（ＬＴＲ）（カレン（Cullen）ら、Ｍｏｌｅｃ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．、５巻、４３８〜４４７頁（１９８５年））に加えて、ＣＭＶ−エンハンサーの断片（ボスハート（Boshart）ら、Ｃｅｌｌ、４１巻、５２１〜５３０頁（１９８５年））を含有する。例えば制限酵素切断部位ＢａｍＨＩ、ＸｂａＩ及びＡｓｐ７ｌ８を含むマルチクローニングサイトが関心遺伝子のクローニングを容易にする。ベクターは、３’イントロンに加えラットプレプロインスリン遺伝子のポリアデニル化及び終結シグナルを含有する。
【０２２３】
ＣＨＯ細胞内でのクローニング及び発現
ベクターｐＣ４をアミロイド抗体の発現に使用する。プラスミドｐＣ４は、プラスミドｐＳＶ２−ｄｈｆｒ（ＡＴＣＣ受入番号３７１４６）の誘導体である。このプラスミドは、ＳＶ４０初期プロモーターの制御下でマウスＤＨＦＲ遺伝子を含む。これらのプラスミドでトランスフェクトされる、ジヒドロ葉酸活性を欠くチャイニーズハムスターの卵巣又はその他の細胞を、化学療法剤メトトレキサートを添加した選択培地（例えば、アルファマイナスＭＥＭ（ライフ・テクノロジーズ（Life Technologies）、メリーランド州ゲイザーズバーグ（Gaithersburg））の中で細胞を増殖させることによって選択することができる。メトトレキサート（ＭＴＸ）に対する耐性をもつ細胞内のＤＨＦＲ遺伝子の増幅は、文献により充分に知られている（例えば、Ｆ．Ｗ．オルト（Alt）ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２５３巻、１３５７〜１３７０頁（１９７８年）；Ｊ．Ｌ．ハムリン（Hamlin）及びＣ．マ（Ma）、Ｂｉｏｃｈｅｍ．ｅｔ  Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ、第１０９７号、１０７〜１４３頁（１９９０年）；及びＭ．Ｊ．ページ（Page）及びＭ．Ａ．シデンハム（Sydenham）、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、第９号、６４〜６８頁（１９９１年）を参照されたい）。ＭＴＸの濃度の増加の中で増殖した細胞は、ＤＨＦＲ遺伝子の増幅の結果として、標的酵素であるＤＨＦＲを過剰生成することにより、薬物に対する耐性を生じる。第２の遺伝子がＤＨＦＲ遺伝子に連結されている場合は、通常、同時増幅され、かつ過剰発現する。増幅遺伝子の１，０００コピー以上を擁する細胞株を発生させるために、このアプローチを使用できることが、当該技術分野において知られている。その後、メトトレキサートが除去された時点で、宿主細胞の１本以上の染色体の中に組み込まれた増幅遺伝子を含有する細胞株が得られる。
【０２２４】
プラスミドｐＣ４は、関心遺伝子を発現させるために、ラウス肉腫ウイルスの長末端反復（ＬＴＲ）の強力なプロモーター（カレン（Cullen）ら、Ｍｏｌｅｃ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．、５巻、４３８〜４４７頁（１９８５年））と、ヒトサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）の前初期遺伝子のエンハンサーから単離された断片（ボシャート（Boshart）ら、Ｃｅｌｌ、４１巻、５２１〜５３０頁（１９８５年））とを含有している。このプロモーターの下流側には、遺伝子の組み込みを可能にするＢａｍＨＩ、ＸｂａＩ、及びＡｓｐ７１８制限酵素切断部位がある。このプラスミドは、これらのクローニングサイトの後ろに、ラットプレプロインスリン遺伝子の３’イントロン及びポリアデニル化部位を有している。発現のためには、例えばヒトｂ−アクチンプロモーター、ＳＶ４０初期若しくは後期プロモーター、又は例えばＨＩＶ及びＨＴＬＶＩ等の他のレトロウイルスからの長末端反復といった、その他の高効率プロモーターを使用することもできる。哺乳類細胞内で制御された方法でアミロイドを発現させるためには、クローンテック（Clontech）社のテットオフ（Tet-Off）及びテットオン（Tet-On）遺伝子発現系及び類似の系を使用することができる（Ｍ．ゴッセン（M. Gossen）及びＨ．ブジャード（H. Bujard）、米国科学アカデミー紀要（Proc. Natl. Acad. Sci.）、８９巻、５５４７〜５５５１頁（１９９２年））。ｍＲＮＡのポリアデニル化のためには、例えばヒト成長ホルモン又はグロビン遺伝子からの他のシグナルを同様に使用することもできる。染色体中に組み込まれた関心遺伝子を保有する安定細胞株は、ｇｐｔ、Ｇ４１８又はハイグロマイシンのような選択可能なマーカーとのコトランスフェクションに際してもまた選択し得る。初めに１種以上の選択可能なマーカー、例えばＧ４１８及びメトトレキサートを使用することが有利である。
【０２２５】
プラスミドｐＣ４を制限酵素で消化し、その後当該技術分野において既知の手順により仔ウシ腸ホスファターゼを使用して脱リン酸化する。ベクターをその後１％アガロースゲルから単離する。
【０２２６】
ある実験セットでは、配列番号４８Ａ〜Ｉ又は４９Ａ〜Ｍに提示したような、本発明のアミロイド抗体のＨＣ及びＬＣ可変領域に対応する、例えば配列番号５１又は５２に提示したような、完全なアミロイド抗体をコードするＤＮＡ配列を既知の方法の段階に従って使用する。適するヒト定常領域（すなわちＨＣ及びＬＣ領域）をコードする単離核酸もまたこのコンストラクト中で使用する。別の実験一式では、配列番号５９又は６０に提示されているようなＨＣ及びＬＣ可変領域に対応する、配列番号６１又は６２に提示されているようなＤＮＡ配列を用いる。
【０２２７】
単離された可変及び定常領域をコードするＤＮＡ並びに脱リン酸化したベクターをその後Ｔ４  ＤＮＡリガーゼを用いて連結する。大腸菌ＨＢ１０１又はＸＬ−１  Ｂｌｕｅ細胞をその後形質転換し、例えば制限酵素分析を使用してプラスミドｐＣ４に挿入された断片を含有する細菌を同定する。
【０２２８】
活性のＤＨＦＲ遺伝子を欠くチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞をトランスフェクションに使用する。５μｇの発現プラスミドｐＣ４をリポフェクションを使用して０．５μｇのプラスミドｐＳＶ２−ｎｅｏとコトランスフェクトする。プラスミドｐＳＶ２ｎｅｏは、優位な選択可能マーカー、すなわちＧ４１８を包含する抗生物質の一群に対する耐性を付与する酵素をコードするＴｎ５からのｎｅｏ遺伝子を含有する。細胞を１μｇ／ｍＬのＧ４１８を補充したα−ＭＥＭに播種する。２日後に細胞をトリプシン処理し、１０、２５又は５０ｎｇ／ｍＬのメトトレキサート及び１μｇ／ｍＬのＧ４１８を補充したα−ＭＥＭ中でハイブリドーマクローニングプレート（ドイツ国グレイナー（Greiner））に播種する。約１０〜１４日後に単一クローンをトリプシン処理し、その後多様な濃度のメトトレキサート（５０ｎＭ、１００ｎＭ、２００ｎＭ、４００ｎＭ、８００ｎＭ）を使用して６ウェルペトリ皿又は１０ｍＬフラスコに播種する。最高濃度のメトトレキサートで増殖するクローンを、その後更により高濃度のメトトレキサート（１ｍＭ、２ｍＭ、５ｍＭ、１０ｍＭ、２０ｍＭ）を含有する新たな６ウェルプレートに移す。１００〜２００ｍＭの濃度で増殖するクローンが得られるまで同一の手順を反復する。所望の遺伝子産物の発現を例えばＳＤＳ−ＰＡＧＥ及びウエスタンブロット又は逆相ＨＰＬＣ分析により分析する。
【０２２９】
ヒト抗ヒトアミロイド抗体の結合キネティクス
ＥＬＩＳＡ分析により、これらの宿主細胞由来の精製した抗体が、濃度依存的方式でアミロイドに結合することを確認する。この場合、その同種抗原（エピトープ）に対する抗体の結合活性を測定する。定量的結合定数を、ヒト抗体のＢＩＡコア（BIAcore）分析を用いて得て、ヒトモノクローナル抗体のいくつかが、１×１０-9〜９×１０-12の範囲のＫDという非常に高い親和性を有することを明らかにする。
【０２３０】
結論
本発明のヒトアミロイド反応性ＩｇＧモノクローナル抗体が生じる。ヒト抗アミロイド抗体は更に特徴付けられる。生じた抗体のいくつかは、１×１０8〜９×１０12の親和性定数を有する。これらの完全なヒトモノクローナル抗体の高親和性により、それらは、アミロイド依存性疾患、病態、又は関連症状における治療的用途に好適になる。
【０２３１】
実施例２：大腸菌内のアミロイドタンパク質又は抗体の発現及び精製
細菌発現ベクターｐＱＥ６０をこの実施例における細菌発現のために使用する（キアゲン社（Qiagen, Inc.）、カリフォルニア州チャッツワース（Chatsworth））。ｐＱＥ６０はアンピシリン抗生物質抵抗性（「Ａｍｐｒ」）をコードし、細菌複製起点（「ｏｒｉ」）、ＩＰＴＧ誘導性プロモーター、リボソーム結合部位（「ＲＢＳ」）、キアゲン社により販売されているニッケル−ニトリロ−トリ酢酸（「Ｎｉ−ＮＴＡ」）親和性樹脂を用いるアフィニティ精製を可能とするヒスチジン残基をコードする６個のコドン、及び適当な単一制限酵素切断部位を含む。それらのエレメントは、タンパク質又は抗体のカルボキシル末端に共有結合した６個のＨｉｓ残基（すなわち「６  Ｘ  Ｈｉｓタグ」）を有するタンパク質又は抗体を生成する様式で、そのタンパク質又は抗体をコードするＤＮＡ断片が挿入できるように配置されている。しかし、タンパク質又は抗体をコードする配列は、所望により、６個のＨｉｓコドンの翻訳が防止されそして、これにより、タンパク質又は抗体が６  Ｘ  Ｈｉｓタグを持たないで生成されるように挿入できる。
【０２３２】
アミロイド抗体の所望の部分をコードする核酸配列、例えば、配列番号４８Ａ〜Ｉ、４９Ａ〜Ｍ、５９、及び６０に表されるようなＨＣ及びＬＣ可変領域、配列番号４２〜４４、及び５３〜５５に表されるようなＨＣ  ＣＤＲ、配列番号４５〜４７及び５６〜５８に表されるようなＬＣ  ＣＤＲであって、所望により更に、所望により及び好ましくは疎水性リーダー配列を欠く既知のヒト定常領域コード配列の一部又は全てを含む配列は、ＰＣＲオリゴヌクレオチドプライマーを用いる蓄積された（deposited）ｃＤＮＡクローンより増幅される（アミロイドタンパク質又は抗体の所望の部分のアミノ酸末端をコードするＤＮＡ配列に、及びｃＤＮＡコード配列に対し蓄積されたコンストラクトの３’内の配列にアニールする、提示された配列に基づく）。ｐＱＥ６０ベクター中のクローニングを促進する制限部位を含む追加のヌクレオチドをそれぞれ５’及び３’配列に付加する。
【０２３３】
アミロイドタンパク質又は抗体をクローニングするために、５’及び３’プライマーはアミロイドタンパク質又は抗体のコード配列の一部分に相当又は相補的なヌクレオチドを既知の方法の工程に従って有する。当業者は、当然ながら、５’プライマーで始まるタンパク質又は抗体コード配列内の点が、完全なタンパク質又は抗体の所望の部分を成熟形よりも短く又は長く増幅するために変化できることを認めるであろう。
【０２３４】
増幅されたアミロイド核酸断片及びベクターｐＱＥ６０は、適当な制限酵素を用いて消化され、次いで消化されたＤＮＡを一緒に連結する。制限されたｐＱＥ６０ベクター内へのアミロイドＤＮＡの挿入は、その関連する終止コドンを含むアミロイドタンパク質又は抗体コード領域を、ＩＰＴＧ誘導性プロモーターより下流にそして開始ＡＵＧコドンとともにインフレームに位置させる。関連する終止コドンは、挿入点より下流の６個のヒスチジンコドンの翻訳を防ぐ。
【０２３５】
標準手順、例えばサムブルック（Sambrook）ら、１９８９年、オースベル（Ausubel）、１９８７〜１９９８年に記載のものを用いて、ライゲーション混合物をコンピーテント大腸菌細胞内に形質転換する。ｌａｃレプッサーを発現し、かつカナマイシン耐性（「Ｋａｎr」）を与えるプラスミドｐＲＥＰ４の複数コピーを含む大腸菌株Ｍ１５／ｒｅｐ４を、本明細書に記載する実施例の実行のために使用する。アミロイドタンパク質又は抗体を発現するために適する多数の中で唯一であるこの株は、キアゲン社より市販されている。形質転換体はアンピシリン及びカナマイシンの存在下でＬＢプレート上で増殖するそれらの能力により同定する。プラスミドＤＮＡは、抵抗性コロニーから単離し、そしてクローニングされたＤＮＡの同一性は制限酵素分析、ＰＣＲ及びＤＮＡ配列決定により確認される。
【０２３６】
所望のコンストラクトを含むクローンをアンピシリン（１００μｇ／ｍＬ）及びカナマイシン（２５μｇ／ｍＬ）の双方を補足したＬＢ培地中の液体培養物内で一晩（「Ｏ／Ｎ」）増殖させる。およそ１：２５〜１：２５０の希釈で、大きい培地に接種するためにＯ／Ｎ培養物を使用した。６００ｎｍでの光学密度（「ＯＤ６００」）が０．４〜０．６となるまで細胞を増殖させる。次いでイソプロピルｂ−Ｄ−チオガラクトピラノシド（「ＩＰＴＧ」）を最終濃度１ｍＭまで加え、ｌａｃＩレプレサーを不活性化してｌａｃレプレッサー感受性プロモーターより転写を誘発させる。その後更に３〜４時間、細胞をインキュベートする。次いで遠心分離により細胞を採取する。
【０２３７】
次いで、６Ｍグアニジン−ＨＣｌ、ｐＨ８中、４℃で３〜４時間細胞を攪拌する。細胞残さを遠心分離により除去し、２００ｍＭ  ＮａＣｌを添加した５０ｍＭ酢酸Ｎａ緩衝剤ｐＨ６に対してアミロイドを含む上清を透析する。あるいは、プロテアーゼ阻害剤を含む５００ｍＭ  ＮａＣｌ、２０％グリセロール、２５ｍＭトリス／ＨＣｌ  ｐＨ７．４に対してそれを透析して、タンパク質又は抗体のリフォールディングに成功できる。
【０２３８】
不溶性のタンパク質が生じた場合、既知の方法の工程に従ってタンパク質を可溶性とする。復元後、タンパク質又は抗体をイオン交換、疎水相互作用及びサイズ排除クロマトグラフィーにより精製する。あるいは、アフィニティクロマトグラフィー法、例えば抗体カラムを純粋のアミロイドタンパク質又は抗体を得るために使用する。精製したタンパク質又は抗体を４℃で保存又は−４０℃〜−１２０℃で冷凍する。
【０２３９】
実施例３：バキュロウイルス発現系内でのアミロイドポリペプチドのクローニング及び発現
この実施例では、バキュロウイルスリーダー及びサマーズ（Summers）ら「バキュロウイルスベクター及び昆虫細胞培養操作のための方法のマニュアル」（A Manual of Methods for Baculovirus Vectors and Insect Cell Culture Procedures）、Ｔｅｘａｓ  Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｓｔａｔｉｏｎ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ、１５５５巻（１９８７年）に記載の標準的な方法を使用して、アミロイド抗体を発現させるために、抗体（例えば、配列番号５１〜５２又は６１〜６２の可変領域を含むが、これらに限定されない）をコードするクローニングしたＤＮＡをバキュロウイルス内に挿入するために、プラスミドシャトルベクターｐＡ２  ＧＰを使用する。この発現ベクターは、オートグラファ核多角体（Autographa california nuclear polyhedrosis）ウイルス（ＡｃＭＮＰＶ）の強力なポリヘドリンプロモーター、次いでバキュロウイルスｇｐ６７タンパク質又は抗体の分泌シグナルペプチド（リーダー）及び好都合な制限酵素部位、例えばＢａｍＨＩ、Ｘｂａ  Ｉ及びＡｓｐ７１８を含む。サルウイルス４０（「ＳＶ４０」）のポリアデニル化部位を効率的なポリアデニル化のために使用する。組み換えウイルスの容易な選択のために、プラスミドは、同じ配向の弱いショウジョウバエ（Drosophila）プロモーターの制御下の大腸菌由来のベータ−ガラクトシダーゼ遺伝子、次いでポリヘドリン遺伝子のポリアデニル化シグナルを含む。挿入された遺伝子は、野生型ウイルスＤＮＡを用いる細胞媒介相同組み換えのためのウイルス配列の両側に隣接して、クローニングしたポリヌクレオチドを発現する生存ウイルスを生成する。
【０２４０】
その他のバキュロウイルスベクターを上記のベクターの代わりに使用し、これらは例えばｐＡｃ３７３、ｐＶＬ９４１及びｐＡｃＩＭ１であり、コンストラクトが、シグナルペプチド及びインフレームＡＵＧを必要に応じて含む転写、翻訳、分泌等のための適切に位置したシグナルを提供する限り、当業者はこれを直ちに認めるであろう。このようなベクターは、例えばルコフ（Luckow）ら、Ｖｉｒｏｌｏｇｙ、１７０巻、３１〜３９頁に記載されている。
【０２４１】
蓄積されたクローン又はその他のクローン中でアミロイド抗体をコードし、ＡＵＧ開始コドン及び天然に関連するヌクレオチド結合部位を欠失するｃＤＮＡ配列は、遺伝子の５’及び３’配列に対応するＰＣＲオリゴヌクレオチドプライマーを用いて増幅される。非限定的な例には、アミロイドタンパク質又は抗体のコード配列の一部分に相当又は相補的なヌクレオチドを有する５’及び３’プライマーが含まれ、例えば既知の方法の工程に従って、ＣＮＴＯ２１２５  （Ｃ７０６又は（ＪＲＦ／ｈＡｂ１１／１））については配列番号４８Ａ〜Ｉ、４９Ａ〜Ｍ、又はＣ８９０Ａについては配列番号５９〜６０で表される。
【０２４２】
増幅された断片は、市販のキット（例えば「ジーンクリーン（Geneclean）」、バイオ１０１社（BIO 101 Inc.）、カリフォルニア州ラホーヤ（La Jolla））を用いて１％アガロースゲルより単離される。次いで断片を適当な制限酵素を用いて消化し、再度、１％アガロースゲル上で精製する。この断片を本明細書では「Ｆ１」と呼ぶ。
【０２４３】
プラスミドを対応する制限酵素を用いて消化し、所望により、当該技術分野では公知の日常的な手順を用いて、仔ウシ腸ホスファターゼ用いて脱リン酸できる。次いで市販のキット（例えば「ジーンクリーン（Geneclean）」、バイオ１０１社（BIO 101 Inc.）、カリフォルニア州ラホーヤ（La Jolla））を用いて１％アガロースゲルよりＤＮＡを単離する。このベクターＤＮＡを本明細書では「Ｖ１」と呼ぶ。
【０２４４】
断片Ｆ１及び脱リン酸したプラスミドＶ１をＴ４  ＤＮＡリガーゼを用いて一緒にライゲーションする。大腸菌ＨＢ１０１又はその他の好適な大腸菌宿主、例えばＸＬ−１  Ｂｌｕｅ（ストラタジーン・クローニングシステムズ（Stratagene CloningSystems）、カリフォルニア州ラホーヤ（La Jolla））細胞を、ライゲーション混合物を用いて形質転換し、培養プレート上に拡げる。細菌は、ＰＣＲ法を用いてヒトアミロイド遺伝子を有するプラスミドを含むと同定され、その中で遺伝子を増幅するために使用されるプライマーの１種及び第２のプライマーが、アミロイド遺伝子断片を含むこれらの細菌コロニーのみがＤＮＡの増幅を示すようにベクター内のウェルに由来する。クローニングした断片の配列は、ＤＮＡ配列決定により確認する。このプラスミドを本明細書ではｐＢａｃアミロイドと呼ぶ。
【０２４５】
プラスミドｐＢａｃアミロイドの５μｇをフェルグナー（Felgner）ら、米国科学アカデミー紀要（Proc. Natl. Acad. Sci.）、８４巻、７４１３〜７４１７頁（１９８７年）に記載のリポフェクション法を用いて、市販の線型化バキュロウイルスＤＮＡ（「バキュロゴールド（BaculoGold）（商標）バキュロウイルスＤＮＡ」、ファルミゲン（Pharmingen）、カリフォルニア州サンディエゴ（San Diego））を１．０μｇ用いてコトランスフェクションする。１μｇのバキュロゴールド（BaculoGold）（商標）ウイルスＤＮＡ及び５μｇのプラスミドｐＢａｃアミロイドを、５０μＬの血清を含まないグレース培地（ライフ・テクノロジーズ（Life Techonologies, Inc.）、メリーランド州ロックビル（Rockville））を収容するマイクロタイタープレートの滅菌ウェル内で混合する。その後、１０μＬリポフェクチン及び９０μＬグレース培地を添加し、混合し、１５分間室温でインキュベートする。次いで、トランスフェクション混合物を、血清を含まないグレース培地１ｍＬを含む３５ｍｍ組織培養プレートに接種したＳｆ９昆虫細胞（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ１７１１）に滴下して加える。プレートを前後に揺らして新たに加えた溶液を混合する。次いでプレートを５時間、２７℃でインキュベートする。５時間後にトランスフェクション溶液をプレートから取り出し、１０％ウシ胎児血清を添加したグレース昆虫培地１ｍＬを加える。プレートをインキュベーターに戻し、２７℃で４日間培養を続ける。
【０２４６】
４日後、上清を回収し、既知の方法に従ってプラークアッセイを行う。「ブルーガル（Blue Gal）」（ライフ・テクノロジーズ社（Life Technologies, Inc.）、メリーランド州ロックビル（Rockville））を含むアガロースゲルを使用して、ｇａｌ発現クローンの同定及び単離を容易にし、これは青色染色プラークを生成する。（この種の「プラークアッセイ」の詳細な説明は、ライフ・テクノロジーズ社（Life Technologies, Inc.）（メリーランド州ロックビル（Rockville））により配付される昆虫細胞培養及びバキュロウイルス学のためのユーザーガイド９〜１０頁にも見いだすことができる。）適当なインキュベーションの後、青色染色したプラークをマイクロピペッターチップ（例えばエッペンドルフ（Eppendorf））を用いて拾い上げる。次いで組み換えウイルスを含む寒天をグレース培地２００μＬを含む微小遠心管内に再懸濁し、組み換えバキュロウイルスを含む懸濁液を３５ｍｍ皿内で接種したＳｆ９細胞に感染させるために使用する。４日後、それらの培養皿の上清を採取し、次いでそれらを４℃で保存する。組み換えウイルスをＶ−アミロイドと呼ぶ。
【０２４７】
アミロイド遺伝子の発現を確認するために、Ｓｆ９細胞を１０％熱不活性化ＦＢＳを添加したグレース培地中で成長させる。約２の感染倍率（「ＭＯＩ」）で組み換えバキュロウイルスＶ−アミロイドを細胞に感染させる。６時間後に培地を取り去り、メチオニン及びシステインを除いたＳＦ９００ＩＩ培地（例えばライフ・テクノロジーズ社（Life Technologies, Inc.）（メリーランド州ロックビル（Rockville））より入手できる）と置換する。放射能標識したタンパク質又は抗体が望ましい場合には、４２時間後に、５ｍＣｉの３５Ｓメチオニン及び５ｍＣｉの３５Ｓ−システイン（アマシャム（Amersham）より入手できる）を加える。細胞を更に１６時間インキュベートし、次いでそれらを遠心分離により採取する。上清内のタンパク質又は抗体並びに細胞内タンパク質又は抗体を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥで分析し次いでオートラジオグラフィーで分析する（放射能標識した場合）。精製したタンパク質又は抗体のアミノ末端のアミノ酸配列のマイクロシークエンシングは、成熟タンパク質又は抗体のアミノ末端配列を決定し、それにより切断点及び分泌シグナルペプチドの長さを決定するために使用できる。
【０２４８】
実施例４：抗ヒトベータアミロイド抗体の直線状エピトープの特徴付け
緒言
アルツハイマー病（ＡＤ）は、ニューロン中の高リン酸化タウ（tau）及び脳内のベータアミロイド（Ａβ）斑の細胞外沈着により特徴付けることができる病態を伴う、進行性認知症である。Ａβ斑は、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の過剰生成、又は自己会合性の高い４２アミノ酸のペプチドの非効率なクリアランスの結果として形成される。ＡＰＰ又はＡβ42ペプチドの正常な機能は未知であるが、Ａβ42はＡＤに関連すると考えられている種である。Ａβ42は速やかに自己会合して、微細繊維、及び次第に斑に進行するオリゴマー構造を形成することができる。これらのプラークは、ＡＤ病態の顕著な特徴である。
【０２４９】
アミロイドカスケードを遮断することを目的とする治療的介入は、Ａβペプチドの活性ワクチン接種又はＡβ特異的モノクローナル抗体の末梢投与を用いてトランスジェニックＡＤ動物モデルにおいて示されている。これらのアプローチの理論的根拠は、免疫系媒介斑及び／又はＡβクリアランスに依存している。斑クリアランスの機序は、脳内で抗体が斑に直接結合することを介して生じ、それにより沈着したＡβを貪食するためにＦｃ受容体を介して小グリア細胞を活性化すると唱えられている。あるいは、末梢的に投与された抗体は、循環しているＡβ部分と結合して、それにより中枢神経系と血漿との間のＡβ濃度の動的平衡を変化させ、脳からのＡβの流出を促進することができる。
【０２５０】
方法
セルロース膜上でのペプチド合成
膜は、インタビス（Intavis）（ドイツ、ベルギッシュグラートバハ（Bergisch Gladbach））から購入した。フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）アミノ酸及びＮ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＢＯＴ）は、ノババイオケム（Novabiochem）（フランス、ムードン（Meudon））から購入した。Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）はフルカ（Fluka）（ドイツ）から購入した。Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）及びＮ−メチルピロリドン−２（ＮＭＰ）は、アプライド・バイオシステムズ（Applied Biosystems）から入手した。リンク（Rink）樹脂は、アドバンストケムテック（Advanced Chem Tech）から購入した。Ａβのペプチド、ＫＭＤＡＥＦＲＨＤＳＧＹＥＶＨＨＱＫＬＶＦＦＡＥＤＶＧＳＮＫＧＡＩＩＧＬＭＶＧＧＶＶＩＡＴＶＩＶＩＴＬＶＭＬ（配列番号５０）の合成は、既に記載されているように（クレーマー（Kramer）ら、１９９４年）、オート・スポット・ロボット（Auto Spot Robot）ＡＳＰ２２２（アビメド社（Abimed GmbH）、ドイツ）を用いて、フランク（Frank）Ｒ．（２００２年）に従って実施した。用いた膜を、８〜１０個のエチレングリコール単位の長さのポリエチレングリコールスペーサーを用いて誘導体化した（アミノ−ＰＥＧ500−ＵＣシート、荷重：４００ｎｍｏｌ／ｃｍ2）（インタビス（Intavis）ＡＧ、ロットＡＣ１１２０５０９００）。グリッドは、Ｃ末端のβ−アラニンをスポッティングすることにより生じた。全てのペプチドをＮ−アセチル化し、スポット１つあたりおよそ２０ｎｍｏｌのペプチドが生じた。
【０２５１】
膜のプロービング及び再生
スーパーブロック（SuperBlock）ブロッキング緩衝剤（ピアース（Pierce））中で一晩飽和工程を行った後、タンパク質Ｇ精製抗体を膜に添加した（１μｇ／ｍＬ、室温で２時間インキュベート）。膜を洗浄した後、西洋ワサビペルオキシダーゼ抱合ヤギ抗マウスＩｇＧ（ジャクソン・イムノリサーチ・ラボラトリー（Jackson ImmunoResearch Laboratory Inc.）で１：１０，０００に希釈したものを、室温で１時間インキュベートした。結合した抗体を、ＥＣＬプラスキット（アマシャム（Amersham））（スポット上の抗体結合に陽性指標を与える）により検出した。
【０２５２】
結論
要約すると、スポット膜を用いる抗Ａβモノクローナル抗体のエピトープマッピングは、これらの抗体が直線状エピトープを認識することを示した。２つのｍＡｂ、ＣＮＴＯ２１２５及びＣ８９０Ａは、Ａβの配列の１つである配列番号５０の少なくとも２〜５アミノ酸に対して特異的である。
【０２５３】
実施例５：抗ヒトベータアミロイド抗体のリガンド結合
方法
バイアコア（BIAcore）３０００、ＣＭ５センサ表面、アミンカップリングキット、ＨＥＰＥＳ緩衝生理食塩水（ＨＢＳ、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ  １５０ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ７．４（３ｍＭ  ＥＤＴＡを含む）及び０．００５％  Ｔｗｅｅｎ−２０）及び１０ｍＭ酢酸ナトリウム  ｐＨ４．５は、バイアコア社（Biacore, Inc.）（ニュージャージー州ピスカタウェイ（Piscataway））から購入した。抗Ａβモノクローナル抗体（１００μｇ／ｍＬ）を、水で１：１０に希釈したＨＢＳで透析した。次いで、透析したｍＡｂ溶液を、ｐＨ４．５の１０ｍＭ酢酸ナトリウムで１：１０に希釈した。ＣＭ５センサ表面を、バイアコア３０００内でＨＢＳを用いて平衡化した。各抗体を、オペレーティングソフトウェア中に提供されている固定化ウィザード及びアミンカップリングキットとともに供給されたプロトコルを用いて、フローセル上に固定化した。ウィザードを、２５００ＲＵの抗体を固定化するよう設定した。典型的には、２０００〜３０００ＲＵが実際に固定化された。
【０２５４】
結果
各ｍＡｂ反応について、時間の関数としてデータを集めた（図４６）。センサグラムから、ペプチドの注入前に１０秒、対合相（association phase）の完了前に１０秒、及び解離相に６０秒、報告点をとった。次いで、このデータを用いて、結合化学量論を決定し、安定性を測定した（６０秒後にセンサ表面上に残る結合したペプチドの画分）。これらの計算は、恐らく、１ＲＵ＝１ｐｇのペプチド（又はタンパク質）／ｍｍ2を推定することにより行われる。
【０２５５】
１〜３８及び１〜４２ペプチドの潜在的な複数の集合状態により、結合定数の定量的解析は不可能である。しかしながら、定性的解析は可能である。図４７は、結合比、及び複合体の安定性を反映した６０秒後に表面上に残る画分の関数として、ｍＡｂを順位付けしたものである。この解析から、ＣＮＴＯ２１２５  ＨＵＭＡＮ及びＣ８９０Ａは、「単量体」ペプチド及び／又は集合したペプチドに結合できると予測される。
【０２５６】
実施例５：抗ヒトベータアミロイド抗体のオリゴマー中和
方法
Ａβ1〜42オリゴマー調製物を、公開されているプロトコルに従って作製した（クライン（Klein）、２００２年）。簡単に述べると、１ｍｇのヒトＡβ1〜42（カリフォルニアペプチド（California peptide）、カタログ番号６４１〜１５）を、１，１，１，３，３，３−ヘキサフルオロ−２−プロパノール（ＨＦＩＰ）中で単量体化し、シリコン化していない微小遠心管を０．４５ｍｇずつ分注した。ＨＦＩＰを、室温のドラフト（hood）内で一晩蒸発させた。ＨＦＩＰが少しでも残った場合、１０分間スピード−バック（speed-vac）でそれを除去した。次いで、５ｍＭのＡβストックを、２０μＬの無水ＤＭＳＯ（ハイブリマックス（Hybri-Max）、シグマ（Sigma））を、０．４５ｍｇの単量体化ペプチドフィルムに添加することにより調製した。次いで、９８０μＬのハムＦ１２培地（バイオソース社（BioSource, Inc））を添加して、１００μＭのオリゴマー溶液を作製した。得られた溶液を４℃で２４時間インキュベートした。インキュベート後、オリゴマー溶液を１４，０００×ｇで１０分間４℃にて遠心分離した。得られた上清を注意深く回収し、細胞毒性試験のために１００μＭオリゴマー溶液として用いた。
【０２５７】
ラットＰＣ１２細胞（ＡＴＣＣ）を、Ｆ１２Ｋ培地（１％ウマ血清、１％  Ｐｅｎ／Ｓｔｒｅｐ）中に、コラーゲンでコーティングした９６ウェルプレートに２０，０００細胞／ウェルでプレーティングし、３７℃及び５％のＣＯ2で一晩付着させた。アッセイを始める直前に、Ｆ１２Ｋで培地を新しくした。全てのＡβ抗体（ＣＮＴＯ２１２５  ＨＵＭＡＮ及びＣ８９０Ａ）及び市販のマウス抗Ａβ抗体、６Ｅ１０（シグネット（Signet）、カタログ番号９３２０−０５）を滅菌水中５．６μｇ／１０μＬに希釈した。次いで、５μＭのＡβ1〜42オリゴマーを、４℃で２時間各抗体とともに前インキュベートした。次いで、オリゴマーと抗体の組み合わせを細胞に添加して、３７℃で２４時間インキュベートした。この実験では、５％のエタノールを細胞毒性の陽性対照として用いた。細胞の生存率を、各ウェルに１０μＬのＭＴＴ試薬（ロシュ（Roche）、＃１−４６５−００７）を添加し、４時間インキュベートすることにより評価した。生存細胞はＭＴＴ試薬をホルマザン塩結晶に還元する。結晶を供給されている緩衝剤（ロシュ（Roche））中で一晩可溶化し、次いで５５０ｎｍ〜６９０ｎｍで分光光度計により読み取った。
【０２５８】
結果
ＡβｍＡｂの、Ａβ42オリゴマー毒性を阻害する能力を、ラットＰＣ１２細胞株を用いて試験した。細胞増殖及び生存率を決定するＭＴＴアッセイを用いて毒性を測定した。ＭＴＴアッセイはまた、細胞のミトコンドリア機能の程度を表す、なぜならミトコンドリアデヒドロゲナーゼ活性が、ＭＴＴ染料をホルマザン塩結晶に還元し、分光光度計で読み取るために必要であるためである。ビヒクル処理したＰＣ１２細胞を、５μＭのＡβオリゴマーで処理したものと比較したとき、図４８に示すように、Ａβ42オリゴマー曝露後のＭＴＴ還元は典型的には、４０〜５０％減少する。抗ヒトＡβ抗体を、Ａβ42オリゴマーの毒性を妨げる能力について試験した。Ａβオリゴマーを、抗ヒトＡβ抗体で予めインキュベートし、その後ニューロン様ＰＣ１２細胞に曝露した。
【０２５９】
細胞を５μＭのオリゴマーのみに曝露したところ、ビヒクル対照に比べて細胞の生存率は２７．３％減少した。全ての抗ヒトＡβ抗体は、２時間オリゴマーで予めインキュベートした後、ＰＣ１２細胞に神経保護作用を付与することができた。ＣＮＴＯ２１２５  ＨＵＭＡＮ及びＣ８９０Ａは両方とも、ＰＣ１２細胞内のＡβ42オリゴマー誘導性毒性を完全に妨げると予想される。市販のマウスモノクローナルＡｂ抗体、６Ｅ１０は、試験した濃度（５６０μｇ／ｍＬ）で細胞を保護しなかった。
【０２６０】
実施例６：ベータアミロイド抗体の動物モデル研究
要約：背景：完全長ペプチドＡｂ１〜４０及びＡｂ１〜４２の役割は広範囲にわたって研究されてきたが、アルツハイマー病における種々の切頭型の役割はそれ程理解されていない。ある特定の切頭型Ａｂ、Ａｂ１１〜４０／４２は、位置１１においてＢＡＣＥ１によりＡｂを更に切断することにより得られ、ＡＰＰにおけるスウェーデン型突然変異（ＡＰＰ６７０／６７１ＫＭaＮＬ）を有するＡＤ患者の生体サンプルで増加していることが見出されている。完全長Ａｂ１〜４０／４２のオリゴマー形は、単量体種よりニューロンに対する毒性効果が大きいことが示されている。疎水性の増大により、Ａｂ１１〜４０／４２断片は、更により容易に集合でき、したがって潜在的にＡｂの毒性型である可能性がある。目的：Ａｂ１１〜４０／４２（ＪＲＦ／ｈＡｂ１１／１）（本発明のヒト抗体可変領域配列ＨＣ配列番号４８Ａ〜Ｉ及びＬＣ配列番号４９Ａ〜Ｍに対応する、ＣＮＴＯ２１２５又は配列番号４２〜４７と同じＣＤＲ配列を有するＣ７０６）に特異的な新規モノクローナル抗体を用いて、特異的にこの断片を標的化することがＴｇ２５７６マウスにおいて少しでも治療的効果を有するかどうかを評価する。方法：Ｔｇ２５７６トランスジェニックマウスを慢性投与計画に付した：ＪＲＦ／ｈＡｂ１１／１抗体又はＰＢＳを、６月齢から始めて２０月齢まで、１週間に１回、腹腔内に投与した。処理後、脳及び血漿サンプル中のＡｂ１１〜４０／４２濃度を測定した。脳をまた、斑沈着について組織学的に分析した。ホールボード試験（holeboard test）、新規物体認識試験、及びＹ字迷路試験のような行動試験を実施して、これらのマウスの認知機能をモニタした。抗体−アミロイドペプチド相互作用を、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）により生物物理学的に特徴付けた。結果：ＪＲＦ／ｈＡｂ１１／１で処理した後、完全長及び切頭型のＡｂのどちらも血漿濃度の増加が観察された。興味深いことに、Ａｂ濃度がこのマウスモデルにおいて増加することが知られているとき、認知機能の穏やかな改善が見られた。結論：ＪＲＦ／ｈＡｂ１１／１（本発明のヒト抗体可変領域配列ＨＣ配列番号４８Ａ〜Ｉ及びＬＣ配列番号４９Ａ〜Ｍに対応する、ＣＮＴＯ２１２５又は配列番号４２〜４７と同じＣＤＲ配列を有するＣ７０６）は、ベータアミロイド断片Ａｂ１１〜４０／４２に対して特異性を示す新規抗体である。Ｔｇ２５７６マウスにおけるこの抗体の末梢投与は、活性Ａｂの沈着中に認知機能の穏やかな改善を示した。インビトロ研究は、この抗体を用いて、ベータアミロイド微細繊維の成熟の進行又は発達をモニタできることを示唆する。
【０２６１】
緒言：
アルツハイマー病におけるｂ−アミロイドの役割は、広範囲にわたって研究されてきた。このペプチドは、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の様々な切断により多くの形態で存在する。ｂ−アミロイドは正常な個体では大部分が完全長１〜４０として存在する。この種は非常に可溶性であり、集合する傾向はない。ｂ−アミロイドの特定の形は、より容易に集合して、インビボでオリゴマー又は微細繊維を形成する。これらはｂ−アミロイドの毒性型であると考えられる。ＢＡＣＥ−１はＡＰＰを＋１の位置で切断するが、この酵素が高発現すると＋１１の位置も更に切断される。このＮ−末端が切頭されたペプチドは、アルツハイマー及びダウン症候群患者からの死後脳サンプルで増加することが示されている（リュウ（Liu）ら）。
【０２６２】
ｂ−アミロイドのこの特定の切頭型の役割をよりよく理解するために、ｂ−アミロイド１１〜４０／４２に特異的なモノクローナル抗体を作製した。この抗体、ＪＲＦ／ｈＡｂ１１／１（本発明のヒト抗体可変領域配列ＨＣ配列番号４８Ａ〜Ｉ及びＬＣ配列番号４９Ａ〜Ｍに対応する、ＣＮＴＯ２１２５又は配列番号４２〜４７と同じＣＤＲ配列を有するＣ７０６）は、アミノ酸１１〜１６でｂ−アミロイドを認識し、優先的に切頭型に結合する。
【０２６３】
この研究では、ＡＰＰにスウェーデン型突然変異を有するＴｇ２５７６（タコニック（Taconic）マウスモデルを用いて、インビボでこれらのＡｂ切頭型を特徴付けた。更に、動物をＪＲＦ／ｈＡｂ１１／１で処理して、このペプチドの標的化が少しでも治療的価値を有するかどうかを決定した。血漿サンプルをこれらの動物から得て、ＥＬＩＳＡにより、ＰＢＳ処理トランスジェニック動物又は未処理野性型対照と比較した、Ａｂ１１〜４０／４２の濃度を調べた。脳内のアミロイド負荷を、ＥＬＩＳＡ及び組織学により調べた。ホールボード試験、新規物体認識試験、及びＹ字迷路試験のような行動試験を実施して、認知機能の改善を評価した。
【０２６４】
方法：
モノクローナル抗体の作製：Ｂａｌｂ／ｃマウスをフロイント完全アジュバント中においてペプチドで刺激した。最初の２つの合成ペプチドは、ｂ−セクレターゼ１１切断部位：ＥＶＨＨＱ（ＫＩ）−Ｃ（ヒトＡｂ１１（６又は８ＡＡ））に、最初の６〜８ヒトアミノ酸（ＡＡ）を含んでいた。固定化するための他の２つのペプチドは、マウスＡｂ１１  ＡＡ配列；ＥＶＲＨＱ（ＫＬ）−Ｃを含んでいた。全てのペプチドは、製造業者の取扱説明書に従って（ピアース（Pierce）、イリノイ州ロックフォード（Rockford））、ピアースのイムジェクト・マレイミド活性化ｍｃＫＬＨ／ＢＳＡキット（＃７７６０５）を用いて、ＣＯＯＨ−末端システイン残基を介して、マレイミド活性化ｍｃ（メガスラ・クレヌタラータ（Megathura crenulata））ＫＬＨ、又はマレイミド活性化ウシ血清アルブミンにペプチドをカップリングすることにより調製した。マウスは２週間毎に１００μｇのＫＬＨカップリングされたペプチドを、最初はフロイント完全アジュバント、その後フロイント不完全アジュバント中でブーストした。
【０２６５】
全てのマウスの脾臓を単離し、ヒトＡｂ１１（６ＡＡ）ペプチドで免疫したマウスの脾臓１つを除いて、液体窒素中で冷凍した。選択されたマウスは、最も高い血清力価を示し、それゆえ融合のために選択された。４日目、融合又は脾臓抽出前に、全てのマウスを、生理食塩水中のｍｃＫＬＨにカップリングした１００μｇのＡｂ１１ペプチドで腹腔内にブーストした。マウス脾臓細胞を、ケーラー（Kohler）及びミルスタイン（Milstein）の変法によりＳＰ２／０細胞と融合させた。ハイブリドーマを３０×９６ウェルプレートに播種し、６ＡＡのＢＳＡ−カップリングしたｈＡｂ１１ペプチド上の直接ＥＬＩＳＡにおいて１０日後スクリーニングし、カップリングしていないＡｂ１１−４０ペプチド上で確認した。遊離ｈＡｂ１１〜４０の陽性細胞をすぐサブクローニングし、陽性クローンを液体窒素中で冷凍した。
【０２６６】
全てのハイブリドーマを、１０％のウシ胎児血清（＃ＳＨ３００７１；ハイクローン（Hyclone）、ヨーロッパ）、２．５％のＥＳＧハイブリドーマサプリメント（＃６０１０  エルスコラボ（Elscolab）、ベルギー、クルイベーク（Kruibeke））、２％のＨＴ（＃Ｈ−０１３７；シグマ（Sigma）、ＵＳＡ）、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム（＃１１３６０−０３９）、２ｍＭのＬ−グルタミン（２５０３０−０２１）及びペニシリン（１００Ｕ／ｍＬ）、及びストレプトマイシン（５０ｍｇ／ｍＬ）（＃１５１４０−１２２）を添加した、ダルベッコ変法イーグル培地（＃４１９６５−０３９）中で成長させた。全ての製品は、ライフ・テクノロジーズ（英国、ペーズリー（Paisley））から購入した。細胞を加湿された８％のＣＯ２空気インキュベーター内でインキュベートした。
【０２６７】
動物：雌半接合体Ｔｇ２５７６マウス、並びに同齢の野性型マウスをこの研究では用いた。Ｔｇ２５７６マウスモデル（タコニック（Taconic））は、早発型ＡＤを有するスウェーデンの家族に由来するヒトＡＰＰの６９５アミノ酸イソ型をコードする導入遺伝子を有する。これらのマウスは高濃度の突然変異Ａｂを発現し、著しいアミロイド斑を発達させ、記憶欠損を示す。マウスをケージあたり４〜５匹飼育し、耳のタグで識別した。動物に、６月齢で始めて、１週間に１度、腹腔内に、ビヒクル（滅菌ＰＢＳ）又は２５ｍｇ／ｋｇの試験品を投与した。動物には、食料及び水を自由に与えた。
【０２６８】
サンプル回収：血液の回収は、６月齢及びそれぞれその後２ヶ月の試験期間に、後眼窩出血により行った。血漿を−８０℃で冷凍した。研究中の特定の時点で、並びに研究の終わりに、動物を人道的に屠殺した。脳を除去し、組織学的検査のために４％パラホルムアルデヒドで固定した。ビヒクル（ＰＢＳ）とＪＲＦ／ｈＡｂ１１／１抗体処理動物との間に組織学的な違いは見られなかった。
【０２６９】
ｂ−アミロイドの濃度の決定：ｂ−アミロイド１１〜４２をイムノアッセイにより測定した。ＮＵＮＣマクシソープ（NUNC Maxisorp）９６ウェルプレートを、２ｍｇ／ｍＬの抗ｂ−アミロイド１〜４２でコーティングし、次いでブロッキングした。洗浄後、生体サンプルを１時間添加し、次いで洗浄した。ビオチン化抗ｂ−アミロイドを次いで１時間添加した。洗浄後、ストレプトアビジン−ユーロピウム溶液を添加し、洗浄前に１時間インキュベートした。次いで、エンハンスメント溶液を各ウェルに添加し、プレートをＥｎＶｉｓｉｏｎプレートリーダーを用いて読み取った。Ａｂ１１〜４０又は１１〜４２の標準曲線を用いて、サンプル中のペプチドの量を決定した。
【０２７０】
行動試験
ホールボード試験：穏やかに絶食させたマウスを、ホールボード（１６のうち３つの穴に餌がついている）上の褒美の餌の位置を学習するよう訓練した。次いで、６月齢で始めて、２ヶ月に１度マウスを再試験した。エラー数とともに、３つ全ての褒美を見つけるための潜時（latency）を記録した。
【０２７１】
物体認識課題：マウスを、物体が全く存在しない試験箱に慣れさせた。獲得試行（acquisition trial）は、５分間マウスに２つの同一の物体を提示することからなっていた。続いて、元の物体のうち１つを新しい物体に置き換えた５分試験試行を行った。試験試行は、獲得試行の１、４、又は２４時間後に行った。各物体の探索に費やした時間を測定した。試験は６月齢で始めて、１ヶ月おきに繰り返した。
【０２７２】
Ｙ迷路試験：最初の訓練試行では、食事を制限したマウスに迷路のいずれかの腕部を選択させた。褒美の餌のある好ましい腕部に動物を２０秒間隔離することにより、選択を強化した。次の試行では、反対の腕部に食餌ペレットを置き、「正しい」選択肢とした。各動物を５日間、１日あたり５回試験した。正しい腕に入るまでの潜時及びエラー数を記録した。６月齢で試験を始め、１ヶ月おきに続けた。
【０２７３】
Ｔｇ２５７６実験動物又は野性型同腹子から採取した血漿サンプル中のｂ−アミロイド１１〜４０／４２の測定。マウスに１週間に１度腹腔内投与し、血漿サンプルを２ヶ月間隔で回収した。検出のためにビオチン化したＪＲＦ／ｈＡｂ１１／１を用いてＥＬＩＳＡによりペプチドの血漿濃度を決定した。１６月齢まではいずれの群でもペプチドは検出されなかったが、その後抗体処理群のみでＡｂ１１〜４０（左）及びＡｂ１１〜４２（右）の両方の濃度上昇が見られた。
【０２７４】
２０月齢のＴｇ２５７６実験動物又は野性型同腹子から採取した脳ホモジネートサンプル中のｂ−アミロイド１１〜４０／４２の測定。脳を、可溶性Ａｂ濃度を測定するためにジエチルアミン中で、不溶性（斑）Ａｂを測定するためにギ酸中でホモジナイズした。Ａｂ１１〜４０／４２ペプチドの濃度を、検出のためにビオチン化したＪＲＦ／ｈＡｂ１１／１を用いてＥＬＩＳＡにより決定した。ビヒクル対照と抗体処理群との間に差は見られなかった。
【０２７５】
ホールボード試験−６月齢で、抗体処理群のＴｇ２５７６動物は、課題を完了するまでの時間（潜時）がいくぶん改善された。１８月齢までに、正しい反応の数が改善するわずかな傾向がＪＲＦ／ｈＡｂ１１／１抗体処理動物で観察されたが、ビヒクル処理動物に対して統計的に有意ではなかった。
【０２７６】
新規物体認識試験−８月齢のＪＲＦ／ｈＡｂ１１／１処理Ｔｇ２５７６動物で、ビヒクル対照に対してわずかに改善が見られたが、試験した他の時点ではいずれも見られなかった。
【０２７７】
Ｙ迷路試験−ＪＲＦ／ｈＡｂ１１／１抗体で処理したＴｇ２５７６マウスにおいて、正しい選択、及び課題を完了するまでにかかる時間（潜時）に改善傾向が見られた。
【０２７８】
結論：
・ｂ−アミロイドペプチドのアミノ酸１１〜１６を認識する新規抗体、ＪＲＦ／ｈＡｂ１１／１（本発明のヒト抗体可変領域配列ＨＣ配列番号４８Ａ〜Ｉ及びＬＣ配列番号４９Ａ〜Ｍに対応する、ＣＮＴＯ２１２５又は配列番号４２〜４７と同じＣＤＲ配列を有するＣ７０６）が生成された。
・ＪＲＦ／ｈＡｂ１１／１は、アミノ酸１１（本発明のヒト抗体可変領域配列ＨＣ配列番号４８Ａ〜Ｉ及びＬＣ配列番号４９Ａ〜Ｍに対応する、ＣＮＴＯ２１２５又は配列番号４２〜４７と同じＣＤＲ配列を有するＣ７０６）で切頭されたペプチドに特異的であることが示された。
・この抗体で慢性的に処理したＴｇ２５７６マウスは、より老齢のマウスの血漿中でｂ−アミロイド１１〜４０／４２濃度の上昇を示したが、ＥＬＩＳＡ又は組織学的検査によって脳のＡｂ負荷に対する効果はなかった。
・興味深いことに、Ｔｇ２５７６マウスをＪＲＦ／ｈＡｂ１１／１（本発明のヒト抗体可変領域配列ＨＣ配列番号４８Ａ〜Ｉ及びＬＣ配列番号４９Ａ〜Ｍに対応する、ＣＮＴＯ２１２５又は配列番号４２〜４７と同じＣＤＲ配列を有するＣ７０６）で処理したとき、行動にいくつかのわずかな改善が見られた。
・より大量の抗体又はこのＡｂ断片に対してより親和性の高い抗体で処理すると、より大きな改善を示す場合がある。
【０２７９】
参考文献：
シャオ（Hsiao），Ｋ．、チャップマン（Chapman），Ｐ．、ニールセン（Nilsen），Ｓ．、エックマン（Eckman），Ｃ．、ハリガヤ（Harigaya），Ｙ．、ユンキン（Younkin），Ｓ．、ヤン（Yang），Ｆ．、及びコール（Cole），Ｇ．トランスジェニックマウスにおける相関的記憶障害、Ａｂ増加、及びアミロイドプラーク（Correlative memory deficits, Ab elevation, and amyloid plaques in transgenic mice）Ｓｃｉｅｎｃｅ（１９９６年）２７４巻、９９〜１０２頁
コーラー（Kohler），Ｇ．、ハウ（Howe），Ｓ．Ｃ．、ミルスタイン（Milstein），Ｃ．免疫グロブリン分泌及び非分泌骨髄腫細胞株間の融合（Fusion between immunoglobulin-secreting and non-secreting myeloma cell lines）Ｅｕｒ  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ（１９７６年）６巻、２９２〜２９５頁
【０２８０】
リュウ（Liu），Ｋ．、ソラノ（Solano），Ｉ．、マン（Mann），Ｄ．、レメール（Lemere），Ｃ．、メルケン（Mercken），Ｍ．、トロジャノスキー（Trojanowski），Ｊ．、及びリー（Lee），Ｖ．Ｍ．−Ｙ．アルツハイマー病（ＡＤ）及び若年性ダウン症候群の脳におけるＡｂ１１〜４０／４２ペプチド蓄積の特徴付け：ＡＤの発症におけるＮ−末端が切頭されたＡｂ種の関連（Characterization of Ab11-40/42 Peptide Deposition in Alzheimer's Disease （AD） and Young Down Syndrome Brains: Implication of N-terminally Truncated Ab Species in the Pathogenesis of AD）（投稿中）
【０２８１】
エルモーデン（El-Mouedden），Ｍ．、バンデルミーレン（Vandermeeren），Ｍ．、ミート（Meert），Ｔ．、及びメルケン（Mercken），Ｍ．アミノ末端が切頭されたベータアミロイドペプチドの定量的研究のための特異的ＥＬＩＳＡの開発（Development of a specific ELISA for the quantitative study of amino-terminally truncated beta-amyloid peptides）Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｍｅｔｈｏｄｓ（２００５年）１４５巻、９７〜１０５頁
【０２８２】
カワラバヤシ（Kawarabayashi），Ｔ．、ユンキン（Younkin），Ｌ．Ｈ．、サイドー（Saido），Ｔ．、ショージ（Shoji），Ｍ．、アッシェ（Ashe），Ｋ．Ｈ．、及びユンキン（Younkin），Ｓ．Ｇ．アルツハイマー病のＴｇ２５７６トランスジェニックマウスモデルにおける、脳の年齢依存的変化、ＣＳＦ、及び血漿アミロイドｂタンパク質（Age-Dependent Changes in Brain, CSF, and Plasma Amyloid b Protein in the Tg2576 Transgenic Mouse Model of Alzheimer's Disease）Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ、２１（２）、３７２〜３８１頁
【０２８３】
以上の記述及び実施例中で特に記されたものとは別な形で本発明を実施できることは明白であろう。
【０２８４】
以上の教示に照らして、本発明の数多くの修正及び変形形態が可能であり、したがってこれらは、添付の特許請求の範囲内に入るものである。
【０２８５】
【表４】
2011500059.tif 000005
【０２８６】
【表５】
2011500059.tif 000006
【配列表】
2011500059000001.app