(57)【要約】式Iの化合物を開示する。式Iにおいて、R1、R2、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ及びＺは、明細書中にて定義される通りであってもよい。化合物は、カンナビノイド受容体によって仲介される疾患の治療に用いられてもよい。【化１】2011520974.tif 000043【選択図】なし
2011520974.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式で表され、
【化１】
2011520974.tif 000040
上記式において、
点線は任意の二重結合を表し、それを任意に含有する環は、ヘキサヒドロ、6a,10a-デヒドロ、8,9-デヒドロ、及び9,10-デヒドロから選択され；
Ｙは、S、O、CH2、CH(CH3)、CH(OH)、C(CH3)(OH)、C(CH3)2、C(-Ｕ(CH2)nＵ-)、C(O)、NH、S(O)、及びS(O)2から選択され；
ｎは１以上の整数であり；
ＵはCH2、S及びOから選択され；
ＺはＨ、置換された及び置換されていないアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリル、アリルアルキル、ヘテロアリル、ヘテロアリルアルキル、ヘテロシクロアルキル、及びヘテロシクロアルキルアルキルから選択され、それぞれのアルキル部分は、任意に３回以下で置換され、それぞれの環部分は、任意に１、２、３、４、又は５個の置換基で置換され；
Ｒ１はＨ並びに置換された及び置換されていないアルキルから選択される、
化合物。
【請求項２】
Ｒ１は、Ｈ及びアルキルから選択され；
Ｙは、カルボニル、ジメチルメチレン及びヒドロキシメチレンから選択され；
Ｚは、置換された又は置換されていないアルキル、置換された又は置換されていないシクロアルキル、置換された又は置換されていないフェニル、及び置換された又は置換されていないチオフェニルから選択される、
請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｚは、アルキル、シクロアルキル、フェニル、又はチオフェニルである、
請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｚは、へキシル、シクロヘキシル、フェニル又はチオフェニルである、
請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｙはジメチルメチレンである、
請求項２に記載の化合物。
【請求項６】
点線部分を有する環はヘキサヒドロ又は6a,10a-デヒドロである、
請求項２に記載の化合物。
【請求項７】
下記式で表される請求項１に記載の化合物。
【化２】
2011520974.tif 000041
【請求項８】
Ｙは、カルボニル、ジメチルメチレン及びヒドロキシメチレンから選択され；
Ｚは、置換された又は置換されていないアルキル、置換された又は置換されていないシクロアルキル、置換された又は置換されていないフェニル、及び置換された又は置換されていないチオフェニルから選択される、
請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
Ｚは、アルキル、シクロアルキル、フェニル又はチオフェニルである、
請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｚは、ヘキシル、シクロヘキシル、フェニル又はチオフェニルである、
請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｙはジメチルメチレンである、
請求項８に記載の化合物。
【請求項１２】
a) 3-ベンジル-6,6,9-トリメチル-6a,7,8,9,10,10a-ヘキサヒドロ-6H-イソクロメノ[3,4-d]ピリミジン-1-オール;
b) (6aS, 9R, 10aR)-6,6,9-トリメチル-3-(2-メチルオクタン-2-イル)-6a,7,8,9,10,10a- ヘキサヒドロ-6H-イソクロメノ[3,4-d]ピリミジン-1-オール;
c) (6aS, 9R, 10aR)-6,6,9-トリメチル-3-(2-フェニルプロパン-2-イル)-6a,7,8,9,10,10a- ヘキサヒドロ-6H-イソクロメノ[3,4-d]ピリミジン-1-オール; 
d) (6aS, 9R, 10aR)-3-(2-シクロヘキシルプロパン-2-イル)-6,6,9-トリメチル-6a,7,8,9,10,10a- ヘキサヒドロ-6H-イソクロメノ[3,4-d]ピリミジン-1-オール;
e) (6aS, 9R, 10aR)-6,6,9-トリメチル-3-(2-(チオフェン-2-イル)プロパン-2-イル)-6a,7,8,9,10,10a- ヘキサヒドロ-6H-イソクロメノ[3,4-d]ピリミジン-1-オール; 
f) (6aR, 9S, 10aS)-6,6,9-トリメチル-3-(2-フェニルプロパン-2-イル)-6a,7,8,9,10,10a- ヘキサヒドロ-6H-イソクロメノ[3,4-d]ピリミジン-1-オール;
g) 3-ベンジル-6,6,9-トリメチル-テトラヒドロ-6H-イソクロメノ[3,4-d]ピリミジン-1-オール;及び
h) 3-ベンジル-6,6,9-トリメチル-7,8,9, 10-テトラヒドロ-6H-イソクロメノ[3,4-d]ピリミジン- 1-オール
から選択される請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
カンナビノイド受容体によって仲介される疾患の治療方法であって、
前記受容体と前記カンナビノイド受容体／仲介疾患を治療できる量の化合物とを接触させることを備え、
前記化合物は、下記式で表され、
【化３】
2011520974.tif 000042
上記式において、
点線は任意の二重結合を表し、それを任意に含有する環は、ヘキサヒドロ、6a,10a-デヒドロ、８，９−デヒドロ、及び９，１０−デヒドロから選択され；
Ｙは、S、O、CH2、CH(CH3)、CH(OH)、C(CH3)(OH)、C(CH3)2、C(-Ｕ(CH２)ｎＵ-)、C(O)、NH、S(O)、及びS(O)2から選択され；
ｎは１以上の整数であってもよく；
ＵはCH2、S及びOから選択され；
ＺはＨ、置換された及び置換されていないアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリル、アリルアルキル、ヘテロアリル、ヘテロアリルアルキル、ヘテロシクロアルキル、及びヘテロシクロアルキルアルキルから選択され、それぞれのアルキル部分は、任意に３回以下で置換され、それぞれの環部分は、任意に１、２、３、４、又は５個の置換基で置換され；
Ｒ１は、Ｈ並びに置換された及び置換されていないアルキルから独立して選択される、
方法。
【請求項１４】
Ｒ１は、Ｈ及びアルキルから選択され、
Ｙは、カルボニル, ジメチルメチレン及びヒドロキシメチレンから選択され;
Ｚは、置換された又は置換されていないアルキル, 置換された又は置換されていないシクロアルキル, 置換された又は置換されていないフェニル, 及び置換された又は置換されていないチオフェニルから選択される、
請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
Ｚは、アルキル, シクロアルキル, フェニル又はチオフェニルである、
請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
Ｚは、ヘキシル, シクロヘキシル, フェニル又はチオフェニルである、
請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
Ｙは、ジメチルメチレンである、
請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
点線部分を有する環は、ヘキサヒドロ又は6a,10a-デヒドロである、
請求項１４に記載の方法。
【請求項１９】
前記化合物は、
a) 3-ベンジル-6,6,9-トリメチル-6a,7,8,9,10,10a-ヘキサヒドロ-6H-イソクロメノ[3,4-d]ピリミジン-1-オール;
b) (6aS,9R,10aR)-6,6,9-トリメチル-3-(2-メチルオクタン-2-イル)-6a,7,8,9,10,10a- ヘキサヒドロ-6H-イソクロメノ[3,4-d]ピリミジン-1-オール;
c) (6aS,9R,10aR)-6,6,9-トリメチル-3-(2-フェニルプロパン-2-イル)-6a,7,8,9,10,10a- ヘキサヒドロ-6H-イソクロメノ[3,4-d]ピリミジン-1-オール; 
d) (6aS,9R,10aR)-3-(2-シクロヘキシルプロパン-2-イル)-6,6,9-トリメチル-6a,7,8,9,10,10a- ヘキサヒドロ-6H-イソクロメノ[3,4-d]ピリミジン-1-オール;
e) (6aS,9R,10aR)-6,6,9-トリメチル-3-(2-(チオフェン-2-イル)プロパン-2-イル)-6a,7,8,9,10,10a- ヘキサヒドロ-6H-イソクロメノ[3,4-d]ピリミジン-1-オール;
f) (6aR,9S,10aS)-6,6,9-トリメチル-3-(2-フェニルプロパン-2-イル)-6a,7,8,9,10,10a- ヘキサヒドロ-6H-イソクロメノ[3,4-d]ピリミジン-1-オール;
g) 3-ベンジル-6,6,9-トリメチル-テトラヒドロ-6H-イソクロメノ[3,4-d]ピリミジン-1-オール;及び
h) 3-ベンジル-6,6,9-トリメチル-7,8,9,10-テトラヒドロ-6H-イソクロメノ[3,4-d]ピリミジン- 1-オール
から選択される、
請求項１３に記載の方法。
【請求項２０】
カンナビノイド受容体は、CB-1及びCB-2から選択される、
請求項１３に記載の方法。
【請求項２１】
前記疾患は、ヒト肺がん、前立腺がん、結腸直腸がん、膵がん、CNSがん、脳腫瘍、及びヒト緑内障から選択される、
請求項１９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
本願は、２００８年５月１９日に出願された出願番号61/128,171の優先権の利益を主張するものであり、その出願の全てを併合するものである。
【０００２】
古典的カンナビノイドであるデルタ‐９‐テトラヒドロカンナビノール（Δ９-THC）は、カンナビス  サティバ（Cannabis sativa）から抽出される主要な有効成分である。カンナビノイドの効果は、特異的高親和性受容体との相互作用による。現在、２つのカンナビノイド受容体が特定されている。すなわち、CB-1、つまり哺乳類の脳及び末梢組織における他の多くの部分で見出される中枢受容体、及びCB-2、つまり主に免疫システムに関連する細胞において見出される末梢受容体である。さらに、近年、GPR35及びGPR55というオーファン受容体が、カンナビノイド型リガンドと結合することが報告され、三つ目の受容体の亜型として紹介された。CB-1受容体は、古典的カンナビノイドと関連する精神活性を仲介すると考えられている。これらの受容体の特性評価は、アゴニストWIN 55212-2等の特異的合成リガンドの開発によって可能となった（D'Ambra et al, J. Med Chem. 35:124 (1992)) 及び CP 55,940 (Melvin et al, Med Chem. 27:67 (1984))。
【０００３】
薬理学的に、カンナビノイドは、中枢神経系、心臓血管、免疫システム及び／又は内分泌系等の様々な標的に影響を与えるために使用可能である。特に、CB-1又はCB-2受容体及び潜在的にGPR35及びGPR55受容体に親和性を持つ化合物は、抗がん剤、抗肥満薬、鎮痛剤、筋弛緩剤及び抗緑内障薬として有用である。これらの化合物は、同様に、胸腺の疾患、嘔吐、様々な神経障害、記憶障害、運動障害、片頭痛治療、多発性硬化症、ぜんそく、てんかん、虚血、苦痛、起立性低血圧、骨粗しょう症、肝線維症、炎症及び過敏性大腸症、並びに心不全の治療に使用可能である。 
【０００４】
しかしながら、Δ9-THC等のカンナビノイドは、同様に細胞膜に作用して、眠気、物アミンオキシダーゼ機能の障害、及び非受容体介在性の脳機能の障害等の望ましくない副作用を引き起こす。カンナビノイドには、依存性及び向精神性を有するものもあり、これらはその治療価値を制限する傾向がある。
【０００５】
構造が同定された多くの古典的が、US特許番号7,169,942に記載されている。本技術分野においては、古典的又は非古典的カンナビノイドのアナログが、現在継続して求められている。アナログは、CB-1 受容体 及び／又はCB-2受容体により仲介される疾患及び障害の処置という治療上の目的に使用可能である。
【発明の概要】
【０００６】
前述の課題に鑑みて、本発明は、様々な複素環カンナビノイドアナログ化合物、組成物、及び／又は関連する方法を提供することを目的とし、それによって、上記に外接した技術を含む従来技術の様々な欠如及び欠陥を克服する。当業者は、本発明の１つ又は複数の側面がある目的を達成でき、その一方で他の１つ又は複数の側面が他の目的を達成できることを理解するであろう。それぞれの目的は、その全ての点において、本発明の全ての側面に等しく当てはまるものではない。下記の目的は、本発明のいずれの側面に対しても適用されると考えられる。
【０００７】
カンナビノイド及びヒト細胞及び組織に存在する関連受容体に対する親和性を示す１又は複数種類のカンナビノイド化合物を特定することも、本発明の目的となり得る。
【０００８】
１又は複数の新たなピリミジン古典的カンナビノイド受容体リガンドを提供することも本発明の目的となり得る。このような化合物は、A環中にピリミジン系置換基を備えてもよく、ヘキサヒドロ−、テトラヒドロ−又は非ピラン環系、及び全ての公知の及び推定されるＣ３側鎖置換基を備えることができる。
【０００９】
治療での使用用のカンナビノイド受容体選択性を示すこれらの化合物の同定も、本発明の他の目的となり得る。
【００１０】
本発明の他の目的、特徴、利益及び利点は、本概要及び下記の実施形態の説明によって明白であり、種々のカンナビノイド化合物及び関連する治療法方の知識を有する当業者にとって、容易に理解できるであろう。このような目的、特徴、利益及び利点は、以下に示される付随の例、データ、図及び全ての妥当な推論単独で又は本明細書に取り込まれる文献の考慮を伴って、結合されることは、明白であろう。
【００１１】
１つに、本発明は、下記式Ｉで表される化合物から選択あれるカンナビノイドアナログ化合物を対象としてもよい。
【００１２】
【化１】
2011520974.tif 000003
式Ｉにおいて、C環は、ヘキサヒドロ, 6a,10a-デヒドロ, 8,9-デヒドロ, 及び9,10-デヒドロ構造を備えるか、これらから選択されてもよく；ＹはＳ，Ｏ，ＣＨ２，CH(CH3)，CH(OH), C(CH3)(OH), C(CH3)2, C(-V(CH2)nV-), C(O), NH, S(O),及びS(O)2から選択されてもよく；VはCH2, S及びOから選択されてもよく；ｎは１以上の整数であり、好ましくは１〜６であり；Ｚは、Ｈ、置換された及び置換されていないアルキル、置換された及び置換されていないシクロアルキル、置換された及び置換されていないアリル、置換された及び置換されていないヘテロアリル、置換された及び置換されていないヘテロシクロアルキル、アリルアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキルアルキル及びヘテロアリルアルキルから選択されてもよく、それぞれのアルキル部分は任意に３回以下で置換されていてもよく、それぞれの環部分は、１、２、３、４、又は５個の置換基によって任意に置換されていてもよく；R1はH、並びにアミノアルキル、モルフォリンアルキル、及びヘミコハク酸エステル部分を包含するがこれに限定されない、置換されていない又は置換されたアルキルから選択されてもよい。
【００１３】
また、本発明は、本書に示すように、化合物の塩を対象とすることができる。
【００１４】
また、本発明は、本書に示すように、化合物のプロドラッグを対象とすることができる。
【００１５】
本発明はまた、以下に説明される化合物、その塩及び／又はプロドラッグ；並びに医薬的に許容されるキャリア成分を含有する医薬組成物を対象とすることができる。
【００１６】
本発明は、カンナビノイド受容体の活性を修飾する方法を対象としてもよい。このような方法は、カンナビノイド又は関連レセプター、その塩及び／又は化合物における活性を有する、本発明の若しくは本書に説明する他の化合物、塩及び又はプロドラッグを提供すること；並びに、細胞及び／又は細胞のカンナビノイド受容体とこのような化合物とを接触させること、を備えてもよい。下記に示すように、このような接触は、カンナビノイドの活性を少なくとも部分的に修飾する少なくとも部分的な効果を奏することができる。
【００１７】
本発明はまた、カンナビノイド受容体介在疾患の治療方法を対象としてもよい。このような方法は、カンナビノイド受容体における活性を有する、本書に示す化合物又は本書に示す他の化合物、その塩及び／又はプロドラッグを提供すること；並びに、患者に、カンナビノイド受容体介在疾患を治療する少なくとも部分的な効果を有する、化合物、塩及び／又はプロドラッグを所定量投与すること；を備えてもよい。本発明のこの側面は、CB-1 及び／若しくは CB-2（又は関連する）受容体の過活性又はCB-1 及び／若しくは CB-2（又は関連する）受容体の非活性又は低活性が介在する病状を治療又は抑制するための、CB-1若しくは関連受容体のアゴニスト、CB-1若しくは関連受容体のアンタゴニスト、CB-2若しくは関連受容体のアゴニスト、並びに／又はCB-2若しくは関連受容体のアンタゴニストの使用に関連してもよい。
【００１８】
本発明はまた、下記式の化合物から選択される化合物を対象としてもよい。
【００１９】
【化２】
2011520974.tif 000004
式Iにおいて、C環は、ヘキサヒドロ‐、6a,10a‐デヒドロ‐、8,9-デヒドロ、及び9,10-デヒドロ構造を含むか、これらから選択されてもよく；R1は、H、アルキル、アミノアルキル、モルフォリンアルキル、及びヘミコハク酸エステル部分から選択されてもよく；Ｙは、カルボニル、ジメチルメチレン及びヒドロキシメチレン部分から選択されてもよく；Ｚは、置換された及び置換されていないアルキル、フェニル、置換されたフェニル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、チオフェニル及び置換されたチオフェニル部分から選択されてもよく、その置換基は本発明を知った当業者により理解され、本書のどこかに記載されたものを包含するが、それに限定されない。ある実施形態において、Ｚは、アルキル、フェニル、チオフェニル又はシクロアルキル部分であってもよく、任意に、Ｙはジメチルメチレン又はカルボニル部分であってもよい。このような化合物は、いずれも、このような化合物の塩、及び/又はプロドラッグから選択されてもよい。
【００２０】
本発明は、限定されることなく、同様に、がんの治療方法を対象とすることができる。このような方法は、がん細胞の成長細胞等のカンナビノイド受容体を有するがん細胞を準備することと；このような成長を式Ｉに示す化合物から選択されるカンナビノイド化合物と接触させることとを備えていてもよい。
【００２１】
【化３】
2011520974.tif 000005
式Ｉにおいて、Ｃ環、Ｒ１、Ｙ及びＺは、上述した通りである。実施形態において、Ｒ１はＨ、アルキル、アルキルアミノ、アルキルモルフォリン、及びヘミコハク酸エステル部分から選択されてもよく；Ｙはカルボニル、ジメチルメチレン、及びヒドロキシメチレン部分から選択されてもよく；Ｚは置換された及び置換されていないアルキル、フェニル、置換されたフェニル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、チオフェニル及び置換されたチオフェニル部分から選択されてもよく、これらの置換基は、本発明を知った当業者によって理解され、本書に記載されたもの、前記化合物の塩及びプロドラッグ、及びそれらの組み合わせを含むがそれらに限定されず、単独の又は複数のこれらの化合物は、ある量で、成長細胞の死を引き起こす効果を少なくとも部分的に奏する。ある他の実施形態では、Zは、置換されたアルキル、置換されていないアルキル、置換されたシクロアルキル、置換されていないシクロアルキル、フェニル、置換されたフェニル、チオフェニル、及び置換されたチオフェニル部分から選択されてもよく、置換基は、クロロ、ヒドロキシ、メトキシ部分から選択されてもよい。このような実施形態において、Ｒ１は、Ｈ及びメチル部分から選択されてもよい。本書で説明されるように、またそれに限定されず、Ｙはジメチルメチレン又はカルボニルであってもよい。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】CB-1受容体における化合物６ｂの機能活性を示す。
【図２】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物６ｂに暴露されたA549細胞による４時間及び１８時間後のG-CSFの分泌結果を示す。
【図３】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物６ｂに暴露されたA549細胞による４時間後及び１８時間後のIL-１βの分泌結果を示す。
【図４】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物６ｂに暴露されたA549細胞による１８時間後のIL-6の分泌結果を示す。
【図５】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物６ｂに暴露されたA549細胞による４時間後のIL-6の分泌結果を示す。
【図６】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物６ｂに暴露されたA549細胞による１８時間後のIL-8の分泌結果を示す。
【図７】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物６ｂに暴露されたA549細胞による４時間後のIL-8の分泌結果を示す。
【図８】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物６ｂに暴露されたA549細胞による４時間後及び１８時間後のMCP-Iの分泌結果を示す。
【図９】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物６ｂに暴露されたA549細胞による４時間後のMIFの分泌結果を示す。
【図１０】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物６ｂに暴露されたA549細胞による１８時間後のMIFの分泌結果を示す。
【図１１】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物６ｂに暴露されたA549細胞による１８時間後のRANTESの分泌結果を示す。
【図１２】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物６ｂに暴露されたA549細胞による４時間後のRANTESの分泌結果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
本発明に包含される新規の化合物は、上述の一般式Iで表される化合物、並びにその医薬的に許容される塩及びプロドラッグである。
【００２４】
本発明において、「アルキル」とは、１〜２０個の炭素原子を有する直鎖又は分岐鎖アルキル基を意味する。任意に、本発明におけるアルキル基は、１又は複数の二重結合及び／又は１又は複数の三重結合を含有していてもよい。
【００２５】
「シクロアルキル」は、３〜１２個の炭素原子を有する炭素環基を意味する。シクロアルキルは、単環でもよく、多数の環が融合した系であってもよい。任意に、本発明のシクロアルキル基は、１又は複数の二重結合及び／又は１又は複数の三重結合を含有していてもよい。
【００２６】
「複素環」とは、縮合環系を包含し、窒素、酸素又は硫黄及びその組み合わせから選択される少なくとも１個かつ４個までのヘテロ原子を含有する、４、５、６又は７員環の１又は複数の複素環系を意味する。
【００２７】
「アリル」は、少なくとも１つの環が芳香環である、単環、多環、又は縮合環を有する芳香族炭素環系を意味する。
【００２８】
「ヘテロアリル」は、縮合環系を包含し、窒素、酸素、又は硫黄及びそれらの組み合わせから選択される少なくとも１個かつ４個までのヘテロ原子を含有する、３〜１２個の原子を有する１又は複数の芳香族環系である。
【００２９】
「アリルアルキル」は、アリル基によって置換されたアルキル基であり、結合部分がアルキル鎖の炭素である。
【００３０】
本書において、「置換された」は、当業者にとって理解されるような置換を意図する。少なくとも１個の、及び５個程度の置換基が、１個の基に存在してもよい。置換基の例として、ハロ、アルキル、アルコキシ、ヒドロキシ、アリル、ヘテロアリル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、チオール、アルキルチオール、ハロアルキル（例えばトリフルオロメチル）、カルボキシ、アルキルカルボキシ、カルバモイル等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００３１】
１つの観点からは、代表として、非限定的なピリミジンアナログが、下記スキームの通り、上述のC‐環を生成するように、中間ピリミジンＩＩが適切なテルピンと反応することで調製される。ヘキサヒドロは、Tietz, Chem. Rev., 96:115-136 (1996) 及び本書で参照されることで本願に組み込まれる文献に記載されたタンデム環化法の修正法を用いて合成される。環の形成は、スキーム１に示されるように、ラセミの又は光学活性のいずれであっても、置換されたピリミジン及びシトロネラルを伴うマイクロ波条件下で実行される。
【００３２】
【化４】
2011520974.tif 000006
9,10- 及び8,9-デヒドロアナログの合成は、ヘキサヒドロと同様の反応条件で行われるが、シトロネラルに代えてTBS保護3-ヒドロキシルシトロネラルが用いられる (スキーム2)。この化合物の合成は、参照することで本書に組み込まれるKesenheimer and Groth, Org. Lett., 8:2507 (2006)によって既に報告されている。
【００３３】
【化５】
2011520974.tif 000007
6a,10a-デヒドロの合成は、ラセミの又は光学活性プレゴン及び適切に置換されたピリジンアナログを用いるAdams (参照されることで本書に組み込まれるUS Patent No. 2,419,934)の方法を用いて行われる（スキーム３）。
【００３４】
【化６】
2011520974.tif 000008
対応するピリミジンは、ジメチル−、ジエチル-、又はビス（トリクロロフェニル）−マロン酸と、置換されたアミジンとのトラウベ型合成によって調整される。スキーム４に示すように、アミジンは、芳香族化合物, 複素環式芳香族化合物, 及び脂肪族ニトリルから、メタノール／HCｌ及びその後のＮＨ３を含む公知の化学反応を用いて、又はアミノ‐クロロ‐メチル‐アルミニウムを用いる直接変換によって、調製される（例えば、参照されることで全体が本書に組み込まれるMoss, Tet. Lett. 36:8761を参照のこと）。
【００３５】
【化７】
2011520974.tif 000009
このように調製されたアミジン及びマロン酸エステルは、例えばナトリウムエトキシドのような塩基の存在下で、置換されたピリミジンを形成するように、環化される（スキーム５）。
【００３６】
【化８】
2011520974.tif 000010
Ｙにgem−ジアルキル、複素環式、又は炭素環式置換基を含有する誘導体は、その化合物は市販されていないが、メチレンニトリルの直接アルキル化（Makriyannisの米国特許番号7,057,076及び公開番号2004/087590を参照のこと。これらの文献の全体は、参照されることで、本書に組み込まれる）又は適切に置換されたアリル、ヘテロアリルハロゲン及びイソプロピルニトリルから調製される（参照されることで全体が本書に組み込まれる、２００３年４月２１日に出願された米国公開番号2005/0065033を参照のこと)。スキーム6及び7は、化学反応の範囲の代表であるが、それに限定されない。
【００３７】
【化９】
2011520974.tif 000011
【００３８】
【化１０】
2011520974.tif 000012
Ｙにケト、ヒドロキシ、又はアルキルヒドロキシ置換基を含有する誘導体は、Ｙ＝ＣＨ２を有する化合物の直接酸化によって、又はＣ２アルデヒドピリミジンから調製され、既に報告されている化学反応を用いて、２，２‐ビス−エチルスルファニル−アセトアミジン及び適切なマロン酸エステルから調製される（スキーム７）（参照されることで本書にその全体が組み込まれる米国特許番号 7,169,942を参照のこと）。
【００３９】
【化１１】
2011520974.tif 000013
いくつかの代表的な、しかし非限定的な化合物の合成が本書で述べられるが、他の種々の化合物が同様の手法及び／又はその単純な変更を用いることで調製され得ることを、当業者は理解するであろう。すなわち、Ｒ１、Ｙ及びＺ部分の特性は、それぞれの試薬、出発物質、中間体及びそれらの化学的性質によってのみ限定される。様々な他のこのような部分及び／又はそれらの置換基は、上述の同時係属出願に記載されたものを含むが、それらに限定されない。
【００４０】
上述した同時に継続する出願に記載されたように、本発明は、より広くは、種々の他のこのような化合物、その塩及び／又はプロドラッグを、それらに対応する医薬組成物と共に、検討する。このような化合物、塩、プロドラッグ、及び／又は医薬組成物は、本書に記載するように使われてもよい。例えば、本発明は、CB-1受容体及びCB-2受容体の一方又は両方の活性を修飾するために使われてもよい。このような方法は、細胞及び／又はそのカンナビノイド受容体と、本発明の化合物とを接触させることによって実行されてもよく、このような接触は、ｅｘ  ｖｉｖｏかｉｎ  ｖｉｖｏかに関わらず、このようなカンナビノイド受容体の活性を少なくとも部分的に修飾する少なくとも部分的な効果を有する。
【００４１】
より一般的には、本発明の化合物及び／又は組成物の種々の薬理学的及び／又は治療上の利点は、同時継続する前述の出願で述べられた情報を考慮して理解可能である。本発明のアナログは、本書に記載するように、幅広い症状の治療に薬理学的に効果のある量で投与され得る。限定されることなく、種々の症状及び／又は病状は、発明の名称が「トリ−アリル／ヘテロ芳香族カンナビノイド及びその使用（Tri-Aryl/Hetero aromatic Cannabinoids and Use Thereof）」で、２００８年３月３日に出願された、同時継続する出願番号12/074,342の段落００６７に記載され、その全体は、本書に組み込まれる。
【００４２】
従って、本発明は、本書に記載される化合物を提供すること（このような化合物は、カンナビノイド受容体での活性を示す）；並びに、そのような化合物にカンナビノイド受容体を有する細胞を接触させること、及び／又は患者にそのような化合物を投与すること（このような化合物は、ある量で、カンナビノイド受容体／仲介疾患を治療するために少なくとも部分的に効果的である）を備える方法を対象としてもよい。このようなカンナビノイド受容体は、本書に記載される受容体であってもよく、本発明を知った当業者によって理解され、実現されてもよい。
【００４３】
医薬組成物若しくは治療の一部に若しくは一部として示されるように、受容体が効果的な量の１つ若しくは複数の本発明の化合物と接触することによって、又は、効果的な量の１つ又は複数の化合物とそのような受容体を有する細胞を接触させることにより、化合物が細胞内で受容体と接触し、カンナビノイド及び関連受容体の活性は、影響を受け、仲介され、及び／又は修飾され得る。接触は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏであっても、ｉｎ  ｖｉｖｏであってもよい。すなわち、当業者によって理解されるように、「接触」とは、カンナビノイド及び／又は関連受容体と、１又は複数の化合物と、このような化合物が、受容体の活性に結合、影響、又は修飾するように、引き合わされることを意味する。受容体の活性を修飾する及び／又はそれに影響を与える１又は複数の化合物の効果的な量は、実験的に決定され、このような決定を行うことは、当該技術分野の技術の範囲である。
【００４４】
限定されることなく、本発明のアナログ化合物は、同時継続している前述の‘３４２出願の実施例２に記載されている受容体結合アッセイにおいてｅｘ  ｖｉｖｏで使用され得る。本発明のアナログ化合物のｉｎ  ｖｉｔｒｏ活性は、その同時継続出願の実施例３に記載されているものと同じ方法によって実証され得る。また、ｉｎ  ｖｉｖｏ活性は、その実施例４及び６に記載されたプロトコルを用いても実証され得る。より具体的には、ヒト肺, 前立腺, 結腸直腸及び膵癌の細胞株に対する、本発明の種々の代表的な化合物の抗がん活性は、上述の同時継続の’３４２出願の実施例９に記載された方法を用いることで確認可能である。このような方法を拡大して、本発明は、同様に中枢神経系のがん成長を治療すること、及び／又はそのような成長における細胞死を誘導することに用いられてもよい。本発明によると、本書に記載される多様なカンナビノイド化合物は、上述されたものを含むがそれらに限定されず、ヒトの神経膠腫及び／又は脳腫瘍の治療方法と関連して用いられてもよい。このような実施形態を描く上で、同時継続出願で記載されたように、ヒト脳腫瘍に接触させ及び／又は治療することに本発明の１又は複数の化合物が提供され使用され得、このような接触及び／又は治療は、細胞死及び／又は関連する効果によって証明される。
【実施例】
【００４５】
下記の非限定的な実施例及びデータは、本書に示す手法を通じて利用可能である通り、ピリミジンの古典的カンナビノイド受容体リガンド及び／又は化合物の合成を含む、本発明の化合物、組成物及び／又は方法に関連する種々の側面及び特徴を説明する。従来技術と比べて、本発明の化合物及び方法は、驚くべき、予想外かつ従来技術に反する結果及びデータを提供する。本発明の利用可能性がいくつかの化合物、部位及び／又はそれらの置換物の調製及び使用を通じて説明されるが、当業者は、同程度の結果が、本発明の範囲に応じて、他の種々の化合物、部位及び／又は置換物によって得られることを理解する。全ての化合物は、ChemBioDraw Ultra Version 11.0.01を用いて命名された。
【００４６】
実施例１ａ
【００４７】
【化１２】
2011520974.tif 000014
２−メチル-２−（チオフェン−２−イル）プロパンニトリル
２-（チオフェン-２-イル）アセトニトリル（１ｇ、８．１３ｍｍｏｌ）の４ｍｌの無水ＴＨＦの溶液に、ＫＨＭＤＳ（２４．４ｍｍｏｌ、４８．９ｍｌ、０．５Ｍトルエン溶液）を０℃で添加した。混合物を３分間撹拌し、１６．２６ｍｍｏｌヨードメタン（１．１３ｍｌを無水ＴＨＦ２６ｍｌに添加したもの）を１０分かけて添加した。混合物を５分間撹拌し、ＴＬＣによってモニターした。完了次第、含水塩化アンモニウムによって反応を停止した。有機相を、酢酸エチルによって分離し、硫酸ナトリウムによって乾燥させた。生成物を、真空蒸留によって精製した（１トールにおける沸点は４２℃）。  収率：89％。  1H NMR(500MHz,CDCl3)：δ(ppm) 7.4ppm (d,1H), 7.2ppm (t, 1H), 7.0ppm (d,1H), 1.9ppm (s, 6H)。
【００４８】
実施例１ｂ
同様に、下記化合物を合成した。
【００４９】
【化１３】
2011520974.tif 000015
2,2-ジメチルオクタンニトリル
真空蒸留（１．１トールでの沸点が５０〜５５℃）。収率：84％  I.R.(neat) ニトリル２２３０ｃｍ−１，1HNMR (500MHz, CDCl3)：δ(ppm) 1.5ppm (m,4H)。1.4〜1.3ppm (m,12H), 0.9ppm (s,3H)。
【００５０】
実施例２ａ
【００５１】
【化１４】
2011520974.tif 000016
2-メチル-フェニルプロピオンニトリル
フルオロベンゼン（5.85 mL, 62.4 mmol）の100 mLの無水トルエン溶液にイソブチロニトリル（22.5 mL, 250 mmol）を添加し、次いで200 mLの0.5 M KHMDSのトルエン溶液（100 mmol）を添加した。反応液を80℃で24時間撹拌した。反応液を室温で冷却し、ジエチルエーテルで希釈し、水及び食塩水で洗浄した。有機分画を硫酸ナトリウムで乾燥させて、減圧下で濃縮した。生成物を酢酸エチル/ヘキサン勾配を用いたフラッシュクロマトグラフィーで精製し、茶色い油状の目的の化合物を4.57g（50％）の収量で得た。MS：(ESI,Pos) m/z 168.0 （M+23）  1HNMR(500MHz, CDCｌ３):δ(ppm) 7.48 (d, 2H), 7.39 (t, 2H),7.31 (t,1H), 1.73(s, 6H)。
【００５２】
実施例２ｂ
同様に、下記化合物を合成した。
【００５３】
【化１５】
2011520974.tif 000017
2-シクロヘキシル-2-メチルプロパンニトリル 
2-ブロモピリジンを出発物質として用い、2-メチル-2-フェニルプロパンニトリルと同様の方法によって精製することで、茶色の油を得た。MS: (ESI, Pos) m/z 168.9 (M+23)。
【００５４】
実施例 ２ｃ
【００５５】
【化１６】
2011520974.tif 000018
２-メチル-２-（ピリジン-２-イル）-プロパンニトリル
２-ブロモピリジンを出発物質として用い、２-メチル-２-フェニル-プロパンニトリルと同様の方法で精製することで、茶色の油得た。MS:(ESI,Pos) m/z 168.9 (M+23)。
【００５６】
実施例３ａ
【００５７】
【化１７】
2011520974.tif 000019
2-フェニルアセトアミジン 
塩化アンモニウム(2.9 g, 54 mmol) を20 mLの無水トルエンに懸濁し、アルゴン下で撹拌し、０℃に冷却した。この懸濁液に25 ml (50 mmol) の2Mのトリメチルアルミニウムのトルエン溶液を添加した。反応液を室温に温め、メタン発生の停止まで継続して撹拌した（〜１時間）。次いで、3.46 mL (30 mmol) のシアン化ベンジル の１０ｍL無水トルエン溶液を加え、反応液を８０℃に１８時間熱した。反応液を室温に冷却し、１５ｇのシリカゲルの５０ｍLクロロホルムスラリーに静かに注ぎ、５分間撹拌した。シリカをろ過し、メタノールで洗浄した。ろ液及び洗浄液を集めて、１５ｍL以下に減らし、再度ろ過した。次いで、18 mL (54 mmol) の3NのＨＣｌメタノール溶液、さらに４００ｍＬのジエチルエーテルを、ろ液に加えた。16時間室温で撹拌した後、形成された白色の沈殿物をろ過した。この粗生成物である固体を、150 mL のイソプロパノール‐アセトンの4:1混合物に添加し、さらに１６時間室温で撹拌した。溶解しなかった塩化アンモニウムをろ過で除去し、ろ液を１５ｍＬ以下に減らした。300 mL のジエチルエーテルを加えた後、混合物を１時間撹拌した。白色の沈殿物をろ過し、乾燥することで、３．７ｇ（７２％）の目的の化合物を、塩酸塩として得た。MS: (ESI, Pos) m/z 157.9 (M+23) 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6):δ(ppm) 9.06 (br.d, 3H), 7.49 (d, 2H), 7.36 (t, 2H), 7.31 (t, 1H), 3.74 (s, 2H)。
【００５８】
実施例3b
同様にして、下記アミジンを合成した。
【００５９】
【化１８】
2011520974.tif 000020
2-メチル-2-フェニルプロパンイミドアミド塩酸塩
収率: 29%  MS: (ESI, Pos) m/z 163.0 (M+l) 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6):δ(ppm) 9.27 (br.s, 2H), 8.71 (br.s, 2H), 7.41 (m, 2H), 7.36 (m, 2H), 7.32 (m, 1H), 1.60 (s, 6H) 13C NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ(ppm) 175.91 , 143.27, 128.71, 127.42, 125.65, 44.06, 26.31。
【００６０】
実施例３ｃ
【００６１】
【化１９】
2011520974.tif 000021
2-メチル-2-(チオフェン-2-イル)プロパンイミドアミド
収率: 36%  MS: (ESI, Pos) m/z 169.0 (M+ 1) 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ(ppm) 8.8 (br.d, 3H), 7.53 (dd, 1H), 7.13 (dd, 1H), 7.04 (dd, 1H), 1.70 (s, 1H) 13C NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ(ppm) 174.75, 147.04, 127.18, 125.72, 125.48, 41.92, 27.20。
【００６２】
実施例３ｄ
【００６３】
【化２０】
2011520974.tif 000022
2-メチル-2-ピリジン-2-イル-プロパンニトリル
出発物質である2-ブロモピリジンから調製し、茶色の油を得た。MS: (ESI, Pos) m/z 168.9 (M+23)。
【００６４】
実施例３ｅ
【００６５】
【化２１】
2011520974.tif 000023
ヘキサンアミジン
収率:84  MS: (ESI, Pos) m/z 115.1 (M+l) 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ(ppm) 9.11 (s, 2H), 8.78 (s, 2H), 2.37 (t, 2H), 1.60 (p, 2H), 1.27 (m, 4H), 0.86 (t, 3H) 13C NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ(ppm) 171.15, 31.58, 30.33, 25.96, 21.59, 13.77。
【００６６】
実施例３ｆ
他の様々なアミジンは、それぞれのニトリルから、後述するように、Y−及び／又はZ-置換ピリミジン中間体を得る途上で説明されたものに相当する合成方法を用いて調製可能である。
【００６７】
実施例４
【００６８】
【化２２】
2011520974.tif 000024
2,2-ビス(エチルチオ)アセトイミドアミド
5.16 mmolのトリメチルアルミニウム(2.6 ml, トルエンを溶媒とする2M溶液)を、2mlの無水トルエンにおける塩化アンモニウム(5.58 mmol, 300 mg)の懸濁液に５℃で静かに添加した。混合物を室温にして、メタンガスの発生が停止するまで撹拌した。3.1 mmol (500 mg) の2,2-ビス(エチルチオ) アセトイミドアミドを1 ml の無水トルエンに加えたものを添加した。混合物を８０℃で１８時間還流し、TLCはニトリルが消費されたことを示した。混合物を1.55 g シリカゲルと 5 ml クロロホルムとの混合物に注ぎ、５分間撹拌した。シリカをろ過で除き、メタノールで洗浄した。ろ液を2 mlになるまで揮散させ、ろ過にてNH4Clを除いた。2 ml の 3N HClメタノール溶液(6 mmol)を、次いで31 ml のエチルエーテルを添加し、混合物を一晩撹拌した。得られた粗生成物である白色沈殿をろ過し、体積比率で４：１のイソプロパノール‐アセトンと混合し、室温で一晩撹拌した。不溶な塩化アンモニウムをろ過で除き、ろ液を蓋タブ２ｍｌになるように揮散させ、31 ml のエーテルと混合した。白色沈殿をろ過し、目的の生成物であることを確認した。生成物を、マススペクトロスコピー及びDMSOを用いたNMRで確認した。+MS=179m/z, 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): 9.35 ppm (d 3H, split). 5.1 ppm(s, 1H). 2.77 ppm (q, 4H). 1.27 ppm (t, 6H)。
【００６９】
実施例５ａ
【００７０】
【化２３】
2011520974.tif 000025
2-ベンジルピリミジン-4,6-ジオール
金属ナトリウム(168 mg, 7.3 mmol) を8 mLの無水エタノールに溶解させた。これに、 500 mg (2.93 mmol) の2-フェニルアセトイミドアミド塩酸塩 3a を添加し、反応液を室温で５分間撹拌した。ジメチルマロン酸(2.9 mmol) を添加して、一晩加熱して還流した。反応液を室温に冷却し、ろ過した。固体を数回無水エタノールで洗浄した。ろ液及び洗浄液を合わせて、体積で２倍の水で薄め5N HClでpHを〜2に調整してすることで、生成物を沈殿させた。混合物を冷却して、ろ過した。固体を数回ジエチルエーテルで洗浄し、乾燥させることで、桃色固体を262mg (収率44%)得た。MS: (ESI, Neg) m/z 200.8 (M-1) 1HNMR (500 MHz, DMSO-d6): δ (ppm) 11.80 (br.s, 2H), 7.32 (m, 4H), 7.25 (m, 1H), 5.09 (s, 1H), 3.80 (s, 2H)。
【００７１】
実施例５ｂ
同様に、下記化合物を合成した。
【００７２】
【化２４】
2011520974.tif 000026
2-(2-フェニルプロパン-2-イル)ピリミジン-4,6-ジオール
MS: (ESI, Neg) m/z 228.9 (M-1); 1H NMR(500 MHz, DMSO-d6): δ (ppm) 11.35 (br.s, 2H), 7.33 (t, 2H), 7.23 (m, 3H), 5.19 (s, 1H), 1.62 (s, 6H)。
【００７３】
実施例５ｃ
【００７４】
【化２５】
2011520974.tif 000027
2-(2-(チオフェン-2-イル)プロパン-2-イル)ピリミジン-4,6-ジオール
MS: (ESI, Neg) m/z 235.1 (M-1); (500 MHz, DMSO-d6): δ (ppm) 11.39 (br.s, 2H), 7.41 (d, 1H), 6.99 (d, 1H), 6.97 (t, 1H), 5.2 (s, 1H), 1.72 (s, 6H)。
【００７５】
実施例５ｄ
【００７６】
【化２６】
2011520974.tif 000028
2-(2-シクロヘキシルプロパン-2-イル)ピリミジン-4,6-ジオール
MS: (ESI, Neg) m/z 235.1 (M-1); (500 MHz, DMSO-d6): δ (ppm) 11.41 (br.s, 2H), 5.12 (s, 1H), 1.80 (t, 1H), 1.69 (d, 2H), 1.38 (s, 1H),1.72 (d, 2H), 1.19 - 1.02 (m, 4H), 1.15 (s, 6H), 0.94 (dd, 2H)。
【００７７】
実施例５ｅ
【化２７】
2011520974.tif 000029
2-(2-メチルオクタン-2-イル)ピリミジン-4,6-ジオール-
MS: (ESI, Neg) m/z 236.8 (M-1); (500 MHz, DMSO-d6): δ (ppm) 11.33 (br.s, 2H), 5.13 (s, 1H), 1.62 (m, 2H), 1.22 (s, 6H), 1.20 (m, 6H), 1.04 (m, 2H), 0.83 (t, 3H)。
【００７８】
実施例６ａ
【化２８】
2011520974.tif 000030
3-ベンジル-6,6,9-トリメチル-6a,7,8,9,10,10a-ヘキサヒドロ-6H-イソクロメノ[3,4-d]ピリミジン-1-オール  (６ａ)
【００７９】
2-ベンジルピリミジン-4,6-ジオール (５ａ, 100 mg, 0.49 mmol) を10 mLマイクロ波反応容器中で、3 mLの無水エタノールに添加した。 これに、66 μLのピリジン及び3 μLのピペリジンを添加し、次いで266 μL (1.47 mmol) の(R)-(+)-シトロネラルを添加した。 反応容器を密封し、２００ワットで１３０℃まで、１時間照射した。溶媒を回転蒸発によって除去し、生成物をメタノール／塩化メチレン勾配を用いたフラッシュクロマトグラフィーで精製し、180 mg (69%) の薄茶色の樹脂として目的生成物を得た。MS: (ESI, Neg) m/z 337.0 (M-1). 1H NMR (5OO MHZ, CDCl3): δ (ppm) 13.01 (br.s, 1H), 7.49 (d, 2H), 7.30 (t, 3H), 7.25 (m, 1H), 3.92 (s, 2H), 3.28 (d, 1H), 2.37 (m, 1H), 1.84 (m, 2H), 1.69 (m, 1H), 1.46 (s, 3H), 1.38 (m, 1H), 1.19 (s, 3H), 1.05 (m, 2H), 0.92 (d, 3H), 0.66 (q, 1H)。
【００８０】
実施例６ｂ
同様に、下記化合物を合成した。
【００８１】
【化２９】
2011520974.tif 000031
(6aS, 9R, 10aR)-6,6,9-トリメチル-3-(2-メチルオクタン-2-イル)- 6a,7,8,9,10,10a-ヘキサヒドロ-6H-イソクロメノ[3,4-d]ピリミジン-1-オール (6b)
収率: 31%  MS: (ESI, Neg) m/z 373.1 (M-1) 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 11.57 (s, 1H), 3.10 (d, 1H), 2.16 (m, 1H), 1.75 (m, 2H), 1.56 (m, 6H), 1.34 (s, 3H), 1.18 (m, 12H), 1.02 (m, 5H), 0.89 (d, 3H), 0.82 (t, 3H), 0.48 (q, 1H)。
【００８２】
実施例６ｃ
【００８３】
【化３０】
2011520974.tif 000032
(6aS, 9R, 10aR)-6,6,9-トリメチル-3-(2-フェニルプロパン-2-イル)-6a,7,8,9,10,10a-ヘキサヒドロ-6H-イソクロメノ[3,4-d]ピリミジン-1-オール  （６ｃ）
収率: 60.4% MS: (ESI, Neg) m/z 365.0 (M-1) 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 11.43 (s, 1H), 7.32 (q, 2H), 7.21 (m, 3H), 3.06 (d, 1H), 2.16 (m, 1H), 1.76 (m, 2H), 1.56 (m, HH), 1.37 (s, 3H), 1.01 (m, 2H), 0.87 (d, 3H), 0.48 (q, 1H)。
【００８４】
実施例６ｄ
【００８５】
【化３１】
2011520974.tif 000033
(6aS, 9R, 10aR)-3-(2-シクロヘキシルプロパン-2-イル)-6,6,9-トリメチル- 6a,7,8,9,10,10a-ヘキサヒドロ-6H-イソクロメノ[3,4-d]ピリミジン-1-オール  （６d）
収率: 36%  MS: (ESI, Neg) m/z 371.0 (M-1) 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 11.52 (s, 1H), 3.10 (s, 1H), 2.16 (m, 1H), 1.73 (m, 5H), 1.52 (m, 2H), 1.34 (s, 3H), 1.26 (m, 4), 1.10 (m, 10H), 1.05 (s, 3H), 0.96 (m, 2H), 0.88 (d, 3H), 0.48 (q, 1H)。
【００８６】
実施例６ｅ
【化３２】
2011520974.tif 000034
【００８７】
(6aS, 9R, 10aR)-6,6,9-トリメチル-3-(2-(チオフェン-2-イル)プロパン-2-イル)- 6a,7,8,9,10,10a-ヘキサヒドロ-6H-イソクロメノ[3,4-d]ピリミジン-1-オール  （６ｅ）
収率：46%  MS: (ESI, Neg) m/z 371.0 (M-1) 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 11.52 (s, 1H), 7.40 (d, 1H), 6.97 (m, 2H), 3.06 (d, 1H), 2.16 (m, 1H), 1.70 (m, 8H), 1.50 (m, 2H), 1.36 (s, 3H), 1.06 (m, 5H), 0.87 (d, 3H), 0.47 (q, 1H)。
【００８８】
実施例６ｆ
【化３３】
2011520974.tif 000035
【００８９】
(6aR, 9S, 10aS)-6,6,9-トリメチル-3-(2-フェニルプロパン-2-イル)- 6a,7,8,9,10,10a-ヘキサヒドロ-6H-イソクロメノ[3,4-d]ピリミジン-1-オール  （６ｆ）
収率: 9% MS: (ESI, Neg) m/z 365.1 (M-1) 1H NMR (500 MHz, メタノール-d4): δ 7.31(m, 2H), 7.22 (m, 3H), 2.93 (m, 1H), 2.30 (m, 1H), 1.72 (m, 2H), 1.64 (m, 8H), 1.58 (s, 3H), 1.45 (s, 3H), 1.09 (m, 2H), 0.90 (d, 3H), 0.56 (q, 1H)。
【００９０】
実施例７
【化３４】
2011520974.tif 000036
3-ベンジル-6,6,9-トリメチル-テトラヒドロ-6H-イソクロメノ [3,4-d]ピリミジン-1-オール  （７）
【００９１】
この物質を、2-ベンジルピリミジン-4,6-ジオール  ５ａ及びTBS保護3-ヒドロキシシトロネラから、前の化合物について説明されたように、合成した (Kesenheimer and Groth, Org. Lett., 8:2507 (2006))。TBS保護基を、TBAFを用いて除き、化合物を一般酸 を用いて脱水することで、分離可能な異性体の混合物を得た。
【００９２】
実施例８
【化３５】
2011520974.tif 000037
3-ベンジル-6,6,9-トリメチル-7,8,9,10-テトラヒドロ-6H-イソクロメノ[3,4-d]ピリミジン-1-オール  （８）
【００９３】
この物質を、2-ベンジルピリミジン-4,6-ジオール  ５ａ及びプレゴンから、Adamsの方法 (米国特許番号 2,419,934)に沿って、合成した。通常、５ａ（1等量）、プレゴン（1.5等量）、POCl3（0.3等量）及び乾燥ベンゼンを、４時間還流した。余剰のPOCl3 を含水重炭酸ナトリウム中で分解し、混合物をEt2Oで抽出して、乾燥し、溶媒を蒸発させた。生成物をメタノール/塩化メチレン勾配を用いたフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。
【００９４】
実施例９
テトラヒドロ及びデヒドロＣ‐環構造を有するいくつかの化合物について述べるが、他のこのような化合物は、様々なＹ‐及び／又はＺ部分を提供するために調製可能であり、このような化合物は、市販され又は合成されることで入手可能な、対応するピリミジン及びテルピン中間体によってのみ限定される。同様に、Ｒ１は、出発物質の選択、又は結果物であるカンナビノイド化合物における二次化学反応によって、様々である。
【００９５】
実施例１０
【化３６】
2011520974.tif 000038
【００９６】
2-(ビス(エチルチオ)メチル)ピリミジン-4,6-ジオール  （１０）
2,2-ビス(エチルチオ)アセトアミジン塩酸塩  ４  及びジエチルマロン酸を出発物質として用いて、５ａと同様の方法によって、暗黄色のろう状の固体を得た。 MS: (ESI, Neg) m/z 245.3 (M-1)。 H1 NMR: 11.7 ppm (d) 2H. 5.2 ppm (s) .69H. 4.8 ppm (s) 1H. 2.65 ppm (m) 4H. 1.17 ppm (t) 6H。続くスルファニルの酸化は、上述したように、様々なＹ部分、C(O)等を生成するために用いることができる。
【００９７】
受容体結合アッセイ
ヒトＣＢ-１受容体でトランスフェクトされたＨＥＫ２９３細胞由来の細胞膜と、ヒトＣＢ−２受容体でトランスフェクトされたＣＨＯ-Ｋ１細胞由来の細胞膜を調整した。１２０Ｃｉ／ｍｍｏｌの特異的活性を有する［３Ｈ］ＣＰ５５，９４０をＰｅｒｋｉｎ-Ｅｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ社から入手した。全ての他の化合物及び試薬は、シグマアルドリッチ社から入手した。アッセイは、１．２μの孔径を持つグラスファイバーフィルター（親水性、ＧＦＣフィルター）を装着したミリポア社の９６穴プレートで行った。アッセイの前に、フィルターを０．０５％ポリエチレンイミン溶液に浸し、脱イオン水で５回洗浄した。ろ過は、９６穴吸引多岐管（ミリポア社）にて行い、実験の最後にフィルターをピペットチップでシンチレーションバイアル中に直接打ち抜き、バイアルを５ｍｌのシンチレーションカクテル  エコライト（＋）（フィッシャーサイエンティフィック社）で満たした。測定は、ベックマン社のシンチレーションカウンターＬＳ６５００モデルで行った。薬物溶液は、ＤＭＳＯ中で調製し、放射性リガンドをエタノール中に溶解させた。
【００９８】
インキュベーションバッファー：５０ｍＭ  ＴＲＩＳ-ＨＣｌ，５ｍＭ  ＭｇＣｌ２，２．５ｍＭ  ＥＤＴＡ，０．５ｍｇ／ｍｌ  脂肪酸フリーの牛血清アルブミン，ｐＨ７．４。
【００９９】
CB-1 受容体への結合プロトコル：８μｇの細胞膜（インキュベーションバッファーでの１：８希釈液２０μｌ）を、５μｌの薬物溶液（１０−４Ｍ〜１０−１２Ｍ）及び５μｌの５．４ｎＭ［３Ｈ］ＣＰ５５，９４０と共に、合計体積を２００μｌとして、３０℃で９０分インキュベートした。非特異的結合を１０μＭのＷＩＮ５５，２１２-２（Ｋｉ＝４．４ｎＭ）を用いて決定した。細胞膜をろ過紙、フィルターを０．２ｍｌの氷冷インキュベーションバッファーで７回洗浄し、減圧下で空気乾燥した。
【０１００】
ＣＢ−２受容体への結合プロトコル：１５．３μｇの細胞膜（インキュベーションバッファーでの１：２０希釈液２０μｌ）を、５μｌの薬物溶液（１０−４Ｍ〜１０−１２Ｍ）及び５μｌの１０ｎＭ［３Ｈ］ＣＰ５５，９４０と共に、合計体積を２００μｌとして、３０℃で９０分インキュベートした。非特異的結合を１０μＭのＷＩＮ５５，２１２-２（Ｋｉ＝４．４ｎＭ）を用いて決定した。細胞膜をろ過紙、フィルターを０．２ｍｌの氷冷インキュベーションバッファーで７回洗浄し、減圧下で空気乾燥した。
【０１０１】
データの蓄積及び統計分析：１０−４Ｍから１０−１２Ｍまでの様々な濃度の薬物を添加した試料を各実験について３点ずつ用意し、個々のモル濃度におけるＩＣ５０値をＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍを用いて決定した。各薬物の対応するＫｉ値をチェン-プルソフ式を用いて決定し、最終データは２点以上の実験のＫｉ±Ｓ．Ｅ．Ｍ．で表される。
【０１０２】
機能アッセイ：環状ヌクレオチド感受性カチオンチャネル及びヒトＣＢ‐１又はＣＢ‐２受容体でステイブルトランスフェクトされたＨＥＫ-293細胞株（ＢＤバイオサイエンス社、サンノゼ、ＣＡ  ＵＳＡ）を、ポリ‐D‐リジンでコートされた９６穴プレートに、細胞７００００個／穴の密度で蒔いた。アッセイの前に、プレートを５％CO2中３７℃で一晩インキュベートした。プレートをインキュベータから取り出し、完全成長培地（ＤＭＥＭ，１０％ＦＢＳ，２５０μｇ／ｍｌ  Ｇ４１８及び１μｇ  ピューロマイシン）を０．２５％ＢＳＡ含有１００μＬのＤＭＥＭに置換した。次に、１００μＬのメンブランポテンシャルダイローディングバッファー（membrane potential dye loading buffer）（モレキュラーデバイス社、サニーベイル、ＣＡ  ＵＳＡ）を使用書にのっとって調製した。プレートをインキュベータに３０分間戻し、薬物添加の前に、基準線蛍光をバイオテックシナジー  ２マルチモードマイクロプレートリーダー（バイオテックインストゥルメンツ社、ウィノースキ、ＶＴ  ＵＳＡ）で、５４０ｎｍ励起光及び５９０ｎｍ発光フィルターを用いて、読み取った。２．５％ＤＭＳＯ、１．２５μＭの５’-（Ｎ-エチルカルボキシアミド）アデノシン及び１２５μＭのＲｏ２０-１７２４を含有する５０μＬのＤＰＢＳに薬物を添加した。プレートを室温で２５分インキュベートし、５４０ｎｍ励起光及び５９０ｎｍ発光にて再度蛍光を測定した。
【０１０３】
図１は、ＣＢ−１受容体における化合物６ｂの機能活性を示す。
【０１０４】
細胞毒性アッセイ：９６穴ポリスチレンプレートに、完全血清培地にて細胞を細胞７５０００個／ｍＬ，１００μＬ／穴の密度で蒔いた。細胞が接着するように、プレートを３７℃かつ５％ＣＯ２下で２４時間インキュベートした。１００倍濃度の薬物溶液をＤＭＳＯにて調製し、１％ＦＢＳ培地に１：１００で混合し、望ましい濃度を得た。薬物−培地混合物を細胞に投与する直前にボルテックスにかけた。完全血清培地を除いて、薬物‐培地混合物で置換し、１８時間インキュベートした。１０μLのCounting Kit 8（ＣＣＫ８，Ｄｏｊｉｎｄｏ♯ＣＫ０４−１１）を各ウェルに添加し、生細胞測定を行った。ＣＣＫ８ダイを添加したインキュベーションを２〜４時間行った後、４５０ｎｍの吸光度をバイオテックシナジー２  プレートリーダーによって測定した。
【０１０５】
グリア芽腫脳腫瘍細胞株であるＬＮ‐２２９に対する選択された化合物の細胞毒性を表１に示す。
【０１０６】
【表１】
2011520974.tif 000039
炎症についての調査
単球の分化：ＴＨＰ-１ヒト単核白血球（ATCC＃TIB-202）の懸濁液に、ホルボール１２‐ミリスチン酸塩13-酢酸塩（PMA Aldrich #P1585）及びイオノマイシン（Aldrich #10634）をそれぞれ１０及び５００ｎｇ／ｍｌ添加し、マクロファージ様細胞への分化を誘導した。細胞を３０，０００個／穴で蒔き、３７℃かつ５％ＣＯ２／９５％大気で３〜１０日インキュベートして、形質転換を完了させた。アッセイまで、必要に応じて培地を交換した。
【０１０７】
サイトカインアッセイ：A549 (ATCC #CCL-185)、HUV-EC-C (ATCC #CRL- 1730)、又は分化したTHP-１細胞を、９６穴ポリスチレンプレートに、３００，０００個／ｍｌ（100μＬ／穴）の密度で蒔き、細胞が接着するように、３７℃で５％ＣＯ２／９５％大気で２４時間インキュベートした。１００倍濃度の薬物溶液をＤＭＳＯにて調製し、１％ＦＢＳ培地に１：１００で混合し、望ましい濃度を得た。
【０１０８】
プレートをインキュベートから取り出し、完全成長培地を、１％ＦＢＳ及び１μｇ／ｍｌのリポ多糖体又はペプチドグリカン（分化したＴＨＰ−１用）、又はＡ５４９及びＨＵＶＥＣの場合のＴＮＦ‐α（１０ｎｇ／ｍｌ）又はＩＬ‐１β（１ｎｇ／ｍｌ）、コントロールウェルの場合の刺激剤なし、を含有する５０μＬの培地に交換した。薬物処理の前に１時間、細胞をインキュベータに戻した。１％ＦＢＳ及び適切な刺激剤を上述の濃度で含有する培地で、所望の終濃度の２倍濃度で薬物‐培地溶液を調製した。薬物を含有しないコントロール培地を同様に調製した。５０μＬの薬物含有培地又はコントロール培地を、適切なウェルに添加し、プレートをインキュベータに１８時間戻した。培地の上清をウェルから除き、アッセイまで−８０℃で冷凍した。
【０１０９】
図２〜図１２は、ＴＮＦ‐αの存在又は非存在下で、ＥＣ１及びＥＣ１０での化合物６ｂに暴露されたＡ５４９による様々なモジュレータの分泌特性を示す。グラフの凡例は、pymC 1-4 = 5.84μＭの化合物6bで4時間；pymC 2-4 =13.3μMの化合物6bで４時間；pymC 1-18 =5.84μMの化合物6bで１８時間；pymC 2-18 = 13.3μMの化合物6bで18 時間；TNF =１０ｎｇ／ｍｌのTNF-αである。
【０１１０】
これで、本発明及びそれを製造する及び使用する方法及び工程について、完全、明確に、簡潔に、かつ正確な用語にて、すべての当業者が製造できて使えるように、説明した。本発明の望ましい実施形態が説明され、請求の範囲に記載された発明の精神又は範囲から逸脱しない範囲での変更が可能であることが理解される。本発明とみなされる対象物を特定し、明確にクレームするために、下記の請求の範囲は本明細書を含む。
【図１】
2011520974.tif 000044
【図２】
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【図３】
2011520974.tif 000046
【図４】
2011520974.tif 000047
【図５】
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【図６】
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【図７】
2011520974.tif 000050
【図８】
2011520974.tif 000051
【図９】
2011520974.tif 000052
【図１０】
2011520974.tif 000053
【図１１】
2011520974.tif 000054
【図１２】
2011520974.tif 000055
【国際調査報告】
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