(57)【要約】本発明は、式（Ｉ）を有する新しい化合物、これら化合物を含む医薬組成物、それらの製造方法、および体重増加に関連した状態、２型糖尿病および異常脂肪血症に対する薬剤の製造におけるレプチン受容体モジュレーター模擬体としてのこれら化合物の使用に関する。2011506294.tif 000069
2011506294.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2011506294.tif 000061
［式中、Ｘは、Ｏ、Ｓ、Ｎ（Ｒ１）およびＣＨ（Ｒ２）より選択され、但し、Ｘを含有する環は、３−ピロリジンではないという条件付きであり；
Ｙは、ＣＨ２、ＯまたはＮ（Ｒ５）であり；
Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１−６−アルキル（未置換、またはハロゲン、ヒドロキシ、シアノおよびＣ１−６−アルコキシより独立して選択される一つまたはそれを超える置換基で置換されていてよい）およびＣ１−６−アシル（未置換、またはハロゲン、ヒドロキシおよびＣ１−６−アルコキシより独立して選択される一つまたはそれを超える置換基で置換されていてよい）より選択され；
Ｒ２およびＲ３は、独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−６−アルキル（未置換、またはハロゲン、ヒドロキシおよびＣ１−６−アルコキシより独立して選択される一つまたはそれを超える置換基で置換されていてよい）およびＣ１−６−アルコキシ（未置換、またはハロゲン、ヒドロキシおよびＣ１−６−アルコキシより独立して選択される一つまたはそれを超える置換基で置換されていてよい）より選択され；
Ｒ４は、独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、ＣＦ３、Ｃ１−６−アルキルおよびＣ１−６−アルコキシより選択され；
Ｒ５は、水素またはＣ１−４−アルキルであり；
ａ、ｂおよびｃは、各々独立して、１、２または３であり；
ｄは、０、１または２であり；
ｅは、１、２または３であり；そして
ｆおよびｇは、各々独立して、０、１または２である］
を有する化合物、またはその薬学的に許容しうる塩、溶媒和化合物、水和物、幾何異性体、互変異性体、光学異性体若しくはＮ−オキシド。
【請求項２】
Ｙが、Ｏである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｘが、Ｏ、Ｎ（Ｒ１）またはＣＨ（Ｒ２）である、請求項１または請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１が、水素、メチル、エチルまたはアセチルである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ２およびＲ３が、独立して、水素、メチルおよびエチルより選択される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ４が、独立して、水素、フルオロ、クロロ、メチルおよびエチルより選択される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項７】
化合物が、式（Ｉ’）
【化２】
2011506294.tif 000062
［式中、Ｘ１およびＸ２は、各々独立して、Ｏ、Ｎ（Ｒ１）およびＣＨ（Ｒ２）より選択され、但し、Ｘ１およびＸ２の少なくとも一つは、Ｎ（Ｒ１）であるという条件付きであり；
Ｒ１、Ｒ２およびＲ４は、請求項１に定義の通りであり；
ｃは、１、２または３であり；
ｅは、１または２であり；そして
ｇは、０または１である］
を有する、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項８】
化合物が、
［（３Ｒ）−１−メチルピペリジン−３−イル］メチル４−（４−メチルフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
［（３Ｓ）−１−メチルピペリジン−３−イル］メチル４−（４−メチルフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
［（２Ｓ）−１，４−ジメチルピペラジン−２−イル］メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート；
［（２Ｒ）−１，４−ジメチルピペラジン−２−イル］メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート；
［（２Ｓ）−１，４−ジメチルピペラジン−２−イル］メチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
［（２Ｒ）−１，４−ジメチルピペラジン−２−イル］メチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
４−フェニルピペラジン−１−カルボン酸２−（１，４−ジメチルピペラジン−２−イル）エチルエステル；
［（２Ｓ）−１，４−ジメチルピペラジン−２−イル］メチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
［（２Ｓ）−４−メチルピペラジン−２−イル］メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート；
（１，４−ジメチルピペラジン−２−イル）メチル４−ベンジルピペラジン−１−カルボキシレート；
モルホリン−２−イルメチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート；
（２Ｓ）−モルホリン−２−イルメチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート；
（２Ｒ）−モルホリン−２−イルメチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート；
（４−メチルモルホリン−２−イル）メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート；
［（２Ｓ）−４−メチルモルホリン−２−イル］メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート；
［（２Ｒ）−４−メチルモルホリン−２−イル］メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート；
［（２Ｓ）−４−メチルモルホリン−２−イル］メチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
［（２Ｒ）−４−メチルモルホリン−２−イル］メチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
［（２Ｓ）−４−メチルモルホリン−２−イル］メチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
［（２Ｒ）−４−メチルモルホリン−２−イル］メチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
モルホリン−２−イルメチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
（２Ｓ）−モルホリン−２−イルメチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
（２Ｒ）−モルホリン−２−イルメチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
（４−メチルモルホリン−２−イル）メチル４−（４−クロロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
（４−メチルモルホリン−２−イル）メチル４−（４−フルオロベンジル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
（４−アセチルモルホリン−２−イル）メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート；
モルホリン−３−イルメチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
（３Ｓ）−モルホリン−３−イルメチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
（３Ｒ）−モルホリン−３−イルメチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
（４−メチルモルホリン−３−イル）メチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
モルホリン−３−イルメチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート；
モルホリン−３−イルメチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
（４−メチルモルホリン−３−イル）メチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
（２Ｓ）−モルホリン−２−イルメチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；および
（２Ｒ）−モルホリン−２−イルメチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート
より選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
医薬製剤であって、活性成分としての請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物を、薬学的に許容しうる希釈剤または担体との組合せで含む医薬製剤。
【請求項１０】
療法に用いるための、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１１】
体重増加に関連した状態または疾患の処置または予防に用いるための、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１２】
状態または疾患が、肥満症、２型糖尿病、脂肪異栄養症、インスリン抵抗性、代謝症候群、高血糖症、高インスリン血症、異常脂肪血症、肝脂肪症、過食症、高血圧症、高トリグリセリド血症、不妊症、体重増加に関連した皮膚障害、または黄斑変性である、請求項１１に記載の化合物。
【請求項１３】
重症体重減少、月経困難症、無月経、女性不妊症または免疫不全の処置または予防に、または創傷治癒の処置に用いるための、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１４】
炎症性状態または疾患、肥満症および過剰血漿レプチンに関連した低レベル炎症、アテローム性動脈硬化症、１型または２型糖尿病の巨大または微小血管合併症、網膜症、腎症、自律神経性ニューロパシー、または虚血またはアテローム性動脈硬化症によって引き起こされる血管損傷の処置または予防に用いるための、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１５】
血管新生の阻害に用いるための、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１６】
体重増加に関連した状態または疾患の処置または予防用の薬剤の製造のための、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項１７】
状態または疾患が、肥満症、２型糖尿病、脂肪異栄養症、インスリン抵抗性、代謝症候群、高血糖症、高インスリン血症、異常脂肪血症、肝脂肪症、過食症、高血圧症、高トリグリセリド血症、不妊症、体重増加に関連した皮膚障害、または黄斑変性である、請求項１６に記載の使用。
【請求項１８】
重症体重減少、月経困難症、無月経、女性不妊症または免疫不全の処置または予防用、または創傷治癒の処置用の薬剤の製造のための、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項１９】
炎症性状態または疾患、肥満症および過剰血漿レプチンに関連した低レベル炎症、アテローム性動脈硬化症、１型または２型糖尿病の巨大または微小血管合併症、網膜症、腎症、自律神経性ニューロパシー、または虚血またはアテローム性動脈硬化症によって引き起こされる血管損傷の処置または予防用の薬剤の製造のための、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項２０】
血管新生の阻害に用いるための薬剤の製造のための、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項２１】
体重増加に関連した状態または疾患の処置または予防の方法であって、このような処置を必要としているヒトを含めた哺乳動物に、有効量の請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物を投与することを含む方法。
【請求項２２】
疾患または状態が、肥満症、２型糖尿病、脂肪異栄養症、インスリン抵抗性、代謝症候群、高血糖症、高インスリン血症、異常脂肪血症、肝脂肪症、過食症、高血圧症、高トリグリセリド血症、不妊症、体重増加に関連した皮膚障害、または黄斑変性である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
重症体重減少、月経困難症、無月経、女性不妊症または免疫不全の処置または予防、または創傷治癒の処置の方法であって、このような処置を必要としているヒトを含めた哺乳動物に、有効量の請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物を投与することを含む方法。
【請求項２４】
炎症性状態または疾患、肥満症および過剰血漿レプチンに関連した低レベル炎症、アテローム性動脈硬化症、１型または２型糖尿病の巨大または微小血管合併症、網膜症、腎症、自律神経性ニューロパシー、または虚血またはアテローム性動脈硬化症によって引き起こされる血管損傷の処置または予防の方法であって、このような処置を必要としているヒトを含めた哺乳動物に、有効量の請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物を投与することを含む方法。
【請求項２５】
血管新生の阻害方法であって、このような処置を必要としているヒトを含めた哺乳動物に、有効量の請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物を投与することを含む方法。
【請求項２６】
請求項１に記載の化合物の製造方法であって、
（ａ）式（II）：
【化３】
2011506294.tif 000063
（式中、Ｒ３、Ｒ４、ｂ、ｃ、ｆおよびｇは、請求項１に定義の通りである）
を有する化合物と、４−ニトロフェニルクロロホルメートまたはビス−（４−ニトロフェニル）カーボネートとを、適する塩基（ＤＩＰＥＡまたはＮＥｔ３など）の存在下、適する溶媒（ＤＣＭまたはＴＨＦなど）中において−１０〜４０℃で反応させて、式（III）：
【化４】
2011506294.tif 000064
を有する化合物を形成すること、
（ｂ）式（III）の化合物と、式（IV）：
【化５】
2011506294.tif 000065
（式中、Ｘ、Ｒ１、Ｒ２、ａ、ｄおよびｅは、請求項１に定義の通りである）
を有する化合物とを、適する塩基（ＮａＨまたはＮＭＭなど）の存在下、適する溶媒（ＴＨＦまたはＤＣＭなど）中において−１０〜４０℃で反応させて、式（Ｉ）の化合物を得ること；および
（ｃ）場合により、１回または数回の工程で、式（Ｉ）の化合物を式（Ｉ）の別の化合物へと変換すること
を含む方法。
【請求項２７】
請求項１に記載の化合物の製造方法であって、
（ａ）式（IV）：
【化６】
2011506294.tif 000066
（式中、Ｘ、Ｒ１、Ｒ２、ａ、ｄおよびｅは、請求項１に定義の通りである）
を有する化合物と、４−ニトロフェニルクロロホルメートまたはビス−（４−ニトロフェニル）カーボネートとを、適する塩基（ＤＩＰＥＡまたはＮＭＭなど）の存在下、適する溶媒（ＤＣＭなど）中において−１０〜４０℃で反応させて、式（Ｖ）：
【化７】
2011506294.tif 000067
を有する化合物を形成すること、
（ｂ）式（Ｖ）の化合物と、式（II）：
【化８】
2011506294.tif 000068
（式中、Ｒ３、Ｒ４、ｂ、ｃ、ｆおよびｇは、請求項１に定義の通りである）
を有する化合物とを、適する塩基（ＤＩＰＥＡなど）の存在下、適する溶媒（ＤＣＭまたはＤＭＦなど）中において−１０〜４０℃で反応させて、式（Ｉ）の化合物を得ること；および
（ｃ）場合により、１回または数回の工程で、式（Ｉ）の化合物を式（Ｉ）の別の化合物へと変換すること
を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新しいピペラジン誘導体、これら化合物を含む医薬組成物、それらの製造方法、および体重増加に関連した状態、２型糖尿病および異常脂肪血症に対する薬剤の製造におけるレプチン受容体モジュレーター模擬体としてのこれら化合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
肥満症の有病率は、産業化社会において増加している。典型的に、第一線の処置は、患者に、食餌の脂肪含有量を減少させることおよび身体活動を増加させることなどの食餌およびライフスタイルへの忠告を与えることである。しかしながら、若干の患者は、更に、前述の食餌およびライフスタイル変化に適応させることによって得られた有益な結果を維持する薬物療法を受ける必要があるかもしれない。
【０００３】
レプチンは、脂肪細胞中で合成されるホルモンであり、視床下部において作用して、食物摂取および体重を減少させると考えられる（例えば、Bryson, J. M. (2000) Diabetes, Obesity and Metabolism 2: 83-89 を参照されたい）。
【０００４】
肥満したヒトの場合、脳脊髄液中のレプチンの比率対循環性レプチンの比率は減少するということが分かった（Koistinen et al., (1998) Eur. J. Clin. Invest. 28: 894-897）。これは、脳中へのレプチン輸送能力が、肥満状態では欠損しているということを示唆している。実際に、肥満症の動物モデル（ＮＺＯマウスおよび Koletsky ラット）において、レプチン輸送の欠損は、低減した脳レプチン含量を生じることが分かった（Kastin, A. J. (1999) Peptides 20: 1449-1453; Banks, W. A. et al., (2002) Brain Res. 950: 130-136）。食餌性肥満齧歯類動物に関する研究において（ヒト肥満症に一層よく似ていると考えられる齧歯類動物モデル、例えば、Van Heek et al. (1997) J. Clin. Invest. 99: 385-390 を参照されたい）、末梢投与された過剰レプチンは、食物摂取および体重を減少させる場合に効果的でないことが分かったが、脳中に直接注射されたレプチンは、食物摂取および体重を減少させる場合に有効であった。更に、過剰の循環性レプチンを有する肥満者の場合、シグナリング系は、レプチン受容体の持続刺激に脱感作状態になるということが分かった（Mantzoros, C. S. (1999) Ann. Intern. Med. 130: 671-680）。
【０００５】
Amgen は、リコンビナントメチオニルヒトレプチンで臨床試験を行った。高血漿濃度のレプチンの存在下でさえも、体重減少は可変であったし、しかも被験患者群の平均体重減少は比較的小さかったので、これら試験による結果を混合した（Obesity Strategic Perspective, Datamonitor, 2001）。
【０００６】
活性フラグメントを見出すいくつかの試みは、レプチン遺伝子コード配列の発見以来、参考文献で報告されてきた。一例は、Samson et al. (1996) Endocrinol. 137: 5182-5185 により、それは、Ｎ末端（２２〜５６）にある活性フラグメントを記載している。この配列は、ＩＣＶ注射時に食物摂取を減少させることが分かったが、Ｃ末端に置かれた配列は、いずれの作用も有さないことが分かった。レプチンフラグメントは、国際特許出願ＷＯ９７／４６５８５号にも開示されている。
【０００７】
その配列のＣ末端部分を調べた他の報告は、１１６〜１３０フラグメントによる黄体形成ホルモン生産の可能な刺激（Gonzalez et al., (1999) Neuroendocrinology 70:213-220）およびＧＨＲＨ投与後のＧＨ生産への作用（フラグメント１２６〜１４０）（Hanew (2003) Eur. J. Endocrin. 149: 407-412）を報告した。
【０００８】
レプチンは、最近では、炎症に関連していた。循環性レプチンレベルは、細菌感染の際におよび炎症の場合に上昇するということが報告された（Otero, M et al. (2005) FEBS Lett. 579: 295-301 およびその参考文献を参照されたい）。レプチンは、更に、炎症性細胞からの炎症誘発性サイトカインＴＮＦおよびＩＬ−６の放出を増大させることによって炎症を増加させるように作用することがありうる（Zarkesh-Esfahani, H. et al. (2001) J. Immunol. 167: 4593-4599）。これら物質は、順次、インスリン受容体シグナリングの効力を減少させることによって、肥満患者に一般的に認められるインスリン抵抗性の原因となりうる（Lyon, C. J. et al. (2003) Endocrinol. 44: 2195-2200）。持続性低級炎症は、（インスリン抵抗性およびII型糖尿病の存在下および不存在下において）肥満症に関連していると考えられる（Browning et al. (2004) Metabolism 53: 899-903, Inflammatory markers elevated in blood of obese women; Mangge et al. (2004) Exp. Clin. Endocrinol. Diabetes 112: 378-382, Juvenile obesity correlates with serum inflammatory marker C-reactive protein; Maachi et al. (2004) Int. J. Obes. Relat. Metab. Disord. 28: 993-997, Systemic low grade inflammation in obese people）。レプチンは、更に、マクロファージ中への脂質取込みおよび内皮機能不全を促進することによって、したがって、アテローム性動脈硬化斑の形成を促進することによって、アテローム発生過程に関係していた（Lyon, C. J. et al. (2003) Endocrinol. 144: 2195-2200 を参照されたい）。
【０００９】
レプチンは、更に、脂肪組織の成長に関係した過程である新しい血管の形成（血管新生）を促進することが分かった（Bouloumie A, et al. (1998) Circ. Res. 83: 1059-1066）。血管新生は、糖尿病性網膜症にも関係していた（Suganami, E. et al. (2004) Diabetes. 53: 2443-2448）。
【００１０】
血管新生は、更に、異常な腫瘍細胞に供給する新しい血管の成長に関与していると考えられる。上昇したレプチンレベルは、多数の癌、具体的には、ヒトの乳癌、前立腺癌および胃腸癌に関連していた（Somasundar P. et al. (2004) J. Surg. Res. 116: 337-349）。
【００１１】
レプチン受容体アゴニストは、更に、創傷治癒を促進する薬剤の製造に用いることができる（Gorden, P. and Gavrilova, O. (2003) Current Opinion in Pharmacology 3: 655-659）。
【００１２】
更に、脳中のレプチンシグナリングを上昇させることは、抑うつ性障害の処置へのアプローチであるかもしれないということが分かった（Lu, Xin-Yun et al. (2006) PNAS 103: 1593-1598）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１３】
【特許文献１】国際特許出願ＷＯ９７／４６５８５号
【非特許文献】
【００１４】
【非特許文献１】Bryson, J. M. (2000) Diabetes, Obesity and Metabolism 2: 83-89
【非特許文献２】Koistinen et al., (1998) Eur. J. Clin. Invest. 28:894-897
【非特許文献３】Kastin, A. J. (1999) Peptides 20: 1449-1453; Banks, W. A. et al., (2002) Brain Res. 950: 130-136
【非特許文献４】Van Heek et al. (1997) J. Clin. Invest. 99: 385-390
【非特許文献５】Mantzoros, C. S. (1999) Ann. Intern. Med. 130: 671-680
【非特許文献６】Obesity Strategic Perspective, Datamonitor, 2001
【非特許文献７】Samson et al. (1996) Endocrinol. 137: 5182-5185
【非特許文献８】Gonzalez et al., (1999) Neuroendocrinology 70:213-220
【非特許文献９】Hanew (2003) Eur. J. Endocrin. 149: 407-412
【非特許文献１０】Otero, M et al. (2005) FEBS Lett. 579: 295-301
【非特許文献１１】Zarkesh-Esfahani, H. et al. (2001) J. Immunol. 167: 4593-4599
【非特許文献１２】Lyon, C. J. et al. (2003) Endocrinol. 44: 2195-2200
【非特許文献１３】Browning et al. (2004) Metabolism 53: 899-903, Inflammatory markers elevated in blood of obese women
【非特許文献１４】Mangge et al. (2004) Exp. Clin. Endocrinol. Diabetes 112: 378-382, Juvenile obesity correlates with serum inflammatory marker C-reactive protein
【非特許文献１５】Maachi et al. (2004) Int. J. Obes. Relat. Metab. Disord. 28: 993-997, Systemic low grade inflammation in obese people
【非特許文献１６】Lyon, C. J. et al. (2003) Endocrinol. 144: 2195-2200
【非特許文献１７】Bouloumie A, et al. (1998) Circ. Res. 83: 1059-1066
【非特許文献１８】Suganami, E. et al. (2004) Diabetes. 53: 2443-2448
【非特許文献１９】Somasundar P. et al. (2004) J. Surg. Res. 116: 337-349
【非特許文献２０】Gorden, P. and Gavrilova, O. (2003) Current Opinion in Pharmacology 3: 655-659
【非特許文献２１】Lu, Xin-Yun et al. (2006) PNAS 103: 1593-1598
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
驚くべきことに、式（Ｉ）の化合物は、齧歯類動物の体重および食物摂取を減少させる場合に有効であるということが判明した。理論によって拘束されたくはないが、式Ｉを有するそれら化合物は、レプチン受容体シグナリング経路をモジュレーションすると考えられる。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
いくつかの態様において、レプチン受容体アゴニスト様性質を有する化合物は、レプチンシグナリングに関する障害、更には、肥満症などの体重増加に関連した状態の処置に有用でありうる。本発明者は、低分子ＣＮＳ浸透剤レプチン模擬体が、脳中への制限取込みシステムを迂回可能であろうと仮定した。更に、この状況が、ヒト肥満状態を反映していると仮定して、本発明者は、比較的長い作用持続期間を有するＣＮＳ活性レプチノイドが、肥満状態およびその不随の合併症、具体的には、（これに制限されるわけではないが）糖尿病に有効な療法になるであろうと考えている。
【００１７】
他の態様において、レプチン受容体アンタゴニスト様性質を有する化合物は、炎症、アテローム性動脈硬化症、糖尿病性網膜症および腎症の処置に有用でありうると考えられる。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】図１は、高炭水化物食で飼養された被験動物間の体重分離の一例を示す。エラーバーは、平均＋／−ＳＥＭである。
【図２】図２は、実施例７のＤＩＯラットでの４日間研究で認められた累積体重変化（％）を示す。
【図３】図３は、実施例２０のＤＩＯラットでの４日間研究で認められた累積体重変化（％）を示す。
【図４】図４は、実施例３０のＤＩＯラットでの４日間研究で認められた累積体重変化（％）を示す。
【図５】図５は、レプチンについてのＪＥＧ−３細胞による［３Ｈ］−チミジン取込みの濃度依存性増加を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
第一の側面において、本発明は、式（Ｉ）
【００２０】
【化１】
2011506294.tif 000003
【００２１】
［式中、Ｘは、Ｏ、Ｓ、Ｎ（Ｒ１）およびＣＨ（Ｒ２）より選択され、但し、Ｘを含有する環は、３−ピロリジンではないという条件付きであり；
Ｙは、ＣＨ２、ＯまたはＮ（Ｒ５）であり；
Ｒ１は、独立して、水素、Ｃ１−６−アルキル（未置換、またはハロゲン、ヒドロキシ、シアノおよびＣ１−６−アルコキシより独立して選択される一つまたはそれを超える置換基で置換されていてよい）およびＣ１−６−アシル（未置換、またはハロゲン、ヒドロキシおよびＣ１−６−アルコキシより独立して選択される一つまたはそれを超える置換基で置換されていてよい）より選択され；
Ｒ２およびＲ３は、独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−６−アルキル（未置換、またはハロゲン、ヒドロキシおよびＣ１−６−アルコキシより独立して選択される一つまたはそれを超える置換基で置換されていてよい）およびＣ１−６−アルコキシ（未置換、またはハロゲン、ヒドロキシおよびＣ１−６−アルコキシより独立して選択される一つまたはそれを超える置換基で置換されていてよい）より選択され；
Ｒ４は、独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、ＣＦ３、Ｃ１−６−アルキルおよびＣ１−６−アルコキシより選択され；
Ｒ５は、水素またはＣ１−４−アルキルであり；
ａ、ｂおよびｃは、各々独立して、１、２または３であり；
ｄは、０、１または２であり；
ｅは、１、２または３であり；そして
ｆおよびｇは、各々独立して、０、１または２である］
を有する化合物、またはその薬学的に許容しうる塩、溶媒和化合物、水和物、幾何異性体、互変異性体、光学異性体若しくはＮ−オキシドに関する。
【００２２】
本発明の好ましい態様において、Ｙは、Ｏである。
別の態様において、Ｘは、好ましくは、Ｏ、Ｎ（Ｒ１）およびＣＨ（Ｒ２）より選択される。
【００２３】
Ｒ１は、好ましくは、水素、Ｃ１−４−アルキルおよびＣ１−４−アシルより選択される。
最も好ましい態様において、Ｒ１は、水素、メチルまたはアセチルである。
【００２４】
Ｒ２およびＲ３は、好ましくは、水素およびＣ１−４−アルキルより独立して選択される。
最も好ましい態様において、Ｒ２およびＲ３は、水素である。
【００２５】
Ｒ４は、好ましくは、水素、ハロゲン、ＣＦ３およびＣ１−４−アルキルより独立して選択される。
最も好ましい態様において、Ｒ４は、独立して、水素、フルオロ、クロロまたはメチルより選択される。
【００２６】
ｄおよびｆは、好ましくは、各々１である。
ｅは、好ましくは、１または２である。
ｇは、好ましくは、０または１であり、より好ましくは、０である。
【００２７】
式（Ｉ）を有する具体的な好ましい化合物は、式（Ｉ’）
【００２８】
【化２】
2011506294.tif 000004
【００２９】
［式中、Ｘ１およびＸ２は、各々独立して、Ｏ、Ｎ（Ｒ１）またはＣＨ（Ｒ２）より選択され、但し、Ｘ１およびＸ２の少なくとも一つは、Ｎ（Ｒ１）であるという条件付きであり；
Ｒ１は、式（Ｉ）に定義の通りであり、好ましくは、水素、メチルまたはアセチルであり；
Ｒ２は、式（Ｉ）に定義の通りであり、好ましくは、水素であり；
Ｒ４は、水素、フルオロ、クロロまたはメチルであり；
ｃは、１、２または３であり；
ｅは、１または２であり；そして
ｇは、０または１である］
を有する化合物である。
【００３０】
式（Ｉ）を有する具体的な好ましい化合物は、
［（３Ｒ）−１−メチルピペリジン−３−イル］メチル４−（４−メチルフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
［（３Ｓ）−１−メチルピペリジン−３−イル］メチル４−（４−メチルフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
［（２Ｓ）−１，４−ジメチルピペラジン−２−イル］メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート；
［（２Ｒ）−１，４−ジメチルピペラジン−２−イル］メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート；
［（２Ｓ）−１，４−ジメチルピペラジン−２−イル］メチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
［（２Ｒ）−１，４−ジメチルピペラジン−２−イル］メチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
４−フェニルピペラジン−１−カルボン酸２−（１，４−ジメチルピペラジン−２−イル）エチルエステル；
［（２Ｓ）−１，４−ジメチルピペラジン−２−イル］メチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
［（２Ｓ）−４−メチルピペラジン−２−イル］メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート；
（１，４−ジメチルピペラジン−２−イル）メチル４−ベンジルピペラジン−１−カルボキシレート；
モルホリン−２−イルメチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート；
（２Ｓ）−モルホリン−２−イルメチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート；
（２Ｒ）−モルホリン−２−イルメチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート；
（４−メチルモルホリン−２−イル）メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート；
［（２Ｓ）−４−メチルモルホリン−２−イル］メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート；
［（２Ｒ）−４−メチルモルホリン−２−イル］メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート；
［（２Ｓ）−４−メチルモルホリン−２−イル］メチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
［（２Ｒ）−４−メチルモルホリン−２−イル］メチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
［（２Ｓ）−４−メチルモルホリン−２−イル］メチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
［（２Ｒ）−４−メチルモルホリン−２−イル］メチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
モルホリン−２−イルメチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
（２Ｓ）−モルホリン−２−イルメチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
（２Ｒ）−モルホリン−２−イルメチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
（４−メチルモルホリン−２−イル）メチル４−（４−クロロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
（４−メチルモルホリン−２−イル）メチル４−（４−フルオロベンジル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
（４−アセチルモルホリン−２−イル）メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート；
モルホリン−３−イルメチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
（３Ｓ）−モルホリン−３−イルメチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
（３Ｒ）−モルホリン−３−イルメチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
（４−メチルモルホリン−３−イル）メチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
モルホリン−３−イルメチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート；
モルホリン−３−イルメチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
（４−メチルモルホリン−３−イル）メチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；
（２Ｓ）−モルホリン−２−イルメチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート；および
（２Ｒ）−モルホリン−２−イルメチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート
から成る群より選択されるものである。
【００３１】
本発明の別の側面は、療法に用いるための式（Ｉ）の化合物である。
もう一つの側面において、本発明は、本明細書中に記載のいずれかの障害または状態の処置または予防に用いるための式（Ｉ）の化合物に関する。
【００３２】
またもう一つの側面において、本発明は、本明細書中に記載のいずれかの障害または状態の処置または予防用の薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物の使用に関する。
いくつかの態様において、それら化合物は、レプチン受容体への選択的作用によって予防される、処置されるまたは改善される状態の処置または予防用の薬剤の製造に用いることができる。
【００３３】
いくつかの態様において、それら化合物は、体重増加に関連した状態（具体的には、代謝性状態）の処置または予防用の薬剤の製造に用いることができる。体重増加に関連した状態には、肥満したまたは過体重の対象に増加した発生率を有する疾患、障害または他の状態が含まれる。例には、脂肪異栄養症、ＨＩＶ脂肪異栄養症、糖尿病（２型）、インスリン抵抗性、代謝性症候群、高血糖症、高インスリン血症、異常脂肪血症、肝脂肪症、過食症、高血圧症、高トリグリセリド血症、不妊症、体重増加に関連した皮膚障害、黄斑変性が含まれる。いくつかの態様において、それら化合物は、更に、対象の体重減少を維持するための薬剤の製造に用いることができる。
【００３４】
いくつかの態様において、レプチン受容体アゴニスト模擬体である式（Ｉ）の化合物は、更に、創傷治癒を促進する薬剤の製造に用いることができる。
いくつかの態様において、レプチン受容体アゴニスト模擬体である式（Ｉ）の化合物は、更に、循環性レプチン濃度の減少を引き起こす状態、および結果としての免疫系および生殖器系の機能不全の処置または予防用の薬剤の製造に用いることができる。このような状態および機能不全の例には、重症体重減少、月経困難症、無月経、女性不妊症、免疫不全、および低テストステロンレベルに関連した状態が含まれる。
【００３５】
いくつかの態様において、レプチン受容体アゴニスト模擬体である式（Ｉ）の化合物は、更に、レプチン欠乏、またはレプチンまたはレプチン受容体突然変異の結果として引き起こされた状態の処置または予防用の薬剤の製造に用いることができる。
【００３６】
いくつかの他の態様において、レプチン受容体アンタゴニスト模擬体である式（Ｉ）の化合物は、炎症性状態または疾患、肥満症および過剰血漿レプチンに関連した低レベル炎症の処置または予防のために；およびアテローム性動脈硬化症を含めた、肥満症に関連した他の合併症を減少させる場合に；および代謝性症候群および糖尿病に認められるインスリン抵抗性の補正のために用いることができる。
【００３７】
いくつかの態様において、レプチン受容体アンタゴニスト模擬体である式（Ｉ）の化合物は、癌（白血病、リンパ腫、癌腫、結腸癌、乳癌、肺癌、膵臓癌、肝細胞癌、腎臓癌、黒色腫、肝、肺、乳房および前立腺の転移等のような）；自己免疫疾患（臓器移植片拒絶、エリテマトーデス、移植片対宿主拒絶、同種移植拒絶、多発性硬化症、関節リウマチ、糖尿病に至る膵島の破壊および糖尿病の炎症性結末を含めたＩ型真性糖尿病など）；自己免疫損傷（多発性硬化症、ギラン・バレー症候群（Guillam Barre Syndrome）、重症筋無力症を含めた）；不十分な組織灌流および炎症に関連した心臓血管状態（アテローム、アテローム性動脈硬化症、脳卒中、虚血再灌流傷害、跛行、脊髄損傷、うっ血性心不全、血管炎、出血性ショック、クモ膜下出血後の血管痙攣、脳血管発作後の血管痙攣、胸膜炎、心膜炎、糖尿病の心臓血管合併症など）；虚血再灌流傷害、虚血および関連炎症、血管形成術後の再狭窄および炎症性動脈瘤；癲癇、神経変性（アルツハイマー病を含めた）、関節炎（関節リウマチ、変形性関節症、リウマチ様脊椎炎、痛風性関節炎など）、線維症（例えば、肺、皮膚および肝の）、多発性硬化症、敗血症、敗血症性ショック、脳炎、感染性関節炎、ヤリッシュ・ヘルクスハイマー反応、帯状疱疹、中毒性ショック、脳性マラリア、ライム病、内毒素性ショック、グラム陰性ショック、出血性ショック、肝炎（組織損傷またはウイルス感染の双方による）、深部静脈血栓症、痛風；呼吸困難に関連した状態（例えば、慢性閉塞性肺疾患、気道の障害および閉塞、気管支収縮、肺血管収縮、呼吸障害、慢性肺炎症性疾患、珪肺症、肺サルコーシス、嚢胞性線維症、肺高血圧症、肺血管収縮、気腫、気管支アレルギーおよび／または炎症、喘息、枯草熱、鼻炎、春季結膜炎および成人呼吸窮迫症候群）；皮膚の炎症に関連した状態（乾癬、湿疹、潰瘍、接触皮膚炎を含めた）；腸の炎症に関連した状態（クローン病、潰瘍性大腸炎および化膿症（pyresis）、過敏性腸症候群、炎症性腸疾患を含めた）；ＨＩＶ（具体的には、ＨＩＶ感染）、脳性マラリア、細菌性髄膜炎、骨粗鬆症および他の骨吸収疾患、変形性関節症、子宮内膜症による不妊症、感染による熱および筋肉痛、および過度の抗炎症性細胞（好中球、好酸球、マクロファージおよびＴ細胞を含めた）活性に媒介される他の状態によって引き起こされるまたはそれに関連した炎症の処置または予防に用いることができる。
【００３８】
いくつかの態様において、レプチン受容体アンタゴニスト模擬体である式（Ｉ）の化合物は、１型または２型糖尿病の巨大または微小血管合併症、網膜症、腎症、自律神経性ニューロパシー、または虚血またはアテローム性動脈硬化症によって引き起こされる血管損傷の処置または予防に用いることができる。
【００３９】
いくつかの態様において、レプチン受容体アンタゴニスト模擬体である式（Ｉ）の化合物は、血管新生を阻害するのに用いることができる。血管新生を阻害する本発明の化合物は、肥満症または肥満症に関連した合併症の処置または予防に用いることができる。血管新生を阻害する本発明の化合物は、炎症に関連した合併症、糖尿病性網膜症、または具体的には、乳癌、前立腺癌または胃腸癌における腫瘍成長の処置または予防に用いることができる。
【００４０】
もう一つの側面において、本発明は、本明細書中に記載のいずれかの障害または状態の処置または予防の方法であって、対象（例えば、それを必要としている対象、例えば、哺乳動物）に、有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法に関する。
【００４１】
本明細書中に詳述されている方法には、対象が、具体的な述べられている処置を必要としていると特定されているものが含まれる。このような処置を必要としている対象を特定することは、対象または医療専門家の判断でありうるし、しかも主観的（例えば、見解）または客観的（例えば、試験または診断法によって測定可能）でありうる。
【００４２】
他の側面において、本明細書中の方法には、処置投与への対象応答を監視することを更に含むものが含まれる。このような監視には、処置方式のマーカーまたは指示薬としての対象組織、体液、検体、細胞、タンパク質、化学的マーカー、遺伝物質等の定期的採取が含まれてよい。他の方法において、対象は、このような処置への適性について関係のあるマーカーまたは指示薬の評価によって、このような処置を必要としていると予備選別されるまたは特定される。
【００４３】
一つの態様において、本発明は、処置進行を監視する方法を提供する。その方法は、本明細書中に詳述されている障害またはその症状に苦しんでいるまたはそれに感受性の対象であって、疾患またはその症状を処置するのに十分な治療的有効量の本明細書中の化合物を投与された対象において、診断用マーカー（Marker）（例えば、本明細書中の化合物によってモジュレーションされる本明細書中に詳述されているいずれかの標的または細胞タイプ）または診断測定（例えば、選別、検定）のレベルを決定する工程を包含する。その方法で決定される Marker のレベルは、健康な正常対照かまたは他の罹患した患者における既知のMarker レベルと比較して、その対象の疾患状態を確かめることができる。好ましい態様において、対象におけるMarker の第一レベルの決定より後の時点で第二レベルを決定し、そしてそれら二つのレベルを比較して、疾患の経過または療法の効力を監視する。特定の好ましい態様において、対象における Marker の前処置レベルを、本発明による処置を開始する前に決定し；次に、この前処置Marker レベルを、処置開始後の対象の Marker レベルと比較して、処置の効力を決定することができる。
【００４４】
特定の方法態様において、対象におけるMarker または Marker 活性のレベルを、少なくとも１回決定する。Marker レベルの、例えば、同じ患者、別の患者または正常対象から以前にまたはそれ以後に得られた Marker レベルの別の測定値との比較は、本発明による療法が、所望の作用を有しているか、そしてそれによって、投薬量レベルの調整を適宜可能にしているかどうかを決定する場合に有用でありうる。Marker レベルの決定は、当該技術分野において知られているまたは本明細書中に記載のいずれか適する試料採取／発現検定方法を用いて行うことができる。好ましくは、組織または体液試料を、最初に、対象から取り出す。適する試料の例には、血液、尿、組織、口腔または頬細胞、および毛根含有毛髪試料が含まれる。他の適する試料は、当業者に知られていると考えられる。その試料中のタンパク質レベルおよび／またはｍＲＮＡレベル（例えば、Marker レベル）の決定は、酵素免疫検定、ＥＬＩＳＡ、放射性標識／検定法、ブロッティング／化学発光法、リアルタイムＰＣＲ等が含まれるがこれに制限されるわけではない、当該技術分野において知られているいずれか適する技法を用いて行うことができる。
【００４５】
いくつかの態様において、式（Ｉ）の化合物が、中枢神経系に浸透可能である場合、それは好都合でありうる。他の態様において、式（Ｉ）の化合物が、ＣＮＳに浸透不能である場合、それは好都合でありうる。概して、レプチン受容体アゴニスト模擬体である化合物は、これら化合物が、ＣＮＳに浸透しうる場合、肥満症、インスリン抵抗性または糖尿病（具体的には、グルコース不耐性）の処置または予防に特に有用でありうると期待される。当業者は、ある化合物が、ＣＮＳに浸透しうるかどうかを容易に決定することができる。用いることができる適する方法は、生物学的方法という項目に記載されている。
【００４６】
レプチン受容体応答は、いずれか適する方法で測定することができる。in vitro では、これを、レプチン受容体シグナリングを測定して行うことができる。例えば、レプチン受容体へのレプチンまたは本発明の化合物の結合に応答したＡｋｔ、ＳＴＡＴ３、ＳＴＡＴ５、ＭＡＰＫ、ｓｈｐ２またはレプチン受容体のリン酸化を、測定することができる。Ａｋｔ、ＳＴＡＴ３、ＳＴＡＴ５、ＭＡＰＫ、ｓｈｐ２またはレプチン受容体のリン酸化の程度は、例えば、ウェスタンブロッティングでまたはＥＬＩＳＡで決定することができる。或いは、ＳＴＡＴレポーター検定、例えば、ＳＴＡＴに駆動されるルシフェラーゼ発現を用いることができる。レプチン受容体を発現する細胞系は、このような検定に用いることかできる。in vivo では、レプチン受容体応答は、レプチンまたは本発明の化合物の投与後に、食物摂取および体重の減少を決定することによって測定することができる。
【００４７】
下の生物学的方法は、本発明の化合物が、レプチン受容体アゴニスト模擬体であるかまたはレプチン受容体アンタゴニスト模擬体であるかを決定するのに用いることができる検定および方法を記載している。
【００４８】
式（Ｉ）の化合物は、他の治療薬と一緒にまたはそれらを伴うことなく投与することができる。例えば、炎症を減少させることが望まれる場合、その化合物は、抗炎症薬（例えば、メトトレキサート、スルファサラジンおよびサイトカイン不活性化薬などの疾患修飾性抗リウマチ薬、ステロイド、ＮＳＡＩＤ、カンナビノイド、タキキニンモジュレーターまたはブラジキニンモジュレーター）と一緒に投与することができる。抗腫瘍作用を与えることが望まれる場合、式（Ｉ）の化合物は、細胞障害性薬（例えば、メトトレキサート、シクロホスファミド）または別の抗腫瘍薬と一緒に投与することができる。
【００４９】
式（Ｉ）の化合物は、受容体置換研究または受容体画像化などの in vitro または in vivo 用途のために（例えば、トリチウムまたは放射性ヨウ素で）放射性標識することができる。
【００５０】
本発明のもう一つの側面は、上に定義の式（Ｉ）の化合物の製造方法に関する。一つの態様において、その方法は、
（ａ）式（II）：
【００５１】
【化３】
2011506294.tif 000005
【００５２】
（式中、Ｒ３、Ｒ４、ｂ、ｃ、ｆおよびｇは、式（Ｉ）に定義の通りである）
を有する化合物と、４−ニトロフェニルクロロホルメートまたはビス−（４−ニトロフェニル）カーボネートとを、適する塩基（ＤＩＰＥＡまたはＮＥｔ３など）の存在下、適する溶媒（ＤＣＭまたはＴＨＦなど）中において−１０〜４０℃で反応させて、式（III）：
【００５３】
【化４】
2011506294.tif 000006
【００５４】
を有する化合物を形成すること、
（ｂ）式（III）の化合物と、式（IV）：
【００５５】
【化５】
2011506294.tif 000007
【００５６】
（式中、Ｘ、Ｒ１、Ｒ２、ａ、ｄおよびｅは、式（Ｉ）に定義の通りである）
を有する化合物とを、適する塩基（ＮａＨまたはＮＭＭなど）の存在下、適する溶媒（ＴＨＦまたはＤＣＭなど）中において−１０〜４０℃で反応させて、式（Ｉ）の化合物を得ること；および
（ｃ）場合により、１回または数回の工程で、式（Ｉ）の化合物を式（Ｉ）の別の化合物へと変換すること
を含む。
【００５７】
別の態様において、その方法は、
（ａ）式（IV）：
【００５８】
【化６】
2011506294.tif 000008
【００５９】
（式中、Ｘ、Ｒ１、Ｒ２、ａ、ｄおよびｅは、式（Ｉ）に定義の通りである）
を有する化合物と、４−ニトロフェニルクロロホルメートまたはビス−（４−ニトロフェニル）カーボネートとを、適する塩基（ＤＩＰＥＡまたはＮＭＭなど）の存在下、適する溶媒（ＤＣＭなど）中において−１０〜４０℃で反応させて、式（Ｖ）：
【００６０】
【化７】
2011506294.tif 000009
【００６１】
を有する化合物を形成すること、
（ｂ）式（Ｖ）の化合物と、式（II）：
【００６２】
【化８】
2011506294.tif 000010
【００６３】
（式中、Ｒ３、Ｒ４、ｂ、ｃ、ｆおよびｇは、式（Ｉ）に定義の通りである）
を有する化合物とを、適する塩基（ＤＩＰＥＡなど）の存在下、適する溶媒（ＤＣＭまたはＤＭＦなど）中において−１０〜４０℃で反応させて、式（Ｉ）の化合物を得ること；および
（ｃ）場合により、１回または数回の工程で、式（Ｉ）の化合物を式（Ｉ）の別の化合物へと変換すること
を含む。
【００６４】
定義
次の定義は、本明細書および請求の範囲を通して適用するものとする。
それ以外に述べられていないまたは示されていない限り、「Ｃ１−６−アルキル」という用語は、１〜６個の炭素原子を有する直鎖または分岐状のアルキル基を示す。このＣ１−６−アルキルの例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、sec−ブチル、ｔ−ブチル、および直鎖および分岐状鎖のペンチルおよびヘキシルが含まれる。「Ｃ１−６−アルキル」という範囲の部分には、Ｃ１−５−アルキル、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−３−アルキル、Ｃ１−２−アルキル、Ｃ２−６−アルキル、Ｃ２−５−アルキル、Ｃ２−４−アルキル、Ｃ２−３−アルキル、Ｃ３−６−アルキル、Ｃ４−５−アルキル等のようなその部分群全てが包含される。
【００６５】
それ以外に述べられていないまたは示されていない限り、「Ｃ１−６−アシル」という用語は、カルボニル基であって、その炭素原子を介して水素原子へ（すなわち、ホルミル基）、またはアルキルが上のように定義される直鎖または分岐状のＣ１−５−アルキル基へ結合しているものを示す。このＣ１−６−アシルの例には、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ｎ−ブチリル、２−メチルプロピオニルおよびｎ−ペントイルが含まれる。「Ｃ１−６−アシル」という範囲の部分には、Ｃ１−５−アシル、Ｃ１−４−アシル、Ｃ１−３−アシル、Ｃ１−２−アシル、Ｃ２−６−アシル、Ｃ２−５−アシル、Ｃ２−４−アシル、Ｃ２−３−アシル、Ｃ３−６−アシル、Ｃ４−５−アシル等のようなその部分群全てが包含される。Ｃ１−６−アシル基が、ハロゲン、ヒドロキシおよびＣ１−６−アルコキシより独立して選択される一つまたはそれを超える置換基で置換されていてよい場合、この置換基は、カルボニル炭素原子へ結合し得ない。
【００６６】
それ以外に述べられていないまたは示されていない限り、「Ｃ１−６−アルコキシ」という用語は、１〜６個の炭素原子を有する直鎖または分岐状のアルコキシ基を示す。このＣ１−６−アルコキシの例には、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ、sec−ブトキシ、ｔ−ブトキシ、および直鎖および分岐状鎖のペントキシおよびヘキソキシが含まれる。「Ｃ１−６−アルコキシ」という範囲の部分には、Ｃ１−５−アルコキシ、Ｃ１−４−アルコキシ、Ｃ１−３−アルコキシ、Ｃ１−２−アルコキシ、Ｃ２−６−アルコキシ、Ｃ２−５−アルコキシ、Ｃ２−４−アルコキシ、Ｃ２−３−アルコキシ、Ｃ３−６−アルコキシ、Ｃ４−５−アルコキシ等のようなその部分群全てが包含される。
【００６７】
「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を意味する。
「ヒドロキシ」は、−ＯＨラジカルを意味する。
「ニトロ」は、−ＮＯ２ラジカルを意味する。
【００６８】
「シアノ」は、−ＣＮラジカルを意味する。
「任意の」または「場合により」は、その後に記載されているイベントまたは状況が、必要である以外は存在しなくてよいということ、およびその説明には、そのイベントまたは状況が存在する場合、およびそれが存在しない場合が含まれるということを意味する。
【００６９】
「哺乳動物」という用語は、マウス、ラット、ウシ、ヒツジ、ブタ、ウサギ、ヤギおよびウマ、サル、イヌ、ネコ、そして好ましくは、ヒトが含まれる生物を包含する。その対象は、ヒト対象であってよいし、または非ヒト動物、具体的には、イヌなどの家畜動物であってよい。
【００７０】
「薬学的に許容しうる」は、概して、安全で、無毒性で、そして生物学的にもそれ以外にも望ましくないものではない医薬組成物を製造する場合に有用であることを意味し、そして獣医学的用途、更には、ヒトの薬学的用途に有用であることを包含する。
【００７１】
本明細書中で用いられる「処置」は、指名された障害または状態の予防、またはいったん確定された障害の改善または除去を包含する。
「有効量」は、被処置対象に治療的作用を与える（例えば、疾患、障害、またはその状態または症状を処置する、制御する、改善する、予防する、その開始を遅らせる、またはそれを発症するリスクを減少させる）化合物の量を意味する。治療的作用は、客観的（すなわち、何らかの試験またはマーカーによって測定可能）であってよいし、または主観的であってよい（すなわち、対象は、作用の指標を与えるまたは作用を感じる）。
【００７２】
「プロドラッグ」は、生理学的条件下においてまたは加溶媒分解によって、式（Ｉ）の生物学的に活性な化合物へと変換されることができる化合物を意味する。プロドラッグは、それを必要としている対象に投与時には不活性であってよいが、式（Ｉ）の活性化合物へと in vivo 変換される。典型的に、プロドラッグは、例えば、血液中の加水分解によって急速に in vivo 変換されて親化合物を生じる。そのプロドラッグ化合物は、通常は、哺乳動物生体内において溶解性、組織適合性または遅延放出の利点を与える（Silverman, R. B., The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action, 2nd Ed., Elsevier Academic Press (2004), pp. 498-549 を参照されたい）。プロドラッグは、式（Ｉ）の化合物中に存在するヒドロキシ基、アミノ基またはメルカプト基などの官能基を修飾することによって、それら修飾が、常套操作でかまたは in vivo で親化合物へと切断されるような方法で製造することができる。プロドラッグの例には、ヒドロキシ官能基のアセテート、ホルメートおよびスクシネート誘導体、またはアミノ官能基のフェニルカルバメート誘導体が含まれるが、これに制限されるわけではない。
【００７３】
本明細書および請求の範囲を通して、与えられている化学式または名称は、その塩、水和物、溶媒和化合物、Ｎ−オキシドおよびプロドラッグの全て形をも包含するであろう。更に、与えられている化学式または名称は、その互変異性体および立体異性体の形も全て包含するであろう。立体異性体には、鏡像異性体およびジアステレオマーが含まれる。鏡像異性体は、それらの純粋な形で、または二つの鏡像異性体のラセミ（等量）混合物または不等量混合物として存在しうる。ジアステレオマーは、それらの純粋な形で、またはジアステレオマー混合物として存在しうる。ジアステレオマーには、更に、幾何異性体が含まれ、それらは、それらの純粋な cis または trans 形で、またはそれらの混合物として存在しうる。
【００７４】
式（Ｉ）の化合物は、そのままで、または適所において、その薬理学的に許容しうる塩（酸または塩基付加塩）として用いることができる。下に挙げられる薬理学的に許容しうる付加塩は、それら化合物が形成可能である治療的に活性な無毒性酸および塩基付加塩の形を含むことを意味する。塩基性を有する化合物は、塩基形を適当な酸で処理することによって、それらの薬学的に許容しうる酸付加塩へと変換することができる。代表的な酸には、塩化水素、臭化水素、ヨウ化水素、硫酸、リン酸などの無機酸；およびギ酸、酢酸、プロパン酸、ヒドロキシ酢酸、乳酸、ピルビン酸、グリコール酸、マレイン酸、マロン酸、シュウ酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、トリフルオロ酢酸、フマル酸、コハク酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、サリチル酸、ｐ−アミノサリチル酸、パモ酸、安息香酸、アスコルビン酸等のような有機酸が含まれる。代表的な塩基付加塩形は、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、および例えば、アンモニア、アルキルアミン、ベンザチンなどの薬学的に許容しうるアミンとの、および例えば、アルギニンおよびリシンなどのアミノ酸との塩である。本明細書中で用いられる付加塩という用語は、更に、それら化合物およびそれらの塩が、例えば、水和物、アルコラート等のような、形成可能である溶媒和化合物を含む。
【００７５】
組成物
臨床的使用について、本発明の化合物は、いろいろな投与様式のための医薬製剤へと製剤化される。本発明の化合物は、生理学的に許容しうる担体、賦形剤または希釈剤と一緒に投与することができる。本発明の医薬組成物は、いずれか適する経路によって、好ましくは、経口、直腸内、鼻、局所（口腔内および舌下を含めた）、舌下、経皮、髄腔内、経粘膜または非経口（皮下、筋肉内、静脈内および皮内を含めた）投与によって投与することができる。
【００７６】
他の製剤は、好都合には、単位剤形、例えば、錠剤および徐放性カプセル剤中およびリポソーム中で提示することができるし、そして薬学技術分野において周知のいずれかの方法によって製造することができる。医薬製剤は、通常は、活性物質またはその薬学的に許容しうる塩を、慣用的な薬学的に許容しうる担体、希釈剤または賦形剤と混合することによって製造される。賦形剤の例は、水、ゼラチン、アラビアゴム（gum arabicum）、ラクトース、微結晶性セルロース、デンプン、ナトリウムデンプングリコラート、リン酸水素カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、コロイド二酸化ケイ素等である。このような製剤は、更に、他の薬理学的活性剤、および安定化剤、湿潤剤、乳化剤、着香剤、緩衝剤等のような慣用的な添加剤を含有しよい。通常は、活性化合物の量は、製剤の重量で０．１〜９５％、好ましくは、非経口使用のための製剤中に０．２〜２０重量％、そしてより好ましくは、経口投与用の製剤中に１〜５０重量％である。
【００７７】
それら製剤は、更に、造粒、圧縮、マイクロカプセル封入、噴霧コーティング等のような既知の方法によって製造することができる。製剤は、慣用的な方法によって、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤、懸濁剤、坐剤または注射剤の剤形で製造することができる。液状製剤は、活性物質を、水または他の適するビヒクル中に溶解させるまたは懸濁させることによって製造することができる。錠剤および顆粒剤は、慣用法でコーティングすることができる。治療的に有効な血漿濃度を長時間維持するために、本発明の化合物は、徐放性製剤中に包含されてよい。
【００７８】
特定の化合物の用量レベルおよび投薬頻度は、用いられる特定の化合物の効力、その化合物の代謝安定性および作用長さ、患者の年齢、体重、全身健康状態、性別、食餌、投与様式および時間、排泄率、薬物組合せ、処置される状態の重症度、および患者が受けている療法を含めたいろいろな因子に依存して異なるであろう。１日投薬量は、例えば、約０．００１ｍｇ〜約１００ｍｇ／キロ体重であってよく、１回でまたは例えば、各々約０．０１ｍｇ〜約２５ｍｇの用量で多数回投与される。通常は、このような投薬量は、経口で与えられるが、非経口投与も選択されてよい。
【００７９】
本発明の化合物の製造
上の式（Ｉ）の化合物は、慣用法によって、またはそれと同様に製造することができる。中心のウレタンまたは尿素リンカーは、式（Ｉ）の化合物を製造する場合に不可欠な合成工程である。大多数の活性化試薬、例えば、アルコールのクロロホルメートを形成するためのホスゲン、またはイミダゾールカルボキシレートを形成するためのカルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）を、ウレタンまたは尿素リンカーの形成に用いることができる。典型的に、式（Ｉ）の化合物中に包含されたウレタンリンカーは、４−ニトロフェニルクロロホルメートまたはビス−（４−ニトロフェニル）カーボネートを活性化剤として利用して合成された。本発明の実施例による中間体および化合物の製造は、具体的には、次のスキーム１およびスキーム２によって明らかにすることができる。本明細書中のスキームにおける構造の可変部分の定義は、本明細書中に詳述されている式中の該当する位置のものと同等である。
【００８０】
スキーム１．ピペラジン部分の活性化による製造
【００８１】
【化９】
2011506294.tif 000011
【００８２】
式中、Ｘ、Ｒ１〜Ｒ４およびａ〜ｇは、式１に定義の通りである。
一つの手順において、スキーム１に概ね示されているように、ピペラジン部分は、ピペラジン誘導体（II）を、塩基（ＤＩＰＥＡなど）の存在下において４−ニトロフェニルクロロホルメートまたはビス−（４−ニトロフェニル）カーボネートで処理して、該当するカルバメート誘導体（III）を形成することによって活性化される。塩基（ＮａＨなど）の存在下における適当なアルコール部分（IV）でのこの活性中間体の処理は、式（Ｉ）の所望の化合物の形成をもたらす。
【００８３】
スキーム２．アルコール部分の活性化による製造
【００８４】
【化１０】
2011506294.tif 000012
【００８５】
式中、Ｘ、Ｒ１〜Ｒ４およびａ〜ｇは、式１に定義の通りである。
別の手順において、アルコール部分は、アルコール（IV）を、塩基（ＤＩＰＥＡなど）の存在下において４−ニトロフェニルクロロホルメートまたはビス−（４−ニトロフェニル）カーボネートで処理して、該当する４−ニトロフェニルカーボネート誘導体（Ｖ）を形成することによって活性化される。次の工程において、その活性カーボネート（Ｖ）を、塩基（ＤＩＰＥＡなど）の存在下において適当なピペラジン部分（II）で処理して、式（Ｉ）の所望の化合物の形成をもたらす。これを、概して、スキーム２に示す。
【００８６】
ウレタンの形成は、典型的に、二段法であるが、これは、活性中間体の現場形成によってワンポット反応で行うこともできる。下の実験項目は、これら合成変法の全ての例を与える。
【００８７】
式（Ｉ）の化合物を製造するのに必要な出発物質は、商業的に入手可能であるか、または当該技術分野において知られている方法によって製造することができる。
下の実験項目に記載の方法は、化合物を遊離塩基の形でまたは酸付加塩として生じるように行うことができる。薬学的に許容しうる酸付加塩は、塩基化合物から酸付加塩を製造する慣用的な手順にしたがって、遊離塩基を適する有機溶媒中に溶解させ、そしてその溶液を酸で処理することによって得ることができる。付加塩形成性酸の例は、上に述べられている。
【００８８】
式（Ｉ）の化合物は、一つまたはそれを超えるキラル炭素原子を有してよく、したがって、それらは、光学異性体の形で、例えば、純粋な鏡像異性体として、または鏡像異性体の混合物（ラセミ体）として、またはジアステレオマー含有混合物として得ることができる。純粋な鏡像異性体を得るための光学異性体混合物の分離は、当該技術分野において周知であり、そして例えば、光学活性な（キラル）酸での塩の分別結晶によって、またはキラルカラム上のクロマトグラフィー分離によって達成することができる。
【００８９】
本明細書中に詳述されている合成経路に用いられる化学薬品には、例えば、溶媒、試薬、触媒、および基を保護し且つ基を脱保護する試薬が含まれてよい。保護基の例は、ｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ベンジルおよびトリチル（トリフェニルメチル）である。上記の方法は、更に、最終的には化合物の合成を可能にするために、適する保護基を加えるまたは除去する工程を、本明細書中に具体的に記載の工程の前かまたは後に包含してもよい。更に、いろいろな合成工程を、代替の配列または順序で行って、所望の化合物を生じることができる。応用可能な化合物を合成する場合に有用な合成化学変換および保護基方法（保護および脱保護）は、当該技術分野において知られ、それには、例えば、R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989)；T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed., John Wiley and Sons (1999)；L. Fieser and M. Fieser, Fieser and Fieser’s Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994)；および L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995) およびそれらのその後の版に記載のものが含まれる。
【００９０】
次の略語を用いた。
ｔ−ＡｍＯＨ  tert−アミルアルコール
Ｂｏｃ  tert−ブトキシカルボニル
ｔ−Ｂｕ  tert−ブチル
ＤＣＭ  ジクロロメタン
ＤＩＰＥＡ  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＦ  Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＥＳ＋  エレクトロスプレー
Ｅｔ２Ｏ  ジエチルエーテル
ＥｔＯＡｃ  酢酸エチル
ＨＩＶ  ヒト免疫不全ウイルス
ＨＰＬＣ  高速液体クロマトグラフィー
ＩＣＶ  脳室内
ＬＣＭＳ  液体クロマトグラフィー・質量分析法
Ｍ  モル
［ＭＨ］＋  プロトン付加分子イオン
ＮＥｔ３  トリエチルアミン
ＮＭＭ  Ｎ−メチルモルホリン
ＲＰ  逆相
tert  第三級
ＴＦＡ  トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ  テトラヒドロフラン
本発明の態様を、添付の図面に関して、以下の実施例に記載する。
【００９１】
本明細書中の可変部分についてのいずれかの定義における化学基のリストの詳説には、挙げられている基のいずれか一つの基または組合せとしてのその可変部分の定義が含まれる。本明細書中の態様の詳説には、いずれか一つの態様としての、またはいずれか他の態様またはその一部分との組合せでのその態様が含まれる。
【００９２】
本発明を、ここで、次の非制限実施例によって更に詳しく説明する。下の具体的な実施例は、単に例示するものとして解釈されるべきであり、いずれにせよ、開示の残部を制限するものとして解釈されるべきではない。更なる詳述を伴うことなく、当業者は、本明細書中の説明に基づいて、本発明を最大限に利用することができると考えられる。本明細書中に引用される参考文献および公報は全て、本明細書中にそのまま援用される。
【実施例】
【００９３】
実施例および中間体化合物
実験方法
試薬は全て、商業グレードであったし、そして特に断らない限り、追加の精製を伴うことなく受け取った状態のままで用いた。商業的に入手可能な無水溶媒を、不活性雰囲気下で行われる反応に用いた。他の場合は全て、特に断らない限り、試薬グレード溶媒を用いた。メチルイソシアネート樹脂は、NovaBiochem（Cat. No. ０１−６４−０１６９）によって供給された。分析ＬＣＭＳは、Agilent １１００ＨＰＬＣシステムに連通した Waters ＺＱ質量分析計で行った。分析ＨＰＬＣは、Agilent １１００システムで行った。高分解能質量スペクトル（ＨＲＭＳ）は、Agilent １１００ＨＰＬＣシステムに連通した Agilent ＭＳＤ−ＴＯＦで得た。それら分析中に、二つの質量によって校正を調べ、必要な場合、自動補正した。スペクトルは、正のエレクトロスプレーモードで得る。得られた質量範囲は、ｍ／ｚ１００〜１１００であった。質量ピークのプロフィール検出を用いた。フラッシュクロマトグラフィーは、Strata ＳＩ−１シリカギガチューブを装備した Flash Master Personal システムで行った。逆相クロマトグラフィーは、Merck LiChoprep（登録商標）ＲＰ−１８（４０〜６３μｍ）４６０ｘ２６ｍｍカラムを装備した Gilson システム、３０ｍＬ／分、水中のメタノールの勾配で行った。分取ＨＰＬＣは、Phenomenex Hydro ＲＰ  １５０ｘ２０ｍｍを装備した Gilson システム、２０ｍＬ／分、水中のアセトニトリルの勾配で行った。それら化合物を、ＡＣＤ６．０または８．０を用いて自動的に命名した。
【００９４】
分析ＨＰＬＣおよびＬＣＭＳデータは、次で得た。
システムＡ：Phenomenex Synergi Hydro ＲＰ（１５０ｘ４．６ｍｍ、４μｍ）、Ｈ２Ｏ（＋０．１％ＴＦＡ）中の５〜１００％ＣＨ３ＣＮ（＋０．０８５％ＴＦＡ）の勾配、７分の勾配時間で１．５ｍＬ／分、２００〜３００ｎｍ、３０℃；または
システムＢ：Phenomenex Synergi Hydro ＲＰ（１５０ｘ４．６ｍｍ、４μｍ）、Ｈ２Ｏ（＋０．１％ＴＦＡ）中の５〜９５％ＣＨ３ＣＮ（＋０．０８５％ＴＦＡ）の勾配、１５．５分の勾配時間で１ｍＬ／分、２００〜３００ｎｍ、４０℃。
【００９５】
分析ＬＣＭＳデータを、更に、次で得た。
システムＣ：Phenomenex Synergi Hydro ＲＰ（３０ｘ４．６ｍｍ、４μｍ）、Ｈ２Ｏ（＋０．１％ＴＦＡ）中の５〜１００％ＣＨ３ＣＮ（＋０．０８５％ＴＦＡ）の勾配、１．７５分の勾配時間で１．５ｍＬ／分、３０℃。
【００９６】
中間体１
４−ニトロフェニル４−（４−メチル）フェニルピペラジン−１−カルボキシレート
【００９７】
【化１１】
2011506294.tif 000013
【００９８】
ＤＣＭ（１００ｍＬ）中の１−（４−メチルフェニル）ピペラジン二塩酸塩（１０．６５ｇ，４２．７ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２２ｍＬ，１３３ｍｍｏｌ）の０℃溶液に、４−ニトロフェニルクロロホルメート（９．５ｇ，４７．１ｍｍｏｌ）を加えた。その反応混合物を、０℃で３０分間撹拌後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（３ｘ２００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空中で濃縮して、４−ニトロフェニル４−（４−メチル）フェニルピペラジン−１−カルボキシレート（１７．８４ｇ，定量的）を黄色固体として生じ、それを、更に精製することなく用いた。
【００９９】
分析ＬＣＭＳ：純度約９０％（システムＣ，ＲＴ＝２．２０分），ＥＳ＋：３４２．１［ＭＨ］＋。
中間体２
４−ニトロフェニル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート
【０１００】
【化１２】
2011506294.tif 000014
【０１０１】
ＤＣＭ（７０ｍＬ）中のフェニルピペラジン（１２．０ｇ，７４．０ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１３．５ｍＬ，８１．６ｍｍｏｌ）の０℃溶液に、４−ニトロフェニルクロロホルメート（１６．５ｇ，８１．７１ｍｍｏｌ）を加えた。その反応混合物を、０℃で３０分間撹拌後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（３ｘ２００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空中で濃縮して、４−ニトロフェニル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート（２４．８ｇ，１０２％）を黄色固体として生じ、それを、更に精製することなく用いた。
【０１０２】
分析ＬＣＭＳ：純度約９０％（システムＣ，ＲＴ＝２．４０分），ＥＳ＋：３２８．１［ＭＨ］＋。
中間体３
１，４−ジメチル−（Ｓ）−２−ヒドロキシメチルピペラジン
【０１０３】
【化１３】
2011506294.tif 000015
【０１０４】
（Ｓ）−２−ピペラジンカルボン酸二塩酸塩（５．１０ｇ，２５．１ｍｍｏｌ）を、水（１０ｍＬ）およびジオキサン（４０ｍＬ）中に溶解させ、０℃に冷却した。水（６ｍＬ）中の水酸化ナトリウム（３．１０ｇ，７７．５ｍｍｏｌ）と、ジ炭酸ジ−tert−ブチル（１１．５ｇ，５２．７ｍｍｏｌ）を加えた。その反応混合物を、室温で１６時間撹拌後、真空中で濃縮した。残留物を、ＤＣＭ（４００ｍＬ）中に懸濁させ、室温で３０分間撹拌後、濾過した。濾液を真空中で濃縮して、（Ｓ）−２−ピペラジン−１，２，４−トリカルボン酸１，４−ジ−tert−ブチルエステル（９．９０ｇ，１１９％）を白色固体として生じ、それを、更に精製することなく用いた。
【０１０５】
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＣ，ＲＴ＝２．２８分），ＥＳ＋：３３１．１［ＭＨ］＋。
（Ｓ）−２−ピペラジン−１，２，４−トリカルボン酸１，４−ジ−tert−ブチルエステル（９．９０ｇ，３０．０ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（１４ｍＬ）中に溶解させた。ＴＨＦ中の１Ｍボラン（９０ｍＬ，９０．０ｍｍｏｌ）を室温で加えた。反応混合物を、還流しながら４時間撹拌後、０℃に冷却し、そしてメタノール（１００ｍＬ）の滴加で急冷後、真空中で濃縮して、（Ｓ）−２−ヒドロキシメチルピペラジン−１，４−ジカルボン酸ジ−tert−ブチルエステル（１２．０７ｇ，１２７％）を白色固体として生じ、それを、更に精製することなく用いた。
【０１０６】
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＣ，ＲＴ＝２．０８分），ＥＳ＋：３３９．４［ＭＨ］＋。
（Ｓ）−２−ヒドロキシメチルピペラジン−１，４−ジカルボン酸ジ−tert−ブチルエステル（５．６６ｇ，１７．９ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中に溶解させ、０℃に冷却した。ＴＨＦ中の２Ｍ  ＬｉＡｌＨ４（２８．５ｍＬ，５７．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、還流しながら４時間撹拌後、０℃に冷却し、そして１Ｍ水酸化ナトリウム溶液（２０ｍＬ）の滴加で急冷した。反応混合物を、ＴＨＦ（５０ｍＬ）で希釈し、濾過し、そして濾液を真空中で濃縮して、１，４−ジメチル−（Ｓ）−２−ヒドロキシメチルピペラジン（１．４４ｇ，５６％）を無色油状物として生じ、それを、更に精製することなく用いた。
【０１０７】
分析ＬＣＭＳ：純度約９０％（システムＣ，ＲＴ＝０．３８分），ＥＳ＋：１４５．２［ＭＨ］＋。
中間体４
１，４−ジメチル−（Ｒ）−２−ヒドロキシメチルピペラジン
【０１０８】
【化１４】
2011506294.tif 000016
【０１０９】
（Ｒ）−ピペラジン−１，３−ジカルボン酸１−tert−ブチルエステル（４．９４ｇ，２１．５ｍｍｏｌ）を、水（１０ｍＬ）およびジオキサン（２０ｍＬ）中に溶解させ、０℃に冷却した。水（４ｍＬ）中の水酸化ナトリウム（１．７２ｇ，４３．０ｍｍｏｌ）と、ジ炭酸ジ−tert−ブチル（５．２０ｇ，２３．８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、室温で１６時間撹拌後、真空中で濃縮した。残留物を、ＤＣＭ（４００ｍＬ）中に懸濁させ、室温で３０分間撹拌し、濾過し、そして濾液を真空中で濃縮して、（Ｒ）−２−ピペラジン−１，２，４−トリカルボン酸１，４−ジ−tert−ブチルエステル（９．７８ｇ，１３８％）を淡黄色油状物として生じ、それを、更に精製することなく用いた。
【０１１０】
分析ＬＣＭＳ：純度約９０％（システムＣ，ＲＴ＝１．５６分），ＥＳ＋：１３１．７［Ｍ＋Ｈ−２Ｂｏｃ］＋。
（Ｒ）−２−ピペラジン−１，２，４−トリカルボン酸１，４−ジ−tert−ブチルエステル（２．１６ｇ，６．５５ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中に溶解させた。ＴＨＦ中の１Ｍボラン（２０ｍＬ，２０．０ｍｍｏｌ）を、室温で加えた。反応混合物を、還流しながら４時間撹拌後、０℃に冷却し、そしてメタノール（６０ｍＬ）の滴加で急冷後、真空中で濃縮して、（Ｒ）−２−ヒドロキシメチルピペラジン−１，４−ジカルボン酸ジ−tert−ブチルエステル（２．６０ｇ，１２５％）をオフホワイト固体として生じ、それを、更に精製することなく用いた。
【０１１１】
分析ＬＣＭＳ：純度約９０％（システムＣ，ＲＴ＝２．０６分），ＥＳ＋：１１６．９［Ｍ＋Ｈ−２Ｂｏｃ］＋。
（Ｒ）−２−ヒドロキシメチルピペラジン−１，４−ジカルボン酸ジ−tert−ブチルエステル（６．２４ｇ，１９．７ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中に溶解させ、０℃に冷却した。ＴＨＦ中の２Ｍ  ＬｉＡｌＨ４（３０．０ｍＬ，６０．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、還流しながら４時間撹拌後、０℃に冷却し、そして１Ｍ水酸化ナトリウム溶液（２０ｍＬ）の滴加で急冷した。反応混合物を、ＴＨＦ（５０ｍＬ）で希釈し、濾過し、そして濾液を真空中で濃縮して、１，４−ジメチル−（Ｒ）−２−ヒドロキシメチルピペラジン（１．７７ｇ，６２％）を無色油状物として生じ、それを、更に精製することなく用いた。
【０１１２】
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＣ，ＲＴ＝０．４４分），ＥＳ＋：１４５．２［ＭＨ］＋。
中間体５
（Ｓ）−（４−メチルピペラジン−２−イル）−メタノール
【０１１３】
【化１５】
2011506294.tif 000017
【０１１４】
ＴＨＦ（４０ｍＬ）中の（Ｓ）−ピペラジン−１，３−ジカルボン酸１−tert−ブチルエステル（５．００ｇ，２１．７ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液に、１．０Ｍボラン・ＴＨＦ錯体溶液（３２．６ｍＬ，３２．６ｍｍｏｌ）を徐々に加えた。その反応を、９０℃に加熱し、還流下で２時間撹拌した。反応混合物を、熱から外した後、更に１．５当量の１．０Ｍボラン・ＴＨＦ錯体溶液（３２．６ｍＬ，３２．６ｍｍｏｌ）を加えた。その反応を、９０℃に再加熱し、還流下で更に２時間撹拌した。反応を０℃に冷却し、そしてＭｅＯＨの緩慢添加で急冷した。次に、反応混合物を、真空中で濃縮した。得られた白色固体を、ＴＨＦ（３０ｍＬ）中に溶解させ、０℃に冷却し、そしてＴＨＦ中の２．０Ｍ  ＬｉＡｌＨ４溶液（２７ｍＬ，５４．０ｍｍｏｌ）を徐々に加えた。その反応を、９０℃に加熱し、還流下で２時間撹拌した。追加部分のＴＨＦ中の２．０Ｍ  ＬｉＡｌＨ４溶液（２７ｍＬ，５４．０ｍｍｏｌ）を加え、そして反応を、還流下で４時間、次に室温で一晩撹拌した。反応混合物を、０℃に冷却し、そして１．０Ｍ  ＮａＯＨ水溶液の緩慢添加で、発熱反応が止むまで急冷した。得られたゲルを、ＴＨＦで希釈し、そして固体を濾去した。次に、濾液を真空中で濃縮して、（Ｓ）−（４−メチルピペラジン−２−イル）−メタノール（２．８４ｇ，１０１％粗収率）を無色油状物として与えた。
【０１１５】
中間体６
４−（４−フルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボン酸４−ニトロフェニルエステル
【０１１６】
【化１６】
2011506294.tif 000018
【０１１７】
１−（４−フルオロフェニル）−ピペラジン（１２．２ｇ，６７．７ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（４．６３ｍＬ，６７．７ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（１５０ｍＬ）中に窒素下で溶解させ、そして反応混合物を０℃に冷却した。無水ＴＨＦ（１５０ｍＬ）中に０℃で溶解した４−ニトロフェニルクロロホルメート（１３．４ｇ，６７．７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。溶媒を真空中で除去し、そして残留物を、水とＥｔＯＡｃとに懸濁させた。水性層を、二つの追加部分のＥｔＯＡｃで抽出し、有機層を一緒にし、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空中で乾燥後、トルエン（５０ｍＬ）／ヘキサン（６０ｍＬ）から再結晶させて、４−（４−フルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボン酸４−ニトロフェニルエステル（１５．８ｇ，６７％）を微細黄色針状物として生じた。
【０１１８】
中間体７
３−ヒドロキシメチルモルホリン−４−カルボン酸tert−ブチルエステル
【０１１９】
【化１７】
2011506294.tif 000019
【０１２０】
モルホリン−３，４−ジカルボン酸４−tert−ブチルエステル（９．５０ｇ，４１ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（５０ｍＬ）中に窒素下で溶解させ、−１０℃に冷却した。１Ｍボラン溶液（８２ｍＬ，８２ｍｍｏｌ）を滴加し、同時に、０℃未満の温度を維持した。反応混合物を室温に暖め、一晩撹拌した。反応混合物を−５℃に冷却し、そして水（１０ｍＬ）を注意深く加えた後、水（２０ｍＬ）中のＮａ２ＣＯ３（９．５ｇ）を加えた。室温で３０分間撹拌後、ＴＨＦを真空中で除去し、水を加え、そして反応混合物を、ジエチルエーテル（ｘ３）で抽出した。合わせた有機抽出物を、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空中で蒸発させて、３−ヒドロキシメチルモルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（８．９ｇ，１００％）を無色油状物として生じた。
【０１２１】
中間体８
（Ｓ）−２−ヒドロキシメチルモルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル
【０１２２】
【化１８】
2011506294.tif 000020
【０１２３】
（Ｓ）−３−アミノ−１，２−プロパンジオール（１６．８ｇ，１８４ｍｍｏｌ）を、ＭｅＯＨ（９０ｍＬ）中に室温で溶解させ、その溶液を、ＭｅＣＮ（５５０ｍＬ）で希釈した。ＮＥｔ３（３０．５ｍＬ，２１９ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を−１０℃に冷却した。クロロアセチルクロリド（２２．２ｇ，１５．６ｍＬ，１９７ｍｍｏｌ）を、窒素下において−１０℃で１．５時間滴加した。温度を、−１０℃で更に１時間維持した後、反応混合物を室温に達しさせ、一晩（１６時間）撹拌した。溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相、Apollo Scientific シリカ、４０〜６０μ、６０Å、ＥｔＯＡｃ中の１％〜１０％ＭｅＯＨの勾配）によって精製した。合わせた画分を蒸発させて、２−クロロ−Ｎ−［（Ｓ）−２，３−ジヒドロキシプロピル］-アセトアミド（２８．５ｇ，９２％）を無色油状物として与え、それは、放置すると白色固体を生じた。
【０１２４】
ｔ−ＡｍＯＨ（１７５ｍＬ）中のｔ−ＢｕＯＫ（１３．７ｇ，１２２ｍｍｏｌ）の溶液に、ｔ−ＡｍＯＨ（３２５ｍＬ）中の２−クロロ−Ｎ−［（Ｓ）−２，３−ジヒドロキシプロピル］アセトアミド（８．１ｇ，４８．３ｍｍｏｌ）の溶液を室温で２時間にわたって加えた。得られた懸濁液を、室温で１時間撹拌した。メタノール（５０ｍＬ）および水（５ｍＬ）を加え、得られた溶液を、室温で０．５時間撹拌後、濃ＨＣｌの添加によってｐＨを５に調整した。その懸濁液を濾過し、固体をメタノールで洗浄した。濾液を真空中で蒸発させ、得られた固体をメタノール（５０ｍＬ）中でスラリーにし、濾去して、（Ｓ）−６−（ヒドロキシメチル）モルホリン−３−オン（１．３ｇ）を白色固体として与えた。ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）を濾液に加えることによって第二収量を得、そして得られた溶液を、シリカプラグ（１ｘ１０ｃｍ）を介して濾過した。溶媒を真空中で蒸発させて、（Ｓ）−６−（ヒドロキシメチル）モルホリン−３−オン（３．９ｇ，全収量５．２ｇ，８２％）を白色固体として与えた。
【０１２５】
無水ＴＨＦ（１００ｍＬ）中の（Ｓ）−６−（ヒドロキシメチル）モルホリン−３−オン（７．５０ｇ，５７．２ｍｍｏｌ）の０℃溶液に、ＴＨＦ中のＢＨ３（１１０ｍＬ，８５．８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、室温に達しさせた後、還流しながら一晩加熱した。その反応を、室温に冷却後、ＴＨＦ（１６ｍＬ）中の水（５ｍＬ）の混合物で、次に７Ｍメタノール性アンモニア（３０ｍＬ）で急冷した。反応混合物を、加熱して３０分間還流させ、冷却し、溶媒を真空中で除去した。残留物を、メタノール（１５ｍＬ）中に溶解させ、Isolute ＳＣＸ−２の２０ｇカラム上に充填し、ＭｅＯＨ（１００ｍＬ）で洗浄し、そしてメタノール性アンモニアで溶離した。溶媒を真空中で除去して、（Ｓ）−モルホリン−２−イルメタノール（１．６７ｇ，２４％）を褐色液体として生じた。
【０１２６】
ＤＣＭ（７５ｍＬ）中の（Ｓ）−モルホリン−２−イルメタノール（１．６３ｇ，１３．９ｍｍｏｌ）の溶液に、水（２ｍＬ）中のＮａＯＨ（０．６１ｇ，１５．３ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。ジ炭酸ジ−tert−ブチル（３．０４ｇ，１３．９ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。水性相を分離し、そしてＤＣＭ（２ｘ１５ｍＬ）で更に抽出した。合わせた有機相を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相シリカ、２０ｇ Isolute−Ｓｉカラム、ＤＣＭ中の１％〜１０％ＭｅＯＨの勾配）によって精製し、真空中で乾燥させて、（Ｓ）−２−ヒドロキシメチルモルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（２．３ｇ，７１％）を白色固体として生じた。
【０１２７】
中間体９
（Ｒ）−２−ヒドロキシメチルモルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル
【０１２８】
【化１９】
2011506294.tif 000021
【０１２９】
（Ｒ）−２−ヒドロキシメチルモルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステルを、中間体８について記載の手順と同様であるが、（Ｒ）−３−アミノ−１，２−プロパンジオールを（Ｓ）−３−アミノ−１，２−プロパンジオールの代わりに用いて製造した。標題化合物を、白色固体として得た（１０％全収率，４工程）。
【０１３０】
中間体１０
（Ｓ）−（４−メチルモルホリン−２−イル）−メタノール
【０１３１】
【化２０】
2011506294.tif 000022
【０１３２】
ＴＨＦ（５ｍＬ）中の（Ｓ）−２−ヒドロキシメチルモルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（中間体８；１．２０ｇ，５．５２ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（１５ｍＬ）中のＬｉＡｌＨ４（１．３０ｇ，３４．３ｍｍｏｌ）の懸濁液に−１０℃で加え、窒素下で１５分間撹拌した。冷却浴を除去し、そして反応混合物を、穏やかに加熱して４時間還流した。反応混合物を、氷浴冷却しているＴＨＦ（２５ｍＬ）中の水（４ｍＬ）の混合物の注意深い添加によって急冷した。ＴＨＦ（５０ｍＬ）を反応混合物に加え、１５分間撹拌し、濾過し、そして固体をＴＨＦ（５０ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を、真空中で蒸発させた。残留物を、ＤＣＭ（５０ｍＬ）中に溶解させ、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空中で除去して、（Ｓ）−（４−メチルモルホリン−２−イル）−メタノール（４９０ｍｇ，６７％）を無色油状物として生じた。
【０１３３】
中間体１１
（Ｒ）−（４−メチルモルホリン−２−イル）−メタノール
【０１３４】
【化２１】
2011506294.tif 000023
【０１３５】
（Ｒ）−（４−メチルモルホリン−２−イル）−メタノールを、中間体１０について記載の手順と同様であるが、（Ｒ）−２−ヒドロキシメチルモルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（中間体９）を（Ｓ）−２−ヒドロキシメチルモルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（中間体８）の代わりに用いて製造した。標題化合物を、無色油状物として得た（５６０ｍｇ，７７％）。
【０１３６】
中間体１２
４−（２，４−ジフルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボン酸４−ニトロフェニルエステル
【０１３７】
【化２２】
2011506294.tif 000024
【０１３８】
１−（２，４−ジフルオロフェニル）−ピペラジン（３．７０ｇ，１８．９ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（２．８ｍＬ，１９．８ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（３０ｍＬ）中に窒素下で溶解させ、反応混合物を０℃に冷却した。無水ＴＨＦ（２５ｍＬ）中に溶解した４−ニトロフェニルクロロホルメート（３．８ｇ，１８．９ｍｍｏｌ）を滴加し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。溶媒を真空中で除去し、そして残留物を水で研和後、濾過した。黄色固体を、ヘキサンおよびトルエン（３：７）の混合物から木炭を用いて再結晶させて、４−（２，４−ジフルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボン酸４−ニトロフェニルエステル（４．３ｇ，６３％）を黄色結晶性固体として生じた。
【０１３９】
中間体１３
２−（１，４−ジメチルピペラジン−２−イル）エタノール
【０１４０】
【化２３】
2011506294.tif 000025
【０１４１】
ジオキサン（１２ｍＬ）および水（６．０ｍＬ）中のメチル−２−ピペラジンアセテート二塩酸塩（５００ｍｇ，２．１６ｍｍｏｌ）の０℃溶液に、水（０．４ｍＬ）中のＮａＯＨ（１８２ｇ，４．５５ｍｍｏｌ）の溶液、次にジ炭酸ジ−tert−ブチル（９９２ｍｇ，４．５５ｍｍｏｌ）を徐々に加えた。その反応混合物を、室温で４時間撹拌後、真空中で濃縮した。得られた塩に、ＤＣＭ（７５ｍＬ）を加え、その懸濁液を激しく３０分間撹拌した。塩を濾去し、ＤＣＭ（５０ｍＬ）で洗浄した。濾液を真空中で濃縮して、２−メトキシカルボニルメチルピペラジン−１，４−ジカルボン酸ジ−tert−ブチルエステル（６６２ｍｇ，８５％）を淡黄色油状物として与えた。
【０１４２】
無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の２−メトキシカルボニルメチルピペラジン−１，４−ジカルボン酸ジ−tert−ブチルエステル（６６２ｍｇ，１．８５ｍｍｏｌ）の０℃撹拌溶液に、ＴＨＦ中の１Ｍ  ＬｉＡｌＨ４溶液（５．７ｍＬ，５．７０ｍｍｏｌ）を徐々に加えた。その撹拌反応混合物を、１５分間にわたって室温に暖めた後、２時間還流させた。この時間後、反応混合物を０℃に冷却し、そして１．０Ｍ  ＮａＯＨ水溶液の滴加によって、発泡が止むまで注意深く急冷した。得られたゲルを、ＴＨＦ（５０ｍＬ）で希釈し、固体を濾去した。濾液を真空中で濃縮して、２−（１，４−ジメチルピペラジン−２−イル）エタノール（１９１ｍｇ，６５％）を無色油状物として与えた。
【０１４３】
実施例１
［（３Ｒ）−１−メチルピペリジン−３−イル］メチル４−（４−メチルフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【０１４４】
【化２４】
2011506294.tif 000026
【０１４５】
ＴＨＦ中の２Ｍ  ＬｉＡｌＨ４溶液（１４．０ｍＬ，２８．０ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（３０ｍＬ）中の（Ｒ）−tert−ブチル３−（ヒドロキシメチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（５．００ｇ，２３．２ｍｍｏｌ）の溶液にアルゴン下において０℃で滴加した。反応混合物を、２時間にわたって室温に暖め、室温で１７時間撹拌した。反応混合物を０℃に冷却し、そして１Ｍ  ＮａＯＨ水溶液（４．０ｍＬ）を滴加した。水（２ｍＬ）を加え、得られた混合物を室温で２時間撹拌した。白色固体を濾過によって除去した。濾液を真空中で濃縮して、（Ｒ）−（１−メチルピペリジン−３−イル）メタノール（３．１９ｇ，１０６％）を無色油状物として生じ、それを、更に精製することなく用いた。
【０１４６】
分析ＬＣＭＳ：純度約９０％（システムＣ，ＲＴ＝０．４６分），ＥＳ＋：１３０．１［ＭＨ］＋。
水素化ナトリウム（０．７０ｇ，鉱油中６０％分散液，１７．５ｍｍｏｌ）を、ヘプタン（１０ｍＬ）中にアルゴン雰囲気下で懸濁させた。ヘプタンを傾瀉除去し、そしてフラスコにＴＨＦ（２０ｍＬ）を入れ、０℃に冷却した。ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の（Ｒ）−（１−メチルピペリジン−３−イル）メタノール（０．７５ｇ，５．８３ｍｍｏｌ）の溶液を、次にＴＨＦ（２０ｍＬ）中の４−ニトロフェニル４−（４−メチルフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（中間体１；２．１９ｇ，６．４２ｍｍｏｌ）の溶液を滴加した。反応混合物を室温に暖め、１８時間撹拌した。次に、反応混合物を０℃に冷却し、そして飽和ＮａＨＣＯ３水溶液の滴加で急冷し、真空中で濃縮した。残留物を、酢酸エチル（２００ｍＬ）中に溶解させ、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（４ｘ５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空中で濃縮した。残留物を、逆相クロマトグラフィー（各々の溶媒中に１％ギ酸を含む、水中の０〜２５％メタノールで勾配溶離する）によって精製した。得られた残留物を、ＤＣＭ（５０ｍＬ）中に溶解させ、固体Ｋ２ＣＯ３と一緒に２０分間撹拌し、濾過し、真空中で濃縮した。残留物を、順相カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭで、次に９０：１０のＤＣＭ：ＭｅＯＨ混合物で溶離する）によって更に精製して、［（３Ｒ）−１−メチルピペリジン−３−イル］メチル４−（４−メチルフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（６１９ｍｇ，３２％）を淡褐色固体として生じた。
【０１４７】
分析ＨＰＬＣ：純度９９．９％（システムＡ，ＲＴ＝４．０７分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝４．４６分），ＥＳ＋：３３２．５［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１９Ｈ２９Ｎ３Ｏ２の理論値３３１．２２６０，実測値３３１．２２７５。
【０１４８】
実施例２
［（３Ｓ）−１−メチルピペリジン−３−イル］メチル４−（４−メチルフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【０１４９】
【化２５】
2011506294.tif 000027
【０１５０】
（Ｓ）−（１−メチルピペリジン−３−イル）メタノール（１．５０ｇ，１１．６ｍｍｏｌ；実施例１にしたがうが、（Ｓ）−tert−ブチル３−（ヒドロキシメチル）ピペリジン−１−カルボキシレートから出発して製造される）を、ＤＣＭ（２０ｍＬ）中に溶解させ、０℃に冷却した。ＮＭＭ（１．３０ｍＬ，１２．２ｍｍｏｌ）およびニトロフェニルクロロホルメート（２．４６ｇ，１２．２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃で２時間撹拌後、ＤＭＦ（４０ｍＬ）中の４−（４−メチルフェニル）ピペラジン二塩酸塩（１．８８ｇ，７．５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（３．７０ｍＬ，２２．１ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。反応混合物を、室温で２時間撹拌後、真空中で濃縮した。残留物を、ＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）中に溶解させた後、１Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３水溶液（５ｘ２００ｍＬ）で逐次的に洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空中で濃縮した。残留物を、順相カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭで、次に８５：１５のＤＣＭ：ＭｅＯＨ混合物で溶離する）、次に逆相ＨＰＬＣ（Advanced Chromatography Technologies ＡＣＥ−１２２−１０３０ＲＰシリカ１００ｘ３０ｍｍカラム、Ａｃｅ５  Ｃ８（５μｍ）で充填、細孔度１００Å、３０ｍＬ／分、各々の溶媒中に０．１％ＴＦＡを含む水中の８〜３８％ＣＨ３ＣＮの勾配）によって精製した。残留物をＤＣＭ（７０ｍＬ）中に溶解させ、そして固体Ｋ２ＣＯ３と一緒に２０分間撹拌し、濾過し、真空中で濃縮して、黄色油状物を生じ、それを、ヘプタン／ＥｔＯＡから再結晶させて、［（３Ｓ）−１−メチルピペリジン−３−イル］メチル４−（４−メチルフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（５２１ｍｇ，１３．５％）を白色固体として生じた。
【０１５１】
分析ＨＰＬＣ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝３．８８分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝４．３９分），ＥＳ＋：３３２．２［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１９Ｈ２９Ｎ３Ｏ２の理論値３３１．２２６０，実測値３３１．２２７０。
【０１５２】
実施例３
［（２Ｓ）−１，４−ジメチルピペラジン−２−イル］メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート
【０１５３】
【化２６】
2011506294.tif 000028
【０１５４】
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の１，４−ジメチル−（Ｓ）−２−ヒドロキシメチルピペラジン（中間体３；１．４９ｇ，１０．３ｍｍｏｌ）の０℃溶液に、水素化ナトリウム（１．２４ｇ，鉱油中６０％分散液，３１．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、０℃で数分間撹拌後、ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の４−ニトロフェニル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート（中間体２；３．７２ｇ，１１．４ｍｍｏｌ）。反応混合物を室温に暖め、７時間撹拌した。次に、反応混合物を０℃に冷却し、そして飽和ＮａＨＣＯ３水溶液の滴加で急冷した。ＴＨＦを真空中で除去し、水性相をＥｔＯＡｃ（ｘ３）で抽出し、合わせた有機相を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（ｘ６）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空中で濃縮した。残留物を、水：ギ酸溶液［１：１］（２０ｍＬ）中に懸濁させ、濾過し、そして濾液を、逆相カラムクロマトグラフィー（各々の溶媒中に１％ギ酸を含む、水中の０〜１５％メタノールで勾配溶離する）によって精製した。得られた残留物を、ＤＣＭ（５０ｍＬ）中に溶解させ、固体Ｋ２ＣＯ３と一緒に２０分間撹拌し、濾過し、真空中で濃縮して、［（２Ｓ）−１，４−ジメチルピペラジン−２−イル］メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート（１．２５ｇ，３６％）を淡黄色固体として生じた。
【０１５５】
分析ＨＰＬＣ：純度９９．８％（システムＡ，ＲＴ＝３．５０分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝３．８６分），ＥＳ＋：３３３．６［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１８Ｈ２８Ｎ４Ｏ２の理論値３３２．２２１２，実測値３３２．２２２７。
【０１５６】
実施例４
［（２Ｒ）−１，４−ジメチルピペラジン−２−イル］メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート
【０１５７】
【化２７】
2011506294.tif 000029
【０１５８】
水素化ナトリウム（１．１４ｇ，鉱油中６０％分散液，２８．６ｍｍｏｌ）を、ヘプタン（１０ｍＬ）中にアルゴン雰囲気下で懸濁させた。ヘプタンを傾瀉除去し、そのフラスコにＴＨＦ（２０ｍＬ）を入れ、０℃に冷却した。ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の１，４−ジメチル−（Ｒ）−２−ヒドロキシメチルピペラジン（中間体４；１．３８ｇ，９．５ｍｍｏｌ）の溶液、次にＴＨＦ（２０ｍＬ）中の４−ニトロフェニル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート（中間体２；４．０６ｇ，１２．４ｍｍｏｌ）の溶液を滴加した。反応混合物を室温に暖め、１６時間撹拌し、反応混合物を０℃に冷却後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液の滴加で急冷し、真空中で濃縮した。残留物を、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）中に溶解させ、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（４ｘ５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空中で濃縮した。残留物を、水：ギ酸溶液［１：１］（２０ｍＬ）中に懸濁させ、濾過し、そして濾液を、逆相カラムクロマトグラフィー（各々の溶媒中に１％ギ酸を含む、水中の０〜１５％メタノールで勾配溶離する）によって精製した。得られた残留物を、ＤＣＭ（５０ｍＬ）中に溶解させ、固体Ｋ２ＣＯ３と一緒に２０分間撹拌し、濾過し、真空中で濃縮して、［（２Ｒ）−１，４−ジメチルピペラジン−２−イル］メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート（１．９３ｇ，６１％）を淡黄色固体として生じた。
【０１５９】
分析ＨＰＬＣ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝３．５５分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝３．９０分），ＥＳ＋：３３３．５［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１８Ｈ２８Ｎ４Ｏ２の理論値３３２．２２１２，実測値３３２．２２２５。
【０１６０】
実施例５
［（２Ｓ）−１，４−ジメチルピペラジン−２−イル］メチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【０１６１】
【化２８】
2011506294.tif 000030
【０１６２】
４−ニトロフェニルクロロホルメート（５．１７ｇ，２５．７ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（２００ｍＬ）中に室温で溶解させ、反応混合物を０℃に冷却し、そしてＤＩＰＥＡ（６．９４ｇ，９．３８ｍＬ，５３．９ｍｍｏｌ）および１，４−ジメチル−（Ｓ）−２−ヒドロキシメチルピペラジン（中間体３；３．７０ｇ，２５．７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、室温で２時間撹拌後、等容量の三つに分けた。一つに、１−（４−フルオロフェニル）−ピペラジン（１．５３ｇ，８．５ｍｍｏｌ）を加え、その混合物を４８時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、そして残留物を、ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）と１．０Ｍ  ＮａＯＨ溶液（２００ｍＬ）とに分配した。有機層を、１．０Ｍ  ＮａＯＨ水溶液（５ｘ１２５ｍＬ）、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。残留物を、ＤＣＭ（１００ｍＬ）中に溶解させ、イソシアネート樹脂（３ｇ）を加え、反応混合物を１４時間振とうし、濾過し、そして溶媒を真空中で除去した。残留物を、逆相カラムクロマトグラフィー（LiChroprep ＲＰ−１８，４０〜６３μｍ，４６０ｘ２６ｍｍ（１００ｇ），３０ｍＬ／分，１％ギ酸を含む水中の０％〜３０％（７５分間にわたる）〜１００％（１３分間にわたる）ＭｅＯＨの勾配）によって精製した。残留物を、ＤＣＭ中のＫ２ＣＯ３を用いて脱塩して、［（２Ｓ）−１，４−ジメチルピペラジン−２−イル］メチル４−（４−フルオロフェニル）-ピペラジン−１−カルボキシレート（１．７８ｇ，６０．０％）を淡黄色ガムとして生じた。
【０１６３】
分析ＨＰＬＣ：純度９９．１％（システムＡ，ＲＴ＝３．６９分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝４．１０分），ＥＳ＋：３５１．１［ＭＨ］＋。
【０１６４】
実施例６
４−フェニルピペラジン−１−カルボン酸２−（１，４−ジメチルピペラジン−２−イル）エチルエステル
【０１６５】
【化２９】
2011506294.tif 000031
【０１６６】
２−（１，４−ジメチルピペラジン−２−イル）エタノール（７０３ｍｇ，４．４４ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）中に溶解させ、その撹拌溶液を０℃に冷却後、ＮａＨ（鉱油中６０％分散液；５５０ｍｇ，１３．８ｍｍｏｌ）を加えた。その懸濁液を１０分間撹拌させた。４−ニトロフェニル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート（中間体２；１．８９ｇ，５．７７ｍｍｏｌ）を、反応混合物に加え、それを、室温で３時間撹拌させた。この時間後、混合物を０℃に冷却し且つ飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍＬ）で注意深く急冷することによって反応を止めた。ＴＨＦを真空中で取り出し、分液漏斗に移し、そこで、有機生成物をＥｔＯＡｃ（３ｘ７５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を一緒に集め、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（３ｘ７５ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮して、粗製黄色スラリーを生じた。その粗製残留物を、逆相カラムクロマトグラフィー（LiChroprep ＲＰ−１８，４０〜６３μｍ，４６０ｘ２６ｍｍ（１００ｇ），３０ｍＬ／分，１％ギ酸を含む水中の０％〜１５％（７０分間にわたる）〜１００％（５分間にわたる）ＭｅＯＨの勾配）によって精製した。脱塩（ＤＣＭ中のＫ２ＣＯ３を用いた）、濾過および真空中の濃縮は、４−フェニルピペラジン−１−カルボン酸２−（１，４−ジメチルピペラジン−２−イル）エチルエステル（２３６ｍｇ，１３％）を暗黄色油状物として与えた。
【０１６７】
分析ＨＰＬＣ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝３．５０分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝３．９２分），ＥＳ＋：３４７．６［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１９Ｈ３０Ｎ４Ｏ２の理論値３４６．２３６９，実測値３４６．２３７８。
【０１６８】
実施例７
［（２Ｓ）−１，４−ジメチルピペラジン−２−イル］メチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【０１６９】
【化３０】
2011506294.tif 000032
【０１７０】
４−ニトロフェニルクロロホルメート（５．１７ｇ，２５．７ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（２００ｍＬ）中に室温で溶解させ、反応混合物を０℃に冷却し、そしてＤＩＰＥＡ（６．９４ｇ，９．３８ｍＬ，５３．９ｍｍｏｌ）および１，４−ジメチル−（Ｓ）−２−ヒドロキシメチルピペラジン（中間体３；３．７０ｇ，２５．７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、室温で２時間撹拌後、等容量の三つに分けた。一つに、１−（２，４−ジフルオロフェニル）−ピペラジン（１．６８ｇ，８．５ｍｍｏｌ）を加え、４８時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、そして残留物を、ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）と１．０Ｍ  ＮａＯＨ水溶液（２００ｍＬ）とに分配した。有機層を、１．０Ｍ  ＮａＯＨ水溶液（５ｘ１２５ｍＬ）、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。残留物を、ＤＣＭ（１００ｍＬ）中に溶解させ、イソシアネート樹脂（３ｇ）を加え、反応混合物を１４時間振とうし、濾過し、溶媒を真空中で除去した。残留物を、逆相カラムクロマトグラフィー（LiChroprep ＲＰ−１８，４０〜６３μｍ，４６０ｘ２６ｍｍ（１００ｇ），３０ｍＬ／分，１％ギ酸を含む水中の０％〜３０％（７５分間にわたる）〜１００％（１３分間にわたる）ＭｅＯＨの勾配）によって精製した。残留物を、ＤＣＭ中のＫ２ＣＯ３を用いて脱塩して、［（２Ｓ）−１，４−ジメチルピペラジン−２−イル］メチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（１．２３ｇ，３９．４％）を淡黄色ガムとして生じた。
【０１７１】
分析ＨＰＬＣ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝４．１２分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝４．５３分），ＥＳ＋：３６９．１［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１８Ｈ２６Ｆ２Ｎ４Ｏ２の理論値３６８．２０２４，実測値３６８．２０３８。
【０１７２】
実施例８
［（２Ｓ）−４−メチルピペラジン−２−イル］メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート三塩酸塩
【０１７３】
【化３１】
2011506294.tif 000033
【０１７４】
Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）およびジオキサン（４０ｍＬ）の混合物中の（Ｓ）−（４−メチルピペラジン−２−イル）−メタノール（中間体５；２．８４ｇ，２１．７ｍｍｏｌ）の０℃懸濁液に、５０％ｗ／ｗＮａＯＨ水溶液（０．９６ｇ，２４．０ｍｍｏｌ）を加えた。ジ炭酸ジ−tert−ブチル（５．０１ｇ，２２．９ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。溶媒を真空中で除去した。残留物を、無水ＴＨＦ（２５ｍＬ）中に溶解させ、その溶液を０℃に冷却した。ＮａＨ（油中６０％ｗｔ分散液；４．０５ｇ，１０１ｍｍｏｌ）を加え、その灰色懸濁液を１０分間撹拌後、４−ニトロフェニル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート（中間体２；１１．２ｇ，３４．１ｍｍｏｌ）を加えた。その反応を、室温で週末にわたって撹拌した。反応混合物を０℃に冷却し、そして飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２０ｍＬ）で急冷後、ＴＨＦを真空中で除去した。有機生成物を、ＥｔＯＡｃ（３ｘ５０ｍＬ）で抽出し、有機層を一緒にし、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（３ｘ５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。ＭｅＯＨを、その粗製スラリーに加え、固体を濾去し、ＭｅＯＨで洗浄した。濾液を濃縮し、そして二つのバッチ中において逆相カラムクロマトグラフィー（LiChroprep ＲＰ−１８，４０〜６３μｍ，４６０ｘ２６ｍｍ（１００ｇ），３０ｍＬ／分，１％ギ酸を含む水中の０％〜５０％（７５分間にわたる）ＭｅＯＨの勾配）によって精製した。その生成物を、ＤＣＭ中のＫ２ＣＯ３を用いて脱塩して、（Ｓ）−４−メチル−２−（４−フェニルピペラジン−１−カルボニルオキシメチル）−ピペラジン−１−カルボン酸 tert−ブチルエステル（１．６５ｇ，１８％）を褐色油状物として生じた。
【０１７５】
ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中の（Ｓ）−４−メチル−２−（４−フェニルピペラジン−１−カルボニルオキシメチル）−ピペラジン−１−カルボン酸 tert−ブチルエステル（１．６５ｇ，３．９ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｅｔ２Ｏ中の２Ｍ  ＨＣｌ溶液（１１．８ｍＬ，２３．６ｍｍｏｌ）を加えた。その反応を、室温で３日間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮した。残留物を、逆相カラムクロマトグラフィー（LiChroprep ＲＰ−１８，４０〜６３μｍ，４６０ｘ２６ｍｍ（１００ｇ），３０ｍＬ／分，０．１％ＴＦＡを含む水中の０％〜１５％（７５分間にわたる）ＭｅＯＨの勾配によって精製した。次に、その物質を、逆相ＨＰＬＣ（ＹＭＣ  ＯＤＳ−Ａ  １００ｘ２０ｍｍ，５μｍ，２５ｍＬ／分，１０％ＭｅＯＨ／水中の５０％〜１００％（７分間にわたる）、次に１００％（３分）ＭｅＯＨの勾配）によって更に精製した。純粋な生成物を、４Ｍ  ＨＣｌ水溶液（１０ｍＬ）中で４時間撹拌後、真空中で濃縮した。得られた油状物を、ヘプタンで洗浄し、真空中で濃縮後、真空オーブン中で一晩乾燥させて、［（２Ｓ）−４−メチルピペラジン−２−イル］メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート三塩酸塩（１．６３ｇ，９６％）を淡褐色固体として与えた。
【０１７６】
分析ＨＰＬＣ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝３．２７分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝３．７１分），ＥＳ＋：３１９．２［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１７Ｈ２６Ｎ４Ｏ２の理論値３１８．２０５６，実測値３１８．２０７１。
【０１７７】
実施例９
（１，４−ジメチルピペラジン−２−イル）メチル４−ベンジルピペラジン−１−カルボキシレート
【０１７８】
【化３２】
2011506294.tif 000034
【０１７９】
１，４−ジメチル−２−ヒドロキシメチルピペラジン（１．００ｇ，６．９４ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（５０ｍＬ）中に室温で溶解させ、ＮＭＭ（０．７４ｇ，７．２９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃に冷却し、４−ニトロフェニルクロロホルメート（１．４ｇ，６．９４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、室温で４時間撹拌後、等容量の二つに分けた。一つに、ＤＩＰＥＡ（１．３５ｇ，１０．４ｍｍｏｌ）、１−ベンジルピペラジン（０．６１ｇ，３．４７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を４時間撹拌した。それら溶媒を真空中で除去し、そして残留物を、ＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）と１．０Ｍ  ＮａＯＨ水溶液（１００ｍＬ）とに分配した。有機層を、１．０Ｍ  ＮａＯＨ水溶液（５ｘ１００ｍＬ）、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。残留物を、ＤＣＭ（１００ｍＬ）中に溶解させ、イソシアネート樹脂を加え、反応混合物を１６時間振とうし、濾過し、溶媒を真空中で除去した。残留物を、逆相カラムクロマトグラフィー（LiChroprep ＲＰ−１８，４０〜６３μｍ，４６０ｘ２６ｍｍ（１００ｇ），３０ｍＬ／分，１％ギ酸を含む水中の０％〜３０％（８８分間にわたる）ＭｅＯＨの勾配）によって精製した。残留物を、ＤＣＭ中のＫ２ＣＯ３を用いて脱塩して、（１，４−ジメチルピペラジン−２−イル）メチル４−ベンジルピペラジン−１−カルボキシレート（０．３２ｇ，２６．３％）を淡黄色油状物として生じた。
【０１８０】
分析ＨＰＬＣ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝２．９４分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝３．４０分），ＥＳ＋：３４７．２［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１９Ｈ３０Ｎ４Ｏ２の理論値３４６．２３６９，実測値３４６．２３８２。
【０１８１】
実施例１０
モルホリン−２−イルメチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート二塩酸塩
【０１８２】
【化３３】
2011506294.tif 000035
【０１８３】
２−ヒドロキシメチルモルホリン−４−カルボン酸tert−ブチルエステル（４．１３ｇ，１９．０ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）中に溶解させ、その溶液を０℃に冷却した。ＮａＨ（油中６０％ｗｔ分散液；２．２８ｇ，５７．０ｍｍｏｌ）を加え、灰色懸濁液を１０分間撹拌後、４−ニトロフェニル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート（中間体２；７．４６ｇ，２２．８ｍｍｏｌ）を加えた。その反応を、室温で週末にわたって撹拌した。更に１．５当量のＮａＨ（油６０％ｗｔ分散液）（１．１４ｇ，２８．５ｍｍｏｌ）を加え、反応を室温で一晩撹拌した。反応混合物を０℃に冷却し、そして飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍＬ）で急冷後、ＴＨＦを真空中で除去した。有機生成物を、ＥｔＯＡｃ（３ｘ５０ｍＬ）で抽出し、有機層を一緒にし、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（３ｘ５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。残留物を、逆相カラムクロマトグラフィー（LiChroprep ＲＰ−１８，４０〜６３μｍ，４６０ｘ３６ｍｍ（２００ｇ），３０ｍＬ／分，１％ギ酸を含む水中の０％〜８０％（１２０分間にわたる）ＭｅＯＨの勾配）によって精製して、２−（４−フェニルピペラジン−１−カルボニルオキシメチル）−モルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（６．６７ｇ，８７％収率）を暗褐色油状物として与えた。
【０１８４】
ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中の２−（４−フェニルピペラジン−１−カルボニルオキシメチル）−モルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（６．６７ｇ，１６．５ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｅｔ２Ｏ中の２Ｍ  ＨＣｌ溶液（１６．５ｍＬ，３２．９ｍｍｏｌ）を加えた。その褐色溶液を、室温で一晩撹拌した。反応混合物を、真空中で濃縮した。残留物を、逆相カラムクロマトグラフィー（LiChroprep ＲＰ−１８，４０〜６３μｍ，４６０ｘ２６ｍｍ（１００ｇ），３０ｍＬ／分，０．１％ＴＦＡを含む水中の０％〜１５％（７５分間にわたる）ＭｅＯＨの勾配）によって精製した。純粋な試料を、４Ｍ  ＨＣｌ水溶液（２０ｍＬ）中で一晩撹拌後、真空中で濃縮した。得られた黄色油状物を、ヘプタンで洗浄し、真空中で濃縮し、真空オーブン中で一晩乾燥させて、モルホリン−２−イルメチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート二塩酸塩（４．７２ｇ，７６％）を淡黄色固体として生じた。
【０１８５】
分析ＨＰＬＣ：純度９９．６％（システムＡ，ＲＴ＝３．５７分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝３．９０分），ＥＳ＋：３０６．５［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１６Ｈ２３Ｎ３Ｏ３の理論値３０５．１７３９，実測値３０５．１７４９。
【０１８６】
実施例１１
（２Ｓ）−モルホリン−２−イルメチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート
【０１８７】
【化３４】
2011506294.tif 000036
【０１８８】
（Ｓ）−２−ヒドロキシメチルモルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（中間体８；１００ｍｇ，０．４６ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（５ｍＬ）中のＮａＨ（油中６０％分散液；５５．０ｍｇ，１．３８ｍｍｏｌ）の懸濁液に加え、窒素下で３０分間撹拌した。４−ニトロフェニル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート（中間体２，１８０ｍｇ，０．５５ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（２ｍＬ）を加え、反応混合物を室温で４８時間撹拌した。反応混合物を、セライトを介して濾過し、固体をＴＨＦ（１０ｍＬ）で洗浄した。濾液を一緒にし、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相シリカ、５ｇ Isolute−Ｓｉカラム、ヘキサン中の１０％〜３０％ＥｔＯＡｃの勾配）によって精製して、（２Ｓ）−（４−フェニルピペラジン−１−カルボニルオキシメチル）−モルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（１８０ｍｇ，９６％）を無色油状物として生じた。
【０１８９】
（２Ｓ）−（４−フェニルピペラジン−１−カルボニルオキシメチル）−モルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（１８０ｍｇ，０．４４ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（２ｍＬ）中に溶解させ、ＴＦＡ（３ｍＬ，ＤＣＭ中１０％）を加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌した。溶媒を真空中で除去した。ヘプタンを加え、溶媒を真空中で除去した。Ｋ２ＣＯ３（５００ｍｇ，３．６ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（２ｍＬ）中の残留物の溶液に加え、３０分間撹拌後、水（０．３ｍＬ）を加え、１時間撹拌した。その混合物を濾過し、濾液を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相、５ｇ Isolute−Ｓｉシリカ、ヘキサン中のＥｔＯＡｃ（１：１）の後、ＥｔＯＡｃ中の１〜１０％ＭｅＯＨ）によって精製した。残留物を、真空中で乾燥させて、（２Ｓ）−モルホリン−２−イルメチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート（１０１ｍｇ，７５％）を白色固体として生じた。
【０１９０】
分析ＨＰＬＣ：純度９８．９％（システムＢ，ＲＴ＝６．６３分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＢ，ＲＴ＝６．５７分），ＥＳ＋：３０６．７［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１６Ｈ２３Ｎ３Ｏ３の理論値３０５．１７３９，実測値３０５．１７５３。
【０１９１】
実施例１２
（２Ｒ）−モルホリン−２−イルメチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート
【０１９２】
【化３５】
2011506294.tif 000037
【０１９３】
（Ｒ）−２−ヒドロキシメチルモルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（中間体９；１００ｍｇ，０．４６ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（５ｍＬ）中のＮａＨ（油中６０％分散液；５５．０ｍｇ，１．３８ｍｍｏｌ）の懸濁液に加え、窒素下で３０分間撹拌した。４−ニトロフェニル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート（中間体２；１８０ｍｇ，０．５５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で４８時間撹拌した。反応混合物を、セライトを介して濾過し、固体をＴＨＦ（１０ｍＬ）で洗浄した。濾液を一緒にし、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相シリカ、５ｇ Isolute−Ｓｉカラム、ヘキサン中の１０％〜５０％ＥｔＯＡｃの勾配）によって精製して、（２Ｒ）−（４−フェニルピペラジン−１−カルボニルオキシメチル）−モルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（１７０ｍｇ，９１％）を淡黄色油状物として生じた。
【０１９４】
（２Ｒ）−（４−フェニルピペラジン−１−カルボニルオキシメチル）−モルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（１３０ｍｇ，０．３２ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（２ｍＬ）中に溶解させ、ＴＦＡ（３ｍＬ，ＤＣＭ中１０％）を加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌した。溶媒を真空中で除去した。ヘプタンを加え、溶媒を真空中で除去した。Ｋ２ＣＯ３（５００ｍｇ，３．６ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（２ｍＬ）中の残留物の溶液に加え、３０分間撹拌後、水（０．３ｍＬ）を加え、１時間撹拌した。その混合物を濾過し、濾液を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相、５ｇ Isolute−Ｓｉカラム、ヘキサン中のＥｔＯＡｃ（１：１）の後、ＥｔＯＡｃ中の１〜１０％ＭｅＯＨ）によって精製した。残留物を、真空中で乾燥させて、（２Ｒ）−モルホリン−２−イルメチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート（５７ｍｇ，５８％）を白色固体として生じた。
【０１９５】
分析ＨＰＬＣ：純度９９．８％（システムＢ，ＲＴ＝６．６３分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＢ，ＲＴ＝６．５４分），ＥＳ＋：３０６．７［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１６Ｈ２３Ｎ３Ｏ３の理論値３０５．１７３９，実測値３０５．１７５３．
実施例１３
（４−メチルモルホリン−２−イル）メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート
【０１９６】
【化３６】
2011506294.tif 000038
【０１９７】
モルホリン−２−イルメチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート（実施例１０の非ＨＣｌ塩；１．００ｇ，３．２７ｍｍｏｌ）および水中の３７％ホルムアルデヒド（１．９７ｇ，１．８２ｍＬ，６５．５ｍｍｏｌ）を、ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中に室温で溶解させた後、トリアセトキシホウ水素化ナトリウム（２．７８ｇ，１３．１ｍｍｏｌ）を少量ずつ５分間にわたって加えた。反応混合物を２時間撹拌した。反応混合物を、飽和Ｎａ２ＣＯ３水溶液の添加によって急冷した。溶媒を真空中で除去し、そして残留水性相を、Isolute ＨＭ−Ｎ  ２０ｍＬカートリッジ上に充填した。所望の生成物を、ＤＣＭ（２００ｍＬ）で溶離し、溶媒を真空中で除去して、（４−メチルモルホリン−２−イル）メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート（０．９３ｇ，８８．９％）を無色ガムとして生じた。
【０１９８】
分析ＨＰＬＣ：純度９９．５％（システムＡ，ＲＴ＝３．６４分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝４．０１分），ＥＳ＋：３２０．１［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１７Ｈ２５Ｎ３Ｏ３の理論値３１９．１８９６，実測値３１９．１８９９。
【０１９９】
実施例１４
［（２Ｓ）−４−メチルモルホリン−２−イル］メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート
【０２００】
【化３７】
2011506294.tif 000039
【０２０１】
（Ｓ）−（４−メチルモルホリン−２−イル）−メタノール（中間体１０；１００ｍｇ，０．７６ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（７ｍＬ）中のＮａＨ（油中６０％分散液；９０．０ｍｇ，２．２８ｍｍｏｌ，）の懸濁液に加え、窒素下で３０分間撹拌した。４−ニトロフェニル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート（中間体２；３００ｍｇ，０．９２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で４８時間撹拌した。反応混合物を、セライトを介して濾過し、固体をＴＨＦ（１０ｍＬ）で洗浄した。濾液を一緒にし、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相シリカ、５ｇ Isolute−Ｓｉカラム、ＤＣＭ中の１〜５％ＭｅＯＨの勾配）によって、次に逆相ＨＰＬＣ（ＹＭＣ  ＯＤＳ−Ａ  １００ｘ２０ｍｍ，５μｍ，２５ｍＬ／分，１０％ＭｅＯＨ／水中の２０％〜１００％（７分間にわたる）、次に１００％（３分）ＭｅＯＨの勾配）によって精製した。純粋な生成物を、ＤＣＭ（５ｍＬ）中に入れ、濾過し、真空中で乾燥させて、［（２Ｓ）−４−メチルモルホリン−２−イル］メチル４−フェニル-ピペラジン−１−カルボキシレート（５０ｍｇ，２０％）を無色ガムとして生じた。
【０２０２】
分析ＨＰＬＣ：純度９９．４％（システムＡ，ＲＴ＝３．６５分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝３．６６分），ＥＳ＋：３２０．３［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１７Ｈ２５Ｎ３Ｏ３の理論値３１９．１８９６，実測値３１９．１９０９。
【０２０３】
実施例１５
［（２Ｒ）−４−メチルモルホリン−２−イル］メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート
【０２０４】
【化３８】
2011506294.tif 000040
【０２０５】
（Ｒ）−（４−メチルモルホリン−２−イル）−メタノール（中間体１１；１００ｍｇ，０．７６ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（７ｍＬ）中のＮａＨ（油中６０％分散液；９０．０ｍｇ，２．２８ｍｍｏｌ）の懸濁液に加え、窒素下で３０分間撹拌した。４−ニトロフェニル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート（中間体２；３００ｍｇ，０．９２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で４８時間撹拌した。反応混合物を、セライトを介して濾過し、固体をＴＨＦ（１０ｍＬ）で洗浄した。濾液を一緒にし、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相シリカ、５ｇ Isolute−Ｓｉカラム、ＤＣＭ中の１〜５％ＭｅＯＨの勾配）によって精製した。溶媒を真空中で除去して、［（２Ｒ）−４−メチルモルホリン−２−イル］メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート（１７５ｍｇ，７２％）を淡黄色ガムとして生じた。
【０２０６】
分析ＨＰＬＣ：純度９９．８％（システムＢ，ＲＴ＝６．８４分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝３．６７分），ＥＳ＋：３２０．５［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１７Ｈ２５Ｎ３Ｏ３の理論値３１９．１８９６，実測値３１９．１８９５。
【０２０７】
実施例１６
［（２Ｓ）−４−メチルモルホリン−２−イル］メチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【０２０８】
【化３９】
2011506294.tif 000041
【０２０９】
（Ｓ）−（４−メチルモルホリン−２−イル）−メタノール（中間体１０；１００ｍｇ，０．７６ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（７ｍＬ）中のＮａＨ（油中６０％分散液；９０．０ｍｇ，２．２８ｍｍｏｌ）の懸濁液に加え、窒素下で３０分間撹拌した。４−（４−フルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボン酸４−ニトロフェニルエステル（中間体６；３１４ｍｇ，０．９１ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で４８時間撹拌した。反応混合物を、セライトを介して濾過し、固体をＴＨＦ（１０ｍＬ）で洗浄した。濾液を一緒にし、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相シリカ、５ｇ Isolute−Ｓｉカラム、ＤＣＭ中の１〜５％ＭｅＯＨの勾配）によって精製し、溶媒を真空中で除去して、［（２Ｓ）−４−メチルモルホリン−２−イル］メチル４−（４−フルオロフェニル）-ピペラジン−１−カルボキシレート（１３０ｍｇ，５１％）を淡褐色固体として生じた。
【０２１０】
分析ＨＰＬＣ：純度９６．０％（システムＢ，ＲＴ＝７．４６分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝３．９７分），ＥＳ＋：３３８．６［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１７Ｈ２４ＦＮ３Ｏ３の理論値３３７．１８０２，実測値３３７．１８１４。
【０２１１】
実施例１７
［（２Ｒ）−４−メチルモルホリン−２−イル］メチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【０２１２】
【化４０】
2011506294.tif 000042
【０２１３】
（Ｒ）−（４−メチルモルホリン−２−イル）−メタノール（中間体１１；１００ｍｇ，０．７６ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（７ｍＬ）中のＮａＨ（油中６０％分散液；９０．０ｍｇ，２．２８ｍｍｏｌ）の懸濁液に加え、窒素下で３０分間撹拌した。４−（４−フルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボン酸４−ニトロフェニルエステル（中間体６；３１４ｍｇ，０．９１ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で４８時間撹拌した。反応混合物を、セライトを介して濾過し、固体をＴＨＦ（１０ｍＬ）で洗浄した。濾液を一緒にし、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相シリカ、５ｇ Isolute−Ｓｉカラム、ＤＣＭ中の１〜５％ＭｅＯＨの勾配）、次に逆相ＨＰＬＣ（ＹＭＣ  ＯＤＳ−Ａ  １００ｘ２０ｍｍ，５μｍ，２５ｍＬ／分，１０％ＭｅＯＨ／水中の２０％〜１００％（７分間にわたる）、次に１００％（３分）ＭｅＯＨの勾配）によって精製した。純粋な生成物を、ＤＣＭ（５ｍＬ）中に入れ、濾過し、真空中で乾燥させて、［（２Ｒ）−４−メチルモルホリン−２−イル］メチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（１００ｍｇ，２８％）を無色ガムとして生じた。
【０２１４】
分析ＨＰＬＣ：純度９９．７％（システムＡ，ＲＴ＝３．９７分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝３．９４分），ＥＳ＋：３３８．３［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１７Ｈ２４ＦＮ３Ｏ３の理論値３３７．１８０２，実測値３３７．１８１５。
【０２１５】
実施例１８
［（２Ｓ）−４−メチルモルホリン−２−イル］メチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【０２１６】
【化４１】
2011506294.tif 000043
【０２１７】
（Ｓ）−（４−メチルモルホリン−２−イル）−メタノール（中間体１０；１００ｍｇ，０．７６ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（７ｍＬ）中のＮａＨ（油中６０％分散液；９０．０ｍｇ，２．２８ｍｍｏｌ）の懸濁液に加え、窒素下で３０分間撹拌した。４−（２，４−ジフルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボン酸４−ニトロフェニルエステル（中間体１２，３３０ｍｇ，０．９１ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で４８時間撹拌した。反応混合物を、セライトを介して濾過し、固体をＴＨＦ（１０ｍＬ）で洗浄した。濾液を一緒にし、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相シリカ、５ｇ Isolute−Ｓｉカラム、ＤＣＭ中の１〜５％ＭｅＯＨの勾配）によって精製し、溶媒を真空中で除去して、［（２Ｓ）−４−メチルモルホリン−２−イル］メチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）-ピペラジン−１−カルボキシレート（１０４ｍｇ，３８％）を無色ガムとして生じた。
【０２１８】
分析ＨＰＬＣ：純度９９．３％（システムＢ，ＲＴ＝８．５５分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＢ，ＲＴ＝８．３２分），ＥＳ＋：３５６．７［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１７Ｈ２３Ｆ２Ｎ３Ｏ３の理論値３５５．１７０７，実測値３５５．１７２４。
【０２１９】
実施例１９
［（２Ｒ）−４−メチルモルホリン−２−イル］メチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【０２２０】
【化４２】
2011506294.tif 000044
【０２２１】
（Ｒ）−（４−メチルモルホリン−２−イル）−メタノール（中間体１１；１００ｍｇ，０．７６ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（７ｍＬ）中のＮａＨ（油中６０％分散液；９０．０ｍｇ，２．２８ｍｍｏｌ）の懸濁液に加え、窒素下で３０分間撹拌した。４−（２，４−ジフルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボン酸４−ニトロフェニルエステル（中間体１２；３３０ｍｇ，０．９１ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で４８時間撹拌した。反応混合物を、セライトを介して濾過し、固体をＴＨＦ（１０ｍＬ）で洗浄した。濾液を一緒にし、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相シリカ、５ｇ Isolute−Ｓｉカラム、ＤＣＭ中の１〜５％ＭｅＯＨの勾配）によって精製して、溶媒を真空中で除去して、［（２Ｒ）−４−メチルモルホリン−２−イル］メチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）-ピペラジン−１−カルボキシレート（８７ｍｇ，３２％）を無色ガムとして生じた。
【０２２２】
分析ＨＰＬＣ：純度１００％（システムＢ，ＲＴ＝８．５７分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝４．６２分），ＥＳ＋：３５６．４［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１７Ｈ２３Ｆ２Ｎ３Ｏ３の理論値３５５．１７０７，実測値３５５．１７２２。
【０２２３】
実施例２０
モルホリン−２−イルメチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート二塩酸塩
【０２２４】
【化４３】
2011506294.tif 000045
【０２２５】
２−ヒドロキシメチルモルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（２．１７ｇ，１０ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（５０ｍＬ）中に溶解させ、反応混合物を０℃に冷却した。ＮａＨ（油中６０％分散液；０．４０ｇ，１０ｍｍｏｌ）を加え、１０分間撹拌後、４−（４−フルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボン酸４−ニトロフェニルエステル（中間体６；３．４５ｇ，１０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌後、水（１ｍＬ）／ＴＨＦ（１０ｍＬ）混合物の滴加によって注意深く急冷後、ＴＨＦを真空中で除去した。残留物を、飽和水性Ｎａ２ＣＯ３（５０ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）とに懸濁させた。有機層を、飽和水性Ｎａ２ＣＯ３（５ｘ５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空中で乾燥させた。残留物を、逆相カラムクロマトグラフィー（LiChroprep ＲＰ−１８，４０〜６３μｍ，４６０ｘ２６ｍｍ（１００ｇ），３０ｍＬ／分，水中の０％〜６０％（６０分間にわたる）ＭｅＯＨの勾配）によって精製して、ＨＰＬＣで約８０％の純物質を生じた。その粗製中間体を、ＤＣＭ（１００ｍＬ）およびＴＦＡ（１０ｍＬ，過剰）中に溶解させ、室温で一晩撹拌した。溶媒を真空中で除去し、そして残留物を、逆相カラムクロマトグラフィー（LiChroprep ＲＰ−１８，４０〜６３μｍ，４６０ｘ２６ｍｍ（１００ｇ），３０ｍＬ／分，１％ギ酸を含む水中の０％〜２０％（７０分間にわたる）、次に２０％で保持される（１２０分間にわたる）ＭｅＯＨの勾配によって再精製した。溶媒を真空中で除去し、残留物を、ＤＣＭ中のＫ２ＣＯ３を用いて脱塩した。その残留物を、ＤＣＭおよびＨＣｌ（Ｅｔ２Ｏ中の２Ｍ，３．２ｍＬ，６．４ｍｍｏｌ）中に溶解させ、真空オーブン中で一晩乾燥させて、モルホリン−２−イルメチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート二塩酸塩（２．３０ｇ，５８％）を無色ガムとして生じた。
【０２２６】
分析ＨＰＬＣ：純度９７．５％（システムＡ，ＲＴ＝３．９０分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝４．２７分），ＥＳ＋：３２４．１［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１６Ｈ２２ＦＮ３Ｏ３の理論値３２３．１６４５，実測値３２３．１６６０。
【０２２７】
実施例２１
（２Ｓ）−モルホリン−２−イルメチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【０２２８】
【化４４】
2011506294.tif 000046
【０２２９】
（Ｓ）−２−ヒドロキシメチルモルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（中間体８；１００ｍｇ，０．４６ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（２ｍＬ）中のＮａＨ（油中６０％分散液；５５．０ｍｇ，１．３８ｍｍｏｌ）の懸濁液に加え、窒素下で３０分間撹拌した。４−（４−フルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボン酸４−ニトロフェニルエステル（中間体６；１９１ｍｇ，０．５５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で４８時間撹拌した。反応混合物を、セライトを介して濾過し、固体をＴＨＦ（１０ｍＬ）で洗浄した。濾液を一緒にし、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相シリカ、５ｇ Isolute−Ｓｉカラム、ヘキサン中の１０％〜５０％ＥｔＯＡｃの勾配）によって精製して、（２Ｓ）−［４−（４−フルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボニルオキシ-メチル］−モルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（２００ｍｇ，定量的）を淡黄色油状物として生じた。
【０２３０】
（２Ｓ）−［４−（４−フルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボニルオキシメチル］−モルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（２００ｍｇ，０．４６ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（２ｍＬ）中に溶解させ、ＴＦＡ（３ｍＬ，ＤＣＭ中１０％）を加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌した。溶媒を真空中で除去した。ヘプタンを加えた後、溶媒を真空中で除去した。Ｋ２ＣＯ３（５００ｍｇ，３．６ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（２ｍＬ）中の残留物の溶液に加え、３０分間撹拌後、水（０．３ｍＬ）を加え、１時間撹拌した。その混合物を濾過し、濾液を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相、５ｇ Isolute−Ｓｉカラム、ヘキサン中のＥｔＯＡｃ（１：１）の後、ＥｔＯＡｃ中の１〜１０％ＭｅＯＨ）によって精製した。残留物を、真空中で乾燥させて、（２Ｓ）−モルホリン−２−イルメチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（１３５ｍｇ，８９％）を白色固体として生じた。
【０２３１】
分析ＨＰＬＣ：純度９８．２％（システムＢ，ＲＴ＝７．２３分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＢ，ＲＴ＝７．１２分），ＥＳ＋：３２４．７［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１６Ｈ２２ＦＮ３Ｏ３の理論値３２３．１６４５，実測値３２３．１６５９。
【０２３２】
実施例２２
（２Ｒ）−モルホリン−２−イルメチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【０２３３】
【化４５】
2011506294.tif 000047
【０２３４】
（Ｒ）−２−ヒドロキシメチルモルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（中間体９；１００ｍｇ，０．４６ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（２ｍＬ）中のＮａＨ（油中６０％分散液；５５．０ｍｇ，１．３８ｍｍｏｌ）の懸濁液に加え、窒素下で３０分間撹拌した。４−（４−フルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボン酸４−ニトロフェニルエステル（中間体６；１９１ｍｇ，０．５５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で４８時間撹拌した。反応混合物を、セライトを介して濾過し、固体をＴＨＦ（１０ｍＬ）で洗浄した。濾液を一緒にし、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相シリカ、５ｇ Isolute−Ｓｉカラム、ヘキサン中の１０％〜５０％ＥｔＯＡｃの勾配）によって精製して、（２Ｒ）−［４−（４−フルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボニルオキシ-メチル］−モルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（１３０ｍｇ，６７％）を無色油状物として生じた。
【０２３５】
（２Ｒ）−［４−（４−フルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボニルオキシメチル］−モルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（１２０ｍｇ，０．４０ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（２ｍＬ）中に溶解させ、ＴＦＡ（３ｍＬ，ＤＣＭ中１０％）を加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌した。溶媒を真空中で除去した。ヘプタンを加えた後、溶媒を真空中で除去した。Ｋ２ＣＯ３（５００ｍｇ，３．６ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（２ｍＬ）中の残留物の溶液に加え、３０分間撹拌後、水（０．３ｍＬ）を加え、１時間撹拌した。その混合物を濾過し、濾液を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相、５ｇ Isolute−Ｓｉシリカ、ヘキサン中のＥｔＯＡｃ（１：１）の後、ＥｔＯＡｃ中の１〜１０％ＭｅＯＨ）によって精製した。残留物を、真空中で乾燥させて、（２Ｒ）−モルホリン−２−イルメチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（１１７ｍｇ，９１％）を白色固体として生じた。
【０２３６】
分析ＨＰＬＣ：純度９９．３％（システムＢ，ＲＴ＝７．２５分）；
分析ＬＣＭＳ：純度９７．９％（システムＢ，ＲＴ＝７．１３分），ＥＳ＋：３２４．６［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１６Ｈ２２ＦＮ３Ｏ３の理論値３２３．１６４５，実測値３２３．１６５９。
【０２３７】
実施例２３
（４−メチルモルホリン−２−イル）メチル４−（４−クロロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート二塩酸塩
【０２３８】
【化４６】
2011506294.tif 000048
【０２３９】
（４−メチルモルホリン−２−イル）−メタノール（１．０５ｇ，８．０ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２．７９ｍｌ，１６．０ｍｍｏｌを、ＤＣＭ（８０ｍＬ）中に溶解させ、反応混合物を０℃に冷却し、そしてｐ−ニトロフェニルクロロホルメート（３．２３ｇ，１６．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温に暖め、２時間撹拌した。反応混合物を４バッチに分け、真空中で濃縮した。一つを、ＤＭＦ（２０ｍＬ）中に溶解させ、１−（４−クロロフェニル）−ピペラジン二塩酸塩（５３９ｍｇ，２ｍｍｏｌ）を加え、得られた反応混合物を室温で２４時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、そして残留物をＤＣＭ（３０ｍＬ）中に溶解させた。有機層を、１．０Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３溶液（３ｘ３０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相、２０ｇ，Strata ＳＩ−１、シリカギガチューブ、２０ｍＬ／分、ＤＣＭ中の０％〜５％ＭｅＯＨの勾配、残留物乾燥充填）によって精製した。溶媒を真空中で除去し、そして残留物をＤＣＭ（５０ｍＬ）中に溶解させ、濾過し、Ｅｔ２Ｏ中の２Ｍ  ＨＣｌ（２ｍＬ，４ｍｍｏｌ）を加えた。溶媒を真空中で除去し、得られた固体を真空オーブン中で一晩乾燥させて、（４−メチルモルホリン−２−イル）メチル４−（４−クロロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート二塩酸塩（０．５１０ｇ，６０％）を白色固体として生じた。
【０２４０】
分析ＨＰＬＣ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝４．６９分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝５．１２分），ＥＳ＋：３５４．４［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１７Ｈ２４ＣｌＮ３Ｏ３の理論値３５３．１５０６，実測値３５３．１５１６。
【０２４１】
実施例２４
（４−メチルモルホリン−２−イル）メチル４−（４−フルオロベンジル）ピペラジン−１−カルボキシレート二塩酸塩
【０２４２】
【化４７】
2011506294.tif 000049
【０２４３】
（４−メチルモルホリン−２−イル）−メタノール（１．０５ｇ，８．０ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２．７９ｍｌ，１６．０ｍｍｏｌを、ＤＣＭ（８０ｍＬ）中に溶解させ、反応混合物を０℃に冷却し、そしてｐ−ニトロフェニルクロロホルメート（３．２３ｇ，１６．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温に暖め、２時間撹拌した。反応混合物を４バッチに分け、真空中で濃縮した。一つを、ＤＭＦ（２０ｍＬ）中に溶解させ、１−（４−フルオロベンジル）−ピペラジン（０．３９ｇ，２ｍｍｏｌ）を加え、得られた反応混合物を室温で２４時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、残留物をＤＣＭ（３０ｍＬ）中に入れた。有機層を、１．０Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３溶液（３ｘ３０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相、２０ｇ，Strata ＳＩ−１、シリカギガチューブ、２０ｍＬ／分、ＤＣＭ中の０％〜５％ＭｅＯＨの勾配、残留物乾燥充填）によって精製した。溶媒を真空中で除去し、残留物をＤＣＭ（５０ｍＬ）中に溶解させ、濾過し、Ｅｔ２Ｏ中の２Ｍ  ＨＣｌ（２ｍＬ，４ｍｍｏｌ）を加えた。溶媒を真空中で除去し、残留物を真空オーブン中で一晩乾燥させて、（４−メチルモルホリン−２−イル）メチル４−（４−フルオロベンジル）ピペラジン−１−カルボキシレート二塩酸塩（０．３７５ｇ，４４％）を白色固体として生じた。
【０２４４】
分析ＨＰＬＣ：純度９９．２％（システムＡ，ＲＴ＝３．１３分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝３．６０分），ＥＳ＋：３５２．５［ＭＨ］＋。
【０２４５】
実施例２５
（４−アセチルモルホリン−２−イル）メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート
【０２４６】
【化４８】
2011506294.tif 000050
【０２４７】
ピリジン（２．２５ｍＬ，２７．７ｍｍｏｌ）中のモルホリン−２−イルメチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート二塩酸塩（実施例１０；０．５２ｇ，１．４０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、塩化アセチル（０．１５ｍＬ，２．１０ｍｍｏｌ）を徐々に加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌後、ピリジンを真空中で除去し、得られた残留物を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍＬ）で希釈した。有機生成物を、ＥｔＯＡｃ（３ｘ５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（３ｘ５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相、２０ｇ，Strata ＳＩ−１、シリカギガチューブ、２０ｍＬ／分、ＥｔＯＡｃ中の０％〜５％ＭｅＯＨの勾配）によって精製した。溶媒を真空中で除去し、真空オーブン中で一晩乾燥させて、（４−アセチルモルホリン−２−イル）メチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート（０．３８ｇ，７８％）を淡褐色油状物として与えた。
【０２４８】
分析ＨＰＬＣ：純度９９．０％（システムＡ，ＲＴ＝４．３４分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝４．６０分），ＥＳ＋：３４８．５［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１８Ｈ２５Ｎ３Ｏ４の理論値３４７．１８４５，実測値３４７．１８５９。
【０２４９】
実施例２６
モルホリン−３−イルメチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【０２５０】
【化４９】
2011506294.tif 000051
【０２５１】
ＮａＨ（ヘキサンで予洗済み油中６０％；１．３０ｇ，３１．７ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（５０ｍＬ）中に窒素下で懸濁させ、反応混合物を撹拌しながら−１０℃に冷却した。ＴＨＦ（５０ｍＬ）中の３−ヒドロキシメチルモルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（中間体７；２．３０ｇ，１０．６ｍｍｏｌ）の溶液を滴加した。反応混合物を０℃で２０分間撹拌した。４−（４−フルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボン酸４−ニトロフェニルエステル（中間体６；４．３８ｇ，１２．７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１０ｍＬ）を加え、溶媒を真空中で除去した。残留物を、水とＥｔＯＡｃとに分配し、水性相をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を、飽和水性ＮａＨＣＯ３（３ｘ１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。残留物を、フラッシュ順カラムクロマトグラフィー（Apollo シリカ，４０〜６３μｍ，６０Ａ）により、ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶離して精製した。不純物質を、フラッシュ順相クロマトグラフィーにより、ＤＣＭ中の１％ＭｅＯＨを用いて更に精製して、３−［４−（４−フルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボニルオキシメチル］−モルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（３．０５ｇ，６８％）を生じた。
【０２５２】
３−［４−（４−フルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボニルオキシメチル］−モルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（２．９８ｇ，７．０４ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（３０ｍＬ）中において０℃で撹拌した。ＤＣＭ（２４ｍＬ）中に溶解したＴＦＡ（６ｍＬ）を滴加した。反応混合物を室温で一晩撹拌した。溶媒を真空中で除去し、そして残留物を、ＤＣＭ（３０ｍＬ）と水性ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ中の５ｇ）とに分配した。水性層を、ＤＣＭ（３ｘ３０ｍＬ）で抽出し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空中で除去して、モルホリン−３−イルメチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（２．１８ｇ，９６％）を白色固体として生じた。
【０２５３】
分析ＨＰＬＣ：純度９８．３％（システムＡ，ＲＴ＝３．８８分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝４．２７分），ＥＳ＋：３２４．０［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１６Ｈ２２ＦＮ３Ｏ３の理論値３２３．１６４５，実測値３２３．１６６１。
【０２５４】
実施例２７
（３Ｓ）−モルホリン−３−イルメチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【０２５５】
【化５０】
2011506294.tif 000052
【０２５６】
ＮａＨ（ヘキサンで予洗済み油中６０％；２．７６ｇ，６９．０ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（１００ｍＬ）中に窒素下で懸濁させ、反応混合物を撹拌しながら０℃に冷却した。ＴＨＦ（１００ｍＬ）中の（Ｓ）−３−ヒドロキシメチルモルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（５．００ｇ，２３．０ｍｍｏｌ）の溶液を滴加した。反応混合物を０℃で３０分間撹拌した。４−（４−フルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボン酸４−ニトロフェニルエステル（中間体６；１０．０ｇ，２９．０ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌後、２４時間放置した。反応混合物を５〜１０℃に冷却した。１０％ＮａＨＣＯ３水溶液（２２ｍＬ）を加え、溶媒を真空中で除去した。残留物を、ＥｔＯＡｃ（７００ｍＬ）と１０％ＮａＨＣＯ３水溶液（２００ｍＬ）／水（４００ｍＬ）とに分配した。ＥｔＯＡｃ層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相シリカ、１００ｇ Isolute−Ｓｉカラム、ヘキサン中のＥｔＯＡｃの勾配）によって精製した。残留物を、ＤＣＭ中に溶解させ、真空中で蒸発させ、繰り返した後、真空中で乾燥させて、（３Ｓ）−３−［４−（４−フルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボニルオキシメチル］−モルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（８．１９ｇ，８４％）を橙色ガムとして生じた。
【０２５７】
（３Ｓ）−３−［４−（４−フルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボニルオキシメチル］−モルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（８．１９ｇ，１９．３ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（９６ｍＬ）中において−５〜０℃で撹拌した。ＤＣＭ（６７ｍＬ）中に溶解したＴＦＡ（２８．９ｍＬ）を滴加し、冷却を３０分間維持した。反応混合物を室温で２０時間撹拌した。反応混合物をヘプタン（２００ｍＬ）で希釈し、赤〜褐色ガムを分離した。そのガムを、真空中で乾燥させた後、ヘプタン（２００ｍＬ）で洗浄した。残留物を、ＤＣＭ（４５０ｍＬ）と１．２Ｍ水性ＮａＨＣＯ３（１３５ｍＬ）とに分配した。水性層をＤＣＭ（２ｘ２２５ｍＬ）で抽出した。合わせたＤＣＭ抽出物を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、溶媒を真空中で除去して、（３Ｓ）−モルホリン−３−イルメチル４−（４−フルオロフェニル）-ピペラジン−１−カルボキシレート（５．８３ｇ，９３％）をベージュ色固体として生じた。
【０２５８】
分析ＨＰＬＣ：純度９９．５％（システムＡ，ＲＴ＝３．８６分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝３．８２分），ＥＳ＋：３２４．７［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１６Ｈ２２ＦＮ３Ｏ３の理論値３２３．１６４５，実測値３２３．１６５２。
【０２５９】
実施例２８
（３Ｒ）−モルホリン−３−イルメチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【０２６０】
【化５１】
2011506294.tif 000053
【０２６１】
ＮａＨ（ヘキサンで予洗済み油中６０％；１．３８ｇ，３４．５ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（５０ｍＬ）中に窒素下で懸濁させ、反応混合物を撹拌しながら−５℃に冷却し、そしてＴＨＦ（５０ｍＬ）中の（Ｒ）−３−ヒドロキシメチルモルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（２．５０ｇ，１１．５ｍｍｏｌ）の溶液を滴加した。反応混合物を０〜３℃で３０分間撹拌した。４−（４−フルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボン酸４−ニトロフェニルエステル（中間体６；５．０１ｇ，１４．５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を氷浴で冷却し、１０％ＮａＨＣＯ３水溶液（１１ｍＬ）を加えた。溶媒を真空中で除去し、そして残留物を、ＥｔＯＡｃ（３５０ｍＬ）と１０％ＮａＨＣＯ３水溶液（１００ｍＬ）／水（２００ｍＬ）とに分配した。ＥｔＯＡｃ層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相シリカ、７０ｇ Isolute−Ｓｉカラム、ヘキサン中のＥｔＯＡｃの勾配）によって精製した。残留物を、ＤＣＭ中に溶解させ、真空中で蒸発させ、１回繰り返した後、真空中で乾燥させて、（３Ｒ）−３−［４−（４−フルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボニルオキシメチル］−モルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（２．８０ｇ）を淡黄色ガムとして生じた。
【０２６２】
この手順を、もう一つのバッチの（Ｒ）−３−ヒドロキシメチルモルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（２．５０ｇ，１１．５ｍｍｏｌ）で繰り返した。双方のバッチからの不純画分の再精製後、８．１７ｇ（８３．９％）の（３Ｒ）−３−［４−（４−フルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボニルオキシメチル］−モルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステルを得た。
【０２６３】
（３Ｒ）−３−［４−（４−フルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボニルオキシメチル］−モルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（５．０７ｇ，１２．０ｍｍｏｌ）を、乾燥ジオキサン（３５ｍＬ）中において室温で撹拌し、ジオキサン中のＨＣｌ（４Ｍ；１５ｍＬ，６０ｍｍｏｌ）を滴加した。反応混合物を室温で２４時間撹拌した。追加部分のジオキサン中のＨＣｌ（４Ｍ；１０ｍＬ，４０ｍｍｏｌ）を加え、一晩撹拌した。ジオキサンを傾瀉し、そして残留ガムを、ジオキサン（ｘ３）およびＥｔ２Ｏ（ｘ２）で洗浄した。残留物を、ＤＣＭ（３００ｍＬ）と１．２Ｍ水性ＮａＨＣＯ３とに分配した。水性層をＤＣＭ（２ｘ２００ｍＬ）で抽出した。合わせたＤＣＭ抽出物を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。残留物をＤＣＭ中に溶解させ、真空中で乾燥させて、（３Ｒ）−モルホリン−３−イルメチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（３．８７ｇ，定量的）をオフホワイト固体として生じた。
【０２６４】
分析ＨＰＬＣ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝３．８７分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝３．８２分），ＥＳ＋：３２４．７［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１６Ｈ２２ＦＮ３Ｏ３の理論値３２３．１６４５，実測値３２３．１６５７。
【０２６５】
実施例２９
（４−メチルモルホリン−３−イル）メチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【０２６６】
【化５２】
2011506294.tif 000054
【０２６７】
ＬｉＡｌＨ４（４．２ｇ，１１０ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（６０ｍＬ）中に窒素下で懸濁させ、撹拌しながら−１０℃に冷却し、そしてＴＨＦ（５０ｍＬ）中の３−ヒドロキシメチルモルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（中間体７；４．１ｇ，１８．４ｍｍｏｌ）の溶液を滴加した。反応混合物を０℃で２０分間撹拌し、加熱して３時間還流後、室温で一晩撹拌した。反応混合物を−１０℃に冷却し、そしてＴＨＦ中の１０％水の滴加で急冷した。反応混合物を、ＴＨＦ（５０ｍＬ）で希釈し、室温で１時間撹拌し、濾過し、濾液を真空中で濃縮した。残留物をＤＣＭ中に溶解させ、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空中で除去して、（４−メチルモルホリン−３−イル）−メタノール（２．０５ｇ，８５％）を無色液体として生じた。
【０２６８】
ＮａＨ（ヘキサンで予洗済み油中６０％；０．９１ｇ，２２．９ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（２５ｍＬ）中に窒素下で懸濁させ、撹拌しながら０℃に冷却した。ＴＨＦ（２５ｍＬ）中の（４−メチルモルホリン−３−イル）−メタノール（１．００ｇ，２．６２ｍｍｏｌ）の溶液を滴加した。４−（４−フルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボン酸４−ニトロフェニルエステル（中間体６；３．１６ｇ，９．１５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１０ｍＬ）を加え、溶媒を真空中で除去した。残留物を、水とＥｔＯＡｃとに分配し、水性相をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を、飽和水性ＮａＨＣＯ３（３ｘ１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。残留物を、フラッシュ順カラムクロマトグラフィー（Apollo シリカ，４０〜６３μｍ，６０Ａ）により、ＤＣＭ中の１％ＭｅＯＨで溶離して精製して、（４−メチルモルホリン−３−イル）メチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（２．１５ｇ，８３％）を白色固体として生じた。
【０２６９】
分析ＨＰＬＣ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝３．９９分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝４．３８分），ＥＳ＋：３３８．０［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１７Ｈ２４ＦＮ３Ｏ３の理論値３３７．１８０２，実測値３３７．１８１１。
【０２７０】
実施例３０
モルホリン−３−イルメチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート
【０２７１】
【化５３】
2011506294.tif 000055
【０２７２】
ＮａＨ（ヘキサンで予洗済み油中６０％；１．２３ｇ，３０．１ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（５０ｍＬ）中に窒素下で懸濁させ、撹拌しながら０℃に冷却した。ＴＨＦ（５０ｍＬ）中の３−ヒドロキシメチルモルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（中間体７；２．２３ｇ，１０．３ｍｍｏｌ）の溶液を滴加した。反応混合物を０℃で２０分間撹拌した。４−ニトロフェニル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート（中間体２；４．０３ｇ，１２．３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で４８時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１０ｍＬ）を加え、溶媒を真空中で除去した。残留物を、水とＥｔＯＡｃとに分配し、水性相をＥｔＯＡｃ（２ｘ１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を、飽和水性ＮａＨＣＯ３（３ｘ１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。残留物を、フラッシュ順カラムクロマトグラフィー（Apollo シリカ，４０〜６３μｍ，６０Ａ）により、ＤＣＭ中の１％ＭｅＯＨで溶離して精製して、３−（４−フェニルピペラジン−１−カルボニルオキシメチル）−モルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（３．３５ｇ，８０％）を生じた。
【０２７３】
３−（４−フェニルピペラジン−１−カルボニルオキシメチル）−モルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（３．３１ｇ，８．１６ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（３０ｍＬ）中において０℃で撹拌した。ＤＣＭ（２４ｍＬ）中に溶解したＴＦＡ（６ｍＬ）を滴加した。反応混合物を室温で一晩撹拌した。溶媒を真空中で除去し、そして残留物を、ＤＣＭ（３０ｍＬ）と水性ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ中の５ｇ）とに分配した。水性層をＤＣＭ（３ｘ３０ｍＬ）で抽出し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空中で除去して、モルホリン−３−イルメチル４−フェニルピペラジン−１−カルボキシレート（２．５５ｇ，定量的）を白色固体として生じた。
【０２７４】
分析ＨＰＬＣ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝３．６０分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝３．９７分），ＥＳ＋：３０６．０［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１６Ｈ２３Ｎ３Ｏ３の理論値３０５．１７３９，実測値３０５．１７４１。
【０２７５】
実施例３１
モルホリン−３−イルメチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【０２７６】
【化５４】
2011506294.tif 000056
【０２７７】
ＴＨＦ（５ｍＬ）中の３−ヒドロキシメチルモルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（中間体７；２５０ｍｇ，０．７６ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（５ｍＬ）中のＮａＨ（ヘキサンで予洗済み油中６０％分散液；１３８ｍｇ，３．４５ｍｍｏｌ）の懸濁液に０℃で滴加し、窒素下で３５分間撹拌した。４−（２，４−ジフルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボン酸４−ニトロフェニルエステル（中間体１２；５０１ｍｇ，１．３８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を、水性ＮａＨＣＯ３（０．５ｍＬ）の０℃での添加で急冷し、溶媒を真空中で除去した。残留物を、水性Ｎａ２ＣＯ３（２０ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）とに懸濁させた。水性相をＥｔＯＡｃ（２ｘ２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を、水性Ｎａ２ＣＯ３（２０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相、Apollo シリカ、ＤＣＭ中の１％ＭｅＯＨ）によって精製し、溶媒を真空中で除去して、３−［４−（２，４−ジフルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボニルオキシメチル］−モルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（１７０ｍｇ，３４％）を生じた。
【０２７８】
ＤＣＭ（５ｍＬ）中の０℃の３−［４−（２，４−ジフルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボニルオキシメチル］−モルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（１７０ｍｇ，０．３９ｍｍｏｌ）に、ＴＦＡ（５ｍＬのＤＣＭ中の１ｍＬ）を加えた。反応混合物を、室温に暖め、一晩撹拌した。溶媒を真空中で除去し、そして残留物を、飽和水性ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）とＤＣＭ（１０ｍＬ）とに懸濁させた。水性相をＤＣＭ（２ｘ１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空中で除去して、モルホリン−３−イルメチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（１０４ｍｇ，７９％）を無色油状物として生じた。
【０２７９】
分析ＨＰＬＣ：純度９８．７％（システムＢ，ＲＴ＝８．２９分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＢ，ＲＴ＝８．０９分），ＥＳ＋：３４２．６［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１６Ｈ２１Ｆ２Ｎ３Ｏ３の理論値３４１．１５５１，実測値３４１．１５６１。
【０２８０】
実施例３２
（４−メチルモルホリン−３−イル）メチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【０２８１】
【化５５】
2011506294.tif 000057
【０２８２】
ＴＨＦ（７．５ｍＬ）中の（４−メチルモルホリン−３−イル）−メタノール（３８７ｍｇ，２．９５ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（７．５ｍＬ）中のＮａＨ（ヘキサンで予洗済み油中６０％分散液；３５４ｍｇ，８．８５ｍｍｏｌ）の懸濁液に０℃で滴加し、窒素下で４０分間撹拌した。４−（２，４−ジフルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボン酸４−ニトロフェニルエステル（中間体１２；１．２８ｇ，３．５４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を、水性ＮａＨＣＯ３（０．５ｍＬ）の０℃での添加で急冷した。反応混合物を１時間撹拌後、溶媒を真空中で除去した。残留物を、水とＥｔＯＡｃとに懸濁させた。水性相をＥｔＯＡｃ（ｘ３）で抽出した。合わせた有機層を、水性Ｎａ２ＣＯ３で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相、Apollo シリカ、ＤＣＭ中の１％ＭｅＯＨ）によって精製し、溶媒を真空中で除去して、（４−メチルモルホリン−３−イル）メチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（１９７ｍｇ，１９％）を無色油状物として生じた。
【０２８３】
分析ＨＰＬＣ：純度９９．３％（システムＢ，ＲＴ＝８．４５分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝４．６１分），ＥＳ＋：３５６．５［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１７Ｈ２３Ｆ２Ｎ３Ｏ３の理論値３５５．１７０７，実測値３５５．１７２４。
【０２８４】
実施例３３
（２Ｓ）−モルホリン−２−イルメチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【０２８５】
【化５６】
2011506294.tif 000058
【０２８６】
（Ｓ）−２−ヒドロキシメチルモルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（中間体８；１００ｍｇ，０．４６ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（２ｍＬ）中のＮａＨ（油中６０％分散液；５５．０ｍｇ，１．３８ｍｍｏｌ）の懸濁液に加え、窒素下で３０分間撹拌した。４−（２，４−ジフルオロ-フェニル）−ピペラジン−１−カルボン酸４−ニトロフェニルエステル（中間体１２；１９１ｍｇ，０．５５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で２４時間撹拌した。反応混合物を、セライトを介して濾過し、固体をＴＨＦ（１０ｍＬ）で洗浄した。濾液を一緒にし、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相シリカ、５ｇ Isolute−Ｓｉカラム、ヘキサン中の１０％〜５０％ＥｔＯＡｃの勾配）によって精製して、（２Ｓ）−［４−（２，４−ジフルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボニルオキシメチル］−モルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（２１０ｍｇ，定量的）を油状物として生じた。
【０２８７】
（２Ｓ）−［４−（２，４−ジフルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボニルオキシメチル］−モルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（２０５ｍｇ，０．４６ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（２ｍＬ）中に溶解させ、ＴＦＡ（３ｍＬ，ＤＣＭ中の１０％）を加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌した。溶媒を真空中で除去した。ヘプタンを加えた後、溶媒を真空中で除去した。Ｋ２ＣＯ３（５００ｍｇ，３．６ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（２ｍＬ）中の残留物の溶液に加え、１時間撹拌した。その混合物を濾過し、濾液を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相、５ｇ， Isolute−Ｓｉ、ヘキサン中のＥｔＯＡｃ（１：１）の後、ＥｔＯＡｃ中の１〜１０％ＭｅＯＨ）によって精製した。残留物を真空中で乾燥させて、（２Ｓ）−モルホリン−２−イルメチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（１０４ｍｇ，６９％）を白色固体として生じた。
【０２８８】
分析ＨＰＬＣ：純度９９．８％（システムＢ，ＲＴ＝８．４０分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＢ，ＲＴ＝８．１５分），ＥＳ＋：３４２．６［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１６Ｈ２１Ｆ２Ｎ３Ｏ３の理論値３４１．１５５１，実測値３４１．１５５９。
【０２８９】
実施例３４
（２Ｒ）−モルホリン−２−イルメチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【０２９０】
【化５７】
2011506294.tif 000059
【０２９１】
（Ｒ）−２−ヒドロキシメチルモルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（中間体９；１００ｍｇ，０．４６ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（２ｍＬ）中のＮａＨ（油中６０％分散液；５５．０ｍｇ，１．３８ｍｍｏｌ）の懸濁液に加え、窒素下で３０分間撹拌した。４−（２，４−ジフルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボン酸４−ニトロフェニルエステル（中間体１２；１９１ｍｇ，０．５５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で２４時間撹拌した。反応混合物を、セライトを介して濾過し、固体をＴＨＦ（１０ｍＬ）で洗浄した。濾液を一緒にし、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相シリカ、５ｇ Isolute−Ｓｉカラム、ヘキサン中の１０％〜５０％ＥｔＯＡｃの勾配）によって精製して、（２Ｒ）−［４−（２，４−ジフルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボニルオキシメチル］−モルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（１７６ｍｇ，８６％）を生じた。
【０２９２】
（２Ｒ）−［４−（２，４−ジフルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボニルオキシメチル］−モルホリン−４−カルボン酸 tert−ブチルエステル（１７６ｍｇ，０．４０ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（２ｍＬ）中に溶解させ、ＴＦＡ（３ｍＬ，ＤＣＭ中の１０％）を加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌した。溶媒を真空中で除去した。ヘプタンを加えた後、溶媒を真空中で除去した。Ｋ２ＣＯ３（５００ｍｇ，３．６ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（２ｍＬ）中の残留物の溶液に加え、３０分間撹拌後、水（０．３ｍＬ）を加え、１時間撹拌した。その混合物を濾過し、濾液を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（順相、５ｇ Isolute−Ｓｉシリカ、ヘキサン中のＥｔＯＡｃ（１：１）の後、ＥｔＯＡｃ中の１〜１０％ＭｅＯＨ）によって精製した。残留物を、真空中で乾燥させて、（２Ｒ）−モルホリン−２−イルメチル４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（８９ｍｇ，６５％）を白色固体として生じた。
【０２９３】
分析ＨＰＬＣ：純度９９．８％（システムＢ，ＲＴ＝８．３８分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＢ，ＲＴ＝８．２３分），ＥＳ＋：３４２．６［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１６Ｈ２１Ｆ２Ｎ３Ｏ３の理論値３４１．１５５１，実測値３４１．１５６１。
【０２９４】
実施例３５
［（２Ｒ）−１，４−ジメチルピペラジン−２−イル］メチル４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【０２９５】
【化５８】
2011506294.tif 000060
【０２９６】
ＮａＨ（鉱油中６０％分散液；０．４５ｇ，１１．３ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）中に窒素下で懸濁させ、反応混合物を撹拌しながら０℃に冷却した。ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の１，４−ジメチル−（Ｒ）−２−ヒドロキシメチルピペラジン（中間体４；０．５０ｇ，３．４７ｍｍｏｌ）の溶液を滴加した。反応混合物を０℃で１０分間撹拌した。４−（４−フルオロフェニル）−ピペラジン−１−カルボン酸４−ニトロフェニルエステル（中間体６；１．５０ｇ，４．３４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を、飽和水性ＮａＨＣＯ３（４０ｍＬ）で急冷し、ＴＨＦを真空中で除去した。水性相をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で抽出した。有機層を、飽和水性ＮａＨＣＯ３（５ｘ１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。残留物を、逆相カラムクロマトグラフィー（LiChroprep ＲＰ−１８，４０〜６３μｍ，４６０ｘ２６ｍｍ（１００ｇ），３０ｍＬ／分、１％ギ酸を含む水中の０％〜３０％（７５分間にわたる）〜１００％（１３分間にわたる）ＭｅＯＨの勾配）によって精製した。残留物を、ＤＣＭ中のＫ２ＣＯ３を用いて脱塩して、［（２Ｒ）−１，４−ジメチルピペラジン−２−イル］メチル４−（４−フルオロフェニル）-ピペラジン−１−カルボキシレート（０．４２ｇ，３５％）を無色ガムとして生じた。
【０２９７】
分析ＨＰＬＣ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝３．８８分）；
分析ＬＣＭＳ：純度１００％（システムＡ，ＲＴ＝３．５８分），ＥＳ＋：３５１．２［ＭＨ］＋；
ＨＲＭＳ：Ｃ１８Ｈ２７ＦＮ４Ｏ２の理論値３５０．２１１８，実測値３５０．２１２５。
【０２９８】
生物学的方法
ヒト肥満症の動物モデル（食餌性肥満ラット）
肥満症の齧歯類動物モデルは、ヒトの肥満状態の開始および維持の原因となる基礎因子を研究するのに有効な手段である。齧歯類動物の食餌性肥満症（ＤＩＯ）モデルは、ＤＩＯラットが、多数の形質をヒト肥満症と共有しているので、この仕事に特に適している。
【０２９９】
これらには、多因子遺伝、インスリン抵抗性、高レプチン血症、成長ホルモン分泌低下、脂肪よりも炭水化物を選択的に酸化する素質、およびカロリー制限時には代謝率を減少させて制限後に体重回復をもたらす能力が含まれる。高エネルギー食を与えられた異系交配ラットの場合、約半分はＤＩＯを発症するが、残りのものは、肥満症に抵抗性であり、しかも飼料を与えられている対照より大きく体重増加することはない（食餌抵抗性、ＤＲ）。食餌性肥満症（ＤＩＯ）モデルは、エネルギー恒常性の調節に関して特別興味深い。脂肪、スクロースおよびエネルギー含量が中程度に高い食餌（ＨＥ食）を与えられた場合、約半分のラットは、他よりも実質的に大きく体重増加するであろう（ＤＩＯ対ＤＲ）。
【０３００】
ＤＩＯを発症する素因があるラットは、低エネルギー（飼料）食を与えられたラットに匹敵する率で体重増加するであろうし、しかもＨＥ食を与えられなければ肥満症にならないであろう。しかしながら、ＤＩＯおよびＤＲ表現型が、ＨＥ食でいったん確定されると、被験動物が規定飼料食へ戻された場合でさえ、得られた体重増加および体組成変化は持続する。体重および組成の変化は、ＤＩＯおよびＤＲ表現型の発生および永続化の際に認められるが、これら調整の根底にあるかもしれない脳機能のいくつかの改変に関連している。
【０３０１】
ＤＩＯプロトコル
肥満傾向がある動物の選択のために、Widdowson, P. S. et al.（Diabetes (1997) 46:1782-1785）によって記載の食餌性肥満症プロトコルにしたがった。
【０３０２】
Wistar 雄ラット（変更された食餌介入の開始時に約２００〜２５０ｇ）に、高炭水化物（ＨＥ）食を８〜１０週間与える。食餌の組成は、３３％（ｗ／ｖ）の粉末飼料（ＲＭ１）、３３％（ｗ／ｖ）のコンデンスミルク（Nestle）、７％（ｗ／ｖ）の Castor 糖（Tate & Lyle）および２７％（ｗ／ｖ）の水である。体重を記録し、そして８週間後、被験動物をそれらの体重によって２群に分ける。いずれの異系交配系統の被験動物（齧歯類動物、霊長類）の場合にも、集団は、二つの群：肥満症の傾向がある（より大きく体重増加する）個体または肥満症抵抗性の（あまり体重増加しない）個体に自然に分かれるであろう。肥満動物は、６週間後に６０ｇまで重くなる。肥満傾向がある動物は、式（Ｉ）の化合物の体重および食物摂取への作用についての研究を行うことを続ける。図１は、極めて嗜好的食餌（高炭水化物）で飼養された被験動物間の体重分離の一例を示す。
【０３０３】
体重に及ぼす化合物の影響についての in vivo 実験
肥満傾向がある動物を、式（Ｉ）の化合物で処置し、そしてそれらの体重への作用を測定する。それら化合物は、１０ｍｇ／ｋｇＰＯで１日２回（bid）、比較のために１ｍＬ／ｋｇの投与容量または相当量のビヒクル用量（食塩水）で投与する。それら用量は、ＡＭ（０９：００）およびＰＭ（１６：００）に投与し、そして体重は、午前中の投与前に測定する。典型的に、一群につき８匹の被験動物である。図２〜４は、実施例７、実施例２０および実施例３０それぞれのＤＩＯラットでの４日間研究で認められた累積体重変化（％）を示す。
【０３０４】
非リコンビナント系におけるレプチン検定
リコンビナント系（例えば、ＯｂＲｂでトランスフェクションされたＨＥＫ２９３細胞）において十分に特性決定されたが、そこでは、レプチンは、ＳＴＡＴ３リン酸化の極めて顕著な増加をもたらし、これら系は、しばしば、レプチン受容体に対する試験化合物の活性の正確な尺度を与えることができなかった。受容体の過発現（更には、レプチンのその受容体との結合によって開始されるシグナリング経路のいろいろな部分にいろいろな薬物が作用する可能性）は、たいていの場合、試験される薬物の活性の不存在を引き起こすと考えられる。
【０３０５】
非リコンビナント系におけるレプチン受容体発現は、しばしば、変動性であり、シグナル安定性が実験中に残っている系を識別するように注意すべきである。このような系を用いると、レプチン受容体アンタゴニスト模擬体は、それらの作用対レプチンを評価することによって識別されうると考えられる（下を参照されたい）。
【０３０６】
レプチンは、主に、脂肪細胞中で生産されるが、ヒトの場合、レプチンをコードしているｍＲＮＡは、胎盤中にも存在する。ここで、レプチンは、微小血管系において重要な増殖的役割を果たしていると考えられる。天然の細胞系においてこの仮説を用いる可能性を評価した。
【０３０７】
ＪＥＧ−３プロトコル
ＪＥＧ−３細胞（絨毛癌細胞系）において、レプチンは、増殖を３倍まで刺激することができる（Biol. Reprod. (2007) 76: 203-10）。レプチンは、更に、ＪＥＧ−３細胞中の［３Ｈ］−チミジン取込みの濃度依存性増加を引き起こす（図５、１００ｎＭで最大作用（ＥＣ５０＝２．１ｎＭ））。細胞によって取り込まれる放射能は、それらの増殖活性の指数であり、液体シンチレーションベータカウンターで、計数／分（ＣＰＭ）で測定している。
【０３０８】
この知見は、ある化合物が、細胞増殖へのレプチンの作用を再現することができるかどうか（レプチン受容体アゴニスト模擬体）（すなわち、ある与えられた化合物は、細胞によって取り込まれる［３Ｈ］−チミジンの増加を引き起こすであろう）かまたは、レプチンに媒介される［３Ｈ］−チミジン取込みの増加を妨げることによってレプチンの作用を阻害することができるかどうか（アンタゴニスト作用）を調べるのに適用することができる。
【０３０９】
このアプローチは、非リコンビナント系を用いる利点を有し、しかも妥当な再現性およびエラー強さを有する。
脳内浸透の測定
試験種（齧歯類動物）に、ボーラス用量の研究中の基質を、通常は、静脈内（ＩＶ）または経口（ＰＯ）経路によって与える。適当な時点で、血液試料を採取し、得られた血漿を抽出し、そして基質濃度について、適所では、代謝産物濃度について分析する。同様の時点で、別の群からの被験動物を屠殺し、脳を摘出し、そして脳表面を清浄にする。次に、脳試料をホモジネートし、抽出し、そして基質濃度について、適所では、代謝産物濃度について分析する。或いは、微量透析プローブを、試験種の１か所またはそれを超える脳領域中に植込み、そして適当な時点で、引き続きの分析用に試料を集める。この方法は、細胞外基質濃度のみを測定する利点を有する。次に、血漿濃度および脳内濃度を比較し、そして個々の時点での平均濃度の比較によってかまたは、濃度−時間プロットの曲線下面積（ＡＵＣ）の計算によって比率を計算する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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