(57)【要約】  一側面において、本発明は、少なくとも１つのＰＡＲＰ阻害剤を対象に投与することを含む、子宮がん、子宮内膜がん、又は卵巣がんの治療方法を提供する。別の側面において、本発明は、少なくとも１つのＰＡＲＰ阻害剤を少なくとも１つの抗腫瘍剤と組み合わせて対象に投与することを含む、子宮がん、子宮内膜がん、又は卵巣がんの治療方法を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つのＰＡＲＰ阻害剤を患者に投与することを含む、患者における子宮がん又は卵巣がんの治療方法。
【請求項２】
少なくとも１つの治療効果が得られ、該少なくとも１つの治療効果は、子宮腫瘍若しくは卵巣腫瘍のサイズ縮小、転移の減少、完全寛解、部分寛解、病理学的完全奏効、又は安定である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
抗腫瘍剤による治療と比較してＰＡＲＰ阻害剤の治療で同等の臨床的有効率（ＣＢＲ＝ＣＲ＋ＰＲ＋ＳＤ≧６ヵ月）が得られる、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
臨床的有効率の改善は、抗腫瘍剤単独の治療よりも少なくとも約３０％である、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
ＰＡＲＰ阻害剤は、４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はその代謝物である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
ＰＡＲＰ阻害剤は、式（ＩＩａ）：
【化１】
2011503071.tif 000027
［式中：（１）Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも１つは、常に硫黄含有置換基であり、そして残りの置換基Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5は、水素、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、ヨード、ブロモ、フルオロ、クロロ、（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、（Ｃ1−Ｃ6）アルコキシ、（Ｃ3−Ｃ7）シクロアルキル、及びフェニルからなる群より独立して選ばれ、ここにおいて、５つのＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも２つは、常に水素であるか；又は（２）Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも１つは、硫黄含有置換基ではなく、そして５つの置換基Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5の少なくとも１つは、常にヨードであり、そしてここにおいて、該ヨードは、ニトロ、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、ヒドロキシ又はアミノ基のいずれかであるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、又はＲ5基に常に隣接しているか；のいずれかである］のもの又はその代謝物、そしてその薬学的に許容しうる塩、溶媒和物、異性体、互変異性体、代謝物、類似体又はプロドラッグである、請求項１に記載の方法。いくつかの実施態様において、（２）の化合物は、ヨード基が、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、ヒドロキシ又はアミノ基であるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4又はＲ5基に常に隣接するような化合物である。いくつかの実施態様において、（２）の化合物は、ヨード基が、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、又はアミノ基であるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4又はＲ5基に常に隣接するような化合物である。
【請求項７】
子宮がんは転移性子宮がんである、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
子宮がんは子宮内膜がんである、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
子宮がんは、再発性、進行性、又は持続性である、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
卵巣がんは転移性卵巣がんである、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
卵巣がんは相同組換えＤＮＡ修復における欠損である、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
子宮がんは相同組換えＤＮＡ修復における欠損である、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
子宮がんはＢＲＣＡ欠損である、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
卵巣がんはＢＲＣＡ欠損である、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
ＢＲＣＡ−欠損は、ＢＲＣＡ１欠損、又はＢＲＣＡ２欠損、又はＢＲＣＡ１及びＢＲＣＡ２両方の欠損である、請求項１３又は１４に記載の方法。
【請求項１６】
治療は、
（ａ）長さ約１０〜約３０日の治療サイクルを設け；そして
（ｂ）該サイクルの１〜１０日の別々の日に、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はモル当量のその代謝物を患者に投与すること、をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はその代謝物は、経口的に、又は非経口の注射剤若しくは注入剤、又は吸入剤として投与される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
ＰＡＲＰ阻害剤は、少なくとも１つの抗腫瘍剤と組み合わせて患者に投与されることをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
抗腫瘍剤は、抗腫瘍性アルキル化剤、抗腫瘍性代謝拮抗剤、抗腫瘍性抗生物質、植物由来の抗腫瘍剤、抗腫瘍性白金錯体、抗腫瘍性カンプトテシン誘導体、抗腫瘍性チロシンキナーゼ阻害剤、モノクローナル抗体、インターフェロン、生物学的反応調節剤、ホルモン性抗腫瘍剤、抗腫瘍性ウイルス剤、抗血管新生剤、分化誘導剤、ＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ／ＡＫＴ阻害剤、細胞周期阻害剤、アポトーシス阻害剤、ｈｓｐ９０阻害剤、チューブリン阻害剤、ＤＮＡ修復阻害剤、抗血管新生剤、受容体チロシンキナーゼ阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤、タキサン、Ｈｅｒ−２を標的とする薬剤、ホルモン拮抗剤、成長因子受容体を標的とする薬剤、又はそれらの薬学的に許容しうる塩である、
請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
抗腫瘍剤は、シタビン、カペシタビン、バロピシタビン又はゲムシタビンである請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
抗腫瘍剤は、アバスチン、スーテント、ネクサバール、レセンチン、ＡＢＴ−８６９、アキシチニブ、イリノテカン、トポテカン、パクリタキセル、ドセタキセル、ラパチニブ、ヘルセプチン、タモキシフェン、プロゲステロン、ステロイド性アロマターゼ阻害剤、非ステロイド性アロマターゼ阻害剤、フルベストラント、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）の阻害剤、セツキシマブ、パニツミマブ、インスリン様成長因子１受容体（ＩＧＦ１Ｒ）の阻害剤、及びＣＰ−７５１８７１からなる群より選ばれる、
請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
ＰＡＲＰ阻害剤を、複数の抗腫瘍剤と組み合わせて患者に投与することをさらに含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２３】
抗腫瘍剤を、ＰＡＲＰ阻害剤を投与する前に、投与と同時に又は投与した後に投与する、請求項１８に記載の方法。
【請求項２４】
手術、放射線治療、化学療法、遺伝子治療、ＤＮＡ治療、アジュバント療法、ネオアジュバント療法、ウイルス性治療、ＲＮＡ治療、免疫療法、ナノ療法又はそれらの組み合わせをさらに含む、
請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
（ａ）患者からサンプルを採取し；
（ｂ）サンプルを試験して患者がＢＲＣＡ欠損であるかどうかを測定し；
（ｃ）試験により患者がＢＲＣＡ欠損であることを指示された場合、少なくとも１つのＰＡＲＰ阻害剤で患者を治療すること：
を含む、このような治療を必要とする患者における、卵巣がん又は子宮がんの治療方法。
【請求項２６】
少なくとも１つの治療効果が得られ、該少なくとも１つの治療効果は、卵巣腫瘍若しくは子宮腫瘍のサイズ縮小、転移の減少、完全寛解、部分寛解、病理学的完全奏効、又は安定である、
請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
抗腫瘍剤による治療と比較してＰＡＲＰ阻害剤の治療で同等の臨床的有効率（ＣＢＲ＝ＣＲ＋ＰＲ＋ＳＤ≧６ヵ月）が得られる、請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
臨床的有効率の改善は、抗腫瘍剤単独による治療と比較して少なくとも約３０％である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２９】
ＰＡＲＰ阻害剤は、４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はその代謝物である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３０】
ＰＡＲＰ阻害剤は、式（ＩＩａ）：
【化２】
2011503071.tif 000028
［式中：（１）Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも１つは、常に硫黄含有置換基であり、そして残りの置換基Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5は、水素、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、ヨード、ブロモ、フルオロ、クロロ、（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、（Ｃ1−Ｃ6）アルコキシ、（Ｃ3−Ｃ7）シクロアルキル、及びフェニルからなる群より独立して選ばれ、ここにおいて、５つのＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも２つは、常に水素であるか；又は（２）Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも１つは、硫黄含有置換基ではなく、そして５つの置換基Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5の少なくとも１つは、常にヨードであり、そしてここにおいて、該ヨードは、ニトロ、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、ヒドロキシ又はアミノ基のいずれかであるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、又はＲ5基に常に隣接しているか；のいずれかである］のもの又はその代謝物、そしてその薬学的に許容しうる塩、溶媒和物、異性体、互変異性体、代謝物、類似体又はプロドラッグである、請求項２５に記載の方法。いくつかの実施態様において、（２）の化合物は、ヨード基が、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、ヒドロキシ又はアミノ基であるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4又はＲ5基に常に隣接するような化合物である。いくつかの実施態様において、（２）の化合物は、ヨード基が、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、又はアミノ基であるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4又はＲ5基に常に隣接するような化合物である。
【請求項３１】
サンプルは、組織又は体液サンプルである、請求項２５に記載の方法。
【請求項３２】
サンプルは、腫瘍サンプル、血液サンプル、血漿サンプル、腹水サンプル、滲出液又は浸出液である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３３】
子宮がんは転移性子宮がんである、請求項２５に記載の方法。
【請求項３４】
子宮がんは子宮内膜がんである、請求項２５に記載の方法。
【請求項３５】
子宮がんは再発性、進行性、又は持続性である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３６】
卵巣がんは転移性卵巣がんである、請求項２５に記載の方法。
【請求項３７】
卵巣がんは相同組換えＤＮＡ修復における欠損である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３８】
子宮がんは相同組換えＤＮＡ修復における欠損である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３９】
子宮がんはＢＲＣＡ欠損である、請求項２５に記載の方法。
【請求項４０】
卵巣がんはＢＲＣＡ欠損である、請求項２５に記載の方法。
【請求項４１】
ＢＲＣＡ欠損は、ＢＲＣＡ１欠損、又はＢＲＣＡ２欠損、又はＢＲＣＡ１及びＢＲＣＡ２両方の欠損である、請求項３９又は４０に記載の方法。
【請求項４２】
治療は、
（ａ）長さ約１０〜約３０日の治療サイクルを設け；そして
（ｂ）該サイクルの１〜１０日の別々の日に、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はモル当量のその代謝物を患者に投与すること、をさらに含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項４３】
４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はその代謝物は、経口的に、又は非経口の注射剤若しくは注入剤、又は吸入剤として投与される、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
ＰＡＲＰ阻害剤は、少なくとも１つの抗腫瘍剤と組み合わせて患者に投与されることをさらに含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項４５】
抗腫瘍剤は、抗腫瘍性アルキル化剤、抗腫瘍性代謝拮抗剤、抗腫瘍性抗生物質、植物由来の抗腫瘍剤、抗腫瘍性白金錯体、抗腫瘍性カンプトテシン誘導体、抗腫瘍性チロシンキナーゼ阻害剤、モノクローナル抗体、インターフェロン、生物学的反応調節剤、ホルモン性抗腫瘍剤、抗腫瘍性ウイルス剤、抗血管新生剤、分化誘導剤、ＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ／ＡＫＴ阻害剤、細胞周期阻害剤、アポトーシス阻害剤、ｈｓｐ９０阻害剤、チューブリン阻害剤、ＤＮＡ修復阻害剤、抗血管新生剤、受容体チロシンキナーゼ阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤、タキサン、Ｈｅｒ−２を標的とする薬剤、ホルモン拮抗剤、成長因子受容体を標的とする薬剤、又はそれらの薬学的に許容しうる塩である、
請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
抗腫瘍剤は、シタビン、カペシタビン、バロピシタビン又はゲムシタビンである、請求項４４に記載の方法。
【請求項４７】
抗腫瘍剤は、アバスチン、スーテント、ネクサバール、レセンチン、ＡＢＴ−８６９、アキシチニブ、イリノテカン、トポテカン、パクリタキセル、ドセタキセル、ラパチニブ、ヘルセプチン、タモキシフェン、プロゲステロン、ステロイド性アロマターゼ阻害剤、非ステロイド性アロマターゼ阻害剤、フルベストラント、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）の阻害剤、セツキシマブ、パニツミマブ、インスリン様成長因子１受容体（ＩＧＦ１Ｒ）の阻害剤、及びＣＰ−７５１８７１からなる群より選ばれる、請求項４４に記載の方法。
【請求項４８】
手術、放射線治療、化学療法、遺伝子治療、ＤＮＡ治療、アジュバント療法、ネオアジュバント療法、ウイルス性治療、ＲＮＡ治療、免疫療法、ナノ療法又はそれらの組み合わせをさらに含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項４９】
（ａ）患者からサンプルを採取し；
（ｂ）サンプルを試験してサンプル中のＰＡＲＰ発現レベルを測定し；
（ｃ）ＰＡＲＰ発現が所定のレベルを超えるかどうかを測定し、そしてその場合は、患者に少なくとも１つのＰＡＲＰ阻害剤を投与すること：
を含む、このような治療を必要とする患者における卵巣がん又は子宮がんの治療方法。
【請求項５０】
少なくとも１つの治療効果が得られ、該少なくとも１つの治療効果は、卵巣腫瘍若しくは子宮腫瘍のサイズ縮小、転移の減少、完全寛解、部分寛解、病理学的完全奏効、又は安定である、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
抗腫瘍剤による治療と比較してＰＡＲＰ阻害剤の治療で同等の臨床的有効率（ＣＢＲ＝ＣＲ＋ＰＲ＋ＳＤ≧６ヵ月）が得られる、
請求項４９に記載の方法。
【請求項５２】
臨床的有効率の改善は、少なくとも約３０％である、請求項４９に記載の方法。
【請求項５３】
ＰＡＲＰ阻害剤は、４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はその代謝物である請求項４９に記載の方法。
【請求項５４】
ＰＡＲＰ阻害剤は、式（ＩＩａ）：
【化３】
2011503071.tif 000029
［式中：（１）Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも１つは、常に硫黄含有置換基であり、そして残りの置換基Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5は、水素、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、ヨード、ブロモ、フルオロ、クロロ、（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、（Ｃ1−Ｃ6）アルコキシ、（Ｃ3−Ｃ7）シクロアルキル、及びフェニルからなる群より独立して選ばれ、ここにおいて、５つのＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも２つは、常に水素であるか；又は（２）Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも１つは、硫黄含有置換基ではなく、そして５つの置換基Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5の少なくとも１つは、常にヨードであり、そしてここにおいて、該ヨードは、ニトロ、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、ヒドロキシ又はアミノ基のいずれかであるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、又はＲ5基に常に隣接しているか；のいずれかである］のもの又はその代謝物、そしてその薬学的に許容しうる塩、溶媒和物、異性体、互変異性体、代謝物、類似体又はプロドラッグである、請求項４９に記載の方法。いくつかの実施態様において、（２）の化合物は、ヨード基が、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、ヒドロキシ又はアミノ基であるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4又はＲ5基に常に隣接するような化合物である。いくつかの実施態様において、（２）の化合物は、ヨード基が、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、又はアミノ基であるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4又はＲ5基に常に隣接するような化合物である。
【請求項５５】
サンプルは、組織又は体液サンプルである、請求項４９に記載の方法。
【請求項５６】
サンプルは、腫瘍サンプル、血液サンプル、血漿サンプル、腹水サンプル、滲出液又は浸出液である、請求項４９に記載の方法。
【請求項５７】
子宮がんは転移性子宮がんである、請求項４９に記載の方法。
【請求項５８】
子宮がんは子宮内膜がんである、請求項４９に記載の方法。
【請求項５９】
子宮がんは、再発性、進行性、又は持続性である、請求項４９に記載の方法。
【請求項６０】
卵巣がんは転移性卵巣がんである、請求項４９に記載の方法。
【請求項６１】
卵巣がんは、相同組換えＤＮＡ修復における欠損である、請求項４９に記載の方法。
【請求項６２】
子宮がんは、相同組換えＤＮＡ修復における欠損である、請求項４９に記載の方法。
【請求項６３】
子宮がんはＢＲＣＡ欠損である、請求項４９に記載の方法。
【請求項６４】
卵巣がんはＢＲＣＡ欠損である、請求項４９に記載の方法。
【請求項６５】
ＢＲＣＡ欠損は、ＢＲＣＡ１欠損、又はＢＲＣＡ２欠損、又はＢＲＣＡ１及びＢＲＣＡ２両方の欠損である、請求項６３又は６４に記載の方法。
【請求項６６】
治療は、
（ａ）長さ約１０〜約３０日の治療サイクルを設け；そして
（ｂ）該サイクルの１〜１０日の別々の日に、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はモル当量のその代謝物を患者に投与すること、をさらに含む、請求項４９に記載の方法。
【請求項６７】
４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はその代謝物は、経口的に、又は非経口の注射剤若しくは注入剤、又は吸入剤として投与される、請求項６６に記載の方法。
【請求項６８】
ＰＡＲＰ阻害剤は、少なくとも１つの抗腫瘍剤と組み合わせて患者に投与されることをさらに含む、請求項４９に記載の方法。
【請求項６９】
抗腫瘍剤は、抗腫瘍性アルキル化剤、抗腫瘍性代謝拮抗剤、抗腫瘍性抗生物質、植物由来の抗腫瘍剤、抗腫瘍性白金錯体、抗腫瘍性カンプトテシン誘導体、抗腫瘍性チロシンキナーゼ阻害剤、モノクローナル抗体、インターフェロン、生物学的反応調節剤、ホルモン性抗腫瘍剤、抗腫瘍性ウイルス剤、抗血管新生剤、分化誘導剤、ＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ／ＡＫＴ阻害剤、細胞周期阻害剤、アポトーシス阻害剤、ｈｓｐ９０阻害剤、チューブリン阻害剤、ＤＮＡ修復阻害剤、抗血管新生剤、受容体チロシンキナーゼ阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤、タキサン、Ｈｅｒ−２を標的とする薬剤、ホルモン拮抗剤、成長因子受容体を標的とする薬剤、又はそれらの薬学的に許容しうる塩である、請求項６８に記載の方法。
【請求項７０】
抗腫瘍剤は、シタビン、カペシタビン、バロピシタビン又はゲムシタビンである、請求項６８に記載の方法。
【請求項７１】
抗腫瘍剤は、アバスチン、スーテント、ネクサバール、レセンチン、ＡＢＴ−８６９、アキシチニブ、イリノテカン、トポテカン、パクリタキセル、ドセタキセル、ラパチニブ、ヘルセプチン、タモキシフェン、プロゲステロン、ステロイド性アロマターゼ阻害剤、非ステロイド性アロマターゼ阻害剤、フルベストラント、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）の阻害剤、セツキシマブ、パニツミマブ、インスリン様成長因子１受容体（ＩＧＦ１Ｒ）の阻害剤、及びＣＰ−７５１８７１からなる群より選ばれる、請求項６８に記載の方法。
【請求項７２】
手術、放射線治療、化学療法、遺伝子治療、ＤＮＡ治療、アジュバント療法、ネオアジュバント療法、ウイルス性治療、ＲＮＡ治療、免疫療法、ナノ療法又はそれらの組み合わせをさらに含む、請求項４９に記載の方法。
【請求項７３】
少なくとも１つのＰＡＲＰ阻害剤及び少なくとも１つの抗腫瘍剤の組み合わせを患者に投与することを含む、患者における子宮がん又は卵巣がんの治療方法。
【請求項７４】
少なくとも１つの治療効果が得られ、該少なくとも１つの治療効果は、子宮腫瘍若しくは卵巣腫瘍のサイズ縮小、転移の減少、完全寛解、部分寛解、病理学的完全奏効、又は安定である、請求項７３に記載の方法。
【請求項７５】
抗腫瘍剤を用いるがＰＡＲＰ阻害剤なしの治療と比較して臨床的有効率（ＣＢＲ＝ＣＲ＋ＰＲ＋ＳＤ≧６ヵ月）の改善が得られる、請求項７３に記載の方法。
【請求項７６】
臨床的有効率の改善は、少なくとも約６０％である、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
子宮がんは転移性子宮がんである、請求項７３に記載の方法。
【請求項７８】
子宮がんは子宮内膜がんである、請求項７３に記載の方法。
【請求項７９】
子宮がんは、再発性、進行性、又は持続性である、請求項７３に記載の方法。
【請求項８０】
卵巣がんは転移性卵巣がんである、請求項７３に記載の方法。
【請求項８１】
卵巣がんは、相同組換えＤＮＡ修復における欠損である、請求項７３に記載の方法。
【請求項８２】
子宮がんは、相同組換えＤＮＡ修復における欠損である、請求項７３に記載の方法。
【請求項８３】
子宮がんはＢＲＣＡ欠損である、請求項７３に記載の方法。
【請求項８４】
卵巣がんはＢＲＣＡ欠損である、請求項７３に記載の方法。
【請求項８５】
ＢＲＣＡ欠損は、ＢＲＣＡ１欠損、又はＢＲＣＡ２欠損、又はＢＲＣＡ１及びＢＲＣＡ２両方の欠損である、請求項８３又は８４に記載の方法。
【請求項８６】
ＰＡＲＰ阻害剤は、ベンズアミド又はその代謝物である、請求項７３に記載の方法。
【請求項８７】
ＰＡＲＰ阻害剤は、４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はその代謝物である、請求項７３に記載の方法。
【請求項８８】
ＰＡＲＰ阻害剤は、式（ＩＩａ）：
【化４】
2011503071.tif 000030
［式中：（１）Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも１つは、常に硫黄含有置換基であり、そして残りの置換基Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5は、水素、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、ヨード、ブロモ、フルオロ、クロロ、（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、（Ｃ1−Ｃ6）アルコキシ、（Ｃ3−Ｃ7）シクロアルキル、及びフェニルからなる群より独立して選ばれ、ここにおいて、５つのＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも２つは、常に水素であるか；又は（２）Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも１つは、硫黄含有置換基ではなく、そして５つの置換基Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5の少なくとも１つは、常にヨードであり、そしてここにおいて、該ヨードは、ニトロ、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、ヒドロキシ又はアミノ基のいずれかであるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、又はＲ5基に常に隣接しているか；のいずれかである］のもの又はその代謝物、そしてその薬学的に許容しうる塩、溶媒和物、異性体、互変異性体、代謝物、類似体又はプロドラッグである、請求項７３に記載の方法。いくつかの実施態様において、（２）の化合物は、ヨード基が、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、ヒドロキシ又はアミノ基であるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4又はＲ5基に常に隣接するような化合物である。いくつかの実施態様において、（２）の化合物は、ヨード基が、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、又はアミノ基であるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4又はＲ5基に常に隣接するような化合物である。
【請求項８９】
抗腫瘍剤は、抗腫瘍性アルキル化剤、抗腫瘍性代謝拮抗剤、抗腫瘍性抗生物質、植物由来の抗腫瘍剤、抗腫瘍性白金錯体、抗腫瘍性カンプトテシン誘導体、抗腫瘍性チロシンキナーゼ阻害剤、モノクローナル抗体、インターフェロン、生物学的反応調節剤、ホルモン性抗腫瘍剤、抗腫瘍性ウイルス剤、抗血管新生剤、分化誘導剤、ＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ／ＡＫＴ阻害剤、細胞周期阻害剤、アポトーシス阻害剤、ｈｓｐ９０阻害剤、チューブリン阻害剤、ＤＮＡ修復阻害剤、抗血管新生剤、受容体チロシンキナーゼ阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤、タキサン、Ｈｅｒ−２を標的とする薬剤、ホルモン拮抗剤、成長因子受容体を標的とする薬剤、又はそれらの薬学的に許容しうる塩である、請求項７３に記載の方法。
【請求項９０】
抗腫瘍剤は、シタビン、カペシタビン、バロピシタビン又はゲムシタビンである、請求項７３に記載の方法。
【請求項９１】
抗腫瘍剤は、アバスチン、スーテント、ネクサバール、レセンチン、ＡＢＴ−８６９、アキシチニブ、イリノテカン、トポテカン、パクリタキセル、ドセタキセル、ラパチニブ、ヘルセプチン、タモキシフェン、プロゲステロン、ステロイド性アロマターゼ阻害剤、非ステロイド性アロマターゼ阻害剤、フルベストラント、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）の阻害剤、セツキシマブ、パニツミマブ、インスリン様成長因子１受容体（ＩＧＦ１Ｒ）の阻害剤、及びＣＰ−７５１８７１からなる群より選ばれる、請求項７３に記載の方法。
【請求項９２】
手術、放射線治療、化学療法、遺伝子治療、ＤＮＡ治療、アジュバント療法、ネオアジュバント療法、ウイルス性治療、ＲＮＡ治療、免疫療法、ナノ療法又はそれらの組み合わせをさらに含む、請求項７３に記載の方法。
【請求項９３】
少なくとも１１日の治療サイクルを選び、そして
（ａ）サイクルの１〜５日の別々の日に、１００〜約２０００ｍｇ／ｍ2のパクリタキセルを患者に投与し；
（ｂ）サイクルの１〜５日の別々の日に、１０〜４００ｍｇ／ｍ2のカルボプラチンを患者に投与し；そして
（ｃ）サイクルの１〜１０日の別々の日に、１〜１００ｍｇ／ｋｇの４−ヨード−３−ニトロベンズアミドを患者に投与すること：
をさらに含む、請求項７３に記載の方法。
【請求項９４】
パクリタキセルを静脈内注入剤として投与する、請求項９３に記載の方法。
【請求項９５】
カルボプラチンを静脈内注入剤として投与する、請求項９３に記載の方法。
【請求項９６】
４−ヨード−３−ニトロベンズアミドを、経口的に、又は非経口の注射剤若しくは注入剤、又は吸入剤として投与する、請求項９３に記載の方法。
【請求項９７】
（ａ）患者からサンプルを採取し；
（ｂ）サンプルを試験して患者がＢＲＣＡ欠損であるかどうかを測定し；
（ｃ）試験により患者がＢＲＣＡ欠損であることが示された場合、少なくとも１つのＰＡＲＰ阻害剤及び少なくとも１つの抗腫瘍剤で患者を治療すること：
を含む、このような治療を必要とする患者における卵巣がん又は子宮がんの治療方法。
【請求項９８】
少なくとも１つの治療効果が得られ、該少なくとも１つの治療効果は、子宮腫瘍若しくは卵巣腫瘍のサイズ縮小、転移の減少、完全寛解、部分寛解、病理学的完全奏効、又は安定である、請求項９７に記載の方法。
【請求項９９】
抗腫瘍剤を用いるがＰＡＲＰ阻害剤なしの治療と比較して臨床的有効率（ＣＢＲ＝ＣＲ＋ＰＲ＋ＳＤ≧６ヵ月）の改善が得られる、請求項９７に記載の方法。
【請求項１００】
臨床的有効率の改善は、少なくとも約６０％である、請求項９９に記載の方法。
【請求項１０１】
子宮がんは転移性子宮がんである、請求項９７に記載の方法。
【請求項１０２】
子宮がんは子宮内膜がんである、請求項９７に記載の方法。
【請求項１０３】
子宮がんは、再発性、進行性、又は持続性である、請求項９７に記載の方法。
【請求項１０４】
卵巣がんは転移性卵巣がんである、請求項９７に記載の方法。
【請求項１０５】
卵巣がんは、相同組換えＤＮＡ修復における欠損である、請求項９７に記載の方法。
【請求項１０６】
子宮がんは、相同組換えＤＮＡ修復における欠損である、請求項９７に記載の方法。
【請求項１０７】
子宮がんはＢＲＣＡ欠損である、請求項９７に記載の方法。
【請求項１０８】
卵巣がんはＢＲＣＡ欠損である、請求項９７に記載の方法。
【請求項１０９】
ＢＲＣＡ欠損は、ＢＲＣＡ１欠損、又はＢＲＣＡ２欠損、又はＢＲＣＡ１及びＢＲＣＡ２両方の欠損である、請求項１０７又は１０８に記載の方法、
【請求項１１０】
ＰＡＲＰ阻害剤は、ベンズアミド又はその代謝物である、請求項９７に記載の方法。
【請求項１１１】
ＰＡＲＰ阻害剤は、４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はその代謝物である、請求項９７に記載の方法。
【請求項１１２】
ＰＡＲＰ阻害剤は、式（ＩＩａ）：
【化５】
2011503071.tif 000031
［式中：（１）Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも１つは、常に硫黄含有置換基であり、そして残りの置換基Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5は、水素、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、ヨード、ブロモ、フルオロ、クロロ、（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、（Ｃ1−Ｃ6）アルコキシ、（Ｃ3−Ｃ7）シクロアルキル、及びフェニルからなる群より独立して選ばれ、ここにおいて、５つのＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも２つは、常に水素であるか；又は（２）Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも１つは、硫黄含有置換基ではなく、そして５つの置換基Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5の少なくとも１つは、常にヨードであり、そしてここにおいて、該ヨードは、ニトロ、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、ヒドロキシ又はアミノ基のいずれかであるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、又はＲ5基に常に隣接しているか；のいずれかである］のもの又はその代謝物、そしてその薬学的に許容しうる塩、溶媒和物、異性体、互変異性体、代謝物、類似体又はプロドラッグである、請求項９７に記載の方法。いくつかの実施態様において、（２）の化合物は、ヨード基が、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、ヒドロキシ又はアミノ基であるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4又はＲ5基に常に隣接するような化合物である。いくつかの実施態様において、（２）の化合物は、ヨード基が、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、又はアミノ基であるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4又はＲ5基に常に隣接するような化合物である。
【請求項１１３】
サンプルは、組織又は体液サンプルである、請求項９７に記載の方法。
【請求項１１４】
サンプルは、腫瘍サンプル、血液サンプル、血漿サンプル、腹水サンプル、滲出液又は浸出液である、請求項９７に記載の方法。
【請求項１１５】
抗腫瘍剤は、抗腫瘍性アルキル化剤、抗腫瘍性代謝拮抗剤、抗腫瘍性抗生物質、植物由来の抗腫瘍剤、抗腫瘍性白金錯体、抗腫瘍性カンプトテシン誘導体、抗腫瘍性チロシンキナーゼ阻害剤、モノクローナル抗体、インターフェロン、生物学的反応調節剤、ホルモン性抗腫瘍剤、抗腫瘍性ウイルス剤、抗血管新生剤、分化誘導剤、ＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ／ＡＫＴ阻害剤、細胞周期阻害剤、アポトーシス阻害剤、ｈｓｐ９０阻害剤、チューブリン阻害剤、ＤＮＡ修復阻害剤、抗血管新生剤、受容体チロシンキナーゼ阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤、タキサン、Ｈｅｒ−２を標的とする薬剤、ホルモン拮抗剤、成長因子受容体を標的とする薬剤、又はそれらの薬学的に許容しうる塩である、請求項９７に記載の方法。
【請求項１１６】
抗腫瘍剤は、シタビン、カペシタビン、バロピシタビン又はゲムシタビンである、請求項９７に記載の方法。
【請求項１１７】
抗腫瘍剤は、アバスチン、スーテント、ネクサバール、レセンチン、ＡＢＴ−８６９、アキシチニブ、イリノテカン、トポテカン、パクリタキセル、ドセタキセル、ラパチニブ、ヘルセプチン、タモキシフェン、プロゲステロン、ステロイド性アロマターゼ阻害剤、非ステロイド性アロマターゼ阻害剤、フルベストラント、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）の阻害剤、セツキシマブ、パニツミマブ、インスリン様成長因子１受容体（ＩＧＦ１Ｒ）の阻害剤、及びＣＰ−７５１８７１からなる群より選ばれる、請求項９７に記載の方法。
【請求項１１８】
手術、放射線治療、化学療法、遺伝子治療、ＤＮＡ治療、アジュバント療法、ネオアジュバント療法、ウイルス性治療、ＲＮＡ治療、免疫療法、ナノ療法又はそれらの組み合わせをさらに含む、請求項９７に記載の方法。
【請求項１１９】
少なくとも１１日の治療サイクルを選び、そして：
（ａ）サイクルの１〜５日の別々の日に、１００〜約２０００ｍｇ／ｍ2のパクリタキセルを患者に投与し；
（ｂ）サイクルの１〜５日の別々の日に、１０〜４００ｍｇ／ｍ2のカルボプラチンを患者に投与し；そして
（ｃ）サイクルの１〜１０日の別々の日に、１〜１００ｍｇ／ｋｇの４−ヨード−３−ニトロベンズアミドを患者に投与すること：
をさらに含む、請求項９７に記載の方法。
【請求項１２０】
パクリタキセルを静脈内注入剤として投与する、請求項１１９に記載の方法。
【請求項１２１】
カルボプラチンを静脈内注入剤として投与する、請求項１１９に記載の方法。
【請求項１２２】
４−ヨード−３−ニトロベンズアミドを、経口的に、又は非経口の注射剤若しくは注入剤、又は吸入剤として投与する、請求項１１９に記載の方法。
【請求項１２３】
（ａ）患者からサンプルを採取し；
（ｂ）サンプルを試験してサンプル中のＰＡＲＰ発現レベルを測定し；
（ｃ）ＰＡＲＰ発現が所定のレベルを超えるかどうかを測定し、そしてその場合は、少なくとも１つのＰＡＲＰ阻害剤及び少なくとも１つの抗腫瘍剤を患者に投与すること：
を含む、患者における子宮がん又は卵巣がんの治療方法。
【請求項１２４】
少なくとも１つの治療効果が得られ、該少なくとも１つの治療効果は、子宮腫瘍若しくは卵巣腫瘍のサイズ縮小、転移の減少、完全寛解、部分寛解、病理学的完全奏効、又は安定である、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１２５】
抗腫瘍剤を用いるがＰＡＲＰ阻害剤なしの治療と比較して臨床的有効率（ＣＢＲ＝ＣＲ＋ＰＲ＋ＳＤ≧６ヵ月）の改善が得られる、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１２６】
臨床的有効率の改善は、少なくとも約６０％である、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１２７】
ＰＡＲＰ阻害剤は、４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はその代謝物である、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１２８】
ＰＡＲＰ阻害剤は、式（ＩＩａ）：
【化６】
2011503071.tif 000032
［式中：（１）Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも１つは、常に硫黄含有置換基であり、そして残りの置換基Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5は、水素、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、ヨード、ブロモ、フルオロ、クロロ、（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、（Ｃ1−Ｃ6）アルコキシ、（Ｃ3−Ｃ7）シクロアルキル、及びフェニルからなる群より独立して選ばれ、ここにおいて、５つのＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも２つは、常に水素であるか；又は（２）Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも１つは、硫黄含有置換基ではなく、そして５つの置換基Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5の少
なくとも１つは、常にヨードであり、そしてここにおいて、該ヨードは、ニトロ、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、ヒドロキシ又はアミノ基のいずれかであるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、又はＲ5基に常に隣接しているか；のいずれかである］のもの又はその代謝物、そしてその薬学的に許容しうる塩、溶媒和物、異性体、互変異性体、代謝物、類似体又はプロドラッグである、請求項１２３に記載の方法。いくつかの実施態様において、（２）の化合物は、ヨード基が、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、ヒドロキシ又はアミノ基であるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4又はＲ5基に常に隣接するような化合物である。いくつかの実施態様において、（２）の化合物は、ヨード基が、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、又はアミノ基であるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4又はＲ5基に常に隣接するような化合物である。
【請求項１２９】
サンプルは、組織又は体液サンプルである、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１３０】
サンプルは、腫瘍サンプル、血液サンプル、血漿サンプル、腹水サンプル、滲出液又は浸出液である、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１３１】
子宮がんは転移性子宮がんである、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１３２】
子宮がんは子宮内膜がんである、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１３３】
子宮がんは、再発性、進行性、又は持続性である、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１３４】
卵巣がんは転移性卵巣がんである、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１３５】
卵巣がんは、相同組換えＤＮＡ修復における欠損である、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１３６】
子宮がんは、相同組換えＤＮＡ修復における欠損である、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１３７】
子宮がんはＢＲＣＡ欠損である、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１３８】
卵巣がんはＢＲＣＡ欠損である、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１３９】
ＢＲＣＡ欠損は、ＢＲＣＡ１欠損、又はＢＲＣＡ２欠損、又はＢＲＣＡ１及びＢＲＣＡ２両方の欠損である、請求項１３７又は１３８に記載の方法。
【請求項１４０】
抗腫瘍剤は、抗腫瘍性アルキル化剤、抗腫瘍性代謝拮抗剤、抗腫瘍性抗生物質、植物由来の抗腫瘍剤、抗腫瘍性白金錯体、抗腫瘍性カンプトテシン誘導体、抗腫瘍性チロシンキナーゼ阻害剤、モノクローナル抗体、インターフェロン、生物学的反応調節剤、ホルモン性抗腫瘍剤、抗腫瘍性ウイルス剤、抗血管新生剤、分化誘導剤、ＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ／ＡＫＴ阻害剤、細胞周期阻害剤、アポトーシス阻害剤、ｈｓｐ９０阻害剤、チューブリン阻害剤、ＤＮＡ修復阻害剤、抗血管新生剤、受容体チロシンキナーゼ阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤、タキサン、Ｈｅｒ−２を標的とする薬剤、ホルモン拮抗剤、成長因子受容体を標的とする薬剤、又はそれらの薬学的に許容しうる塩である、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１４１】
抗腫瘍剤は、シタビン、カペシタビン、バロピシタビン又はゲムシタビンである、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１４２】
抗腫瘍剤は、アバスチン、スーテント、ネクサバール、レセンチン、ＡＢＴ−８６９、アキシチニブ、イリノテカン、トポテカン、パクリタキセル、ドセタキセル、ラパチニブ、ヘルセプチン、タモキシフェン、プロゲステロン、ステロイド性アロマターゼ阻害剤、非ステロイド性アロマターゼ阻害剤、フルベストラント、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）の阻害剤、セツキシマブ、パニツミマブ、インスリン様成長因子１受容体（ＩＧＦ１Ｒ）の阻害剤、及びＣＰ−７５１８７１からなる群より選ばれる、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１４３】
手術、放射線治療、化学療法、遺伝子治療、ＤＮＡ治療、アジュバント療法、ネオアジュバント療法、ウイルス性治療、ＲＮＡ治療、免疫療法、ナノ療法又はそれらの組み合わせをさらに含む、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１４４】
少なくとも１１日の治療サイクルを選び、そして：
（ａ）サイクルの１〜５日の別々の日に、１００〜約２０００ｍｇ／ｍ2のパクリタキセルを患者に投与し；
（ｂ）サイクルの１〜５日の別々の日に、１０〜４００ｍｇ／ｍ2のカルボプラチンを患者に投与し；そして
（ｃ）サイクルの１〜１０日の別々の日に、１〜１００ｍｇ／ｋｇの４−ヨード−３−ニトロベンズアミドを患者に投与すること：
をさらに含む、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１４５】
パクリタキセルを静脈内注入剤として投与する、請求項１４４に記載の方法。
【請求項１４６】
カルボプラチンを静脈内注入剤として投与する、請求項１４４に記載の方法。
【請求項１４７】
４−ヨード−３−ニトロベンズアミドを、経口的に、又は非経口の注射剤若しくは注入剤、又は吸入剤として投与する、請求項１４４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
相互参照
本願は、２００７年１１月１２日に出願の「Treatment of Uterine Cancer with a Combination of a Taxane, a Platinum Complex, and a PARP-1 Inhibitor」と題する米国仮出願第６０／９８７,３３５号（代理人整理番号第２８８２５−７４２．１０２号）；２００７年１２月７日に出願の「Treatment of Cancer with Combinations of Topoisomerase Inhibitors and PARP Inhibitors」と題する米国仮出願第６１／０１２３６４号（代理人整理番号第２８８２５−７４７．１０１号）；及び２００８年６月３日に出願の「Treatment of Breast, Ovarian, and Uterine Cancer with a PARP Inhibitor」と題する米国仮出願第６１／０５８５２８号（代理人整理番号第２８８２５−７５７．１０１号）の利益を請求し、これらの出願のおのおのは、参照によりいずれもそれらの全体が本明細書に組み込まれている。
【背景技術】
【０００２】
がんは、細胞成長の異常制御を特徴とする疾患の一群である。がんの年間発生数は、米国だけで１３０万件を超えると推定される。がんを治療するために手術、放射線、化学療法及びホルモンが用いられているが、がんは、米国における死亡原因の第２位のままである。毎年５６万人を超える米国人ががんで死亡すると推定される。
【０００３】
がん細胞は、細胞成長及び細胞死を正及び負に調節するいくつかの経路を同時に活性化する。この特性は、細胞死及び生存シグナルを調節することで現在の化学療法の治療有効性を改善するための新しい戦略を提供できることを示唆している。
【０００４】
がん性及び肉腫性の両方の要素を含む悪性の子宮新生物は、子宮新生物の世界保健機構（ＷＨＯ）の分類においてがん肉腫として明記されている。別の名称は、悪性ミュラー管混合腫瘍（ＭＭＭＴ）である。また、がん肉腫は、卵巣／卵管、子宮頸、腹膜及び非婦人科部位にも生じるが、子宮よりも頻度が非常に低い。これらの腫瘍は非常に活動的であり、予後が不良である。ほとんどの子宮がん肉腫は、単クローン性であってがん性要素が鍵要素であり、そしてがん腫から又は異なる分化を受けた幹細胞から誘導された肉腫性成分（すなわち化生性がん）である。肉腫性成分は、相同性（子宮において通常見出される組織で構成される）又は非相同（子宮において通常見出されない組織、多くの場合、悪性軟骨又は骨格筋を含む）である。
【０００５】
子宮のがん肉腫における多くの単剤を調査した以前の研究は、以下の奏効率（response
rate）を報告している：エトポシド（６．５％）；ドキソルビシン（９．８％）；シスプラチン（１８％）；イホスファミド（３２．２％）；パクリタキセル（１８．２％）；及びトポテカン（１０％）。従って、これまで発見された３つの最も活性な薬剤には、シスプラチン、イホスファミド及びパクリタキセルが含まれる。イホスファミド対イホスファミド＋シスプラチンを比較するランダム化第３相試験は、高められた奏効率（３６％対５４％）、無増悪生存の中央値（median progression-free survival）における僅かな改善（４対６ヵ月、ｐ＝０．０２）を示したが、生存の中央値（median survival）における改善を示さなかった（７．６対９．４ヵ月、ｐ＝０．０７）。第二のランダム化試験では、パクリタキセルの役割を評価した。この研究では、患者は、ランダム化されてイホスファミド対イホスファミド＋パクリタキセルの組み合わせを摂取し、そして高められた奏効率（２９％対４５％）、無増悪生存の中央値における改善（３．６対５．８ヵ月、ｐ＝０．０３）、及び生存の中央値における改善（８．４対１３．５ヵ月、ｐ＝０．０３）を示した。イホスファミドの使用は厄介であり、有意の毒性を生じる。
【０００６】
非常に関連のある疾患、子宮内膜がんでは、最適治療の問題を扱ったいくつかのランダム化試験がある。これらの研究では、第II相試験で同定された３つの活性剤：ドキソルビシン、白金薬剤及びパクリタキセルに焦点を合わせている。１つの研究では、２８１人の女性をドキソルビシン（６０ｍｇ／ｍ2）単独対ドキソルビシン（６０ｍｇ／ｍ2）＋シスプラチン（５０ｍｇ／ｍ2）（ＡＰ）にランダム化する。奏効率（ＲＲ）（４２％対２５％；ｐ＝０．００４）及びＰＦＳ（３．８対５．７ヵ月；ＨＲ０．７４［９５％ＣＩ ０．５８、０．９４；ｐ＝０．１４）に関しては併用療法に統計学的に有意な利点があるが、ＯＳにおける差は観察されなかった（９対９．２ヵ月）。パクリタキセルは、進行性又は再発性の子宮内膜がんにおいて３６％の奏効率で有意な単剤活性を有した。従って、３１７人の患者をパクリタキセル及びドキソルビシン又は標準治療群にランダム化した。この研究は、２つの治療群間のＲＲ、ＰＦＳ又はＯＳにおける有意差を示すことに失敗し、そしてＡＰが治療標準として残った。しかしながら、白金及びパクリタキセルの両方が高い単剤活性を示したため、進行性及び再発性の子宮内膜がんのための最先端のレジメンでは、パクリタキセル及びシスプラチンを含めることに強い興味が持たれている。続いて、別の研究では、２６３人の患者をＡＰ対ＴＡＰにランダム化した：日１にドキソルビシン（４５ｍｇ／ｍ2）及びシスプラチン（５０ｍｇ／ｍ２）、続いて日２にパクリタキセル（３時間かけて１６０ｍｇ／ｍ2 ＩＶ）（Ｇ−ＣＳＦ支持による）。ＴＡＰは、ＯＲＲ（５７％対３４％；ｐ＜０．０１）、ＰＦＳ中央値（８．３対５．３ヵ月；ｐ＜０．０１）及びＯＳ中央値１５．３（ＴＡＰ）対１２．３ヵ月（ＡＰ）（ｐ＝０．０３７）に関してＡＰより優れている。この改善された有効性は、増強された毒性の代価として得られた。
【０００７】
がん治療の治療上の選択肢は限られているが、再発性、進行性又は持続性の子宮がん及びＢＲＣＡ欠損の卵巣がんを含むがんの変種は、標準の化学療法剤又はホルモン治療に対して難治性である可能性があるため、特に困難である。従って、一般にがん、そして特にがん変種に対する有効な治療が必要である。本発明は、これらの必要性に取り組み、さらに関連する利点を提供する。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
一態様において、本発明は、少なくとも１つのＰＡＲＰ阻害剤を患者に投与することを含む、患者における子宮がん又は卵巣がんの治療方法を提供する。別の態様において、本発明は、（ａ）患者からサンプルを採取し；（ｂ）サンプルを試験して患者がＢＲＣＡ欠損であるかどうかを測定し；（ｃ）試験により患者がＢＲＣＡ欠損であることが示された場合、少なくとも１つのＰＡＲＰ阻害剤で患者を治療すること：を含む、このような治療を必要とする患者における卵巣がん又は子宮がんの治療方法を提供する。別の態様において、本発明は、（ａ）患者からサンプルを採取し；（ｂ）サンプルを試験してサンプル中のＰＡＲＰ発現レベルを測定し；（ｃ）ＰＡＲＰ発現が所定のレベルを超えるかどうかを測定し、そして超える場合は、患者に少なくとも１つのＰＡＲＰ阻害剤を投与すること：を含む、このような治療を必要とする患者における卵巣がん又は子宮がんの治療方法を提供する。
【０００９】
本明細書に記載された方法のいずれかを実施する際、いくつかの実施態様において、少なくとも１つの治療効果が得られ、該少なくとも１つの治療効果は、子宮腫瘍若しくは卵巣腫瘍のサイズ縮小、転移の減少、完全寛解（complete remission）、部分寛解（partial remission）、病理学的完全奏効（pathologic complete response）、又は安定（stable disease）である。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤による治療と比較してＰＡＲＰ阻害剤の治療では同等の臨床的有効率（clinical benefit rate）（ＣＢＲ＝ＣＲ＋ＰＲ＋ＳＤ≧６ヵ月）が得られる。いくつかの実施態様において、臨床的有効率の改善は、抗腫瘍剤単独による治療と比較して少なくとも約３０％である。いくつかの実施態様において、ＰＡＲＰ阻害剤は、４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はその代謝物である。いくつかの実施態様において、ＰＡＲＰ阻害剤は、式（ＩＩａ）：
【化１】
2011503071.tif 000002
［式中：（１）Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも１つは、常に硫黄含有置換基であり、そして残りの置換基Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5は、水素、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、ヨード、ブロモ、フルオロ、クロロ、（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、（Ｃ1−Ｃ6）アルコキシ、（Ｃ3−Ｃ7）シクロアルキル、及びフェニルからなる群より独立して選ばれ、ここにおいて、５つのＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも２つは、常に水素であるか；又は（２）Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも１つは、硫黄含有置換基ではなく、そして５つの置換基Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5の少なくとも１つは、常にヨードであり、そしてここにおいて、該ヨードは、ニトロ、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、ヒドロキシ又はアミノ基のいずれかであるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、又はＲ5基に常に隣接しているか；のいずれかである］のもの又はその代謝物、そしてその薬学的に許容しうる塩、溶媒和物、異性体、互変異性体、代謝物、類似体、又はプロドラッグである。いくつかの実施態様において、（２）の化合物は、ヨード基が、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、ヒドロキシ又はアミノ基であるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4又はＲ5基に常に隣接するような化合物である。いくつかの実施態様において、（２）の化合物は、ヨード基が、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、又はアミノ基であるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4又はＲ5基に常に隣接するような化合物である。
【００１０】
いくつかの実施態様において、子宮がんは転移性子宮がんである。いくつかの実施態様において、子宮がんは子宮内膜がんである。いくつかの実施態様において、子宮がんは再発性、進行性、又は持続性である。いくつかの実施態様において、卵巣がんは転移性卵巣がんである。いくつかの実施態様において、卵巣がんは相同組換えＤＮＡ修復における欠損である。いくつかの実施態様において、子宮がんは相同組換えＤＮＡ修復における欠損である。いくつかの実施態様において、子宮がんはＢＲＣＡ欠損である。いくつかの実施態様において、卵巣がんはＢＲＣＡ欠損である。いくつかの実施態様において、ＢＲＣＡ欠損は、ＢＲＣＡ１欠損であり、又はＢＲＣＡ２欠損、又はＢＲＣＡ１及びＢＲＣＡ２欠損の両方である。いくつかの実施態様において、治療は、（ａ）長さ約１０〜約３０日の治療サイクルを設定し；そして（ｂ）サイクルの１〜１０日の別々の日に、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はモル当量のその代謝物を患者に投与することをさらに含む。いくつかの実施態様において、４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はその代謝物は、経口的に、又は非経口の注射剤若しくは注入剤、又は吸入剤として投与される。いくつかの実施態様において、方法は、ＰＡＲＰ阻害剤を少なくとも１つの抗腫瘍剤と組み合わせて患者に投与することを含む。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、抗腫瘍性アルキル化剤、抗腫瘍性代謝拮抗剤、抗腫瘍性抗生物質、植物由来の抗腫瘍剤、抗腫瘍性白金錯体、抗腫瘍性カンプトテシン誘導体、抗腫瘍性チロシンキナーゼ阻害剤、モノクローナル抗体、インターフェロン、生物学的反応調節剤、ホルモン抗腫瘍剤、抗腫瘍性ウイルス剤、抗血管新生剤、分化誘導剤、ＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ／ＡＫＴ阻害剤、細胞周期阻害剤、アポトーシス阻害剤、ｈｓｐ９０阻害剤、チューブリン阻害剤、ＤＮＡ修復阻害剤、抗血管新生剤、受容体チロシンキナーゼ阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤、タキサン、Ｈｅｒ−２を標的とする薬剤、ホルモン拮抗剤、成長因子受容体を標的とする薬剤、又はその薬学的に許容しうる塩である。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、シタビン、カペシタビン、バロピシタビン（valopicitabine）又はゲムシタビンである。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、アバスチン、スーテント、ネクサバール、レセンチン（Recentin）、ＡＢＴ−８６９、アキシチニブ（Axitinib）、イリノテカン、トポテカン、パクリタキセル、ドセタキセル、ラパチニブ、ヘルセプチン（Herceptin）、タモキシフェン、プロゲステロン、ステロイド性アロマターゼ阻害剤、非ステロイド性アロマターゼ阻害剤、フルベストラント、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）の阻害剤、セツキシマブ（Cetuximab）、パニツミマブ（Panitumimab）、インスリン様成長因子１受容体（ＩＧＦ１Ｒ）の阻害剤、及びＣＰ−７５１８７１からなる群より選ばれる。いくつかの実施態様において、方法は、ＰＡＲＰ阻害剤を複数の抗腫瘍剤と組み合わせて患者に投与することをさらに含む。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、ＰＡＲＰ阻害剤を投与する前に、投与と同時に又は投与した後に投与される。いくつかの実施態様において、方法は、手���、放射線治療、化学療法、遺伝子治療、ＤＮＡ治療、アジュバント療法、ネオアジュバント療法、ウイルス性治療、ＲＮＡ治療、免疫療法、ナノ療法又はそれらの組み合わせをさらに含む。いくつかの実施態様において、サンプルは、組織又は体液サンプルである。いくつかの実施態様において、サンプルは、腫瘍サンプル、血液サンプル、血漿サンプル、腹水サンプル、滲出液又は浸出液である。
【００１１】
別の態様において、本発明は、少なくとも１つのＰＡＲＰ阻害剤及び少なくとも１つの抗腫瘍剤の組み合わせを患者に投与することを含む、患者における子宮がん又は卵巣がんの治療方法を提供する。別の態様において、本発明は、（ａ）患者からサンプルを採取し；（ｂ）サンプルを試験して患者がＢＲＣＡ欠損であるかどうかを測定し；（ｃ）試験により患者がＢＲＣＡ欠損であることが示された場合、少なくとも１つのＰＡＲＰ阻害剤及び少なくとも１つの抗腫瘍剤で患者を治療すること：を含む、このような治療を必要とする患者における卵巣がん又は子宮がんの治療方法を提供する。別の態様において、本発明は、（ａ）患者からサンプルを採取し；（ｂ）サンプルを試験してサンプル中のＰＡＲＰ発現レベルを測定し；（ｃ）ＰＡＲＰ発現が所定のレベルを超えるかどうかを測定し、そしてその場合は、少なくとも１つのＰＡＲＰ阻害剤及び少なくとも１つの抗腫瘍剤を患者に投与すること：を含む、患者における子宮がん又は卵巣がんの治療方法を提供する。
【００１２】
本明細書に記載された主題の方法のいずれかを実施する際、いくつかの実施態様において、少なくとも１つの治療効果が得られ、前記少なくとも１つの治療効果は、子宮腫瘍又は卵巣腫瘍サイズの縮小、転移の減少、完全寛解、部分寛解、病理学的完全奏効、又は安定である。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤を用いるが、ＰＡＲＰ阻害剤を用いない治療と比較して臨床的有効率の改善（ＣＢＲ＝ＣＲ＋ＰＲ＋ＳＤ≧６ヵ月）が得られる。いくつかの実施態様において、臨床的有効率の改善は、少なくとも約６０％である。いくつかの実施態様において、子宮がんは転移性子宮がんである。いくつかの実施態様において、子宮がんは子宮内膜がんである。いくつかの実施態様において、子宮がんは再発性、進行性、又は持続性である。いくつかの実施態様において、卵巣がんは転移性卵巣がんである。いくつかの実施態様において、卵巣がんは相同組換えＤＮＡ修復における欠損である。いくつかの実施態様において、子宮がんは相同組換えＤＮＡ修復における欠損である。いくつかの実施態様において、子宮がんはＢＲＣＡ欠損である。いくつかの実施態様において、卵巣がんはＢＲＣＡ欠損である。いくつかの実施態様において、ＢＲＣＡ欠損は、ＢＲＣＡ１欠損又はＢＲＣＡ２欠損、又はＢＲＣＡ１及びＢＲＣＡ２欠損の両方である。いくつかの実施態様において、ＰＡＲＰ阻害剤は、ベンズアミド又はその代謝物である。いくつかの実施態様において、ＰＡＲＰ阻害剤は、４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はその代謝物である。いくつかの実施態様において、ＰＡＲＰ阻害剤は、式（ＩＩａ）：
【化２】
2011503071.tif 000003
［式中：（１）Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも１つは、常に硫黄含有置換基であり、そして残りの置換基Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5は、水素、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、ヨード、ブロモ、フルオロ、クロロ、（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、（Ｃ1−Ｃ6）アルコキシ、（Ｃ3−Ｃ7）シクロアルキル、及びフェニルからなる群より独立して選ばれ、ここにおいて、５つのＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも２つは、常に水素であるか；又は（２）Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも１つは、硫黄含有置換基でなく、そして５つの置換基Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5の少なくとも１つは、常にヨードであり、そしてここにおいて、該ヨードは、ニトロ、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、ヒドロキシ又はアミノ基のいずれかであるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、又はＲ5基に常に隣接しているか：のいずれか］のもの又はその代謝物、そしてその薬学的に許容しうる塩、溶媒和物、異性体、互変異性体、代謝物、類似体、又はプロドラッグである。いくつかの実施態様において、（２）の化合物は、ヨード基が、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、ヒドロキシ又はアミノ基であるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、又はＲ5基に常に隣接するような化合物である。いくつかの実施態様において、（２）の化合物は、ヨード基が、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、又はアミノ基であるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4又はＲ5基に常に隣接するような化合物である。
【００１３】
いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、抗腫瘍性アルキル化剤、抗腫瘍性代謝拮抗剤、抗腫瘍性抗生物質、植物由来の抗腫瘍剤、抗腫瘍性白金錯体、抗腫瘍性カンプトテシン誘導体、抗腫瘍性チロシンキナーゼ阻害剤、モノクローナル抗体、インターフェロン、生物学的反応調節剤、ホルモン抗腫瘍剤、抗腫瘍性ウイルス剤、血管新生阻害剤、分化誘導剤、ＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ／ＡＫＴ阻害剤、細胞周期阻害剤、アポトーシス阻害剤、ｈｓｐ９０阻害剤、チューブリン阻害剤、ＤＮＡ修復阻害剤、抗血管新生剤、受容体チロシンキナーゼ阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤、タキサン、Ｈｅｒ−２を標的とする薬剤、抗ホルモン、成長因子受容体を標的とする薬剤、又はそれらの薬学的に許容しうる塩である。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、シタビン、カペシタビン、バロピシタビン又はゲムシタビンである。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、アバスチン、スーテント、ネクサバール、レセンチン、ＡＢＴ−８６９、アキシチニブ、イリノテカン、トポテカン、パクリタキセル、ドセタキセル、ラパチニブ、ヘルセプチン、タモキシフェン、プロゲステロン、ステロイド性アロマターゼ阻害剤、非ステロイド性アロマターゼ阻害剤、フルベストラント、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）の阻害剤、セツキシマブ、パニツミマブ、インスリン様成長因子１受容体（ＩＧＦ１Ｒ）の阻害剤、及びＣＰ−７５１８７１からなる群より選ばれる。いくつかの実施態様において、方法は、手術、放射線治療、化学療法、遺伝子治療、ＤＮＡ治療、アジュバント療法、ネオアジュバント治療、ウイルス性治療、ＲＮＡ治療、免疫療法、ナノ治療又はそれらの組み合わせをさらに含む。いくつかの実施態様において、方法は、少なくとも１１日の治療サイクルを選び、そして：（ａ）サイクルの１〜５日の別々の日に１００〜約２０００ｍｇ／ｍ2のパクリタキセルを患者に投与し；（ｂ）サイクルの１〜５日の別々の日に１０〜４００ｍｇ／ｍ2のカルボプラチンを患者に投与し；そして（ｃ）サイクルの１〜１０日の別々の日に１〜１００ｍｇ／ｋｇの４−ヨード−３−ニトロベンズアミドを患者に投与すること：をさらに含む。いくつかの実施態様において、パクリタキセルは静脈内注入剤として投与される。いくつかの実施態様において、カルボプラチンは静脈内注入剤として投与される。いくつかの実施態様において、４−ヨード−３−ニトロベンズアミドは、経口的に、又は非経口の注射剤若しくは注入剤、又は吸入剤として投与される。いくつかの実施態様において、サンプルは、組織又は体液サンプルである。いくつかの実施態様において、サンプルは、腫瘍サンプル、血液サンプル、血漿サンプル、腹水サンプル、滲出液又は浸出液である。
【００１４】
参照による組み込み
本明細書に記載されたすべての刊行物及び特許出願は、個々の刊行物又は特許出願が参照により組み込まれるべく、具体的にそして個々に示されたのと同じ範囲まで参照により本明細書に組み込まれる。
【００１５】
本発明の新規な特徴は、添付の特許請求の範囲に具体的に記載されている。本発明の特徴及び効果は、本発明の原理を利用する具体的な実施態様が記載された以下の詳細な説明を参照することによってより良好に理解され、そして添付の図面について：
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】ヒト原発がんにおけるＰＡＲＰ１遺伝子発現の上方制御を示す。水平線、ＰＡＲＰ１発現の中央値；囲み、四分位範囲；バー、標準偏差。
【図２】ＳＣＩＤマウスのＯＶＣＡＲ−３異種移植モデルにおける４−ヨード−３−ニトロベンズアミドによるＰＡＲＰの阻害を示す。
【図３】ＯＶＣＡＲ−３卵巣がん腫瘍モデルにおける４−ヨード−３−ニトロベンズアミドのカプラン−マイヤープロットを示す。
【図４】卵巣がんを有する患者におけるトポテカンと組み合わせたＢＡ治療の４サイクル後の腫瘍反応を示す。
【図５】４−ヨード−３−ニトロベンズアミドを摂取している患者からの末梢単核血液細胞（ＰＭＢＣ）におけるＰＡＲＰ阻害を示す。
【図６】ＢＡが子宮頚部腺がんヒーラ細胞の増殖を阻害することを示す。
【００１７】
詳細な説明
卵巣がんの治療
卵巣がんは、女性におけるがんによる死亡の第５位にランクしており、早期段階で検出するのが困難である。腫瘍の成長が隣接する組織に広がる前に見出されるのは約２０パーセントの卵巣がんのみである。３つの基本的なタイプの卵巣腫瘍があり、上皮性腫瘍、胚細胞腫瘍及び間質細胞腫瘍が含まれる。
【００１８】
卵巣がんの有意な危険因子には、ＢＲＣＡ１又はＢＲＣＡ２遺伝子に受け継がれた突然変異が含まれる。これらの遺伝子は、乳がんの複数の症例を有するファミリーで同定されているが、約５〜１０パーセントの卵巣がんと関連している。
【００１９】
手術、免疫療法、化学療法、ホルモン療法、放射線治療又はそれらの組み合わせは、卵巣がんのために入手できるいくつかの可能な治療である。いくつかの可能な外科的手技としては、減量及び片側若しくは両側卵巣摘出術及び／又は片側若しくは両側卵管摘除術が含まれる。また、使用される抗がん剤としては、シクロホスファミド、エトポシド、アルトレタミン及びイホスファミドが含まれる。また、薬物タモキシフェンを用いるホルモン療法も、卵巣腫瘍を縮小するために用いられる。放射線治療には、外照射療法及び／又は近接照射療法が場合により含まれる。
【００２０】
本明細書に記載されたいくつかの実施態様は、少なくとも１つのＰＡＲＰ阻害剤を患者に投与することを含む、患者における卵巣がんの治療方法を提供する。いくつかの実施態様において、少なくとも１つの治療効果が得られ、該少なくとも１つの治療効果は、卵巣腫瘍のサイズ縮小、転移の減少、完全寛解（complete remission）、部分寛解（partial remission）、病理学的完全奏効（pathologic complete response）、又は安定（stable disease）である。いくつかの実施態様において、ＰＡＲＰ阻害剤なしの治療と比較して臨床的有効率（clinical benefit rate）の改善（ＣＢＲ＝ＣＲ＋ＰＲ＋ＳＤ≧６ヵ月）が得られる。いくつかの実施態様において、臨床的有効率の改善は、少なくとも約３０％である。いくつかの実施態様において、ＰＡＲＰ阻害剤は、ＰＡＲＰ−１阻害剤である。別の実施態様において、ＰＡＲＰ−１阻害剤は、ベンズアミド又はその代謝物である。いくつかの実施態様において、ベンズアミドは、４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はその代謝物である。いくつかの実施態様において、卵巣がんは、転移性卵巣がんである。いくつかの実施態様において、卵巣がん患者においてＢＲＣＡ遺伝子の欠損が検出される。いくつかの実施態様において、ＢＲＣＡ遺伝子は、ＢＲＣＡ１である。別の実施態様において、ＢＲＣＡ遺伝子は、ＢＲＣＡ−２である。さらに別の実施態様において、ＢＲＣＡ遺伝子は、ＢＲＣＡ−１及びＢＲＣＡ−２である。別の実施態様において、欠損は、ＢＲＣＡ遺伝子における遺伝子欠損である。いくつかの実施態様において、遺伝子欠損は、ＢＲＣＡ遺伝子の突然変異、挿入、置換、重複又は欠失である。
【００２１】
いくつかの実施態様において、卵巣がんの治療方法は、ＰＡＲＰ阻害剤を抗腫瘍剤と組み合わせて投与することをさらに含む。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、抗腫瘍性アルキル化剤、抗腫瘍性代謝拮抗剤、抗腫瘍性抗生物質、抗腫瘍性ウイルス剤、植物由来の抗腫瘍剤、抗腫瘍性白金錯体、抗腫瘍性カンプトテシン誘導体、抗腫瘍性チロシンキナーゼ阻害剤、モノクローナル抗体、インターフェロン、生物学的反応調節剤、ホルモン抗腫瘍剤、抗血管新生剤、分化誘導剤、若しくは抗腫瘍活性を示す他の薬剤、又はそれらの薬学的に許容しうる塩である。いくつかの実施態様において、白金錯体は、シスプラチン、カルボプラチン、オキサプラチン又はオキサリプラチンである。いくつかの実施態様において、代謝拮抗剤は、シタビン、カペシタビン、ゲムシタビン又はバロピシタビンである。いくつかの実施態様において、方法は、ＰＡＲＰ阻害剤を複数の抗腫瘍剤と組み合わせて患者に投与することをさらに含む。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、ＰＡＲＰ阻害剤を投与する前に、投与と同時に又は投与した後に投与される。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、アバスチンのような抗血管新生剤又はスーテント、ネクサバール、レセンチン（Recentin）、ＡＢＴ−８６９及びアキシチニブ（Axitinib）を含むがそれらに制限されない受容体チロシンキナーゼ阻害剤である。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、イリノテカン、トポテカン、又はカンプトセシンを含むがこれらに制限されないトポイソメラーゼ阻害剤である。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、パクリタキセル、ドセタキセル及びアブラキサンを含むがこれらに制限されないタキサンである。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、Ｈｅｒ−２を標的とする薬剤、例えばヘルセプチン（Herceptin）又はラパチニブである。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、ホルモン類似体、例えばプロゲステロンである。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、タモキシフェン、ステロイド性アロマターゼ阻害剤、非ステロイド性アロマターゼ阻害剤、又はフルベストラントである。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、成長因子受容体を標的とする薬剤である。いくつかの実施態様において、このような薬剤は、セツキシマブ（Cetuximab）及びパニツミマブ（Panitumimab）を含むがこれらに制限されない上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）の阻害剤である。いくつかの実施態様において、成長因子受容体を標的とする薬剤は、ＣＰ−７５１８７１のようなインスリン様成長因子１（ＩＧＦ−１）受容体（ＩＧＦ１Ｒ）の阻害剤である。別の実施態様において、方法は、手術、放射線治療、化学療法、遺伝子治療、ＤＮＡ治療、アジュバント療法、ネオアジュバント療法、ウイルス性治療、ＲＮＡ治療、免疫療法、ナノ療法又はそれらの組み合わせをさらに含む。
【００２２】
いくつかの実施態様において、治療は、少なくとも１１日、すなわち長さ約１１〜約３０日の治療サイクルを含み、その際、サイクルの１〜１０日の別々の日に、約１〜約１００ｍｇ／ｋｇの４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はモル当量のその代謝物を患者に投与する。いくつかの実施態様において、サイクルの１〜１０日の別々の日に、約１〜約５０ｍｇ／ｋｇの４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はモル当量のその代謝物を患者に投与する。いくつかの実施態様において、サイクルの１〜１０日の別々の日に、約１、２、３、４、６、８又は１０、１２、１４、１６、１８又は２０ｍｇ／ｋｇの４−ヨード−３−ニトロベンズアミドを患者に投与する。
【００２３】
本明細書に記載されたいくつかの実施態様は、２１日の治療サイクル中、サイクルの日１、４、８及び１１に、約１０〜約１００ｍｇ／ｋｇの４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はモル当量のその代謝物を患者に投与することを含む、ＢＲＣＡ遺伝子に欠損を有する患者における卵巣がんの治療方法を提供する。いくつかの実施態様において、４−ヨード−３−ニトロベンズアミドは、経口的に、又は非経口の注射剤若しくは注入剤、又は吸入剤として投与される。
【００２４】
本明細書に記載されたいくつかの実施態様は、（ａ）長さ約１０〜約３０日の治療サイクルを設定し；（ｂ）サイクルの１〜１０日の別々の日に１ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇの４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はモル当量のその代謝物を患者に投与すること：を含む、ＢＲＣＡ遺伝子に欠損を有する患者における卵巣がんの治療方法を提供する。いくつかの実施態様において、４−ヨード−３−ニトロベンズアミドは、経口的に、又は非経口の注射剤若しくは注入剤、又は吸入剤として投与される。
【００２５】
本明細書において提供されるいくつかの実施態様は、（ａ）患者からサンプルを採取し；（ｂ）サンプルを試験してＢＲＣＡ遺伝子に欠損があるかどうかを測定し；（ｃ）試験により患者がＢＲＣＡ遺伝子に欠損を有することが示された場合、少なくとも１つのＰＡＲＰ阻害剤で患者を治療し；そして（ｄ）試験により患者がＢＲＣＡ遺伝子に欠損を有することが示されなかった場合、異なる治療選択肢を選ぶこと：を含む、このような治療を必要とする患者における卵巣がんの治療方法を含む。いくつかの実施態様において、少なくとも１つの治療効果が得られ、前記少なくとも１つの治療効果は、卵巣腫瘍のサイズ縮小、転移の減少、完全寛解、部分寛解、病理学的完全奏効、又は安定である。いくつかの実施態様において、ＰＡＲＰ阻害剤なしの治療と比較して臨床的有効率（ＣＢＲ＝ＣＲ＋ＰＲ＋ＳＤ≧６ヵ月）の改善が得られる。いくつかの実施態様において、臨床的有効率は、少なくとも約３０％である。いくつかの実施態様において、ＰＡＲＰ阻害剤は、ＰＡＲＰ−１阻害剤である。別の実施態様において、ＰＡＲＰ−１阻害剤は、ベンズアミド又はその代謝物である。いくつかの実施態様において、ベンズアミドは、４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はその代謝物である。いくつかの実施態様において、サンプルは、組織又は体液サンプルである。いくつかの実施態様において、サンプルは、腫瘍サンプル、血液サンプル、血漿サンプル、腹水サンプル、滲出液又は浸出液である。いくつかの実施態様において、卵巣がんは、転移性卵巣がんである。いくつかの実施態様において、ＢＲＣＡ遺伝子は、ＢＲＣＡ−１である。別の実施態様において、ＢＲＣＡ遺伝子は、ＢＲＣＡ−２である。いくつかの実施態様において、ＢＲＣＡ遺伝子は、ＢＲＣＡ−１及びＢＲＣＡ−２である。別の実施態様において、欠損は、ＢＲＣＡ遺伝子における遺伝子欠損である。いくつかの実施態様において、遺伝子欠損はＢＲＣＡ遺伝子の突然変異、挿入、置換、重複又は欠失である。
【００２６】
いくつかの実施態様は、（ａ）患者からのサンプルをＰＡＲＰ発現について試験し；そして（ｂ）ＰＡＲＰ発現が所定のレベルを超える場合、患者に少なくとも１つのＰＡＲＰ阻害剤を投与すること：を含む、患者における卵巣がんの治療方法を提供する。いくつかの実施態様において、少なくとも１つの治療効果が得られ、前記少なくとも１つの治療効果は、卵巣腫瘍のサイズ縮小、転移の減少、完全寛解、部分寛解、病理学的完全奏効、又は安定である。いくつかの実施態様において、ＰＡＲＰ阻害剤なしの治療と比較して臨床的有効率（ＣＢＲ＝ＣＲ＋ＰＲ＋ＳＤ≧６ヵ月）の改善が得られる。いくつかの実施態様において、臨床的有効率の改善は、少なくとも約３０％である。いくつかの実施態様において、ＰＡＲＰ阻害剤は、ＰＡＲＰ−１阻害剤である。別の実施態様において、ＰＡＲＰ−１阻害剤は、ベンズアミド又はその代謝物である。いくつかの実施態様において、ベンズアミドは、４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はその代謝物である。いくつかの実施態様において、卵巣がんは、転移性卵巣がんである。
【００２７】
子宮がん及び子宮内膜がんの治療
がん性及び肉腫性の両方の要素を含む悪性の子宮新生物は、子宮新生物の世界保健機構（ＷＨＯ）の分類においてがん肉腫として明記されている。別の名称は、悪性ミュラー管混合腫瘍（ＭＭＭＴ）である。ほとんどの子宮がん肉腫は、単クローン性であってがん性要素が鍵要素であり、そしてがん腫から又は異なる分化を受けた幹細胞から誘導された肉腫性成分（すなわち化生性がん）である。肉腫性成分は、相同性（子宮において通常見出される組織で構成される）又は非相同（子宮において通常見出されない組織、多くの場合、悪性軟骨又は骨格筋を含む）である。
【００２８】
子宮のがん肉腫における多くの単剤を調査した以前の研究は、以下の奏効率を報告している：エトポシド（６．５％）；ドキソルビシン（９．８％）；シスプラチン（１８％）；イホスファミド（３２．２％）；パクリタキセル（１８．２％）；及びトポテカン（１０％）。従って、これまで発見された３つの最も活性な薬剤には、シスプラチン、イホスファミド及びパクリタキセルが含まれる。イホスファミド対イホスファミド＋シスプラチンを比較するランダム化第３相試験は、高められた奏効率（３６％対５４％）、無増悪生存の中央値における僅かな改善（４対６ヵ月、ｐ＝０．０２）を示したが、生存の中央値における改善を示さなかった（７．６対９．４ヵ月、ｐ＝０．０７）。第二のランダム化試験では、パクリタキセルの役割を評価した。この研究では、患者は、ランダム化されてイホスファミド対イホスファミド＋パクリタキセルの組み合わせを摂取し、そして高められた奏効率（２９％対４５％）、無増悪生存の中央値における改善（３．６対５．８ヵ月、ｐ＝０．０３）、及び生存の中央値における改善（８．４対１３．５ヵ月、ｐ＝０．０３）を示した。イホスファミドの使用は厄介であり、有意の毒性を生じる。
【００２９】
非常に関連のある疾患、子宮内膜がんでは、最適治療の問題を扱ういくつかのランダム化試験がある。この研究は、第２相試験で同定された３つの活性剤：ドキソルビシン、白金薬剤及びパクリタキセルに焦点を合わせた。１つの研究では、２８１人の女性をドキソルビシン（６０ｍｇ／ｍ2）単独対ドキソルビシン（６０ｍｇ／ｍ2）＋シスプラチン（５０ｍｇ／ｍ2）（ＡＰ）にランダム化する。併用療法には、奏効率（ＲＲ）（４２％対２５％；ｐ＝０．００４）及びＰＦＳ（３．８対５．７ヵ月；ＨＲ ０．７４［９５％ＣＩ ０．５８、０．９４；ｐ＝０．１４）に関しては、統計学的に有意な利点があるが、ＯＳにおける差は観察されなかった（９対９．２ヵ月）。パクリタキセルは、進行性又は再発性の子宮内膜がんにおいて３６％の奏効率で有意な単剤活性を有した。従って、３１７人の患者をパクリタキセル及びドキソルビシン又は標準治療群にランダム化した。この研究は、２つの治療群間のＲＲ、ＰＦＳ又はＯＳにおける有意差を示すことに失敗し、そしてＡＰが治療標準として残った。しかしながら、白金及びパクリタキセルの両方が高い単剤活性を示したため、進行性及び再発性の子宮内膜がんのための最先端のレジメンでは、パクリタキセル及びシスプラチンを含めることに強い興味が持たれている。続いて、別の研究では、２６３人の患者をＡＰ対ＴＡＰにランダム化した：
日１にドキソルビシン（４５ｍｇ／ｍ2）及びシスプラチン（５０ｍｇ／ｍ2）、続いて日２にパクリタキセル（３時間かけて１６０ｍｇ／ｍ2 ＩＶ）（Ｇ−ＣＳＦ支持により）。ＴＡＰは、ＯＲＲ（５７％対３４％；ｐ＜０．０１）、ＰＦＳ（８．３対５．３ヵ月；ｐ＜０．０１）の中央値及びＯＳ中央値１５．３（ＴＡＰ）対１２．３ヵ月（ＡＰ）（ｐ＝０．０３７）に関してＡＰよりも優れている。しかしながら、この改善された有効性は、増強された毒性の代価として得られた。
【００３０】
子宮腫瘍
子宮腫瘍は、体、峡部（子宮頚内膜と子宮体部との間の移行）及び頸部に局在化することができる新生物の群からなる。また、卵管及び子宮靭帯は、腫瘍変換を受けることがある。子宮腫瘍は、子宮内膜、筋肉又は他の支持組織に影響を及ぼすことがある。子宮腫瘍は、組織学的及び生物学的に異なり、いくつかのタイプに分けることができる。子宮腫瘍は、いくつかの分類系に従って組織学的に分類することができる。最も頻繁に使用されるものは、ＷＨＯ（世界保健機構）の腫瘍の国際組織分類（International Histological Classification of Tumours）及びＩＳＧＹＰ（国際婦人科病理学会（International Society of Gynecological Pathologists））に基づく。最も広く認められた病期分類系は、ＦＩＧＯ（世界産婦人科連合（International Federation of Gynecology and Obstetrics））のものである。
【００３１】
分類
ＷＨＯ推奨によれば、主な子宮頸部のカテゴリーは、上皮性腫瘍；間葉性腫瘍；上皮性・間葉性混合腫瘍；及び二次腫瘍：である。また、主な子宮体部のカテゴリーは、ＷＨＯ推奨によれば、上皮性腫瘍、間葉性腫瘍、上皮性・間葉性混合腫瘍（mixed epithelial and mesenchymal tumors）、絨毛性腫瘍、及び二次腫瘍：である。子宮がんは、最も一般的であり、具体的には子宮体部の子宮内膜がんである。
【００３２】
子宮体部の新形成
最も一般的な子宮体部の悪性腫瘍は、子宮内膜がん（約９５％）であり；肉腫は４％を占めるだけであり、そして横紋筋肉腫、骨肉腫及び軟骨肉腫のような異種組織腫瘍は、残りの１％である。
【００３３】
子宮内膜がんは、原因、分化、遺伝的背景及び臨床結果に基づいていくつかのサブタイプを有する。子宮内膜がんは、通常、子宮内膜で生じる腺分化による上皮性腫瘍として定義され、それは子宮筋層に浸潤して遠位の部位に広がる可能性がある。子宮内膜がんは、類子宮内膜腺がん、漿液性がん、明細胞がん、粘液がん、漿液性がん、混合型のがん腫、及び未分化がんとして分類することができる。子宮内膜がんは、異質な実体（heterogeneous entity）であり、Ｉ型：類内膜がん：閉経期前及び閉経期前後、エストロゲン依存性、子宮内膜増殖症に関連、低グレード、不活性な性質、症例の約８０％を占める；ＩＩ型：漿液性がん：閉経後、エストロゲン非依存性、萎縮性子宮内膜に関連、高グレード、活動的な性質、症例の約１０％を占める：を含む。他の組織学的なタイプの中には、Ｉ型としては、粘液性及び分泌性がんが含まれるのに対して、ＩＩ型としては、明細胞腫及び腺扁平上皮がんが含まれる(Gurpide E, J Natl Cancer Inst 1991; 83: 405−416; Blaustein's Pathology of the Female Genital Tract, Kurman R.J. 4th ed. Springer−Verlag. New−York 1994)。
【００３４】
子宮頸部の新形成
世界的に見て、浸潤性子宮頸がんは、乳がんの後、二次的に最もよくみられる女性の悪性腫瘍であり、毎年５００，０００件の新しい症例が診断されている。子宮頚がんは、上皮性新形成及び間葉性新形成のようないくつかのサブタイプを有する。
【００３５】
病因論
子宮頸部のがん腫は、前駆体病変から生じると考えられ、種々のサブタイプのヒト乳頭腫ウィルス（ＨＰＶ）は、疾患の病原論における主要な病因学的要因である。
【００３６】
子宮腫瘍の異質性（Heterogenity）は、この種のがんを治療及び治癒するための治療法を見出して最適化するための挑戦を提供し、そして他のがんに有効な化学療法剤は、子宮内膜がんのような子宮腫瘍に有効ではない。一例として、タモキシフェンを挙げることができる。選択的エストロゲン受容体（ＥＲ）モジュレーター、タモキシフェンは、乳がん治療に最も広く処方されるホルモン療法である。タモキシフェン治療が有益であるにもかかわらず、タモキシフェンに反応性のほとんどすべての乳がん患者は、治療に対する抵抗性を生じる。タモキシフェン治療はいくらか利益があるにもかかわらず、タモキシフェンに反応性のほとんどすべての乳がん患者は、治療に対する抵抗性を生じる。さらに、タモキシフェンは、子宮内膜においてエストロゲン様効果を示し、子宮内膜がんの発生率を高める(Fisher B, Costantino JP, Redmond CK, et al. J Natl Cancer Inst 1994; 86:527−37; Shah YM, et.al. Mol Cancer Ther. 2005 Aug;4(8): 1239−49)。
【００３７】
持続性又は再発性の非子宮頚部扁平上皮がん（nonsquamous cell carcinoma of the cervix）の患者において、タモキシフェンの抗腫瘍活性を評価するための研究が、Gynecologic Oncology Groupによって実施された(L. R. Bigler, J. et.al. (2004) International Journal of Gynecological Cancer 14 (5), 871−874)。疾患進行又は許容できない副作用がさらなる治療を妨げるまでクエン酸タモキシフェンを１日２回経口的に１０ｍｇの用量で投与する。合計３４人の患者（年齢の中央値：４９歳）がこの研究に登録され；２人が不適格であると宣告された。３２人の患者が副作用について評価可能であり、そして２７人が反応について評価可能であった。グレード３及び４の６種類の副作用しか報告されていない：白血球減少（１人の患者）、貧血（２人）、嘔吐（１人）、胃腸障害（１人）及び神経障害（１人）。客観的奏効率は１１．１％であり、完全奏効１人及び部分奏効２人であった。結論として、タモキシフェンは、非子宮頚部扁平上皮がんにおいて最小限の活性を有すると考えられる。
【００３８】
従って、本明細書に記載されたいくつかの実施態様は、患者における子宮がん又は子宮内膜がんの治療方法を提供する。少なくとも１つのＰＡＲＰ阻害剤を患者に投与することを含む。いくつかの実施態様において、少なくとも１つの治療効果が得られ、前記少なくとも１つの治療効果は、子宮腫瘍のサイズ縮小、転移の減少、完全寛解、部分寛解、病理学的完全奏効、又は安定である。いくつかの実施態様において、ＰＡＲＰ阻害剤なしの治療と比較して臨床的有効率（ＣＢＲ＝ＣＲ＋ＰＲ＋ＳＤ≧６ヵ月）の改善が得られる。いくつかの実施態様において、臨床的有効率の改善は、少なくとも約３０％である。いくつかの実施態様において、ＰＡＲＰ阻害剤は、ＰＡＲＰ−１阻害剤である。別の実施態様において、ＰＡＲＰ−１阻害剤は、ベンズアミド又はその代謝物である。いくつかの実施態様において、ベンズアミドは、４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はその代謝物である。いくつかの実施態様において、子宮がんは、転移性子宮がんである。いくつかの実施態様において、子宮がんは、再発性、進行性又は持続性である。
【００３９】
いくつかの実施態様において、子宮がん又は子宮内膜がんの治療方法は、ＰＡＲＰ阻害剤を抗腫瘍剤と組み合わせて投与することをさらに含む。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、抗腫瘍性アルキル化剤、抗腫瘍性代謝拮抗剤、抗腫瘍性抗生物質、植物由来の抗腫瘍剤、抗腫瘍性白金錯体、抗腫瘍性カンプトテシン誘導体、抗腫瘍性チロシンキナーゼ阻害剤、モノクローナル抗体、インターフェロン、生物学的反応調節剤、ホルモン抗腫瘍剤、抗腫瘍性ウイルス剤、抗血管新生剤、分化誘導剤、若しくは抗腫瘍活性を示す他の薬剤、又はそれらの薬学的に許容しうる塩である。いくつかの実施態様において、白金錯体は、シスプラチン、カルボプラチン、オキサプラチン又はオキサリプラチンである。いくつかの実施態様において、代謝拮抗剤は、シタビン、カペシタビン、ゲムシタビン又はバロピシタビンである。いくつかの実施態様において、方法は、ＰＡＲＰ阻害剤を複数の抗腫瘍剤と組み合わせて患者に投与することをさらに含む。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、ＰＡＲＰ阻害剤を投与する前に、投与と同時に又は投与した後に投与される。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、アバスチンのような抗血管新生剤又はスーテント、ネクサバール、レセンチン、ＡＢＴ−８６９及びアキシチニブを含むがそれらに制限されない受容体チロシンキナーゼ阻害剤である。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、イリノテカン、トポテカン、又はカンプトセシンを含むがこれらに制限されないトポイソメラーゼ阻害剤である。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、パクリタキセル、ドセタキセル及びアブラキサンを含むがこれらに制限されないタキサンである。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、Ｈｅｒ−２を標的とする薬剤、例えばヘルセプチン又はラパチニブである。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、ホルモン類似体、例えばプロゲステロンである。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、タモキシフェン、ステロイド性アロマターゼ阻害剤、非ステロイド性アロマターゼ阻害剤、又はフルベストラントである。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、成長因子受容体を標的とする薬剤である。いくつかの実施態様において、このような薬剤は、セツキシマブ及びパニツミマブを含むがこれらに制限されない上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）の阻害剤である。いくつかの実施態様において、成長因子受容体を標的とする薬剤は、ＣＰ−７５１８７１のようなインスリン様成長因子１（ＩＧＦ−１）受容体（ＩＧＦ１Ｒ）の阻害剤である。別の実施態様において、方法は、手術、放射線治療、化学療法、遺伝子治療、ＤＮＡ治療、アジュバント療法、ネオアジュバント療法、ウイルス性治療、ＲＮＡ治療、免疫療法、ナノ療法又はそれらの組み合わせをさらに含む。
【００４０】
いくつかの実施態様において、治療は、少なくとも１１日、すなわち長さ約１１〜約３０日の治療サイクルを含み、その際、サイクルの１〜１０日の別々の日に、患者は、約１〜約１００ｍｇ／ｋｇの４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はモル当量のその代謝物を摂取する。いくつかの実施態様において、サイクルの１〜１０日の別々の日に、患者は、約１〜約５０ｍｇ／ｋｇの４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はモル当量のその代謝物を摂取する。いくつかの実施態様において、サイクルの１〜１０日の別々の日に、患者は、約１、２、３、４、６、８又は１０、１２、１４、１６、１８又は２０ｍｇ／ｋｇの４−ヨード−３−ニトロベンズアミドを摂取する。
【００４１】
本明細書に記載されたいくつかの実施態様は、２１日の治療サイクル中、サイクルの日１、４、８及び１１に約１〜約１００ｍｇ／ｋｇの４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はモル当量のその代謝物を患者に投与することを含む、患者における子宮がん又は子宮内膜がんの治療方法を提供する。いくつかの実施態様において、４−ヨード−３−ニトロベンズアミドは、経口的に、又は非経口の注射剤若しくは注入剤、又は吸入剤として投与される。
【００４２】
本明細書に記載されたいくつかの実施態様は、（ａ）長さ約１０〜約３０日の治療サイクルを設定し；（ｂ）サイクルの１〜１０日の別々の日に約１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はモル当量のその代謝物を患者に投与すること：を含む、患者における子宮がん又は子宮内膜がんの治療方法を提供する。いくつかの実施態様において、４−ヨード−３−ニトロベンズアミドは、経口的に、又は非経口の注射剤若しくは注入剤、又は吸入剤として投与される。
【００４３】
本明細書において提供されるいくつかの実施態様は、（ａ）患者からサンプルを採取し；（ｂ）子宮がんが再発性、持続性又は進行性であるかどうかを測定し；（ｃ）試験により子宮がんが再発性、持続性又は進行性であることが示された場合、少なくとも１つのＰＡＲＰ阻害剤で患者を治療し；そして（ｄ）試験により子宮がんが再発性、持続性又は進行性であることが示されなかった場合、異なる治療選択肢を選ぶこと：を含む、このような治療を必要とする患者における子宮がんの治療方法を含む。いくつかの実施態様において、少なくとも１つの治療効果が得られ、前記少なくとも１つの治療効果は、子宮腫瘍のサイズ縮小、転移の減少、完全寛解、部分寛解、病理学的完全奏効、又は安定である。いくつかの実施態様において、ＰＡＲＰ阻害剤なしの治療と比較して臨床的有効率（ＣＢＲ＝ＣＲ＋ＰＲ＋ＳＤ≧６ヵ月）の改善が得られる。いくつかの実施態様において、臨床的有効率は、少なくとも約３０％である。いくつかの実施態様において、ＰＡＲＰ阻害剤は、ＰＡＲＰ−１阻害剤である。別の実施態様において、ＰＡＲＰ−１阻害剤は、ベンズアミド又はその代謝物である。いくつかの実施態様において、ベンズアミドは、４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はその代謝物である。いくつかの実施態様において、サンプルは、組織又は体液サンプルである。いくつかの実施態様において、サンプルは、腫瘍サンプル、血液サンプル、血漿サンプル、腹水サンプル、滲出液又は浸出液である。いくつかの実施態様において、子宮がんは、転移性子宮がんである。
【００４４】
いくつかの実施態様は、（ａ）患者からのサンプルをＰＡＲＰ発現について試験し；そして（ｂ）ＰＡＲＰ発現が所定のレベルを超える場合、患者に少なくとも１つのＰＡＲＰ阻害剤を投与すること：を含む、患者における子宮がん、子宮内膜がん、又は卵巣がんの治療方法を提供する。いくつかの実施態様において、少なくとも１つの治療効果が得られ、前記少なくとも１つの治療効果は、子宮腫瘍のサイズ縮小、転移の減少、完全寛解、部分寛解、病理学的完全奏効、又は安定である。いくつかの実施態様において、ＰＡＲＰ阻害剤なしの治療と比較して臨床的有効率（ＣＢＲ＝ＣＲ＋ＰＲ＋ＳＤ≧６ヵ月）の改善が得られる。いくつかの実施態様において、臨床的有効率の改善は、少なくとも約３０％である。いくつかの実施態様において、ＰＡＲＰ阻害剤は、ＰＡＲＰ−１阻害剤である。別の実施態様において、ＰＡＲＰ−１阻害剤は、ベンズアミド又はその代謝物である。いくつかの実施態様において、ベンズアミドは、４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はその代謝物である。いくつかの実施態様において、子宮がんは、転移性子宮がんである。いくつかの実施態様において、卵巣がんは、転移性卵巣がんである。
【００４５】
従って、本明細書に提供された実施態様は、少なくとも１つがＰＡＲＰ阻害剤であるものを用いて患者を治療することを含み、その際、ＰＡＲＰ阻害剤は、場合によりＰＡＲＰ−１阻害剤である。いくつかの実施態様において、１つ又はそれ以上のこれらの物質は、さまざまな物理的形態−例えば遊離塩基、塩（特に薬学的に許容しうる塩）、水和物、多形体、溶媒和物、などで存在することができる。本明細書において特に明記しない限り、化学名の使用は、記載された化学物質のすべての物理的形態を包含するものとする。例えば、特に制限のない４−ヨード−３−ニトロベンズアミドの説明は、一般的に遊離塩基だけでなくすべての薬学的に許容しうる塩、多形体、水和物、などを包含するものとする。本開示又は特許請求の範囲を化合物の特定の物理的形態に制限しようとする場合、これは、化合物への参照が記載された引用文の文脈又は特許請求の範囲から明らかである。
【００４６】
いくつかの実施態様において、本明細書の開示は、少なくとも１つの抗腫瘍剤及び少なくとも１つのＰＡＲＰ阻害剤の組み合わせを患者に投与することを含む、患者における子宮がん、子宮内膜がん、又は卵巣がんの治療方法を提供する。いくつかの実施態様において、少なくとも１つの治療効果が得られ、前記少なくとも１つの治療効果は、腫瘍のサイズ縮小、転移の減少、完全寛解、部分寛解、病理学的完全奏効、又は安定である。いくつかの実施態様において、ＰＡＲＰ阻害剤は、ベンズアミド又はその代謝物である。いくつかの実施態様において、ベンズアミドは、４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はその代謝物である。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、抗腫瘍性アルキル化剤、抗腫瘍性代謝拮抗剤、抗腫瘍性抗生物質、植物由来の抗腫瘍剤、抗腫瘍性白金錯体、抗腫瘍性カンプトテシン誘導体、抗腫瘍性チロシンキナーゼ阻害剤、モノクローナル抗体、インターフェロン、生物学的反応調節剤、ホルモン抗腫瘍剤、抗腫瘍性ウイルス剤、抗血管新生剤、分化誘導剤、若しくは抗腫瘍活性を示す他の薬剤、又はそれらの薬学的に許容しうる塩である。いくつかの実施態様において、白金錯体は、シスプラチン、カルボプラチン、オキサプラチン及びオキサリプラチンからなる群より選ばれる。いくつかの実施態様において、白金錯体は、カルボプラチンである。いくつかの実施態様において、タキサンは、パクリタキセル又はドセタキセルである。いくつかの実施態様において、タキサンは、パクリタキセルである。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、アバスチンのような抗血管新生剤又はスーテント、ネクサバール、レセンチン、ＡＢＴ−８６９、及びアキシチニブを含むがそれらに制限されない受容体チロシンキナーゼ阻害剤である。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、イリノテカン、トポテカン、又はカンプトセシンを含むがこれらに制限されないトポイソメラーゼ阻害剤である。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、パクリタキセル、ドセタキセル及びアブラキサンを含むがこれらに制限されないタキサンである。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、Ｈｅｒ−２を標的とする薬剤、例えばヘルセプチン又はラパチニブである。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、ホルモン類似体、例えばプロゲステロンである。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、タモキシフェン、ステロイド性アロマターゼ阻害剤、非ステロイド性アロマターゼ阻害剤、又はフルベストラントである。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、成長因子受容体を標的とする薬剤である。いくつかの実施態様において、このような薬剤は、セツキシマブ及びパニツミマブを含むがこれらに制限されない上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）の阻害剤である。いくつかの実施態様において、成長因子受容体を標的とする薬剤は、ＣＰ−７５１８７１のようなインスリン様成長因子１（ＩＧＦ−１）受容体（ＩＧＦ１Ｒ）の阻害剤である。いくつかの実施態様において、がんは子宮がんである。いくつかの実施態様において、がんは、進行性子宮がん肉腫、持続性子宮がん肉腫又は再発性子宮がん肉腫である。いくつかの実施態様において、がんは子宮内膜がんである。いくつかの実施態様において、がんは卵巣がんである。いくつかの実施態様において、がんは転移性卵巣がん又は子宮がんである。いくつかの実施態様において、方法は、少なくとも１１日の治療サイクルを選び、そして（ａ）サイクルの日１に約１０〜２００ｍｇ／ｍ2のパクリタキセルを患者に投与し；（ｂ）サイクルの日１に約１０〜４００ｍｇ／ｍ2のカルボプラチンを患者に投与し；そして（ｃ）日１及びサイクルの全体を通して週に２回、約１〜１００ｍｇ／ｋｇの４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はモル当量のその代謝物を患者に投与すること：を含む。
【００４７】
いくつかの実施態様において、本開示は、（ａ）患者からサンプルを採取し；（ｂ）サンプルを試験してサンプル中のＰＡＲＰ発現レベルを測定し；（ｃ）ＰＡＲＰ発現が所定のレベルを超えるかどうかを測定し、そしてその場合は、少なくとも１つのタキサン、少なくとも１つの白金錯体及び少なくとも１つのＰＡＲＰ阻害剤を患者に投与すること：を含む、患者における子宮がん、子宮内膜がん、又は卵巣がんの治療方法を提供する。いくつかの実施態様において、方法は、サンプル中のＰＡＲＰ発現が所定のレベルを超えない場合、異なる治療選択肢を場合により選ぶことをさらに含む。いくつかの実施態様において、方法は、サンプル中のＰＡＲＰ発現が所定のレベルを超えない場合、異なる治療選択肢を場合により選ぶことをさらに含む。いくつかの実施態様において、がんは子宮がんである。いくつかの実施態様において、がんは、進行性子宮がん肉腫、持続性子宮がん肉腫又は再発性子宮がん肉腫である。いくつかの実施態様において、がんは子宮内膜がんである。いくつかの実施態様において、がんは卵巣がんである。いくつかの実施態様において、がんは転移性卵巣がんである。いくつかの実施態様において、タキサンは、シスプラチン、カルボプラチン、オキサプラチン又はオキサリプラチンである。いくつかの実施態様において、タキサンは、パクリタキセルである。いくつかの実施態様において、白金錯体は、シスプラチン又はカルボプラチンである。いくつかの実施態様において、白金錯体は、カルボプラチンである。いくつかの実施態様において、ＰＡＲＰ阻害剤は、ベンズアミド又はその代謝物である。いくつかの実施態様において、ＰＡＲＰ阻害剤は、４−ヨード−３−ニトロベンズアミドである。いくつかの実施態様において、サンプルは、組織サンプル又は体液サンプルである。
【００４８】
いくつかの実施態様において、本開示は、２１日の治療サイクル中、（ａ）サイクルの日１に７５０ｍｇ／ｍ2のパクリタキセルを患者に投与し；（ｂ）サイクルの日１に１０〜４００ｍｇ／ｍ2のカルボプラチンを患者に投与し；そして（ｃ）サイクルの日１、そしてその後、週に２回、１〜１００ｍｇ／ｋｇの４−ヨード−３−ニトロベンズアミドを患者に投与すること：を含む、患者における子宮がん、子宮内膜がん、又は卵巣がんの治療方法を提供する。いくつかの実施態様において、パクリタキセルは、静脈内注入剤として投与される。いくつかの実施態様において、カルボプラチンは、静脈内注入剤として投与される。いくつかの実施態様において、４−ヨード−３−ニトロベンズアミドは、経口的に、又は非経口の注射剤若しくは注入剤、又は吸入剤として投与される。いくつかの実施態様において、がんは、進行性子宮がん肉腫、持続性子宮がん肉腫及び再発性子宮がん肉腫から選ばれる子宮がんである。いくつかの実施態様において、がんは卵巣がんである。
【００４９】
本明細書に記載されたいくつかの実施態様は、（ａ）長さ約１０〜約３０日の治療サイクルを設定し；（ｂ）サイクルの１〜５日に別々の日に約１０〜約３００分かけて静脈内注入によって約１００〜約２０００ｍｇ／ｍ2のパクリタキセルを患者に投与し；（ｃ）サイクルの１〜５日に別々の日に約１０〜約３００分かけて静脈内注入によって１０〜４００ｍｇ／ｍ2のカルボプラチンを患者に投与し；そして（ｄ）サイクルの１〜１０日の別々の日に、約１０〜約３００分かけて約１ｍｇ／ｋｇ〜約８ｍｇ／ｋｇの４−ヨード−３−ニトロベンズアミドを患者に投与すること：を含む、患者における子宮がん、子宮内膜がん、又は卵巣がんの治療方法を提供する。
【００５０】
本明細書に記載されたいくつかの実施態様は、（ａ）患者からの子宮腫瘍サンプルを試験して以下（ｉ）子宮がんが進行性であるかどうか；（ｉｉ）子宮がんが持続性であるかどうか；（ｉｉｉ）子宮がんが再発性であるかどうか：の少なくとも１つを測定し、（ｂ）試験により子宮がんが進行性、持続性又は再発性であることが示された場合、治療剤の組み合わせで患者を治療し、その際、治療剤は少なくとも１つの抗腫瘍剤及び少なくとも１つのＰＡＲＰ阻害剤を含むこと：を含む、このような治療を必要とする患者における子宮がんの治療方法を提供する。いくつかの実施態様において、少なくとも１つの治療効果が得られ、前記少なくとも１つの治療効果は、子宮腫瘍のサイズ縮小、転移の減少、完全寛解、部分寛解、病理学的完全奏効、又は安定である。いくつかの実施態様において、ＰＡＲＰ阻害剤は、ベンズアミド又はその代謝物である。いくつかの実施態様において、ベンズアミドは、４−ヨード−３−ニトロベンズアミド又はその代謝物である。いくつかの実施態様において、白金錯体は、シスプラチン、カルボプラチン、オキサプラチン及びオキサリプラチンからなる群より選ばれる。いくつかの実施態様において、白金錯体は、カルボプラチンである。いくつかの実施態様において、タキサンは、パクリタキセル又はドセタキセルである。いくつかの実施態様において、タキサンは、パクリタキセルである。いくつかの実施態様において、がんは、進行性がん肉腫、持続性がん肉腫又は再発性がん肉腫である。いくつかの実施態様において、がんは子宮内膜がんである。
【００５１】
いくつかの実施態様において、方法は、少なくとも３つの化学的に異なる物質で患者を治療することを含み、そのうちの１つがタキサン（例えばパクリタキセル又はドセタキセル）であり、そのうちの１つが白金含有錯体（例えばシスプラチン又はカルボプラチン又はシスプラチン）であり、そしてそのうちの１つがＰＡＲＰ阻害剤（例えばＢＡ又はその代謝物）である。いくつかの実施態様において、１つ又はそれ以上のこれらの物質は、さまざまな物理的形態、例えば遊離塩基、塩（特に薬学的に許容しうる塩）、水和物、多形体、溶媒和物、又は代謝物、などで存在することができる。本明細書において特に明記しない限り、化学名の使用は、記載された化学物質のすべての物理的形態を包含するものとする。例えば、特に条件付けのない４−ヨード−３−ニトロベンズアミドの説明は、一般に遊離塩基と同様にそのすべての薬学的に許容しうる塩、多形体、水和物及び代謝物を包含するものとする。本開示又は特許請求の範囲を化合物の特定の物理的形態に制限しようとする場合、これは、化合物への言及が行われた関連する文脈又は特許請求の範囲から明らかである。
【００５２】
「有効量」又は「薬学的に有効量」という用語は、所望の生物学的、治療上の及び／又は予防上の結果を得るための薬剤の十分な量のことである。その結果は、疾患の徴候、症状、若しくは原因の縮小及び／又は緩和、又は生体系の他のなんらかの所望の変化であることができる。例えば、治療使用のための「有効量」は、疾患における臨床上有意な縮小を得るために必要な、それ自体本明細書に記載されたニトロベンズアミド化合物又は本明細書におけるニトロベンズアミド化合物を含む組成物の量である。あらゆる個々の場合に適切な有効量は、常用の実験を用いて当業者により決定することができる。
【００５３】
「薬学的に許容しうる」又は「薬理学的に許容しうる」とは、生物学的に又はその他の点で不適当ではない物質、すなわち、物質が、有意な望ましくない生物学的効果を生じることなく又はそれが含まれる組成物のすべての成分と有害な方法で相互作用することなく人に投与することができることを意味する。
【００５４】
本明細書に用いられる「治療」という用語及びその文法的に同等のものは、治療上の利益及び／又は予防上の利益を達成することを含む。治療上の利益とは、治療する根底にある障害の根絶又は改善を意味する。例えば、がん患者において、治療上の利益は、根底にあるがんの根絶又は改善を含む。また、治療上の利益は、患者が根底にある障害でなお苦しむかもしれないという事実があるにもかかわらず、患者において改善が観察されるような、根底にある障害と関連する生理学的症状の１つ又はそれ以上の根絶又は改善により達成される。予防上の利益のために、本発明の方法は、発がんの危険にさらされた患者に又は状態の診断が行われていなくても、このような状態の生理学的症状の１つ又はそれ以上を報告している患者に本発明の組成物を投与することで実施することができる。
【００５５】
抗腫瘍剤
本発明に用いることができる抗腫瘍剤としては、抗腫瘍性アルキル化剤、抗腫瘍性代謝拮抗剤、抗腫瘍性抗生物質、植物由来の抗腫瘍剤、抗腫瘍性白金錯体化合物、抗腫瘍性カンプトテシン誘導体、抗腫瘍性チロシンキナーゼ阻害剤、抗腫瘍性ウイルス剤、モノクローナル抗体、インターフェロン、生物学的反応調節剤、及び抗腫瘍活性を示す他の薬剤、又はそれらの薬学的に許容しうる塩が含まれるが、これらに制限されるわけではない。
【００５６】
いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、アルキル化剤である。本明細書における「アルキル化剤」という用語は、一般に、有機化合物の水素原子がアルキル基で置換されるアルキル化反応においてアルキル基を提供する試薬のことである。抗腫瘍性アルキル化剤の例としては、ナイトロジェンマスタードＮ−オキシド、シクロホスファミド、イホスファミド、メルファラン、ブスルファン、ミトブロニトール、カルボコン、チオテパ、ラニムスチン、ニムスチン、テモゾロミド又はカルムスチンが含まれるが、これらに制限されるわけではない。
【００５７】
いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、代謝拮抗剤である。本明細書に用いられる「代謝拮抗剤」という用語には、広い意味で、生体系にとって重要である代謝物とそれらの構造又は機能性が類似しているために、正常な代謝を妨げる物質及び電子伝達系を阻害して高エネルギーの中間体の産生を防止する物質（例えばビタミン、コエンザイム、アミノ酸及びサッカリド）が含まれる。抗腫瘍活性を有する代謝拮抗剤の例としては、メトトレキセート、６−メルカプトプリンリボシド、メルカプトプリン、５−フルオロウラシル、テガフール、ドキシフルリジン、カルモフール、シタラビン、シタラビンオクホスファート、エノシタビン、Ｓ−１、ゲムシタビン、フルダラビン又はペメトレキセド二ナトリウムが含まれるが、これらに制限されるわけではなく、そして５−フルオロウラシル、Ｓ−１、ゲムシタビン及び同様のものが好ましい。
【００５８】
いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、抗腫瘍性抗生物質である。抗腫瘍性抗生物質の例としては、アクチノマイシンＤ、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ネオカルチノスタチン、ブレオマイシン、ペプロマイシン、マイトマイシンＣ、アクラルビシン、ピラルビシン、エピルビシン、ジノスタチンスチマラマー、イダルビシン、シロリムス又はバルルビシンが含まれるが、これらに制限されるわけではない。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、植物由来の抗腫瘍剤である。植物由来の抗腫瘍剤の例としては、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシン、エトポシド、ソブゾキサン、ドセタキセル、パクリタキセル及びビノレルビンが含まれるが、これらに制限されるわけではなく、そしてドセタキセル及びパクリタキセルが好ましい。
【００５９】
いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、抗腫瘍活性を示すカンプトセシン誘導体である。抗腫瘍性カンプトセシン誘導体の例としては、カンプトセシン、１０−ヒドロキシカンプトセシン、トポテカン、イリノテカン又は９−アミノカンプトセシンが含まれるが、これらに制限されるわけではなく、カンプトセシン、トポテカン及びイリノテカンが好ましい。さらに、イリノテカンはin vivoで代謝され、ＳＮ−３８として抗腫瘍効果を示す。カンプトセシン誘導体の作用機序及び活性は、カンプトセシンのものと実質的に同様であると考えられる（例えば、Nitta, et al., Gan to Kagaku Ryoho, 14, 850−857 (1987)）。
【００６０】
いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、抗腫瘍活性を有する有機白金化合物又は白金配位化合物である。本明細書における有機白金化合物は、イオン形態の白金を供給する白金含有化合物のことである。好ましい有機白金化合物としては、シスプラチン；シス−ジアミンジアクオ白金（cis−diamminediaquoplatinum）（ＩＩ）−イオン；クロロ（ジエチレントリアミン）−白金（ＩＩ）クロリド；ジクロロ（エチレンジアミン）−白金（ＩＩ）；ジアミン（１,１−シクロブタンジカルボキシラト）白金（ＩＩ）（カルボプラチン）；スピロプラチン；イプロプラチン；ジアミン（２−エチルマロナト）白金（ＩＩ）；エチレンジアミンマロナト白金（ＩＩ）；アクア（１,２−ジアミノジシクロヘキサン）スルファト白金（ＩＩ）；アクア（１,２−ジアミノジシクロヘキサン）マロナト白金（ＩＩ）；（１,２−ジアミノシクロヘキサン）マロナト白金（ＩＩ）；（４−カルボキシフタラト）（１,２−ジアミノシクロヘキサン）白金（ＩＩ）；（１,２−ジアミノシクロヘキサン）−（イソシトラト）白金（ＩＩ）；（１,２−ジアミノシクロヘキサン）オキサラト白金（ＩＩ）；オルマプラチン；テトラプラチン；カルボプラチン、ネダプラチン及びオキサリプラチンが含まれるが、これらに制限されるわけではなく、そしてカルボプラチン又はオキサリプラチンが好ましい。さらに、本明細書に記載された他の抗腫瘍性有機白金化合物は、知られており、商業的に入手可能であり、及び／又は慣用の技術により当業者によって製造可能である。
【００６１】
いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、抗腫瘍性チロシンキナーゼ阻害剤である。本明細書における「チロシンキナーゼ阻害剤」という用語は、ＡＴＰのλ−リン酸塩基をタンパク質中の特異的なチロシンのヒドロキシル基に移す「チロシンキナーゼ」を阻害する化学物質のことである。抗腫瘍性チロシンキナーゼ阻害剤の例としては、ゲフィチニブ、イマチニブ、エルロチニブ、スーテント、ネクサバール、レセンチン、ＡＢＴ−８６９、及びアキシチニブが含まれるが、これらに制限されるわけではない。
【００６２】
いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、抗腫瘍活性を示す抗体又は抗体の結合部分である。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤はモノクローナル抗体である。その例としては、アブシキシマブ、アダリムマブ、アレムツズマブ、バシリキシマブ、ビバシズマブ、セツキシマブ、ダクリズマブ、エクリズマブ、エファリズマブ、イブリツモマブ、チウキセタン、インフリキシマブ、ムロモナブ−ＣＤ３、ナタリズマブ、オマリズマブ、パリビズマブ、パニツムマブ、ラニビズマブ、ゲムツズマブオゾガマイシン、リタキシマブ、トシツモマブ、トラスツズマブ、又は抗原に特異的なあらゆる抗体フラグメントが含まれるが、これらに制限されるわけではない。
【００６３】
いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤はインターフェロンである。このようなインターフェロンは、抗腫瘍活性を有し、そしてそれはウイルス感染によりほとんどの動物細胞によって産生され、分泌される糖タンパク質である。それは、ウイルス成長を阻害する効果だけでなく、細胞（特に、腫瘍細胞）の成長阻害及びナチュラルキラー細胞活性の強化を含む種々の免疫エフェクター機構を有し、そのためサイトカインの１つのタイプとして明記される。抗腫瘍性インターフェロンの例としては、インターフェロンα、インターフェロンα−２ａ、インターフェロンα−２ｂ、インターフェロンβ、インターフェロンγ−１ａ及びインターフェロンγ−ｎ１が含まれるが、これらに制限されるわけではない。
【００６４】
いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、生物学的反応調節剤である。それは、一般に生体の防衛機構又は組織細胞の生存、成長又は分化といったような生物学的反応を改良して腫瘍、感染症又は他の疾患に対して個々に有用となるようにするための物質又は薬物についての一般名称である。生物学的反応調節剤の例としては、クレスチン、レンチナン、シゾフィラン、ピシバニール及びウベニメクスが含まれるが、これらに制限されるわけではない。
【００６５】
いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤としては、ミトキサントロン、Ｌ−アスパラギナーゼ、プロカルバジン、ダカルバジン、ヒドロキシカルバミド、ペントスタチン、トレチノイン、アレファセプト、ダルベポエチンアルファ、アナストロゾール、エキセメスタン、ビカルタミド、リュープロレリン、フルタミド、フルベストラント、ペガプタニブオクタソジウム（pegaptanib octasodium）、デニロイキンディフチトクス（denileukin diftitox）、アルデスロイキン、チロトロピンアルファ、三酸化ヒ素、ボルテゾミブ、カペシタビン、及びゴセレリンが含まれるが、これらに制限されるわけではない。
【００６６】
上述の用語「抗腫瘍性アルキル化剤」、「抗腫瘍性代謝拮抗剤」、「抗腫瘍性抗生物質」、「植物由来の抗腫瘍剤」、「抗腫瘍性白金配位化合物」、「抗腫瘍性カンプトセシン誘導体」、「抗腫瘍性チロシンキナーゼ阻害剤」、「モノクローナル抗体」、「インターフェロン」、「生物学的反応調節剤」及び「他の抗腫瘍剤」は、全て知られており、そして商業的に入手可能であるか、又はそれ自体で知られている方法によって若しくはよく知られた若しくは慣用の方法によって当業者により製造可能である。ゲフィチニブの製造方法は、例えば、米国特許第５,７７０,５９９号に記載されており；セツキシマブの製造方法は、例えば、ＷＯ ９６／４０２１０に記載されており；ビバシズマブの製造方法は、例えば、ＷＯ ９４／１０２０２に記載されており；オキサリプラチンの製造方法は、例えば、米国特許第５,４２０,３１９号及び同第５，９５９，１３３号に記載されており；ゲムシタビンの製造方法は、例えば、米国特許第５,４３４,２５４号及び同第５，２２３，６０８号に記載されており；そしてカンプトセシンの製造方法は、米国特許第５，１６２，５３２号、同第５，２４７，０８９号、同第５，１９１，０８２号、同第５，２００，５２４号、同第５，２４３，０５０号及び同第５，３２１，１４０号に記載されており；イリノテカンの製造方法は、例えば、米国特許第４,６０４,４６３号に記載されており；トポテカンの製造方法は、例えば、米国特許第５,７３４,０５６号に記載されており；テモゾロミドの製造方法は、例えば、特公平第４−５０２９号公報に記載されており；そしてリタキシマブの製造方法は、例えば、特表平第２−５０３１４３号公報に記載されている。
【００６７】
上記の抗腫瘍性アルキル化剤は、以下によって例示されるように商業的に入手可能である：ニトロリン（商品名）として三菱ファルマ社（Mitsubishi Pharma Corp.）からのナイトロジェンマスタードＮ−オキシド；エンドキサン（商品名）として塩野義製薬（Shionogi & Co., Ltd.）からのシクロホスファミド；イホマイド（商品名）として塩野義製薬からのイホスファミド；アルケラン（商品名）としてグラクソ・スミスクライン社（GlaxoSmithKline Corp.）からのメルファラン；マブリン（商品名）として武田薬品工業株（Takeda Pharmaceutical Co., Ltd.）からのブスルファン；ミエブロール（商品名）としてキョーリン製薬（Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd.）からのミトブロニトール；エスキノン（商品名）として三共（Sankyo Co., Ltd.）からのカルボコン；テスパミン（商品名）として住友製薬（Sumitomo Pharmaceutical Co., Ltd.）からのチオテパ；サイメリン（商品名）として三菱ファルマ社からのラニムスチン；ニドラン（商品名）として三共からのニムスチン；テモダール（商品名）としてシェリング社（Schering Corp.）からのテモゾロミド；及びグリアデルウエハー（商品名）としてギルフォード・ファーマシューティカルズ社（Guilford Pharmaceuticals Inc.）からのカルムスチン。
【００６８】
上記の抗腫瘍性代謝拮抗剤は、以下によって例示されるように商業的に入手可能である：メトトレキセート（商品名）として武田薬品工業からのメトトレキセート；チオイノシン（商品名）としてアベンティス社（Aventis Corp.）からの６‐メルカプトプリンリボシド；ロイケリン（商品名）として武田薬品工業からのメルカプトプリン；５−ＦＵ（商品名）として協和醗酵工業（Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd.）からの５‐フルオロウラシル；フトラフール（商品名）として大鵬薬品工業（Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. ）からのテガフール；フルツロン（商品名）として日本ロシュ社（Nippon Roche Co., Ltd.）からのドキシフルリジン；ヤマフール（商品名）として山之内製薬（Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd.）からのカルモフール；キロサイド（商品名）として日本新薬（Nippon Shinyaku Co., Ltd. ）からのシタラビン；ストラシド（商品名）として日本化薬（Nippon Kayaku Co., Ltd.）からのシタラビンオクホスファート；サンラビン（Sanrabin）（商品名）として旭化成（Asahi Kasei Corp. ）からのエノシタビン；ＴＳ−１（商品名）として大鵬薬品工業からのＳ−１；ジェムザール（商品名）としてイーライリリー社（Eli Lilly & Co.）からのゲムシタビン；フルダラ（商品名）として日本シェリング社からのフルダラビン；及びアリムタ（商品名）としてイーライリリー社からのペメトレキセド二ナトリウム。以下によって例示されるように、上記の抗腫瘍性抗生物質は商業的に入手可能である：コスメゲン（商品名）として萬有製薬（Banyu Pharmaceutical Co., Ltd.）からのアクチノマイシンＤ；アドリアシン（商品名）として協和醗酵工業からのドキソルビシン；ダウノマイシンとして明治製菓（Meiji Seika Kaisha Ltd.）からのダウノルビシン；ネオカルチノスタチン（商品名）として山之内製薬からのネオカルチノスタチン；ブレオ（商品名）として日本化薬からのブレオマイシン；ペプロ（商品名）として日本化薬からのペプロマイシン；マイトマイシン（商品名）として協和醗酵工業からのマイトマイシンＣ；アクラシノン（商品名）として山之内製薬からのアクラルビシン；ピノルビシン（Pinorubicin）（商品名）として日本化薬からのピラルビシン；ファルモルビシン（商品名）としてファルマシア社（Pharmacia Corp.）からのエピルビシン；スマンクス（商品名）として山之内製薬からのジノスタチンスチマラマー；イダマイシン（商品名）としてファルマシア社からのイダルビシン；ラパミューン（商品名）としてワイエス社（Wyeth Corp. ）からのシロリムス；及びバルスター（商品名）としてアントラシューティカルズ社（Anthra Pharmaceuticals Inc. ）からのバルルビシン。
【００６９】
上記の植物由来の抗腫瘍剤は、以下によって例示されるように商業的に入手可能である：オンコビン（商品名）として塩野義製薬からのビンクリスチン；ビンブラスチン（商品名）としてキョーリン製薬からのビンブラスチン；フィルデシン（商品名）として塩野義製薬からのビンデシン；ラステット（商品名）として日本化薬からのエトポシド；ペラゾリン（商品名）として全薬工業（Zenyaku Kogyo Co., Ltd. ）からのソブゾキサン；タキソテール（商品名）としてアベンティス社からのドセタキセル；タキソール（商品名）としてブリストル・マイヤーズスクイブ社（Bristol−Myers Squibb Co. ）からのパクリタキセル；及びナベルビン（商品名）として協和醗酵工業からのビノレルビン。
【００７０】
上記の抗腫瘍性白金配位化合物は、以下によって例示されるように商業的に入手可能である：ランダ（商品名）として日本化薬からのシスプラチン；パラプラチン（商品名）としてブリストル・マイヤーズスクイブ社からのカルボプラチン；アクプラ（商品名）として塩野義製薬からのネダプラチン；及びエロキサチン（商品名）としてサノフィ・サンテラボ社（Sanofi−Synthelabo Co.）からのオキサリプラチン。
【００７１】
上記の抗腫瘍性カンプトセシン誘導体は、以下によって例示されるように商業的に入手可能である：カンプト（商品名）としてヤクルト本社（Yakult Honsha Co., Ltd.）からのイリノテカン；ハイカムチン（商品名）としてグラクソ・スミスクライン社からのトポテカン；およびアルドリッチケミカル社（Aldrich Chemical Co., Inc.）米国からのカンプトセシン。上記の抗腫瘍性チロシンキナーゼ阻害剤は、以下によって例示されるように商業的に入手可能である：イレッサ（商品名）としてアストラゼネカ社（AstraZeneca Corp.）からのゲフィチニブ；グリベック（商品名）としてノバルティスＡＧ（Novartis AG）からのイマチニブ；及びタルセバ（商品名）としてＯＳＩファーマチューティカルズ（OSI Pharmaceuticals Inc.）からのエルロチニブ。
【００７２】
上記のモノクローナル抗体は、以下によって例示されるように商業的に入手可能である：エルビタックス（商品名）としてブリストル・マイヤーズスクイブ社からのセツキシマブ；アバスチン（商品名）としてジェネンテック社（Genentech, Inc. ）からのビバシズマブ；リタキサン（商品名）としてバイオジェン・アイデック社（Biogen Idec Inc.）からのリタキシマブ；キャンパス（商品名）としてベルレックス社（Berlex Inc.）からのアレムツズマブ；及びヘルセプチン（Herceptin）（商品名）として中外製薬（Chugai Pharmaceutical Co., Ltd.）からのトラスツズマブ。
【００７３】
上記のインターフェロンは、以下によって例示されるように商業的に入手可能である：スミフェロン（商品名）として住友製薬（Sumitomo Pharmaceutical Co., Ltd. ）からのインターフェロンα；キャンフェロン−Ａ（商品名）として武田薬品工業からのインターフェロンα−２ａ；イントロンＡ（商品名）としてシェリング−プラウ社（Schering−Plough Corp.）からのインターフェロンα−２ｂ；ＩＦＮ.ベータ（商品名）として持田製薬（Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. ）からのインターフェロンβ；イムノマックス−δ（商品名）として塩野義製薬からのインターフェロンγ−１ａ；及びオーガンマ（商品名）として大塚製薬（Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. ）からのインターフェロンγ−ｎ１。 上記の生物学的反応調節剤は、以下によって例示されるように商業的に入手可能である：クレスチン（商品名）として三共からのクレスチン；レンチナン（商品名）としてアベンティス社からのレンチナン；ソニフィラン（商品名）として科研製薬（Kaken Seiyaku Co., Ltd.）からのシゾフィラン；ピシバニール（商品名）として中外製薬からのピシバニール；及びベスタチン（商品名）として日本化薬からのウベニメクス。
【００７４】
上記の他の抗腫瘍剤は、以下によって例示されるように商業的に入手可能である：ノバントロン（商品名）としてワイエス・レダリー社（Wyeth Lederle Japan, Ltd.）からのミトキサントロン；ロイナーゼ（商品名）として協和醗酵工業からのエルアスパラギナーゼ；ナツラン（商品名）として日本ロシュ社からのプロカルバジン；ダカルバジン（商品名）として協和醗酵工業からのダカルバジン；ハイドレア（商品名）としてブリストル・マイヤーズスクイブ社からのヒドロキシカルバミド；コホリン（商品名）として化学及血清療法研究所（Kagaku Oyobi Kessei Ryoho Kenkyusho）からのペントスタチン；ベサノイド（商品名）として日本ロシュ社からのトレチノイン；アメビブ（商品名）としてバイオジェン・アイデック社からのアレファセプト；アラネスプ（商品名）としてアムジェン社（Amgen Inc.）からのダルベポエチンアルファ；アリミデックス（商品名）としてアストラゼネカ社からのアナストロゾール；アロマシン（商品名）としてファイザー社（Pfizer Inc. ）からのエキセメスタン；カソデックス（商品名）としてアストラゼネカ社からのビカルタミド；リュープリン（商品名）として武田薬品工業からのリュープロレリン；ユーレキシン（Eulexin）（商品名）としてシェリング・プラウ社からのフルタミド；ファスロデックス（商品名）としてアストラゼネカ社からのフルベストラント；マクゲン（商品名）としてギリアド・サイエンシズ社（Gilead Sciences, Inc.）からのペガプタニブオクタソジウムナトリウム（pegaptanib octasodium）；オンタック（商品名）としてリガンドファーマシューティカルズ社（Ligand Pharmaceuticals Inc.）からのデニロイキンディフチトクス（denileukin diftitox）；プロロイキン（商品名）としてカイロン社（Chiron Corp. ）からのアルデスロイキン；タイロゲン（商品名）としてジェンザイム社（Genzyme Corp. ）からのチロトロピンアルファ；トリセノックス（商品名）としてセル・セラピューティクス社（Cell Therapeutics, Inc.）からの三酸化ヒ素；ベルケイド（商品名）としてミレニアムファーマシュティカルズ社（Millennium Pharmaceuticals, Inc. ）からのボルテゾミブ；ゼローダ（商品名）としてホフマン・ラ・ロシュ社（Hoffmann−La Roche, Ltd）からのカペシタビン；及びゾラデックス（商品名）としてアストラゼネカ社からのゴセレリン。本明細書に用いられる「抗腫瘍剤」という用語には、上述の抗腫瘍性アルキル化剤、抗腫瘍性代謝拮抗剤、抗腫瘍性抗生物質、植物由来の抗腫瘍剤、抗腫瘍性白金配位化合物、抗腫瘍性カンプトセシン誘導体、抗腫瘍性チロシンキナーゼ阻害剤、モノクローナル抗体、インターフェロン、生物学的反応調節剤及び他の抗腫瘍剤が含まれる。
【００７５】
他の抗腫瘍剤又は抗新生物剤（anti−neoplastic agents）は、ベンゾピロン化合物と組み合わせて用いることができる。このような適切な抗腫瘍剤又は抗新生物剤としては、１３−シス−レチノイン酸、２−ＣｄＡ、２−クロロデオキシアデノシン、５−アザシチジン、５−フルオロウラシル、５−ＦＵ、６−メルカプトプリン、６−ＭＰ、６−ＴＧ、６−チオグアニン、アブラキサン、アキュテイン、アクチノマイシン−Ｄ、アドリアマイシン、アドルシル、アグリリン、アラ−コート（Ala−Cort）、アルデスロイキン、アレムツズマブ、アリムタ、アリトレチノイン、アルカバン−ＡＱ、アルケラン、オールトランスレチノイン酸、アルファインターフェロン、アルトレタミン、アメトプテリン、アミホスチン、アミノグルテチミド、アナグレリド、アナンドロン、アナストロゾール、アラビノシルシトシン、アラビノシルシトシン、アラネスプ、アレディア、アリミデックス、アロマシン、アラノン、三酸化ヒ素、アスパラギナーゼ、ＡＴＲＡ、アバスチン、アザシチジン、ＢＣＧ、ＢＣＮＵ、ベンダムスチン、ビバシズマブ、ベキサロテン、ＢＥＸＸＡＲ、ビカルタミド、ＢｉＣＮＵ、ブレノキサン、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、ブスルファン、ブスルフェックス、Ｃ２２５、ロイコボリン−カルシウム、キャンパス、カンプトサール（Camptosar）、カンプトセシン−１１、カペシタビン、キャラック（Carac）、カルボプラチン、カルムスチン、カルムスチンウエハー（Carmustine Wafer）、カソデックス、ＣＣ−５０１３、ＣＣＩ−７７９、ＣＣＮＵ、ＣＤＤＰ、シーヌ（CeeNU）、セル
ビジン、セツキシマブ、クロランブシル、シスプラチン、シトロボラム因子、クラドリビン、コルチゾン、コスメゲン、ＣＰＴ−１１、シクロホスファミド、シタドレン（Cytadren）、シタラビン、シタラビンリポソーム、サイトサール−Ｕ、シトキサン（Cytoxan）、ダカルバジン、ダコゲン、ダクチノマイシン、ダルベポエチンアルファ、ダサチニブ、ダウノマイシン、ダウノルビシン、塩酸ダウノルビシン、ダウノルビシンリポソーム、ダウノキソーム（DaunoXome）、デカドロン、デシタビン、デルタ−コルテフ（Delta−Cortef）、デルタゾン、デニロイキンディフチトクス、デポサイトTM（DepoCytTM）、デキサメサゾン、酢酸デキサメタゾン、リン酸デキサメタゾンナトリウム、デキサゾン（Dexasone）、デキソラゾキサン、ＤＨＡＤ、ＤＩＣ、ジオデックス（Diodex）、ドセタキセル、ドキシル、ドキソルビシン、ドキソルビシンリポソーム、ドロキシアTM、ＤＴＩＣ、ＤＴＩＣ−ドーム、デュラロン（Duralone）、エフデックス、エリガード、エレンス、エロキサチン、エルスパー（Elspar）、エムサイト（Emcyt）、エピルビシン、エポエチンアルファ、エルビタックス、エルロチニブ、エルウィニアエルアスパラギナーゼ、エストラムスチン、エチヨル（Ethyol）、エトポホス、エトポシド、リン酸エトポシド、ユーレキシン（Eulexin）、エビスタ、エキセメスタン、フェアストン（Fareston）、ファスロデックス、フェマーラ、フィルグラスチム、フロクスウリジン、フルダラ、フルダラビン、フルオロプレックス、フルオロウラシル、フルオロウラシル（クリーム）、フルオキシメステロン、フルタミド、フォリン酸、ＦＵＤＲ、フルベストラント、Ｇ−ＣＳＦ、ゲフィチニブ、ゲムシタビン、ゲムツズマブオゾガマイシン、ジェムザール及びジェムザール副作用−化学療法剤、グリベック、グリアデルウエハー、ＧＭ−ＣＳＦ、ゴセレリン、顆粒球コロニー刺激因子、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、ハロテスチン、ヘルセプチン（Herceptin）、ヘキサドロール（Hexadrol）、ヘキサレン、ヘキサメチルメラミン、ＨＭＭ、ハイカムチン、ハイドレア、酢酸ヒドロコート（Hydrocort Acetate）、ヒドロコルチゾン、リン酸ヒドロコルチゾンナトリウム、コハク酸ヒドロコルチゾンナトリウム、リン酸ハイドロコートン（Hydrocortone Phosphate）、ヒドロキシ尿素、イブリツモマブ、イブリツモマブチウキセタン、イダマイシン、イダルビシン、Ｉｆｅｘ、ＩＦＮ−アルファ、イホスファミド、ＩＬ−１１、ＩＬ−２、イマチニブメシラート、イミダゾールカルボキサミド、インターフェロンアルファ、インターフェロンアルファ−２ｂ（ＰＥＧ結合体（PEG Conjugate））、インターロイキン−２、インターロイキン−１１、イントロンＡ（インターフェロンアルファ−２ｂ）、イレッサ、イリノテカン、イソトレチノイン、イクサベピロン、イグゼンプラ（Ixempra）、キドロラーゼ（ｔ）（Kidrolase (t)）、ラナコルト（Lanacort）、ラパチニブ、エルアスパラギナーゼ、ＬＣＲ、レナリドマイド、レトロゾール、ロイコボリン、ロイケラン（Leukeran）、ロイキン（Leukine）、ロイプロリド、ロイロクリスチン、ロイスタチン、リポソーマルＡｒａ−Ｃ（Liposomal Ara−C）、液体Ｐｒｅｄ（Liquid Pred）、ロムスチン、Ｌ−ＰＡＭ、Ｌ−サルコリシン、ルプロン（Lupron）、���プロンデポー（Lupron Depot）、マチュレーン（Matulane）、マキシデックス、メクロレタミン、塩酸メクロレタミン、メドラロン（Medralone）、メドロール、メゲース、メゲストロール、酢酸メゲストロール、メルファラン、メルカプトプリン、メスナ、メスネックス（Mesnex）、メトトレキセート、メトトレキセートナトリウム、メチルプレドニゾロン、メチコルテン、マイトマイシン、マイトマイシン−Ｃ、ミトキサントロン、Ｍ−プレドニソール（M−Prednisol）、ＭＴＣ、ＭＴＸ、ムスタルゲン（Mustargen）、ムスチン（Mustine）、ムタマイシン（Mutamycin）、ミレラン（Myleran）、マイロセル（Mylocel）、マイロターグ（Mylotarg）、ナベルビン、ネララビン、ネオサール（Neosar）、ノイラスタ（Neulasta）、ノイメガ（Neumega）、ノイポゲン（Neupogen）、ネクサバール、ニランドロン、ニルタミド、ニペント、ナイトロジェンマスタード、ノバルデックス、ノバントロン、オクトレオチド、酢酸オクトレオチド、オンコスパー（Oncospar）、オンコビン、オンタック、オンキサール（Onxal）、オプレルベキン、オラプレッド（Orapred）、オラソン（Orasone）、オキサリプラチン、パクリタキセル、タンパク結合パクリタキセル、パミドロネート、パニツムマブ、パンレチン、パラプラチン、ペジアプレド（Pediapred）、ＰＥＧインターフェロン、ペガスパルガーゼ、ペグフィルグラスチム、ＰＥＧ−イントロン、ＰＥＧ−Ｌ−アスパラギナーゼ、ペメトレキセド、ペントスタチン、フェニルアラニンマスタード、プラチノール、プラチノール−ＡＱ、プレドニゾロン、プレドニゾン、プレロン、プロカルバジン、プロクリット、プロロイキン、カルムスチンインプラントによるプロリフェプロスパン２０（Prolifeprospan 20 with Carmustine Implant）、プリネトール、ラロキシフェン、レブリミド、リウマトレックス、リタキサン、リツキシマブ、ロフェロン−Ａ（インターフェロンアルファ−２ａ）、ルベックス、塩酸ルビドマイシン、サンドスタチン、サンドスタチンＬＡＲ、サルグラモスチン、ソル−コルテフ（Solu−Cortef）、ソル−メドロール、ソラフェニブ、スプリセル、ＳＴＩ−５７１、ストレプトゾシン、ＳＵ１１２４８、スニチニブ、スーテント、タモキシフェン、タルセバ、ターグレチン、タキソール、タキソテール、テモダール、テモゾロミド、テムシロリムス、テニポシド、ＴＥＳＰＡ、サリドマイド、サロミド、テラシス（TheraCys）、チオグアニン、チオグアニンタブロイド、チオホスホアミド、チオプレックス、チオテパ、タイス（TICE）、トポサー（Toposar）、トポテカン、トレミフェン、トリセル、トシツモマブ、トラスツズマブ、トレチノイン、トレクサールTM（TrexallTM）トリセノックス、ＴＳＰＡ、ＴＹＫＥＲＢ、ＶＣＲ、ベクチビックス、ベクチビックス、ベルバン、ベルケイド、ベプシド（VePesid）、ベサノイド、ビアドゥール（Viadur）、ビダザ、ビンブラスチン、硫酸ビンブラスチン、ビンカサールＰｆｓ（Vincasar Pfs）、ビンクリスチン、ビノレルビン、酒石酸ビノレルビン、ＶＬＢ、ＶＭ−２６、ボリノスタット、ＶＰ−１６、ブモン（Vumon）、ゼローダ、ザノサール、ゼバリン、ザインカード、ゾラデックス、ゾレドロン酸、ゾリンザ、ゾメタが含まれるが、これらに制限されるわけではない。
【００７６】
代謝拮抗剤：
代謝拮抗剤は、正常な細胞代謝プロセスを妨げる薬物である。がん細胞は急速に複製を行うため、細胞代謝の妨害は、宿主細胞よりがん細胞に大いに影響を及ぼす。ゲムシタビン（４−アミノ１−［３,３−ジフルオロ−４−ヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−２−イル］−１Ｈ−ピリミジン−２−オン；イーライリリー社（Eli Lilly and Company）によりジェムザール(R)（GEMZAR(R)）として市販されている）は、ヌクレオシド類似体であり、それはＤＮＡ合成を阻止することによって細胞分裂を妨げ、そのため見かけ上アポトーシス機構を通して細胞死をもたらす。ゲムシタビンの投与量は、特定の患者に応じて調整することができる。成人では、ゲムシタビンの投与量は、白金剤及びＰＡＲＰ阻害剤と組み合わせて用いる場合、約１００ｍｇ／ｍ2〜約５０００ｍｇ／ｍ2の範囲、約１００ｍｇ／ｍ2〜約２０００ｍｇ／ｍ2の範囲、約７５０〜約１５００ｍｇ／ｍ2、約９００〜約１４００ｍｇ／ｍ2又は約１２５０ｍｇ／ｍ2の範囲である。次元ｍｇ／ｍ2は、患者の単位表面積平方メートル（ｍ2）当たりのゲムシタビンのミリグラム（ｍｇ）量のことである。ゲムシタビンは、例えば約１０〜約３００分、約１５〜約１８０分、約２０〜約６０分又は約１０分の期間をかけて静脈内（ＩＶ）注入により投与することができる。これに関する「約」という用語は、およその通常の使用法を示し；いくつかの実施態様において±１０％又は±５％の許容度を示す。
【００７７】
タキサン：
タキサンは、タイヘイヨウイチイ（Pacific yew）の木、Taxus brevifoliaの小枝、針葉及び樹皮から誘導された薬物である。特にパクリタキセルは、知られている合成方法により１０−デアセチルバッカチンから誘導することができる。パクリタキセルのようなタキサン及びその誘導体ドセタキセルは、さまざまな腫瘍タイプで抗腫瘍活性を示している。タキサンは、その構造を過剰に安定化し、それにより正常なやり方で細胞骨格を使用する細胞の能力を破壊することによって微小管成長の正常な機能を妨げる。具体的には、タキサンは、微小管の構成ブロックであるチューブリンのβサブユニットに結合する。生成したタキサン／チューブリン複合体は分解することができず、その結果、細胞機能に異常を生じ、最終的に細胞死に至る。パクリタキセルは、Ｂｃｌ−２（Ｂ細胞白血病２）と称するアポトーシス阻害性タンパク質に結合し、それによりＢｃｌ−２がアポトーシスを阻害するのを妨げることによってがん細胞におけるプログラム細胞死（アポトーシス）を誘発する。従って、パクリタキセルは、細胞分裂中に正常な細胞骨格の再配列を妨害することによって細胞分裂を下方制御し、抗Ｂｃｌ−２機構を経てアポトーシスを誘発するため、種々のがんに有効な治療であることがわかっている。
【００７８】
パクリタキセルの投与量は、身長、体重、物理条件、腫瘍サイズ及び進行状態、などに応じて変えることができる。いくつかの実施態様において、パクリタキセルの投与量は、約１０〜約２０００ｍｇ／ｍ2、約１０〜約２００ｍｇ／ｍ2又は約１００〜約１７５ｍｇ／ｍ2の範囲にある。いくつかの実施態様において、パクリタキセルは、約１０時間まで、約８時間まで又は約６時間までの期間をかけて投与される。これに関する「約」という用語は、およその通常の使用法を示し；いくつかの実施態様において±１０％又は±５％の許容度を示す。
【００７９】
白金錯体：
白金錯体は、がんを治療するために用いられる薬学的組成物であり、それは少なくとも１つの有機基で錯体形成された少なくとも１つの白金中心を含んでいる。シスプラチン及びオキサリプラチンのような、カルボプラチン（（ＳＰ−４−２）−ジアミン［１,１−シクロブタンジカルボキシラト（２−）−Ｏ,Ｏ'白金）は、ＤＮＡアルキル化剤である。カルボプラチンの投与量は、患者のクレアチニンクリアランス率を考慮してがん化学療法の分野の当業者に知られている方法によって、血漿中濃度曲線下面積（ＡＵＣ）を算出することで決定される。いくつかの実施態様において、タキサン（例えばパクリタキセル及びドセタキセル）及びＰＡＲＰ阻害剤（例えば４−ヨード−３−ニトロベンズアミド）を共に用いる併用療法でのカルボプラチンの投与量を算出して約０．１〜６ｍｇ／ｍｌ分、約１〜３ｍｇ／ｍｌ分、約１．５〜約２．５ｍｇ／ｍｌ分、約１．７５〜約２．２５ｍｇ／ｍｌ又は約２ｍｇ／ｍｌ分のＡＵＣを得た。（ＡＵＣ２は、例えば、２ｍｇ／ｍｌ分についての短縮形である。）いくつかの実施態様において、適切なカルボプラチン用量約１０〜約４００ｍｇ／ｍ2、例えば約３６０ｍｇ／ｍ2が投与される。カルボプラチンのような白金錯体は、通常、約１０〜約３００分、約３０〜約１８０分、約４５〜約１２０分又は約６０分の期間をかけて静脈内に（ＩＶ）投与される。これに関して、「約」という用語は、その通常の意味を有する。いくつかの実施態様において、約は、±１０％又は±５％を意味する。
【００８０】
トポイソメラーゼ阻害剤
いくつかの実施態様において、本発明の方法は、ＰＡＲＰ阻害剤の有効量をトポイソメラーゼ阻害剤、例えば、イリノテカン又はトポテカンと組み合わせて乳子宮がん又は卵巣がんの患者に投与することを含むことができる。
【００８１】
トポイソメラーゼ阻害剤は、トポイソメラーゼ酵素（トポイソメラーゼＩ及びＩＩ）の作用を妨げるために設計された薬剤であり、これは、正常な細胞周期におけるＤＮＡ鎖のリン酸ジエステル骨格鎖の切断及び再結合に触媒作用を及ぼすことによってＤＮＡ構造
http://en.wikipedia.org/wiki/Topoisomerase_inhibitor-cite_note-urlDorlands_Medical_Dictionary:tipoisomerase_inhibitor-1#cite_note-urlDorlands_Medical_Dictionary:tipoisomerase_inhibitor-1
における変化を制御する酵素である。トポイソメラーゼは、がん化学療法治療の一般的な標的となっている。トポイソメラーゼ阻害剤は、細胞周期のライゲーション工程（ligation step）を阻止し、一本及び二本鎖を破壊してゲノムの完全性を損なうと考えられる。これらの破壊により、続いてアポトーシス及び細胞死に至る。トポイソメラーゼ阻害剤は、多くの場合、どのタイプの酵素を阻害するにより分類される。真核細胞中に最も多く見出されるトポイソメラーゼタイプ、トポイソメラーゼＩは、トポテカン、イリノテカン、ルートテカン及びエキサテカンによる標的となり、これらはそれぞれ商業的に入手可能である。トポテカンは、商品名ハイカムチン(R)（Hycamtim (R)）の下でグラクソ・スミスクライン（GlaxoSmithKline）から入手可能である。イリノテカンは、商品名カンプトサール(R)（Camptosar (R)）の下でファイザー（Pfizer）から入手可能である。ルートテカンは、ギリアド・サイエンシズ社（Gilead Sciences Inc.）からリポソーム製剤として入手することもできる。トポイソメラーゼ阻害剤は、有効量で投与することができる。いくつかの実施態様において、ヒト治療の有効量は、約０．０１〜約１０ｍｇ／ｍ2／日の範囲である。治療は、毎日、隔週、週２回、毎週、又は毎月を基準にして繰り返すことができる。いくつかの実施態様において、治療期間の後に、１日から数日まで、又は１週間から数週間までの休止期間があってもよい。ＰＡＲＰ−１阻害剤との組み合わせにおいて、ＰＡＲＰ−１阻害剤及びトポイソメラーゼ阻害剤は、同じ日に投与してもよいし、又は別々の日に投与してもよい。
【００８２】
ＩＩ型トポイソメラーゼを標的とする化合物は、主に２つの種類：トポイソメラーゼ−ＤＮＡ複合体を標的とするトポイソメラーゼ毒、及び触媒による代謝回転を中断するトポイソメラーゼ阻害剤に分類される。トポＩＩ毒には、真核性ＩＩ型トポイソメラーゼ阻害剤（トポＩＩ）：アムサクリン、エトポシド、リン酸エトポシド、テニポシド及びドキソルビシンが含まれるが、これらに制限されるわけではない。これらの薬物は、抗がん治療剤である。トポイソメラーゼ阻害剤の例としては、ＩＣＲＦ−１９３が含まれる。これらの阻害剤は、トポＩＩのＮ末端のＡＴＰアーゼ領域を標的とし、トポＩＩを代謝回転から回避させる。ＡＴＰアーゼドメインに結合したこの化合物の構造は、クラッセン（Classen）(Proceedings of the National Academy of Science, 2004)によって解明されており、薬物は非競合的やり方で結合し、ＡＴＰアーゼドメインの二量化を終了させることを示している。
【００８３】
抗血管新生剤
いくつかの実施態様において、本発明の方法は、ＰＡＲＰ阻害剤の有効量を抗血管新生剤と組み合わせて子宮、子宮内膜、又は卵巣がんの患者に投与することを含むことができる。
【００８４】
抗血管新生剤は、血管新生（新しい血管の成長）を阻害する物質である。すべての固形腫瘍（白血病と対照的に）は、一旦、一定のサイズに到達したら、それを生きた状態に保持するために血管を生成する必要がある。腫瘍は、新しい血管を形成する場合にしか成長することができない。通常、組織修復が活発に進行中でなければ、成人体内の他の場所で血管が形成されることはない。血管新生抑制剤（angiostatic agent）エンドスタチン及び関連する化学物質は、血管の形成を抑制し、がんが無期限に成長するのを予防することができる。患者を用いた試験では、腫瘍は不活性となりエンドスタチン治療が完了した後でもそのままであった。その治療は、副作用が非常に少ないが、選択性が非常に制限されるようである。サリドマイド及び自然植物ベースの物質のような他の血管新生抑制剤は、盛んに研究されている。
【００８５】
知られている阻害剤としは、薬物ビバシズマブ（アバスチン（Avastin））が含まれ、それは血管内皮成長因子（vascular endothelial growth factor）（ＶＥＧＦ）に結合して、血管新生を促進する受容体へのその結合を阻害する。他の抗血管新生剤としては、カルボキシアミドトリアゾール、ＴＮＦ−４７０、ＣＭ１０１、ＩＮＦ−アルファ、ＩＬ−１２、血小板因子−４、スラミン、ＳＵ５４１６、トロンボスポンジン、血管新生抑制ステロイド（angiostatic steroids）＋ヘパリン、軟骨由来の血管新生阻止因子、マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤、アンギオスタチン、エンドスタチン、２−メトキシエストラジオール、テコガラン（tecogalan）、トロンボスポンジン、プロラクチン、αvβ3阻害剤及びリノミド（linomide）が含まれるが、これらに制限されるわけではない。
【００８６】
Ｈｅｒ−２を標的とする治療
いくつかの実施態様において、本発明の方法は、ＰＡＲＰ阻害剤の有効量をヘルセプチンと組み合わせてＨＥＲ２陽性の子宮、子宮内膜、又は卵巣がんの患者に投与することを含むことができる。
【００８７】
Ｈｅｒ−２過剰発現は、卵巣がんで見出されており、そしてＨＥＲ２過剰発現及び増幅は、進行性卵巣がん（ＡＯＣ）と関連があるHellstroem et.al. Cancer Research 61, 2420-2423, March 15, 2001)。子宮内膜がんにおけるＨｅｒ−２／ｎｅｕの過剰発現は、進行期の疾患と関連がある(Berchuck A, et.al. Am J Obstet Gynecol. 1991 Jan;164(1 Pt 1): 15-21)。ヘルセプチンは、ＨＥＲ２を過剰発現している子宮、子宮内膜、又は卵巣がんのアジュバント治療に用いることができる。ヘルセプチンは、ドキソルビシン、シクロホスファミド及びパクリタキセル又はドセタキセルのいずれかを含む治療レジメンの一部として；ドセタキセル及びカルボプラチンと共に；又は多様なアントラサイクリンベースの治療に従って単一薬剤として：いくつかの異なる方法で用いることができる。パクリタキセルと組み合わせたヘルセプチンは、ＨＥＲ２を過剰発現する子宮、子宮内膜、又は卵巣がんの最初に使用される治療として認められている。単一薬剤としてのヘルセプチンは、転移性疾患用の１つ又はそれ以上の化学療法レジメンを受けた患者においてＨＥＲ２を過剰発現する子宮、子宮内膜、又は卵巣がんの治療のために認められている。
【００８８】
ラパチニブ又はトシル酸ラパチニブ（lapatinib ditosylate）は、乳がんのような固形腫瘍のための経口的に活性な化学療法的薬物治療である。開発中、それは小分子ＧＷ５７２０１６として知られていた。ラパチニブは、細胞成長に必要とされるいくつかの酵素を阻止することによって腫瘍細胞の成長を停止することができる。トポテカンのような化学療法に用いられる薬物は、細胞を殺すことによって又は分裂を妨げることによってさまざまなやり方で作用して腫瘍細胞の成長を停止する。トポテカンと共にラパチニブを与えると抗腫瘍性有効性を高めることができる。
【００８９】
ホルモン療法
いくつかの実施態様において、本発明の方法は、ＰＡＲＰ阻害剤の有効量をホルモン療法と組み合わせて子宮、子宮内膜、又は卵巣がんの患者に投与することを含むことができる。
【００９０】
子宮がんの治療は、疾患の段階及び患者の全般的な健康に左右される。腫瘍の除去（外科的切除）は、一次治療である。放射線治療、ホルモン療法、及び／又は化学療法は、転移性又は再発性疾患の患者におけるアジュバント治療として（すなわち、手術に加えて）用いることができる。
【００９１】
ホルモン療法は、転移性又は再発性の子宮内膜がんを治療するために用いられる。また、手術又は放射線を受けることができない患者を治療するために用いることができる。治療前にホルモン受容体試験を実施して子宮内膜組織がこれらのタンパク質を含むかどうかを測定することができる。ホルモン療法は、通常、丸剤形態で合成タイプのプロゲステロンを含む。エストロゲンは、卵巣の上皮性がん細胞を成長させることがある。従って、ホルモン療法は卵巣がんを治療するために用いることができる。
【００９２】
タモキシフェン−ホルモン拮抗剤
タモキシフェン（ノルバデックスとして市販されている）は、体に存在するがん細胞の成長を遅らせる又は停止させる。タモキシフェンは、選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）と称する一種の薬物である。それは、抗エストロゲン剤として機能する。タモキシフェンは、進行している再発性の卵巣がんを急速に安定化するため、卵巣がんの一次治療におけるその役割は、細胞毒性化学療法と組み合わせて考えなければならない。
【００９３】
ステロイド性及び非ステロイド性アロマターゼ阻害剤
アロマターゼ阻害剤（ＡＩ）は、閉経婦人における卵巣がんの治療に用いられる、アロマターゼ酵素を阻止する薬物の一種である。アロマターゼ阻害剤は、ホルモン受容体陽性卵巣がんを有する閉経婦人においてエストロゲンの量を低下させる。体内のエストロゲンがより少ないと、ホルモン受容体は、成長シグナルを少ししか受け取らず、がん成長を遅らせるか又は停止させることができる。
【００９４】
アロマターゼ阻害剤の投薬には、アリミデックス（化学名：アナストロゾール）、アロマシン（化学名：エキセメスタン）、及びフェマーラ（化学名：レトロゾール）が含まれる。それぞれは、丸剤によって日に１回最長５年間摂取される。しかし、進行性（転移性）疾患の女性については、十分に作用する限り、薬を継続する。
【００９５】
ＡＩは、２つのタイプ：アロマターゼ酵素複合体と永続的な結合を形成するエキセメスタンのような不可逆性のステロイド性阻害剤；及び可逆性の競合によって酵素を阻害する非ステロイド性阻害剤（例えばアナストロゾール、レトロゾール）に分類される。
【００９６】
ＩＣＩ １８２，７８０及び「ファスロデックス」としても知られているフルベストラントは、抗エストロゲン療法後に疾患進行を伴う閉経婦人におけるホルモン受容体陽性転移性卵巣がんの薬物療法である。エストロゲンにより、卵巣の上皮性がん細胞が成長することがある。フルベストラントは、アゴニスト効果のないエストロゲン受容体拮抗剤であり、それはエストロゲン受容体を下方制御することによって及び分解することによって作用する。それは、毎月１回の注射剤として投与される。
【００９７】
標的療法
いくつかの実施態様において、本発明の方法は、ＰＡＲＰ阻害剤の有効量を上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）及びインスリン様成長因子Ｉ受容体（ＩＧＦ１Ｒ）を含むがこれらに制限されない成長因子受容体を標的とする阻害剤と組み合わせて子宮、子宮内膜、又は卵巣がんの患者に投与することを含むことができる。
【００９８】
ＥＧＦＲは、子宮、子宮内膜、肺、乳房、及び卵巣がんを含むがこれらに制限されないヒト癌腫のある種のタイプの細胞において過剰発現される。卵巣がんにおけるＥＧＦＲ過剰発現は、予後不良と関連がある。さらに、ＥＧＦＲは、正常な子宮内膜で高度に発現され、そして子宮内膜がん検体中で過剰発現されることがわかっており、その場合、それは予後不良と関連がある。ＥＧＦＲの発現増加は、薬剤抵抗性の表現型の原因となることがある。チロシンキナーゼ阻害剤ＺＤ１８３９（イレッサTM）は、進行性子宮内膜がんで女性の第２相試験（ＧＯＧ ２２９Ｃ）における単剤として研究されてきた。予備的なデータ分析は、登録された２９人の患者のうち、１人の患者が完全奏効を経験し、そして他の数人が６ヵ月の安定を有したことを示す。(Leslie, K.K.; et.al. International Journal of Gynecological Cancer, Volume 15, Number 2, 2005, pp. 409-411(3)。ＥＧＦＲ阻害剤の例としては、セツキシマブが含まれるが、これに制限されるわけではなく、それは、転移性結直腸がん及び頭頚部がんを含むがそれらに制限されないがんを治療するために静脈注射によって与えられるキメラモノクローナル抗体である。パニツミマブは、ＥＧＦＲ阻害剤の別の例である。それは、ＥＧＦＲに対するヒト化モノクローナル抗体である。パニツミマブは、進行性大腸がん患者において単独で用いたときに支持療法よりも有益であり、良好であることが示されており、そしてこの使用についてはＦＤＡによって認められている。
【００９９】
Ｉ型インスリン様成長因子受容体（ＩＧＦＩＲ）の活性化は、さまざまな細胞タイプにおいて増殖を促進し、そしてアポトーシスを阻害する。ＩＧＦ１Ｒ阻害剤の１つの例は、ＣＰ−７５１８７１である。ＣＰ−７５１８７１は、ＩＧＦ１Ｒに選択的に結合するヒトモノクローナル抗体であり、ＩＧＦ１が受容体に結合してその後に受容体が自己リン酸化するのを防ぐ。ＩＧＦ１Ｒの自己リン酸化が阻害される結果、ＩＧＦ１Ｒを発現する腫瘍細胞において受容体発現が減少し、ＩＧＦの抗アポトーシス効果が減少し、そして腫瘍成長が阻害されうる。ＩＧＦ１Ｒは、ほとんどの腫瘍細胞において発現される受容体チロシンキナーゼであり、有糸分裂誘発、血管新生及び腫瘍細胞の生存に関与している。
【０１００】
ＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ経路
ホスファチジルイノシトール−３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）経路の調節解除は、染色体１０から除去された腫瘍抑制遺伝子フォスファターゼ及びテンシンホモログ（tumor suppressor phosphatase and tensin homologue deleted from chromosome 10）の不活化又はｐ１１０−αの突然変異の活性化のいずれかによるヒトがんにおける共通現象であり、これらのホットスポット突然変異により酵素の発がん活性が生じ、抗ＨＥＲ２抗体トラスツズマブに対する治療抵抗性に寄与する。Ａｋｔ及びｍＴＯＲリン酸化は、卵巣及び子宮内膜がんでもしばしば検出される。従って、ＰＩ３Ｋ経路は、がん治療にとって魅力的な標的である。ＮＶＰ−ＢＥＺ２３５、ＰＩ３Ｋの二重阻害剤及び下流の哺乳類ラパマイシン標的（downstream mammalian target of rapamycin）（ｍＴＯＲ）は、野生型及び突然変異型ｐ１１０−αの療法を有するがん細胞において抗増殖及び抗腫瘍活性を有することがわかっている(Violeta Serra, et.al. Cancer Research 68, 8022−8030, October 1, 2008)。
【０１０１】
Ｈｓｐ９０阻害剤
この薬物は、熱ショックタンパク質９０（ｈｓｐ９０）を標的とする。Ｈｓｐ９０は、シャペロンタンパク質の一種であり、その通常の仕事は、他のタンパク質が、仕事を行うためにそれらのタンパク質に必要な形状を獲得し、維持するのを助けることである。シャペロンタンパク質は、他のタンパク質と物理的接触することによって作用する。Ｈｓｐ９０は、がん細胞を生存可能にすることができ、通常、細胞が死ぬような遺伝子欠損でさえ成長させることができる。従って、特にシャペロン機能の阻止を、がん細胞生存を阻止するための他の戦略と組み合わせれば、ＨＳＰ９０及び関連するシャペロンタンパク質の機能を阻止することによりがん細胞を殺すことができる。
【０１０２】
チューブリン阻害剤
チューブリンは、微小管を形成するタンパク質であり、それは細胞の細胞骨格（構造ネットワーク）の重要な成分である。微小管は、細胞分裂（有糸分裂）、細胞構成、運搬、シグナル伝達及び運動に必要である。有糸分裂におけるその主な役割を考えると、微小管は抗がん剤にとっての重要な標的であり、細胞分裂抑制剤、チューブリン阻害剤及び微小管を標的とする薬剤と称することも多い。これらの化合物は、微小管中でチューブリンに結合し、そして細胞分裂に必要な微小管形成を妨げることによってがん細胞増殖を予防する。この妨害により細胞周期の連鎖が阻止され、アポトーシスに至る。
【０１０３】
アポトーシス阻害剤
アポトーシスの阻害剤（ＩＡＰ）は、本来、アポトーシスの内因性阻害剤として役立つバキュロウイルスを特徴とする機能的及び構造的に関連するタンパク質のファミリーである。ヒトＩＡＰファミリーは、少なくとも６つのメンバーから構成され、ＩＡＰホモログは、多くの生体中で同定されている。１００５８−Ｆ４は、細胞周期の停止及びアポトーシスを誘発するｃ−Ｍｙｃ阻害剤である。それは、ｃ−Ｍｙｃ−Ｍａｘ相互作用を特異的に阻害し、ｃ−Ｍｙｃ標的遺伝子発現のトランス活性化を予防する細胞透過性チアゾリジノンである。１００５８−Ｆ４は、in vitro及びin vivoの両方でｃ−Ｍｙｃ依存性のや
り方で腫瘍細胞の成長を阻害する。ＢＩ−６Ｃ９は、ｔＢｉｄ阻害剤及び抗アポトーシス剤である。ＧＮＦ−２は、新しい種類のＢｃｒ−ａｂｌ阻害剤に属する。ＧＮＦ−２は、活性部位から離れたアロステリック部位であるミリストイル結合ポケットに結合してキナーゼの不活性形態を安定化すると考えられている。それは、２６７ｎＭのＩＣ50でＢｃｒ−ａｂｌリン酸化を阻害するが、天然ｃ−Ａｂｌを含む６３種の他のキナーゼパネルを阻害せず、そしてＢｒｃ−Ａｂｌを発現しない細胞に対して毒性の完全な欠如を示す。ＧＮＦ−２は、Ｂｃｒ−ａｂｌ活性を研究するための、そしてＢｒｃ−Ａｂｌ腫瘍性タンパク質を生じる耐性慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）を治療するための新種の阻害剤として大きな可能性を示す。ピフィトリン−α（Pifithrin−α）は、ｐ５３が介在するアポトーシス及びｐ５３依存性遺伝子転写、例えばサイクリンＧ、ｐ２１／ｗａｆ１、及びｍｄｍ２発現の可逆的阻害剤である。ピフィトリン−αは、ＵＶ照射のような遺伝毒性ストレス及びドキソルビシン、エトポキシド、パクリタキセル及びシトシン−β−Ｄ−アラビノフラノシドを含む細胞毒性化合物を用いた治療の後に細胞生存を高める。ピフィトリン−αは、がんの発生率を高めることなく致死性の全身γ照射からマウスを保護する。
【０１０４】
ＰＡＲＰ阻害剤：
本発明は、少なくとも１つのＰＡＲＰ阻害剤をその必要のある被験者に投与することによる、子宮がん又は卵巣がんの治療方法を提供する。別の実施態様において、本発明は、少なくとも１つのＰＡＲＰ阻害剤を本明細書に記載された少なくとも１つの抗腫瘍剤と組み合わせてその必要のある被験者に投与することによる子宮がん又は卵巣がんの治療方法を提供する。
【０１０５】
なんらかの特定の作用機構に制限しようとするものではないが、本明細書に記載された化合物は、ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）活性を調節するため抗がん性を有すると考えられる。この作用機構は、ＰＡＲＰに結合してその活性を低下させるＰＡＲＰ阻害剤の能力と関係がある。ＰＡＲＰは、β−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤ＋）からニコチンアミド及びポリ−ＡＤＰ−リボース（ＰＡＲ）への転換に触媒作用を及ぼす。ポリ（ＡＤＰ−リボース）及びＰＡＲＰは、いずれも転写の調節、細胞増殖、ゲノム安定性及び発がんに関連している(Bouchard V.J. et.al. Experimental
Hematology, Volume 31, Number 6, June 2003, pp. 446−454(9); Herceg Z.; Wang Z.−Q. Mutation Research/ Fundamental and Molecular Mechanisms of Mutagenesis, Volume 477, Number 1, 2 June 2001, pp. 97−110(14))。ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１（ＰＡＲＰ１）は、ＤＮＡ一本鎖切断（ＳＳＢ）の修復における重要な分子である(de Murcia J, et al. 1997, Proc Natl Acad Sci USA 94:7303−7307; Schreiber V, Dantzer F, Ame JC, de Murcia G (2006) Nat Rev Mol Cell Biol 7:517−528; Wang ZQ, et al. (1997) Genes Dev 11:2347−2358)。ＰＡＲＰ１機能の阻害によるＳＳＢ修復のノックアウトによりＤＮＡ二本鎖切断（ＤＢＳ）が誘発され、これは欠損のある相同性に誘導されたＤＢＳ修復によるがん細胞において合成致死性（synthetic lethality）を誘発することができる(Bryant HE, et al. (2005) Nature 434:913−917; Farmer H, et al. (2005) Nature 434:917−921)。
【０１０６】
ＢＲＣＡ１及びＢＲＣＡ２は、相同組換え機構（ＨＲ）の不可欠な成分として作用する(Narod SA, Foulkes WD (2004) Nat Rev Cancer 4:665−676; Gudmundsdottir K, Ashworth A (2006) Oncogene 25:5864−5874)。
【０１０７】
ＢＲＣＡ１又はＢＲＣＡ２に欠損のある細胞は、遺伝子転換による相同組換え（ＨＲ）機構による二本鎖切断（ＤＢＳ）の修復において欠損を有する(Farmer H, et al. (2005)
Nature 434:917−921; Narod SA, Foulkes WD (2004) Nat Rev Cancer 4:665−676; Gudmundsdottir K, Ashworth A (2006) Oncogene 25:5864−5874; Helleday T, et al. (2008) Nat Rev Cancer 8:193−204)。乳がん感受性タンパク質ＢＲＣＡ１又はＢＲＣＡ２のいずれかにおける欠損は、ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）活性の阻害に対する重大な細胞感受性を誘発し、細胞周期の停止及びアポトーシスを生じる。相同組換え（ＨＲ）による二本鎖切断の修復においてＢＲＣＡ１及びＢＲＣＡ２の役割が重要であるということが、この感受性の根本的な理由であり、そしてＲＡＤ５１、ＲＡＤ５４、ＤＳＳ１、ＲＰＡ１、ＮＢＳ１、ＡＴＲ、ＡＴＭ、ＣＨＫ１、ＣＨＫ２、ＦＡＮＣＤ２、ＦＡＮＣＡ又はＦＡＮＣＣの欠損は、このような感受性を誘発することが報告されている(McCabe N. et.al. Deficiency in the repair of DNA damage by homologous recombination and sensitivity to poly(ADP−ribose) polymerase inhibition, Cancer research 2006, vol. 66, 8109−8115)。ＰＡＲＰ１阻害は、ＢＲＣＡ１／２又は他のＨＲ経路の成分における欠損によるがんに対する特異的療法となりうることが提案されている(Helleday T, et al. (2008) Nat Rev Cancer 8:193−204)。子宮腫瘍及び卵巣腫瘍は、ＢＲＣＡ１機能障害のような、相同組換え（ＨＲ）によるＤＮＡ二本鎖切断の修復における欠損を伴っていることが多い(Rottenberg S, et.al. Proc Natl Acad Sci U S A. 2008 Nov
4;105(44): 17079−84)。
【０１０８】
ＰＡＲＰ分子の活性を阻害することは、これらの分子の活性を低下させることを含む。「阻害する」という用語及び「阻害性」のようなその文法的な活用は、ＰＡＲＰ活性における完全な低下を必要とするものでない。いくつかの実施態様において、このような低下は、阻害作用がない場合、例えば、本発明のニトロベンズアミド化合物のような阻害剤がない場合の分子活性の少なくとも約５０％、少なくとも約７５％、少なくとも約９０％、又は少なくとも約９５％である。いくつかの実施態様において、阻害とは、活性における観察可能な又は測定可能な低下のことである。いくつかの症例を扱う際、阻害は、治療する状態において治療上の及び／又は予防上の利益を得るために十分である。「阻害しない」という語句及びその文法的な活用は、活性における効果が完全に欠如している必要はない。例えば、それは、本発明のニトロベンズアミド化合物のような阻害剤の存在下でＰＡＲＰ活性における低下が約２０％未満、約１０％未満、そして好ましくは約５％未満である状態のことである。
【０１０９】
ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）は、ＤＮＡ修復における必須酵素であり、従って化学療法抵抗性において潜在的役割を果たしている。ＰＡＲＰを標的にすることは、潜在的にＤＮＡ修復を中断し、それによってタキサンが介在する、代謝拮抗剤が介在する、トポイソメラーゼ阻害剤が介在する、及び成長因子受容体阻害剤、例えばＩＧＦ１Ｒ阻害剤が介在する、及び／又は白金錯体が介在するがん細胞におけるＤＮＡ複製及び／又は修復を増強すると考えられる。また、ＰＡＲＰ阻害剤は、ＢＲＣＡ１及びＢＲＣＡ２の機能が損なわれた子宮がん、卵巣がん、及び子宮内膜がん又は他のＤＮＡ修復経路が欠損したそれらの患者に対して非常に活性でありうる。
【０１１０】
４−ヨード−３−ニトロベンズアミド（ＢＡ）は、正常細胞に毒性効果を及ぼすことなく腫瘍細胞に作用する小分子である。ＢＡは、ＰＡＲＰの阻害によってその抗新生物効果を達成すると考えられる。ＢＡは非常に親油性であり、脳及び脳脊髄液（ＣＳＦ）を含む組織中に急速に広く分配される。それは薬剤抵抗性の細胞系を含む広範囲のin vitroがん細胞に対して活性である。ＢＡが、例えば薬学的に許容しうる塩、溶媒和物又は錯体としてすべての薬学的に許容しうる形態で投与できることは、当業者に認められる。さらに、ＢＡは溶液中で互変異性化することができるため、ＢＡの互変異性形態は、塩、溶媒和物又は錯体とともに用語ＢＡ（又は同等の４−ヨード−３−ニトロベンズアミド）によって包含されるものとする。いくつかの実施態様において、ＢＡは、ヒドロキシプロピルベータシクロデキストリンのようなシクロデキストリンと組み合わせて投与することができる。しかしながら、他の活性及び不活性な薬剤をＢＡと組み合わせることができ；そして、ＢＡの説明は、特に明記しない限り、そのすべての薬学的に許容しうる形態を含むことは当業者に認められる。
【０１１１】
基底様子宮内膜がんは脳に転移する傾向が高く；そしてＢＡは血液脳関門を通過することが知られている。なんら特定の理論によって拘束されることを望まないが、ＢＡはＰＡＲＰの機能を阻害することによってその抗新生物効果を達成すると考えられる。いくつかの実施態様において、ＢＡは、転移性卵巣がんの治療に用いることができる。いくつかの実施態様において、ＢＡは、転移性子宮がんの治療に用いることができる。いくつかの実施態様において、ＢＡは、転移性子宮内膜がんの治療に用いることができる。別の実施態様において、ＢＡは、抗腫瘍剤と組み合わせて子宮、子宮内膜、又は卵巣腫瘍の治療に用いることができる。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、ゲムシタビンのような代謝拮抗剤である。いくつかの実施態様において、抗腫瘍剤は、カルボプラチンのような白金錯体である。いくつかの実施態様において、ＢＡは、パクリタキセルのようなタキサンと組み合わせて子宮、子宮内膜、又は卵巣腫瘍の治療に用いることができる。別の実施態様において、ＢＡは、抗血管新生剤と組み合わせて子宮、子宮内膜、又は卵巣腫瘍の治療に用いることができる。さらに別の実施態様において、ＢＡは、イリノテカンのようなトポイソメラーゼ阻害剤と組み合わせて子宮、子宮内膜、又は卵巣腫瘍の治療に用いることができる。別の実施態様において、ＢＡは、ホルモン療法と組み合わせて子宮、子宮内膜、又は卵巣腫瘍の治療に用いることができる。さらに別の実施態様において、ＢＡは、ＥＧＦＲ又はＩＧＦ１Ｒ阻害剤を含むがこれらに制限されない成長因子受容体阻害剤と組み合わせて子宮、子宮内膜、又は卵巣腫瘍の治療に用いることができる。いくつかの実施態様において、子宮、子宮内膜、又は卵巣がんは、転移性がんである。
【０１１２】
ＰＡＲＰ阻害剤の投与量は、患者の年齢、身長、体重、健康全般、などに応じて変えることができる。いくつかの実施態様において、ＢＡの投与量は、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約２ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、約２ｍｇ／ｋｇ、約４ｍｇ／ｋｇ、約６ｍｇ／ｋｇ、約８ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約１２ｍｇ／ｋｇ、約１５ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ、約２５ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ、約３５ｍｇ／ｋｇ、約４０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ、約６０ｍｇ／ｋｇ、約７５ｍｇ／ｋｇ、約９０ｍｇ／ｋｇ、約１〜約２５ｍｇ／ｋｇ、約２〜約７０ｍｇ／ｋｇ、約４〜約１００ｍｇ、約４〜約２５ｍｇ／ｋｇ、約４〜約２０ｍｇ／ｋｇ、約５０〜約１００ｍｇ／ｋｇ又は約２５〜約７５ｍｇ／ｋｇの範囲である。ＢＡは、約１０〜約３００分、約３０〜約１８０分、約４５〜約１２０分又は約６０分（すなわち約１時間）かけて静脈内に、例えばＩＶ注入によって投与することができる。いくつかの実施態様において、ＢＡは、別法として経口的に投与することができる。これに関して、「約」という用語は、およその通常の意味を有する。いくつかの実施態様において、約は、±１０％又は±５％を意味する。
【０１１３】
ＢＡ（４−ヨード−３−ニトロベンズアミド）の合成は、米国特許第５,４６４,８７１号に記載されており、それは全体として参照により本明細書に組み込まれている。ＢＡは１０ｍｇ／ｍｌの濃度で製造することができ、そして都合のよい形態、例えば１０ｍＬバイアル中にパックすることができる。
【０１１４】
ＢＡ代謝物：
本明細書に用いられるように、「ＢＡ」は、４−ヨード−３−ニトロベンズアミドを意味し；「ＢＮＯ」は、４−ヨード−３−ニトロソベンズアミドを意味し；「ＢＮＨＯＨ」は、４−ヨード−３−ヒドロキシアミノベンズアミドを意味する。
【０１１５】
本発明に有用な前駆体化合物は、式（Ｉａ）
【化３】
2011503071.tif 000004
［式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5は、水素、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、ヨード、（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、（Ｃ1−Ｃ6）アルコキシ、（Ｃ3−Ｃ7）シクロアルキル、及びフェニルからなる群より独立して選ばれ、ここにおいて、５つのＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも２つは、常に水素であり、５つの置換基の少なくとも１つは常にニトロであり、そしてニトロに隣接している少なくとも１つの置換基は常にヨードである］及びその薬学的に許容しうる塩、溶媒和物、異性体、互変異性体、代謝物、類似体又はプロドラッグである。また、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5は、ハライド、例えばクロロ、フルオロ又はブロモ置換基であることができる。
【０１１６】
式Ｉａの好ましい前駆体化合物は、
【化４】
2011503071.tif 000005
である。
【０１１７】
本発明に有用ないくつかの代謝物は、式（ＩＩａ）：
【化５】
2011503071.tif 000006
［式中：（１）Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも１つは、常に硫黄含有置換基であり、そして残りの置換基Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5は、水素、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、ヨード、ブロモ、フルオロ、クロロ、（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、（Ｃ1−Ｃ6）アルコキシ、（Ｃ3−Ｃ7）シクロアルキル、及びフェニルからなる群より独立して選ばれ、ここにおいて、５つのＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも２つは、常に水素であるか；又は（２）Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5置換基の少なくとも１つは、硫黄含有置換基でなく、そして５つの置換基Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5の少なくとも１つは、常にヨードであり、そしてここにおいて、該ヨードは、ニトロ、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、ヒドロキシ又はアミノ基のいずれかであるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、又はＲ5基に常に隣接しているか；のいずれかでわる］のもの、そしてその薬学的に許容しうる塩、溶媒和物、異性体、互変異性体、代謝物、類似体又はプロドラッグである。いくつかの実施態様において、（２）の化合物は、ヨード基が、ニトロソ、ヒドロキシアミノ、ヒドロキシ又はアミノ基であるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、又はＲ5基に常に隣接するような化合物である。いくつかの実施態様において、（２）の化合物は、ヨード基が、ニトロソ、ヒドロキシアミノ又はアミノ基であるＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、又はＲ5基に常に隣接するような化合物である。
【０１１８】
以下の組成物は、好ましい代謝物化合物であり、それぞれ、化学式：
【化６】
2011503071.tif 000007
【０１１９】
Ｒ6は、水素、アルキル（Ｃ1−Ｃ8）、アルコキシ（Ｃ1−Ｃ8）、イソキノリノン、インドール、チアゾール、オキサゾール、オキサジアゾール、チオフェン、又はフェニルからなる群より選ばれる。
【０１２０】
【化７】
2011503071.tif 000008
【０１２１】
【化８】
2011503071.tif 000009
によって表される。
【０１２２】
いずれか１つの特定の機構に限定されるわけではないが、以下は、ニトロレダクターゼ又はグルタチオン抱合機構によるＭＳ２９２代謝の例を提供する：
【化９】
2011503071.tif 000010
【０１２３】
ＢＡグルタチオン抱合及び代謝：
【化１０】
2011503071.tif 000011
【０１２４】
本発明は、ＢＲＣＡ遺伝子における遺伝子欠損を有する卵巣がん、又は再発性、進行性、若しくは持続性子宮がんを治療するための前述のニトロベンズアミド代謝物化合物の使用を提供する。
【０１２５】
ニトロベンズアミド代謝物化合物は、悪性がん細胞において選択的細胞毒性を有するが、非悪性がん細胞ではそうではないことが報告されている。Rice et at., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:7703−7707 (1992)参照、その全体は本明細書に組み込まれている。一実施態様において、本発明の方法に使用されるニトロベンズアミド代謝物化合物は、非腫瘍細胞より腫瘍細胞に対してより選択的に毒性を示すことができる。従って、本発明による代謝物は、少なくとも１つの白金錯体（例えばカルボプラチン、シスプラチン、など）に加えて少なくとも１つのタキサン（例えばパクリタキセル又はドセタキセル）を用いる化学療法と併せてこのような治療を必要とする患者に投与することができる。このような代謝物の投与量範囲は、約０．０００４〜約０．５ｍｍｏｌ／ｋｇ（患者の体重キログラム当たり代謝物のミリモル）の範囲であってもよく、その投与量は、モル基準で、約０．１〜約１００ｍｇ／ｋｇのＢＡの範囲に対応する。代謝物の投与量の他の有効範囲は、０．００２４〜０．５ｍｍｏｌ／ｋｇ及び０．００４８〜０．２５ｍｍｏｌ／ｋｇである。このような用量は毎日、１日おきに、週に２回、毎週、隔週、毎月又は他の適切なスケジュールで投与することができる。代謝物については、本質的にＢＡと同じ投与方法、例えば経口、ｉ.ｖ.、ｉ.ｐ.、などを用いることができる。
【０１２６】
併用療法
本発明のある種の実施態様において、本発明の方法は、ＰＡＲＰ阻害剤を、少なくとも１つの抗腫瘍剤と共に又はなしで手術、放射線治療（例えばＸ線）、遺伝子治療、ＤＮＡ治療、アジュバント療法、ネオアジュバント療法、ウイルス性治療、免疫療法、ＲＮＡ治療、又はナノ療法を含むがこれらに制限されない別の抗がん治療と組み合わせて被験者に投与することによって子宮がん、子宮内膜がん、又は卵巣がんを治療することをさらに含む。
【０１２７】
併用療法が非薬物治療をさらに含む場合、非薬物治療は、治療剤及び非薬物治療の組み合わせの共同作用による有益効果が達成される限り、あらゆる適切なときに実施することができる。例えば、適切な場合、非薬物治療が、かなりの期間、治療剤の投与から時間的に離れている場合でも、有益効果が達成される。複合体（conjugate）及び他の薬理活性剤は、同時に、順次又は組み合わせて患者に投与することができる。本発明の組み合わせを用いる場合、本発明の化合物及び他の薬理活性剤は、同じ薬学的に許容しうる担体中にあってもよく、そのため同時に投与されることは言うまでもない。それらは、同時に投与される従来の経口投与形態のような別々の薬剤担体中にあってもよい。「組み合わせ」という用語は、さらに、化合物が別個の投与形態で提供され、順次投与される場合をもいう。
【０１２８】
放射線治療
放射線治療（又は放射線療法）は、悪性細胞を制御するがん治療の一部としてのイオン化放射線の医学的使用である。放射線療法は、治癒的な又は補助的ながん治療に用いることができる。それは、待機的治療（治癒が可能でなくそして局所的な疾患管理又は症状の軽減を目的とする場合）として又は治療的治療（治療により生存の恩恵があり、治癒が可能である場合）として用いられる。放射線療法は悪性腫瘍の治療に用いられ、そして一次治療として用いてもよい。また、放射線療法を手術、化学療法、ホルモン療法又は３つのいくつかを混合したものと組み合わせることも一般的である。最もよくみられるがんタイプは、いくつかのやり方で放射線療法により治療することができる。正確な治療目的（治癒的な、アジュバント的な、ネオアジュバント的な、治療的な、又は待機的な）、腫瘍のタイプ、位置及び病期と同様に患者の健康状態に左右される。
【０１２９】
放射線治療は、一般にがん腫瘍に適用される。また、流入領域リンパ節が臨床的に若しくは放射線学的に腫瘍に関与する場合、又は不顕性の悪性腫瘍が広がる危険性があると考えられる場合、放射線照射野には流入領域リンパ節が含まれる。毎日の設定及び内部腫瘍の移動における不確定要素を考慮して腫瘍周囲に正常組織のマージンを含む必要がある。
【０１３０】
放射線治療は、細胞のＤＮＡを損傷することによって作用する。損傷は、ＤＮＡ鎖を構成する原子を直接又は間接的にイオン化する光子、電子、養子、中性子又はイオンビームによって生じる。間接的なイオン化は、水のイオン化の結果、フリーラジカル、特にヒドロキシル基が形成されて起こり、次いで、それがＤＮＡを損傷する。放射線治療の最も一般的な形態では、ほとんどの放射線効果は、フリーラジカルによるものである。細胞はＤＮＡ損傷を修復するための機構を有するため、両鎖におけるＤＮＡの破壊は、細胞の特徴を変える際の最も重要な技術であることがわかる。がん細胞は一般に未分化で、そして幹細胞様であるため、より多く複製し、ほとんどの健康な分化細胞と比較して亜致死性損傷を修復する能力が低い。ＤＮＡ損傷は、細胞分裂を通して受け継がれ、がん細胞への損傷が蓄積され、がん細胞を死に至らせるか又は複製をより遅くする。陽子放射線療法は、腫瘍で正確に停止するように運動エネルギーを変化させて陽子を送ることによって作用する。
【０１３１】
また、ガンマ線も子宮、子宮内膜、及び卵巣番を含むある種のがんの治療に用いられる。ガンマ−ナイフ手術（gamma−knife surgery）と称する方法では、がん細胞を殺すために複数のガンマ線の集中ビームを成長部分に向ける。周囲組織に損傷を最小限にしながら、異なる角度からビームを向けて成長部分に放射線の焦点を合わせる。
【０１３２】
遺伝子治療剤
遺伝子治療剤は、患者の細胞の特異的なセットに遺伝子のコピーを挿入し、そしてがん及び非がん性細胞の両方を標的とする。遺伝子治療の目標は、変質した遺伝子を機能性遺伝子で置き換えること、がんに対する患者の免疫反応を刺激すること、がん細胞を化学療法に対してより感受性にすること、「自殺」遺伝子をがん細胞に入れること、又は血管新生を阻害することである。遺伝子は、ウイルス、リポソーム、又は他のキャリア若しくはベクターを用いて標的細胞に送達してもよい。これは、遺伝子−キャリア組成物を直接注射するか、又はex vivoで感染細胞を患者に取り込ませることによって行ってもよい。このような組成物は、本発明の使用に適切である。
【０１３３】
アジュバント療法
アジュバント療法は、治癒の機会を増強するために一次治療の後に施される治療である。アジュバント療法は、化学療法、放射線治療、ホルモン療法、又は生物学的治療を含んでもよい。
【０１３４】
アジュバント化学療法は、進行性子宮がん又は卵巣がんの患者に有効である。ドキソルビシン及びシスプラチンの組み合わせは、３４〜６０％の範囲の全奏効率を達成し、パクリタキセルの添加は、進行性疾患の患者の結果を改善すると考えられるが、それは有意により高い毒性を誘発する。現在、Gynecologic Oncology Study Groupの第ＩＩＩ相研究では、三つ組パクリタキセル＋ドキソルビシン＋シスプラチン＋Ｇ−ＣＳＦ対毒性の低い組み合わせのパクリタキセル＋カルボプラチンを調べている。継続中の計画された第ＩＩＩ相試験では、より新しい併用化学療法レジメン、照射及び化学療法の組み合わせ並びに腫瘍抑制率及び生活の質の改善を目的とする標的療法の実施を評価する。
【０１３５】
アジュバント放射線治療（ＲＴ）−アジュバント放射線治療は、子宮がんが局所的に（すなわち、骨盤又は膣中）再発する危険性を有意に低減する。一般に、ＲＴを実施するには２つの方法があり：膣内近接照射療法として又は外照射療法（ＥＢＲＴ）として行うことができる。膣内近接照射療法では、一時的に体内に置かれた線源から近接照射療法により膣組織に直接ＲＴを施す。これにより、がん細胞が最も見出されそうな領域に高線量の放射線を送達することができる。外照射療法（ＥＢＲＴ）では、放射線源は、体の外側にある。
【０１３６】
ホルモン療法、例えばタモキシフェン又はゴナドトロピン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）類似体、及び放射性モノクローナル抗体療法を含むがこれらに制限されない種々の治療は、卵巣がんを治療するために用いられている。
【０１３７】
ネオアジュバント療法
ネオアジュバント療法は、一次治療の前に施す治療のことである。ネオアジュバント療法の例としては、化学療法、放射線治療及びホルモン療法が含まれる。婦人科がんにおけるネオアジュバント化学療法は、生存にプラスの効果があることがわかっているアプローチである。それにより卵巣及び子宮頸がんにおける切除可能率が高まり、そのため生存に寄与する(Ayhan A. et. al. European journal of gynaecological oncology. 2006, vol. 27)。
【０１３８】
腫瘍崩壊性ウイルス性治療
がんのウイルス性治療では、腫瘍崩壊ウイルスと称するタイプのウイルスを利用する。腫瘍崩壊ウイルスは、正常細胞を無傷のまま、がん細胞を感染させて溶解することができるウイルスであり、がん治療において有用である可能性がある。腫瘍崩壊ウイルスの複製は、腫瘍細胞の破壊を促進し、そしてまた腫瘍部位における用量増幅を生じる。それは、抗がん遺伝子のベクターとして作用してもよく、抗がん遺伝子を腫瘍部位に特異的に送達するのを可能にする。
【０１３９】
腫瘍選択性を生じるために、２つの主要なアプローチ：形質導入による及び形質導入によらない標的化（transductional and non−transductional targeting）がある。形質導入による標的化には、ウイルスコートタンパク質の特異性を改良し、それにより非標的細胞への侵入を減らしながら標的細胞への侵入を増やすことが含まれる。形質導入によらない標的化には、がん細胞中でしか複製できないようにウイルスのゲノムを変えることが含まれる。これは、ウイルス複製に必須の遺伝子を腫瘍特異性プロモーターの管理下に置く転写標的化、又は正常細胞中ではなく、がん細胞中で不必要な機能を排除するウィルスゲノムの中に欠失を導入することが含まれる転写減衰（attenuation）のいずれかによって行うことができる。また、さらに少しわかりにくい他の方法もある。
【０１４０】
Chen 等 (2001)は、マウスの前立腺がんにおいて放射線療法と共に前立腺に特異的なアデノウイルス、ＣＶ７０６を使用した。併用治療により細胞死が相乗的に増加しただけでなく、ウイルスの放出量（各細胞溶解物（cell lysis）から放出されたウイルス粒子の数）が著しく増加した。
【０１４１】
ＯＮＹＸ−０１５は化学療法と結合してトライアルが行なわれている。併用治療では、いずれかの単独治療よりも大きな反応を得たが、結果が完全に決定的であるわけではなかった。ＯＮＹＸ−０１５は、放射線療法との結合が有望である。
【０１４２】
静脈内に投与されるウイルス剤は、従来的に治療するのが特に困難である転移がんに対して特に有効でありうる。しかしながら、血液を媒介とするウイルス（bloodborne viruse）は、抗体によって非活性化され、例えばクッパー細胞（アデノウイルスを排除する役割を担っている、肝臓中で極めて活性な食細胞）によって素早く血流から取り除くことができる。腫瘍が破壊されるまで免疫系を回避することが、腫瘍崩壊ウイルス治療の成功にとって最も大きな障害となるにちがいない。これまで、免疫系を回避するために使用される技術で完全に満足のいくものはない。腫瘍崩壊ウイルスは、従来のがん治療との併用において、併用療法が明白なマイナスの効果なしに相乗的に作動するため最も有望である。
【０１４３】
腫瘍崩壊ウイルスの特異性及び柔軟性とは、それが最小限の副作用で子宮がん、子宮内膜がん、及び卵巣がんを含むさまざまながんを治療する可能性を有することを意味する。腫瘍崩壊ウイルスには、がん細胞を選択的に殺すという問題を解決する可能性がある。
【０１４４】
ナノ療法
ナノメートルサイズの粒子は、個々の分子又はバルク固体のいずれからも入手することができない新規な光学的、電子的、そして構造的性質を有する。腫瘍特異性リガンド又はモノクローナル抗体のような腫瘍標的部分と結合したとき、これらのナノ粒子は、高い親和性及び精度でがん特異的受容体、腫瘍抗原（バイオマーカー）、及び腫瘍血管系を標的にするために用いることができる。がんナノ療法についての製剤及び製造方法は、米国特許第７１７９４８４号、及び論文M. N. Khalid, P. Simard, D. Hoarau, A. Dragomir, J. Leroux, Long Circulating Poly(Ethylene Glycol)Decorated Lipid Nanocapsules Deliver Docetaxel to Solid Tumors, Pharmaceutical Research, 23(4), 2006に記載されており、それらのすべては、それらの全体として参照により本明細書に組み込まれている。
【０１４５】
ＲＮＡ治療
ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ミクロＲＮＡを含むがこれらに制限されないＲＮＡは、遺伝子発現の調節及びがん治療に用いることができる。二本鎖オリゴヌクレオチドは、２本の明確なオリゴヌクレオチド配列の構築によって形成され、ここで一方の鎖のオリゴヌクレオチド配列は、２本目の鎖のオリゴヌクレオチド配列に対して相補的であり；このような二本鎖オリゴヌクレオチドは、２つの別々のオリゴヌクレオチド（例えばｓｉＲＮＡ）から又はそれ自体折り畳まれて二本鎖構造を形成している単一分子（例えばｓｈＲＮＡ又は低分子ヘアピン型ＲＮＡ）から一般に構成される。当分野で知られているこれらの二本鎖オリゴヌクレオチドは、全て二本鎖の各鎖が明瞭なヌクレオチド配列を有するという共通の特徴を有し、その際、１つのヌクレオチド配列領域（ガイド配列又はアンチセンス配列）のみが標的核酸配列に対して相補性を有し、そして他の鎖（センス配列）は、標的核酸配列に対して相同性であるヌクレオチド配列を含む。
【０１４６】
ミクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）は、遺伝子発現を調節する、長さ約２１〜２３個のヌクレオチドの一本鎖ＲＮＡ分子である。ｍｉＲＮＡは、ＤＮＡから転写されるが、タンパク質に翻訳されない遺伝子によってコードされており（非翻訳ＲＮＡ）；その代わりにｐｒｉ−ｍｉＲＮＡとして知られている一次転写産物からｐｒｅ−ｍｉＲＮＡと称するショートステムループ構造、そして最終的に機能性ｍｉＲＮＡに加工される。成熟したｍｉＲＮＡ分子は、１つ又はそれ以上のメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）分子に対して部分的に相補的であり、そしてその主な機能は、遺伝子発現を下方制御することである。
【０１４７】
ある種のＲＮＡ阻害剤は、がん表現型と関連するメッセンジャーＲＮＡ（「ｍＲＮＡ」）の発現又は翻訳を阻害するのに利用することができる。本明細書における使用に適したこのような薬剤の例としては、低分子干渉ＲＮＡ（「ｓｉＲＮＡ）、リボザイム及びアンチセンスオリゴヌクレオチドが含まれるが、これらに制限されるわけではない。本明細書における使用に適したＲＮＡ阻害剤の例としては、Ｃａｎｄ５、Ｓｉｒｎａ−０２７、ホミビルセン、及びアンギオザイムが含まれるが、これらに制限されるわけではない。
【０１４８】
小分子酵素阻害剤
ある種の小分子治療剤は、チロシンキナーゼ酵素活性又は上皮成長因子受容体（「ＥＧＦＲ」）若しくは血管内皮成長因子受容体（「ＶＥＧＦＲ」）のような特定の細胞受容体の下流のシグナル伝達シグナルを標的にすることができる。小分子療法によるこのような標的化は、抗がん効果を生じることができる。本明細書における使用に適したこのような薬剤の例としては、イマチニブ、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ラパチニブ、カネルチニブ、ＺＤ６４７４、ソラフェニブ（ＢＡＹ４３−９００６）、ＥＲＢ−５６９、並びにそれらの類似物及び誘導体が含まれるが、これらに制限されるわけではない。
【０１４９】
抗転移剤
がん細胞が最初の腫瘍部位から体中の他の場所に広がるプロセスをがん転移と称する。ある種の薬剤は、がん細胞が広がるのを抑制するために設計された抗転移性を有する。本明細書における使用に適したこのような薬剤の例としては、マリマスタット、ビバシズマブ、トラスツズマブ、リタキシマブ、エルロチニブ、ＭＭＩ−１６６、ＧＲＮ１６３Ｌ、ハンター−キラーペプチド、メタロプロテイナーゼの組織阻害剤（ＴＩＭＰ）、それらの類似体、誘導体及び変種が含まれるが、これらに制限されるわけではない。
【０１５０】
化学予防剤
ある種の薬剤は、がんの最初の発生を予防するために又は再発若しくは転移を予防するために用いることができる。本発明のエフロルニチン−ＮＳＡＩＤ結合体と組み合わせたこのような化学予防剤の投与は、がんの治療及び再発の予防の両方に作用することができる。本明細書における使用に適した化学予防剤の例としては、タモキシフェン、ラロキシフェン、チボロン、ビスホスホネート、イバンドロネート、エストロゲン受容体モジュレーター、アロマターゼ阻害剤（レトロゾール、アナストロゾール）、黄体形成ホルモン放出ホルモン作動剤、ゴセレリン、ビタミンＡ、レチナール、レチン酸、フェンレチニド、９−シス−レチノイド酸（9−cis−retinoid acid）、１３−シス−レチノイド酸（13−cis−retinoid acid）、オールトランスレチノイン酸、イソトレチノイン、トレチノイド（tretinoid）、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、シクロオキシゲナーゼ阻害剤、非ステロイド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）、アスピリン、イブプロフェン、セレコキシブ、ポリフェノール、ポリフェノールＥ、緑茶抽出物、葉酸、グルカル酸、インターフェロンアルファ、アネトールジチオールチオン、亜鉛、ピリドキシン、フィナステリド、ドキサゾシン、セレニウム、インドール−３−ガルビナル（indole−3−carbinal）、アルファ−ジフルオロメチルオルニチン、カロチノイド、ベータ−カロチン、リコペン、抗酸化剤、コエンザイムＱ１０、フラボノイド、ケルセチン、クルクミン、カテキン、没食子酸エピガロカテキン、Ｎ−アセチルシステイン、インドール−３−カルビノール、イノシトール六リン酸、イソフラボン、グルカン酸（glucanic acid）、ローズマリー、大豆、ノコギリヤシ（saw palmetto）、及びカルシウムが含まれるが、これらに制限されるわけではない。本発明の使用に適した化学予防剤のさらなる例は、がんワクチンである。これは、予防接種プロセスによって、標的となるがん細胞タイプの全部又は一部を有する患者に免疫性を与えることにより行うことができる。
【０１５１】
臨床的有効性：
臨床的有効性（clinical efficacy）は、当分野で知られているあらゆる方法で測定することができる。いくつかの実施態様において、本明細書に記載された治療的治療の臨床的有効性は、臨床的有効率（clinical benefit rate）（ＣＢＲ）を測定することで判定することができる。臨床的有効率は、治療の終わりから少なくとも６ヵ月の時点で完全寛解（ＣＲ）の患者、部分寛解（ＰＲ）の患者数及び安定（ＳＤ）にいる患者数のパーセンテージの合計を測定することにより評価される。この式の短縮形は、ＣＢＲ＝ＣＲ＋ＰＲ＋ＳＤ≧６ヵ月である。パクリタキセル及びカルボプラチンを用いる組み合わせ療法についてのＣＢＲは、４５％である。従って、タキサン、白金錯体及びＰＡＲＰ阻害剤（例えばパクリタキセル、カルボプラチン及びＢＡ；ＣＢＲGCB）を用いる三重組み合わせ療法についてのＣＢＲは、パクリタキセル及びカルボプラチン（ＣＢＲGC）を用いる二重組み合わせ療法のそれに匹敵しうる。いくつかの実施態様において、ＣＢＲGCBは、少なくとも約６０％である。いくつかの実施態様において、ＣＢＲは、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、又は少なくとも約５０％である。
【０１５２】
本明細書に記載されたいくつかの実施態様において、方法は、がんがＰＡＲＰモジュレーターによって治療できることを予め決定することを含む。いくつかのそのような方法は、患者の子宮、子宮内膜、又は卵巣がんサンプル中のＰＡＲＰレベルを同定し、サンプル中のＰＡＲＰ発現レベルが所定の値より大きいかどうかを測定し、そしてＰＡＲＰ発現が前記所定の値より大きい場合、本明細書に記載された抗腫瘍剤及びＢＡのようなＰＡＲＰ阻害剤の組み合わせを用いて患者を治療することを含む。別の実施態様において、方法は、患者の子宮、子宮内膜、又は卵巣がんサンプル中のＰＡＲＰレベルを同定し、サンプル中のＰＡＲＰ発現レベルが所定の値より大きいかどうかを測定し、そしてＰＡＲＰ発現が前記所定の値より大きい場合、ＢＡのようなＰＡＲＰ阻害剤を用いて患者を治療することを含む。
【０１５３】
ＢＲＣＡ１又はＢＲＣＡ２遺伝子のいずれかの欠損を受け継ぐ女性の子宮腫瘍は、腫瘍細胞が損傷を受けたＤＮＡを修復する特異的な機構を失ったために生じる。ＢＲＣＡ１及びＢＲＣＡ２は、相同組換えによるＤＮＡ二本鎖切断修復にとって重要であり、そしてこれらの遺伝子における突然変異は、子宮及び他のがんににかかりやすくなる。ＰＡＲＰは、ＤＮＡ一本鎖切断の修復における経路、塩基除去修復に関与している。ＢＲＣＡ１又はＢＲＣＡ２機能障害は、ＰＡＲＰ酵素活性の阻害に対して細胞を感受性にし、染色体不安定性、細胞周期停止及びその後のアポトーシスを生じる(Jones C, Plummer ER. PARP inhibitors and cancer therapy − early results and potential applications. Br J Radiol. 2008 Oct;81 Spec No 1: S2−5; Drew Y, Calvert H. The potential of PARP inhibitors in genetic breast and ovarian cancers. Ann N Y Acad Sci. 2008 Sep;1138:136−45; Farmer H, et.al. Targeting the DNA repair defect in BRCA mutant cells as a therapeutic strategy. Nature. 2005 Apr 14;434(7035): 917−21)。
【０１５４】
ＢＲＣＡ遺伝子に欠損がある患者は、ＰＡＲＰレベルが上方制御されることがある。ＰＡＲＰ上方制御は、欠損のあるＤＮＡ修復経路及び認識されてないＢＲＣＡ様遺伝子欠損の指標となりうる。ＰＡＲＰ遺伝子発現及び損なわれたＤＮＡ修復、特に欠損のある相同組換えＤＮＡ修復の評価は、ＰＡＲＰ阻害剤への腫瘍感受性の指標として用いることができる。従って、いくつかの実施態様において、子宮がんお治療は、がんのＨＲ及び／又はＨＥＲ２の状態を測定することによってだけでなく、ＰＡＲＰのレベルを測定することによりＢＲＣＡ及び相同組換えＤＮＡ修復欠損のある患者におけるがんの早期発症を同定することによっても強化することができる。ＰＡＲＰが上方制御される場合、ＰＡＲＰ阻害剤によって治療できるＢＲＣＡ及び相同組換えＤＮＡ修復欠損のある患者を同定することができる。さらに、このような相同組換えＤＮＡ修復欠損のある患者は、ＰＡＲＰ阻害剤を用いて治療することができる。
【０１５５】
いくつかの実施態様において、サンプルは、子宮病変を有するか又はがんの成長が疑われる患者から集める。このようなサンプルは、あらゆる入手可能な生物組織であってもよいが、ほとんどの場合、サンプルは、腹腔鏡検査又は観血手術（例えば子宮摘出術）によって得たかどうかに関係なく、疑わしい子宮病変の一部である。次いで、ＰＡＲＰ発現について分析することができ、そしてＰＡＲＰ発現が所定のレベルより上である（例えば、正常組織と比較して上方制御される）場合、患者は、ＰＡＲＰ阻害剤をタキサン及び白金薬剤と組み合わせて治療することができる。従って、本明細書に記載された実施態様は子宮内膜がん、再発性、進行性、若しくは持続性の子宮がん、及びＢＲＣＡ欠損に関連する卵巣がんの治療に関するが、いくつかの実施態様において、ＰＡＲＰ上方制御閾値を満たしている限り、子宮又は卵巣がんはこれらの特性を有する必要がないことを理解すべきである。
【０１５６】
いくつかの実施態様において、相同組換え欠損のある腫瘍は、ＰＡＲＰ発現のレベルを評価することによって同定される。ＰＡＲＰの上方制御が観察される場合、このような腫瘍は、ＰＡＲＰ阻害剤を用いて治療することができる。別の実施態様は、ＰＡＲＰ発現のレベルを評価し、そして過剰発現が観察される場合、がんをＰＡＲＰ阻害剤で治療することを含む、相同組換え欠損のあるがんの治療方法である。
【０１５７】
サンプル収集、調製及び分離
生体サンプルは、体液サンプル又は組織サンプルを含む患者のさまざまな供給源から集めることができる。集めたサンプルは、ヒトの正常及び腫瘍サンプル、乳頭アスピラント（nipple aspirants）であることができる。サンプルは、長期間（例えば、およそ１日１回、週に１回、月に１回、半年毎、又は毎年）にわたって繰り返し個体から集めることができる。一定期間にわたって個体から多くのサンプルを得ることにより、より早期の検出から結果を確認すること及び／又は例えば、増悪、薬物治療、などの結果として生物学的パターンにおける変性を同定することに用いることができる。
【０１５８】
サンプルの調製及び分離は、集めたサンプルのタイプ及び／又はＰＡＲＰの分析に応じていずれかの方法で行うことができる。このような方法は、ほんの一例として、濃縮、希釈、ｐＨの調整、多量のポリペプチド（例えばアルブミン、ガンマグロブリン及びトランスフェリン、など）の除去、保存剤及びキャリブラント（calibrants）の添加、プロテアーゼ阻害剤の添加、変性剤の添加、サンプルの脱塩、サンプルタンパク質の濃縮、脂質の抽出及び精製を含む。
【０１５９】
また、サンプル調製では、非共有結合的複合体において他のタンパク質（例えばキャリアタンパク質）に結合した分子を単離することもできる。この方法は、特異的なキャリアタンパク質（例えばアルブミン）に結合した分子を単離することができ、又は、例えば、酸を用いたタンパク質変性によりすべてのキャリアタンパク質から結合した分子を解放し、続いてキャリアタンパク質を除去するといったようなより一般的な方法を用いることができる。
【０１６０】
サンプルからの望ましくないタンパク質（例えば多量の、情報価値がない、又は検出不可能なタンパク質）の除去は、高親和性試薬、高分子量フィルター、超遠心分離及び／又は電気透析を用いて実施することができる。高親和性試薬には、多量のタンパク質に選択的に結合する抗体又は他の試薬（例えばアプタマー）が含まれる。また、サンプル調製は、イオン交換クロマトグラフィ、金属イオンアフィニティクロマトグラフィ、ゲル濾過、疎水性クロマトグラフィ、クロマトフォーカシング、吸着クロマトグラフィ、等電点電気泳動及び関連技術を含むことができる。分子量フィルターは、サイズ及び分子量に基づいて分子を分離する膜を含む。このようなフィルターは、さらに逆浸透、ナノ濾過、限外濾過及び精密濾過で使用してもよい。
【０１６１】
超遠心分離は、サンプルから望ましくないポリペプチドを除去するための方法である。超遠心分離では、光学系を用いて粒子の沈降（又はその欠如）をモニターしながら約１５，０００〜６０，０００ｒｐｍでサンプルを遠心分離する。電気透析は、電位勾配の影響下で一方の溶液から他方へ半透膜を通してイオンを輸送する方法において電気膜（electromembrane）又は半透膜を用いる方法である。電気透析に用いる膜は、陽性又は陰性電荷を有するイオンを選択的に輸送し、反対電荷のイオンを拒絶し、又はサイズ及び電荷に基づいて化学種が半透膜を通して移動するのを可能にする能力を有することができるため、電気透析は、電解質の濃縮、除去又は分離に有用である。
【０１６２】
本発明における分離及び精製は、キャピラリー電気泳動（例えば、キャピラリー中又はオンチップ）又はクロマトグラフィ（例えば、キャピラリー、カラム中又はチップ上）といったような当分野で知られているあらゆる方法を含むことができる。電気泳動は、電界の影響下でイオン性分子を分離するために用いることができる方法である。電気泳動は、ゲル、キャピラリー中、又はチップ上のマイクロチャネル中で実施することができる。電気泳動に用いるゲルの例としては、デンプン、アクリルアミド、ポリエチレンオキシド、アガロース、又はそれらの組み合わせが含まれる。ゲルは、その架橋性、洗浄剤又は変性剤の添加、酵素又は抗体（アフィニティー電気泳動）又は基質（ザイモグラフィ）の固定化及びｐＨ勾配の組込みによって改良することができる。電気泳動に用いるキャピラリーの例としては、エレクトロスプレーと適合するキャピラリーが含まれる。
【０１６３】
キャピラリー電気泳動法（ＣＥ）は、複合体親水性分子及び高度に荷電された溶質の分離にとって好ましい。また、ＣＥ技術は、マイクロ流体チップ上でも実施することができる。使用するキャピラリー及びバッファーのタイプに応じて、ＣＥは、キャピラリーゾーン電気泳動（ＣＺＥ）、キャピラリー等電点電気泳動（ＣＩＥＦ）、キャピラリー等速電気泳動（ｃＩＴＰ）及びキャピラリー電気クロマトグラフィ（ＣＥＣ）といったような分離技術にさらに分けることができる。エレクトロスプレーイオン化にＣＥ技術を連結する実施態様には、揮発性溶液、例えば、揮発性酸及び／又は塩基及び有機物、例えばアルコール又はアセトニトリルを含む水性混合物の使用が含まれる。
【０１６４】
キャピラリー等速電気泳動（ｃＩＴＰ）は、検体が一定速度でキャピラリー中を移動するが、それにもかかわらずそれぞれの移動性によって分離される技術である。自由溶液ＣＥ（free−solution CE）（ＦＳＣＥ）としても知られているキャピラリーゾーン電気泳動（ＣＺＥ）は、化学種の電気泳動移動度における差に基づいており、分子が移動中に接触する摩擦抵抗によって測定され、これは分子上の電荷及び分子のサイズに正比例していることが多い。キャピラリー等電点電気泳動（ＣＩＥＦ）では、わずかにイオン化可能な両性分子を、ｐＨ勾配の電気泳動によって分離することができる。ＣＥＣは、従来の高性能液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）とＣＥとのハイブリッド技術である。
【０１６５】
本発明に用いられる分離及び精製技術には、当分野で知られているあらゆるクロマトグラフィ方法が含まれる。クロマトグラフィは、ある種の検体の示差吸着及び溶離又は移動相と固定相との間での検体の分配に基づくことができる。クロマトグラフィの異なる例としては、液体クロマトグラフィ（ＬＣ）、ガスクロマトグラフィ（ＧＣ）、高性能液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）などが含まれるが、これらに制限されるものではない。
【０１６６】
ＰＡＲＰのレベルの同定
ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）は、ポリ（ＡＤＰ−リボース）合成酵素及びポリＡＤＰ−リボシルトランスフェラーゼとしても知られている。ＰＡＲＰは、細胞タンパク質に（同様にそれ自体に）結合してそれによりそのタンパク質の活性を改良することができるポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリマーの形成に触媒作用を及ぼす。酵素は、ＤＮＡ修復の増強に役割を果たしており、そしてまた転写の調節、細胞増殖及びクロマチン再構築に役割を果たしている（総説については、D. D famours et al. “Poly (ADP−ribosylation reactions in the regulation of nuclear functions,”Biochem. J. 342: 249−268 (1999)参照）。
【０１６７】
ＰＡＲＰ−１は、Ｎ末端ＤＮＡ結合ドメイン、自己修飾ドメイン（automodification domain）及びＣ末端触媒ドメインを含み、そして種々の細胞のタンパク質はＰＡＲＰ−１と相互作用する。Ｎ末端ＤＮＡ結合ドメインは、２つの亜鉛フィンガーモチーフを含む。転写エンハンサー因子−１（ＴＥＦ−１）、レチノイドＸ受容体α、ＤＮＡポリメラーゼα、Ｘ線修復交互補足因子−１（X−ray repair cross−complementing factor−1）（ＸＲＣＣ１）及びＰＡＲＰ−１それ自体は、このドメイン中のＰＡＲＰ−１と相互作用する。自己修飾ドメインは、タンパク質−タンパク質相互作用モジュールの１つであるＢＲＣＴモチーフを含む。このモチーフは、ＢＲＣＡ１（子宮がん感受性タンパク質１）のＣ末端で最初に見出され、そしてＤＮＡ修復、組換え及び細胞周期チェックポイント制御に関連する種々のタンパク質中に存在する。ＰＯＵ−ホメオドメインを含有する八量体転写因子−１（Ｏｃｔ−１）、Yin Yang（ＹＹ）１及びユビキチン結合酵素９（ｕｂｃ９）は、ＰＡＲＰ−１中のこのＢＲＣＴモチーフと相互作用することもある。
【０１６８】
哺乳類ゲノムには１５種のメンバーを超えるＰＡＲＰファミリーの遺伝子が存在する。ＰＡＲＰファミリータンパク質及びポリ（ＡＤＰ−リボース）をＡＤＰ−リボースに分解するポリ（ＡＤＰ−リボース）グリコヒドロラーゼ（ＰＡＲＧ）は、ＤＮＡ損傷反応及び転写調節を含むさまざまな細胞調節機能に関与していることもあり、そして多くの点で発がん及びがんの生物学に関連している可能性がある。
【０１６９】
いくつかのＰＡＲＰファミリータンパク質が同定されている。タンキラーゼは、テロメア調節因子１（ＴＲＦ−１）と相互作用するタンパク質として見出され、テロメア調節に関与している。ヴォールトＰＡＲＰ（ＶＰＡＲＰ）は、核−細胞質輸送体として作用するヴォールト複合体中の成分である。また、ＰＡＲＰ−２、ＰＡＲＰ−３及び２,３,７,８−テトラクロロジベンゾ−ｐ−ジオキシン誘導性ＰＡＲＰ（ＴｉＰＡＲＰ）も同定されている。従って、ポリ（ＡＤＰ−リボース）代謝は、さまざまな細胞調節機能と関係があると考えられる。
【０１７０】
この遺伝子ファミリーのメンバーは、ＰＡＲＰ−１である。ＰＡＲＰ−１遺伝子産物は、細胞核において高レベルで発現され、活性化についてはＤＮＡ損傷に依存している。なんら理論によって拘束されることはないが、ＰＡＲＰ−１は、アミノ末端ＤＮＡ結合ドメインを通したＤＮＡ一本又は二本鎖破壊に関係があると考えられる。結合によりカルボキシ末端触媒ドメインを活性化し、その結果、標的分子においてＡＤＰ−リボースのポリマーが形成される。ＰＡＲＰ−１は、中央に位置する自己修飾ドメインによるポリＡＤＰリボシル化の標的それ自体である。ＰＡＲＰ−１のリボシル化によりＤＮＡからＰＡＲＰ−１分子の解離が生じる。結合、リボシル化及び解離の全体プロセスは、きわめて急速に生じる。ＤＮＡ損傷部位へのＰＡＲＰ−１のこの一時的な結合は、ＤＮＡ修復機構の補強（recruitment）を行うか、又は修復機構の補強にとって十分に長い間、組換えを抑制するように作用しうることが示唆されている。
【０１７１】
ＰＡＲＰ反応のためのＡＤＰ−リボースの供給源は、ニコチンアミドアデノシンジヌクレオチド（ＮＡＤ）である。ＮＡＤは、細胞中で細胞のＡＴＰ貯蔵部位から合成され、そのためＰＡＲＰ活性が高レベルで活性化されると、細胞のエネルギー貯蔵部位の枯渇を急速に招くことがある。ＰＡＲＰ活性を誘発すると細胞死に至ることがあり、それは細胞のＮＡＤ及びＡＴＰプールの枯渇と関連があることが示されている。ＰＡＲＰ活性は、酸化的ストレスの多くの場合に又は炎症中に誘発される。例えば、虚血性組織の再灌流の際に反応性一酸化窒素が生成され、そして一酸化窒素が、過酸化水素、ペルオキシニトラート（peroxynitrate）及びヒドロキシル基を含むさらなる活性酸素種を生成することになる。これらの後者の種は、ＤＮＡを直接損傷することがあり、生成した損傷はＰＡＲＰ活性の活性化を誘発する。多くの場合、ＰＡＲＰ活性が十分に活性化されると細胞のエネルギー貯蔵が減少して細胞死に至ると考えられている。同様の機構は、炎症中に内皮細胞及び炎症誘発性細胞が一酸化窒素を合成するときに働くと考えられ、これにより周囲細胞における酸化的ＤＮＡ損傷、そしてその後にＰＡＲＰ活性の活性化が起こる。ＰＡＲＰ活性化から生じる細胞死は、虚血−再灌流障害から又は炎症から生じる組織損傷の程度に寄与する主な要因であると考えられる。
【０１７２】
いくつかの実施態様において、患者からのサンプル中のＰＡＲＰのレベルを所定の標準サンプルと比較する。患者からのサンプルは、通常、がん細胞又は組織のような患部組織からである。標準サンプルは、同じ患者から又は異なる対象からであることができる。標準サンプルは、通常、正常な非病変サンプルである。しかしながら、疾患の病期分類するため又は治療の有効性を評価するといったようないくつかの実施態様では、標準サンプルは、病変組織からである。標準サンプルは、数人の異なる対象からのサンプルの組み合わせであることができる。いくつかの実施態様において、患者からのＰＡＲＰのレベルを所定のレベルと比較する。この所定のレベルは、通常、正常サンプルから得られる。本明細書に記載された通り、「所定のＰＡＲＰレベル」は、ほんの一例として、治療のために選ばれうる患者を評価するため、ＰＡＲＰ阻害剤治療に対する効果を評価するため、ＰＡＲＰ阻害剤と二次的な治療剤の治療との組み合わせに対する効果を評価するため、及び／又はがん、炎症、疼痛及び／又は関連する状態について患者を診断するために使用されるＰＡＲＰのレベルであってもよい。所定のＰＡＲＰレベルは、がんを有する又は有しない患者の集団で測定してもよい。所定のＰＡＲＰレベルは、すべての患者に同様に適用できる単一の数であることができ、又は所定のＰＡＲＰレベルは、患者の特定の部分母集団に応じて変えることができる。例えば、男性は、女性とは異なる所定のＰＡＲＰレベルを有する可能性があり；非喫煙者は、喫煙者とは異なる所定のＰＡＲＰレベルを有することもありうる。患者の年齢、体重及び身長は、個々の所定のＰＡＲＰレベルに影響を及ぼすことがある。さらにまた、所定のＰＡＲＰレベルは、個々に各患者について測定されるレベルであることができる。所定のＰＡＲＰレベルは、いずれか適切な標準であることができる。例えば、所定のＰＡＲＰレベルは、患者選択を判断するのと同じ又は異なるヒトから得ることができる。一実施態様において、所定のＰＡＲＰレベルは、同じ患者の前の評価から得ることができる。このようなやり方で、患者選択の経過は、時間をかけてモニターすることができる。さらに、標準は、別のヒト又は複数のヒト、例えば選ばれたヒトの群の評価から得ることができる。このようなやり方で、選択を判断されるヒトの選択範囲は、適切な他のヒト、例えば、類似の又は同じ状態を患っているヒトのように関心あるヒトと類似の状態にある他のヒトと比較することができる。
【０１７３】
本発明のいくつかの実施態様において、所定のレベルからのＰＡＲＰの変化は、約０．５倍、約１．０倍、約１．５倍、約２．０倍、約２．５倍、約３．０倍、約３．５倍、約４．０倍、約４．５倍、又は約５．０倍である。いくつかの実施態様において、変化の倍率は、約１未満、約５未満、約１０未満、約２０未満、約３０未満、約４０未満、又は約５０未満である。別の実施態様において、所定のレベルと比較したＰＡＲＰレベルにおける変化は、約１を超え、約５を超え、約１０を超え、約２０を超え、約３０を超え、約４０を超え、又は約５０を超える。所定のレベルからの好ましい変化倍率は、約０．５、約１．０、約１．５、約２．０、約２．５、及び約３．０である。
【０１７４】
患者におけるＰＡＲＰレベルの分析は、医師がより効果的に最良の治療を選ぶことができるだけでなく、より積極的な治療及びＰＡＲＰの上方制御された又は下方制御されたレベルに基づく治療レジメンを利用することができるため、特に有益で価値がある。より積極的な治療、又は併用療法及びレジメンは、患者の予後及び全体の生存期間を延ばすのに役立つことができる。この情報を備えることで、医師は、ＰＡＲＰ阻害剤を用いた治療及び／又はより積極的な治療といったようなある種の治療タイプを提供することを選択することができる。
【０１７５】
一定期間にわたって患者のＰＡＲＰレベルをモニタリングする際、期間は、数日、数週、数ヵ月そして場合によっては数年又はそれらのさまざまな間隔であってもよく、患者の体液サンプル、例えば、血清又は血漿を、医師又は臨床家のような、従事者によって決定された間隔をおいて集め、ＰＡＲＰのレベルを測定し、そして治療又は疾患の経過にわたって正常な人のレベルと比較することができる。例えば、本発明に従って患者のサンプルを採取し、そして毎月、２ヵ月毎に、又は１、２若しくは３ヵ月の間隔を組み合わせてモニターすることができる。さらに、時間をかけて得られた患者のＰＡＲＰレベルは、モニタリング期間中、正常な対照のＰＡＲＰ値だけでなく相互に都合よく比較することができ、それによって長期的なＰＡＲＰモニタリングの内部、又は個人的対照として患者自身のＰＡＲＰ値を得ることができる。
【０１７６】
ＰＡＲＰの分析技術
ＰＡＲＰの分析は、ＤＮＡ、ＲＮＡの分析を含むＰＡＲＰ遺伝子発現の分析、ＰＡＲＰレベルの分析及び／又はモノ及びポリ−ＡＤＰ−リボシル化のレベルを含むＰＡＲＰ活性の分析を含むことができる。本発明の範囲を制限することなく、当分野で知られている多数の技術をＰＡＲＰの分析に使用することができ、それらはすべて本発明の範囲内にある。このような検出技術のいくつかの例を下に記載するが、これらの例が、本発明に使用することができる種々の検出技術をなんら制限することはない。
【０１７７】
遺伝子発現プロファイリング：遺伝子発現プロファイリングの方法としては、ポリヌクレオチド、ポリリボヌクレオチドのハイブリダイゼーション分析に基づく方法、ポリヌクレオチド、ポリリボヌクレオチドの塩基配列決定に基づく方法及びプロテオミクスベースの方法が含まれる。サンプル中のｍＲＮＡ発現を定量するために当分野で知られている最も一般に使用される方法としては、ノーザンブロット及びin situハイブリダイゼーション(Parker & Barnes, Methods in Molecular Biology 106:247−283 (1999))；ＲＮＡｓｅ保護アッセイ(Hod, Biotechniques 13:852−854 (1992))；及びＰＣＲベースの方法、例えば逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ−ＰＣＲ）(Weis et al., Trends in Genetics
8:263−264 (1992))が含まれる。別法として、ＤＮＡ二本鎖、ＲＮＡ二本鎖、及びＤＮＡ‐ＲＮＡハイブリッド二本鎖又はＤＮＡ−タンパク質二本鎖を含む特異的な二本鎖を認識することができる抗体を使用してもよい。シークエンシングに基づく遺伝子発現分析の代表的な方法としては、遺伝子発現の連続分析（ＳＡＧＥ）、及び超並列シグニチャーシークエンシング（massively parallel signature sequencing）（ＭＰＳＳ）による遺伝子発現分析、比較ゲノムハイブリダイゼーション（ＣＧＨ）、クロマチン免疫沈降（ＣｈＩＰ）、一塩基多型（ＳＮＰ）及びＳＮＰアレイ、蛍光in situハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）、タンパク質結合アレイ及びＤＮＡマイクロアレイ（また、一般に、遺伝子若しくはゲノムチップ、ＤＮＡチップ、又は遺伝子アレイとして知られている）、ＲＮＡマイクロアレイが含まれる。
【０１７８】
逆転写酵素ＰＣＲ（ＲＴ−ＰＣＲ）：最も感受性で最も順応性のある定量的ＰＣＲベースの遺伝子発現プロファイリング方法の１つは、ＲＴ−ＰＣＲであり、これは、薬物治療を伴う又は伴わない正常及び腫瘍組織における異なるサンプル個体群においてｍＲＮＡレベルを比較し、遺伝子発現のパターンを特徴づけ、密接に関連するｍＲＮＡを弁別し、そしてＲＮＡ構造を分析するために用いることができる。第１工程は、標的サンプルからのｍＲＮＡの単離である。例えば、出発物質は、典型的に、ヒト腫瘍又は腫瘍細胞株及びそれぞれ対応する正常組織又は細胞株から単離された全ＲＮＡであることができる。従って、ＲＮＡは、さまざまな正常な及び病変した細胞及び組織、例えば乳房、肺、結腸直腸、前立腺、脳、肝臓、腎臓、膵臓、脾臓、胸腺、精巣、卵巣、子宮、などを含む腫瘍、又は腫瘍細胞株から単離することができる。ｍＲＮＡの供給源が原発腫瘍である場合、ｍＲＮＡは、例えば凍結された又は保管された固定組織、例えばパラフィン包埋された及び固定された（例えばホルマリン固定）組織サンプルから抽出することができる。ｍＲＮＡ抽出の一般的な方法は、当分野でよく知られており、そしてAusubel et al., Current Protocols of Molecular Biology, John Wiley and Sons (1997)を含む分子生物学の標準テキストに記載されている。
【０１７９】
特に、ＲＮＡ単離は、商業的な製造者からの精製キット、バッファーセット及びプロテアーゼを用いて、製造者の説明書に従って実施することができる。腫瘍から調製されたＲＮＡは、例えば、塩化セシウム密度勾配遠心法によって単離することができる。ＲＮＡはＰＣＲのテンプレートとして用いることができないため、ＲＴ−ＰＣＲによる遺伝子発現プロファイリングにおける第１工程は、ＲＮＡテンプレートをｃＤＮＡへ逆転写し、続いてＰＣＲ反応においてそれを指数関数的に増幅することである。最も一般に使用される２つの逆転写酵素は、ニワトリ（avilo）骨髄芽球症ウイルス逆転写酵素（ＡＭＶ−ＲＴ）及びモロニーマウス白血病ウイルス逆転写酵素（ＭＭＬＶ−ＲＴ）である。逆転写工程では、典型的に発現プロファイリングの環境及び目標に応じて特異的なプライマー、ランダム六量体、又はオリゴ−ｄＴプライマーを用いて活性化（primed）する。次いで誘導されたｃＤＮＡを、その後のＰＣＲ反応におけるテンプレートとして用いることができる。
【０１８０】
過誤及びサンプルごとの変動効果を最小限にするため、ＲＴ−ＰＣＲは、通常、内部標準を用いて実施される。理想的な内部標準は、異なる組織において一定レベルで発現され、そして実験的治療に影響を受けない。遺伝子発現のパターンを標準化するために最も頻繁に用いられるＲＮＡは、ハウスキーピング遺伝子グリセルアルデヒド−３−リン酸−デヒドロゲナーゼ（ＧＡＰＤＨ）のｍＲＮＡ及びβ−アクチンである。
【０１８１】
ＲＴ−ＰＣＲ技術のさらに最近の変法は、リアルタイム定量的ＰＣＲであり、これは二重標識化蛍光発生プローブ（dual−labeled fluorogenic probe）を通してＰＣＲ生成物の蓄積を測定する。リアルタイムＰＣＲは、各標的配列についての内部競合者（internal
competitor）を標準化に用いる定量的競合的ＰＣＲ（quantitative competitive PCR）、及びＲＴ−ＰＣＲ用にサンプル、又はハウスキーピング遺伝子内に含まれる基準化遺伝子（normalization gene）を用いる定量的比較ＰＣＲ（quantitative comparative PCR）の両方に適合しうる。
【０１８２】
蛍光顕微鏡検査法：本発明のいくつかの実施態様は、ＰＡＲＰ分析のための蛍光顕微鏡検査法を含む。蛍光顕微鏡検査法では、抗体のような化学特異性の高い蛍光標識化されたプローブを用いることにより観察している構造の分子組成を同定することが可能である。それは、フルオロフォア（fluorophore）をタンパク質に直接結合し、そしてこれを細胞中に導入することによって行うことができる。蛍光類似体は、天然タンパク質のように作用することがあり、そのため細胞中のこのタンパク質の分布及び挙動を示すのに役立つことができる。ＮＭＲと共に、赤外分光法、円偏光二色性及び他の技術、タンパク質内在蛍光減衰及びそれに関連する蛍光異方性の観察、衝突消光（collisional quenching）及び共鳴エネルギー移動は、タンパク質検出の技術である。天然の蛍光タンパク質は、蛍光プローブとして用いることができる。オワンクラゲは、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）として知られている天然の蛍光タンパク質を産生する。標的タンパク質に対するこれらの蛍光プローブの融合により蛍光顕微鏡検査法による視覚化及びフローサイトメトリーによる定量が可能となる。ほんの一例として、いくつかのプローブは、フルオレセイン及びその誘導体、カルボキシフルオレセイン、ローダミン及びそれらの誘導体、アト標識（atto labels）、赤色蛍光及び橙色蛍光：ｃｙ３／ｃｙ５代替物、長寿命ランタニド錯体、長波長標識−最大８００ｎｍ、ＤＹシアニン標識、及びフィコビリタンパク質といったような標識である。ほんの一例として、いくつかのプローブは、イソチオシアネート複合体、ストレプトアビジン複合体、及びビオチン複合体といったような複合体である。ほんの一例として、いくつかのプローブは、蛍光発生及び発色性基質のような酵素基質である。ほんの一例として、いくつかのプローブは、ＦＩＴＣ（緑色蛍光、励起／発光＝５０６／５２９ｎｍ）、ローダミンＢ（橙色蛍光、励起／発光＝５６０／５８４ｎｍ）、及びナイルブルーＡ（赤色蛍光、励起／発光＝６３６／６８６ｎｍ）といったような蛍光色素である。蛍光ナノ粒子は、さまざまなイムノアッセイに用いることができる。蛍光ナノ粒子は、ポリアクリロニトリル及びポリスチレンなどのような異なる物質をベースとする。蛍光分子のローターは、その回転が拘束されたときに蛍光性となる微小環境限定のセンサである。分子拘束のいくつかの例としては、色素増加（凝集）、抗体への結合、又はアクチンの重合にける捕捉が含まれる。ＩＥＦ（等電点電気泳動）は、両性電解質、主にタンパク質を分離するための分析手段である。蛍光ＩＥＦ−マーカーを用いたＩＥＦ−ゲル電気泳動の利点は、勾配形成を直接観察できることである。蛍光ＩＥＦ−マーカーは、２８０ｎｍ（２０℃）でＵＶ−吸収により検出することもできる。
【０１８３】
ペプチドライブラリーは、固体支持体上に合成することができ、そして着色受容体を用いることによって、その後に染色された固体支持体を１つずつ選択することができる。受容体がなんら色を示すことができない場合、その結合している抗体を染色することができる。その方法は、タンパク質受容体においてだけでなく、合成された人工受容体の結合リガンドのスクリーニング及び新しい金属結合リガンドのスクリーニングにも同様に用いることができる。また、ＨＴ及びＦＡＣＳ（蛍光標示式細胞分取器）の自動化された方法も用いることもできる。ＦＡＣＳ装置では、最初に細胞をキャピラリーに通し、そしてその蛍光強度を検出することによって細胞を分離する。
【０１８４】
免疫測定法：本発明のいくつかの実施態様は、ＰＡＲＰ分析のための免疫測定法を含む。電気泳動で分離されたタンパク質のウエスタンブロットのような免疫ブロット法では、単一タンパク質をその抗体によって同定することができる。免疫測定法は、抗体分子の限られたプールに対して検体が標識抗原と競合する競合的結合免疫測定法であるといえる（例えば放射免疫測定法、ＥＭＩＴ）。免疫学的検定は、非競合的であってもよく、その際、抗体が過剰に存在して標識化される。また、検体抗原複合体が増加するにつれ、標識抗体−抗原複合体の量が増加しうる（例えばＥＬＩＳＡ）。抗体は、実験動物への抗原注射によって製造する場合、多クローン性であることができ、又は細胞融合及び細胞培養技術によって製造する場合、単クローン性であることができる。免疫測定法では、抗体は、検体抗原に対する特異試薬として作用してもよい。
【０１８５】
本発明の範囲及び内容を制限することなく、免疫測定法のいくつかのタイプは、ほんの一例として、ＲＩＡ（放射免疫測定法）、ＥＬＩＳＡ（酵素結合イムノソルベント検定法）のような酵素免疫検定法、ＥＭＩＴ（酵素多重免疫測定法）、微小粒子酵素免疫測定法（ＭＥＩＡ）、ＬＩＡ（発光免疫測定法）、及びＦＩＡ（蛍光免疫測定法）である。これらの技術は、鼻の検体中の生体物質を検出するために用いることができる。抗体は、一次又は二次のいずれかのものとして用いられ、放射性同位体（例えば１２５Ｉ）、蛍光色素（例えばＦＩＴＣ）又は蛍光発生若しくは発光原（luminogenic）反応に触媒作用を及ぼしうる酵素（例えばＨＲＰ又はＡＰ）で標識化することができる。
【０１８６】
ビオチン、又はビタミンＨは、アビジン及びストレプトアビジンに対する特異的な親和性を受け継ぐ補酵素である。この相互作用のため、ビオチン化ペプチドは質及び量を試験するための種々のバイオテクノロジー検定における有用な手段となる。立体障害を最小限にすることによってビオチン／ストレプトアビジン認識を改善するには、ビオチンとペプチドそれ自体との間の距離を広げる必要があるはずである。これは、ビオチンとペプチドとの間にスペーサー分子（例えば６−ニトロヘキサン酸）をカップリングすることによって達成することができる。
【０１８７】
ビオチン化タンパク質についてのビオチン定量検定では、タンパク質上のビオチン標識の数を正確に測定するための高感度蛍光分析を用いる。ビオチン化ペプチドは、ストレプトアビジンでコーティングされたビーズ、膜、ガラススライド又はマイクロタイタープレート上へ少なくとも１つの相互作用パートナーを固定化する必要があるさまざまな生物医学的スクリーニング系で広く使われている。アッセイは、試薬のビオチン結合部位からクエンチャー色素でタグ付けされたリガンドの置換に基づく。立体的に制限されて試薬に到達できない多重標識化タンパク質中のすべてのビオチン基を曝露するために、タンパク質を消化するためのプロテアーゼでタンパク質を処理することができる。
【０１８８】
ＥＭＩＴは、通常の分離工程を回避する競合的結合免疫測定法である。タンパク質を酵素で標識化し、そして酵素−タンパク質−抗体複合体が酵素的に不活性となり、非標識化タンパク質の定量化が可能となる一種の免疫測定法である。本発明のいくつかの実施態様は、ＰＡＲＰを分析するためのＥＬＩＳＡを含む。ＥＬＩＳＡは、酵素反応と組み合わせて固体支持体に結合された選択的抗体に基づいており、低レベルのタンパク質を検出することができる系が得られる。また、それは酵素免疫測定法又はＥＩＡとして知られている。タンパク質は抗体によって検出され、抗体はタンパク質に対するようになっており、すなわちタンパク質はそのための抗原である。モノクローナル抗体が用いられることが多い。 試験は、試験管の内部表面のような固体表面に固定されるべき抗体、及び酵素に結合された同じ抗体の標本（preparation）が必要となりうる。酵素は、無色の基質から有色の生成物を生じるもの（例えばβ−ガラクトシダーゼ）であってもよい。試験は、例えば、検定すべき抗原溶液（例えばタンパク質）を管に充填することによって行なってもよい。存在するあらゆる抗原分子は、固定化された抗体分子に結合することができる。抗体−酵素複合体を反応混合物に加えてもよい。複合体の抗体部分が、予め結合されたいずれかの抗原分子に結合して抗体−抗原−抗体「サンドイッチ」を生じる。結合してないすべての複合体を洗浄した後、基質溶液を加えてもよい。設定された間隔の後、反応を停止し（例えば、１Ｎ ＮａＯＨを加えることによって）形成された色のついた生成物の濃度を分光光度計で測定する。色の純度（intensity of the color）は、結合した抗原の濃度に比例する。
【０１８９】
また、ＥＬＩＳＡは、抗体濃度の測定に適応させることができ、その場合、ウェルを適切な抗原でコーティングする。抗体を含む溶液（例えば血清）を加えてもよい。固定化された抗原に結合する時間をとった後、試験する抗体に対する抗体からなる、酵素結合した抗免疫グロブリンを加えてもよい。未反応の試薬を洗浄した後、基質を加えてもよい。生じた色の純度は、結合した酵素−標識抗体の量（つまり、検定した抗体の濃度）に比例する。
【０１９０】
本発明のいくつかの実施態様は、ＰＡＲＰを分析するための放射免疫測定法を含む。放射性同位体は、少量の化合物のin vivo代謝、分布、及び結合を研究するために用いることができる。3Ｈ、14Ｃ、32Ｐ、35Ｓ及び125Ｉのような体内の1Ｈ、12Ｃ、31Ｐ、32Ｓ及び127Ｉの放射性同位体が使用される。９６穴プレートにおける受容体固定法では、抗体又は化学的方法を用いて受容体を各ウェル中に固定化してもよく、そして放射性標識リガンドを各ウェルに加えて結合を誘導してもよい。非結合リガンドはウォッシュアウト（washed out）してもよく、次いで結合したリガンドの放射活性又はウォッシュアウトリガンドのそれを定量分析することによって標準を決定することができる。次いで、スクリーニング標的化合物の添加により受容体との競合的結合反応を誘導してもよい。化合物が標準放射性リガンドより受容体に対して高い親和性を示す場合、ほとんどの放射性リガンドは、受容体と結合しないで溶液中に残っていると考えられる。従って、結合した放射性リガンド（又は、ウォッシュアウトリガンド）の量を分析することによって、受容体に対する試験化合物の親和性を示すことができる。
【０１９１】
フィルターメンブラン法（filter membrane method）は、受容体を９６穴プレートに固定化することができないとき、又はリガンド結合を溶液相中で行う必要があるときに必要となりうる。換言すれば、溶液中のリガンド−受容体結合反応後、ニトロセルロース濾紙を通して反応溶液を濾過する場合、リガンドを含む小分子は、それを通過してもよく、タンパク質受容体のみ紙上に残ることになる。受容体に強く結合したリガンドだけが濾紙上にとどまり、そして添加した化合物の相対親和度は、標準放射性リガンドの定量分析によって同定することができる。
【０１９２】
本発明のいくつかの実施態様は、ＰＡＲＰを分析するための蛍光免疫測定を含む。蛍光に基づく免疫学的方法は、高度に特異的な受容体部位における標識リガンド対非標識のものの競合的結合に基づく。蛍光技術は、検体濃度を変えることにより蛍光寿命が変化することに基づく免疫測定法に用いることができる。この技術は、蛍光がエオシン（受容体）へのエネルギー転移によって消光しうるフルオレッセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）（供与体）のような短寿命の色素を用いて行ってもよい。シアニン、オキサジン、チアジン、ポルフィリン、フタロシアニン、蛍光赤外線発光多核芳香族炭化水素、フィコビリタンパク質、スクアライン（squaraines）、及び有機金属錯体、炭化水素及びアゾ色素といったような多くの光輝性化合物を使用することができる。
【０１９３】
蛍光に基づく免疫学的方法は、例えば、不均一又は均一であることができる。不均一免疫測定法（Heterogenous immunoassays）は、遊離標識検体から結合を物理的に分離することを含む。検体又は抗体は、固体表面に結合してもよい。その技術は、競合的（より高い選択性用）又は非競合的（より高い感度用）であることができる。検出は、直接的（使用する抗体のタイプは１つだけ）又は間接的（二次的なタイプの抗体を使用する）であることができる。均一免疫測定法（Homogenous immunoassays）は、物理的分離を含まない。二重抗体フルオロフォア−標識抗原は、抗原及びフルオロフォアの両方に対する抗体との平衡反応に関与する。標識及び非標識抗原は、限定された数の抗−抗原抗体について競合しうる。
【０１９４】
いくつかの蛍光免疫測定法としては、簡易蛍光標識法、蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）、時間分解蛍光（ＴＲＦ）、及び走査型プローブ顕微鏡法（ＳＰＭ）が含まれる。簡易蛍光標識法方法は、ｐＨ、イオン濃度及び電圧のような種々のin vivo生理学的変化の蛍光指示薬として適切な蛍光を用いることにより受容体−リガンド結合酵素活性に用いることができる。ＴＲＦは、他の蛍光分子の発光が完了した後にランタニド系列の蛍光を選択的に測定する方法である。ＴＲＦは、ＦＲＥＴと共に使用することができ、そしてランタニド系列は供与体又は受容体になることができる。走査型プローブ顕微鏡法では、捕捉相において、例えば、少なくとも１つのモノクローナル抗体が固相に固着しており、固相表面に存在しうる抗原／抗体複合体を検出するために走査型プローブ顕微鏡を利用する。走査型トンネリング顕微鏡法の使用は標識の必要がなく、それは通常、抗原／抗体複合体を検出するための多くの免疫測定法系で利用される。
【０１９５】
タンパク質同定法：ほんの一例として、タンパク質同定法は、エドマン分解による低処理量シークエンシング、質量分析技術、ペプチド質量フィンガープリント法、新規のシークエンシング、及び抗体ベースの検定を含む。タンパク質定量検定は、蛍光色素ゲル染色、標識付け又は化学修飾法（すなわち同位体コードアフィニティタグ（ＩＣＡＴＳ）、複合分別対角線クロマトグラフィ（combined fractional diagonal chromatography）（ＣＯＦＲＡＤＩＣ））。また、精製されたタンパク質は、三次元結晶構造の測定に用いてもよく、それは分子間相互作用をモデル化するために用いることができる。三次元結晶構造を測定するために一般的な方法としては、Ｘ線結晶学及びＮＭＲ分光法が含まれる。タンパク質の三次元構造を表す特性は、質量分析で精査することができる。空間的に近いが配列が遠く離れているタンパク質部分を結合する化学的架橋を用いることにより、全体構造に関する情報を推測することができる。アミドプロトンを溶媒から重水素で交換することによって、タンパク質の種々の部分の溶媒露出度（solvent accessibility）を精査することが可能である。
【０１９６】
一実施態様において、蛍光活性化細胞選別（fluorescence−activated cell−sorting）（ＦＡＣＳ）は、ＰＡＲＰ発現細胞の同定に用いられる。ＦＡＣＳは、フローサイトメトリーの特化したタイプである。それは、各細胞の特異的光散乱及び蛍光特性に基づいて、生物学的細胞の不均一混合物を、一度に１つの細胞で（one cell at a time）２つ又はそれ以上の容器に分類するための方法を提供する。それにより個々の細胞からの蛍光発光の定量的記録が得られるだけでなく、特に興味の細胞が物理的に分離される。さらに別の実施態様において、ＰＡＲＰ発現を評価するためにマイクロ流体ベースのデバイスを用いる。
【０１９７】
また、患者のサンプルからＰＡＲＰを特徴づけるために質量分析を用いることができる。全タンパク質をイオン化する２つの方法は、エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）及びマトリックス支援レーザー脱離／イオン化（ＭＡＬＤＩ）である。最初に、インタクトなタンパク質を上記の２つの技術のいずれかによってイオン化してから質量分析器に入れる。次に、トリプシン又はペプシンのような薬剤を用いてタンパク質をより小さなペプチドに酵素的に消化する。他のタンパク質分解消化剤も用いられる。次いで、ペプチド生成物の収集物を質量分析器に入れる。これは、タンパク質分析の「ボトムアップの」アプローチと称することが多い。
【０１９８】
全タンパク質の質量分析は、飛行時間型（time−of−flight）（ＴＯＦ）ＭＳ、又はフーリエ変換イオンサイクロトロン共鳴（ＦＴ−ＩＣＲ）を用いて実施される。ペプチド質量分析に用いられる機器は、四重極イオントラップである。また、多段式四重極飛行時間型（Multiple stage quadrupole−time−of−flight）及びＭＡＬＤＩ飛行時間型の機器も本明細書における用途を見出される。
【０１９９】
タンパク質、又はそのペプチド生成物を酵素消化物からの分別するために２つの方法を用いる。第１の方法は、全タンパク質を分別し、二次元ゲル電気泳動と称する。第２の方法では、高性能液体クロマトグラフィを用いて酵素消化後のペプチドを分別する。状況により、これらの技術の両方を組み合わせる必要がありうる。
【０２００】
タンパク質を同定するために用いることができる２つのやり方の質量分析がある。ペプチド質量は、予測質量のデータベースの検索への入力としてタンパク質分解ペプチドの質量を用い、データベースは既知タンパク質リストのダイジェストから得られる。参照リスト中のタンパク質配列で実験値に適合する有意な数の予測質量がある場合、このタンパク質が最初のサンプル中に存在するといういくつかの証拠となる。
【０２０１】
また、タンデム型ＭＳは、タンパク質を同定するための方法である。衡突誘起解離（Collision−induced dissociation）は、特異的なペプチドイオンから一組の断片を生成するための主流の適用法に用いられる。断片化プロセスは、主としてペプチド結合を切断された分解生成物を生じる。
【０２０２】
タンデム型質量分析（ＭＳ／ＭＳ）、ペプチドデノボシークエンシング（peptide de novo sequencing）及び配列タグに基づく検索からペプチド及びタンパク質を同定するために、多くの異なるアルゴリズム的アプローチが記載されている。包括的な範囲のデータ分析の特徴を組み合わせる１つの選択肢は、ＰＥＡＫＳである。他の既存の質量仕様の分析ソフトウェアとしては：ペプチド断片フィンガープリント法ＳＥＱＵＥＳＴ、Ｍａｓｃｏｔ、ＯＭＳＳＡ及びＸ！Ｔａｎｄｅｍが含まれる。
【０２０３】
また、タンパク質は、質量分析によって定量化することができる。典型的には、炭素（Ｃ１３）又は窒素（Ｎ１５）の安定な（例えば非放射性の）より重い同位体を一方のサンプルに組み込むのに対して、もう一方のものを対応する軽い同位体（例えばＣ１２及びＮ１４）で標識化する。２つのサンプルを分析前に混合する。異なるサンプルから誘導されたペプチドをそれらの質量差により区別することができる。それらのピーク強度の比率は、ペプチド（及びタンパク質）の相対的な存在比に対応している。同位体標識化の方法は、ＳＩＬＡＣ（細胞培養においてアミノ酸を用いる安定な同位体標識化）、トリプシン触媒によるＯ１８標識化、ＩＣＡＴ（同位体コード化アフィニティ標識付け）、ＩＴＲＡＱ（相対的及び絶対的定量化のための同位体タグ）である。「半定量的」質量分析は、サンプルを標識化することなく実施することができる。典型的に、これは、ＭＡＬＤＩ分析（線形モードで）を用いて行われる。ここで、個々の分子（典型的にタンパク質）からのピーク強度又はピーク面積は、サンプル中のタンパク質の量と相関している。しかしながら、個々のシグナルは、タンパク質の一次構造、サンプルの複雑さ、及び機器の設定に左右される。
【０２０４】
Ｎ末端シークエンシングは、未知タンパク質の同定を助け、組換え型タンパク質の同一性及び忠実度（読取り枠、翻訳開始点、など）を確定し、ＮＭＲ及び結晶学的データの解釈を助け、タンパク質間の同一性の程度を示し、又は抗体生成、などについての合成ペプチドを設計するためのデータを提供する。Ｎ末端シークエンシングは、エドマン分解化学を利用し、タンパク質のＮ末端からアミノ酸残基を逐次的に除去し、そして逆相ＨＰＬＣによってそれらを同定する。感度は、１００ｓフェムトモルのレベルにあることができ、そして長い配列の読み取り（２０〜４０残基）は、多くの場合、数１０ｓピコモルの出発物質から得ることができる。純粋なタンパク質（＞９０％）では、データを容易に解釈することができるが、精製の不十分なタンパク質混合物でも、厳密なデータ解釈にかけて有用なデータを得ることができる。遊離第一級アミノ基がないとエドマン化学が適用されないため、Ｎ末端修飾（特に、アセチル化された）タンパク質は直接配列決定することができない。しかしながら、ブロックされたタンパク質をタンパク質限定加水分解（例えば、臭化シアンを用いる）することにより、機器の各サイクルでアミノ酸の混合物を生成させることができ、これをデータベース分析にかけて意味のある配列情報を解釈することができる。Ｃ末端のシークエンシングは、翻訳後修飾であり、タンパク質の構造及び活性に影響を及ぼす。種々の疾患状態は、タンパク質プロセシングの障害と関連している可能性があり、そしてＣ末端のシークエンシングは、タンパク質構造及びプロセシング機構の研究のためのさらなる手段を提供する。
【実施例】
【０２０５】
実施例１：子宮、子宮内膜及び卵巣がんにおけるＰＡＲＰ１発現
これまでの研究から、卵巣がん、肝細胞がん、及び直腸腫瘍におけるＰＡＲＰ活性は、白血病患者のヒト末梢血リンパ球中と同様に、正常で健康な対照組織と比較して増大していることが示されている(Yalcintepe L, et.al. Braz J Med Biol Res 2005;38:361−5. Singh N. et.al. Cancer Lett 1991;58:131−5; Nomura F, et.al. J Gastroenterol Hepatol 2000;15:529−35)。本発明は、遺伝子発現データベースを用いて、２０００を超える原発性悪性の及び正常なヒト組織においてＰＡＲＰ１遺伝子調節を試験する。
【０２０６】
組織サンプル
通常の外科的手技の一環として検体を採取し、そして切除３０分以内に急速冷凍した。分析にかけたサンプルに関して内部病理審査（review）及び確定を行った。隣接する組織から作成したヘマトキシリン−エオジン（Ｈ＆Ｅ）染色ガラススライドを用いて確定し、診断上のカテゴリーに分類し、そして新生物の細胞充実性を評価した。免疫組織化学及び蛍光in situハイブリダイゼーションを用いてＥＲ、ＰＲ及びＨＥＲ２の発現を測定した。これらの結果、それに加えて随伴する病理及び臨床データにサンプル目録及び管理データベースで注釈をつけた(Ascenta, BioExpress databases; GeneLogic, Inc., Gaithersburg, MD)。
【０２０７】
ＲＮＡ抽出及び発現プロファイリング
ＲＮＡ抽出及びハイブリダイゼーションは、Hansel 等によって記載された通り行なった。アレイハイスループットアプリケーション（array high throughput application）(Ascenta, Bioexpress Gene Logic, Gaithersburg MD and Affymetrix, Santa Clara, CA)を用いてアレイデータの品質を評価し、これにより、５'／３'ＧＡＰＤＨ比、シグナル／ノイズ比及びバックグラウンド、及び他のさらなる測定基準を含む多目的標準に対してデータを評価した。ジーン・チップ（GeneChip）解析は、Affymetrix Microarray Analysis Suite version 5.0, Data Mining Tool 2.0、及びMicroarrayデータベースソフトウェア(Affymetrix, Santa Clara, CA)を用いて行なった。ジーン・チップ上に表される遺伝子の全てを網羅的に標準化し、シグナル強度１００にスケール化した。
【０２０８】
マイクロアレイデータ分析
病理学的に正常な組織サンプルを用いてＰＡＲＰ１ ｍＲＮＡのベースライン発現を測定した。個々の予測値について平均及び９０％、９５％、９９％、及び９９．９％上限信頼限界（ＵＣＬ）を算出した。正規集合から外れた個々のサンプルがベースライン分布中にある尤度を評価しているので、平均についての信頼区間よりむしろ予測区間を選択して、将来的な個々の測定で期待される範囲を推定した。予測区間は、式
【数１】
2011503071.tif 000012
によって定義され、ここで、
【数２】
2011503071.tif 000013
は、正常な乳房サンプルの平均であり、Ｓは、標準偏差であり、ｎは、症例数であり、そしてＡは、自由度ｎ−１でのスチューデントｔ分布の１００（１−（ｐ／２））thパーセンタイル値である。病理学的に正常な組織サンプルを用いてＰＡＲＰ１のベースライン発現を測定した。腫瘍の病期、喫煙状態、ＣＡ１２５状態、又は年齢を含む特徴に従ってサンプルを種々のサブカテゴリー中に分類した。各腫瘍サンプルを９０％、９５％、９９％、又は９９．９％ＵＣＬに従って評価した。分析は、Windows(R)用SAS v8.2 (www.sas.com)を用いて行なった。
【０２０９】
ＰＡＲＰ１と比較して１１個のプローブ集合（probe sets）についてピアソンの相関（Pearson's correlations）を算出した。相関（Correlations）は、１９４個のサンプルの完全集合（complete set）に基づく。ピアソンの積率相関（Pearson's product−moment correlation）は、式
【数３】
2011503071.tif 000014
によって定義され、ここで、
【数４】
2011503071.tif 000015
は、ＰＡＲＰ１プローブ集合の平均であり、そして
【数５】
2011503071.tif 000016
は、ＰＡＲＰ１が相関しているプローブ集合の平均である。統計的有意性は、式
【数６】
2011503071.tif 000017
によって決定され、ここで、ｒは相関であり、そして、ｎはサンプル数である。得られた値は、自由度ｎ−２でｔ分布を有すると推定される。
【０２１０】
多重逆転写酵素−ポリメラーゼ連鎖反応（Multiplex Reverse Transcriptase−Polymerase Chain Reaction）（ＲＴ−ＰＣＲ）：
多重ＲＴ−ＰＣＲは、前述のとおり、各サンプルの全ＲＮＡ２５ｎｇを用いて行なった(Khan et al., 2007)。本試験に用いられる多重検定は、ホルマリン固定パラフィン包埋（ＦＦＰＥ）サンプルから又は凍結組織からＲＮＡを検出するよう設計されている。ＲＮＡの濃度は、Wallac Victo r2 1420 Multilabel Counterを備えたRiboGreen RNA Quantitation Kit (Invitrogen)を用いて測定した。各サンプルからのＲＮＡのサンプルは、Agilent BioanalyzerでAgilent 2100 Bioanalyzerの説明書に従って分析した。逆転写（ＲＴ）反応は、Applied Biosystems 9700を用いて前述した通り行なった。ＰＣＲ反応は、Applied Biosystems 9700を用いて各ｃＤＮＡで行なった。ＲＴ反応は、カナマイシンＲＮＡでスパイクしてＲＴ及びＰＣＲ反応の効率をモニターした。使用した対照には、陽性対照ＲＮＡ、テンプレートなしの対照、及び逆転写酵素なしの対照が含まれる。ＰＣＲ反応は、キャピラリー電気泳動法によって分析した。蛍光標識ＰＣＲ反応液を希釈し、Genome Lab size standard−400 (Beckman−Coulter,)と混ぜ、変性させ、そしてCEQ 8800 Genetic Analysis Systemを用いてアッセイした。同じ反応内のβ−グルクロニダーゼ（ＧＵＳＢ）の発現と比較した各標的遺伝子の発現を各サンプルについて３つの独立した評価の平均及び標準偏差として報告した。
【０２１１】
ＰＡＲＰ１発現及び活性は、多くの正常なヒト組織及び器官にわたってきわめて低く一様であるが、それは選ばれた腫瘍細胞及び原発性ヒト悪性腫瘍においては上方制御され、最も顕著な差は乳房、卵巣、肺、及び子宮がんにおいて見出される（図１）。
【０２１２】
実施例２：卵巣がん腫瘍瘍モデルにおける非臨床的薬理学
４−ヨード−３−ニトロベンズアミド（ＢＡ）は、薬剤抵抗性の細胞株を含む培養物において広範囲のがん細胞に対して活性である。in vitro試験では、ＢＡは、乳房、結腸、前立腺、頸部、肺、及び卵巣がんを含むさまざまなヒト腫瘍細胞の増殖を阻害する。
【０２１３】
マウス
雌CB.17 SCIDマウス(Charles River)は、８〜１１週齢であり、そして本試験のＤ１において１２．６〜２３．０ｇの体重（ＢＷ）範囲を有する。雌胸腺欠損マウス(nu/nu, Harlan)は、１１週齢であり、そして本試験のＤ１において１８．９〜２８．４ｇの体重（ＢＷ）範囲を有する。動物には、水（逆浸透、１ｐｐｍＣｌ）並びに１８．０％粗タンパク質、５．０％粗脂肪及び５．０％粗繊維からなるNIH 31 Modified and Irradiated Lab Diet(R)を自由に与えた。実験動物のケア及び使用の認められた標準でコンプライアンスを保証するAssociation for Assessment and Accreditation of Laboratory Internationalによって公認された実験室中、２１〜２２℃（７０〜７２°Ｆ）及び湿度４０〜６０％で、１２時間の明サイクルで静置ミクロアイソレータ中の放射線照射用ALPHA−dri(R) bed−o−cobs(R) Laboratory Animal Beddingにマウスを収容した。
【０２１４】
腫瘍移植
本試験で利用するヒトOVCAR−3 (NIH−OVCAR−3)卵巣腺がんを、連続的移植によって胸腺欠損ヌードマウス中に維持した。本試験で利用するヒトSW620結腸腺がんを連続的移植によってヌードマウス中に維持した。腫瘍断片（１ｍｍ3）を各試験マウスの右側腹部中に皮下（s.c.）移植した。腫瘍を週に２回、次いで体積が８０〜１２０ｍｍ3に近づくにつれて毎日モニターした。本試験のＤ１において、腫瘍サイズ６３〜２２１ｍｍ3及び群の平均腫瘍サイズ約１０５ｍｍ3の治療群に動物を振り分けた。腫瘍質量は、１ｍｇが腫瘍体積１ｍｍ3に等しいと仮定して推定することができる。
【数７】
2011503071.tif 000018
【０２１５】
治療
マウスを群（ｎ＝１０）に振り分け、プロトコールに従って処理した。経口群は、Ｄ１ｐ.ｍ.からＤ６８ａ.ｍ.まで（ｂ.ｉ.ｄ.〜終わり、すなわち試験期間中１日２回の投与）１日２回ＢＡをｐ.ｏ.（経口的に）投与した。日１、１５及び２９にAlzetモデル浸透ポンプを移植した。ポンプを３７℃で約１時間予熱し、次いでイソフルオラン麻酔したマウスの左側腹の皮下に（ｓ.ｃ.）移植した。各ポンプは、１４日にわたりＢＡの全用量２５ｍｇ／ｋｇ／週を送達する。ＢＡを週に２回それぞれ１５ｍｇ／ｋｇ腹腔内に（ｉ.ｐ.）投与する。
【０２１６】
エンドポイント
腫瘍は、試験期間の間中週に２回キャリパスで測定した。新生物が所定のエンドポイントサイズ（１，０００ｍｍ3）に到達したときに各動物を安楽死させる。各マウスについてのエンドポイント（ＴＴＥ）までの時間は、以下の式によって算出する：
【数８】
2011503071.tif 000019
【０２１７】
ここで、ＴＴＥは、日で表され、エンドポイント体積は、ｍｍ3であり、ｂは、切片（intercept）であり、そしてｍは、ログ変換された腫瘍増殖データセットの線形回帰によって得られた線の傾きである。データセットには、試験エンドポイント体積を超える第１の観察及びエンドポイント体積の達成直前の３つの連続的な観察が含まれている。算出されたＴＴＥは、通常、動物が腫瘍サイズにより安楽死させられた日よりも少ない。エンドポイントに到達しない動物は、試験終了後、安楽死させて最終日（６８日）と同じＴＴＥ値を割り当てた。治療有効性は、腫瘍増殖遅延（ＴＧＤ）から決定され、これは、対照群と比較した治療群のＴＴＥの中央値における増加：ＴＧＤ＝Ｔ−Ｃ、（すなわち治療マウスと対照マウスのＴＴＥ値の中央値間の差）として日で表されるか、又は対照群のＴＴＥの中央値のパーセンテージとして定義される：
【数９】
2011503071.tif 000020
ここで：
Ｔ＝治療群のＴＴＥの中央値、
Ｃ＝対照群１のＴＴＥの中央値。
【０２１８】
末梢血リンパ球及び腫瘍サンプルの調製
ＥＤＴＡバキュテーナー中に全血を集め、ヒトＰＢＭＣを、BD VacutainerTM CPTTM Cell Preparationキットにより製造者の説明書(BD VacutainerTM, REF 362760)に従って得た。腫瘍サンプルを無菌容器に集め、直ちに氷上に置いた。３０分以内に、腫瘍サンプルを液体窒素中でスナップ凍結（snap−frozen）し、分析用にホモジナイズするまで−８０℃で貯蔵した。検体を氷上で解凍し、湿潤質量を記録した。等張緩衝液［７ｍｍｏｌ／ｌ ＨＥＰＥＳ、２６ｍｍｏｌ／ｌ ＫＣｌ、０．１ｍｍｏｌ／ｌデキストラン、０．４ｍｍｏｌ／ｌ ＥＧＴＡ、０．５ｍｍｏｌ／ｌ ＭｇＣｌ2、４５ｍｍｏｌ／Ｌ スクロース（ｐＨ７．８）］を用いて組織をホモジナイズした。ホモジネートはプロセス全体を通して氷上に保持し、ホモジナイズは１０秒のバーストで行ってサンプルが過度に温まるのを防いだ。ホモジナイズの日にアッセイしない場合、サンプルを−８０℃に再凍結し、分析するまでこの温度で貯蔵した。
【０２１９】
ポリ（ＡＤＰ―リボース）ポリメラーゼアッセイ方法
細胞調製品を室温で急速に解凍し、氷冷ＰＢ中で２回洗浄した。細胞ペレットを０．１５ｍｇ／ｍｌのジギトニンに１ｘ１０6〜２×１０6細胞／ｍＬの密度に５分間再懸濁して細胞を透過化処理し（トリパンブルー染色によって確認）、その後、氷冷等張緩衝液９容を加え、そしてサンプルを氷上に置いた。最大刺激されたＰＡＲＰ活性は、振動する水浴中、２６℃で先に記載した（２４）ように、最終体積１００μＬで１００ｍｍｏｌ／ｌ トリス−ＨＣｌ、１２０ｍｍｏｌ／ｌ ＭｇＣｌ2（ｐＨ７．８）の反応緩衝液中に３５０ｍｍｏｌ／ｌ ＮＡＤ＋及び１０ｍｇ／ｍｌオリゴヌクレオチドを含む反応混合物中の２０，０００細胞の複製サンプル（replicate samples）において測定した。過剰のＰＡＲＰ阻害剤（１２．５μｍｏｌ／ＬのＡｇ０１４６９９ ４００μＬ）を添加することによって６分後に反応を停止させ、２４穴マニホールドを用いてニトロセルロース膜(Hybond−N, Amersham)上に細胞をブロットした。精製されたＰＡＲ標準を各膜上に装填（０〜２５ｐｍｏｌのモノマー当量）して標準曲線を作成し、定量を可能にした。一次抗体（０．０５％ＰＢＳ＋５％Tween 20＋粉乳中１：５００）を用いて４℃で一夜インキュベーションした後、ＰＢＳ−Ｔ（ＰＢＳ＋０．０５％Tween 20）中で２回洗浄し、次いで二次抗体（０．０５％ＰＢＳ＋５％Tween 20＋粉乳中１:１,０００）中、室温で１時間インキュベーションした。インキュベートされた膜を１時間にわたってＰＢＳで頻繁に洗浄し、次いで製造者によって供給された増強された化学発光反応溶液に１分間曝露させた。５分曝露中に検出された化学発光を、Fuji LAS3000 UV Illuminator (Raytek, Sheffield, United Kingdom)を用いて測定し、画像化ソフトウェア(Fuji LAS Image version 1.1, Raytek)を用いてデジタル化した。入手した画像は、Aida Image Analyzer（バージョン3.28.001）を用いて解析し、結果をＬＡＵ／ｍｍ2で表した。曝露されたブロットにおける３つのバックグラウンド領域を測定し、そして膜からのバックグラウンドシグナルの平均を、すべての結果から差し引いた。ＰＡＲポリマー標準曲線は、非加重１部位結合非線形回帰モデル（unweighted one−site binding nonlinear regression model）を用いて解析し、そしてこのように作成した標準曲線から未知のものを読み取った。次いで、結果を、装填された細胞数と比較して表した。５，０００Ｌ１２１０細胞の三連（triplicate）品質対照サンプルを各アッセイで行ない、１人の患者からのすべてのサンプルを同じブロットで分析した。腫瘍ホモジネートは、同様の方法でアッセイした；しかしながら、ホモジナイズプロセスは、最大ＰＡＲＰ活性を刺激するのに十分なＤＮＡ損傷を誘発するため、オリゴヌクレオチドは必要ではなかった。ホモジネートのタンパク質濃度は、ＢＣＡタンパク質アッセイ及びTitertek Multiscan MCC/340プレートリーダーを用いて測定した。結果は、形成されたＰＡＲのｐｍｏｌ／タンパク質のｍｇとして表した。
【０２２０】
in vivo試験は、がんの動物モデルにおけるＢＡによるＰＡＲＰ阻害を示した。例えば、ＢＡ単回投与後のＳＣＩＤマウスにおけるヒト卵巣腺がんＯＶＣＡＲ−３の異種移植モデルから得た組織サンプルの評価は、ＰＡＲＰ活性におけるＢＡの阻害作用を示し、少なくとも８時間持続することが観察された。
【０２２１】
ＳＣＩＤマウスにおけるＯＶＣＡＲ−３異種移植モデルを用いた早期のin vivo有効性試験は、ＢＡが有意に腫瘍増殖を阻害することを示した。異なる投与経路を経たＢＡによるこれらのマウスの治療は、非治療対照と比較して生存期間を改善した（図３）。
【０２２２】
実施例３：進行性固形腫瘍を有する患者における化学療法と組み合わせたＢＡのフェーズＩＢ試験
フェーズ１ｂオープンラベル用量漸増試験では、卵巣腫瘍を含む進行性固形腫瘍を有する被験者において化学療法レジメン（トポテカン、ゲムシタビン、テモゾロミド及びカルボプラチン＋パクリタキセル）と組み合わせた４−ヨード−３−ニトロベンズアミド（ＢＡ）（２．０、２．８、４．０、５．６、８．０及び１１．２ｍｇ／ｋｇ）の安全性を評価した。試験の用量漸増期を完了し、ＢＡ及び細胞毒性化学療法の忍容性の良好な組み合わせを同定した。プロトコールを修正して特異的な腫瘍タイプにおいて化学療法と組み合わせたＢＡを評価した。
【０２２３】
理論的根拠
トポテカン標的トポイソメラーゼＩ、これはＤＮＡ複製、転写及び組換えにおいて重要な役割を果たしている。トポテカンは、トポイソメラーゼＩ−ＤＮＡ共有結合複合体を選択的に安定化し、トポイソメラーゼＩ仲介一本鎖ＤＮＡ切断の再連結を阻害し、致死性の二本鎖ＤＮＡ切断を生じる。ポリ（ＡＤＰ―リボース）ポリメラーゼ−１（ＰＡＲＰ−１）は、トポイソメラーゼＩと相互作用し、トポイソメラーゼ１阻害剤に対する腫瘍感受性を増強する。前臨床試験は、ＰＡＲＰ１阻害剤ＢＡはトポテカンの抗腫瘍活性を増強することを示した。ＰＡＲＰ１は、ヒト原発性卵巣腫瘍において有意に上方制御される。
【０２２４】
試験デザイン：
・ＢＡ＋細胞毒性化学療法（ＣＴＸ）
・ＣＴＸ投与：
−トポテカン：２１日サイクルの５日間１．５ｍｇ／ｍ2又は１．１ｍｇ／ｍ2のＱＤ
−テモゾロミド：２８日サイクルの２１日間７５ｍｇ／ｍ2のＰ.Ｏ.ＱＤ
−ゲムシタビン：３０分間注入ＱＷとして１０００ｍｇ／ｍ2；８週のうち７週；安全性評価については最初の２８日
−カルボプラチン／パクリタキセル：Ｃ＝６ＡＵＣ；Ｐｘｌ＝２００ｍｇ／ｍ2；２１日サイクルの日１に両方
・ＢＡ投与：
−週に２回；静脈内注入
−標準３＋ＢＡ用量漸増デザイン３
−試験された用量レベル：２．０、２．８、４．０、５．６、８．０及び最大１１．２ｍｇ／ｋｇ
試験エンドポイント：
・各組み合わせの安全性、忍容性及びＭＴＤ
・２サイクル毎のＲＥＣＩＳＴを介して臨床効果（clinical response）
一般的な適格性：
・難治性進行性固形腫瘍、＜＝２のＥＣＯＧ ＰＳ、並びに血液学的に適切な腎臓及び肝臓機能を有する＿１８歳の被験者
・前化学療法レジメン数における制限はない
【０２２５】
有効性
有効性に関して、６６人の被験者のうち５３人がかなりの臨床的な利益を示した（表１）。
【表１】
2011503071.tif 000021
【０２２６】
卵巣がん患者の効果
図４に示すように、進行性卵巣がんの患者は、トポテカンと組み合わせＢＡの４サイクル後に部分奏効を有した。肝臓病変（標的病変）は、４．６ｃｍから１．５ｃｍに縮小した。ＣＡ２７−２９バイオマーカーも、＞３００から＜２００に低減した。
【０２２７】
末梢血リンパ球及び腫瘍サンプルの調製
ＥＤＴＡバキュテーナー中に全血を集め、ヒトＰＢＭＣを、BD VacutainerTM CPTTM Cell Preparationキットにより製造者の説明書(BD VacutainerTM, REF 362760)に従って得た。腫瘍サンプルを無菌容器に集め、直ちに氷上に置いた。３０分以内に、腫瘍サンプルを液体窒素中でスナップ凍結（snap−frozen）し、分析用にホモジナイズするまで−８０℃で貯蔵した。検体を氷上で解凍し、湿潤質量を記録した。等張緩衝液［７ｍｍｏｌ／ｌ ＨＥＰＥＳ、２６ｍｍｏｌ／ｌ ＫＣｌ、０．１ｍｍｏｌ／ｌ デキストラン、０．４ｍｍｏｌ／ｌ ＥＧＴＡ、０．５ｍｍｏｌ／ｌ ＭｇＣｌ2、４５ｍｍｏｌ／Ｌ スクロース（ｐＨ７．８）］を用いて組織をホモジナイズした。ホモジネートはプロセス全体を通して氷上に保持し、ホモジナイズは１０秒のバーストで行ってサンプルが過度に温まるのを防いだ。ホモジナイズの日に検定しない場合、サンプルを−８０℃に再凍結し、分析するまでこの温度で貯蔵した。
【０２２８】
ポリ（ＡＤＰ―リボース）ポリメラーゼアッセイ方法
細胞調製を室温で急速に解凍し、氷冷ＰＢ中で２回洗浄した。細胞ペレットを０．１５ｍｇ／ｍｌのジギトニンに１ｘ１０6〜２×１０6細胞／ｍＬの密度に５分間再懸濁して細胞を透過化処理し（トリパンブルー染色によって確認）、その後、氷冷等張緩衝液９容を加え、そしてサンプルを氷上に置いた。最大刺激されたＰＡＲＰ活性は、振動する水浴中、２６℃で先に記載した（２４）ように、最終体積１００μＬで１００ｍｍｏｌ／ｌ トリス−ＨＣｌ、１２０ｍｍｏｌ／ｌ ＭｇＣｌ2（ｐＨ７．８）の反応緩衝液中に３５０ｍｍｏｌ／ｌ ＮＡＤ＋及び１０ｍｇ／ｍｌオリゴヌクレオチドを含む反応混合物中の２０，０００細胞の複製サンプル（replicate samples）において測定した。過剰のＰＡＲＰ阻害剤（１２．５μｍｏｌ／ＬのＡＧ０１４６９９ ４００μＬ）を添加することによって６分後に反応を停止し、２４穴マニホールドを用いてニトロセルロース膜(Hybond−N, Amersham)上に細胞をブロットした。精製されたＰＡＲ標準を各膜上に装填（０〜２５ｐｍｏｌのモノマー当量）して標準曲線を作成し、定量を可能にした。一次抗体（０．０５％ＰＢＳ＋５％Tween 20＋粉乳中１：５００）を用いて４℃で一夜インキュベーションした後、ＰＢＳ−Ｔ（ＰＢＳ＋０．０５％Tween 20）で２回洗浄し、次いで二次抗体（０．０５％ＰＢＳ＋５％Tween 20＋粉乳中１:１,０００）中、室温で１時間インキュベーションした。インキュベートされた膜を１時間にわたってＰＢＳで頻繁に洗浄し、次いで製造者によって供給された増強された化学発光反応溶液に１分間曝露させた。５分曝露中に検出された化学発光を、Fuji LAS3000 UV Illuminator (Raytek, Sheffield, United Kingdom)を用いて測定し、画像化ソフトウェア(Fuji LAS Image version 1.1, Raytek)を用いてデジタル化した。入手した画像は、Aida Image Analyzer（バージョン3.28.001）を用いて解析し、結果をＬＡＵ／ｍｍ2で表した。曝露されたブロットにおける３つのバックグラウンド領域を測定し、そして膜からのバックグラウンドシグナルの平均を、すべての結果から差し引いた。ＰＡＲポリマー標準曲線は、非加重１部位結合非線形回帰モデル（unweighted one−site binding nonlinear regression model）を用いて解析し、そしてこのように作成した標準曲線から未知のものを読み取った。次いで、結果を、装填された細胞数と比較して表した。５，０００Ｌ１２１０細胞の三連品質対照サンプルを各アッセイで行ない、１人の患者からのすべてのサンプルを同じブロットで分析した。腫瘍ホモジネートは、同様の方法でアッセイした；しかしながら、ホモジナイズプロセスは、最大ＰＡＲＰ活性を刺激するのに十分なＤＮＡ損傷を誘発するため、オリゴヌクレオチドは必要ではなかった。ホモジネートのタンパク質濃度は、ＢＣＡタンパク質検定及びTitertek Multiscan MCC/340プレートリーダーを用いて測定した。結果は、形成されたＰＡＲのｐｍｏｌ／タンパク質のｍｇとして表した。
【０２２９】
患者からの末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）の評価は、２．８ｍｇ／ｋｇ又はそれ以上のＢＡ用量で反復投与した後に有意な持続性のＰＡＲＰ阻害を示した（図５）。
【０２３０】
ＢＡ及び細胞毒性化学療法の忍容性の良好な組み合わせが確認された。観察されるいずれの毒性も、各化学療法レジメンの既知の予想された副作用と一致した。いずれの試験された細胞毒性レジメンに対してもＢＡを加えることが知られている毒性を増強する又は予想される毒性の頻度を増加させるという証拠はなかった。有効前臨床血中濃度で有意な持続性のＰＡＲＰ阻害を誘発する生物学的に適切な用量（２．８ｍｇ／ｋｇ）が同定された。約８０％の被験者は、２サイクル又はそれ以上の治療で安定の証拠を示し、臨床的利益の可能性を示した。腫瘍縮小効果（tumor response）の観察されたパターンは、ＰＡＲＰ発現及び／又は化学療法剤を用いた相乗効果と一致した。
【０２３１】
実施例４：ＢＡを用いた進行性、持続性又は再発性子宮がん肉腫の治療
４−ヨード−３−ニトロベンズアミド（ＢＡ）を用いた進行性、持続性又は再発性子宮がん肉腫の治療における治療有効性を示すための多施設オープンランダム化試験（multi−center, open−label, randomized study）を行なった。
試験目的：本試験の主要な目的は、以下の通りである：
臨床的有効率（ＣＢＲ＝ＣＲ＋ＰＲ＋ＳＤ≧６ヵ月）：ゲムシタビン及びカルボプラチンを用いた治療に関する４５％のＣＢＲと比較してＢＡは３０％又はそれ以上のＣＢＲを生じることを測定する。
・さらにＢＡの安全性及び認容性を試験すること
・本試験の第２の目的は、以下の通りである：
・全奏効率（Overall Response Rate）（ＯＲＲ）
・無増悪生存期間（Progression−free survival）（ＰＦＳ）
・各治療群に関する毒性の評価
・本試験の探索目的は、以下の通りである：
・ＢＡによるＰＡＲＰ活性の阻害を特徴づけること
・従来の腫瘍組織サンプルにおけるＰＡＲＰ活性を特徴づけること
・進行性、持続性又は再発性子宮がんにおけるＢＲＣＡの状態を試験すること
・基底又は管腔のいずれかとして乳がん組織を分類すること
試験デザイン：最大９０人の患者（各群４５人）をいずれかに対してランダム化する非盲検２群ランダム化安全性及び有効性試験：
・試験群１：２１日サイクルの日１及び８にゲムシタビン（１０００ｍｇ／ｍ2；３０分ＩＶ注入）及びカルボプラチン（ＡＵＣ２；６０分ＩＶ注入）；又は
・試験群２：各２１日サイクルの日１、４、８及び１１に４−ヨード−３−ニトロベンズアミド（４ｍｇ／ｋｇ １時間ＩＶ注入）
・試験群２にランダム化された患者は、疾患進行時点で本治験を中止する。
・クロスオーバー（Crossover）：試験群１にランダム化された患者は、疾患進行時点で４−ヨード−３−ニトロベンズアミドと組み合わせたゲムシタビン／カルボプラチンで継続される治療を受けるために交差し得る。
・参加者数：最大９０人、各治療群最大４５人の被験者が本治験に参加する。被験者は群−１又は群−２のそれぞれに最大４５人ランダム化される。
【０２３２】
被験者集団：
・選択基準：
・少なくとも１８歳
・ＲＥＣＩＳＴ基準により測定可能な疾患を有する進行性、持続性又は再発性子宮がん肉腫
・転移の設定で、０〜２回の前化学療法レジメン。前アジュバント／ネオアジュバント療法は許容される。
・原発腫瘍若しくは転移性病変の際に行なわれた免疫組織化学（０、１）によって又はＦＩＳＨによる増幅される非遺伝子がないこと（non−gene amplified by FISH）で、ＥＲ陰性、ＰＲ陰性でＨｅｒ−２過剰発現がない乳がん（原発性又は転移部位のいずれか）であることの組織学的証拠。
・治験エントリーの少なくとも３週間前に前化学療法が完了している。
・患者は、アジュバント設定又は転移設定（metastatic setting）で治療を受けていてもよいが、ビスホスホネートを摂取している場合、骨病変を進行又は反応のために用いることはできない。
・放射線治療は、治験エントリーの少なくとも２週間前に完了していなければならず、放射線を受けた病変を、測定可能な疾患とすることはできない。
・局所治療後に少なくとも３ヵ月間安定（進行の徴候がない）ならば、患者はＣＮＳ転移を有してもよい。
・ＥＣＯＧパフォーマンスステータス０〜１
・適切な器官機能は、以下のように定義される：１，５０００／ｍｍ3以上のＡＮＣ、１００，０００／ｍｍ3以上の血小板、５０ｍＬ／分を超えるクレアチニンクリアランス、２．５ｘ正常上限（ＵＬＮ）未満（又は肝転移の症例では、５ｘＵＬＮ未満）のＡＬＴ及びＡＳＴ；１．５ｍｇ／ｄｌ未満の全ビリルビン。
・ＰＡＲＰ試験用に利用可能な組織塊が推奨されるが、患者の参加を排除するわけではない。
・妊娠中又は授乳中の女性は除外する。妊娠の可能性がある女性は、治験エントリーの２週以内に妊娠テスト陰性を実証し、治験治療期間中は許容可能な産児制限に同意しなければならない。
・署名されたＩＲＢ承認の書面によるインフォームドコンセント。
除外基準：
・ＰＥＴによってのみ同定可能な病変
・２回を超える前化学療法レジメン（アジュバントを含む）。ＡＣ−パクリタキセルのような連続的なレジメンは、１回のレジメンとされる。
・ゲムシタビン、カルボプラチン、シスプラチン又は４−ヨード−３−ニトロベンズアミドを用いた治療を以前に受けている。
・治験エントリーに影響を及ぼしうる主な医学的状態（コントロール不良な肺、腎臓又は肝臓の機能障害、コントロール不良な感染症）。
・コントロール不良な心臓疾患の有意な病歴；すなわち、コントロール不良高血圧、不安定狭心症、最近の心筋梗塞（６ヵ月前以内）、コントロール不良うっ血性心不全、及び症候性又は無症候性のいずれかであるが、駆出率が４５％未満に低下した心筋症。
・本治験における有効かつ安全な参加が危ぶまれると治験責任医師が感じる他の有意な併発状態。
・別の薬物トライアルの治験デバイスに登録しているか又は他の治験薬を投与されている被験者
・同時又は前（試験日１の７日以内）の抗凝固治療（ポートメンテナンス（port maintenance）のための低用量は許容される）
・特定の併用投薬
・本試験の経過の間中同時放射線治療は、容認されない。
・本試験の要求の誘導に対する無力。
・施設内倫理委員会（Institutional Review Board ）（ＩＲＢ）が承認した書面によるインフォームドコンセントに署名したものを各被験者から受け取った後にしか、スクリーニング試験及び評価を行なわない。別段の注記のない限り、投与（日１）の１４日以内に方法を行なう。
臨床評価：全ての病歴、身体検査、ＥＣＯＧ状態、身長、体重、生命徴候、及び併用投薬の記録。
【０２３３】
臨床検査試験：血液検査（分画（differential）、網状赤血球数及び血小板と共に）；プロトロンビン時間（ＰＴ）及び部分トロンボプラスチン時間（ＰＴＴ）；包括的な化学パネル（ナトリウム、カリウム、クロリド、ＣＯ2、クレアチニン、カルシウム、リン、マグネシウム、ＢＵＮ、尿酸、アルブミン、ＡＳＴ、ＡＬＴ、アルカリホスファターゼ、総ビリルビン、及びコレステロール、ＨＤＬ及びＬＤＬ）、鏡検による尿検査、ＰＢＭＣにおけるＰＡＲＰ阻害、妊娠の可能性のある女性のための血清又は尿妊娠テスト。別個のインフォームドコンセントに署名された場合、ＢＲＣＡプロファイリングを得ることになる。また、この情報は、被験者の病歴から取り出してもよい。臨床病期分類：コンピュータ断層撮影（ＣＴ）又は磁気共鳴（ＭＲＩ）により測定可能な疾患の画像化。
治療：適格患者を本試験に登録し、群１又は群２のいずれかにランダム化する：
・試験治療群１：２１日サイクルの日１及び８にゲムシタビン（１０００ｍｇ／ｍ2；３０分間ＩＶ注入）及びカルボプラチン（ＡＵＣ２；６０分間ＩＶ注入）；又は
・試験群２：各２１日サイクルの日１、４、８及び１１に４−ヨード−３−ニトロベンズアミド（４ｍｇ／ｋｇ，１時間ＩＶ注入）。
・クロスオーバー：試験群１にランダム化された患者は、疾患進行の時点で４−ヨード−３−ニトロベンズアミドと組み合わせたゲムシタビン／カルボプラチンで継続される治療を受けるために交差することができる。
・投与前（pre−dose）及び投与後（post−dose）試験を試験プロトコールに概説されているように行なう。
・両治療群についての投与を２１日サイクルで繰り返す。
【０２３４】
被験者は、彼らが薬物不耐性若しくは増悪（disease progression）を経験するか、又は同意を撤回するまで本試験に参加できる。ＣＲを達成する被験者は、さらに４サイクルを受ける。ＰＤ前に治療を中止する被験者は、ＰＤ時までにプロトコール当たりの定型的な病期分類評価を受けなければならない。被験者が治療を中止したら、無増悪生存期間（progression free survival）及び全奏効率（overall response rate）についての評価を、疾患進行又は死亡まで３ヵ月間隔で続ける。
【０２３５】
ベースラインで為される最初の病期分類に加えて、測定可能な疾患についての最初の定期的な腫瘍縮小効果（tumor response）を、サイクル２の後、次いで別の治療サイクル毎（約６〜８週間毎）に行なう。固形がんの治療効果判定のための新ガイドライン（Response Evaluation Criteria in Solid Tumors ）（ＲＥＣＩＳＴ）による腫瘍効果を用いてＣＴ又はＭＲＩにより疾患進行を確認した（スクリーニングに用いた同じ技術を使用しなければならない）。
治療の終了：すべての被験者において、プロトコールに記載された治療方法の終了は、４−ヨード−３−ニトロベンズアミドの最終投与後３０日を超えない。さらに、４−ヨード−３−ニトロベンズアミドの最終投与の前３０日に為されていない場合、被験者は、臨床画像化を介して全腫瘍反応について評価される。
安全性の評価：安全性は、標準的な臨床試験及び臨床検査試験（血液検査、血液化学検査及び尿検査）によって評価される。毒性グレードは、米国がん研究所（National Cancer Institute ）CTCAE v3.0によって定義される。
【０２３６】
薬物動態学／薬力学
ＰＫ及び薬力学分析用の血液サンプルは、クロスオーバー被験者を含む試験群２に登録された被験者からのみ得る。
ＰＫサンプルは、サイクル１中の日１及び１１の投与前、及び注入の終了後、直ちに集める。
【０２３７】
薬力学又はＰＡＲＰサンプルは、サイクル１中の日１、４、８及び１の投与前に集める。投与後のサンプルは、日１のみ。
【０２３８】
特定されているようにＰＫ又は薬力学サンプルを採取できない部位については、本試験への参加を容認し、それらの部位に従ってプロトコールを修正する。
【０２３９】
有効性：ベースラインにおいて、次いで臨床的に明らかな疾患の進行がない場合はその後約６〜８週間毎、標準的な方法（例えばＣＴ）によって腫瘍を評価する。
【０２４０】
統計的方法
本試験の主要な目的は、ＢＡ群における臨床的有効率（ＣＢＲ）を評価することである。２つの群のそれぞれにおいて、有効性プライマリーエンドポイント（primary efficacy endpoint）（ＣＢＲ）を評価し、そして正確な二項分布９０％信頼区間を算出する。５％有意水準で片側のフィッシャーの正確検定（one−sided Fisher's exact test）を用いて２つの群におけるＣＢＲを比較する。無増悪生存期間（progression−free survival）及び全生存期間（overall survival）の副次的及び探索的有効性エンドポイントを評価し、そしてカプラン−マイアー法を用いて９５％信頼区間を算出する。ログランク検定を用いて２つの群における無増悪生存期間及び全生存の分布を比較する。ＰＡＲＰ阻害データの分析は、実際のところ探索的かつ記述的である。安全性プライマリーエンドポイント（primary safety endpoint）について、ＡＥ及び重篤有害事象（ＳＡＥ）を試験群、器官別大分類及び好ましい項目によって表にする。第１サイクル後の臨床検査試験結果をベースライン値からのシフトに関してまとめる。
フォローアップ：日９０に、そして試験薬物を最後に投与した後９０日（±２０日）毎にフォローアップ情報を得る。
【０２４１】
臨床検査評価
−標準的な方法を用いて血液検査、血清化学検査及び尿検査用の血液及び尿サンプルを調製する。臨床検査パネルは、以下の通りに定義される：
血液検査：分画を伴なう白血球数（WBC count with differential）、ＲＢＣ数、ヘモグロビン、ヘマトクリット及び血小板数
血清化学検査：アルブミン、ＡＬＰ、ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＢＵＮ、カルシウム、二酸化炭素、クロリド、クレアチニン、γ−グルタミルトランスフェラーゼ、グルコース、乳酸デヒドロゲナーゼ、リン、カリウム、ナトリウム、総ビリルビン、及び総タンパク質
尿検査：外観、色、ｐＨ、比重、ケトン、タンパク質、グルコース、ビリルビン、亜硝酸、ウロビリノーゲン、及び潜血（尿検査の試験紙（dipstick ）評価の結果が陽性である場合のみ、沈渣の顕微鏡検査を実施する）
薬物動態学的血液サンプルは、試験群２に登録された又は試験群２にクロスオーバーする被験者からのみ得る。サンプルは、サイクル１中の研究日１及び１１において投与直前及び各注入終了直後に集める。
【０２４２】
バイオマーカーは、正常な生物学的プロセス、病原性プロセス、又は治療介入に対する薬理学的反応を客観的に測定して評価する指標である。腫瘍学では、腫瘍形成プロセスの根底にある分子変化が特に関心があり、それによりがんサブタイプ、病期を特定し、腫瘍増殖の量を評価し、又は疾患進行、転移及びＢＡに対する反応を予測することができる。
【０２４３】
ＢＡ治療の前及び後のＰＡＲＰの機能活性は、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）中のＰＡＲＰ活性アッセイを用いて測定する。治験マニュアルに詳細に記載された方法に従って５ｍＬの血液サンプルからＰＢＭＣを調製し、そしてＰＡＲＰ活性／阻害を測定する。
【０２４４】
すべてのＰＡＲＰサンプルの収集、取り扱い、及び輸送の詳細な方法についてはそれぞれの現場に提供される治験マニュアルに言及される。
【０２４５】
乳がん（ＢＲＣＡ）遺伝子検査は、正常な細胞増殖を制御するのを助ける遺伝子（ＢＲＣＡ１及びＢＲＣＡ２）における特異的変化（突然変異）について調べるための血液検査である。ＢＲＣＡ突然変異を有する女性は、卵巣がんを発症する可能性が１６％〜６０％あることが示されている。ＢＲＣＡ突然変異を有する女性へのＰＡＲＰ阻害剤の投与は、有益であると証明することができる。本試験は、ＢＲＣＡ状態とＢＡを用いた治療に対する反応との間のなんらかの関連性を判定するための最初の試みである。
【０２４６】
これを達成するには、ＢＲＣＡ状態をすべての被験者について判定しなければならない（まだわかっていない場合）。被験者は、個々のインフォームドコンセントの書面に署名する必要がある。これは本試験にとっての選択基準でないため、この検査に同意しない可能性のある被験者でも、その理由だけで本試験への参加から除外されることはない。
【０２４７】
２つの群のそれぞれにおいて、一次有効性エンドポイント（ＣＢＲ）を評価し、そして正確な二項分布９０％信頼区間を算出する。有意水準５％で片側のフィッシャーの正確検定を用いて２つの群におけるＣＢＲを比較する。２つの群における無増悪生存期間及び全生存期間の副次的及び探索的有効性エンドポイントを、ログランク検定を用いて比較する。
【０２４８】
腫瘍縮小効果データは、ＢＡ治療が測定可能な臨床効果（例えば増悪期間（time to progression））を有しているかどうか測定する目的で安全性集団（safety population）におけるすべての被験者のリストとして記述的に報告され、そして最初の８週間を超えて継続しなければならない。効果データは、改定ＲＥＣＩＳＴを用いて分類する。
【０２４９】
ＰＡＲＰ阻害分析は、適切な場合探索的であり、そして実際のところ記述的である。ＰＡＲＰ阻害における差異についての統計群比較、並びにＢＡ治療の前、間及び後に摂取されたサンプルからのあらゆる薬理ゲノム学的結果（例えばＢＲＣＡ）を考察する。
【０２５０】
少なくとも１回投与量のＢＡを投与されたすべての被験者について安全性の分析を完了する。
【０２５１】
本試験中に用いられるＢＡは、１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）中に２５％ヒドロキシプロピルベータシクロデキストリンを含み１０ｍｇ／ｍｌの濃度で製剤化される。
【０２５２】
固形がんの治療効果判定のためのガイドライン（Response Evaluation Criteria in Solid Tumors）（ＲＥＣＩＳＴ）：
適格性
ベースラインで測定可能な疾患を有する患者のみを、客観的腫瘍縮小効果がプライマリーエンドポイントであるプロトコールに含めるべきである。
【０２５３】
測定可能な疾患−少なくとも１つの測定可能な病変の存在。測定可能な疾患が孤立性病変に限られる場合、その新生物の性質は、細胞学／組織学によって確定しなければならない。
【０２５４】
測定可能な病変−少なくとも一次元において、従来の技術を用いて最も長い直径≧２０ｍｍ又はスパイラルＣＴスキャンを用いて≧１０ｍｍを正確に測定することができる病変。
【０２５５】
測定不能な病変−小さな病変（従来の技術を用いて最も長い直径＜２０ｍｍ又はスパイラルＣＴスキャンを用いて＜１０ｍｍ）を含む他の全ての病変、すなわち、骨病変、軟膜疾患、腹水、胸膜／心膜の滲出液、炎症性乳房疾患、リンパ管炎の皮膚／肺、嚢胞性病変、及びまた、画像化技術によって確認し、追跡されない腹部腫瘤；など。
【０２５６】
すべての測定は、定規又はキャリパスを用いて行い、メートル法で記録しなければならない。すべてのベースライン評価は、治療開始にできる限り近く治療開始前の４週間以内に行なわなければならない。
【０２５７】
ベースラインで及びフォローアップを通じて確認及び報告された病変をそれぞれ特徴づけるために、同じ評価法及び同じ技術を用いなければならない。
【０２５８】
臨床病変は、それらが表在性（例えば皮膚小結節及び触知可能なリンパ節）である場合にのみ、測定可能であるとみなされる。皮膚病変の場合、病変サイズを評価するための定規を含んだカラー写真による資料が推奨される。
【０２５９】
測定方法
ＣＴ及びＭＲＩは、反応評価のために選ばれた標的病変を測定するための現在最も広く利用可能でかつもっとも優れた再現可能な方法である。従来のＣＴ及びＭＲＩは、連続してスライス厚が１０ｍｍ又はそれ以下の断面を用いて行なわなければならない。スパイラルＣＴは、５ｍｍの連続した再構成アルゴリズムを用いて行なわなければならない。これは、胸部、腹部及び骨盤の腫瘍に適用される。頭部及び頚部腫瘍並びに四肢の腫瘍に、通常特殊なプロトコールが必要である。
【０２６０】
胸部Ｘ線上の病変は、それらが明確に画成され、含気肺によって囲まれている場合、測定可能な病変として許容される。しかしながら、ＣＴが好ましい。
【０２６１】
本試験のプライマリーエンドポイントが客観的反応評価である場合、腫瘍病変の測定に超音波（ＵＳ）を使用すべきではない。しかしながら、表在性の触知可能なリンパ節、皮下の病変及び甲状腺結節を臨床的に測定するための代替法の可能性はある。また、ＵＳは、通常、診察によって評価される表在性病変の完全消失を確認する際には有用となりうる。
【０２６２】
客観的腫瘍評価（tumor evalution）のための内視鏡検査及び腹腔鏡検査の利用は、まだ十分に広範に検証されているわけではない。この特定の関係において、それらを使用するには、いくつかの施設でしか利用可能でない精密装置と高水準の専門知識が必要である。従って、客観的腫瘍反応のためのこのような技術の利用は、専門施設におけるバリデーション目的に制限すべきである。しかしながら、生検材料が得られる場合、このような技術は、病理学的な完全奏功（complete response）の確認に有用であるといえる。
【０２６３】
腫瘍マーカー単独では、反応を評価するために用いることができない。マーカーが最初に正常値の上限を超えている場合、すべての病変が消失したときに臨床的に完全奏功したとされるためにはそれらが患者について正常化している必要がある。
【０２６４】
細胞学及び組織学は、特殊な場合にＰＲとＣＲとを区別するために用いることができる（例えば、治療後、胚細胞腫瘍のような腫瘍タイプにおいて残存良性病変と残存悪性病変とを区別するため）。
【０２６５】
「標的」及び「非標的」病変のベースライン考証
関与するすべての器官の代表的な、器官当たり最大で５個の病変、合計１０個の病変までのすべての測定可能な病変を標的病変として確認し、そしてベースラインで記録し、測定しなければならない。
【０２６６】
標的病変は、そのサイズ（最長径を有する病変）と、正確な反復測定に対するその適性（画像化技術又は臨床のいずれか）に基づいて選ばなければならない。
【０２６７】
すべての標的病変についての最長径（ＬＤ）の和を算出し、ベースラインＬＤ和（baseline sum LD）として報告する。ベースラインＬＤ和は、目的腫瘍を特徴づける基準として用いられる。
【０２６８】
他の全ての病変（又は疾患部位）を非標的病変として確認し、そしてまたベースラインで記録しなければならない。これらの病変を測定する必要はないが、それぞれが存在する又は存在しないかは、フォローアップを通じて書き留めなければならない。
【０２６９】
効果基準（response criteria）
標的病変の評価：
・完全奏効（Complete Response）（ＣＲ）：すべての標的病変の消失
・部分奏効（Partial Response）（ＰＲ）：ベースラインＬＤ和に基づいて標的病変のＬＤ和が少なくとも３０％の減少
・進行（Progressive Disease）（ＰＤ）：
治療開始から記録された最小ＬＤ和に基づいて標的病変のＬＤにおける少なくとも２０％の増加、又は１つ若しくはそれ以上の新病変の出現
・安定（Stable Disease）（ＳＤ）：治療開始からの最小ＬＤ和に基づいてＰＲとするには不十分な縮小で、かつＰＤとするには不十分な増大
【０２７０】
非標的病変の評価：
・完全奏効（ＣＲ）：すべての非標的病変の消失及び腫瘍マーカーレベルの正常化
・不完全奏効（Incomplete Response）／安定（Stable Disease）（ＳＤ）：１つ又はそれ以上の非標的病変の残存又は／及び腫瘍マーカーレベルが正常上限の上で維持される
・進行（Progressive Disease）（ＰＤ）：１つ又はそれ以上の新病変の出現及び／又は既存の非標的病変の明確な増悪（１）
・「非標的」病変のみの明らかな増悪を示すことはまれであるが、このような状況では、治療医師の意見を優先しなければならず、審査委員会（review panel）（又は研究代表者（study chair））によって後日増悪の状態が確定されなければならない。
【０２７１】
最良総合効果（best overall response）の評価
最良総合効果 は、治療開始から増悪／再発までに記録された最良効果（best response）（ＰＤを基準として取る際には、治療開始以降に記録された最小測定値）である。一般に、患者の最良効果への割付けは、測定及び確定基準の両方の達成に基づいて行なう。
【０２７２】
【表２】
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【０２７３】
増悪の客観的証拠が得られないままその時点で治療を中止せざるを得ない健康状態が全般的に悪化した患者は、「病状悪化（symptomatic deterioration）」を有するものとして分類すべきである。治療の中止後でも客観的増悪の証拠を得るためにあらゆる努力を払わなければならない。
【０２７４】
状況により、残存疾患を正常組織と区別することは困難な場合がある。完全奏効の評価がこの測定に依存している場合は、完全奏効状態を確定するために残存病変を調査（細針吸引液／生検）することが推奨される。
【０２７５】
確定（confirmation）
客観的効果の確定（confirmation）の主な目標は、観察された奏効率の過大評価を回避することである。効果の確定が不可能な場合、効果が確定されないことを、このような試験のアウトカムを報告するときに明確にしなければならない。
【０２７６】
ＰＲ又はＣＲの状態を割り付けるためには、効果基準が最初に満たされた後４週以内に行なうべき再評価（repeat assessment）によって腫瘍測定における変化を確定しなければならない。また、研究プロトコールによって決定されたより長い期間が適切な場合もある。
【０２７７】
ＳＤの場合、フォローアップ測定は、研究プロトコールの全奏効期間（Duration of overall response）において定義された最短期間（一般に、６〜８週未満ではない）で、治験エントリー後に少なくとも１回ＳＤ基準を満たさなければならない。
【０２７８】
全奏効期間は、ＣＲ又はＰＲの測定基準を満たした時点（最初に記録された状態がいずれかであれ）から再発又はＰＤが客観的に実証された最初の日（治療開始以降に記録された最小測定値をＰＤの基準にして）までが測定単位である。
【０２７９】
安定期間（Duration of stable disease）
ＳＤは、治療開始から記録された最小測定値を基準にして、治療開始から増悪の基準が満たされるまでが測定単位である。
【０２８０】
ＳＤ期間の臨床的妥当性は、種々の腫瘍タイプ及び悪性度（grade）で変化する。従って、プロトコールは、ＳＤを決定するための２回の測定間に必要な最短期間を明記することが強く推奨される。この時間間隔は、このような状態が試験下で集団にもたらしうる、予期される臨床的利益を考慮に入れるべきである。
【０２８１】
効果の審査（Response review）
奏効率（response rate）がプライマリーエンドポイントである試験について試験終了時に本試験とは独立した専門家によってすべての効果について審査を受けることが強く推奨される。患者ファイル及び放射線像を同時に審査することが最良の方法である。
【０２８２】
結果の報告
プロトコール治療からの大きな逸脱がある場合、又は不適格な場合であっても、本試験に組入れられたすべての患者について、治療に対する効果を評価しなければならない。各患者は、以下のカテゴリーの１つに割り付けられる：１）完全奏効（complete response）、２）部分奏効（partial response）、３）安定（stable disease）、４）進行（progressive disease）、５）悪性疾患による早期死亡（early death from malignant disease）、６）毒性による早期死亡（early death from toxicity）、７）他の原因による早期死亡（early death because of other cause）、又は９）不明（評価不能、データ不十分）（unknown (not assessable, insufficient data)）。
【０２８３】
奏効率の主要分析には、適格基準を満たしたすべての患者を含めなければならない。効果カテゴリー４〜９の患者は、治療に奏効しなかった（増悪(disease progression)）と
みなすべきである。従って、不正確な治療スケジュール又は薬物投与であることが、奏効率の分析からそれを排除することにはならない。カテゴリー４〜９についての精密な定義は、プロトコール特異的である。
すべての結論はすべての適格患者に基づくべき。
【０２８４】
次いで、プロトコールからの大きな逸脱が確認されている（例えば他の理由のための早期死亡、治療の早期の中止、大きなプロトコール違反、など）ものを除き、患者のサブセットに基づいてサブグループ解析（Sub−analyses）を行なう場合がある。しかしながら、これらのサブグループ解析は、治療有効性に関して結論を導くための根拠として役立ててはならず、そして解析から患者を除く理由は明確に報告しなければならない。
【０２８５】
９５％信頼区間が得られなければならない。
【０２８６】
実施例５：パクリタキセル、カルボプラチン及びＢＡの組み合わせを用いた進行性、持続性又は再発性子宮がん肉腫の治療
患者は、増悪（disease progression）が記録された進行性（ＩＩＩ期又はＩＶ期）、持続性又は再発性子宮がん肉腫を有する。最初の原発腫瘍の組織学的確定が必要である。
【０２８７】
すべての患者は、測定可能な疾患を有する。測定可能な疾患とは、少なくとも一次元で正確に測定（最も長い次元を記録する）することができる少なくとも１つの病変として定義される。各病変は、触診、単純Ｘ線、ＣＴ及びＭＲＩを含む従来の技術で測定するときは≧２０ｍｍ、又はスパイラルＣＴで測定するときは≧１０ｍｍでなければならない。
【０２８８】
患者は、ＲＥＣＩＳＴ（第８．１節）によって定義されるこのプロトコールにおいて効果を評価するために用いられる少なくとも１つの「標的病変」を有する。以前に照射された領域内の腫瘍は、増悪が記録されてないか、又は生検を得て放射線治療の完了後少なくとも９０日で残存が確定されない限り「非標的」病変として割り付ける。さらに、患者は、最近の手術、放射線療法又は他の治療の影響から回復していなければならず、そして抗生剤を必要とする活動性感染症にかかっていてはならない。
【０２８９】
悪性腫瘍に対するあらゆるホルモン療法は、登録の少なくとも１週間前に中止しなければならない。ホルモン補充療法の継続は、容認される。
【０２９０】
患者は、適性を有しなければならない：
・骨髄機能：１００，０００／マイクロリットル以上の血小板数、及びCTCAE v3.0 grade
1と同等の１，５００／マイクロリットル以上のＡＮＣ数。
・腎機能：CTCAE v3.0 grade 1の１．５ｘ組織正常上限（ＵＬＮ）以下のクレアチニン。・肝臓機能：１．５ｘＵＬＮ(CTCAE v3.0 grade 1)以下のビリルビン 。２．５ｘＵＬＮ(CTCAE v3.0 grade 1)以下のＳＧＯＴ及びアルカリホスファターゼ 。
・神経病学的機能：CTCAE v3.0 grade 1以下の神経障害（知覚及び運動）。
・妊娠の可能がある患者は、治験エントリー前に血清妊娠テスト陰性であり、かつ有効な形で避妊法を行なわなければならない。
【０２９１】
不適格な患者：
子宮がん肉腫の管理のため以前に細胞毒性化学療法を受けた患者。
非黒色腫皮膚がん及び第３．２３節及び第３．２４節に述べたような他の特殊な悪性腫瘍を除く他の浸潤性悪性腫瘍の病歴のある患者は、最近５年以内に他の悪性腫瘍が存在する証拠がある場合、除外される。また、患者の以前のがん治療がこのプロトコール治療に禁忌を示す場合、その患者は除外される。
【０２９２】
最近５年以内に子宮がん肉腫の治療とは別に腹腔又は骨盤のいずれかの部分に以前の放射線療法を受けた患者は、除外される。乳房、頭部及び頚部又は皮膚の局限性のがんに対する以前の放射線は、登録の３年より前に完了しており、患者に再発性又は転移性疾患が残っていない場合に容認される。
【０２９３】
局限性子宮がんに対して以前にアジュバント化学療法を受けたことがある患者、但し、登録の３年より前に完了しており、患者に再発性又は転移性疾患が残っていない。
【０２９４】
手術、放射線及びコルチコステロイドを含むがこれらに制限されない併用治療を必要とする症候性の又は未治療の脳転移。
【０２９５】
試験日１の６ヵ月以内の心筋梗塞（ＭＩ）、不安定狭心症、ニューヨーク心臓協会（New York Heart Association） (NYHA)による＞クラスＩＩのうっ血性心不全（ＣＨＦ）又はコントロール不良高血圧。
【０２９６】
発作疾患の病歴がある又は現在、鎮痙薬物が適用されている。
【０２９７】
試験モダリティ（modality）
カルボプラチン（パラプラチン(R)、ＮＳＣ＃２４１２４０）
製剤：カルボプラチンは、静脈内注入による投与用のカルボプラチン５０ｍｇ、１５０ｍｇ及び４５０ｍｇを含む単回投与量バイアルの入手可能な無菌凍結乾燥粉末として供給された。各バイアルは、等しい質量部のカルボプラチン及びマンニトールを含む。
溶液調製：以下のスケジュールに従って使用直前に注射用蒸留水、ＵＳＰ、５％ブドウ糖液、又は０．９％塩化ナトリウム注射液、ＵＳＰのいずれかを用いて、各バイアルの内容物を再構成しなければならない：
【０２９８】
【表３】
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【０２９９】
これらの希釈液により、全て１０ｍｇ／ｍｌのカルボプラチン濃度となる。
注：アルミニウムは、カルボプラチンと反応して沈殿形成を引き起こし、効力を喪失する。従って、カルボプラチンの製造又は投与には薬物と接触しうるアルミニウム部品を含む針又は静脈用セットを使用してはならない。
貯蔵：カルボプラチンの未開封バイアルは、室温調節下で貯蔵され、光から保護されている場合、パッケージに記載された有効期限の間は安定である。
安定性：指示通りに調製した場合、カルボプラチン溶液は、室温で８時間安定である。製剤には抗菌性保存剤が含まれてないので、カルボプラチン溶液は、希釈８時間後には廃棄することが推奨される。
供給者：ブリストル・マイヤーズスクイブ社（Bristol−Myers Squibb Company）から商業的に入手可能である。
【０３００】
パクリタキセル（タキソール(R)（Taxol(R)）、NSC #673089）
製剤：パクリタキセルは、ヨーロッパイチイ（Taxus baccata）からの難溶性（poorly soluble）植物性産物である。溶解度の改善には、０．９％塩化ナトリウム又は５％ブドウ糖液でさらに希釈された混合溶媒系が必要である。
パクリタキセルは、５ｍｌバイアル中、ポリオキシエチル化ヒマシ油（クレモホールＥＬ）５０％及び無水アルコール、ＵＳＰ、５０％中の６ｍｇ／ｍｌ（３０ｍｇ／バイアル）無菌液濃厚物として供給された。バイアルの内容物を臨床使用の直前に希釈しなければならない。また、それは１００及び３００ｍｇバイアルでも入手可能である。
溶液調製：適切な用量のパクリタキセルを０．９％塩化ナトリウム注射液５００〜１０００ｍｌ、ＵＳＰ又は５％デキストロース注射、ＵＳＰ（Ｄ５Ｗ）で希釈した（パクリタキセルが単剤である場合、５００ｍｌが適当である）。パクリタキセルを可溶化するクレモホールビヒクルによってフタル酸ジエチルヘキシル（ＤＥＨＰ）可塑剤がポリ塩化ビニル（ＰＶＣ）バッグ及び静脈チューブから浸出するため、パクリタキセルはガラス又はポリオレフィン容器中で調製しなければならない。
注：パクリタキセル調製後に溶液中に少数の繊維形成（ＬＶＰ用にUSP Particulate Matter Testによって確立された許容限界内）が観察された。従って、パクリタキセル溶液の投与にはインライン濾過が必要である。インライン濾過は、注入ポンプに対して遠位のＩＶ流路中に、細孔サイズが０．２２ミクロンより大きくない親水性の微孔質フィルター（例えば：ＩＶＥＸ−ＩＩ、ＩＶＥＸ−ＨＰ又は同等のもの）を組み込むことによって達成しなければならない。粒子形成により薬物効力の喪失が示されることはないが、過度の粒子状物質形成を示す溶液は使用すべきではない。
貯蔵：インタクトなバイアルは、オリジナルパッケージにて２０〜２５℃（３６〜７７°Ｆ）の温度範囲で貯蔵することができる。凍結又は冷凍が製品の安定性に悪影響を及ぼすことはない。
安定性：上記のように調製した場合、パクリタキセル（０．３〜１．２ｍｇ／ｍｌ）の溶液は、周囲温度（約２５℃）及び室内照明条件で２７時間、物理的及び化学的に安定であるが、パクリタキセルのすべての溶液は、薬物の濃度及び調製後に経過した時間に比例して僅かに曇りを示す。
供給者：ブリストル・マイヤーズスクイブ（Bristol−Myers Squibb Company）から商業的に入手可能である。
投与：パクリタキセルを、適切な用量及び希釈度で３時間連続ＩＶ注入として与える。パクリタキセルは、非経口ニトログリセリンを注入するために用いられるＩＶ投与セット（ポリエチレン又はポリオレフィン）のような非ＰＶＣチューブ及びコネクタを用いて注入制御装置（ポンプ）を介して投与される。パクリタキセルが投与されるラインを通して注入されるものは、他にはない。第５．２節を参照のこと。
【０３０１】
ＢＡ（４−ヨード−３−ニトロベンズアミド）
バイパー・サイエンシズ（BiPar Sciences）に代わってＢＡを製造して包装し、そしてバイパー（BiPar）に認可された臨床治験薬物配給方法を用いて配給される。ＢＡは、１０ｍＬ使い捨てバイアル中の液体無菌製剤として提示される。ＢＡは、１０ｍｇ／ｍｌの活性成分濃度で２５％ヒドロキシプロピルベータシクロデキストリン／１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）中に処方される。各バイアルは、少なくとも９．０ｍＬの内部体積（extractable volume）を含む。試験薬のラベル上に記載された情報は、ＩＣＨの基準及び米国食品医薬品局（US Food and Drug Administration）（ＦＤＡ）のものに適合する。大量のＢＡバイアルは、カートン当たり１０バイアルのカートンで輸送され、一カ所にラベルが貼られる。ラベルは、以下の情報を含む：米国の治験薬用の注意書き、治験番号、商品名、濃度、貯蔵、再試験日、及び治験スポンサーの名称。
溶液調製：ＢＡを下記のように調製し、１時間かけて静脈内に投与する：
被験者のベースライン体重に用量レベルを乗算して用いることによって投薬に必要なＢＡ量（４ｍｇ／ｋｇ）を算出する。例えば
被験者のベースライン体重＝７０ｋｇ
用量＝４ｍｇ／ｋｇ
必要な用量＝（４ｍｇ／ｋｇｘ７０ｋｇ）＝ＢＡ２８０ｍｇ
バイアル中のＢＡ濃度（１０ｍｇ／ｍｌ）によって必要なＢＡ用量を分割して投与に必要なＢＡ製剤のｍＬ量を決定する。例：
２８０ｍｇ÷１０ｍｇ／ｍｌ＝２８ｍＬ
バイアル当たり１０ｍＬでＢＡのバイアル数を計算して必要な体積を得る。（この例では、３バイアルが必要である。）ＢＡの必要な体積を得る必要がある場合、追加のバイアルを用いてもよい。
シリンジによってバイアルから適切な体積のＢＡ製剤を抜き取り、以下のようにＩＶバッグを準備する間、それをわきに置く：
ＩＶバッグ中には合計２５０ｍＬの溶液があり、１時間かけて送達することが推奨される。０．９％ＮＳ又はＤ５ＷのＩＶ溶液を用いる。２５０ｍＬを超える溶液を含むＩＶバッグを用いて開始する場合、溶液に加えるべき製剤の全体積に加えて過剰の溶液は除去して捨てる。ＩＶバッグに算出した体積のＢＡ製剤を注入し、適切な混合を確実にする。ＩＶチューブを取り付け、それに溶液を入れる。注：空のＩＶバッグを用いて算出したＢＡ体積を注入し、次いで０．９％ＮＳ又は５ＤＷを加えて２５０ｍｌの全体積にすることもできる。これは５０ｍｌを超えるＢＡ体積について有用でありうる。
貯蔵：ＢＡ製剤バイアルは、２〜８℃で貯蔵し、光から保護しなければならない。製剤バイアルは、オリジナルカートン中に保管し、２〜８℃の温度制御された設備中に置く。ＢＡは、必要に応じて２４時間の間２５℃で貯蔵してもよい。ＢＡがこれらの貯蔵条件下で取り扱われなかったとみなされる場合、直ちにバイパー（BiPar）と連絡を取る。推奨された貯蔵条件で貯蔵されなかったバイアルを、バイパーからの許可なしに使用してはならない。
安定性：調製後８時間以内にＢＡを投与する。被験者に投与するまで、投与溶液は周囲温度（室温）に保持しなければならない。
供給者：バイパー・サイエンシズ社（BiPar Sciences Inc.）
【０３０２】
治療プラン
増悪又は有害作用によりさらなる治療が制限されるまで、２１日毎に、日１にパクリタキセル１７５ｍｇ／ｍ2を３時間注入、続いて３０分かけてカルボプラチンをＡＵＣ＝６．０で投与、さらに日１に開始して週に２回１時間の注入時間をかけてＢＡ ４ｍｇ／ｋｇＩＶ（ＢＡの用量は少なくとも２日に分けなければならない）。この３週間を１つの治療サイクルとする。完全臨床効果（complete clinical response）を超えるサイクル数は、治療医師の裁量による。疾患の進行（progression of disease）についての基準（部分奏効（partial response）又は安定（stable disease））を満たしてない患者は、毒性によって制限されるまで試験治療を継続しなければならない。
カルボプラチンの投与量：Jelliffe式からの推定糸球体濾過率（ＧＦＲ）を用いてCalvert式に従って濃度ｘ時間の標的曲線下面積（ＡＵＣ）に達する用量を算出する。初回量は、ＡＵＣ＝６を３０分かけて注入する。
【０３０３】
カルボプラチンの初回量は、ＧＦＲを用いて算出しなければならない。腎臓の新たな閉塞又はCTCAE v3.0 grade 2を超える若しくはそれに同等の他の腎毒性（血清クレアチニン＞１．５ｘＵＬＮ）がない場合、カルボプラチンの用量をその後のサイクルのために再計算することはないが、述べたように用量を変更することになる。
【０３０４】
低下したタンパク質摂取及び／又は低筋肉量のために血清クレアチニンが異常に低い患者（０．６ｍｇ／ｄｌ以下）では、クレアチニンクリアランスは、０．６ｍｇ／ｄｌの最小値を用いて評価しなければならない。より適切なベースラインクレアチニン値が治療の４週間以内に入手可能である場合、それはＧＦＲの最初の評価に用いてもよい。
【０３０５】
Calvert式：カルボプラチン用量（ｍｇ）＝標的ＡＵＣｘ（ＧＦＲ＋２５）
このプロトコールの目的では、ＧＦＲはクレアチニンクリアランスと同等であるとされる。クレアチニンクリアランス（Ｃｃｒ）は、以下の式を用いてJelliffeの方法によって推定される：｛９８−［０．８（年齢−２０）］｝Ｃｃｒ＝０．９ｘＳｃｒ、ここで：Ｃｃｒ＝推定クレアチニンクリアランス（ｍｌ／分）；年齢＝患者の年齢（歳）（２０〜８０歳）；Ｓｃｒ＝血清クレアチニン（ｍｇ／ｄｌ）。新たな腎臓閉塞又は１．５ｘＵＬＮ (CTCAE v3.0 grade 2)を超える血清クレアチニンの上昇がない場合、カルボプラチンの用量を、その後のサイクルのために再計算することはないが、述べたように血液学的基準及び他のイベントのために用量を変更することになる。
【０３０６】
化学療法による投与方法の提案：レジメンは、外来患者設定で投与することができる。パクリタキセルを３時間注入、続いて３０分かけてカルボプラチン、続いて１時間かけてＢＡを投与する。ＢＡは、本試験期間の間中、週に２回静脈内に投与する（１時間かけての注入として）。ＢＡの用量は、少なくとも２日に分けなければならない（例えば月曜日／木曜日、月曜日／金曜日、又は火曜日／金曜日に用量を与えることができる）。制吐剤レジメンは、パクリタキセル及びカルボプラチン治療での日１治療が推奨される。使用した制吐剤レジメンは、相互審査による（peer−reviewed）コンセンサスガイドラインに基づかなければならない。予防的制吐剤は、単独で与えるＢＡ用量には必要ない。
パクリタキセルの予備レジメン：パクリタキセルは、本試験において３時間注入として投与される。パクリタキセルを投与することになっているすべてのサイクルでは、予備レジメンを使用して過敏性反応に関連する危険性を低減することが推奨される。このレジメンは、デキサメサゾン（ＩＶ又はＰＯ）、抗ヒスタミン剤Ｈ１（例えばジフェンヒドラミン）及び抗ヒスタミン剤Ｈ２（例えばシメチジン、ラニチジン又はファモチジン）を含まなければならない。
【０３０７】
用量計算に用いる最大体表面積は、２．０ｍ2である。
【０３０８】
副作用が重篤でない場合、治験責任医師の裁量で患者はいつまでも試験薬剤を続けてもよい。完全臨床効果を達成した患者は、治療する医師の裁量でさらにサイクルを継続してもよい。
【０３０９】
評価基準
効果のパラメーター−ＲＥＣＩＳＴ基準
測定可能な疾患は、少なくとも一次元（最も長い次元を記録する）で正確に測定することができる少なくとも１つの病変として定義される。各病変は、触診、単純Ｘ線、ＣＴ及びＭＲＩを含む従来の技術で測定したときに≧２０ｍｍ、又はスパイラルＣＴで測定したときに≧１０ｍｍでなければならない。
【０３１０】
「標的」及び「非標的」病変のベースライン考証
器官当たり最高で５個の病変、そして関与するすべての器官の代表的な全部で１０個の病変のすべての測定可能な病変を標的病変として定めるべきであり、そしてベースラインで記録し、そして測定する。標的病変は、そのサイズ（最も長い次元を有する病変）及び１つの一貫した評価方法（画像化技術又は臨床のいずれか）によって正確に繰り返し測定するためのその適性に基づいて選ばなければならない。すべての標的病変についての最も長い次元（ＬＤ）の和を算出し、そしてベースラインＬＤ和として報告する。ベースラインＬＤ和は、疾患の測定可能な次元の客観的腫瘍縮小効果をさらに特徴づける基準として用いられる。
【０３１１】
他の全ての病変（又は疾患の部位）は、非標的病変として定め、そしてまたベースラインで記録しなければならない。測定する必要はなく、これらの病変は「存在する」又は「存在しない」として追跡調査する。
【０３１２】
疾患状態のすべてのベースライン評価は、治療開始のできるだけ近くで行なうべきであり、治療開始の４週間より前であってはならない。
【０３１３】
最良の効果
各病変サイズで最も長い次元の測定を追跡調査する必要がある。これらの次元の和における変化から腫瘍サイズにおける変化のいくつかの評価が得られ、それにより治療有効性が得られる。すべての疾患は、ベースラインと同じ技術を用いて評価しなければならない。個々の場合におけるこれらの変化の報告は、本試験に入ってからその症例で達成された最良の効果に関するものでなければならない。
【０３１４】
完全奏効（Complete Response）（ＣＲ）は、すべての標的及び非標的病変の消失及び新病変の徴候なしが、少なくとも４週間離れた２回の疾患評価により記録されることである。
【０３１５】
部分奏効（Partial Response）（ＰＲ）は、ベースラインＬＤ和と比較してすべての標的測定可能な病変の最長次元（ＬＤ）の和が少なくとも３０％減少することである。非標的病変の明確な増悪、新病変はあり得ない。少なくとも４週間離れた２回の疾患評価による考証が必要である。唯一の標的病変が物理的試験で測定される孤立性骨盤腔内腫瘤である場合、これはＸ線撮影で測定不可能であり、ＬＤにおける５０％減少が必要である。
【０３１６】
疾患拡大（Increasing Disease）とは、最小ＬＤ和と比較して標的病変のＬＤ和における少なくとも２０％増加又は治験エントリー８週間以内の新病変の出現である。治験エントリー８週間以内で、治療する医師の見解で新生物発生の細胞学的証拠のない胸水以外の既存の非標的病変の明確な増悪もまた疾患拡大とみなされる（この状況では、説明をする必要がある）。唯一の標的病変が物理的試験で測定される孤立性骨盤腔内腫瘤である場合、それはＸ線撮影で測定不可能であり、ＬＤにおける５０％増大が必要である。
【０３１７】
病状悪化（Symptomatic deterioration）とは、増悪の客観的な証拠なしに治療における変更が必要な疾患に起因する健康状態の全体的な悪化として定義される。
【０３１８】
安定（Stable Disease）とは、上の基準を満たしていないすべての状態である。
【０３１９】
評価不能（Inevaluable for response）とは、症状又は疾患の徴候と関係のない理由のため、試験治療開始後に腫瘍評価を繰り返し行ってないこととして定義される。
【０３２０】
増悪（Progression）（測定可能な疾患試験）は、以下のいずれかとして定義される：
治験エントリー以降記録された最小ＬＤ和と比較してＬＤ標的病変和における少なくとも２０％の増加
唯一の標的病変が、Ｘ線撮影で測定不可能な、物理的試験で測定される孤立性骨盤腔内腫瘤である場合、治験エントリー以降記録された最小ＬＤと比較してＬＤにおける５０％の増大が必要である。
１つ又はそれ以上の新病変の出現
事前に増悪の客観的考証をしてない疾患による死亡
増悪の客観的証拠なしに治療における変更を必要とする疾患に起因する健康状態の全体的な悪化
治療する医師の見解で新生物発生の細胞学的証拠のない胸水以外の既存の非標的病変の明確な増悪（この状況では、説明をする必要がある）
再発（Recurrence）（測定不可能な疾患試験）とは、治験エントリー以降の疾患の臨床的、放射線学的又は組織学的徴候の増大として定義される。
【０３２１】
生存期間（Survival）とは、本試験への参加から死亡又は最後にコンタクトした日までの観察された寿命の長さである。
【０３２２】
無増悪生存期間（Progression−Free Survival）（測定可能な疾患試験）とは、治験エントリーから増悪、死亡又は最後にコンタクトした日までの期間である。
【０３２３】
無再発生存期間（Recurrence−Free Survival）（測定不可能な疾患試験）とは、治験エントリーから疾患再発、死亡又は最後にコンタクトした日までの期間である。
【０３２４】
パフォーマンスステータス、特異的な症状及び副作用を含む主観的なパラメーターは、CTCAE v3.0に従って類別した。
【０３２５】
試験期間
増悪又は耐えがたい毒性の介入まで患者は治療を受ける。患者は、いつでも本試験の治療を拒否することができる。治療に対して完全臨床効果を有する患者は、治療する医師の裁量で治療の追加数のサイクルを継続する。部分奏効又は安定（stable disease）の患者は、耐えがたい毒性がさらなる治療を妨げない限り治療を継続しなければならない。
【０３２６】
増悪又は研究離脱まですべての患者を治療する（すべての必要な症例報告書をまとめる）。次いで、患者については、最初の２年間は３ヵ月毎に、それから次の３年間は６ヵ月毎に追跡調査する（物理的試験及び病歴により）。同意が撤回されない限り、GOG Statistical and Data Centerに提出される質問形式（Q forms）と共に遅延毒性及びこの５年間の生存期間について患者をモニターする。
【０３２７】
実施例６：ＢＲＣＡ−１又はＢＲＣＡ−２に関連する進行性の上皮性卵巣、卵管、又は原発性腹膜がんを有する患者における４−ヨード−３−ニトロベンズアミドのフェーズ２単一治療群試験
これは、ＢＲＣＡ−１又はＢＲＣＡ−２に関連する進行性の上皮性卵巣、卵管、又は原発性腹膜がんを有する患者における４−ヨード−３−ニトロベンズアミド（ＢＡ）の単一施設による単一治療群試験である。本試験の目標は、ＢＡがこの患者集団において有効であるかどうかを決定することである。適格患者は、白金／タキサン併用療法による初期治療を受け、医師により決定された治癒的選択肢を有することはない。以前の治療数における制限はない。本試験ではSimon二段階最適デザイン（two−stage optimal design）を用いて最大３５人の患者を治療した。
【０３２８】
プロトコールスキーマを以下に示す。合計８週間、日１及び４に週に２回静脈内に治験薬ＢＡで患者を治療する。これは、治療の１サイクルを含む。サイクル１の日１の前４週以内にベースラインＣＴ又はＭＲＩスキャン及びＣＡ１２５レベルを記録する。疾患の再評価をサイクル１の第８週に行う。患者は、安定又は奏効（ＲＥＣＩＳＴ基準による）を有し、試験に残ることを望む限りさらなるサイクルの治療を続ける。
【化１１】
2011503071.tif 000024
【０３２９】
本試験のさらなる探索的構成要素としては、ＰＡＲＰ−１遺伝子発現についての従来のパラフィン包埋腫瘍組織の評価、ＰＡＲＰ阻害についての末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）の評価、二次遺伝子内変異についてのＢＲＣＡ１又はＢＲＣＡ２のシークエンシング、及びバイオマーカー分析に適切な腹水液の収集を含む。
【０３３０】
客観的及び科学的な目的
一次
・ＢＲＣＡ−１又はＢＲＣＡ−２関連の進行性の上皮性卵巣、卵管、又は原発性腹膜がんを有する被験者に週に、２回静脈内に８ｍｇ／ｋｇで投与したときのＢＡに対する奏効率（response rate）（ＲＥＣＩＳＴによる）を評価すること。
二次
・ＢＲＣＡ−１又はＢＲＣＡ−２関連の進行性の上皮性卵巣、卵管、又は原発性腹膜がんを有する被験者において週に２回静脈内に８ｍｇ／ｋｇで投与したときのＢＡの臨床的有効率（全奏効率及び安定）を評価すること。
・ＢＡを投与した被験者において無増悪生存期間（progression free survival）（ＰＦＳ）及び全生存期間（overall survival）（ＯＳ）を評価すること。
・ＢＡを投与している被験者のＣＡ−１２５レベルによって測定して効果を評価すること。
・週に２回静脈内に８ｍｇ／ｋｇで投与したときのＢＡの安全性及び忍容性を評価すること。
探索的
・末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）におけるＰＡＲＰ阻害の程度を評価すること。
・腫瘍サンプルにおけるＰＡＲＰ−１遺伝子発現を評価し、そしてＢＡに対して反応する発現レベルを相関させること。
・二次遺伝子内変異を同定し、そしてＢＡに対する反応と相関させること。
・腫瘍バンキング（tumor banking）が臨床的に必要であるときに患者から腹水液を集めること。
【０３３１】
本試験についての理論的根拠
本試験の目標は、ＢＲＣＡ関連卵巣がんを有する患者におけるＢＡの有効性を決定することである。ＰＡＲＰ阻害に対してＢＲＣＡ欠損腫瘍細胞に独特な感受性があるとすれば、ＢＡによる治療は、卵巣がん患者のこのサブセットに、現在利用可能なレジメンと比較した場合により少ない毒性で有効な治療を提供することができる。１２ヵ月未満の無症候期間（disease−free interval）を有する患者における現在利用可能な化学療法に対する奏効率は、１５〜２０％の範囲である。23  種々のＰＡＲＰ阻害剤を用いるフェーズＩ試験は、ＢＲＣＡ関連の卵巣がん患者５／１１で効果を示した。19  従って、本試験では、調べて１０％と３０％効果間の差を知ることがある（poared to see）。
【０３３２】
設計
これは、ＢＲＣＡ−１又はＢＲＣＡ−２関連の進行性上皮性卵巣、卵管、又は原発性腹膜がんを有する患者におけるＢＡの単一治療群研究である。Simon最適二段階統計的デザイン（Simon optimal two−stage statistical design）(Simon, Controlled Clin Trials, 10:1−10,1989)を用いて患者を登録した。本試験では合計３５人の患者を登録した。１２人を第一期に登録した。第一期において２／１２の患者が治療に対して奏効を示した場合（ＲＥＣＩＳＴ基準によって定義されるように）、さらに２３人の患者を第二期に登録した。試験終了後、少なくとも６／３５の患者が奏効を示した場合、本試験は有益であるとみなされる。本試験は調べて、タイプ１エラー＝.１０及びタイプ２エラー＝.１０で１０％と３０％効果間の差を知ることがある。副次的エンドポイントは表にして記述的に報告する。探索的試験は、将来的な試験のための仮説作成であり、記述的に報告される。
【０３３３】
被験者の適格性についての基準
被験者選択基準
・女性、年齢１８歳又はそれ以上。
・組織学的に又は細胞学的に確定された進行性の上皮性卵巣がん、卵管がん又は原発性腹膜がん（ＩＩＩ期又はＩＶ期）。
・患者は、白金／タキサン治療の少なくとも１つのレジメンを受けなければならない。
・確定されたＢＲＣＡ１又はＢＲＣＡ２状態。
・１つ又はそれ以上の測定可能な病変、スパイラルＣＴスキャンによる最長径が少なくとも１０ｍｍ又は従来の技術（触診、単純Ｘ線、ＣＴ又はＭＲＩ）で測定したときに最長径が２０ｍｍ。
・カルノフスキーパフォーマンスステータス≧７０％。
・少なくとも１６週の推定平均余命。
【０３３４】
被験者除外基準
・スクリーニング臨床検査値：
ｏ好中球絶対数＜１５００／□Ｌ
ｏ血小板数＜１００,０００／μＬ
ｏヘモグロビン＜８．５ｇ／ｄｌ
ｏ血清ビリルビン＞２．０ｘ正常上限（ＵＬＮ）
ｏＡＳＴ及びＡＬＴ＞２．５ｘＵＬＮ（肝転移を伴なう被験者についてはＡＳＴ及びＡＬＴ＞５ｘＵＬＮ）
ｏ血清クレアチニン＞１．５ｘＵＬＮ
・日１より前の２１日の範囲内のいずれかの抗がん治療。
・適切に治療された子宮頸部上皮内がん、乳房の非浸潤性乳管がん（ＤＣＩＳ）、又は基底若しくは扁平細胞皮膚がんを除く、日１の３年以内の他のいずれかの悪性腫瘍。
・ＨＩＶ／ＡＩＤＳ、Ｂ型肝炎又はＣ型肝炎感染症を含む活性ウイルス感染症。
・活性中枢神経系又は脳転移。
・痙攣の病歴又は抗てんかん剤投薬を伴う現在の治療。
・脱毛症を除く、以前の治療に由来する持続性の悪性度２又はそれより大きい毒性。
治療／介入プラン
【０３３５】
このフェーズＩＩ単一治療群の単一施設による試験は、進行性の上皮性卵巣、卵管、又は原発性腹膜がんを有する最大３５人の患者になる。推定集積率は、１ヵ月当たり２〜４人の患者である。
【０３３６】
すべての治療は、外来患者設定で行われる。本試験における登録の資格を得た患者は、上述した前処理スクリーニング評価の後、治療を開始する。８ｍｇ／ｋｇの用量のＢＡを、週に２回、合計８週間静脈内に投与する。治療は、各週の日１及び４に投与する。ＢＡ用量は、治療なしの日を２日隔てなければならない。患者は、治療の週８中にそれらの疾患のＸ線撮影評価を受ける。増悪のない患者（ＳＤ、ＰＲ又はＣＲ）は、追加サイクルの治療を続けることができる。
【０３３７】
治療中のルーチンモニタリング
サイクル１中、患者は、毎週生命徴候を測定する。それは、２週毎に（日１、１５、２９、４３）全病歴及び物理的試験、パフォーマンスステータス評価、体重、全血球数、凝固試験（Ｐｔ／ＰＴＴ）、包括的な代謝パネル、マグネシウムレベルにより評価する。患者は、併用投薬におけるあらゆる変化又は試験中に生じた副作用を報告するよう指示される。各サイクルの第８週中にＣＴ又はＭＲＩを用いるＸ線撮影画像化、ＥＫＧ、及び血液ＣＡ−１２５レベルが行われる。
【０３３８】
治療中の実験手順
サイクル１及び２の日１及び１５において、ＢＡ投与の１時間前、直前、及び直後に血液サンプル（５ｍｌ）を集めて末梢血単核細胞中のＰＡＲＰ阻害のレベルを測定する。生殖細胞系列ＤＮＡ抽出用に血液サンプル（１０ｍｌ）を１回集める。これは、ＢＲＣＡ１又は２の二次突然変異を評価する相関試験に用いる。これは、治療開始又はサイクル１の日１の前処理の１４日以内に行なってもよい。治療中に臨床的に指示された穿刺を受けている患者では、サンプルを腫瘍バンキング用に集める。これは、治療中任意の時点で各患者について１回行なうことができる。
【０３３９】
患者は、なんらかの理由で本試験から離脱したら、最終的なフォローアップ通院をすることになる。この通院は、最後のＢＡ投与の少なくとも４週後に行う。以下の評価は、この通院時に行う：
・病歴、身体検査、カルノフスキーパフォーマンスステータス、身長、体重、生命徴候（血圧、呼吸数、脈拍、体温）を含む臨床評価
・併用投薬の記録
・以下のための採血：
ｏＣＡ−１２５
ｏ全血球数（ＣＢＣ）
ｏプロトロンビン時間（Ｐｔ）及び部分トロンボプラスチン時間（ＰＴＴ）を含む凝固試験
ｏ包括的な代謝パネル（ＢＵＮ、クレアチニン、Ｎａ、Ｃｌ、ＣＯ2、Ｃａ、グルコース、全ビリルビン、全タンパク質、アルブミン、アルカリホスファターゼ、ＡＳＴ、ＡＬＴ）
ｏマグネシウム
・毒性評価
【０３４０】
試験離脱時に安定を有する患者は、ＢＡの投与を停止した後、少なくとも３ヵ月毎にＣＴ又はＭＲＩスキャンによる疾患負担のＸ線撮影及びＣＡ−１２５レベルの評価を続けることが奨励される。これは、ＰＦＳの副次的エンドポイントの測定に用いられる。試験スタッフは、最初の１年間は３ヵ月毎に、そして最初の１年後は６ヵ月毎に患者との接触を続けて疾患状態及び生存期間を評価する。
【０３４１】
治療の変更
用量減少
今までのところ、ＢＡに関連している重篤な有害イベント又は悪性度３又は４の毒性はない。薬物は安全であり、そして忍容性が良好であると考えられる。しかしながら、患者が悪性度３又は４のなんらかの毒性を経験する場合、毒性が＜悪性度２になるまで、薬物を控えなければならない。
【０３４２】
スケジューリングの遅れ及び投与の見送り（missing）
所定の週の日１又は４において患者が治療を受けられないようなスケジューリングの制約が起る場合、以下に概説するように一日だけのスケジュールのシフトは容認される。治療日は、下線を引いた太字によって示す。
【表４】
2011503071.tif 000025
【０３４３】
投与の間に２日の無治療期間が必要であるため、患者が、上記のように投与を見送った次の日に治療を受けることができない場合、投与を抜かす。次いで、患者は、次の予定日１又は４に治療を再開する。試験中投与を２回抜かすことは、許容される。スケジューリングの調整がつかないために投与を３回抜かした患者は、試験プロトコールから除外する。
【０３４４】
探索的試験／相関科学
末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）におけるＰＡＲＰ阻害
末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）におけるＰＡＲＰ活性アッセイを用いてＢＡ治療の１時間前、直前及び後のＰＡＲＰの機能性活性を測定する。これは、サイクル１及び２の日１及び１５に行う。治験マニュアルに詳細に記載された手順に従って５ｍＬの血液サンプルからＰＢＭＣを調製し、そしてＰＡＲＰ活性／阻害を測定する。各血液サンプルを三連（triplicate）で分析し、ＰＡＲＰ活性を相対発光量（relative light unit）（ＲＬＵ）として報告し、標準曲線に正規化する。ＢＡの１時間前のサンプルをＢＡ投与の直前のサンプルと比較して薬理学的介入にもかかわらずその日の種々の時間でＰＡＲＰ活性における正常な変動があるかどうかを評価する。
【０３４５】
腫瘍サンプルにおけるＰＡＲＰ−１遺伝子発現
多重ＲＴ―ＰＣＲを用いて患者の腫瘍検体でＰＡＲＰ遺伝子発現を評価する。治療を開始する前に、各患者についてのパラフィン包埋腫瘍検体からパラフィン塊又は６枚のスライドガラスを集める。また、パラフィン包埋正常組織からパラフィン塊又は４枚のスライドガラスを集める。スライドガラスは、それぞれ腫瘍又は正常組織を≧７５％含まなければならない。正常な検体は、腫瘍と同じ組織タイプである必要はなく（すなわち最初の手術からの正常な卵管、子宮組織又は他の正常組織検体を用いることができる）、そしてＰＡＲＰ  ＲＴ−ＰＣＲ用の対照検体として用いられる。腫瘍サンプルは、患者の最初の手術又は他の腫瘍生検検体からであってもよい。好ましくは、検体は、ＰＡＲＰ発現が時間をかけて変化したイベントにおける最新の腫瘍サンプリング手順からのものである。６枚の腫瘍スライドガラスのうち２枚を相関免疫組織化学分析（correlative immunohistochemistry analysis）に用いる。
【０３４６】
二次遺伝子内変異分析
本試験では、各患者の１０ｍｌの末梢血から生殖細胞系列ＤＮＡを集める。１又は２本のＥＤＴＡ入りパープルトップ血液採取管（purple top blood collection tubes）中に血液サンプルを集める。検体をGynecology Research Labに運び、ここでＤＮＡ抽出及び希釈を行う。腫瘍組織は、パラフィン塊又は４枚の未染色スライドガラスから得る。組織を整えて最終検体中に少なくとも８０％の腫瘍細胞核を得る。標準検査方法に従って腫瘍ＤＮＡを抽出する。患者が有することがわかっているすべての突然変異に基づいてＢＲＣＡ１又はＢＲＣＡ２のいずれかの全コード領域について腫瘍ＤＮＡの配列決定を行う。配列決定は、ＨＯＰＰ翻訳コア（translational core）を通して行なわれる。半自動配列解釈を実施してすべての二次突然変異又は欠失を同定する。すべての同定された変異体を、第二のＰＣＲ増幅及び配列決定によって確定する。陽性の場合に生殖細胞系列ＤＮＡの配列決定を行い、突然変異又は欠失について体細胞の性質を確定する。
【０３４７】
腹水液腫瘍バンキング
試験中に待機的又は治療的穿刺術を必要とする腹水症の患者は、腫瘍バンキング用に集められる腹水液を有する。これらのサンプルの将来的な使用は、ＭＳＫＣＣガイドラインに従ってＩＲＢの承認を必要とする。腹水液腫瘍バンキングは、バイオマーカー分析のための卵巣腫瘍細胞の貴重な供給源である。
【０３４８】
治療効果／アウトカム評価の基準
本試験の主要な目的は、ＢＡで治療した被験者における奏効率を決定することである。効果は、ＲＥＣＩＳＴ基準を用いて決定する。測定可能な疾患及び反応の最初の評価に必要なパラメーターは、以下の通りである：
【０３４９】
ベースライン測定可能な疾患−ＧＯＧ  ＲＥＣＩＳＴ基準
測定可能な疾患は、少なくとも一次元（最も長い次元を記録する）で正確に測定することができる少なくとも１つの病変として定義される。各病変は、触診、単純Ｘ線、ＣＴ及びＭＲＩを含む慣用の技術で測定したときに≧２０ｍｍ、又はスパイラルＣＴで測定したときに≧１０ｍｍでなければならない。
【０３５０】
「標的」及び「非標的」病変のベースライン考証
器官当たり最高で５個の病変、そして関与するすべての器官の代表的な全部で１０個の病変のすべての測定可能な病変を標的病変として定めるべきであり、そしてベースラインで記録し、そして測定する。標的病変は、そのサイズ（最も長い次元を有する病変）及び１つの一貫した評価方法（画像化技術又は臨床のいずれか）によって正確に繰り返し測定するためのその適性に基づいて選ばなければならない。すべての標的病変についての最も長い次元（ＬＤ）の和を算出し、そしてベースラインＬＤ和として報告する。ベースラインＬＤ和は、疾患の測定可能な次元の客観的腫瘍縮小効果をさらに特徴づける基準として用いられる。
【０３５１】
他の全ての病変（又は疾患の部位）は、非標的病変として定め、そしてまたベースラインで記録しなければならない。測定する必要はなく、これらの病変は「存在する」又は「存在しない」として追跡調査する。
【０３５２】
疾患状態のすべてのベースライン評価は、治療開始のできるだけ近くで行なうべきであり、治療開始の４週間より前であってはならない。
【０３５３】
最良の効果
各病変サイズで最も長い次元の測定を追跡調査する必要がある。これらの次元の和における変化から腫瘍サイズにおける変化のいくつかの評価が得られ、それにより治療有効性が得られる。すべての疾患は、ベースラインと同じ技術を用いて評価しなければならない。個々の場合におけるこれらの変化の報告は、本試験に入ってからその症例で達成された最良の効果に関するものでなければならない。
【０３５４】
完全奏効（Complete Response）（ＣＲ）は、すべての標的及び非標的病変の消失及び新病変の徴候なしである。完全奏効の確定には、少なくとも４週間離れた２回の疾患評価により記録される必要がある。
【０３５５】
部分奏効（Partial Response）（ＰＲ）は、ベースラインＬＤ和と比較してすべての標的測定可能な病変の最長次元（ＬＤ）の和が少なくとも３０％減少することである。非標的病変の明確な増悪、新病変はあり得ない。部分奏効の確定には、少なくとも４週間離れた２回の疾患評価による考証が必要である。唯一の標的病変が物理的試験で測定される孤立性骨盤腔内腫瘤である場合、これはＸ線撮影で測定不可能であり、ＬＤにおける５０％減少が必要である。
【０３５６】
疾患拡大（Increasing Disease）とは、最小ＬＤ和と比較して標的病変のＬＤ和における少なくとも２０％増加又は治験エントリー８週間以内の新病変の出現である。治験エントリー８週間以内で、治療する医師の見解で新生物発生の細胞学的証拠のない胸水以外の既存の非標的病変の明確な増悪もまた疾患拡大とみなされる（この状況では、説明をする必要がある）。唯一の標的病変が物理的試験で測定される孤立性骨盤腔内腫瘤である場合、それはＸ線撮影で測定不可能であり、ＬＤにおける５０％増大が必要である。
【０３５７】
病状悪化（Symptomatic deterioration）とは、増悪の客観的な証拠なしに治療における変更が必要な疾患に起因する健康状態の全体的な悪化として定義される。
【０３５８】
安定（Stable Disease）とは、上の基準を満たしていないすべての状態である。
【０３５９】
評価不能（Inevaluable for response）とは、症状又は疾患の徴候と関係のない理由のため、試験治療開始後に腫瘍評価を繰り返し行ってないこととして定義される。
【０３６０】
増悪（Progression）（測定可能な疾患試験）は、以下のいずれかとして定義される：
治験エントリー以降記録された最小ＬＤ和と比較してＬＤ標的病変和における少なくとも２０％の増加
唯一の標的病変が、Ｘ線撮影で測定不可能な、物理的試験で測定される孤立性骨盤腔内腫瘤である場合、治験エントリー以降記録された最小ＬＤと比較してＬＤにおける５０％の増大が必要である。
【０３６１】
１つ又はそれ以上の新病変の出現
事前に増悪の客観的考証をしてない疾患による死亡
増悪の客観的証拠なしに治療における変更を必要とする疾患に起因する健康状態の全体的な悪化
治療する医師の見解で新生物発生の細胞学的証拠のない胸水以外の既存の非標的病変の明確な増悪（この状況では、説明をする必要がある）
【０３６２】
ＲＥＣＩＳＴ反応を評価するための概要を以下に示す。
【表５】
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【０３６３】
試験の副次的エンドポイントとしては、無増悪生存期間及び全生存期間、安全性並びにＣＡ１２５反応を評価することが含まれる。これらは、以下のパラメーターを用いて測定される：
無増悪生存期間は、治験エントリーから増悪、死亡又は最終接触日までの期間である。
全生存期間は、試験へのエントリーから死亡又は最終接触日までの観察された寿命である。
パフォーマンスステータス、特異的症状及び副作用を含む安全性パラメーターは、CTCAE v3.0に従って等級分けした。
【０３６４】
ＣＡ−１２５効果ガイドライン
試験治療を開始する前、少なくとも１週間離れた２回の場合に高ＣＡ−１２５（＞５０Ｕ／ｍＬ）を有する被験者を、試験中ＣＡ−１２５効果について評価する。
完全奏効（ＣＲ）：ＣＡ−１２５レベルにおける正常範囲内への減少が、４週間以後に再評価によって確定される。
部分奏効（ＰＲ）：ＣＡ−１２５レベルにおける＞５０％の減少が、４週間以後の再評価によって確定される。
安定（ＳＤ）：ＰＤ、ＰＲ、又はＣＲの定義に当てはまらないすべてのＣＡ１２５変化。進行（ＰＤ）：正常上限より高いＣＡ−１２５の最低レベルの倍増が４週間以後の再評価によって確定される。
【０３６５】
生物統計学的
プライマリーエンドポイント
これは、ＢＲＣＡ−１又はＢＲＣＡ−２の関連の進行性上皮性卵巣、卵管、又は原発性腹膜がんを有する患者におけるＢＡの単一治療群試験である。プライマリーエンドポイントは、ＣＲ＋ＰＲとして定義される奏効率である。治療の第１サイクル終了後、効果について患者を評価する。Simon最適二段階統計的デザインを用いて患者を登録する。1  本試験では合計３５人の患者を登録する。１２人を第一期に登録する。治療に対して第一期の２／１２人の患者が奏効する場合（ＲＥＣＩＳＴ基準によって定義されるように）、さらに２３人の患者を第二期に登録する。試験終了後、少なくとも６／３５人の患者が奏効する場合、本試験は有益であるものとする。本試験では、タイプ１エラー＝.１０及びタイプ２エラー＝.１０で調査して奏効率１０％と３０％間の差を知ることになる。
【０３６６】
副次的エンドポイント
ＣＲ＋ＰＲ＋ＳＤとして定義される臨床的有効率は、９５％の信頼区間で報告される。ＰＦＳ及びＯＳのような臨床結果は、カプランマイヤー法を用いて中央値及び９５％信頼区間によりまとめられる。ＣＡ１２５奏効（CA125 response）は、次のサイクルで追跡される確証的な値を有する正常範囲（０〜３５）への減少として定義される。ＣＡ１２５奏効率は、それぞれ９５％信頼区間で報告される。
【０３６７】
安全性は、ＮＣＩ有害事象共通用語基準（Common Terminology Criteria for Adverse Events）（バージョン３．０）を用いて毒性を表にすることによって記載する。忍容性とは、第９節に説明したように、１６回の投与のうち２回を超える投与を見送ることなく週２回の投与を厳守する能力のことである。見送られた投与のある患者を表にする。
【０３６８】
探索的エンドポイント
探索的試験により将来的な試験のための仮説を立て、そして記述的に報告する。ＰＢＭＣにおけるＰＡＲＰ阻害の程度を評価するために、連続的なスケールでＰＡＲＰ酵素を測定するアッセイを、最初の２サイクルの日１及び日１５の治療前及び後に集める。４つの時点にわたるＰＡＲＰ酵素における変化を中央値及び範囲を介してまとめ、そしてグラフ式の集約尺度（graphical summary measures）を介して記載する。適切な変換を用いてＰＡＲＰ  ＲＬＵスケールにおける大きな変動性を説明する。
【０３６９】
ＰＡＲＰ−１遺伝子発現を連続的なスケールで測定する。ノンパラメトリック試験を用いて奏効者（ＣＲ＋ＰＲ）が非奏効者より高い発現を有するかどうかを評価する。
【０３７０】
ＢＲＣＡ１又は２における二次突然変異についての分析を、記述的に報告する。白金抵抗性の患者又はプロトコール治療に対する反応が遅いことがわかった患者は、ＢＲＣＡ１／２オープンリーディングフレームを修復する遺伝子内の欠失を有することがある。二次突然変異又は欠失の存在は、プロトコール治療に対する効果と相関している。仮説は、二次突然変異又は欠失のない患者が二次突然変異又は欠失を有するものよりもより良好に奏功するということである。適切ならばカイ二乗検定又はフィッシャーの正確検定を用いて二次突然変異又は欠失とＢＡ治療に対する効果との間に有意な関連があるかどうかを評価する。この仮説が正しいという証拠が立証されれば、この薬物を含む将来的な試験のためのスクリーニング法として役立てることができる。
【０３７１】
実施例７：子宮頚部腺がんヒーラ細胞の増殖におけるＢＡの効果
子宮頚部腺がんヒーラ細胞の増殖においてＢＡの効果を試験した。細胞増殖は、本明細書に記載されたようにＢｒｄＵアッセイによって評価する。
細胞培養
ヒーラ細胞は、医学研究で用いられる不死の細胞株である。細胞株は、子宮頸部がん細胞から誘導された。ヒーラＳ３は、親ヒーラ系統のクローン誘導体である。ヒーラＳ３クローンは、染色体変異、細胞栄養、及びプラーク形成能力に関する哺乳動物細胞集団のクローン分析においてきわめて有用である。ヒーラ細胞は、ヒト乳頭腫ウイルス１８（ＨＰＶ−１８）配列を含むことが報告されている。当分野における標準プロトコール（ＡＴＣＣ）に従って細胞を培養した。
簡潔に言えば：１．培地を除去し、そして捨てる。２．０．２５％（ｗ／ｖ）トリプシン−０．５３ｍＭ ＥＤＴＡ溶液を用いて細胞層を簡潔にすすぎ、トリプシンインヒビター
を含む血清のすべての痕跡物（traces）を除去する。３．トリプシン−ＥＤＴＡ溶液２．０〜３．０ｍｌをフラスコに加え、そして細胞層が分散されるまで（通常５〜１５分以内）、倒立顕微鏡下で細胞を観察する。分離が困難な細胞を３７℃で置いて分散を促進する。４．６．０〜８．０ｍｌの完全成長培地を加え、そして穏やかにピペット操作によって細胞を吸引する。５．細胞懸濁液の適切なアリコートを新しい培養容器に加える。６．３７℃で培養物をインキュベートする。
【０３７２】
物質及び方法
ＢｒｄＵ検定は当分野でよく知られている。簡潔には、３７℃の適切な９６ウェルＭＰ中、それぞれの試験物質の存在下で一定期間（個々の検定系に応じて１〜５日）細胞を培養する。続いて、ＢｒｄＵを細胞に加え、そして細胞を再インキュベートする（通常２〜２４時間）。この標識化期間中に、増殖している細胞のＤＮＡ中にチミジンの代わりにピリミジン類似体ＢｒｄＵを組み込む。培地を除去した後に、細胞を固定し、FixDenatを加えることによってＤＮＡを一工程で変性させる（ＤＮＡの変性は、抗体による検出のため組み込まれたＢｒｄＵのアクセスしやすさを改善するために必要である）。抗ＢｒｄＵ−ＰＯＤ抗体を加え、新しく合成された細胞ＤＮＡ中に組み込まれたＢｒｄＵに抗体が結合する。免疫複合体は、化学発光検出を介してその後の基質反応によって検出される（Rocheからの細胞増殖ＥＬＩＳＡ、ＢｒｄＵ化学発光プロトコールに基づく）。
【０３７３】
ＢＡは、種々の濃度で細胞培養液に加えられる。図６に示すように、ＢＡは、子宮頚部腺がんヒーラ細胞の増殖を阻害する。
【０３７４】
本発明の好ましい実施態様を本明細書に示し、そして記載してきたが、このような実施態様が単に実施例を用いて与えられていることは、当業者にとって明白である。ここで、当業者にとっては、本発明から逸脱することなく多くの変法、変更及び置換が考えられる。当然ながら、本発明を実施する際、本明細書に記載された本発明のその実施態様の種々の代替が使用しうる。以下の特許請求の範囲は、本発明の範囲を定義し、そしてこれらの特許請求の範囲内の方法及び構造、並びにそれと均等のものが、それに包含されるものとする。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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