(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
微生物を濃縮するプロセスであって、該プロセスが、
（ａ）ビスマス含有材料を含む微生物用濃縮剤を提供する工程であって、該ビスマス含有材料が、酸化ビスマス、炭酸ビスマス、オキシ炭酸ビスマス、オキシ塩化ビスマス、又はこれらの混合物のうち任意のものである、工程と、
（ｂ）該微生物を含む流体試料を提供する工程と、
（ｃ）該濃縮剤を該流体試料に接触させる工程と、
（ｄ）該微生物を該濃縮剤に結合させて、結合された微生物を形成する工程と、を含み、
該結合された微生物が生存状態にある、プロセス。
【請求項２】
前記微生物が細菌株、真菌、酵母、原生動物、ウイルス、微生物の芽胞、又はこれらの混合物である、請求項１に記載のプロセス。
【請求項３】
前記ビスマス含有材料が、粒子の形態である、請求項１又は２に記載のプロセス。
【請求項４】
前記濃縮剤が更に多孔質マトリックスを含み、前記粒子が、該多孔質マトリックスの表面上に分散されているか、該多孔質マトリックスの全体に分散されているか、又は該多孔質マトリックスの表面上及び全体の両方にわたって分散されている、請求項３に記載のプロセス。
【請求項５】
ビスマス含有材料を含む微生物用濃縮剤と、該濃縮剤に結合した微生物と、を含む物品であって、
前記ビスマス含有材料が、酸化ビスマス、炭酸ビスマス、オキシ炭酸ビスマス、オキシ塩化ビスマス、又はこれらの混合物のうち任意のものであり、
前記微生物が生存状態にある、物品。
【請求項６】
ビスマス含有材料を含む微生物用濃縮剤と、多孔質マトリックスと、を含む物品であって、
前記ビスマス含有材料が、酸化ビスマス、炭酸ビスマス、オキシ炭酸ビスマス、オキシ塩化ビスマス、又はこれらの混合物のうち任意のものであり、
前記濃縮剤が、前記多孔質マトリックスの表面上に、前記多孔質マトリックスの全体に、又はその組み合わせで分散されており、
前記多孔質マトリックスが、不織繊維及び所望によりポリマーバインダーを含む、物品。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
［分野］
［０００１］  微生物用の濃縮剤、その濃縮剤を含む物品、及び微生物を濃縮するためのプロセスが提供される。
【０００２】
［背景］
［０００２］  微生物汚染により生じる感染症の懸念が高まっている。よって、様々な医療、食品、環境、及びその他のタイプの試料中の微生物の存在に関してアッセイを行い、存在する微生物の特定及び／又は定量を行うことがしばしば望ましく、又は必要である。特定の微生物の存在を検出する能力はしばしば、分析される試料中の微生物の濃度に依存する。
【０００３】
［０００３］  様々な物理的濃縮方法（例えば濾過、クロマトグラフィー、遠心分離、及び重力沈殿など）が、様々な微生物の非特異的な捕捉のために利用されている。このような非特異的な濃縮方法は、速度、費用（少なくとも一部のものは高価な装置、材料、及び／又は訓練を受けた技術者が必要になる）、試料要件（例えば、試料の性質及び／又は量の制限）、空間的要件、使用の容易さ（少なくとも一部のものは複雑な複数の工程のプロセスを必要とする）、現場使用での適合性、及び／又は効果の点において様々に異なっている。これらの物理的濃縮方法のいくつかでは、追加で、様々な金属水酸化物及び／又は金属酸化物などの無機材料を微生物の濃縮剤として使用しており、例えば、ＰＣＴ国際公開番号ＷＯ２００９／０４６１８３  Ａ１号（Ｋｓｈｉｒｓａｇａｒ）、同第ＷＯ２００９／０４６１９１  Ａ２号（Ｋｓｈｉｒｓａｇａｒ）、同第ＷＯ２００９／０８５３５７  Ａ２号（Ｋｓｈｉｒｓａｇａｒ）、同第ＷＯ２０１０／１１４７２５  Ａ１号（Ｋｓｈｉｒｓａｇａｒ）、同第ＷＯ２０１０／１１４７２７  Ａ１号（Ｋｓｈｉｒｓａｇａｒ）、及び同第ＷＯ２０１１／０７９０３８号（Ｋｓｈｉｒｓａｇａｒ）に記述されているものが挙げられる。
【０００４】
［０００４］  微生物（例えば、細菌株、真菌、酵母、原生動物、ウイルス、及び微生物の芽胞）の非特異的濃縮に好適な新しい濃縮剤が望まれており、本明細書で提示される。加えて、濃縮剤を含む物品、及び、その濃縮剤を用いて微生物を濃縮する方法が提供される。この濃縮剤はビスマスを含む。
【０００５】
［０００５］  この濃縮剤は、病原性生物などの微生物の濃度を、検出に好適なレベルまで高めるのに使用することができる。この濃縮剤は、様々な微生物を濃縮する迅速で単純な（すなわち、複雑な装置又は手順を伴わない）方法を提供する。この濃縮剤は、例えば様々なタイプの試料マトリックス、様々な異なる細菌負荷、及び様々な異なる試料量など、様々な条件下で効果的に使用することができる。
【０００６】
［０００６］  第１の態様において、微生物を濃縮するためのプロセスが提供される。このプロセスは、ビスマス含有化合物を含む濃縮剤を提供する工程を含み、ここにおいて、このビスマス含有材料は、酸化ビスマス、炭酸ビスマス、オキシ炭酸ビスマス、オキシ塩化ビスマス、又はこれらの混合物のうち任意のものである。このプロセスは更に、微生物を含む流体試料を提供する工程と、この流体試料に濃縮剤を接触させる工程とを含む。このプロセスは更に、微生物を濃縮剤に結合させて、結合された微生物を形成する工程を含み、ここにおいて、この結合された微生物は生存状態にある。
【０００７】
［０００７］  第２の態様において、濃縮剤と、濃縮剤に結合した微生物とを含む物品が提供される。この濃縮剤は、ビスマス含有化合物を含み、ここにおいて、このビスマス含有材料は、酸化ビスマス、炭酸ビスマス、オキシ炭酸ビスマス、オキシ塩化ビスマス、又はこれらの混合物のうち任意のものである。
【０００８】
［０００８］  第３の態様において、濃縮剤と多孔質マトリックスとを含む物品が提供される。この濃縮剤は、ビスマス含有化合物を含み、ここにおいてこのビスマス含有材料は、酸化ビスマス、炭酸ビスマス、オキシ炭酸ビスマス、オキシ塩化ビスマス、又はこれらの混合物のうち任意のものである。この濃縮剤は、多孔質マトリックスの表面上、多孔質マトリックスの全体、又はこれらの組み合わせに対して分散される。いくつかの実施形態において、この多孔質マトリックスは、不織繊維及び所望によりポリマーバインダーを含む。
【０００９】
［詳細な説明］
［０００９］  濃縮剤、この濃縮剤を含む物品、及び、この濃縮剤を用いて微生物を濃縮するプロセスが提供される。より具体的には、この濃縮剤はビスマス含有材料を含む。この濃縮剤は、微生物を濃縮又は捕捉するのに使用することができる。この濃縮剤は、一般に、微生物の特定の株、種又はタイプに特異的なものではなく、したがって試料中の一般的な微生物の集団を濃縮するのに使用することができる。特定の微生物を検出するための任意の公知の検出方法を用いて、捕捉された微生物の集団から特定の微生物を検出することができる。
【００１０】
［００１０］  用語「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」、「ａｔ  ｌｅａｓｔ  ｏｎｅ」は、交換可能に使用される。
【００１１】
［００１１］  「及び／又は」という用語は、列挙された要素のうちの１つ又は両方を意味する。例えば、「Ａ及び／又はＢ」とは、Ａのみ、Ｂのみ、又は、Ａ及びＢの双方を意味する。
【００１２】
［００１２］  「含む（comprises）」という用語及びその変化形は、それらの用語が説明及び請求項に使用される場合、限定的な意味を有するものではない。
【００１３】
［００１３］  数値範囲は、その範囲の両端と、その範囲内にあるすべての数値を含む。
【００１４】
［００１４］  いくつかの実施形態において、ビスマス含有材料は、酸化ビスマス（「Ｂｉ２Ｏ３」）、炭酸ビスマス（「Ｂｉ２（ＣＯ３）３」）、オキシ炭酸ビスマス（「Ｂｉ２Ｏ２（ＣＯ３）」）、オキシ塩化ビスマス（「ＢｉＯＣｌ」）、又はこれらの混合物のうち任意のものである。
【００１５】
［００１５］  いくつかの実施形態において、このビスマス含有材料は水和物である。いくつかの実施形態において、このビスマス含有化合物は無水物である。
【００１６】
［００１６］  いくつかの実施形態において、この濃縮剤は酸化ビスマスを含まない。他の実施形態において、この濃縮剤は最大２０重量パーセントの酸化ビスマスを含む。例えば、この濃縮剤は、最大１０重量パーセント、最大５重量パーセント、最大２重量パーセント、又は更に最大１重量パーセントの酸化ビスマスを含み得る。
【００１７】
［００１７］  この濃縮剤は典型的に粒子を含む。別に述べるように、この濃縮剤中のビスマス含有材料はしばしば、複数の粒子の形態である。これらの粒子は任意の望ましい寸法を有し得るが、この粒子の平均粒径（すなわち最大寸法の平均サイズ）は典型的に、１００マイクロメートル以下、７５マイクロメートル以下、５０マイクロメートル以下、４０マイクロメートル以下、３０マイクロメートル以下、２０マイクロメートル以下、又は更に１０マイクロメートル以下である。この粒子は典型的に、１マイクロメートル超、２マイクロメートル超、又は更に５マイクロメートル超の平均直径を有する。例えば、粒子の平均直径は、１〜１００マイクロメートル、１〜７５マイクロメートル、１〜５０マイクロメートル、１〜２０マイクロメートル、又は更に１〜１０マイクロメートルの範囲であり得る。
【００１８】
［００１８］  微生物は濃縮剤に結合することができる。別に述べると、濃縮剤中のビスマス含有材料は、流体試料から微生物を捕捉、単離、分離、除去、又は濃縮するのに使用することができる。微生物を含む可能性のある関心対象の任意の流体試料を使用することができる。この流体試料は、液体、液体中の固体分散液若しくは懸濁液、又は、第２の液体中における第１の液体の分散液若しくは懸濁液であり得る。この流体試料は、直接使用することができ、濃縮することができ（例えば、遠心分離又は蒸発により）、又は希釈することができる（例えば、ｐＨ緩衝溶液などの緩衝液の添加により）。固体又は半固体の形態である試料は、抽出することができ（例えば、流体で洗浄又はすすぎを行うことにより）、又は流体中に懸濁又は分散させることができる。試料は、スワブにより、及び／又は流体ですすぐことにより、表面から採取することができる。この試料には、生物学的試料、環境試料、食品試料、飼料試料、研究室試料、及び産業用試料が挙げられるがこれらに限定されない。
【００１９】
［００１９］  流体相で処置した後に直接的又は間接的に使用することができる具体的な食品試料としては、生鮮野菜、ひき肉、乳製品、ジュース、飲料等が挙げられるがこれらに限定されない。食品試料は、食品加工装置、食品取扱装置、食品調理エリア等の検査によりもたらされることもある。流体相で処置した後に直接的又は間接的に使用することができる具体的な生物学的流体としては、全血又は全血の構成成分（例えば血漿、多血小板血液分画、血小板濃縮物、及び濃縮赤血球）、細胞調製物（例えば、分散した組織、骨髄吸引液、及び椎体骨髄）、細胞懸濁液、尿、唾液、肺液、脳液、創傷浸出液、創傷生検試料、眼液、脊髄液、及び溶解調製液が挙げられるがこれらに限定されない。流体相で処置した後に直接的又は間接的に使用することができる具体的な環境試料としては、飲料水、地下水、土壌試料、及び産業廃棄液試料が挙げられるがこれらに限定されない。更に他の産業用試料は、様々なバイオプロセス又は医薬製剤化に伴うものである。
【００２０】
［００２０］  この流体試料と濃縮剤を、接触させる。濃縮剤を流体試料に加えることができ、又は流体試料を濃縮剤に加えることができる。任意の好適な量の流体試料と濃縮剤を使用することができる。流体試料の量はしばしば、具体的な用途に依存する。流体試料が診断又は研究用途に関連する場合、その量はマイクロリットル範囲であり得る（例えば、１マイクロリットル〜１０００マイクロリットル）。流体試料が食品病原体試験に関するか、又は飲料水試験のためのものである場合、その量は、ミリリットル〜リットル範囲であり得る（例えば、１ミリリットル〜１０リットル以上）。流体試料が産業用用途に関する場合、その量は数百リットル超であり得る。流体試料の量に対して必要な濃縮剤の量は、当業者が容易に決定することができる。いくつかの用途において、試料ミリリットル当たり１〜１０ミリグラムの濃縮剤が有用であり得る。
【００２１】
［００２１］  数多くの実施形態において、濃縮剤の少なくとも一部分を、流体試料中に懸濁又は分散させることができる。例えば、濃縮剤を担持したスパチュラ又はディップスティック又はその他の物品を、流体試料に浸すことができる。他の例において、流体試料を、濃縮剤を担持したフィルムに注ぐことができ、あるいは、流体試料を、濃縮剤を含むチューブ又はウェルに加えることができる。更に他の例において、濃縮剤と流体試料とを、任意の様々な容器中で（任意の添加順序を用いて）混合する。この容器は所望により、例えばキャップ付き試験管及びキャップ付き瓶又はジャーなどのように、キャップするか、閉鎖するか、又は密封することができる。望ましい場合、この容器は、流体試料を添加する前に滅菌することができる。
【００２２】
［００２２］  濃縮剤と流体試料との間の接触は、混合（例えば、攪拌、振盪、振り混ぜ、揺れ）により強化することができ、これにより濃縮剤が流体試料のかなりの部分に曝される。少量の流体試料（例えば１ミリリットル以下の量を有するもの）の場合、例えば、米国特許第５，２３８，８１２号（Ｃｏｕｌｔｅｒら）に記述されているように、渦形成などの混合方法を使用することができる。より多量の流体試料（例えば１ミリリットル〜１０リットルの範囲のもの）の場合、例えば、米国特許第５，５７６，１８５号（Ｃｏｕｌｔｅｒら）に記述されている「くるくる回転させる」方法で濃縮剤と流体試料とを静かに転倒混和させることによって、混合を達成することができる。接触は、任意の望ましい時間にわたって実施することができる。約１００ミリリットル以下の量を有する流体試料については、接触時間は最長６０分以下、４５分以下、３０分以下、２０分以下、１０分以下、又は更に５分以下であり得る。そのような流体試料の接触時間はしばしば、少なくとも５秒、少なくとも１０秒、少なくとも１５秒、少なくとも３０秒、又は更には少なくとも１分である。
【００２３】
［００２３］  望ましい場合、１つ以上の添加剤を、流体試料と濃縮剤の混合物に加えることができる。好適な添加剤には、溶解試薬、生物発光分析試薬、微生物増殖培地、緩衝液（例えば、固体試料を分散又は抽出するため）、微生物染色試薬、洗浄用緩衝液（例えば、結合していない物質を洗い流すため）、溶出剤（例えば、血清アルブミン）、界面活性剤、及び機械的摩耗／溶出剤（例えば、ガラスビーズ）が挙げられるがこれらに限定されない。
【００２４】
［００２４］  流体試料が濃縮剤と接触している間に、流体試料中に存在する微生物が、濃縮剤に結合し得る。結合した微生物（すなわち、濃縮剤に結合した微生物）は、残りの流体試料から分離することができる。いくつかの実施形態において、そのような分離は、少なくとも部分的に、重力による沈殿に依存することにより達成され得る。例えば、結合した微生物は、最長６０分、最長４５分、最長３０分、最長１５分、最長１０分、又は更には最長５分の時間にわたって沈降させることができる。他の実施形態において、そのような分離は、例えば遠心分離などの技法によって達成することができる。これらの実施形態のいずれにおいても、上澄みは、容器を傾けて除去する、サイホンで除去する、濾過して除去する、又は当該技術分野において既知のその他の方法によって、除去することができる。結合した微生物は、分離工程中に使用した容器又は器の底に残しておくことができる。あるいは、結合した微生物は濾材上にあってもよい。
【００２５】
［００２５］  流体試料を濃縮剤に接触させる他の方法において、濃縮剤は、多孔質マトリックスをも含む濃縮装置の一部である。これらの濃縮装置内の濃縮剤は、多孔質マトリックスの表面上、多孔質マトリックスの全体、又はこれらの組み合わせに対して分散された複数の粒子の形態である。任意の好適な多孔質マトリックスを使用することができる。
【００２６】
［００２６］  濃縮装置のいくつかの実施形態において、多孔質マトリックスはポリマーであり、易焼結性粒子を用いて形成される。すなわち、濃縮装置は、（ａ）焼結されたポリマー粒子の多孔質マトリックスと、（ｂ）ビスマス含有材料を含む複数の濃縮剤粒子とを含む。この濃縮剤粒子は、多孔質マトリックスの表面上、多孔質マトリックスの全体、又はこれらの組み合わせに対して分散される。
【００２７】
［００２７］  この濃縮装置を形成するためには、易焼結性ポリマー粒子と濃縮剤粒子を合わせて混合し、ポリマー粒子を軟化させるのに十分な温度まで加熱する。冷却により、この軟化したポリマー材料が互いに融合し、焼結ポリマー粒子の多孔質マトリックスを形成する。結果として得られる濃縮装置はしばしば、固体又は自立性の多孔質マトリックスの形態で、その多孔質マトリックスの中に、又は多孔質マトリックスの表面に、又はその両方に埋め込まれた濃縮剤を備えている。濃縮装置は複雑な孔構造（例えば、多孔質マトリックスの全体にわたって蛇行した孔経路）を有していてよく、良好な機械的強度を有し得る。
【００２８】
［００２８］  粒子状態のときに焼結され得るポリマーには、様々な熱可塑性ポリマーが挙げられる。比較的高い粘度と比較的低いメルトフローレートとを備えた熱可塑性ポリマーは、焼結プロセス中の粒子の形状保持を促進し得る（すなわち、もし粒子形状が保持されない場合、多孔性が低いか又は多孔性がない本体が生じ得る）。
【００２９】
［００２９］  有用な熱可塑性ポリマーとしては、ポリオレフィン（オレフィンホモポリマー及びコポリマー、並びにオレフィンと他のビニルモノマーのコポリマーを含む）、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン、ポリフェニレンスルフィドなど、及びこれらの組み合わせが挙げられるがこれらに限定されない。有用なポリマーの代表的な例としては、エチレンビニルアセテート（ＥＶＡ）ポリマー、エチレンメチルアクリレート（ＥＭＡ）ポリマー、ポリエチレン（例えば、低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、線状低密度ポリエチレン（ＬＬＤＰＥ）、高密度ポリエチレン（ＨＤＰＥ）、及び超高分子量ポリエチレン（ＵＨＭＷＰＥ）を含む）、ポリプロピレン、エチレン−プロピレンゴム、エチレン−プロピレン−ジエンゴム、ポリスチレン、ポリ（１−ブテン）、ポリ（２−ブテン）、ポリ（１−ペンテン）、ポリ（２−ペンテン）、ポリ（３−メチル−１−ペンテン）、ポリ（４−メチル−１−ペンテン）、１，２−ポリ−１，３−ブタジエン、１，４−ポリ−１，３−ブタジエン、ポリイソプレン、ポリクロロプレン、ポリ（ビニルアセテート）、ポリ（ビニリデンクロリド）、ポリ（ビニリデンフルオリド）、ポリ（テトラフルオロエチレン）など、及びこれらの組み合わせが挙げられる。
【００３０】
［００３０］  いくつかのより具体的な濃縮装置において、ポリマー多孔質マトリックスを形成するのに使用される熱可塑性ポリマーには、例えば超高分子量ポリエチレン（ＵＨＭＷＰＥ）などのポリエチレンが挙げられる。超高分子量ポリエチレンの例は、重量平均分子量が少なくとも約７５０，０００グラム／モル、少なくとも約１，０００，０００グラム／モル、少なくとも約２，０００，０００グラム／モル、又は更には少なくとも約３，０００，０００グラム／モルを有するものである。
【００３１】
［００３１］  易焼結性ポリマーは、焼結されたポリマー多孔質マトリックス中の望ましい孔（例えば、穴、凹み、又は好ましくはチャネル）の寸法に応じて、幅広い粒径を有し得る。粒子が細かいほど、多孔質マトリックス中の穴寸法が小さくなり得る。一般に、ポリマー粒子は、１〜１０００マイクロメートルの平均粒径（すなわち最長寸法の直径）を有する微粒子であり得る。例えば、この平均粒径は、１〜７５０マイクロメートルの範囲、１〜５００マイクロメートルの範囲、１〜３００マイクロメートルの範囲、５〜３００マイクロメートルの範囲、１〜２００マイクロメートルの範囲、５〜２００マイクロメートルの範囲、１０〜２００マイクロメートルの範囲、５０〜２００マイクロメートルの範囲、又は更には１００〜２００マイクロメートルの範囲であり得る。結果として得られる孔は、マイクロメートル範囲以下であり得る。望ましい場合は、高メルトフローレート及び低メルトフローレートの熱可塑性ポリマーの混合物を使用することにより、多孔質マトリックスの多孔度を変動又は制御することもできる。
【００３２】
［００３２］  熱可塑性ポリマー粒子と濃縮剤粒子（及び、湿潤剤又は界面活性剤などの任意の所望による添加物）を合わせ、機械的に混合して（例えば、市販の混合装置を使用して）、混合物を形成することができる。この混合物は典型的に、均質になるまで混合される。一般に、微粒子濃縮剤は、混合物中の固体の全重量に対して最高９０重量パーセントの濃度で、混合物中に存在し得る。この固体は典型的に、ポリマー粒子、濃縮剤粒子、及び所望による添加剤に伴う任意の追加固体を含む。より多量の濃縮剤を使用する場合、濃縮装置に含まれる、多孔質マトリックスを形成するためのポリマー材料の量が、不十分になることがある。濃縮剤は、例えば、混合物中の固体の全重量に対して、最高８５重量パーセント、最高８０重量パーセント、最高７５重量パーセント、又は更には最高７０重量パーセントの量で存在し得る。濃縮剤の量は典型的に、混合物中の固体の全重量に対して、少なくとも５重量パーセントである。濃縮剤の量がこれより少ない場合、濃縮剤による微生物の捕捉効率が低すぎて不十分になることがある。濃縮剤の量はしばしば、混合物中の固体の全重量に対して、少なくとも１０重量パーセント、少なくとも２０重量パーセント、少なくとも３０重量パーセント、少なくとも４０重量パーセント、又は更には少なくとも５０重量パーセントである。
【００３３】
［００３３］  いくつかの例の濃縮装置は、混合物中の固体の全重量に対して、５〜９０重量パーセントの濃縮剤と、１０〜９５重量パーセントのポリマー粒子とを含む。例えば、濃縮装置は、１０〜８０重量パーセントの濃縮剤粒子と２０〜９０重量パーセントのポリマー粒子、２０〜８０重量パーセントの濃縮剤粒子と２０〜８０重量パーセントのポリマー粒子、４０〜８０重量パーセントの濃縮剤粒子と２０〜６０重量パーセントのポリマー粒子、又は更には１０〜５０重量パーセントの濃縮剤粒子と５０〜９０重量パーセントを含み得る。望ましい場合、混合物中に従来の添加物（例えば、湿潤剤、界面活性剤など）を少量（例えば、５重量パーセントまで）含めることができる。
【００３４】
［００３４］  得られる混合物を成形鋳型又は他の好適な容器又は基材中に入れることができる。有用な成形鋳型は、単一又は複数の空洞を有し得、炭素鋼、ステンレス鋼、真鍮、アルミニウム、チタン、ニッケル等で製造することができる。この空洞は、加工処理が完了した後に、焼結されたポリマー多孔質マトリックスを成形鋳型から取り出すことができるものであれば、本質的に任意の望ましい形状のものであり得る。この成形鋳型は、市販の粉末取扱装置及び／又は震動装置を用いて充填することができる。
【００３５】
［００３５］  ポリマー粒子を焼結するための加熱プロセスは、この成形鋳型に熱を導入することによって（例えば、電気抵抗加熱、電気誘導加熱、又は蒸気加熱を介して）実行できる。成形鋳型をポリマーの焼結に充分な温度まで加熱することができる（例えば、ポリマーの融点より若干下の温度まで加熱することにより）。この温度はしばしば、ポリマー粒子の分子量に応じて、９０℃〜２００℃の範囲又はこれ以上である。例えば、この温度は、１００℃〜２００℃の範囲、１２０℃〜２００℃の範囲、１００℃〜１８０℃の範囲、又は更には１２０℃〜１８０℃の範囲であり得る。所望により、加熱プロセス中に混合物に対し圧力をかけることができる。加熱プロセス後、成形鋳型を周囲温度（例えば、２０℃〜２５℃の範囲の温度）まで自然に冷ますことができ、又は、本質的に、任意の好都合な冷却方法又は装置の使用により冷却することができる。
【００３６】
［００３６］  濃縮装置の一例は、米国特許第７，１１２，２７２号（Ｈｕｇｈｅｓら）、同第７，１１２，２８０号（Ｈｕｇｈｅｓら）、及び同第７，１６９，３０４号（Ｈｕｇｈｅｓら）に記述されているポリマー粒子及び加工方法を使用することにより、調製することができる。一方が「ポップコーン形状」（表面渦巻きを備える）であり、他方が実質的に球状である、２つの異なるタイプの超高分子量ポリエチレン（ＵＨＭＷＰＥ）粒子を合わせて混合することができる。「ポップコーン形状」及び球状ＵＨＭＷＰＥの例は、Ｔｉｃｏｎａ（Ｃｅｌａｎｅｓｅの一部門、Ｆｒａｎｋｆｕｒｔ，Ｇｅｒｍａｎｙに本部を置く）からＰＭＸＣＦ−１（０．２５〜０．３０グラム／立方センチメートルのかさ密度及び約１０マイクロメートル〜約１００マイクロメートルの範囲で約３０〜４０マイクロメートルの平均直径を有する）及びＰＭＸＣＦ−２（０．４０〜０．４８グラム／立方センチメートルのかさ密度及び約１０マイクロメートル〜約１８０マイクロメートルの範囲で約５５〜６５マイクロメートルの平均直径を有する）として入手可能である。匹敵する形態、かさ密度、及び粒径を有し、約７５０，０００グラム／モル〜約３，０００，０００グラム／モルの重量平均分子量を有する、他のメーカーのＵＨＭＷＰＥも、利用することができる。同じ又は異なる分子量となるように、２つのタイプのＵＨＭＷＰＥ粒子を選択することができる。もう１つの具体的な例において、両方のタイプの粒子が、一定範囲内で同様の分子量を有する；例えば、両方のタイプの粒子が、３，０００，０００グラム／モル近くの重量平均分子量を有し得る。２つのタイプのＵＨＭＷＰＥ粒子を様々な相対量（例えば、等量）で一体化し、次いで上述の比で濃縮剤と更に一体化することができる。濃縮装置の所望の特性によって、ＵＨＭＷＰＥのどちらかのタイプを他のタイプよりも少量使用するか、又は混合物から除去することもできる。
【００３７】
［００３７］  濃縮装置の他の実施形態において、多孔質マトリックスは不織繊維状である。すなわち、濃縮装置は、（ａ）不織繊維状多孔質マトリックスと、（ｂ）ビスマス含有材料を含む複数の濃縮剤粒子とを含む。この濃縮剤粒子は、多孔質マトリックスの表面上、多孔質マトリックスの全体、又はこれらの組み合わせに対して分散される。
【００３８】
［００３８］  そのような濃縮装置は、その中に濃縮剤粒子を絡め閉じ込めている不織繊維状多孔質マトリックスを提供することができる、本質的に任意のプロセスによって調製され得る。このタイプの多孔質マトリックスは典型的に、織布又は編布ではない形状の、相互に横たえられた繊維を含むウェブ又は媒体である。不織繊維状多孔質マトリックスを調製するための有用なプロセスには、エアレイ技法、スパンレイ技法（例えばメルトブロー又はスパンボンド）、カーディング、湿式レイ、及びこれらの組み合わせが挙げられるがこれらに限定されない。いくつかの用途において、スパンレイ又は湿式レイ技法による不織繊維状マトリックスの調製が好ましい場合がある。
【００３９】
［００３９］  濃縮装置の不織繊維性多孔質マトリックスの調製に使用するのに好適な繊維は通常、パルプ化可能又は押出成形可能な繊維であり、例えば、放射線及び／又は様々な溶媒に対して安定であるものである。有用な繊維には、ポリマー繊維、無機繊維、及びこれらの組み合わせが挙げられる。数多くの実施形態において、繊維にはポリマー繊維が含まれ、しばしば、複数の異なるタイプのポリマー繊維が含まれる。例えば、少なくともいくつかのポリマー繊維が、ある程度の親水性を呈するよう選択され得る。
【００４０】
［００４０］  好適なポリマー繊維には、天然ポリマー（動物又は植物原料に由来するもの）及び／又は合成ポリマー（熱可塑性及び溶媒分散性ポリマーを含む）から製造されたものが挙げられる。有用なポリマーとしては、羊毛；絹；セルロース系ポリマー（例えば、セルロース、セルロース誘導体（例えばレーヨン）など）；フッ素化ポリマー（例えば、ポリ（フッ化ビニル）、ポリ（フッ化ビニリデン）、フッ化ビニリデンのコポリマー（例えばポリ（フッ化ビニリデン−ｃｏ−ヘキサフルオロプロピレン））、クロロトリフルオロエチレンのコポリマー（例えばポリ（エチレン−ｃｏ−クロロトリフルオロエチレン）など）；塩素化ポリマー；ポリオレフィン（例えば、ポリ（エチレン）、ポリ（プロピレン）、ポリ（１−ブテン）、エチレンとプロピレンとのコポリマー、αオレフィンコポリマー（例えば、エチレン又はプロピレンと１−ブテン、１−ヘキセン、１−オクテン、及び１−デセンとのコポリマー）、ポリ（エチレン−ｃｏ−１−ブテン）、ポリ（エチレン−ｃｏ−１−ブテン−ｃｏ−１−ヘキセン）、及び同類物）；ポリ（イソプレン）；ポリ（ブタジエン）；ポリアミド（例えば、ナイロン６；ナイロン６，６；ナイロン６，１２；ポリ（イミノアジポイルイミノヘキサメチレン）；ポリ（イミノアジポイルイミノデカメチレン）；ポリカプロラクタムなど）；ポリイミド（例えば、ポリ（ピロメリットイミド）など）；ポリエーテル；ポリ（エーテルスルホン）（例えば、ポリ（ジフェニルエーテルスルホン）、ポリ（ジフェニルスルホン−ｃｏ−酸化ジフェニレンスルホン）、及び同類物）；ポリ（スルホン）；ポリ（酢酸ビニル）；酢酸ビニルのコポリマー（例えば、ポリ（エチレン−ｃｏ−酢酸ビニル）、アセテート基の少なくとも一部が加水分解されて各種ポリ（ビニルアルコール）（例えば、ポリ（エチレン−ｃｏ−ビニルアルコール）等）を生成するコポリマーなど）；ポリ（ホスファゼン）；ポリ（ビニルエステル）；ポリ（ビニルエーテル）；ポリ（ビニルアルコール）；ポリアラミド（例えば、ポリ（パラフェニレンテレフタルアラミド）などのパラアラミド及びＤｕＰｏｎｔ  Ｃｏ．（Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＤＥ）により商品名「ＫＥＶＬＡＲ」で販売されている繊維（該繊維のパルプは、パルプを形成する繊維長に基づき様々な等級で市販されており、例えば、「ＫＥＶＬＡＲ  １Ｆ３０６」及び「ＫＥＶＬＡＲ  １Ｆ６９４」などであり、これらは共に長さが少なくとも４ｍｍであるアラミド繊維を含む）等）；ポリ（カーボネート）など；並びにこれらの組み合わせが挙げられる。いくつかの具体的な実施例において、ポリマー繊維には、ポリアミド、ポリオレフィン、ポリスルホン、及びこれらの組み合わせが挙げられる。更に他の具体的な実施例には、ナイロン、ポリ（エチレン）、及びこれらの組み合わせが挙げられる。
【００４１】
［００４１］  好適な無機繊維としては、ガラス、セラミックス、及びこれらの組み合わせから選択される少なくとも１つの無機材料を含むものが挙げられる。有用な無機繊維としては、例えば、繊維ガラス（例えば、Ｅガラス、Ｓガラスなど）、セラミック繊維（例えば、金属酸化物（アルミナなど）、炭化ケイ素、窒化ホウ素、炭化ホウ素などで製造された繊維）、並びにこれらの組み合わせが挙げられる。有用なセラミック繊維は、少なくとも部分的に結晶性であり得る（認識可能なＸ線粉末回折図形を示す、又は結晶質相及び非晶質（ガラス）相の両方を含有する）。いくつかの用途において、無機繊維には繊維ガラス及びこの組み合わせが挙げられる。
【００４２】
［００４２］  不織繊維性多孔質マトリックスを形成するために使用される繊維は、特定用途（例えば、特定の種類の試料マトリックス）にとって十分な構造的一体性及び十分な多孔性を有する多孔質マトリックスを提供することができる長さ及び直径のものであり得る。例えば、この繊維の長さは、しばしば少なくとも約０．５ミリメートル、少なくとも１ミリメートル、少なくとも２ミリメートル、少なくとも３ミリメートル、少なくとも４ミリメートル、少なくとも６ミリメートル、少なくとも８ミリメートル、少なくとも１０ミリメートル、少なくとも１５ミリメートル、少なくとも２０ミリメートル、少なくとも２５ミリメートル、又は更には少なくとも３０ミリメートルである。繊維の直径は例えば、少なくとも１０マイクロメートル、少なくとも２０マイクロメートル、少なくとも４０マイクロメートル、又は更には少なくとも６０マイクロメートルであり得る。繊維の長さ及び直径は、例えば繊維の性質及び用途のタイプなどの要因に応じて様々である。
【００４３】
［００４３］  濃縮剤粒子の捕捉を促進するため、及び／又は高表面積を確保するために、不織繊維性多孔質マトリックスを形成するのに用いられる繊維は、しばしば、（例えば、多くのより小さな結合フィブリルで取り囲まれた主繊維の形態の）少なくとも１つのフィブリル化繊維を含む。主繊維は一般に、０．５ミリメートル〜５ミリメートルの範囲の長さ、及び１マイクロメートル〜２０マイクロメートルの範囲の直径を有し得る。繊維は典型的に、マイクロメートル未満の直径を有し得る。
【００４４】
［００４４］  不織繊維性多孔質マトリックスは、複数の異なるタイプの繊維を含み得る。いくつかの実施形態において、多孔質マトリックスは、２種類、３種類、４種類、又は更にはそれ以上の異なるタイプの繊維を用いて形成され得る。例えば、強度及び一体性をもたせるためにナイロン繊維を加えることができる一方、粒子を捕捉するためにフィブリル化ポリエチレンを加えることができる。フィブリル化繊維と非フィブリル化繊維を組み合わせて使用する場合、フィブリル化繊維の非フィブリル化繊維に対する重量比はしばしば、少なくとも１：２、少なくとも１：１、少なくとも２：１、少なくとも３：１、少なくとも５：１、又は更には少なくとも８：１である。
【００４５】
［００４５］  濃縮装置はしばしば、濃縮装置中の固体（例えば、繊維、ポリマーバインダー、及び濃縮剤）の全重量に対して、少なくとも１０重量パーセントの繊維を含み得る。繊維の量がこれより少ない場合、濃縮装置は十分な多孔性を有さない可能性がある。いくつかの濃縮装置は、少なくとも１５重量パーセント、少なくとも２０重量パーセント、又は更には少なくとも２５重量パーセントの繊維を含む。繊維性多孔質マトリックスはしばしば、固体の全重量に対して、最高９５重量パーセントの繊維を含む。繊維の量がこれより多い場合、流体試料に接触したときに、微生物を捕捉するために存在する濃縮剤の量が不十分であり得る。いくつかの例の濃縮装置は、固体の全重量に対して、最高９０重量パーセント、８０重量パーセント、最高７０重量パーセント、最高６０重量パーセント、又は更には最高５０重量パーセントの繊維を含む。
【００４６】
［００４６］  不織繊維性多孔質マトリックスはしばしば、少なくとも１つのポリマーバインダーを含む。好適なポリマーバインダーには、比較的不活性な（繊維又は濃縮剤粒子のいずれかと化学的相互作用をほとんどあるいは全く示さない）天然及び合成ポリマー材料が含まれる。有用なポリマーバインダーとしては、ポリマー樹脂（例えば、粉末及びラテックスの形態）、ポリマーバインダー繊維等、並びにこれらの組み合わせが挙げられる。
【００４７】
［００４７］  不織繊維性多孔質マトリックスに使用するのに好適なポリマー樹脂には、天然ゴム、ネオプレン、スチレン−ブタジエンコポリマー、アクリレート樹脂、ポリ塩化ビニル、ポリ酢酸ビニル、及びこれらの組み合わせが挙げられるがこれらに限定されない。数多くの実施形態において、このポリマー樹脂にはアクリレート樹脂が含まれる。
【００４８】
［００４８］  好適なポリマーバインダーには、接着専用タイプ繊維と、２成分繊維が挙げられる。例としての接着専用タイプ繊維には、Ｅａｓｔｍａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ（Ｋｉｎｇｓｐｏｒｔ、ＴＮ、ＵＳＡ）から商標名ＫＯＤＥＬ（例えば、ＫＯＤＥＬ  ４３ＵＤ）として市販されているものが挙げられる。２成分繊維は、例えば、並列形態、シース・コア形態などであり得る。並列２成分繊維の一例は、チッソ株式会社（日本・大阪）から商標名ＣＨＩＳＳＯ（例えば、ＣＨＩＳＳＯ  ＥＳ）として市販されているポリオレフィン熱接着２成分繊維である。シース・コア形態２成分繊維の一例は、ユニチカ株式会社（日本・大阪）から商標名ＭＥＬＴＹ（例えば、ＭＥＬＴＹ  ４０８０）として市販されている。この繊維はポリエステルコアとポリ（エチレン）シースを有している。酢酸エチルビニル（シース）及びポリプロピレン（コア）から製造されている（他の市販のシース・コア形態２成分繊維は、Ｍｉｎｉｆｉｂｅｒｓ（Ｊｏｈｎｓｏｎ  Ｃｉｔｙ、ＴＮ）から入手できる。
【００４９】
［００４９］  使用されるポリマーバインダーのタイプにかかわらず、結果として得られる濃縮装置中のバインダーの（乾燥形態での）量は、しばしば、濃縮装置中の固体（例えば、繊維、ポリマーバインダー、及び濃縮剤）の全重量に対して０．５〜１０重量パーセントの範囲である。そうした量のポリマーバインダーは、一般に、濃縮剤粒子を顕著にコーティングすることなく、多くの用途で使用するのに十分な一体性を不織繊維性多孔質マトリックスにもたらすことができる。例えば、ポリマーバインダーの量は、濃縮装置中の固体の全重量に対して１〜８重量パーセント、１〜６重量パーセント、１〜５重量パーセント、１〜４重量パーセント、２〜８重量パーセント、又は更には３〜７重量パーセントの範囲であり得る。
【００５０】
［００５０］  好ましくは、ポリマーバインダーは実質的に、濃縮剤粒子に接着しない。換言すれば、濃縮装置を走査電子顕微鏡で調べると、濃縮剤粒子の総面積の５％未満がポリマーバインダーで覆われている。例えば、濃縮剤粒子の総面積の４パーセント未満、３パーセント未満、２パーセント未満、又は更には１パーセント未満がポリマーバインダーで覆われている。
【００５１】
［００５１］  このタイプの濃縮装置は、（ａ）複数の上述の繊維を提供すること、（ｂ）複数の上述の濃縮剤の粒子を提供すること、及び（ｃ）複数の繊維の少なくとも一部を形成して、その中に濃縮剤粒子を絡め閉じ込めている不織繊維性多孔質マトリックスにすること、を含むプロセスによって調製され得る。上記のように、この形成は、その中に濃縮剤粒子を絡め閉じ込めている不織繊維性多孔質マトリックスを提供することができるような、本質的に任意のプロセスによって実施され得る。
【００５２】
［００５２］  濃縮装置を調整するためのもう１つの具体的なプロセスが、「湿式レイ」又は「湿式レイド」プロセスである。このプロセスでは、（ａ）複数の繊維、（ｂ）複数の濃縮剤粒子、（ｃ）ポリマーバインダー、及び（ｄ）分散性液体（例えば水、水混和性有機溶媒、又はこれらの混合物）を含む分散液が形成される。繊維、濃縮剤、濃縮剤粒子、及びポリマーバインダーの構成成分は、分散性液体中に一緒に分散され得る。あるいは、１つ又は２つの構成成分を分散させてから、他の構成成分を導入することができる。いくつかの実施形態において、この繊維は、添加剤、表面処理剤、又は、分散液中の繊維の分散を促進するための化学基を有する。例えば、ポリオレフィン系繊維は、無水マレイン酸又は無水コハク酸官能基を有し得、又は、ポリエチレン系繊維を調製する溶融プロセス中に、好適な界面活性剤を添加することができる。
【００５３】
［００５３］  湿式レイドプロセスは追加として、繊維の少なくとも一部分にポリマーバインダーを少なくとも部分的に堆積させる工程と、分散液から分散性液体を除去する工程とを含む。繊維上へのポリマーバインダーの堆積は、ポリマーバインダーの性質に応じて、分散性液体除去又は脱水工程の前又は後に行うことができる。例えば、ポリマーラテックスをポリマーバインダーとして使用する場合、ポリマーラテックスは、濃縮剤粒子添加の前又は後、及び脱水工程の前に繊維上に沈殿され得る。脱水後、熱を加えて、脱水を完了し、得られた堆積ラテックスを固めることができる。ポリマーバインダー繊維をポリマーバインダーとして使用する場合、最初に脱水を行った後、熱を加えて、脱水を完了しかつポリマーバインダー繊維を融解する（それによって、繊維上にポリマーバインダーを堆積する）ことができる。
【００５４】
［００５４］  このタイプの濃縮装置の調製に際し、１つ以上の補助剤又は添加剤を使用することができる。有用な補助剤としては、加工助剤（例えば、ポリマーバインダーを繊維上に沈殿させるのを助けることができる、アルミン酸ナトリウム及び硫酸アルミニウムなどの沈降剤）、得られる濃縮装置の全体的性能を高めることができる物質等が挙げられる。そのような補助剤が使用される場合、補助剤の量は、濃縮装置の全乾燥重量（例えば、繊維、濃縮剤、及びポリマーバインダー）に対して、最高５重量パーセント、最高４重量パーセント、最高３重量パーセント、最高１重量パーセント、又は更には最高０．５重量パーセントで存在し得る。濃縮装置に含めることができる濃縮剤粒子の量を最大限にするために、補助剤の合計量は典型的に、できる限り少量になるように選択される。
【００５５】
［００５５］  １つ以上の具体的な湿式レイドプロセスでは、繊維（例えば、短繊維）は、分散性液体（例えば、水、アルコールなどの水混和性有機溶媒、又はこれらの混合物）の存在下で容器内で混合され、スラリーを形成することができる。スラリーを形成した後、濃縮剤粒子、ポリマーバインダー、及び所望による沈殿剤（例えば、ミョウバンなどのｐＨ調整剤）をこのスラリーに加えることができる。
【００５６】
［００５６］  当該技術分野において既知のハンドシート方法を用いて湿式レイプロセスが実施される場合、３つの構成成分（すなわち、繊維、ポリマーバインダー、及び濃縮剤粒子）を分散液に加える順序は、濃縮装置の最終的な性能に大きな影響を与えないことが見出されている。しかしながら、濃縮剤粒子を加えた後にポリマーバインダーを加えることにより、繊維に対する濃縮剤粒子の接着が若干良好な濃縮装置を得ることができる。
【００５７】
［００５７］  形成後、分散混合物を成形鋳型に注ぎ、この底をスクリーンで覆うことができる。分散性液体は、スクリーンを通して（濡れたシート形状の）混合物から排液させることができる。十分な量の液体が排液された後、通常、濡れたシートを成形鋳型から取り外し、加圧、加熱、又はその２つの組み合わせにより該シートを乾燥させることができる。一般に、この圧力は約３００〜約６００ｋＰａの範囲である。９０℃〜２００℃の範囲、１００℃〜１７５℃の範囲、９０℃〜１５０℃の範囲、又は更には９０℃〜１２０℃の範囲の温度を、濡れたシートを乾かすのに使用することができる。乾燥ではしばしば、全部又は大半の分散性液体が除去される（例えば、分散液を形成するのに添加された分散性液体の量に対して、最高８５重量パーセント、最高９０重量パーセント、最高９５重量パーセント、最高９８重量パーセント、又は更には最高９９重量パーセントの分散性液体）。ポリマーバインダー繊維が湿式レイドプロセスにおけるポリマーバインダーとして使用される場合、沈殿剤は通常は不要であり、適用される熱を使用して、ポリマーバインダー繊維を融解することができる。
【００５８】
［００５８］  結果として得られる乾燥シートは、少なくとも０．１ミリメートル、少なくとも０．２ミリメートル、少なくとも０．５ミリメートル、少なくとも０．８ミリメートル、少なくとも１ミリメートル、少なくとも２ミリメートル、少なくとも４ミリメートル、又は少なくとも５ミリメートルの平均厚さを有し得る。この平均厚さはしばしば、最高２０ミリメートル、最高１５ミリメートル、最高１２ミリメートル、又は更には最高１０ミリメートルである。望ましい場合は、カレンダ加工を使用して、乾燥シートの追加の圧縮又は融合を提供することができる。
【００５９】
［００５９］  不織繊維性多孔質マトリックスを含む濃縮装置において、濃縮剤は、使用される繊維の性質に応じて、化学的相互作用（例えば化学結合）又は物理的相互作用（例えば吸着又は機械的な絡まり）のいずれかによって閉じ込められ得る。
【００６０】
［００６０］  濃縮装置の能力及び効率は、含有する濃縮剤粒子の量によって様々であり得るため、比較的高い粒子負荷が一般に望ましい可能性がある。濃縮装置における濃縮剤の量はしばしば、濃縮装置中の固体（例えば、繊維、ポリマーバインダー、及び濃縮剤）の全重量に対して、１０〜９０重量パーセントの範囲である。１０重量パーセント未満の濃縮剤が使用される場合は、微生物を濃縮する濃縮装置の効果が、望ましくないほど低くなり得る。９０重量パーセント超の濃縮剤が使用される場合は、多孔質マトリックスを形成するために存在する繊維が少なすぎる可能性がある。いくつかの例の濃縮装置において、濃縮剤は、濃縮装置中の固体の全重量に対して、少なくとも２０重量パーセント、少なくとも３０重量パーセント、少なくとも４０重量パーセント、又は更には少なくとも５０重量パーセント存在する。濃縮装置中の濃縮剤粒子の量はしばしば、濃縮装置中の固体の全重量に対して、最高８５重量パーセント、最高８０重量パーセント、最高７５重量パーセント、最高７０重量パーセント、又は更には最高６０重量パーセントである。濃縮剤はしばしば好ましくは、多孔質マトリックスの全体にわたって本質的に均一に分散される。
【００６１】
［００６１］  一般に、乾燥シート材料の平均孔径は、走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）で測定した場合、０．１〜１０マイクロメートルの範囲であり得る。２０〜８０体積パーセントの範囲、又は４０〜６０体積パーセントの範囲の空隙体積が有用であり得る。乾燥シート材料の多孔性は、繊維混合物中により大きい直径又はより高い剛性の繊維を使用することにより改変する（増加させる）ことができる。
【００６２】
［００６２］  この乾燥シート材料は可撓性であり得る（例えば、直径０．７５インチ（約２ｃｍ）のコアに巻き付けることができる）。この可撓性は、シート材料にひだを付ける又はシート材料を丸めるのを可能にし得る。シート材料は、比較的低い背圧を有し得る（すなわち、比較的大量の液体が、比較的高い背圧を生成することなく、比較的迅速にシート材料を通過することができる）。本明細書で使用されるとき、「比較的低い背圧」は、３ｍＬ／ｃｍ２の流量（ここにおいて流量は、シート材料の前面表面積に基づく）で、３ポンド／平方インチ以下（２０．７ｋＰａ）、２．５ポンド／平方インチ以下（１７．２ｋＰａ）、２ポンド／平方インチ以下（１３．８ｋＰａ）、１．５ポンド／平方インチ以下（１０．３ｋＰａ）、１ポンド／平方インチ以下（６．９ｋＰａ）、又は０．５ポンド／平方インチ以下（３．５ｋＰａ）の背圧差を指す。
【００６３】
［００６３］  カレンダ加工されていないシート材料は、望ましい寸法に切断し、流体試料に接触させて微生物を結合させるのに使用することができる。所望により（例えば、シート全体の有意な圧力低下が懸念事項でない場合）、使用の前に引張り強度を高めるために、シート材料をカレンダ加工することができる。シート材料にひだを付ける場合、典型的に、乾燥及びカレンダ加工が回避される。
【００６４】
［００６４］  不織繊維性多孔質マトリックスを備えたいくつかの濃縮装置において、単層のドライシート材料が有効であり得る。他の濃縮装置において、より大きな微生物結合能を提供するために、多層のドライシート材料が使用される。
【００６５】
［００６５］  上述の濃縮装置の任意のものは、例えば、１つ以上のプレフィルター（例えば、試料を多孔質マトリックスに通す前に試料から比較的大きい粒子を除去するため）、装置に圧力差を印加するためのマニホールド（例えば、試料を多孔質マトリックスに通すのを助けるため）、及び／又は外部ハウジング（例えば、多孔質マトリックスを収容し及び／又は保護するための使い捨てカートリッジ）などの、１つ以上の他の構成要素を更に含み得る。
【００６６】
［００６６］  上述の濃縮装置の任意のものは、任意の好適な様相で、微生物を含む流体試料に接触させることができる。流体試料に濃縮装置を加えることができ、又は濃縮装置に流体試料を加えることができる。流体試料中に濃縮装置を浸漬することができ、濃縮装置の上に流体試料を注ぐことができ、濃縮装置を入れた管又はウェルに流体試料を注ぐことができ、又は、濃縮装置の上又は中に流体試料を通すことができる。好ましくは、流体試料が多孔質マトリックスの少なくとも１つの細孔内を通るような方法で、接触が実施される。
【００６７】
［００６７］  濃縮装置及び流体試料は、様々な容器又はホルダーの任意のものの中で（任意の添加順序で）合わせることができる。好適な容器又はホルダーは典型的に、濃縮装置と流体試料の両方を、漏れがないように保持するよう設計される。いくつかの例の容器は、キャップするか、閉鎖するか、又は密封することができる。いくつかの実施形態において、この容器又はホルダーは、カラム、又は注射器の筒である。本発明のプロセスを実施する際の使用に好適な容器は、個々の試料によって決定され、量及び性質により大きく異なり得る。例えば、容器は１０マイクロリットル容器（例えば試験管又は注射器）などの小さいものであり得、又は１００ミリリットルから３リットル容器（例えば、三角フラスコ又は環状円筒容器）などの大きいものであり得る。
【００６８】
［００６８］  容器、濃縮装置、及び流体試料に直接接触する任意のその他の器具又は添加物は、使用する前に、滅菌（例えば、制御された熱、エチレンオキシドガス、又は放射線によって）して、誤検出を起こし得る流体試料のいかなる汚染も低減又は防止することができる。特定の流体試料の微生物の捕捉又は濃縮に充分な、検出を成功させる濃縮装置中の濃縮剤の量は、場合によって異なり（例えば、濃縮剤及び素子の性状及び形並びに流体試料の量に依存する）、当業者によって容易に決定可能である。
【００６９】
［００６９］  濃縮装置と流体試料との接触時間は、任意の望ましい時間であり得る。例えば、接触時間は、最高２４時間、最高１２時間、最高６時間、最高４時間、最高２時間、最高１時間、最高３０分、最高１５分、最高１０分、最高５分、最高１分、最高３０秒、又は更には最高１５秒であり得る。接触は、混合によって強化することができる（例えば、攪拌によって、振盪によって、又は、濃縮装置にわたって圧力差を適用し、多孔質マトリックスを流体試料が通過するのを促進することによって）。
【００７０】
［００７０］  いくつかの実施形態において、流体試料は濃縮装置を少なくとも１回（しばしば１回だけ）通過する（例えば、ポンプ、圧力、又は重力供給により）。任意のタイプのポンプ（例えば、蠕動ポンプ）、又は濃縮装置にわたって圧力差を生じさせるための他の装置（例えば、注射器又はプランジャ）を、使用することができる。例えば、１分当たり約１００ミリリットルまで又はそれ以上の濃縮装置を通る試料流量が有効であり得る。この流量は、例えば、１〜１００ミリリットル／分の範囲、１０〜１００ミリリットル／分の範囲、１０〜５０ミリリットル／分の範囲、又は更には１０〜２５ミリリットル／分の範囲であり得る。
【００７１】
［００７１］  望ましい場合、１つ以上の所望による添加剤を、流体試料と濃縮装置の混合物に加えることができる。好適な添加剤には、溶解試薬、生物発光分析試薬、微生物増殖培地、緩衝液（例えば、固体試料を分散又は抽出するため）、微生物染色試薬、洗浄用緩衝液（例えば、結合していない物質を洗い流すため）、溶出剤（例えば、血清アルブミン）、界面活性剤、及び機械的摩耗／溶出剤（例えば、ガラスビーズ）が挙げられるがこれらに限定されない。
【００７２】
［００７２］  流体試料が濃縮装置と接触している間に、流体試料中に存在する微生物が、濃縮装置中の濃縮剤に結合し得る。結合した微生物（すなわち、濃縮装置中の濃縮剤に結合した微生物）は典型的に、残りの流体試料から分離される。また、接触後に、結合した微生物（又はその１つ以上の構成成分）を濃縮装置から単離又は分離することが可能である。例えば、溶出剤又は溶解剤を、濃縮装置の上又は中に通すことができる。
【００７３】
［００７３］  上述の濃縮装置の任意のものを、流体試料（例えば、水）から微生物汚染物質又は病原体を除去するための濾材として使用することができる。この濾材には、多孔質マトリックスと、多孔質マトリックスの表面上、多孔質マトリックスの全体、又はこれらの組み合わせに対して分散された複数の濃縮剤粒子とが含まれる。いくつかの実施形態において、この濾材は、（ａ）不織繊維性多孔質マトリックスと、（ｂ）複数の濃縮剤粒子とを含み、この濃縮剤粒子は、不織繊維性多孔質マトリックスの中に絡め閉じ込められている。他の実施形態において、この濾材は、（ａ）焼結されたポリマー粒子の多孔質マトリックスと、（ｂ）複数の濃縮剤粒子とを含み、この濃縮剤粒子は、焼結されたポリマー粒子の多孔質マトリックスの中に埋め込まれている。
【００７４】
［００７４］  上述の濃縮剤及び濃縮装置を使うことによって、様々な微生物を濃縮及び検出することができる。試料には複数の微生物株が含まれることがあり、任意の株を、他の株とは独立に検出することができる。この微生物には、細菌（グラム陽性菌とグラム陰性菌を含む）、真菌、カビ、酵母、原生動物、ウイルス（非エンベロープウイルスとエンベロープウイルスの両方を含む）、微生物の芽胞、及び同様物、及びこれらの組み合わせが挙げられるがこれらに限定されない。
【００７５】
［００７５］  検出される標的微生物の属には、リステリア属、大腸菌属、サルモネラ属、カンピロバクター属、クロストリジウム属、ヘリコバクター属、マイコバクテリウム属、シゲラ属、ブドウ球菌属、腸球菌属、バチルス属、ナイセリア属、シゲラ属、連鎖球菌属、ビブリオ属、エルシニア属、ボルデテラ属、ボレリア属、シュードモナス属、サッカロミケス属、カンジダ属等、並びにこれらの組み合わせが挙げられる。
【００７６】
［００７６］  検出の標的となり得る具体的な微生物には、大腸菌、腸炎エルシニア菌、エルシニア仮性結核菌、コレラ菌、腸炎ビブリオ菌、ビブリオ・バルニフィカス菌、リステリア・モノサイトゲネス、黄色ブドウ球菌、サルモネラ菌、サッカロマイセス・セレヴィシエ、カンジダ・アルビカンス、ブドウ球菌エンテロトキシン亜種、セレウス菌、炭疽菌、バチルス・アトロファエウス、枯草菌、ウェルシュ菌、ボツリヌス菌、クロストリジウム・ディフィシル、エンテロバクター・サカザキ、大腸菌バクテリオファージがサロゲートであるヒト感染性非エンベロープ型腸内ウイルス、緑膿菌等、並びにこれらの組み合わせが挙げられる。
【００７７】
［００７７］  この微生物は典型的に、濃縮剤に結合した後も生存可能なままである。これらは、好適な栄養などの好ましい条件が利用できるようになると、複製又は増殖を行うことができる。
【００７８】
［００７８］  捕捉効率は、結合効率とも呼ぶことができ、これは典型的に、試料中の合計微生物量に対して、少なくとも５０パーセント、少なくとも６０パーセント、少なくとも７０パーセント、少なくとも８０パーセント、少なくとも９０パーセント、又は更には少なくとも９０パーセントである。
【００７９】
［００７９］  濃縮装置又は濃縮剤により捕捉又は結合された（例えば、吸着又は篩い分けにより）微生物は、現在知られている、又は今後開発される本質的に任意の所望の方法によって検出可能である。このような方法には、例えば、培養による方法（時間が許す場合は好ましいことがある）、顕微鏡（例えば透過光型顕微鏡又は落射蛍光顕微鏡（蛍光染料で標識した微生物を可視化するのに使用できる））、及びその他の画像手法、免疫学的検出方法、及び遺伝子学的検出方法が挙げられる。微生物の捕捉後の検出プロセスは、任意に、試料マトリックスの構成要素を除去するために洗浄すること、濃縮装置の多孔質不織繊維性マトリックスをスライスするか別の方法で細かくすること、細胞検体を濃縮装置から放出させるために染色する、沸騰させる、あるいは溶出緩衝液又は溶解剤を使用することなどを含み得る。
【００８０】
［００８０］  免疫学的検出は、標的生物に由来する抗原物質の検出であり、これは一般的に、細菌又はウイルス粒子の表面上にあるマーカーとして作用する生物学的分子（例えばタンパク質又はプロテオグリカン）である。抗原物質の検出は通常、抗体、例えばファージディスプレイなどのプロセスによって選択されたポリペプチド、又はスクリーニングプロセスから得られたアプタマーによって行うことができる。
【００８１】
［００８１］  免疫学的検出方法は周知であり、それには、例えば免疫沈降及び酵素結合免疫吸着検定（ＥＬＩＳＡ）が挙げられる。抗体結合は、様々な方法で検出することができる（例えば、一次抗体又は二次抗体のいずれかを、蛍光染料で、量子ドットで、又は化学発光若しくは着色基質を生成できる酵素で標識し、プレートリーダー又はラテラルフロー装置のいずれかを用いる）。
【００８２】
［００８２］  検出はまた、遺伝子学的検定法（例えば核酸のハイブリダイゼーション又はプライマーを用いた増幅）によって実行することができ、これが好ましい方法であることが多い。捕捉又は結合された微生物は溶解され、検定に利用できる遺伝子学的物質を供給する。溶解方法は周知であり、これには例えば、音波処理、浸透性ショック、高温処理（例えば約５０℃〜約１００℃）、及びリゾチーム、グルコラーゼ、チモラーゼ（zymolose）、リチカーゼ、プロテイナーゼＫ、プロテイナーゼＥ、又はウイルスエンドリシン類（enolysins）などの酵素、と共にインキュベーションすることが挙げられる。
【００８３】
［００８３］  一般的に使用されている遺伝子学的検出検定法の多くは、ＤＮＡ及び／又はＲＮＡを含む、具体的な微生物の核酸を検出する。遺伝子学的検出方法に使用される条件の厳密性は、検出される核酸配列の変異レベルに相関する。塩濃度及び温度の条件が非常に厳しい、標的の正確な核酸配列の検出が制限され得る。よって、標的核酸配列に小さな変異を有する微生物株は、非常に厳しい遺伝子学的検定法を使用して区別することができる。遺伝子学的検出は、核酸ハイブリダイゼーションに基づくことができ、その場合、一本鎖核酸プローブが微生物の変性核酸にハイブリッド化して、プローブ鎖を含む二本鎖核酸が生成される。当業者は、ゲル電気泳動、細管式電気泳動、又はその他の分離方法の後でハイブリッドを検出するための、放射性、蛍光、及び化学発光標識などのプローブ標識について熟知するであろう。
【００８４】
［００８４］  特に有用な遺伝子学的検出方法は、プライマーを用いた増幅に基づくものである。プライマーを用いた核酸増幅方法には、例えば、熱サイクル方法（例えばポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ−ＰＣＲ）、及びリガーゼ連鎖反応（ＬＣＲ）、並びに等温方法及び鎖置換増幅（ＳＤＡ）（及びこれらの組み合わせ、好ましくはＰＣＲ又はＲＴ−ＰＣＲ）が挙げられる。増幅された生成物を検出する方法は、例えばゲル電気泳動分離及びエチジウムブロミド染色、並びに生成物中に組み込んだ蛍光標識又は放射性標識の検出が含まれ、これらに限定されない。増幅生成物の検出前に分離工程を必要としない方法（例えば、リアルタイムＰＣＲ又はホモジニアス検出法）も使用することができる。
【００８５】
［００８５］  生物発光検出法は周知であり、例えば、米国特許第７，４２２，８６８号（Ｆａｎら）に記述されているものを含むアデノシン（adensosine）三リン酸（ＡＴＰ）検出方法が挙げられる。他の発光に基づく検出方法も使用することができる。
【００８６】
［００８６］  上述の濃縮剤及び濃縮装置は、株に対して非特異性であるため、同じ試料中の分析対象となっている複数の微生物株に対応することが可能な、包括的な捕捉システムを提供するのに使用することができる。例えば、食品試料の汚染について分析を行う場合、同じ試料内でリステリア・モノサイトゲネス、大腸菌、及びサルモネラの全部について試験を行うことが望ましいことがあり得る。捕捉工程を１回行い、次に例えば、これら微生物株それぞれの、異なる核酸配列を増幅するための固有プライマーを使用して、ＰＣＲ又はＲＴ−ＰＣＲ分析を行うことができる。したがって、それぞれの株について別々の試料取扱い及び作製手順を行う必要性を回避することができる。
【００８７】
［００８７］  診断キットが提供され、この診断キットは、（ａ）少なくとも１つの上述の濃縮装置、及び（ｂ）本発明の濃縮プロセスの実施において使用するための少なくとも１つの試験容器又は試験試薬（好ましくは無菌の試験容器又は試験試薬）を含む。好ましくは、診断キットは、方法を実施するための取り扱い説明書を更に含む。
【００８８】
［００８８］  有用な試験容器又はホルダーとしては上述のものが挙げられ、これを例えば、接触、インキュベーション、溶出液の捕集、又は他の所望のプロセス工程に使用することができる。有用な試験試薬としては、微生物培養又は生長媒体、溶解剤、溶出剤、緩衝液、発光検出アッセイ構成要素（例えば、照度計、溶解剤、ルシフェラーゼ酵素、酵素基質、反応緩衝液など）、遺伝子学的検出アッセイ構成要素など、及びこれらの組み合わせが挙げられる。好ましい溶解試薬は、緩衝液中に供給された溶解酵素又は薬品であり、好ましい遺伝子学的検出検定構成要素としては、標的微生物に固有の１つ以上のプライマーが挙げられる。このキットは、所望により更に、無菌のピンセットなどを含み得る。
【００８９】
［００８９］  様々な項目が提供される。微生物を濃縮するために行われる様々な項目、及び、微生物に対する濃縮剤を含む物品が提示される。
【００９０】
項目１．微生物を濃縮するプロセスであって、該プロセスが、
（ａ）ビスマス含有材料を含む濃縮剤を提供する工程であって、該ビスマス含有材料が、酸化ビスマス、炭酸ビスマス、オキシ炭酸ビスマス、オキシ塩化ビスマス、又はこれらの混合物のうち任意のものである、工程と、
（ｂ）該微生物を含む流体試料を提供する工程と、
（ｃ）該濃縮剤を該流体試料に接触させる工程と、
（ｄ）該微生物を該濃縮剤に結合させて、結合された微生物を形成する工程と、
を含み、該結合された微生物が生存状態にある、プロセス。
【００９１】
項目２．前記濃縮剤が粒子を含む、項目１に記載のプロセス。
【００９２】
項目３．前記微生物が細菌株、真菌、酵母、原生動物、ウイルス、微生物の芽胞、又はこれらの混合物である、項目１又は２に記載のプロセス。
【００９３】
項目４．前記微生物がグラム陰性細菌又はグラム陽性細菌である、項目１〜３に記載のプロセス。
【００９４】
項目５．前記結合された微生物を前記流体試料から分離する工程を更に含む、項目１〜４のいずれか一項に記載のプロセス。
【００９５】
項目６．前記濃縮剤が複数の粒子を含み、更に多孔質マトリックスを含み、該複数の粒子が、該多孔質マトリックスの表面上に分散され、該多孔質マトリックスの全体に分散され、又は該多孔質マトリックスの表面上及び全体の両方にわたって分散されている、項目１〜５のいずれか一項に記載のプロセス。
【００９６】
項目７．前記多孔質マトリックスが不織繊維を含む、項目６に記載のプロセス。
【００９７】
項目８．前記不織繊維が、フィブリル化繊維を含む、項目７に記載のプロセス。
【００９８】
項目９．前記不織繊維が、ポリマー繊維、無機繊維、又はこれらの組み合わせである、項目７に記載のプロセス。
【００９９】
項目１０．前記多孔質マトリックスが更にポリマーバインダーを含む、項目６〜９のいずれか一項に記載のプロセス。
【０１００】
項目１１．前記多孔質マトリックスが焼結されたポリマー材料を含む、項目６に記載のプロセス。
【０１０１】
項目１２．前記焼結されたポリマー材料が、焼結された熱可塑性ポリマーである、項目１１に記載のプロセス。
【０１０２】
項目１３．前記結合した微生物の存在を検出する工程を更に含む、項目１〜１２のいずれか一項に記載のプロセス。
【０１０３】
項目１４．ビスマス含有材料を含む濃縮剤と、該濃縮剤に結合した微生物と、を含む物品であって、
該ビスマス含有材料が、酸化ビスマス、炭酸ビスマス、オキシ炭酸ビスマス、オキシ塩化ビスマス、又はこれらの混合物のうち任意のものであり、
該微生物が生存状態にある、物品。
【０１０４】
項目１５．前記濃縮剤が複数の粒子を含む、項目１４に記載の物品。
【０１０５】
項目１６．
ビスマス含有材料を含む濃縮剤と、多孔質マトリックスと、を含む物品であって、
該ビスマス含有材料が、酸化ビスマス、炭酸ビスマス、オキシ炭酸ビスマス、オキシ塩化ビスマス、又はこれらの混合物のうち任意のものであり、
該濃縮剤が、該多孔質マトリックスの表面上、該多孔質マトリックスの全体、又はこれらの組み合わせに対して分散されている、物品。
【０１０６】
項目１７．前記濃縮剤が複数の粒子を含む、項目１６に記載の物品。
【０１０７】
項目１８．前記多孔質マトリックスが、不織繊維、及び所望によりポリマーバインダーを含む、項目１６〜１７のいずれか一項に記載の物品。
【０１０８】
項目１９．前記不織繊維が、ポリマー繊維、無機繊維、又はこれらの組み合わせを含む、項目１８に記載の物品。
【０１０９】
項目２０．前記多孔質マトリックスが、焼結されたポリマー材料を含む、項目１６〜１７のいずれか一項に記載の物品。
【０１１０】
項目２１．前記焼結されたポリマー材料が、焼結された熱可塑性材料を含む、項目２０に記載の物品。
【０１１１】
項目２２．前記多孔質マトリックスが濾材の形態である、項目１６〜２１のいずれか一項に記載の物品。
【０１１２】
項目２３．前記濃縮剤に結合した微生物を更に含む、項目１６〜２２のいずれか一項に記載の物品。
【０１１３】
項目２４．前記濃縮剤が酸化ビスマスである、項目１〜１３のいずれか一項に記載のプロセス。
【０１１４】
項目２５．前記濃縮剤が炭酸ビスマスである、項目１〜１３のいずれか一項に記載のプロセス。
【０１１５】
項目２６．前記濃縮剤がオキシ炭酸ビスマスである、項目１〜１３のいずれか一項に記載のプロセス。
【０１１６】
項目２７．前記濃縮剤がオキシ塩化ビスマスである、項目１〜１３のいずれか一項に記載のプロセス。
【０１１７】
項目２８．前記ビスマス含有材料が無水物である、項目１〜１３のいずれか一項に記載のプロセス。
【０１１８】
項目２９．前記ビスマス含有材料が少なくとも部分的に水和している、項目１〜１３のいずれか一項に記載のプロセス。
【０１１９】
項目３０．前記濃縮剤が酸化ビスマスである、項目１４〜１５のいずれか一項に記載の物品。
【０１２０】
項目３１．前記濃縮剤が炭酸ビスマスである、項目１４〜１５のいずれか一項に記載の物品。
【０１２１】
項目３２．前記濃縮剤がオキシ炭酸ビスマスである、項目１４〜１５のいずれか一項に記載の物品。
【０１２２】
項目３３．前記濃縮剤がオキシ塩化ビスマスである、項目１４〜１５のいずれか一項に記載の物品。
【０１２３】
項目３４．前記ビスマス含有材料が無水物である、項目１４〜１５のいずれか一項に記載の物品。
【０１２４】
項目３５．前記ビスマス含有材料が少なくとも部分的に水和している、項目１４〜１５のいずれか一項に記載の物品。
【０１２５】
項目３６．前記濃縮剤が酸化ビスマスである、項目１６〜２２のいずれか一項に記載の物品。
【０１２６】
項目３７．前記濃縮剤が炭酸ビスマスである、項目１６〜２２のいずれか一項に記載の物品。
【０１２７】
項目３８．前記濃縮剤がオキシ炭酸ビスマスである、項目１６〜２２のいずれか一項に記載の物品。
【０１２８】
項目３９．前記濃縮剤がオキシ塩化ビスマスである、項目１６〜２２のいずれか一項に記載の物品。
【０１２９】
項目４０．前記ビスマス含有材料が無水物である、項目１６〜２２のいずれか一項に記載の物品。
【０１３０】
項目４１．前記ビスマス含有材料が少なくとも部分的に水和している、項目１６〜２２のいずれか一項に記載の物品。
【０１３１】
項目４２．キットであって：
（ａ）濃縮剤であって、該濃縮剤が
ビスマス含有材料を含み、該ビスマス含有材料が、酸化ビスマス、炭酸ビスマス、オキシ炭酸ビスマス、オキシ塩化ビスマス、又はこれらの混合物のうち任意のものであり、
多孔質マトリックスを含み、該濃縮剤が、該多孔質マトリックスの表面上、該多孔質マトリックスの全体、又はこれらの組み合わせに対して分散されている、多孔質マトリックスと、を含む、濃縮剤と、
（ｂ）試験容器と、
（ｃ）項目６に記載のプロセスを実施する際に該濃縮剤を使用するための指示書と、
を含む、キット。
【実施例】
【０１３２】
［００９０］  実施例に使用されるパーセンテージは、別に特記されている場合を除き、すべて重量パーセントである。実施例はすべて、別途記載がない限り、各２回ずつ試験が行われた。別途記載がない限り、材料はすべて納品されたままの状態で使用した。
【０１３３】
【表１】
0005826436.tif 000002
【０１３４】
細菌及び酵母の培養
［００９１］  大腸菌（ＡＴＣＣ  ５１８１３）、黄色ブドウ球菌（ＡＴＣＣ  ６５３８）、緑膿菌（ＡＴＣＣ  ９０２７）、サッカロマイセス・セレヴィシエ（ＡＴＣＣ  ２０１３９０）、及びリステリア・モノサイトゲネス（ＡＴＣＣ  ５１４１４）は、別途記載がない限り、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）から購入した。別途記載がない限り、試験用細菌を、標準的微生物学技法に従って、トリプシン大豆寒天プレート上に培養物をストリーキング（ｓｔｒｅａｋｉｎｇ）し、プレートを３７℃で一晩インキュベートすることによって、調製したストリーキング培養物から単離した。試験用酵母培養物は、標準的微生物学技法に従って、酵母抽出ペプトンデキストロース寒天プレート上に培養物をストリーキングし、プレートを３０℃で一晩インキュベートすることによって調製したストリーキング培養物から単離した。
【０１３５】
コロニー数
［００９２］  コロニーは、別途記載がない限り、標準的な微生物学的手法に従って手作業で計数された。
【０１３６】
Ｘ線回折解析
［００９３］  試料は、ゼロ背景石英インサート上で直接検査された。反射配置データは、Ｐｈｉｌｉｐｓ垂直回折計、銅Ｋα放射線及び散乱放射線の比例検出器レジストリを使用することにより、測量走査の形態で収集した。回折計に、可変入射ビームスリット、固定回折ビームスリット、及びグラファイト回折ビームモノクロメータを取り付けた。測量走査は、０．０４°のステップサイズ及び４秒の滞留時間を使用して５〜８０度（２θ）で行った。Ｘ線発生器は４５ｋＶ及び３５ｍＡに設定された。回折パターンで観察された反射に基づいて、相の同定のために、粉末回折ファイル（ＰＤＦ）を使用した。
【０１３７】
酸化ビスマスの調製
［００９４］  市販により入手した炭酸ビスマス（３４．３６ｇ）を石英ボート中で６０分間加熱して２２℃から４５０℃まで上げ、４５０℃で１２０分間保持してから、ゆっくりと約５０℃まで冷ました。すべての加熱は空気中、箱型炉（Ｃａｒｂｏｌｉｔｅ  ＬＴＤ（Ｈｏｐｅ  Ｖａｌｌｅｙ、ＵＫ）から入手、商標名「ＣＡＲＢＯＬＩＴＥ  ＲＨＦ  １５００  ＦＵＲＮＡＣＥ」）で行われた。結果として得られた粉末は明るい黄色で、重量は３１．５８ｇであった。生成物のＸ線回折解析により、主に酸化ビスマス（Ｂｉ２Ｏ３、ＰＤＦ：０１−０７４−１３７４）の存在と、少量の輝蒼鉛鉱（Ｂｉ２Ｏ２ＣＯ３、ＰＤＦ：０４−００９−８５３３；市販で得られる炭酸ビスマスは、Ｘ線回折解析により、主に輝蒼鉛鉱であった）。
【０１３８】
濃縮剤での大腸菌の捕捉
大腸菌懸濁液
［００９５］  グラム陰性細菌である大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）のストリーキング培養物を使用して、３ｍＬのＤＩ水中に、０．５マクファーランド標準液を調製した。結果として得られた細菌ストック溶液は、１ミリリットル当たり１０８個のコロニー形成単位（「ＣＦＵ／ｍＬ」）を含んでおり、これを吸着緩衝液で連続希釈して、１ｍＬ当たり１０３個の微生物を有する細菌懸濁液を得た（「大腸菌微生物懸濁液」）。これを用いて下記の試料を作製した。
【０１３９】
ＥＣ−１
［００９６］  大腸菌微生物懸濁液１．０ｍＬを、上記で調製された酸化ビスマス１０ミリグラムが入ったラベル付き滅菌済み５ｍＬポリプロピレン試験管（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ（Ｆｒａｎｋｌｉｎ  Ｌａｋｅｓ、ＮＪ）から入手、商標名「ＢＤ  ＦＡＬＣＯＮ」）に加えた。
【０１４０】
ＥＣ−２
［００９７］  大腸菌微生物懸濁液１．０ｍＬを、炭酸ビスマス１０ミリグラムが入ったラベル付き滅菌済み５ｍＬポリプロピレン試験管（「ＢＤ  ＦＡＬＣＯＮ」）に加えた。
【０１４１】
ＥＣ−３
［００９８］  大腸菌微生物懸濁液１．０ｍＬを、オキシ塩化ビスマス１０ミリグラムが入ったラベル付き滅菌済み５ｍＬポリプロピレン試験管（「ＢＤ  ＦＡＬＣＯＮ」）に加えた。
【０１４２】
ＥＣ−４（比較）
［００９９］  大腸菌微生物懸濁液１．０ｍＬを、次サリチル酸ビスマス１０ミリグラムが入ったラベル付き滅菌済み５ｍＬポリプロピレン試験管（「ＢＤ  ＦＡＬＣＯＮ」）に加えた。
【０１４３】
［００１００］  大腸菌対照試料は、大腸菌微生物懸濁液１．０ｍＬを、濃縮剤の添加なしで、ラベル付き滅菌済み５ｍＬポリプロピレン試験管（「ＢＤ  ＦＡＬＣＯＮ」）に加えた。
【０１４４】
大腸菌試料の処理
［００１０１］  上述の試料ＥＣ−１〜ＥＣ−４及び大腸菌対照試料の入った試験管にキャップをして、ボルテックスミキサー（Ｂａｒｎｓｔｅａｄ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（Ｄｕｂｕｑｕｅ、ＩＡ）から入手、商標名「ＴＨＥＲＭＯＬＹＮＥ  ＭＡＸＩＭＩＸ  ＰＬＵＳ  ＶＯＲＴＥＸ  ＭＩＸＥＲ」）で混合し、プラットフォームロッカー（Ｂａｒｎｓｔｅａｄ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌから入手、商標名「ＴＨＥＲＭＯＬＹＮＥ  ＶＡＲＩ  ＭＩＸ  ＰＬＡＴＦＯＲＭ  ＲＯＣＫＥＲ」）の上で、室温（２５℃）で１０分間、１４サイクル／分の速度で攪拌した。攪拌後、各試験管を実験台上に１０分間立てて置き、存在している粉末があればそれを沈殿させた。
【０１４５】
［００１０２］  各試験管について、沈殿した材料を回収し、再び１ｍＬの滅菌バターフィールド緩衝液で再懸濁させて、メーカーの説明書に従ってＡＣプレート上で培養した。大腸菌対照試料も、ＡＣプレート上で培養した。プレートを３７℃で１８〜２０時間インキュベートした。プレートリーダー（３Ｍ  Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｓｔ．Ｐａｕｌ、ＭＮ）、商標名「３Ｍ  ＰＥＴＲＩＦＩＬＭ  ＰＬＡＴＥ  ＲＥＡＤＥＲ」）を使って、コロニー数が測定された。
【０１４６】
［００１０３］  捕捉効率（Ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ）は、再懸濁させた材料の上に捕捉された微生物数（パーセント）に等しかった。捕捉効率は、再懸濁させた材料（「捕捉」）でのコロニー数と、未処理の対照試料（「対照」）でのコロニー数から、次の式により決定された：
捕捉効率捕捉効率（％）＝（（捕捉）／（対照））×１００
【０１４７】
大腸菌試料の捕捉効率の結果を表１に示す。
【表２】
0005826436.tif 000003
【０１４８】
捕捉効率の標準偏差は、別途記載のない限り、１０％未満である。表１のデータの対照試料は、１３０ＣＦＵ／ｍＬの大腸菌を含んでいた。次サリチル酸ビスマス試料ＥＣ−４（比較実施例Ｃ１）については、培養物の沈殿材料からも上澄みからも、コロニー数は得られなかった。
【０１４９】
濃縮剤での黄色ブドウ球菌の捕捉
［００１０４］  大腸菌について上述された手順に従い、ただし試験される微生物をグラム陽性細菌である黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）にして、調製及び試験を行った。したがって、試料ＳＡ−１、ＳＡ−２、及びＳＡ−３には、黄色ブドウ球菌と、表２に示す濃縮剤とを含めた。捕捉効率の結果を表２に示す。
【表３】
0005826436.tif 000004
【０１５０】
表２のデータの対照試料は、３９ＣＦＵ／ｍＬの黄色ブドウ球菌を含んでいた。
【０１５１】
濃縮剤での緑膿菌の捕捉
［００１０５］  大腸菌について上述された手順に従い、ただし試験される微生物をグラム陰性細菌である緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）にして、調製及び試験を行った。したがって、試料ＰＡ−１、ＰＡ−２、ＰＡ−３、及びＰＡ−４には、緑膿菌と、表３に示す濃縮剤とを含めた。捕捉効率の結果を表３に示す。
【表４】
0005826436.tif 000005
【０１５２】
表３のデータの対照試料は、４９ＣＦＵ／ｍＬの緑膿菌を含んでいた。次サリチル酸ビスマス試料ＰＡ−４（比較実施例Ｃ２）については、培養物の沈殿材料からも上澄みからも、コロニー数は得られなかった。
【０１５３】
濃縮剤を含む多孔質マトリックスの調製
（実施例１０）
［００１０６］  ４Ｌブレンダー（ＶＷＲ（Ｒａｄｎｏｒ、ＰＡ）から入手、商標名「ＷＡＲＩＮＧ  ＣＯＭＭＥＲＣＩＡＬ  ＨＥＡＶＹ  ＤＵＴＹ  ＢＬＥＮＤＥＲ、ＭＯＤＥＬ  ３７ＢＬ８４）中で、中速で６０秒間、３０．０ｇの繊維１、６．０ｇの繊維２、４．５ｇの繊維３、及び３．０ｇの繊維４を、４リットルの冷水道水と混合することにより、調製した。この混合物に、粒又は塊がなく繊維が均一に分散しているか調べ、必要に応じて更にブレンドして、塊を破壊した。この繊維プレミックス１リットルを、１リットルのステンレス鋼製ビーカーに入れ、インペラミキサー（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ）から入手、商標名「ＳＴＥＤＦＡＳＴ  ＳＴＩＲＲＥＲ  ＭＯＤＥＬ  ＳＬ２４００」）で、速度設定４で５分間混合した。次に、ラテックスバインダー０．５ｇを、５０ｍＬビーカーに入れた約２５ｍＬの水道水中に分散させ、これをプレミックスに加えた。別にとった約２５ｍＬの水道水でビーカーをすすぎ、これを混合物に加え、約２分間混合した。同様にして、１．０ｇの凝集剤を約２５ｍＬの水道水中に分散させ、混合しながら混合物に加え、次に別にとった約２５ｍＬのビーカーのすすぎ水を混合物に加えた。ラテックスバインダーが溶液から繊維上に析出し、プレミックスの液相は、濁った状態から実質的に透明に変化した。次に５．０グラムの酸化ビスマス（上記で調製）を加え、ボルテックスミキサーで１分間混合した。
【０１５４】
［００１０７］  パッドメーカー装置（Ｗｉｌｌｉａｍｓ  Ａｐｐａｒａｔｕｓ（Ｗａｔｅｒｔｏｗｎ、ＮＹ）から入手、商標名「ＴＡＰＰＩ」）を用いてフェルトが調製された。この装置は、一辺約２０センチメートル（８インチ）の正方形、高さ２０センチメートル（８インチ）の箱で、底に細かいメッシュスクリーンと排水弁を備えていた。この箱のスクリーンの上方約１センチメートルの高さまで水道水を充填した。粒子含有混合物を箱に注ぎ込み、弁を直ちに開いて、箱から水を引き出す減圧を形成した。得られた湿式レイドフェルトの厚さは約３ミリメートルであった。
【０１５５】
［００１０８］  この湿式レイドフェルトを、装置から、一辺２０センチメートルの吸い取り紙（９６ポンド（４３．５ｋｇ）白色紙、Ａｎｃｈｏｒ  Ｐａｐｅｒ（Ｓｔ．Ｐａｕｌ、ＭＮ）から入手）の上に移した。フェルトを２〜４枚（シートの湿り程度による）の吸い取り紙の間に挟み、１平方インチ当たり６０ポンド（４１３．７ｋＰａ）（１平方インチ当たり約１２ポンド（８２．７ｋＰａ）の圧力がフェルトに印加されていると計算される）に設定した空気圧プレスで、２枚の強化スクリーンの間で１〜２分間、それ以上排出される水が観察されなくなるまで、プレスした。プレスしたフェルトを、新しい吸い取り紙の上に移し、１２０℃に設定した炉（ＳＰＸ  Ｔｈｅｒｍａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ（Ｗｈｉｔｅ  Ｄｅｅｒ、ＰＡ）から入手、商標名「ＢＬＵＥ  Ｍ  ＳＴＡＢＩＬ−ＴＨＥＲＭ  ＯＶＥＮ、ＭＯＤＥＬ  ＯＶ−５６０Ａ２」）に約４０分間入れて、残った水分を除去し、ラテックスバインダーを硬化させて、多孔質マトリックスを形成した。
【０１５６】
（実施例１１）
［００１０９］  実施例１０に記述されている手順に従って、ただし、酸化ビスマスの量を１０．０ｇとして、多孔質マトリックスが調製された。
【０１５７】
多孔質マトリックスでのリステリア・モノサイトゲネスの捕捉
［００１１０］  リステリア・モノサイトゲネスのストリーキング培養物を使用して、３ｍＬのＢＨＩブロス中で０．５マクファーランド標準を調製した。約１０３ＣＦＵ／ｍＬを含有する細菌懸濁液を得るために、約１０８ＣＦＵ／ｍＬを含有する得られた細菌ストックをＢＨＩブロスで連続的に希釈した。
【０１５８】
実施例１２の濾過
［００１１１］  実施例１０の多孔質マトリックスから、直径１４ｍｍのディスクをダイ型抜きし、フィルターホルダー（ＳＷＩＮＮＥＸ）に挿入した。３ｍＬの注射器を使用して１．５ｍＬの細菌懸濁液をホルダーのディスクの上に供給した。フィルターホルダーは、濾液を回収する容器の上に保持された。濾過は約１５秒で完了した。
【０１５９】
実施例１３の濾過
［００１１２］  実施例１２に記述されている手順を繰り返し、ただし、実施例１１の多孔質材料から直径１４ｍｍのディスクをダイ型抜きした。
【０１６０】
［００１１３］  実施例１２及び１３で得た各濾液から１００マイクロリットルを、ＭＯＸプレートで培養した。対照試料は、濾過していない細菌懸濁液１００マイクロリットルを、ＭＯＸプレートで培養した。各濾過の後、表面滅菌したピンセットを使って、実施例１２及び１３の多孔質マトリックスをフィルターホルダーから取り出し、１００マイクロリットルのバターフィールド緩衝液と共にＭＯＸプレートで培養した。全てのプレートを３７℃で１８〜２０時間インキュベートした。コロニーは手作業で計数した。
【０１６１】
［００１１４］  対照試料は３３７０ＣＦＵ／ｍＬ（１．５ｍＬ中に５０５５ＣＦＵ）であった。培養したすべてのプレートがリステリア・モノサイトゲネスの増殖を示し、これは、捕捉された細菌細胞が生存可能であったことを示している。
【０１６２】
［００１１５］  培養した濾液で得たコロニー数を使用して、この多孔質マトリックスの捕捉効率を次のように計算した。濾過効率（効率）は、濾液でのコロニー数（「濾液カウント数」）と、濾過していない対照試料でのコロニー数（「対照カウント数」）から、次の式により決定された：
濾過効率（％）＝（（濾液カウント数）／（対照カウント数））×１００
捕捉効率（％）＝１００−濾過効率
【０１６３】
捕捉効率の結果を表４に示す。
【表５】
0005826436.tif 000006
【０１６４】
多孔質マトリックスでの大腸菌の捕捉
［００１１６］  大腸菌のストリーキング培養物を使用して、３ｍＬの滅菌ＤＩ水中で、０．５マクファーランド標準液を調製した。結果として得られた細菌ストック溶液１×１０８ＣＦＵ／ｍＬを、ＤＩ水で連続希釈し、約１０５ＣＦＵ／ｍＬを有する細菌懸濁液を得た。
【０１６５】
（実施例１４）
［００１１７］  実施例１０の多孔質マトリックスから、直径１４ｍｍのディスクをダイ型抜きし、フィルターホルダー（ＳＷＩＮＮＥＸ）に挿入した。
【０１６６】
（実施例１５）
［００１１８］  実施例１１の多孔質マトリックスから、直径１４ｍｍのディスクをダイ型抜きし、フィルターホルダー（ＳＷＩＮＮＥＸ）に挿入した。
【０１６７】
［００１１９］  ３ｍＬの注射器を使用して１．０ｍＬの細菌懸濁液をフィルターのマトリックスの上に供給した。濾過後、濾液を回収し、ＤＩ水で１：１００に希釈し、大腸菌プレート上で培養した。対照試料は、約１０５ＣＦＵ／ｍＬの細菌懸濁液をバターフィールド緩衝液で１：１００に希釈し、希釈液１ｍＬを培養することによって調製した。プレートを３７℃で１８〜２０時間インキュベートした。プレートリーダー（３Ｍ  Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｓｔ．Ｐａｕｌ、ＭＮ）、商標名「３Ｍ  ＰＥＴＲＩＦＩＬＭ  ＰＬＡＴＥ  ＲＥＡＤＥＲ」）を使って、コロニー数が測定された。
【０１６８】
［００１２０］  対数減少値（「ＬＲＶ」）は、濾過マトリックスの細菌除去能力の指標である。この値は、次の式に従って、対照中のコロニー数（ＣＦＵ／ｍＬ）の対数値（Ｌｏｇ対照カウント数）から、濾液中のコロニー数（濾液カウント数）の対数値を引くことによって計算された：
ＬＲＶ＝（Ｌｏｇ１０（対照カウント数））−（Ｌｏｇ１０（濾液カウント数））
【０１６９】
対照は、平均コロニーカウント数１３５，０００ＣＦＵ／ｍＬであった（５．１３  Ｌｏｇ  ＣＦＵ／ｍＬ）。実施例１４及び１５の対数減少値を表５に示す。
【表６】
0005826436.tif 000007
【０１７０】
多孔質マトリックスでのサッカロマイセス・セレヴィシエ（ビール試料から）の捕捉
［００１２１］  ＹＰＤ寒天培地のサッカロマイセス・セレヴィシエ（Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）のストリーキング培養を使用して、３ｍＬのビール（「Ｍｉｃｈｅｌｏｂ  Ｇｏｌｄｅｎ  Ｌｉｇｈｔ  Ｄｒａｆｔ」ビール、アルコール度４．３％、地元小売店で購入）中で０．５マクファーランド標準液を作製した。結果として得られた酵母ストック液は、約１０６ＣＦＵ／ｍＬを含み、これをビールで連続希釈して、１０３ＣＦＵ／ｍＬを含む酵母懸濁液を得た。スパイクされたビール試料は、この懸濁液の１：１００希釈を、ビール１００ｍＬに接種して１０ＣＦＵ／ｍＬとすることによって調製された。
【０１７１】
［００１２２］  実施例１１の多孔質マトリックスから、１４ｍｍのディスクをダイ型抜きし、フィルターホルダー（ＳＷＩＮＮＥＸ）に挿入した。スパイクされたビール試料（１００ｍＬ）を、２０ｍＬ注射器を使って、５つのバッチに分けてフィルターホルダーに供給した。全試料がマトリックスを通過した後、表面滅菌されたピンセットを使って、このディスクを、空の滅菌済み１．５ｍＬポリプロピレン製マイクロ遠心分離管（ＶＷＲ、カタログＮｏ．８９０００−０２８）に移した。
【０１７２】
実施例１６−ビール試料からの酵母微生物の濃縮
［００１２３］  試料調製キット（３Ｍ  Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｓｔ．Ｐａｕｌ、ＭＮ）から入手、商標名「３Ｍ  ＣＬＥＡＮ−ＴＲＡＣＥ  ＳＵＲＦＡＣＥ  ＡＴＰ  ＳＹＳＴＥＭ」）の酵素溶液１００マイクロリットル及び抽出溶液５０マイクロリットルを、上述のディスクの入った管に入れることによって、「濃縮試料ディスク」が調製された。この内容物を、ボルテックスミキサー（ＶＷＲ（Ｗｅｓｔ  Ｃｈｅｓｔｅｒ  ＰＡ）から入手、商標名「ＶＷＲ  ＦＩＸＥＤ  ＳＰＥＥＤ  ＶＯＲＴＥＸ  ＭＩＸＥＲ」）を用いて約３２００ｒｐｍで５秒間混合した。この試料のＡＴＰ信号は、ベンチトップ型照度計（Ｔｕｒｎｅｒ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ（Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ、ＣＡ）から入手、商標名「２０／２０Ｎ  ＳＩＮＧＬＥ  ＴＵＢＥ  ＬＵＭＩＮＯＭＥＴＥＲ」、２０／２０ｎ  ＳＩＳソフトウェアを搭載）を用いて、１０秒間隔で１分間、相対発光量（ＲＬＵ）単位で測定された。発光値は、下記に従って解析された。ＡＴＰの直接検出は、捕捉された微生物の事前抽出／溶出の必要なしに実施された。
【０１７３】
［００１２４］  バックグラウンドＡＴＰレベルの決定は、実施例１１の多孔質マトリックスからダイ型抜きしたディスクで、１００ｍＬのスパイクされていないビール（すなわち、Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅを加えていないビール）を濾過することによって行われた。このディスク（「スパイクされていないビールバックグラウンドディスク」）は、濃縮試料について上述された手順に従って処理され、ＡＴＰ信号が測定された。
【０１７４】
［００１２５］  １００マイクロリットルのビールのみ（「スパイクされていないビールバックグラウンド」）のＡＴＰ信号も測定された。「スパイクされていないビール」は、Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅの添加がないビールを指す。バックグラウンドＡＴＰ信号を、試験試料を含むビールのＡＴＰ信号から差し引いて、表６に示す補正ＡＴＰ信号値が算出された。
【０１７５】
［００１２６］  更に、１０３ＣＦＵを含む未濾過酵母懸濁液（１００マイクロリットル）、及び未濾過のスパイクされたビール試料（１００マイクロリットル）についても、ＡＴＰ信号が測定された。これらの試料はそれぞれ、「１０３ＣＦＵ対照」及び「スパイクされたビール対照」として使用された。
【０１７６】
［００１２７］  次の式に従って、対照の補正ＡＴＰ信号値から、％  ＡＴＰ信号が計算された：
％  ＡＴＰ信号＝（補正ＲＬＵ／１０３ＣＦＵ対照のＲＬＵ）×１００
【０１７７】
結果を表６に示す。
【表７】
0005826436.tif 000008
【０１７８】
［００１２８］  ビール試料の酵母カウント数は、メーカーの説明書に従いＹ／Ｍプレートで、１００ｍＬのスパイクされたビール対照の１ｍＬを培養することによって決定され、この試料は合計１７００ＣＦＵの酵母細胞を有していた。表６のデータは、実施例１１の多孔質マトリックス（例えば、濃縮試料ディスクデータを参照）が、大量の飲料試料を手作業で処理し、この試料を最初の体積１００ｍＬから最終体積１００マイクロリットルまで濃縮できる能力を示している。捕捉信号の事前の抽出／溶出の必要なしに、多孔質マトリックスを用いて、ＡＴＰの直接検出が実施された。
【０１７９】
実施例１７及び１８−多孔質マトリックスによるビーフ試料の濾過
［００１２９］  以下のように実施例１７を調製した。９９ｍＬのバターフィールド緩衝液と、１１グラムの牛ひき肉（脂肪分１５％）（地元食料品店で購入）を、ｓｔｏｍａｃｈｅｒバッグに入れ、メーカーの説明書に従って、２３０ｒｐｍの速度で３０秒間、ｓｔｏｍａｃｈｅｒで処理を行うことにより、牛ひき肉試料が調製された。１０ｍＬの試料を、１０ｍＬ注射器で、フィルターホルダー（ＳＷＩＮＮＥＸ）内の実施例１０の１４ｍｍディスクに供給した。この注射器はフィルターホルダーの流入口ポートに嵌め込まれ、注射器のプランジャを使用して正圧を試料に印加し、すべての試料をマトリックスに通した。
【０１８０】
［００１３０］  実施例１８及び比較実施例Ｃ３は、上記と同様に調製及び試験が行われたが、ただし実施例１７では、実施例１１のディスクが使用され、比較実施例Ｃ３では、市販の０．２２ミクロンポリカーボネート（「ＰＣ」）Ｗｈａｔｍａｎフィルター（ＶＷＲから購入）をダイ型抜きして、直径１４ｍｍのディスクを得た。
【０１８１】
［００１３１］  実施例１７、１８及び比較実施例Ｃ３の濾液量及び濾過時間を表７に示す。
【表８】
0005826436.tif 000009
【０１８２】
表７のデータは、実施例１０及び１１の多孔質マトリックスが、標準の微生物フィルター（ポリカーボネートフィルター）よりも、ある程度目詰まりしにくいが、複合試料マトリックスを処理する際に、より大きな濾過容量を有していたことを示している。
【０１８３】
実施例１９及び２０−多孔質マトリックスによる豆乳試料の濾過
［００１３２］  以下のように実施例１９を調製した。１１ｍＬの豆乳（脂肪分４．５グラム）（地元食料品店で購入）を、９９ｍＬのバターフィールド緩衝液と共に旋回攪拌することにより、豆乳試料が調製された。１０ｍＬの試料を、１０ｍＬ注射器で、フィルターホルダー（ＳＷＩＮＮＥＸ）内の実施例１０の１４ｍｍディスクに供給した。この注射器はフィルターホルダーの流入口ポートに嵌め込まれ、注射器のプランジャを使用して正圧を試料に印加し、すべての試料をマトリックスに通した。
【０１８４】
［００１３３］  実施例２０及び比較実施例Ｃ４は、上記実施例１９と同様に調製及び試験が行われたが、ただし実施例２０では、実施例１１のディスクが使用され、比較実施例Ｃ４では、市販の０．２２ミクロンポリカーボネート（「ＰＣ」）Ｗｈａｔｍａｎフィルター（ＶＷＲから購入）を、同じ直径１４ｍｍとした。
【０１８５】
［００１３４］  実施例１９、２０及び比較実施例Ｃ４の濾液量及び濾過時間を表８に示す。
【表９】
0005826436.tif 000010
【０１８６】
表８のデータは、実施例１０及び１１の多孔質マトリックスが、標準の微生物フィルター（ポリカーボネートフィルター）よりも、ある程度目詰まりしにくいが、複合試料マトリックスを処理する際に、より大きな濾過容量を有していたことを示している。