(57)【要約】  【解決手段】  本発明は、インスリン医薬製剤を同じ鼻孔中に連続的に少なくとも２回の用量を投与することで、治療的に有効な血漿中インスリン濃度を達成する為の方法を提供するものである。当該２回目の用量の投与を同じ鼻孔に対して行った場合、２つの違う鼻孔に連続的に投与した場合に比べて、血漿中インスリン濃度は大幅に高くなる。インスリンの１回目の用量は、いかなる特定の生理学的機序に限定されるものではないが、鼻粘膜への充填用量として機能していると考えられる。この充填用量は、その後に続く用量投与において見られる血漿中インスリン濃度を達成するのに必要である。本発明における前記方法および製剤により達成される血漿中インスリンのＣｍａｘは、血漿中インスリンが２回目の用量の投与から０分〜約４５分後の期間に測定される場合、少なくとも約７０μＵ／ｍｌとなってもよい。達成されるＡＵＣは、少なくとも１８００μＵ／（ｍｌ×ｍｉｎ）となってもよい。  【選択図】      なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療的に有効な血漿中インスリン濃度を達成する方法であって、インスリンの医薬製剤の少なくとも約２回の用量を１つの鼻孔中に連続的に投与する工程を有するものである、方法。
【請求項２】
請求項１記載の方法において、１回用量は１００μｌ当たり少なくとも約１０〜約１００国際単位（Ｕ）のインスリンを有するものである。
【請求項３】
請求項２記載の方法において、血漿中インスリンのＣｍａｘは、血漿中インスリンが２回目の用量の投与から約０分〜約４５分後において測定される場合、少なくとも約７０μＵ／ｍｌとなるものである。
【請求項４】
請求項３記載の方法において、前記２回目の用量の後における血漿中インスリンのＡＵＣは、少なくとも約１８００μＵ／（ｍｌ×ｍｉｎ）となるものである。
【請求項５】
請求項１または２記載の方法において、２回目の用量の後における血漿中インスリンのＣｍａｘは、血漿中インスリンが２回目の用量の投与から約０分〜約４５分後に測定される場合、１回目の用量の後における血漿中インスリンのＣｍａｘに比べて約２倍〜約１０倍大きいものである。
【請求項６】
請求項５記載の方法において、２回目の用量の後における血漿中インスリンのＣｍａｘは、１回目の用量の後における血漿中インスリンのＣｍａｘに比べて約３倍〜約８倍大きいものである。
【請求項７】
請求項６記載の方法において、２回目の用量の後における血漿中インスリンのＣｍａｘは、１回目の用量の後における血漿中インスリンのＣｍａｘに比べて約５倍大きいものである。
【請求項８】
請求項５記載の方法において、２回目の用量の後における血漿中インスリンのＡＵＣは、１回目の用量の後における血漿中インスリンのＡＵＣに比べて約２倍〜約１０倍大きいものである。
【請求項９】
請求項８記載の方法において、２回目の用量の後における血漿中インスリンのＡＵＣは、１回目の用量の後における血漿中インスリンのＡＵＣに比べて約３倍〜約８倍大きいものである。
【請求項１０】
請求項９記載の方法において、２回目の用量の後における血漿中インスリンのＡＵＣは、１回目の用量の後における血漿中インスリンのＡＵＣに比べて約５倍大きいものである。
【請求項１１】
請求項１記載の方法において、２回目の用量が同じ鼻孔に連続して投与された後の血漿中インスリンのＣｍａｘは、２回目の用量が２つの異なる鼻孔に連続して投与された場合に観察される血漿中インスリンのＣｍａｘに比べて少なくとも約２倍大きいものであり、血漿中インスリンは、インスリンの２回目の用量の投与から約０分〜約４５分後に測定されるものである。
【請求項１２】
請求項１１記載の方法において、前記２回目の用量が同じ鼻孔に連続して投与された後の血漿中インスリンのＡＵＣは、２回目の用量が２つの異なる鼻孔に連続して投与された場合に観察される血漿中インスリンのＡＵＣに比べて約２倍大きいものである。
【請求項１３】
請求項１記載の方法において、インスリンの前記医薬製剤は、治療的有効量のインスリン、透過促進剤、および液状担体を有するものであり、前記透過促進剤は以下の構造を有するＨｓｉｅｈ促進剤であり、
【化４】
2011522830.tif 000006
式中、ＸおよびＹは酸素、硫黄、または構造
【化５】
2011522830.tif 000007
あるいは＝Ｎ−−Ｒのイミノ基であり、ただしＹが当該イミノ基である場合Ｘはイミノ基であり、Ｙが硫黄である場合Ｘは硫黄またはイミノ基であり、Ａは構造
【化６】
2011522830.tif 000008
を有する基であり、ここで、ＸおよびＹは上記のように定義され、ｍおよびｎは１〜２０の値を有する整数であり、ｍ＋ｎの合計は２５以下であり、ｐは０あるいは１の値を有する整数であり、ｑは０あるいは１の値を有する整数であり、ｒは０あるいは１の値を有する整数であり、またＲ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、Ｒ１からＲ６の一つのみがアルキル基であるという条件で、それぞれ独立して水素あるいは、直鎖または枝分かれした１〜６の炭素原子を有するアルキル基であり、ただし、ｐ、ｑおよびｒが０の値を有し、且つＹが酸素である場合、ｍ＋ｎは少なくとも１１であり、またさらなる条件としてＸがイミノ基、ｑが１、Ｙが酸素、およびｐ並びにｒが０の場合、ｍ＋ｎは少なくとも１１である。
【請求項１４】
治療的有効量のインスリンを吸収できる被験者を特定する方法であって、医薬製剤中に約２０Ｕ〜約２００Ｕの範囲でインスリンの１回の用量を鼻から投与する工程と、ついで当該用量の投与から約１０分〜約３０分後における血漿中インスリン濃度を測定する工程とを有するものである、方法。
【請求項１５】
請求項１４記載の方法において、インスリンの前記用量は約２５Ｕ〜約１５０Ｕの範囲である。
【請求項１６】
請求項１５記載の方法において、インスリンの前記用量は約５０Ｕ〜約１２５Ｕの範囲である。
【請求項１７】
請求項１６記載の方法において、インスリンの前記用量は約７５〜約１１０Ｕの範囲である。
【請求項１８】
請求項１７記載の方法において、インスリンの前記用量は約１００Ｕである。
【請求項１９】
請求項１４記載の方法において、血漿中インスリンのＣｍａｘは約１５〜約４００μＵ／ｍｌの範囲である。
【請求項２０】
請求項１９記載の方法において、血漿中インスリンのＣｍａｘは約３０〜約２５０μＵ／ｍｌの範囲である。
【請求項２１】
請求項２０記載の方法において、血漿中インスリンのＣｍａｘは約５０〜約１５０μＵ／ｍｌの範囲である。
【請求項２２】
請求項１９記載の方法において、血漿中インスリンのＣｍａｘは約７０μＵ／ｍｌである。
【請求項２３】
製品の物品であって、鼻腔投与用のインスリンの医薬製剤と、治療的に有効な血漿中インスリン濃度を達成するために、インスリンの前記医薬製剤の少なくとも約２回の用量が１つの鼻孔に連続的に投与されるべきであることを示す印刷物とを有する、製品の物品。
【請求項２４】
請求項２３記載の製品の物品において、インスリンの前記医薬製剤は、治療的有効量のインスリン、透過促進剤、および液状担体を有するものであり、前記透過促進剤は以下の構造を有するＨｓｉｅｈ促進剤であり、
【化７】
2011522830.tif 000009
式中、ＸおよびＹは酸素、硫黄、または構造
【化８】
2011522830.tif 000010
あるいは＝Ｎ−−Ｒのイミノ基であり、ただしＹが当該イミノ基である場合Ｘはイミノ基であり、Ｙが硫黄である場合Ｘは硫黄またはイミノ基であり、Ａは構造
【化９】
2011522830.tif 000011
を有する基であり、ここで、ＸおよびＹは上記のように定義され、ｍおよびｎは１〜２０の値を有する整数であり、ｍ＋ｎの合計は２５以下であり、ｐは０あるいは１の値を有する整数であり、ｑは０あるいは１の値を有する整数であり、ｒは０あるいは１の値を有する整数であり、またＲ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、Ｒ１からＲ６の一つのみがアルキル基であるという条件で、それぞれ独立して水素あるいは、直鎖または枝分かれした１〜６の炭素原子を有するアルキル基であり、ただし、ｐ、ｑおよびｒが０の値を有し、且つＹが酸素である場合、ｍ＋ｎは少なくとも１１であり、またさらなる条件としてＸがイミノ基、ｑが１、Ｙが酸素、およびｐ並びにｒが０の場合、ｍ＋ｎは少なくとも１１である。
【請求項２５】
請求項２３記載の製品の物品において、前記印刷物は、用量が１００μｌ当たり少なくとも約１０Ｕ〜約１００Ｕのインスリンを有することを記載するものである。
【請求項２６】
請求項２５記載の製品の物品において、前記用量は１００μｌ当たり少なくとも約１５Ｕ〜約７５Ｕのインスリンを有するものである。
【請求項２７】
請求項２５または２６記載の製品の物品において、前記用量は１００μｌ当たり少なくとも約２５Ｕのインスリンを有するものである。
【請求項２８】
請求項２３記載の製品の物品において、前記印刷物は、血漿中インスリンが約０分〜約４５分において測定される場合、２回目の用量の投与後におけるインスリンのＣｍａｘが少なくとも約７０μＵ／ｍｌとなることを記載するものである。
【請求項２９】
請求項２８記載の製品の物品において、前記印刷物は、前記２回目の用量の後における血漿中インスリンのＡＵＣが、少なくとも約１８００μＵ／（ｍｌ×ｍｉｎ）となることを記載するものである。
【請求項３０】
請求項２３記載の製品の物品において、前記印刷物は、２回目の用量の投与後における血漿中インスリンのＣｍａｘが、１回目の用量の投与後における血漿中インスリンのＣｍａｘに比べて約２倍〜約１０倍大きいものであることを記載するものである。
【請求項３１】
請求項３０記載の製品の物品において、前記印刷物は、前記２回目の用量の後におけるインスリンのＡＵＣが、前記１回目の用量の後におけるインスリンのＡＵＣに比べて約２倍〜約１０倍大きいものであることを記載するものである。
【請求項３２】
製品の物品であって、鼻腔投与用のインスリンの医薬製剤と、印刷物とを有し、前記印刷物は、前記医薬製剤の投与前に、被験者が治療的有効量のインスリンを吸収できるかどうかを決定するために当該被験者は評価されるべきであることを示すものであり、医薬製剤中に約２０Ｕ〜約２００Ｕの範囲でインスリンの１回の用量を鼻から投与する工程と、ついで当該用量の投与から約１０分〜３０分後における血漿中インスリン濃度を測定する工程とを有するものである、製品の物品。
【請求項３３】
請求項３２記載の製品の物品において、インスリンの前記用量は約２５Ｕ〜約１５０Ｕの範囲である。
【請求項３４】
請求項３３記載の製品の物品において、インスリンの前記用量は約５０Ｕ〜約１２５Ｕの範囲である。
【請求項３５】
請求項３４記載の製品の物品において、インスリンの前記用量は約７５Ｕ〜約１１０Ｕの範囲である。
【請求項３６】
請求項３５記載の製品の物品において、インスリンの前記用量は約１００Ｕである。
【請求項３７】
請求項３２記載の製品の物品において、インスリンのＣｍａｘは約１５Ｕ〜約４００Ｕの範囲である。
【請求項３８】
請求項３７記載の製品の物品において、インスリンの前記Ｃｍａｘは約３０Ｕ〜約２５０Ｕの範囲である。
【請求項３９】
請求項３８記載の製品の物品において、インスリンの前記Ｃｍａｘは約５０Ｕ〜約１５０Ｕの範囲である。
【請求項４０】
請求項３２記載の製品の物品において、前記Ｃｍａｘは約７０μＵ／ｍｌより大きいものである。
【請求項４１】
請求項３２または４０記載の製品の物品において、インスリンの前記医薬製剤は、治療的有効量のインスリン、透過促進剤、および液状担体を有するものであり、前記透過促進剤は以下の構造を有するＨｓｉｅｈ促進剤であり、
【化１０】
2011522830.tif 000012
式中、ＸおよびＹは酸素、硫黄、または構造
【化１１】
2011522830.tif 000013
あるいは＝Ｎ−−Ｒのイミノ基であり、ただしＹが当該イミノ基である場合Ｘはイミノ基であり、Ｙが硫黄である場合Ｘは硫黄またはイミノ基であり、Ａは構造
【化１２】
2011522830.tif 000014
を有する基であり、ここで、ＸおよびＹは上記のように定義され、ｍおよびｎは１〜２０の値を有する整数であり、ｍ＋ｎの合計は２５以下であり、ｐは０あるいは１の値を有する整数であり、ｑは０あるいは１の値を有する整数であり、ｒは０あるいは１の値を有する整数であり、またＲ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、Ｒ１からＲ６の一つのみがアルキル基であるという条件で、それぞれ独立して水素あるいは、直鎖または枝分かれした１〜６の炭素原子を有するアルキル基であり、ただし、ｐ、ｑおよびｒが０の値を有し、且つＹが酸素である場合、ｍ＋ｎは少なくとも１１であり、またさらなる条件としてＸがイミノ基、ｑが１、Ｙが酸素、およびｐ並びにｒが０の場合、ｍ＋ｎは少なくとも１１である。
【請求項４２】
請求項３２記載の製品の物品において、前記印刷物は、さらに、前記医薬製剤の投薬が、鼻腔内噴霧装置がどの程度深く鼻孔に挿入されたか、前記被験者が吸気していたか、または前記鼻腔内噴霧の挿入角度に依存しないことを記載するものである。
【請求項４３】
治療的有効量のインスリンを吸収できる被験者を特定する方法であって、医薬製剤中に約２０Ｕ〜約２００Ｕの範囲でインスリンの１回の用量を鼻から投与する工程と、カロリー負荷を与える工程と、ついで前記用量の投与から約１５分〜約１２０分後における血漿中グルコース濃度の上昇を測定する工程とを有するものである、方法。
【請求項４４】
請求項４３記載の方法において、インスリンの前記用量は、約２５Ｕ〜約１５０Ｕの範囲である。
【請求項４５】
請求項４４記載の方法において、インスリンの前記用量は、約５０Ｕ〜約１２５Ｕの範囲である。
【請求項４６】
請求項４５記載の方法において、インスリンの前記用量は、約７５Ｕ〜約１１０Ｕの範囲である。
【請求項４７】
請求項４６記載の方法において、インスリンの前記用量は、約１００Ｕである。
【請求項４８】
請求項４３記載の方法において、血漿中グルコースの上昇は約６０ｍｇ／ｄｌである。
【請求項４９】
請求項４８記載の方法において、前記上昇は約４０ｍｇ／ｄｌ未満である。
【請求項５０】
請求項４９記載の方法において、前記上昇値は約２０ｍｇ／ｄｌ未満である。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２００８年６月５日付で出願の米国仮特許出願第６１／０５９，２２５号明細書に対して米国特許法１１９条（ｅ）のもとで優先権を主張するものである。
【０００２】
本発明はインスリンの鼻腔内輸送の方法、および製剤に関する。
【背景技術】
【０００３】
インスリンは血中から細胞内へのグルコース輸送を誘導するホルモンであり、そのグルコースはエネルギー源を供給する。タイプ１とタイプ２の糖尿病に罹患した人々は、血糖値を調整する為に外来のインスリンの投与を頻繁に必要とする。糖尿病の多くの主要な合併症の発生率と重症度とを調整する為には、血中グルコースの厳重な調節が重要な意味を持つことが多数の研究で示されている。Ｓｋｙｌｅｒ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ２２（４）：１６２−１６６（２００４）。特にインスリン産生が制限あるいは欠損しているタイプ１の糖尿病において、血中グルコースの維持において重要な要因となるのは、食事後の血中グルコースの上昇に対応したインスリンの量を適切なタイミングで供給することである。もし過剰量のインスリンが供給されたり、あるいはインスリン供給のタイミングが要求に適切に対応していない場合、低血糖症を起こす可能性がある。対照的に、もし過小量のインスリンしか供給されない場合、高血糖症を起こす恐れがある。両方共の状態が深刻な臨床的合併症の原因となる可能性がある。インスリン療法における最も一般的な投与計画は、持続時間の短い速効性のインスリンの食事前の皮下注射と、それに併せてより持続時間の長い遅効性のインスリン製剤の投与とを行う方法である。厳密にモニターされている場合、この持続時間の短いインスリンと長いインスリンとの組み合わせによる、その最終的な成果は一般的に十分なものとなる。しかしながら、血中グルコースの調節において個人間にかなりの変動が存在する。一部には、この変動は注射箇所からのインスリン放出が変動しやすいことによる。注射箇所におけるインスリンの取込み量は、皮膚温度、血管分布、および皮下の筋肉が運動しているかどうかによって影響を受けやすい。時間と共に反復注射による注射箇所における組織の瘢痕化および過敏症といった副作用もまた、注射箇所からのインスリン取込み量の変動性につながる可能性がある。
【０００４】
インスリンは吸入によってもまた投与することが出来る。しかしながら、この投与経路には欠点がある。インスリンの成長促進性と免疫原性とに起因する、吸入インスリンの慢性使用による潜在的な肺毒性に関わる懸念が提起されている。さらに、肺機能の低下がタイプ１およびタイプ２の糖尿病患者の両方で報告されている。Ｍｏｒｉ  ｅｔ  ａｌ，Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，３１：１８９−９３（１９９２）。吸入インスリンの肺機能に対する安全性は、その臨床開発を通して大きな懸案事項であった。
【０００５】
１９８０年代以来、鼻からのインスリン供給の可能性に大きな関心が寄せられている。この投与方法の利点は、粘膜からのインスリン吸収が直接的なことであり、すなわち供給箇所と血液循環との間に最小限の障壁しかないということである。さらに、注射による投与の場合に抗原性効果を生じさせる作用因子は、鼻腔内投与の場合にはその効果を生じさせないことが明らかになっている。鼻腔用噴霧装置はサイズが小さく、それ故に経肺投与に用いられる噴霧装置よりも便利である。使用の容易性は、特に青年期の患者において、服薬遵守の向上に繋がるであろう。
【０００６】
一般的に、鼻腔内投与したインスリンの生物学的利用能は良くなかった（１〜２％）。製剤に吸収促進剤を加えても、絶対的生物学的利用能は５〜１５％の間に留まっていた。Ｈｉｎｃｈｃｌｉｆｆｅ  ｅｔ  ａｌ，Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ．３５：１９９−２３４（１９９９）．鼻腔内用製剤の開発促進の取組みの中で、吸収促進剤として多くの作用因子が提案されてきた。このような作用因子としては例えば、胆汁酸塩およびその誘導体、界面活性物質、脂肪酸およびその誘導体、ならびに様々な生物接着分子が挙げられる。Ｈｉｎｃｈｃｌｉｆｆｅ  ｅｔ  ａｌ，Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ．３５：１９９−２３４（１９９９）。しかしながら、鼻腔内投与における生物学的利用能の悪さは今もなお一般的に見られ、さらにこの投与経路におけるインスリン吸収量の比較的高い個人間変動によって複雑化している。鼻用のインスリン製剤の改良に加えて、患者の鼻からのインスリン吸収能を測定することで、インスリンの投与方法の最適化およびインスリン療法の安全性の改善を図ることが、急ぎ必要とされている。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の目的は、インスリン医薬製剤の少なくとも約２回の用量を１つの鼻孔に連続的に投与することで、治療的に有効な血漿中インスリン濃度を達成する方法を提供することである。前記インスリン医薬製剤の各回の用量は、１００μｌ当たり少なくとも約１０Ｕ（ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ｕｎｉｔｓ：Ｕ）〜約１００Ｕのインスリンを有する。この用量はまた、１００μｌ当たり約１５Ｕ〜約７５Ｕ、約２０Ｕ〜約５０Ｕ、または約２５Ｕのインスリンを有していてもよい。前記血漿中インスリンは２回目の用量の投与から０分〜約４５分後、または約２５分〜約３０分後の範囲の期間において測定される。２回目の医薬用量の後の、当該選択された投与後期間における前記血漿中インスリンの最大測定濃度（Ｃｍａｘ）は、少なくとも約７０μＵ／ｍｌとなる。２回目の医薬用量の後の、前記血漿中インスリン濃度の時間曲線下面積（ＡＵＣ）は、少なくとも約１８００μＵ／（ｍｌ×ｍｉｎ）となる。２回目の用量の後における前記血漿中インスリンのＣｍａｘ（またはＡＵＣ）は、前記血漿中インスリンが２回目の用量の投与から０分〜約４５分後、または約２５分〜約３０分後の範囲の期間において測定される場合、１回目の用量の後における前記血漿中インスリンのＣｍａｘ（またはＡＵＣ）に比べて約２倍〜約１０倍、約３倍〜約８倍、約４倍〜約５倍、または約５倍大きくなる。２回目の用量の投与が同じ鼻孔に連続して行われた場合の血漿中インスリンのＣｍａｘ（またはＡＵＣ）は、２回目の用量の投与が２つの異なる鼻孔に連続して行われた場合に見られる血漿中インスリンのＣｍａｘ（またはＡＵＣ）に比べて約２倍となる。当該インスリン医薬製剤は、治療的有効量のインスリン、浸透増進剤、および液状担体を有していてもよい。
【０００８】
本発明はさらに、治療的有効量のインスリンを鼻から吸収できる被験者を特定する方法であって、医薬製剤中に約２０Ｕ〜約２００Ｕの範囲で含まれるインスリンを１回の用量として鼻から投与する工程と、ついで当該用量の投与から約１０分〜３０分後における前記血漿中インスリン濃度を測定する工程とを有する方法を提供する。前記用量は、複数回のより小さい用量、例えば４×２５Ｕ／用量となる様に分割してもよい。前記用量のインスリンはまた、約２５Ｕ〜約１５０Ｕ、約５０Ｕ〜約１２５Ｕ、または約７５Ｕ〜約１１０Ｕの範囲であってもよい。前記用量のインスリンはまた、約１００Ｕであってもよい。治療的有効量のインスリンを吸収する被験者において、血漿中インスリンのＣｍａｘは約１５〜約４００μＵ／ｍｌ、約３０〜約２５０μＵ／ｍｌ、約５０〜約１５０μＵ／ｍｌ、約７０〜約１００μＵ／ｍｌ、または約１５〜約２０μＵ／ｍｌの範囲である。治療的有効量のインスリンを吸収する被験者におけるＣｍａｘの好ましい範囲は、約７０μＵ／ｍｌ以上である。
【０００９】
本発明はさらに、鼻腔投与用のインスリンの医薬製剤と、治療的に有効な血漿中インスリン濃度を達成するために、このインスリンの医薬製剤の少なくとも約２回の用量が１つの鼻孔に連続的に投与されるべきであることを示す印刷物とを有する製品の物品を提供する。前記印刷物には、前記用量が１００μｌ当たり少なくとも約１０Ｕ〜約１００Ｕのインスリンを有することを記載している。この用量はまた、１００μｌ当たり約１５Ｕ〜約７５Ｕ、約２０Ｕ〜約５０Ｕ、または約２５Ｕのインスリンを有していてもよい。前記インスリン医薬製剤はまた、治療的有効量のインスリン、浸透増進剤、および液状担体を有していてもよい。前記印刷物は、血漿中インスリンが投与から０分〜約４５分後、または約２５分〜約３０分後の期間において測定される場合、２回目の用量の投与後における血漿中インスリンのＣｍａｘが、少なくとも約７０μＵ／ｍｌとなることを記載している。前記印刷物はまた、２回目の用量の投与後における血漿中インスリンのＡＵＣが、少なくとも約１８００μＵ／（ｍｌ×ｍｉｎ）となることを記載している。前記印刷物はまた、２回目の用量の投与後における血漿中インスリンのＣｍａｘ（またはＡＵＣ）が、１回目の用量の投与後における血漿中インスリンのＣｍａｘ（またはＡＵＣ）に比べて約２倍〜約１０倍、約３倍〜約８倍、約４倍〜約５倍、または約５倍大きくなることを記載している。
【００１０】
前記印刷物はまた、鼻からの製剤によるインスリンの投与に先立って、被験者を診断して鼻から治療的有効量のインスリンを吸収出来るかどうか決定するための評価を行うべきであることを記載していてもよい。この作業手順は、医薬製剤中に約２０Ｕ〜約２００Ｕの範囲で含まれるインスリンを１回の用量として鼻から投与する工程と、ついで当該用量の投与から約１０分〜３０分後における前記血漿中インスリン濃度を測定する工程とを有する。前記用量のインスリンはまた、約２５Ｕ〜約１５０Ｕ、約５０Ｕ〜約１２５Ｕ、または約７５Ｕ〜約１００Ｕの範囲であってもよい。前記用量のインスリンはまた、約１００Ｕであってもよい。治療的有効量のインスリンを吸収する被験者において、血漿中インスリンのＣｍａｘは約１５〜約４００μＵ／ｍｌ、約３０〜約２５０μＵ／ｍｌ、約５０〜約１５０μＵ／ｍｌ、約７０〜約１００μＵ／ｍｌ、または約１５〜約２０μＵ／ｍｌの範囲である。治療的有効量のインスリンを吸収する被験者におけるＣｍａｘの好ましい範囲は、約７０μＵ／ｍｌ以上である。前記印刷物は、インスリン医薬製剤の投与が、鼻腔内噴霧装置をどの程度深く鼻孔に挿入したか、被験者が吸気していたか、または鼻腔内噴霧器の挿入角度に依存しないことを記載している。
【００１１】
本発明はさらに、治療的有効量のインスリンを吸収した被験者を特定する方法であって、医薬製剤中に約２０Ｕ〜約２００Ｕの範囲で含まれるインスリンを１回の用量として鼻から投与する工程と、カロリー負荷を与える工程と、ついで前記用量の投与から約１５分〜約１２０分後における血漿中グルコース濃度の上昇を測定する工程とを有する方法を提供する。前記用量のインスリンはまた、約２５Ｕ〜約１５０Ｕ、約５０Ｕ〜約１２５Ｕ、または約７５Ｕ〜約１１０Ｕの範囲であってもよい。前記用量のインスリンはまた、約１００Ｕであってもよい。前記期間の範囲内において、グルコースの上昇値が約６０ｍｇ／ｄｌ未満の被験者は、鼻から治療的有効量のインスリンを吸収できる被験者であるとみなした。このグルコース上昇値の応答の範囲は、約６０ｍｇ／ｄｌ未満、約４０ｍｇ／ｄｌ未満、または約２０ｍｇ／ｄｌ未満であってもよい。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】図１Ａは、１回、２回、または３回の用量のインスリンを１つの鼻孔に連続的に投与した時の、用量−暴露量関係を示すものである。図１Ｂは、同じ鼻孔にインスリンを投与した時の、３つの異なる用量間における全身の暴露比率を示すものである。
【図２】図２は、インスリンの２回目の用量を同じ鼻孔に投与した方が、１回目の投薬を行った鼻孔とは逆の鼻孔に連続的に投与した場合に比べて、より高い全身暴露量を達成することを示すものである。図２Ａおよび２Ｂは、２回目の用量の投与から約０〜約４５分後の期間に血漿中インスリン濃度を測定した後の、血漿中インスリンのＣｍａｘおよびＡＵＣをそれぞれ示すものである。
【図３】図３は鼻腔投与したインスリンの吸収における高い個人間の変動性の高さを示すものである。
【図４】図４はオイグリセミッククランプの検査の結果を示しており、またここで、インスリンの最大濃度が７０μＵ／ｍｌより高い時にグルコース代謝が起こっていることを示すものである。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明は、インスリン医薬製剤を同じ鼻孔中に連続的に少なくとも２回の用量を投与することで、治療的に有効な血漿中インスリン濃度を達成する為の方法を提供するものである。当該２回目の用量の投与を同じ鼻孔に対して行った場合、医薬用量の投与を２つの違う鼻孔に連続的に行った場合に比べて、血漿中インスリン濃度は大幅に高くなる。また、本発明における当該方法および製剤には、１つの鼻孔へのインスリン１回用量の単回投与も含まれる。インスリンの１回目の用量は、いかなる特定の生理学的機序に限定されるものではないが、鼻粘膜への充填用量として機能していると考えられる。この充填用量は、その後に続く投薬において見られる血漿中インスリン濃度を達成するのに必要である。本発明における当該方法および製剤により達成される血漿中インスリンのＣｍａｘは、血漿中インスリンが２回目の用量の投与から０分〜約４５分後の期間に測定される場合、少なくとも約７０μＵ／ｍｌとなってもよい。達成されるＡＵＣは、少なくとも１８００μＵ／（ｍｌ×ｍｉｎ）となってもよい。本明細書で使用する場合、用語「Ｕ」は「ＩＵ」に等しい。
【００１４】
同じ鼻孔に連続的に投与される場合、２回目の用量の後の、基準値で補正した血漿中インスリンのＣｍａｘは、１回目の用量の後に見られる血漿中インスリンのＣｍａｘに比べて、約５倍大きくなる。ここでは、血漿中インスリンは２回目の用量の投与から約０〜約４５分後、または約２５〜約３０分後に測定されている事に留意すること。同じ鼻孔に連続的に投与される場合、３回目の用量の後の血漿中インスリンのＣｍａｘは、１回目の用量の後に見られる血漿中インスリンのＣｍａｘに比べて、約６倍〜約７倍大きくなる。ここでは、血漿中インスリンは３回目の用量の投与から約０〜約４５分後、または約２５〜約３０分後に測定されている。同様に、２回目の用量の後の血漿中インスリンのＡＵＣは、１回目の用量の後に見られる血漿中インスリンのＣｍａｘに比べて、約５倍大きくなる。３回目の用量の後の血漿中インスリンのＡＵＣは、１回目の用量の後に見られる血漿中インスリンのＣｍａｘに比べて、約６倍〜約７倍大きくなる。鼻腔に投与するインスリンの投与量に依存して、２回目の用量の後の血漿中インスリンのＣｍａｘ（またはＡＵＣ）は、１回目の用量の後に見られる血漿中インスリンのＣｍａｘ（またはＡＵＣ）に比べて、約２倍〜約１０倍、約３倍〜約８倍、約４倍〜約５倍、または約５倍大きい範囲をとってもよい。３回目の用量の後の血漿中インスリンのＣｍａｘ（またはＡＵＣ）は、１回目の用量の後に見られる血漿中インスリンのＣｍａｘ（またはＡＵＣ）に比べて、約３倍〜約１５倍、約４倍〜約１２倍、または約６倍〜約７倍大きい範囲をとってもよい。
【００１５】
同じ鼻孔へ連続的に投与した場合の血漿中インスリンのＣｍａｘは、２つの異なる鼻孔に連続的に投与した場合に見られる血漿中インスリンのＣｍａｘに比べて、約２倍大きくなる（血漿中インスリンは、同様の期間において、すなわち、インスリンの２回目の用量の投与から約０〜約４５分後、または約２５〜約３０分後の期間において測定されている。）。同様の違いが、同じ鼻孔への２回目の用量の後のＡＵＣにおいても見られる。すなわち、１つの鼻孔へ連続的に投与した場合、２回目の用量の後の血漿中インスリンのＡＵＣは、２回目の用量を２つの異なる鼻孔へ連続的に投与した場合に見られる血漿中インスリンのＡＵＣに比べて、約２倍大きくなる。
【００１６】
本発明における医薬製剤は、治療有効量のインスリンおよび透過促進剤を含んでいてもよい。米国特許第７，１１２，５６１号明細書、米国特許第７，２４４，７０３号明細書、および米国特許第７，３２０，９６８号明細書。当該透過促進剤は、以下の構造を有するＨｓｉｅｈ促進剤であってもよい。
【００１７】
【化１】
2011522830.tif 000002
【００１８】
式中、ＸおよびＹは酸素、硫黄、または構造
【化２】
2011522830.tif 000003
【００１９】
あるいは＝Ｎ−−Ｒのイミノ基であり、ただしＹが当該イミノ基である場合Ｘはイミノ基であり、Ｙが硫黄である場合Ｘは硫黄またはイミノ基であり、Ａは構造
【化３】
2011522830.tif 000004
【００２０】
を持つ基であり、ここでＸおよびＹは上記のように定義され、ｍおよびｎは１〜２０の値を持つ整数であり、ｍ＋ｎの合計は２５以下であり、ｐは０あるいは１の値を持つ整数である。ｑは０あるいは１の値を持つ整数である。ｒは０あるいは１の値を持つ整数である。またＲ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、Ｒ１からＲ６の一つのみがアルキル基であるという条件で、それぞれ独立して水素あるいは、直鎖または枝分かれした１〜６の炭素原子を持つアルキル基である。ただし、ｐ、ｑおよびｒが０の値を持ち、Ｙが酸素である場合、ｍ＋ｎは少なくとも１１であり、またさらなる条件としてＸがイミノ基、ｑが１、Ｙが酸素、およびｐとｒとが０の場合、ｍ＋ｎは少なくとも１１であり、前記化合物は体膜を経る薬剤の通過速度を促進するであろう。以下、これらの化合物は促進剤と称される。Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５あるいはＲ６がアルキルである場合、それはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、アミル、ヘキシル等であってもよい。前記透過促進剤は、米国特許第５，０２３，２５２号明細書および米国特許第５，７３１，３０３号明細書に開示されている。
【００２１】
前記透過促進剤の例として、環状ラクトン（化合物はここでＸ及びＹの両方ともが酸素、ｑが１、ｒが０）、環状ジエステル（化合物はここでＸ及びＹの両方ともが酸素、ｑ及びｒの両方ともが１）、及び環状ケトン（化合物はここでｑ及びｒの両方ともが０、Ｙが酸素）が挙げられる。前記環状ジエステルにおいて、ｍ＋ｎは少なくとも３であるのが望ましい。前記環状ケトンにおいて、ｍ＋ｎは少なくとも１１〜１５であり、ｐは０であるのが望ましい。
【００２２】
本発明において使用される促進剤の例として、大環状促進剤が挙げられる。"大環状"という当該用語は、本明細書では環中に少なくとも１２個の炭素を持つ環状化合物について言及するために用いられる。前記大環状促進剤の例として、（Ａ）大環状ケトン、例えば３メチルシクロペンタデカノン（ムスコン）、９−シクロヘプタデセン−１−オン（シベトン）、シクロヘキサデカノン、及びシクロペンタデカノン（ノルムスコン（ｎｏｒｍｕｓｃｏｎｅ））、及び（Ｂ）大環状エステル、例えばオキサシクロヘキサデカン−２−オン（シクロペンタデカノリド、ω−ペンタデカラクトン）等のペンタデカラクトンが挙げられる。
【００２３】
使用されうる他の透過促進剤の例としては、各種の薬局方大要で一般に安全と認められる（Ｇｅｎｅｒａｌｌｙ  Ｒｅｃｏｇｎｉｚｅｄ  Ａｓ  Ｓａｆｅ；ＧＲＡＳ）単長鎖エステルがある。これらは中間長鎖までの単純脂肪族不飽和あるいは飽和（完全飽和が望ましい）エステルを含んでもよい。前記エステルの非限定的な実例としては、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、ミリスチン酸ミリスチル、パルミチン酸オクチル等が挙げられる。前記促進剤は、医薬組成物での使用に適したものである。本技術分野における普通の当業者はまた、これらの材料のうち粘膜に不適合であるかあるいは粘膜を刺激するものは避けるべきであることを認識しているであろう。
【００２４】
前記促進剤は、膜を通して送達されるインスリンの透過を促進するのに有効な濃度で当該組成物中に存在する。使用する促進剤の量を決定するにあたって、様々なことを考慮すべきである。前記考慮すべきことには、例えば得られる流動量（膜の通過率）、製剤中の成分の安定性及び親和性が挙げられる。前記促進剤は通常、前記組成物の約０．０１〜約２５重量％の量で、より一般的には前記組成物の約０．１〜約１５重量％の量で、幾つかの実施形態においては組成物の約０．５〜約１５重量％の量で用いられる。米国特許第７，１１２，５６１号明細書。
【００２５】
本発明の医薬製剤は、治療的有効量のインスリン、浸透増進剤、および液状担体を有していてもよい。本製剤はｐＨが４．５以下のような酸性のｐＨを有していてもよい。前記液体担体は、本発明の当該組成物の適当な輸送手段として働くのに有効な濃度で当該組成物中に存在する。通常、前記担体は前記組成物の約４０から約９８重量％の量で、幾つかの実施形態においては組成物の約５０〜約９８重量％の量で用いられる。
【００２６】
インスリンの１回目の用量は、いかなる特定の生理学的機序に限定されるものではないが、鼻粘膜への充填用量として機能していると考えられる。１回目の用量に含まれる前記透過促進剤が、その後に続く（複数の）投薬において、粘膜層あるいは上皮細胞の細胞膜の透過性を一過性に上昇させるのであろう。前記透過促進剤はまた、上皮細胞の細胞間結合を可逆的に開き、追加の用量が同じ鼻孔に投与された時、より多くのインスリンを吸収するのであろう。
【００２７】
本発明の一実施形態においては、インスリンの鼻腔投与は鼻腔用噴霧器を用いて行われ、この鼻腔用噴霧器は液状担体として水を用い、この水には治療的有効量のインスリンが分散または溶解している。別の実施形態において、前記透過促進剤はインスリン包む水相中に乳化する。前記乳化は、一つあるいはそれ以上の適切な界面活性剤を用いてもたらすことができる。任意の適切な界面活性剤あるいは界面活性剤の混合物、例えば陰イオン、陽イオン、非イオン性界面活性剤を本発明の実施に用いることができる。前記非イオン性界面活性剤の例としては、ＰＥＧ−６０トウモロコシグリセリド、ＰＥＧ−２０モノステアリン酸ソルビタン、フェノキシ−ポリ（エチレンオキシ）エタノール、モノオレイン酸ソルビタン等が挙げられる。通常、前記界面活性剤は組成物の約２重量％未満の量で存在する。別の実施形態において、前記界面活性剤は組成物の約１．５重量％未満、約１．３重量％未満、約１重量％未満、または約０．３重量％未満の量で存在してもよい。
【００２８】
任意の種類のインスリンを、本発明の方法および製剤において使用する事が可能であり、例として、天然インスリン、つまり牛または豚から精製されたインスリン、組換えインスリン、プロインスリン、任意のインスリンの類縁体、誘導体、多形体、代謝産物、プロドラッグ、塩、または／あるいは水和物が挙げられ、またそれらに限定されない。インスリンの類縁体の例としては、ヒトインスリン、インスリンリスプロ、インスリンアスパルト、インスリングルリジン、インスリングラルギン、およびインスリンデテミルが挙げられる。インスリンの亜鉛塩もまた使用することが出来る。インスリンの誘導体には、内部または末端のアミノ酸が修飾されたインスリン、例えば、リジン／プロリン置換型のインスリンが含まれる。速効性、中間性および持続性のインスリンもまた、本発明の方法および方式において使用することが可能である。Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｂｏａｒｄ  ｏｆ  Ｆａｍｉｌｙ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ．１８：１９９−２０４（２００５）。
【００２９】
一般的に、前記インスリンまたはインスリン誘導体は、前記医薬製剤において当該組成物中に約０．０１〜約１５重量％の範囲の量で存在している。一実施形態においては、当該組成物中に、約０．０１〜約１０重量％の量で使用される。あるいは、前記インスリンは医薬製剤中に約０．１〜約５％重量％の量で存在している。使用されるインスリンの当該用量は、約２５Ｕ〜約１５０Ｕ、約５０Ｕ〜約１２５Ｕ、約７５Ｕ〜約１１０Ｕ、または約２５Ｕ〜約５０Ｕの範囲をとることが出来る。投薬の一例において、約１００Ｕのインスリンが投与される。前記用量は、１回または複数回の用量で送達されてもよい。この用量は、等しいまたは異なる量のインスリンを含んでいてもよい。一実施形態においては、１００Ｕのインスリンが、２５Ｕ／用量を４回、等しい用量で送達される。
【００３０】
本発明の組成物は通常、鼻腔用噴霧注入器により投与される。鼻腔内注入が望まれる場合には、当該組成物は鼻腔内噴霧投与装置あるいは噴霧器に入れられ、鼻腔の粘膜に送達するために被験者の鼻腔鼻孔に噴霧することにより注入することができる。所望の全身あるいは局所的薬剤濃度が得られるように、十分な量が噴霧される。鼻腔内噴霧では通常、約２００μｌまで注入され、約５０〜約１５０μｌの注入が望ましい。好ましい実施形態においては、用量毎に約１００μｌになる。一つあるいはそれ以上の鼻孔に投与することができ、注入は要望に応じてあるいは必要に応じて何回でも行うことができる。本発明においては、投与は１つの鼻孔に連続的に行われる。一実施形態において、前記鼻内噴霧注入器は平均サイズ約１０ミクロン〜約２００ミクロンの組成物の液滴を供給するものが選択される。より一般的には、前記液滴サイズは約３０ミクロン〜約１００ミクロンである。
【００３１】
本発明のインスリン噴霧組成物は通常、治療を受ける被験者によって決まる投与計画において用いられる。したがって使用頻度及び投与量は被験者毎に異なり得る。通常、投与される量は用量毎に約１０Ｕ〜約５０Ｕであり、総投与量は約１００Ｕになる。好ましい実施形態において、用量毎または噴霧毎に約１５Ｕ〜３０Ｕである。この分野において知られている通り、インスリン療法による糖尿病等の疾患の治療法は被験者毎に異なる。既知のインスリン療法とここでの教示に基づいて、医師などの本技術分野における当業者は、特定の被験者あるいは被験者群への投与方式及び投与量を選択することができる。
【００３２】
被験者は、１回用量のインスリンを１つの鼻孔に投与される。どの程度深く鼻孔に鼻腔内噴霧装置を挿入したか、被験者が吸気していたか、あるいは装置の挿入の角度は、投与される量とは独立している。１回用量は、１００μｌ当たり少なくとも約１０Ｕ〜約１００Ｕのインスリンを有することができる。この用量はまた、１００μｌ当たり約１５Ｕ〜約７５Ｕ、約２０Ｕ〜約５０Ｕ、または約２５Ｕのインスリンを有していてもよい。一実施形態においては、１００μｌ中の２５Ｕのインスリンが鼻孔に投与される。前記液量が吸収されるのに適当な時間の経過後、２回目の用量が同じ鼻孔に連続的に投与される。一実施形態において、この２回目の用量は１回目の用量の投与から１〜５秒以内に投与されてもよい。この２回目の用量は約２５Ｕを含んでいてもよい。しかし、この１回目または２回目の用量に含まれるインスリンの量は臨床的に決定され、変化する可能性がある。
【００３３】
鼻腔用インスリンの投与後、血漿中インスリン濃度および血漿中グルコース濃度を分析し、選択された投与後期間における血漿中インスリンの最大測定濃度（Ｃｍａｘ）、血漿中インスリン濃度の時間曲線下面積（ＡＵＣ０−ｔ）およびＣｍａｘに至るまでの時間（Ｔｍａｘ）を決定してもよい。ＡＵＣは時間０〜時間ｔにおいて測定されてもよく、ここでは様々な時間間隔が選択されてもよい。一実施形態においては、鼻腔用インスリンの投与後−５分（鼻腔用インスリンの投与５分前）、−１分、ならびに１０、１５、２０、２５、３０、および４５分の時間において血液が採取される。インスリンおよびＣペプチドは免疫測定法で測定されてもよい。血漿中グルコースはいかなる標準的な実験室用の化学的方法を用いて測定されてもよい。
【００３４】
薬物動態学的（ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ：ＰＫ）パラメーターは、グルコースおよびインスリンの関連する血中濃度のデータから得られる。グルコースおよびインスリンは０〜４５分に得られたサンプルにおいて測定される。インスリンについての前記薬物動態学的パラメーターは、Ｃｍａｘ、ＡＵＣ０−ｔ、Ｔｍａｘ、および個体内変動および用量応答を決定する為の全投与の動態比較を含む。グルコースについての前記薬物動態学的パラメーターは、ＡＵＣ０−ｔ、および同一量反復投与と漸増投与とにおける動的効果の一貫性の比較を含む。前記ＡＵＣは混合対数線形則を用いて計算されてもよい。この方法を用いると、前記ＡＵＣは最初の（データ）ポイントとＴｍａｘとの間を台形法によって、ついでＴｍａｘと最後のデータポイントとの間を対数法によって計算される。前記計算は、２つのデータポイントの間で濃度水準が上昇または等しくなる度に、台形法に自動的に切り替わる。Ｔｍａｘ以前に見られる定量限界（ｌｉｍｉｔ  ｏｆ  ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ：ＬＯＱ）未満の値はゼロだと見なされる。Ｔｍａｘ以降に見られる定量限界未満の値は、回帰直線終端の計算において無視される。定量限界未満の値または欠測値が、２つの定量限界以上の値の間で見られる場合は、データポイント間の補間が許容される。消失速度定数（Ｌｚ）の推定の為に、曲線（ｔから無限）下の外挿領域は、ｔの調整とともに対数（ｌｎ）変換した曲線のデータポイントに線形回帰を行うことで計算される。それぞれのＰＫパラメーターは、順序、治療および期間の固定効果、ならびに順序内の被験者および被験者内誤差の変量効果を含んだ期間分散分析（ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｖａｒｉａｎｃｅ：ＡＮＯＶＡ）モデルを用いて、各治療間で比較された。全体の治療効果は、ＡＮＯＶＡモデルからの平均二乗誤差を用いて、５％の有意水準で検定された。もし全体の治療効果が有意でない場合、治療間の比較は意味を持たないであろう。この２つの治療間の比較は、ＳＡＳ  ＭＩＸＥＤプロシジャにおける"ＥＳＴＩＭＡＴＥ"ステートメントを用いて行われる。それぞれのＰＫパラメーターの為に、Ｎ、平均値、中央値、標準偏差、最小値、および最大値を含む記述統計が、各治療群について計算される。ＡＵＣおよびＣｍａｘの為に、上記の要約統計に加えて、幾何平均および変動係数もまた、各地両軍について計算される。他に規定されない限り、全ての統計検定は両側対立仮説に対して、有意水準0.05を採用して行われる。
【００３５】
インスリンの鼻腔内経路を介した吸収には、かなりの個人間変動が存在する。Ｈｅｉｎｅｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｅｓｉｇｎ．７：１３２７−１３５１（２００１）．本発明はさらに治療的有効量のインスリンを鼻から吸収できる被験者または被験者群を特定する方法を提供する。この特定のために投与するインスリン用量は、医薬製剤中約２０Ｕ〜約２００Ｕの範囲を取ってもよい。投与後、血漿中インスリン濃度は、用量の投与から約１０〜３０分後に測定される。前記試験するインスリン用量は、約２５Ｕ〜約１５０Ｕ、約５０Ｕ〜約１２５Ｕ、または約７５Ｕ〜約１１０Ｕの範囲を取ってもよく、あるいは約１００Ｕであってもよい。投与後の血漿中インスリンのＣｍａｘは、約１５〜約４００μＵ／ｍｌ、約３０〜約２５０μＵ／ｍｌ、約５０〜約１５０μＵ／ｍｌ、約７０〜約１００μＵ／ｍｌ、または約１５〜約２０μＵ／ｍｌの範囲を取ってもよく、あるいは約７０μＵ／ｍｌ以上（約２００〜２５０μＵ／ｍｌの上限内）であってもよい。本発明の個々の実施形態において、１００Ｕの試験用量に対するＣｍａｘは約１００μＵ／ｍｌであり、７５Ｕの試験用量に対しては約６７μＵ／ｍｌ、およびに５０Ｕの用量に対しては約３０μＵ／ｍｌである。
【００３６】
あるいは、前記血中グルコース濃度はインスリンの鼻腔投与後に測定されてもよい。血中グルコースは標準的な手法を用いて決定されてもよい。（血中グルコース［オンライン］，［２００９年６月５日に検索］．インターネットより検索<ＵＲＬ：ｈｔｔｐ：／／ｅｎ．ｗｉｋｉｐｅｄｉａ．ｏｒｇ／ｗｉｋｉ／Ｂｌｏｏｄ＿ｓｕｇａｒ>）。さらに、治療的有効量のインスリンを鼻から吸収できる被験者の特定は、カロリー負荷の有無にかかわらず行われてもよい。例えば、絶食状態の被験者は個々の血漿中グルコースの基準値の測定を受けるであろう。一般的に、この値は約１００〜２５０ｍｇ／ｄｌの範囲を取るであろう。鼻腔用噴霧器の適切な訓練の後、前記被験者はついで鼻からインスリンの用量を受け取るであろう。投与される前記インスリン用量は、鼻腔用に適合した医薬製剤中約２０Ｕ〜約２００Ｕの範囲を取ってもよい。投与後、血漿中インスリン濃度は、用量の投与から約１０〜３０分後に測定される。前記インスリン用量は、約２５Ｕ〜約１５０Ｕ、約５０Ｕ〜約１２５Ｕ、または約７５Ｕ〜約１１０Ｕの範囲を取ってもよく、あるいは約１００Ｕであってもよい。
【００３７】
血漿中グルコースはついで、インスリンの鼻からの投与から約１５〜約１２０分後に測定されるであろう。前記血漿中グルコースがグルコースの基準値を下回る場合、当該被験者は鼻から治療有効量のインスリンを吸収できる、または血漿中グルコースの減少をもたらすほど十分な感受性を有する可能性があると見なされる。あるいは、前記測定は標準的なカロリー負荷、例えば固体または液体の炭水化物含有の食品または飲料を用いて行われてもよい。例えば、７５ｇｍのグルコースを含む飲料が用いられてもよい。絶食状態の被験者には、血漿中グルコースの基準値テストを行ってもらうであろう。言及した様に、血漿中グルコースは約１００〜２５０ｍｇ／ｄｌの範囲を取ってもよい。前記インスリン用量の範囲は上述されている。鼻腔用インスリンを投与された直後に、当該被験者はカロリー負荷を受けるであろう。血漿中グルコースはカロリー負荷から約１０〜約１２０分後の範囲の期間において、再度測定されるであろう。グルコースの上昇が約６０ｍｇ／ｄｌ未満となる被験者は、治療有効量のインスリンを鼻から吸収することが出来る被験者であると見なされるであろう。グルコース上昇の応答の範囲は、約６０ｍｇ／ｄｌ未満、約４０ｍｇ／ｄｌ未満、または約２０ｍｇ／ｄｌ未満であってもよい。
【００３８】
本発明はさらに、鼻腔投与用のインスリン医薬製剤と、治療的に有効な血漿中インスリン濃度を達成する為に、このインスリン医薬製剤の少なくとも約２回の用量を１つの鼻孔に連続的に投与すべきであることを記した印刷物とを有するキットのような、製品の物品を提供する。前記印刷物には、前記用量が１００μｌ当たり少なくとも約１０Ｕ〜約１００Ｕのインスリンを有することを記載している。この用量はまた、１００μｌ当たり約１５Ｕ〜約７５Ｕ、約２０Ｕ〜約５０Ｕ、または約２５Ｕのインスリンを有していてもよい。前記印刷物は、血漿中インスリンがインスリンの２回目の用量の投与から約０〜約４５分後、または約２５分〜約３０分後に測定される場合、２回目の用量の投与後における血漿中インスリンのＣｍａｘが、約１５〜約４００μＵ／ｍｌ、約３０〜約２５０μＵ／ｍｌ、約５０〜約１５０μＵ／ｍｌ、約７０〜約１００μＵ／ｍｌ、または約１５〜約２０μＵ／ｍｌの範囲を取ってもよく、あるいは約７０μＵ／ｍｌ以上であってもよいことを記載している。前記印刷物はまた、２回目の用量の投与後における血漿中インスリンのＡＵＣが、少なくとも約１８００μＵ／（ｍｌ×ｍｉｎ）となることを記載している。前記印刷物はまた、２回目の用量の投与後における血漿中インスリンのＣｍａｘ（またはＡＵＣ）が、１回目の用量の投与後における血漿中インスリンのＣｍａｘ（またはＡＵＣ）に比べて約２倍〜約１０倍、約３倍〜約８倍、約４倍〜約５倍、または約５倍大きくなることを記載している。
【００３９】
前記印刷物はまた、鼻から治療的有効量のインスリンを吸収出来る被験者または被験者群を特定するために、被験者を検査するべきであることを記載していてもよい。鼻から投与する前記インスリン用量は、鼻腔投与が可能な医薬製剤中に約２０Ｕ〜約２００Ｕの範囲を取ってもよい。前記血漿中インスリンは、用量の投与から約１０〜３０分後に測定されてもよい。前記インスリン用量は、、約２５Ｕ〜約１５０Ｕ、約５０Ｕ〜約１２５Ｕ、または約７５Ｕ〜約１００Ｕの範囲を取ってもよく、あるいは約１００Ｕであってもよい。鼻腔用インスリンの投与後、血漿中インスリンのＣｍａｘは、約１５〜約４００μＵ／ｍｌ、約３０〜約２５０μＵ／ｍｌ、約５０〜約１５０μＵ／ｍｌ、約７０〜約１００μＵ／ｍｌ、または約１５〜約２０μＵ／ｍｌの範囲を取ってもよく、あるいは約７０μＵ／ｍｌ以上（約２００〜２５０μＵ／ｍｌの上限内）であってもよい。
【００４０】
あるいは、前記印刷物は、鼻から治療的有効量のインスリンを吸収出来る被験者を決定する為に、鼻腔用インスリンの投与後に血漿中グルコースを測定するべきであることを記載していてもよい。前記印刷物は、前記測定は標準的なカロリー負荷、例えば固体または液体の炭水化物含有の食品または飲料を用いて行われるべきであることを記載していてもよい。例えば、７５ｇｍのグルコースを含む飲料が用いられてもよい。絶食状態の被験者には、血漿中グルコースの基準値テストを行ってもらうであろう。鼻腔用インスリンを投与された直後に、当該被験者はカロリー負荷を受けるであろう。血漿中グルコースはカロリー負荷から約１０〜約１２０分後の範囲の期間において、再度測定されるであろう。グルコースの上昇が約６０ｍｇ／ｄｌ未満となる被験者は、治療有効量のインスリンを鼻から吸収することが出来る被験者であると見なされるであろう。グルコース上昇の応答の範囲は、約６０ｍｇ／ｄｌ未満、約４０ｍｇ／ｄｌ未満、または約２０ｍｇ／ｄｌ未満であってもよい。
【００４１】
この分野において知られている通り、インスリン療法による糖尿病等の疾患の治療法は被験者毎に異なる。製品の物品の中に組み込まれる前記印刷物は、インスリン医薬製剤の投与が、鼻腔内噴霧装置をどの程度深く鼻孔に挿入したか、被験者が吸気していたか、または鼻腔内噴霧器の挿入角度に依存しないことを記載していてもよい。
【００４２】
鼻粘膜を越えて送達されることの出来る、いかなる薬学的活性作用物質、またはそのような作用物質の２つ以上の混合物が、本発明の実施において用いられていてもよい。"薬学的活性作用物質"の用語には、ペプチド、タンパク質、ペプチド疑似体、ペプトイド、および化学化合物を含むほか、同様に、前駆体、塩、複合体、類似体、ならびに前記ペプチド、タンパク質、ペプチド疑似体、ペプトイド、および化学化合物の誘導体を含む。前記作用物質は治療的、予防的、または診断的な性質があってもよい。
【００４３】
本発明の実施において用いられてもよい薬学的活性作用物質の例には以下の物を含む：糖尿病の治療に有用な化合物で、例えばインスリン、プロインスリン、プレプロインスリン、インスリン類似体、およびグルカゴン様ペプチド（ＧＬＰｓ）；カルシトニンおよびカルシトニン遺伝子関連ペプチド；成長ホルモン；成長ホルモン放出因子；ガン治療薬で、例えば、ソマトスタチン（ＳＲＩＦｓ）およびその類似体；ゴナドトロピン放出薬（ＧｎＲＨｓ、黄体形成ホルモン放出ホルモン作動薬（ＬＨＲＨｓ）としても知られる）；ゴナドトロピン放出ホルモン拮抗薬で、例えば、アンチド；デルタ睡眠誘発ペプチド（ＤＳＩＰｓ）；オピオイド；抗肥満薬；抗炎症薬；アンジオゲニン拮抗薬；抗オピエートペプチドで、例えば、モルヒネ調節神経ペプチド；β拮抗薬で、例えばアルブテロール；抗不安薬で、例えば、ジアゼパム、ミダゾラム、バルビツレート、パロキセチン、イミプラミン、および関連する向精神作用の化合物；β遮断薬；食欲増強作用の化合物；麻酔剤およびオピオイド鎮痛剤；性ホルモンで、例えばテストステロン、プロゲステロン、およびエストラジオール；ならびに、代謝制御ペプチドで、例えば、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、甲状腺刺激ホルモン、胸腺液性因子（ＴＨＦ）、および卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）。ＷＯ０３／０００１５８。
【００４４】
ペプチドまたはタンパク質を有する本発明の実施形態において、当該組成物は、例えば吸収部位において起こるペプチドまたはタンパク質の分解を、防ぐことの出来る酵素阻害剤もまた有していてもよい。実質的にあらゆる適切な酵素阻害剤または酵素阻害剤の混合物が本発明の実施において使われてもよい。本発明の実施において使われてもよい酵素阻害剤の例は、ロイペプチン、ベスタチン、アプロチニンである。任意のタンパク質またはペプチドにおける酵素切断部位に応じて、異なる酵素阻害剤が使用されてもよい。前記酵素阻害剤は投与部位における酵素的分解を阻害するのに十分な濃度で使用されることができる。指針の目的で記すと、ほとんどの注入には前記酵素阻害剤の使用が、当該組成物中の約０．０００１〜約１．０重量％の量で、およびより好ましくは当該組成物の約０．００５〜約０．１重量％の量で、含まれるであろうと考えられる。ＷＯ０３／０００１５８。前記実施例は、本発明の実施形態を説明するものであり、限定するものと見なされてはならない。
【実施例１】
【００４５】
本試験の目的は、インスリンの鼻腔内投与についての最適な方法論を決定すること、および用量応答の薬物動態学的性質と薬物力学的性質とを確認することであった。本試験は参加施設の治験審査委員会に承認されたプロトコルに従って行われた。
【００４６】
製剤および装置
試験された製剤は鼻腔内インスリン噴霧剤であり、標準的な短時間作用性のヒト組換えインスリンを、幾つかの一般的な賦形剤を加えた水の中に溶解させたものを含有していた。この賦形剤にはポリソルベート２０、ソルビタンモノラウリン酸、綿実油、およびシクロペンタデカラクトン（ＣＰＥ−２１５）を含んでいた。この賦形剤のシクロペンタデカトンはセイヨウトウキの様な植物の中に天然に存在する化合物であり、多くの食品、化粧品、個人用生理用品に含まれる一般的な構成成分である。重要なことに、インスリン製剤は使用の前に２〜１０時間室温におかれた。またこのインスリン製剤は２〜３回穏やかにひっくり返された。噴霧器は一番最初に使用される際に、ポンプのプライムを行った。１００μｌの各噴霧により、およそ２５Ｕのインスリンが送出された。ＡＰＦ（Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅ  Ｆｒｅｅ）の鼻腔用噴霧装置の使用により、投与容積は少なくとも１週間の期間中、許容範囲内に保たれた。
【００４７】
試験の被験者
１８歳〜５０歳の、健康で喫煙をせず、後記の採択／除外基準を満たした男性被験者８人が本試験に参加した。被験者は以下に記す採択基準の全てを満たさなければならなかった。現病歴と身体検査（鼻腔検査を含む）において臨床的に重大な異常がない；体格指数が３３以下である；体重が７０ｋｇ以上である；Ｃペプチド値が１．０ｍｇ／ｍｌより高い；本試験に入る前に書面による同意書に合意を得ている。
【００４８】
被験者がもし以下に記す除外基準のいずれか１つでも満たしていた場合は除外された。心臓、胃腸、内分泌系、神経系、肝臓、または腎臓に重大な疾患がある；インスリンの吸収、送達、代謝、または排泄を阻害することが知られている現病歴がある；何らかの理由で薬物を慢性使用している（ただし安定性のビタミンおよび栄養サプリメントは許容される）；空腹時の血漿中グルコースが１２６ｍｇ／ｄｌ以上である；肝酵素（ＡＬＴ、ＡＳＴ、アルカリ性リン酸塩）の値が正常値の上限の１．５倍より高い；少なくとも２年以内において薬物またはアルコールの乱用歴がある；初回検診前３０日以内において治験薬の使用がある；鼻腔用噴霧器の日常的な使用がある；選別検診の際の尿検査において薬物陽性である。
【００４９】
試験の手順
被験者は表１に記載された計画表に従って投与を受けた。バイタルサインは被験者が少なくとも５分間座り続けた後に測定した。血圧と心拍数は、各用量の投与前および治療した日中必要な時に測定および記録をした。およそ６００ｋｃａｌｓ（炭水化物５０％、脂肪３０％、タンパク質２０％）を含む標準化した食事が、各インスリンの治療の４５分後および最後の採血の後に与えられた。
【００５０】
【表１】
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【００５１】
試験期間において、全ての被験者は朝の治療の前夜少なくとも８時間は絶食した。この終夜絶食の際、水については投与の１時間前までは自由に摂取することが許可されていた。被験者は直立して座っている間に、鼻腔内投与を受けるか、あるいは自分で投与を行った。
【００５２】
被験者は以下に記すプロトコルに従って投与を行った。被験者は両方の鼻孔の通りが良いかどうかを、択一的に片側の鼻孔を押さえて息を吸う事で確認した。両方の鼻孔の通りが良い場合、被験者は片方の鼻孔がもう片方の鼻孔に比べて、より通りが良いかどうかを確認した。もしそうであった場合、より通りが良い方の鼻孔に２５Ｕ（１噴霧）の用量を投与した。もし両方の鼻孔の通りが完全に詰まっていた場合、被験者は少なくとも片方の鼻孔の詰まりが無くなるまで、穏やかに鼻をかんだ。投与する用量が５０Ｕ、７５Ｕ、および１００Ｕ（２回、あるいはそれ以上の噴霧）の場合、両方の鼻孔の通りが良いことを（必要ならば穏やかに鼻をかむことによって）確実にし、噴霧の間には約１０〜２０秒の時間を空けた。被験者は座位で頭を自分の胸に向けて曲げて投与を行った。これにより各投薬において適切に管が浸漬されることを確実にする。このポンプ噴霧器はプライムを行ってから、作動部を鼻孔に挿入した。
【００５３】
被験者はその時に投与をしていない側の鼻孔を閉じた。各噴霧において、被験者または医療介護従事者は、注入器の底部を親指で支えながら注入器の肩部を人差し指と中指を用いてしっかりと押し下げた。噴霧器が使用されると同時に、被験者は穏やかに息を吸い込み、また鼻孔内にしっかりと吸入した。被験者はついで口から息を吐き出した。息の吸い込みと吐き出しとは、必要に応じて繰り返された。各被験者は用量を受け取る前に、この鼻吸入手技を練習した。被験者は投与後の３０分間は鼻をかむことを禁止された。なお、上に記された指示は、キットの一部として被験者に手渡されるであろう印刷物の中に取り入れてもよい。
【００５４】
サンプル採取と測定方法
４ｍｌの静脈血サンプルを、下に記した時間計画に従って、各被験者ボランティアから（静脈内用カニューレを通して）無菌的に吸引した。インスリンのＰＫ（Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ；薬物動態学）を８サンプル：−５，−１，１０，１５，２０，２５，３０，４５分後；グルコースのＰＫを８サンプル：−５，−１，１０，１５，２０，２５，３０，４５分後；治療の間のベッドサイドでのグルコース測定を４サンプル：＊−５，３０，４０，４５分後（＊投与を始めるには−５分後のグルコース数値が１２６ｍｇ／ｄｌより低い必要があった）。
【００５５】
血漿中グルコースの測定のために、血液サンプルをフッ化シュウ酸塩チューブ中に収集した。これらはまとられ、同じ検査回で処理を行った。サンプルをもう１つ、空の（抗血液凝固剤の無い）チューブに収集し、室温で３０分間置いて凝固させた。血清を分離し、ドライアイスの中に直立させ−７０℃で保存していたラベル付のポリプロピレンチューブの中に、二組に分割して分注した。遠心分離後に残った血球は廃棄した。全てのインスリンサンプルは各検査日毎にまとめられ、同じ検査回で処理を行った。
【００５６】
免疫測定法により、各血液サンプルのインスリン濃度とＣペプチド濃度とを測定した。インスリン濃度は０〜４５分に採られたサンプルでのみ測定し、Ｃペプチド濃度は選別目的でのみ測定を行った。検証手順は国際ガイドラインに従って行った。
【００５７】
インスリンの結果
図１Ａにおいて、インスリン用量に対する血漿中インスリンのＣｍａｘまたはＡＵＣがプロットされており、それぞれ３つの異なる用量（２５、５０、および７５Ｕ）のインスリンを同じ鼻孔に対して１回投与した後の、用量−暴露量関係が示されている。暴露量は循環系に吸収されたインスリンの量である。同じ鼻孔に２回目の２５Ｕ（合計用量は５０Ｕになる）を投与することで、２５Ｕの１回用量の投与に比べて２倍以上のＣｍａｘとＡＵＣを達成した。実際のところ、同じ鼻孔に１回用量の時の暴露量に比べて概して約５倍の暴露量を達成していた。３回目の２５Ｕ（合計用量は７５Ｕになる）の投与による増加はおおよそ比例しており、ＣｍａｘおよびＡＵＣの増分は、５０Ｕの投与の暴露量に対してそれぞれ４８％と４１％であった。図１Ｂは、それぞれ３つの異なる用量（２５、５０、および７５Ｕ）を同じ鼻孔に投与した時の、暴露量の増加率をＣｍａｘおよびＡＵＣの測定値から示している。このグラフ中の左側には、予期される暴露量の変化を示してある。つまり例えば、もし２回分の用量、つまり５０Ｕ（２×２５Ｕ）が投与されれば、線形に比例すればＣｍａｘかＡＵＣのどちらかが２倍の上昇になる、と予期される。しかしながら、同じ鼻孔に各２５Ｕの２回噴霧を投与した時（合計用量は５０Ｕになる）、ＣｍａｘあるいはＡＵＣにおいて、２５Ｕの１回噴霧の投与に比べて約５倍の増加が見られた。
【００５８】
図２Ａと図２Ｂにおいて、３つの異なる用量（５０、７５、および１００Ｕ）を２つの鼻孔に対して２回繰り返し投与した場合と、３つの異なる用量（２５、５０、および７５Ｕ）を同じ鼻孔に対して１回投与した場合の、その後の用量−暴露量関係が示されている。２回目の２５Ｕの用量を同じ鼻孔に投与することで、１回の用量の時の暴露量の約５倍の暴露量を達成した事が、図２Ａ中のＣｍａｘおよび図２Ｂ中のＡＵＣに反映されているが、その一方で、２つの異なる鼻孔に連続的に投与した場合、２回目の２５Ｕの用量によって達成されたのは約２倍の暴露量であった。
【００５９】
図３は鼻腔投与したインスリンの吸収における個人間での変動性の高さを示しており、個人間で血漿中インスリンのＣｍａｘに１５倍の開きを示しているのはその変動性の高さを反映している可能性がある。＃１７〜＃２４は異なる試験被験者を指している。同一の投与スケジュールによる２回繰り返し試行間での個人内変動は、より低くなるようであった。以前には、この個人間変動は投与における手技に起因するとされてきた。それには例えば、どの程度深く鼻孔に鼻腔内噴霧装置を挿入したか、被験者が吸気していたか、あるいは鼻腔内噴霧器の挿入の角度、といった手技が挙げられる。しかしながら、この試験によりそれらの可能性は否定され、個人間変動はむしろ、この投与方法によって鼻粘膜を通して治療的有効量のインスリンを吸収することが出来る被験者と、それとは対照的に著しく低い量のインスリンしか吸収しない被験者とが存在することに、起因するであろうことが示された。それ故に、インスリン療法の安全性を向上させるために、インスリン投与に先立って、鼻腔投与後のインスリン吸収量を決定する為の測定を被験者が受けることが重要である。
【実施例２】
【００６０】
グルコースクランプ法は、グルコース取込みへのインスリンの即時的な効果を測定する十分に確立された手法である。この測定方法は、試験しているインスリンの働きを相殺するように調整された速度でグルコースを注入することによって、事前に決定した血中グルコース値（例えば〜１００ｍｇ／ｄｌ）にクランプ、つまり維持することで、行われるものである。それ故に、グルコース注入速度（ＧＩＲ）は、時間単位毎に血漿中から「消失する」グルコース量の、直接的な尺度となる。
【００６１】
このグルコースクランプ法の検査は、以下の手順の従って行われた。
ａ．被験者は前夜の午後１１時から絶食した（水は除く）。
ｂ．被験者が５分間座って休めた後に、バイタルサインを測定した。
ｃ．血管拡張のために両腕を温熱パッドの上に置いた。片方の腕に、静脈カテーテルを肘正中静脈に刺入し、２つの活栓から２０％デキストロースとインスリンとを注入した。もう１つ静脈カテーテルを刺入し、グルコース測定のために、動脈血化した血液を逆行させて採取した。温熱パッドはグルコース注入箇所から取り除いてもよいが、逆行カテーテルの刺入箇所は６５℃に維持した。開始時の血液（−３０分）を、グルコース基準値のサンプルとして採取した。クランプ処置に適切な流量を確実に得るために、３０分後にインスリンの注入を始めた。
ｄ．投与の１時間前に、標準生理食塩水を３０ｃｃ／ｈｒの速度で注入した。
ｅ．血中グルコース測定のために、クランプ処置の間５分毎にサンプルを採取した。状態はＹＳＩ２３００グルコース分析器を用いて分析した。グルコースの注入速度は、必要に応じて調整し、血中グルコースを９０〜１１０ｍｇ／ｄｌの一定水準に維持した。
ｆ．血液サンプルはグルコース値とインスリン値との測定の為に、−１０、−１、３、６、９、１２、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、９０、１２０、１５０、１８０、および２４０分時点で採取した。Ｃペプチドは各投与において、−１０、−１、６０、１２０、および２４０分時点で採取した。
ｇ．２０％デキストロースの注入をさらに１５分続けた。
ｈ．バイタルサインを測定した。
ｉ．被験者に食事を与え、被験者の血中グルコース値が退院前に１００ｍｇ／ｄｌより高くなることを確実にした。
【００６２】
図４は測定したＣｍａｘに対してＧＩＲの最大値をプロットしたものである。インスリンのＣｍａｘが約７０μＵ／ｍｌよりも大きい時に、十分なグルコース代謝が起きることを、データは示している。
【００６３】
本発明の範囲は、上述の部分で明確に図示および記述されてきたものだけに限定されない。本発明の開示中には、特許や様々な出版物などの数多くの参考文献が引用されおり、またそれらについて考察されている。そのような参考文献に対する引用および考察は、単に本発明の記述を明確にする目的で加えたものであり、いずれの参考文献も、ここに記載した本発明の先行技術であると認めて記載したものではない。本明細書において引用および考察した参考文献は、その全体を参照することにより組み込まれるものである。本明細書の記載事項においての変更、改良、およびその他の実施が、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく、本技術分野における通常の当業者により生じるであろう。本発明の一定の実施形態について図示及び記述してきたが、本技術分野の当業者にとって、変形および改良が、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなしに行われうることは明白であろう。以上の記述において説明された事項および添付の図面は、あくまでも例示する為のものであって、それに限定はされない。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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