(57)【要約】本発明は、イオンチャネルの阻害剤として有用な複素環式誘導体に関する。本発明はまた、本発明の化合物を含む製薬上許容される組成物および様々な障害の処置において組成物を使用する方法も提供する。これらの化合物および製薬上許容される組成物は、限定されないが、急性、慢性、神経因性、もしくは炎症性の疼痛、関節炎、偏頭痛、群発頭痛、三叉神経痛、ヘルペス神経痛、一般神経痛、癲癇もしくは癲癇状態、神経変性障害、不安および鬱病などの精神障害、筋緊張症、不整脈、運動障害、神経内分泌障害、運動失調、多発性硬化症、過敏性腸症候群、失禁、内臓痛、骨関節炎痛、ヘルペス後神経痛、糖尿病性神経障害、根性痛、坐骨神経痛、背痛、頭部もしくは頸部痛、重篤もしくは難治性の疼痛、侵害受容性疼痛、突出痛、手術後疼痛、または癌性疼痛を含む、様々な疾患、障害、または状態を処置またはその重篤度を減らすために有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物または製薬上許容されるその塩：
【化６５】
2011526919.tif 000076
［式中、各々独立して、
ＲおよびＲ１は、ハロまたはＣ１〜Ｃ６脂肪族であり、
ｍは、０〜４の整数（両端を含む）であり、
ｎは、０〜５の整数（両端を含む）である］。
【請求項２】
Ｒがハロである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１がハロである、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１がＣ１〜Ｃ６脂肪族である、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項５】
ｍが０である、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
ｍが２である、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
ｎが０である、請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
ｎが１である、請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
ｎが２である、請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０】
ＲがＦである、請求項１から９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ１がＣｌである、請求項１から３および５から１０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ１がＦである、請求項１から３および５から１０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ１がメチルである、請求項１から２および４から１０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１４】
ｍおよびｎが０である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１５】
ｍが０であり、ｎが１である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１６】
ｍが０であり、ｎが２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１７】
ｍが０であり、ｎが１であり、Ｒ１がＣｌである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１８】
ｍが０であり、ｎが１であり、Ｒ１がＦである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１９】
ｍが０であり、ｎが２であり、Ｒ１がＣｌである、請求項１に記載の化合物。
【請求項２０】
ｍが０であり、ｎが２であり、Ｒ１がＣｌおよびＭｅである、請求項１に記載の化合物。
【請求項２１】
ｍが２であり、ＲがＦであり、ｎが２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２２】
ｍが２であり、ＲがＦであり、ｎが２であり、Ｒ１がＣｌである、請求項１に記載の化合物。
【請求項２３】
式Ｉａ、Ｉｂ、Ｉｃ、Ｉｄ、またはＩｅを有する、請求項１に記載の化合物：
【化６６】
2011526919.tif 000077
【化６７】
2011526919.tif 000078
［式中、各々独立して、
ＲおよびＲ１は、Ｃ１〜Ｃ６脂肪族またはハロである］。
【請求項２４】
化合物が以下
【化６８】
2011526919.tif 000079
【化６９】
2011526919.tif 000080
【化７０】
2011526919.tif 000081
【化７１】
2011526919.tif 000082
から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項２５】
請求項１から２４のいずれか一項に記載の化合物および製薬上許容される担体を含む薬学的組成物。
【請求項２６】
ＮａＶ１．１またはＮａＶ１．３ナトリウムイオンチャネルを請求項１から２４のいずれか一項に記載の化合物と接触させるステップを含む、ＮａＶ１．１またはＮａＶ１．３ナトリウムイオンチャネルを調節する方法。
【請求項２７】
有効量の請求項１から２４のいずれか一項に記載の化合物を処置または重篤度を減らすことを必要としている被験体に投与することを含む、該被験体において、急性、慢性、神経因性、もしくは炎症性の疼痛、関節炎、偏頭痛、群発頭痛、三叉神経痛、ヘルペス神経痛、一般神経痛、癲癇もしくは癲癇状態、神経変性障害、不安および鬱病などの精神障害、双極性障害、筋緊張症、不整脈、運動障害、神経内分泌障害、運動失調、多発性硬化症、過敏性腸症候群、失禁、内臓痛、骨関節炎痛、ヘルペス後神経痛、糖尿病性神経障害、根性痛、坐骨神経痛、背痛、頭部もしくは頸部痛、重篤もしくは難治性の疼痛、侵害受容性疼痛、突出痛、手術後疼痛、癌性疼痛、脳卒中、脳虚血、外傷性脳傷害、筋萎縮性側索硬化症、ストレスもしくは運動誘導性の狭心症、動悸、高血圧、偏頭痛、または異常な胃腸管運動を処置またはその重篤度を減らす方法。
【請求項２８】
急性、慢性、神経因性、もしくは炎症性の疼痛を処置またはその重篤度を減らすために使用する、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
根性痛、坐骨神経痛、背痛、頭痛、頸部痛、難治性疼痛、急性疼痛、手術後疼痛、背痛、耳鳴または癌性疼痛を処置またはその重篤度を減らすために使用する、請求項２７に記載の方法。
【請求項３０】
大腿骨癌性疼痛、非悪性慢性骨痛、関節リウマチ、骨関節炎、脊髄狭窄症、神経因性腰痛、神経因性腰痛、筋筋膜痛症候群、線維筋痛症、側頭下顎関節痛、腹部を含む慢性内臓痛、膵臓、ＩＢＳ疼痛、慢性および急性の頭痛、偏頭痛、群発頭痛を含む緊張性頭痛、ヘルペス後神経痛を含む慢性および急性の神経因性疼痛、糖尿病性神経障害、ＨＩＶ関連神経障害、三叉神経痛、シャルコー−マリー歯神経障害、遺伝性感覚神経障害、末梢神経傷害、有痛性神経腫、異所性近位および遠位放電、神経根障害、化学療法誘導性の神経因性疼痛、放射線療法誘導性の神経因性疼痛、乳房切除術後疼痛、中枢疼痛、脊髄損傷疼痛、脳卒中後疼痛、視床痛、複合性局所疼痛症候群、幻肢痛、難治性疼痛、急性疼痛、急性手術後疼痛、急性筋骨格痛、関節痛、機械的腰痛、頸部痛、腱炎、傷害／運動痛、腹痛を含む急性内臓痛、腎盂腎炎、虫垂炎、胆嚢症、腸管閉塞、ヘルニアなど、心臓痛を含む胸部痛、陣痛を含む骨盤痛、腎仙痛、急性産科的疼痛、帝王切開術疼痛、急性炎症性の火傷および外傷痛、子宮内膜症を含む急性間欠痛、急性帯状疱疹痛、鎌状赤血球貧血、急性膵炎、突出痛、副鼻腔炎痛、歯痛を含む口腔顔面痛、多発性硬化症（ＭＳ）疼痛、鬱病疼痛、らい病疼痛、ベーチェット病疼痛、有痛脂肪症、静脈炎疼痛、ギラン−バレー疼痛、痛む脚および動く足趾、ハグルンド症候群、肢端紅痛症疼痛、ファブリー病疼痛、尿失禁を含む膀胱および泌尿生殖器の疾患、過活動膀胱、有痛性膀胱症候群、間質性膀胱炎ＩＣ）、もしくは前立腺炎、Ｉ型およびＩＩ型の複合性局所疼痛症候群（ＣＲＰＳ）、または狭心症誘導性の疼痛を処置するまたはその重篤度を減らすために使用する、請求項２７に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、イオンチャネルの阻害剤として有用な化合物に関する。本発明はまた、本発明の化合物を含む製薬上許容される組成物および様々な障害の処置において組成物を使用する方法も提供する。
【背景技術】
【０００２】
Ｎａチャネルは、ニューロンおよび筋細胞などのすべての興奮性細胞における活動電位の発生の中心となっている。これらは脳、胃腸管の平滑筋、骨格筋、末梢神経系、脊髄および気道を含む興奮性組織において主要な役割を果たす。したがって、これらは、癲癇（Ｍｏｕｌａｒｄ，Ｂ．およびＤ．Ｂｅｒｔｒａｎｄ（２００２）「Ｅｐｉｌｅｐｓｙ  ａｎｄ  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌ  ｂｌｏｃｋｅｒｓ」、Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ、１２（１）：８５−９１）を参照）、疼痛（Ｗａｘｍａｎ，Ｓ．Ｇ．、Ｓ．Ｄｉｂ−Ｈａｊｊら（１９９９）「Ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌｓ  ａｎｄ  ｐａｉｎ」、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ、９６（１４）：７６３５−９およびＷａｘｍａｎ，Ｓ．Ｇ．、Ｔ．Ｒ．Ｃｕｍｍｉｎｓら（２０００）「Ｖｏｌｔａｇｅ−ｇａｔｅｄ  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌｓ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｏｆ  ｐａｉｎ：ａ  ｒｅｖｉｅｗ」、Ｊ  Ｒｅｈａｂｉｌ  Ｒｅｓ  Ｄｅｖ、３７（５）：５１７−２８を参照）、筋緊張症（Ｍｅｏｌａ，Ｇ．およびＶ．Ｓａｎｓｏｎｅ（２０００）「Ｔｈｅｒａｐｙ  ｉｎ  ｍｙｏｔｏｎｉｃ  ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ  ａｎｄ  ｉｎ  ｍｕｓｃｌｅ  ｃｈａｎｎｅｌｏｐａｔｈｉｅｓ」、Ｎｅｕｒｏｌ  Ｓｃｉ、２１（５）：Ｓ９５３−６１およびＭａｎｋｏｄｉ，Ａ．およびＣ．Ａ．Ｔｈｏｒｎｔｏｎ（２００２）「Ｍｙｏｔｏｎｉｃ  ｓｙｎｄｒｏｍｅｓ」、Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｎｅｕｒｏｌ、１５（５）：５４５−５２を参照）、運動失調（Ｍｅｉｓｌｅｒ，Ｍ．Ｈ．、Ｊ．Ａ．Ｋｅａｒｎｅｙら（２００２）「Ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｖｏｌｔａｇｅ−ｇａｔｅｄ  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌｓ  ｉｎ  ｍｏｖｅｍｅｎｔ  ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ  ａｎｄ  ｅｐｉｌｅｐｓｙ」、Ｎｏｖａｒｔｉｓ  Ｆｏｕｎｄ  Ｓｙｍｐ、２４１：７２−８１を参照）、多発性硬化症（Ｂｌａｃｋ，Ｊ．Ａ．、Ｓ．Ｄｉｂ−Ｈａｊｊら（２０００）「Ｓｅｎｓｏｒｙ  ｎｅｕｒｏｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌ  ＳＮＳ  ｉｓ  ａｂｎｏｒｍａｌｌｙ  ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｂｒａｉｎｓ  ｏｆ  ｍｉｃｅ  ｗｉｔｈ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｌｌｅｒｇｉｃ  ｅｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ  ａｎｄ  ｈｕｍａｎｓ  ｗｉｔｈ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ」、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ、９７（２１）：１１５９８−６０２およびＲｅｎｇａｎａｔｈａｎ，Ｍ．、Ｍ．Ｇｅｌｄｅｒｂｌｏｍら（２００３）「Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｎａ（ｖ）１．８  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌｓ  ｐｅｒｔｕｒｂｓ  ｔｈｅ  ｆｉｒｉｎｇ  ｐａｔｔｅｒｎｓ  ｏｆ  ｃｅｒｅｂｅｌｌａｒ  ｐｕｒｋｉｎｊｅ  ｃｅｌｌｓ」、Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ、９５９（２）：２３５−４２を参照）、過敏性腸（Ｓｕ，Ｘ．、Ｒ．Ｅ．Ｗａｃｈｔｅｌら（１９９９）「Ｃａｐｓａｉｃｉｎ  ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ  ａｎｄ  ｖｏｌｔａｇｅ−ｇａｔｅｄ  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｕｒｒｅｎｔｓ  ｉｎ  ｃｏｌｏｎ  ｓｅｎｓｏｒｙ  ｎｅｕｒｏｎｓ  ｆｒｏｍ  ｒａｔ  ｄｏｒｓａｌ  ｒｏｏｔ  ｇａｎｇｌｉａ」、Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ、２７７（��パート１）：Ｇ１１８０−８およびＬａｉｒｄ，Ｊ．Ｍ．、Ｖ．Ｓｏｕｓｌｏｖａら（２００２）「Ｄｅｆｉｃｉｔｓ  ｉｎ  ｖｉｓｃｅｒａｌ  ｐａｉｎ  ａｎｄ  ｒｅｆｅｒｒｅｄ  ｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉａ  ｉｎ  Ｎａｖ１．８（ＳＮＳ／ＰＮ３）−ｎｕｌｌ  ｍｉｃｅ」、Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ、２２（１９）：８３５２−６を参照）、尿失禁および内臓痛（Ｙｏｓｈｉｍｕｒａ，Ｎ．、Ｓ．Ｓｅｋｉら（２００１）「Ｔｈｅ  ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｔｅｔｒｏｄｏｔｏｘｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌ  Ｎａ（ｖ）１．８（ＰＳ３／ＳＮＳ）  ｉｎ  ａ  ｒａｔ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｖｉｓｃｅｒａｌ  ｐａｉｎ」、Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ、２１（２１）：８６９０−６を参照）、ならびに不安および鬱病などの数々の精神機能不全（Ｈｕｒｌｅｙ，Ｓ．Ｃ．（２００２）「Ｌａｍｏｔｒｉｇｉｎｅ  ｕｐｄａｔｅ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｕｓｅ  ｉｎ  ｍｏｏｄ  ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ」、Ａｎｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ、３６（５）：８６０−７３を参照）等の様々な病状において主要な役割を果たす。
【０００３】
電位作動型Ｎａチャネルは、９個の異なるサブタイプ（ＮａＶ１．１〜ＮａＶ１．９）からなる遺伝子ファミリーを含む。表１に示すように、これらのサブタイプは組織特異的な局在化および機能的な差異を示す（非特許文献１を参照）。遺伝子ファミリーの３つのメンバー（ＮａＶ１．８、１．９、１．５）は周知のＮａチャネル遮断剤ＴＴＸによる遮断に対して耐性があり、この遺伝子ファミリー内でのサブタイプ特異性が実証されている。突然変異の分析により、グルタミン酸３８７がＴＴＸ結合の重大な残基として同定されている（非特許文献２を参照）。
【０００４】
【表１】
2011526919.tif 000002
一般に、電位作動型ナトリウムチャネル（ＮａＶ）は、正常および異常な疼痛感覚を構成およびコード化している電気シグナルを伝達する神経系中の興奮性組織の活動電位の迅速な上昇の開始を担っている。ＮａＶチャネルのアンタゴニストはこれらの疼痛シグナルを減衰させることができ、限定されないが、急性、慢性、炎症性、および神経因性の疼痛が含まれる様々な疼痛状態の処置に有用である。ＴＴＸ、リドカイン（Ｍａｏ，Ｊ．およびＬ．Ｌ．Ｃｈｅｎ（２０００）「Ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ｌｉｄｏｃａｉｎｅ  ｆｏｒ  ｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃ  ｐａｉｎ  ｒｅｌｉｅｆ」、Ｐａｉｎ、８７（１）：７−１７．を参照）、ブピバカイン、フェニトイン（Ｊｅｎｓｅｎ，Ｔ．Ｓ．（２００２）「Ａｎｔｉｃｏｎｖｕｌｓａｎｔｓ  ｉｎ  ｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃ  ｐａｉｎ：ｒａｔｉｏｎａｌｅ  ａｎｄ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｅｖｉｄｅｎｃｅ」、Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐａｉｎ、６（補遺Ａ）：６１−８を参照）、ラモトリギン（Ｒｏｚｅｎ，Ｔ．Ｄ．（２００１）「Ａｎｔｉｅｐｉｌｅｐｔｉｃ  ｄｒｕｇｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃｌｕｓｔｅｒ  ｈｅａｄａｃｈｅ  ａｎｄ  ｔｒｉｇｅｍｉｎａｌ  ｎｅｕｒａｌｇｉａ」、Ｈｅａｄａｃｈｅ、４１補遺１：Ｓ２５−３２およびＪｅｎｓｅｎ，Ｔ．Ｓ．（２００２）「Ａｎｔｉｃｏｎｖｕｌｓａｎｔｓ  ｉｎ  ｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃ  ｐａｉｎ：ｒａｔｉｏｎａｌｅ  ａｎｄ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｅｖｉｄｅｎｃｅ」、Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐａｉｎ、６（補遺Ａ）：６１−８．を参照）、ならびにカルバマゼピン（Ｂａｃｋｏｎｊａ，Ｍ．Ｍ．（２００２）「Ｕｓｅ  ｏｆ  ａｎｔｉｃｏｎｖｕｌｓａｎｔｓ  ｆｏｒ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃ  ｐａｉｎ」、Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ、５９（５補遺２）：Ｓ１４−７を参照）などの既知のＮａＶアンタゴニストは、ヒトおよび動物モデルにおける疼痛の減衰に有用であることが示されている。
【０００５】
組織の傷害または炎症の存在下で発生する痛覚異常過敏（有痛性のものに対する極端な感度）は、少なくとも部分的に、傷害部位を神経支配する高閾値一次求心性ニューロンの易興奮性の増加を反映している。電位感受性ナトリウムチャネルの活性化は神経活動電位の生成および伝播に重要である。ＮａＶ電流の変調が神経の易興奮性を制御するために使用される内在性機構であるということを示す証拠が増えている（Ｇｏｌｄｉｎ，Ａ．Ｌ．（２００１）「Ｒｅｓｕｒｇｅｎｃｅ  ｏｆ  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌ  ｒｅｓｅａｒｃｈ」、Ａｎｎｕ  Ｒｅｖ  Ｐｈｙｓｉｏｌ、６３：８７１−９４を参照）。いくつかの動力学的および薬理学的に明確に異なる電位作動型ナトリウムチャネルが後根神経節（ＤＲＧ）ニューロン中で見つかっている。ＴＴＸ耐性電流はマイクロモル濃度のテトロドトキシンに非感受性であり、他の電位作動型ナトリウムチャネルと比較した場合に遅い活性化および不活性化の動力学ならびにより脱分極した活性化閾値を示す。ＴＴＸ耐性ナトリウム電流は、侵害受容に関与している可能性が高い感覚ニューロンの部分集団に主に限定されている。具体的には、ＴＴＸ耐性ナトリウム電流は小さな細胞体直径を有するニューロン中でほぼ排他的に発現されており、カプサイシンに応答性である小さな直径の伝導速度の遅い軸索を生じる。大量の実験的証拠により、ＴＴＸ耐性ナトリウムチャネルがＣ線維状で発現されており、脊髄への侵害受容性の情報の伝達に重要であることが実証されている。
【０００６】
ＴＴＸ耐性ナトリウムチャネル（ＮａＶ１．８）の独特の領域を標的とするアンチセンスオリゴ−デオキシヌクレオチドのくも膜下腔内投与により、ＰＧＥ２誘導性の痛覚異常過敏の有意な低下がもたらされた（Ｋｈａｓａｒ，Ｓ．Ｇ．、Ｍ．Ｓ．Ｇｏｌｄら（１９９８）「Ａ  ｔｅｔｒｏｄｏｔｏｘｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｕｒｒｅｎｔ  ｍｅｄｉａｔｅｓ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｐａｉｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｒａｔ」、Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｌｅｔｔ、２５６（１）：１７−２０を参照）。より最近では、機能的なＮａＶ１．８を欠くノックアウトマウス系がＷｏｏｄおよび同僚によって作製された。この突然変異は、炎症誘発剤カラゲナンに対する動物の応答を評価する試験において鎮痛効果を有する（Ａｋｏｐｉａｎ，Ａ．Ｎ．、Ｖ．Ｓｏｕｓｌｏｖａら（１９９９）「Ｔｈｅ  ｔｅｔｒｏｄｏｔｏｘｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌ  ＳＮＳ  ｈａｓ  ａ  ｓｐｅｃｉａｌｉｚｅｄ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ｐａｉｎ  ｐａｔｈｗａｙｓ」、Ｎａｔ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ、２（６）：５４１−８．を参照）。さらに、機械受容および温度受容の両方の欠損がこれらの動物で観察された。Ｎａｖ１．８ノックアウト突然変異体によって示される鎮痛は侵害受容におけるＴＴＸ耐性電流の役割に関する観察と一致している。
【０００７】
免疫組織化学的なｉｎ−ｓｉｔｕハイブリダイゼーションおよびｉｎ−ｖｉｔｒｏ電気生理学の実験はすべて、ナトリウムチャネルＮａＶ１．８が後根神経節および三叉神経節の小感覚ニューロンに選択的に局在していることを示す（Ａｋｏｐｉａｎ，Ａ．Ｎ．、Ｌ．Ｓｉｖｉｌｏｔｔｉら（１９９６）「Ａ  ｔｅｔｒｏｄｏｔｏｘｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｖｏｌｔａｇｅ−ｇａｔｅｄ  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌ  ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  ｂｙ  ｓｅｎｓｏｒｙ  ｎｅｕｒｏｎｓ」、Ｎａｔｕｒｅ、３７９（６５６２）：２５７−６２．を参照）。これらのニューロンの主な役割は侵害受容性刺激の検出および伝達である。また、アンチセンスおよび免疫組織化学の証拠も神経因性疼痛におけるＮａＶ１．８の役割を支持している（Ｌａｉ，Ｊ．、Ｍ．Ｓ．Ｇｏｌｄら（２００２）「Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃ  ｐａｉｎ  ｂｙ  ｄｅｃｒｅａｓｅｄ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｔｅｔｒｏｄｏｔｏｘｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌ，ＮａＶ１．８」、Ｐａｉｎ、９５（１−２）：１４３−５２およびＬａｉ，Ｊ．、Ｊ．Ｃ．Ｈｕｎｔｅｒら（２０００）「Ｂｌｏｃｋａｄｅ  ｏｆ  ｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃ  ｐａｉｎ  ｂｙ  ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｏｆ  ｔｅｔｒｏｄｏｔｏｘｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌｓ  ｉｎ  ｓｅｎｓｏｒｙ  ｎｅｕｒｏｎｓ」、Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ、３１４：２０１−１３．を参照）。ＮａＶ１．８タンパク質は神経傷害に隣接する非損傷Ｃ線維に沿ってアップレギュレーションされる。アンチセンス処置は神経に沿ったＮａＶ１．８の再分布を防止し、神経因性疼痛を逆転させる。遺伝子ノックアウトおよびアンチセンスのデータは、一緒になって炎症性および神経因性の疼痛の検出および伝達におけるＮａＶ１．８の役割を支持する。
【０００８】
神経因性疼痛状態では、Ｎａチャネルの分布およびサブタイプのリモデリングが存在する。損傷神経では、ＮａＶ１．８およびＮａＶ１．９の発現が大きく低下している一方で、ＴＴＸ感受性サブユニットＮａＶ１．３の発現は５〜１０倍アップレギュレーションされている（Ｄｉｂ−Ｈａｊｊ，Ｓ．Ｄ．、Ｊ．Ｆｊｅｌｌら（１９９９）「Ｐｌａｓｔｉｃｉｔｙ  ｏｆ  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ＤＲＧ  ｎｅｕｒｏｎｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｃｏｎｓｔｒｉｃｔｉｏｎ  ｉｎｊｕｒｙ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃ  ｐａｉｎ．」、Ｐａｉｎ、８３（３）：５９１−６００を参照）。ＮａＶ１．３の増加の時間経過は、神経傷害に続く動物モデルにおけるアロディニアの出現に平行している。ＮａＶ１．３チャネルの生物物理学は、活動電位に続く不活性化後に非常に速い再プライミングを示すという点で明確に異なる。これにより、損傷神経においてしばしば見られるように、高い発火の割合の持続が可能となる（Ｃｕｍｍｉｎｓ，Ｔ．Ｒ．、Ｆ．Ａｇｌｉｅｃｏら（２００１）「Ｎａｖ１．３  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌｓ：ｒａｐｉｄ  ｒｅｐｒｉｍｉｎｇ  ａｎｄ  ｓｌｏｗ  ｃｌｏｓｅｄ−ｓｔａｔｅ  ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｄｉｓｐｌａｙ  ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ  ａｆｔｅｒ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ａ  ｍａｍｍａｌｉａｎ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅ  ａｎｄ  ｉｎ  ｓｐｉｎａｌ  ｓｅｎｓｏｒｙ  ｎｅｕｒｏｎｓ」、Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ、２１（１６）：５９５２−６１．を参照）。ＮａＶ１．３は人間の中枢および末梢系で発現される。ＮａＶ１．９は、後根神経節および三叉神経節の小感覚ニューロンに選択的に局在しているためＮａＶ１．８に類似している（Ｆａｎｇ，Ｘ．、Ｌ．Ｄｊｏｕｈｒｉら（２００２）．「Ｔｈｅ  ｐｒｅｓｅｎｃｅ  ａｎｄ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｔｅｔｒｏｄｏｔｏｘｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌ  Ｎａ（ｖ）１．９（ＮａＮ）  ｉｎ  ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｖｅ  ｐｒｉｍａｒｙ  ａｆｆｅｒｅｎｔ  ｎｅｕｒｏｎｓ．」、Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ、２２（１７）：７４２５−３３．を参照）。これは遅い速度の不活性化および左にシフトした活性化の電位依存性を有する（Ｄｉｂ−Ｈａｊｊ，Ｓ．、Ｊ．Ａ．Ｂｌａｃｋら（２００２）「ＮａＮ／Ｎａｖ１．９：ａ  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌ  ｗｉｔｈ  ｕｎｉｑｕｅ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ」、Ｔｒｅｎｄｓ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ、２５（５）：２５３−９．を参照）。これら２つの生物物理学的特性は、ＮａＶ１．９が侵害受容性ニューロンの静止膜電位の確立において役割を果たすことを可能にする。ＮａＶ１．９を発現する細胞の静止膜電位は、他の末梢および中枢ニューロンのほとんどにおける−６５ｍＶと比較して、−５５〜−５０ｍＶの範囲である。この持続性の脱分極は、ＮａＶ１．９チャネルの持続した低レベルの活性化が大部分の原因である。この脱分極により、ニューロンは、より容易に侵害受容性刺激に応答して発火活動電位の閾値に達することが可能となる。ＮａＶ１．９チャネルを遮断する化合物は有痛性刺激を検出するためのセットポイントの確立において重要な役割を果たし得る。慢性疼痛状態では、神経および神経終末は肥大して過感受性となり、緩和なまたは刺激なしの高頻度の活動電位発火を示す場合がある。これらの病理学的神経腫脹は神経腫と呼ばれ、それ中で発現される主なＮａチャネルはＮａＶ１．８およびＮａＶ１．７である（Ｋｒｅｔｓｃｈｍｅｒ，Ｔ．、Ｌ．Ｔ．Ｈａｐｐｅｌら（２００２）「Ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＰＮ１  ａｎｄ  ＰＮ３  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌｓ  ｉｎ  ｐａｉｎｆｕｌ  ｈｕｍａｎ  ｎｅｕｒｏｍａ−ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｆｒｏｍ  ｉｍｍｕｎｏｃｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」、Ａｃｔａ  Ｎｅｕｒｏｃｈｉｒ、（Ｗｉｅｎ）１４４（８）：８０３−１０、考察８１０．を参照）。ＮａＶ１．６およびＮａＶ１．７も後根神経節ニューロン中で発現され、これらの細胞中で見られる小ＴＴＸ感受性構成成分に寄与する。したがって、特にＮａＶ１．７は、神経内分泌の易興奮性におけるその役割に加えて、潜在的な疼痛標的であり得る（Ｋｌｕｇｂａｕｅｒ，Ｎ．、Ｌ．Ｌａｃｉｎｏｖａら（１９９５）「Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｎｅｗ  ｍｅｍｂｅｒ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｔｅｔｒｏｄｏｔｏｘｉｎ−ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ  ｖｏｌｔａｇｅ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌ  ｆａｍｉｌｙ  ｆｒｏｍ  ｈｕｍａｎ  ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｅ  ｃｅｌｌｓ」、Ｅｍｂｏ  Ｊ、１４（６）：１０８４−９０を参照）。
【０００９】
ＮａＶ１．１（Ｓｕｇａｗａｒａ，Ｔ．、Ｅ．Ｍａｚａｋｉ−Ｍｉｙａｚａｋｉら（２００１）「Ｎａｖ１．１  ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｃａｕｓｅ  ｆｅｂｒｉｌｅ  ｓｅｉｚｕｒｅｓ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ａｆｅｂｒｉｌｅ  ｐａｒｔｉａｌ  ｓｅｉｚｕｒｅｓ．」、Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ、５７（４）：７０３−５．を参照）およびＮａＶ１．２（Ｓｕｇａｗａｒａ，Ｔ．、Ｙ．Ｔｓｕｒｕｂｕｃｈｉら（２００１）「Ａ  ｍｉｓｓｅｎｓｅ  ｍｕｔａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａ＋  ｃｈａｎｎｅｌ  ａｌｐｈａ  ＩＩ  ｓｕｂｕｎｉｔ  ｇｅｎｅ  Ｎａ（ｖ）１．２  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔ  ｗｉｔｈ  ｆｅｂｒｉｌｅ  ａｎｄ  ａｆｅｂｒｉｌｅ  ｓｅｉｚｕｒｅｓ  ｃａｕｓｅｓ  ｃｈａｎｎｌｅ  ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ」、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ、９８（１１）：６３８４−９を参照）は、熱性癲癇発作を含む癲癇状態に関連づけられている。ＮａＶ１．１中の９個を超える遺伝子突然変異が熱性癲癇発作に関連している（Ｍｅｉｓｌｅｒ，Ｍ．Ｈ．、Ｊ．Ａ．Ｋｅａｒｎｅｙら（２００２）「Ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｖｏｌｔａｇｅ−ｇａｔｅｄ  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌｓ  ｉｎ  ｍｏｖｅｍｅｎｔ  ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ  ａｎｄ  ｅｐｉｌｅｐｓｙ」、Ｎｏｖａｒｔｉｓ  Ｆｏｕｎｄ  Ｓｙｍｐ、２４１：７２−８１を参照）。
【００１０】
ＮａＶ１．５のアンタゴニストが開発されており、心不整脈を処置するために使用されている。電流に対してより大きな非不活性化構成成分を生じるＮａＶ１．５中の遺伝子欠損が人間における長いＱＴと関連づけられており、経口利用可能な局所麻酔剤メキシレチン（ｍｅｘｉｌｉｔｉｎｅ）がこの状態の処置に使用されている（Ｗａｎｇ，Ｄ．Ｗ．、Ｋ．Ｙａｚａｗａら（１９９７）「Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｏｆ  ｌｏｎｇ  ＱＴ  ｍｕｔａｎｔ  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌｓ．」、Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ、９９（７）：１７１４−２０を参照）。
【００１１】
いくつかのＮａチャネル遮断剤が、癲癇（Ｍｏｕｌａｒｄ，Ｂ．およびＤ．Ｂｅｒｔｒａｎｄ（２００２）「Ｅｐｉｌｅｐｓｙ  ａｎｄ  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌ  ｂｌｏｃｋｅｒｓ」、Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ、１２（１）：８５−９１．を参照）、急性（Ｗｉｆｆｅｎ，Ｐ．、Ｓ．Ｃｏｌｌｉｎｓら（２０００）「Ａｎｔｉｃｏｎｖｕｌｓａｎｔ  ｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  ａｃｕｔｅ  ａｎｄ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｐａｉｎ」、Ｃｏｃｈｒａｎｅ  Ｄａｔａｂａｓｅ  Ｓｙｓｔ  Ｒｅｖ  ３を参照）、慢性（Ｗｉｆｆｅｎ，Ｐ．、Ｓ．Ｃｏｌｌｉｎｓら（２０００）「Ａｎｔｉｃｏｎｖｕｌｓａｎｔ  ｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  ａｃｕｔｅ  ａｎｄ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｐａｉｎ」、Ｃｏｃｈｒａｎｅ  Ｄａｔａｂａｓｅ  Ｓｙｓｔ  Ｒｅｖ  ３およびＧｕａｙ，Ｄ．Ｒ．（２００１）「Ａｄｊｕｎｃｔｉｖｅ  ａｇｅｎｔｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｐａｉｎ」、Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ、２１（９）：１０７０−８１を参照）、炎症性（Ｇｏｌｄ，Ｍ．Ｓ．（１９９９）「Ｔｅｔｒｏｄｏｔｏｘｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  Ｎａ＋  ｃｕｒｒｅｎｔｓ  ａｎｄ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉａ．」、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ、９６（１４）：７６４５−９を参照）、および神経因性の疼痛（Ｓｔｒｉｃｈａｒｔｚ，Ｇ．Ｒ．、Ｚ．Ｚｈｏｕら（２００２）「Ｔｈｅｒａｐｅｒｕｔｉｃ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｌｏｃａ  ａｎａｅｓｔｈｅｔｉｃｓ  ｕｎｖｅｉｌ  ｔｈｅ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｌｅｓ  ｉｎ  ｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃ  ｐａｉｎ」、Ｎｏｖａｒｔｉｓ  Ｆｏｕｎｄ  Ｓｙｍｐ、２４１：１８９−２０１およびＳａｎｄｎｅｒ−Ｋｉｅｓｌｉｎｇ，Ａ．、Ｇ．Ｒｕｍｐｏｌｄ  Ｓｅｉｔｌｉｎｇｅｒら（２００２）「Ｌａｍｏｔｒｉｇｉｎｅ  ｍｏｎｏｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  ｃｏｎｔｒｏｌ  ｏｆ  ｎｅｕｒａｌｇｉａ  ａｆｔｅｒ  ｎｅｒｖｅ  ｓｅｃｔｉｏｎ」、Ａｃｔａ  Ａｎａｅｓｔｈｅｓｉｏｌ  Ｓｃａｎｄ、４６（１０）：１２６１−４を参照）、心不整脈（Ａｎ，Ｒ．Ｈ．、Ｒ．Ｂａｎｇａｌｏｒｅら（１９９６）「ＬＱＴ−３突然変異体ヒトＮａ＋チャネルのリドカイン遮断（Ｌｉｄｏｃａｉｎｅ  ｂｌｏｃｋ  ｏｆ  ＬＱＴ−３  ｍｕｔａｎｔ  ｈｕｍａｎ  Ｎａ＋  ｃｈａｎｎｌｅｓ」、Ｃｉｒｃ  Ｒｅｓ、７９（１）：１０３−８およびＷａｎｇ，Ｄ．Ｗ．、Ｋ．Ｙａｚａｗａら（１９９７）「Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｏｆ  ｌｏｎｇ  ＱＴ  ｍｕｔａｎｔ  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌｓ」、Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ、９９（７）：１７１４−２０を参照）を処置するため、神経保護（Ｔａｙｌｏｒ，Ｃ．Ｐ．およびＬ．Ｓ．Ｎａｒａｓｉｍｈａｎ（１９９７）「Ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  ｃｅｎｔｒａｌ  ｎｅｒｖｏｕｓ  ｓｙｓｔｅｍ  ｄｉｓｅａｓｅｓ」、Ａｄｖ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、３９：４７−９８を参照）ならびに麻酔剤として（Ｓｔｒｉｃｈａｒｔｚ，Ｇ．Ｒ．、Ｚ．Ｚｈｏｕら（２００２）「Ｔｈｅｒａｐｅｒｕｔｉｃ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｌｏｃａ  ａｎａｅｓｔｈｅｔｉｃｓ  ｕｎｖｅｉｌ  ｔｈｅ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｌｅｓ  ｉｎ  ｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃ  ｐａｉｎ」、Ｎｏｖａｒｔｉｓ  Ｆｏｕｎｄ  Ｓｙｍｐ、２４１：１８９−２０１を参照）、現在使用されている、または臨床上で試験されている。
【００１２】
臨床的有意性を有する様々な動物モデルが数々の異なる疼痛兆候のナトリウムチャネルモジュレーターを研究するために開発されている。たとえば、悪性慢性疼痛（Ｋｏｈａｓｅ，Ｈ．ら、Ａｃｔａ  Ａｎａｅｓｔｈｅｓｉｏｌ  Ｓｃａｎｄ．２００４、４８（３）：３８２−３を参照）、大腿骨癌性疼痛（Ｋｏｈａｓｅ，Ｈ．ら、Ａｃｔａ  Ａｎａｅｓｔｈｅｓｉｏｌ  Ｓｃａｎｄ．２００４、４８（３）：３８２−３を参照）、非悪性慢性骨痛（Ｃｉｏｃｏｎ，Ｊ．Ｏ．ら、Ｊ  Ａｍ  Ｇｅｒｉａｔｒ  Ｓｏｃ．、１９９４、４２（６）：５９３−６を参照）、関節リウマチ（Ｃａｌｖｉｎｏ，Ｂ．ら、Ｂｅｈａｖ  Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．１９８７、２４（１）：１１−２９を参照）、骨関節炎（Ｇｕｚｍａｎ，Ｒ．Ｅ．ら、Ｔｏｘｉｃｏｌ  Ｐａｔｈｏｌ．２００３、３１（６）：６１９−２４を参照）、脊髄狭窄症（Ｔａｋｅｎｏｂｕ，Ｙ．ら、Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｍｅｔｈｏｄｓ．２００１、１０４（２）：１９１−８を参照）、神経因性腰痛（Ｈｉｎｅｓ，Ｒ．ら、Ｐａｉｎ  Ｍｅｄ．２００２、３（４）：３６１−５、Ｍａｓｓｉｅ，Ｊ．Ｂ．ら、Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｍｅｔｈｏｄｓ．２００４、１３７（２）：２８３−９を参照、神経因性腰痛（Ｈｉｎｅｓ，Ｒ．ら、Ｐａｉｎ  Ｍｅｄ．２００２、３（４）：３６１−５、Ｍａｓｓｉｅ，Ｊ．Ｂ．ら、Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｍｅｔｈｏｄｓ．２００４、１３７（２）：２８３−９を参照）、筋筋膜痛症候群（ＤａｌｐｉａｚおよびＤｏｄｄｓ、Ｊ  Ｐａｉｎ  Ｐａｌｌｉａｔ  Ｃａｒｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ．２００２、１６（１）：９９−１０４、Ｓｌｕｋａ  ＫＡら、Ｍｕｓｃｌｅ  Ｎｅｒｖｅ．２００１、２４（１）：３７−４６を参照）、線維筋痛症（ＢｅｎｎｅｔおよびＴａｉ、Ｉｎｔ  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｒｅｓ．１９９５、１５（３）：１１５−９を参照）、側頭下顎関節痛（Ｉｍｅ  Ｈ、Ｒｅｎ  Ｋ、Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ  Ｍｏｌ  Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．１９９９、６７（１）：８７−９７を参照）、腹部を含む慢性内臓痛（Ａｌ−Ｃｈａｅｒ，Ｅ．Ｄ．ら、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．２０００、１１９（５）：１２７６−８５を参照）、骨盤／会陰痛（Ｗｅｓｓｅｌｍａｎｎら、Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｌｅｔｔ．１９９８、２４６（２）：７３−６を参照）、膵臓（Ｖｅｒａ−Ｐｏｒｔｏｃａｒｒｅｒｏ，Ｌ．Ｂ．ら、Ａｎｅｓｔｈｅｓｉｏｌｏｇｙ．２００３、９８（２）：４７４−８４を参照）、ＩＢＳ疼痛（Ｖｅｒｎｅ，Ｇ．Ｎ．ら、Ｐａｉｎ．２００３、１０５（１−２）：２２３−３０、Ｌａ  ＪＨら、Ｗｏｒｌｄ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．２００３、９（１２）：２７９１−５を参照）、慢性頭痛（ＷｉｌｌｉｍａｓおよびＳｔａｒｋ、Ｃｅｐｈａｌａｌｇｉａ．２００３、２３（１０）：９６３−７１を参照）、偏頭痛（Ｙａｍａｍｕｒａ，Ｈ．ら、Ｊ  Ｎｅｕｒｏｐｈｙｓｉｏｌ．１９９９、８１（２）：４７９−９３を参照）、群発頭痛を含む緊張性頭痛（Ｃｏｓｔａ，Ａ．ら、Ｃｅｐｈａｌａｌｇｉａ．２０００、２０（２）：８５−９１を参照）、ヘルペス後神経痛を含む慢性神経因性疼痛（Ａｔｔａｌ，Ｎ．ら、Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ．２００４、６２（２）：２１８−２５、ＫｉｍおよびＣｈｕ��ｇ、１９９２、Ｐａｉｎ、５０：３５５を参照）、糖尿病性神経障害（Ｂｅｉｄｏｕｎ  Ａら、Ｃｌｉｎ  Ｊ  Ｐａｉｎ．２００４、２０（３）：１７４−８、Ｃｏｕｒｔｅｉｘ，Ｃ．ら、Ｐａｉｎ．１９９３、５３（１）：８１−８を参照）、ＨＩＶ関連神経障害（ＰｏｒｔｅｇｉｅｓおよびＲｏｓｅｎｂｅｒｇ、Ｎｅｄ  Ｔｉｊｄｓｃｈｒ  Ｇｅｎｅｅｓｋｄ．２００１、１４５（１５）：７３１−５、Ｊｏｓｅｐｈ  ＥＫら、Ｐａｉｎ．２００４、１０７（１−２）：１４７−５８、Ｏｈ，Ｓ．Ｂ．ら、Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２００１、２１（１４）：５０２７−３５を参照）、三叉神経痛（Ｓａｔｏ，Ｊ．ら、Ｏｒａｌ  Ｓｕｒｇ  Ｏｒａｌ  Ｍｅｄ  Ｏｒａｌ  Ｐａｔｈｏｌ  Ｏｒａｌ  Ｒａｄｉｏｌ  Ｅｎｄｏｄ．２００４、９７（１）：１８−２２、Ｉｍａｍｕｒａ  Ｙら、Ｅｘｐ  Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．１９９７、１１６（１）：９７−１０３を参照）、シャルコー−マリー歯神経障害（Ｓｅｒｅｄａ，Ｍ．ら、Ｎｅｕｒｏｎ．１９９６、１６（５）：１０４９−６０を参照）、遺伝性感覚神経障害（Ｌｅｅ，Ｍ．Ｊ．ら、Ｈｕｍ  Ｍｏｌ  Ｇｅｎｅｔ．２００３、１２（１５）：１９１７−２５を参照）、末梢神経傷害（Ａｔｔａｌ，Ｎ．ら、Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ．２００４、６２（２）：２１８−２５、ＫｉｍおよびＣｈｕｎｇ、１９９２、Ｐａｉｎ、５０：３５５、ＢｅｎｎｅｔｔおよびＸｉｅ、１９８８、Ｐａｉｎ、３３：８７、Ｄｅｃｏｓｔｅｒｅｄ，Ｉ．およびＷｏｏｌｆ，Ｃ．Ｊ．、２０００、Ｐａｉｎ、８７：１４９、Ｓｈｉｒ，Ｙ．およびＳｅｌｔｚｅｒ，Ｚ．１９９０、Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｌｅｔｔ、１１５：６２を参照）、有痛性神経腫（ＮａｈａｂｅｄｉａｎおよびＪｏｈｎｓｏｎ、Ａｎｎ  Ｐｌａｓｔ  Ｓｕｒｇ．２００１、４６（１）：１５−２２、ＤｅｖｏｒおよびＲａｂｅｒ、Ｂｅｈａｖ  Ｎｅｕｒａｌ  Ｂｉｏｌ．１９８３、３７（２）：２７６−８３を参照）、異所性近位および遠位放電（Ｌｉｕ，Ｘ．ら、Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．２００１、９００（１）：１１９−２７を参照）、神経根障害（ＤｅｖｅｒｓおよびＧａｌｅｒ（Ｃｌｉｎ  Ｊ  Ｐａｉｎ．２０００、１６（３）：２０５−８を参照、Ｈａｙａｓｈｉ  Ｎら、Ｓｐｉｎｅ．１９９８、２３（８）：８７７−８５を参照）、化学療法誘導性の神経因性疼痛（Ａｌｅｙ，Ｋ．Ｏ．ら、Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ．１９９６、７３（１）：２５９−６５を参照）、放射線療法誘導性の神経因性疼痛、乳房切除術後疼痛（ＤｅｖｅｒｓおよびＧａｌｅｒ、Ｃｌｉｎ  Ｊ  Ｐａｉｎ．２０００、１６（３）：２０５−８を参照）、中枢疼痛（Ｃａｈａｎａ，Ａ．ら、Ａｎｅｓｔｈ  Ａｎａｌｇ．２００４、９８（６）：１５８１−４）、脊髄損傷疼痛（Ｈａｉｎｓ，Ｂ．Ｃ．ら、Ｅｘｐ  Ｎｅｕｒｏｌ．２０００、１６４（２）：４２６−３７を参照）、脳卒中後疼痛、視床痛（ＬａＢｕｄａ，Ｃ．Ｊ．ら、Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｌｅｔｔ．２０００、２９０（１）：７９−８３を参照）、複合性局所疼痛症候群（Ｗａｌｌａｃｅ，Ｍ．Ｓ．ら、Ａｎｅｓｔｈｅｓｉｏｌｏｇｙ．２０００、９２（１）：７５−８３、Ｘａｎｔｏｓ  Ｄら、Ｊ  Ｐａｉｎ．２００４、５（３補遺２）：Ｓ１を参照）、幻肢痛（ｐｈａｎｔｏｎ  ｐａｉｎ）（Ｗｅｂｅｒ，Ｗ．Ｅ．、Ｎｅｄ  Ｔｉｊｄｓｃｈｒ  Ｇｅｎｅｅｓｋｄ．２００１、１４５（１７）：８１３−７、ＬｅｖｉｔｔおよびＨｅｙｂａｃｋ、Ｐａｉｎ．１９８１、１０（１）：６７−７３を参照）、難治性疼痛（Ｙｏｋｏｙａｍａ，Ｍ．ら、Ｃａｎ  Ｊ  Ａｎａｅｓｔｈ．２００２、４９（８）：８１０−３を参照）、急性疼痛、急性手術後疼痛（Ｋｏｐｐｅｒｔ，Ｗ．ら、Ａｎｅｓｔｈ  Ａｎａｌｇ．２００４、９８（４）：１０５０−５、Ｂｒｅｎｎａｎ，Ｔ．Ｊ．ら、Ｐａｉｎ．１９９６、６４（３）：４９３−５０１を参照）、急性筋骨格痛、関節痛（Ｇｏｔｏｈ，Ｓ．ら、Ａｎｎ  Ｒｈｅｕｍ  Ｄｉｓ．１９９３、５２（１１）：８１７−２２を参照）、機械的腰痛（Ｋｅｈｌ，Ｌ．Ｊ．ら、Ｐａｉｎ．２０００、８５（３）：３３３−４３を参照）、頸部痛、腱炎、傷害／運動痛（Ｓｅｓａｙ，Ｍ．ら、Ｃａｎ  Ｊ  Ａｎａｅｓｔｈ．２００２、４９（２）：１３７−４３を参照）、腹痛を含む急性内臓痛、腎盂腎炎、虫垂炎、胆嚢症、腸管閉塞、ヘルニアなど（Ｇｉａｍｂｅｒｎａｒｄｉｎｏ，Ｍ．Ａ．ら、Ｐａｉｎ．１９９５、６１（３）：４５９−６９を参照）、心臓痛を含む胸部痛（Ｖｅｒｇｏｎａ，Ｒ．Ａ．ら、Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．１９８４、３５（１８）：１８７７−８４を参照）、陣痛を含む骨盤痛、腎仙痛、急性産科的疼痛（Ｓｅｇａｌ，Ｓ．ら、Ａｎｅｓｔｈ  Ａｎａｌｇ．１９９８、８７（４）：８６４−９を参照）、帝王切開術疼痛、急性炎症性の火傷および外傷痛、子宮内膜症を含む急性間欠痛（Ｃａｓｏｎ，Ａ．Ｍ．ら、Ｈｏｒｍ  Ｂｅｈａｖ．２００３、４４（２）：１２３−３１を参照）、急性帯状疱疹痛、鎌状赤血球貧血、急性膵炎（Ｔｏｍａ，Ｈ、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．２０００、１１９（５）：１３７３−８１を参照）、突出痛、副鼻腔炎痛、歯痛を含む口腔顔面痛（Ｎｕｓｓｔｅｉｎ，Ｊ．ら、Ｊ  Ｅｎｄｏｄ．１９９８、２４（７）：４８７−９１、Ｃｈｉｄｉａｃ，Ｊ．Ｊ．ら、Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐａｉｎ．２００２、６（１）：５５−６７を参照）、多発性硬化症（ＭＳ）疼痛（ＳａｋｕｒａｉおよびＫａｎａｚａｗａ、Ｊ  Ｎｅｕｒｏｌ  Ｓｃｉ．１９９９、１６２（２）：１６２−８を参照）、鬱病疼痛（Ｇｒｅｅｎｅ  Ｂ、Ｃｕｒｒ  Ｍｅｄ  Ｒｅｓ  Ｏｐｉｎ．２００３、１９（４）：２７２−７を参照）、らい病疼痛、ベーチェット病疼痛、有痛脂肪症（ＤｅｖｉｌｌｅｒｓおよびＯｒａｎｊｅ、Ｃｌｉｎ  Ｅｘｐ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１９９９、２４（３）：２４０−１を参照）、静脈炎疼痛、ギラン−バレー疼痛、痛む脚および動く足趾、ハグルンド症候群、肢端紅痛症疼痛（Ｌｅｇｒｏｕｘ−Ｃｒｅｓｐｅｌ，Ｅ．ら、Ａｎｎ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ  Ｖｅｎｅｒｅｏｌ．２００３、１３０（４）：４２９−３３を参照）、ファブリー病疼痛（Ｇｅｒｍａｉｎ，Ｄ．Ｐ．、Ｊ  Ｓｏｃ  Ｂｉｏｌ．２００２、１９６（２）：１８３−９０を参照）、尿失禁を含む膀胱および泌尿生殖器の疾患（Ｂｅｒｇｇｒｅｎ，Ｔ．ら、Ｊ  Ｕｒｏｌ．１９９３、１５０（５パート１）：１５４０−３を参照）、過活動膀胱（Ｃｈｕａｎｇ，Ｙ．Ｃ．ら、Ｕｒｏｌｏｇｙ．２００３、６１（３）：６６４−７０を参照）、有痛性膀胱症候群（Ｙｏｓｈｉｍｕｒａ，Ｎ．ら、Ｊ  Ｎｅ��ｒｏｓｃｉ．２００１、２１（２１）：８６９０−６を参照）、間質性膀胱炎（ｃｙｃｔｉｔｉｓ）（ＩＣ）（ＧｉａｎｎａｋｏｐｏｕｌｏｓおよびＣａｍｐｉｌｏｍａｔｏｓ、Ａｒｃｈ  Ｉｔａｌ  Ｕｒｏｌ  Ｎｅｆｒｏｌ  Ａｎｄｒｏｌ．１９９２、６４（４）：３３７−９、Ｂｏｕｃｈｅｒ，Ｍ．ら、Ｊ  Ｕｒｏｌ．２０００、１６４（１）：２０３−８を参照）、ならびに前立腺炎（Ｍａｙｅｒｓａｋ，Ｊ．Ｓ．、Ｉｎｔ  Ｓｕｒｇ．１９９８、８３（４）：３４７−９、Ｋｅｉｔｈ，Ｉ．Ｍ．ら、Ｊ  Ｕｒｏｌ．２００１、１６６（１）：３２３−８を参照）である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】Ｇｏｌｄｉｎ，Ａ．Ｌ．（２００１）「Ｒｅｓｕｒｇｅｎｃｅ  ｏｆ  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌ  ｒｅｓｅａｒｃｈ」、Ａｎｎｕ  Ｒｅｖ  Ｐｈｙｓｉｏｌ、６３：８７１−９４
【非特許文献２】Ｎｏｄａ，Ｍ．、Ｈ．Ｓｕｚｕｋｉら（１９８９）「Ａ  ｓｉｎｇｌｅ  ｐｏｉｎｔ  ｍｕｔａｔｉｏｎ  ｃｏｎｆｅｒｓ  ｔｅｔｒｏｄｏｔｏｘｉｎ  ａｎｄ  ｓａｘｉｔｏｘｉｎ  ｉｎｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ  ｏｎ  ｔｈｅ  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌ  ＩＩ」、ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ、２５９（１）：２１３−６
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
残念ながら、上述のように、上述の病状に現在使用されているナトリウムチャネル遮断剤の有効性は、いくつかの副作用によって大幅に制限されている。これらの副作用には、かすみ目、眩暈、嘔気、および鎮静などの様々なＣＮＳ障害ならびに生命を脅かす潜在性がより高い心不整脈および心不全が含まれる。したがって、さらなるＮａチャネルアンタゴニスト、好ましくはより高い効力およびより少ない副作用を有するものを開発する必要性が依然として存在する。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
今回、本発明の化合物およびその製薬上許容される組成物がＮａＶ１．１およびＮａＶ１．３電位作動型ナトリウムチャネルの阻害剤として有用であることが見い出された。これらの化合物は一般式Ｉまたは製薬上許容されるその塩を有する。
【００１６】
【化１】
2011526919.tif 000003
これらの化合物および製薬上許容される組成物は、限定されないが、急性、慢性、神経因性、もしくは炎症性の疼痛、関節炎、偏頭痛、群発頭痛、三叉神経痛、ヘルペス神経痛、一般神経痛、癲癇もしくは癲癇状態、神経変性障害、不安および鬱病などの精神障害、筋緊張症、不整脈、運動障害、神経内分泌障害、運動失調、多発性硬化症、過敏性腸症候群、失禁、内臓痛、骨関節炎痛、ヘルペス後神経痛、糖尿病性神経障害、根性痛、坐骨神経痛、背痛、頭部もしくは頸部痛、重篤もしくは難治性の疼痛、侵害受容性疼痛、突出痛、手術後疼痛、または癌性疼痛を含む、様々な疾患、障害、または状態を処置またはその重篤度を減らすために有用である。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
一実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物または製薬上許容されるその塩を提供する：
【００１８】
【化２】
2011526919.tif 000004
［式中、各々独立して、
ＲおよびＲ１は、ハロまたはＣ１〜Ｃ６脂肪族であり、
ｍは、０〜４の整数（両端を含む）であり、
ｎは、０〜５の整数（両端を含む）である］。
【００１９】
本発明の目的のために、化学元素は元素周期表（ｔｈｅ  Ｐｅｒｉｏｄｉｃ  Ｔａｂｌｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｅｌｅｍｅｎｔｓ）、ＣＡＳ版、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｐｈｙｓｉｃｓ、第７５版に従って同定する。さらに、有機化学の一般原理は、その内容の全体が本明細書中に参考として組み込まれている「Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」、Ｔｈｏｍａｓ  Ｓｏｒｒｅｌｌ、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｂｏｏｋｓ、Ｓａｕｓａｌｉｔｏ：１９９９および「Ｍａｒｃｈ’ｓ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」、第５版、Ｓｍｉｔｈ，Ｍ．Ｂ．およびＭａｒｃｈ，Ｊ．編、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：２００１に記載されている。
【００２０】
本明細書中に記載のように、本発明の化合物は、一般に上記に例示したもの、または本発明の特定のクラス、サブクラス、および種に例示したなどの、１つまたは複数の置換基で、任意選択で置換されていてもよい。語句「任意選択で置換された」は語句「置換または非置換の」と互換性があるように使用することを理解されたい。一般に、用語「置換された」とは、用語「任意選択で」によって前置されるかどうかにかかわらず、所定の構造中の水素基を指定した置換基で置き換えることをいう。別段に指定しない限りは、任意選択で置換された基は、基のそれぞれの置換可能な（すなわち、所定の置換基が利用可能な必要な結合価を有する）位置に置換基を有していてもよく、任意の所定の構造中の複数の位置が指定した群から選択された複数の置換基で置換されていてよい場合は、置換基はそれぞれの位置で同一または異なるものであってよい。本発明によって想定される置換基の組合せは、安定または化学的に可能な化合物の形成をもたらすものであることが好ましい。本明細書中で使用する用語「安定」とは、その生成、検出、および好ましくはその回収、精製、ならびに本明細書中に開示した目的のうちの１つまたは複数における使用を可能にする条件に供した際に、実質的に変更されない化合物をいう。一部の実施形態では、安定な化合物または化学的に可能な化合物とは、４０℃以下の温度、水分または他の化学的に反応性の条件の非存在下で少なくとも１週間保った場合に実質的に変更されないものである。
【００２１】
本明細書中で使用する用語「脂肪族」または「脂肪族基」とは、完全に飽和であるまたは１つもしくは複数の不飽和の単位を含有する、直鎖（すなわち非分枝状）または分枝状の、置換または非置換の炭化水素鎖を意味する。別段に指定しない限りは、脂肪族基は１〜２０個の脂肪族炭素原子を含有する。一部の実施形態では、脂肪族基は１〜１０個の脂肪族炭素原子を含有する。他の実施形態では、脂肪族基は１〜８個の脂肪族炭素原子を含有する。さらに他の実施形態では、脂肪族基は１〜６個の脂肪族炭素原子を含有し、さらに他の実施形態では、脂肪族基は１〜４個の脂肪族炭素原子を含有する。適切な脂肪族基には、限定されないが、直鎖状または分枝状の、置換または非置換のアルキル、アルケニル、アルキニル基が含まれる。用語「シクロ脂肪族」とは、完全に飽和であるまたは１つもしくは複数の不飽和の単位を含有するが芳香族ではなく、分子の残りの部分と単一の結合点を有する、単環の炭化水素、二環、または三環の炭化水素を意味する。一部の実施形態では、「シクロ脂肪族」とは、完全に飽和であるまたは１つもしくは複数の不飽和の単位を含有するが芳香族ではなく、分子の残りの部分と単一の結合点を有し、前記二環の環系中の任意の個々の環が３〜７個のメンバーを有する、単環のＣ３〜Ｃ８炭化水素または二環のＣ８〜Ｃ１２炭化水素をいう。
【００２２】
別段に指定しない限りは、本明細書中で使用する用語「複素環」、「ヘテロシクリル」、「ヘテロシクロ脂肪族」、または「複素環式」とは、１つまたは複数の環メンバー中の１つまたは複数の環原子が、独立して選択されるヘテロ原子である、非芳香族、単環、二環、または三環の環系を意味する。複素環は飽和であるか、または１つもしくは複数の不飽和結合を含有することができる。一部の実施形態では、「複素環」、「ヘテロシクリル」、または「複素環式」の基は３〜１４個の環メンバーを有し、１つまたは複数の環メンバーは酸素、硫黄、窒素、またはリンから独立して選択されたヘテロ原子であり、環系中のそれぞれの環は３〜７個の環メンバーを含有する。
【００２３】
用語「ヘテロ原子」とは、酸素、硫黄、窒素、リン、またはケイ素を意味する（窒素、硫黄、リン、もしくはケイ素、任意の塩基性窒素の第四級型、または複素環の置換可能な窒素、たとえば、Ｎ（３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピロリル中など）、ＮＨ（ピロリジニル中など）もしくはＮＲ＋（Ｎ置換のピロリジニル中など）の任意の酸化型が含まれる）。
【００２４】
本明細書中で使用する用語「不飽和」とは、部分が１つまたは複数の不飽和の単位を有するが芳香族でないことを意味する。
【００２５】
本明細書中で使用する用語「アルコキシ」または「チオアルキル」とは、酸素（「アルコキシ」）または硫黄（「チオアルキル」）原子を介して主炭素鎖と付着した、以前に定義したアルキル基をいう。
【００２６】
単独で使用する、または「アラルキル」、「アラルコキシ」、もしくは「アリールオキシアルキル」などのようにより大きな部分の一部として使用する用語「アリール」とは、合計５〜１４個の環炭素原子を有し、系中の少なくとも１つの環が芳香族であり、系中のそれぞれの環が３〜７個の環炭素原子を含有する、単環、二環、および三環の環系をいう。用語「アリール」は、用語「アリール環」と互換性があるように使用し得る。
【００２７】
単独で使用する、または「ヘテロアラルキル」もしくは「ヘテロアリールアルコキシ」などのようにより大きな部分の一部として使用する用語「ヘテロアリール」とは、合計５〜１４個の環メンバーを有し、系中の少なくとも１つの環が芳香族であり、系中の少なくとも１つの環が１つまたは複数のヘテロ原子を含有し、系中のそれぞれの環が３〜７個の環メンバーを含有する、単環、二環、および三環の環系をいう。用語「ヘテロアリール」は、用語「ヘテロアリール環」または用語「芳香族複素環式」と互換性があるように使用し得る。
【００２８】
用語「アルキリデン鎖」とは、完全に飽和または１つもしくは複数の不飽和の単位を有してもよく、分子の残りの部分と２つの結合点を有する、直鎖状または分枝状の炭素鎖をいう。
【００２９】
本発明の化合物を参照した場合の用語「選択的に」または「選択的」とは、ＮａＶ１．１および／またはＮａＶ１．３ナトリウムイオンチャネルに対するこれらの化合物の活性が他のナトリウムイオンチャネルを超えて増加していることをいい、一般に３０〜１００倍程度高い。
【００３０】
用語「スピロシクロアルキレン」とは、同一の炭素原子から分子の残りの部分との２つの結合点を有するシクロ脂肪族環をいう。
【００３１】
別段に記述しない限りは、本明細書中に示す構造には、構造のすべての異性体（たとえば、鏡像異性体、ジアステレオマー、および幾何異性体（またはコンホメーション異性体））、たとえば、それぞれの不斉中心のＲおよびＳ立体配置、（Ｚ）および（Ｅ）二重結合異性体、ならびに（Ｚ）および（Ｅ）コンホメーション異性体も含まれることを意味する。したがって、本化合物の単一の立体化学異性体ならびに鏡像異性体、ジアステレオマー、および幾何異性体（またはコンホメーション異性体）の混合物が本発明の範囲内にある。
【００３２】
別段に記述しない限りは、本発明の化合物のすべての互変異性体が本発明の範囲内にある。たとえば、式（Ｉ）の化合物の特定の実施形態、ただし、水素およびチアゾール−２−イルは、以下に示す互変異性体で存在することができる。
【００３３】
【化３】
2011526919.tif 000005
したがって、本発明の範囲内には、環の窒素原子が１〜３個の互変異性シフトを受け入れられる、式（Ｉ）の化合物の互変異性体が含まれる。
【００３４】
さらに、別段に記述しない限りは、本明細書中に示す構造には、１つまたは複数の同位体的に濃縮された原子の存在のみが異なる化合物も含まれることを意味する。たとえば、１つもしくは複数の水素原子が重水素もしくはトリチウムで置き換えられている、または１つもしくは複数の炭素原子が１３Ｃもしくは１４Ｃが濃縮された炭素によって置き換えられている式（Ｉ）の化合物が本発明の範囲内にある。そのような化合物は、たとえば、分析ツールとして、生物学的アッセイにおけるプローブとして、または改善された治療プロフィールを有するナトリウムチャネル遮断剤として有用である。
【００３５】
一実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物および付随する定義に関し、式中、Ｒはハロである。別の実施形態では、ＲはＦである。
【００３６】
別の実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物および付随する定義に関し、式中、Ｒ１はハロである。別の実施形態では、Ｒ１はＣｌである。別の実施形態では、Ｒ１はＦである。別の実施形態では、Ｒ１はＣ１〜Ｃ６脂肪族である。別の実施形態では、Ｒ１はメチルである。
【００３７】
別の実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物および付随する定義に関し、式中、ｍは０である。別の実施形態では、ｍは２である。
【００３８】
別の実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物および付随する定義に関し、式中、ｎは０である。別の実施形態では、ｎは１である。別の実施形態では、ｎは２である。
【００３９】
別の実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物および付随する定義に関し、式中、ｍおよびｎは０である。別の実施形態では、ｍは０であり、ｎは１である。別の実施形態では、ｍは０であり、ｎは２である。
【００４０】
別の実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物および付随する定義に関し、式中、ｍは０であり、ｎは１であり、Ｒ１はＣｌである。別の実施形態では、ｍは０であり、ｎは１であり、Ｒ１はＦである。別の実施形態では、ｍは０であり、ｎは２であり、Ｒ１はＣｌである。別の実施形態では、ｍは０であり、ｎは２であり、Ｒ１はＣｌおよびＭｅである。別の実施形態では、ｍは２であり、ＲはＦであり、ｎは２である。別の実施形態では、ｍは２であり、ＲはＦであり、ｎは２であり、Ｒ１はＣｌである。
【００４１】
別の実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物および付随する定義に関し、式Ｉａ、Ｉｂ、Ｉｃ、Ｉｄ、またはＩｅを有する：
【００４２】
【化４】
2011526919.tif 000006
［式中、各々独立して：
ＲおよびＲ１は、Ｃ１〜Ｃ６脂肪族またはハロである］。
【００４３】
別の実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物および付随する定義に関し、化合物は表２から選択される。
【００４４】
別の態様では、本発明は、式Ｉの化合物および製薬上許容される担体を含む薬学的組成物に関する。
【００４５】
別の実施形態では、本発明は、ナトリウムイオンチャネルを請求項１から２４のいずれか一項に記載の化合物と接触させるステップを含む、ＮａＶ１．１またはＮａＶ１．３ナトリウムイオンチャネルを調節する方法に関する。
【００４６】
別の態様では、本発明は、有効量の式Ｉの化合物を、処置または重篤度を減らすことを必要としている被験体に投与することを含む、被験体において、急性、慢性、神経因性、もしくは炎症性の疼痛、関節炎、偏頭痛、群発頭痛、三叉神経痛、ヘルペス神経痛、一般神経痛、癲癇もしくは癲癇状態、神経変性障害、不安および鬱病などの精神障害、双極性障害、筋緊張症、不整脈、運動障害、神経内分泌障害、運動失調、多発性硬化症、過敏性腸症候群、失禁、内臓痛、骨関節炎痛、ヘルペス後神経痛、糖尿病性神経障害、根性痛、坐骨神経痛、背痛、頭部もしくは頸部痛、重篤もしくは難治性の疼痛、侵害受容性疼痛、突出痛、手術後疼痛、癌性疼痛、脳卒中、脳虚血、外傷性脳傷害、筋萎縮性側索硬化症、ストレスもしくは運動誘導性の狭心症、動悸、高血圧、偏頭痛、または異常な胃腸管運動を処置またはその重篤度を減らす方法に関する。
【００４７】
別の実施形態では、前記方法は、急性、慢性、神経因性、または炎症性の疼痛を処置またはその重篤度を減らすために使用する。
【００４８】
別の実施形態では、前記方法は、根性痛、坐骨神経痛、背痛、頭痛、頸部痛、難治性疼痛、急性疼痛、手術後疼痛、背痛、耳鳴（ｔｉｎｎｉｔｉｓ）または癌性疼痛を処置またはその重篤度を減らすために使用する。
【００４９】
別の実施形態では、前記方法は、大腿骨癌性疼痛、非悪性慢性骨痛、関節リウマチ、骨関節炎、脊髄狭窄症、神経因性腰痛、神経因性腰痛、筋筋膜痛症候群、線維筋痛症、側頭下顎関節痛、腹部を含む慢性内臓痛、膵臓、ＩＢＳ疼痛、慢性および急性の頭痛、偏頭痛、群発頭痛を含む緊張性頭痛、ヘルペス後神経痛を含む慢性および急性の神経因性疼痛、糖尿病性神経障害、ＨＩＶ関連神経障害、三叉神経痛、シャルコー−マリー歯神経障害、遺伝性感覚神経障害、末梢神経傷害、有痛性神経腫、異所性近位および遠位放電、神経根障害、化学療法誘導性の神経因性疼痛、放射線療法誘導性の神経因性疼痛、乳房切除術後疼痛、中枢疼痛、脊髄損傷疼痛、脳卒中後疼痛、視床痛、複合性局所疼痛症候群、幻肢痛、難治性疼痛、急性疼痛、急性手術後疼痛、急性筋骨格痛、関節痛、機械的腰痛、頸部痛、腱炎、傷害／運動痛、腹痛を含む急性内臓痛、腎盂腎炎、虫垂炎、胆嚢症、腸管閉塞、ヘルニアなど、心臓痛を含む胸部痛、陣痛を含む骨盤痛、腎仙痛、急性産科的疼痛、帝王切開術疼痛、急性炎症性の火傷および外傷痛、子宮内膜症を含む急性間欠痛、急性帯状疱疹痛、鎌状赤血球貧血、急性膵炎、突出痛、副鼻腔炎痛、歯痛を含む口腔顔面痛、多発性硬化症（ＭＳ）疼痛、鬱病疼痛、らい病疼痛、ベーチェット病疼痛、有痛脂肪症、静脈炎疼痛、ギラン−バレー疼痛、痛む脚および動く足趾、ハグルンド症候群、肢端紅痛症疼痛、ファブリー病疼痛、尿失禁を含む膀胱および泌尿生殖器の疾患、過活動膀胱、有痛性膀胱症候群、間質性膀胱炎（ｃｙｃｔｉｔｉｓ）（ＩＣ）、もしくは前立腺炎、Ｉ型およびＩＩ型の複合性局所疼痛症候群（ＣＲＰＳ）、または狭心症誘導性の疼痛を処置またはその重篤度を減らすために使用する。
【００５０】
本発明の例示的な化合物を以下の表２に示す。
【００５１】
【表２−１】
2011526919.tif 000007
【００５２】
【表２−２】
2011526919.tif 000008
【００５３】
【表２−３】
2011526919.tif 000009
本発明の化合物は、当分野で知られている方法を用いて容易に調製し得る。以下のスキーム１〜スキーム６に本発明の化合物の調製方法を例示する。
【００５４】
一般スキーム１
【００５５】
【化５】
2011526919.tif 000010
一般スキーム２
【００５６】
【化６】
2011526919.tif 000011
一般スキーム３
【００５７】
【化７】
2011526919.tif 000012
一般スキーム４
【００５８】
【化８】
2011526919.tif 000013
一般スキーム５
【００５９】
【化９】
2011526919.tif 000014
一般スキーム６
【００６０】
【化１０】
2011526919.tif 000015
使用、配合物および投与
製薬上許容される組成物
上述のように、本発明は電位作動型ナトリウムイオンチャネルの阻害剤である化合物を提供し、したがって、本化合物は、限定されないが、急性、慢性、神経因性、または炎症性の疼痛、関節炎、偏頭痛、群発頭痛、三叉神経痛、ヘルペス神経痛、一般神経痛、癲癇または癲癇状態、神経変性障害、不安および鬱病などの精神障害、筋緊張症、不整脈、運動障害、神経内分泌障害、運動失調、多発性硬化症、過敏性腸症候群、ならびに失禁を含む、疾患、障害、および状態の処置に有用である。したがって、本発明の別の態様では、本明細書中に記載の化合物のうちの任意のものを含み、製薬上許容される担体、アジュバントまたはビヒクルを任意選択で含む、製薬上許容される組成物を提供する。特定の実施形態では、これらの組成物は、１つまたは複数の追加の治療剤を任意選択でさらに含む。
【００６１】
本発明の特定の化合物は、処置用の遊離形態、または適切な場合はその製薬上許容される誘導体として存在することができることを理解されたい。本発明によれば、製薬上許容される誘導体には、限定されないが、必要としている被験体に投与した際に、本明細書中に他の様式で記載した化合物またはその代謝物もしくは残留物を直接または間接的に提供することができる、製薬上許容される塩、エステル、そのようなエステルの塩、または任意の他の付加物もしくは誘導体が含まれる。
【００６２】
本明細書中で使用する用語「製薬上許容される塩」とは、正しい医学的判断の範囲内にあり、過度の毒性、刺激、アレルギー応答などなしで、ヒトおよび下等動物の組織と接触させて使用するために適切であり、合理的な損益比に相応する塩をいう。「製薬上許容される塩」とは、レシピエントに投与した際に、本発明の化合物またはその阻害的に活性のある代謝物もしくは残渣を直接または間接的のいずれかで提供することができる、本発明の化合物の任意の無毒性の塩またはエステルの塩を意味する。本明細書中で使用する用語「その阻害的に活性のある代謝物または残渣」とは、その代謝物または残留物が電位作動型ナトリウムイオンチャネルの阻害剤でもあることを意味する。
【００６３】
製薬上許容される塩は当分野で周知である。たとえば、Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅらは、本明細書中に参考として組み込まれているＪ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、１９７７、６６、１−１９中で製薬上許容される塩を詳述している。本発明の化合物の製薬上許容される塩には、適切な無機および有機の酸および塩基から誘導されるものが含まれる。製薬上許容される無毒性の酸付加塩の例は、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸および過塩素酸などの無機酸または酢酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸もしくはマロン酸などの有機酸を用いて、あるいはイオン交換などの当分野で使用されている他の方法を使用することによって形成したアミノ基の塩である。他の製薬上許容される塩には、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、硫酸水素塩、ホウ酸、酪酸、ショウノウ酸、ショウノウスルホン酸、クエン酸、シクロペンタンプロピオン酸、ジグルコン酸、ドデシル硫酸、エタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、グルコヘプトン酸、グリセロリン酸、グルコン酸、ヘミ硫酸、ヘプタン酸、ヘキサン酸、ヨウ化水素酸、２−ヒドロキシ−エタンスルホン酸、ラクトビオン酸、乳酸、ラウリン酸、ラウリル硫酸、リンゴ酸、マレイン酸、マロン酸、メタンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、ニコチン酸、硝酸、オレイン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、ペクチン酸、過硫酸、３−フェニルプロピオン酸、リン酸、ピクリン酸、ピバリン酸、プロピオン酸、ステアリン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、チオシアン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ウンデカン酸、吉草酸の塩などが含まれる。適切な塩基から誘導される塩には、アルカリ金属、アルカリ土類金属、アンモニウムおよびＮ＋（Ｃ１〜４アルキル）４の塩が含まれる。また、本発明では、本明細書中に開示した化合物の任意の塩基性窒素含有基の第四級化も想定する。水または油に溶解または分散可能な生成物がそのような第四級化によって得られ得る。代表的なアルカリまたはアルカリ土類金属の塩には、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどが含まれる。さらなる製薬上許容される塩には、適切な場合に、無毒性アンモニウム、第四級アンモニウム、ならびにハロゲンイオン、水酸化物イオン、カルボン酸イオン、硫酸イオン、リン酸イオン、硝酸イオン、低級スルホン酸アルキルイオンおよびアリールスルホンイオン酸などの対イオンを用いて形成したアミン陽イオンが含まれる。
【００６４】
上述のように、本発明の製薬上許容される組成物は製薬上許容される担体、アジュバント、またはビヒクルをさらに含み、本明細書中で使用する場合、これらには、所望する特定の剤形に適した任意かつすべての溶媒、希釈剤、または他の液体ビヒクル、分散または懸濁補助剤、界面活性剤、等張化剤、増粘剤または乳化剤、保存料、固体結合剤、潤滑剤などが含まれる。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１６版、Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎ（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．、ペンシルバニア州Ｅａｓｔｏｎ、１９８０）は、製薬上許容される組成物の配合に使用される様々な担体およびそれを調製するための既知の技術を開示している。任意の慣用の担体媒体が、任意の望ましくない生物学的効果を生じるまたは製薬上許容される組成物の任意の他の構成成分と他の様式で有害に相互作用するなどによって本発明の化合物に不適合である場合以外は、その使用は本発明の範囲内にあることが企図される。製薬上許容される担体として役割を果たすことができる材料の一部の例には、限定されないが、イオン交換剤、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、ヒト血清アルブミンなどの血清タンパク質、ホスフェートなどの緩衝物質、グリシン、ソルビン酸、またはソルビン酸カリウム、飽和植物性脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩または硫酸プロタミンなどの電解質、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド状シリカ、三ケイ素マグネシウム、ポリビニルピロリドン、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、羊毛脂、ラクトース、グルコースおよびスクロースなどの糖、コーンスターチおよびジャガイモデンプンなどのデンプン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロースなどのセルロースおよびその誘導体、粉末トラガカント、麦芽、ゼラチン、タルク、カカオ脂および坐薬ワックスなどの賦形剤、ピーナッツ油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油およびダイズ油などの油、プロピレングリコールまたはポリエチレングリコールなどのグリコール、オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチルなどのエステル、寒天、水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウムなどの緩衝剤、アルギン酸、発熱物質を含まない水、等張性生理食塩水、リンゲル液、エチルアルコール、リン酸緩衝溶液、ならびにラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウムなどの他の無毒性の適合性のある潤滑剤が含まれ、また、着色料、放出剤、コーティング剤、甘味料、調味料および香料、保存料、抗酸化剤も配合する者の判断に従って組成物中に存在することができる。
【００６５】
化合物および製薬上許容される組成物の使用
さらに別の態様では、有効量の化合物または化合物を含む製薬上許容される組成物を、処置または重篤度を減らすことを必要としている被験体に投与することを含む、急性、慢性、神経因性、もしくは炎症性の疼痛、関節炎、偏頭痛、群発頭痛、三叉神経痛、ヘルペス神経痛、一般神経痛、癲癇もしくは癲癇状態、神経変性障害、不安および鬱病などの精神障害、双極性障害、筋緊張症、不整脈、運動障害、神経内分泌障害、運動失調、多発性硬化症、過敏性腸症候群、失禁、内臓痛、骨関節炎痛、ヘルペス後神経痛、糖尿病性神経障害、根性痛、坐骨神経痛、背痛、頭部もしくは頸部痛、重篤もしくは難治性の疼痛、侵害受容性疼痛、突出痛、手術後疼痛、または癌性疼痛を処置するまたはその重篤度を減らす方法を提供する。
【００６６】
特定の実施形態では、有効量の化合物または化合物を含む製薬上許容される組成物を、処置または重篤度を減らすことを必要としている被験体に投与することを含む、脳卒中、脳虚血、外傷性脳傷害、筋萎縮性側索硬化症、ストレスもしくは運動誘導性の狭心症、動悸、高血圧、偏頭痛、または異常な胃腸管運動を処置するまたはその重篤度を減らす方法を提供する。
【００６７】
特定の実施形態では、有効量の化合物または製薬上許容される組成物を、処置または重篤度を減らすことを必要としている被験体に投与することを含む、急性、慢性、神経因性、または炎症性の疼痛を処置するまたはその重篤度を減らす方法を提供する。特定の他の実施形態では、有効量の化合物または製薬上許容される組成物を、処置または重篤度を減らすことを必要としている被験体に投与することを含む、根性痛、坐骨神経痛、背痛、頭痛、または頸部痛を処置するまたはその重篤度を減らす方法を提供する。さらに他の実施形態では、有効量の化合物または製薬上許容される組成物を、処置または重篤度を減らすことを必要としている被験体に投与することを含む、重篤もしくは難治性の疼痛、急性疼痛、手術後疼痛、背痛、耳鳴（ｔｉｎｎｉｔｉｓ）または癌性疼痛を処置するまたはその重篤度を減らす方法を提供する。
【００６８】
特定の実施形態では、有効量の化合物または製薬上許容される組成物を、処置または重篤度を減らすことを必要としている被験体に投与することを含む、大腿骨癌性疼痛、非悪性慢性骨痛、関節リウマチ、骨関節炎、脊髄狭窄症、神経因性腰痛、神経因性腰痛、筋筋膜痛症候群、線維筋痛症、側頭下顎関節痛、腹部を含む慢性内臓痛、膵臓、ＩＢＳ疼痛、慢性および急性の頭痛、偏頭痛、群発頭痛を含む緊張性頭痛、ヘルペス後神経痛を含む慢性および急性の神経因性疼痛、糖尿病性神経障害、ＨＩＶ関連神経障害、三叉神経痛、シャルコー−マリー歯神経障害、遺伝性感覚神経障害、末梢神経傷害、有痛性神経腫、異所性近位および遠位放電、神経根障害、化学療法誘導性の神経因性疼痛、放射線療法誘導性の神経因性疼痛、乳房切除術後疼痛、中枢疼痛、脊髄損傷疼痛、脳卒中後疼痛、視床痛、複合性局所疼痛症候群、幻肢痛、難治性疼痛、急性疼痛、急性手術後疼痛、急性筋骨格痛、関節痛、機械的腰痛、頸部痛、腱炎、傷害／運動痛、腹痛を含む急性内臓痛、腎盂腎炎、虫垂炎、胆嚢症、腸管閉塞、ヘルニアなど、心臓痛を含む胸部痛、陣痛を含む骨盤痛、腎仙痛、急性産科的疼痛、帝王切開術疼痛、急性炎症性の火傷および外傷痛、子宮内膜症を含む急性間欠痛、急性帯状疱疹痛、鎌状赤血球貧血、急性膵炎、突出痛、副鼻腔炎痛、歯痛を含む口腔顔面痛、多発性硬化症（ＭＳ）疼痛、鬱病疼痛、らい病疼痛、ベーチェット病疼痛、有痛脂肪症、静脈炎疼痛、ギラン−バレー疼痛、痛む脚および動く足趾、ハグルンド症候群、肢端紅痛症疼痛、ファブリー病疼痛、尿失禁を含む膀胱および泌尿生殖器の疾患、過活動膀胱、有痛性膀胱症候群、間質性膀胱炎（ｃｙｃｔｉｔｉｓ）（ＩＣ）、または前立腺炎、Ｉ型およびＩＩ型の複合性局所疼痛症候群（ＣＲＰＳ）、狭心症誘導性の疼痛を処置するまたはその重篤度を減らす方法を提供する。
【００６９】
本発明の特定の実施形態では、「有効量」の化合物または製薬上許容される組成物とは、急性、慢性、神経因性、もしくは炎症性の疼痛、関節炎、偏頭痛、群発頭痛、三叉神経痛、ヘルペス神経痛、一般神経痛、癲癇もしくは癲癇状態、神経変性障害、不安および鬱病などの精神障害、筋緊張症、不整脈、運動障害、神経内分泌障害、運動失調、多発性硬化症、過敏性腸症候群、失禁、内臓痛、骨関節炎痛、ヘルペス後神経痛、糖尿病性神経障害、根性痛、坐骨神経痛、背痛、頭部もしくは頸部痛、重篤もしくは難治性の疼痛、侵害受容性疼痛、突出痛、手術後疼痛、耳鳴（ｔｉｎｎｉｔｉｓ）または癌性疼痛のうちの１つまたは複数を処置するまたはその重篤度を減らすために有効な量である。
【００７０】
本発明の方法による化合物および組成物は、急性、慢性、神経因性、もしくは炎症性の疼痛、関節炎、偏頭痛、群発頭痛、三叉神経痛、ヘルペス神経痛、一般神経痛、癲癇もしくは癲癇状態、神経変性障害、不安および鬱病などの精神障害、筋緊張症、不整脈、運動障害、神経内分泌障害、運動失調、多発性硬化症、過敏性腸症候群、失禁、内臓痛、骨関節炎痛、ヘルペス後神経痛、糖尿病性神経障害、根性痛、坐骨神経痛、背痛、頭部もしくは頸部痛、重篤もしくは難治性の疼痛、侵害受容性疼痛、突出痛、手術後疼痛、耳鳴（ｔｉｎｎｉｔｉｓ）または癌性疼痛のうちの１つまたは複数を処置するまたはその重篤度を減らすために有効な任意の量および任意の投与経路で投与し得る。正確な必要量は、被験体の種、年齢、および全体的状態、感染症の重篤度、特定の薬剤、その投与様式などに応じて被験体間で変動する。本発明の化合物は、投与を容易にし、用量を均一にするために単位剤形で配合することが好ましい。本明細書中で使用する表現「単位剤形」とは、処置する被験体に適した、物理的に区別された薬剤の単位。しかし、本発明の化合物および組成物の合計一日用量は、担当医によって健全な医学的判断の範囲内で決定されることが理解されよう。任意の特定の被験体または生物の具体的な有効用量レベルは、処置する障害および障害の重篤度、用いる具体的な化合物の活性、用いる具体的な組成物、被験体の年齢、体重、全体的な健康、性別および食習慣、用いる具体的な化合物の投与時間、投与経路、および排泄速度、処置期間、用いる具体的な化合物と組み合わせてまたは同時に使用する薬物、ならびに医学分野で周知の同様の要因を含む様々な要因に依存する。本明細書中で使用する用語「被験体」とは、動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトを意味する。
【００７１】
本発明の製薬上許容される組成物は、処置する感染症の重篤度に応じて、経口、直腸非経口、嚢内、膣内、腹腔内、外用（散剤、軟膏、または液滴などによる）、経口または鼻腔スプレーなどとして頬内に、ヒトおよび他の動物に投与することができる。特定の実施形態では、本発明の化合物は、所望の治療効果を得るために１日あたり被験体の体重１ｋｇあたり約０．０１ｍｇ〜約５０ｍｇ、好ましくは約１ｍｇ〜約２５ｍｇの用量レベルで、１日１回または複数回、経口または非経口で投与し得る。
【００７２】
経口投与用の液体剤形には、限定されないが、製薬上許容される乳濁液、マイクロエマルジョン、液剤、懸濁液、シロップおよびエリキシルが含まれる。活性化合物に加えて、液体剤形は、当分野で一般的に使用されている不活性希釈剤、たとえば、水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、たとえばエチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油（特に、綿実油、ラッカセイ油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油、およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール、ソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにその混合物が挙げられる。不活性希釈剤の他に、経口組成物には、湿潤剤、乳化剤および懸濁剤などのアジュバント、甘味料、調味料、ならびに香料も含み得る。
【００７３】
注射用調製物、たとえば無菌的な注射用の水性または油性懸濁液は、既知の分野に従って適切な分散剤または湿潤剤および懸濁剤を用いて配合し得る。また、無菌的な注射用調製物は、無毒性非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の無菌的な注射用液剤、懸濁液または乳濁液、たとえば１，３−ブタンジオール中の溶液でもあり得る。用い得る許容されるビヒクルおよび溶媒は、とりわけ、水、リンゲル液、Ｕ．Ｓ．Ｐ．および等張性塩化ナトリウム溶液である。さらに、無菌的な不揮発性油が溶媒または懸濁媒として慣習的に用いられる。この目的のために、合成モノまたはジグリセリドを含む任意の無刺激の不揮発性油を用いることができる。さらに、オレイン酸などの脂肪酸を注射用剤の調製に使用する。
【００７４】
注射用配合物は、たとえば、細菌保持フィルターを通した濾過によって、または使用前に滅菌水もしくは他の無菌的な注射用媒体中に溶解もしくは分散させることができる無菌的な固体組成物の形態の滅菌剤を取り込ませることによって、滅菌することができる。
【００７５】
本発明の化合物の効果を延長させるために、多くの場合は、皮下または筋肉内注射からの化合物の吸収を遅延させることが望ましい。これは、水溶性の乏しい結晶性または非晶質物質の液体懸濁液を使用することによって達成し得る。その結果、化合物の吸収速度はその溶解速度に依存し、立ち代ってこれは、結晶の大きさおよび結晶形に依存し得る。あるいは、非経口投与した化合物形態の遅延吸収は、化合物を油性ビヒクル中に溶解または懸濁させることによって達成する。注射用デポー形態は、化合物のマイクロカプセルマトリックスをポリ乳酸−ポリグリコリドなどの生分解性ポリマー中で形成することによって作製する。化合物対ポリマーの比および用いる特定のポリマーの性質に応じて、化合物放出速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例には、ポリ（オルトエステル）およびポリ（酸無水物）が含まれる。また、デポー注射用配合物は、化合物を体組織と適合性のあるリポソームまたはマイクロエマルジョン中に封入することによっても調製される。
【００７６】
直腸または経膣投与用の組成物は、好ましくは、本発明の化合物を、周囲温度では固体であるが体温では液体であり、したがって直腸または経膣の腔内で溶解して活性化合物を放出する、カカオ脂、ポリエチレングリコールまたは坐薬ワックスなどの適切な非刺激賦形剤または担体と混合することによって調製することができる坐薬である。
【００７７】
経口投与用の固体剤形には、カプセル、錠剤、丸薬、散剤、および顆粒が含まれる。そのような固体剤形中では、活性化合物を少なくとも１つの不活性の製薬上許容される賦形剤もしくは担体、たとえばクエン酸ナトリウムもしくはリン酸二カルシウム、ならびに／またはａ）充填剤もしくは増量剤、たとえば、デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、およびケイ酸、ｂ）結合剤、たとえば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリジノン、スクロース、およびアカシア、ｃ）湿潤剤、たとえばグリセロール、ｄ）崩壊剤、たとえば、寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモもしくはタピオカデンプン、アルギン酸、特定のケイ酸塩、および炭酸ナトリウム、ｅ）溶液緩染剤、たとえばパラフィン、ｆ）吸収促進剤、たとえば第四級アンモニウム化合物、ｇ）湿潤剤、たとえば、セチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロール、ｈ）吸収剤、たとえば、カオリンおよびベントナイト粘土、ならびにｉ）潤滑剤、たとえば、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、およびその混合物と混合する。カプセル、錠剤および丸薬の場合、剤形は緩衝剤も含み得る。
【００７８】
また、同様の種類の固体組成物は、ラクトースまたは乳糖および高分子量ポリエチレングリコールなどの賦形剤を用いて、軟および硬ゼラチンカプセル中の充填剤として使用され得る。錠剤、糖衣錠、カプセル、丸薬、および顆粒の固体剤形は、腸溶コーティングおよび製薬配合分野で周知の他のコーティングなどのコーティングおよびシェルを用いて調製することができる。これらは乳白剤を任意選択で含有してもよく、また、腸管の特定の部分中で、任意選択で遅延様式で活性成分のみを放出するまたはそれを優先的に放出するような組成であることができる。使用できる包埋組成物の例には、ポリマー物質およびワックスが含まれる。また、同様の種類の固体組成物は、ラクトースまたは乳糖および高分子量ポリエチレングリコール（ｐｏｌｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｇｌｙｃｏｌｓ）などの賦形剤を用いて、軟および硬ゼラチンカプセル中の充填剤として用い得る。
【００７９】
また、活性化合物は、上述の１つまたは複数の賦形剤と共にマイクロカプセル封入した形態であることもできる。錠剤、糖衣錠、カプセル、丸薬、および顆粒の固体剤形は、腸溶コーティング、放出制御コーティングおよび製薬配合分野で周知の他のコーティングなどのコーティングおよびシェルを用いて調製することができる。そのような固体剤形中では、活性化合物をスクロース、ラクトースまたはデンプンなどの少なくとも１つの不活性希釈剤と混合し得る。また、そのような剤形は、正常な実施として、不活性希釈剤以外の追加の物質、たとえば、ステアリン酸マグネシウムおよび結晶セルロースなどの錠剤形成潤滑剤および他の錠剤形成補助剤も含み得る。カプセル、錠剤および丸薬の場合、剤形は緩衝剤も含み得る。これらは乳白剤を任意選択で含有してもよく、また、腸管の特定の部分中で、任意選択で遅延様式で活性成分のみを放出するまたはそれを優先的に放出するような組成であることができる。使用できる包埋組成物の例には、ポリマー物質およびワックスが含まれる。
【００８０】
本発明の化合物の外用または経皮投与用の剤形には、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ゲル、散剤、液剤、スプレー、吸入剤またはパッチが含まれる。活性構成成分は、必要に応じて無菌的条件下で製薬上許容される担体および任意の必要な保存料または緩衝剤と混合する。眼用配合物、点耳剤、および点眼剤も本発明の範囲内にあるとして企図される。さらに、本発明は、化合物の身体への制御された送達を提供するという追加の利点を有する、経皮パッチの使用を企図する。そのような剤形は、化合物を適切な媒体中に溶解または分注することによって調製する。また、皮膚を通る化合物の流動を増加させるために吸収エンハンサーも使用することができる。速度は、速度制御膜を提供することまたは化合物をポリマーマトリックスもしくはゲルを分散させることのいずれかによって制御することができる。
【００８１】
一般的に上述したように、本発明の化合物は電位作動型ナトリウムイオンチャネルの阻害剤として有用である。一実施形態では、本発明の化合物および組成物は、ＮａＶ１．１またはＮａＶ１．３のうちの１つまたは複数の阻害剤であり、したがって、任意の特定の理論に束縛されることを望まずに、化合物および組成物は、ＮａＶ１．１またはＮａＶ１．３のうちの１つまたは複数の活性化または過活動が疾患、状態、または障害に関連づけられている場合に、疾患、状態、または障害を処置するまたはその重篤度を減らすために特に有用である。ＮａＶ１．１またはＮａＶ１．３の活性化または過活動が特定の疾患、状態、または障害に関連づけられている場合、疾患、状態、または障害は、「ＮａＶ１．１またはＮａＶ１．３に媒介される疾患、状態または障害」としても呼び得る。したがって、別の態様では、本発明は、ＮａＶ１．１またはＮａＶ１．３のうちの１つまたは複数の活性化または過活動が病状に関連づけられている場合に、疾患、状態、または障害を処置するまたはその重篤度を減らす方法を提供する。
【００８２】
本発明においてＮａＶ１．１またはＮａＶ１．３の阻害剤として利用した化合物の活性は、本明細書の実施例中に一般的に記載した方法に従って、または当業者が利用可能な方法に従ってアッセイし得る。
【００８３】
特定の例示的な実施形態では、本発明の化合物は、ＮａＶ１．３および／またはＮａＶ１．１の阻害剤として有用である。
【００８４】
また、本発明の化合物および製薬上許容される組成物は組合せ療法で用いることができる、すなわち、化合物および製薬上許容される組成物は１つまたは複数の他の所望の治療剤または医学的手順と同時に、その前に、またはそれに続いて投与することができることも理解されたい。組合せレジメンで用いる治療（治療剤または手順）の特定の組合せでは、所望の治療剤および／または手順の適合性ならびに達成する所望の治療効果を考慮する。用いる治療は、同じ障害で所望の効果を達成し得る（たとえば、本発明の化合物は同じ障害を処置するために使用する別の薬剤と同時に投与し得る）、またはこれらは異なる効果（たとえば任意の有害作用の制御）を達成し得ることを理解されたい。本明細書中で使用する、特定の疾患または状態を処置または予防するために通常投与する追加の治療剤は、「処置する疾患または状態に適切である」として知られる。たとえば、例示的な追加の治療剤には、限定されないが、非オピオイド鎮痛剤（エトドラク、インドメタシン、スリンダク、トルメチンなどのインドール、ナブメトンなどのナフチルアルカノン、ピロキシカムなどのオキシカム、アセトアミノフェンなどのｐ−アミノフェノール誘導体、フェノプロフェン、フルルビプロフェン、イブプロフェン、ケトプロフェン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、オキサプロジンなどのプロピオン酸、アスピリン、トリサリチル酸コリンマグネシウム、ジフルニサルなどのサリチル酸塩、メクロフェナム酸、メフェナム酸などのフェナメート、およびフェニルブタゾンなどのピラゾール）、またはオピオイド（麻薬性）作用剤（コデイン、フェンタニル、ヒドロモルホン、レボルファノール、メペリジン、メサドン、モルヒネ、オキシコドン、オキシモルホン、プロポキシフェン、ブプレノルフィン、ブトルファノール、デゾシン、ナルブフィン、およびペンタゾシンなど）が含まれる。さらに、非薬物鎮痛手法は、本発明の１つまたは複数の化合物の投与と併せて利用し得る。たとえば、無痛（脊髄内インフュージョン、神経遮断）、神経外科（ＣＮＳ経路の神経剥離）、神経刺激（経皮的電気神経刺激、脊髄後柱刺激）、物理療法（理学療法、装具、ジアテルミー）、または心理学（認知性方法−催眠、生体フィードバック、もしくは行動性方法）手法も利用し得る。さらなる追加の治療剤または手法は、その内容の全体が本明細書中に参考として組み込まれているＴｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ、第１７版、Ｍａｒｋ  Ｈ．ＢｅｅｒｓおよびＲｏｂｅｒｔ  Ｂｅｒｋｏｗ編、Ｍｅｒｃｋ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、１９９９および食品薬品局のウェブサイト、ｗｗｗ．ｆｄａ．ｇｏｖに一般的に記載されている。
【００８５】
本発明の組成物中に存在する追加の治療剤の量は、その治療剤を唯一の活性剤として含む組成物中で通常投与される量を超えない。好ましくは、本開示中の組成物中の追加の治療剤の量は、その薬剤を唯一の治療上活性のある薬剤として含む組成物中に通常存在する量の約５０％〜１００％の範囲である。
【００８６】
また、本発明の化合物またはその製薬上許容される組成物は、人工装具、人工弁、血管移植片、ステントおよびカテーテルなどの移植可能な医療装置をコーティングするための組成物中に取り込ませ得る。したがって、別の態様では、本発明には、一般に上記ならびに本明細書中のクラスおよびサブクラス中に記載した本発明の化合物と、前記移植可能な装置のコーティングに適した担体とを含む、移植可能な装置をコーティングするための組成物が含まれる。さらに別の態様では、本発明には、一般に上記ならびに本明細書中のクラスおよびサブクラス中に記載した本発明の化合物と、前記移植可能な装置のコーティングに適した担体とを含む組成物でコーティングした移植可能な装置が含まれる。適切なコーティングおよびコーティングした移植可能な装置の一般的な調製は、米国特許第６，０９９，５６２号、第５，８８６，０２６号、および第５，３０４，１２１号に記載されている。コーティングは、典型的にはヒドロゲルポリマー、ポリメチルジシロキサン、ポリカプロラクトン、ポリエチレングリコール、ポリ乳酸、エチレン酢酸ビニル、およびその混合物などの生体適合性ポリマー材料である。コーティングは、組成物に徐放性特徴を与えるためにフルオロケイ素、ポリサッカライド（ｐｏｌｙｓａｃｃａｒｉｄｅ）、ポリエチレングリコール、リン脂質またはその組合せの適切なトップコートによって任意選択でさらに覆われていてもよい。
【００８７】
本発明の別の態様は、生体試料または被験体におけるＮａＶ１．１またはＮａＶ１．３活性のうちの１つまたは複数の阻害に関し、この方法は、被験体に式Ｉの化合物もしくは前記化合物を含む組成物を投与すること、または前記生体試料をそれと接触させることを含む。本明細書中で使用する用語「生体試料」には、限定されないが、細胞培養物またはその抽出物、哺乳動物から得た生検材料またはその抽出物、および血液、唾液、尿、糞便、精液、涙、もしくは他の体液またはその抽出物。
【００８８】
生体試料におけるＮａＶ１．１またはＮａＶ１．３活性のうちの１つまたは複数の阻害は、当業者に知られている様々な目的に有用である。そのような目的の例には、限定されないが、生物学的および病理学的現象におけるナトリウムイオンチャネルの研究、ならびに新規ナトリウムイオンチャネル阻害剤の比較評価が含まれる。
【実施例】
【００８９】
一般方法。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ）および１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ）スペクトルは、重水素化クロロホルム（ＣＤＣｌ３）またはジメチルスルホキシド−Ｄ６（ＤＭＳＯ）中の溶液として得た。質量スペクトル（ＭＳ）は、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ５０×４．６０ｍｍのｌｕｎａ−５μのＣ１８カラムを備えたＡｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  ＡＰＩ  ＥＸ  ＬＣ／ＭＳシステムを用いて得た。ＬＣ／ＭＳ溶出システムは、４．５分間の直線勾配および４．０ｍＬ／分の流速を用いた、０．０３５％ｖ／ｖのトリフルオロ酢酸を含むＨ２Ｏ中の１０〜９９％のアセトニトリルであった。シリカゲルクロマトグラフィーは、２３０〜４００メッシュの粒子径を有するシリカゲル−６０を用いて行なった。ピリジン、ジクロロメタン（ＣＨ２Ｃｌ２）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）はＡｌｄｒｉｃｈからのものであった（Ｓｕｒｅ−Ｓｅａｌボトルを乾燥窒素下で保存した）。すべての反応は、別段に注記しない限りは磁気撹拌した。別段に指定しない限りは、すべての温度は内部反応温度をいう。
【００９０】
経路１
１−（２，３−ジメトキシベンジル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン
【００９１】
【化１１】
2011526919.tif 000016
無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のマレイン酸無水物（２．００ｇ、２０．４ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素下で、無水ＴＨＦ（７．５ｍＬ）中のベラトリルアミン（３．０ｍＬ、２０．４ｍｍｏｌ）の溶液を１５分間かけて室温で滴下して処理し、その後、反応混合物を３．５時間加熱還流し、室温まで冷却し、続いて、室温で１６時間撹拌した。混合物を真空下で濃縮し、無水酢酸（２５ｍＬ）に懸濁させ、酢酸ナトリウム（１．０９ｇ、１３．３ｍｍｏｌ）で処理し、撹拌しながら１００℃、窒素下で３時間、加熱した。室温まで冷ました後、反応混合物を濃縮した。残渣をＤＣＭ（１００ｍＬ）に溶かし、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２×５０ｍＬ）および水（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中に２０〜６０％のＥｔＯＡｃ）による精製により、生成物が黄色−白色固形物として得られた（１．２４ｇ、２５％）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．０７（ｄ、Ｊ＝３．９Ｈｚ、２Ｈ）、６．８８（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、６．８４（ｄ、Ｊ＝１．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．７３（ｄｄ、Ｊ＝２．０、８．２Ｈｚ、１Ｈ）、４．５２（ｓ、２Ｈ）、３．３３（ｓ、６Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ）、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝２４８．５、ｔＲ＝１．１０分。
【００９２】
３−（３，５−ジクロロフェニル）−１−（２，３−ジメトキシベンジル）ピロリジン−２，５−ジオン
【００９３】
【化１２】
2011526919.tif 000017
１，４−ジオキサン（５ｍＬ）中のμ−ジクロロテトラエチレンジロジウム（Ｉ）（２０ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ、５ｍｏｌ％のＲｈ）およびラセミのＢＩＮＡＰ（６９ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ、５．５ｍｏｌ％）の溶液を、１５分間室温で、窒素下で撹拌した。ＫＯＨ（１．０１ｍＬ、１．０１ｍｍｏｌ、１．０Ｍの水溶液）を加え、得られた溶液を６分間室温で撹拌した。３，５−ジクロロフェニルボロン酸（１．１６ｇ、６．０１ｍｍｏｌ）を加え、６分間撹拌した後、この混合物を、１，４−ジオキサン（５ｍＬ）中の１−（３，４−ジメトキシベンジル）マレイミド（５００ｍｇ、２．０２ｍｍｏｌ）を含有するシュレンクフラスコに窒素下で移した。得られた混合物を５０℃で４０分間撹拌した。室温まで冷ました後、粗反応混合物を濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中に２０〜６０％の酢酸エチル）による精製により、生成物が黄色−白色固形物として得られた（６９０ｍｇ、８７％）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．５６（ｔ、Ｊ＝１．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．４４（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、２Ｈ）、６．８９（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、６．８５（ｄ、Ｊ＝１．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｄｄ、Ｊ＝１．９、８．２Ｈｚ、１Ｈ）、４．５４（ｓ、２Ｈ）、４．３３（ｄｄ、Ｊ＝５．６、９．４Ｈｚ、１Ｈ）、３．７４（ｓ、３Ｈ）、３．７２（ｓ、３Ｈ）、３．２０（ｄｄ、Ｊ＝９．４、１８．０Ｈｚ、１Ｈ）、２．９１−２．９９（ｍ、１Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ）、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝３９４．１、ｔＲ＝１．８１分。
【００９４】
３−（３，５−ジクロロフェニル）−１−（２，３−ジメトキシベンジル）ピロリジン
【００９５】
【化１３】
2011526919.tif 000018
ＴＨＦ（１．０Ｍ、２６．５ｍＬ、２６．５ｍｍｏｌ）中の水素化アルミニウムリチウムの溶液に、窒素下、５℃未満で、３−（３，５−ジクロロフェニル）−１−（２，３−ジメトキシベンジル）ピロリジン−２，５−ジオン（１．４９ｇ、３．７８ｍｍｏｌ）の溶液を２０分間かけてゆっくりと加えた。得られた溶液を室温で２０分間撹拌した。０℃まで冷ました後、水（５ｍＬ）を注意深く加えることによって反応混合物を反応停止させ、酢酸エチル（２０ｍＬ）で希釈し、セライトパッド上で濾過した。濾過ケークを追加の酢酸エチル（４００ｍＬ）ですすぎ、濾液を濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中に２０〜１００％の酢酸エチル）による精製により、生成物が黄色油状物として得られた（５１１ｍｇ、３７％）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．４０（ｓ、１Ｈ）、７．４０（ｄｄ、Ｊ＝１．９、１１．１Ｈｚ、２Ｈ）、６．９３（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．８７（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｄｄ、Ｊ＝１．７、８．１Ｈｚ、１Ｈ）、３．７４（ｓ、３Ｈ）、３．７２（ｓ、３Ｈ）、３．６２−３．６５（ｍ、１Ｈ）、３．４５−３．４８（ｍ、１Ｈ）、３．３０−３．３５（ｍ、１Ｈ）、２．８０（ｔｄ、Ｊ＝８．８、４．４Ｈｚ、１Ｈ）、２．７３−２．６９（ｍ、１Ｈ）、２．５５−２．４６（ｍ、２Ｈ）、２．３１−２．２２（ｍ、１Ｈ）、１．７７−１．６８（ｍ、１Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ）、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝３６６．１、ｔＲ＝１．３４分。
【００９６】
３−（３，５−ジクロロフェニル）ピロリジン
【００９７】
【化１４】
2011526919.tif 000019
無水ＤＣＭ（１５ｍＬ）中の３−（３，５−ジクロロフェニル）−１−（２，３−ジメトキシベンジル）ピロリジン（３９０ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（３２４ｍｇ、２．３４ｍｍｏｌ）の混合物に、０℃、窒素下で、１−クロロエチルクロロギ酸（０．２６ｍＬ、２．３４ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を２時間加熱還流した。室温まで冷ました後、反応混合物を濾過した。濾液を濃縮し、無水メタノール（１５ｍＬ）に溶かし、１時間加熱還流した。室温まで冷ました後、反応混合物を濃縮した。水（５０ｍＬ）およびジエチルエーテル（５０ｍＬ）を残渣に加え、相を分離し、水相を追加のエーテル（２×５０ｍＬ）で洗浄した。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍＬ）を水相に加え、その後、これをＤＣＭ（３×７５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、生成物が緑色油状物として得られた（１９２ｍｇ、８３％）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．３８（ｓ，１Ｈ）、７．３４（ｄ、Ｊ＝１．９Ｈｚ、２Ｈ）、３．７２（ｓ、１Ｈ）、３．２０−３．１０（ｍ、２Ｈ）、３．００−２．９４（ｍ、１Ｈ）、２．８７−２．８０（ｍ、１Ｈ）、２．６８−２．５９（ｍ、１Ｈ）、２．１７−２．０９（ｍ、１Ｈ）、１．６８−１．５９（ｍ、１Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ）、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝２１６．３、ｔＲ＝１．００分。
【００９８】
経路２
一般手順１
【００９９】
【化１５】
2011526919.tif 000020
水（１５ｍｌ）および濃ＨＣｌ（１２．２ｍＬ、１４８．５ｍｍｏｌ）中のアニリン（４５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、−５℃で、新しく調製した水（８ｍＬ）中の亜硝酸ナトリウム（４．０４ｇ、５９ｍｍｏｌ）の水溶液をゆっくりと１０分間かけて加えた。１５分間、−５℃で撹拌した後、新しく調製した水（１４ｍＬ）中のテトラフルオロホウ酸ナトリウム（６．９２ｇ、６３ｍｍｏｌ）の水溶液を一度に加えて、沈殿物を形成した。固形物を濾過し、冷（５℃）ジエチルエーテル（１０ｍＬ）で洗浄した。固形物をアセトン（１５ｍＬ）に溶かし、濾過した。濾液にジエチルエーテル（１５ｍＬ）を加えて、アレーンジアゾニウムテトラフルオロボレートを沈殿させた。固形物を濾過し、冷（５℃）ジエチルエーテル（５ｍＬ）で洗浄し、その後、空気乾燥させて、生成物が白色固形物として提供された。
【０１００】
４−クロロ−３−メチルベンゼンジアゾニウムテトラフルオロボレート
【０１０１】
【化１６】
2011526919.tif 000021
一般手順１に従って合成した。水（１５ｍＬ）および濃ＨＣｌ（９．５ｍＬ、１１６．５ｍｍｏｌ）中の４−クロロ−３−メチルアニリン（５ｇ、３５．３ｍｍｏｌ）に、−５℃で、新しく調製した水（８ｍＬ）中の亜硝酸ナトリウム（３．２ｇ、４５．９ｍｍｏｌ）の水溶液をゆっくりと１０分間かけて加えた。１５分間−５℃で撹拌した後、新しく調製した水（１４ｍＬ）中のテトラフルオロホウ酸ナトリウム（５．４ｇ、４９．４ｍｍｏｌ）の水溶液を一度に加えて、沈殿物が形成された。固形物を濾過し、冷（５℃）ジエチルエーテル（１０ｍＬ）で洗浄した。固形物をアセトン（１５ｍＬ）に溶かし、濾過した。濾液にジエチルエーテル（１５ｍＬ）を加えて、アレーンジアゾニウムテトラフルオロボレートを沈殿させた。固形物を濾過し、冷（５℃）ジエチルエーテル（５ｍＬ）で洗浄し、その後、終夜空気乾燥させて、４−クロロ−３−メチルベンゼンジアゾニウムテトラフルオロボレート（８．０７ｇ、３３．６ｍｍｏｌ、９５％の収率）が黄褐色固形物として提供された。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．６８（ｄ、Ｊ＝２．２Ｈｚ、１Ｈ）、８．５６（ｄｄ、Ｊ＝２．４、８．８Ｈｚ、１Ｈ）、８．１０（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）および３．４７（ｓ、３Ｈ）ｐｐｍ。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ）、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝１２５．０、ｔＲ＝０．２４分。
【０１０２】
一般手順２
【０１０３】
【化１７】
2011526919.tif 000022
メタノール（１００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−カルボキシレート（１２ｍｍｏｌ）および酢酸パラジウム（ＩＩ）（５〜１０ｍｏｌ％）の撹拌溶液に、Ｎ２下、５℃（砕氷／水浴）で、アリールジアゾニウムテトラフルオロボレート（１〜１．５当量）を固形物として加えた。得られた暗色溶液を室温まで温め、その後、セライトプラグを通して濾過し、濾過ケークを酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾液を酢酸エチル（１５０ｍＬ）でさらに希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２×１５０ｍＬ）、ブライン（１５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮して、粗生成物として使用したか、またはシリカゲル上に吸収させ、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中に１〜１０％の酢酸エチル）によって精製した。
【０１０４】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−クロロ−３−メチルフェニル）−２−メトキシピロリジン−１−カルボキシレート
【０１０５】
【化１８】
2011526919.tif 000023
一般手順２に従って合成した。メタノール（７５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−カルボキシレート（２．５ｇ、１４．８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、Ｎ２下、室温で、４−クロロ−３−メチルベンゼンジアゾニウムテトラフルオロボレート（５．３ｇ、２２．２ｍｍｏｌ）を加え、次いで酢酸パラジウム（ＩＩ）（３３６ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ）を加えた。得られた溶液を室温で１時間撹拌し、酢酸エチル（３７５ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１５０ｍＬ）で分配した。有機層を除去し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１５０ｍＬ）、ブライン（１５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣を真空下で乾燥させて、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−クロロ−３−メチルフェニル）−２−メトキシピロリジン−１−カルボキシレート（４．２５ｇ、１３．０ｍｍｏｌ、８８％の収率）が茶色油状物として得られた。粗生成物ををいかなる追加の精製もなしに次の反応ステップで使用した。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．３５−７．２６（ｍ、２Ｈ）、７．１６（ｄｄ、Ｊ＝１．９、８．２Ｈｚ、１Ｈ）、５．２０−５．０５（ｍ、１Ｈ）、３．７０−３．６３（ｍ、１Ｈ）、３．５４−３．４５（ｍ、１Ｈ）、３．２８（ｓ、３Ｈ）、３．２１−３．１０（ｍ、１Ｈ）、２．３０（ｓ、３Ｈ）、２．１０−１．９８（ｍ、２Ｈ）および１．４７（ｓ、９Ｈ）ｐｐｍ。
【０１０６】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（３，５−ジクロロフェニル）−２−メトキシピロリジン−１−カルボキシレート
【０１０７】
【化１９】
2011526919.tif 000024
一般手順２に従って合成した。ＭｅＯＨ（３００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−カルボキシレート（１０．０ｇ、０．０５９ｍｏｌ）および酢酸パラジウム（ＩＩ）（０．６７５ｇ、３．０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、Ｎ２下、５℃（砕氷／水浴）で、３，５−ジクロロフェニルジアゾニウムテトラフルオロボレート（１７．７２ｇ、０．０６８ｍｏｌ）を固形物として３ｇの部分で６０分間かけて加えた。得られた暗色溶液を室温まで温め、その後、セライトプラグを通して濾過し、濾過ケークを酢酸エチル（５００ｍＬ）で洗浄した。濾液を酢酸エチル（５００ｍＬ）でさらに希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２×５００ｍＬ）、ブライン（５００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、残渣を一定重量まで真空下でさらに乾燥させて、２２ｇの暗色油状物が粗生成物としてが提供された。物質をシリカゲル上に吸収させ、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中に１〜１０％の酢酸エチル）によって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル−４−（３，５−ジクロロフェニル）−２−メトキシピロリジン−１−カルボキシレート（１６．３７ｇ、０．０４７ｍｏｌ、８０％の収率）が透明な赤色っぽい油状物としてとして得られた。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．３１−７．２２（ｍ、１Ｈ）、７．１４（ｓ、２Ｈ）、５．３５−５．１０（ｍ、１Ｈ）、３．８１（ｄｄ、Ｊ＝８．５、１０．３Ｈｚ、１Ｈ）、３．７２−３．６０（ｍ、１Ｈ）、３．４５−３．３９（ｍ、３Ｈ）、３．３１−３．２２（ｍ、１Ｈ）、２．２５（ｄｄ、Ｊ＝５．９、１２．５Ｈｚ、１Ｈ）、１．９６（ｔｄ、Ｊ＝１２．５、５．８Ｈｚ、１Ｈ）および１．５１（ｓ、９Ｈ）ｐｐｍ。
【０１０８】
一般手順３
【０１０９】
【化２０】
2011526919.tif 000025
酢酸（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（アリール）−２−メトキシピロリジン−１−カルボキシレート（１２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、Ｎ２下、０℃で、水素化ホウ素ナトリウム（２〜４当量）を少量ずつ２０分間かけて加えた。得られた溶液を室温まで温め、その後、室温で１時間撹拌した。反応混合物を２ＭのＮａＯＨ水溶液（５００ｍＬ）中にゆっくりと注ぎ、酢酸エチル（３×２５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、セライトパッドを通して濾過し、その後、減圧下で濃縮して、生成物が得られた。
【０１１０】
ｔｅｒｔ−ブチル３−（４−クロロ−３−メチルフェニル）ピロリジン−１−カルボキシレート
【０１１１】
【化２１】
2011526919.tif 000026
一般手順３に従って合成した。酢酸（５０ｍＬ）中の粗ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−クロロ−３−メチルフェニル）−２−メトキシピロリジン−１−カルボキシレート（４．２５ｇ、１３．０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、Ｎ２下、０℃で、水素化ホウ素ナトリウム（２．２ｇ、５８．７ｍｍｏｌ）を少量ずつ２０分間かけて加えた。得られた溶液を室温まで温め、その後、室温で２時間撹拌した。反応混合物をゆっくりと飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２５０ｍＬ）中に注ぎ、酢酸エチル（３×２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル−３−（４−クロロ−３−メチルフェニル）ピロリジン−１−カルボキシレート（３．７５ｇ、１２．６７ｍｍｏｌ、９７％の収率）が茶色油状物として得られた。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．３３（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．２８（ｓ、１Ｈ）、７．１４−７．０３（ｍ、１Ｈ）、３．６８（ｔ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．４８−３．４２（ｍ、１Ｈ）、３．３２−３．１０（ｍ、３Ｈ）、２．３０（ｓ、３Ｈ）、２．１７−２．１５（ｍ、１Ｈ）、１．７８−１．７３（ｍ、１Ｈ）および１．４２（ｓ、９Ｈ）ｐｐｍ。
【０１１２】
ｔｅｒｔ−ブチル３−（３，５−ジクロロフェニル）ピロリジン−１−カルボキシレート
【０１１３】
【化２２】
2011526919.tif 000027
一般手順３に従って合成した。酢酸（２００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（３，５−ジクロロフェニル）−２−メトキシピロリジン−１−カルボキシレート（２０ｇ、０．０５８ｍｏｌ）の撹拌溶液に、Ｎ２下、０℃で、水素化ホウ素ナトリウム（４．３７ｇ、０．１１６ｍｏｌ）を少量ずつ２０分間かけて加えた。得られた溶液を室温まで温め、その後、室温で１時間撹拌した。反応混合物をゆっくりと２ＭのＮａＯＨ水溶液（５００ｍＬ）中に注ぎ、酢酸エチル（３×５００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、セライトパッドを通して濾過し、その後、減圧下で濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル−３−（３，５−ジクロロフェニル）ピロリジン−１−カルボキシレート（１８．３ｇ、０．０５８ｍｏｌ、１００％の収率）が茶色油状物としてとして得られた。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．２８−７．２４（ｍ、１Ｈ）、７．１３（ｄ、Ｊ＝１．３Ｈｚ、２Ｈ）、３．８０−３．７６（ｍ、１Ｈ）、３．６５（ｔ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、３．５６（ｔ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、３．４６−３．３９（ｍ、１Ｈ）、３．３５−３．２３（ｍ、１Ｈ）、２．２７（ｄ、Ｊ＝４．３Ｈｚ、１Ｈ）、２．０１−１．９３（ｍ、１Ｈ）および１．５１（ｓ、９Ｈ）ｐｐｍ。
【０１１４】
一般手順４
【０１１５】
【化２３】
2011526919.tif 000028
１，４−ジオキサン（４Ｍ、１５ｍＬ、０．０６０ｍｏｌ、５当量）中の塩化水素の溶液をｔｅｒｔ−ブチル−３−（アリール）ピロリジン−１−カルボキシレート（０．０１２ｍｏｌ）に加え、得られた溶液を室温で１時間撹拌した。反応混合物をゆっくりと飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１５０ｍＬ）中に注ぎ、酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中に１〜２５％のＭｅＯＨ）による精製により、生成物が得られた。
【０１１６】
３−（４−クロロ−３−メチルフェニル）ピロリジン
【０１１７】
【化２４】
2011526919.tif 000029
一般手順４に従って合成した。１，４−ジオキサン（４Ｍ、１４．７ｍＬ、５８．７ｍｍｏｌ）中のＨＣｌの溶液をｔｅｒｔ−ブチル−３−（４−クロロ−３−メチルフェニル）−ピロリジン−１−カルボキシレート（３．７５ｇ、１２．７ｍｍｏｌ）に加え、得られた溶液を室温で１時間撹拌した。反応混合物をゆっくりと飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（３００ｍＬ）中に注ぎ、酢酸エチル（３×２５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮して、（５ｇ）の茶色油状物が粗３−（４−クロロ−３−メチルフェニル）ピロリジンとして提供された。粗油状物をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン中に１〜２５％のＭｅＯＨ）によって精製して、３−（４−クロロ−３−メチルフェニル）ピロリジン（２．１７ｇ、１１．１ｍｍｏｌ、８５％の収率）が琥珀色油状物としてとして得られた。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．３０（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．２６（ｓ、１Ｈ）、７．１７−７．０４（ｍ、１Ｈ）、４．６３（ｓ、１Ｈ）、３．７２−３．６６（ｍ、１Ｈ）、３．５２−３．４２（ｍ、１Ｈ）、３．２３−３．１８（ｍ、１Ｈ）、３．１０（ｔ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）、２．６９−２．６２（ｍ、１Ｈ）、２．２９（ｓ、３Ｈ）、２．２２（ｄ、Ｊ＝２．５Ｈｚ、１Ｈ）および１．６９−１．６５（ｍ、１Ｈ）ｐｐｍ。
【０１１８】
３−（３，５−ジクロロフェニル）ピロリジンオキサレート
【０１１９】
【化２５】
2011526919.tif 000030
一般手順４に従って合成した。１，４−ジオキサン（４Ｍ、３２．５ｍＬ、０．１３０ｍｏｌ）中のＨＣｌの溶液をｔｅｒｔ−ブチル−３−（３，５−ジクロロフェニル）ピロリジン−１−カルボキシレート（１８．３ｇ、０．０５８ｍｏｌ）に加え、得られた溶液を室温で１時間撹拌した。反応混合物をゆっくりと２ＭのＮａＯＨ水溶液（５００ｍＬ）中に注ぎ、酢酸エチル（３×５００ｍＬ）で抽出した。その後、合わせた有機抽出物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮して、粗３−（３，５−ジクロロフェニル）ピロリジン（１２．４８ｇ、０．０５８ｍｏｌ、１００％の収率））が茶色油状物として提供された。粗物質をＭｅＯＨ（３９ｍＬ）に溶かし、シュウ酸（５．２ｇ、０．０５８ｍｏｌ）で一度に処理した。得られた溶液を室温で３０分間静置し、沈殿した固形物を濾取し、ジエチルエーテル（２×５０ｍＬ）で洗浄し、その後、一定重量まで真空下で乾燥させて、３−（３，５−ジクロロフェニル）ピロリジンオキサレート（１２．４ｇ、０．０４１ｍｏｌ、７０％の収率）がオフホワイト色固形物としてとして提供された。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．５２（ｔ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．４７（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、２Ｈ）、３．６２（ｄｄ、Ｊ＝８．２、１１．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．５３−３．３０（ｍ、２Ｈ）、３．２５−３．０８（ｍ、２Ｈ）、２．４０−２．３３（ｍ、１Ｈ）および２．００−１．９０（ｍ、１Ｈ）ｐｐｍ。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ）、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝２１６．３、ｔＲ＝１．００分。
【０１２０】
（Ｒ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）ピロリジン（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセテート
【０１２１】
【化２６】
2011526919.tif 000031
３−（３，５−ジクロロフェニル）ピロリジンオキサレート（４７１．６ｇ、１．５４ｍｏｌ）を２ＭのＮａＯＨ水溶液（１０００ｍＬ）に溶かし、酢酸エチル（３×３５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で蒸発させて、（Ｒ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）ピロリジンの遊離塩基（３２５．４ｇ、９８％）が透明な琥珀色油状物としてとして提供された。５Ｌの丸底フラスコに機械撹拌子、加熱マントル、Ｊ−Ｋｅｍ温度プローブ／制御装置、水冷却の還流冷却器および窒素の入口／出口を取り付けた。容器に３−（３，５−ジクロロフェニル）ピロリジン（１００ｇ、０．４６ｍｏｌ）および２−プロパノール（８００ｍＬ、８ｍＬ／ｇ）を窒素雰囲気下、室温で満たした。（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−フェニル酢酸（７０．４ｇ、０．４６ｍｏｌ）を固形物として一度に加え、得られた溶液を５分間撹拌した後、固形物が形成され始めた。懸濁液を８５℃で５分間加熱し、その後、ゆっくりと室温まで冷ました。固形物を濾過し、２−プロパノール（２×２５０ｍＬ）で洗浄し、高真空下で乾燥させた。２−プロパノール（１ｍＬ／ｇ）中でのこの塩の繰り返しの再結晶化（８×）により、（Ｒ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）ピロリジン（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセテート（３０ｇ、１８％）が＞９６％のｅｅで得られた。Ｘ線分析に基づいて絶対配置を割り当てた。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．５０（ｔ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．４２−７．３８（ｍ、５Ｈ）、７．２６−７．２２（ｍ、２Ｈ）、７．１６（ｄｄ、Ｊ＝５．２、９．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．６１（ｓ、１Ｈ）、３．５１（ｄｄ、Ｊ＝８．２、１０．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．４４−３．２７（ｍ、２Ｈ）、３．１５−３．０１（ｍ、３Ｈ）、２．５０（ｔ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、２．３２−２．２４（ｍ、１Ｈ）および１．９１−１．８１（ｍ、１Ｈ）ｐｐｍ。Ｃｈｉｒａｌ  ＨＰＬＣ（Ａｓｔｅｃ  Ｃｈｉｒｏｂｉｏｔｉｃ、（２５ｃｍ×４．６ｍｍ）、１００％のＭｅＯＨ（０．１％のＴＥＡ、０．１％のＨＯＡｃ）、１．２ｍＬ／分）：ｔＲ＝３３．９分（Ｓ）、３４．９分。（Ｒ）。
【０１２２】
経路３
（Ｓ）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）ジヒドロフラン−２（３Ｈ）−オン
【０１２３】
【化２７】
2011526919.tif 000032
（Ｓ）−３−ヒドロキシジヒドロフラン−２（３Ｈ）−オン（５．２４ｇ、５１．４ｍｍｏｌ）、イミダゾール（３．８ｇ、５６ｍｍｏｌ）、およびＴＨＦ（７０ｍＬ）の撹拌溶液に、０℃、Ｎ２下で、ｔ−ブチルジフェニルシリルクロリド（１１．８ｇ、４３ｍｍｏｌ）を滴下した。混合物を０℃で６時間撹拌した。ＴＢＭＥ（１５０ｍＬ）を加え、溶液を水（２×１００ｍＬ）、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発乾固して、（Ｓ）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）ジヒドロフラン−２（３Ｈ）−オン（１３．９ｇ、９５％）がわずかに黄色の油状物として得られた。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．８４−．８２（ｍ、２Ｈ）、７．７３−７．７１（ｍ、２Ｈ）、７．５０−７．４０（ｍ、６Ｈ）、４．４１−４．３１（ｍ、２Ｈ）、４．０６−４．００（ｍ、１Ｈ）、２．２９−２．１９（ｍ、２Ｈ）、１．１０（ｓ、９Ｈ）。
【０１２４】
一般手順５
【０１２５】
【化２８】
2011526919.tif 000033
アニリン（１．３ｍｍｏｌ）およびＤＣＭ（５．５ｍＬ）の撹拌懸濁液に、Ｎ２下、０℃で、ヘキサン（２．０Ｍ、１．３ｍｍｏｌ）中のトリメチルアルミニウムの溶液を２０分間かけて滴下した。溶液を周囲温度で３０分間撹拌した。溶液を０℃まで冷却し、次いでＣＨ２Ｃｌ２（１．０ｍＬ）中の３−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）ジヒドロフラン−２（３Ｈ）−オン（１ｍｍｏｌ）を３０分間かけて滴下した。溶液を周囲温度で１９時間撹拌した。溶液を０℃まで冷却し、１．０ＭのＨＣｌ水溶液を滴下した。有機部分を１．０ＭのＨＣｌ水溶液（２×１．０ｍＬ）で洗浄し、減圧下で蒸発乾固した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、所望のアミドが得られた。
【０１２６】
（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）−４−ヒドロキシ−Ｎ−［（４−（Ｎ−チアゾール−２−イルスルファモイル）フェニル）］ブタンアミド
【０１２７】
【化２９】
2011526919.tif 000034
一般手順５に従って合成した。ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中のスルファチアゾール（１１．２ｇ、４４ｍｍｏｌ）、ＣＨ２Ｃｌ２（１５０ｍＬ）、トリメチルアルミニウム（ヘキサン中に２．０Ｍ、２２ｍＬ、４４ｍｍｏｌ）、および（Ｓ）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）ジヒドロフラン−２（３Ｈ）−オン（１２．６ｇ、３７ｍｍｏｌ）を用いて反応を設定した。シリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中に１０％のＭｅＯＨ）による精製により、所望のアミドが白色固形物として得られた（２２ｇ、８４％の収率）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．７３（ｓ、１Ｈ）、７．７６（ｄｄ、Ｊ＝１．８、７．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．７４（ｓ、１Ｈ）、７．５９−７．５３（ｍ、４Ｈ）、７．４４−７．２８（ｍ、８Ｈ）、７．０９（ｄ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．４６（ｄ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．３４（ｄｄ、Ｊ＝４．１、６．７Ｈｚ、１Ｈ）、３．６４−３．５９（ｍ、１Ｈ）、３．５４（ｄｄ、Ｊ＝６．１、１１．４Ｈｚ、１Ｈ）、１．９９−１．９１（ｍ、１Ｈ）、１．８１−１．７０（ｍ、１Ｈ）、１．１０（ｓ、９Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ））、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝５９６．５、ｔＲ＝１．９３分。
【０１２８】
一般手順６
【０１２９】
【化３０】
2011526919.tif 000035
方法Ａ
ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−アゾジカルボキシレート（３．０当量、３．０ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（２．０ｍＬ）の撹拌溶液に、Ｎ２下、０℃で、トリブチルホスフィン（３．０当量、３．０ｍｍｏｌ）を５分間かけて滴下した。無色の溶液を０℃で３０分間撹拌した。ＴＨＦ（０．６０ｍＬ）中のアミドアルコール（１．０当量、１．０ｍｍｏｌ）の溶液を５分間かけて滴下した。溶液を周囲温度で２時間撹拌した。この溶液にＨ２Ｏ（４０μＬ）を加え、溶液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、所望のラクタムが得られた。
【０１３０】
方法Ｂ
無水ＤＣＭ（４．０ｍＬ）中のアルコール（１．０当量、１．０ｍｍｏｌ）を撹拌し、０℃まで冷却した。これに無水ＤＣＭ（０．９０ｍＬ）中のＰＰｈ３（１．５当量、１．５ｍｍｏｌ）の溶液をゆっくりと加え、次いで無水ＤＣＭ（０．９０ｍＬ）中のＣＢｒ４（１．５当量、１．５ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。ＣＢｒ４の添加が完了した後、反応を０℃で５分間維持した。氷浴を取り外し、反応を室温で４時間撹拌した。反応をＤＣＭで希釈し、有機層を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２×）およびブライン（１×）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（０〜１００％のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、ブロマイドが淡黄色固形物として提供された。クロロホルム（３．５ｍＬ）中のブロマイド（１．０当量、１．０ｍｍｏｌ）の溶液にＤＢＵ（２．０当量、２．０ｍｍｏｌ）を加え、室温、Ｎ２雰囲気下で１時間撹拌した。反応をＤＣＭで希釈し、有機層を１ＮのＨＣｌ水溶液（３×）、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２×）およびブライン（１×）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、所望のラクタムが黄色固形物として提供された。
【０１３１】
（Ｓ）−４−（３−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）−２−オキソピロリジン−１−イル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミド
【０１３２】
【化３１】
2011526919.tif 000036
一般手順６、方法Ａに従って合成した。ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−アゾジカルボキシレート（１．８１ｇ、７．８８ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（１５ｍＬ）、トリブチルホスフィン（１．５９ｇ、７．８８ｍｍｏｌ）、および（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）−４−ヒドロキシ−Ｎ−［（４−（Ｎ−チアゾール−２−イルスルファモイル）フェニル）］ブタンアミド（１．５６ｇ、２．６３ｍｍｏｌ）を用いて反応を設定した。シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中に４０％のＥｔＯＡｃ）による精製により、所望のラクタムが白色固形物として得られた（１．３ｇ、２．３ｍｍｏｌ、８６％の収率）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８３−７．７６（ｍ、４Ｈ）、７．７０（ｄｄ、Ｊ＝１．９、７．０Ｈｚ、２Ｈ）、７．６５（ｄｄ、Ｊ＝１．５、８．０Ｈｚ、２Ｈ）、７．３９−７．２９（ｍ、６Ｈ）、７．０６（ｄ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．４４（ｄ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．３５（ｄｄ、Ｊ＝７．９、９．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．６７−３．６２（ｍ、１Ｈ）、３．４８−３．４２（ｍ、１Ｈ）、２．１８−１．９８（ｍ、２Ｈ）  １．１１（ｓ、９Ｈ）。
【０１３３】
一般手順７
【０１３４】
【化３２】
2011526919.tif 000037
ＴＨＦ（０．５〜１Ｍ）中のＴＢＤＰＳエーテル（１当量）の溶液に、Ｎ２下で、ＴＨＦ（１Ｍ、４当量）中のフッ化テトラブチルアンモニウムの溶液を加えた。添加が完了した後、混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を水中に注ぎ、ＣＨ２Ｃｌ２（２×）で抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーによる精製によって所望の生成物が得られた。
【０１３５】
（Ｓ）−４−（３−ヒドロキシ−２−オキソピロリジン−１−イル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）］ベンゼンスルホンアミド
【０１３６】
【化３３】
2011526919.tif 000038
一般手順７に従って合成した。ＴＨＦ（３．９ｍＬ）中の（Ｓ）−４−［（３−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）−２−オキソピロリジン−１−イル−Ｎ−（チアゾール−２−イル）］ベンゼン−スルホンアミド（１．３ｇ、２．２５ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ２下で、ＴＨＦ（１Ｍ、４．５ｍＬ、４．５ｍｍｏｌ）中のフッ化テトラブチルアンモニウムの溶液を加えた。添加が完了した後、混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を水中に注ぎ、ＣＨ２Ｃｌ２（２×５０ｍＬ）で抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中に２〜１０％のＭｅＯＨ）による精製により、  （Ｓ）−４−（３−ヒドロキシ−２−オキソピロリジン−１−イル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミドが得られた（０．５８ｇ、７６％）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８５（ｄｄ、Ｊ＝２．１、６．９Ｈｚ、４Ｈ）、７．２５（ｄ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．８２（ｄ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、１Ｈ）、５．８３（ｄ、Ｊ＝５．９Ｈｚ、１Ｈ）、４．３２（ｄ、Ｊ＝５．３Ｈｚ、１Ｈ）、３．７７（ｄｄ、Ｊ＝１．９、９．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．７１−３．６９（ｍ、１Ｈ）、２．４１−２．３８（ｍ、１Ｈ）、１．８４（ｄｄ、Ｊ＝９．２、１２．３Ｈｚ、１Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ））、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝３４０．０、ｔＲ＝０．５４分。
【０１３７】
一般手順８
【０１３８】
【化３４】
2011526919.tif 000039
ＤＣＭまたはＤＭＦ（０．６Ｍ）中のスルホンアミド（１当量）の撹拌溶液に、Ｎ２下、５℃（氷浴）で、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１当量）を加えた。この溶液にスルホニルクロリド（１当量）を少量ずつ１０分間かけて加えた。溶液を周囲温度で２０分間撹拌した。この溶液にＭｅＯＨを加えた。混合物を５℃まで冷却し、３０分間撹拌した。得られた沈殿物を濾過し、ＭｅＯＨで洗浄し、真空乾燥させて、所望のビススルホンアミドが得られた。
【０１３９】
（Ｓ）−４−（３−ヒドロキシ−２−オキソピロリジン−１−イル）−Ｎ−（４−メトキシフェニルスルホニル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミド
【０１４０】
【化３５】
2011526919.tif 000040
一般手順８に従って合成した。ＤＭＦ（０．７５ｍＬ）中の（Ｓ）−４−（３−ヒドロキシ−２−オキソピロリジン−１−イル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミド（１５０ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）、４−メトキシベンゼンスルホニルクロリド（９１ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（５７ｍｇ、７７μＬ、０．４４ｍｍｏｌ）の溶液を室温で１時間撹拌した。反応混合物をＭｅＯＨ（１ｍＬ）および水（１０ｍＬ）で希釈し、得られた沈殿した固形物を真空濾過によって収集した。沈殿物を水、次いで冷Ｅｔ２Ｏで洗浄しして、生成物（Ｓ）−４−（３−ヒドロキシ−２−オキソピロリジン−１−イル）−Ｎ−（４−メトキシフェニルスルホニル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミド（２００ｍｇ、０．３９２５ｍｍｏｌ）が白色固形物として得られた。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８６−７．８０（ｍ、４Ｈ）、７．７０（ｄ、Ｊ＝５．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．６０（ｄ、Ｊ＝９．０Ｈｚ、２Ｈ）、７．０３−６．９８（ｍ、３Ｈ）、５．８８（ｄ、Ｊ＝５．９Ｈｚ、１Ｈ）、４．３８−４．３２（ｍ、１Ｈ）、３．８５−３．７７（ｍ、１Ｈ）、３．８１（ｓ、３Ｈ）、３．７０（ｔｄ、Ｊ＝９．４、５．４Ｈｚ、１Ｈ）、２．４８−２．４１（ｍ、１Ｈ）および１．９２−１．８２（ｍ、１Ｈ）ｐｐｍ。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ））、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝５１０．０、ｔＲ＝１．２２分。
【０１４１】
一般手順９
【０１４２】
【化３６】
2011526919.tif 000041
ＤＣＭ（３ｍＬ）中のアルコール（１．０ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、−２０〜−４０℃、窒素下で、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３．０ｍｍｏｌ、３当量）を加え、次いでトリフルオロメタンスルホン酸無水物（１．２〜１．５ｍｍｏｌ、１．２〜１．５当量）を加えた。温度を−２０〜−４０℃に保って反応を１時間撹拌した。ジクロロメタン（１．５ｍＬ）中のアミン（１〜１．５ｍｍｏｌ、１〜１．５当量）の溶液を加えた。ＬＣ／ＭＳ分析に基づいて完全な変換が達成されるまで反応混合物をこの温度に保った。モルホリン（２．０ｍｍｏｌ、２当量）をこの温度で滴下し、反応混合物をゆっくりと室温まで温め、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２５ｍＬ）中に注いだ。相を分離し、水相をＤＣＭ（２×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中に２〜５％のＭｅＯＨ）による精製により、生成物が得られた。
【０１４３】
４−［（３Ｓ、３’Ｒ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−２’−オキソ−１，３’−ビピロリジン−１’−イル）］−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミドおよび４−［（３Ｒ、３’Ｒ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−２’−オキソ−１，３’−ビピロリジン−１’−イル）］−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミド
【０１４４】
【化３７】
2011526919.tif 000042
一般手順９に従って合成した。ＤＣＭ（３ｍＬ）中の（Ｓ）−４−（３−ヒドロキシ−２−オキソピロリジン−１−イル）−Ｎ−（４−メトキシフェニルスルホニル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミド（１５０ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）の懸濁液に、窒素下、−２０〜−３０℃で、ＤＩＥＡ（１１４ｍｇ、１５４μＬ、０．８８ｍｍｏｌ）を加え、次いでトリフル酸無水物（１２５ｍｇ、７４μＬ、０．４４ｍｍｏｌ）を滴下した。３０分間この温度で撹拌した後、ＤＣＭ（１ｍＬ）中の３−（３，５−ジクロロフェニル）ピロリジン（６４ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）の溶液を滴下した。反応混合物を−２０〜−３０℃で１時間撹拌し続けた。モルホリン（５１ｍｇ、５１μＬ、０．５９ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をさらに２０分間撹拌した。反応混合物を室温まで温め、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２５ｍＬ）中に注ぎ、相を分離し、水相をＤＣＭ（２×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中に０〜５％のＭｅＯＨ）による精製により、生成物がオフホワイト色固形物として得られた（６３ｍｇ、４０％）。ＳＦＣによるキラル分離（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＳ−Ｈカラム（２×２５ｃｍ）、５０％のメタノール（０．１％のＤＥＡ）／ＣＯ２、５０ｍＬ／分））により、＞９８％ｄｅの両ジアステレオマーを得た。Ｃ−３（ピロリジン）での絶対配置は、鏡像異性的に濃縮された（Ｓ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）ピロリジンを用いた独立した合成に基づいて割り当て、これにより第２のピークが溶出された（ＳＦＣ−分析）。
【０１４５】
（３Ｒ，３’Ｒ）：１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８４（ｄ、Ｊ＝９．０Ｈｚ、２Ｈ）、７．８０（ｄ、Ｊ＝９．０Ｈｚ、２Ｈ）、７．４３−７．３８（ｍ、３Ｈ）、７．２５（ｄ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．８２（ｄ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、１Ｈ）、３．８４−３．７３（ｍ、２Ｈ）、３．６５−３．６０（ｍ、１Ｈ）、３．３９−３．２５（ｍ、１Ｈ）、３．１４（ｔｄ、Ｊ＝８．６、４．３Ｈｚ、１Ｈ）、２．７４（ｔ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、２．６５（ｄｄ、Ｊ＝６．４、８．６Ｈｚ、１Ｈ）、２．３２−２．２０（ｍ、２Ｈ）、２．１２−１．９９（ｍ、１Ｈ）および１．７９−１．７１（ｍ、１Ｈ）ｐｐｍ。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ））、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝５３７．３、ｔＲ＝１．３０分。ＳＦＣ（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＳ−Ｈ、（０．４６×２５ｃｍ）、５０％のメタノール（０．１％のＤＥＡ）／ＣＯ２、３ｍＬ／分）：ｔＲ＝６．６０分。
【０１４６】
（３Ｓ，３’Ｒ）：１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８４−７．７７（ｍ、４Ｈ）、７．４３−７．３７（ｍ、３Ｈ）、７．２４（ｄ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｄ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、１Ｈ）、３．８３−３．７２（ｍ、２Ｈ）、３．５８（ｔ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．０７−２．９６（ｍ、３Ｈ）、２．８７（ｔｄ、Ｊ＝８．６、４．３Ｈｚ、１Ｈ）、２．３４−２．２０（ｍ、２Ｈ）、２．１１−２．０２（ｍ、１Ｈ）および１．７４（ｄｔ、Ｊ＝１９．９、６．９Ｈｚ、１Ｈ）ｐｐｍ。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ））、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝５３７．３、ｔＲ＝１．３０分。ＳＦＣ（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＳ−Ｈ、（０．４６×２５ｃｍ）、５０％のメタノール（０．１％のＤＥＡ）／ＣＯ２、３ｍＬ／分）：ｔＲ＝７．２分。
【０１４７】
経路４
（Ｒ）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）ジヒドロフラン−２（３Ｈ）−オン
【０１４８】
【化３８】
2011526919.tif 000043
（Ｒ）−３−ヒドロキシジヒドロフラン−２（３Ｈ）−オン（４１．０ｇ、４０１ｍｍｏｌ）、イミダゾール（６１．４ｇ、９２０ｍｍｏｌ）、およびＣＨ２Ｃｌ２（１７５ｍＬ）の撹拌溶液に、０℃、Ｎ２下で、ｔ−ブチルジフェニルシリルクロリド（１２９ｍＬ、１３８ｇ、４９７ｍｍｏｌ）を３０分間かけて滴下した。混合物を室温で１９時間撹拌した。混合物をＣＨ２Ｃｌ２（７００ｍＬ）とＨ２Ｏ（１００ｍＬ）との間で分配した。有機部分を減圧下で濃縮乾固した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中に５０％のＥｔＯＡｃ）によって精製して、（Ｒ）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）ジヒドロフラン−２（３Ｈ）−オン（１２７ｇ、３７３ｍｍｏｌ、９３％の収率）が白色固形物としてとして得られた。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．８４−７．８２（ｍ、２Ｈ）、７．７３−７．７１（ｍ、２Ｈ）、７．５０−７．４０（ｍ、６Ｈ）、４．４１−４．３１（ｍ、２Ｈ）、４．０６−４．００（ｍ、１Ｈ）、２．２９−２．１９（ｍ、２Ｈ）、１．１０（ｓ、９Ｈ）。
【０１４９】
（Ｒ）−２−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）−４−ヒドロキシ−Ｎ−フェニルブタンアミド
【０１５０】
【化３９】
2011526919.tif 000044
ＤＣＭ（１７ｍＬ）中のアニリン（３５６ｍｇ、３４８μＬ、３．８２ｍｍｏｌ）の溶液にトリメチルアルミニウム（２．０Ｍ、２．１ｍＬ、４．２ｍｍｏｌ）を滴下し、反応混合物を室温で４０分間撹拌した。ＤＣＭ（１２ｍＬ）中の（Ｒ）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）−ジヒドロフラン−２（３Ｈ）−オン（１．００ｇ、２．９４ｍｍｏｌ）の溶液を滴下し、反応混合物を室温で１６時間撹拌した。反応混合物を酒石酸カリウムナトリウムの飽和溶液中に注ぎ、１５分間撹拌した。層を分離し、水層をＤＣＭ（４×）で洗浄した。合わせた有機物を０．１ＭのＨＣｌ（２×）、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発乾固した。シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中に１０〜３０％のＥｔＯＡｃ）による精製により、（Ｒ）−２−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）−４−ヒドロキシ−Ｎ−フェニルブタンアミド（１．００ｇ、７８％）が得られた。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ））、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝４３４．７、ｔＲ＝２．１６分。
【０１５１】
（Ｒ）−３−（Ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）−１−フェニルピロリジン−２−オン
【０１５２】
【化４０】
2011526919.tif 000045
ＴＨＦ（１７．２５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルイミノカルバメート（２．４４ｇ、１０．６１ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で、ｎ−トリブチルホスフィン（２．１５ｇ、２．６４ｍＬ、１０．６１ｍｍｏｌ）を滴下し、冷却浴を取り外し、反応混合物を室温で２０分間撹拌した。その後、反応混合物を０℃まで冷却し、ＴＨＦ（１７．２５ｍＬ）中の（Ｒ）−２−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）−４−ヒドロキシ−Ｎ−フェニルブタンアミド（１．１５ｇ、２．６５ｍｍｏｌ）の溶液をゆっくりと加え、冷却浴を取り外し、反応混合物を室温で４５分間撹拌した。反応混合物を水中に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。合わせた有機物を水（２×）、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、蒸発乾固した。シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中に１〜１０％のＥｔＯＡｃ）による精製により、（Ｒ）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）−１−フェニルピロリジン−２−オンが油状物として得られた（１．１ｇ、９６％）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８１（ｄｄ、Ｊ＝１．５、７．７Ｈｚ、２Ｈ）、７．７２−７．６６（ｍ、４Ｈ）、７．５１−７．３６（ｍ、８Ｈ）、７．１５（ｍ、１Ｈ）、４．５１（ｄｄ、Ｊ＝８．１、９．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．７２−３．５９（ｍ、２Ｈ）、２．２６−２．２１（ｍ、１Ｈ）、２．０３−１．９８（ｍ、１Ｈ）および１．０６（ｓ、９Ｈ）ｐｐｍ。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ））、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝４１６．７、ｔＲ＝２．４０分。
【０１５３】
（Ｒ）−３−ヒドロキシ−１−フェニルピロリジン−２−オン
【０１５４】
【化４１】
2011526919.tif 000046
ＴＨＦ（８．６ｍＬ）中の（３Ｒ）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）−１−フェニルピロリジン−２−オン（２．８８ｇ、６．９３ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で、ＴＢＡＦ（ＴＨＦ中に１Ｍを１３．９ｍＬ、１３．８６ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、反応混合物を室温で３時間撹拌した。反応混合物を水中に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。合わせた有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発乾固した。シリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中に０〜１０％のＭｅＯＨ）によって精製して、（Ｒ）−３−ヒドロキシ−１−フェニルピロリジン−２−オンが白色固形物として得られた（０．９ｇ、７３％）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．６９（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、２Ｈ）、７．４０−７．３６（ｍ、２Ｈ）、７．１４（ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．７５（ｄ、Ｊ＝５．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．３３−４．２７（ｍ、１Ｈ）、３．７７−３．６６（ｍ、２Ｈ）、２．４４−２．３６（ｍ、１Ｈ）および１．８６−１．８１（ｍ、１Ｈ）ｐｐｍ。
【０１５５】
一般手順１０
【０１５６】
【化４２】
2011526919.tif 000047
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のアルコール（４．６４ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１１．５９ｍｍｏｌ）の溶液に、−２０℃で、トリフル酸無水物（５．５６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をこの温度で２０分間撹拌した。ＤＣＭ（６ｍＬ）中のピロリジン（３．８６ｍｍｏｌ）の溶液を加え、反応混合物を−２０℃で１時間撹拌した。反応混合物を水中に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。合わせた有機抽出物を水（２×）、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発乾固した。シリカゲルクロマトグラフィーによる精製により、所望の生成物が得られた。
【０１５７】
（３Ｒ，３’Ｓ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−１’−フェニル−１，３’−ビピロリジン−２’−オン
【０１５８】
【化４３】
2011526919.tif 000048
一般手順１０に従って合成した。ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の（Ｒ）−３−ヒドロキシ−１−フェニルピロリジン−２−オン（８２２ｍｇ、４．６４ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１．５０ｇ、２．０２ｍＬ、１１．５９ｍｍｏｌ）の溶液に、−２０℃で、トリフル酸無水物（１．５７ｇ、９３６μＬ、５．５６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をこの温度で２０分間撹拌した。ＤＣＭ（６ｍＬ）中の（Ｒ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）ピロリジン（８３５ｍｇ、３．８６ｍｍｏｌ）の溶液を加え、反応混合物を−２０℃で１時間撹拌した。反応混合物を水中に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。合わせた有機抽出物を水（２×）、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発乾固した。シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中に３０〜６０％のＥｔＯＡｃ）によって精製して、（３Ｒ，３’Ｓ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−１’−フェニル−１，３’−ビピロリジン−２’−オンが静置後に固化した油状物として得られた（０．９ｇ、６２％）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．６７（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、２Ｈ）、７．４２−７．３６（ｍ、５Ｈ）、７．１５（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、１Ｈ）、３．７７（ｍ、２Ｈ）、３．５２（ｔ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、１Ｈ）、３．０５−２．９８（ｍ、４Ｈ）、２．８８（ｍ、１Ｈ）、２．３１−２．２３（ｍ、２Ｈ）、２．０６（ｍ、１Ｈ）および１．７７−１．７４（ｍ、１Ｈ）ｐｐｍ。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ）、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝３７５．５、ｔＲ＝１．３５分。
【０１５９】
一般手順１１
【０１６０】
【化４４】
2011526919.tif 000049
ＤＣＥ（１０ｍＬ）中のピロリジン（２．４０ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で、クロロスルホン酸（１２．０ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。その後、反応混合物を０℃で３０分間、室温で１時間および５０℃で１時間撹拌した。この時点で、さらなるクロロスルホン酸（２．４０ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を５０℃で１時間撹拌し、その後、反応混合物を７０℃まで１０分間加熱し、室温まで冷却し、氷水上にゆっくりと注いだ。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を用いてｐＨを約７にし、反応混合物をＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。合わせた有機相を水、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、蒸発乾固して、所望の塩化スルホニルが得られた。
【０１６１】
４−［（３Ｒ，３’Ｓ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−２’−オキソ−１，３’−ビピロリジン−１’−イル］ベンゼン−１−スルホニルクロリド
【０１６２】
【化４５】
2011526919.tif 000050
一般手順１１に従って合成した。ＤＣＥ（１０ｍＬ）中の（３Ｒ，３’Ｓ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−１’−フェニル−１，３’−ビピロリジン−２’−オン（９００ｍｇ、２．４０ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で、クロロスルホン酸（１．４０ｇ、８００μＬ、１２．０ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。その後、反応混合物を０℃で３０分間、室温で１時間および５０℃で１時間撹拌した。この時点で、さらなるクロロスルホン酸（２７９ｍｇ、１６０μＬ、２．４０ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を５０℃で１時間撹拌し、その後、反応混合物を７０℃まで１０分間加熱し、室温まで冷却し、氷水上にゆっくりと注いだ。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を用いてｐＨを約７にし、反応混合物をＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。合わせた有機相を水、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、蒸発乾固して、４−［（３Ｒ，３’Ｓ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−２’−オキソ−１，３’−ビピロリジン−１’−イル］ベンゼン−１−スルホニルクロリドがタン色固形物として得られた（１．００ｇ、８８％）。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ））、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝４７３．３、ｔＲ＝１．５８分。
【０１６３】
一般手順１２
【０１６４】
【化４６】
2011526919.tif 000051
方法Ａ：ピリジン（０．４ｍＬ）中の２−アミノチアゾール（０．１６ｍｍｏｌ）の溶液に塩化スルホニル（０．０５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合物をＤＭＳＯで希釈し、濾過し、５％〜９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ）を用いた逆相ＨＰＬＣによって精製して、所望の生成物が得られた。
【０１６５】
方法Ｂ：アセトニトリル（１ｍＬ）中の２−アミノチアゾール（０．８９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、０℃で、２−ｔｅｒｔ−ブチル−１，１，３，３−テトラメチルグアニジン（０．８９ｍｍｏｌ）を滴下し、反応混合物を０℃で１５分間撹拌した。これにアセトニトリル（０．５ｍＬ）中の塩化スルホニル（０．１７ｍｍｏｌ）の懸濁液をゆっくりと加え、反応混合物を０℃で１５分間撹拌し、冷却浴を取り外し、反応混合物を室温で３０分間撹拌した。その後、反応混合物を水中に注ぎ、１ＭのＨＣｌを用いてｐＨを約７に調節し、ＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発乾固した。シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ中に０〜１０％のＭｅＯＨ）または５％〜９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ）を用いた逆相ＨＰＬＣによって精製して、所望の生成物が得られた。
【０１６６】
４−［（３Ｒ，３’Ｓ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−２’−オキソ−１，３’−ビピロリジン−１’−イル］−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミド
【０１６７】
【化４７】
2011526919.tif 000052
一般手順１２、方法Ａに従って合成した：ピリジン（０．４ｍＬ）中の２−アミノチアゾール（１５．９ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）の溶液に、４−［（３Ｒ，３’Ｓ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−２’−オキソ−１，３’−ビピロリジン−１’−イル］ベンゼン−１−スルホニルクロリド（２５ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合物をＤＭＳＯで希釈し、濾過し、５％〜９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ）を用いた逆相ＨＰＬＣによって精製して、所望の生成物が得られた。
【０１６８】
一般手順１２、方法Ｂに従って合成した：アセトニトリル（１ｍＬ）中の２−アミノチアゾール（８８．８ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、０℃で、２−ｔｅｒｔ−ブチル−１，１，３，３−テトラメチルグアニジン（１５２ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）を滴下し、反応混合物を０℃で１５分間撹拌した。これにアセトニトリル（０．５ｍＬ）中の４−［（３Ｒ，３’Ｓ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−２’−オキソ−１，３’−ビピロリジン−１’−イル］ベンゼン−１−スルホニルクロリド（１００ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）の懸濁液をゆっくりと加え、反応混合物を０℃で１５分間撹拌し、冷却浴を取り外し、反応混合物を室温で３０分間撹拌した。その後、反応混合物を水中に注ぎ、１ＭのＨＣｌを用いてｐＨを約７に調節し、ＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発乾固した。シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ中に０〜１０％のＭｅＯＨ）による精製により、所望の生成物が固形物として得られた（２７ｍｇ、２８％）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８４−７．７７（ｍ、４Ｈ）、７．４３−７．３７（ｍ、３Ｈ）、７．２４（ｄ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｄ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、１Ｈ）、３．８３−３．７２（ｍ、２Ｈ）、３．５８（ｔ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．０７−２．９６（ｍ、３Ｈ）、２．８７（ｔｄ、Ｊ＝８．６、４．３Ｈｚ、１Ｈ）、２．３４−２．２０（ｍ、２Ｈ）、２．１１−２．０２（ｍ、１Ｈ）および１．７４（ｄｔ、Ｊ＝１９．９、６．９Ｈｚ、１Ｈ）ｐｐｍ。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ））、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝５３７．３、ｔＲ＝１．２１分。
【０１６９】
経路５
（Ｒ）−Ｓ−エチル２−（２，２−ジメチル−５−オキソ−１，３−ジオキソラン−４−イル）エタンチオエート
【０１７０】
【化４８】
2011526919.tif 000053
（Ｒ）−（−）−ジメチル−５−オキソ−１，２−ジオキソラン−４−酢酸（３．５ｇ、２０ｍｍｏｌ）およびＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）の撹拌懸濁液に、０℃、Ｎ２下で、イソバレリルクロロフォルメート（２．９ｍＬ、２２ｍｍｏｌ）を５分間かけて滴下した。混合物を０℃で１０分間撹拌した。トリエチルアミン（５．５ｍＬ、４０ｍｍｏｌ）を０℃で滴下し、次いでエタンチオール（３．４ｍＬ、４４ｍｍｏｌ）を滴下した。ピンク色混合物を０℃で１０分間撹拌した。反応にＥｔ２Ｏ（４０ｍＬ）を加え、混合物を濾過した。濾液を１．０ＮのＨＣｌ水溶液（２０ｍＬ）、０．１ＮのＮａＯＨ水溶液（２０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）およびブライン（２０ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を減圧下で蒸発乾固して、所望のチオエステルが透明な油状物として得られた（３．４ｇ、１６ｍｍｏｌ、８２％の収率）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ４．７１−４．６５（ｍ、１Ｈ）、３．９１−３．８１（ｍ、１Ｈ）、３．１１−２．７０（ｍ、３Ｈ）、１．５３（ｓ、３Ｈ）、１．５０（ｓ、３Ｈ）、０．８７−０．８６（ｍ、３Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ））、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝２１９．４、ｔＲ＝１．３３分。
【０１７１】
（Ｒ）−２−（２，２−ジメチル−５−オキソ−１，３−ジオキソラン−４−イル）アセトアルデヒド
【０１７２】
【化４９】
2011526919.tif 000054
（Ｒ）−Ｓ−エチル２−（２，２−ジメチル−５−オキソ−１，３−ジオキソラン−４−イル）エタンチオエート（１．９ｇ、８．７ｍｍｏｌ）、１０％の炭素担持パラジウム（４７０ｍｇ）、およびＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）の撹拌懸濁液に、Ｎ２下、２５℃で、トリエチルシラン（２．０８ｍＬ、１３．０ｍｍｏｌ）を１０分間かけて滴下した。混合物を２５℃で１時間撹拌した。混合物を濾過し、濾液を減圧下で蒸発乾固して、所望のアルデヒドが透明な油状物として得られた（１．２ｇ、８７％）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ９．７０（ｓ、１Ｈ）、４．７２（ｑ、Ｊ＝３．５Ｈｚ、１Ｈ）、３．１０−３．０１（ｍ、１Ｈ）、２．９３−２．８４（ｍ、１Ｈ）、１．５６（ｓ、３Ｈ）、１．５１（ｓ、３Ｈ）。
【０１７３】
（Ｒ）−５−［２−（３，５−ジフルオロフェニルアミノ）エチル］−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−オン
【０１７４】
【化５０】
2011526919.tif 000055
１，２−ジクロロエタン（１００ｍＬ）中の３，５−ジフルオロアニリン（４．０ｇ、３１．０ｍｍｏｌ）、（Ｒ）−２−（２，２−ジメチル−５−オキソ−１，３−ジオキソラン−４−イル）アセトアルデヒド（４．９ｇ、３１．０ｍｍｏｌ）および酢酸（１．７ｍｌ、３１．０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、窒素下、０℃で、水素化ホウ素ナトリウム（１．１７ｇ、３１．０ｍｍｏｌｍｏｌ）を少量ずつ１０分間かけて加えた。得られた混合物を室温で２．５時間撹拌した。０℃まで冷ました後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１００ｍＬ）、次いでＤＣＭ（１００ｍＬ）を注意深く加えることによって反応混合物を反応停止させた。相を分離し、水相をジクロロメタン（２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮して、粗（Ｒ）−５−［２−（３，５−ジフルオロフェニルアミノ）エチル］−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−オン（８．０７ｇ、２９．７ｍｍｏｌ、９６％の収率）が黄色油状物としてとして提供され、これをいかなる追加の精製もなしに次の反応ステップで使用した。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ）、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝２７２．３、ｔＲ＝１．７６分。
【０１７５】
（Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロフェニル）−３−ヒドロキシピロリジン−２−オン
【０１７６】
【化５１】
2011526919.tif 000056
ＭｅＯＨ（７５ｍＬ）中の（Ｒ）−５−（２−（３，５−ジフルオロフェニルアミノ）エチル）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−オン（８．０ｇ、２９．５ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸（ｔｏｌｕｅｎｓｕｌｆｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）一水和物（５０８ｍｇ、２．９５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液を、窒素下で、７０℃まで７５分間加熱した。反応混合物をゆっくりと室温まで冷却し、その後、室温で終夜撹拌し続けた。反応混合物を減圧下で濃縮して、９．５ｇの茶色のワックス状固形物が提供された。固形物をＭｅＯＨ（１０ｍＬ）に溶かし、ジエチルエーテル（１００ｍＬ）を加えた。溶液を室温で終夜静置した。固形物を収集し、ジエチルエーテル（２×２５ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥させて、（Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロフェニル）−３−ヒドロキシピロリジン−２−オン（４．０９ｇ、１９．２ｍｍｏｌ、６５％）がタン色固形物としてとして提供された。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．３５−７．２７（ｍ、２Ｈ）、６．６８−６．６３（ｍ、１Ｈ）、４．５１（ｄｄ、Ｊ＝８．３、９．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．８５−３．７１（ｍ、２Ｈ）、３．０８（ｓ、１Ｈ）、２．６９−２．６２（ｍ、１Ｈ）および２．１９−２．０７（ｍ、１Ｈ）ｐｐｍ。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ））、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝２１４．１、ｔＲ＝０．９７分。
【０１７７】
（３’Ｓ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−１’−（３，５−ジフルオロフェニル）−１，３’−ビピロリジン−２’−オン
【０１７８】
【化５２】
2011526919.tif 000057
一般手順１０に従って合成した。ＤＣＭ（０．７ｍＬ）中の（Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロフェニル）−３−ヒドロキシピロリジン−２−オン（２１３ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液に、−２０℃で、ＤＩＥＡ（２５９ｍｇ、３４８μＬ、２．０ｍｍｏｌ）を加え、次いで、トリフリン酸無水物（２８２ｍｇ、１６８μＬ、１．０ｍｍｏｌ）を滴下し、反応混合物を−２０℃で４５分間撹拌した。ＤＣＭ（０．７ｍＬ）中の３−（３，５−ジクロロフェニル）ピロリジン（２１６ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液を滴下し、反応混合物を−２０℃で１６時間撹拌した。反応混合物を水中に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発乾固した。シリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中に０〜２０％のＥｔＯＡＣ）による精製により、（３’Ｓ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−１’−（３，５−ジフルオロフェニル）−１，３’−ビピロリジン−２’−オンが静置後に固化した油状物として得られた（２１０ｍｇ、５１％）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）７．３３−７．２８（ｍ、２Ｈ）、７．１９−７．１７（ｍ、２Ｈ）、６．６４−６．５８（ｍ、２Ｈ）、３．８３−３．７４（ｍ、１Ｈ）、３．７２（ｄｄ、Ｊ＝７．４、８．７Ｈｚ、１Ｈ）、３．６４−３．５７（ｍ、１Ｈ）、３．４９−３．４５（ｍ、０．５Ｈ）、３．３７−３．２５（ｍ、１．５Ｈ）、３．１９（ｍ、１Ｈ）、３．０６−２．９０（ｍ、１．５Ｈ）、２．７６（ｄｄ、Ｊ＝７．３、９．０Ｈｚ、０．５Ｈ）、２．４３−２．２９（ｍ、２Ｈ）、２．２３−２．１５（ｍ、１Ｈ）および１．９４−１．８５（ｍ、１Ｈ）ｐｐｍ。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ））、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝４１１．３、ｔＲ＝１．４６分。
【０１７９】
４−［（３’Ｓ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−２’−オキソ−１，３’−ビピロリジン−１’−イル］−２，６−ジフルオロベンゼン−１−スルホニルクロリド
【０１８０】
【化５３】
2011526919.tif 000058
一般手順１１に従って合成した。ＤＣＥ（０．４ｍＬ）中の（３’Ｓ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−１’−（３，５−ジフルオロフェニル）−１，３’−ビピロリジン−２’−オン（５０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で、クロロスルホン酸（７１ｍｇ、４０μＬ、０．６１ｍｍｏｌ）を滴下し、反応混合物を０℃から室温まで１時間かけて撹拌し、温度を５０℃まで上げ、反応混合物をこの温度で２時間撹拌した。さらなるクロロスルホン酸（７１ｍｇ、４０μＬ、０．６１ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を５０℃で２時間撹拌した。反応混合物を水中に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。合わせた有機抽出物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、水、およびブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発乾固した。粗生成物をさらに精製せずに次の反応ステップで使用した。（ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ））、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝４１１．３、ｔＲ＝１．４６分。
【０１８１】
４−［（３’Ｓ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−２’−オキソ−１，３’−ビピロリジン−１’−イル］−２，６−ジフルオロ−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミド
【０１８２】
【化５４】
2011526919.tif 000059
一般手順１２、方法Ｂに従って合成した。アセトニトリル（０．４ｍＬ）中の２−アミノチアゾール（３５ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で、２−ｔｅｒｔ−ブチル−１，１，３，３−テトラメチルグアニジン（６１ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）を滴下し、反応混合物を０℃で１０分間撹拌した。４−［（３’Ｓ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−２’−オキソ−１，３’−ビピロリジン−１’−イル］−２，６−ジフルオロベンゼン−１−スルホニルクロリド（６０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で１６時間撹拌した。反応混合物をＤＭＳＯで希釈し、濾過し、５％〜９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ）を用いた逆相ＨＰＬＣによって精製して、４−［（３’Ｓ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−２’−オキソ−１，３’−ビピロリジン−１’−イル］−２，６−ジフルオロ−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミドが得られた。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ））、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝５７３．３、ｔＲ＝１．３２分。
【０１８３】
経路６
（Ｒ）−４−［２−（２，２−ジメチル−５−オキソ−１，３−ジオキソラン−４−イル）エチルアミノ］−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミド
【０１８４】
【化５５】
2011526919.tif 000060
（Ｒ）−Ｓ−エチル２−（２，２−ジメチル−５−オキソ−１，３−ジオキソラン−４−イル）エタンチオエート（１．９ｇ、８．７ｍｍｏｌ）、１０％の炭素担持パラジウム（４７０ｍｇ）、およびＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）撹拌混合物に、Ｎ２下、２５℃で、トリエチルシラン（２．０８ｍＬ、１３．０ｍｍｏｌ）を１０分間かけて滴下した。混合物を２５℃で１時間撹拌した。混合物を濾過し、濾液を減圧下で蒸発乾固して、所望のアルデヒドが透明な油状物として得られた（１．２ｇ）。アルデヒドをスルファチアゾール（１．１ｇ、４．３ｍｍｏｌ）、ＭｅＯＨ（２５ｍＬ）、およびトリフルオロ酢酸（２．５ｍＬ）の撹拌溶液に加えた。この溶液に水素化ホウ素ナトリウム（８１３ｍｇ、２１．４ｍｍｏｌ）を少量ずつ１０分間かけて加えた。混合物を１０分間撹拌し、減圧下で蒸発させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中に５％のＭｅＯＨ）によって精製して、（Ｒ）−４−［２−（２，２−ジメチル−５−オキソ−１，３−ジオキソラン−４−イル）エチルアミノ］−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミドが白色固形物として得られた（１．５ｇ、３．９ｍｍｏｌ、４５％の収率）。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ））、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝３９８．３、ｔＲ＝１．１８分。
【０１８５】
（Ｒ）−４−（３−ヒドロキシ−２−オキソピロリジン−１−イル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミド
【０１８６】
【化５６】
2011526919.tif 000061
（Ｒ）−４−［２−（２，２−ジメチル−５−オキソ−１，３−ジオキソラン−４−イル）エチルアミノ］−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼン−スルホンアミド（８３３ｍｇ、２．１５ｍｍｏｌ）、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（４２ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）、およびＴＨＦ（１０ｍＬ）の撹拌溶液を８０℃で３時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮乾固した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中に５％のＭｅＯＨ）によって精製して、（Ｒ）−４−（３−ヒドロキシ−２−オキソピロリジン−１−イル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミドが白色固形物として得られた（４９６ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ、６５％の収率）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８５（ｄｄ、Ｊ＝２．１、６．９Ｈｚ、４Ｈ）、７．２５（ｄ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．８２（ｄ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、１Ｈ）、５．８３（ｄ、Ｊ＝５．９Ｈｚ、１Ｈ）、４．３２（ｄ、Ｊ＝５．３Ｈｚ、１Ｈ）、３．７７（ｄｄ、Ｊ＝１．９、９．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．７１−３．６９（ｍ、１Ｈ）、２．４１−２．３８（ｍ、１Ｈ）、１．８４（ｄｄ、Ｊ＝９．２、１２．３Ｈｚ、１Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ））、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝３４０．２、ｔＲ＝０．５０分。
【０１８７】
［（Ｒ）−４−フルオロ−Ｎ−（４−（３−ヒドロキシ−２−オキソピロリジン−１−イル）フェニルスルホニル］−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミド
【０１８８】
【化５７】
2011526919.tif 000062
一般手順８に従って合成した。（Ｒ）−４−（３−ヒドロキシ−２−オキソピロリジン−１−イル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミド（５．０ｇ、１４．８ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（２５ｍＬ）の撹拌溶液に、Ｎ２下、５℃（氷浴）で、ＤＩＥＡ（２．５ｍＬ、１４．８ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液に塩化４−フルオロベンゼンスルホニル（２．９ｇ、１４．８ｍｍｏｌ）を少量ずつ１０分間かけて加えた。溶液を周囲温度で２０分間撹拌した。この溶液にＭｅＯＨ（７５ｍＬ）を加えた。混合物を氷浴によって５℃まで冷却し、３０分間撹拌した。沈殿物を濾過し、ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させて、［（Ｒ）−４−フルオロ−Ｎ−（４−（３−ヒドロキシ−２−オキソピロリジン−１−イル）フェニルスルホニル］−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミドが白色固形物として得られた（６．５ｇ、１３．１ｍｍｏｌ、８９％の収率）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ８．０３−７．９６（ｍ、２Ｈ）、７．８３−７．８０（ｍ、２Ｈ）、７．７２（ｄ、Ｊ＝５．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．６１（ｄｄ、Ｊ＝１．８、７．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．５９（ｓ、１Ｈ）、７．３７（ｓ、１Ｈ）、７．３７（ｄｄ、Ｊ＝２．０、１５．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．０２（ｄ、Ｊ＝５．１Ｈｚ、１Ｈ）、５．８８（ｄ、Ｊ＝５．９Ｈｚ、１Ｈ）、４．３８−４．３２（ｍ、１Ｈ）、３．８３−３．７８（ｍ、１Ｈ）、３．７１（ｔｄ、Ｊ＝９．５、５．４Ｈｚ、１Ｈ）、２．５２−２．４２（ｍ、１Ｈ）、１．８７（ｔｄ、Ｊ＝９．４、４．１Ｈｚ、１Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ））、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝４９８．３、ｔＲ＝１．３２分。
【０１８９】
４−［（３’Ｓ）−３−（４−クロロ−３−メチルフェニル）−２’−オキソ−１，３’−ビピロリジン−１’−イル］−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミド
【０１９０】
【化５８】
2011526919.tif 000063
一般手順９に従って合成した。無水ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の［（Ｒ）−４−フルオロ−Ｎ−（４−（３−ヒドロキシ−２−オキソピロリジン−１−イル）フェニルスルホニル］−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミド（５００ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液に、窒素下、−２０℃で、ＤＩＥＡ（０．８８ｍＬ、５．０３ｍｍｏｌ）を加え、次いでトリフリル酸無水物（０．２２ｍＬ、１．３１ｍｍｏｌ）を５分間かけて滴下した。１５分間−２０℃で撹拌した後、無水ＤＣＭ（１ｍＬ）中の３−（４−クロロ−３−メチルフェニル）ピロリジン（１９７ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）の溶液を５分間かけて滴下した。反応混合物を−２０℃で１時間撹拌し続けた。モルホリン（０．３５ｍＬ、４．０２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を−２０℃で１．５時間撹拌した。その後、反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１０ｍＬ）中に注ぎ、ＤＣＭ（５ｍＬ）を加え、相を分離した。水相をＤＣＭ（５ｍＬ）で抽出した。有機部分を合わせ、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５×５ｍｌ）で洗浄した。有機層をブライン（５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、セライト上に吸収させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ中に１〜５％のＭｅＯＨ）による精製により、４−［（３’Ｓ）−３−（４−クロロ−３−メチルフェニル］−２’−オキソ−１，３’−ビピロリジン−１’−イル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミドが白色固形物として得られた（３８５ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ、７４％の収率）。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ））、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝５１７．０、ｔＲ＝１．１１分。
【０１９１】
４−［（３Ｓ，３’Ｓ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−２’−オキソ−１，３’−ビピロリジン−１’−イル］−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミドおよび４−［（３Ｒ，３’Ｓ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−２’−オキソ−１，３’−ビピロリジン−１’−イル］−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミド
【０１９２】
【化５９】
2011526919.tif 000064
一般手順９に従って合成した。ＤＣＭ（９ｍＬ）中の［（Ｒ）−４−フルオロ−Ｎ−（４−（３−ヒドロキシ−２−オキソピロリジン−１−イル）フェニルスルホニル］−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼン−スルホンアミド（４３５ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）の懸濁液に、窒素下、−２０〜−３０℃で、ＤＩＥＡ（５６５ｍｇ、７６０μＬ、４．３７ｍｍｏｌ）を加え、次いでトリフル酸無水物（３２１ｍｇ、１９１μＬ、１．１４ｍｍｏｌ）を滴下した。１５分間この温度で撹拌した後、ＤＣＭ（２ｍＬ）中の３−（３，５−ジクロロフェニル）ピロリジン（１８９ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）の溶液を滴下した。反応混合物を−２０〜−３０℃で４０分間撹拌し続けた。モルホリン（０．３０ｍＬ、３．５０ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をさらに３０分間撹拌した。反応混合物を室温まで温め、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２５ｍＬ）中に注ぎ、相を分離し、水相をＤＣＭ（２×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中に２〜５％のＭｅＯＨ）による精製により、生成物（２７０ｍｇ、５７％）がオフホワイト色固形物として得られた。ＳＦＣによるキラル分離（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＳ−Ｈカラム（２×２５ｃｍ）、４０％のメタノール（０．１％のＤＥＡ）／ＣＯ２、５０ｍＬ／分））により、＞９８％ｄｅの両ジアステレオマーを得た。Ｃ−３（ピロリジン）での絶対配置は、鏡像異性的に濃縮された（Ｒ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）ピロリジンを用いた独立した合成に基づいて割り当て、これにより第１のピークが溶出された（ＳＦＣ−分析）。
【０１９３】
（３Ｒ，３’Ｓ）：１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８４−７．７７（ｍ、４Ｈ）、７．４３−７．３７（ｍ、３Ｈ）、７．２４（ｄ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｄ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、１Ｈ）、３．８３−３．７２（ｍ、２Ｈ）、３．５８（ｔ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．０７−２．９６（ｍ、３Ｈ）、２．８７（ｔｄ、Ｊ＝８．６、４．３Ｈｚ、１Ｈ）、２．３４−２．２０（ｍ、２Ｈ）、２．１１−２．０２（ｍ、１Ｈ）および１．７４（ｄｔ、Ｊ＝１９．９、６．９Ｈｚ、１Ｈ）ｐｐｍ。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ））、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝５３７．３、ｔＲ＝１．３０分。ＳＦＣ（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＳ−Ｈ、（０．４６×２５ｃｍ）、４０％のメタノール（１％のＤＥＡ）／ＣＯ２、３ｍＬ／分）：ｔＲ＝１３．０分。
【０１９４】
（３Ｓ，３’Ｓ）：１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８４（ｄ、Ｊ＝９．０Ｈｚ、２Ｈ）、７．８０（ｄ、Ｊ＝９．０Ｈｚ、２Ｈ）、７．４３−７．３８（ｍ、３Ｈ）、７．２５（ｄ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．８２（ｄ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、１Ｈ）、３．８４−３．７３（ｍ、２Ｈ）、３．６５−３．６０（ｍ、１Ｈ）、３．３９−３．２５（ｍ、１Ｈ）、３．１４（ｔｄ、Ｊ＝８．６、４．３Ｈｚ、１Ｈ）、２．７４（ｔ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、２．６５（ｄｄ、Ｊ＝６．４、８．６Ｈｚ、１Ｈ）、２．３２−２．２０（ｍ、２Ｈ）、２．１２−１．９９（ｍ、１Ｈ）および１．７９−１．７１（ｍ、１Ｈ）ｐｐｍ。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ）、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝５３７．３、ｔＲ＝１．３０分。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ））、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝５３７．３、ｔＲ＝１．３０分。ＳＦＣ（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＳ−Ｈ、（０．４６×２５ｃｍ）、４０％のメタノール（１％のＤＥＡ）／ＣＯ２、３ｍＬ／分）：ｔＲ＝１４．３分。
【０１９５】
（Ｒ）−４−（３−ヒドロキシ−２−オキソピロリジン−１−イル）−Ｎ−（４−メトキシフェニルスルホニル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミド
【０１９６】
【化６０】
2011526919.tif 000065
一般手順８に従って合成した。ＤＣＭ（２０５ｍＬ）中の（Ｒ）−４−（３−ヒドロキシ−２−オキソピロリジン−１−イル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミド（４１ｇ、０．１２１ｍｏｌ）の撹拌懸濁液に、Ｎ２下、０℃で、ＤＩＥＡ（１５．６ｇ、２１ｍＬ、０．１２１ｍｏｌ）を加えた。この懸濁液に、０℃で、４−メトキシベンゼンスルホニルクロリド（２５ｇ、０．１２１ｍｏｌ）を少量ずつ１５分間かけて加えた。冷却浴を取り外し、懸濁液を１時間かけて室温まで温め、その間に反応混合物が均一な溶液となった。溶液を０℃まで冷却し、ＭｅＯＨ（２．０５Ｌ）を加えた。撹拌を０℃で続けた。１０分後、沈殿物が形成された。得られた懸濁液を０℃で３０分間撹拌し、その後、濾過した。濾過ケークをＭｅＯＨ（２×２５０ｍＬ）で洗浄し、その後、一定重量まで真空下で乾燥させて、（Ｒ）−４−（３−ヒドロキシ−２−オキソピロリジン−１−イル）−Ｎ−（４−メトキシフェニルスルホニル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミド（５５．４９ｇ、０．１０９ｍｏｌ、９０％の収率）が白色固形物としてとして提供された。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８６−７．８０（ｍ、４Ｈ）、７．７０（ｄ、Ｊ＝５．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．６０（ｄ、Ｊ＝９．０Ｈｚ、２Ｈ）、７．０３−６．９８（ｍ、３Ｈ）、５．８８（ｄ、Ｊ＝５．９Ｈｚ、１Ｈ）、４．３８−４．３２（ｍ、１Ｈ）、３．８５−３．７７（ｍ、１Ｈ）、３．８１（ｓ、３Ｈ）、３．７０（ｔｄ、Ｊ＝９．４、５．４Ｈｚ、１Ｈ）、２．４８−２．４１（ｍ、１Ｈ）および１．９２−１．８２（ｍ、１Ｈ）ｐｐｍ。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ））、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝５１０．０、ｔＲ＝１．２２分。
【０１９７】
一般手順１３
【０１９８】
【化６１】
2011526919.tif 000066
ＤＣＭ（１４０ｍＬ）中のアルコール（３９．３ｍｍｏｌ）の懸濁液に、窒素下、−５℃で、ＤＩＥＡ（１１７．８ｍｍｏｌ）を加え、次いでトリフル酸無水物（５８．８８ｍｍｏｌ）を３０分間かけて滴下した。得られた懸濁液を１時間、−５℃で撹拌し、その後、ＤＣＭ（４０ｍＬ）中のピロリジン（４３．１８ｍｍｏｌ）の溶液を３０分間かけて滴下して処理した。得られた溶液を−５℃で１時間撹拌し続け、ＤＣＭ（２００ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２５０ｍＬ）で分配した。有機層を除去し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で蒸発させた。シリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中に１〜５％のＭｅＯＨ）による精製により所望の生成物が得られた。
【０１９９】
４−［（３Ｒ，３’Ｓ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−２’−オキソ−１，３’−ビピロリジン−１’−イル］−Ｎ−（４−メトキシフェニルスルホニル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミド
【０２００】
【化６２】
2011526919.tif 000067
一般手順１３に従って合成した。ＤＣＭ（１４０ｍＬ）中の（Ｒ）−４−（３−ヒドロキシ−２−オキソピロリジン−１−イル）−Ｎ−（４−メトキシフェニルスルホニル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミド（２０．０ｇ、３９．３ｍｍｏｌ）の懸濁液に、窒素下、−５℃で、ＤＩＥＡ（１５．２２ｇ、２０．５ｍＬ、１１７．８ｍｍｏｌ）を加え、次いでトリフル酸無水物（１６．６１ｇ、９．９１ｍｌ、５８．８８ｍｍｏｌ）を３０分間かけて滴下した。得られた薄茶色懸濁液を１時間、−５℃で撹拌し、その後、ＤＣＭ（４０ｍＬ）中の（３Ｒ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）ピロリジン（９．３３ｇ、４３．１８ｍｍｏｌ）の溶液を３０分間かけて滴下して処理した。得られた透明な茶色溶液を−５℃で１時間撹拌し続け、ＤＣＭ（２００ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２５０ｍＬ）で分配した。有機層を除去し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で蒸発させて、茶色泡沫が提供された（３０．６ｇ）。この物質をシリカゲル上に吸収させ、シリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中に１〜５％のＭｅＯＨ）によって精製して、４−［（３Ｒ，３’Ｓ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−２’−オキソ−１，３’−ビピロリジン−１’−イル］−Ｎ−（４−メトキシフェニルスルホニル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミド（２２．７６ｇ、３２．１６ｍｍｏｌ、８２％の収率）が薄い茶色固形物としてとして提供された。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８６−７．７９（ｍ、４Ｈ）、７．７０（ｄ、Ｊ＝５．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．６０（ｄ、Ｊ＝８．９Ｈｚ、２Ｈ）、７．４３−７．３８（ｍ、３Ｈ）、７．０３−６．９８（ｍ、３Ｈ）、３．８５−３．７３（ｍ、１Ｈ）、３．８２（ｓ、３Ｈ）、３．６１−３．５７（ｍ、２Ｈ）、３．４０−３．３５（ｍ、１Ｈ）、３．０８−３．０１（ｍ、３Ｈ）、２．９０（ｔｄ、Ｊ＝８．７、４．４Ｈｚ、１Ｈ）、２．３８−２．２１（ｍ、２Ｈ）、２．１４−２．０６（ｍ、１Ｈ）および１．８０−１．７１（ｍ、１Ｈ）ｐｐｍ。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ））、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝７０７．１、ｔＲ＝１．６３分。
【０２０１】
一般手順１４
【０２０２】
【化６３】
2011526919.tif 000068
ＤＣＭ（３２０ｍＬ）中のビススルホンアミド（５６．５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、窒素下、０℃で、モルホリン（６２．２ｍｍｏｌ）を５分間かけて滴下した。冷却浴を取り外し、反応混合物を室温まで温めた。撹拌を室温で２時間続け、その間に生成物が沈殿した。固形物を濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄し、一定重量まで真空下で乾燥させて、所望の生成物が提供された。
【０２０３】
４−［（３Ｒ，３’Ｓ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−２’−オキソ−１，３’−ビピロリジン−１’−イル］−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミド
【０２０４】
【化６４】
2011526919.tif 000069
一般手順１４に従って合成した。無水ＤＣＭ（３２０ｍＬ）中の４−［（３Ｒ，３’Ｓ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−２’−オキソ−１，３’−ビピロリジン−１’−イル］−Ｎ−（４−メトキシフェニルスルホニル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミド（４０ｇ、５６．５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、窒素下、０℃で、モルホリン（５．４２ｇ、５．４２ｍＬ、６２．２ｍｍｏｌ）を５分間かけて滴下した。冷却浴を取り外し、反応混合物を室温まで温めた。撹拌を室温で２時間続け、その間に生成物が沈殿した。固形物を濾過し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄し、一定重量まで真空下で乾燥させて、４−［（３Ｒ，３’Ｓ）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−２’−オキソ−１，３’−ビピロリジン−１’−イル］−Ｎ−（チアゾール−２−イル）ベンゼンスルホンアミド（２３．５０ｇ、４３．７ｍｍｏｌ、７７％の収率）が白色固形物としてとして提供された。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８４−７．７７（ｍ、４Ｈ）、７．４３−７．３７（ｍ、３Ｈ）、７．２４（ｄ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｄ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、１Ｈ）、３．８３−３．７２（ｍ、２Ｈ）、３．５８（ｔ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．０７−２．９６（ｍ、３Ｈ）、２．８７（ｔｄ、Ｊ＝８．６、４．３Ｈｚ、１Ｈ）、２．３４−２．２０（ｍ、２Ｈ）、２．１１−２．０２（ｍ、１Ｈ）および１．７４（ｄｔ、Ｊ＝１９．９、６．９Ｈｚ、１Ｈ）ｐｐｍ。ＬＣ／ＭＳ（１０％−９９％のＣＨ３ＣＮ（０．０３５％のＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０５％のＴＦＡ））、ｍ／ｚ：Ｍ＋１、観測値＝５３７．３、ｔＲ＝１．３０分。ＳＦＣ（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＳ−Ｈ、（０．４６×２５ｃｍ）、４０％のメタノール（１％のＤＥＡ）／ＣＯ２、３ｍＬ／分）：ｔＲ＝１３．０分。
【０２０５】
以下の表３に上記表２の化合物の分析データを列挙する。
【０２０６】
【表３】
2011526919.tif 000070
化合物のＮａＶ阻害特性を検出および測定するためのアッセイ
化合物のＮａＶ阻害特性をアッセイするための光学的方法
本発明の化合物は電位作動型ナトリウムイオンチャネルのアンタゴニストとして有用である。試験化合物のアンタゴニスト特性は以下のように評価した。目的のＮａＶを発現する細胞をマイクロタイタープレート内に入れた。インキュベーション期間後、細胞を膜内外電位差に感受性のある蛍光色素で染色した。試験化合物をマイクロタイタープレートに加えた。細胞を化学的または電気的手段のどちらかによって刺激して、非遮断チャネルからのＮａＶ依存性の膜電位変化を誘起し、膜内外電位差感受性色素を用いてこれを検出および測定した。アンタゴニストは、刺激に対する膜電位応答の減少として検出した。光学的膜電位アッセイでは、ＧｏｎｚａｌｅｚおよびＴｓｉｅｎ（Ｇｏｎｚａｌｅｚ，Ｊ．Ｅ．およびＲ．Ｙ．Ｔｓｉｅｎ（１９９５）「Ｖｏｌｔａｇｅ  ｓｅｎｓｉｎｇ  ｂｙ  ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ  ｒｅｓｏｎａｎｃｅ  ｅｎｅｒｇｙ  ｔｒａｎｓｆｅｒ  ｉｎ  ｓｉｎｇｌｅ  ｃｅｌｌｓ」、Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｊ、６９（４）：１２７２−８０、ならびにＧｏｎｚａｌｅｚ，Ｊ．Ｅ．およびＲ．Ｙ．Ｔｓｉｅｎ（１９９７）「Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｉｎｄｉｃａｔｏｒｓ  ｏｆ  ｃｅｌｌ  ｍｅｍｂｒａｎｅ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｔｈａｔ  ｕｓｅ  ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ  ｒｅｓｏｎａｎｃｅ  ｅｎｅｒｇｙ  ｔｒａｎｓｆｅｒ」、Ｃｈｅｍ  Ｂｉｏｌ、４（４）：２６９−７７を参照）によって記載されている電位感受性ＦＲＥＴセンサーを、電位／イオンプローブ読取器（ＶＩＰＲ（登録商標））などの蛍光変化を測定するための装置（Ｇｏｎｚａｌｅｚ，Ｊ．Ｅ．、Ｋ．Ｏａｄｅｓら（１９９９）「Ｃｅｌｌ−ｂａｓｅｄ  ａｓｓａｙｓ  ａｎｄ  ｉｎｓｔｒｕｍａｎｔａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ  ｉｏｎ−ｃｈａｎｎｅｌ  ｔａｒｇｅｔｓ」、Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ  Ｔｏｄａｙ、４（９）：４３１−４３９を参照）と組み合わせて利用した。
【０２０７】
化学的刺激を用いたＶＩＰＲ（登録商標）光学的膜電位アッセイ方法
細胞の取扱いおよび色素のロード
ＶＩＰＲ上のアッセイの２４時間前に、ＮａＶ１．２型の電位作動型ＮａＶを内在的に発現するＣＨＯ細胞を、９６ウェルのポリリシンでコーティングしたプレートに、６０，０００個の細胞／ウェルで播種する。他のサブタイプは、目的のＮａＶを発現する細胞系において同様の様式で行なう。
【０２０８】
１）アッセイ当日に培地を吸引し、細胞を２２５μＬの浴溶液＃２（ＢＳ＃２）で２回洗浄する。
【０２０９】
２）５ｍＭのクマリン保存溶液を１０％のＰｌｕｒｏｎｉｃ  １２７と１：１で混合し、その後、混合物を適切な体積のＢＳ＃２に溶かすことによって、１５ｕＭのＣＣ２−ＤＭＰＥ溶液を調製する。
【０２１０】
３）浴溶液を９６ウェルプレートから除去した後、８０μＬのＣＣ２−ＤＭＰＥ溶液を用いて細胞をロードする。プレートを暗所で３０分間、室温でインキュベーションする。
【０２１１】
４）細胞をクマリンで染色している間にＢＳ＃２中の１５μＬのオキソノール溶液を調製する。この溶液は、ＤｉＳＢＡＣ２（３）に加えて０．７５ｍＭのＡＢＳＣ１および３０μＬのベラトリジン（１０ｍＭのＥｔＯＨ保存から調製、Ｓｉｇｍａ＃Ｖ−５７５４）を含有しているべきである。
【０２１２】
５）３０分後、ＣＣ２−ＤＭＰＥを除去し、細胞を２２５  ＬのＢＳ＃２で２回洗浄する。前述と同様、残留体積は４０μＬであるべきである。
【０２１３】
６）浴を取り外した後、細胞を８０μＬのＤｉＳＢＡＣ２（３）溶液にロードし、その後、所望の試験濃度を達成するために、ＤＭＳＯに溶かした試験化合物を薬物添加プレートからのそれぞれのウェル加え、十分に混合する。ウェル中の体積は約１２１μＬであるべきである。その後、細胞を２０〜３０分間インキュベーションする。
【０２１４】
７）インキュベーションが完了した後、細胞はナトリウム加減プロトコルを用いたＶＩＰＲ（登録商標）上でアッセイする準備が整う。１２０μＬの浴溶液＃１を加えてＮａＶ依存性の脱分極を刺激する。２００μＬのテトラカインをＮａＶチャネルの遮断のアンタゴニスト陽性対照として使用した。
【０２１５】
ＶＩＰＲ（登録商標）データの分析
データは、４６０ｎｍおよび５８０ｎｍのチャネルで測定した、バックグラウンドを減算した発光強度の正規化した比として分析および報告する。その後、バックグラウンド強度をそれぞれのアッセイチャネルから減算する。バックグラウンド強度は、細胞を用いずに同様に処理したアッセイウェルからの同じ期間中の発光強度を測定することによって得る。その後、時間の関数としての応答を以下の式を用いて得られた比として報告する：
【０２１６】
【数１】
2011526919.tif 000071
データは初期の（Ｒｉ）および最終の（Ｒｆ）の比によってさらに換算する。これらは、刺激前の期間の一部またはすべての間、および刺激期間中のサンプル点の間の平均の比の値である。その後、刺激に対する応答Ｒ＝Ｒｆ／Ｒｉを計算する。Ｎａ＋加減分析時間ウィンドウでは、ベースラインは２〜７秒であり、最終応答は１５〜２４秒でサンプリングする。
【０２１７】
対照応答は、テトラカインなどの所望の特性を有する化合物の存在下（陽性対照）、および薬理学的薬剤の非存在下（陰性対照）においてアッセイを行なうことによって得られる。陰性（Ｎ）および陽性（Ｐ）対照に対する応答を上記のように計算する。化合物のアンタゴニスト活性Ａは以下のように定義する：
【０２１８】
【数２】
2011526919.tif 000072
［式中、Ｒは試験化合物の応答の比である］。
【０２１９】
溶液［ｍＭ］
浴溶液＃１：ＮａＣｌ  １６０ｍＭ、ＫＣｌ  ４．５ｍＭ、ＣａＣｌ２  ２ｍＭ、ＭｇＣｌ２  １ｍＭ、ＨＥＰＥＳ  １０ｍＭ、ＮａＯＨでｐＨ７．４
浴溶液＃２  ＴＭＡ−Ｃｌ  １６０ｍＭ、ＣａＣｌ２  ０．１ｍＭ、ＭｇＣｌ２  １ｍＭ、ＨＥＰＥＳ  １０ｍＭ、ＫＯＨでｐＨ７．４（最終Ｋ濃度  約５ｍＭ）
ＣＣ２−ＤＭＰＥ：ＤＭＳＯ中の５ｍＭの保存溶液として調製、−２０℃で保存
ＤｉＳＢＡＣ２（３）：ＤＭＳＯ中の１２ｍＭの保存として調製、−２０℃で保存
ＡＢＳＣ１：蒸留Ｈ２Ｏ中の２００ｍＭの保存として調製、室温で保存
細胞培養
ＣＨＯ細胞を１０％のＦＢＳ（ウシ胎児血清、認定、ＧｉｂｃｏＢＲＬ＃１６１４０−０７１）および１％のＰｅｎ−Ｓｔｒｅｐ（ペニシリン−ストレプトマイシン、ＧｉｂｃｏＢＲＬ＃１５１４０−１２２）を添加したＤＭＥＭ（ダルベッコ変法イーグル培地、ＧｉｂｃｏＢＲＬ＃１０５６９−０１０）中で増殖させる。細胞を通気キャップのフラスコ中、９０％の湿度および１０％のＣＯ２で、１００％コンフルエントになるまで増殖させる。これらは通常スケジュールの要件に応じてトリプシン化によって１：１０または１：２０に分割し、次の分割の前に２〜３日間、増殖させる。
【０２２０】
電気刺激を用いたＶＩＰＲ（登録商標）光学的膜電位アッセイ方法
以下は、光学的膜電位方法＃２を用いてＮａＶ１．３阻害活性を測定する例である。他のサブタイプは、目的のＮａＶを発現する細胞系において同様の様式で行なう。
【０２２１】
ＮａＶ１．３を安定に発現するＨＥＫ２９３細胞を９６ウェルのマイクロタイタープレート内にプレートする。適切なインキュベーション期間後、細胞を以下の電位感受性色素ＣＣ２−ＤＭＰＥ／ＤｉＳＢＡＣ２（３）で染色する。
【０２２２】
試薬：
乾燥ＤＭＳＯ中の１００ｍｇ／ｍＬのＰｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−１２７（Ｓｉｇｍａ＃Ｐ２４４３）
乾燥ＤＭＳＯ中の１０ｍＭのＤｉＳＢＡＣ２（３）（Ａｕｒｏｒａ＃００−１００−０１０）
乾燥ＤＭＳＯ中の１０ｍＭのＣＣ２−ＤＭＰＥ（Ａｕｒｏｒａ＃００−１００−００８）
Ｈ２Ｏ中の２００ｍＭのＡＢＳＣ１
１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（Ｇｉｂｃｏ  ＃１５６３０−０８０）を添加したハンクス平衡塩溶液（Ｈｙｃｌｏｎｅ＃ＳＨ３０２６８．０２）
ロードプロトコル：
２×ＣＣ２−ＤＭＰＥ＝２０μＭのＣＣ２−ＤＭＰＥ：１０ｍＭのＣＣ２−ＤＭＰＥを等体積の１０％のｐｌｕｒｏｎｉｃと共にボルテックスし、次いで、１０ｍＭのＨＥＰＥＳを含有する所要量のＨＢＳＳ中でボルテックスする。それぞれの細胞プレートは５ｍＬの２×ＣＣ２−ＤＭＰＥを要する。５０μＬの２×ＣＣ２−ＤＭＰＥを、洗浄した細胞を含有するウェルに加えて、１０μＭの最終染色濃度がもたらされる。細胞を３０分間、暗所、室温で染色する。
【０２２３】
ＡＢＳＣ１＝６μＭのＤＩＳＢＡＣ２（３）および１ｍＭのＡＢＳＣ１を含む２×ＤＩＳＢＡＣ２（３）：所要量の１０ｍＭのＤＩＳＢＡＣ２（３）を５０ｍｌの円錐形チューブに加え、作製する溶液１ｍＬあたり１μＬの１０％のｐｌｕｒｏｎｉｃと共に混合し、一緒にボルテックスする。その後、ＨＢＳＳ／ＨＥＰＥＳを加えて２×溶液を作製する。最後にＡＢＳＣ１を加える。
【０２２４】
２×ＤｉＳＢＡＣ２（３）溶液を用いて化合物プレートを溶媒和することができる。化合物プレートは２×薬物濃度で作製することに注意されたい。染色したプレートを再度洗浄し、残留体積５０μＬを残す。ＡＢＳＣ１を含む５０ｕＬ／ウェルの２×ＤｉＳＢＡＣ２（３）を加える。３０分間、暗所、室温で染色する。
【０２２５】
使用する電気刺激装置および方法は、本明細書中に参考として組み込まれているＰＣＴ／ＵＳ０１／２１６５２号のイオンチャネルアッセイ方法に記載されている。装置は、マイクロタイター・プレート・ハンドラー、クマリン色素を励起させると同時にクマリンおよびオキソノールの発光を記録するための光学システム、波形発生器、電流または電位制御増幅器、ならびに電極をウェル中に挿入するための装置を含む。統合コンピュータ制御下では、この装置は、ユーザがプログラミングした電気刺激プロトコルをマイクロタイタープレートのウェル内の細胞に伝達する。
【０２２６】
試薬
アッセイ緩衝液＃１
１４０ｍＭのＮａＣｌ、４．５ｍＭのＫＣｌ、２ｍＭのＣａＣｌ２、１ｍＭのＭｇＣｌ２、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１０ｍＭのグルコース、ｐＨ７．４０、３３０ｍＯｓｍ
Ｐｌｕｒｏｎｉｃ保存（１０００×）：乾燥ＤＭＳＯ中の１００ｍｇ／ｍＬのｐｌｕｒｏｎｉｃ  １２７
オキソノール保存（３３３３×）：乾燥ＤＭＳＯ中の１０ｍＭのＤｉＳＢＡＣ２（３）
クマリン保存（１０００×）：乾燥ＤＭＳＯ中の１０ｍＭのＣＣ２−ＤＭＰＥ
ＡＢＳＣ１保存（４００×）：水中の２００ｍＭのＡＢＳＣ１
アッセイプロトコル
アッセイするそれぞれのウェル内に電極を挿入または使用する。
【０２２７】
電流制御増幅器を用いて刺激パルス波を３秒間送達する。非刺激の強度を得るために２秒間の刺激前記録を行なう。静止期への弛緩を検査するために５秒間の刺激後記録を行なう。
【０２２８】
データ分析
データは、４６０ｎｍおよび５８０ｎｍのチャネルで測定した、バックグラウンドを減算した発光強度の正規化した比として分析および報告する。その後、バックグラウンド強度をそれぞれのアッセイチャネルから減算する。バックグラウンド強度は、細胞を用いずに同様に処理したアッセイウェルからの同じ期間中の発光強度を測定することによって得る。その後、時間の関数としての応答を以下の式を用いて得られた比として報告する：
【０２２９】
【数３】
2011526919.tif 000073
データは初期の（Ｒｉ）および最終の（Ｒｆ）の比を計算することによってさらに換算する。これらは、刺激前の期間の一部またはすべての間、および刺激期間中のサンプル点の間の平均の比の値である。その後、刺激に対する応答Ｒ＝Ｒｆ／Ｒｉを計算する。
【０２３０】
対照応答は、テトラカインなどの所望の特性を有する化合物の存在下（陽性対照）、および薬理学的薬剤の非存在下（陰性対照）においてアッセイを行なうことによって得られる。陰性（Ｎ）および陽性（Ｐ）対照に対する応答を上記のように計算する。化合物のアンタゴニスト活性Ａは以下のように定義する：
【０２３１】
【数４】
2011526919.tif 000074
［式中、Ｒは試験化合物の応答の比である］。
【０２３２】
ＮａＶの活性および試験化合物の阻害のための電気生理学的アッセイ
パッチクランプ電気生理学的を用いて、後根神経節ニューロンにおけるナトリウムチャネル遮断剤の有効性および選択性を評価した。ラットニューロンを後根神経節から単離し、２〜１０日間、ＮＧＦ（５０ｎｇ／ｍｌ）の存在下で培養中に維持した（Ｂ２７、グルタミンおよび抗生物質を添加したＮｅｕｒｏｂａｓａｌＡからなる培養培地）。小径ニューロン（侵害受容器、直径８〜１２μｍ）を視覚的に同定し、増幅器に接続した先の細いガラス電極でプローブした（Ａｘｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）。「電位固定」モードを用いて、細胞を−６０ｍＶに保って化合物のＩＣ５０を評価した。さらに、「電流クランプ」モードを用いて、電流の注入に応答した活動電位の発生を遮断することにおける化合物の有効性を試験した。これらの実験の結果は、化合物の有効性プロフィールの定義に寄与している。
【０２３３】
ＤＲＧニューロンにおける電位固定アッセイ
パッチクランプ技術の全細胞変形を用いて、ＴＴＸ耐性ナトリウム電流をＤＲＧ細胞体から記録した。記録は室温（約２２℃）で、厚肉ホウケイ酸ガラス電極を用いて行なった（ＷＰＩ、抵抗３〜４Ｍ、Ａｘｏｐａｔｃｈ  ２００Ｂ増幅器を使用（Ａｘｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）。全細胞の構成を確立した後、記録を開始する前にピペット溶液を細胞内で平衡化させるために約１５分間置いた。電流を２〜５ｋＨｚでローパスフィルターし、１０ｋＨｚでデジタルサンプリングした。直列抵抗を６０〜７０％補償し、実験全体にわたって連続的に監視した。細胞内ピペット溶液と外部記録溶液との間の液間電位差（−７ｍＶ）はデータ分析で考慮しなかった。試験溶液は重力駆動高速灌流システム（ＳＦ−７７、Ｗａｒｎｅｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を用いて細胞に施用した。
【０２３４】
用量応答関係は、電位固定モードで、細胞を実験特異的な保持電位から＋１０ｍＶの試験電位に６０秒毎に１回繰り返して脱分極することによって決定した。遮断効果は次の試験濃度に進む前にプラトーに達させた。
【０２３５】
溶液
細胞内溶液：Ｃｓ−Ｆ（１３０ｍＭ）、ＮａＣｌ（１０ｍＭ）、ＭｇＣｌ２（１ｍＭ）、ＥＧＴＡ（１．５ｍＭ）、ＣａＣｌ２（０．１ｍＭ）、ＨＥＰＥＳ（１０ｍＭ）、グルコース（２ｍＭ）、ｐＨ＝７．４２、２９０ｍＯｓｍ。
【０２３６】
細胞外溶液：ＮａＣｌ（１３８ｍＭ）、ＣａＣｌ２（１．２６ｍＭ）、ＫＣｌ（５．３３ｍＭ）、ＫＨ２ＰＯ４（０．４４ｍＭ）、ＭｇＣｌ２（０．５ｍＭ）、ＭｇＳＯ４（０．４１ｍＭ）、ＮａＨＣＯ３（４ｍＭ）、Ｎａ２ＨＰＯ４（０．３ｍＭ）、グルコース（５．６ｍＭ）、ＨＥＰＥＳ（１０ｍＭ）、ＣｄＣｌ２（０．４ｍＭ）、ＮｉＣｌ２（０．１ｍＭ）、ＴＴＸ（０．２５×１０−３ｍＭ）。
【０２３７】
化合物のＮａＶチャネル阻害活性の電流クランプアッセイ
Ｍｕｌｔｉｐｌａｍｐ  ７００Ａ増幅器（Ａｘｏｎ  Ｉｎｓｔ）を用いて細胞を全細胞構成で電流クランプした。ボロシリケート製ピペット（４〜５メガオーム）に以下を満たした：１５０ｍＭのＫ−グルコネート、１０ｍＭのＮａＣｌ、０．１ｍＭのＥＧＴＡ、１０ｍＭのＨｅｐｅｓ、２ｍＭのＭｇＣｌ２（ＫＯＨでｐＨ７．３４に緩衝した）。細胞は以下に浸した：１４０ｍＭのＮａＣｌ、３ｍＭのＫＣｌ、１ｍＭのＭｇＣｌ２、１ｍＭのＣａＣｌ２、および１０ｍＭのＨｅｐｅｓ）。密封を形成する前にピペット電位をゼロにし、液間電位差は収集中に補正しなかった。記録は室温で行なった。
【０２３８】
本明細書中の表２に例示した化合物は、表４に提示するように、本明細書中で上述したアッセイを用いて測定して１つまたは複数のナトリウムチャネルに対して活性がある。
【０２３９】
【表４】
2011526919.tif 000075
当業者には明らかなように、範囲から逸脱せずに本明細書中に記載した実施形態の多くの改変および変形を行ない得る。本明細書中に記載した具体的な実施形態は例としてのみ提供する。
【国際調査報告】
2011526919.tif 000083
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