(57)【要約】  本開示は、とりわけ、薬物での治療を受けている被験者が薬物の有効な血中濃度を得ているかどうかを判定するための方法に関する。さらに、本開示は、血管新生のバイオマーカーをモニターすることにより、疾病に罹患しやすいまたは罹患している被験者が薬物での治療の恩恵に浴するかどうかを判定する、および治療（例えば、癌のためのものなど）を受けている被験者の応答を判定する方法にも関する。詳細には、本開示は、ＰｌＧＦ−１コンパニオン診断方法および製品に関する。
2011525241.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
投薬またはスケジューリングを最適化するために、薬物を投与されている被験者が前記薬物の有効な血中レベルを達成したかどうかをモニターする方法であって、
（ａ）Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体を投与されている被験者から得た試験サンプルと、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合する第一の捕捉抗体とを接触させて、第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体を形成する段階；
（ｂ）前記第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体と、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合する第二の抗体であって、検出可能な標識にコンジュゲートさせた第二の抗体（「検出抗体」）とを接触させて、第二の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体を形成する段階；
（ｃ）検出可能な標識を検出することによって、段階（ｂ）において形成された第二の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体の量を決定する段階（形成された第二の複合体の量は、試験サンプルに含有されるヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの量である。）；および
（ｄ）段階（ｃ）において決定された試験サンプル中のヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの量を所定のレベルと比較する段階（段階（ｃ）において決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度が、所定のレベルより低い場合には、被験者は、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素もしくはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体の有効な量を受けていないと考えられ、およびさらに、段階（ｃ）において決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度が、所定のレベルと同じであるもしくは所定のレベルより高い場合には、被験者は、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素もしくはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体の有効な量を受けていると考えられる。）
を含む方法。
【請求項２】
捕捉抗体がモノクローナル抗体２６４であり、および検出抗体がポリクローナル抗体ｐＢ２６４である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
捕捉抗体がモノクローナル抗体でありおよび検出抗体がポリクローナル抗体であるときの所定のレベルが、被験者がＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体での治療を最初に受けた後、約２４時間の時点で、ミリリットルあたり約３０ピコグラムである、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
捕捉抗体がモノクローナル抗体でありおよび検出抗体がポリクローナル抗体であるときの所定のレベルが、被験者がＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体での治療を最初に受けた後、約１５日の時点で、ミリリットルあたり約４０ピコグラムからミリリットルあたり約７５ピコグラムである、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
捕捉抗体が、モノクローナル抗体８２６であり、および検出抗体が、モノクローナル抗体２５５である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
捕捉抗体が、モノクローナル抗体であり、および検出抗体が、モノクローナル抗体であり、ならびに段階（ｃ）において決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度が、被験者がＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体での治療を最初に受けた約８または１５日後に定常状態で所定のレベルと比較してミリリットルあたり約６０ピコグラムからミリリットルあたり約１５０ピコグラム増加されるときの、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
被験者が、肺癌、乳癌、胃癌、膀胱癌、大腸癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、腎癌、肝細胞癌、直腸癌、造血性悪性疾患、膠芽腫および幼児性血管腫から成る群より選択される癌の治療を受けている、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体での治療についての用量またはスケジュールが、段階（ｄ）における比較に基づいて患者をミリリットルあたり約４０ピコグラムからミリリットルあたり約７５ピコグラムの範囲にするように調整される、請求項２に記載の方法。
【請求項９】
Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体での治療についての用量またはスケジュールが、段階（ｄ）における比較に基づいて患者をミリリットルあたり約６０ピコグラムからミリリットルあたり約１５０ピコグラムの範囲にするように調整される、請求項５に記載の方法。
【請求項１０】
自動システムまたは半自動システムでの使用に適している、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
抗癌薬での癌の治療を受けている被験者の応答をモニターする方法であって、
（ａ）Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体での治療を受けている被験者から得た試験サンプルと、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合にする第一の捕捉抗体とを接触させて、第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体を形成する段階；
（ｂ）前記第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体と、ヒトＰｌＧＦ−１に結合する第二の抗体であって、検出可能な標識にコンジュゲートさせた第二の抗体（「検出抗体」）とを接触させて、第二の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体を形成する段階；
（ｃ）検出可能な標識を検出することによって、段階（ｂ）において形成された第二の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体の量を決定する段階（形成された第二の複合体の量は、試験サンプルに含有されるヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１の量である。）；および
（ｄ）段階（ｃ）において決定された試験サンプル中のヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１の量と所定のレベルとを比較する段階（段階（ｃ）において決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度が、所定のレベルより低い場合には、被験者は、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体での治療に応答していないと考えられるので、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体での治療を中止し、ならびにさらに、段階（ｃ）において決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度が、所定のレベルと同じであるまたは所定のレベルより高い場合には、被験者は、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体での治療に応答していると考えられる。）
を含む方法。
【請求項１２】
捕捉抗体が、モノクローナル抗体２６４であり、および検出抗体が、ポリクローナル抗体ｐＢ２６４である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
捕捉抗体が、モノクローナル抗体８２６であり、および検出抗体が、モノクローナル抗体２５５である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
癌が、肺癌、乳癌、胃癌、膀胱癌、大腸癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、腎癌、肝細胞癌、直腸癌、直腸癌、造血性悪性疾患、膠芽腫および幼児性血管腫から成る群より選択される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
自動システムまたは半自動システムでの使用に適している、請求項１１に記載の方法。
【請求項１６】
疾病に罹患しやすいまたは疾病に罹患している被験者が、薬物での治療を受けることの恩恵に浴するかどうかを判定する方法であって、
（ａ）疾病に罹患しやすいまたは少なくとも１つの疾病に罹患している被験者であって、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体を投与された被験者から得た試験サンプルと、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合する第一の捕捉抗体とを接触させて、第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体を形成する段階；
（ｂ）前記第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体と、ヒトＰｌＧＦ−１に結合する第二の抗体であって、検出可能な標識にコンジュゲートさせた第二の抗体（「検出抗体」）とを接触させて、第二の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体を形成する段階；
（ｃ）検出可能な標識を検出することによって、段階（ｂ）において形成された第二の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体の量を決定する段階（形成された第二の複合体の量は、試験サンプルに含有されるヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの量である。）；および
（ｄ）段階（ｃ）において決定された試験サンプル中のヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１の量と所定のレベルとを比較する段階（段階（ｃ）において決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度が、所定のレベルより低い場合には、被験者が、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体でのさらなるまたは継続治療を受けることの恩恵に浴さないという判定が下され、およびさらに、段階（ｃ）において決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度が、所定のレベルと同じであるまたは所定のレベルより高い場合には、被験者が、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体でのさらなるまたは継続治療を受けることの恩恵に浴するという判定が下される。）
を含む方法。
【請求項１７】
捕捉抗体が、モノクローナル抗体２６４であり、および検出抗体が、ポリクローナル抗体ｐＢ２６４である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
少なくとも１つの疾病が、肺癌、乳癌、胃癌、膀胱癌、大腸癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、腎癌、肝細胞癌、直腸癌、直腸癌、造血性悪性疾患、膠芽腫および幼児性血管腫から成る群より選択される癌である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
自動システムまたは半自動システムでの使用に適している、請求項１６に記載の方法。
【請求項２０】
肺癌、乳癌、胃癌、膀胱癌、大腸癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、腎癌、肝細胞癌、直腸癌、造血性悪性疾患、膠芽腫および幼児性血管腫から成る群より選択される少なくとも１つの癌に罹患している被験者を治療する方法であって、
（ａ）癌に罹患している被験者であって、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体の所定の量での治療を受けている被験者から試験サンプルを得る段階；
（ｂ）試験サンプルと、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合する第一の捕捉抗体とを接触させて、第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体を形成する段階；
（ｃ）前記第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体と、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合する第二の抗体であって、検出可能な標識にコンジュゲートさせた第二の抗体（「検出抗体」）とを接触させて、第二の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体を形成する段階；
（ｄ）検出可能な標識を検出することによって、段階（ｃ）において形成された第二の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体の量を決定する段階（形成された第二の複合体の量は、試験サンプルに含有されるヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの量である。）；
（ｅ）段階（ｄ）において決定された試験サンプル中のヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの量を所定のレベルと比較する段階；および
（ｆ）所定のレベルより低い段階（ｄ）において決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度を有する被験者を、（ｉ）段階（ａ）において述べたＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素もしくはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体の所定の量より高い、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素もしくはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体の調整量；（ｉｉ）Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素もしくはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体以外の薬物；または（ｉｉｉ）（ｉ）と（ｉｉ）の組み合わせで治療する段階
を含む方法。
【請求項２１】
捕捉抗体が、モノクローナル抗体２６４であり、および検出抗体が、ポリクローナル抗体ｐＢ２６４である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
捕捉抗体がモノクローナル抗体でありおよび検出抗体がポリクローナル抗体であるときの所定のレベルが、被験者がＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体での治療を最初に受けた後、約２４時間の時点で、ミリリットルあたり約３０ピコグラムである、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
捕捉抗体がモノクローナル抗体でありおよび検出抗体がポリクローナル抗体アッセイであるときの所定のレベルが、被験者がＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体での治療を最初に受けた後、約１５日の時点で、ミリリットルあたり約４０ピコグラムからミリリットルあたり約７５ピコグラムである、請求項２０に記載の方法。
【請求項２４】
捕捉抗体が、モノクローナル抗体８２６であり、および検出抗体が、モノクローナル抗体２５５である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２５】
捕捉抗体が、モノクローナル抗体であり、および検出抗体がモノクローナル抗体であり、ならびに段階（ｅ）において決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度が、被験者がＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体での治療を最初に受けた約８または１５日後に定常状態で所定のレベルと比較してミリリットルあたり約６０ピコグラムからミリリットルあたり約１５０ピコグラム増加されるときの、請求項２０に記載の方法。
【請求項２６】
キットであって、
（ａ）モノクローナル抗体２６４、ポリクローナル抗体ｐＢ２６４およびこれらの組み合わせから成る群より選択される少なくとも１つの抗体と；
（ｂ）薬物（薬物は、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体である。）での治療を受けている被験者が、前記薬物の有効な血中レベルを得ているかどうかを判定すること；薬物（薬物は、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体である。）での治療を受けている被験者が、前記薬物の有効な血中濃度を得ているかどうかを判定すること、抗癌薬（薬は、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体である。）での癌の治療を受けている被験者の応答をモニターすること、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体を投与されている被験者においてＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体の生物活性を確認すること、およびこれらの組み合わせから成る群より選択される目的のために前記キットを使用するための取り扱い説明書と
を含むキット。
【請求項２７】
キットであって、
（ａ）モノクローナル抗体８２６、モノクローナル抗体２５５およびこれらの組み合わせから成る群より選択される少なくとも１つの抗体と；
（ｂ）疾病に罹患しやすいまたは疾病に罹患している被験者が、薬物（薬物は、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体である。）での治療に応答するかどうかを判定すること、疾病に罹患しやすいまたは罹患している被験者が、薬物（薬物は、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体である。）での治療に応答するかどうかを判定すること、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体で治療されている被験者において疾病の進行をモニターすること、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体で治療されている被験者において疾病の進行をモニターすること、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体を投与されている被験者においてＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体の生物活性を確認すること、およびこれらの組み合わせから成る群より選択される目的のために前記キットを使用するための取り扱い説明書と
を含むキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願情報
本出願は、２００９年６月１６日に出願されたＵ．Ｓ．Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．１２／４８５，１１４の恩典、２００８年１０月３１日に出願されたＵ．Ｓ．Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．６１／１１０，０６３、２００８年６月１８日に出願されたＵ．Ｓ．Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．６１／０７３，６２４および２００８年８月１５日に出願されたＵ．Ｓ．Ｓｅｒｉａｌ  Ｎｏ．６１／０８９，１７２の恩典を請求するものであり、これらのそれぞれについての内容が参照により本明細書に援用されている。
【０００２】
共同研究契約の参照
本開示の内容は、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素（ＡＢＴ−８６９としても公知）に関する、２００７年６月２２日にＧｅｎｅｎｔｅｃｈおよびＡｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓにより、ＧｅｎｅｎｔｅｃｈとＡｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓの間で結ばれた共同研究契約下に存する。
【０００３】
本開示は、とりわけ、薬物（例えば、癌のためのものなど）での治療を受けている被験者が薬物の有効な血中レベルを得ているかどうかを、血管新生のバイオマーカーのレベルをモニターすることによって判定するための方法に関する。さらに、本開示は、血管新生のバイオマーカーをモニターすることにより、疾病に罹患しやすいまたは罹患している被験者が薬物での治療の恩恵に浴するかどうかを判定する方法および治療（例えば、癌のためのものなど）を受けている被験者の応答を判定する方法にも関する。詳細には、本開示は、ＰｌＧＦ−１コンパニオン診断方法および製品に関する。
【背景技術】
【０００４】
新生血管形成は、腫瘍成長にとって非常に重要である。具体的には、新生血管形成は、血管新生抑制分子と血管新生促進分子、例えば、血管内皮成長因子受容体（ＶＥＧＦＲ）１および２と相互作用して既存の微小血管系および循環内皮前駆細胞から内皮細胞を活性化する腫瘍細胞、マクロファージおよび間質細胞から分泌される血管内皮成長因子の不均衡が関係する複雑なプロセスである（Ｄｖｏｒａｋ，ＨＦ，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．，２０：４３６８−４３８０（２００２）参照）。腫瘍血管構造は、無秩序であり、正常な血管構造より漏出性であり、その結果、透過性増加、間質圧上昇および腫瘍への化学療法配給不良が生じる（Ｆｅｒｒａｒａ，Ｎ．，ＶＥＧＦ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，６９：Ｓ１１−Ｓ１６，（２００５）（ｓｕｐｐｌ  ３）参照）。胎盤由来成長因子は、この受容体（ＰＤＧＦＲ）に結合することにより、新たな微小血管の周皮細胞カバー率を助長することによって、腫瘍成長を活性化し、血管新生を増進する（Ｃａｒｍｅｌｉｅｔ，Ｐ．，Ｎａｔ  Ｍｅｄ．，９：６５３−６６０（２００３）およびＢｅｎｊａｍｉｎ  ＬＥら，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ．，１０３：１５９−１６５（１９９９）参照）が、ＶＥＧＦＲ−３は、リンパ管真性を助長することによりこのプロセスに寄与し、ことによると腫瘍転移にとって重要である可能性がある（Ｓｕｎｄａｒ，ＳＳら，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．，２５：４２９８−４３０７（２００７））。これらの経路の活性化亢進は、成長、腫瘍生存および癌細胞の転移を促進する（Ｂｌｕｍｅ−Ｊｅｎｓｅｎ  Ｐら，Ｎａｔｕｒｅ，４１１：３５５−３６５（２００１）参照）。これらに鑑みて、ＶＥＧＦＲ−１、−２、−３およびＰＤＧＦＲは、血管新生およびリンパ管新生の阻害ならびに正規化された血管構造の回復ための重要なターゲットである。ＶＥＧＦＲ−１、−２、−３およびＰＤＧＦＲの総合阻害によって、それぞれの受容体単独の特異的阻害より有効に腫瘍成長、生存および転移が中断される。ソラフェニブおよびスニチニブは、フォンヒッペル・リンドウ（ｖｏｎ  Ｈｉｐｐｅｌ  Ｌｉｎｄａｕ）遺伝子の欠失が低酸素誘導性因子複合体の異常活性化ならびにその後のＶＥＧＦおよびＰＤＧＦ過発現を生じさせる結果となる（Ｍｏｔｚｅｒ，ＲＪら，Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ．，３５６：１１５−１２４（２００７））、転移性腎細胞癌腫を治療するために用いられる小分子受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）阻害剤の例である（Ｂａｔｃｈｅｌｏｒ，ＴＴら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ，１１：８３−９５（２００７）およびＥｓｃｕｄｉｅｒ，Ｂら，Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３５６：１２５−１３４（２００７）参照）。
【０００５】
疾病の特定のタイプに関連した多数のバイオマーカーが公知である。この個人化医療（患者の疾病または疾病への素因をよりよく取り扱い、管理するための新たな分析およびバイオインフォマティクス方法の使用を含む。）およびファーマコゲノミクス（薬物およびゲノミクスの科学を兼備する。）の時代に、治療選択、開始、用量カスタマイズ化または忌避をよりよく通知するために治療製品との併用を意図した診断製品である、いわゆる「コンパニオン診断」の使用および問い合わせが推進されている。例えば、バイオマーカーと薬物または医薬組成物の薬理作用および生物活性との相関関係をこれらのバイオマーカーの血漿中レベルの評定によって確立することを用いて、患者の予後判定および治療戦略を個人化することができる。これに関しては、多数のバイオマーカーが血管新生と関連づけられている。これらとしては、ＶＥＧＦ−Ａ、可溶性ＶＥＧＦＲ−１（ｓＶＥＧＦＲ−１、ｓＦｌｔ−１としても公知）、可溶性ＶＥＧＦＲ−２（ｓＶＥＧＦＲ−２、ｓＫＤＲとしても公知）、可溶性ＶＥＧＦＲ−３（ｓＶＥＧＦＲ−３）、胎盤成長因子（ＰｌＧＦ、成長因子のＶＥＧＦファミリーのメンバーおよびＶＥＧＦＲ−１の特異的リガンド）、エリスロポエチンなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｄｖｏｒａｋ，ＨＦ，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．，２０：４３６８−４３８０（２００２）
【非特許文献２】Ｆｅｒｒａｒａ，Ｎ．，ＶＥＧＦ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，６９：Ｓ１１−Ｓ１６，（２００５）（ｓｕｐｐｌ  ３）
【非特許文献３】Ｃａｒｍｅｌｉｅｔ，Ｐ．，Ｎａｔ  Ｍｅｄ．，９：６５３−６６０（２００３）
【非特許文献４】Ｂｅｎｊａｍｉｎ  ＬＥら，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ．，１０３：１５９−１６５（１９９９）
【非特許文献５】Ｓｕｎｄａｒ，ＳＳら，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．，２５：４２９８−４３０７（２００７）
【非特許文献６】Ｂｌｕｍｅ−Ｊｅｎｓｅｎ  Ｐら，Ｎａｔｕｒｅ，４１１：３５５−３６５（２００１）
【非特許文献７】Ｍｏｔｚｅｒ，ＲＪら，Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ．，３５６：１１５−１２４（２００７）
【非特許文献８】Ｂａｔｃｈｅｌｏｒ，ＴＴら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ，１１：８３−９５（２００７）
【非特許文献９】Ｅｓｃｕｄｉｅｒ，Ｂら，Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３５６：１２５−１３４（２００７）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
それ故、血管新生のバイオマーカー、特にＰｌＧＦをモニターすることにより、薬物（例えば、癌のためのものなど）での治療を受けている被験者が薬物の有効な血中レベルを得ているかどうかをモニターまたは判定するための方法が、当分野において必要とされている。具体的には、被験者が、薬物（例えば、癌のためのものなど）の単回用量だけを摂取した後、前記薬物での継続治療の恩恵に浴するかどうかを同定する方法も、当分野において必要とされている。さらに、血管新生のバイオマーカー、特にＰｌＧＦおよびとりわけＰｌＧＦ−１をモニターすることにより、腫瘍についての治療（例えば、癌のためのものなど）を受けている被験者の応答をモニターする方法も、当分野において必要とされている。尚、さらに、薬力学に基づく投薬情報を用いて、特定の薬物の有効性と関連づけられているまたは相関関係が証明されている必要薬物曝露範囲（例えば、曲線下面積（「ＡＵＣ」）に被験者を導く方法も、当分野において必要とされている。本開示のこれらおよび他の目的は、本明細書における以下の説明から明らかになる。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
１つの実施形態において、本開示は、投薬またはスケジューリングを最適化するために、薬物を投与されている被験者が、薬物の有効な血中レベルを得ているかどうかをモニターする方法を提供し、この方法は、
（ａ）Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体を投与されている被験者から得た試験サンプルと、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合する第一の捕捉抗体とを接触させて、第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体を形成する段階；
（ｂ）第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体と、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合する第二の抗体であって、検出可能な標識にコンジュゲートさせた第二の抗体（「検出抗体」）とを接触させて、第二の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体を形成する段階；
（ｃ）検出可能な標識を検出することによって、段階（ｂ）において形成された第二の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体の量を決定する段階（形成された第二の複合体の量は、試験サンプルに含有されるヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの量である。）；および
（ｄ）段階（ｃ）において決定された試験サンプル中のヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの量を所定のレベルと比較する段階（段階（ｃ）において決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度が、所定のレベルより低い場合には、被験者は、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素もしくはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体の有効な量を受けていないと考えられ、およびさらに、段階（ｃ）において決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度が、所定のレベルと同じであるもしくは所定のレベルより高い場合には、被験者は、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素もしくはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体の有効な量を受けていると考えられる。）
を含む。
【０００９】
このような方法の１つの態様において、捕捉抗体は、モノクローナル抗体２６４であり、および検出抗体は、ポリクローナル抗体ｐＢ２６４である。場合により、所定のレベルは、被験者がＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体での治療を最初に受けた後、約２４時間の時点で、ミリリットルあたり約３０ピコグラムである。または、場合により、所定のレベルは、被験者がＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素もしくはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体での治療後に定常状態の濃度に達した時点で、ミリリットルあたり約４０ピコグラムからミリリットルあたり約７５ピコグラムである。
【００１０】
このような方法のもう１つの態様において、捕捉抗体は、モノクローナル抗体８２６であり、および検出抗体は、モノクローナル抗体２５５である。この方法の１つの態様では、このとき、捕捉抗体は、モノクローナル抗体であり、および検出抗体は、モノクローナル抗体であり、および段階（ｃ）において決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度は、被験者がＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体での治療を最初に受けた約８または１５日後に定常状態で所定のレベルと比較してミリリットルあたり約６０ピコグラムからミリリットルあたり約１５０ピコグラム増加される。
【００１１】
本明細書に記載するような方法は、被験者が、とりわけ、肺癌、乳癌、胃癌、膀胱癌、大腸癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、腎癌、肝細胞癌、直腸癌、造血性悪性疾患、膠芽腫および幼児性血管腫から成る群より選択される癌について治療されている場合に、利用することができる。１つの実施形態において、方法は、自動システムまたは半自動システムでの使用に適している。
【００１２】
方法の１つの態様において、捕捉抗体がモノクローナル抗体でありおよび検出抗体がポリクローナル抗体であるとき、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体での治療についての用量またはスケジュールを、段階（ｄ）における比較に基づいて患者をミリリットルあたり約４０ピコグラムからミリリットルあたり約７５ピコグラムの範囲にするように調整することができる。
【００１３】
方法のもう１つの態様において、捕捉抗体がモノクローナル抗体でありおよび検出抗体がモノクローナル抗体であるとき、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体での治療についての用量またはスケジュールを、段階（ｄ）における比較に基づいて患者をミリリットルあたり約６０ピコグラムからミリリットルあたり約１５０ピコグラムの範囲にするように調整することができる。
【００１４】
従って、本明細書における説明により、抗癌薬での癌の治療を受けている被験者の応答をモニターする方法を提供し、この方法は、
（ａ）Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体での治療を受けている被験者から得た試験サンプルと、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合する第一の捕捉抗体とを接触させて、第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体を形成する段階；
（ｂ）第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体と、ヒトＰｌＧＦ−１に結合する第二の抗体であって、検出可能な標識にコンジュゲートさせた第二の抗体（「検出抗体」）とを接触させて、第二の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体を形成する段階；
（ｃ）検出可能な標識を検出することによって、段階（ｂ）において形成された第二の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体の量を決定する段階（形成された第二の複合体の量は、試験サンプルに含有されるヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１の量である。）；および
（ｄ）段階（ｃ）において決定された試験サンプル中のヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１の量と所定のレベルとを比較する段階（段階（ｃ）において決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度が、所定のレベルより低い場合には、被験者は、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体での治療に応答していないと考えられるので、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体での治療を中止し、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体以外の抗癌薬を投与し、ならびにさらに、段階（ｃ）において決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度が、所定のレベルと同じであるまたは所定のレベルより高い場合には、被験者は、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体での治療に応答していると考えられる。）
を含む。
【００１５】
この方法の１つの態様において、場合により、捕捉抗体は、モノクローナル抗体２６４であり、および検出抗体は、ポリクローナル抗体ｐＢ２６４である。この方法のもう１つの態様において、場合により、捕捉抗体は、モノクローナル抗体８２６であり、および検出抗体は、モノクローナル抗体２５５である。方法は、癌が、とりわけ肺癌、乳癌、胃癌、膀胱癌、大腸癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、腎癌、肝細胞癌、直腸癌、直腸癌、造血性悪性疾患、膠芽腫および幼児性血管腫から成る群より選択される場合に、利用することができる。１つの実施形態において、方法は、自動システムまたは半自動システムでの使用に適している。
【００１６】
疾病に罹患しやすいまたは疾病に罹患している被験者が、薬物での治療を受けることの恩恵に浴するかどうかを判定するために提供するもう１つの方法を、本明細書においてさらに提供する。場合により、方法は、
（ａ）疾病に罹患しやすいまたは少なくとも１つの疾病に罹患している被験者であって、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体を投与された被験者から得た試験サンプルと、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合する第一の捕捉抗体とを接触させて、第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体を形成する段階；
（ｂ）第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体と、ヒトＰｌＧＦ−１に結合する第二の抗体であって、検出可能な標識にコンジュゲートさせた第二の抗体（「検出抗体」）とを接触させて、第二の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体を形成する段階；
（ｃ）検出可能な標識を検出することによって、段階（ｂ）において形成された第二の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体の量を決定する段階（形成された第二の複合体の量は、試験サンプルに含有されるヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１の量である。）；および
（ｄ）段階（ｃ）において決定された試験サンプル中のヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１の量と所定のレベルとを比較する段階（段階（ｃ）において決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度が、所定のレベルより低い場合には、被験者がＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体でのさらなるまたは継続治療を受けることの恩恵に浴さないという判定を下し、およびさらに、段階（ｃ）において決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度が、所定のレベルと同じであるまたは所定のレベルより高い場合には、被験者がＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体でのさらなるまたは継続治療を受けることの恩恵に浴するという判定を下す。）
を含む。
【００１７】
この方法の１つの態様において、場合により、捕捉抗体は、モノクローナル抗体２６４であり、および検出抗体は、ポリクローナル抗体ｐＢ２６４である。この方法のもう１つの態様において、場合により、捕捉抗体は、モノクローナル抗体８２６であり、および検出抗体は、モノクローナル抗体２５５である。さらにもう１つの態様において、場合により、少なくとも１つの疾病は、肺癌、乳癌、胃癌、膀胱癌、大腸癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、腎癌、肝細胞癌、直腸癌、直腸癌、造血性悪性疾患、膠芽腫および幼児性血管腫から成る群より選択される癌である。１つの実施形態において、方法は、自動システムまたは半自動システムでの使用に適している。
【００１８】
被験者の治療に対する応答の尤度を予測する方法も本明細書において提供し、この方法は、
（ａ）疾病に罹患する被験者であって、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体を投与されている被験者から、治療開始前に第一の試験サンプルを得る段階；
（ｂ）第一の試験サンプルと、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合する第一の捕捉抗体とを接触させて、第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体を形成する段階；
（ｃ）第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体と、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合する第二の抗体であって、検出可能な標識にコンジュゲートさせた第二の抗体（「検出抗体」）とを接触させて、第二の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体を形成する段階；
（ｄ）検出可能な標識を検出することによって、段階（ｂ）において形成された第二の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体の量を決定する段階（形成された第二の複合体の量は、第一の試験サンプルに含有されるヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度である。）；
（ｅ）疾病に罹患している被験者であって、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体を投与されている被験者から得られる第二の試験サンプルを、段階（ａ）において第一試験サンプルを得た後、ちょうどよい時点で得る段階；
（ｆ）第二の試験サンプルと、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合する第一の捕捉抗体とを接触させて、第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体を形成する段階；
（ｇ）第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体と、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合する第二の抗体であって、検出可能な標識にコンジュゲートさせた第二の抗体（「検出抗体」）とを接触させて、第二の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体を形成する段階；
（ｈ）前記検出可能な標識を検出することによって、段階（ｇ）において形成された第二の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体の量を決定する段階（形成された第二の複合体の量は、第二の試験サンプルに含有されるヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度である。）；および
（ｉ）段階（ｄ）におけるヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度と、段階（ｈ）におけるヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度とを比較する段階（段階（ｈ）において決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度が、段階（ｄ）において決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度と比較して増加されている場合には、段階（ｈ）において決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度が、段階（ｄ）におけるヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度と比較して変わっていないまたはより高い場合、高いＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントレベルを有する患者ほど、応答する可能性が高い。）
を含む。
【００１９】
この方法における１つの態様において、第一の試験サンプルの採取と第二の試験サンプルの採取の間の期間は、約１分、約５分、約１０分、約１５分、約３０分、約４５分、約６０分、約２時間、約３時間、約４時間、約５時間、約６時間、約７時間、約８時間、約９時間、約１０時間、約１１時間、約１２時間、約１３時間、約１４時間、約１５時間、約１６時間、約１７時間、約１８時間、約１９時間、約２０時間、約２１時間、約２２時間、約２３時間、約２４時間、約２日、約３日、約４日、約５日、約６日、約７日、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約６週間、約７週間、約８週間、約９週間、約１０週間、約１１週間、約１２週間、約１３週間、約１４週間、約１５週間、約１６週間、約１７週間、約１８週間、約１９週間、約２０週間、約２１週間、約２２週間、約２３週間、約２４週間、約２５週間、約２６週間、約２７週間、約２８週間、約２９週間、約３０週間、約３１週間、約３２週間、約３３週間、約３４週間、約３５週間、約３６週間、約３７週間、約３８週間、約３９週間、約４０週間、約４１週間、約４２週間、約４３週間、約４４週間、約４５週間、約４６週間、約４７週間、約４８週間、約４９週間、約５０週間、約５１週間、約５２週間、約１．５年、約２年、約２．５年、約３．０年、約３．５年、約４．０年、約４．５年、約５．０年、約５．５年、約６．０年、約６．５年、約７．０年、約７．５年、約８．０年、約８．５年、約９．０年、約９．５年、および約１０．０年から成る群より選択される期間である。場合により、捕捉抗体は、モノクローナル抗体２６４であり、および検出抗体は、ポリクローナル抗体ｐＢ２６４である。または、場合により、捕捉抗体は、モノクローナル抗体８２６であり、および検出抗体は、モノクローナル抗体２５５である。さらに、場合により、少なくとも１つの疾病は、肺癌、乳癌、胃癌、膀胱癌、大腸癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、腎癌、肝細胞癌、直腸癌、直腸癌、造血性悪性疾患、膠芽腫および幼児性血管腫から成る群より選択される癌である。さらに場合により、１つの態様において、方法は、自動システムまたは半自動システムでの使用に適している。
【００２０】
尚、さらにもう１つの実施形態において、本発明は、肺癌、乳癌、胃癌、膀胱癌、大腸癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、腎癌、肝細胞癌、直腸癌、造血性悪性疾患、膠芽腫および幼児性血管腫から成る群より選択される少なくとも１つの癌に罹患している被験者を治療する方法に関する。このような方法は、
（ａ）癌に罹患している被験者であって、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体の所定の量での治療を受けている被験者から試験サンプルを得る段階；
（ｂ）試験サンプルと、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合する第一の捕捉抗体とを接触させて、第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体を形成する段階；
（ｃ）第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体と、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合する第二の抗体であって、検出可能な標識にコンジュゲートさせた第二の抗体（「検出抗体」）とを接触させて、第二の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体を形成する段階；
（ｄ）検出可能な標識を検出することによって、段階（ｃ）において形成された第二の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出抗体の量を決定する段階（形成された第二の複合体の量は、試験サンプルに含有されるヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの量である。）；
（ｅ）段階（ｄ）において決定された試験サンプル中のヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの量を所定のレベルと比較する段階；および
（ｆ）所定のレベルより低い段階（ｄ）において決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度を有する被験者を、（ｉ）段階（ａ）において述べたＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素もしくはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体の所定の量より高い、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素もしくはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体の調整量；（ｉｉ）Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素もしくはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体以外の薬物；または（ｉｉｉ）（ｉ）と（ｉｉ）の組み合わせで治療する段階
を含む。
【００２１】
上記方法において、捕捉抗体は、モノクローナル抗体２６４であり、および検出抗体は、ポリクローナル抗体ｐＢ２６４である。
【００２２】
さらに、上記方法において、場合により、捕捉抗体がモノクローナル抗体でありおよび検出抗体がポリクローナル抗体であるときの所定のレベルは、被験者がＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体での治療を最初に受けた後、約２４時間の時点で、ミリリットルあたり約３０ピコグラムである。尚、さらに場合により、上記方法において、捕捉抗体がモノクローナル抗体でありおよび検出抗体がポリクローナル抗体アッセイであるときの所定のレベルは、被験者がＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体での治療を最初に受けた後、約１５日の時点で、ミリリットルあたり約４０ピコグラムからミリリットルあたり約７５ピコグラムである。
【００２３】
または、上記方法において、捕捉抗体は、モノクローナル抗体８２６であり、および検出抗体は、モノクローナル抗体２５５である。
【００２４】
尚、さらに、上記方法において、場合により、捕捉抗体がモノクローナル抗体でありおよび検出抗体がモノクローナル抗体アッセイであるとき、所定のレベルは、    である。この方法の１つの態様において、このとき、捕捉抗体は、モノクローナル抗体であり、および検出抗体は、モノクローナル抗体であり、および段階（ｅ）において決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度は、被験者がＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体での治療を最初に受けた約８または１５日後に定常状態で所定のレベルと比較してミリリットルあたり約６０ピコグラムからミリリットルあたり約１５０ピコグラム増加される。
【００２５】
さらにもう１つの実施形態において、薬物（薬物は、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体である。）での治療を受けた被験者が、薬物の有効な血中濃度を得ているかどうかを判定する際に使用するためのキットを本明細書において提供し、このキットは、
（ａ）少なくとも、モノクローナル抗体２６４、ポリクローナル抗体ｐＢ２６４およびこれらの組み合わせから成る群より選択される抗体と；
（ｂ）キットを使用するための取り扱い説明書と
を含む。
【００２６】
さらに、薬物（薬物は、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体である。）での治療を受けている被験者が、薬物の有効な血中レベルを得ているかどうかを判定する際に使用するためのキットを提供し、このキットは、
（ａ）少なくとも、モノクローナル抗体８２６、モノクローナル抗体２５５およびこれらの組み合わせから成る群より選択される抗体と；
（ｂ）キットを使用するための取り扱い説明書と
を含む。
【００２７】
さらに、抗癌薬（薬は、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体である。）での癌の治療を受けている被験者の応答をモニターする際に使用するためのキットを提供し、このキットは、
（ａ）少なくとも、モノクローナル抗体２６４、ポリクローナル抗体ｐＢ２６４およびこれらの組み合わせから成る群より選択される抗体と；
（ｂ）該キットを使用するための取り扱い説明書と
を含む。
【００２８】
尚、その上さらに、抗癌薬（薬は、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体である。）での癌の治療を受けている被験者の応答をモニターする際に使用するためのキットを提供し、このキットは、
（ａ）少なくとも、モノクローナル抗体８２６、モノクローナル抗体２５５およびこれらの組み合わせから成る群より選択される抗体と；
（ｂ）キットを使用するための取り扱い説明書と
を含む。
【００２９】
さらにもう１つの実施形態において、疾病に罹患しやすいまたは疾病に罹患している被験者が、薬物（薬物は、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体である。）での治療に応答するかどうかを判定する際に使用するためのキットを本明細書において提供し、このキットは、
（ａ）少なくとも、モノクローナル抗体２６４、ポリクローナル抗体ｐＢ２６４およびこれらの組み合わせから成る群より選択される抗体と；
（ｂ）キットを使用するための取り扱い説明書と
を含む。
【００３０】
尚、さらにもう１つの実施形態において、疾病に罹患しやすいまたは疾病に罹患している被験者が、薬物（薬物は、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体である。）での治療に応答するかどうかを判定する際に使用するためのキットを本明細書において提供し、このキットは、
（ａ）少なくとも、モノクローナル抗体８２６、モノクローナル抗体２５５およびこれらの組み合わせから成る群より選択される抗体と；
（ｂ）キットを使用するための取り扱い説明書と
を含む。
【００３１】
さらに、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体を投与されている被験者において疾病の進行をモニターする際に使用するためのキットを本明細書において提供し、このキットは、
（ａ）少なくとも、モノクローナル抗体２６４、ポリクローナル抗体ｐＢ２６４およびこれらの組み合わせから成る群より選択される抗体と；
（ｂ）キットを使用するための取り扱い説明書と
を含む。
【００３２】
尚、さらに、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体を投与されている被験者において疾病の進行をモニターする際に使用するためのキットを本明細書において提供し、このキットは、
（ａ）少なくとも、モノクローナル抗体８２６、モノクローナル抗体２５５およびこれらの組み合わせから成る群より選択される抗体と；
（ｂ）キットを使用するための取り扱い説明書と
を含む。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】図１は、実施例１において説明するとおりの、様々な時点でのヒトＰｌＧＦ−１に関する用量応答性増加を示す図である。この図において、−◆−は、０．１ｍｇ／ｋｇ（Ｎ＝１１）であり、−■−は、０．２５ｍｇ／ｋｇ（Ｎ＝１１）であり、−▲−は、０．３ｍｇ／ｋｇ（Ｎ＝３）であり、および−●−は、すべての患者（Ｎ＝３０）である。
【図２】図２は、実施例１において説明するとおりの、（治療的恩恵を示す）療法に関する時間について患者を層化した最適なヒトＰｌＧＦ−１閾値を示す図である。ＡＢＴ−８６９での治療開始後の２４時間時点について、全患者（点線（．．．）として示す（Ｎ＝３１）（１３３に等しいＴＴＰ中央値を有する。））、３０ｐｇ／ｍＬより多い（破線と点線（−・−・−）として示す（Ｎ＝２０）（１４４に等しいＴＴＰ中央値を有する。））または３０ｐｇ／ｍＬ未満（太い実線（――）として示す（Ｎ＝１１）（８２に等しいＴＴＰ中央値を有する。））として群を示す。それぞれの群についての進行までの時間の明瞭な違いを示す。
【図３】図３は、実施例１において説明するとおりの（治療的恩恵を示す）療法に関する時間について患者を層化した最適なヒトＰｌＧＦ−１閾値を示す図である。ＡＢＴ−８６９での治療開始後、安定状態時点について、全患者（点線（．．．）として示す（Ｎ＝３０）（１３３に等しいＴＴＰ中央値を有する。））、４０ｐｇ／ｍＬより多い（破線と点線（−・−・−）として示す（Ｎ＝１７）（３２８に等しいＴＴＰ中央値を有する。））または４０ｐｇ／ｍＬ未満（太い実線（――）として示す（Ｎ＝１３）（９６に等しいＴＴＰ中央値を有する。））として群を示す。それぞれの群についての進行までの時間の明瞭な違いを示す。
【図４】図４は、実施例１において説明するとおりの、様々な時点にわたってヒトＰｌＧＦ−１時間経過を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００３４】
結腸直腸癌に罹患している被験者において腫瘍組織におけるヒトＰｌＧＦ−１発現が不良な予後および生存と相関することは、当分野において公知である（Ｗｅｉら，Ｇｕｔ，５４：６６６−６７２（２００５）参照）。従って、当業者は、疾病負担を低減することができ、それによって寛解を生じさせることおよび進行のない生存を延長することができる有効な療法が、ヒトＰｌＧＦ−１の血漿中濃度を増加させる結果となると予想する。意外にも、本開示の発明者らは、癌などの疾病に罹患している被験者におけるヒトＰｌＧＦ−１濃度の増加が、特に癌に罹患している被験者において、有効な療法および進行までの時間改善と関係づけられるマーカーとして役立ち得ることを発見した。
【００３５】
従って、本開示は、とりわけ、ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体での治療を受けている被験者と協力して用いることができるヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントコンパニオン診断アッセイに関する。より具体的には、本開示は、ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体での治療を受けている被験者が薬物の有効な血中レベルを得ているかどうかを、治療過程の前記被験者におけるヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントのレベルをモニターすることによって判定するための方法に関する。さらに、本開示は、血管新生のバイオマーカーをモニターすることにより、疾病に罹患しやすいまたは罹患している被験者が、薬物での治療の恩恵に浴するかどうかを判定する、および治療（例えば、癌のためのものなど）を受けている被験者の応答を判定する方法にも関する。詳細には、本開示は、ＰｌＧＦ−１コンパニオン診断方法および製品に関する。場合により、本明細書に記載する方法は、自動システムまたは半自動システムでの使用に適している。
【００３６】
最後に、本開示は、１つ以上のタイプの癌または１つ以上のタイプの自己免疫疾患に罹患している被験者を治療する方法に関する。
【００３７】
Ａ．定義
本明細書において用いる場合、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、この文脈が明瞭に別様に指図していない限り、複数の指示対象を含む。本明細書における数値範囲の列挙については、同じ精度で、これらの間のそれぞれの介在数が明確に意図される。例えば、範囲６から９については、６および９に加えて数７および８が意図され、および範囲６．０から７．０については、数６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９および７．０が明確に意図される。
【００３８】
ａ）ＡＢＴ−８６９
本明細書において用いる場合、用語「ＡＢＴ−８６９」は、キナーゼ酵素アッセイにおいてＶＥＧＦＲ１（ＩＣ５０  ３０ｎＭ）、２（ＩＣ５０  ８．５ｎＭ）、３（ＩＣ５０  ４０ｎＭ）、ＰＤＧＦＲβ（ＩＣ５０  ２５ｎＭ）、ＣＳＦ−１Ｒ（ＩＣ５０  ５．３ｎＭ）およびＦｌｔ−３キナーゼ（ＩＣ５０  ９．５ｎＭ）に対して強い阻害活性を有するＡＴＰ−競合受容体チロシンキナーゼ阻害剤である、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素を指す。ＡＢＴ−８６９、ＡＢＴ−８６９を製造するための方法（実施例５参照）、ＡＢＴ−８６９を含有する製剤のタイプ（例えば、カプセルもしくは錠剤；粉末もしくは顆粒；水性もしくは非水性液中の溶液もしくは懸濁液；可食フォームもしくはホイップ；または水中油型液体エマルジョンもしくは油中水型エマルジョン）、投与経路（例えば、経口経路（口腔内もしくは舌下経路を含む。）、直腸内経路、鼻経路、局所経路（口腔内、舌下、もしくは経皮経路を含む。）、膣経路、または非経口経路（皮下、筋肉内、静脈内もしくは皮内経路を含む。））は、すべて、Ｕ．Ｓ．Ｐａｔｅｎｔ  Ｎｏ．７，２９７，７０９に記載されており、この内容は参照により本明細書に援用されている。
【００３９】
ｂ）ＡＢＴ−８６９の類似体またはＡＢＴ−８６９類似体
本明細書において交換可能に用いるような、本明細書において用いる場合の語句「ＡＢＴ−８６９の類似体」または「ＡＢＴ−８６９類似体」は、ＡＢＴ−８６９の塩、エステル、アミド、プロドラッグ、コンジュゲート、活性代謝産物、ならびに他のこのような誘導体、類似体および関連化合物をはじめとする（しかし、これらに限定されない）薬理活性類似体を指す。ＡＢＴ−８６９の例示的類似体としては、下記構造式（Ｉ−ＸＸ）を有する化合物が挙げられるが、これらに限定されない：
【００４０】
【化１】
2011525241.tif 000003
【００４１】
ｃ）抗体
本明細書において用いる場合、用語「抗体」は、免疫グロブリン分子またはこの免疫活性部分、即ち抗原結合部位を指す。免疫グロブリン分子の免疫活性部分の例としては、例えば抗体をペプシンなどの酵素で処理することにより、生成することができるＦ（ａｂ）およびＦ（ａｂ’）２フラグメントが挙げられる。本開示において使用することができる抗体の例としては、とりわけポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、組換え抗体、一本鎖Ｆｖ（「ｓｃＦｖ」）、親和性成熟抗体、一本鎖抗体、単一ドメイン抗体、Ｆ（ａｂ）フラグメント、Ｆ（ａｂ’）フラグメント、ジスルフィド結合Ｆｖ（「ｓｄＦｖ」）、および抗イディオタイプ（「抗Ｉｄ」）抗体、ならびに上述のもののいずれかについての機能的に活性なエピトープ結合フラグメントが挙げられるが、これらに限定されない。抗体は、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤもしくはＩｇＥクラスのもの、またはこれらのフラグメントもしくは誘導体であり得る。簡略化のために、分析物に対する抗体を、多くの場合、「抗分析物抗体」または単に「分析物抗体」（例えば、ヒトＰｌＧＦ−１抗体）と呼ぶ。当分野において公知の１つ以上の化学的、ペプチドまたはポリペプチド部分を取り付けることによって、抗体を誘導体化することができる。抗体は化学的部分と結合する可能性がある。
【００４２】
ｄ）ヒトＰｌＧＦ−１
本明細書において交換可能に用いるような語句「ヒトＰｌＧＦ−１」または「ヒトＰｌＧＦ−１ポリペプチド」は、シグナルペプチドを伴うまたは伴わない、任意の完全長（即ち、これらのフラグメントでない）ヒトＰｌＧＦ−１配列を指す。例えば、完全長ヒトＰｌＧＦ−１は、システイン結び目構造を形成する８つの保存システイン残基と中央に位置するＰＤＧＦ様ドメインを有する１８アミノ酸シグナル配列を伴う１４９アミノ酸未成熟ポリペプチドである場合がある。または、ヒトＰｌＧＦ−１は、（文献に記載されているものなどの）１８アミノ酸シグナル配列を含有しない１３１アミノ酸成熟ポリペプチドである場合もある。ＰｌＧＦは、少なくとも４つの選択的にスプライシングされた形態：ＰｌＧＦ−１、ＰｌＧＦ−２、ＰｌＧＦ−３およびＰｌＧＦ−４で存在し得る。ＰｌＧＦ−２およびＰｌＧＦ−４は、細胞膜との会合増加またはＰｌＧＦ受容体に対する親和性改変を生じさせる結果となるＰｌＧＦ−２およびＰｌＧＦ−４におけるヘパリン結合ドメインの挿入により、他の形態と異なる可能性がある。ＰｌＧＦのアミノ酸配列は、ＥＰ  ０５５０５１９に記載されており、この内容は参照により本明細書に援用されている。ヒトＰｌＧＦポリペプチド（例えば、ポリアミノ酸）配列は、自然界で見出されるとおりのもの、自然界で見出されるような配列に基づくもの、単離されたもの、合成のもの、半合成のもの、組換え体、または他のものである。特に、本明細書で言及する場合のＰｌＧＦは、ＰｌＧＦ−１である。
【００４３】
本明細書における開示は、（例えば、コドン認識についての必然的最適化を伴う）原核性および／もしくは真核性バックグラウンドに存在するような、ならびに／または原核性および／もしくは真核性バックグラウンドにおいて生産されるような、多数の異なるヒトＰｌＧＦ−１ポリペプチド配列を包含する。要するに、ポリペプチドおよびポリヌクレオチド配列は、（ａ）シグナルペプチド；および（ｂ）当業者には明らかであるものなどの他の変異を有するもしくはコードする場合もあり、または有さないもしくはコードしない場合もある。
【００４４】
ｅ）ヒトＰｌＧＦ−１フラグメント
本明細書において用いる場合、用語「ヒトＰｌＧＦ−１フラグメント」は、ヒトＰｌＧＦ−１（成熟タンパク質と呼ぶ場合もある、１３１アミノ酸）またはシグナルペプチドを含むＰｌＧＦ−１（未成熟タンパク質と呼ぶ場合もある、１４９アミノ酸）の全体に満たない（即ち、完全長でない）一部分を含むポリペプチドを指す。詳細には、ヒトＰｌＧＦフラグメントは、ヒトＰｌＧＦの少なくとも約５の連続するアミノ酸、ヒトＰｌＧＦの少なくとも約１０の連続するアミノ酸残基；ヒトＰｌＧＦのアミノ酸の少なくとも約１５の連続するアミノ酸残基；ヒトＰｌＧＦの少なくとも約２０の連続するアミノ酸残基；ヒトＰｌＧＦの少なくとも約２５の連続するアミノ酸残基、ヒトＰｌＧＦのアミノ酸の少なくとも約３０の連続するアミノ酸残基、ヒトＰｌＧＦの少なくとも約３５の連続するアミノ酸残基、ヒトＰｌＧＦの少なくとも約４０の連続するアミノ酸残基、ヒトＰｌＧＦの少なくとも約４５の連続するアミノ酸残基、ヒトＰｌＧＦの少なくとも約５０の連続するアミノ酸残基、ヒトＰｌＧＦの少なくとも約５５の連続するアミノ酸残基、ヒトＰｌＧＦの少なくとも約６０の連続するアミノ酸残基、ヒトＰｌＧＦの少なくとも約６５の連続するアミノ酸残基、ヒトＰｌＧＦの少なくとも約７０の連続するアミノ酸残基、ヒトＰｌＧＦの少なくとも約７５の連続するアミノ酸残基、ヒトＰｌＧＦの少なくとも約８０の連続するアミノ酸残基、ヒトＰｌＧＦの少なくとも約８５の連続するアミノ酸残基、ヒトＰｌＧＦの少なくとも約９０の連続するアミノ酸残基、ヒトＰｌＧＦの少なくとも約９５の連続するアミノ酸残基、ヒトＰｌＧＦの少なくとも約１００の連続するアミノ酸残基、ヒトＰｌＧＦの少なくとも約１０５の連続するアミノ酸残基、ヒトＰｌＧＦの少なくとも約１１０の連続するアミノ酸残基、ヒトＰｌＧＦの少なくとも約１１５の連続するアミノ酸残基、ヒトＰｌＧＦの少なくとも約１２０の連続するアミノ酸残基、ヒトＰｌＧＦの少なくとも約１２５の連続するアミノ酸残基、ヒトＰｌＧＦの少なくとも約１３０の連続するアミノ酸残基、ヒトＰｌＧＦの少なくとも約１３５の連続するアミノ酸残基、ヒトＰｌＧＦの少なくとも約１４０の連続するアミノ酸残基またはヒトＰｌＧＦの少なくとも約１４４の連続するアミノ酸残基を含む。
【００４５】
例示的ヒトＰｌＧＦ−１フラグメントは、ミネソタ州ミネアポリスのＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．（カタログ番号＃Ｐ４９７６３）から市販されている、ヒトＰｌＧＦ−１の残基２１−１４９を含む。このヒトＰｌＧＦフラグメントは、ヒトＰｌＧＦフラグメント−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントについてのイムノアッセイの際に較正物質または対照として使用することができる。
【００４６】
ｆ）同一の
２つ以上のポリペプチドまたはポリヌクレオチド配列に関連して本明細書において用いる場合の「同一の」または「同一性」は、これらの配列が、明記されている領域にわたって同じである残基の明記されている百分率を有することを意味する可能性がある。この百分率は、２つの配列を最適にアラインし、明記されている領域にわたってこれら２つの配列を比較し、同一残基が存在する両方の配列内の位置の数を判定してマッチした位置の数を得、マッチした位置の数をこの明記されている領域内の位置の総数で割り、その結果に１００をかけて配列同一性の百分率を得ることにより、計算することができる。２つの配列が、異なる長さのものであり、またはアラインメントによって１つ以上の食い違った末端が生じ、明記されている比較領域が単一の配列しか含まない場合、単一配列の残基をこの計算の分母には含めるが、分子には含めない。
【００４７】
ｇ）モノクローナル抗体２６４
本明細書において用いる場合、語句「モノクローナル抗体２６４」または「ＭＡＢ２６４」は、ミネソタ州ミネアポリスのＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．（カタログ番号ＭＡＢ２６４）から市販されている、Ｃｌｏｎｅ３７２０３からの非コンジュゲート型マウス抗ヒトＰｌＧＦ−１モノクローナル抗体を指す。
【００４８】
ｈ）モノクローナル抗体２５５
本明細書において用いる場合、語句「モノクローナル抗体２５５」または「ＭＡＢ２５５」は、Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓが所有する、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎアクセッション番号ＰＴＡ−８５３６を有するマウスハイブリドーマ細胞株１−２５５−７１３から生産される、非コンジュゲート型マウス抗ヒトＰｌＧＦ−１モノクローナル抗体を指す。マウスハイブリドーマ細胞株１−２５５−７１３は、２００７年７月１２日に１０８０１  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｂｌｖｄ．，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ  ２０１１０−２２０９のＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎに寄託され、アクセッション番号ＰＴＡ−８５３６を指定された。モノクローナル抗体２５５は、２００８年６月１８日に出願されたＵ．Ｓ．Ｓｅｒｉａｌ  Ｎｕｍｂｅｒ．６１／０７３，６２４および２００８年８月１５日に出願されたＵ．Ｓ．Ｓｅｒｉａｌ  Ｎｕｍｂｅｒ．６１／０８９，１７２に記載されており、これらのそれぞれについての内容は参照により本明細書に援用されている。
【００４９】
語句「モノクローナル抗体２５５」または「ＭＡＢ２５５」は、マウスハイブリドーマ細胞株１−２５５−２６７５によって生産されるモノクローナル抗体を含めて、マウスハイブリドーマ細胞株１−２５５−７１３のサブクローンによって生産される、非コンジュゲート型マウス抗ヒトＰｌＧＦ−１モノクローナル抗体も指す。マウスハイブリドーマ細胞株１−２５５−２６７５によって生産されるモノクローナル抗体は、マウスハイブリドーマ細胞株１−２５５−７１３によって生産されるモノクローナル抗体と同一である。マウスハイブリドーマ細胞株１−２５５−２６７５は、２００９年６月１６日に出願されたＵ．Ｓ．Ｓｅｒｉａｌ  Ｎｏ．１２／４８５，１１４に記載されており、この内容は参照により本明細書に援用されている。コンジュゲート（即ち、検出抗体）として利用されるとき、ＭＡＢ２５５は、全分子として使用されることもあり、またはこのフラグメント（例えば、Ｆａｂ’２フラグメント）として使用されることもある。
【００５０】
ｉ）モノクローナル抗体８２６
本明細書において用いる場合、語句「モノクローナル抗体８２６」または「ＭＡＢ８２６」は、Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓが所有する、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎアクセッション番号ＰＴＡ−８５３９を有するマウスハイブリドーマ細胞株２−８２６−３３５から生産される、非コンジュゲート型マウス抗ヒトＰｌＧＦ−１モノクローナル抗体を指す。マウスハイブリドーマ細胞株は、２００７年７月１２日にＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｂｌｖｄ．，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ  ２０１１０−２２０９のＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎに寄託され、アクセッション番号ＰＴＡ−８５３６を指定された。モノクローナル抗体８２６は、２００８年６月１８日に出願されたＵ．Ｓ．Ｓｅｒｉａｌ  Ｎｕｍｂｅｒ．６１／０７３，６２４および２００８年８月１５日に出願されたＵ．Ｓ．Ｓｅｒｉａｌ  Ｎｏ．６１／０８９，１７２に記載されており、これらのそれぞれについての内容は参照により本明細書に援用されている。
【００５１】
ｊ）医薬組成物
本明細書において用いる場合、用語「医薬組成物」は、小分子（例えば、活性薬剤を含有する薬物、概して非ペプチド性）であろうと、または生物製剤（例えば、ＰＥＧ化などの（しかし、これに限定されない）修飾を有する任意のものを含む、ペプチドもしくはタンパク質系薬物）であろうと、治療を必要とする疾病または状態に罹患している被験者を治療するために使用することができる任意の薬剤または薬物を指す。医薬組成物の例としては、ＡＢＴ−８６９、ＡＢＴ−８６９の類似体、高脂血症薬（ナイアシン、フィブラート（例えば、クロフィブラート、フェノフィブラート、フェノフィブリン酸、シンフィブラート（ｓｉｍｆｒａｔｅ）、フェノフィブリン酸の塩、およびこれらの任意の組み合わせ）、エゼチミブ、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤（例えば、スタチン、例えば、これらに限定されないが、ロスバスタチン、シンバスタチン、およびこれらの組み合わせ（他の高脂血症薬との組み合わせ（例えばシンバスタチンとエゼチミブ）を含む。）、抗炎症薬、ナトリウム利尿ペプチド誘導体など、ならびにこれらの任意の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５２】
ｋ）ポリクローナル抗体ｐＢ２６４
本明細書において交換可能に用いるような語句「ポリクローナル抗体ｐＢ２６４」、「ｐＢ２６４」、「ＡＦ−２６４−ＰＢ」、「ＰＡＢ２６４」またはＡＢ−２６４−ＰＢは、ミネソタ州ミネアポリスのＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．から入手できる非コンジュゲート型ヤギ抗ヒトＰｌＧＦ−１ポリクローナル抗体（カタログ番号ＡＦ−２６４−ＰＢ）を指す。ポリクローナル抗体ｐＢ２６４は、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）由来の精製された組換えヒト胎盤成長因子で免疫されたヤギにおいて生産される。ヒトＰｌＧＦアフィニティークロマトグラフィーによってＰｌＧＦ−１特異的ＩｇＧを精製した。
【００５３】
ｌ）所定のレベル
本明細書において用いる場合、用語「所定のレベル」は、一般に、アッセイカットオフ値でのものを指し、このカットオフ値、アッセイ結果をこの所定のレベルに対照することにより診断結果を評定するために用いられるものであり、ここでの所定のレベルは、様々な臨床パラメータ（例えば、薬物で治療されている被験者が、該薬物の有効な血中レベルを達成したかどうかをモニターするもの、抗癌薬での癌の治療を受けている被験者の応答をモニターするもの、腫瘍の応答を、前記腫瘍についての治療を受けている被験者において、モニターするものなど）に既に結び付けられているまたは既に関連づけられている。所定のレベルは、絶対値であることもあり（例えば、より詳細に本明細書中で説明するモノクローナル抗体／ポリクローナルアッセイの場合）、または療法の開始前に患者から得た値を引き算することによって正規化された値であることもある（例えば、より詳細に本明細書中で説明するようなモノクローナル抗体／モノクローナル抗体の場合）。用いることができる所定のレベルの例は、１つ以上の疾病または状態に場合によっては罹患していることがある１者以上の被験者から得られるベースラインレベルである。本開示は、例示的所定のレベルを提供し、およびこのようなレベルと本明細書において説明するような例示的イムノアッセイについての臨床パラメータとの最初の結びつきまたは関連を説明する。しかし、カットオフ値がこのイムノアッセイの性質（例えば、利用する抗体など）に依存して変わり得ることは周知である。さらに、本明細書における開示を他のイムノアッセイに適応させて、この説明に基づき他のイムノアッセイについてのイムノアッセイ特異的カットオフ値を得ることは、十分に当業者の通常技能の範囲内である。
【００５４】
ｍ）実質的に同一の
本明細書において用いる場合の「実質的に同一の」は、第一の配列および第二の配列が、約８から約１００残基以上の領域（詳細には、約８から約１００残基の中の任意の範囲を含む。）にわたって少なくとも約５０％から約９９％同一であることを意味し得る。
【００５５】
ｎ）被験者または患者
本明細書において用いる場合、用語「被験者」および「患者」は、交換可能に用いられる。本明細書において用いられる場合、用語「被験者」および「患者」は、動物を指し、ある態様では鳥（例えば、カモもしくはガチョウ）を指し、別の態様ではサメもしくはクジラを指し、またはさらなる態様では、非霊長類（例えば、雌ウシ、ブタ、ラクダ、ラマ、ウマ、ヤギ、ウサギ、ヒツジ、ハムスター、モルモット、ネコ科の動物、イヌ科の動物、ラットおよびネズミ科の動物）および霊長類（例えば、サル、例えばカニクイザル（ｃｙｎｏｍｏｌｏｇｏｕｓ  ｍｏｎｋｅｙ）、チンパンジー、およびヒト）を含む哺乳動物を指す。
【００５６】
ｏ）試験サンプル
本明細書において用いる場合、用語「試験サンプル」または「サンプル」は、ヒトＰｌＧＦ−１もしくはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントなどの対象となる分析物について試験されるおよび／または分析物を含有することが疑われる生体材料を指す。試験サンプルは、任意の生物源、例えば、全血、血清、血漿、間質液、唾液、眼レンズ液、脳脊髄液、汗、尿、乳、腹水、粘液、鼻汁、痰、滑液、腹膜液、膣液、月経分泌物、羊水、精液などをはじめとする（しかし、これらに限定されない）生理的液体から採取することができる。試験サンプルは、生体源から得たまま直接使用されることもあり、またはサンプルの特性を修飾するための前処理後に使用されることもある。例えば、このような前処理としては、血液からの血清の調製、粘液の希釈などを挙げることができる。前処理方法は、濾過、沈殿、希釈、蒸留、混合、濃縮、干渉成分の不活性化、試薬の添加、溶解なども含むことがある。さらに、液体培地を形成するようにまたは分析物を放出するように固体試験サンプルを修飾することが有益である場合もある。
【００５７】
ｐ）毒性レベル
本明細書において用いる場合、語句「毒性レベル」は、医薬組成物で治療を受けている被験者が、前記医薬組成物での治療の結果として１つ以上の有害事象または有害副作用を経験し始める可能性のある値を指す。
【００５８】
ｑ）変異体
本明細書において用いる場合の「変異体」は、アミノ酸の挿入、欠失または保存的置換の点でアミノ酸配列が異なるが少なくとも１つの生物活性を保持する、ペプチドまたはポリペプチドを意味し得る。本開示のために、「生物活性」は、特異的抗体による結合を受ける能力を含む。アミノ酸の保存的置換、即ち、類似した特性（例えば、親水性、荷電領域の程度および分布）を有する異なるアミノ酸でのアミノ酸の置換は、概して小さな変化を伴うと当分野において認識されている。これらの小さな変化は、一つには、当分野において理解されているようなアミノ酸のヒドロパシー指数を考慮することによって同定することができる。Ｋｙｔｅら，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１５７：１０５−１３２（１９８２）。アミノ酸のヒドロパシー指数は、この疎水性および変化の考慮に基づく。類似したヒドロパシー指数のアミノ酸を置換でき、これらが尚、タンパク質機能を保持できることは、当分野において公知である。１つの態様では、±２のヒドロパシー指数を有するアミノ酸を置換する。生体機能を保持するタンパク質を生じさせる結果となる置換を明らかにするために、アミノ酸の親水性を用いることができる。ペプチドに関連してのアミノ酸の親水性の考慮により、このペプチドの最大局所平均親水性（抗原性および免疫原性とよく相関すると報告されている有用な尺度）の計算が可能となる。参照により本明細書に援用されている、Ｕ．Ｓ．Ｐａｔｅｎｔ  Ｎｏ．４，５５４，１０１。類似した親水性値を有するアミノ酸の置換は、当分野において理解されているように、生物活性、例えば免疫原性を保持するペプチドを生じさせる結果となり得る。１つの態様では、互いに±２以内の親水性値を有するアミノ酸で置換を行う。アミノ酸の疎水性指数と親水性値の両方が、このアミノ酸の特定の側鎖による影響を受ける。この観察と一致して、生体機能に適合しているアミノ酸置換は、疎水性、親水性、変化、サイズおよび他の特性によって示されるように、アミノ酸の、および特にこれらのアミノ酸の側鎖の、相対的類似性に依存することがわかっている。
【００５９】
変異体は、（ｉ）約８から約１００アミノ酸以上（詳細には、約８から約１００残基の中の任意の範囲を含む。）であり得る、参照するタンパク質の一部分；または（ｉｉ）参照するタンパク質と実質的に同一であるタンパク質であるタンパク質を指す場合もある。変異体は、タンパク質分解、リン酸化または他の翻訳後修飾などにより、差次的にプロセッシングされたタンパク質である場合もある。
【００６０】
Ｂ．ＰｌＧＦ−１アッセイおよび治療方法
本開示は、被験者から得た試験サンプル中のヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメント濃度を決定するためのアッセイにも関する。意図されるアッセイとしては、イムノアッセイ（例えば、サンドイッチおよび競合イムノアッセイ）、臨床化学アッセイおよび酵素的アッセイが挙げられる。好ましくは、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメント測定は、イムノアッセイ、およびさらに好ましくはサンドイッチイムノアッセイを用いて行われ、これらを本明細書でさらに詳細に説明する。
【００６１】
被験者から得た試験サンプル中のヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメント濃度を決定するためのアッセイは、（ａ）被験者から得られた試験サンプルを用意する段階；および（ｂ）この試験サンプル中のヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度を決定する段階を含み得る。ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメント濃度を判定するために行うことができるアッセイの特定のタイプがイムノアッセイである。イムノアッセイは、当分野において公知の任意の形式、例えば、これらに限定されないが、サンドイッチ形式、競合阻害形式（正方向もしくは逆方向照合阻害アッセイ両方を含む。）を用いて、または蛍光分極形式で行うことができる。上で述べたように、好ましくは、イムノアッセイは、サンドイッチ形式でのものである。具体的には、本開示の１つの態様では、少なくとも２つの抗体を用いて、試験サンプル中のヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントを分離し、定量する。より具体的には、少なくとも２つの抗体は、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの一定のエピトープに結合して、「サンドイッチ」と呼ばれる免疫複合体を形成する。一般に、イムノアッセイでは、１つ以上の抗体を使用して、試験サンプル中のヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントを捕捉することができ（これらの抗体は、多くの場合、「捕捉」抗体と呼ばれる。）、および１つ以上の抗体を使用して、検出可能な（即ち、定量可能な）標識をサンドイッチに結合することができる（これらの抗体は、多くの場合、「検出抗体」、または「コンジュゲート」と呼ばれる。）。サンドイッチアッセイでは、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合する両方の抗体が、アッセイにおける任意の他の抗体のこのそれぞれの結合部位への結合によって減少されないことが好ましい。言い換えると、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントを含有することが疑われる試験サンプルまたは試験サンプル抽出物と接触させる１つ以上の第一の抗体が、第二のまたは後続の抗体によって認識される結合部位のすべてまたは一部に結合せず、その結果、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合する１つ以上の第二の検出抗体の能力に干渉しないように、抗体を選択すべきである。
【００６２】
本発明の１つの態様では、モノクローナル抗体を捕捉抗体としておよびポリクローナル抗体を検出抗体として、またはポリクローナル抗体を捕捉抗体としておよびモノクローナル抗体を検出抗体として使用して、優れた（即ち、非常に強いまたは高品質）イムノアッセイ、特にサンドイッチアッセイを行うことができる（本明細書では、「モノ／ポリアッセイ」と呼ぶ。）。例示的イムノアッセイの一例は、捕捉抗体としてモノクローナル抗体２６４、および検出抗体としてポリクローナル抗体ｐＢ２６４を利用するものである。場合により、異なる市販抗体（例えば、モノクローナル抗体２６４以外）を第一の捕捉抗体として使用することができ、モノクローナル抗体２６４を第二のまたは後続の捕捉抗体として使用することができる。または、モノクローナル抗体２６４を第一の捕捉抗体として使用する場合、異なる抗体（モノクローナル抗体２６４以外、即ち、他の市販抗体）を第二の捕捉抗体として使用することができる。また、場合により、ポリクローナル抗体ｐＢ２６４に加えて第二の検出抗体を使用することができる。任意の市販抗体を第二の検出抗体として使用することもできる。例えば、ポリクローナル抗体ｐＢ２６４を第二の検出抗体として使用することができる。
【００６３】
本発明のもう１つの態様では、モノクローナル抗体を捕捉抗体としても検出抗体としても使用して、優れた（即ち、非常に強いまたは高品質）イムノアッセイ、特にサンドイッチアッセイを行うことができる（本明細書では、「モノ／モノアッセイ」と呼ぶ。）。例示的イムノアッセイの一例は、捕捉抗体としてモノクローナル抗体８２６、および検出抗体としてモノクローナル抗体２５５を利用するものである。場合により、異なる抗体（例えば、モノクローナル抗体８２６以外）を第一の捕捉抗体として使用することができ、モノクローナル抗体８２６を第二のまたは後続の捕捉抗体として使用することができる。例えば、モノクローナル抗体２６４を第一の捕捉抗体として使用し、モノクローナル抗体８２６を第二のまたは後続の捕捉抗体として使用することができる。または、モノクローナル抗体８２６を第一の捕捉抗体として使用することとなる場合、異なる抗体（モノクローナル抗体８２６以外の抗体、即ち、他の市販抗体）を第二の捕捉抗体として使用することができる。例えば、モノクローナル抗体８２６を第一の捕捉抗体として使用し、モノクローナル抗体２６４を第二の捕捉抗体として使用することができる。また、場合により、モノクローナル抗体２５５に加えて第二の検出抗体を使用することができる。ポリクローナル抗体を含めて、任意の市販抗体を第二の検出抗体として使用することができるが、但し、第一の検出抗体がモノクローナル抗体であることを条件とする。例えば、モノクローナル抗体を第一の検出抗体として使用する場合、ポリクローナル抗体ｐＢ２６４を第二の検出抗体として使用することができる。
【００６４】
ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントについて試験することとなる（例えば、含有することが疑われる）サンプルを、少なくとも１つの捕捉抗体および少なくとも１つの検出抗体（検出抗体は、第二の検出抗体または第三の検出抗体のいずれかである。）と、同時にまたは逐次的におよび任意の順序で接触させることができる。例えば、試験サンプルを少なくとも１つの捕捉抗体と先ず接触させ、次に（逐次的に）、少なくとも１つの検出抗体と接触させることができる。または、試験サンプルを少なくとも１つの検出抗体と先ず接触させ、次に（逐次的に）少なくとも１つの捕捉抗体と接触させることができる。さらにもう１つの選択肢では、試験サンプルを捕捉抗体および検出抗体と同時に接触させることができる。
【００６５】
サンドイッチアッセイ形式では、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントを含有することが疑われる試験サンプルを、先ず、少なくとも１つの第一の捕捉抗体と、第一の抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体の形成を可能にする条件下で接触させる。１つ以上の捕捉抗体を使用すると、第一の多数の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１（またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメント）複合体が形成される。サンドイッチアッセイでは、抗体、好ましくは、少なくとも１つの捕捉抗体を、試験サンプル中の予測されるヒトＰｌＧＦ−１の最大量のモル過剰量で使用する。例えば、緩衝液（例えば、微粒子被覆用緩衝液）のｍＬあたり約５μｇ／ｍＬから約１ｍｇ／ｍＬの抗体を使用することができる。
【００６６】
場合により、試験サンプルを少なくとも１つの捕捉抗体（例えば、第一の捕捉抗体）と接触させる前に、試験サンプルからの第一の抗体ヒトＰｌＧＦ−１複合体の分離を助長する固体支持体または固相にこの少なくとも１つの捕捉抗体を結合させることができる。反応トレーのウエル、試験管またはビーズ（例えば、ポリスチレンビーズ、磁気ビーズ）、ニトロセルロースストリップ、膜、微粒子（例えば、ラテックス粒子、シープ（ｓｈｅｅｐ）およびＤＵＲＡＣＹＴＥＳ（登録商標）（イリノイ州アボットパークのＡｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ；ＤＵＲＡＣＹＴＥＳ（登録商標）は、ピルビンアルデヒドおよびホルムアルデヒドによって「固定」されている赤血球である。））の形態で高分子材料から製造された固体支持体をはじめとする（しかし、これらに限定されない）、当分野において公知の任意の固体支持体を使用することができる。
【００６７】
固相は、検出抗体による出入りを可能にする十分な多孔度と、抗原を結合するための適切な表面親和性とを有する、任意の適する多孔質材料も含むことができる。微孔質構造が一般に好ましいが、水和状態でゲル構造を有する材料も使用できる。このような有用な固体支持体としては、ニトロセルロースおよびナイロンが挙げられるが、これらに限定されない。このような多孔質固体支持体は、好ましくは、約０．０１から０．５ｍｍ、好ましくは約０．１ｍｍの厚さのシートの形態のものである。気孔径は、広い範囲内で様々であり得るが、好ましくは、約０．０２５から約１５マイクロメートル、特に約０．１５から約１５マイクロメートルである。このような支持体の表面を、この支持体への抗原または抗体の共有結合性連結を生じさせる化学的プロセスによって、活性化することができる。しかし、一般に、抗原または抗体の不可逆的結合は、よく解っていない疎水力による多孔質材料上への吸着によって達成される。
【００６８】
吸着により、化学的カップリング剤を使用して共有結合により、または当分野において公知の他の手段により、抗体を固体支持体または固相に結合させることができるが、但し、このような結合が、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合するこの抗体の能力に干渉しないことを条件とする。または、ストレプタビジンもしくはビオチンで予め被覆された微粒子と抗体を（例えば、インディアナ州、インディアナポリスのＳｅｒａｄｙｎから入手できるＰｏｗｅｒ−Ｂｉｎｄ（商標）ストレプタビジン被覆微粒子と、当分野において公知の手段を用いてビオチニル化された抗体を使用して）結合させることができる。または、抗体種特異的モノクローナル抗体で予め被覆された微粒子を使用して、抗体を結合することができる。さらに、必要な場合には、抗体上の様々な官能基と反応性にさせるように固体支持体を誘導することができる。このような誘導は、一定のカップリング剤、例えば、無水マレイン酸、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドおよび１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（しかし、これらに限定されない。）の使用を必要とする。
【００６９】
ヒトＰｌＧＦ−１もしくはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントについて試験するおよび／またはヒトＰｌＧＦ−１もしくはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントを含有することが疑われるサンプルを少なくとも１つの捕捉抗体（例えば、第一の捕捉抗体）と接触させた後、この混合物をインキュベートして、第一の抗体（または多数の抗体）−ヒトＰｌＧＦ−１複合体を形成させる。このインキュベーションは、約４．５から約１０．０のｐＨで、約２℃から約４５℃の温度で、および少なくとも約一（１）分から約十八（１８）時間、好ましくは約１から２０分、最も好ましくは約２から６分の期間にわたって行うことができる。本明細書に記載するイムノアッセイは、一段階（一段階とは、試験サンプル、少なくとも１つの捕捉抗体および少なくとも１つの検出抗体を、すべて、逐次的にもしくは同時に、反応容器に添加することを意味する。）で、または１段階より多い段階、例えば二段階、三段階などで行うことができる。
【００７０】
（第一のまたは多数の）捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体の形成後、次に、この複合体を少なくとも１つの検出抗体と（（第一のまたは多数の）捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１−（第二のまたは多数の）抗体検出複合体の形成を可能にする条件下で）接触させる。少なくとも１つの検出抗体は、イムノアッセイにおいて使用される第二、第三、第四などの抗体であり得る。捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体を１つより多くの検出抗体と接触させると、（第一のまたは多数の）捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１−（多数の）検出抗体複合体が形成される。捕捉抗体（例えば、第一の捕捉抗体）と同じように、少なくとも第二の（および後続の）検出抗体を捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体と接触させるときには、上で説明したものに類似した条件下でのインキュベーション期間が、（第一のまたは多数の）捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１−（第二のまたは多数の）検出抗体複合体の形成に必要とされる。好ましくは、少なくとも１つの検出抗体は、検出可能な標識を含有する。この検出可能な標識は、（第一のまたは多数の）捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１−（第二のまたは多数の）検出抗体複合体の形成前に、形成と同時に、または形成後に、少なくとも１つの検出抗体（例えば、第二の検出抗体）に結合させることができる。当分野において公知の任意の検出可能な標識を使用することができる。例えば、検出可能な標識は、放射性標識、例えば３Ｈ、１３５Ｉ、３５Ｓ、１４Ｃ、３２Ｐ、３３Ｐ、酵素標識、例えばホースラディッシュペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、グルコース６−リン酸デヒドロゲナーゼなど、化学発光標識、例えばアクリジニウム（例えば、アクリジニウム（ａｃｒｉｄｉｕｍ）エステル、アクリジニウムＳＰＳＰ（Ｎ１０−（３−スルホプロピル）−Ｎ−（３−スルホプロピルなど）、ルミノール、イソルミノール、チオエステル、スルホンアミド、フェナントリジニウムエステルなど、蛍光標識、例えばフルオレセイン（５−フルオレセイン、６−カルボキシフルオレセイン、３’６−カルボキシフルオレセイン、５（６）−カルボキシフルオレセイン、６−ヘキサクロロフルオレセイン、６−テトラクロロフルオレセイン、フルオレセインイソチオシアナートなど）、ローダミン、フィコビリプロテイン、Ｒ−フィコエリトリン、量子ドット（硫化亜鉛でキャップされたセレン化カドミウム）、温度標識または免疫−ポリメラーゼ連鎖反応標識であり得る。標識の導入、標識手順および標識の検出は、Ｐｏｌａｋ  ａｎｄ  Ｖａｎ  Ｎｏｏｒｄｅｎ，Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｉｍｍｕｎｏｃｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２ｎｄ  ｅｄ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ，Ｎ．Ｙ．（１９９７）において、およびオレゴン州ユージーンのＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃによって出版されたハンドブックとカタログを兼ねたものである、Ｈａｕｇｌａｎｄ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ  Ｐｒｏｂｅｓ  ａｎｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（１９９６）において見つけられる。
【００７１】
検出可能な標識を抗体に直接またはカップリング剤により結合させることができる。使用することができるカップリング剤の一例は、ミズーリ州セントルイスのＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈから市販されているＥＤＡＣ（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルビジイミド、塩酸塩）である。使用することができる他のカップリング剤は、当分野において公知である。検出可能な標識を抗体に結合させるための方法は、当分野において公知である。加えて、検出可能な標識の抗体へのカップリングを助長する末端基を既に含有する多数の検出可能な標識、例えば、Ｎ１０−（３−スルホプロピル）−Ｎ−（３−カルボキシプロピル）−アクリジニウム−９−カルボキサミド、別様にはＣＰＳＰ−アクリジニウムエステルとして公知、またはＮ１０−（３−スルホプロピル）−Ｎ−（３−スルホプロピル）−アクリジニウム−９−カルボキサミド、別様にはＳＰＳＰ−アクリジニウムエステルとして公知、を購入または合成することができる。
【００７２】
（第一のまたは多数の）捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１−（第二のまたは多数の）検出抗体複合体を、標識の定量前に、試験サンプルの残部から、分離する必要はないが、分離してもよい。例えば、少なくとも１つの捕捉抗体（例えば、第一の捕捉抗体）を固体支持体または固相、例えば、反応トレーのウエル、ビーズまたは微粒子（しかし、これらに限定されない。）に結合させる場合、この固体支持体との接触面から（試験サンプルの）流体を除去することによって分離を果たすことができる。または、少なくとも第一の捕捉抗体を固体支持体に結合させる場合には、これをヒトＰｌＧＦ−１（またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメント）含有サンプルおよび少なくとも１つの第二の検出抗体と同時に接触させて、第一の（多数の）抗体−ヒトＰｌＧＦ−１−第二の（多数の）抗体複合体を形成し、その後、この固体支持体との接触面から流体（試験サンプル）を除去することができる。少なくとも１つの第一の捕捉抗体を固体支持体に結合させない場合には、標識量の定量のために（第一のまたは多数の）捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１−（第二のまたは多数の）検出抗体複合体を試験サンプルから除去する必要はない。
【００７３】
標識された捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１−検出抗体複合体（例えば、第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１−第二の検出抗体複合体）の形成後、当分野において公知の技術を用いて、この複合体中の標識の量を定量する。例えば、酵素標識を使用する場合、標識された複合体を、色の発現などの定量可能な反応をもたらすこの標識のための基質と反応させる。標識が放射性標識である場合、シンチレーションカウンターを使用してこの標識を定量する。標識が蛍光標識である場合、ある色の光（「励起波長」として公知）でこの標識を刺激すること、およびこの刺激に応じてこの標識が発する別の色（「発光波長」として公知で）を検出することによって、この標識を定量する。標識が化学発光標識である場合、視覚的に、または照度計、Ｘ線フィルム、高速写真フィルム、ＣＣＤカメラなどを使用することにより、放射される光を検出することによって、この標識を定量する。複合体中の標識の量を定量したら、既知濃度のヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの系列希釈物を使用して生成した標準曲線を使用することにより、この試験サンプル中のヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度を決定する。ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの系列希釈物の使用以外に、重量測定により、質量分光法によりおよび当分野において公知の他の技術により、標準曲線を生成することができる。
【００７４】
本明細書に記載する方法およびキットが、イムノアッセイを行うための他の試薬および方法を包含する必要があることは、言うまでもない。例えば様々な緩衝液、例えば、当分野において公知であるもの、ならびに／または利用するために、例えば洗浄のために、コンジュゲート希釈剤としておよび／もしくは較正物質希釈剤として、容易に調製もしくは最適化できるものを包含する。例示的コンジュゲート希釈剤は、２−（Ｎ−モルホリノ）エタンスルホン酸（ＭＥＳ）、別の塩、タンパク質遮断薬、抗菌剤および希釈剤を含有する、ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標）Ｈｕｍａｎ  ＰｌＧＦ−１コンジュゲート希釈剤（イリノイ州アボットパークのＡｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）である。例示的較正物質希釈剤は、ＭＥＳ、別の塩、タンパク質遮断薬および抗菌剤を含有する緩衝液を含む、ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標）Ｈｕｍａｎ  ＰｌＧＦ−１較正物質希釈剤（イリノイ州アボットパークのＡｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）である。
【００７５】
さらに、前に述べたように、方法およびキットは、場合により、自動または半自動システムでの使用に適している。非自動システム（例えば、ＥＬＩＳＡ）と比較したときの自動または半自動システム間の違いの幾つかとしては、捕捉抗体を付ける基質（この基質は、サンドイッチ形成および分析物反応性に影響を及ぼすことがある。）、ならびに捕捉、検出および／または任意の洗浄段階の長さおよびタイミングが挙げられる。ＥＬＩＳＡなどの非自動形式は、サンプルおよび捕捉試薬との比較的長いインキュベーション時間（例えば、約２時間）を含むことがあるのに対して、自動または半自動形式（例えば、ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標））は、比較的短いインキュベーション時間（例えば、ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標）についてはおおよそ１８分）を有することがある。類似して、ＥＬＩＳＡなどの非自動形式は、コンジュゲート試薬（Ｐｂ２６４）などの検出抗体を、比較的長いインキュベーション時間（例えば、約２時間）にわたってインキュベートすることがあるのに対して、自動または半自動形式（例えば、ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標））は、比較的短いインキュベーション時間（例えば、ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標）についてはおおよそ４分）を有することがある。
【００７６】
本開示のアッセイは、ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体などの薬物を投与されている被験者が前記薬物の有効な（または最適な）血中レベルを得ているかどうかをモニターするために用いることができる。言い換えると、本開示のアッセイによって、治療する医師は、治療を実現するために十分な量のＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体を被験者が受けているかどうかを判定することができる。このようなアッセイは、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合する第一の捕捉抗体と、ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体での治療を受けている被験者から得た試験サンプルとを接触させて、第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体を形成することを含む。モノ／ポリアッセイにおいて、捕捉抗体は、場合により、モノクローナル抗体２６４である。モノ／モノアッセイにおいて、捕捉抗体は、場合により、モノクローナル抗体８２６である。第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体の形成後に、この試験サンプルと、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合する第二の抗体であって、検出可能な標識にコンジュゲートさせた第二の抗体とを接触させて、第二の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体を形成する。モノ／ポリアッセイにおいて、検出抗体は、場合により、ポリクローナル抗体ｐＢ２６４である。モノ／モノアッセイにおいて、検出抗体は、場合により、モノクローナル抗体２２５である。次に、検出可能な標識を検出することによって、形成された捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体の量を決定する。試験サンプル中に存在する捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体の量は、この試験サンプル中のヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの量と相関する。次に、この試験サンプル中のヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの量を所定のレベルと比較する。具体的には、試験サンプル中のヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの濃度が、所定のレベルより低い場合には、この被験者は、ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体の有効な（または最適な）量を受けていないと考えられる。このとき、治療する医師は、被験者に投与するＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体の量を増加させるという決定を下すことができる。しかし、決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの試験サンプル中の濃度が所定のレベルと同じであるまたは所定のレベルより高い場合には、この被験者は、ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体の有効な（最適な）量を受けていると考えられる。例えば、モノ／モノアッセイにおいて、ミリリットルあたり約６０ピコグラムの所定のレベル（またはベースラインレベル（例えば、ＡＢＴ−８６９もしくはＡＢＴ−８６９の類似体での治療前のもの）からの増加を明示する被験者は、ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体の有効な（または最適な）量を受けていると考えられる。より具体的には、ミリリットルあたり約６０ピコグラムからミリリットルあたり約１５０ピコグラムの範囲の所定のレベル（またはベースラインレベル（例えば、ＡＢＴ−８６９もしくはＡＢＴ−８６９の類似体での治療前のもの）からの増加を明示する被験者は、ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体の有効な（または最適な）量を受けていると考えられる。ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体での治療を被験者が最初に受けた後、約８または１５日の時点で、定常状態（即ち、少なくとも約３日、少なくとも約５日、少なくとも約７日、少なくとも約１０日、少なくとも約１５日、少なくとも２０日、少なくとも３０日、少なくとも３５日、少なくとも４０日、少なくとも４５日、少なくとも５０日、少なくとも６０日など）で、ミリリットルあたり６６．５ピコグラムの所定のレベル（例えば、ベースラインレベル）から所定のレベル（例えば、ベースラインレベル）より上への増加。このとき、治療する医師は、被験者に投与しているＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体の量を変化させないまたは変更しないという決定を下すことができるが、治療する医師は、本明細書においてさらに論じる理由のため、被験者に投与しているＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体の量を低下させることを決めることもまたあり得る。
【００７７】
加えて、もう１つの態様において、モノ／モノアッセイにおいて、ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体で治療されている被験者の毒性レベルが、ミリリットルあたり１３０ピコグラムからミリリットルあたり１６０ピコグラムの範囲に達した場合、治療している医師は、この被験者に投与しているＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体の量を減少させることができる。治療している医師が被験者に投与しているＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体の量を減少させることができる例示的毒性レベルは、ミリリットルあたり１５０ピコグラムである。
【００７８】
モノ／ポリアッセイにおける例示的所定のレベルは、被験者がＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体での治療を最初に受けた後、約２４時間の時点で、ミリリットルあたり約３０ピコグラムであり得る。または、モノ／ポリアッセイにおいて、所定のレベルは、被験者がＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体での治療を最初に受けた後、定常状態（即ち、少なくとも約３日、少なくとも約５日、少なくとも約７日、少なくとも約１０日、少なくとも約１５日、少なくとも２０日、少なくとも３０日、少なくとも３５日、少なくとも４０日、少なくとも４５日、少なくとも５０日、少なくとも６０日など）で、ミリリットルあたり約４０ピコグラムからミリリットルあたり約７５ピコグラムであり得る。モノ／モノアッセイにおける例示的所定のレベルは、被験者がＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体での治療を最初に受けた後、約２４時間の時点で、ミリリットルあたり約６６．５ピコグラムであり得る。
【００７９】
試験サンプル中のヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの量および所定のレベル（例えば、ベースラインレベル）にかかわる上で説明した比較（情報分析とも呼ぶ。）は、上で説明したアッセイを行う自動もしくは半自動装置（例えば、コンピュータプラットホーム）の一部であるまたは上で説明したアッセイを行う自動もしくは半自動装置（例えば、コンピュータプラットホーム）と互換性があるソフトウェアプログラムまたはインテリジェンスシステムなどの、自動システムによって行ってもよい。または、上で説明した比較を医師が行ってもよい。
【００８０】
ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体での治療を受けている被験者は、癌のための治療を受けていることがある。癌のタイプとしては、肺癌、乳癌、胃癌、膀胱癌、大腸癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、腎癌、肝細胞癌、直腸癌、造血性悪性疾患、膠芽腫または幼児性血管腫が挙げられるが、これらに限定されない。または、被験者は、自己免疫疾患、例えば、関節リウマチ、甲状腺炎、１型糖尿病、多発性硬化症、サルコイドーシス、炎症性腸疾患、クローン病、重症筋無力症および全身性エリテマトーデス；乾癬、臓器移植拒絶反応（例えば、腎拒絶反応、移植片対宿主病）、良性および新生物性増殖性疾患もしくは眼病（黄斑変性を含むがこれに限定されない。）に罹患していることがある。
【００８１】
もう１つの態様において、本開示のアッセイは、抗癌薬での癌の治療を受けている被験者の応答をモニターするために用いることができる。このようなアッセイは、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合する第一の捕捉抗体と、癌に罹患しており、ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体での治療を受けている被験者から得た試験サンプルとを接触させて、第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体を形成することを含む。モノ／ポリアッセイについては、場合により、捕捉抗体はモノクローナル抗体２６４である。モノ／モノアッセイについては、場合により、捕捉抗体はモノクローナル抗体８２６である。第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体の形成後に、試験サンプルと、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合する第二の抗体であって、検出可能な標識にコンジュゲートさせた第二の抗体とを接触させて、第二の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体を形成する。モノ／ポリアッセイについては、場合により、検出抗体はポリクローナル抗体ｐＢ２６４である。モノ／モノアッセイについては、場合により、検出抗体はモノクローナル抗体２５５である。次に、検出可能な標識を検出することによって、形成されたこの捕捉抗体−ＰｌＧＦ−１検出複合体の量を決定する。試験サンプル中に存在する捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体の量は、この試験サンプル中に存在するヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの量と相関する。次に、この試験サンプル中のヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１試験フラグメントの量を所定のレベルと比較する。具体的には、決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１試験フラグメントの試験サンプル中の濃度が所定のレベルより低い場合には、この被験者は、ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体での治療に応答していないと考えられるので、ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体での治療を中止する。
【００８２】
このとき、治療している医師は、被験者に投与しているＡＢＴ−８６９もしくはＡＢＴ−８６９の類似体の量を増加させてもしくは被験者を全く異なる抗癌薬に切り替えて、効果を試すおよび癌を治療するという決定を下すことができ、またはこの治療レジメンに別の抗癌薬を追加する（例えば、別の抗癌薬と併用でＡＢＴ−８６９もしくはＡＢＴ−８６９の類似体を被験者に投与する。）ことができる。加えて、このとき、ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体以外の抗癌薬である新たな（例えば、異なる）抗癌薬を被験者に投与することができる。しかし、決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの試験サンプル中の濃度が、所定のレベルと同じであるまたは所定のレベルより高い場合には、この被験者は、ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体での治療に応答していると考えられる。例えば、モノ／モノアッセイにおいて、ミリリットルあたり約６０ピコグラムの所定のレベルからの増加を明示する被験者は、ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体での治療に応答していると考えられる。より具体的には、ミリリットルあたり約６０ピコグラムからミリリットルあたり約１５０ピコグラムの所定のレベルからの増加を明示する被験者は、ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体での治療に応答していると考えられる。所定のレベルより上のミリリットルあたり６６．５ピコグラムの増加が特に好ましい。このとき、治療している医師は、被験者に投与しているＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体の量を変化させないまたは変更しないという決定を下すことができるが、治療している医師は、被験者に投与しているＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体の量を低下させることを決めることもある。例えば、モノ／モノアッセイにおいて、ミリリットルあたり約６０ピコグラムの所定のレベル（またはベースラインレベル）からの増加を明示する被験者は、ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体での治療に応答していると考えられる。より具体的には、ミリリットルあたり約６０ピコグラムからミリリットルあたり約１５０ピコグラムの範囲の所定のレベル（例えば、ベースラインレベル）からの増加を明示する被験者は、ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体での治療に応答していると考えられる。ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体での治療を被験者が最初に受けた後、約８または１５日の時点で、被験者がＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体での治療を最初に受けた後、定常状態（即ち、少なくとも約３日、少なくとも約５日、少なくとも約７日、少なくとも約１０日、少なくとも約１５日、少なくとも２０日、少なくとも３０日、少なくとも３５日、少なくとも４０日、少なくとも４５日、少なくとも５０日、少なくとも６０日など）で、ミリリットルあたり６６．５ピコグラムの所定のレベル（例えば、ベースラインレベル）から所定のレベル（例えば、ベースラインレベル）より上への増加。
【００８３】
加えて、モノ／モノアッセイにおいても、ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体で治療されている被験者の毒性レベルが、ミリリットルあたり１３０ピコグラムからミリリットルあたり１６０ピコグラムの範囲に達した場合、治療している医師は、被験者に投与しているＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体の量を減少させることができる。治療している医師が被験者に投与しているＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体の量を減少させることがある例示的毒性レベルは、ミリリットルあたり１５０ピコグラムである。
【００８４】
モノ／ポリアッセイにおける例示的所定のレベルは、被験者がＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体での治療を最初に受けた後、約２４時間の時点で、ミリリットルあたり約３０ピコグラムであり得る。または、モノ／ポリにおける所定のレベルは、被験者がＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体での治療を最初に受けた後、定常状態（即ち、少なくとも約３日、少なくとも約５日、少なくとも約７日、少なくとも約１０日、少なくとも約１５日、少なくとも２０日、少なくとも３０日、少なくとも３５日、少なくとも４０日、少なくとも４５日、少なくとも５０日、少なくとも６０日など）で、ミリリットルあたり約４０ピコグラムからミリリットルあたり約７５ピコグラムであり得る。モノ／モノアッセイにおける例示的所定のレベルは、被験者がＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体での治療を最初に受けた後、約２４時間の時点で、ミリリットルあたり約６６．５ピコグラムであり得る。試験サンプル中のヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの量および所定のレベル（例えば、ベースラインレベル）にかかわる上で説明した比較（情報分析とも呼ぶ。）は、上で説明したアッセイを行う自動もしくは半自動装置（例えば、コンピュータプラットホーム）の一部であるまたは上で説明したアッセイを行う自動もしくは半自動装置（例えば、コンピュータプラットホーム）と互換性があるソフトウェアプログラムまたはインテリジェンスシステムなどの、自動システムによって行ってもよい。または、上で説明した比較を医師が行ってもよい。ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体での治療を受けている被験者は、肺癌、乳癌、胃癌、膀胱癌、大腸癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、腎癌、肝細胞癌、直腸癌、造血性悪性疾患、膠芽腫または幼児性血管腫に罹患していることがある。
【００８５】
もう１つの態様において、本開示のアッセイは、疾病（例えば、癌の１タイプ）に罹患しやすいまたは疾病に罹患している被験者が、薬物での治療に応答するかどうかを判定するために用いることができる。このようなアッセイは、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合する第一の捕捉抗体と、疾病に罹患しやすいもしくは疾病の素因を有するまたは少なくとも１つの疾病に罹患している被験者であって、ＡＢＴ−８６９もしくはＡＢＴ−８６９の類似体での治療を受けている被験者から得た試験サンプルとを接触させて、第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体を形成することを含む。モノ／ポリアッセイにおいて、場合により、捕捉抗体はモノクローナル抗体２６４である。モノ／モノアッセイにおいて、場合により、捕捉抗体はモノクローナル抗体８２６である。第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体の形成後に、試験サンプルと、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合する第二の抗体であって、検出可能な標識にコンジュゲートさせた第二の抗体とを接触させて、第二の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体を形成する。モノ／ポリアッセイにおいて、場合により、捕捉抗体は、ポリクローナル抗体ｐＢ２６４である。モノ／モノアッセイにおいて、場合により、検出抗体はモノクローナル抗体２５５である。次に、この検出可能な標識を検出することによって、形成された捕捉抗体−ＰｌＧＦ−１検出複合体の量を決定する。試験サンプル中に存在する捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体の量は、この試験サンプル中に存在するヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの量と相関する。次に、この試験サンプル中のヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの量を所定のレベルと比較する。具体的には、決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１試験フラグメントの試験サンプル中の濃度が、所定のレベルより低い場合には、被験者がＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体でのさらなるまたは継続治療の恩恵に浴さないという判定を下す。このとき、治療している医師は、被験者が異なる薬物でのさらなるまたは継続治療に適格であるかどうかを確かめるという決定を下すことができる。しかし、決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの試験サンプル中の濃度が、所定のレベルと同じであるまたは所定のレベルより高い場合には、被験者がＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体でのさらなるまたは継続治療の恩恵に浴するという判定を下す。薬物での治療に適格であるか適格でないかを判定するために試験することができる被験者は、肺癌、乳癌、胃癌、膀胱癌、大腸癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、腎癌、肝細胞癌、直腸癌、造血性悪性疾患、膠芽腫または幼児性血管腫などの癌に罹患している被験者である。または、被験者は、自己免疫疾患、例えば、関節リウマチ、甲状腺炎、１型糖尿病、多発性硬化症、サルコイドーシス、炎症性腸疾患、クローン病、重症筋無力症および全身性エリテマトーデス；乾癬、臓器移植拒絶反応（例えば、腎拒絶反応、移植片対宿主病）、良性および新生物性増殖性疾患もしくは眼病（黄斑変性を含むがこれに限定されない。）に罹患していることがある。
【００８６】
上のアッセイは、急性状態に罹患している被験者において疾病の進行をモニターするために用いることができる。急性状態は、クリティカルケア状態としても公知であり、ならびに心血管系（敗血症を含むが、これに限定されない。）、中枢神経系（ｓｔｅｍ）および／または呼吸器系が関係する急性の命にかかわる疾病または他の危篤病態を指す。概して、クリティカルケア状態は、病院に準拠する環境（救急室、集中治療室、外傷センターもしくは他の救急ケア環境を含むが、これらに限定されない。）において急性医療介入を必要とするまたは救急救命士もしくは他の分野に準拠する医療従事者による投与を必要とする状態を指す。危篤病態については、より短い時間枠内、即ち、数分、数時間または数日（例えば、約１分、約５分、約１０分、約１５分、約３０分、約４５分、約６０分、約２時間、約３時間、約４時間、約５時間、約６時間、約７時間、約８時間、約９時間、約１０時間、約１１時間、約１２時間、約１３時間、約１４時間、約１５時間、約１６時間、約１７時間、約１８時間、約１９時間、約２０時間、約２１時間、約２２時間、約２３時間、約２４時間、約２日、約３日、約４日、約５日、約６日または約７日）以内に反復モニタリングが一般に行われ、同様に、より短い時間枠内、例えば、疾病または状態の開始から数分、数時間または数日以内に最初のアッセイが一般に行われる。
【００８７】
上のアッセイは、慢性、即ち非急性状態に罹患している被験者において疾病の進行をモニターするために用いることもできる。非クリティカルケア、即ち非急性状態は、心血管系、中枢神経系および／または呼吸器系が関係する急性の命にかかわる疾病または他の危篤病態以外の状態を指す。概して、非急性状態は、より長い期間または長期にわたる継続期間を含み、および例えば、眼科的状態および癌を含む。非急性状態については、より長い時間枠で、例えば、数時間、数日、数週間、数か月または数年（例えば、約１時間、約２時間、約３時間、約４時間、約５時間、約６時間、約７時間、約８時間、約９時間、約１０時間、約１１時間、約１２時間、約１３時間、約１４時間、約１５時間、約１６時間、約１７時間、約１８時間、約１９時間、約２０時間、約２１時間、約２２時間、約２３時間、約２４時間、約２日、約３日、約４日、約５日、約６日、約７日、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約６週間、約７週間、約８週間、約９週間、約１０週間、約１１週間、約１２週間、約１３週間、約１４週間、約１５週間、約１６週間、約１７週間、約１８週間、約１９週間、約２０週間、約２１週間、約２２週間、約２３週間、約２４週間、約２５週間、約２６週間、約２７週間、約２８週間、約２９週間、約３０週間、約３１週間、約３２週間、約３３週間、約３４週間、約３５週間、約３６週間、約３７週間、約３８週間、約３９週間、約４０週間、約４１週間、約４２週間、約４３週間、約４４週間、約４５週間、約４６週間、約４７週間、約４８週間、約４９週間、約５０週間、約５１週間、約５２週間、約１．５年、約２年、約２．５年、約３．０年、約３．５年、約４．０年、約４．５年、約５．０年、約５．５．年、約６．０年、約６．５年、約７．０年、約７．５年、約８．０年、約８．５年、約９．０年、約９．５年または約１０．０年）で反復モニタリングが一般に行われ、同様に、より長い時間枠内に、例えば、疾病または状態の開始から約数時間、数日、数か月または数年以内に最初のアッセイが一般に行われる。
【００８８】
もう１つの態様において、本発明のアッセイは、薬物での癌（例えば、腫瘍）の治療を受けている被験者の応答をモニターするために用いることができる。このようなアッセイは、ＰｌＧＦ−１に結合する第一の捕捉抗体と、１つ以上の腫瘍を有し、ＡＢＴ−８６９での治療を受けている被験者から得た試験サンプルとを接触させて、第一の捕捉抗体−ＰｌＧＦ−１複合体を形成することを含む。モノ／ポリアッセイにおいて、場合により、捕捉抗体はモノクローナル抗体２６４である。モノ／モノアッセイにおいて、場合により、捕捉抗体はモノクローナル抗体８２６である。第一の捕捉抗体−ＰｌＧＦ複合体の形成後に、この試験サンプルと、ＰｌＧＦ−１に結合する第二の抗体であって、検出可能な標識にコンジュゲートされた第二の抗体とを接触させて、第二の捕捉抗体−ＰｌＧＦ−１検出複合体を形成する。モノ／ポリアッセイにおいて、場合により、検出抗体はポリクローナル抗体ｐＢ２６４である。モノ／モノ抗体において、場合により、検出抗体はモノクローナル抗体２５５である。次に、この検出可能な標識を検出することにより、形成された捕捉抗体−ＰｌＧＦ−１検出複合体の量を決定する。試験サンプル中に存在する捕捉抗体−ＰｌＧＦ−１検出複合体の量は、この試験サンプル中のＰｌＧＦ−１の量と相関する。次に、この試験サンプル中のＰｌＧＦ−１の量を所定のレベルと比較する。具体的には、決定されたＰｌＧＦ−１の試験サンプル中の濃度が、所定のレベルより低い場合には、この患者は、ＡＢＴ−８６９での治療に応答していないと考えられる。このとき、治療している医師は、被験者に投与しているＡＢＴ−８６９の量を増加させてもしくは被験者を全く異なる薬物に切り替えて、効果を試すおよび癌（例えば、腫瘍）を治療するという決定を下すことができ、またはこの治療レジメンに別の薬物を追加する（例えば、別の薬物と併用でＡＢＴ−８６９を被験者に投与する。）ことができる。しかし、決定されたＰｌＧＦ−１の試験サンプル中の濃度が、所定のレベルと同じであるまたは所定のレベルより高い場合には、この被験者は、ＡＢＴ−８６９での治療に応答していると考えられる。このとき、治療している医師は、被験者に投与しているＡＢＴ−８６９の量を変化させないまたは変更しないという決定を下すことができるが、治療している医師は、被験者に投与しているＡＢＴ−８６９の量を低下させることを決めることもある。ＡＢＴ−８６９での治療を受けている被験者は、肺癌、乳癌、胃癌、膀胱癌、大腸癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、腎癌、肝細胞癌、直腸癌、造血性悪性疾患、膠芽腫または幼児性血管腫などの癌に関連して癌（例えば、腫瘍）に罹患していることがある。または、被験者は、自己免疫疾患、例えば、関節リウマチ、甲状腺炎、１型糖尿病、多発性硬化症、サルコイドーシス、炎症性腸疾患、クローン病、重症筋無力症および全身性エリテマトーデス；乾癬、臓器移植拒絶反応（例えば、腎拒絶反応、移植片対宿主病）、良性および新生物性増殖性疾患もしくは眼病（黄斑変性を含むがこれに限定されない。）に罹患していることがある。
【００８９】
もう１つの態様において、本開示のアッセイは、ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体の生物活性を確認するために用いることができる。このようなアッセイは、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合する第一の捕捉抗体と、ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体を投与された被験者から得た試験サンプルとを接触させて、第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体を形成することを含む。モノ／ポリアッセイにおいて、場合により、捕捉抗体はモノクローナル抗体２６４である。モノ／モノアッセイにおいて、場合により、捕捉抗体はモノクローナル抗体８２６である。第一の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１複合体の形成後に、試験サンプルと、ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに結合する第二の抗体であって、検出可能な標識にコンジュゲートさせた第二の抗体とを接触させて、第二の捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体を形成する。モノ／ポリアッセイにおいて、場合により、検出抗体は、ポリクローナル抗体ｐＢ２６４である。モノ／モノアッセイにおいて、場合により、検出抗体はモノクローナル抗体２５５である。次に、この検出可能な標識を検出することによって、形成された捕捉抗体−ＰｌＧＦ−１検出複合体の量を決定する。試験サンプル中に存在する捕捉抗体−ヒトＰｌＧＦ−１検出複合体の量は、この試験サンプル中に存在するヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの量と相関する。次に、この試験サンプル中のヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１試験フラグメントの量を、所定のレベル（例えば、この被験者をＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体で治療する前のベースラインレベル）と比較する。具体的には、決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１試験フラグメントの試験サンプル中の濃度が、所定のレベルより低い場合には、ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体がこの被験者において生物活性を示さないという判定を下す。しかし、決定されたヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの試験サンプル中の濃度が、所定のレベルと同じであるまたは所定のレベルより高い場合には、ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体がこの被験者において生物活性を示すという判定を下す。
【００９０】
尚、さらにもう１つの態様において、本開示は、１つ以上のタイプの癌または１つ以上のタイプの自己免疫疾患に罹患している被験者を治療する方法に関する。例えば、本発明の方法に従って治療することができる癌は、肺癌、乳癌、胃癌、膀胱癌、大腸癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、腎癌、肝細胞癌、直腸癌、造血性悪性疾患、膠芽腫および幼児性血管腫から成る群より選択される１つ以上の癌であり得る。本発明の方法に従って治療することができる自己免疫疾患としては、関節リウマチ、甲状腺炎、１型糖尿病、多発性硬化症、サルコイドーシス、炎症性腸疾患、クローン病、重症筋無力症および全身性エリテマトーデス；乾癬、臓器移植拒絶反応（例えば、腎拒絶反応、移植片対宿主病）、良性および新生物性増殖性疾患または眼病（黄斑変性を含むがこれに限定されない。）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９１】
本開示の治療方法は、少なくとも１つの癌または少なくとも１つの自己免疫疾患に罹患している被験者であって、Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体の所定の量での治療を受けている被験者から試験サンプルを得ることを含む。試験サンプルを得ることとなる被験者に投与されるＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体の所定の量は、治療している医師が治療している癌または自己免疫疾患に適切であると判定した量である。例えば、投与または投薬されることとなるＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素またはＮ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素の類似体の所定の量は、０．０１ｍｇ／ｋｇ、０．０５ｍｇ／ｋｇ、０．１０ｍｇ／ｋｇ、０．２５ｍｇ／ｋｇ、０．５０ｍｇ／ｋｇ、０．７５ｍｇ／ｋｇ、１．００ｍｇ／ｋｇ、１．２５ｍｇ／ｋｇ、１．５０ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、２．２５ｍｇ／ｋｇ、２．５０ｍｇ／ｋｇ、２．７５ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、３．２５ｍｇ／ｋｇ、３．５０ｍｇ／ｋｇ、３．７５ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、４．２５ｍｇ／ｋｇ、４．５０ｍｇ／ｋｇ、４．７５ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｋｇ、５．２５ｍｇ／ｋｇ、５．５０ｍｇ／ｋｇ、５．７５ｍｇ／ｋｇ、６．０ｍｇ／ｋｇ、６．２５ｍｇ／ｋｇ、６．５０ｍｇ／ｋｇ、６．７５ｍｇ／ｋｇ、７．０ｍｇ／ｋｇ、７．２５ｍｇ／ｋｇ、７．５０ｍｇ／ｋｇ、７．７５ｍｇ／ｋｇ、８．０ｍｇ／ｋｇ、８．２５ｍｇ／ｋｇ８．５０ｍｇ／ｋｇ、８．７５ｍｇ／ｋｇ、９．０ｍｇ／ｋｇ、９．２５ｍｇ／ｋｇ、９．５０ｍｇ／ｋｇ、９．７５ｍｇ／ｋｇ、１０．００ｍｇ／ｋｇなどであり得る。
【００９２】
試験サンプルを被験者から得たら、この試験サンプルと、ＰｌＧＦ−１に結合する第一の捕捉抗体とを接触させて、第一の捕捉抗体−ＰｌＧＦ−１複合体を形成する。モノ／ポリアッセイにおいて、場合により、捕捉抗体はモノクローナル抗体２６４である。モノ／モノアッセイにおいて、場合により、捕捉抗体はモノクローナル抗体８２６である。第一の捕捉抗体−ＰｌＧＦ−１複合体の形成後に、試験サンプルと、ＰｌＧＦ−１に結合する第二の抗体であって、検出可能な標識にコンジュゲートさせた第二の抗体とを接触させて、第二の捕捉抗体−ＰｌＧＦ−１検出複合体を形成する。モノ／ポリアッセイにおいて、場合により、検出抗体は、ポリクローナル抗体ｐＢ２６４である。モノ／モノ抗体において、場合により、検出抗体はモノクローナル抗体２５５である。次に、この検出可能な標識を検出することによって、形成された捕捉抗体−ＰｌＧＦ−１検出複合体の量を決定する。試験サンプル中に存在する捕捉抗体−ＰｌＧＦ−１検出複合体の量は、この試験サンプル中に存在するＰｌＧＦ−１の量と相関する。次に、この試験サンプル中のＰｌＧＦ−１の量を、所定のレベル（例えば、この被験者をＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体で治療する前のベースラインレベル）と比較する。具体的には、決定されたＰｌＧＦ−１の試験サンプル中の濃度が、所定のレベルより低い場合には、この患者は、ＡＢＴ−８６９での治療に応答していないと考えられる。このとき、治療している医師は、（ａ）ＡＢＴ−８６９もしくはＡＢＴ−８６９の類似体の量が、被験者に以前に投与されたＡＢＴ−８６９もしくはＡＢＴ−８６９の所定の類似体の量より高くなるようにこの被験者に投与するＡＢＴ−８６９もしくはＡＢＴ−８６９の類似体の量を増加させるもしくは調整することによってこの被験者を治療するという決定を下す（例えば、試験サンプルを得る時点で被験者にと投与されているＡＢＴ−８６９もしくはＡＢＴ−８６９の所定の類似体の量が、０．０５ｍｇ／ｋｇである場合には、治療している医師は、ＡＢＴ−８６９もしくはＡＢＴ−８６９の類似体の投薬量を０．０５ｍｇ／ｋｇから０．２５ｍｇ／ｋｇに増加させることによってこの被験者を治療するという決定を下す）ことができ、（ｂ）被験者を、癌（例えば、腫瘍）もしくは自己免疫疾患を治療するための完全に異なる薬物に切り替えることによってこの被験者を治療するという決定を下すことができ；または（ｃ）この治療レジメンに別の薬物を追加する（例えば、別の薬物と併用でＡＢＴ−８６９を被験者に投与する。）ことができる。しかし、決定されたＰｌＧＦ−１の試験サンプル中の濃度が、所定のレベルと同じであるまたは所定のレベルより高い場合には、この被験者は、ＡＢＴ−８６９での治療に応答していると考えられる。このとき、治療している医師は、被験者に投与しているＡＢＴ−８６９の量を変化させるまたは変更することによってこの患者をさらに治療しないという決定を下すことができるが、治療している医師は、被験者に投与しているＡＢＴ−８６９の量を低下させることによってこの患者を治療することを決めることもできる。
【００９３】
試験サンプル中のヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの量および所定のレベル（例えば、ベースラインレベル）にかかわる上で説明した比較（情報分析とも呼ぶ。）は、上で説明したアッセイを行う自動もしくは半自動装置（例えば、コンピュータプラットホーム）の一部であるまたは上で説明したアッセイを行う自動もしくは半自動装置（例えば、コンピュータプラットホーム）と互換性があるソフトウェアプログラムまたはインテリジェンスシステムなどの、自動システムによって行ってもよい。または、上で説明した比較を医師が行ってもよい。
【００９４】
加えて、モノ／モノアッセイにおいても、ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体で治療されている被験者の毒性レベルが、ミリリットルあたり１３０ピコグラムからミリリットルあたり１６０ピコグラムの範囲に達したら、治療している医師は、この被験者に投与しているＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体の量を減少させることができる。治療している医師が被験者に投与しているＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体の量を減少させることがある例示的毒性レベルは、ミリリットルあたり１５０ピコグラムである。
【００９５】
Ｃ．キット
本開示は、試験サンプル中のヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントの存在を検出するためのおよびＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体についてのコンパニオン診断用具として利用するためのキットも意図している。このようなキットは、本明細書に記載する抗体の１つ以上を含む、１つ以上の抗体を含むことができる。より具体的には、キットが、イムノアッセイを行うためのキットである場合、このキットは、場合により、（１）ヒトＰｌＧＦ−１またはヒトＰｌＧＦ−１フラグメントに特異的に結合する少なくとも１つの捕捉抗体；（２）少なくとも１つのコンジュゲート；および（３）ＡＢＴ−８６９またはＡＢＴ−８６９の類似体に関してのイムノアッセイを行うための１つ以上の取り扱い説明書（例えば、患者選択および／または診断最適化についてのものを含む。）を含有することができる。本明細書に記載する抗体をこのような試験キットに、捕捉抗体として、検出抗体として、または捕捉抗体と検出抗体の両方として含めることができる。例えば、モノ／ポリアッセイにおいて使用するために、モノクローナル抗体２６４を捕捉抗体としてキットに含めることができ、およびポリクローナル抗体ｐＢ２６４を検出抗体としてこのキットに含めることができる。または、ポリクローナル抗体ｐＢ２６４を捕捉抗体としてキットに含めることができ、およびモノクローナル抗体２６４を検出抗体としてこのキットに含めることができる。尚、さらにもう１つの選択肢では、モノクローナル抗体２６４またはポリクローナル抗体ｐＢ２６４を捕捉抗体としてキットに含めることができ、および異なる抗体を検出抗体としてこのキットに含めることができる。尚、さらにもう１つの選択肢では、モノクローナル抗体２６４またはポリクローナル抗体ｐＢ２６４を検出抗体としてキットに含めることができ、および異なる抗体を捕捉抗体としてこのキットに含めることができる。さらに、例えば、モノ／モノアッセイにおいて使用するために、モノクローナル抗体８２６を捕捉抗体としてキットに含めることができ、およびモノクローナル抗体２５５を検出抗体としてこのキットに含めることができる。または、モノクローナル抗体２５５を捕捉抗体としてキットに含めることができ、およびモノクローナル抗体８２６を検出抗体としてこのキットに含めることができる。尚、さらにもう１つの選択肢では、モノクローナル抗体８２６またはモノクローナル抗体２５５を捕捉抗体としてキットに含めることができ、および異なる抗体を検出抗体としてこのキットに含めることができる。尚、さらにもう１つの選択肢では、モノクローナル抗体８２６またはモノクローナル抗体２５５を検出抗体としてキットに含めることができ、および異なる抗体を捕捉抗体としてこのキットに含めることができる。
【００９６】
場合により、キットは、少なくとも１つの較正物質または対照も含有することがある。任意の較正物質または対照をキットに含めることができる。しかし、好ましくは、較正物質または対照は、ヒトＰｌＧＦ−１フラグメントである。さらに好ましくは、較正物質または対照は、ヒトＰｌＧＦ−１の残基２１−１４９を含むヒトＰｌＧＦ−１のアイソフォームを含み、このアイソフォームは、ミネソタ州ミネアポリスのＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓから入手できる（カタログ番号Ｐ４９７６３）。場合により、キットは、少なくとも１つのサンプル採取管も含有することがある。
【００９７】
従って、本開示は、本明細書に記載する１つ以上の抗体を含む診断および品質管理キットにさらに備えている。場合により、本発明のアッセイ、キットおよびキット構成要素を、市販のプラットホーム（例えば、イリノイ州アボットパークのＡｂｂｏｔｔ  ＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓのＰｒｉｓｍ（登録商標）、ＡｘＳＹＭ（登録商標）、ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標）およびＥＩＡ（Ｂｅａｄ）プラットホームを用いるイムノアッセイ、ならびに他の市販および／またはインビトロ診断アッセイ）での使用のために最適化する。加えて、アッセイ、キットおよびキット構成要素を他の形式で、例えば電気化学的または他の携帯もしくはポイント・オブ・ケア・アッセイシステムで、用いることができる。本開示は、例えば、ＴｎＩ、ＣＫＭＢおよびＢＮＰをはじめとする幾つかの心臓マーカーについてサンドイッチイムノアッセイを行う市販Ａｂｂｏｔｔ  Ｐｏｉｎｔ  ｏｆ  Ｃａｒｅ（イリノイ州アボットパークのＡｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓのｉ−ＳＴＡＴ（登録商標））電気化学的イムノアッセイシステムに適用することができる。免疫センサーおよび使い捨て試験器具においてこれらを動作させる方法は、例えば、Ｕ．Ｓ．Ｐａｔｅｎｔ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ２００３０１７０８８１、２００４００１８５７７、２００５００５４０７８および２００６０１６０１６４に記載されており、これらは参照により本明細書に援用されている。電気学的および他のタイプの免疫センサーの製造に関する追加のバックグラウンドは、Ｕ．Ｓ．Ｐａｔｅｎｔ５，０６３，０８１において見出され、この特許も電気学的および他のタイプの免疫センサーの製造に関するこの教示について参照により本明細書に援用されている。
【００９８】
場合により、キットは、品質管理試薬（例えば、感度パネル、較正物質、および陽性対照）を含む。品質管理試薬の調製は、当分野において周知であり、例えば、様々な免疫診断製品挿入シートに記載されている。
【００９９】
もう１つの実施形態において、本開示は、アッセイ性能特性を評価するためのならびに／またはアッセイにおいて使用する抗原の取り込みを定量およびモニターするための感度パネルとして使用するための、本明細書に記載する１つ以上の抗体を含む品質管理キットに備えている。
【０１００】
キットは、診断アッセイを行うためにまたは品質管理評価を助長するために必要とされる他の試薬、例えば、緩衝液、塩、酵素、酵素補因子、基質、検出試薬などを場合により含むことがある。他の構成要素、例えば、試験サンプルの単離および／または処理のための緩衝液および溶液（例えば、前処理試薬）もキットに含めることができる。加えて、キットは、１つ以上の他の対照を含むことがある。キットの構成要素の１つ以上が凍結乾燥されていることがあり、このキットは、これらの凍結乾燥構成要素の再構成に適する試薬をさらに含むことがある。
【０１０１】
キットの様々な構成要素は、適するコンテナーに入れて提供される。上で示したように、これらのコンテナーの１つ以上がマイクロタイタープレートである場合がある。キットは、サンプルを保持または保管するためのコンテナー（例えば、血液または尿サンプルのためのコンテナーまたはカートリッジ）をさらに含む場合がある。適切な場合には、キットは、反応容器、混合容器、および試薬または試験サンプルの調製を助長する他の構成要素も場合によっては含有することがある。キットは、試験サンプルの採取を助けるための１つ以上の器具、例えば注射器、ピペット、ピンセット、計量スプーンなども含むことがある。
【０１０２】
キットは、使用のための取り扱い説明書を場合により含むことがあり、これらは、紙形態で提供されることもあり、またはディスク、ＣＤ、ＤＶＤなどのコンピュータ可読形態で提供されることもある。
【０１０３】
本発明による例示的キットは、薬物での治療を受けている被験者がこの薬物の有効な血中レベルを得ているかどうかを判定するために使用することができ、抗癌薬での癌の治療を受けている被験者の応答をモニターするために使用することができ、疾病に罹患しやすいもしくは疾病に罹患している被験者が薬物での治療に応答するかどうかを判定するために使用することができ、薬物で治療されている被験者において疾病の進行をモニターするために使用することができ、被験者におけるＡＢＴ−８６９もしくはＡＢＴ−８６９の類似体のような薬物の生物活性を確認するために使用することができ、または癌もしくは自己免疫疾患に罹患している被験者を治療するための治療レジメンの一部として使用することができる。
【０１０４】
Ｄ．本開示の方法の適応
本明細書に記載するとおりの本発明は、Ｕ．Ｓ．Ｐａｔｅｎｔ  Ｎｏ．５，０８９，４２４およびＵ．Ｓ．Ｐａｔｅｎｔ  Ｎｏ．５，００６，３０９に記載されているような、ならびに例えば、ＡｂｂｏｔｔのＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標）、ＡｘＳＹＭ（登録商標）、ＩＭＸ、ＰＲＩＳＭ（登録商標）およびＱｕａｎｔｕｍ  ＩＩ装置をはじめとする（しかし、これらに限定されない）Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（イリノイ州、アボットパーク）によって市販されているような、様々な自動および半自動システム（固相が微粒子を含むものを含む。）、ならびに他のプラットホームでの使用に適応させることができる。さらに、本発明は、場合により、サンドイッチイムノアッセイを行うためのＡｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ市販Ｐｏｉｎｔ  ｏｆ  Ｃａｒｅ（ｉ−ＳＴＡＴ（商標））電気化学的イムノアッセイシステムに適応できる。免疫センサー、ならびにこれらの製造方法および使い捨て試験器具での動作方法は、例えば、Ｕ．Ｓ．Ｐａｔｅｎｔ  Ｎｏ．５，０６３，０８１、Ｕ．Ｓ．Ｐａｔｅｎｔ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ２００３／０１７０８８１、Ｕ．Ｓ．Ｐａｔｅｎｔ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ２００４／００１８５７７、Ｕ．Ｓ．Ｐａｔｅｎｔ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ２００５／００５４０７８、およびＵ．Ｓ．Ｐａｔｅｎｔ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ２００６／０１６０１６４に記載されており、これらは、これら全体が、免疫センサー、およびこれらの製造方法および使い捨て試験器具での動作方法に関するこれらの教示について参照により援用されている。
【０１０５】
ここで、例として、限定することなく、本開示の実施例を記載する。
【実施例１】
【０１０６】
ヒトＰｌＧＦ−１分析を含むＡＢＴ−８６９での治療を受けている治療抵抗性充実性悪性疾患を有する患者にかかわる試験
Ａ．患者および方法
適格な患者は、標準的な療法に対して治療抵抗性のまたは標準的な療法がない組織学的に確認された進行性非血液学的悪性疾患を有する１８歳以上であった。他の基準としては、０−２のＥＣＯＧ（Ｅａｓｔｅｒｎ  Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ｇｒｏｕｐ）動作スコア、ＣＴまたはＭＲＩにより測定可能な疾病、および次の基準を満たす臨床検査値を有することが挙げられた：ヘモグロビン≧９．０ｇ／ｄＬ、血小板≧１００，０００／μＬ、絶対好中球数（ＡＮＣ）≧１，０００／μＬ、クレアチニン≦１．５×正常値上限（ＵＬＮ）、ビリルビン、ＡＳＴおよびＡＬＴ≦１．５×施設の正常範囲のＵＬＮ。
【０１０７】
主要除外基準は：過去２８日以内の抗癌療法；１２週間未満の余命；中枢神経系転移の病歴；有意な蛋白尿；制御困難な高血圧；左室駆出分画＜５０％；活性出血徴候；または治療目的での血液凝固阻止療法であった。この試験は、施設の倫理審査委員会による承認および全患者により提供された書面でのインフォームド・コンセントを受けたものであった。
【０１０８】
Ｂ．試験計画および薬物治療
この試験は、単群、非盲検第Ｉ相試験であり、３つのセグメント（Ａ、ＢおよびＣ）で行った。セグメントＡは、最大耐用量（ＭＴＤ）を定義することを主目的とした逐次的用量漸増試験であり、セグメントＢは、認容性をさらに評価するための、合計１２人の患者に対するすぐ下の用量の比較を含み、ならびにセグメントＣは、用量と効果の関係をよりよく定義するための、より低い用量のコホートについての認容性および薬力学の試験であった。３つすべてのセグメントにおいて、患者は、腫瘍進行または投与薬剤量規制毒性（ＤＬＴ）発生までＡＢＴ−８６９を摂取した。
【０１０９】
より感度の高い種であるラットでの１か月の試験において使用した有害事象非観察レベル投薬量に５の安全率を適用することにより、１０ｍｇの開始用量を得た。１０ｍｇの用量を予測Ｃｍａｘとして選択し、ＡＵＣ（それぞれ、０．０５μｇ／ｍＬおよび０．７５μｇ・時／ｍＬ）は、体表面積スケーリングに基づき７０ｋｇについて少なくとも４．２の観察毒性の安全域を有した。２１日の治療期間、（ＰＫ評定のために薬物を午前中に投与した第１および１５日を除き）夜に連続経口日用量としてＡＢＴ−８６９を自己投与した。第１４日には薬物を投与しなかった。ＡＢＴ−８６９には高い水溶性がないので、治験薬を６０ｍＬのＥｎｓｕｒｅ  Ｐｌｕｓ（登録商標）で希釈した。１０ｍｇの場合の用量での予備的ＰＫが経口クリアランスと体重のわずかな相関関係を示したので、セグメントＡでの後続の用量禅僧は、体重に基づいた。
【０１１０】
それぞれ患者３人のコホートで用量漸増を計画し、第一治療期間の間に３人に１人の患者においてＤＬＴが発生した場合には患者６人へのコホート拡大を計画した。ＤＬＴは、次のように定義した：グレード３の疲労；グレード３の蛋白尿；介入にもかかわらず持続的グレード３の高血圧；発熱を伴うグレード３の好中球減少；グレード４の好中球減少＞７日；グレード４の血小板減少；任意の他の関連するグレード３または４の有害事象；および用量変更または１週間より長い延期を必要とする、治療との関係があり得るまたはありそうな任意の予想外のグレード２の毒性。用量コホート内の６人のうち２人以上の患者が第一治療期間内にＤＬＴを経験した場合、用量漸増を中止した；この容量は、ＭＴＤと考えられる。
【０１１１】
Ｃ．ヒトＰｌＧＦ−１分析のための無血小板血漿
ＴＰ１Ｄ１投与前、ならびに投与後６および２４時間の時点、ならびにＴＰ１Ｄ１５投与前、および投与後６時間の時点で、静脈穿刺によりおおよそ４ｍＬの血液を４ｍＬ  ＥＤＴＡ（紫色のキャップ）に採取した。追加の検体をＴＰ２Ｄ１（第２２日）およびＴＰ３Ｄ１（第４３日）ならびにＴＰ４、６および８の最後に採取した。最終訪問時にサンプルを採取した。無力症のグレード３毒性のときにもサンプルを採取した。採取管を（２から３回）反転させて、血餅形成の尤度を減少させた。採取３０分以内に、この管を１５００×ｇで１５分間、２から８℃で遠心分離した。血漿を２つの１．５ｍＬアリコートに分割し、１０，０００×ｇで１０分間、２−８℃で遠心分離して、血小板除去を完了した。直ちにこの血漿を２本の適切なラベルを貼った２ｍＬクリオバイアルに移し（上清）、−７０℃で凍結させた。これらのサンプルを、バッチを出荷する通知を受け取るまで、−７０℃で保管した。遠心分離、クリオバイアルへの移入および凍結の全プロセスを採血から１時間未満で遂行した。
【０１１２】
Ｄ．腫瘍応答評価および安全性
ベースラインＣＴイメージング（ＣＴ）をＡＢＴ−８６９治療前４週間以内に行い、２治療期間（６週間）ごとに繰り返した。ＲＥＣＩＳＴ（固形癌治療効果判定基準（Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｉｎ  Ｓｏｌｉｄ  Ｔｕｍｏｒｓ））を用いて病変を評価した。有害事象を記録し、ＣＴＣ（共通用語基準：Ｃｏｍｍｏｎ  Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ  Ｃｒｉｔｅｉａ）バージョン３．０に従ってグレードをつけた。最初の４治療期間は少なくとも毎週、身体検査、全血球計算、トロポニンＴを含む血清化学、尿検査および心電図を評定した。ＡＣＴＨ試験およびマルチゲートスキャン（Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｇａｔｅｄ  Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ  Ｓｃａｎ）をベースラインにおいておよび４治療期間すべての後に行って、反復投与に関する副腎および心臓の安全性を評定した。
【０１１３】
Ｅ．薬物動態の評定
第１日、１５日の次の時点でＰＫサンプリングを行った：投薬前、投薬の０．２５、０．５、１、２、３、４、６、８および２４時間後。１．０ｎｇ／ｍＬの定量の下限を有する三連四重極タンデム質量分析に基づく検証されている方法を用いて、血漿中のＡＢＴ−８６９およびこの代謝産物濃度を決定した。ＷＩＮＮＯＮＬＩＮ（ノースカロライナ州ケアリーのＰｈａｒｓｉｇｈｔ  Ｃｏｒｐ．）に基づく非区画法を用いて薬物動態パラメータおよび代謝産物を分析した。対数−線形台形オプションを用いて、および少なくとも最終３濃度点を含む末端曲線の無限大への外挿によって、濃度−時間曲線下面積（ＡＵＣ）を推定し；経口クリアランス、半減期（ｔ１／２）、および定常状態での分布容積（ＶＤｓｓ）を計算した。
【０１１４】
Ｆ．薬力学的評定
血管新生のバイオマーカーについてのサンプルを、第４および第６治療期間の第１日（ベースラインならびに投薬の６および２４時間後）、第１５日、第２１日および第４２日ならびに最後に採取した。Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（ミネソタ州、ミネアポリス）からの市販ＥＬＩＳＡキットを使用して、血漿ＶＥＧＦを測定した。Ａｂｂｏｔｔ  ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標）計器システム（イリノイ州アボットパークのＡｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）でＰｌＧＦ−１を測定するように設計された基本型自動イムノアッセイをこの試験では用いた。このイムノアッセイは、モノクローナル抗体２６４を捕捉抗体としておよびポリクローナル抗体ｐＢ２６４を検出抗体として使用し、組換えヒトＰｌＧＦ−１（ミネソタ州ミネアポリスのＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、カタログ番号２６４−ＰＧ／ＣＦ）を較正物質として使用する、二段階サンドイッチアッセイ形式に構成されたものである。（当分野において公知の常例的技術を用いて製造した）抗ＰｌＧＦ−１モノクローナル抗体２６４被覆常磁性微粒子を使用して、血液検体中に存在する循環（または遊離）ＰｌＧＦ−１を捕捉し、アクリジニウムで標識した親和精製抗ＰｌＧＦ−１ポリクローナル抗体ｐＢ２６４によって検出した。このアッセイのダイナミックレンジは、０から１５００ｐｇ／ｍＬであった。
【０１１５】
一般に、カルボキシル官能基で誘導体化された常磁性ラテックス微粒子（４．７μＭ）に、抗ＰｌＧＦ−１モノクローナル抗体を、５０ｍＭ  ２−（Ｎ−モルホリノ）エタンスルホン酸（ＭＥＳ）、ｐＨ５．５中の微粒子（２重量％固体）の表面積に吸着する抗体のレベルを最大にするために十分であることが実証されている抗体濃度で被覆した。１０分後、これらの粒子をＭＥＳ緩衝液で何度も洗浄することにより、非吸着抗体を除去した。粒子の洗浄後、ＥＤＡＣ（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、塩酸塩；ミズーリ州セントルイスのＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を添加し、放置して反応させて、これらの粒子への抗体分子の供給結合性カップリングを形成した。その後、粒子をリン酸緩衝食塩水で洗浄して、反応を停止させ、未反応のＥＤＡＣを除去した。その後、自動免疫化学分析装置での使用のために、これらの粒子を緩衝液中０．１％に希釈した。
【０１１６】
アクリジニウム標識抗ＰｌＧＦ−１抗体は、ポリクローナル抗体（または、使用することができるモノクローナル抗体）をＳＰＳＰと称するアクリジニウム（Ｎ１０−（３−スルホプロピル）−Ｎ−（３−スルホプロピル）アクリジニウム−９−カルボジイミド）と共に、１から１００にわたる抗体に対するアクリジニウムのモル比でインキュベートすることによって調製した。その後、コンジュゲートしていないアクリジニウムをサイズクロマトグラフィーによりアクリジニウム標識抗体コンジュゲートから分離した。その後、この精製されたコンジュゲートを、アッセイにおいて最大シグナル対ノイズ比を生じさせる濃度に緩衝液で希釈した。
【０１１７】
以前にＭａｎｃｕｓｏ  Ｐら，Ｂｌｏｏｄ  ９７：３６５８−３６６１（２００１）およびＹｅｅ，Ｋ．Ｗ．ら，Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，１１：６６１５−６６２４（２００５）に記載された、改良されたフローサイトメトリーに基づく方法を用いて、活性化、アポトーシスおよびプロジェニター内皮細胞の循環集団を測定した。
【０１１８】
Ｇ．統計分析
ＰｌＧＦ−１分析のために、ＳＡＳ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅによって作製されたＪＭＰ７．０．１統計分析プログラムを用いて統計分析を行った。ログランク分析での単変量生存分析を行って最適ＰｌＧＦ−１閾値を特定し、それにより、（治療的恩恵を示す）治療に関する時間について患者を層化した。第１５日の時点について全患者、＞４０ｐｇ／ｍＬまたは＜４０ｐｇ／ｍＬのいずれかとして群を示す。それぞれの群には進行までの時間に明確な差がある。
【０１１９】
治療期間４の時点でまたは４より前に腫瘍進行を発生した場合には不良な効果を有するものとして患者を分離し、およびこの時点で進行が発生していなかった場合には良好な効果を有するものとして分類した。
【０１２０】
Ｈ．結果
患者背景
３３人の患者をこの試験に動員した（下の表１参照）。
【０１２１】
【表１】
2011525241.tif 000004
【０１２２】
１８人の患者において疾病進行および有害事象のため治療を中止し、そのうち１３人の被験者は、Ｘ線学的疾病進行を有し；５人の患者は、ＡＢＴ−８６９に関連した有害事象のため中止し；１人の患者は、ＡＢＴ−８６９とは無関係の有害事象のため中止し；１人の患者は、ＡＢＴ−８６９との関係不明の有害事象のため中止し；４人の患者は継続して、悪化した時点で臨床的恩恵がある治療を受けた。すべての用量コホートについての（ＡＢＴ−８６９を摂取していない日を除く。）全治療医期間中央値は、８４日（４から６９４日の範囲）であった。治療に関連した死亡は無かった。
【０１２３】
Ｉ．反復投与の毒性および認容性
最も一般的な薬物関連有害事象は、疲労、蛋白尿、高血圧、筋肉痛、皮膚毒性（手および足の疱疹）ならびに口腔過敏症であり、これらの毒性は、用量の増加と共に、頻度および強度の点で増加した（下の表２Ａおよび２Ｂならびに３参照）。
【０１２４】
【表２】
2011525241.tif 000005
【０１２５】
【表３】
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【０１２６】
【表４】
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【０１２７】
最も一般的な薬物関連有害事象は、疲労、蛋白尿、高血圧、筋肉痛、皮膚毒性（手および足の疱疹）ならびに口腔過敏症であり、これらの毒性は、用量の増加と共に、頻度および強度の点で増加した（表２Ｂ参照）。セグメントＡでの第一治療期間（３週間）におけるＤＬＴは、１０ｍｇ／日では患者６人のうち１人でのグレード３の疲労、０．２５ｍｇ／ｋｇでは無し、０．３ｍｇ／ｋｇ／日のＭＴＤでは１人の患者でのグレード３の高血圧および別の患者でのグレード３の蛋白尿であった。セグメントＢでは、０．２５ｍｇ／ｋｇ／日のコホートを合計１２人の患者に拡大し、グレード３のタンパク質尿の第一治療期間ＤＬＴが、静止状態の全身性エリテマトーデスの診断を有する患者において観察され、１人の患者は、グレード３の高血圧を有した。第一治療期間後の０．２５ｍｇ／ｋｇ／日の反復投与は、グレード３の蛋白尿とグレード２の高血圧の両方を有する１人の患者（サイクル３）、グレード３の足の疱疹を有する一人の患者（サイクル２）、二次性のグレード２の高血圧を有する１人の患者（サイクル２）、グレード３の胃腸炎を有する１人の患者（サイクル５）およびグレード３の腹痛を有する１人の患者（サイクル３）を含む、７人の患者において薬物関連毒性のために用量を減少させる結果となった。加えて、２人の患者（サイクル１およびサイクル３においてそれぞれ１人）は、肺結節の療法誘導空洞形成に起因するグレード２またはグレード３の気胸を経験した。
【０１２８】
１０ｍｇの開始用量は、有効性の目標にした最低ＰＫを達成しまたは上回り、抗腫瘍効果が観察されたので、セグメントＣにおける追加の１２人の患者において０．１ｍｇ／ｋｇ／日の用量より低い用量を試験した。０．２５ｍｇ／ｋｇ／日と比較して、０．１ｍｇ／ｋｇ／日の用量では、グレード２以上の毒性のエピソードがより少なく、ＤＬＴは、第一治療期間においてグレード３の蛋白尿を経験した１人の患者および治療期間１の後にグレード３の高血圧および蛋白尿をそれぞれ有する患者において観察された。高血圧の発生率は用量依存性であり、少なくともグレード２の高血圧の発生率は、０．２５ｍｇ／ｋｇ／日の５０％と比較して０．１ｍｇ／ｋｇ／日では２５％であった。加えて、平均血圧の変化は、用量と相関した（データは示さない。）。高血圧は、アンギオテンシン転換酵素阻害剤、β遮断薬およびカルシウムチャネル遮断薬での標準的な降圧療法に応答し、高血圧性緊急症を発現した患者はいなかった。皮膚の疱疹および蛋白尿は、ＡＢＴ−８６９の減少また中止後、消散した。試験したいずれの患者においても有意な血液学的毒性および心臓毒性は観察されなかった。全体的には、１４人の患者（４２％）が有害事象のため用量減少を必要とした。４人の患者は、用量安定化後に大きな累積毒性なしに１２ヶ月以上にわたってこの試験を続けた。
【０１２９】
Ｊ．薬物動態評価
第１および１５日にそれぞれ３２および３１人の患者について薬物動態データを入手できた。０．１ｍｇ／ｋｇより上の用量によって、前臨床マウスＨＴ１０８０線維肉腫モデル（Ａｌｂｅｒｔら，Ｍｏｌｅｃ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ．５（４），９９６−１００６（２００６）参照）に基づき抗腫瘍活性について適切である血漿曝露（＞２．７μｇ・時／ｍＬ）が達成された。試験した用量範囲にわたって、ＡＢＴ−８６９の吸収および除去は、線形であり（表３参照）、ＡＢＴ−８６９の薬物動態は、用量に比例し、時間不変性であった。Ｃｍａｘへの平均時間、ｔ１／２および経口クリアランスは、それぞれ、２．９時間（範囲２から８時間）、１８．６±５．７時間および２．７±１．２Ｌ／時であった。第１５日累積比は、１．１±０．４であった。主全身代謝産物は、カルボキシラート代謝産物であった。４人の患者の尿中回収率分析から、ＡＢＴ−８６９用量の＜１０％が、尿中で不変薬物およびカルボキシラート代謝産物として回収された。最終分析では、ＣＬ／Ｆは、体重と相関しなかった。ＢＳＡ、クレアチニンクリアランス、およびベースラインＡＳＴ／ＡＬＴ／アルブミンと相関がないことが観察された。
【０１３０】
Ｋ．有効性
ベースライン後ＣＴスキャンの１人を含めて２９人の患者のうちの３人（１０％）は、部分的応答（ＰＲ）を達成した；０．３ｍｇ／ｋｇ／日および１０ｍｇ／ｋｇ／日でそれぞれ治療した、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）を有した２人、ならびに０．１ｍｇ／ｋｇ／日で治療した、結腸直腸癌（ＣＲＣ）を有した１人（図１および２ａ）。追加の１６人の患者は、１２週間より長く持続して安定した疾病を有し、彼らの中には、ＣＲＣを有する患者（５人）、ＮＳＣＬＣを有する患者（２人）、卵巣癌を有する患者（２人）、肝細胞癌腫（ＨＣＣ）を有する患者（２人）および神経内分泌腫瘍を有する患者（２人）がいた。最小限の毒性で１２ヶ月より長く持続する長期間安定した疾病が、４人の患者において観察された；胞巣状軟部肉腫（２７か月）、ＣＲＣ（１９か月）、ＨＣＣ（１７か月）、および腎細胞癌腫（１８か月）。しかし、０．２５ｍｇ／ｋｇ／日のＡＢＴ−８６９を摂取したおよび以前のベバシズマブ治療にもかかわらず肺結節の空洞形成を発現したＣＲＣを有する患者は、グレード３の腹部不快感のため、０．１ｍｇ／ｋｇへの用量減少２回を必要とした。計画した治験実験計画からはずれて０．１５ｍｇ／ｋｇ／日に用量を増加させると、１１か月後にさらなる腫瘍減少および空洞形成が観察された。この観察は、ＡＢＴ−８６９からの抗血管新生活性に対する用量応答を示唆している。
【０１３１】
Ｌ．薬力学的分析
ヒトＰｌＧＦ−１（ｎ＝３１）は、ベースラインでの１５．６±４．８ｐｇ／ｍＬから６時間の時点で２０．７±９．５ｐｇ／ｍＬ（ｐ＝０．０２）に増加し、第４２日に８２．０±７０．３ｐｇ／ｍＬで有意に上昇したままであった（ｐ＝０．０００１）（図１から４参照）。ベースラインでの血漿ＶＥＧＦ（ｎ＝１２）は、６８．２±８２．４ｐｇ／ｍＬであり、１２４．８±８０．７ｐｇ／ｍＬでの第１５日まで有意に増加した（ｐ＝０．００４）。０．１ｍｇ／ｋｇ／日の用量と０．２５ｍｇ／ｋｇ／日の用量の間のこれらのバイオマーカーの比較により、治療第１５日における有意に高いヒトＰｌＧＦ−１（対応のあるｔ検定ｐ＝０．０１７）、アポトーシスＣＥＣ百分率（ｐ＝０．０２８）および低い活性化ＣＥＣ百分率（ｐ＝０．０２７）が証明された。加えて、ＰｌＧＦ−１の増加百分率は、ＡＢＴ８６９−ＡＵＣｉｎｆ（ｒ＝０．５７  ｐ＝０．０００１）およびＡＢＴ８６９−Ｃｍａｘ（ｒ＝０．４２  ｐ＝０．０００１）と正の相関関係を有した。
【実施例２】
【０１３２】
３つの第２相単剤多施設臨床試験を肝細胞癌腫（ＨＣＣ）、腎細胞癌腫（ＲＣＣ）および非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）に関して行った。これらのそれぞれを別々にまとめることにする。
【０１３３】
ＨＣＣ
進行性疾患（本明細書では、以後「ＰＤ」と呼ぶ。）または認容不能毒性まで１日１回のチャイルド・ピュー（Ｃｈｉｌｄ−Ｐｕｇｈ）Ａ（本明細書では、以後「Ｃ−ＰＡ」））患者におけるまたは一日おき（「ＱＯＤ」）のチャイルド・ピューＢ（本明細書では、以後「Ｃ−ＰＢ」と呼ぶ。）患者（本明細書では、以後「ｐｔｓ」と呼ぶ。）における０．２５ｍｇ／ｋｇでの経口ＡＢＴ−８６９の非盲検、無作為化、多施設第２相試験（Ｍ０６−８７９）を行っている。重要な選択基準としては、切除不能または転移性ＨＣＣ；ファーストライン前（ｐｒｉｏｒ  ｌｉｎｅ）の１回以下の全身治療；およびコンピュータ断層撮影法（本明細書では、以後「ＣＴ」）スキャンにより測定可能な少なくとも１つの病変が挙げられた。主要評価項目としては、１６週での無進行（本明細書では、以後「ＰＦ」）率であった。副次的評価項目は、奏効率（本明細書では、「ＯＲＲ」）、進行までの時間（本明細書では、「ＴＴＰ」）、無進行生存期間（本明細書では、「ＰＦＳ」）および全生存期間（本明細書では、「ＯＳ」）が挙げられた。中央管理方式でおよび治験担当医がＣＴスキャンを評定した。提示する結果は、中央管理方式の評定からのものである。疾病進行もしくは認容不能毒性まで、または最終患者参加後１８ヶ月までの間、治療を続けることとなる。安全性（ＮＣＩ  ＣＴＣＡＥ、Ｖｅｒ．３．０によってグレードをつける。）を試験訪問時に評価した。
【０１３４】
組入れ基準：切除不能または転移性ＨＣＣを有すると診断された、固形癌治療効果判定基準（Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  Ｃｒｉｔｅｉａ  Ｉｎ  Ｓｏｌｉｄ  Ｔｕｍｏｒｓ：ＲＥＣＩＳＴ）により測定可能な病変を有すると診断された、ＨＣＣについてのファーストライン前の全身治療を１回より多く受けていない、ＥＣＯＧ動作状態０−２を有する、過去５年以内に他の悪性疾患を有さない、および妥当な器官機能を有する成人。除外基準：投薬の前２１日（５半減期）以内に抗癌療法または（アバスチンが許される前に）ＶＥＧＦ／ＰＤＧＦ／ＴＫＩ療法を受けたこと、未治療の脳もしくは髄膜転移、チャイルド・ピューＣ肝障害、蛋白尿、制御困難な高血圧、左室駆出分画＜５０％、＞グレード２の脳症（ＣＴＣ基準）、臨床的に有意な制御困難な状態、および／または血液凝固阻止療法もしくは抗レトロウイルス療法を受けていること。患者のベースライン特徴および病歴を下の表４に示す。
【０１３５】
【表５】
2011525241.tif 000008
【０１３６】
結果：４４人の患者が６つの施設で２００７年９月から２００８年８月まで国際的に参加した。３８人のＣ−ＰＡ患者（年齢中央値、６３．５歳［範囲、２０から８１］）および６人のＣ−ＰＢ患者（年齢中央値、６４．５歳［範囲、３６から６９］）がおり、７３．５％が、以前に全身療法を受けていなかった。３３／４４（７５％）の患者を少なくとも１６週間、疾病進行について追跡した。
【０１３７】
治験実験計画書に従う中間分析に組み入れた３８人の評価可能なＣ−ＰＡ患者については、１６週の時点で１３人（３４．１％）に進行がなかった［９５％  ＣＩ  １９．６、５１．４］。推定ＯＲＲは、３８人のＣ−ＰＡ患者については７．９％［９５％  ＣＩ、１．７、２１．４］であり、中央イメージングによって再検査した少なくとも１つのベースライン後ＣＴスキャンを有した６人のＣ−ＰＢ患者については０％であった。４４人すべての患者について、ＴＰＰ中央値は、５．４か月［９９．５％  ＣＩ、３．７、−未到達］であり、ＯＳ中央値は、９．３か月［９５％  ＣＩ、６．０、１１．０］であった。すべての患者について最も一般的な有害事象（ＡＥ）は、高血圧（４１％）、疲労（４７％）、下痢（３８％）、発疹（３５％）、蛋白尿（２４％）、嘔吐（２４％）、咳（２４％）および末梢性浮腫（２４％）であった。すべての患者について最も一般的なグレード３／４ＡＥは、高血圧（２０．６％）および疲労（１１．８％）であった。最も多いＡＥは、軽度／中等度であり、ＡＢＴ−８６９の中断／用量減少／または中止に伴って可逆的であった。
【０１３８】
結論：ＡＢＴ−８６９は、１１２日の推定ＴＰＰおよび許容可能な安全性プロフィールにより、ＨＣＣ患者にとって有益であるようである。
【０１３９】
ＮＳＣＬＣ
ＮＳＣＬＣを有する患者におけるＡＢＴ−８６９の抗腫瘍活性および毒性を評定するために、疾病進行（ＰＤ）または認容不能毒性までの１日１回、０．１０ｍｇ／ｋｇ（アームＡ）および１日１回、０．２５ｍｇ／ｋｇ（アームＢ）でのＡＢＴ−８６９のこの進行中の非盲検、無作為、多施設第２相試験を開始した。選択基準は、局所進行または転移性のＮＳＣＬＣ；≧１の以前の全身治療、および≧１のＲＥＣＩＳＴ基準により測定可能な病変を含んだ。主要評価項目は、１６週の時点での無進行（本明細書では、「ＰＦ」）率であった。副次的評価項目は、奏効率（本明細書では、「ＯＲＲ」）、進行までの時間（本明細書では、「ＴＴＰ」）、無進行生存期間（本明細書では、「ＰＦＳ」）および全生存期間（本明細書では、「ＯＳ」）であった。治験担当医がおよび中央管理方式でＣＴスキャンを評定した。中央管理方式の評定結果を提供する。ＡＢＴ−８６９に１：１で患者を無作為に割り当て、用量およびアジア人ステータスにより層化した。ＡＢＴ−８６９  ０．１０または０．２５ｍｇ／ｋｇを絶食条件下で１日１回の経口用量として自己投与した。疾病が進行した、０．１０ｍｇ／ｋｇを摂取している患者を、最後の０．１０ｍｇ／ｋｇ用量から３０日以内に０．２５ｍｇ／ｋｇにクロスオーバーさせた。安全性（ＮＣＩ  ＣＴＣＡＥ、Ｖｅｒ．３．０によってグレードをつける。）を試験訪問時に評価した。
【０１４０】
組入れ基準：局所進行または転移性のＮＳＣＬＣを有すると診断された；ＣＴスキャンでＲＥＣＩＳＴにより測定可能な非放散病変を少なくとも１つ有した；ＮＳＣＬＣについてのファーストライン前の全身治療を少なくとも１から２回受けた；およびＮＳＣＬＣについてのネオアジュバントまたはアジュバント化学療法を受けていない；ＥＣＯＧ動作状態０から２；過去５年以内に他の活性悪性疾患のない；妥当な器官機能の成人。除外基準：投薬前２１日または５半減期以内に抗癌療法、投薬前の過去２１日以内に放射線もしくは大きな外科手術、または（アバスチンが許される前に）ＶＥＧＦ／ＰＤＧＦ／ＴＫＩターゲット療法を受けたこと、未治療の脳または髄膜転移を有したこと、検査に入る前の６週間の間の＞１０％体重減少の履歴、心臓または大血管に浸潤／隣接する有意な胸郭中央部病変、臨床的に妥当な喀血、蛋白尿、制御困難な二次性または持続性高血圧、左室駆出分画＜５０％、＞グレード２の脳症（ＣＴＣ基準）、臨床的に有意な制御困難な状態を有したこと、治療的血液凝固阻止療法または抗レトロウイルス療法を受けていること。患者のベースライン特徴および病歴を下の表５に示す。
【０１４１】
【表６】
2011525241.tif 000009
【０１４２】
下の表６は、最も一般的な治療関連有害事象を示すものである。
【０１４３】
【表７】
2011525241.tif 000010
フィッシャー直接確率検定を用いる高用量群対低用量群間の比較についてのＰ値
＊統計的に有意な差
【０１４４】
結果：１３８人の患者（ｐｔ）が、２７施設から、０８／０７から１０／０８まで参加し、１２０／１３９（８６％）の患者を少なくとも１６週間、疾病進行について追跡した。合計１０人の患者は、扁平上皮細胞組織学を有した（１０人すべてを中間分析に組み入れた）。残りの者は、扁平上皮組織学を有さなかった。年齢中央値は、アームＡおよびアームＢにおいてそれぞれ６４歳および６２歳であった。中間分析集団（アームＡ、ｎ＝２４；アームＢ、ｎ＝２４）について、１６人（３３．３％）の患者は、１６週の時点でＰＦであった：アームＡにおける７人（２９．２％）およびアームＢにおける９人（３７．５％）。アームＡ（ｎ＝３０）におけるＯＲＲは０％であり、アームＢ（ｎ＝４１）では７．３％であった。ＴＴＰ平均値およびＰＦＳ中央値は、アームＡおよびＢにおいて、それぞれ、１１０および１０９日、ならびに１１２日および１０８日であった。アームＡにおける最も一般的な有害事象（ＡＥ）は、疲労（３５％）、悪心（２１％）、および食欲不振（２１％）であり、アームＢでは、高血圧（５１％）、疲労（５１％）、下痢（４３％）、食欲不振（４１％）、悪心（３１％）、蛋白尿（３１％）および嘔吐（２６％）であった。アームＡにおける最も一般的なグレード３／４毒性は、疲労（７％）、腹水（５％）、脱水症状（５％）、胸水（５％）であり、アームＢでは、高血圧（２３％）、疲労（８％）、ＰＰＥ症候群（８％）、呼吸困難（６％）および口内炎（６％）であった。最も多いＡＥは、軽度／中等度であり、ＡＢＴ−８６９の中断／用量減少／または中止に伴って可逆的であった。
【０１４５】
結論：ＡＢＴ−８６９は、ＮＳＣＬＣ患者において許容可能な安全性プロフィールを明示し、有効であるようである。
【０１４６】
ＲＣＣ
スニチニブで以前に治療した進行ＲＣＣを有する成人における第ＩＩ相、単群、非盲検、多施設試験。毎日（「ＱＤ」）ＡＢＴ−８６９  ０．２５ｍｇ／ｋｇの経口用量が絶食条件下で患者によって自己投与された。疾病進行または認容不能毒性まで治療を継続した。有効性評価項目：主要：奏効率（本明細書では、「ＯＲＲ」）；副次的：無進行生存期間（本明細書では、「ＰＦＳ」）、全生存期間（本明細書では、「ＯＳ」）、および１６週の時点での無進行率（本明細書では、「ＰＦＲ」）。
【０１４７】
組入れ基準：局所再発または転移性ＲＣＣを有すると診断された、ＲＥＣＩＳＴにより一次元測定可能な病変少なくとも１つ有すると診断された、以前の腎切除、ＲＣＣについてのスニチニブでの＞２サイクル（１２週）の治療を受けたおよびスクリーニング前１００日以内に疾病進行のため療法を停止した、ＥＣＯＧ動作状態０−１、過去５年以内に他の活性癌の病歴がない、少なくとも４か月の余命、および妥当な器官機能の成人。除外基準：投薬前２１日（５半減期）以内に抗癌療法を受けたこと、投薬前２１日以内に大きな外科手術を受けたこと、（ベバシズマブが許される前に）スニチニブもしくはソラフェニブ以外のＶＥＧＦＲおよび／もしくはＰＤＧＦＲをターゲットにしたＴＫＩ療法を受けたこと、ＨＩＶについての抗レトロウイルス療法を受けたこと、蛋白尿、制御困難な症候性もしくは二次性高血圧、左室駆出分画＜５０％、腎臓に関係する公知自己免疫疾患、臨床的に有意な制御困難な状態。ＲＥＣＩＳＴを用いて８週間隔で腫瘍応答を評定した。安全性は、身体検査、検体検査、ＥＣＯＧ動作状態評価、およびＡＥによって評定した。米国国立癌研究所有害事象共通用語基準（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｃｏｍｍｏｎ  Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ  Ｃｒｅｔｅｒｉａ  ｆｏｒ  ＡＥｓ）、バージョン３．０を用いて、ＡＥのグレードをつけた。
【０１４８】
２００７年８月から２００８年１０月まで、米国およびカナダにおける１２の施設にわたって５３人の患者がこの試験に参加した。４７／５３（８９％）の患者は、疾病進行を発現した、または彼らを疾病進行について少なくとも２４週間追跡した。これらの患者についてのベースライン特徴を表７に示す。
【０１４９】
【表８】
2011525241.tif 000011
【０１５０】
治療中止の理由
３０人の患者  進行性疾患（ＰＤ）（臨床的、Ｘ線学的、またはＰＤに関連したＡＥ）のため
７人の患者  ＰＤとは無関係のＡＥのため
１人の患者  他の理由のため
この分析の時点で、１５人の患者が治験に残った。
【０１５１】
患者の応答を表８に示し、ＡＥを下の表９に示す。
【０１５２】
【表９】
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【０１５３】
【表１０】
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【０１５４】
新たな有効性および毒性閾値の同定を必要とするより高い感度を有する、実施例３において説明する最適化ＰｌＧＦ−１アッセイを用いて、上記３つの２相単剤療法試験におけるＰｌＧＦ−１濃度の分析を行った。このより大きな患者集団でのＰｌＧＦ−１のベースライン濃度に関するより大きな変動に注目し、それ故、（前処理数を後処理数から引き、これを用いて結果の値を得る）ベースライン引き算によって正規化した値を用いてＰｌＧＦ−１の分析を行った。ＰｌＧＦ−１のベースライン値を、応答を予測するものであると判断し、結局、２４ｐｇ／ｍＬより低いＰｌＧＦ−１濃度を有するものが、より良好に機能した（進行までの時間（ＴＴＰ）１６８対１１２日、ｐ＝０．０３）。任意の用量減少／中断の前に採取した初期サンプル（第８および／もしくは１５日）を用いて、または３週間の治療にわたって用量強度を反映する平均ＰｌＧＦ−１  ＡＵＣ（このＡＵＣは、投薬中断中に導出された値を含めて投薬期間中の所与の患者についてのすべてのＰｌＧＦ−１値を用いて導出した）を用いて、ＡＢＴ−８６９の投与後のＰｌＧＦ−１の変化を分析し、結果として、最適化されたＰｌＧＦ−１有効性閾値を決定した。チャイルド・ピューＡ患者について、８１．５ｐｇ／ｍＬの初期ＰｌＧＦ−１閾値は、改善された全生存期間（３１６対２６６日、ｐ＝０．０３）に関連づけられた。この同じＰｌＧＦ−１閾値は、腎細胞癌腫（ＲＣＣ）でのＡＢＴ−８６９の第２相試験におけるＴＰＰ中央値（２１１対５８日、ｐ＝０．０５）およびＯＳ中央値（３５２対２８４日、ｐ＝３）について患者を予測するものでもあった。類似して、最初の２２日についてのＡＵＣ閾値は、患者を改善された応答について分ける（６６．５ｐｇ／ｍＬ未満、ＯＳ＝２６８日、および６６．５ｐｇ／ｍＬより上、この中央値に到達しなかった、ｐ＝０．０４）。
【０１５５】
これらの試験における患者の多くは、投薬中断および／または用量減少のいずれかを必要とする毒性を経験した。初期用量減少前サンプルを使用して、１４８ｐｇ／ｍＬの明瞭なＰｌＧＦ−１毒性カットオフを同定した（これより上では、肝細胞癌（ＨＣＣ）患者の８７％が「毒性」（用量減少／中断を生じさせる結果となるグレード３／４事象、または用量中断を生じさせる結果となるグレード２毒性）を有した）。この閾値は、３つすべての試験において毒性を予測するものであった。この毒性閾値の利用は、事前の毒性管理対策の際に一定の役割を果たす。興味深いことに、最良の全生存期間を有した患者は、治療の最初の２週間以内の高いＰｌＧＦ−１値、およびその後の用量減少を有した。ＨＣＣにおける第５６日およびＲＣＣにおける第１１２日までの平均ＡＵＣ  ＰｌＧＦ−１濃度の分析は、初期用量とそれぞれの試験についての患者の大部分にとって適切な時点での用量減少の影響の両方を考慮に入れている。６６．５ｐｇ／ｍＬのＰｌＧＦ−１有効性閾値（第２２日までの平均ＡＵＣから生成）および１４８ｐｇ／ｍＬ毒性閾値をこのデータセットに適用することにより、最適ＰｌＧＦ−１濃度を同定できること、およびこの最適ＰｌＧＦ−１濃度が、結果として、ＨＣＣにおいて（３１６対１９３日、ｐ＝０．０１５）およびＲＣＣ（未決定の中央値対４０５日、ｐ＝０．０３５）においてＯＳ増加を生じさせることが実証された。
【実施例３】
【０１５６】
実施例２での上記３つの第２相単剤療法試験におけるＰｌＧＦ−１濃度の分析を、２００９年６月１６日に出願されたＵ．Ｓ．Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｓｅｒｉａｌ  Ｎｏ．１２／４８５，１１４の（実施例１１を参照して）実施例１５においてより詳細に説明されているようなＰｌＧＦ−１アッセイを用いて行った（特許出願は、ＰｌＧＦ−１アッセイに関するこの教示について参照により援用されている。）。簡単に言うと、このアッセイは、ヒトＰｌＧＦ−１の検出のためにＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標）イムノアッセイ形式を利用し、および常磁性微粒子上に固定化された捕捉試薬として２−８２６−３３５ハイブリドーマ細胞株（ＭＡＢ８２６）からの抗ＰｌＧＦ−１モノクローナル抗体を利用し、およびアクリジニウムで標識されたコンジュゲート試薬として１−２５５−７１３または１−２５５−２６７５ハイブリドーマ細胞株（ＭＡＢ２５５）からの抗ＰｌＧＦ−１モノクローナル抗体を使用する。コンジュゲート試薬は、インタクトＩｇＧモノクローナル抗体、Ｆ（ａｂ’）２、またはＦａｂフラグメントのいずれかであった。アッセイの最適化のために５０から１００マイクロタイターのサンプル容積範囲を用いて、Ｕ．Ｓ．Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．１２／４８５，１１４の実施例１１に記載されているようにＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標）アッセイを実行した。このアッセイの最適なサンプル容積は、５０マイクロタイターである。Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓから購入したＰｌＧＦ−１をこのアッセイのための較正物質材料として使用した。「較正物質希釈剤」と呼ばれる緩衝剤マトリックス（２−（Ｎ−モルホリノ）エタンスルホン酸（ＭＥＳ）、他の塩、タンパク質遮断薬および抗菌剤を含有する緩衝液）でＰｌＧＦ−１を先ず希釈して濃縮中間体保存溶液を得た。化学天秤での重量測定により較正物質希釈剤でこの中間体保存溶液を希釈することによって較正物質を調製した。０、１０、３０、６０、５００および１，５００ｐｇ／ｍＬ（それぞれ、Ｃａｌ  Ａ、Ｃａｌ  Ｂ、Ｃａｌ  Ｃ、Ｃａｌ  Ｄ、Ｃａｌ  ＥおよびＣａｌ  Ｆ）のＰｌＧＦ−１濃度の較正物質を調製した。ＥＤＴＡ血漿または血清採取管に検体を採取した。
【０１５７】
自動ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標）ｉ２０００分析装置（イリノイ州アボットパークのＡｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）によってイムノアッセイを行った。簡単に言うと、次の段階を含んだ：
１．５０μＬのヒトサンプルを抗ＰｌＧＦ−１抗体（即ち、ＭＡＢ８２６）で被覆した５０μＬの微粒子と混合する段階。類似して、この段階でヒトサンプルの代わりに較正物質溶液を使用して標準曲線を作成し、このアッセイを較正することができる。
２．３３から３８℃の維持された周囲温度でおおよそ１８分間、この反応混合物をインキュベートする段階。サンプル中のヒトＰｌＧＦ−１抗原が微粒子上の抗ヒトＰｌＧＦ−１抗体に結合した。
３．磁気保留微粒子から未結合ヒトＰｌＧＦ−１を分離し、排出して廃棄物にした。これらの微粒子をリン酸緩衝液で洗浄した。
４．アクリジニウムエステルで標識した検出抗体（モノクローナル抗体ＭＡｂ２５５）５０μＬをこの反応混合物に添加する段階。
５．おおよそ４分、３３−３８℃でこの反応混合物をインキュベートする段階。抗ヒトＰｌＧＦ−１抗体−アクリジニウム分子が、微粒子上に固定された抗体によって補足されたヒトＰｌＧＦ−１とともにサンドイッチを形成する。
６．これらの微粒子をリン酸緩衝液で洗浄する段階。
７．Ｐｒｅ−ｔｒｉｇｇｅｒ（過酸化水素を伴う酸性溶液）およびＴｒｉｇｇｅｒ（塩基性溶液）を添加して、この捕捉されたヒトＰｌＧＦ−１に光を放射させ、これを相対発光量（Ｒｅｌａｔｉｖｅ  Ｌｉｇｈｔ  Ｕｎｉｔｓ：ＲＬＵｓ）として計器によって測定する段階。ＲＬＵは、ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標）システムで用いる光学測定単位の呼称である。本質的に、ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ（登録商標）光学システムは、化学発光反応によって放射される光に基づいて光子計数を行う高電子増倍管（ＰＭＴ）である。化学発光反応によって生成される光の量は、反応混合物中に存在するアクリジニウム光トレーサーの量に比例するので、それによってサンプル分析物（これも、化学発光反応が発生したときに反応混合物中に残存するアクリジウムの量に比例する。）の定量が可能となる。用語「相対発光量」は、一定量のアクリジニウムに対する光子計数の関係からきている。それぞれの光学モジュールを１セットのアクリジニウム標準物質で較正する。化学発光反応が発生すると、光が放射され、これらの光子を３秒の期間にわたって測定する。ＰＭＴがこれらの光子をデジタルシグナルに変換して、このデジタルシグナルを処理用の回路基板に送る。この光回路基板がＰＭＴからのデジタルシグナルをアナログシグナルに変換する。このアナログシグナルは、計数された光子に比例し、またこの計数された光子は、存在するアクリジニウムの量に比例する。その後、このアナログシグナルをさらに処理してＲＬＵ値を生じさせる。この関係を確立して、この光学モジュールの較正のための標準物質を作り、様々なアクリジニウム標準物質が、これらに割り当てられたＲＬＣ値を有する。そのため、ＲＬＵ単位これ自体は、任意であるが、これは、アクリジニウムの一定の量に比例する（即ち、相対的である。）。
【０１５８】
このアッセイの最適化の間、５０から１００マイクロリットルのサンプル容積範囲を用いた。好ましいサンプル容積は、５０から７５マイクロリットルであり、最適なサンプル容積は、５０マイクロリットルである。Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓから購入したＰｌＧＦ−１をこのアッセイのための較正物質材料として使用した。０、１０、３０、６０、５００および１，５００ｐｇ／ｍＬのＰｌＧＦ−１濃度の較正物質を調製した。
【０１５９】
この好ましいイムノアッセイ形式を用いて、４００人の見たところ正常な個体においてＰｌＧＦ−１を測定した。検体は、ＰｒｏＭｅｄＤｘ，ＬＬＣ（マサチューセッツ州、ノートン）から購入したものであり、２００人の男性および２００人の女性から成った。これらの検体をＥＤＴＡ血漿または血清採取管のいずれかに採取した。結果を表１０に示す。表１０において、ＰｌＧＦ濃度中央値は１６．０ｐｇ／ｍＬであり、上位９７．３パーセンタイルは２５．８ｐｇ／ｍＬである。このサンプルセットにおいて、最低サンプルは７．９ｐｇ／ｍＬであり、最高値は２９．８ｐｇ／ｍＬである。
【０１６０】
【表１１】
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【０１６１】
この好ましいイムノアッセイ形式を用いて、４．５から３９週にわたる在胎期間を有する妊娠個体においてＰｌＧＦを測定した。これらの検体をＥＤＴＡ血漿中に採取した。結果を図５に示す（Ｎ＝１，４９０検体）。図５において、ＰｌＧＦ値の定常的増加が、在胎期間増加に伴っておおよそ３０週まで観察される。おおよそ３２週間後、ＰｌＧＦ値は、広く分散される。これらの検体のＰｌＧＦ濃度は、おおよそ７．０ｐｇ／ｍＬからおおよそ４，５００ｐｇ／ｍＬにわたる。１，５００ｐｇ／ｍＬより大きい初期値を有する検体を４倍希釈後に再検定して、較正範囲内の結果を得た。
【０１６２】
これらの結果は、この好ましいイムノアッセイ形式により妊娠個体におけるヒトＰｌＧＦ−１を検出できることを示している。子癇前症を有する個体、心臓の病気を有する患者、ならびに腎細胞癌腫、肝細胞癌腫および非小細胞肺癌腫などの癌腫を有する患者においてもこの好ましいイムノアッセイ形式で試験を行った。
【０１６３】
本開示が、本明細書に内在するものばかりでなく、言及した目的の遂行ならびに言及した結果および利点の獲得によく適するものであることは、当業者には容易に理解される。本明細書に記載する分子複合体ならびに方法、手順、治療、分子、特定の化合物は、好ましい実施形態を現在代表するものであり、例示的であり、および本発明の範囲の限定と解釈されない。本発明の範囲および精神を逸脱することなく、本明細書に開示する本発明に様々な置換および変更を加えることができることは、当業者には容易に理解される。
【０１６４】
本明細書において言及したすべての特許および出版物は、本発明が属する技術分野の技術者のレベルを示すものである。すべての特許および出版物は、それぞれの個々の出版物が参照により援用されていると具体的におよび個々に示されている場合と同程度に、参照により本明細書に援用されている。
【０１６５】
好適に本明細書に例示的に記載する本発明を、任意の要素が不在の状態で実施することができ、この制限を本明細書には具体的に開示していない。従って、例えば、本明細書におけるそれぞれの事例において、用語「を含む」、「から本質的に成る」および「から成る」のいずれかを他の２つの用語のいずれかで置き換えることができる。用いる用語および表現は、説明の用語として用いており、限定の用語としては用いておらず、ならびにこのような用語および表現の使用に関して、示しているおよび記載している特徴またはこの部分の任意の等価物を除外する意図はないが、特許請求の範囲に記載する本発明の範囲内で様々な変更が可能であることは理解される。このように、本開示を好ましい実施形態および任意の特徴によって具体的に開示したが、当業者は本明細書に開示する概念の変更および変形に頼ることができること、ならびにこのような変更および変形が、添付の特許請求の範囲によって定義するとおりの本発明の範囲内であると考えられることは、理解されるはずである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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