(57)【要約】  本発明は、治療の必要のある患者に有効量の本明細書中に示される式のキノロン化合物を投与することによる、メチシリン非感受性細菌、バンコマイシン非感受性細菌、ペニシリン非感受性細菌、クラリスロマイシン非感受性細菌、またはメトロニダゾール非感受性細菌による感染症の治療方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効量の下記式：
【化１】
2011526887.tif 000026
の化合物を感染症を治療する必要のある患者に投与することを有する、感染症の治療方法であって、前記感染症が、メチシリン非感受性細菌、バンコマイシン非感受性細菌、ペニシリン非感受性細菌、クラリスロマイシン非感受性細菌、またはメトロニダゾール非感受性細菌によって引き起こされる感染症の治療方法。
【請求項２】
前記感染症が、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)、排出関連(efflux-related)メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)、バンコマイシン低感受性黄色ブドウ球菌(vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus)、ヘテロバンコマイシン低感受性黄色ブドウ球菌(hetero-vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus)、またはバンコマイシン耐性黄色ブドウ球菌(vancomycin-resistant Staphylococcus aureus)によって引き起こされる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記感染症が、市中感染型メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(community-associated Staphylococcus aureus)によって引き起こされる、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記感染症が、メチシリン耐性表皮ブドウ球菌(Staphylococcus epidermidis)によって引き起こされる、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記感染症が、ペニシリン耐性肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)によって引き起こされる、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記感染症が、メチシリン、バンコマイシン、およびペニシリンの少なくとも一種に耐性がある、多剤耐性肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)によって引き起こされる、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記感染症が、クラリスロマイシン耐性ヘリコバクターピロリ(Helicobacter pylori)またはメトロニダゾール耐性ヘリコバクターピロリ(Helicobacter pylori)によって引き起こされる、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記感染症が、糖尿病足感染症、手術創感染症、尿路感染症、血流感染症、院内感染性肺炎、市中肺炎、または皮膚感染症である、請求項２に記載の方法。
【請求項９】
前記化合物が塩の形態である、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記化合物がリンゴ酸塩の形態である、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記化合物がリンゴ酸塩０．５水和物の形態である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記化合物が下記式：
【化２】
2011526887.tif 000027
を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記化合物が塩の形態である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記化合物がリンゴ酸塩の形態である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記化合物がリンゴ酸塩０．５水和物の形態である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記感染症が、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)、排出関連(efflux-related)メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)、ヘテロバンコマイシン低感受性黄色ブドウ球菌(hetero-vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus)、バンコマイシン低感受性黄色ブドウ球菌(vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus)、またはバンコマイシン耐性黄色ブドウ球菌(vancomycin-resistant Staphylococcus aureus)によって引き起こされる、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記感染症が、市中感染型メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(community-associated Staphylococcus aureus)によって引き起こされる、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記感染症が、メチシリン耐性表皮ブドウ球菌(Staphylococcus epidermidis)によって引き起こされる、請求項１５に記載の方法。
【請求項１９】
前記感染症が、ペニシリン耐性肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)によって引き起こされる、請求項１５に記載の方法。
【請求項２０】
前記感染症が、メチシリン、バンコマイシン、およびペニシリンの少なくとも一種に耐性がある、多剤耐性肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)によって引き起こされる、請求項１５に記載の方法。
【請求項２１】
前記感染症が、クラリスロマイシン耐性ヘリコバクターピロリ(Helicobacter pylori)またはメトロニダゾール耐性ヘリコバクターピロリ(Helicobacter pylori)によって引き起こされる、請求項１５に記載の方法。
【請求項２２】
前記感染症が、糖尿病足感染症、手術創感染症、尿路感染症、血流感染症、院内感染性肺炎、市中肺炎、または皮膚感染症である、請求項１６に記載の方法。
【請求項２３】
前記化合物が下記式：
【化３】
2011526887.tif 000028
を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項２４】
前記化合物が塩の形態である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記化合物がリンゴ酸塩の形態である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記化合物がリンゴ酸塩０．５水和物の形態である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記感染症が、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)、排出関連(efflux-related)メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)、ヘテロバンコマイシン低感受性黄色ブドウ球菌(hetero-vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus)、バンコマイシン低感受性黄色ブドウ球菌(vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus)、またはバンコマイシン耐性黄色ブドウ球菌(vancomycin-resistant Staphylococcus aureus)によって引き起こされる、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記感染症が、市中感染型メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(community-associated Staphylococcus aureus)によって引き起こされる、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記感染症が、メチシリン耐性表皮ブドウ球菌(Staphylococcus epidermidis)によって引き起こされる、請求項２６に記載の方法。
【請求項３０】
前記感染症が、ペニシリン耐性肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)によって引き起こされる、請求項２６に記載の方法。
【請求項３１】
前記感染症が、メチシリン、バンコマイシン、およびペニシリンの少なくとも一種に耐性がある、多剤耐性肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)によって引き起こされる、請求項２６に記載の方法。
【請求項３２】
前記感染症が、クラリスロマイシン耐性ヘリコバクターピロリ(Helicobacter pylori)、またはメトロニダゾール耐性ヘリコバクターピロリ(Helicobacter pylori)によって引き起こされる、請求項２６に記載の方法。
【請求項３３】
前記感染症が、糖尿病足感染症、手術創感染症、尿路感染症、血流感染症、院内感染性肺炎、市中肺炎、または皮膚感染症である、請求項２７に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
相互参照
本出願は、２００８年７月１日付で提出の、米国仮特許出願第６１／０７７，２９３号の優先権を主張し、前記出願の内容は参考で本明細書中に引用される。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
細菌の抗生物質耐性は、本来備わっている特質でありうるまたは突然変異によって獲得されるものでありうる。抗生物質に耐性のある細菌は人々の健康に重大な脅威を及ばすようになっている。
【０００３】
例えば、世界の人口の約１％が、一般的に使用される抗生物質に対して耐性がある細菌株である、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)（ＭＲＳＡ）を有している。ほとんどのＭＲＳＡ感染症は、老人ホームや透析センター等の、病院や医療機関で起こる。これは、健康関連ＭＲＳＡ(heath-associated MRSA)（ＨＡ−ＭＲＳＡ）として知られている。年配の人々や免疫系の弱っている人々は、ＨＡ−ＭＲＳＡ感染症に罹る危険性が高い。近年、より広い地域にいる他の健常な人々の中に、他のタイプのＭＲＳＡである、市中感染型ＭＲＳＡ（ＣＡ−ＭＲＳＡ）が見つかっている。ＣＡ−ＭＲＳＡは、重篤な皮膚や軟組織の感染症のおよび重篤な型の肺炎の原因である。
【０００４】
抗生物質耐性菌によって引き起こされる感染症は、しばしば、既存の抗生物質によって治療できない。このため、新規な抗生物質を開発する必要ある。
【発明の概要】
【０００５】
要約
本発明は、メチシリン非感受性細菌、バンコマイシン非感受性細菌、ペニシリン非感受性細菌、クラリスロマイシン非感受性細菌、またはメトロニダゾール非感受性細菌によって引き起こされる感染症の治療方法に関する。本方法は、有効量の下記式（Ｉ）：
【０００６】
【化１】
2011526887.tif 000002
【０００７】
のキノロン化合物の一を患者に投与することを有する。
【０００８】
上記キノロン化合物は、不斉中心を有する。これらは、すべての形態の立体異性体を包含する。異性化合物の２例としては、下記がある：
【０００９】
【化２】
2011526887.tif 000003
【００１０】
【化３】
2011526887.tif 000004
【００１１】
上記キノロン化合物は、当該化合物自体であってもよいが、加えてこれらの塩、プロドラッグ、または溶媒和物であってもよい。塩は、当該化合物上にアニオンおよび正電荷を有する基（例えば、アミノ基）の間に形成されうる。適当なアニオンとしては、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、クエン酸塩、メタンスルホン酸塩、トリフルオロ酢酸塩、酢酸塩、リンゴ酸塩、トシレート(tosylate)、酒石酸塩、フマル酸塩、グルタミン酸塩、グルコン酸塩、乳酸塩、グルタレート(glutarate)、およびマレイン酸塩などが挙げられる。同様にして、塩はまた、当該化合物上にカチオンおよび負電荷を有する基（例えば、カルボキレート）の間に形成されうる。適当なカチオンとしては、ナトリウムイオン、カリウムイオン、マグネシウムイオン、カルシウムイオン、及びテトラメチルアンモニウムイオン等のアンモニウムカチオンなどが挙げられる。プロドラッグは、エステルおよび他の製薬上許容できる誘導体であってもよく、これは、患者に投与されると、式（Ｉ）の化合物を提供できる。溶媒和物は、式（Ｉ）の化合物および製薬上許容できる溶媒の間に形成される複合体を意味する。製薬上許容できる溶媒は、水、エタノール、イソプロパノール、酢酸エチル、酢酸、及びエタノールアミンでありうる。したがって、本発明を実施するのに使用されるキノロン化合物は、例えば、当該化合物のマレート塩（リンゴ酸塩）および当該塩の０．５水和物でありうる。
【００１２】
一以上の上記キノロン化合物および製薬上許容できる担体を含む、メチシリン非感受性細菌、バンコマイシン非感受性細菌、ペニシリン非感受性細菌、クラリスロマイシン非感受性細菌、またはメトロニダゾール非感受性細菌によって引き起こされる感染症の治療に使用される組成物、ならびに当該感染症の治療のための薬剤の製造のための当該組成物の使用もまた、本発明の範囲に包含される。上記細菌は、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)、排出関連(efflux-related)メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)、バンコマイシン低感受性黄色ブドウ球菌(vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus)、ヘテロバンコマイシン低感受性黄色ブドウ球菌(hetero-vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus)、またはバンコマイシン耐性黄色ブドウ球菌(vancomycin-resistant Staphylococcus aureus)
でありうる。上記細菌によって引き起こされる感染症の例としては、以下に制限されるものではないが、手術創感染症、尿路感染症、血流感染症（敗血症）、肺炎（院内感染性肺炎または市中肺炎）、糖尿病足感染症、ならびに蜂巣炎(cellulites)、腫れ物(boils)、膿瘍、麦粒腫(sty)、癰(carbuncles)、及び膿痂疹等の皮膚感染症などが挙げられる。
【００１３】
本発明の様々な形態の詳細を下記説明で記載する。本発明の他の特徴、目的、および利点は、下記記載から、および特許請求の範囲から明らかであろう。
【００１４】
詳細な説明
本発明を実施するにあたって使用されるキノロン化合物は、公知の方法によって製造できる。下記実施例１には、２つの異性化合物を調製するための合成方法が詳述される。当業者は、当該合成方法を修飾することによって、他の異性体または他の形態の化合物を得ることができるであろう。当該合成に使用できる合成化学変換および保護基法（保護および脱保護）は当該分野において既知であり、例えば、R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed., John Wiley and Sons (1999); L. Fieser and M. Fieser, Fieser and Fieser’s Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994); and L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995)、およびこれらの再版に記載される方法などが挙げられる。
【００１５】
このようにして合成される化合物は、フラッシュカラムクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー、結晶化、または他の適当な方法によってさらに精製されてもよい。
【００１６】
上記キノロン化合物は、メチシリン非感受性細菌、バンコマイシン非感受性細菌、ペニシリン非感受性細菌、クラリスロマイシン非感受性細菌、およびメトロニダゾール非感受性細菌の生育を阻害する。したがって、本発明の一態様は、有効量の上記キノロン化合物の一を上記細菌の一によって引き起こされる感染症を治療する必要のある患者に投与することによる、当該感染症の治療方法に関する。上記方法の一形態としては、メチシリン、バンコマイシン、およびペニシリンの少なくとも一種に耐性がある、多剤耐性肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)によって引き起こされる感染症を治療するのにキノロン化合物を用いることがある。
【００１７】
本明細書中で使用される「非感受性」ということばは、中間レベルから十分なレベルでの薬剤に対する耐性を意味する。メチシリン非感受性細菌としては、以下に制限されるものではないが、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)、排出関連(efflux-related)メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)、市中感染型メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(community-associated Staphylococcus aureus)およびメチシリン耐性表皮ブドウ球菌(Staphylococcus epidermidis)などが挙げられる。バンコマイシン非感受性細菌としては、以下に制限されるものではないが、ヘテロバンコマイシン低感受性黄色ブドウ球菌(hetero-vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus)、バンコマイシン低感受性黄色ブドウ球菌(vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus)、およびバンコマイシン耐性黄色ブドウ球菌(vancomycin-resistant Staphylococcus aureus)などが挙げられる。ペニシリン非感受性細菌としては、以下に制限されるものではないが、ペニシリン耐性肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)などが挙げられる。クラリスロマイシン非感受性細菌としては、以下に制限されるものではないが、クラリスロマイシン耐性ヘリコバクターピロリ(Helicobacter pylori)などが挙げられる。メトロニダゾール非感受性細菌としては、以下に制限されるものではないが、メトロニダゾール耐性ヘリコバクターピロリ(Helicobacter pylori)などが挙げられる。
【００１８】
「有効量」ということばは、患者の意図される治療効果を与えるのに必要な活性剤の量を意味する。有効量は、当業者によって認識されるとおり、投与経路、賦形剤の使用、および他の薬剤との併用の可能性によって、異なりうる。「治療(treating)」ということばは、上記感染症を治療する(cure)、治癒する(heal)、軽減する(alleviate)、緩和する(relieve)、修正する(alter)、救済する(remedy)、改善する(ameliorate)、改良する(improve)、または作用する(affect)ことを目的として、上記感染症を有する、またはこのような感染症の症状を有する、またはこのような感染症になりやすい傾向のある患者に上記キノロン化合物の一つを投与することを意味する。
【００１９】
本方法を実施するために、キノロン化合物は、経口で、非経口で、吸入スプレーによって、または埋め込みリザーバー(implanted reservoir)を介して投与されうる。本明細書中で使用される「非経口」ということばは、皮下、皮内、静脈内、筋肉内、関節内、動脈内、滑液嚢内、胸骨内(intrasternal)、髄腔内、病巣内、及び頭蓋内注射または輸液技術を含む。
【００２０】
経口投与用の組成物は、以下に制限されないが、錠剤、カプセル、エマルジョンならびに水性懸濁剤、分散剤および溶液などの、経口で許容できる任意の剤形でありうる。錠剤に一般的に用いられる担体としては、ラクトースおよびコーンスターチが挙げられる。ステアリン酸マグネシウム等の、平滑剤もまた、一般的に錠剤に添加される。カプセル形態での経口投与の目的で、有用な希釈剤として、乳糖および乾燥コーンスターチが挙げられる。水性懸濁剤またはエマルジョンを経口投与する場合には、乳化剤または懸濁化剤と組み合わされた油相中に活性成分を懸濁または溶解させればよい。所望により、ある種の甘味剤、香味剤または着色剤を添加してもよい。
【００２１】
注射可能な滅菌組成物（例えば、水性または油性懸濁液）は、適当な分散または湿潤剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ  ８０など）及び懸濁化剤を用いて当該分野において既知の技術に従って配合されうる。また、注射可能な滅菌製剤は、例えば、１，３−ブタンジオール中の溶液等の、非毒性の非経口で許容できる希釈剤または溶媒中の注射可能な滅菌の溶液または懸濁液でありうる。用いられうる許容できるベヒクルおよび溶媒としては、マンニトール、水、リンガー溶液および等張塩化ナトリウム溶液がある。加えて、滅菌の固定油が溶媒または懸濁化媒体（例えば、合成モノまたはジグリセリド）として従来用いられている。オレイン酸およびそのグリセリド誘導体等の、脂肪酸は、オリーブ油またはヒマシ油、特にそのポリオキシエチル化体等の、製薬上許容できる天然油などの、注射剤の調製に有用である。これらの油の溶液または懸濁液はまた、長鎖アルコール希釈剤もしくは分散剤、またはカルボキシメチルセルロースまたは同様の分散剤を含みうる。
【００２２】
吸入組成物は、製剤処方の分野で周知の技術に従って調製でき、ベンジルアルコールもしくは他の適当な保存剤、バイオアベイラビリティを改善するための吸収促進剤、フルオロカーボン、および／または当該分野において既知の他の可溶化剤もしくは分散剤を用いて、生理食塩水中の溶液として調製されうる。
【００２３】
局所組成物は、油、クリーム、ローション、軟膏などの形態で配合できる。当該組成物用の適当な担体としては、植物油または鉱油、白色ワセリン（白色軟パラフィン）、分岐鎖の脂肪または油、獣脂および高分子量アルコール（Ｃ１２超）が挙げられる。好ましい担体は、活性成分が可溶性であるものである。乳化剤、安定化剤、保湿剤及び抗酸化剤、さらには色や芳香を付与する薬剤もまた、必要であれば、含まれうる。加えて、経皮透過促進剤を上記局所製剤に使用してもよい。これらの促進剤の例としては、米国特許第３，９８９，８１６号及び第４，４４４，７６２号に記載されるものがありうる。鉱油、自己乳化蜜ろうおよび水の混合物から、クリームを配合することが好ましく、この混合物中に、活性成分がアーモンドオイル等の少量の油中に溶解される。このようなクリームの一例としては、約４０部の水、約２０部の蜜ろう、約４０部の鉱油および約１部のアーモンドオイルを含むものがある。アーモンドオイル等の、植物油における活性成分の溶液を温かい軟パラフィンと混合して、この混合物を冷却することによって、軟膏を配合してもよい。このような軟膏の一例として、約３０重量％のアーモンド及び約７０重量％の白色軟パラフィンを含むものがある。
【００２４】
薬剤組成物中の担体は、製剤の活性成分と適合し（好ましくは、製剤を安定化でき）、治療を受ける患者に有害でないという点で「許容できる」必要がある。例えば、シクロデキストリン（抽出物の活性化合物の一以上と特定の可溶性がより高い複合体を形成する）等の、可溶化剤を、活性成分をデリバリーするための薬剤賦形剤として使用してもよい。他の担体の例としては、コロイド状二酸化ケイ素、ステアリン酸マグネシウム、セルロース、ラウリル硫酸ナトリウム、及びＤ＆Ｃ  Ｙｅｌｌｏｗ  ＃  １０が挙げられる。
【００２５】
適当なｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイが、細菌の成長を抑制する際の上記化合物の１つの有効性を予め評価するのに使用されうる。当該化合物は、ｉｎ  ｖｉｖｏアッセイで細菌感染症を治療する際の有効性についてさらに調べられうる。例えば、化合物を、感染症を患っている動物（例えば、マウスモデル）に投与した後、その治療効果をアクセスする。その結果に基づいて、適当な投与量の範囲および投与経路もまた決定されうる。
【００２６】
さらに説明することなく、上記説明により、本発明を適切に実施できると考えられる。したがって、下記特定の実施例は、単に詳細に説明することを意図しており、残りの開示を限定するものではないと、解される。本明細書に列挙された、特許を含む、すべての公報は、参考で全体を本明細書中に引用される。
【００２７】
実施例１
（３Ｓ，５Ｓ）−７−［３−アミノ−５−メチル−ピペリジニル］−１−シクロプロピル−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸[(3S,5S)-7-[3-amino-5-methyl-piperidinyl]-1-cyclopropyl-1,4-dihydro-8-methoxy-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid]のリンゴ酸塩（化合物１）および（３Ｓ，５Ｒ）−７−［３−アミノ−５−メチル−ピペリジニル］−１−シクロプロピル−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸[(3S,5R)-7-[3-amino-5-methyl-piperidinyl]-1-cyclopropyl-1,4-dihydro-8-methoxy-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid]のリンゴ酸塩（化合物１’）を以下のようにして合成した：
（Ａ）（３Ｓ，５Ｓ）−（５−メチル−ピペリジン−３−イル）−カルバミン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル[(3S,5S)-(5-Methyl-piperidin-3-yl)-carbamic acid tert-butyl ester]（化合物９）および（３Ｓ，５Ｒ）−（５−メチル−ピペリジン−３−イル）−カルバミン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル[(3S,5R)-(5-Methyl-piperidin-3-yl)-carbamic acid tert-butyl ester]（化合物９’）の合成
化合物９’を下記スキーム１に示されるようにして合成した：
【００２８】
【化４】
2011526887.tif 000005
【００２９】
５０−Ｌの反応器に、化合物２（５．５０ｋｇ、４２．６０ｍｏｌ）、メタノール（２７Ｌ）を仕込み、１０〜１５℃に冷却した。３０℃以下の温度に保持するように外部冷却しながら、塩化チオニル（１０．１１ｋｇ、２．０当量）を６５分間にわたって添加漏斗を介して添加した。得られた溶液を２５℃で１．０時間攪拌した後、減圧下でメタノールを除去した。油状残渣をエチル酢酸と共沸して（３×２．５Ｌ）、残ったメタノールを除去し、酢酸エチル（２７．４Ｌ）に溶解し、５０Ｌの反応器に加え、３０℃以下でトリエチルアミン（３．６ｋｇ）をゆっくり添加することによって中和した。得られた懸濁液を濾過して、トリエチルアミン塩酸塩を除去した。
【００３０】
ＤＭＡＰ（０．５３ｋｇ）と共に、濾液を５０Ｌの反応器に加えた。二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（８．４３ｋｇ）を、２０〜３０℃の温度で３０分間にわたって、温水で加熱した添加漏斗を介して添加した。ＴＬＣ分析によって測定しながら、１時間後に反応を終了した。有機相を氷冷した１Ｎ  ＨＣｌ（２×７．５Ｌ）、飽和重炭酸ナトリウム（１×７．５Ｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥して、濾過した。酢酸エチルを減圧下で除去した後、結晶性のスラリーを得、ＭＴＢＥ（１０．０Ｌ）で粉砕し(triturate)、濾過することによって、化合物３を白色固体として得た（５．４５ｋｇ、５２．４％）。
【００３１】
【化５】
2011526887.tif 000006
【００３２】
５０−Ｌの反応器に、化合物３（７．２５ｋｇ、２８．８ｍｏｌ）、ＤＭＥ（６．３１ｋｇ）、およびブレデレック試薬(Bredereck's Reagent)（７．７ｋｇ、４４．２ｍｏｌｅ）を仕込んだ。溶液を攪拌し、７５℃±５℃で３時間加熱した。反応物を１時間にわたって０℃に冷却し、この間に沈殿物が形成した。この混合物を、０℃で１時間保持し、濾過し、３０℃±５℃で少なくとも３０時間、真空オーブンで乾燥することによって、化合物４を白色結晶性固体として得た（６．９３ｋｇ、７７．９％）。
【００３３】
【化６】
2011526887.tif 000007
【００３４】
１０ガロンのＰｆａｕｄｌｅｒ反応器に、ＥＳＣＡＴ  １４２（Ｅｎｇｅｌｈａｒｄ  Ｃｏｒｐ．  Ｎ．Ｊ，  ＵＳ）のカーボンに担持された５％パラジウム粉末（ｐａｌｌａｄｉｕｍ  ｐｏｗｄｅｒ  ｏｎ  ｃａｒｂｏｎ）（５０％ｗｅｔ、０．５８ｋｇ  湿重量）、化合物４（１．８９ｋｇ、６．３３ｍｏｌ）、及びイソプロパノール（２２．４ｋｇ）を仕込んだ。４５℃で１８時間、４５−ｐｓｉ水素雰囲気下で攪拌した後、反応混合物を室温まで冷却し、セライト(Celite)（０．５１ｋｇ）の床で濾過した。濾液を減圧下で蒸発させ、粘稠な油を得、これを放置すると固化して、９３：７のジアステレオマー混合物として化合物５を得た（１．６９ｋｇ、１００％）。
【００３５】
産物混合物のサンプルを予備ＨＬＣで精製することによって、分析データ用の材料を得た。
【００３６】
【化７】
2011526887.tif 000008
【００３７】
５０Ｌの反応器に、化合物５（３．０２ｋｇ、１１．７ｍｏｌ）、無水エタノール（８．２２ｋｇ）、及びＭＴＢＥ（１４．８１ｋｇ）を仕込んだ。ホウ化水素ナトリウム（１．３６ｋｇ、３５．９ｍｏｌ）を０℃±５℃で少しずつ添加した。少量の泡立ちを観察した。この反応混合物を１０℃±５℃に加温し、塩化カルシウム２水和物（２．６５ｋｇ）を１０℃±５℃で１時間かけて一部ずつ添加した。この反応物を１時間かけて２０℃±５℃に加温し、２０℃±５℃でさらに１２時間攪拌した。反応物を−５℃±５℃に冷却した後、氷冷した２Ｎ  ＨＣｌ（２６．９ｋｇ）を０℃±５℃でゆっくり添加した。攪拌を終了した。下部の水相を除去した。この反応器に、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（１５．６ｋｇ）を攪拌しながら５分かけて仕込んだ。攪拌を再度止めて、下部の水相を除去した。反応器に、硫酸マグネシウム（２．５ｋｇ）を仕込み、少なくとも１０分間攪拌した。この混合物をｎｕｔｓｃｈｅフィルターで濾過し、減圧下で濃縮することにより、化合物６を得た（１．８０ｋｇ、６６％）。
【００３８】
【化８】
2011526887.tif 000009
【００３９】
５０Ｌの反応器に、酢酸イソプロピル（１９．７ｋｇ）における化合物６（５．１ｋｇ）の溶液を仕込んだ。この反応物を１５℃±５℃に冷却し、この温度でトリエチルアミン（７．８ｋｇ）を添加した。この反応器をさらに０℃±５℃に冷却し、塩化メタンスルホニル（ＭｓＣｌ）（６．６ｋｇ）を添加した。この反応物を数時間攪拌し、ＨＰＬＣまたはＴＬＣで終了をモニターした。この反応物を飽和重炭酸塩溶液で急冷した。有機相を単離し、冷１０％トリエチルアミン水溶液、冷ＨＣｌ水溶液、冷飽和重炭酸塩水溶液、最後に飽和ブライン水溶液で順次洗浄した。有機相を乾燥、濾過し、５５℃±５℃以下で真空中で濃縮することによって、化合物７を固体／液体スラリーとして得、これをさらに精製せずに次の反応に使用した。
【００４０】
９．１ｋｇの無水(neat)ベンジルアミンを仕込んだ後、５０Ｌの反応器を５５℃に加温し、この温度で、１，２−ジメトキシエタン（１４．１ｋｇ）における化合物７（８．２ｋｇ）の溶液を添加した。添加後、この反応物を数時間６０℃±５℃で攪拌し、ＴＬＣまたはＨＰＬＣで終了をモニターした。この反応物を周囲温度に冷却し、溶剤を真空下で除去した。残渣を１１．７ｋｇの１５％（ｖ／ｖ）酢酸エチル／ヘキサン溶液で希釈し、攪拌しながら、１８．７ｋｇの２０％（ｗｔ）炭酸カリウム水溶液で処理した。放置すると、３相の混合物を得た。上部の有機相を集めた。単離した中間層を、１５％（ｖ／ｖ）酢酸エチル／ヘキサン溶液１１．７ｋｇずつで再度２回抽出した。有機層を合わせたものを真空下で濃縮して、油状残渣を得た。次に、この残渣をクロマトグラフィーで精製することにより、化合物８を油として得た。
【００４１】
４０Ｌの圧力容器に、０．６ｋｇの５０％  カーボンに担持された湿ったパラジウム固体（ｗｅｔ，  ｓｏｌｉｄ  ｐａｌｌａｄｉｕｍ  ｏｎ  ｃａｒｂｏｎ）（Ｅ１０１、１０ｗｔ．％）を窒素を流しながら仕込んだ。次に、１３．７ｋｇの無水エタノールにおける化合物８（３．２ｋｇ）の溶液を窒素下でこの反応器に添加した。この反応器に、窒素をパージした後、４５ｐｓｉで水素で加圧した。次に、この反応物を４５℃に加熱した。ＴＬＣまたはＬＣでこれをモニターした。終了したら、反応物を周囲温度に冷却し、通気し、窒素でパージした。この混合物をセライト(Celite)の床で濾過し、固体を２．８ｋｇの無水エタノールで洗浄した。濾液を真空下で濃縮することにより、化合物９をワックス状の固体として得た。
【００４２】
【化９】
2011526887.tif 000010
【００４３】
同様にして、（３Ｓ，５Ｒ）−（５−メチル−ピペリジン−３−イル）−カルバミン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル[(3S,5R)-(5-Methyl-piperidin-3-yl)-carbamic acid tert-butyl ester]（化合物９’）をスキーム２に示されるようにして合成した。
【００４４】
【化１０】
2011526887.tif 000011
【００４５】
（Ｂ）１−シクロプロピル−７−フルオロ−８−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−キノリン−３−カルボン酸(1-Cyclopropyl-7-fluoro-8-methoxy-4-oxo-1,4-dihydro-quinoline-3-carboxylic acid)（化合物１０）の合成
化合物１０を、米国特許第６，３２９，３９１号に記載の方法に従って調製した。
【００４６】
（Ｃ）１−シクロプロピル−７−フルオロ−８−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−キノリン−３−カルボン酸のボロンエステルキレート(borone ester chelate of 1-Cyclopropyl-7-fluoro-8-methoxy-4-oxo-1,4-dihydro-quinoline-3-carboxylic acid)（化合物１１）の合成
【００４７】
【化１１】
2011526887.tif 000012
【００４８】
反応器に、酸化ホウ素（２．０ｋｇ、２９ｍｏｌ）、氷酢酸（８．１Ｌ、１４２ｍｏｌ）、及び無水酢酸（１６．２Ｌ、１７１ｍｏｌ）を仕込んだ。得られた混合物を少なくとも２時間還流した後、４０℃に冷却し、この温度で、７−フルオロキノロン酸化合物１０(7-fluoroquinolone acid compound 10)（１４．２ｋｇ、５１ｍｏｌ）を添加した。この混合物を少なくとも６時間還流した後、約９０℃に冷却した。トルエン（４５Ｌ）をこの反応物に添加した。５０℃で、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（１９Ｌ）を添加して、沈殿させた。次に、この混合物を２０℃に冷却して、濾過して沈殿を単離した。さらに、この単離された固体をｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（２６Ｌ）で洗浄した後、４０℃（５０ｔｏｒｒ）で真空オーブン中で乾燥することにより、化合物１１を８６．４％の収率で得た。
【００４９】
【化１２】
2011526887.tif 000013
【００５０】
（Ｄ）（３Ｓ，５Ｓ）−７−［３−アミノ−５−メチル−ピペリジニル］−１−シクロプロピル−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸のリンゴ酸塩[malate salt of (3S,5S)-7-[3-amino-5-methyl-piperidinyl]-1-cyclopropyl-1,4-dihydro-8-methoxy-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid]（化合物１）および（３Ｓ，５Ｒ）−７−［３−アミノ−５−メチル−ピペリジニル］−１−シクロプロピル−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸のリンゴ酸塩[malate salt of (3S,5R)-7-[3-amino-5-methyl-piperidinyl]-1-cyclopropyl-1,4-dihydro-8-methoxy-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid]（化合物１’）の合成
化合物１を下記スキーム４に示されるようにして化合物９から合成した。
【００５１】
【化１３】
2011526887.tif 000014
【００５２】
反応器に、化合物１１（４．４ｋｇ、１０．９ｍｏｌ）、化合物９（２．１ｋｇ、９．８ｍｏｌ）、トリエチルアミン（ＴＥＡ）（２．１Ｌ、１４．８ｍｏｌ）、及びアセトニトリル（３３．５Ｌ、１５．７Ｌ／ｋｇ）を仕込んだ。得られた混合物を、ＨＰＬＣ または逆相ＴＬＣでモニターしながら、反応が終了するまで、約５０℃で攪拌した。これを約３５℃に冷却し、０〜４００ｔｏｒｒの真空下でアセトニトリルを蒸留することによって、反応物の容積を約半分にまで減らした。２８．２ｋｇの３．０Ｎ  ＮａＯＨ（ａｑ）溶液を添加した後、この反応混合物を約４０℃に加温し、さらに蒸留物が観察されなくなるまで、真空下で蒸留し、室温で加水分解した。ＨＰＬＣ または逆相ＴＬＣで加水分解の終了をモニターしたら、４〜５ｋｇの氷酢酸を添加して、反応混合物を中和した。
【００５３】
得られた溶液を、１２．７ｋｇ（９．６Ｌ）のジクロロメタンで３回抽出した。有機層を合わせて、他の反応器に移した。４０℃で蒸発させることにより、反応物の容積を約半分にまで減らした。２０．２ｋｇの６．０Ｎ  ＨＣｌ（ａｑ）溶液を添加した後、この反応混合物を３５℃で少なくとも１２時間攪拌した。ＨＰＬＣ または逆相ＴＬＣで反応の終了をモニターした後、攪拌をやめて、相分離させた。有機相を除去し、水層を１２．７ｋｇ（９．６Ｌ）のジクロロメタンで抽出した。水層を１８．３ｋｇの蒸留水で希釈し、約５０℃に加温した。真空下（１００〜４００ｔｏｒｒ）で蒸留させることによって、ジクロロメタンをさらに除去した。
【００５４】
次に、約９．４２ｋｇの３．０Ｎ  ＮａＯＨ（ａｑ）を６５℃以下で添加することによって、この水溶液のｐＨを７．８〜８．１に調節した。この反応混合物を５０℃で少なくとも１時間攪拌した後、室温に冷却した。沈殿物を吸引濾過によって単離し、５．２ｋｇの蒸留水で２回洗浄し、少なくとも１２時間の吸引でおよび５５℃で対流式オーブンでさらに１２時間、乾燥した。化合物１２（３．２ｋｇ、７９％）が固体として得られた。
【００５５】
反応器に、３．２ｋｇの化合物１２及び２５．６ｋｇの９５％エタノールを仕込んだ。この反応器に、１．１ｋｇの固体のＤ，Ｌ−リンゴ酸を加えた。この混合物を温度（〜８０℃）で還流した。蒸留水（〜５．７Ｌ）を添加して、沈殿物を溶かし、０．２ｋｇの活性炭を加えた。この反応混合物をフィルターに通した。透明な濾液を４５℃に冷却し、少なくとも２時間放置し、結晶化させた。反応混合物をさらに５℃に冷却した後、沈殿物を吸引濾過によって単離し、６．６ｋｇの９５％エタノールで洗浄し、少なくとも４時間吸引しながら乾燥した。この固体をさらに、４５℃で少なくとも１２時間、対流式オーブンで乾燥することによって、３．１ｋｇの化合物１を得た（収率：７０％）。
【００５６】
【化１４】
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【００５７】
同様にして、化合物１’を下記スキーム５に示されるようにして化合物９’から合成した。
【００５８】
【化１５】
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【００５９】
実施例２
化合物１によるメチシリン耐性黄色ブドウ球菌(Sta phylococcus aureus)（ＭＲＳＡ）の阻害
ＭＲＳＡ分離株（ｎ＝１９３）をカナダ国立集中治療室(Canadian National Intensive Care Unit)（ＣＡＮ−ＩＣＵ）の研究の一環として得た。ＩＣＵが活動しているカナダの全地域から１９か所の医療センターが関与するＣＡＮ−ＩＣＵの研究に参加した。感染症の疾患が推測される患者から「臨床的に有意な」試料を得ることのみが依頼された。監視スワブ(surveillance swab)、目、耳、鼻および咽頭スワブは除いた。嫌気生物および真菌状の生物もまた除いた。
【００６０】
２００５年９月から２００６年６月（含む）まで、各センターは、ＩＣＵの患者の血液、尿、組織／創傷、および呼吸器の試料から単離された最大３００個の継続的な病原菌（１患者あたり１培養部位あたり１病原菌）を集めた。これらの分離株を、エイミーズチャーコールスワブ(Amies charcoal swabs)で参照試験所(Health Sciences Centre, Winnipeg, Canada)に輸送され(shipped)、適当な培地で継代培養され、−８０℃でスキムミルク中でストックされた。
【００６１】
Clinical and Laboratory Standards Instituteによって記載されるディスク拡散法(disk diffusion method)を用いて、これらの分離株のメチシリン耐性を確認した。全ての分離株について、前記したように、ｍｅｃＡ  ＰＣＲ、さらには分子特性化(molecular characterization)（ＰＶＬ分析及びフィンガープリント法など）を行い、市中感染型(community-associated)かあるいは医療機関感染型(healthcare-associated)かを評価した(Christianson et al., J Clin Microbiol. 2007, 45 (6): 1904-11; Mulvey et al., J Clin. Microbiol. 2001, 39(10): 3481-5; Mulvey et al., Emerg Infect Dis. 2005,11(6): 844-50; Oliveira et al., Antimicrob Agents Chemother. 2002, 46(7): 2155-61)。これらの分離株をまた、前記(Mulvey et al., J Clin Microbiol. 2001, 39(10): 3481-5)したように、カナダ標準化プロトコルに従ってパルスフィールドゲル電気泳動（ＰＦＧＥ）を用いてサブタイプした(subtype)。このようにして得られたこれらのＰＦＧＥフィンガープリントを、１．０の位置公差および１．０の最適化を用いてBioNumerics v3.5 (Applied Maths St. Marten-Latem, Belgium)で分析した。株の同系性を、前記(Tenover et al., 1995)したように、決定した。これらの分離株のフィンガープリントを、国立ＭＲＳＡフィンガープリントデータベース(national MRSA fingerprint database)と比較し、前記(Mulvey et al., Emerg Infect Dis. 2005,11(6):844-50)したように、１０個のカナダで流行しているＭＲＳＡ(Canadian epidemic MRSA)（ＣＭＲＳＡ−１、ＣＭＲＳＡ−２など）の一つに分類した。これらのＭＲＳＡ分離株は、以下の遺伝子型に属する：ＣＭＲＳＡ−１（ＵＳＡ６００）、ＣＭＲＳＡ−２（ＵＳＡ  １００）、ＣＭＲＳＡ−４（ＵＳＡ２００）、ＣＭＲＳＡ−７（ＵＳＡ４００、ＭＷ２）およびＣＭＲＳＡ−１０（ＵＳＡ３００）。
【００６２】
化合物１および他の抗生物質について、Clinical and Laboratory Standards Instituteによって規定されるような微量液体希釈ガイドライン(broth microdilution guideline)を用いてＭＲＳＡ分離株に対する阻害活性を試験した。下記表には、１９３種のＭＲＳＡ株の阻害に関する化合物１および様々なフルオロキノロン系抗生物質の最小阻止濃度（ＭＩＣ）が示される。
【００６３】
【表１】
2011526887.tif 000017
【００６４】
下記表は、下記市中感染型ＭＲＳＡ（ＣＡ−ＭＲＳＡ）株−−ＵＳＡ  ３００及びＵＳＡ  ４００−−ならびに下記医療機関感染型ＭＲＳＡ株−−ＵＳＡ  ２００、ＵＳＡ  ６００、及びＵＳＡ  １００／８００の阻害に関する、化合物１およびフルオロキノン系抗生物質のＭＩＣを示す。
【００６５】
【表２】
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【００６６】
化合物１は、ＭＲＳＡを効率よく阻害した。また、この化合物は医療機関感染型ＭＲＳＡ株よりも市中感染型ＭＲＳＡ株に対してより活性のあることが分かった。
【００６７】
化合物１による多剤耐性メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)、およびエンテロコッカス  フェシウム(Enterococci faecium)、および大便連鎖球菌(Enterococci faecalis)の阻害
化合物１について、台湾の全地域における１０箇所の医療センターによって得られた多剤耐性メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)、およびエンテロコッカス属(Enterococci)に対する阻害効果を試験した。Clinical and Laboratory Standards Institute（ＣＬＳＩ−Ｍ１００−Ｓ１８）によって推奨される寒天希釈法を用いて、ＭＩＣを測定した。結果を下記表に示す。
【００６８】
【表３】
2011526887.tif 000019
【００６９】
表に示されるように、化合物１は、シプロフロキサシン耐性、バンコマイシン低感受性(Vancomycin-intermediate-resistant)、およびダプトマイシン非感受性であるＭＲＳＡ分離株を阻害するのに有効であった。また、当該化合物は、バンコマイシン耐性エンテロコッカス  フェシウム(Enterococci faecium)およびバンコマイシン耐性大便連鎖球菌(Enterococcus faecalis)を阻害するのにも有効であった。
【００７０】
化合物１によるブドウ球菌(Staphylococcal bacteria)の阻害
化合物１について、２６個のメチシリン耐性黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)（ＭＲＳＡ）株、２個のヘテロバンコマイシン低感受性黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)（ｈＶＩＳＡ）株、２４個のバンコマイシン低感受性黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)（ＶＩＳＡ）株、５個のバンコマイシン耐性黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)（ＶＲＳＡ）株、および３１個のＱＲＤＲ中に所定の変異を有するキノロン耐性バンコマイシン感受性ＭＲＳＡ株に対する阻害効果を試験した。これらの変異は、ＱＲＤＲ（ｇｙｒＡ、ｇｙｒＢ、ｇｒｌＡ、及びｇｒｌＢ）の配列分析によって決定した。レセルピン法(Brenwald, et al., Antimicrob. Agents Chemother. 1998, 42: 2032-2035)によって、流出試験(efflux testing)を行った。Clinical and Laboratory Standards Institute（ＣＬＳＩ−Ｍ１００−Ｓ１８）によって推奨される寒天希釈法を用いて、ＭＩＣを測定し、下記表に示す。
【００７１】
【表４】
2011526887.tif 000020
【００７２】
化合物１は、メチシリン耐性、ヘテロバンコマイシン低感受性、バンコマイシン低感受性、およびバンコマイシン耐性である黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)分離株を効果的に阻害した。また、化合物１は、キノロン耐性バンコマイシン感受性ＭＲＳＡをも効果的に阻害した。化合物１は、これらの株に対して、非常に低いＭＩＣ（０．０６〜μｇ／ｍｌ）を示した。
【００７３】
３１個のＭＲＳＡキノロン耐性株のうち、５株はＱＲＤＲ変異［ＧｙｒＡ（Ｓ８４Ｌ）、ＧｒｌＡ（Ｓ８０Ｆ／Ｙ）、ＧｒｌＢ（Ｌ４１３Ｓ、Ｅ４２２Ｋ／Ｎ、Ｄ４３２Ｎ、Ｅ４７１Ｋ）；ＧｙｒＡ（Ｓ８４Ｌ）、ＧｒｌＡ（Ｓ８０Ｆ／Ｙ）、ＧｙｒＢ（Ｒ４０４Ｌ）；ＧｙｒＡ（Ｓ８４Ｌ）、ＧｒｌＡ（Ｓ８０Ｆ／Ｙ）；ＧｙｒＡ（Ｓ８４Ｌ）、ＧｒｌＡ（Ｓ８０Ｆ／Ｙ、Ｅ８４Ｖ）、ＧｒｌＢ（Ｅ４２２Ｄ）及びＧｙｒＡ（Ｓ８４Ｌ）、ＧｒｌＡ（Ｓ８０Ｆ／Ｙ、Ｅ８４Ｖ／Ｋ／ＧｏｒＳ１０８Ｎ）］を有する。化合物１に関連する流出が、耐性菌発現に関連することが知られている遺伝子型の中で見つかった。
【００７４】
化合物１によるグラム陽性球菌(cocci)の阻害
２００７年１月〜１２月まで、カナダの１２箇所の病院が、病院外来、緊急治療室、病棟及び手術室(surgical ward)、ならびに集中治療室で看護を受けた患者からの分離株を提出した。３４７３個のグラム陽性球菌を含む７８８１個の分離株（ＣＡＮＷＡＲＤ  ２００７）を集めた。化合物１及びレボフロキサシンの感受性試験を、Clinical and Laboratory Standards Instituteの微量希釈法(broth microdilution)を用いて行った。ＭＩＣ５０及びＭＩＣ９０を下記に示す。
【００７５】
【表５】
2011526887.tif 000021
【００７６】
化合物１は、ＭＲＳＡ、ＶＩＳＡ、ＶＲＳＡ、ＭＲＳＥ、ＰｅｎＩ−ＳＰＮ、ＰｅｎＲ−ＳＰＮ、及びＣｉｐＲ−ＳＰＮを含むグラム陽性球菌の阻害に際し、レボフロキサシンより活性があった。
【００７７】
化合物１によるヘリコバクター  ピロリ(Helicobacter pylori)の阻害
化合物１、シプロフロキサシン、レボフロキサシン、モキシフロキサシン及びゲミフロキサシンについて、台湾（２０００〜２００７）の全地域にある１０ヶ所の医療センターによって得られたヘリコバクター  ピロリ(Helicobacter pylori)の２００個の分離株に対する阻害効果を試験した。Clinical and Laboratory Standards Institute（ＣＬＳＩ−Ｍ１００−Ｓ１８）によって推奨される寒天希釈法を用いて、ＭＩＣを測定した。
【００７８】
２００個のヘリコバクター  ピロリ(Helicobacter pylori)の分離株のうち、２％、６％、２９％、２％、および２％が、それぞれ、アモキシシリン（ＭＩＣｓ≧０．５μｇ／ｍＬ）、クラリスロマイシン（ＭＩＣｓ≧１μｇ／ｍＬ、ＣＬＳＩ）、メトロニダゾール（ＭＩＣｓ≧８μｇ／ｍＬ）、シプロフロキサシン（ＭＩＣｓ≧１μｇ／ｍＬ）、およびレボフロキサシン（ＭＩＣｓ≧１μｇ／ｍＬ）に対して耐性があった。試験した５種のキノロン薬剤のＭＩＣ  Ｒａｎｇｅ、ＭＩＣ５０、およびＭＩＣ９０は、下記のとおりである：
【００７９】
【表６】
2011526887.tif 000022
【００８０】
化合物１は、ヘリコバクター  ピロリ(Helicobacter pylori)の分離株を効果的に阻害した。上記表から、化合物１は、シプロフロキサシン、レボフロキサシン、及びモキシフロキサシンより、ヘリコバクター  ピロリ(Helicobacter pylori)の分離株の阻害に有効であり、さらに、ゲミフロキサシンに匹敵することが示される。
【００８１】
化合物１’による抗生物質耐性菌の阻害
化合物１’、シプロフロキサシン、及びレボフロキサシンについて、異なる１０日目に０．００８〜８μｇ／ｍｌの様々な濃度でメチシリン耐性黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)及びメチシリン耐性肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)に対する阻害効果を試験した。黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)の分離株及び肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)の分離株を、台湾の全地域にある１０ヶ所の医療センターから得た。微量液体希釈法を用いて、ＭＩＣを測定した。下記表に示されるように、化合物１’は、黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)及び肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)を阻害するのにも非常に効果的であった。
【００８２】
【表７】
2011526887.tif 000023
【００８３】
上記表に示されるように、化合物１’は、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)及び肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)を阻害するのに効果的であった。
【００８４】
薬物動態アッセイ
１０日目の０時間（投与前）ならびに０．５、１、１．５、２、４、６、８、１２、１６及び２４時間（投与後）に、化合物１を摂取した各患者から、血液サンプルを集めた。各サンプル５ｍＬを、へパリンナトリウムチューブに移し、即座に氷上に置いた。約４℃で遠心することによって血漿を分離し、適切にラベルが付けられたポリプロピレン検体容器に移し（１〜１．５ｍＬ血漿／チューブで２本のチューブ）、使用するまで約−７０℃で凍結した。
【００８５】
血液サンプルを分析する前に、薬物動態アッセイを確認した。アッセイ確認の詳細を、下記表に列挙する。
【００８６】
【表８】
2011526887.tif 000024
【００８７】
Charles River Laboratories (Worcester, MA)によって、血液サンプルの薬物動態アッセイを行った。非コンパートメント法(non-compartmental approaches)(WinNonlin version 4.1, Pharsight Corporation, CA)を用いて血漿濃度−時間データから、Ｃｍａｘ（血漿中の化合物１のピーク濃度）およびＡＵＣ０−２４ｈ（直線／ｌｏｇ台形法(log trapezoidal method)によって算出された、投与後０〜２４時間での血漿濃度−時間曲線での面積）を測定した。
【００８８】
また、タンパク質結合性を以下のようにして測定した：〜３０００ｒｐｍ（３０分、〜３７℃）で分子量カットオフ限外濾過装置(molecular weight cutoff ultrafiltration device)（３０，０００Ｄａ）で上記化合物１含有ヘパリン化ヒト血漿を遠心することによって、限外濾過液（ＵＦ）サンプルを得た。このＵＦサンプル（０．０２５ｍＬ）を、内部標準液（〜８００ｎｇ／ｍＬ、０．０５０ｍＬ）としてのＯ１３ＣＤ３−化合物１（化合物１のＯＣＨ３基をＯ１３ＣＤ３基に置換して、Ｏ１３ＣＤ３−化合物１を得た）と混合し、２０倍に希釈し、さらに３．５ミクロンのＣ−１８カラムの逆相ＨＰＬＣによって分析した。陽イオンターボ−イオンスプレーイオン化(positive ion Turbo-Ion Spray ionization)によるＭＲＭ(multiple reaction monitoring)によって、定量結果(quantitation)を得た。限外濾過液の標準物質を用いて、血漿品質管理サンプル及び未知の試料中の非結合薬剤を定量した。非特異的タンパク質結合性（ＮＳＢ）を測定し（ＮＳＢ＝０．０４１５）、補正係数として使用して、最終タンパク質結合性（％）を測定した。検体の定量化の公称範囲は、５０〜１０，０００ｎｇ／ｍＬであった。ヒト血漿の０．４００ｍＬアリコートを、アッセイで使用した。急上昇した(spiked)ＵＦ標準物質から得た較正曲線の測られた(weighed)直線（１／ｘ２）回帰を用いて逆算によって、サンプル濃度を測定した。直線範囲にわたって、化合物１のバッチ間のＣＶ（％）は、４．９％〜１１．８％であった。
【００８９】
被検者に、１日当たり、５００ｍｇ、７５０ｍｇ、及び１０００ｍｇ投与した際の化合物１のＡＵＣ０−２４、Ｃｍａｘ、及びタンパク質結合値を、下記表に示す。下記表中に示される遊離Ｃｍａｘ値及び遊離ＡＵＣ０−２４値を、血漿タンパク質結合性について修正した。また、細菌耐性の発現に加えて、臨床転帰及び微生物学的結果の予想に有用である、遊離Ｃｍａｘ／ＭＩＣ及び遊離ＡＵＣ／ＭＩＣを、下記表に示す。約８以上の遊離Ｃｍａｘ／ＭＩＣ及び約１００以上の遊離ＡＵＣ／ＭＩＣが抗生物質薬剤では好ましい。
【００９０】
【表９】
2011526887.tif 000025
【００９１】
他の実施形態
本明細書に記載されるすべての態様は、いずれの組み合わせで結合されてもよい。同じ、等価の、または同様の目的を果たす別の態様を本明細書に記載される各態様の代わりに使用してもよい。ゆえに、特記しない限り、開示される各態様は、一般的な一連の等価のまたは同様の態様の例にすぎない。
【００９２】
上記記載から、当業者は、本発明の必須の特徴を容易に確認でき、本発明の概念および範囲から逸脱しない限り、本発明の様々な変更及び修飾を行って様々な用途や症状に適合することができる。ゆえに、他の実施形態もまた、下記特許請求の範囲の範囲に包含される。
【国際調査報告】
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