(57)【要約】  以下の一般式Ｉのペプチド、ペプチド模倣物およびそれらの誘導体：Ｈ２Ｎ−ＧＨＲＰＸ１Ｘ２Ｘ３−β−Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８Ｘ９Ｘ１０−Ｘ１１（Ｉ）［式中、Ｘ１〜Ｘ１０は、遺伝子的にコードされる２０のアミノ酸の１つを表し、Ｘ８、Ｘ９およびＸ１０は、個別にまたは一緒に、単化学結合を表してもよく、Ｘ１１は、ＯＲ１（式中、Ｒ１は水素または（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルである）、ＮＲ２Ｒ３（Ｒ２およびＲ３は同じかまたは異なり、水素、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、または残基−Ｗ−ＰＥＧ５−６０Ｋ（式中、ＰＥＧ残基は適切なスペーサーＷを介してＮ原子と結合している）を表す）、または残基ＮＨ−Ｙ−Ｚ−ＰＥＧ５−６０Ｋ（式中、Ｙは、単化学結合またはＳ、Ｃ、ＫもしくはＲの群からの遺伝子的にコードされるアミノ酸を表し、Ｚは、それを介してポリエチレングリコール（ＰＥＧ）残基が結合できるスペーサーを表す）を表す］ならびにそれらの生理的に許容される塩（さらに、βは、ペプチド主鎖中にベンドまたはターンを誘導するさらなる特性を有する、遺伝子的にコードされるかもしくはされないアミノ酸、またはペプチド模倣要素を表す）。このようなアミノ酸は、限定されないが、Ｌ−プロリン、Ｄ−プロリン、Ｌ−ヒドロキシプロリン、Ｄ−ヒドロキシプロリン、Ｌ−（Ｏ−ベンジル）−ヒドロキシプロリン、Ｄ−（Ｏ−ベンジル）−ヒドロキシプロリン、Ｌ−（Ｏ−ｔ−ブチル）−ヒドロキシプロリン、４−（Ｏ−２−ナフチル）−ヒドロキシプロリン、４−（Ｏ−２−ナフチル−メチル）−ヒドロキシプロリン、４−（Ｏ−フェニル）−ヒドロキシプロリン、４−（４−フェニル−ベンジル）−プロリン、ｃｉｓ−３−フェニル−プロリン、ｃｉｓ−４−フェニル−プロリン、ｔｒａｎｓ−４−フェニル−プロリン、ｃｉｓ−５−フェニル−プロリン、ｔｒａｎｓ−５−フェニル−プロリン、４−ベンジル−プロリン、４−ブロモベンジル−プロリン、４−シクロヘキシル−プロリン、４−フルオロ−プロリン、Ｌ−テトラヒドロイソキノリン−２−カルボン酸（Ｌ−Ｔｉｃ）、オクタヒドロ−インドール−２−カルボン酸（Ｏｉｃ）の全てのジアステレオマー、および１−アザ−ビシクロ［３，３，０］オクタン−２−カルボン酸の全てのジアステレオマーまたはペプチド模倣残基からなる群から選択される残基を含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の一般式Ｉ：
Ｈ2Ｎ−ＧＨＲＰＸ1Ｘ2Ｘ3−β−Ｘ4Ｘ5Ｘ6Ｘ7Ｘ8Ｘ9Ｘ10−Ｘ11（Ｉ）
｛式中、
Ｘ1〜Ｘ10は、遺伝子的にコードされる（ｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙ  ｃｏｄｅｄ）２０のアミノ酸の１つを表し、Ｘ8、Ｘ9およびＸ10は、個別にまたは一緒に、単化学結合（ｓｉｎｇｌｅ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｂｏｎｄ）を表してもよく；
Ｘ11は、ＯＲ1（式中、Ｒ1は水素または（Ｃ1〜Ｃ10）アルキルである）、ＮＲ2Ｒ3［Ｒ2およびＲ3は同じかまたは異なり、水素、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキル、または残基  −Ｗ−ＰＥＧ5-60K（式中、ＰＥＧ残基は適切なスペーサーＷを介してＮ原子と結合している）を表す]、または残基  ＮＨ−Ｙ−Ｚ−ＰＥＧ5-60K（式中、Ｙは、単化学結合またはＳ、Ｃ、ＫもしくはＲの群からの遺伝子的にコードされるアミノ酸を表し、Ｚは、それを介してポリエチレングリコール（ＰＥＧ）残基が結合できるスペーサーを表す）を表す；
さらに、式中、
βは、ペプチド主鎖中にベンドまたはターンを誘導するというさらなる特性を有する、遺伝子的にコードされていてもされていなくてもよいアミノ酸、またはペプチド模倣要素（ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃ  ｅｌｅｍｅｎｔ）を表し、前記アミノ酸は、限定されないが、Ｌ−プロリン、Ｄ−プロリン、Ｌ−ヒドロキシプロリン、Ｄ−ヒドロキシプロリン、Ｌ−（Ｏ−ベンジル）−ヒドロキシプロリン、Ｄ−（Ｏ−ベンジル）−ヒドロキシプロリン、Ｌ−（Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル）−ヒドロキシプロリン、４−（Ｏ−２−ナフチル）−ヒドロキシプロリン、４−（Ｏ−２−ナフチル−メチル）−ヒドロキシプロリン、４−（Ｏ−フェニル）−ヒドロキシプロリン、４−（４−フェニル−ベンジル）−プロリン、ｃｉｓ−３−フェニル−プロリン、ｃｉｓ−４−フェニル−プロリン、ｔｒａｎｓ−４−フェニル−プロリン、ｃｉｓ−５−フェニル−プロリン、ｔｒａｎｓ−５−フェニル−プロリン、４−ベンジル−プロリン、４−ブロモベンジル−プロリン、４−シクロヘキシル−プロリン、４−フルオロ−プロリン、Ｌ−テトラヒドロイソキノリン−２−カルボン酸（Ｌ−Ｔｉｃ）、オクタヒドロ−インドール−２−カルボン酸（Ｏｉｃ）の全てのジアステレオマー、および１−アザ−ビシクロ［３．３．０］オクタン−２−カルボン酸の全てのジアステレオマー、または
【表１】
2011523634.tif 000008
2011523634.tif 000009
2011523634.tif 000010
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2011523634.tif 000012
の群から選択される残基を含む｝
のペプチド、ペプチド模倣物（ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃｓ）およびそれらの誘導体ならびにそれらの生理的に許容される塩。
【請求項２】
Ｘ1、Ｘ4が、Ｌ、Ｉ、Ｓ、ＭまたはＡを表し、
Ｘ2が、ＥまたはＤを表し、
Ｘ3が、ＲまたはＫを表し、
Ｘ5、Ｘ6、Ｘ7が、Ａ、Ｇ、ＳまたはＬを表し、
Ｘ8が、Ｇ、ＡもしくはＬまたは単化学結合を表し、
Ｘ9が、Ｙ、Ｆ、Ｈまたは単化学結合を表し、
Ｘ10が、Ｒ、Ｋまたは単化学結合を表し、
βおよびＸ11が、上記の意味を有する、
式Ｉのペプチド、ペプチド模倣物およびそれらの誘導体ならびにそれらの生理的に許容される塩。
【請求項３】
一般式ＩＩ：
Ｈ2Ｎ−ＧＨＲＰＬＤＫ−β−ＩＳＧＧＸ8Ｘ9Ｘ10−Ｘ11（ＩＩ）
（式中、Ｘ8、Ｘ9、Ｘ10およびＸ11は、式Ｉについての上記の意味を有する）
のペプチド、ペプチド模倣物およびそれらの誘導体ならびにそれらの生理的に許容される塩。
【請求項４】
一般式ＩＩ：
Ｈ2Ｎ−ＧＨＲＰＬＤＫ−β−ＩＳＧＧＸ8Ｘ9Ｘ10−Ｘ11（ＩＩ）
（式中
残基Ｘ19、Ｘ20およびＸ21のうち２つはそれぞれグリシン残基であり、残りの１つが残基Ｃ−（Ｓ−スクシンイミド）−（ＰＥＧ5-40K）であり、前記スクシンイミド残基はシステイン残基の硫黄原子にＣ原子３を介して結合し；
Ｘ17は、ＮＲ2Ｒ3を表し、Ｒ2およびＲ3は同じか異なり、水素または（Ｃ1〜Ｃ10）アルキルである）
のペプチド、ペプチド模倣物およびそれらの誘導体ならびにそれらの生理的に許容される塩。
【請求項５】
一般式ＩＩ：
Ｈ2Ｎ−ＧＨＲＰＬＤＫ−β−ＩＳＧＧＸ8Ｘ9Ｘ10−Ｘ11（ＩＩ）
[式中
Ｘ11は、ＮＲ2Ｒ3（式中、Ｒ2およびＲ3は同じか異なり、水素または（Ｃ1〜Ｃ10）アルキルを表す）；または
残基  Ｃ（ＮＲ2Ｒ3）−（Ｓ−スクシンイミド）−（ＰＥＧ5-40K）（式中、スクシンイミド残基は、システイン残基の硫黄原子に、スクシンイミド環の炭素原子３を介して結合している）を表す]
のペプチド、ペプチド模倣物およびそれらの誘導体ならびにそれらの生理的に許容される塩。
【請求項６】
請求項１に記載の一般式Ｉのペプチドおよびペプチド誘導体の製造方法であって、下記のいずれかを特徴とする方法：
（Ｅ）それぞれの配列のＣ末端の最初のアミノ酸を、適切な切断可能なスペーサーを介してポリマー樹脂と結合させ、官能基の適切な保護基を任意選択的に含んでいてもよいそれ以降のアミノ酸またはペプチド模倣要素を、当技術分野において知られる方法に従って段階的に結合させ、完成したペプチドを、当技術分野において知られる適切な方法に従ってポリマー樹脂から切り離し、存在する場合は保護基を適切な方法により切り離し、ペプチドまたはペプチド誘導体を適切な方法に従って精製する、または
（Ｆ）所望の分子量を有するＰＥＧ基を、適切なスペーサーを介してポリマー樹脂と結合させ、ペプチドのＮ末端の最初のアミノ酸を、適切な方法を用いて結合させ、残りのステップは（Ａ）に記載のものと同様に行う、または
（Ｇ）ε−アミノ基に適切な保護基を含むリジン残基を、適切なスペーサーを介して適切な方法を用いて適切なポリマー樹脂と結合させ、ペプチド鎖を、（Ａ）に記載されるようにして合成し、ポリマー樹脂から切断し精製した後、必要であれば、ε−アミノ基の保護基を適切な方法を用いて切り離し、所望の分子量を有するＰＥＧ基を、適切な活性化剤を用いてε−アミノ基と結合させ、任意選択的に残存している保護基を切断し、最終生成物を適切な方法を用いて精製すること、または
（Ｈ）システイン残基を含むペプチドをＰＥＧ−マレイミドと反応させて、請求項３、４および５のいずれか一項に記載の式（ＩＩ）の化合物を形成すること。
【請求項７】
一般式（Ｉ）の化合物を含有する医薬組成物。
【請求項８】
一般式（Ｉ）の化合物の医療的な使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ペプチド、ペプチド模倣物およびそれらの誘導体と、それらの製造と、治療および／または予防活性のある薬物の調製のためのそれらの使用と、そのような医薬品（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｄｒｕｇ）に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＥＰ１５８６５８６は、抗炎症性効果を有するフィブリンの配列からのペプチドの使用について記載している。
【０００３】
上記の効果は、フィブリンおよびその分解中に生じるフィブリンフラグメントが、そのＢベータ鎖の新しいＮ末端を介して内皮細胞に、さらにはＡアルファ鎖の配列を介して血流中の細胞に結合することにより、組織へのこれらの細胞の接着および遊出（ｔｒａｎｓｍｉｇｒａｔｉｏｎ）を導くことに基づき得る。内皮細胞へのフィブリンおよびフィブリンフラグメントの結合パートナーは、血管内皮（ＶＥ）カドヘリンタンパク質であり、これは、隣接する内皮細胞同士の接着結合においてのみ発現する。本発明によるペプチドは、この相互作用を遮断し、そのことにより、血液細胞の遊出を妨げる。しかし、血液中の白血球による感染に対する天然防御は、有害な影響を受けない。したがって、顆粒球、リンパ球および単球のような白血球の構成成分は、天然防御プロセスが維持されるように影響を受けないままである。
【０００４】
フィブリノゲンは肝臓で生成され、この形態では生物活性がなく、血液中におよそ３ｇ／ｌの濃度で通常は提供される。酵素前駆体であるプロトロンビンのタンパク質切断がトロンビンの形成をもたらし、これがフィブリノペプチドＡおよびＢをフィブリノゲンから切り離す。このようにして、フィブリノゲンは、その生物学的活性型に変換される。フィブリンおよびフィブリン切断生成物が生じる。
【０００５】
トロンビンは、血液凝固が活性化されたときはいつでも、すなわち炎症、外傷もしくは変性のどれに由来しようと組織損傷に伴って形成される。トロンビンにより媒介されるフィブリンの形成は、基本的に、血管系に対して引き起こされたいずれの欠陥をも迅速に封鎖することを目的とする保護プロセスである。しかし、フィブリンの形成は、病原性プロセスでもある。心筋梗塞を誘発する原因としてのフィブリン血栓の出現は、ヒトの医学における最も顕著な問題の１つである。
【０００６】
血流から組織への炎症性細胞の血管外遊出は、一方で、組織中の病原性微生物または腫瘍細胞に対する防御のための所望されるプロセスであるが、他方で、それ自体が、組織に対して行われた損傷を誘導するかもしくは延長するプロセスであるが、この血流から組織への炎症性細胞の血管外遊出中にフィブリンが演じる役割は、現在のところ全く、または十分な程度には調べられていない。フィブリンは、そのＢベータの新しいＮ末端を介して、Ｂベータへの配列により内皮細胞に、そしてＡアルファの配列により血流中の細胞に結合し、そのことにより組織への細胞の接着および遊出を導く。
【０００７】
上記の機構により、本発明によるペプチドまたはタンパク質は、血流から血管壁の内皮細胞への細胞の接着、および／または血液から組織へのそれらのその後の遊出を妨げ得る。
【０００８】
急性炎症性疾患に関連する主な異常の１つは、内皮バリア機能の喪失である。内皮の構造的および機能的な完全性は、バリア機能の維持に必要であり、これらのいずれかが損なわれると、溶質および過剰の血漿流体が単層を通って漏れ出し、組織浮腫と炎症性細胞の遊走をもたらす。多くの薬剤が、収縮または退縮のような内皮細胞形状変化を誘発して単層透過性を増加させて、細胞間隙の形成を導く（ＬｕｍおよびＭａｌｉｋ、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２６７：Ｌ２２３〜Ｌ２４１（１９９４）。これらの薬剤は、例えば、トロンビン、ブラジキニンおよび血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）を含む。
【０００９】
血管壁の透過性亢進は、過剰の流体およびタンパク質が間質空間に漏れ出すことを許容する。この急性の炎症性事象は、組織虚血および急性臓器不全としばしば結びつく。活性化された内皮細胞（ＥＣ）の部位で形成されるトロンビンは、近接するＥＣ間の大きい傍細胞性の穴の形成により、この微小血管バリア不全を開始する（Ｃａｒｂａｊａｌら、Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  ２７９：Ｃ１９５〜Ｃ２０４、２０００）。このプロセスは、Ｆアクチン依存性細胞骨格収縮張力の発生を開始するミオシン軽鎖リン酸化（ＭＬＣＰ）によるＥＣの形状の変化を特徴とする（Ｇａｒｃｉａら、Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．１９９５；１６３：５１０〜５２２  ＬｕｍおよびＭａｌｉｋ、Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｈｅａｒｔ  Ｃｉｒｃ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．２７３（５）：Ｈ２４４２〜Ｈ２４５１．（１９９７）。
【００１０】
トロンビンにより誘導される内皮透過性亢進は、細胞間接着の変化によっても媒介され得る（Ｄｅｊａｎａ  Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９８：１９４９〜１９５３（１９９６）。内皮細胞間接着は、接着接合を形成するＣａ依存性細胞間接着分子である血管内皮（ＶＥ）カドヘリン（カドヘリン５）の機能により主に決定される。カドヘリン５の機能は、ａ−カテニン（ビンクリンと相同）およびＦアクチン細胞骨格と次に結合するアクセサリータンパク質であるｂ−カテニン、プラコグロビン（ｇ−カテニン）およびｐ１２０との会合により、細胞質側から調節される。
【００１１】
ＶＥカドヘリンは、微小血管透過性と、血管新生に関連する形態学的および増殖性の事象とにおいて基本的な役割を演じる接着分子として明らかになった（Ｖｉｎｃｅｎｔら、Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ、２８６（５）：Ｃ９８７〜Ｃ９９７（２００４）。その他のカドヘリンと同様に、ＶＥカドヘリンは、カルシウム依存性の同種親和性接着を媒介し、細胞骨格のための細胞膜結合部位として機能する。しかし、ＶＥカドヘリンは、血管内皮独自に重要なシグナル伝達経路および細胞系に組み込まれる。内皮細胞の生物学および生理学における最近の進歩により、接着分子のカドヘリンファミリーのメンバーのうちで独特であろうＶＥカドヘリンの特性が明らかになっている。これらの理由から、ＶＥカドヘリンは、カドヘリンファミリーの原型であり、しかも機能および生理的関連性において独特でもあるカドヘリンの代表である。血管バリア機能、血管新生および心血管性生理学に対するＶＥカドヘリンの寄与について、いくつかの優れた概説が検討している。
【００１２】
ＶＥカドヘリンにより媒介される細胞間接着が、カドヘリンおよびカテニンを含む接合部タンパク質のリン酸化と脱リン酸化との間の動的平衡により制御されるとの証拠が、積み上げられている。ｂ−カテニンのチロシンリン酸化の増加が、カドヘリンおよび細胞骨格からのカテニンの解離をもたらし、弱い接着接合（ＡＪ）を導いた。同様に、ＶＥカドヘリンおよびｂ−カテニンのチロシンリン酸化は緩いＡＪで生じ、かたく集密な単層において著しく低減された（Ｔｉｎｓｌｅｙら、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ、２７４、２４９３０〜２４９３４（１９９９）。
【００１３】
さらに、接着接合におけるＶＥカドヘリン単量体の正しいクラスタリングは、ＶＥカドヘリンの正しいシグナル伝達活性にとって不可欠である。なぜなら、全長ＶＥカドヘリン細胞質尾部を含むキメラ変異体（ＩＬ２−ＶＥ）を有する細胞は、ベータ−カテニンおよびｐ１２０に結合するその能力にもかかわらず、正しいシグナル伝達を引き起こすことができないからである（Ｌａｍｐｕｇｎａｎｉら、Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．ｏｆ  ｔｈｅ  Ｃｅｌｌ、１３、１１７５〜１１８９（２００２）。
【００１４】
Ｒｈｏ  ＧＴＰアーゼは、細胞のアクチン細胞骨格に対する重大な作用を有する小さいＧＴＰアーゼのファミリーである。これらは、血管系の機能に関しては、細胞形状、細胞収縮、細胞運動性および細胞接着の調節に関与する。Ｒｈｏ  ＧＴＰアーゼの最も著名な３つのファミリーメンバーは、ＲｈｏＡ、Ｒａｃおよびｃｄｃ４２である。ＲｈｏＡの活性化は、細胞内でｆアクチンストレス繊維の形成を誘導し、一方、Ｒａｃおよびｃｄｃ４２は、それぞれ膜のひだおよびマイクロスパイクを誘導することによりアクチン細胞骨格に影響する（Ｈａｌｌ、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２７９：５０９〜５１４．１９９８）。Ｒａｃおよびｃｄｃ４２は、タンパク質ＰＡＫの活性化により、限定された範囲でＭＬＣＫ活性に影響し得るが（ＧｏｅｃｋｅｌｅｒらＪ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２７５、２４、１８３６６〜１８３７４（２０００）、ＲｈｏＡは、ＭＬＣのリン酸化状態を安定化するその能力により、アクチン−ミオシン相互作用に対して顕著な刺激効果を有する（Ｋａｔｏｈら、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２８０、Ｃ１６６９〜Ｃ１６７９（２００１）。このことは、Ｒｈｏキナーゼの活性化により生じ、これが次いで、リン酸化ＭＬＣを加水分解するホスファターゼＰＰ１Ｍを阻害する。さらに、Ｒｈｏキナーゼは、コフィリンのアクチン切断作用を阻害し、よってｆアクチン繊維を安定化する（Ｔｏｓｈｉｍａら、Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．ｏｆ  ｔｈｅ  Ｃｅｌｌ．１２、１１３１〜１１４５（２００１）。さらに、Ｒｈｏキナーゼは、細胞膜においてタンパク質にアクチン細胞骨格をつなぎとめることに関与することもあり、よって、接合部タンパク質とアクチン細胞骨格との間の相互作用に対して潜在的に作用する可能性がある（Ｆｕｋａｔａら、Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  １４５：３４７〜３６１（１９９９）。
【００１５】
トロンビンは、Ｇα１２／１３およびいわゆるグアニンヌクレオチド交換因子（ＧＥＦ）を介してＲｈｏＡを活性化できる（Ｓｅａｓｈｏｌｔｚら；Ｍｏｌ：Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５５、９４９〜９５６（１９９９）。ＧＥＦは、ＲｈｏＡと結合したＧＤＰをＧＴＰに交換し、そのことによりＲｈｏＡが活性になる。この活性化により、ＲｈｏＡは膜に転位され、ここでこれはその親油性ゲラニル−ゲラニル−アンカーにより結合する。
【００１６】
ＲｈｏＡは、リゾホスファチジン酸、トロンビンおよびエンドセリンを含むいくつかの血管作動薬により活性化され得る。膜に結合したＲｈｏＡは、グアニン解離阻害因子（ＧＤＩ）の作用により、またはＧＴＰアーゼ活性化タンパク質（ＧＡＰ）の作用の後に膜から解離される。グアニン解離阻害因子（ＧＤＩ）は、ＲｈｏＡのカルボキシル末端に結合する調節タンパク質である。
【００１７】
ＧＤＩは、ＧＤＰの解離を遅らせ、活性ＲｈｏＡを細胞膜から引き離すことにより、ＲｈｏＡの活性を阻害する。トロンビンは、ヒト内皮細胞においてＲｈｏＡを直接活性化し、細胞膜へのＲｈｏＡの転位を誘導する。同じ条件下で、関連するＧＴＰアーゼであるＲａｃは活性化されなかった。クロストリジウム・ボツリナムからのＣ３トランスフェラーゼによるＲｈｏＡの特異的阻害は、内皮ＭＬＣリン酸化および透過性のトロンビンにより誘導される増加を低減したが、透過性の一過的なヒスタミン依存性の増加には影響しなかった（ｖａｎ  Ｎｉｅｕｗ  ＡｍｅｒｏｎｇｅｎらＣｉｒｃ  Ｒｅｓ．１９９８；８３：１１１５〜１１２３１（１９９８）。ＲｈｏＡの影響は、Ｒｈｏキナーゼにより媒介されるようである。なぜなら、特異的Ｒｈｏキナーゼ阻害剤Ｙ２７６３２は、トロンビンにより誘導される内皮透過性を同様に低減したからである。
【００１８】
Ｒａｃ１およびＲｈｏＡは、内皮バリア機能に対して拮抗効果を有する。急性低酸素症は、正常成体肺動脈内皮細胞（ＰＡＥＣ）においてＲａｃ１を阻害し、かつＲｈｏＡを活性化し、このことは、バリア機能の崩壊を導く（Ｗｏｊｃｉａｋ−ＳｔｏｔｈａｒｄおよびＲｉｄｌｅｙ、Ｖａｓｃｕｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、３９：１８７〜９９（２００２）。慢性低酸素症により誘導される肺高血圧症の子豚からのＰＡＥＣは、Ｒａｃ１の持続的な低下とＲｈｏＡ活性の増加という安定した異常表現型を有する。これらの活性は、内皮細胞骨格、接着接合および透過性における変化と関連する。Ｒａｃ１の活性化およびＲｈｏＡの阻害は、異常な表現型および透過性を正常に戻した（Ｗｏｊｃｉａｋ−Ｓｔｏｔｈａｒｄら、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ，Ｌｕｎｇ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２９０、Ｌ１１７３〜Ｌ１１８２（２００６）。
【００１９】
Ｒａｃ１を活性化し、ＲｈｏＡ活性を正常かつ安定な状態の内皮細胞で観察されるレベルにまで低減する物質は、よって、内皮透過性亢進を低減し、いくつかの疾患において有益な治療効果を有すると期待できる。好ましくは、この効果は、接着接合におけるＶＥカドヘリンのクラスタリングの安定化によりもたらされる。ＶＥカドヘリンに結合するタンパク質の細胞内複合体の重要な構成成分は、ｓｒｃチロシンキナーゼのメンバーであるキナーゼであるｆｙｎである。本発明の主題である化合物のＶＥカドヘリンへの結合は、ＶＥカドヘリンからのｆｙｎの解離を引き起こし、これが次いでトロンビンにより誘導される活性ＲｈｏＡの不活性化を導く。
【００２０】
ＷＯ９２１６２２１は、例えばメトキシ−ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）のような長鎖ポリマーに共有結合するポリペプチドについて記載している。このようなポリマーへのポリペプチドの結合は、これらのポリペプチドの生物学的半減期の延長をしばしばもたらし、それらの腎排泄を遅らせる。これらの特性の概要は、Ｄａｖｉｓら、Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｕｓｅ、４４１〜４５１ページ（１９８０）に見出すことができる。ＰＥＧ基の付加は、ＰＥＧ化ペプチドの分子量に比例してこの効果を発揮する。なぜなら、分子のあるサイズまでは、糸球体ろ過率が分子量に逆比例するからである。
【００２１】
ＷＯ２００４／１０１６００も、新しいポリ（エチレングリコール）修飾化合物およびそれらの使用について記載し、特に、エリスロポエチン受容体を活性化する修飾ペプチドを強調している。
【００２２】
ペプチドおよびタンパク質のＰＥＧ残基の共有結合修飾についてのさらなる例は、インターロイキン（Ｋｎａｕｆら、Ｊ．Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．１９８８、２６３、１５０６４；Ｔｓｕｔｕｍｉら、Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  １９９５、３３、４４７）、インターフェロン（Ｋｉｔａら、Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｓ．１９９０、６  １５７）、カタラーゼ（Ａｂｕｃｈｏｗｓｋｉら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９９７、２５２、３５８２）である。従来技術の概説は、Ｒｅｄｄｙ、Ａｎｎ．ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ、２０００、３４、９１５で見出すことができる。
【００２３】
延長された生物学的半減期は、ペプチドの種々の治療的な使用にとって有利である。特に、長期間にわたる活性薬剤の投与が適応となる慢性疾患の場合にはそうである。このような適用とともに、患者の服薬遵守を改善し得る。なぜなら、活性薬剤を１日１回投与することは、例えば、連続注入よりも容易に受け入れられるからである。共有結合修飾により分子質量を増加させることとは別に、ポリペプチドの持続性は、タンパク質分解酵素（例えばエキソ−またはエンドプロテアーゼもしくはペプチダーゼ）によるそれらの分解を妨げるような様式でそれらを修飾することにより延長され得る。
【００２４】
非修飾ペプチドと比較して薬物動態的効果に対する著しい影響を妨げるように、各ペプチドの適切な修飾をカスタマイズすることが必要であることが、種々の例を用いて示されている。この関係において、以下を参照できる：カルシトニン（ＬｅｅらＰｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１９９９、１６、８１３）、成長ホルモン放出ホルモン（Ｅｓｐｏｓｉｔｏら、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ、２００３、５５、１２７９）、グルカゴン様ペプチド１（Ｌｅｅら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｒｅｓ．２００５、１６、３７７）および成長ホルモン受容体拮抗剤であるペグビソマント（Ｒｏｓｓら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎ．Ｍｅｔａｂ．２００１、８６、１７１６）。ＣａｌｉｃｅｔｉおよびＶｅｒｏｎｅｓｅ（Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．２００３、５５  １２６１）、ならびにＨａｒｒｉｓおよびＣｈｅｓｓ（Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ２００３、２、２１４）による概説は、ペプチド−またはタンパク質−ＰＥＧコンジュゲートを設計する場合に、元来の物質の構造、ペプチドおよびポリマーの分子量、コンジュゲートさせるポリマー鎖の数、ならびにリンカー化学を、効果的なペプチド−ＰＥＧコンジュゲートが得られるように考慮する必要があることを論じている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２５】
驚くべきことに、Ｂベータ（１５−４２）フィブリンフラグメントの鎖に由来するペプチドおよびペプチド模倣物（これらにおいては、１つまたは複数のアミノ酸が除去され、その代わりにペプチド主鎖中のベンドもしくはターンを容易にするアミノ酸またはペプチド模倣要素を含む）、ならびにペプチド配列のＣ末端が修飾された誘導体も、強い抗炎症効果および内皮安定化効果を有することが、今回、見出された。同じことが、このようなターン誘導要素を含むＢベータ（１５−４２）フィブリンフラグメントの基本配列に一般に由来するペプチド−ＰＥＧコンジュゲートおよびペプチド模倣物−ＰＥＧコンジュゲートについても、ペプチド、ペプチド模倣物およびそれらの誘導体（これらは修飾されており、それによってプロテアーゼまたはペプチダーゼによる分解が妨げられている）についても、当てはまる。
【課題を解決するための手段】
【００２６】
よって、本発明は、Ｂベータ（１５−４２）−フィブリンフラグメントの鎖に由来し、配列の１つまたはいくつかのアミノ酸が、遺伝子的にコードされるかもしくは遺伝子的にコードされないアミノ酸またはペプチド模倣物（これらはペプチド主鎖中にベンドまたはターンを誘導する性質を有する）により置換された、修飾されたペプチドおよびペプチド模倣物に関する。
【００２７】
本発明の化合物は、治療される温血動物のフィブリンの天然配列と比較して、アミノ酸の保存的置換を１つまたはいくつかの位置に有してもよい。保存的置換とは、それぞれのアミノ酸の側鎖が、類似の化学構造および極性を有する側鎖（遺伝子的にコードされるかもしくは遺伝子的にコードされないアミノ酸に由来する）で置き換えられること、と定義される。類似の側鎖を有するこの種のアミノ酸のファミリーは、当技術分野において知られている。これらは、例えば、塩基性側鎖（リジン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖（アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性側鎖（グリシン、アスパラギン（ａｓｐａｒｔａｍｉｃ  ａｃｉｄ）、グルタミン、セリン、スレオニン、チロシン、システイン）、非極性側鎖（アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）、ベータ分岐側鎖（スレオニン、バリン、イソロイシン）および芳香族側鎖（チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）を有するアミノ酸を含む。側鎖のこのような保存的置換は、好ましくは、非本質的（ｎｏｎ−ｅｓｓｅｎｔｉａｌ）の位置で行うこともできる。この関係において、配列中の本質的位置とは、関連するアミノ酸の側鎖がその生物学的効果にとって重要である位置である。
【００２８】
本発明は、特に、以下の一般式Ｉ：
以下の一般式Ｉ：
Ｈ2Ｎ−ＧＨＲＰＸ1Ｘ2Ｘ3−β−Ｘ4Ｘ5Ｘ6Ｘ7Ｘ8Ｘ9Ｘ10−Ｘ11（Ｉ）
｛式中、
Ｘ1〜Ｘ10は、遺伝子的にコードされる（ｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙ  ｃｏｄｅｄ）２０のアミノ酸の１つを表し、Ｘ8、Ｘ9およびＸ10は、個別にまたは一緒に、単化学結合（ｓｉｎｇｌｅ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｂｏｎｄ）を表してもよく；
Ｘ11は、ＯＲ1（式中、Ｒ1は水素または（Ｃ1〜Ｃ10）アルキルである）、ＮＲ2Ｒ3［Ｒ2およびＲ3は同じかまたは異なり、水素、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキル、または残基  −Ｗ−ＰＥＧ5-60K（式中、ＰＥＧ残基は適切なスペーサーＷを介してＮ原子と結合している）を表す]、または残基  ＮＨ−Ｙ−Ｚ−ＰＥＧ5-60K（式中、Ｙは、単化学結合またはＳ、Ｃ、ＫもしくはＲの群からの遺伝子的にコードされるアミノ酸を表し、Ｚは、それを介してポリエチレングリコール（ＰＥＧ）残基が結合できるスペーサーを表す）を表す；
さらに、式中、
βは、ペプチド主鎖中にベンドまたはターンを誘導するというさらなる特性を有する、遺伝子的にコードされていてもされていなくてもよいアミノ酸、またはペプチド模倣要素を表す）
のペプチド、ペプチド模倣物およびそれらの誘導体に関する。
【００２９】
このようなアミノ酸は、限定されないが、Ｌ−プロリン、Ｄ−プロリン、Ｌ−ヒドロキシプロリン、Ｄ−ヒドロキシプロリン、Ｌ−（Ｏ−ベンジル）−ヒドロキシプロリン、Ｄ−（Ｏ−ベンジル）−ヒドロキシプロリン、Ｌ−（Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル）−ヒドロキシプロリン、４−（Ｏ−２−ナフチル）−ヒドロキシプロリン、４−（Ｏ−２−ナフチル−メチル）−ヒドロキシプロリン、４−（Ｏ−フェニル）−ヒドロキシプロリン、４−（４−フェニル−ベンジル）−プロリン、ｃｉｓ−３−フェニル−プロリン、ｃｉｓ−４−フェニル−プロリン、ｔｒａｎｓ−４−フェニル−プロリン、ｃｉｓ−５−フェニル−プロリン、ｔｒａｎｓ−５−フェニル−プロリン、４−ベンジル−プロリン、４−ブロモベンジル−プロリン、４−シクロヘキシル−プロリン、４−フルオロ−プロリン、Ｌ−テトラヒドロイソキノリン−２−カルボン酸（Ｌ−Ｔｉｃ）、オクタヒドロ−インドール−２−カルボン酸（Ｏｉｃ）の全てのジアステレオマー、および１−アザ−ビシクロ［３．３．０］オクタン−２−カルボン酸の全てのジアステレオマーを含む。ターン誘導特性を有するさらなるアミノ酸は、当業者に知られており、それらを含む式Ｉの化合物も本発明の主題である。
【００３０】
本発明に関するペプチド模倣要素は、ペプチド鎖の１つまたはいくつかのアミノ酸を置き換えることができ、ペプチド主鎖中にベンドまたはターンを誘導するというさらなる特性も有する残基である。いくつかのこのような残基は、例えば、特許出願ＷＯ２００５／０５６５７７に記載されており、ここでは、これらはペプチド性ＨＩＶ阻害剤の調製のために用いられた。
【００３１】
本発明の目的のための有用な選択されるペプチド模倣要素は、限定されないが、以下のとおりである：
【００３２】
【表１】
2011523634.tif 000002
2011523634.tif 000003
2011523634.tif 000004
2011523634.tif 000005
2011523634.tif 000006
2011523634.tif 000007
【００３３】
本発明の好ましい対象は、
Ｘ1、Ｘ4が、Ｌ、Ｉ、Ｓ、ＭまたはＡを表し、
Ｘ2が、ＥまたはＤを表し、
Ｘ3が、ＲまたはＫを表し、
Ｘ5、Ｘ6、Ｘ7が、Ａ、Ｇ、ＳまたはＬを表し、
Ｘ8が、Ｇ、ＡもしくはＬまたは単化学結合を表し、
Ｘ9が、Ｙ、Ｆ、Ｈまたは単化学結合を表し、
Ｘ10が、Ｒ、Ｋまたは単化学結合を表し、
βおよびＸ11が、上記の意味を有する、
一般式Ｉの化合物およびそれらの生理的に許容される塩である。
【００３４】
特に好ましい本発明の対象は、一般式ＩＩの化合物：
Ｈ2Ｎ−ＧＨＲＰＬＤＫ−β−ＩＳＧＧＸ8Ｘ9Ｘ10−Ｘ11（ＩＩ）
（式中、Ｘ8、Ｘ9、Ｘ10およびＸ11は、式Ｉについての上記の意味を有する）
およびそれらの生理的に許容される塩である。
【００３５】
最も好ましい本発明の対象は、
Ｘ11が、ＮＲ2Ｒ3（式中、Ｒ2およびＲ3は同じか異なり、水素または（Ｃ1〜Ｃ10）アルキルを表す）、または残基  Ｃ（ＮＲ2Ｒ3）−（Ｓ−スクシンイミド）−（ＰＥＧ5-40K）（式中、スクシンイミド残基は、システイン残基の硫黄原子に、スクシンイミド環の炭素原子３を介して結合している）を表す、
一般式ＩＩの化合物およびそれらの生理的に許容される塩である。
【００３６】
上記の式ＩおよびＩＩにおいて、以下の文字は、タンパク質およびペプチドについての以下の一般的な注釈に従うアミノ酸残基を表す：フェニルアラニンはＦであり、ロイシンはＬであり、イソロイシンはＩであり、メチオニンはＭであり、バリンはＶであり、セリンはＳであり、プロリンはＰであり、スレオニンはＴであり、アラニンはＡであり、チロシンはＹであり、ヒスチジンはＨであり、グルタミンはＱであり、アスパラギンはＮであり、リジンはＫであり、アスパラギン酸はＤであり、グルタミン酸はＥであり、システインはＣであり、トリプトファンはＷであり、アルギニンはＲであり、グリシンはＧである。
【００３７】
式Ｉの化合物中のアミノ酸残基は、それらのＤまたはＬの立体配置のいずれかで存在し得る。
【００３８】
用語ペプチドとは、アミド結合により結合するこれらのアミノ酸のポリマーのことをいう。
【００３９】
「生理的に許容される」とは、ヒトに対して用いたときにその付加が望ましくない影響を有さない酸または塩基を用いて塩が形成されることを意味する。その使用が、温血動物、特にヒトでの使用について米国薬局方またはいずれかのその他の一般的に認識される薬局方に収載されている酸または塩基との塩が好ましい。
【００４０】
ＰＥＧは、５０００〜６００００ダルトンの分子量を有するポリエチレングリコール残基を表し、この分子量は、分子量分布の最大値であるので、混合物の個別の構成成分は、より高いかまたはより低い分子量を有し得る。
【００４１】
本発明は、さらに、一般式（Ｉ）のペプチドおよびペプチド誘導体の製造方法であって、
（Ａ）それぞれの配列のＣ末端の最初のアミノ酸を、適切な切断可能なスペーサーを介してポリマー樹脂と結合させ、官能基の適切な保護基を任意選択的に含んでいてもよいそれ以降のアミノ酸またはペプチド模倣要素を、当技術分野において知られる方法に従って段階的に結合させ、完成したペプチドを、当技術分野において知られる適切な方法に従ってポリマー樹脂から切り離し、存在する場合は保護基を適切な方法により切り離し、ペプチドまたはペプチド誘導体を適切な方法に従って精製する、または
（Ｂ）所望の分子量を有するＰＥＧ基を、適切なスペーサーを介してポリマー樹脂と結合させ、ペプチドのＮ末端の最初のアミノ酸を、適切な方法を用いて結合させ、残りのステップは（Ａ）に記載のものと同様に行う、または
（Ｃ）ε−アミノ基に適切な保護基を含むリジン残基を、適切なスペーサーを介して適切な方法を用いて適切なポリマー樹脂と結合させ、ペプチド鎖を、（Ａ）に記載されるようにして合成し、ポリマー樹脂から切断し精製した後、必要であれば、ε−アミノ基の保護基を適切な方法を用いて切り離し、所望の分子量を有するＰＥＧ基を、適切な活性化剤を用いてε−アミノ基と結合させ、任意選択的に残存している保護基を切り離し、最終生成物を適切な方法を用いて精製すること、または
（Ｄ）システイン残基を含むペプチドをＰＥＧ−マレイミドと反応させて、請求項３、４および５のいずれか一項に記載の式（ＩＩ）の化合物を形成すること、
のいずれかを特徴とする方法に関する。
【００４２】
（Ａ）、（Ｂ）または（Ｃ）に従う適切な処理ステップおよび適切な試薬は、例えばＷＯ２００４／１０１６００の文献に記載されている。
【００４３】
それぞれの処理ステップの実施形態はそれ自体新しくなく、有機合成の分野の経験のある専門家にとって明確である。
【００４４】
ＰＥＧ残基をペプチド鎖に結合させる方法は、当業者に知られる。例えば、システイン（Ｃ）残基をＰＥＧ−マレイミドと反応させて、残基Ｚのためのスペーサーとしてのスクシンイミド残基を得ることができる。さらなる可能性は、任意選択的に活性化したＣ末端カルボキシ残基を、アミノアルキル置換ＰＥＧ残基と反応させることである。さらなる可能性は、アルデヒド置換ＰＥＧ残基をリジン残基のε−アミノ官能基と反応させることによるＰＥＧ残基の導入である。適切なスペーサーと反応性基とを有する活性化ＰＥＧ試薬は、例えばＮＯＦ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｔｏｋｙｏ、Ｊａｐａｎ）から得ることができる。
【００４５】
本発明による物質および医薬品の製造のための本発明による物質の使用は、白血球細胞の組織損傷効果に起因するかまたは血管を裏打ちする内皮細胞の層の完全性および完全な生理的完全性が損なわれる疾患の治療のための医薬品の製造のために、特に重要である。
【００４６】
この群に属する疾患は自己免疫の関係のものであり、膠原病、リウマチ性疾患、クローン病または潰瘍性大腸炎のような炎症性腸疾患、乾癬および乾癬性関節リウマチ、ならびに後／感染随伴性（ｐａｒａｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ）疾患とともに、移植片対宿主反応により引き起こされる疾患などが例示される。この医薬が、組織内への白血球細胞の遊走を遮断するので、治癒効果が生じる。よって、白血球細胞は血流中に残り、組織にとって有害な自己反応性の影響を引き起こすことができない。本発明の物質のこの効果は、ショック状態、特にグラム陽性またはグラム陰性の細菌病原体への感染およびウイルス感染により誘発される敗血性ショック、ならびに重度の外傷または細菌もしくはウイルス感染による重度の血液喪失により引き起こされる出血ショックの場合の治療にとってさらに重要である。
【００４７】
本発明の物質は、「全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）」、「急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）」、「毛細管漏出症候群（ＣＬＳ）」および臓器または多臓器不全の用語でそれぞれ表すことができる状態において一般的に用いてよい。
【００４８】
臓器移植の拒絶反応の治療および／または予防のための医薬品は、治癒効果を伴う。なぜなら、この医薬品は、血流中からドナーの臓器中への白血球細胞の遊走を妨げ、したがってドナー臓器が例えば自己反応性リンパ球により損傷され得ない。
【００４９】
動脈硬化の治療および／または予防のための医薬品は、治癒および／または予防効果を伴う。なぜなら、この医薬品は、組織の壁の中へのリンパ球および単球の遊走を遮断し、よって組織壁の細胞の活性化を遮断するからである。よって、動脈硬化の進行が最小限になるかまたは停止され、それに起因する動脈硬化プラークの進展が阻害され、それにより動脈硬化が抑制される。
【００５０】
例えば経皮的冠動脈インターベンション、脳卒中、血管手術、心臓バイパス手術および臓器移植の後などの、手術または医薬的に行われた血液の再供給の後の再潅流性傷害の治療および／または予防のための医薬品は、治癒および／または予防効果を伴う。なぜなら、この医薬品は、血管壁の中へのリンパ球、好中球および単球の遊走を阻害するからである。再潅流傷害は、血液の再供給中の血管の細胞の酸素欠乏／アシドーシスにより引き起こされ、その活性化および／または損傷を導く。このことにより、リンパ球、好中球および単球は血管壁に接着し、その中に遊走する。血管壁へのリンパ球、好中球および単球の接着ならびに遊走を遮断することは、血管への永続的な損傷を引き起こすその後の炎症性反応を起こすことなく、低酸素症（ｈｙｐｏｘｙ）／アシドーシスにより誘導される損傷を減少させる。本発明の化合物の内皮安定化効果は、さらに、浮腫の形成、およびそれぞれの血管を経て供給される臓器へのさらなる損傷も妨げる。
【００５１】
代謝疾患の結果または加齢のプロセスとしての動脈硬化の治療および／または予防のための医薬品は、治癒および／または予防効果を伴う。なぜなら、この医薬品は、血管壁中へのリンパ球、好中球および単球の遊走を阻害し、よってそれに起因する動脈硬化プラークの悪化が阻害されるからである。
【００５２】
本発明による医薬品は、別の薬物の輸送のために用いてもよい。本発明の薬物は、内皮細胞の表面分子に特異的に結合する。よって、そこに結合した薬物は、他の部位にて副作用を示すいずれの危険性もなく、高濃度で内皮細胞に送達され得る。本明細書中で挙げることができる例は、内皮細胞に特異的にもたらされて、血管新生抑制効果を有し得る細胞分裂を阻害する物質の使用である。これは、腫瘍患者において治癒効果を引き起こす。なぜなら、内皮細胞の増殖を妨げ、そのことにより新しい血管新生を妨げることにより腫瘍の成長が遮断されるからである。本発明の化合物は、それ自体で、血管新生抑制効果を生じることもできる。なぜなら、これらは、内皮安定化効果により、内皮細胞が増殖性の表現型に変化することを妨げ、よって、新しい毛細血管の形成を妨げるからである。よって、これら自身が、全ての種類の腫瘍疾患の治療、ならびに腫瘍転移の予防および／または治療に適する。
【００５３】
式（Ｉ）の本発明の化合物は、医薬的なアジュバントおよび添加剤と一緒に、これもまた本発明の対象である医薬調製物に調剤してもよい。このような製剤を調製するために、ペプチドまたはペプチド誘導体の治療有効用量を、薬学的に許容される希釈剤、安定化剤、可溶化剤、乳化補助剤、アジュバントまたは担体と混合し、適切な治療形態にする。このような調製物は、例えば、異なるｐＨおよびイオン強度の種々の緩衝剤の希釈物（例えばＴｒｉｓ−ＨＣｌ、酢酸塩、リン酸塩）、界面活性剤および可溶化剤（例えばＴｗｅｅｎ８０、Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔ８０）、抗酸化剤（例えばアスコルビン酸）および充填剤（例えばラクトース、マンニトール）を含有する。これらの剤型は、活性薬剤のバイオアベイラビリティーおよび代謝挙動に影響し得る。
【００５４】
本発明による医薬調製物は、経口、非経口（筋肉内、腹腔内、静脈内または皮下）、経皮的に、または適切な生体分解性ポリマー（例えばポリラクテートまたはポリグリコレート）の浸食性インプラント中で投与してよい。
【００５５】
ＲｈｏＡ活性化およびその結果としての内皮細胞の細胞骨格構造における変化の防止に関する本発明による化合物の有効性は、例えば、下記のステップを含む方法により証明し得る：
ａ．培養内皮細胞のコンフルエント層を、少なくとも１つの試験化合物の存在下でトロンビンと接触させるステップと、
ｂ．内皮細胞を溶解緩衝液で溶解するステップと、
ｃ．ＲｈｏＡ活性を特異的アッセイ、好ましくはいわゆる「プルダウンアッセイ」（ｐｕｌｌ  ｄｏｗｎ  ａｓｓａｙ）を用いて測定するステップ。
【００５６】
ｉｎ  ｖｉｖｏでの有効性は、例えば、げっ歯類における急性肺炎モデルを用いて実証し得る。急性肺炎は、例えば、細菌リポ多糖（ＬＰＳ）の気管内注入によりマウスに引き起こす。活性物質の効果は、肺洗浄中の動物に注入されたエバンスブルーの量を測定すること、または肺洗浄流体中の血管外遊出白血球数を測定することにより測定する。本発明の化合物は、０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜５００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の用量、好ましくは０．１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの範囲の用量にて効果を示す。
【００５７】
生物学的効果をｉｎ  ｖｉｖｏで確立するためのさらなる可能性は、溶血性ウイルスまたは細菌への感染による死亡率の低減または完全な抑制である。この目的のために、マウスに、例えば、感染後５〜２０日以内の期間に動物の５０％が死亡するデングウイルスの用量を感染させる。本発明の化合物は、この死亡率の低減を、０．００１〜５００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の用量、好ましくは０．１〜５０ｍｇ／ｇ体重の範囲の用量にてもたらす。
【発明を実施するための形態】
【００５８】
以下の実施例は、本発明をこれらの実施例に限定することなく、本発明を例示するものである。
【００５９】
本発明によるペプチドの全般的な調製および精製
上記ペプチド誘導体の調製および精製は、通常、文献（例えば、Ｅ．Ａｔｈｅｒｔｏｎ、Ｒ．Ｃ．Ｓｈｅｐｐａｒｄによる「ｓｏｌｉｄ  ｐｈａｓｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ−Ａ  ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ａｐｐｒｏａｃｈ」、Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｐｒｅｓｓ  １９８９）にも記載されている、市販のバッチペプチド合成機を用いる酸不安定性樹脂支持体上でのＦＭＯＣ−方法（ｓｔｒａｔｅｇｙ）によって行う。官能性側鎖が酸感応性（ａｃｉｄ−ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ）保護基で保護されたＮ−アルファ−ＦＭＯＣ保護誘導体を、アミノ酸成分として用いる。そうでないと記載しない限り、精製は、水／アセトニトリル勾配と、イオン対試薬としての０．１％ＴＦＡとを用いるＲＰクロマトグラフィーにより行う。
【実施例１】
【００６０】
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１Ｓ，２Ｒ）Ａｃｈｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
０．２４ｍｍｏｌ／ｇの最初のアミノ酸としてのＦＭＯＣ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）を有する１００ｍｇのＴｅｎｔａｇｅｌ（Ｒａｐｐ  Ｐｏｌｙｍｅｒｅ）を、市販のペプチド合成装置（ＰＳＭＭ（Ｓｈｉｍａｄｚｕ））に移し、ここでペプチド配列を、カルボジイミド／ＨＯＢｔ法に従って段階的に構築する。
【００６１】
ＦＭＯＣ−アミノ酸誘導体を、５倍等モル過剰量のジ−イソプロピル−カルボジイミド（ＤＩＣ）、ジ−イソプロピル−エチルアミン（ＤＩＰＥＡ）およびヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）を加えることによりあらかじめ活性化し、これらを反応容器に移した後、樹脂支持体と３０分間混合する。洗浄ステップは、９００μｌのＤＭＦの５回の添加および１分間の十分な混合により行う。切断ステップは、３×９００μｌのＤＭＦ中の３０％ピペリジンの添加および４分間の十分な混合により行う。
【００６２】
個別の反応溶液および洗浄溶液の除去は、反応容器の底のフリット（ｆｒｉｔ）に溶液を通過させることにより行う。
【００６３】
アミノ酸誘導体ＦＭＯＣ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）、ＦＭＯＣ−Ａｓｐ、ＦＭＯＣ−Ｇｌｙ、ＦＭＯＣ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）、ＦＭＯＣ−Ｉｌｅ、ＦＭＯＣ−Ｌｅｕ、ＦＭＯＣ−Ｌｙｓ（ＢＯＣ）、ＦＭＯＣ−（１Ｓ，２Ｒ）−Ａｃｈｃ、ＦＭＯＣ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）およびＦＭＯＣ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）（ＮｅｏＭＰＳ）を用いる。
【００６４】
合成が完了すると、ペプチド樹脂を乾燥させる。その後、ペプチドアミドを、トリフルオロ酢酸／ＴＩＳ／ＥＤＴ／水（９５：２：２：１容量）による室温で２時間の処理により切り出す。ろ過、溶液の濃縮および氷冷ジエチルエーテルの添加による沈殿により粗生成物（７５ｍｇ）が固体として得られる。
【００６５】
ペプチドを、１２ｍｌ／ｍｉｎの流速にて４０分間で５から６０％の勾配のアセトニトリルを用いる０．１％ＴＦＡ中のＫｒｏｍａｓｉｌ  ＲＰ−１８  ２５０−２０、１０μｍでのＲＰ−ＨＰＬＣと、２１５ｎｍでのＵＶ検出器による溶出液の評価とにより精製する。個別の画分の純度は、分析ＲＰ−ＨＰＬＣおよび質量分析法により決定する。精製画分の組合せと凍結乾燥の後に、４８ｍｇの純粋生成物が得られる。Ｍａｌｄｉ−ＴＯＦ、１６３８．７ｍ／ｚ（ｍ．ｉ．）。
【実施例２】
【００６６】
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｄｎ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
この化合物の固相合成は、実施例１の記載に従って行った。このカップリングステップにおいて用いたアミノ酸およびペプチド模倣誘導体は、ＦＭＯＣ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）、ＦＭＯＣ−Ａｓｐ、ＦＭＯＣ−Ｇｌｙ、ＦＭＯＣ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）、ＦＭＯＣ−Ｉｌｅ、ＦＭＯＣ−Ｌｅｕ、ＦＭＯＣ−Ｌｙｓ（ＢＯＣ）、ＦＭＯＣ−Ａｃｄｎ、ＦＭＯＣ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）およびＦＭＯＣ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）（ＮｅｏＭＰＳ）であった。
【００６７】
合成が完了すると、ペプチド樹脂を乾燥させる。その後、ペプチドアミドを、トリフルオロ酢酸／ＴＩＳ／ＥＤＴ／水（９５：２：２：１容量）による室温で２時間の処理により切り出す。ろ過、溶液の濃縮および氷冷ジエチルエーテルの添加による沈殿により粗生成物（７５ｍｇ）が固体として得られる。
【００６８】
ペプチドを、１２ｍｌ／ｍｉｎの流速にて４０分間で５から６０％の勾配のアセトニトリルを用いる０．１％ＴＦＡ中のＫｒｏｍａｓｉｌ  ＲＰ−１８  ２５０−２０、１０μｍでのＲＰ−ＨＰＬＣと、２１５ｎｍでのＵＶ検出器による溶出液の評価とにより精製する。個別の画分の純度は、分析ＲＰ−ＨＰＬＣおよび質量分析法により決定する。精製画分の組合せと凍結乾燥の後に、４８ｍｇの純粋生成物が得られる。Ｍａｌｄｉ−ＴＯＦ、１７２２．２ｍ／ｚ（ｍ．ｉ．）。
【実施例３】
【００６９】
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（ｃｉｓ−４−Ａｃｈａ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
この化合物の固相合成は、実施例１の記載に従って行った。このカップリングステップにおいて用いたアミノ酸およびペプチド模倣誘導体は、ＦＭＯＣ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）、ＦＭＯＣ−Ａｓｐ、ＦＭＯＣ−Ｇｌｙ、ＦＭＯＣ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）、ＦＭＯＣ−Ｉｌｅ、ＦＭＯＣ−Ｌｅｕ、ＦＭＯＣ−Ｌｙｓ（ＢＯＣ）、ＦＭＯＣ−ｃｉｓ−４−Ａｃｈａ、ＦＭＯＣ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）およびＦＭＯＣ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）（ＮｅｏＭＰＳ）であった。
【００７０】
合成が完了すると、ペプチド樹脂を乾燥させる。その後、ペプチドアミドを、トリフルオロ酢酸／ＴＩＳ／ＥＤＴ／水（９５：２：２：１容量）による室温で２時間の処理により切り出す。ろ過、溶液の濃縮および氷冷ジエチルエーテルの添加による沈殿により粗生成物（７５ｍｇ）が固体として得られる。
【００７１】
ペプチドを、１２ｍｌ／ｍｉｎの流速にて４０分間で５から６０％の勾配のアセトニトリルを用いる０．１％  ＴＦＡ中のＫｒｏｍａｓｉｌ  ＲＰ−１８  ２５０−２０、１０μｍでのＲＰ−ＨＰＬＣと、２１５ｎｍでのＵＶ検出器による溶出液の評価とにより精製する。個別の画分の純度は、分析ＲＰ−ＨＰＬＣおよび質量分析法により決定する。精製画分の組合せと凍結乾燥の後に、４８ｍｇの純粋生成物が得られる。Ｍａｌｄｉ−ＴＯＦ、１６５２．３ｍ／ｚ（ｍ．ｉ．）。
【実施例４】
【００７２】
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｈａｉｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
この化合物の固相合成は、実施例１の記載に従って行った。このカップリングステップにおいて用いたアミノ酸およびペプチド模倣誘導体は、ＦＭＯＣ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）、ＦＭＯＣ−Ａｓｐ、ＦＭＯＣ−Ｇｌｙ、ＦＭＯＣ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）、ＦＭＯＣ−Ｉｌｅ、ＦＭＯＣ−Ｌｅｕ、ＦＭＯＣ−Ｌｙｓ（ＢＯＣ）、ＦＭＯＣ−Ｈａｉｃ、ＦＭＯＣ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）およびＦＭＯＣ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）（ＮｅｏＭＰＳ）であった。
【００７３】
合成が完了すると、ペプチド樹脂を乾燥させる。その後、ペプチドアミドを、トリフルオロ酢酸／ＴＩＳ／ＥＤＴ／水（９５：２：２：１容量）による室温で２時間の処理により切り出す。ろ過、溶液の濃縮および氷冷ジエチルエーテルの添加による沈殿により粗生成物（７５ｍｇ）が固体として得られる。
【００７４】
ペプチドを、１２ｍｌ／ｍｉｎの流速にて４０分間で５から６０％の勾配のアセトニトリルを用いる０．１％ＴＦＡ中のＫｒｏｍａｓｉｌ  ＲＰ−１８  ２５０−２０、１０μｍでのＲＰ−ＨＰＬＣと、２１５ｎｍでのＵＶ検出器による溶出液の評価とにより精製する。個別の画分の純度は、分析ＲＰ−ＨＰＬＣおよび質量分析法により決定する。精製画分の組合せと凍結乾燥の後に、４８ｍｇの純粋生成物が得られる。Ｍａｌｄｉ−ＴＯＦ、１７４１．１ｍ／ｚ（ｍ．ｉ．）。
【００７５】
以下のペプチドペプチド模倣物を、適切に保護されたビルディングブロック（ｂｕｉｌｄｉｎｇ  ｂｌｏｃｋ）を用いて、上記の実施例１に記載した基本手順に従って調製した。
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−ヒドロキシプロリン−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｄ−ヒドロキシプロリン−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（Ｏ−ベンジル−ヒドロキシプロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｄ−（Ｏ−ベンジル−ヒドロキシプロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（Ｏ−ｔ−ブチル−ヒドロキシプロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（Ｏ−２−ナフチル−ヒドロキシプロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（Ｏ−２−ナフチル−メチル−ヒドロキシプロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（Ｏ−フェニル−ヒドロキシプロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−４−（４−フェニル−ベンジル−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（シス−３−フェニル−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（シス−４−フェニル−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（トランス−４−フェニル−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（シス−５−フェニル−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（トランス−５−フェニル−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（４−ベンジル−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（４−（４−ブロモベンジル）−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（４−シクロヘキシル−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（４−フルオロ−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−Ｔｉｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（ＳＳＳ）−Ｏｉｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（ＳＳＳ）１−アザ−ビシクロ［３．３．０］ビシクロオクタン−カルボキシル−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−シス−Ａｃｐｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１Ｒ，２Ｒ）−Ａｃｐｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１Ｓ，２Ｓ）−Ａｃｐｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１−Ａｃｈａ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｐｏ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１−Ａｃｂｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｐｏ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１−Ａｃｈｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−Ａｃｈｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（（１Ｓ，２Ｒ）−２−Ａｃｈｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（（１Ｓ，２Ｓ）−２−Ａｃｈｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１−Ａｃｐｅｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１−Ａｃｐｒｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｅｄｆｐ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１−Ａｉｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（２−Ａｉｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｍｂｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｍｐａ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｎｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｔｐｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（２−Ａｔｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｂｔ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｂｏ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１−Ａｃｍｂ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（２−Ａｃｍｂ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｍｖ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｑ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｃｂ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｐｂ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−ＰＢＤ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｂｐｐｐ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｃｐｔｄ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｈｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｃｌ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−ＰＬＳＰ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−ＢＴＤ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１Ｓ，２Ｒ）Ａｃｈｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１Ｓ，２Ｒ）Ａｃｈｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１Ｓ，２Ｒ）Ａｃｈｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｄｎ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｄｎ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｄｎ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ
【実施例５】
【００７６】
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１Ｓ，２Ｒ）Ａｃｈｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
１００ｍｇのＴｅｎｔａｇｅｌ−Ｓ−ＲＡＭ（Ｒａｐｐ−Ｐｏｌｙｍｅｒｅ）を０．２４ｍｍｏｌ／ｇの添加量で、市販のペプチド合成装置（ＰＳＭＭ（Ｓｈｉｍａｄｚｕ））に移し、ここでペプチド配列を、カルボジイミド／ＨＯＢｔ法に従って段階的に構築する。
【００７７】
ＦＭＯＣ−アミノ酸誘導体を、５倍等モル過剰量のジ−イソプロピル−カルボジイミド（ＤＩＣ）、ジ−イソプロピル−エチルアミン（ＤＩＰＥＡ）およびヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）を加えることによりあらかじめ活性化し、これらを反応容器に移した後、樹脂支持体と３０分間混合する。洗浄ステップは、９００μｌのＤＭＦの５回の添加および１分間の十分な混合により行う。切断ステップは、３×９００μｌのＤＭＦ中の３０％ピペリジンの添加および４分間の十分な混合により行う。
【００７８】
個別の反応溶液および洗浄溶液の除去は、反応容器の底のフリットに溶液を通過させることにより行う。
【００７９】
アミノ酸誘導体ＦＭＯＣ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）、ＦＭＯＣ−Ａｓｐ、ＦＭＯＣ−Ｇｌｙ、ＦＭＯＣ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）、ＦＭＯＣ−Ｉｌｅ、ＦＭＯＣ−Ｌｅｕ、ＦＭＯＣ−Ｌｙｓ（ＢＯＣ）、ＦＭＯＣ−（１Ｓ，２Ｒ）−Ａｃｈｃ、ＦＭＯＣ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）およびＦＭＯＣ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）（ＮｅｏＭＰＳ）を用いる。
【００８０】
合成が完了すると、ペプチド樹脂を乾燥させる。その後、ペプチドアミドを、トリフルオロ酢酸／ＴＩＳ／ＥＤＴ／水（９５：２：２：１容量）による室温で２時間の処理により切り出す。ろ過、溶液の濃縮および氷冷ジエチルエーテルの添加による沈殿により粗生成物（７５ｍｇ）が固体として得られる。
【００８１】
ペプチドを、１２ｍｌ／ｍｉｎの流速にて４０分間で５から６０％の勾配のアセトニトリルを用いる０．１％ＴＦＡ中のＫｒｏｍａｓｉｌ  ＲＰ−１８  ２５０−２０、１０μｍでのＲＰ−ＨＰＬＣと、２１５ｎｍでのＵＶ検出器による溶出液の評価とにより精製する。個別の画分の純度は、分析ＲＰ−ＨＰＬＣおよび質量分析法により決定する。精製画分の組合せと凍結乾燥の後に、４８ｍｇの純粋生成物が得られる。質量分析による分子量：１６３７．６。
【実施例６】
【００８２】
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｄｎ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
この化合物の固相合成は、実施例１の記載に従って行った。このカップリングステップにおいて用いたアミノ酸およびペプチド模倣誘導体は、ＦＭＯＣ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）、ＦＭＯＣ−Ａｓｐ、ＦＭＯＣ−Ｇｌｙ、ＦＭＯＣ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）、ＦＭＯＣ−Ｉｌｅ、ＦＭＯＣ−Ｌｅｕ、ＦＭＯＣ−Ｌｙｓ（ＢＯＣ）、ＦＭＯＣ−Ａｃｄｎ、ＦＭＯＣ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）およびＦＭＯＣ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）（ＮｅｏＭＰＳ）であった。
【００８３】
合成が完了すると、ペプチド樹脂を乾燥させる。ペプチドアミドを、その後、トリフルオロ酢酸／ＴＩＳ／ＥＤＴ／水（９５：２：２：１容量）による室温で２時間の処理により切り出す。ろ過、溶液の濃縮および氷冷ジエチルエーテルの添加による沈殿により粗生成物（７５ｍｇ）が固体として得られる。
【００８４】
ペプチドを、１２ｍｌ／ｍｉｎの流速にて４０分間で５から６０％の勾配のアセトニトリルを用いる０．１％ＴＦＡ中のＫｒｏｍａｓｉｌ  ＲＰ−１８  ２５０−２０、１０μｍでのＲＰ−ＨＰＬＣと、２１５ｎｍでのＵＶ検出器による溶出液の評価とにより精製する。個別の画分の純度は、分析ＲＰ−ＨＰＬＣおよび質量分析法により決定する。精製画分の組合せと凍結乾燥の後に、４８ｍｇの純粋生成物が得られる。Ｍａｌｄｉ−ＴＯＦ、１７２１．４ｍ／ｚ（ｍ．ｉ．）。
【００８５】
以下のペプチドペプチド模倣物を、適切に保護されたビルディングブロックを用いて上記の実施例１に記載した基本手順に従って調製した。
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−ヒドロキシプロリン−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｄ−ヒドロキシプロリン−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（Ｏ−ベンジル−ヒドロキシプロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｄ−（Ｏ−ベンジル−ヒドロキシプロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（Ｏ−ｔ−ブチル−ヒドロキシプロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（Ｏ−２−ナフチル−ヒドロキシプロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（Ｏ−２−ナフチル−メチル−ヒドロキシプロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（Ｏ−フェニル−ヒドロキシプロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−４−（４−フェニル−ベンジル−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（シス−３−フェニル−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（シス−４−フェニル−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（トランス−４−フェニル−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（シス−５−フェニル−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（トランス−５−フェニル−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（４−ベンジル−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（４−（４−ブロモベンジル）−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（４−シクロヘキシル−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（４−フルオロ−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−Ｔｉｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（ＳＳＳ）−Ｏｉｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（ＳＳＳ）１−アザ−ビシクロ［３．３．０］ビシクロオクタン−カルボキシル−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−シス−Ａｃｐｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１Ｒ，２Ｒ）−Ａｃｐｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１Ｓ，２Ｓ）−Ａｃｐｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１−Ａｃｈａ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｐｏ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１−Ａｃｂｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｐｏ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１−Ａｃｈｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−Ａｃｈｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（（１Ｓ，２Ｒ）−２−Ａｃｈｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（（１Ｓ，２Ｓ）−２−Ａｃｈｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１−Ａｃｐｅｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１−Ａｃｐｒｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｅｄｆｐ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１−Ａｉｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（２−Ａｉｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｍｂｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｍｐａ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｎｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｔｐｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（２−Ａｔｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｂｔ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｂｏ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１−Ａｃｍｂ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（２−Ａｃｍｂ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｍｖ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｑ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｈａｉｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｃｂ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｐｂ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−ＰＢＤ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｂｐｐｐ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｃｐｔｄ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｈｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｃｌ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−ＰＬＳＰ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−ＢＴＤ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１Ｓ，２Ｒ）Ａｃｈｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１Ｓ，２Ｒ）Ａｃｈｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１Ｓ，２Ｒ）Ａｃｈｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｄｎ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｄｎ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｄｎ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【実施例７】
【００８６】
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１Ｓ，２Ｒ）Ａｃｈｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
最初のアミノ酸としてのＦＭＯＣ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）を有する樹脂支持体としてＴｅｎｔａｇｅｌ（Ｒａｐｐ  Ｐｏｌｙｍｅｒｅ）を用いて、単量体ペプチドを実施例１のとおり合成する。
ＦＭＯＣ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）、ＦＭＯＣ−Ａｓｐ、ＦＭＯＣ−Ｇｌｙ、ＦＭＯＣ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）、ＦＭＯＣ−Ｉｌｅ、ＦＭＯＣ−Ｌｅｕ、ＦＭＯＣ−Ｌｙｓ（ＢＯＣ）、ＦＭＯＣ−（１Ｓ，２Ｒ）−Ａｃｈｃ、ＦＭＯＣ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）およびＦＭＯＣ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）（ＮｅｏＭＰＳ）。
【００８７】
ペプチドの切断および精製の後に、反応を、２〜８倍モル過剰量のマレインイミド−ＰＥＧ20Kを用いて行う。回収の後に、精製をＫｒｏｍａｓｉｌ  ＲＰ−１８で行い、生成物を分析ＲＰ−ＨＰＬＣおよびＭＡＬＤＩ−ＭＳにより同定する。
【実施例８】
【００８８】
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｄｎ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
最初のアミノ酸としてＦＭＯＣ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）を有する樹脂支持体としてＴｅｎｔａｇｅｌ（Ｒａｐｐ  Ｐｏｌｙｍｅｒｅ）を用いて、単量体ペプチドを実施例１のとおり合成する。
ＦＭＯＣ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）、ＦＭＯＣ−Ａｓｐ、ＦＭＯＣ−Ｇｌｙ、ＦＭＯＣ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）、ＦＭＯＣ−Ｉｌｅ、ＦＭＯＣ−Ｌｅｕ、ＦＭＯＣ−Ｌｙｓ（ＢＯＣ）、ＦＭＯＣ−Ａｃｄｎ、ＦＭＯＣ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）およびＦＭＯＣ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）（ＮｅｏＭＰＳ）。
【００８９】
ペプチドの切断および精製の後に、２〜８倍モル過剰量のマレインイミド−ＰＥＧ20Kを用いて、反応を行う。回収の後に、精製をＫｒｏｍａｓｉｌ  ＲＰ−１８で行い、生成物を分析ＲＰ−ＨＰＬＣおよびＭＡＬＤＩ−ＭＳにより同定する。
【００９０】
適切なビルディングブロック構成成分を用いて、以下のペプチドおよびペプチド模倣誘導体を調製した：
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−ヒドロキシプロリン−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｄ−ヒドロキシプロリン−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（Ｏ−ベンジル−ヒドロキシプロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｄ−（Ｏ−ベンジル−ヒドロキシプロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（Ｏ−ｔ−ブチル−ヒドロキシプロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（Ｏ−２−ナフチル−ヒドロキシプロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（Ｏ−２−ナフチル−メチル−ヒドロキシプロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（Ｏ−フェニル−ヒドロキシプロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−４−（４−フェニル−ベンジル−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（シス−３−フェニル−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（シス−４−フェニル−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇg-Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（トランス−４−フェニル−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（シス−５−フェニル−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（トランス−５−フェニル−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（４−ベンジル−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（４−（４−ブロモベンジル）−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（４−シクロヘキシル−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−（４−フルオロ−プロリン）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｌ−Ｔｉｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（ＳＳＳ）−Ｏｉｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（ＳＳＳ）１−アザ−ビシクロ［３．３．０］ビシクロオクタン−カルボキシル−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−シス−Ａｃｐｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１Ｒ，２Ｒ）−Ａｃｐｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１Ｓ，２Ｓ）−Ａｃｐｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１−Ａｃｈａ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｐｏ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１−Ａｃｂｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｐｏ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１−Ａｃｈｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−Ａｃｈｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（（１Ｓ，２Ｒ）−２−Ａｃｈｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（（１Ｓ，２Ｓ）−２−Ａｃｈｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１−Ａｃｐｅｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１−Ａｃｐｒｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｅｄｆｐ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１−Ａｉｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（２−Ａｉｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｍｂｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｍｐａ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｎｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｔｐｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（２−Ａｔｃ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｂｔ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｂｏ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１−Ａｃｍｂ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（２−Ａｃｍｂ）−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｍｖ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｑ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｈａｉｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｃｂ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｐｂ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−ＰＢＤ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｂｐｐｐ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｃｐｔｄ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｈｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｃｌ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−ＰＬＳＰ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−ＢＴＤ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１Ｓ，２Ｒ）Ａｃｈｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１Ｓ，２Ｒ）Ａｃｈｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１Ｓ，２Ｒ）Ａｃｈｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｄｎ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｄｎ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｄｎ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ20K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１Ｓ，２Ｒ）Ａｃｈｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ30K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−（１Ｓ，２Ｒ）Ａｃｈｃ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ40K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｄｎ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ30K）−アミド
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｃｄｎ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−（Ｓ−スクシンイミド−ＰＥＧ40K）−アミド
【実施例９】
【００９１】
化合物の生物学的効果は、ヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）培養物中でのトロンビン誘導ＲｈｏＡ活性化モデルにおいて実証した。
【００９２】
ＨＵＶＥＣを、標準的条件下でコンフルエントに達するまで増殖させる。Ｒｈｏ活性の誘導の前に、ＨＵＶＥＣを４時間、成長因子も血清補充物も含まないＩＭＤＭ（Ｇｉｂｃｏ）を用いることにより飢餓状態にした。飢餓期間の後に、飢餓培地に５Ｕ／ｍｌのトロンビン（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ）または５Ｕのトロンビン  プラス  ５０μｇ／ｍｌの試験化合物を加えて１、５および１０分間置く。Ｕｐｓｔａｔｅ社製のＲｈｏアッセイ試薬を製造元の使用説明に従って用いて、活性ＲｈｏＡを単離した。単離物を１５％ポリアクリルアミドゲルで分離し、ニトロセルロースメンブレン（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）にブロットした。ＲｈｏＡを、Ｕｐｓｔａｔｅ社製の抗Ｒｈｏ（−Ａ、−Ｂ、−Ｃ）、クローン５５（１：５００）を用いることにより検出した。
【００９３】
未刺激対照と比較した相対的ＲｈｏＡ刺激
対照ペプチド１分                      １
対照ペプチド５分                      １
対照ペプチド１０分                    １
トロンビン５分                        ５．６
トロンビン＋化合物実施例１（１０分）  １．５
トロンビン＋化合物実施例２（１０分）  １．３
トロンビン＋化合物実施例３（１０分）  １．０
トロンビン＋化合物実施例４（１０分）  １．３
【手続補正書】
【提出日】平成22年3月12日(2010.3.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の一般式Ｉ：
Ｈ２Ｎ−ＧＨＲＰＸ１Ｘ２Ｘ３−β−Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８Ｘ９Ｘ１０−Ｘ１１（Ｉ）
｛式中、
Ｘ１〜Ｘ１０は、遺伝子的にコードされる（ｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙ  ｃｏｄｅｄ）２０のアミノ酸の１つを表し、Ｘ８、Ｘ９およびＸ１０は、個別にまたは一緒に、単化学結合（ｓｉｎｇｌｅ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｂｏｎｄ）を表してもよく；
Ｘ１１は、ＯＲ１（式中、Ｒ１は水素または（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルである）、ＮＲ２Ｒ３［Ｒ２およびＲ３は同じかまたは異なり、水素、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、または残基  −Ｗ−ＰＥＧ５−６０Ｋ（式中、ＰＥＧ残基は適切なスペーサーＷを介してＮ原子と結合している）を表す]、または残基  ＮＨ−Ｙ−Ｚ−ＰＥＧ５−６０Ｋ（式中、Ｙは、単化学結合またはＳ、Ｃ、ＫもしくはＲの群からの遺伝子的にコードされるアミノ酸を表し、Ｚは、それを介してポリエチレングリコール（ＰＥＧ）残基が結合できるスペーサーを表す）を表す；
さらに、式中、
βは、ペプチド主鎖中にベンドまたはターンを誘導するというさらなる特性を有する、遺伝子的にコードされていてもされていなくてもよいアミノ酸、またはペプチド模倣要素を表し、前記アミノ酸は、限定されないが、Ｌ−プロリン、Ｄ−プロリン、Ｌ−ヒドロキシプロリン、Ｄ−ヒドロキシプロリン、Ｌ−（Ｏ−ベンジル）−ヒドロキシプロリン、Ｄ−（Ｏ−ベンジル）−ヒドロキシプロリン、Ｌ−（Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル）−ヒドロキシプロリン、４−（Ｏ−２−ナフチル）−ヒドロキシプロリン、４−（Ｏ−２−ナフチル−メチル）−ヒドロキシプロリン、４−（Ｏ−フェニル）−ヒドロキシプロリン、４−（４−フェニル−ベンジル）−プロリン、ｃｉｓ−３−フェニル−プロリン、ｃｉｓ−４−フェニル−プロリン、ｔｒａｎｓ−４−フェニル−プロリン、ｃｉｓ−５−フェニル−プロリン、ｔｒａｎｓ−５−フェニル−プロリン、４−ベンジル−プロリン、４−ブロモベンジル−プロリン、４−シクロヘキシル−プロリン、４−フルオロ−プロリン、Ｌ−テトラヒドロイソキノリン−２−カルボン酸（Ｌ−Ｔｉｃ）、オクタヒドロ−インドール−２−カルボン酸（Ｏｉｃ）の全てのジアステレオマー、および１−アザ−ビシクロ［３．３．０］オクタン−２−カルボン酸の全てのジアステレオマー、または
【表１】
2011523634.tif 000013
2011523634.tif 000014
2011523634.tif 000015
2011523634.tif 000016
2011523634.tif 000017
の群から選択される残基を含む｝
のペプチド、ペプチド模倣物（ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃｓ）およびそれらの誘導体ならびにそれらの生理的に許容される塩。
【請求項２】
一般式Ｉにおいて、
Ｘ１、Ｘ４が、Ｌ、Ｉ、Ｓ、ＭまたはＡを表し、
Ｘ２が、ＥまたはＤを表し、
Ｘ３が、ＲまたはＫを表し、
Ｘ５、Ｘ６、Ｘ７が、Ａ、Ｇ、ＳまたはＬを表し、
Ｘ８が、Ｇ、ＡもしくはＬまたは単化学結合を表し、
Ｘ９が、Ｙ、Ｆ、Ｈまたは単化学結合を表し、
Ｘ１０が、Ｒ、Ｋまたは単化学結合を表し、
βおよびＸ１１が、請求項１に記載の意味を有する、
請求項１に記載のペプチド、ペプチド模倣物およびそれらの誘導体ならびにそれらの生理的に許容される塩。
【請求項３】
一般式ＩＩ：
Ｈ２Ｎ−ＧＨＲＰＬＤＫ−β−ＩＳＧＧＸ８Ｘ９Ｘ１０−Ｘ１１（ＩＩ）
（式中、Ｘ８、Ｘ９、Ｘ１０およびＸ１１は、式Ｉに記載の意味を有する）
である、請求項１に記載のペプチド、ペプチド模倣物およびそれらの誘導体ならびにそれらの生理的に許容される塩。
【請求項４】
一般式ＩＩ：
Ｈ２Ｎ−ＧＨＲＰＬＤＫ−β−ＩＳＧＧＸ８Ｘ９Ｘ１０−Ｘ１１（ＩＩ）
（式中
残基Ｘ１９、Ｘ２０およびＸ２１のうち２つはそれぞれグリシン残基であり、残りの１つが残基Ｃ−（Ｓ−スクシンイミド）−（ＰＥＧ５−４０Ｋ）であり、前記スクシンイミド残基はシステイン残基の硫黄原子にＣ原子３を介して結合し；
Ｘ１７は、ＮＲ２Ｒ３を表し、Ｒ２およびＲ３は同じか異なり、水素または（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルである）
である、請求項１に記載のペプチド、ペプチド模倣物およびそれらの誘導体ならびにそれらの生理的に許容される塩。
【請求項５】
一般式ＩＩ：
Ｈ２Ｎ−ＧＨＲＰＬＤＫ−β−ＩＳＧＧＸ８Ｘ９Ｘ１０−Ｘ１１（ＩＩ）
[式中
Ｘ１１は、ＮＲ２Ｒ３（式中、Ｒ２およびＲ３は同じか異なり、水素または（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表す）；または
残基  Ｃ（ＮＲ２Ｒ３）−（Ｓ−スクシンイミド）−（ＰＥＧ５−４０Ｋ）（式中、スクシンイミド残基は、システイン残基の硫黄原子に、スクシンイミド環の炭素原子３を介して結合している）を表す]
である、請求項１に記載のペプチド、ペプチド模倣物およびそれらの誘導体ならびにそれらの生理的に許容される塩。
【請求項６】
請求項１に記載の一般式Ｉのペプチドおよびペプチド誘導体の製造方法であって、下記のいずれかを特徴とする方法：
（Ａ）それぞれの配列のＣ末端の最初のアミノ酸を、適切な切断可能なスペーサーを介してポリマー樹脂と結合させ、官能基の適切な保護基を任意選択的に含んでいてもよいそれ以降のアミノ酸またはペプチド模倣要素を、当技術分野において知られる方法に従って段階的に結合させ、完成したペプチドを、当技術分野において知られる適切な方法に従ってポリマー樹脂から切り離し、存在する場合は保護基を適切な方法により切り離し、ペプチドまたはペプチド誘導体を適切な方法に従って精製する、または
（Ｂ）所望の分子量を有するＰＥＧ基を、適切なスペーサーを介してポリマー樹脂と結合させ、ペプチドのＮ末端の最初のアミノ酸を、適切な方法を用いて結合させ、残りのステップは（Ａ）に記載のものと同様に行う、または
（Ｃ）ε−アミノ基に適切な保護基を含むリジン残基を、適切なスペーサーを介して適切な方法を用いて適切なポリマー樹脂と結合させ、ペプチド鎖を、（Ａ）に記載されるようにして合成し、ポリマー樹脂から切断し精製した後、必要であれば、ε−アミノ基の保護基を適切な方法を用いて切り離し、所望の分子量を有するＰＥＧ基を、適切な活性化剤を用いてε−アミノ基と結合させ、任意選択的に残存している保護基を切断し、最終生成物を適切な方法を用いて精製すること、または
（Ｄ）システイン残基を含むペプチドをＰＥＧ−マレイミドと反応させて、請求項３、４および５のいずれか一項に記載の式（ＩＩ）の化合物を形成すること。
【請求項７】
請求項１に記載の一般式（Ｉ）の化合物を含有する医薬組成物。
【請求項８】
医薬品として用いるための、請求項１に記載の一般式Ｉに記載の化合物。
【国際調査報告】
2011523634.tif 000018
2011523634.tif 000019
2011523634.tif 000020