(57)【要約】本発明は、３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナートのフマル酸水素塩と３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナートのリン酸二水素塩を用いた非常に効果的な虚血性心疾患の治療に関するものである。【特許請求の範囲】
【請求項１】
虚血性心疾患の治療薬の製造に、リン酸二水素塩とフマル酸水素塩からなるグループから選んだ３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナートの塩を用いる方法。
【請求項２】
虚血性心疾患の治療のための３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナートの塩。
【請求項３】
虚血性心疾患が心筋梗塞であることを特徴とする、請求項１または２に記載の３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナートの塩を用いる方法。
【請求項４】
３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナートのフマル酸水素塩であることを特徴とする、請求項１から３のいずれか一つに記載の３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナートの塩。
【請求項５】
３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナートのリン酸二水素塩であることを特徴とする、請求項１から３のいずれか一つに記載の３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナートの塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、虚血性心疾患の治療における３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナートのフマル酸水素塩と、３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナートのリン酸二水素塩の使用方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
心筋梗塞は、長時間の虚血から生じる心筋の不可逆的な壊死の病気である。
【０００３】
心筋梗塞（心臓発作）は、冠動脈疾患による重篤な疾患である。心筋梗塞（ＭＩ）は、長時間の虚血から続発する心筋の不可逆的な壊死である。心臓発作もしくは心筋梗塞は、心臓への血液の供給が突然かつ深刻に減少し、または断絶され、酸素不足から心筋が死に至るという医学的な緊急事態である。毎年百十万人を超える人々が心臓発作（心筋梗塞）に襲われ、そのうちの多くの人にとってその心臓発作が冠動脈疾患の初期症状である。心臓発作は、死を招くほど重症であることもあれば、無症状であることもある。軽い症状しかない人もしくは無症状の人が五人に一人もの数になり、心臓発作は、暫く後に定期的な心電図検査を受けたときにしか発見されない。
【０００４】
心臓発作（心筋梗塞）は、通常、血栓が生じて心臓の動脈を閉塞することによって起こる。動脈は、壁に脂肪が堆積することによって、既に何度も狭められてきている。このような堆積物は、分裂したり広がったりすることで、血流を減少させ、血小板に粘りを生じさせ、更に血栓を生じやすくさせることがある。時には、心臓そのものの内部に血栓が形成されることもあり、それが剥がれて、その心臓に血液を供給する動脈に付着する。これらの動脈のうちの一本にでも痙攣が生じると血流が停止する。
【０００５】
（メルドニウム二水和物という国際一般名称で知られている）３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナートの二水和物は、心臓保護特性のある化合物として知られている。３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナートは、米国特許第４４８１２１８号明細書（ＩＮＳＴ  ＯＲＧＡＮＩＣＨＥＳＫＯＧＯ  ＳＩＮＴＥＺＡ）に１９８４年１１月６日に開示されている。
【０００６】
二水和物としての３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナートが、カルニチンとガンマ・ブチロベタインの濃度、ひいては体内の脂肪酸のベータ酸化速度をも制御するために広く用いられていることは周知である。ＤＡＭＢＲＯＶＡ  Ｍ．，ＬＩＥＰＩＮＳＨ  Ｅ．，ＫＡＬＶＩＮＳＨ  Ｉ．Ｉ．ミルドロネート：カルニチン低減効果を通じての心臓保護作用。心臓血管医学における趨勢、２００２，ｖｏｌ．１２，ｎｏ．６，ｐ．２７５−２７９。
【０００７】
これらの特性により、メルドニウム二水和物は、様々な心臓脈管疾患ならびにその他の組織虚血を伴う病理の治療において、抗虚血薬、ストレス保護薬また心保護薬として、医学上広く適用されている。ＫＡＲＰＯＶ  Ｒ．Ｓ．，ＫＯＳＨＥＬＳＫＡＹＡ  Ｏ．Ａ．，ＶＲＵＢＬＥＶＳＫＹ  Ａ．Ｖ．，ＳＯＫＯＬＯＶ  Ａ．Ａ．，ＴＥＰＬＹＡＫＯＶ  Ａ．Ｔ．，ＳＫＡＲＤＡ  Ｉ．，ＤＺＥＲＶＥ  Ｖ．，ＫＬＩＮＴＳＡＲＥ  Ｄ．，ＶＩＴＯＬＳ  Ａ．，ＫＡＬＮＩＮＳ  Ｕ．，ＫＡＬＶＩＮＳＨ  Ｉ．，ＭＡＴＶＥＹＡ  Ｌ．，ＵＲＢＡＮＥ  Ｄ．。虚血性心疾患と慢性心不全の患者におけるミルドロネートの臨床効果と安全性。Ｋａｒｄｉｏｌｏｇｉｙａ．２０００，ｎｏ．６，ｐ．６９−７４。心臓脈管疾患の治療において３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナートの作用機序は、カルニチン生合成速度の制限ならびに、関連する長鎖脂肪酸の運搬のミトコンドリア膜を介した制限に基づくものである。ＳＩＭＫＨＯＶＩＣＨ  Ｂ．Ｚ．，ＳＨＵＴＥＮＫＯ  Ｚ．Ｖ．，ＭＥＩＲＥＮＡ  Ｄ．Ｖ．，ＫＨＡＧＩ  Ｋ．Ｂ．，ＭＥＺＨＡＰＵＫＥ  Ｒ．Ｊ．，ＭＯＬＯＤＣＨＩＮＡ  Ｔ．Ｎ．，ＫＡＬＶＩＮＳ  Ｉ．Ｊ．，ＬＵＫＥＶＩＣＳ  Ｅ。３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナート（ＴＨＰ）−心臓保護特性を備えた新規なガンマ・ブチロベタイン水酸化酵素阻害薬。Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．１９８８，ｖｏｌ．３７，ｐ．１９５−２０２．，ＫＩＲＩＭＯＴＯ  Ｔ．，ＡＳＡＫＡ  Ｎ．，ＮＡＫＡＮＯ  Ｍ．，ＴＡＪＩＭＡ  Ｋ．，ＭＩＹＡＫＥ  Ｈ．，ＭＡＴＳＵＵＲＡ  Ｎ．。心筋梗塞の後に生じた心不全を抱えるラットにおけるＭＥＴ−８８、ガンマ・ブチロベタイン水酸化酵素阻害薬の薬効。Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．２０００，ｖｏｌ．３９５，ｎｏ．３，ｐ．２１７−２２４。
【０００８】
国際公開第００／００３０６３号Ａ（ＳＩＧＭＡ  ＴＡＵ  ＩＮＤ  ＦＡＲＭＡＣＥＵＴＩ）において２０００年６月２日に開示されたのは、多くの使用者および／または患者において臓器虚血が発症する危険性を減らし、また、特に心循環器系器官を害されるのを予防および／または治療するのに適した組成物をＬ−カルニチンのフマル酸塩とそのアルカノイル誘導体を用いて調製する方法である。Ｌ−カルニチンとメルドニウム二水和物の構造は非常に似ている。しかしながら、メルドニウム二水和物の薬理作用は、Ｌ−カルニチンの効果を相殺するものと考えられてきた。したがって、当業者にとって、逆転写酵素阻害薬をメルドニウム二水和物と組み合わせることが自明であるとは考えられない。
【０００９】
メルドニウムのフマル酸水素塩およびリン酸二水素塩は、欧州特許出願公開第１６６７９６０号明細書（ＪＯＩＮＴ  ＳＴＯＣＫ  ＣＯＭＰＡＮＹ  ＧＲＩＮＤＥＫＳ）ではメルドニウム二水和物よりも更に安定した物質として２００６年６月１４日に開示されている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
どのようなメルドニウム二水和物が虚血性心疾患の治療に用いられるかは周知である。しかし、虚血性心疾患の治療にどのようなメルドニウムの塩が用いられるかのデータはない。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
驚くべきことに、心筋梗塞および／または虚血の治療にフマル酸水素塩メルドニウムを用いたところ、予期せぬ効果を示し、インビボでの心筋梗塞モデルでメルドニウム二水和物を用いた場合よりも効果的であった。薬剤として受容可能な塩類であるメルドニウムのフマル酸水素塩およびリン酸二水素塩は、メルドニウム二水和物と生物学的に同等なものであるからメルドニウム二水和物と同じ医学的効果を示すはずだが、予期せぬことに、メルドニウム二水和物よりも統計的に治療効果が高かった。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下の数々の例により、更に発明を明らかにしていく。
【００１３】
抗虚血性活性
【００１４】
初期重量が３００−３５０ｇの成熟した雄性のウィスターラットで実験を行なった。実験中、ラットたちは８頭ずつの組に分け、標準的な透かし箱に入れられた。餌は、標準化された餌Ｒ７０（ＬＡＢＦＯＲ，Ｌａｃｔａｍｉｎ  ＡＢ，スェーデン）である。室温は２１−２３℃、相対湿度は６５＋−１０％、明暗周期は１２時間ごとである。
【００１５】
実験手順は、欧州共同体の指針および現地の法令並びに政策にしたがって、ラトビア動物保護倫理委員会、食品獣医局の承認を得て行なった。
【００１６】
実験１インビボでの心筋梗塞
【００１７】
体重が約３００ｇのラットを無作為に、それぞれ８頭ずつ４つの組に分けた。第一組に生理食塩水を経口投与し（対照群）、第二組にメルドニウム二水和物１００ｍｇ／ｋｇを経口投与し、第三組にフマル酸水素塩メルドニウム１００ｍｇ／ｋｇを経口投与し、第四組にリン酸二水素塩メルドニウム１００ｍｇ／ｋｇを経口投与し、これを１４日間続けた。
【００１８】
ラットらに、ペントバルビタールナトリウム（６０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐ．）で麻酔をかけた。そのラットらに挿管処置を施し、齧歯目のための呼吸装置（齧歯目のための人工呼吸器７０２５，Ｕｇｏ  Ｂａｓｉｌｅ，イタリア）を用いて毎分５５回の呼吸速度、１５ｍＬ／ｋｇの室内空気で、人工呼吸を行なった。
【００１９】
胸郭を胸骨の左側で切開するが、必要であれば、第四と第五の肋骨を切る。心膜を切開し、５／０のポリプロピレン縫合糸（Ｓｕｒｇｉｐｒｏ  ＩＩ，Ｓｙｎｅｔｕｒｅ）を、冠動脈の左前下行枝の下を通し、そして冠動脈の可逆的閉塞が起こるように小さなプラスチック管に通す。冠動脈の流量は、ＡＤＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社製の超音波流量検出器（ＨＳＥ）ならびにＰｏｗｅｒＬａｂ８／３０システムを用いて測定する。
【００２０】
プラスチックの管を通した糸を締めつけることによって、血管閉塞を行なった。
【００２１】
１２０分間の再灌流を行なった後に、心臓を切り取り、５０ｍｍＨｇの一定の圧力で、（ｍｍｏｌ／ＬでＮａＣｌを１１８、ＣａＣｌ２を２．５２、ＭｇＣｌ２を１．６４、ＮａＨＣＯ３を２４．８８、ＫＨ２ＰＯ４を１．１８、グルコースを１０．０、ＥＤＴＡを０．０５含有する）３７℃でｐＨが７．３−７．５の酸化されたクレブスヘンセレイト緩衝剤を用いて大動脈を介して逆に灌流した。つぎに、１０分後に、冠動脈の左前下行枝を脇にやって、危惧される部分の輪郭を、大動脈根幹部を介して注入した０．１％のメチレンブルー溶液を含むクレブスヘンセレイト緩衝剤を４ｍｌ用いて描いた。心臓を先端から底辺まで、２ｍｍの厚みで横手方向に区分し、１％の塩化トリフェニル・テトラゾリウムを含むリン酸塩緩衝剤（ｐＨ７．４，３７℃）で１０分間培養し、生育可能な組織を赤、壊死組織を白に染めた。その後、右心室を切除して、左心室の薄片の写真をミノルタ７Ｄカメラで撮影した。Ｉｍａｇｅ−Ｐｒｏ  Ｐｌｕｓ４．５．１ソフトウェアを用いて写真をコンピューターの面積測定分析にかけて、危惧される領域（ＡＲ）と壊死領域（ＡＮ）の面積を左心室（ＬＶ）に占める割合の百分率で決定した。つぎに、そのようにして得られた値を用いて、以下の式により、梗塞面積（ＩＳ）を危惧領域の百分率として計算した。
ＩＳ（％）＝（ＡＮ／ＡＲ）×１００
【００２２】
メルドニウム二水和物、フマル酸水素塩メルドニウムおよびリン酸二水素塩メルドニウムの１４日間の投与によるインビボでの心筋梗塞の結果を以下の表１にまとめている。
【００２３】
【表１】
2011506285.tif 000002
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２４】
【特許文献１】米国特許第４４８１２１８号明細書
【特許文献２】国際公開第００／００３０６３号パンフレット
【特許文献３】欧州特許出願公開第１６６７９６０号明細書
【手続補正書】
【提出日】平成21年7月2日(2009.7.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
心筋梗塞の治療薬の製造に、リン酸二水素塩とフマル酸水素塩からなるグループから選んだ３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナートの塩を用いる方法。
【請求項２】
３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナートのフマル酸水素塩であることを特徴とする、請求項１に記載の３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナートの塩。
【請求項３】
３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナートのリン酸二水素塩であることを特徴とする、請求項１に記載の３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナートの塩。
【請求項４】
心筋梗塞の治療のための、リン酸二水素塩とフマル酸水素塩からなるグループから選んだ３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナートの塩。
【請求項５】
３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナートのフマル酸水素塩であることを特徴とする、請求項４に記載の３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナートの塩。
【請求項６】
３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナートのリン酸二水素塩であることを特徴とする、請求項４に記載の３−（２，２，２−トリメチルヒドラジニウム）プロピオナートの塩。
【国際調査報告】
2011506285.tif 000003
2011506285.tif 000004
2011506285.tif 000005