(57)【要約】  本発明は、有効成分、特にはタンパク質、すなわち本質的にはペプチドを調節放出するための新規の微粒子状経口剤形を提案することを目的としている。また、本発明はその使用、特にはこれらの微粒子状経口剤形の治療用又は化粧用の使用に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１種の有効成分をコンディショニングし、またｐＨ及び／又は時間に応じて制御された放出プロファイルに沿ってこの有効成分を生体内で放出するのに有用な微粒子状経口剤形であって、
少なくともその有効成分を含有し且つその有効成分の放出プロファイルに影響を与える少なくとも１つのコーティング層でコーティングされたコアを有する微粒子を少なくとも含み、
コーティング層が、少なくとも１種の疎水性化合物Ｂと組み合わされた、５〜７のｐＨ範囲内の可溶化ｐＨ値を有する少なくとも１種のポリマーＡを含む材料から形成され、
微粒子のコア中に存在する有効成分が、少なくとも１種のポリマーＰＯＭから形成されたナノ粒子と少なくとも部分的に非共有結合的に結合し、ポリマーが、１つ以上の疎水性基（Ｇ）を有する親水性炭化水素鎖又は両親媒性炭化水素鎖を含むことを特徴とする微粒子状経口剤形。
【請求項２】
ポリマーＰＯＭが、水性媒質、特には水中に分散させられた場合に自発的にナノ粒子を形成することができる、請求項１に記載の経口剤形。
【請求項３】
有効成分と非共有結合的に結合したナノ粒子を、支持された形態で使用する、請求項１又は２に記載の経口剤形。
【請求項４】
微粒子のサイズが２０００μｍ未満、特には１００〜１０００μｍ、特には１００〜８００μｍ、特には１００〜５００μｍ未満である、先行の請求項のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項５】
ナノ粒子のサイズが１〜１０００ｎｍ、特には５〜５００ｎｍ、特には１０〜３００ｎｍ、とりわけ１０〜１００ｎｍである、先行の請求項のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項６】
コーティング層が、２５μｍ以上、好ましくは３０μｍ以上又は３５μｍ以上でさえある平均厚さを有する、先行の請求項のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項７】
腸内又は同様の媒質内に存在する場合、含有しているナノ粒子を２４時間未満、特には１２時間未満、特には６時間未満、特には２時間未満又は１時間未満でさえ放出可能である、先行の請求項のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項８】
炭化水素鎖が、ポリアミノ酸、例えばデキストランサルフェート、カルボキシメチルセルロース、アラビアゴム、ヒアルロン酸及びその誘導体、ポリガラクツロン酸、ポリグルクロン酸などのアニオン性多糖類、例えばキトサン、コラーゲン及びそのゼラチンタイプ誘導体などのカチオン性多糖類から成る群から選択される、先行の請求項のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項９】
炭化水素鎖が、α−ペプチド鎖が形成された線状ポリアミノ酸によって形成される、先行の請求項のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項１０】
ポリマーＰＯＭが少なくとも２つのタイプの反復アミノ酸ＡＡＮ及びＡＡＩを含むポリアミノ酸であって、
タイプＡＡＮが中性疎水性アミノ酸に対応し、
タイプＡＡＩがイオン化可能な側鎖を有するアミノ酸に対応し、タイプＡＡＩの反復アミノ酸の少なくとも一部がイオン化された形態であり、
各タイプＡＡＮ、ＡＡＩの反復アミノ酸が同一又は互いに異なり、
ポリアミノ酸の質量基準によるモル質量が２５００Ｄ以上、特には４０００Ｄ以上、好ましくは５０００Ｄ以上である、先行の請求項のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項１１】
ポリマーＰＯＭが、アスパラギン酸単位及び／又はグルタミン酸単位によって形成されたポリアミノ酸であって、これらの単位の少なくとも一部が、少なくとも１つの疎水性基（Ｇ）を含むグラフトを有する、請求項１〜９のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項１２】
炭化水素鎖が、α−Ｌ−グルタメート又はα−Ｌ−グルタミン酸ホモポリマーによって構成される、請求項１〜９及び１１のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項１３】
炭化水素鎖が、α−Ｌ−アスパルテート又はα−Ｌ−アスパラギン酸ホモポリマーによって構成される、請求項１〜９及び１１のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項１４】
炭化水素鎖が、α−Ｌ−アスパルテート／α−Ｌ−グルタメート又はα−Ｌ−アスパラギン酸／α−Ｌ−グルタミン酸コポリマーによって構成される、請求項１〜９及び１１のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項１５】
ポリマーＰＯＭが、同一又は異なる少なくとも複数のペンダント疎水性基（Ｇ）を含むポリヒドロキシアルキルグルタミンである、請求項１〜９及び１１又は１２のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項１６】
ポリマーＰＯＭとして以下の式（Ｉ）の少なくとも１種の化合物又はその薬学的に許容可能な塩の１つを含み、
【化１】
2011529100.tif 000012
式中、
Ａが独立して
ＲＮＨ−（式中、ＲはＨ、直鎖Ｃ2〜Ｃ10アルキル、分岐Ｃ3〜Ｃ10アルキル又はベンジルを表す）、
式：
【化２】
2011529100.tif 000013
の末端アミノ酸残基（式中、Ｒ7は−ＯＨ、−ＯＲ9又は−ＮＨＲ10であり、Ｒ8、Ｒ9及びＲ10は独立してＨ、直鎖Ｃ2〜Ｃ10アルキル、分岐Ｃ3〜Ｃ10アルキル又はベンジルを表す）を表し、
Ｂが直接結合、二価、三価又は四価の結合を有する基であり、好ましくは−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−、アミノ酸残基、ジオール、トリオール、ジアミン、トリアミン、アミノアルコール又は１〜６個の炭素原子を含むヒドロキシ酸から選択され、
Ｄが、Ｈ、直鎖Ｃ2〜Ｃ10アシル、分岐Ｃ3〜Ｃ10アシル又はピログルタメートを表し、
疎水性基Ｇがそれぞれ互いに独立して
任意で少なくとも１つの不飽和及び／又は少なくとも１つのヘテロ原子（好ましくはＯ及び／又はＮ及び／又はＳ）を含むことができる直鎖又は分岐Ｃ8〜Ｃ30アルキル、或いは
任意で少なくとも１つの不飽和及び／又は少なくとも１つのヘテロ原子（好ましくはＯ及び／又はＮ及び／又はＳ）を含むことができるＣ8〜Ｃ30アルキルアリール又はアリールアルキル、或いは
任意で少なくとも１つの不飽和及び／又は少なくとも１つのヘテロ原子（好ましくはＯ及び／又はＮ及び／又はＳ）を含むことができるＣ8〜Ｃ30（多）環式基から選択され、
好ましくは以下の群：オクチルオキシ−、ドデシルオキシ−、テトラデシルオキシ−、ヘキサデシルオキシ−、オクタデシルオキシ−、９−オクタデセニルオキシ−、トコフェリルオキシ−又はコレステリルオキシ−から選択され、その場合、Ｂは直接結合であり、
Ｒ1が、以下の群：
−ＮＨ−（ＣＨ2）w−ＮＨ3+、Ｚ-、ｗは２〜６、好ましくはｗは４に等しく、
−ＮＨ−（ＣＨ2）4−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ3+、Ｚ-、
−Ｏ−（ＣＨ2）2−ＮＨ3+、Ｚ-、
−Ｏ−（ＣＨ2）2−Ｎ+（ＣＨ3）3、Ｚ-、
式：
【化３】
2011529100.tif 000014
のアミノ酸残基又はアミノ酸誘導体（式中、Ｘは酸素原子又は−ＮＨ−であり、Ｒ12はＨ、直鎖Ｃ2〜Ｃ10アルキル、分岐Ｃ3〜Ｃ10アルキル又はベンジルであり、Ｒ13は−（ＣＨ2）4−ＮＨ3+、Ｚ-、−（ＣＨ2）3−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ3+、Ｚ-、−（ＣＨ2）3−ＮＨ3+、Ｚ-）から選択され、対アニオンＺ-がクロライド、サルフェート、ホスフェート又はアセテート、好ましくはクロライドであり、
Ｒ3が、ヒドロキシエチルアミノ−、ジヒドロキシプロピルアミノ、アルキレングリコール残基、ポリオキシアルキレングリコール又は式：
【化４】
2011529100.tif 000015
（式中、Ｒ10は、−Ｈ、−ＣＯ2Ｈ、アルキルエステル（好ましくは−ＣＯＯＭｅ又は−ＣＯＯＥｔ）、−ＣＨ2ＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ2、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ3又は−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（ＣＨ3）2を表す）の基を表し、
ｐ、ｑ、ｒ及びｓが正の整数であり、ｑ、ｒ及びｓはゼロであってもよく、
（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が１０〜１０００、特には２０〜５００、好ましくは３０〜５００であり、
疎水性基Ｇのモルグラフト率（ｐ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が２〜９９モル％、好ましくは３〜５０％であり、ただし各コポリマー鎖が少なくとも２つ、好ましくは少なくとも３つの疎水性基を有し、
カチオン性基のモルグラフト率（ｑ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が０〜９８モル％であり、
中性基のモルグラフト率（ｒ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が０〜９８モル％であり、
アニオン性基のモルグラフト率（ｓ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が０〜９８モル％であり、
鎖の全体的な電荷レベルＱ＝（ｑ−ｓ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が正又は負になり得て、
一般式Ｉのモノマーの鎖形成がランダム、モノブロック又はマルチブロックタイプであることを特徴とする、請求項１〜９及び１１、１２又は１３のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項１７】
Ａが−ＮＨ2を表し、
Ｂが直接結合であり、
ＤがＨ又はピログルタメートを表し、
疎水性基Ｇがそれぞれ互いに独立してオクチルオキシ−、ドデシルオキシ−、テトラデシルオキシ−、ヘキサデシルオキシ−、オクタデシルオキシ−、９−オクタデセニルオキシ−、トコフェリルオキシ−又はコレステリルオキシ−から選択され、
Ｒ3が、ヒドロキシエチルアミノ−又はジヒドロキシプロピルアミノを表す、先行の請求項に記載の経口剤形。
【請求項１８】
（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が２０〜２５０、好ましくは５０〜２２５であり、
（ｐ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が好ましくは４〜３０％であり、ただし、各コポリマー鎖が少なくとも２つの疎水性基を有し、
（ｑ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が１０％以上であり、
（ｒ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が１０％以上であり、
（ｓ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が１０％以上であり、
Ｑ＝（ｑ−ｓ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が、正の場合、＋２０％〜＋６０％であり、負の場合、−２０％未満である、請求項１６又は１７に記載の経口剤形。
【請求項１９】
（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が２０〜２５０、好ましくは５０〜２２５であり、
（ｐ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が好ましくは４〜３０％であり、ただし、各コポリマー鎖が少なくとも２つの疎水性基を有し、
（ｑ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が１０〜８０％、好ましくは１０〜６０％であり、
（ｒ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が１０％以上であり、
（ｓ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が１５％未満である、請求項１６又は１７に記載の経口剤形。
【請求項２０】
（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が２０〜２５０、好ましくは５０〜２２５であり、
（ｐ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が好ましくは４〜３０％であり、ただし、各コポリマー鎖が少なくとも２つの疎水性基を有し、
（ｑ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が１０％以上であり、
（ｒ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が５％未満であり、
（ｓ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が１０％より高く、
Ｑ＝（ｑ−ｓ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が、正の場合、＋２０％〜＋６０％であり、負の場合、−２０％未満である、請求項１６又は１７に記載の経口剤形。
【請求項２１】
（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が２０〜２５０、好ましくは５０〜２２５であり、
（ｐ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が好ましくは４〜３０％であり、ただし、各コポリマー鎖が少なくとも２つの疎水性基を有し、
（ｑ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が１％未満であり、
（ｒ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が１％未満である、請求項１６又は１７に記載の経口剤形。
【請求項２２】
（ｐ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）比が１５〜２５％であり、
（ｑ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が１％未満であり、
（ｒ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）が１％未満であり、
重合度が例えば１５０〜２５０又は７０〜１３０である、請求項１６又は１７又は２１に記載の経口剤形。
【請求項２３】
基Ｇの少なくとも１つ、好ましくは全てがトコフェリルオキシ基を形成する、請求項１〜９及び１１〜２２のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項２４】
ポリマーＰＯＭが、１０〜１０００、３０〜５００、とりわけ５０〜２５０の重合度ＤＰを有することを特徴とする、先行の請求項のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項２５】
ＰＯＭが、グルタメート及び／又はアスパルテート単位に連結されたポリアルキレングリコールタイプの少なくとも１つのグラフトを有することを特徴とする、先行の請求項のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項２６】
ポリアルキレングリコールがポリエチレングリコールであり、より具体的にはポリエチレングリコールのグラフトのモルパーセンテージ１〜３０％で使用される、先行の請求項に記載の経口剤形。
【請求項２７】
ポリマーＡが、メタクリル酸とメチルメタクリレートとのコポリマー、メタクリル酸とエチルアクリレートとのコポリマー、セルロース誘導体、例えばセルロースアセテートフタレート、セルロースアセテートスクシネート、セルロースアセテートトリメリレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネート、シェラックガム、ポリビニルアセテートフタレート及びこれらの混合物から選択される、先行の請求項のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項２８】
微粒子のコーティングが、その総質量に対して２５〜９０質量％、特には３０〜８０質量％、特には３５〜７０質量％、４０〜６０質量％でさえあるポリマーＡを含有する、先行の請求項のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項２９】
疎水性化合物Ｂが、融点Ｔfb≧４０℃、好ましくはＴfb≧５０℃、より一層好ましくは４０℃≦Ｔfb≦９０℃を有する結晶化された固体状態の生成物から選択される、先行の請求項のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項３０】
化合物Ｂが、
各種植物蝋、
好ましくは水素化綿実油、水素化大豆油、水素化パーム油を含む群から選択される各種水素化植物油単体又はこれらの混合物、
グリセロールと少なくとも１種の脂肪酸、好ましくはベヘン酸とのモノ及び／又はジ及び／又はトリエステル単体並びに
これらの混合物
から選択される、先行の請求項に記載の経口剤形。
【請求項３１】
化合物Ｂが、胃腸液に不溶のポリマーである、請求項１〜２８のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項３２】
ポリマーＢが、
非水溶性セルロース誘導体、とりわけセルロースアセテートブチレート、セルロースアセテート、
（メタ）クリル酸（コ）ポリマーの非水溶性誘導体、とりわけタイプＡ又はタイプＢのエチルアクリレート、メチルメタクリレートとトリメチルアンモニオエチルメタクリレートとのコポリマー及びポリ（メタ）クリル酸エステル
から選択される、先行の請求項に記載の経口剤形。
【請求項３３】
有効成分が、治療用又は化粧用の分子である、先行の請求項のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項３４】
有効成分が、タンパク質、糖タンパク質、多糖、リポ糖、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド又はペプチドである、先行の請求項のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項３５】
有効成分がインシュリンである、先行の請求項のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項３６】
少なくとも２つのタイプのナノ粒子を含み、このナノ粒子が、有効成分及び／又はこの有効成分と結合したＰＯＭの性質によって異なる、先行の請求項のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項３７】
コーティング層及び／又は取り込んでいる有効成分の性質によって互いに異なる少なくとも２つのタイプの微粒子を組み合わせている、先行の請求項のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項３８】
粉末、懸濁液の状態又は錠剤若しくはゼラチンカプセルの形態に処方された、先行の請求項のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項３９】
薬物及び／又は化粧品の調製を目的としていることを特徴とする、先行の請求項のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項４０】
第１相においてポリマーＰＯＭのナノ粒子と結合した有効成分を放出し、次に第２相においてこの有効成分をナノ粒子から解離させるのに適した、先行の請求項のいずれかに記載の経口剤形。
【請求項４１】
少なくとも１種の有効成分をコンディショニングし、またｐＨ及び／又は時間に応じて制御された放出プロファイルに沿って生体内でこの有効成分を放出するのに有用な微粒子を調製するための方法であって、
この微粒子が、少なくともこの有効成分を含有し且つこの有効成分の放出プロファイルに影響を与える少なくとも１つのコーティング層でコーティングされたコアを有し、少なくとも、
（ａ）少なくとも１種の有効成分を、１つ以上の疎水性基（Ｇ）を有する親水性炭化水素鎖を含む又は両親媒性炭化水素鎖を含む少なくとも１種のポリマーＰＯＭから形成されたナノ粒子と非共有結合的に結合させ、
（ｂ）工程（ａ）のナノ粒子から、このナノ粒子と１種以上の賦形剤とを含むコアを形成し、
（ｃ）５〜７のｐＨ範囲内の可溶化ｐＨ値を有する少なくとも１種のポリマーＡ及び少なくとも１種の疎水性化合物Ｂから、工程（ｂ）において形成したコアの周囲に配置するコーティング層を形成し、
（ｄ）期待される微粒子を回収する
工程を含む方法。
【請求項４２】
工程（ｃ）が、少なくとも１種の疎水性化合物Ｂと組み合わせた５〜７のｐＨ範囲内の可溶化ｐＨ値を有する少なくとも１種のポリマーＡを、流動層内で工程（ｂ）のナノ粒子上に噴霧することによって行われる、先行の請求項に記載の方法。
【請求項４３】
工程（ａ）の粒子が請求項２〜２６で定義されたとおりである、請求項４１又は４２に記載の方法。
【請求項４４】
ポリマーＡ及び化合物Ｂが、請求項２７〜３２で定義されたとおりである、請求項４０〜４３のいずれかに記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、有効成分（ａｃｔｉｖｅ  ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ：ＡＩと省略）、特にはタンパク質、すなわち本質的にはペプチドを調節放出するための新規の微粒子状経口剤形を提案することを目的としている。また、本発明はその使用、特にはこれらの微粒子状経口剤形の治療用又は化粧用の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
治療用、予防用、化粧用であるかに関係なく、有効成分の全投与方法の中でも、特には患者にとっての快適性や多種多様な処方との相性という観点から、経口投与が特に一般的である。
【０００３】
残念ながら、この投与方法だと経口摂取された有効成分は胃腸管を通過する際に極めて多様な生理学的条件下に曝され、特にｐＨによって、特定の有効成分に関して、例えば酸性媒質中での有効成分の分解によりバイオアベイラビリティに問題が生じる場合がある。更に、有効成分によっては、その吸収域（ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｗｉｎｄｏｗ）の位置に応じて放出方法を特定のものにしなくてはならない。
【０００４】
この点を満足のいくものにするために、多層粒子経口剤形（ｍｕｌｔｉｐａｒｔｉｃｌｅ  ｏｒａｌ  ｄｏｓａｇｅ  ｆｏｒｍ）がすでに開発されている。
【０００５】
これらの多層粒子剤形は一般に微粒子又はマイクロカプセルの形態であり、有効成分又は有効成分の混合物を含有しているそのコアはコーティングで覆われており、その組成及び／又は厚さは、この有効成分の放出を制御できるように正確に調節されている。
【０００６】
このため、一般に２０００μｍ未満の直径を有する複数のマイクロカプセルから構成されるこれらの微粒子系は、有効成分の放出を確実に遅延、制御するのに特に効果的であると判明している。
【０００７】
多層粒子状態のこれらの徐放性剤形の実例として、特に文献ＵＳ２００２／０１９２２８５、ＵＳ６２３８７０３、ＵＳ２００２／０１９２２８５、ＵＳ２００５／０１１８２６８及びＵＳ５８００８３６に記載のもの、とりわけ国際出願ＷＯ０３／０３０８７８に記載のものを挙げることができる。この文献ＷＯ０３／０３８７８は、少なくとも１種の有効成分を経口投与するための多層粒子系を提案しており、有効成分の放出は、有効成分を含有している微粒子のコアを覆う外被の化学的性質により時間について、またｐＨに応じて制御される。より正確には、この外被は、中性ｐＨでイオン化基を有する少なくとも１種の親水性ポリマー（例えば、（メタ）クリル酸とアルキル（メタ）クリレートとのコポリマー）及び少なくとも１種の疎水性化合物（水素化植物蝋等）を含む材料から形成される。
【０００８】
これらの微粒子系は、一方でそれが担持している有効成分の胃腸管内での輸送、他方で小腸、適切な場合は例えば胃内での放出を信頼性高く制御するのに特に有用であるが、残念ながら、安定性及び／又は吸収性が低い有効成分の輸送には適当ではないと判明している。この安定性の欠如は、酸性度が極めて高いｐＨ及び／又はこれらの有効成分に作用する酵素を含有する胃腸管内腔等の過酷な環境への曝露に起因する速すぎる分解の結果である場合がある。吸収性の低さに関しては、これもまた極めて低い溶解度又は対象となる有効成分に対峙する上皮膜の浸透性が不十分なことに起因する可能性がある。
【０００９】
本発明の特定の主題は、これらの問題を解決することを目的とした、ひいては有効成分（タンパク質、糖タンパク質、ペプチド、多糖類、リポ多糖類、オリゴ−又はポリヌクレオチド、小分子、特には疎水性分子等）のターゲティングに特に有用な新規の経口微粒子系を提案することである。
【００１０】
より正確には、本発明の態様は、それ自体は少なくとも１種のポリマー（ＰＯＭと省略）のナノ粒子と少なくとも部分的に非共有結合的に結合された有効成分を、制御された形で放出するリザーバー型微粒子から主に構成される経口剤形を提案することである。この系は、非結合形態で含有している有効成分を放出する慣用のリザーバー型微粒子系とは異なる。
【発明の概要】
【００１１】
したがって、本発明は、その第１の態様において、少なくとも１種の有効成分をコンディショニングし、またｐＨ及び／又は時間に応じて制御された放出プロファイルに沿ってその有効成分を生体内で放出するのに有用な微粒子状経口剤形に関し、この剤形は、少なくともその有効成分を含有し且つその有効成分の放出プロファイルに影響を与える少なくとも１つのコーティング層でコーティングされたコアを有する微粒子を少なくとも含み、
コーティング層は、少なくとも１種の疎水性化合物Ｂに組み合わされた、５〜７のｐＨ範囲内の可溶化ｐＨ値を有する少なくとも１種のポリマーＡを含む材料から形成され、
微粒子のコア中に存在する有効成分は、１つ以上の疎水性基（Ｇ）を有する親水性炭化水素鎖又は両親媒性炭化水素鎖を含む少なくとも１種のポリマーＰＯＭから形成されたナノ粒子と少なくとも部分的に非共有結合的に結合していることを特徴とする。
【００１２】
本発明の意味において、用語「コンディショニング（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ）」は、有効成分を含有し運搬する本発明の微粒子の能力を意味するものである。
【００１３】
その別の態様において、本発明は、少なくとも１種の有効成分をコンディショニングし、またｐＨ及び／又は時間に応じて制御された放出プロファイルに沿って生体内でこの有効成分を放出するのに有用な微粒子を調製するための方法にも関し、この微粒子は、少なくともこの有効成分を含有し且つこの有効成分の放出プロファイルに影響を与える少なくとも１つのコーティング層でコーティングされたコアを有し、この方法は少なくとも、
（ａ）少なくとも１種の有効成分を、１つ以上の疎水性基（Ｇ）を有する親水性炭化水素鎖を含む又は両親媒性炭化水素鎖を含む少なくとも１種のポリマーＰＯＭから形成されたナノ粒子と非共有結合的に結合させ、
（ｂ）工程（ａ）のナノ粒子から、このナノ粒子と１種以上の賦形剤とを含むコアを形成し、
（ｃ）５〜７のｐＨ範囲内の可溶化ｐＨ値を有する少なくとも１種のポリマーＡ及び少なくとも１種の疎水性化合物Ｂから、工程（ｂ）において形成したコアの周囲に配置するコーティング層を形成し、
（ｄ）期待される微粒子を回収する
工程を含む。
【００１４】
工程（ｂ）は、湿式製粒法、塊状化、押し出し成形／球状化加工、圧縮、微粒化、スプレーコーティング等のいずれの慣用の顆粒化技法を使用しても行うことができる。
【００１５】
工程（ｃ）に関して、この工程は、慣用のコーティング技法によって行われる。有利には、この工程を、流動層において、少なくとも１種の疎水性化合物Ｂと組み合わせた５〜７のｐＨ範囲内の可溶化ｐＨ値を有する少なくとも１種のポリマーＡを、工程（ａ）のナノ粒子に噴霧することによって行うことができる。
【００１６】
本発明は、より具体的には、本発明による少なくとも１種のポリマーＰＯＭのナノ粒子と結合させた形態での有効成分の上記で定義したような徐放性多層粒子系への組み込みが達成可能であり且つこの結合させたＡＩ／ＰＯＭ形態をその吸収部位（一般に、腸）でより高いバイオアベイラビリティ及び／又はより長い腸内吸収時間でもって放出可能であるとの発明者による観察結果から生まれたものである。理論による拘束を望むものではないが、微粒子から放出された後、有効成分を担持させたナノ粒子は、そのサブミクロンサイズにより腸の粘液と相互作用を起こして、次に徐々に放出される有効成分の吸収を向上させると考えられる。
【００１７】
後述の実施例から明らかなように、本発明の微粒子状経口剤形は、有利には、この剤形が含有している有効成分を順次放出すると予測することを可能にする。第１相において、経口投与された有効成分は、ポリマーＰＯＭのナノ粒子と結合した形態で放出され、この形態は、同じ有効成分の遊離形態と比較するとバイオアベイラビリティ及び／又は吸収時間が向上している。この有効成分と結合させた部分のポリマーＰＯＭのナノ粒子からの解離は第２相でしか起こらない。
【００１８】
非経口での有効成分の投与に、本発明で検討しているようなポリマーのナノ粒子を使用することは知られている。このため、Ｆｌａｍｅｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社は、治療用タンパク質が、疎水性基と親水性基とを含むコポリアミノ酸のナノ粒子と結合させられている医薬製剤について記載している（ＷＯ９６／２９９９１、ＷＯ０３／０４３３０３）。文献ＷＯ０３／０４３０３は、より具体的には、アスパラギン酸残基及び／又はグルタミン酸残基を含み、これらの残基の少なくとも一部が少なくとも１つのα−トコフェロール単位を含むグラフトを有するポリアミノ酸タイプのポリマー（例えば、α−トコフェロールをグラフトしたポリグルタメート又はポリアスパルテート）について開示している。これらの「疎水性に変性された」ホモポリアミノ酸は、水中で自発的にナノ粒子のコロイド懸濁液を形成し、ｐＨ７．４の水性懸濁液において、少なくとも１種の活性タンパク質と容易に結合可能である。特許出願ＰＣＴ／ＥＰ２００８／０５５５０７も生分解性ポリアミノ酸を提案しており、このポリアミノ酸は、有効成分と可逆的に結合可能なコロイド状ターゲティングナノ粒子又は微粒子に変化させることができる。これらの粒子は、より具体的には、中性又は中性に近いｐＨでの正の電荷とペンダント疎水性基の両方を有する両親媒性コポリグルタメートである。
【００１９】
しかしながら、これらの系は全て、運搬する有効成分の時間及び／又はｐＨに応じた放出プロファイルを調節することも、この有効成分を胃液から保護することもできないため、結果的に経口投与には適さない。
【００２０】
したがって、本発明の粒子状経口剤形は、幾つかの理由により慣用の粒子系より特に有利であることがわかる。
【００２１】
本発明の粒子状経口剤形は、目的とする吸収部位にまで有効成分を効果的に運搬する。本発明の粒子状経口剤形は、吸収部位で放出する有効成分を、経口投与されることで求められている生物活性の発揮にとって直接有害となる可能性のある例えば加水分解型の分解又は酵素による消化から効果的に保護する。最後に、本発明の粒子状経口剤形は、含有している有効成分の放出プロファイルを効果的に制御することを可能にする。このため、広い吸収域を有するＡＩの場合、微粒子は、ＡＩ／ＰＯＭナノ粒子を１２時間未満、好ましくは６時間未満に亘って又は２時間未満でさえ放出することができる。一方、吸収域が狭いＡＩの場合、腸管において、微粒子が、有効成分を担持させたナノ粒子ＡＩ／ＰＯＭを例えば２時間未満、更に好ましくは１時間未満の短時間に亘って放出することが重要である。胃内滞留時間の間、胃の酸性媒質内に留まるポリマーＰＯＭから形成されるナノ粒子にとって、既定の時間に亘るナノ粒子の放出に関するこの要件を満たすことは極めて困難である。胃等の酸性媒質を通過した後のナノ粒子の放出時間を極めて広い範囲内で調節することを可能にする、微粒子をコーティングするための組成物群を同定したことは、出願人の功績である。有利には、このナノ粒子は、酸性媒質内に長時間留まっても影響を受けず、更に個々の粒子状態が保たれるため、これらのナノ粒子が塊となって連続的に放出されるリスクをなくすことができる。
【００２２】
まさにこれを目的としたコーティング層は、特には以下で定義されるような、少なくとも１種の疎水性化合物Ｂと組み合わされた５〜７のｐＨ範囲内の可溶化ｐＨ値を有する少なくとも１種のポリマーＡを含む材料から形成される。
【００２３】
以下で示されるように、この効果は、形成するコーティング層の厚さを調節することによって強化される。
【００２４】
微粒子
本発明のリザーバー型微粒子は、少なくとも１種のポリマーＰＯＭのナノ粒子に結合した形態の有効成分を含有しているコアと、このコアを取り囲むコーティングによって構成される。
【００２５】
微粒子からのナノ粒子の制御された放出は、各リザーバー粒子のコアを取り囲むコーティングによって確保される。このコーティングは、有効成分とポリマーＰＯＭとを、例えば胃腸管における有効成分の吸収域に対応する胃腸管の極めて限定された部位で放出するように設計される。
【００２６】
このコーティングのこの性質により、本発明で考慮される経口剤形は、有利には、時間とｐＨに応じた２重放出機序を有することができる。
【００２７】
すなわち、本発明で考慮される経口剤形は、以下の２つの特殊性を有する。その微粒子のコーティングを形成しているポリマーＡの可溶化ｐＨ値未満では、本発明の経口剤形は、極めて限られた量のナノ粒子しか放出しない。一方、腸内又は同様の媒質内に在る場合、本発明の経口剤形は、ナノ粒子の効果的な放出を確保する。次にこの放出を、有利には、２４時間未満、特には１２時間未満、特には６時間未満、特には２時間未満に亘って又は１時間未満でさえ行うことができる。
【００２８】
極めて狭い吸収域を有する有効成分の場合、例えば十二指腸又はパイエル板に限定される場合、ナノ粒子の放出時間は２時間未満であり、好ましくは１時間未満である。
【００２９】
本発明で考慮される微粒子のサイズは、有利には、２０００μｍ未満、特には１００〜１０００μｍであり、特には１００〜８００μｍ、特には１００〜５００μｍである。
【００３０】
本発明の意味において、粒子のサイズは、Ｓｉｒｏｃｃｏ２０００乾式モジュールを備えたＭａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ社の装置Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ２０００を使用したレーザー粒度分析によって測定される体積平均直径Ｄ4,3として表される。
【００３１】
粒子のコーティングに関し、このコーティングは、
５〜７のｐＨ範囲内の可溶化ｐＨ値を有する少なくとも１種の化合物Ａと、
少なくとも１種の疎水性化合物Ｂと、
任意の少なくとも１種の可塑剤及び／又はその他の慣用の賦形剤
との混合物から得られる複合材料から形成される。
【００３２】
ポリマーＡ
本発明の意味において、ポリマーＡの可溶化ｐＨ値は、それを下回る値ではポリマーが不溶の状態で見出され、それを上回る値ではこの同じポリマーＡが可溶の状態で見出される生理学的媒質又はモデル試験管内媒質のｐＨ値である。
【００３３】
当然のことながら、このｐＨ値は所定のポリマーに特異的であり、またその化学的性質、鎖長等のその固有の物理化学的特徴に直接関係している。
【００３４】
本発明に適したポリマーＡの非限定的な実例として、
メタクリル酸とメチルメタクリレートとのコポリマー、
メタクリル酸とエチルアクリレートとのコポリマー、
セルロースアセテートフタレート（ＣＡＰ）、セルロースアセテートスクシネート（ＣＡＳ）、セルロースアセテートトリメリテート（ＣＡＴ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（又はヒプロメロースフタレート）（ＨＰＭＣＰ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネート（又はヒプロメロースアセテートスクシネート）（ＨＰＭＣＡＳ）等のセルロース誘導体、
シェラック（Ｓｈｅｌｌａｃ）ガム、
ポリビニルアセテートフタレート（ＰＶＡＰ）及び
これらの混合物
を特に挙げることができる。
【００３５】
本発明の好ましい実施形態において、このポリマーＡは、メタクリル酸とメチルメタクリレートとのコポリマー、メタクリル酸とエチルアクリレートとのコポリマー及びこれらの混合物から選択される。
【００３６】
既に詳述したように、本発明で考慮されるポリマーＡは、接触するｐＨ値がその可溶化ｐＨ値より高いか低いかに応じて異なる溶解度プロファイルを有する。
【００３７】
本発明の意味において、ポリマーＡは一般に、その可溶化ｐＨ値より低いｐＨ値では不溶であり、それとは対照的にその可溶化ｐＨ値より高いｐＨ値では可溶である。
【００３８】
例えば、ポリマーＡは、その可溶化ｐＨ値が以下のようなポリマーになり得る。
・５．０。例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、特にはＳｈｉｎ−Ｅｔｓｕ社のＨＰ−５０の名で市販のもの
・５．５。例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、特にはＳｈｉｎ−Ｅｔｓｕ社のＨＰ−５５の名で市販のもの又はメタクリル酸とエチルアクリレートとのコポリマー（１：１）、特にはＥｖｏｎｉｋ社のＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ１００−５５の名で市販のもの
・６．０。例えば、メタクリル酸とメチルメタクリレートとのコポリマー（１：１）、特にはＥｖｏｎｉｋ社からＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ１００の名で市販のもの
・７．０。例えば、メタクリル酸とメチルメタクリレートとのコポリマー（１：２）、特にはＥｖｏｎｉｋ社からＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｓ１００の名で市販のもの
【００３９】
これらのポリマーは全て、その可溶化ｐＨより高いｐＨ値で可溶である。
【００４０】
コーティングは、有利には、その総質量に対して２５〜９０質量％、特には３０〜８０質量％、特には３５〜７０質量％又は４０〜６０質量％でさえあるポリマーＡから構成される。
【００４１】
より好ましくは、ポリマーＡは、メタクリル酸とエチルアクリレートとのコポリマー（１：１）である。
【００４２】
疎水性化合物Ｂ
第１の変形において、化合物Ｂを、固体状態に結晶化され且つ融点Ｔfb≧４０℃、好ましくはＴfb≧５０℃、より一層好ましくは４０℃≦Ｔfb≦９０℃を有する生成物から選択することができる。
【００４３】
より好ましくは、次にこの化合物は以下の生成物群から選択される。
・各種植物蝋単体又はこれらの混合物。例えばＤＹＮＡＳＡＮ  Ｐ６０、ＤＹＮＡＳＡＮ１１６の商標名で市販のもの
・各種水素化植物油単体又はこれらの混合物。好ましくは、水素化綿実油、水素化大豆油、水素化パーム油及びこれらの混合物を含む群から選択されるもの
・グリセロールと少なくとも１種の脂肪酸、好ましくはベヘン酸とのモノ及び／又はジ及び／又はトリエステル単体又はこれらの混合物、及び
・これらの混合物
【００４４】
この実施形態において、ポリマーＢ／Ａ質量比は０．２〜１．５、好ましくは０．４５〜１になり得る。
【００４５】
より好ましくは、化合物Ｂは水素化綿実油である。
【００４６】
このようなコーティングから形成された微粒子は特に、文献ＷＯ０３／３０８７８に記載されている。
【００４７】
第２の変形において、化合物Ｂは、消化管液に不溶のポリマーであり得る。
【００４８】
消化管液又は胃腸液にも不溶であるこのポリマーはとりわけ
非水溶性セルロース誘導体、
非水溶性（メタ）クリル酸（コ）ポリマー誘導体及び
これらの混合物
から選択される。
【００４９】
より好ましくは、このポリマーは、エチルセルロース及び／又は誘導体（例えば、Ｅｔｈｏｃｅｌ（登録商標）の名で市販のもの）、セルロースアセテートブチレート、セルロースアセテート、アンモニオ（メタ）クリレートコポリマー、タイプＡ又はタイプＢのエチルアクリレート、メチルメタクリレートとトリメチルアンモニオエチルメタクリレートとのコポリマー（特には、Ｅｕｄｒａｇｉｔ（登録商標）ＲＬ、Ｅｕｄｒａｇｉｔ（登録商標）ＲＳの名で市販のもの）、ポリ（メタ）クリル酸エステル（特には、Ｅｕｄｒａｇｉｔ（登録商標）ＮＥの名で市販のもの）並びにこれらの混合物から選択することができる。
【００５０】
エチルセルロース、セルロースアセテートブチレート及びアンモニオ（メタ）クリレートコポリマー、特にはＥｕｄｒａｇｉｔ  ＲＳ（登録商標）、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＲＬ（登録商標）の名で市販のものが本発明にとって特に有用である。
【００５１】
この際、微粒子のコーティングは、その総質量に対して１０〜７５質量％のポリマーＡを含有し、また好ましくは１５〜６０質量％、より好ましくは２０〜５５質量％又は２５〜５５質量％でさえあり、より一層具体的には３０〜５０質量％のポリマーＡを含有することができる。
【００５２】
有利には、コーティングを次に、この実施形態において、ポリマーＢ／ポリマーＡ質量比が０．２５より高く、特には０．３以上、特には０．４以上、特には０．５以上又は０．７５以上でさえある２種類のポリマーＡとポリマーＢとの混合物から形成することができる。
【００５３】
別の変形実施形態において、ポリマーＡ／ポリマーＢ比は更に８未満、特には４未満又は２未満でさえあり、とりわけ１．５未満である。
【００５４】
本発明に極めてよく適したポリマーＡとポリマーＢとの混合物の代表例として、特に、エチルセルロース、セルロースアセテートブチレート又はタイプＡ若しくはＢのアンモニオ（メタ）クリレートコポリマーと少なくとも１種のメタクリル酸とエチルアクリレートとのコポリマー又はメタクリル酸とメチルメタクリレートとのコポリマー又はこれらの混合物との混合物を挙げることができる。
【００５５】
上記の２つのタイプの化合物Ａ、Ｂとは別に、本発明の粒子のコーティングは、少なくとも１種の可塑剤を含むことができる。
【００５６】
可塑剤
この可塑剤は特に、
グリセロール及びそのエステル、好ましくはアセチル化グリセリド、グリセリル−モノ−ステアレート、グリセリル−トリアセテート、グリセリル−トリブチレート、
フタレート、好ましくはジブチルフタレート、ジエチルフタレート、ジメチルフタレート、ジオクチルフタレート、
シトレート、好ましくはアセチルトリブチルシトレート、アセチルトリエチルシトレート、トリブチルシトレート、トリエチルシトレート、
セバケート、好ましくはジエチルセバケート、ジブチルセバケート、
アジペート、
アゼラート、
ベンゾエート、
クロロブタノール、
ポリエチレングリコール、
植物油、
フマレート、好ましくはジエチルフマレート、
マレート、好ましくはジエチルマレート、
オキサラート、好ましくはジエチルオキサラート、
スクシネート、好ましくはジブチルスクシネート、
ブチレート、
セチルアルコールエステル、
マロネート、好ましくはジエチルマロネート、
ひまし油及び
これらの混合物
から選択することができる。
【００５７】
特に、このコーティングは、その総質量に対して３０質量％未満、好ましくは１〜２５質量％、より一層好ましくは５〜２０質量％の可塑剤を含むことができる。
【００５８】
特に有利な実施形態において、コーティング層は、２５μｍ以上、好ましくは３０μｍ以上又は３５μｍ以上でさえある平均厚さを有する。
【００５９】
本発明の微粒子経口剤形のコーティング層のこのような厚さによって、有利には、腸のｐＨを代表する５より高いｐＨの媒質における、微粒子経口剤形が含有している有効成分の完全な放出が可能になる。
【００６０】
別の特定の実施形態において、コーティング層は、２００μｍ未満、とりわけ１００μｍ以下の厚さを有する。
【００６１】
特に、５００〜７００μｍのサイズの粒子の場合、コーティング層は、有利には、２５〜５０μｍの厚さを有する。
【００６２】
本発明の微粒子の形成は、リザーバー型カプセルの形成に適したいずれの慣用の技法でも行うことができ、そのコアは、全体又は一部が、特には以下で定義され且つ適切な場合は１種以上の結合剤及び１種以上の慣用の賦形剤を使用して中性の基体上に支持される又は支持されないポリマーＰＯＭのナノ粒子に非共有結合的に結合された少なくとも１種の有効成分によって形成される。
【００６３】
このため、ある変形実施形態において、有効成分と非共有結合的に結合しているナノ粒子は、微粒子において支持された形態で存在することができる。
【００６４】
限定するものではないが、微粒子のコアは、例えば、有効成分と結合したナノ粒子及び慣用の賦形剤とは別に、ショ糖及び／又はブドウ糖及び／又は乳糖、或いはこのナノ粒子の支持体として機能するセルロース等の不活性基体の微粒子も含有することができる。
【００６５】
このため、本発明の第１の好ましい実施形態において、微粒子のコアは、ＰＯＭと、有効成分と、顆粒の接着力を確保するための１種以上の結合剤と当業者に既知の様々な賦形剤とを含有する顆粒である。次に、当業者に既知の技法を使用して、有利にはスプレーコーティングによりコーティングをこの顆粒上に堆積する。
【００６６】
この実施形態の微粒子の質量基準による組成は、以下のとおりである。
・コアにおける有効成分を担持させたナノ粒子の質量基準による含有量は、０．１〜８０％、好ましくは２〜７０％、好ましくは１０〜６０％である。
・コアにおける結合剤の質量基準による含有量は、０．５〜４０％、好ましくは２〜２５％である。
・微粒子におけるコーティングの質量基準による含有量は、５〜５０％、好ましくは１５〜３５％である。
【００６７】
第２の好ましい実施形態において、本発明の微粒子のコアは、周囲に層が堆積される中性のコアを含み、このコアは、有効成分と、ＰＯＭナノ粒子と、この層の接着力を確保するための結合剤と、当業者に既知の任意の異なる賦形剤（例えば、ショ糖、トレハロース、マンニトール）を含有している。中性のコアは、コーティングに役立つセルロース又は糖又はいずれの不活性の有機若しくは塩類化合物の粒子になり得る。
【００６８】
したがって、この実施形態の粒子の質量基準による組成は、以下のとおりである。
・コアにおける有効成分を担持させたナノ粒子の質量基準による含有量は、０．１〜８０％、好ましくは２〜７０％、好ましくは１０〜６０％である。
・微粒子のコアにおける中性コアの質量基準による含有量は、５〜５０％、好ましくは１０〜３０％である。
・微粒子のコアにおける結合剤の質量基準による含有量は、０．５〜４０％、好ましくは２〜２５％である。
・微粒子におけるコーティングの質量基準による含有量は、５〜５０％、好ましくは１５〜３５％である。
【００６９】
好ましくは、微粒子は、化合物Ａ、Ｂ及び、存在する場合は、一般に溶質状態にある可塑剤を含むその他の原料の噴霧によって形成される。この溶媒は一般に、水と混合された又は混合されていない有機溶媒を含有する。このようにして形成されるコーティングは、ほぼ水性の液体における同じポリマーの分散液によって形成されるコーティングより組成という観点で均質であると判明している。
【００７０】
好ましい変形実施形態において、この噴霧溶液は、４０質量％未満、特には３０質量％未満、とりわけ２５質量％未満の水を含有する。
【００７１】
ナノ粒子
上記から明らかなように、本発明の経口粒子状剤形を構成している微粒子のコアが含有している有効成分は、少なくとも一部が少なくとも１種のポリマーＰＯＭのナノ粒子と非共有結合的に結合した形態でコア内に存在している。
【００７２】
１種以上の有効成分とポリマーＰＯＭとの関係を限定するのに使用される用語「結合（ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ）」又は「結合した（ｃｏｍｂｉｎｅｄ）」は、有効成分が、特には非共有結合的な物理的相互作用、特には疎水的相互作用及び／又は静電相互作用及び／又は水素結合及び／又はポリマーＰＯＭによる立体封入によってポリマーＰＯＭに結合されることを意味する。
【００７３】
この結合は一般に疎水的及び／又は静電相互作用から生じるため、ポリマーＰＯＭはその構造にこのタイプの相互作用を引き起こすことができる単位を取り込んでいると考えられる。
【００７４】
これらの単位、特には疎水性又はイオン化単位は、このポリマーの骨格を形成している炭化水素鎖内に直接存在することができる及び／又はこの炭化水素鎖に付加された１つ以上の疎水性若しくはイオン化基によって形成することができる。
【００７５】
「付加基（ｂｏｒｎｅ  ｇｒｏｕｐ）」という表現は、この基がペンダント基であることを意味しており、つまりこの基は、１つ以上の共有結合によってポリマーの主鎖に連結された側基である。例えば、ポリマーがアミノ酸残基を含むポリアミノ酸である場合、このペンダント基はアミノ酸残基に関しての側基であり、また特にはこの側基を有するアミノ酸残基のγ位におけるカルボニル官能基の置換基となり得る。
【００７６】
本発明で考慮されるポリマーＰＯＭは一般に、１０〜１０００、特には３０〜５００、とりわけ５０〜２５０又は２０〜１５０でさえある重合度ＤＰを有する。
【００７７】
本発明で考慮されるポリマーＰＯＭは更に、水性媒質、特に水中で分散させられた場合に自発的にナノ粒子を形成することができる。
【００７８】
このナノ粒子は、アニオン性、カチオン性又は中性となり得て、好ましくはアニオン性又はカチオン性である。
【００７９】
本発明の意味において、「アニオン性ナノ粒子」は、中性ｐＨでの全体的な電荷が負であるポリマーＰＯＭのナノ粒子を意味し、「カチオン性ナノ粒子」は、中性ｐＨでの全体的な電荷が正であるポリマーＰＯＭのナノ粒子を意味する。
【００８０】
全体的な電荷は、当業者に既知のいずれの方法でも測定することができ、例えば中性ｐＨでのゼータ電位の測定である。
【００８１】
一般的なやり方において、ナノ粒子のサイズは１〜１０００ｎｍ、特には５〜５００ｎｍ、特には１０〜３００ｎｍ、とりわけ１０〜１００ｎｍである。ＰＯＭのナノ粒子のサイズは、これらの粒子の平均流体力学的直径によって評価される。測定は、ＡＬＶ社の装置ＣＧＳ−３を使用した光の準弾性拡散（ｑｕａｓｉ−ｅｌａｓｔｉｃ  ｄｉｆｆｕｓｉｏｎ）によって行われる。そのために、ＰＯＭの懸濁液は、平衡を達成するに十分な静止時間の後、塩類媒質（０．１５ＭのＮａＣｌ等）中で０．５ｍｇ／ｍｌに濃縮される。
【００８２】
炭化水素鎖
上述したように、本発明のポリマーＰＯＭは、１つ以上の疎水性基（Ｇ）を有する親水性炭化水素鎖又は両親媒性炭化水素鎖を含む。
【００８３】
特定の実施形態において、ポリマーＰＯＭは、１つ以上の疎水性基（Ｇ）を有する親水性炭化水素鎖を含むポリマーである。
【００８４】
ポリマーＰＯＭを形成している炭化水素鎖は、ポリアミノ酸、例えばデキストランサルフェート、カルボキシメチルセルロース、アラビアゴム、ヒアルロン酸及びその誘導体、ポリガラクツロン酸、ポリグルクロン酸などのアニオン性多糖類、例えばキトサン、コラーゲン及びそのゼラチンタイプ誘導体などのカチオン性多糖類から選択することができる。
【００８５】
上記を鑑みると、本発明の意味において、「炭化水素鎖」という表現が、１つ以上の窒素原子を含むことができる炭化水素鎖をカバーすることが理解できる。
【００８６】
以下において、「炭化水素鎖」、「１つ以上の窒素原子を含むことができる炭化水素鎖」という表現は、同じ意味で使用される。
【００８７】
有利には、ポリマーＰＯＭを形成している炭化水素鎖はポリアミノ酸である。本発明のある態様において、ポリマーＰＯＭは生分解性である。
【００８８】
本発明の意味において、「ポリアミノ酸」という用語は、天然ポリアミノ酸、合成ポリアミノ酸の両方、また２０個より多いアミノ酸残基を含むポリアミノ酸と同じように１０〜２０個のアミノ酸残基を含むオリゴアミノ酸をカバーする。
【００８９】
ポリアミノ酸は合成線状ポリマーであり、有利にはペプチド結合によって連結されたα−アミノ酸から構成される。
【００９０】
ブロック又は統計的（ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ）ポリマー、多鎖ポリマー及び固定アミノ酸配列を含むポリマーを生成するための多数の合成技法がある（Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ、第１２巻、７８６頁、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓを参照のこと）。
【００９１】
当業者は、その知識に基づいて、本発明に適したポリマーを手に入れるためにこれらの技法を実施することが可能である。特に、当業者は、文献ＷＯ９６／２９９９１、ＷＯ０３／１０４３０３、ＷＯ９６／０７９６１４及びＰＣＴ／ＥＰ／２００８／０５５５０７の教示も参照することができる。ポリマーＰＯＭを形成している炭化水素鎖が事実上両親媒性である本発明の変形例において、このポリアミノ酸は、少なくとも１種又はそれより多い中性の疎水性アミノ酸を含む。
【００９２】
より具体的には、このようなポリマーＰＯＭは、少なくとも２つのタイプの反復アミノ酸残基ＡＡＮ、ＡＡＩを含むポリアミノ酸になり得て、
タイプＡＡＮは中性疎水性アミノ酸に対応し、
タイプＡＡＩはイオン化可能な側鎖を有するアミノ酸に対応し、タイプＡＡＩのアミノ酸の少なくとも一部はイオン化された形態であり、
各タイプＡＡＮ、ＡＡＩのアミノ酸は同一又は互いに異なり、ポリアミノ酸の質量基準によるモル質量は、２５００Ｄ以上、特には４０００Ｄ以上、好ましくは５０００Ｄ以上である。
【００９３】
このようなポリアミノ酸は特に、文献ＷＯ９６／２９９９１に記載されており、その内容は参照により組み込まれる。
【００９４】
本発明のＰＯＭのこの変形実施形態において、ＡＡＮはとりわけ以下のリスト：Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ及びこれらの混合物から選択され、ＡＡＩはとりわけＧｌｕ及び／又はＡｓｐによって形成される。
【００９５】
より一層好ましくは、このようなポリアミノ酸は、好ましくはＧｌｕに対応する単一のタイプのＡＡＩモノマー及び好ましくはＬｅｕに対応する単一のタイプのＡＡＮモノマーを含む。
【００９６】
別の変形実施形態において、ポリマーＰＯＭを形成している炭化水素鎖は親水性ポリアミノ酸である。
【００９７】
より具体的には、ここでこのようなＰＯＭを形成しているポリアミノ酸は、反復グルタミン酸又はアスパラギン酸単位を含むオリゴマー若しくはホモポリマー又はこれら２つのタイプのアミノ酸残基の混合物を含むコポリマーである。これらのポリマーで考慮される残基は好ましくは構造Ｄ又はＬ又はＤ／Ｌを有し、またグルタメート又はグルタミン酸残基の場合はそのα又はγ位、アスパラギン酸又はアスパルテート残基の場合はα又はβ位で連結され、より好ましくは構造Ｌを有し且つそのα位で連結される。
【００９８】
好ましくは、ポリマーＰＯＭは、アスパラギン酸単位及び／又はグルタミン酸単位によって形成されたポリアミノ酸炭化水素鎖を含み、これらの単位の少なくとも一部は、少なくとも１つの疎水性基（Ｇ）を含むグラフトを有する。
【００９９】
ある変形実施形態において、炭化水素鎖は、α−Ｌ−グルタメート又はα−Ｌ−グルタミン酸ホモポリマーによって構成される。
【０１００】
別の変形実施形態において、炭化水素鎖は、α−Ｌ−アスパルテート又はα−Ｌ−アスパラギン酸ホモポリマーによって構成される。
【０１０１】
別の特に好ましい変形実施形態において、炭化水素鎖は、α−Ｌ−アスパルテート／α−Ｌ−グルタメート又はα−Ｌ−アスパラギン酸／α−Ｌ−グルタミン酸コポリマーによって構成される。
【０１０２】
このようなポリマーＰＯＭは特に、文献ＷＯ０３／１０４３０３、ＷＯ９６／０７９６１４及びＰＣＴ／ＥＰ／２００８／０５５５０７に記載されており、その内容は参照により組み込まれる。これらのポリアミノ酸は、特許出願ＰＣＴ  ＷＯ−Ａ−００／３０６１８に記載のもののタイプにもなり得る。
【０１０３】
これらのポリマーは、当業者に既知の方法によって得ることができる。
【０１０４】
本発明で使用できる一定数のポリマー、例えば、様々な質量のポリ（α−Ｌ−グルタミン酸）、ポリ（α−Ｄ−グルタミン酸）、ポリ（α−Ｄ，Ｌ−グルタメート）及びポリ（γ−Ｌ−グルタミン酸）タイプが市販されている。
【０１０５】
ポリ（Ｌ−グルタミン酸）は、特許出願ＦＲ２８０１２２６に記載のやり方に従って合成することもできる。
【０１０６】
重合化学及び基のカップリング反応は標準的なものであり、当業者に周知である（例えば、出願人の上記の特許又は特許出願を参照のこと）。
【０１０７】
より具体的には、ポリマーＰＯＭは、同一又は異なる複数のペンダント疎水性基（Ｇ）、好ましくは少なくとも２つの疎水性基（Ｇ）、適切な場合は１つ以上のカチオン性基及び／又は１つ以上のイオン化可能な基及び／又は１つ以上の中性基を含むポリヒドロキシアルキルグルタミンである。
【０１０８】
本明細書において、「カチオン性基」は、グルタミン酸残基に共有結合によってグラフトされ且つ１つ以上のアミン官能基又は１つ以上の四級アンモニウムを含む基を意味する。アミン官能基の場合、この基は主に、そのｐＫａより低いいずれのｐＨでもイオン化され、四級アンモニウムの場合、基はいずれのｐＨでもイオン化される。
【０１０９】
本明細書において、「中性基」は、３〜１０のいずれのｐＨでも電荷を有しない基を意味し、例えば、グルタミン酸残基のカルボキシル基とのエタノールアミン（窒素によって結合）、アミノ−プロパンジオール、アルキレングリコール又はポリオキシアルキレングリコールの縮合によって得られる基である。
【０１１０】
ポリマーＰＯＭは実際、構成要素であるアミノ酸単位に結合されたポリアルキレングリコールタイプの１つ以上のグラフトを有する場合がある。好ましくは、ポリアルキレングリコールはポリエチレングリコールであり、より具合的にはポリエチレングリコールのグラフトのモルパーセンテージ１〜３０％で使用される。
【０１１１】
更に、変性ポリグルタメートの残留カルボン酸官能基は、ｐＨ及び組成に応じて中性（ＣＯＯＨ形態）又はイオン化（ＣＯＯ-アニオン）のいずれかであることに留意しなくてはならない。したがって、以下の用語：（ｉ）グルタメート残基又はグルタミン酸残基、（ｉｉ）ポリグルタメート又はポリグルタミン酸は同じ意味で使用される。
【０１１２】
疎水性基
より具体的には、疎水性基Ｇは同一又は互いに異なり、また
（ｉ）アルキル、アシル又は直鎖若しくは分岐アルケニル、好ましくは直鎖Ｃ1〜Ｃ20、より一層好ましくはＣ2〜Ｃ18、
（ｉｉ）１つ以上のヘテロ原子を含む炭化水素基、好ましくは酸素及び／又は硫黄を含む炭化水素基並びに、より一層好ましくは、以下の式：
【化１】
2011529100.tif 000002
（式中、Ｒ60は直鎖又は分岐アルキル、アシル又はアルケニル、好ましくは直鎖Ｃ1〜Ｃ20、より一層好ましくはＣ2〜Ｃ18基であり、Ｒ61及びＲ62は同一又は互いに異なり且つ水素又は直鎖若しくは分岐アルキル、アシル若しくはアルケニルラジカル、好ましくは直鎖Ｃ1〜Ｃ20、より一層好ましくはＣ2〜Ｃ18基に対応し、ｑ＝１〜１００である）の炭化水素基、
（ｉｉｉ）アリール、アラルキル又はアルキルアリール、好ましくはアリール、
（ｉｖ）疎水性誘導体、好ましくはホスファチジルエタノールアミノ−基、又は、オクチルオキシ−、ドデシルオキシ−、テトラデシルオキシ−、ヘキサデシルオキシ−、オクタデシルオキシ−、９−オクタデセニルオキシ−、トコフェリルオキシ−又はコレステリルオキシ−から選択される基
を含む群から選択される。
【０１１３】
「炭化水素基」は、本発明の意味において、特には水素原子及び炭素原子を含む基を意味する。
【０１１４】
好ましくは、この変形において、疎水性基は、以下の群：メチル、エチル、プロピル、ドデシル、ヘキサデシル、オクタデシルから選択される。
【０１１５】
特に好ましくは、疎水性基（Ｇ）は、以下の群：
任意で少なくとも１つの不飽和及び／又は少なくとも１つのヘテロ原子を含み得る直鎖又は分岐Ｃ8〜Ｃ30アルキル、
任意で少なくとも１つの不飽和及び／又は少なくとも１つのヘテロ原子を含み得るＣ8〜Ｃ30アルキルアリール又はアリールアルキル並びに
任意で少なくとも１つの不飽和及び／又は少なくとも１つのヘテロ原子を含み得るＣ8〜Ｃ30の（多）環式基
から選択される。
【０１１６】
より正確には、疎水性基（Ｇ）の少なくとも１つは、オクタノール、ドデカノール、テトラデカノール、ヘキサデカノール、オクタデカノール、オレイルアルコール、トコフェロール又はコレステロールを含む群から選択される前駆体からグラフトによって得られる。
【０１１７】
有利には、本発明で考慮される疎水性基Ｇは、８〜３０個の炭素原子を含む。
【０１１８】
特定の実施形態において、ポリマーＰＯＭ中に存在する少なくとも１つ、好ましくは全ての基Ｇがトコフェリルオキシ−基を形成する。
【０１１９】
有利には、疎水性基Ｇの少なくとも１つは、この疎水性Ｇ基のポリマーＰＯＭの構造体への連結を可能にする少なくとも１つのスペーサーヒンジ（又は単位）を含む疎水性グラフトに含まれる。
【０１２０】
このヒンジは、例えば、少なくとも１つの直接共有結合及び／又は少なくとも１つのアミド結合及び／又は少なくとも１つのエステル結合を含むことができる。例えば、ヒンジは、炭化水素鎖、アミノアルコール誘導体、ポリアミン誘導体（例えば、ジアミン）、ポリオール誘導体（例えば、ジオール）及びヒドロキシ酸誘導体を構成しているモノマー単位とは異なるアミノ酸残基を特に含む群に属するタイプのものになり得る。
【０１２１】
疎水性基Ｇのアミン鎖へのグラフトは、この鎖への結合が可能な疎水性基Ｇの前駆体を伴う場合がある。
【０１２２】
疎水性基Ｇの前駆体は、実際には、限定するものではないが、アルコール及びアミンを含む群から選択され、これらの化合物は、当業者によって簡単に官能化することができる。
【０１２３】
疎水性基Ｇを有する疎水性グラフトを形成しているヒンジは、二価、三価又は四価（又は五価以上でさえある）になり得る。二価のヒンジの場合、疎水性グラフトは単一の基Ｇを含み、三価のヒンジは、疎水性グラフトに二又の性質をもたらす。すなわち、グラフトは２つのＧ置換基を有する。三価のヒンジの例として、とりわけ、アミノ酸残基、例えばグルタミン酸又はポリオール残基、例えばグリセロールを挙げることができる。したがって、二又のＧを含む疎水性グラフトの２つの有利ではあるが限定的ではない例は、ジアルキルグリセロール及びジアルキルグルタメートである。疎水性グラフトＧのカップリングは当業者の能力の範囲内にあり、特には、文献ＰＣＴ／ＥＰ２００８／０５５５０７、ＷＯ０３／１０４３０３に記載のプロトコールに従って行うことができる。
【０１２４】
カチオン性基又は中性基
本発明のポリアミノ酸はカチオン性基を有することもできる。これらの基は、グルタミン酸残基に、好ましくはアミド又はエステル結合によってグラフトされる。
【０１２５】
本発明の別の変形において、カチオン性基は、少なくとも１種の四級アンモニウム又は半中和ｐＨが８．０を超える少なくとも１種の強塩基を含むものから選択することができる。
【０１２６】
このようなカチオン性基は、以下の前駆体化合物から得ることができる。
・２〜６個の炭素原子を有する直鎖ジアミン、好ましくはプトレシン
・アグマチン
・酸素によって結合されるエタノールアミン
・酸素によって結合されるコリン
・α位でアミン官能基によって結合される、側鎖が中性ｐＨで正に帯電するアミノ酸（すなわち、リシン、アルギニン、オルニチン）のエステル又はアミド誘導体
【０１２７】
したがって、グルタメート残基の官能化に使用することができるカチオン性基は同一又は互いに異なり、また
ヒスチジンエステル、好ましくはメチルエステル及びエチルエステル、ヒスチジノール、ヒスタミン、ヒスチジンアミド、ヒスチジンアミドのＮ−モノメチル誘導体並びにヒスチジンアミドのＮ，Ｎ’−ジメチル誘導体を含む群から選択されるヒスチジン誘導体、
以下の一般式：
【化２】
2011529100.tif 000003
（式中、Ｘ＝Ｏ、ＮＨ、Ｙ＝独立してＨ又はＣＨ3、Ｚ-＝クロライド、サルフェート、ホスフェート又はアセテート、Ｌ＝任意でカルボキシルタイプの官能基によって置換される直鎖（Ｃ2〜Ｃ6）アルキレン又は誘導体）に対応することができる。
【０１２８】
より正確には、本発明で使用することができるカチオン性基は、以下の群：
−ＮＨ−（ＣＨ2）w−ＮＨ3+、Ｚ-、ｗは２〜６であり、好ましくはｗは４に等しい、
−Ｏ−（ＣＨ2）2−ＮＨ3+、Ｚ-、
−Ｏ−（ＣＨ2）2−Ｎ+（ＣＨ3）3、Ｚ-、
以下の群から選択される基：
−ＮＨ−（ＣＨ2）4−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ3+、Ｚ-、
式：
【化３】
2011529100.tif 000004
（式中、Ｒ1はアルコキシ、好ましくは−ＯＭｅ又は−ＯＥｔ、或いはＲ1は−ＮＨ2、アルキルアミノ、好ましくは−ＮＨ−ＣＨ3又は−Ｎ（ＣＨ3）2であり、Ｒ13は−（ＣＨ2）4−ＮＨ3+、Ｚ-、−（ＣＨ2）3−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ3+、Ｚ-、−（ＣＨ2）3−ＮＨ3+、Ｚ-である）のアミノ酸残基又はアミノ酸誘導体
から選択され、Ｚ-はクロライド、サルフェート、ホスフェート又はアセテート、好ましくはクロライドである。
【０１２９】
例えば、カチオン性基は、以下の式：
【化４】
2011529100.tif 000005
（式中、Ｒ1はアルコキシ又はアルキルアミノ、好ましくは−ＯＭｅ、−ＯＥｔ、−ＮＨ2、−ＮＨＣＨ3又は−Ｎ（ＣＨ3）2を表し、Ｒ2は、水素原子、−ＣＨ2ＯＨ、−ＣＯ2Ｈ又は−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ1を表す）を有することができる。
【０１３０】
中性基に関しては、以下の群：ヒドロキシエチルアミノ−、ジヒドロキシプロピルアミノ−、ヒドロキシアルキルオキシ−又はポリオキシアルキレンから選択することができる。
【０１３１】
カチオン性基及び任意の中性基とポリマーの酸性官能基とのカップリングは、カップリング剤としてのクロロホルメートの存在下、ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）又はジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）等の適当な溶媒中で第２工程において同時に行われる。
【０１３２】
カチオン性基が２つの化学的に分化していないアミン官能基（例えば、直鎖ジアミン）を含む場合、カチオン性基を、２つの官能基の一方が保護された形態で導入することができる。その場合、保護基を開裂させる最後の工程が加えられる。
【０１３３】
重合化学及び基のカップリング反応は標準的なものであり、また当業者に周知である（例えば、出願人の上記の特許又は特許出願を参照のこと）。
【０１３４】
一般式ＩのポリマーＰＯＭ
本発明の好ましい変形において、ポリマーＰＯＭは、以下の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容可能な塩の１つであって、 
【化５】
2011529100.tif 000006
式中、
Ａは独立して
ＲＮＨ−（式中、ＲはＨ、直鎖Ｃ2〜Ｃ10アルキル、分岐Ｃ3〜Ｃ10アルキル又はベンジルを表す）、
式：
【化６】
2011529100.tif 000007
の末端アミノ酸残基（式中、Ｒ7は−ＯＨ、−ＯＲ9又は−ＮＨＲ10であり、Ｒ8、Ｒ9及びＲ10は独立してＨ、直鎖Ｃ2〜Ｃ10アルキル、分岐Ｃ3〜Ｃ10アルキル又はベンジルを表す）を表し、
Ｂは直接結合、二価、三価又は四価の結合を有する基であり、好ましくは−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−、アミノ酸残基（好ましくは天然）、ジオール、トリオール、ジアミン、トリアミン、アミノアルコール又は１〜６個の炭素原子を含むヒドロキシ酸から選択され、
Ｄは、Ｈ、直鎖Ｃ2〜Ｃ10アシル、分岐Ｃ3〜Ｃ10アシル又はピログルタメートを表し、
疎水性基Ｇはそれぞれ互いに独立して
任意で少なくとも１つの不飽和及び／又は少なくとも１つのヘテロ原子（好ましくはＯ及び／又はＮ及び／又はＳ）を含むことができる直鎖又は分岐Ｃ8〜Ｃ30アルキル、或いは
任意で少なくとも１つの不飽和及び／又は少なくとも１つのヘテロ原子（好ましくはＯ及び／又はＮ及び／又はＳ）を含むことができるＣ8〜Ｃ30アルキルアリール又はアリールアルキル、或いは
任意で少なくとも１つの不飽和及び／又は少なくとも１つのヘテロ原子（好ましくはＯ及び／又はＮ及び／又はＳ）を含むことができるＣ8〜Ｃ30（多）環式基から選択され、
Ｒ1は、以下の群：
−ＮＨ−（ＣＨ2）w−ＮＨ3+、Ｚ-（ｗは２〜６、好ましくはｗは４に等しい）、
−ＮＨ−（ＣＨ2）4−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ3+、Ｚ-、
−Ｏ−（ＣＨ2）2−ＮＨ3+、Ｚ-、
−Ｏ−（ＣＨ2）2−Ｎ+（ＣＨ3）3、Ｚ-、
式：
【化７】
2011529100.tif 000008
のアミノ酸残基又はアミノ酸誘導体（式中、Ｘは酸素原子又は−ＮＨ−であり、Ｒ12はＨ、直鎖Ｃ2〜Ｃ10アルキル、分岐Ｃ3〜Ｃ10アルキル又はベンジルであり、Ｒ13は−（ＣＨ2）4−ＮＨ3+、Ｚ-、−（ＣＨ2）3−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ3+、Ｚ-、−（ＣＨ2）3−ＮＨ3+、Ｚ-から選択され、対アニオンＺ-はクロライド、サルフェート、ホスフェート又はアセテート、好ましくはクロライドであり、
Ｒ3は、ヒドロキシエチルアミノ−、ジヒドロキシプロピルアミノ、アルキレングリコール残基、ポリオキシアルキレングリコール又は式：
【化８】
2011529100.tif 000009
（式中、Ｒ10は、−Ｈ、−ＣＯ2Ｈ、アルキルエステル（好ましくは−ＣＯＯＭｅ又は−ＣＯＯＥｔ）、−ＣＨ2ＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ2、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ3又は−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（ＣＨ3）2を表す）の基を表し、
ｐ、ｑ、ｒ及びｓは正の整数であり、ｑ、ｒ及びｓはゼロであってもよく、
重合度ＤＰである（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は１０〜１０００、特には２０〜５００、好ましくは３０〜５００であり、
疎水性基Ｇのモルグラフト率（ｐ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は２〜９９モル％、好ましくは３〜５０％であり、ただし各コポリマー鎖は少なくとも２つ、好ましくは少なくとも３つの疎水性基を有し、
カチオン性基のモルグラフト率（ｑ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は０〜９８モル％であり、
中性基のモルグラフト率（ｒ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は０〜９８モル％であり、
アニオン性基のモルグラフト率（ｓ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は０〜９８モル％であり、
鎖の全体的な電荷レベルＱ＝（ｑ−ｓ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は正又は負になり得て、
一般式Ｉのモノマーの鎖形成はランダム、ブロック又はマルチブロックタイプである。
【０１３５】
このようなポリマーは特に、文献ＰＣＴ／ＥＰ２００８／０５５５０７に詳細に記載されており、その内容は参照により組み込まれる。その合成についての更なる詳細については、文献ＦＲ０２０７００８、ＦＲ０３５０１９０の参照が役立つ。
【０１３６】
上記の一般式（Ｉ）は、配列（ｓｅｑｕｅｎｃｅｄ）（又はブロック）コポリマーしか表さないと解釈されるべきではなく、ランダムコポリマー又はマルチブロックコポリマーも表す。
【０１３７】
本発明のポリマーの「薬学的に許容可能な塩（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ  ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ  ｓａｌｔ）」という表現は、対イオンがポリマーのイオン化された官能基と結合した全てのポリマーを意味する。正の電荷と負の電荷が同時に存在する特定の構造の場合、電荷の完全な又は部分的な中和があると想定することもできる。同等数の正の電荷と負の電荷とを有する（等電点）ポリマーは、対アニオン又は対カチオンがなくても存在することができる。
【０１３８】
好ましくは、疎水性基Ｇ、アニオン性基及びカチオン性基は、ペンダント基としてランダムに配置される。
【０１３９】
好ましくは、疎水性基Ｇは、以下の群：オクチルオキシ−、ドデシルオキシ−、テトラデシルオキシ−、ヘキサデシルオキシ−、オクタデシルオキシ−、９−オクタデセニルオキシ−、トコフェリルオキシ−又はコレステリルオキシ−から選択され、その場合、Ｂは直接結合である。
【０１４０】
本発明に極めてよく適しているのは、一般式Ｉに対応する一般式Ｉ’の化合物であり、この式Ｉ’において
Ａは−ＮＨ2を表し、
Ｂは直接結合であり、
ＤはＨ又はピログルタメートを表し、
疎水性基Ｇはそれぞれ互いに独立してオクチルオキシ−、ドデシルオキシ−、テトラデシルオキシ−、ヘキサデシルオキシ−、オクタデシルオキシ−、９−オクタデセニルオキシ−、トコフェリルオキシ−又はコレステリルオキシ−から選択され、
Ｒ3は、ヒドロキシエチルアミノ−又はジヒドロキシプロピルアミノを表す。
【０１４１】
一般式Ｉの化合物は、これらの化合物がそれぞれ有する疎水性、カチオン性及び／又はアニオン性基の化学的性質、またこれらの基のそれぞれにおけるモルグラフト率に応じて区別することができる。
【０１４２】
更に、カチオン性及び／又はアニオン性基におけるグラフトの割合に関し、一般式Ｉの化合物は、中性ｐＨでアニオン性、中性又はカチオン性になり得る。
【０１４３】
したがって、第１の変形実施形態において、化合物は一般式Ｉ又はＩ’によって表され、
（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は２０〜２５０、好ましくは５０〜２２５であり、
（ｐ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は好ましくは４〜３０％であり（ただし、各コポリマー鎖は少なくとも２つの疎水性基を有する）、
（ｑ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は１０％以上であり、
（ｒ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は１０％以上であり、
（ｓ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は１０％以上であり、
Ｑ＝（ｑ−ｓ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は、正の場合、＋２０％〜＋６０％であり、負の場合、−２０％未満である。
【０１４４】
第２の変形実施形態において、化合物は一般式Ｉ又はＩ’によって表され、
（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は２０〜２５０、好ましくは５０〜２２５であり、
（ｐ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は好ましくは４〜３０％であり（ただし、各コポリマー鎖は少なくとも２つの疎水性基を有する）、
（ｑ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は１０〜８０％、好ましくは１０〜６０％であり、
（ｒ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は１０％以上であり、
（ｓ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は１５％未満である。
【０１４５】
第３の変形実施形態において、化合物は一般式Ｉ又はＩ’によって表され、
（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は２０〜２５０、好ましくは５０〜２２５であり、
（ｐ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は好ましくは４〜３０％であり（ただし、各コポリマー鎖は少なくとも２つの疎水性基を有する）、
（ｑ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は１０％以上であり、
（ｒ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は５％未満であり、
（ｓ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は１０％より高く、
Ｑ＝（ｑ−ｓ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は、正の場合、＋２０％〜＋６０％であり、負の場合、−２０％未満である。
【０１４６】
第４の変形実施形態において、化合物は一般式Ｉ又はＩ’によって表され、
（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は２０〜２５０、好ましくは５０〜２２５であり、
（ｐ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は好ましくは４〜３０％であり（ただし、各コポリマー鎖は少なくとも２つの疎水性基を有する）、
（ｑ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は１％未満であり、
（ｒ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）は１％未満である。
【０１４７】
特定の実施形態において、ＤＰが７０〜１３０、（ｐ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）比が７〜１３％、（ｑ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）比が３０〜５０％、（ｒ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）比が４０〜６０％、（ｓ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）比が１％未満である上記の第２の変形実施形態のポリマーは、ポリマーＰＯＭとして本発明に特によく適している。
【０１４８】
特に、１０％をビタミンＥ、４０％をアルギニン、５０％をエタノールアミンにカチオングラフトさせたポリグルタメートが適切である。
【０１４９】
別の特定の実施形態において、（ｐ）／（ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ）比が１５〜２５％であり、ＤＰが１５０〜２５０又は７０〜１３０である上記の第４の変形実施形態のポリマーは、ポリマーＰＯＭとして本発明に特によく適している。
【０１５０】
特定の例は、ビタミンＥと２０％グラフトさせたポリグルタメートである。
【０１５１】
ＰＯＭと有効成分との結合
１種以上の有効成分と本発明のポリマーＰＯＭ、より具体的には本発明の変性ポリアミノ酸とを結合するための技法は、特に特許ＵＳ６６３０１７１に記載のものと同様である。
【０１５２】
タンパク質、ペプチド又は小分子等の有効成分は、ポリアミノ酸タイプのポリマーＰＯＭと自発的に結合することができる。小分子とは、質量が１０００Ｄａ未満の有機分子を意味する。
【０１５３】
この結合は純粋に物理的なものであり、有効成分とポリマーとの間での共有結合の形成を伴わない。
【０１５４】
理論によって拘束されるものではないが、この非特異的な結合は、疎水的及び／又は静電相互作用、ポリマーと有効成分との間での水素結合及び／又はポリマーによる有効成分の立体封入によって達成されると考えることができる。有効成分をナノ粒子と、ペプチド性の又は抗原／抗体又は酵素／基質タイプの特異的受容体によって結合する必要はなく、また多くの場合望ましくさえないことに留意されたい。
【０１５５】
得られた粒子の化学的架橋の工程は設けられない。化学的架橋がないことによって、有効成分を含有している粒子の架橋工程中での有効成分の化学分解の回避が可能になる。このような架橋は実際、一般に、重合性の実体の活性化によって行われ、紫外線照射、又はグルタルアルデヒド等の変性を引き起こす可能性がある物質が関わってくる。
【０１５６】
有効成分とポリマーＰＯＭとの結合は特に、以下の実施形態に従って行うことができる。
【０１５７】
第１の実施形態において、有効成分は水溶液に溶解させられ、ポリマーＰＯＭの水性懸濁液と混合させられる。
【０１５８】
第２の実施形態において、粉末の形態の有効成分を、ポリマーＰＯＭの水性懸濁液中に分散させ、均質で澄んだ懸濁液が得られるまで混合物を攪拌する。
【０１５９】
第３の実施形態において、ポリマーＰＯＭを粉末の形態で有効成分の水溶液中に導入する。
【０１６０】
第４の実施形態において、有効成分及び／又はポリマーを、水と混和性の有機溶媒（エタノール、又はイソプロパノール等）を含有している溶液に溶解させる。次に、上記の実施形態１〜３の手順に従う。任意で、この溶媒を、透析又は当業者に既知のその他の技法によって除去することができる。
【０１６１】
これらの実施形態の全てに関して、超音波又は温度の上昇の利用による有効成分とポリマーＰＯＭとの相互作用の促進が有利になる可能性がある。
【０１６２】
ＡＩ／ＰＯＭ混合物を中性球体タイプの中性基体に適用することが望ましい場合、以下の手順に従うことができる。
【０１６３】
中性コア上に堆積される層の接着性を確保することが意図された慣用の結合剤を、有効成分とポリマーＰＯＭとの均質な混合物に添加する。
【０１６４】
このような結合剤は特には、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｇｒａｎｕｌａｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｄｉｌｉｐ  Ｍ．Ｐａｒｉｋｈ  ｅｄ．，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ  Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９７中の、Ｋｈａｎｋａｒｉ  Ｒ．Ｋ．らのＢｉｎｄｅｒｓ  ａｎｄ  Ｓｏｌｖｅｎｔｓにおいて提案されている。
【０１６５】
以下のヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、メチルセルロース（ＭＣ）及びヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）は、結合剤として本発明に特によく適している。
【０１６６】
次に、対応する混合物の堆積を、当業者に既知の標準的な技法によって行う。これは特に、有効成分を担持させたナノ粒子の、結合剤、任意のその他の化合物を含有しているコロイド懸濁液の流動層中の支持体上への噴霧を伴う場合がある。
【０１６７】
当然のことながら、有効成分／ポリマーＰＯＭ質量比は、考慮される有効成分の用量に応じて大きく異なる可能性がある。
【０１６８】
より具体的には、この比は、０．１〜３００質量％、１〜１００質量％又は５〜８０質量％である。
【０１６９】
有効成分
本発明で考慮される有効成分は有利には、動物又はヒトに経口で投与可能な生理学的に活性な化合物である。
【０１７０】
本発明のポリアミノ酸と結合し得る有効成分の例として、非限定的な実例として
タンパク質、例えばインシュリン、インターフェロン、成長ホルモン、インターロイキン、エリスロポエチン又はサイトカイン、
糖タンパク質、
１種以上のポリアルキレングリコール鎖に連結されるタンパク質（好ましくは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）：ペグ化タンパク質）、
ペプチド、
多糖類、
リポ糖類、
オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド及び
これらの混合物
を挙げることができる。
【０１７１】
一般的なやり方において、有効成分はいずれの治療用又は化粧用有効成分であっても、すなわち上記のものとは異なる有効成分であってもよい。本発明の意味において、能動的な薬学的用途のための粒子状経口剤形は、ヒト及び動物の両方の治療に関係する。
【０１７２】
好ましくは、有効成分は、タンパク質又はペプチドを含む群から選択される。
【０１７３】
特定の好ましい実施形態において、有効成分はインシュリンである。
【０１７４】
本発明は、本発明の微粒子状経口剤形から発展させた新規の医薬製剤又は食事療法用の製剤にも関係する。
【０１７５】
したがって、この粒子状の剤形を、粉末、懸濁液、錠剤又はゼラチンカプセルの形態で提示することができる。
【０１７６】
ある変形実施形態において、経口剤形は、有効成分及び／又はこの有効成分に結合したＰＯＭの性質が異なる少なくとも２つのタイプのナノ粒子を含むことができる。
【０１７７】
先行の変形実施形態と組み合わせることもできる更に別の変形において、経口剤形は、コーティング層及び／又は取り込まれている有効成分の性質が互いに異なる少なくとも２つのタイプの微粒子を組み合わせることができる。
【０１７８】
最後に、本発明は、既定の治療量に従った、上記で定義されたようなマイクロカプセルを含む薬物の経口摂取から成る治療方法にも関する。
【０１７９】
本発明は、単なる実例として挙げられた以下の実施例によってより良く説明される。
【図面の簡単な説明】
【０１８０】
【図１】図１は、実施例１の微粒子からのカルベジロールの試験管内放出プロファイルを表し、一方はポリマーＰＯＭと結合していない遊離カルベジロールの放出プロファイルであり（＋）、もう一方は、全カルベジロール、すなわち遊離カルベジロール及びＰＯＭと結合したカルベジロールの放出プロファイルであり（◆）、３時間に亘る０．１ＮのＨＣｌ媒質中、次に５Ｎのソーダ及びリン酸カリウムの添加による媒質のｐＨ及び塩分の調節後のｐＨ＝７．０の０．０５Ｍの媒質中での時間Ｔ（時間）対する放出プロファイルである。
【図２】図２は、実施例３の微粒子からのインシュリンの試験管内放出プロファイルを表し、一方はＰＯＭと結合していない遊離インシュリンの放出プロファイルであり（＋）、もう一方は、全インシュリン、すなわち遊離インシュリン及びＰＯＭと結合したインシュリンの放出プロファイルであり（◆）、３時間に亘る０．１ＮのＨＣｌ媒質中、次に５Ｎのソーダ及びリン酸カリウムの添加による媒質のｐＨ及び塩分の調節後のｐＨ＝７．０の０．０５Ｍの媒質中での時間Ｔ（時間）に対する放出プロファイルである。
【図３】図３は、実施例５の微粒子からのインシュリンの試験管内放出プロファイルを表し、２時間に亘る０．１ＮのＨＣｌ媒質中、次に５Ｎのソーダ及びリン酸カリウムの添加による媒質のｐＨ及び塩分の調節後のｐＨ＝６．８の０．０５Ｍの媒質中での時間Ｔ（時間）に対する放出プロファイルである。
【図４】図４は、実施例７の微粒子からのカルベジロールの試験管内放出プロファイルを表し、３時間に亘る０．１ＮのＨＣｌ媒質中、次に５Ｎのソーダ及びリン酸カリウムの添加による媒質のｐＨ及び塩分の調節後のｐＨ＝６．８の０．０５Ｍの媒質中での時間Ｔ（時間）に対する放出プロファイルである。
【実施例】
【０１８１】
実施例１
ビタミンＥに２０％グラフトされた重合度約１００のポリグルタメートと結合したカルベジロール塩基の微粒子の調製及び処方
工程１：カルベジロール塩基とビタミンＥに２０％グラフトされた重合度約１００のポリグルタメートポリマー（ｐＧｌｕ−ＶＥ  １００−２０）との結合物の調製
式Ｉから、このポリマーＰＯＭは、ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ＝１００、ｐ＝２０、ｑ＝０、ｒ＝０及びｓ＝８０によって特徴づけられる。
【０１８２】
１．２１ｇのカルベジロール塩基を、２５０ｍｌのガラスフラスコに導入する。１３３．２９ｇのｐＧｌｕ−ＶＥ  １００−２０の水溶液（ｐＨ＝７．０、９０ｍｇ／ｇに濃縮）を添加する。調合物を、カルベジロール塩基が完全に溶解するまで（すなわち、未可溶のカルベジロール塩基粉末が消失するまで）外界温度の超音波浴内に入れる。カルベジロール塩基の溶解後、完全に澄んだ溶液が得られる。
【０１８３】
工程２：顆粒の調製（コーティング工程）
１２．５ｇのショ糖（Ｔｅｒｅｏｓ社のＣｏｍｐｒｅｓｓｕｃ  ＰＳ）及び６．３ｇのポビドン（ＩＳＰ社のＰｌａｓｄｏｎｅ  Ｋ２９／３２）を、工程１で調製したｐＧｌｕ−ＶＥ  １００−２０と結合させたカルベジロール塩基の１３４．５ｇの溶液が入った２５０ｍｌのガラスフラスコ内にマグネチックスターラで攪拌しながら導入する。ショ糖の結晶及びポビドン粉末が一旦溶解したら、溶液を、底部噴霧構成（コーティング溶液を、粒子層の底部に位置するノズルから噴霧する）のＭｉｎｉＧｌａｔｔ流動層内の３８．０ｇのセルロース球体（旭化成）上に噴霧する。噴霧後、得られた生成物を６３０μｍの篩で篩過する。次に、６３０μｍ未満のサイズの７０．５ｇの顆粒を回収する。
【０１８４】
Ｓｉｒｏｃｃｏ２０００乾式モジュールを備えたＭａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社の装置Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ２０００を使用したレーザー回折によって測定されるその体積平均直径は、５３６μｍである。
【０１８５】
５８０ｍｇの顆粒を、１００ｍｌの０．０５Ｍのリン酸カリウム媒質（ｐＨ＝７．０）を入れたビーカーに導入して懸濁液中のポリマーＰＯＭ濃度約１ｍｇ／ｍｌを得る。この懸濁液を、外界温度で２時間に亘ってマグネチックスターラの攪拌棒で攪拌する。次に１０ｍｌの懸濁液を取り出し、孔径０．４５μｍのＡｃｒｏｄｉｓｃフィルタ上で濾過する。その時、濾液中に浮遊しているナノ粒子の流体力学的直径は（ＡＬＶ社の装置ＣＧＳ−３を使用した角度９０°での光の拡散によって強度モードで求められる）１４ｎｍである。
【０１８６】
工程３：コーティング相
工程２で調製した４５．００ｇの顆粒を、ＭｉｎｉＧｌａｔｔ流動層内で、７８℃の１３５．３ｇのイソプロパノールに溶解させた９．００ｇのメタクリル酸とエチルアクリレートとのコポリマー（Ｅｖｏｎｉｋ社のＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ１００−５５）及び６．００ｇの水素化綿実油（ＪＲＳ  Ｐｈａｒｍａ社のＬｕｂｒｉｔａｂ）でコーティングする。噴霧後、５７．９０ｇの微粒子が得られる。Ｓｉｒｏｃｃｏ２０００乾式モジュールを備えたＭａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社の装置Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ２０００を使用したレーザー回折によって測定されるその体積平均直径は、６００μｍである。
【０１８７】
したがって、工程２中に調製された顆粒上に堆積されるコーティングの平均厚さは、上記の工程２で得られた顆粒及び工程３で得られた微粒子について求めた体積平均直径から計算したところ、３２μｍである。
【０１８８】
実施例２
試験管内溶解試験
実施例１で調製した微粒子の試験管内の放出動態を、３７℃±０．５℃、９００ｍｌの０．１ＮのＨＣｌ媒質内で３時間に亘って評価し、次に５Ｎのソーダ及びリン酸カリウムの添加による媒質のｐＨ及び塩分の調節後、ｐＨ＝７．０の９００ｍｌの０．０５Ｍの媒質において評価する。溶解試験は、ＵＳＰタイプＩＩパドル装置で行われる。パドルの回転速度は１００ｒｐｍである。
【０１８９】
より正確には、溶解媒質中に存在する一方の遊離カルベジロール（すなわち、ｐＧｌｕ−ＶＥ  １００−２０と結合していない）ともう一方の総カルベジロール（すなわち、遊離カルベジロール及びｐＧｌｕ−ＶＥ  １００−２０と結合しているカルベジロール）の量は、ＨＰＬＣ液体クロマトグラフィによって経時的に監視される。これを目的として、各試料採取時間で、溶解媒質の試料を一方では直接ＨＰＬＣ液体クロマトグラフィで分析して総カルベジロールの割合を求め、もう一方では、濾液をＨＰＬＣで分析する前に、限外濾過によって処理してカルベジロール遊離塩基の割合を求める。
【０１９０】
試験結果を図１に示す。
【０１９１】
図１及び以下の表１から、媒質のｐＨ及び塩分の調節後に溶解媒質中で放出されるカルベジロールの殆どがｐＧｌｕ−ＶＥ  １００−２０と結合することが注目される。
【０１９２】
【表１】
2011529100.tif 000010
【０１９３】
実施例３
ｐＧｌｕ−ＶＥポリマーと結合したインシュリンの微粒子の調製及び処方
工程１：インシュリンとビタミンＥに２０％グラフトされた重合度約１００のポリグルタメートポリマー（ｐＧｌｕ−ＶＥ  １００−２０）との結合物の調製
２．４０ｇのインシュリン（Ｂｉｏｃｏｎ社）を、２５０ｍｌのガラスフラスコに導入する。１３３．７ｇのｐＧｌｕ−ＶＥ  １００−２０の水溶液（９０ｍｇ／ｇに濃縮）を添加する。調合物を、インシュリンが完全に溶解するまで外界温度の超音波浴内に入れる。インシュリンの溶解後、完全に澄んだ溶液が得られる。
【０１９４】
工程２：顆粒の調製（コーティング工程）
１２．００ｇのショ糖（Ｔｅｒｅｏｓ社のＣｏｍｐｒｅｓｓｕｃ  ＰＳ）及び６．６０ｇのポビドン（ＩＳＰ社のＰｌａｓｄｏｎｅ  Ｋ２９／３２）を、上で調製したｐＧｌｕ−ＶＥ  １００−２０と結合させたインシュリンの１３６．１ｇの溶液が入った２５０ｍｌのガラスフラスコ内にマグネチックスターラで攪拌しながら導入する。ショ糖の結晶及びポビドン粉末が一旦溶解したら、溶液を、底部噴霧構成（コーティング溶液を、粒子層の底部に位置するノズルから噴霧する）の流動層内の３８．００ｇのセルロース球体（旭化成）上に噴霧する。噴霧後、得られた生成物を６３０μｍの篩で篩過する。次に、６３０μｍ未満のサイズの６６．２ｇの顆粒を回収する。
【０１９５】
Ｓｉｒｏｃｃｏ２０００乾式モジュールを備えたＭａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社の装置Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ２０００を使用したレーザー回折によって測定されるその体積平均直径は、５３５μｍである。
【０１９６】
５８０ｍｇの顆粒を、１００ｍｌの０．０５Ｍのリン酸カリウム媒質（ｐＨ＝７．０）を入れたビーカーに導入して懸濁液中のポリマーＰＯＭ濃度約１ｍｇ／ｍｌを得る。この懸濁液を、外界温度で２時間に亘ってマグネチックスターラの攪拌棒で攪拌する。次に１０ｍｌの懸濁液を取り出し、孔径０．４５μｍのＡｃｒｏｄｉｓｃフィルター上で濾過する。ナノ粒子の流体力学的直径は（Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社の装置ＣＧＳ−３を使用した角度９０°での光の拡散によって強度モードで求められる）１２ｎｍである。
【０１９７】
工程３：コーティング相
上で調製した３６．０６ｇの顆粒を、ＭｉｎｉＧｌａｔｔ流動層内で、７８℃の１０８．３４ｇのイソプロパノールに溶解させた７．２０ｇのメタクリル酸とエチルアクリレートとのコポリマー（Ｅｖｏｎｉｋ社のＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ１００−５５）及び４．８０ｇの水素化綿実油（ＪＲＳ  Ｐｈａｒｍａ社のＬｕｂｒｉｔａｂ）でコーティングする。噴霧後、４６．３０ｇの微粒子が得られる。Ｓｉｒｏｃｃｏ２０００乾式モジュールを備えたＭａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社の装置Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ２０００を使用したレーザー回折によって測定されるその体積平均直径は、６２３μｍである。
【０１９８】
したがって、工程２中に調製された顆粒上に堆積されるコーティングの平均厚さは、上記の工程２で得られた顆粒及び工程３で得られた微粒子について求めた体積平均直径から計算したところ、４４μｍである。
【０１９９】
実施例４
試験管内溶解試験
実施例３で調製した微粒子の試験管内の放出動態を、３７℃±０．５℃、９００ｍｌの０．１ＮのＨＣｌ媒質内で３時間に亘って監視し、次に５Ｎのソーダ及びリン酸カリウムの添加による媒質のｐＨ及び塩分の調節後、ｐＨ＝７．０の９００ｍｌの０．０５Ｍの媒質において監視する。溶解試験は、ＵＳＰタイプＩＩパドル装置で行われる。パドルの回転速度は１００ｒｐｍである。
【０２００】
より正確には、溶解媒質中に存在する一方の遊離インシュリン（すなわち、ポリマーｐＧｌｕ−ＶＥ  １００−２０と結合していない）ともう一方の総インシュリン（すなわち、遊離インシュリン及びポリマーｐＧｌｕ−ＶＥ  １００−２０と結合しているインシュリン）の量は、ＨＰＬＣ液体クロマトグラフィによって経時的に監視される。これを目的として、試料を採取するたびに、溶解媒質の試料を一方では直接ＨＰＬＣ液体クロマトグラフィで分析して総インシュリンの割合を求め、もう一方では、濾液をＨＰＬＣで分析する前に、限外濾過によって処理して遊離インシュリンの割合を求める。
【０２０１】
試験結果を図２に示す。
【０２０２】
図２及び以下の表２から、媒質のｐＨ及び塩分の調節後に溶解媒質中で放出されるインシュリンの殆どがポリマーｐＧｌｕ−ＶＥ  １００−２０と結合することが注目される。
【０２０３】
【表２】
2011529100.tif 000011
*許容範囲の実験誤差限界に従う
【０２０４】
実施例５
ｐＧｌｕ−ＶＥ−Ａｒｇ−ＥＡカチオン性ポリマーと結合したインシュリンの微粒子の調製
工程１：インシュリンとビタミンＥに１０％、アルギニンに４０％、エタノールアミンに５０％グラフトされたカチオン性ポリグルタメートポリマーとの結合物の調製
式Ｉから、このポリマーＰＯＭは、ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ＝１００、ｐ＝１０、ｑ＝４０、ｒ＝５０及びｓ＝０によって特徴づけられる。
【０２０５】
０．６０４ｇのインシュリン（Ｂｉｏｃｏｎ社）を、２５０ｍｌのガラスフラスコに導入する。１３３．３ｇのビタミンＥに１０％、アルギニンに４０％、エタノールアミンに５０％グラフトさせたポリグルタメートポリマーの水溶液（ｐＨ＝５．９、７９．４ｍｇ／ｇに濃縮）を添加する。調合物を、インシュリンが完全に溶解するまで（すなわち、未可溶のインシュリン粉末が消失するまで）外界温度の超音波浴内に入れる。インシュリンの溶解後、完全に澄んだ溶液が得られる。
【０２０６】
工程２：顆粒の調製（コーティング工程）
６．０ｇのショ糖（Ｔｅｒｅｏｓ社のＣｏｍｐｒｅｓｓｕｃ  ＰＳ）及び４．４ｇのポビドン（ＩＳＰ社のＰｌａｓｄｏｎｅ  Ｋ２９／３２）を、上で調製したビタミンＥに１０％、アルギニンに４０％、エタノールアミンに５０％グラフトさせたポリグルタメートと結合させたインシュリンの１５１．１８ｇの溶液が入った２５０ｍｌのガラスフラスコ内にマグネチックスターラで攪拌しながら導入する。ショ糖の結晶及びポビドン粉末が一旦溶解したら、溶液を、底部噴霧構成（コーティング溶液を、粒子層の底部に位置するノズルから噴霧する）のＭｉｎｉＧｌａｔｔ流動層内の３３．００ｇのセルロース球体（旭化成）上に噴霧する。噴霧後、得られた生成物を７１０μｍの篩で篩過する。次に、７１０μｍ未満のサイズの３７．４ｇの顆粒を回収する。Ｓｉｒｏｃｃｏ２０００乾式モジュールを備えたＭａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社の装置Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ２０００を使用したレーザー回折によって強度モードで測定されるその体積平均直径は、５３１μｍである。
【０２０７】
９５．８ｍｇの顆粒を、２０ｍｌの０．０５Ｍのホスフェート媒質（ｐＨ＝６．８）を入れたビーカーに導入して懸濁液中のポリマーＰＯＭ濃度約１ｍｇ／ｍｌを得る。この懸濁液を、外界温度で２時間に亘ってマグネチックスターラの攪拌棒で攪拌する。次に懸濁液を取り出し、孔径０．４５μｍのＡｃｒｏｄｉｓｃフィルター上で濾過する。その時、濾液中に浮遊しているナノ粒子の流体力学的半径は（Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社の装置ＣＧＳ−３を使用した角度９０°での光の拡散によって強度モードで求められる）６ｎｍである。
【０２０８】
インシュリンとの結合前のビタミンＥと１０％、アルギニンと４０％、エタノールアミンと５０％グラフトさせたポリグルタメートの、ナノ粒子のＭａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社の装置ＣＧＳ−３を使用して角度９０°での光の拡散によって求めた流体力学的半径は７ｎｍであることに留意すべきである。この溶液の濃度は、測定前にＰＯＭポリマー中で１ｍｇ／ｍｌに調節された。
【０２０９】
工程３：コーティング相
上で調製した３０．０ｇの顆粒を、ＭｉｎｉＧｌａｔｔ流動層内で、７８℃の９０．４７ｇのイソプロパノールに溶解させた２．０ｇのメタクリル酸とエチルアクリレートとのコポリマー（Ｅｖｏｎｉｋ社のＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ１００−５５）、４．０ｇのメタクリル酸とメチルメタクリレートとのコポリマー（Ｅｖｏｎｉｋ社のＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｓ１００）及び４．０ｇの水素化綿実油（ＪＲＳ  Ｐｈａｒｍａ社のＬｕｂｒｉｔａｂ）でコーティングする。噴霧後、３９．７ｇの微粒子が得られる。Ｓｉｒｏｃｃｏ２０００乾式モジュールを備えたＭａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社の装置Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ２０００を使用したレーザー回折によって測定されるその体積平均直径は、５８８μｍである。
【０２１０】
したがって、工程２中に調製された顆粒上に堆積されるコーティングの平均厚さは、上記の工程２で得られた顆粒及び工程３で得られた微粒子について求めた体積平均直径から計算したところ、２８．５μｍである。
【０２１１】
実施例６
試験管内溶解試験
実施例５で調製した微粒子の試験管内の放出動態を、３７℃±０．５℃、５００ｍｌの０．１ＮのＨＣｌ媒質内で２時間に亘って監視し、次に５Ｎのソーダ及びリン酸カリウムの添加による媒質のｐＨ及び塩分の調節後、ｐＨ＝６．８の５００ｍｌの０．０５Ｍの媒質において監視する。溶解媒質の各試料を、直接ＨＰＬＣクロマトグラフィで分析して溶解媒質に溶解しているインシュリンの割合を求める。溶解試験は、ＵＳＰタイプＩＩパドル装置で行われる。パドルの回転速度は１００ｒｐｍである。
【０２１２】
試験結果を図３に示す。
【０２１３】
媒質のｐＨ及び塩分の調節後に、インシュリンの全用量が溶解媒質中で放出されることに留意すべきである。
【０２１４】
実施例７
ｐＧｌｕ−ＶＥポリマーと結合したカルベジロール塩基の微粒子の調製
工程１：カルベジロール塩基とビタミンＥに１０％グラフトさせたｐＧｌｕ−ＶＥポリマーとの結合物の調製
式Ｉから、このポリマーＰＯＭは、ｐ＋ｑ＋ｒ＋ｓ＝１００、ｐ＝１０、ｑ＝０、ｒ＝０及びｓ＝９０によって特徴づけられる。
【０２１５】
１．０１ｇのカルベジロール塩基を、２５０ｍｌのガラスフラスコに導入する。１５１．２ｇのビタミンＥに１０％グラフトさせたポリグルタメートポリマーの水溶液（ｐＨ＝６．９、５２．８ｍｇ／ｇに濃縮）を添加する。調合物を、カルベジロール塩基が完全に溶解するまで（すなわち、未可溶のカルベジロール塩基粉末が消失するまで）外界温度の超音波浴内に入れる。カルベジロール塩基の溶解後、完全に澄んだ溶液が得られる。
【０２１６】
工程２：顆粒の調製（コーティング工程）
４．００ｇのショ糖（Ｔｅｒｅｏｓ社のＣｏｍｐｒｅｓｓｕｃ  ＰＳ）及び３．０３ｇのポビドン（ＩＳＰ社のＰｌａｓｄｏｎｅ  Ｋ２９／３２）を、上で調製したビタミンＥに１０％グラフトさせたポリグルタメートと結合させたカルベジロール塩基の１５２．２ｇの溶液が入った２５０ｍｌのガラスフラスコ内にマグネチックスターラで攪拌しながら導入する。ショ糖の結晶及びポビドン粉末が一旦溶解したら、溶液を、底部噴霧構成（コーティング溶液を、粒子層の底部に位置するノズルから噴霧する）のＭｉｎｉＧｌａｔｔ流動層内の３０．００ｇのセルロース球体（旭化成）上に噴霧する。噴霧後、得られた生成物を６３０μｍの篩で篩過する。次に、６３０μｍ未満のサイズの４６．０ｇの顆粒を回収する。Ｓｉｒｏｃｃｏ２０００乾式モジュールを備えたＭａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社の装置Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ２０００を使用したレーザー回折によって測定されるその体積平均直径は、４９７μｍである。
【０２１７】
３００ｍｇの顆粒を、５０ｍｌの０．０５Ｍのホスフェート媒質（ｐＨ＝６．８）を入れたビーカーに導入して懸濁液中のポリマーＰＯＭ濃度約１ｍｇ／ｍｌを得る。この懸濁液を、外界温度で２時間に亘ってマグネチックスターラの攪拌棒で攪拌する。次に１０ｍｌの懸濁液を取り出し、孔径０．４５μｍのＡｃｒｏｄｉｓｃフィルター上で濾過する。その時、濾液中に浮遊しているナノ粒子の流体力学的半径は（Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社の装置ＣＧＳ−３を使用した角度９０°での光の拡散によって強度モードで求められる）１８ｎｍである。
【０２１８】
工程３：コーティング相
上で調製した３６．００ｇの顆粒を、ＭｉｎｉＧｌａｔｔ流動層内で、７８℃の１０８．７８ｇのイソプロパノールに溶解させた３．８５ｇのメタクリル酸とエチルアクリレートとのコポリマー（Ｅｖｏｎｉｋ社のＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ１００−５５）、２．１７ｇのメタクリル酸とメチルメタクリレートとのコポリマー（Ｅｖｏｎｉｋ社のＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｓ１００）及び６．００ｇの水素化綿実油（ＪＲＳ  Ｐｈａｒｍａ社のＬｕｂｒｉｔａｂ）でコーティングする。噴霧後、４４．８ｇの微粒子が得られる。Ｓｉｒｏｃｃｏ２０００乾式モジュールを備えたＭａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社の装置Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ２０００を使用したレーザー回折によって測定されるその体積平均直径は、５７１μｍである。
【０２１９】
したがって、工程２中に調製された顆粒上に堆積されるコーティングの平均厚さは、上記の工程２で得られた顆粒及び工程３で得られた微粒子について求めた体積平均直径から計算したところ、３７μｍである
【０２２０】
実施例８
試験管内溶解試験
実施例７で調製した微粒子の試験管内の放出動態を、ＵＶ分光分析によって３７℃±０．５℃、９００ｍｌの０．１ＮのＨＣｌ内で３時間に亘って監視し、次に媒質のｐＨ及び塩分の調節後、ｐＨ＝６．８、０．０５Ｍのリン酸カリウムにおいて監視する。溶解試験は、ＵＳＰタイプＩＩパドル装置で行われる。パドルの回転速度は１００ｒｐｍである。
【０２２１】
得られたプロファイルを図４に示す。
【０２２２】
媒質のｐＨ及び塩分の調節後、カルベジロール塩基が溶解媒質中で全て放出されることに留意すべきである。
【図１】
2011529100.tif 000016
【図２】
2011529100.tif 000017
【図３】
2011529100.tif 000018
【図４】
2011529100.tif 000019
【国際調査報告】
2011529100.tif 000020
2011529100.tif 000021
2011529100.tif 000022
2011529100.tif 000023
2011529100.tif 000024
2011529100.tif 000025