(57)【要約】  本発明は、癌、再狭窄および炎症のような過剰増殖性疾患の治療のために、式（Ｉ）で示される新規化合物、その製造および使用を提供する。
2011529963.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）で示される化合物、および医薬的に許容されるその塩、溶媒和物またはプロドラッグ：
【化１】
2011529963.tif 000033
（式中：
ＸはＮＨまたはＯ、
Ｒ1は水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ＳＨまたはＨａｌ、
Ｒ2は水素、メトキシ、エトキシ、アセチレン、シアノ、ＳＨまたはＨａｌ、
Ｒ3およびＲ4は独立して水素、ＳＨまたはＨａｌから選択され、
Ｒ5およびＲ6は独立してＯＨ、ＳＨまたはＮＨ2から選択され、
ＨａｌはＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩである。）。
【請求項２】
詳しく示されていない基が、請求項１の式（Ｉ）について示した意味を有するが、以下の下位式（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＣ）、（ＩＤ）、（ＩＥ）、（ＩＦ）、（ＩＧ）および（ＩＨ）により示される請求項１に記載の化合物、および医薬的に許容されるその塩、溶媒和物またはプロドラッグ：
下位式ＩＡにおいて、
ＸはＮＨ、
Ｒ1はＨａｌ、メチルまたはエチル、
Ｒ2は水素、Ｈａｌ、メトキシまたはアセチレン、
Ｒ3は水素またはＨａｌ、
Ｒ4は水素またはＨａｌ、
Ｒ5およびＲ6はＯＨ、
ＨａｌはＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩである、
下位式ＩＢにおいて、
ＸはＮＨ、
Ｒ1はＨａｌ、
Ｒ2は水素またはＨａｌ、
Ｒ3は水素またはＨａｌ、
Ｒ4は水素またはＨａｌ、
Ｒ5およびＲ6はＯＨ、
ＨａｌはＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩである、
下位式ＩＣにおいて、
ＸはＮＨ、
Ｒ1はＦ、Ｃｌ、メチルまたはエチル、
Ｒ2は水素、Ｉ、Ｂｒ、メトキシまたはアセチレン、
Ｒ3は水素またはＨａｌ、
Ｒ4は水素またはＨａｌ、
Ｒ5およびＲ6はＯＨ、
ＨａｌはＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩである、
下位式ＩＤにおいて、
ＸはＮＨ、
Ｒ1はＦ、Ｃｌ、メチルまたはエチル、
Ｒ2は水素、Ｉ、Ｂｒ、メトキシまたはアセチレン、
Ｒ3は水素またはＦ、
Ｒ4は水素またはＣｌ、
Ｒ5およびＲ6はＯＨである、
下位式ＩＥにおいて、
ＸはＮＨ、
Ｒ1はＦまたはＣｌ、
Ｒ2はＩまたはＢｒ、
Ｒ3は水素またはＦ、
Ｒ4は水素またはＣｌ、
Ｒ5およびＲ6はＯＨである、
下位式ＩＦにおいて、
ＸはＮＨ、
Ｒ1はＦまたはＣｌ、
Ｒ2はＩまたはＢｒ、
Ｒ3は水素またはＦ、
Ｒ4は水素またはＣｌ、
Ｒ5およびＲ6はＯＨである、
下位式ＩＧにおいて、
ＸはＮＨ、
Ｒ1はＦまたはＣｌ、
Ｒ2はＩまたはＢｒ、
Ｒ3は水素、
Ｒ4は水素、
Ｒ5およびＲ6はＯＨである、
および、下位式ＩＨにおいて、
ＸはＮＨ、
Ｒ1はＦ、
Ｒ2はＩ、
Ｒ3は水素またはＦ、
Ｒ4は水素またはＣｌ、
Ｒ5およびＲ6はＯＨである。
【請求項３】
式（ＩＩ）
【化２】
2011529963.tif 000034
の請求項１または２に記載の化合物、および医薬的に許容されるその塩、溶媒和物またはプロドラッグ（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、式（Ｉ）またはその下位式ＩＡ、ＩＢ、ＩＣ、ＩＤ、ＩＥ、ＩＦ、ＩＧまたはＩＨについて示した意味を有する。）。
【請求項４】
化合物が以下の化合物からなる群より選択される請求項１に記載の化合物、および医薬的に許容されるその塩、溶媒和物またはプロドラッグ：
【表１−１】
2011529963.tif 000035
【表１−２】
2011529963.tif 000036
【請求項５】
医薬的に許容されるキャリアと共に、有効成分として、請求項１〜４のいずれかに記載の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物またはプロドラッグを含む医薬組成物。
【請求項６】
薬剤としての使用するための、請求項１〜４のいずれかに記載の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物またはプロドラッグ。
【請求項７】
哺乳動物における、ＭＥＫの過剰活性に係わる過剰増殖性疾患およびＭＥＫカスケードにより修飾される疾患を治療するための、請求項１〜４のいずれかに記載の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物またはプロドラッグ。
【請求項８】
前記疾患が、癌、炎症、膵炎または腎臓疾患、疼痛、皮膚の良性過形成、再狭窄、前立腺疾患、脈管形成または血管形成に係わる疾患、腫瘍血管新生；乾癬、湿疹および強皮症から選択される皮膚疾患；糖尿病、糖尿病性網膜症、未熟児網膜症、加齢性黄斑変性症、血管腫、神経膠腫、黒色腫およびカポジ肉腫からなる群より選択される、請求項７に記載の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物またはプロドラッグ。
【請求項９】
哺乳動物における、ＭＥＫの過剰活性に係わる過剰増殖性疾患およびＭＥＫカスケードにより修飾される疾患の治療用の薬剤を調製するための、請求項１〜４のいずれかに記載の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物またはプロドラッグの使用。
【請求項１０】
前記疾患が、癌、炎症、膵炎または腎臓疾患、疼痛、皮膚の良性過形成、再狭窄、前立腺疾患、脈管形成または血管形成に係わる疾患、腫瘍血管新生；乾癬、湿疹および強皮症から選択される皮膚疾患；糖尿病、糖尿病性網膜症、未熟児網膜症、加齢性黄斑変性症、血管腫、神経膠腫、黒色腫およびカポジ肉腫からなる群より選択される、請求項９に記載の使用。
【請求項１１】
請求項１〜４のいずれかに記載の化合物または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物またはプロドラッグを被検体に投与することを含んでなる、哺乳動物におけるＭＥＫの過剰活性に係わる過剰増殖性疾患およびＭＥＫカスケードにより修飾される疾患を治療する方法。
【請求項１２】
前記疾患が、癌、炎症、膵炎または腎臓疾患、疼痛、皮膚の良性過形成、再狭窄、前立腺疾患、脈管形成または血管形成に係わる疾患、腫瘍血管新生；乾癬、湿疹および強皮症から選択される皮膚疾患；糖尿病、糖尿病性網膜症、未熟児網膜症、加齢性黄斑変性症、血管腫、神経膠腫、黒色腫およびカポジ肉腫からなる群より選択される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
（ａ）有効量の請求項１〜４のいずれかに記載の化合物または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物またはプロドラッグと、
（ｂ）有効量のさらなる薬剤有効成分との
別々のパックからなるセット（キット）。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、哺乳動物における癌および炎症性疾患のような過剰増殖性疾患の治療において有用な、一連の置換フェニルアミノイソニコチンアミド化合物に関する。哺乳動物、特にヒトにおける過剰増殖性疾患の治療におけるそのような化合物の使用、およびそのような化合物を含む医薬組成物も開示する。
【背景技術】
【０００２】
Ｒａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ経路は、複数の細胞表面受容体から、遺伝子発現を調節する核の転写因子に信号を伝達する中枢信号変換経路である。この経路はＭＡＰキナーゼ経路と呼ばれることが多い、すなわち、ＭＡＰＫはマイトジェンにより活性化されたタンパクキナーゼ(mitogen-activated protein kinase)を表しており、この経路が、マイトジェン、サイトカインおよび成長因子により刺激され得ることを示唆している（Ｓｔｅｅｌｍａｎ  ｅｔ ａｌ．，Ｌｅｕｋｅｍｉａ ２００４，１８，１８９−２１８）。刺激および細胞型に依存して、この経路は信号を伝達することができ、その結果、アポトーシスまたは細胞周期の進行が防止または誘発される。
【０００３】
Ｒａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ経路は、細胞増殖およびアポトーシス防止において重要な役割を果たすことが示されている。悪性形質転換された細胞において、この経路の異常な活性化が一般的に観察される。Ｒａｓプロトオンコジーンが増幅すること、および突然変異が活性化されて恒常的活性Ｒａｓタンパクが発現されることが、ヒトの全ての癌の約３０％において観察される（Ｓｔｉｒｅｗａｌｔ  ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  ２００１，９７，３５８９−９５）。
【０００４】
Ｒａｓの突然変異した発癌性型が、結腸癌の５０％および膵臓癌の９０％以上、および多くの他のタイプの癌において見られる（Ｋｏｈｌ  ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  １９９３，２６０，１８３４−１８３７）。増殖および腫瘍形成へのＲａｓの効果が、不死細胞系に報告されている（ＭｃＣｕｂｒｅｙ  ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ  Ｊ  Ｏｎｃｏｌ  １９９５，７，２９５３１０）。悪性黒色腫の６０％以上において、ｂＲａｆ突然変異が確認された（Ｄａｖｉｅｓ，Ｈ  ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ２００２，４１７，９４９−９５４）。
【０００５】
Ｒａｓで検出された突然変異が高度である場合、この経路は、治療的介入にとって重要な対象であると前々から考えられていた（Ｃｈａｎｇ  ｅｔ ａｌ．，Ｌｅｕｋｅｍｉａ  ２００３，７７，１２６３−９３）。
【０００６】
Ｒａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ信号伝達経路は、ＮＦ−κκＢ、ＣＲＥＢ、Ｅｔｓ−１、ＡＰ−１およびｃ−Ｍｙｃを含む下流の転写因子標的を介する増殖を調節することができる。ＥＲＫは、Ｅｔｓ−１、ＡＰ−１およびｃ−Ｍｙｃを直接リン酸化し、それらを活性化することができる。あるいは、ＥＲＫは、下流のキナーゼ標的ＲＳＫをリン酸化および活性化することができ、次に、ＣＲＥＢのような転写因子をリン酸化および活性化する。これらの転写因子は、細胞周期の進行に重要な遺伝子、例えば、Ｃｄｋ’ｓ、ｃｙｃｌｉｎｓおよび成長因子、およびアポトーシス防止に重要な遺伝子、例えば、ａｎｔｉａｐｏｐｔｏｔｉｃ  Ｂｃｌ−２およびサイトカインの発現を誘発する。全体としては、細胞を成長因子で処理するとＥＲＫが活性化し、その結果、増殖および、ある場合には、分化が生じる（Ｌｅｗｉｓ  ｅｔ ａｌ．，Ａｄｖ.Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ，１９９８，７４，４９−１３９）。
【０００７】
ＭＥＫ遺伝子ファミリーは、ＭＥＫ１、ＭＥＫ２、ＭＥＫ３、ＭＥＫ４およびＭＥＫ５の５つの遺伝子からなる。この二重特異性キナーゼのファミリーは、セリン／スレオニンおよびチロシンキナーゼ活性の両方を有する。ＭＥＫの構造は、アミノ末端の負の調節領域とカルボキシ末端のＭＡＰキナーゼ結合領域とからなり、これは、ＥＲＫの結合と活性化に必要である。調節ＭＥＫ１領域が欠失する結果、恒常的ＭＥＫ１およびＥＲＫ活性化が生じる（Ｓｔｅｅｌｍａｎ  ｅｔ ａｌ．，Ｌｅｕｋｅｍｉａ  ２００４，１８，１８９−２１８）。
【０００８】
ＭＥＫ１は分子量４４ｋＤａの３９３−アミノ酸タンパクである（Ｃｒｅｗｓ  ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  １９９２，２５８，４７８−８０）。ＭＥＫ１は胚発生期において穏やかに発現され、成人の組織において上昇し、脳組織において最も高水準で検出される。ＭＥＫ１は、Ｓ２１８およびＳ２２２をリン酸化して活性化させ、これらの残基をアスパラギン酸（Ｄ）またはグルタミン酸（Ｅ）で置換して活性を向上させると共にＮＩＨ３Ｔ３細胞中にフォーカスを形成することを要求する（Ｈｕａｎｇ  ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ  Ｃｅｌｌ，１９９５，６，２３７−４５）。初代培養細胞におけるＭＥＫ１の恒常的活性は老化を促進しｐ５３およびｐ１６INK4aを誘発するが、不死化細胞またはｐ５３もしくはｐ１６INK4aのいずれかを欠く細胞においては、逆のことが観察された（Ｌｉｎ  ｅｔ ａｌ．，Ｇｅｎｅｓ  Ｄｅｖ，１９９８，１２，３００８−３０１９）。ＭＥＫ１の恒常的活性は、ｐ３８  ＭＡＰＫ活性を負の方向に調節することにより、ＮＦ−κκＢ転写を阻害する（Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ ａｌ．，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２０００，２７５，２７８５８−６４）。ＭＥＫの主な生理学的基質は、タンパクのＥＲＫ（細胞外信号調節キナーゼ）またはＭＡＰＫ（マイトジェン活性化タンパクキナーゼ）ファミリーの一員である。ＭＥＫ１の異常発現が、多くの異なるタイプの癌において検出され、ＭＥＫ１の突然変異型が、線維芽細胞、造血細胞および他の細胞型を形質転換する。
【０００９】
ＭＥＫ１の恒常的活性化の結果として、細胞が形質転換される。従って、ＭＥＫ１は、増殖性および炎症性疾患における薬理学的介入のための有望なターゲットである（Ｌｅｅ  ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  １９９４，３７２，７３９−７４６（非特許文献１）；Ｄｕｄｌｅｙ  ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ.Ｎａｔｌ.Ａｃａｄ.Ｓｃｉ.Ｕ.Ｓ.Ａ.１９９５，９２，７６８６−７６８９）。
【００１０】
複数の研究において治療的利益の見込みのあるＭＥＫの有用な阻害剤が開発された。例えば、低分子ＭＥＫ阻害剤が、ヌードマウス異種移植片においてヒトの腫瘍の成長を阻害することが示された（Ｙｅｈ，Ｔ．ｅｔ ａｌ，Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ２００４，４５，Ａｂｓ  ３８８９  ａｎｄ  Ｌｅｅ，Ｐ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ２００４，４５，Ａｂｓ  ３８９０）。ＭＥＫ阻害剤は臨床試験も行われている、すなわち、ＡＲＲＹ１４２８８６（Ｗａｌｌａｃｅ，Ｅ.  ｅｔ  ａｌ，Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ２００４，４５，Ａｂｓ３８９１；Ａｄｊｅｉ，Ａ．Ａ．ｅｔ ａｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  ２００８，２６，２１３９−２１４６；Ｓｈａｎｎｏｎ，Ａ．Ｍ．ｅｔ ａｌ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ２００７，６，３４１４Ｓ−３４１５Ｓ  Ｐａｒｔ  ２）、ＰＤ−０３２５９０１（Ｓｗａｎｔｏｎ  Ｃ，Ｊｏｈｎｓｔｏｎ  Ｓ  ＩＤＤＢ  ＭＥＥＴＩＮＧ  ＲＥＰＯＲＴ  ２００３，Ｆｅｂｒｕａｒｙ  １３−１；  Ｈａｕｒａ，Ｅ．Ｂ．ｅｔ ａｌ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ２００７，６，３４６８Ｓ−３４６９Ｓ  Ｐａｒｔ  ２；ＬｏＲｕｓｓｏ，Ｐ．Ａ．  ｅｔ ａｌ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ２００７，６，３４６９Ｓ−３４７０Ｓ  Ｐａｒｔ２）、ＰＤ−１８４３５２（Ｗａｔｅｒｈｏｕｓｅ  ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  ２００３，２２，Ａｂｓ  ８１６）、ＸＬ−５１８（Ｊｏｈｎｓｔｏｎ，Ｓ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ２００７，６，３５９５Ｓ−３５９５Ｓ  Ｐａｒｔ  ２）、ＲＤＥＡ−１１９（２００７  ｐｒｅｓｓ  ｒｅｌｅａｓｅ）およびＲＤＥＡ−４３６（２００８  ｐｒｅｓｓ  ｒｅｌｅａｓｅ）。
【００１１】
ＭＥＫ阻害剤として適した化合物は、ＵＳ５,５２５,６２５(特許文献１)、ＷＯ９８／４３９６０、ＷＯ９９／０１４２１、ＷＯ９９／０１４２６、ＷＯ００／４１５０５、ＷＯ００／４２００２、ＷＯ００／４２００３、ＷＯ００／４１９９４、ＷＯ００／４２０２２、ＷＯ００／４２０２９、ＷＯ００／６８２０１、ＷＯ０１／６８６１９、ＷＯ０２／０６２１３、ＷＯ０３／０７７８５５、ＷＯ０３／０７７９１４、ＷＯ２００４／００５２８４、ＷＯ２００４／０５６７８９、ＷＯ２００６／０４５５１４、ＷＯ２００８／０７６４１５、ＷＯ２００７／１２１２６９およびＷＯ２００７／１２１４８１にも開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】米国特許第５５２５６２５号明細書
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】Ｌｅｅ  ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  １９９４，３７２，７３９−７４６
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
哺乳動物における癌および炎症のようなＭＥＫの過剰活性に係わる過剰増殖性疾患およびＭＥＫカスケードにより修飾される疾患の治療において有用であり、それらの活性と、それらの可溶性、代謝クリアランスおよび生体利用性との両方について優れた薬理的特性を奏する、新規ＭＥＫ阻害剤を提供することが本発明の目的である。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
結果として、本発明は、ＭＥＫ阻害剤であって前記疾患の治療において有用である、新規置換フェニルアミノイソニコチンアミド化合物および医薬的に許容されるその塩、溶媒和物またはプロドラッグを提供する。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
化合物は、
式（Ｉ）により定義される化合物、
式（Ｉ）
【００１７】
【化１】
2011529963.tif 000003
【００１８】
（式中：
ＸはＮＨまたはＯ、
Ｒ1水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ＳＨまたはＨａｌ、
Ｒ2は水素、メトキシ、エトキシ、アセチレン、シアノ、ＳＨまたはＨａｌ、
Ｒ3およびＲ4は独立して水素、ＳＨまたはＨａｌから選択され、
Ｒ5およびＲ6は独立してＯＨ、ＳＨまたはＮＨ2から選択され、
ＨａｌはＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩである。）、
および医薬的に許容されるその塩、溶媒和物、またはプロドラッグである。
【００１９】
好ましいのは、式（Ｉ）の下位式（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＣ）、（ＩＤ）、（ＩＥ）、（ＩＦ）、（ＩＧ）および（ＩＨ）で示される化合物、および医薬的に許容されるその塩、溶媒和物またはプロドラッグである。
【００２０】
下位式ＩＡにおいて、
ＸはＮＨ、
Ｒ1はＨａｌ、メチルまたはエチル、
Ｒ2は水素、Ｈａｌ、メトキシまたはアセチレン、
Ｒ3は水素またはＨａｌ、
Ｒ4は水素またはＨａｌ、
Ｒ5およびＲ6はＯＨ、
ＨａｌはＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩである。
【００２１】
下位式ＩＢにおいて、
ＸはＮＨ、
Ｒ1はＨａｌ、
Ｒ2は水素またはＨａｌ、
Ｒ3は水素またはＨａｌ、
Ｒ4は水素またはＨａｌ、
Ｒ5およびＲ6はＯＨ、
ＨａｌはＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩである。
【００２２】
下位式ＩＣにおいて、
ＸはＮＨ、
Ｒ1はＦ、Ｃｌ、メチルまたはエチル、
Ｒ2は水素、Ｉ、Ｂｒ、メトキシまたはアセチレン、
Ｒ3は水素またはＨａｌ、
Ｒ4は水素またはＨａｌ、
Ｒ5およびＲ6はＯＨ、
ＨａｌはＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩである。
【００２３】
下位式ＩＤにおいて、
ＸはＮＨ、
Ｒ1はＦ、Ｃｌ、メチルまたはエチル、
Ｒ2は水素、Ｉ、Ｂｒ、メトキシまたはアセチレン、
Ｒ3は水素またはＦ、
Ｒ4は水素またはＣｌ、
Ｒ5およびＲ6はＯＨである。
【００２４】
下位式ＩＥにおいて、
ＸはＮＨ、
Ｒ1はＦまたはＣｌ、
Ｒ2はＩまたはＢｒ、
Ｒ3は水素またはＦ、
Ｒ4は水素またはＣｌ、
Ｒ5およびＲ6はＯＨである。
【００２５】
下位式ＩＦにおいて、
ＸはＮＨ、
Ｒ1はＦまたはＣｌ、
Ｒ2はＩまたはＢｒ、
Ｒ3は水素またはＦ、
Ｒ4は水素またはＣｌ、
Ｒ5およびＲ6はＯＨである。
【００２６】
下位式ＩＧにおいて、
ＸはＮＨ、
Ｒ1はＦまたはＣｌ、
Ｒ2はＩまたはＢｒ、
Ｒ3は水素、
Ｒ4は水素、
Ｒ5およびＲ6はＯＨである。
【００２７】
および下位式ＩＨにおいて、
ＸはＮＨ、
Ｒ1はＦ、
Ｒ2はＩ、
Ｒ3は水素またはＦ、
Ｒ4は水素またはＣｌ、
Ｒ5およびＲ6はＯＨである。
【００２８】
式（Ｉ）およびその下位式ＩＡ、ＩＢ、ＩＣ、ＩＤ、ＩＥ、ＩＦ、ＩＧおよびＩＨで示される化合物のより好ましい群は、式（ＩＩ）に相当する：
【００２９】
【化２】
2011529963.tif 000004
【００３０】
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、式（Ｉ）またはその好ましい下位式ＩＡ、ＩＢ、ＩＣ、ＩＤ、ＩＥ、ＩＦ、ＩＧまたはＩＨについて示した意味を有する。）。
【００３１】
式（Ｉ）および／または式（ＩＩ）で示される特に好ましい化合物として、下記化合物からなる群のもの、またはその医薬的に許容される塩、溶媒和物またはプロドラッグが挙げられる：
【００３２】
【表１−１】
2011529963.tif 000005
【００３３】
【表１−２】
2011529963.tif 000006
【００３４】
二つの構造がその間の「＋」サインと共に示される場合、二つの光学異性体の１：１ラセミ混合物であることを示す。
【００３５】
本発明の化合物は、プロドラッグ化合物の状態であり得る。「プロドラッグ化合物」は、例えば、各々が酵素的または無酵素的に行われる酸化、還元、加水分解等により、生体内において生理学的条件下に本発明の生物学的活性化合物に転化される誘導体を意味する。プロドラッグの例は、本発明の化合物のアミノ基がアシル化、アルキル化またはリン酸化されたもの、例えば、エイコサノイルアミノ、アラニルアミノ、ピバロイルオキシメチルアミノ、またはヒドロキシル基がアシル化、アルキル化、リン酸化もしくはホウ酸エステルに転化されたもの、例えば、アセチルオキシ、パルミトイルオキシ、ピバロイルオキシ、スクシニルオキシ、フマリルオキシ、アラニルオキシ、またはカルボキシル基がエステル化もしくはアミド化されたもの、またはスルフヒドリル基がキャリア分子とジスルフィド橋を形成したもの、例えば、薬剤を選択的にターゲットおよび／または細胞の細胞質に送達するペプチドである。これらの化合物は、本発明の化合物から、よく知られている方法に従って製造することができる。プロドラッグの他の例は、本発明の化合物のカルボキシレートが、例えば、アルキル−、アリール−、コリン−、アミノ、アシルオキシメチルエステル、リノレノイル−エステルに転化されている化合物である。本発明の化合物の代謝産物も、本発明の範囲内に含まれる。
【００３６】
本発明の化合物またはそれらのプロドラッグの互変異性、例えば、ケト−エノール互変異性が起こる場合、個々の型、例えば、ケトまたはエノール型が、別々に、および一緒になって任意の比の混合物として権利請求される。同じことが、立体異性体、例えば、光学異性体、シス／トランス異性体、配座異性体などにあてはまる。
【００３７】
要すれば、異性体を、当該分野でよく知られている方法、例えば、液体クロマトグラフィーにより分離することができる。同じことが、例えば、キラル固定相を用いることにより、光学異性体に適用される。さらに、光学異性体は、それらをジアステレオマーに転化することにより単離することができる、すなわち、エナンチオマーとして純粋な補助化合物とカップリングさせ、続いて、得られるジアステレオマーを分離し、補助残基を開裂させることにより単離することができる。あるいは、光学的に純粋な出発材料を用いる立体選択的合成から、本発明の化合物の任意の光学異性体を得ることができる。
【００３８】
本発明の化合物は、医薬的に許容される塩または溶媒和物の状態であり得る。「医薬的に許容される塩」という用語は、無機の塩基または酸、および有機の塩基または酸を含む医薬的に許容される非毒性の塩基または酸から調製される塩を意味する。本発明の化合物が一種または二種以上の酸性または塩基性基を含む場合、本発明は、それらの対応する医薬的にまたは毒物学的に許容される塩、特に、それらの医薬的に利用可能な塩も含む。すなわち、酸性基を含む本発明の化合物は、塩の状態で存在することができ、本発明に従って、例えば、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩またはアンモニウム塩として用いることができる。そのような塩のより的確な例として、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、または、例えばエチルアミン、エタノールアミン、トリエタノールアミンもしくはアミノ酸のような有機アミンとのまたはアンモニアとの塩が挙げられる。塩基性基、すなわちプロトン化し得る基を一種または二種以上含む本発明の化合物は、塩の状態で存在することができ、本発明に従って、無機または有機酸とのそれらの付加塩の状態で用いることができる。適切な酸としては、例えば、塩化水素、臭化水素、リン酸、硫酸、硝酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、シュウ酸、酢酸、酒石酸、乳酸、サリチル酸、安息香酸、蟻酸、プロピオン酸、ピバル酸、ジエチル酢酸、マロン酸、コハク酸、ピメリン酸、フマル酸、マレイン酸、リンゴ酸、スルファミン酸、フェニルプロピオン酸、グルコン酸、アスコルビン酸、イソニコチン酸、クエン酸、アジピン酸、および、当業者に知られている他の酸が挙げられる。本発明の化合物が、酸性基と塩基性基とを同時に分子内に含む場合、本発明は、前記塩型に加えて、分子内塩またはベタイン（両性イオン）も含む。それぞれの塩は、当業者に知られている一般的方法により、例えば、それらを溶媒または分散剤中で有機または無機の酸または塩基に接触させることにより、または、他の塩とのアニオン交換またはカチオン交換により得ることができる。本発明は、生理学的適合性が低いために薬剤中に用いるのに直接適してはいないが例えば化学反応のためのまたは医薬的に許容される塩の調製のための中間体として用いることができる、本発明の化合物の全ての塩も含む。
【００３９】
さらに、本発明は、医薬的に許容されるキャリアと共に、有効成分としての本発明の化合物、そのプロドラッグ化合物、またはその医薬的に許容される塩もしくは溶媒和物を含む医薬組成物に関する。
【００４０】
「医薬組成物」は、一種または二種以上の有効成分、および、キャリアを構成する一種または二種以上の不活性成分、並びに、それら成分の任意の二種またはそれ以上の組合せ、錯体もしくは集合から、それら成分の一種または二種以上の解離から、またはそれら成分の一種または二種以上の他のタイプの反応または相互作用から、直接または間接的に生じる任意の生成物を意味する。従って、本発明の医薬組成物は、本発明の化合物と医薬的に許容されるキャリアとを混合することにより作られる組成物を包含する。
【００４１】
本発明の医薬組成物は、本発明の一種または二種以上のさらなる化合物、またはプロドラッグ化合物もしくは他のＭＥＫ阻害剤のような、一種または二種以上の他の化合物を有効成分としてさらに含んでよい。これら医薬組成物としては、経口投与、直腸投与、局所投与、非経口投与（皮下、筋肉内および静脈内を含む）、眼内投与（眼球）、肺投与（鼻孔吸入または口腔吸入）、または鼻腔投与に適した組成物が挙げられるが、所定の場合における最適の経路は、治療される症状の性質および重症度、および有効成分の性質に依存する。これらは、単位剤型として提供されることが好都合であり、製薬学の分野でよく知られている方法により調製され得る。
【００４２】
一つの態様において、前記化合物および医薬組成物は、癌、例えば、脳腫瘍、肺癌、扁平上皮癌、膀胱癌、胃癌、膵臓癌、乳癌、頭部癌、頸部癌、腎癌、腎臓癌、卵巣癌、前立腺癌、結腸直腸癌、食道癌、精巣癌、婦人科癌、甲状腺癌、黒色腫、血液悪性腫瘍、例えば、急性骨髄性白血病、多発性骨髄腫、慢性骨髄性白血病、骨髄細胞白血病、または他のタイプの固形もしくは液状腫瘍の治療のためのものである。もう一つの態様において、前記医薬組成物は、非癌性過剰増殖性疾患、例えば、皮膚の良性過形成（例えば乾癬）、再狭窄、多発性嚢胞腎、または前立腺疾患（例えば前立腺肥大(ＢＰＨ)）の治療のためのものであり、炎症性および自己免疫性疾患、例えば、関節リウマチ、クローン病、喘息、潰瘍性大腸炎、過敏性腸症候群、多発性硬化症、紅斑性狼瘡および他の疾患の治療のためのものでもある。もう一つの態様において、前記医薬組成物は、ＭＥＫ／ＥＲＫ経路の上方調節を特徴とする遺伝状態、例えば、コステロ症候群、ヌーナン症候群、カルディオファシオクタニアス（ＣＦＣ：cardiofaciocutaneous）症候群および他の疾患の治療のためのものである。
【００４３】
本発明は、哺乳動物におけるＭＥＫの過剰活性に係わる過剰増殖性疾患およびＭＥＫカスケードにより媒介される疾患、または、癌や炎症のような異常増殖により媒介される疾患の治療のための薬剤を調製するための、本発明の化合物の使用にも関する。
【００４４】
本発明は、治療有効量の本発明の化合物または医薬的に許容されるその塩、プロドラッグもしくは水和物、および医薬的に許容されるキャリアを含んでなる、哺乳動物における膵炎または腎臓病（腎疾患により誘発される増殖性糸球体腎炎および糖尿病を含む）または疼痛を治療するための化合物または医薬組成物にも関する。
【００４５】
本発明は、治療有効量の本発明の化合物または医薬的に許容されるその塩、プロドラッグもしくは水和物、および医薬的に許容されるキャリアを含んでなる、哺乳動物における未分化胚芽細胞の転移を防止するための化合物または医薬組成物にも関する。
【００４６】
本発明は、治療有効量の本発明の化合物または医薬的に許容されるその塩、プロドラッグもしくは水和物、および医薬的に許容されるキャリアを含んでなる、哺乳動物における脈管形成または血管形成に関する疾患を治療するための化合物または医薬組成物にも関する。
【００４７】
一つの態様において、前記化合物または医薬組成物は、腫瘍血管新生、慢性炎症性疾患、例えば、関節リウマチ、炎症性腸疾患、アテローム性動脈硬化症、皮膚疾患、例えば、乾癬、湿疹および強皮症、糖尿病、糖尿病性網膜症、未熟児網膜症、加齢(性)黄斑変性症、血管腫、神経膠腫、黒色腫、カポジ肉腫、および、卵巣癌、乳癌、肺癌、膵臓癌、前立腺癌、結腸癌および扁平上皮癌からなる群より選択される疾患を治療するためのものである。
【００４８】
本発明は、治療有効量の本発明の化合物または医薬的に許容されるその塩、プロドラッグもしくは水和物を哺乳動物に投与することを含んでなる、哺乳動物における過剰増殖性疾患を治療するための使用にも関する。一つの態様において、前記使用は、癌、例えば、脳腫瘍、肺癌、扁平上皮癌、膀胱癌、胃癌、膵臓癌、乳癌、頭部癌、頸部癌、腎癌、腎臓癌、卵巣癌、前立腺がん、結腸直腸癌、食道癌、精巣癌、婦人科癌または甲状腺癌の治療に関する。もう一つの態様において、前記使用は、非癌性過剰増殖性疾患、例えば、皮膚の良性過形成(例えば乾癬)、再狭窄、または前立腺疾患(例えば前立腺肥大(ＢＰＨ))の治療に関する。
【００４９】
本発明は、分裂抑制剤、アルキル化剤、代謝拮抗物質、挿入抗生物質、成長因子抑制剤、血管新生阻害剤、細胞周期抑制剤、酵素阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤、生物反応修飾物質、抗ホルモン、血管形成阻害剤、および抗アンドロゲンまたは免疫調節物質からなる群より選択される抗腫瘍薬と組み合わせて、治療有効量の本発明の化合物または医薬的に許容されるその塩、プロドラッグもしくは水和物を哺乳動物に投与することを含んでなる、哺乳動物における過剰増殖性疾患を治療するための使用にも関する。
【００５０】
本発明は、治療有効量の本発明の化合物または医薬的に許容されるその塩、プロドラッグもしくは水和物を哺乳動物に投与することを含んでなる、哺乳動物における膵炎もしくは腎臓疾患または疼痛を治療するための使用にも関する。本発明は、治療有効量の本発明の化合物または医薬的に許容されるその塩、プロドラッグもしくは水和物を哺乳動物に投与することを含んでなる、哺乳動物における未分化胚芽細胞の転移を防止するための使用にも関する。
【００５１】
本発明は、治療有効量の本発明の化合物または医薬的に許容されるその塩、プロドラッグもしくは水和物を哺乳動物に投与することを含んでなる、哺乳動物における脈管形成または血管形成に係わる疾患を治療するための使用にも関する。一つの態様において、前記方法は、腫瘍血管新生、慢性炎症性疾患、例えば、関節リウマチ、アテローム性動脈硬化症、炎症性腸疾患、皮膚疾患、例えば、乾癬、湿疹および強皮症、糖尿病、糖尿病性網膜症、未熟児網膜症、加齢(性)黄斑変性症、血管腫、神経膠腫、黒色腫、カポジ肉腫、および、卵巣癌、乳癌、肺癌、膵臓癌、前立腺癌、結腸癌および扁平上皮癌からなる群より選択される疾患を治療するためのものである。本発明の方法に従って、本発明の化合物またはその化合物の医薬的に許容される塩、プロドラッグおよび水和物で治療することができる患者としては、例えば、乾癬、再狭窄、アテローム性動脈硬化、ＢＰＨ、肺癌、骨肉種、慢性骨髄単球性白血病、膵臓癌、皮膚癌、頭部および頸部の癌、皮膚または眼内黒色腫、子宮癌、卵巣癌、直腸癌、肛門部の癌、胃癌、結腸癌、乳癌、精巣癌、婦人科腫瘍(例えば、子宮肉腫、卵管癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、膣癌または外陰癌)、ホジキン病、食道癌、小腸癌、内分泌系癌(例えば、甲状腺、副甲状腺または副腎の癌)、軟組織の肉腫、尿道癌、陰茎癌、前立腺癌、慢性または急性白血病、小児の固形腫瘍、リンパ球性リンパ腫、膀胱癌、腎臓または尿管の癌(例えば、腎細胞癌、腎盂癌)、または中枢神経系の新生物(例えば、中枢神経系原発リンパ腫、脊髄軸腫瘍、脳幹グリオーマまたは下垂体腺腫)を有すると診断された患者が挙げられる。
【００５２】
本発明は、哺乳動物における異常細胞成長を阻害するための化合物または医薬組成物であって、所定量の本発明の化合物または医薬的に許容されるその塩もしくは溶媒和物もしくはプロドラッグを、所定量の他の抗癌治療薬と共に含んでなり、その化合物、塩、溶媒和物またはプロドラッグの量とその化学治療薬の量とが一緒になって異常細胞成長の阻害に効果的であることを特徴とする化合物または医薬組成物にも関する。現在、当該分野において多くの抗癌治療薬が知られている。一つの態様において、抗癌治療薬は、分裂抑制剤、アルキル化剤、代謝拮抗物質、挿入抗生物質、成長因子抑制剤、細胞周期抑制剤、酵素阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤、生物反応修飾物質、抗ホルモン、血管形成阻害剤および抗アンドロゲンからなる群より選択される化学治療薬である。もう一つの態様において、抗癌治療薬は、ベバシズマブ、ＣＤ４０−特異的抗体、ｃｈＴＮＴ−１／Ｂ、デノスマブ、ザノリムマブ、ＩＧＦ１Ｒ−特異的抗体、リンツズマブ、エドレコロマブ、ＷＸ  Ｇ２５０、リツキシマブ、チシリムマブ、トラスツズマブおよびセツキシマブからなる群より選択される抗体である。
【００５３】
本発明は、さらに、哺乳動物における異常細胞成長を阻害するまたは過剰増殖性疾患を治療する方法であって、放射線治療薬と組み合わせて、所定量の本発明の化合物または医薬的に許容されるその塩もしくは溶媒和物もしくはプロドラッグを哺乳動物に投与することを含んでなり、その化合物、塩、溶媒和物またはプロドラッグの量が、放射線治療薬と組み合わせて、哺乳動物における異常細胞成長の阻害または過剰増殖性疾患の治療において効果的であることを特徴とする方法に関する。放射線治療薬を投与する技術は当該分野で知られており、これらの技術を、明細書に記載の組合せ療法において用いることができる。この組合せ治療における本発明の化合物の投与は、明細書に記載のように決めることができる。本発明の化合物は、異常細胞の成長を阻害および／または殺す目的で、異常細胞を放射線での治療に対してより感受性にすることができると考えられる。
【００５４】
従って、本発明は、さらに、哺乳動物において異常細胞を放射線での治療に感受性にする方法であって、所定量の本発明の化合物または医薬的に許容されるその塩もしくは溶媒和物もしくはプロドラッグを哺乳動物に投与することを含んでなり、その量が異常細胞を放射線治療に対して感受性にするのに効果的であることを特徴とする方法に関する。この方法における化合物、塩または溶媒和物の量は、ここに記載のそれら化合物の有効量を調べるための手段に従って決めることができる。本発明は、所定量の本発明の化合物または医薬的に許容されるその塩または溶媒和物、そのプロドラッグ、または同位体で標識されたその誘導体、および、抗血管形成剤、信号伝達阻害剤および抗増殖剤から選択される所定量の一種または二種以上の物質を含んでなる哺乳動物における異常細胞成長を阻害するための方法にも関する。
【００５５】
実際の使用において、本発明の化合物を有効成分として、従来の医薬配合技術に従って医薬キャリアと組み合わせて緊密混合することができる。キャリアは、例えば、経口または非経口(静脈内を含む)のような投与に要望される製剤型に依存して、種々の形状を取ってよい。経口投与型の組成物の調製において、例えば水、グリコール、オイル、アルコール、香味剤、防腐剤、着色剤などのようないかなる通常の医薬媒体を用いてもよい。経口液状製剤の場合、任意の通常の医薬媒体を用いてよく、例えば、懸濁液、エリキシルおよび溶液；または、キャリア、例えば、澱粉、糖類、微結晶性セルロース、希釈剤、造粒剤、潤滑剤、バインダー、崩壊剤などを用いてよい。経口固形製剤の場合、組成物は、例えば、粉末、硬質および軟質カプセル、および錠剤のような形状をとってよく、固形経口製剤が、液状製剤よりも好ましい。
【００５６】
その投与の容易性故に、錠剤およびカプセルが最も有利な経口投与単位型であり、その場合、明らかに固形医薬キャリアが用いられる。要すれば、錠剤を、標準的水性または非水性技術により被覆してよい。そのような組成物および製剤は、少なくとも０．１％の活性化合物を含むべきである。これらの組成物中の活性化合物の百分率はもちろん変化してよく、単位の重量の約２％〜約６０％の間が好都合である。そのような治療に有用な組成物中の活性化合物の量は、有効投与量が得られるような量である。活性化合物は、例えば液状ドロップまたはスプレーとして、鼻腔内投与することもできる。
【００５７】
錠剤、ピル、カプセル等は、バインダー、例えばトラガカントガム、アカシア、コーンスターチまたはゼラチン；賦形剤、例えばリン酸ジカルシウム；崩壊剤、例えばコーンスターチ、じゃがいも澱粉、アルギン酸；潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウム；および甘味料、例えばスクロース、ラクトースまたはサッカリンを含んでもよい。投与単位型がカプセルの場合、前記タイプの材料に加えて、脂肪油のような液状キャリアを含んでよい。
【００５８】
種々の他の材料が、被覆として、または、投与単位の物理的形状を変化させるために存在してよい。例えば、錠剤をシェラック、糖類またはその両方で被覆してよい。シロップまたはエリキシルは、有効成分に加えて、甘味料としてのスクロース、防腐剤としてのメチルおよびプロピルパラベン、および染料および香味料、例えば、チェリーまたはオレンジフレーバーを含んでよい。
【００５９】
本発明の化合物は、非経口的に投与してもよい。ヒドロキシ−プロピルセルロースのような界面活性剤と適切に混合された水中で、これら活性化合物の溶液または懸濁液を調製することができる。グリセロール中で、液状ポリエチレングリコール中で、および油中のそれらの混合物の中で分散液を調製することもできる。貯蔵および使用の一般的条件下において、これらの製剤は、微生物の成長を防止するために防腐剤を含む。
【００６０】
注入性用途に適した医薬型としては、滅菌注入性溶液または分散液の即時調製のための滅菌水性溶液または分散液、および滅菌粉末が挙げられる。全ての場合、剤型は無菌でなくてはならず、注入が容易である程度に流体でなくてはならない。これは、製造および貯蔵の条件下に安定でなくてはならず、細菌および真菌のような微生物の汚染作用に対して保護されなくてはならない。キャリアは、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコールおよび液状ポリエチレングリコール）、それらの適当な混合物、および植物油を含む溶媒または分散媒であり得る。
【００６１】
哺乳動物、特にヒトに、有効量の本発明の化合物を提供するために、いかなる適当な投与経路を用いてもよい。例えば、経口、直腸、局所、非経口、眼内、肺、鼻孔などを用いてよい。投与型としては、錠剤、トローチ、分散液、懸濁液、溶液、カプセル、クリーム、軟膏、エアロゾル等が挙げられる。好ましくは、本発明の化合物は経口投与される。
【００６２】
用いられる有効成分の有効投与量は、用いられる特性の化合物、投与方式、治療される状態、および治療される症状の重症度に依存して変わり得る。そのような投与量は、当業者により容易に確認することができる。
【００６３】
本発明の化合物が適用される癌、炎症または他の増殖性疾患を治療または予防する場合、本発明の化合物を、動物の体重１ｋｇ当たり約０．０１ｍｇ〜約１００ｍｇの一日容量で投与、好ましくは、毎日一回の服用とすれば、概して満足できる結果が得られる。大部分の大型哺乳動物にとって、合計日容量は約０．１ｍｇ〜約１０００ｍｇ、好ましくは約０．２ｍｇ〜約５０ｍｇである。７０ｋｇの成人ヒトの場合、合計日容量は、通常、約０．２ｍｇ〜約２００ｍｇである。この投与方式を、最適治療反応を提供するように調節することができる。
【００６４】
本発明は、
（ａ）有効量の本発明の化合物または生理学的に許容されるその塩、溶媒和物またはプロドラッグ、および
（ｂ）有効量のさらなる医薬有効成分
の別々のパックからなるセット（キット）にも関する。
【００６５】
このセットは、適切な容器、例えば、箱、個々の瓶、袋またはアンプルを含む。このセットは、例えば、別々のアンプルを含み、各アンプルは、有効量の本発明の化合物および／または医薬的に利用可能なその誘導体、溶媒和物および立体異性体（任意の割合のそれらの混合物を含む）、および有効量のさらなる医薬有効成分を、溶解または凍結乾燥された状態で含む。
【００６６】
本出願で現れる略号は以下の如くである。
【００６７】
（略号）
【００６８】
【表２−１】
2011529963.tif 000007
【００６９】
【表２−２】
2011529963.tif 000008
【００７０】
本発明の化合物は、適切な材料を用いて、以下のスキームおよび実施例の手順に従って調製することができ、さらに、以下の具体例により例示される。さらに、当該分野における通常の知識と組み合わせて、ここに記載の手順を利用することにより、ここに特許請求している本発明のさらなる化合物を容易に調製することができる。しかしながら、実施例に示される化合物は、本発明と考えられる唯一の種類を形成すると解釈すべきでない。これらの実施例は、さらに、本発明の化合物の調製のための詳細を説明する。当業者は、以下の調製手順の条件およびプロセスを変化させてこれらの化合物を調製し得ることを、容易に理解する。
【００７１】
本発明の化合物は、通常、前述のような医薬的に許容される塩の状態で単離される。単離された塩に対応するアミン非含有塩基は、水性炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウムおよび水酸化カリウムのような適当な塩基を用いて中和し、遊離されたアミン非含有塩基を有機溶媒中に抽出し、続いて蒸発させることにより発生させることができる。このように単離されたアミン非含有塩基は、有機溶媒中に溶解し、次に適当な酸を添加し、続いて、蒸発、沈殿または結晶化することにより、さらに、別の医薬的に許容される塩に転化することができる。
【００７２】
本発明の化合物の調製の説明を、以下のスキームに示す。スキーム中に特記しなければ、変化させたものは、前述と同じ意味を有する。
【００７３】
本発明は、以下に記載のスキームおよび実施例に従って、式（Ｉ）、（ＩＩ）および下位式ＩＡ〜ＩＨで示される化合物、および表１に記載の化合物を製造するための方法にも関する。
【００７４】
スキーム１
スキーム１は、式（Ｉ）で示される全ての実施例２．１〜２．２０の合成のために用いられる一般的合成経路を示す。第１の工程は、置換アニリン（１１）と３−フルオロ−イソニコチン酸またはその誘導体（１２）との間の、それぞれの酸中間体（１３）を提供するための、縮合反応である。酸中間体を、順次、適切なアミンまたはアルコールと反応させて、それぞれアミドまたはエステル（１４）を提供した。保護基（例えばアセトニド基など）が存在する場合、最後に適切な脱保護工程が含まれて、化合物（１５）を得た。
【００７５】
【化３】
2011529963.tif 000009
【００７６】
スキーム２
スキーム２は、好ましいアミンジオール中間体またはそのジオール保護類似体の合成を示す。この合成は、ラセミ体シクロヘクス−２−エノール（１６）から、まずアセチル化で始まる。次に、（１７）のアセチル基を、トロスト配位子（トロスト配位子）の存在下におけるカリウムフタルイミドとのパラジウム触媒反応において立体特異的に置換（Ｔｒｏｓｔ  ｅｔ ａｌ． ｉｎ Ｊ.Ａｍ.Ｃｈｅｍ.Ｓｏｃ.１９９４、１１６、４０８９−４０９０に記載）して、化合物（１８）を得る。次に、二重結合を四酸化オスミウムで処理することによりｓｙｎ−ジヒドロキシル化してジオール（１９）を得、続いて、フタルイミド基を直接除去する（それによりアミン２７を得る）、またはまずジオールをアセトニド（２０）として保護し次にフタルイミド基を除去してアミン（２１）を得た。
【００７７】
【化４】
2011529963.tif 000010
【００７８】
スキーム３
スキーム３において、ラセミ体アミノジオールの合成を示す。（１）Ｎｉｓｈｉｋａｗａ，Ｎ； Ａｓａｉ，Ｍ； Ｏｈｙａｂｕ，Ｎ； Ｉｓｏｂｅ，Ｍ；Ｊ.Ｏｒｇ.Ｃｈｅｍ.１９８８、１８８−１９２.および（２）Ｄｏｎｏｈｏｅ，Ｊ.Ｔ.； Ｂｌａｄｅｓ，Ｋ； Ｍｏｏｒｅ，Ｐ.Ｒ.； Ｗａｒｉｎｇ，Ｍ.Ｊ.； Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ.Ｊ.Ｇ.； Ｈｅｌｌｉｗｅｌｌ，Ｍ．； Ｎｅｗｃｏｍｂｅ，Ｎ.Ｊ.； Ｓｔｅｍｐ，Ｇ；Ｊ.Ｏｒｇ.Ｃｈｅｍ.２００２、７９４６−７９５６に記載のように、合成は、ラセミ体シクロヘクス−２−エノール（１６）のオーヴァーマン転移で始まり（トリクロルアセチミデート中間体を介して）、トリクロルアセトアミド（２２）を得、次に、四酸化オスミウムで処理することによりｓｙｎ−ジヒドロキシル化されてジオール２３−２６を得る。得られる４種のアミノジオール（２３−２６）のジアステレオマー混合物を、アキラルクロマトグラフィーにより２種のラセミ対（２３／２４および２５／２６）に分離し、次に脱保護して対応するラセミ体アミノジオール（２７／２８および２９／３０）を得ることができる。
【００７９】
【化５】
2011529963.tif 000011
【実施例】
【００８０】
以下に示す実施例は、本発明の特定の態様を説明することを意図しており、明細書の範囲または特許請求の範囲を制限することを決して意図していない。
【００８１】
（１）分析
以下の２法を用いてＬＣ／ＭＳ分析を行った。
【００８２】
（方法Ａ）：Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｃ18，５μｍ，３×３０ｍｍカラムを使用、流量は４００μＬ／分、サンプルループは５μｌ、移動相(Ａ)：０．１％蟻酸を含む水、移動相(Ｂ)：０．１％蟻酸を含むメタノール、保持時間は分で示す。方法の詳細：（Ｉ）ＵＶ／Ｖｉｓダイオードアレイ検出器Ｇ１３１５Ｂ(Ａｇｉｌｅｎｔ製)およびＦｉｎｎｉｇａｎ  ＬＣＱ  Ｄｕｏ  ＭＳ検出器を備えるＱｕａｔｅｒｎａｒｙ  Ｐｕｍｐ  Ｇ１３１１Ａ(Ａｇｉｌｅｎｔ製)において、ＥＳＩ＋モードで、２５４および２８０ｎｍでＵＶ検出し、３．２分線形グラジエントにおけるグラジエント１５−９５％（Ｂ）で実行、（ＩＩ）９５％（Ｂ）で１．４分保持、（ＩＩＩ）０．１分線形グラジエントにおいて９５％から１５％（Ｂ）に低下、（ＩＶ）１５％（Ｂ）で２．３分保持。
【００８３】
（方法Ｂ）：Ｗａｔｅｒｓ  Ｓｙｍｍｅｔｒｙ  Ｃ18，３．５μｍ，４．６×７５ｍｍカラムを使用、流量は１ｍｌ／分、サンプルループは１０μｌ、移動相(Ａ)：０．０５％ＴＦＡを含む水、移動相(Ｂ)：０．０５％ＴＦＡを含むＡＣＮ、保持時間は分で表す。方法の詳細：（Ｉ）ＵＶ／Ｖｉｓダイオードアレイ検出器Ｇ１３１５Ｂ(Ａｇｉｌｅｎｔ製)およびＡｇｉｌｅｎｔ  Ｇ１９５６Ｂ（ＳＬ）ＭＳ検出器を備えるＢｉｎａｒｙ  Ｐｕｍｐ  Ｇ１３１２Ａ（Ａｇｉｌｅｎｔ製）において、ＥＳＩ＋モードで、２５４および２８０ｎｍでＵＶ検出し、１０分線形グラジエントにおけるグラジエント２０−８５％（Ｂ）で実行、（ＩＩ）８５％（Ｂ）で１分保持、（ＩＩＩ）０．２分線形グラジエントにおいて８５％から２０％（Ｂ）に低下、（ＩＶ）２０％（Ｂ）で３．８分保持。
【００８４】
（キラルＨＰＬＣ分析）
Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓシステムにおいてダイセル化学工業製のＣｈｉｒａｌＰａｋ  ＡＤ−Ｈカラム（２５０×４．６ｍｍ）を用いてキラルＨＰＬＣ分析を行った。この方法において、注入体積は５．０μＬとし、１００％メタノールを２５℃で流量１ｍｌ／分で１５分間流し、２５４および２８０ｎｍでＵＶ検出を行った。
【００８５】
（分取ＨＰＬＣ）
Ｗａｔｅｒｓ  Ａｔｌａｎｔｉｓ  ｄＣ18  ＯＢＤ(登録商標)１０μＭ(３０×２５０ｍｍ)カラムまたはＷａｔｅｒｓ  Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｐｒｅｐ  Ｃ18  ＯＢＤ  １０μＭ(３０×２５０ｍｍ)カラムを用いて、分取ＨＰＬＣを行った。これらカラムは、サンプルループ(１０ｍＬ)およびＩＳＣＯ  ＵＡ−６  ＵＶ／Ｖｉｓ検出器を備えるＷａｔｅｒｓ  Ｐｒｅｐ  ＬＣ  ４０００システムにおいて、流量６０ｍＬ／分で用いた。移動相は、（Ａ）水および（Ｂ）ＨＰＬＣ級のアセトニトリルを含む２つの溶媒貯留器から引き出した。典型的分取操作で線形グラジエントを用いた（例えば、０−６０％溶媒Ｂにて６０分間）。
【００８６】
（２）化学的合成
（２．１）酢酸シクロヘクス−２−エニル（１７）
【００８７】
【化６】
2011529963.tif 000012
【００８８】
２−シクロヘキセン−１−オール（１６）（４５．５ｍｍｏｌ、５．０２ｍＬ）をピリジン（０．２７ｍｏｌ、２２ｍＬ）中に含む溶液に、０℃で、無水酢酸を滴下し、反応混合物を０℃で０．５時間攪拌した。氷浴を除去し、混合物を室温で一晩攪拌した。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、ＨＣｌ（１Ｎ）、飽和ＮａＨＣＯ3および塩水で洗い、減圧下に濃縮して粗生成物１７を６ｇ（９４％）得、これを、さらに精製することなく次の工程で用いた。ＴＬＣでは、５％Ｈ2ＳＯ4／ＥｔＯＨを加えた２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用し、（１６）のＲｆは０．４、（１７）のＲｆは０．８であった。
【００８９】
（２．２）  ２−［（１Ｒ）−シクロヘクス−２−エン−１−イル］−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン（１８）
【００９０】
【化７】
2011529963.tif 000013
【００９１】
無水ＤＣＭ（４０ｍＬ）中にカリウムフタルイミド（１６０ｍｍｏｌ、２９．６ｇ）、Ｎ,Ｎ'−（１Ｓ，２Ｓ）−シクロヘキサン−１，２−ジイルビス［２−（ジフェニルホスフィノ）ベンズアミド］（トロスト配位子）（６ｍｍｏｌ、４．１４ｇ）、［Ｐｄ(ｐ−アリル)Ｃｌ］2（２ｍｍｏｌ、０．７３ｇ）およびテトラヘキシルアンモニウムブロミド（２１６ｍｍｏｌ、９４ｇ）を含む混合物に、Ｎ2雰囲気下に、無水ＤＣＭ４０ｍＬ中の酢酸２−シクロヘキセン−１−イル（１７）（１３ｇ、粗物）を加えた。混合物を、周囲温度で一晩攪拌した。次に、反応液を水（２５０ｍｌ）で急冷し、ＤＣＭ（３×２５０ｍｌ）で抽出した。有機層を併せ、塩水（４００ｍｌ）で洗い、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、濃縮して粗生成物を黄色油状物として得た。ＭｅＯＨから再結晶して、生成物９．０２４ｇを得た（純度：ＨＰＬＣによると１００％、収率：５０％）。母液を、フラッシュクロマトグラフィー（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製して、化合物１８を８．８ｇ得た（純度：ＨＰＬＣによると８６％、収率：４８％）。ＮＭＲおよびＭＳのデータは、公表論文に一致する：Ｔｒｏｓｔ，Ｂ.Ｍ.； Ｂｕｎｔ，Ｒ.Ｃ.； Ｊ.Ａｍ.Ｃｈｅｍ.Ｓｏｃ.１９９４、４０８９−４０９０。
【００９２】
（２．３）  ２−［（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−２，３−ジヒドロキシシクロヘキシル］−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン（１９）
【００９３】
【化８】
2011529963.tif 000014
【００９４】
２−［（１Ｒ）−シクロヘクス−２−エン−１−イル］−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン（１８）（１９．９ｍｍｏｌ、４．５３ｇ）および４−メチルモルホリン−Ｎ−オキシド（６０ｍｍｏｌ、７．０１ｇ）をアセトン／水（４：１、６２．５ｍＬ）中に含む懸濁液に、四酸化オスミウム（０．２ｍｍｏｌ、５０ｍｇ）を加えた。反応液を４時間攪拌した。混合物を濃縮し、飽和亜硫酸ナトリウム（４０ｍＬ）を加えた。次に、これを、迅速に、ＥｔＯＡｃで３回抽出した。併せた有機層を水および塩水で洗い、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濃縮して粗生成物を白色固形物として得た（４．９４ｇ、収率：９５％）。キラルＨＰＬＣ［８．５３分間］。分析データは、公表データに一致した（Ｄｏｎｏｈｏｅ，Ｊ．Ｔ．；ｅｔ  ａｌ．，Ｊ.Ｏｒｇ.Ｃｈｅｍ．，２００２，６７，７９４６−７９５６）。
【００９５】
（２．４）  ２−［（３ａＳ，４Ｒ，７ａＲ）−２，２−ジメチルヘキサヒドロ−１，３−ベンゾジオキソール−４−イル］−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン（２０）
【００９６】
【化９】
2011529963.tif 000015
【００９７】
２−［（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−２，３−ジヒドロキシシクロヘキシル］−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン（１９）（５０．０ｇ、１９１．４ｍｍｏｌ）および２，２−メトキシプロパン（５００ｍＬ、４．０７ｍｏｌ）をアセトン（５００ｍＬ）中に含む溶液に、触媒量のｐ−トルエンスルホン酸を加え、得られる反応混合物を室温で３時間攪拌した。反応液を、飽和Ｎａ2ＣＯ3溶液を用いて急冷してｐＨを１０に調節し、溶媒を除去した。水（７５０ｍＬ）を残渣に加え、酢酸エチルで抽出した（２×７５０、５００ｍＬ）。有機層を併せ、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、濃縮して所望の生成物を白色固形物として得た（５５．８ｇ、収率：９６．８％）。ＬＣ／ＭＳ［方法Ｂ：ｒｔ：６．１６分；ｍ／ｚ：３０２（Ｍ＋１）］。
【００９８】
（２．５）  （３ａＳ，４Ｒ，７ａＲ）−２，２−ジメチルヘキサヒドロ−１，３−ベンゾジオキソール−４−アミン（２１）
【００９９】
【化１０】
2011529963.tif 000016
【０１００】
エタノール（５００ｍＬ）中に２−［（３ａＳ，４Ｒ，７ａＲ）−２，２−ジメチルヘキサヒドロ−１，３−ベンゾジオキソール−４−イル］−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン（２０）（１９１．４ｍｍｏｌ、５０．０Ｏｇ）およびヒドラジン（３０８．４ｍｍｏｌ、１５．０ｍＬ）を含む混合物を、４時間還流した。反応はＨＰＬＣでモニターした。ＨＰＬＣ分析は、反応が完了しなかったことを示した（８６％転化）。さらなるヒドラジン３ｍＬを反応混合物に加え、２時間還流した。反応液を０℃に冷却し、濾過した。フィルターケーキをＩＰＡで洗い、乾燥して所望の生成物２１を得た（９．５２ｇ、収率：２１％、重量純度：ＮＭＲにより８４％）。濾液を濃縮し、残渣をＩＰＡ（約２００ｍＬ）に取り込んだ。副生物が結晶化し、濾過により取り出し、濾液から揮発分を除去し、乾燥して所望の生成物２１の第二産物を得た（２８．４６ｇ、収率：６４％）。ＴＬＣ（８０％ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃと酢酸１滴、ニンヒドリン軽度浸漬）。
【０１０１】
（２．６）  ３−［（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ］イソニコチン酸
【０１０２】
【化１１】
2011529963.tif 000017
【０１０３】
無水テトラヒドロフラン（８０ｍＬ）中に２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミン（２０．０ｇ、８４．３８ｍｍｏｌ）を含む混合物を、不活性雰囲気下に−６５℃に冷却してから、内部温度を−５５℃より低温に維持する割合で１．０Ｍリチウムビス（トリメチルシリル）アミド（２５５ｍＬ、２５５ｍｍｏｌ）をゆっくり添加した。最終的添加後、濃スラリーを３０分間攪拌し、次に、３−フルオロ−イソニコチン酸（８．０ｇ、５６．６９ｍｍｏｌ）で処理した。混合物を室温で４日間攪拌し、次に、水性の２．０Ｎ水酸化ナトリウム（１０００ｍｌ）および酢酸エチル  （２５０ｍｌ）に注ぎ込んだ。層を分離し、有機層を再び水性水酸化ナトリウム（２×１０００ｍｌ）で抽出した。併せた水性フラクションのｐＨを、濃塩酸で２に調節し、それにより固形分を沈殿させた。材料を濾過し、水（３００ｍｌ）で洗い、高減圧下に４０℃で１８時間乾燥して生成物（１９．０５ｇ、５３．１９ｍｍｏｌ、９４％）を黄色固形物として得た。
【０１０４】
（２．７）  Ｎ−［（３ａＳ，４Ｒ，７ａＲ）−２，２−ジメチルヘキサヒドロ−１，３−ベンゾジオキソール−４−イル］−３−［（２−フルオロ−４−オドフェニル）アミノ］イソニコチンアミド（３１）
【０１０５】
【化１２】
2011529963.tif 000018
【０１０６】
３−［（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ］イソニコチン酸（１０．４６ｇ、２９．２ｍｍｏｌ）、（３ａＳ，４Ｒ，７ａＲ）−２，２−ジメチルヘキサヒドロ−１，３−ベンゾジオキソール−４−アミン（２１）（５．００ｇ、２９．２ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４．４１ｇ、２９．２ｍｍｏｌ）およびＥＤＣＩ（５．６ｇ、２９．２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１００ｍＬ）中に含む懸濁液を、室温で一晩攪拌した。反応液を水（１５０ｍＬ）で急冷し、酢酸エチル（１５０ｍＬ）で抽出した。乳濁液が形成され、これを集め、濾過し、濾液を有機層に組み合わせた。有機層を飽和ＮａＨＣＯ3溶液（１５０ｍＬ）および水（２×１５０ｍＬ）および塩水で洗い、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、濃縮して褐色泡状物を得た。粗生成物を、ＩＰＡから結晶化することにより精製した。母液を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーにより精製して所望の生成物を得た（１２ｇ、収率：８０％）。ＬＣ／ＭＳ［方法Ａ： ｒｔ：７．３５分； ｍ／ｚ： ５１２（Ｍ＋１）］。
【０１０７】
（２．８）  （Ｎ−［（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−２，３−ジヒドロキシシクロヘキシル］−３−［（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ］イソニコチンアミド）（８）
【０１０８】
【化１３】
2011529963.tif 000019
【０１０９】
ジエチルエーテル中の２Ｍ  ＨＣｌの１７．６２ｍＬを、Ｎ−［（３ａＲ，４Ｓ，７ａＳ）−２，２−ジメチルヘキサヒドロ−１，３−ベンゾジオキソール−４−イル］−３−［（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ］イソニコチンアミド（３１）（６．６５ｍｍｏｌ、３．１５ｇ）をＭｅＯＨ（６４ｍＬ）中に含む褐色溶液に添加し、得られる反応混合物を室温で５時間攪拌した。反応混合物を約３０ｍＬまで濃縮すると、黄色固形物が形成され、それを濾過して塩酸塩としての生成物を得た。その塩にＭｅＯＨ１０ｍＬを加え、水酸化アンモニウムをｐＨ１０になるまで添加した。白色固形物が形成され、固形物（１．８３ｇ、収率：５８％）を濾過により集め、水で洗った。濾液を濃縮して、第二産物を白色固形物として得た（０．５６ｇ、収率：１８％）。ＬＣ／ＭＳ［方法Ｂ： ｒｔ： ５．８３分； ｍ／ｚ： ４７２（Ｍ＋１）］。キラルＨＰＬＣ［７．０６分］。
【０１１０】
（２．９）  ２，２，２−トリクロロ−Ｎ−シクロヘクス−２−エン−１−イルアセトアミド（２２）
【０１１１】
【化１４】
2011529963.tif 000020
【０１１２】
２−シクロヘキセン−１−オール（１６）（１８ｇ、０．１８３ｍｏｌ）を無水ジクロロメタン（２７５ｍｌ）中に含む溶液に、ＤＢＵ（４１．８８ｇ、０．２７５ｍｏｌ）を加え、混合物を−２０℃に冷却した。この溶液に、トリクロロアセトニトリル（４７．６６ｇ、０．３３０ｍｏｌ）を滴下した。反応液を、−２０℃で３時間攪拌し、塩化アンモニウム水溶液で急冷した。有機相を分離し、炭酸カリウムで乾燥した。溶媒を減圧下に除去して、中間体シクロヘクス−２−エン−１−イル  ２，２，２−トリクロロエタンイミドエートを得た。これをトルエン（１００ｍｌ）に溶解し、炭酸カリウム（３０ｇ）で処理した。混合物を１２時間還流した。冷却後、混合物をセライトを通して濾過し、濾液を蒸発させて化合物（２２）９ｇ（２０％）を固形物として得た。ＬＣ／ＭＳ：実測質量（ｍ／ｚ，ＭＳ，２４２．９）。方法：Ａ−０．１％  ＨＣＯＯＨ、Ｂ−ＡＣＮ（７０％）、流量−０．８ｍｌ／分。カラム：ＧＥＮＥＳＩＳ  Ｃ１８  ５０×４．６ｍｍ  ３Ｕ。Ｒｔ(分)：１．６４５：1Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ3、４００ＭＨｚ)  δ１．６４−１．７４(３Ｈ,ｍ），１．９６−２．１２(３Ｈ,ｍ），４．４６−４．４７(１Ｈ,ｍ)，５．６４−５．６７(１Ｈ,ｍ)，５．９７−５．６．０１(１Ｈ,ｍ)，６．５９(１Ｈ,ｂｓ)。
【０１１３】
（２．１０）  ２，２，２−トリクロロ−Ｎ−［（１ＲＳ，２ＳＲ，３ＲＳ）−２、３−ジヒドロキシシクロヘキシル］アセトアミド（２３と２４とのラセミ混合物）
【０１１４】
【化１５】
2011529963.tif 000021
【０１１５】
２，２，２−トリクロロ−Ｎ−シクロヘクス−２−エン−１−イルアセトアミド（２２）（４．５ｇ、０．０１８２ｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン−Ｎ−オキシド（７．５ｇ、０．０５５ｍｏｌ）をアセトン（１００ｍｌ）中に含む溶液に、水（２５ｍｌ）を加え、続いて、触媒量の四酸化オスミウム（０．１ｇ、固形）を加える。反応混合物を室温で１４時間攪拌し、亜硫酸ナトリウムの飽和溶液（２０ｍｌ）で急冷した。混合物をさらに２０分間攪拌し、次に、溶媒を減圧下に除去し、残渣を、溶離液として石油エーテル／酢酸エチル（３／７）を用いるクロマトグラフィーにより精製して、ラセミジオール３．３ｇ（６０％）を固形物として得た。ＬＣ／ＭＳ：実測質量（ｍ／ｚ，−ＭＳ，２７５．８）。方法：Ａ−０．１％  ＨＣＯＯＨ、Ｂ−ＡＣＮ（７０％）。流量−０．８ｍｌ／分。カラム：ＧＥＮＥＳＩＳ  Ｃ１８  ５０×４．６ｍｍ  ３Ｕ。Ｒｔ（分）：０．６９５： 1Ｈ  ＮＭＲ(ＣＤＣｌ3、４００ＭＨｚ) δ１．３１−１．７０(６Ｈ,ｍ)，３．８７−３．９２(２Ｈ,ｍ)，４．００−４．１０(１Ｈ,ｍ)，７．６８(１Ｈ,ｂｓ）。
【０１１６】
（２．１１）  （１ＲＳ，２ＳＲ，３ＲＳ）−３−アミノシクロヘキサン−１，２−ジオール．ＨＣｌ（２７と２８とのラセミ混合物）
【０１１７】
【化１６】
2011529963.tif 000022
【０１１８】
２，２，２−トリクロロ−Ｎ−［（１ＲＳ，２ＳＲ，３ＲＳ）−２，３−ジヒドロキシシクロヘキシル］アセトアミド（２３と２４）（２．３ｇ）および５Ｍ水性ＨＣｌ（３０ｍｌ）の混合物を１０時間還流し、減圧下に蒸発させて表記化合物１．２ｇ（８６％）を粘ちょう液体として得た。ＭＳ：質量（ｍ／ｚ，ＭＳ，１３１．９）。ＨＰＬＣ＞９８％。方法：Ａ−水、Ｂ−ＡＣＮ。流量０．８ｍｌ／分。カラム：Ｃ１８  ＸＤＢ，２５０×４．６ｍｍ，ＳＣ／２７６。Ｒｔ（分）２．７１５： 1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ,４００ＭＨｚ） δ１．４３−１．９１(６Ｈ,ｍ)，２．９８−３．０２(１Ｈ,ｍ)，３．３１−３．４２(１Ｈ,ｍ)，３．８４(１Ｈ,ｍ)。
【０１１９】
（２．１２）  Ｎ−［（１ＳＲ，２ＲＳ，３ＳＲ）−２，３−ジヒドロキシシクロヘキシル］−３−フルオロ−５−［（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）イソニコチンアミド（２）
【０１２０】
【化１７】
2011529963.tif 000023
【０１２１】
３−フルオロ−５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−イソニコチン酸（１１９ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）および１，１’−カルボニルビス（１Ｈ−イミダゾール）（６７ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ（２ｍｌ）中に懸濁させた。混合物を、室温で一晩（１２時間）攪拌した。次に、３−アミノシクロヘキサン−１，２−ジオール（ラセミ体２７／２８）（４０ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．０７ｍｌ、０．４９ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温でさらに６時間攪拌した。反応完了時、反応混合物を、水性水酸化ナトリウム（１ｍｌ、１．０Ｍ）で処理し、室温で４時間攪拌した。溶液を、濃ＨＣｌを用いてｐＨ７に中和した。次に、混合物を回転蒸発させて大部分の水を除去した。得られる混合物を、分取ＨＰＬＣにより精製して生成物（２）を得た。ＬＣ／ＭＳ［方法Ａ：ｒｔ： ４．８９分；ｍ／ｚ：４９０（Ｍ＋１）］。
【０１２２】
（２．１３）  Ｎ−［（１ＳＲ，２ＲＳ，３ＳＲ）−２，３−ジヒドロキシシクロヘキシル］−３−［（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ］  イソニコチンアミド（３）
【０１２３】
【化１８】
2011529963.tif 000024
【０１２４】
３−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−イソニコチン酸（３００ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ）および１，１’−カルボニルビス（１Ｈ−イミダゾール）（１７７ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ（４ｍｌ）中に懸濁させた。混合物を、室温で一晩（１２時間）攪拌した。次に、３−アミノシクロヘキサン−１，２−ジオール（ラセミ２７／２８）（１１０ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温でさらに１２時間攪拌した。混合物を分取ＨＰＬＣにより分離して、２つの生成物、すなわちラセミアミド（３）とラセミエステル（４）とを得た。ＬＣ／ＭＳ［方法Ａ：ｒｔ：６．０１分；ｍ／ｚ：４７２（Ｍ＋１）］。キラルＨＰＬＣ［７．１０分、１３．１２分］。
【０１２５】
（２．１４）  ３−フルオロ−５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−イソニコチン酸（１ＲＳ，２ＳＲ，３ＲＳ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−シクロヘキシルエステル（４）
【０１２６】
【化１９】
2011529963.tif 000025
【０１２７】
実施例２．１３を参照されたい。ＬＣ／ＭＳ［方法Ａ：ｒｔ：４．５３分；ｍ／ｚ：４７２（Ｍ＋１）］。
【０１２８】
（２．１５）  ２−クロロ−Ｎ−（（１ＲＳ，２ＳＲ，３ＲＳ）−２，３−ジヒドロキシシクロヘキシル）−５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−イソニコチンアミド（１）
【０１２９】
【化２０】
2011529963.tif 000026
【０１３０】
２−クロロ−５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−イソニコチン酸（７５ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）および１，１’−カルボニルビス（１Ｈ−イミダゾール）（４０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ（２．５ｍｌ）中に懸濁させた。混合物を室温で一晩（１２時間）攪拌した。次に、３−アミノシクロヘキサン−１，２−ジオール（ラセミ２７／２８）（３２ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．０５ｍｌ、０．３８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で一晩攪拌した。混合物を分取ＨＰＬＣにより精製して生成物を得た。ＬＣ／ＭＳ［方法Ｂ：ｒｔ：５．３５９分；ｍ／ｚ：５０６（Ｍ＋１）］。
【０１３１】
（２．１６）  ３−（４−ブロモ−２−フルオロ−フェニルアミノ）−Ｎ−（（１ＲＳ，２ＳＲ，３ＲＳ）−２，３−ジヒドロキシシクロヘキシル）−イソニコチンアミド（５）
【０１３２】
【化２１】
2011529963.tif 000027
【０１３３】
（１）の一般的手順により調製。ＬＣ／ＭＳ［方法Ｂ：ｒｔ：５．６０２分；ｍ／ｚ：  ４２５（Ｍ＋１）］。
【０１３４】
（２．１７）  ３−（４−ブロモ−２−クロロ−フェニルアミノ）−Ｎ−（（１ＲＳ，２ＳＲ，３ＲＳ）−２，３−ジヒドロキシシクロヘキシル−イソニコチンアミド（６）
【０１３５】
【化２２】
2011529963.tif 000028
【０１３６】
（１）の一般的手順により調製。ＬＣ／ＭＳ［方法Ｂ：ｒｔ：６．１６３分；ｍ／ｚ：  ４４１（Ｍ＋１）］。
【０１３７】
（２．１８）  Ｎ−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−２，３−ジヒドロキシシクロヘキシル）−３−（２−フルオロ−フェニルアミノ）−イソニコチンアミド（１０）
【０１３８】
【化２３】
2011529963.tif 000029
【０１３９】
密閉管に、（Ｎ−［（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−２，３−ジヒドロキシシクロヘキシル］−３−［（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ］イソニコチンアミド）（８）（４２ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）、ホウ水素化ナトリウム（３４ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）、二塩化パラジウム（７．９ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）、水酸化ナトリウム（１７．８ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ−水（１：１、３ｍｌ）を仕込んだ。混合物を室温で２日間攪拌した。混合物を濾過し、濾液を濃縮した。得られる残渣をフラッシュクロマトグラフィーに付して生成物を得た。ＬＣ／ＭＳ［方法Ａ：ｒｔ：０．４３分；ｍ／ｚ：３４６（Ｍ＋１）］。
【０１４０】
（２．１９）  ３−（４−ブロモ−２−フルオロフェニルアミノ）−Ｎ−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−２，３−ジヒドロキシシクロヘキシル）イソニコチンアミド（９）
【０１４１】
【化２４】
2011529963.tif 000030
【０１４２】
ジオールのラセミ混合物の代わりにキラル的に純粋な３−アミノシクロヘキサン−１，２−ジオール（２７）を用いた以外は、（１）の一般的手順により調製。ＬＣ／ＭＳ［方法Ｂ：ｒｔ：５．１９分；ｍ／ｚ：４２６．１（Ｍ＋１）］。
【０１４３】
（２．２０）  Ｎ−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ）−２，３−ジヒドロキシシクロヘキシル）−３−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）イソニコチンアミド（７）
【０１４４】
【化２５】
2011529963.tif 000031
【０１４５】
ジオールのラセミ混合物の代わりにキラル的に純粋な３−アミノシクロヘキサン−１，２−ジオール（２８）を用いた以外は、（１）の一般的手順により調製。ＬＣ／ＭＳ［方法Ａ：ｒｔ：４．５４分；ｍ／ｚ：４７２．３（Ｍ＋１）］。
【０１４６】
（３）生物学的活性
（３．１）ＭＥＫ−１酵素アッセイ（ＬＡＮＣＥ−ＨＴＲＦ）
本発明の化合物の活性は、以下の手順により決めることができる：ヒトＭＥＫ１キナーゼ活性の阻害を、均一蛍光系アッセイによりモニターした。このアッセイは、ＭＥＫ１によるＥＲＫ１のリン酸化についてプローブへの時間分解蛍光共鳴エネルギーの転移を用いる。このアッセイは、低体積９６穴マイクロタイタープレートで行う。合計体積１５μｌで、化合物を、２ＯｍＭ  ＴＲＩＳ／ＨＣｌ、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ2、１００μＭ  ＮａＶＯ4、１ｍＭ  ＤＴＴおよび０．００５％  Ｔｗｅｅｎ  ２０（ｐＨ７．４）を含む緩衝液を用いて、１００ｎＭ  ＭＥＫ１、１５μＭ  ＡＴＰおよび３００ｎＭ  ＥＲＫ２と一緒にインキュベートする。２時間後、５０ｍＭ  ＥＤＴＡおよび０．０５％  ＢＳＡを含む緩衝液中の５ｎＭ  ユーロピウム−抗−ＰＹ２０（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ製）および５０ｎＭ  抗−ＧＳＴ−アロフィコシアニン（ＣｉｓＢｉｏ製）を添加し、反応液を暗部で１時間インキュベートする。時間分解した蛍光を、励起波長３４０ｎｍおよび発光波長６６５ｎｍとしてＬＪＬ−Ａｎａｌｙｓｔ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ製）を用いて測定する。ＤＭＳＯの最終濃度は２％である。化合物の阻害性能を評価するために、表１に示すようにＩＣ５０−価を決めた。
【０１４７】
（３．２）  腫瘍細胞増殖アッセイ（ＡＴＰ  Ｌｉｔｅ）
マウス結腸Ｃ２６、ヒト黒色腫Ａ３７５およびヒト膵臓ＭｉａＰａＣａ−２細胞を、９６穴コーニングホワイトプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ  ｗｈｉｔｅ  ｐｌａｔｅｓ）（Ｃ２６については１５００細胞／穴、Ａ３７５およびＭｉａＰａＣａ−２については２０００細胞／穴）に配し、５％ＣＯ2中、３７℃で一晩培養する。阻害剤を１００％ＤＭＳＯ中に連続的に希釈し、続いて、細胞に添加して最終的濃度を０．２５％ＤＭＳＯとする。細胞成長培地（Ｃ２６およびＭｉａＰａＣａ−２については、１０％ウシ胎児血清および２ｍＭグルタミンを含むＤＭＥＭ、Ａ３７５については、１０％ウシ胎児血清および２ｍＭグルタミンを含むＲＰＭＩ）中で試験化合物の存在下に、細胞を４日間インキュベートした。細胞増殖を、ＡＴＰ  ｌｉｔｅ細胞増殖キット（Ｐａｃｋａｒｄ製）を用いて定量化した。細胞増殖の阻害を表１に示す。２−５欄は、ヒト子宮内膜細胞の５０％細胞死（ＩＣ５０、μＭ単位）を誘発するのに必要な化合物の濃度を示している。
【０１４８】
【表３】
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【０１４９】
（３．３）  生体内（インビボ）効能研究（マウス異種移植片モデル）
雄ヌード（ｎｕ／ｎｕ）マウスに、Ｃｏｌｏ−２０５、Ａ３７５または  ＭｉａＰａＣａ２のようなヒト腫瘍細胞系の特定数の細胞を、右前肢の上部で皮下注射した。細胞を移植してから１週間後、腫瘍をキャリパーを用いて測定した。腫瘍の長さ(ｌ)および幅(ｗ)を測定し、腫瘍体積を式：ｌ×ｗ2／２により計算した。動物を、各群の平均腫瘍体積が１５０−２００ｍｍ3となるように幾つかの群に仕分けし、化合物での処理を開始した（０日目と表示）。０、４、６、８、１０、１２および１４日目に、各動物について、腫瘍体積および体重を測定した。腫瘍の体積および体重％を、変数の双方向繰り返し測定分析（Ｔｗｏ−Ｗａｙ  Ｒｅｐｅａｔｅｄ  Ｍｅａｓｕｒｅｓ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  Ｖａｒｉａｎｃｅ：ＲＭ−ＡＮＯＶＡ）および、それに続く、処理群平均のＦｉｓｈｅｒ’ｓポストホック多重ペアワイズ比較により分析した。この態様の化合物はこれらの腫瘍モデルにおいて効果的であり、腫瘍退化または腫瘍を含む、投与量依存的腫瘍成長阻害が得られた。例えば、化合物（９）は、経口経路により毎日１．５ｍｇ／ｋｇ投与した場合、Ｃｏｌｏ−２０５異種移植片モデルにおいて９８．５％腫瘍成長阻害を提供した。化合物（８）は、同じモデルにおいて、経口経路により１日５０μｇ／ｋｇ投与した場合、１００．６９％腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を提供し、一日１５０μｇ／ｋｇ投与した場合、１１５．３３％腫瘍成長阻害を提供した。ＭｉａＰａＣａ２モデルにおいては、化合物（８）は、一日３３μｇ／ｋｇの場合、１００．９７％  ＴＧＩを提供し、一日５０μｇ／ｋｇの場合、１１０．７４％  ＴＧＩを提供した。
【国際調査報告】
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