(57)【要約】式（Ｉ）の化合物：式中、Ａは、５、６または７環員を含む（ヘテロ）芳香族または非（ヘテロ）芳香族環であり、Ｚ１、Ｚ２およびＺ３は、互いに独立して、ＣＨ基または窒素原子であり、これら３個の基の少なくとも一つが窒素原子であり、Ｘは、明細書中で定義されたアルキレン鎖であり、Ｒ２は、アリールまたはヘテロアリール基であり、Ｒ１は、明細書中で定義された式（II）の基である。
2011528028.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１１】
2011528028.tif 000013
［式中、
◆  Ａは、酸素、硫黄および窒素から選択される１または２個のヘテロ原子を含んでもよい５、６または７員の、芳香環または非芳香環を表し、前記窒素は、直鎖または分枝鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基により置換されていることができ、このように定義された環Ａは、２個の硫黄原子または２個の酸素原子を含むことができず、環員の一つがＣ＝Ｏ基であってもよいと理解され、
◆  Ｚ１、Ｚ２およびＺ３は、互いに独立して、ＣＨ基または窒素原子を表し、３個の基の少なくとも一つが窒素原子であると理解され、
◆  Ｒ２は、アリールまたはヘテロアリール基を表し、
◆  Ｘは、１〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖のアルキレン鎖を表し、その１または２個の炭素原子は、酸素原子、シクロアルキレン基、アリーレン基、ヘテロアリーレン基またはＳＯ２基で置き換えられてもよく、
◆  Ｒ１は、式（II）：
【化１２】
2011528028.tif 000014
で示される基を表し、式中、
−  Ｙは、基Ｃ＝ＯまたはＣＨ２を表し、
−  Ｒ４は、水素原子を表し、この場合、Ｒ５は、水素原子または基−ＮＲ６Ｒ’６もしくは−ＣＨ２−ＮＲ６Ｒ’６（ここで、Ｒ６およびＲ’６は、各々、同じであっても、異なっていてもよく、互いに独立して、水素原子または一つ以上のアリール、ヘテロアリール、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アリールチオ、ヘテロアリールチオ、ヘテロシクロアルキルもしくはＮＲ９Ｒ’９基で置換されている、直鎖もしくは分枝鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを表し、ここで、
＊  Ｒ９およびＲ’９は、同じであっても、異なっていてもよく、水素、直鎖または分枝鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、直鎖または分枝鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、アリールおよびヘテロアリールから選択されるか、
＊  あるいは、Ｒ９およびＲ’９は、酸素、窒素および硫黄から選択されるヘテロ原子により場合により置換されている飽和または不飽和の、単環または二環の基を形成し、一つ以上の環員は、Ｃ＝Ｏ基を表してもよいか、以下に与えられる複素環の定義に示すように置換されていてもよいことが理解される）を表すか、
あるいは、Ｒ４およびＲ５は、それらを有する２個の炭素原子と一緒になって、ＳＯ２基に対してパラの位置に窒素原子を含む、５または６個の環員を有する、芳香環または非芳香環を形成し、窒素原子に加えて更に１個の窒素原子および／またはＳＯ２基を含んでもよく、そのように定義された環が上記に定義されたとおりのＲ６基により置換されており、
−  Ｒ３は、ハロゲン原子またはＮＯ２、Ｒ７、ＳＯ２−Ｒ８、直鎖もしくは分枝鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルキルまたは直鎖もしくは分枝鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基（ここで、Ｒ７は、前記Ｒ６の定義のいかなる意味であってもよい）を表し、
−  Ｒ８は、アミノ基または場合により一つ以上のハロゲン原子で置換されている直鎖もしくは分枝鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表し、
−  「アリール」は、フェニル、ナフチルまたはビフェニル基を意味し、
−  「ヘテロアリール」は、少なくとも一つの芳香族部分を有し、５〜１０の環員を含み、酸素、硫黄および窒素から選択されるヘテロ原子を１〜３個有していてもよい、例えばフラン、チオフェン、ピロール、イミダゾリン、ピリジン、キノリン、イソキノリン、クロマン、インドール、ベンゾチオフェン、ベンゾフラン、１，３−ベンゾジオキソールおよび２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾジオキシンのような基であるいかなる単環または二環の基をも意味し、
−  「ヘテロシクロアルキル」は、４〜１０の環員を有し、酸素、硫黄および窒素から選択されるヘテロ原子を１〜３個有してもよい単環または二環のいかなる非芳香族基をも意味し、
−  「シクロアルキル」は、４〜１０の環員を有する単環または二環のいかなる非芳香族基をも意味することが理解され、
このように定義されたアリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキルおよびシクロアルキル基は、ヒドロキシまたはアミノ基によって場合により置換されている直鎖または分枝鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、直鎖または分枝鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、ヒドロキシ、カルボキシ、ホルミル、ニトロ、シアノ、アミノ、直鎖または分枝鎖（Ｃ１−Ｃ６）ポリハロアルキル、アルキルオキシカルボニルおよびハロゲン原子から選択される１〜３個の基で置換されていることができ、
−  「アリーレン」、「ヘテロアリーレン」および「シクロアルキレン」は、それぞれ、アルキレン鎖の炭素原子の位置に挿入された、上記定義されたとおりのアリール、ヘテロアリールおよびシクロアルキル基を意味する］
で示される化合物、鏡像異性体およびジアステレオ異性体、ならびにその薬学的に許容される酸または塩基とのその付加塩。
【請求項２】
Ｙが、Ｃ＝Ｏ基を表す、請求項１記載の式（Ｉ）の化合物、その鏡像異性体およびジアステレオ異性体、ならびに薬学的に許容される酸または塩基とのその付加塩。
【請求項３】
Ｒ３が、ＮＯ２基を表す、請求項１記載の式（Ｉ）の化合物、その鏡像異性体およびジアステレオ異性体、ならびに薬学的に許容される酸または塩基とのその付加塩。
【請求項４】
Ｘ−Ｒ２が、場合により一つ以上のハロゲン原子で置換されている（［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル基を表す、請求項１記載の式（Ｉ）の化合物、その鏡像異性体およびジアステレオ異性体、ならびに薬学的に許容される酸または塩基とのその付加塩。
【請求項５】
Ｒ４が、水素原子を表す、請求項１記載の式（Ｉ）の化合物、その鏡像異性体およびジアステレオ異性体、ならびに薬学的に許容される酸または塩基とのその付加塩。
【請求項６】
Ｒ６が、基１−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）−４−（フェニルスルファニル）−ブタン−３−イルを表す、請求項１記載の式（Ｉ）の化合物、その鏡像異性体およびジアステレオ異性体、ならびに薬学的に許容される酸または塩基とのその付加塩。
【請求項７】
Ｒ’６が、水素原子を表す、請求項１記載の式（Ｉ）の化合物、その鏡像異性体およびジアステレオ異性体、ならびに薬学的に許容される酸または塩基とのその付加塩。
【請求項８】
以下：
・  Ｎ−（｛２−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピリド−［４’，３’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル｝カルボニル）−４−（｛（１Ｒ）−３−（ジメチルアミノ）−１−［（フェニルスルファニル）メチル］プロピル｝アミノ）−３−ニトロベンゼンスルホンアミド、
・  Ｎ−（｛８−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−６，７，８，９，９ａ，１０−ヘキサヒドロピリド−［２’，３’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル｝カルボニル）−４−（｛（１Ｒ）−３−（ジメチルアミノ）−１−［（フェニルスルファニル）メチル］プロピル｝アミノ）−３−ニトロベンゼンスルホンアミド、
・  Ｎ−（｛７−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−５，５ａ，６，７，８，９−ヘキサヒドロピリド−［３’，２’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−３−イル｝カルボニル）−４−（｛（１Ｒ）−３−（ジメチルアミノ）−１−［（フェニルスルファニル）メチル］プロピル｝アミノ）−３−ニトロベンゼンスルホンアミド、
・  Ｎ−（｛３−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−２，３，４，４ａ，５，６−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［１，２−ａ］［１，５］ナフチリジン−８−イル｝カルボニル）−４−（｛（１Ｒ）−３−（ジメチルアミノ）−１−［（フェニルスルファニル）メチル］プロピル｝アミノ）−３−ニトロベンゼンスルホンアミド、
・  Ｎ−（｛８−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−６，６ａ，７，８，９，１０−ヘキサヒドロ−５Ｈ−ピラジノ［１，２−ａ］［１，７］ナフチリジン−３−イル｝カルボニル）−４−（｛（１Ｒ）−３−（ジメチルアミノ）−１−［（フェニルスルファニル）メチル］プロピル｝アミノ）−３−ニトロベンゼンスルホンアミド、
・  Ｎ−（｛８−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−６，６ａ，７，８，９，１０−ヘキサヒドロ−５Ｈ−ピラジノ［１，２−ａ］［１，８］ナフチリジン−３−イル｝カルボニル）−４−（｛（１Ｒ）−３−（ジメチルアミノ）−１−［（フェニルスルファニル）メチル］プロピル｝アミノ）−３−ニトロベンゼンスルホンアミド、
である、式（Ｉ）の化合物、及び薬学的に許容される酸または塩基とのその付加塩。
【請求項９】
式（Ｉ）の化合物を製造する方法であって、式（III）：
【化１３】
2011528028.tif 000015
［式中、Ｙは、式（Ｉ）について定義されたとおりであり、Ｃｙは、式（IV）：
【化１４】
2011528028.tif 000016
（式中、Ａ、Ｘ、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３およびＲ２は、式（Ｉ）について定義されたとおりである）で示される縮合した三環系を表し、−Ｙ−Ｃｌ基が、このように定義された三環系のａの位置に結合している］
で示される化合物を出発物質として用いて、式（III）の化合物を、塩基性媒体中、カップリング剤の存在下または非存在下で、式（Ｖ）：
【化１５】
2011528028.tif 000017
（式中、Ｒ３は、式（Ｉ）について定義されたとおりである）
で示される化合物と縮合させ、式（VI）：
【化１６】
2011528028.tif 000018
（式中、Ｃｙ、ＹおよびＲ３は、上記に定義されたとおりである）
で示される化合物を得て、これを、式ＨＮＲ６Ｒ’６（ここで、Ｒ６およびＲ’６は、式（Ｉ）について定義されたとおりである）で示される化合物と縮合させ、式（Ｉ）の化合物の特定の場合である式（Ｉ／ａ）：
【化１７】
2011528028.tif 000019
（式中、Ｃｙ、Ｙ、Ｒ３、Ｒ６およびＲ’６は、前記定義のとおりである）
で示される化合物を得て、これを慣用の分離手法に従って精製してもよく、所望であれば、薬学的に許容される酸または塩基とのその付加塩へと変換し、場合により慣用の分離手法に従ってその異性体に分離することを特徴とする方法。
【請求項１０】
式（Ｉ）の化合物を製造する方法であって、式（III’）：
【化１８】
2011528028.tif 000020
［式中、Ｙは、式（Ｉ）について定義されたとおりであり、Ｃｙは、式（VI）：
【化１９】
2011528028.tif 000021
（式中、Ａ、Ｘ、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３およびＲ２は、式（Ｉ）について定義されたとおりである）で示される縮合した三環系を表し、−Ｙ−ＯＨ基は、このように定義された三環系のａの位置に結合している］
で示される化合物を出発物質として用いて、式（III’）の化合物を、塩基性媒体中、カップリング剤の存在下、式（VII）：
【化２０】
2011528028.tif 000022
（式中、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、式（Ｉ）について定義されたとおりである）
で示される化合物と縮合させ、式（Ｉ）の化合物を得て、これを慣用の分離手法によって精製してもよく、所望であれば、薬学的に許容される酸または塩基とのその付加塩に変換し、場合により慣用の分離手法によってその異性体に分離することを特徴とする方法。
【請求項１１】
請求項１〜８のいずれか１項記載の式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容される酸もしくは塩基とのその付加塩を、一つ以上の薬学的に許容される賦形剤との組み合わせで含む医薬組成物。
【請求項１２】
アポトーシス促進剤としての医薬の製造に用いるための、請求項１１記載の医薬組成物。
【請求項１３】
癌の処置に用いる医薬の製造に用いるための、請求項１１記載の医薬組成物。
【請求項１４】
膀胱癌、脳癌、乳癌、子宮癌、慢性リンパ性白血病、結腸癌、食道癌、肝臓癌、リンパ芽球性白血病、濾泡性リンパ腫、黒色腫、悪性血液疾患、骨髄腫、卵巣癌、非小細胞肺癌、前立腺癌および小細胞肺癌の処置に用いる医薬の製造に用いるための、請求項１１記載の医薬組成物。
【請求項１５】
遺伝毒性剤、有糸分裂毒、代謝拮抗物質、プロテアソーム阻害剤およびキナーゼ阻害剤から選択される抗癌剤との、請求項１〜８のいずれか１項記載の式（Ｉ）の化合物の組み合わせ。
【請求項１６】
癌の処置に用いるための医薬の製造における、請求項１５記載の組み合わせの使用。
【請求項１７】
放射線治療と組み合わせて、癌の処理に用いるための医薬の製造における、請求項１〜８のいずれか１項記載の式（Ｉ）の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規な三環式化合物、それを製造する方法、およびそれを含有する医薬組成物に関するものである。
【０００２】
本発明の化合物は、新規であり、アポトーシスおよび癌腫学の分野で非常に貴重な薬理学的特徴を有する。
【０００３】
アポトーシス、またはプログラムされた細胞死は、胚の発生、および組織ホメオスタシスの維持に決定的に重要な生理学的過程である。
【０００４】
アポトーシス型の細胞死は、核の凝集のような形態学的変化、ＤＮＡの断片化、およびカスパーゼの活性化のような生化学的現象が関与して、それらが細胞の枢要な構造的要素に損傷を引き起こし、そのため、その分解および死を誘導する。アポトーシス過程の調節は、複雑であり、いくつかの細胞内シグナリング経路の活性化または抑制が関与する［Cory, S. et al., Nature Review Cancer, 2002, 2: 647-656］。
【０００５】
アポトーシスの脱制御には、一定の病理学が関与する。アポトーシスの増加は、パーキンソン病、アルツハイマー病および虚血のような神経変性性疾患に関連する。逆に、アポトーシス実行の不足は、癌およびその化学耐性の発達、自己免疫疾患、炎症性疾患およびウイルス感染に有意な役割を果たす。したがって、アポトーシスの欠如は、癌の表現型における特徴の一つである［Hanahan, D. et al., Cell 2000, 100, 57-70］。
【０００６】
本発明の化合物は、新規であることに加えて、アポトーシスを促進する特性を有するため、たとえば癌の処置のような、アポトーシスの欠陥が関与する病理学にそれを利用することが可能になる。
【０００７】
より格別には、本発明は、式（Ｉ）：
【０００８】
【化１】
2011528028.tif 000003
【０００９】
［式中、
◆  Ａは、酸素、硫黄および窒素から選択される１または２個のヘテロ原子を含んでもよい５、６または７員の、芳香環または非芳香環を表し、前記窒素は、直鎖または分枝鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基により置換されていることができ、このように定義された環Ａは、２個の硫黄原子または２個の酸素原子を含むことができず、環員の一つがＣ＝Ｏ基であってもよいと理解され、
◆  Ｚ１、Ｚ２およびＺ３は、互いに独立して、ＣＨ基または窒素原子を表し、３個の基の少なくとも一つが窒素原子であると理解され、
◆  Ｒ２は、アリールまたはヘテロアリール基を表し、
◆  Ｘは、１〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖のアルキレン鎖を表し、その１または２個の炭素原子は、酸素原子、シクロアルキレン基、アリーレン基、ヘテロアリーレン基またはＳＯ２基で置き換えられてもよく、
◆  Ｒ１は、式（II）：
【００１０】
【化２】
2011528028.tif 000004
【００１１】
で示される基を表し、式中、
−  Ｙは、基Ｃ＝ＯまたはＣＨ２を表し、
−  Ｒ４は、水素原子を表し、この場合、Ｒ５は、水素原子または基−ＮＲ６Ｒ’６もしくは−ＣＨ２−ＮＲ６Ｒ’６（ここで、Ｒ６およびＲ’６は、各々、同じであっても、異なっていてもよく、互いに独立して、水素原子または一つ以上のアリール、ヘテロアリール、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アリールチオ、ヘテロアリールチオ、ヘテロシクロアルキルもしくはＮＲ９Ｒ’９基で置換されている、直鎖もしくは分枝鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを表し、ここで、
＊  Ｒ９およびＲ’９は、同じであっても、異なっていてもよく、水素、直鎖または分枝鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、直鎖または分枝鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、アリールおよびヘテロアリールから選択されるか、
＊  あるいは、Ｒ９およびＲ’９は、酸素、窒素および硫黄から選択されるヘテロ原子により場合により置換されている飽和または不飽和の、単環または二環の基を形成し、一つ以上の環員は、Ｃ＝Ｏ基を表してもよいか、以下に与えられる複素環の定義に示すように置換されていてもよいことが理解される）を表すか、
あるいは、Ｒ４およびＲ５は、それらを有する２個の炭素原子と一緒になって、ＳＯ２基に対してパラの位置に窒素原子を含む、５または６個の環員を有する、芳香環または非芳香環を形成し、窒素原子に加えて更に１個の窒素原子および／またはＳＯ２基を含んでもよく、そのように定義された環が上記に定義されたとおりのＲ６基により置換されており、
−  Ｒ３は、ハロゲン原子またはＮＯ２、Ｒ７、ＳＯ２−Ｒ８、直鎖もしくは分枝鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルキルまたは直鎖もしくは分枝鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基（ここで、Ｒ７は、前記Ｒ６の定義のいかなる意味であってもよい）を表し、
−  Ｒ８は、アミノ基または場合により一つ以上のハロゲン原子で置換されている直鎖もしくは分枝鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表し、
−  「アリール」は、フェニル、ナフチルまたはビフェニル基を意味し、
−  「ヘテロアリール」は、少なくとも一つの芳香族部分を有し、５〜１０の環員を含み、酸素、硫黄および窒素から選択されるヘテロ原子を１〜３個有していてもよい、例えばフラン、チオフェン、ピロール、イミダゾリン、ピリジン、キノリン、イソキノリン、クロマン、インドール、ベンゾチオフェン、ベンゾフラン、１，３−ベンゾジオキソールおよび２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾジオキシンのような基であるいかなる単環または二環の基をも意味し、
−  「ヘテロシクロアルキル」は、４〜１０の環員を有し、酸素、硫黄および窒素から選択されるヘテロ原子を１〜３個有してもよい単環または二環のいかなる非芳香族基をも意味し、
−  「シクロアルキル」は、４〜１０の環員を有する単環または二環のいかなる非芳香族基をも意味することが理解され、
このように定義されたアリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキルおよびシクロアルキル基は、ヒドロキシまたはアミノ基によって場合により置換されている直鎖または分枝鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、直鎖または分枝鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、ヒドロキシ、カルボキシ、ホルミル、ニトロ、シアノ、アミノ、直鎖または分枝鎖（Ｃ１−Ｃ６）ポリハロアルキル、アルキルオキシカルボニルおよびハロゲン原子から選択される１〜３個の基で置換されていることができ、
−  「アリーレン」、「ヘテロアリーレン」および「シクロアルキレン」は、それぞれ、アルキレン鎖の炭素原子の位置に挿入された、上記定義されたとおりのアリール、ヘテロアリールおよびシクロアルキル基を意味する］
で示される化合物、その鏡像異性体およびジアステレオ異性体、ならびに薬学的に許容される酸または塩基とのその付加塩に関するものである。
【００１２】
薬学的に許容される酸のうちでも、塩酸、臭化水素酸、硫酸、ホスホン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、乳酸、ピルビン酸、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、フマル酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、アスコルビン酸、シュウ酸、メタンスルホン酸、ショウノウ酸等々を、いかなる限定も意味せずに列挙し得る。
【００１３】
薬学的に許容される塩基のうちでも、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、トリエチルアミン、ｔｅｒｔ−ブチルアミン等々を、いかなる限定も意味せずに列挙し得る。
【００１４】
Ｙは、Ｃ＝Ｏ基を表すのが好都合である。
【００１５】
Ｒ3基は、ＮＯ2であるのが好ましい。
【００１６】
好ましいＸ−Ｒ2基は、一つ以上のハロゲン原子で場合により置換された（［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル基である。
【００１７】
Ｒ4は、水素原子を表すのが好ましい。
【００１８】
Ｒ6基は、基１−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）−４−（フェニルスルファニル）−ブタン−３−イルであるのが好ましい。
【００１９】
Ｒ’6は、水素原子を表すのが好都合である。
【００２０】
はるかに格別には、本発明は、
・  Ｎ−（｛２−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピリド［４’，３’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル｝カルボニル）−４−（｛（１Ｒ）−３−（ジメチルアミノ）−１−［（フェニルスルファニル）メチル］プロピル｝アミノ）−３−ニトロベンゼンスルホンアミド、
・  Ｎ−（｛８−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−６，７，８，９，９ａ，１０−ヘキサヒドロピリド［２’，３’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル｝カルボニル）−４−（｛（１Ｒ）−３−（ジメチルアミノ）−１−［（フェニルスルファニル）メチル］プロピル｝アミノ）−３−ニトロベンゼンスルホンアミド、
・  Ｎ−（｛７−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−５，５ａ，６，７，８，９−ヘキサヒドロピリド［３’，２’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−３−イル｝カルボニル）−４−（｛（１Ｒ）−３−（ジメチルアミノ）−１−［（フェニルスルファニル）メチル］プロピル｝アミノ）−３−ニトロベンゼンスルホンアミド、
・  Ｎ−（｛３−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−２，３，４，４ａ，５，６−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［１，２−ａ］［１，５］ナフチリジン−８−イル｝カルボニル）−４−（｛（１Ｒ）−３−（ジメチルアミノ）−１−［（フェニルスルファニル）メチル］プロピル｝アミノ）−３−ニトロベンゼンスルホンアミド、
・  Ｎ−（｛８−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−６，６ａ，７，８，９，１０−ヘキサヒドロ−５Ｈ−ピラジノ［１，２−ａ］［１，７］ナフチリジン−３−イル｝カルボニル）−４−（｛（１Ｒ）−３−（ジメチルアミノ）−１−［（フェニルスルファニル）メチル］プロピル｝アミノ）−３−ニトロベンゼンスルホンアミド、
・  Ｎ−（｛８−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−６，６ａ，７，８，９，１０−ヘキサヒドロ−５Ｈ−ピラジノ［１，２−ａ］［１，８］ナフチリジン−３−イル｝カルボニル）−４−（｛（１Ｒ）−３−（ジメチルアミノ）−１−［（フェニルスルファニル）メチル］プロピル｝アミノ）−３−ニトロベンゼンスルホンアミド
である式（Ｉ）の化合物に関するものである。
【００２１】
本発明の好適化合物の鏡像異性体およびジアステレオ異性体、ならびに薬学的に許容される酸または塩基とのその付加塩は、本発明の不可欠の部分を形成する。
【００２２】
本発明は、式（Ｉ）の化合物を製造する方法であって、式（III）：
【００２３】
【化３】
2011528028.tif 000005
【００２４】
［式中、Ｙは、式（Ｉ）について定義されたとおりであり、Ｃｙは、式（IV）：
【００２５】
【化４】
2011528028.tif 000006
【００２６】
（式中、Ａ、Ｘ、Ｚ1、Ｚ2、Ｚ3およびＲ2は、式（Ｉ）について定義されたとおりである）で示される縮合三環系を表して、−Ｙ−Ｃｌ基は、このように定義された三環系のａの位置で結合している］
で示される化合物を出発材料として用いて、式（III）の化合物を、塩基性媒体中、カップリング剤の存在または不在下で、式（Ｖ）：
【００２７】
【化５】
2011528028.tif 000007
【００２８】
［式中、Ｒ3は、式（Ｉ）について定義されたとおりである］
で示される化合物と縮合させて、式（VI）：
【００２９】
【化６】
2011528028.tif 000008
【００３０】
［式中、Ｃｙ、ＹおよびＲ3は、上記に定義されたとおりである］
で示される化合物を得て、これを、式ＨＮＲ6Ｒ’6［式中、Ｒ6およびＲ’6は、式（Ｉ）について定義されたとおりである］で示される化合物と縮合させて、式（Ｉ）の化合物の特定の場合である式（Ｉ／ａ）：
【００３１】
【化７】
2011528028.tif 000009
【００３２】
［式中、Ｃｙ、Ｙ、Ｒ3、Ｒ6およびＲ’6は、上記に定義されたとおりである］
で示される化合物を得て、これを、慣用の分離手法に従って精製してもよく、所望であれば、薬学的に許容される酸または塩基とのその付加塩に変換し、場合により、慣用の分離手法に従ってその異性体に分離することを特徴とする方法にも関するものである。
【００３３】
式（III）および（Ｖ）の化合物は、商業的に入手可能であるか、または当業者によって、文献中に記載された慣用の化学反応を用いて得ることができる。
【００３４】
好都合な変化形は、式（Ｉ）の化合物を製造する方法であって、式（III’）：
【００３５】
【化８】
2011528028.tif 000010
【００３６】
［式中、Ｙは、式（Ｉ）について定義されたとおりであり、Ｃｙは、式（IV）：
【００３７】
【化９】
2011528028.tif 000011
【００３８】
（式中、Ａ、Ｘ、Ｚ1、Ｚ2、Ｚ3およびＲ2は、式（Ｉ）について定義されたとおりである）で示される縮合三環系を表して、−Ｙ−ＯＨ基は、このように定義された三環系のａの位置で結合している］
で示される化合物を出発材料として用いて、式（III’）の化合物を、塩基性媒体中、カップリング剤の存在下で、式（VII）：
【００３９】
【化１０】
2011528028.tif 000012
【００４０】
［式中、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5は、式（Ｉ）について定義されたとおりである］
で示される化合物と縮合させて、式（Ｉ）の化合物を得て、これを、慣用の分離手法に従って精製してもよく、所望であれば、薬学的に許容される酸または塩基とのその付加塩に変換し、場合により、慣用の分離手法に従ってその異性体に分離することを特徴とする方法に関するものである。
【００４１】
式（III’）および（VII）の化合物は、商業的に入手可能であるか、または当業者によって、文献中に記載された慣用の化学反応を用いて得ることができる。
【００４２】
本発明の化合物の薬理学的研究から、それらは、アポトーシスを促進する特性を有することが示された。癌性細胞におけるアポトーシスの過程を再活性化できる能力は、癌の処置において治療上の多大な関心が持たれる。より格別には、本発明の化合物は、化学−または放射線−耐性の癌、悪性血液疾患、および小細胞肺癌の処置に役立つと思われる。
【００４３】
想定される癌処置のうちでも、膀胱、脳、胸部および子宮の癌、慢性リンパ性白血病、結腸、食道および肝臓の癌、リンパ芽球性白血病、濾胞性リンパ腫、黒色腫、悪性血液疾患、骨髄腫、卵巣癌、非小細胞肺癌、前立腺癌ならびに小細胞肺癌を、いかなる限定も意味せずに列挙し得る。
【００４４】
本発明は、式（Ｉ）の少なくとも一つの化合物を、それ自体のみか、または薬学的に許容される一つ以上の賦形剤と併せて含む医薬組成物にも関するものである。
【００４５】
本発明の医薬組成物のうちでも、より格別には、経口、非経口、経鼻、経皮もしくは貫皮、直腸、口腔内、眼内または呼吸器投与に適するもの、特に錠剤または糖衣錠、舌下錠、サシェ、パケット、カプセル剤、グロセット剤（glossette）、トローチ剤、坐剤、クリーム剤、軟膏、経皮ゲル、および飲用または注射可能アンプルを列挙し得る。
【００４６】
有用な投与量は、患者の性別、年齢および体重、投与経路、治療適応症の性質、ならびに付随するいかなる処置にも応じて変動し、１回またはそれ以上の投与として２４時間あたり０．０１mg〜１gの範囲にわたる。
【００４７】
更に、本発明は、式（Ｉ）の化合物と、遺伝毒性薬剤、有糸分裂毒、代謝拮抗物質、プロテアソームインヒビターおよびキナーゼインヒビターから選択される抗癌剤との組み合わせに、また癌の処置に用いるための医薬の製造におけるこの種の組み合わせの使用にも関するものである。
【００４８】
本発明の化合物は、癌の処置における放射線療法との組み合わせに用いてもよい。
【００４９】
下記の製造例および実施例は、本発明を例示するが、いかなる方法でもそれを限定しない。
【００５０】
製造例１：２−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピリド［４’，３’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−８−カルボン酸三トリフルオロ酢酸塩
工程Ａ：２−メトキシ−４−メチル−５−ニトロピリジン
ナトリウムメトキシド（メタノール中３０重量％）のメタノール３０ml中の溶液４５mlに、２−クロロ−４−メチル−５−ニトロピリジン（２５g）を４５分にわたって分割して加えた。こうして得られた反応混合物を、４時間、次いで還流にて１時間撹拌してから、氷冷水１Lに注ぎ込んだ。この不均質な混合物を一晩撹拌し、次いでろ過して、乾燥した後に、標記生成物を栗色の褐色固体の形態で得た。
【００５１】
工程Ｂ：３−（２−メトキシ−５−ニトロ−４−ピリジル）−２−オキソプロパン酸エチル
エタノール３０mlに、カリウムｔ−ブトキシド（１５．１４g）、ジエチルエーテル（３００ml）およびシュウ酸ジエチル（１８．４３ml）を加えた。１５分間接触させた後、工程Ａの化合物（２２．６９g）を加え、次いで、こうして得られた反応混合物を、還流にて４時間、そして周囲温度で一晩撹拌した。得られた赤色沈殿を、ろ取し、ジエチルエーテルで洗浄し、次いで水５００mlで希釈した。氷酢酸を、pHが４になるまで加え、次いで、反応混合物を、周囲温度で２時間撹拌し、次いでろ過して、標記生成物をベージュ色の固体の形態で得た。
【００５２】
工程Ｃ：５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボン酸エチル
エタノール３５０ml中の工程Ｂの化合物（２７．８４g）の不均一な溶液に、パラジウム担持炭（５．９g、２０重量％）を加えた。反応混合物を、２４時間水素化し、ついてろ過し、濃縮した。得られた残渣をエーテル／水の混合物に溶解し、次いで、生成物を、エーテルを用いて抽出した。有機相を、飽和炭酸カリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、濃縮して、標記生成物を褐色固体の形態で得た。
【００５３】
工程Ｄ：１−アセチル−５−メトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボン酸エチル
ジクロロメタン６０ml中の工程Ｃの化合物１０gの溶液に、トリエチルアミン（７．５７ml）、４−ジメチルアミノピリジン（５５０mg）および無水酢酸（５．４８ml、滴下）を加えた。反応混合物を、周囲温度で２４時間撹拌し、次いで水で希釈した。生成物を、ジクロロメタンを用いて抽出し、次いで、有機相を、水および飽和塩化ナトリウム水溶液を用いて洗浄した。次いで、硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、濃縮した。こうして得られた残渣のエタノール２００ml中の溶液に、塩化パラジウム（II）（７９８mg）を加えた。次いで、反応混合物を、２４時間水素化した。ろ過および濃縮した後、残渣を、シリカゲル越しのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／酢酸エチル）によって精製して、標記生成物を灰白色固体の形態で得た。
【００５４】
工程Ｅ：５−メトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボン酸エチル
１NＨＣｌエタノール溶液７５ml中の上記工程の保護されたアザインドール（１７．９g）の溶液を、８時間還流下に置いた。周囲温度に復帰させた後、反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和し、次いで、生成物を、酢酸エチルを用いて抽出した。有機相を濃縮し、残渣を次工程に直接用いた。
【００５５】
行程Ｆ：８−メトキシ−２，３，１０，１０ａ−テトラヒドロピリド［４’，３’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−１，４−ジオン
テトラヒドロフラン３００ml中のベンジルオキシカルボニルアミノ酢酸（１７g）の溶液に、ＰＣｌ5（１５g）を０℃で分割して加えた。反応混合物を同じ温度で２時間撹拌し、次いで、テトラヒドロフラン１００mlおよびピリジン５０ml中の工程Ｅの化合物の溶液をこれに滴下した。周囲温度に復帰させた後、反応混合物を１２時間撹拌した。反応混合物を、０℃で滴下して加水分解し、次いで酢酸エチルを用いて抽出した。有機相を、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、濃縮した。シリカ越しにろ過した後、得られた固体をテトラヒドロフラン１００mlおよびメタノール３５０mlに溶解した。次いで、ギ酸アンモニウム（４．８g）を分割して加え、反応混合物を１０時間還流下に置いた。ろ過し、温テトラヒドロフランおよび温ジメチルホルムアミドで洗浄した後、ろ液を濃縮し、冷メタノールに溶解して、標記生成物を白色固体の形態で得た。
【００５６】
工程Ｇ：２−ベンジル−８−メトキシ−２，３，１０，１０ａ−テトラヒドロピリド［４’，３’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−１，４−ジオン
ジメチルホルムアミド５０ml中の水素化ナトリウム（１．８２g）の不均一溶液に、ジメチルホルムアミド４５０ml中の工程Ｆの化合物（７．０９g）の溶液を０℃で２時間にわたって滴下した。４時間にわたって周囲温度に復帰させた後、臭化ベンジル（４．５４ml）を２５分にわたって加えた。反応混合物を１７時間撹拌し、次いで濃縮した。得られた残渣を、酢酸エチルおよび水の混合物に溶解し、生成物を、酢酸エチルを用いて抽出した。有機相を、飽和塩化リチウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、濃縮した。シリカゲル越しのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／酢酸エチル）によって精製した後、標記生成物を、灰白色固体の形態で得た。
【００５７】
工程Ｈ：２−ベンジル−８−メトキシ−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピリド［４’，３’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン
テトラヒドロフラン２２５mlおよびトルエン２２５ml中の工程Ｇの化合物（７．７２g）の溶液に、テトラヒドロフラン（７５ml）中１Mの水素化アルミニウムリチウム溶液を０℃で５０分にわたって滴下した。反応混合物を還流下に６時間放置した。周囲温度に復帰させた後、それぞれ水１０ml、１５％水酸化ナトリウム水溶液１０mlおよび水３０mlを滴下して加えることによって、０℃で加水分解した。周囲温度に復帰させた後、混合物を６時間激しく撹拌し、次いでろ過した。ろ液を濃縮し、酢酸エチルおよび飽和炭酸水素ナトリウム水溶液の混合物に溶解した。次いで、生成物を、酢酸エチルを用いて抽出した。有機相を濃縮した後、残渣を、シリカゲル越しのフラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール）によって精製して、標記生成物を褐色の油の形態で得た。
【００５８】
工程Ｉ：２−ベンジル−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピリド［４’，３’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−８−イルトリフルオロメタンスルホネート
酢酸中３３％の臭化水素酸溶液への工程Ｈの化合物（２．６g）の溶液を、還流にて３時間加熱した。周囲温度に復帰させた後、炭酸水素ナトリウム水溶液を、pH８に達するまで０℃で滴下した。生成物を、ジクロロメタンを用いて抽出し、次いで、有機相を併せ、硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、濃縮した。こうして得られた残渣のピリジン７０ml中の溶液に、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（１３ml）を０℃で５０分にわたって滴下した。反応混合物を１６時間にわたって周囲温度に復帰させ、次いで濃縮した。残渣を、酢酸エチルおよび水の混合物に溶解した。生成物を、酢酸エチルを用いて抽出し、次いで、有機相を、炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、濃縮した。残渣を、シリカゲル越しのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／酢酸エチル）によって精製して、標記生成物を緑色の油の形態で得た。
【００５９】
工程Ｊ：２−ベンジル−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピリド［４’，３’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−８−カルボン酸メチル
ジメチルスルホキシド／メタノール（３／２）の混合物５８ml中の上記工程のトリフラート化合物（２．３g）の溶液に、トリエチルアミン（１．８ml）、１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン（６４３mg）および酢酸パラジウム（II）（１３０．２mg）を加えた。反応混合物を、１５分間アルゴンの、次いで一酸化炭素の発泡に付した。次いで、フラスコを一酸化炭素下で加圧した。反応混合物を、６５℃に加熱し、次いで１８時間攪拌した。濃縮後、残渣を酢酸エチル／水の混合物に溶解した。生成物を酢酸エチルで抽出し、次いで、有機相を、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、濃縮した。ジオキサン中で凍結乾燥した後、残渣を、シリカゲル越しのフラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール）によって精製して、標記生成物を得た。
【００６０】
工程Ｋ：１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピリド［４’，３’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−８−カルボン酸メチル二塩酸塩
１NＨＣｌメタノール溶液３５ml中の上記工程の化合物（１．４９g）の溶液に、水酸化パラジウム（II）担持炭（３００mg、２０重量％）を加えた。反応混合物を、１６時間水素化し、次いでろ過し、濃縮して、標記生成物を褐色固体の形態で得た。
【００６１】
工程Ｌ：２−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピリド［４’，３’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−８−カルボン酸メチル
ジメチルホルムアミド１５ml中の工程Ｋの化合物（１．０１６g）の溶液に、トリエチルアミン（１．８４ml）、４’−クロロ−２−クロロメチルビフェニル（７８７mg）およびヨウ化ナトリウム（５０mg）を加えた。反応混合物を、５０℃で３時間攪拌し、濃縮し、次いで、酢酸エチルおよび飽和炭酸水素ナトリウム水溶液の混合物に溶解した。酢酸エチルを用いて抽出した後、有機相を、飽和塩化リチウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、濃縮した。残渣を、シリカゲル越しのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／酢酸エチル）によって精製して、標記生成物をオフホワイトの固体の形態で得た。
【００６２】
工程Ｍ：２−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピリド［４’，３’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−８−カルボン酸三トリフルオロ酢酸塩
ジオキサン／水（４／１）の混合物中の上記工程のエステル化合物（１．０８５g）の懸濁液に、水酸化リチウム（５２５mg）を加えた。反応混合物を、周囲温度で２４時間攪拌し、次いで濃縮し、水および１N塩酸水溶液（１／１）の混合物２０mlに溶解した。反応混合物を、周囲温度で２時間攪拌し、次いで濃縮した。残渣を、Ｏａｓｉｓなるカートリッジ（水／アセトニトリル／トリフルオロ酢酸）上で精製し、アセトニトリルおよび水の混合物中で凍結乾燥して、標記生成物を得た。
【００６３】
製造例２：８−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−６，７，８，９，９ａ，１０−ヘキサヒドロピリド［２’，３’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−カルボン酸トリフルオロ酢酸塩
手順は、製造例１の工程Ａ〜Ｍのとおりであるが、工程Ａでの２−クロロ−４−メチル−５−ニトロピリジンを６―クロロ−２−メチル−３−ニトロピリジンに置き換えた。
【００６４】
製造例３：７−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−５、５ａ，６，７，８，９−ヘキサヒドロピリド［３’，２’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−３−カルボン酸トリフルオロ酢酸塩
工程Ａ：３−メチル−２−ピリジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
ヘキサン４００ml中のジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボナート（１６１．５g）の溶液に、酢酸エチル５０ml中の３−メチル−２−アミノピリジン（５０g）の溶液を２時間にわたって加えた。反応混合物を、還流にて１時間加熱し、次いでヘキサン５５０mlで希釈し、周囲温度で２時間攪拌した。沈殿をろ取して、標記生成物を白色固体の形態で得た。
【００６５】
工程Ｂ：３−｛２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３−ピリジル｝−２−オキソプロパン酸エチル
テトラヒドロフラン２００ml中の上記工程の化合物（１０g）の溶液に、ｎ−ブチルリチウムを５℃以下の温度で加えた。次いで、反応混合物を、０℃で１時間１５分攪拌してから、−３℃以下の温度で、カニューレによって、テトラヒドロフラン５０ml中のシュウ酸ジエチルの溶液（１４ml）に移した。
【００６６】
工程Ｃ：１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボン酸エチル
上記工程の反応混合物を、周囲温度で２時間１５分攪拌し、次いで５N塩酸溶液３０ml中に１０℃を越えない温度で静かに注ぎ込んだ。得られた溶液を、還流下に２時間放置した。周囲温度に復帰させた後、５N水酸化ナトリウム溶液を用いて、pHが３になるまで中和した。生成物を、エーテルを用いて抽出し、次いで、有機相を、飽和炭酸カリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、濃縮した。残渣をメタノールに溶解して、標記生成物をベージュ色の固体の形態で得た。
【００６７】
工程Ｄ：１−アセチル−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボン酸エチル
製造例１の工程Ｄに記載した手順を、上記工程で得られたアザインドールに適用した。標記生成物は、最終的には明緑色の固体の形態となった。
【００６８】
工程Ｅ：５，５ａ，７，８−テトラヒドロピリド［３’，２’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−６，９−ジオン
製造例１の工程Ｅに記載した手順を、上記工程で得られたアザインドリンに適用した。標記生成物は、最終的には白色固体の形態となった。
【００６９】
工程Ｆ：７−ベンジル−５，５ａ，７，８−テトラヒドロピリド［３’，２’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−６，９−ジオン
製造例１の工程Ｆに記載した手順を、上記工程の化合物に適用した。標記生成物は、最終的には淡黄色の固体の形態となった。
【００７０】
工程Ｇ：７−ベンジル−５，５ａ，６，７，８，９−ヘキサヒドロピリド［３’，２’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン
製造例１の工程Ｇに記載した手順を、上記工程の化合物に適用した。標記生成物は、最終的には褐色の油の形態となった。
【００７１】
工程Ｈ：７−ベンジル−３−ブロモ−５，５ａ，６，７，８，９−ヘキサヒドロピリド［３’，２’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン
ジメチルホルムアミド５０ml中の工程Ｇの化合物の溶液に、ジメチルホルムアミド３０ml中のＮ−ブロモスクシンイミド（７８５mg）の溶液を０℃で４５分にわたって滴下した。反応混合物を、同じ温度で２．５時間撹拌してから、加水分解した。次いで、生成物を酢酸エチルを用いて抽出した。有機相を、飽和塩化リチウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、濃縮した。残渣を、シリカゲル越しのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／酢酸エチル）によって精製して、標記生成物を褐色の油の形態で得た。
【００７２】
工程Ｉ：７−ベンジル−５，５ａ，６，７，８，９−ヘキサヒドロピリド［３’，２’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−３−カルボン酸メチル
製造例１の工程Ｊに記載した手順を、上記工程の化合物に適用した。標記生成物は、最終的には褐色の油の形態となった。
【００７３】
工程Ｊ：５，５ａ，６，７，８，９−ヘキサヒドロピリド［３’，２’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−３−カルボン酸メチル二塩酸塩
製造例１の工程Ｋに記載した手順を、上記工程の化合物に適用した。標記生成物は、最終的には褐色の油の形態となった。
【００７４】
工程Ｋ：７−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−５，５ａ，６，７，８，９−ヘキサヒドロピリド［３’，２’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−３−カルボン酸メチル
製造例１の工程Ｌに記載した手順を、上記工程の化合物に適用した。標記生成物は、最終的には白色固体の形態となった。
【００７５】
工程Ｌ：７−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−５，５ａ，６，７，８，９−ヘキサヒドロピリド［３’，２’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−３−カルボン酸トリフルオロ酢酸塩
製造例１の工程Ｍに記載した手順を、上記工程の化合物に適用した。標記生成物は、最終的には白色固体の形態となった。
【００７６】
製造例４：３−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−２，３，４，４ａ，５，６−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［１，２−ａ］［１，５］ナフチリジン−８−カルボン酸トリフルオロ酢酸塩
製造例１の工程Ｆ〜Ｍに記載した操作を繰り返したが、工程Ｆで、工程Ｅの化合物を６−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ［１，５］ナフチリジン−２−カルボン酸メチルに置き換えた。
【００７７】
製造例５：８−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−６，６ａ，７，８，９，１０−ヘキサヒドロ−５Ｈ−ピラジノ［１，２−ａ］［１，７］ナフチリジン−３−カルボン酸トリフルオロ酢酸塩
製造例１の工程Ｆ〜Ｍに記載した操作を繰り返したが、工程Ｆで、工程Ｅの化合物を６−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ［１，７］ナフチリジン−２−カルボン酸メチルに置き換えた。
【００７８】
製造例６：８−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−６，６ａ，７，８，９，１０−ヘキサヒドロ−５Ｈ−ピラジノ［１，２−ａ］［１，８］ナフチリジン−３−カルボン酸トリフルオロ酢酸塩
製造例１の工程Ｆ〜Ｍに記載した操作を繰り返したが、工程Ｆで、工程Ｅの化合物を６−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ［１，８］ナフチリジン−２−カルボン酸メチルに置き換えた。
【００７９】
実施例１：Ｎ−（｛２−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピリド［４’，３’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル｝カルボニル）−４−（｛（１Ｒ）−３−（ジメチルアミノ）−１−［（フェニルスルファニル）メチル］プロピル｝アミノ）−３−ニトロベンゼンスルホンアミド三塩酸塩
工程Ａ：Ｎ−（｛２−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピリド［４’，３’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル｝カルボニル）−４−（｛（１Ｒ）−３−（ジメチルアミノ）−１−［（フェニルスルファニル）メチル］プロピル｝アミノ）−３−ニトロベンゼンスルホンアミド
ジクロロメタン１０ml中の製造例１の化合物（３４６mg）の溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（３００μl）、４−（｛（１Ｒ）−３−（ジメチルアミノ）−１−［（フェニルスルファニル）メチル］プロピル｝アミノ）−３−ニトロベンゼンスルホンアミド（１９１mg）、Ｎ−エチル−Ｎ’−３−ジメチルアミノプロピルカルボジイミン（１２１mg）および４−ジメチルアミノピリジン（７７mg、０．６３mmol、１．４当量）を加えた。反応混合物を周囲温度で６日間攪拌し、次いで、飽和塩化アンモニウム水溶液を用いて加水分解した。生成物を、酢酸エチルを用いて抽出した。有機相を、硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、濃縮した。残渣を、シリカゲル越しのフラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタン／アンモニアメタノール溶液）によって精製して、標記生成物を淡黄色の固体の形態で得た。
【００８０】
工程Ｂ：Ｎ−（｛２−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピリド［４’，３’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル｝カルボニル）−４−（｛（１Ｒ）−３−（ジメチルアミノ）−１−［（フェニルスルファニル）メチル］プロピル｝アミノ）−３−ニトロベンゼンスルホンアミド三塩酸塩
工程Ａの化合物を、ジクロロメタン４mlに溶解し、次いで１NＨＣｌエーテル溶液（８０５μl）を加えた。反応混合物を、周囲温度で２時間攪拌し、濃縮して、標記生成物を、凍結乾燥した後に、黄色の固体の形態で得た。
元素微量分析：
％Ｃ          ％Ｈ        ％Ｎ        ％Ｓ        ％Ｃｌ
計算値    ５０．６６  ５．５６      ９．８５    ６．４４  １２．８０
実測値    ５０．４３  ５．３８    １０．０２    ６．３７  １２．９３
【００８１】
実施例２：Ｎ−（｛８−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−６，７，８，９，９ａ，１０−ヘキサヒドロピリド［２’，３’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２−イル｝カルボニル）−４−（｛（１Ｒ）−３−（ジメチルアミノ）−１−［（フェニルスルファニル）メチル］プロピル｝アミノ）−３−ニトロベンゼンスルホンアミド二塩酸塩
手順は実施例１の工程ＡおよびＢのとおりであるが、工程Ａで、製造例１の化合物を製造例２の化合物に置き換えた。
元素微量分析：
％Ｃ          ％Ｈ        ％Ｎ        ％Ｓ        ％Ｃｌ
計算値    ５４．４０    ５．２７    １０．５７  ６．９１    １２．２３
実測値    ５４．７３    ５．２１    １０．４５  ６．４５    １２．４９
【００８２】
実施例３：Ｎ−（｛７−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−５，５ａ，６，７，８，９−ヘキサヒドロピリド［３’，２’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−３−イル｝カルボニル）−４−（｛（１Ｒ）−３−（ジメチルアミノ）−１−［（フェニルスルファニル）メチル］プロピル｝アミノ）−３−ニトロベンゼンスルホンアミド三塩酸塩
手順は実施例１の工程ＡおよびＢのとおりであるが、工程Ａで、製造例１の化合物を製造例３の化合物に置き換えた。
元素微量分析：
％Ｃ          ％Ｈ        ％Ｎ        ％Ｓ        ％Ｃｌ
計算値    ５３．５０    ５．２１    １０．４０  ６．８０    １３．９１実測値    ５３．８２    ５．２４    １０．２０  ６．７４    １４．１３
【００８３】
実施例４：Ｎ−（｛３−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−２，３，４，４ａ，５，６−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［１，２−ａ］［１，５］ナフチリジン−８−イル｝カルボニル）−４−（｛（１Ｒ）−３−（ジメチルアミノ）−１−［（フェニルスルファニル）メチル］プロピル｝アミノ）−３−ニトロベンゼンスルホンアミド二塩酸塩
手順は実施例１の工程ＡおよびＢのとおりであるが、工程Ａで、製造例１の化合物を製造例４の化合物に置き換えた。
【００８４】
実施例５：Ｎ−（｛８−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−６，６ａ，７，８，９，１０−ヘキサヒドロ−５Ｈ−ピラジノ［１，２−ａ］［１，７］ナフチリジン−３−イル｝カルボニル）−４−（｛（１Ｒ）−３−（ジメチルアミノ）−１−［（フェニルスルファニル）メチル］プロピル｝アミノ）−３−ニトロベンゼンスルホンアミド二塩酸塩
手順は実施例１の工程ＡおよびＢのとおりであるが、工程Ａで、製造例１の化合物を製造例５の化合物に置き換えた。
【００８５】
実施例６：Ｎ−（｛８−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−６，６ａ，７，８，９，１０−ヘキサヒドロ−５Ｈ−ピラジノ［１，２−ａ］［１，８］ナフチリジン−３−イル｝カルボニル）−４−（｛（１Ｒ）−３−（ジメチルアミノ）−１−［（フェニルスルファニル）メチル］プロピル｝アミノ）−３−ニトロベンゼンスルホンアミド二塩酸塩
手順は実施例１の工程ＡおよびＢのとおりであるが、工程Ａで、製造例１の化合物を製造例６の化合物に置き換えた。
【００８６】
薬理学的研究
実施例Ａ：インビトロでのカスパーゼ活性の誘導
この研究は、下記のヒト腫瘍細胞系で実施した：１小細胞肺癌、Ｈ１４６
【００８７】
この細胞系を、インキュベーター内で、３７℃、５％ＣＯ2の存在下で培養した。より具体的には、Ｈ１４６細胞を、１０％ウシ胎児血清、２mMグルタミン、５０単位/mlのペニシリン、５０μg/mlのストレプトマイシン、および１０mMＨＥＰＥＳ緩衝液（pH＝７．４）を含有する完全ＲＰＭＩ１６４０培地で培養した。細胞を６穴プレート上に散布し、試験化合物に６時間接触させた。次いで、細胞を採集し、溶解し、細胞溶解物中のカスパーゼ活性を測定した。この酵素測定は、蛍光発生性分解生成物（Pharmacia）の出現を測定することによって実施した。
【００８８】
結果から、本発明の化合物は、強力なアポトーシス誘導物質であって、試験した腫瘍細胞系でカスパーゼ３活性を測定することによって評価されることが示された。例示するならば、実施例１〜３の化合物は、１０μMで、それぞれ、１５，３９５、９，９４８および１７，７７６RFU（相対蛍光単位）の活性を示した。
【００８９】
実施例Ｂ：インビトロでの細胞毒性
実施例Ａに示した腫瘍系について、細胞毒性の研究を実施した。細胞を、マイクロプレート上に散布し、試験化合物に４８時間接触させた。次いで、細胞生存率を、比色分析法である微量培養テトラゾリウムアッセイ（Microculture Tetrazolium Assay［Cancer Res. 1987, 47:939-942］）によって定量した。
【００９０】
ＩＣ50（化合物の、細胞生存率を５０％阻害する濃度）で表した結果から、本発明の化合物は、細胞毒性を有することが示された。
【００９１】
実施例Ｃ：インビボでのカスパーゼ活性の誘導
本発明の化合物がカスパーゼ３を活性化できる能力を、Ｈ１４６なる小細胞肺癌細胞の異種移植片モデルで評価した。５×１０6個のＨ１４６細胞を、免疫抑制されたマウス（ＮＯＤ  ＳＣＩＤ系）に皮下移植した。移植の２５〜３０日後に、試験化合物を、Ｔｗｅｅｎ８０／水の混合物として腹腔内経路によって注射した。処置の１６時間後に、腫瘍塊を回収し、溶解し、腫瘍溶解物中のカスパーゼ３活性を測定した。
【００９２】
得られた結果から、本発明の化合物は、インビボで、Ｈ１４６なる腫瘍細胞系にアポトーシスを誘導できることが示された。
【００９３】
実施例Ｄ：薬学的組成物：錠剤
Ｎ−（｛２−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピリド［４’，３’：４，５］ピロロ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル｝カルボニル）−４−（｛（１Ｒ）−３−（ジメチルアミノ）−１−［（フェニルスルファニル）メチル］プロピル｝アミノ）−３−ニトロベンゼンスルホンアミド三塩酸塩（実施例１）５mgの用量を含有する１，０００錠の処方
実施例１の化合物．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．  ５g
コムギでん粉．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．２０g
トウモロコシでん粉．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．２０g
乳糖．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．３０g
ステアリン酸マグネシウム．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．  ２g
シリカ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．  １g
ヒドロキシプロピルセルロース．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．  ２g
【国際調査報告】
2011528028.tif 000023
2011528028.tif 000024
2011528028.tif 000025
2011528028.tif 000026