(57)【要約】  ＰＧＧＡ−ＰＴＸ結合体を含む薬学的組成物が調製される。薬学的組成物は、種々の癌（例えば、肺癌、皮膚癌、腎臓癌、肝臓癌および脾臓癌）を治療するために使用される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
肺癌、メラノーマ、腎臓癌、肝臓癌および脾臓癌からなる群から選択される癌に罹患している人を同定する工程、および前記癌の治療に有効な量でポリマー結合体をその人に投与する工程を含み、
前記ポリマー結合体は、ポリ−（ガンマ−Ｌ−グルタミルグルタミン）（ＰＧＧＡ）およびパクリタキセル（ＰＴＸ）を含み、
前記ＰＧＧＡの分子量は、約５０，０００〜約１００，０００の範囲であり、
前記ポリマー結合体中のパクリタキセルの重量パーセントは、ポリマー結合体の総重量に対して約２０％〜約５０％の範囲である、癌の治療方法。
【請求項２】
前記ＰＧＧＡの分子量が、約７０，０００である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ポリマー結合体中のパクリタキセルの重量パーセントが、約３５％である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記ポリマー結合体中の前記ＰＧＧＡの分子量が、約７０，０００であり、前記ポリマー結合体中のパクリタキセルの重量パーセントが、約３５％である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記ポリマー結合体が、注射によって前記人に投与される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記ポリマー結合体が、肺、皮膚、腎臓または脾臓に局所的に投与される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記ポリマー結合体が、希釈剤、キャリアおよび賦形剤から選択される少なくとも１つの薬学的に適当な成分との混合物として投与される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記人が、メラノーマに罹患していると診断されており、前記ポリマー結合体が、約４０ｍｇＰＴＸ当量／ｋｇ〜約３４５ｍｇＰＴＸ当量／ｋｇの範囲の用量でその人に投与される、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記人が、肺癌、腎臓癌、肝臓癌および脾臓癌からなる群から選択される少なくとも１つに罹患していると診断されており、前記ポリマー結合体が、約４０ｍｇＰＴＸ当量／ｋｇ〜約５５０ｍｇＰＴＸ当量／ｋｇの範囲の用量でその人に投与される、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記癌に罹患している前記人が、肺組織、皮膚組織、腎臓組織、肝臓組織および脾臓組織からなる群から選択される少なくとも１つの組織から得られた癌マーカー遺伝子の発現プロファイリングによって同定されている、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
ポリ−（ガンマ−Ｌ−グルタミルグルタミン）（ＰＧＧＡ）およびパクリタキセル（ＰＴＸ）ポリマー結合体を含み、
前記ＰＧＧＡの分子量は、約５０，０００〜約１００，０００の範囲であり、
前記ポリマー結合体中のＰＴＸの重量パーセントは、ポリマー結合体の総重量に対して約２０％〜約５０％の範囲である、薬学的組成物。
【請求項１２】
前記ポリマー結合体中のＰＴＸの重量パーセントが、約３５％である、請求項１１に記載の薬学的組成物。
【請求項１３】
前記ＰＧＧＡの分子量が、約７０，０００である、請求項１１または１２に記載の薬学的組成物。
【請求項１４】
請求項１１〜１３のいずれか１項に記載のポリマー結合体、ならびに賦形剤、キャリアおよび希釈剤から選択される少なくとも１つの薬学的に許容し得る成分を含む薬学的組成物。
【請求項１５】
注射可能な液体の形態の、請求項１１〜１４のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、２００８年３月６日出願の「ポリマー結合体および癌の治療方法（POLYMER CONJUGATES AND METHODS FOR TREATING CANCER）」と題される米国仮出願番号６１／０３４，４２３号、および２００８年４月１１日出願の「ポリマー結合体および癌の治療方法（POLYMER CONJUGATES AND METHODS FOR TREATING CANCER）」と題される米国仮出願番号６１／０４４２１４号（これらの両方が、すべての目的のために本明細書中でそれらの全体が参考として援用される）に対する優先権を主張するものである。
【０００２】
本発明は、概して、生体適合性ポリマー結合体、およびそれらを用いた癌の治療方法、特に、ポリ−（ガンマ−Ｌ−グルタミルグルタミン）−パクリタキセル、および該ポリマー結合体を用いた癌の治療方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
薬物、生体分子および造影剤を送達するための種々の系が用いられている。例えば、そのような系としては、カプセル、リポソーム、微小粒子、ナノ粒子およびポリマーが挙げられる。
【０００４】
種々のポリエステルベースの生分解性の系が、特徴づけられ、研究されている。ポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリグリコール酸（ＰＧＡ）およびそれらのコポリマーであるポリ乳酸−コ−グリコール酸（ＰＬＧＡ）は、薬物送達に適用するためのデザインおよび性能に関して最もよく特徴づけられているバイオマテリアルの一部である。非特許文献１および非特許文献２を参照のこと。また、２−ヒドロキシプロピルメタアクリレート（ＨＰＭＡ）は、薬物送達に適用するためのポリマーを生成するために広く使用されている。ポリオルトエステルに基づく生分解性の系もまた、検討されている。非特許文献３を参照のこと。ポリ無水物の系もまた、検討されている。そのようなポリ無水物は、典型的には生体適合性であり、インビボで、代謝産物として身体から排除される比較的無毒性の化合物に分解されうる。非特許文献４を参照のこと。
【０００５】
アミノ酸ベースのポリマーもまた、新しいバイオマテリアルの潜在的な供給源として考えられている。良好な生体適合性を有するポリアミノ酸は、低分子量化合物を送達するために検討されている。比較的少数のポリグルタミン酸およびコポリマーが、薬物送達のための候補材料として知られている。非特許文献５を参照のこと。
【０００６】
疎水性の抗癌薬ならびに治療的なタンパク質およびポリペプチドの投与は、生態学的利用能が小さいことに悩まされることが多い。いくつかの場合において、このような生態学的利用能の低さは、疎水性薬物と水溶液の二相性溶液の不適合性、および／または酵素的分解によって血液循環からこれらの分子が迅速に除去されることに起因しうると理論づけられている。投与されるタンパク質および他の小分子薬剤の有効性を高めるために研究されている１つの手法は、その投与される薬剤を、インビボにおける酵素的分解から保護することができるポリエチレングリコール（「ＰＥＧ」）分子などのポリマーに結合体化することを必要とする。そのような「ＰＥＧ化」により、投与される薬剤の循環時間が改善され、それゆえ生態学的利用能が改善される場合が多い。
【０００７】
しかしながら、ＰＥＧは、いくつかの点で短所を有する。例えば、ＰＥＧは、線状ポリマーであるため、ＰＥＧによってもたらされる立体的な保護は、分枝ポリマーに比して限定的である。ＰＥＧの別の短所は、一般に、２つの末端で誘導体化の影響を受けやすい点である。そのため、容易にＰＥＧに結合体化が可能な他の機能分子（例えば、特定の組織へのタンパク質または薬物の送達のために有益な分子）の数が限定される。
【０００８】
ポリグルタミン酸（ＰＧＡ）は、疎水性抗癌薬を可溶化するために好まれる別のポリマーである。ＰＧＡに結合体化された多くの抗癌薬が報告されている。非特許文献６を参照のこと。しかしながら、そのいずれもが現在、ＦＤＡに承認されていない。
【０００９】
タイヘイヨウイチイの木の樹皮から抽出されたパクリタキセル（ＰＴＸ）（非特許文献７）は、卵巣癌および乳癌の治療のためにＦＤＡに承認された薬物である。パシリタキセルは、生態学的利用能が低いとの難点があると考えられている。パシリタキセルをＣｒｅｍｏｐｈｏｒ−ＥＬと無水エタノールとの混合物（１：１，ｖ／ｖ）中に製剤化することをはじめとした、生態学的利用能を改善するためのアプローチが試みられた（非特許文献８）。この製剤は、現在、タキソール（Taxol、登録商標）（Bristol-Myers Squibb）として商品化されている。しかしながら、このビヒクルは、有効な薬物レベルの送達が不適切であり、高い毒性を生じる。パクリタキセルのタキソールＴＭブランドは、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）での臨床的有効性が証明されているが、急性過敏症反応および末梢神経障害を含む重篤な副作用を引き起こす。
【００１０】
パクリタキセルの生態学的利用能を改善するための別のアプローチは、高剪断均質化を用いる乳化によるものである（非特許文献９）。ポリマー−パクリタキセル結合体は、いくつかの臨床試験に進んでいる（非特許文献１０）。パクリタキセルは、ヒトアルブミンタンパク質を有するナノ粒子に製剤化されており、臨床研究で使用されている（非特許文献１１および非特許文献１２）。この製剤は、現在、アブラキサン（Abraxane、登録商標）（American Pharmaceutical Partners社）として商品化されている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Uhrich, K. E.; Cannizzaro, S. M.; Langer, R. S. and Shakeshelf, K. M. “Polymeric Systems for Controlled Drug Release”, Chem. Rev., 1999, 99, 3181-3198.
【非特許文献２】Panyam, J., Labhasetwar, V. “Biodegradable nanoparticles for drug and gene delivery to cells and tissue”, Adv. Drug Deliv. Rev., 2003, 55, 329-47.
【非特許文献３】Heller, J., Barr, J., Ng, S. Y., Abdellauoi, K. S., and Gurny, R., “Poly(ortho esters): synthesis, characterization, properties and uses.”, Adv. Drug Del. Rev., 2002, 54, 1015-1039.
【非特許文献４】Kumar, N., Langer, R. S., and Domb, A. J., “Polyanhydrides: an overview.”, Adv. Drug Del. Rev., 2002, 54, 889-91.
【非特許文献５】Bourke, S. L., and Kohn, J., “Polymers derived from the amino acid L-tyrosine: polycarbonates, polyarylates and copolymers with poly(ethylene glycol)”, Adv. Drug Del. Rev., 2003, 55, 447-466.
【非特許文献６】Chun, Li. “Poly(L-glutamic acid)-anticancer drug conjugates”, Adv. Drug Del. Rev., 2002, 54, 695-713.
【非特許文献７】Wani et al.“Plant antitumor agents.VI. The isolation and structure of taxol, a novel antileukemic and antitumor agent from Taxus brevifolia.” J Am. Chem. Soc., 1971, 93, 2325-7.
【非特許文献８】Sparreboom et al. “Cremophor EL-mediated Alteration of Paclitaxel Distribution in Human Blood: Clinical Pharmacokinetic Implications.”, Cancer Research, 1999, 59, 1454-1457.
【非特許文献９】Constantinides et al. “Formulation Development and Antitumor Activity of a Filter-Sterilizable Emulsion of Paclitaxel”, Pharmaceutical Research 2000, 17, 175-182.
【非特許文献１０】Ruth Duncan, “The Dawning era of polymer therapeutics.”, Nature Reviews Drug Discovery, 2003, 2, 347-360.
【非特許文献１１】Damascelli et al., “Intraarterial chemotherapy with polyoxyethylated castor oil free paclitaxel, incorporated in albumin nanoparticles (ABI-007): Phase II study of patients with squamous cell carcinoma of the head and neck and anal canal: preliminary evidence of clinical activity”,  Cancer, 2001, 92, 2592-602.
【非特許文献１２】Ibrahim et al.,“Phase I and pharmacokinetic study of ABI-007, a Cremophor-free, protein-stabilized, nanoparticle formulation of paclitaxel”, Clin. Cancer Res., 2002, 8, 1038-44.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
しかしながら、既存の製剤は、完全に満足のいくものではなく、ゆえに、パクリタキセル製剤の改善およびそれらを送達する方法について長年にわたる切実な必要性が存在する。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本明細書中に記載されるようなポリマー結合体の実施形態は、癌の治療に使用することができる。肺癌、メラノーマ、腎臓癌、肝臓癌および脾臓癌の治療方法が、本発明の一態様に従って提供される。いくつかの実施形態において、癌に罹患している人が同定され、そしてポリ−（ガンマ−Ｌ−グルタミルグルタミン）（ＰＧＧＡ）およびパクリタキセルを含むポリマー結合体が、その人に投与される。
【００１４】
ポリ−（ガンマ−Ｌ−グルタミルグルタミン）−パクリタキセルポリマー結合体を含む薬学的組成物が、本発明の別の態様に従って提供される。そのポリマー結合体中のＰＧＧＡの分子量は、約５０，０００〜約１００，０００の範囲であり、そのポリマー結合体中のパクリタキセルの重量パーセントは、ポリマー結合体の総重量に対して約２０％〜約５０％の範囲である。
【００１５】
これらおよび他の実施形態は、以下においてより詳細に記載される。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】遊離パクリタキセル（ＰＴＸ）とポリ−（ガンマ−Ｌ−グルタミルグルタミン）−パクリタキセル（ＭＷ＝７０ｋ、ポリマー結合体中のパクリタキセルの重量パーセント＝３５％）（ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５）とを比較する血漿研究の結果を表すグラフを示している。
【００１７】
【図２】遊離パクリタキセル（ＰＴＸ）とポリ−（ガンマ−Ｌ−グルタミルグルタミン）−パクリタキセル（ＭＷ＝７０ｋ、ポリマー結合体中のパクリタキセルの重量パーセント＝３５％）（ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５）とを比較するＮＣＩ−４６０ヒト肺癌モデルにおける腫瘍研究の結果を表すグラフを示している。
【００１８】
【図３】遊離パクリタキセル（ＰＴＸ）とポリ−（ガンマ−Ｌ−グルタミルグルタミン）−パクリタキセルＭＷ＝７０ｋ、ポリマー結合体中のパクリタキセルの重量パーセント＝３５％）（ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５）とを比較する肝臓組織における薬物蓄積研究の結果を表すグラフを示している。
【００１９】
【図４】遊離パクリタキセル（ＰＴＸ）とポリ−（ガンマ−Ｌ−グルタミルグルタミン）−パクリタキセル（ＭＷ＝７０ｋ、ポリマー結合体中のパクリタキセルの重量パーセント＝３５％）（ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５）とを比較する肺組織における薬物蓄積研究の結果を表すグラフを示している。
【００２０】
【図５】遊離パクリタキセル（ＰＴＸ）とポリ−（ガンマ−Ｌ−グルタミルグルタミン）−パクリタキセル（ＭＷ＝７０ｋ、ポリマー結合体中のパクリタキセルの重量パーセント＝３５％）（ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５）とを比較する脾臓組織における薬物蓄積研究の結果を表すグラフを示している。
【００２１】
【図６】遊離パクリタキセル（ＰＴＸ）とポリ−（ガンマ−Ｌ−グルタミルグルタミン）−パクリタキセル（ＭＷ＝７０ｋ、ポリマー中のパクリタキセルの重量パーセント＝３５％）（ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５）とを比較する腎臓組織における薬物蓄積研究の結果を表すグラフを示している。
【００２２】
【図７】遊離パクリタキセル（ＰＴＸ）とポリ−（ガンマ−Ｌ−グルタミルグルタミン）−パクリタキセル（ＭＷ＝７０ｋ、ポリマー中のパクリタキセルの重量パーセント＝３５％）（ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５）とを比較する筋肉における薬物蓄積研究の結果を表すグラフを示している。
【００２３】
【図８】４８時間以内に腎臓によって排出された、遊離パクリタキセル（ＰＴＸ）およびポリ−（ガンマ−Ｌ−グルタミルグルタミン）−パクリタキセル（ＭＷ＝７０ｋ、ポリマー結合体中のパクリタキセルの重量パーセント＝３５％）（ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５）のパーセンテージを表す棒グラフを示している。
【００２４】
【図９】４８時間以内に便中に排泄される、遊離パクリタキセル（ＰＴＸ）およびポリ−（ガンマ−Ｌ−グルタミルグルタミン）−パクリタキセル（ＭＷ＝７０ｋ、ポリマー結合体中のパクリタキセルの重量パーセント＝３５％）（ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５）のパーセンテージを表す棒グラフを示している。
【００２５】
【図１０】Ｂ１６メラノーマモデルにおけるアブラキサン（登録商標）およびポリ−（ガンマ−Ｌ−グルタミルグルタミン）−パクリタキセル（ＭＷ＝７０ｋ、ポリマー結合体中のパクリタキセルの重量パーセント＝３５％）（ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５）の抗腫瘍活性を表すグラフを示している。
【００２６】
【図１１】Ｂ１６メラノーマモデルにおけるアブラキサン（登録商標）およびポリ−（ガンマ−Ｌ−グルタミルグルタミン）−パクリタキセル（ＭＷ＝７０ｋ、ポリマー結合体中のパクリタキセルの重量パーセント＝３５％）（ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５）に対する体重減少のパーセンテージを表すグラフを示している。
【００２７】
【図１２】ヒト非小肺癌モデルにおけるアブラキサン（登録商標）およびポリ−（ガンマ−Ｌ−グルタミルグルタミン）−パクリタキセル（ＭＷ＝７０ｋ、ポリマー結合体中のパクリタキセルの重量パーセント＝３５％）（ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５）の抗腫瘍活性を表すグラフを示している。
【００２８】
【図１３】ヒト非小肺癌モデルにおけるアブラキサン（登録商標）およびポリ−（ガンマ−Ｌ−グルタミルグルタミン）−パクリタキセル（ＭＷ＝７０ｋ、ポリマー結合体中のパクリタキセルの重量パーセント＝３５％）（ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５）に対する体重減少のパーセンテージを表すグラフを示している。
【００２９】
【図１４】ポリ−（γ−Ｌ−グルタミルグルタミン）を調製するための反応スキームを示している。
【００３０】
【図１５】ＰＧＧＡ−ＰＴＸを調製するための一般的な反応スキームを示している。
【発明を実施するための形態】
【００３１】
別段定義されない限り、本明細書中で使用されるすべての技術用語および科学用語は、当業者が通常理解している意味と同じ意味を有する。本明細書中で参照されるすべての特許、出願、公開された出願、および他の刊行物は、別段述べられない限り、その全体が参考として援用される。本明細書中の用語について複数の定義が存在する場合、別段述べられない限り、本項における定義が優先される。
【００３２】
用語「ポリマー結合体」は、その通常の意味において本明細書中で使用され、ＰＴＸなどの生物学的に活性な薬剤または１以上のタイプの薬剤と結合したポリマーを含む。例えば、ＰＧＧＡ−ＰＴＸは、ＰＧＧＡがパクリタキセルに結合しているポリマー結合体である。前記ポリマー（例えば、ＰＧＧＡ）は、他の種（例えば、ＰＴＸ）に直接結合していてもよいし、連結基によって結合していてもよい。前記連結基は、例えば、エステル結合またはアミド結合のような比較的小さい化学部分であってもよいし、例えば、アルキルエステル結合またはアルキレンオキシド結合のようなより大きい化学部分であってもよい。
【００３３】
用語「ポリマー」は、その通常の意味において本明細書中で使用され、様々な分子構造を有するホモポリマーおよびコポリマーの両方を含む。例えば、ＰＧＧＡは、実質的にすべての繰り返し単位がガンマ−Ｌ−グルタミルグルタミン繰り返し単位であるホモポリマーであってもよいし、繰り返し単位のほとんど（例えば、５０モル％超、好ましくは、７０モル％超、より好ましくは、９０モル％超）がガンマ−Ｌ−グルタミルグルタミン繰り返し単位であるコポリマーであってもよい。ＰＧＧＡの繰り返し単位の一部または全部が、塩、例えば、図１４〜１５に示されるようなナトリウム塩の形態でありうる。したがって、ＰＧＧＡに対する本明細書中の記載は、ＰＧＧＡが酸の形態のみならず、繰り返し単位の一部または全部が塩の形態であるＰＧＧＡの形態も含むことが当業者によって理解されるであろう。
【００３４】
いくつかの実施形態は、ポリマー結合体を用いた癌の治療方法を提供する。一般的な用語において、そのような方法は、肺癌、メラノーマ、腎臓癌、肝臓癌および脾臓癌からなる群から選択される癌に罹患している人を同定する工程を含む。そのような同定は、例えば、公知の方法を含み、臨床的診断によるものでありうる。好ましい実施形態において、ＰＧＧＡおよびパクリタキセルを含むポリマー結合体（本明細書中、ＰＧＧＡ−ＰＴＸと称されることがある）が、癌を治療するのに有効な量でその人に投与される。ある特定の実施形態において、ＰＧＧＡ−ＰＴＸ中のＰＧＧＡの分子量は、約５０，０００〜約１００，０００の範囲であり、ＰＧＧＡ−ＰＴＸ中のパクリタキセルの重量パーセントは、ＰＧＧＡ−ＰＴＸの総重量に対して約２０％〜約５０％の範囲である。例えば、例証される実施形態において、ＰＧＧＡの分子量は、約７０，０００であり、かつ／あるいは、ＰＧＧＡ−ＰＴＸ中のパクリタキセルの重量パーセントは、約３５％である。
【００３５】
癌の薬物送達技術における著しい進歩が、本明細書中に開示される。ある実施形態において、その技術は、上述の問題の１以上を克服する能力（例えば、抗癌剤の送達を高める能力）を有する。本発明は、作用理論に拘束されないが、この技術は、高い透過性および／または保持機構などによる１以上の機構を通じてそのような問題を克服すると考えられる。１つの例示的な薬物送達組成物としては、ＰＧＧＡが約７０，０００の分子量を有し、ポリマー結合体中のパクリタキセルの重量パーセントが約３５％であるＰＧＧＡ−ＰＴＸが挙げられ、それは、本明細書中でＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５と称されることがある。本明細書中に記載されるＰＧＧＡ−ＰＴＸ組成物は、例えば、図１４および１５に示されるように、例えば、エステル結合を介して、ＰＴＸをＰＧＧＡに結合体化することによって生成され得る。ＰＧＧＡ−ＰＴＸの形成についての追加の詳細は、特に、そのようなポリマー結合体、ならびにそれらを生成する方法および使用する方法を説明する目的で、ポリグルタメート−アミノ酸結合体および方法（POLYGLUTAMATE-AMINO ACID CONJUGATES AND METHODS）と題される米国公開番号２００７−０１２８１１８（その全体が本明細書によって参考として援用される）に記載されている。いくつかの実施形態において、ＰＧＧＡ−ＰＴＸは、水性の環境においてナノ粒子を自発的に形成する。好都合なことに、ＰＧＧＡ−ＰＴＸ組成物は、静脈注射によって簡便に投与することができる。
【００３６】
癌に罹患している人は、当該分野で公知の手法によって同定することができる。例えば、特定の癌に罹患している人は、当該分野で公知の癌マーカー遺伝子の発現プロファイリングによって同定することができる。組織特異的な癌マーカー遺伝子の発現プロファイリングは、肺組織、皮膚組織、腎臓組織、肝臓組織および／または脾臓組織から得られる組織を用いて行うことができる。組織特異的な癌マーカー遺伝子は、当該分野で公知の方法に従って選択することができる。発現プロファイリングを使用することに加えて、またはそれに代えて、肺癌、皮膚癌、腎臓癌、肝臓癌または脾臓癌を診断するために当業者に公知の臨床的な方法および手順を用いて癌に罹患している人を同定することができる。
【００３７】
ＰＧＧＡ−ＰＴＸは、経口経路または非経口経路を介して、好ましくは、非経口経路を介して、投与されうる。例えば、いくつかの実施形態において、ＰＧＧＡ−ＰＴＸは、注射、例えば、静脈注射によって、その人に投与される。いくつかの実施形態において、ＰＧＧＡ−ＰＴＸは、肺、皮膚、腎臓、肝臓および／または脾臓に局所的に投与される。
【００３８】
いくつかの実施形態において、ＰＧＧＡ−ＰＴＸは、本質的にヒト患者に投与される。他の実施形態において、ＰＧＧＡ−ＰＴＸは、ＰＧＧＡ−ＰＴＸが少なくとも１つの薬学的に適当な成分（例えば、希釈剤、適当なキャリアおよび／または賦形剤）と混合された薬学的組成物の形態で投与される。例えば、薬学的組成物は、注射可能な液体の形態で提供されうる。
【００３９】
特定の患者に適したＰＧＧＡ−ＰＴＸの治療有効量は、その患者の特徴、癌の進行のステージおよび患者が罹患している癌のタイプに左右される。患者が、肺癌、腎臓癌、肝臓癌および／または脾臓癌に罹患していると診断されている場合、ＰＧＧＡ−ＰＴＸは、約４０ｍｇＰＴＸ当量／ｋｇ〜約５５０ｍｇＰＴＸ当量／ｋｇの範囲の用量でその人に有利に投与されうる。患者が、メラノーマに罹患していると診断されている場合、ＰＧＧＡ−ＰＴＸは、約４０ｍｇＰＴＸ当量／ｋｇ〜約３４５ｍｇＰＴＸ当量／ｋｇの範囲の用量でその人に有利に投与されうる。
【００４０】
いくつかの実施形態において、ＰＧＧＡ−ＰＴＸを含む薬学的組成物が提供される。ＰＧＧＡの分子量およびＰＧＧＡ−ＰＴＸ中のＰＴＸの量は、ＰＧＧＡ−ＰＴＸの送達の特徴に影響を与えるがゆえに有効性に影響することが見出されている。ＰＧＧＡ−ＰＴＸ中のＰＧＧＡの分子量は、好ましくは、約５０，０００〜約１００，０００の範囲であり、ＰＧＧＡ−ＰＴＸ中のパクリタキセルの重量パーセントは、好ましくは、ＰＧＧＡ−ＰＴＸの総重量に対して約２０％〜約５０％の範囲である。いくつかの実施形態において、ＰＧＧＡの分子量は、約７０，０００である。他の実施形態において、ＰＧＧＡ−ＰＴＸ中のパクリタキセルの重量パーセントは、約３５％である。さらなる他の実施形態において、ＰＧＧＡの分子量は、約７０，０００であり、ＰＧＧＡ−ＰＴＸ中のパクリタキセルの重量パーセントは、約３５％である。
【００４１】
＜薬学的組成物＞
用語「薬学的組成物」とは、本明細書中に開示される化合物（例えば、ＰＧＧＡ−ＰＴＸ）と他の化学成分（例えば、希釈剤、賦形剤および／またはキャリア）との混合物のことを指す。薬学的組成物は、生物への前記化合物の投与を容易にする。化合物を投与する複数の手法が、当該分野に存在する。化合物を投与する手法としては、経口、注射、エアロゾル、非経口および局所的投与が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４２】
用語「キャリア」とは、細胞または組織への化合物の取り込みを容易にする化学物質のことを指す。例えば、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）は、生物の細胞または組織への多くの有機化合物の取り込みを容易にするので、一般に利用されるキャリアである。
【００４３】
用語「希釈剤」とは、水に希釈される化学物質であり、目的の化合物（例えば、ＰＧＧＡ−ＰＴＸ）を溶解するもの、あるいは目的の化合物の生物学的に活性な形態を安定化するものである。当該分野では、緩衝溶液に溶解された塩が希釈剤として利用される。一般に使用される緩衝溶液の１つは、リン酸緩衝食塩水である。というのも、リン酸緩衝食塩水は、ヒト血液の塩の条件を模倣するからである。緩衝塩は、低濃度で溶液のｐＨを調節可能であるため、緩衝希釈剤は、化合物の生物学的活性をほとんど改変しない。用語「生理的に許容し得る」とは、化合物の生物学的な活性および特性を取り消さないキャリアまたは希釈剤のことを指す。
【００４４】
いくつかの実施形態において、本明細書中に開示される化合物のプロドラッグ、代謝産物、立体異性体、水和物、溶媒和化合物、同質異像および薬学的に許容し得る塩（例えば、ポリマー結合体および／またはそれが構成する薬剤）が提供される。
【００４５】
用語「薬学的に許容し得る塩」とは、投与される生物に対して著しい刺激を引き起こさず、その化合物の生物学的な活性および特性を取り消さない、化合物の塩のことを指す。いくつかの実施形態において、塩は、その化合物の酸付加塩である。薬学的な塩は、化合物を無機酸（例えば、ハロゲン化水素酸（例えば、塩酸または臭化水素酸）、硫酸、硝酸、リン酸など）と反応させることによって得られうる。薬学的な塩は、化合物を有機酸（例えば、脂肪族または芳香族のカルボン酸またはスルホン酸、例えば、酢酸、コハク酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、ニコチン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸またはナフタレンスルホン酸）と反応させることによっても得られうる。薬学的な塩は、化合物を塩基と反応させることにより、塩（例えば、アンモニウム塩、アルカリ金属塩（例えば、ナトリウム塩またはカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウム塩またはマグネシウム塩）、有機塩基の塩（例えば、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミン、Ｃ１−Ｃ７アルキルアミン、シクロヘキシルアミン、トリエタノールアミン、エチレンジアミン）およびアミノ酸（例えば、アルギニン、リシン）との塩などを形成することによっても得られうる。
【００４６】
薬学的処方物の製造において、薬学的賦形剤と塩の形態の活性成分とが本質的に混合すされる場合においては、非塩基性、すなわち、酸性または中性の賦形剤である薬学的賦形剤を使用することが望ましい場合がある。
【００４７】
様々な実施形態において、本明細書中に開示される化合物（例えば、ＰＧＧＡ−ＰＴＸ）は、単独で、本明細書中に開示される他の化合物と併用して、または本明細書中に記載される治療領域で活性な他の薬剤の１以上と併用して、使用することができる。
【００４８】
別の態様において、本開示は、１以上の生理的に許容し得る界面活性剤、キャリア、希釈剤、賦形剤、平滑化剤、懸濁剤、被膜形成物質およびコーティング補助剤、あるいはこれらの組み合わせ、ならびに本明細書中に開示される化合物（例えば、ＰＧＧＡ−ＰＴＸ）を含む薬学的組成物に関する。治療的に使用するための許容し得るキャリアまたは希釈剤は、薬学分野において周知であり、例えば、Remington’s Pharmaceutical Sciences,18th Ed., Mack Publishing Co., Easton, PA (1990)に記載されている（その全体が本明細書中で参考として援用される）。保存剤、安定剤、色素、甘味料、芳香剤、香味料などが、薬学的組成物中に含まれていてもよい。例えば、安息香酸ナトリウム、アスコルビン酸およびｐ−ヒドロキシ安息香酸のエステルが、保存剤として加えられてもよい。さらに、酸化防止剤および懸濁剤を使用してもよい。様々な実施形態において、アルコール、エステル、硫酸化された脂肪族アルコールなどを、界面活性剤として使用してもよく、スクロース、グルコース、ラクトース、デンプン、結晶セルロース、マンニトール、軽質無水ケイ酸塩、アルミン酸マグネシウム、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、合成ケイ酸アルミニウム、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、リン酸水素カルシウム、カルボキシメチルセルロースカルシウムなどを、賦形剤として使用してもよく；ステアリン酸マグネシウム、タルク、硬化油などを、平滑剤として使用してもよく；ヤシ油、オリーブ油、ゴマ油、落花生油、大豆を、懸濁剤または潤滑剤として使用してもよく；セルロースまたは糖などの炭水化物の誘導体としての酢酸フタル酸セルロースまたはポリビニルの誘導体としてのメチルアセテート−メタアクリレートコポリマーを、懸濁剤として使用してもよく；フタル酸エステルなどの可塑剤を、懸濁剤として使用してもよい。
【００４９】
本明細書中に記載されるＰＧＧＡ−ＰＴＸは、ヒト患者にそれ自体を投与することもでき、併用療法においては、ＰＧＧＡ−ＰＴＸが他の活性成分または適当なキャリアもしくは賦形剤と混合された薬学的組成物として投与することもできる。製剤化および投与のための手法は、“Remington’s Pharmaceutical Sciences”,  Mack Publishing Co., Easton, PA, 18th edition, 1990に見出されるであろう。
【００５０】
適当な投与経路としては、例えば、経口、直腸、経粘膜的、局所的または腸管投与、筋肉内、皮下、静脈、髄内注射、ならびに髄腔内、直接的な脳（心）室内、腹腔内、鼻腔内または眼内注射を含む非経口送達が挙げられうる。本化合物（例えば、ＰＧＧＡ−ＰＴＸ）は、所定の速度で、長期にわたっておよび／または指定時間において、パルス投与のための徐放または放出制御の剤形（蓄積注射、浸透圧ポンプ、丸剤、経皮（電気輸送を含む）パッチなどを含む）として投与することができる。
【００５１】
本明細書中に記載される薬学的組成物は、例えば、従来の混合、溶解、造粒、糖衣錠作製、湿式粉砕、乳化、被包、封入または錠剤化のプロセスを用いて、公知の方法で製造されうる。薬学的組成物は、活性な化合物を、薬学的に使用可能な調製物にプロセシングするのを容易にする賦形剤および補助剤を含む１以上の生理的に許容し得るキャリアを用いて、従来の様式で製剤化されうる。適切な製剤化は、選択される投与経路に依存する。周知の手法、キャリアおよび賦形剤のいずれかを、適切かつ当該分野において理解されているように、例えば、上記のRemington’s Pharmaceutical Sciencesにおけるように、使用することができる。
【００５２】
注射可能物は、従来の形態で調製することができ、液体の溶液あるいは懸濁液のいずれでもよく、注射の前は、液体へ溶解あるいは懸濁させるのに適した固体の形態であってもよく、またはエマルジョンとして調整されてもよい。適当な賦形剤は、例えば、水、食塩水、デキストロース、マンニトール、ラクトース、レシチン、アルブミン、グルタミン酸ナトリウム、塩酸システインなどである。さらに、必要に応じて、注射可能な薬学的組成物は、微量の無毒性の補助的物質（例えば、湿潤剤、ｐＨ緩衝剤など）を含んでもよい。生理的に適合性のある緩衝液としては、ハンクス液、リンガー溶液または生理食塩緩衝液が挙げられるが、これらに限定されない。必要に応じて、吸収増強調製物（例えば、リポソーム）を利用してもよい。経粘膜的投与の場合、処方物中に透過される障壁に適切な浸透剤を使用してもよい。例えば、ボーラス注射または持続注入による、非経口投与のための薬学的処方物は、水溶型で活性な化合物の水溶液を含む。さらに、活性な化合物の懸濁液は、適切な油性注射懸濁液として調製されてもよい。適当な脂肪親和性の溶媒またはビヒクルとしては、ゴマ油などの脂肪油もしくは他の有機油（例えば、ダイズ油、グレープフルーツオイルまたはアーモンドオイル）または合成脂肪酸エステル（例えば、オレイン酸エチルまたはトリグリセリド）あるいはリポソームが挙げられる。水性の注射懸濁液は、懸濁液の粘度を増加させる物質（例えば、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、ソルビトールまたはデキストラン）を含み得る。必要に応じて、懸濁液は、適当な安定剤、または化合物の溶解性を高めることで高濃度の溶液の調製を可能とするような薬剤も含んでもよい。注射用の処方物は、例えば、アンプル、または複数回用量の容器の単位剤形で、保存剤が加えられて、存在し得る。それらの組成物は、油性または水性のビヒクルで、懸濁液、溶液またはエマルジョンのような形態をとってもよく、製剤化剤（例えば、懸濁剤、安定化剤および／または分散剤）を含んでもよい。あるいは、活性成分は、粉末の形態で、使用前に適当なビヒクル、例えば、無菌のパイロジェンフリー水を構成するものであってもよい。
【００５３】
経口投与の場合、本化合物は、活性な化合物（例えば、ＰＧＧＡ−ＰＴＸ）を、当該分野で周知の薬学的に許容し得るキャリアと組み合わせることによって容易に製剤化することができる。そのようなキャリアは、本発明の化合物を、治療対象の患者が経口摂取するための錠剤、丸剤、糖衣錠、カプセル、液体、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁液などとしての製剤化を可能にする。経口的に使用するための薬学的調製物は、活性な化合物を固体賦形剤と組み合わせ、必要に応じて、得られる混合物を粉砕し、そして所望により、錠剤または糖衣錠のコアを得るために適当な補助剤を加えた後に顆粒剤の混合物を処理することによって得られうる。適当な賦形剤は、特に、充填剤、例えば、ラクトース、スクロース、マンニトールまたはソルビトールを含む糖；セルロース調製物、例えば、トウモロコシデンプン、コムギデンプン、コメデンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチル−セルロース、カルボキシルメチルセルロースナトリウムおよび／またはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）である。所望により、崩壊剤（例えば、架橋されたポリビニルピロリドン、寒天またはアルギン酸もしくはアルギン酸ナトリウムなどのその塩）を加えてもよい。糖衣錠のコアは、適当なコーティングとともに提供される。この目的のために、アラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、カルボポールゲル、ポリエチレングリコールおよび／または二酸化チタン、ラッカー溶液、ならびに適当な有機溶媒または溶媒混合物を必要に応じて含みうる濃縮された糖溶液を使用してもよい。識別のため、または異なる組み合わせの活性な化合物の用量を特徴づけるために、染料または色素を、錠剤または糖衣錠のコーティングに加えてもよい。この目的のために、アラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、カルボポールゲル、ポリエチレングリコールおよび／または二酸化チタン、ラッカー溶液、ならびに適当な有機溶媒または溶媒混合物を必要に応じて含みうる濃縮された糖溶液を使用してもよい。識別のため、または異なる組み合わせの活性な化合物の用量を特徴づけるために、染料または色素を、錠剤または糖衣錠のコーティングに加えてもよい。
【００５４】
経口的に使用可能な薬学的調製物は、ゼラチンで作製された押し込み型カプセル、ならびにゼラチンおよび可塑剤（例えば、グリセロールまたはソルビトール）で作製された密閉型ソフトカプセルを含む。押し込み型カプセルは、活性成分を、ラクトースなどの充填剤、デンプンなどの結合剤、および／またはタルクもしくはステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤、ならびに必要に応じて安定剤との混合物として含むことができる。ソフトカプセルでは、活性な化合物を、適当な液体（例えば、脂肪油、液体パラフィンまたは液体ポリエチレングリコール）に溶解してもよいし、懸濁してもよい。さらに、安定剤を加えてもよい。経口投与用のすべての処方物が、そのような投与に適した投薬量であるべきである。
【００５５】
頬側投与の場合、組成物は、従来の様式で製剤化された錠剤または舐剤の形態をとりうる。
【００５６】
吸入による投与の場合、本発明に従って使用するための化合物は、適当な噴霧剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素または他の適当なガスを使用した、加圧パックまたは噴霧器からのエアロゾルスプレー調製物の形態で簡便に送達される。加圧エアロゾルの場合、その投薬単位は、計量された量を送達するバルブを提供することによって決定されうる。化合物および適当な粉末基剤（例えば、ラクトースまたはデンプン）の混合粉末を含む、吸入器または注入器において使用するための、例えばゼラチンの、カプセルおよびカートリッジが、製剤化されうる。
【００５７】
眼内、鼻腔内および耳介内送達を含む用途のための、薬学分野において周知である様々な薬学的組成物が、本明細書中にさらに開示される。これらの用途に適した浸透剤は、一般に当該分野で公知である。眼内送達用の薬学的組成物は、点眼剤などの水溶型、またはジェランガム（Shedden et al., Clin. Ther., 23 (3): 440-50 (2001)）もしくはヒドロゲル（Mayer et al., Ophthalmologica, 210 (2): 101-3 (1996)）における活性な化合物の水性の眼科用溶液；眼科用軟膏；微粒子、液体キャリア媒質に懸濁された、薬物を含む小さい重合体粒子などの眼科用懸濁液（Joshi, A., J. Ocul., Pharmacol, 10 (1): 29-45 (1994)）、脂溶性処方物（Alm et al., Prog. Clin. Biol. Res., 312: 447-58 (1989)）およびミクロスフェア（Mordenti, Toxicol. Sci., 52 (1): 101-6 (1999)）；および眼球挿入物を含む。上述の参考文献のすべてが、本明細書中でそれらの全体が参考として援用される。そのような適当な薬学的処方物は、安定性および快適性のために、無菌、等張性、かつ緩衝されて製剤化されることがほとんどであり、かつ好ましい。鼻腔内送達用の薬学的組成物は、液滴およびスプレーも含むことがあるが、それは、しばしば、正常な繊毛作用の維持を確実にするために、多くの点において鼻の分泌を模倣して調製される。Remington著  Pharmaceutical Sciences, 18th Ed., Mack Publishing Co., Easton, PA (1990)（その全体が本明細書中で参考として援用される）に開示されているように、また、当業者に周知のように、適当な処方物は、等張性であり、かつ５．５〜６．５のｐＨを維持するようにわずかに緩衝されていることが最も多く、好ましく、そして、抗菌性の保存剤および適切な薬物安定剤を含むことが最も多く、好ましい。耳介内送達用の薬学的処方物は、耳への局所的適用のための懸濁液および軟膏を含む。そのような耳の処方物に対する通常の溶媒としては、グリセリンおよび水が挙げられる。
【００５８】
本化合物は、坐剤や停留浣腸のような直腸組成物として製剤化されていてもよく、例えば、カカオバターまたは他のグリセリドのような従来の坐剤の基剤が含まれる。
【００５９】
これまでに記載された処方物に加えて、本化合物は、デポー製剤として製剤化されてもよい。そのような長時間作用性の処方物は、埋め込み（例えば、皮下または筋肉内に）によって投与してもよいし、筋肉注射によって投与してもよい。したがって、例えば、本化合物は、適当な重合体材料もしくは疎水性材料（例えば、許容し得る油のエマルジョンとして）またはイオン交換樹脂を用いて、あるいは難溶性誘導体、例えば、難溶性塩とともに、製剤化されてもよい。
【００６０】
疎水性化合物の場合、適当な薬学的キャリアは、ベンジルアルコール、非極性の界面活性物質、水混和性の有機ポリマーおよび水相を含む共溶媒系でありうる。よく使用される共溶媒系は、ＶＰＤ共溶媒系である。これは、無水エタノールの体積に対して、３％ｗ／ｖのベンジルアルコール、８％ｗ／ｖの非極性界面活性物質ポリソルベート８０（Polysorbate80ＴＭ）、および６５％ｗ／ｖのポリエチレングリコール３００の溶液であって、無水エタノールで体積を補充したものである。当然のことながら、溶解性および毒性の特徴を損なわない範囲で共溶媒系の比率を相当に変動させてもよい。さらに、共溶媒の構成要素を変更することもできる。例えば、ポリソルベート８０ＴＭの代わりに他の低毒性で非極性の界面活性物質を使用することもでき、ポリエチレングリコールの割合を代えてもよく、ポリエチレングリコールを他の生体適合性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドンに置き換えてもよく、デキストロースに代えて、他の糖または多糖を用いてもよい。
【００６１】
あるいは、疎水性の薬学的化合物に対する他の送達系を使用してもよい。リポソームおよびエマルジョンは、疎水性薬物のための送達ビヒクルまたはキャリアの周知の例である。一般に毒性がより高いとの代償を有するが、ジメチルスルホキシドなどの特定の有機溶媒も使用することができる。さらに、それらの化合物は、治療薬を含む固体の疎水性ポリマーの半透性マトリックスなどの徐放系を用いて送達されてもよい。様々な徐放材料が、確立されており、当業者に周知である。徐放カプセルは、その化学的性質に応じて、数時間または数週間から最大１００日間にわたって化合物を放出することがある。治療的試薬の化学的性質および生物学的安定性に応じて、タンパク質安定化のための追加のストラテジーを用いてもよい。
【００６２】
細胞内への投与が意図された薬剤は、当業者に周知の手法を用いて投与されうる。例えば、そのような薬剤は、リポソーム内に被包されうる。水溶液中に存在するすべての分子が、リポソーム形成時にリポソームの水性の内部に組み込まれる。リポソームの内容物は、外側の微小環境から保護され、かつ、リポソームが細胞膜と融合するので、細胞質に効率的に送達される。リポソームは、組織特異的抗体でコーティングされてもよい。リポソームは、所望の器官に対して標的化され、その所望の器官に選択的に取り込まれる。あるいは、小さい疎水性の有機分子を、細胞内に直接投与してもよい。
【００６３】
追加の治療用または診断用の薬剤を薬学的組成物に組み込んでもよい。それに代えて、あるいはそれに加えて、薬学的組成物に、他の治療用または診断用の薬剤を含む他の組成物を組み合わせてもよい。
【００６４】
＜投与の方法＞
本化合物または薬学的組成物は、任意の適当な手段によって患者に投与されうる。投与の方法の非限定的な例としては、とりわけ、（ａ）経口経路を介する投与（カプセル、錠剤、顆粒剤、スプレー、シロップ剤または他のそのような形態での投与を含む）；（ｂ）非経口経路（例えば、直腸、膣、尿道内、眼内、鼻腔内または耳介内）を介する投与（水性懸濁液、油性調製物などとして、または点滴、スプレー、坐剤、軟膏（ｓａｌｖｅ）、軟膏（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）などとしての投与を含む）；（ｃ）皮下、腹腔内、静脈内、筋肉内、皮内、眼窩内、嚢内、髄腔内、胸骨内などへの、輸液ポンプ送達を含む注射を介する投与；（ｄ）局所的な投与（例えば、デポーの埋め込みによる腎臓または心臓の領域への直接的な注射による投与）；ならびに（ｅ）活性な化合物を生組織と接触させるために当業者が適切と考えるような局所的な投与が挙げられる。
【００６５】
投与に適した薬学的組成物は、活性成分（例えば、ＰＴＸ）を、その意図される目的を達成するのに有効な量で含んでいる組成物を含む。用量として必要とされる本明細書中に開示される化合物の治療有効量は、投与経路、治療対象の動物のタイプ（ヒトを含む）、および検討中の特定の動物の身体的特徴に左右される。その用量は、所望の効果を達成するように調整し得るが、体重、食餌、併用の薬剤等の因子、および医学分野の当業者が認識する他の因子に左右される。より詳細には、治療有効量とは、疾患の症状を予防するか、軽減するか、もしくは回復させるか、または治療対象の被験体の生存時間を延長するのに有効な化合物の量のことを意味する。治療有効量の決定は、特に、本明細書中に提供される詳細な開示に鑑みて、十分に当業者能力の範囲内である。
【００６６】
当業者に容易に明らかになるように、有用なインビボ投薬量および特定の投与方法は、年齢、体重および治療対象の哺乳動物種、使用される特定の化合物、ならびにこれらの化合物が使用される特定の用途に応じて変化する。有効な投薬量レベル、すなわち所望の結果を達成するために必要な投薬量レベルは、通例の薬理学的方法を用いて当業者によって決定されうる。典型的には、ヒトへの生成物の臨床適用は、より低い投薬量レベルで開始され、所望の効果が達成されるまで、投薬量レベルを増加させる。あるいは、許容し得るインビトロ研究を用いて、確立された薬理学的方法を適用することで、本方法による組成物の有用な用量および投与経路を確立することができる。
【００６７】
非ヒト動物研究では、有望な生成物の適用は、より高い投薬量レベルで開始され、所望の効果が達成されなくなるまで、または有害な副作用が消失するまで、投薬量を減少させる。投薬量は、所望の効果および治療指標に応じて、広範な範囲にわたる場合がある。典型的には、投薬量は、約１０μｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは、約１００μｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ体重でありうる。あるいは、投薬量は、当業者によって理解されるように、患者の表面積に基づき、算出されてもよい。
【００６８】
本発明の薬学的組成物に対する正確な処方、投与経路および投薬量については、患者の状態を考慮して個別の医師が選択することができる（例えば、Fingl et al., 1975, “The Pharmacological Basis of Therapeutics”（これにより本明細書中でその全体が参考として援用される）特に、第１章第１頁を参照のこと）。典型的には、患者に投与される組成物の用量の範囲は、約０．５〜１０００ｍｇ／ｋｇ患者体重でありうる。投薬は、１回であってもよいし、患者が必要とするときは１日以上にわたって投与される一続きの２回以上であってもよい。化合物のヒトへの投薬量が、少なくともいくつかの状態に対して確立されている場合、本発明は、そのいくつかの投薬量、またはその確立されたヒトへの投薬量の約０．１％〜５００％、より好ましくは、約２５％〜２５０％の投薬量を適用し得る。新しく発見された薬学的組成物に対する場合のように、ヒトへの投薬量が確立されていない場合、適当なヒトへの投薬量は、ＥＤ５０もしくはＩＤ５０値、または動物での毒性研究および有効性研究によって適切とされたインビトロもしくはインビボ研究から得られた他の適切な値から推論することができる。
【００６９】
毒性または器官の機能不全に起因して、主治医が投与を終了するか、中断するか、または調整する方法および時を承知しているだろうことに注意されるべきである。逆に、主治医は、臨床反応が適切でない場合に、処置をより高いレベルに調整しなければならないことも承知しているだろう（毒性の防止）。目的の障害の管理において投与される用量の規模は、処置される状態の重症度および投与経路によって変動しうる。状態の重症度は、例えば、標準的な予後評価方法によって部分的に評価されることがある。さらに、用量およびおそらく投薬頻度もまた、個別の患者の年齢、体重および反応に従って変動しうる。上で考察されたプログラムに相当するプログラムを、獣医学において使用してもよい。
【００７０】
正確な投薬量は、薬物ごとに決定されるが、ほとんどの場合において、その投薬量に関して、ある程度一般化することができる。成人ヒト患者に対する１日の投薬計画は、例えば、０．１ｍｇ〜２０００ｍｇ、好ましくは、１ｍｇ〜５００ｍｇ、例えば、５〜２００ｍｇの各活性成分の経口用量でありうる。他の実施形態において、０．０１ｍｇ〜１００ｍｇ、好ましくは、０．１ｍｇ〜６０ｍｇ、例えば、１〜４０ｍｇの各活性成分の静脈内、皮下または筋肉内用量が採用される。薬学的に許容し得る塩を投与する場合、投薬量は、遊離塩基として算出されてもよい。いくつかの実施形態において、本組成物は、１日あたり１〜４回投与される。あるいは、連続的な静脈内注入によって、好ましくは、１日あたり最大１０００ｍｇの各活性成分の用量で本発明の組成物を投与してもよい。当業者によって理解されるように、ある特定の状況では、特に侵攻性の疾患または感染症を効果的および積極的に治療するために、上述の好ましい投薬量の範囲を超える、あるいははるかに超える量で、本明細書中に開示される化合物を投与することが必要な場合がある。いくつかの実施形態において、それらの化合物は、連続的な治療の期間、例えば、１週間もしくはそれ以上、または数ヶ月もしくは数年にわたって投与される。
【００７１】
投薬の量および間隔は、調節効果、あるいは最小有効濃度（ＭＥＣ）を維持するのに十分な血漿中濃度を活性な部位へもたらすように、個別に調整されてもよい。ＭＥＣは、化合物ごとに異なるが、インビトロデータから推定することができる。ＭＥＣを達成するために必要な投薬量は、個体の特徴および投与経路に左右される。しかしながら、ＨＰＬＣアッセイまたはバイオアッセイを用いることで、血漿中濃度を決定し得る。
【００７２】
投薬の間隔もまた、ＭＥＣ値を用いて決定し得る。組成物は、その時間の１０〜９０％、好ましくは、３０〜９０％、最も好ましくは、５０〜９０％にわたってＭＥＣを超える血漿中濃度を維持する投与計画により投薬されるべきである。
【００７３】
局所投与または選択的取り込みの場合、薬物の有効な局所濃度は、血漿中濃度に関係しない場合がある。
【００７４】
投与される組成物の量は、治療対象の被験体、被験体の体重、苦痛の重症度、投与様式および処方する医師の判断に左右される場合がある。
【００７５】
公知の方法を用いて、本明細書中に開示される化合物（例えば、ポリマー結合体および／またはそれが構成する薬剤）を有効性および毒性について評価することができる。例えば、特定の化合物、またはある特定の化学部分を共有する化合物のサブセットの毒性は、インビトロで細胞株（例えば、哺乳動物、好ましくは、ヒトの細胞株）に対する毒性を決定することによって確立される場合がある。そのような研究の結果は、しばしば、動物（例えば、哺乳動物、またはより詳細には、ヒト）に対する毒性を予測する。あるいは、公知の方法を用いて、動物モデル（例えば、マウス、ラット、ウサギまたはサル）における特定の化合物の毒性を決定してもよい。特定の化合物の有効性は、いくつかの認められている方法（例えば、インビトロ方法、動物モデルまたはヒト臨床試験）を用いて、確立してもよい。ほぼすべてのクラスの状態（癌、循環器疾患および様々な免疫機能不全が挙げられるがこれらに限定されない）に対して、広く知られたインビトロモデルが存在する。同様に、許容し得る動物モデルを用いることにより、そのような状態を治療するための化学物質の有効性を確立することもできる。有効性を決定するモデルを選択するとき、当業者は、適切なモデル、用量および投与経路ならびに投与計画を、先端技術によって導かれて、選択することができる。当然のことながら、ヒトに対する臨床試験を用いることで、ヒトに対する化合物の有効性を判定することもできる。
【００７６】
本組成物は、必要に応じて、活性成分を含む１以上の単位剤形を含みうるパックまたはディスペンサー装置として存在してもよい。パックは、例えば、金属箔またはプラスチック箔（例えば、ブリスター包装）を含みうる。パックまたはディスペンサー装置は、投与のための指示書が添付されている場合がある。そのパックまたはディスペンサーには、医薬品の製造、使用または販売を規制する行政機関が定める形態で、警告が容器に添付されていることがあるが、その警告は、ヒトまたは動物に投与するための薬物の形態の、機関による承認を表すものである。そのような警告は、例えば、処方薬に対して米国食品医薬品局によって承認されたラベル、または承認された製品の挿入文書でありうる。適合性の薬学的キャリア中に製剤化された本発明の化合物を含む組成物もまた、調製され、適切な容器に入れられ、示されている状態の処置に関するラベルが付される場合がある。
【００７７】
薬学的組成物の最大耐用量（ＭＴＤ）に基づいて、投薬量を調節してもよい。例えば、ＰＧＧＡ−ＰＴＸのＭＴＤは、腫瘍を有さないヌードマウスおよび腫瘍を有するヌードマウスで評価することができる。ＰＧＧＡ−ＰＴＸの治療有効性は、ヒトＮＳＣＬＣ（ＮＣＩ−Ｈ４６０）の異種移植片モデルで評価することができ、アブラキサン（登録商標）と比較することができる。ＰＧＧＡ−ＰＴＸの好ましい処方物は、食塩水に易溶性である（５０ｍｇ／ｍｌ）。下記の実施例に示されるように、ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５の複数回の注射による処置（ｑ７ｄｘ２、ｉ．ｖ．）は、それぞれのＭＴＤまたは対応する用量レベルにおいて、アブラキサン（登録商標）よりも優れた抗腫瘍活性を示した（Ｐ＝０．００８）。さらに、ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５は、アブラキサン（登録商標）に比して１３６％の腫瘍成長遅延（ＴＧＤ）を引き起こした。これらの観察結果から、ＰＧＧＡ−ＰＴＸ（好ましくは、約５０，０００〜約１００，０００の範囲のＰＧＧＡ分子量および約２０％〜約５０％の範囲のＰＴＸ重量パーセントを有する）が、他の抗癌薬送達系が遭遇する毒性問題に対する解決を提供し得ることが示唆される。さらに、ＰＧＧＡ−ＰＴＸは、動物に対して、より多い投薬量の薬物の送達を可能にし得るが、これによって優れた抗癌性の治療効率をもたらし得る。
【００７８】
下記の実施例では、皮下にＮＣＩ−Ｈ４６０肺癌異種移植片を有するマウスに、静脈内ボーラス注射として［３Ｈ］ＰＧＧＡ７０ｋ−［３Ｈ］ＰＴＸ３５を４０ｍｇＰＴＸ当量／ｋｇの用量で投与した。血漿、腫瘍および主要な器官のサンプルを３４０時間まで間隔をおいて回収した。血漿中および消化された組織サンプル中での［３Ｈ］−ＰＴＸを、液体シンチレーション測定法によって定量した。非コンパートメントモデルを使用するＷｉｎＮｏｎｌｉｎソフトウェアを用いて、薬物動態学的パラメータを推定した。
【００７９】
図１および２は、それぞれ血漿および腫瘍の研究結果を示すグラフであり、ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５と遊離パクリタキセル（ＰＴＸ）とを比較している。血漿では、［３Ｈ］ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５および［３Ｈ］ＰＴＸに対するＡＵＣｌａｓｔは、それぞれ３，４５４μｇ時／ｍｌおよび１４６μｇ時／ｍｌであり、Ｃｍａｘ値は、それぞれ５１７μｇ時／ｍｌおよび６０μｇ／ｍｌであった。すなわち、等量のＰＴＸを投与する場合、ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５を使用することにより、ＡＵＣｌａｓｔは２３．６倍、Ｃｍａｘは８．５倍に増加した。［３Ｈ］ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５の平均消失半減期（mean terminal half-life）は、２９６時間であったのに対し、［３Ｈ］では、５９．９時間であった。さらに、［３Ｈ］ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５と［３Ｈ］ＰＴＸの両方が、十分灌流された組織に急速に分配された。腫瘍組織では、［３Ｈ］ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５および［３Ｈ］ＰＴＸに対するＡＵＣｌａｓｔは、それぞれ２，４９６μｇ時／ｍｌおよび３２３μｇ時／ｍｌであり、Ｃｍａｘ値は、それぞれ１７μｇ／ｍｌおよび８．３μｇ／ｍｌであった。すなわち、等量のＰＴＸを投与する場合、ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５を使用することにより、腫瘍におけるＡＵＣｌａｓｔは７．７倍、Ｃｍａｘは２．１倍に増加した。腫瘍組織における［３Ｈ］ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５および［３Ｈ］ＰＴＸの消失半減期は、それぞれ１０７時間および５１時間であった。さらに、［３Ｈ］ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５および［３Ｈ］ＰＴＸの分布容積は、それぞれ４８９７６ｍＬ／ｋｇおよび２３１６７ｍＬ／ｋｇであった。表１および２は、［３Ｈ］ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５および［３Ｈ］ＰＴＸに対する血漿および腫瘍薬物動態をまとめたものである。
【００８０】
【表１】
2011513412.tif 000002
【００８１】
【表２】
2011513412.tif 000003
【００８２】
ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５が腫瘍へのＰＴＸの送達を増加させる能力は、ＮＣＩ−Ｈ４６０肺癌異種移植片モデルにおける抗腫瘍活性および治療指数の実質的な増加と関連していた。さらに、ＰＴＸをＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５ポリマーに組み込むことによって、血漿と腫瘍の両区画においてＰＴＸの半減期が有意に長くなった。このことにより、腫瘍に送達されたＰＴＸの量が７．７倍増加したが、これは、腫瘍成長遅延により測定される有効性の大幅な増加と関連していた。
【００８３】
図３〜７および表３は、ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５およびＰＴＸに対する、様々な器官での薬物蓄積研究の結果を提供している。ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５は、肝臓、肺、腎臓および脾臓においてより一層安定である。投与の４８時間後、かなりの量のＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５が、上記の器官で保持されていた。例えば、投与の４８時間後、肝臓には約２３０μｇ／ｇのＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５が、肺には４０μｇ／ｇのＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５が、腎臓には６０μｇ／ｇのＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５が、そして脾臓には１６０μｇ／ｇのＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５が残存していた。対照的に、投与の４８時間後、上記の器官に保持されていた遊離ＰＴＸは、より一層少ない量であり、上記のすべての器官において、投与の４８時間後に存在していたＰＴＸ量は２μｇ／ｇ未満であった。これらの結果から、ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５は、肝臓、肺、腎臓および脾臓において遊離ＰＴＸよりも有効な抗癌薬であることが示唆される。
【００８４】
【表３】
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【００８５】
図８および図９は、ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５および遊離パクリタキセル（ＰＴＸ）のパーセンテージを示す棒グラフであり、それぞれ４８時間以内に腎臓によって排泄されたもの、および４８時間以内に便中に排出されたものを示している。図８および９に示されるように、ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５は、注射後に分解され、腎臓によって排泄された（尿）。推定される４８時間における尿中排泄の合計は、ＰＴＸで２３．５％、ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５で１３．９％であった。ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５とＰＴＸの両者において、投与された用量のかなりの割合が便中に回収された。３［Ｈ］−ＰＴＸを注射されたマウスでは、化合物のおよそ７２％が、最初の４８時間以内に便中に検出された。比較すると、［３Ｈ］ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５を注射されたマウスについては、同じ４８時間で、組成物の３６％しか便中に検出されなかった。これらの結果から、所与の時間において、ＰＴＸに比して、より多い量のＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５由来の薬物が、体内に留まることが示唆される。これらの結果は、上で考察された体内分布の結果と一致しており、ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５が、肝臓、肺、腎臓および脾臓においてＰＴＸよりも有効な抗癌薬であることがさらに確かめられる。さらに、これらの結果から、ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５が、血液循環および全身の系において分解されうることが示唆される。
【００８６】
図１０は、ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５のＢ１６メラノーマに対する抗腫瘍成長活性を、アブラキサン（登録商標）と比較したものである。アブラキサン（登録商標）投与に供されたマウスに比してＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５投与に供されたマウスの腫瘍体積は、有意に減少した。図１１は、ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５の毒性とアブラキサン（登録商標）の毒性を比較しており、体重減少のパーセンテージが示すように、ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５とアブラキサン（登録商標）とが、マウスに対して同様の毒性を有することを示している。図１２および１３は、肺癌を有するマウスに対する抗腫瘍活性および毒性について、ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５とアブラキサン（登録商標）とを比較した結果を示している。これらの図に示されているように、ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５は、アブラキサン（登録商標）よりも強い抗腫瘍活性を有する。これらの結果から、ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５が、アブラキサン（登録商標）よりも良好な抗腫瘍性薬物であることが示唆される。
【実施例】
【００８７】
以下の実施例は、本明細書中に記載される実施形態をさらに説明する目的で提供されるものであり、本発明の範囲を限定するものではない。
【００８８】
［材料］
様々な分子量（多角度光散乱（ＭＡＬＳ）による平均分子量が、４１，４００（ＰＧＡ（９７ｋ））、１７，６００（ＰＧＡ（４４ｋ））、１６，０００（ＰＧＡ（３２ｋ））および１０，９００（ＰＧＡ（２１ｋ））ダルトン）を有するポリ−Ｌ−グルタミン酸ナトリウム塩；１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）；Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）；ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）；ピリジン；４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）；Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）；酢酸ガドリニウム；クロロホルム；および炭酸水素ナトリウムは、Sigma-Aldrich Chemical社から購入した。２Ｎ塩酸溶液を用いて、ポリ−Ｌ−グルタメートをポリ−Ｌ−グルタミン酸に変換した。トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）は、Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅから購入した。OmniscanＴＭ（ガドジアミド）は、GE healthcareから購入した。
【００８９】
１Ｈ  ＮＭＲは、Joel（４００ＭＨｚ）から得たものであり、粒径は、ZetalPals（Brookhaven Instruments社)によって測定した。マイクロ波化学は、Ｂｉｏｔａｇｅ装置で行った。ポリマーの分子量は、多角度光散乱（ＭＡＬＳ）（Wyatt Corporation）検出器と組み合わされたサイズ排除クロマトグラフィ（ＳＥＣ）によって測定した。
＜ＳＥＣ−ＭＡＬＳ解析条件＞
・ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ１２００
・カラム：          Ｓｈｏｄｅｘ  ＳＢ８０６Ｍ  ＨＱ
（プルランに対する排除限界：２０，０００，０００、粒径：１３ミクロン、サイズ（ｍｍ）ＩＤ×長さ：８．０×３００）
・移動相：          １×ＤＰＢＳまたはＤＰＢＳ中の１％ＬｉＢｒ（ｐＨ７．０）
・流速：            １ｍｌ／分
・ＭＡＬＳ検出器：  Ｗｙａｔｔ製  ＤＡＷＮ  ＨＥＬＥＯＳ
・ＤＲＩ検出器：    Ｗｙａｔｔ製  Ｏｐｔｉｌａｂ  ｒＥＸ
・オンライン粘度計：Ｗｙａｔｔ製  ＶｉｓｃｏＳｔａｒ
・ソフトウェア：    Ｗｙａｔｔ製  ＡＳＴＲＡ  ５．１．９
・サンプル濃度：    １〜２ｍｇ／ｍｌ
・注入体積：        １００μｌ
ポリマーのｄｎ／ｄｃ値：この測定では０．１８５を用いた。
実際のサンプルを実行する前に、ＢＳＡをコントロールとして用いた。
【００９０】
上記のシステムおよび条件（本明細書中では以後、ＭＡＬＳ検出器を備えたＨｅｌｅｏｓシステムと呼ぶ）を用いて実験的に測定したところ、出発ポリマー（ＭＡＬＳを備えたシステムを用いてSigma-Aldrichによって報告されている平均分子量が、それぞれ４１，４００、１７，６００、１６，０００および１０，９００ダルトンのポリ−Ｌ−グルタミン酸ナトリウム塩）の平均分子量は、それぞれ４９，０００、１９，８００、１９，４５０および９，４００ダルトンであった。
【００９１】
メタノール中の既知濃度のパクリタキセルを用いて作成された検量線に基づいて、ポリマー−パクリタキセル結合体中のパクリタキセルの含有量を、紫外／可視分光光度計（Lambda Bio 40,PerkinElmer）によって推定した（λ＝２２８ｎｍ）。
【００９２】
［実施例１］
図１４および１５に示される一般的なスキームに従って、ＰＧＧＡ−ＰＴＸを調製した。
【００９３】
まず、図１４に示される一般的なスキームに従って、ポリ−（γ−Ｌ−グルタミル−グルタミン）を調製した。
【００９４】
ＭＡＬＳ検出器を備えたＨｅｌｅｏｓシステムによる平均分子量が１９，８００ダルトンであるポリグルタミン酸ナトリウム塩（０．４０ｇ）、ＥＤＣ（１．６０ｇ）、ＨＯＢｔ（０．７２ｇ）およびＨ−ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−（ＯｔＢｕ）−ＨＣｌ（１．５１ｇ）を、ＤＭＦ（３０ｍＬ）中で混合した。反応混合物を室温で１５〜２４時間撹拌し、次いで、蒸留水溶液（２００ｍＬ）に注ぎ込んだ。生じた白色沈殿物を濾過し、水で洗浄した。次いで、その中間体ポリマーをフリーズドライした。１Ｈ−ＮＭＲで、Ｏ−ｔＢｕ基由来の１．４ｐｐｍにおけるピークの存在から、中間体ポリマーの構造が確認された。
【００９５】
その中間体ポリマーをＴＦＡ（２０ｍＬ）で５〜８時間処理した。次いで、ＴＦＡを回転蒸発によって部分的に除去した。残渣に水を加え、その残渣を、半膜セルロース（カットオフ分子量１０，０００ダルトン）を用いて、逆浸透水（４回水を交換）で一晩透析した。透析後のポリ−（γ−Ｌ−グルタミル−グルタミン）は、ｐＨ７の水中で透明であった。凍結乾燥後、ポリ−（γ−Ｌ−グルタミル−グルタミン）（０．６ｇ）が白色粉末として得られた。１Ｈ−ＮＭＲでＯ−ｔＢｕ基由来の１．４ｐｐｍにおけるピークが消失していることから、ポリマーの構造が確認された。ポリ−（γ−Ｌ−グルタミル−グルタミン）の平均分子量を測定したところ、３８，３９０ダルトンであった。
【００９６】
次いで、図１５に示される一般的なスキームに従って、ＰＧＧＡ−ＰＴＸを調製した。
【００９７】
平均分子量１１０，８００ダルトンのポリ−（γ−Ｌ−グルタミル−グルタミン）（１．０ｇ）を、ＤＭＦ（５５ｍＬ）に部分的に溶解した。その混合物にＥＤＣ（６００ｍｇ）およびパクリタキセル（２８２ｍｇ）をそれぞれ加えた。混合物に触媒として作用するＤＭＡＰ（３００ｍｇ）を加えた。反応混合物を室温で１日間撹拌した。反応の完了をＴＬＣによって確かめた。混合物を、０．２Ｎの希塩酸溶液（３００ｍＬ）に注ぎ込んだ。生じた沈殿物を１０，０００ｒｐｍで遠心分離後に回収した。次いで、残渣を炭酸水素ナトリウム溶液０．５Ｍ  ＮａＨＣＯ３溶液に再溶解した。そのポリマー溶液を、逆浸透水（４回水を交換する）中のセルロース膜（カットオフ１０，０００ダルトン）を用いて１日間、脱イオン水中で透析した。澄んだ溶液が得られ、これをフリーズドライした。ＰＧＧＡ−ＰＴＸ（１．１ｇ）が得られたことを１Ｈ  ＮＭＲによって確認した。紫外分光法により測定したＰＧＧＡ−ＰＴＸ中のパクリタキセルの含有量は、重量に対して２０重量％であった。
【００９８】
［実施例２］  薬物動態
複数の雌ｎｕ／ｎｕマウスのそれぞれの肩およびそれぞれの臀部に、組織培養で生育された４×１０６ヒト肺癌ＮＣＩ−Ｈ４６０細胞をＳＣ接種した（ＲＰＭＩ１６４０培地中４×１０７細胞／ｍＬ，注射体積０．１ｍｌ）。集団全体の平均腫瘍体積が４００〜５００ｍｍ３（直径９〜１０ｍｍ）に達した時に、各マウスに、３Ｈ標識ＰＴＸまたはＰＧＧＡ−［３Ｈ］ＰＴＸをＩＶボーラス注射により１回で投与した。［３Ｈ］ＰＴＸおよびＰＧＧＡ−［３Ｈ］ＰＴＸのいずれも、投与量は４０ｍｇＰＴＸ当量／ｋｇであった。各薬物について、６匹のマウスの群を様々な時点で麻酔し、心臓穿刺によって得られた０．３ｍｌの血液を、ヘパリン処理されたチューブに回収した。その後、麻酔から回復する前にマウスを屠殺し、それぞれの固体から、以下の組織、すなわち４つの腫瘍、肺、肝臓、脾臓、両方の腎臓、骨格筋および心臓を採取し、凍結させた。ＩＶボーラス注射が終わった後、０時間（すなわち、ＩＶ注射後できるだけ早く）、０．１６６時間、０．５時間、１時間、２時間、４時間、２４時間、４８時間、９６時間、１４４時間、２４０時間および３４０時間の時点にマウスを屠殺した。各薬物について、合計７２匹のマウスが必要であった（マウス６匹／時点、１２の時点）。
【００９９】
［実施例３］  癌研究
ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５は、食塩水に易溶性であった（５０ｍｇ／ｍｌ）。ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５の最大耐用量（ＭＴＤ）を、腫瘍を有さないヌードマウスおよび腫瘍ヌードマウス（Charles River，マサチューセッツ州）で評価した。ＮＣＩ−Ｈ４６０非小細胞肺癌異種移植片モデルとマウスＢ１６メラノーマモデルの両方で、アブラキサン（ABI，カリフォルニア州）と比較したＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５の治療有効性を評価した。Ｂ１６メロノーマまたはヒト肺癌を有する無胸腺マウスに対する、ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５の抗腫瘍成長活性およびＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５の毒性を、表４および５ならびに図１０〜１３に示す。
【０１００】
【表４】
2011513412.tif 000005
【０１０１】
【表５】
2011513412.tif 000006
【０１０２】
数多くの改変および様々な改変が、本発明の精神から逸脱することなく行われうることが、当業者によって理解されるであろう。それゆえ、本発明の形態は、単なる例示であり、本発明の範囲の限定を意図するものではないことが明確に理解されるべきである。
【図８】
2011513412.tif 000007
【図１】
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【図２】
2011513412.tif 000009
【図３】
2011513412.tif 000010
【図４】
2011513412.tif 000011
【図５】
2011513412.tif 000012
【図６】
2011513412.tif 000013
【図７】
2011513412.tif 000014
【図９】
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【図１０】
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【図１１】
2011513412.tif 000017
【図１２】
2011513412.tif 000018
【図１３】
2011513412.tif 000019
【図１４】
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【図１５】
2011513412.tif 000021
【手続補正書】
【提出日】平成23年1月11日(2011.1.11)
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００９】
タイヘイヨウイチイの木の樹皮から抽出されたパクリタキセル（ＰＴＸ）（非特許文献７）は、卵巣癌および乳癌の治療のためにＦＤＡに承認された薬物である。パクリタキセルは、生態学的利用能が低いとの難点があると考えられている。パクリタキセルをＣｒｅｍｏｐｈｏｒ−ＥＬと無水エタノールとの混合物（１：１，ｖ／ｖ）中に製剤化することをはじめとした、生態学的利用能を改善するためのアプローチが試みられた（非特許文献８）。この製剤は、現在、タキソール（Taxol、登録商標）（Bristol-Myers Squibb）として商品化されている。しかしながら、このビヒクルは、有効な薬物レベルの送達が不適切であり、高い毒性を生じる。パクリタキセルのタキソールＴＭブランドは、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）での臨床的有効性が証明されているが、急性過敏症反応および末梢神経障害を含む重篤な副作用を引き起こす。 
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２７】
【図１２】ヒト非小細胞肺癌モデルにおけるアブラキサン（登録商標）およびポリ−（ガンマ−Ｌ−グルタミルグルタミン）−パクリタキセル（ＭＷ＝７０ｋ、ポリマー結合体中のパクリタキセルの重量パーセント＝３５％）（ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５）の抗腫瘍活性を表すグラフを示している。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２８】
【図１３】ヒト非小細胞肺癌モデルにおけるアブラキサン（登録商標）およびポリ−（ガンマ−Ｌ−グルタミルグルタミン）−パクリタキセル（ＭＷ＝７０ｋ、ポリマー結合体中のパクリタキセルの重量パーセント＝３５％）（ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５）に対する体重減少のパーセンテージを表すグラフを示している。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９５】
その中間体ポリマーをＴＦＡ（２０ｍＬ）で５〜８時間処理した。次いで、ＴＦＡを回転蒸発によって部分的に除去した。残渣に水を加え、その残渣を、半透膜セルロース（カットオフ分子量１０，０００ダルトン）を用いて、逆浸透水（４回水を交換）で一晩透析した。透析後のポリ−（γ−Ｌ−グルタミル−グルタミン）は、ｐＨ７の水中で透明であった。凍結乾燥後、ポリ−（γ−Ｌ−グルタミル−グルタミン）（０．６ｇ）が白色粉末として得られた。１Ｈ−ＮＭＲでＯ−ｔＢｕ基由来の１．４ｐｐｍにおけるピークが消失していることから、ポリマーの構造が確認された。ポリ−（γ−Ｌ−グルタミル−グルタミン）の平均分子量を測定したところ、３８，３９０ダルトンであった。 
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９９】
［実施例３］  癌研究
ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５は、食塩水に易溶性であった（５０ｍｇ／ｍｌ）。ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５の最大耐用量（ＭＴＤ）を、腫瘍を有さないヌードマウスおよび腫瘍ヌードマウス（Charles River，マサチューセッツ州）で評価した。ＮＣＩ−Ｈ４６０非小細胞肺癌異種移植片モデルとマウスＢ１６メラノーマモデルの両方で、アブラキサン（ABI，カリフォルニア州）と比較したＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５の治療有効性を評価した。Ｂ１６メラノーマまたはヒト肺癌を有する無胸腺マウスに対する、ＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５の抗腫瘍成長活性およびＰＧＧＡ７０Ｋ−ＰＴＸ３５の毒性を、表４および５ならびに図１０〜１３に示す。 
【手続補正７】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
癌を治療するための薬学組成物であって、有効な量のポリマー結合体を含み、
前記ポリマー結合体は、ポリ−（ガンマ−Ｌ−グルタミルグルタミン）（ＰＧＧＡ）およびパクリタキセル（ＰＴＸ）ポリマー結合体を含み、
前記ＰＧＧＡの分子量は、約５０，０００〜約１００，０００の範囲であり、
前記ポリマー結合体中のＰＴＸの重量パーセントは、ポリマー結合体の総重量に対して約２０％〜約５０％の範囲であり、
前記癌が、肺癌、メラノーマ、腎臓癌、肝臓癌および脾臓癌からなる群から選択される癌である、薬学組成物。
【請求項２】
前記ＰＧＧＡの分子量が、約７０，０００である、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項３】
前記ポリマー結合体中のＰＴＸの重量パーセントが、約３５％である、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項４】
前記ポリマー結合体中の前記ＰＧＧＡの分子量が、約７０，０００であり、前記ポリマー結合体中のパクリタキセルの重量パーセントが、約３５％である、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項５】
注射による投与に適している、請求項１〜４のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項６】
肺、皮膚、腎臓または脾臓への局所的投与に適している、請求項１〜４のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項７】
希釈剤、キャリアおよび賦形剤から選択される少なくとも１つの薬学的に許容し得る成分をさらに含む、請求項１〜６のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項８】
約４０ｍｇＰＴＸ当量／ｋｇ〜約３４５ｍｇＰＴＸ当量／ｋｇの範囲の用量で、メラノーマに罹患していると診断されている患者に投与するための、請求項１〜７のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項９】
約４０ｍｇＰＴＸ当量／ｋｇ〜約５５０ｍｇＰＴＸ当量／ｋｇの範囲の用量で、肺癌、腎臓癌、肝臓癌および脾臓癌からなる群から選択される少なくとも１つに罹患していると診断されている患者に投与するための、請求項１〜７のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項１０】
肺組織、皮膚組織、腎臓組織、肝臓組織および脾臓組織からなる群から選択される少なくとも１つの組織から得られた癌マーカー遺伝子の発現プロファイリングによって癌に罹患していると診断されている患者に投与するための、請求項１〜９のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【国際調査報告】
2011513412.tif 000022
2011513412.tif 000023
2011513412.tif 000024