(57)【要約】  本発明は、治療の有効性をモニターする方法であって、前記治療がＲａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ経路の異常活性を含む疾患を治療するように設計された阻害剤を含む方法を提供する。【選択図】図１【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｂ−ｒａｆ、ＭＥＫ１／２（ＭＥＫ：マイトジェン活性化プロテインキナーゼ／細胞外シグナル関連キナーゼキナーゼ（Ｍｉｔｏｇｅｎ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｋｉｎａｓｅ／Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｓｉｇｎａｌ  ｒｅｌａｔｅｄ  ｋｉｎａｓｅ  Ｋｉｎａｓｅ））又はＥＲＫ１／２（ＥＲＫ：細胞外シグナル関連キナーゼ（Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｓｉｇｎａｌ  Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｋｉｎａｓｅ））の阻害剤であって、黒色腫に罹患した被験体を治療するために使用される阻害剤の有効性をモニターする方法であって、
（ａ）第１の時点で、前記被験体に関してインビボイメージング手順を実施して検査対象領域の第１のインビボ画像を生成する段階であって、前記検査対象領域が前記黒色腫であり、前記インビボイメージング手順が
（ｉ）インビボイメージング成分で標識されたベクターを含むインビボイメージング剤であって、αvβ3インテグリンに関する競合的結合アッセイにおいて＜１０ｎＭのＫｉ（ここで、Ｋｉ値はエキスタチンとの競合によって決定される。）をもってαvβ3インテグリンに結合するインビボイメージング剤を前記被験体に投与し、
（ｉｉ）段階（ｉ）で投与されたインビボイメージング剤を前記黒色腫によって発現されたαvβ3インテグリンに結合させ、
（ｉｉｉ）段階（ｉｉ）の結合したインビボイメージング剤のインビボイメージング成分によって放出される信号を検出し、
（ｉｖ）段階（ｉｉｉ）で検出された信号を、前記検査対象領域中の前記黒色腫細胞の表面上でのαvβ3インテグリン発現を表す第１のインビボ画像に変換することを含む段階、
（ｂ）前駆体被験体を前記阻害剤で治療する段階、
（ｃ）第２の時点で、段階（ａ）で定義したインビボイメージング手順を繰り返して前記検査対象領域の第２のインビボ画像を生成する段階、並びに
（ｄ）前記第１のインビボ画像を前記第２のインビボ画像と比較することで、前記第２の時点での前記検出信号の減少が前記黒色腫の治療における前記阻害剤の有効性を表す段階
を含んでなる方法。
【請求項２】
前記黒色腫がＢ−ｒａｆ遺伝子中に突然変異を含む、請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記突然変異が単一の置換Ｖ５９９Ｅによって引き起こされる、請求項２記載の方法。
【請求項４】
前記被験体がインタクトな哺乳動物被験体の生体である、請求項１乃至請求項３のいずれか１項記載の方法。
【請求項５】
前記被験体がヒト被験体である、請求項４記載の方法。
【請求項６】
前記インビボイメージング剤が次の式Ｉを有する、請求項１乃至請求項５のいずれか１項記載の方法。
【化１】
2011528014.tif 000016
（式中、
Ｗ1及びＷ2は独立に任意のリンカー部分であり、前記リンカー部分は式−（Ｌ）n−（式中、各Ｌは独立に−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＲ’2−、−ＣＲ’＝ＣＲ’−、−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＲ’2ＣＯ2−、−ＣＯ2ＣＲ’2−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’ＣＯ−、−ＣＯＮＲ’−、−ＮＲ’（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ’−、−ＮＲ’（Ｃ＝Ｓ）ＮＲ’−、−ＳＯ2ＮＲ’−、−ＮＲ’ＳＯ2−、−ＣＲ’2ＯＣＲ’2−、−ＣＲ’2ＳＣＲ’2−、−ＣＲ’2ＮＲ’ＣＲ’2−、Ｃ4-8シクロヘテロアルキレン基、Ｃ4-8シクロアルキレン基、Ｃ5-12アリーレン基、Ｃ3-12ヘテロアリーレン基、アミノ酸、ポリアルキレングリコール、ポリ乳酸又はポリグリコール酸部分であり、ｎは１〜１５の値を有する整数であり、各Ｒ’基は独立にＨ、Ｃ1-10アルキル、Ｃ3-10アルキルアリール、Ｃ2-10アルコキシアルキル、Ｃ1-10ヒドロキシアルキル又はＣ1-10フルオロアルキルであるか、或いは２以上のＲ’基がこれらの結合する原子と共に炭素環式又は複素環式の飽和又は不飽和環を形成する。）を有する二価基であり、
Ｚ1及びＺ2は独立に（ｉ）インビボイメージング成分を含む基、（ｉｉ）糖部分又は（ｉｉｉ）水素であるが、Ｚ1及びＺ2の少なくとも一方はインビボイメージング成分であることを条件とする。）
【請求項７】
インビボイメージング成分が以下のものから選択される、請求項１乃至請求項６のいずれか１項記載の方法。
（ａ）放射性金属イオン、
（ｂ）γ線放出型放射性ハロゲン、
（ｃ）陽電子放出型放射性非金属、及び
（ｄ）常磁性金属イオン。
【請求項８】
黒色腫の治療におけるＢ−Ｒａｆ、ＭＥＫ１／２又はＥＲＫ１／２の阻害剤の最適用量及び投与計画を決定するために臨床治験で使用するための、請求項１乃至請求項７のいずれか１項記載の方法。
【請求項９】
黒色腫の治療においてＢ−Ｒａｆ、ＭＥＫ１／２又はＥＲＫ１／２の阻害剤に対する関連の初期応答を評価するための、請求項１乃至請求項７のいずれか１項記載の方法。
【請求項１０】
黒色腫の治療においてＢ−Ｒａｆ、ＭＥＫ１／２又はＥＲＫ１／２の阻害剤に最も応答しそうな患者を選択するための、請求項１乃至請求項７のいずれか１項記載の方法。
【請求項１１】
Ｂ−Ｒａｆ、ＭＥＫ１／２又はＥＲＫ１／２の阻害剤による黒色腫の治療を継続すべきか否かについて判断を下すのに使用するための、請求項１乃至請求項７のいずれか１項記載の方法。
【請求項１２】
請求項１乃至請求項１１のいずれか１項記載の方法におけるインビボイメージング剤の使用であって、前記インビボイメージング剤が請求項１、請求項６及び請求項７のいずれか１項で定義した通りである、使用。
【請求項１３】
請求項１乃至請求項１１のいずれか１項記載の方法で使用するのに適した薬剤の製造におけるインビボイメージング剤の使用であって、前記インビボイメージング剤が請求項１、請求項６及び請求項７のいずれか１項で定義した通りである、使用。
【請求項１４】
請求項１乃至請求項１１のいずれか１項記載の方法を実施するのに使用するためのコンピュータープログラム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はインビボイメージングに関し、特に治療のモニタリングに対するインビボイメージングの応用に関する。詳しくは、本発明はＲａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ経路に作用する薬剤による黒色腫の治療をモニターするために適している。
【背景技術】
【０００２】
ＲＧＤペプチドに基づく多数のインビボイメージング剤がインテグリン発現の検出のために適することが知られており、これらは例えば国際公開第２００２／２６７７６号、同第２００３／００６４９１号、同第２００５／０１２３３５号及び同第２００６／５４９０４号に記載されている。これらのイメージング剤は細胞表面インテグリンを標的化し、ある範囲の血管新生関連病態の診断に有用であると教示されている。これらの先行技術文献はまた、ＲＧＤペプチドに基づくこれらのイメージング剤が血管新生関連病態の治療をモニターする際にも有用であることを教示している。
【０００３】
生理学的には、Ｒａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫシグナリング経路（ＭＥＫ：マイトジェン活性化プロテインキナーゼ／細胞外シグナル関連キナーゼキナーゼ（Ｍｉｔｏｇｅｎ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｋｉｎａｓｅ／Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｓｉｇｎａｌ  ｒｅｌａｔｅｄ  ｋｉｎａｓｅ  Ｋｉｎａｓｅ）、ＥＲＫ：細胞外シグナル関連キナーゼ（Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｓｉｇｎａｌ  Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｋｉｎａｓｅ）は、（Ｐｅｙｓｓｏｎｎａｕｘ  ａｎｄ  Ｅｙｃｈｅｎｅ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｃｅｌｌ  ２００１；９３：３−６２に総説されているように）細胞増殖、分化、生存、不死化及び血管新生を含む各種の細胞機能の調節において中心的な役割を果たす。この経路はすべての真核生物間で高度に保存されており、各種の細胞外シグナルを核中にトランスデュースする際に肝要な役割を果たす。成長因子及びインテグリンの接合作用がＲａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫシグナリング経路を活性化して血管新生をもたらすと考えられている（Ｈｏｏｄ  ｅｔ  ａｌ  Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．２００３；１６２（５）：９３３−４３）。これは、αvβ3−インテグリン発現の阻害がＥＲＫシグナリングを抑制して内皮細胞のアポトーシス及び血管新生の阻止をもたらすという事実によって裏付けられる（Ｅｌｉｃｅｉｒｉ  ｅｔ  ａｌ  Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１９９８；１４０：１２５５−１２６３）。この「アウトサイド・イン（ｏｕｔｓｉｄｅ−ｉｎ）」シグナリングに加えて、並行した「インサイド・アウト（ｉｎｓｉｄｅ−ｏｕｔ）」シグナリング機構も示されている。Ｗｏｏｄｓ  ｅｔ  ａｌ（Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．２００１；２１（９）：３１９２−２０５）は、ヒト黒色腫細胞株におけるＭＥＫ１の薬理学的阻害が細胞表面のα6及びβ3インテグリンの発現低下をもたらすことを実証した。
【０００４】
ある範囲の疾患においてＲａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ経路の異常な又は不適切な機能が確認され、特に癌の腫瘍形成挙動においてＲａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ経路の構成性活性化が確認された。黒色腫の９〜１５％を含め、すべての癌の約３０％においてＲａｓの活性化突然変異が見出される（Ｂｏｓ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １９８９；４９（１７）：４６８２−９）。構成性活性化をもたらすＢ−Ｒａｆの体細胞ミスセンス突然変異は黒色腫において一層頻度が高く、６０〜６６％の悪性皮膚黒色腫で見出される（Ｄａｖｉｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ２００２；４１７：９４９  ９５４）。Ｂ−Ｒａｆにおいて最も頻度が高い突然変異（８０％）は、５９９位におけるバリンからグルタミン酸への置換（Ｖ５９９Ｅ）である。これらのＢ−Ｒａｆ置換はＢ−Ｒａｆの基礎キナーゼ活性を高め、Ｒａｓ及び成長因子受容体の活性化を含む上流の増殖駆動因子からＲａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫシグナリングを切り離してＥＲＫの構成性活性化をもたらすと考えられる。変異したＢ−Ｒａｆタンパク質は、黒色腫細胞の生存能力及びトランスフォーメーションにとって必須であることが実証されている（Ｈｉｎｇｏｒａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２００３；６３：５１９８−５２０２）。
【０００５】
最近の数年間において、Ｂ−Ｒａｆを阻害する化合物の癌治療における評価に関する多数の抄録及び科学論文が発表されている（Ｅｉｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ  Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ２００６；９５Ｐ：５８１−６、Ｇａｔｚｅｍｅｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ  Ｐｒｏｃ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２００６；２４：ａｂｓｔｒａｃｔ  ７００２、Ｗｕ  ｅｔ  ａｌ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ．Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ，ＵＳＡ．Ｆｅｂ  ２４−２６，２００６：ａｂｓｔｒａｃｔ  ２５９、及びＦｌａｈｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ  Ｐｒｏｃ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２００３；２２：４１０）。加えて、ＭＥＫを阻害する化合物の癌治療における評価に関する様々な報告も発表されている（Ｓｅｂｏｌｔ−Ｌｅｏｐｏｌｄ  ｅｔ  ａｌ  Ｎａｔ．Ｍｅｄ．１９９９；５：８１０−６、Ｓｅｂｏｌｔ−Ｌｅｏｐｏｌｄ  ｅｔ  ａｌ  Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ  ２００４；４：９３７−４７、Ａｌｅｓｓｉ  ｅｔ  ａｌ  Ｊ．Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．１９９５；２７０（４６）：２７４８９−９４、Ｈａａｓ  ｅｔ  ａｌ  Ｍｅｌａｎｏｍａ  Ｒｅｓ．２００６；１６：Ｓ９２−Ｓ９３、Ａｄｊｅｉ  ｅｔ  ａｌ  Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２００８；２６（１３）：２１３９−４６、及びＭａｃｋｉｎ  ｅｔ  ａｌ  Ｊ．Ｓｕｒｇｉｃａｌ  Ｒｅｓ．２００６；１３０（２）：２６２）。
【０００６】
Ｂ−Ｒａｆ又はＭＥＫの阻害は、Ｒａｓ又はＢ−Ｒａｆの活性化突然変異を有する黒色腫を効果的に治療するものと期待される。しかし、一定割合の黒色腫はかかる治療に応答しないであろう。最良の治療計画を選択するためには、（ｉ）Ｂ−Ｒａｆ又はＭＥＫ阻害剤に応答する黒色腫と（ｉｉ）応答しない黒色腫とを識別できることが有益であろう。
【発明の概要】
【０００７】
本発明は、先行技術の上述した問題を解決する方法を提供する。本発明の方法はインビボイメージングを用いて黒色腫治療の有効性をモニターするものであり、したがって最小限の侵襲性を有する。本発明の方法は治療に対する初期応答を観察するために使用でき、特定の治療が適当であるか否か、或いはそれを継続すべきか否かを判定するために役立ち得る。臨床用として承認された治療法の有効性をモニターするのに有用であるばかりでなく、本発明の方法は、新しい治療法の開発（例えば、最適用量及び投与計画の決定）において並びに治療に最も応答しそうな被験体を同定するために応用できる。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】図１は、拡大した外腸骨リンパ節中の転移性黒色腫腫瘍を示すＰＥＴスキャンである。
【図２】図２は、左腹膜後腔中の転移性黒色腫腫瘍を示すＰＥＴスキャンである。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
一態様では、本発明は、Ｂ−ｒａｆ、ＭＥＫ１／２（ＭＥＫ：マイトジェン活性化プロテインキナーゼ／細胞外シグナル関連キナーゼキナーゼ（Ｍｉｔｏｇｅｎ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｋｉｎａｓｅ／Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｓｉｇｎａｌ  ｒｅｌａｔｅｄ  ｋｉｎａｓｅ  Ｋｉｎａｓｅ））又はＥＲＫ１／２（ＥＲＫ：細胞外シグナル関連キナーゼ（Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｓｉｇｎａｌ  Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｋｉｎａｓｅ））の阻害剤であって、黒色腫に罹患した被験体を治療するために使用される阻害剤の有効性をモニターする方法であって、
（ａ）第１の時点で、前記被験体に関してインビボイメージング手順を実施して検査対象領域の第１のインビボ画像を生成する段階であって、前記検査対象領域が前記黒色腫であり、前記インビボイメージング手順が
（ｉ）インビボイメージング成分で標識されたベクターを含むインビボイメージング剤であって、αvβ3インテグリンに関する競合的結合アッセイにおいて＜１０ｎＭのＫｉ（ここで、Ｋｉ値はエキスタチンとの競合によって決定される。）をもってαvβ3インテグリンに結合するインビボイメージング剤を前記被験体に投与し、
（ｉｉ）段階（ｉ）で投与されたインビボイメージング剤を前記黒色腫によって発現されたαvβ3インテグリンに結合させ、
（ｉｉｉ）段階（ｉｉ）の結合したインビボイメージング剤のインビボイメージング成分によって放出される信号を検出し、
（ｉｖ）段階（ｉｉｉ）で検出された信号を、前記検査対象領域中の前記黒色腫細胞の表面上でのαvβ3インテグリン発現を表す第１のインビボ画像に変換することを含む段階、
（ｂ）前駆体被験体を前記阻害剤で治療する段階、
（ｃ）第２の時点で、段階（ａ）で定義したインビボイメージング手順を繰り返して前記検査対象領域の第２のインビボ画像を生成する段階、並びに
（ｄ）前記第１のインビボ画像を前記第２のインビボ画像と比較することで、前記第２の時点での前記検出信号の減少が前記黒色腫の治療における前記阻害剤の有効性を表す段階
を含んでなる方法を提供する。
【００１０】
本発明の「被験体」は、任意のヒト又は動物被験体であり得る。好ましくは、本発明の被験体は哺乳動物である。最も好ましくは、前記被験体はインタクトな哺乳動物生体である。特に好ましい実施形態では、本発明の被験体はヒトである。
【００１１】
本発明に関しては、「Ｒａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ経路」という用語は当技術分野で知られている意味を有し、即ち、最終的には転写因子の活性を調節するように作用する一連のプロテインキナーゼを含むシグナルトランスダクション経路を意味する。成長因子、サイトカイン、紫外線及びストレス誘発剤を含む各種のシグナルに応答して、Ｒａｆファミリーのメンバーはグアノシン三リン酸（ＧＴＰ）をロードしたＲａｓとの結合後に原形質膜に動員され、Ｒａｆタンパク質のリン酸化及び活性化をもたらす。次いで、活性化されたＲａｆタンパク質がＭＡＰＫ／ＥＲＫキナーゼ１／２（ＭＥＫ１／２）のリン酸化及び活性化を行い、ひいては細胞外シグナル調節キナーゼ１／２（ＥＲＫ１／２）のリン酸化及び活性化を行う。活性化後、ＥＲＫは細胞質から核に転位し、Ｅｌｋ−Ｉ及びＭｙｃのような転写因子のリン酸化及び活性調節をもたらす。Ｒａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ経路の異常な活性は腫瘍転移に関連している。
【００１２】
「Ｂ−ｒａｆ、ＭＡＰＫ／ＥＲＫキナーゼ１／２（ＭＥＫ１／２）又は細胞外シグナル調節キナーゼ１／２（ＥＲＫ１／２）の阻害剤」は、それぞれＢ−ｒａｆ、ＭＥＫ１／２又はＥＲＫ１／２の阻害によってＲａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ経路を標的化する化合物である。ＭＥＫ１／２及びＥＲＫ１／２は、Ｒａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ経路中でＢ−Ｒａｆより下流のプロテインキナーゼである。前記被験体を前記阻害剤で「治療」する段階は、前記阻害剤を適当な医薬組成物として前記被験体に投与することで実施される。一般的に述べれば、「医薬組成物」は、活性薬剤を哺乳動物への投与に適した形態で生体適合性キャリヤーと共に含んでいる。前記活性薬剤がＢ−ｒａｆ、ＭＥＫ１／２又はＥＲＫ１／２の阻害剤である場合、「生体適合性キャリヤー」は、組成物が生理学的に認容され得るようにして（即ち、毒性又は過度の不快感なしに哺乳動物体に投与できるようにして）活性薬剤を混入するための薬学的に許容される賦形剤である。生体適合性キャリヤーの選択は投与経路に依存する。本発明の方法の阻害剤は、無毒性の薬学的に許容される賦形剤又は希釈剤を含む単位用量製剤として、（例えば、錠剤、カプセル、顆粒又は粉末の形態での）経口投与、舌下投与、口腔内適用、（例えば、皮下注射、静脈内注射、筋肉内注射又は胸骨内注射或いは（例えば、無菌で注射用の水性又は非水性溶液又は懸濁液としての）輸液技法による）非経口投与、（例えば、吸入スプレーによる）鼻腔内投与、（例えば、クリーム又は軟膏の形態での）局所適用、或いは（例えば、坐剤の形態での）直腸内投与によって投与できる。
【００１３】
キャリヤー材料と組み合わせて１回分の用量形態の医薬組成物を生成することができる阻害剤の量は、処置されるホスト及び個々の投与モードに依存する。好ましくは、阻害剤組成物は、０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重／日の用量の阻害剤を被験体に投与できるように製剤化すべきである。また、任意の個々の被験体に関する特定の用量及び治療計画は、使用する特定の阻害剤、年齢、体重、全身の健康、性別、食事、適用時間、排泄速度、薬物の併用、並びに治療する医師の判断及び治療すべき特定の疾患の重篤度を含む各種の因子に依存することを理解すべきである。組成物中の阻害剤の量はまた、個々の阻害剤にも依存する。
【００１４】
好ましい阻害剤は、（ｉ）ＢＡＹ  ４３−９００６、ＰＬＸ  ４０３２及びＣＨＩＲ−２６５のようなＢ−Ｒａｆを阻害する薬剤、並びに（ｉｉ）ＰＤ１８４３５２、ＰＤ０９８０５９、ＰＤ０３２５９０１、ＡＺＤ６２４４及びＵＯ１２６のようなＭＥＫを阻害する薬剤から選択される。次に、これらの薬剤の各々を一層詳しく説明する。
【００１５】
ＢＡＹ  ４３−９００６（ソラフェニブ／Ｎｅｘａｖａｒ（登録商標）、Ｂａｙｅｒ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ社）は、癌細胞増殖及び血管新生に関する広いスペクトルの抗腫瘍活性を有するマルチキナーゼ阻害剤である（Ｗｉｌｈｅｌｍ  ｅｔ  ａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２００４；６４：７０９９−７１０９）。その標的の１つはＢ−Ｒａｆである。非小細胞肺癌、前立腺癌及び黒色腫におけるＢＡＹ  ４３−９００６の効力は、無作為化第２相治験（Ｅｉｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ  Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ２００６；９５Ｐ：５８１−６）及びシングルアーム第２相臨床試験（Ｇａｔｚｅｍｅｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ  Ｐｒｏｃ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２００６；２４：ａｂｓｔｒａｃｔ  ７００２；及びＷｕ  ｅｔ  ａｌ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ．Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ，ＵＳＡ．Ｆｅｂ  ２４−２６，２００６：ａｂｓｔｒａｃｔ  ２５９）で評価を受けた。ＢＡＹ  ４３−９００６に比べてＢ−Ｒａｆ阻害に関し一層高い親和性及び特異性を有し得る他の薬剤、即ちＰＬＸ  ４０３２及びＣＨＩＲ−２６５が開発中であり、両者は第１相治験で評価されたか、又は評価されつつある（Ｆｌａｈｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ  Ｐｒｏｃ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２００３；２２：４１０；及びｗｗｗ．ｐｌｅｘｘｉｃｏｎ．ｃｏｍ）。
【００１６】
ＰＤ１８４３５２（ＣＩ−１０４０、Ｐｆｉｚｅｒ社）は、ＭＥＫ１／２の経口用選択的小分子阻害剤である。ＰＤ１８４３５２は、インビボで腫瘍増殖を阻止することが報告された最初のＭＥＫ阻害剤である（Ｓｅｂｏｌｔ−Ｌｅｏｐｏｌｄ  ｅｔ  ａｌ  Ｎａｔ．Ｍｅｄ．１９９９；５：８１０−６；及びＳｅｂｏｌｔ−Ｌｅｏｐｏｌｄ  ｅｔ  ａｌ  Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ  ２００４；４：９３７−４７）。ＰＤ０３２５９０１（Ｐｆｉｚｅｒ社）は臨床開発に入った第二世代のＭＥＫ阻害剤であって、良好な薬理学的性質を有するように思われ、研究者達はこれが一層良好な抗癌効果をもたらし得るものと期待している。第２相試験では、生検腫瘍組織がすへての用量レベル並びに（黒色腫、乳癌、結腸癌及び肺癌を含む）すべての腫瘍タイプにおいてリン酸化ＥＲＫの抑制を示した。
【００１７】
ＰＤ０９８０５９は、ＲａｆによるＭＥＫ１／２の活性化を阻害することでＲａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ経路をブロックするが、他のＲａｆ又はＭＥＫキナーゼ基質のリン酸化を阻害せず、それは不活性形のＭＥＫ１／２に結合することでその効果を及ぼすことを表している。ＰＤ０９８０５９はまた、Ｓｗｉｓｓ  ３Ｔ３細胞におけるＭＥＫの活性化の特異的阻害剤としても作用し、各種のアゴニストによるその活性化を８０〜９０％抑制する（Ａｌｅｓｓｉ  ｅｔ  ａｌ  Ｊ．Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．１９９５；２７０（４６）：２７４８９−９４）。
【００１８】
ＡＺＤ６２４４（Ａｓｔｒａ  Ｚｅｎｅｃａ社）は、インビトロ及びインビボでＢ−Ｒａｆ  Ｖ６００Ｅ保有黒色腫の増殖をブロックすることが証明されているＭＥＫ阻害剤である（Ｈａａｓ  ｅｔ  ａｌ  Ｍｅｌａｎｏｍａ  Ｒｅｓ．２００６；１６：Ｓ９２−Ｓ９３）。５７名の癌患者群における第１相治験が文書化されていて、ＡＺＤ６２４４は推奨される第２相用量でＥＲＫリン酸化の実証可能な阻害を示しながら十分に認容されることを報告している（Ａｄｊｅｉ  ｅｔ  ａｌ  Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２００８；２６（１３）：２１３９−４６）。最近、Ａｓｔｒａ  Ｚｅｎｅｃａ社及びＭｅｒｃｋ社は、ＡＺＤ６２４４及びＭＫ−２２０６を含む治療法を共同研究することを公表した（ｗｗｗ．ａｓｔｒａｚｅｎｅｃａ．ｃｏｍ）。ＭＫ−２２０６はホスファチジルイノシトール−３キナーゼ経路と相互作用する。
【００１９】
ＵＯ１２６は、ＭＥＫの阻害によってＲａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ経路をブロックする。癌細胞株ＨｅｐＧ２（肝癌）、Ｈｔ−２９（結腸癌）、ＭｉａＰａｃａ（膵臓癌）及びＰａｎｃ−１（膵臓癌）を２０〜５０μＭの範囲内の濃度のＵＯ１２６で４５分間処理したところ、試験した細胞株においてかなりの活性を有することが証明された（Ｍａｃｋｉｎ  ｅｔ  ａｌ  Ｊ．Ｓｕｒｇｉｃａｌ  Ｒｅｓ．２００６；１３０（２）：２６２）。
【００２０】
かかる阻害剤のいずれか１種の「有効性のモニタリング」は、該阻害剤で治療しようとする罹患組織の測定可能な特性の選択を含んでいる。本発明の場合、測定可能な特性はＲａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ経路の活性であって、これはαvβ3インテグリンの発現レベルから推論される。
【００２１】
モニタリングが価値を有するためには、罹患組織の治療に際して阻害剤が有効であれば、罹患組織の細胞中のＲａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ経路の活性の低下が予想されるような特定の時点が選択される。例えば、「第１の時点」は、被験体が黒色腫に罹患しているという診断後かつ阻害剤を被験体に適用する前であるのが有用であり得る。「第２の時点」は、阻害剤による治療を開始した後に選択される。阻害剤が効力を生じるために要する時間が知られている場合には、この第２の時点はほぼこの時間に位置するように選択できる。他の場合、特に新しい薬物候補を評価する場合には、この時間は知られていないことがあるので、第２の時点は経験的に決定する必要がある。Ｒａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ経路の活性が経時的に減少する場合、これは阻害剤が有効であったことを示している。本発明の方法の好ましい実施形態では、さらに他の時点を選択することで、疾患の寛解のような明確な終点に至るまでの治療期間全体にわたって阻害剤による治療の経過をモニターすることができる。
【００２２】
Ｂ−Ｒａｆ遺伝子中の突然変異を有する黒色腫は、Ｂ−Ｒａｆ、ＭＥＫ１／２又はＥＲＫ１／２の阻害剤によく応答するものと予想される。したがって、本発明の方法における好ましい黒色腫は、Ｂ−Ｒａｆ遺伝子中の突然変異、特にＶ５９９Ｅ置換から生じる突然変異を含む黒色腫である。
【００２３】
本明細書中で使用する「インビボイメージング」という用語は、本発明の被験体の内部構造の全部又は一部の画像を非侵襲的に生成する技法をいう。本発明で使用するための好ましいインビボイメージング方法は、単光子放出コンピューター断層撮影（ＳＰＥＣＴ）、陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）及び磁気共鳴イメージング（ＭＲＩ）である。最も好ましいインビボイメージング方法はＳＰＥＣＴ又はＰＥＴであり、ＰＥＴが特に好ましい。本発明の方法においてＰＥＴが好ましいのは、それが優れた感度及び分解能を有する結果、病変部における比較的小さい変化でも経時的に観察できるからである。ＰＥＴスキャナーは、日常的にピコモル範囲内の放射能濃度を測定している。現在、マイクロＰＥＴスキャナーは約１ｍｍの空間分解能に接近しているが、臨床スキャナーは約４〜５ｍｍである。
【００２４】
本発明のインビボイメージング方法は、前記被験体にインビボイメージング剤を「投与」することで開始される。ここで、前記インビボイメージング剤はインビボイメージング成分で標識されたベクターを含んでいる。インビボイメージング剤の投与のためには非経口投与が好ましく、最も好ましくは静脈内投与である。投与後、前記インビボイメージング剤を前記黒色腫によって発現されるαvβ3インテグリンに結合させる。インビボイメージング剤は、＜１０ｎＭ、好ましくは＜５ｎＭのＫｉをもってαvβ3インテグリンに結合するように選択される。Ｋｉを決定するためには、αvβ3インテグリンに関する公知の競合的結合アッセイが使用でき、この場合にＫｉ値はエキスタチンとの競合によって決定される（Ｋｕｍａｒ  ｅｔ  ａｌ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ．１９９７；２８３：８４３−８５３）。
【００２５】
「インビボイメージング成分で標識された」という用語は、インビボイメージング成分がベクターの構成部分（例えば、11Ｃ又は18Ｆ原子）であることを意味する。別法として、インビボイメージング成分がベクターにコンジュゲートされる化学基の一部をなし、任意のリンカー部分がベクターとインビボイメージング成分とを互いに結合する。「インビボイメージング成分」は、投与後に前記被験体の外部で検出できる信号を放出する原子を含んでいる。本発明の好ましいインビボイメージング成分は下記に記載される。
【００２６】
「ベクター」はαvβ3インテグリンと結合する化合物である。背景技術セクションに記載した通り、かかる化合物には、ＲＧＤ含有ペプチド及び対応するペプチド模倣体並びにモノクローナル抗体である。定義上、αvβ3インテグリンと結合するエキスタチン及びその誘導体も好適なベクターである。「ペプチド模倣体」は、天然親ペプチドの生物学的作用を模倣し又はそれに拮抗することが可能な非ペプチド構造要素を含む化合物である。かかるベクターを含むインビボイメージング剤を得るための方法は、当技術分野の文献に記載されている（例えば、Ｈｕａ  ｅｔ  ａｌ  Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ２００５；１１１：３２５５−３２６０、Ｂａｃｈ−Ｇａｎｓｍｏ  ｅｔ  ａｌ  Ｊ  Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ  ２００６；４７：１４３４−１４３９、Ｓｉｐｋｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ  Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  １９９８；４（５）：６２３−６、Ｅｌｌｅｇａｌａ  ｅｔ  ａｌ（Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ２００３；１０８：３３６−４１、Ｗｉｎｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ２００３；１０８：２２７０−４を参照されたい）。好適には、ベクターがＲＧＤ含有ペプチドである場合、それは５〜２０のアミノ酸、好ましくは６〜１２のアミノ酸、最も好ましくは８〜１０のアミノ酸の長さを有する。若干の好ましいＲＧＤペプチドが下記に一層詳しく記載される。
【００２７】
本発明の「リンカー部分」は、式−（Ｌ）n−を有する二価基である。式中、
各Ｌは独立に−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＲ’2−、−ＣＲ’＝ＣＲ’−、−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＲ’2ＣＯ2−、−ＣＯ2ＣＲ’2−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’ＣＯ−、−ＣＯＮＲ’−、−ＮＲ’（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ’−、−ＮＲ’（Ｃ＝Ｓ）ＮＲ’−、−ＳＯ2ＮＲ’−、−ＮＲ’ＳＯ2−、−ＣＲ’2ＯＣＲ’2−、−ＣＲ’2ＳＣＲ’2−、−ＣＲ’2ＮＲ’ＣＲ’2−、Ｃ4-8シクロヘテロアルキレン基、Ｃ4-8シクロアルキレン基、Ｃ5-12アリーレン基、Ｃ3-12ヘテロアリーレン基、アミノ酸、ポリアルキレングリコール、ポリ乳酸又はポリグリコール酸部分であり、
ｎは１〜１５の値を有する整数であり、
各Ｒ’基は独立にＨ、Ｃ1-10アルキル、Ｃ3-10アルキルアリール、Ｃ2-10アルコキシアルキル、Ｃ1-10ヒドロキシアルキル又はＣ1-10フルオロアルキルであるか、或いは２以上のＲ’基がこれらの結合する原子と共に炭素環式又は複素環式の飽和又は不飽和環を形成する。
【００２８】
好ましくは、前記リンカー部分は１０〜１００原子、最も好ましくは１０〜５０原子の鎖である。好ましいＬ基は、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＨ2−、−ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ2−及びアミノ酸である。特に除外されるのは、２以上のカルボニル基が互いに結合したリンカー部分、又は２以上のヘテロ原子が互いに結合したリンカー部分である。当業者には理解される通り、これらは化学的に実現できないか、或いは過度の反応性又は不安定性を有するため本発明で使用するのに適さない。
【００２９】
好ましいインビボイメージング成分は、以下のものから選択される。
（ａ）放射性金属イオン、
（ｂ）γ線放出型放射性ハロゲン、
（ｃ）陽電子放出型放射性非金属、及び
（ｄ）常磁性金属イオン。
インビボイメージング成分（ａ）〜（ｃ）が好ましく、（ｃ）が最も好ましい。
【００３０】
本発明の方法の「検出」段階は、インビボイメージング剤のインビボイメージング成分によって放出される信号を、前記信号に対して感受性を有する検出器によって検出することを含んでいる。本発明で使用するのに適した、インビボイメージング成分によって放出される信号の例は、投与後に前記被験体の外部で検出できるものである。
【００３１】
本発明の方法の「変換」段階は、検出された信号に再構築アルゴリズムを適用してデータセットを得るコンピューターによって実施される。通例、このデータセットを操作することで、細胞表面上におけるαvβ3インテグリン発現を表す被験体内の領域を示す前記第１及び第２のインビボ画像が生成される。また、かかるデータセットをインビボ画像の生成前又は生成なしに評価することで、検出された信号の量及び強度の経時的な変化を観察することもできる。しかし、より多くの情報（例えば、罹患組織の位置及びサイズ）を得ることができる点でインビボ画像の生成が好ましい。
【００３２】
Ｒａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ経路の活性化とαvβ3インテグリン発現との間における公知の関連（Ｗｏｏｄｓ  ｅｔ  ａｌ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ２００１；２１（９）：３１９２−３２０５）に基づき、本発明者らは、αvβ3インテグリン発現がＲａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ経路活性の代用マーカーとして使用できることを提唱する。
【００３３】
好ましい実施形態では、インビボイメージング剤のベクターはＲＧＤペプチドである。多数のかかるインビボイメージング剤が当技術分野で知られており、αvβ3インテグリン発現のインビボイメージングのために有用であることが教示されている（例えば、Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２００７；６７（４）：１５５５−６２、Ｂｅｅｒ  ｅｔ  ａｌ  Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２００６；１２（１３）：３９４２−９、国際公開第０２／２６７７６号、同第２００３／００６４９１号、同第２００５／１２３３５号及び同第２００５／１２３７６７号を参照されたい）。
【００３４】
本発明の方法で使用するための、ＲＧＤペプチドに基づく好ましいインビボイメージング剤は、次の式Ｉを有している。
【００３５】
【化１】
2011528014.tif 000002
式中、
Ｗ1及びＷ2は独立に任意のリンカー部分であり、前記リンカー部分は上記に定義した通りであり、
Ｚ1及びＺ2は独立に（ｉ）インビボイメージング成分を含む基、（ｉｉ）糖部分又は（ｉｉｉ）水素であるが、Ｚ1及びＺ2の少なくとも一方はインビボイメージング成分である。
【００３６】
式Ｉのインビボイメージング剤のペプチド部分は、あらゆる公知の化学合成方法を用いて合成できるが、特に有用なのは自動化ペプチド合成機を用いたＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄの固相法である（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９６４；８５：２１４９）。合成戦略のための標準的手順は、Ｅ．Ａｔｈｅｒｔｏｎ  ＆  Ｒ．Ｃ．Ｓｈｅｐｐａｒｄ，“Ｓｏｌｉｄ  ｐｈａｓｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：ａ  ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ａｐｐｒｏａｃｈ，１９８９，ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ，Ｏｘｆｏｒｄ中に記載されている。
【００３７】
酸不安定リンカー基を有する合成樹脂を用いて、これに所望の保護Ｃ末端アミノ酸残基をアミド結合形成によって結合する。例えば、（ジメトキシフェニル−アミノメチル）−フェノキシ系リンカーを有するいわゆるＲｉｎｋアミドＡＭ樹脂が適用できる（Ｒｉｎｋ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．１９８７；３０：３７８７）。この樹脂からペプチドを酸分解で切断すれば、ペプチドアミドが得られる。別法として、Ｏ−ビス−（アミノエチル）エチレングリコールトリチル樹脂（Ｂａｒｌｏｓ  ｅｔ  ａｌ，Ｌｉｅｂｉｇｓ  Ａｎｎ．Ｃｈｅｍ．１９８８；１０７９）を用いることもでき、酸分解で切断すれば、第一アミンハンドルを有するペプチドが得られる。
【００３８】
インビボイメージング剤を得るためのインビボイメージング成分によるベクターの標識は、「前駆体化合物」を用いて簡便に実施できる。前駆体化合物は、好都合な化学形態の所望インビボイメージング成分との化学反応が部位特異的に起こり、最小数の段階（理想的にはただ１つの段階）で反応を実施でき、かつ格別の精製の必要なしに（理想的にはいかなる追加の精製も必要なしに）所望のインビボイメージング剤が得られるように設計された、αvβ3発現を標的化するベクターの誘導体である。かかる前駆体化合物は合成品であり、良好な化学純度で簡便に得ることができる。
【００３９】
前駆体化合物はキットの一部として供給できるが、これは放射線薬局における放射性標識インビボイメージング剤の調製のため特に好都合である。かかるキットは、適宜に改造された自動化合成装置内に挿入できるカートリッジを含み得る。かかるカートリッジは、前駆体化合物以外に、不要の放射性イオンを除去するためのカラム、及び反応混合物を蒸発させかつ生成物を製剤化するため必要に応じて連結される適当な容器を含み得る。試薬及び溶媒並びに合成のために必要なその他の消耗品もまた、放射能濃度、体積、送出時間などに関するカスタマーの要求条件を満たすように合成装置を運転させるソフトウェアを保持したコンパクトディスクと共に含めることができる。簡便には、試験間での汚染の可能性を最小限に抑えると共に無菌性及び品質を保証するため、キットのすべての構成要素は使い捨てである。
【００４０】
前駆体化合物は、任意にはベクターのある種の官能基に関して１以上の保護基を含むことができる。「保護基」という用語は、望ましくない化学反応を阻止又は抑制するが、分子の残部を変質させない十分に温和な条件下で問題の官能基から脱離させ得るのに十分な反応性を有するように設計された基を意味する。脱保護後には所望の生成物が得られる。保護基は当業者にとって公知であり、アミン基に関してはＢｏｃ（ここでＢｏｃはｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルである。）、Ｆｍｏｃ（ここでＦｍｏｃはフルオレニルメトキシカルボニルである。）、トリフルオロアセチル、アリルオキシカルボニル、Ｄｄｅ［即ち、１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘキシリデン）エチル］及びＮｐｙｓ（即ち、３−ニトロ−２−ピリジンスルフェニル）から適宜に選択され、カルボキシル基に関してはメチルエステル、ｔｅｒｔ−ブチルエステル及びベンジルエステルから適宜に選択される。ヒドロキシル基に関しては、好適な保護基は、メチル、エチル又はｔｅｒｔ−ブチル、アルコキシメチル又はアルコキシエチル、ベンジル、アセチル、ベンゾイル、トリチル（Ｔｒｔ）、又はテトラブチルジメチルシリルのようなトリアルキルシリルである。チオール基に関しては、好適な保護基はトリチル及び４−メトキシベンジルである。さらに他の保護基の使用は、‘Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ’，Ｔｈｅｏｒｏｄｏｒａ  Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐｅｔｅｒ  Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ（Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，１９９９）に記載されている。
【００４１】
好ましくは、リンカー部分が存在する場合、それはバイオモディファイアー部分として作用する。「バイオモディファイアー部分」は、インビボイメージング剤の薬物動態及び血中クリアランス速度を調整する機能を有する。好適なバイオモディファイアー部分の例は、単分散ＰＥＧ構成単位に基づいていて、１〜１０の前記構成単位を含むものである。さらに、前記バイオモディファイアー部分は１〜１０のアミノ酸残基を表すこともできる。前記バイオモディファイアー部分用の好ましいアミノ酸残基は、リシン及びグルタミン酸のような帯電アミノ酸、或いはシステイン酸及びホスホノアラニンのような帯電非天然アミノ酸である。加えて、アミノ酸であるグリシン、アスパラギン酸及びセリンも含めることができる。好ましい実施形態では、バイオモディファイアー部分は、単分散ＰＥＧ様構造である次の式（ＩＩ）の１７−アミノ−５−オキソ−６−アザ−３，９，１２，１５−テトラオキサヘプタデカン酸からなる。
【００４２】
【化２】
2011528014.tif 000003
式中、ｍは１〜１０の整数に等しく、Ｃ末端単位はアミド部分である。バイオモディファイアー部分は、インビボイメージング剤の薬物動態及び血中クリアランス速度を調整するように作用する。本発明におけるバイオモディファイアー成分の機能は、組織中への取込みを減少させると共に腎臓経由の排泄を増加させることで、バックグラウンド妨害を少なくして一層良好なインビボ画像を与えることである。バイオモディファイアー部分はさらに、グルタル酸及び／又はコハク酸及び／又はポリエチレングリコール系単位及び／又は上記に示した式ＩＩの単位から優先的に導かれる部分を表すことができる。本発明の目的のためには、バイオモディファイアー部分の主たる目標の１つはインビボイメージング剤のバックグラウンド組織取込みを低減させることである。これにより、バックグラウンド信号に比べ、特異的に結合したインビボイメージング剤から放出される信号の最適検出が保証される。リンカー部分の性質は、標的受容体に対するインビボイメージング剤の親和性を妨害すべきでない。加えて、リンカー部分は、例えば過大なポリエチレングリコール系単位を使用した場合に起こり得るようなインビボイメージング剤のバックグラウンド肝臓取込みを増加させるように作用すべきでない。
【００４３】
Ｚ1又はＺ2のいずれかが糖部分である場合、それも上記に定義したバイオモディファイアー部分として作用し得る。「糖部分」は、通常は多価アルコールのアルデヒド又はケトン誘導体である炭水化物基である。それはフルクトース又はグルコースのようなモノマー（単糖）であってもよいし、或いは２つの糖が互いに結合して二糖を形成してもよい。二糖には、グルコース及びフルクトースから構成されるスクロースのような糖がある。糖という用語は、置換糖及び非置換糖の両方並びに糖の誘導体を含む。好ましくは、糖はグルコース、グルコサミン、ガラクトース、ガラクトサミン、マンノース、ラクトース、フコース及びこれらの誘導体（例えば、シアル酸及びグルコサミンの誘導体）から選択される。糖は好ましくはα又はβである。糖は特にマンノピラノシド又はガラクトースピラノシドであり得る。糖上のヒドロキシル基は、例えば１以上のアセチル基で保護することができる。糖部分は、好ましくはＮ−アセチル化されている。かかる糖の好ましい例には、Ｎ−アセチルガラクトサミン、シアル酸、ノイラミン酸、Ｎ−アセチルガラクトース及びＮ−アセチルグルコサミンがある。
【００４４】
最近、糖コンジュゲーションがインビボイメージング剤の薬物動態を有利に変化させ得ることが示された。炭水化物化は小さい放射性標識ペプチドの親油性を低下させ、かくして肝胆道排泄を劇的に減少させて腎排泄を増加させる（Ｈａｕｂｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ  Ｊ．Ｎｕｃ．Ｍｅｄ．２００１；４２：３２６−３６）。
【００４５】
インビボイメージング成分が放射性金属イオン（即ち、放射性金属）からなる場合、好適な放射性金属は、64Ｃｕ、48Ｖ、52Ｆｅ、55Ｃｏ、94mＴｃ又は68Ｇａのような陽電子放射体、或いは99mＴｃ、111Ｉｎ、113mＩｎ又は67Ｇａのようなγ放射体であり得る。好ましい放射性金属は99mＴｃ、64Ｃｕ、68Ｇａ及び111Ｉｎである。最も好ましい放射性金属はγ放射体、特に99mＴｃである。
【００４６】
インビボイメージング成分が常磁性金属イオンからなる場合、好適なかかる金属イオンには、Ｇｄ（ＩＩＩ）、Ｍｎ（ＩＩ）、Ｃｕ（ＩＩ）、Ｃｒ（ＩＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）、Ｃｏ（ＩＩ）、Ｅｒ（ＩＩ）、Ｎｉ（ＩＩ）、Ｅｕ（ＩＩＩ）及びＤｙ（ＩＩＩ）がある。好ましい常磁性金属イオンはＧｄ（ＩＩＩ）、Ｍｎ（ＩＩ）及びＦｅ（ＩＩＩ）であり、Ｇｄ（ＩＩＩ）が特に好ましい。
【００４７】
インビボイメージング成分が金属イオンからなる場合、それは好ましくは金属イオンと合成リガンドとの金属錯体として存在する。「金属錯体」という用語は、金属イオンと１以上のリガンドとの配位錯体を意味する。金属錯体は、「キレート交換に耐える」こと（即ち、金属配位座に関して他の潜在的に競合するリガンドとのリガンド交換を受けにくいこと）が極めて好ましい。潜在的に競合するリガンドには、インビトロでは製剤中の他の賦形剤（例えば、製剤中に使用される放射線防護剤又は抗菌防腐剤）があり、インビボでは内因性化合物（例えば、グルタチオン、トランスフェリン又は血漿タンパク質）がある。「合成」という用語はそれの通常の意味を有し、即ち、天然の供給源（例えば、哺乳動物体）から単離されるものではなく人造のものを意味する。かかる化合物は、それの製造及び不純物プロファイルを完全に制御できるという利点を有している。
【００４８】
キレート交換に耐える金属錯体を形成するために本発明で使用するのに適したリガンドには、２〜６（好ましくは２〜４）の金属ドナー原子が（金属ドナー原子を結合する炭素原子又は非配位ヘテロ原子の非配位主鎖を有することで）五員又は六員のキレート環を生じるように配列されたキレート剤、或いは金属イオンと強く結合するドナー原子を含む単座リガンド（例えば、イソニトリル、ホスフィン又はジアゼニド）がある。キレート剤の一部として金属とよく結合するドナー原子種の例は、アミン、チオール、アミド、オキシム及びホスフィンである。ホスフィンは非常に強い金属錯体を形成するので、単座又は二座のホスフィンでも好適な金属錯体を形成する。イソニトリル及びジアゼニドの直線形状はキレート剤中に組み込みにくいものであり、したがって通例は単座リガンドとして使用される。好適なイソニトリルの例には、ｔｅｒｔ−ブチルイソニトリルのような単純アルキルイソニトリル、及びＭＩＢＩ（即ち、１−イソシアノ−２−メトキシ−２−メチルプロパン）のようなエーテル置換イソニトリルがある。好適なホスフィンの例には、テトロフォスミン（Ｔｅｔｒｏｆｏｓｍｉｎ）、及びトリス（３−メトキシプロピル）ホスフィンのような単座ホスフィンがある。好適なジアゼニドの例には、ＨＹＮＩＣ系列のリガンド（即ち、ヒドラジン置換ピリジン又はニコチンアミド）がある。
【００４９】
金属イオンがテクネチウムである場合、キレート交換に耐える金属錯体を形成する好適なキレート剤には、特に限定されないが、下記のものがある。
（ｉ）ジアミンジオキシム、
（ｉｉ）ＭＡＧ3（メルカプトアセチルトリグリシン）のようなチオールトリアミドドナーセット又はＰｉｃａのようなジアミドピリジンチオールドナーセットを有するＮ3Ｓリガンド及び関連するリガンド、
（ｉｉｉ）ＢＡＴ又はＥＣＤ（即ち、エチルシステイネート二量体）のようなジアミンジチオールドナーセット或いはＭＡＭＡのようなアミドアミンジチオールドナーセットを有するＮ2Ｓ2リガンド、
（ｉｖ）シクラム、モノオキソシクラム又はジオキソシクラムのようなテトラアミン、アミドトリアミン又はジアミドジアミンドナーセットを有する開鎖又は大環状リガンドであるＮ4リガンド、並びに
（ｖ）ジアミンジフェノールドナーセットを有するＮ2Ｏ2リガンド。
【００５０】
インビボイメージング成分がテクネチウムからなる場合における本発明の好ましいキレート剤は、ジアミンジオキシム及びテトラアミンである。好ましいジアミンジオキシムキレート剤の構造及びそれを得るための方法は、国際公開第０３／００６０７０号に開示されている。好ましいテトラアミンキレート剤の構造及びそれを得るための方法は、国際公開第０６／００８４９６号に開示されている。
【００５１】
上述のリガンドはテクネチウム（例えば、94mＴｃ又は99mＴｃ）を錯体化するために特に適しており、Ｊｕｒｉｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ（Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．１９９９；９９：２２０５−２２１８）によって一層詳しく記載されている。かかるリガンドは、銅（64Ｃｕ又は67Ｃｕ）、バナジウム（例えば、48Ｖ）、鉄（例えば、52Ｆｅ）或いはコバルト（例えば、55Ｃｏ）のような他の金属に対しても有用である。
【００５２】
他の好適なリガンドはＳａｎｄｏｚの国際公開第９１／０１１４４号に記載されており、その中にはインジウム、イットリウム及びガドリニウムに対して特に好適なリガンド（特に大環状アミノカルボキシレート及びアミノホスホン酸リガンド）が含まれる。ガドリニウムの非イオン性（即ち、中性）金属錯体を形成するリガンドが知られており、米国特許第４，８８５，３６３号に記載されている。ガドリニウムに対して特に好ましいのは、ＤＴＰＡ、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、トリエチレンテトラアミン六酢酸（ＴＴＨＡ）、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、１０−（２−ヒドロキシプロピル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸（ＤＯ３Ａ）及びこれらの誘導体をはじめとするキレートである。
【００５３】
インビボイメージング成分が金属錯体の一部をなす場合、本明細書中において前記に定義したような付随するリンカー部分が存在することが好ましい。この場合におけるリンカー部分の役割は、金属配位後に生じる比較的バルキーな金属錯体をペプチドの活性部位から遠ざけることで、例えば基質の結合が損なわれないようにすることである。これは、バルキーな基が活性部位から離れて位置する自由を与えるような柔軟性（例えば、単純アルキル鎖）及び／又は金属錯体が活性部位から離れるように向きを定める剛性（例えば、シクロアルキル又はアリールスペーサー）の組合せによって達成できる。これらのキレーターに関連する好ましいリンカー部分は、２〜１０の原子、最も好ましくは２〜５の原子を含む主鎖を有しており、２つ又は３つの原子が特に好ましい。２つの原子を含む最小リンカー基主鎖は、キレーターがペプチドから十分に引き離される結果としていかなる相互作用も最小限に抑えられるという利点を与える。さらに、ペプチドが金属イオンに対するキレーターの配位と効果的に競合することはありそうにない。このようにして、ペプチドの生物学的標的化特性及びキレーターの金属錯体化能力が共に維持される。金属錯体は、結合が血中において容易に代謝を受けないようにしてペプチドに結合していることが極めて好ましい。それは、インビボイメージング剤が所望のインビボ標的部位に到達する前に、かかる代謝がイメージング金属錯体の切断をもたらすからである。したがってペプチドは、好ましくは容易に代謝されない結合を含むリンカー部分を介して金属錯体に共有結合される。好適なかかる結合は、炭素−炭素結合、アミド結合、尿素又はチオ尿素結合、或いはエーテル結合である。
【００５４】
アルキレン基又はアリーレン基のような非ペプチドリンカー基は、式Ｉのペプチド部分との顕著な水素結合が存在しない結果としてリンカーがペプチドと相互作用しないという利点を有する。好ましいアルキレンスペーサー基は−（ＣＨ2）q−（式中、ｑは２〜５の値を有する整数である。）である。好ましくは、ｑは２又は３である。好ましいアリーレンスペーサーは次の式ＩＩＩを有する。
【００５５】
【化３】
2011528014.tif 000004
式中、ａ及びｂは各々独立に０、１又は２である。
【００５６】
かくして、好ましいリンカー部分は−ＣＨ2ＣＨ2−（Ｌ）p−（式中、Ｌは上記に定義した通りであり、ｐは０〜３の値を有する整数である。）である。最も好ましくは、−（Ｌ）p−は−ＣＯ−又は−ＮＲ−である。
【００５７】
イメージング金属がテクネチウムである場合、通常のテクネチウム出発原料は、テクネチウムがＴｃ（ＶＩＩ）酸化状態にある過テクネチウム酸イオン（即ち、ＴｃＯ4-）である。過テクネチウム酸イオン自体は容易に金属錯体を形成せず、したがってテクネチウム錯体の製造には、第一スズイオンのような適当な還元剤を添加してテクネチウムの酸化状態を低い酸化状態（通常はＴｃ（Ｉ）乃至Ｔｃ（Ｖ））に還元することで錯体化を容易にすることが通常必要である。溶媒は、有機溶媒又は水性溶媒或いはこれらの混合物であり得る。溶媒が有機溶媒を含む場合、有機溶媒は好ましくはエタノール又はＤＭＳＯのような生体適合性溶媒である。好ましくは、溶媒は水性溶媒であり、最も好ましくは等張食塩水である。
【００５８】
インビボイメージング成分がγ線放出型放射性ハロゲンである場合、放射性ハロゲンは好適には123Ｉ、131Ｉ及び77Ｂｒから選択される。125Ｉは、外部インビボイメージング用のイメージング成分として使用するのに適さないので特に除外される。インビボイメージング用の好ましいγ線放出型放射性ハロゲンは123Ｉである。
【００５９】
インビボイメージング成分が放射性ヨウ素である場合、式Ｉのインビボイメージング剤は、求電子又は求核ヨウ素化を受ける誘導体或いは標識アルデヒド又はケトンとの縮合を受ける誘導体からなる前駆体化合物を用いて得ることができる。第１のカテゴリーの例は下記の（ａ）〜（ｃ）である。
（ａ）トリアルキルスタンナン（例えば、トリメチルスタンニル又はトリブチルスタンニル）、トリアルキルシラン（例えば、トリメチルシリル）或いは有機ホウ素化合物（例えば、ボロネートエステル又はオルガノトリフルオロボレート）のような有機金属誘導体。
（ｂ）ハロゲン交換用の非放射性アルキルブロミド、或いは求核ヨウ素化用のアルキルトシレート、メシレート又はトリフレート。
（ｃ）求核ヨウ素化に向けて活性化された芳香環（例えば、アリールヨードニウム塩、アリールジアゾニウム塩、アリールトリアルキルアンモニウム塩又はニトロアリール誘導体）。
【００６０】
好ましいかかる前駆体化合物は、（放射性ヨウ素交換を可能にするための）アリールヨージド又はブロミドのような非放射性ハロゲン原子、有機金属前駆体化合物（例えば、トリアルキルスズ、トリアルキルシリル又は有機ホウ素化合物）、或いはトリアゼンのような有機前駆体又は求核置換のための良好な脱離基（例えば、ヨードニウム塩）からなる。放射性ヨウ素化のために好ましくは、前駆体は有機金属前駆体化合物からなり、最も好ましくはトリアルキルスズからなる。
【００６１】
有機分子中に放射性ヨウ素を導入するための前駆体化合物及び方法は、Ｂｏｌｔｏｎ（Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｏｍｐ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．２００２；４５：４８５−５２８）によって記載されている。好適なボロネートエステル有機ホウ素化合物及びその製法は、Ｋａｂａｌｋａ  ｅｔ  ａｌ（Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．２００２；２９：８４１−８４３及びＮｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．２００３；３０：３６９−３７３）によって記載されている。好適なオルガノトリフルオロボレート及びその製法は、Ｋａｂａｌｋａ  ｅｔ  ａｌ（Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．２００４；３１：９３５−９３８）によって記載されている。
【００６２】
放射性ヨウ素を結合できるアリール基の例を下記に示す。
【００６３】
【化４】
2011528014.tif 000005
これらの基はいずれも、芳香環上への容易な放射性ヨウ素置換を可能にする置換基を含んでいる。チロシン残基は、その固有のフェノール基を用いて放射性ヨウ素化を実施することを可能にする。
【００６４】
放射性ヨウ素を含む別の置換基は、例えば次式のように、放射性ハロゲン交換による直接ヨウ素化で合成することができる。
【００６５】
【化５】
2011528014.tif 000006
飽和脂肪族系に結合したヨウ素原子はインビボでの代謝を受けやすく、したがって放射性ヨウ素の損失を招きやすいことが知られているので、放射性ヨウ素原子は好ましくはベンゼン環のような芳香環への直接共有結合によって結合される。
【００６６】
インビボイメージング成分が陽電子放出型放射性非金属である場合、好適なかかる陽電子放射体には、11Ｃ、13Ｎ、15Ｏ、17Ｆ、18Ｆ、75Ｂｒ、76Ｂｒ及び124Ｉがある。好ましい陽電子放出型放射性非金属は11Ｃ、13Ｎ、18Ｆ及び124Ｉであり、特に好ましくは11Ｃ及び18Ｆであり、最も好ましくは18Ｆである。
【００６７】
放射性フッ素化は、18Ｆ−フッ化物と良好な脱離基を有する前駆体化合物（例えば、アルキルブロミド、アルキルメシレート又はアルキルトシレート）中の適当な化学基との反応を用いる直接標識によって実施できる。18Ｆはまた、18Ｆ（ＣＨ2）3ＯＨ反応体でＮ−ハロアセチル基をアルキル化して−ＮＨ（ＣＯ）ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2）318Ｆ誘導体を得ることによっても導入できる。アリール系に関しては、アリールジアゾニウム塩、アリールニトロ化合物又はアリール第四級アンモニウム塩からの18Ｆ−フッ化物求核置換が、アリール−18Ｆ誘導体への好適な経路である。
【００６８】
本発明の18Ｆ標識化合物は、18Ｆ−フルオロジアルキルアミンを生成させ、次いで18Ｆ−フルオロジアルキルアミンを（例えば）塩素、Ｐ（Ｏ）Ｐｈ3又は活性化エステルを含む前駆体と反応させた場合のアミド生成によって得ることができる。
【００６９】
ペプチドの放射性フッ素化のために特に適するさらに別の放射性フッ素化アプローチが国際公開第０３／０８０５４４号に記載されており、これはチオールカップリングを使用するものである。以下の置換基の１つを含む前駆体化合物を
【００７０】
【化６】
2011528014.tif 000007
次の式ＩＶの化合物と反応させることで、
【００７１】
【化７】
2011528014.tif 000008
（式中、
ＹXは式−（ＬY）y−（式中、ＬYはＬに関して前記に定義した通りであり、ｙは１〜１０である。）のリンカー部分であり、任意には１〜６のヘテロ原子を含み、
ＸXは式−（ＬX）x−（式中、ＬXはＬに関して前記に定義した通りであり、ｘは１〜３０である。）のリンカーであり、任意には１〜１０のヘテロ原子を含み、
星印（*）はインビボイメージング剤の残部への結合点を定義する。）
それぞれ次の式（ＩＶａ）又は式（ＩＶｂ）の放射性フッ素化インビボイメージング剤を得る。
【００７２】
【化８】
2011528014.tif 000009
（式中、ＸX、ＹX及び星印（*）は上記に定義した通りである。）
ペプチドの放射性フッ素化のために特に適する追加のアプローチは、Ｐｏｅｔｈｋｏ  ｅｔ  ａｌ（Ｊ．Ｎｕｃ．Ｍｅｄ．，２００４；４５：８９２−９０２）によって記載されており、これはアミノキシカップリングを利用するものである。放射性フッ素化は、次の式（Ｖ）の前駆体化合物を次の式（Ｖａ）の化合物と反応させるか、
【００７３】
【化９】
2011528014.tif 000010
或いは次の式（ＶＩ）の前駆体化合物を次の式（ＶＩａ）の化合物と反応させることで実施される。
【００７４】
【化１０】
2011528014.tif 000011
（式中、
ＸXI及びＸXIIは式−（ＬXI）z−（式中、ＬXIはＬに関して前記に定義した通りであり、ｚは１〜１０である。）のリンカー基であり、任意には１〜６のヘテロ原子を含み、
Ｒ1はアルデヒド部分、ケトン部分、アセタールのような保護アルデヒド、ケタールのような保護ケトン、或いは酸化剤を用いてアルデヒド又はケトンに迅速かつ効率的に酸化し得る官能基（例えば、ジオール又はＮ−末端セリン残基）であり、
Ｒ2は水性緩衝液のような温和な条件下でＲ1と部位特異的に反応して安定なコンジュゲートを与える官能基であり、Ｒ2は第一アミン、第二アミン、ヒドロキシルアミン、ヒドラジン、ヒドラジド、アミノキシ、フェニルヒドラジン、セミカルバジド又はチオセミカルバジドのようなアンモニア誘導体であり得るが、好ましくはヒドラジン、ヒドラジド又はアミノキシ基であり、
Ｒ3はＲ4と部位特異的に反応する官能基であり、Ｒ3は第一アミン、第二アミン、ヒドロキシルアミン、ヒドラジン、ヒドラジド、アミノキシ、フェニルヒドラジン、セミカルバジド又はチオセミカルバジドのようなアンモニア誘導体であり得るが、好ましくはヒドラジン、ヒドラジド又はアミノキシ基であり、
Ｒ4はアルデヒド部分、ケトン部分、アセタールのような保護アルデヒド、ケタールのような保護ケトン、或いは酸化剤を用いてアルデヒド又はケトンに迅速かつ効率的に酸化し得る官能基（例えば、ジオール又はＮ末端セリン残基）である。）
かくして、それぞれ次の式（ＶＩＩ）又は式（ＶＩＩＩ）のコンジュゲートが得られる。
【００７５】
【化１１】
2011528014.tif 000012
（式中、Ｗは−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−、−Ｏ−、−ＮＨＣＯＮＨ−又は−ＮＨＣＳＮＨ−であり、好ましくは−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−であり、ＹはＨ、Ｃ1-6アルキル又はＣ5-6アリール置換基であり、ＸXI、ＸXII及び星印（*）は前記に定義した通りである。）
本発明の好ましい18Ｆ標識インビボイメージング剤は、Ｉｎｄｒｅｖｏｌｌ  ｅｔ  ａｌ（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．２００６；１６：６１９０−３）によって開示されている。18Ｆ標識誘導体の合成経路のさらなる詳細は、Ｂｏｌｔｏｎ（Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｏｍｐ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．２００２；４５：４８５−５２８）によって記載されている。
【００７６】
好ましいイメージング成分は、インビボ投与後、例えばＳＰＥＣＴ、ＰＥＴ及びＭＲＩによって外部から非侵襲的に検出できるものである。最も好ましいインビボイメージング成分は、放射性のもの、とりわけ放射性金属イオン、γ線放出型放射性ハロゲン及び陽電子放出型放射性非金属であり、特にＳＰＥＣＴ又はＰＥＴを用いるイメージングに適したもの（例えば、99mＴｃ、123Ｉ、11Ｃ及び18Ｆ）である。
【００７７】
好ましい実施形態では、Ｗ1はリンカー部分を表し、Ｚ1はインビボイメージング成分を含み、Ｗ2は任意のリンカー部分を表し、Ｚ2は水素であって、以下のものがある。
【００７８】
【化１２】
2011528014.tif 000013
イメージング剤１及び３の製造方法は国際公開第２００５／０１２３３５号に詳述されており、イメージング剤２の製造方法はＫｅｎｎｙ  ｅｔ  ａｌ（Ｊ．Ｎｕｃ．Ｍｅｄ．２００８；４９：８７９−８６）によって記載されている。
【００７９】
さらに別の好ましい実施形態では、Ｗ1は任意のリンカー部分を表し、Ｚ1は水素であり、Ｗ2はリンカー部分を表し、Ｚ2はインビボイメージング成分を含んでいて、例えば以下のものがある。
【００８０】
【化１３】
2011528014.tif 000014
【００８１】
【化１４】
2011528014.tif 000015
イメージング剤４〜７の製造方法は国際公開第２００３／００６４９１号に詳述されている。
【００８２】
本発明の被験体がインタクトな哺乳動物生体である場合、インビボイメージング剤は好ましくは医薬組成物として投与される。本明細書中で前記に示した医薬組成物の一般的な定義が適用される。しかし、この実施形態では、活性薬剤は前記インビボイメージング剤である。生体適合性キャリヤーは、組成物が生理学的に認容され得るようにして（即ち、毒性又は過度の不快感なしに哺乳動物体に投与できるようにして）インビボイメージング剤を懸濁又は溶解するための流体（特に液体）である。生体適合性キャリヤー媒質は、好適には、無菌のパイロジェンフリー注射用水、（有利には注射用の最終生成物が等張性又は非低張性になるように平衡させ得る）食塩水のような水溶液、或いは１種以上の張度調整物質（例えば、血漿陽イオンと生体適合性対イオンとの塩）、糖（例えば、グルコース又はスクロース）、糖アルコール（例えば、ソルビトール又はマンニトール）、グリコール（例えば、グリセロール）又は他の非イオン性ポリオール物質（例えば、ポリエチレングリコール、プロピレングリコールなど）の水溶液のような注射可能なキャリヤー液体である。生体適合性キャリヤー媒質はまた、エタノールのような生体適合性有機溶媒を含んでいてもよい。かかる有機溶媒は、親油性の高い化合物又は配合物を可溶化するために有用である。好ましくは、生体適合性キャリヤー媒質はパイロジェンフリー注射用水、等張食塩水又はエタノール水溶液である。静脈内注射用生体適合性キャリヤー媒質のｐＨは好適には４．０〜１０．５の範囲内にある。
【００８３】
かかるインビボイメージング剤医薬組成物は、好適には、無菌保全性を維持しながら皮下注射針による１回又は数回の穿刺に適したシール（例えば、クリンプ加工した隔壁シールクロージャー）を備えた容器に入った状態で供給される。かかる容器は１回分又は複数回分の患者用量を含み得る。好ましい複数用量容器は、複数の患者用量を含む（例えば、容積１０〜３０ｃｍ3の）単一のバルクバイアルからなり、したがって臨床的状況に合わせて製剤の実用寿命中に様々な時間間隔で１回分の患者用量を臨床グレードの注射器に抜き取ることができる。予備充填注射器は１回分のヒト用量又は「単位用量」を含むように設計され、したがって好ましくは臨床用に適した使い捨て注射器又は他の注射器である。医薬組成物が放射性医薬組成物である場合、予備充填注射器には、施術者を放射線量から防護するための注射器シールドを任意に設けることができる。好適なかかる放射性医薬品注射器シールドは当技術分野で公知であり、好ましくは鉛又はタングステンからなっている。
【００８４】
かかる医薬組成物はキットから製造できる。別法として、それを無菌製造条件下で製造することで所望の無菌生成物を得ることができる。かかる医薬組成物を非無菌条件下で製造し、次いで例えばγ線照射、オートクレーブ処理、乾熱又は（例えば、エチレンオキシドによる）化学処理を用いて終末滅菌を施すこともできる。
【００８５】
本発明者らは、本発明の方法が黒色腫に罹患している被験体を含む臨床試験において試験すべき阻害剤の最適用量及び投与計画を決定するために有用であることを提唱する。別の用途は、これらの阻害剤に対する患者の初期応答の評価である。加えて、本発明の方法は、例えば最も応答しそうな患者のみを含む登録治験の一部として、阻害剤に最も応答しそうな被験体を選択するために使用できる。これらの阻害剤のいずれかが臨床用として承認されていれば、本発明の方法は、阻害剤による治療を継続すべきか否か、用量を変えるへきか否か、或いは異なる治療戦略を追求すべきか否かの判断を可能にするために応用できる。これらの使用の各々は、本発明の方法の好ましい態様をなしている。
【００８６】
別の態様では、本発明は、本発明の方法におけるαvβ3インテグリンに結合するインビボイメージング剤の使用を提供する。本発明のこの態様に関しては、前記インビボイメージング剤及び前記方法の好適で好ましい実施形態は本発明の前記方法に関して上記に定義した通りである。
【００８７】
さらに別の態様では、本発明は、本発明の方法で使用するのに適する薬剤の製造における、αvβ3インテグリンに結合するインビボイメージング剤の使用を提供する。本発明のこの態様に関しては、前記インビボイメージング剤及び前記方法の好適で好ましい実施形態は本発明の前記方法に関して上記に定義した通りである。
【００８８】
本発明はさらに、本明細書中に記載した本発明の方法及び使用を実施する際に使用するためのコンピュータープログラムも提供する。本発明のこの態様に関しては、前記インビボイメージング剤及び前記方法の好適で好ましい実施形態は本発明の前記方法に関して上記に定義した通りである。
【実施例】
【００８９】
以下の実験例は、黒色腫病変部へのαvβ3インテグリン結合イメージング剤の特異的な取込みを実証している。
【００９０】
実施例の簡単な説明
実施例１は、イメージング剤２を用いて確認された転移性黒色腫を有するヒト被験体のイメージングを行ったインビボイメージング実験を表している。
【００９１】
実施例中で使用される略語
ＭＢｑ  メガベクレル
ＰＥＴ  陽電子放出断層撮影
ＣＴ    コンピューター断層撮影
実施例１：転移性黒色腫のインビボイメージング
生検で確認された転移性黒色腫を有する６０歳の女性患者に関し、（αvβ3インテグリンに対して１１．１ｎＭの結合親和性（ＩＣ50）を有する）イメージング剤２（Ｋｅｎｎｙ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｎｕｃ．Ｍｅｄ．２００８；４９：８７９−８６を参照されたい）を用いたインビボイメージングを実施した。
【００９２】
３６５ＭＢｑのイメージング剤２（Ｋｅｎｎｙ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｎｕｃ．Ｍｅｄ．２００８；４９：８７９−８６に記載された方法によって調製された注入液）を患者に投与した。ＧＥ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｒｘ  ＰＥＴ/ＣＴ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社）上でインビボイメージングデータを取得した。
【００９３】
全身取得の最初のベッド位置は、イメージング剤２の注入から４１分後に開始された。各ベッド位置の持続時間は５分間であり、９平面のオーバーラップを有する５つのベッド位置を取得した。データを不感時間、崩壊、ランダム誤差、散乱及び減衰（後者ではエネルギースケールのＣＴ取得を用いる）に関して補正し、Ｖｕｅ  Ｐｏｉｎｔ  ＨＤ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社）再構築アルゴリズム（９回の反復及び２１のサブセット）を用いて再構築した。
【００９４】
図１及び図２は、確認された転移性黒色腫病変部へのイメージング剤２の取込みを示している。したがって、このインビボイメージング方法は、黒色腫病変部へのαvβ3インテグリン結合イメージング剤の特異的な取込みを実証している。
【図１】
2011528014.tif 000017
【図２】
2011528014.tif 000018