(57)【要約】  ＡＰＭＶ３、ＡＰＭＶ４、ＡＰＭＶ５、ＡＰＭＶ６、ＡＰＭＶ７、ＡＰＭＶ８、ＡＰＭＶ９、マプレラウイルス（Ｍａｐｕｅｒａｖｉｒｕｓ）及びＦｅｒ−ｄｅ−Ｌａｎｃｅの群から選択されるパラミクロウイルスが記載され、これらは腫瘍処置用の医薬組成物を生産するのに使用される。該ウイルスは、ヒト腫瘍細胞を選択的に殺傷するが、同じ用量で正常な分化細胞及びヒト正常増殖細胞を殺傷しない。該ウイルスは、遺伝子操作により、１つ以上の遺伝子が追加され、又は関連するパラミクソウイルスの相同遺伝子に置き換えられるように改変され得る。該方法により生じるキメラウイルスの抗腫瘍活性は、元のウイルスと比較して亢進される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
腫瘍処置用医薬を生産するための、ＡＰＭＶ３、ＡＰＭＶ４、ＡＰＭＶ５、ＡＰＭＶ６、ＡＰＭＶ７、ＡＰＭＶ８、ＡＰＭＶ９、マプレラウイルス（Ｍａｐｕｅｒａｖｉｒｕｓ）及びＦｅｒ−ｄｅ−Ｌａｎｃｅの群から選択されるパラミクロウイルスの使用。
【請求項２】
前記ウイルスが、ＲＮＡレベルで配列の同一性が８０％を超える、極めて近縁のパラミクソウイルスである、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記ウイルスが組換え種である、請求項１に記載の使用。
【請求項４】
前記ウイルスが、ＡＰＭＶ１〜９を起源とする１つの追加的な遺伝子を発現するように改変されている、請求項１に記載の使用。
【請求項５】
前記ウイルスがＡＰＭＶ１〜９を起源とする２つ以上の追加的な遺伝子を発現するように改変されている、請求項１に記載の使用。
【請求項６】
前記遺伝子が他のパラミクソウイルスのＦ及び／又はＨＮタンパク質をコードする、請求項４又は５に記載の使用。
【請求項７】
前記Ｆタンパク質が、多塩基性（ｍｕｌｔｉｂａｓｉｃ）開裂部位を有する、請求項６に記載の使用。
【請求項８】
前記ウイルスが、１つの遺伝子がＡＰＭＶ１〜９からなる群に由来するウイルスの相同遺伝子により置換されるように改変されている、請求項３に記載の使用。
【請求項９】
前記遺伝子改変が、鳥類における病原性の弱体化をもたらす、請求項３に記載の使用。
【請求項１０】
前記遺伝子改変が、ウイルスに、形質転換していない正常細胞よりも腫瘍細胞に対して高度な選択性を付与するものである、請求項３に記載の使用。
【請求項１１】
腫瘍を担持しているヌードマウスに投与されたとき、前記遺伝子改変が、抗腫瘍作用により測定される高度な腫瘍崩壊能力をもたらす、請求項３に記載の使用。
【請求項１２】
前記ウイルスが腫瘍内に投与される、請求項１に記載の使用。
【請求項１３】
前記ウイルスが腹腔内に投与される、請求項１に記載の使用。
【請求項１４】
前記ウイルスが吸入により投与される、請求項１に記載の使用。
【請求項１５】
前記ウイルスが静脈内に投与される、請求項１に記載の使用。
【請求項１６】
前記ウイルスが勾配超遠心（ｇｒａｄｉｅｎｔ  ｕｌｔｒａｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｔｉｏｎ）により精製される、請求項１に記載の使用。
【請求項１７】
前記ウイルスがタンジェンシャルフロー濾過（ｔａｎｇｅｎｔｉａｌ  ｆｌｏｗ  ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ）により精製される、請求項１に記載の使用。
【請求項１８】
前記腫瘍が、直腸癌、乳癌、肺癌、前立腺癌、卵巣癌、黒色腫、子宮頸癌、膀胱癌、グリア芽腫及び線維肉腫からなる群から選択される、請求項１に記載の使用。
【請求項１９】
前記医薬組成物が更に化学治療剤を含む、請求項１に記載の使用。
【請求項２０】
前記医薬組成物が更に組換え治療抗体を含む、請求項１に記載の使用。
【請求項２１】
前記医薬組成物が更に組換え治療タンパク質を含む、請求項１に記載の使用。
【請求項２２】
前記ウイルスが、結合タンパク質をコードする１つ以上の追加的な遺伝子を発現するように改変されている、請求項１に記載の使用。
【請求項２３】
前記ウイルスが、酵素をコードする１つ以上の追加的な遺伝子を発現するように改変されている、請求項１に記載の使用。
【請求項２４】
前記ウイルスが、プロドラッグ転換酵素（ｐｒｏｄｒｕｇ  ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ  ｅｎｚｙｍｅ）をコードする１つ以上の追加的な遺伝子を発現するように改変されている、請求項１に記載の使用。
【請求項２５】
前記ウイルスが、抗体をコードする１つ以上の追加的な遺伝子を発現するように改変されている、請求項１に記載の使用。
【請求項２６】
前記ウイルスが、１つの抗体可変領域と１つ以上のイムノグロブリンドメインとの融合タンパク質をコードする１つ以上の追加的な遺伝子を発現するように改変されている、請求項３に記載の使用。
【請求項２７】
前記腫瘍が転移性である、請求項１に記載の使用。
【請求項２８】
２〜５個の遺伝子が置き換えられた結果、キメラウイルスに元のウイルス起源の遺伝子が１〜４個しか残っていない、請求項８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、活性動物パラミクソウイルスの投与による腫瘍の処置に関する。該ウイルスは選択的にヒト腫瘍細胞を殺傷するが、同じ用量でヒト正常分化細胞及びヒト正常分裂細胞を殺傷しない。遺伝子操作により、該ウイルスは、関連するパラミクソウイルスの類似遺伝子により１つ以上の遺伝子が置き換えられるように改変され得る。あるいは、これらの相同遺伝子は、ウイルスゲノム中に追加的な導入遺伝子として挿入される。本方法により生じるキメラウイルスの抗腫瘍活性は、元のウイルスと比較して亢進される。
【背景技術】
【０００２】
また、本遺伝子操作手法は、腫瘍細胞で発現する酵素に認識されるべきＦタンパク質開裂部位の改変を可能とする。
【０００３】
当該技術分野において、腫瘍崩壊ウイルスががん治療に使用され得ることは公知である。一般に腫瘍の処置に使用され得る腫瘍崩壊ウイルスは、（Ｃｈｉｏｃｃａ，  ２００２）に概説されている。腫瘍崩壊ウイルスの詳細なリストは、（Ｖａｈａ−Ｋｏｓｋｅｌａ，  Ｈｅｉｋｋｉｌａ，  ａｎｄ  Ｈｉｎｋｋａｎｅｎ，  ２００７）に記載されている。これらのウイルスは、様々なウイルスのクラス（ｃｒａｓｓ）及び科（ｆａｍｉｌｙ）に属する。
【０００４】
腫瘍溶解剤として試験されたパラミクソウイリダエ（ｐａｒａｍｙｘｏｖｉｈｄａｅ）科のウイルスは、麻疹ウイルス（例えば（Ｐｅｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００１））、ニューカッスル病ウイルス（例えば（Ｓｉｎｋｏｖｉｃｓ  ａｎｄ  Ｈｏｒｖａｔｈ，  ２０００））、ツパイア・パラミクソウイルス（Ｔｕｐａｉａ  ｐａｒａｍｙｘｏｖｉｒｕｓ）  （Ｓｐｈｎｇｆｅｌｄ  ｅｔ  ａｌ．，２００５）、ムンプスウイルス（例えば（Ｍｙｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００５））、シミアンウイルス（例えば（Ｐａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００２））、及びセンダイウイルス（例えば（Ｋｉｎｏｈ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００４））を含む。
【０００５】
（Ｓｔｏｊｄｌ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００３）において、試験された腫瘍細胞株の８０％が、水疱性口内炎ウイルス（ＶＳＶ）に感染した後、インターフェロン応答が欠如することが記載されている。ＶＳＶとＮＤＶはいずれもモノネガウイラレス目（ｏｒｄｅｒ  ｍｏｎｏｎｅｇａｖｉｒａｌｅｓ）のメンバーであるから、これに近い割合の腫瘍細胞株が、ＮＤＶの感染に感受性であると推定し得る。また、ＮＤＶの腫瘍細胞中での選択的複製の機構が、ウイルスに対するインターフェロン応答の欠如に基づくことも示されている（例えばＷＯ  ９９／１８７９９を参照されたい）。
【０００６】
組換えパラミクソウイルスに関して、ＥＰ−Ａ−０７０２０８５に、感染性の、複製する、セグメント化されていないマイナス鎖ＲＮＡウイルス突然変異であって、ウイルスゲノムのオープンリーディングフレーム、シュードゲン領域又は遺伝子間領域に挿入及び／又は欠失を含むものが記載されている。更に、ＷＯ９９／６６０４５に、ウイルスゲノムの全長ｃＤＮＡ分子から得た、遺伝子改変ＮＤＶウイルスが記載されている。
【０００７】
ＷＯ  ００／６２７３５において、ＮＤＶ等の、インターフェロン感受性かつ複製可能なクローンＲＮＡウイルスの投与を含む腫瘍処置方法が記載されている。更に、鳥類のパラミクソウイルス２の使用が記載されている。しかしながら、ＡＰＭＶ２が腫瘍崩壊活性を有することを支持するデータは記載されていない。
【０００８】
ＷＯ  ０１／２０９８９（ＰＣＴ／ＵＳＯＯ／２６１１６）において、組換え腫瘍崩壊パラミクソウイルスを用いる、腫瘍を有する患者を処置する方法が記載されている。複製可能なパラミクソウイリダエ（ｐａｒａｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ）ウイルスの投与により、腫瘍が減少する。腫瘍崩壊能力を改善するためにウイルスを操作するのに使用され得る様々な方法が記載されている。
【０００９】
更に、ＷＯ  ０３／００５９６４において、サイトカインをコードする核酸を含む組換えＶＳＶが記載されている。
【００１０】
ＵＳ  ６，６９９，４７９において、低いレベルでＶ−タンパク質を発現し、編集遺伝子座（ｅｄｉｔｉｎｇ  ｌｏｃｕｓ）にヌクレオチド置換を含むＮＤＶ突然変異が記載されている。ＵＳ  ２００４／０１７０６０において、通常のヒト病原体ではないウイルスの投与による黒色腫の処置が記載されている。
【００１１】
ＷＯ２００６／５０９８４において、組換えＮＤＶウイルスと、抗腫瘍タンパク質をコードする遺伝子が記載されている。特に、疾患処置用、特に腫瘍溶解処置用の、組換えＲＮＡ−ウイルス、好ましくはパラミクソウイルス、好ましくはニューカッスル病ウイルス（ＮＤＶ）が記載されている。更に、組換えウイルスが、結合タンパク質（抗体、アンキリンリピート分子、ペプチド等）、プロドラッグ転換タンパク質及び／又はプロテアーゼをコードし、ウイルス感染腫瘍細胞においてのみこれらの分子が発現することが記載されている。これらの結合タンパク質、プロドラッグ転換タンパク質及び／又はプロテアーゼは、ウイルスの抗腫瘍効果を増大させる。ＷＯ２００６／５０９８４において、このような癌処置用の改変ウイルスの製品及び使用が記載されている。
【００１２】
ＮＤＶは、ＥＰ−Ａ−０７０２  ０８５等に記載されるような逆遺伝学的技術を使用して、遺伝的に操作し得る。例えば、分泌性アルカリホスファターゼ（Ｚｈａｏ  ａｎｄ  Ｐｅｅｔｅｒｓ，  ２００３）、緑色蛍光タンパク質（Ｅｎｇｅｌ−Ｈｅｒｂｅｒｔ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００３）、感染性ファブリーキウス嚢病ウイルスのＶＰ２タンパク質（Ｈｕａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００４）、インフルエンザウイルス血球凝集素（Ｎａｋａｙａ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００１  ）及びクロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（Ｈｕａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００１  ）をコードする追加的な核酸を含む組換えＮＤＶコンストラクトの作製が知られている（Ｋｈｓｈｎａｍｕｒｔｈｙ，  Ｈｕａｎｇ，  ａｎｄ  Ｓａｍａｌ，  ２０００）。これらの組換えＮＤＶのいずれも、ヒトの疾患の処置において使用するために構築されたものではない。該組換えＮＤＶは、ＮＤＶの基礎的なウイルス学の研究のために、又は家禽用のワクチン株を開発するために作製されたものである。また、親ウイルスとしてＮＤＶのレントジェニック（ｌｅｎｔｏｇｅｎｉｃ）株が用いられており、これらの株は顕著な腫瘍崩壊能力を有しない。
【００１３】
ウイルスのシステム及びプロセスが公知のものであっても、癌、各腫瘍の治療に選択的に使用され得て、そして既存のウイルス種よりも優位性を有するウイルス種は、なおも需要が強い。
【００１４】
更に、当該技術分野において、ＡＰＭＶ３〜９が癌、各腫瘍を処置するための医薬の生産に使用され得ることを示すデータは存在しない。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明において、驚くべきことに、パラミクソウイルス科中ＡＰＭＶ３〜９のサブクラスの本発明に係る選択的ウイルス種が、当該技術分野で言及される種と対比して驚くほど高効率な活性で腫瘍の処置に使用され得ることが見出された。
【００１６】
本発明のパラミクソウイルスは、当該技術分野で、従来は、抗腫瘍効果を有するものとして記載されていなかった。
【００１７】
パラミクソウイルスの科から選択されるウイルスは、例えば、鳥類パラミクソウイルス３（ＡＰＭＶ３）、鳥類パラミクソウイルス４（ＡＰＭＶ４）、鳥類パラミクソウイルス５（ＡＰＭＶ５）、鳥類パラミクソウイルス６（ＡＰＭＶ６）、鳥類パラミクソウイルス７（ＡＰＭＶ７）、鳥類パラミクソウイルス８（ＡＰＭＶ８）、及び鳥類パラミクソウイルス９（ＡＰＭＶ９）、並びにマプレラウイルス（Ｍａｐｕｅｒａｖｉｒｕｓ）及びＦｅｒ−ｄｅ−Ｌａｎｃｅウイルス等が挙げられる。
【００１８】
ＡＰＭＶ３〜９のウイルスは、（Ａｌｅｘａｎｄｅｒ，  ２００３）に記載されている。
【００１９】
更に、本発明は、異なるウイルスの遺伝的エレメントを分子生物学的に組み合わせてキメラウイルスを作製するプロセスを含む。特に、本発明は、癌、各腫瘍を処置するための医薬組成物を生産するための、ＡＰＭＶ３、ＡＰＭＶ４、ＡＰＭＶ５、ＡＰＭＶ６、ＡＰＭＶ７、ＡＰＭＶ８、ＡＰＭＶ９、マプレラウイルス及びＦｅｒ−ｄｅ−Ｌａｎｃｅの群から選択されるパラミクロウイルスの使用を含む。
【００２０】
癌及び腫瘍の処置とは、感染から一定の時間を隔てた腫瘍増殖の抑制、好ましくは腫瘍細胞の殺傷又は増殖の抑制を意味する。記載されるパラミクソウイルスは、腫瘍細胞中で選択的に複製する。
【００２１】
特に、本発明に記載の使用は、増殖性の障害、特に過剰増殖性の障害を処置するための医薬の生産を含む。好ましくは、前記ウイルスで新生物が処置され、好ましくは肺、結腸、前立腺、胸部及び脳の癌が処置され得る。
【００２２】
より好ましくは、本発明は、固形腫瘍及び転移性腫瘍を処置するための医薬を生産するための本発明に係るウイルスの使用に関する。
【００２３】
より好ましくは、増殖速度の低い腫瘍が処置され得る。
【００２４】
増殖速度の低い腫瘍の例として、前立腺癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、黒色腫、子宮頸癌、膀胱癌、グリア芽腫及び線維腫が挙げられる。
【００２５】
更に選択される側面において、本発明は、脳腫瘍及びグリア芽腫を治療するための医薬を生産するための前記ウイルスの使用に関する。
【００２６】
本発明の更なる側面は、ＲＮＡレベルで配列の同一性が８０％を超える、極めて近縁のパラミクソウイルスである。該ウイルスは、新規に見出されたパラミクソウイルスである。
【００２７】
更に、本発明に係るウイルスは組換え体で会ってもよく、そして更にＡＰＭＶ１〜９を起源とする１つ以上の追加的な遺伝子を発現するように改変されてもよく、好ましくは、ＡＰＭＶ１（ニューカッスル病ウイルス）を起源とする１つ以上の追加的な遺伝子を発現するように改変されてもよい。
【００２８】
本発明に係るウイルスは、更に、結合タンパク質をコードする遺伝子を含むように改変されてもよい（ＷＯ２００６／０５０９８４を参照されたい）。
【００２９】
前記追加的な遺伝子は、酵素、特にプロドラッグ転換酵素を、抗体又は１つの抗体可変領域と１つ以上のイムノグロブリンドメインとを含む融合タンパク質をコードしてもよい（ＷＯ２００６／０５０９８４を参照されたい）。
【００３０】
腫瘍を担持しているヒト又はマウス、例えばヌードマウスに投与されたとき、前記改変は、抗腫瘍作用により測定される高度な腫瘍崩壊能力をもたらす。
【００３１】
本発明に係るウイルスは、更に、他のパラミクソウイルスのＦ及び／又はＨＮタンパク質の遺伝子をコードしてもよく、ここで、Ｆタンパク質は多塩基性（ｍｕｌｔｉｂａｓｉｃ）開裂部位を有してもよく、そして該ウイルスは、１つの遺伝子がＡＰＭＶ１〜９からなる群から選択されるウイルスの相同遺伝子により置換されるように改変されてもよい。
【００３２】
更に、前記遺伝子改変は、鳥類におけるウイルスの病原性の弱体化をもたらし得る。
【００３３】
更に、本発明は、上記疾患を治療するための医薬を生産するためのウイルスの、医薬として許容される担体及び希釈剤と組み合わせての使用を含む。そのような担体及び希釈剤は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，  １５ｔｎ  ｅｄ．  Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，  Ｅａｓｔｏｎ  Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ  （１９８０）に記載されている。使用されるウイルスのタイターは、処置の指示に従って、投与あたり１０９〜１０１２ｐｆｕの範囲内、投与あたり１０８〜１０１１ｐｆｕの範囲内、投与あたり１０７〜１０１０ｐｆｕの範囲内、又は投与あたり１０６〜１０９ｐｆｕの範囲内であり得る。
【００３４】
前記医薬的担体及び希釈剤は、発明に係るウイルスのエマルジョンを含んでもよく、そして吸入、静脈内注射、皮下注入、腹腔内注入又は腫瘍内注入により投与されてもよい。
【００３５】
本発明のなおも他の側面は、増殖性の障害、特に癌を予防する、及び／又は処置する方法であり、治療が必要な対象に、医薬有効量（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ  ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  ａｍｏｕｎｔ）の本発明の医薬組成物を投与することを含む。医薬有効量は、本発明のウイルス、特に疾患を治癒又は抑制する本発明のウイルスのタイターである。
【００３６】
治療的効果を奏する許容される用量は、例えばコンストラクト、患者、投与手段及び癌の種類に応じて変化する。
【００３７】
更に、本発明は、化学治療剤とを組み合わせた本発明に係るウイルスの使用を含む。
【００３８】
本発明に係るウイルスは、抗腫瘍剤、アルキル化剤、代謝拮抗剤、植物由来抗腫瘍剤、ホルモン系治療剤、トポイソメラーゼ阻害剤、カンプトテシン誘導体、キナーゼ阻害剤、標的薬物、抗体、インターフェロン及び／又は生物反応修飾物質（ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｍｏｄｉｆｉｅｒ）、並びに他の抗腫瘍薬物と共に使用され得る。なお、以下に列挙するものは、本発明のウイルスと共に使用され得る、非限定的な二次的薬剤の例である。
【００３９】
限定されないが、アルキル化剤として、ナイトロジェンマスタードＮ−オキシド、シクロホスファミド、イホスファミド、チオテパ、ラニムスチン、ニムスチン、テモゾロミド、アルトレタミン、アパジコン（ａｐａｚｉｑｕｏｎｅ）、ブロスタリシン、ベンダムスチン、カルムスチン、エストラムスチン、フォテムスチン、グルホスファミド、イホスファミド、マホスファミド、ベンダムスチン及びミトラクトールが含まれる。プラチナ協調（ｐｌａｔｉｎｕｍ  ｃｏｏｄｉｎａｔｅｄ）アルキル化剤として、限定されないが、シスプラチン、カルボプラチン、エプタプラチン、ロバプラチン、ネダプラチン、オキサリプラチン又はサトルプラチン（ｓａｔｒｐｌａｔｉｎ）が含まれる。
【００４０】
代謝拮抗剤は、限定されないが、メトトレキセート、６−メルカプトプリンリボシド、メルカプトプリン、５−フルオロウラシル単独若しくはロイコボリンとの組合せ、テガフール、ドキシフルリジン、カルモフール、シタラビン、シタラビンオクフォスファート（ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ  ｏｃｆｏｓｆａｔｅ）、エノシタビン、ゲムシタビン、フルダラビン、５−アザシチジン、カペシタビン、クラドリビン、クロファラビン、デシタビン、エフロルニチン、エチニルシチジン、シトシンアラビノシド、ヒドロキシウレア、メルファラン、ネララビン、ノラトレキセド（ｎｏｌａｔｒｅｘｅｄ）、オクフォスフィト（ｏｃｆｏｓｆｉｔｅ）、ジソジウムプレメトレキセド、ペントスタチン、ペリトレキソール、ラルチトレキセド、タピン、トリメトレキセート、ビダラビン、ビンクリスチン、ビノレルビン、ホルモン治療剤、例えばエキセメスタン、ルプロン、アナストロゾール、ドキセルカルシフェロール（ｄｏｘｅｒｃａｌｃｉｆｅｒｏｌ）、ファドロゾール、フォルメスタン、１１ベータ−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ１阻害剤、１７−アルファヒドロキシラーゼ／１７，２０リアーゼ阻害剤、例えばアビラテロンアセテート、５−アルファリダクターゼ阻害剤、例えばベアルフィナ（フィナステリド）、及びエフステリド、抗エストロゲン剤、例えばタモキシフェンシトレート、及びフルベストラント、トレルスター（Ｔｒｅｌｓｔａｒ）、トレミフェン、ラロキシフェン、ラソフォキシフェン、レトロゾール、又は抗アンドロゲン剤、例えばビカルタミド、フルタミド、ミフェプリストン、ニルタミド、カソデックス（Ｃａｓｏｄｅｘ）、又は抗プロゲステロン剤、並びにそれらの組合せを含む。
【００４１】
植物由来抗腫瘍物質は、例えば、細胞分裂阻害剤、例えばエポチロン、例えばサゴピロン、イクサベピロン（Ｉｘａｂｅｐｉｌｏｎｅ）又はエポチロンＢ、ビンブラスチン、ビンフルニン、ドケタキセル、及びパクリタキセルを含む。
【００４２】
細胞傷害性トポイソメラーゼ阻害剤は、アクラルビシン、アモナフィド、ベロテカン、カンプトテシン、１０−ヒドロキシカンプトテシン、９−アミノカンプトテシン、ジフロモテカン、イリノテカン（Ｃａｍｐｔｏｓａｒ）、エドテカリン、エピビシン（Ｅｌｌｅｎｃｅ）、エトポシド、エキサテカン、ギメテカン、ルルトテカン、ミトカサントロン、ピラムビシン、ピキサトロン、ルビテカン、ソブゾキサン、タフルポシド、及びトポテカン、並びにそれらの組合せからなる群から選択される１つ以上の薬剤を含む。
【００４３】
免疫剤（Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ）として、インターフェロン及び他の多くの免疫亢進剤が含まれる。
【００４４】
インターフェロンには、インターフェロンアルファ、インターフェロンアルファ−２ａ、インターフェロンアルファ−２ｂ、インターフェロンベータ、インターフェロンガンマ−１ａ、又はインターフェロンガンマ−ｎ１が含まれる。他の薬剤として、Ｌ１９−ＩＬ２及び他のＬ１９誘導体、フィルグラスチム（ｆｉｌｇｒａｓｔｉｍ）、レンチナン、シゾフィラン、テラシス（ＴｈｅｒａＣｙｓ）、ウベニメックス、アルデスロイキン、アレムトズマブ、ＢＡＭ−００２、デカルバジン、ダクリズマブ、デニロイキン、ゲムツズマブ、オゾガミシン、イブリツモマブ、イミキモド（ｉｍｉｑｕｉｍｏｄ）、レノグラスチム、レンチナン、黒色腫ワクチン（Ｃｏｒｉｘａ）、モルグラモスチム、サルグラモスチム、タソネルミン、テクロイキン、チマラシン（ｔｈｙｍａｌａｓｉｎ）、トシツモマブ、ビムリジン（Ｖｉｍｌｉｚｉｎ）、エプラツズマブ、ミツモマブ、オレゴボマブ、ペムツモマブ、プロベンジ（Ｐｒｏｖｅｎｇｅ）が含まれる。
【００４５】
生物反応修飾物質は、生物体の防御メカニズム、又は組織細胞の生存、増殖若しくは分化等の生物反応を修飾する薬剤であり、抗腫瘍活性を誘導する。そのような薬剤として、クレスチン、レンチナン、シゾフィラン、ピシバニール、プロムネ（ＰｒｏＭｕｎｅ）又はウベニメックスが含まれる。
【００４６】
アポトーシス促進剤は、ＹＭ１５５、ＡＭＧ６５５、ＡＰＯ２Ｌ／ＴＲＡＩＬ、ＣＨＲ−２７９７である。
【００４７】
抗血管形成化合物として、アシトレチン、アフリベルセプト（Ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）、アンジオスタチン、アプリジン、アセンタール、アキシチニブ（Ａｘｉｔｉｎｉｂ）、レセンチン（Ｒｅｃｅｎｔｉｎ）、ベバシズマブ（Ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ）、ブリバニブアラニネート、シレングチド、コンブレタスタチン、ＤＡＳＴ、エンドスタチン、フェンレチニド、ハロフギノン、パゾパニブ、ラニビズマブ（Ｒａｎｉｂｉｚｕｍａｂ）、レビマスタッ（ｒｅｂｉｍａｓｔａｔ）、レモバブ（ｒｅｍｏｖａｂ）、レブリミド（Ｒｅｖｌｉｍｉｄ）、ソラフェニブ（Ｓｏｒａｆｅｎｉｂ）、バタラニブ（Ｖａｔａｌａｎｉｂ）、スカラミン（ｓｑｕａｌａｍｉｎｅ）、スニチニブ（Ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ）、テラチニブ（Ｔｅｌａｔｉｎｉｂ）、タリドミド、ウクライン（ｕｋｒａｉｎ）、ビタキシン（Ｖｉｔａｘｉｎ）が含まれ、プラチナ協調化合物として、限定されないが、シスプラチン、カルボプラチン、ネダプラチン、サトラプラチン、又はオキサプラチンが含まれる。
【００４８】
カンプトテシン誘導体として、限定されないが、カンプトテシン、１０−ヒドロキシカンプトシン、９−アミノカンプトテシン、イリノテカン、エドテカリン、及びトポテカンが含まれる。
【００４９】
抗体として、トラスツズマブ（Ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ）、セツキシマブＣｅｔｕｘｉｍａｂ）、ベバシズマブ（Ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ）、又はリツキシマブ（Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ）、チシリムマブ、イピリムマブ（Ｉｐｉｌｉｍｕｍａｂ）、ルミリキシマブ、カツマキソマブ、カツマキソマブアタシセプト、オレゴボマブ、アレムツズマブが含まれる。
【００５０】
ＶＥＧＦ阻害剤も、本発明に係るウイルスと組み合され得る。ＶＥＧＦ阻害剤の例として、ソラフェニブ（Ｓｏｒａｆｅｎｉｂ）、ＤＡＳＴ、ベバシズマブ（Ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ）、スニチニブ（Ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ）、レケンチン（Ｒｅｃｅｎｔｉｎ）、アキシチニブ（Ａｘｉｔｉｎｉｂ）、アフリベルセプト（Ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）、テラチニブ（Ｔｅｌａｔｉｎｉｂ）、ブリバニブアラニネート、バタラニブ（Ｖａｔａｌａｎｉｂ）、パゾパニブ及びラニビズマブ（Ｒａｎｉｂｉｚｕｍａｂ）が挙げられる。
【００５１】
ＥＧＦＲ（ＨＥＲ１）阻害剤も、本発明に係るウイルスと組み合わされ得る。ＥＧＦＲ阻害剤の例として、セツキシマブ（Ｃｅｔｕｘｉｍａｂ）、パニツムマブ（Ｐａｎｉｔｕｍｕｍａｂ）、ベクチビックス（Ｖｅｃｔｉｂｉｘ）、ゲフィチニブ（Ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ）、エルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）、ザクチマ（Ｚａｃｔｉｍａ）が挙げられる。
【００５２】
ＨＥＲ２阻害剤も、本発明に係るウイルスと組み合わされ得る。ＨＥＲ２阻害剤の例として、ラパチニブ（Ｌａｐａｔｉｎｉｂ）、トラツズマブ（Ｔｒａｔｕｚｕｍａｂ）、ペルツズマブ（Ｐｅｒｔｕｚｕｍａｂ）が挙げられる。
【００５３】
ｍＴＯＲ阻害剤も、本発明に係るウイルスと組み合され得る。ｍＴＯＲ阻害剤の例として、テムシロリムス（Ｔｅｍｓｉｒｏｌｉｍｕｓ）、シロリムス／ラパマイシン（Ｒａｐａｍｙｃｉｎ）、エベロリムスが挙げられる。
【００５４】
ｃＭＥＴ阻害剤も、本発明に係るウイルスと組み合され得る。
【００５５】
ＰＩ３Ｋ−及びＡＫＴ阻害剤も、本発明に係るウイルスと組み合され得る。
【００５６】
ＣＤＫ阻害剤も、本発明に係るウイルスと組み合され得る。ＣＤＫ阻害剤の例として、ロスコビチン及びフラボピリドールが挙げられる。
【００５７】
紡錘体集合チェックポイント阻害剤及び標的抗細胞分裂薬剤も、本発明に係るウイルスと組み合され得る。標的抗細胞分裂薬剤は、ＰＬＫ阻害剤、Ａｕｒｏｒａ阻害剤、例えばヘスペラジン（Ｈｅｓｐｅｒａｄｉｎ）、チェックポイントキナーゼ阻害剤、及びＬＳＰ阻害剤が含まれる。
【００５８】
ＨＤＡＣ阻害剤も、本発明に係るウイルスと組み合され得る。ＨＤＡＣ阻害剤の例として、パノビノスタット、ボリノスタット、ＭＳ２７５、ベリノスタット及びＬＢＨ５８９が挙げられる。
【００５９】
ＨＳＰ９０阻害剤及びＨＳＰ７０阻害剤も、本発明に係るウイルスと組み合され得る。
【００６０】
プロテアソーム阻害剤も、本発明に係るウイルスと組み合され得る。プロテアソーム阻害剤の例として、ボルテゾミブ及びカルフィルゾミブが挙げられる。
【００６１】
セリン／スレオニンキナーゼ阻害剤も、本発明に係るウイルスと組み合され得る。セリン／スレオニンキナーゼ阻害剤には、ＭＥＫ阻害剤及びＲａｆ阻害剤、例えばソラフェニブ（Ｓｏｒａｆｅｎｉｂ）が含まれる。
【００６２】
本発明に係るウイルスは、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、例えばチピファルニブと共に使用され得る。
【００６３】
本発明のウイルスは、ダサチニブ（Ｄａｓａｔｉｎｉｂ）、ニロチビブ（Ｎｉｌｏｔｉｂｉｂ）、ＤＡＳＴ、ボスチニブ（Ｂｏｓｕｔｉｎｉｂ）、ソラフェニブ（Ｓｏｒａｆｅｎｉｂ）、ベバシズマブ（Ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ）、スニチニブ（Ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ）、ＡＺＤ２１７１、アキシチニブ（Ａｘｉｔｉｎｉｂ）、アフリベルセプト（Ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）、テラチニブ（Ｔｅｌａｔｉｎｉｂ）、イマチニブメシレート、ブリバニブアラニネート、パゾパニブ、ラニビズマブ（Ｒａｎｉｂｉｚｕｍａｂ）、バタラニブ（Ｖａｔａｌａｎｉｂ）、セツキシマブ（Ｃｅｔｕｘｉｍａｂ）、パニツムマブ（Ｐａｎｉｔｕｍｕｍａｂ）、ベクチビックス（Ｖｅｃｔｉｂｉｘ）、ゲフィチニブ（Ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ）、エルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）、ラパチニブ（Ｌａｐａｔｉｎｉｂ）、トラツズマブ（Ｔｒａｔｕｚｕｍａｂ）、ペルツズマブ（Ｐｅｒｔｕｚｕｍａｂ）及びｃ−Ｋｉｔ阻害剤を含む、チロシンキナーゼ阻害剤と共に使用され得る。
【００６４】
ビタミンＤ受容体アゴニストは、本発明に係るウイルスと組み合わされ得る。
【００６５】
Ｂｃｌ−２タンパク質阻害剤は、本発明に係るウイルスと組み合され得る。Ｂｃｌ−２タンパク質阻害剤の例として、オバトクラックス、ナトリウムオブリメルセン（ｏｂｌｉｍｅｒｓｅｎ  ｓｏｄｉｕｍ）及びゴシポール（ｇｏｓｓｙｐｏｌ）が挙げられる。
【００６６】
ＣＤ２０受容体アンタゴニストは、本発明に係るウイルスと組み合され得る。ＣＤ２０受容体アンタゴニストの一例として、リツキシマブが挙げられる。
【００６７】
リボヌクレオチドリダクターゼ阻害剤は、本発明に係るウイルスと組み合され得る。リボヌクレオチドリダクターゼ阻害剤の一例として、ゲムシタビンが挙げられる。
【００６８】
トポイソメラーゼＩ及びＩＩ阻害剤は、本発明に係るウイルスと組み合され得る。トポイソメラーゼＩ及びＩＩ阻害剤の例として、カンプトサール（Ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ）及びドキソルビシンが挙げられる。
【００６９】
腫瘍壊死因子関連アポトーシス誘導リガンド受容体１アゴニスト（Ｔｕｍｏｒ  Ｎｅｃｒｏｓｉｓ  Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  Ｉｎｄｕｃｉｎｇ  Ｌｉｇａｎｄ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １  Ａｇｏｎｉｓｔ）は、本発明に係るウイルスと組み合され得る。腫瘍壊死因子関連アポトーシス誘導リガンド受容体１アゴニストの一例として、マパツムマブが挙げられる。
【００７０】
５−ヒドロキシトリプタミン受容体アンタゴニストは、本発明に係るウイルスと組み合され得る。５−ヒドロキシトリプタミン受容体アンタゴニストの例として、ｒＥＶ５９８、キサリプロード（Ｘａｌｉｐｒｏｄｅ）、塩酸パロノセトロン（Ｐａｌｏｎｏｓｅｔｒｏｎ  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、グラニセトロン、ジンドール（Ｚｉｎｄｏｌ）、塩酸パロノセトロン又はＡＢ−１００１が挙げられる。
【００７１】
インテグリン阻害剤は、本発明に係るウイルスと組み合され得る。インテグリン阻害剤の例として、アルファ５ベータ１インテグリン阻害剤、例えばＥ７８２０、ＪＳＭ６４２５、ボロシキシマブ又はエンドスタチン（Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ）が挙げられる。
【００７２】
アンドロゲン受容体アンタゴニストは、本発明に係るウイルスと組み合され得る。アンドロゲン受容体アンタゴニストの例として、ナンドロロンデカノエート、フルオキシメステロン、フルオキシメステロン、アンドロイド（Ａｎｄｒｏｉｄ）、プロスト−エイド（Ｐｒｏｓｔ−ａｉｄ）、アンドロムスチン（Ａｎｄｒｏｍｕｓｔｉｎｅ）、ビカルタミド（Ｂｉｃａｌｕｔａｍｉｄｅ）、フルタミド（Ｆｌｕｔａｍｉｄｅ）、アポ−シプロテロン（Ａｐｏ−  Ｃｙｐｒｏｔｅｒｏｎｅ）、アポ−フルタミド（Ａｐｏ−Ｆｌｕｔａｍｉｄｅ）、クロルマジノンアセテート、ビカルタミド、アンドロクール（Ａｎｄｒｏｃｕｒ）、タビ（Ｔａｂｉ）、シプロテロンアセテート、シプロテロンタブレット（Ｃｙｐｒｏｔｅｒｏｎｅ  Ｔａｂｌｅｔｓ）、ニルタミドが挙げられる。
【００７３】
アロマターゼ阻害剤は、本発明に係るウイルスと組み合され得る。アロマターゼ阻害剤の例として、アナストロゾール、レトロゾール、テストラクトン、エクセメスタン、アミノグルテチミド（Ａｍｉｎｏｇｌｕｔｅｔｈｉｍｉｄｅ）及びフォルメスタンが挙げられる。
【００７４】
マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤は、本発明に係るウイルスと組み合され得る。
【００７５】
他の抗癌剤として、アリトレチノイン、アンプリゲン、アトラセンタンベキサロテン、ボルテゾミブ、ボセンタン、カルシトリオール、エキシスリンド、フィナステリド、フォテムスチン、イバンドロン酸、ミルテフォシン、ミトキサントロン、１−アスパラギナーゼ、プロカルバジン、ダカルバジン、ヒドロキシカルバミド、ヒドロキシカルバミド、ペグアスパルガーゼ、ペントスタチン、タザロトン、ベルケード、ガリウムニトレート、カンフォスファミドダリナパルシン（Ｃａｎｆｏｓｆａｍｉｄｅ  ｄａｒｉｎａｐａｒｓｉｎ）又はトレチノインが含まれる。
【実施例】
【００７６】
腫瘍選択的複製
ＨＴ２９結腸癌細胞又はＨＴ１０８０線維肉腫細胞等のヒト腫瘍細胞と共にインキュベートするとき、本発明のウイルスは、複製及び子孫ウイルスの生産が可能である。腫瘍細胞中で達成されるタイターは、初代正常細胞中で達成されるタイターの１００倍以上である。
【００７７】
本発明のウイルスの細胞殺傷作用を試験するとき、初代正常細胞を殺傷するのに必要なＭＯＩは、ヒト腫瘍細胞を殺傷するのに十分なＭＯＩの１００倍以上、より好ましくは１０００倍以上高い。
【００７８】
ウイルスの生産
本発明のウイルスは、胚を有する鳥類の卵（好ましくは鶏卵）中で、又はヒト腫瘍細胞株若しくはヒト腫瘍細胞株の派生物（ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ）中で増殖する。
【００７９】
本発明のウイルスは、卵の尿膜腔液から、又は細胞の上澄若しくは細胞ペレット（細胞協調ウイルス）から回収される。
【００８０】
本発明のウイルスは、非連続的スクロース勾配超遠心を使用して、濃縮及び精製される。あるいは、本発明のウイルスは、タンジェンシャルフロー濾過（ｔａｎｇｅｎｔｉａｌ  ｆｌｏｗ  ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ）を使用して、濃縮及び精製される。
【００８１】
抗腫瘍効果
本発明のウイルスの抗腫瘍効果は、マウスの腫瘍モデルにおいて示される。腫瘍内に、又は静脈内に投与されたとき、本発明のウイルスは、ヌードマウス中に定着したヒト異種移植腫瘍の退縮を引き起こす。ウイルスの効果的な用量は、１回の投与あたり１０５〜１０９ｐｆｕの範囲内である。幾つかの腫瘍モデルにおいて、最も効果的であるのに、２〜１４日の周期での投与の繰り返しが必要である。
【００８２】
ウイルスの遺伝子操作
逆遺伝学システムは多くのパラミクソウイルスについて公表されている。これは、本発明のパラミクソウイルスにも同様に適用される。
【００８３】
本発明のウイルスのゲノムは、シークエンシングされている。このシークエンスデータに基づき、ウイルスゲノム内の特異的な制限酵素認識部位を挟むクローニング用のプライマーがデザインされる。ＲＴ−ＰＣＲにより、ウイルスゲノムの幾つかの断片が、ｐＸ８δＴ等のプラスミドベクター中のＤＮＡとしてクローニングされる。
【００８４】
前記ゲノムプラスミド内で、突然変異、遺伝子の交換、及び他の種類の遺伝子操作が、ＤＮＡレベルで行われる。
【００８５】
Ｔ７−ポリメラーゼを発現する細胞中に、ヘルパープラスミドと共に前記ゲノムプラスミドＤＮＡをトランスフェクションすることにより、組換えウイルスはレスキューされ得る。ウイルスをレスキューする他の方法も使用され得る。例えば、細胞にＴ７−ポリメラーゼをコードする発現プラスミドと共にコトランスフェクションすることにより、Ｔ７−ポリメラーゼの発現が達成され得る。
【００８６】
関連するウイルスＮＤＶに記載される（Ｐｕｎｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００８）ように、本発明のウイルス中で追加的な導入遺伝子が発現する。
【００８７】
前記追加的な導入遺伝子は、好ましくはＭ−Ｆ間又はＦ−ＨＮ間の遺伝子間領域中に挿入される。
【００８８】
Ｆ及びＨＮ導入遺伝子はいずれかのＡＰＭＶに由来するものであり、好ましくは強力な腫瘍崩壊能力を有するウイルスに由来する。Ｆ及びＨ／ＨＮ導入遺伝子は、ＡＰＭＶ以外の他のパラミクソウイルスに由来し得る。
【００８９】
本発明のウイルスの腫瘍崩壊能力を増大させるのに、異種的なＦ又はＨＮタンパク質が個別にのみ発現すれば十分であり得る。
【００９０】
キメラウイルス
２つの異なるウイルスの長所を組み合わせるために、又は短所を取り除くために、ゲノムの断片を他のウイルスの相同断片と置き換えることが可能である。他のウイルスは、任意の関連するパラミクソウイルスであってもよく、ＡＰＭＶに限定されない。
【００９１】
ＡＰＭＶのＦ及びＨＮタンパク質をコードする内在遺伝子は、関連するパラミクソウイルス由来の相同遺伝子により置き換えられ、本発明のウイルスの特異性及び腫瘍選択性が変化し得る。
【００９２】
ウイルス粒子の適切な集合を可能とするために、Ｍ、Ｆ、及びＨＮの３つのタンパク質全てが、関連するウイルスの相同遺伝子断片に置き換えられる場合がある。
【００９３】
鳥類における病原性を低下させるために、Ｐ／Ｖタンパク質をコードする遺伝子を、突然変異させるか、又は関連するウイルス由来の遺伝子に置き換える。同一の手順で、ヒト腫瘍細胞の殺傷において、正常細胞と比較してウイルスの特異性が増大する場合もある。
【００９４】
内在性Ｌ、Ｐ及びＮＰタンパク質は、差し替えられ得る。これらの３つのタンパク質の差し替えは、本発明のウイルスの複製能力に影響を及ぼし得る。
【００９５】
導入遺伝子
ウイルスの病原性を低下させるために、本発明のウイルスゲノム中に、鳥類インターフェロンをコードする遺伝子が挿入される場合がある。
【００９６】
ウイルスの腫瘍浸透を増大させるために、リラキシン、コラゲナーゼ、ＭＭＰ等の細胞外マトリックス分解酵素をコードする導入遺伝子が挿入される。
【００９７】
治療的能力を増大させるために、毒素、プロドラッグ転換酵素、プロテアーゼ、抗体等の、抗腫瘍活性を有するタンパク質をコードする導入遺伝子が挿入される。例として、ＴＲＡＩＬ及びその突然変異、ＭＤＡ−７、ＩＬ−２、ＴＮＦ−ａ、ＩＧＦ−ＢＰ−７が挙げられる。
【００９８】
映像化の目的で、及びバイオマーカーとして、ＧＦＰ、ルシフェラーゼ、ＮＩＳ、又はマーカーペプチド、例えばＰＳＡ、インスリンＣペプチド、通常のウイルス抗原（ペプチド）等の、レポーター遺伝子をコードする導入遺伝子が挿入される。
【００９９】
引用文献
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Ｋｒｉｓｈｎａｍｕｒｔｈｙ，  Ｓ．，  Ｈｕａｎｇ，  Ｚ．，  ａｎｄ  Ｓａｍａｌ，  Ｓ．  Ｋ．  （２０００）．  Ｒｅｃｏｖｅｒｙ  ｏｆ  ａ  ｖｉｒｕｌｅｎｔ  ｓｔｒａｉｎ  ｏｆ  ｎｅｗｃａｓｔｌｅ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｖｉｒｕｓ  ｆｒｏｍ  ｃｌｏｎｅｄ  ｃＤＮＡ：  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｆｏｒｅｉｇｎ  ｇｅｎｅ  ｒｅｓｕｌｔｓ  ｉｎ  ｇｒｏｗｔｈ  ｒｅｔａｒｄａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ａｔｔｅｎｕａｔｉｏｎ．  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  ２７８（１），  １６８−８２．
Ｍｙｅｒｓ，  Ｒ．，  Ｇｒｅｉｎｅｒ，  Ｓ．，  Ｈａｒｖｅｙ，  Ｍ．，  Ｓｏｅｆｆｋｅｒ，  Ｄ．，  Ｆｒｅｎｚｋｅ，  Ｍ．，  Ａｂｒａｈａｍ，  Ｋ．，  Ｓｈａｗ，  Ａ．，  Ｒｏｚｅｎｂｌａｔｔ，  Ｓ．，  Ｆｅｄｅｒｓｐｉｅｌ，  Ｍ．  Ｊ．，  Ｒｕｓｓｅｌｌ，  Ｓ．  Ｊ．，  ａｎｄ  Ｐｅｎｇ，  Ｋ．  Ｗ．  （２００５）．  Ｏｎｃｏｌｙｔｉｃ  ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ  ｏｆ  ａｐｐｒｏｖｅｄ  ｍｕｍｐｓ  ａｎｄ  ｍｅａｓｌｅｓ  ｖａｃｃｉｎｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  ｏｖａｒｉａｎ  ｃａｎｃｅｒ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ  １２（７），  ５９３−９．
Ｎａｋａｙａ，  Ｔ．，  Ｃｒｏｓ，  Ｊ．，  Ｐａｒｋ，  Ｍ．  Ｓ．，  Ｎａｋａｙａ，  Ｙ．，  Ｚｈｅｎｇ，  Ｈ．，  Ｓａｇｒｅｒａ，  Ａ．，  Ｖｉｌｌａｒ，  Ｅ．，  Ｇａｒｃｉａ−Ｓａｓｔｒｅ，  Ａ．，  ａｎｄ  Ｐａｌｅｓｅ，  Ｐ．  （２００１）．  Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  Ｎｅｗｃａｓｔｌｅ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｖｉｒｕｓ  ａｓ  ａ  ｖａｃｃｉｎｅ  ｖｅｃｔｏｒ．  Ｊ  Ｖｉｒｏｌ  ７５（２３），  １１８６８−７３．
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Ｓｐｒｉｎｇｆｅｌｄ，  Ｃ，  ｖｏｎ  Ｍｅｓｓｌｉｎｇ，  Ｖ．，  Ｔｉｄｏｎａ，  Ｃ．  Ａ．，  Ｄａｒａｉ，  Ｇ．，  ａｎｄ  Ｃａｔｔａｎｅｏ，  Ｒ．  （２００５）．  Ｅｎｖｅｌｏｐｅ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ：  ｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ  ａｔｔａｃｈｍｅｎｔ  ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ｒａｔｈｅｒ  ｔｈａｎ  ｆｕｓｉｏｎ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｃｌｅａｖａｇｅ−ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｒｅｓｔｒｉｃｔｓ  Ｔｕｐａｉａ  ｐａｒａｍｙｘｏｖｉｒｕｓ  ｔｒｏｐｉｓｍ．  Ｊ  Ｖｉｒｏｌ  ７９（１６），  １０１５５−６３．
Ｓｔｏｊｄｌ，  Ｄ．  Ｆ．，  Ｌｉｃｈｔｙ，  Ｂ．  Ｄ．，  ｔｅｎＯｅｖｅｒ，  Ｂ．  Ｒ．，  Ｐａｔｅｒｓｏｎ，  Ｊ．  Ｍ．，  Ｐｏｗｅｒ，  Ａ．  Ｔ．，  Ｋｎｏｗｌｅｓ，  Ｓ．，  Ｍａｒｉｕｓ，  Ｒ．，  Ｒｅｙｎａｒｄ，  Ｊ．，  Ｐｏｌｉｑｕｉｎ，  Ｌ．，  Ａｔｋｉｎｓ，  Ｈ．，  Ｂｒｏｗｎ，  Ｅ．  Ｇ．，  Ｄｕｒｂｉｎ，  Ｒ．  Ｋ．，  Ｄｕｒｂｉｎ，  Ｊ．  Ｅ．，  Ｈｉｓｃｏｔｔ，  Ｊ．，  ａｎｄ  Ｂｅｌｌ，  Ｊ．  Ｃ．  （２００３）．  ＶＳＶ  ｓｔｒａｉｎｓ  ｗｉｔｈ  ｄｅｆｅｃｔｓ  ｉｎ  ｔｈｅｉｒ  ａｂｉｌｉｔｙ  ｔｏ  ｓｈｕｔｄｏｗｎ  ｉｎｎａｔｅ  ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ａｒｅ  ｐｏｔｅｎｔ  ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ａｎｔｉ−ｃａｎｃｅｒ  ａｇｅｎｔｓ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ  ４（４），  ２６３−７５．
Ｖａｈａ−Ｋｏｓｋｅｌａ，  Ｍ．  Ｊ．，  Ｈｅｉｋｋｉｌａ，  Ｊ．  Ｅ．，  ａｎｄ  Ｈｉｎｋｋａｎｅｎ，  Ａ．  Ｅ．  （２００７）．  Ｏｎｃｏｌｙｔｉｃ  ｖｉｒｕｓｅｓ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ  ｔｈｅｒａｐｙ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｌｅｔｔ．  Ｚｈａｏ，  Ｈ．，  ａｎｄ  Ｐｅｅｔｅｒｓ，  Ｂ．  Ｐ．  （２００３）．  Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  Ｎｅｗｃａｓｔｌｅ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｖｉｒｕｓ  ａｓ  ａ  ｖｉｒａｌ  ｖｅｃｔｏｒ：  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｇｅｎｏｍｉｃ  ｌｏｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｆｏｒｅｉｇｎ  ｇｅｎｅ  ｏｎ  ｇｅｎｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ａｎｄ  ｖｉｒｕｓ  ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ．  Ｊ  Ｇｅｎ  Ｖｉｒｏｌ  ８４（Ｐｔ  ４），  ７８１−８．
【国際調査報告】
2011512344.tif 000002
2011512344.tif 000003
2011512344.tif 000004
2011512344.tif 000005
2011512344.tif 000006
2011512344.tif 000007