(57)【要約】本発明は、取り扱いミスにより細胞試料の混同を生じるリスクを最小限にするために、細胞の確実な取り扱いを支援するように配置されたシステムに関する。システムは、全培養期間中の細胞の１対１識別を可能にする。これは、一度に１つのデバイスのみを装填／除去することができることを確実にする、装填／排出制御手段を有する培養システムを提供することにより得られる。システムは、少なくとも２つの顕微鏡対象物の培養および随意で監視を実施するために配置され、少なくとも２つの顕微鏡対象物は、少なくとも２つの別個のデバイスの中に配置される。システムは、インキュベータと、インキュベータの中に配置されるようにデバイスを装填するための装填ポートと、インキュベータからデバイスを回収するための排出ポートと、一度に１つのデバイスのみがシステム内に装填可能であることを制御することができる装填制御手段とを備える。【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも２つの顕微鏡対象物の培養および随意で監視を実施するために配置されるシステムであって、前記少なくとも２つの顕微鏡対象物は、少なくとも２つの別個のデバイスの中に配置され、前記システムは、
インキュベータと、
前記インキュベータの中に配置されるようにデバイスを装填するための装填ポートと、
前記インキュベータからデバイスを回収するための排出ポートと、
一度に１つのデバイスのみが前記システム内に装填可能であることを制御することができる装填制御手段と
を備えている、システム。
【請求項２】
装填制御手段は、一度に１つのデバイスの進入のみを可能にする、前記装填ポートの大きさにより構成される、請求項１に記載のシステム。
【請求項３】
前記排出ポートの大きさは、一度に１つのデバイスの排出のみを可能にする、請求項１または２に記載のシステム。
【請求項４】
前記装填ポートおよび前記排出ポートは、同一のポートである、請求項１〜請求項３のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項５】
２つ以上のデバイスホルダ位置を有する格納手段をさらに備え、各デバイスホルダ位置は、前記格納手段上の固定位置に前記デバイスを保持するように適合されている、請求項１〜請求項４のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項６】
前記格納手段は、コンベヤベルトである、請求項１〜請求項５のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項７】
前記システムは、顕微鏡をさらに備え、前記格納手段は、前記顕微鏡に相対して前記デバイスを位置付けるように配置され、それにより、少なくとも１つの顕微鏡対象物が前記顕微鏡により視認されることを可能にする、請求項１〜請求項６のいずれか１項に記載のシステム。  
【請求項８】
前記格納手段は、少なくとも６つのデバイスホルダ位置等の、少なくとも４つのデバイスホルダ位置を備えている、請求項１〜請求項７のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項９】
各デバイスは、少なくとも５つの顕微鏡対象物等の、少なくとも２つの顕微鏡対象物を収容することができる、請求項１〜請求項８のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項１０】
各デバイスには、機械可読識別タグが提供され、前記システムには、前記機械可読識別タグを読み取ることができる機械読取装置が提供されている、請求項１〜請求項９のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項１１】
前記機械可読識別タグは、バーコードである、請求項１０に記載のシステム。
【請求項１２】
前記機械可読タグは、ＲＦＩＤである、請求項１〜請求項１１のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項１３】
前記システムは、１つ以上のユーザ命令を入力するための手段を備えている、請求項１〜請求項１２のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項１４】
１つ以上の命令を入力するための前記手段は、前記インキュベータから前記排出ポートへの特異的に識別されたデバイスの自動的に命令された排出を可能にする、請求項１３に記載のシステム。
【請求項１５】
前記デバイスは、前記デバイスの頂面に少なくとも２つの凹部を備え、各凹部は、個別に顕微鏡対象物および対象物培地を収容するように適合されている、請求項１〜請求項１４のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項１６】
前記少なくとも２つの顕微鏡対象物を培養するための温度を提供するために好適な熱源をさらに備えている、請求項１〜請求項１５のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項１７】
前記格納手段は、前記デバイスと前記熱源との間の熱的接触を確実にするために使用される、請求項１６に記載のシステム。
【請求項１８】
前記格納手段は、前記デバイスの底面外形と一致するように適合されているデバイスホルダを備えている、請求項１６〜請求項１７のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項１９】
所与の安定した温度を少なくとも前記凹部に提供するように適合されている熱伝導層がさらに提供され、前記温度は、培養に好適であり、特に、前記少なくとも２つの顕微鏡対象物のインキュベーションに好適である、請求項１６〜請求項１８のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項２０】
前記顕微鏡はさらに、カメラまたはビデオ機器等の撮像手段を備えている、請求項１〜請求項１９のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項２１】
前記格納手段はさらに、
前記デバイスホルダを通して延伸している少なくとも１つの垂直穴と、
垂直光を提供するレーザー等の発光体と、
光センサであって、前記デバイスホルダが監視および／または培養のための正しい位置にある時に放射される光を感知するための前記発光体に相対した前記デバイスの反対側上の光センサと
を備えている、請求項５〜請求項２０のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項２２】
前記格納手段は、前記顕微鏡および／または前記熱源に相対して前記デバイスを自動的に位置付けるための制御ユニットをさらに備えている、請求項５〜請求項２１のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項２３】
前記制御ユニットは、安定したインキュベータ環境のために前記熱源の温度を制御するように適合され、かつ／または、前記撮像手段を使用して前記顕微鏡対象物の画像を監視および／または取得するように、かつ／または、前記対象物の品質評価のために前記画像を分析するように、かつ／または、交換スライドの記録を保管するように適合されている、請求項２２に記載のシステム。
【請求項２４】
例えば、ｐＨ、酸素含有量、およびそれと同様なものを測定するためのマイクロセンサを含む、代謝活性の非侵襲性測定を実施するための手段をさらに備えている、請求項１〜請求項２３のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項２５】
少なくとも２つの顕微鏡対象物を監視および／または培養するためのデバイスであって、前記デバイスは、機械可読タグを備えている、デバイス。
【請求項２６】
前記デバイスの頂面に少なくとも２つの凹部を備え、各凹部は、個別に顕微鏡対象物および対象物培地を収容するように適合されている、請求項２５に記載のデバイス。
【請求項２７】
前記機械可読識別タグは、バーコードまたはＲＦＩＤである、請求項２５または請求項２６に記載のデバイス。
【請求項２８】
前記デバイスは、凹部マーキングを備えている、請求項２５〜請求項２７のいずれか１項に記載のデバイス。
【請求項２９】
前記デバイスは、ラベル受容領域または事前貼付されたラベルを備えている、請求項２５または請求項２６に記載のデバイス。
【請求項３０】
少なくとも２つの顕微鏡対象物を取り扱う方法であって、前記方法は、インキュベータの中の少なくとも２つの別個のデバイスの中で、前記少なくとも２つの顕微鏡対象物を培養するステップを包含し、前記インキュベータは、一度に１つのデバイスのみが前記システム内に装填可能であることを制御することができる装填制御手段を備えている、方法。
【請求項３１】
請求項１〜請求項２５のいずれか１項に記載のシステムは、前記少なくとも２つの顕微鏡対象物を培養するために使用される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
請求項２６〜請求項２８のいずれか１項に記載のデバイスは、前記少なくとも２つの顕微鏡対象物を収容するために使用される、請求項３０または請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記顕微鏡対象物は、体外受精卵等の胚である、請求項３０〜請求項３２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３４】
前記胚の品質評価を包含する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記品質評価は、前記胚がインキュベータの内側にある間に実施される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記品質評価は、個別の胚の少なくとも２つの写真等の、個別の胚の少なくとも２つの視界に基づく、請求項３４〜請求項３５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３７】
前記品質評価は、コンピュータにより実施される、請求項３４〜請求項３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３８】
品質評価は、所定の基準を満たす胚の選択を包含する、請求項３４〜請求項３７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３９】
移植、凍結、および／または破壊のための胚が選択される、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記選択された胚に関する情報は、ラベルにより提供される、請求項３８または請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記選択された胚を収容する凹部には、ラベルが貼付される、請求項３８〜請求項４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４２】
前記ラベルは、前記デバイス上に設置された胚を収容する前記デバイスの概略図である、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記選択された胚に関する情報は、事前貼付されたラベルの有効化または無効化により提供される、請求項３８〜請求項４２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４４】
少なくとも２つの顕微鏡対象物を収容するデバイス内で選択された対象物を識別するように配置されているシステムであって、前記システムは、選択された対象物に関する情報を前記デバイスに提供する手段を備えている、システム。
【請求項４５】
対象物は、品質評価により選択される、請求項４４に記載のシステム。
【請求項４６】
前記デバイスは、ラベル受容領域を備えている、請求項４４または請求項４５に記載のシステム。
【請求項４７】
前記ラベル受容領域は、前記デバイスの頂面上にある、請求項４６に記載のシステム。
【請求項４８】
前記選択された対象物に関する情報は、前記デバイスの頂面上の情報ラベル受容領域上のマーキングにより提供される、請求項４７に記載のシステム。
【請求項４９】
前記ラベル受容領域は、前記デバイスの底面上にある、請求項４６に記載のシステム。
【請求項５０】
前記選択された対象物に関する情報は、前記デバイスの底面上の情報ラベル受容領域上のマーキングにより提供される、請求項４９に記載のシステム。
【請求項５１】
前記情報を提供する手段は、デバイスカバーを含む、請求項５０に記載のシステム。
【請求項５２】
前記デバイスカバーは、情報ラベル受容領域を備えている、請求項５１に記載のシステム。
【請求項５３】
選択された対象物に関する情報は、前記デバイスカバーの前記情報ラベル受容領域上のマーキングにより提供される、請求項５２に記載のシステム。
【請求項５４】
前記マーキングは、前記デバイスカバーにおける開口部である、請求項５３に記載のシステム。
【請求項５５】
選択された対象物に関する情報は、視覚的マークにより提供される、請求項４４〜請求項５４のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項５６】
前記視覚的マークは、色、記号、または文章により提供される、請求項５５に記載のシステム。
【請求項５７】
前記視覚的マークは、選択された対象物の除去中に視認可能である、請求項５６に記載のシステム。
【請求項５８】
前記マークは、情報ラベル受容領域上にある、請求項５５〜請求項５７のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項５９】
前記マークは、直接、情報ラベル受容領域上にある、請求項５５〜請求項５８のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項６０】
前記マークは、情報ラベル受容領域に貼付されたラベル上にある、請求項５５〜請求項５９のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項６１】
前記システムは、前記少なくとも２つの顕微鏡対象物を培養および監視するように配置されている、請求項４４〜請求項６０のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項６２】
前記システムは、インキュベータと、監視機器とを備えている、請求項６１に記載のシステム。
【請求項６３】
請求項１〜請求項２４の特徴のうちのいずれかを備えている、請求項６２に記載のシステム。
【請求項６４】
前記デバイスは、請求項２５〜請求項２９の特徴のうちのいずれかを備えている、請求項４４〜請求項６３のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項６５】
前記システムは、２つ以上のデバイスを培養および監視するように配置されている、請求項４４〜請求項６４のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項６６】
少なくとも２つの顕微鏡対象物を備えるデバイスを取り扱う方法であって、前記方法は、前記デバイスがインキュベータの内側にある間に対象物を選択するステップを包含し、前記選択された対象物の識別は、前記デバイスに提供される、方法。
【請求項６７】
前記方法は、請求項１〜請求項６６のいずれかに記載の特徴のいずれかを含む、請求項６６に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、取り扱いミスにより細胞試料の混同を生じるリスクを最小限にするために、細胞の確実な取り扱いを支援するために配置されたシステムに関する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
体外受精胚および他の脆弱な細胞物質の培養は、細胞物質の品質、トレーサビリティおよび培養プロセスの再現性を提供するために、高性能な機器を必要とする。温度および雰囲気制御は基礎的な要素であり、培養および監視中の環境変化を最小にするための内側監視機器が望まれる。明白な理由から、体外受精胚等の個別の細胞試料の混同は防止されるべきである。実際にこの問題は、各インキュベータで培養される対象物の数を削減することにより、特に、１つのインキュベータには一女性からの卵子等の、一実験設定から得られる対象物のみを培養することによって、しかるに、対象物および対象物源の１対１識別を確実にすることにより、解決されることが多い。実践的および経済的理由から、これは、取り扱える試料の数を限定し、かつ／または高価で場所を取る多数の培養システムを必要とするため、魅力的ではない。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
（発明の概要）
本発明は、全培養期間中の細胞の１対１識別を可能にする培養システムに関する。これは、一度に１つのデバイスのみが装填／除去されることを確実にする、装填／排出制御手段を伴う培養システムを提供することにより得られる。
【０００４】
本発明の側面は、少なくとも２つの顕微鏡対象物の培養および随意で監視を実施するために配置されるシステムに関し、少なくとも２つの顕微鏡対象物は、少なくとも２つの別個のデバイスの中に配置され、システムは、インキュベータと、インキュベータの中に配置されるデバイスを装填するための装填ポートと、インキュベータからデバイスを排出するための排出ポートとを備え、システムはさらに、一度に１つのデバイスのみをシステムに装填可能であることを制御することができる、装填制御手段を備える。
【０００５】
本発明のさらなる側面は、少なくとも２つの顕微鏡対象物を監視および／または培養するためのデバイスに関し、デバイスは機械可読タグを備える。
【０００６】
さらなる側面において、本発明は、少なくとも２つの顕微鏡対象物を取り扱う方法に関し、インキュベータ内の少なくとも２つの別個のデバイスにおいて少なくとも２つの顕微鏡対象物を培養することを包含し、インキュベータは、一度に１つのデバイスのみがシステムに装填可能であることを制御することができる装填制御手段を備える。
【０００７】
本発明の側面は、少なくとも２つの顕微鏡対象物を収容するデバイスにおいて選択された対象物を識別するように配置されるシステムに関し、システムは、選択された対象物についての情報をデバイスに提供するための手段を備える。
【０００８】
さらなる側面において、本発明は、少なくとも２つの顕微鏡対象物を備えるデバイスを取り扱うための方法に関し、デバイスがインキュベータの内側にある間に対象物を選択することを包含し、選択された対象物の識別は、デバイスに提供される。
【０００９】
（定義）
胚細胞：胚細胞は、内部細胞塊を有する初期胚発生で形成される構造、もしくは後に胚を形成する胚結節、および外部細胞塊、もしくは胎盤を形成する栄養膜である。胚細胞形成は、５日目に始まり、胚細胞は、７０〜１００の細胞を含む。
【００１０】
胚：その発育の最も初期の段階における多細胞二倍体真核生物。場合により「胚」という用語は、胎児になる段階の受精後８週までの子宮着床後の受精卵母細胞を説明するために使用される。本定義に従い、受精卵母細胞は、着床が起こるまで前期胚（ｐｒｅ−ｅｍｂｒｙｏ）と呼ばれることが多い。しかしながら、本特許出願を通して、本発明者らは、前期胚相を含む、用語「胚」の広範な定義を使用する。したがって、卵母細胞の受精から、桑実胚、胚盤胞期孵化および着床までの全ての発育段階を包含する。
【００１１】
接合体：卵子細胞および精子細胞の受精結果は、両親からの全てのＤＮＡを含む接合体と呼ばれる細胞である。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
（図面の詳細な説明）
【図１】図１は、装填制御手段。インキュベータは、１つの対象物収容デバイスのみへのアクセスを提供する装填ポート（１）を装備する。写真は、インキュベータ内側の２つのデバイスを示すが、最も左にあるデバイスのみが簡単にインキュベータから除去することができる。デバイスをさらにインキュベータから除去するために、格納手段の使用によるデバイスの再配置には、第２のデバイスを直接装填ポート内側のデバイスホルダ位置に移動することを必要とする。複数のデバイスの装填は、１つずつ同様に発生しなければならず、空のデバイスホルダ位置は、装填ポート内側に直接存在することを必要とする。
【図２】図２は、１２の顕微鏡対象物を収容することができるデバイス。
【図３】図３は、図２に示したデバイスの側面図であり、顕微鏡対象物を収容するための凹部（２）および凹部のくぼみ（３）を開示する。
【図４】図４〜６は、異なる倍率で示される個別の凹部／くぼみの識別マーク（４）。
【図５】図４〜６は、異なる倍率で示される個別の凹部／くぼみの識別マーク（４）。
【図６】図４〜６は、異なる倍率で示される個別の凹部／くぼみの識別マーク（４）。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
（発明の詳細な説明）
体外受精のプロセスにおいて、卵子および精子は、約１８時間、培地で一緒にインキュベートされるか、あるいは、細胞質内精子注入法（ＩＣＳＩ）を用いて、単一精子が卵子に直接注入される。受精卵は、２つの前核を示し、その後、特殊な成長培地に移され、卵子が６〜８細胞段階に達するまで、約４８時間放置される。この時点で、胚の選択は、通常、胚の品質および生存率に基づき実施される。胚の品質は、細胞数、成長の均一性、および分裂の程度等の特徴を考慮することにより、胚の視覚的外見に基づき決定され得る。胚の品質評価に基づき胚を選択する方法は、国際出願ＰＣＴ／ＤＫ２００７／０００２９１号明細書に記載されている。
【００１４】
胚の生体外培養期間に暗黙的に影響する胚移植のタイミングは、地域によって異なり、例えば、米国は、胚盤胞段階まで等、培養を延長するプログラムを有するが、欧州では、通常、６〜８細胞段階（２日移植）で、胚を受容者の子宮に移植する。培養の延長は、胚の選択基準に影響し得る。
【００１５】
胚の培養は、胚の培養および随意で監視を実施するためのシステムを必要とする。論理的に、所与のシステムにおいて培養された胚の識別は、間違った受容者に胚を移植する結果を引き起こす可能性があるため、混同されるべきではない。これを防止するため、異なる個人からの胚は、通常、別々に培養される。
【００１６】
本発明は、胚等の顕微鏡対象物の培養および随意で監視するために配置されるシステムに関する。本明細書に記載されるシステムは、別個のデバイスの中に配置される、少なくとも２つの顕微鏡対象物を培養するために配置される。
【００１７】
システムは、培養手順中の細胞試料等の異なる対象物を監視するために適用され得ることを想定する。用途は、選択パラメータが監視機器を用いて評価され得るスクリーニング手順中の生の解析等であり得る。別のデバイスは、したがって、異なる化合物、異なる濃度、または異なる細胞種を試験するために使用され得る。蛍光顕微鏡と関連して使用される場合、蛍光タグの位置がインキュベーション中に視認され得る。
【００１８】
システムは、温度および雰囲気制御等のあらゆる必要な調節機能を備える、細胞培養用に適合されるインキュベータを備える（以下を参照）。上述のように、胚の品質評価において、培養中、例えば、環境ストレスに非常に敏感である細胞発育へのあらゆる不必要な妨害または干渉を避け、胚を収容するデバイスをインキュベータから除去する必要なく胚を監視することができるのは、有利である。したがって、システムが、随意で培養中に胚を監視するための監視機器を備えることが好ましい。
【００１９】
監視機器を含むことにより、胚の必要な取り扱いは、顕微鏡対象物を収容するデバイスの装填および除去にまで最小化され得る。システムで培養される顕微鏡対象物は、標準的な方法でデバイスの中に配置された後、装填ポートを通してシステムに装填され、排出ポートから除去される。システムの安全性を強化するために、例えば、顕微鏡対象物のあらゆる混同のリスクを最小限にするために、システムは、一度に１つのデバイスのみがシステムに装填可能であることを制御することができる装填制御手段を装備する。
【００２０】
標準的なインキュベータは、インキュベータ内の全ての試料にアクセスできる開口部を含む。ユーザが厳密な取り扱いプロトコルおよび十分な制御ルーチンに従う場合でも、２つ以上の試料、またはこのような試料を含有する２つ以上のラックを一度に装填または除去することは、物理的に可能であり、手動の取り扱いエラーのリスクを増大する。装填制御手段を含むことにより、本発明のシステムは、胚の取り扱い手順に対するさらなる確実性を提供する。
【００２１】
本発明の側面は、少なくとも２つの顕微鏡対象物を培養および随意で監視を実施するように配置されるシステムに関し、少なくとも２つの顕微鏡対象物は、少なくとも２つの別個のデバイスの中に配置され、システムは、インキュベータと、インキュベータの中に配置されるデバイスを装填するための装填ポートと、インキュベータからデバイスを排出するための排出ポートとを備え、一度に１つのデバイスのみをシステムに装填可能であることを制御することができる装填制御手段をさらに備える。
【００２２】
（装填制御手段）
装填制御手段は、一度に１つのデバイスのみがシステムに装填できることを確実にする。使用中、一女性からの胚／受精卵は、１つの個別のデバイス内に装填され、続く単一の装填手順は、一度に、母親となる可能性のある一人に由来する胚のみをインキュベータに挿入することを保証する。以下に記載するように、それぞれのデバイスには、デバイスの識別をさらに容易にするために、識別タグが提供され得る。好適な実施形態において、装填ポートの大きさは、一度に１つのデバイスの進入のみを可能とする。排出ポートは、一度に１つのデバイスのみの排出が可能であることがさらに好ましい。最も好適な実施形態において、装填ポートおよび排出ポートは、同一ポートであり、装填／排出ポートの大きさにより制限される１つのデバイスのみが、一度に装填／排出され得る。デバイスの識別は、識別タグにより制御され得、装填／排出はさらに、個別のデバイスの位置の制御を維持するコンピュータにより制御され得る。
【００２３】
代替的な実施形態において、以下、本明細書に記載される格納手段は、それぞれのデバイスを固定位置に固定するロックを含み得る。これらのロックは、相互接続またはコンピュータ制御され得、一度に１つのロックのみを開放することができ、これにより装填制御手段を提供する。これはさらに、事前選択される、１つの位置からデバイスの装填または除去のみを可能にすることにより実装され得る。さらなるデバイスの装填は、次いで、最初のデバイスの位置変更を必要とするであろう。本実施形態において、装填および排出は、観覧車の乗降のように実施され得る。上記のように、ロック解除位置にある個別のデバイスの位置および個別のデバイスの装填は、コンピュータにより制御され、デバイスの混同がデバイスの取り扱い中に生じるリスクをさらに最小限にし得る。
【００２４】
（格納手段）
本発明に従うシステムの十分な利点を得るために、システムは、２つ以上のデバイスホルダ位置を有する格納手段を備え、各デバイスホルダ位置は、格納手段上の固定位置にデバイスを保持するように適合されることが好ましい。格納手段は、デバイスの水平移動のため、コンベヤベルトであり得る。格納手段は、これにより、それぞれのデバイスを、監視機器を通して顕微鏡対象物を視認することが可能な監視位置に移動してもよい。
【００２５】
好適な実施形態において、格納手段は、デバイスを監視位置に移動することにより、顕微鏡対象物の視認を可能にするように（以下を参照）、デバイスを相対的に顕微鏡に位置付けることができる。デバイスは、個別の対象物の視認を可能にするように、かつ／またはデバイスにより収容された対象物の全体的な視認を可能にするように位置付けされ得ることがさらに好ましい（以下の監視システムに関するセクションを参照）。
【００２６】
同様に、格納手段は、インキュベータの装填ポートおよび／または排出ポートにおけるデバイスまたは空のデバイスホルダ位置を位置付けることが可能であることがさらに好ましい。したがって、好ましい実施形態では、システムは、装填位置および／または排出位置を有する。
【００２７】
システムが、以下の本明細書に記載されるように、識別システムに関連して使用される時、格納手段は、デバイスをラベル貼付位置に移動することにより、デバイスを相対的にラベル貼付機器に位置付けることができることがさらに好ましい。ラベル貼付位置は、１つ以上の監視位置、装填または排出位置と同一または異なってもよい。好適な実施形態において、ラベル貼付位置は、排出位置と同一またはその近くであり、これにより、識別ラベルは、システムからデバイスを除去する直前に容易に添付される。さらなる好適な実施形態において、ラベル貼付位置は、監視位置と同一またはその近くであり、これにより、識別ラベルは、デバイスの監視の終了時に容易に添付される。
【００２８】
簡単な実施形態において、格納手段は、デバイスの監視および装填／除去の両方を可能にするために、デバイスを水平に移動することができるコンベヤベルトである。デバイスは、装填ポートに対して横方向に移動するスライド上に配置され得る。装填ポートが開放される時、１つのデバイスへのアクセスが提供される。
【００２９】
これらの特性を備える複数の格納手段は、本発明に従い想定され得る。スタッカー（デバイスを保持）と観測位置との間の移動ユニットを含むシステムは、欧州特許出願公開第１９１６２９６号明細書に記載されており、本発明に従う格納手段は、デバイスホルダから監視位置、または装填／排出位置に所与のデバイスを移動できる、１つ以上の類似する移動ユニットを含んでもよい。複数のデバイスは、インキュベータの内側で、並列して、または異なる高さでのいずれかで水平に格納される。格納手段の異なる型が、コンベヤベルト、エレベーター型、または観覧車型の格納手段等の、インキュベータ内側に再配置システムを有するように組み合わせられてもよい。内部再配置システムを含むことにより、他のデバイスがインキュベータの内側に維持される間、個別のデバイスは、監視または排出のために選択されてもよく、新しいデバイスが装填されてもよい。インキュベータ内側のデバイスの再配置は、インキュベータの外側から手動で実施されるか、または好ましくは、システムのコンピュータにより内部的または外部的に制御される自動プロセスにより実施され得ることが考えられる。デバイス、対象物、および対象物源の１対１の識別は、上述したような装填制御手段により支援される。デバイスの排出またはシステムへの装填の識別性は、個別のデバイスが取り扱われる時、コンピュータで、および／または手動で制御され得るため、識別タグ（以下に記載）は、システムの安全性をさらに確実にすることを支援してもよい。
【００３０】
好適な実施形態において、格納手段は、少なくとも６つのデバイスホルダ位置等の、少なくとも４つを備える。さらなる実施形態において、格納手段は、少なくとも１０のデバイスホルダ位置等の、少なくとも８つを備える。
【００３１】
（識別タグ）
使用中、顕微鏡対象物を収容するためのデバイスには、識別タグが提供される。このようなタグは、好ましくは、機械可読識別タグであり、より好ましくは、バーコードまたはＲＦＩＤ（無線周波識別）である。機械可読タグの使用は、機械可読識別タグを読み取ることができる機械読取装置が提供されるシステムと有利に組み合わせられる。
【００３２】
（顕微鏡対象物を収容するためのデバイス）
胚の培養において、複数の卵子は、たとえ少数のみがさらに処理される場合であっても、受精されるか、または受精のために培養される。本発明に従うシステムの使用を最適化するために、それぞれのデバイスが、少なくとも５つの顕微鏡対象物等の、少なくとも２つの顕微鏡対象物を収容することができることが好ましい。さらなる実施形態において、それぞれのデバイスが、少なくとも１０の顕微鏡対象物等の、少なくとも８つの顕微鏡対象物を収容することができることがさらにより好ましい。
【００３３】
顕微鏡対象物に加え、デバイスは、対象物を培養するための対象物培地をさらに含有することができなくてはならない。好適な実施形態において、それぞれのデバイスは、デバイスの頂面に少なくとも２つの凹部を備え、各凹部は、顕微鏡対象物および顕微鏡対象物を培養するための対象物培地を収容するために適合される。
【００３４】
本発明の側面は、デバイスの識別のための機械可読タグを備える、少なくとも２つの顕微鏡対象物を監視および／または培養するためのデバイスに関する。
【００３５】
一実施形態において、デバイスは、好ましくは、収容に適合するデバイスの頂面に少なくとも２つの凹部、および個別の顕微鏡対象物ならびに対象物培地を備える。
【００３６】
さらに好適な実施形態において、デバイスは、バーコードまたはＲＦＩＤの形態で、識別タグを備える。
【００３７】
本発明に従って顕微鏡対象物を収容するために適したデバイスは、国際出願ＰＣＴ／ＤＫ２００８／０５０１６２号明細書に詳細に記載されており、代替的デバイスへの参照をさらに含む。
【００３８】
上述のように、システムの確実性は、たとえデバイスが上述のように複数の胚を収容する能力を有する場合であっても、異なる女性からの卵子がデバイス内で一緒に培養されないという期待に基づく。この特徴は、システム内の１つのデバイスにおいて、同一女性からの複数の胚を培養するために代替的に使用され得る。着床に適した適度な数の高品質の胚を得る機会を増やすために、システム内に同一女性からの胚を収容する複数のデバイスを配置することも、もちろん可能である。
【００３９】
一実施形態において、それぞれの凹部は、それぞれの顕微鏡対象物および対象物培地を収容するための凹部よりも小さい断面のくぼみを備える。さらに、本発明に従うデバイスは、好ましくは、デバイスホルダの輪郭に対応する底面外形を呈し、このことが方向制御システム（以下を参照）の一部であり得るように、デバイスの簡単で密接な装填を可能にする。
【００４０】
デバイスは、好ましくは、凹部マーキング等の、それぞれの凹部を一意的に識別するための手段を装備する。マーキングは、より好ましくは、監視システム（以下を参照）を通して目視可能であり、監視される凹部の簡単な識別を可能にする。
【００４１】
好ましくは、マーキングは、顕微鏡を通して直接目視可能であり、対象物の評価のために好適な視界において識別を可能にする大きさであり、つまり、マーキングは、おそらく、検査される対象物の視界に干渉することなく、顕微鏡を通して視認されるべき顕微鏡的大きさであることを意味する。したがって、マーキングは、最も好ましくは、凹部の周縁に位置する。マーキングは、単純な採番システムであるか、座標系であるか、または当該分野において既知のあらゆる他の適したシステムであり得る。
【００４２】
好適な実施形態において、それぞれの凹部を一意的に識別するための手段は、デバイスにおいて、凹部の列を識別するための少なくとも１つのマーカーと、凹部の段を識別するための少なくとも１つのマーカーとを備える。
【００４３】
好適な実施形態において、凹部マーキングは、機械可読であり、上述の座標系により提供され得る。座標系は、異なる大きさのデバイスが使用できるため、特に好ましい。
【００４４】
（情報ラベルおよびラベル受容領域）
デバイスはさらに、ラベル受容領域を備えることにより、識別ラベルを受容するように解釈されてもよい。ラベル受容領域は、それぞれの凹部と関連して設置される、一般的なラベル受容領域または凹部特有のラベル受容領域であり得る。ラベル受容領域は、ステッカーの固定に適した、あるいは、記号、文字、または色標識等の単純な記述の受容に適した領域であり得、この領域は、品質評価からの情報を伝達するために使用され得る。
【００４５】
一般的なラベルは、デバイスの頂面または底面と一致するラベルの形態であり得、それによって、あらゆる選択された胚に関する情報を対象物のさらなるプロセス中に見ることができる。ラベルは、ユーザにどの対象物が選択されたかを通知するものである。一実施形態において、情報は、選択された対象物を収容する凹部の上の開口部の形態であり、これにより、選択された対象物へのさらなるプロセスが制限される。さらなる実施形態において、ラベルは、対象物を収容するデバイスを覆うカバーであり、そこを通して、選択された対象物のみへのアクセスが提供される。またさらなる実施形態において、着色は、選択された対象物を収容する凹部をマーキングするために使用される。
【００４６】
熱または光感応であるラベルをデバイスに事前貼付することがさらに可能である。これらは、品質評価中またはその終了時に、培養および監視システムにより有効化または無効にされ得る。
【００４７】
好適な実施形態において、本発明に従うデバイスは、ラベル受容領域または事前貼付されたラベルを備える。
【００４８】
本明細書の以下に記載する識別システムの使用は、顕微鏡対象物の取り扱い手順に安全性をさらに提供する。さらなる実施形態において、デバイスは、識別システムに関して、以下に記載する特徴のいずれかを備えてもよい。
【００４９】
前述のように、さらなるプロセスにおける対象物の評価は、生での監視、または前の培養期間に得た写真もしくはフィルムの分析によって手動で、あるいは、対象物および特定の胚品質を決定するためのコンピュータ支援された方法でのいずれかにより、対象物の培養中に実施され得る。
【００５０】
さらなるプロセスのために１つ以上の対象物を選択する時、システムは、顕微鏡対象物を収容するデバイス上に、凹部特有ラベル受容領域等の、選択された対象物を収容する凹部にラベル貼付するための手段を提供することが好ましい。代替的に、それぞれのデバイスは、一般的なラベル受容領域を含み得、この領域において、どの凹部が選択された対象物を含有するかの情報がシステムにより保管される。
【００５１】
識別ラベルは、点、十字、ステッカー、全体を覆うカバー、または、対象物を収容するデバイスを受容するように特に解釈されるプレート等の、他のより洗練された手段等の、あらゆる種類の適したラベルであり得、ここで、プレートは、光または他のラベル貼付方法の使用により選択された対象物を含有する凹部を指示することができる。一般的なラベルは、選択された凹部を指示するデバイスの略図等であり得る。ラベル貼付は、識別タグ、および対象物を選択するためのコンピュータに基づく方法によりさらに支援され得、それによって、システムは、試料を取り扱う個人によって最小限に影響される。
【００５２】
（方向制御手段）
システムの安全性をさらに高めるために、システムは、デバイスの装填が一方向にのみ可能であるように、方向制御手段を備えることが好ましい。好ましくは、デバイスホルダおよびデバイスは、デバイスホルダの受容部分と一致する底面を備えるデバイスを提供することにより、一方向にのみデバイスを装填できるように構成される。これは、一意的に嵌合する、デバイスホルダとデバイスの複数のペアを構成することによってなおもさらに改善され得、それにより、どのデバイスがどのデバイスホルダに挿入されるかも制御する。
【００５３】
（温度制御手段）
インキュベータ内側、特に顕微鏡対象物を収容するデバイス内側を所望の温度に維持するために、温度が継続して制御されることが細胞培養の前提条件である。一実施形態において、本発明に従うシステムは、少なくとも２つの顕微鏡対象物を培養するための温度を提供するのに適した熱源を備える。
【００５４】
上述のように、対象物を収容するデバイスは、本システムの好適な実施形態において、格納手段により保持され、これらは、さらに好適な実施形態において、デバイスと熱源との間の熱的接触を確実にするために使用され得る。最適化されたより好適な実施形態において、格納手段は、デバイスに提供される底面と一致するように適合される、デバイスホルダを備える。
【００５５】
システムは、したがって、少なくとも凹部に対して所与の安定した温度を提供するように適合される熱伝導層が提供され得、この温度は、培養に適し、特に少なくとも２つの顕微鏡対象物のインキュベーションに適する。
【００５６】
（監視システム）
本発明に従うシステムで培養される顕微鏡対象物は、随意で培養中監視される。このような監視は、システムに備えられる顕微鏡の使用による、対象物の可視化を含んでもよい。これは、顕微鏡を備えるシステムを、顕微鏡に対してデバイスを位置付けるように配置される格納手段を備えるシステムと組み合わせることによって、少なくとも１つの顕微鏡対象物が顕微鏡を通して視認されることにより、実施可能であり得る。監視されるデバイスは、顕微鏡デバイスホルダ位置または監視位置に移動される。所望の視界に依存して、１つ以上の倍率で、それぞれの対象物を個別に監視するか、またはデバイス全体を見渡すことを可能にするため、システムの倍率を変更してもよい。
【００５７】
顕微鏡対象物の評価に利用される選択基準に依存して、監視および評価の異なる自動化手順が実施され得る。顕微鏡は、好ましくは、顕微鏡により視認されるように位置付けられた顕微鏡対象物の画像を取得することができるカメラに接続される。個別の顕微鏡対象物の画像は、規則的な間隔で顕微鏡対象物を培養する期間中に取得され得、かつ、受容者の子宮に着床するための胚の場合等、継続プロセス用に対象物を選定するために使用され得る。対象物の監視は、代替的に、生録画を取得することができるビデオ機器を用いて実施され得る。
【００５８】
本発明のシステムは、好ましくは、顕微鏡、ならびに、カメラおよび／またはビデオ機器等のさらなる撮像手段を備える。
【００５９】
上述のように、最も有望な胚を選定するための任意の方法が利用され得る。
【００６０】
（位置制御）
顕微鏡および／またはあらゆる接続された撮像手段の使用による、顕微鏡対象物のあらゆる監視は、顕微鏡対象物が顕微鏡に対して正確に配置されることを必要とする。顕微鏡を通した／による顕微鏡対象物の視認を可能にし、培養および監視中のデバイスの正しい位置を確実にするために、格納手段、特に顕微鏡格納手段が、
−デバイスホルダを通して延伸する、少なくとも１つの垂直穴と、
−垂直光を提供するレーザー等の発光体と、
−デバイスホルダが監視および／または培養のための正しい位置にある時に、放射された光を感知するための発光体に対してデバイスの反対側にある光センサと
を備えることが好ましい。
【００６１】
システムは、顕微鏡および／または熱源に対してデバイスを自動的に位置付けるための制御ユニットをさらに備える、格納手段を備えることがさらに好ましい。
【００６２】
好適な実施形態において、本発明に従うシステムは、安定したインキュベータ環境のために熱源の温度を制御するために適合される、および／または、撮像手段を用いて顕微鏡対象物の画像を監視および／または取得する、および／または、対象物の品質評価のために画像を分析する、および／または、交換スライドの記録を保管するために適合される、制御ユニットを備える。
【００６３】
本発明に従うシステムの異なる用途は、顕微鏡対象物を保持する個別の凹部における代謝活性の非侵襲測定から恩恵を受け得る。培地のｐＨは培養中に変化し得、ガス含有量は局在的に変化し得る。したがって、より好適な実施形態において、システムは、例えば、ｐＨ、酸素含有量および／または同様なもの等を測定するためのマイクロセンサを備える、代謝活性の非侵襲性測定を実施するための手段を備える。
【００６４】
（顕微鏡対象物を培養するための方法）
さらなる側面において、本発明は、２つの顕微鏡対象物を取り扱う方法に関し、この方法は、一度に１つのデバイスのみがシステムに装填可能であることを制御することができる装填制御手段を備えるインキュベータ内の少なくとも２つの別個のデバイスにおいて、少なくとも２つの顕微鏡対象物を培養することを包含する。
【００６５】
方法は、本明細書に記載されるシステムの使用により、少なくとも２つの顕微鏡対象物を培養、および随意で監視するステップを包含することが好ましい。本明細書に記載されるように、少なくとも２つのデバイスが、少なくとも２つの顕微鏡対象物を収容するために使用されることがさらに好ましい。
【００６６】
胚の定期的な品質評価中、選択の直前に、胚を保持するデバイスが品質評価のためにインキュベータから除去されることは一般的であり、それによって、培養期間の終了時に、選択が対象物の単一の視界上で実施される。
【００６７】
本明細書に記載されるシステム、デバイス、および方法は、システムが培養環境に干渉することなく品質評価の実施に適するため、着床前の胚の培養に特に有用である。さらに好適な実施形態において、顕微鏡対象物は、体外受精卵等の胚である。
【００６８】
あらゆる品質評価のいずれか、または少なくとも一部は、胚がインキュベータの内側にある間に実施されることがさらに好ましい。
【００６９】
本発明に従うシステムの使用により、品質評価は、少なくとも２つの視界等の、それぞれの個別の胚の複数の視界に基づくことが可能である。対象物は、培養期間中、いつでも検査されてもよく、分析は、それぞれの胚の写真、または生映像を取得することにより延期されてもよい。国際出願ＰＣＴ／ＤＫ２００７／０００２９１号明細書に記載されるように、品質評価は、複数の基準を用いて実施されてもよい。品質評価は、コンピュータの支援と共に、または、いくつかの事前決定された基準（単数／複数）に基づいてコンピュータ単体によって実施されてもよい。
【００７０】
品質評価は、異なる選択基準に基づき、着床、凍結、および／または破壊のための胚を選択するために使用されてもよい。
【００７１】
選択された胚を備える凹部が識別され、この情報がユーザに伝達されることが好ましい。好適な一実施形態において、選択された胚に関する情報は、デバイスに貼付されたラベル、例えば、特定のデバイスにより収容される全ての胚に関する情報を含む、凹部特有ラベルまたは一般的なラベルにより提供される。
【００７２】
代替的な実施形態において、選択された胚に関する情報は、熱または光感応ラベル等の、デバイスに含まれる事前貼付されたラベルの有効化または無効化によって提供される。
【００７３】
さらなる側面において、本発明は、少なくとも２つの顕微鏡対象物を備えるデバイスを取り扱う方法に関し、方法は、デバイスがインキュベータの内側にある時に対象物を選択するステップを包含し、選択された対象物の識別は、デバイスに提供される。
【００７４】
（識別システム）
上述のように、対象物は、手動で、またはコンピュータ化技法により選択されてもよい。このような顕微鏡対象物は、非常に脆弱であり得るため、対象物をできるだけ長く同じ環境に維持すること、例えば、あらゆる選択は、対象物が適したインキュベータ内に維持されながら実施されることが望ましい。対象物の選択時に、対象物は、システムに収容される対象物の種類に依存して、様々な手順によってさらにプロセスされる。さらなるプロセスは、ほとんどの場合、対象物を収容するデバイスから対象物の除去を含む。選択プロセスは、好ましくは、対象物の除去から切り離され、したがって、選択された対象物に関する情報は、デバイスからの選択された対象物の除去を支援する安全かつ簡単な手法で、さらなるプロセスを取り扱う個人に提供されなければならない。
【００７５】
さらなる側面における本用途は、少なくとも２つの顕微鏡対象物を収容するデバイス内における選択された対象物の識別のためのシステムを説明し、ここで、システムは、選択された対象物に関する情報をデバイスに提供する手段を備える。
【００７６】
本発明に従うシステムは、選択された対象物の位置を識別するか、指示するか、またはマーキングする。好適な実施形態において、対象物は、品質評価に基づき選択される。これは、例えば、着床のための胚の選択に特に適している。
【００７７】
前述のように、顕微鏡対象物を収容するデバイスは、ラベル受容領域を備えることにより、選択された対象物に関する情報を受容すると解釈されてもよい。この領域は、デバイスの頂面上、デバイスの底面上、または代替的にデバイスカバー上にあってもよい。
【００７８】
本発明の一実施形態において、選択された対象物に関する情報は、デバイスの頂面上、デバイスの底面上、または代替的にデバイスカバー上等、情報ラベル受容領域上の情報ラベルにより提供される。
【００７９】
選択された対象物をシステムのユーザに対して特定させるために、選択された対象物に関する情報を提供する情報ラベルは、好ましくは、視覚的マークである。情報ラベルは、前述のように、ユーザがラベルにより提供される情報を使用可能である限り、あらゆる適した形態であってもよい。好適な実施形態において、選択された対象物に関する情報は、色標識、記号、または文章等の、視覚的マークにより提供される。このような視覚的マークは、顕微鏡下での除去中か、または、選択制御のステップが、選択された対象物の顕微鏡的検査を示唆する時に、目視可能であることがさらに好ましい。
【００８０】
情報ラベルがデバイスカバーのラベル受容領域に提供される、特定の実施形態において、ラベルは、好適な実施形態において、選択された対象物の物理的なラベル貼付、言い換えると、未選択対象物の除去を妨害する物理的障害を提供する、デバイスカバー内の開口部であってもよい。
【００８１】
ラベルは、好ましくは、情報ラベル受容領域上であって、その領域上に直接、またはその領域に貼付されたラベル上のいずれかに提供される。前述のように、熱または光感応であってもよい事前貼付されたラベルは、本発明に従い使用されてもよい。
【００８２】
識別システムは、少なくとも２つの顕微鏡対象物を培養および監視するように配置されるシステムを提供するように、さらなる特徴を含み得る。したがって、システムは、好ましくは、インキュベータと、監視機器とをさらに備える。
【００８３】
識別システムは、本明細書において上述のように、少なくとも２つの顕微鏡対象物の培養、および随意で監視を実施するように配置されるシステムの特徴のうちのいずれかを備え得ることがさらに想定される。
【００８４】
さらなる実施形態において、識別システムは、本明細書に記載したように、少なくとも２つの顕微鏡対象物を収容するためのデバイスを備える。したがって、好適な実施形態において、識別システムは、２つ以上のデバイスを培養および監視するために配置される。
【００８５】
本明細書に記載された培養システム、識別システム、デバイス、および上述された方法のうちの１つ以上からの特徴を使用することにより、顕微鏡対象物の処理のための非常に確実かつ機能的なシステムが得られる。確実性の特徴は、それぞれのデバイスをデバイスにより収容される顕微鏡対象物の由来と関連付ける、デバイスに貼付された識別タグと好ましくは組み合わせられる、単一の装填を含む。第２に、対象物の選択は、対象物がインキュベータの内側にある間に実施され得、選択はさらに、それぞれの対象物の複数の視界に基づき得る。総合すると、これは高品質の選択のための基礎を提供する。選択された対象物をデバイス内のその位置と関連付けるための識別システムを使用することにより、選択された対象物に関する情報をデバイスに提供することにより、選択された対象物の位置は、さらなる取り扱いのために明確にマークされる。結論として、システムは、対象物の由来、対象物を保持するデバイス、およびそこから選択された対象物の、１対１の識別を確実にするための方法を可能にする。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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