(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
メトホルミンまたは薬剤学的に許容可能なその塩250-1000 mgおよびボグリボース0.1-0.4 mgを含む糖尿病治療用経口複合製剤として、前記糖尿病治療用経口複合製剤はメトホルミンまたは薬剤学的に許容可能なその塩と薬剤学的に許容可能な担体が結合された第1顆粒層と、ボグリボースと薬剤学的に許容可能な担体の混合液が前記第1顆粒層の外部にコーティングされた第2顆粒層を含むことを特徴とする、糖尿病治療用経口複合製剤。
【請求項２】
前記メトホルミンの薬剤学的に許容可能な塩はメトホルミン塩酸塩であることを特徴する請求項１に記載の糖尿病治療用経口複合製剤。
【請求項３】
前記薬剤学的に許容可能な担体はヒドロキシプロピルセルロースであることを特徴する請求項１に記載の糖尿病治療用経口複合製剤。
【請求項４】
前記第1顆粒層はメトホルミンまたは薬剤学的に許容可能なその塩とヒドロキシプロピルセルロースの混合粉末がヒドロキシプロピルセルロース水溶液を結合液にして結合形成したことを特徴する請求項１に記載の糖尿病治療用経口複合製剤。
【請求項５】
前記第1顆粒層はメトホルミン100重量部に対してヒドロキシプロピルセルロースを1〜50重量部含むことを特徴する請求項１に記載の糖尿病治療用経口複合製剤。
【請求項６】
前記ボグリボースおよび薬剤学的に許容可能な担体の混合液はボグリボース100重量部に対してヒドロキシプロピルセルロースを500〜5000重量部含むことを特徴とする請求項１に記載の糖尿病治療用経口複合製剤。
【請求項７】
前記複合製剤の1回投与量は3回であることを特徴とする請求項１に記載の糖尿病治療用経口複合製剤。
【請求項８】
前記経口複合製剤の形態はカプセルまたは錠剤であることを特徴とする 請求項１に記載の糖尿病治療用経口複合製剤。
【請求項９】
メトホルミンまたは薬剤学的に許容可能なその塩と薬剤学的に許容可能な担体が結合させた1次顆粒を形成させる段階と、前記1次顆粒の外部にボグリボースと薬剤学的に許容可能な担体の混合液を噴霧して2次顆粒を形成させる段階とを含むことを特徴とする、糖尿病治療用経口複合製剤の製造方法。
【請求項１０】
前記メトホルミンの薬剤学的に許容可能な塩はメトホルミン塩酸塩であることを特徴する請求項９に記載の糖尿病治療用経口複合製剤の製造方法 。
【請求項１１】
前記薬剤学的に許容可能な担体はヒドロキシプロピルセルロースであることを特徴する請求項９に記載の糖尿病治療用経口複合製剤の製造方法 。
【請求項１２】
前記1次顆粒を形成させる段階は、メトホルミンまたは薬剤学的に許容可能なその塩とヒドロキシプロピルセルロースを混合して混合粉末を形成させる段階と、前記混合粉末にヒドロキシプロピルセルロース水溶液を噴霧して1次顆粒を形成させる段階とを含むことを特徴する請求項９に記載の糖尿病治療用経口複合製剤の製造方法 。
【請求項１３】
前記1次顆粒はメトホルミン100重量部に対してヒドロキシプロピルセルロースを1〜50重量部含むことを特徴する請求項１２に記載の糖尿病治療用経口複合製剤の製造方法 。
【請求項１４】
前記ボグリボースおよび薬剤学的に許容可能な担体の混合液はボグリボース100重量部に対してヒドロキシプロピルセルロースを500〜5000重量部含むことを特徴とする請求項９に記載の糖尿病治療用経口複合製剤の製造方法 。
【請求項１５】
前記2次顆粒を滑澤剤と混合した後、楕円形錠剤で圧縮成形する段階をさらに含むことを特徴とする請求項９に記載の糖尿病治療用経口複合製剤の製造方法 。 
【請求項１６】
前記複合製剤はメトホルミン250−1000ｍｇおよびボグリボース0.1−0.4ｍを含むことを特徴する請求項１５に記載の糖尿病治療用経口複合製剤の製造方法 。
【請求項１７】
前記1次顆粒および２次顆粒の製造後、それぞれ篩で篩過して乾燥する段階をさらに含むことを特徴する請求項９に記載の糖尿病治療用経口複合製剤の製造方法 。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、メトホルミンおよびボグリボースを含有する2型糖尿病の治療に有用な経口製剤およびその製造方法に関するものであって、さらに詳しくは、メトホルミンおよびボグリボースをそれぞれ別の製剤として併用投与する場合と同等以上の効果を示すとともに、服用が簡便であり、患者のコンプライアンスを向上させることができる経口製剤およびその製造方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
インスリン非依存性糖尿病の2型糖尿病は、全世界的に約5％の有病率を示す最も有り触れた代謝性疾患の一つであり、今後、2010年内に7％まで増加する傾向にあり、世界中の総糖尿病患者の数は今後10年間、約2倍増加すると予想される。
【０００３】
2型糖尿病の病態生理はインスリン分泌障害やインスリン抵抗性が特徴であり、インスリン抵抗性は膵臓のβ細胞から過インスリン分泌を招くことがあり、これは再び過インスリン血症につながるが、過インスリン血症は糖尿病として診断される前から既に存在し、他の様々なの疾病に対する独立的な危険因子として作用する。このような過程で、結局、β細胞の機能が低下してインスリン不足が起こるようになり、その結果、食事後の耐糖能低下および空腹時高血糖を特徴とする糖尿病が発病する。糖尿病が長期間続くと、遂に網膜症、神経病症、または心臓病症のような微細血管合併症や、心血管、脳血管、または抹消動脈血管のような大血管合併症など、様々な慢性合併症が発生する。このような慢性合併症は糖尿病患者の生活の質を低下させ、死亡率を大きく増加させる。従って、2型糖尿病の管理は慢性合併症を予防するためのものであって、言い換えると、このような慢性合併症の発病と進行を遅延させるためのものである。
【０００４】
糖尿による慢性合併症を経験する可能性のある糖尿病患者は厳格な糖尿病治療過程に参加して、正常、あるいは少なくとも正常に近いグリコヘモグロビン(HbA1c)を維持するように、それを満足するほどの代謝調節をしなければならない。血糖調節と合併症研究(Diabetes Control and Complication Trial)や英国糖尿病前向き研究(United Kingdom Prospective Diabetes Study, UKPDS)の結果は、厳格な血糖調節が糖尿による慢性合併症の発生危険度を下げるということをよく示している。しかし、実際の臨床では数多くの2型糖尿病患者が米国糖尿病学会が提示した目標値以下に血糖を調節することに失敗している。また、前記UKPDSの分析結果を見ると、経口血糖降下剤の単独療法の失敗率は時間が経つとともに増加し、これにより、効果的な血糖調節のためには他の薬物との併用は不可欠である。
【０００５】
併用療法における適切な薬剤の選択は、個人の事情によって様々ではあるが、相互補完的な効果を考慮して、互いに異なるメカニズムを有する薬物を併用することが好ましい。このような側面から、α−グリコシダーゼ抑制薬物とメトホルミンとの併用は2型糖尿病の二つの病理学的メカニズムである食後血糖増加とインスリン抵抗性を同時に調節することができる理想的な併用療法である。実際に既に多くの臨床試験により、α−グリコシダーゼ抑制薬物とメトホルミンの併用療法が各々の単独療法と比べて、血糖調節の側面で効果的であるという事実が立証された(Clinical therapeutics vol.25 No.12 2003, Diabetes Care vol.24 No.6 June 2001)。
【０００６】
しかし、2つ以上の経口血糖降下剤の併用療法は、実際臨床では患者が不特定長期間を持続し難いという点がある。このような低いコンプライアンスは結局、経口血糖降下剤の併用療法を必要とする相当数の2型糖尿病患者が血糖調節に失敗する重要な原因の一つである。
【０００７】
従って、2つの経口血糖降下剤を一つの剤形に結合させた複合剤は服用に便利なため、薬物に対する患者のコンプライアンスを改善させ、長期的かつ効果的な血糖調節のための代案となり得る。経口血糖降下剤の併用療法において、投与方式による患者のコンプライアンスを比較したある研究結果によると、それぞれを別々に服用した被検者群のコンプライアンスは54％に留まったのに対し、複合剤を服用した被験者群のコンプライアンスは77％を示し、このような複合剤の利点は単純な可能性を超えて、長期間の併用療法が要求される相当数の2型糖尿病患者に実質的な利益を与えられるということが立証された。
【０００８】
ビグアニド系糖尿病治療剤であるメトホルミンは塩酸塩の形態であって、グルコファージ(Glucophage)という登録商標で販売されている。メトホルミン塩酸塩は肝臓での糖生成を減少させ、末端での吸収を増加させることによってインスリンの感受性を増加させる薬物である。また、50〜60％の経口生体利用率を持つ親水性薬物であって、1.5〜4.5時間の多様な生物学的半減期により、効果的な血漿濃度を維持するために一日3回、500mgずつ繰り返して投与しなければならない薬物である。メトホルミン塩酸塩は本質的にそのほどんどが上部胃腸管で吸収され、小腸、大腸、結腸などの下部胃腸管では浸透力が悪い。従って、メトホルミンを含有する製剤がメトホルミンを迅速に放出せず、時間の経過とともに胃腸管の下部に移動すると、メトホルミンの生体利用率は減少することになる。
【０００９】
また、ボグリボースなどのようなα−グリコシダーゼ抑制剤はインスリン非依存型糖尿病治療剤であって、既存のスルホニルウレア系とは違う結合方式で胃腸管細胞に存在するα−グリコシダーゼを抑制してブドウ糖への転換を抑制することにより、食事直後の急激な血糖濃度の上昇を有意に抑制し、優れた血糖降下作用を示す。また、低血糖が発現することなく充分な血糖調節効果を発揮して、患者のコンプライアンスを増加させる。このようなα−グリコシダーゼ抑制剤も同様に、食事直後の急激な血糖濃度上昇を抑制しなければならないため、充分な効果を出すためには製剤から迅速に放出されて吸収されなければならない。
【００１０】
一方、投与される薬物の容量は、メトホルミンは1回250〜1000と非常に高く、 α−グリコシダーゼ抑制剤に該当するボグリボースは1回0.2〜0.3mgと非常に低い。従って、このような二つの薬物の複合製剤を製造する場合、ボグリボースの低い容量のため、製剤間均一な混合度および溶出を示すのは困難であり、それぞれの薬物動態学的特性および薬物動力学的特性により、必要な薬物の吸収条件が影響を受けることもある。
【００１１】
従って、糖尿病患者の血糖を効果的に調節するとともに患者のコンプライアンスを高めるための2つ以上の経口血糖降下剤を含有する複合製剤を製造する際に、それぞれの薬物を別の薬物として併用投与する場合と同等以上の効果を示すようにする製剤の開発が必要とされる。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
従って、本発明の目的は、製剤間均一な混合度および溶出特性を示すとともに、それぞれの薬物を別の薬物として併用投与する場合と同等以上の効果を示すようにするメトホルミンおよびα−グリコシダーゼ抑制剤を含む経口製剤を提供することである。
【００１３】
また、本発明の目的は、前記メトホルミンおよびα−グリコシダーゼ抑制剤を含む経口製剤を製造する方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
前記目的を達成するために、本発明は、
メトホルミンおよびヒドロキシプロピルセルロースの混合粉末に対し、ヒドロキシプロピルセルロース水溶液を結合液にして製造した1次湿式顆粒に、α−グリコシダーゼ抑制剤およびヒドロキシプロピルセルロース混合水溶液でコーティングして形成された2次湿式顆粒を含む経口製剤を提供する。
【００１５】
また、本発明は、メトホルミンおよびヒドロキシプロピルセルロースの混合粉末を流動層顆粒機に入れ、ヒドロキシプロピルセルロース水溶液を噴霧して1次湿式顆粒を形成させる段階と、流動層顆粒機で前記1次湿式顆粒にα−グリコシダーゼ抑制剤およびヒドロキシプロピルセルロース混合水溶液を噴霧して2次湿式顆粒を形成させる段階とを含む、前記本発明による経口製剤を製造する方法を提供する。
【００１６】
以下、本発明をさらに詳しく説明する。
【００１７】
本発明による経口製剤は、メトホルミンおよびα−グリコシダーゼ抑制剤を含む製剤であって、メトホルミンおよびα−グリコシダーゼ抑制剤を製剤間均一な 混合度および溶出を示すとともに、それぞれの活性成分が個別に投与される場合と同等以上の効果を出す溶出パターンを示すようにするための製剤である。
【００１８】
本発明による製剤はこのような溶出パターンを示すようにするために、メトホルミンおよびヒドロキシプロピルセルロースの混合粉末に対し、ヒドロキシプロピルセルロース水溶液を結合液にして形成させた1次湿式顆粒に、α−グリコシダーゼ抑制剤およびヒドロキシプロピルセルロース混合水溶液でコーティングして形成された2次湿式顆粒を含むことを特徴とする。前記製剤は1次湿式顆粒中にメトホルミンおよびヒドロキシプロピルセルロースが均質に混合されており、そのそれぞれの顆粒にα−グリコシダーゼ抑制剤およびヒドロキシプロピルセルロースがコーティングされており、製剤中にメトホルミンおよびα−グリコシダーゼ抑制剤が均質な形態ではないが、メトホルミン中にα−グリコシダーゼ抑制剤が均一に分布される形態を有する。従って、製剤間活性成分の混合度にバラツキが少ないと予想される。また、薬物の特性上、食前投与して迅速な効果を出さなければならないα−グリコシダーゼ抑制剤が顆粒の外部にコーティングされ、親水性重合体のヒドロキシプロピルセルロースとともに分散されており、投与時に顆粒外部で迅速に崩壊されて放出されることができるため、複合製剤としてα−グリコシダーゼ抑制剤を単独投与した場合以上の効果を示すことができる。メトホルミンを含む1次顆粒部もまた、α−グリコシダーゼ抑制剤を含有するコーティング層の崩壊後、ヒドロキシプロピルセルロースとともに迅速に崩壊および溶出されることができる。従って、本発明による経口製剤は、現在市販されているメトホルミンおよびα−グリコシダーゼ抑制剤それぞれの単一製剤と比べて、それぞれの成分をさらに迅速に放出し、血中へ迅速に吸収されることができる。
【００１９】
前記本発明の経口製剤における1次湿式顆粒の製造および2次湿式顆粒の製剤は、薬剤学分野で通常使用される顆粒製造方法を使用することができ、好ましくは、メトホルミンおよびヒドロキシプロピルセルロースの混合物を流動層顆粒機で流動させながら、ヒドロキシプロピルセルロース水溶液結合液を噴霧して1次顆粒を形成させた後、流動層顆粒機中で1次顆粒にα−グリコシダーゼ抑制剤およびヒドロキシプロピルセルロースの混合水溶液を結合液として噴霧して2次顆粒を製造することができる。
【００２０】
前記本発明による経口製剤は、前記1次湿式顆粒はメトホルミン100重量部に対してヒドロキシプロピルセルロースを1〜50重量部含み、α−グリコシダーゼ抑制剤およびヒドロキシプロピルセルロース混合水溶液はα−グリコシダーゼ抑制剤100重量部に対してヒドロキシプロピルセルロースを500〜5000重量部含む。活性成分に対するヒドロキシプロピルセルロースの量は製造しようとする顆粒の大きさおよび強度や、顆粒の比表面積、そして活性成分の含量や所望する活性成分の溶出速度などによって変わる。
【００２１】
前記本発明の経口製剤は、前記2次顆粒の形態のまま顆粒剤であるか、顆粒剤を含むカプセル剤または錠剤で、さらに製剤化された形態である。カプセル剤は薬剤学分野で通常利用されるカプセル剤の製造方法によって、カプセルに前記2次顆粒を単独、または澱粉類、乳糖類、セルロース類などの賦形剤とともに充填して製造される。前記本発明の経口製剤は好ましくは錠剤であり、錠剤は前記2次顆粒を滑沢剤とともに打錠して製造される。前記滑沢剤は、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、パルミチン酸、タルク、ステアリン酸カルシウム、カルナウバロウ、及びこれらの組み合わせからなる群から選択することができる。
【００２２】
本発明による経口投与製剤に活性成分として含有されるメトホルミンは、メトホルミンまたはメトホルミンの薬剤学的に許容可能な塩であり、好ましくはメトホルミン塩酸塩である。さらに他の活性成分であるα−グリコシダーゼ抑制剤は、アカルボース、ミグリトール、またはボグリボースであるが、これに限定されるものではなく、好ましくはボグリボースである。
【００２３】
前記本発明による経口投与製剤は、1回投与量当たり、メトホルミン塩酸塩は250-1000mg、ボグリボースは0.1-0.4 mg含有されることができ、製造しようとする薬物の強度によって適切に増減することができる。前記経口製剤は各成分の効果的な作用のために食事中または食後に投与することができる。
【００２４】
本発明による経口投与製剤は下記実験例によると、従来のメトホルミン単一製剤であるグルコファージと比べて、メトホルミンをpH 1.2乃至7の媒質内でより迅速に放出することが示され、ボグリボース単一製剤であるベイスンと同等以上にボグリボースを放出することが確認された。また、ビーグル犬による生体利用率試験でも、本発明による経口投与製剤はグルコファージと比べてメトホルミンに対する生体利用率が同等以上であることが示された。従って、本発明による経口投与製剤は、それぞれの活性成分を別の薬物として併用投与する場合と同等以上の効果を示す血糖調節用複合製剤である。
【００２５】
本発明は他の側面で、メトホルミンおよびヒドロキシプロピルセルロースの混合粉末を流動層顆粒機に入れ、ヒドロキシプロピルセルロース水溶液を噴霧して1次湿式顆粒を製造する段階と、流動層顆粒機で前記1次湿式顆粒にα−グリコシダーゼ抑制剤およびヒドロキシプロピルセルロース混合水溶液を噴霧して2次湿式顆粒を形成させる段階とを含む、本発明による経口製剤を製造する方法を提供する。
【００２６】
前記1次湿式顆粒および2次湿式顆粒の製造に利用される流動層顆粒機を用いた顆粒の製造は、50〜70℃の温度条件で行うことができる。
【００２７】
前記1次湿式顆粒および2次湿式顆粒の製造後には、それぞれ篩で篩過して、大きさ75〜500mの顆粒を以後の段階で用いることが好ましい。
【００２８】
前記経口製剤を製造する方法は、前記製造された2次湿式顆粒を滑沢剤とともに打錠して錠剤を製造する段階をさらに加えて、錠剤を製造することができる。
【００２９】
前記滑沢剤は、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、パルミチン酸、タルク、ステアリン酸カルシウム、カルナウバロウ、及びこれらの組み合わせからなる群から選択することができるが、これに限定されるものではない。
【発明の効果】
【００３０】
本発明によると、製剤間均一な混合度および溶出率を有するだけでなく、メトホルミンおよびα−グリコシダーゼ抑制剤を別の薬物として併用投与する場合と同等以上の効果を示す血糖調節用複合製剤を提供することができる。このような複合製剤は、2つの薬物の複合投与により糖尿病患者の血糖を効果的に調節するとともに患者のコンプライアンスを高めることができ、長期間の血糖調節が必要な糖尿病の血糖管理に非常に効果的である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３１】
以下、本発明を実施例によってさらに詳しく説明する。しかし、これらの実施例は本発明を例示的に説明するためのものであって、本発明の範囲がこれらの実施例に限定されるものではない。
【００３２】
実施例1：メトホルミンおよびボグリボースの複合製剤製造(1)
メトホルミン塩酸塩300g、ヒドロキシプロピルセルロース36gを均一に混合した後、20メッシュの篩を用いて篩過し、流動層顆粒機に入れて60℃で10分間予熱した。ヒドロキシプロピルセルロース6gを水120mLに溶かして結合液を製造した後、製造した結合液を1分当たり7mLの速度で噴霧して1次顆粒を製造し、20メッシュの篩で篩過した。
【００３３】
ボグリボース0.18gとヒドロキシプロピルセルロース6gを水120mLによく攪拌して溶解した後、これを前記製造した顆粒に噴霧して2次顆粒を製造した。20メッシュの篩で篩過した後、乾燥して完成した。
【００３４】
実施例2：メトホルミンおよびボグリボースの複合製剤製造(2)
メトホルミン塩酸塩300g、ヒドロキシプロピルセルロース36gを均一に混合した後、20メッシュの篩を用いて篩過し、流動層顆粒機に入れて60℃で10分間予熱した。ヒドロキシプロピルセルロース6gを水120mLに溶かして結合液を製造した後、製造した結合液を1分当たり7mLの速度で噴霧して1次顆粒を製造し、20メッシュの篩で篩過した。
【００３５】
ボグリボース0.12gとヒドロキシプロピルセルロース6gを水120mLによく攪拌して溶解した後、これを前記製造した顆粒に噴霧して2次顆粒を製造した。20メッシュの篩で篩過した後、乾燥して完成した。
【００３６】
実施例3：メトホルミンおよびボグリボースの複合製剤製造(3)
メトホルミン塩酸塩300g、ヒドロキシプロピルセルロース36gを均一に混合した後、20メッシュの篩を用いて篩過し、流動層顆粒機に入れて60℃で10分間予熱した。ヒドロキシプロピルセルロース6gを水120mLに溶かして結合液を製造した後、製造した結合液を1分当たり7mLの速度で噴霧して1次顆粒を製造し、20メッシュの篩で篩過した。
【００３７】
ボグリボース0.36gとヒドロキシプロピルセルロース6gを水120mLによく攪拌して溶解した後、これを前記製造した顆粒に噴霧して2次顆粒を製造した。20メッシュの篩で篩過した後、乾燥して完成した。
【００３８】
実施例4：メトホルミンおよびボグリボースの複合製剤製造(4)
メトホルミン塩酸塩300g、ヒドロキシプロピルセルロース36gを均一に混合した後、20メッシュの篩を用いて篩過し、流動層顆粒機に入れて60℃で10分間予熱した。ヒドロキシプロピルセルロース6gを水120mLに溶かして結合液を製造した後、製造した結合液を1分当たり7mLの速度で噴霧して1次顆粒を製造し、20メッシュの篩で篩過した。
【００３９】
ボグリボース0.24gとヒドロキシプロピルセルロース6gを水120mLによく攪拌して溶解した後、これを前記製造した顆粒に噴霧して2次顆粒を製造した。20メッシュの篩で篩過した後、乾燥して完成した。
【００４０】
実施例5：メトホルミンおよびボグリボースの複合製剤製造(5)
前記実施例1で製造した顆粒を滑沢剤のステアリン酸マグネシウム3gと適正時間、混合した後、585.3±30mgの重量で楕円形錠剤に圧縮成形した。それぞれの錠剤は平均、メトホルミン塩酸塩500mgとボグリボース0.3mgを含む。
【００４１】
実施例6：メトホルミンおよびボグリボースの複合製剤製造(6)
前記実施例2で製造した顆粒を滑沢剤のステアリン酸マグネシウム3gと適正時間、混合した後、585.3±30mgの重量で楕円形錠剤に圧縮成形した。それぞれの錠剤は平均、メトホルミン塩酸塩500mgとボグリボース0.2mgを含む。
【００４２】
実施例7：メトホルミンおよびボグリボースの複合製剤製造(7)
前記実施例3で製造した顆粒を滑沢剤のステアリン酸マグネシウム3gと適正時間、混合した後、292.8±15mgの重量で楕円形錠剤に圧縮成形した。それぞれの錠剤は平均、メトホルミン塩酸塩250mgとボグリボース0.3mgを含む。
【００４３】
実施例8：メトホルミンおよびボグリボースの複合製剤製造(8)
前記実施例1で製造した顆粒を滑沢剤のステアリン酸マグネシウム3gと適正時間、混合した後、292.8±15mgの重量で楕円形錠剤に圧縮成形した。それぞれの錠剤は平均、メトホルミン塩酸塩292.8±15mgとボグリボース0.2mgを含む。
【００４４】
実験例1
前記実施例7で製造された錠剤をグルコファージに対して溶出試験を行った。溶出試験の条件は次のようである。
【００４５】
− 溶出液：精製水、pH 6.8リン酸塩緩衝液、pH 4.0酢酸塩緩衝液、pH 1.2緩衝液
pH 1.2緩衝液(崩壊試験法第1液)はNaCl 2.0gにc-HCl 7.0mLおよび水を入れて溶かし、1Lにしたものであり、この液は無色無臭で、pHは約1.2である。pH 4.0酢酸塩緩衝液(酢酸塩緩衝液)は0.05 mol/L酢酸液、0.05 mol/L酢酸ナトリウム液の混合液(41：9)を製造して、pH 4.0に調節したものである。
− 溶出機器：Hanson Dissolution Tester(USA)
− 溶出速度：50rpm
− 溶出時間：60分
− 検液の製造：溶出試験開始30分後に溶出液10mLを取って0.45μmメンブレンフィルターで濾過する。最初の濾液5mLを捨て、残り5mLを取って100mL容量フラスコに入れる。溶出液で標線に合わせて、検液として使用する。
−標準液の製造：メトホルミン標準品50mgを精密に取って20mL容量フラスコに入れ、溶出液で標線に合わせる。この液1mLを正確に取って20mL容量フラスコに入れ、溶出液で標線に合わせる。再びこの液5mLを正確に取って50mL容量フラスコに入れ、溶出液で標線に合わせて標準液として使用する。
−操作：検液と標準液を233nmで紫外可視吸光度測定法によって、それぞれの吸光度を測定する。
【００４６】
前記条件で溶出試験を行った結果を図1乃至図4に示した。
【００４７】
図1乃至図4の結果によると、本発明による複合製剤が従来の市販製剤であるグルコファージと比べてpH 1.2−7の媒質で迅速にメトホルミンを放出するということが分った。
【００４８】
実験例2：生体利用率試験
前記実施例5で製造された錠剤をグルコファージを対照薬にして、ビーグル犬を対象に下記のような方法で経口投与し、生体利用率を試験した。
【００４９】
- 試験機器：
Vortex Mixer (Thermolyne, USA; Type 37600 Mixer)
冷凍庫((株)LASSELE; DY-110F
Micro Centrifuge (Hanil Co., Korea; Micro 17TR)
HPLC (SHISEIDO; NANOSPACE)
MS/MS (Applied Biosystems; API 5000)
【００５０】
- 試験器具
Dispenser (Eppendorf)
Micro Pipette (Gilson Co., France; P-20, P-100, P-200, P-1000)
【００５１】
-試験方法
ストック溶液の製造：標準物質として使用するメトホルミン、IS(フェンホルミン)をそれぞれガラスバイアル(水とACNで拭いて乾燥した5mL容量のバイアル)に3mg以上、重量を測定した後、マイクロピペットを使用して1 mg/mlの濃度となるようにメタノールに溶かして実験に使用する。使用するまで4℃に保管して使用する。1 mg/mlのメトホルミンストック溶液は50% ACNで10倍希釈して100 μg/mlのストック溶液を製造し、2倍希釈して50、25、12.5、6.25、3.13、1.56、0.78、0.39 μg/mlのストック溶液を製造して検量線作成に使用し、このうち、高、中、低濃度とLLOQ濃度を検証(validation)試料として使用する。
【００５２】
試料の前処理：100μlのブランク血漿に10μlのIS(フェンホルミン、25μg/ml)を添加し、5秒間ボルテキシングした後、500μlのACNを入れて2分間ボルテキシングする。遠心分離機で13,000rpm、4℃で5分間遠心分離した後、上層液50μlは新しいチューブに移し、ここに移動相を500μl入れて1分間ボルテキシングする。遠心分離(13,000rpm、4℃、2分)と濾過(0.2μm)を経た後、LC/MS/MSで分析する。
【００５３】
HPLC条件：
カラム−CAPCELL PAK CR 5μ (50 x 2.00 mm)
カラム温度−40℃
溶離液 − ACN(0.1% ギ酸):10 mM 酢酸アンモニウム(0.1% ギ酸) = 250:50
流速：0.3 ml/min
注入体積：2μl
ランニング時間−3.0分
【００５４】
MS/MS条件：
極性−ES＋
注入電圧(Entrance Potential)−10V
デクラスタリング電圧(Declustering Potential)−81V(メトホルミン)、86V(フェンホルミン)
衝突エネルギー(Collision Energy)−35V(メトホルミン)、25V(フェンホルミン)
衝突細胞出口電圧(Collision Cell Exit Potential)−14V(メトホルミン)、10V(フェンホルミン)
衝突気体−10
カーテン気体(Curtain Gas)−20
イオン発生源気体(Ion Source Gas) 1−50
イオン発生源気体(Ion Source Gas) 2−50
イオンスプレー電圧−5500
温度−450℃
【００５５】
前記試験条件による生体利用率試験の結果を図2に示した。
【００５６】
図2の結果によると、本発明による複合製剤が従来の市販製剤であるベイスンと同等以上の生体利用率を有することが分かる。
【００５７】
実験例3：安定性試験
前記実施例5で製造された錠剤を、グルコファージおよびベイスンとともに安定性試験を下記のような条件で行った。
【００５８】
−試験条件：加速安定性試験 (45℃, 75%)
−試験期間：6ヶ月
【００５９】
−試験方法：
検液の製造
この薬10錠を取って移動相200mLを正確に加え、振とう混合して完全に分解した後、遠心分離する。上澄液を0.45μmメンブレンフィルターで濾過する。最初の濾液1mLを捨て、次の液を試料溶液にする。
【００６０】
標準液の製造
定量用ボグリボース約10mgを精密に取って移動相に溶かし、正確に20mLにした後、2mLを取ってそれぞれ100mL容量フラスコに入れ、移動相で標線を合わせる。
【００６１】
液体クロマトグラフ法の操作条件
検出器−蛍光光度計(励起波長：350nm、蛍光波長 : 430nm)
カラム− YMC-Pack ポリアミン(4.6 mm I.D. x 250 mm L, 5 μm)
カラム温度−25℃
移動相−アセトニトリル：リン酸ナトリウム緩衝液(pH 6.5)混合液＝1：1
リン酸ナトリウム緩衝液(pH 6.5)はリン酸二水素ナトリウム一水和物1.38gに水を加えて溶かし、500mLにした液と、リン酸一水素ナトリウム1.42gに水を加えて溶かし、500mLにした液とを合わせてpH 6.5に調整したものである。
流速−ボグリボースの保持時間が約15分になるように調整する。
発蛍光試液−タウリン6.25gおよび過ヨウ素酸ナトリウム2.56gを水に溶かし、1Lとする。
反応コイル用恒温槽の温度：100℃
冷却コイル用恒温槽の温度：25℃
【００６２】
その結果を下記表1に示した。
【表１】
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【００６３】
前記表1の結果によると、本発明による製剤は保管安定性の側面でも、各成分の単一製剤と同等以上の安定性を有することが確認された。
【図面の簡単な説明】
【００６４】
【図１】本発明の一具現例による錠剤をグルコファージを対照薬にして、水で時間の経過による溶出試験を実施した結果を示したグラフである。
【図２】本発明の一具現例による錠剤をグルコファージを対照薬にして、pH 6.8のリン酸塩緩衝溶液で時間の経過による溶出試験を実施した結果を示したグラフである。
【図３】本発明の一具現例による錠剤をグルコファージを対照薬にして、pH 4.0の酢酸塩緩衝溶液で時間の経過による溶出試験を実施した結果を示したグラフである。
【図４】本発明の一具現例による錠剤をグルコファージを対照薬にして、pH 1.2の緩衝溶液で時間の経過による溶出試験を実施した結果を示したグラフである。
【図５】本発明の一具現例による錠剤をグルコファージを対照薬にして、ビーグル犬を対象に経口投与した後、時間の経過によるメトホルミンの血漿濃度を測定した結果を示したグラフである。
【符号の説明】
【００６５】
FO801：実施例7で製造された錠剤
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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