(57)【要約】  本発明は、PM02734の、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン及びスニチニブから選択される他の抗癌薬との組合せ、ならびに癌の治療におけるこれらの組合せの使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療を必要とする患者に、治療上有効な量のPM02734またはその医薬として許容し得る塩と、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブ、またはそれらの医薬として許容し得る塩から選択される治療上有効な量の他の抗癌薬とを投与することを含む、癌の治療方法。
【請求項２】
癌の治療にて、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブから選択される抗癌薬の治療効力を増大させる方法であって、それを必要とする患者に治療上有効な量のPM02734またはその医薬として許容し得る塩を投与することを含む、方法。
【請求項３】
PM02734またはその医薬として許容し得る塩と、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブ、またはそれらの医薬として許容し得る塩から選択される前記他の抗癌薬とが、同一組成物の部分を構成する、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
PM02734またはその医薬として許容し得る塩と、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブ、またはそれらの医薬として許容し得る塩から選択される前記他の抗癌薬とが、同時にまたは異なる時点で投与するための別々の組成物として提供される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項５】
PM02734またはその医薬として許容し得る塩と、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブ、またはそれらの医薬として許容し得る塩から選択される前記他の抗癌薬とが、異なる時点で投与するための別々の組成物として提供される、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
PM02734と併用される抗癌薬が、シスプラチンまたはその医薬として許容し得る塩である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
PM02734と併用される抗癌薬が、ゲムシタビンまたはその医薬として許容し得る塩である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
PM02734と併用される抗癌薬が、パクリタキセルまたはその医薬として許容し得る塩である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
PM02734と併用される抗癌薬が、オキサリプラチンまたはその医薬として許容し得る塩である、請求項1から5のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
PM02734と併用される抗癌薬が、5-フルオロウラシルまたはその医薬として許容し得る塩である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
PM02734と併用される抗癌薬が、トラベクテジンまたはその医薬として許容し得る塩である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
PM02734と併用される抗癌薬が、ラパマイシンまたはその医薬として許容し得る塩である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
PM02734と併用される抗癌薬が、スニチニブまたはその医薬として許容し得る塩である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
治療されるべき癌が、精巣癌、膀胱癌、肺癌、咽喉癌、胃癌、卵巣癌、乳癌、膵臓癌、結腸直腸癌、白血病、メラノーマ、及び前立腺癌から選択される、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法のための薬剤を製造するための、PM02734またはその医薬として許容し得る塩の使用。
【請求項１６】
請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法のための薬剤を製造するための、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブ、またはそれらの医薬として許容し得る塩から選択される抗癌薬の使用。
【請求項１７】
請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法のための、PM02734またはその医薬として許容し得る塩。
【請求項１８】
請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法のための、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブ、またはそれらの医薬として許容し得る塩から選択される抗癌薬。
【請求項１９】
PM02734またはその医薬として許容し得る塩と、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブ、またはそれらの医薬として許容し得る塩から選択される他の抗癌薬とを含有する医薬組成物。
【請求項２０】
PM02734またはその医薬として許容し得る塩の剤形と、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブ、またはそれらの医薬として許容し得る塩から選択される他の抗癌薬の剤形と、双方の薬物を併用して使用するための説明書とを含む、癌の治療で使用するためのキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、PM02734と他の抗癌薬との組合せ(具体的には、他の抗癌薬は、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブから選択される)、ならびに癌の治療におけるこれらの組合せの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
癌は、身体の一部の細胞が制御されずに増殖し始めると、発生する。癌には多くの種類があるが、それらは、すべて、異常な細胞の制御されない増殖から生じる。癌細胞は、近傍組織を侵襲することができ、かつ血流及びリンパ系を介して身体の他の部分に拡がることができる。癌には、いくつかの主な部類がある。癌腫は、悪性新生物であり、上皮細胞から生じる制御されていない進行性の異常増殖である。上皮細胞は、臓器、脈管、及びその他の小腔の内膜を含む、身体の内表面及び外表面を覆っている。肉腫は、骨、軟骨、脂肪、筋肉、血管、またはその他の結合もしくは支持組織から生じる癌である。白血病は、骨髄などの造血組織中に生じ、多数の異常血球の産生を引き起こし、血流に入り込む癌である。リンパ腫及び多発性骨髄腫は、免疫系の細胞から生じる癌である。
【０００３】
加えて、癌は、侵襲性であり、周囲の組織に浸潤し、転移を起こす傾向がある。癌は、周囲の組織中に直接的に拡がることができ、リンパ系及び循環系を介して身体の他の部分に拡がる可能性もある。
【０００４】
限局性疾患のための手術及び放射線、ならびに化学療法を含む多くの治療法が、癌に対して利用可能である。しかし、多くの部類の癌に対して利用可能な治療法の効力は、限られており、臨床的利益を示す改善された新たな治療形態が必要とされている。このことは、進行性及び/または転移性疾患を呈しているそれらの患者にとって、及び、確立された療法で前に治療された後に、耐性の獲得または付随する毒性による療法の適用制限によって無効または不耐容となっている進行性疾患を再発している患者にとって、特に当てはまる。
【０００５】
1950年代以来、化学療法による癌の管理において、重要な進歩があった。残念ながら、すべての癌患者の50%超は、初期療法に応答しないか、あるいは治療への初期応答の後に再発を経験し、結局、進行性の転移性疾患で死亡する。したがって、新規抗癌薬の設計及び発見に対する継続的関与が、決定的に重要である。
【０００６】
その古典的形態において、化学療法は、DNA、RNA、及びタンパク質の生合成を含む細胞の全般的代謝過程を標的とすることによって、急速に増殖している癌細胞を死滅させることに主として焦点を合わせていた。化学療法薬は、それらが癌細胞内の特定の化学物質にどのように影響を及ぼすか、該薬物が細胞のどの活動または過程を妨害するか、及び該薬物が細胞周期のどの特定の段階に影響を及ぼすかに基づいていくつかの群に分けられる。最も一般的に使用される部類の化学療法薬には、DNA-アルキル化薬(シクロホスファミド、イフォスファミド、シスプラチン、カルボプラチン、ダカルバジンなど)、代謝拮抗薬(5-フルオロウラシル、カペシタビン、6-メルカプトプリン、メトトレキサート、ゲムシタビン、シタラビン、フルダラビンなど)、有糸分裂阻害薬(パクリタキセル、ドセタキセル、ビンブラスチン、ビンクリスチンなど)、アントラサイクリン(ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、イダルビシン、ミトキサントロンなど)、トポイソメラーゼI及びII阻害薬(トポテカン、イリノテカン、エトポシド、テニポシドなど)、及びホルモン療法薬(タモキシフェン、フルタミドなど)が含まれる。
【０００７】
理想的な抗腫瘍薬は、非癌細胞に対するその毒性に比較してかけ離れた指数で癌細胞を選択的に死滅させ、さらに、該薬物への長期曝露の後でさえも癌細胞に対するその効力を保持する。残念ながら、これらの薬剤を用いる現在のいずれの化学療法も、理想的なプロフィールを所持しない。ほとんどは、極めて狭い治療指数を所持し、加えて、わずかに致死量以下の濃度の化学療法薬に曝露された癌性細胞は、このような薬剤に対する耐性を、そして、他のいくつかの抗癌薬に対してかなり頻繁に交差耐性を発現する可能性がある。
【０００８】
PM02734((4S)-MeHex-D-Val-L-Thr-L-Val-D-Val-D-Pro-L-Orn-D-allo-Ile-cyclo(D-allo-Thr-D-all-Ile-D-Val-L-Phe-Z-Dhb-L-Val)は、カハラリド化合物のファミリーに関連する新規な合成デプシペプチドである。この化合物は、国際公開第2004/035613号の主題であり、次の構造を有する:
【０００９】
【化１】
2011513370.tif 000002
【００１０】
カハラリド化合物は、ハワイの草食性海洋性軟体動物種クシモトミドリガイ(Elysia rufescens)、及びその食餌である緑藻ハネモ(Briopsis)属種から初めて単離された環状デプシペプチドである。カハラリドA〜Gは、Hamannらによって発表され(J.Am.Chem.Soc.1993,115,5825〜5826及びJ.Org.Chem.1996,61,6594〜6600)、それらの多くは、癌及びAIDS関連日和見感染症に対して活性を示す。いくつかのその他の天然カハラリド化合物も、例えば、カハラリドH及びJはScheuerらによって(J.Nat.Prod.1997,60,562〜567)、カハラリドOはScheuerらによって(J.Nat.Prod.2000,63(1),152〜154)、カハラリドKはKanらによって(J.Nat.Prod.1999,62(8),1169〜1172)開示されている。
【００１１】
天然起源のカハラリド化合物の中で、カハラリドFは、その抗腫瘍活性のために、最も期待できる。欧州特許出願公開第610078号は、初期の前臨床in vitroスクリーニング研究が、マウスの白血病(P388)ならびに2種のヒト固形腫瘍:すなわち非小細胞肺腫瘍(A549)及び結腸腫瘍(HT-29)に対するカハラリドFのマイクロモルでの活性を確認したことを報告している。カハラリドFの主な作用機構は、まだ確認されていないが、カハラリドFは、MDR、Her2、P53、及びblc-2から独立に、サブG1細胞周期の休止及び細胞傷害性を誘導するNCI-COMPARE化合物であることが見出された(Janmaatら、Proceedings of the 2nd International Symposium on Signal Transduction Modulators in Cancer Therapy:23〜25 October,Amsterdam 2003:69(Abst.B02))。細胞増殖経路について遺伝子的かつ分子的に特徴付けられた60種のヒト癌細胞株のパネルにおけるCOMPARE解析は、Erb/Her-neu経路と相互作用する新たな化学的存在のリスト中にカハラリドFを含めた(Wosikowskiら、J.Natl.Cancer Inst.1997,89,1505〜1515)。カハラリドFに対する感受性は、種々の起源からの確立された細胞株のパネルの中で、ErbB3(HER3)のベースラインでの発現レベルに有意に関連していたが他のErbB3受容体のレベルには関連していなかった。さらに、ErbB3受容体に連結された下流P13K/Akt経路も、カハラリドFでの治療によって影響される。カハラリドFは、リン酸化されたAktのレベルを低下させ、この低下は、カハラリドF感受性細胞株における細胞傷害性と関連している(Janmaatら、Mol Pharmacol 2005,68,502〜510)。
【００１２】
PM02734は、in vivo癌モデルにおいて、天然起源のカハラリド化合物、特にカハラリドFを用いて観察されるような活性に関して有意に改善された効果を示した。PM02734は、白血病、メラノーマ、乳房、結腸、卵巣、膵臓、肺、及び前立腺などの広範な範囲の腫瘍型に対してin vitroで抗腫瘍活性を示し、乳房、前立腺、及びメラノーマなどのヒト腫瘍細胞形型を使用する異種移植片で移植されたマウスモデルにおいてin vivoで有意な活性を示した。さらに、PCT/US08/80309において、PM02734は、EGFRチロシンキナーゼ阻害薬、特にエルロチニブと併用して、肺癌の治療に関して評価された。
【００１３】
PM02734及びその他のカハラリド化合物、特にカハラリドF及びその類似体、それらの使用、製剤及び合成に関するより多くの情報は、特許出願、欧州特許出願公開第610078号、国際公開第2004/035613号、01/58934号、2005/023846号、2004/075910号、03/033012号、02/36145号、2005/103072号、及びPCT/US08/80309中に見出すことができる。本発明者らは、これらの出願本文のそれぞれの内容を詳細に参照して援用する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１４】
【特許文献１】国際公開第2004/035613号
【特許文献２】欧州特許出願公開第610078号
【特許文献３】PCT/US08/80309
【特許文献４】国際公開第01/58934号
【特許文献５】国際公開2005/023846号
【特許文献６】国際公開2004/075910号
【特許文献７】国際公開第03/033012号
【特許文献８】国際公開第02/36145号
【特許文献９】国際公開第2005/103072号
【非特許文献】
【００１５】
【非特許文献１】Hamannら、J.Am.Chem.Soc.1993,115,5825〜5826
【非特許文献２】Hamannら、J.Org.Chem.1996,61,6594〜6600
【非特許文献３】Scheuerら、J.Nat.Prod.1997,60,562〜567
【非特許文献４】Scheuerら、J.Nat.Prod.63(1),152〜154
【非特許文献５】Kanら、J.Nat.Prod.1999,62(8),1169〜1172
【非特許文献６】Janmaatら、Proceedings of the 2nd International Symposium on Signal Transduction Modulators in Cancer Therapy;23〜25 October,Amsterdam 2003:60(Abst.B02)
【非特許文献７】Wosikowskiら、J.Natl.Cancer Inst.1997,89,1505〜1515
【非特許文献８】Janmaatら、Mol Pharmacol 2005,68,502〜510
【非特許文献９】Chou TC及びTalalay P.、Adv.Enzyme Regul.1984,22,27〜55
【非特許文献１０】Hansenら、J.Immunol.Method,1989,119(2),203〜210
【非特許文献１１】Mosmann、J.Immunol.Methods,1983,65(1〜2),55〜63
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１６】
癌は、動物及びヒトにおける死亡の主要原因であるので、癌を患う患者に適用されるであろう安全で効果的な療法を獲得するために、いくつかの努力が、過去に企てられ、今なお行われている。本発明によって解決すべき課題は、癌治療において有用である抗癌療法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
本発明らは、PM02734が、他の抗癌薬、特に、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブの効力を増強し、かくして、それらの抗癌薬を、癌を治療するための併用療法において成功裡に使用することができることを立証した。
【００１８】
したがって、本発明は、これらの併用療法を利用して癌を治療するための医薬組成物、キット、方法、及び併用療法のための薬剤の製造におけるPM02734の使用を対象とする。
【００１９】
本発明の一態様によれば、本発明者らは、PM02734をベースとし、かつシスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブから選択される他の抗癌薬を使用する、癌を治療するための効果的な併用療法を提供する。
【００２０】
別の実施形態において、本発明は、このような治療を必要とする患者に、治療上有効な量のPM02734またはその医薬として許容し得る塩、ならびにシスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択され、PM02734を投与する前に、投与中に、投与後に投与される治療上有効な量の他の抗癌薬を投与することを含む、癌の治療方法を包含する。2種の薬物は、同一組成物の部分を構成してもよいし、あるいは、同時にまたは異なる時点で投与するための別々の組成物として提供することもできる。
【００２１】
別の態様において、本発明は、癌治療にてシスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブから選択される抗癌薬の治療効力を増大させる方法であって、それを必要とする患者に治療上有効な量のPM02734またはその医薬として許容し得る塩を投与することを含む、方法を包含する。PM02734は、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシンまたはスニチニブを投与する前に、投与中に、または投与後に投与される。
【００２２】
別の実施形態において、本発明は、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブから選択される他の抗癌薬との併用療法で癌を治療するための薬剤を製造するための、PM02734またはその医薬として許容し得る塩の使用を包含する。
【００２３】
関連する実施形態において、本発明は、PM02734との併用療法で癌を治療するための薬剤を製造するための、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される抗癌薬の使用を包含する。
【００２４】
さらなる態様において、本発明は、PM02734またはその医薬として許容し得る塩、ならびに/あるいは癌を治療するための併用療法で使用するシスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される他の抗癌薬を含有する医薬組成物を包含する。
【００２５】
本発明は、また、PM02734またはその医薬として許容し得る塩の剤形、ならびに/あるいはシスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される他の抗癌薬の剤形、ならびに双方の薬物を併用して使用するための説明書を含む癌の治療で使用するためのキットを包含する。
【００２６】
1つの好ましい態様において、本発明は、PM02734またはその医薬として許容し得る塩の、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される他の抗癌薬との相乗作用性組合せに関する。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】DU145細胞株におけるPM02734とオキサリプラチンとの併用効果を示す図である。A)PM02734をオキサリプラチンに先立って投与;B)オキサリプラチンをPM02734に先立って投与;C)PM02734をオキサリプラチンと同時に投与。
【図２】Colo205細胞株におけるPM02734とオキサリプラチンとの併用効果を示す図である。A)PM02734をオキサリプラチンに先立って投与;B)オキサリプラチンをPM02734に先立って投与;C)PM02734をオキサリプラチンと同時に投与。
【図３】DU145細胞株におけるPM02734とシスプラチンとの併用効果を示す図である。A)PM02734をシスプラチンに先立って投与;B)シスプラチンをPM02734に先立って投与;C)PM02734をシスプラチンと同時に投与。
【図４】DU145細胞株におけるPM02734と5-FUとの併用効果を示す図である。A)PM02734を5-FUに先立って投与;B)5-FUをPM02734に先立って投与;C)PM02734を5-FUと同時に投与。
【図５】Colo205細胞株におけるPM02734と5-FUとの併用効果を示す図である。A)PM02734を5-FUに先立って投与;B)5-FUをPM02734に先立って投与;C)PM02734を5-FUと同時に投与。
【図６】DU145細胞株におけるPM02734とゲムシタビンとの併用効果を示す図である。A)PM02734をゲムシタビンに先立って投与;B)ゲムシタビンをPM02734に先立って投与;C)PM02734をゲムシタビンと同時に投与。
【図７】DU145細胞株におけるPM02734とトラベクテジンとの併用効果を示す図である。A)トラベクテジンをPM02734に先立って投与;B)PM02734をトラベクテジンと同時に投与。
【図８】DU145細胞株におけるPM02734とラパマイシンとの併用効果を示す図である。A)PM02734をラパマイシンに先立って投与;B)ラパマイシンをPM02734に先立って投与;C)PM02734をラパマイシンと同時に投与。
【図９】Colo205細胞株におけるPM02734とラパマイシンとの併用効果を示す図である。A)PM02734をラパマイシンに先立って投与;B)ラパマイシンをPM02734に先立って投与;C)PM02734をラパマイシンと同時に投与。
【図１０】DU145細胞株におけるPM02734とスニチニブとの併用効果を示す図である。A)PM02734をスニチニブに先立って投与;B)スニチニブをPM02734に先立って投与;C)PM02734をスニチニブと同時に投与。
【図１１】Colo205細胞株におけるPM02734とスニチニブとの併用効果を示す図である。A)PM02734をスニチニブに先立って投与;B)スニチニブをPM02734に先立って投与。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
本発明者らは、驚くべきことに、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブの抗癌活性が、PM02734との併用で著しく増強されることを見出した。かくして、本発明は、PM02734と、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブから選択される他の抗癌薬との併用をベースにした効果的な治療を提供することを対象とする。
【００２９】
本出願において、「癌」とは、腫瘍、新生組織形成、及び原因として悪性の組織または細胞を有する任意のその他の疾患を包含することを意味する。
【００３０】
用語「治療すること」は、本明細書中で使用される場合、そうでないことを指摘しない限り、このような用語が適用される障害もしくは状態、またはこのような障害もしくは状態の症状の1つまたは複数の進行を逆転、軽減、抑制すること、またはそれらを予防することを意味する。用語「治療」は、本明細書中で使用される場合、そうでないことを指摘しない限り、直ぐ上で定義された「治療すること」のような治療する行為を指す。
【００３１】
用語「併用」は、本明細書中で使用される場合、癌を患う患者へ、言及する治療薬群を同一または別々の医薬製剤で、同一または異なる時点で投与することを包含することを意味する。治療薬群を異なる時点で投与するなら、それらの薬剤は、相乗作用のある応答が生じるように、十分に近接した時間で投与されるべきである。
【００３２】
前に言及したように、PM02734((4S)-MeHex-D-Val-L-Thr-L-Val-D-Val-D-Pro-L-Orn-D-allo-Ile-cyclo(D-allo-Thr-D-allo-Ile-D-Val-L-Phe-Z-Dhb-L-Val)は、次の構造を有する合成デプシペプチドである:
【００３３】
【化２】
2011513370.tif 000003
【００３４】
用語「PM02734」は、本明細書中で、任意の医薬として許容し得る塩、エステル、溶媒和物、水和物、プロドラッグ、または患者に投与すると本明細書に記載のような化合物を(直接または間接的に)提供する能力を有する任意の他の化合物を包含すると解釈される。塩、エステル、溶媒和物、水和物、プロドラッグ、及び誘導体の調製は、当技術分野で周知の方法によって実施することができる。
【００３５】
PM02734のプロドラッグである任意の化合物は、本発明の範囲及び精神に包含される。用語「プロドラッグ」は、その最も広範な意味で使用され、in vivoでPM02734に転換されるような誘導体を包含する。プロドラッグを、生物学的条件下で加水分解し、酸化し、または別の方法で反応させてPM02734を提供することができる。このような誘導体は、当業者にとって容易に思い浮かび、例えば、遊離ヒドロキシル基がエステル誘導体に転換された化合物が含まれる。
【００３６】
本発明により使用するためのPM02734は、参照により本明細書に援用される国際公開第2004/035613号、2005/103072号、01/58934号、及び2005/023846号中に開示されているような合成方法に従って調製することができる。
【００３７】
使用できるPM02734またはその医薬として許容し得る塩の医薬組成物には、静脈内投与に適した賦形剤を含む溶液、懸濁液、乳液、凍結乾燥組成物などが含まれる。PM02734またはその医薬として許容し得る塩の医薬組成物に関するさらなる手引きについては、例えば、参照によりその全体で本明細書に援用される国際公開第2004/035613号に記載の製剤を参照されたい。
【００３８】
PM02734またはその医薬として許容し得る塩、あるいは該化合物を含有する医薬組成物の投与は、好ましくは静脈内点滴による。最長72時間までの、より好ましくは1〜24時間の点滴時間を採用することができ、約1時間または約3時間のどちらかが最も好ましい。病院に終夜滞在しないで治療を実施することを可能にする短い点滴時間が、特に望ましい。しかし、必要なら、点滴は、約24時間、またはより長くてもよい。
【００３９】
好ましくは、PM02734の投与は、周期的に実施される。好ましい適用方法では、各サイクルの最初の週にPM02734の静脈内点滴を患者に施し、サイクルの残りで患者を回復させる。各サイクルの好ましい継続期間は1、3または4週間のどれかである。必要なら、複数のサイクルを施すことができる。別の投与プロトコールにおいて、PM02734は、3または4週間毎に連続5日間、例えば約1時間で施される。その他のプロトコールも変形として考案できる。PM02734の投与及び投与量に関する手引きについては、例えば、参照により本明細書に援用される国際公開第2004/035613号を参照されたい。
【００４０】
シスプラチンは、次の構造式を有する無機の白金剤である:
【００４１】
【化３】
2011513370.tif 000004
【００４２】
シスプラチンは、ストランド内及びストランド間のDNA架橋、及びDNA-タンパク質架橋を含む、DNA中のGCに富む部位などの求核基に結合する高度に反応性のある帯電した白金錯体を構成する。これらの架橋は、アポトーシス及び細胞増殖阻害をもたらす。この薬物は、精巣、膀胱、肺、咽喉(食道)、胃、及び卵巣癌を治療するのに最も一般的に使用される。それは、利用されるスケジュールに応じた投与量の静脈内点滴によって投与されるのが通常である。この薬物に関する情報は、シスプラチンに関して存在する多くの文献から入手できる。
【００４３】
ゲムシタビンは、次の構造式を有するヌクレオシド類似体である:
【００４４】
【化４】
2011513370.tif 000005
【００４５】
この薬物は、Gemzar(登録商標)の商品名でその塩酸塩の形態で市販されている。この薬物は、現在、いくつかの部類の癌の治療に、特に、卵巣癌、乳癌、非小細胞肺癌(NSCLC)及び膵臓癌の治療に適用されている。単剤として、ゲムシタビンは、最長で7週間の間、週1回、1000mg/mm2の投与量での30分間にわたる静脈内点滴によって投与し、続いて治療を1週間休止することが推奨されている。次のサイクルは、4週間毎に連続3週間での週1回の点滴からなるべきである。この薬物に関する情報は、ウェブサイト、www.gemzar.com.及びゲムシタビンに関する多数の文献から入手できる。
【００４６】
ゲムシタビンは、細胞期特異性を示し、主として、DNA合成(S-期)を行っている細胞を死滅させ、さらにG1/S-期の境界を通過する細胞の発達を遮断する。ゲムシタビンは、細胞内でヌクレオシドキナーゼによって代謝されて活性な二リン酸化(dFdCDP)及び三リン酸化(dFdCTP)ヌクレオシドになる。ゲムシタビンの細胞傷害効果は、DNA合成の阻害をもたらす、二リン酸化及び三リン酸化ヌクレオシドの2つの作用の組合せに帰せられる。第1に、ゲムシタビン二リン酸は、DNA合成のためのデオキシヌクレオシド三リン酸を生成する反応を触媒する責任を負うリボヌクレオチドレダクターゼを阻害する。二リン酸化ヌクレオシドによるこの酵素の阻害は、dCTPを含むデオキシヌクレオチドの濃度低下を引き起こす。第2に、ゲムシタビン三リン酸は、dCTPとDNA中への組み込みについて競合する。dCTPの細胞内濃度の低下(二リン酸の作用による)は、DNA中へのゲムシタビン三リン酸の組み込みを高める(自己増強)。ゲムシタビンヌクレオチドがDNA中に組み込まれると、ただ1つのさらなるヌクレオチドが成長するDNAストランドに付加される。この付加の後、さらなるDNA合成の阻害が存在する。DNAポリメラーゼεは、ゲムシタビンヌクレオチドを除去し、かつ成長しているDNAストランドを修復することができない(連鎖停止の遮蔽)。CEM Tリンパ芽球様細胞において、ゲムシタビンは、プログラム細胞死の特徴の1つであるヌクレオソーム間DNA断片化を誘導する。
【００４７】
パクリタキセルは、次の構造式を有する天然物である:
【００４８】
【化５】
2011513370.tif 000006
【００４９】
パクリタキセル(Taxol(登録商標))は、チューブリン二量体からの微小管の組立てを促進し、かつ解重合を防止することによって微小管を安定化する微小管薬である。この安定化は、極めて重要な間期及び有糸分裂細胞機能にとって必須である微小管ネットワークの正常な動的再構築の阻害をもたらす。加えて、それは、細胞サイクル中での微小管の異常な配列または「束」、及び有糸分裂中での微小管の多様な星状体を誘導する。
【００５０】
パクリタキセルは、卵巣、乳房及び肺の癌、ならびにAIDS関連カポジ肉腫の治療に適用される。それは、使用しているスケジュールに応じた投与量の静脈内点滴によって投与されるのが通常である。この薬物に関する情報は、パクリタキセルに関して存在する多数の文献から入手できる。
【００５１】
スニチニブは、次の構造式を有するマルチキナーゼ阻害薬である:
【００５２】
【化６】
2011513370.tif 000007
【００５３】
この薬物は、SUTENT(登録商標)の商品名でそのリンゴ酸塩の形態で市販されており、現在、いくつかの部類の癌の治療に、特に、消化管間質性腫瘍(GIST)及び腎細胞癌に適用されている。単剤として、推奨される用量は、4週間治療し、続いて2週間休止するスケジュールに基づき1日1回服用される、1回50mgの経口投与である。個々の安全性及び耐容性に基づいて12.5mgの増分での投与量の増減が推奨される。この薬物に関する情報は、ウェブサイト、www.sutent.com.及びスニチニブに関する多数の文献から入手できる。
【００５４】
オキサリプラチンは、シスプラチンと同じファミリーの白金をベースにした化学療法薬である。シスプラチンと比較すると、オキサリプラチンでは、抗腫瘍活性を改善するために、2つのアミノ基が、シクロヘキシルジアミンで代替されている。加えて、水溶性を改善するために、シスプラチンの塩素配位子が、シュウ酸に由来するオキサラト二座配位子で代替されている。
【００５５】
【化７】
2011513370.tif 000008
【００５６】
この薬物は、Eloxatin(登録商標)の商品名で市販されており、結腸直腸癌を治療するために、5-フルオロウラシル及びロイコボリンと併用して投与されるのが典型的である。この薬物に関する情報は、ウェブサイト、www.eloxatin.com.及びオキサリプラチンに関する多数の文献から入手できる。
【００５７】
5-フルオロウラシル(フルオロウラシル、5-FU)は、代謝拮抗薬と呼ばれる薬物のファミリーに属するピリミジン類似体である。
【００５８】
【化８】
2011513370.tif 000009
【００５９】
5-フルオロウラシルは、約40年間、癌の治療で使用されてきた。その主な用途のいくつかは、結腸直腸癌及び膵臓癌にあり、それは、数10年間にわたって化学療法の確立された形態であった。この薬物は、いくつかの方式で作用するが、主としてチミジン酸シンターゼ阻害薬として作用する。この酵素の作用を妨害すると、DNAの複製に必要とされるヌクレオチドであるピリミジン、チミジンの合成が遮断される。多くの抗癌薬と同様に、5-FUの効果は、全組織で感じられるが、癌細胞のようにそれらのヌクレオチド合成機構を激しく使用する急速に分裂している細胞に最も重くのしかかる。この薬物に関するさらなる情報は、5-フルオロウラシルに関する多数の文献から入手できる。
【００６０】
ラパマイシンは、シロリムスとしても知られ、初めは細菌ストレプトミセス・ヒグロスコピカス(Streptomyces hygroscopicus)の産生物として発見されたマクロライドである。
【００６１】
【化９】
2011513370.tif 000010
【００６２】
ラパマイシンは、当初、抗真菌薬として開発された。しかし、このことは、それが強力な免疫抑制及び抗増殖特性を有することが発見された時点で放棄された。ラパマイシンの抗増殖効果は、癌治療において役割を有する可能性がある。この薬物に関する情報は、ウェブサイト、www.rapamune.com.及びラパマイシンに関する多数の文献から入手できる。
【００６３】
トラベクテジンは、ET-743としても知られ、初めは、被嚢類エクテイナシジア・ツルビナタ(Ecteinascidia turbinata)中で発見された、海洋由来の抗腫瘍薬である。
【００６４】
【化１０】
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【００６５】
この薬物は、軟組織肉腫の治療のためにYondelis(登録商標)の商品名で市販されている。それは、また、卵巣癌、乳癌、肺癌、前立腺癌及び小児腫瘍に関して臨床試験を受けている。それは、DNAの副溝に結合し、細胞分裂及び遺伝的転写過程、ならびにDNA修復機構を妨害する。この薬物に関する情報は、ウェブサイト、www.yondelis.com.及びトラベクテジンに関する多数の文献から入手できる。
【００６６】
本明細書で言及される組合せの一部である薬物の医薬として許容し得る塩は、塩基性または酸性部分を含む親化合物から通常の化学的方法によって合成される。一般に、このような塩は、例えば、これらの化合物の遊離の酸または塩基形態を化学量論的量の適切な塩基または酸と水中または有機溶媒中あるいはこれら2種の混合物中で反応させることによって調製される。一般に、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノールまたはアセトニトリルのような非水性媒質が好ましい。酸付加塩の例には、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩などの鉱酸付加塩、ならびに例えば、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、シュウ酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、マンデル酸塩、メタンスルホン酸塩及びp-トルエンスルホン酸塩などの有機酸付加塩が含まれる。アルカリ付加塩の例には、例えば、ナトリウム、カリウム、カルシウム及びアンモニウム塩などの無機塩、ならびに例えば、エチレンジアミン、エタノールアミン、N,N-ジアルキレンエタノールアミン、トリエタノールアミン及び塩基性アミノ酸塩などの有機アルカリ塩が含まれる。
【００６７】
加えて、本明細書中で言及される任意の薬物は、遊離化合物または溶媒和物(例えば、水和物)のいずれかとしての結晶性形態であってよく、双方の形態とも、本発明の範囲に包含されると解釈される。溶媒和の方法は、一般に、当技術分野で周知である。
【００６８】
本発明の治療方法による抗癌効果には、腫瘍の種類及び疾患の進行段階に応じて、限定はされないが、腫瘍増殖の阻害、腫瘍増殖の遅延、腫瘍の退行、腫瘍の縮小、治療休止における腫瘍再増殖までの時間の増大、疾患進行の減速、及び転移の防止が含まれる。本発明の治療方法を、このような治療を必要とするヒト患者などの患者に適用した場合、前記の治療方法は、例えば、抗癌効果の程度、応答率、疾患進行までの時間、または生存率によって測定されるような効果をもたらす。特に、本発明の治療方法は、ヒト患者、特に、再発しているまたは以前の化学療法に対して不応性である患者に適している。最初に使用する療法も考えられる。
【００６９】
本発明の組合せは、単独で、または各種の抗癌薬または支持薬の1種または複数と併用して使用できる。
【００７０】
一実施形態において、本発明は、PM02734またはその医薬として許容し得る塩、ならびにシスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される他の抗癌薬を採用する相乗作用のある組合せに関する。相乗効果の徴候は、組合せを試験すること、及び例えば、Chou-Talalay法によって結果を解析することによって得ることができる。この問題を説明するためには実施例1〜4が参照される。
【００７１】
別の態様において、本発明は、PM02734またはその医薬として許容し得る塩を、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される他の抗癌薬と共に採用する併用療法によって癌を効果的に治療するための薬剤を製造するための、PM02734またはその医薬として許容し得る塩の使用を対象とする。
【００７２】
関連する態様において、本発明は、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシンまたはスニチニブあるいはその医薬として許容し得る塩を、PM02734またはその医薬として許容し得る塩と共に採用する併用療法によって癌を効果的に治療するための薬剤を製造するための、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される抗癌薬の使用を対象とする。
【００７３】
さらなる態様において、本発明は、このような治療を必要とする患者に、治療用有効な量のPM02734またはその医薬として許容し得る塩を、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される治療上有効な量の他の抗癌薬と組み合わせて投与することを含む、癌の治療方法を対象とする。
【００７４】
本発明は、また、このような治療を必要とする患者に、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される治療上有効な量の抗癌薬を、治療用有効な量のPM02734またはその医薬として許容し得る塩と組み合わせて投与することを含む、癌の治療方法を提供とする。
【００７５】
組合せの薬物は、一緒に、代わるがわる、または別々に、1つの組合せ単位剤形で、あるいは2つの別々の単位剤形で投与できる。単位剤形は、固定された組合せでもよい。
【００７６】
同時投与は、例えば、2種以上の活性成分を含む1つの固定された組合せの形態で、または独立に製剤される2種以上の活性成分を同時に投与することによって行うことができる。
【００７７】
逐次使用投与は、好ましくは、ある組合せ中の1つ(またはそれ以上)の成分をある時点で投与し、残りの成分を異なる時点で、すなわち好ましくは、該組合せが、独立に投与される単一化合物よりもより大きな効力を示す(特に相乗効果を示す)ように、長期的に交互交替的に投与することを意味する。
【００７８】
別々の使用(投与)は、好ましくは、組合せ中の成分を互いに独立に異なる時点で投与することを意味する。
【００７９】
したがって、PM02734またはその医薬として許容し得る塩、ならびにシスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される他の抗癌薬は、同時にまたは異なる時点で投与するための別々の薬剤として提供することができる。好ましくは、PM02734及び他の抗癌薬は、異なる時点で投与するための別々の薬剤として提供される。別々に及び異なる時点で投与する場合には、PM02734または他の抗癌薬のどちらかを最初に投与することができる。加えて、双方の薬物を、同一日にまたは異なる日に投与することができ、それらは、治療サイクルの間に同一のスケジュールまたは異なるスケジュールを使用して投与することができる。したがって、本発明の医薬組成物は、単一の医薬として許容し得る製剤中にすべての成分(薬物)を含有することができる。別法として、成分を、別々に製剤し、互いに組み合わせて投与することもできる。本発明では、当業者に周知の医薬として許容し得る各種の製剤を、使用することができる。さらに、組合せの薬物は、異なる投与経路を利用して投与できる。例えば、一方の薬物は、例えば、錠剤またはカプセルのように経口投与に適した形態、他方の薬物は、例えば、無菌の溶液、懸濁液または乳液のように非経口注射(静脈内、皮下、筋内、血管内または点滴)に適した形態でよい。別法として、双方の薬物は、同一投与経路で投与できる。本発明で使用するのに適切な製剤の選択は、投与方式及び組成物中の成分の溶解特性に基づいて、当業者が定型的に実施することができる。
【００８０】
組合せ中の化合物の妥当な投与量は、個々の製剤、適用方式、ならびに治療される個々の部位、宿主及び腫瘍により異なる。年齢、体重、性別、食事、投与時刻、排泄速度、宿主の状態、薬物の組合せ、反応感受性、及び疾患の重症度のようなその他の因子を考慮するものとする。投与は、最大耐容投与量の範囲内で連続的にまたは周期的に実施することができる。
【００８１】
別の態様において、本発明は、癌の治療において、PM02734を、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブから選択される他の抗癌薬と組み合わせて投与するためのキットを対象とし、該キットは、PM02734またはその医薬として許容し得る塩の少なくとも1サイクル用の投与単位での補給品、及び双方の薬物を組み合わせて使用するための印刷された説明書を含む。
【００８２】
関連する態様において、本発明は、癌の治療において、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブから選択される抗癌薬を、PM02734と組み合わせて投与するためのキットを対象とし、該キットは、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される抗癌薬の少なくとも1サイクル用の投与単位での補給品、及び双方の薬物を組み合わせて使用するための印刷された説明書を含む。
【００８３】
関連する態様において、本発明は、癌の治療において、PM02734を、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン及びスニチニブから選択される他の抗癌薬と組み合わせて投与するためのキットを対象とし、該キットは、PM02734またはその医薬として許容し得る塩の少なくとも1サイクル用の投与単位での補給品、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される抗癌薬の少なくとも1サイクル用の投与単位での補給品、及び双方の薬物を組み合わせて使用するための印刷された説明書を含む。
【００８４】
別の態様において、本発明は、また、癌の治療において、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブから選択される他の抗癌薬と組み合わせて使用するための、PM02734またはその医薬として許容し得る塩、及び医薬として許容し得る担体を含有する医薬組成物を提供する。
【００８５】
さらなる態様において、本発明は、また、癌の治療において、PM02734と組み合わせて使用するための、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される抗癌薬、及び医薬として許容し得る担体を含有する医薬組成物を提供する。
【００８６】
加えて、本発明は、また、PM02734またはその医薬として許容し得る塩、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される抗癌薬、ならびに医薬として許容し得る担体を含有する、癌の治療において使用するための医薬組成物を提供する。
【００８７】
別の態様において、本発明は、さらに、癌の治療においてシスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブから選択される他の抗癌薬と組み合わせて使用するための組成物の調製における、PM02734またはその医薬として許容し得る塩の使用を提供する。
【００８８】
関連する態様において、本発明は、さらに、癌の治療においてPM02734と組み合わせて使用するための組成物の調製における、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される抗癌薬の使用を提供する。
【００８９】
そしてさらなる態様において、本発明は、また、癌の治療で使用するための組成物の調製における、PM02734またはその医薬として許容し得る塩、ならびにシスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される他の抗癌薬の使用を提供する。
【００９０】
別の態様において、本発明は、さらに、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブから選択される他の抗癌薬との併用療法で癌を治療するための薬剤を製造するための、PM02734またはその医薬として許容し得る塩の使用を提供する。
【００９１】
関連する態様において、本発明は、さらに、PM02734との併用療法で癌を治療するための薬剤を製造するための、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される抗癌薬の使用を提供する。
【００９２】
関連する態様において、本発明は、さらに、癌を治療するための薬剤を製造するための、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される他の抗癌薬と組み合わせたPM02734またはその医薬として許容し得る塩の使用を提供する。
【００９３】
別の態様において、本発明は、さらに、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブから選択される他の抗癌薬との併用療法で癌を治療するための、PM02734またはその医薬として許容し得る塩の使用を提供する。
【００９４】
関連する態様において、本発明は、さらに、PM02734との併用療法で癌を治療するための、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される抗癌薬の使用を提供する。
【００９５】
別の態様において、本発明は、さらに、PM02734またはその医薬として許容し得る塩の、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される他の抗癌薬と組み合わせた、癌を治療するための使用を提供する。
【００９６】
別の態様において、本発明は、さらに、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブから選択される他の抗癌薬との併用療法における、薬剤としてのPM02734またはその医薬として許容し得る塩の使用を提供する。
【００９７】
関連する態様において、本発明は、さらに、PM02734との併用療法における、薬剤としてのシスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される抗癌薬の使用を提供する。
【００９８】
別の実施態様において、本発明は、さらに、PM02734またはその医薬として許容し得る塩の、薬剤としてのシスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される他の抗癌薬と組み合わせた使用を提供する。
【００９９】
別の態様において、本発明は、さらに、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される他の抗癌薬との併用療法における、癌を治療するための薬剤としてのPM02734またはその医薬として許容し得る塩の使用を提供する。
【０１００】
関連する態様において、本発明は、さらに、PM02734またはその医薬として許容し得る塩との併用療法における、癌を治療するための薬剤としてのシスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される抗癌薬の使用を提供する。
【０１０１】
別の実施形態において、本発明は、さらに、PM02734またはその医薬として許容し得る塩の、癌を治療するための薬剤としてのシスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される他の抗癌薬と組み合わせた使用を提供する。
【０１０２】
別の態様において、本発明は、治療上有効な量のPM02734またはその医薬として許容し得る塩を、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される治療上有効な量の抗癌薬と組み合わせて投与することを含む、癌治療のための、PM02734またはその医薬として許容し得る塩を提供する。
【０１０３】
関連する態様において、本発明は、さらに、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される治療上有効な量の抗癌薬を、治療上有効な量のPM02734またはその医薬として許容し得る塩と組み合わせて投与することを含む、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される、癌を治療するための抗癌薬を提供する。
【０１０４】
別の態様において、本発明は、治療上有効な量のPM02734またはその医薬として許容し得る塩を、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される治療上有効な量の他の抗癌薬の投与と組み合わせて投与することを含み、該組合せが、一緒にまたは別々に投与されてもよい、癌の治療を提供する。
【０１０５】
好ましくは、PM02734またはその医薬として許容し得る塩の、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される他の抗癌薬との組合せは、精巣癌、膀胱癌、肺癌、咽喉癌、胃癌、卵巣癌、乳癌、膵臓癌、結腸直腸癌(結腸癌としても知られる)、白血病、メラノーマ、及び前立腺癌を治療するのに使用される。特に好ましいのは、肺癌、乳癌、結腸直腸癌、及び前立腺癌を治療するための組合せの使用である。
【０１０６】
一実施形態では、癌細胞を、PM02734またはその医薬として許容し得る塩とシスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される他の抗癌薬との組合せと接触させるか、あるいはそれを用いて治療する。癌細胞は、好ましくは、ヒト細胞であり、癌腫細胞、肉腫細胞、白血病細胞、リンパ腫細胞、及び骨髄腫細胞が含まれる。より好ましくは、癌細胞には、精巣癌細胞、膀胱癌細胞、肺癌細胞、咽喉癌細胞、胃癌細胞、卵巣癌細胞、乳癌細胞、膵臓癌細胞、結腸直腸癌細胞、白血病細胞、メラノーマ細胞、及び前立腺癌細胞が含まれる。特に、癌細胞には、ヒト肺癌細胞、ヒト乳癌細胞、ヒト結腸直腸癌細胞、及びヒト前立腺癌細胞が含まれる。加えて、該組合せは、癌細胞に対して、特に、ヒト肺癌細胞、ヒト乳癌細胞、ヒト結腸直腸癌細胞、及びヒト前立腺癌細胞に対して相乗的な阻害効果を提供する。
【０１０７】
例えば、該組合せは、被接触癌細胞の増殖または生存を阻害する。被接触癌細胞の増殖または生存が非接触癌細胞と比較してより低いレベルであることは、PM02734またはその医薬として許容し得る塩とシスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される他の抗癌薬との組合せが、その特定タイプの癌を有する患者を治療するのに有効であることを支持する。
【０１０８】
別の態様において、本発明は、前記癌細胞を、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブから選択される他の抗癌薬と組み合わせた有効量のPM02734またはその医薬として許容し得る塩と接触させることを含む、癌細胞の増殖阻害法を提供する。
【０１０９】
関連する態様において、本発明は、前記癌細胞を、PM02734と組み合わせた、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される有効量の抗癌薬と接触させることを含む、癌細胞の増殖阻害法を提供する。
【０１１０】
関連する態様において、本発明は、前記細胞を、PM02734またはその医薬として許容し得る塩とシスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される抗癌薬との有効な組合せと、一緒にまたは別々に接触させることを含む、癌細胞の増殖阻害法を提供する。
【０１１１】
別の態様において、本発明は、前記癌細胞を、PM02734またはその医薬として許容し得る塩と、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される他の抗癌薬との相乗作用のある組合せと、一緒にまたは別々に接触させることを含み、前記組合せが、(i)シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブから選択される抗癌薬の不在下でのPM02734またはその医薬として許容し得る塩、または(ii)PM02734の不在下でのシスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される抗癌薬と比較して、癌細胞の増殖に対して改善された阻害を提供する、癌細胞の増殖阻害法を提供する。
【０１１２】
別の態様において、本発明は、癌細胞の増殖を阻害するために、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブから選択される他の抗癌薬と組み合わせて使用するための、有効量のPM02734または医薬として許容し得るその塩を含有する医薬組成物を提供する。
【０１１３】
関連する態様において、本発明は、癌細胞の増殖を阻害するために、PM02734と組み合わせて使用するための、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される有効量の抗癌薬を含有する医薬組成物を提供する。
【０１１４】
関連する態様において、本発明は、癌細胞の増殖を阻害するために、PM02734またはその医薬として許容し得る塩、ならびにシスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される他の抗癌薬との有効な組合せを含有する医薬組成物を提供する。
【０１１５】
別の態様において、本発明は、癌細胞の増殖を阻害するための、PM02734またはその医薬として許容し得る塩と、シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される他の抗癌薬との相乗作用のある組合せを含有し、前記組合せが、(i)シスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン及びスニチニブから選択される抗癌薬の不在下でのPM02734またはその医薬として許容し得る塩、または(ii)PM02734の不在下でのシスプラチン、ゲムシタビン、パクリタキセル、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、トラベクテジン、ラパマイシン、及びスニチニブまたはその医薬として許容し得る塩から選択される抗癌薬と比較して、癌細胞の増殖に対して改善された阻害を提供する、医薬組成物を提供する。
【０１１６】
以下の実施例により本発明をさらに説明する。これらの実施例を、本発明の範囲を限定するものと解釈すべきでない。
【０１１７】
より簡潔な説明を提供するために、本明細書中に示される量的表現の中には、用語「約」で形容されないものもある。用語「約」を明示して使用しているかどうかに関わらず、本明細書中に示されるすべての量は、現に示された値を指すことを意味し、かつまた、その量は、このような示された値に対する、当技術分野の通常の技能に基づいて合理的に推測されるであろう近似値(同一値またはこのような示された値を得るための実験及び/または測定条件に起因する近似値を含む)を指すことを意味する。
【０１１８】
(実施例)
(実施例1)
シスプラチン、ゲムシタビン及びパクリタキセルと組み合わせたPM02734の肺癌細胞株に対する効果を判定するためのin vitro研究
単剤としての、またはシスプラチン、ゲムシタビン及びパクリタキセルから選択される他の抗癌薬と組み合わせたPM02734を、肺癌と関連するいくつかの腫瘍細胞株に対して評価した。具体的には、試験する細胞株は、ATCCから入手したA549(ATCC番号CCL-185)、欧州コレクションDSMZから入手したDV90(ACC番号307)(www.dsmz.de)、及び米国コレクションDTP(Developmental Therapeutics Program of the NCI)から入手したHOP62(http://dtp.nci.gov/index.html)とした。これらの細胞株を、次の培地中で培養した:
・A549細胞は、2mM L-グルタミン及び1.5g/L重炭酸ナトリウムで補足されたHAM'S F12培地中で増殖させた。
・DV90及びHOP62細胞は、2mM L-グルタミンで補足されたRPMI培地中で増殖させた。
すべての培養培地は、10%ウシ胎児血清(FBS)、100μg/mLペニシリン、100μg/mLストレプトマイシン、0.25μg/mLアムホテリシンB、及び25mM HEPESで補足した。
【０１１９】
スクリーニングは2つの要素について実施した:
a.第1のセットのアッセイでは、それぞれの腫瘍細胞株において、薬物に72時間曝露した後の各薬物のIC50値を求めた。
【０１２０】
細胞を、24ウェルプレートに70%の集密で播種した。詳細には、A549細胞株では40000細胞/ウェル、DV90細胞株では75000細胞/ウェル、HOP62細胞株では60000細胞/ウェルで播種した。24時間後、細胞を、異なる濃度のPM02734トリフルオロ酢酸塩、シスプラチン、パクリタキセルまたはゲムシタビン塩酸塩に5%CO2及び80%を超える湿度下で37℃で72時間曝露した。インキュベーション期間の終末時に、クリスタルバイオレット法で生存率をアッセイした。簡潔には、細胞を、PBSで洗浄し、次いで2%グルタルアルデヒド中で20分間固定し、PBS中で再び2回洗浄し、クリスタルバイオレットで20分間染色し、次いで大量の脱イオン水で洗浄した。着色剤を1%酢酸で回収し、590nmで光学密度を評価した。細胞生存率を、590nmの分光測定で定量された着色剤の量に対応させた。実験は、三つ組みで実施した。
【０１２１】
各薬物について得られた個々のIC50値をTable I(表1)に示す。
【０１２２】
【表１】
2011513370.tif 000012
【０１２３】
b.第2のセットのアッセイでは、各細胞株を、PM02734と、前に挙げた抗癌薬のそれぞれと組み合わせてインキュベートした。
【０１２４】
PM02734トリフルオロ酢酸塩を、ゲムシタビン塩酸塩、シスプラチンまたはパクリタキセルと、各薬物の単独でのIC50値の0.125、0.25、0.5、1及び2倍に相当する固定比率の投与量で組み合わせた。例外として、DV90細胞株に関してPM02734トリフルオロ酢酸をゲムシタビン塩酸塩またはパクリタキセルと組み合わせた場合、試験される固定比率の投与量は、各薬物の単独でのIC50値の0.0625、0.125、0.25、0.5及び1倍に相当させた。
【０１２５】
併用指数(CI)は、用量-効果曲線の効力及び形状を考慮に入れるChou-Talalay式に基づいて計算した。CI<1、CI=1、CI>1は、それぞれ、相乗作用、相加効果、及び拮抗作用を指摘する(Chou TC及びTalalay P.、Adv.Enzyme Regul.1984,22,27〜55)。Chou-Talalayの併用指数解析には、CalcuSynソフトウェア(Biosoft、Ferguson、ミズーリ州)を使用した。
【０１２６】
Table II(表2)に、PM02734をシスプラチンと種々の投与量で組み合わせて得られたA549細胞株に対する併用指数(CI)を示す。
【０１２７】
【表２】
2011513370.tif 000013
【０１２８】
Table III(表3)に、PM02734をシスプラチンと種々の投与量で組み合わせて得られたDV90細胞株に対する併用指数(CI)を示す。
【０１２９】
【表３】
2011513370.tif 000014
【０１３０】
Table IV(表4)に、PM02734をシスプラチンと種々の投与量で組み合わせて得られたHOP62細胞株に対する併用指数(CI)を示す。
【０１３１】
【表４】
2011513370.tif 000015
【０１３２】
これらのアッセイにより、PM02734のシスプラチンとの組合せは、肺癌細胞株、特にDV90及びHOP62細胞株において双方の薬物の高投与量で相乗作用を示すことが見出された。
【０１３３】
Table V(表5)に、PM02734をパクリタキセルと種々の投与量で組み合わせて得られたA549細胞株に対する併用指数(CI)を示す。
【０１３４】
【表５】
2011513370.tif 000016
【０１３５】
Table VI(表6)に、PM02734をパクリタキセルと種々の投与量で組み合わせて得られたDV90細胞株に対する併用指数(CI)を示す。
【０１３６】
【表６】
2011513370.tif 000017
【０１３７】
Table VII(表7)に、PM02734をパクリタキセルと種々の投与量で組み合わせて得られたHOP62細胞株に対する併用指数(CI)を示す。
【０１３８】
【表７】
2011513370.tif 000018
【０１３９】
これらのアッセイにより、PM02734のパクリタキセルとの組合せは、肺癌細胞株において相乗作用を示すことが見出された。特に、相乗作用は、A549及びDV90細胞株では双方の薬物の低投与量で、HOP62細胞株では広範な範囲の投与量で観察された。
【０１４０】
Table VIII(表8)に、PM02734をゲムシタビンと種々の投与量で組み合わせて得られたA549細胞株に対する併用指数(CI)を示す。
【０１４１】
【表８】
2011513370.tif 000019
【０１４２】
Table IX(表9)に、PM02734をゲムシタビンと種々の投与量で組み合わせて得られたDV90細胞株に対する併用指数(CI)を示す。
【０１４３】
【表９】
2011513370.tif 000020
【０１４４】
Table X(表10)に、PM02734をゲムシタビンと種々の投与量で組み合わせて得られたHOP62細胞株に対する併用指数(CI)を示す。
【０１４５】
【表１０】
2011513370.tif 000021
【０１４６】
これらのアッセイにより、PM02734のゲムシタビンとの組合せは、肺癌細胞株において相乗作用を示すことが見出された。特に、相乗作用は、A549及びHOP62細胞株では双方の薬物の低投与量で、DV90細胞株では低及び高投与量で観察された。
【０１４７】
(実施例2)
シスプラチン、ゲムシタビン及びパクリタキセルと組み合わせたPM02734の乳癌細胞株に対する効果を判定するためのin vitro研究
単剤としての、またはシスプラチン、ゲムシタビン塩酸塩及びパクリタキセルから選択される他の抗癌薬と組み合わせたPM02734トリフルオロ酢酸塩を、乳腺癌と関連するいくつかの腫瘍細胞株に対して評価した。具体的には、試験する細胞株は、すべてATCCから入手したMDA-MB-231(ATCC番号HTB-26)、MDA-MB-435(ATCC番号HTB-129)、及びMCF7(ATCC番号HTB-22)とした。これらの細胞株を、次の培地中で培養した:
・MDA-MB-231及びMDA-MB-435細胞は、2mM L-グルタミン及び4.5g/Lグルコースで補足されたDMEM中で増殖させた。
・MCF-7細胞は、2mM L-グルタミンで補足されたRPMI培地中で増殖させた。
すべての培養培地は、10%ウシ胎児血清(FBS)、100μg/mLペニシリン、100μg/mLストレプトマイシン、0.25μg/mLアムホテリシンB、及び25mM HEPESで補足した。
【０１４８】
スクリーニングは2つの要素について実施した:
a.第1のセットのアッセイでは、それぞれの腫瘍細胞株において、薬物に72時間曝露した後の各薬物のIC50値を求めた。
【０１４９】
細胞を、24ウェルプレートに70%の集密で播種した。詳細には、MDA-MB-231細胞株では30000細胞/ウェル、MDA-MB-435細胞株では40000細胞/ウェル、MCF-7細胞株では60000細胞/ウェルで播種した。次いで、実施例1で開示したものと同様の方法論を使用した。
【０１５０】
個々のIC50値をTable XI(表11)に示す。
【０１５１】
【表１１】
2011513370.tif 000022
【０１５２】
b.第2のセットのアッセイでは、各細胞株を、PM02734トリフルオロ酢酸塩と、前に挙げた抗癌薬のそれぞれと組み合わせてインキュベートした。実施例1で開示したものと同様の方法論を使用した。
【０１５３】
Table XII(表12)に、PM02734をシスプラチンと種々の投与量で組み合わせて得られたMDA-MB-231細胞株に対する併用指数(CI)を示す。
【０１５４】
【表１２】
2011513370.tif 000023
【０１５５】
Table XIII(表13)に、PM02734をシスプラチンと種々の投与量で組み合わせて得られたMDA-MB-435細胞株に対する併用指数(CI)を示す。
【０１５６】
【表１３】
2011513370.tif 000024
【０１５７】
Table XIV(表14)に、PM02734をシスプラチンと種々の投与量で組み合わせて得られたMCF7細胞株に対する併用指数(CI)を示す。
【０１５８】
【表１４】
2011513370.tif 000025
【０１５９】
これらのアッセイにより、PM02734のシスプラチンとの組合せは、乳腺癌細胞株において相乗作用を示すことが見出された。特に、相乗作用は、MDA-MB-231細胞株では双方の薬物の低投与量で、MD-MB-435細胞株では低及び高投与量で、及びMCF7細胞株では高投与量で見出された。
【０１６０】
Table XV(表15)に、PM02734をパクリタキセルと種々の投与量で組み合わせて得られたMDA-MB-231細胞株に対する併用指数(CI)を示す。
【０１６１】
【表１５】
2011513370.tif 000026
【０１６２】
Table XVI(表16)に、PM02734をパクリタキセルと種々の投与量で組み合わせて得られたMDA-MB-435細胞株に対する併用指数(CI)を示す。
【０１６３】
【表１６】
2011513370.tif 000027
【０１６４】
Table XVII(表17)に、PM02734をパクリタキセルと種々の投与量で組み合わせて得られたMCF7細胞株に対する併用指数(CI)を示す。
【０１６５】
【表１７】
2011513370.tif 000028
【０１６６】
これらのアッセイにより、PM02734のパクリタキセルとの組合せは、乳癌細胞株において相乗作用を示すことが見出された。特に、相乗作用は、MDA-MB-435細胞株では双方の薬物の低及び高投与量で、MCF7細胞株では低投与量で観察された。
【０１６７】
Table XVIII(表18)に、PM02734をゲムシタビンと種々の投与量で組み合わせて得られたMDA-MB-231細胞株に対する併用指数(CI)を示す。
【０１６８】
【表１８】
2011513370.tif 000029
【０１６９】
Table XIX(表19)に、PM02734をゲムシタビンと種々の投与量で組み合わせて得られたMDA-MB-435細胞株に対する併用指数(CI)を示す。
【０１７０】
【表１９】
2011513370.tif 000030
【０１７１】
Table XX(表20)に、PM02734をゲムシタビンと種々の投与量で組み合わせて得られたMCF7細胞株に対する併用指数(CI)を示す。
【０１７２】
【表２０】
2011513370.tif 000031
【０１７３】
これらのアッセイにより、PM02734のゲムシタビンとの組合せは、乳癌細胞株において相乗作用を示すことが見出された。特に、相乗作用は、MDA-MB-231及びMDA-MB-435細胞株では双方の薬物の広範な範囲の投与量範囲で、MCF-7細胞株では双方の薬物の高投与量で観察された。
【０１７４】
(実施例3)
シスプラチン、ゲムシタビン及びパクリタキセルと組み合わせたPM02734の結腸癌細胞株に対する効果を判定するためのin vitro研究
単剤としての、またはシスプラチン、ゲムシタビン塩酸塩及びパクリタキセルから選択される他の抗癌薬と組み合わせたPM02734トリフルオロ酢酸塩を、結腸直腸腺癌と関連するいくつかの腫瘍細胞株に対して評価した。具体的には、試験する細胞株は、ATCCから入手したDLD1(ATCC番号CCL-221)及びHT29(ATCC番号HTB-38)とした。これらの細胞株を、次の培地中で培養した:
・DLD1細胞は、2mM L-グルタミン及び4.5g/Lグルコースで補足されたDMEM中で増殖させた。
・HT29細胞は、2mM L-グルタミンで補足されたRPMI培地中で増殖させた。
すべての培養培地は、10%ウシ胎児血清(FBS)、100μg/mLペニシリン、100μg/mLストレプトマイシン、0.25μg/mLアムホテリシンB、及び25mM HEPESで補足した。
【０１７５】
スクリーニングは2つの要素について実施した:
a.第1のセットのアッセイでは、それぞれの腫瘍細胞株において、薬物に72時間曝露した後の各薬物のIC50値を求めた。
【０１７６】
細胞を、24ウェルプレートに75%の集密で播種した。詳細には、DLD1細胞株では60000細胞/ウェル、HT29細胞株では75000細胞/ウェルで24ウェルプレートに播種した。次いで、実施例1で開示したものと同様の方法論を使用した。
【０１７７】
個々のIC50値をTable XXI(表21)に示す。
【０１７８】
【表２１】
2011513370.tif 000032
【０１７９】
b.第2のセットのアッセイでは、各細胞株を、PM02734トリフルオロ酢酸塩と、前に挙げた抗癌薬のそれぞれと組み合わせてインキュベートした。実施例1で開示したものと同様の方法論を使用した。
【０１８０】
Table XXII(表22)に、PM02734をシスプラチンと種々の投与量で組み合わせて得られたDLD1細胞株に対する併用指数(CI)を示す。
【０１８１】
【表２２】
2011513370.tif 000033
【０１８２】
Table XXIII(表23)に、PM02734をシスプラチンと種々の投与量で組み合わせて得られたHT29細胞株に対する併用指数(CI)を示す。
【０１８３】
【表２３】
2011513370.tif 000034
【０１８４】
これらのアッセイにより、PM02734のシスプラチンとの組合せは、結腸直腸腺癌細胞株において相乗作用を示すことが見出された。特に、相乗作用は、DLD1細胞株において双方の薬物の広範な範囲の投与量で観察された。
【０１８５】
Table XXIV(表24)に、PM02734をパクリタキセルと種々の投与量で組み合わせて得られたDLD1細胞株に対する併用指数(CI)を示す。
【０１８６】
【表２４】
2011513370.tif 000035
【０１８７】
Table XXV(表25)に、PM02734をパクリタキセルと種々の投与量で組み合わせて得られたHT29細胞株に対する併用指数(CI)を示す。
【０１８８】
【表２５】
2011513370.tif 000036
【０１８９】
これらのアッセイにより、PM02734のパクリタキセルとの組合せは、結腸直腸腺癌細胞株において相乗作用を示すことが見出された。特に、相乗作用は、DLD1細胞株において双方の薬物の広範な範囲の投与量で観察された。
【０１９０】
Table XXVI(表26)に、PM02734をゲムシタビンと種々の投与量で組み合わせて得られたDLD1細胞株に対する併用指数(CI)を示す。
【０１９１】
【表２６】
2011513370.tif 000037
【０１９２】
Table XXVII(表27)に、PM02734をゲムシタビンと種々の投与量で組み合わせて得られたHT29細胞株に対する併用指数(CI)を示す。
【０１９３】
【表２７】
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【０１９４】
これらのアッセイにより、PM02734のゲムシタビンとの組合せは、結腸直腸腺癌細胞株において相乗作用を示すことが見出された。特に、相乗作用は、DLD1細胞株において双方の薬物の広範な範囲の投与量で観察された。
【０１９５】
(実施例4)
オキサリプラチン、シスプラチン、5-FU、ゲムシタビン、トラベクテジン、ラパマイシン及びスニチニブと組み合わせたPM02734の結腸癌細胞株に対する効果を判定するためのin vitro研究
オキサリプラチン、シスプラチン、5-FU、ゲムシタビン、トラベクテジン、ラパマイシン及びスニチニブから選択される他の抗癌薬と組み合わせたPM02734を、1つは前立腺癌もう1つは結腸癌に関連した2種の腫瘍細胞株に対して評価した。具体的には、試験する細胞株は、ATCC(Rockville、メリーランド州)から入手したDU145(前立腺癌)及びColo205(結腸癌)とした。
【０１９６】
細胞は、10%ウシ胎児血清(InVitrogen、Cergy-Pontoise、フランス)、2mMグルタミン、100単位/mLペニシリン及び100μg/mLストレプトマイシンで補足されたRPMI培地中で単層として増殖させた。すべての細胞を、トリプシン/EDTA(それぞれ、0.25%及び0.02%、InVitrogen、Cergy-Pontoise、フランス)を使用して週に2回分割し、2.5×104細胞/mlの濃度で接種した。すべての細胞株は、Stratageneキット(La Jolla、カリフォルニア州)を使用するPCRによってマイコプラズマ(Mycoplasma)汚染について定期的に検定した。
【０１９７】
組合せは、腫瘍細胞株のPM02734及びその他の薬物への同時または逐次曝露によって試験した:
a.同時薬物曝露では、細胞を、2×103細胞/ウェルで96ウェルプレートに接種し、24時間後に、2種の薬物で同時に、増加する濃度のPM02734トリフルオロ酢酸塩単独またはIC20、IC40もしくはIC60値に相当する各種濃度の他の薬物のどちらかを用いて治療した。ほぼ4回の倍加時間の後、増殖阻害効果をMTTアッセイで測定した。併用研究は、各化合物に関する単一薬物でのインキュベーションと比較して実施した。
b.逐次薬物曝露では、細胞を、2×103細胞/ウェルで96ウェルプレートに接種し、24時間増殖させた。次いで、細胞を、各種濃度の第1薬物に24時間(48時間)曝露し、薬物を除去し、細胞を洗浄し、第2薬物を添加した。さらなる薬物曝露の後に、第2薬物を除去し、細胞を、洗浄し、薬物不含培地中で72時間の事後インキュベーションを行った。次いで、MTTアッセイにより増殖阻害を求めた。
【０１９８】
MTTアッセイは、以前に発表されているように実施した(Hansenら、J.Immunol.Method,1989,119(2),203〜210)。簡潔には、細胞は、2×103細胞/ウェルの密度で96ウェル組織培養プレートに接種した。細胞生存率は、120時間インキュベートした後に、黄色水溶性テトラゾリウムMTT(3-[4,5-ジメチルチアゾール-2-イル]-2,5-ジフェニルテトラゾリウムブロミド;Sigma社、Saint-Quentin Fallavier、フランス)の紫色非水溶性フォルマザンへの比色定量的な転換によって測定した。この反応は、ミトコンドリアのデヒドロゲナーゼによって触媒され、相対的生存細胞数を見積るのに使用される(Mosmann、J.Immunol.Methods,1983,65(1〜2),55〜63)。細胞を、0.4mg/mLのMTTと共に37℃で4時間インキュベートした。インキュベートした後、上清液を廃棄し、細胞ペレットを0.1mLのDMSOに再懸濁し、マイクロプレートリーダー(Molecular Devices、Menlo Park、カリフォルニア州)を使用して、560nmで吸光度を測定した。非治療細胞を含むウェル、または細胞不含の薬物含有培地を含むウェルを、それぞれ陽性及び陰性対照として使用した。非治療対照細胞の比率として増殖阻害曲線をプロットした。
【０１９９】
薬物併用の効果は、メディアン効果(median effect)の原理に基づくChou及びTalalay法を使用して評価した(Chou及びTalalay、Adv.Enzyme Regul.1984,22,27〜55)。これは、各薬物について、及び多数の希釈された固定比率の組合せについて、式:fa/fu=(C/Cm)mを使用して用量-効果曲線をプロットすることを含み、式中、Cは薬物濃度、ICmは最大半量効果に必要とされる濃度(すなわち、IC50=細胞増殖の50%阻害)、faは薬物濃度Cによって影響される細胞分率(例えば、細胞増殖が90%まで阻害されるなら0.9)、fuは影響されない分率、mは濃度-効果曲線のシグモイド性係数である。組合せ中の各薬物についての曲線の勾配に基づいて、該薬物が相互に非排他的効果(例えば、独立または相互作用方式の作用)を有するかどうかを判定することができる。次いで、次式により併用指数(CI)を求める:
CI=[(C)1/(Cx)1]+[(C)2/(Cx)2]+[α(C)1(C)2/(Cx)1(Cx)2]
式中、(Cx)1は、その薬物が単独でxパーセントの効果を生じさせるのに必要とされる薬物1の濃度であり、(C)1は、(C)2と併用して同じxパーセントの効果を生じさせるのに必要とされる薬物1の濃度である。薬物の作用方式が、相互に排他的または非排他的であるなら、αは、それぞれ0または1である。CI値は、異なるfa値について(すなわち、異なる細胞増殖阻害の程度について)式を解くことによって計算した。1未満のCI値は相乗作用を指摘し、1の値は相加効果を指摘し、1を超える値は拮抗作用を指摘する。データは、濃度-効果解析用のCalcuSynソフトウェア(Biosoft、Cambridge、英国)を使用して解析した。統計解析及びグラフには、Prismソフトウェア(GraphPad、San Diego、米国)を使用した。結果は、重複して実施された少なくとも3つの実験の平均値±標準偏差として表現した。
【０２００】
異なるスケジュールを使用して試験した薬物組合せの細胞増殖に対する効果を図1〜11に示す:
・PM02734のオキサリプラチンとの併用;
PM02734のオキサリプラチンとの併用は、DU145(図1)及びColo205細胞株(図2)において、使用した濃度に関係なく相乗効果(CI<1)をもたらした。オキサリプラチンと併用したPM02734の効果は、投与計画に依存するとは思われなかった。
・PM02734のシスプラチンとの併用;
PM02734のシスプラチンとの併用は、DU145細胞株(図3)において、双方の薬物の高濃度において相乗効果(CI<1)をもたらした。シスプラチンと併用したPM02734の効果は、投与計画に依存するとは思われなかった。
・PM02734の5-FUとの併用;
PM02734の5-FUとの併用は、DU145(図4)及びColo205細胞株(図5)において、5-FUの後にPM02734を付加した場合に、相乗効果(CI<1)をもたらした。PM02734を5-FUに先立ってまたは同時に投与すると、効果は、DU145では相加/相乗的であり、Colo205細胞では拮抗的であった。
・PM02734のゲムシタビンとの併用;
PM02734のゲムシタビンとの併用は、DU145細胞株(図6)において、PM02734をゲムシタビンの後に付加すると、高濃度において若干の相乗効果(CI<1)をもたらした。
・PM02734のトラベクテジンとの併用;
PM02734のトラベクテジンとの併用は、DU145細胞株(図7)において、PM02734をトラベクテジンの後にまたは同時に投薬すると、若干の相乗効果(CI<1)をもたらした。
・PM02734のラパマイシンとの併用;
PM02734のラパマイシンとの併用は、PM02734をラパマイシンと同時に付加すると、DU145(図8)及びColo205細胞株(図9)において相乗効果(CI<1)をもたらした。PM02734をラパマイシンの後に投与すると、効果は相加的であり、逆の順序ではほとんど拮抗的であった。
・PM02734のスニチニブとの併用;
PM02734のスニチニブとの併用は、DU145(図10)及びColo205細胞株(図11)において、少なくとも相加的であり、若干の相乗効果(CI<1)をもたらした。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図６Ｃ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図８Ｃ】
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【図９Ａ】
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【図９Ｂ】
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【図９Ｃ】
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【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【図１０Ｃ】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【国際調査報告】
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