(57)【要約】  本発明は、２−メチレン−１９，２６−ジノル−（２０Ｓ，２２Ｅ，２５Ｒ）−ビタミンＤ類似物質、特定的には、２−メチレン−１９，２６−ジノル−（２０Ｓ，２２Ｅ，２５Ｒ）−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３、並びにこれらの医薬としての使用を開示する。この化合物は、転写活性を示し、未分化細胞の増殖を抑止し、単球への分化を誘発するという顕著な活性を示し、したがって、このことは、抗癌剤としての使用、および乾癬のような皮膚疾患の治療、およびしわ、皮膚のたるみ、乾燥肌、不十分な皮脂分泌のような皮膚の状態のための使用の証拠となる。また、この化合物は、天然ホルモンである１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３と比較して、ｉｎ  ｖｉｖｏで骨のカルシウムを導入する活性を示さず、腸のカルシウムを移動する活性が比較的低く、したがって、ヒトの自己免疫障害または炎症性疾患、および腎性骨ジストロフィーを治療するために使用することができる。また、この化合物は、肥満を治療または予防するために使用することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下式を有する化合物であって、
【化１】
2011527699.tif 000009
式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３は、同じであっても異なっていてもよく、それぞれ、水素又はヒドロキシ保護基から選択される。
【請求項２】
Ｘ３が水素である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｘ１が水素である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３がすべてｔ−ブチルジメチルシリルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
有効な量の請求項１に記載の少なくとも１つの化合物を、医薬的に許容される賦形剤とともに含有する、医薬組成物。
【請求項６】
前記有効量が、前記組成物１ｇあたり約０．０１μｇ〜約１０００μｇを含む、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記有効量が、前記組成物１ｇあたり約０．１μｇ〜約５００μｇを含む、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項８】
下式を有する、２−メチレン−１９，２６−ジノル−（２０Ｓ，２２Ｅ，２５Ｒ）−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３。
【化２】
2011527699.tif 000010
【請求項９】
有効な量の２−メチレン−１９，２６−ジノル−（２０Ｓ，２２Ｅ，２５Ｒ）−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３を、医薬的に許容される賦形剤とともに含有する、医薬組成物。
【請求項１０】
前記有効量が、前記組成物１ｇあたり約０．０１μｇ〜約１０００μｇを含む、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記有効量が、前記組成物１ｇあたり約０．１μｇ〜約５００μｇを含む、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
有効な量の下式を有する化合物を、乾癬を患う対象に投与することを含む、乾癬を治療する方法であって、
【化３】
2011527699.tif 000011
式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３は、同じであっても異なっていてもよく、それぞれ、水素又はヒドロキシ保護基から選択される。
【請求項１３】
前記化合物が経口投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記化合物が非経口投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
前記化合物が経皮投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
前記化合物が局所投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１７】
前記化合物が直腸投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１８】
前記化合物が経鼻投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１９】
前記化合物が舌下投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項２０】
前記化合物が、約０．０１μｇ／日〜約１０００μｇ／日の用量で投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項２１】
前記化合物が、下式を有する、２−メチレン−１９，２６−ジノル−（２０Ｓ，２２Ｅ，２５Ｒ）−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３である、請求項１２に記載の方法。
【化４】
2011527699.tif 000012
【請求項２２】
白血病、結腸癌、乳癌、皮膚癌又は前立腺癌からなる群より選択される疾患を患う対象に、有効な量の下式を有する化合物を投与することを含む、前記疾患を治療する方法であって、
【化５】
2011527699.tif 000013
式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３は、同じであっても異なっていてもよく、それぞれ、水素又はヒドロキシ保護基から選択される。
【請求項２３】
前記化合物が経口投与される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記化合物が非経口投与される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
前記化合物が経皮投与される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２６】
前記化合物が直腸投与される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２７】
前記化合物が経鼻投与される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２８】
前記化合物が舌下投与される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２９】
前記化合物が、約０．０１μｇ／日〜約１０００μｇ／日の用量で投与される、請求項２２に記載の方法。
【請求項３０】
前記化合物が、下式を有する、２−メチレン−１９，２６−ジノル−（２０Ｓ，２２Ｅ，２５Ｒ）−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３である、請求項２２に記載の方法。
【化６】
2011527699.tif 000014
【請求項３１】
多発性硬化症、ループス、糖尿病、移植片対宿主拒絶反応、臓器移植の拒絶反応からなる群より選択される自己免疫疾患を患う対象に、有効な量の下式を有する化合物を投与することを含む、前記疾患を治療する方法であって、
【化７】
2011527699.tif 000015
式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３は、同じであっても異なっていてもよく、それぞれ、水素又はヒドロキシ保護基から選択される。
【請求項３２】
前記化合物が経口投与される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記化合物が非経口投与される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
前記化合物が経皮投与される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３５】
前記化合物が直腸投与される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３６】
前記化合物が経鼻投与される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３７】
前記化合物が舌下投与される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３８】
前記化合物が、約０．０１μｇ／日〜約１０００μｇ／日の用量で投与される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３９】
前記化合物が、下式を有する、２−メチレン−１９，２６−ジノル−（２０Ｓ，２２Ｅ，２５Ｒ）−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３である、請求項３１に記載の方法。
【化８】
2011527699.tif 000016
【請求項４０】
関節リウマチ、喘息、炎症性腸疾患からなる群より選択される炎症性疾患を患う対象に、有効な量の下式を有する化合物を投与することを含む、前記疾患を治療する方法であって、
【化９】
2011527699.tif 000017
式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３は、同じであっても異なっていてもよく、それぞれ、水素又はヒドロキシ保護基から選択される。
【請求項４１】
前記化合物が経口投与される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記化合物が非経口投与される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４３】
前記化合物が経皮投与される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４４】
前記化合物が直腸投与される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４５】
前記化合物が経鼻投与される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４６】
前記化合物が舌下投与される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４７】
前記化合物が、約０．０１μｇ／日〜約１０００μｇ／日の用量で投与される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４８】
前記化合物が、下式を有する、２−メチレン−１９，２６−ジノル−（２０Ｓ，２２Ｅ，２５Ｒ）−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３である、請求項４０に記載の方法。
【化１０】
2011527699.tif 000018
【請求項４９】
しわ、十分な皮膚の堅さが失われること、十分な皮膚の水分が失われること、不十分な皮脂分泌からなる群より選択される皮膚の状態を有する対象に、有効な量の下式を有する化合物を投与することを含む、前記状態を治療する方法であって、
【化１１】
2011527699.tif 000019
式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３は、同じであっても異なっていてもよく、それぞれ、水素又はヒドロキシ保護基から選択される。
【請求項５０】
前記化合物が経口投与される、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記化合物が非経口投与される、請求項４９に記載の方法。
【請求項５２】
前記化合物が経皮投与される、請求項４９に記載の方法。
【請求項５３】
前記化合物が局所投与される、請求項４９に記載の方法。
【請求項５４】
前記化合物が直腸投与される、請求項４９に記載の方法。
【請求項５５】
前記化合物が経鼻投与される、請求項４９に記載の方法。
【請求項５６】
前記化合物が舌下投与される、請求項４９に記載の方法。
【請求項５７】
前記化合物が、約０．０１μｇ／日〜約１０００μｇ／日の用量で投与される、請求項４９に記載の方法。
【請求項５８】
前記化合物が、下式を有する、２−メチレン−１９，２６−ジノル−（２０Ｓ，２２Ｅ，２５Ｒ）−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３である、請求項４９に記載の方法。
【化１２】
2011527699.tif 000020
【請求項５９】
腎性骨ジストロフィーを患う対象に、有効な量の下式を有する化合物を投与することを含む、腎性骨ジストロフィーを治療する方法であって、
【化１３】
2011527699.tif 000021
式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３は、同じであっても異なっていてもよく、それぞれ、水素又はヒドロキシ保護基から選択される。
【請求項６０】
前記化合物が経口投与される、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
前記化合物が非経口投与される、請求項５９に記載の方法。
【請求項６２】
前記化合物が経皮投与される、請求項５９に記載の方法。
【請求項６３】
前記化合物が直腸投与される、請求項５９に記載の方法。
【請求項６４】
前記化合物が経鼻投与される、請求項５９に記載の方法。
【請求項６５】
前記化合物が舌下投与される、請求項５９に記載の方法。
【請求項６６】
前記化合物が、約０．０１μｇ／日〜約１０００μｇ／日の用量で投与される、請求項５９に記載の方法。
【請求項６７】
前記化合物が、下式を有する、２−メチレン−１９，２６−ジノル−（２０Ｓ，２２Ｅ，２５Ｒ）−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３である、請求項５９に記載の方法。
【化１４】
2011527699.tif 000022
【請求項６８】
動物の肥満を治療するか、又は予防する、脂肪細胞の分化を阻害する、ＳＣＤ−１遺伝子の転写を阻害する、及び／又は体脂肪を減らすことが必要な動物に、有効な量の下式を有する化合物を投与することを含む、動物の肥満を治療するか、又は予防する方法、脂肪細胞の分化を阻害する方法、ＳＣＤ−１遺伝子の転写を阻害する方法、及び／又は動物の体脂肪を減らす方法であって、
【化１５】
2011527699.tif 000023
式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３は、同じであっても異なっていてもよく、それぞれ、水素又はヒドロキシ保護基から選択される。
【請求項６９】
前記化合物が経口投与される、請求項６８に記載の方法。
【請求項７０】
前記化合物が非経口投与される、請求項６８に記載の方法。
【請求項７１】
前記化合物が経皮投与される、請求項６８に記載の方法。
【請求項７２】
前記化合物が直腸投与される、請求項６８に記載の方法。
【請求項７３】
前記化合物が経鼻投与される、請求項６８に記載の方法。
【請求項７４】
前記化合物が舌下投与される、請求項６８に記載の方法。
【請求項７５】
前記化合物が、約０．０１μｇ／日〜約１０００μｇ／日の用量で投与される、請求項６８に記載の方法。
【請求項７６】
前記化合物が、下式を有する、２−メチレン−１９，２６−ジノル−（２０Ｓ，２２Ｅ，２５Ｒ）−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３である、請求項６８に記載の方法。
【化１６】
2011527699.tif 000024
【請求項７７】
前記動物がヒトである、請求項６８に記載の方法。
【請求項７８】
前記動物が飼育されている動物である、請求項６８に記載の方法。
【請求項７９】
前記動物が農業用動物である、請求項６８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ビタミンＤ化合物に関し、さらに特定的には、２−メチレン−１９，２６−ジノル−（２０Ｓ，２２Ｅ，２５Ｒ）−ビタミンＤ類似物質、及びこれらの医薬としての使用に関する。
【０００２】
天然ホルモンである１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３、及びそのエルゴステロール群の類似物質、すなわち、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ２は、動物及びヒトにおけるカルシウムホメオスタシスの極めて強力な調整剤であることが知られており、細胞分化におけるこれらの活性も、Ｏｓｔｒｅｍ  ｅｔ  ａｌ．によって、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８４、２６１０（１９８７）で確立されている。１α−ヒドロキシビタミンＤ３、１α−ヒドロキシビタミンＤ２、種々の側鎖が認定されているビタミン及びフッ素化された類似物質を含め、これらの代謝物の多くの構造類似物質が調製され、試験されている。これらの化合物のうち、いくつかは、細胞分化及びカルシウム調節において興味深い分離活性を示す。この活性の差は、腎性骨ジストロフィー、ビタミンＤ抵抗性くる病、骨粗鬆症、乾癬、特定の悪性腫瘍といった種々の疾患の治療で有用であり得る。
【０００３】
別の種類のビタミンＤ類似物質、すなわち、いわゆる１９−ノル−ビタミンＤ化合物は、ビタミンＤ系では典型的なＡ環の環外メチレン基（炭素１９）が２個の水素原子と置き換わっていることを特徴とする。このような１９−ノル−類似物質（例えば、１α，２５−ジヒドロキシ−１９−ノル−ビタミンＤ３）の生物学的試験は、細胞分化を誘導する高い能力を有し、カルシウム代謝活性がきわめて低いという選択的な活性プロフィールを明らかにした。従って、これらの化合物は、悪性腫瘍の治療、または種々の皮膚障害の治療の治療薬剤として有用な可能性を秘めている。このような１９−ノル−ビタミンＤ類似物質の２つの異なる合成方法が記載されている（Ｐｅｒｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．３１、１８２３（１９９０）；Ｐｅｒｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．３２、７６６３（１９９１）、ＤｅＬｕｃａ  ｅｔ  ａｌ．、米国特許第５，０８６，１９１号）。
【０００４】
米国特許第４，６６６，６３４において、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３の２β−ヒドロキシ類似物質及びアルコキシ類似物質（例えば、ＥＤ−７１）が記載されており、骨粗鬆症の有望な薬物として、及び抗腫瘍剤として、中外グループによって試験されている。また、Ｏｋａｎｏ  ｅｔ  ａｌ．、Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１６３、１４４４（１９８９）を参照。１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３の他の２−置換された（ヒドロキシアルキルで、例えば、ＥＤ−１２０、フルオロアルキル基で）Ａ環類似物質も、側鎖にシクロプロプル基を有する類似物質（例えば、カルシポトリエンとして知られており、Ｎｉｓｈｉｉ  ｅｔ  ａｌ、米国特許第５，０６３，２２１号に記載される、ＭＣ−９０３）と同様に、調製され、試験されている（Ｍｉｙａｍｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．４１、１１１１（１９９３）；Ｎｉｓｈｉｉ  ｅｔ  ａｌ．、Ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ  Ｉｎｔ．Ｓｕｐｐｌ．１、１９０（１９９３）；Ｐｏｓｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５９、７８５５（１９９４）、及び、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．６０、４６１７（１９９５））。
【０００５】
１α，２５−ジヒドロキシ−１９−ノル−ビタミンＤ３の２−置換された類似物質、すなわち、２位で、ヒドロキシ基またはアルコキシ基で置換された化合物（ＤｅＬｕｃａ  ｅｔ  ａｌ．、米国特許第５，５３６，７１３号）、２−アルキル基で置換された化合物（ＤｅＬｕｃａ  ｅｔ  ａｌ、米国特許第５，９４５，４１０号）、および２−アルキリデン基で置換された化合物（ＤｅＬｕｃａ  ｅｔ  ａｌ、米国特許第５，８４３，９２８号）も合成されており、これらは、興味深く選択的な活性プロフィールを示す。これらのすべての研究は、ビタミンＤ受容体の結合部位が、合成されたビタミンＤ類似物質のＣ−２に異なる置換基を受け入れることが可能であることを示す。
【０００６】
薬理学的に重要なビタミンＤ化合物である１９−ノル群を調査する努力を続けていく中で、炭素２（Ｃ−２）にメチレン置換基が存在し、炭素１（Ｃ−１）にヒドロキシル基が存在し、炭素２０（Ｃ−２０）に短い側鎖が結合していることを特徴とする類似物質も合成され、試験されている。１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−プレグナカルシフェロールは、米国特許第６，５６６，３５２号に記載されており、一方、１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールは、米国特許第６，５７９，８６１号に記載されており、１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ビスホモプレグナカルシフェロールは、米国特許第６，６２７，６２２号に記載されている。これら３種類の化合物はすべて、ビタミンＤ受容体に対して相対的に高い結合活性を有しており、比較的高い細胞分化活性を有しているが、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３と比較して、カルシウム血症活性は、それがあったとしても非常に低い。これらの生物学的活性は、’３５２特許、’８６１特許、’６２２特許に記載されているように、これらの化合物を、種々の医薬用途のすぐれた候補物質にする。
【０００７】
１７−エンビタミンＤ化合物、ならびに側鎖に二重結合を有するビタミンＤ化合物も知られており、種々の薬理学的用途が提案されている。骨粗鬆症のような骨の疾患、乾癬のような皮膚障害、白血病のような癌、しわのような美容に関する状態は、このような化合物で提案されている用途のうち、ほんのいくつかである。１７−エン化合物は、米国特許第５，５４５，６３３号；第５，９２９，０５６号、第６，３９９，７９７号に記載されており、一方、二重結合を有する側鎖を有する２−アルキリデン化合物は、例えば、米国特許第５，８４３，９２８号に記載されている。
【０００８】
環Ａの炭素−２の位置で、メチルのようなアルキル基、またはメチレンのようなアルキリデン基で置換されており、標準的な１つ以上のビタミンＤ３置換基を持っていない側鎖を有する１９−ノルビタミンＤ化合物も知られており、種々の薬理学的用途が提案されている。例えば、多くの２α−メチル−１９，２６，２７−トリノル類似物質が、米国出願番号第２００７／０２８７０４号に記載されており、公開されている米国出願番号第２００７／０２７０３９１に記載されており、多くの２−メチレン−１９，２６，２７−トリノル類似物質が、公開されている米国出願番号第２００７／０２４９５６７号に記載されている。それに加えて、２α−メチル−１９−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシ−ビスホモプレグナカルシフェロールが、公開されている米国出願番号第２００７／０２５４８５７号に記載されており、多くの２−メチレン−１９，２６−ジノルビタミンＤ類似物質は、公開されている米国出願番号第２００７／０１９１３１７号および公開されている米国出願番号第２００７／０１９１３１６号に記載されている。
【発明の概要】
【０００９】
本発明は、２−メチレン−１９，２６−ジノル−（２０Ｓ，２２Ｅ，２５Ｒ）−ビタミンＤ類似物質、それらの生物学的活性、及びそれらの化合物の種々の薬理学的用途に関する。これまでに知られていない、これらの新規ビタミンＤ化合物は、２−位（Ｃ−２）にメチレン基を有し、側鎖の２５−位（Ｃ−２５）に接続したヒドロキシル置換基を有し、通常は側鎖の２６位（Ｃ−２６）に位置しているメチル基が、水素原子と置き換わっており、二重結合が、側鎖の炭素原子２２と２３（Ｃ−２２とＣ−２３）の間に位置する１９−ノル−ビタミンＤ類似物質である。好ましいビタミンＤ類似物質は、２−メチレン−１９，２６−ジノル−（２０Ｓ，２２Ｅ，２５Ｒ）−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３（以下、「ＳＯＲ−１」と称する）である。
【００１０】
構造的に、これらの２−メチレン−１９，２６−ジノル−（２０Ｓ，２２Ｅ，２５Ｒ）−ビタミンＤ類似物質は、以下に示される一般式Ｉによって特徴づけられ、
【化１】
2011527699.tif 000002
式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３は、同じであっても異なっていてもよく、それぞれ、水素又はヒドロキシ保護基から選択される。好ましい類似物質は、以下の式Ｉａを有する、２−メチレン−１９，２６−ジノル−（２０Ｓ，２２Ｅ，２５Ｒ）−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３である。
【化２】
2011527699.tif 000003
上の化合物Ｉ、特にＩａは、望ましく、極めて有益な生物学的活性パターンを示す。これらの化合物は、ビタミンＤ受容体に対し、比較的に結合性が高いことを特徴とし、天然のホルモン１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３よりもほんのわずか低い。これらの化合物は、特に、推奨される低い用量では、腸のカルシウム輸送をｉｎ  ｖｉｖｏで促進する能力は比較的低い。これらは、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３と比較して、低い活性を有するものと分類され、従って、腸のカルシウム輸送活性をｉｎ  ｖｉｖｏで刺激する能力は低いと分類される。これらの化合物Ｉ、特にＩａは、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３と比較して、骨からカルシウムを移動させる能力も極めて低く、これらは、骨のカルシウムを移動させる活性は実質的にないと分類されるであろう。プレプロ副甲状腺ホルモン遺伝子（Ｄａｒｗｉｓｈ  ＆  ＤｅＬｕｃａ、Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．３６５、１２３−１３０、１９９９）および副甲状腺の増殖を抑制する場合、血清カルシウムが生理学的レベルを超えた値まで上がることは望ましくない。骨のカルシウムを移動させる活性は相対的にないが、細胞分化に対しては非常に活性である、これらの類似物質は、腎性骨ジストロフィーの二次性副甲状腺機能亢進症を抑制するための治療として有用であると予想される。
【００１１】
また、本発明の化合物Ｉ、特にＩａは、免疫系の失調によって特徴づけられるヒトの障害、例えば、多発性硬化症、ループス、糖尿病、移植片対宿主拒絶反応、臓器移植の拒絶反応を含む自己免疫疾患の治療及び予防、さらに、関節リウマチ、喘息のような炎症性疾患、セリアック病、潰瘍性大腸炎、クローン病のような炎症性腸疾患に特に適していることが発見されている。座瘡、脱毛症、高血圧は、本発明の化合物で治療し得る他の状態である。
【００１２】
上の化合物Ｉ、特にＩａは、比較的高い細胞分化活性と、転写を促進することによっても特徴づけられる。従って、これらの化合物は、乾癬を治療するため、または抗癌剤、特に、白血病、結腸癌、乳癌、皮膚癌、前立腺癌の抗癌剤として治療薬剤も提供する。それに加えて、これらが比較的高い細胞分化活性を有するため、これらの化合物は、しわ、十分な皮膚の水分が失われること、すなわち、乾燥肌、十分な皮膚の堅さが失われること、すなわち、皮膚のたるみ、不十分な皮脂分泌を含む種々の皮膚の状態を治療するための治療薬剤を提供する。従って、これらの化合部物の使用は、皮膚を保湿するだけではなく、皮膚の障壁機能も高める。
【００１３】
式Ｉ、特に式Ｉａの化合物は、肥満を予防するか、または治療し、脂肪細胞の分化を阻害し、ＳＣＤ−１遺伝子の転写を阻害し、及び／又は、動物対象の体脂肪を減らすことにも有用である。従って、ある実施形態では、肥満を予防するか、または治療する方法、脂肪細胞の分化を阻害する方法、ＳＣＤ−１遺伝子の転写を阻害する方法、及び／又は動物対象の体脂肪を減らす方法は、動物対象に、式Ｉの１つ以上の化合物、または式Ｉの１つ以上の化合物を含む医薬組成物を有効な量投与することを含む。１つ以上の化合物または医薬組成物を対象に投与すると、脂肪細胞の分化を阻害し、遺伝子の転写を阻害し、及び／又は動物対象において体脂肪を減らす。
【００１４】
上述の１つ以上の化合物は、上述の疾患および障害を治療するために、組成物の約０．０１μｇ／ｇ〜約１０００μｇ／ｇの量で、好ましくは、組成物の約０．１μｇ／ｇ〜約５００μｇ／ｇの量で組成物中に存在してもよく、約０．０１μｇ／日〜約１０００μｇ／日、好ましくは、約０．１μｇ／日〜約５００μｇ／日の容量で、局所投与、経皮投与、経口投与、直腸投与、経鼻投与、舌下投与または非経口投与されてもよい。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
図面において、図１〜５は、以下、「１，２５（ＯＨ）２Ｄ３」と称する天然のホルモンである１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３と比較した、以下「ＳＯＲ−１」と称する２−メチレン−１９，２６−ジノル−（２０Ｓ，２２Ｅ，２５Ｒ）−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３の種々の生物学的活性を示す。
【図１】図１は、全長組み換えラットビタミンＤ受容体に対する結合について、［３Ｈ］−１，２５−（ＯＨ）２−Ｄ３と競合する、ＳＯＲ−１および１，２５（ＯＨ）２Ｄ３の相対活性を示すグラフである。
【図２】図２は、ＳＯＲ−１および１，２５（ＯＨ）２Ｄ３の濃度の関数として、ＨＬ−６０細胞分化の割合（％）を示すグラフである。
【図３】図３は、１，２５（ＯＨ）２Ｄ３のｉｎ  ｖｉｔｒｏでの転写活性をＳＯＲ−１と比較して示すグラフである。
【図４】図４は、動物の一群において、１，２５（ＯＨ）２Ｄ３が、骨のカルシウムを動員する活性をＳＯＲ−１と比較して示すグラフである。
【図５】図５は、動物の一群において、１，２５（ＯＨ）２Ｄ３が、腸のカルシウムを移動させる活性をＳＯＲ−１と比較して示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
炭素２（Ｃ−２）にメチレン置換基が存在し、側鎖の２５−位（Ｃ−２５）に接続したヒドロキシル置換基を有し、通常は側鎖の２６位（Ｃ−２６）に位置しているメチル基が、水素原子と置き換わっており、二重結合が、側鎖の炭素原子２２と２３（Ｃ−２２とＣ−２３）の間に位置する１９−ノルビタミンＤ類似物質である、２−メチレン−１９，２６−ジノル−（２０Ｓ，２２Ｅ，２５Ｒ）−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３（本明細書では「ＳＯＲ−１」と称する）が合成され、試験された。Ｃ−２位置にある比較的小さなメチレン基は、ビタミンＤ受容体への結合を妨害しないはずであるため、このようなビタミンＤ類似物質は、興味深い標的であると思われる。構造的に、この１９−ノル類似物質は、本明細書ですでに示された一般式Ｉａによって特徴づけられ、そのプロドラッグ（保護されたヒドロキシ形態）は、本明細書ですでに示された一般式Ｉによって特徴づけられる。
【００１７】
構造Ｉを有する２−メチレン−１９，２６−ジノル−（２０Ｓ，２２Ｅ，２５Ｒ）−ビタミンＤ類似物質の調製は、通常の一般的な方法によって行うことができ、すなわち、Ｗｉｎｄａｕｓ−Ｇｒｕｎｄｍａｎｎ型の二環式ケトンＩＩをアリルホスフィンオキシドＩＩＩと縮合させて、対応する２−メチレン−１９−ノル−ビタミンＤ類似物質ＩＶにした後、後者の化合物のＣ−１、Ｃ−３、Ｃ−２５で脱保護する（本明細書のスキームＩ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶを参照）。
【化３】
2011527699.tif 000004
構造ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶにおいて、Ｘ１基、Ｘ２基、Ｘ３基は、ヒドロキシ保護基であり、好ましくは、ｔ−ブチルジメチルシリルであり、縮合反応に感受性であるか、または縮合反応を妨害するであろう任意の官能基は、当該技術分野で十分に知られているように適切に保護されることも理解される。上に示されるプロセスは、収束型合成の概念の適用をあらわしており、ビタミンＤ化合物を調製するのに有効に適用されている［例えば、Ｌｙｔｈｇｏｅ  ｅｔ  ａｌ．、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ．Ｉ、５９０（１９７８）；Ｌｙｔｈｇｏｅ、Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｒｅｖ．９、４４９（１９８３）；Ｔｏｈ  ｅｔ  ａｌ．、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．４８、１４１４（１９８３）；Ｂａｇｇｉｏｌｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ．、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５１、３０９８（１９８６）；Ｓａｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５１、１２６４（１９８６）；Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５１、１２６９（１９８６）；ＤｅＬｕｃａ  ｅｔ  ａｌ．、米国特許第５，０８６，１９１；ＤｅＬｕｃａ  ｅｔ  ａｌ．、米国特許第５，５３６，７１３号］。
【００１８】
一般構造ＩＩのヒドリンダノンは既知ではない。これは、本明細書のスキームＩ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶに示されている方法によって調製することができる（化合物ＲＲ−２２の調製を参照）。
【００１９】
一般構造ＩＩＩの必要なホスフィンオキシドを調製するために、Ｐｅｒｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．３２、７６６３（１９９１）、ＤｅＬｕｃａ  ｅｔ  ａｌ．、米国特許第５，０８６，１９１に記載されているように、市販の（１Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−（−）−キナ酸から容易に得られるメチルキニケート（ｍｅｔｈｙｌ  ｑｕｉｎｉｃａｔｅ）誘導体から出発する合成経路が開発されている。
【００２０】
化合物ＩおよびＩａの全体的な合成プロセスは、「２−Ａｌｋｙｌｉｄｅｎｅ−１９−Ｎｏｒ−Ｖｉｔａｍｉｎ  Ｄ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ」という名称の米国特許第５，８４３，９２８号に示され、もっと完全に記載されており、この明細書は、特に、参照により組み込まれる。
【００２１】
この記載および特許請求の範囲で使用される場合、用語「ヒドロキシ保護基」は、ヒドロキシ官能基を一時的に保護するために一般的に使用される任意の基を示し、例えば、アルコキシカルボニル基、アシル基、アルキルシリル基又はアルキルアリールシリル基（以下、単に「シリル」基と称する）及びアルコキシアルキル基を意味する。アルコキシカルボニル保護基は、アルキル−Ｏ−ＣＯ−群であり、例えば、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ブトキシカルボニル、イソブトキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニルまたはアリルオキシカルボニルである。用語「アシル」は、すべての異性体形態での１〜６個の炭素を有するアルカノイル基、または１〜６個の炭素を有するカルボキシアルカノイル基、例えば、オキサリル基、マロニル基、スクシニル基、グルタリル基、または、芳香族アシル基、例えば、ベンゾイル基、またはハロ基、ニトロ基またはアルキル置換されたベンゾイル基を意味する。用語「アルキル」は、この記載および特許請求の範囲で使用される場合、すべての異性体形態での１〜１０個の炭素を有する直鎖または分枝鎖のアルキル基を意味する。アルコキシアルキル保護基は、メトキシメチル、エトキシメチル、メトキシエトキシメチル、またはテトラヒドロフラニルおよびテトラヒドロピラニルのような群である。好ましいシリル保護基は、トリメチルシリル、トリエチルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル、ジブチルメチルシリル、ジフェニルメチルシリル、フェニルジメチルシリル、ジフェニル−ｔ−ブチルシリル、および類似するアルキル化シリル基である。用語「アリール」は、フェニル置換されたフェニル基、またはアルキル置換されたフェニル基、ニトロ置換されたフェニル基、またはハロ置換されたフェニル基を表す。
【００２２】
「保護されたヒドロキシ」基は、ヒドロキシ官能基を一時的または永久的に保護するために一般的に使用される、例えば、すでに定義された、シリル基、アルコキシアルキル基、アシル基またはアルコキシカルボニル基のような、上述のいずれかの基によって誘導体化されたか、または保護されたヒドロキシ基である。用語「ヒドロキシアルキル」「重水素アルキル（ｄｅｕｔｅｒｏａｌｋｙｌ）」、「フルオロアルキル」は、それぞれ、１個以上のヒドロキシ基、重水素、またはフルオロ基で置換されたアルキル基を指す。
【００２３】
さらに特定的には、以下の実例となる例および記載、並びに化合物ＳＯＲ−１を調製する詳細な実例のための本明細書のスキームＩ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶに対して、参照がなされるべきである。
【００２４】
この例では、アラビア数字（１、２、３）によって特定される特定の生成物は、スキームＩ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶで特定される特定の構造を指す。
【実施例】
【００２５】
化学。紫外線（ＵＶ）吸収スペクトルは、記載した溶媒中、Ｈｉｔａｃｈｉ  Ｍｏｄｅｌ  ６０−１００  ＵＶ−ｖｉｓ分光計で記録された。１Ｈ核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＭ−５００  ＦＴ分光計を用い、重水素クロロホルム中、５００ＭＨｚで報告された。化学シフト（δ）は、内部Ｍｅ４Ｓｉ（δ０．００）からの低磁場で報告される。マススペクトルは、Ｋｒａｔｏｓ  ＤＳ−５０  ＴＣ装置に、Ｋｒａｔｏｓ  ＭＳ−５５データシステムを取り付け、７０ｅＶで報告された。試料を、直接挿入プローブを介し、１２０〜２５０℃に維持されているイオン源に導入した。高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）は、Ｗａｔｅｒｓ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ液体クロマトグラフをＭｏｄｅｌ  ６０００Ａ  溶媒送達システム、Ｍｏｄｅｌ  ６  ＵＫ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌインジェクタ、Ｍｏｄｅｌ  ４８６の調整可能な吸光度検出器、Ｒ  ４０１型示差屈折計を取り付けて行った。
【００２６】
（実施例１）
【００２７】
（３Ｒ）−１−ｐ−トルエンスルホニルオキシ−３−トリエチルシリルオキシ−ブタン（２）の調製
（Ｒ）−（−）−１，３−ブタンジオール１（１ｇ、１１．１ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（３０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（４．６ｍＬ、３．３３ｇ、３３ｍｍｏｌ）の無水塩化メチレン（２０ｍＬ）溶液を撹拌し、これに、ｐ−トルエンスルホニルクロリド（２．５４ｇ、１３．３ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。この反応混合物を、４℃で２２時間撹拌した。塩化メチレンを添加し、混合物を水で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによってヘキサン／酢酸エチル（８：２、次いで１：１）で精製して、トシレートを無色油状物として得た（２．１７ｇ、収率８０％）。
【００２８】
上述のトシレート（２．１７ｇ、８．９ｍｍｏｌ）および２，６−ルチジン（１．１４ｍＬ、１．０５ｇ、９．８ｍｍｏｌ）の無水塩化メチレン（１５ｍＬ）溶液を撹拌し、これに、トリエチルシリルトリフルオロメタンスルホネート（２ｍＬ、２．３５ｇ、８．９ｍｍｏｌ）を−５０℃で添加した。反応混合物を、室温まで加温し（４時間）、撹拌をさらに２０時間続けた。塩化メチレンを添加し、混合物を水で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによってヘキサン／酢酸エチル（９７：３）で精製し、生成物２を無色油状物として得た（３．１６ｇ、収率９９％）。
【００２９】
［α］Ｄ−２０．７（ｃ  １．６２，ＣＨＣｌ３）；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ７．７７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，ｏ−ＨＴｓ），７．３３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，ｍ−ＨＴｓ），４．１０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１−Ｈ２），３．９０（１Ｈ，ｍ，３−Ｈ），２．４３（３Ｈ，ｓ，ＭｅＴｓ），１．７２（２Ｈ，ｍ，２−Ｈ２），１．１０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，４−Ｈ３），０．８８（９Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，３ｘＳｉＣＨ２ＣＨ３），０．５０（６Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，３ｘＳｉＣＨ２ＣＨ３）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ）δ  １４４．６２（ｓ，ｐ−ＣＴｓ），１３３．０２（ｓ，ｉ−ＣＴｓ），１２９．７２（ｄ，ｍ−ＣＴｓ），１２７．８２（ｄ，ｏ−ＣＴｓ），６７．７８（ｔ，Ｃ−１），６４．４５（ｄ，Ｃ−３），３８．４６（ｔ，Ｃ−２），２３．８１（ｑ，Ｃ−４），２１．５１（ｑ，ＭｅＴｓ），６．７１（ｑ，ＳｉＣＨ２ＣＨ３），４．７６（ｔ，ＳｉＣＨ２ＣＨ３）；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ  ３５９（０．５，ＭＨ＋），３２９（５９，Ｍ＋−Ｃ２Ｈ５），２８５（２４），２５８（７１），２２９（２２），２１２（１４），１９９（１２），１５９（２８），１４５（４５），１１５（７２），９１（１００）；Ｃ１５Ｈ２５Ｏ４ＳＳｉとして算出した正確な質量（Ｍ＋−Ｃ２Ｈ５）３２９．１２４３、実測値３２９．１２４８。
【００３０】
（３Ｒ）−１−ヨード−３−トリエチルシリルオキシ−ブタン（３）の調製
【００３１】
トシレート２（３．１５ｇ、８．８ｍｍｏｌ）の無水アセトン（５０ｍＬ）溶液を撹拌し、これに、ヨウ化カリウム（８ｇ、４８ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を１０時間還流した。水（３０ｍＬ）を添加し、溶液を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機相を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによってヘキサン／酢酸エチル（９７：３）で精製して、アルコール３を無色油状物として得た（２．６ｇ、収率９４％）。
【００３２】
［α］Ｄ−３９．５（ｃ  １．７５，ＣＨＣｌ３）；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ３．８９（１Ｈ，ｍ，３−Ｈ），３．２２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１−Ｈ２），１．９１（２Ｈ，ｍ，２−Ｈ２），１．１６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，４−Ｈ３），０．９６（９Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，３  ｘ  ＳｉＣＨ２ＣＨ３），０．６１（６Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，３  ｘ  ＳｉＣＨ２ＣＨ３）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ）δ  ６８．１４（ｄ，Ｃ−３），４３．２４（ｔ，Ｃ−２），２３．４６（ｑ，Ｃ−４），６．８７（ｑ，ＳｉＣＨ２ＣＨ３），５．００（ｔ，ＳｉＣＨ２ＣＨ３），３．３７（ｔ，Ｃ−１）；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ  ３１４（１，Ｍ＋），２９９（３，Ｍ＋−ＣＨ３），２８５（１００，Ｍ＋−Ｃ２Ｈ５），２５７（７８，Ｍ＋−Ｃ４Ｈ９），２２８（５６），２１２（９９），１８４（６５），１５７（７０），１２９（４６），１１５（４６）；Ｃ８Ｈ１８ＯＩＳｉとして算出した正確な質量（Ｍ＋−Ｃ２Ｈ５）２８５．０１７２，実測値２８５．０１６７。
【００３３】
（３Ｒ）−ヒドロキシブチル−トリフェニルホスホニウムヨージド（４）の調製
【００３４】
ヨウ化物３（１．２４ｇ、３．９ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（５０ｍＬ）溶液を撹拌し、これに、トリフェニルホスフィン（３．１ｇ、１１．８ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を２日間還流した。アセトニトリルを減圧下で蒸発させ、酢酸エチル（５０ｍＬ）を添加し、混合物を室温で４時間撹拌した。濾過によって溶媒を除去した後、固体を酢酸エチルで洗浄し、濾別し、乾燥した。純粋なホスホニウム塩４（１．７４ｇ、収率９６％）を白色結晶として得た。
【００３５】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ  ８．００−７．７０（１５Ｈ，ｍ，ＨＰｈ），３．８９（１Ｈ，ｍ，３−Ｈ），３．４８（２Ｈ，ｍ，１−Ｈ２），１．７３（２Ｈ，ｍ，２−Ｈ２），１．１９（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，４−Ｈ３）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ）δ  １３６．４１（ｄ，ｐ−ＣＰｈ），１３４．９９（ｄ，ＪＣ−Ｐ＝１０．１Ｈｚ，ｍ−ＣＰｈ），１３１．７０（ｄ，ＪＣ−Ｐ＝１２．１Ｈｚ，ｏ−ＣＰｈ），１２０．０３（ｓ，ＪＣ−Ｐ＝８６．５Ｈｚ，ｉ−ＣＰｈ），６７．９４（ｄ，ＪＣ−Ｐ＝１７．１Ｈｚ，Ｃ−３），３２．５２（ｔ，ＪＣ−Ｐ＝４．０Ｈｚ，Ｃ−２），２３．３８（ｑ，Ｃ−４），１９．８５（ｔ，ＪＣ−Ｐ＝５４．３Ｈｚ，Ｃ−１）；Ｃ２２Ｈ２４ＯＰＩとして算出した正確な質量（Ｍ＋）３３５．１５６５，実測値３３５．１５６２。
【００３６】
（８Ｓ，２０Ｓ）−デス−Ａ，Ｂ−２０−（ヒドロキシメチル）プレグナン−８−オール（５）の調製
【００３７】
メタノール（２５０ｍＬ）及びピリジン（２．４４ｇ、２．５ｍＬ、３１ｍｍｏｌ）中のビタミンＤ２（３ｇ、７．６ｍｍｏｌ）溶液に、−７８℃で５０分間、オゾンを通気した。次いで、反応混合物に、１５分間酸素を流し、残留オゾンがを除去し、この溶液をＮａＢＨ４（０．７５ｇ、２０ｍｍｏｌ）で処理した。２０分後、第２の量のＮａＢＨ４（０．７５ｇ、２０ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温まで加温した。次いで、第３の量のＮａＢＨ４（０．７５ｇ、２０ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を１８時間撹拌した。反応物を水（４０ｍＬ）でクエンチし、溶液を減圧下で濃縮した。残渣を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機相を、１Ｍ  ＨＣｌ水溶液、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによってヘキサン／酢酸エチル（７５：２５）で精製し、ジオール５を白色結晶として得た（１．２１ｇ、収率７５％）。
【００３８】
ｍ．ｐ．１０６〜１０８℃；［α］Ｄ＋３０．２°（ｃ  １．４６，ＣＨＣｌ３）；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ４．０８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，８α−Ｈ），３．６３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．５，３．１Ｈｚ，２２−Ｈ），３．３８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．５，６．８Ｈｚ，２２−Ｈ），１．９９（１Ｈ，ｂｒ．ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ），１．０３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２１−Ｈ３），０．９５６（３Ｈ，ｓ，１８−Ｈ３）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ）δ  ６９．１６（ｄ，Ｃ−８），６７．７４（ｔ，Ｃ−２２），５２．９０（ｄ），５２．３３（ｄ），４１．８３（ｓ，Ｃ−１３），４０．１９（ｔ），３８．２０（ｄ），３３．５３（ｔ），２６．６２（ｔ），２２．５４（ｔ），１７．３６（ｔ），１６．５９（ｑ，Ｃ−２１），１３．５４（ｑ，Ｃ−１８）；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ  ２１２（２，Ｍ＋），１９４（３４，Ｍ＋−Ｈ２Ｏ），１７９（３３，Ｍ＋−Ｈ２Ｏ−ＣＨ３），１６３（１８，Ｍ＋−ＣＨ２ＯＨ−Ｈ２Ｏ），１３５（３６），１２５（５４），１１１（１００），９５（６３），８１（６７）；Ｃ１３Ｈ２２Ｏとして算出した正確な質量（Ｍ＋−Ｈ２Ｏ）１９４．１６７１，実測値１９４．１６６５。
【００３９】
（８Ｓ，２０Ｓ）−デス−Ａ，Ｂ−８−ベンゾイルオキシ−２０−（ヒドロキシメチル）プレグナン（６）の調製
【００４０】
ジオール５（０．６ｇ、２．８ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（１５ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の無水ピリジン（１０ｍＬ）溶液に、０℃で、塩化ベンゾイル（１．２ｇ、１ｍＬ、８．５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を４℃で２４時間撹拌し、塩化メチレン（１００ｍＬ）で希釈し、５％  ＨＣｌ水溶液、水、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮した。残渣（１．６５ｇ）を、室温で、ＫＯＨ（１ｇ，１５．５ｍｍｏｌ）の無水エタノール（３０ｍＬ）溶液で処理した。この反応混合物を３時間撹拌した後、ｐＨ＝６になるまで、氷および５％  ＨＣｌ水溶液を添加した。この溶液を、酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×３回）、合わせた有機相を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによってヘキサン／酢酸エチル（７５：２５）で精製して、アルコール６を無色油状物として得た（０．７８ｇ、収率８８％）。
【００４１】
［α］Ｄ＋５６．０（ｃ  ０．４８，ＣＨＣｌ３）；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３＋ＴＭＳ）δ  ８．０８−８．０２（２Ｈ，ｍ，ｏ−ＨＢｚ），７．５９−７．５３（１Ｈ，ｍ，ｐ−ＨＢｚ），７．５０−７．４０（２Ｈ，ｍ，ｍ−ＨＢｚ），５．４２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，８α−Ｈ），３．６５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．５，３．２Ｈｚ，２２−Ｈ），３．３９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．５，６．８Ｈｚ，２２−Ｈ），１．０８（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，２１−Ｈ３），１．０７（３Ｈ，ｓ，１８−Ｈ３）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ）δ  １６６．７０（ｓ，Ｃ＝Ｏ），１３２．９３（ｄ，ｐ−ＣＢｚ），１３０．０４（ｓ，ｉ−ＣＢｚ），１２９．７５（ｄ，ｏ−ＣＢｚ），１２８．５７（ｄ，ｍ−ＣＢｚ），７２．２７（ｄ，Ｃ−８），６７．９５（ｔ，Ｃ−２２），５２．９６（ｄ），５１．６０（ｄ），４２．１５（ｓ，Ｃ−１３），３９．９８（ｔ），３８．６１（ｄ），３０．７３（ｔ），２６．８１（ｔ），２２．９１（ｔ），１８．２０（ｔ），１６．８７（ｑ，Ｃ−２１），１３．８１（ｑ，Ｃ−１８）；  ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ  ３１６（５，Ｍ＋），３０１（３，Ｍ＋−Ｍｅ），２９９（１，Ｍ＋−ＯＨ），２９８（２，Ｍ＋−Ｈ２Ｏ），２８５（１０，Ｍ＋−ＣＨ２ＯＨ），２５７（６），２３０（９），１９４（８０），１３５（８４），１０５（１００）；Ｃ２０Ｈ２８Ｏ３として算出した正確な質量３１６．２０３８，実測値３１６．２０１９。
【００４２】
（８Ｓ，２０Ｓ）−デス−Ａ，Ｂ−８−ベンゾイルオキシ−２０−ホルミルプレグナン（７）の調製
【００４３】
無水塩化メチレン（５ｍＬ）及び無水ＤＭＳＯ（１ｍＬ）中のアルコール６（３２０ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．７０ｍＬ、０．５１ｇ、５．０５ｍｍｏｌ）溶液に、０℃で三酸化硫黄ピリジン錯体（０．９７ｇ、６．１ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を、アルゴン下、０℃で１時間撹拌し、次いで、濃縮した。残渣を酢酸エチルで希釈し、ブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによってヘキサン／酢酸エチル（９５：５）で精製して、アルデヒド７を油状物として得た（２５１ｍｇ、収率７９％）。
【００４４】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３＋ＴＭＳ）δ  ９．６０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．１Ｈｚ，ＣＨＯ），８．０５（２Ｈ，ｍ，ｏ−ＨＢｚ），７．５７（１Ｈ，ｍ，ｐ−ＨＢｚ），７．４５（２Ｈ，ｍ，ｍ−ＨＢｚ），５．４４（１Ｈ，ｓ，８α−Ｈ），２．３９（１Ｈ，ｍ，２０−Ｈ），２．０３（２Ｈ，ｄｍ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ），１．１５（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２１−Ｈ３），１．１０（３Ｈ，ｓ，１８−Ｈ３）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ）δ  ２０４．７８（ｄ，ＣＨＯ），１６６．７０（ｓ，Ｃ＝Ｏ），１３２．７８（ｄ，ｐ−Ｂｚ），１３０．６９（ｓ，ｉ−Ｂｚ），１２９．５０（ｄ，ｏ−Ｂｚ），１２８．３８，（ｄ，ｍ−Ｂｚ），７１．６６（ｄ，Ｃ−８），５１．３０（ｄ），５０．９５（ｄ），４９．２０（ｄ），４２．３８（ｓ，Ｃ−１３），３９．６２（ｔ），３０．４７（ｔ），２５．９９（ｔ），２２．９２（ｔ），１７．９２（ｔ），１３．９０（ｑ），１３．３５（ｑ）；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ  ３１４（１，Ｍ＋），２９９（０．５，Ｍ＋−Ｍｅ），２８６（１，Ｍ＋−ＣＯ），２８５（５，Ｍ＋−ＣＨＯ），２５７（１，Ｍ＋−Ｃ３Ｈ５Ｏ），２０９（１０，Ｍ＋−ＰｈＣＯ），１９２（３８），１３４（６０），１０５（１００），７７（５０）；Ｃ２０Ｈ２６Ｏ３として算出した正確な質量３１４．１８８２，実測値３１４．１８８７。
【００４５】
（８Ｓ，２０Ｒ）−デス−Ａ，Ｂ−８−ベンゾイルオキシ−２０−（ヒドロキシメチル）プレグナン（８）の調製
【００４６】
アルデヒド７（１８２ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（１０ｍＬ）に溶解し、４０％  ｎ−Ｂｕ４ＮＯＨ水溶液（０．７３ｍＬ、０．７２ｇ、１．１２ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を、アルゴン下、室温で１６時間撹拌し、塩化メチレン（１５ｍＬ）で希釈し、水で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによってヘキサン／酢酸エチル（９５：５）で精製して、アルデヒド７及び２０−エピマーの混合物（１４６ｍｇ、収率８０％）を比率約１：２で得た（１Ｈ  ＮＭＲによる）。
【００４７】
このアルデヒド混合物（１４６ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（５ｍＬ）に溶解し、ＮａＢＨ４（３２ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、エタノール（５ｍＬ）を滴下した。反応混合物を室温で３０分間撹拌し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液でクエンチした。混合物をエーテルで抽出し（２０ｍＬ×３回）、合わせた有機相を水で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによってヘキサン／酢酸エチル（９６：４→８０：２０）で精製して、所望の純粋な（２０Ｒ）−アルコール８（８０ｍｇ、収率５５％）を油状物として得て、８とその２０−エピマーとの混合物６（６３ｍｇ、収率４３％）を比率約１：３で得た（１Ｈ  ＮＭＲによる）。
【００４８】
［α］Ｄ＋５０．１（ｃ  １．０９，ＣＨＣｌ３）；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３＋ＴＭＳ）δ  ８．０５（２Ｈ，ｍ，ｏ−ＨＢｚ），７．５５（１Ｈ，ｍ，ｐ−ＨＢｚ），７．４４（２Ｈ，ｍ，ｍ−ＨＢｚ），５．４１（１Ｈ，ｓ，８α−Ｈ），３．７７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．４，３．３Ｈｚ，２２−Ｈ），３．４５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．４，７．４Ｈｚ，２２−Ｈ），１．０６７（３Ｈ，ｓ，１８−Ｈ３），０．９７３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２１−Ｈ３）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ）δ  １６６．３６（ｓ，Ｃ＝Ｏ），１３２．６１（ｄ，ｐ−ＣＢｚ），１３０．６３（ｓ，ｉ−ＣＢｚ），１２９．３９（ｄ，ｏ−ＣＢｚ），１２８．２３（ｄ，ｍ−ＣＢｚ），７１．９７（ｄ，Ｃ−８），６６．４２（ｔ，Ｃ−２２），５２．６５（ｄ），５１．３８（ｄ），４１．５８（ｓ，Ｃ−１３），３９．１６（ｔ），３７．４５（ｄ），３０．３８（ｔ），２６．２９（ｔ），２２．３５（ｔ），１７．８９（ｔ），１６．４２（ｑ，Ｃ−２１），１３．７８（ｑ，Ｃ−１８）；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ  ３１６（１６，Ｍ＋），３０１（５，Ｍ＋−Ｍｅ），２９９（２，Ｍ＋−ＯＨ），２９８（３，Ｍ＋−Ｈ２Ｏ），２８５（９，Ｍ＋−ＣＨ２ＯＨ），２５７（５），２４２（１１），２３０（８），１９４（６０），１４７（７１），１０５（１００）；Ｃ２０Ｈ２８Ｏ３として算出した正確な質量３１６．２０３８，実測値３１６．２０５０。
【００４９】
（８Ｓ，２０Ｒ）−デス−Ａ，Ｂ−８−ベンゾイルオキシ−２０−ホルミルプレグナン（９）の調製
【００５０】
無水塩化メチレン（５ｍＬ）及び無水ＤＭＳＯ（１ｍＬ）中のアルコール８（４０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（８８μＬ、６４ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）溶液に、０℃で三酸化硫黄ピリジン錯体（１２２ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を、アルゴン下、０℃で１時間撹拌し、次いで、濃縮した。残渣を酢酸エチルで希釈し、ブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによってヘキサン／酢酸エチル（９５：５）で精製して、アルデヒド９（３０ｍｇ、収率７６％）を油状物として得た。
【００５１】
［α］Ｄ＋２８．８（ｃ  ０．８８，ＣＨＣｌ３）；１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ９．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，ＣＨＯ），８．０２（２Ｈ，ｍ，ｏ−ＨＢｚ），７．５４（１Ｈ，ｍ，ｐ−ＨＢｚ），７．４３（２Ｈ，ｍ，ｍ−ＨＢｚ），５．４２（１Ｈ，ｓ，８α−Ｈ），２．３５（１Ｈ，ｍ，２０−Ｈ），２．０７（１Ｈ，ｍ），１．８７（１Ｈ，ｍ），１．０５（３Ｈ，ｓ，１８−Ｈ３），１．０４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２１−Ｈ３）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ）δ  ２０５．５１（ｄ，ＣＨＯ），１６６．３４（ｓ，Ｃ＝Ｏ），１３２．７６（ｄ，ｐ−ＣＢｚ），１３０．６２（ｓ，ｉ−ＣＢｚ），１２９．４７（ｄ，ｏ−ＣＢｚ），１２８．３５，（ｄ，ｍ−ＣＢｚ），７１．５２（ｄ，Ｃ−８），５２．０８（ｄ），５１．０８（ｄ），４８．４０（ｄ），４１．５５（ｓ，Ｃ−１３），３８．５４（ｔ），３０．４１（ｔ），２５．２８（ｔ），２２．０８（ｔ），１７．６８（ｔ），１４．４９（ｑ），１３．３８（ｑ）；  ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ  ３１４（２，Ｍ＋），２８５（３，Ｍ＋−ＣＨＯ），２０９（８，Ｍ＋−ＰｈＣＯ），１９２（３０，Ｍ＋−ＰｈＣＯＯＨ），１７７（１４），１３４（４５），１０５（１００），７７（５０）；Ｃ１９Ｈ２５Ｏ２として算出した正確な質量（Ｍ＋−ＣＨＯ）２８５．１８５５，実測値２８５．１８４９。
【００５２】
（８Ｓ，２０Ｓ）−デス−Ａ，Ｂ−８−ベンゾイルオキシ−２０−［（４Ｒ）−ヒドロキシ−ペンタ−（１Ｅ）−ｅｎ−ｙｌ］プレグナン（１０）の調製
【００５３】
ホスホニウム塩４（９７ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（５ｍＬ）懸濁物を撹拌し、これに、−２０℃で、ブチルリチウム（１．６Ｍ，３１７μＬ、０．５０ｍｍｏｌ）を添加した。溶液は深い橙色に変わった。１時間後、あらかじめ冷却しておいた（−２０℃）アルデヒド９（３０ｍｇ、９６μｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（２ｍＬ）溶液を添加し、反応混合物を、−２０℃で３時間撹拌し、室温で１８時間撹拌した。反応を水でクエンチし、混合物を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによってヘキサン／酢酸エチル（９５：５）で精製して、生成物１０を得た（２２ｍｇ、収率６１％）。
【００５４】
［α］Ｄ−２８．８（ｃ  ０．８，ＣＨＣｌ３）；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ８．０５（２Ｈ，ｍ，ｏ−ＨＢｚ），７．５５（１Ｈ，ｍ，ｐ−ＨＢｚ），７．４４（２Ｈ，ｍ，ｍ−ＨＢｚ），５．４１（１Ｈ，ｓ，８α−Ｈ），５．５０−５．３０（２Ｈ，ｍ，２２−Ｈ及び２３−Ｈ），３．８４（１Ｈ，ｍ，２５−Ｈ），１．２０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２７−Ｈ３），１．０４（３Ｈ，ｓ，１８−Ｈ３），０．９３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２１−Ｈ３）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ）δ  １６６．４５（ｓ，Ｃ＝Ｏ），１４０．７４（ｄ，Ｃ−２２），１３２．６７（ｄ，ｐ−ＣＢｚ），１３０．８６（ｓ，ｉ−ＣＢｚ），１２９．５３（ｄ，ｏ−ＣＢｚ），１２８．３２（ｄ，ｍ−ＣＢｚ），１２３．３３（ｄ，Ｃ−２３），７２．０８（ｄ，Ｃ−８），６７．７０（ｄ，Ｃ−２５），５６．３３（ｄ），５１．４８（ｄ），４２．４６（ｔ），４１．９４（ｓ，Ｃ−１３），４０．１６（ｄ），３９．４８（ｔ），３０．６０（ｔ），２６．８６（ｔ），２２．７４（ｑ，Ｃ−２７），２２．５０（ｔ），２１．４６（ｑ，Ｃ−２１），１７．８１（ｔ），１３．８９（ｑ，Ｃ−１８）；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ  ３７０（８，Ｍ＋），３５５（１，Ｍ＋−ＣＨ３），３２６（２，Ｍ＋−Ｃ２Ｈ４Ｏ），２８４（１２，Ｍ＋−Ｃ５Ｈ１０Ｏ），２６５（２，Ｍ＋−ＰｈＣＯ），２４８（２８，Ｍ＋−ＰｈＣＯＯＨ），２３０（９），２０４（１４），１８９（１０），１６２（６３），１３５（７１），１０５（１００）；Ｃ２４Ｈ３４Ｏ３Ｎａとして算出した正確な質量（ＭＮａ＋）３９３．２４０６，実測値３９３．２４０７。
【００５５】
（８Ｓ，２０Ｓ）−デス−Ａ，Ｂ−８−ベンゾイルオキシ−２０−［（４Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−ペンタ−（１Ｅ）−エニル］プレグナン（１１）の調製
【００５６】
アルコール１０（２２ｍｇ、５９μｍｏｌ）及び２，６−ルチジン（３０μＬ、２７ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）の無水塩化メチレン（３ｍＬ）溶液に、−２０℃で、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート（２９μＬ、３４ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を、アルゴン下、０℃で１時間撹拌した。反応を水でクエンチし、塩化メチレンで抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって、ヘキサン、次いでヘキサン／酢酸エチル（９７：３）で精製して、生成物１１を得た（２４ｍｇ、８４％）。
【００５７】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３＋ＴＭＳ）δ  ８．０５（２Ｈ，ｍ，ｏ−ＨＢｚ），７．５４（１Ｈ，ｍ，ｐ−ＨＢｚ），７．４２（２Ｈ，ｍ，ｍ−ＨＢｚ），５．４１（１Ｈ，ｓ，８α−Ｈ），５．４０−５．２０（２Ｈ，ｍ，２２−Ｈ及び２３−Ｈ），３．７８（１Ｈ，ｍ，２５−Ｈ），１．１１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２７−Ｈ３），１．０２（３Ｈ，ｓ，１８−Ｈ３），０．８８（９Ｈ，ｓ，Ｓｉ−ｔ−Ｂｕ），０．８２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２１−Ｈ３），０．０４（６Ｈ，ｓ，ＳｉＭｅ２）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ）δ  １６６．５２，１３８．８７，１３２．６６，１３０．９０，１２９．５５，１２８．３３，１２４．１７，７２．１５，６８．７４，５６．３８，５２．１８，４２．８９，４１．８８，４０．０８，３４．８６，３０．６１，２６．９８，２５．８０，２３．６７，２２．６８，１８．６１，１８．４８，１８．０３，１３．７８，−４．４７，−４．７５；Ｃ３０Ｈ４８Ｏ３ＳｉＮａとして算出した正確な質量（ＭＮａ＋）５０７．３２６７，実測値５０７．３２５４。
【００５８】
（８Ｓ，２０Ｓ）−デス−Ａ，Ｂ−２０−［（４Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−ペンタ−（１Ｅ）−エニル］プレグナン−８−オール（１２）の調製
【００５９】
ベンゾエート１１（２４ｍｇ、４８μｍｏｌ）の無水エタノール（５ｍＬ）溶液を撹拌し、これに、水酸化ナトリウムのエタノール（２．５Ｍ、２ｍＬ）溶液を添加し、反応混合物を１８時間還流した。この混合物を室温まで冷却し、５％ＨＣｌ水溶液で中和し、ジクロロメタンで抽出した。合わせた有機相を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによってヘキサン／酢酸エチル（９５：５）で精製して、アルコール１２を得た（１２ｍｇ、収率６５％）。
【００６０】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ５．４０−５．２５（２Ｈ，ｍ，２２−Ｈ及び２３−Ｈ），４．０２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，８α−Ｈ），３．７３（１Ｈ，ｍ，２５−Ｈ），１．１１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２７−Ｈ３），０．９２（３Ｈ，ｓ，１８−Ｈ３），０．８８（９Ｈ，ｓ，Ｓｉ−ｔ−Ｂｕ），０．８１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２１−Ｈ３），０．０４（６Ｈ，ｓ，ＳｉＭｅ２）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ）δ  １３８．８７，１２４．１５，６９．４５，６８．９４，５６．４３，５２．６６，４２．８９，４１．６８，４０．０８，３９．６３，３３．５４，２７．６０，２５．８０，２３．２４，２２．４８，１８．７８，１８．１６，１７．４３，１３．６８，−４．３９，−４．６９。
【００６１】
（２０Ｓ）−デス−Ａ，Ｂ−２０−［（４Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−ペンチル］プレグナン−８−オン（１３）の調製
【００６２】
アルコール１２（１０ｍｇ、２６μｍｏｌ）及びピリジニウム  ｐ−トルエンスルホネート（２ｍｇ、８μｍｏｌ）の無水塩化メチレン（５ｍＬ）溶液に、二クロム酸ピリジニウム（５１ｍｇ、１３８μｍｏｌ）を添加した。得られた懸濁物を室温で３時間撹拌した。反応混合物をＷａｔｅｒｓ  ｓｉｌｉｃａ  Ｓｅｐ−Ｐａｋカートリッジ（５ｇ）で濾過し、さらに、ヘキサン／酢酸エチル（８：２）で洗浄した。溶媒を除去した後、ケトン１３（６．７ｍｇ、収率６７％）を無色油状物として得た。
【００６３】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ５．３５−５．２２（２Ｈ，ｍ，２２−Ｈ及び２３−Ｈ），３．７４（１Ｈ，ｍ，２５−Ｈ），２．４１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．５，７．６Ｈｚ），１．１３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２７−Ｈ３），０．８９（９Ｈ，ｓ，Ｓｉ−ｔ−Ｂｕ），０．８４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２１−Ｈ３），０．６３（３Ｈ，ｓ，１８−Ｈ３），０．０５３（６Ｈ，ｓ，ＳｉＭｅ２）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ）δ  ２１２．１３，１３９．１２，１２４．４４，６８．６６，６２．２２，５６．４９，５０．０４，４２．６６，４１．０５，４０．１８，３３．８５，２７．１３，２５．８９，２４．０３，２３．７８，２１．６１，１８．９３，１８．１６，１２．７０，−４．３８，−４．７０；Ｃ２３Ｈ４２Ｏ２ＳｉＮａとして算出した正確な質量（ＭＮａ＋）４０１．２８５２，実測値４０１．２８４８。
【００６４】
（２０Ｓ，２５Ｒ）−２−メチレン−１９，２６−ジノル−２２−（Ｅ）−エン−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３（１５）の調製
【００６５】
ホスフィンオキシド１４（２５ｍｇ、４３μｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（４００μＬ）溶液に、−２０℃で、アルゴン下、撹拌しながら、ＰｈＬｉ（ジ−ｎ−ブチルエーテル中１．８Ｍ、３４μＬ、６１μｍｏｌ）をゆっくりと添加した。溶液は深い橙色に変わった。３０分後、混合物を−７８℃まで冷却し、あらかじめ冷却しておいた（−７８℃）ケトン１３（６．５ｍｇ、１７μｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（２００＋１００μＬ）溶液をゆっくりと添加した。この混合物を、アルゴン下、−７８℃で３時間撹拌し、０℃で１８時間撹拌した。酢酸エチルを添加し、有機相をブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させた。残渣をヘキサンに溶解し、Ｗａｔｅｒｓ  ｓｉｌｉｃａ  Ｓｅｐ−Ｐａｋカートリッジ（２ｇ）で濾過した。このカートリッジを、ヘキサン、ヘキサン／酢酸エチル（９９．５：０．５）で洗浄し、１９−ノルビタミン誘導体１５を得た（６ｍｇ、収率４８％）。次いで、このＳｅｐ−Ｐａｋを酢酸エチルで洗浄し、ジフェニルホスフィンオキシド１４（１１ｍｇ）を回収した。分析目的で、保護されたビタミン１５の試料を、ＨＰＬＣ（９．４×２５０ｍｍ  Ｚｏｒｂａｘ  Ｓｉｌカラム、４ｍＬ／分、ヘキサン／２−プロパノール（９９．９：０．１）溶媒系，Ｒｔ＝３．７０分）によってさらに精製した。
【００６６】
ＵＶ（ヘキサン中）λｍａｘ  ２６２．６，２５３．０，２４４．８ｎｍ；１Ｈ  ＮＭＲ（６００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ６．２２及び５．８４（それぞれ１Ｈ，それぞれｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，６−Ｈ及び７−Ｈ），５．３８−５．２７（２Ｈ，ｍ，２２−Ｈ及び２３−Ｈ），４．９７及び４．９１（それぞれ１Ｈ，それぞれｓ，＝ＣＨ２），４．４３（２Ｈ，ｍ，１β−Ｈ及び３α−Ｈ），３．７７（１Ｈ，ｍ，２５−Ｈ），２．８３（１Ｈ，ｄｍ，Ｊ＝１２．６Ｈｚ，９β−Ｈ），２．５２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．２，６．０Ｈｚ，１０α−Ｈ），２．４６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．６，４．５Ｈｚ，４α−Ｈ），２．３３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．２，２．９Ｈｚ，１０β−Ｈ），２．１８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．６，８．３Ｈｚ，４β−Ｈ），１．１２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２７−Ｈ３），０．８９８（９Ｈ，ｓ，Ｓｉ−ｔ−Ｂｕ），０．８９２（９Ｈ，ｓ，Ｓｉ−ｔ−Ｂｕ），０．８６７（９Ｈ，ｓ，Ｓｉ−ｔ−Ｂｕ），０．８４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２１−Ｈ３），０．５４（３Ｈ，ｓ，１８−Ｈ３），０．０８２（３Ｈ，ｓ，ＳｉＭｅ），０．０６７（３Ｈ，ｓ，ＳｉＭｅ），０．０５２（９Ｈ，ｓ，３  ｘ  ＳｉＭｅ），０．０２７（３Ｈ，ｓ，ＳｉＭｅ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ）δ  １５２．９８，１４１．２２，１３８．９８，１３２．７４，１２４．７４，１２２．４０，１１６．１１，１０６．２５，７２．５３，７１．６５，６８．７４，５６．６２，５６．１９，４７．６１，４５．６７，３８．５７，３６．１３，３５．９２，２８．７６，２７．３７，２６．１３，２５．８４，２５．７８，２３．６７，２３．４５，２２．３２，２０．８０，１８．７６，１８．２５，１８．１７，１２．２３，−４．３８，−４．７１，−４．８７，−５．０９；Ｃ４４Ｈ８２Ｏ３Ｓｉ３Ｎａとして算出した正確な質量（ＭＮａ＋）７６５．５４６８，実測値７６５．５４６１。
【００６７】
保護されたビタミン１５（４．５ｍｇ、６．０μｍｏｌ）を、ＴＨＦ（２ｍＬ）及びアセトニトリル（２ｍＬ）に溶解した。４８％  ＨＦ水のアセトニトリル溶液（比率１：９、２ｍＬ）を０℃で添加し、得られた混合物を室温で６時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を添加し、反応混合物を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）減圧下で濃縮した。残渣を、ヘキサン／酢酸エチル（８：２）２ｍＬで希釈し、Ｗａｔｅｒｓ  ｓｉｌｉｃａ  Ｓｅｐ−Ｐａｋカートリッジ（２ｇ）で濾過した。ヘキサン／酢酸エチル（８：２）で溶出し、次いで酢酸エチルで溶出し、粗生成物１６（２ｍｇ）を得た。ビタミン１６を、逆相ＨＰＬＣ［９．４×２５０ｍｍ  Ｚｏｒｂａｘ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  ＸＤＢ−Ｃ１８カラム、３ｍＬ／分、メタノール／水（８５：１５）溶媒系、Ｒｔ＝１１．７６分］でさらに精製して、無色油状物を得た（１．０ｍｇ、収率４３％）。
【００６８】
ＵＶ（ＥｔＯＨ中）λｍａｘ  ２６２．１，２５２．６，２４４．１ｎｍ；１Ｈ  ＮＭＲ（９００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ６．２８及び５．８１（それぞれ１Ｈ，それぞれｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，６−Ｈ及び７−Ｈ），５．３８−５．２５（２Ｈ，ｍ，２２−Ｈ及び２３−Ｈ），５．０４及び５．０２（それぞれ１Ｈ，それぞれｓ，＝ＣＨ２），４．４０（２Ｈ，ｍ，１β−Ｈ及び３α−Ｈ），３．７６（１Ｈ，ｍ，２５−Ｈ），２．７８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．５，４．５Ｈｚ，１０βＨ），２．７３（１Ｈ，ｂｒｄ，Ｊ＝１３．５Ｈｚ，９β−Ｈ），２．５１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．５，４．５Ｈｚ，４α−Ｈ），２．２７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．５，６．３Ｈｚ，４β−Ｈ），２．２２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．６，８．１Ｈｚ，１０α−Ｈ），１．１１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２７−Ｈ３），０．８７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２１−Ｈ３），０．４５（３Ｈ，ｓ，１８−Ｈ３）；Ｃ２６Ｈ４０Ｏ３Ｎａ＋として算出した正確な質量（ＭＮａ＋）４２３．２８７５，実測値４２３．２８８１。
【化４】
2011527699.tif 000005
【化５】
2011527699.tif 000006
【化６】
2011527699.tif 000007
【化７】
2011527699.tif 000008
【００６９】
（２−メチレン−１９，２６−ジノル−（２０Ｓ，２２Ｅ，２５Ｒ）−ビタミンＤ類似物質の生物学的活性）
２−位にメチレン基、および側鎖の２５−位（Ｃ−２５）に接続したヒドロキシル置換基の導入、通常は側鎖の２６位（Ｃ−２６）に位置しているメチル基を、側鎖の２５位にある炭素原子に結合した水素原子と置き換えること、および側鎖の炭素原子２２と２３（Ｃ−２２とＣ−２３）の間の位置への二重結合の導入は、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３と比較して、全長組み換えラットビタミンＤ受容体に対するＳＯＲ−１の結合にほとんど影響を及ぼさなかった。化合物ＳＯＲ−１は、標準物質１，２５−（ＯＨ）２Ｄ３と比較して、核内ビタミンＤ受容体に対してほとんど同じ親和性で結合した（図１）。これらの結果から、化合物ＳＯＲ−１は、同等の生体活性を有するであろうと予想され得る。しかし、驚くべきことに、化合物ＳＯＲ−１は、固有の生体活性を有し、きわめて選択的な類似物質である。
【００７０】
図５は、ＳＯＲ−１が、ｉｎ  ｖｉｖｏで腸のカルシウムを移動させる活性を上昇させる能力が相対的に低いことを示す。ＳＯＲ−１は、天然ホルモンである１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３（１，２５（ＯＨ）２Ｄ３）の効能と比較して、腸のカルシウム移動の刺激について、特に、推奨されている低い用量では、ｉｎ  ｖｉｖｏでの効能が明らかに低い。
【００７１】
図４は、ＳＯＲ−１が、１，２５（ＯＨ）２Ｄ３と比較して、骨のカルシウムを動員する活性が、それがあったとしても、きわめて低いことを示す。ＳＯＲ−１は、１，２５（ＯＨ）２Ｄ３の用量の約３倍というきわめて高い用量の場合でも、骨のカルシウムを移動させる活性を示さなかった（１，２５（ＯＨ）２Ｄ３  ７８０ｐｍｏｌ／日に対し、ＳＯＲ−１  ２，３４０ｐｍｏｌ／日）。したがって、ＳＯＲ−１は、試験したすべての用量で、１，２５（ＯＨ）２Ｄ３と比較して、骨からカルシウムを移動させる効能は明らかに顕著に低い。
【００７２】
したがって、図４および図５は、ＳＯＲ−１が、腸のカルシウムを移動させる活性が低く、骨のカルシウムを動員する活性を実質的にもたないという特徴を有し得ることを示す。
【００７３】
図２は、ＳＯＲ−１が、ＨＬ−６０細胞分化、すなわち、ＨＬ−６０細胞を単球に分化させることに対し、１，２５（ＯＨ）２Ｄ３よりも約３倍以上強力であることを示す。したがって、ＳＯＲ−１は、乾癬および癌の治療に対し、特に、白血病，結腸癌、乳癌、皮膚癌、前立腺癌に対し、優れた候補物質であろう。それに加えて、ＳＯＲ−１が相対的に高い細胞分化活性を有するため、この化合物は、しわ、十分な皮膚の水分が失われること、すなわち、乾燥肌、十分な皮膚の堅さが失われること、すなわち、皮膚のたるみ、不十分な皮脂分泌を含む種々の皮膚の状態を治療するための治療薬剤を提供する。したがって、この化合物の使用は、皮膚を保湿するだけではなく、皮膚の障壁機能も高める。
【００７４】
図３は、骨の細胞において、化合物ＳＯＲ−１が、２４−ヒドロキシラーゼ遺伝子の転写を高めることについて１，２５（ＯＨ）２Ｄ３よりも約３倍以上強力であることを示す。この結果を、図２の細胞分化活性とあわせると、ＳＯＲ−１が、細胞分化、遺伝子転写を引き起こし、細胞成長を抑制するという直接的な細胞活性を有しているため、乾癬にきわめて有効である可能性を示唆している。また、これらのデータは、ＳＯＲ−１が、抗癌剤として、特に、白血病、結腸癌、乳癌、皮膚癌、前立腺癌に対して顕著な活性を有する可能性を示している。
【００７５】
ＨＬ−６０分化に対し、ＳＯＲ−１の活性が相対的に強いことは、ＳＯＲ−１が、副甲状腺の成長を抑制し、プレプロ副甲状腺遺伝子を抑制する活性があることを示唆している。
【００７６】
（実験法）
（ビタミンＤ受容体の結合）
（試験物質）
（タンパク質源）
全長組み換えラット受容体が、Ｅ．ｃｏｌｉ  ＢＬ２１（ＤＥ３）Ｃｏｄｏｎ  Ｐｌｕｓ  ＲＩＬ細胞で発現され、２種類の異なるカラムクロマトグラフィーシステムを用いて均一になるように精製した。第１の系は、このタンパク質に対し、Ｃ−末端ヒスチジンタグを利用するニッケル親和性樹脂であった。この樹脂から溶出したタンパク質を、イオン交換クロマトグラフィー（Ｓ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  Ｆａｓｔ  Ｆｌｏｗ）を用いてさらに精製した。精製したタンパク質を等分し、液体窒素で迅速に凍結し、使用するまで−８０℃で保存した。結合アッセイで使用するために、このタンパク質を、０．１％  Ｃｈａｐｓ洗浄剤を含むＴＥＤＫ５０（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、１．５ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ７．４、５ｍＭ  ＤＴＴ、１５０ｍＭ  ＫＣｌ）で希釈した。受容体タンパク質およびリガンド濃度は、受容体に結合する添加された放射能標識されたリガンドが２０％を超えないように最適化された。
【００７７】
（試験薬物）
標識されていないリガンドを、エタノールに溶解し、ＵＶ分光光度法を用いて濃度を決定した（１，２５（ＯＨ）２Ｄ３：モル吸光係数＝１８，２００およびλｍａｘ＝２６５ｎｍ；類似物質：モル吸光係数＝４２，０００およびλｍａｘ＝２５２ｎｍ）。放射能標識されたリガンド（３Ｈ−１，２５（ＯＨ）２Ｄ３、約１５９Ｃｉ／ｍｍｏｌｅ）を、最終濃度が１ｎＭになるようにエタノールに添加した。
【００７８】
（アッセイ条件）
放射能標識されたリガンドおよび標識されていないリガンドを、最終エタノール濃度が１０％以下になるように希釈したタンパク質１００ｍｃｌに添加し、混合して、結合を平衡状態にするため、氷上で一晩インキュベーションした。次の日に、ヒドロキシルアパタイトスラリー（５０％）１００ｍｃｌをそれぞれの管に添加し、１０分間隔で３０分間混合した。ヒドロキシルアパタイトを、遠心分離によって収集し、次いで、０．５％  Ｔｉｔｒｏｎ  Ｘ−１００を含有するＴｒｉｓ−ＥＤＴＡバッファ（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、１．５ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ７．４）で３回洗浄した。最後の洗浄が終わったら、Ｂｉｏｓａｆｅ  ＩＩシンチレーションカクテル４ｍｌを含有するシンチレーションバイアルにペレットを移し、混合して、シンチレーションカウンターに置いた。放射能標識されたリガンドのみを含む管から、全結合を決定した。
【００７９】
（ＨＬ−６０の分化）
（試験物質）
（試験薬物）
試験薬物を、エタノールに溶解し、ＵＶ分光光度法を用いて濃度を決定した。細胞培養物中の最終エタノール濃度（≦０．２）を変えずに、さまざまな薬物濃度を試験することができるように、段階希釈物を調製した。
【００８０】
（細胞）
ヒト前骨髄球性白血病（ＨＬ６０）細胞を、１０％胎児ウシ血清を含有するＲＰＭＩ−１６４０培地で成長させた。この細胞を、５％ＣＯ２存在下、３７℃でインキュベーションした。
【００８１】
（アッセイ条件）
ＨＬ６０細胞を、１．２×１０５細胞／ｍｌで播種した。播種してから１８時間後、２ッ組の細胞を、薬物で処理した。４日後、細胞を採集し、ニトロブルーテトラゾリウム還元アッセイを行った（Ｃｏｌｌｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ．、１９７９；Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１４９：９６９−９７４）。分化した細胞の割合は、合計２００細胞を計数し、細胞内に黒〜青色のホルマザンの沈殿を含む数を記録することによって決定した。単球細胞への分化の検証を、食作用活性を測定することによって決定した（データは示されていない）。
【００８２】
（ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの転写アッセイ）
転写活性を、ルシフェラーゼレポーター遺伝子の上流の２４−ヒドロキシラーゼ（２４Ｏｈａｓｅ）遺伝子プロモーターで安定にトランスフェクトされたＲＯＳ  １７／２．８（骨）細胞で測定した（Ａｒｂｏｕｒ  ｅｔ  ａｌ．、１９９８）。細胞に、さまざまな投与量を与えた。投与の１６時間後、細胞を採集し、ルシフェラーゼ活性を、照度計を用いて測定した。
【００８３】
ＲＬＵ＝相対ルシフェラーゼユニット
【００８４】
（腸のカルシウム移動および骨のカルシウム動員）
雄の離乳期Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットを、Ｄｉｅｔ  １１（０．４７％  Ｃａ）食餌＋ＡＥＫ油の状態に１週間置き、次いで、Ｄｉｅｔ  １１（０．０２％  Ｃａ）＋ＡＥＫ油の状態に３週間置いた。次いで、このラットを、０．４７％  Ｃａを含む食餌に１週間変更し、次いで、０．０２％  Ｃａを含有する食餌に２週間変更した。０．０２％  カルシウムの食餌の最後の週に、投与量の投与を開始した。約２４時間の間隔をあけて、４回連続して腹腔内投与を行った。最後の投与から２４時間後、切断された頸部から血液を採集し、血清カルシウム濃度を、骨のカルシウム動員の測定値として測定した。反転腸管法を用いて腸のカルシウム移動を分析するために、最初の腸１０ｃｍも採集した。
【００８５】
（データの解釈）
生物学的知見のまとめ。この化合物ＳＯＲ−１は、天然のホルモンよりもわずかに低い親和性でＶＤＲに結合し、この活性において、１，２５（ＯＨ）２Ｄ３よりもわずかに効能が低いと考えることができる。また、ＳＯＲ−１は、１，２５（ＯＨ）２Ｄ３と比較して、約３倍以上の細胞分化活性を示し、約３倍以上のｉｎ  ｖｉｔｒｏでの遺伝子転写活性を示す。この化合物は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでは１，２５（ＯＨ）２Ｄ３よりも効能が強いが、天然ホルモンと比較して、ｉｎ  ｖｉｖｏでのカルシウム動員および腸では、より低い活性を示す。この化合物は、１，２５（ＯＨ）２Ｄ３が活性を示す投与量よりも約３倍以上多い投与量で、骨においてなんら活性を示さない。ＳＯＲ−１は、骨の貯蔵庫からカルシウムを動員する効能は低く、腸管で活性なカルシウム移動を刺激する効能も低いが、細胞分化における効能は高く、すでに作られている化合物よりも安全性の範囲が大きい化合物をもたらすため、治療薬開発には潜在的に価値のある化合物である。この化合物は、比較的顕著な細胞分化および転写活性を示すが、カルシウム血症活性はほとんど有していないため、種々の自己免疫疾患、癌、腎性骨ジストロフィー、乾癬または他の皮膚疾患を患う患者を治療するのに有用であり得る。ＳＯＲ−１は、上に列挙した疾患の治療に有用なだけではなく、上に列挙した疾患の予防にも有用であろう。
【００８６】
（ＶＤＲへの結合、ＨＬ６０細胞分化、および転写活性）
ＳＯＲ−１（Ｋｉ＝１ｘ１０−１０Ｍ）は、全長組み換えラットビタミンＤ受容体に対する結合について、［３Ｈ］−１，２５−（ＯＨ）２−Ｄ３と競合する能力に関し、天然ホルモンである１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３（Ｋｉ＝５ｘ１０−１１Ｍ）よりもわずかに活性が低い（図１）。ＳＯＲ−１は、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３（ＥＣ５０＝２ｘ１０−９Ｍ）と比較した場合、ＨＬ−６０の細胞分化を促進する能力（有効性または効力）において、約３倍以上の活性を示す（ＥＣ５０＝９ｘ１０−１０Ｍ）（図２を参照）。また、化合物ＳＯＲ−１（ＥＣ５０＝８ｘ１０−１１Ｍ）は、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３（ＥＣ５０＝２ｘ１０−１０Ｍ）よりも、骨細胞における転写活性が約３倍以上である（図３を参照）。これらの結果は、ＳＯＲ−１が、細胞分化、遺伝子転写を引き起こし、細胞成長を抑制するという直接的な細胞活性を有しているため、乾癬にきわめて有効である可能性を示唆している。また、これらのデータは、ＳＯＲ−１が、抗癌剤として、特に、白血病、結腸癌、乳癌、皮膚癌、前立腺癌に対して顕著な活性を有する可能性を示しており、さらに、乾燥肌（皮膚の水分が失われること）、過度な皮膚のたるみ（不十分な皮膚の堅さ）、不十分な皮脂分泌、しわのような皮膚の状態に対して顕著な活性を有する可能性を示している。また、ＳＯＲ−１は、二次的な副甲状腺機能亢進症を抑制することに非常に活性があると予想されるであろう。
【００８７】
ビタミンＤ欠損動物における、骨からのカルシウム動員および腸のカルシウム吸収。低カルシウムの食餌（０．０２％）を与えたビタミン欠損ラットを使い、腸および骨におけるＳＯＲ−１および１，２５（ＯＨ）２Ｄ３の活性を試験した。予想されたように、天然のホルモン（１，２５（ＯＨ）２Ｄ３）は、すべての投与量で血清カルシウム濃度を増加させた（図４）。図４に報告されている試験は、ＳＯＲ−１が、骨からカルシウムを動員する活性は比較的低いか、ほとんどないことを示す。２，３４０ｐｍｏｌ／日のＳＯＲ−１を連続して４日間投与した場合であっても、骨のカルシウム動員は起こらず、一方、天然のホルモンである１，２５（ＯＨ）２Ｄ３は、大幅なな影響がみられた７８０ｐｍｏｌ／日で顕著な活性を有していた。
【００８８】
腸のカルシウム移動を、反転腸管法を用いて、同じ動物群で評価した（図５）。図５に報告されている試験は、ＳＯＲ−１が、腸のカルシウムを移動する活性は比較的低いことを示す。７８０ｐｍｏｌ／日のＳＯＲ−１を連続して４日間投与しても、１，２５（ＯＨ）２Ｄ３と比較して、ほとんど活性はなかった。ＳＯＲ−１は、２，３４０ｐｍｏｌ／日投与まで、１，２５（ＯＨ）２Ｄ３と同じ活性は観察されなかった。
【００８９】
これらの結果は、化合物ＳＯＲ−１が、用量に依存する様式で腸のカルシウム移動を促進することを示している。したがって、ＳＯＲ−１は、推奨される、より低い用量において、腸のカルシウムを移動する活性が１，２５（ＯＨ）２Ｄ３よりも低いと結論づけることができるだろう。
【００９０】
これらの結果は、ＳＯＲ−１が、本明細書に記載されるような多くのヒトの治療のために、優れた候補物質であることを示しており、腎性骨ジストロフィー、自己免疫疾患、癌、多くの種類の皮膚状態、乾癬の二次的な二次的な副甲状腺機能亢進症を抑制するといった多くの状況で特に有用な可能性があることを示している。ＳＯＲ−１は、乾癬を治療するのに優れた候補物質である。なぜなら、（１）ＳＯＲ−１は、顕著なＶＤＲ結合活性、転写活性、細胞分化活性を有しており、（２）ＳＯＲ−１は、１，２５（ＯＨ）２Ｄ３とは異なり、高カルシウム血症の弊害がほとんどなく、（３）ＳＯＲ−１は、簡単に合成されるからである。ＳＯＲ−１は、ビタミンＤ受容体に比べて顕著な結合活性を有しているが、血清カルシウムを上げる能力はほとんどないので、このことは、腎性骨ジストロフィーの二次的な副甲状腺機能亢進症の治療に特に有用である可能性がある。
【００９１】
これらのデータは、本発明の化合物ＳＯＲ−１が、免疫系の失調によって特徴づけられるヒトの障害、例えば、多発性硬化症、ループス、糖尿病、移植片対宿主拒絶反応、臓器移植の拒絶反応を含む自己免疫疾患の治療および予防に特に適しており、さらに、関節リウマチ、喘息のような炎症性疾患、セリアック病、潰瘍性大腸炎、クローン病のような炎症性腸疾患に特に適していることも示している。座瘡、脱毛症、高血圧は、本発明の化合物ＳＯＲ−１で治療可能な他の状態である。
【００９２】
本発明の式Ｉの化合物、特に式ＩａのＳＯＲ−１は、肥満を予防するか、または治療し、脂肪細胞の分化を阻害し、ＳＣＤ−１遺伝子の転写を阻害し、及び／又は、動物対象の体脂肪を減らすことにも有用である。従って、ある実施形態では、肥満を予防するか、または治療する方法、脂肪細胞の分化を阻害する方法、ＳＣＤ−１遺伝子の転写を阻害する方法、及び／又は動物対象の体脂肪を減らす方法は、動物対象に、式Ｉの１つ以上の化合物、または式１の１つ以上の化合物を含む医薬組成物を有効量で投与することを含む。化合物または医薬組成物を対象に投与すると、脂肪細胞の分化を阻害し、遺伝子の転写を阻害し、及び／又は動物対象において体脂肪を減らす。動物は、ヒト、イヌまたはネコのような飼育されている動物、または農業用動物であってもよく、特に、ヒトが消費するための肉を提供する動物、例えば、ニワトリ、シチメンチョウ、キジまたはウズラのような鳥類、ウシ、ヒツジ、ヤギまたはブタのような動物であってもよい。
【００９３】
予防及び／又は治療の目的で、式Ｉに定義される本発明の化合物、特にＳＯＲ−１は、医薬用途のために、当該技術分野で既知の従来の方法に従って、無害な溶媒の溶液、または適切な溶媒または担体のエマルション、懸濁物または分散物、または固体担体とともに丸薬、錠剤またはカプセルとして配合されてもよい。また、任意のこのような配合物は、安定化剤、抗酸化剤、結合剤、着色剤、乳化剤または味覚改質剤のような、他の医薬的に許容され、毒性のない賦形剤を含有していてもよい。
【００９４】
式Ｉの化合物、特にＳＯＲ−１は、経口、局所、非経口、直腸、経鼻、舌下または経皮で投与されてもよい。この化合物は、注射によって、または静脈内注入または適切な滅菌溶液によって、または、液体または固体の投薬形態で、消化管を経て、または、クリーム、軟膏、パッチまたは経皮塗布するのに適した同様のビヒクルの形態で、有益に投与される。化合物Ｉ、特にＳＯＲ−１の投与量が１日あたり０．０１μｇ〜１０００μｇ、好ましくは、１日あたり約０．１μｇ〜約５００μｇであることが、予防および／または治療目的で適しており、このような投与量は、当該技術分野では十分に理解されているように、治療すべき疾患、疾患の重篤度、対象の応答によって調整される。この化合物が作用について特異性を示すため、それぞれを単独で適切に投与してもよく、骨中の無機質の動員およびカルシウム移動の刺激が異なるレベルであることが有益であることが分かっている状況では、別の活性があるビタミンＤ化合物、例えば、１α−ヒドロキシビタミンＤ２またはＤ３、すなわち１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３の投与量を段階的に変えて併用投与してもよい。
【００９５】
上述の治療のための組成物は、活性成分として上の式ＩおよびＩａによって定義される有効な量の式Ｉの化合物、特にＳＯＲ−１と、適切な担体とを含む。本発明に従って使用するための、このような化合物の有効な量は、組成物１ｇあたり、約０．０１μｇ〜約１０００μｇ、好ましくは、組成物１ｇあたり、約０．１μｇ〜約５００μｇであり、約０．０１μｇ／日〜約１０００μｇ／日の投与量で、好ましくは、約０．１μｇ／日〜約５００μｇ／日の投与量で、局所、経皮、経口、直腸、経鼻、舌下、または非経口で投与されてもよい。
【００９６】
化合物Ｉ、特にＳＯＲ−１は、クリーム、ローション、軟膏、局所用パッチ、丸薬、カプセルまたは錠剤、坐剤、エアロゾルとして配合されてもよく、または、医薬的に無害で許容される溶媒または油の溶液、エマルション、分散物または懸濁物として液体形態で配合されてもよく、このような製剤は、それに加えて、安定化剤、酸化防止剤、乳化剤、着色剤、結合剤または味覚改質剤のような、他の医薬的に無害または有益な成分を含有していてもよい。
【００９７】
式Ｉの化合物、特にＳＯＲ−１は、前骨髄球から正常なマクロファージへの分化に影響を与えるのに十分な量で投与されるのが有益な場合がある。上述のような投与量が適しており、与えられている量は、当該技術分野で十分に理解されているように、疾患の重篤度、対象の状態および反応に従って調整すべきであることが理解される。
【００９８】
本発明の配合物は、従って医薬的に許容される担体と組み合わせて、活性成分を含み、場合により、他の治療成分を含む。担体は、配合物の他の成分と適合性を有し、受容者に有害ではないという観点で、「許容される」ものでなければならない。
【００９９】
経口投与に適した本発明の配合物は、それぞれ所定量の活性成分を含むカプセル、小袋、錠剤または薬用キャンディーのような別個の投与単位の形態、粉末または顆粒の形態、水系液体または非水系液体の溶液または懸濁物の形態、または、水中油エマルションまたは油中水エマルションの形態であり得る。
【０１００】
直腸投与のための配合物は、活性成分と、ココアバターのような担体とが組み込まれた坐剤の形態、または浣腸剤の形態であってもよい。
【０１０１】
非経口投与に適した配合物は、便宜上、油系または水系の活性成分の滅菌製剤を含み、好ましくは、受容者の血液と等張性である。
【０１０２】
局所投与に適した配合物は、塗布薬、ローション、膏薬、水中油エマルションまたは油中水エマルション、例えば、クリーム、軟膏またはペースト、または、溶液または懸濁物、例えば、点薬、またはスプレーのような、液体または半液体の製剤を含む。
【０１０３】
経鼻投与の場合、粉末の吸入、スプレー缶を用いて分注する自己噴射式配合物またはスプレー式配合物、ネブライザまたはアトマイザを用いてもよい。配合物が分注される場合、好ましくは、粒径は、１０〜１００μの範囲である。
【０１０４】
配合物は、便宜上、投薬単位形態で存在していてもよく、医薬分野でよく知られている任意の方法によって調製することができる。用語「投薬単位」とは、単位を意味し、すなわち、活性成分を、それ自体で含むか、または、医薬品用の固体または液体の希釈剤または担体とともに含む、物理的および化学的に安定な単位投与量として患者に投与することが可能な１つの投与量を意味する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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