(57)【要約】  放射性医薬製剤を含む、疾患を診断およびステージ分類するため、薬物の治療効果をモニターするため、および患者を画像診断するための方法および組成物が提供される。放射性同位体と錯体形成したＧａ−ＡＭＢＡを含む組成物；ならびにガストリン放出ペプチド受容体（ＧＲＰ−Ｒ）担持組織の画像診断方法および異常ＧＲＰ−Ｒ機能と関連する疾患の疑いがある患者における疾患の診断またはステージ分類方法が提供される。また、ＧＲＰ−Ｒとクロストークする受容体を標的とする薬物の治療効果をモニターする方法；ならびにＧＲＰ−Ｒを含有する非標的組織に前投与／同時投与する方法が提供される。特に、ＧＲＰ−Ｒと結合するリガントを使用することによりインビボ／インビトロでの受容体の活性および受容体経路をモニターする方法；ならびに外部手段によっても検出可能なリガンドを使用することにより受容体または受容体群の活性およびＧＲＰ−Ｒとのクロストークを示すそれらの関連経路を測定する方法が提供される。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｇａの放射性同位体と錯体形成した、式：
【化１】
2011520971.tif 000105
で示されるＬ７０を含む組成物。
【請求項２】
放射性同位体が68Ｇａである、請求項２記載の組成物。
【請求項３】
請求項１記載の組成物、バッファーおよびセレノメチオニンを含む、放射性医薬製剤。
【請求項４】
バッファーが酢酸ナトリウムを含む、請求項３記載の放射性医薬製剤。
【請求項５】
さらにアスコルビン酸、ＥＤＴＡおよび生理食塩水を含む、請求項３または４いずれか１項放射性医薬製剤。
【請求項６】
患者におけるＧＲＰ−Ｒ担持組織の画像診断方法であって、
ａ）請求項１、３または３いずれか１項記載の組成物を患者に投与する工程；および
ｂ）患者を画像診断する工程
を含む、方法。
【請求項７】
ＰＥＴを使用して患者を画像診断する、請求項６記載の画像診断方法。
【請求項８】
異常ＧＲＰ−Ｒ機能に関連する疾患の疑いがある患者の疾患の診断またはステージ分類方法であって、
ａ）請求項１、３または３いずれか１項記載の組成物を患者に投与する工程；および
ｂ）患者を画像診断する工程
を含む、方法。
【請求項９】
ＰＥＴを使用して患者を画像診断する、請求項８記載の疾患の診断またはステージ分類方法。
【請求項１０】
工程ａ）において放射性標識組成物を投与する前に、さらにリンカーおよび／またはキレート剤と結合していてもよい第２のＧＲＰ受容体標的ペプチドを投与して非標的組織におけるＧＲＰ受容体結合部位を占有することを含む、請求項６または８いずれか１項記載の方法。
【請求項１１】
工程ａ）において、さらに
ａ）非標的組織におけるＧＲＰ受容体結合部位を占有するためのリンカーおよび／またはキレート剤と結合していてもよい第１のＧＲＰ受容体標的ペプチド；および
ｂ）放射性標識組成物
の組み合わせを投与することを含む、請求項６または８いずれか１項記載の方法。
【請求項１２】
ＧＲＰ−Ｒとクロストークする受容体を標的とする薬物の治療効果をモニターする方法であって、
ａ）一般式：
Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇ
［式中、
Ｍは、金属放射線核種と錯体形成した金属キレート剤、または、18Ｆ−、123Ｉ−、124Ｉ−もしくは131Ｉ−のような放射性標識ハロゲンを含有する基であり；
Ｎは、存在しないか、またはαアミノ酸、環状基を有する非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｏは、αアミノ酸または環状基を有する非αアミノ酸であり；
Ｐは、存在しないか、またはαアミノ酸、環状基を有する非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｇは、ＧＲＰ受容体標的ペプチドであり、
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは環状基を有する非αアミノ酸である］
で示される化合物を含む組成物を患者に投与すること
ｂ）患者を画像診断すること；
ｃ）画像に基づいてＧＲＰ−Ｒの活性を評価すること；
ｄ）ＧＲＰ−Ｒとクロストークする受容体を標的とする薬物を患者に投与する工程；
ｅ）一般式：
Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇ
［式中、
Ｍは、金属放射線核種と錯体形成した金属キレート剤、または、18Ｆ−、123Ｉ−、124Ｉ−もしくは131Ｉ−のような放射性標識ハロゲンを含有する基であり；
Ｎは、０、αアミノ酸、環状基を有する非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｏは、αアミノ酸または環状基を有する非αアミノ酸であり；
Ｐは、０、αアミノ酸、環状基を有する非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｇは、ＧＲＰ受容体標的ペプチドであり、
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは環状基を有する非αアミノ酸である］
を有する化合物を含む組成物を患者に投与すること；
ｆ）患者を画像診断すること；
ｇ）画像に基づいてＧＲＰ−Ｒの活性を評価すること；
ｈ）薬物の投与後にＧＲＰ−Ｒ活性の変化を評価すること；および
ｉ）ＧＲＰ−Ｒ活性の変化に基づいて薬物の治療効果を評価すること
を含む、方法。
【請求項１３】
さらに評価された薬物の治療効果に基づいて治療方針を変更することを含む、請求項１２記載の方法。
【請求項１４】
工程ａ）〜ｃ）を工程ｄ）の約３０日前に行う、請求項１２記載の方法。
【請求項１５】
工程ａ）〜ｃ）を工程ｄ）の約１５日前に行う、請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
工程ａ）〜c）を工程ｄ）の約７日前に行う、請求項１５記載の方法。
【請求項１７】
工程ｅ）〜ｉ）を工程ｄ）の約１５日前に行う、請求項１２記載の方法。
【請求項１８】
工程ｅ）〜ｉ）を工程ｄ）の約７日前に行う、請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
方法を、治療工程の間じゅう数回繰り返す、請求項１２記載の方法。
【請求項２０】
ＧＲＰ−Ｒとクロストークする受容体がエストロゲン受容体および受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）からなる群から選択される、請求項１２記載の方法。
【請求項２１】
ＲＴＫが、ＥＧＦＲ、Ｓｒｃファミリー、ＨＥＲ２／ＥｒｂＢ３、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ＳＣＦ、ＫＩＴ、ＰＤＧＦ、ＶＥＧＦ−Ｒ1,２,３、ＦＬＴ３、Ｒａｓ、Ｒａｆ、ＣＳＦ−１ＲおよびＲＥＴからなる群から選択される、請求項２０記載の方法。
【請求項２２】
薬物が、エキセメスタン、ラパチニブ、ダサチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ、エルロチニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、アナストロゾール、ボルテゾミブ、タモキシフェンおよびβ２−エストラジオールからなる群から選択される、請求項１２記載の方法。
【請求項２３】
式Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇで示される化合物が、診断用放射線核種と錯体形成した、式
【化２】
2011520971.tif 000106
で示されるＬ７０である、請求項１２記載の方法。
【請求項２４】
Ｌ７０が、ＰＥＴによって検出され得る放射線核種と錯体形成した、請求項２３記載の方法。
【請求項２５】
Ｌ７０が、ＳＰＥＣＴによって検出され得る放射線核種と錯体形成した、請求項２３記載の方法。
【請求項２６】
Ｌ７０が68Ｇａと錯体形成した、請求項２４記載の方法。
【請求項２７】
組成物がさらにバッファーおよびセレノメチオニンを含む、請求項２３または２６いずれか１項記載の方法。
【請求項２８】
バッファーが酢酸ナトリウムを含む、請求項２７記載の方法。
【請求項２９】
組成物がさらにアスコルビン酸、ＥＤＴＡおよび生理食塩水を含む、請求項２７記載の方法。
【請求項３０】
ＰＥＴを使用して患者を画像診断する、請求項１２記載の方法。
【請求項３１】
ＳＰＥＣＴを使用して患者を画像診断する、請求項１２記載の方法。
【請求項３２】
さらに、リンカーおよび／またはキレート剤と結合していてもよい第２のＧＲＰ受容体標的ペプチドを投与して、工程ａ）もしくはｅ）においてまたは工程ａ）およびｅ）において組成物を投与する前に非標的組織におけるＧＲＰ受容体結合部位を占有するためにことを含む、請求項１２記載の方法。
【請求項３３】
さらに、工程ａ）もしくはｅ）において、または工程ａ）およびｅ）において、
ａ）非標的組織におけるＧＲＰ受容体結合部位を占有するためのリンカーおよび／またはキレート剤と結合していてもよい第１のＧＲＰ受容体標的ペプチド；および
ｂ）放射性標識組成物
の組み合わせを投与することを含む、請求項１２記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、以下の出願の各々の利益を主張し、これらの出願を出典明示によりその全体として本明細書の一部に取込む：２００８年２月１９日出願の米国特許出願番号第61/054,335号；２００３年１月１３日出願の米国特許出願第１０／３４１，５７７号の一部継続出願である２００３年１２月２４日出願の国際出願ＰＣＴ／ＵＳ２００３／０４１３２８の一部継続出願である２００４年４月２０日出願の米国特許出願第１０／８２８，９２５号である２００５年６月２４日出願の米国特許出願第１１／１６５，７２１号の一部継続出願である２００６年２月１０日出願の米国特許出願第１１／３５２，１５６号。上記出願は全て出典明示によりその全体として本明細書の一部を構成する。
【０００２】
発明の分野
本発明は、診断用造影剤または放射線治療薬として有用な新規ガストリン放出ペプチド（ＧＲＰ）化合物に関する。これらのＧＲＰ化合物は、放射線核種またはインビボでの光イメージングによって検出可能な標識で標識されており、改善された薬物動態をもたらす標識と標的ペプチドとの間での新規リンカーの使用を含む。
【０００３】
本発明は、また、ガストリン放出ペプチド（ＧＲＰ）受容体に結合するリガンドを使用することによってＧＲＰ受容体に対するそれらの効果を観察することによってインビボおよびインビトロで特異的受容体および受容体経路を標的とする薬物の活性をモニターする手段を記載する。さらに詳しくは、本発明は、ＧＲＰ受容体に結合し、いくつかの外部手段によって検出され得るリガンドの使用によってＧＲＰ受容体とのクロストークを示す受容体または一群の受容体およびそれらの関連経路の活性を測定する手段を提供する。かかる手段としては、放射線核種造影、光学造影、またはインビボまたはインビトロでリガンドの分布を造影する他の方法が挙げられる。
【背景技術】
【０００４】
癌の検出および治療のための放射性医薬品（例えば、検出用造影剤、放射線治療薬）の使用はよく知られている。近年では、癌検出および／または治療のための部位特異的放射性医薬品の発見が好評を得てきており、医療専門家がこのような化合物の特異性、有効性および利用性を良く評価するので、増え続けている。
【０００５】
細胞または細胞を取り巻くマトリックスにおける特異的な受容体または経路と相互作用するために薬物が投与される標的療法は、特に癌の分野で、近年、進歩している。標的療法は、所定の病態が細胞レベルで１つのまたは限られた数のメカニズムによって駆動されるという考えから始まるが、明らかに、耐性の発生は、おそらく不均一性および／またはゲノム不安定性によって駆動される適応性の顕在化である。標的が存在しているにもかかわらず標的薬物がないことの考えられる理由の１つは、標的システムが混乱させられる場合に細胞が使用しているかまたは使用することができて、細胞を破壊（細胞死）から逃れさせ、機能および生存を継続させる代替システムがあるということである。
【０００６】
この数年間、新しいオンコロジー薬の約６５％は、ＦＤＡによって承認されたそれらの標識化において、標的と相互作用する薬物の投与前に患者における標的の実証が義務付けられている。幾人かの劇的な成功にもかかわらず、全体的な結果はいまひとつであった。例えば、ＨＥＲ２／ｎｅｕ（ＥＲＢＢ２；ＥＧＦＲ２；上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）ファミリーのメンバー）を標的とするＨｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）で処置した乳癌では、全体で９％の応答がある（３０％がＨＥＲ２／ｎｅｕを有し、処置した３０％が応答する）。転移性結腸癌に関しては、ＥＧＦＲを標的とするＥｒｂｉｔｕｘは１１〜１４％が応答しＶＥＧＦＲを標的とするＡｖａｓｔｉｎ（登録商標）は１０％が応答する。この可変性の１つの原因は、同一患者における一次転移内および異なる転移間の表現型および遺伝子型における既知の不均一性である。
【０００７】
癌細胞は遺伝学的に不安定であることが知られているので、この不均一性は、腫瘍塊の発生直後に存在し得るか、腫瘍細胞が体内で経験する特定の環境に起因する表現型の変化として生じ得るか、または、前処置の効果のために生じ得る。
【０００８】
遺伝子型または表現型を決定する方法はほとんど、生検標本または血液試料のいずれかを採取することを含む。生検は、腫瘍内でのサンプリングエラーの傾向があり、また、方法の侵襲性のために一の患者における同一腫瘍からまたは体内の多数の腫瘍部位のうちの同一腫瘍から容易に採取することができないというさらなる制限を受ける。加えて、骨のような生検試料の採取が困難な組織がいくつかある。このことは、骨に転移する乳癌および前立腺癌に特に関連する。血液または尿のような多くの液体試料を採取するのは容易であるが、これらは、それらが全身のための平均シグナルだけをもたらすという欠点をもつ。体の全組織を一度に調べることができ、多くの場合に使用され得る画像検査法は好ましい。
【０００９】
固体試料は、通常、１つまたは多くても少数の関心のある標的について調べられるが、一方、液体試料は、例えば遺伝子チップまたはプロテオミクスチップアッセイによって、多数の分析物について調べられ得る。単一の物質の投与および画像化は多重アレイよりも劣るかもしれないと思われ得るが、一方、適当な物質の使用によって、標的だけではなく標的システムを形成する様々な調節経路およびシグナル伝達経路の照合が可能になることに注目すべきである。
【００１０】
多くが標的を有するにもかかわらず低い割合の患者において有効な標的薬物の使用は、より良い治療が開始されるまでに浪費した時間において、および、利益を伴わない毒性作用の可能性のために、応答しないこれらの患者にとって有害である。たとえば、２００７年のいくつかの標的薬物の世界全体の販売高は１〜３０億ドルの範囲であると予想される。第１四半期販売高に基づく（×４）２００７年のいくつかのオンコロジー薬の販売高は、Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）が１９億ドル、Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標）が２４億ドル、Ｒｉｔｕｘａｎ（登録商標）が２３億ドル、Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標）が１２億ドルである。この物質の大半が応答しない患者に使用されるとするならば、それは莫大な経済的負担であり、応答しない患者における損失時間または起こり得る有害事象において害をもたらす。現在、固形腫瘍は、生存増加の代用としてＷＨＯまたはＲＥＣＩＳＴ基準のような形態学的基準を使用して測定される。しかしながら、このような形態学的応答は、最適な処置および応答を伴う最良の環境下でさえ処置開始後に観察可能となるまでかなりの時間がかかり、その間、最終的に非応答である者の不適切な処置が続く可能性がある。
【００１１】
受容体、細胞または細胞群の応答をさらに特徴付ける手段が必要である。近年、形態学的応答が検出可能になる前または腫瘍の形態の予測される変化がない場合に生化学的レベルで腫瘍応答を特徴付けるために画像を使用することが増えてきた。
【００１２】
このような生化学的画像化を行う最も一般的な方法は、解糖経路の一部（例えば、グルコース代謝）を報告するＦ−１８フルオロデオキシグルコースを使用することである。いくつかの期待できる結果が得られたが、その取り込みは、腫瘍に伴ってまたは腫瘍とは無関係に生じ得、腫瘍解糖と無関係に増減し得る炎症の領域を増大させるので、特異性が低下する。実際に、解糖は、ほとんどの正常組織によるエネルギー生産の主形態でもある。かくして、正常組織は、腫瘍組織によりもたらされるシグナルの単離を困難にし得るバックグラウンドの増加を示し得る。加えて、炎症の領域は、また、乳癌のようないくつかの炎症性癌に関連する特定の問題であるグルコース消費の増加を示す。炎症は癌と混同され得る。さらに、腫瘍の処置に対する正常な応答として誘発される炎症は、腫瘍解糖の増加として、かくして、処置の失敗として誤解釈され得る。加えて、解糖は、ほとんどの細胞において基本的な系の１つであり、ほとんどの薬物標的のかなり下流にある。最後に、ＦＤＧは、その利用性を制限し得るサイクロトロンで製造される。
【００１３】
細胞増殖を測定するためにＦ−１８フルオロチミジンを使用する方法および脂質代謝回転の側面を測定するためにＦ−１８フルオロコリンを使用する方法の一般的な性質を有する２つの方法がある。これらの技術は、各々、極めて敏感であるが、各々が正常細胞によっても使用される代謝のいくつかの側面を測定するので、それらは、特異性が低下する。
【００１４】
必要なものは、薬物の標的により近い、基底レベルのエネルギー生産の下流にある標的に対する薬物の効果の指標となる薬剤である。理想的には、必要なものは、様々な薬物／標的相互作用の効果に対する感受性を示す様座菜経路におけるポイントからの情報を与える薬剤である。
【００１５】
１つの方法は、問題になっている標的を直接測定することである。たとえば、Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）は放射性標識されており、Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）による処置の前および後に患者における分布が測定される。その結果は、心筋取り込み量に基づいて心毒性を予測することが可能ではないこと、既知の腫瘍のいくつかが可視化されただけであること、およびさらなる腫瘍が同定され得ることを示す。処置に対する応答の予測は試みられなかった。他方、動物系における処置に対する応答は、Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）の放射性標識Ｆ(ａｂ')2フラグメントを使用して示された。
【００１６】
ＥＧＦＲファミリーの別のメンバーについてのインビトロ試験において、ＥＧＦＲは、ＥＧＦＲ標的療法のために患者を選択するために多くの臨床試験において用いられており、Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標）による処置のための患者の選択のためにＦＤＡにより義務付けられている。応答のプレディクターとしてのその有用性はまだ明らかではない。ほとんどのＥＧＦＲ研究から、どのサブセットの患者がＥＧＦＲ標的薬剤から最も多くの利益を引き出すことができるかを示すデータは得られていない。ＥＧＦＲは、幅広い種類の悪性腫瘍において様々な程度に過剰発現される。ＥＧＦＲ発現および変異についての多くの新しい試験が開発中であり、ＥＧＦＲ標的療法のための患者選択の決定におけるそれらの役割を解明するために多数の臨床試験が進行中である。
【００１７】
ＥＧＦＲ発現は、この標的を発現している癌を処置するために使用される抗体（Ｃｅｔｕｘｉｍａｂ（登録商標）／Ｃ２２５）の放射性標識誘導体および既知のリガンド、ＥＧＦ、または小分子阻害物質を用いてインビボで試験された。いくつかの場合には腫瘍組織における放射能の取り込みと独立した手段によって測定されるＥＧＦＲ存在との間に良好な相関関係があったが、応答を予測する試みは行われなかった。実際に、特異性を立証するためのブロッキング研究（薬物による）は、標的治療薬の動物への投与が標的による画像化リガンドの取り込みをブロックしたという点で、治療に関与した標的を画像化するために標的のためのリガンドを使用する一般的な問題をはっきりとさせる。これにより、標的の占有と応答の間に単一の直接的な関係がない限り、応答との関連性がないシグナルを減少させるかまたはなくすことができる。これがそうではないかもしれないことは、標的の存在が知られているにもかかわらず患者の応答が低いことからはっきり分かる。
【００１８】
各受容体または標的に対して特異的なリガンドの使用に対する別の欠点は、臨床試験においてより多く標的との日常的使用が既に承認されている様々な標的に対する多くの標的薬物があることである。必要なリガンドの数が巨大になる可能性があることは、開発および承認過程に重い負担をかけるであろう。加えて、小サブセットの患者においてのみであるが各々が良好な応答を有する多くの標的薬物が存在し得るならば、再度、１標的１造影剤シナリオの下に、応答の可能性を評価するために複数の手順を必要とするであろう様々な組み合わせが有益であり得ると予想することができる。
【００１９】
最後に、標的の多くに変異が存在することが知られていることは、標的の存在が不十分であり、機能の遮断の知識が必要とされることを示唆している。
【００２０】
かくして、標的の機能に対する標的薬物の活性を決定するより一般的な方法、好ましくは、２以上の標的の活性／薬物相互作用について報告することができる手段および正常組織の最小干渉を示している病態に特異的な手段の開発が必要とされている。
【００２１】
標的薬によって取り組まれている受容体の多くが「クロストーク」を示すことが知られている。「クロストーク」とは、１つの受容体の活性の調節が直接結合されていない他の受容体の発現レベルまたは活性に影響を及ぼす状況をいう。このようなクロストークは、同族のリガンドが結合する場合に二量体を形成する密接に関連するチロシンキナーゼＥＧＦＲおよびＨＥＲ２の相互作用によって特徴付けられるタイプのものではないが、異なるクラスの受容体が細胞内経路または細胞外経路を介して相互作用するタイプのものである。例えば、ソマトスタチン受容体の発現レベルはエストロゲン受容体の占有および活性によって調節され得ることが知られている。この場合、ソマトスタチン受容体は、外部細胞膜上に通常存在しているＧタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）であり、ここからシグナル開始が生じ、エストロゲン受容体は、通常、核に近接して存在し、核内に活性を有する。エストロゲンは、活性後にホルモン−応答遺伝子の転写および発現を増加させる核内ホルモン受容体を介して作用する。
【００２２】
この研究は、エストロゲンへの暴露がアンタゴニストまたは部分アゴニストによって遮断された後に、エストロゲン受容体およびソマトスタチン受容体の両方を有する２つのヒト乳癌細胞株について放射性標識ソマトスタチン受容体バインダーの細胞１個当たりの結合の増加を示す。ソマトスタチン受容体を有するがエストロゲン受容体を有しない細胞株においては同様の増加は生じなかった。３人の乳癌患者を、抗エストロゲン治療の開始前および開始直後に試験した。結果を、一人の患者における腫瘍取り込みのある程度の減少と合わせた。
【００２３】
承認薬の多くはＧＰＣＲを標的とするが、近年、受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）を標的とする薬物がより一般的になってきており、新しい癌薬の多くがＲＴＫを標的とする。例えば、クロストークを示すことが知られているＲＴＫの部分リストおよびそれらの作用を阻害するための承認薬のいくつかを以下に示す。
【表１】
2011520971.tif 000003
それらの作用様式に起因して、ＲＴＫを標的とする薬物がＧＰＣＲに対する直接作用を有することは予想されない。
【００２４】
ＧＲＰ受容体ファミリーは、脳の外側の正常な成体組織に広く分布されておらず、様々な他の受容体とのクロストークを示すことが知られている受容体の一群である。配列類似性によって同定される４つ目の両生類受容体に加えて、ヒトにおけるこの受容体の３つの既知のサブタイプ、ＢＢ１（ＮＭＢＲ）、ＢＢ２（ＧＲＰＲ）およびｂｂ３（ＢＲＳ−３）がある。ＧＲＰ受容体ファミリーと多くのＲＴＫとの間のクロストークは、独立して立証されている。例えば、ＧＲＰは、ＴＮＦ−α変換酵素の刺激およびＥＧＦＲに対する前駆リガンドの１つであるアンフィレギュリンの放出によりＥＧＦＲの活性化を増加させることが示されている。
【００２５】
これらの例および多くの他の例において、クロストークはＧＲＰＲからＲＴＫ（例えば、ＥＧＦＲ）の方向であり、すなわち、ＧＲＰＲアゴニスト／アンタゴニストはＥＧＦＲシグナル伝達の活性化／非活性化を引き起こす。インビボ画像化によって検出可能であり得るＧＲＰ受容体特異的シグナルの発現を増加または減少させ得る、ＲＴＫからＧＲＰＲへの反対方向のクロストークを立証する入手可能なデータはない。
【００２６】
ＧＲＰ−受容体標的放射性医薬品
最近、癌組織に局在化させるように設計された標的放射性医薬品がいくつか報告されている。これらの新しい放射性医薬品は、典型的には、例えばテクネチウム、インジウムもしくはガリウムのような診断用金属放射線核種または例えばルテチウム、イットリウムもしくはレニウムのような治療用金属放射線核種とキレート化され得る（例えば、錯体を形成することができる）金属キレート剤と結合している標的薬剤からなる。金属キレート剤の役割は、放射性医薬品が所望の部位に送達されるように金属放射線核種を保持すること（すなわち、キレート化すること）である。金属放射線核種と強く結合していない金属キレート剤は、結果的に該金属放射線核種がその所望の部位に到達しないので、放射性医薬品をその所望の使用に無効にする。かくして、さらなる研究開発によって、金属放射線核種に対する強い結合親和性および標的薬剤とのコンジュゲート能を示した、Pollakらの特許文献１およびTweedleらの特許文献２に報告されているもの（出典明示により本明細書の一部を構成する）のような金属キレート剤が発見された。その後、例えばPollakらの特許文献３（出典明示により本明細書の一部を構成する）において、金属キレート剤と標的薬剤との間に物理的な分離を生じさせるために「スペーサー」を使用するという概念がさらに導入された。
【００２７】
標的薬剤の役割は、体内の特定の結合部位に対するその親和性によって、金属放射線核種を含有する放射性医薬品のような診断薬を検出または処置のために所望の部位に向けることである。典型的には、標的薬剤としては、所定の受容体に対して特異的な親和性を示すタンパク質、ペプチド、または他の巨大分子もしくは小分子を挙げることができる。他の既知の標的薬剤としては、モノクローナル抗体（ＭＡｂ）、抗体フラグメント（Ｆabおよび(Ｆab)2）、および受容体−ａｖｉｄペプチドが挙げられる。非特許文献１および非特許文献２。これらの参考文献は、出典明示によりその全体として本明細書の一部を構成する。
【００２８】
近年、いくつかの癌細胞が、多くのサブタイプが存在するガストリン放出ペプチド（ＧＲＰ）受容体（ＧＲＰ−Ｒ）を含有することが知られてきた。特に、癌細胞のいくつかのタイプは、過剰発現されたかまたは独特に発現されたＧＲＰ受容体を有することが示された。このため、ＧＲＰ受容体ファミリーと結合するＧＲＰおよびＧＲＰアナログに対して多くの調査研究が行われてきた。１つのこのようなアナログは、ヒトＧＲＰのアナログであり、高特異性およびＧＲＰと類似の親和性をもってＧＲＰ受容体と結合する、カエルの皮膚から単離された１４アミノ酸ペプチド（すなわち、テトラデカペプチド）であるボンベシン（ＢＢＮ）である。
【００２９】
ボンペシンおよびＧＲＰアナログは、アゴニストまたはアンタゴニストの形態を取り得る。ＧＲＰまたはＢＢＮアゴニストのＧＲＰ受容体への結合は、これらの癌細胞の細胞分裂速度を増大させ、このようなアゴニストは、細胞によって内部移行され、一方、ＧＲＰまたはＢＢＮアンタゴニストの結合は、一般的に、細胞による内部移行または細胞分裂の速度の増大を引き起こさない。このようなアンタゴニストは、ＧＲＰ受容体への内在性ＧＲＰ結合を競合的に阻害し、癌細胞増殖速度を低下させるように設計させる。例えば、非特許文献３を参照。このため、多くの研究が存在しており、アンタゴニストであるＢＢＮまたはＧＲＰアナログを開発するために進められている。例えば、非特許文献４。
【００３０】
癌の診断薬または治療薬としての使用のための有効な化合物を設計する際に、該薬剤が適当なインビボ標的特性および薬物動態学的特性を有することが重要である。例えば、放射性医薬品については、放射性標識ペプチドは癌細胞による（例えば、ＧＲＰ受容体を介する）高い特異的取り込みを有することが好ましい。加えて、放射線核種が癌部位で局在化すると、画像化を可能にするためか、または、治療目的のためには該部位に高度に局在化した放射線量を送達するために、所望の時間、そこに留まっていることが好ましい。
【００３１】
さらにまた、正常組織から効果的に取り出される放射性標識ペプチドを開発することもまた、放射性医薬品に重要な要因である。金属放射線核種で（キレート抱合を介して）標識された生体分子（例えば、ＭＡｂ、Ｆabまたはペプチド）は、ヒトのような動物に投与され、金属放射線核種（化学的形態）の大部分は、腎実質または肝実質において「トラップ」され得る（尿または胆汁中に分泌されない）。非特許文献５。小さい放射性標識生体分子（すなわち、ペプチドまたはＦab）について、活性のクリアランスの主要経路は、高レベル（すなわち、通常、＞１０〜１５％の注射投与量）の放射性金属を保持することもできる腎臓を介するものである。腎臓または肝臓における金属放射線核種の保持は、明らかに望ましくない。反対に、急速過ぎる腎臓による放射性医薬品の血液流からのクリアランスも、診断用画像化のための長いインプットまたは放射線療法のための高い腫瘍取り込み量が必要ならば望ましくない。
【００３２】
Hoffmanらの特許文献４および特許文献５（出典明示によりその全体として本明細書の一部を構成する）における研究のようなその後の研究は、一般式Ｘ−Ｙ−Ｂ（式中、Ｘは、金属複合化能を有する基であり、Ｙは、スペーサー基上の共有結合であり、Ｂは、ボンベシンアゴニスト結合基である）を有する化合物を形成することによってこの問題を克服することを試みた。このような化合物は、ＧＲＰ受容体への高結合親和性を有することが報告されており、該放射能は、長時間、細胞の内部に保持された。加えて、正常なマウスにおけるインビボ研究は、腎臓における放射性金属の保持が当該技術分野で知られているものよりも低く、大部分の放射能が尿中に分泌されることを示している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００３３】
【特許文献１】米国特許第５,６６２,８８５号明細書
【特許文献２】米国特許第６,１３,２７４号明細書
【特許文献３】米国特許第５,９７６,４９５号明細書
【特許文献４】米国特許第６,２００,５４６号明細書
【特許文献５】米国特許出願公開第２００２／００５４８５５号明細書
【非特許文献】
【００３４】
【非特許文献１】Donald J. Buchsbaum, “Cancer Therapy with Radiolabeled Antibodies; Pharmacokinetics of Antibodies and Their Radiolabels; Experimental Radioimmunotherapy and Methods to Increase Therapeutic Efficacy,” CRC Press, Boca Raton, Chapter 10, pp. 115-140, (1995)
【非特許文献２】Fischman, et al. “A Ticket to Ride: Peptide Radiopharmaceuticals,” The Journal of Nuclear Medicine, vol. 34, No. 12, (Dec. 1993)
【非特許文献３】Hoffken, K.; Peptides in Oncology II, Somatostatin Analogues and Bombesin Antagonists (1993), pp. 87-112
【非特許文献４】Davis et al., Metabolic Stability and Tumor Inhibition of Bombesin/GPR Receptor Antagonists, Peptides, vol. 13, pp. 401-407, 1992
【非特許文献５】Duncan et al.; Indium-111-Diethylenetriaminepentaacetic Acid-Octreotide Is Delivered in Vivo to Pancreatic, Tumor Cell, Renal, and Hepatocyte Lysosomes, Cancer Research 57, pp. 659-671, (Feb. 15, 1997)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００３５】
向上した特異性をもってＧＲＰ−Ｒおよびそのサブタイプを標的とすることができ、診断用分子（例えば、検出可能な標識）および／または治療用分子を送達するのに有用な化合物が依然として必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００３６】
本発明の実施態様では、診断用画像化または放射線療法において用いるための新規の改善された化合物が提供される。該化合物は、リンカーまたはスペーサー基によってＧＲＰ受容体標的ペプチドに結合している医学的に有用な金属イオンまたは放射線核種（金属キレート剤）と錯体形成する能力を有する化学基を含む。別の実施態様では、これらの化合物は、リンカーまたはスペーサー基によってＧＲＰ受容体標識ペプチドに結合している光学的標識（例えば、光標識、または光イメージング、光音響イメージングもしくは光ルミネッセンスにより検出可能な他の標識）を含む。
【００３７】
一般的に、本発明の化合物は、式：
Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇ
［式中、Ｍは、金属キレート剤（金属放射線核種と錯体形成されているかまたはされていない形態）、または18Ｆ、123Ｉ−、124Ｉ−もしくは131Ｉ−のような放射性標識ハロゲンまたは光学的標識を含有する基であり、Ｎ−Ｏ−Ｐはリンカーであり、Ｇは、ＧＲＰ受容体標的ペプチドである］
を有し得る。
【００３８】
金属キレート剤Ｍは、医学的に有用な金属イオンまたは放射線核種と錯体を形成する技術分野で知られている金属キレート剤のいずれかであり得る。好ましいキレート剤としては、ＤＴＰＡ、ＤＯＴＡ、ＤＯ３Ａ、ＨＰ−ＤＯ３Ａ、ＥＤＴＡ、ＴＥＴＡ、ＥＨＰＧ、ＨＢＥＤ、ＮＯＴＡ、ＤＯＴＭＡ、ＴＥＴＭＡ、ＰＤＴＡ、ＴＴＨＡ、ＬＩＣＡＭ、ＭＥＣＡＭ、Ａａｚｔａおよびそれらの誘導体、または本明細書に記載されているもののようなペプチドキレート剤が挙げられる。金属キレート剤は、金属放射線核種と錯体を形成してもしなくてもよく、単一のアミノ酸のような任意のスペーサーを含んでもよい。
【００３９】
放射性イメージングまたは放射線療法のための好ましい金属放射線核種としては、99mＴｃ、51Ｃｒ、67Ｇａ、68Ｇａ、47Ｓｃ、51Ｃｒ、167Ｔｍ、141Ｃｅ、111Ｉｎ、168Ｙｂ、175Ｙｂ、140Ｌａ、90Ｙ、88Ｙ、153Ｓｍ、166Ｈｏ、165Ｄｙ、166Ｄｙ、62Ｃｕ、64Ｃｕ、67Ｃｕ、97Ｒｕ、103Ｒｕ、186Ｒｅ、188Ｒｅ、203Ｐｂ、211Ｂｉ、212Ｂｉ、213Ｂｉ、214Ｂｉ、225Ａｃ、105Ｒｈ、109Ｐｄ、117mＳｎ、149Ｐｍ、161Ｔｂ、177Ｌｕ、198Ａｕおよび199Ａｕが挙げられる。金属の選択は、所望の治療用途または診断用途に基づいて決定される。例えば、診断目的のためには、好ましい放射線核種としては、64Ｃｕ、67Ｇａ、68Ｇａ、99mＴｃおよび111Ｉｎが挙げられ、99mＴｃ、111Ｉｎおよび68Ｇａが特に好ましい。治療目的のためには、好ましい放射線核種としては、64Ｃｕ、90Ｙ、105Ｒｈ、111Ｉｎ、117mＳｎ、149Ｐｍ、153Ｓｍ、161Ｔｂ、166Ｄｙ、166Ｈｏ、175Ｙｂ、177Ｌｕ、186/188Ｒｅおよび199Ａｕが挙げられ、177Ｌｕおよび90Ｙが特に好ましい。本発明の化合物にしようされる好ましいキレート剤は、１−置換４,７,１０−トリカルボキシメチル１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン三酢酸（ＤＯ３Ａ）である。
【００４０】
18Ｆ、123Ｉ−、124Ｉ−または131Ｉ−のような放射性標識ハロゲンを含む部分は、好ましくは、Zhang et al, J. Nuclear Med. 47:492-501(2006)（出典明示によりその全体として本明細書の一部を構成する）に記載されているものの１つである。
【００４１】
光学的標識Ｍは、当該技術分野で知られている種々の光学的標識のいずれかであり得るる。好ましい標識としては、シアニン色素、光吸収化合物、光反射性および散乱性化合物ならびに生物発光分子のような有機発色団またはフルオロフォアを包含する光学色素が挙げられるが、これに限定されるものではない。
【００４２】
一の実施態様では、リンカーＮ−Ｏ−Ｐは、少なくとも１つの非αアミノ酸を含有する。
【００４３】
別の実施態様では、リンカーＮ−Ｏ−Ｐは、少なくとも１つの置換胆汁酸を含有する。
【００４４】
さらに別の実施態様では、リンカーＮ−Ｏ−Ｐは、環状基を有する少なくとも１つの非αアミノ酸を含有する。
【００４５】
最も好ましい実施態様では、Ｍは、金属キレート剤であり、リンカーＮ−Ｏ−Ｐは、環状基を有する少なくとも１つの非αアミノ酸を含有する。加えて、Ｍは、放射性または常磁性金属と錯体を形成し得る。より好ましい実施態様では、Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇは、本明細書に記載されるようなＬ７０またはＡＭＢＡである。特に好ましい実施態様では、Ｌ７０またはＡＭＢＡは、177Ｌｕと錯体を形成する（177Ｌｕ−ＡＭＢＡまたは177Ｌｕ−Ｌ７０）か、またはポジトロン放出断層撮影（ＰＥＴ）によって検出可能な放射線核種、例えば68Ｇａと錯体を形成する（68Ｇａ−ＡＭＢＡまたは68Ｇａ−Ｌ７０）。
【００４６】
ＧＲＰ受容体標的ペプチドは、ＧＲＰ、ボンベシンまたはそのいずれかの誘導体もしくはアナログであり得る。好ましい実施態様では、ＧＲＰ受容体標的ペプチドは、アゴニストとして作用するＧＲＰまたはボンベシンアナログである。特に好ましい実施態様では、ＧＲＰ受容体標的ペプチドは、米国特許第６,２００,５４６号および米国特許出願公開第２００２／００５４８５５号（出典明示により本明細書の一部を構成する）に開示されているボンベシンアナログアゴニスト結合部分である。
【００４７】
本発明の化合物を使用する新規の画像化方法もまた提供される。好ましい実施態様では、ＰＥＴは、組織、特に本願化合物を担持している癌組織におけるＧＲＰ−Ｒを画像化するのに使用される。より好ましい実施態様では、68Ｇａ−ＡＭＢＡまたは68Ｇａ−Ｌ７０は、インビボでヒトの組織におけるＧＲＰ−Ｒを画像化するのに使用される。
【００４８】
本発明の例示的実施態様において、本発明の診断薬または治療薬の製造に必要な成分の全てを含有するシングル−またはマルチ−バイアルキットが提供される。
【００４９】
また、本発明の化合物を含有する物質を注射用画像媒体に加える工程を含む、診断用造影剤の新規製造方法が提供される。
【００５０】
例えば乳癌および前立腺癌を包含する癌のようなＧＲＰ受容体の過剰発現に関与する病態の治療またはその進行の遅延のための、本発明の化合物を使用する新規放射線療法もまた提供される。本発明の化合物を含む物質を注射用治療媒体に加える工程を含む放射線治療薬の新規製造方法もまた提供される。好ましい実施態様では、かかる方法では177Ｌｕ−ＡＭＢＡまたは177Ｌｕ−Ｌ７０が使用される。
【００５１】
本発明の標識化合物によってＧＲＰ発現標的組織の標的化を亢進させる方法である、本発明の標識化合物の改善された投与方法が提供される。
【００５２】
本発明者らは、いくつかのＲＴＫまたはエストロゲン受容体の活性の、それらのリガンドまたはアンタゴニスト（例えばかかる受容体を標的とする抗癌剤を包含する）による調節がＧＰＣＲの活性および特にＧＲＰファミリーの受容体の活性に影響を及ぼすことを予想外にも見出した。かくして、ＧＲＰ受容体を画像化することによるかかる活性の検出（またはＧＲＰ受容体の変化を検出する他の方法）により、ＲＴＫまたはエストロゲン受容体に向けられた治療介入によって影響を受けるＲＴＫまたはエストロゲン受容体の活性の間接的な評価が可能になる。かくして、本発明は、乳癌および前立腺癌を包含するがこれらに限定されるものではないＧＲＰＲを発現する広範囲のヒト固形腫瘍（原発性腫瘍および転移）についてＧＲＰ受容体とのクロストーク、特にＲＴＫまたは「他の標的」からＧＲＰＲへの方向でのクロストークを試験する方法を提供する。詳しくは、通常の臨床条件（用量およびスケジュール）下で投与されるＲＴＫ受容体またはエストロゲン受容体を標的とする広範囲の治療薬（例えば、ＲＴＫ阻害剤、エストロゲン阻害剤）のいずれか１つによる治療の効果が、かかる受容体（例えば、ＲＴＫ受容体またはエストロゲン受容体）がクロストークを示すＧＲＰ受容体特異的シグナルの発現の変化によって検出されるかかる受容体の機能に及ぼし得ることを評価すること。本発明は、インビボでＧＲＰ受容体特異的シグナル活性の増大、減少、または無変化によって、治療に対する予測される応答の機能的指標を提供する。好ましい実施態様では、例えばＳＰＥＣＴまたはＰＥＴにより検出可能な診断用放射線核種と錯体を形成する本発明のＧＲＰ−Ｒ標的化合物が、ＧＲＰ受容体の変化をモニターするために使用される（または、Ｍは、検出可能であってＧＲＰ−Ｒ受容体をモニターすることができる放射性ハロゲンを含む基である）。特に好ましい実施態様では、68Ｇａ−ＡＭＢＡまたは68Ｇａ−Ｌ７０が投与され、画像化されて、インビボでＧＲＰ−Ｒシグナル活性の変化を検出することができる。
【００５３】
本発明は、また、放射性標識または他の検出可能な標識を付したＧＲＰ受容体のアゴニストまたはアンタゴニストを使用してインビトロでＧＲＰ受容体ファミリーの活性の変化について新規薬物をスクリーニングする方法を提供する。好ましい実施態様では、本発明のＧＲＰ−Ｒ標的化合物は、例えばＳＰＥＣＴまたはＰＥＴにより検出可能な診断用放射線核種と錯体を形成する（または、Ｍは検出可能であってＧＲＰ−Ｒ受容体をモニターすることができる放射性ハロゲンを含む基である）。特に好ましい実施態様では、68Ｇａ−ＡＭＢＡまたは68Ｇａ−Ｌ７０が投与され、画像化されて、インビボでＧＲＰ−Ｒシグナル活性の変化を検出することができる。本発明は、また、ＧＲＰ−Ｒとクロストークする受容体を標的とする薬物の治療効果をモニターするためにＧＲＰ受容体の放射性標識アゴニストまたはアンタゴニストを使用してインビボでＧＲＰ受容体ファミリーの活性を画像化する方法を提供する。好ましい実施態様では、本発明の放射性標識ＧＲＰ−Ｒ標的化合物は、例えばＳＰＥＣＴまたはＰＥＴにより検出可能な診断用放射線核種と錯体を形成する（または、Ｍは検出可能であってＧＲＰ−Ｒ受容体をモニターすることができる放射性ハロゲンを含む基である）。特に好ましい実施態様では、68Ｇａ−ＡＭＢＡまたは68Ｇａ−Ｌ７０が投与され、画像化されて、インビボでＧＲＰ−Ｒシグナル活性の変化を検出することができる。
【図面の簡単な説明】
【００５４】
【図１Ａ】図１Ａは、実施例Ｉに記載されるＡ（(３β,５β)−３−アミノコラン−２４−酸メチル）およびＢ（(３β,５β)−３−アミノコラン−２４−酸）からの中間体Ｃ（(３β,５β)−３−(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)アミノコラン−２４−酸）の合成のための一連の化学反応を示す図である。
【図１Ｂ】図１Ｂは、実施例Ｉに記載されるＮ−[(３β,５β)−３−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]コラン−２４−イル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ６２）の合成のための逐次反応を示す図である。
【図２Ａ】図２Ａは、実施例ＩＩに記載されるＮ−[４−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ７０）の合成のための逐次反応を示す図である。
【図２Ｂ】図２Ｂは、実施例ＩＩに記載されるＮ−[４−[２−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]エトキシ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ７３）、Ｎ−[３−[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]メチル]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ１１５）およびＮ−[４−[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]メチル]フェニルアセチル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ１１６）の合成のための逐次反応を示す全体図である。
【図２Ｃ】図２Ｃは、実施例ＩＩに記載されるＮ−[４−[２−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]エトキシ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ７３）の合成のための図２Ｂの合成反応において使用されるリンカーの化学構造を示す図である。
【図２Ｄ】図２Ｄは、実施例ＩＩに記載されるＮ−[３−[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]メチル]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ１１５）の合成のための図２Ｂの合成反応において使用されるリンカーの化学構造を示す図である。
【図２Ｅ】図２Ｅは、実施例ＩＩに記載されるＮ−[４−[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]メチル]フェニルアセチル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ１１６）の合成のための図２Ｂの合成反応において使用されるリンカーの化学構造を示す図である。
【図２Ｆ】図２Ｆは、実施例ＩＩに記載されるＮ−[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]グリシル−４−ピペリジンカルボニル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ７４）の合成のための逐次反応を示す図である。
【図３Ａ】図３Ａは、実施例ＩＩＩに記載される中間体(３β,５β)−３−[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)アミノ]アセチル]アミノ−１２−オキソコラン−２４−酸（Ｃ）の合成のための一連の化学反応を示す図である。
【図３Ｂ】図３Ｂは、Ｎ−[(３β,５β)−３−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]−１２,２４−ジオキソコラン−２４−イル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ６７）の合成のための逐次反応を示す図である。
【図３Ｃ】図３Ｃは、実施例ＩＩＩに記載される(３β,５β)−３−アミノ−１２−オキソコラン−２４−酸（Ｂ）の化学構造を示す図である。
【図３Ｄ】図３Ｄは、実施例ＩＩＩに記載される(３β,５β)−３−[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)アミノ]アセチル]アミノ−１２−オキソコラン−２４−酸（Ｃ）の化学構造を示す図である。
【図３Ｅ】図３Ｅは、実施例ＩＩＩに記載されるＮ−[(３β,５β)−３−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]−１２,２４−ジオキソコラン−２４−イル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ６７）の化学構造を示す図である。
【図４Ａ】図４Ａは、実施例ＩＶに記載される中間体(３β,５β,１２α)−３−[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)アミノ]アセチル]アミノ−１２−ヒドロキシコラン−２４−酸（３ａ）および(３β,５β,７α,１２α)−３−[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)アミノ]アセチル]アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸（３ｂ）を得るための一連の反応を示す図である。
【図４Ｂ】図４Ｂは、実施例ＩＶに記載されるＮ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]−１２−ヒドロキシ−２４−オキソコラン−２４−イル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ６３）の合成のための逐次反応を示す図である。
【図４Ｃ】図４Ｃは、実施例ＩＶに記載されるＮ−[(３β,５β,７α,１２α)−３−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]−７,１２−ジヒドロキシ−２４−オキソコラン−２４−イル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ６４）の合成のための逐次反応を示す図である。
【図４Ｄ】図４Ｄは、実施例ＩＶに記載される(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸（２ｂ）の化学構造を示す図である。
【図４Ｅ】図４Ｅは、実施例ＩＶに記載される(３β,５β,１２α)−３−[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)アミノ]アセチル]アミノ−１２−ヒドロキシコラン−２４−酸（３ａ）の化学構造を示す図である。
【図４Ｆ】図４Ｆは、実施例ＩＶに記載される(３β,５β,７α,１２α)−３−[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)アミノ]アセチル]アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸（３ｂ）の化学構造を示す図である。
【図４Ｇ】図４Ｇは、実施例ＩＶに記載されるＮ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]−１２−ヒドロキシ−２４−オキソコラン−２４−イル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ６３）の化学構造を示す図である。
【図４Ｈ】図４Ｈは、実施例ＩＶに記載されるＮ−[(３β,５β,７α,１２α)−３−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]−７,１２−ジヒドロキシ−２４−オキソコラン−２４−イル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ６４）の化学構造を示す図である。
【図５Ａ】図５Ａは、実施例Ｖに記載される４−[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]メチル]ベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ７１）およびトランス−４−[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]メチル]シクロヘキシルカルボニル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ７２）の合成のための逐次反応を示す全体図であり、ここで、リンカーは、それぞれ、図５Ｂおよび図５Ｃからのものである。
【図５Ｂ】図５Ｂは、図５Ａに示され、実施例Ｖに記載される化合物Ｌ７１において使用されるリンカーの化学構造を示す図である。
【図５Ｃ】図５Ｃは、図５Ａに示され、実施例Ｖに記載される化合物Ｌ７２において使用されるリンカーの化学構造を示す図である。
【図５Ｄ】図５Ｄは、実施例Ｖに記載されるボンベシン[７−１４]（Ｂ）で官能化されたＲｉｎｋアミド樹脂の化学構造を示す図である。
【図５Ｅ】図５Ｅは、実施例Ｖに記載されるトランス−４−[[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]メチル]シクロヘキサンカルボン酸（Ｄ）の化学構造を示す図である。
【図６Ａ】図６Ａは、実施例ＶＩに記載される中間体リンカー２−[[[９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]メチル]安息香酸（Ｅ）の合成のための一連の反応を示す図である。
【図６Ｂ】図６Ｂは、実施例ＶＩに記載される中間体リンカー４−[[[９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]メチル]−３−ニトロ安息香酸（Ｈ）の合成のための一連の反応を示す図である。
【図６Ｃ】図６Ｃは、実施例ＶＩに記載されるＮ−[２−[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]メチル]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ７５）の合成法を示す図である。
【図６Ｄ】図６Ｄは、実施例ＶＩに記載されるＮ−[４−[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]メチル]−３−ニトロベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ７６）の合成法を示す図である。
【図７Ａ】図７Ａは、実施例ＶＩＩに記載される中間体リンカー[４−[[[９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]メチル]フェノキシ]酢酸（Ｅ）の合成のための一連の反応を示す図である。
【図７Ｂ】図７Ｂは、実施例ＶＩＩに記載されるＮ−[[４−[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]メチル]フェノキシ]アセチル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ１２４）の合成法を示す図である。
【図７Ｃ】図７Ｃは、実施例ＶＩＩに記載されるＮ−[[４−[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]メチル]フェノキシ]アセチル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ１２４）の化学構造を示す図である。
【図８Ａ】図８Ａは、実施例ＶＩＩＩに記載される中間体４−[[[９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]メチル]−３−メトキシ安息香酸（Ｅ）の合成のための一連の反応を示す図である。
【図８Ｂ】図８Ｂは、実施例ＶＩＩＩに記載されるＮ−[４−[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]メチル]−３−メトキシベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド、(Ｌ１２５）の合成法を示す図である。
【図８Ｃ】図８Ｃは、実施例ＶＩＩＩに記載されるＮ−[４−[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]メチル]−３−メトキシベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド、(Ｌ１２５）の化学構造を示す図である。
【図９Ａ】図９Ａは、実施例ＩＸに記載される３−[[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]アセチル]アミノ安息香酸（Ｂ）の合成のための反応を示す図である。
【図９Ｂ】図９Ｂは、実施例ＩＸに記載される６−[[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]アセチル]アミノナフトエ酸（Ｃ）の合成のための反応を示す図である。
【図９Ｃ】図９Ｃは、実施例ＩＸに記載される４−[[[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]アセチル]メチルアミノ]安息香酸（Ｄ）の合成のための反応を示す図である。
【図９Ｄ】図９Ｄは、実施例ＩＸに記載されるＮ−[４−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]フェニルアセチル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ１４６）、Ｎ−[３−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２３３）、Ｎ−[６−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]ナフトイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２３４）、およびＮ−[４−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]メチルアミノ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２３５）の合成のための反応を示す図である。
【図１０Ａ】図１０Ａは、実施例Ｘに記載される７−[[ビス(１,１−ジメチルエトキシ)ホスフィニル]メチル]−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１,４,１０−三酢酸４,１０−ビス(１,１−ジメチルエチル)エステルＨの合成のための反応を示す図である。
【図１０Ｂ】図１０Ｂは、実施例Ｘに記載されるＮ−[４−[[[[[４,１０−ビス(カルボキシメチル)−７−(ジヒドロキシホスフィニル)メチル−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２３７）の合成のための反応を示す図である。
【図１１Ａ】図１１Ａは、実施例ＸＩに記載されるＮ,Ｎ−ジメチルグリシル−Ｌ−セリニル−[Ｓ−[(アセチルアミノ)メチル]]−Ｌ−システイニル−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２３８）の合成のための反応を示す図である。
【図１１Ｂ】図１１Ｂは、実施例ＸＩに記載されるＮ,Ｎ−ジメチルグリシル−Ｌ−セリニル−[Ｓ−[(アセチルアミノ)メチル]]−Ｌ−システイニル−グリシル−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシ−２４−オキソコラン−２４−イル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２３９）の合成のための反応を示す図である。
【図１２Ａ】図１２Ａは、実施例ＸＩＩに記載される４−[[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]アセチル]アミノ−３−メトキシ安息香酸（Ａ）の合成のための反応を示す図である。
【図１２Ｂ】図１２Ｂは、実施例ＸＩＩに記載される４−[[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]アセチル]アミノ−３−クロロ安息香酸（Ｄ）の合成のための反応を示す図である。
【図１２Ｃ】図１２Ｃは、実施例ＸＩＩに記載される４−[[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]アセチル]アミノ−３−メチル安息香酸（Ｅ）の合成のための反応を示す図である。
【図１２Ｄ】図１２Ｄは、実施例ＸＩＩに記載されるＮ−[４−[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]グリシル]アミノ]−３−メトキシベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−l−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２４０）の化学構造を示す図である。
【図１２Ｅ】図１２Ｅは、実施例ＸＩＩに記載される化合物Ｎ−[４−[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]グリシル]アミノ]３−クロロベンゾイル]Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−l−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２４１）の化学構造を示す図である。
【図１２Ｆ】図１２Ｆは、実施例ＸＩＩに記載されるＮ−[４−[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]グリシル]アミノ]３−メチルベンゾイル]Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−l−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２４２）の化学構造を示す図である。
【図１３Ａ】図１３Ａは、実施例ＸＩＩＩに記載される４−[Ｎ,Ｎ'−ビス[２−[(９−Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノエチル]アミノ]−４−オキソブタン酸（Ｄ）の合成のための反応を示す図である。
【図１３Ｂ】図１３Ｂは、実施例ＸＩＩＩに記載されるＮ−[４−[[４−[ビス[２−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]エチル]アミノ−１,４−ジオキソブチル]アミノ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２４４）の合成のための反応を示す図である。
【図１３Ｃ】図１３Ｃは、実施例ＸＩＩＩに記載される化合物Ｌ２４４の化学構造を示す図である。
【図１４】図１４Ａおよび図１４Ｂは、実施例ＸＬＩＩＩに記載の結合および競合曲線を示すグラフである。
【図１５Ａ】図１５Ａは、実施例ＬＶに記載の放射線療法実験の結果を示すグラフである。
【図１５Ｂ】図１５Ｂは、実施例ＬＶに記載の別の放射線療法実験の結果を示すグラフである。
【図１６】図１６は、Ｎ−[４−[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]グリシル]アミノ]−Ｌ−リシニル−(３,６,９)−トリオキサウンデカン−１,１１−ジカルボン酸−３,７−ジデオキシ−３−アミノコール酸)−Ｌ−アルギニル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ６５）の化学構造を示す図である。
【図１７】図１７は、Ｎ−[２−Ｓ−[[[[[１２α−ヒドロキシ−１７α−(１−メチル−３−カルボキシプロピル)エチオコラン−３β−カルバモイルメトキシエトキシエトキシアセチル]−アミノ−６−[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]ヘキサノイル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ６６）の化学構造を示す図である。
【図１８Ａ】図１８Ａは、Ｎ−[４−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ７０）の化学構造を示す図である。。
【図１８Ｂ】図１８Ｂは、Ｎ−[４−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]−３−カルボキシプロピオニル]アミノ]アセチル]アミノ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ１１４）の化学構造を示す図である。
【図１８Ｃ】図１８Ｃは、Ｎ−[４−[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]−２−ヒドロキシ−３−プロポキシ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ１４４）の化学構造を示す図である。
【図１８Ｄ】図１８Ｄは、Ｎ−[(３β,５β,７α,１２α)−３−[[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]エトキシエトキシ]アセチル]アミノ]−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−イル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ６９）の化学構造を示す図である。
【図１８Ｅ】図１８Ｅは、Ｎ−[４−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]フェニルアセチル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ１４６）の化学構造を示す図である。
【図１９】図１９は、実施例ＬＶＩに記載される化合物Ｌ６４およびＬ７０の製造に使用することができる中間体の化学構造を示す図である。
【図２０】図２０は、実施例ＬＶＩに記載されるセグメントカップリングを使用するＬ６４の製造法を示す図である。
【図２１】図２１は、(１Ｒ)−１−(ビス{２−[ビス(カルボキシメチル)アミノ]エチル}アミノ)プロパン−３−カルボン酸−１−カルボキシl−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２０１）の製造法を示す図である。
【図２２Ａ】図２２Ａは、Ｌ２０２の製造に使用される中間体の化学構造を示す図である。
【図２２Ｂ】図２２Ｂは、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]−４−ヒドラジノベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２０２）の製造法を示す図である。
【図２３Ａ】図２３Ａは、Ｌ２０３の製造に使用される中間体の化学構造を示す図である。
【図２３Ｂ】図２３Ｂは、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−４−アミノベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２０３）の製造法を示す図である。
【図２４】図２４は、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−４−アミノベンゾイル−グリシル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２０４）の製造法を示す図である。
【図２５】図２５は、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−４−アミノベンゾイル−グリシル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２０５）の製造法を示す図である。
【図２６Ａ】図２６Ａは、Ｌ２０６の製造に使用される中間体の化学構造を示す図である。
【図２６Ｂ】図２６Ｂは、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]−[４'−アミノ−２'−メチル−ビフェニル−４−カルボキシl]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２０６）の製造法を示す図である。
【図２７Ａ】図２７Ａは、Ｌ２０７の製造に使用される中間体の化学構造を示す図である。
【図２７Ｂ】図２７Ｂは、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]−[３'−アミノ−ビフェニル−３−カルボキシl]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２０７）の製造法を示す図である。
【図２８】図２８は、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]−[１,２−ジアミノエチル−テレフタリル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２０８）の製造法を示す図である。
【図２９Ａ】図２９Ａは、Ｌ２０９の製造に使用される中間体の化学構造を示す図である。
【図２９Ｂ】図２９Ｂは、Ｌ２０９の製造法を示す図である。
【図３０Ａ】図３０Ａは、Ｌ２１０の製造に使用される中間体の化学構造を示す図である。
【図３０Ｂ】図３０Ｂは、Ｌ２１０の化学構造を示す図である。
【図３１】図３１は、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２１１）の化学構造を示す図である。
【図３２】図３２は、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−グルタミル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２１２）の化学構造を示す図である。
【図３３】図３３は、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンカルボン酸（Ｌ２１３）の化学構造を示す図である。
【図３４】図３４は、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２１４）の化学構造を示す図である。
【図３５】図３５は、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−アルギニル−Ｌ−ロイシル−グリシル−Ｌ−アスパルギニル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２１５）の化学構造を示す図である。
【図３６】図３６は、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−アルギニル−Ｌ−チロシニル−グリシル−Ｌ−アスパルギニル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２１６）の化学構造を示す図である。
【図３７】図３７は、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−リジル−Ｌ−チロシニル−グリシル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２１７）の化学構造を示す図である。
【図３８】図３８は、Ｌ２１８の化学構造を示す図である。
【図３９】図３９は、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−アミノペンチル（Ｌ２１９）の化学構造を示す図である。
【図４０】図４０は、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−セリニル−Ｌ−バリル−Ｄ−アラニル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２２０）の化学構造を示す図である。
【図４１】図４１は、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−ロイシンアミド（Ｌ２２１）の化学構造を示す図である。
【図４２】図４２は、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｄ−チロシニル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−β−アラニル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−ノルロイシンアミド（Ｌ２２２）の化学構造を示す図である。.
【図４３】図４３は、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−β−アラニル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−ノルロイシンアミド（Ｌ２２３）の化学構造を示す図である。
【図４４】図４４は、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−ロイシンアミド（Ｌ２２４）の化学構造を示す図である。
【図４５】図４５は、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリニル−グリシル−Ｌ−セリニル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２２５）の化学構造を示す図である。
【図４６】図４６は、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２２６）の化学構造を示す図である。
【図４７】図４７は、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−セリニル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２２７）の化学構造を示す図である。
【図４８】図４８は、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２２８）の化学構造を示す図である。
【図４９Ａ】図４９Ａは、実施例ＬＶＩＩに記載される(３β,５β,７α,１２α)−３−(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸（Ｂ）の合成のための反応を示す図である。
【図４９Ｂ】図４９Ｂは、実施例ＬＶＩＩに記載されるＮ−[３β,５β,７α,１２α)−３−[[[２−[２−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]エトキシ]エトキシ]アセチル]アミノ]−７,１２−ジヒドロキシ−２４−オキソコラン−２４−イル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ６９）の合成のための反応を示す図である。
【図５０】図５０は、実施例ＬＶＩＩＩに記載されるＮ−[４−[２−ヒドロキシ−３−[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]プロポキシ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ１４４）の合成のための反応を示す図である。
【図５１】図５１は、Ｌ３００の化学構造を示す図である。
【図５２】図５２は、Ｌ３０１の化学構造を示す図である。
【図５３】図５３は、実施例ＬＸＩＩに記載されるＬ５００の製造法を示す図である。
【図５４】図５４は、実施例ＬＸＩＩＩに記載されるＬ５０１の製造法を示す図である。
【図５５】図５５は、対照マウスおよび経時的に177Ｌｕ−ＡＭＢＡ（177Ｌｕ−Ｌ７０）で処理したマウスにおける斑状出血の発生を示すグラフである。
【図５６】図５６は、対照マウスおよび経時的に177Ｌｕ−ＡＭＢＡ（177Ｌｕ−Ｌ７０）で処理したマウスにおける斑状出血の発生を決定する実験からの対照群マウスの写真である。
【図５７】図５７は、対照マウスおよび経時的に177Ｌｕ−ＡＭＢＡ（177Ｌｕ−Ｌ７０）で処理したマウスにおける斑状出血の発生を決定する実験からの試験群マウスの写真である。
【図５８】図５８は、ＧＲＰ受容体についてのクロストーク経路の略図である。
【図５９】図５９は、68Ｇａ−ＡＭＢＡによる癌の標的化および画像化を示す。
【発明を実施するための形態】
【００５５】
本明細書において使用される略語
【表２−１】
2011520971.tif 000004
【表２−２】
2011520971.tif 000005
【００５６】
本発明の実施例において使用される化学療法薬、クロストークに関与する標的、該化学療法薬が承認されている癌のタイプ、および適用可能な臨床試験の一部のリストを以下に示す。
・タモキシフェン（４ＯＨ−ＴＡＭ）：  エストロゲン結合を阻害する（エストロゲン受容体修飾薬−ＳＥＲＭ）；乳癌の治療について承認されている；前立腺癌、卵巣癌、骨癌、肝癌および進行固形腫瘍について臨床試験中。
・ゲフィチニブ：  キナーゼ阻害剤：  ＥＧＦＲ；チロシンキナーゼの細胞内リン酸化を阻害する；非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）について承認されている；乳癌、前立腺癌、卵巣癌、食道癌、脳癌、肝癌および腎癌について臨床試験中。
・ダサチニブ：  Ｓｒｃファミリーキナーゼ阻害剤；ＣＭＬについて承認されている；乳癌、前立腺癌、脳癌、肝癌、肺癌および結腸直腸癌について臨床試験中。
・ラパチニブ：  二重キナーゼ阻害剤：  ＥＧＦＲおよびＨＥＲ２／ＥｒｂＢ２（およびＥｒｂＢ３）；乳癌について承認されている；前立腺癌、卵巣癌、結腸直腸癌、脳癌および進行固形腫瘍について臨床試験中。
・イマチニブ：  多重キナーゼ阻害剤：  Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ；ＰＤＧＦおよび幹細胞因子（ＳＣＦ）、Ｋｉｔも阻害し、ＰＤＧＦ媒介およびＳＣＦ媒介細胞イベントを阻害する；ＣＭＬおよび消化管間質性腫瘍（ＧＩＳＴ）について承認されている；乳癌、卵巣癌および前立腺癌について臨床試験中。
・エルロチニブ：  キナーゼ阻害剤：  ＥＧＦＲ；ＮＳＣＬＣおよび膵癌について承認されている；ＨＥＲ２陰性乳癌、前立腺癌、食道癌、結腸直腸癌および脳癌について臨床試験中。
・ソラフェニブ：  多重キナーゼ阻害剤：  ＰＤＧＦＲｂａ／ＶＥＧＦＲ  １,２,３／ＫＩＴ、ＦＬＴ３／ＥＧＦ／Ｒａｓ／Ｒａｆキナーゼ；肝細胞癌（ＨＣＣ）および腎細胞癌（ＲＣＣ）について承認されている；乳癌、前立腺癌、脳癌および進行固形腫瘍について臨床試験中。
・スニチニブ：  多重キナーゼ阻害剤：  ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＥｒｂＢ３；ＰＤＧＦαおよびβ；幹細胞因子受容体（ＫＩＴ）；ＦＬＴ３；ＣＳＦ−１Ｒ；向精神性因子受容体（ＲＥＴ）；ＲＣＣおよびＧＩＳＴについて承認されている；乳癌、前立腺癌、脳癌、結腸直腸癌および進行固形腫瘍について臨床試験中。
・アナストロゾール：  アロマターゼ阻害剤、エストロゲン／エストラジオール（例えば、腫瘍産生エストロゲン）の産生を遮断する；乳癌について承認されている；卵巣および進行乳癌について臨床試験中。
・ボルテゾミブ：  プロテアソーム阻害剤；ユビキチン経路を遮断して、アポトーシスをもたらす；多発性骨髄腫について承認されている；乳癌、前立腺癌、子宮頚癌、卵巣癌、脳癌、結腸直腸癌、ＮＳＣＬＣおよび進行固形腫瘍について臨床試験中。
【００５７】
（発明の詳細な説明）
以下の説明において、本発明の様々な特徴をさらに詳述する。説明の目的で、本発明の完全な理解を与えるために具体的な形態および詳細を記載する。しかしながら、当業者にとって当然のことであるが、本発明は、具体的詳細がなくても実施され得る。さらにまた、本発明を不明瞭にしないために、周知の特徴は、省略または簡略化することもある。
【００５８】
本発明の実施態様では、診断用画像化または放射線療法において用いるための新規の改善された化合物が提供される。該化合物は、リンカーもしくはスペーサー基によってＧＲＰ受容体標的ペプチドに結合している、光学的標識、または医学的に有用な金属イオンもしくは放射線核種（金属キレート剤）を複合化する能力を有する化学基を含む。
[００１６６]
【００５９】
一般的に、本発明の化合物は、式：
Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇ
［式中、Ｍは、金属キレート剤（金属放射線核種と錯体形成されているかまたはされていない形態）、または18Ｆ、123Ｉ−、124Ｉ−もしくは131Ｉ−のような放射性標識ハロゲンを含有する基であり、Ｎ−Ｏ−Ｐはリンカーであり、Ｇは、ＧＲＰ受容体標的ペプチドである］
を有することができる。金属キレート剤、光学的標識、リンカーおよびＧＲＰ受容体標的ペプチドの各々を以下に記載する。
【００６０】
本発明の最も好ましい実施態様では、Ｍは金属キレート剤であり、リンカーＮ−Ｏ−Ｐは、環状基を有する少なくとも１つの非αアミノ酸を含有する。別の好ましい実施態様では、Ｍは、式８で示される金属キレート剤（好ましくは、Ａａｚｔａキレート剤またはその誘導体）であり、リンカーＮ−Ｏ−Ｐは、環状基を有する少なくとも１つの非αアミノ酸を含有する。より好ましい実施態様では、Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｑは、本明細書に記載されるＬ７０またはＡＭＢＡである。特に好ましい実施態様では、Ｌ７０またはＡＭＢＡは、177Ｌｕと錯体を形成する（177Ｌｕ−ＡＭＢＡまたは177Ｌｕ−Ｌ７０）か、またはポジトロン放出断層撮影（ＰＥＴ）によって検出可能な放射線核種、例えば、68Ｇａと錯体を形成する（68Ｇａ−ＡＭＢＡまたは68Ｇａ−Ｌ７０）。
【００６１】
本発明の別の実施態様では、光学的標識または金属キレート剤をＧＲＰ受容体標的ペプチドに連結する能力を有する新規の改善されたリンカーまたはスペーサー基が提供される。一般に、本発明のリンカーは、式：
Ｎ−Ｏ−Ｐ
［式中、Ｎ、ＯおよびＰの各々は本明細書の全体において定義される］
を有することができる。
【００６２】
本明細書で定義される基準を満たす化合物は、薬物動態特性が当該技術分野で知られている他のＧＲＰ受容体標的ペプチド複合体と比べて改善されているという知見が得られた。例えば、本発明のリンカーを含有する化合物は、血流中に長く保持され、かくして、従来知られている化合物よりも長い半減期を有する。この長い半減期は、癌細胞および腫瘍が多量の放射性標識ペプチドを受ける診断用画像化および特に治療用途に有用なより良い腫瘍標的化を可能にしたので、医学的に有益であった。加えて、本発明の化合物は、組織受容体特異性が従来の化合物と比べて改善されていた。
【００６３】
さらにまた、本発明は、本発明の標識化合物の投与の前またはその間に適当な量のＧＲＰ受容体標的ペプチドまたは複合体を投与することを含む、本発明の標識化合物のＧＲＰ受容体発現標的組織への標的化を亢進させる方法を含む。同様に、本発明は、本発明の標識化合物の投与の前またはその間に適当な用量のＧＲＰ受容体標的ペプチドまたは複合体を投与することを含む、腫瘍標的化を最適化する本発明の標識化合物の投与の改良方法を含む。このような前投与または同時投与は、非標的ＧＲＰ−受容体を飽和させて、該受容体の標的（例えば、腫瘍）組織上ＧＲＰ受容体と競合する能力を低下させることが判明した。
【００６４】
本発明は、また、乳癌および前立腺癌を包含するがこれらに限定されるものではないＧＲＰＲを発現する広範囲のヒト固形腫瘍（原発性腫瘍および転移）についてＧＲＰ受容体とのクロストーク、特にＲＴＫまたは「他の標的」からＧＲＰＲへの方向でのクロストークを試験する方法を提供する。詳しくは、本発明は、通常の臨床条件（用量およびスケジュール）下で投与されるＲＴＫ受容体またはエストロゲン受容体を標的とする広範囲の治療薬（例えば、ＲＴＫ阻害剤、エストロゲン阻害剤）のいずれか１つによる治療の効果が、かかる受容体（例えば、ＲＴＫ受容体またはエストロゲン受容体）がクロストークを示すＧＲＰ受容体特異的シグナルの発現の変化によって検出されるかかる受容体の機能に及ぼし得ることを評価することを可能にする。本発明は、インビボでのＧＲＰ受容体特異的シグナル活性の増大、減少または無変化によって、治療に対する予測される応答の機能的指標を提供する。本発明は、また、放射性標識または他の検出可能な標識を付したＧＲＰ受容体のアゴニストまたはアンタゴニストを使用してインビトロでＧＲＰ受容体ファミリーの活性の変化について新規薬物をスクリーニングする方法を提供する。本発明は、また、ＧＲＰ受容体の放射性標識アゴニストまたはアンタゴニストを使用してインビボでＧＲＰ受容体ファミリーの活性を画像化する方法を提供する。特に、本発明は、患者の管理を改善するためにインビボで画像（ＰＥＴおよび／またはＳＰＥＣＴ）を得るための米国特許第７,２２６,５７７号（出典明示により本明細書の一部を構成する）に記載されている放射性標識ボンベシンアナログの使用を意図する。
【００６５】
１Ａ．金属キレート剤
「金属キレート剤」なる用語は、金属原子との錯体であって生理学的条件下で安定な錯体を形成する分子をいう。すなわち、該金属は、インビボでキレート剤骨格と錯体を形成したままである。さらに詳しくは、金属キレート剤は、放射線核種と錯体を形成して、生理学的条件下で安定な金属錯体を成形する分子であって、リンカーＮ−Ｏ−Ｐとの結合のための少なくとも１つの反応性官能基をも有する分子である。該金属キレート剤Ｍは、医学的に有用な金属イオンまたは放射線核種と錯体形成するための当該技術分野で知られている金属キレート剤のいずれかであり得る。該金属キレート剤は、金属放射線核種と錯体を形成してもしなくてもよい。さらにまた、金属キレート剤は、金属と錯体形成しないが金属キレート剤とリンカーとの間の物理的分離を生じる単一のアミノ酸（例えば、Ｇｌｙ）のような任意のスペーサーを含むことができる。
【００６６】
本発明の金属キレート剤としては、例えば、直鎖、大環状、テルピリジン、およびＮ3Ｓ、Ｎ2Ｓ2、またはＮ4キレート剤（米国特許第５,３６７,０８０号、米国特許第５,３６４,６１３号、米国特許第５,０２１,５５６号、米国特許第５,０７５,０９９号、米国特許第５,８８６,１４２号も参照、これらの記載内容は、出典明示によりその全体として本明細書の一部を構成する）、ならびに、ＨＹＮＩＣ、ＤＴＰＡ、ＥＤＴＡ、ＤＯＴＡ、ＴＥＴＡ、およびビスアミノビスチオール（ＢＡＴ）キレート剤（米国特許第５,７２０,９３４号も参照）を包含するがこれらに限定されるものではない当該技術分野で知られている他のキレート剤が挙げられる。例えば、Ｎ4キレート剤は、米国特許第６,１４３,２７４号；第６,０９３,３８２号；第５,６０８,１１０号；第５,６６５,３２９号；第５,６５６,２５４号；および第５,６８８,４８７号（これらの記載内容は、出典明示によりその全体として本明細書の一部を構成する）に記載されている。ある種のＮ3Ｓキレート剤は、ＰＣＴ／ＣＡ９４／００３９５、ＰＣＴ／ＣＡ９４／００４７９、ＰＣＴ／ＣＡ９５／００２４９ならびに米国特許第５,６６２,８８５号；第５,９７６,４９５号；および第５,７８０,００６号（これらの記載内容は、出典明示によりその全体として本明細書の一部を構成する）に記載されている。該キレート剤としては、また、Ｎ3Ｓ、およびＮ2Ｓ2系、例えばＭＡＭＡ（モノアミドモノアミンジチオール）、ＤＡＤＳ（Ｎ2Ｓジアミンジチオール）、ＣＯＤＡＤＳおよび同類のものを含有するキレート形成性リガンドであるメルカプト−アセチル−グリシル−グリシル−グリシン（ＭＡＧ３）の誘導体を挙げることができる。これらのリガンド系およびその他の種々のリガンド系は、Liu and Edwards, Chem Rev. 1999, 99, 2235-2268およびその引用文献（これらの記載内容は、出典明示によりその全体として本明細書の一部を構成する）に記載されている。
【００６７】
該金属キレート剤は、また、四座配列で金属に供与されないリガンド原子を含有する錯体を含むことができる。これらとしては、米国特許第５,１８３,６５３号；第５,３８７,４０９号；および第５,１１８,７９７号（それらの記載内容は、出典明示によりその全体として本明細書の一部を構成する）に記載されているもののようなテクネチウムジオキシムおよびレニウムジオキシムのホウ酸付加物が挙げられる。
【００６８】
好ましいキレート剤の例としては、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、１,４,７,１０−テトラアザシクロテトラデカン−１,４,７,１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、１−置換−１,４,７−トリカルボキシメチル−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン三酢酸（ＤＯ３Ａ）、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、４−カルボニルメチル−１０−ホスホノメチル−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１,７−二酢酸（Ｃｍ４ｐｍ１０ｄ２ａ）；および１,４,８,１１−テトラアザシクロテトラデカン−１,４,８,１１−四酢酸（ＴＥＴＡ）が挙げられるが、これらに限定されるものではない。さらなるキレート形成性リガンドは、エチレンビス−(２−ヒドロキシ−フェニルグリシン)（ＥＨＰＧ）およびその誘導体（５−Ｃｌ−ＥＨＰＧ、５−Ｂｒ−ＥＨＰＧ、５−Ｍｅ−ＥＨＰＧ、５−ｔ−Ｂｕ−ＥＨＰＧおよび５−sec−Ｂｕ−ＥＨＰＧが挙げられる）；ベンゾジエチレントリアミン五酢酸（ベンゾ−ＤＴＰＡ）およびその誘導体（ジベンゾ−ＤＴＰＡ、フェニル−ＤＴＰＡ、ジフェニル−ＤＴＰＡ、ベンジル−ＤＴＰＡおよびジベンジル−ＤＴＰＡが挙げられる）；ビス−２−(ヒドロキシベンジル)−エチレン−ジアミン二酢酸（ＨＢＥＤ）およびその誘導体；少なくとも３個（好ましくは少なくとも６個）の炭素原子および少なくとも２個のヘテロ原子（Ｏおよび／またはＮ）を含有する大環状化合物群（ここで、該大環状化合物は、１つの環からなっていても、ヘテロ環原子で一緒に結合する２つまたは３つの環からなっていてもよい）、例えばベンゾ−ＤＯＴＡ、ジベンゾ−ＤＯＴＡおよびベンゾ−ＮＯＴＡ（ここで、ＮＯＴＡは、１,４,７−トリアザシクロノナン−Ｎ,Ｎ',Ｎ''−三酢酸である）、ベンゾ−ＴＥＴＡ、ベンゾ−ＤＯＴＭＡ（ここで、ＤＯＴＭＡは、１,４,７,１０−テトラアザシクロテトラデカン−１,４,７,１０−テトラ(メチル四酢酸)である）、およびベンゾ−ＴＥＴＭＡ（ここで、ＴＥＴＭＡは、１,４,８,１１−テトラアザシクロテトラデカン−１,４,８,１１−(メチル四酢酸)である）；１,３−プロピレンジアミン四酢酸（ＰＤＴＡ）およびトリエチレンテトラアミン六酢酸（ＴＴＨＡ）の誘導体；１,５,１０−Ｎ,Ｎ',Ｎ''−トリス(２,３−ジヒドロキシベンゾイル)トリカテコラート（ＬＩＣＡＭ）および１,３,５−Ｎ,Ｎ',Ｎ''−トリス(２,３−ジヒドロキシベンゾイル)アミノメチルベンゼン（ＭＥＣＡＭ）の誘導体である。他の好ましいキレート剤としては、Ａａｚｔａおよびその誘導体（ＣｙＡａｚｔａを包含する）が挙げられる。本発明によって意図される代表的なキレート剤およびキレート形成性基の例は、国際公開第９８／１８４９６号、国際公開第８６／０６６０５号、国際公開第９１／０３２００号、国際公開第９５／２８１７９号、国際公開第９６／２３５２６号、国際公開第９７／３６６１９号、国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ９８／０１４７３、国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ９８／２０１８２、および米国特許第４,８９９,７５５号、米国特許第５,４７４,７５６号、米国特許第５,８４６,５１９号および米国特許第６,１４３,２７４号（各々、出典明示によりその全体として本明細書の一部を構成する）に記載されている。
【００６９】
特に好ましい金属キレート剤としては、下記式１、２、３および８で示されるもの（111Ｉｎ、ならびに放射性ランタノイド、例えば177Ｌｕ、90Ｙ、153Ｓｍ、68Ｇａおよび166Ｈｏについて）、および下記式４、５および６で示されるもの（放射性の99mＴｃ、186Ｒｅおよび188Ｒｅについて）が挙げられる。これらの金属キレート形成性基および他の金属キレート形成性基は、米国特許第６,０９３,３８２号および第５,６０８,１１０号（出典明示によりその全体として本明細書の一部を構成する）に記載されている。加えて、式３で示されるキレート形成性基は、例えば、米国特許第６,１４３,２７４号に記載されており、式５で示されるキレート形成性基は、例えば、米国特許第５,６２７,２８６号および第６,０９３,３８２号に記載されており、式６で示されるキレート形成性基は、例えば、米国特許第５,６６２,８８５号、第５,７８０,００６号および第５,９７６,４９５号に記載されている（これらは、すべて、出典明示により本明細書の一部を構成する）。式８で示されるキレート形成性基は、同時係属の２００４年１月１５日出願の米国特許出願第１０／４８４,１１１号および２００５年６月２３日出願の米国特許出願第１１／１６５,７９３号（どちらも、出典明示により本明細書の一部を構成する）に記載されている。式６で示される具体的な金属キレート剤としては、Ｎ,Ｎ−ジメチルＧｌｙ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ；Ｎ,Ｎ−ジメチルＧｌｙ−Ｔhr−Ｃｙｓ；Ｎ,Ｎ−ジエチルＧｌｙ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ；Ｎ,Ｎ−ジベンジルＧｌｙ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ；およびそれらの他のバリエーションが挙げられる。例えば、余分な単一のアミノ酸Ｇｌｙのような金属放射線核種と実際に錯体を形成しないスペーサーをこれらの金属キレート剤に結合させてもよい（例えば、Ｎ,Ｎ−ジメチルＧｌｙ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ；Ｎ,Ｎ−ジメチルＧｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ；Ｎ,Ｎ−ジエチルＧｌｙ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ；Ｎ,Ｎ−ジベンジルＧｌｙ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ）。米国特許第６,３３４,９９６号（出典明示により本明細書の一部を構成する）に記載されているもののような他の有用な金属キレート剤（例えば、ジメチルｇｌｙ−Ｌ−ｔ−ブチルｇｌｙ−Ｌ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ；ジメチルｇｌｙ−Ｄ−ｔ−ブチルｇｌｙ−Ｌ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ；ジメチルｇｌｙ−Ｌ−ｔ−ブチルｇｌｙ−Ｌ−Ｃｙｓ等）
【００７０】
さらにまた、Ａｃｍ（アセトアミドメチル）、トリチルまたは他の既知のアルキル、アリール、アシル、アルカノイル、アリロイル、メルカプトアシルおよび有機チオール基のような硫黄保護基をこれらの金属キレート剤のシステインアミノ酸と結合させてもよい。
【００７１】
さらに、他の有用な金属キレート剤としては以下のものが挙げられる：
【化１−１】
2011520971.tif 000006
【化１−２】
2011520971.tif 000007
【化１−３】
2011520971.tif 000008
【００７２】
上記式１および２において、Ｒは、アルキル、好ましくはメチルである。上記式５ａおよび５ｂにおいて、Ｘは、ＣＨ2またはＯであり；Ｙは、Ｃ1−Ｃ10分枝または非分枝アルキル；アリール、アリールオキシ、アリールアミノ、アリールアミノアシル；アリールアルキル（ここで、アリール基に結合しているアルキル基は、Ｃ1−Ｃ10分枝または非分枝アルキル基、Ｃ1−Ｃ10分枝または非分枝ヒドロキシまたはポリヒドロキシアルキル基またはポリアルコキシアルキルまたはポリヒドロキシ−ポリアルコキシアルキル基である）であり、；Ｊは、任意であるが、存在する場合には、Ｃ(＝Ｏ)−、ＯＣ(＝Ｏ)−、ＳＯ2−、ＮＣ(＝Ｏ)−、ＮＣ(＝Ｓ)−、Ｎ(Ｙ)、ＮＣ(＝ＮＣＨ3)−、ＮＣ(＝ＮＨ)−、Ｎ＝Ｎ−、であるか、または合成もしくは天然アミノ酸から誘導されたホモポリアミドまたはヘテロポリアミンであり；全てにおいてｎは１〜１００である。これらの構造を有する他の変形例は、例えば、米国特許第６,０９３,３８２号に記載されている。式６において、基Ｓ−ＮＨＣＯＣＨ3は、ＳＨまたはＳ−Ｚと置き換えられ得る（ここで、Ｚは、上記したもののような既知の硫黄保護基のいずれかである）。式７は、金属キレート剤として有用なｔ−ブチル化合物の１つの具体例を示す。上記特許、出願および引用文献のそれぞれの記載内容は、出典明示によりその全体として本明細書の一部を構成する。
【００７３】
Ａａｚｔａファミリーの金属キレート剤は、一般的に、下記一般式（８）を有する：
【化２】
2011520971.tif 000009
式中、
Ｒ1は、水素、Ｃ1−Ｃ20アルキル（１個以上のカルボキシ基で置換されていてもよい）、Ｃ3−Ｃ10シクロアルキル、Ｃ4−Ｃ20シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキルであるか、または、２つのＲ1基が一緒になって直鎖または環状Ｃ2−Ｃ10アルキレン基またはオルト−二置換アリーレンを形成し；
Ｒ2は、水素もしくはカルボキシであるか、または、Ｃ1−Ｃ20アルキル、Ｃ3−Ｃ10シクロアルキル、Ｃ4−Ｃ20シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、酸性基含有基およびアミノ基含有基から選択される置換されていてもよい基（これらは、各々、生理学的な系と相互作用することができる好適な分子との結合を可能にする官能基でさらに置換されていてもよい）であり；
Ｒ3、Ｒ4およびＲ5は、同一であっても異なっていてもよく、水素もしくはカルボキシであるか、または、Ｃ1−Ｃ20アルキル、Ｃ3−Ｃ10シクロアルキル、Ｃ4−Ｃ20シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、酸性基含有基およびアミノ基含有基から選択される置換されていてもよい基（これらは、各々、生理学的な系と相互作用することができる好適な分子との結合を可能にする官能基でさらに置換されていてもよい）であり；
ＦＧは、同一であっても異なっていてもよく、カルボキシ、−ＰＯ3Ｈ2または−ＲＰ(Ｏ)ＯＨ基であり、ここで、Ｒは、水素であるか、または、Ｃ1−Ｃ20アルキル、Ｃ3−Ｃ10シクロアルキル、Ｃ4−Ｃ20シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、酸性基含有基およびアミノ基含有基から選択される置換されていてもよい基（これらは、各々、生理学的な系と相互作用することができる好適な分子との結合を可能にする官能基でさらに置換されていてもよい）である。
【００７４】
標的分子、または生理学的な系と相互作用することができる他の分子との結合を可能にする官能基は、討議者に公知である。このような基としては、例えば、カルボン酸、アミン、アルデヒド、アルキルハロゲン、アルキルマレイミド、スルフヒドリル基、ヒドロキシル基等が挙げられる。
【００７５】
このようなＡａｚｔａ金属キレート剤またはその誘導体の具体的な例としては、ＣｙＡａｚｔａが挙げられるが、これに限定されるものではない。Ａａｚｔａ誘導体としては、また、以下のものが挙げられる：
【化３−１】
2011520971.tif 000010
【化３−２】
2011520971.tif 000011
【００７６】
好ましい実施例では、金属キレート剤としては、環状または非環状ポリアミノカルボン酸、例えば、ＤＯＴＡ（１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１,４,７,１０−四酢酸）、ＤＴＰＡ（ジエチレントリアミン五酢酸）、ＤＴＰＡ−ビスメチルアミド、ＤＴＰＡ−ビスモルホリンアミド、Ｃｍ４ｐｍ１０ｄ２ａ（１,４−カルボニルメチル−１０−ホスホノメチル−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１,７−二酢酸）、ＤＯ３Ａ  Ｎ−[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル、ＨＰ−ＤＯ３Ａ、ＤＯ３Ａ−モノアミドおよびそれらの誘導体が挙げられる。別の好ましい実施態様では、金属キレート剤としては、Ａａｚｔａまたはその誘導体が挙げられる。
【００７７】
シンチグラフィーまたは放射線療法のための好ましい金属放射線核種としては、99mＴｃ、51Ｃｒ、67Ｇａ、68Ｇａ、47Ｓｃ、51Ｃｒ、167Ｔｍ、141Ｃｅ、111Ｉｎ、168Ｙｂ、175Ｙｂ、140Ｌａ、90Ｙ、88Ｙ、153Ｓｍ、166Ｈｏ、165Ｄｙ、166Ｄｙ、62Ｃｕ、64Ｃｕ、67Ｃｕ、97Ｒｕ、103Ｒｕ、186Ｒｅ、188Ｒｅ、203Ｐｂ、211Ｂｉ、212Ｂｉ、213Ｂｉ、214Ｂｉ、105Ｒｈ、109Ｐｄ、117mＳｎ、149Ｐｍ、161Ｔｂ、177Ｌｕ、198Ａｕおよび199Ａｕ、ならびにそれらの酸化物または窒化物が挙げられる。金属の選択は、所望の治療用途または診断用途に基づいて決定される。例えば、診断目的のため（例えば、原発性腫瘍および転移を診断し、その治療の進捗をモニターするため）には、好ましい放射線核種としては、64Ｃｕ、67Ｇａ、68Ｇａ、99mＴｃおよび111Ｉｎが挙げられ、99mＴｃ、111Ｉｎおよび68Ｇａが特に好ましい。治療目的のため（例えば、前立腺癌、乳癌、肺癌などの癌に関係する原発性腫瘍および転移について放射線療法を施すため）には、好ましい放射線核種としては、64Ｃｕ、90Ｙ、105Ｒｈ、111Ｉｎ、117mＳｎ、149Ｐｍ、153Ｓｍ、161Ｔｂ、166Ｄｙ、166Ｈｏ、175Ｙｂ、177Ｌｕ、186/188Ｒｅおよび199Ａｕが挙げられ、177Ｌｕおよび90Ｙが特に好ましい。
【００７８】
99mＴｃは、特に有用であり、その安価さ、有効性、画像化特性および高い特異的活性のために、ＳＰＥＣＴおよび二次元画像化のための診断用放射線核種に好ましい。99mＴｃの核特性および放射性により、この同位体は理想的なシンチグラフィー造影剤となる。この動態は、１４０ｋｅＶの単一光子エネルギーおよび約６時間の放射能半減期を有し、99Ｍｏ−99mＴｃ発生器から容易に入手可能である。例えば、99mＴｃ標識ペプチドは、原発性腫瘍および因子腫瘍を診断し、その治療の進捗をモニターするために使用することができる。
【００７９】
同様に、68Ｇａは、特に有用であり、ポジトロン放出断層撮影（ＰＥＴ）のための理想的な同位体である。それは68ゲルマニウム／68ガリウム発生器から生成され、かくして、サイクロトロンへアクセスせずにポジトロン放出性同位体の使用を可能にする。いくつかのタイプの68Ｇｅ／68Ｇａ発生器が当業者に知られている。これらは、68Ｇｅを保持するために使用される吸着剤の性質、長寿命の親同位体、発生器、およびカラムから68Ｇａを溶出させるための溶離液が異なる（例えば、Fania et al, Contrast Media Mol. Imaging 2008, 3 67-77；Zhernosekov et al. J. Nucl. Med, 2007, 48, 1741-1748を参照）。
【００８０】
このような発生器を溶出するために、しばしば、多量の酸（例えば、ＨＣｌ）が使用され、この溶離液の量の多さおよび酸性度が後の標識化反応に理想的でないことは当業者に知られている。したがって、場合によっては、発生器溶離液を、例えば、68Ｇｅブレイクスルーを取り除くことによって溶出液の前精製することができ、および／または、後に少量の酸または酸とアセトンのような有機溶媒との混合物を使用して樹脂から取り出すことができる68Ｇａの濃縮に役立つ陰イオン交換樹脂または陽イオン交換樹脂を使用して前精製する。別法として、最高濃度の同位体を含有する発生器溶出液のほんの少量のフラクションを使用することができる。これは分画として知られている手法である。68Ｇａは、６８分の物理的半減期を有しており、ペプチド、抗体フラグメント、オリゴヌクリオチドおよびアプタマーおよび小分子のような多くの低分子量放射性医薬品のクリアランス薬物動態と一致する。68Ｇａは約８９％がポジトロン放出によって崩壊し、約１１％が電子捕獲により崩壊する。崩壊当たりの平均位置エネルギーは７４０ｋｅＶであり、ＰＥＴ画像化に有用なエネルギーである。
【００８１】
68Ｇａ標識化合物は、典型的には、化合物を間接的に製造し、（必要に応じて）精製するようにプログラムされ得る自動合成装置を使用して宿主細胞中で調製される；これは、化学者を不適切な放射線暴露から保護する。同位体の短い半減期のために、マイクロ波加熱の使用を含む反応速度を上げるのに有用な方法が有利である（Velikyan、国際公開第２００４／０８９５１７号）。
【００８２】
177Ｌｕ、90Ｙまたは他の治療用放射線核種で標識されたＧＲＰ含有ペプチドは、前立腺癌、乳癌、肺癌などの癌に関係する原発性腫瘍および転移についての放射線療法を施すために使用され得る。
【００８３】
１Ｂ．光学的標識
例示的な実施態様では、本発明の化合物を、多くの非局在化環系を有しており、４００〜１５００ｎｍの範囲の最大の吸収または放出を有する有機発色団またはフルオロフォアを包含する光学色素のような光標識と結合させることができる。別法として、本発明の化合物を生物発光分子により誘導体化させることができる。光標識の最大吸収の好ましい範囲は、ヘモグロビンからのシグナルによる干渉を最小にするために、６００〜１０００ｎｍである。好ましくは、光吸収標識は、大きなモル吸光度、例えば、＞１０5ｃｍ-1Ｍ-1を有しており、一方、蛍光光学色素は、高量子収率を有する。光学色素の例としては、国際公開第９８／１８４９７、国際公開第９８／１８４９６、国際公開第９８／１８４９５、国際公開第９８／１８４９８、国際公開第９８／５３８５７、国際公開第９６／１７６２８、国際公開第９７／１８８４１、国際公開第９６／２３５２４、国際公開第９８／４７５３８、およびそれらに引用されている参考文献に記載されるものが挙げられるが、これらに限定されるものではない。例えば、光標識を、本発明のＧＲＰ受容体標的ペプチドおよびリンカーからなる化合物のような本発明の化合物と直接共有結合させることができる。電磁スペクトルの可視近赤外領域の光を吸収および放出するいくつかの色素が、現在、それらの生体適合性、高モル吸光度および／または高蛍光量子収率のために、種々の生物医学的応用に使用されている。造影剤としての色素と併用する光学モダリティーの高い感度は、核医学の感度に匹敵し、電離放射線の望ましくない効果を伴わずに器官および組織の可視化を可能にする。生体組織は近赤外（ＮＩＲ）領域で光学的に透明であるので、この領域における極めて強い吸収および放出を有するシアニン色素は特に有用である。たとえば、ＮＩＲ領域で吸収および放出するインドシアニングリーンは、心拍出量、肝機能および肝血流量をモニターするのに使用されており、その官能性誘導体は、診断目的のために生体分子と結合するために使用されてきた（R. B. Mujumdar, L. A. Ernst, S. R. Mujumdar, et al., Cyanine dye labeling reagents: Sulfoindocyanine succinimidyl esters. Bioconjugate Chemistry, 1993, 4(2), 105-111；Linda G. Lee and Sam L. Woo. "N-Heteroaromatic ion and iminium ion substituted cyanine dyes for use as fluorescent labels"、米国特許第５,４５３,５０５号；Eric Hohenschuh, et al. "Light imaging contrast agents"、国際公開第９８／４８８４６号；Jonathan Turner, et al. "Optical diagnostic agents for the diagnosis of neurodegenerative diseases by means of near infra-red radiation"、国際公開第９８／２２１４６号；Kai Licha, et al. "In-vivo diagnostic process by near infrared radiation"、国際公開第９６／１７６２８号；Robert A. Snow, et al., Compounds、国際公開第９８／４８８３８号）。様々な画像化技術および試薬が米国特許第６,６６３,８４７号、第６,６５６,４５１号、第６,６４１,７９８号、第６,４８５,７０４号、第６,４２３,５４７号、第６,３９５,２５７号、第６,２８０,７０３号、第６,２７７,８４１号、第６,２６４,９２０号、第６,２６４,９１９号、第６,２２８,３４４号、第６,２１７,８４８号、第６,１９０,６４１号、第６,１８３,７２６号、第６,１８０,０８７号、第６,１８０,０８６号、第６,１８０,０８５号および第６,０１３,２４３号、ならびに米国特許出願公開第２００３１８５７５６号、第２００３１６５６４３２号、第２００３１５８１２７号、第２００３１５２５７７号、第２００３１４３１５９号、第２００３１０５３００号、第２００３１０５２９９号、第２００３０７２７６３号、第２００３０３６５３８号、第２００３０３１６２７号、第２００３０１７１６４号、第２００２１６９１０７号、第２００２１６４２８７号および第２００２１５６１１７に記載されている。上記の参考文献は全て出典明示によりその全体として本明細書の一部を構成する。
【００８４】
１Ｃ．放射性標識ハロゲンを含有する基
例えば放射性ヨウ素、放射性フッ素などのような放射性標識ハロゲンを含有する基は、当該技術分野で知られており、それらに本発明のＮ−Ｏ−Ｐ−Ｇ成分に結合する方法も知られている。好ましい実施態様では、Zhang et al, J. Nuclear Medicine 47:492-501 (2006)に記載されているような基が用いられる。
【００８５】
２Ａ．少なくとも１つの非αアミノ酸を含有するリンカー
本発明の一の実施態様では、リンカーＮ−Ｏ−Ｐは、少なくとも１つの非αアミノ酸を含有する。かくして、リンカーＮ−Ｏ−Ｐのこの実施態様では、
Ｎは、０（ここで、０は存在しないことを意味する）であるか、またはαもしくは非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｏは、αまたは非αアミノ酸であり；
Ｐは、０であるか、またはαもしくは非αアミノ酸または他の連結基であり、
ここで、Ｎ、ＯまたはＰのうち少なくとも１つは非αアミノ酸である。
かくして、一例として、ＮはＧｌｙであり、Ｏは非αアミノ酸であり、Ｐは０である。
【００８６】
αアミノ酸は当該技術分野で周知であり、天然アミノ酸および合成アミノ酸を包含する。
【００８７】
非αアミノ酸もまた当該技術分野で知られており、天然または合成のものを包含する。好ましい非αアミノ酸としては、
８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸；
Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−酢酸；および
式ＮＨ2−(ＣＨ2ＣＨ2Ｏ)n−ＣＨ2ＣＯ2ＨまたはＮＨ2−(ＣＨ2ＣＨ2Ｏ)n−ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ2Ｈ（ここで、ｎは２〜１００である）を有するポリエチレングリコール誘導体
が挙げられる。
【００８８】
少なくとも１つの非αアミノ酸を有するリンカーを含有する式Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇを有する化合物の例を表１に挙げる。これらの化合物は、本明細書に、特に実施例に記載されている方法を使用して、また、当業者に知られている類似の方法によって、製造され得る。
【００８９】
【表３−１】
2011520971.tif 000012
【表３−２】
2011520971.tif 000013
【表３−３】
2011520971.tif 000014
【表３−４】
2011520971.tif 000015
【表３−５】
2011520971.tif 000016
【表３−６】
2011520971.tif 000017
【００９０】
*  ＢＢＮ(７−１４)は、ＱＷＡＶＧＨＬＭ（配列番号１）に対応する。
1  ＨＰＬＣ法とは、ＨＰＬＣ勾配液について１０分間にわたって生じる勾配変化をいう。
2  ＨＰＬＣ  ＲＴとは、ＨＰＬＣにおける化合物の保持時間をいう。
3  ＭＳとは、質量／単位電荷（ｍ／ｅ）から分子量を算出する質量スペクトルをいう。
4  ＩＣ50とは、ヨウ素化ボンベシンの細胞上ＧＲＰ受容体への結合を５０％阻害するための化合物の濃度をいう。
【００９１】
２Ｂ．少なくとも１つの置換胆汁酸を含有するリンカー
本発明の別の実施態様では、リンカーＮ−Ｏ−Ｐは、少なくとも１つの置換胆汁酸を含有する。かくして、リンカーＮ−Ｏ−Ｐのこの実施態様では、
Ｎは、０（ここで、０は、存在しないことを意味する）であるか、またはαアミノ酸、置換胆汁酸または他の連結基であり；
Ｏは、αアミノ酸または置換胆汁酸であり；
Ｐは、０であるか、またはαアミノ酸、置換胆汁酸または他の連結基であり、
ここで、Ｎ、ＯまたはＰのうち少なくとも１つは、置換酸である。
【００９２】
胆汁酸は、胆汁（肝臓の分泌物）に含まれており、カルボキシル基の末端に１つのヒドロキシル基および五炭素原子側鎖を有するステロイドである。置換胆汁酸では、胆汁酸の水素原子のような少なくとも１つの原子が、別の原子、分子または化学基と置き換えられている。例えば、置換胆汁酸としては、７位および１２位が水素、ヒドロキシルまたはケト官能基で置換されていてもよい３−アミノ,２４−カルボキシル官能基を有するものが挙げられる。
【００９３】
本発明において有用な他の置換胆汁酸としては、置換コール酸およびその誘導体が挙げられる。具体的な置換コール酸誘導体としては、
(３β,５β)−３−アミノコラン−２４−酸；
(３β,５β,１２α)−３−アミノ−１２−ヒドロキシコラン−２４−酸；
(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸；
Ｌｙｓ−(３,６,９)−トリオキサウンデカン−１,１１−ジカルボニル３,７−ジデオキシ−３−アミノコール酸）；
(３β,５β,７α)−３−アミノ−７−ヒドロキシ−１２−オキソコラン−２４−酸；および
(３β,５β,７α)−３−アミノ−７−ヒドロキシコラン−２４−酸
が挙げられる。
【００９４】
少なくとも１つの置換胆汁酸を有するリンカーを含有する式Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇを有する化合物の例を表２に挙げる。これらの化合物は、本明細書に、特に実施例に記載されている方法を使用して、また、当業者に知られている類似の方法によって、製造され得る。
【００９５】
【表４−１】
2011520971.tif 000018
【表４−２】
2011520971.tif 000019
【表４−３】
2011520971.tif 000020
【表４−４】
2011520971.tif 000021
【００９６】
*  ＢＢＮ(７−１４)は、ＱＷＡＶＧＨＬＭ（配列番号１）に対応する。
1  ＨＰＬＣ法とは、ＨＰＬＣ勾配液について１０分間をいう。
2  ＨＰＬＣ  ＲＴとは、ＨＰＬＣにおける化合物の保持時間をいう。
3  ＭＳとは、質量／単位電荷（ｍ／ｅ）から分子量を算出する質量スペクトルをいう。
4  ＩＣ50とは、ヨウ素化ボンベシン（125Ｉ−[Ｔｙｒ4]−ＢＢＮ）の細胞上ＧＲＰ受容体への結合を５０％阻害するための化合物の濃度をいう。
【００９７】
２Ｃ．環状基を有する少なくとも１つの非αアミノ酸を含有するリンカー
本発明の別の実施態様では、リンカーＮ−Ｏ−Ｐは、環状基を有する少なくとも１つの非αアミノ酸を含有する。かくして、リンカーＮ−Ｏ−Ｐのこの実施態様では、
Ｎは、０（ここで、０は、存在しないことを意味する）であるか、またはαアミノ酸、環状基を有する非αアミノ酸、または他の連結基であり；
Ｏは、αアミノ酸、または環状基を有する非αアミノ酸であり；
Ｐは、０であるか、またはαアミノ酸、環状基を有する非αアミノ酸、または他の連結基であり、
ここで、Ｎ、ＯまたはＰのうち少なくとも１つは、環状基を有する非αアミノ酸である。
【００９８】
環状基を有する非αアミノ酸としては、置換されているフェニル、ビフェニルもしくはシクロヘキシル、または他のアミンおよびカルボキシルを含有する環状基、脂肪族基もしくは複素環基が挙げられる。このようなものの例としては、以下のものが挙げられる：
【００９９】
【表５】
2011520971.tif 000022
【０１００】
環状基を有する少なくとも１つのαアミノ酸を有するリンカーを含有する式Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇを有する化合物の例を表３に挙げる。これらの化合物は、本明細書に、特に実施例に記載されている方法を使用して、また、当業者に知られている類似の方法によって、製造され得る。
【０１０１】
【表６−１】
2011520971.tif 000023
【表６−２】
2011520971.tif 000024
【表６−３】
2011520971.tif 000025
【表６−４】
2011520971.tif 000026
【表６−５】
2011520971.tif 000027
【表６−６】
2011520971.tif 000028
【表６−７】
2011520971.tif 000029
【表６−８】
2011520971.tif 000030
【表６−９】
2011520971.tif 000031
【０１０２】
*  ＢＢＮ(７−１４)は、ＱＷＡＶＧＨＬＭ（配列番号１）に対応する。
**  ＮＴは、「試験していない」と定義される。
***  ＢＯＡは、(１Ｒ)−１−(ビス{２−[ビス(カルボキシメチル)アミノ]エチル}アミノ)プロパン−１,３−ジカルボン酸と定義される。
1  ＨＰＬＣ法とは、ＨＰＬＣ勾配液について１０分間にわたって生じる勾配変化をいう。
2  ＨＰＬＣ  ＲＴとは、ＨＰＬＣにおける化合物の保持時間をいう。
3  ＭＳとは、質量／単位電荷（ｍ／ｅ）から分子量を算出する質量スペクトルをいう。
4  ＩＣ50とは、ヨウ素化ボンベシンの細胞上ＧＲＰ受容体への結合を５０％阻害するための化合物の濃度をいう。
【０１０３】
好ましいリンカーおよび種々のＧＲＰ受容体標的ペプチドを含有する化合物のサブセットを表４に記載する。これらの化合物は、本明細書に、特に実施例に記載されている方法を使用して、また、当業者に知られている類似の方法によって、製造され得る。
【０１０４】
【表７−１】
2011520971.tif 000032
【表７−２】
2011520971.tif 000033
【表７−３】
2011520971.tif 000034
【表７−４】
2011520971.tif 000035
【０１０５】
*  ＢＢＮ(７−１４)は、ＱＷＡＶＧＨＬＭ（配列番号１）に対応する。
【０１０６】
２Ｄ．他の連結基
リンカーＮ−Ｏ−Ｐ内で使用され得る他の連結基としては、ＧＲＰ受容体標的ペプチドと金属キレート剤または光学的標識とを結合させる役割を果たすが、ＧＲＰ受容体標的ペプチドの標的機能または金属キレート剤の金属錯体形成機能または光学的標識検出能に悪影響を及ぼさない化学基が挙げられる。好適な他の連結基としては、ペプチド（すなわち、連結しているアミノ酸）単独、非ペプチド基（例えば、炭化水素鎖）、またはアミノ酸配列と非ペプチドスペーサーとの組み合わせが挙げられる。
【０１０７】
一の実施態様では、リンカーＮ−Ｏ−Ｐ内で用いるための他の連結基としては、Ｌ−グルタミンおよび炭化水素鎖、またはそれらの組み合わせが挙げられる。
【０１０８】
別の実施態様では、リンカーＮ−Ｏ−Ｐ内で用いるための他の連結基としては、一連のアミノ酸（例えば、ジグリシン、トリグリシン、ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｕ、ｇｌｙ−ｓｅｒ−ｇｌｙなど）からなる純粋なペプチド連結基（ここで、高分子鎖中のＧＲＰ受容体標的ペプチドのＮ末端残基と金属キレート剤または光学的標識との間の原子の総数は１２原子以下である）が挙げられる。
【０１０９】
さらなる実施態様では、リンカーＮ−Ｏ−Ｐ内で用いるための他の連結基としては、炭化水素鎖［すなわち、Ｒ1−(ＣＨ2)n−Ｒ2］（ここで、ｎは０〜１０であり、好ましくは、ｎは３〜９であり、Ｒ1は、リガンド骨格または予め形成された金属キレート剤もしくは金属錯体形成骨格または光学的標識と共有結合する部位として使用することができる基（例えば、Ｈ2Ｎ−、ＨＳ−、−ＣＯＯＨ）であり；Ｒ2は、ＧＲＰ受容体標的ペプチドのＮ末端ＮＨ2−基との共有結合に使用される基である（例えば、Ｒ2は、活性ＣＯＯＨ基である））を挙げることができる。リガンド（すなわち、キレート剤）または好ましい金属キレートを生体分子と結合させるためのいくつかの化学的方法は、文献［Wilbur, 1992; Parker, 1990；Hermanson, 1996；Frizberg et al., 1995］に十分に記載されている。これらの方法のうち１つ以上が、非錯体形成リガンド（キレート剤）または放射性金属キレートまたは光学的標識のいずれかをリンカーと結合させるために、またはリンカーをＧＲＰ受容体標的ペプチドに結合させるために使用され得る。これらの方法としては、酸無水物、アルデヒド、アリールイソチオシアナート、活性エステル、またはＮ−ヒドロキシスクシンイミドの形成が挙げられる［Wilbur, 1992；Parker, 1990；Hermanson, 1996；Frizberg et al., 1995］。
【０１１０】
好ましい実施態様では、リンカーＮ−Ｏ−Ｐ内で用いるための他の連結基は、以下に記載されるような求電子試薬または求核試薬を有するリンカー前駆体から形成され得る：
ＬＰ１：  リンカーの少なくとも２つの位置に同一の求電子試薬Ｅ１または同一の求核試薬Ｎｕ１を有するリンカー前駆体；
ＬＰ２：  求電子試薬Ｅ１、およびリンカーの別の位置に異なる求電子試薬Ｅ２を有するリンカー前駆体；
ＬＰ３：  求核試薬Ｎｕ１、およびリンカーの別の位置に異なる求核試薬Ｎｕ２を有するリンカー前駆体；または
ＬＰ４：  一端が求電子試薬Ｅ１で官能化されており、他端が求核試薬Ｎｕ１で官能化されているリンカー前駆体。
【０１１１】
好ましい求核試薬Ｎｕ１／Ｎｕ２としては、−ＯＨ、−ＮＨ、−ＮＲ、−ＳＨ、−ＨＮ−ＮＨ2、−ＲＮ−ＮＨ2および−ＲＮ−ＮＨＲ'（ここで、Ｒ'およびＲは、独立して、Ｒについての上記定義から選択されるが、Ｒ'はＨではない）が挙げられる。
【０１１２】
好ましい求電子試薬Ｅ１／Ｅ２としては、−ＣＯＯＨ、−ＣＨ＝Ｏ（アルデヒド）、−ＣＲ＝ＯＲ'（ケトン）、−ＲＮ−Ｃ＝Ｓ、−ＲＮ−Ｃ＝Ｏ,−Ｓ−Ｓ−２−ピリジル、−ＳＯ2−Ｙ、−ＣＨ2Ｃ(＝Ｏ)Ｙ、および
【化４】
2011520971.tif 000036
が挙げられる、ここで、Ｙは、以下の群から選択され得る：
【化５】
2011520971.tif 000037
【０１１３】
３．ＧＲＰ受容体標的ペプチド
ＧＲＰ受容体標的ペプチド（すなわち、式Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−ＧにおけるＧ）は、ＧＲＰ受容体ファミリーに対して結合親和性を有するいずれものペプチド、その等価物、誘導体またはアナログである。
【０１１４】
ＧＲＰ受容体標的ペプチドは、アゴニストまたはアンタゴニストの形態をとり得る。ＧＲＰ受容体標的ペプチドアゴニストは、高親和性をもって結合して細胞を「活性化」させることが知られており、細胞により内部に取り込まれ得る。反対に、ＧＲＰ受容体標的ペプチドアンタゴニストは、細胞によって内部に取り込まれることなく、また、細胞を「活性化」させることなく、細胞上のＧＲＰ受容体だけに結合することが知られている。好ましい実施態様では、ＧＲＰ受容体標的ペプチドはアゴニストである。
【０１１５】
本発明のより好ましい実施態様では、ＧＲＰアゴニストは、ボンベシン（ＢＢＮ）アナログおよび／またはその誘導体である。ＢＢＮ誘導体またはそのアナログは、好ましくは、ＢＢＮ結合領域（すなわち、ＢＢＮ(７−１４)（配列番号１））の同一の一次構造、またはＢＢＮ単独よりも優れているかまたはそれと同様の結合親和性（すなわち、Ｋｄ＜２５ｎＭ）をもってＧＲＰ受容体に特異的に結合する特定のアミノ酸置換を有する類似の一次構造を含有する。好適な化合物としては、ペプチド、ペプチド模倣物およびアナログならびにそれらの誘導体が挙げられる。ＢＢＮ−１４位でのＬ−メチオニン（Ｍｅｔ）の存在は、一般に、アゴニスト特性を与えるが、一方、ＢＢＮ−１４位でのこの残基の不在は、一般に、アンタゴニスト特性を与える［Hoffken, 1994］。いくつかの有用なボンベシンアナログは、米国特許出願公開第２００３／０２２４９９８号（出典明示によりその全体として本明細書の一部を構成する）に記載されている。
【０１１６】
結合親和性を低下させずに行われ得るＢＢＮ(７−１４)結合領域における特定のアミノ酸置換（例えば、Ｌ−Ｇｌｙ11のＤ−Ａｌａ11への置換、またはＬ−Ｔｒｐ8のＤ−Ｔｒｐ8への置換）が数個あることは当該技術分野の文献に十分に記載されている［Leban et al., 1994；Qin et al., 1994；Jensen et al., 1993］。加えて、ＢＢＮ−８位のＮ末端アミン基（すなわち、Ｔｒｐ８残基）にいくつかのアミノ酸鎖または他の基を結合させることにより、ＢＢＮアナログのＧＲＰ受容体に対する結合親和性を劇的に低下させることができる［Davis et al., 1992；Hoffken, 1994；Moody et al., 1996；Coy, et al., 1988；Cai et al., 1994］。結合親和性を低下させずにさらなるアミノ酸または化学基を結合させることができる場合がいくつかある。
【０１１７】
ＢＢＮ受容体標的ペプチドのアナログとしては、ＢＢＮと同等またはそれ以上の結合力をもってＧＲＰ受容体を標的とする分子、ならびにＧＲＰまたはＢＢＮの変異タンパク質、レトロペプチドおよびレトロ−インバーソ−ペプチドが挙げられる。当業者には当然のことであるが、これらのアナログには、また、１つまたは数個のアミノ酸の置換および／または欠失および／または付加を含む修飾が、これらの修飾が本明細書に記載のペプチドの生物学的活性をネガティブに変更しない限り、含まれ得る。これらの置換は、１つ以上のアミノ酸をそれらの同義アミノ酸に置き換えることによって行われ得る。１つのグループ内の同義アミノ酸は、分子の生物学的機能を保存するために、１つのグループのメンバー間での置換を可能にするのに十分な物理化学的特性を有するアミノ酸であると定義される。
【０１１８】
アミノ酸の欠失または挿入もまた、それらが定義された配列の生物学的機能を変更しないならば、その配列に導入され得る。好ましくは、このような挿入または欠失は、１、２、３、４または５つのアミノ酸に制限されるべきであり、機能的構造に不可欠であるアミノ酸の除去、物理的な妨害および置換をすべきではない。本明細書に記載されているＧＲＰ受容体標的ペプチドの変異タンパク質は、アミノ酸置換、欠失または挿入が１つ以上のアミノ酸位置に存在する、本明細書に記載の配列と相同の配列を有することができる。変異タンパク質は、本明細書に記載のペプチドの少なくとも４０％、好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは６０〜７０％、最も好ましくは８０〜９０％の生物学的活性を有することができる。しかしながら、それらは、また、具体的に例示したペプチドよりも高い生物学的活性を有することができ、かくして、必ずしも例示したペプチドの生物学的機能と同一である必要はない。ＧＲＰ受容体標的ペプチドのアナログとしては、また、ペプチド骨格のアミド結合にチオアミド、メチレンアミンおよびＥ−オレフィンを包含する変化を取込んでいるペプチド模倣物または偽ペプチドが挙げられる。また、ＧＲＰもしくはＢＢＮの構造をベースとするペプチド、またはＮ置換ヒドラジンカルボニル化合物によって置換されたアミノ酸（アザアミノ酸としても知られている）を有するそれらのペプチドアナログは、本明細書で使用されるアナログなる用語に含まれる。
【０１１９】
ＧＲＰ受容体標的ペプチドは、選択されたキレート剤に依存する様々な方法によって製造され得る。該ペプチドは、一般に、固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）法のようなペプチド合成の技術分野で一般的に確立されていて知られている技術によって最も好都合に製造され得る。固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）は、ポリスチレンのような不溶性支持体またはマトリックスに結合される伸長ペプチド鎖にアミノ酸残基を段階的に付加することを含む。該ペプチドのＣ末端残基（そのアミノ基はｔ−ブチルオキシカルボニル基（Ｂｏｃ）またはフルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）基のようなＮ保護剤で保護されている）をまず市販の支持体に固着させる。アミノ保護基を好適な脱保護剤、例えばＢｏｃの場合にはＴＦＡ、Ｆｍｏｃの場合にはピペリジンで除去し、Ｎ,Ｎ'−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、またはＮ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）または２−(１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）のようなカップリング剤と一緒に次のアミノ酸残基（Ｎ保護形態で）を添加する。ペプチド結合の形成後、該試薬を支持体から洗い落とす。最後の残基を付加した後、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）またはフッ化水素（ＨＦ）のような好適な試薬を用いて、該ペプチドを支持体から切断する。
【０１２０】
次いで、ＧＲＰ受容体標的ペプチドのＴｒｐ8残基の遊離アミノ基をリンカーの適当な官能基と反応させることによってリンカーを結合させて複合体を形成することができる。同様に、上記のキレート剤、リンカーおよび標的基の全体的な構築物は、また、樹脂上で組み立て得れ、次いで、トリフルオロ酢酸またはＨＦのような好適な試薬の媒介によって切断され得る。
【０１２１】
ボンベシン(７−１４)は、ペプチドの半減期を短縮する、インビトロおよびインビボでのタンパク質切断を受ける。ポリペプチドの骨格のアミド結合は置換されることができ、活性を保持することができるが、一方、タンパク質切断に抵抗することが文献から周知である。例えば、望ましくないタンパク質分解、または血清安定性を低下させて生物活性を低下または消滅させる他の分解経路を減少させるかまたはなくすために、あるいは、構造的柔軟性を制限または向上させるために、ペプチドの骨格内のアミド結合を、所望の方法で現存の構造を模倣するかまたは構造を変更する官能基で置換することは一般的である。このような修飾により、結合親和性または薬物動態反応を向上させることができる。当然のことながら、ペプチド合成の技術分野における当業者は、生じたペプチドが同一または向上した活性を有することができることを見込んで、２つのアミノ酸を連結するいずれものアミド結合（例えば、標的基、リンカー、キレート剤などのにおけるアミド結合）についての以下のアミド結合変化を行うことができる：α−Ｎ−メチルアミドまたは骨格チオアミドの挿入、同族の二級アミンを得るためのカルボニルの除去、セミカルバゾン誘導体を得るための１つのアミノ酸のアザアミノ酸による置換、ならびにアミド結合代替としてのＥ−オレフィンおよび置換Ｅ−オレフィンの使用。不安定なアミド結合のアミノ酸のうちの１つのＤ−アミノ酸の取り込みにより、またはα−メチルアミノ酸誘導体により、加水分解を防止することができる。骨格アミド結合は、また、オキサゾール、ピロリジン、イミダゾールのような複素環、ならびにケトメチレンおよびフルオロオレフィンによって置換されてきた。
【０１２２】
このようなアミド結合修飾を含むいくつかの具体的な化合物を表４ａに挙げる。種々のアミド結合修飾について表４ａで用いた略語を以下に例示する：
【０１２３】
【化６】
2011520971.tif 000038
【０１２４】
【表８−１】
2011520971.tif 000039
【表８−２】
2011520971.tif 000040
【表８−３】
2011520971.tif 000041
【０１２５】
上記表中、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は、配列番号１であり、ＱＷＡＶＧＨＦＬ−ＮＨ2（Ｌ３００）は、配列番号２２である。
【０１２６】
４．放射性医薬品の標識および投与
金属の放射性医薬品複合体内への取り込みは、配位化学の分野で一般的に知られている様々な方法によって行われ得る。金属が診断用画像化のための好ましい放射線核種である99mＴｃである場合、以下の一般的な手順を使用してテクネチウム錯体を形成することができる。ペプチド−キレート剤複合体溶液は、まず、該複合体を水、希酸に溶解するか、またはエタノールのようなアルコールの水溶液に溶解することによって得られる。次いで、該溶液を脱気して溶存酸素を除去してもよい。ペプチド中に−ＳＨ基が存在する場合、チオール保護基、例えばＡｃｍ（アセトアミドメチル）、トリチルまたは他のチオール保護基を使用してチオールを酸化から保護してもよい。チオール保護基は、適当な試薬、例えば水酸化ナトリウムを用いて除去され、次いで、酢酸のような有機酸を用いて中和される（ｐＨ６.０〜６.５）。別法として、チオール保護基は、テクネチウムキレート化の間にその反応系で除去され得る。標識化工程では、該複合体の溶液に、モリブデン発生器から得られる過テクネチウム酸ナトリウムを、テクネチウムを還元するのに十分な量の還元剤（例えば、塩化第一スズ）と一緒に添加し、室温で放置するかまたは加熱する。標識複合体は、例えばＣ−１８  Ｓｅｐ  Ｐａｋカートリッジ［Millipore Corporation, Waters Chromatography Division, 34 Maple Street, Milford, Massachusetts 01757］を用いて、または、当業者に公知の方法を使用するＨＰＬＣによって、クロマトグラフィーにより不純物99mＴｃＯ4-およびコロイド状99mＴｃＯ2と分離することができる。
【０１２７】
別法として、標識化は、トランスキレート形成反応によって行うことができる。この方法では、テクネチウム源はテクネチウムの溶液であり、これは、選択されたキレート剤との反応の前に還元されて不安定なリガンドと錯体を形成して該選択されたキレート剤とのリガンド交換を促進する。トランスキレート形成に好適なリガンドの例としては、酒石酸エステル、クエン酸エステル、グルコン酸エステルおよびヘプタグルコン酸エステルが挙げられる。当然のことながら、該複合体は、上記の方法を使用して標識化され得るか、または、別法として、キレート剤自体が標識され、次いで、ペプチドと結合して複合体が形成される；この方法は「前標識キレート」法と称される。ＲｅおよびＴｃは、共に、周期表のＶＩＩＢ列にあり、それらは、化学的同族体である。かくして、高いインビトロおよびインビボ安定性を示すこれらの２つの金属のリガント骨格との錯体形成化学は、ほとんど同じであり［Eckelman, 1995］、類似のキレート剤および方法を使用してＲｅで標識することができる。ペプチドおよびタンパク質と安定な放射性金属錯体を形成するために使用される多くの99mＴｃまたは186/188Ｒｅ錯体は、これらの金属をそれらの＋５酸化状態でキレート形成する［Lister-James et al., 1997］。この酸化状態により、99mＴｃ−または186/188Ｒｅを、様々な99mＴｃ(Ｖ)および／または186/188Ｒｅ(Ｖ)弱キレート（例えば、99mＴｃ−グルコヘプトネート、シトレート、グルコネート等）から構築される既に生体分子と結合しているリガンド骨格内に選択的に配置することができる［Eckelman, 1995；Lister-James et al., 1997；Pollak et al., 1996］。これらの参考文献は、出典明示によりその全体として本明細書の一部を構成する。
【０１２８】
ポジトロン放出放射性同位体68Ｇａは、ＰＥＴ（ポジトロン放出断層撮影）画像化のための好ましい放射性金属である。68Ｇａの重要な性質は、68Ｇｅ／68Ｇａ放射線核種発生器系によるそのサイクロトロン非依存性利用能である。相対的長命の親68Ｇｅ（半減期［ｔ1/2］＝２７０.９５日）は短命の68Ｇａ（ｔ1/2＝６７.７１分）を生成し、その後崩壊して安定な６８68Ｚｎとなる。68Ｇａは優れたポジトロン放出体であり、８９％のポジトロン分岐が低光子放出（１,０７７ｋｅＶ、３.２２％）により行われる。68Ｇｅ／68Ｇａ放射線核種発生器は、およそ５０年間、開発および研究中であった。最近の概説としては、Roesch et al.（Roesch F, Knapp FF. Radionuclide generators. In: Vertes A, Nagy S, Klencsar Z, Roesch F, eds. Handbook of Nuclear Chemistry. Dordrecht, The Netherlands: Kluwer Academic Publishers; 2003;4:81-118.）を参照。
【０１２９】
現在、最も一般的な市販の68Ｇｅ／68Ｇａ放射線核種発生器は、ＴｉＯ2固相法に基づいているが、他の固相法を使用することができる。「イオン型」68Ｇａ3+は、例えば０.１Ｎ  ＨＣｌ溶液を用いて該発生器から溶出されるが、他の溶離液を使用することもできる。68Ｇａ収率は、溶出液５ｍＬ中＞６０％である；長命の親68Ｇｅのブレイクスルーは、通常、５×１０-3％以下である。この溶出液は、標識のために直接使用され得るか、または、標識化前に前精製して濃縮されるか、および／または68Ｇｅおよび他の微量金属を除去することができる。例えば、Hofmann et al（Hofmann M, Maecke HR, Boerner AR, et al. Biokinetics and imaging with the somatostatin receptor PET radioligand 68Ga-DOTATOC: preliminary data. Eur J Nucl Med. 2001;28:1751-1757）およびMeyer et al（Meyer G-J, Maecke HR, Schuhmacher J, Knapp WH, Hofmann M. 68Ga-Labelled DOTA-derivatised peptide ligands. Eur J Nucl Med. 2004;31:1097-1104）には、初期発生器溶出液を強酸（例えば、９.５Ｎ  ＨＣｌ）で処理する濃縮方法が記載されているこれらの条件下では、68Ｇａは、68Ｇａ(ＩＩＩ)の陰イオンクロロ錯体として強い陰イオン交換体に吸着され得る。５.５Ｎ  ＨＣｌによる洗浄工程の後、樹脂を窒素流でフラッシュし、次いで、少量のＨ2Ｏで溶離する。このストラテジーにより、68Ｇｅは68Ｇａと分離される。
【０１３０】
Konstantin（K. P. Zhernosekov, D. V. Filosofov, R. P. Baum, P. Aschoff, H. Bihl, A. A. Razbash, M. Jahn, M. Jennewein and F. Roesch, Processing of Generator-Produced 68Ga for Medical Application, J. Nucl. Med.Vol. 48, 1741-1748）には、初期発生器溶出液の再濃縮および精製が、68Ｇａを除去するために塩酸／アセトンを使用して溶出される有機陽イオン交換樹脂を含有する小カラムを使用して行われる別法が記載されている。精製フラクションは、純粋な水性溶液またはバッファー中にてオクトレオチド誘導体のようなキレート剤含有ペプチドの標識化に使用され得る。
【０１３１】
別法は、初期発生器溶出液を分画することである。最高濃度の68Ｇａを含有する溶出液の部分だけを回収するのは、溶出容量、酸性ｐＨ、ならびに68Ｇｅおよび化学的不純物の存在のような問題を解消するのに役立つ（Breeman WAP, de Jong M, de Blois E, Bernard BF, Konijnenberg M, Krenning EP. Radiolabelling DOTA-peptides with 68Ga. Eur J Nucl Med. 2004;32:478-485）。別法として、発生器溶出液からの68Ｇａは、例えばBokhari et al（Bokhari TH, Mushtaq A, Khan IU, Concentration of 68Ga via solvent extraction, Appl Radiat Isot. 2009;67(1):100-102）に記載されているように、例えばメチルエチルケトンのような有機溶媒中に、抽出することができる。溶媒の蒸発により放射性同位体が濃縮され、次いで、放射性標識化のためにバッファーで希釈される。場合によっては、溶出液は前精製されず、代わりに、固相抽出法またはＨＰＬＣのような技術を使用して、放射性標識化後に68Ｇｅブレイクスルーを除去する。
【０１３２】
放射性同位体溶液をどのようにして得るかまたは精製するかに関係なく、放射性標識化は、典型的には、放射性金属をキレート剤に取込むのに好適なｐＨ値で水性または水性／有機混合物中にて行われる。ＮＯＴＡ、ＤＯＴＡおよびＤＯ３Ａ誘導体のような大環状キレート剤は、典型的には、68Ｇａを結合するのに使用されるが、開鎖多座リガンド、例えばＮ,Ｎ'−ビス[２−ヒドロキシ−５−(カルボキシエチル)ベンジル]エチレンジアミン−Ｎ,Ｎ'−二酢酸、そのビスアミン、ビス−チオールリガンドＢＡＴ−ＴＥＣＨ（ビス−アミノエタンチオール−テトラエチル−シクロヘキシル）およびエチレンジシステイン（ＥＣ）、Ｎ3Ｓもまた、68Ｇａのような短命の同位体にとって重要であるそれらの速い標識化速度のために使用され得る。これらのキレート剤は、約２〜約７のｐＨ値、最も一般的には、３〜５のｐＨで標識され得る。ｐＨが低すぎる場合には、放射性金属は、十分には取込まれない。ｐＨが高すぎる場合には、Ｇａ3+と水およびＯＨ-との競合反応が生じ、放射性コロイドとして知られている不溶性Ｇａ−水酸化物（オキソ）含有化合物の形成をもたらす。放射性金属取り込みに適正なｐＨは、典型的には、アセテート、シトレート、ビカルボネート、ＨＥＰＥＳおよび同類のもののような生理学上許容されるバッファーを使用して維持される。溶離液が強酸中にて提供される場合には高いバッファー濃度を使用することができる。
【０１３３】
所望の68Ｇａ錯体を高収率で得るために十分なリガンドを加える。必要なリガンドの量は、放射能濃度、ｐＨ、バッファー組成、キレート剤の性質、発生器の最後の溶出からの時間、および標識溶液中に存在する競合金属の量によって決定される。競合金属としては、68Ｇａ3+の崩壊により得られるＺｎ2+、ならびに発生器の溶出に使用される溶媒中に存在するかまたは発生器自体から溶出されるＦｅ(ＩＩＩ)およびＡｌ(ＩＩＩ)などを挙げることができる。典型的には、＞２：１の比率の錯体形成リガンド／Ｇａが使用されなければならない。放射性金属をリガンド中に取り込むためには、該反応混合物を室温にて放置するか、または、反応物の性質に依存して、約３７℃〜約１００℃で（熱的に、またはマイクロ波を使用して）加熱する。
【０１３４】
最終生成物の比活性は、考慮すべき重要なことである。研究下の系が低い受容体濃度を有し、放射性標識生成物が過剰のリガンドを除去するために精製されるものではない場合、反応に使用されるリガンドの量を最少にするのが重要である。というのは、これは放射性標識生成物と競合して標的での有効なシグナルを減少させるからである。加えて、いくつかのリガンドは、過剰のリガンドを除去することができる生理学的効果を有する。望ましい場合には、不純物を除去し、固相抽出法、イオン交換および／または逆相高速液体クロマトグラフィーのような技術によって放射性標識生成物を精製して未標識キレート剤および／または他の金属で標識されたキレート剤を除去することによって比活性を上昇させることができる。
【０１３５】
必要な場合には、注射前に化合物への放射線分解性ダメージを防止するために化合物を安定化させることができる。放射線安定剤は、当業者に知られており、例えば、パラ−アミノ安息香酸、アスコルビン酸およびゲンチジン酸など、ならびにセレノメチオニンのようなセレニウム含有誘導体、システイン誘導体、またはジチオカルバメートを包含する米国特許出願公開第２００７／０２６９３７５号および国際公開第０５／００９３９３号（出典明示によりその全体として本明細書の一部を構成する）に記載のものが挙げられる。それらは、また、可溶化剤および静菌剤、例えばベンジルアルコールを含有することもできる。ＥＤＴＡまたはＤＴＰＡのようなキレート剤を添加して、反応後に残っている未反応「遊離」放射性金属と結合させることもできる。
【０１３６】
67ガリウム標識化合物は、また、上記の方法と類似の標識化方法を使用して調製され得る。67Ｇａ 放射性同位体は、典型的には、塩化物またはクエン酸塩のような希酸性溶液中にて供給される。標識溶液におけるＺｎ(ＩＩ)および他の競合する微量金属の存在をオフセットするために十分なリガンドを使用しなければならない。
【０１３７】
５．Ｇａ−ＡＭＢＡ
Ｇａ−ＡＭＢＡ（または67Ｇａ−ＡＭＢＡおよび／または68Ｇａ−ＡＭＢＡ）とは、ＡＭＢＡの67Ｇａまたは68Ｇａ標識アナログをいい、本明細書ではＧａ−Ｌ７０（または67Ｇ−Ｌ７０および68Ｇａ−Ｌ７０）と記載することもある。それは、本発明の好ましい造影剤であり、本発明ではＧＲＰ−Ｒとクロストークする薬物に対する治療応答をモニターするために使用され得る。
【０１３８】
Ｌｕ−ＡＭＢＡに含まれるＤＯ３ＡのようなＬｕ3+を結合するキレート剤は、また、Ｇａ3+を結合する。68Ｇａはｔ1/2＝６８分を有するＰＥＴ画像化に有用な発生器生成同位体であるので、68Ｇａは特に好ましい同位体である。67Ｇａおよび68Ｇａ−ＡＭＢＡはともにＧＲＰ−Ｒ陽性癌を標的とする。このようなアナログの構造の例を以下に示す：
【化７】
2011520971.tif 000042
【０１３９】
該分子は、キレート剤、受容体サブタイプ特異性を制御するリンカー基、およびＧＲＰ−Ｒの天然リガンドであるボンベシンから切断されたオクタペプチド標的基（ＢＢＮ７−１４)の３つの部分を有する。Ｌｕ−ＡＭＢＡは、ＧＲＰ−Ｒに関してＫｄ約２〜３ｎＭを有する。Ｇａ3+およびＬｕ3+は、ともに、Ｌｕ−ＡＭＢＡ（Ｌｕ−Ｌ７０）に使用されるＲ−ＤＯ３Ａ大環状分子のような多価アミノカルボキシレートリガンド中にて同様に結合する３＋金属イオンである。
【０１４０】
表５に示されるように、67Ｇａおよび177Ｌｕ−ＡＭＢＡは、ＧＲＰ−Ｒ陽性ＰＣ−３ヒト前立腺腫瘍罹患マウスモデルにおいて生物学的に同等であることが判明した。68Ｇａについて同様の結果が予想される。
【０１４１】
【表９】
2011520971.tif 000043
【０１４２】
表５に示されるように、177Ｌｕ−ＡＭＢＡの体内分布は、67Ｇａ−ＡＭＢＡ（68Ｇａ−ＡＭＢＡの代替）に匹敵した。ＰＣ−３腫瘍標的への分布は有意に異なっていなかった。これらのデータおよびインビトロデータに基づいて、177Ｌｕ−ＡＭＢＡは、インビトロおよびインビボでのＧａ−ＡＭＢＡの反応を予測するのに合理的な代替物であり、本発明の好ましい造影剤である。Ｇａ−ＡＭＢＡは、また、ＧＲＰ−Ｒとクロストークする受容体を標的とする薬物に対する治療応答をモニターする好ましい造影剤である。
【０１４３】
６．診断的および治療的使用
診断上および／または治療上有用な金属または光学的標識で標識された場合、本発明の化合物は、放射線診断学、放射線治療学および光学画像化の分野で確立されている方法によるＧＲＰ受容体（またはＮＭＢ受容体）の過剰発現に関与する病態の治療および／または検出に使用され得る。［例えば、以下の文献を参照：Bushbaum, 1995；Fischman et al., 1993；Schubiger et al., 1996；Lowbertz et al., 1994；Krenning et al., 1994；光学色素の例としては、国際公開第９８／１８４９７号、国際公開第９８／１８４９６号、国際公開第９８／１８４９５号、国際公開第９８／１８４９８号、国際公開第９８／５３８５７号、国際公開第９６／１７６２８号、国際公開第９７／１８８４１号、国際公開第９６／２３５２４号、国際公開第９８／４７５３８号に記載のものが挙げられるがこれらに限定されるものではない（出典明示によりその全体として本明細書の一部を構成する）］。
【０１４４】
ＧＲＰ−Ｒ発現は、様々なヒトの腫瘍において高度にアップレギュレートされる。例えば、国際公開第９９／６２５６３号を参照。かくして、本発明の化合物は、前立腺癌（原発性および転移性）、乳癌（原発性および転移性）、大腸癌、胃癌、膵癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、ガストリノーマ、メラノーマ、神経膠芽腫、神経芽細胞腫、子宮平滑筋肉腫、前立腺上皮内腫瘍［ＰＩＮ］、および卵巣癌を包含する癌の治療および診断に広く有用であり得る。さらに、本発明の化合物は、ＧＲＰ受容体がアップレギュレートされる条件とアップレギュレートされない条件（例えば、それぞれ慢性膵炎および膵管癌）を区別するのに有用であり得る。
【０１４５】
本発明の化合物は、実施例でさらに詳しく説明されるが、本明細書に記載される新規リンカーを有しない化合物よりも高いインビボでの腫瘍中の特異性および多い取込量を示し、ＧＲＰ受容体発現腫瘍を標的とする能力の向上、かくして、これらの組織に対する放射線療法を画像化または送達する能力の向上を示す。
【０１４６】
これらの化合物の診断的用途は、シンチグラフィー光学造影を使用する腫瘍細胞の存在についての第１の診断スクリーンとして、放射免疫ガイド手術（ＲＩＧＳ）の分野における携帯型放射線検出装置を使用して腫瘍組織を標的とする薬剤として、マッチドペア放射線療法用化合物の投与前に線量測定データを得る手段として、経時的にＧＲＰ受容体標的療法の治療の機能としてＧＲＰ受容体活性を評価する手段として、および、経時的に非ＧＲＰ受容体標的治療剤としてＧＲＰ受容体を評価して標的受容体の治療に対する応答を間接的に評価する手段としてのものであり得る。
【０１４７】
これらの化合物の治療的用途は、癌の治療における第１の治療として使用される薬剤、化学療法剤または他の薬物との併用療法剤、および／または、マッチドペア新断罪／治療剤であると定義され得る。治療は、所定の状態の症状の少なくとも部分的な寛解または軽減を包含する。例えば、治療は、腫瘍または他の疾患領域の大きさの縮小化、この腫瘍または疾患領域の大きさの増大の予防、腫瘍内の異常血流の減量または該血流の正常化、腫瘍の進行時間の遅延、患者の生存の増加などをもたらすことができる。マッチドペア物とは、適当なキレートと結合するために選択された放射性金属に依存して診断剤および治療剤の両方として作用することができる単一の金属不含化合物をいう。該キレート剤が所望の金属を収容できない場合には、インビボでの診断用化合物の反応が放射線治療用化合物の反応を予測するために使用され得るように薬理作用を維持しながら種々の金属を収容することができるように適当な置換を行うことができる。併用療法と併用して使用される場合、例えば抗腫瘍剤、例えば白金化合物（例えばスピロプラチン（spiroplatin）、シスプラチンおよびカルボプラチン）、メトトレキサート、アドリアマイシン、マイトマイシン、アンサミトシン、ブレオマイシン、シトシン、アラビノシド、アラビノシルアデニン、メルカプトポリリジン、ビンクリスチン、ブスルファン、クロラムブシル、メルファラン（例えば、ＰＡＭ、ａ、Ｌ−ＰＡＭまたはフェニルアラニンマスタード）、メルカプトプリン、ミトタン、塩酸プロカルバジン、ダクチノマイシン（オクチノマイシンＤ）、塩酸ダウノルビシン、塩酸ドキソルビシン、タキソール、マイトマイシン、プリカマイシン（ミトラマイシン）、アミノグルテチミド、リン酸エストラムスチンナトリウム、フルタミド、酢酸リュープロリド、酢酸メゲストロール、クエン酸タモキシフェン、テストラクトン、トリロスタチン、アムサクリン（ｍ−ＡＭＳＡ）、アスパラギナーゼ（Ｌ−アスパラギナーゼ）Erwina aparaginase、エトポシド−(ＶＰ−１６)、インターフェロンα−２ａ、インターフェロンα−２ｂ、テニポシド（ＶＭ−２６）、硫酸ビンブラスチン（ＶＬＢ）およびアラビノシルを包含するいずれかの好適な化学療法剤または薬物を使用することができる。ある実施態様では、治療薬は、モノクローナル抗体、例えばメラノーマ抗原と結合する能力を有するモノクローナル抗体であり得る。
【０１４８】
放射線核種金属、例えば、177Ｌｕ、111Ｉｎ、68Ｇａまたは99mＴｃで標識された複合体を、ヒト患者または対象体を包含する哺乳動物に、例えば医薬上許容される担体および／または等張生理食塩水などの塩溶液のような溶液中にて静脈注射、皮下注射または腹腔内注射によって投与することができる。好適な量の放射能を有する本発明によって提供される放射性標識シンチグラフィー造影剤が提供される。99mＴｃ 放射性錯体の形成において、一般的に、１ｍＬ当たり約０.０１ミリキューリー（ｍＣｉ）〜１００ｍＣｉの濃度で放射能を含有する溶液中にて放射性錯体を形成するのが好ましい。一般的に、投与される単位用量は、約０.０１ｍＣｉ〜約１００ｍＣｉ、好ましくは、１ｍＣｉ〜３０ｍＣｉの放射能を有する。単位用量で注射される溶液は、約０.０１ｍＬ〜約１０ｍＬである。急速に除去される複合体は急速に除去されない複合体よりも高い用量で投与される必要があるかもしれないという意味で、投与に適した標識複合体の量は、選択された複合体の分布特性に依存する。インビボ分布および局在化は、投与後の適当な時間で、典型的には非標的組織でのクリアランス速度に対する標的部位での蓄積速度に依存して３０分間〜１８０分間、標準的なシンチグラフィー技術によって追跡され得る。例えば、本発明の診断用放射線核種標識化合物を患者に注射した後、造影剤中に取り込まれた核種のガンマ線エネルギーについて較正されたガンマカメラを使用して、薬剤の取込の領域を画像化し、該部位に存在する放射能の量を定量化することができる。インビボでの部位の画像化は、数分の間に起こり得る。しかしながら、画像化は、必要な場合および放射線核種の物理的半減期が許す場合には、放射性標識ペプチドが患者に注射されてから数時間またはそれ以上の後に起こり得る。ほとんどの場合、投与された用量のうち十分な量が約０.１時間以内に画像化されるべき領域に蓄積して撮像を可能にする。
【０１４９】
本発明の化合物は、単独で、または、賦形剤、希釈剤、ラジカルスカベンジャー、安定剤および担体（これらのは全て当該技術分野において周知である）のような他の成分を含有する組成物の一部として、患者に投与され得る。該化合物は、患者に静脈内投与または腹腔内投与され得る。
【０１５０】
本発明に伴う利点がたくさん存在する。本発明のいくつかの実施態様に従って調製された化合物は、安定な明確に定義された99mＴｃまたは186/188Ｒｅ標識化合物を形成する。他の実施態様に関して、67Ｇａ、68Ｇａ、111Ｉｎまたは177Ｌｕで標識された化合物が形成される。本発明の類似化合物は、また、安定な明確に定義された、153Ｓｍ、90Ｙ、166Ｈｏ、105Ｒｈ、199Ａｕ、149Ｐｍまたは他の放射性金属で標識された生成物を形成するために各放射性金属について適当なキレート剤構造を使用することによって調製され得る。放射性標識ＧＲＰ受容体標的ペプチドは、ＧＲＰ受容体を発現する腫瘍細胞と選択的に結合し、アゴニストが使用される場合には腫瘍細胞中に取り込まれて長時間保持される。癌細胞に到達しない（すなわち、結合しない）放射性物質は、好ましくは、腎臓中に放射性金属が最少時間保持されて尿中に効果的に排泄される。
【０１５１】
ａ．ＧＲＰ−Ｒの標的化を亢進する方法
さらにまた、本発明は、本発明の標識化合物のＧＲＰ受容体発現標的組織への標的化を正常な（例えば、非標的）ＧＲＰ受容体発現組織と比べて亢進する方法を含む。この方法は、本発明の標的化合物の投与の前またはその間に適当な量のＧＲＰ受容体標的ペプチドまたは複合体を投与することを含む。同様に、本発明は、本発明の標識化合物の投与の前またはその間に適当な量のＧＲＰ受容体標的ペプチドまたは複合体を投与することを含む、腫瘍標的化を最適化する本発明の標的化合物の投与の改良方法を包含する。このような前投与または同時投与は、非標的ＧＲＰ受容体を飽和させて、該受容体の腫瘍組織上ＧＲＰ受容体と競合する能力を低下させることが判明した。
【０１５２】
循環性結合部位、または活性成分について標的組織結合部位と競合する正常な（例えば、非標的）組織上結合部位を占有するために多量の活性成分を前投与または同時投与することが有益であり得ることは予め立証されている。このような前投与または同時投与の目的は、標的組織への標的化および標的組織における取り込みを亢進することである。例えば、疾患部位の可視化を向上させる目的で循環性細胞上の結合部位を占有するために放射性抗ＣＤ２０抗体の投与の前に未標識抗ＣＤ２０抗体が投与された。別の例では、正常組織の結合部位を飽和させて疾患の可視化を向上させる目的で多量のコールド・ソマトスタチンが投与された。
【０１５３】
循環性ＧＲＰ受容体標的ペプチド結合タンパク質は、現在まで全く同定されていない。しかしながら、ＧＲＰ受容体発現標的組織と競合することができる感知できるレベルのＧＲＰ受容体を発現する体内の正常組織がいくつか存在する。高用量は、このような組織中の結合部位を飽和させることが考えられる。しかしながら、本発明の化合物が数回投与された場合、意外にも、ＧＲＰ受容体発現腫瘍組織の反応がＧＲＰ受容体発現正常組織の反応とは異なることが見出された。詳しくは、ＧＲＰ受容体を発現する正常組織は該用量により予測された飽和を示して本発明の標識化合物の取り込みを低下させるが、一方、ＧＲＰ発現腫瘍組織は、意外にも、用量が多いほど飽和に対して抵抗して、本発明の標識化合物を結合する能力を保持する。正常組織と腫瘍組織との間の応答の差異は、腫瘍組織の制御回避の反映であり得る。かくして、この有益な効果は、通常、正常組織の生理学によって厳重に制御される調節ペプチドまたは化合物についての結合部位が例えばＧＲＰ受容体発現腫瘍組織の場合のように腫瘍組織中に存在する場合にこのような制御を回避する場合に生じる可能性が最も高い。
【０１５４】
かくして、腫瘍標的化を最適化するために、適当な用量の本発明の化合物を本発明の標識化合物の投与の前またはその間に投与することができる。一用量の本発明の非標識化合物の投与が好ましいが、リンカーおよび／または金属キレート剤または検出可能な標識と結合しているかどうかに関係なく、また、標識されているかどうかに関係なく、ＧＲＰ受容体と結合し相互作用する活性ペプチドが使用され得ることに注意すべきである。好ましくは、一用量のＧＲＰ受容体アゴニストが使用され、より好ましくは、リンカーおよび／または金属キレート剤または検出可能な標識、例えば本明細書に記載のものに結合される。最も好ましくは、一用量の本発明の化合物が投与される。いくつかの実施態様には非標識化合物の使用が好ましいが、該用量は標識化合物を含むことができる。実際、同時投与用途のためには、該用量および診断的または治療的用量の標識化合物を含む１回投与量の投与が好ましい。この場合、適当な用量の非標識化合物および診断上または治療上有用な量の標識化合物の両方を送達する、標識されているが低い比活性用量が投与される。
【０１５５】
適当な用量は、患者および用途の特異性に依存するが、このような用量の選択は、当該技術分野における技量の範囲内である。有用な用量は、約１〜約２０μｇ／ｍ2の範囲であり、好ましい用量は、約２〜約１０μｇ／ｍ2の範囲である。該用量が本発明の標識化合物の前に投与される場合（例えば、前投与）、該用量は、好ましくは、治療的または診断的投与前の約６０分以内に投与される。
【０１５６】
ｂ．光学的画像化、音ルミネッセンス、光音響画像化および光線療法
本発明によると、本発明の光学的標識化合物を対処対に注射した後、インビボ光画像化を用いて標的の位置を決定するために多くの光学的パラメーターを用いることができる。画像の作成において検出されるべき光学的パラメーターとしては、透過放射、吸収、蛍光もしくはリン光放出、光反射、吸光度振幅の変化または最大値、および弾性的散乱放射を挙げることができる。例えば、生体組織は、６５０〜１０００ｎｍの近赤外（ＮＩＲ）波長範囲で光に対して比較的半透明である。ＮＩＲ放射は数センチメートルまでの組織を透過することができ、インビボで標的含有組織を画像化するための本発明の化合物の使用を可能にする。診療における可視近赤外（ＮＩＲ）光の使用は急増している。電磁スペクトルの可視、ＮＩＲまたは長波長（ＵＶ−Ａ、＞３５０ｎｍ）領域において吸収または放出する化合物は、光学断層画像化、内視鏡可視化および光線療法に有用である可能性がある。
【０１５７】
生物医学的光学の主な利点は、その治療可能性にある。光線療法は、外面および内面両方の様々な表面の損傷の治療のための安全かつ有効な方法であることが立証されている。染料は、光学的画像化および光線療法において、シグナル検出および／または組織の感光を増強するのに重要である。従前の研究により、ある種の染料が腫瘍中に局在化することができ、小さい癌の検出および治療のための強力なプローブとして役立ち得ることが示された（D. A. Bellnier et al., Murine pharmacokinetics and antitumor efficacy of the photodynamic sensitizer 2-[1-hexyloxyethyl]-2-devinyl pyropheophorbide-a, J. Photochem. Photobiol., 1993, 20, pp. 55-61；G. A. Wagnieres et al., In vivo fluorescence spectroscopy and imaging for oncological applications, Photochem. Photobiol., 1998, 68, pp. 603-632；J. S. Reynolds et al., Imaging of spontaneous canine mammary tumors using fluorescent contrast agents, Photochem. Photobiol., 1999, 70, pp. 87-94）。これらの参考文献は全て、出典明示によりその全体として本明細書の一部を構成する。しかしながら、これらの染料は、悪性の組織中に優先的に局在化しない。
【０１５８】
例示的な実施態様では、本発明の化合物は、広範囲の非局在化環系を有しており、４００〜１５００ｎｍの範囲で最大吸収または放出を有する、有機発色団またはフルオロフォアを包含する光学色素のような光標識と結合され得る。本発明の化合物は、別法として、生物発光分子で誘導体化され得る。光標識についての好ましい最大吸収の好ましい範囲は、６００〜１０００ｎｍであり、ヘモグロビンからのシグナルによる干渉を最小する。好ましくは、光吸収標識は、大きなモル吸光係数、例えば、＞１０5ｃｍ-1Ｍ-1を有するが、一方、蛍光光学色素は、高い量子収率を有する。光学色素の例としては、米国特許第６,６４１,７９８号、国際公開第９８／１８４９７号、国際公開第９８／１８４９６号、国際公開第９８／１８４９５号、国際公開第９８／１８４９８号、国際公開第９８／５３８５７号、国際公開第９６／１７６２８号、国際公開第９７／１８８４１号、国際公開第９６／２３５２４号、国際公開第９８／４７５３８号およびこれらに引用されている参考文献（これらはすべて出典明示によりその全体として本明細書の一部を構成する）に記載されるものが挙げられるが、これらに限定されるものではない。例えば、光標識は、例えば本発明のＧＲＰ受容体標的ペプチドおよびリンカーからなる化合物のような本発明の化合物に直接共有結合され得る。電磁スペクトルの可視近赤外領域で吸収および放出するいくつかの染料は、それらの生体適合性、高いモル吸光度および／または高い蛍光量子収率のために、現在、様々な生物医学的用途に使用されている。コントラスト剤としての染料と併用する光学的診断法の高い感度は、核医学のものに匹敵し、電離放射の望ましくない作用を伴わずに器官および組織の可視化を可能にする。近赤外（ＮＩＲ）領域で強い吸収および放出を有するシアニン染料は、生体組織がこの領域で光学的に透明であるので、特に有用である（B. C. Wilson, Optical properties of tissues. Encyclopedia of Human Biology, 1991, 5, 587-597）。例えば、ＮＩＲ領域で吸収し放出するインドシアニングリーンは、心拍出量、肝機能および肝血流をモニターするのに使用されており（Y-L. He, H. Tanigami, H. Ueyama, T. Mashimo, and I. Yoshiya, Measurement of blood volume using indocyanine green measured with pulse-spectrometry: Its reproducibility and reliability. Critical Care Medicine, 1998, 26(8), 1446-1451；J. Caesar, S. Shaldon, L. Chiandussi, et al., The use of indocyanine green in the measurement of hepatic blood flow and as a test of hepatic function. Clin. Sci. 1961, 21, 43-57）、そして、その官能化誘導体は、診断目的のために生体分子を結合させるのに使用されている（R. B. Mujumdar, L. A. Ernst, S. R. Mujumdar, et al., Cyanine dye labeling reagents: Sulfoindocyanine succinimidyl esters. Bioconjugate Chemistry, 1993, 4(2), 105-111；Linda G. Lee and Sam L. Woo. "N-Heteroaromatic ion and iminium ion substituted cyanine dyes for use as fluorescent labels", 米国特許第５,４５３,５０５号；Eric Hohenschuh, et al. "Light imaging contrast agents"、国際公開第９８／４８８４６号；Jonathan Turner, et al. "Optical diagnostic agents for the diagnosis of neurodegenerative diseases by means of near infra-red radiation"、国際公開第９８／２２１４６号；Kai Licha, et al. "In-vivo diagnostic process by near infrared radiation"、国際公開第９６／１７６２８号；Robert A. Snow, et al., Compounds, 国際公開第９８／４８８３８、米国特許第６,６４１,７９８号）。これらの参考文献はすべて出典明示によりその全体として本明細書の一部を構成する。
【０１５９】
光学標識化合物の注射後、薬剤に用いた光標識に適当な波長領域で１つ以上の光源（例えば、レーザー）を用いて患者をスキャンする。使用される光は、単色または多色の連続光またはパルス光であり得る。透過光、散乱光または反射光は、対象体における標的含有組織（例えば、ＧＲＰを含有する組織）の位置を決定するために１つまたは複数の波長に向けられた光検出器によって検出される。光学的パラメーターの変化は、標的部位（ＧＲＰ受容体を有する腫瘍または他の部位）での光学標識試薬の蓄積を検出するために経時的にモニターされ得る。本発明の光学的画像化試薬と合わせて標準的な画像処理および検出装置が使用され得る。
【０１６０】
上記光学的画像化試薬はまた、光学標識造影剤を用いて行われる音響光学または音ルミネッセンス画像化に使用され得る（米国特許第５,１７１,２９８号、国際公開第９８／５７６６６号およびそれらに引用される参考文献を参照）。音響光学的画像化において、超音波照射が対象体に施され、透過光、散乱光または反射光の光学的パラメーターに影響を及ぼす。音ルミネッセンス画像化において、照射された超音波は、実際に、検出される光を生じる。このような技術を使用する好適な画像化方法は、国際公開第９８／５７６６６号に記載されている。
【０１６１】
様々な画像化技術および試薬は、米国特許第６,６６３,８４７号、第６,６５６,４５１号、第６,６４１,７９８号、第６,４８５,７０４号、第６,４２３,５４７号、第６,３９５,２５７号、第６,２８０,７０３号、第６,２７７,８４１号、第６,２６４,９２０号、第６,２６４,９１９号、第６,２２８,３４４号、第６,２１７,８４８号、第６,１９０,６４１号、第６,１８３,７２６号、第６,１８０,０８７号、第６,１８０,０８６号、第６,１８０,０８５号および第６,０１３,２４３号、ならびに米国特許出願公開第２００３１８５７５６号、第２００３１６５６４３２号、第２００３１５８１２７号、第２００３１５２５７７号、第２００３１４３１５９号、第２００３１０５３００号、第２００３１０５２９９号、第２００３０７２７６３号、第２００３０３６５３８号、第２００３０３１６２７号、第２００３０１７１６４号、第２００２１６９１０７号、第２００２１６４２８７号および第２００２１５６１１７号（これらはすべて出典明示により本明細書の一部を構成する）に記載されている。
【０１６２】
ｃ．放射線療法
放射性同位体療法は、標的組織にダメージを与えるかまたは標的組織を破壊するのに十分な量の放射性標識化合物の投与を含む。化合物の投与（例えば、静脈注射、皮下注射または腹腔内注射による）の後、放射性標識医薬は、疾患部位（この場合、腫瘍組織、または関連するＧＲＰ受容体を発現する他の組織）で優先的に局在化する。一旦局在化すると、次に、放射性標識化合物は、投与された同位体の放射性崩壊の間に放出されるエネルギーによって疾患組織にダメージを与えるかまたは疾患組織を崩壊する。本明細書に記載するように、本発明は、また、化学療法と組み合わせる（または、いずれかの適当な治療薬と組み合わせる）放射線療法の使用を含む。
【０１６３】
成功した放射線治療剤の設計にはいくつかの重要な因子が含まれる：
１．放射能を疾患部位に送達するのに適当な標的基の選択；
２．隣接する正常組織に後にダメージを与えずに疾患部位にダメージを与えるのに十分であるがエネルギーを放出する適当な放射線核種の選択；および
３．この複合体の疾患部位で局在化する能力に悪影響を及ぼさない標的基および放射線核種の適当な組み合わせの選択。放射性金属について、これは、しばしば、キレートを標的基と結合するリンカーと組み合わせた放射線核種に緊密に配位するキレート形成性基であって、化合物の全体内分布に影響を及ぼして標的組織における取り込みを最大にし、正常な批評的器官における取り込みを最少にするキレート形成性基を含む。
【０１６４】
放射線治療剤は、ランタニドとして知られている元素類（原子番号５７〜７１の元素）からのキレート化３＋金属イオンおよびそれらのアナログ（すなわち、イットリウムおよびインジウムのようなＭ3+金属）を含有することができる。この群の典型的な放射性金属としては、同位体９０−イットリウム、１１１−インジウム、１４９−プロメチウム、１５３−サマリウム、１６６−ジスプロシウム、１６６−ホルミウム、１７５−イッテルビウムおよび１７７−ルテチウムが挙げられる。これらの金属のすべて（およびランタニド系列における他の金属）は、それらが＋３酸化状態のままである点で非常に類似の化学を有し、周知のキレートＤＴＰＡ（ジエチレントリアミン五酢酸）の誘導体およびポリアザ−ポリカルボキシレート大環状分子、例えば、ＤＯＴＡ（１,４,７,１０−テトラシクロドデカン−Ｎ、Ｎ',Ｎ'',Ｎ'''−四酢酸）およびその近いアナログに代表されるようなハードな（酸素／窒素）ドナー原子を有するリガンドとキレート形成するのが好ましい。これらのキレート形成リガンドの構造は、それらの完全に脱保護された形態で、以下に示される。
【０１６５】
【表１０】
2011520971.tif 000044
【０１６６】
これらのキレート形成リガンドは、複数の窒素原子および酸素原子を介して放射性金属に結合することによってこの放射性金属を被包して、遊離（未結合）放射性金属の体内への放出を防止する。このことは、３+放射性金属のそれらのキレートからのインビボ解離によって肝、骨および脾臓における放射性金属の取り込みが生じ得るので重要である［Brechbiel MW, Gansow OA, “Backbone-substituted DTPA ligands for 90Y radioimmunotherapy”, Bioconj. Chem. 1991; 2: 187-194；Li, WP, Ma DS, Higginbotham C, Hoffman T,  Ketring AR, Cutler CS,  Jurisson, SS, “ Development of an in vitro model for assessing the in vivo stability of lanthanide chelates.” Nucl. Med. Biol.  2001; 28(2): 145-154；Kasokat T, Urich K. Arzneim.-Forsch, “Quantification of dechelation of gadopentetate dimeglumine in rats”. 1992; 42(6):  869-76］。１つがこれらの器官を特異的に標的としていない限り、このような非特異的取り込みは、骨髄の照射による造血抑制のような問題を生じ得る非標的組織の非特異的照射を引き起こすので、非常に望ましくない。
【０１６７】
放射線治療用途について、本明細書に記載の治療用放射線核種についてのキレート剤のいずれかを使用することができる。しかしながら、ＤＯＴＡキレートの形態［Tweedle MF, Gaughan GT, Hagan JT, “1-Substituted-1,4,7-triscarboxymethyl-1,4,7,10-tetraazacyclododecane and analogs.” 米国特許第４,８８５,３６３号、Dec. 5, 1989］は、体内においてＤＴＰＡまたは他の線形キレートよりもキレート分解されないと考えられるので、特に好ましい。化合物Ｌ６４およびＬ７０（適当な治療用放射線核種で標識された場合）は、放射線療法に特に好ましい。
【０１６８】
リンカーを介してＤＯＴＡ型大環状分子を標的基に結合させる（例えば、リンカー上のアミノ基と反応して安定なアミド結合を形成する活性エステルを形成させるためのＤＯＴＡのカルボン酸塩の１つの活性化による）一般的な方法は、当業者に知られている（例えば、Tweedle et al. 米国特許第４,８８５,３６３号を参照）。結合は、また、ポリアザ環の骨格上で修飾されているＤＯＴＡ型大環状分子上で行われ得る。
【０１６９】
特定の放射線治療用途に用いるための適正な核種の選択は、以下に挙げられる多くの因子に依存する：
【０１７０】
物理的半減期  −  これは、放射性金属および複合体からの放射線治療用構築物の合成および精製ならびに注射前の有意な放射性崩壊を伴わずに該構築物の注射部位への送達を可能にするのに十分に長いことが必要である。好ましくは、該放射線核種は、０.５〜８日間の物理的半減期を有しなければならない。
【０１７１】
放射線核種からの放出のエネルギー  −  放射線治療用途について、粒子放射体（例えば、α放射体、β放射体およびオージェ電子放出体）である放射線核種は、それらのエネルギーを短い距離にわたって付与するエネルギー粒子を高度に放出することによって非常に局在化したダメージを生じるので、特に有用である。β放出放射線核種は、これらの同位体からのβ粒子放出によるエネルギーが５〜約１５０細胞径内に付与されるので、特に好ましい。これらの核種から調製された放射性治療剤は、それらの局在化部位に比較的近い疾患細胞を死滅させる能力を有するが、骨髄のような隣接する正常組織にダメージを与えるように長距離を移動することはできない。
【０１７２】
比活性（すなわち、放射線核種の質量当たりの放射能）  −  高い比活性を有する放射性核種（例えば、発生器生成９０−Ｙ、１１１−Ｉｎ、１７７−Ｌｕ）は、特に好ましい。放射線核種の比活性は、その生成方法、その生成に使用される特定の標的、および問題の同位体の性質によって決定される。
【０１７３】
多くのランタニド類およびランタノイド類は、それらがβ粒子またはオージェ電子を放出するので、それらを放射線治療薬としての使用に適するようにする核特性を有する放射性同位体を包含する。これらのうちのいくつかを表６に示す。
【０１７４】
【表１１】
2011520971.tif 000045
【０１７５】
Ｐｍ：プロメチウム、Ｓｍ：サマリウム、Ｄｙ：ジスプロシウム、Ｈｏ：ホルミウム、Ｙｂ：イッテリビウム、Ｌｕ：ルテチウム、Ｙ：イットリウム、Ｉｎ：インジウム
【０１７６】
β放出ランタニド放射性同位体のような放射性金属の製造方法は、当業者に知られており、他にも記載されている［例えば、Cutler C S, Smith CJ, Ehrhardt GJ.; Tyler TT, Jurisson SS, Deutsch E. “Current and potential therapeutic uses of lanthanide radioisotopes.”  Cancer Biother. Radiopharm. 2000; 15(6): 531-545］。これらの同位体の多くは、比較的低価格のために高収率で生成され得、多く（例えば、90Ｙ、149Ｐｍ、177Ｌｕ）は、無担体比活性に近い比活性で生成され得る（すなわち、高い割合の原子が放射活性である）。非放射性原子は標的組織上の受容体との結合についてそれらの放射性アナログと競合することができるので、高い比活性放射性同位体の使用は、標的組織にできる限り高い線量の放射能を送達するために重要である。
【０１７７】
レニウムのβ放出同位体（186−Ｒｅおよび188−Ｒｅ）を含有する本発明の放射線治療用誘導体もまた特に好ましい。
【０１７８】
本発明は、標的基、放射線核種、金属キレートおよびリンカーの適正な選択を介して、上記３つの基準の全てを満たす放射線治療薬を提供する。本発明の化合物は、実施例でさらに詳しく説明されるように、本明細書に記載の新規リンカーを有しない化合物と比べてインビボで高い特異性および高い腫瘍中取り込み量を示し、ＧＲＰ受容体発現腫瘍標的能の向上、かくして、画像化能またはこれらの組織への送達能の向上を示す。実際に、実施例において示されるように、本発明の化合物を使用する放射線療法は、より有効である（また、生存時間が増加する）
【０１７９】
さらにまた、実施例において示されるように、本発明の化合物は、前立腺癌の骨または軟組織転移を包含する前立腺癌の治療において、また、ホルモン感受性前立腺癌およびホルモン不応性前立腺癌のどちらにおいても特に有用である。
【０１８０】
本発明の化合物、特に放射性標識Ｌ７０は、また、前立腺癌、特にホルモン感受性前立腺癌の進行を遅延させる方法およびその血管透過性を低下させる方法に有用である。実際に、実施例において示されるように、本発明の化合物は、進行までの時間を約１００％遅延させることができる。これは、承認されているいくつかの薬物が進行までの時間をわずか１５％しか減少させないので、特に有意である。本発明の化合物は、また、ホルモン感受性前立腺癌の併用療法の促進に有用である。併用療法は、本発明の化合物、および化学療法薬のような前立腺癌の治療に有用な別の物質の投与を含む。本発明の化合物は、例えば腫瘍への血流を正常化し、さらなる治療剤の送達を促進することによってこのような併用療法を促進する。
【０１８１】
ｄ．ＧＲＰ−Ｒとクロストークする受容体を標的とする薬物に対する治療的利用性およひせ応答を評価する方法（例えば、68Ｇａ−ＡＭＢＡ：センチネル受容体としてのＧＲＰ−ＲのＰＥＴ画像化）
本発明は、また、乳癌および前立腺癌を包含するがこれらに限定されるものではないＧＲＰＲを発現する広範囲に及ぶヒト固形腫瘍（原発性腫瘍および転移性腫瘍）についてＲＴＫまたは「他の標的」からＧＲＰＲの方向で特異的にクロストークするＧＲＰ受容体とのクロストークを試験する方法を提供する。図５８に関して、ＧＲＰ−Ｒと癌治療薬において使用される他の受容体を含む既知のクロストークが示されている。これらの場合のクロストークは、「中心」ＧＲＰ受容体が標的とされる場合の「周辺」受容体に対する効果を示す。驚くべきことに、本発明者らは、このたび、クロストークが反対方向に作動する、すなわち、「周辺」受容体の活性が干渉により変えられる場合、これは、「中心」ＧＲＰ受容体の活性を変えるという知見を得た。本発明の分子によって標的とされるＧＲＰ受容体は、広範囲の他の癌受容体とクロストークを行う。クロストークとは、「中心」ＧＲＰ受容体と１つ以上の「周辺」受容体との間にコミュニケーションがあることを意味する。ＧＲＰ受容体とのクロストークを示す「周辺」受容体は、それに向けられた干渉の結果としての活性の変化により、ＧＲＰ受容体の活性の変化を生じる。これが一貫して十分な程度に生じる場合、ＧＲＰ受容体は、他の周辺の受容体の状態を決定するために使用され得る。これらの受容体は各々、各受容体に関連する標的薬物による癌治療において非常に重要である。特定の理論に縛られることなく、これらの受容体は、ＧＲＰ−Ｒに対して影響を及ぼし得、かくして、ＧＲＰ−Ｒ標的本発明の化合物は、１つ以上の他の受容体が患者の腫瘍において活性である場合に決定するために使用され得、腫瘍学者は画像から、この受容体を標的とする薬物がこの腫瘍において有効である程度を決定することができる。
【０１８２】
詳しくは、本発明は、通常の臨床条件（用量およびスケジュール）下で投与される、ＲＴＫ受容体またはエストロゲン受容体のようなＧＲＰ−Ｒとクロストークする受容体を標的とする幅広い治療薬群のいずれか１つ（例えば、ＲＴＫ阻害剤、エストロゲン阻害剤）による有効な治療を評価することができ、このような受容体（例えば、ＲＴＫ受容体またはエストロゲン受容体）がクロストークを示すＧＲＰ受容体特異的シグナルの発現の変化によって検出されるこれらの受容体の機能に対して及ぼし得る。ＧＲＰ−Ｒ受容体の画像化は、ＧＲＰ−Ｒとクロストークする他の受容体を標的とする薬物（例えば、イレッサ、Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎおよびタモキシフェン）の治療（前／後）に対する応答の情報を提供し、応答率が低い場合に特に有用である。例えば、乳癌において、Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎは、９％が応答する（３０％がＨｅｒ２ｎｅｕを有し、処置した３０％が応答する）。 同様に、Ａｖａｓｔｉｎは、転移性大腸癌において１０％が応答し、Ｅｒｂｉｔｕｘは、転移性大腸癌において１１〜１４％が応答する。
【０１８３】
本発明は、インビボでのＧＲＰ受容体特異的シグナル活性の増大、低下または無変化によってかかる薬物による治療に対する予測される応答の機能的指標を提供する。
【０１８４】
本発明は、また、ＧＲＰ受容体の放射性標識または他の検出可能な標識アゴニストまたはアンタゴニストを使用してインビトロでＧＲＰ受容体ファミリーの活性の変化についてのＧＲＰ−Ｒとクロストークする周辺受容体を標的とする新規薬物のスクリーニング方法を提供する。
【０１８５】
本発明は、また、薬物の治療効果をモニターするためにＧＲＰ受容体の放射性標識アゴニストまたはアンタゴニストを使用する、インビボでＧＲＰ受容体ファミリーの活性を画像化する方法を提供する。
【０１８６】
このような方法は、ＧＲＰＲとクロストークする受容体を標的とする薬物の治療進行をモニターするためにＧＲＰ−Ｒを画像化するために、本明細書で定義した本発明のＧＲＰ−Ｒ結合リガンド（ここで、Ｍは、シンチグラフィーまたはＰＥＴ画像化によって検出可能な放射線核種と錯体形成したキレート剤であるか、またはＦ−１８、123Ｉ−、124Ｉ−または131Ｉ−のような放射性標識ハロゲンを含有する基であり、Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｑは本明細書で定義したとおりである）を使用する。
【０１８７】
好ましい実施態様では、該方法は、ＧＲＰＲとクロストークする受容体を標的とする薬物に対する治療応答をモニターするために、好ましくは68Ｇａで標識されたか（本明細書では、互換性をもって68Ｇａ−Ｌ７０または68Ｇａ−ＡＭＢＡと記載する）またはＦ−１８、123Ｉ−、124Ｉ−、131Ｉ−もしくは99mＴｃ標識された本発明のＧＲＰＲ結合リガンド、ＡＭＢＡ（本明細書では、互換性をもってＬ７０またはＡＭＢＡと記載する）を使用することを意図する。特に好ましい実施態様では、このような方法に68Ｇａ−ＡＭＢＡが使用される。
【０１８８】
好ましい実施態様では、ＧＲＰ−Ｒの画像化は、長手方向である：例えば、画像化は、初期治療の前（基底値を得るため）、治療の間（応答を予測しモニターし、腫瘍集団におけるシフトが治療の変化を保証し得る場合に検出するため）、治療の最後または治療後（効力の決定、次なる治療工程の決定に役立つため、そして、再発を予測または予期するため）に生じる。
【０１８９】
前画像化は、治療開始の約３０日前まで、好ましくは１５日前まで、理想的には７日前までに生じる。治療開始後の画像化は、最初の治療過程の最後に、好ましくは治療開始の１５日以内、理想的には開始の７日後までに生じる。治療の最後の画像化は、計画された治療過程の後、および、その後定期的にまたは再発の疑い時に生じる。
【０１９０】
ボーラスによるかまたは３０分間にわたるゆっくりとした点滴によって投与されるペプチドの約５０ｍｇの用量を含む放射性標識化合物（例えば、68Ｇａ−ＡＭＢＡまたは67Ｇａ−ＡＭＢＡ）の約３〜１２ｍＣｉ（１１１〜４４４ＭＢｑ）、好ましくは約３〜５ｍＣｉ（１１０〜１８５ＭＢｑ）の画像化用量を使用することができる。
【０１９１】
本発明の放射性標識化合物の画像化は、投与後に適当な間隔で行われる。例えば、68Ｇａについて、画像化は、当該技術分野の当業者に周知のポジトロン放出断層撮影（ＰＥＴ）と呼ばれる画像技術および装置を使用して、68Ｇａ標識物質の投与から約０.５〜２時間後に行われる。例えば、R.P. Baum at the European Association of Nuclear Medicine Meeting in Copenhagen in 2007に記載のもの。別法として、非ポジトロン放出放射線核種の画像化は、当該技術分野における当業者に周知の技術を使用してＳＰＥＣＴ装置を用いて行うことができる。長命の放射線核種については、画像化は、それらの物理的半減期と一致する長い時間において行われる。
【０１９２】
予測される応答は、治療薬の標的とＧＲＰ受容体との間の特定の関係に依存し、画像化により検出されるＧＲＰ受容体特異的シグナルの単調な増加、減少または無変化を包含するが、これらに限定されるものではない。
【０１９３】
例えば、活性の低下は、クロストークによるＧＲＰ受容体の活性の低下およびＧＲＰＲを支持／レスキューに切り替えることができない腫瘍組織の無能さを引き起こす治療薬による有効な標的化によってもたらされ得るか；または、それは、治療が効果的ではしないこと、したがって、ＧＲＰＲを切り替えるための腫瘍組織上の選択的な圧力がないことを示し得る。
【０１９４】
あるいは、活性の増大は、ＧＲＰ受容体を含む生存メカニズムを開始する細胞または腫瘍によって引き起こされ得る。このようなメカニズムは、細胞の最終的な死または破壊を回避する試みを予知することができる（ＧＲＰを、持続的成長、または例えばＧＲＰＲによる標的経路のトランス活性化による標的経路のブースティングに切り替えることができる）。
【０１９５】
最後に、ＧＲＰＲの無変化は、治療的処置が効果的であること、そして、ＧＲＰＲが細胞に対して利用可能なレスキューのための代替経路ではないこと；または治療が成功ではなく、したがって、ＧＲＰＲのトランス活性化が必要でないこと；またはＧＲＰがレスキューを媒介しているが、ＧＲＰＲの発現の増加を必要としないことを意味することができる。
【０１９６】
予測される応答は、使用される治療薬または組み合わせおよび標的とされる癌細胞のどちらにも依存し、引用された例によって明らかになる。ＧＲＰファミリーの受容体の機能におけるこれらの変化をモニターリングすることは、腫瘍の明らかな変化が見られる前に、すなわち、腫瘍細胞増殖の観察可能な低下および／または腫瘍増殖速度の低下として観察可能な腫瘍細胞消失の増加または実際に腫瘍サイズの縮小が起こる前に、それらが生じる場合に最も有用である。
【０１９７】
下記表は、単独または18Ｆ−ＦＤＧと組み合わせた本発明の化合物（好ましくは、Ｇａ−ＡＭＢＡ）でＧＲＰ−Ｒを画像化する結果の可能性をまとめて示す。
【０１９８】
【表１２】
2011520971.tif 000046
【０１９９】
【表１３】
2011520971.tif 000047
【０２００】
実施例においてさらに詳しく説明されるように、本明細書における実験は、ＧＲＰ受容体を標的としない薬物療法が、細胞培養液中においてインビトロで生細胞をベースとして、そして、マウスにおいてインビボで、177Ｌｕ−ＡＭＢＡ（および、推論により、67/68Ｇａ−ＡＭＢＡ）のＧＲＰ−Ｒ取り込みを調節することを示している。このような実験は、周辺のクロストーク受容体を標的とする薬物と前立腺および乳癌細胞株におけるＧＲＰ受容体を標的とする薬物との間のクロストークを立証している。
【０２０１】
驚くべきことに、該実施例は、また、ＧＲＰ−Ｒ活性を測定するために177Ｌｕ−ＡＭＢＡを使用して検出されるシグナルがＦＤＧのものと異なることを確立している。例えば、ＰＣ−３前立腺癌細胞のダサチニブ治療は、177Ｌｕ−ＡＭＢＡ取り込みを７６％増加させるが、２−デオキシグルコースおよび18Ｆ−フルオロデオキシグルコースの蛍光アナログであるＮＢＤＧを同様の量だけ減少させる。一般に、シグナルの増加は、高いダイナミックレンジのためにシグナルの減少よりも望ましい。
【０２０２】
かくして、該実施例は、ＧＲＰ−Ｒ活性（かくして、ＧＲＰ−Ｒの画像化）の、ＧＲＰ−Ｒとクロストークする受容体（例えばエストロゲン受容体、Ｓｒｃ受容体ファミリー、種々のＲＴＫ受容体など）を標的とする薬物の効果を立証する能力を立証している。さらに、該実施例は、治療の進捗をモニターするのに18Ｆ−ＦＤＧよりもＧａ−ＡＭＢＡのような本発明の化合物が適していることを示している。
【０２０３】
６．用量および活性
本発明の化合物についての適正な用量スケジュールは、当該技術分野の当業者に知られている。該化合物は、単回または複数回用ＩＶまたはＩＰ注射を包含するがこれらに限定されるものではない多くの方法を使用して投与され得る。放射性医薬品について、画像化を可能にするのに十分な量であるか、または放射線療法の場合には標的ＧＲＰ−Ｒ含有組織のダメージまたはアブレーションを引き起こすのに十分な量であるが、本質的なダメージが非標的（正常組織）に生じるようなことはない量の放射能を投与する。シンチグラフィー画像化に必要な量および線量は、上記のとおりである。放射線療法に必要な量および線量は、また、使用された同位体のエネルギーおよび半減期、該薬物の取り込みの程度および身体からのクリアランスの程度ならびに腫瘍の質量に依存して、構築物によって異なる。一般に、用量は、約３０〜５０ｍＣｉの単回投与量から約３キュリーまでの累積投与量の範囲であり得る。
【０２０４】
本明細書で説明されるように、適当に選択された用量の投与は、機能しているＧＲＰ受容体を有する正常組織における本発明の標識化合物の投与量の割合を低下させることができ、かくして、腫瘍シグナルの明確さを向上させ、および／または腫瘍における治療用放射線核種の用量を増加させることができる。
【０２０５】
光学的画像化化合物について、所望の画像処理を行うのに十分な用量は、当該技術分野の当業者に知られており、使用される染料または他の化合物、画像化しようとする器官または組織、使用される画像化装置などに依存して大きく異なり得る。
【０２０６】
本発明の組成物は、生理学上許容されるバッファーを含むことができ、注射前の化合物ヘの放射線分解性ダメージを予防するために放射線安定剤を必要とすることがある。放射線安定剤は、当該技術分野の当業者に知られており、例えば、パラ−アミノ安息香酸、アスコルビン酸およびゲンチシン酸などを挙げることができる。
【０２０７】
本発明の診断薬または治療薬の調製に必要に全ての成分を含有するシングルバイアルキットまたはマルチバイアルキットは本発明の不可欠な部分である。放射性医薬品の場合、このようなキットは、しばしば、放射線核種を除いて全ての必要な成分を含む。
【０２０８】
例えば、本発明の放射性医薬品の調製のためのシングルバイアルキットは、好ましくは、式Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇで示されるキレート剤／リンカー／標的ペプチド複合体、スズ塩源（還元が必要な場合、例えばテクネチウムを使用する場合）または他の医薬上許容される還元剤を含有し、医薬上許容される酸または塩基で適切に緩衝されてｐＨを約３〜約９の値に調整する。使用される還元剤の量およびタイプは、形成されるべき交換錯体の性質に非常に依存する。適正な条件は、当該技術分野の当業者に周知である。該キットの内容物が凍結乾燥形態であるのが好ましい。このようなシングルバイアルキットは、グルコヘプトネート、グルコネート、マンニトール、マレート、クエン酸または酒石酸のような不安定または交換リガンドを含有していてもよく、最終生成物の放射化学的純度および安定性を向上させるのに有用なジエチレントリアミン−五酢酸（ＤＰＴＡ）、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）またはα、βもしくはγ−シクロデキストリンのような反応修飾因子を含有することできる。該キットは、また、安定剤、凍結乾燥工程で助けるように設計されるマンニトールのような増量剤、および当該技術分野の当業者に知られている他の添加剤を含有することができる。
【０２０９】
マルチバイアルキットは、好ましくは、同一の一般成分を含有するが、放射性医薬品の再構成において２つ以上のバイアルを用いる。例えば、１つのバイアルは、過テクネチウム酸（例えば、スズ源または他の還元剤）の添加により不安定なＴｃ(Ｖ)錯体を形成するのに必要な成分の全てを含有する。このバイアルに過テクネチウム酸を添加し、適当な時間待った後、このバイアルの内容物を、キレート剤および標的ペプチド、ならびにｐＨを最適な値に調整するのに適したバッファーを含有する別のバイアルに添加する。約５〜６０分の反応時間の後、本発明の錯体が形成される。このマルチバイアルキットの両方のバルアイの内容物は凍結保存されていることが有利である。上記のように、反応修飾剤、交換リガンド、安定剤、増量剤などは、いずれかまたは両方のバイアル中に存在し得る。
【０２１０】
化合物の一般的な製造方法
本発明の化合物は、選択されたキレート剤に依存して様々な方法で製造され得る。該化合物のペプチド部分は、一般的に確立されており、最も好都合には、固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）法のようなペプチド合成の技術分野で知られている技術によって製造され得る。代替ＦＭＯＣ保護および脱保護の使用は、それが固相合成法に適しているので、短いペプチドの好ましい製造方法である。組換えＤＮＡ技術は、タンパク質およびその長いフラグメントの製造に好ましい。
【０２１１】
固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）法は、ポリスチレンのような不溶性支持体またはマトリックスに結合している伸長ペプチド鎖へのアミノ酸残基の段階的付加を含む。アミノ基がｔ−ブチルオキシカルボニル基（Ｂｏｃ）またはフルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）基のようなＮ保護剤で保護されているペプチドのＣ末端残基をまず市販の支持体に固着させる。好適な脱保護剤（例えば、Ｂｏｃの場合にはＴＦＡ、Ｆｍｏｃの場合にはピペリジン）を用いて該アミノ保護基を除去し、ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）のようなカップリング剤と一緒に次のアミノ酸残基（Ｎ保護形態）を添加する。ペプチド結合の形成後、支持体から試薬を洗い流す。最後の残基を添加した後、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）またはフッ化水素（ＨＦ）のような好適な試薬を用いて支持体からペプチドを切断する。
【０２１２】
セグメントカップリングによる当該化合物の別の製造方法
本発明の化合物は、また、セグメントカップリングまたはフラグメント縮合として当該技術分野で知られている方法によっても製造され得る（Barlos, K. and Gatos, D.; 2002 “Convergent Peptide Synthesis” in Fmoc Solid Phase Synthesis-A Practical Approach; Eds. Chan, W.C. and White, P.D.; Oxford University Press, New York; Chap. 9, pp 215-228）。この方法では、液相合成法もしくは固相合成法のいずれかまたはこの２つの方法の組み合わせによって、通常側鎖保護形態であるペプチドのセグメントが別々に調製される。セグメントの選択は、極めて重要であり、Ｃ末端残基およびＮ末端残基がペプチド合成において最もクリーンなカップリングをもたらすと予測される管理可能な数のセグメントを提供することができる分割ストラテジーを使用して行われる。最良のセグメントのＣ末端残基は、キラルα炭素を持っていない（グリシン、またはカップリング工程で活性化されるべきカルボキシル基に対してαの炭素にて光学不活性な他の基）か、または、アミノ酸からなる。活性化およびカップリングの間のラセミ化傾向は、可能な選択肢の中で最低である。各セグメントについてのＮ末端アミノ酸の選択は、該アミノ基の活性アシル中間体のカップリングの容易さに基づく。分割ストラテジーが選択されると、各セグメントのカップリング法は、必要な中間体の合成到達性ならびに得られた生成物の操作および精製の相対的な容易さ（必要な場合）に基づいて選択される。次いで、いずれも溶液中にあるか、または１つが固相上にあり、もう１つが溶液中にあるセグメントを一緒にカップリングさせて、完全または部分的保護形態の最終構造を調製する。
【０２１３】
次いで、保護標的化合物から保護基を除去し、精製し、単離して、所望の最終化合物を得る。セグメントカップリング法の利点は、各セグメントを別々に精製して、不完全なカップリングにより生じる欠失配列のような副生成物、またはカップリング工程の間の側鎖アミド脱水もしくはＦｍｏｃ基の脱保護の間のαアミノ基への側鎖（例えば、Ｇｌｎの側鎖）の分子内環化のような反応に由来する副生成物の除去を可能にすることができることである。このような副生成物は、すべて、慣用の樹脂をベースとする「直線状」ペプチド鎖アセンブリの最終生成物中に存在するが、一方、これらの物質の除去は、要すればセグメントカップリングストラテジーにおける多くの段階で行うことができる。セグメントカップリングストラテジーのもう１つの重要な利点は、各セグメントの合成を高純度および高収率に最適化することによって最終生成物の純度および収率を向上させるのに、様々な溶媒、試薬および条件を適用することができるということである。実現される他の利点は、試薬の消耗の低下および低価格である。
【実施例】
【０２１４】
種々の本発明の化合物を製造するために使用され得る様々な方法の例を以下に記載する。各実施例において、１つの大文字（例えば、Ａ、Ｂ、Ｃ）で同定される化合物は、同定された図面において同一の標示をした対応する化合物と関連している。
【０２１５】
一般的な実験
Ａ．使用されるさらなる略語の定義
本明細書の全体にわたって以下の一般的な略語が使用されている：
１,１−ジメチルエトキシカルボニル（ＢｏｃまたはＢｏｃ）；
９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）；
アリルオキシカルボニル（Ａｌｏｃ）；
１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔまたはＨＯＢＴ）；
Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）；
Ｎ−メチルピロリジン（ＮＭＰ）；
無水酢酸（Ａｃ2Ｏ）；
(４,４−ジメチル−２,６−ジオキソシクロヘキサ−１−イリデン)−３−メチルブチル（ｉｖ−Ｄｄｅ）；
トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）；
試薬Ｂ（ＴＦＡ：Ｈ2Ｏ：フェノール：トリイソプロピルシラン、８８：５：５：２）；
ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）；
Ｏ−(１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル)−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）；
Ｏ−(７−アザベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）；
Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）；
固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）；
ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）；
ジクロロメタン（ＤＣＭ）；
ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）；
ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）；
１,４,７,１０−テトラアザシクロテトラデカン−１,４,７,１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）；
トリイソプロピルシラン（ＴＩＰＳ）；
１,４,７,１０−テトラアザシクロテトラデカン−１,４,７,１０−四酢酸（ＤＯＴＡ)
(１Ｒ)−１−[１,４,７,１０−テトラアザ−４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)シクロドデシル]エタン−１,２−ジカルボン酸（ＣＭＤＯＴＡ）；
ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）；
ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）；
ヒト前立腺癌細胞株（ＰＣ３）；
クロロギ酸イソブチル（ＩＢＣＦ）；
トリブチル アミン（ＴＢＡ）；
放射化学的純度（ＲＣＰ）；および
高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）。
【０２１６】
Ｂ．材料
使用されたＦｍｏｃ保護アミノ酸は、（米国カリフォルニア州サンディエゴ）、Advanced Chem Tech（米国ケンタッキー州ルイビル）、Chem-Impex International（米国イリノイ州ウッドデイル）およびMultiple Peptide Systems（米国カリフォルニア州サンディエゴ）から購入した。合成に必要な他の化学薬品、試薬および吸着剤は、Aldrich Chemical Co.（米国ウィスコンシン州ミルウォーキー）およびVWR Scientific Products（米国ニュージャージー州ブリッジポート）から購入した。ペプチド合成の溶媒は、Pharmco Co.（米国コネティカット州ブルックフィールド）から入手した。ＨＰＬＣ分析用および精製用のカラムは、Waters Co.（米国マサチューセッツ州ミルフォード）から入手した。市販されていないものについての実験の詳細は以下に記載する。
【０２１７】
Ｃ．ペプチド合成装置
ペプチドは、Ａｄｖａｎｃｅｄ  ＣｈｅｍＴｅｃｈ  ４９６  Ω  ＭＯＳ合成器、Ａｄｖａｎｃｅｄ  ＣｈｅｍＴｅｃｈ  ３５７  ＦＢＳ合成器の使用により、および／または手動のペプチド合成によって、調製された。しかしながら、使用された反復脱保護および鎖伸長のためのプロトコールは、全てについて同一であった。
【０２１８】
Ｄ．シンフォニー装置（Rainin製）による自動合成
合成は、Protein Technologies Inc.によって供給されたＳｙｍｐｈｏｎｙ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ（Ｖｅｒｓｉｏｎ  ３）を用いて行われた。０.２５ｍｍｏｌ／ｇの置換を有するＮｏｖａｇｅｌ  ＴＧＲ樹脂を使用し、各ウェルは該樹脂０.２ｇ（５０μｍｏｌ）を含有していた。アミノ酸をＮＭＰに溶解した。その濃度は０.２５Ｍであった。ＨＢＴＵおよびＮ−メチルモルホリンのＤＭＦ中０.２５Ｍ溶液を調製し、カップリングに使用した。カップリングは、すべて、２.０時間行った。該樹脂を別の反応容器へ移し、手動合成法におけると同じ試薬Ｂを用いて、機械の外側で切断を行った。
【０２１９】
Ｅ．分析および精製に使用される装置
分析用ＨＰＬＣは、システム制御、データ収集および後処理のためにＳｈｉｍａｄｚｕ−ＣｌａｓｓＶＰソフトウェアバージョン４.１を用いてＳｈｉｍａｄｚｕ−ＬＣ−１０Ａ二重ポンプ勾配分析用ＬＣシステムを使用して行われた。質量スペクトルは、直接フローインジェクションまたはＷａｔｅｒｓ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ  ＸＴｅｒｒａ  ＭＳ  Ｃ１８カラム（４.６ｍｍ×５０ｍｍ、粒径５μ、孔径１２０Å）上のへのインジェクションのために装着したＡｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  １１００シリーズ自動回収装置を装着したＨｅｗｌｅｔｔ−Ｐａｃｋａｒｄ  Ｓｅｒｉｅｓ  １１００二重ポンプ勾配ＨＰＬＣシステムと適合したＨｅｗｌｅｔｔ−Ｐａｃｋａｒｄ  Ｓｅｒｉｅｓ  １１００  ＭＳＤ質量分析計にて収集した。該装置は、サンプルサブミッションのために「ＭＳＤ  Ａｎｙｏｎｅ」ソフトウェアを使用し、装置制御およびデータ収集のためにＨＰ  ＣｈｅｍＳｔａｔｉｏｎソフトウェアを使用してＨＰ  Ｋａｙａｋワークステーションによって駆動された。ほとんどの場合、試料は、１ｍｇ／ｍＬの濃度の試料溶液の５μＬインジェクションを使用して直接インフュージョンにより導入され、陽イオンエレクトロスプレーを使用して分析して、構造の確認のためにｍ／ｅおよびｍ／ｚ（多価）イオンを得た。1Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、Ｖａｒｉａｎ  Ｉｎｎｏｖａ分光計にて５００ＭＨｚで得られた。13Ｃ−ＮＭＲスペクトルは、同装置にて１２５.７３ＭＨｚで得られた。一般に、残留1Ｈ吸収、または13Ｃ−ＮＭＲの場合には使用された溶媒の13Ｃ吸収は、内部参照として使用された；他の場合には、テトラメチルシラン（δ＝０.００ｐｐｍ）を用いた。共鳴値は、δ単位で与えられる。微量分析データは、ニュージャージー州ホワイトハウスのQuantitative Technologies Inc.から入手した。分取ＨＰＬＣは、システム制御、データ収集、フラクション回収および後処理のためにＳｈｉｍａｄｚｕ−ＣｌａｓｓＶＰソフトウェアバージョン４.３を使用してＳｈｉｍａｄｚｕ−ＬＣ−８Ａ二重ポンプ勾配分取ＨＰＬＣシステムにて行われた。
【０２２０】
Ｆ．一般的なペプチド合成法
Ｒｉｎｋアミド−Ｎｏｖａｇｅｌ  ＨＬ樹脂（０.６ｍｍｏｌ／ｇ）を固体支持体として使用した。
【０２２１】
Ｇ．カップリング法
代表的な実験において、樹脂０.１ｇ（０.０６ｍｍｏｌ）上に最初のアミノ酸を付した。該樹脂にＮＭＰ中の適当なＦｍｏｃ−アミノ酸（０.２５Ｍ溶液；０.９６０ｍＬ）を付加し、次いで、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＮＭＰ中０.５Ｍ；０.４８ｍＬ）を付した。反応ブロック（自動ペプチド合成の場合）または個々の反応容器（手動ペプチド合成の場合）を約２分間振盪した。上記混合物にジイソプロピルカルボジイミド（ＮＭＰ中０.５Ｍ；０.４８ｍＬ）を添加し、反応混合物を周囲温度で４時間振盪した。次いで、陽圧の乾燥窒素の適用によって反応ブロックまたは個々の反応容器から反応物をパージした。
【０２２２】
Ｈ．洗浄方法
反応ブロックの各ウェルにＮＭＰ  １.２ｍＬを充填し、該ブロックを５分間振盪した。陽圧窒素下で溶液を排出させた。この方法を３回繰り返した。個々の容器を用いる手動合成の場合には、同方法を適当な容量のＮＭＰと一緒に使用した。
【０２２３】
Ｉ．Ｆｍｏｃ保護基の除去
Ｆｍｏｃ保護アミノ酸を有する樹脂をＤＭＦ中２０％（ｖ／ｖ）ピペリジン１.５ｍＬで処理し、反応ブロックまたは個々の手動合成容器を１５分間振盪した。樹脂から溶液を排出させた。この方法を１回繰り返し、上記の洗浄方法を用いて樹脂を洗浄した。
【０２２４】
Ｊ．リガンド（ＤＯＴＡおよびＣＭＤＯＴＡ）の最終カップリング
樹脂結合ペプチドリンカー構築物のＮ末端アミノ基を脱ブロックし、該樹脂を洗浄した。所望のリガンドおよびＨＢＴＵのＮＭＰ中０.２５Ｍ溶液を調製し、２倍の当量のＤＩＥＡで処理した。得られた活性リガンドの溶液を上記樹脂（１.９７２ｍＬ； ０.４８ｍｍｏｌ）に添加し、反応混合物を周囲温度で２４〜３０時間振盪した。溶液を排出させ、樹脂を洗浄した。ジクロロメタン１.５ｍＬ（３×）を用いて樹脂の最終洗浄を行った。
【０２２５】
Ｋ．最終ペプチドの脱保護および精製
樹脂に試薬Ｂの溶液（２ｍＬ； ８８：５：５：２−ＴＦＡ：フェノール：水：ＴＩＰＳ）を添加し、反応ブロックまたは個々の溶液を周囲温度で４.５時間振盪した。得られた脱保護ペブチド含有溶液をバイアル中に移した。試薬Ｂ  １ｍＬを用いてこの方法をさらに２回繰り返した。合わせた濾液を、Ｇｅｎｅｖａｃ  ＨＴ−１２シリーズＩＩ遠心式濃縮器を使用して減圧下にて濃縮した。次いで、各バイアル中の残留物をＥｔ2Ｏ  ２ｍＬと一緒にトリチュレートし、上清をデカントした。この方法を２回繰り返して、ペプチドを無色固体として得た。粗ペプチドを水／アセトニトリルに溶解し、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＴｅｒｒａ  ＭＳ  Ｃ１８分取ＨＰＬＣカラム（５０ｍｍ×１９ｍｍ、粒径５μｍ、孔径１２０Å）またはＷａｔｅｒｓ−ＹＭＣ  Ｃ１８  ＯＤＳカラム（２５０ｍｍ×３０ｍｍ内径、粒径１０μｍ、孔径１２０Å）を用いて精製した。生成物含有フラクションを回収し、ＨＰＬＣにより分析した。純度＞９５％のフラクションをプールし、凍結乾燥によりペプチドを単離した。
【０２２６】
分取ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  ＸＴｅｒｒａ  Ｃｏｌｕｍｎ）の条件：
溶出速度：５０ｍＬ／分
検出：ＵＶ、λ＝２２０ｎｍ
溶離液Ａ：０.１％ＴＦＡ水溶液；溶離液Ｂ：アセトニトリル（０.１％ＴＦＡ）。
【０２２７】
ＨＰＬＣ分析の条件：
カラム：Ｗａｔｅｒｓ  ＸＴｅｒｒａ（Waters Co.；４.６×５０ｍｍ；ＭＳ  Ｃ１８；粒径５μｍ、孔径１２０Å）。
溶出速度：３ｍＬ／分；検出：ＵＶ、λ＝２２０ｎｍ
溶離液Ａ：０.１％ＴＦＡ水溶液；溶離液Ｂ：アセトニトリル（０.１％ＴＦＡ）。
【０２２８】
実施例Ｉ  −  図１Ａ−Ｂ
Ｌ６２の合成
概要：図１Ａ−Ｂに示されるように、以下の工程を用いてＬ６２を製造した：(３β,５β)−３−アミノコラン−２４−酸メチルエステルＡのＮａＯＨによる加水分解により、対応する酸Ｂを得、次いで、これをＦｍｏｃ−Ｃｌと反応させて、中間体Ｃを得た。オクタペプチドＧｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ2（ＢＢＮ[７−１４]（配列番号１）で官能化されたＲｉｎｋアミド樹脂を逐次的にＣ、Ｆｍｏｃ−グリシンおよびＤＯＴＡトリ−ｔ−ブチルエステルと反応させた。試薬Ｂによる切断および脱保護の後、粗生成物を分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ６２を得た。全収率：２.５％。以下にさらに詳細に記載する：
【０２２９】
Ａ．ボンベシン[７−１４]（配列番号１）で官能化されたＲｉｎｋアミド樹脂、（Ａ）
固相ペプチド合成容器中にて、ＲｉｎｋアミドＮｏｖａＧｅｌTM樹脂（１０ｇ；６.０ｍｍｏｌ）ＡのＤＭＦ（４５ｍＬ）中懸濁液に逐次的にＦｍｏｃ−アミノ酸（２４ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）（３.６７ｇ；２４ｍｍｏｌ）およびＮ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）（３.７５ｍＬ；２４ｍｍｏｌ）を添加した。該混合物を、卓上振盪器を用いて室温で３時間振盪し、次いで、溶液を捨て、樹脂をＤＭＦ（５×４５ｍＬ）で洗浄した。樹脂をＤＭＦ中２５％ピペリジン（４５ｍＬ）と一緒に４分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＦ中２５％ピペリジン（４５ｍＬ）を加えた。該懸濁液を１０分間振盪し、次いで、溶液を捨て、樹脂をＤＭＦ（５×４５ｍＬ）で洗浄した。
【０２３０】
この方法を以下のアミノ酸について逐次的に適用した：Ｎ−α−Ｆｍｏｃ−Ｌ−メチオニン、Ｎ−α−Ｆｍｏｃ−Ｌ−ロイシン、Ｎ−α−Ｆｍｏｃ−Ｎｉｍ−トリチル−Ｌ−ヒスチジン、Ｎ−α−Ｆｍｏｃ−グリシン、Ｎ−α−Ｆｍｏｃ−Ｌ−バリン、Ｎ−α−Ｆｍｏｃ−Ｌ−アラニン、Ｎ−α−Ｆｍｏｃ−Ｎin−Ｂｏｃ−Ｌ−トリプトファン。
【０２３１】
最後のカップリング反応において、樹脂にＮ−α−Ｆｍｏｃ−Ｎ−γ−トリチル−Ｌ−グルタミン（１４.６ｇ；２４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（３.６７ｇ；２４ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（３.７５ｍＬ；２４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（４５ｍＬ）中にて添加した。該混合物を室温で３時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＦ（５×４５ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（５×４５ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させた。
【０２３２】
Ｂ．中間体ＢおよびＣの製造（図１Ａ）：
１．(３β,５β)−３−アミノコラン−２４−酸（Ｂ）の合成
４５℃にて(３β,５β)−３−アミノコラン−２４−酸メチルエステル（５.０ｇ；１２.８ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（６５ｍＬ）中溶液にＮａＯＨの１Ｍ溶液（１６.６ｍＬ；１６.６ｍｍｏｌ）を滴下した。４５℃で３時間撹拌した後、混合物を２５ｍＬに濃縮し、Ｈ2Ｏ（４０ｍＬ）および１Ｍ  ＨＣｌ（２２ｍＬ）を添加した。沈殿した固体を濾過し、Ｈ2Ｏ（２×５０ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させて、Ｂを白色固体として得た（５.０ｇ；１３.３ｍｍｏｌ）。収率８０％。
【０２３３】
２．(３β,５β)−３−(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)アミノコラン−２４−酸、（Ｃ）の合成
０℃で撹拌した(３β,５β)−３−アミノコラン−２４−酸Ｂ（１.０ｇ；２.６６ｍｍｏｌ）の１０％Ｎａ2ＣＯ3水溶液（１６ｍＬ）および１,４−ジオキサン（９ｍＬ）中懸濁液に９−フルオレニルメトキシカルボニルクロライド（０.７６ｇ；２.９３ｍｍｏｌ）の１,４−ジオキサン（９ｍＬ）中溶液を滴下した。室温で６時間撹拌した後、Ｈ2Ｏ（９０ｍＬ）を添加し、水性相をＥｔ2Ｏ（２×９０ｍＬ）で洗浄し、次いで、２Ｍ  ＨＣｌ（１５ｍＬ）を添加した（最終ｐＨ：１.５）。水性相をＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で抽出し、有機層をＮａ2ＳＯ4で乾燥させ、蒸発させた。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、Ｃを白色固体として得た（１.２ｇ；２.０ｍｍｏｌ）。収率６９％。
【０２３４】
Ｃ．Ｌ６２（Ｎ−[(３β,５β)−３−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]−コラン−２４−イル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド）の合成（図１Ｂ）：
固相ペプチド合成容器中にて、樹脂Ａ（０.５ｇ；０.３ｍｍｏｌ）をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加した。懸濁液を２０分間振盪し、次いで、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。該樹脂に(３β,５β)−３−(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)アミノコラン−２４−酸Ｃ（０.７２ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で２４時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合部つをさらに２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。該樹脂にＮ−α−Ｆｍｏｃ−グリシン（０.７９ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ：１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加した。該混合物を室温で３時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物をさらに２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄し、次いで、樹脂に１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１,４,７,１０−四酢酸トリス(１,１−ジメチルエチル)エステル付加物をＮａＣｌ（０.７９ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ：１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（０.４０ｍＬ；２.４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）と一緒に添加した。混合物を室温で２４時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（５×７ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させた。フラスコ中にて試薬Ｂ（２５ｍＬ）と一緒に樹脂を４.５時間振盪した。樹脂を濾過し、溶液を減圧下にて蒸発させて、油状粗生成物を得、これをＥｔ2Ｏ（２０ｍＬ）と一緒にトリチュレートして、沈殿物を得た。遠心分離によって沈殿物を回収し、Ｅｔ2Ｏ（３×２０ｍＬ）で洗浄し、次いで、ＨＰＬＣにより分析し、分取ＨＰＬＣにより精製した。生成物を含有するフラクションを凍結乾燥させて、Ｌ６２（６.６ｍｇ；３.８×１０-3ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。収率４.５％。
【０２３５】
実施例ＩＩ  −  図２Ａ−Ｆ
Ｌ７０、Ｌ７３、Ｌ７４、Ｌ１１５およびＬ１１６の合成
概要：Ｒｉｎｋアミド樹脂上のオクタペプチドＧｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ2（ＢＢＮ(７−１４)（配列番号１）（適当な側鎖保護を有する）を様々なリンカーとカップリングさせ、次いで、ＤＯＴＡトリ−ｔ−ブチルエステルで官能化することによって、当該生成物を得た。試薬Ｂにより切断および脱保護した後、最終生成物を分取ＨＰＬＣにより精製した。全収率３〜９％。
【０２３６】
Ａ．Ｌ７０の合成（図２Ａ）：
固相ペプチド合成容器中にて樹脂Ａ（０.５ｇ；０.３ｍｍｏｌ）をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加した。懸濁液を２０分間撹拌し、次いで、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂にＦｍｏｃ−４−アミノ安息香酸（０.４３ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で３時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物を２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。Ｆｍｏｃ−グリシン（０.３６ｇ；１.２ｍｍｏｌ）ＨＡＴＵ（０.４６ｇ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０.４０ｍＬ；２.４ｍｍｏｌ）をＤＭＡ（７ｍＬ）中にて１５分間撹拌し、次いで、該溶液を樹脂に添加し、混合物を室温で２時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物を２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１,４,７,１０−四酢酸トリス(１,１−ジメチルエチル)エステル付加物をＮａＣｌ（０.７９ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ：１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（０.４０ｍＬ；２.４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）と一緒に添加した。混合物を室温で２４時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（５×７ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させた。フラスコ中にて試薬Ｂ（２５ｍＬ）と一緒に樹脂を４時間振盪した。樹脂を濾過し、濾液を減圧下にて蒸発させて、油状粗生成物を得、これをＥｔ2Ｏ（５ｍＬ）と一緒にトリチュレートした。遠心分離によって沈殿物を回収し、Ｅｔ2Ｏ（５×５ｍＬ）で洗浄し、次いで、ＨＰＬＣにより分析し、分取ＨＰＬＣにより精製した。生成物を含有するフラクションを凍結乾燥させて、Ｌ７０を白色の綿毛状固体として得た（６.８ｍｇ；０.００５ｍｍｏｌ）。収率３％。
【０２３７】
Ｂ．Ｌ７３、Ｌ１１５およびＬ１１６の合成（図２Ｂ−２Ｅ）：
固相ペプチド合成容器中にて樹脂Ａ（０.５ｇ；０.３ｍｍｏｌ）をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加した。懸濁液を２０分間撹拌し、次いで、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂にＦｍｏｃ−リンカー−ＯＨ（１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で３時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物を２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１,４,７,１０−四酢酸トリス(１,１−ジメチルエチル)エステル付加物をＮａＣｌ（０.７９ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ：１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（０.４０ｍＬ；２.４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）と一緒に添加した。混合物を室温で２４時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（５×７ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させた。フラスコ中にて試薬Ｂ（２５ｍＬ）と一緒に樹脂を４時間振盪した。樹脂を濾過し、溶液を減圧下にて蒸発させて、油状粗生成物を得、これをＥｔ2Ｏ（５ｍＬ）と一緒にトリチュレートした。遠心分離によって沈殿物を回収し、Ｅｔ2Ｏ（５×５ｍＬ）で洗浄し、次いで、ＨＰＬＣにより分析し、分取ＨＰＬＣにより精製した。生成物を含有するフラクションを凍結乾燥させた。
【０２３８】
Ｃ．Ｌ７４の合成（図２Ｆ）：
固相ペプチド合成容器中にて樹脂Ａ（０.５ｇ；０.３ｍｍｏｌ）をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加した。懸濁液を２０分間撹拌し、次いで、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂にＦｍｏｃ−イソニペコチン酸（０.４２ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で３時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物を２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂にＦｍｏｃ−グリシン（０.３６ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で３時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物を２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１,４,７,１０−四酢酸トリス(１,１−ジメチルエチル)エステル付加物をＮａＣｌ（０.７９ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ：１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（０.４０ｍＬ；２.４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）と一緒に添加した。混合物を室温で２４時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（５×７ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させた。フラスコ中にて試薬Ｂ（２５ｍＬ）と一緒に樹脂を４時間振盪した。樹脂を濾過し、溶液を減圧下にて蒸発させて、油状粗生成物を得、これをＥｔ2Ｏ（５ｍＬ）と一緒にトリチュレートした。遠心分離によって沈殿物を回収し、Ｅｔ2Ｏ（５×５ｍＬ）で洗浄し、次いで、ＨＰＬＣにより分析し、ＨＰＬＣにより精製した。生成物を含有するフラクションを凍結乾燥させて、Ｌ７４を白色の綿毛状固体として得た（１８.０ｍｇ；０.０１２ｍｍｏｌ）。収率８％。
【０２３９】
実施例ＩＩＩ  −  図３Ａ−Ｅ
Ｌ６７の合成
概要：(３β,５β)−３−アミノ−１２−オキソコラン−２４−酸メチルエステルＡのＮａＯＨによる加水分解によって対応する酸Ｂを得、次いで、Ｆｍｏｃ−グリシンと反応させて、中間体Ｃを得た。オクタペプチドＧｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ2（ＢＢＮ[７−１４]（配列番号１）で官能化されたＲｉｎｋアミド樹脂を逐次的にＣおよびＤＯＴＡトリ−ｔ−ブチルエステルと反応させた。試薬Ｂによる切断および脱保護の後、粗生成物を分取ＨＰＬＣにより精製してＬ６７を得た。全収率：５.２％。
【０２４０】
Ａ．(３β,５β)−３−アミノ−１２−オキソコラン−２４−酸、（Ｂ）の合成（図３Ａ）
４５℃にて(３β,５β)−３−アミノ−１２−オキソコラン−２４−酸メチルエステルＡ（２.１ｇ；５.１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１５ｍＬ）中溶液にＮａＯＨの１Ｍ溶液（６.６ｍＬ；６.６ｍｍｏｌ）を滴下した。４５℃で３時間撹拌した後、混合物を２５ｍＬに濃縮し、次いで、Ｈ2Ｏ（２５ｍＬ）および１Ｍ  ＨＣｌ（８ｍＬ）を添加した。沈殿した固体を濾過し、Ｈ2Ｏ（２×３０ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させて、Ｂを白色固体として得た（１.７ｇ；４.４ｍｍｏｌ）。収率８８％。
【０２４１】
Ｂ．(３β,５β)−３−[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)アミノ]アセチル]アミノ−１２−オキソコラン−２４−酸、（Ｃ）の合成（図３Ａ）
０℃で撹拌したＮ−α−Ｆｍｏｃ−グリシン（０.９ｇ；３.１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２５ｍＬ）中溶液にトリブチルアミン（０.７ｍＬ；３.１ｍｍｏｌ）を滴下した。次いで、クロロギ酸イソブチル（０.４ｍＬ；３.１ｍｍｏｌ）を添加し、１０分後、冷却した溶液にトリブチルアミン（０.６ｍＬ；２.６ｍｍｏｌ）および(３β,５β)−３−アミノ−１２−オキソコラン−２４−酸Ｂ（１.０ｇ；２.６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３０ｍＬ）中懸濁液を１時間にわたって滴下した。該混合物を加温し、６時間後、溶液を４０ｍＬに濃縮し、次いで、Ｈ2Ｏ（５０ｍＬ）および１Ｎ  ＨＣｌ（１０ｍＬ）を添加した（最終ｐＨ：１.５）。沈殿した固体を濾過し、Ｈ2Ｏ（２×５０ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させ、フラッシュクロマトグラフィーにより精製して、Ｃを白色固体として得た（１.１ｇ；１.７ｍｍｏｌ）。収率６６％。
【０２４２】
Ｃ．Ｌ６７（Ｎ−[(３β,５β)−３−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]−１２,２４−ジオキソコラン−２４−イル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド）の合成（図３Ｂおよび図３Ｅ）。
ＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を入れた固相ペプチド合成容器中にて樹脂Ｄ（０.５ｇ；０.３ｍｍｏｌ）を１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加した。懸濁液を２０分間撹拌し、次いで、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に(３β,５β)−３−[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)アミノ]アセチル]アミノ]−１２−オキソコラン−２４−酸Ｃ（０.８０ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温にて２４時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物を２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１,４,７,１０−四酢酸トリス(１,１−ジメチルエチル)エステル付加物をＮａＣｌ（０.７９ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ：１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（０.４０ｍＬ；２.４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）と一緒に添加した。混合物を室温で２４時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（５×７ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させた。フラスコ中にて試薬Ｂ（２５ｍＬ）と一緒に樹脂を４.５時間振盪した。樹脂を濾過し、溶液を減圧下にて蒸発させて、油状粗生成物を得、これをＥｔ2Ｏ（２０ｍＬ）と一緒にトリチュレートした。
【０２４３】
実施例ＩＶ  −  図４Ａ−Ｈ
Ｌ６３およびＬ６４の合成
概要：(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸メチルエステル１ｂのＮａＯＨによる加水分解によって中間体２ｂを得、次いで、Ｆｍｏｃ−グリシンと反応させて、３ｂを得た。オクタペプチドＧｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ2（ＢＢＮ[７−１４]（配列番号１）で官能化されたＲｉｎｋアミド樹脂を３ｂと反応させ、次いで、ＤＯＴＡトリ−ｔ−ブチルエステルと反応させた。試薬Ｂによる切断および脱保護の後、粗生成物を分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ６４を得た。既に得ていた中間体２ａから開始して同方法を繰り返して、Ｌ６３を得た。全収率：それぞれ９％および４％。
【０２４４】
Ａ．(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸、（２ｂ）の合成（図４Ａ）
４５℃で加熱した(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸メチルエステル１ｂ（４２.１ｇ；０.１０ｍｏｌ）のＭｅＯＨ（３００ｍＬ）中溶液にＮａＯＨの１Ｍ溶液（１３０ｍＬ；０.１３ｍｏｌ）を滴下した。４５℃で３時間撹拌した後、混合物を１５０ｍＬに濃縮し、Ｈ2Ｏ（３５０ｍＬ）を添加した。ＣＨ2Ｃｌ2（２×１００ｍＬ）で抽出した後、水性溶液を２００ｍＬに濃縮し、１Ｍ  ＨＣｌ（１５０ｍＬ）を添加した。沈殿した固体を濾過し、Ｈ2Ｏ（２×１００ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させて、２ｂを白色固体として得た（３４.８ｇ；０.０８ｍｏｌ）。収率８０％。
【０２４５】
Ｂ．(３β,５β,１２α)−３−[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)アミノ]アセチル]アミノ−１２−ヒドロキシコラン−２４−酸、（３ａ）の合成（図４Ａ）
０℃で撹拌したＮ−α−Ｆｍｏｃ−グリシン（６.０ｇ；２０.２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１２０ｍＬ）中溶液にトリブチルアミン（４.８ｍＬ；２０.２ｍｍｏｌ）を滴下した。次いで、クロロギ酸イソブチル（２.６ｍＬ；２０.２ｍｍｏｌ）を添加し、１０分後、冷却した溶液にトリブチルアミン（３.９ｍＬ；１６.８ｍｍｏｌ）および(３β,５β,１２α)−３−アミノ−１２−ヒドロキシコラン−２４−酸２a（６.６ｇ；１６.８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１２０ｍＬ）中懸濁液を１時間にわたって滴下した。混合物を加温し、６時間後、溶液を１５０ｍＬに濃縮し、次いで、Ｈ2Ｏ（２５０ｍＬ）および１Ｎ  ＨＣｌ（４０ｍＬ）を添加した（最終ｐＨ：１.５）。沈殿した固体を濾過し、Ｈ2Ｏ（２×１００ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させ、フラッシュクロマトグラフィーにより精製して、３ａを白色固体として得た（３.５ｇ；５.２ｍｍｏｌ）。収率３１％。
【０２４６】
Ｃ．(３β,５β,７α,１２α)−３−[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)アミノ]アセチル]アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸、（３ｂ）の合成（図４Ａ）
０℃で撹拌したＮ−α−Ｆｍｏｃ−グリシン（４.０ｇ；１３.５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（８０ｍＬ）中溶液にトリブチルアミン（３.２ｍＬ；１３.５ｍｍｏｌ）を滴下した。次いで、クロロギ酸イソブチル（１.７ｍＬ；１３.５ｍｍｏｌ）を添加し、１０分後、冷却した溶液にトリブチルアミン（２.６ｍＬ；１１.２ｍｍｏｌ）および(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸３ａ（４.５ｇ；１１.２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（８０ｍＬ）中懸濁液を１時間にわたって滴下した。混合物を加温し、６時間後、溶液を１２０ｍＬに濃縮し、次いで、Ｈ2Ｏ（１８０ｍＬ）および１Ｎ  ＨＣｌ（３０ｍＬ）を添加した（最終ｐＨ：１.５）。沈殿した固体を濾過し、Ｈ2Ｏ（２×１００ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させ、フラッシュクロマトグラフィーにより精製して、３ａを白色固体として得た（１.９ｇ；２.８ｍｍｏｌ）。収率２５％。
【０２４７】
別法において、(３β,５β,７α,１２α)−３−[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)アミノ]アセチル]アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸、（３ｂ）を以下のとおり製造することができる：
【０２４８】
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ（４.０ｇ、１３.４５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１５ｍＬ）中撹拌溶液にＮ−ヒドロキシスクシンイミド（１.７０ｇ、１４.７７ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（１.８７ｇ、１４.７７ｍｍｏｌ）を逐次的に添加し；得られた混合物を室温で４時間撹拌した。形成したＮ,Ｎ'−ジイソプロピル尿素を濾過により取り出し、該固体をエーテル（２０ｍＬ）で洗浄した。揮発物質を除去し、形成した固体Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−スクシンイミジルエステルをエーテル（３×２０ｍＬ）で洗浄した。次いで、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−スクシンイミジルエステルを乾燥ＤＭＦ（１５ｍＬ）に溶解し、該透明溶液に３−アミノデオキシコール酸（５.２１ｇ、１２.７８ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で４時間撹拌し、水（２００ｍＬ）を添加し、沈殿した固体を濾過し、水で洗浄し、乾燥させ、シリカゲルクロマトグラフィー（ＴＬＣ（シリカ）：（Ｒf：０.５０、シリカゲル、ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ、９：１）（溶離液：ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ（９：１））により精製して、(３β,５β,７α,１２α)−３−[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)アミノ]アセチル]アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸を無色の固体として得た。収率：７.４６ｇ（８５％）。
【０２４９】
Ｄ．Ｌ６３（Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]−１２−ヒドロキシ−２４−オキソコラン−２４−イル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド）の合成（図４Ｂ）
固相ペプチド合成容器中にて樹脂Ａ（０.５ｇ；０.３ｍｍｏｌ）をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加した。懸濁液を２０分間撹拌し、次いで、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に(３β,５β,１２α)−３−[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)アミノ]アセチル]アミノ−１２−ヒドロキシコラン−２４−酸３ａ（０.８２ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温にて２４時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物を２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１,４,７,１０−四酢酸トリス(１,１−ジメチルエチル)エステル付加物をＮａＣｌ（０.７９ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ：１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（０.４０ｍＬ；２.４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）と一緒に添加した。混合物を室温で２４時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（５×７ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させた。フラスコ中にて試薬Ｂ（２５ｍＬ）と一緒に樹脂を４時間振盪した。樹脂を濾過し、溶液を減圧下にて蒸発させて、油状粗生成物を得、Ｅｔ2Ｏ（５ｍＬ）で処理した後沈殿物を得た。遠心分離によって沈殿物を回収し、Ｅｔ2Ｏ（５×５ｍＬ）で洗浄し、次いで、分析し、ＨＰＬＣにより精製した。生成物を含有するフラクションを凍結乾燥させて、Ｌ６３を白色の綿毛状固体として得た（１２.８ｍｇ；０.００７３ｍｍｏｌ）。収率９％。
【０２５０】
Ｅ．Ｌ６４（Ｎ−[(３β,５β,７α,１２α)−３−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]−７,１２−ジヒドロキシ−２４−オキソコラン−２４−イル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド）の合成（図４Ｃ）
固相ペプチド合成容器中にて樹脂Ａ（０.５ｇ；０.３ｍｍｏｌ）をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加した。懸濁液を２０分間撹拌し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に(３β,５β,７α,１２α)−３−[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)アミノ]アセチル]アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸３ｂ（０.８１ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温にて２４時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物を２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１,４,７,１０−四酢酸トリス(１,１−ジメチルエチル)エステル付加物をＮａＣｌ（０.７９ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ：１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（０.４０ｍＬ；２.４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）と一緒に添加した。混合物を室温で２４時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（５×７ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させた。フラスコ中にて試薬Ｂ（２５ｍＬ）と一緒に樹脂を４時間振盪した。樹脂を濾過し、溶液を減圧下にて蒸発させて、油状粗生成物を得、これをＥｔ2Ｏ（５ｍＬ）と一緒にトリチュレートした。遠心分離によって沈殿物を回収し、Ｅｔ2Ｏ（５×５ｍＬ）で洗浄した。次いで、Ｈ2Ｏ（２０ｍＬ）に溶解し、Ｎａ2ＣＯ3（０.１０ｇ；０.７０ｍｍｏｌ）を添加し；得られた混合物を室温で４時間撹拌した。この溶液をＨＰＬＣにより精製し、生成物を含有するフラクションを凍結乾燥させて、Ｌ６４を白色の綿毛状固体として得た（３.６ｍｇ；０.００２１ｍｍｏｌ）。収率４％。
【０２５１】
実施例Ｖ  −  図５Ａ−Ｅ
Ｌ７１およびＬ７２の合成
概要：２つの工程で生成物を得た。第１の工程は、上記したＲｉｎｋアミド樹脂上でのオクタペプチドＧｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ2（ＢＢＮ[７−１４]（配列番号１）（適当な側鎖保護基を有する）の固相合成であった。第２の工程は、種々のリンカーとのカップリングに次ぐＤＯＴＡトリ−ｔ−ブチルエステルによる官能化であった。試薬Ｂにより切断および脱保護した後、最終生成物を分取ＨＰＬＣにより精製した。全収率３〜９％。
【０２５２】
Ａ．ボンベシン[７−１４]官能化および切断方法（図５Ａおよび５Ｄ）
ＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を入れた固相ペプチド合成容器中にて樹脂Ｂ（０.５ｇ；０.３ｍｍｏｌ）を１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加した。懸濁液を２０分間撹拌し、次いで、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂にＦｍｏｃ−リンカー−ＯＨ（１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加した。混合物を室温で３時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物を２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１,４,７,１０−四酢酸トリス(１,１−ジメチルエチル)エステル付加物をＮａＣｌ  Ｃ（０.７９ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ：１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（０.４０ｍＬ；２.４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）と一緒に添加した。混合物を室温で２４時間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（５×７ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させた。フラスコ中にて試薬Ｂ（２５ｍＬ）と一緒に樹脂を４時間振盪した。樹脂を濾過し、濾液を減圧下にて蒸発させて、油状粗生成物を得、これをエーテル（５ｍＬ）と一緒にトリチュレートした。遠心分離によって沈殿物を回収し、エーテル（５×５ｍＬ）で洗浄し、次いで、分析ＨＰＬＣにより分析し、分取ＨＰＬＣにより精製した。生成物を含有するフラクションを凍結乾燥させた。
【０２５３】
Ｂ．生成物
１．Ｌ７１（４−[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]メチル]ベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド）
生成物を白色の綿毛状固体として得た（７.３ｍｇ；０.００５ｍｍｏｌ）。収率７.５％。
【０２５４】
２．Ｌ７２（トランス−４−[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]メチル]シクロヘキシルカルボニル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド）
生成物を白色の綿毛状固体として得た（７.０ｍｇ；０.００５ｍｍｏｌ）。収率４.８％。
【０２５５】
Ｃ．トランス−４−[[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]メチル]シクロヘキサンカルボン酸、（Ｄ）（図５Ｅ）
０℃に冷却したトランス−４−(アミノメチル)シクロヘキサンカルボン酸（２.０ｇ；１２.７ｍｍｏｌ）の１０％Ｎａ2ＣＯ3（３０ｍＬ）中溶液にＮ−(９−フルオレニルメトキシカルボニルオキシ)スクシンイミド（４.４ｇ；１４.０ｍｍｏｌ）の１,４−ジオキサン（４０ｍＬ）中溶液を滴下した。次いで、混合物を周囲温度に加温し、室温で１時間撹拌した後、１Ｎ  ＨＣｌ（３２ｍＬ）で処理して、最終ｐＨを２にした。得られた溶液をｎ−ＢｕＯＨ（１００ｍＬ）で抽出し；揮発物質を除去し、粗残留物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、Ｄを白色固体として得た（１.６ｇ；４.２ｍｍｏｌ）。収率３３％。
【０２５６】
実施例ＶＩ  −  図６Ａ−Ｆ
Ｌ７５およびＬ７６の合成
概要：Ｒｉｎｋアミド樹脂上にてオクタペプチドＧｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ2（ＢＢＮ[７−１４]、配列番号１）（Ａ）を２つのリンカーＥおよびＨとカップリングさせ、次いで、ＤＯＴＡトリ−ｔ−ブチルエステルによって官能化することによって、２つの生成物を得た。試薬Ｂにより切断および脱保護した後、最終生成物を分取ＨＰＬＣにより精製した。全収率：８.５％（Ｌ７５）および５.６％（Ｌ７６）。
【０２５７】
Ａ．２−[(１,３−ジヒドロ−１,３−ジオキソ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)メチル]安息香酸、（Ｃ）（図６Ａ）
文献（Bornstein, J;Drummon, P. E.;Bedell, S. F. Org Synth. Coll. Vol. IV 1963, 810-812）に記載されている方法に従って生成物を合成した。
【０２５８】
Ｂ．２−(アミノメチル)安息香酸、（Ｄ）（図６Ａ)
２−[(１,３−ジヒドロ−１,３−ジオキソ−２Ｈ−イソインドール−２−イル)メチル]安息香酸Ｃ（２ｇ；７.１ｍｍｏｌ）にメチルアミンの４０％溶液（６.１４ｍＬ；７.１ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、ＥｔＯＨ（３０ｍＬ）を添加した。室温で５分間撹拌した後、反応混合物を５０℃で加熱した。２.５時間後、混合物を冷却し、溶媒を減圧下にて蒸発させた。粗生成物を無水エタノール５０ｍＬに懸濁し、懸濁液を室温で１時間撹拌した。固体を濾過し、ＥｔＯＨで洗浄して、２−(アミノメチル)安息香酸Ｄ（０.８７ｇ；５.８ｍｍｏｌ）を得た。収率８１％。
【０２５９】
Ｃ．２−[[[９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]メチル]安息香酸、（Ｅ）（図６Ａ）
文献（Sun, J-H.;Deneker, W. F. Synth. Commun. 1998, 28, 4525-4530）に記載されている方法に従って生成物を合成した。
【０２６０】
Ｄ．４−(アミノメチル)−３−ニトロ安息香酸、（Ｇ）（図６Ｂ）
４−(ブロモメチル)−３−ニトロ安息香酸（３.２ｇ；１２.３ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ中８％ＮＨ3（３００ｍＬ）に溶解し、得られた溶液を室温で撹拌した。２２時間後、溶液を蒸発させ、残留物をＨ2Ｏ（７０ｍＬ）に懸濁した。懸濁液を１５分間撹拌し、濾過した。回収した固体をＨ2Ｏ（４０ｍＬ）に懸濁し、２５％ＮＨ4ＯＨ水溶液（ｐＨ１２）を数滴添加することにより溶解し、次いで、６Ｎ  ＨＣｌの添加により溶液のｐＨを６に調整した。沈殿した固体を濾過し、逐次的にＭｅＯＨ（３×５ｍＬ）およびＥｔ2Ｏ（１０ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させて（１.３ｋＰａ；Ｐ2Ｏ5）、４−(アミノメチル)−３−ニトロ安息香酸を薄茶色の固体として得た（１.６５ｇ；８.４ｍｍｏｌ）。収率６８％。
【０２６１】
Ｅ．４−[[[９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]メチル]−３−ニトロ安息香酸、（Ｈ）（図６Ｂ）
４−(アミノメチル)−３−ニトロ安息香酸Ｇ（０.８ｇ；４ｍｍｏｌ）を１０％Ｎａ2ＣＯ3水溶液（２５ｍＬ）および１,４−ジオキサン（１０ｍＬ）に溶解し、溶液を０℃に冷却した。クロロギ酸９−フルオレニルメチル（Ｆｍｏｃ−Ｃｌ）（１.０６ｇ；４ｍｍｏｌ）の１,４−ジオキサン（１０ｍＬ）中溶液を２０分間滴下した。０〜５℃で２時間、１０℃で１時間後、反応混合物を濾過し、１Ｎ  ＨＣｌの添加により溶液をｐＨ５に酸性化した。沈殿物を濾過し、Ｈ2Ｏ（２×２ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させて（１.３ｋＰａ；Ｐ2Ｏ5）、４−[[[９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]メチル]−３−ニトロ安息香酸を白色固体として得た（１.６ｇ；３.７ｍｍｏｌ）。収率９２％。
【０２６２】
Ｆ．Ｌ７５（Ｎ−[２−[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]メチル]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド）（図６Ｃ）
固相ペプチド合成容器中にて樹脂Ａ（０.５ｇ；０.３ｍｍｏｌ）をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加した。懸濁液を２０分間撹拌し、次いで、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に２−[[[９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]メチル]安息香酸、Ｅ（０.４５ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で２４時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物を２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１,４,７,１０−四酢酸トリス(１,１−ジメチルエチル)エステル付加物をＮａＣｌ（ＤＯＴＡトリ−ｔ−ブチルエステル）（０.７９ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ：１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（０.４０ｍＬ；２.４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）と一緒に添加した。混合物を室温で２４時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（５×７ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させた。フラスコ中にて試薬Ｂ（２５ｍＬ）と一緒に樹脂を４.５時間振盪した。樹脂を濾過し、濾液を減圧下にて蒸発させて、油状粗生成物を得、Ｅｔ2Ｏ（２０ｍＬ）で処理した後、沈殿物を得た。得られた沈殿物を遠心分離により回収し、Ｅｔ2Ｏ（３×２０ｍＬ）で洗浄して、Ｌ７５（１９０ｍｇ；０.１３ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。収率４４％。
【０２６３】
Ｇ．Ｌ７６（Ｎ−[４−[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]メチル]−３−ニトロベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド）（図６Ｄ）
固相ペプチド合成容器中にて樹脂Ａ（０.５ｇ；０.３ｍｍｏｌ）をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加した。懸濁液を２０分間撹拌し、次いで、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に４−[[[９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]メチル]−３−ニトロ安息香酸、Ｈ（０.５０ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温にて２４時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物を２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂にＤＯＴＡトリ−ｔ−ブチルエステル（０.７９ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ：１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（０.４０ｍＬ；２.４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加した。混合物を室温で２４時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（５×７ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させた。フラスコ中にて試薬Ｂ（２５ｍＬ）と一緒に樹脂を４.５時間振盪した。樹脂を濾過し、溶液を減圧下にて蒸発させて、油状粗生成物を得、Ｅｔ2Ｏ（２０ｍＬ）と一緒にトリチュレートした。遠心分離によって沈殿物を回収し、Ｅｔ2Ｏ（３×２０ｍＬ）で洗浄して、固体（１４１ｍｇ）を得、ＨＰＬＣにより分析した。粗生成物の一部３７ｍｇを分取ＨＰＬＣにより精製した。生成物を含有するフラクションを凍結乾燥させて、Ｌ７６（１０.８ｍｇ；７.２×１０-3ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。収率９％。
【０２６４】
実施例ＶＩＩ  −  図７Ａ−Ｃ
Ｌ１２４の合成
概要：アセトン中にて４−シアノフェノールＡをブロモ酢酸エチルおよびＫ2ＣＯ3と反応させて、中間体Ｂを得、ＮａＯＨにより加水分解して、対応する酸Ｃを得た。次いで、ＥｔＯＨ／ＣＨＣｌ3中にて３５５ｋＰａでＨ2およびＰｔＯ2によってＣを水素添加することにより対応するアミノ酸Ｄを得、ＦｍｏｃＯＳｕで直接保護してＥを得た。オクタペプチドＧｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ2（ＢＢＮ[７−１４]、配列番号１）により官能化されたＲｉｎｋアミド樹脂をＥと反応させ、次いで、ＤＯＴＡトリ−ｔ−ブチルエステルと反応させた。試薬Ｂによる切断および脱保護の後、粗生成物を分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ１２４を得た。全収率：１.３％
【０２６５】
Ａ．(４−シアノフェノキシ)酢酸エチルエステル、（Ｂ）の合成（図７Ａ）
文献（Archimbault, P.; LeClerc, G.; Strosberg, A. D.; Pietri-Rouxel, F. ＰＣＴ国際出願公開第９８０００５号, 1998）に記載の方法に従って生成物を合成した。
【０２６６】
Ｂ．(４−シアノフェノキシ)酢酸、（Ｃ）の合成（図７Ａ）
(４−シアノフェノキシ)酢酸エチルエステルＢ（１.５５ｇ；７.６ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１５ｍＬ）中溶液にＮａＯＨの１Ｎ溶液（７.６ｍＬ；７.６ｍｍｏｌ）を滴下した。１時間後、溶液を１Ｎ  ＨＣｌ（７.６ｍＬ；７.６ｍｍｏｌ）で酸性化し、蒸発させた。残留物を水（２０ｍＬ）に溶解し、ＣＨＣｌ3（２×３０ｍＬ）で抽出した。有機相を蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、(４−シアノフェノキシ)酢酸Ｃ（０.９７ｇ；５.５ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。収率７２％。
【０２６７】
Ｃ．[４−[[[９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]メチル]フェノキシ]酢酸、（Ｅ）の合成（図７Ａ）
(４−シアノフェノキシ)酢酸Ｃ（１.０５ｇ；５.９ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１４７ｍＬ）およびＣＨＣｌ3（３ｍＬ）中溶液にＰｔＯ2（１５０ｍｇ）を添加した。懸濁液を水素雰囲気下（３５５ｋＰａ；２０℃）で３０時間撹拌した。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドで濾過し、溶液を真空下にて蒸発させた。残留物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、酸Ｄ（０.７ｇ）を得、０℃にてＨ2Ｏ（１０ｍＬ）、ＭｅＣＮ（２ｍＬ）およびＥｔ3Ｎ（０.６ｍＬ）に溶解し、次いで、Ｎ−(９−フルオレニルメトキシカルボニルオキシ)スクシンイミド（１.３ｇ；３.９ｍｍｏｌ）のＭｅＣＮ（２２ｍＬ）中溶液を滴下した。室温で１６時間撹拌した後、反応混合物を濾過し、揮発物質を真空下にて除去した。残留物を１Ｎ  ＨＣｌ（１０ｍＬ）で処理し、沈殿した固体を濾過し、フラッシュクロマトグラフィーにより精製して、[４−[[[９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]メチル]フェノキシ]酢酸Ｅ（０.５６ｇ；１.４ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。全収率２４％。
【０２６８】
Ｄ．Ｌ１２４（Ｎ−[[４−[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]メチル]フェノキシ]アセチル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド）の合成（図７Ｂ）
ＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を入れた固相ペプチド合成容器中にて樹脂Ａ（４８０ｍｇ；０.２９ｍｍｏｌ）を１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加した。懸濁液を２０分間撹拌し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に[４−[[[９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]メチル]フェノキシ]酢酸Ｅ（４８０ｍｇ；１.１９ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）（１８２ｍｇ；１.１９ｍｍｏｌ）、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）（１８５μＬ；１.１９ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温にて２４時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（６ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（６ｍＬ）を添加し、混合物を２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１,４,７,１０−四酢酸トリス(１,１−ジメチルエチル)エステル付加物をＮａＣｌ（７５０ｍｇ；１.１９ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１８２ｍｇ；１.１９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（４０４μＬ；２.３６ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（１８５μＬ；１.１９ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（６ｍＬ）と一緒に添加した。混合物を室温で２４時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（２×７ｍＬ）、ＣＨ2Ｃｌ2（５×７ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させた。フラスコ中にて試薬Ｂ（２５ｍＬ）と一緒に樹脂を４時間振盪した。樹脂を濾過し、濾液を減圧下にて蒸発させて、油状粗生成物を得、これをＥｔ2Ｏ（５ｍＬ）と一緒にトリチュレートした。遠心分離によって沈殿物を回収し、Ｅｔ2Ｏ（５×５ｍＬ）で洗浄して、固体（１４８ｍｇ）を得、ＨＰＬＣにより分析した。粗生成物の一部６５ｍｇを分取ＨＰＬＣにより精製した。生成物を含有するフラクションを凍結乾燥させて、Ｌ１２４（図７Ｃ）を白色固体として得た（１５ｍｇ；０.０１ｍｍｏｌ）。収率７.９％。
【０２６９】
実施例ＶＩＩＩ  −  図８Ａ−Ｃ
Ｌ１２５の合成
概要：ＤＭＦ中にて４−(ブロモメチル)−３−メトキシ安息香酸メチルエステルＡをＮａＮ3と反応させて中間体アジドＢを得、次いで、Ｐｈ3ＰおよびＨ2Ｏで還元してアミンＣを得た。ＣをＮａＯＨで加水分解して酸Ｄを得、ＦｍｏｃＯＳｕで直接保護してＥを得た。オクタペプチドＧｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ2（ＢＢＮ[７−１４]、配列番号１）（Ａ）で官能化されたＲｉｎｋアミド樹脂をＥと反応させ、次いで、ＤＯＴＡトリ−ｔ−ブチルエステルと反応させた。試薬Ｂによる切断および脱保護の後、粗生成物を分取ＨＰＬＣにより精製してＬ１２５を得た。全収率：０.２％。
【０２７０】
Ａ．４−(アジドメチル)−３−メトキシ安息香酸メチルエステル、（Ｂ）の合成（図８Ａ）
４−(ブロモメチル)−３−メトキシ安息香酸メチルエステル（８ｇ；３１ｍｍｏｌ）およびＮａＮ3(２ｇ；３１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（９０ｍＬ）中溶液を室温で一夜撹拌した。揮発物質を真空下にて除去し、粗生成物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）に溶解した。溶液を水（２×５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた。揮発物質を蒸発させて、４−(アジドメチル)−３−メトキシ安息香酸メチルエステル（６.６８ｇ；３０ｍｍｏｌ）を得た。収率９７％。
【０２７１】
Ｂ．４−(アミノメチル)−３−メトキシ安息香酸メチルエステル、（Ｃ）（図８Ａ）
(４−アジドメチル)−３−メトキシ安息香酸メチルエステルＢ（５ｇ；２２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）中溶液にトリフェニルホスフィン（６.０６ｇ；２３ｍｍｏｌ）を添加した：水素発生および白色固体の形成が見られた。混合物を窒素下にて室温で撹拌した。２４時間後、さらにトリフェニルホスフィン（０.６ｇ；２.３ｍｍｏｌ）を添加した。２４時間後、アジドが消耗され、Ｈ2Ｏ（１０ｍＬ）を添加した。４時間後、白色固体が消失した。混合物を４５℃で３時間加熱し、室温で一夜撹拌した。溶液を蒸発乾固させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、４−(アミノメチル)−３−メトキシ安息香酸メチルエステルＣ（１.２ｇ；６.１ｍｍｏｌ）を得た。収率２８％。
【０２７２】
Ｃ．４−[[[９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]メチル]−３−メトキシ安息香酸、（Ｅ）（図８Ａ）
４０℃で加熱した４−(アミノメチル)−３−メトキシ安息香酸メチルエステルＣ（１.２ｇ；６.１４ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２５ｍＬ）中溶液にＮａＯＨの１Ｎ溶液（６.１５ｍＬ；６.１４ｍｍｏｌ）を滴下した。４５℃で８時間撹拌した後、溶液を室温で一夜撹拌した。ＮａＯＨの１Ｎ溶液（０.６ｍＬ；０.６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を４０℃で４時間加熱した。溶液を濃縮し、１Ｎ  ＨＣｌ（８ｍＬ；８ｍｍｏｌ）で酸性化し、ＥｔＯＡｃ（２×１０ｍＬ）で抽出し、次いで、水性層を１５ｍＬに濃縮した。この溶液（ｐＨ４.５）を０℃で冷却し、Ｅｔ3Ｎ（９３６μＬ；６.７５ｍｍｏｌ）を添加した（ｐＨ１１）。Ｎ−(９−フルオレニルメトキシカルボニルオキシ)スクシンイミド（３.０４ｇ；９ｍｍｏｌ）のＭｅＣＮ（３０ｍＬ）中溶液を滴下し（最終ｐＨ９）、白色固体が沈殿した。室温で１時間撹拌した後、固体を濾過し、１Ｎ  ＨＣｌ（１５ｍＬ）に懸濁し、懸濁液を３０分間撹拌した。固体を濾過して、４−[[[９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]メチル]−３−メトキシ安息香酸Ｅを白色固体として得た（２７５ｍｇ；０.７ｍｍｏｌ）。
【０２７３】
濾液を真空下にて蒸発させ、得られた白色残留物を１Ｎ  ＨＣｌ（２０ｍＬ）に懸濁し、３０分間撹拌した。固体を濾過し、フラッシュクロマトグラフィーにより精製して、さらに酸Ｅ（１９８ｍｇ；０.５ｍｍｏｌ）を得た。全収率２０％。
【０２７４】
Ｄ．Ｌ１２５（Ｎ−[４−[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]メチル]−３−メトキシベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド）（図８Ｂ）
ＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を入れた固相ペプチド合成容器中にて樹脂Ａ（４１０ｍｇ；０.２４ｍｍｏｌ）を１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加した。懸濁液を２０分間撹拌し、次いで、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に４−[[[９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]メチル]−３−メトキシ安息香酸Ｅ（３９８ｍｇ；０.９８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１５１ｍｇ；０.９８ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（１５４μＬ；０.９８ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（６ｍＬ）を添加し；混合物を室温にて２４時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（６ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（６ｍＬ）を添加し、混合物を２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１,４,７,１０−四酢酸トリス(１,１−ジメチルエチル)エステル付加物をＮａＣｌ（６１８ｍｇ；０.９８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１５１ｍｇ；０.９８ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（１５４μＬ；０.９８ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（３３３μＬ；１.９６ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（６ｍＬ）と一緒に添加した。混合物を室温で２４時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（５×７ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させた。フラスコ中にて試薬Ｂ（２５ｍＬ）と一緒に樹脂を４時間振盪した。樹脂を濾過し、溶液を減圧下にて蒸発させて、油状粗生成物を得、これをＥｔ2Ｏ（５ｍＬ）と一緒にトリチュレートした。得られた沈殿物を遠心分離によって回収し、Ｅｔ2Ｏ（５×５ｍＬ）で洗浄し、ＨＰＬＣにより分析し、分取ＨＰＬＣにより精製した。生成物を含有するフラクションを凍結乾燥させて、Ｌ１２５（図８Ｃ）を白色固体として得た（１５.８ｍｇ；０.０１１ｍｍｏｌ）。収率４.４％。
【０２７５】
実施例ＩＸ  −  図９Ａ−９Ｄ
Ｌ１４６、Ｌ２３３、Ｌ２３４およびＬ２３５の合成
概要：Ｒｉｎｋアミド樹脂上にてオクタペプチドＧｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ2（ＢＢＮ[７−１４]）（Ａ）から開始していくつかの工程で生成物を得た。試薬Ｂによる最終的な切断および脱保護の後、粗生成物を分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ１４６、Ｌ２３３、Ｌ２３４およびＬ２３５を得た。全収率：それぞれ、１０％、１１％、４.５％、５.７％。
【０２７６】
Ａ．３−[[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]アセチル]アミノ安息香酸、Ｂ（図９Ａ）
Ｆｍｏｃ−グリシンクロライド（１.２ｇ；４.０ｍｍｏｌ）（３）のＴＨＦ（１０ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（１０ｍＬ）中溶液に３−アミノ安息香酸（０.５ｇ；３.８ｍｍｏｌ）およびＮ−エチルジイソプロピルアミン（ＤＩＥＡ）（０.６４ｍＬ；３.８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）中溶液を滴下した。室温で２４時間撹拌した後、１Ｍ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）を添加した（最終ｐＨ：１.５）。沈殿物を濾過し、Ｈ2Ｏ（２×１００ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させ、ＣＨＣｌ3／ＣＨ3ＯＨ（１：１）から結晶化して、Ｂを白色固体として得た（０.７ｇ；１.６ｍｍｏｌ）。収率４３％。
【０２７７】
Ｂ．Ｎ−[３−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド、Ｌ２３３（図９Ｄ）
固相ペプチド合成容器中にて樹脂Ａ（０.５ｇ；０.３ｍｍｏｌ）をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加した。
【０２７８】
懸濁液をさらに２０分間撹拌し、次いで、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に３−[[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]アセチル]アミノ安息香酸、Ｂ（０.５０ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で６時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物をさらに２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂にＤＯＴＡトリ−ｔ−ブチルエステル付加物をＮａＣｌ２（０.７９ｇ；１.２ｍｍｏｌ）（５）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ：１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（０.４０ｍＬ；２.４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）と一緒に添加した。混合物を室温で２４時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（５×７ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させた。フラスコ中にて試薬Ｂ（２５ｍＬ）と一緒に樹脂を４.５時間振盪した。樹脂を濾過し、溶液を減圧下にて蒸発させて、油状粗生成物を得、Ｅｔ2Ｏ（２０ｍＬ）で処理した後、沈殿物を得た。遠心分離によって沈殿物を回収し、Ｅｔ2Ｏ（３×２０ｍＬ）で洗浄して、固体（１５２ｍｇ）を得、ＨＰＬＣにより分析した。粗生成物（５０ｍｇ）を分取ＨＰＬＣにより精製した。生成物を含有するフラクションを凍結乾燥させて、Ｌ２３３（１７.０ｍｇ；１１.３×１０-3ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。収率１１％。
【０２７９】
Ｃ．Ｎ−[４−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]フェニルアセチル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド、Ｌ１４６（図９Ｄ）
固相ペプチド合成容器中にて樹脂Ａ（０.５ｇ；０.３ｍｍｏｌ）をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を濾過し、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加した。懸濁液をさらに２０分間撹拌し、次いで、溶液を濾過し、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂にＦｍｏｃ−４−アミノフェニル酢酸（０.４５ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で６時間振盪し、濾過し、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を濾過し、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物をさらに２０分間振盪した。溶液を濾過し、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。Ｆｍｏｃ−グリシン（０.３６ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（０.４６ｇ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０.４０ｍＬ；２.４ｍｍｏｌ）をＤＭＡ（７ｍＬ）中にて１５分間撹拌し、次いで、該溶液を樹脂に添加し、混合物を室温で２時間振盪し、濾過し、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を濾過し、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物をさらに２０分間振盪した。溶液を濾過し、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂にＤＯＴＡトリ−ｔ−ブチルエステル付加物をＮａＣｌ（０.７９ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（０.４０ｍＬ；２.４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）と一緒に添加した。混合物を室温で２４時間振盪し、濾過し、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（５×７ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させた。フラスコ中にて試薬Ｂ（２５ｍＬ）と一緒に樹脂を４.５時間振盪した。樹脂を濾過し、溶液を減圧下にて蒸発させて、油状粗生成物を得 that Ｅｔ2Ｏ（２０ｍＬ）で処理した後、沈殿物を得た。遠心分離によって沈殿物を回収し、Ｅｔ2Ｏ（３×２０ｍＬ）で洗浄して、固体（２０３ｍｇ）を得、ＨＰＬＣにより分析した。粗生成物（５０ｍｇ）を分取ＨＰＬＣにより精製した。生成物を含有するフラクションを凍結乾燥させて、Ｌ１４６（１１.２ｍｇ；７.４×１０-3ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。収率１０％。
【０２８０】
Ｄ．６−[[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]アセチル]アミノナフトエ酸、Ｃ（図９Ｂ）
室温で撹拌したＦｍｏｃ−グリシンクロライド（７６０ｍｇ；２.４１ｍｍｏｌ）のＣＨ2Ｃｌ2／ＴＨＦ（１：１）（１０ｍＬ）中溶液に６−アミノナフトエ酸（５００ｍｇ；２.４１ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（４１０μＬ、２.４１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）中溶液を滴下した。２４時間後、溶媒を真空下にて蒸発させた。残留物を０.５Ｎ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）に溶解し、１時間撹拌した。沈殿した白色固体を濾過し、乾燥させた。白色固体をメタノール（３０ｍＬ）に懸濁し、５分間沸騰させ、次いで、濾過して、生成物Ｃ（６９０ｍｇ；１.４８ｍｍｏｌ）を得た。収率６２％。
【０２８１】
Ｅ．Ｎ−[６−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]ナフトイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド、Ｌ２３４
ＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を入れた固相ペプチド合成容器中にて樹脂Ａ（５００ｍｇ；０.３ｍｍｏｌ）を１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加した。懸濁液をさらに２０分間撹拌し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に６−[[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]アセチル]アミノナフトエ酸Ｃ（５６０ｍｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１８４ｍｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（１８７μＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で６時間振盪させ、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（６Ｌ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物をさらに２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂にＤＯＴＡトリ−ｔ−ブチルエステル付加物をＮａＣｌ（７５７ｍｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１８４ｍｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（１８７μＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（５３７μＬ；２.４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）と一緒に添加した。混合物をフラスコ中にて振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（２×７ｍＬ）、ＣＨ2Ｃｌ2（５×７ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させた。フラスコ中にて試薬Ｂ（２５ｍＬ）と一緒に樹脂を４.５時間振盪した。樹脂を濾過し、溶液を減圧下にて蒸発させて、油状粗生成物、Ｅｔ2Ｏ（２０ｍＬ）で処理した後、沈殿物を得た。遠心分離によって沈殿物を回収し、Ｅｔ2Ｏ（３×２０ｍＬ）で洗浄して、固体（１４４ｍｇ）を得、ＨＰＬＣにより分析した。粗生成物（５４ｍｇ）を分取ＨＰＬＣにより精製した。生成物を含有するフラクションを凍結乾燥させて、Ｌ２３４（８ｍｇ；５.１×１０-3ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。収率４.５％。
【０２８２】
Ｆ.４−[[[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]アセチル]メチルアミノ]安息香酸、Ｄ（図９Ｃ）
Ｆｍｏｃ−グリシンクロライド（１.０４ｇ；３.３ｍｍｏｌ）のＣＨ2Ｃｌ2／ＴＨＦ（１：１）（１０ｍＬ）中溶液に４−Ｎ−メチルアミノナフトエ酸（５００ｍｇ；３.３ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（５６２μＬ、３.３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）中溶液を添加し、室温で撹拌した。２４時間後、溶媒を真空下にて蒸発させた。残留物を０.５Ｎ  ＨＣｌ（３０ｍＬ）に溶解し、０℃で３時間撹拌した。沈殿した白色固体を濾過し、乾燥させた。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、化合物Ｄ（３５０ｍｇ；０.８１ｍｍｏｌ）を得た。収率２５％。
【０２８３】
Ｇ．Ｎ−[４−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]メチルアミノ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド、Ｌ２３５（図９Ｄ）
ＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を入れた固相ペプチド合成容器中にて樹脂Ａ（５００ｍｇ；０.３ｍｍｏｌ）を１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加した。懸濁液をさらに２０分間撹拌し、次いで、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に４−[[[[９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]アセチル]−Ｎ−メチル]アミノ−安息香酸Ｄ（５１０ｍｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１８４ｍｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（１８７μＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で６時間振盪させ、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物をさらに２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂にＤＯＴＡトリ−ｔ−ブチルエステル付加物をＮａＣｌ（７５７ｍｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１８４ｍｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（１８７μＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（５３７μＬ；２.４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）と一緒に添加した。混合物をフラスコ中にて振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（２×７ｍＬ）、ＣＨ2Ｃｌ2（５×７ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させた。フラスコ中にて試薬Ｂ（２５ｍＬ）と一緒に樹脂を４.５時間振盪した。樹脂を濾過し、溶液を減圧下にて蒸発させて油状粗生成物を得、Ｅｔ2Ｏ（２０ｍＬ）で処理した後、沈殿物を得た。
【０２８４】
沈殿物を遠心分離により回収し、Ｅｔ2Ｏ（３×２０ｍＬ）で洗浄して固体（１２６ｍｇ）を得、ＨＰＬＣにより分析した。粗生成物（５３ｍｇ）を分取ＨＰＬＣにより精製した。生成物を含有するフラクションを凍結乾燥させて、Ｌ２３５（１１ｍｇ；７.２×１０-3ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。収率５.７％。
【０２８５】
実施例Ｘ  −  図１０Ａ−Ｂ
Ｌ２３７の合成
概要：ｐＨ３にてクロロギ酸ベンジルで１−ホルミル−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン（Ａ）を選択的に保護してＢを得、ブロモ酢酸ｔ−ブチルでアルキル化し、ヒドロキシルアミン・塩酸塩で脱ホルミル化してＤを得た。Ｐ(ＯｔＢｕ)3およびパラホルムアルデヒドとの反応によりＥを得、水素化により脱保護し、ブロモ酢酸ベンジルでアルキル化してＧを得、最後に水素化してＨを得た。オクタペプチドＧｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ2（ＢＢＮ[７−１４]）（Ａ）で官能化されたＲｉｎｋアミド樹脂を逐次的にＦｍｏｃ−４−アミノ安息香酸、Ｆｍｏｃ−グリシンおよびＨと反応させた。試薬Ｂによる切断および脱保護の後、粗生成物を分取ＨＰＬＣにより精製してＬ２３７を得た。全収率０.２１％。
【０２８６】
Ａ．７−ホルミル−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１−カルボン酸フェニルメチルエステル・二塩酸塩、Ｂ（図１０Ａ）
１−ホルミル−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカンＡ（１４ｇ；６９.９ｍｍｏｌ）をＨ2Ｏ（１００ｍＬ）に溶解し、１２Ｎ  ＨＣｌ（１１ｍＬ）を添加してｐＨ３にし、次いで、１,４−ジオキサン（２２０ｍＬ）を添加した。ｐＨｓｔａｔ装置を用いて２Ｎ  ＮａＯＨ（６８.４ｍＬ）を添加し続けることによって反応混合物を一定にｐＨ３に維持しながら、クロロギ酸ベンジル（１３.８ｇ；７７ｍｍｏｌ）の１,４−ジオキサン（１５ｍＬ）中溶液を３.５時間の間にゆっくりと添加した。添加終了時に反応物を１時間撹拌し、次いで、ｎ−ヘキサン（４×１００ｍＬ）およびｉＰｒ2Ｏ（４×１００ｍＬ）で洗浄した。１０Ｎ  ＮａＯＨ（６.１ｍＬ）の添加により水性相をｐＨ１３にし、ＣＨＣｌ3（４×１００ｍＬ）で抽出した。有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、蒸発させた。油状残留物をアセトン（２００ｍＬ）に溶解し、６Ｎ  ＨＣｌ（２６ｍＬ）を添加した。沈殿した固体を濾過し、アセトン（２×５０ｍＬ）で洗浄し、真空下にて乾燥させて、化合物Ｂ（２３.６ｇ；５８ｍｍｏｌ）を白色結晶性固体として得た。収率８３％。
【０２８７】
Ｂ．４−(フェニルメトキシ)カルボニル−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１,７−二酢酸ビス(１,１−ジメチルエチル)エステル、Ｄ（図１０Ａ）
Ｂ（１４.４ｇ；３５.３ｍｍｏｌ）のＨ2Ｏ（４５０ｍＬ）および１Ｎ  ＮａＯＨ（７４ｍＬ；７４ｍｍｏｌ）中溶液を２０分間撹拌し、次いで、ＣＨＣｌ3（４×２００ｍＬ）で抽出した。有機層を蒸発させて、油状残留物（１２.３ｇ）を得、ＣＨ3ＣＮ（１８０ｍＬ）およびＮ−エチルジイソプロピルアミン（ＤＩＥＡ）（１５ｍＬ；８８.２５ｍｍｏｌ）に溶解した。上記溶液にブロモ酢酸ｔ−ブチル（１６.８ｇ；８６.１ｍｍｏｌ）のＣＨ3ＣＮ（１５ｍＬ）中溶液を２.５時間の間滴下した。室温で２０時間の後、溶媒を蒸発させ、油状残留物をＣＨＣｌ3（１５０ｍＬ）に溶解し、Ｈ2Ｏ（５×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、蒸発乾固させて、Ｃを黄色油状物として得た。粗生成物Ｃ（２２ｇ）をＥｔＯＨ（２５０ｍＬ）に溶解し、ＮＨ2ＯＨ・ＨＣｌ（２.９３g；４２.２ｍｍｏｌ）を添加し、溶液を加熱還流した。４８時間後、溶媒を蒸発させ、残留物をＣＨ2Ｃｌ2（２５０ｍＬ）に溶解し、Ｈ2Ｏ（３×２５０ｍＬ）で洗浄し、次いで、ブライン（３×２５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、蒸発させた。油状残留物を（１８.８５ｇ）をフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。生成物を含有するフラクションを回収し、蒸発させて、ガラス状白色固体（１７.６２ｇ）を得、Ｈ2Ｏ（６００ｍＬ）および１Ｎ  ＮａＯＨ（９０ｍＬ；９０ｍｍｏｌ）に溶解し、ＣＨＣｌ3（３×２５０ｍｌ）で抽出した。有機層を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、蒸発乾固させて、Ｄ（１６.６ｇ；３１ｍｍｏｌ）を油状物として得た。収率８８％。
【０２８８】
Ｃ．４−(フェニルメトキシ)カルボニル−１０−[[ビス(１,１−ジメチルエトキシ)ホスフィニル]メチル]−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１,７−二酢酸ビス(１,１−ジメチルエチル)エステル、Ｅ（図１０Ａ）
化合物Ｄ（１３.８７ｇ；２６ｍｍｏｌ）、Ｐ(ＯｔＢｕ)3（７.６ｇ；２８.６ｍｍｏｌ）（１０）およびパラホルムアルデヒド（０.９ｇ；３０ｍｍｏｌ）の混合物を６０℃で加熱した。１６時間後、さらにＰ(ＯｔＢｕ)3（１ｇ；３.７６ｍｍｏｌ）およびパラホルムアルデヒド（０.１ｇ；３.３３ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を６０℃でさらに２０時間加熱し、次いで、真空下にて８０℃で８時間加熱して、揮発性不純物を除去した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、Ｅ（９.３３ｇ；８ｍｍｏｌ）を油状物として得た。収率３１％。
【０２８９】
Ｄ．７−[[ビス(１,１−ジメチルエトキシ)ホスフィニル]メチル]−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１,４,１０−三酢酸１−フェニルメチル４,１０−ビス(１,１−ジメチルエチル)エステル、Ｇ（図１０Ａ）
Ｅ（６.５ｇ；５.５３ｍｍｏｌ）のＣＨ3ＯＨ（１６０ｍＬ）中溶液に５％Ｐｄ／Ｃ（１ｇ；０.５２ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を水素雰囲気下にて室温で撹拌した。４時間後（消費したＨ2  １６５ｍＬ；６.７ｍｍｏｌ）、混合物をＭｉｌｌｉｐｏｒｅ（登録商標）フィルター（ＦＴ  ０.４５μｍ）で濾過し、溶液を減圧下にて蒸発させた。粗生成物（５.９ｇ）をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、Ｆ（４.２ｇ）を油状物として得た。ブロモ酢酸ベンジル（１.９ｇ；８.３ｍｍｏｌ）をＣＨ3ＣＮ（８ｍＬ）に溶解し、Ｆ（４.２ｇ）のＣＨ3ＣＮ（４０ｍＬ）およびＤＩＥＡ（１.５ｍＬ；８.７２ｍｍｏｌ）中溶液に１時間の間に滴下した。室温で３６時間後、溶媒を蒸発させ、残留物（５.７６ｇ）をＣＨＣｌ3（１００ｍＬ）に溶解し、Ｈ2Ｏ（２×１００ｍＬ）で洗浄し、次いで、ブライン（２×７０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、蒸発させた。粗生成物（５.５ｇ）をフラッシュクロマトグラフィーによって２回精製し、フラクションを回収し、蒸発乾固させて、Ｇ（１.１２ｇ；１.４８ｍｍｏｌ）を油状物として得た。収率２７％。
【０２９０】
Ｅ．７−[[ビス(１,１−ジメチルエトキシ)ホスフィニル]メチル]−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１,４,１０−三酢酸４,１０−ビス(１,１−ジメチルエチル)エステル、Ｈ（図１０Ａ）
Ｇ（１.１２ｇ；１.４８ｍｍｏｌ）のＣＨ3ＯＨ（２７ｍＬ）中溶液に５％Ｐｄ／Ｃ（０.２ｇ；０.０８７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を水素雰囲気下にて室温で撹拌した。２時間後（消費したＨ2  ３５ｍＬ；１.４３ｍｍｏｌ）、混合物をＭｉｌｌｉｐｏｒｅ（登録商標）フィルター（ＦＴ  ０.４５μｍ）で濾過し、溶液を蒸発乾固させて、Ｈ（０.９４ｇ；１.４１ｍｍｏｌ）を薄黄色の油状物として得た。収率９７％。
【０２９１】
Ｆ．Ｎ−[４−[[[[[４,１０−ビス(カルボキシメチル)−７−(ジヒドロキシホスフィニル)メチル−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド、Ｌ２３７（図１０Ｂ）
固相ペプチド合成容器中にて樹脂Ａ（３３０ｍｇ；０.２０ｍｍｏｌ）（１７）をＤＭＡ中５０％モルホリン（５ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（５ｍＬ）を添加した。懸濁液をさらに２０分間撹拌し、次いで、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×５ｍＬ）で洗浄した。樹脂にＦｍｏｃ−４−アミノ安息香酸（２９０ｍｇ；０.８０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１２０ｍｇ；０.８０ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（１３０μＬ；０.８０ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（５ｍＬ）を添加し、混合物を室温で３時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×５ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（５ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（５ｍＬ）を添加し、混合物をさらに２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×５ｍＬ）で洗浄した。ＤＭＡ（５ｍＬ）中にてＦｍｏｃ−グリシン（２４０ｍｇ；０.８ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（３１０ｍｇ；０.８ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（２６０μＬ；１.６ｍｍｏｌ）を１５分間撹拌し、次いで、該溶液を樹脂に添加し、混合物を室温で２時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×５ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（５ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（５ｍＬ）を添加し、混合物をさらに２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×５ｍＬ）で洗浄した。樹脂にＨ（５３２ｍｇ；０.８０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１２０ｍｇ；０.８０ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（１３０μＬ；０.８０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（２６０μＬ；１.６ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（５ｍＬ）を添加した。混合物をフラスコ中にて室温で４０時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×５ｍＬ）、ＣＨ2Ｃｌ2（５×５ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させた。フラスコ中にて試薬Ｂ（２５ｍＬ）と一緒に樹脂を４時間振盪した。樹脂を濾過し、溶液を減圧下にて蒸発させて、油状粗生成物を得、Ｅｔ2Ｏ（２０ｍＬ）で処理した後、沈殿物を得た。遠心分離によって沈殿物を回収し、Ｅｔ2Ｏ（３×２０ｍＬ）で洗浄して、固体（９０ｍｇ）を得、ＨＰＬＣにより分析した。粗生成物（５０ｍｇ）を分取ＨＰＬＣにより精製した。生成物を含有するフラクションを凍結乾燥させて、Ｌ２３７（６ｍｇ；３.９×１０-3ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。収率３.５％。
【０２９２】
実施例ＸＩ  −  図１１Ａ−Ｂ
Ｌ２３８およびＬ２３９の合成
概要：Ｒｉｎｋアミド樹脂上にてオクタペプチドＧｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ2（ＢＢＮ[７−１４]）（Ａ）から開始していくつかの工程で生成物を得た。試薬Ｂによる切断および脱保護の後、粗生成物を分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ２３８およびＬ２３９を得た。全収率：それぞれ、１４および９％。
【０２９３】
Ａ．Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシル−Ｌ−セリル−[Ｓ−[(アセチルアミノ)メチル]]−Ｌ−システイニル−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド、Ｌ２３８（図１１Ａ）
固相ペプチド合成容器中にて樹脂Ａ（０.５ｇ；０.３ｍｍｏｌ）をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加した。懸濁液をさらに２０分間撹拌し、次いで、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂にＦｍｏｃ−４−アミノ安息香酸（０.４３ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で３時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物をさらに２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。Ｆｍｏｃ−グリシン（０.３６ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（０.４６ｇ；１.２ｍｍｏｌ）およびＮ−エチルジイソプロピルアミン（０.４０ｍＬ；２.４ｍｍｏｌ）をＤＭＡ（７ｍＬ）中にて１５分間撹拌し、次いで、該溶液を樹脂に添加し、混合物を室温で２時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物をさらに２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂にＮ−α−Ｆｍｏｃ−Ｓ−アセトアミドメチル−Ｌ−システイン（０.５０ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で３時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物をさらに２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂にＮ−α−Ｆｍｏｃ−Ｏ−ｔ−ブチル−Ｌ−セリン（０.４６ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ：１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で３時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物をさらに２０分間振盪した。
【０２９４】
溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン（０.１２ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（０.４６ｇ；１.２ｍｍｏｌ）およびＮ−エチルジイソプロピルアミン（０.４０ｍＬ；２.４ｍｍｏｌ）をＤＭＡ（７ｍＬ）中にて１５分間撹拌し、次いで、溶液を樹脂に添加した。混合物を室温で２時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（５×７ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させた。フラスコ中にて試薬Ｂ（２５ｍＬ）と一緒に樹脂を４.５時間振盪した。樹脂を濾過し、溶液を減圧下にて蒸発させて、油状粗生成物を得 that Ｅｔ2Ｏ（２０ｍＬ）で処理した後、沈殿物を得た。遠心分離によって沈殿物を回収し、Ｅｔ2Ｏ（３×２０ｍＬ）で洗浄して、固体（１６９ｍｇ）を得、ＨＰＬＣにより分析した。粗生成物（６０ｍｇ）を分取ＨＰＬＣにより精製した。生成物を含有するフラクションを凍結乾燥させて、Ｌ２３８（２２.０ｍｇ；０.０１５ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。収率１４％。
【０２９５】
Ｂ．Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシル−Ｌ−セリル−[Ｓ−[(アセチルアミノ)メチル]]−Ｌ−システイニル−グリシル−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシ−２４−オキソコラン−２４−イル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド、Ｌ２３９（図１１Ｂ）
固相ペプチド合成容器中にて樹脂Ａ（０.５ｇ；０.３ｍｍｏｌ）をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加した。懸濁液をさらに２０分間撹拌し、次いで、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に(３β,５β,７α,１２α)−３−[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)アミノ]アセチル]アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸Ｂ（０.８２ｇ；１.２ｍｍｏｌ）（７）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で２４時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物をさらに２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂にＮ−α−Ｆｍｏｃ−Ｓ−アセトアミドメチル−Ｌ−システイン（０.５０ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で３時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物をさらに２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂にＮ−α−Ｆｍｏｃ−Ｏ−ｔ−ブチル−Ｌ−セリン（０.４６ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ：１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で３時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物をさらに２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン（０.１２ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（０.４６ｇ；１.２ｍｍｏｌ）およびＮ−エチルジイソプロピルアミン（０.４０ｍＬ；２.４ｍｍｏｌ）をＤＭＡ（７ｍＬ）中にて１５分間撹拌し、次いで、溶液を樹脂に添加した。
【０２９６】
固相ペプチド合成容器中にて樹脂Ａ（０.５ｇ；０.３ｍｍｏｌ）をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加した。懸濁液をさらに２０分間撹拌し、次いで、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に(３β,５β,７α,１２α)−３−[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)アミノ]アセチル]アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸Ｂ（０.８２ｇ；１.２ｍｍｏｌ）ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で２４時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物をさらに２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂にＮ−α−Ｆｍｏｃ−Ｓ−アセトアミドメチル−Ｌ−システイン（０.５０ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で３時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物をさらに２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂にＮ−α−Ｆｍｏｃ−Ｏ−ｔ−ブチル−Ｌ−セリン（０.４６ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ：１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で３時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物をさらに２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン（０.１２ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（０.４６ｇ；１.２ｍｍｏｌ）およびＮ−エチルジイソプロピルアミン（０.４０ｍＬ；２.４ｍｍｏｌ）をＤＭＡ（７ｍＬ）中にて１５分間撹拌し、次いで、溶液を樹脂に添加した。
【０２９７】
実施例ＸＩＩ  −  図１２Ａ−Ｆ
Ｌ２４０、Ｌ２４１、Ｌ２４２の合成
概要：Ｒｉｎｋアミド樹脂上にてオクタペプチドＧｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ2（ＢＢＮ[７−１４]）（Ａ）から開始していくつかの工程で生成物を得た。試薬Ｂによる切断および脱保護の後、粗生成物を分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ２４０、Ｌ２４１およびＬ２４２を得た。全収率：それぞれ、７.４、３.２、１.３％。
【０２９８】
Ａ．４−[[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]アセチル]アミノ−３−メトキシ安息香酸Ａ（図１２Ａ）
Ｆｍｏｃ−グリシルクロライド（１.８８ｇ；５.９ｍｍｏｌ）のＣＨ2Ｃｌ2／ＴＨＦ（１：１）（２０ｍＬ）中溶液に４−アミノ−３−メトキシ安息香酸（１.０ｇ；５.９ｍｍｏｌ）およびＮ−エチルジイソプロピルアミン（１.０２ｍＬ ５.９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）中溶液を滴下し、Ｎ2下にて室温で撹拌した。３時間後、溶媒を真空下にて蒸発させた。残留物を０.５Ｎ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）に溶解し、０℃で１時間撹拌し、次いで、濾過し、乾燥させた。白色固体をＭｅＯＨ（３０ｍＬ）に懸濁し、１時間撹拌し、次いで、濾過し、ＣＨＣｌ3／ヘキサン（１：４）溶液（７５ｍＬ）に懸濁した。懸濁液を濾過して、化合物Ａを白色固体として得た（１.０２ｇ；２.２８ｍｍｏｌ）。収率３９％。
【０２９９】
Ｂ．Ｎ−[４−[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]グリシル]アミノ]−３−メトキシベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−l−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミドＬ２４０
固相ペプチド合成容器中にて樹脂Ａ（０.５ｇ；０.３ｍｍｏｌ）をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加した。懸濁液をさらに２０分間撹拌し、次いで、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に４−[[[（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]アセチル]アミノ−３−メトキシ安息香酸、Ａ（０.５０ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で５時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物をさらに２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１,４,７,１０−四酢酸トリス(１,１−ジメチルエチル)エステル付加物をＮａＣｌ（０.７９ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ：１.２ｍｍｏｌ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０.４０ｍＬ；２.４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）と一緒に添加した。混合物を室温で２４時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（５×７ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させた。フラスコ中にて試薬Ｂ（２５ｍＬ）と一緒に樹脂を４.５時間振盪した。樹脂を濾過し、溶液を減圧下にて蒸発させて油状粗生成物を得、Ｅｔ2Ｏ（２０ｍＬ）で処理した後、沈殿物を得た。遠心分離によって沈殿物を回収し、Ｅｔ2Ｏ（５×２０ｍＬ）で洗浄して、固体（１５２ｍｇ）を得、ＨＰＬＣにより分析した。粗生成物（５２ｍｇ）を分取ＨＰＬＣにより精製した。生成物を含有するフラクションを凍結乾燥させて、Ｌ２４０（１２.０ｍｇ；７.８×１０-3ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。収率７.４％。
【０３００】
Ｃ．４−アミノ−３−クロロ安息香酸Ｃ（図１２Ｂ）
４５℃にて、４−アミノ−３−クロロ安息香酸メチル（２ｇ；１０.８ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中溶液に１Ｎ  ＮａＯＨ（１１ｍＬ；１１ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を４５℃で５時間撹拌し、次いで、室温で一夜撹拌した。さらに１Ｎ  ＮａＯＨ（５ｍＬ；５ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を４５℃で２時間撹拌した。溶媒の濃縮後１Ｎ  ＨＣｌ（１６ｍｌ）を添加した。沈殿した固体を濾過し、乾燥させて、４−アミノ−３−クロロ安息香酸、Ｃを白色固体として得た（１,７５ｇ；１０.２ｍｍｏｌ）。収率９４.６％。
【０３０１】
Ｄ．４−[[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]アセチル]アミノ−３−クロロ安息香酸、Ｄ（図１２Ｂ）
Ｆｍｏｃ−グリシルクロライド（２.７６ｇ；８.７５ｍｍｏｌ）のＣＨ2Ｃｌ2／ＴＨＦ（１：１）（３０ｍＬ）中溶液に４−アミノ−３−クロロ安息香酸（１.５ｇ；８.７５ｍｍｏｌ）およびＮ−エチルジイソプロピルアミン（１.４６ｍＬ、８.７５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）中溶液を滴下し、Ｎ2下にて室温で撹拌した。３時間後、溶媒を真空下にて蒸発させた。残留物を０.５Ｎ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）に溶解し、濾過し、乾燥させた。
白色固体をＭｅＯＨ（３０ｍＬ）に懸濁し、１時間撹拌し、次いで、濾過し、乾燥させて、４−[[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]アセチル]アミノ−３−クロロ安息香酸（２.９５ｇ；６.５ｍｍｏｌ）を得た。収率７５％。
【０３０２】
Ｅ．Ｎ−[４−[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]グリシル]アミノ]３−クロロベンゾイル]Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−l−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド、Ｌ２４１（図１２Ｅ）
固相ペプチド合成容器中にて樹脂Ａ（０.５ｇ；０.３ｍｍｏｌ）をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加した。懸濁液をさらに２０分間撹拌し、次いで、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に４−[[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]アセチル]アミノ−３−クロロ安息香酸、Ｄ（０.５４ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で５時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。
【０３０３】
次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物をさらに２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１,４,７,１０−四酢酸トリス(１,１−ジメチルエチル)エステル付加物をＮａＣｌ（０.７９ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ：１.２ｍｍｏｌ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０.４０ｍＬ；２.４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）と一緒に添加した。混合物を室温で４０時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（５×７ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させた。フラスコ中にて試薬Ｂ（２５ｍＬ）と一緒に樹脂を４.５時間振盪した。樹脂を濾過し、溶液を減圧下にて蒸発させて、油状粗生成物を得、Ｅｔ2Ｏ（２０ｍＬ）で処理した後、沈殿物を得た。遠心分離によって沈殿物を回収し、Ｅｔ2Ｏ（５×２０ｍＬ）で洗浄して固体（１５１ｍｇ）を得、ＨＰＬＣにより分析した。粗生成物（５６ｍｇ）を分取ＨＰＬＣにより精製した。生成物を含有するフラクションを凍結乾燥させて、Ｌ２４１（５.６ｍｇ；３.６×１０-3ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。収率３.２％。
【０３０４】
Ｆ．４−[[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノ]アセチル]アミノ−３−メチル安息香酸、Ｅ（図１２Ｃ）
Ｆｍｏｃ−グリシルクロライド（１.６９ｇ；５.３５ｍｍｏｌ）のＣＨ2Ｃｌ2／ＴＨＦ（１：１）（２０ｍＬ）中溶液に４−アミノ−３−メチル安息香酸（０.８１ｇ；５.３５ｍｍｏｌ）およびＮ−エチルジイソプロピルアミン（０.９ｍＬ、５.３５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）中溶液を滴下し、Ｎ2下にて室温で撹拌した。３時間後、溶媒を真空下にて蒸発させた。残留物を０.５Ｎ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）と一緒に振盪し、０℃で３時間撹拌し、次いで、濾過し、乾燥させた。白色固体をＭｅＯＨ（５０ｍＬ）に懸濁し、１時間撹拌し、次いで、濾過し、乾燥させて、化合物Ｅ（１.６９ｇ；３.９ｍｍｏｌ）を得た。収率７３％。
【０３０５】
Ｇ．Ｎ−[４−[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]グリシル]アミノ]３−メチルベンゾイル]Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミドＬ２４２（図１２Ｆ）
固相ペプチド合成容器中にて樹脂Ａ（０.５ｇ；０.３ｍｍｏｌ）をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加した。懸濁液をさらに２０分間撹拌し、次いで、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に４−[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)アミノ]アセチル]アミノ−３−メチル安息香酸、Ｅ（０.５２ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で５時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物をさらに２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１,４,７,１０−四酢酸トリス(１,１−ジメチルエチル)エステル付加物をＮａＣｌ（０.７６ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０.４０ｍＬ；２.４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）と一緒に添加した。
【０３０６】
混合物を室温で４０時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（５×７ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させた。フラスコ中にて試薬Ｂ（２５ｍＬ）と一緒に樹脂を４.５時間振盪した。樹脂を濾過し、溶液を減圧下にて蒸発させて油状粗生成物を得、Ｅｔ2Ｏ（２０ｍＬ）で処理した後、沈殿物を得た。遠心分離によって沈殿物を回収し、Ｅｔ2Ｏ（５×２０ｍＬ）で洗浄して固体（１３４ｍｇ）を得、ＨＰＬＣにより分析した。粗生成物（１０３ｍｇ）を分取ＨＰＬＣにより精製した。生成物を含有するフラクションを凍結乾燥させて、Ｌ２４２（４.５ｍｇ；２.９×１０-3ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。収率１.３％。
【０３０７】
実施例ＸＩＩＩ  −  図１３Ａ−Ｃ
Ｌ２４４の合成
概要：Ｒｉｎｋアミド樹脂（Ａ）上にてオクタペプチドＧｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ2（ＢＢＮ[７−１４]）から開始していくつかの工程で生成物を得た。ＤＯＴＡトリ−ｔ−ブチルエステルによる最終カップリング工程を、試薬Ｂによるリンカー−ＢＢＮ[７−１４]の切断および脱保護の後に溶液相中にて行った。粗生成物を分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ２４４を得た。全収率：０.４％。
【０３０８】
Ａ．Ｎ,Ｎ'−(イミノジ−２,１−エタンジイル)ビス[２,２,２−トリフルオロアセトアミド]、Ａ（図１３Ａ）
０℃にてジエチレントリアミン（１８ｇ；０.１７５ｍｏｌ）のＴＨＦ（１８０ｍＬ）中溶液にトリフルオロ酢酸エチルエステル（５０ｇ；０.３５ｍｏｌ）を滴下した。室温で２０時間後、混合物を蒸発させて油状残留物を得た（５４ｇ）。油状物をＥｔ2Ｏ（５０ｍＬ）から結晶化し、濾過し、冷Ｅｔ2Ｏ（２×３０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させて、Ａを白色固体として得た（４６ｇ；０.１５６ｍｏｌ）。収率８９％。
【０３０９】
Ｂ．４−[Ｎ,Ｎ'−ビス[２−(トリフルオロアセチル)アミノエチル]アミノ]−４−オキソブタン酸、Ｂ（図１３Ａ）
室温にて、Ａ（１ｇ；３.４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）中溶液に無水コハク酸（０.３４ｇ；３.４ｍｍｏｌ）を添加した。２８時間後、粗生成物を濃縮して残留物（１.５９ｇ）を得、ＥｔＯＡｃ（２×１０ｍＬ）および１Ｎ  ＨＣｌ（２×１５ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ2ＳＯ4で乾燥させ、濾過し、蒸発させて、油状残留物（１.３ｇ）を得、フラッシュクロマトグラフィー（５）によって精製して、Ｂを油状物として得た（０.８５ｇ；２.１５ｍｍｏｌ）。収率６３％。
【０３１０】
Ｃ．４−[Ｎ,Ｎ'−ビス[２−[(９−Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)カルボニル]アミノエチル]アミノ]−４−オキソブタン酸、Ｄ（図１３Ａ）
室温にて、Ａ（５ｇ；１６.９４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２５ｍＬ）中溶液に無水コハク酸（２ｇ；２０ｍｍｏｌ）を添加した。２８時間後、粗生成物を濃縮して残留物（７ｇ）を得、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄し、次いで、１Ｎ  ＨＣｌ（２×５０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ2ＳＯ4で乾燥させ、濾過し、蒸発させて、粗Ｂを油状残留物として得た（６.５３ｇ）。粗Ｂ（５ｇ）のＥｔＯＨ（３５ｍＬ）中懸濁液に２Ｎ  ＮａＯＨ（２５ｍＬ）を添加し、室温で１時間後に完全な溶液を得た。２０時間後、溶媒を蒸発させて、Ｃを油状物として得た（８.４８ｇ）。０℃にて、Ｃの１０％Ｎａ2ＣＯ3水溶液（３０ｍＬ）中溶液にクロロギ酸９−フルオレニルメチル（６.５４ｇ、２５.３ｍｍｏｌ）の１,４−ジオキサン（３０ｍＬ）中溶液を１時間の間に添加した。室温で２０時間後、ゼラチン状の懸濁液を得、濾過して、白色固体（３.５ｇ）および黄色溶液を得た。溶液を蒸発させ、残存する水性溶液をＨ2Ｏ（１５０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（７０ｍＬ）で抽出した。水性相に新しいＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）を添加て、懸濁液を得、０℃に冷却し、濃ＨＣｌでｐＨ２に酸性化した。有機層をＨ2Ｏ（５×２００ｍＬ）で洗浄して中性ｐＨにし、次いで、乾燥させて、ガラス状固体（６.１６ｇ）を得た。該化合物を沸騰ｎ−ヘキサン（６０ｍＬ）に１時間懸濁し、濾過して、Ｄを白色固体として得た（５.５３ｇ、８.５４ｍｍｏｌ）。全収率５０％。
【０３１１】
Ｄ．Ｎ−[４−[[４−[ビス[２−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]エチル]アミノ−１,４−ジオキソブチル]アミノ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド、Ｌ２４４（図１３Ｂ）
固相ペプチド合成容器中にて樹脂Ａ（０.５ｇ；０.３ｍｍｏｌ）をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加した。懸濁液をさらに２０分間撹拌し、次いで、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。樹脂に４−[Ｎ,Ｎ'−ビス[２−[(９−Ｈ−フルオレン−９−イル メトキシ）カルボニル]アミノエチル] アミノ]−４−オキソブタン酸（７７７.３ｍｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１８４ｍｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（１８７μＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で４０時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物を２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（２×７ｍＬ）で洗浄し、次いで、ＣＨ2Ｃｌ2（５×７ｍＬ）で洗浄し、次いで、フラスコ中にて試薬Ｂ（２５ｍＬ）と一緒に４.５時間振盪した。樹脂を濾過し、溶液を減圧下にて蒸発させて、油状粗生成物を得、Ｅｔ2Ｏ（２０ｍＬ）で処理した後、沈殿物を得た。遠心分離によって沈殿物を回収し、Ｅｔ2Ｏ（５×２０ｍＬ）で洗浄して、Ｆを白色固体として得た（１４０ｍｇ）。Ｆ（５０ｍｇ；０.０４４５ｍｍｏｌ）のＤＭＡ（３ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（２ｍＬ）中溶液にＤＯＴＡトリ−ｔ−ブチルエステル（１１２ｍｇ；０.１７８ｍｍｏｌ）ＨＡＴＵ（７０ｍｇ；０.１７８ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（６０μＬ；０.３５６ｍｍｏｌ）を添加し、室温で２４時間撹拌した。粗生成物を蒸発させて減量し（１ｍＬ）、試薬Ｂ（２５ｍＬ）と一緒に４.５時間振盪した。溶媒を蒸発させた後、残留物をＥｔ2Ｏ（２０ｍＬ）で処理して、沈殿物を得た。遠心分離によって沈殿物を回収し、Ｅｔ2Ｏ（５×２０ｍＬ）で洗浄して、ベージュ色の固体（１３２ｍｇ）を得、ＨＰＬＣにより分析した。粗生成物（１００ｍｇ）を分取ＨＰＬＣにより精製した。生成物を含有するフラクションを凍結乾燥させて、Ｌ２４４（図１３Ｃ）（３.５ｍｇ；１.８４×１０-3ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。収率０.８％。
【０３１２】
実施例ＸＩＶ−実施例ＸＬＩＩについての一般的な実験
Ｌ２０１−Ｌ２２８
Ａ．手動カップリング
６.０当量の適当に保護されたアミノ酸を各６.０当量のＨＯＢｔおよびＤＩＣで処理し、反応容器外で活性化させた。次いで、ＮＭＰ中のこの活性カルボン酸を、アミンを含有する樹脂に移し、反応を４〜６時間行い、次いで、樹脂を取り出し、洗浄した。
【０３１３】
Ｂ．Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨの４−アミノ安息香酸およびアミノビフェニルカルボン酸アミドへの特異なカップリング：
ＮＭＰ中にてＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ（１０.０当量）をＨＡＴＵ（１０.０当量）およびＤＩＥＡ（２０.０当量）で処理し（アミノ酸１ｇにつきＮＭＰ  １０ｍＬを使用）、溶液を室温で１０〜１５分間撹拌した後、アミン含有樹脂を入れた容器に移した。樹脂１ｇにつき溶液の容量を１５.０ｍｌとした。カップリングを室温で２０時間続け、樹脂から全て反応物を取り除いた。この方法をさらに１回繰り返し、次いで、ＮＭＰで洗浄した後、次工程に移った。
【０３１４】
Ｃ．Ｄ０３Ａモノアミドの製造：
８.０当量のＤＯＴＡモノ酸をＮＭＰに溶解し、８.０当量のＨＢＴＵおよび１６.０当量の ＤＩＥＡで処理した。この溶液を室温で１５分間撹拌し、次いで、樹脂上のアミンに移し、カップリングを室温で２４時間続けた。次いで、樹脂を取り出し、洗浄し、次いで、ペプチドを切断し、精製した。
【０３１５】
Ｄ．粗ペプチドの樹脂からの切断および精製：
樹脂を試薬Ｂ（１５.０ｍｌ／ｇ）に懸濁し、室温で４時間振盪した。次いで、樹脂を取り出し、試薬Ｂ（２×５ｍＬ）で再度洗浄し、上記濾液と合わせた。次いで、濾液を減圧下にて室温で濃縮してペースト／液体を得、（使用した樹脂１ｇにつき）２５.０ｍＬの無水エーテルと一緒にトリチュレートした。次いで、懸濁液を遠心分離し、エーテル層をデカントした。この方法をさらに２回繰り返し、無色の沈殿物をエーテル洗浄後に分取ＨＰＬＣにより精製した。
【０３１６】
実施例ＸＩＶ  −  図２１
Ｌ２０１の合成
Ｆｍｏｃ−Ｑ(Ｔｒｔ)−Ｗ(Ｂｏｃ)−Ａ−Ｖ−Ｇ−Ｈ(Ｔｒｔ)−Ｍ−樹脂０.５ｇ（０.４ｍｍｏｌ／ｇ、０.５g、０.２ｍｍｏｌ）（樹脂Ａ）を使用した。一般的な方法に記載したようにアミノ酸ユニットの残りを添加して、(１Ｒ)−１−(ビス{２−[ビス(カルボキシメチル)アミノ]エチル}アミノ)プロパン−３−カルボン酸−１−カルボキシル−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２０１）を製造した。収率：１７.０ｍｇ（５.４％）
【０３１７】
実施例ＸＶ  −  図２２Ａおよび２２Ｂ
Ｌ２０２の合成
Ａ．４−Ｆｍｏｃ−ヒドラジノ安息香酸（図２２Ａ)：
４−ヒドラジノ安息香酸（５.０ｇ、３２.９ｍｍｏｌ）の水（１００ｍｌ）中懸濁液を炭酸セシウム（２１.５ｇ、６６.０ｍｍｏｌ）で処理した。上記溶液にＴＨＦ（２５ｍＬ）中のＦｍｏｃ−Ｃｌ（９.１ｇ、３５.０ｍｍｏｌ）を、１時間にわたって撹拌しながら滴下した。添加後、溶液をさらに４時間撹拌し、反応混合物を約７５ｍＬに濃縮し、エーテル（２×１００ｍＬ）で抽出した。エーテル層を捨て、水性層を２Ｎ  ＨＣｌで酸性化した。分離した固体を濾過し、水（５×１００ｍＬ）で洗浄し、次いで、アセトニトリルから再結晶して、生成物（化合物Ｂ）を無色の固体として得た。収率：１１.０ｇ（８９％）。1H NMR(DMSO-d6)：δ 4.5(m,1H,Ar-CH2-CH), 4.45(m,2H,Ar-CH2), 6.6(bs,1H,Ar-H), 7.4-7.9(m,9,Ar-H and Ar-CH2), 8.3(s,2H,Ar-H), 9.6(s,2H,Ar-H)。M.S.-m/z 373.2 [M-H]
【０３１８】
Ｆｍｏｃ−Ｑ(Ｔｒｔ)−Ｗ(Ｂｏｃ)−Ａ−Ｖ−Ｇ−Ｈ(Ｔｒｔ)−Ｍ−樹脂０.５ｇ（０.４ｍｍｏｌ／ｇ、０.５g、０.２ｍｍｏｌ）（樹脂Ａ）を添加した。一般的な方法に記載したように化合物Ｂを含むアミノ酸ユニットを添加して、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]−４−ヒドラジノベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２０２）（図２２Ｂ）を製造した。収率：２５.０ｍｇ（８.３％）
【０３１９】
実施例ＸＶＩ  −  図２３Ａおよび２３Ｂ
Ｌ２０３の合成
Ａ．４−Ｂｏｃ−アミノ安息香酸ベンジル化合物Ｂの製造（図２３Ａ）：
４−ｂｏｃ−アミノ安息香酸（０.９５ｇ、４.０ｍｍｏｌ）の乾燥アセトニトリル（１０.０ｍＬ）中懸濁液を炭酸セシウム粉末（１.３ｇ、４.０ｍｍｏｌ）で処理し、窒素下にて強く撹拌した。臭化ベンジル（０.７５ｇ、４.４ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を窒素下にて２０時間還流した。次いで、反応混合物を氷冷水（２００ｍＬ）中に注ぎ、分離した固体を濾過し、水（５×５０ｍＬ）で洗浄した。次いで、粗物質を水性メタノールから再結晶して、生成物を無色の固体として得た（化合物Ｂ）。収率：０.８ｇ（６１％）。1H NMR(CDCl3)：δ 1.5(s,9H,Tertiary methyls), 5.4(s,2H,Ar-CH2), 7.4(m,7H,Ar-H) and 8.0(m,2H,Ar-H)。M.S.-m/z 326.1 [M+H]。
【０３２０】
Ｂ．４−アミノ安息香酸ベンジル化合物Ｃ（図２３Ａ）：
ＴＦＡ（２５容量％）を含有するＤＣＭ（２０ｍＬ）に４−Ｂｏｃ−アミノ安息香酸ベンジル（０.８ｇ、２.５ｍｍｏｌ）を溶解し、室温で２時間撹拌した。反応混合物を砕氷１００.０ｇ中に注ぎ、重炭酸ナトリウム飽和溶液で中和してｐＨを約８.５にした。有機層を分取し、水性層をＤＣＭ（３×２０ｍＬ）で抽出し、有機層をすべて合わせた。次いで、ＤＣＭ層を飽和重炭酸ナトリウム（１×５０ｍＬ）、水（２×５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（硫酸ナトリウム）。溶媒を除去して、無色の固体（化合物Ｃ）を得、さらなる精製を行わずに次工程に用いた。収率：０.５１ｇ（９１％）。1H NMR(CDCl3)：δ 5.3(s,2H,Ar-CH2), 6.6(d,2H,Ar-H,j =1.0 Hz), 7.4(m,5H,Ar-H,J=1.0 Hz) and 7.9(d,2H,Ar-H,J=1.0 Hz)。
【０３２１】
Ｃ．４−(２−クロロアセチル)アミノ安息香酸ベンジル化合物Ｄ（図２３Ａ）：
アミン（０.５１ｇ、２.２ｍｍｏｌ）を乾燥ジメチルアセトアミド（５.０ｍＬ）に溶解し、氷冷した。シリンジによりクロロアセチルクロライド（０.２８ｇ、２.５ｍｍｏｌ）を滴下し、溶液を室温にし、２時間撹拌した。さらにクロロアセチルクロライド２.５ｍｍｏｌを添加し、撹拌をさらに２時間続けた。次いで、反応混合物を氷冷水（１００ｍＬ）中に注いだ。沈殿した固体を濾過し、水で洗浄し、次いで、ヘキサン／エーテルから再結晶して、無色の固体（化合物Ｄ）を得た。収率：０.３８ｇ（５６％）。1H NMR(CDCl3)：δ 4.25(s,2H,CH2-Cl), 5.4(s,2H,Ar-H), 7.4(m,5H,Ar-H), 7.6(d,2H,Ar-H), 8.2(d,2H,Ar-H) and 8.4(s,1H,-CONH)。
【０３２２】
２−{１,４,７,１０−テトラアザ−７,１０−ビス{[(tert−ブチル)オキシカルボニル]メチル}−４−[(Ｎ−{４−[ベンジルオキシカルボニル]フェニル}カルバモイル]シクロドデシル}酢酸tert−ブチル、化合物Ｅ（図２３Ａ）：
ＤＯ３Ａ−トリ−ｔ−ブチルエステル・ＨＣｌ（５.２４ｇ、９.５ｍｍｏｌ）を乾燥アセトニトリル３０.０ｍＬに懸濁し、炭酸カリウム無水物（２.７６ｇ、２０ｍｍｏｌ）を添加し、３０分間撹拌した。次いで、上記混合物に乾燥アセトニトリル（２０.０ｍＬ）中のクロロアセトアミドＤ（２.８ｇ、９.２ｍｍｏｌ）を１０分間滴下した。次いで、反応混合物を一夜撹拌した。溶液を濾過し、次いで、減圧下にて濃縮してペーストを得た。ペーストを水約２００.０ｍＬに溶解し、酢酸エチル（５×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水（２×１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（硫酸ナトリウム）。溶液を濾過し、減圧下にて蒸発させてペーストを得、ペーストをフラッシュシリカゲル（６００.０ｇ）でクロマトグラフィー処理した。ＤＣＭ中５％メタノールで溶離して生成物を溶出させた。ＴＬＣで均質であったフラクションをすべてプールし、蒸発させて、無色のガム状物を得た。ガム状物をイソプロピルエーテルおよびＤＣＭから再結晶して、化合物Ｅを製造した。収率：４.１ｇ（５５％）。1H NMR(CDCl3)：δ 1.5(s,27H,methyls), 2.0-3.75(m,24H,NCH2s), 5.25(d,2H,Ar-CH2), 7.3(m,5H,Ar-H), 7.8(d,2H,Ar-H) and 7.95(d,2H,Ar-H)。M.S.-m/z 804.3 [M+H]。
【０３２３】
Ｄ．上記酸Ｅの還元による化合物Ｆの製造（図２３Ａ）：
上記ベンジルエステルＥ（１.０ｇ、１.２４ｍｍｏｌ）をメタノール−水混合物（１０.０ｍＬ、９５：５）に溶解し、パラジウム−炭素（１０％、０.２ｇ）を添加した。次いで、Ｐａｒｒ装置を使用して溶液を５０.０ｐｓｉにて８時間水素添加した。溶液から触媒を濾去し、次いで、減圧下にて濃縮して、無色の綿毛状固体Ｆを得た。さらには精製せず、そのまま次工程で使用した。MS:m/z  714.3 [M+Na]。
【０３２４】
Ｅ．Ｌ２０３の製造（図２３Ｂ）
上記の標準的なカップリング方法を使用して、上記酸Ｆを樹脂［Ｈ−Ｑ(Ｔｒｔ)−Ｗ(Ｂｏｃ)−Ａ−Ｖ−Ｇ−Ｈ(Ｔｒｔ)−Ｌ−Ｍ−樹脂］樹脂Ａ上のアミンとカップリングさせた。樹脂０.５ｇ（０.２ｍｍｏｌ）から最終精製ペプチド（１０.９％）Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−４−アミノベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２０３）（図２３Ｂ）３１.５ｍｇを得た。
【０３２５】
実施例ＸＶＩＩ  −  図２４
Ｌ２０４の合成
Ｆｍｏｃ−Ｑ(Ｔｒｔ)−Ｗ(Ｂｏｃ)−Ａ−Ｖ−Ｇ−Ｈ(Ｔｒｔ)−Ｌ−Ｍ−樹脂（０.５ｇ、０.２ｍｍｏｌ）（樹脂Ａ）を使用した。標準的なカップリング条件を用いて、最初にＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを加え、次いで、上記方法で得たＦを加えた（図２３Ａ）。収率：２４.５ｍｇ（８.１６％）のＮ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−４−アミノベンゾイル−グリシル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２０４）（図２４）。
【０３２６】
実施例ＸＶＩＩＩ  −  図２５
Ｌ２０５の合成
文献（“Synthesis of diacylhydrazine compound for therapeutic use”. Hoelzemann, G.; Goodman, S. (Merck Patent G.m.b.H.., Germany). Ger.Offen. 2000, 16 pp. CODEN:GWXXBX DE 19831710 A1 20000120）の記載に従って、Ｆｍｏｃ−６−アミノニコチン酸１を製造し、予め加えたＦｍｏｃ−Ｑ(Ｔｒｔ)−Ｗ(Ｂｏｃ)−Ａ−Ｖ−Ｇ−Ｈ(Ｔｒｔ)−Ｌ−Ｍ−樹脂（０.５ｇ、０.２ｍｍｏｌ）樹脂Ａをカップリングさせ、次いで、上記の別のアミノ基をカップリングさせて、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−４−アミノベンゾイル−グリシル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２０５）を製造した。収率：１.２８ｍｇ（０.４％）。
【０３２７】
実施例ＸＩＸ  −  図２６Ａおよび２６Ｂ
Ｌ２０６の合成
Ａ．４'−Ｆｍｏｃ−アミノ−３'−メチルビフェニル−４−カルボン酸Ｂ：
アミノ酸（０.４１ｇ、１.８ｍｍｏｌ）を炭酸セシウム（０.９８ｇ、３.０ｍｍｏｌ）の水１０.０ｍＬ中溶液に溶解した。“Rational Design of Diflunisal Analogues with Reduced Affinity for Human Serum Albumin“ Mao, H. et al J. Am. Chem. Soc., 2001, 123(43), 10429-10435を参照。この溶液を氷浴中にて冷却し、強く撹拌しながらＦｍｏｃ−Ｃｌ（０.５２ｇ、２.０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０.０ｍＬ）中溶液を滴下した。添加後、反応混合物を室温で２０時間撹拌した。次いで、溶液を２Ｎ  ＨＣｌで酸性化した。沈殿した固体を濾過し、水（３×２０ｍＬ）で洗浄し、風乾させた。次いで、粗固体をアセトニトリルから再結晶して、無色の綿毛状固体Ｂ（図２６Ａ）を得た。収率：０.６６ｇ（７５％）。1H NMR(DMSO-d6)：δ  2.2(s,Ar-Me), 4.25(t,1H,Ar-CH,j=5Hz), 4.5(d,2H,O-CH2,j=5.0 Hz), 7.1(bs,1H,CONH), 7.4-8.0(m,8H,Ar-H) and 9.75(bs,1H,-COOH)。M.S.:m/z 472.0 [M-H]。
【０３２８】
標準的なカップリング条件を用いて、上記の酸ＢをＦｍｏｃ−Ｑ(Ｔｒｔ)−Ｗ(Ｂｏｃ)−Ａ−Ｖ−Ｇ−Ｈ(Ｔｒｔ)−Ｌ−Ｍ−樹脂（０.２g、０.０８ｍｍｏｌ）樹脂Ａとカップリングさせた。さらなる基を上記のように添加して、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]−[４'−アミノ−２'−メチル ビフェニル−４−カルボキシル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２０６）を製造した。収率：３０.５ｍｇ（２４％）。
【０３２９】
実施例ＸＸ  −  図２７Ａ−Ｂ
Ｌ２０７の合成
上記の方法を使用して、３'−Ｆｍｏｃ−アミノ−ビフェニル−３−カルボン酸を対応するアミンから製造した。“Synthesis of 3'-methyl-4-‘-nitrobiphenylcarboxylic acids by the reaction of 3-methyl-4-nitrobenzenenediazonium acetate with methyl benzoate”, Boyland, E. and Gorrod, J., J.Chem. Soc., Abstracts(1962), 2209-11を参照。アミン０.７ｇからＦｍｏｃ−誘導体０.８１ｇ（５８％）（化合物Ｂ、図２７Ａ）を得た。1H NMR(DMSO-d6)：δ 4.3(t,1H,Ar-CH), 4.5(d,2H,O-CH2), 7.25-8.25(m,16H,Ar-H) and 9.9(s,1H,-COOH)。M.S.-m/z 434 [M-H]
【０３３０】
Ｆｍｏｃ−Ｑ(Ｔｒｔ)−Ｗ(Ｂｏｃ)−Ａ−Ｖ−Ｇ−Ｈ(Ｔｒｔ)−Ｌ−Ｍ−樹脂（０.２g、０.０８ｍｍｏｌ）樹脂Ａを上記酸Ｂおよび上記のさらなる基とカップリングさせた（図２７Ｂ）。Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]−[３'−アミノ−ビフェニル−３−カルボキシル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２０７）２９.０ｍｇを製造した（２３％）。
【０３３１】
実施例ＸＸＩ  −  図２８
Ｌ２０８の合成
Ｆｍｏｃ−Ｑ(Ｔｒｔ)−Ｗ(Ｂｏｃ)−Ａ−Ｖ−Ｇ−Ｈ(Ｔｒｔ)−Ｌ−Ｍ−樹脂Ａ（０.２g、０.０８ｍｍｏｌ）を脱ブロックし、カップリング剤としてＨＡＴＵを使用してテレフタル酸とカップリングさせた。樹脂上の得られた酸をＤＩＣおよびＮＨＳで活性化し、次いで、エチレンジアミンとカップリングさせた。最後に、樹脂上のアミンとＤＯＴＡ−モノ酸をカップリングさせた。Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]−[１,２−ジアミノエチル−テレフタリル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド（Ｌ２０８）を１７.５ｍｇ（１４％）の収量で製造した。
【０３３２】
実施例ＸＸＩＩ  −  図２９Ａ−Ｂ
Ｌ２０９の合成
Ａ．Ｂｏｃ−Ｇｌｕ(Ｇ−ＯＢｎ)−Ｇ−ＯＢｎ：
Ｂｏｃ−グルタミン酸（５.０ｇ、２０.２ｍｏｌ）をＴＨＦ（５０.０ｍＬ）に溶解し、氷浴中にて０℃に冷却した。ＨＡＴＵ（１５.６１ｇ、４１.０ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、ＤＩＥＡ（６.５ｇ、５０.０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を０℃で３０分間撹拌した。ＴＨＦ（２５.０ｍＬ）中にてグリシンのベンジルエステル［８.４５ｇ、５０ｍｍｏｌ、ベンジルグリシン・塩酸塩を炭酸ナトリウムで中和し、ＤＣＭで抽出し、溶媒除去することによって生成］を添加した。反応混合物を室温にし、室温で２０時間撹拌した。減圧下にて揮発物質をすべて除去した。残留物を炭酸ナトリウム飽和溶液（１００ｍＬ）で処理し、酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、１Ｎ  ＨＣｌ（２×１００ｍＬ）および水（２×１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（硫酸ナトリウム）。溶液を濾過し、溶媒を減圧下にて除去して、ペーストを得、フラッシュシリカゲル（５００.０ｇ）でクロマトグラフィー処理した。ＤＣＭ中２％メタノールで溶離して、生成物を無色のペーストとして得た（化合物Ｂ、図２９Ａ）。収率：８.５ｇ（７４.５％）。1H NMR(CDCl3)：δ  1.4(s,9H,-CH3s), 2.0-2.5(m,4H,-CH-CH2 and CO-CH), 4.2(m,5H,N-CH2-CO), 5.15(s,4H,Ar-CH2), 5.45(bs,1H,Boc-NH), 7.3(m,10H,Ar-H) and 7.6(2bs,2H,CONH)。M.S.-m/z 564.1 [M+H]。分析用ＨＰＬＣ保持時間−８.２９分（純度＞９７％、２０〜６５％Ｂ、１５分間にわたって）。
【０３３３】
Ｂ．Ｈ−Ｇｌｕ(Ｇ−ＯＢｎ)−Ｇ−ＯＢｎ：
上記の完全に保護されたグルタミン酸誘導体Ｂ（１.７ｇ、３.２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ／ＴＦＡ（４：１、２０ｍＬ）に溶解し、ＴＬＣにおいて出発物質が消失するまで（２時間）出発物質を撹拌した。反応混合物を氷冷重炭酸ナトリウム飽和溶液（２００ｍＬ）中に注ぎ、有機層を分取し、水性層をＤＣＭ（２×５０ｍＬ）で抽出し、上記有機層と合わせた。ＤＣＭ層を飽和重炭酸ナトリウム（２×１００ｍＬ）、水（２×１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（硫酸ナトリウム）。溶液を濾過し、減圧下にて蒸発させ、残留物を真空下にて乾燥させて、ガラス状物（化合物Ｃ、図２９Ａ）を得、さらには精製せずに次工程で使用した。収率：０.７２ｇ（９５％）。M.S.-m/z 442.2 [M+H]。
【０３３４】
Ｃ．(ＤＯＴＡ−トリ−ｔ−ブチル)−Ｇｌｕ−(Ｇ−ＯＢｎ)−Ｇ−ＯＢｎ：
無水ＤＣＭ（１０.０ｍＬ）中の上記アミンＣ（１.３３ｇ、３ｍｍｏｌ）をＤＯＴＡ−トリ−ｔ−ブチルエステルの活性溶液［２.２７ｇ、３.６ｍｍｏｌをＨＢＴＵ（１.３６ｇ、３.６ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１.０４ｇ、８ｍｍｏｌ）で処理し、乾燥ＤＣＭ  ２５ｍＬ中にて室温で３０分間撹拌した］に添加し、室温で２０時間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ  ２００ｍＬで希釈し、飽和炭酸ナトリウム（２×１５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（硫酸ナトリウム）。溶液を濾過し、溶媒を減圧下にて除去して、茶色のペーストを得た。粗生成物をフラッシュシリカゲル（５００.０ｇ）でクロマトグラフィー処理した。ＤＣＭ中２％メタノールで溶離して、生成物を無色のガム状物として得た（化合物Ｄ、図２９Ａ）。収率：１.７ｇ（５６.８％）。1H NMR(CDCl3)：δ  1.3 and 1.4(2s,9H,three methyls each from the free base and the sodium adduct of DOTA), 2.0-3.5(m,20H,N-CH2s and-CH-CH2and CO-CH2), 3.75-4.5(m,13H,N-CH2-CO), 5.2(m,4H,Ar-CH2) and 7.25(m,10H,Ar-H)。M.S. m/z-1018.3 [M+Na] and 996.5 [M+H] and 546.3 [M+Na+H]/2。ＨＰＬＣ−保持時間：１１.２４分（＞９０％、２０〜８０％Ｂ、３０分間にわたって）。
【０３３５】
Ｄ．(ＤＯＴＡ−トリ−ｔ−ブチル)−Ｇｌｕ−(Ｇ−ＯＨ)−Ｇ−ＯＨ：
上記ビスベンジルエステルＤ（０.２ｇ、０.２ｍｍｏｌ）をメタノール−水（２０ｍＬ、９：１）に溶解し、１０％Ｐｄ／Ｃ触媒（０.４ｇ、水５０重量％）の存在下にて５０ｐｓｉで水素添加した。ＨＰＬＣおよびＴＬＣにて出発物質が消失した後（４時間後）、溶液から触媒を濾去し、溶媒を減圧下にて除去し、残留物を高真空（＜０.１ｍｍ）下にて約２０時間乾燥させて、生成物を無色の泡沫体として得た（化合物Ｅ、図２９Ａ）。収率：０.１２ｇ（７３.５％）。1H NMR(DMSO-d6)：δ  1.3 and 1.4(2s,9H corresponding to methyls of free base and the sodium adduct of DOTA), 1.8-4.7(m,33H,NCH2s,COCH2 and CH-CH2 and NH-CH-CO), 8.1,8.2 and 8.4(3bs,NHCO)。M.S.：m/z-816.3 [M+H] and 838.3 [M+Na]。ＨＰＬＣ保持時間：３.５２分（２０〜８０％Ｂ、３０分間にわたって、純度＞９５％）。
【０３３６】
Ｅ．Ｈ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタノイル−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタノイル−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ2：
Ｆｍｏｃ−Ｑ(Ｔｒｔ)−Ｗ(Ｂｏｃ)−Ａ−Ｖ−Ｇ−Ｈ(Ｔｒｔ)−Ｌ−Ｍ−樹脂Ａ（０.５ｇ、０.２ｍｍｏｌ）を脱ブロックし、８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸と逐次的に２回カップリングさせ、分取ＨＰＬＣ精製後、上記脱保護ペプチド（化合物Ｆ、図２９Ｂ）を得た。収率：９１.０ｍｇ（３７％）。
【０３３７】
ＨＰＬＣ保持時間：８.９８分（純度＞９５％、１０〜４０％Ｂ、１０分間にわたって）。M.S.:m/z-1230.6 [M+H],615.9 [M+2H]/2.
【０３３８】
Ｆ．上記ビス−酸ＥおよびアミンＦの液相カップリング：（図２９Ｂ）
ビス−酸Ｅ（１３.５ｍｇ、０.０１６６ｍｍｏｌ）を乾燥アセトニトリル１００μＬに溶解し、ＮＨＳ（４.０ｍｇ、０.０３５ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（５.０５ｍｇ、０.０４ｍｍｏｌ）で処理し、室温で２４時間撹拌した。上記活性酸に遊離アミンＦ（５１.０ｍｇ、０.４１ｍｍｏｌ）［ＴＦＡ塩を飽和重炭酸ナトリウムで処理し、次いで、該溶液を凍結乾燥させて、該アミンを綿毛状固体として得た］を添加し、次いで、ＮＭＰ  １００μＬを添加し、撹拌を室温でさらに４０時間続けた。溶液を無水エーテル（１０ｍＬ）で希釈し、沈殿物を遠心分離により回収し、無水エーテル（２×１０ｍＬ）で洗浄した。次いで、粗固体を分取ＨＰＬＣにより精製して、図２９Ｂにおけるように生成物Ｌ２０９を無色の綿毛状固体として得た。収量７.５ｍｇ（１４.７％）。
【０３３９】
実施例ＸＸＩＩＩ  −  図３０Ａ−Ｂ
Ｌ２１０の合成
Ａ．Ｈ−８−アミノオクタノイル−８−アミノオクタノイル−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ2：
１−アミノオクタン酸を使用する以外は化合物Ｆ（図２９Ｂ）の場合と全く同じ方法でこれを製造し、該アミン（化合物Ｂ、図３０Ａ）を分取ＨＰＬＣにより精製した。収率：９５.０ｍｇ（３８.９％）。ＨＰＬＣ 保持時間：７.４９分（純度＞９５％；１０〜４０％Ｂ、１０.０分間にわたって）。M.S.:m/z-1222.7 [M+H],611.8 [M+2H]/2。
【０３４０】
Ｌ２０９の場合と同様に、アセトニトリル  １００μＬ中にて(ＤＯＴＡ−トリ−ｔ−ブチル)−Ｇｌｕ−(Ｇ−ＯＨ)−Ｇ−ＯＨ（０.０１６３ｇ、０.０２ｍｍｏｌ）をそのビス−ＮＨＳエステルに変え、ＮＭＰ  １００μＬ中にて遊離塩基、化合物Ｂ（６０.０ｍｇ、０.０５ｍｍｏｌ）で処理し、反応を４０時間続け、次いで、後処理し、上記のように精製して、Ｌ２１０（図３０Ｂ）を製造した。収量１１.０ｍｇ（１８％）。
【０３４１】
実施例ＸＸＩＶ  −  図３１
Ｌ２１１の合成
標準的なプロトールでＦｍｏｃ−Ｑ(Ｔｒｔ)−Ｗ(Ｂｏｃ)−Ａ−Ｖ−Ｇ−Ｈ(Ｔｒｔ)−Ｌ−Ｍ−樹脂０.２ｇ（０.０８ｍｍｏｌ）から製造した。Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミドＬ２１１を収量４.７ｍｇ（３.７％）で製造した（図３１）。
【０３４２】
実施例ＸＸＶ  −  図３２
Ｌ２１２の合成
標準的なプロトコールにより、樹脂上に配列を構築することによってＲｉｎｋアミドＮｏｖａｇｅｌ樹脂（０.４７ｍｍｏｌ／ｇ、０.２ｇ、０.０９４ｍｍｏｌ）から製造した。Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−グルタミル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミドＬ２１２を収量２５.０ｍｇ（１７.７％）で製造した（図３２）。
【０３４３】
実施例ＸＸＶＩ  −  図３３
Ｌ２１３の合成
標準的な方法を使用して、Ｆｍｏｃ−Ｍｅｔ−２−クロロトリチルクロライド樹脂（NovaBioChem、０.７８ｍｍｏｌ／ｇ、０.２６ｇ、０.２ｍｍｏｌ）から製造し、配列の残りを構築した。Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンＬ２１３を収量４９.０５ｍｇ（１６.４％）で製造した（図３３）。
【０３４４】
実施例ＸＸＶＩＩ  −  図３４
Ｌ２１４の合成
Ｆｍｏｃ−Ｑ(Ｔｒｔ)−Ｗ(Ｂｏｃ)−Ａ−Ｖ−Ｇ−Ｈ(Ｔｒｔ)−Ｌ−Ｍ−樹脂Ａ（０.２ｇ、０.０８ｍｍｏｌ）を使用し、標準的な条件を使用して、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミドＬ２１４を製造した。生成物８.５ｍｇ（６.４％）を得た（図３４）。
【０３４５】
実施例ＸＸＶＩＩＩ  −  図３５
Ｌ２１５の合成
Ｆｍｏｃ−Ｑ(Ｔｒｔ)−Ｗ(Ｂｏｃ)−Ａ−Ｖ−Ｇ−Ｈ(Ｔｒｔ)−Ｌ−Ｍ−樹脂Ａ（０.２ｇ、０.０８ｍｍｏｌ）を使用して、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−アルギニル−Ｌ−ロイシル−グリシル−Ｌ−アスパルギニル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミドＬ２１５を製造した。９.２ｍｇ（５.５％）を得た（図３５）。
【０３４６】
実施例ＸＸＩＸ  −  図３６
Ｌ２１６の合成
Ｆｍｏｃ−Ｑ(Ｔｒｔ)−Ｗ(Ｂｏｃ)−Ａ−Ｖ−Ｇ−Ｈ(Ｔｒｔ)−Ｌ−Ｍ−樹脂Ａ（０.２ｇ、０.０８ｍｍｏｌ）を使用して、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−アルギニル−Ｌ−チロシニル−グリシル−Ｌ−アスパルギニル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミドＬ２１６を製造した。２５.０ｍｇ（１４.７％）を得た（図３６）。
【０３４７】
実施例ＸＸＸ  −  図３７
Ｌ２１７の合成
Ｆｍｏｃ−Ｑ(Ｔｒｔ)−Ｗ(Ｂｏｃ)−Ａ−Ｖ−Ｇ−Ｈ(Ｔｒｔ)−Ｌ−Ｍ−樹脂Ａ（０.２ｇ、０.０８ｍｍｏｌ）を使用して、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−リジル−Ｌ−チロシニル−グリシル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミドＬ２１７を製造した。５８.０ｍｇ（３４.７％）を得た（図３７）。
【０３４８】
実施例ＸＸＸＩ  −  図３８
Ｌ２１８の合成
Ｆｍｏｃ−Ｑ(Ｔｒｔ)−Ｗ(Ｂｏｃ)−Ａ−Ｖ−Ｇ−Ｈ(Ｔｒｔ)−Ｌ−Ｍ−樹脂Ａ（０.２ｇ、０.０８ｍｍｏｌ）を使用した。リジンの導入のためにＦｍｏｃ−Ｌｙｓ(ｉｖＤｄｅ)を用いた。直線配列が完了した後、ＤＭＦ中１０％ヒドラジン（２×１０ｍＬ；各１０分、次いで、洗浄）を使用してリジンの保護基を除去した。次いで、「一般」のセクションに記載の方法を使用して、アミノ酸の残りを導入して、所望のペプチド配列を完了した。図３８中のＬ２１８を収量４０.０ｍｇ（２３.２％）で得た。
【０３４９】
実施例ＸＸＸＩＩ−図３９
Ｌ２１９の合成
４−スルファミルブチリルＡＭ  Ｎｏｖａｇｅｌ樹脂（１.１ｍｍｏｌ／ｇ；０.５ｇ；０.５５ｍｍｏｌ）を使用した。この樹脂に第１のアミノ酸を−２０℃で２０時間負荷した。通常のカップリング方法を使用して、配列の残りを完了した。洗浄後、２０.０当量のヨードアセトニトリルおよび１０.０当量のＤＩＥＡを用いて２０時間樹脂をアルキル化した。次いで、樹脂から液体を除去し、洗浄し、次いで、ＴＨＦ  ５.０ｍＬ中にて２.０当量のペンチルアミンで２０時間切断した。次いで、樹脂をＴＨＦ（２×５.０ｍＬ）で洗浄し、濾液を全て合わせた。次いで、ＴＨＦを減圧下にて蒸発させ、次いで、残留物を試薬Ｂ  １０.０ｍＬで脱ブロックし、上記方法のようにペプチドＮ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−アミノペンチル、Ｌ２１９を精製した。２８.０ｍｇ（２.８％）を得た（図３９）。
【０３５０】
実施例ＸＸＸＩＩＩ−図４０
Ｌ２２０の合成
ＮｏｖａＳｙｎ  ＴＧＲ樹脂Ａ（０.２５ｍｍｏｌ／ｇ；０.１５ｇ、０.０５ｍｍｏｌ）を使用して、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−Ｄ−アラニル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド、Ｌ２２０を製造した。３１.５ｍｇ（４１.４％）を得た（図４０）。
【０３５１】
実施例ＸＸＸＩＶ  −  図４１
Ｌ２２１の合成
ＮｏｖａＳｙｎ  ＴＧＲ樹脂Ａ（０.２５ｍｍｏｌ／ｇ；０.１５ｇ、０.０５ｍｍｏｌ）を使用して、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−ロイシンアミド、Ｌ２２１を製造した。２８.０ｍｇ（３４.３％）を得た（図４１）。
【０３５２】
実施例ＸＸＸＶ  −  図４２
Ｌ２２２の合成
ＮｏｖａＳｙｎ  ＴＧＲ樹脂Ａ（０.２５ｍｍｏｌ／ｇ；０.１５ｇ、０.０５ｍｍｏｌ）を使用して、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｄ−チロシニル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−β−アラニル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−ノルロイシンアミド、Ｌ２２２を製造した。３４.０ｍｇ（４０.０％）を得た（図４２）。
【０３５３】
実施例ＸＸＸＶＩ  −  図４３
Ｌ２２３の合成
ＮｏｖａＳｙｎ  ＴＧＲ（０.２５ｍｍｏｌ／ｇ；０.１５ｇ、０.０５ｍｍｏｌ）樹脂Ａを使用して、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−β−アラニル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−ノルロイシンアミド、Ｌ２２３を製造した。３１.２ｍｇ（３７.１％）を得た（図４３）。
【０３５４】
実施例ＸＸＸＶＩＩ  −  図４４
Ｌ２２４の合成
ＮｏｖａＳｙｎ  ＴＧＲ（０.２５ｍｍｏｌ／ｇ；０.１５ｇ、０.０５ｍｍｏｌ）樹脂Ａを使用して、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−ロイシンアミド、Ｌ２２４を製造した。３０.０ｍｇ（４２.２％）を得た（図４４）。
【０３５５】
実施例ＸＸＸＶＩＩＩ  −  図４５
Ｌ２２５の合成
ＮｏｖａＳｙｎ  ＴＧＲ（０.２５ｍｍｏｌ／ｇ；０.１５ｇ、０.０５ｍｍｏｌ）樹脂Ａを使用して、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリニル−グリシル−Ｌ−セリニル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−メチオニンアミド、Ｌ２２５を製造した。１５.０ｍｇ（２０.４％）を得た（図４５）。
【０３５６】
実施例ＸＸＸＩＸ  −  図４６
Ｌ２２６の合成
ＮｏｖａＳｙｎ  ＴＧＲ（０.２５ｍｍｏｌ／ｇ；０.１５ｇ、０.０５ｍｍｏｌ）樹脂Ａを使用して、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド、Ｌ２２６を製造した。４０.０ｍｇ（５２.９％）を得た（図４６）。
【０３５７】
実施例ＸＬ  −  図４７
Ｌ２２７の合成
ＮｏｖａＳｙｎ  ＴＧＲ（０.２５ｍｍｏｌ／ｇ；０.１５ｇ、０.０５ｍｍｏｌ）樹脂Ａを使用して、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−トレオニル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−メチオニンアミドＬ２２７を製造した。２８.０ｍｇ（３６.７％）を得た（図４７）。
【０３５８】
実施例ＸＬＩ  −  図４８
Ｌ２２８の合成
ＮｏｖａＳｙｎ  ＴＧＲ（０.２５ｍｍｏｌ／ｇ；０.１５ｇ、０.０５ｍｍｏｌ）樹脂Ａを使用して、Ｎ−[(３β,５β,１２α)−３−[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]−グリシル−４−アミノベンゾイル−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−メチオニンアミド、Ｌ２２８を製造した。２６.０ｍｇ（３３.８％）を得た（図４８）。
【０３５９】
実施例ＸＬＩＩ  −  さらなるＧＲＰ化合物の合成
Ａ．４,４'−アミノメチルビフェニルカルボン酸（Ｂ２）および３,３'−アミノメチルビフェニルカルボン酸（Ｂ３）の一般的な製造方法：
１．ヒドロキシメチルビフェニルカルボン酸メチル：
市販の（Aldrich Chemical Co.）４−ヒドロキシメチルフェニルホウ酸または３−ヒドロキシメチルフェニルホウ酸（１.０ｇ、６.５８ｍｍｏｌ）をイソプロパノール（１０ｍＬ）および２Ｍ炭酸ナトリウム（１６ｍＬ）と一緒に、溶液が均一になるまで撹拌した。溶液に窒素を通気させて溶液を脱気し、次いで、固体３−ブロモ安息香酸メチルまたは４−ブロモ安息香酸メチル（１.３５ｇ、６.３ｍｍｏｌ）で処理し、次いで、Ｐｄ(０)触媒｛[(Ｃ6Ｈ5)3Ｐ]4Ｐｄ；０.０２３g、０.００３ｍｍｏｌ｝で処理した。出発ブロモ安息香酸エステルが消費されたことがＴＬＣ分析によって判定されるまで（２〜３時間）、反応混合物を窒素下にて還流させた。次いで、反応混合物を水２５０ｍＬで希釈し、酢酸エチル（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、重炭酸ナトリウム飽和溶液（２×５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（Ｎａ2ＳＯ4）。溶媒を減圧下にて除去し、残留物をフラッシュシリカゲル（１００ｇ）でクロマトグラフィー処理した。ヘキサン中４０％酢酸エチルで要理して、生成物を固体または油状物として得た。
収量：
Ｂ２  −  ０.４５ｇ（３１％）；融点  −  １７０〜１７１℃。
Ｂ３  −  ０.６９ｇ（６２％）；油状物。
1H NMR(CDCl3)δ B2-3.94(s,3H, -COOCH3), 4.73(s,2H,-CH2-Ph), 7.475(d,2H,J= 5Hz), 7.6(d,2H,J=10 Hz), 7.65(d,2H,J=5Hz)and 8.09(d,2H,J=10 Hz)。
M.S.-m/e-243.0 [M+H]
B3-3.94(s,3H,-COOCH3), 4.76(s,2H,-CH2-Ph), 7.50(m,4H), 7.62(s,1H), 7.77(s,1H), 8.00(s,1H)and 8.27(s,1H)。
M.S.-m/e-243.2 [M+H]
【０３６０】
２．アジドメチルビフェニルカルボキシレート：
乾燥ジクロロメタン（１０ｍＬ）中の上記ビフェニルアルコール（２.０ｍｍｏｌ）を氷冷し、ジフェニルホスホリルアジド（２.２ｍｏｌ）およびＤＢＵ（２.０ｍｍｏｌ）で処理し、窒素下にて２４時間撹拌した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル（２×２５ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、逐次的に０.５Ｍクエン酸溶液（２×２５ｍＬ）、水（２×２５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（Ｎａ2ＳＯ4）。溶液を濾過し、減圧下にて蒸発させて、粗生成物を得た。ヘキサン／エーテルから４,４'−異性体を結晶化し、３,３'−異性体をイソプロピルエーテルと一緒にトリチュレートして、全ての不純物を除去した；生成物は、ＴＬＣ分析による判定で均質であり、さらなる精製は必要なかった。
収率：
４−アジドメチル−４−ビフェニルカルボン酸メチル  −  ０.２４５ｇ（４６％）；融点  −  １０６〜１０８℃。
４−アジドメチル−４−ビフェニルカルボン酸メチル  −  ０.３６ｇ（５９％、油状物）
1H NMR(CDCl3)δ  −4,4'-isomer-3.95(s,3H,-COOCH3), 4.41(s,2H,-CH2N3), 7.42(d,2H,J=5 Hz), 7.66(m,4H) and 8.11(d,2H,J=5 Hz)
3,3'-Isomer-3.94(s,3H,-COOCH3), 4.41(s,2H,-CH2N3), 7.26-7.6(m,5H), 7.76(d,1H,J=10 Hz), 8.02(d,1H,J=5 Hz) and 8.27(s,1H)。
【０３６１】
３．ビフェニルカルボン酸のメチルエステルの加水分解：
約４ｍｍｏｌのメチルエステルを２Ｍ水酸化リチウム溶液２０ｍＬで処理し、溶液が均一になるまで（２０〜２４時間）撹拌した。水性層をエーテル（２×５０ｍＬ）で抽出し、有機層を捨てた。次いで、水性層を０.５Ｍクエン酸で酸性化し、沈殿した固体を濾過し、乾燥させた。他の精製は必要ではなく、この酸を次工程で使用した。
収率：
４,４'−異性体  −  メチルエステル０.８７ｇから０.７５４ｇ酸を得た（８６.６％）；融点  −  ２０５〜２１０℃
３,３'−異性体  −  メチルエステル０.４８ｇから酸０.３４ｇを得た（６３.６％）；融点  −  １０２〜１０５℃。
1H NMR(DMSO-d6)δ :4,4'-isomer-4.52(s,2H,-CH2N3), 7.50(d,2H,J=5 Hz), 7.9(m,4H), and 8.03(d,2H,J=10 Hz)
3,3'-isomer-4.54(s,2H,-CH2N3), 7.4( d,1H,J=10 Hz), 7.5-7.7(m,4H), 7.92(ABq,2H)and 8.19(s,1H)。
【０３６２】
４．アジドのアミンへの還元：
これは固相上にて行われ、アミンは単離しなかった。標準的なペプチドカップリングプロトコールを使用して、樹脂に対してアジドカルボン酸を負荷した。洗浄後、アジドを含有する樹脂をＴＨＦ／水（９５：５）中にて２０当量のトリフェニルホスフィンと一緒に２４時間振盪した。窒素の陽圧下にて溶液を捨て、次いで、標準的な洗浄方法で洗浄した。得られたアミンを次のカップリングに使用した。
【０３６３】
５．(３β,５β,７α,１２α)−３−[{(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)アミノ]アセチル}アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸：
０℃にて撹拌したＦｍｏｃ−グリシン（４.０ｇ、１３.５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（８０ｍＬ）中溶液にトリブチルアミン（３.２ｍＬ；１３.５ｍｍｏｌ）を滴下した。次いで、クロロギ酸イソブチル（１.７ｍＬ；１３.５ｍｍｏｌ）を添加し、１０分後、冷却した溶液にトリブチルアミン（２.６ｍＬ；１１.２ｍｍｏｌ）および(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸（４.５ｇ；１１.２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（８０ｍＬ）中懸濁液を１時間にわたって滴下した。混合物を周囲温度に加温し、６時間後、溶液を１２０ｍＬに濃縮し、次いで、水（１８０ｍＬ）および１Ｎ  ＨＣｌ（３０ｍＬ）を添加した（最終ｐＨ１.５）。沈殿した固体を濾過し、水（２×１００ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させ、フラッシュクロマトグラフィーによって精製した。クロロホルム／メタノール（８：２）で溶離して、生成物を無色の固体として得た。
収率：１.９ｇ（２５％）。ＴＬＣ：Ｒf０.３０（ＣＨＣｌ3／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ  ６：３：１）。
【０３６４】
化合物のインビトロおよびインビボ試験
実施例ＸＬＩＩＩ：ＰＣ−３細胞株におけるＧＲＰ受容体のインビトロ結合アッセイ−図１４Ａ−Ｂ
有望なリード化合物を同定するために、ＧＲＰ−Ｒに対して高親和性をもつ化合物を同定するインビトロアッセイを使用した。ヒト前立腺癌由来のＰＣ３細胞株は、細胞表面上でＧＲＰ−Ｒの高発現を示すことが知られているので、９６ウェルプレートフォーマットにおける放射性リガンド結合アッセイを展開し、125Ｉ−ＢＢＮのＧＲＰ−Ｒ陽性ＰＣ３細胞への結合およびこの結合を阻害する本発明の化合物の能力を測定するために使用した。ＲＰ５２７リガンド、ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ａｏｃ−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（対照）、およびＧＲＰ−Ｒの125Ｉ−ＢＢＮへの結合を阻害する本発明の化合物のＩＣ50を測定するために、このアッセイを使用した。（ＲＰ５２７＝Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−５−アミノペンタン酸−ＢＢＮ（７−１４）、配列番号１）、ＭＳ＝１４４２.６、ＩＣ50  −  ０.８４）。Van de Wiele C, Dumont F et al., Technetium-99m RP527, a GRP analogue for visualization of GRP receptor-expressing malignancies:a feasibility study. Eur.J.Nucl.Med., (2000)27;1694-1699.；ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ａｏｃ−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は、ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノ−オクタン酸−ＢＢＮ（７−１４）（配列番号１）とも称され、ＭＳ＝１４６７.０を有する。ＤＯ３Ａモノアミド−アミノオクタニル−ＢＢＮ[７−１４]
【０３６５】
放射性リガンド結合プレートアッセイは、ＢＢＮおよびＢＢＮアナログ（市販のＢＢＮおよびＬ１を包含する）について、放射性リガンドとして99mＴｃ  ＲＰ５２７を使用して、行われた。
【０３６６】
Ａ．材料および方法：
１．細胞培養：
ＰＣ３（ヒト前立腺癌細胞株）をAmerican Type Culture Collectionから入手し、組織培養フラスコ（Corning）中にてＲＰＭＩ  １６４０（ＡＴＣＣ）中で培養した。この成長培地に１０％熱不活化ＦＢＳ（Hyclone、ＳＨ３００７０.０３）、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（GibcoBRL、１５６３０−０８０）、および最終濃度のペニシリン−ストレプトマイシン（１００ユニット／ｍＬ）のための抗菌／抗真菌（ＧｉｂｃｏＢＲＬ、１５２４０−０６２）、およびファンギゾン（０.２５μｇ／ｍＬ）を添加した。全ての培養を３７℃で５％ＣＯ2／９５％空気を含有する湿雰囲気中に維持し、０.０５％トリプシン／ＥＤＴＡ（ＧｉｂｃｏＢＲＬ ２５３００−０５４）を使用してルーチン的に継代させた。被験細胞を９６ウェル白色／透明底マイクロタイタープレート（Ｆａｌｃｏｎ  Ｏｐｔｉｌｕｘ−Ｉ）または９６ウェル黒色／透明コラーゲンＩセルウェアプレート（Beckton Dickinson Biocoat）中にて２.０×１０4／ウェルの濃度でプレーティングした。プレーティングの１日後または２日後に結合研究のためにプレートを使用した。
【０３６７】
２．結合バッファー：
ＲＰＭＩ  １６４０（ＡＴＣＣ）に２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、０.１％ＢＳＡ（ｗ／ｖ）、０.５ｍＭ  ＰＭＳＦ（ＡＥＢＳＦ）、バシトラシン（５０ｍｇ／５００ｍｌ）、ｐＨ７.４を添加した。125Ｉ−ＢＢＮ（無担体、２２００Ｃｉ／ｍｍｏｌ）をPerkin-Elmerから入手した。
【０３６８】
Ｂ．ＰＣ３細胞におけるＧＲＰ−Ｒについて125Ｉ−ＢＢＮとの競合アッセイ：
ヒトＧＲＰ−Ｒへの125Ｉ−ＢＢＮの結合を阻害することができる種々の本発明の化合物のＩＣ50を決定するために９６ウェルプレートアッセイを使用した。以下の一般的な方法に従った：
【０３６９】
試験する全ての化合物を結合バッファーに溶解し、結合バッファーで適当な希釈を行った。アッセイのためのＰＣ３細胞（ヒト前立腺癌細胞株）を９６ウェル白色／透明底マイクロタイタープレート（Ｆａｌｃｏｎ  Ｏｐｔｉｌｕｘ−Ｉ）または９６ウェル黒色／透明コラーゲンＩセルウェアプレート（Beckton Dickinson Biocoat）中にて２.０×１０4／ウェルの濃度でプレーティングした。プレーティングの１日後または２日後に結合研究のためにプレートを使用した。アッセイ前にプレートの培養密度（集密度＞９０％）をチェックした。アッセイのために、ＲＰ５２７またはＤＯ３Ａ−モノアミド−Ａｏｃ−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2リガンド、（対照）、または本発明の化合物を１.２５×１０-9Ｍ〜５×１０-9Ｍの範囲の濃度で125Ｉ−ＢＢＮ（２５,０００ｃｐｍ／ウェル）と一緒に共インキュベートした。これらの研究はウェルあたり７５μｌのアッセイ容量で行った。データポイントごとに３つのウェルを使用した。適当な溶液の添加後、、プレートを４℃で１時間インキュベートしてリガンド−受容体複合体の内部移行を防止した。氷冷インキュベーションバッファー２００μｌの添加によってインキュベーションを終わらせた。プレートを５回洗浄し、ブロット乾燥させた。ＬＫＢ  ＣｏｍｐｕＧａｍｍａカウンターまたはマイクロプレートシンチレーションカウンターを使用して放射能を検出した。
【０３７０】
ＲＰ５２７（対照）およびＬ７０、本発明の化合物についての競合結合曲線は、図１４Ａ−Ｂに見ることができる。これらのデータは、ＲＰ５２７対照についてのＩＣ50が２.５ｎＭであり、Ｌ７０、本発明の化合物が５ｎＭであることを示している。ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ａｏｃ−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2対照のＩＣ50は５ｎＭであった。試験したこれらの本発明の化合物のＩＣ50値は、上記表１〜３に見ることができ、それらが対照のものに匹敵し、かくして、インビボでの受容体担持細胞による取り込みを可能にするのに十分な受容体に対する親和性を有することが予想されることを示している。
【０３７１】
Ｃ．内部移行および流出アッセイ：
これらの研究は、９６ウェルプレート中にて行われた。洗浄して血清タンパク質を除去した後、ＰＣ３細胞を125Ｉ−ＢＢＮ、177Ｌｕ−ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ａｏｃ−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2または本発明の放射性標識化合物と一緒に３７℃で４０分間インキュベートした。氷冷結合バッファー２００μｌの添加によってインキュベーションを停止させた。プレートを結合バッファーで２回洗浄した。表面結合放射性リガンドを除去するために、細胞を０.２Ｍ酢酸（生理食塩水中、ｐＨ２.８）と一緒に２分間インキュベートした。プレートを遠心分離し、酸洗浄媒体を回収して内部移行しなかった放射能の量を測定した。細胞を回収して、内部移行した125Ｉ−ＢＢＮの量を測定し、全ての試料をガンマカウンターで分析した。内部移行アッセイのデータを、様々な時点で得られたカウントを最終時点（Ｔ＝４０分）で得られたカウントと比較することによって正規化した。
【０３７２】
流出研究のために、ＰＣ３細胞を125Ｉ−ＢＢＮまたは本発明の放射性標識化合物と一緒に３７℃で４０分間負荷した後、未結合物質を濾過し、内部移行の％を上記のように測定した。次いで、細胞を結合バッファーに３７℃で最長３時間再懸濁した。０.５時間目、１時間目、２時間目または３時間目に、初期負荷レベルと相対的な内部移行したままの量を上記のように測定し、表９に記載した流出パーセントを算出するために使用した。
【０３７３】
【表１４】
2011520971.tif 000048
これらのデータは、本発明の化合物が対照と同程度にＰＣ３細胞によって内部移行され保持されることを示している。
【０３７４】
実施例ＸＬＩＶ  −  Ｔｃ標識ＧＲＰ化合物の製造
表１０において同定される本発明の化合物のペプチド溶液を０.１％ＴＦＡ水溶液中１ｍｇ／ｍＬの濃度で製造した。１Ｎ  ＨＣｌにＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏ（２０ｍｇ／ｍＬ）を溶解させて塩化スズ溶液を製造した。水にグルコン酸ナトリウム１３ｍｇを溶解して製造したグルコン酸ナトリウム溶液にＳｎＣｌ2溶液のアリコート（１０μＬ）を添加して、１００μＬあたりＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏ  ２０μｇを含有するグルコン酸スズ溶液を製造した。水１ｍＬにＨＰ−γ−ＣＤ  ５０ｍｇを溶解して、ヒドロキシプロピルガンマシクロデキストリン［ＨＰ−γ−ＣＤ］溶液を製造した。
【０３７５】
非標識化合物（２０μｇ）の溶液２０μＬ、ＨＰ−γ−ＣＤ溶液５０μＬ、Ｓｎ−グルコネート溶液１００μＬおよび99mＴｃ過テクネチウム酸（５〜８ｍＣｉ、Syncor）２０〜５０μＬを混合することによって以下に同定される99mＴｃ標識化合物を製造した。最終容量は約２００μＬであり、最終ｐＨは４.５〜５であった。反応混合物を１００℃で１５〜２０分間加熱し、次いで、逆相ＨＰＬＣによって分析して、放射化学的純度（ＲＣＰ）を決定した。ＨＰＬＣによって所望の生成物ピークを単離し、５ｍｇ／ｍＬのアスコルビン酸、１６ｍｇ／ｍＬのＨＰ−γ−ＣＤおよび５０ｍＭのリン酸塩バッファー（ｐＨ４.５）を含有する安定化バッファー中に回収し、スピードバキュームを使用して濃縮して、アセトニトリルを除去した。分析および精製に使用したＨＰＬＣシステムは、以下のとおりである：Ｃ１８  Ｖｙｄａｃカラム、４.６×２５０ｍｍ、水性相：水中０.１％ＴＦＡ、有機相：アセトニトリル中０.０８５％ＴＦＡ。流速：１ｍＬ／分。個々のペプチドの性質に依存して、２０％〜２５％アセトニトリル／０.０８５％ＴＦＡでの定組成溶離を使用した。
【０３７６】
標識結果を表１０に示す。
【０３７７】
【表１５】
2011520971.tif 000049
【０３７８】
n.d.＝検出していない
１：全ての化合物をＮ,Ｎ'−ジメチルグリシル−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ金属キレート剤と結合させた。該リガンドのＡｃｍ保護形態を使用した。したがって、Ｌ２の99mＴｃ錯体を製造するのに使用したリガンドは、Ｎ,Ｎ'−ジメチルグリシル−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−ＲＪＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2であった。Ｔｃとのキレート形成の間にＡｃｍ基を除去した。
２：配列において、「Ｊ」は、８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸を表し、「ａ」はＤ−アラニンを表す。
３：初期ＲＣＰ測定は、加熱の直後であってＨＰＬＣ精製前に行った。
４：ＲＣＰは、ＨＰＬＣ単離およびスピードバキュームによるアセトニトリル除去後に測定した。
【０３７９】
実施例ＸＬＶ  −  細胞結合のための177Ｌｕ−Ｌ６４の調製および体内分布研究：
０.０５Ｎ  ＨＣｌ（ＭＵＲＲ）中にてＬ６４リガンド１０μｇ（水中１ｍｇ／ｍＬ溶液１０μＬ）、酢酸アンモニウムバッファー（０.２Ｍ、ｐＨ５.２）１００μＬおよび約１〜２ｍＣｉの177ＬｕＣｌ3を９０℃で１５分間インキュベートすることによって、この化合物を合成した。水中１％Ｎａ2ＥＤＴＡ・２Ｈ2Ｏ（Aldrich）溶液２０μＬを添加して遊離177Ｌｕを除去した。得られた放射化学的純度（ＲＣＰ）は約９５％であった。３０分間にわたる６８％Ａ／３２％Ｂ〜６６％Ａ／３４％Ｂの勾配液を用いてカラム温度３０℃および流速１ｍＬ／分でＹＭＣ  Ｂａｓｉｃ  Ｃ８カラム［４.６×１５０ｍｍ］を使用するＨＰＬＣによって、放射性標識生成物を非標識リガンドおよび他の不純物から分取した（ここで、Ａはシトレートバッファー（０.０２Ｍ、ｐＨ３.０）であり、Ｂは８０％ＣＨ3ＣＮ／２０％ＣＨ3ＯＨである）。単離した化合物は、ＲＣＰ約１００％およびＨＰＬＣ保持時間２３.４分を有していた。
【０３８０】
所望のＨＰＬＣピークをシトレートバッファー（０.０５Ｍ、ｐＨ５.３、１％アスコルビン酸および０.１％ＨＳＡを含有する）１０００μＬ中に回収することによって、体内分布および細胞結合研究のための試料を調製した。３０分間の遠心分離式濃縮によって、回収した溶出液中の有機溶離液を除去した。細胞結合研究については、インビトロ研究の３０分以内に精製試料を細胞結合培地で１.５μＣｉ／ｍＬの濃度まで希釈した。体内分布研究について、インビボ研究の３０分以内に試料をシトレートバッファー（０.０５Ｍ、ｐＨ５.３、１％アスコルビン酸ナトリウムおよび０.１％ＨＳＡを含有する）で最終濃度５０μＣｉ／ｍＬまで希釈した。
【０３８１】
実施例ＸＬＶＩ  −  放射線療法研究のための177Ｌｕ−Ｌ６４の調製：
０.０５Ｎ  ＨＣｌ（ＭＵＲＲ）中にてＬ６４リガンド７０μｇ（水中１ｍｇ／ｍＬ溶液７０μＬ）、酢酸アンモニウムバッファー（０.２Ｍ、ｐＨ５.２）２００μＬおよび約３０〜４０ｍＣｉの177ＬｕＣｌ3を８５℃で１０分間インキュベートすることによって、この化合物を合成した。室温に冷却した後、水中２％Ｎａ2ＥＤＴＡ・２Ｈ2Ｏ（Aldrich）溶液２０μＬの添加によって、遊離177Ｌｕを除去した。得られた放射化学的純度（ＲＣＰ）は約９５％であった。水、５０％アセトニトリル／水、次いで、１ｇ／Ｌ酢酸アンモニウム水溶液で流速１ｍＬ／分で逐次溶離する３００ＶＨＰ  Ａｎｉｏｎ  Ｅｘｃｈａｎｇｅカラム（７.５×５０ｍｍ）（Vydac）を使用するＨＰＬＶによって、放射性標識生成物を非標識リガンドおよび他の不純物から分離した。所望の化合物を５０％ＣＨ3ＣＮによってカラムから溶出させ、５％アスコルビン酸、０.２％ＨＳＡおよび０.９％（ｖ：ｖ）ベンジルアルコールを含有するシトレートバッファー（０.０５Ｍ、ｐＨ５.３）約１ｍＬと混合した。４０分間のスピンバキューによって単離フラクションの有機部分を除去し、インビボ研究の３０分以内に５％アスコルビン酸、０.２％ＨＳＡおよび０.９％（ｖ：ｖ）ベンジルアルコールを含有するシトレートバッファー（０.０５Ｍ、ｐＨ５.３）を使用して濃縮溶液（約２０〜２５ｍＣｉ）を７.５ｍＣｉ／ｍＬの濃度に調整した。得られた化合物は、＞９５％のＲＣＰを有していた。
【０３８２】
実施例ＸＬＶＩＩ  −  111Ｉｎ−Ｌ６４の調製：
０.０５Ｎ  ＨＣｌ（８０μＬ）および酢酸ナトリウムバッファー（０.５Ｍ、ｐＨ４.５）１５５μＬ中にてＬ６４リガンド１０μｇ（０.０１Ｎ  ＨＣｌ中２ｍｇ／ｍＬ溶液５μＬ）、エタノール６０μＬ、１.１２ｍＣｉの111ＩｎＣｌ3を８５℃で３０分間インキュベートすることによって、この化合物を合成した。水中２％Ｎａ2ＥＤＴＡ・２Ｈ2Ｏ（Aldrich）溶液２０μＬの添加によって、遊離111Ｉｎを除去した。得られた放射化学的純度（ＲＣＰ）は８７％であった。２０分間にわたる７５％Ａ／２５％Ｂ〜６５％Ａ／３５％Ｂの勾配液を用いてカラム温度５０℃および流速１.５ｍＬ／分でＶｙｄａｃ  Ｃ１８カラム［４.６×２５０ｍｍ］を使用するＨＰＬＣによって、放射性標識生成物を非標識リガンドおよび他の不純物から分離した（ここで、Ａは水中０.１％ＴＦＡであり、Ｂはアセトニトリル中０.０８５％ＴＦＡである）。このシステムについて、111Ｉｎ−Ｌ６４の保持時間は１５.７分である。単離した化合物はＲＣＰ  ９６.７％を有した。
【０３８３】
実施例ＸＬＶＩＩＩ  −  177Ｌｕ−ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ａｏｃ−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（対照）の調製
０.０１Ｎ  ＨＣｌにＤＯ３Ａ−モノアミド−Ａｏｃ−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2リガンド（米国特許出願公開第２００２／００５４８５５号および国際公開第０２／８７６３７号（どちらも出典明示により本明細書の一部を構成する）に記載に従って調製した）を１ｍｇ／ｍＬの濃度出よう開することによって、ペプチドの貯蔵溶液を調製した。以下に示した順序で下記試薬を混合することによって、177Ｌｕ−ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ａｏｃ−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2を調製した。
【表１６】
2011520971.tif 000050
【０３８４】
反応混合物を８５℃で１０分間インキュベートした。水浴中にて室温に冷却した後、１％ＥＤＴＡ溶液２０μＬおよびＥｔＯＨ  ２０μｌを添加した。２０分間にわたって２１〜２５％Ｂの勾配液で流速１ｍＬ／分で溶離するＣ１８カラム（ＶＹＤＡＣ  Ｃａｔ  ＃  ２１８ＴＰ５４）を使用してＨＰＬＣにより化合物を分析した（ここで、Ａは０.１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏであり、Ｂは０.１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮである）。177Ｌｕ−−ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ａｏｃ−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は収率９７.１％（ＲＣＰ）で得られ、この系において約１６分間の保持時間を有していた。
【０３８５】
実施例ＸＬＩＸ  −  177Ｌｕ−Ｌ６３の調製
177Ｌｕ−ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ａｏｃ−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2はＢＢＮ(７−１４)配列（配列番号１）である）についての記載に従ってこの化合物を調製した。２０分間にわたって３０〜３４％Ｂの勾配液で流速１ｍＬ／分で溶離するＣ１８カラム（ＶＹＤＡＣ  Ｃａｔ  ＃  ２１８ＴＰ５４）を使用してＨＰＬＣにより該化合物を分析した（ここで、溶媒Ａは０.１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏであり、Ｂは０.１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮである）。形成された177Ｌｕ−Ｌ６３は９７.８％のＲＣＰおよびこの系において約１４.２分間の保持時間を有していた。
【０３８６】
実施例Ｌ  −  細胞結合および体内分布研究のための177Ｌｕ−Ｌ７０の調製：
Ｌ７０（実施例ＩＩのリガンド）を代わりに使用した以外は上記方法に従ってこの化合物を調製した。４０分間にわたる８０％Ａ／２０％Ｂ〜７５％Ａ／２５％Ｂの勾配液を用いてＹＭＣ  Ｂａｓｉｃ  Ｃ８カラム（４.６×１５０ｍｍ）、カラム温度３０℃および流速１ｍＬ／分を使用して精製を行った（ここで、Ａはシトレートバッファー（０.０２Ｍ、ｐＨ４.５）であり、Ｂは８０％ＣＨ3ＣＮ／２０％ＣＨ3ＯＨである）。単離した化合物は、約１００％のＲＣＰおよび２５.４分間のを有していた。
【０３８７】
実施例ＬＩ  −  放射線療法研究のための177Ｌｕ−Ｌ７０の調製：
Ｌ６４についての上記した方法に従ってこの化合物を調製した。
【０３８８】
実施例ＬＩＩ  −  細胞結合および体内分布研究のための111Ｉｎ−Ｌ７０の調製：
０.０５Ｎ  ＨＣｌ（６１μＬ、Mallinckrodt）および生理食塩水５０μＬ中でＬ７０リガンド１０μｇ（０.０１Ｎ  ＨＣｌ中１ｍｇ／ｍＬ溶液１０μＬ）、酢酸アンモニウムバッファー（０.２Ｍ、ｐＨ５.３）１８０μＬ、１.１ｍＣｉの111ＩｎＣｌ3を８５℃で３０分間インキュベートすることによって、この化合物を合成した。水中１％Ｎａ2ＥＤＴＡ・２Ｈ2Ｏ（Aldrich）溶液２０μＬを添加することによって、遊離111Ｉｎを除去した。得られた放射化学的純度（ＲＣＰ）は８６％であった。カラム温度３０℃および流速１ｍＬ／分で下記表に記載の勾配液を用いてＶｙｄａｃ強陰イオン交換樹脂カラム［７.５×５０ｍｍ］と連結したＷａｔｅｒｓ  ＸＴｅｒｒａ  Ｃ１８カートリッジを使用してＨＰＬＣにより放射性標識生成物を非標識リガンドおよび他の不純物から分離した（ここで、Ａは水中０.１ｍＭ  ＮａＯＨ、ｐＨ１０.０であり、Ｂは水中１ｇ／Ｌ酢酸アンモニウム、ｐＨ６.７であり、Ｃはアセトニトリルである）。この系について、111Ｉｎ−Ｌ７０の保持時間は５分間であるが、Ｌ７０リガンドの保持時間は２７〜２８分である。単離した化合物は、９６％のＲＣＰを有していた。
【０３８９】
【表１７】
2011520971.tif 000051
【０３９０】
所望のＨＰＬＣピークをシトレートバッファー（０.０５Ｍ、ｐＨ５.３、５％アスコルビン酸、１ｍｇ／ｍＬのＬ−メチオニンおよび０.２％ＨＳＡを含有する）５００μＬ中に回収することによって、体内分布および細胞結合研究のための試料を調製した。３０分間のスピンバキュームによって回収物の有機部分を除去した。細胞結合研究については、インビトロ研究の３０分以内に、精製した濃縮試料を使用した。体内分布研究については、インビボ研究の３０分以内に、シトレートバッファー（０.０５Ｍ、ｐＨ５.３、５％アスコルビン酸ナトリウムおよび０.２％ＨＳＡを含有する）によって試料を１０μＣｉ／ｍＬの最終濃度に希釈した。
【０３９１】
実施例ＬＩＩＩ  −  インビボ薬物動態研究
Ａ．トレーサー量体内分布：
異種移植ＰＣ３腫瘍担持ヌードマウス（［Ｎｃｒ］−Ｆｏｘｎ１＜ｎｕ＞）において以下において同定される本発明の化合物を使用して低用量の薬物動態研究（例えば、体内分布研究）を行った。すべての研究において、マウスに２００μＣｉ／ｋｇの177Ｌｕ標識試験化合物１００μＬを、グループ（ｎ＝３〜４）あたり１および２４時間の滞留時間をもって静脈内投与した。適当なスタンダートにおいてＬＫＢ  １２８２  ＣｏｍｐｕＧａｍｍａカウンターで組織を分析した。
【０３９２】
【表１８】
2011520971.tif 000052
【０３９３】
Ｌ６４およびＬ７０注射後の血液、肝臓および腎臓における放射能の分布は、対照化合物、ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ａｏｃ−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2はＢＢＮ(７−１４)配列（配列番号１）である）のものと類似しており、腫瘍における取り込み量は、Ｌ６４およびＬ７０のどちらも１時間および２４時間目で非常に高い。Ｌ６３もまた、高い腫瘍取り込み量を示しているが、初期の血液および肝臓の値が高い。ＧＲＰ受容体を有することが知られている正常な器官であるマウスの膵臓における取り込み量は、Ｌ６４、Ｌ７０およびＬ６３は、対照化合物ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ａｏｃ−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2はＢＢＮ(７−１４)配列（配列番号１）である）と比べて非常に高い。
【０３９４】
Ｂ．腫瘍および正常組織におけるＬ７０のペプチド用量の効果
ヒトＰＣ−３ヌードマウスモデル（Ｔａｃ：Ｃｒ：（ＮＣｒ）−Ｆｏｘ１ｎｕ）において以下の体内分布研究を行った。
【０３９５】
下記表に記載したペプチド質量を達成するのに十分なＬ７０リガンドを添加した177Ｌｕ−Ｌ７０の適当な溶液（０.１ｍＬ）をマウスに尾部静脈内投与した。与えられた177Ｌｕ−Ｌ７０の放射線量は１０〜７５０μＣｉであった。
【０３９６】
全て研究の課題をレジデンスインターバルの最後に終了し、器官および組織を回収した。ガンマカウンターで放射能をアッセイした。データは、組織１ｇあたりの全投与放射能のパーセンテージで表される（％ＩＤ／ｇ）。
【表１９−１】
2011520971.tif 000053
【表１９−２】
2011520971.tif 000054
【０３９７】
該データは、ＧＲＰ受容体を発現することが知られているマウスにおけるこれらの正常な器官（例えば、膵臓および消化管）は予測される用量効果（すなわち、用量の増加を伴う放射能取り込み量の低下）を示しているが、腫瘍はマス用量が増加した場合には意外にも飽和に対して抵抗することを示している。
【０３９８】
放射性物質の投与前にＬ７０リガンドを投与することによって同様の効果を得ることができる。この研究では、ヒトＰＣ−３ヌードマウスモデル（Ｔａｃ：Ｃｒ：（ＮＣｒ）−Ｆｏｘ１ｎｕ）において体内分布研究を行った（ここで、該動物は、177Ｌｕ−Ｌ７０の静脈内投与の５分前、１５分前または６０分前にＬ７０リガンド（０.６４μｇ）またはバッファー対照の静脈注射１回により前処理した）；マウス１ｋｇあたりペプチド用量０.１μｇ。177Ｌｕ−Ｌ７０の投与の１時間後に動物を屠殺し、組織をカウントして、Ｌ７０での前処理が体内分布に効果をもたらすか決定した。
【表２０】
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【０３９９】
上記のように、177Ｌｕ−Ｌ７０投与の５分前または１５分前にＬ７０で前処理した動物においては、膵臓における放射能の量の有意な減少が見られたが、全てのＬ７０前処理グループ（５分、１５分および６０分）では消化管の放射能の減少が見られた。腎効果は、一過性であり、５分前処理グループにおける対照と有意に異なるだけであった；しかし、尿分泌の差は、Ｌ７０投与の６０分後まで持続された。結果は、標的腫瘍がＬ７０による前処理による影響を受けず、全ての前処理条件下での177Ｌｕ−Ｌ７０の取り込みを示したことを示している。合わせると、これらの結果は、本発明の化合物との前投与または同時投与の有益な効果を示している。
【０４００】
実施例ＬＩＶ−受容体サブタイプ特異性
現在、ＧＲＰ受容体ファミリーの４つの哺乳類メンバーが知られている：ＧＲＰ選択的受容体（ＧＲＰ−Ｒ）、ニューロメジンＢ選択的受容体（ＮＭＢ−Ｒ）、ボンベシン受容体サブタイプ３（ＢＢ３−Ｒ）およびボンベシン受容体サブタイプ４（ＢＢ４−Ｒ）。１７７Ｌｕ−Ｌ７０の受容体サブタイプ特異性を調査した。結果は、１７７Ｌｕ−Ｌ７０がＧＲＰ−ＲおよびＮＭＢ−Ｒに特異的に結合し、ＢＢ３−Ｒに対してはほとんどアフィニティーを有しないことを示す。
【０４０１】
Ｌ７０のルテチウム複合体（本明細書では、177Ｌｕ−Ｌ７０）（supraに記載のとおりに調製）のサブタイプ特異性は、Reubiら、“Bombesin Receptor Subtypes in Human Cancers：Detection with the Universal Radioligand 125I-[D-Tyr6, beta-Ala, Phe13, Nle14]”, Clin. Cancer Res. 8:1139-1146(2002)に記載の製法およびＧＲＰ受容体の１のサブタイプのみを発現することが既に見出されていた組織サンプル、ならびに正常な膵臓および結腸を含む非腫瘍組織、ならびに慢性膵炎を用いてインビトロ受容体オートラジオグラフィーによって決定された（以下の表１２ａに示される）。ヒト回腸カルチノイド組織は、ＮＭＢ−Ｒ、ＧＲＰ−Ｒのヒト前立腺癌およびＢＢ３−Ｒサブタイプ受容体のヒト気管支カルチノイドの起源として用いられた。比較のために、受容体オートラジオグラフィーはまた、隣接組織切片上の、３種のサブセットすべてのＧＲＰ−Ｒに結合する、他のボンベシン放射性リガンド、例えば、１２５Ｉ−Ｔｙｒ４−ボンベシンまたはユニバーサルリガンド（Universal ligand）として周知の化合物、１２５Ｉ−［ＤＴｙｒ６，βＡｌａ，Ｐｈｅ１３，Ｎｌｅ１４］−ＢＢＮ（６−１４）で行われた。さらなる議論のために、Fleischmannら、“Bombesin Receptors in Distinct Tissue Compartments of Human Pancreatic Diseases,” Lab. Invest. 80:1807-1817(2000);Markwalderら, “Gastrin-Releasing Peptide Receptors in the Human Prostate:Relation to Neoplastic Transformation,” Cancer Res. 59:1152-1159(1999);Guggerら, “GRP Receptors in Non-Neoplastic and Neoplastic Human Breast,” Am. J. Pathol. 155:2067-2076(1999)を参照のこと。
【０４０２】
【表２１】
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【０４０３】
表１２ａから分かるように、すべてのＧＲＰ−Ｒ発現腫瘍、例えば、前立腺癌、乳癌、および腎細胞癌はまた、それ自体は既存の放射性リガンドで同定されたものであり、インビトロにおいて１７７Ｌｕ−Ｌ７０で視覚化された。よりよい感受性によって、低レベルのＧＲＰ−Ｒを有する選択された腫瘍は、表１２ａに示されるように、１７７Ｌｕ−Ｌ７０で同定されうるが、１２５Ｉ−Ｔｙｒ４−ＢＢＮでは同定され得ない。既存の放射性リガンドで同定されたすべてのＮＭＢ−Ｒ発現腫瘍はまた、１７７Ｌｕ−Ｌ７０で視覚化された。逆に、ＢＢ３腫瘍は、１７７Ｌｕ−Ｌ７０で検出されなかった。 試験ケースは多数のケースにおいて受容体陽性として選択されたので、ごくわずかな選択された陰性対照で、表１２aに列挙された種々の腫瘍における自然の受容体発現率について結論を出すべきではない。正常なヒト膵臓は177Ｌｕ−Ｌ７０で標識されない、一方、マウス膵臓は同一条件下で強く標識される。正常な膵臓は非常に急激に分解可能な組織であって、受容体を含むタンパク質の分解を完全に除去することはできないが、ヒト膵臓データが実際に否定的であることを示唆する因子には、同様の条件下でマウス膵臓の陽性対照および検査されたヒト膵臓の質に対して陽性対照を示す、各ヒト膵臓の膵島にて見出される強く標識されたＢＢ３が含まれる。さらに、病理学的に変化する膵臓組織（慢性膵炎）におけるＧＲＰ−Ｒの検出は、ＧＲＰ−Ｒが、存在する場合に、該組織において選択された実験条件下で同定されうることを示す。実際に、１７７Ｌｕ−Ｌ７０は、１２５Ｉ−Ｔｙｒ４−ＢＢＮより大きな感受性を有する慢性膵炎におけるこれらのＧＲＰ−Ｒを同定する。膵癌は測定可能な量のＧＲＰ−Ｒを有していなかったが、数個の結腸癌は、１７７Ｌｕ−Ｌ７０で測定された低密度の不均一に分布したＧＲＰ受容体を示した（表１２ａ）。結腸の平滑筋がＧＲＰ−Ｒを発現し、インビトロにおいて１７７Ｌｕ−Ｌ７０でならびに既存のボンベシンリガンドで検出されたことにさらに留意すべきである。
【０４０４】
【表２２】
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【０４０５】
表１２ｂに示されるように、完全に標識された１７５Ｌｕ−Ｌ７０は、ヒト組織において発現されるヒトＧＲＰおよびＮＭＢ受容体に対して非常に高いアフィニティーを有していたが、ＢＢ３受容体に対しては低いアフィニティーのみを有していた。これらの実験は、放射性トレーサーとして１２５Ｉ−［ＤＴｙｒ６，βＡｌａ１１，Ｐｈｅ１３，Ｎｌｅ１４］−ＢＢＮ（６−１４）を用いた。１７７Ｌｕ標識Ｌ７０を放射性トレーサーとして用いて、これによって上記のデータを確認し、拡大する。すべてのＧＲＰ−Ｒ発現ヒト癌は、１７７Ｌｕ−Ｌ７０で非常に強く標識された。すべてのＮＭＢ−Ｒ陽性腫瘍についても同様である。逆に、ＢＢ３を有する腫瘍は視覚化されなかった。１７７Ｌｕ−Ｌ７０の感受性は、１２５Ｉ−Ｔｙｒ４−ＢＢＮまたは１２５Ｉ−標識ユニバーサルボンベシンアナログのものよりよく見える。そのため、低密度のＧＲＰ−Ｒを発現する数個の腫瘍は、１７７Ｌｕ−Ｌ７０で容易に同定されうると同時に、それらは１２５Ｉ−Ｔｙｒ４−ＢＢＮに対し陽性ではない。１７７Ｌｕ−Ｌ７０の結合特性はまた、非腫瘍性組織において確認されうる。対照としてのマウス膵臓は、非常に高密度のＧＲＰ−Ｒを発現することが示されていたが、正常なヒト膵腺房はＧＲＰ−Ｒを欠乏していた。しかしながら、慢性膵炎の状態において、ＧＲＰ−Ｒは、Fleischmannら, “Bombesin Receptors in Distinct Tissue Compartments of Human Pancreatic Diseases”, Lab. Invest. 80:1807-1817(2000)において既に報告されるように、腺房および１２５Ｉ−Ｔｙｒ４−ＢＢＮを用いるより１７７Ｌｕ−Ｌ７０を用いることによってよりよい感受性を再度有する、組織において同定されうる。逆に、ＢＢ３発現膵島は、１７７Ｌｕ−Ｌ７０で検出されなかったが、それらは、Fleischmannら, “Bombesin Receptors in Distinct Tissue Compartments of Human Pancreatic Diseases”, Lab. Invest. 80:1807-1817(2000)に既に報告されるように、ユニバーサルリガンドで強く標識された。少数の結腸癌は、通常非常に低密度でかつ不均一に分布された、ＧＲＰ−Ｒを有していたが、正常な結腸平滑筋は、高密度のＧＲＰ−Ｒを発現した。
【０４０６】
表１２aおよび１２ｂの結果は、Ｌｕ標識Ｌ７０誘導体が、主にＧＲＰ−Ｒを発現する、ヒト前立腺癌に十分に結合することを期待することを示す。それらはまた、Ｌｕ標識Ｌ７０誘導体が正常なヒト膵臓（主にＢＢ３−Ｒ受容体を発現する）にまたは主にＢＢ３−Ｒ受容体サブタイプを発現する癌に十分に結合することが記載されないことを示す。
【０４０７】
実施例ＬＶ−放射線療法試験
Ａ．有効性試験：
放射線療法試験は、ＰＣ３担癌ヌードマウスモデルを用いて行われた。短期有効性試験において、本発明の１７７Ｌｕ標識化合物Ｌ６４、Ｌ７０、Ｌ６３および処置対照化合物ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ａｏｃ−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ２は、未処置対照群と比較した。（最大３０日間、各処置群についてｎ＝１２、最大３１日間、プール未処置対照群についてｎ＝３６）。すべての有効性試験について、マウスは、滅菌条件下で３０ｍＣｉ／ｋｇにて１００μＬの本発明の１７７Ｌｕ標識化合物が静脈内または皮下投与された。対象を、試験期間中バリアフリー環境中で飼育した。体重および腫瘍の大きさ（キャリパー測定による）を、試験期間中１週間に３回、各対象について収集した。早期中止の基準には、死亡；全体重（ＴＢＷ）の２０％以上の減少；２ｃｍ３以上の腫瘍サイズが含まれていた。短期有効性試験の結果は、図１５Ａに示される。これらの結果は、Ｌ７０、Ｌ６４またはＬ６３で処置された動物が、未処置の対照動物および同量のＤＯ３Ａ−モノアミド−Ａｏｃ−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ２対照が投与された動物より生存率が増大したことを示す。
【０４０８】
長期有効性試験は、前記と同量を用いてＬ６４およびＬ７０で行われたが、化合物ごとに多量の動物（ｎ＝４６）用い、最大１２０日間それらを続けた。長期有効性試験の結果は、図１５Ｂに示される。前記と同一の対照と比較すると（ｎ＝３６）、Ｌ６４およびＬ７０の両方の処置は、統計的には相互に異なっていなかった（ｐ＜０．０６７）が、Ｌ６４よりよいＬ７０で生存率が有意に増大した（ｐ＜０．０００１）。
【０４０９】
実施例ＬＶＩ
セグメントカップリングを用いるＬ６４およびＬ７０の別の調製法
化合物Ｌ６４およびＬ７０は、Ａ−Ｄで一般的に表される一群の中間体を用いて調製され得（図１９）、それ自体は固相および液相ペプチド合成の技術分野に周知の標準的方法によって調製される(Synthetic Peptides−A User's Guide  1992, Grant, G., Ed. WH. Freeman Co., NY, Chap 3 and Chap 4 pp 77-258;Chan, W.C. and White, P.D. Basic Procedures in Fmoc Solid Phase Peptide Synthesis-A Practical Approach 2002, Chan, W.C. and White, P.D. Eds Oxford University Press, New York, Chap. 3 pp 41-76;Barlos, K and Gatos, G. Convergent Peptide Synthesis in Fmoc Solid Phase Peptide Synthesis-A Practical Approach 2002, Chan, W.C. and White, P.D. Eds Oxford University Press, New York, Chap. 9 pp 216-228)、それらは出典明示により本明細書の一部とする。
【０４１０】
これらの方法には、Ａｌｏｃ、Ｂｏｃ、Ｆｍｏｃまたはベンジルオキシカルボニルに基づくペプチド合成法または固相もしくは溶液における方法の賢明に選択された組み合わせが含まれる。所定の工程に用いられる中間体は、図１に示される基の一覧から選択されうる、分子の各位置についての適当な保護基の選択に基づいて選択される。当業者はまた、別の保護基からなる、ペプチド合成法に適合する、中間体も用いられうることならびに上記の保護基の列挙された選択肢は説明するものとして有用であるが、包含しないこと、ならびにかかる代替物が当該分野にて周知であることを理解するであろう。
【０４１１】
このことは、アプローチを概略する図２０にて十分に説明されている。Ｌ６４の合成に示されるＣ１の代わりに中間体Ｃ２の置換は、同一の合成法が適用される場合にＬ７０を提供する。
【０４１２】
実施例ＬＶＩＩ−図４９Ａおよび４９Ｂ
Ｌ６９の合成
概要：(３β，５β，７α，１２α)−３−アミノ−７，１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸ＡとＦｍｏｃ−Ｃｌとの反応は中間体Ｂを提供した。オクタペプチドＧｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ2（ＢＢＮ[７−１４]）（配列番号１）（Ａ）で官能基化されたリンクアミド樹脂は、Ｂ、Ｆｍｏｃ−８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸およびＤＯＴＡトリ−ｔ−ブチルエステルと連続して反応した。試薬Ｂによる切断および脱保護の後、粗生成物を分取ＨＰＬＣにより精製し、Ｌ２３０を得た。全収率：４．２％。
【０４１３】
Ａ．(３β，５β，７α，１２α)−３−(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)アミノ−７，１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸、Ｂ（図４９Ａ）
９−フルオレニルメトキシカルボニルクロライド（１.４ｇ；５.４ｍｍｏｌ）の１,４−ジオキサン（１８ｍＬ）中溶液を、０℃にて撹拌しながら(３β，５β，７α，１２α)−３−アミノ−７，１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸Ａ（２.０ｇ；４.９ｍｍｏｌ）（３）の１０％水性Ｎａ2ＣＯ3（３０ｍＬ）および１,４−ジオキサン（１８ｍＬ）中懸濁液に滴下した。室温にて６時間撹拌した後、Ｈ2Ｏ（１００ｍＬ）を添加し、水性相をＥｔ2Ｏ（２×９０ｍＬ）で洗浄し、次いで、２Ｍ  ＨＣｌ（１５ｍＬ）を添加した（最終ｐＨ：１.５）。沈殿した固体を濾過し、Ｈ2Ｏ（３×１００ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させ、次いで、フラッシュクロマトグラフィーにより精製し、Ｂを白色固体として得た（２.２ｇ；３.５ｍｍｏｌ）。収率７１％。
【０４１４】
Ｂ．Ｎ−[３β，５β，７α，１２α)−３−[[[２−[２−[[[４，７，１０−トリス(カルボキシメチル)−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]エトキシ]エトキシ]アセチル]アミノ]−７,１２−ジヒドロキシ−２４−オキソコラン−２４−イル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド、Ｌ６９（図４９Ｂ）
固相ペプチド合成容器中にて樹脂Ａ（０.５ｇ；０.３ｍｍｏｌ）をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を濾過し、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加した。懸濁液をさらに２０分間撹拌し、次いで、溶液を濾過し、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。(３β，５β，７α，１２α)−３−(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)アミノ−７，１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸Ｂ（０.７５ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を樹脂に添加し、混合物を室温で２４時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を捨て、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物をさらに２０分間振盪した。溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。Ｆｍｏｃ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸（０.７９ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ；１.２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を樹脂に添加した。混合物を室温で３時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。次いで、樹脂をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を濾過し、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加し、混合物をさらに２０分間振盪した。溶液を濾過し、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。ＮａＣｌ（０.７９ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１８ｇ；１.２ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１９ｍＬ：１.２ｍｍｏｌ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０.４０ｍＬ；２.４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）との１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１,４,７,１０−四酢酸トリス(１,１−ジメチルエチル)エステル付加物を樹脂に添加した。混合物を室温で２４時間振盪し、濾過し、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）、ＣＨ2Ｃｌ2（５×７ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させた。フラスコ中にて試薬Ｂ（２５ｍＬ）（２）と一緒に樹脂を４.５時間振盪した。樹脂を濾過し、溶液を減圧下にて蒸発させて、油状粗生成物を得、Ｅｔ2Ｏ（２０ｍＬ）で処理した後、沈殿物を得た。遠心分離によって沈殿物を回収し、Ｅｔ2Ｏ（３×２０ｍＬ）で洗浄し、固体（２４８ｍｇ）を得、ＨＰＬＣにより分析した。粗生成物（５０ｍｇ）を分取ＨＰＬＣにより精製した。生成物を含有するフラクションを凍結乾燥させ、Ｌ６９（６.５ｍｇ；３.５×１０−３ｍｍｏｌ）（図４９Ｂ）を白色固体として得た。収率５.８％。
【０４１５】
実施例ＬＶＩＩＩ−図５０
Ｌ１４４の合成
概要：オクタペプチドＧｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ2（ＢＢＮ[７−１４]）（配列番号１）（Ａ）で官能基化されたリンクアミド樹脂は、４−[２−ヒドロキシ−３−[４,７,１０−トリス[２−(１,１−ジメチルエトキシ)−２−オキソエチル]−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]プロポキシ]安息香酸と反応させた。試薬Ｂ（２）による切断および脱保護の後、粗生成物を分取ＨＰＬＣにより精製し、Ｌ１４４を得た。全収率：１２％。
【０４１６】
Ａ．Ｎ−[４−[２−ヒドロキシ−３−[４，７，１０−トリス(カルボキシメチル)−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]プロポキシ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミド、Ｌ１４４（図５０）
固相ペプチド合成容器中にて樹脂Ａ（０.４ｇ；０.２４ｍｍｏｌ）をＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）と一緒に１０分間振盪し、溶液を濾過し、新しいＤＭＡ中５０％モルホリン（７ｍＬ）を添加した。懸濁液をさらに２０分間撹拌し、次いで、溶液を濾過し、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）で洗浄した。４−[２−ヒドロキシ−３−[４，７，１０−トリス[２−(１，１−ジメチルエトキシ)−２−オキソエチル]−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]プロポキシ]安息香酸Ｂ（０.５ｇ；０.７ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０.１１ｇ；０.７ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（０.１１ｍＬ；０.７ｍｍｏｌ)）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０.２４ｍＬ；１.４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（７ｍＬ）を樹脂に添加した。混合物を室温で２４時間振盪し、溶液を捨て、樹脂をＤＭＡ（５×７ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（５×７ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させた。フラスコ中にて試薬Ｂ（２５ｍＬ）（２）と一緒に樹脂を４.５時間振盪した。樹脂を濾過し、溶液を減圧下にて蒸発させて、油状粗生成物を得、Ｅｔ2Ｏ（２０ｍＬ）で処理した後、沈殿物を得た。沈殿物を遠心分離により回収し、Ｅｔ2Ｏ（３×２０ｍＬ）で洗浄し、固体（２４０ｍｇ）を得、ＨＰＬＣにより分析した。粗生成物（６０ｍｇ）を分取ＨＰＬＣにより精製した。生成物を含有するフラクションを凍結乾燥させ、Ｌ１４４（１０.５ｍｇ；７.２×１０−３ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。収率１２％。
【０４１７】
実施例ＬＩＸ
Ｌ３００および177Ｌｕ−Ｌ３００の調製
０.２ｇのリンクアミドNovagel樹脂（０.６３ｍｍｏｌ／ｇ、０.１２６ｍｍｏｌ）から、分取カラムクロマトグラフィーの後にＬ３００（０.０３３ｇ、１７％）を得た。保持時間は６.６６分であった。分子式はＣ７２Ｈ９９Ｎ１９Ｏ１８である。計算された分子量は１５１８.７１である；１５１９.６を観測した。配列はＤＯ３Ａ−Ｇｌｙ−Ａｂｚ４−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−ＮＨ2であり、ここで、Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−ＮＨ2（すなわち、ＱＷＡＶＧＨＦＬ−ＮＨ2）は配列番号２２である。Ｌ３００の構造は、図５１に示される。
【０４１８】
Ｌ３００（１３.９μＬの０.２Ｍ ｐＨ４.８ 酢酸ナトリウムバッファーでは１３.９μｇ）を１５０μＬの０.２Ｍ ｐＨ４.８ 酢酸ナトリウムバッファーおよび４μＬの１７７ＬｕＣｌ３（１.１３６ｍＣｉ、Missouri Research Reactor）と混合した。１００℃にて１０分後、放射化学的純度（ＲＣＰ）は９５％であった。生成物を、水中０.１％ＴＦＡ（Ａ）およびアセトニトリル中０.０８５％ＴＦＡ（Ｂ）の水性／有機勾配を用いて流速１ｍＬ／分で溶出されるVydac Ｃ１８ ペプチドカラム（４.６×２５０ｍｍ、５ｕｍ細孔径）により精製した。以下の勾配を用いた：アイソクラチック２２％Ｂ ３０分間、〜６０％Ｂ ５分間、６０％Ｂで保持 ５分間。１８.８分の保持時間で溶出した、化合物を、ＨＳＡを生理食塩水およびアスコルビン酸の９：１混合液に注入することによって調製される、１ｍＬの０.８％ヒト血清アルブミン溶液に収集した。アセトニトリルを、Speed Vacuum（Savant）を用いて除去した。精製後、化合物は１００％のＲＣＰを有していた。
【０４１９】
実施例ＬＸ−ＧＲＰ受容体サブタイプに関するリンカー特異性の特性化
２種の細胞株、Ｃ６、ＮＭＢ−Ｒ発現齧歯類神経膠芽腫細胞株およびＰＣ３、ＧＲＰ−Ｒ発現ヒト前立腺癌細胞株を、該アッセイにて用いた。各受容体サブタイプ（ＮＭＢ−ＲおよびＧＲＰ−Ｒ）に対する種々の非標識化合物のアフィニティーは、Ｃ６およびＰＣ３細胞において１２５Ｉ−ＮＭＢまたは１２５Ｉ−ＢＢＮのその対応する受容体への結合と競合するその能力を測定することによって間接的に測定された。
【０４２０】
Ａ．物質および方法：
１．細胞培養：
Ｃ６細胞をＡＴＣＣ（ＣＣＬ−１０７）から獲得し、２ｍＭ Ｌ−グルタミン、１.５ｇ／Ｌ重炭酸ナトリウム、１５％ウマ血清および２.５％ＦＢＳが追加されたＦ１２Ｋ培地（ＡＴＣＣ）中で培養した。アッセイの細胞を、４８ウェルポリ−リジン被覆プレート（Beckton Dickinson Biocoat）にて９.６×１０４／ウェルの濃度で播種した。ＰＣ３をＡＴＣＣ（ＣＲＬ−１４３５）から獲得し、２ｍＭ Ｌ−グルタミン、１.５ｇ／Ｌ重炭酸ナトリウム、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳおよび１０％ＦＢＳが追加されたＲＰＭＩ １６４０（ＡＴＣＣ）中で培養した。両方の培養物を、３７℃にて５％ＣＯ2／９５％空気を含有する湿気のある環境中で保持した。アッセイのＰＣ３細胞を、９６ウェル白色／透明底プレート（Falcon Optilux-I）にて２.０×１０４細胞／ウェルの濃度で播種した。プレートを、播種後の２日目のアッセイに用いた。
【０４２１】
２．結合バッファー、および放射性リガンド：
２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、０.２％ＢＳＡ フラクションＶ、１.０ｍＭ ＡＥＢＳＦ（ＣＡＳ # ３０８７−９９−７）および０.１％バシトラシン（ＣＡＳ # １４０５−８７−４）、ｐＨ７.４を含有するＲＰＭＩ １６４０（ＡＴＣＣ）。
特注125Ｉ−[Ｔｙｒ０]ＮＭＢ、＞２.０ Ｃｉ／μモル（Amersham Life Science）[125Ｉ−ＮＭＢ]および市販の125Ｉ−[Ｔｙｒ４]ＢＢＮ、＞２.０ Ｃｉ／μモル（Perkin Elmer Life Science）[125Ｉ−ＢＢＮ]を、放射性リガンドとして用いた。
【０４２２】
Ｂ．インビトロアッセイ：
４８ウェルプレートアッセイシステム（Ｃ６研究について）を用い、競合実験を125Ｉ−ＮＭＢを用いて行った。すべてのＰＣ３研究を、125Ｉ−ＢＢＮを用いて実施例ＸＬＩＩＩに記載されるように行った。アッセイの化合物の選択は、リンカーサブタイプに基づく。結果は表１３に示される。
【０４２３】
【表２３】
2011520971.tif 000058
【０４２４】
試験から得られた結合パラメーターを、GraphPad Prismで一部分競合非線形回帰分析（one−site competition non−linear regression analysis）を用いて分析した。Ｃ６細胞におけるＮＭＢ−Ｒに対する種々の化合物の相対的アフィニティーを、市販の[Ｔｙｒ４]−ＢＢＮおよび[Ｔｙｒ０]−ＮＭＢを用いて得られたものと比較した。ＧＲＰ−Ｒ選択的化合物をＮＭＢ−Ｒ＋ＧＲＰ−Ｒ選択的化合物と識別するために、各化合物について得られたＩＣ５０を、Ｃ６細胞上の125Ｉ−ＮＭＢで[Ｔｙｒ４］−ＢＢＮから得られたものと比較した。２群の化合物の間のカット・オフ・ポイントを、１０倍の[Ｔｙｒ４]−ＢＢＮのＩＣ50として得た。試験化合物のうち、８個の化合物は、選択的にＧＲＰ−Ｒに結合するが（表１４に示される）、３２個の化合物は、同様のアフィニティーを有するＧＲＰ−ＲおよびＮＭＢ−Ｒの両方に結合し、２個はＮＭＢ−Ｒを優先する。
【０４２５】
【表２４−１】
2011520971.tif 000059
【表２４−２】
2011520971.tif 000060
【表２４−３】
2011520971.tif 000061
【表２４−４】
2011520971.tif 000062
【０４２６】
上記の表において、“na”は、“非適用”を示す（例えば、化合物は、本発明のリンカーを含有しないので、Ｌ＃が割り当てられなかった）。
【０４２７】
上記に基づき、いくつかの結果を観測した。受容体結合領域単独（ＢＢＮ７−１４またはＢＢＮ８−１４）は、ＧＲＰ−ＲまたはＮＭＢ−Ｒを優先しなかった。受容体結合領域へのキレート剤の付加は、ＧＲＰ−ＲまたはＮＭＢ−Ｒ（ＤＯ３Ａ−モノアミド−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ２、ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ２はＢＢＮ（７−１４）配列（配列番号１）である）に対するペプチドのアフィニティーに寄与しなかった。リンカーを介してペプチドにキレート剤をカップリングすることは、受容体に対するペプチドのアフィニティーに寄与しなかった。しかしながら、リンカーの種類によっては、該アフィニティーは、デュアル（ＮＭＢ−ＲおよびＧＲＰ−Ｒの両方を優先）であることからＧＲＰ−Ｒ（選択性ＧＲＰ−Ｒ）に変わった。上記の段落において、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ２は、ＢＢＮ（７−１４）配列（配列番号１）である。
【０４２８】
リンカーとしての試験ω−アミノアルカン酸（１７５Ｌｕ−ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ａｏｃ−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ２およびＤＯ３Ａ−モノアミド−Ａｏｃ−ＱＷＡＶＧＨＬ−Ｎｌｅ−ＮＨ２では８−アミノオクタン酸、ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ａｐａ３−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ２では３−アミノプロピオン酸ならびにＤＯ３Ａ−モノアミド−Ａｂｕ４−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ２では４−アミノブタン酸）は、ＧＲＰ−ＲおよびＮＭＢ−Ｒの両方に対するデュアルアフィニティーを有するペプチドを提供した。１７５Ｌｕ−ＤＯＴＡ−Ａｏｃ−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ２における「Ｍｅｔ」の「Ｎｌｅ」による置換は、ペプチドの該デュアルアフィニティーを変化しなかった。上記の段落において、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ２は、ＢＢＮ（７−１４）配列（配列番号１）である。
【０４２９】
コール酸含有リンカー（Ｌ６４では３−アミノコール酸、Ｌ６３では３−アミノ−１２−ヒドロキシコラン酸およびＬ６７では３−アミノ−１２−ケトコラン酸）は、ＧＲＰ−ＲおよびＮＭＢ−Ｒに対するデュアルアフィニティーを有するペプチドを提供した。シクロアルキルおよび芳香族置換アラニン含有リンカー（ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｃｈａ−Ｃｈａ−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ２では３−シクロヘキシルアラニン、ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｃｈａ−Ｎａ１１−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ２では１−ナフチルアラニン、ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｎａｌ１−Ｂｐａ４−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ２では４−ベンゾイルフェニルアラニンおよびＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｎａｌ１−Ｂｉｐ−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ２ではビフェニルアラニン）は、ＧＲＰ−Ｒに対する選択的アフィニティーを有するペプチドを提供した。４−（２−アミノエチルピペラジン）−１のみを含有するリンカーはまた、ＧＲＰ−Ｒ選択性を有するペプチド（Ｌ８９）に寄与した。上記の段落において、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ２は、ＢＢＮ（７−１４）配列（配列番号１）である。
【０４３０】
ＮＭＢ配列へのＧ−４−アミノ安息香酸リンカーの導入は、その固有のＮＭＢ−Ｒアフィニティーに加えてＧＲＰ−Ｒへのアフィニティーを有する化合物をもたらした（Ｌ２２７対ＧＮＬＷＡＴＧＨＦＭ−ＮＨ2（配列番号２４）。リンカー周辺のＧｌｙの位置を変えることは、Ｌ７０のアフィニティーをそのデュアルアフィニティーからＮＭＢ−Ｒ（Ｌ２０４）への選択的アフィニティーに変えた。Ｌ７０における４−アミノ安息香酸の３−メトキシ置換（Ｌ２４０も同様）は、デュアルアフィニティーをＧＲＰ−Ｒへの選択的アフィニティーに変えた。
【０４３１】
リンカーが受容体サブタイプ特異性に対する有意な効果を有することは前記のデータから明らかである。３群の化合物が同定されうる：
【０４３２】
ＧＲＰ−Ｒにて活性であるもの
これらの化合物は、診断目的として用いられうる、インビトロおよびインビボにおける該受容体に特異的な情報を提供する。これらの化合物が治療用放射線核種で放射性標識される場合、療法は、ＮＭＢ−Ｒを含有するものを付属する、該受容体のみを含有する組織で行われうる。
【０４３３】
ＮＭＢ−Ｒにて活性であるもの
これらの化合物は、診断目的として用いられうる、インビトロおよびインビボにおける該受容体に特異的な情報を提供する。治療用放射線核種で放射性標識された場合、療法は、ＧＲＰ−Ｒを含有するものを付属する、該受容体のみを含有する組織で行われうる。
【０４３４】
ＧＲＰ−ＲおよびＮＭＢ−Ｒの両方にて活性であるもの
これらの化合物は、診断目的として用いられうるインビトロおよびインビボにおけるこれらの２つの受容体サブタイプの存在の組み合わせに関する情報を提供する。両受容体を標的とすることは、特異性を用いて検査の感度を向上させうる。これらの化合物が治療用放射線核種で放射性標識される場合、療法は、両方の受容体を含有する組織で行われ得、所望の組織に輸送される用量を増大しうる。
【０４３５】
実施例ＬＸＩ  −  ヒト前立腺癌（ＰＣ３）細胞のＧＲＰ−Ｒに対する、125Ｉ−ＢＢＮを有する改変されたボンベシン（ＢＢＮ）アナログの競合研究
ＢＢＮ７−１４アナログにおける一定のアミノ酸の置換の効果を測定するために、標的化部位で改変されたペプチドを作成し、ヒト前立腺癌（ＰＣ３）細胞のＧＲＰ−Ｒへの競合結合についてアッセイした。これらのペプチドは、すべて、金属キレート部分（ＤＯＴＡ−Ｇｌｙ−Ａｂｚ４−）に結合した共通のリンカーを有する。結合データ（ＩＣ５０ｎＭ）を下記の表１５に示す。
【０４３６】
Ａ. 材料と方法：
１. 細胞培養：
ＰＣ３細胞株は、ＡＴＣＣ（ＣＲＬ−１４３５）から入手し、２ｍＭ Ｌ−グルタミン、１.５ｇ／Ｌ重炭酸ナトリウム、１０ｍＭ ＨＥＰＥＳおよび１０％ＦＢＳを添加したＲＰＭＩ１６４０（ＡＴＣＣ）中で培養した。５％ＣＯ２／９５％空気を含む加湿大気中、３７℃で培養を維持した。アッセイ用のＰＣ３細胞を、２.０×１０４細胞／ウェルの密度で、９６−ウェル白色／透明底プレート（Falcon Optilux-I）に播いた。プレートを播種後２日目にアッセイに使用した。
【０４３７】
２. 結合バッファー：
２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、０.２％ＢＳＡ フラクション Ｖ、１.０ｍＭ ＡＥＢＳＦ（ＣＡＳ # ３０８７−９９−７）および０.１％バシトラシン（ＣＡＳ # １４０５−８７−４）を含有するＲＰＭＩ１６４０（ＡＴＣＣ）、ｐＨ７.４。
【０４３８】
３. 125Ｉ−Ｔｙｒ４−ボンベシン [125Ｉ−ＢＢＮ]
125Ｉ−ＢＢＮ（Ｃａｔ ＃ ＮＥＸ２５８）は、PerkinElmer Life Sciences から入手した。
【０４３９】
Ｃ. インビトロアッセイ：
125Ｉ−ＢＢＮを用いるＰＣ３細胞のＧＲＰ−Ｒに対する競合アッセイ：
全ての被験化合物を、結合バッファーに溶解し、適当な希釈も結合バッファーで行った。アッセイ用のＰＣ３細胞を、２.０×１０４／ウェルの密度で、９６−ウェルの黒色／透明コラーゲンＩセルウェア（cellware）プレート（Beckton Dickinson Biocoat）のいずれかに播いた。プレートを播種後２日目に結合研究に使用した。アッセイに先立ち、プレートの培養密度（＞９０％コンフルエント）を確認した。競合アッセイのために、Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシル−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｇｌｙ−Ａｖａ５−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ２（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ２は、ＢＢＮ（７−１４）配列（配列番号１）（対照）である）、または、他の競合物質を、１.２５×１０−９Ｍないし５００×１０−９Ｍの濃度で、１２５Ｉ−ＢＢＮ（２５,０００ｃｐｍ／ウェル）と共にインキュベートした。これらの研究は、７５μＬ／ウェルのアッセイ量で実施した。各データポイントにつき、トリプリケートのウェルを使用した。適当な溶液の添加後、プレートを１時間４℃でインキュベートした。氷冷インキュベーションバッファー２００μＬの添加によりインキュベーションを停止した。プレートを５回洗浄し、吸収により乾燥させた。LKB CompuGamma カウンターまたはマイクロプレートシンチレーションカウンターを使用して放射能を検出した。結合した１２５Ｉ−ＢＢＮの放射能を、競合物質の阻害濃度に対してプロットし、１２５Ｉ−ＢＢＮ結合が５０％まで阻害される濃度（ＩＣ５０）を結合曲線から得た。
表１５：１２５Ｉ−ＢＢＮを用いるＰＣ３細胞のＧＲＰ−Ｒに対する競合研究
【表２５−１】
2011520971.tif 000063
【表２５−２】
2011520971.tif 000064
【０４４０】
結果／結論：標的化部位で改変された様々なペプチドの結合結果の分析は、以下のことを示した：
ニューロメジンアナログ（ＧＮＬＷＡＴＧＨＦＭ−ＮＨ２、ｙＧＮＬＷＡＴＧＨＦＭ−ＮＨ２、ここで、ＧＮＬＷＡＴＧＨＦＭ−ＮＨ２は配列番号２４である）は、ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−Ａｂｚ４（Ｌ２２７）に結合した場合を除き、ＧＲＰ−Ｒに対して競合できない。しかしながら、それらは、有効なＮＭＢ競合物質である。これは、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ２、ＤＯ３Ａ−モノアミド−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ２（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ２はＢＢＮ（７−１４）配列、配列番号１である）およびＬ７０に反映されたボンベシン配列のアミノ末端の誘導体化の要件に類似している。ヒスチジン（Ｌ２２５）の置換は、ＧＲＰ−Ｒでの競合を低減させる。
【０４４１】
Ｌ２０４を与えるＬ７０中の２つのリンカー成分の反転は、サブタイプ特異性をＮＭＢサブタイプに有利に変化させる。ボンベシン配列中のＬ１３Ｆ置換は、ＧＲＰ−Ｒ活性を維持する（Ｌ２２８）。
表１６
【表２６】
2011520971.tif 000065
*ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ２は、ＢＢＮ（７−１４）配列（配列番号１）である
【０４４２】
ここでわかる通り、Ｌ２２８におけるＦ１３Ｍ１４からＦ１３Ｌ１４への置換は、ＧＲＰ−Ｒでの活性が高い化合物（Ｌ３００）をもたらす。メチオニンの除去は、それが酸化しやすいので有利である。この利益は、Ｌ１３Ｆ置換もなされていなければ生じない（Ｌ２２１）。Ｖ１０の除去は、Ｌ２２４で見られる通り、完全な結合の喪失をもたらした。
表１７
【表２７】
2011520971.tif 000066
【０４４３】
表１８
表１８に見られる通り、ＢＢＮ２−６領域（Ｌ２１４−Ｌ２１７、Ｌ２２６）で様々な置換が可能である。
【表２８】
2011520971.tif 000067
* ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ２は、ＢＢＮ（７−１４）配列（配列番号１）である
【０４４４】
表１９
予測通り、表１９の結果は、ユニバーサルアゴニスト（Ｌ２２２およびＬ２２３）が合理的に良好に〜５０ｎＭのレベルで競合することを示す。
【表２９】
2011520971.tif 000068
【０４４５】
実施例ＬＸＩＩ  −  Ｌ５００の合成
図５３
化合物Ｌ５００を、図５３に例示説明する通りに製造した。特に、ジイソプロピルエチルアミン（１５０μＬ）を、ＤＭＦ（１ｍＬ）中の酸Ａ（０.１９ｇ、０.３ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（０.１２ｇ、０.３２ｍｍｏｌ）の冷却溶液に添加し、５分間撹拌した。次いで、精製したペプチドＢ（０.１１ｇ、０.１ｍｍｏｌ）を反応混合物に添加し、１８時間撹拌した。ＤＭＦを除去し、得られた油状物をＤＭＦ／ＣＨ３ＣＮの混合物に溶解し、分取ＨＰＬＣにより精製した。テトラ−ｔ−ブチルエステルを含有する純粋な画分を回収し、凍結乾燥させ、テトラ−ｔ−ブチルエステルを白色固体として得た。収率８０ｍｇ（３２％）。得られたテトラ−ｔ−ブチルエステルを、試薬Ｂに溶解し、８時間撹拌した。ＴＦＡを除去し、得られたペースト状の固体をＨＰＬＣによりＣＨ３ＣＮ／水／０.１％ＴＦＡを使用して精製した。純粋な画分を回収し、凍結乾燥させ、Ｌ５００を白色固体として得た。収率２３ｍｇ（３８％）ＭＳ：１５１５.７（Ｍ−Ｈ）、７５７.４（Ｍ−２Ｈ）／２。
【０４４６】
実施例ＬＸＩＩＩ  −  Ｌ５０１の合成
図５４
化合物Ｌ５０１を、図５４に例示説明する通りに製造した。ジイソプロピルエチルアミン（１５０μＬ）を、ＤＭＦ（１ｍＬ）中のＡ（０.２７８ｇ、０.４ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（０.１５２ｇ、０.４ｍｍｏｌ）の冷却混合物に添加し、５分間撹拌した。精製したペプチドＢ（０.１２ｇ、０.１１ｍｍｏｌ）を反応混合物に添加し、１８時間撹拌した。ＤＭＦを除去し、得られた油状物をＤＭＦ／ＣＨ３ＣＮの混合物に溶解し、分取ＨＰＬＣにより精製した。テトラ−ｔ−ブチルエステルを含有する純粋な画分を回収し、凍結乾燥させ、テトラｔ−ブチルエステルを得た。収率６２ｍｇ（３２％）。テトラｔ−ブチルエステル（３６.０ｍｇ、０.０２ｍｍｏｌ）を試薬Ｂに溶解し、８時間撹拌した。ＴＦＡを除去し、得られた濃厚な油状物をＨＰＬＣによりＣＨ３ＣＮ／水／０.１％ＴＦＡを使用して精製した。純粋な画分を回収し、凍結乾燥させ、Ｌ５０１を白色固体として得た。収率１２ｍｇ（３８％）。ＭＳ：１５６９.７（Ｍ−Ｈ）、７８４.４（Ｍ−２Ｈ／２）、８０３.３（Ｍ＋Ｋ−２Ｈ）／２。
【０４４７】
実施例ＬＸＩＶ  −  Ｌ５００およびＬ５０１の放射性標識（１７７Ｌｕ）および体内分布
Ｌ５００およびＬ５０１の１７７Ｌｕ−錯体の放射性標識およびＨＰＬＣ分析
放射性標識の手順：
典型的には、１ｍｇ／ｍＬのリガンドの溶液を、０.２Ｍ酢酸ナトリウムバッファー（ｐＨ４.８）中で調製した。この溶液のアリコート（２ないし５μＬ）および６ないし１０ｍＣｉの１７７ＬｕＣｌ３（０.０５Ｎ ＨＣｌ中、比活性２.８−４.０９Ｃｉ／μｍｏｌ）を、０.２Ｍ、ｐＨ４.８のＮａＯＡｃバッファー１００ないし２００μＬに添加し、リガンドのＬｕに対するモル比２：１を達成した。室温で５分間インキュベーションした後、１０ｍＭ Ｎａ２ＥＤＴＡ・２Ｈ２Ｏ１０μＬを添加して反応を停止し、溶液中に残っている遊離の１７７Ｌｕを除去した。次いで、静菌性０.９％塩化ナトリウム注射液ＵＳＰ／ＡＳＣＯＲ Ｌ５００（登録商標）アスコルビン酸注射液ＵＳＰ（０.２ｍＬ）の９：１（ｖ／ｖ）混合物を添加し、得られた放射性錯体の放射線分解を阻害した。放射化学的純度（ＲＣＰ）をＨＰＬＣにより測定した。すべての被験配位子について、Ｌｕ−１７７の完全な配位が、５分以内の室温でのインキュベーションで観察された。
【０４４８】
インビボ体内分布研究のために調製された放射性標識錯体：
体内分布研究のために、上記の通りに放射性標識化合物を調製した。但し、配位子のルテニウムに対する１：１のモル比を使用して、すべての出発配位子の完全なキレート化を確実にした。得られた１７７Ｌｕ錯体を含有するＨＰＬＣのピークを、０.１％ＨＳＡを含有する９：１静菌性塩水／ＡＳＣＯＲ Ｌ５００（登録商標）溶液１ｍＬ中に回収し、高速真空装置を使用して有機溶媒を除去した。残っている溶液を、９対１［ｖ／ｖ］の比で混合した静菌性塩水／ＡＳＣＯＲ Ｌ５００（登録商標）アスコルビン酸注射液ＵＳＰを使用して、必要な放射能濃度にさらに希釈した。すべてのサンプルの放射化学的純度は＞９５％であった。
【０４４９】
ＨＰＬＣ分析：すべてのＨＰＬＣ研究を、カラム温度３７℃を使用して、流速１.５ｍＬ／分で実施した。
１. 177Ｌｕ−Ｌ５００
ＨＰＬＣカラム：Zorbax Bonus-RP、５μm、８０Åの細孔サイズ、２５０ｍｍ x ４.６ｍｍ（Agilent）。
移動相：以下のグラジエントを使用した。ここで、Ａ＝水；Ｂ＝３０ｍＭ（ＮＨ４)２ＳＯ４を含有する水；Ｃ＝メタノール；Ｄ＝アセトニトリル。
表２０
【表３０】
2011520971.tif 000069
保持時間：１７７Ｌｕ−Ｌ５００＝２５.５分
【０４５０】
２. １７７Ｌｕ−Ｌ５０１
ＨＰＬＣカラム：Zorbax Bonus-RP、５μm、８０Åの細孔、２５０ｍｍ x ４.６ｍｍ（Agilent）。
移動相：以下のグラジエントを使用した。ここで、Ａ＝水；Ｂ＝３０ｍＭ（ＮＨ４)２ＳＯ４を含有する水；Ｃ＝メタノール；Ｄ＝アセトニトリル。
表２１
【表３１】
2011520971.tif 000070
保持時間：177Ｌｕ−Ｌ５０１＝２３.１分
【０４５１】
体内分布研究：
１７７Ｌｕ−Ｌ５００、１７７Ｌｕ−ＸＸ１００、１７７Ｌｕ−Ｌ５０１および１７７Ｌｕ−Ｌ７０の腫瘍標的化能力、体内分布および動態を、ヒトＰＣ−３ヌードマウスモデルで評価した。ＨＰＬＣで精製した化合物１０−５０μＣｉを、各マウスにｉ.ｖ.尾静脈注射により、ｎ＝４／群で投与した。注射の１時間、１および７日後に、マウスを殺し、器官および組織を回収した。放射能をガンマカウンターで評価した。データを、膀胱と合わせた尿および血液プールについて、投与した総放射能の百分率（％ＩＤ）として表した；他の全被験器官について、投与した総放射能の百分率／ｇ（％ＩＤ／ｇ）として表した。
表２２
【表３２】
2011520971.tif 000071
*７２時間の時点、ＮＤ−実施せず
【０４５２】
データは、誘導体化していないシクロヘキシルａａｚｔａキレート剤の錯体（ＸＸ１００）として投与されたＬｕ−１７７（ＧＲＰ受容体標的化部分を含まない）は、身体から迅速に除去され、どの器官または組織にも残存する局在が殆ど無いことを示す。錯体（またはその密接に関連する誘導体）がＧＲＰ標的化ペプチド（Ｌ５００およびＬ５０１にあるような）で誘導体化されると、放射能は、腫瘍への局在を示す。このデータは、１７７Ｌｕ−Ｌ７０のものと類似しており、それは、本明細書に示す通り、放射線療法の目的で放射能をＰＣ−３腫瘍に送達する効力を立証されている。腫瘍局在化および身体の他の組織への放射能の保持の欠如は、これらの２種のキレート剤を含有する本発明の化合物の、放射線画像法および放射線療法への有用性を示す。
【０４５３】
177Ｌｕ−ＸＸ１００の構造は、
【化８】
2011520971.tif 000072
である。
【０４５４】
実施例ＬＸＶ  −  ＬＮＣaＰ腫瘍の異常な血管透過性の低減
図５５−５７
ここで図５５を参照し、好ましい実施態様では、ＣｒＴＡＣ：ＮＣｒ：Ｆｏｘｎ１ｎｕ／ｎｕマウスにおいて異種移植片として増殖したＬＮＣaＰ細胞は、腫瘍脈管構造から皮膚への大量の血液の血管外漏出を伴う低いプロフィールの浸潤性を示し、盛り上がらない（nonelevated）、円形または不規則形の、暗色またはより暗色のパッチ（斑状出血）をもたらす（図５６）。斑状出血は、明確に目視でき、腫瘍脈管構造の漏れやすさの尺度を提供する。図５５および５７に示す通り、ＬＮＣａＰ腫瘍の１７７Ｌｕ−Ｌ７０による処置は斑状出血を減らすことが示され、このことは、それが異常な血管透過性を低減することを示す。その血管透過性に対する効果のために、他の治療剤と組み合わせた放射性Ｌ７０による処置は、他の治療剤の送達を改善すると予測された。
【０４５５】
図５５−５７に示す通り、好ましい実施態様では、ＬＮＣａＰ（アンドロゲン感受性前立腺癌）腫瘍を有するヌードマウスモデルを使用して、放射線療法の研究を実施した。１７７Ｌｕ標識した本発明の化合物を、非処置対照群と比較した（各群にｎ＝１２、６０日間）。処置マウスに、１００μＬの１７７Ｌｕ標識した本発明の化合物を、３０ｍＣｉ／ｋｇの総用量で、ｉ.ｖ.またはｓ.ｃ.で、無菌条件下で投与した。研究の期間中、対象を囲まれた環境で飼育した。体重、腫瘍サイズ（径測定による）および臨床所見を、研究の期間中、各対象につき週３回集めた。早い終了の基準には、死亡；２０％以上の全体重（ＴＢＷ）の喪失；２ｃｍ３以上の腫瘍サイズが含まれた。１７７Ｌｕ−Ｌ７０による処置は、処置をしなかった対照動物に対して生存率を高めないが、１７７Ｌｕ−Ｌ７０で処置されたマウスには、観察可能な斑状出血に有意な減少があった（Ｐ＝０.００５６）。研究期間にわたる斑状出血の発生を図５５に示し、図５６および５７に描写する。
【０４５６】
進行時間（time to progression）は、新しい物質の抗癌活性を評価する代替的手段である。それは、腫瘍が直径で２０％の増加を示す時点として定義される。平均進行時間は、ある群の動物の半数がその点に達する研究日数である。好ましい実施態様では、この度、ＬＮＣａｐ腫瘍における平均腫瘍進行時間は、177Ｌｕ−Ｌ７０処置により約１００％まで増加することが判明した。平均進行時間のデータを、表２３に示す。
表２３
【表３３】
2011520971.tif 000073
進行までの平均時間＝少なくとも２０％＞２ｒの増加、ここで、ｒ＝平均（Ｌ×Ｗ）／２。
【０４５７】
図５６に示す通り、１７７Ｌｕ−Ｌ７０を受容しなかった対照のマウスは、ＬＮＣａＰ異種移植片を有し、それは、同側の後肢に広がる斑状出血を伴った。比較すると、図５７では、１７７Ｌｕ−Ｌ７０を受容した実験マウスは、対照マウスと比較して減少した斑状出血を示すＬＮＣａＰ異種移植片を有した。
【０４５８】
この実施例で示す通り、１７７Ｌｕ−Ｌ７０による処置は、ＬＮＣａｐ腫瘍において、有利な応答、即ち、腫瘍の血管の正常化および進行時間の実質的な増加をもたらす。
【０４５９】
実施例ＬＸＶＩ  −  ＢＴ−４７４ヒト乳癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するラパチニブの効果のインビトロでの実証
ＢＴ−４７４乳癌細胞（ヒト原発性浸潤性乳管癌；ＥＲ＋、ＰＲ＋、増幅されたＨＥＲ２／ｎｅｕ＋）を、the American Type Culture Collection から入手した。ＢＴ−４７４細胞の増殖培地は、１０％熱非動化ＦＢＳ（Hyclone、ＳＨ３００７０.０３）、０.２％ＮａＨＣＯ３およびペニシリン−ストレプトマイシンの最終濃度（１x、１００ユニット／ｍＬ）の抗生物質／抗真菌剤"ＰＳＦ−１x"（GibcoBRL、１５２４０−０６２）、および、ファンギゾン（０.２５μg／ｍＬ）を添加した Hybri-care Medium（Ｃat Ｎo：４６Ｘ、ＡＴＣＣ）である。ＢＴ−４７４を、CellBind(商標）組織培養フラスコ（Corning）で、５％ＣＯ2／９５％空気を含有する加湿大気中、３７℃で維持し、０.０５％トリプシン／ＥＤＴＡ（GibcoBRL ２５３００−０５４）を使用して日常的に植え継いだ。結合実験用の細胞を０日目に５.６ｘ１０４細胞／ｃｍ２で９６−ウェル白色／透明底マイクロタイタープレート（Falcon Optilux-I）、または９６ウェル黒色／透明コラーゲンＩセルウェアプレート（Beckton Dickinson Biocoat）に播いた。
結合バッファー：
２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、０.１％ＢＳＡ（w／v）、０.５ｍＭ ＰＭＳＦ（ＡＥＢＳＦ）、バシトラシン（５０ｍｇ／５００ｍｌ）を添加したＲＰＭＩ１６４０、ｐＨ７.４。
ラパチニブ溶液：
原液：１００％ＤＭＳＯ中、１ｍＭ原液
使用時：完全増殖培地中、０.１−１.０μＭ
【０４６０】
細胞の処理および結合アッセイ：
処理：ＢＴ−４７４細胞を、０日目に播いた（上記参照）；播種の約２４−４８時間後、処理１および２日目（ＤＴ１、ＤＴ２）に、培地を除去し、新鮮な増殖培地（対照）またはラパチニブ（０.１−１.０μＭ）を添加した増殖培地で置き換える。
細胞結合アッセイ：３日目に、結合バッファーで２回洗浄して血清タンパク質を除去した後、細胞を１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ（連続希釈５μＣｉ／ｍＬ−０.６２５μＣｉ／ｍＬ）と６０分間２２℃でインキュベートした。氷冷結合バッファー２００μＬの添加によりインキュベーションを停止した。プレートをもう３回結合バッファーで洗浄し、シンチレーション液１４０μＬを各ウェルに添加し、プレートを密閉し、Microβプレートリーダー（Microbeta Trilux、Perkin−Elmer）で分析した。
【０４６１】
ラパチニブによる処理は、１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ（１７７Ｌｕ−Ｌ７０とも呼ばれる）結合の非処理対照の１４０％までの増加により示される通り（０.１−１.０μＭ）、ＢＴ−４７４乳癌細胞において、細胞当たりのＧＲＰ受容体特異的シグナルの増加をもたらした。加えて、最高濃度では細胞増殖の６５％までの減少が見られ、これは、恐らく、ＧＲＰ受容体特異的シグナルの増幅を示している。上述のことは、ＥＧＦＲおよび／またはＨＥＲ２とＧＲＰ−Ｒとの間のクロストークを立証する。増加は、破壊を逃れるための代替経路（即ち、増殖の継続のためのＧＲＰへの切り換え、または、ＧＲＰＲによるＥＧＦＲのトランス活性化）と解釈し得、これは、元の治療薬への耐性を早期に示すものとして、治療的に活用し得る。シグナルの増加は、また、腫瘍細胞の死亡を逃れるための最後の試み（「最後のあがき」）とも解釈し得、これは、最終的には腫瘍の死亡に至る。そのような変化を画像化により検出する能力は、非常な有益なものであろう。
【０４６２】
この実施例から実施例ＸＣＩＩまでの結果を、表２４（下記）に記録する。これは、ＧＲＰ受容体に標的化されていない薬物処理が、生細胞を基礎とするインビトロの細胞培養において、１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ（および、推論により、６７／６８Ｇａ−ＡＭＢＡ）のＧＲＰ−Ｒ取り込みを調節することを示す：
表２４
【表３４】
2011520971.tif 000074
上記の表は、受容体−リガンド結合アッセイにより検出される通り、左側の薬物により標的とされた受容体と、前立腺癌および乳癌の細胞株のＧＲＰ受容体との間の、インビトロのクロストークを立証する。
【０４６３】
実施例ＬＸＶＩＩ  −  Ｔ４７Ｄヒト乳癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するラパチニブの効果のインビトロでの実証
Ｔ−４７Ｄ乳癌細胞（胸水から単離されたヒト転移性乳腺管癌（mammary gland ductal adenocarcinoma）、ＥＲ+、ＰＲ＋）を、the American Type Culture Collection から入手した。Ｔ−４７Ｄ用の増殖培地は、１０％熱非動化ＦＢＳ（Hyclone、ＳＨ３００７０.０３）、０.５％インシュリン（１０５１６−５ＭＬ、Sigma）、およびＰＳＦ−１ｘを添加したＲＰＭＩ１６４０（１０−０４１−ＣＭ、Mediatech、Inc）であり、細胞を実施例ＬＸＶＩと同様に維持した。結合バッファー、ラパチニブ溶液、処理方法および細胞結合アッセイは、実施例ＬＸＶＩと同じである。
【０４６４】
ラパチニブでの処理は、１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合の非処理対照の５０％までの増加により示される通り（０.１−１.０μＭ）、Ｔ−４７Ｄ乳癌細胞において、細胞当たりのＧＲＰ受容体特異的シグナルの増加をもたらし、最高濃度では細胞増殖の３５％までの減少を伴った。上述のことは、ＥＧＦＲおよび／またはＨＥＲ２とＧＲＰ−Ｒとの間のクロストークを立証する；解釈は、実施例ＬＸＶＩと同一である。結果は実施例ＬＸＶＩの表２４に記録されている。
【０４６５】
実施例ＬＸＶＩＩＩ  −  ＰＣ−３前立腺癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するラパチニブの効果のインビトロでの実証
ＰＣ−３（ヒト前立腺癌、骨転移、ＡＲ−、ＥＲ）を、the American Type Culture Collection から入手した。ＰＣ−３細胞用の培養培地は、１０％熱非動化ＦＢＳ（Hyclone、ＳＨ３００７０.０３）およびＰＳＦ−１ｘ（実施例ＬＸＶＩと同様）を添加したＲＰＭＩ１６４０（１０−０４１−ＣＭ、Mediatech, Inc）である。結合バッファー、ラパチニブ溶液、処理方法および細胞結合アッセイは、実施例ＬＸＶＩと同じである。
【０４６６】
結果：ラパチニブによる処理は、０.１−１.０μＭで非処理対照と同等の１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合により示される通り、ＰＣ−３前立腺癌細胞において、増殖または細胞当たりのＧＲＰ受容体特異的シグナルに変化をもたらさなかった。
【０４６７】
解釈：これは、ＥＧＦＲおよび／またはＨＥＲ２と、恐らくＧＲＰ−Ｒとの間のクロストークを立証する。これは、処理が成功裏に標的化しており、かつ、ＧＲＰＲが代替的救済経路ではないこと；処理が成功せず、従ってＧＲＰＲをトランス活性化する必要がないこと；または、ＧＲＰが救済を媒介しているが、ＧＲＰＲの発現を増加させる必要はないこと、を示し得る。結果は、実施例ＬＸＶＩの表２４に記録されている。
【０４６８】
実施例ＬＸＩＸ  −  ＢＴ−４７４ヒト乳癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するダサチニブの効果のインビトロでの実証
ＢＴ−４７４細胞を、実施例ＬＸＶＩの通りに維持し、処理し、結合アッセイした。
ダサチニブ溶液：
原液：１００％ＤＭＳＯ中、１ｍＭ
使用時：完全増殖培地中（０.１−１.０μＭ）
【０４６９】
結果：ダサチニブによる処理は、１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合の非処理対照の１０−１５％までの減少により示される通り（０.１−１.０μＭ）、ＢＴ−４７４乳癌細胞において、細胞当たりのＧＲＰ受容体特異的シグナルの減少をもたらした。
【０４７０】
解釈：これは、ＳｒｃファミリーキナーゼのメンバーとＧＲＰＲとの間のクロストークを立証する。減少は、有効な標的化であるがＧＲＰＲを補助／救済に切り換える能力はないこと；または、処理は有効ではなく、従ってＧＲＰＲに切り換える必要がないことを示すものであり得る。結果は、実施例ＬＸＶＩの表２４に記録されている。
【０４７１】
実施例ＬＸＸ  −  Ｔ４７Ｄヒト乳癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するダサチニブの効果のインビトロでの実証
Ｔ−４７Ｄ細胞を、実施例ＬＸＶＩおよびＬＸＶＩＩの通りに維持し、処理し、結合アッセイした。ダサチニブ溶液は実施例ＬＸＩＸの通りである。
【０４７２】
結果：ダサチニブによる処理は、１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合の非処理対照の５００％までの増加により示される通り（０.１−１.０μＭ）、Ｔ−４７Ｄ乳癌細胞において、細胞当たりのＧＲＰ受容体特異的シグナルの増加をもたらした。
【０４７３】
解釈：このことは、ＳｒｃファミリーキナーゼのメンバーとＧＲＰＲとの間のクロストークを立証する；解釈は、実施例ＬＸＶＩと同一である。結果は、実施例ＬＸＶＩの表２４に記録されている。
【０４７４】
実施例ＬＸＸ１  −  ＰＣ−３前立腺癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するダサチニブの効果のインビトロでの実証
ＰＣ−３細胞を、実施例ＬＸＶＩおよびＬＸＶＩＩＩの通りに維持し、処理し、結合アッセイした。ダサチニブ溶液は実施例ＬＸＩＸの通りである。
【０４７５】
結果：ダサチニブによる処理は、１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合の非処理対照の２５０％までの増加により示される通り（０.１−１.０μＭ）、ＰＣ−３前立腺癌細胞において、細胞当たりのＧＲＰ受容体特異的シグナルの増加をもたらした。
【０４７６】
解釈：このことは、ＳｒｃファミリーキナーゼのメンバーとＧＲＰＲとの間のクロストークを立証する；解釈は、実施例ＬＸＶＩと同一である。結果は、実施例ＬＸＶＩの表２４に記録されている。
【０４７７】
実施例ＬＸＸＩＩ  −  ＢＴ−４７４ヒト乳癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するゲフィチニブの効果のインビトロでの実証
ＢＴ−４７４細胞を、実施例ＬＸＶＩの通りに維持し、処理し、結合アッセイした。
ゲフィチニブ溶液：
原液：０.５Ｍ Ｈ３ＰＯ４中、１ｍＭ原液
使用時：完全増殖培地中、０.１−１.０μＭ
【０４７８】
結果：ゲフィチニブによる処理は、０.１−１.０μＭで非処理対照と同等の１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合により示される通り、ＢＴ−４７４乳癌細胞において、細胞当たりのＧＲＰ受容体特異的シグナルに変化をもたらさなかった。
【０４７９】
解釈：これは、Ｓｒｃファミリーキナーゼのメンバーと、ＧＲＰＲとの間のクロストークを立証し得る。これは、処理が成功裏に標的化しており、かつ、ＧＲＰＲが代替的救済経路ではないこと；処理が成功せず、従ってＧＲＰＲをトランス活性化する必要がないこと；または、ＧＲＰが救済を媒介しているが、ＧＲＰＲの発現を増加させる必要はないことを示し得る。報告によれば、ＧＲＰは、ゲフィチニブに曝露されたＮＳＣＬＣ細胞を、下流のｃ−ｓｒｃに媒介されるＡｋｔ（重要なＥＧＦＲにより活性化されるシグナル伝達経路）のトランス活性化により救済することにより、ゲフィチニブ耐性と関連付けられた（Liu X, et al., Exp Cell Res 2007, 313;1361-72）。しかしながら、これは、ＧＲＰＲの発現の増加を必要としないかもしれない。結果は、実施例ＬＸＶＩの表２４に記録されている。
【０４８０】
実施例ＬＸＸＩＩＩ  −  Ｔ４７Ｄヒト乳癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するゲフィチニブの効果のインビトロでの実証
Ｔ−４７Ｄ細胞を、実施例ＬＸＶＩおよびＬＸＶＩＩの通りに維持し、処理し、結合アッセイした。ゲフィチニブ溶液は実施例ＬＸＸＩＩの通りである。
【０４８１】
結果：ゲフィチニブによる処理は、１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合の非処理対照の２０％までの増加により示される通り（０.１−１.０μＭ）、Ｔ−４７Ｄ乳癌細胞において、細胞当たりのＧＲＰ受容体特異的シグナルの増加をもたらした。
【０４８２】
解釈：このことは、ＥＧＦＲとＧＲＰＲとの間のクロストークを立証する；解釈は、実施例ＬＸＶＩの通りである。結果は、実施例ＬＸＶＩの表２４に記録されている。
【０４８３】
実施例ＬＸＸＩＶ  −  ＰＣ−３前立腺癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するゲフィチニブの効果のインビトロでの実証
ＰＣ−３細胞を、実施例ＬＸＶＩおよびＬＸＶＩＩＩの通りに維持し、処理し、結合アッセイした。ゲフィチニブ溶液は実施例ＬＸＸＩＩの通りである。
【０４８４】
結果：ゲフィチニブによる処理は、１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合の非処理対照の２０−４０％までの減少により示される通り（０.１−１.０μＭ）、ＰＣ−３前立腺癌細胞において、細胞当たりのＧＲＰ受容体特異的シグナルの減少をもたらした。
【０４８５】
解釈：このことは、ＥＧＦＲとＧＲＰＲとの間のクロストークを立証する；解釈は、実施例ＬＸＩＸの通りである。結果は、実施例ＬＸＶＩの表２４に記録されている。
【０４８６】
実施例ＬＸＸＶ  −  ＢＴ−４７４ヒト乳癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するイマチニブの効果のインビトロでの実証
ＢＴ−４７４細胞を、実施例ＬＸＶＩの通りに維持し、処理し、結合アッセイした。
イマチニブ溶液：
原液：１００ｍＭ ＣＨ3ＣＯＯＨ中、１ｍＭ原液
使用時：完全増殖培地中、０.１−１.０μＭ
【０４８７】
結果：イマチニブによる処理は、０.１−１.０μＭで非処理対照と同等の１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合により示される通り、ＢＴ−４７４乳癌細胞において、細胞当たりのＧＲＰ受容体特異的シグナルに変化をもたらさなかった。
【０４８８】
解釈：これは、多重キナーゼ阻害剤（Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ；ＰＤＧＦおよび幹細胞因子（ＳＣＦ）、ＫｉｔおよびＰＤＧＦＲも阻害する）とＧＲＰＲとの間のクロストークを立証する；解釈は、実施例ＬＸＶＩＩＩと同一である。結果は、実施例ＬＸＶＩの表２４に記録されている。
【０４８９】
実施例ＬＸＸＶＩ  −  Ｔ４７Ｄヒト乳癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するイマチニブの効果のインビトロでの実証
Ｔ−４７Ｄ細胞を、実施例ＬＸＶＩおよびＬＸＶＩＩの通りに維持し、処理し、結合アッセイした。イマチニブ溶液は実施例ＬＸＸＶの通りである。
【０４９０】
結果：イマチニブによる処理は、１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合の非処理対照の１５％までの増加により示される通り（０.１−１.０μＭ）、Ｔ−４７Ｄ乳癌細胞において、細胞当たりのＧＲＰ受容体特異的シグナルの増加をもたらした。
【０４９１】
解釈：これは、多重キナーゼ阻害剤（Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ；ＰＤＧＦおよび幹細胞因子（ＳＣＦ）、ＫｉｔおよびＰＤＧＦＲも阻害する）とＧＲＰＲとの間のクロストークを立証する；解釈は、実施例ＬＸＶＩＩＩと同一である。結果は、実施例ＬＸＶＩの表２４に記録されている。
【０４９２】
実施例ＬＸＸＶＩＩ  −  ＰＣ−３前立腺癌細胞におけるイマチニブの効果のインビトロでの証明。
ＰＣ−３細胞を実施例ＬＸＶＩおよびＬＸＶＩＩＩの通りに維持し、処置し、そして結合アッセイしており、そしてイマチニブ溶液は実施例ＬＸＸＶにおける通りである。
【０４９３】
結果：イマチニブでの処置は、未処置対照の１５−２５％までの１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合の減少により示される通り、ＰＣ−３前立腺癌細胞において細胞あたりのＧＲＰ受容体特異的シグナルの低下をもたらした(範囲０.１−１.０μM)。
【０４９４】
解釈：多重キナーゼ阻害剤(Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ；ＰＤＧＦおよび幹細胞因子(ＳＣＦ)、Ｋｉｔ、およびＰＤＧＦＲも阻害する)とＧＲＰＲの間のクロストークを証明する；実施例ＬＸＩＸと同じ解釈である。結果は実施例ＬＸＶＩの表２４に記載する。
【０４９５】
実施例ＬＸＸＶＩＩＩ  −  ＢＴ−４７４ヒト乳癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するエルロチニブの効果のインビトロでの証明。
ＢＴ−４７４細胞を、実施例ＬＸＶＩの通りに維持し、処置し、そして結合アッセイした。
エルロチニブ溶液：
ストック：１００mM  ＣＨ３ＣＯＯＨ中の１mMストックを９５％エタノール中に調製した
作業：完全増殖培地中０.１−１.０μM
【０４９６】
結果：エルロチニブでの処置は、０.１−１.０μMで未処置対照と１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合が同等であることにより示される通り、ＢＴ−４７４乳癌細胞において細胞あたりのＧＲＰ受容体特異的シグナルを変化させなかった。
【０４９７】
解釈：これは、ＥＧＦＲとＧＲＰ−Ｒの間のクロストークを証明する；実施例ＬＸＶＩＩＩと同じ解釈である。結果は実施例ＬＸＶＩの表２４に記載する。
【０４９８】
実施例ＬＸＸＩＸ  −  Ｔ４７Ｄヒト乳癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するエルロチニブの効果のインビトロでの証明。
Ｔ−４７Ｄ細胞を、実施例ＬＸＶＩおよびＬＸＶＩＩの通りに維持し、処置し、そして結合アッセイしており、そしてエルロチニブ溶液は実施例ＬＸＸＶＩＩＩにおける通りである。
【０４９９】
結果：エロチニブでの処置は、未処置対照の５−２０％までの１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合の増加により示される通り、Ｔ−４７Ｄ乳癌細胞において細胞あたりのＧＲＰ受容体特異的シグナルの増加をもたらした(範囲０.１−１.０μM)。
【０５００】
解釈：これは、ＥＧＦＲとＧＲＰ−Ｒの間のクロストークを証明する；実施例ＬＸＶＩと同じ解釈である。結果は実施例ＬＸＶＩの表２４に記載する。
【０５０１】
実施例ＬＸＸＸ  −  ＰＣ−３前立腺癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するエルロチニブの効果のインビトロでの証明。
ＰＣ−３細胞を、実施例ＬＸＶＩおよびＬＸＶＩＩＩの通りに維持し、処置し、そして結合アッセイしており、そしてエルロチニブ溶液は実施例ＬＸＸＶＩＩＩにおける通りである。
【０５０２】
結果：エロチニブでの処置は、未処置対照の５−２０％までの１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合の減少により示される通り、ＰＣ−３前立腺癌細胞において細胞あたりのＧＲＰ受容体特異的シグナルの低下をもたらした(範囲０.１−１.０μM)。
【０５０３】
解釈：これは、ＥＧＦＲとＧＲＰ−Ｒの間のクロストークを証明する；実施例ＬＸＩＸと同じ解釈である。結果は実施例ＬＸＶＩの表２４に記載する。
【０５０４】
実施例ＬＸＸＸＩ  −  ＢＴ−４７４ヒト乳癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するソラフェニブの効果のインビトロでの証明。
ＢＴ−４７４細胞を、実施例ＬＸＶＩの通りに維持し、処置し、そして結合アッセイした。
ソラフェニブ溶液：
ストック：１００mM  ＣＨ３ＣＯＯＨ中の１mMストックを９５％エタノール中に調製した
作業：完全増殖培地中０.１−１.０μM
【０５０５】
結果：ソラフェニブでの処置は、未処置対照の１０−２５％までの１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合の減少により示される通り、ＢＴ−４７４乳癌細胞において細胞あたりのＧＲＰ受容体特異的シグナルの低下をもたらした(範囲０.１−１.０μM)。
【０５０６】
解釈：これは、多重キナーゼ阻害剤(ＰＤＧＦＲｂａ／ＶＥＧＦＲ１、２、３／ＫＩＴ、ＦＬＴ３／ＥＧＦ／Ｒａｓ／Ｒａｆキナーゼ)とＧＲＰＲの間のクロストークを証明する；実施例ＬＸＩＸと同じ解釈である。結果は実施例ＬＸＶＩの表２４に記載する。
【０５０７】
実施例ＬＸＸＸＩＩ  −  Ｔ４７Ｄヒト乳癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するソラフェニブの効果のインビトロでの証明。
Ｔ−４７Ｄ細胞を、実施例ＬＸＶＩおよびＬＸＶＩＩの通りに維持し、処置し、そして結合アッセイしており、そしてソラフェニブ溶液は実施例ＬＸＸＸＩにおける通りである。
【０５０８】
結果：ソラフェニブでの処置は、０.１−１.０μMで未処置対照と１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合が同等であることにより示される通り、Ｔ−４７Ｄ乳癌細胞において細胞あたりのＧＲＰ受容体特異的シグナルを変化させなかった。
【０５０９】
解釈：これは、多重キナーゼ阻害剤(ＰＤＧＦＲｂａ／ＶＥＧＦＲ１、２、３／ＫＩＴ、ＦＬＴ３／ＥＧＦ／Ｒａｓ／Ｒａｆキナーゼ)とＧＲＰＲの間のクロストークを証明する；実施例ＬＸＶＩＩＩと同じ解釈である。結果は実施例ＬＸＶＩの表２４に記載する。
【０５１０】
実施例ＬＸＸＸＩＩＩ  −  ＰＣ−３前立腺癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するソラフェニブの効果のインビトロでの証明。
ＰＣ−３細胞を実施例ＬＸＶＩおよびＬＸＶＩＩＩの通りに維持し、処置し、そして結合アッセイしており、そしてソラフェニブ溶液は実施例ＬＸＸＸＩにおける通りである。
【０５１１】
結果：ソラフェニブでの処置は、未処置対象の１０−２０％までの１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合の減少により示される通り、ＰＣ−３前立腺癌細胞において細胞あたりのＧＲＰ受容体特異的シグナルの低下をもたらした(範囲０.１−１.０μM)。
【０５１２】
解釈：これは、多重キナーゼ阻害剤(ＰＤＧＦＲｂａ／ＶＥＧＦＲ１、２、３／ＫＩＴ、ＦＬＴ３／ＥＧＦ／Ｒａｓ／Ｒａｆキナーゼ)とＧＲＰＲの間のクロストークを証明する；実施例ＬＸＩＸと同じ解釈である。結果は実施例ＬＸＶＩの表２４に記載する。
【０５１３】
実施例ＬＸＸＸＩＶ  −  ＢＴ−４７４ヒト乳癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するスニチニブの効果のインビトロでの証明。
ＢＴ−４７４細胞を、実施例ＬＸＶＩの通りに維持し、処置し、そして結合アッセイした。
スニチニブ溶液：
ストック：１００mM  ＣＨ３ＣＯＯＨ中の１mMストックを９５％中に調製した
作業：完全増殖培地中０.１−１.０μM
【０５１４】
結果：スニチニブでの処置は、未処置対照の８％までの１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合の減少により示される通り、ＢＴ−４７４乳癌細胞における細胞あたりのＧＲＰ受容体特異的シグナルの低下をもたらした(範囲０.１−１.０μM)。
【０５１５】
解釈：これは、多重キナーゼ阻害剤(ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＥｒｂＢ３；ＰＤＧＦαおよびβ；幹細胞因子受容体(ＫＩＴ)；ＦＬＴ３；ＣＳＦ−１Ｒ；神経栄養(neurotropic)因子受容体(ＲＥＴ)とＧＲＰＲの間のクロストークを証明する；実施例ＬＸＩＸと同じ解釈である。結果は実施例ＬＸＶＩの表２４に記載する。
【０５１６】
実施例ＬＸＸＸＶ  −  Ｔ４７Ｄヒト乳癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するスニチニブの効果のインビトロでの証明。
Ｔ−４７Ｄ細胞を、実施例ＬＸＶＩおよびＬＸＶＩＩの通りに維持し、処置し、そして結合アッセイしており、そしてスニチニブ溶液は実施例ＬＸＸＸＩＶにおける通りである。
【０５１７】
結果：スニチニブでの処置は、未処置対照の１３％までの１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合の増加により示される通り、Ｔ−４７Ｄ乳癌細胞において細胞あたりのＧＲＰ受容体特異的シグナルの増加をもたらした(範囲０.１−１.０μM)。
【０５１８】
解釈：これは、多重キナーゼ阻害剤(ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＥｒｂＢ３；ＰＤＧＦαおよびβ；幹細胞因子受容体(ＫＩＴ)；ＦＬＴ３；ＣＳＦ−１Ｒ；神経栄養(neurotropic)因子受容体(ＲＥＴ)とＧＲＰＲの間のクロストークを証明する；実施例ＬＸＶＩと同じ解釈である。結果は実施例ＬＸＶＩの表２４に記載する。
【０５１９】
実施例ＬＸＸＸＶＩ  −  ＰＣ−３前立腺癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するスニチニブの効果のインビトロでの証明。
ＰＣ−３細胞を実施例ＬＸＶＩおよびＬＸＶＩＩＩの通りに維持し、処置し、そして結合アッセイしており、そしてスニチニブ溶液は実施例ＬＸＸＸＩＶにおける通りである。
【０５２０】
結果：スニチニブでの処置は、未処置対照の１０％までの１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合の増加により示される通り、ＰＣ−３前立腺癌細胞において細胞あたりのＧＲＰ受容体特異的シグナルの増加をもたらした(範囲０.１−１.０μM)。
【０５２１】
解釈：これは、多重キナーゼ阻害剤(ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＥｒｂＢ３；ＰＤＧＦαおよびβ；幹細胞因子受容体(ＫＩＴ)；ＦＬＴ３；ＣＳＦ−１Ｒ；神経栄養(neurotropic)因子受容体(ＲＥＴ)とＧＲＰＲの間のクロストークを証明する；実施例ＬＸＶＩと同じ解釈である。結果は実施例ＬＸＶＩの表２４に記載する。
【０５２２】
実施例ＬＸＸＸＶＩＩ  −  ＢＴ−４７４ヒト乳癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するアナストロゾールの効果のインビトロでの証明。
ＢＴ−４７４細胞を、実施例ＬＸＶＩの通りに維持し、処置し、そして結合アッセイした。
アナストロゾール溶液：
ストック：１００％エタノール中１mMストック
作業：完全増殖培地中０.１−１.０μM
【０５２３】
結果：アナストロゾールでの処置は、０.１−１.０μMで未処置対照と１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合が同等であることにより示される通り、ＢＴ−４７４乳癌細胞において細胞あたりのＧＲＰ受容体特異的シグナルを変化させなかった。
【０５２４】
解釈：これは、エストロゲン受容体とＧＲＰＲの間のクロストークを証明する；実施例ＬＸＶＩＩＩと同じ解釈である。結果は実施例ＬＸＶＩの表２４に記載する。
【０５２５】
実施例ＬＸＸＸＶＩＩＩ  −  Ｔ４７Ｄヒト乳癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するアナストロゾールの効果のインビトロでの証明。
Ｔ−４７Ｄ細胞を、実施例ＬＸＶＩおよびＬＸＶＩＩの通りに維持し、処置し、そして結合アッセイしており、そしてアナストロゾール溶液は実施例ＬＸＸＸＶＩＩにおける通りである。
【０５２６】
結果：アナストロゾールでの処置は、未処置対照の１０％までの１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合の減少により示される通り、Ｔ−４７Ｄ乳癌細胞においける細胞あたりのＧＲＰ受容体特異的シグナルの低下をもたらした(範囲０.１−１.０μM)。
【０５２７】
解釈：これは、エストロゲン受容体とＧＲＰＲの間のクロストークを証明する；実施例ＬＸＩＸと同じ解釈である。結果は実施例ＬＸＶＩの表２４に記載する。
【０５２８】
実施例ＬＸＸＸＩＸ  −  ＰＣ−３前立腺癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するアナストロゾールの効果のインビトロでの証明。
ＰＣ−３細胞を実施例ＬＸＶＩおよびＬＸＶＩＩＩの通りに維持し、処置し、そして結合アッセイしており、そしてアナストロゾール溶液は実施例ＬＸＸＸＶＩＩにおける通りである。
【０５２９】
結果：アナストロゾールでの処置は、未処置対照の１０％までの１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合の減少により示される通り、ＰＣ−３前立腺癌細胞における細胞あたりのＧＲＰ受容体特異的シグナルの低下をもたらした(範囲０.１−１.０μM)。
【０５３０】
解釈：これは、エストロゲン受容体とＧＲＰＲの間のクロストークを証明する；実施例ＬＸＩＸと同じ解釈である。結果は実施例ＬＸＶＩの表２４に記載する。
【０５３１】
実施例ＸＣ  −  ＢＴ−４７４ヒト乳癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するボルテゾミブの効果のインビトロでの証明。
ＢＴ−４７４細胞を、実施例ＬＸＶＩの通りに維持し、処置し、そして結合アッセイした。
ボルテゾミブ溶液：
ストック：１００％ＤＭＳＯ中１mMストック
作業：完全増殖培地中０.１−１.０μM
【０５３２】
結果：ボルテゾミブでの処置は、未処置対照の５０％までの１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合の減少により示される通り、ＢＴ−４７４乳癌細胞における細胞あたりのＧＲＰ受容体特異的シグナルの低下をもたらした(範囲０.１−１.０μM)。
【０５３３】
解釈：これは、ユビキチン経路の下流シグナル伝達とＧＲＰＲの間のクロストークを証明する；実施例ＬＸＩＸと同じ解釈である。結果は実施例ＬＸＶＩの表２４に記載する。
【０５３４】
実施例ＸＣＩ  −  Ｔ４７Ｄヒト乳癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するボルテゾミブの効果のインビトロでの証明。
Ｔ−４７Ｄ細胞を、実施例ＬＸＶＩおよびＬＸＶＩＩの通りに維持し、処置し、そして結合アッセイしており、そしてボルテゾミブ溶液は実施例ＸＣにおける通りである。
【０５３５】
結果：ボルテゾミブでの処置は、未処置対照の５０％までの１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合の減少により示される通り、Ｔ−４７Ｄ乳癌細胞において細胞あたりのＧＲＰ受容体特異的シグナルの低下をもたらした(範囲０.１−１.０μM)。
【０５３６】
解釈：これは、ユビキチン経路の下流シグナル伝達とＧＲＰＲの間のクロストークを証明する；実施例ＬＸＩＸと同じ解釈である。結果は実施例ＬＸＶＩの表２４に記載する。
【０５３７】
実施例ＸＣＩＩ  −  ＰＣ−３前立腺癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対するボルテゾミブの効果のインビトロでの証明。
ＰＣ−３細胞を実施例ＬＸＶＩおよびＬＸＶＩＩＩの通りに維持し、処置し、そして結合アッセイしており、そしてボルテゾミブ溶液は実施例ＸＣにおける通りである。
【０５３８】
結果：ボルテゾミブでの処置は、未処置対照の６０％までの１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合の減少により示される通り、ＰＣ−３前立腺癌細胞において細胞あたりのＧＲＰ受容体特異的シグナルの低下をもたらした(範囲０.１−１.０μM)。
【０５３９】
解釈：これは、ユビキチン経路の下流シグナル伝達とＧＲＰＲの間のクロストークを証明する；実施例ＬＸＩＸと同じ解釈である。結果は実施例ＬＸＶＩの表２４に記載する。
【０５４０】
実施例ＸＣＩＩＩ  −  ＢＴ−４７４ヒト乳癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対する４−ＯＨタモキシフェンの効果のインビトロでの証明。
ＢＴ−４７４細胞を、実施例ＬＸＶＩの通りに維持し、処置し、そして結合アッセイした。
４−ＯＨタモキシフェン溶液：
ストック：９５％エタノール中１mM
作業：完全増殖培地中０.００１−０.１μM
【０５４１】
結果：４−ＯＨタモキシフェンでの処置は、未処置対照の７３％までの１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合の減少により示される通り、ＢＴ−４７４乳癌細胞において細胞あたりのＧＲＰ受容体特異的シグナルの低下をもたらした(範囲０.００１−０.１μM)。
【０５４２】
解釈：これは、ＥＲとＧＲＰＲの間のクロストークを証明する；実施例ＬＸＩＸと同じ解釈である。結果は次の表２５に記載する：
【表３５】
2011520971.tif 000075
【０５４３】
実施例ＸＣＩＶ  −  Ｔ４７Ｄヒト乳癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対する４−ＯＨタモキシフェンの効果のインビトロでの証明。
Ｔ−４７Ｄ細胞を、実施例ＬＸＶＩおよびＬＸＶＩＩの通りに維持し、処置し、そして結合アッセイしており、そして４−ＯＨタモキシフェン溶液は実施例ＸＣＩＩＩにおける通りである。
【０５４４】
結果：４−ＯＨタモキシフェンでの処置は、未処置対照の３５％までの１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合の減少により示される通り、Ｔ−４７Ｄ乳癌細胞における細胞あたりのＧＲＰ受容体特異的シグナルの低下をもたらした(範囲０.００１−０.１μM)。
【０５４５】
解釈：これは、ＥＲとＧＲＰＲの間のクロストークを証明する；実施例ＬＸＩＸと同じ解釈である。結果を実施例ＸＣＩＩＩの表２５に記載する。
【０５４６】
実施例ＸＣＶ  −  ＰＣ−３前立腺癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対する４−ＯＨタモキシフェンの効果のインビトロでの証明。
ＰＣ−３細胞を実施例ＬＸＶＩおよびＬＸＶＩＩＩの通りに維持し、処置し、そして結合アッセイしており、そして４−ＯＨタモキシフェン溶液は実施例ＸＣＩＩＩにおける通りである。
【０５４７】
結果：タモキシフェン(４−ＯＨ  ＴＭＸ)での処置は、０.００１−０.１μMの範囲で未処置対照と１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合が同等であることにより示される通り、ＰＣ−３前立腺癌細胞において細胞あたりのＧＲＰ受容体特異的シグナルを変化させなかった。
【０５４８】
解釈：これは、ＥＲとＧＲＰＲの間のクロストークを証明する；実施例ＬＸＶＩＩＩと同じ解釈である。結果を実施例ＸＣＩＩＩの表２５に記載する。
【０５４９】
実施例ＸＣＶＩ  −  ＢＴ−４７４ヒト乳癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対する４−ＯＨタモキシフェンとβ２−エストラジオールの効果のインビトロでの証明。
ＢＴ−４７４細胞を、β２−エストラジオールを添加する以外、実施例ＬＸＶＩの通りに維持し、処置し、そして結合アッセイした(下記参照)。
４−ＯＨタモキシフェン溶液：
ストック：９５％エタノール中１mM
作業：完全増殖培地中０.００１−０.１μM
β２−エストラジオール溶液：
ストック：９５％エタノール中１mM
作業：完全増殖培地中１nM
【０５５０】
処置：ＢＴ−４７４細胞を０日目に播種し、１日目および２日目(ＤＴ１、ＤＴ２)に処理した。培地を除去し、新鮮増殖培地(対照)；またはＤＴ１に増殖培地、続いてＤＴ２に１nM  β２−エストラジオール；またはＤＴ１に４−ＯＨタモキシフェン、続いてＤＴ２に１nM  β２−エストラジオールのいずれかに置き換えた。
【０５５１】
結果：β２−エストラジオールでの処理は、対照を４７％超える１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合の増加により示される通り、ＢＴ−４７４乳癌細胞においてＧＲＰ受容体特異的シグナルを増加させた。４−ＯＨタモキシフェンと、続くβ２−エストラジオールでの処置は、４−ＯＨタモキシフェン処置単独で得られた値を変化させなかった(実施例ＸＣＩＩＩ参照)。
【０５５２】
解釈：これは、ＥＲとＧＲＰＲの間のクロストークを証明する；実施例ＬＸＶＩと同じ解釈である。結果を実施例ＸＣＩＩＩの表２５に記載する。
【０５５３】
実施例ＸＣＶＩＩ  −  Ｔ４７Ｄヒト乳癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対する４−ＯＨタモキシフェンとβ２−エストラジオールおよびβ２−エストラジオール単独の効果のインビトロでの証明。
Ｔ４７Ｄ細胞を、実施例ＬＸＶＩおよびＬＸＶＩＩ、およびＸＣＶＩの通りに維持し、処置し、そして結合アッセイした。
【０５５４】
結果：β２−エストラジオールでの処は、Ｔ４７Ｄ乳癌細胞における細胞あたりのＧＲＰ受容体特異的シグナルを変化させなかった。タモキシフェンと、続くβ２−エストラジオールでの処理は、Ｔ−４７Ｄ乳癌細胞における細胞あたりのＧＲＰ−Ｒを２７％、タモキシフェン単独と比較して８％少なく減少させた(実施例ＸＣＩＶ)。
【０５５５】
解釈：これは、ＥＲとＧＲＰＲの間のクロストークを証明する；実施例ＬＸＶＩＩＩと同じ解釈である。結果を実施例ＸＣＩＩＩの表２５に記載する。
【０５５６】
実施例ＸＣＶＩＩＩ  −  ＰＣ−３前立腺癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対する４−ＯＨタモキシフェンとβ２−エストラジオールの効果のインビトロでの証明。
ＰＣ−３細胞を、実施例ＬＸＶＩおよびＬＸＶＩＩＩ、およびＸＣＶＩの通りに維持し、処置し、そして結合アッセイした。
【０５５７】
結果：β２−エストラジオールまたは４−ＯＨタモキシフェンと、続くβ２−エストラジオールでの処置は、０.００１−０.１μMの範囲で未処置対照と１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合が同等であることにより示される通り、ＰＣ−３前立腺癌細胞における細胞あたりのＧＲＰ受容体特異的シグナルを変化させなかった。
【０５５８】
解釈：これは、ＥＲとＧＲＰＲの間のクロストークを証明する；実施例ＬＸＶＩＩＩと同じ解釈である。結果を実施例ＸＣＩＩＩの表２５に記載する。
【０５５９】
実施例ＸＣＩＸ−  ＰＣ−３前立腺癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合およびグルコース取り込みに対するダサチニブの効果のインビトロでの証明(一プレートアッセイ法を使用)
方法：ＰＣ−３(ヒト前立腺腺癌、骨転移、ＡＲ−、ＥＲ)を、American Type Culture Collectionから得た。ＰＣ−３細胞の増殖培地は、１０％熱不活性化ＦＢＳ(Hyclone, SH30070.03)およびＰＳＦ−１ｘ(実施例ＬＸＶＩにおける通り)を補ったRPMI 1640(10-041-CM, Mediatech, Inc)である。細胞を０日目に播種した(７.５ｋ／ウェル  ９６ウェルPE Scintiplate)。播種約２４時間後、処置１日目および２日目(ＤＴ１、ＤＴ２)に、培地を除去し、新鮮増殖培地(対照)、またはダサチニブ(０−０.１μM)添加増殖培地に置き換えた。３日目に、１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合アッセイを先に記載の通りに行った。細胞数および増殖を測定するために、１００μLのＤＰＢＳ中１０％ＣＣＫ−Ｆ溶液(Molecular technologies)を同じプレートに添加し、３０分間、３７℃でインキュベートし、５３５nmで相対蛍光(ＲＦＵ)を測定した。細胞数および１７７Ｌｕ結合に基づき、Ｂｍａｘ(fmoles結合／１００万細胞)を計算し、結果を対照と比較した。
【０５６０】
グルコース取り込み試験について、蛍光標識した２−デオキシグルコース誘導体(２−ＮＢＤＧ)を使用した。上記の通りのダサチニブ処置後、細胞を、結合緩衝液中２−ＮＢＤＧ(２００uM)と２時間、３７℃でインキュベートし、ＲＦＵを５３０nmで測定した。細胞数を上に記載したＣＣＫ−Ｆを使用して決定した。細胞数に基づき、グルコース取り込みについてのＢｍａｘを決定し、対照と比較した。
【０５６１】
予測通り、細胞増殖の有意な減少があり、増殖阻害は、１００nM  ダサチニブで最大３３％であった。驚くべきことに、１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ取り込みは、ダサチニブ処置(対照)無しでの２６６fmoles／１００万細胞の平均Ｂｍａｘから、１００nM  ダサチニブで４７０fmoles／１００万細胞まで上昇し、７６.７％の上昇であった。グルコース取り込みは、１００nM  ダサチニブで最大６７.８％下がった。
【表３６】
2011520971.tif 000076
この結果は、ＧＲＰ受容体活性がＳｒｃ受容体ファミリーに対して標的化したダサチニブ処置の効果を立証する能力を証明する。
【０５６２】
実施例Ｃ  −  ＺＲ−７５−１ヒト乳癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合およびグルコース取り込みに対する４−ヒドロキシタモキシフェンの効果のインビトロでの証明
方法：ＺＲ−７５−１乳癌細胞株(エストロゲン受容体を有するヒト腺管癌)をAmerican Type Culture Collection(ＡＴＣＣ)から得た。細胞を、T-150 CellBind Tissue培養フラスコ(Corning)中、１０％熱不活性化ＦＢＳ(hyclone, SH30070.03)を補ったＡＴＣＣ(Cat No:30-2001)からの完全増殖、ＲＰＭＩ−１６４０培地で培養し、５％ＣＯ２／９５％空気を含む加湿雰囲気下、３７℃で維持した。細胞を、Mediatech, Inc. (Cat No:25-053-cl)からの０.２５％トリプシン／ＥＤＴＡを使用して一般的な方法で継代した。
【０５６３】
ＺＲ−７５−１細胞を０日に播種した(４０ｋ／ウェル  ９６ウェルPE Scintiplate)。播種約４８後、処置時、２日目および３日目(ＤＴ２、ＤＴ３)に、培地を除去し、新鮮増殖培地(対照)、または４−ヒドロキシタモキシフェン(０−０.１μM)を添加した増殖培地に置き換えた。４日目に、１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合アッセイを先に記載の通りに行った。細胞数および増殖を測定するために、１００μLのＤＰＢＳ中１０％ＣＣＫ−Ｆ溶液(Molecular technologies)を同じプレートに添加し、３０分間、３７℃でインキュベートし、５３５nmで相対蛍光(ＲＦＵ)を測定した。細胞数および１７７Ｌｕ結合に基づき、Ｂｍａｘ(fmol結合／１００万細胞)を計算した。
【０５６４】
グルコース取り込み試験について、蛍光標識した２−デオキシグルコース誘導体(２−ＮＢＤＧ)を使用した。上記の通り４−ヒドロキシタモキシフェン処置後、細胞を結合緩衝液中２−ＮＢＤＧ(２００ｕＭ)と２時間、３７℃でインキュベートし、ＲＦＵを５３０nmで測定した。細胞数を、上記の通りＣＣＫ−Ｆ処置により決定した。
【表３７】
2011520971.tif 000077
【０５６５】
これらの濃度で試験した細胞増殖はわずかしか変化しなかった。ＺＲ−７５−１細胞における１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡの相対的取り込みは、１−１００nM  ４−ＯＨタモキシフェン処置後４０−７０％まで有意に減少したが、２−ＮＢＤＧ取り込みで証明される通り、解糖は中程度の減少(〜２０％)しかなかった。この結果は、ＧＲＰ受容体活性がエストロゲン受容体に対して標的化したタモキシフェン処置の効果を立証する能力を証明する。
【０５６６】
実施例：ＣＩ  −  ＺＲ−７５−１ヒト乳癌細胞におけるＧＲＰ受容体結合に対する４−ヒドロキシタモキシフェンの長期(２−１２日間)効果のインビトロでの証明
方法：
１. ＧＲＰ取り込みに対する４−ＯＨタモキシフェン処置の２日目の効果：ＺＲ−７５−１乳癌細胞株を上記の通り培養した。４−ＯＨ  Ｔａｍでの２日間試験と続く１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ取り込みは上記の通り行った。
【０５６７】
２. ＺＲ−７５−１細胞におけるＧＲＰまたはグルコース取り込みに対する４−ＯＨタモキシフェンの５日目の効果：
２日間試験としてＺＲ−７５−１細胞を、１５Ｋ／ウェルで、２個の９６ウェルscintiplateに同じ日に播種した。処置を１００nM  ４−ＯＨタモキシフェンで２日目から５日目まで毎日行った。ＺＲ−７５−１細胞における４−ＯＨタモキシフェンのＧＲＰ−Ｒまたはグルコース取り込みに対する効果を、６日目に２日間  ４−ＯＨタモキシフェン試験の効果と同じ方法により決定した。
【０５６８】
３. ４−ＯＨタモキシフェンのＺＲ−７５−１細胞におけるＧＲＰまたはグルコース取り込みに対する１１日目の効果：
ＺＲ−７５−１細胞を、この試験が開始する同じ日にＴ−７５  ＴＣフラスコで培養し、細胞を１００nM  ４−ＯＨタモキシフェンで、２日目から５日目まで毎日処置したか、または処置しなかった。６日目に、細胞を１５Ｋ／ウェルで２個の９６ウェルscintiplateｓに播種し、処置を１００nM  ４−ＯＨタモキシフェンで１１日目まで毎日行った。４−ＯＨタモキシフェンのＺＲ−７５−１細胞におけるＧＲＰ−Ｒまたはグルコース取り込みにおける効果を、１２日目に先に適用したのと同じ方法により決定した。
【表３８】
2011520971.tif 000078
【０５６９】
結果は、ＺＲ−７５−１の４−ＯＨタモキシフェンの長期処置は、ＺＲ−７５−１細胞増殖を、１２日目までに見られる２８％阻害まで減少させることを示した。処置に応答した１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡ取り込みの有意な変化が、２−ＮＢＤＧ取り込みのわずかな変化と共に見られた。この結果は、ＧＲＰ受容体活性がエストロゲン受容体に対して標的化したタモキシフェン処置の効果を立証する能力を証明する。６７Ｇａ−ＡＭＢＡは、かかる処置経過をモニターするために１８Ｆ−ＦＤＧよりもよく試験されている。
【０５７０】
実施例ＣＩＩ  −  Ｇａ−ＡＭＢＡ(Ｇａ−Ｌ７０)の製造および特徴付け。
(ａ)ＡＭＢＡリガンド：
ＡＭＢＡ[(ＤＯ３Ａ−ＣＨ２ＣＯ−Ｇ−(４−アミノベンゾイル)−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ２)、ＤＯ３Ａ＝(１,４,７,１０−テトラアザ−４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−シクロドデシル)−アセチル]を、米国特許第７,２２６,５７７号(Cappelletti et al)に記載されている、固相ペプチド合成化学を使用して合成した。
【０５７１】
このリガンドの構造式を以下に示す。
【化９】
2011520971.tif 000079
【０５７２】
(ｂ)非放射性Ｇａ−ＡＭＢＡ標準の合成：
非放射性Ｇａ−ＡＭＢＡのサンプルを、ＡＭＢＡリガンド(２５μg)とセレノメチオニン(２００μg)を、０.２mLの０.２Ｍ  ＮａＯＡｃ緩衝液(ｐＨ４.８)中、２μgのガリウムと混合することにより製造した(Gallium AAS標準溶液)。これは、１.８から１のＧａ対リガンド比を示す。過剰のＧａを使用して全ＡＭＢＡリガンドを消費させ、続く精製をより容易なものとした。この混合物を１００℃で１０分間加熱した。配位後、２０μLの１０mM  ＥＤＴＡを反応溶液に添加して、残った遊離ガリウムをすべてキレート化させた。このＧａ−ＡＭＢＡ反応溶液を、次に記載する条件を使用してＬＣ／ＭＳ分析のためのＨＰＬＣに注入した。
【０５７３】
カラム：Zorbax Bonus-RP包埋アミドＣ１４(２５０mm×４.６mm、サイズ５μm)。溶媒：Ａ：Ｈ２Ｏ／０.１％ギ酸／０.０１％ＴＦＡ(ｖ／ｖ)；Ｂ：アセトニトリル／０.１％ギ酸／０.０１％ＴＦＡ(ｖ／ｖ)。勾配は以下の表２６に記載する。流速：０.６mL／分。カラム温度：３７℃。
【表３９】
2011520971.tif 000080
【０５７４】
ＬＣ／ＭＳに使用したＨＰＬＣ条件下で、Ｇａ−ＡＭＢＡの保持時間は〜２４.８分間であった。天然に存在するガリウムは、２種の非放射性同位体、Ｇａ−６９およびＧａ−７１のそれぞれ６０.１１％および３９.８９％の量での混合物である。Ｇａ−ＡＭＢＡの同位体質量の測定値と予測値はよく一致した。
【表４０】
2011520971.tif 000081
【０５７５】
第二の非放射性Ｇａ−ＡＭＢＡ標準を、１０mLの０.２  Ｍ、ｐＨ４.８  ＮａＯＡｃ緩衝液に溶解した１０mgの“そのままの”ＡＭＢＡを０.８mgのガリウムで処理することにより製造した(Gallium AAS標準溶液)。この反応において、Ｇａ対リガンド比は、〜２から１であった。続くＧａ−ＡＭＢＡ複合体の精製を容易にするため、過剰のＧａを使用してキレート化中に全てのＡＭＢＡを消費させた。この混合物を１００℃で２０分間加熱した。配位後、２mLの１０mM  ＥＤＴＡを反応溶液に添加して、残った遊離ガリウムをすべてキレート化させた
【０５７６】
このＧａ−ＡＭＢＡを、次に記載するＨＰＬＣ条件を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製した。
【表４１】
2011520971.tif 000082
【０５７７】
Ｇａ−ＡＭＢＡピークを回収し、凍結乾燥した。Ｇａ−ＡＭＢＡの８.４mgサンプルを得て、元素分析の結果は２０３７.６(３ＴＦＡ・７Ｈ２Ｏ)の式重量と一致した。
【表４２】
2011520971.tif 000083
【０５７８】
(ｃ)６７Ｇａ−ＡＭＢＡの製造：
６７Ｇａ−ＡＭＢＡを、本明細書および同時係属米国出願第１１／７５１,３３７号に記載する１７７Ｌｕ−ＡＭＢＡに使用したものに準じる方法を使用して製造した。５０μLの０.２Ｍ、ｐＨ４.８  ＮａＯＡｃ緩衝液中のＡＭＢＡ(無水リガンド６μg、４nmol)およびセレノメチオニン(０.０５mg)を１.７mCiの６７ＧａＣｌ３(Nordion)と混合した。反応バイアルを１００℃の加熱ブロックで１０分間加熱し、次いで〜２分間室温度水浴で冷却した。冷却後、静菌０.９％塩化ナトリウム注射液ＵＳＰおよびASCOR L500(登録商標)アスコルビン酸注射液ＵＳＰの０.１mLの９：１混合物をバイアルに添加し、続いて２０μLの１０mM  ＥＤＴＡを添加して、残っている遊離放射性核種を全て配位させた。この未精製反応混合物のＲＣＰは９０.１％であった。この反応混合物の一定量を、次のＨＰＬＣ系を使用してＨＰＬＣ精製して、過剰のリガンドを除去した。カラム：Zorbax Bonus-RP包埋アミドＣ１４(２５０mm×４.６mm、サイズ５μm、Agilent)。カラム温度：３７℃、流速：１.５mL／分。勾配：移動相Ａ＝Ｈ２Ｏ、Ｂ＝０.１％トリフルオロ酢酸(ＴＦＡ)(ｖ／ｖ)および３０mM(ＮＨ４)２ＳＯ４含有Ｈ２Ｏ。(３.９６ｇ／Ｌ)、Ｃ＝メタノール(ＭｅＯＨ)、およびＤ＝アセトニトリル(ＡＣＮ)。
【表４３】
2011520971.tif 000084
【０５７９】
所望のフラクションを１mLの０.１％ＨＳＡ含有静菌生理食塩水／ASCOR L500(９：１)に回収した。有機物を高速真空(speed vacuum)を使用して除去し、最終生成物を０.１％ＨＳＡ含有静菌食塩水／ASCOR L500の９：１混合物を使用して０.１mCi／mLに希釈した。最終ＲＣＰは９９.８％であった。製造時の６７Ｇａ−ＡＭＢＡの平均異的活性は、〜２０Ci／μmoleであった。Ｇａ−ＡＭＢＡ標準(２６.２分間)の保持時間は、検出器補正を考慮に入れたとき、６７Ｇａ−ＡＭＢＡ(２６.４分間)のものと同じであった。
【０５８０】
（ｄ）67Ｇａ−ＡＭＢＡのＰＣ−３腫瘍細胞へのインビトロの結合
【０５８１】
ヒト前立腺癌（ＰＣ−３）細胞を、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション(ＡＴＣＣ、Ｌｏｔ＃３２５０)から得て、組織培養フラスコ(Corning)内でＬ−グルタミンおよび２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ(Cellgro, cat# 10-041-CMから得る)を含有するＲＰＭＩ−１６４０中で培養した。この増殖培地に、１０％の熱不活化ＦＢＳ(Hyclone, SH30070.03)およびファンギゾン(０.２５μｇ／ｍＬ)を追加した。全ての培養物を、３７℃、５％ＣＯ2を含む加湿大気中に維持し、０.２５％トリプシン/ＥＤＴＡ(VWR, Cat # 45000-664)を用いて定期的に継代した。細胞を、９６ウェルの白色/透明な底の組織培養プレート(Falcon Optilux-I)中で２０ｘ１０３/ウェルの濃度で播種した。コンフルエントになった場合に、全細胞数が約２５-３０ｘ１０３細胞/ウェルであると決定した。このプレートを、播種後２日目に結合試験に使用した。結合緩衝液は、０.２％ＢＳＡ(ｗ／ｖ)、０.５ｍＭ ＰＭＳＦ(AEBSF)、バシトラシン(Sigma, lot # 60K082；５０ｍｇ／５００ｍｌ)(ｐＨ７.２)(RPMI-1640はCellgro, Cat# 10-041-Cm, Lot # 10041059から得た)を追加したＲＰＭＩ−１６４０であった。
【０５８２】
９６ウェルプレートアッセイを用いて、67Ｇａ−ＡＭＢＡのＧＲＰ−Ｒへの結合を阻害するための、非放射性活性Ｇａ−ＡＭＢＡのＥＣ50を決定した。全ての試験した化合物を、結合緩衝液に溶解し、好適な希釈もまた結合緩衝液にて行った。アッセイのために、１.０ｘ１０-9Ｍ〜５０x１０-9Ｍの濃度範囲の、ＡＭＢＡリガンド、または非放射活性金属錯体のＬｕ−ＡＭＢＡまたはＧａ−ＡＭＢＡを、全容量（７５μL）中で67Ｇａ−ＡＭＢＡ(０.０３５μＣｉ、１.５μＣｉ／ｍＬ)と共にコインキュベートした。これらの試験を、各データ点に対して３枚のウェルを用いて、１ウェルあたり７５μＬのアッセイ容量で行った。好適な溶液の添加後に、プレートを１時間４℃でインキュベートした。結合試験を、リガンド−受容体複合体の取込みを予防するために４℃で行った。インキュベーションを、氷冷インキュベーション緩衝液(２００μL)の添加により終了した。プレートを、５回洗浄し、吸い取り乾燥させた。該細胞結合放射活性を、LKB CompuGamma カウンター用いて検出した。このデータを、GraphPad Prizm ソフトウェアにより分析し、５０％の結合を阻害するのに必要な“有効濃度”(ＥＣ50値)を得た。
【０５８３】
プレートアッセイを用いる67Ｇａ−ＡＭＢＡの飽和結合試験:
67Ｇａ−ＡＭＢＡの飽和結合について、次の一般的な方法を使用した：ＰＣ−３細胞を上記したとおりに播種し、コンフルエントとし、その後各ウェルに、三連の異なる濃度[０−５０ｎＭ]（７５μＬ）にて67Ｇａ−ＡＭＢＡ[ストック：２０μＣｉ／ｍＬ、５０ｎＭ]を加えた担体を添加し、細胞を４℃で１時間インキュベートした。平行試験において、該細胞を、様々な濃度の６７Ｇａ−ＡＭＢＡと共に、大過剰量のコールドのＧａ−ＡＭＢＡ(１μＭ)の存在下にてインキュベートし、任意の非特異的結合(ＮＳＢ)を決定した。非結合放射活性を洗い流した後、該細胞に結合した全放射活性を決定した。該データを、GraphPad Prism ソフトウェアを用いて分析して、ＫｄおよびＢｍａｘ値を得た。受容体数をＢｍａｘ値から計算した。
【０５８４】
取込みおよび流出量アッセイ:
ＰＣ−３細胞を、結合緩衝液(全アッセイ容量７５μＬ)中で67Ｇａ−ＡＭＢＡ（100,000 cpm、７５μL、１μＣｉ／ｍＬ)と共に４０分間３７℃でインキュベートした。インキュベーションを、氷冷結合緩衝液(２００μL)の添加により停止し、非結合放射活性を、結合緩衝液(４℃)を用いて洗浄することにより(４ｘ)排除した。細胞表面に結合した放射リガンドを除くために、該細胞を、４分間０−５℃で(氷浴)０.２Ｍ 酢酸の生理食塩水（ｐＨ２.８)と共にインキュベートした。各ウェルからこの溶液(酸の洗浄培養基)を、それぞれ収集した。酸洗浄を、再度反復し、合わせた溶液をγカウンターで計測して、この表面の結合放射活性を決定した。次いで、該細胞を、０.５Ｎ ＮａＯＨ(１００μＬ／ウェル)を用いて３分間室温で処理することにより溶解させた。各ウェルからの溶液を個々に収集した。０.５Ｎ ＮａＯＨとのインキュベーションを再度繰り返した。合わせた溶液を計測して、ＰＣ−３細胞に取込まれた放射活性物質の量を決定した。全てのサンプルを、γカウンターで分析した。
【０５８５】
流出量試験について、ＰＣ−３細胞と67Ｇａ−ＡＭＢＡ(７５μＬ、１μＣｉ／ｍＬ)とを４０分間３７℃でインキュベートした後に、この非結合物質を、コールドの結合緩衝液(４℃)を用いて洗い流した(４ｘ)。新たな結合培養基(２００μL)を各ウェルに添加し、該細胞を、３時間までインキュベートした。０、１、２および３時間の、培養基の放射活性(観察された流出量)、表面結合量(酸洗浄）および取込み量(溶解物)を、上記のとおりに決定した。
【０５８６】
培養基中で観察された流出量は細胞表面から放出された放射活性を含むために、真の流出量を、下記式を用いて各時点での細胞内への取込みを維持した放射性活性から計算した：
【表４４】
2011520971.tif 000085
【０５８７】
ＡＭＢＡは、177Ｌｕ−ＡＭＢＡおよび67Ｇａ−ＡＭＢＡの双方と同等に十分競合することを示し、そのＥＣ50は、各々２.９５(±０.２８)および２.８９(±０.１８)ｎＭであった。同様に、ＡＭＢＡのＬｕおよびＧａ-キレートは、１.０−１.５ｎＭ[ＥＣ50]にて67Ｇａ−ＡＭＢＡおよび177Ｌｕ−ＡＭＢＡと競合および交差競合する。
【０５８８】
放射性標識したＡＭＢＡと、ＡＭＢＡリガンドおよび非放射活性金属錯体のＰＣ−３細胞への競合結合の比較
【表４５】
2011520971.tif 000086
【０５８９】
ＬｕおよびＧａ−ＡＭＢＡの双方は、金属不含ＡＭＢＡよりも低い濃度であっても67Ｇａ−ＡＭＢＡおよび177Ｌｕ−ＡＭＢＡと競合および交差競合することが判った。例えば、金属キレート(Ｌｕ−ＡＭＢＡおよびＧａ−ＡＭＢＡ)に対するＥＣ50値は１.０−１.５ｎＭの範囲内であることが判ったが、一方金属不含ＡＭＢＡは、常に若干高いＥＣ50値(２.８９-２.９５ｎＭ)を示した。
【０５９０】
結合親和性を、ＰＣ−３中において、67Ｇａ−ＡＭＢＡを添加した担体のＧＲＰ−Ｒへの飽和結合により決定した。このデータを、Prizmソフトウェアにより分析し、親和性(ｋＤ)および結合能(Ｂｍａｘ)を得た。Ｂｍａｘ値から、受容体密度を計算した。
【０５９１】
この結果から、67Ｇａ−ＡＭＢＡの親和性[ｋＤ０.４６±０.０７ｎＭ]が、ＰＣ−３細胞中のＧＲＰ−Ｒに対する177Ｌｕ−ＡＭＢＡ(ｋＤ０.４４±０.０８ｎＭ)の親和性と類似していることが判った。同様に、この４０２fmoles/million 細胞および受容体数２４２０００/細胞のＢｍａｘは、177Ｌｕ−ＡＭＢＡ試験(Ｂｍａｘ４０８ fmoles/million 細胞、および受容体２４５０００/細胞)から得たものと類似する。
【０５９２】
ＰＣ−３細胞による67Ｇａ−ＡＭＢＡおよび177Ｌｕ−ＡＭＢＡの結合の比較
【表４６】
2011520971.tif 000087
【０５９３】
67Ｇａ−ＡＭＢＡとＰＣ−３細胞とのプレインキュベーション後に、全細胞結合放射活性の７８.４％が取込まれ、表面結合が２０.９％に達したことが判った。取込み活性の大部分は、３時間後でさえ取込みを維持した。２時間時の計算された流出量は、２.４％であると決定された。表面結合活性は、全取込みの１５-２０％を維持した。異なる時点(観察された流出量)で培養基中に見られる放射性活性は、殆どが細胞表面結合活性に由来するようである。67Ｇａ−ＡＭＢＡの取込みおよび流出のパターンが、177Ｌｕ−ＡＭＢＡのものと同じであることが判った。
【０５９４】
ＰＣ−３細胞による放射性標識ＡＭＢＡに関する取込みおよび流出量の比較
【表４７】
2011520971.tif 000088
【０５９５】
実施例ＣＩＩＩ−ＰＣ−３の腫瘍担持免疫不全オスマウスにおけるルテチウム-１７７またはガリウム-６７により標識したＡＭＢＡの生体内分布データ
生体内分布試験を、ＨＰＬＣ精製物質の放射活性の痕跡用量レベル(５０μＣｉ／ｍＬ)を用いて行った。対象（ｎ＝４／ガリウム-６７群、ｎ＝９／ルテチウム-１７７群) を、０.１ｇの最近傍値まで秤量して、この体重を記録した。各対象を、０.１ｍＬ用量の67Ｇａ−ＡＭＢＡ(０.０００２μg)または177Ｌｕ−ＡＭＢＡ(平均０.００２６μg)のいずれかを尾部血管静脈内投与により投与した。滞留期間の終時に、該対象を、頸椎脱臼により屠殺した。屠殺直後に、評価すべき所定の組織を回収した。摘出した臓器、組織、および血液のアリコートを秤量し(最近傍値ｍｇまで)、Perkin-Elmer, 1480 3'' Wizard 自動化γカウンターにて滞留放射活性をアッセイした。この物質の重量および１分間あたりの関連カウント数(ｃｐｍ)を、GraphPadTMを用いるさらなる統計分析のためにExcel spreadsheetに移した。ルテチウム-１７７およびガリウム-６７は、67Ｇａ−ＡＭＢＡを用いるスチューデントｔ検定により、血中の増加レベル（ｐ＜０.０５)は例外として、類似した全体的な生体内分布ならびに標的および非標的組織の取込みを示した。特に、腫瘍取込みは、１および２４時間双方同程度である。
【０５９６】
ＰＣ−３異種移植片マウスのモデルにおけるＬｕ−ＡＭＢＡおよびＧａ−ＡＭＢＡの分布
【表４８】
2011520971.tif 000089
【０５９７】
これらのデータおよびインビトロデータに基づくと、Ｌｕ−ＡＭＢＡは、インビトロおよびインビボのＧａ−ＡＭＢＡに関する挙動を予測するための合理的な代用物(surrogate)である。
【０５９８】
実施例ＣＩＶ−マウス異種移植片モデルにおけるＢＴ−４７４ヒト乳癌細胞のＧＲＰ受容体結合に対するタモキシフェンの効果の検出
【０５９９】
67Ｇａ−ＡＭＢＡに対して有効な代用物として177Ｌｕ−ＡＭＢＡを使用することは、予め確立されており(実施例ＸＣＶＩおよびＸＣＶＩＩ)、この代用物を続いて有用性について主に使用した。
【０６００】
メスのヌードマウス([Ｎｃｒ]-Ｆｏｘｎ１＜ｎｕ＞）に、６０日間の徐放性ペレットの皮下埋込み(０.７２ ｍｇ／６０日  放出；０.６mg/ｋｇ；Innovative Research of America, Sarasota, FL)により１７β-エストラジオールの投与によるホルモンの補充を行った。ホルモン処理開始４−７日後に、該マウスを、マトリゲル(ＰＢＳを用いて１：１)皮下注射中の１０００万のＢＴ−４７４細胞を脇腹に異種移植した。１７β-エストラジオールは、このモデルにおいて腫瘍細胞増殖に必要である。
【０６０１】
クエン酸タモキシフェンを、腫瘍が１００-２００mm3の平均サイズに達した時点で、皮下に埋め込まれた徐放性ペレット（１０ｍｇ／２１日 放出；２５ｍｇ/ｋｇ；Innovative Research of America, Sarasota, FL)を介してＢＴ−４７４腫瘍担持マウスに毎日１回投与した。コントロールマウスに、ビヒクルのみの徐放性ペレット(ホルモンの補充に加えて)を投与した。
【０６０２】
化学療法剤の投与１４日後に、低用量の薬物動態試験をＧａ−ＡＭＢＡに対する代用物として177Ｌｕ−ＡＭＢＡを用いて行い、コントロールに対比してＧＲＰ−Ｒによる取込みを決定した。全ての試験において、マウスに、177Ｌｕ−ＡＭＢＡ(１００μＬ）を、１時間／群(ｎ＝３)の滞留時間にて、２００μＣｉ／ｋｇで静脈内投与した。組織を、好適な標準物を用いてＬＫＢ １２８２ CompuGammaカウンターにて分析した。
【０６０３】
結果：β２-エストラジオール(０.６mg/kg)を添加したＢＴ−４７４腫瘍担持マウスでのクエン酸タモキシフェン(２５ｍｇ／ｋｇ)による処理は、177Ｌｕ−ＡＭＢＡ結合の低下により示されたとおり、コントロールの腫瘍の値を超えて６８％まで有意に(Ｐ＜０.０５)腫瘍ＧＲＰ受容体特異的シグナルを低下した。ＢＴ−４７４腫瘍への取込みにおけるこの低下は、４-ＯＨタモキシフェンにより処理した同じ細胞を用いるインビトロ試験で見られる値に匹敵する。
【０６０４】
ＢＴ−４７４腫瘍担持ヌードマウス(１７β−エストラジオールによるホルモン補充をうけた)における、１時間での177Ｌｕ−ＡＭＢＡの分布のタモキシフェンの効果
【表４９】
2011520971.tif 000090
【０６０５】
実施例ＣＶ：68Ｇａ−ＡＭＢＡの調製
ａ）68Ｇａ−ＡＭＢＡ ＲＣＰに対するセレノメチオニンの効果： 二組の実験を３連で行い、68Ｇａ−ＡＭＢＡの放射化合物の純度(ＲＣＰ)に対するセレノ-Ｌ−メチオニン(Ｓｅ−Ｍｅｔ)の効果を試験した。セレノメチオニンは、放射性分解性の損傷、特にＡＭＢＡリガンド(-ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2)の残基中のメチオニン残基に対する保護効果を提供すると認められているアミノ酸である。
【０６０６】
実験の第一組みにおいて、68Ｇａ−ＡＭＢＡをＳｅ−Ｍｅｔの存在下で調製したが、一方で第二組みにおいてＳｅ−Ｍｅｔを含まずに調製した。二組みの結果を比較した。作業者への被爆を制限するために、この合成は双方自動合成機TRACERlab FX-FNを用いて行った。両方の場合において、68Ｇａの放射性同位体溶液を、シリンジポンプを用いて１.５ｍＬ／分の流速で０.１Ｍ ＨＣｌ(５ｍＬ）により溶出された68Ｇｅ／68Ｇａ発生器の溶出により得た。ピーク画分(１ｍＬ)を回収し、この試験に使用した。
【０６０７】
Ｓｅ−Ｍｅｔ存在下での68Ｇａ−ＡＭＢＡの合成：処方溶液は、Ｓｅ−Ｍｅｔ(Aldrich)（１ｍｇ／ｍＬ）を含有する０.２Ｍ酢酸ナトリウム(ＮａＯＡｃ)緩衝液(ｐＨ４.５)にＡＭＢＡリガンド(１２２〜１２３μｇ)を溶解することにより調製した。ＡＭＢＡの終濃度は１２０μｇ／ｍＬであった。68Ｇａ発生器溶出液(１ｍＬ)(６.４〜７.６ｍＣｉ)に、ＡＭＢＡ処方液［ＡＭＢＡ(１２μg)を含有する］(１００μＬ)、ならびにＨ２Ｏ(１２０μL)とＮａＯＡｃ(１３.１ｍｇ）を含有する注射用のＵＳＰ酢酸ナトリム(８０μＬ）(Hospira)とを混合して調製したＮａＯＡｃ溶液（２００μＬ）を添加した。この溶液を、９５℃で７分間加熱して、３０℃に冷却し、ＨＰＬＣ分析のためのバイアルに移した。反応器ならびに該反応器からその生成物用バイアルへのチューブを洗浄するために、Ｈ２Ｏ(３ｍＬ)中の１０％ＥｔＯＨを、該反応器中に導入し、該生成物用バイアルに移した。
【０６０８】
ＨＰＬＣ分析を、４成分のグラジエント［Ａ：Ｈ２Ｏ；Ｂ：３０ｍＭ (ＮＨ4)2ＳＯ4／０.１％ＴＦＡ(ｖ：ｖ)；Ｃ：アセトニトリル(ＡＣＮ)；Ｄ：メタノール(ＭｅＯＨ)、流速＝１.５ｍＬ／分、カラム温度＝３７℃］を用いてZorbax Bonus-RP カラム(４.６ｘ２５０ｍｍ；５μm，Agilent)で行った。使用したグラジエントを以下に示す。
【表５０】
2011520971.tif 000091
【０６０９】
Ｓｅ−Ｍｅｔの非存在下における68Ｇａ−ＡＭＢＡの合成：処方溶液を、０.２Ｍ ＮａＯＡｃ緩衝液(ｐＨ４.５)にＡＭＢＡリガンド(１０６〜１３４μg)溶解することにより１２０μｇ／ｍＬの終濃度に調製した。68Ｇａ発生器溶出液(６.６〜７.５ｍＣｉ)(１ｍＬ)に、ＡＭＢＡ処方液(ＡＭＢＡ１２μg)(１００μＬ）ならびにＮａＯＡｃ(１３.１ mg)を含有する注射用のＵＳＰ酢酸ナトリム(８０μＬ)(Hospira)とＨ2Ｏ(１２０μＬ）とを混合して調製したＮａＯＡｃ溶液(２００μＬ）を添加した。この溶液を、９５℃に７分間加熱して、３０℃に冷却して、ＨＰＬＣ分析用のバイアルに移した。反応器ならびに該反応器からその生成物用バイアルへのチューブを洗浄するために、Ｈ２Ｏ(３ｍＬ)中の１０％ＥｔＯＨを、該反応器中に導入し、該生成物用バイアルに導入した。
【０６１０】
ＨＰＬＣ分析を、前記したカラムおよび方法に従って行った。実験の結果を、下記の表２７および２８ならびにラジオクロマトグラムに示した。ｔ＝０、１時間および２時間後の標識化にて得た放射化合物の純度（ＲＣＰ）の値を示した。
表２７
【表５１】
2011520971.tif 000092
表２８
【表５２】
2011520971.tif 000093
【０６１１】
【表５３】
2011520971.tif 000094
【０６１２】
前記表およびラジオクロマトグラムから、Ｓｅ−Ｍｅｔは68Ｇａ−ＡＭＢＡ中のメチオニン残基の酸化を防止したことが明らかである。また、他の６８Ｇａ−標識された親水性の不純物の形成も防止した。Ｓｅ−Ｍｅｔの非存在下では８３.３±２.１％のＲＣＰであるのに対して、Ｓｅ−Ｍｅｔを使用した場合には９６％(９３.７±３.２％)までのＲＣＰ値が認められた。
【０６１３】
（ｂ）68Ｇａ−ＡＭＢＡ安定性に対するアスコルビン酸および生理食塩水の効果。２組みの実験を３連で行い、アスコルビン酸および生理食塩水を含有する放射性物質安定剤化溶液を用いるＳｅｐ−Ｐａｋ精製した68Ｇａ−ＡＭＢＡの希釈効果を試験した。安定化溶液を、９部の通常の生理食塩水と１部のASCOR L 500（登録商標）とを混合して調製した。Ascor L 500 (McGuff)は、注射用のアスコルビン酸のＵＳＰ溶液であって、アスコルビン酸ナトリウム（５００ｍｇ／ｍＬ）、エデト酸２ナトリウム(０.０２５％)、注射用の水(q.s.)およびｐＨ調整剤として重炭酸ナトリウム(ｐＨ５.５−７.０)を含む。
【０６１４】
第一組みの実験においては、Ｓｅｐ−Ｐａｋ精製後の68Ｇａ−ＡＭＢＡを、生理食塩水(４ｍＬ)と混合したが、第二組みの実験では、それを９部の生理食塩水(３ｍＬ）：１部のＡｓｃｏｒおよびＨ2Ｏ(１ｍＬ）を用いて希釈した。この二組みの結果を比較した。
【０６１５】
９部の生理食塩水：１部のＡｓｃｏｒを含まない68Ｇａ−ＡＭＢＡの合成
作業者への被爆を制限するために、この合成は自動合成機TRACERlab FX-FNを用いて行った。処方溶液を、Ｓｅ−Ｍｅｔ(Aldrich)(１ｍｇ／ｍＬ)を含有する０.２Ｍ 酢酸ナトリウム(ＮａＯＡｃ)緩衝液(pＨ４.５)に、ＡＭＢＡリガンド(１２０μg)を溶解することにより調製した。ＡＭＢＡの終濃度は１２０μｇ／ｍＬであった。68Ｇａ発生器溶出液(１ｍＬ)に、ＡＭＢＡ処方液［１００μＬ(１２μg)］およびＨ2Ｏ(１２０μＬ)をＵＳＰ ＮａＯＡｃ(Hospira)(８０μＬ）(１３.１mg)と混合して調製したＮａＯＡｃ溶液(２００μＬ)を添加した。この溶液を、９５℃で７分間加熱し、３０℃に冷却して、ＥｔＯＨ(３ｍＬ）およびＨ2Ｏ(８ｍＬ）を用いて調整したWater C18 Light Sep-Pakに移した。回収量を増やすために、該反応器および該反応から生成物用バイアルまでのチューブを、Ｈ2Ｏ中の１０％ＥｔＯＨ(２ｍｌ)を該反応器に導入し、この溶液をＳｅｐ−Ｐａｋに移して洗浄した。このＳｅｐ−ＰａｋをＨ2Ｏ(４ｍＬ）により洗浄し、該生成物(５.５−５.８ｍＣｉ)を、ＥｔＯＨ(５００μＬ）にて生成物用バイアル中に溶出した。次いで、Ｓｅｐ−Ｐａｋを生理食塩水(４ｍＬ）ですすぎ、生成物用バイアル中に収集した。ＨＰＬＣ分析を、前記したカラムおよび方法を用いて行った。
【０６１６】
９生理食塩水：１のＡｓｃｏｒを用いる68Ｇａ−ＡＭＢＡの合成
68Ｇａ発生器溶出液(１ｍＬ)に、上記のとおりに調製したＡＭＢＡ処方液［１００μＬ(１２μg)］ならびにＨ2Ｏ(１２０μＬ)をＵＳＰ ＮａＯＡｃ(Hospira)［８０μＬ(１３.１ｍｇ)］と混合して調製したＮａＯＡｃ溶液(２００μＬ）を添加した。この溶液を、９５℃で７分間加熱し、３０℃に冷却して、Water C18 Light Sep-Pakに移した。回収量を増やすために、該反応器および該反応から生成物用バイアルまでのチューブを、Ｈ2Ｏ中の１０％ＥｔＯＨ(２ｍｌ)を該反応器に導入して、この溶液をＳｅｐ−Ｐａｋに移して洗浄した。このＳｅｐ−ＰａｋをＨ2Ｏ(４ｍＬ）により洗浄し、該生成物(４.６−４.９ｍＣｉ)を、ＥｔＯＨ(５００μＬ）にて、９：１の生理食塩水(HospiraのUSP)：Ａｓｃｏｒ(McGuff Pharmaceuticals)混合物（３ｍＬ）を含有する生成物用バイアル中に溶出した。次いで、Ｓｅｐ−ＰａｋをＨ2Ｏ(１ｍＬ)にて洗浄し、生成物用バイアル中に収集した。
【０６１７】
ＨＰＬＣ分析を、上記したカラムおよび方法を用いて行った。実験の結果を、下記表２９および３０に示した：
表２９
【表５４】
2011520971.tif 000095
【０６１８】
表３０
【表５５】
2011520971.tif 000096
【０６１９】
ｔ＝０およびt=１時間でのＲＣＰは、統計学的に違いはなかった(p＜０.０５)。ｔ＝２時の生成物に対するＲＣＰ値は統計学的に異なっており(p＜０.０５)、９部の生理食塩水：１部のＡｓｃｏｒの混合物は放射性物質の保護剤として作用することを示す。
【０６２０】
発生器溶出液(１ｍＬ)およびＡＭＢＡ処方液(１００μＬ)を用いる68Ｇａ−ＡＭＢＡの合成
作業者への被爆を制限するために、この合成を自動合成機TRACERlab FX-FNを用いて行った。68Ｇａ発生器溶出液(１ｍＬ)に、上記したとおりに調製したＡＭＢＡ処方液［１００μＬ(１２μg)］およびＨ2Ｏ(１２０μＬ)をＵＳＰ ＮａＯＡｃ(Hospira)(８０μＬ）(１３.１mg)と混合して調製したＮａＯＡｃ溶液(２００μＬ)を添加した。この溶液を、９５℃で７分間加熱し、３０℃に冷却して、Water C18 Light Sep-Pakに移した。回収量を増やすために、該反応器ならびに該反応から生成物用バイアルまでのチューブを、Ｈ2Ｏ中の１０％ＥｔＯＨ(２ｍｌ)を該反応器に導入し、この溶液をＳｅｐ−Ｐａｋに移して洗浄した。このＳｅｐ−ＰａｋをＨ2Ｏ(４ｍＬ）により洗浄し、該生成物（４.６−４.９ｍＣｉ)を、ＥｔＯＨ(５００ｕＬ)にて、９ 生理食塩水(HospiraのUSP)：１ Ａｓｃｏｒ(McGuff Pharmaceuticals)の混合物（３ｍＬ）を含有する生成物用バイアル中に溶出した。次いで、Ｓｅｐ−ＰａｋをＨ2Ｏ(１ｍＬ)にて洗浄し、これを生成物用バイアル中に収集した。
【０６２１】
ＨＰＬＣ分析を、上記したカラムおよび方法を用いて行った。実験の結果を、下記表３１に示した：
表３１
【表５６】
2011520971.tif 000097
【０６２２】
発生器溶出液(３ｍＬ)、ＡＭＢＡ処方液(４００μＬ)による68Ｇａ−ＡＭＢＡの合成、およびＨＰＬＣ精製
【０６２３】
この試験において、より大量のＧａ発生器溶出液を使用し、反応混合物中のＡＭＢＡ処方液の量を増加させた。該生成物は、反応後の遊離のリガンドを除去するためにＨＰＬＣ精製した。作業者への被爆を制限するために、この合成を自動合成機TRACERlab FX-FNを用いて行った。
【０６２４】
68Ｇａ発生器溶出液(３ｍＬ)に、上記したとおりに調製したＡＭＢＡ処方液［４００μＬ(４８μg)］およびＮａＯＡｃ（３６ｍｇ）を含有するＵＳＰ ＮａＯＡｃ(Hospira)(２２０μＬ）を添加した。この溶液を、９５℃で７分間加熱し、３０℃に冷却して、Ｈ2Ｏ（８８１μＬ）およびＥｔＯＨ（５００μＬ）を添加した。この溶液を、５ｍＬ／分間で２９％ＣＨ3ＣＮ／８１％Ｈ２Ｏにて溶出する、ＭＮ Nucleosil カラム(１００−７ Ｃ１８、２０ｘ２５０ｍｍ)を用いるＨＰＬＣにより精製した。目的とする生成物を含有する画分を、Ｈ2Ｏ(１０ｍＬ)を含有するバイアル中に収集した。この溶液を、ＥｔＯＨ(３ｍＬ)およびＨ2Ｏ(８ｍｌ)で調整した Waters C18 Sep-Pak上に重層した。Ｓｅｐ−Ｐａｋを、Ｈ2Ｏ(４ｍＬ)で洗浄し、生成物(４.７−５.４ｍＣｉ、ｎ＝４)を、ＥｔＯＨ(５００μＬ)を用いて、生成物用バイアル中に溶出した。次いで、Ｓｅｐ−ＰａｋをＨ2Ｏ(３ｍＬ)にて洗浄し、これを該生成物用バイアル中に収集した。
【０６２５】
ＨＰＬＣ分析を、上記したカラムおよび方法を用いて行った。実験の結果を、下記表３２に示した：
【０６２６】
表３２
【表５７】
2011520971.tif 000098
【０６２７】
本発明の実施態様
本発明の様々な実施態様を以下に例示するが、これらに限定されるものではない：
【０６２８】
１．一般式：
Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇ
［式中、
Ｍは、放射線核種と錯体形成していてもよい光学的標識または金属キレート剤であり；
Ｎは、０、αもしくは非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｏは、αまたは非αアミノ酸であり；
Ｐは、０、αもしくは非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｇは、ＧＲＰ受容体標的ペプチドであり；
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは非αアミノ酸である］
を有する化合物。
【０６２９】
２．Ｇがアゴニストであるか、またはアゴニスト活性を与えるペプチドである、実施態様１の化合物。
【０６３０】
３．非αアミノ酸が
８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸；
Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン−酢酸；および
式ＮＨ2−(ＣＨ2ＣＨ2Ｏ)n−ＣＨ2ＣＯ2ＨまたはＮＨ2−(ＣＨ2ＣＨ2Ｏ)n−ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ2Ｈ（ここで、ｎは２〜１００である）を有するポリエチレングリコール誘導体
からなる群から選択される、実施態様１の化合物。
【０６３１】
４．金属キレート剤がＤＴＰＡ、ＤＯＴＡ、ＤＯ３Ａ、ＨＰ−ＤＯ３Ａ、ＥＤＴＡ、ＴＥＴＡ、ＥＨＰＧ、ＨＢＥＤ、ＮＯＴＡ、ＤＯＴＭＡ、ＴＥＴＭＡ、ＰＤＴＡ、ＴＴＨＡ、ＬＩＣＡＭ、ＭＥＣＡＭおよびＣＭＤＯＴＡからなる群から選択される、実施態様１の化合物。
【０６３２】
５．金属キレート剤が
Ｎ,Ｎ−ジメチルＧｌｙ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ；
Ｎ,Ｎ−ジメチルＧｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ；
Ｎ,Ｎ−ジエチルＧｌｙ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ；および
Ｎ,Ｎ−ジベンジルＧｌｙ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ
からなる群から選択される、実施態様１の化合物。
【０６３３】
６．金属キレート剤が
Ｎ,Ｎ−ジメチルＧｌｙ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ；
Ｎ,Ｎ−ジメチルＧｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ；
Ｎ,Ｎ−ジエチルＧｌｙ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ；および
Ｎ,Ｎ−ジベンジルＧｌｙ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ
からなる群から選択される、実施態様１の化合物。
【０６３４】
７．Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｄala−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｌｙｓ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ａｒｇ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ａｓｐ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｓｅｒ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｕ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｄａｌａ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−２,３−ジアミノプロピオン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−２,３−ジアミノプロピオン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−２,３−ジアミノプロピオン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−２,３−ジアミノプロピオン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ａｓｐ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ｓｅｒ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ａｒｇ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−２,３−ジアミノプロピオン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ｌｙｓ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ａｓｐ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ｓｅｒ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ａｒｇ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−２,３−ジアミノプロピオン酸ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ｌｙｓ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−４−ヒドロキシプロリン−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−４−アミノプロリン−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−２,３−ジアミノプロピオン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；および
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−２,３−ジアミノプロピオン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）
からなる群から選択される、実施態様１の化合物。
【０６３５】
８．Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｄａｌａ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｌｙｓ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ａｒｇ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ａｓｐ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｓｅｒ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｕ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｄａｌａ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−２,３−ジアミノプロピオン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−２,３−ジアミノプロピオン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−２,３−ジアミノプロピオン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−２,３−ジアミノプロピオン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ａｓｐ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ｓｅｒ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ａｒｇ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−２,３−ジアミノプロピオン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ｌｙｓ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ａｓｐ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ｓｅｒ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ａｒｇ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−２,３−ジアミノプロピオン酸ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ｌｙｓ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−４−ヒドロキシプロリン−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−４−アミノプロリン−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−２,３−ジアミノプロピオン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；および
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−２,３−ジアミノプロピオン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）
からなる群から選択される、実施態様１の化合物。
【０６３６】
９．ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ジアミノプロピオン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ビフェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ジフェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−４−ベンゾイルフェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−５−アミノペンタン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｄ−フェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；および
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノオクタン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）
からなる群から選択される、実施態様１の化合物。
【０６３７】
１０．光学的標識が有機発色団、有機フルオロフォア、光吸収性化合物、光反射性化合物、光散乱性化合物および生物発光分子からなる群から選択される、実施態様１、２または３のいずれか１つの実施態様の化合物。
【０６３８】
１１．画像診断方法であって、
Ｍが診断用放射線核種と錯体形成した金属キレート剤である実施態様１の化合物を含む診断用造影剤を患者に投与する工程、および
患者を画像診断する工程
を含む方法。
【０６３９】
１２．画像診断方法であって、
診断用放射線核種と錯体形成した実施態様８の化合物を含む診断用造影剤を患者に投与する工程、および
患者を画像診断する工程
を含む方法。
【０６４０】
１３．画像診断方法であって、
Ｍが光学的標識である実施態様１の化合物を含む診断用造影剤を患者に投与する工程、および
患者を画像診断する工程
を含む方法。
【０６４１】
１４．画像診断方法であって、
実施態様１０の化合物を含む診断用造影剤を患者に投与する工程、および
患者を画像診断する工程
を含む方法。
【０６４２】
１５．実施態様１の化合物を含む物質を注射用媒体に添加する工程を含む、診断用造影剤の製造方法。
【０６４３】
１６．治療用放射線核種と錯体を形成した実施態様７、８または９の化合物を含む放射線治療薬を患者に投与する工程を含む、患者を治療する方法。
【０６４４】
１７．治療用放射線核種と錯体形成した実施態様４の化合物を含む放射線治療薬を患者に投与する工程を含む、患者を治療する方法。
【０６４５】
１８．実施態様７、８または９の化合物を含む物質を注射用媒体に添加する工程を含む、放射線治療薬の製造方法。
【０６４６】
１９．実施態様４の化合物を含む物質を注射用媒体に添加する工程を含む、放射線治療薬の製造方法。
【０６４７】
２０．一般式：
Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇ
［式中、
Ｍは、放射線核種と錯体形成していてもよい光学的標識または金属キレート剤であり；
Ｎは、０、αアミノ酸、置換胆汁酸または他の連結基であり；
Ｏは、αアミノ酸または置換胆汁酸であり；
Ｐは、０、αアミノ酸、置換胆汁酸または他の連結基であり；
Ｇは、ＧＲＰ受容体標的ペプチドであり；
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは、置換胆汁酸である］
を有する化合物。
【０６４８】
２１．Ｇがアゴニストであるか、またはアゴニスト活性を与えるペプチドである、実施態様２０の化合物。
【０６４９】
２２．置換胆汁酸が
３β−アミノ−３−デオキシコール酸；
(３β,５β)−３−アミノコラン−２４−酸；
(３β,５β,１２α)−３−アミノ−１２−ヒドロキシコラン−２４−酸；
(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸；
Ｌｙｓ−(３,６,９)−トリオキサウンデカン−１,１１−ジカルボニル３,７−ジデオキシ−３−アミノコール酸）；
(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７−ヒドロキシ−１２−オキソコラン−２４−酸；および
(３β,５β,７α)−３−アミノ−７−ヒドロキシコラン−２４−酸
からなる群から選択される、実施態様２０の化合物。
【０６５０】
２３．ＭがＤＴＰＡ、ＤＯＴＡ、ＤＯ３Ａ、ＨＰＤＯ３Ａ、ＥＤＴＡ、ＴＥＴＡおよびＣＭＤＯＴＡからなる群から選択される、実施態様２０の化合物。
【０６５１】
２４．ＭがＥＨＰＧおよびその誘導体からなる群から選択される、実施態様２０の化合物。
【０６５２】
２５．Ｍが５−Ｃｌ−ＥＨＰＧ、５−Ｂｒ−ＥＨＰＧ、５−Ｍｅ−ＥＨＰＧ、５−ｔ−Ｂｕ−ＥＨＰＧおよび５−sec−Ｂｕ−ＥＨＰＧからなる群から選択される、実施態様２０の化合物。
【０６５３】
２６．Ｍベンゾジエチレントリアミン五酢酸（ベンゾ−ＤＴＰＡ）およびその誘導体からなる群から選択される、実施態様２０の化合物。
【０６５４】
２７．Ｍがジベンゾ−ＤＴＰＡ、フェニル−ＤＴＰＡ、ジフェニル−ＤＴＰＡ、ベンジル−ＤＴＰＡおよびジベンジル−ＤＴＰＡからなる群から選択される、実施態様２０の化合物。
【０６５５】
２８．ＭがＨＢＥＤおよびその誘導体からなる群から選択される、実施態様２０の化合物。
【０６５６】
２９．Ｍが、少なくとも３個の炭素原子及び少なくとも２個ヘテロ原子（Ｏおよび／またはＮ）を含有する大環状化合物である（ここで、大環状化合物は、１つの環、またはヘテロ環原子で一緒に結合する２つもしくは３つの環からなり得る）、実施態様２０の化合物。
【０６５７】
３０．Ｍがベンゾ−ＤＯＴＡ、ジベンゾ−ＤＯＴＡおよびベンゾ−ＮＯＴＡ、ベンゾ−ＴＥＴＡ、ベンゾ−ＤＯＴＭＡおよびベンゾ−ＴＥＴＭＡからなる群から選択される、実施態様２０の化合物。
【０６５８】
３１．Ｍが、１,３−プロピレンジアミン四酢酸（ＰＤＴＡ）およびトリエチレンテトラアミン六酢酸（ＴＴＨＡ）の誘導体；１,５,１０−Ｎ,Ｎ',Ｎ''−トリス(２,３−ジヒドロキシベンゾイル）トリカテコラート（ＬＩＣＡＭ）および１,３,５−Ｎ,Ｎ',Ｎ''−トリス(２,３−ジヒドロキシベンゾイル)アミノメチルベンゼン（ＭＥＣＡＭ）の誘導体からなる群から選択される、実施態様２０の化合物。
【０６５９】
３２．ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β)−３−アミノコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,１２α)−３−アミノ−１２−ヒドロキシコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−(３,６,９)−トリオキサウンデカン−１,１１−ジカルボニル３,７−ジデオキシ−３−アミノコール酸)−Ａｒｇ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−３,６,９−トリオキサウンデカン−１,１１−ジカルボニル
Ｌｙｓ(ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ)−Ａｒｇ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−１２−オキソコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−１−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＱＷＡＶａＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶａＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１４である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ｆ−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ｆ−ＷＡＶＧＨＬＬ−ＮＨ2（ここで、ＷＡＶＧＨＬＬ−ＮＨ2は配列番号２６である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ｆ−ＱＷＡＶＧＨＬ−ＮＨ−ペンチル（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬ−ＮＨ−ペンチルは配列番号６である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−y−ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−Ｈ−Ｆ−Ｎｌｅ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−Ｈ−Ｆ−Ｎｌｅ−ＮＨ2は配列番号９である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ｆ−ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−Ｈ−Ｆ−Ｎｌｅ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−Ｈ−Ｆ−Ｎｌｅ−ＮＨ2は配列番号９である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＱＷＡＶＧＨＦＬ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＦＬ−ＮＨ2は配列番号２２である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＱＷＡＶＧＮＭｅＨ−Ｌ−Ｍ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＮＭｅＨ−Ｌ−Ｍ−ＮＨ2は配列番号１５である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＬＷＡＶＧＳＦ−Ｍ−ＮＨ2（ここで、ＬＷＡＶＧＳＦ−Ｍ−ＮＨ2は配列番号１１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＨＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＨＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１２である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＬＷＡＧＨＦＭ−ＮＨ2（ここで、ＬＷＡＧＨＦＭ−ＮＨ2は配列番号２０である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＱＷＡＶＧＨＦＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＦＭ−ＮＨ2は配列番号１３である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＱＲＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＲＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号３である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＱＲＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＲＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号４である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＱＫＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＫＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号５である）；
Ｐｇｌｕ−Ｑ−Ｌｙｓ（ＤＯ３Ａ−モノアミド)−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１８である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ＱＲＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＲＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号３である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ＱＲＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＲＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号４である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ＱＫＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＫＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号５である）；および
Ｐｇｌｕ−Ｑ−Ｌｙｓ(ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−３−アミノ−３−デオキシコール酸)−ＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１８である）
からなる群から選択される、実施態様２０の化合物。
【０６６０】
３３．光学的標識が有機発色団、有機フルオロフォア、光吸収性化合物、光反射性化合物、光散乱性化合物および生物発光分子からなる群から選択される、実施態様２０、２１または２２のいずれか１つの実施態様の化合物。
【０６６１】
３４．画像診断方法であって、
Ｍが診断用放射線核種と錯体形成した金属キレート剤である実施態様２０の化合物を含む診断用造影剤を患者に投与する工程、および
患者を画像診断する工程
を含む方法。
【０６６２】
３５．画像診断方法であって、
実施態様３２の化合物を含む診断用造影剤を患者に投与する工程、および
患者を画像診断する工程
を含む方法。
【０６６３】
３６．画像診断方法であって、
Ｍが光学的標識である実施態様２０の化合物を含む診断用造影剤を患者に投与する工程、および
患者を画像診断する工程
を含む方法。
【０６６４】
３７．画像診断方法であって、
実施態様３３の化合物を含む診断用造影剤を患者に投与する工程、および
患者を画像診断する工程
を含む方法。
【０６６５】
３８．実施態様２０の化合物を含む物質を注射用媒体に添加する工程を含む、診断用造影剤の製造方法。
【０６６６】
３９．治療用放射線核種と錯体形成した実施態様２０の化合物を含む放射線治療薬を患者に投与する工程を含む、患者を治療する方法。
【０６６７】
４０．実施態様２０の化合物を含む物質を注射用媒体に添加する工程を含む、放射線治療薬の製造方法。
【０６６８】
４１．化合物ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）。
【０６６９】
４２．画像診断方法であって、
診断用放射線核種と錯体形成したＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）を含む診断用造影剤を患者に投与する工程、および
患者を画像診断する工程
を含む方法。
【０６７０】
４３．ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）を含む化合物を注射用媒体に添加する工程を含む、診断用造影剤の製造方法。
【０６７１】
４４．治療用放射線核種と錯体形成した実施態様４１の化合物を含む放射線治療薬を患者に投与する工程を含む、患者を治療する方法。
[００７４１]
【０６７２】
４５．実施態様４１の化合物を含む物質を注射用媒体に添加する工程を含む、放射線治療薬の製造方法。
【０６７３】
４６．化合物ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）。
【０６７４】
４７．画像診断方法であって、
診断用放射線核種と錯体形成したＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）を含む診断用造影剤を患者に投与する工程、および
患者を画像診断する工程。
を含む方法。
【０６７５】
４８．ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）を含む化合物を注射用媒体に添加する工程を含む、診断用造影剤の製造方法。
【０６７６】
４９．治療用放射線核種と錯体形成した実施態様４６の化合物を含む放射線治療薬を患者に投与する工程を含む、患者を治療する方法。
【０６７７】
５０．実施態様４６の化合物を含む物質を注射用媒体に添加する工程を含む、放射線治療薬の製造方法。
【０６７８】
５１．一般式：
Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇ
［式中、
Ｍは、放射線核種と錯体形成していてもよい光学的標識または金属キレート剤であり；
Ｎは、０、αアミノ酸、環状基を有する非αアミノ酸、または他の連結基であり；
Ｏは、αアミノ酸、または環状基を有する非αアミノ酸であり；
Ｐは、０、αアミノ酸、環状基を有する非αアミノ酸、または他の連結基であり；
Ｇは、ＧＲＰ受容体標的ペプチドであり；
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは環状基を有する非αアミノ酸である］
を有する化合物。
【０６７９】
５２．Ｇがアゴニストであるか、またはアゴニスト活性を与えるペプチドである、実施態様５１の化合物。
【０６８０】
５３．環状基を有する非αアミノ酸が
４−アミノ安息香酸；
４−アミノメチル安息香酸；
トランス−４−アミノメチルシクロヘキサンカルボン酸；
４−(２−アミノエトキシ)安息香酸；
イソニペコチン酸；
２−アミノメチル安息香酸；
４−アミノ−３−ニトロ安息香酸；
４−(３−カルボキシメチル−２−ケト−１−ベンゾイミダゾリル)−ピペリジン；
６−(ピペラジン−１−イル)−４−(３Ｈ)−キナゾリン−３−酢酸；
(２Ｓ,５Ｓ)−５−アミノ−１,２,４,５,６,７−ヘキサヒドロ−アゼピノ[３,２１−ｈｉ]インドール−４−オン−２−カルボン酸；
(４Ｓ,７Ｒ)−４−アミノ−６−アザ−５−オキソ−９−チアビシクロ[４.３.０]ノナン−７−カルボン酸；
３−カルボキシメチル−１−フェニル−１,３,８−トリアザスピロ[４.５]デカン−４−オン；
Ｎ１−ピペラジン酢酸；
Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−酢酸；
(３Ｓ)−３−アミノ−１−カルボキシメチルカプロラクタム；および
(２Ｓ,６Ｓ,９)−６−アミノ−２−カルボキシメチル−３,８−ジアザビシクロ−[４,３,０]−ノナン−１,４−ジオン
からなる群から選択される、実施態様５１の化合物。
【０６８１】
５４．ＭがＤＴＰＡ、ＤＯＴＡ、ＤＯ３Ａ、ＨＰＤＯ３Ａ、ＥＤＴＡ、およびＴＥＴＡからなる群から選択される、実施態様５１の化合物。
[００７５１]
【０６８２】
５５．ＭがＥＨＰＧおよびその誘導体からなる群から選択される、実施態様５１の化合物。
【０６８３】
５６．Ｍが５−Ｃｌ−ＥＨＰＧ、５−Ｂｒ−ＥＨＰＧ、５−Ｍｅ−ＥＨＰＧ、５−ｔ−Ｂｕ−ＥＨＰＧおよび５−sec−Ｂｕ−ＥＨＰＧからなる群から選択される、実施態様５１の化合物。
【０６８４】
５７．Ｍがベンゾジエチレントリアミン五酢酸（ベンゾ−ＤＴＰＡ）およびその誘導体からなる群から選択される、実施態様５１の化合物。
【０６８５】
５８．Ｍがジベンゾ−ＤＴＰＡ、フェニル−ＤＴＰＡ、ジフェニル−ＤＴＰＡ、ベンジル−ＤＴＰＡおよびジベンジル−ＤＴＰＡからなる群から選択される、実施態様５１の化合物。
【０６８６】
５９．ＭがＨＢＥＤおよびその誘導体からなる群から選択される、実施態様５１の化合物。
【０６８７】
６０．Ｍが、少なくとも３個の炭素原子及び少なくとも２個ヘテロ原子（Ｏおよび／またはＮ）を含有する大環状化合物である（ここで、大環状化合物は、１つの環、またはヘテロ環原子で一緒に結合する２つもしくは３つの環からなり得る）、実施態様５１の化合物。
【０６８８】
６１．Ｍがベンゾ−ＤＯＴＡ、ジベンゾ−ＤＯＴＡおよびベンゾ−ＮＯＴＡ、ベンゾ−ＴＥＴＡ、ベンゾ−ＤＯＴＭＡおよびベンゾ−ＴＥＴＭＡからなる群から選択される、実施態様５１の化合物。
【０６８９】
６２．Ｍが、１,３−プロピレンジアミン四酢酸（ＰＤＴＡ）およびトリエチレンテトラアミン六酢酸（ＴＴＨＡ）の誘導；１,５,１０−Ｎ,Ｎ',Ｎ''−トリス(２,３−ジヒドロキシベンゾイル)トリカテコラート（ＬＩＣＡＭ）および１,３,５−Ｎ,Ｎ',Ｎ''−トリス(２,３−ジヒドロキシベンゾイル)アミノメチルベンゼン（ＭＥＣＡＭ）の誘導体からなる群から選択される、実施態様５１の化合物。
【０６９０】
６３．ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノメチル安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキシルカルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−(２−アミノエトキシ)安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−イソニペコチン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−２−アミノメチル安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノメチル−３−ニトロ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−１−ナフチルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−(３−カルボキシメチル−２−ケト−１−ベンゾイミダゾリル−ピペリジン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−６−(ピペラジン−１−イル)−４−(３Ｈ)−キナゾリン−３−酢酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−(２Ｓ,５Ｓ)−５−アミノ−１,２,４,５,６,７−ヘキサヒドロ−アゼピノ[３,２１−ｈｉ]インドール−４−オン−２−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−(４Ｓ,７Ｒ)−４−アミノ−６−アザ−５−オキソ−９−チアビシクロ[４.３.０]ノナン−７−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−３−カルボキシメチル−１−フェニル−１,３,８−トリアザスピロ[４.５]デカン−４−オン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｎ１−ピペラジン酢酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−(３Ｓ)−３−アミノ−１−カルボキシメチルカプロラクタム−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−(２Ｓ,６Ｓ,９)−６−アミノ−２−カルボキシメチル−３,８−ジアザビシクロ−[４,３,０]−ノナン−１,４−ジオン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−５−アミノペンタン酸−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−Ｄ−フェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノメチル安息香酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−ベンゾイル−(Ｌ)−フェニルアラニン−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−Ａｒｇ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−Ｌｙｓ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−ジフェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−１−ナフチルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−Ｓｅｒ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−２,３−ジアミノプロピオン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−ビフェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−(２Ｓ,５Ｓ)−５−アミノ−１,２,４,５,６,７−ヘキサヒドロ−アゼピノ[３,２１−ｈｉ]インドール−４−オン−２−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−フェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−フェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノオクタン酸−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４'−アミノメチル−ビフェニル−１−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−３'−アミノメチル−ビフェニル−３−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＣＭＤＯＴＡ−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノメチルフェノキシ酢酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４−アミノフェニル酢酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＨＰＤＯ３Ａ−４−フェノキシ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−３−アミノメチル安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノメチルフェニル酢酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノメチル−３−メトキシ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｂｏａ−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４−ヒドラジノベンゾイル−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノ安息香酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−６−アミノニコチン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４'−アミノ−２'−メチルビフェニル−４−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３'−アミノビフェニル−３−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−１,２−ジアミノエチル−テレフタル酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＥＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＥＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号２である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＯＨ（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＯＨは配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−(Ｄ)−Ｐｈｅ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＲＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＲＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号３である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＲＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＲＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号４である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＫＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＫＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号５である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−(Ｄ)−Ｐｈｅ−ＱＷＡＶＧＨＬ−ＮＨ−ペンチル（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬ−ＮＨ−ペンチルは配列番号６である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＷＳＶａＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＳＶａＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号７である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−(Ｄ)−Ｐｈｅ−ＱＷＡＶＧＨＬＬ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＬ−ＮＨ2は配列番号８である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−(Ｄ)−Ｔｙｒ−ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−ＨＦ−Ｎｌｅ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−ＨＦ−Ｎｌｅ−ＮＨ2は配列番号９である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−Ｐｈｅ−ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−ＨＦ−Ｎｌｅ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−ＨＦ−Ｎｌｅ−ＮＨ2は配列番号９である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＷＡＧＨＦＬ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＧＨＦＬ−ＮＨ2は配列番号１０である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＬＷＡＶＧＳＦＭ−ＮＨ2（ここで、ＬＷＡＶＧＳＦＭ−ＮＨ2は配列番号１１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＨＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＨＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１２である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＬＷＡＶＧＳＦＭ−ＮＨ2（ここで、ＬＷＡＶＧＳＦＭ−ＮＨ2は配列番号１１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＷＡＶＧＨＦＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＦＭ−ＮＨ2は配列番号１３である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−６−アミノナフトエ酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４−メチルアミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｃｍ４ｐｍ１０ｄ２ａ−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３−メトキシ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３−クロロ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３−メチル−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３−ヒドロキシ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
(ＤＯ３Ａ−モノアミド)２−Ｎ,Ｎ'−ビス(２−アミノエチル)−スクシンアミド酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＷＡＶＧＨＦＬ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＦＬ−ＮＨ2は配列番号２２である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノメチル安息香酸−Ｌ−１−ナフチルアラニン−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１である）；および
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＷＡＶＧＮＭｅＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＮＭｅＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１５である）
からなる群から選択される、実施態様５１の化合物。
【０６９１】
６４．、光が有機発色団、有機フルオロフォア、光吸収性化合物、光反射性化合物、光散乱性化合物、および生物発光分子からなる群から選択される、実施態様５１、５２または５３いずれか１つの実施態様の化合物。
【０６９２】
６５．画像診断方法であって、
Ｍが診断用放射線核種と錯体形成した金属キレート剤である実施態様５１の化合物を含む診断用造影剤を患者に投与する工程、および
患者を画像診断する工程
を含む方法。
【０６９３】
６６．画像診断方法であって、
実施態様６３の化合物を含む診断用造影剤を患者に投与する工程、および
患者を画像診断する工程
を含む方法。
【０６９４】
６７．画像診断方法であって、
Ｍが光学的標識である実施態様５１の化合物を含む診断用造影剤を患者に投与する工程、および
患者を画像診断する工程
を含む方法。
【０６９５】
６８．実施態様５１の化合物を含む物質を注射用媒体に添加する工程を含む、診断用造影剤の製造方法。
【０６９６】
６９．治療用放射線核種と錯体を形成する実施態様５１の化合物を含む放射線治療薬を患者に投与する工程を含む、患者を治療する方法。
【０６９７】
７０．実施態様５１の化合物を含む物質を注射用媒体に添加する工程を含む、放射線治療薬の製造方法。
【０６９８】
７１．（ａ）固相ペプチド合成容器中にて、樹脂および少なくとも１つのペプチド構築成分を含む溶液を振盪する工程、
（ｂ）該溶液をフラッシュする工程、および
（ｃ）樹脂をＤＭＡで洗浄する工程
を含む、ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）の合成方法［ここで、
少なくとも１つのペプチド構築成分は、ＤＭＡ、モルホリン、（３β,５β,７α,１２α)−３−[[(９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ)アミノ]アセチル]アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸、ＨＯＢｔ、ＤＩＣ、ＨＡＴＵまたはそれらの混合物を含み、
工程（ａ）、（ｂ）および（ｃ）は、各々、化合物ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）が得られるまで繰り返される］。
【０６９９】
７２．（ａ）固相ペプチド合成容器または反応ブロック中にて、樹脂および少なくとも１つのペプチド構築成分を含む溶液を振盪する工程、
（ｂ）該溶液をフラッシュする工程、および
（ｃ）該樹脂をＤＭＡで洗浄する工程
を含む、ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）の合成方法［ここで、
少なくとも１つのペプチド構築成分は、ＤＭＡ、モルホリン、Ｆｍｏｃ−４−アミノ安息香酸、ＨＯＢｔ、ＤＩＣ、ＨＢＴＵ、ＨＡＴＵまたはそれらの混合物を含み、
工程（ａ）、（ｂ）および（ｃ）は、各々、化合物ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）が得られるまで繰り返される］。
【０７００】
７３．ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）の標識化方法であって、
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）、
酢酸アンモニウム、
177ＬｕＣｌ3または111ＩｎＣｌ3からなる群から選択される放射性金属前駆体、および
ＨＣｌ、
を含む第１の溶液をインキュベートする工程、ならびに
該第１の溶液に、Ｎａ2ＥＤＴＡ・２Ｈ2Ｏおよび水を含む第２の溶液を添加して９５％を超える放射化学的純度を得る工程
を含む、方法。
【０７０１】
７４．ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１であるの標識化方法であって、
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）、
酢酸アンモニウム、
177ＬｕＣｌ3または111ＩｎＣｌ3からなる群から選択される放射性金属前駆体、および
ＨＣｌ
を含む第１の溶液をインキュベートする工程、ならびに
該第１の溶液に、Ｎａ2ＥＤＴＡ・２Ｈ2Ｏおよび水を含む第２の溶液を添加して９５％を超える放射化学的純度を得る工程
を含む、方法。
【０７０２】
７５．溶液中におけるカップリング工程の前または後の必要なさらなる試薬による処理またはプロセシング工程を伴う、個々のアミノ酸、保護アミノ酸または修飾アミノ酸のカップリングによる、ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）の合成方法。
【０７０３】
７６．溶液中におけるかまたは固相上におけるカップリング工程の前または後の必要なさらなる試薬による処理またはプロセシング工程を伴う、または合わせた液相および固相合成工程および方法による、修飾、保護、非保護または様々なペプチドフラグメントのセグメントカップリングによる、ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）の合成方法
【０７０４】
７７．溶液中におけるカップリング工程の前または後の必要なさらなる試薬による処理またはプロセシング工程を伴う、個々のアミノ酸、保護アミノ酸または修飾アミノ酸のカップリングによる、ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）の合成方法。
【０７０５】
７８．一般式：
Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇ
［式中、
Ｍは、放射線核種と錯体形成していてもよいＤＯ３Ａであり；
Ｎは、０、αもしくは非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｏは、αまたは非αアミノ酸であり；
Ｐは、０、αもしくは非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｇは、ＧＲＰ受容体標的ペプチドであり；
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸である］
を有する化合物。
【０７０６】
７９．ＧＲＰ受容体標的ペプチドが、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＯＨ（配列番号１）、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（配列番号１）、ＱＷＡＶＧＮＭｅＨＬＭ−ＮＨ2（配列番号１５）、ＱＷＡＶＧＨＦＬ−ＮＨ2（配列番号２２）、ＱＲＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（配列番号３）、ＱＲＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（配列番号４）、ＱＫＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（配列番号５）、ＱＷＡＶＧＨＬ−ＮＨ−ペンチル（配列番号６）、ＱＷＳＶａＨＬＭ−ＮＨ2（配列番号７）、ＱＷＡＶＧＨＬＬ−ＮＨ2（配列番号８）、ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−ＨＦ−Ｎｌｅ−ＮＨ2（配列番号９）、ＱＷＡＧＨＦＬ−ＮＨ2（配列番号１０）、ＬＷＡＶＧＳＦＭ−ＮＨ2（配列番号１１）、ＨＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（配列番号１２）、ＬＷＡＴＧＳＦＭ−ＮＨ2（配列番号１７）、ＬＷＡＶＧＳＦＭ−ＮＨ2（配列番号１１）、ＱＷＡＶａＨＬＭ−ＮＨ2（配列番号１４）およびＱＷＡＶＧＨＦＭ−ＮＨ2（配列番号１３）からなる群から選択される、実施態様７８の化合物。
【０７０７】
８０．一般式：
Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇ
［式中、
Ｍは、放射線核種と錯体形成していてもよいＤＯ３Ａであり；
Ｎは、０、αもしくは非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｏは、αまたは非αアミノ酸であり；
Ｐは、０、αもしくは非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｇは、ＧＲＰ受容体標的ペプチドであり；
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは(３β,５β,１２α)−３−アミノ−１２−ヒドロキシコラン−２４−酸である］
を有する化合物。
【０７０８】
８１．ＧＲＰ受容体標的ペプチドが、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＯＨ（配列番号１）、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（配列番号１）、ＱＷＡＶＧＮＭｅＨＬＭ−ＮＨ2（配列番号１５）、ＱＷＡＶＧＨＦＬ−ＮＨ2（配列番号２２）、ＱＲＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（配列番号３）、ＱＲＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（配列番号４）、ＱＫＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（配列番号５）、ＱＷＡＶＧＨＬ−ＮＨ−ペンチル（配列番号６）、ＱＷＳＶａＨＬＭ−ＮＨ2（配列番号７）、ＱＷＡＶＧＨＬＬ−ＮＨ2（配列番号８）、ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−ＨＦ−Ｎｌｅ−ＮＨ2（配列番号９） ＱＷＡＧＨＦＬ−ＮＨ2（配列番号１０）、ＬＷＡＶＧＳＦＭ−ＮＨ2（配列番号１１）、ＨＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（配列番号１２）、ＬＷＡＴＧＳＦＭ−ＮＨ2（配列番号１７）、ＬＷＡＶＧＳＦＭ−ＮＨ2（配列番号１１）、ＱＷＡＶａＨＬＭ−ＮＨ2（配列番号１４）およびＱＷＡＶＧＨＦＭ−ＮＨ2（配列番号１３）からなる群から選択される、実施態様８０の化合物。
【０７０９】
８２．一般式：
Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇ
［式中、
Ｍは、放射線核種と錯体形成していてもよいＤＯ３Ａであり；
Ｎは、０、αもしくは非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｏは、αまたは非αアミノ酸であり；
Ｐは、０、αもしくは非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｇは、ＧＲＰ受容体標的ペプチドであり；
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは４−アミノ安息香酸である］
を有する化合物。
【０７１０】
８３．ＧＲＰ受容体標的ペプチドが、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＯＨ（配列番号１）、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（配列番号１）、ＱＷＡＶＧＮＭｅＨＬＭ−ＮＨ2（配列番号１５）、ＱＷＡＶＧＨＦＬ−ＮＨ2（配列番号２２）、ＱＲＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（配列番号３）、ＱＲＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（配列番号４）、ＱＫＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（配列番号５）、ＱＷＡＶＧＨＬ−ＮＨ−ペンチル（配列番号６）、ＱＷＳＶａＨＬＭ−ＮＨ2（配列番号７）、ＱＷＡＶＧＨＬＬ−ＮＨ2（配列番号８）、ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−ＨＦ−Ｎｌｅ−ＮＨ2（配列番号９）、ＱＷＡＧＨＦＬ−ＮＨ2（配列番号１０）、ＬＷＡＶＧＳＦＭ−ＮＨ2（配列番号１１）、ＨＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（配列番号１２）、ＬＷＡＴＧＳＦＭ−ＮＨ2（配列番号１７）、ＬＷＡＶＧＳＦＭ−ＮＨ2（配列番号１１）、ＱＷＡＶａＨＬＭ−ＮＨ2（配列番号１４）、ＱＷＡＶＧＨＦＭ−ＮＨ2（配列番号１３）、Ｎｍｅ−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は、（配列番号１）である）、Ｑ−Ψ[ＣＳＮＨ]ＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、Ｑ−Ψ[ＣＨ2ＮＨ]−ＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、Ｑ−Ψ[ＣＨ＝ＣＨ]ＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、α−ＭｅＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＮｍｅ−ＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷ−Ψ[ＣＳＮＨ]−ＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷ−Ψ[ＣＨ2ＮＨ]−ＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷ−Ψ[ＣＨ＝ＣＨ]−ＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、Ｑ−α−Ｍｅ−ＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷ−Ｎｍｅ−ＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡ＝Ψ[ＣＳＮＨ]−ＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡ−Ψ[ＣＨ2ＮＨ]−ＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷ−Ａｉｂ−ＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡＶ−Ｓａｒ−ＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡＶＧ−Ψ[ＣＳＮＨ]−ＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡＶＧ−Ψ[ＣＨ＝ＣＨ]−ＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡＶ−Ｄａｌａ−ＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡＶＧ−Ｎｍｅ−Ｈｉｓ−ＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡＶＧ−Ｈ−Ψ[ＣＳＮＨ]−Ｌ−Ｍ−ＮＨ2、ＱＷＡＶＧ−Ｈ−Ψ[ＣＨ2ＮＨ]−ＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡＶＧＨ−Ψ[ＣＨ＝ＣＨ]−ＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡＶＧ−α−Ｍｅ−ＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡＶＧＨ−Ｎｍｅ−ＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡＶＧＨ−α−ＭｅＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡＶＧＨＦ−Ｌ−ＮＨ2およびＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１であり、ＱＷＡＶＧＨＦＬ−ＮＨ2は配列番号２２である）、
からなる群から選択される、実施態様８２の化合物。
【０７１１】
８４．Ｍが光線療法に有用な光学的標識である実施態様１、２０または５１のいずれか１つの実施態様の化合物を患者に投与することを含む光線療法の方法。
【０７１２】
８５．ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＷＡＶａＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶａＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１４である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ｆＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ｆＱＷＡＶＧＨＬＬ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＬ−ＮＨ2は配列番号８である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ｆＱＷＡＶＧＨＬ−ＮＨ−ペンチル（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬ−ＮＨ−ペンチルは配列番号６である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ｙＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−ＨＦＮｌｅ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−ＨＦＮｌｅ−ＮＨ2は配列番号９である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ｆＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−ＨＦＮｌｅ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−ＨＦＮｌｅ−ＮＨ2は配列番号９である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＷＡＶＧＨＦＬ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＦＬ−ＮＨ2は配列番号２２である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＷＡＶＧＮＭｅＨｉｓＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＮＭｅＨｉｓＬＭ−ＮＨ2は配列番号１５である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＬＷＡＶＧＳＦＭ−ＮＨ2（ここで、ＬＷＡＶＧＳＦＭ−ＮＨ2は配列番号１１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＨＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＨＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１２である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＬＷＡＴＧＨＦＭ−ＮＨ2（ここで、ＬＷＡＴＧＨＦＭ−ＮＨ2は配列番号１６である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＷＡＶＧＨＦＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＦＭ−ＮＨ2は配列番号１３である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＲＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＲＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号３である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＲＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＲＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号４である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＫＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＫＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号５である）；
Ｐｇｌｕ−Ｑ−Ｌｙｓ(ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸)−ＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１８である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ＱＷＡＶａＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶａＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１４である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ｆＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ｆＱＷＡＶＧＨＬＬ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＬ−ＮＨ2は配列番号８である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ｆＱＷＡＶＧＨＬ−ＮＨ−ペンチル（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬ−ＮＨ−ペンチルは配列番号６である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ｙＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−ＨＦＮｌｅ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−ＨＦＮｌｅ−ＮＨ2は配列番号９である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ｆＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−ＨＦＮｌｅ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−ＨＦＮｌｅ−ＮＨ2は配列番号９である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ＱＷＡＶＧＨＦＬ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＦＬ−ＮＨ2は配列番号２２である）
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ＱＷＡＶＧＮＭｅＨＬＭＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＮＭｅＨＬＭＮＨ2は配列番号１５である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ＬＷＡＶＧＳＦＭ−ＮＨ2（ここで、ＬＷＡＶＧＳＦＭ−ＮＨ2は配列番号１１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ＨＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＨＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１２である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ＬＷＡＴＧＨＦＭ−ＮＨ2（ここで、ＬＷＡＴＧＨＦＭ−ＮＨ2は配列番号１６である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ＱＷＡＶＧＨＦＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＦＭ−ＮＨ2は配列番号１３である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ＱＲＬＧＮＱＷＡＶＧｌｙＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＲＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号３である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ＱＲＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＲＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号４である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ＱＫＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＫＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号５である）；および
Ｐｇｌｕ−Ｑ−Ｌｙｓ(ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−３−アミノ−３−デオキシコール酸)−ＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１８
からなる群から選択される化合物。
【０７１３】
８６．さらに化学療法薬または他の治療薬の投与を含む、実施態様１６、１７、３９、４４、４９または６９のいずれか１つの実施態様の方法。
【０７１４】
８７．ＧＲＰ受容体標的ペプチドが、Ｎｍｅ−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、Ｑ−Ψ[ＣＳＮＨ]ＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、Ｑ−Ψ[ＣＨ2ＮＨ]−ＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、Ｑ−Ψ[ＣＨ＝ＣＨ]ＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、α−ＭｅＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＮｍｅ−ＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷ−Ψ[ＣＳＮＨ]−ＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷ−Ψ[ＣＨ2ＮＨ]−ＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷ−Ψ[ＣＨ＝ＣＨ]−ＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、Ｑ−α−Ｍｅ−ＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷ−Ｎｍｅ−ＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡ＝Ψ[ＣＳＮＨ]−ＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡ−Ψ[ＣＨ2ＮＨ]−ＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷ−Ａｉｂ−ＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡＶ−Ｓａｒ−ＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡＶＧ−Ψ[ＣＳＮＨ]−ＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡＶＧ−Ψ[ＣＨ＝ＣＨ]−ＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡＶ−Ｄａｌａ−ＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡＶＧ−Ｎｍｅ−Ｈｉｓ−ＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡＶＧ−Ｈ−Ψ[ＣＳＮＨ]−Ｌ−Ｍ−ＮＨ2、ＱＷＡＶＧ−Ｈ−Ψ[ＣＨ2ＮＨ]−ＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡＶＧＨ−Ψ[ＣＨ＝ＣＨ]−ＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡＶＧ−α−Ｍｅ−ＨＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡＶＧＨ−Ｎｍｅ−ＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡＶＧＨ−α−ＭｅＬＭ−ＮＨ2、ＱＷＡＶＧＨＦ−Ｌ−ＮＨ2およびＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１であり、ＱＷＡＶＧＨＦＬ−ＮＨ2は配列番号２２である）からなる群から選択される、実施態様７８または８０のいずれか１つの実施態様の化合物。
【０７１５】
８８．ガストリン放出ペプチド受容体（ＧＲＰ−Ｒ）およびニューロメジン−Ｂ受容体（ＮＭＢ−Ｒ）を標的化する方法であって、一般式：
Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇ
［式中、
Ｍは、放射線核種と錯体形成していてもよい光学的標識または金属キレート剤であり；
Ｎは、０、αもしくは非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｏは、αまたは非αアミノ酸であり；
Ｐは、０、αもしくは非αアミノ酸または他の連結基であり,
Ｇは、ＧＲＰ受容体標的ペプチドであり；
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは非αアミノ酸である］
を有する化合物を投与することを含む、方法。
【０７１６】
８９．Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つが環状基を有する非αアミノ酸である、実施態様８８の方法。
【０７１７】
９０．ＮがＧｌｙであり、Ｏが４−アミノ安息香酸であり、Ｐが存在しない、実施態様８９の方法。
【０７１８】
９１．ＧＲＰ−ＲおよびＮＭＢ−Ｒを標的化する方法であって、一般式：
Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇ
［式中、
Ｍは、放射線核種と錯体形成していてもよい光学的標識または金属キレート剤であり；
Ｎは、０、αアミノ酸、置換胆汁酸または他の連結基であり；
Ｏは、αアミノ酸または置換胆汁酸であり；
Ｐは、０、αアミノ酸、置換胆汁酸または他の連結基であり；
Ｇは、ＧＲＰ受容体標的ペプチドであり、
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは置換胆汁酸である］
を有する化合物を投与することを含む、方法。
【０７１９】
９２．ＮがＧｌｙであり、Ｏが(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸であり、Ｐが存在しない、実施態様９１の方法。
【０７２０】
９３．ＧＲＰ受容体標的ペプチドが
Ｎｍｅ−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
Ｑ−Ψ[ＣＳＮＨ]ＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
Ｑ−Ψ[ＣＨ2ＮＨ]−ＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
Ｑ−Ψ[ＣＨ＝ＣＨ]ＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
α−ＭｅＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＮｍｅ−ＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷ−Ψ[ＣＳＮＨ]−ＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷ−Ψ[ＣＨ2ＮＨ]−ＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷ−Ψ[ＣＨ＝ＣＨ]−ＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
Ｑ−α−Ｍｅ−ＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷ−Ｎｍｅ−ＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷＡ＝Ψ[ＣＳＮＨ]−ＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷＡ−Ψ[ＣＨ2ＮＨ]−ＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷ−Ａｉｂ−ＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷＡＶ−Ｓａｒ−ＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷＡＶＧ−Ψ[ＣＳＮＨ]−ＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷＡＶＧ−Ψ[ＣＨ＝ＣＨ]−ＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷＡＶ−Ｄａｌａ−ＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷＡＶＧ−Ｎｍｅ−Ｈｉｓ−ＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷＡＶＧ−Ｈ−Ψ[ＣＳＮＨ]−Ｌ−Ｍ−ＮＨ2、
ＱＷＡＶＧ−Ｈ−Ψ[ＣＨ2ＮＨ]−ＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷＡＶＧＨ−Ψ[ＣＨ＝ＣＨ]−ＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷＡＶＧ−α−Ｍｅ−ＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷＡＶＧＨ−Ｎｍｅ−ＬＭ−ＮＨ2、および
ＱＷＡＶＧＨ−α−ＭｅＬＭ−ＮＨ2
（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１であり、ＱＷＡＶＧＨＦＬ−ＮＨ2は配列番号２２である）
からなる群から選択される、実施態様８８、８９または９１のいずれか１つの実施態様の方法。
【０７２１】
９４．実施態様１、２０、５１、７８、８０または８２のいずれか１つの実施態様の化合物のインビボ活性を向上させる方法、ＧＲＰ受容体標的ペプチドを修飾して該ペプチドのタンパク質分解性切断を減少させる工程を含む、方法。
【０７２２】
９５．修飾ＧＲＰ−Ｒ標的ペプチドがアゴニストである、実施態様９４の方法。
【０７２３】
９６．実施態様１、２０、５１、７８、８０または８２のいずれか１つの実施態様のガストリン放出ペプチド（ＧＲＰ）アナログのタンパク質分解性切断を減少させる方法であって、ＧＲＰ−Ｒ標的基におけるペプチド結合を修飾する工程を含む、方法。
【０７２４】
９７．修飾ＧＲＰ−Ｒ標的ペプチドがアゴニストである、実施態様９６の方法。
【０７２５】
９８．アゴニストであるガストリン放出ペプチド受容体（ＧＲＰ−Ｒ）標的基を有するガストリン放出ペプチド（ＧＲＰ）アナログのタンパク質分解性切断を減少させる方法であって、ＧＲＰ−Ｒ標的基におけるペプチド結合を修飾する工程を含む、方法。
【０７２６】
９９．ＧＲＰ−Ｒ標的基が、
Ｎｍｅ−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
Ｑ−Ψ[ＣＳＮＨ]ＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
Ｑ−Ψ[ＣＨ2ＮＨ]−ＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
Ｑ−Ψ[ＣＨ＝ＣＨ]ＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
α−ＭｅＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＮｍｅ−ＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷ−Ψ[ＣＳＮＨ]−ＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷ−Ψ[ＣＨ2ＮＨ]−ＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷ−Ψ[ＣＨ＝ＣＨ]−ＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
Ｑ−α−Ｍｅ−ＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷ−Ｎｍｅ−ＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷＡ＝Ψ[ＣＳＮＨ]−ＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷＡ−Ψ[ＣＨ2ＮＨ]−ＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷ−Ａｉｂ−ＶＧＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷＡＶ−Ｓａｒ−ＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷＡＶＧ−Ψ[ＣＳＮＨ]−ＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷＡＶＧ−Ψ[ＣＨ＝ＣＨ]−ＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷＡＶ−Ｄａｌａ−ＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷＡＶＧ−Ｎｍｅ−Ｈｉｓ−ＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷＡＶＧ−Ｈ−Ψ[ＣＳＮＨ]−Ｌ−Ｍ−ＮＨ2、
ＱＷＡＶＧ−Ｈ−Ψ[ＣＨ2ＮＨ]−ＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷＡＶＧＨ−Ψ[ＣＨ＝ＣＨ]−ＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷＡＶＧ−α−Ｍｅ−ＨＬＭ−ＮＨ2、
ＱＷＡＶＧＨ−Ｎｍｅ−ＬＭ−ＮＨ2、および
ＱＷＡＶＧＨ−α−ＭｅＬＭ−ＮＨ2
（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１であり、ＱＷＡＶＧＨＦＬ−ＮＨ2は配列番号２２である）
からなる群から選択される、実施態様９４、９６または９８のいずれか１つの実施態様の方法。
【０７２７】
１００．Ｇが、タンパク質分解性切断を減少させるように修飾されているＧＲＰ受容体標的ペプチドである、実施態様１、２０、５１、７８、８０または８２のいずれか１つの実施態様の化合物。
【０７２８】
１０１．放射線核種と錯体を形成していてもよい光学的標識または金属キレート剤およびＧＲＰ−Ｒ標的ペプチドを含む化合物にＧＲＰ−Ｒおよび／またはＮＭＢ−Ｒに対する特異性を付与する方法であって、かかる化合物において一般式：
Ｎ−Ｏ−Ｐ
［式中、
Ｎは、０、αもしくは非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｏは、αまたは非αアミノ酸であり；
Ｐは、０、αもしくは非αアミノ酸または他の連結基であり、
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは非αアミノ酸である］
を有するリンカーを含ませることを含む、方法。
【０７２９】
１０２．放射線核種と錯体を形成していてもよい光学的標識または金属キレート剤およびＧＲＰ−Ｒ標的ペプチドを含む化合物にＧＲＰ−Ｒおよび／またはＮＭＢ−Ｒに対する特異性を付与する方法であって、かかる化合物において一般式：
Ｎ−Ｏ−Ｐ
［式中、
Ｎは、０、αアミノ酸、置換胆汁酸または他の連結基であり；
Ｏは、αアミノ酸または置換胆汁酸であり；
Ｐは、０、αアミノ酸、置換胆汁酸または他の連結基であり、
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは置換胆汁酸である］
を有するリンカーを含ませることを含む、方法。
【０７３０】
１０３．放射線核種と錯体を形成していてもよい光学的標識または金属キレート剤およびＧＲＰ−Ｒ標的ペプチドを含む化合物にＧＲＰ−Ｒおよび／またはＮＭＢ−Ｒに対する特異性を付与する方法であって、かかる化合物において一般式：
Ｎ−Ｏ−Ｐ
［式中、
Ｎは、０、αアミノ酸、環状基を有する非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｏは、αアミノ酸または環状基を有する非αアミノ酸であり；
Ｐは、０、αアミノ酸、環状基を有する非αアミノ酸または他の連結基であり、
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは環状基を有する非αアミノ酸である］
を有するリンカーを含ませることを含む、方法。
【０７３１】
１０４．放射線核種と錯体を形成していてもよい光学的標識または金属キレート剤およびＧＲＰ−Ｒ標的ペプチドを含む化合物のインビボ活性を向上させる方法であって、かかる化合物において一般式：
Ｎ−Ｏ−Ｐ
［式中、
Ｎは、０、αもしくは非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｏは、αまたは非αアミノ酸であり；
Ｐは、０、αもしくは非αアミノ酸または他の連結基であり、
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは非αアミノ酸である］
を有するリンカーを含ませることを含む、方法。
【０７３２】
１０５．放射線核種と錯体を形成していてもよい光学的標識または金属キレート剤およびＧＲＰ−Ｒ標的ペプチドを含む化合物のインビボ活性を向上させる方法であって、かかる化合物において一般式：
Ｎ−Ｏ−Ｐ
［式中、
Ｎは、０、αアミノ酸、置換胆汁酸または他の連結基であり；
Ｏは、αアミノ酸または置換胆汁酸であり；
Ｐは、０、αアミノ酸、置換胆汁酸または他の連結基であり、
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは置換胆汁酸である］
を有するリンカーを含ませることを含む、方法。
【０７３３】
１０６．放射線核種と錯体を形成していてもよい光学的標識または金属キレート剤およびＧＲＰ−Ｒ標的ペプチドを含む化合物のインビボ安定性を向上させる方法であって、かかる化合物において一般式：
Ｎ−Ｏ−Ｐ
［式中、
Ｎは、０、αアミノ酸、環状基を有する非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｏは、αアミノ酸または環状基を有する非αアミノ酸であり；
Ｐは、０、αアミノ酸、環状基を有する非αアミノ酸または他の連結基であり、
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは環状基を有する非αアミノ酸である］
を有するリンカーを含ませることを含む、方法。
【０７３４】
１０７．下記構造：
【化１０】
2011520971.tif 000099
を有する化合物。
【０７３５】
１０８．一般式：
Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇ
［式中、
Ｍは、式８：
【化１１】
2011520971.tif 000100
を有する、放射線核種と錯体形成していてもよい金属キレート剤であり、ここで、
Ｒ1は、水素、Ｃ1−Ｃ20アルキル（１個以上のカルボキシ基で置換されていてもよい）、Ｃ3−Ｃ10シクロアルキル、Ｃ4−Ｃ20シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキルであるか、または、２つのＲ1基が一緒になって直鎖または環状Ｃ2−Ｃ10アルキレン基またはオルト−二置換アリーレンを形成し；
Ｒ2は、水素もしくはカルボキシであるか、または、Ｃ1−Ｃ20アルキル、Ｃ3−Ｃ10シクロアルキル、Ｃ4−Ｃ20シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、酸性基含有基およびアミノ基含有基から選択される置換されていてもよい基（これらは、各々、生理学的な系と相互作用することができる好適な分子との結合を可能にする官能基でさらに置換されていてもよい）であり；
Ｒ3、Ｒ4およびＲ5は、同一であっても異なっていてもよく、水素もしくはカルボキシであるか、または、Ｃ1−Ｃ20アルキル、Ｃ3−Ｃ10シクロアルキル、Ｃ4−Ｃ20シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、酸性基含有基およびアミノ基含有基から選択される置換されていてもよい基（これらは、各々、生理学的な系と相互作用することができる好適な分子との結合を可能にする官能基でさらに置換されていてもよい）であり；
ＦＧは、同一であっても異なっていてもよく、カルボキシ、−ＰＯ3Ｈ2または−ＲＰ(Ｏ)ＯＨ基であり、ここで、Ｒは、水素であるか、または、Ｃ1−Ｃ20アルキル、Ｃ3−Ｃ10シクロアルキル、Ｃ4−Ｃ20シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、酸性基含有基およびアミノ基含有基から選択される置換されていてもよい基（これらは、各々、生理学的な系と相互作用することができる好適な分子との結合を可能にする官能基でさらに置換されていてもよい）であり；
Ｎは、０、αアミノ酸、環状基を有する非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｏは、αアミノ酸または環状基を有する非αアミノ酸であり；
Ｐは、０、αアミノ酸、環状基を有する非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｇは、ＧＲＰ受容体標的ペプチドであり、
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは環状基を有する非αアミノ酸である］
を有する化合物。
【０７３６】
１０９．一般式：
Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇ
［式中、
Ｍは、式８：
【化１２】
2011520971.tif 000101
を有する放射線核種と錯体形成していてもよい金属キレート剤であり、ここで、
Ｒ1は、水素、Ｃ1−Ｃ20アルキル（１個以上のカルボキシ基で置換されていてもよい）、Ｃ3−Ｃ10シクロアルキル、Ｃ4−Ｃ20シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキルであるか、または、２つのＲ1基が一緒になって直鎖または環状Ｃ2−Ｃ10アルキレン基またはオルト−二置換アリーレンを形成し；
Ｒ2は、水素もしくはカルボキシであるか、または、Ｃ1−Ｃ20アルキル、Ｃ3−Ｃ10シクロアルキル、Ｃ4−Ｃ20シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、酸性基含有基およびアミノ基含有基から選択される置換されていてもよい基（これらは、各々、生理学的な系と相互作用することができる好適な分子との結合を可能にする官能基でさらに置換されていてもよい）であり；
Ｒ3、Ｒ4およびＲ5は、同一であっても異なっていてもよく、水素もしくはカルボキシであるか、または、Ｃ1−Ｃ20アルキル、Ｃ3−Ｃ10シクロアルキル、Ｃ4−Ｃ20シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、酸性基含有基およびアミノ基含有基から選択される置換されていてもよい基（これらは、各々、生理学的な系と相互作用することができる好適な分子との結合を可能にする官能基でさらに置換されていてもよい）であり；
ＦＧは、同一であっても異なっていてもよく、カルボキシ、−ＰＯ3Ｈ2または−ＲＰ(Ｏ)ＯＨ基であり、ここで、Ｒは、水素であるか、または、Ｃ1−Ｃ20アルキル、Ｃ3−Ｃ10シクロアルキル、Ｃ4−Ｃ20シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、酸性基含有基およびアミノ基含有基から選択される置換されていてもよい基（これらは、各々、生理学的な系と相互作用することができる好適な分子との結合を可能にする官能基でさらに置換されていてもよい）であり；
Ｎは、０、αもしくは非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｏは、αまたは非αアミノ酸であり；
Ｐは、０、αもしくは非αアミノ酸または他の連結基であり、
Ｇは、ＧＲＰ受容体標的ペプチドであり、
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは非αアミノ酸である］
を有する化合物。
【０７３７】
１１０．一般式：
Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇ
［式中、
Ｍは、式８：
【化１３】
2011520971.tif 000102
を有する、放射線核種と錯体形成していてもよい金属キレート剤であり、ここで、
Ｒ1は、水素、Ｃ1−Ｃ20アルキル（１個以上のカルボキシ基で置換されていてもよい）、Ｃ3−Ｃ10シクロアルキル、Ｃ4−Ｃ20シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキルであるか、または、２つのＲ1基が一緒になって直鎖または環状Ｃ2−Ｃ10アルキレン基またはオルト−二置換アリーレンを形成し；
Ｒ2は、水素もしくはカルボキシであるか、または、Ｃ1−Ｃ20アルキル、Ｃ3−Ｃ10シクロアルキル、Ｃ4−Ｃ20シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、酸性基含有基およびアミノ基含有基から選択される置換されていてもよい基（これらは、各々、生理学的な系と相互作用することができる好適な分子との結合を可能にする官能基でさらに置換されていてもよい）であり；
Ｒ3、Ｒ4およびＲ5は、同一であっても異なっていてもよく、水素もしくはカルボキシであるか、または、Ｃ1−Ｃ20アルキル、Ｃ3−Ｃ10シクロアルキル、Ｃ4−Ｃ20シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、酸性基含有基およびアミノ基含有基から選択される置換されていてもよい基（これらは、各々、生理学的な系と相互作用することができる好適な分子との結合を可能にする官能基でさらに置換されていてもよい）であり；
ＦＧは、同一であっても異なっていてもよく、カルボキシ、−ＰＯ3Ｈ2または−ＲＰ(Ｏ)ＯＨ基であり、ここで、Ｒは、水素であるか、または、Ｃ1−Ｃ20アルキル、Ｃ3−Ｃ10シクロアルキル、Ｃ4−Ｃ20シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、酸性基含有基およびアミノ基含有基から選択される置換されていてもよい基（これらは、各々、生理学的な系と相互作用することができる好適な分子との結合を可能にする官能基でさらに置換されていてもよい）であり；
Ｎは、０、αアミノ酸、置換胆汁酸または他の連結基であり；
Ｏは、αアミノ酸または置換胆汁酸であり；
Ｐは、０、αアミノ酸、置換胆汁酸または他の連結基であり；
Ｇは、ＧＲＰ受容体標的ペプチドであり、
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは置換胆汁酸である］
を有する化合物。
【０７３８】
１１１．一般式：
Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇ
［式中、
Ｍは、放射線核種と錯体形成していてもよいＡａｚｔａ金属キレート剤またはその誘導体であり；
Ｎは、０、αアミノ酸、環状基を有する非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｏは、αアミノ酸または環状基を有する非αアミノ酸であり；
Ｐは、０、αアミノ酸、環状基を有する非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｇは、ＧＲＰ受容体標的ペプチドであり、
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは環状基を有する非αアミノ酸である］
を有する化合物。
【０７３９】
１１２．一般式：
Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇ
［式中、
Ｍは、放射線核種と錯体形成していてもよいＡａｚｔａキレート剤またはその誘導体であり；
Ｎは、０、αもしくは非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｏは、αまたは非αアミノ酸であり；
Ｐは、０、αもしくは非αアミノ酸または他の連結基であり、
Ｇは、ＧＲＰ受容体標的ペプチドであり、
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは非αアミノ酸である］
を有する化合物。
【０７４０】
１１３．一般式：
Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇ
［式中、
Ｍは、放射線核種と錯体形成していてもよいＡａｚｔａ金属キレート剤またはその誘導体であり；
Ｎは、０、αアミノ酸、置換胆汁酸または他の連結基であり；
Ｏは、αアミノ酸または置換胆汁酸であり；
Ｐは、０、αアミノ酸、置換胆汁酸または他の連結基であり；
Ｇは、ＧＲＰ受容体標的ペプチドであり、
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは置換胆汁酸である］
を有する化合物。
【０７４１】
１１４．Ｇがアゴニストであるか、またはアゴニスト活性を与えるペプチドである、実施態様１０８〜１１３のいずれか１つの実施態様の化合物。
【０７４２】
１１５．環状基を有する非αアミノ酸が
４−アミノ安息香酸；
４−アミノメチル安息香酸；
トランス−４−アミノメチルシクロヘキサンカルボン酸；
４−(２−アミノエトキシ)安息香酸；
イソニペコチン酸；
２−アミノメチル安息香酸；
４−アミノ−３−ニトロ安息香酸；
４−(３−カルボキシメチル−２−ケト−１−ベンゾイミダゾリル)−ピペリジン；
６−(ピペラジン−１−イル)−４−(３Ｈ)−キナゾリン−３−酢酸；
(２Ｓ,５Ｓ)−５−アミノ−１,２,４,５,６,７−ヘキサヒドロ−アゼピノ[３,２１−ｈｉ]インドール−４−オン−２−カルボン酸；
(４Ｓ,７Ｒ)−４−アミノ−６−アザ−５−オキソ−９−チアビシクロ[４.３.０]ノナン−７−カルボン酸；
３−カルボキシメチル−１−フェニル−１,３,８−トリアザスピロ[４.５]デカン−４−オン；
Ｎ１−ピペラジン酢酸；
Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−酢酸；
(３Ｓ)−３−アミノ−１−カルボキシメチルカプロラクタム；および
(２Ｓ,６Ｓ,９)−６−アミノ−２−カルボキシメチル−３,８−ジアザビシクロ−[４,３,０]−ノナン−１,４−ジオン
からなる群から選択される、実施態様１０８または１１１の化合物。
【０７４３】
１１６．非αアミノ酸が
８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸；
Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン−酢酸；および
式ＮＨ2−(ＣＨ2ＣＨ2Ｏ)n−ＣＨ2ＣＯ2ＨまたはＮＨ2−(ＣＨ2ＣＨ2Ｏ)n−ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ2Ｈ（ここで、ｎは２〜１００である）を有するポリエチレングリコール誘導体
からなる群から選択される、実施態様１０９または１１２の化合物。
【０７４４】
１１７．置換胆汁酸が
３β−アミノ−３−デオキシコール酸；
(３β,５β)−３−アミノコラン−２４−酸；
(３β,５β,１２α)−３−アミノ−１２−ヒドロキシコラン−２４−酸；
(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸；
Ｌｙｓ−(３,６,９)−トリオキサウンデカン−１,１１−ジカルボニル３,７−ジデオキシ−３−アミノコール酸）；
(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７−ヒドロキシ−１２−オキソコラン−２４−酸；および
(３β,５β,７α)−３−アミノ−７−ヒドロキシコラン−２４−酸
からなる群から選択される、実施態様１１０または１１３の化合物。
【０７４５】
１１８．画像診断方法であって、
Ｍが放射性金属または常磁性金属と錯体形成した金属キレート剤である実施態様１０９〜１１３のいずれか１つの実施態様の化合物を含む診断用造影剤を患者に投与する工程、および
患者を画像診断する工程
を含む方法。
【０７４６】
１１９．実施態様１０８〜１１３のいずれか１つの実施態様の化合物を含む物質を注射用媒体に添加する工程を含む、診断用造影剤の製造方法。
【０７４７】
１２０．治療用放射線核種と錯体形成した実施態様１０８〜１１３のいずれか１つの実施態様の化合物を含む放射線治療薬を患者に投与する工程を含む、患者を治療する方法。
【０７４８】
１２１．実施態様１０８〜１１３のいずれか１つの実施態様の化合物を含む物質を注射用媒体に添加する工程を含む、放射線治療薬の製造方法。
【０７４９】
１２２．ＭがＡａｚｔａであり、ＮがＧｌｙであり、Ｏが４−アミノ安息香酸であり、Ｐが０であり、ＧがＢＢＮ（７−１４）（ここで、ＢＢＮ(７−１４)は配列番号１である）である、実施態様１０８の化合物。
【０７５０】
１２３．ＭがＣｙＡａｚｔａであり、ＮがＧｌｙであり、Ｏが４−アミノ安息香酸であり、Ｐが０であり、ＧがＢＢＮ（７−１４）（ここで、ＢＢＮ(７−１４)は配列番号１である）である、実施態様１０８の化合物。
【０７５１】
１２４．、ＭがＡａｚｔａであり、ＮがＧｌｙであり、Ｏが(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸であり、Ｐが０であり、ＧがＢＢＮ（７−１４）（ここで、ＢＢＮ(７−１４)は配列番号１である）である、実施態様１１０の化合物。
【０７５２】
１２５．ＭがＣｙＡａｚｔａであり、ＮがＧｌｙであり、Ｏが(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸であり、Ｐが０であり、ＧがＢＢＮ（７−１４）（ここで、ＢＢＮ(７−１４)は配列番号１である）である、実施態様１１０の化合物。
【０７５３】
１２６．下記構造：
【化１４】
2011520971.tif 000103
を有する化合物。
【０７５４】
１２７．下記構造：
【化１５】
2011520971.tif 000104
を有する化合物。
【０７５５】
１２８．対象体内での標的化合物のＧＲＰ受容体発現標的組織への標的化を向上させる方法であって、
ＧＲＰ受容体標的ペプチドを含む第１の投薬を対象体に投与して非標的組織におけるＧＲＰ受容体結合部位を占有する工程、
一般式：
Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇ
［式中、
Ｍは、放射線核種と錯体形成した光学的標識または金属キレート剤であり；
Ｎは、０、αもしくは非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｏは、αまたは非αアミノ酸であり；
Ｐは、０、αもしくは非αアミノ酸または他の連結基であり、
Ｇは、ＧＲＰ受容体標的ペプチドであり、
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは非αアミノ酸である］
を有する標識化合物を含む第２の投薬を対象体に投与する工程
を含む、方法。
【０７５６】
１２９．第１の投薬を投与する工程および第２の投薬を投与する工程を同時に行う、実施態様１２８の方法、
【０７５７】
１３０．第１の投薬におけるＧＲＰ受容体標的ペプチドがリンカーに結合している、実施態様１２８の方法。
【０７５８】
１３１．第１の投薬におけるＧＲＰ受容体標的ペプチドが、１つ以上の金属キレート剤と結合しているリンカーと結合している、実施態様１２８の方法。
【０７５９】
１３２．第１の投薬のＧＲＰ受容体標的ペプチド、リンカーおよび金属キレート剤が、第２の投薬のＧＲＰ受容体標的ペプチド、Ｎ−Ｏ−Ｐリンカーおよび金属キレート剤と同じである、実施態様１３１の方法。
【０７６０】
１３３．非αアミノ酸が、
８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸；
Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン−酢酸；および
式ＮＨ2−(ＣＨ2ＣＨ2Ｏ)n−ＣＨ2ＣＯ2ＨまたはＮＨ2−(ＣＨ2ＣＨ2Ｏ)n−ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ2Ｈ（ここで、ｎは２〜１００である）を有するポリエチレングリコール誘導体
からなる群から選択される、実施態様１２８の方法。
【０７６１】
１３４．金属キレート剤が、ＤＴＰＡ、ＤＯＴＡ、ＤＯ３Ａ、ＨＰ−ＤＯ３Ａ、ＥＤＴＡ、ＴＥＴＡ、ＥＨＰＧ、ＨＢＥＤ、ＮＯＴＡ、ＤＯＴＭＡ、ＴＥＴＭＡ、ＰＤＴＡ、ＴＴＨＡ、ＬＩＣＡＭ、ＭＥＣＡＭ、ＭＤＯＴＡ、Ｎ、Ｎ−ジメチルＧｌｙ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ、Ａａｚｔａおよびその誘導体からなる群から選択される、実施態様１２８の方法。
【０７６２】
１３５．標識化合物が：
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｄａｌａ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｌｙｓ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ａｒｇ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ａｓｐ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｓｅｒ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｕ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｄａｌａ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−２,３−ジアミノプロピオン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−２,３−ジアミノプロピオン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−２,３−ジアミノプロピオン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−２,３−ジアミノプロピオン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ａｓｐ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ｓｅｒ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ａｒｇ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−２,３−ジアミノプロピオン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ｌｙｓ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ａｓｐ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ｓｅｒ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ａｒｇ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−２,３−ジアミノプロピオン酸ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ｌｙｓ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−４−ヒドロキシプロリン−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−４−アミノプロリン−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−２,３−ジアミノプロピオン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；および
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−２,３−ジアミノプロピオン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）
からなる群から選択される化合物を含む、実施態様１２８の方法。
【０７６３】
１３６．標識化合物が、
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ジアミノプロピオン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ビフェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ジフェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−４−ベンゾイルフェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−５−アミノペンタン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｄ−フェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノオクタン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｅ(Ｇ８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2)−８−アミノオクタン酸−８−アミノオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；および
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｅ(Ｇ−Ａoa−Ａoa−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2)−８−アミノオクタン酸−８−アミノオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）
からなる群から選択される化合物を含む、実施態様１２８の方法。
【０７６４】
１３７．対象体内での標的化合物のＧＲＰ受容体発現標的組織への標的化を向上させる方法であって、
ＧＲＰ受容体標的ペプチドを含む第１の投薬を対象体に投与して非標的組織におけるＧＲＰ受容体結合部位を占有する工程、
一般式：
Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇ
［式中、
Ｍは、放射線核種と錯体形成した光学的標識または金属キレート剤であり；
Ｎは、０、αアミノ酸、置換胆汁酸または他の連結基であり；
Ｏは、αアミノ酸または置換胆汁酸であり；
Ｐは、０、αアミノ酸、置換胆汁酸または他の連結基であり；
Ｇは、ＧＲＰ受容体標的ペプチドであり、
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは置換胆汁酸である］
を有する標識化合物を含む第２の投薬を対象体に投与する工程
を含む、方法。
【０７６５】
１３８．第１の投薬を投与する工程および第２の投薬を投与する工程を同時に行う、実施態様１３７の方法。
【０７６６】
１３９．第１の投薬におけるＧＲＰ受容体標的ペプチドがリンカーに結合している、実施態様１３７の方法。
【０７６７】
１４０．第１の投薬におけるＧＲＰ受容体標的ペプチドが、１つ以上の金属キレート剤と結合しているリンカーと結合している、実施態様１３７の方法。
【０７６８】
１４１．第１の投薬のＧＲＰ受容体標的ペプチド、リンカーおよび金属キレート剤が、第２の投薬のＧＲＰ受容体標的ペプチド、Ｎ−Ｏ−Ｐリンカーおよび金属キレート剤と同じである、実施態様１４０の方法。
【０７６９】
１４２．置換胆汁酸が
３β−アミノ−３−デオキシコール酸；
(３β,５β)−３−アミノコラン−２４−酸；
(３β,５β,１２α)−３−アミノ−１２−ヒドロキシコラン−２４−酸；
(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸；
Ｌｙｓ−(３,６,９)−トリオキサウンデカン−１,１１−ジカルボニル３,７−ジデオキシ−３−アミノコール酸）；
(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７−ヒドロキシ−１２−オキソコラン−２４−酸；および
(３β,５β,７α)−３−アミノ−７−ヒドロキシコラン−２４−酸
からなる群から選択される、実施態様１３７の方法。
【０７７０】
１４３．金属キレート剤が、ＤＴＰＡ、ＤＯＴＡ、ＤＯ３Ａ、ＨＰＤＯ３Ａ、ＥＤＴＡ、ＴＥＴＡ、ＣＭＤＯＴＡ、Ｎ、Ｎ−ジメチルＧｌｙ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ、Ａａｚｔａおよびその誘導体からなる群から選択される、実施態様１３７の方法。
【０７７１】
１４４．標識化合物が
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β)−３−アミノコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,１２α)−３−アミノ−１２−ヒドロキシコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−(３,６,９)−トリオキサウンデカン−１,１１−ジカルボニル３,７−ジデオキシ−３−アミノコール酸)−Ａｒｇ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−３,６,９−トリオキサウンデカン−１,１１−ジカルボニルＬｙｓ(ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ)−Ａｒｇ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−１２−オキソコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−１−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＱＷＡＶａＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶａＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１４である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ｆ−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ｆ−ＷＡＶＧＨＬＬ−ＮＨ2（ここで、ＷＡＶＧＨＬＬ−ＮＨ2は配列番号８である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ｆ−ＱＷＡＶＧＨＬ−ＮＨ−ペンチル（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬ−ＮＨ−ペンチルは配列番号６である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−y−ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−Ｈ−Ｆ−Ｎｌｅ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−Ｈ−Ｆ−Ｎｌｅ−ＮＨ2は配列番号９である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ｆ−ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−Ｈ−Ｆ−Ｎｌｅ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−Ｈ−Ｆ−Ｎｌｅ−ＮＨ2は配列番号９である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＱＷＡＶＧＨＦＬ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＦＬ−ＮＨ2は配列番号２２である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＱＷＡＶＧＮＭｅＨ−Ｌ−Ｍ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＮＭｅＨ−Ｌ−Ｍ−ＮＨ2は配列番号１５である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＬＷＡＶＧＳＦ−Ｍ−ＮＨ2（ここで、ＬＷＡＶＧＳＦ−Ｍ−ＮＨ2は配列番号１１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＨＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＨＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１２である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＬＷＡＧＨＦＭ−ＮＨ2（ここで、ＬＷＡＧＨＦＭ−ＮＨ2は配列番号２０である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＱＷＡＶＧＨＦＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＦＭ−ＮＨ2は配列番号１３である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＱＲＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＲＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号３である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＱＲＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＲＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号４である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＱＫＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＫＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号５である）；
Ｐｇｌｕ−Ｑ−Ｌｙｓ（ＤＯ３Ａ−モノアミド)−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１８である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ＱＲＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＲＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号３である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ＱＲＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＲＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号４である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ＱＫＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＫＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号５である）；
Ｐｇｌｕ−Ｑ−Ｌｙｓ(ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−３−アミノ−３−デオキシコール酸)−ＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１８である）；
Ａａｚｔａ−Ｇｌｙ−(３β,５β,７a,１２a)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；および
ＣｙＡａｚｔａ−Ｇｌｙ−(３β,５β,７a,１２a)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）
からなる群から選択される化合物を含む、実施態様１３７の方法。
【０７７２】
１４５．標識化合物が、ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）を含む、実施態様１３７の方法。
【０７７３】
１４６．対象体内での標的化合物のＧＲＰ受容体発現標的組織への標的化を向上させる方法であって、
ＧＲＰ受容体標的ペプチドを含む第１の投薬を対象体に投与して非標的組織におけるＧＲＰ受容体結合部位を占有する工程、
一般式：
Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇ
［式中、
Ｍは、放射線核種と錯体形成した光学的標識または金属キレート剤であり；
Ｎは、０、αアミノ酸、環状基を有する非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｏは、αアミノ酸または環状基を有する非αアミノ酸であり；
Ｐは、０、αアミノ酸、環状基を有する非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｇは、ＧＲＰ受容体標的ペプチドであり、
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは環状基を有する非αアミノ酸である］
を有する標識化合物を含む第２の投薬を対象体に投与する工程
を含む、方法。
【０７７４】
１４７．第１の投薬を投与する工程および第２の投薬を投与する工程を同時に行う、実施態様１４６の方法。
【０７７５】
１４８．第１の投薬におけるＧＲＰ受容体標的ペプチドがリンカーに結合している、実施態様１４６の方法。
【０７７６】
１４９．第１の投薬におけるＧＲＰ受容体標的ペプチドが、１つ以上の金属キレート剤と結合しているリンカーと結合している、実施態様１４６の方法。
【０７７７】
１５０．第１の投薬のＧＲＰ受容体ペプチド、リンカーおよび金属キレート剤が、第２の投薬のＧＲＰ受容体標的ペプチド、Ｎ−Ｏ−Ｐリンカーおよび金属キレート剤と同じである、実施態様１４９の方法。
【０７７８】
１５１．環状基を有する非αアミノ酸が、
４−アミノ安息香酸；
４−アミノメチル安息香酸；
トランス−４−アミノメチルシクロヘキサンカルボン酸；
４−(２−アミノエトキシ)安息香酸；
イソニペコチン酸；
２−アミノメチル安息香酸；
４−アミノ−３−ニトロ安息香酸；
４−(３−カルボキシメチル−２−ケト−１−ベンゾイミダゾリル)−ピペリジン；
６−(ピペラジン−１−イル)−４−(３Ｈ)−キナゾリン−３−酢酸；
(２Ｓ,５Ｓ)−５−アミノ−１,２,４,５,６,７−ヘキサヒドロ−アゼピノ[３,２１−ｈｉ]インドール−４−オン−２−カルボン酸；
(４Ｓ,７Ｒ)−４−アミノ−６−アザ−５−オキソ−９−チアビシクロ[４.３.０]ノナン−７−カルボン酸；
３−カルボキシメチル−１−フェニル−１,３,８−トリアザスピロ[４.５]デカン−４−オン；
Ｎ１−ピペラジン酢酸；
Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−酢酸；
(３Ｓ)−３−アミノ−１−カルボキシメチルカプロラクタム；および
(２Ｓ,６Ｓ,９)−６−アミノ−２−カルボキシメチル−３,８−ジアザビシクロ−[４,３,０]−ノナン−１,４−ジオン
からなる群から選択される、実施態様１４６の方法。
【０７７９】
１５２．金属キレート剤が、ＤＴＰＡ、ＤＯＴＡ、ＤＯ３Ａ、ＨＰＤＯ３Ａ、ＥＤＴＡ、ＴＥＴＡ、Ｎ、Ｎ−ジメチルＧｌｙ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ、Ａａｚｔａおよびその誘導体からなる群から選択される、実施態様１４６の方法。
【０７８０】
１５３．標識化合物が
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノメチル安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキシルカルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−(２−アミノエトキシ)安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−イソニペコチン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−２−アミノメチル安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノメチル−３−ニトロ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−１−ナフチルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−(３−カルボキシメチル−２−ケト−１−ベンゾイミダゾリル−ピペリジン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−６−(ピペラジン−１−イル)−４−(３Ｈ)−キナゾリン−３−酢酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−(２Ｓ,５Ｓ)−５−アミノ−１,２,４,５,６,７−ヘキサヒドロ−アゼピノ[３,２１−ｈｉ]インドール−４−オン−２−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−(４Ｓ,７Ｒ)−４−アミノ−６−アザ−５−オキソ−９−チアビシクロ[４.３.０]ノナン−７−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−３−カルボキシメチル−１−フェニル−１,３,８−トリアザスピロ[４.５]デカン−４−オン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｎ１−ピペラジン酢酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−(３Ｓ)−３−アミノ−１−カルボキシメチルカプロラクタム−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−(２Ｓ,６Ｓ,９)−６−アミノ−２−カルボキシメチル−３,８−ジアザビシクロ−[４,３,０]−ノナン−１,４−ジオン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−５−アミノペンタン酸−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−Ｄ−フェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノメチル安息香酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−ベンゾイル−(Ｌ)−フェニルアラニン−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−Ａｒｇ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−Ｌｙｓ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−ジフェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−１−ナフチルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−Ｓｅｒ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−２,３−ジアミノプロピオン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−ビフェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−(２Ｓ,５Ｓ)−５−アミノ−１,２,４,５,６,７−ヘキサヒドロ−アゼピノ[３,２１−ｈｉ]インドール−４−オン−２−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−フェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−フェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノオクタン酸−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４'−アミノメチル−ビフェニル−１−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−３'−アミノメチル−ビフェニル−３−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＣＭＤＯＴＡ−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノメチルフェノキシ酢酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４−アミノフェニル酢酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＨＰＤＯ３Ａ−４−フェノキシ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−３−アミノメチル安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノメチルフェニル酢酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノメチル−３−メトキシ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｂｏａ−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４−ヒドラジノベンゾイル−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノ安息香酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−６−アミノニコチン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４'−アミノ−２'−メチル ビフェニル−４−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３'−アミノビフェニル−３−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−１,２−ジアミノエチル−テレフタル酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＥＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＥＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号２である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＯＨ（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＯＨは配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−(Ｄ)−Ｐｈｅ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＲＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＲＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号３である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＲＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＲＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号４である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＫＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＫＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号５である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−(Ｄ)−Ｐｈｅ−ＱＷＡＶＧＨＬ−ＮＨ−ペンチル（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬ−ＮＨ−ペンチルは配列番号６である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＷＳＶａＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＳＶａＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号７である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−(Ｄ)−Ｐｈｅ−ＱＷＡＶＧＨＬＬ−ＮＨ2 ＱＷＡＶＧＨＬＬ−ＮＨ2は配列番号８である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−(Ｄ)−Ｔｙｒ−ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−ＨＦ−Ｎｌｅ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−ＨＦ−Ｎｌｅ−ＮＨ2は配列番号９である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−Ｐｈｅ−ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−ＨＦ−Ｎｌｅ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−ＨＦ−Ｎｌｅ−ＮＨ2は配列番号９である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＷＡＧＨＦＬ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＧＨＦＬ−ＮＨ2は配列番号１０である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＬＷＡＶＧＳＦＭ−ＮＨ2（ここで、ＬＷＡＶＧＳＦＭ−ＮＨ2は配列番号１１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＨＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＨＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１２である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＬＷＡＶＧＳＦＭ−ＮＨ2（ここで、ＬＷＡＶＧＳＦＭ−ＮＨ2は配列番号１１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＷＡＶＧＨＦＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＦＭ−ＮＨ2は配列番号１３である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−６−アミノナフトエ酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４−メチルアミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｃｍ４ｐｍ１０ｄ２ａ−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３−メトキシ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３−クロロ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３−メチル−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３−ヒドロキシ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
(ＤＯ３Ａ−モノアミド)２−Ｎ,Ｎ'−ビス(２−アミノエチル)−スクシンアミド酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＷＡＶＧＨＦＬ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＦＬ−ＮＨ2は配列番号２２である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノメチル安息香酸−Ｌ−１−ナフチルアラニン−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＷＡＶＧＮＭｅＨｉｓＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＮＭｅＨｉｓＬＭ−ＮＨ2は配列番号１５である）；
Ａａｚｔａ−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；および
ＣｙＡａｚｔａ−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）
からなる群から選択される化合物を含む、実施態様１４６の方法。
【０７８１】
１５４．標識化合物が、ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）を含む、実施態様１４６の方法。
【０７８２】
１５５．対象体内での標的化合物のＧＲＰ受容体発現標的組織への標的化を向上させる方法であって、
非標的組織におけるＧＲＰ受容体結合部位を占有するための第１のＧＲＰ受容体標的ペプチド、および
一般式：
Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇ
［式中、
Ｍは、放射線核種と錯体形成した光学的標識または金属キレート剤であり；
Ｎは、０、αもしくは非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｏは、αまたは非αアミノ酸であり；
Ｐは、０、αもしくは非αアミノ酸または他の連結基であり、
Ｇは、第２のＧＲＰ受容体標的ペプチドであり、
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは非αアミノ酸である］
を有する標識化合物
の組み合わせを含む投薬を患者に投与する工程を含む、方法。
【０７８３】
１５６．第１のＧＲＰ受容体標的ペプチドがリンカーと結合している、実施態様１５５の方法。
【０７８４】
１５７．第１のＧＲＰ受容体標的ペプチドが、１つ以上の金属キレート剤と結合しているリンカーと結合している、実施態様１５５の方法。
【０７８５】
１５８．第１のＧＲＰ受容体ペプチド、リンカーおよび金属キレート剤が標識化合物の第２のＧＲＰ受容体標的ペプチド、Ｎ−Ｏ−Ｐリンカーおよび金属キレート剤と同じである、実施態様１５７の方法。
【０７８６】
１５９．非αアミノ酸が
８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸；
Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン−酢酸；および
式ＮＨ2−(ＣＨ2ＣＨ2Ｏ)n−ＣＨ2ＣＯ2ＨまたはＮＨ2−(ＣＨ2ＣＨ2Ｏ)n−ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ2Ｈ（ここで、ｎは２〜１００である）を有するポリエチレングリコール誘導体
からなる群から選択される、実施態様１５８の方法。
【０７８７】
１６０．金属キレート剤が、ＤＴＰＡ、ＤＯＴＡ、ＤＯ３Ａ、ＨＰ−ＤＯ３Ａ、ＥＤＴＡ、ＴＥＴＡ、ＥＨＰＧ、ＨＢＥＤ、ＮＯＴＡ、ＤＯＴＭＡ、ＴＥＴＭＡ、ＰＤＴＡ、ＴＴＨＡ、ＬＩＣＡＭ、ＭＥＣＡＭ、ＣＭＤＯＴＡ、Ｎ、Ｎ−ジメチルＧｌｙ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ、Ａａｚｔａおよびその誘導体からなる群から選択される、実施態様１５５の方法。
【０７８８】
１６１．標識化合物が
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｄａｌａ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｌｙｓ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ａｒｇ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ａｓｐ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｓｅｒ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｕ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｄａｌａ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−２,３−ジアミノプロピオン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−２,３−ジアミノプロピオン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−２,３−ジアミノプロピオン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−２,３−ジアミノプロピオン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ａｓｐ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ｓｅｒ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ａｒｇ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−２,３−ジアミノプロピオン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ｌｙｓ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ａｓｐ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ｓｅｒ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ａｒｇ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−２,３−ジアミノプロピオン酸ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−Ｌｙｓ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−４−ヒドロキシプロリン−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−４−アミノプロリン−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−２,３−ジアミノプロピオン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；および
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−２,３−ジアミノプロピオン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）
からなる群から選択される化合物を含む、実施態様１５５の方法。
【０７８９】
１６２．標識化合物が
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ジアミノプロピオン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ビフェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ジフェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−４−ベンゾイルフェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−５−アミノペンタン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−Ｄ−フェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノオクタン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｅ(Ｇ８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2)−８−アミノオクタン酸−８−アミノオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；および
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｅ(Ｇ−Ａoa−Ａoa−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2)−８−アミノオクタン酸−８−アミノオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）
からなる群から選択される化合物を含む、実施態様１５５の方法。
【０７９０】
１６３．対象体内での標的化合物のＧＲＰ受容体発現標的組織への標的化を向上させる方法であって、
非標的組織におけるＧＲＰ受容体結合部位を占有するための第１のＧＲＰ受容体標的ペプチド、および
一般式：
Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇ
［式中、
Ｍは、放射線核種と錯体形成した光学的標識または金属キレート剤であり；
Ｎは、０、αアミノ酸、置換胆汁酸または他の連結基であり；
Ｏは、αアミノ酸または置換胆汁酸であり；
Ｐは、０、αアミノ酸、置換胆汁酸または他の連結基であり；
Ｇは、第２のＧＲＰ受容体標的ペプチドであり、
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは置換胆汁酸である］
を有する標識化合物
の組み合わせを含む第２の投薬を対象体に投与することを含む、方法。
【０７９１】
１６４．第１のＧＲＰ受容体標的ペプチドがリンカーと結合している、実施態様１６３の方法の方法。
【０７９２】
１６５．第１のＧＲＰ受容体標的ペプチドが、１つ以上の金属キレート剤と結合しているリンカーと結合している、実施態様１６３の方法。
【０７９３】
１６６．第１のＧＲＰ受容体ペプチド、リンカーおよび金属キレート剤が標識化合物の第２のＧＲＰ受容体標的ペプチド、Ｎ−Ｏ−Ｐリンカーおよび金属キレート剤と同じである、実施態様１６６の方法。
【０７９４】
１６７．置換胆汁酸が
３β−アミノ−３−デオキシコール酸；
(３β,５β)−３−アミノコラン−２４−酸；
(３β,５β,１２α)−３−アミノ−１２−ヒドロキシコラン−２４−酸；
(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸；
Ｌｙｓ−(３,６,９)−トリオキサウンデカン−１,１１−ジカルボニル３,７−ジデオキシ−３−アミノコール酸）；
(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７−ヒドロキシ−１２−オキソコラン−２４−酸；および
(３β,５β,７α)−３−アミノ−７−ヒドロキシコラン−２４−酸
からなる群から選択される、実施態様１６３の方法。
【０７９５】
１６８．金属キレート剤が、ＤＴＰＡ、ＤＯＴＡ、ＤＯ３Ａ、ＨＰＤＯ３Ａ、ＥＤＴＡ、ＴＥＴＡ、ＣＭＤＯＴＡ、Ｎ、Ｎ−ジメチルＧｌｙ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ、Ａａｚｔａおよびその誘導体からなる群から選択される、実施態様１６３の方法。
【０７９６】
１６９．標識化合物が
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β)−３−アミノコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,１２α)−３−アミノ−１２−ヒドロキシコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−(３,６,９)−トリオキサウンデカン−１,１１−ジカルボニル３,７−ジデオキシ−３−アミノコール酸)−Ａｒｇ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−３,６,９−トリオキサウンデカン−１,１１−ジカルボニル Ｌｙｓ(ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ)−Ａｒｇ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−１２−オキソコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−１−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＱＷＡＶａＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶａＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１４である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ｆ−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ｆ−ＷＡＶＧＨＬＬ−ＮＨ2（ここで、ＷＡＶＧＨＬＬ−ＮＨ2は配列番号２６である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ｆ−ＱＷＡＶＧＨＬ−ＮＨ−ペンチル（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬ−ＮＨ−ペンチルは配列番号６である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−y−ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−Ｈ−Ｆ−Ｎｌｅ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−Ｈ−Ｆ−Ｎｌｅ−ＮＨ2は配列番号９である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ｆ−ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−Ｈ−Ｆ−Ｎｌｅ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−Ｈ−Ｆ−Ｎｌｅ−ＮＨ2は配列番号９である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＱＷＡＶＧＨＦＬ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＦＬ−ＮＨ2は配列番号２２である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＱＷＡＶＧＮＭｅＨ−Ｌ−Ｍ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＮＭｅＨ−Ｌ−Ｍ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＮＭｅＨ−Ｌ−Ｍ−ＮＨ2は配列番号１５である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＬＷＡＶＧＳＦ−Ｍ−ＮＨ2（ここで、ＬＷＡＶＧＳＦ−Ｍ−ＮＨ2は配列番号１１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＨＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＨＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１２である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＬＷＡＧＨＦＭ−ＮＨ2（ここで、ＬＷＡＧＨＦＭ−ＮＨ2は配列番号２０である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＱＷＡＶＧＨＦＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＦＭ−ＮＨ2は配列番号１３である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＱＲＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＲＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号３である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＱＲＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＲＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号４である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＱＫＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＫＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号５である）；
Ｐｇｌｕ−Ｑ−Ｌｙｓ（ＤＯ３Ａ−モノアミド)−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１８である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ＱＲＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＲＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号３である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ＱＲＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＲＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号４である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ＱＫＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＫＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号５である）；
Ｐｇｌｕ−Ｑ−Ｌｙｓ(ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−３−アミノ−３−デオキシコール酸)−ＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１８である）；
Ａａｚｔａ−Ｇｌｙ−(３β,５β,７a,１２a)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；および
ＣｙＡａｚｔａ−Ｇｌｙ−(３β,５β,７a,１２a)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）
からなる群から選択される化合物を含む、実施態様１６３の方法。
【０７９７】
１７０．標識化合物が、ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−(３β,５β,７α,１２α)−３−アミノ−７,１２−ジヒドロキシコラン−２４−酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）を含む、実施態様１６３の方法。
【０７９８】
１７１．対象体内での標的化合物のＧＲＰ受容体発現標的組織への標的化を向上させる方法であって、
非標的組織におけるＧＲＰ受容体結合部位を占有するための第１のＧＲＰ受容体標的ペプチド、および
一般式：
Ｍ−Ｎ−Ｏ−Ｐ−Ｇ
［式中、
Ｍは、放射線核種と錯体形成した光学的標識または金属キレート剤であり；
Ｎは、０、αアミノ酸、環状基を有する非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｏは、αアミノ酸または環状基を有する非αアミノ酸であり；
Ｐは、０、αアミノ酸、環状基を有する非αアミノ酸または他の連結基であり；
Ｇは、第２のＧＲＰ受容体標的ペプチドであり、
ここで、Ｎ、ＯまたはＰの少なくとも１つは環状基を有する非αアミノ酸である］
を有する標識化合物
の組み合わせを含む第２の投薬を対象体に投与する工程を含む、方法。
【０７９９】
１７２．第１のＧＲＰ受容体標的ペプチドがリンカーと結合している、実施態様１７１の方法の方法。
【０８００】
１７３．第１のＧＲＰ受容体標的ペプチドが、１つ以上の金属キレート剤と結合しているリンカーと結合している、実施態様１７１の方法。
【０８０１】
１７４．第１のＧＲＰ受容体ペプチド、リンカーおよび金属キレート剤が、標識化合物のＧＲＰ受容体標的ペプチド、Ｎ−Ｏ−Ｐ リンカーand 金属キレート剤と同じである、実施態様１７３の方法。
【０８０２】
１７５．環状基を有する非αアミノ酸が
４−アミノ安息香酸；
４−アミノメチル安息香酸；
トランス−４−アミノメチルシクロヘキサンカルボン酸；
４−(２−アミノエトキシ)安息香酸；
イソニペコチン酸；
２−アミノメチル安息香酸；
４−アミノ−３−ニトロ安息香酸；
４−(３−カルボキシメチル−２−ケト−１−ベンゾイミダゾリル)−ピペリジン；
６−(ピペラジン−１−イル)−４−(３Ｈ)−キナゾリン−３−酢酸；
(２Ｓ,５Ｓ)−５−アミノ−１,２,４,５,６,７−ヘキサヒドロ−アゼピノ[３,２１−ｈｉ]インドール−４−オン−２−カルボン酸；
(４Ｓ,７Ｒ)−４−アミノ−６−アザ−５−オキソ−９−チアビシクロ[４.３.０]ノナン−７−カルボン酸；
３−カルボキシメチル−１−フェニル−１,３,８−トリアザスピロ[４.５]デカン−４−オン；
Ｎ１−ピペラジン酢酸；
Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−酢酸；
(３Ｓ)−３−アミノ−１−カルボキシメチルカプロラクタム；および
(２Ｓ,６Ｓ,９)−６−アミノ−２−カルボキシメチル−３,８−ジアザビシクロ−[４,３,０]−ノナン−１,４−ジオン
からなる群から選択される、実施態様１７１の方法。
【０８０３】
１７６．金属キレート剤が、ＤＴＰＡ、ＤＯＴＡ、ＤＯ３Ａ、ＨＰＤＯ３Ａ、ＥＤＴＡ、ＴＥＴＡ、Ｎ、Ｎ−ジメチルＧｌｙ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ、Ａａｚｔａおよびその誘導体からなる群から選択される、実施態様１７１の方法。
【０８０４】
１７７．標識化合物が
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノメチル安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキシルカルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−(２−アミノエトキシ)安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−イソニペコチン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−２−アミノメチル安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノメチル−３−ニトロ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−１−ナフチルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−(３−カルボキシメチル−２−ケト−１−ベンゾイミダゾリル−ピペリジン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−６−(ピペラジン−１−イル)−４−(３Ｈ)−キナゾリン−３−酢酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−(２Ｓ,５Ｓ)−５−アミノ−１,２,４,５,６,７−ヘキサヒドロ−アゼピノ[３,２１−ｈｉ]インドール−４−オン−２−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−(４Ｓ,７Ｒ)−４−アミノ−６−アザ−５−オキソ−９−チアビシクロ[４.３.０]ノナン−７−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−３−カルボキシメチル−１−フェニル−１,３,８−トリアザスピロ[４.５]デカン−４−オン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｎ１−ピペラジン酢酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｎ−４−アミノエチル−Ｎ−１−ピペラジン酢酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−(３Ｓ)−３−アミノ−１−カルボキシメチルカプロラクタム−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−(２Ｓ,６Ｓ,９)−６−アミノ−２−カルボキシメチル−３,８−ジアザビシクロ−[４,３,０]−ノナン−１,４−ジオン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−５−アミノペンタン酸−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−Ｄ−フェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノメチル安息香酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−ベンゾイル−(Ｌ)−フェニルアラニン−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−Ａｒｇ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−Ｌｙｓ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−ジフェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−１−ナフチルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−Ｓｅｒ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−２,３−ジアミノプロピオン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−ビフェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−(２Ｓ,５Ｓ)−５−アミノ−１,２,４,５,６,７−ヘキサヒドロ−アゼピノ[３,２１−ｈｉ]インドール−４−オン−２−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノ−３,６−ジオキサオクタン酸−フェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−フェニルアラニン−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−８−アミノオクタン酸−トランス−４−アミノメチルシクロヘキサン−１−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４'−アミノメチル−ビフェニル−１−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−３'−アミノメチル−ビフェニル−３−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＣＭＤＯＴＡ−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノメチルフェノキシ酢酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４−アミノフェニル酢酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＨＰＤＯ３Ａ−４−フェノキシ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−３−アミノメチル安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノメチルフェニル酢酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノメチル−３−メトキシ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｂｏａ−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４−ヒドラジノベンゾイル−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノ安息香酸−Ｇｌｙ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−６−アミノニコチン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４'−アミノ−２'−メチル ビフェニル−４−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３'−アミノビフェニル−３−カルボン酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−１,２−ジアミノエチル−テレフタル酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＥＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＥＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号２である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＯＨ（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＯＨは配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−(Ｄ)−Ｐｈｅ−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＲＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＲＬＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号３である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＲＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＲＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号４である）；        
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＫＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＫＹＧＮＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号５である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−(Ｄ)−Ｐｈｅ−ＱＷＡＶＧＨＬ−ＮＨ−ペンチル（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬ−ＮＨ−ペンチルは配列番号６である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＷＳＶａＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＳＶａＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号７である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−(Ｄ)−Ｐｈｅ−ＱＷＡＶＧＨＬＬ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＬ−ＮＨ2は配列番号８である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−(Ｄ)−Ｔｙｒ−ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−ＨＦ−Ｎｌｅ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−ＨＦ−Ｎｌｅ−ＮＨ2は配列番号９である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−Ｐｈｅ−ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−ＨＦ−Ｎｌｅ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶ−Ｂａｌａ−ＨＦ−Ｎｌｅ−ＮＨ2は配列番号９である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＷＡＧＨＦＬ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＧＨＦＬ−ＮＨ2は配列番号１０である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＬＷＡＶＧＳＦＭ−ＮＨ2（ここで、ＬＷＡＶＧＳＦＭ−ＮＨ2は配列番号１１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＨＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＨＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１２である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＬＷＡＶＧＳＦＭ−ＮＨ2（ここで、ＬＷＡＶＧＳＦＭ−ＮＨ2は配列番号１１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＷＡＶＧＨＦＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＦＭ−ＮＨ2は配列番号１３である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−６−アミノナフトエ酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４−メチルアミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｃｍ４ｐｍ１０ｄ２ａ−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
Ｎ,Ｎ−ジメチルグリシン−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ(Ａｃｍ)−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−３−アミノ−３−デオキシコール酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３−メトキシ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３−クロロ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３−メチル−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−３−ヒドロキシ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
(ＤＯ３Ａ−モノアミド)２−Ｎ,Ｎ'−ビス(２−アミノエチル)−スクシンアミド酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＷＡＶＧＨＦＬ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＦＬ−ＮＨ2は配列番号２２である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−４−アミノメチル安息香酸−Ｌ−１−ナフチルアラニン−ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＨＬＭ−ＮＨ2は配列番号１である）；
ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇ−４−アミノ安息香酸−ＱＷＡＶＧＮＭｅＨｉｓＬＭ−ＮＨ2（ここで、ＱＷＡＶＧＮＭｅＨｉｓＬＭ−ＮＨ2は配列番号１５である）；
Ａａｚｔａ−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）；および
ＣｙＡａｚｔａ−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）
からなる群から選択される化合物を含む、実施態様１７１の方法。
【０８０５】
１７８．標識化合物が、ＤＯ３Ａ−モノアミド−Ｇｌｙ−４−アミノ安息香酸−ＢＢＮ(７−１４)（ここで、ＢＢＮ(７−１４)配列は配列番号１である）を含む、実施態様１７１の方法。
【０８０６】
１７９．第１の投薬のＧＲＰ受容体標的ペプチドがアゴニストである、実施態様１２８の方法。
【０８０７】
１８０．第１の投薬のＧＲＰ受容体標的ペプチドがアゴニストである、実施態様１３７の方法。
【０８０８】
１８１．第１の投薬のＧＲＰ受容体標的ペプチドがアゴニストである、実施態様１４６の方法。
【０８０９】
１８２．第１のＧＲＰ受容体標的ペプチドがアゴニストである、実施態様１５５の方法。
【０８１０】
１８３．第１のＧＲＰ受容体標的ペプチドがアゴニストである、実施態様１６３の方法。
【０８１１】
１８４．第１のＧＲＰ受容体標的ペプチドがアゴニストである、実施態様１７１の方法。
【０８１２】
１８５．前立腺癌の骨または軟組織転移の治療方法であって、放射性標識Ｌ７０、Ｎ−[４−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミドを含む投薬を対象体に投与する工程を含む、方法。
【０８１３】
１８６．放射性標識が177Ｌｕである、実施態様１８５の方法の方法。
【０８１４】
１８７．投薬が約３〜３０ｍＣｉ／ｋｇの177Ｌｕ標識Ｌ７０、Ｎ−[４−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミドである、実施態様１８５の方法。
【０８１５】
１８８．投薬が静脈内投与される、実施態様１８５の方法。
【０８１６】
１８９．腫瘍が異常脈管構造の減少を示す、実施態様１８５の方法。
【０８１７】
１９０．進行までの期間が少なくとも約１５％増大する、実施態様１８５の方法。
【０８１８】
１９１．放射性標識Ｌ７０、Ｎ−[４−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミドを含む投薬を対象体に投与する工程を含む、ホルモン感受性前立腺癌の治療方法
【０８１９】
１９２．放射性標識が177Ｌｕである、実施態様１９１の方法。
【０８２０】
１９３．該投薬が、約３〜３０ｍＣｉ／ｋｇの177Ｌｕ−標的Ｌ７０、Ｎ−[４−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１ yl]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミドである、実施態様１９１の方法。
【０８２１】
１９４．投薬が静脈内投与される、実施態様１９１の方法。
【０８２２】
１９５．腫瘍が異常脈管構造の減少を示す、実施態様１９１の方法。
【０８２３】
１９６．進行までの期間が少なくとも約１５％増大する、実施態様１９１の方法。
【０８２４】
１９７．ホルモン不応性前立腺癌の治療方法であって、放射性標識Ｌ７０、Ｎ−[４−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミドを含む投薬を対象体に投与する工程をふくむ、方法。
【０８２５】
１９８．放射性標識が177Ｌｕである、実施態様１９７の方法の方法。
【０８２６】
１９９．投薬が約３〜３０ｍＣｉ／ｋｇの177Ｌｕ標識Ｌ７０、Ｎ−[４−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミドである、実施態様１９７の方法。
【０８２７】
２００．投薬が静脈内投与される、実施態様１９７の方法。
【０８２８】
２０１．ホルモン感受性前立腺癌の進行を遅らせる方法であって、腫瘍の異常脈管構造の減少または進行までの期間の増大を生じさせるのに十分な量の放射性標識Ｌ７０、Ｎ−[４−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミドを含む投薬を対象体に投与する工程を含む、方法。
【０８２９】
２０２．放射性標識が177Ｌｕである、実施態様２０１の方法。
【０８３０】
２０３．投薬が約３〜３０ｍＣｉ／ｋｇの177Ｌｕ標識Ｌ７０、Ｎ−[４−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミドである、実施態様２０１の方法。
【０８３１】
２０４．投薬が静脈内投与される、実施態様２０１の方法。
【０８３２】
２０５．腫瘍が異常脈管構造の減少を示す、実施態様２０１の方法。
【０８３３】
２０６．進行までの期間が少なくとも約１５％増大する、実施態様２０１の方法。
【０８３４】
２０７．進行までの期間が少なくとも約５０％増大する、実施態様２０１の方法。
【０８３５】
２０８．進行までの期間が約１００％増大する、実施態様２０１の方法。
【０８３６】
２０９．ホルモン感受性前立腺癌における併用療法を促進する方法であって、腫瘍における異常脈管構造の減少または進行までの期間の増大を生じるのに十分な量の放射性標識Ｌ７０、Ｎ−[４−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミドを含む投薬を対象体に投与する工程を含む、方法。
【０８３７】
２１０．放射性標識が177Ｌｕである、実施態様２０９の方法。
【０８３８】
２１１．投薬が、約３〜３０ｍＣｉ／ｋｇの177Ｌｕ標識Ｌ７０、Ｎ−[４−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミドである、実施態様２０９の方法。
【０８３９】
２１２．投薬が静脈内投与される、実施態様２０９の方法。
【０８４０】
２１３．腫瘍が異常脈管構造の減少を示す、実施態様２０９の方法。
【０８４１】
２１４．進行までの期間が少なくとも約１５％増大する、実施態様２０９の方法。
【０８４２】
２１５．ホルモン感受性前立腺癌患者における異常血管透過性を減少させる方法であって、放射性標識Ｌ７０、Ｎ−[４−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミドを含む投薬を対象体に投与する工程を含む、方法。
【０８４３】
２１６．放射性標識が177Ｌｕである、実施態様２１５の方法。
【０８４４】
２１７．投薬が約３〜３０ｍＣｉ／ｋｇの177Ｌｕ標識Ｌ７０、Ｎ−[４−[[[[[４,７,１０−トリス(カルボキシメチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカ−１−イル]アセチル]アミノ]アセチル]アミノ]ベンゾイル]−Ｌ−グルタミニル−Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−アラニル−Ｌ−バリル−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−メチオニンアミドである、実施態様２１５の方法。
【０８４５】
２１８．投薬が静脈内投与される、実施態様２１５の方法。
【０８４６】
２１９．種々の薬物のうち１種類以上の薬物で治療される場合に種々の受容体のうち１つの受容体の機能に対する効果を試験する方法であって、このような機能の変化がクロストークを示すＧＲＰ受容体に対して及ぼす効果を調べることによる方法。
【０８４７】
２２０．ＧＲＰ受容体の放射性標識アゴニストまたはアンタゴニスト、特に放射性標識Ｌ７０（ＡＭＢＡ）、および最も好ましくはＧａで放射性標識されたＬ７０を使用して、インビトロにおけるＧＲＰ受容体ファミリーの活性をスクリーニングする方法。
【０８４８】
２２１．ＧＲＰ受容体の放射性標識アゴニストまたはアンタゴニスト、特に放射性標識Ｌ７０（ＡＭＢＡ）、および最も好ましくはＧａで放射性標識されたＬ７０を使用して、インビボにおけるＧＲＰ受容体ファミリーの活性を画像診断する方法。
【０８４９】
２２２．ＧＲＰ−Ｒとクロストークする受容体を標的とする薬物による処置を受けている患者の患者管理を向上させる方法であって、初期治療の前（規定値を得るため）、治療の間（応答を予測しモニターし、腫瘍集団におけるシフトが治療の変化を保証し得る場合に検出するため）、および治療の最後または治療後（効力の決定、次なる治療工程の決定に役立つため、そして、再発を予測または予期するため）に患者への放射性標識Ｌ７０の投与後の患者の一連の画像を得ること、およびＧＲＰ−Ｒ活性の変化を評価することを含む、方法。
【図１Ａ】
2011520971.tif 000107
【図１Ｂ】
2011520971.tif 000108
【図２Ａ】
2011520971.tif 000109
【図２Ｂ】
2011520971.tif 000110
【図２Ｃ−２Ｅ】
2011520971.tif 000111
【図２Ｆ】
2011520971.tif 000112
【図３Ａ】
2011520971.tif 000113
【図３Ｂ】
2011520971.tif 000114
【図３Ｃ】
2011520971.tif 000115
【図３Ｄ】
2011520971.tif 000116
【図３Ｅ】
2011520971.tif 000117
【図４Ａ】
2011520971.tif 000118
【図４Ｂ】
2011520971.tif 000119
【図４Ｃ】
2011520971.tif 000120
【図４Ｄ】
2011520971.tif 000121
【図４Ｅ】
2011520971.tif 000122
【図４Ｆ】
2011520971.tif 000123
【図４Ｇ】
2011520971.tif 000124
【図４Ｈ】
2011520971.tif 000125
【図５Ａ】
2011520971.tif 000126
【図５Ｂ】
2011520971.tif 000127
【図５Ｃ】
2011520971.tif 000128
【図５Ｄ】
2011520971.tif 000129
【図５Ｅ】
2011520971.tif 000130
【図６Ａ】
2011520971.tif 000131
【図６Ｂ】
2011520971.tif 000132
【図６Ｃ】
2011520971.tif 000133
【図６Ｄ】
2011520971.tif 000134
【図７Ａ】
2011520971.tif 000135
【図７Ｂ】
2011520971.tif 000136
【図７Ｃ】
2011520971.tif 000137
【図８Ａ】
2011520971.tif 000138
【図８Ｂ】
2011520971.tif 000139
【図８Ｃ】
2011520971.tif 000140
【図９Ａ】
2011520971.tif 000141
【図９Ｂ】
2011520971.tif 000142
【図９Ｃ】
2011520971.tif 000143
【図９Ｄ】
2011520971.tif 000144
【図１０Ａ】
2011520971.tif 000145
【図１０Ｂ】
2011520971.tif 000146
【図１１Ａ】
2011520971.tif 000147
【図１１Ｂ】
2011520971.tif 000148
【図１２Ａ】
2011520971.tif 000149
【図１２Ｂ】
2011520971.tif 000150
【図１２Ｃ】
2011520971.tif 000151
【図１２Ｄ】
2011520971.tif 000152
【図１２Ｅ】
2011520971.tif 000153
【図１２Ｆ】
2011520971.tif 000154
【図１３Ａ】
2011520971.tif 000155
【図１３Ｂ】
2011520971.tif 000156
【図１３Ｃ】
2011520971.tif 000157
【図１４Ａ】
2011520971.tif 000158
【図１４Ｂ】
2011520971.tif 000159
【図１５Ａ】
2011520971.tif 000160
【図１５Ｂ】
2011520971.tif 000161
【図１６】
2011520971.tif 000162
【図１７】
2011520971.tif 000163
【図１８Ａ】
2011520971.tif 000164
【図１８Ｂ】
2011520971.tif 000165
【図１８Ｃ】
2011520971.tif 000166
【図１８Ｄ】
2011520971.tif 000167
【図１８Ｅ】
2011520971.tif 000168
【図１９】
2011520971.tif 000169
【図２０】
2011520971.tif 000170
【図２１】
2011520971.tif 000171
【図２２Ａ】
2011520971.tif 000172
【図２２Ｂ】
2011520971.tif 000173
【図２３Ａ】
2011520971.tif 000174
【図２３Ｂ】
2011520971.tif 000175
【図２４】
2011520971.tif 000176
【図２５】
2011520971.tif 000177
【図２６Ａ】
2011520971.tif 000178
【図２６Ｂ】
2011520971.tif 000179
【図２７Ａ】
2011520971.tif 000180
【図２７Ｂ】
2011520971.tif 000181
【図２８】
2011520971.tif 000182
【図２９Ａ】
2011520971.tif 000183
【図２９Ｂ】
2011520971.tif 000184
【図３０Ａ】
2011520971.tif 000185
【図３０Ｂ】
2011520971.tif 000186
【図３１】
2011520971.tif 000187
【図３２】
2011520971.tif 000188
【図３３】
2011520971.tif 000189
【図３４】
2011520971.tif 000190
【図３５】
2011520971.tif 000191
【図３６】
2011520971.tif 000192
【図３７】
2011520971.tif 000193
【図３８】
2011520971.tif 000194
【図３９】
2011520971.tif 000195
【図４０】
2011520971.tif 000196
【図４１】
2011520971.tif 000197
【図４２】
2011520971.tif 000198
【図４３】
2011520971.tif 000199
【図４４】
2011520971.tif 000200
【図４５】
2011520971.tif 000201
【図４６】
2011520971.tif 000202
【図４７】
2011520971.tif 000203
【図４８】
2011520971.tif 000204
【図４９Ａ】
2011520971.tif 000205
【図４９Ｂ】
2011520971.tif 000206
【図５０】
2011520971.tif 000207
【図５１】
2011520971.tif 000208
【図５２】
2011520971.tif 000209
【図５３】
2011520971.tif 000210
【図５４】
2011520971.tif 000211
【図５５】
2011520971.tif 000212
【図５６】
2011520971.tif 000213
【図５７】
2011520971.tif 000214
【図５８】
2011520971.tif 000215
【図５９】
2011520971.tif 000216
【手続補正書】
【提出日】平成23年3月29日(2011.3.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
診断用放射性核種と錯体形成した、式：
【化１】
2011520971.tif 000217
で示されるＬ７０を含む、ＧＲＰ−Ｒとクロストークする受容体を標的とする薬物の治療効果のモニターリングに使用するための組成物であって、該モニターリングが
ａ）該組成物を前投与した患者の画像に基づいてＧＲＰ−Ｒの活性を評価すること；
ｂ）（ｉ）エキセメスタン、ラパチニブ、ダサチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ、エルロチニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、アナストロゾール、ボルテゾミブ、タモキシフェンおよびβ２−エストラジオールからなる群から選択される、ＧＲＰ−Ｒとクロストークする受容体を標的とする薬物、および
（ｉｉ）上記組成物
を投与した上記患者の画像に基づいてＧＲＰ−Ｒの活性を評価すること；
ｃ）薬物投与後のＧＲＰ−Ｒ活性の変化を評価すること；および
ｄ）ＧＲＰ−Ｒ活性の変化に基づいて薬物の治療効果を評価すること
を含むことを特徴とする、組成物。
【請求項２】
工程ａ）が工程ｂ）（ｉ）の３０日前までに行われることを特徴とする、請求項１記載の組成物。
【請求項３】
工程ａ）が工程ｂ）（ｉ）の１５日前までに行われることを特徴とする、請求項２記載の組成物。
【請求項４】
工程ａ）が工程ｂ）（ｉ）の７日前までに行われることを特徴とする、請求項３記載の組成物。
【請求項５】
工程ｃ）〜ｄ）が工程ｂ）（ｉ）から１５日以内に行われることを特徴とする、請求項１記載の組成物。
【請求項６】
工程ｃ）〜ｄ）が工程ｂ）（ｉ）から７日以内に行われることを特徴とする、請求項５記載の組成物。
【請求項７】
モニターリングが、治療工程の間じゅう数回繰り返されることを特徴とする、請求項１記載の組成物。
【請求項８】
ＧＲＰ−Ｒとクロストークする受容体がエストロゲン受容体および受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）からなる群から選択されることを特徴とする、請求項１記載の組成物。
【請求項９】
ＲＴＫが、ＥＧＦＲ、Ｓｒｃファミリー、ＨＥＲ２／ＥｒｂＢ３、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ＳＣＦ、ＫＩＴ、ＰＤＧＦ、ＶＥＧＦ−Ｒ１,２,３、ＦＬＴ３、Ｒａｓ、Ｒａｆ、ＣＳＦ−１ＲおよびＲＥＴからなる群から選択されることを特徴とする、請求項８記載の組成物。
【請求項１０】
Ｌ７０が、ＰＥＴによって検出され得る放射性核種と錯体形成していることを特徴とする、請求項１記載の組成物。
【請求項１１】
Ｌ７０が、ＳＰＥＣＴによって検出され得る放射性核種と錯体形成していることを特徴とする、請求項１記載の組成物。
【請求項１２】
Ｌ７０が68Ｇａと錯体形成していることを特徴とする、請求項１０記載の組成物。
【請求項１３】
画像がＰＥＴによって得られることを特徴とする、請求項１または１０記載の組成物。
【請求項１４】
画像がＳＰＥＣＴによって得られることを特徴とする、請求項１または１１記載の組成物。
【請求項１５】
患者がリンカーおよび／またはキレート剤と結合していてもよい第２のＧＲＰ受容体標的ペプチドを前投与されており、工程ａ）もしくはｂ）（ｉｉ）においてまたは工程ａ）およびｂ）（ｉｉ）において組成物を投与する前に非標的組織におけるＧＲＰ受容体結合部位が占有されていることを特徴とする、請求項１記載の組成物。
【請求項１６】
さらに、工程ａ）もしくはｂ）（ｉｉ）において、または工程ａ）およびｂ）（ｉｉ）において、患者が
ａ）非標的組織におけるＧＲＰ受容体結合部位を占有するためのリンカーおよび／またはキレート剤と結合していてもよい第１のＧＲＰ受容体標的ペプチド；および
ｂ）診断用放射性核種と錯体形成しているＬ７０を含む組成物
の組み合わせを投与されていることを特徴とする、請求項１記載の組成物。
【請求項１７】
薬物が前立腺癌または乳癌を標的とするものであることを特徴とする、請求項１記載の組成物。
【国際調査報告】
2011520971.tif 000218
2011520971.tif 000219