(57)【要約】本発明は、自己免疫疾病の処置用の医薬品の製造におけるＣＤ２０アンタゴニストの使用に関し、該医薬品は、該アンタゴニストを１回の治療的に有効な静脈内注入（ｉ．ｖ．）でヒト患者に投与するためのものである。ＣＤ２０アンタゴニストは好ましくはＣＤ２０抗体であり、自己免疫疾病は好ましくは関節リウマチである。【特許請求の範囲】
【請求項１】
自己免疫疾病の処置用の医薬品の製造におけるＣＤ２０アンタゴニストの使用であって、該医薬品は、該アンタゴニストを１回の治療的に有効な静脈内注入（ｉ．ｖ．）でヒト患者へ投与するためのものである、該使用。
【請求項２】
１回目の投与から４〜６ヶ月後に２回目の完全治療有効量のＣＤ２０アンタゴニストの静脈内注入を行なう、請求項１記載の使用。
【請求項３】
２回目の静脈内注入の投与は、１回目の投与後に応答したが再発した患者への投与のためである、請求項２記載の使用。
【請求項４】
ＣＤ２０アンタゴニストは、ＣＤ２０モノクローナル抗体である、請求項１〜３のいずれか１項記載の使用。
【請求項５】
１回目と２回目の静脈内注入における投与のための治療有効量は本質的に同じである、請求項１〜４のいずれか１項記載の使用。
【請求項６】
ＣＤ２０モノクローナル抗体は、キメラ、ヒト化、又はヒトである、請求項４〜５のいずれか１項記載の使用。
【請求項７】
自己免疫疾病は、関節リウマチ、全身性エリテマトーサス（ＳＬＥ）、ループス腎炎、潰瘍性大腸炎、クローン病、シェーグレン症候群、視神経脊髄炎（ＮＭＯ）、ＡＮＣＡ関連血管炎、ウェゲナー病、炎症性腸疾病、突発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ)、自己免疫性血小板減少症、多発性硬化症、乾癬、ＩｇＡ腎症、ＩｇＭ多発性神経炎、重症筋無力症、糖尿病、レイノー症候群、及び糸球体腎炎からなる群より選択される、請求項１〜６のいずれか１項記載の使用。
【請求項８】
自己免疫疾病は、関節リウマチである、請求項１〜７のいずれか１項記載の使用。
【請求項９】
患者は、メトトレキセート、ＴＮＦアンタゴニスト、又は異なるＣＤ２０アンタゴニストを用いた以前の処置に対して不十分な応答を示した、請求項１〜８のいずれか１項記載の使用。
【請求項１０】
自己免疫疾病は、活動性関節リウマチである、請求項１〜９のいずれか１項記載の使用。
【請求項１１】
活動性関節リウマチは、中程度から重度の関節リウマチである、請求項１０記載の使用。
【請求項１２】
治療有効量は、１０mg〜２０００mgである、請求項１〜１１のいずれか１項記載の使用。
【請求項１３】
ＣＤ２０抗体は、ヒト化２Ｈ７抗体である、請求項１〜１２のいずれか１項記載の使用。
【請求項１４】
治療有効量は、４００mg〜１５００mgである、請求項１〜１３のいずれか１項記載の使用。
【請求項１５】
治療有効量は４００mgである、請求項１〜１４のいずれか１項記載の使用。
【請求項１６】
治療有効量は１０００mgである、請求項１〜１５のいずれか１項記載の使用。
【請求項１７】
治療有効量は１５００mgである、請求項１〜１６のいずれか１項記載の使用。
【請求項１８】
ヒト化ＣＤ２０抗体は、それぞれ、配列番号６で示される完全長Ｌ鎖並びに配列番号７、８、及び１５で示される完全長重鎖を含む、２Ｈ７変異体Ａ、Ｂ、及びＩ、又はその断片からなる群より選択される、請求項１〜１７のいずれか１項記載の使用。
【請求項１９】
ヒト化ＣＤ２０抗体は、配列番号６で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号７で示される完全長Ｈ鎖、又はその断片を含む、２Ｈ７変異体Ａである、請求項１〜１８のいずれか１項記載の使用。
【請求項２０】
ヒト化ＣＤ２０抗体は、配列番号６で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号７で示される完全長Ｈ鎖、又はその断片を含む、２Ｈ７変異体Ａと本質的に同じエピトープに結合する、請求項１〜１７のいずれか１項記載の使用。
【請求項２１】
ヒト化ＣＤ２０抗体は、それぞれ、配列番号９で示される完全長Ｌ鎖並びに配列番号１０、１１、１２、１３及び１４で示される完全長Ｈ鎖、又はその断片を含む、２Ｈ７変異体Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｇ、及びＨからなる群より選択される、請求項１〜１７のいずれか１項記載の使用。
【請求項２２】
ヒト化ＣＤ２０抗体は、配列番号６で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号８で示される完全長Ｈ鎖、又はその断片を含む、２Ｈ７変異体Ｂである、請求項１〜１８のいずれか１項記載の使用。
【請求項２３】
ヒト化ＣＤ２０抗体は、配列番号９で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号１０で示される完全長Ｈ鎖、又はその断片を含む、２Ｈ７変異体Ｃである、請求項１〜１７及び２１のいずれか１項記載の使用。
【請求項２４】
抗体は、キメラ抗体リツキシマブである、請求項１〜１７のいずれか１項記載の使用。
【請求項２５】
ＣＤ２０抗体は、ヒト抗体ＨＵＭＡＸ−ＣＤ２０（商標）である、請求項１〜１７のいずれか１項記載の使用。
【請求項２６】
ＣＤ２０抗体は、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤｓ）、鎮痛薬、糖質コルチコステロイド、シクロホスファミド、アダリムマブ、レフルノミド、インフリキシマブ、エタネルセプト、オファツムマブ、トシリズマブ、ＡＭＥ−１３３、Ｉｍｍｕ−１０６、及びＣＯＸ−２阻害剤からなる群より選択された薬物と併用して投与するためのものである、請求項１〜２５のいずれか１項記載の使用。
【請求項２７】
第２の治療剤を含む、投与のための請求項１〜２６のいずれか１項記載の使用。
【請求項２８】
第２の治療剤は、免疫抑制剤である、請求項１〜２７のいずれか１項記載の使用。
【請求項２９】
第２の治療剤はメトトレキセートである、請求項１〜２８のいずれか１項記載の使用。
【請求項３０】
メトトレキセートの使用は、１０〜２５mg／週の用量で投与するためのものである、請求項１〜２９のいずれか１項記載の使用。
【請求項３１】
ＣＤ２０抗体の投与前に、１〜６個のＤＭＡＲＤの投与を含む、請求項１〜３０のいずれか１項記載の使用。
【請求項３２】
ＣＤ２０抗体の投与前に、ステロイド処置を全く含まない、請求項１〜３１のいずれか１項記載の使用。
【請求項３３】
活動性関節リウマチ（ＲＡ)の処置用の医薬品の製造におけるＣＤ２０抗体の使用であって、該医薬品は、４００mg〜１５００mgの用量の該抗体を１回の治療的に有効な静脈内注入（ｉ．ｖ．）でヒト患者に投与するためのものである、該使用。
【請求項３４】
ＣＤ２０抗体は、キメラ、ヒト化、又はヒトのモノクローナル抗体である、請求項３３記載の使用。
【請求項３５】
ヒト化ＣＤ２０抗体は、それぞれ、配列番号６で示される完全長Ｌ鎖並びに配列番号７、８及び１５で示される完全長重鎖、又はその断片を含む、２Ｈ７変異体Ａ、Ｂ、及びＩからなる群より選択される、請求項３３〜３４のいずれか１項記載の使用。
【請求項３６】
ヒト化ＣＤ２０抗体は、配列番号６で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号７で示される完全長Ｈ鎖、又はその断片を含む、２Ｈ７変異体Ａである、請求項３３〜３５のいずれか１項記載の使用。
【請求項３７】
ヒト化ＣＤ２０抗体は、配列番号６で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号７で示される完全長Ｈ鎖、又はその断片を含む、２Ｈ７変異体Ａと本質的に同じエピトープに結合する、請求項３３〜３４のいずれか１項記載の使用。
【請求項３８】
ヒト化ＣＤ２０抗体は、それぞれ、配列番号９で示される完全長Ｌ鎖並びに配列番号１０、１１、１２、１３、及び１４で示される完全長Ｈ鎖、又はその断片を含む、２Ｈ７変異体Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｇ、及びＨからなる群より選択される、請求項３３〜３４のいずれか１項記載の使用。
【請求項３９】
ヒト化ＣＤ２０抗体は、配列番号６で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号８で示される完全長Ｈ鎖、又はその断片を含む、２Ｈ７変異体Ｂである、請求項３３〜３５のいずれか１項記載の使用。
【請求項４０】
ヒト化ＣＤ２０抗体は、配列番号９で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号１０で示される完全長Ｈ鎖、又はその断片を含む、２Ｈ７変異体Ｃである、請求項３８記載の使用。
【請求項４１】
抗体は、キメラ抗体リツキシマブである、請求項３３〜３４のいずれか１項記載の使用。
【請求項４２】
投与の後に、少なくとも４ヶ月間は２回目のＣＤ２０抗体の投与を行わない、請求項３３〜４１のいずれか１項記載の使用。
【請求項４３】
４００mgの用量のＣＤ２０抗体が投与される、請求項３３〜４２のいずれか１項記載の使用。
【請求項４４】
１０００mgの用量のＣＤ２０抗体が投与される、請求項３３〜４２のいずれか１項記載の使用。
【請求項４５】
１５００mgの用量のＣＤ２０抗体が投与される、請求項３３〜４２のいずれか１項記載の使用。
【請求項４６】
活動性関節リウマチ（ＲＡ)の処置用の医薬品の製造における、配列番号６で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号７で示される完全長Ｈ鎖、又はその断片を含む、２Ｈ７変異体Ａの使用であって、該医薬品は、４００mgの用量の該抗体を１回の治療的に有効な静脈内注入（ｉ．ｖ．）でヒト患者に投与するためのものである、該使用。
【請求項４７】
活動性関節リウマチ（ＲＡ）の処置用の医薬品の製造における、配列番号６で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号７で示される完全長Ｈ鎖、又はその断片を含む、２Ｈ７変異体Ａの使用であって、該医薬品は、１０００mgの用量の該抗体を１回の治療的に有効な静脈内注入（ｉ．ｖ．）でヒト患者に投与するためのものである、該使用。
【請求項４８】
活動性関節リウマチ（ＲＡ）の処置用の医薬品の製造における、配列番号６で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号７で示される完全長Ｈ鎖、又はその断片を含む、２Ｈ７変異体Ａの使用であって、該医薬品は、１５００mgの用量の該抗体を１回の治療的に有効な静脈内注入（ｉ．ｖ．）でヒト患者に投与するためのものである、該使用。
【請求項４９】
投与の後に、少なくとも４ヶ月間は２回目のＣＤ２０抗体の投与を行わない、請求項４６〜４８のいずれか１項記載の使用。
【請求項５０】
（ａ）ＣＤ２０アンタゴニストを含む容器、及び（ｂ）ヒト被験体における自己免疫疾病を処置するための指示書を含む添付文書を含む、製品であって、ここでの指示書には、被験体に、１回の静脈内注入として完全治療有効量のＣＤ２０アンタゴニストが投与されると示されている、該製品。
【請求項５１】
ＣＤ２０アンタゴニストは、キメラ、ヒト化、又はヒトのＣＤ２０モノクローナル抗体である、請求項５１の製品。
【請求項５２】
自己免疫疾病は、関節リウマチである、請求項５０〜５１のいずれか１項記載の製品。
【請求項５３】
ＣＤ２０アンタゴニストは、配列番号６で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号７で示される完全長Ｈ鎖、又はその断片を含む、ＣＤ２０抗体２Ｈ７変異体Ａである、請求項５０〜５２のいずれか１項記載の製品。
【請求項５４】
指示書には、４００mg〜１５００mgの完全治療有効量が示されている、請求項５０〜５３のいずれか１項記載の製品。
【請求項５５】
（ａ）ＣＤ２０抗体を含む容器、及び（ｂ）ヒト被験体における関節リウマチを処置するための指示書を含む添付文書を含む、製品であって、ここでの指示書には、被験体に、１回の静脈内注入として４００mg〜１５００mgの完全治療有効量のＣＤ２０抗体が投与されると示されている、該製品。
【請求項５６】
ＣＤ２０抗体は、配列番号６で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号７で示される完全長Ｈ鎖、又はその断片を含む、ヒト化２Ｈ７変異体Ａである、請求項５６記載の製品。
【請求項５７】
ヒト化２Ｈ７変異体Ａは、１０mM硫酸ヒスチジン、６０mg／mlスクロース、０．２mg／mlポリソルベート２０、及び滅菌注射用水中において、ｐＨ５．８で、２０mg／mlの抗体となるように製剤化される、請求項５５〜５６のいずれか１項記載の製品。
【請求項５８】
１回限りの静脈内投与に適した形態の完全有効量のＣＤ２０抗体を含む、薬学的製剤。
【請求項５９】
ＣＤ２０抗体は、配列番号６で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号７で示される完全長Ｈ鎖、又はその断片を含む、ヒト化２Ｈ７変異体Ａである、請求項５８記載の薬学的製剤。
【請求項６０】
有効量は４００mg〜１５００mgである、請求項５８〜５９のいずれか１項記載の薬学的製剤。
【請求項６１】
ＣＤ２０抗体は、配列番号６で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号７で示される完全長Ｈ鎖、又はその断片を含む、ヒト化２Ｈ７変異体Ａである、請求項５８〜６０のいずれか１項記載の薬学的製剤。
【請求項６２】
ヒト化２Ｈ７変異体Ａは、１０mM硫酸ヒスチジン、６０mg／mlスクロース、０．２mg／mlポリソルベート２０、及び滅菌注射用水中において、ｐＨ５．８で、２０mg／mlの抗体となるように製剤化される、請求項５８〜６１のいずれか１項記載の薬学的製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、処置開始時における単回の全有効量の静脈内注入を含む処置レジメンを使用した、ＣＤ２０抗体の投与による、関節リウマチを含む自己免疫疾病の処置に関する。
【０００２】
発明の背景
リンパ球は、白血球に属する数個の集団の中の１つであり、外来抗原を特異的に認識してそれに応答する。リンパ球の主な３つの分類は、Ｂリンパ球（Ｂ細胞）、Ｔリンパ球（Ｔ細胞）及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞である。Ｂリンパ球は、抗体産生に関与する細胞であり、体液性免疫を与える。Ｂ細胞は骨髄内で成熟し、骨髄を出て、その細胞表面上に抗原結合抗体を発現する。ナイーブＢ細胞がその膜結合抗体に特異的な抗原と初めて遭遇すると、該細胞は速やかに分裂し、その子孫をメモリーＢ細胞と「形質細胞」と呼ばれるエフェクター細胞に分化させる。メモリーＢ細胞はより長い寿命を持ち、もとの親細胞と同じ特異性を有する膜結合抗体を発現し続ける。形質細胞は、膜結合抗体を産生する代わりに、分泌型抗体を産生する。分泌された抗体は、体液性免疫の主要なエフェクター分子である。
【０００３】
ＣＤ２０抗原（ヒトＢリンパ球制限分化抗原、Ｂｐ３５とも呼ばれる）は、プレＢ及び成熟Ｂリンパ球上に位置するおよそ３５ｋＤの分子量の疎水性膜貫通型タンパク質である（Valentineら、J. Biol. Chem. 264(19): 11282-11287 (1989); 及びEinfeldら、EMBO J. 7(3): 711-717 (1988)）。この抗原はまた９０％を超えるＢ細胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ)上でも発現しているが（Andersonら、Blood 63(6): 1424-1433 (1984)）、造血幹細胞、プロＢ細胞、正常な形質細胞、又は他の正常な組織上には見られない（Tedderら、J. Immunol. 135(2): 973-979 (1985)）。ＣＤ２０は、細胞周期の開始及び分化についての活性化方法における初期のステップを制御すると考えられており（Tedderら、前記）、そしておそらくカルシウムイオンチャネルとして機能する（Tedderら、J. Cell. Biochem. 14D: 195 (1990))。
【０００４】
Ｂ細胞リンパ腫においてＣＤ２０が発現している場合、この抗原はこのようなリンパ腫を処置するための有用な治療ターゲットとなる。米国ではＢ細胞性ＮＨＬを患う人は３００，０００人を超え、毎年、新たに５６，０００件の症例が診断されている。ＣＤ２０はまた、自己免疫疾病を処置するための有用なターゲット抗原でもある。
【０００５】
ヒトＣＤ２０抗原に対して指向される遺伝子工学されたキメラマウス／ヒトモノクローナル抗体であるリツキシマブ（ＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標）、欧州ではＭａｂｔｈｅｒａ（登録商標））抗体（米国カリフォルニア州サウスサンフランシスコ所在のGenentech, Inc.により市販されている）は、再発性又は難治性の、低悪性度又は濾胞性の、ＣＤ２０陽性の、Ｂ細胞性非ホジキンリンパ腫患者の処置に使用されている。リツキシマブは、１９９８年４月７日に発行された米国特許第５，７３６，１３７号（Andersonら）及び米国特許第５，７７６，４５６号において「Ｃ２Ｂ８」とも呼ばれる抗体である。
【０００６】
リツキシマブは、Ｂ細胞及び自己抗体が、疾病の病理生理学に関与すると思われる種々の非悪性自己免疫疾患において研究されている。Edwardsら、Biochem Soc. Trans. 30: 824-828 (2002)。リツキシマブは、例えば、関節リウマチ（ＲＡ）（Leandroら、Ann. Rheum. Dis. 61: 883-888 (2002); Edwardsら、Arthritis Rheum., 46 (Suppl. 9): S46 (2002); Stahlら、Ann. Rheum. Dis., 62 (Suppl. 1): OP004 (2003); Emeryら、Arthritis Rheum. 48(9): S439 (2003)）、ループス（Eisenberg, Arthritis. Res. Ther. 5: 157-159 (2003); Leandroら、Arthritis Rheum. 46: 2673-2677 (2002); Gormanら、Lupus, 13: 312-316 (2004)）、免疫性血小板減少性紫斑病（D' Arenaら、Leuk. Lymphoma 44: 561-562 (2003); Stasiら、Blood, 98: 952-957 (2001); Salehら、Semin. Oncol., 27 (Supp 12): 99-103 (2000); Zajaら、Haematolgica, 87: 189-195 (2002); Ratanatharathornら、Ann. Int. Med., 133: 275-279 (2000)）、赤芽球ろう（Aunerら、Br. J. Haematol., 116: 725-728 (2002)）、自己免疫性貧血（Zajaら、Haematologica 87: 189-195 (2002)（Haematologica 87: 336 (2002)に誤植あり））、寒冷凝集素症（Layiosら、Leukemia, 15: 187-8 (2001); Berentsenら、Blood, 103: 2925-2928 (2004); Berentsenら、Br. J. Haematol., 115: 79-83 (2001); Bauduer, Br. J. Haematol., 112: 1083-1090 (2001); Zajaら、Br. J. Haematol., 115: 232-233 (2001)）、重症インスリン耐性のタイプＢ症候群（Collら、N. Engl. J. Med., 350: 310-311 (2004)）、混合型クリオグロブリン血症（DeVitaら、Arthritis Rheum. 46 Suppl. 9: S206／S469 (2002)）、重症筋無力症（Zajaら、Neurology, 55: 1062-63 (2000); Wylamら、J. Pediatr., 143: 674-677 (2003)）、ウェゲナー肉芽腫症（Specksら、Arthritis & Rheumatism 44: 2836-2840 (2001)）、難治性尋常性天疱瘡（Dupuyら、Arch Dermatol., 140: 91-96 (2004)）、皮膚筋炎（Levine, Arthritis Rheum., 46 (Suppl. 9): S1299 (2002)）、シェーグレン症候群（Somerら、Arthritis & Rheumatism, 49: 394-398 (2003)）、急性タイプＩＩ混合クリオグロブリン血症（Zajaら、Blood, 101: 3827-3834 (2003)）、尋常性天疱瘡（Dupayら、Arch. Dermatol., 140: 91-95 (2004)）、自己免疫性神経障害（Pestronkら、J. Neurol. Neurosurg. Psychiatry 74: 485-489 (2003)）、傍腫瘍性眼球クローヌス・ミオクローヌス症候群（Pranzatelliら、Neurology 60(Suppl. 1) PO5.128: A395 (2003)）、及び再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）の兆候及び症状を強力に緩和すると報告されている。Crossら、(abstract) "Preliminary Results from a Phase II Trial of Rituximab in MS" Eighth Annual Meeting of the Americas Committees for Research and Treatment in Multiple Sclerosis, 20-21 (2003)。
【０００７】
第ＩＩ相試験（ＷＡ１６２９１）は、関節リウマチ（ＲＡ)を有する患者において行ない、リツキシマブの安全性及び効力に関する４８週間経過観察データが提供された。Emeryら、Arthritis Rheum 48(9): S439 (2003); Szczepanskiら、Arthritis Rheum 48(9): S121 (2003)。合計１６１人の患者を均等に４つの処置群：メトトレキセート、リツキシマブのみ、リツキシマブ＋メトトレキセート、及びリツキシマブ＋シクロホスファミド（ＣＴＸ)に無作為に割り当てた。リツキシマブの処置レジメンは、１ｇを静脈内に第１日目と第１５日目に投与するものであった。ＲＡを有するほとんどの患者においてリツキシマブの点滴は、ほとんどの患者によって十分に耐容され、１回目の点滴の間に少なくとも１回の有害事象を起こしたのは患者の３６％であった（これに対し、プラセボを投与された患者では３０％）。全体的に、大部分の有害事象は、軽度から中等度の重篤度であると見られ、全ての処置群で偏りがなかった。４８週間にわたって４つの処置群において、合計１９件の重篤な有害事象が存在し、リツキシマブ／ＣＴＸ群における頻度が僅かに高かった。感染の発生率は、全ての群にわたって偏りがなかった。このＲＡ患者集団における重篤な感染症の平均感染率は、年間１００人の患者につき４．６６人であり、これは、地域密着型の疫学研究において報告されているＲＡ患者における入院の必要な感染症の感染率よりも低い（年間１００人の患者につき９．５７人）。Doranら、Arthritis Rheum. 46: 2287-2293 (2002)。
【０００８】
自己免疫性神経障害（Pestronkら、前記）、眼球クローヌス・ミオクローヌス症候群（Pranzatelliら、前記）、及びＲＲＭＳ（Crossら、前記）を含む、神経学的疾患を有する少数の患者において報告されているリツキシマブの安全プロファイルは、腫瘍学又はＲＡにおいて報告されているものと類似していた。ＲＲＭＳを有する患者におけるインターフェロン−β（ＩＮＦ−β）又は酢酸グラチラマーと併用したリツキシマブの進行中の研究者主導の治験（ＩＳＴ）において、処置された患者の１０人中１人が、リツキシマブの１回目の点滴後に中程度の発熱及び悪寒を起こした後、一晩観察のために入院したが、他の９人の患者は、報告されているいかなる有害事象もなく４回の点滴レジメンを完了した。
【０００９】
ＣＤ２０抗体、ＣＤ２０結合分子、及び自己抗原ワクチンに関する特許及び特許公報としては、米国特許第５，７７６，４５６号、第５，７３６，１３７号、第５，８４３，４３９号、第６，３９９，０６１号、及び第６，６８２，７３４号、並びに、米国公開特許第２００２／０１９７２５５号、米国公開特許第２００３／００２１７８１号、米国公開特許第２００３／００８２１７２号、米国公開特許第２００３／００９５９６３号、米国公開特許第２００３／０１４７８８５号、米国公開特許第２００５／０１８６２０５号及び国際公開公報第１９９４／１１０２６号（Andersonら）；
米国特許第６，４５５，０４３号、米国公開特許第２００３／００２６８０４号、米国公開特許第２００３／０２０６９０３号、及び国際公開公報第２０００／０９１６０号（Grillo-Lopez, A.）、国際公開公報第２０００／２７４２８号（Grillo-Lopez及びLeonard）、米国公開特許第２００４／０２１３７８４号、及び国際公開公報第２０００／２７４３３号（Grillo-Lopez及びLeonard）、国際公開公報第２０００／４４７８８号（Braslawskyら）、国際公開公報第２００１／１０４６２号（Rastetter, W.）、国際公開公報第２００１／１０４６１号（Rastetter及びWhite）；国際公開公報第２００１／１０４６０号（White及びGrillo-Lopez）、米国公開特許第２００１／００１８０４１号、米国公開特許第２００３／０１８０２９２号、米国公開特許第２００２／００２８１７８号、国際公開公報第２００１／３４１９４号、及び国際公開公報第２００２／２２２１２号（Hanna及びHariharan）、米国公開特許第２００２／０００６４０６号及び国際公開公報第２００２／０４０２１号（Hanna及びHariharan）；
米国公開特許第２００２／００１２６６５号、米国公開特許第２００５／０１８０９７５号、国際公開公報第２００１／７４３８８号、及び米国特許第６，８９６，８８５Ｂ５号（Hanna, N.）、米国公開特許第２００２／００５８０２９号（Hanna, N.）、米国公開特許第２００３／０１０３９７１号（Hariharan及びHanna）、米国公開特許第２００５／０１２３５４０号（Hannaら）；米国公開特許第２００２／０００９４４４号及び国際公開公報第２００１／８０８８４号（Grillo-Lopez, A.）、国際公開特許第２００１／９７８５８号、米国公開特許第２００５／０１１２０６０号、米国公開特許第２００２／００３９５５７号、及び米国特許第６，８４６，４７６号（White, C.）、米国公開特許第２００２／０１２８４４８号及び国際公開公報第２００２／３４７９０号（Reff, M.）、国際公開公報第２００２／０６０９５５号（Braslawskyら）、国際公開公報第２００２／０９６９４８号（Braslawskyら）、国際公開公報第２００２／０７９２５５号（Reff及びDavies）、米国特許第６，１７１，５８６号及び第６，９９１，７９０号、及び国際公開公報第１９９８／５６４１８号（Lamら）、米国公開特許第２００４／０１９１２５６号及び国際公開公報第１９９８／５８９６４号（Raju, S.）；
国際公開公報第１９９９／２２７６４号（Raju, S.）、国際公開公報第１９９９／５１６４２号、米国特許第６，１９４，５５１号、米国特許第６，２４２，１９５号、米国特許第６，５２８，６２４号、及び米国特許第６，５３８，１２４号（Idusogieら）；米国特許第７，１２２，６３７号、米国公開特許第２００５／０１１８１７４号、米国公開特許第２００５／０２３３３８２号、米国公開特許第２００６／０１９４２９１号、米国公開特許第２００６／０１９４２９０号、米国公開特許第２００６／０１９４９５７号、及び国際公開公報第２０００／４２０７２号（Presta, L.）；国際公開公報第２０００／６７７９６号（Curdら）、国際公開公報第２００１／０３７３４号（Grillo-Lopezら）、米国公開特許第２００２／０００４５８７号、米国公開特許第２００６／００２５５７６号、及び国際公開公報第２００１／７７３４２号（Miller及びPresta）、米国公開特許第２００２／０１９７２５６号、及び国際公開公報第２００２／０７８７６６号（Grewal, I.）、米国公開特許第２００３／０１５７１０８号、及び国際公開公報第２００３／０３５８３５号（Presta, L.）；
米国特許第５，６４８，２６７号、第５，７３３，７７９号、第６，０１７，７３３号、及び第６，１５９，７３０号、及び国際公開公報第１９９４／１１５２３号（Reffら、expression technology）、米国特許第６，５６５，８２７号、第６，０９０，３６５号、第６，２８７，５３７号、第６，０１５，５４２号、第５，８４３，３９８号、及び第５，５９５，７２１号（Kaminskiら）；米国特許第５，５００，３６２号、第５，６７７，１８０号、第５，７２１，１０８号、第６，１２０，７６７号、第６，６５２，８５２号、及び第６，８９３，６２５号、並びに国際公開公報第１９８８／０４９３６号（Robinsonら）；米国特許第６，４１０，３９１号（Zelsacher）；米国特許第６，２２４，８６６号、及び国際公開公報第００／２０８６４号（Barbera-Guillem, E.）；国際公開公報第２００１／１３９４５号（Barbera-Guillem, E.）、国際公開公報第２０００／６７７９５号（Goldenberg）；米国特許第７，０７４，４０３号（Goldenberg及びHansen）；米国特許第７，１５１，１６４号（Hansenら）、米国公開特許第２００３／０１３３９３０号、国際公開公報第２０００／７４７１８号、及び米国公開特許第２００５／０１９１３００Ａ１号（Goldenberg及びHansen）；
米国公開特許第２００３／０２１９４３３号、及び国際公開公報第２００３／６８８２１号（Hansenら）、国際公開公報第２００４／０５８２９８号（Goldenberg及びHansen）；国際公開公報第２０００／７６５４２号（Golayら）；国際公開公報第２００１／７２３３３号（Wolin及びRosenblatt）；米国特許第６，３６８，５９６号（Ghetieら）；米国特許第６，３０６，３９３号及び米国公開特許第２００２／００４１８４７号（Goldenberg, D.）；米国公開特許第２００３／００２６８０１号（Weiner及びHartmann）；国際公開公報第２００２／１０２３１２号（Engleman, E.）；米国公開特許第２００３／００６８６６４号（Albitarら）、国際公開公報第２００３／００２６０７号（Leung, S.）；国際公開公報第２００３／０４９６９４号、米国公開特許第２００２／０００９４２７号、及び米国公開特許第２００３／０１８５７９６号（Wolinら）；国際公開公報第２００３／０６１６９４号（Sing及びSiegall）；米国公開特許第２００３／０２１９８１８号（Bohenら）；米国公開特許第２００３／０２１９４３３号、及び国際公開特許第２００３／０６８８２１号（Hansenら）、米国公開特許第２００３／０２１９８１８号（Bohenら）、米国公開特許第２００２／０１３６７１９号（Shenoyら）；国際公開公報第２００４／０３２８２８号及び米国公開特許第２００５／０１８０９７２号（Wahlら）、及び国際公開公報第２００２／５６９１０号（Hayden-Ledbetter）が挙げられる。
また、米国特許第５，８４９，８９８号及び欧州特許第３３０，１９１号（Seedら）；欧州特許第３３２，８６５Ａ２号（Meyer及びWeiss）；米国特許第４，８６１，５７９号（Meyerら）；米国公開特許第２００１／００５６０６６号（Bugelskiら）；国際公開公報第１９９５／０３７７０号（Bhatら）；米国公開特許第２００３／０２１９４３３Ａ１号（Hansenら）；国際公開公報第２００４／０３５６０７号及び米国公開特許第２００４／１６７３１９号（Teelingら）；国際公開公報第２００５／１０３０８１号（Teelingら）；米国公開特許第２００６／００３４８３５号、米国公開特許第２００６／００２４３００号、及び国際公開公報第２００４／０５６３１２号（Lowmanら）；米国公開特許第２００４／００９３６２１号（Shitaraら）；国際公開公報第２００４／１０３４０４号（Watkinsら）；国際公開公報第２００５／０００９０１号（Tedderら）；米国公開特許第２００５／００２５７６４号（Watkinsら）；米国公開特許第２００６／０２５１６５２号（Watkinsら）；国際公開公報第２００５／０１６９６９号（Carrら）；米国公開特許第２００５／００６９５４５号（Carrら）；国際公開公報第２００５／０１４６１８号（Changら）；米国公開特許第２００５／００７９１７４号（Barbera-Guillem及びNelson）；米国公開特許第２００５／０１０６１０８号（Leung及びHansen）；米国公開特許第２００５／０１２３５４６号（Umanaら）；米国公開特許第２００４／００７２２９０号（Umanaら）；米国公開特許第２００３／０１７５８８４号（Umanaら）；及び
国際公開公報第２００５／０４４８５９号（Umanaら）；国際公開公報第２００５／０７０９６３号（Allanら）；米国公開特許第２００５／０１８６２１６号（Ledbetter及びHayden-Ledbetter）；米国公開特許第２００５／０２０２５３４号（Hayden-Ledbetter及びLedbetter）；米国公開特許第２００５／１３６０４９号（Ledbetterら）；米国公開特許第２００３／１１８５９２号（Ledbetterら）；米国公開特許第２００３／１３３９３９号（Ledbetter及びHayden-Ledbetter）；米国公開特許第２００５／０２０２０１２号（Ledbetter及びHayden-Ledbetter）、米国公開特許第２００５／０１７５６１４号（Ledbetter及びHayden-Ledbetter）；米国公開特許第２００５／０１８０９７０号（Ledbetter及びHayden-Ledbetter）；米国公開特許第２００５／０２０２０２８号（Hayden-Ledbetter及びLedbetter）；米国公開特許第２００５／０２０２０２３号（Hayden-Ledbetter及びLedbetter）；国際公開公報第２００５／０１７１４８号（Ledbetterら）；国際公開公報第２００５／０３７９８９号（Ledbetterら）；米国特許第６，１８３，７４４号（Goldenberg）；米国特許第６，８９７，０４４号（Braslawskiら）；国際公開公報第２００６／００５４７７号（Krauseら）；米国公開特許第２００６／００２９５４３号（Krauseら）；
米国公開特許第２００６／００１８９００号（McCormickら）；米国公開特許第２００６／００５１３４９号（Goldenberg及びHansen); 国際公開公報第２００６／０４２２４０号（Iyer及びDunussi-Joannopoulos）；米国公開特許第２００６／０１２１０３２号（Dahiyatら）；国際公開公報第２００６／０６４１２１号（Teillaudら）；米国公開特許第２００６／０１５３８３８号（Watkins）、中国特許第１７１８５８７号（Chenら）；国際公開公報第２００６／０８４２６４号（Adamsら）；米国公開特許第２００６／０１８８４９５号（Barronら）；米国公開特許第２００４／０２０２６５８号及び国際公開公報第２００４／０９１６５７号（Benynes, K.）；米国公開特許第２００５／００９５２４３号、米国公開特許第２００５／０１６３７７５号、国際公開公報第２００５／００３５１号、及び国際公開公報第２００６／０６８８６７号（Chan, A.）；米国公開特許第２００６／０１３５４３０号及び国際公開公報第２００５／００５４６２号（Chenら）；米国公開特許第２００５／００３２１３０号及び国際公開公報第２００５／０１７５２９号（Beresiniら）、米国公開特許第２００５／００５３６０２号及び国際公開公報第２００５／０２３３０２号（Brunetta, P.)；
米国公開特許第２００６／０１７９５０１号及び国際公開公報第２００４／０６００５２号（Chenら）；国際公開公報第２００４／０６００５３号（Chenら）；米国公開特許第２００５／０１８６２０６号及び国際公開公報第２００５／０６０９９９号（Brunetta, P.); 米国公開特許第２００５／０１９１２９７号及び国際公開公報第２００５／０６１５４２号（Brunetta, P.); 米国公開特許第２００６／０００２９３０号及び国際公開公報第２００５／１１５４５３号（Brunettaら）；米国公開特許第２００６／００９９６６２号及び国際公開公報第２００５／１０８９８９号（Chuntharapaiら）；中国特許第１４２０１２９Ａ号（Zhongxin Guojian Pharmaceutical）；米国公開特許第２００５／０２７６８０３号及び国際公開公報第２００５／１１３００３号（Chenら）；米国公開特許第２００５／０２７１６５８号及び国際公開公報第２００５／１１７９７２号（Brunettaら）；米国公開特許第２００５／０２５５５２７号及び国際公開公報第２００５／１１４２８号（Yang, J.）；米国公開特許第２００６／００２４２９５号及び国際公開公報第２００５／１２０４３７号（Brunetta, P.)）；米国公開特許第２００６／００５１３４５号及び国際公開公報第２００５／１１７９７８号（Frohna, P.）；米国公開特許第２００６／００６２７８７号及び国際公開公報第２００６／０１２５０８号（Hitraya, E.）；
米国公開特許第２００６／００６７９３０号及び国際公開公報第２００６／３１３７０号（Lowmanら）；国際公開公報第２００６／２９２２４号（Ashkenazi, A.）；米国公開特許第２００６／０１１０３８７号及び国際公開公報第２００６／４１６８０号（Brunetta, P.）；米国公開特許第２００６／０１３４１１１号及び国際公開公報第２００６／０６６０８６号（Agarwal, S.）；国際公開公報第２００６／０６９４０３号（Ernst及びYansura）；米国公開特許第２００６／０１８８４９５号及び国際公開公報第２００６／０７６６５１号（Dummer, W.）；国際公開公報第２００６／０８４２６４号（Lowman, H.）；国際公開公報第２００６／０９３９２３号（Quan及びSewell）；国際公開公報第２００６／１０６９５９号（Numazakiら）；国際公開公報第２００６／１２６０６９号（Morawala）；国際公開公報第２００６／１３０４５８号（Gazit-Bornsteinら）；米国公開特許第２００６／０２７５２８４号（Hanna, G.）；米国公開特許第２００７／００１４７８５号（Golayら）；米国公開特許第２００７／００１４７２０号（Gazit-Bornsteinら）；及び米国公開特許第２００７／００２０２５９号（Hansenら）；米国公開特許第２００７／００２０２６５号（Goldenberg及びHansen）；米国公開特許第２００７／００１４７９７号（Hitraya）；米国公開特許第２００６／０２４６００４号及び国際公開公報第０６／０８４２６４号も参照されたい。
【００１０】
リツキシマブを用いた処置に関する科学的刊行物としては、Perotta及びAbuel、"Response of chronic relapsing ITP of 10 years duration to rituximab" Abstract # 3360 Blood 10(1)(part 1-2): p. 88B(1998); Perottaら、"Rituxan in the treatment of chronic idiopathic thrombocytopaenic purpura (ITP)」、Blood, 94: 49(abstract)(1999); Matthews,R.、"Medical Heretics"、New Scientist (２００１年４月７日）；Leandroら、"Clinical outcome in 22 patients with rheumatoid arthritis treated with B lymphocyte depletion"、Ann Rheum Dis、前記；Leandroら、"Lymphocyte depletion in rheumatoid arthritis: early evidence for safety,efficacy and dose response"、Arthritis and Rheumatism 44(9): S370(2001); 
Leandroら、"An open study of B lymphocyte depletion in systemic lupus erythematosus", Arthritis and Rheumatism, 46: 2673-2677(2002)、ここで、２週間の間、各患者にリツキシマブの５００mgの点滴を２回、シクロホスファミドの７５０mgの点滴を２回、及び高用量の経口コルチコステロイドを与え、この処置された患者のうち２人がそれぞれ７ヶ月後と８カ月後に再発し、そして異なるプロトコールで再処置されている；"Successful long-term treatment of systemic lupus erythematosus with rituximab maintenance therapy" Weideら、Lupus, 12: 779-782(2003)、ここで、患者は、リツキシマブ（１週間に１回の間隔で３７５mg／ｍ２×４反復）で処置されており、そして、更なるリツキシマブ適用を５〜６カ月ごとに受け、次いで３カ月ごとの３７５mg／ｍ２のリツキシマブによる維持療法を受け、そして難治性ＳＬＥを有する第２の患者はリツキシマブで成功裏に治療され、そして、維持療法を３カ月ごとに受けて、ここで、両患者はリツキシマブ療法に対して十分に応答している；
Edwards及びCambridge、"Sustained improvement in rheumatoid arthritis following a protocol designed to deplete B lymphocytes" Rheumatology 40: 205-211(2001); Cambridgeら、"B lymphocyte depletion in patients with rheumatoid arthritis: serial studies of immunological parameters" Arthritis Rheum., 46 (Suppl. 9): S1350(2002); Cambridgeら、"Serologic changes following B lymphocyte depletion therapy for rheumatoid arthritis" Arthritis Rheum., 48: 2146-2154(2003); Edwardsら、"B-lymphocyte depletion therapy in rheumatoid arthritis and other autoimmune disorders" Biochem Soc.Trans.、前記；Edwardsら、"Efficacy and safety of rituximab,a B-cell targeted chimeric monoclonal antibody: A randomized, placebo controlled trial in patients with rheumatoid arthritis.Arthritis and Rheumatism 46(9): S197(2002); 
Edwardsら、"Efficacy of B-cell-targeted therapy with rituximab in patients with rheumatoide arithritis" N Engl.J.Med.350: 2572-2582(2004); Pavelkaら、Ann.Rheum.Dis.63: (S1): 289-290(2004); Emeryら、Arthritis Rheum.50(S9): S659(2004); Levine及びPestronk、"IgM antibody-related polyneuropathies: B-cell depletion chemotherapy using rituximab" Neurology 52: 1701-1704(1999); Uchidaら、"The innate mononuclear phagocyte network depletes B lymphocytes through Fc receptor-dependent mechanisms during anti-CD20 antibody immunotherapy" J.Exp.Med.199: 1659-1669(2004); Gongら、"Importance of cellular microenvironment and circulatory dynamics in B cell immunotherapy" J.Immunol.174: 817-826(2005); Hamaguchiら、"The peritoneal cavity provides a protective niche for B1 and conventional B lymphocytes during anti-CD20 immunotherapy in mice" J.Immunol.174: 4389-4399(2005); Craggら、"The biology of CD20 and its potential as a target for mAb therapy" Curr.Dir.Autoimmun.8: 140-174 (2005); Eisenberg、"Mechanisms of autoimmunity" Immunol.Res.27: 203-218(2003); 
DeVitaら、"Efficacy of selective B cell blockade in the treatment of rheumatoid arthritis"Arthritis & Rheum 46: 2029-2033(2002); Higashidaら、"Treatment of DMARD-refractory rheumatoid arthritis with rituximab" Annual Scientific Meeting of the American College of Rheumatology;Oct24-29;(Abstract#LB11)、New Orleans, LA2002において発表されたもの；Tuscano,J. "Successful treatment of infliximab-refractory rheumatoid arthritis with rituximab" Annual Scientific Meeting of the American College of Rheumatology;Oct24-29;New Orleans, LA 2002において発表されたもの、及び刊行されたTuscano, Arthritis Rheum.46: 3420(2002); "Pathogenic roles of B cells in human autoimmunity;insights from the clinic" Martin及びChan、Immunity20：517-527(2004); 
Silverman及びWeisman、"Rituximab therapy and autoimmune disorders,prospects for anti-B cell therapy"、Arthritis and Rheumatism, 48: 1484-1492(2003); Kazkaz及びIsenberg、"Anti B cell therapy(rituximab)in the treatment of autoimmune diseases"、Current opinion in pharmacology, 4: 398-402(2004); Virgolini及びVanda、"Rituximab in autoimmune diseases"、Biomedicine & pharmacotherapy, 58: 299-309(2004);Klemmerら、"Treatment of antibody mediated autoimmune disorders with a AntiCD20 monoclonal antibody Rituximab"、Arthritis And Rheumatism, 48: (9)9,S(SEP), page: S624-S624(2003); Kneitzら、"Effective B cell depletion with rituximab in the treatment of autoimmune diseases"、Immunobiology, 206: 519-527(2002); Arzooら、"Treatment of refractory antibody mediated autoimmune disorders with an anti-CD20 monoclonal antibody (rituximab)" Annals of the Rheumatic Diseases, 61(10), p922-924(2002)Comment in Ann Rheum Dis.61: 863-866(2002); 
"Future strategies in immunotherapy"、Lake及びDionneによる, Burger's Medicinal Chemistry and Drug Discovery(2003, John Wiley & Sons, Inc.)中の、オンライン記事投稿日２００３年１月１５日（Chapter2 "Antibody-Directed Immunotherapy"); Liang及びTedder、Wiley Encyclopedia of Molecular Medicine, Section: CD20 as an Immunotherapy Target、「ＣＤ２０」と題されたオンライン記事投稿日：２００２年１月１５日；"Monoclonal Antibodies to Human Cell Surface Antigens"と題された付録４Ａ、Stockingerら編：Coliganらによる、Current Protocols in Immunology (2003 John Wiley & Sons, Inc.)中の、オンライン投稿日：２００３年５月；印刷物公開日：２００３年２月；Penichet及びMorrison、"CD Antibodies/molecules: Definition;Antibody Engineering" Wiley Encyclopedia of Molecular Medicine Section中: Chimeric,Humanized and Human Antibodies；２００２年１月１５日にオンライン投稿が挙げられる。
【００１１】
更に、Looney" B cells as a therapeutic target in autoimmune diseases other than rheumatoid arthritis" Rheumatology, 44 Suppl2: ii13-ii17(2005); Chambers及びIsenberg、"Anti-B cell therapy(rituximab)in the treatment of autoimmune diseases」Lupus14(3): 210-214(2005); Looneyら、"B-cell depletion as a novel treatment for systemic lupus erythematosus: a phase I/II dose-escalating trial of rituximab" Arthritis Rheum.50: 2580-2589(2004); Looney、"Treating human autoimmune disease by depleting B cells" Ann Rheum.Dis.61: 863-866(2002); Edelbauerら、"Rituximab in childhood systemic lupus erythematosus refractory to conventional immunosuppression Case report" Pediatr.Nephrol.20(6): 811-813(2005); D'Cruz及びHughes、"The treatment of lupus nephritis" BMJ 330(7488): 377-378(2005); 
Looney、"B cell-targeted therapy in diseases other than rheumatoid arthritis" J.Rheumatol.Suppl.73: 25-28;discussion29-30(2005); Sfikakisら、"Remission of proliferative lupus nephritis following B cell depletion therapy is preceded by down-regulation of the T cell costimulatory molecule CD40 ligand: an open-label trial" Arthritis Rheum.52(2): 501-513(2005); Rastetterら、"Rituximab: expanding role in therapy for lymphomas and autoimmune diseases" Annu.Rev.Med.55: 477-503(2004); Silverman、"Anti-CD20 therapy in systemic lupus erythematosus: a step closer to the clinic" Arthritis Rheum.52(2): 371-7 (2005), Arthritis Rheum.52(4): 1342(2005)に誤植あり；Ahnら、"Long-term remission from life-threatening hypercoagulable state associated with lupus anticoagulant (LA) following rituximab therapy" Am.J.Hematol.78(2): 127-129(2005); 
Tahirら、"Humanized anti-CD20 monoclonal antibody in the treatment of severe resistant systemic lupus erythematosus in a patient with antibodies against rituximab" Rheumatology, 44(4): 561-562(2005)、オンライン公開日２００５年１月１１日；Looneyら、"Treatment of SLE with anti-CD20 monoclonal antibody" Curr. Dir. Autoimmun.8: 193-205(2005); Craggら、"The biology of CD20 and its potential as a target for mAb therapy" Curr. Dir. Autoimmun. 8: 140-174(2005); Gottenbergら、"Tolerance and short term efficacy of rituximab in 43 patients with systemic autoimmune diseases" Ann. Rheum. Dis. 64(6): 913-920(2005)オンライン公開日２００４年１１月１８日；Tokunagaら、"Down-regulation of CD40 and CD80 on B cells in patients with life-threatening systemic lupus erythematosus after successful treatment with rituximab" Rheumatology 44(2): 176-182(2005)、オンライン公開日２００４年１０月１９日を参照されたい。また、Leandroら、"B cell repopulation occurs mainly from naive B cells in patient with rheumatoid arthritis and systemic lupus erythematosus" Arthritis Rheum., 48(Suppl9): S1160(2003)も参照されたい。
【００１２】
Specksら、"Response of Wegener’s granulomatosis to anti-CD20 chimeric monoclonal antibody therapy" Arthritis & Rheumatism 44(12): 2836-2840(2001)では、ウェゲナー肉芽腫症の処置が、リツキシマブの３７５mg／ｍ２の４回の点滴及び高用量の糖質コルチコイドを使用して成功したことが開示されている。この療法は、ｃＡＮＣＡが再発したときに１１カ月後に再度行われたが、その療法では糖質コルチコイドは用いなかった。リツキシマブの第２クールの８カ月後には、患者の疾病は完全に緩解したままであった。更に、別の研究において、リツキシマブを、経口プレドニゾン１mg／kg／日（４週目までに４０mg／日まで減少させ、そして、その後１６週間にわたって中断した）と共に３７５mg／ｍ２×４の用量で使用したとき、リツキシマブは、十分に耐容され、重篤なＡＮＣＡ関連血管炎に対する有効な緩解誘導剤であることが見出された。ＡＮＣＡの再発／ＡＮＣＡの力価の上昇に対して、４人の患者をリツキシマブのみで再処置した。糖質コルチコイド以外、更なる免疫抑制剤は、緩解誘導及び持続した緩解の維持（６か月以上）に必要でないと思われる。Keoghら、Kidney Blood Press. Res. 26: 293(2003)において、難治性ＡＮＣＡ関連血管炎を有する１１人の患者を、１週間１回、４回の３７５mg／ｍ２のリツキシマブの投与及び高用量糖質コルチコイドで処置し、その結果、緩解がもたらされたことが報告された。
【００１３】
難治性ＡＮＣＡ関連血管炎を有する患者に、免疫抑制医薬品（例えば、静脈内へのシクロホスファミド、ミコフェノール酸モフェチル、アザチオプリン、又はレフルノミド）と共にリツキシマブを投与したところ、明らかに効果的であった。Eriksson、"Short-term outcome and safety in 5 patients with ANCA-positive vasculitis treated with rituximab", Kidney and Blood Pressure Research, 26: 294(2003)（４週間、１週間に１回、３７５mg／ｍ２のリツキシマブで処置したＡＮＣＡ関連血管炎を有する５人の患者は、その処置に応答した）；Jayneら、"B-cell depletion with rituximab for refractory vasculitis" Kidney and Blood Pressure Research, 26: 294-295(2003)（バックグラウンドの免疫抑制及びプレドニゾロンとシクロホスファミドと共に３７５mg／ｍ２のリツキシマブの点滴を１週間に１回、４回受けた難治性血管炎を有する６人の患者は、血管炎活性が大きく低下した）。難治性全身性血管炎を有する患者に投与するために静脈内シクロホスファミドと共に４回の３７５mg／ｍ２／用量のリツキシマブを使用する更なる報告は、Smith及びJayne、A prospective,open label trial of B-cell depletion with rituximab in refractory systemic vasculitis、ポスター９９８(11th International Vasculitis and ANCA workshop)、American Society of Nephrology, J. Am. Soc. Nephrol., 14: p.755A(2003)に提供されている。５００mg／週の用量の２回又は４回のリツキシマブで成功裏に処置されたＡＮＣＡ陽性血管炎を有する９人の患者に関するEriksson、J. Internal Med., 257: 540-548(2005)、並びに、２０００年１月から２００２年９月に行われた、３７５mg／ｍ２／週の用量のリツキシマブで４回処置又は再処置された難治性ＡＮＣＡ関連血管炎を有する１１人の患者において、Ｂリンパ球枯渇によって緩解が誘導されたことを報告しているKeoghら、Arthritis and Rheumatism, 52: 262-268(2005)も参照されたい。
【００１４】
ヒト化抗ＣＤ２０抗体の活性に関しては、例えば、Vugmeysterら、"Depletion of B cells by a humanized anti-CD20 antibody PRO70769 in Macaca fascicularis" J. Immunother. 28: 212-219(2005)を参照されたい。ヒトモノクローナル抗体に関する考察については、Bakerら、"Generation and characterization of LymphoStat-B,a human monoclonal antibody that antagonizes the bioactivities of B lymphocyte stimulator" Arthritis Rheum.48: 3253-3265(2003)を参照されたい。更に、若年者の患者における高悪性度の非ホジキンリンパ腫を治療するためのリツキシマブを用いたＭＩＮＴ試験は成功した（Lancet Oncology(２００６年４月５日）。
【００１５】
Trubion Pharmaceuticals Inc.は、近年、バックグラウンド療法としてメトトレキセートの投与も受けている２７６人の関節リウマチ患者において実施された多施設共同無作為化二重盲検プラセボ対照第ＩＩｂ相臨床試験において、ＴＲＵ−０１５と称される抗ＣＤ２０抗体断片型分子の安全性及び効力を評価した。これらの患者は、無作為に均等に５つの群に分けられ、これらの群は、プラセボ、２００mg、４００mg、８００mg、又は１６００mgのＴＲＵ−０１５を１回の静脈内注入により投与された。ＴＲＵ−０１５は一般的に十分に耐容されたと報告された。
【００１６】
疾患を処置するにあたり、効力があり、かつ安全で、殆ど又は全く副作用を伴うことなく患者に十分に耐容され、患者にとってできるだけ不便のないように毎日の医療に有利に実施できるような方法で薬物を投与できることが有益である。以下の詳細な説明から明らかであるように、本発明は、自己免疫疾病の処置におけるＣＤ２０抗体の投与のための新しいプロトコールを提供することにより、この必要性を充足する。
【００１７】
発明の要約
１つの局面において、本発明は、１回の静脈内注入（ｉ．ｖ．）として完全治療有効量のＣＤ２０アンタゴニストを患者に投与することを含む、自己免疫疾病を有するヒト患者のＢ細胞を枯渇させる方法に関する。それ故、本発明は、自己免疫疾病を処置するための医薬品の製造におけるＣＤ２０アンタゴニストの使用に関し、ここでの医薬品は、該アンタゴニストを１回の治療的に有効な静脈内注入（ｉ．ｖ．）でヒト患者に投与するためのものである。
【００１８】
本発明による使用の１つの態様において、１回目の投与の４〜６ヶ月後に、完全治療有効量のＣＤ２０アンタゴニストの２回目の静脈内注入が、前記投与の後に行われる。通常２回目の投与は、処置された患者が１回目の処置に応答したが再発した兆候を示した場合に行なわれる。従って、本発明による使用の別の態様において、前記の２回目の静脈内注入の投与は、１回目の投与後に応答したが再発した患者へ投与するためのものである。本発明による使用の別の態様において、１回目と２回目の静脈内注入における治療有効投与量は、本質的に同じである。
【００１９】
本発明による使用の別の態様において、ＣＤ２０アンタゴニストは、ＣＤ２０モノクローナル抗体である。本発明による使用の好ましい態様において、ＣＤ２０モノクローナル抗体は、キメラ、ヒト化、又はヒトである。より好ましくは、ＣＤ２０抗体はヒト化２Ｈ７抗体である。
【００２０】
本発明による使用の別の態様において、自己免疫疾病は、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、ループス腎炎、潰瘍性大腸炎、クローン病、シェーグレン症候群、視神経脊髄炎（ＮＭＯ）、ＡＮＣＡ関連血管炎、ウェゲナー病、炎症性腸疾患、突発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ)、自己免疫性血小板減少症、多発性硬化症、乾癬、ＩｇＡ腎症、ＩｇＭ多発性神経炎、重症筋無力症、糖尿病、レイノー症候群、及び糸球体腎炎からなる群より選択される。好ましい態様において、自己免疫疾病は、関節リウマチである。更により好ましい態様において、自己免疫疾病は、活動性関節リウマチである。最も好ましい態様において、活動性関節リウマチは、中程度から重度の関節リウマチである。
【００２１】
本発明による使用の別の態様において、処置された患者は、以前に投与されたメトトレキセート、ＴＮＦアンタゴニスト、及び／又は他の抗ＣＤ２０アンタゴニスト（本発明に従って投与された抗体以外のＣＤ２０抗体を含む）に対して不適切な応答を示した。
【００２２】
本発明による使用における治療有効量は、典型的には、１０mg〜２０００mg、好ましくは約４００mg〜１５００mgである。別の態様において、治療有効量は、４００mg、１０００mg、及び１５００mgである。
【００２３】
好ましい態様において、自己免疫疾病は関節リウマチであり、ＣＤ２０抗体はヒト化２Ｈ７抗体である。
【００２４】
様々な態様において、ヒト化ＣＤ２０抗体は、（１）配列番号６で示される完全長Ｌ鎖並びにそれぞれ配列番号７、８、及び１５で示される完全長重鎖を含む、２Ｈ７変異体Ａ、Ｂ及びＩ、又はその断片からなる群より選択されるか、あるいは（２）配列番号６で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号７で示される完全長Ｈ鎖を含む、２Ｈ７変異体Ａであるか、又はその断片、あるいは（３）配列番号６で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号７で示される完全長Ｈ鎖を含む２Ｈ７変異体Ａ、又はその断片と本質的に同じエピトープに結合する抗体であるか、あるいは（４）配列番号９で示される完全長Ｌ鎖並びにそれぞれ配列番号１０、１１、１２、１３、及び１４で示される完全長Ｈ鎖を含む、２Ｈ７変異体Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｇ、及びＨ、又はその断片からなる群より選択されるか、あるいは（５）配列番号６で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号８で示される完全長Ｈ鎖を含む、２Ｈ７変異体Ｂであるか、又はその断片、あるいは（６）配列番号９で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号１０で示される完全長Ｈ鎖を含む、２Ｈ７変異体Ｃ、又はその断片である。
【００２５】
１つの特定の態様において、抗体は、キメラ抗体リツキシマブである。
【００２６】
別の態様において、ＣＤ２０抗体は、ヒト抗体ＨＵＭＡＸ−ＣＤ２０（商標）である。
【００２７】
本発明による使用の更なる態様において、ＣＤ２０抗体は、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤｓ）、鎮痛薬、糖質コルチコステロイド、シクロホスファミド、アダリムマブ、レフルノミド、インフリキシマブ、エタネルセプト、オファツムマブ、トシリズマブ、ＡＭＥ−１３３、Ｉｍｍｕ−１０６、及びＣＯＸ-２阻害剤からなる群より選択された薬物と併用して投与するためのものである。
【００２８】
また更なる態様において、該使用は、第二の治療剤（これは例えば免疫抑制剤でもよい）を含む投与のためのものである。好ましくは、該使用は、メトトレキセートを含む。最も好ましくは、メトトレキセートは、１０〜２５mg／週の投与量である。
【００２９】
別の態様において、該使用は、ＣＤ２０抗体の投与前に、１〜６個のＤＭＡＲＤの投与を含む。
【００３０】
更に別の態様において、該使用は、ＣＤ２０抗体の投与前にステロイド処置を全く含まない。
【００３１】
別の局面において、本発明は、活動性関節リウマチ（ＲＡ）処置のための医薬品の製造におけるＣＤ２０抗体の使用に関し、ここでの医薬品は、４００mg〜１５００mgの用量の該抗体を１回の治療的に有効な静脈内注入（ｉ．ｖ．）でヒト患者に投与するためのものである。より好ましくは、用量は、４００mg、１０００mg、又は１５００mgからなる群より選択される。
【００３２】
先と同じように、該抗体は、キメラ、ヒト化、又はヒトのモノクローナル抗体であり、例えば、前記に列挙したＣＤ２０抗体のいずれかであり得る。
【００３３】
別の態様において、本発明は、活動性関節リウマチ（ＲＡ）処置のための医薬品の製造における、配列番号６で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号７で示される完全長Ｈ鎖を含む、２Ｈ７変異体Ａ、又はその断片の使用に関し、ここでの医薬品は、４００mgの用量の該抗体を１回の治療的に有効な静脈内注入（ｉ．ｖ．）で投与するためのものである。
【００３４】
さらに別の態様において、本発明は、活動性関節リウマチ（ＲＡ）処置のための医薬品の製造における、配列番号６で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号７で示される完全長Ｈ鎖を含む、２Ｈ７変異体Ａ、又はその断片の使用に関し、ここでの医薬品は、１０００mgの用量の該抗体を１回の治療的に有効な静脈内注入（ｉ．ｖ．）で投与するためのものである。
【００３５】
別の態様において、本発明は、活動性関節リウマチ（ＲＡ）処置のための医薬品の製造における、配列番号６で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号７で示される完全長Ｈ鎖を含む、２Ｈ７変異体Ａ、又はその断片の使用に関し、ここでの医薬品は、１５００mgの用量の該抗体を１回の治療的に有効な静脈内注入（ｉ．ｖ．）で投与するためのものである。
【００３６】
本発明による使用の特定の態様において、ＣＤ２０抗体は、少なくとも１カ月、又は少なくとも２カ月、又は少なくとも３カ月、又は少なくとも４カ月の間、２回目のＣＤ２０抗体の投与を行わない投与のためのものである。
【００３７】
更なる局面において、本発明は、配列番号６で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号７で示される完全長Ｈ鎖を含む、２Ｈ７変異体Ａ、又はその断片を４００mg患者に投与することを含む、ヒト患者における活動性関節リウマチ（ＲＡ）の処置法に関する。
【００３８】
また更なる局面において、本発明は、配列番号６で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号７で示される完全長Ｈ鎖を含む、ＣＤ２０抗体２Ｈ７変異体Ａ、又はその断片を１０００mg患者に投与することを含む、ヒト患者における活動性関節リウマチ（ＲＡ）の処置法に関する。
【００３９】
特定の態様において、１回目の投与後に、少なくとも１カ月、又は少なくとも２カ月、又は少なくとも３カ月、又は少なくとも４カ月は、２回目のＣＤ２０抗体の投与を行わない。
【００４０】
本明細書の全ての使用において、初期の注入速度は、通常の標準的な注入速度の範囲内であり、例えば、５０mg／ｈから１００mg／ｈである。注入速度は、全ての投与時間において同じである必要はなく、むしろ、例えば実施例１に記載したように、加速してもよい。
【００４１】
異なる局面において、本発明は、（ａ）ＣＤ２０アンタゴニストを含む容器、及び（ｂ）ヒト被験体における自己免疫疾病を処置するための指示書を含む添付文書（ここでの指示書には、被験体が、１回の静脈内注入として完全治療有効量のＣＤ２０アンタゴニストが投与されることが示されている）を備えた、製品に関する。好ましくは、ＣＤ２０アンタゴニストは、キメラ、ヒト化、又はヒトのＣＤ２０モノクローナル抗体である。また好ましくは、自己免疫疾病は関節リウマチである。
【００４２】
より好ましい態様において、ＣＤ２０アンタゴニストは、配列番号６で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号７で示される完全長Ｈ鎖を含む、ＣＤ２０抗体２Ｈ７変異体Ａ、又はその断片である。別の好ましい態様において、指示書には、４００mg〜１５００mgの完全治療有効量が示されている。より好ましくは、製品には、（ａ）ＣＤ２０抗体を含む容器、及び（ｂ）ヒト被験体における関節リウマチを処置するための指示書を含む添付文書（ここでの指示書には、被験体が、１回の静脈内注入として４００mg〜１５００mgの完全治療有効量のＣＤ２０抗体が投与されることが示されている）、を含む。
【００４３】
より好ましくは、本発明による製品において、ＣＤ２０抗体は、配列番号６で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号７で示される完全長Ｈ鎖を含む、ヒト化２Ｈ７変異体Ａ、又はその断片である。最も好ましくは、該ヒト化２Ｈ７変異体Ａは、１０mM硫酸ヒスチジン、６０mg／mlスクロース、０．２mg／mlポリソルベート２０、及び滅菌注射用水中において、ｐＨ５．８で、２０mg／mlの抗体となるように製剤化される。
【００４４】
更なる局面において、本発明は、１回限りの静脈内投与に適した形態の完全有効量のＣＤ２０抗体を含む、薬学的製剤に関する。好ましくは、本発明による薬学的製剤は、配列番号６で示される完全長Ｌ鎖及び配列番号７で示される完全長Ｈ鎖を含む、ヒト化２Ｈ７変異体Ａ、又はその断片であるＣＤ２０抗体を含む。より好ましくは、薬学的製剤は、４００mg〜１５００mgの有効量を含む。更により好ましくは、この量は、４００mg、１０００mg、又は１５００mgの群より選択される。最も好ましくは、該ヒト化２Ｈ７変異体Ａは、１０mM硫酸ヒスチジン、６０mg／mlスクロース、０．２mg／mlポリソルベート２０、及び滅菌注射用水中において、ｐＨ５．８で、２０mg／mlの抗体となるように製剤化される。
【００４５】
好ましい態様の詳細な説明
Ｉ．定義
「Ｂ細胞」は、骨髄内で成熟するリンパ球であり、それらとしては、全ての発達段階における、ナイーブＢ細胞、記憶Ｂ細胞、又はエフェクターＢ細胞（形質細胞）が挙げられる。本明細書においてＢ細胞は、正常又は非悪性のＢ細胞である。
【００４６】
本明細書で使用したような「Ｂ細胞枯渇」とは、処置前のレベルと比べて、薬物又は抗体による処置の後に、動物又はヒトにおけるＢ細胞のレベルが減少することをいう。Ｂ細胞レベルは、全血球計算を行うことにより、公知のＢ細胞マーカーに対して染色するＦＡＣＳ分析により、及び当技術分野において周知の他の方法などの、周知のアッセイを使用して測定できる。１つの態様において、ＣＤ２０発現Ｂ細胞の枯渇は少なくとも２５％である。Ｂ細胞枯渇薬を投与されている患者では、Ｂ細胞は、一般に、薬物が患者の体内を循環している時からＢ細胞の回復のための時までの期間、枯渇している。
【００４７】
「Ｂ細胞表面マーカー」又は「Ｂ細胞表面抗原」又は「Ｂ細胞抗原」は、本明細書において、Ｂ細胞の表面上に発現している抗原であり、それに結合するアンタゴニストでターゲティングされ得る。例示的なＢ細胞表面マーカーとしては、ＣＤ１０、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ２４、ＣＤ３７、ＣＤ４０、ＣＤ５３、ＣＤ７２、ＣＤ７３、ＣＤ７４、ＣＤｗ７５、ＣＤｗ７６、ＣＤ７７、ＣＤｗ７８、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ８０、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ８３、ＣＤｗ８４、ＣＤ８５、及びＣＤ８６白血球表面マーカーが挙げられる（詳細については、The Leukocyte Antigen Facts Book、第２版、1997、Barclayら編Academic Press, Harcourt Brace & Co.,New Yorkを参照されたい）。他のＢ細胞表面マーカーとしては、ＲＰ１０５、ＦｃＲＨ２、Ｂ細胞ＣＲ２、ＣＣＲ６、Ｐ２Ｘ５、ＨＬＡ−ＤＯＢ、ＣＸＣＲ５、ＦＣＥＲ２、ＢＲ３、Ｂｔｉｇ、ＮＡＧ１４、ＳＬＧＣ１６２７０、ＦｃＲＨ１、ＩＲＴＡ２、ＡＴＷＤ５７８、ＦｃＲＨ３、ＩＲＴＡ１、ＦｃＲＨ６、ＢＣＭＡ、及び２３９２８７が挙げられる。特定の対象となるＢ細胞表面マーカーは、哺乳動物の他の非Ｂ細胞組織と比べて優先的にＢ細胞上に発現されており、前駆Ｂ細胞と成熟Ｂ細胞の両方の上に発現していることがある。好ましいＢ細胞表面マーカーは、本明細書においてＣＤ２０及びＣＤ２２である。
【００４８】
「ＣＤ２０」抗原すなわち「ＣＤ２０」は、末梢血由来又はリンパ系臓器由来のＢ細胞の９０％超の表面上に見られる約３５ｋＤａの非グリコシル化リン酸化タンパク質である。ＣＤ２０は、正常Ｂ細胞と悪性Ｂ細胞の両方の上に存在するが、幹細胞上には発現されていない。文献中でのＣＤ２０に対する他の名称としては、「Ｂリンパ球制限抗原」及び「Ｂｐ３５」が挙げられる。ＣＤ２０抗原は、例えば、Clarkら、Proc. Natl. Acad.Sci (USA)82: 1766(1985)に記載されている。
【００４９】
「ＣＤ２０アンタゴニスト」は、Ｂ細胞上のＣＤ２０に結合した際に、哺乳動物においてＢ細胞を破壊するかもしくは枯渇させ、そして／又は、例えば、Ｂ細胞によって誘発される体液性応答を低減するかもしくは妨げることによって１つもしくは複数のＢ細胞の機能を干渉する分子である。ＣＤ２０アンタゴニストは、好ましくは、それで処置された哺乳動物、例えばヒト被験体においてＢ細胞を枯渇する（すなわち、循環Ｂ細胞のレベルを低下させる）ことができる。そのような枯渇は、ＡＤＣＣ及び／又はＣＤＣ、Ｂ細胞増殖阻害、及び／又はＢ細胞死の誘導（例えば、アポトーシスを介して）などの様々なメカニズムを介して達成され得る。本発明の範囲内に含まれるアンタゴニストとしては、ＣＤ２０に結合し、場合により別の分子とコンジュゲートしているか又は融合している、抗体、他のＣＤ２０ターゲティング（結合）タンパク質、合成もしくは天然配列のペプチド、イムノアドヘシン、及び低分子アンタゴニストが挙げられる。好ましいアンタゴニストは、抗体からなるか、本質的に抗体からなるか、又は抗体を含む。
【００５０】
「抗体アンタゴニスト」は、本明細書において、Ｂ細胞上のＢ細胞表面マーカーに結合した際に、哺乳動物においてＢ細胞を破壊するかもしくは枯渇させ、そして／又は、例えばＢ細胞によって誘発される体液性応答を低減するかもしくは妨げることによって１つもしくは複数のＢ細胞機能を干渉する抗体である。この抗体アンタゴニストは、好ましくは、それで処置された哺乳動物においてＢ細胞を枯渇させる（すなわち、循環Ｂ細胞レベルを低下させる）ことができる。そのような枯渇は、ＡＤＣＣ及び／又はＣＤＣ、Ｂ細胞増殖阻害、及び／又はＢ細胞死の誘導（例えば、アポトーシスを介して）などの様々なメカニズムを介して達成され得る。従って、「ＣＤ２０抗体アンタゴニスト」又は「アンタゴニストＣＤ２０抗体」は、Ｂ細胞上のＣＤ２０に結合した際に、哺乳動物、例えばヒト被験体においてＢ細胞を破壊するかもしくは枯渇させ、そして／又は、例えばＢ細胞によって誘発される体液性応答を低減するかもしくは妨げることによって１つもしくは複数のＢ細胞機能を干渉する抗体である。ＣＤ２０アンタゴニスト抗体には、リツキシマブ（Genentech)、ＴＲＵ−０１５（Trubion, Wyeth）、オファツムマブ（HuMax-CD20; Genmab）；ＡＭＥ−１３３（Eli Lilly）、Ｉｍｍｕ−１０６（Immunomedics）が挙げられ、これらは全て背景の章において参照されている。
【００５１】
用語「ＣＤ２０アンタゴニストに対する不適切な応答」とは、毒性及び／又は不適切な効力のために、ＣＤ２０アンタゴニストを用いた以前及び現在の処置に対する不適切な応答のことをいう。不適切な応答は、問題となる疾病の処置に関する技能を有する臨床医により評価されることができる。ＣＤ２０アンタゴニストを用いた以前又は現在の処置により「毒性」が生じた哺乳動物（例えばヒト）には、それに関連した１つ又は複数のネガティブな副作用、例えば、心臓、肺、腎臓の副作用、特に重篤な副作用、例えば急性呼吸窮迫症候群、心筋梗塞、心室細動、心原性ショック、低酸素症、肺浸潤、急性腎不全、皮膚粘膜反応（mococutaneous reactions）、又は感染、例えばウイルス感染が引き起こされる。「不適切な効力」が引き起こされた哺乳動物は、ＣＤ２０アンタゴニストを用いた以前又は現在の処置の後も活動性の疾病を有し続ける。例えば、患者は、ＣＤ２０アンタゴニストによる治療の１カ月又は３カ月後も活発な疾病活動を有する場合がある。
【００５２】
用語「自己免疫疾病」及び「自己免疫疾患」は、同義語として用いられ、個体自身の組織もしくは共分離（co-segregate）から生じる又は個体自身の組織もしくは共分離に向けられる疾病もしくは疾患、又はその兆候、又はそこから生じる容態のことをいう。「自己免疫疾病」は、臓器特異的疾病（すなわち、免疫応答は、内分泌系、造血系、皮膚、心肺系、消化管及び肝臓系、腎臓系、甲状腺、眼、神経筋系、中枢神経系などの臓器系に対して特異的に指向される）、又は、多数の臓器系に影響を及ぼし得る全身疾病（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、関節リウマチ、多発性筋炎）である。
自己免疫疾病又は疾患の例には、自己免疫リウマチ性疾患、例えば関節炎（関節リウマチ、例えば急性関節炎、慢性関節リウマチ、痛風性関節炎、急性痛風性関節炎、慢性炎症性関節炎、変形性関節炎、感染性関節炎、ライム関節炎、増殖性関節炎、乾癬性関節炎、脊椎関節炎、及び若年発症関節リウマチ、骨関節炎、慢性進行性関節炎、変形性関節炎、慢性原発性多発性関節炎、反応性関節炎、及び強直性脊椎炎）、
炎症性過剰増殖性皮膚疾病、乾癬（例えば尋常性乾癬、滴状乾癬、膿胞性乾癬、及び爪乾癬）、アトピー（例えば花粉症及びＪｏｂ症候群のようなアトピー疾病を含む）、皮膚炎（接触性皮膚炎、慢性接触性皮膚炎、アレルギー性皮膚炎、アレルギー性接触性皮膚炎、ヘルペス状の皮膚炎、及びアトピー性皮膚炎を含む）、ｘ連鎖高ＩｇＭ症候群、蕁麻疹（例えば、慢性アレルギー性蕁麻疹及び慢性特発性蕁麻疹、例として慢性自己免疫性蕁麻疹）、多発性筋炎／皮膚筋炎、若年性皮膚筋炎、中毒性表皮壊死症、強皮症（全身強皮症を含む）、硬化症（例えば、全身性硬化症、多発性硬化症（ＭＳ）、例えば脊椎−眼（spino-optical）ＭＳ、原発性進行性ＭＳ（ＰＰＭＳ）、及び再発寛解型ＭＳ（ＲＲＭＳ）、進行性全身性硬化症、アテローム性動脈硬化症、動脈硬化症、播種性硬化症、及び失調性硬化症）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）（例えば、クローン病、自己免疫媒介性消化管疾病、大腸炎、例えば潰瘍性大腸炎、大腸性潰瘍、顕微鏡的大腸炎、コラーゲン大腸炎、大腸ポリープ、壊死性全腸炎、及び貫壁性大腸炎、及び自己免疫性炎症性腸疾病）、壊疸性膿皮症、結節性紅斑、原発性硬化性胆管炎、上強膜炎、呼吸窮迫症候群（成人性又は急性の呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）を含む）、
髄膜炎、ブドウ膜の全部又は一部の炎症、虹彩炎、脈絡膜炎、自己免疫性血液疾患、リウマチ様脊椎炎、突発性聴力障害、ＩｇＥ媒介性疾病（例えば、アナフィラキシー並びにアレルギー性及びアトピー性鼻炎）、脳炎（例えば、ラスムッセン脳症、並びに辺縁及び／又は脳幹の脳炎）、ブドウ膜炎（例えば、前部ブドウ膜炎、急性前ブドウ膜炎、肉芽腫性ブドウ膜炎、非顆粒性ブドウ膜炎、水晶体抗原性ブドウ膜炎、後部ブドウ膜炎、又は自己免疫性ブドウ膜炎）、ネフローゼ症候群を有する又は有さない糸球体腎炎（ＧＮ）（例えば、慢性又は急性の糸球体腎炎、例えば原発性ＧＮ、免疫性ＧＮ、膜性ＧＮ（膜性腎症）、特発性膜性ＧＮ又は特発性膜性腎症、膜又は膜性増殖性ＧＮ（ＭＰＧＮ）（タイプＩ及びタイプＩＩを含む）、及び急速進行性ＧＮ、アレルギー容態及び応答、アレルギー反応、発疹（アレルギー性及びアトピー性発疹を含む）、喘息（例えば、喘息気管支炎、気管支喘息、及び自己免疫性喘息）、Ｔ細胞の浸潤及び慢性炎症応答を伴う容態、妊娠中の胎児Ａ−Ｂ−Ｏ血液型のような外来性抗原に対する免疫反応、慢性肺炎症性疾病、自己免疫性心筋炎、白血球接着不全症、
全身性エリテマトーサス（ＳＬＥ）（systemic lupus erythematosus）又は全身性エリテマトーデス（例えば、皮膚ＳＬＥ）、亜急性皮膚エリテマトーサス、新生児期ループス症候群（ＮＬＥ)、播種性ループスエリテマトーサス、ループス（ループス腎炎、ループス脳炎、小児ループス、非腎性ループス、腎外ループス、円板状ループス、脱毛症ループスを含む）、若年発症型（Ｉ型）糖尿病（小児インスリン依存性糖尿病（ＩＤＤＭ）を含む）、成人発症型糖尿病（ＩＩ型糖尿病）、自己免疫性糖尿病、特発性尿崩症、サイトカイン及びＴリンパ球によって媒介される急性及び遅延性過敏症と関連する免疫応答、結核、サルコイドーシス、肉芽腫症（リンパ腫様肉芽腫症、ウェゲナー肉芽腫症を含む）、無顆粒球症、血管炎（vasculitides）（血管炎（vasculitis）［大血管血管炎（リウマチ性多発筋痛症及び巨細胞性（高安）動脈炎を含む）、中血管血管炎（川崎病及び結節性多発動脈炎／結節性動脈周囲炎を含む）、顕微鏡的多発血管炎、ＣＮＳ血管炎、壊死性血管炎、皮膚性血管炎、又は過敏性血管炎、全身性壊死性血管炎、ＡＮＣＡ関連の血管炎（ＡＡＶ)（例えばチャーグ・ストラウス血管炎もしくは症候群（ＣＳＳ））、ＡＮＣＡ陰性血管炎を含む］、側頭動脈炎を含む）、
再生不良性貧血、自己免疫性再生不良性貧血、クームス陽性貧血、ダイヤモンド・ブラックファン貧血、溶血性貧血、又は免疫性溶血性貧血（自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）を含む）、悪性貧血（貧血症悪性熱）、アジソン病、赤芽球貧血症又は赤芽球ろう（ＰＲＣＡ）、第ＶＩＩＩ因子欠損症、血友病Ａ、自己免疫抗中球減少症、凡血球減少症、白血球減少症、白血球血管外漏出を伴う疾病、ＣＮＳ炎症性疾患、多臓器損傷症候群（例えば、敗血症、外傷、又は出血に続発性のもの）、抗原−抗体複合体により媒介される疾病、抗糸球体基底膜疾病、抗リン脂質抗体症候群、アレルギー性神経炎、ベーチェット（Bechet）病又はベーチェット（Behcet）病、キャッスルマン症候群、グッドパスチャー症候群、レイノー症候群、シェーグレン症候群、スティーブンジョンソン症候群、類天疱瘡（例えば水泡性類天疱瘡及び類天疱瘡皮膚）、天疱瘡（尋常性天疱瘡、落葉状天疱瘡、天疱瘡粘膜類天疱瘡、及び紅斑性天疱瘡を含む）、自己免疫性多腺性内分泌障害、ライター病又は症候群、免疫複合体腎炎、抗体媒介性腎炎、視神経脊髄炎（ＮＭＯ；デビック症候群としても知られる）、多発性神経障害、慢性神経障害（例えば、ＩｇＭ多発性神経障害又はＩｇＭ媒介性神経障害）、
血小板減少症（例えば、心筋梗塞患者に生じるもの）（血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ)、輸血後紫斑病（ＰＴＰ)、へパリン誘発血小板減少症、及び自己免疫性もしくは免疫媒介性血小板減少症、例えば慢性もしくは急性のＩＴＰを含む特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）を含む）、精巣及び卵巣の自己免疫性疾病（自己免疫性精巣炎及び卵巣炎を含む）、原発性甲状腺機能低下症、副甲状腺機能低下症、自己免疫性内分泌疾病［甲状腺炎（例えば、自己免疫性甲状腺炎、橋本病、慢性甲状腺炎（橋本甲状腺炎）、又は亜急性甲状腺炎）、自己免疫甲状腺疾病、特発性甲状腺機能低下症、グレーブ病、多腺性症候群（例えば自己免疫多腺性症候群（又は多腺性内分泌障害症候群））を含む］、腫瘍随伴症候群（神経性腫瘍随伴症候群、例えばランバート・イートン筋無力症症候群又はイートン・ランバート症候群、スティッフマン又はスティッフパーソン症候群）、脳脊髄炎（例えばアレルギー性脳脊髄炎又は脳脊髄炎性アレルギー及び実験的アレルギー性脳脊髄炎（ＥＡＥ)）、重症筋無力症（例えば胸腺腫関連の重傷筋無力症）、小脳変性症、神経性筋強直症、眼球クローヌス又は眼球クローヌス・ミオクローヌス症候群（ＯＭＳ）、及び感覚性神経障害、多巣性運動神経障害、シーハン症候群、
自己免疫性肝炎、慢性肝炎、ルポイド肝炎、巨細胞性肝炎、慢性活動性肝炎又は自己免疫性慢性活動性肝炎、リンパ球様間質性肺炎（ＬＩＰ）、閉塞性細気管支炎（非移植）対ＮＳＩＰ、ギラン・バレー症候群、ベルジェ病（ＩｇＡ腎症）、特発性ＩｇＡ腎症、線状ＩｇＡ皮膚病、原発性胆汁性肝硬変、肺線維症、自己免疫性腸疾患症候群、セリアック病、コエリアック病、セリアックスプルー（グルテン腸症）、難治性スプルー、特発性スプルー、クリオグロブリン血症、筋委縮性側索硬化症（ＡＬＳ；ルー・ゲーリック病）、冠動脈疾病、自己免疫性耳疾病（例えば自己免疫性内耳疾病（ＡＩＥＤ））、自己免疫性難聴、眼球クローヌス・ミオクローヌス症候群（ＯＭＳ）、多発性軟骨炎（例えば難治性又は再発多発性軟骨炎）、肺胞タンパク症、アミロイドーシス、強膜炎、非癌性リンパ球増加症、モノクローナルＢ細胞リンパ球増加症（例えば、良性単クローン性免疫グロブリン血症、及び意義不明の単クローン性免疫グロブリン血症、ＭＧＵＳ）を含む原発性リンパ球増加症、末梢神経障害、腫瘍随伴症候群、チャネル病、例えば癲癇、偏頭痛、不整脈、筋疾患、難聴、盲目、周期性麻痺、及びＣＮＳのチャネル病、
自閉症、炎症性筋障害、巣状分節性糸球体硬化症（ＦＳＧＳ）、内分泌性眼障害、ブドウ膜網膜炎、脈絡網膜炎、自己免疫性肝疾患、線維筋痛症、多発性内分泌不全、シュミット症候群、副腎炎、胃アトニー、初老期認知症、脱髄性疾病（例えば自己免疫性脱髄性疾病及び慢性炎症性脱髄性多発神経障害）、糖尿病性腎症、ドレスラー症候群、円形脱毛症、ＣＲＥＳＴ症候群（石灰沈着症、レイノー現象、食堂蠕動低下、強指症、及び毛細血管拡張症）、男性及び女性の自己免疫性不妊、混合性結合組織病、シャーガス病、リウマチ熱、反復流産、農夫肺、多形成紅斑、開心術後症候群、クッシング症候群、鳥飼病、アレルギー性肉芽腫性血管炎、良性リンパ球性血管炎、アルポート症候群、肺胞炎（例えばアレルギー性肺胞炎及び線維性肺胞炎）、間質性肺炎、輸血反応、ハンセン病、マラリア、リーシュマニア症、キパノソミアシス（kypanosomiasis）、住血吸虫症、回虫症、アスペルギルス症、サンプター症候群、カプラン症候群、デング熱、心内膜炎、心内膜心筋線維症、びまん性間質性肺線維症、間質性肺線維症、肺線維症、特発性肺線維症、嚢胞性線維症、眼内炎、持久性隆起性紅斑、胎児赤芽球症、好酸球性筋膜炎、シャルマン症候群、フェルティ症候群、フレア炎症（flariasis）、毛様体炎（例えば慢性毛様体炎、異時性毛様体炎、虹彩毛様体炎（急性又は慢性）、又はフックス毛様体炎）、ヘノッホ・シェーンライン紫斑病、
ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染、エコーウイルス感染、心筋症、アルツハイマー病、パルボウイルス感染、風疹ウイルス感染、ワクチン接種後症候群、先天性風疹感染症、エプスタインバーウイルス感染、ムンプス、エヴァンス症候群、自己免疫性性腺機能不全、シデナム舞踏病、連鎖球菌感染後腎炎、閉塞性血栓血管炎、甲状腺中毒症、脊髄ろう、脈絡膜炎、巨細胞多発性筋痛、内分泌性眼障害、慢性過敏性肺炎、乾性角結膜炎、流行性角結膜炎、特発性腎炎症候群、微笑変化型ネフローゼ、良性家族性及び虚血再灌流障害、網膜自己免疫、関節炎症、気管支炎、慢性閉塞性気道疾病、塵肺症、アフタ、アフタ性口内炎、動脈硬化性疾患、アスペルミオジェネース（aspermiogenese）、自己免疫性溶血、ベック病、クリオグロブリン血症、デュプイトラン拘縮、水晶体アナフィラキシー眼内炎（endophthalmia phacoanaphylactica）、アレルギー性腸炎、らい性結節性紅斑、特発性顔面麻痺、慢性疲労症候群、リウマチ熱、ハンマンリッチ病、感覚神経性聴力障害、発作性ヘモグロビン尿症、性腺機能低下症、限局性回腸炎、白血球減少症、伝染性単核球症、横断性脊髄炎、原発性特発性粘液水腫、ネフローゼ、
交感性眼炎、肉芽腫性精巣炎、膵炎、急性多発神経根炎、壊疸性膿皮症、ケルバン甲状腺炎、後天性脾臓委縮症、抗精子抗体による不妊症、非悪性胸腺腫、白斑、ＳＣＩＤ及びエプシュタインバールウイルスに関連した疾病、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）、寄生虫症（例えばリーシュマニア）、毒素性ショック症候群、食中毒、Ｔ細胞の浸潤を伴う容態、白血球粘着不全症、サイトカイン及びＴリンパ球により媒介される急性型及び遅延型過敏症に関連した免疫応答、白血球血管外漏出を伴う疾病、多臓器損傷症候群、抗原抗体複合体により媒介される疾病、抗糸球体基底膜病、アレルギー性神経炎、自己免疫性多腺性内分泌障害、卵巣炎、原発性粘液水腫、自己免疫性萎縮性胃炎、交感性眼炎、リウマチ病、混合性結合組織病、ネフローゼ症候群、膵島炎、多腺性内分泌不全、末梢神経障害、多腺性自己免疫症候群Ｉ型、成人発症型特発性副甲状腺機能低下症（ＡＯＩＨ）、全頭脱毛症、拡張型心筋症、後天性表皮水泡症（ＥＢＡ）、ヘモクロマトーシス、心筋炎、ネフローゼ症候群、原発性硬化性胆管炎、化膿性又は非化膿性副鼻腔炎、急性又は慢性副鼻腔炎、篩骨洞炎、前頭洞炎、上顎洞炎、又は蝶形骨洞炎、好酸球に関連した疾患（例えば好酸球増加症、肺浸潤性好酸球増加症、好酸球増多筋痛症候群、レフラー症候群、慢性好酸球性肺炎、局所性肺好酸球増加症、気管支肺アスペルギルス症、アスペルギルス腫、又は好酸球を含む肉芽腫）、アナフィラキシー、
血清反応陰性脊椎関節炎、多腺性内分泌性自己免疫疾病、硬化性胆管炎、強膜、上強膜、慢性粘膜皮膚カンジダ症、ブルトン症候群、乳児期一過性低ガンマグロブリン血症、ウィスコット・アルドリッチ症候群、毛細血管拡張性運動失調症、膠原病に関連した自己免疫疾患、リウマチ、神経病、リンパ節炎、虚血再灌流疾患、血圧応答の低下、血管機能不全、血管拡張症、組織損傷、心血管虚血、痛感過敏、脳虚血、及び血管新生を伴う疾病、アレルギー性過敏性疾患、糸球体腎炎、再灌流損傷、心筋又は他の組織の再灌流損傷、急性炎症性成分による皮膚症、急性化膿性髄膜炎又は他の中枢神経系炎症疾患、眼及び眼窩炎症疾患、顆粒球輸血関連症候群、サイトカイン誘発毒性、急性の重篤な炎症、慢性難治性炎症、腎盂炎、肺線維症、糖尿病性網膜症、糖尿病性大血管疾患、動脈内過形成、消化性潰瘍、弁膜炎、並びに子宮内膜症が挙げられるがそれらに限定されるわけではない。
【００５３】
用語「関節リウマチ」すなわち「ＲＡ」は、本明細書において最も広い意味で使用され、関節リウマチの分類についての２０００年の改訂版American Rheumatoid Association基準又は任意の同様の基準に従って診断され得る、認識されている疾病状態のことをいう。ＲＡの生理学的指標としては、関節リウマチにおいて特徴的であるが不変ではない、対称性の関節腫脹が挙げられる。手の近位指節間（ＰＩＰ）関節、並びに中手指節関節（ＭＣＰ）、手首、肘、膝、足首及び中足指節（ＭＴＰ）関節の紡錘状腫脹を通常発症しており、腫脹は容易に検出される。受動運動時の疼痛は、関節炎症に対して最も感度の高い試験であり、炎症及び構造的な変形は、罹患している関節の可動域を制限することが多い。典型的な目に見える変化としては、ＭＣＰ関節における指の尺側偏位、ＭＣＰ及びＰＩＰ関節の過伸展又は過屈曲、肘の屈曲拘縮、並びに手根骨及び足指の亜脱臼が挙げられる。関節リウマチを有する被験体は、症状を処置する際にＤＭＡＲＤｓが有効ではないか、又は完全に有効ではないという点においてＤＭＡＲＤｓに対して抵抗性であり得る。関節リウマチは、軽度、中等度、又は重度と記載することができる。軽度ＲＡは、関節外病変を全く伴わない少なくとも３か所の関節（同時）の発症により特徴づけられる。リウマチ因子（ＲＦ）は、典型的には陰性であり、Ｘ線写真にも全く侵食は見られない。中等度の疾病では６〜２０か所の関節の活動性の炎症が見られ、通常、Ｘ線写真に変化が見られ、ＲＦは陽性であり、典型的には関節外の徴候は全くない。中等度の疾病では、単にＮＳＡＩＤ療法だけではなく、ＮＳＡＩＤとＤＭＡＲＤＳが共に必要であることが示唆される。重度ＲＡは、２０を超える数の関節の発症により特徴づけられ、ＲＦ（通常、高力価）は陽性であり、関節外病変を含み、典型的には、更に、低アルブミン血症及び慢性疾病の貧血を含む他の全身性作用を引き起こす。重度の形態のＲＡでは急速に機能的能力が低下している。本明細書において使用した用語「関節リウマチ」すなわち「ＲＡ」は、活動性関節リウマチ、どの程度の期間患者がＲＡを患っているかに基づいた初期及び後期ＲＡ、並びに中等度から重度の関節リウマチを含むがこれに限定されない、全ての形態及び段階のＲＡを含む。
【００５４】
リウマチ因子（ＲＦ）は、関節リウマチの診断のための血液検査として一般的に使用される別の免疫グロブリンのＦｃ部分に対して指向される免疫グロブリンである。それは、関節腔内で自己凝集して格子のような形態へとなり、表面上では炎症細胞が接着し、活動し得る。高力価のＲＦを示した関節リウマチ患者（およそ患者の８０％）は、ＲＦが陰性の患者に比べて、長期成績がより悪くより攻撃性の高い疾病を有し、死亡率もより高かった。
【００５５】
「活動性関節リウマチ」を有する患者とは、活動性であって潜在性ではない関節リウマチ症状を有する患者のことをいう。本発明の目的において「活動性関節リウマチ」は、少なくとも４か所の腫脹した関節の存在により定義される。
【００５６】
「初期活動性関節リウマチ」を有する被験体は、ＲＡの分類についての１９８７年に改訂されたＡＣＲ基準によると、少なくとも８週間、しかし４年間を超えないと診断された活動性関節リウマチを有する被験体である。
【００５７】
「処置すること」又は「処置」又は「緩解」は、治療的処置及び予防対策もしくは阻止対策を意味し、その目的はターゲットとした病的容態又は疾患を、阻止又は遅延（減少）させることである。本発明の方法による本発明のＣＤ２０結合抗体などのＣＤ２０アンタゴニストの治療有効量を投与した後、被験体が特定の自己免疫疾病の１つ又は複数の兆候及び症状に観察可能な及び／又は測定可能な減少又は消失を示したならば、自己免疫疾病に対して成功裏に「処置」されている。例えば、ターゲット疾病が関節リウマチである場合、処置の必要な被験体には、その疾病をすでに罹患している被験体、並びに、関節損傷又は関節損傷の進行などの疾病の様々な特徴を含む疾病の発症を阻止したい被験体が含まれる。従って、被験体は、関節リウマチに罹患していると診断されていてもよく、又は、関節リウマチにかかる素因があるか関節リウマチにかかりやすくてもよく、あるいは、処置をしなければ進行しそうな軽度もしくは中程度の関節リウマチに罹患していてもよい。疾病及び／又は疾病の様々な特徴又は症状が緩解又は治癒されていれば、又は、疾病の進行が、投与前に比べて停止又は減速していれば、処置は成功である。成功裏の処置には更に、疾病の発症の完全又は部分的な阻止が含まれる。本明細書の目的では、疾病又は疾病の症状又は疾病の症状の進行を減速又は減少させることは、症状の停止、減少、又は回復と同じである。関節リウマチの症状には、関節リウマチの分類についての２０００年に改訂されたAmerican Rheumatoid Association基準に列挙された任意の症状、例えば、関節腫脹、関節損傷、骨変形、骨侵食、疼痛、炎症、及びより進行形態の関節リウマチに関連した全身作用（低アルブミン血症及び慢性病の貧血を含む）が挙げられるが、それらに限定されるわけではない。
【００５８】
用語「有効量」とは、本明細書において、治療的に及び予防的に有効な量のことをいう。従って、本発明の方法において、「有効量」とは、関節リウマチを処置（予防を含む）する上で効果的なＣＤ２０抗体又は別のＣＤ２０アンタゴニストの量のことをいう。「有効量」を投与する結果として、ターゲット疾病及び／又は該疾病の様々な特徴もしくは症状は、緩解又は治癒されるか、あるいは、疾病の進行が、投与前に比べて停止又は減速する。成功裏の処置にはさらに、疾病の発症の完全又は部分的な阻止が含まれる。本明細書の目的において、疾病又は疾病の症状又は疾病の症状の進行の減速又は減少は、症状の停止、減少、又は回復と同じである。関節リウマチの症状には、関節リウマチの分類についての２０００年に改訂されたAmerican Rheumatoid Association基準に列挙された任意の症状、例えば、関節腫脹、関節損傷、骨変形、骨侵食、疼痛、炎症、及びより進行形態の関節リウマチに関連した全身作用（低アルブミン血症及び慢性病の貧血を含む）が挙げられるが、それらに限定されるわけではない。
【００５９】
「１回の静脈内注入（ｉ．ｖ．）」として投与される用語「完全治療有効量」とは、本明細書において、関節リウマチなどのターゲット疾病の治療処置に効果的であるＣＤ２０抗体などのＣＤ２０アンタゴニストの全量を、２回以上の分割用量（治療有効量よりは少ない）で連続的に、例えば数日間又は数週間おいて別々の点滴で投与するのではなく、１回の静脈内注入として投与することをいう。
【００６０】
「ＣＤ２０」抗原は、末梢血由来又はリンパ系臓器由来のＢ細胞の９０％超の表面上に見られる約３５ｋＤａの分子量の非グリコシル化膜貫通型リン酸化タンパク質である。ＣＤ２０は、初期プレＢ細胞発達中に発現され、形質細胞に分化するまで留まり、ヒト幹細胞、リンパ球前駆細胞、又は正常な形質細胞上には見られない。ＣＤ２０は、正常Ｂ細胞並びに悪性Ｂ細胞の両方に存在する。文献においてのＣＤ２０の他の名称には、「Ｂリンパ球制限分化抗原」及び「Ｂｐ３５」が挙げられる。ＣＤ２０抗原は、例えば、Clark及びLedbetter、Adv.Can.Res.52: 81-149 (1989)及びValentineら、J.Biol.Chem.264(19): 11282-11287(1989)に記載されている。
【００６１】
用語「抗体」は、最も広い意味で使用され、特に、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、多重特異性抗体（例えば二重特異性抗体）、一本鎖抗体及び抗体断片（所望の生物学的活性又は機能を示している限り）を網羅する。
【００６２】
本発明のＣＤ２０結合抗体の生物活性には、ヒトＣＤ２０への該抗体の結合、より好ましくはヒト及び他の霊長類ＣＤ２０（カニクイザル、アカゲザル、チンパンジー、ヒヒを含む）への該抗体の結合が含まれる。該抗体は、１×１０−８より低いＫｄ値、好ましくは１×１０−９より低いＫｄ値でＣＤ２０に結合し、このような抗体で処置していない適切なネガティブ対照と比較した場合、好ましくは少なくとも２０％インビボでＢ細胞を死滅又は枯渇させ得る。Ｂ細胞の枯渇は、ＡＤＣＣ、ＣＤＣ、アポトーシス、又は他のメカニズムの１つ又は複数の結果であり得る。本明細書の疾病処置のある態様では、特定のエフェクター機能又は機序が他のものよりも望まれ、ヒト化２Ｈ７のある変異体又はあるヒトＣＤ２０結合抗体が、ＡＤＣＣなどの生物学的機能を達成する上で好ましい。
【００６３】
「抗体断片」には、完全長抗体の一部、一般にはその抗原結合領域又は可変領域が含まれる。抗体断片の例には、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖ断片；ダイアボディ（diabodies); 直鎖状抗体；一本鎖抗体分子；並びに、抗体断片から形成される多重特異性抗体が含まれる。「Ｆｖ」は、完全な抗原認識部位及び抗原結合部位を含む最小抗体断片である。この断片は、１本の重鎖及び１本の軽鎖可変領域ドメインが密接に非共有結合的に会合したダイマーからなる。これらの２つのドメインの折りたたみから、６つの超可変ループ（Ｈ鎖及びＬ鎖に由来する各３つのループ）が生じ、それにより抗原結合のためのアミノ酸残基がもたらされ、抗体に抗原特異性が付与される。しかし、単一の可変ドメイン（又は、抗原に特異的なＣＤＲを３つだけを含む、Ｆｖの半分）でさえ、全結合部位の場合よりも親和性は低いが、抗原を認識し抗原と結合する能力を有する。
【００６４】
本明細書において使用した用語「モノクローナル抗体」とは、実質的に均一な抗体の集団に由来する抗体のことをいう。すなわち、該集団を構成する個々の抗体は、モノクローナル抗体の作製中に生じ得る一般に少量で存在し得る可能性がある変異体を除いて、同一であり、そして／又は同じエピトープに結合する。このようなモノクローナル抗体は、典型的には、ターゲットに結合するポリペプチド配列を含む抗体を含み、ここでのターゲット結合ポリペプチド配列は、複数のポリペプチド配列から単一のターゲット結合ポリペプチド配列を選択することを含む方法により得られた。例えば、選択方法は、複数のクローン（例えば、ハイブリドーマクローン、ファージクローン、又は組換えＤＮＡクローンのプール）から独特のクローンを選択することであり得る。選択されたターゲット結合配列は、例えば、ターゲットへの親和性を向上させるために、ターゲット結合配列をヒト化するために、細胞培養液中でのその産生を向上させるために、インビボでのその免疫原性を低下させるために、多重特異性抗体を作り出す等のために、更に改変することができ、そして、改変されたターゲット結合配列を含む抗体も、本発明のモノクローナル抗体であると理解されたい。様々な決定基（エピトープ）に対して指向される様々な抗体を典型的に含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、モノクローナル抗体調製物の各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対して指向される。その特異性に加えて、モノクローナル抗体調製物は、典型的には他の免疫グロブリンが混入していないという点において有利である。
修飾語句「モノクローナル」は、実質的に均一な抗体の集団から得たものとしての抗体の特徴を示すものであり、任意の特定の方法によってその抗体が作製される必要があると解釈されるべきではない。例えば、本発明により使用されるモノクローナル抗体は、例えば、ハイブリドーマ法（例えば、Kohlerら、Nature, 256: 495(1975); Harlowら、Antibodies: A Laboratory Manual, (Cold Spring Harbor Laboratory Press、第２版、1988）；Hammerlingら、Monoclonal Antibodies and T-Cell Hybridomas 563-681, (Elsevier, N.Y., 1981)）、組換えＤＮＡ法（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号参照）、ファージディスプレイ技術（例えば、Clacksonら、Nature, 352: 624-628(1991); Marksら、J. Mol. Biol., 222: 581-597(1991); Sidhuら、J. Mol. Biol. 338(2): 299-310(2004); Leeら、J.Mol.Biol.340(5): 1073-1093(2004); Fellouse、Proc. Nat. Acad. Sci. USA 101(34): 12467-12472(2004); 及びLeeら、J. Immunol. Methods 284(1-2): 119-132(2004)を参照）、
並びにヒト免疫グロブリン配列をコードするヒト免疫グロブリンローカス又は遺伝子の一部もしくは全てを有する動物において、ヒト又はヒト様抗体を産生する技術（例えば、国際公開公報第１９９８／２４８９３号；国際公開公報第１９９６／３４０９６号；国際公開公報第１９９６／３３７３５号；国際公開公報第１９９１／１０７４１号；Jakobovitsら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90: 2551(1993）；Jakobovitsら、Nature, 362: 255-258(1993); Bruggemannら、Year in Immuno., 7: 33(1993); 米国特許第５，５４５，８０６号；第５，５６９，８２５号；第５，５９１，６６９号（全てGenPharm）；第５，５４５，８０７号；国際公開公報第１９９７／１７８５２号；米国特許第５，５４５，８０７号；第５，５４５，８０６号；第５，５６９，８２５号；第５，６２５，１２６号；第５，６３３，４２５号；及び第５，６６１，０１６号；Marksら、Bio/Technology, 10: 779-783(1992); Lonbergら、Nature, 368: 856-859(1994); Morrison, Nature, 368: 812-813(1994); Fishwildら、Nature Biotechnology, 14: 845-851(1996); Neuberger, Nature Biotechnology, 14: 826(1996); 並びにLonberg及びHuszar、Intern. Rev. Immunol., 13: 65-93 (1995)を参照）を含む、様々な技術によって作製することができる。
【００６５】
本発明のＣＤ２０結合抗体の「機能的断片」は、それ自体が由来するインタクトな完全長分子と実質的に同じ親和性でもってＣＤ２０への結合を保持し、本明細書において記載したようなインビトロ又はインビボアッセイにより測定されるＢ細胞の枯渇を含む生物学的活性を示す、断片である。
【００６６】
用語「可変」とは、可変ドメインのあるセグメントが、抗体間で配列が大きく異なることをいう。Ｖドメインは、抗原結合を媒介し、その特定の抗原に対する特定の抗体の特異性を規定する。しかし、可変性は、可変ドメインの１１０アミノ酸スパンにわたって均一に分布していない。代わりに、Ｖ領域は、それぞれ９〜１２アミノ酸長の「超可変領域」と呼ばれる極めて可変性の短い領域により分離される、１５〜３０アミノ酸のフレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる相対的に不変なストレッチからなる。天然の重鎖及び軽鎖の可変ドメインは各々、３つの超可変領域により接続された４つのＦＲ（大部分がβシート立体構造をとっている）を含み、ここでの超可変領域は、βシート立体構造を接続しているループを形成し、いくつかの場合においてβシート構造の一部を形成している。各鎖における超可変領域は、ＦＲに隣接して共に保持されており、他方の鎖由来の超可変領域と共に、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する（Kabatら、Sequences of Proteins of Immunological Interest、第５版、Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD.(1991)を参照）。定常ドメインは、抗原への抗体の結合に直接関与していないが、抗体依存性細胞障害（ＡＤＣＣ）への抗体の関与のような様々なエフェクター機能を示す。
【００６７】
用語「超可変領域」とは、本明細書において使用されるとき、抗原結合に関与する抗体のアミノ酸残基のことをいう。超可変領域は、一般に、「相補性決定領域」すなわち「ＣＤＲ」由来のアミノ残基（例えば、ＶＬのおよそ２４〜３４（Ｌ１）、５０〜５６（Ｌ２）、及び８９〜９７（Ｌ３）の残基、並びに、ＶＨのおよそ３１〜３５Ｂ（Ｈ１）、５０〜６５（Ｈ２）及び９５〜１０２（Ｈ３）の残基；Kabatら、Sequences of Proteins of Immunological Interest、第５版、Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD.(1991)）、及び／又は、「超可変ループ」由来の残基（例えば、ＶＬの２６〜３２（Ｌ１）、５０〜５２（Ｌ２）及び９１〜９６（Ｌ３）、並びに、ＶＨの２６〜３２（Ｈ１）、５２Ａ〜５５（Ｈ２)、及び９６〜１０１（Ｈ３）；Chothia及びLesk、J. Mol. Biol. 196: 901-917(1987)）を含む。
【００６８】
本明細書で言及した「コンセンサス配列」又はコンセンサスＶドメイン配列は、公知のヒト免疫グロブリン可変領域配列のアミノ酸配列の比較から得られた人工的な配列である。これらの比較に基づいて、ヒトκ及びヒトＨ鎖サブグループＩＩＩＶドメインから得られたコンセンサス配列である、Ｖドメインアミノ酸をコードする組換えアミノ酸配列を調製した。コンセンサスＶ配列は、いかなる公知の抗体結合特異性も親和性も有さない。
【００６９】
「キメラ」抗体（免疫グロブリン）は、重鎖及び／又は軽鎖の一部が、特定の種由来の抗体又は特定の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体における対応配列と同一であるか、又は相同であり、一方、その鎖の残部は、別の種に由来の抗体又は別の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体、並びに所望の生物学的活性を示す限りそのような抗体の断片における対応配列と同一であるか、又は相同である（米国特許第４，８１６，５６７号；及びMorrisonら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81: 6851-6855(1984)）。本明細書で使用したようなヒト化抗体は、キメラ抗体のサブセットである。
【００７０】
「ヒト化」型の非ヒト（例えばマウス）抗体は、非ヒト免疫グロブリン由来の最小配列を含む、キメラ抗体である。ほとんどの部分について、ヒト化抗体は、レシピエントの超可変領域残基が、所望の特異性、親和性及び能力を有する非ヒト種（例えば、マウス、ラット、ウサギ、又は非ヒト霊長類）由来の超可変領域残基（ドナー抗体）で置換されている、ヒト免疫グロブリン（レシピエント又はアクセプター抗体）である。いくつかの場合において、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク領域（ＦＲ）残基が、対応する非ヒト残基によって置換されている。更に、ヒト化抗体は、レシピエント抗体又はドナー抗体に見られない残基を含んでいてもよい。これらの改変は、結合親和性などの抗体の性能を更に洗練するために行われる。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含み、ここで、その超可変ループの全て又は実質的に全てが、非ヒト免疫グロブリンの超可変ループに相当し、ＦＲ領域の全て又は実質的に全てが、ヒト免疫グロブリン配列のＦＲ領域であるが、ＦＲ領域は、結合親和性を向上させる１つ又は複数のアミノ酸置換を含んでいてもよい。ＦＲ中のこれらのアミノ酸置換の数は、典型的には、Ｈ鎖では６以下、Ｌ鎖では３以下である。ヒト化抗体は、場合により、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部、典型的にはヒト免疫グロブリンの定常領域の少なくとも一部を含む。更なる詳細については, Jonesら、Nature 321: 522-525(1986); Reichmannら、Nature 332: 323-329(1988); 及びPresta、Cur. Op.Struct.Biol.2: 593-596(1992)を参照されたい。
【００７１】
抗体「エフェクター機能」は、抗体のＦｃ領域（天然配列のＦｃ領域、又はアミノ酸配列変異体のＦｃ領域）に起因する生物学的活性を意味し、それは抗体のアイソタイプにより変化する。抗体エフェクター機能の例には、Ｃ１ｑ結合及び補体依存性細胞障害；Ｆｃレセプター結合；抗体依存性細胞介在性細胞障害（ＡＤＣＣ）；ファゴサイトーシス；細胞表面レセプター（例えばＢ細胞レセプター）のダウンレギュレーション；並びにＢ細胞活性化が挙げられる。
【００７２】
「抗体依存性細胞介在性細胞障害」すなわち「ＡＤＣＣ」とは、特定の細胞障害性細胞（例えば、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、好中球、及びマクロファージ）上に存在するＦｃレセプター（ＦｃＲｓ）上に結合した分泌Ｉｇにより、これらの細胞障害性エフェクター細胞が、抗原を有するターゲット細胞に特異的に結合できるようになり、その後、細胞毒でターゲット細胞を死滅させるという、細胞障害性の形態のことをいう。抗体は細胞障害性細胞を「武装（arm）」させ、このような死滅に絶対的に必要とされる。ＡＤＣＣを媒介するための主要な細胞であるＮＫ細胞は、ＦｃγＲＩＩIのみを発現する一方で、単球は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、及びＦｃγＲＩＩIを発現する。造血細胞上でのＦｃＲの発現は、Ravetch及びKinet、Annu. Rev. Immunol 9: 457-92(1991)の４６４頁の表３に要約されている。対象の分子のＡＤＣＣ活性を評価するために、米国特許第５，５００，３６２号及び第５，８２１，３３７号に記載されているようなインビトロでのＡＤＣＣアッセイを行なうことができる。このようなアッセイに有用なエフェクター分子には、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞が挙げられる。代替的に又は追加的に、対象の分子のＡＤＣＣ活性は、インビボで、例えば、Clynesら、PNAS(USA)95: 652-656(1998)に開示されたような動物モデルで評価してもよい。
【００７３】
「Ｆｃレセプター」すなわち「ＦｃＲ」は、抗体のＦｃ領域に結合するレセプターのことをいう。好ましいＦｃＲは、天然配列のヒトＦｃＲである。更に、好ましいＦｃＲは、ＩｇＧ抗体に結合するもの（ガンマレセプター）であり、それにはＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、及びＦｃγＲＩＩIサブクラスのレセプター（これらのレセプターのアレル変異体及び選択的にスプライシングされた型を含む）が挙げられる。ＦｃγＲＩＩレセプターとしては、ＦｃγＲＩＩＡ（［活性化レセプター」）及びＦｃγＲＩＩＢ（「阻害性レセプター」）が挙げられ、それらは、類似のアミノ酸配列を有しているが、主にその細胞質ドメインの点において異なっている。活性化レセプターＦｃγＲＩＩＡは、その細胞質ドメイン中に免疫レセプターチロシンベースの活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を含む。阻害性レセプターＦｃγＲＩＩＢは、その細胞質ドメインに免疫レセプターチロシンベースの阻害モチーフ（ＩＴＩＭ）を含む。（M.in Daeron、Annu. Rev.I mmunol. 15: 203-234(1997)の概説を参照されたい）。ＦｃＲは、Ravetch及びKinet、Annu. Rev. Immunol 9: 457-92 (1991); Capelら、Immunomethods 4: 25-34(1994); 並びにde Haasら、J. Lab. Clin. Med. 126: 330-41 (1995)に概説されている。将来同定されるものを含む他のＦｃＲは、本明細書において用語「ＦｃＲ」によって包含される。この用語はまた、母体から胎児へのＩｇＧの輸送に関与する新生児レセプターであるＦｃＲｎも含む（Guyerら、J. Immunol. 117: 587 (1976)及びKimら、 J. Immunol. 24: 249 (1994)）。
【００７４】
国際公開公報第００／４２０７２号（Presta）及び国際公開公報第２００４／０５６３１２号（Lowmanら）は、ＦｃＲへの結合を向上又は減少させた抗体変異体を記載している。これらの特許公報の内容は、具体的に参照により本明細書に組み入れられる。また、Shieldsら、Journal of Biological Chemistry 276(9): 6591-6604 ( 2001)も参照されたい。
【００７５】
「補体依存性細胞障害」すなわち「ＣＤＣ」とは、補体の存在下におけるターゲット細胞の溶解のことをいう。古典的な補体活性化経路は、補体系の第１の成分（Ｃ１ｑ）が、同族抗原に結合している抗体（適切なサブクラスの抗体）に結合することによって開始される。補体の活性化を評価するために、例えばGazzano-Santoroら、J. Immunol. Methods 202: 163 (1996)などのＣＤＣアッセイを行なうことができる。
【００７６】
Ｆｃ領域のアミノ酸配列を変化させ、Ｃ１ｑ結合能を向上又は低下させたポリペプチド変異体が、米国特許第６，１９４，５５１Ｂ１号、国際公開公報第９９／５１６４２号に記載されている。これらの特許公報の内容は、具体的に参照により本明細書に組み入れられる。また、Idusogieら、J. Immunol. 164: 4178-4184 (2000)参照されたい。
【００７７】
「ネイキッドな抗体」は、異種分子（例えば、細胞障害性部分、ポリマー、又は放射標識）とコンジュゲートしていない抗体（本明細書において定義されるような）である。
【００７８】
「単離された」抗体は、その天然の環境の成分から、同定及び分離及び／又は回収されている抗体である。その天然環境のコンタミ成分は、抗体の診断的又は治療的使用に干渉する物質であり、それらとしては、酵素、ホルモン、及び他のタンパク質性もしくは非タンパク質性溶質が挙げられ得る。好ましい態様において、前記抗体は、（１）Ｌｏｗｒｙ法によって測定される場合に、抗体の９５重量％超にまで、最も好ましくは９９重量％超まで精製されるか、（２）スピニングカップ（spinning cup）シークエンサーを使用することによって、Ｎ末端のアミノ酸配列もしくは内部のアミノ酸配列の少なくとも１５残基を得るのに十分な程度まで精製されるか、又は（３）クーマシーブルーもしくは好ましくは銀染色を用いて還元もしくは非還元条件下でのＳＤＳ−ＰＡＧＥによって均一となるまで精製される。抗体の天然環境の少なくとも１つの成分も存在していないので、単離された抗体には、組換え細胞内のその場における抗体が含まれる。しかし、通常は、単離された抗体は、少なくとも１回の精製ステップにより調製される。
【００７９】
「関節損傷」は、最も広い意味で使用され、１つ又は複数の関節（結合組織及び軟骨を含む）の任意の部分に対する、損傷又は部分的もしくは完全な破壊を意味し、ここでの、損傷は、任意の原因による構造的及び／又は機能的損傷を含み、関節の疼痛／関節痛を引き起こしていてもいなくてもよい。関節損傷には、具体的には、炎症性関節疾病並びに非炎症性関節疾病に関連するか、又はそれらによって生じた関節損傷が含まれるがそれに限定されるわけではない。この損傷は、例えば、自己免疫疾病、例えばループス（例えば、全身性エリテマトーサス）、関節炎（例えば、急性及び慢性の関節炎、関節リウマチ（若年性発症関節リウマチ、若年性特発性関節炎（ＪＩＡ）、又は若年性ＲＡ（ＪＲＡ)を含む）、及びリウマチ滑膜炎、痛風もしくは痛風関節炎、急性免疫性関節炎、慢性炎症性関節炎、変形性関節症、ＩＩ型コラーゲン誘発関節炎、感染性関節炎、化膿性関節炎、ライム関節炎、増殖性関節炎、乾癬性関節炎、スチル病、脊椎関節炎、骨関節炎、慢性進行性関節炎、変形性関節炎、慢性原発性多発性関節炎、反応性関節炎、更年期関節炎、エストロゲン欠乏性関節炎、及び強直性脊椎炎／リウマチ性脊椎炎）、ＲＡ以外のリウマチ性自己免疫疾病、ＲＡに続発する顕著な全身の発症（血管炎、肺線維症、又はフェルティ症候群を含むがそれらに限定されるわけではない）、シェーグレン症候群、特定のそのような続発性症候群、及びＲＡによる続発性の限定された皮膚血管炎を引き起こし得る。
【００８０】
補助的療法のために本明細書で使用した用語「免疫抑制剤」とは、本明細書において処置される哺乳動物の免疫系を抑制又は遮蔽するように作用する物質のことをいう。これには、サイトカインの産生を抑制するか、自己抗原の発現をダウンレギュレーションもしくは抑制するか、又はＭＨＣ抗原を遮蔽する物質が含まれる。このような薬剤の例としては、２−アミノ−６−アリール−５−置換ピリミジン（米国特許第４，６６５，０７７号）；非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤｓ）；ガンシクロビル、タクロリムス、糖質コルチコイド（例えばコルチゾール）、又はアルドステロン、抗炎症剤（例えば、シクロオキシゲナーゼ阻害剤、５−リポキシゲナーゼ阻害剤、又はロイコトリエンレセプターアンタゴニスト）；プリンアンタゴニスト、例えばアザチオプリン又はミコフェノール酸モフェチル（ＭＭＦ）；アルキル化剤、例えばシクロホスファミド；ブロモクリプチン；ダナゾール；ダプソン；グルタルアルデヒド（これは、米国特許第４，１２０，６４９号に記載されているように、ＭＨＣ抗原を遮蔽する）；
ＭＨＣ抗原及びＭＨＣ断片に対する抗イディオタイプ抗体；シクロスポリンＡ；ステロイド、例えばコルチコステロイド又は糖質コルチコステロイド又は糖質コルチコイド類似体、例えば、プレドニゾン、メチルプレドニゾロン（ＳＯＬＵ−ＭＥＤＲＯＬ（登録商標）コハク酸メチルプレドニゾロンナトリウムを含む）、及びデキサメタゾン；ジヒドロ葉酸還元酵素阻害剤、例えばメトトレキセート（経口用又は皮下用）；抗マラリア剤、例えばクロロキン及びヒドロキシクロロキン；スルファサラジン；レフルノミド；サイトカインアンタゴニスト、例えばサイトカイン抗体又はサイトカインレセプター抗体（抗インターフェロン−α、−β、もしくは−γ抗体、抗腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）α抗体（インフリキシマブ（ＲＥＭＩＣＡＤＥ（登録商標））又はアダリムマブ）、抗ＴＮＦαイムノアドヘシン（エタネルセプト）、抗ＴＮＦ−β抗体、抗インターロイキン−２（ＩＬ−２）抗体、抗ＩＬ−２レセプター抗体、並びに抗インターロイキン−６（ＩＬ−６）レセプター抗体及びアンタゴニストを含む）；抗ＬＦＡ-１抗体（抗ＣＤ−１１ａ及び抗ＣＤ１８抗体を含む）；抗Ｌ３Ｔ４抗体；異種抗リンパ球グロブリン；ｐａｎ−Ｔ抗体、好ましくは抗ＣＤ３又は抗ＣＤ４／ＣＤ４ａ抗体；
ＬＦＡ−３結合ドメインを含む可溶性ペプチド（９０年７月２６日に公開された国際公開公報第９０／０８１８７号）；ストレプトキナーゼ；トランスフォーミング増殖因子−β（ＴＧＦ−β）；ストレプトドルナーゼ；宿主由来のＲＮＡ又はＤＮＡ；ＦＫ５０６；ＲＳ−６１４４３；クロラムブシル；デオキシスペルグアリン；ラパマイシン；Ｔ細胞レセプター（Cohenら、米国特許第５，１１４，７２１号）；Ｔ細胞レセプター断片（Offnerら、Science, 251: 430-432 (1991); 国際公開公報第９０／１１２９４号；Ianeway, Nature, 341: 482 (1989); 及び国際公開公報第９１／０１１３３号）；ＢＡＦＦアンタゴニスト、例えばＢＡＦＦ抗体及びＢＲ３抗体及びｘＴＮＦ４アンタゴニスト（概説としては、Mackay及びMackay、Trends Immunol., 23: 113-5 (2002)を参照されたい）；Ｔ細胞ヘルパーシグナルを干渉する生物学的薬剤、例えば、抗ＣＤ４０レセプター又は抗ＣＤ４０リガンド（ＣＤ１５４）（ＣＤ４０−ＣＤ４０リガンドに対する遮断抗体（例えば、Durieら、Science, 261: 1328-30 (1993); Mohanら、J. Immunol., 154: 1470-80 (1995)）及びＣＴＬＡ４−Ｉｇ（Finckら、Science, 265: 1225-7 (1994)）を含む）；
並びに、Ｔ細胞レセプター抗体（欧州特許第３４０，１０９号）、例えばＴ１０Ｂ９が挙げられる。本明細書のいくつかの免疫抑制剤はまた、メトトレキセートなどのＤＭＡＲＤｓである。本明細書における好ましい免疫抑制剤の例には、シクロホスファミド、クロラムブシル、アザチオプリン、レフルノミド、ＭＭＦ、又はメトトレキセートが挙げられる。
【００８１】
「疾病修飾性抗リウマチ薬」すなわち「ＤＭＡＲＤｓ」の例には、ヒドロキシクロロキン、スルファサラジン、メトトレキセート、レフルノミド、エタネルセプト、インフリキシマブ（＋経口用及び皮下用メトトレキセート）、アザチオプリン、Ｄ−ペニシラミン、金塩（経口用）、金塩（筋肉内用）、ミノサイクリン、シクロスポリン（シクロスポリンＡ及び局所的シクロスポリンを含む）、スタフィロコッカス・プロテインＡ（Goodyear及びSilverman、J. Exp. Med., 197, (9), p1125-39 (2003)）（それらの塩及び誘導体を含む）などが挙げられる。本明細書において好ましいＤＭＡＲＤは、メトトレキセートである。
【００８２】
「非ステロイド系抗炎症薬」すなわち「ＮＳＡＩＤｓ」の例には、アスピリン、アセチルサリチル酸、イブプロイフェン、フルルビプロフェン、ナプロキセン、インドメタシン、スリンダク、トルメチン、フェニルブタゾン、ジクロフェナク、ケトプロフェン、ベノリラート、メフェナム酸、メトトレキセート、フェンブフェン、アザプロパゾン；ＣＯＸ−２阻害剤、例えばセレコキシブ（ＣＥＬＥＢＲＥＸ（登録商標）；４−（５−（４−メチルフェニル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ベンゼンスルホンアミド）、バルデコキシブ（ＢＥＸＴＲＡ（登録商標））、メロキシカム（ＭＯＢＩＣ（登録商標））、ＧＲ２５３０３５（Glaxo Wellcome）；及びＭＫ９６６（Merck Sharp & Dohme）（その塩及び誘導体を含む）などが挙げられる。好ましくは、それらは、アスピリン、ナプロキセン、イブプロフェン、インドメタシン、又はトルメチンである。
【００８３】
本明細書において「インテグリンアンタゴニスト又は抗体」の例としては、ＬＦＡ−１抗体（例えばGenentechから市販されているエファリツマブ（ＲＡＰＴＩＶＡ（登録商標））、又はα４インテグリン抗体（例えば、Biogenから入手可能なナタリズマブ（ＡＮＴＥＧＲＥＮ（登録商標））、又はジアザ環式（diazacyclic）フェニルアラニン誘導体（国際公開公報第２００３／８９４１０号）、フェニルアラニン誘導体（国際公開公報第２００３／７０７０９号、国際公開公報第２００２／２８８３０号、国際公開公報第２００２／１６３２９号、及び国際公開公報第２００３／５３９２６号）、フェニルプロピオン酸誘導体（国際公開公報第２００３／１０１３５号）、エナミン誘導体（国際公開公報第２００１／７９１７３号）、プロパン酸誘導体（国際公開公報第２０００／３７４４４号）、アルカン酸誘導体（国際公開公報第２０００／３２５７５号）、置換フェニル誘導体（米国特許第６，６７７，３３９号及び第６，３４８，４６３号）、芳香族アミン誘導体（米国特許第６，３６９，２２９号）、ＡＤＡＭディスインテグリンドメインポリペプチド（米国公開特許第２００２／００４２３６８号）、αｖβ３インテグリンに対する抗体（欧州特許第６３３９４５号）、アザ架橋二環式アミノ酸誘導体（国際公開公報第２００２／０２５５６号）などが挙げられる。
【００８４】
「コルチコステロイド」とは、天然に存在するコルチコステロイドの作用を模倣又は増強した、ステロイドの一般化学構造を有するいくつかの合成物質又は天然に存在する物質のいずれか１つのことをいう。合成コルチコステロイドの例には、プレドニゾン、プレドニゾロン（メチルプレドニゾロン、例えばＳＯＬＵ−ＭＥＤＲＯＬ（登録商標）コハク酸メチルプレドニゾロンナトリウムを含む）、デキサメタゾン、又はデキサメタゾントリアムシノロン、ヒドロコルチゾン、及びベタメタゾンが挙げられる。本明細書において好ましいコルチコステロイドは、プレドニゾン、メチルプレドニゾロン、ヒドロコルチゾン、又はデキサメタゾンである。
【００８５】
関節リウマチの処置のための「ＴＮＦ」薬には、ＴＮＦαリガンドをターゲティングする分子、並びに、ＴＮＦ−ＴＮＦαのレセプター、すなわちＴＮＦＲ−１及びＴＮＦＲ−２をターゲティングする分子が挙げられる。
【００８６】
本明細書の目的において、「腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ−α）」とは、Pennicaら、Nature, 312: 721 (1984)又はAggarwalら、JBC, 260: 2345 (1985)に記載されているようなアミノ酸配列を含む、ヒトＴＮＦα分子のことをいう。
【００８７】
本明細書において「ＴＮＦα阻害剤」又は「ＴＮＦαアンタゴニスト」は、一般にＴＮＦαに又はＴＮＦαレセプターに結合し、ＴＮＦαの活性を中和することによって、ＴＮＦαの生物学的機能をある程度まで阻害する薬剤である。本明細書において具体的に考えられるＴＮＦ阻害剤の例は、エタネルセプト（ＥＮＢＲＥＬ（登録商標））、インフリキシマブ（ＲＥＭＩＣＡＤＥ（登録商標））、及びアダリムマブ（ＨＵＭＩＲＡ（商標））である。
【００８８】
用語「ＴＮＦα阻害剤に対する不適切な応答」とは、毒性及び／又は不適切な効力のために、ＴＮＦα阻害剤を用いた以前又は現在の処置に対する不適切な応答のことをいう。不適切な応答は、問題となる疾患の処置に関する技能を有する臨床医により評価されることができる。ＴＮＦα阻害剤を用いた以前又は現在の処置により「毒性」が生じた哺乳動物には、それに関連した１つ又は複数のネガティブな副作用、例えば、感染（特に重度の感染）、うっ血性心不全、脱髄（多発性硬化症に至る）、過敏症、神経学的事象、自己免疫、非ホジキンリンパ腫、結核（ＴＢ）、自己抗体などが引き起こされる。「不適切な効力」が引き起こされた哺乳動物は、ＴＮＦα阻害剤を用いた以前又は現在の処置の後も活動性の疾患を有し続ける。例えば、患者は、ＴＮＦα阻害剤による治療の１カ月後又は３カ月後も活発な疾患活動を有する場合がある。
【００８９】
「添付文書」とは、適応症、用法、用量、投与、禁忌、同包される製品と併用される他の治療製品、及び／又はそのような治療用製品の使用に関する警告などについての情報を含む、治療用製品の市販パッケージに慣用的に含まれる指示書のことをいうために使用される。
【００９０】
「医薬品」は、関節損傷又はその症状又は副作用を処置するための活性な薬物である。
【００９１】
用語「再発」とは、本明細書において、患者が緩解した後の疾病の兆候及び症状の逆戻りのことをいうために使用される。従って、最初、ターゲット疾病及び／又は該疾病の様々な特徴もしくは症状が軽減又は治癒されたか、あるいは、疾病の進行が停止又は減速し、その後、疾病又は疾病の１つもしくは複数の特徴が戻った場合、患者は「再発」したと言われる。関節リウマチの症状には、関節リウマチの分類についての２０００年の改訂版American Rheumatoid Association基準に列挙された任意の症状、例えば、関節腫脹、関節損傷、骨変形、骨侵食、疼痛、炎症、及びより進行形態の関節リウマチに関連した全身作用（低アルブミン血症及び慢性病の貧血を含む）が挙げられるがそれらに限定されるわけではない。初期の成功裏の処置の後に、１つ又は複数のこれらの症状が戻った場合、患者は再発したと考えられる。
【００９２】
ＩＩ．処置法
本発明は、自己免疫疾病を処置するための、ヒト被験体へのＣＤ２０アンタゴニストの新規投与様式に関する。従って、１つの態様において、本発明は、自己免疫疾病、例えば慢性ＣＤ２０関連自己免疫疾病、例えば関節リウマチ（ＲＡ）又はループスを処置するために、ＣＤ２０抗体を投与するための新規な処置プロトコールに関する。
【００９３】
ＣＤ２０抗体がＲｉｔｕｘａｎ（登録商標）である場合、現在のプロトコールでは、２週間の間隔をおいた２回の１０００mgの静脈内注入が含まれる。これに対し、本発明の処置プロトコールは、前記に考察したように、最初に静脈内注入の形態で全有効量の投与を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなる。
【００９４】
本発明によると、有効量のＣＤ２０アンタゴニスト（例えばＣＤ２０抗体）は、処置開始時に、初回の１回の全用量が静脈内注入（ｉ．ｖ．）の形態で投与され、場合により、初回投与から約３〜７ヶ月後、典型的には４〜６カ月後に２回目の全有効量（通常であって必ずしもではないが、初回と同じ用量）の静脈内注入を行なう。処置される自己免疫疾病が活動性ＲＡである場合、２回目のｉ．ｖ．投与は、通常、初回処置から６カ月後に行なわれる。ループスの場合、２回目のｉ．ｖ．投与は、通常、初回処置から４カ月後又は１６週間後に予定されるが、２回目の投与の時期は、処置される自己免疫疾病の性質及び段階、並びに、初回処置に対する患者の応答（これは個体により異なり得る）に応じて変更し得る。２回目の有効量は、典型的には初回用量と同じであるが、初回処置に対する患者の応答及び生じた患者の容態の変化に応じて初回用量より多くしても少なくしてもよい。
【００９５】
ＣＤ２０抗体には、現在「リツキシマブ」（「ＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標）」）と呼ばれている「Ｃ２Ｂ８」（米国特許第５，７３６，１３７号）；IDEC Pharmaceuticals, Incから市販されている「Ｙ２Ｂ８」又は「イブリツモマブチウキセタン」（ＺＥＶＡＬＩＮ（登録商標））と称されるイットリウム−［９０］標識２Ｂ８マウス抗体（米国特許第５，７３６，１３７号；１９９３年６月２２日にアクセッションナンバーＨＢ１１３８８としてＡＴＣＣに寄託された２Ｂ８）；「トシツモマブ」とも呼ばれるマウスＩｇＧ２ａ「Ｂ１」、場合により１３１Ｉで標識されて生成された、Ｃｏｒｉｘａから市販されている「１３１Ｉ−Ｂ１」又は「ヨウ素Ｉ１３１トシツモマブ」抗体（ＢＥＸＸＡＲ（登録商標））（米国特許第５，５９５，７２１号も参照）；マウスモノクローナル抗体「１Ｆ５」（Pressら、Blood 69(2): 584-591 (1987)）及び「フレームワークパッチ（framework patched）」又はヒト化１Ｆ５（国際公開公報第２００３／００２６０７号、Leung, S.；ＡＴＣＣ寄託ＨＢ−９６４５０）を含むその変異体；マウス２Ｈ７及びキメラ２Ｈ７抗体（米国特許第５，６７７，１８０号）；ヒト化２Ｈ７（国際公開公報第２００４／０５６３１２号（Lowmanら）及び以下に示す通り）；ＨＵＭＡＸ−ＣＤ２０（商標）完全ヒト抗体（Genmab、Denmark；例えば、Glennie及びvan de Winkel、Drug Discovery Today 8: 503-510 (2003)及びCraggら、Blood 101: 1045-1052 (2003)を参照）；国際公開公報第２００４／０３５６０７号（Teelingら）に示されているヒトモノクローナル抗体；米国公開特許第２００４／００９３６２１号（Shitaraら）に記載されている、Ｆｃ領域に結合したＮ−グリコシド連結型糖鎖の複合体を有する抗体；国際公開公報第２００４／１０３４０４号（Watkinsら、Applied Molecular Evolution）に示されているＡＭＥ−１３３（商標）抗体などのＡＭＥシリーズの抗体などのＣＤ２０結合分子；キメラ又はヒト化Ａ２０抗体（それぞれｃＡ２０、ｈＡ２０）（米国公開特許第２００３／０２１９４３３号、Immunomedics）などのＡ２０抗体又はその変異体；並びに, International Leukocyte Typing Workshopから入手可能なモノクローナル抗体Ｌ２７、Ｇ２８−２、９３−１Ｂ３、Ｂ−Ｃ１、又はＮＵ−Ｂ２（Valentineら、Leukocyte Typing III (McMichael,編, p. 440, Oxford University Press (1987)）が挙げられる。本明細書において好ましいＣＤ２０抗体は、ヒト化、キメラ、又はヒトのＣＤ２０抗体、より好ましくは、ヒト化２Ｈ７抗体、リツキシマブ、キメラもしくはヒト化Ａ２０抗体（Immunomedics）、及びＨＵＭＡＸ−ＣＤ２０（商標）ヒトＣＤ２０抗体（Genmab）である。
【００９６】
ヒトＣＤ２０及び好ましくは他の霊長類ＣＤ２０にも同様に結合するヒト化抗体は、非ヒト種の抗ヒトＣＤ２０抗体（ドナー抗体）のＨ鎖ＣＤＲの少なくとも１つ、好ましくは２つ又は全てを有する重（Ｈ）鎖、及び、レシピエント抗体であるヒトコンセンサス抗体のフレームワーク残基の実質的に全てを含む。ドナー抗体は、様々な非ヒト種（マウス、ラット、モルモット、ヤギ、ウサギ、ウマ、霊長類を含む）に由来していてもよいが、最も多いのはげっ歯類抗体である。この脈絡での「実質的に全て」とは、ヒト化抗体におけるレシピエントＦＲ領域には、ヒトコンセンサスＦＲ配列にもともと存在しない１つ又は複数のアミノ酸置換を含んでいてもよいことをいう。これらのＦＲ変化は、レシピエント抗体又はドナー抗体に見られない残基を含んでいてもよい。
【００９７】
１つの態様において、ドナー抗体は、マウス２Ｈ７抗体であり、そのＨ鎖及びＬ鎖の各々のＣＤＲ及びＦＲ配列を含むＶ領域が、図１Ａ及び１Ｂに示されている。具体的な態様において、ヒトＦａｂフレームワークの残基は、ヒトＶκサブグループＩ及びＶＨサブグループＩＩＩのコンセンサス配列に相当し、これらのコンセンサス配列は図１Ａ及び図１Ｂにそれぞれ示されている。本発明のヒト化２Ｈ７抗体は、マウスドナー抗体のＨ鎖のＣＤＲを少なくとも１つ有する。１つの態様において、ヒトＣＤ２０に結合するヒト化２Ｈ７抗体は、ドナー抗体のＨ鎖及びＬ鎖の両方のＣＤＲを含む。
【００９８】
完全長抗体では、本発明のヒト化ＣＤ２０結合抗体は、ヒト免疫グロブリンのＣドメインに連結されたヒト化Ｖドメインを含む。好ましい態様において、Ｈ鎖Ｃ領域は、ヒトＩｇＧに由来し、好ましくはＩｇＧ１又はＩｇＧ３に由来する。Ｌ鎖Ｃドメインは、好ましくは、ヒトκ鎖に由来する。
【００９９】
残基のナンバリングは、Kabatら、Sequences of Immunological Interest. 第５版、Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991)に従い、配列図において挿入はａ、ｂ、ｃ、ｄ、及びｅで示され、ギャップはダッシュで示されている。Ｆｃ領域を含むＣＤ２０結合抗体において、Ｆｃ領域のＣ末端リジン（ＥＵナンバリングシステムによると残基４４７）は、例えば、抗体の精製中に、又は、抗体ポリペプチドをコードする核酸を組換え操作することにより除去してもよい。従って、本発明において有用なＣＤ２０結合抗体組成物は、Ｋ４４７残基を有する抗体、全てのＫ４４７を除去した抗体、又は、Ｋ４４７残基を有する抗体と有さない抗体の混合物を含み得る。
【０１００】
ＣＤ２０に結合するヒト化２Ｈ７抗体の作製及び産生は、国際公開特許第０４／０５６３１２号及び米国公開特許第２００６／００３４８３５号に記載され、その全開示が参照により本明細書に組み入れられる。
【０１０１】
具体的な態様において、ヒト化２Ｈ７抗体は、表１に列挙されている抗体である。
【０１０２】
【表１】
2011501734.tif 000002
【０１０３】
表１の抗体変異体Ａ、Ｂ及びＩの各々が、軽鎖可変配列（ＶＬ）：
【表２】
2011501734.tif 000003
及び、重鎖可変配列（ＶＨ）：
【表３】
2011501734.tif 000004
を含む。
【０１０４】
表１の抗体変異体Ｃ、Ｄ、Ｆ、及びＧの各々が、軽鎖可変配列（ＶＬ）：
【表４】
2011501734.tif 000005
及び、重鎖可変配列（ＶＨ）：
【表５】
2011501734.tif 000006
を含む。
【０１０５】
表１の抗体変異体Ｈは、配列番号３（前記）で示される軽鎖可変配列（ＶＬ）及び重鎖可変配列（ＶＨ）：
【表６】
2011501734.tif 000007
を含む。
【０１０６】
表１の抗体変異体Ａ、Ｂ、及びＩの各々は、完全長軽鎖配列：
【表７】
2011501734.tif 000008
を含む。
【０１０７】
表１の変異体Ａは、完全長重鎖配列：
【表８】
2011501734.tif 000009
を含む。
【０１０８】
表１の変異体Ｉは、完全長重鎖配列：
【表９】
2011501734.tif 000010
を含む。
【０１０９】
表１の変異体Ｂは、完全長重鎖配列：
【表１０】
2011501734.tif 000011
を含む。
【０１１０】
表１の抗体変異体Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｇ、及びＨの各々は、完全長軽鎖配列：
【表１１】
2011501734.tif 000012
を含む。
【０１１１】
表１の変異体Ｃは、完全長重鎖配列：
【表１２】
2011501734.tif 000013
を含む。
【０１１２】
表１の変異体Ｄは、完全長重鎖配列：
【表１３】
2011501734.tif 000014
を含む。
【０１１３】
表１の変異体Ｆは、完全長重鎖配列：
【表１４】
2011501734.tif 000015
を含む。
【０１１４】
表１の変異体Ｇは、完全長重鎖配列：
【表１５】
2011501734.tif 000016
を含む。
【０１１５】
表１の変異体Ｈは、完全長重鎖配列：
【表１６】
2011501734.tif 000017
を含む。
【０１１６】
特定の態様において、本発明のヒト化２Ｈ７抗体は、更に、ＩｇＧＦｃにおけるアミノ酸変化を含み、そして、該抗体は、ヒトＦｃＲｎに対しての結合親和性において、野生型ＩｇＧＦｃを有する抗体に比べて、少なくとも６０倍、少なくとも７０倍、少なくとも８０倍、より好ましくは少なくとも１００倍、好ましくは少なくとも１２５倍、更により好ましくは少なくとも１５０倍から約１７０倍の増加を示す。
【０１１７】
ＩｇＧにおけるＮ−グリコシル化部位は、ＣＨ２ドメインのＡｓｎ２９７である。本発明のヒト化２Ｈ７抗体組成物には、Ｆｃ領域を有する前出のヒト化２Ｈ７抗体のいずれかの組成物が挙げられ、ここで、組成物中の抗体の約８０〜１００％（好ましくは約９０〜９９％）が、糖タンパク質のＦｃ領域に付着した、フコースを欠いた成熟コア炭水化物構造を含む。このような組成物は、本明細書において、Ｆｃ（ＲＩＩＩＡ（Ｆ１５８））への結合において驚くべき改善を示すことが実証されたが、これは、ヒトＩｇＧとの相互作用においてはＦｃ（ＲＩＩＩＡ（Ｖ１５８））ほど効果的ではない。Ｆｃ（ＲＩＩＩＡ（Ｆ１５８））は、正常で健康なアフリカ系アメリカ人及びコーカサス人において、Ｆｃ（ＲＩＩＩＡ（Ｖ１５８））よりも一般的である。Lehrnbecherら、Blood 94: 4220 (1999)を参照されたい。歴史的には、最も頻繁に使用される産業用の宿主の１つであるチャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ）において産生された抗体は、集団中にフコシル化されていない抗体を約２〜６％を含む。しかし、ＹＢ２／０及びＬｅｃ１３は、７８〜９８％のフコシル化されていない種を有する抗体を産生することができる。Shinkawaら、J Bio. Chem. 278 (5), 3466-347 (2003)は、ＹＢ２／０及びＬｅｃ１３細胞において産生された抗体は、ＦＵＴ８活性が低いが、これはインビトロにおいて有意に増加したＡＤＣＣ活性を示すことを報告した。フコース含量の減少した抗体の産生はまた、例えば、Liら、(GlycoFi) “Optimization of humanized IgGs in glycoengineered Pichia pastoris”  Nature Biology オンライン記事発表日２００６年１月２２日；Niwa R.ら、Cancer Res. 64(6): 2127-2133 (2004); 米国公開特許第２００３／０１５７１０８号（Presta）；米国特許第６，６０２，６８４号及び米国公開特許第２００３／０１７５８８４号（Glycart Biotechnology）；米国公開特許第２００４／００９３６２１号、米国公開特許第２００４／０１１０７０４号、米国公開特許第２００４／０１３２１４０号(全て協和発酵工業）にも記載されている。
【０１１８】
ＣＤ２０結合抗体は、二重特異性ＣＤ２０結合抗体を包含し、ここでの該抗体の一方の腕には、ＣＤ２０結合抗体の重（Ｈ）鎖及び軽（Ｌ）鎖、例えば本発明のヒト化２Ｈ７抗体のＨ鎖及びＬ鎖を有し、他方の腕には、第二の抗原に対する結合特異性を有するＶ領域を有する。具体的な態様において、第二の抗原は、ＣＤ３、ＣＤ６４、ＣＤ３２Ａ、ＣＤ１６、ＮＫＧ２Ｄ、又は他のＮＬ活性化リガンドからなる群より選択される。
【０１１９】
Genentech及びBiogen Idecの臨床研究により、１０mgという低い用量から最大１ｇまでの用量の抗ＣＤ２０（ヒト化２Ｈ７変異体及びリツキシマブ）を使用した自己免疫疾病の処置に関する治療的効力が評価された（リツキシマブ研究におけるBackgroundの章；及び、国際公開公報第０４／０５６３１２号、実施例１６を参照）。一般に、これらの臨床研究では、抗体は、約２週間の間隔をおいた２回の用量で投与された。臨床研究で研究されたレジメンの例としては、関節リウマチにおいてヒト化ＣＤ２０抗体２Ｈ７を、２×１０mg（１用量あたり１０mgで２用量；７０kg、身長６７インチの患者において全量約１０．１mg／ｍ２を意味する）、２×５０mg（７０kg、身長６７の患者において、全量５５mg／ｍ２）、２×２００mg（７０kg、身長６７の患者において、全量２２０mg／ｍ２）、２×５００mg（７０kg、身長６７の患者において全量約５５０mg／ｍ２）、及び２×１０００mg（７０kg、身長６７の患者において全量約１１００mg／ｍ２）；リツキサンを、２×５００mg（７０kg、身長６７の患者において全量約５５０mg／ｍ２）、２×１０００mg（７０kg、身長６７の患者において全量約１１００mg／ｍ２）などが挙げられる。
【０１２０】
自己免疫疾病の処置の治療的効力は、１mgという低用量から最大２ｇまでの用量のＣＤ２０抗体を使用して評価されている。実施例に示されるように、１回の注入処置により、試験した全ての用量（４００mg、１０００mg、１５００mg、及び２０００mg）について類似した結果が示されたので、有効量は、幅広い範囲で変更させることができ、典型的には有効量は約０．１mg〜約２０００mg、又は約１mg〜約２０００mg、又は約１０mg〜２０００mg、又は約４００mg〜２０００mgのＣＤ２０抗体である。有効量は、使用されるＣＤ２０抗体、処置される疾病（疾病の重度を含む）、患者の性別、体重、年齢、及び全身容態、及び臨床医により通常考察される他の因子に応じて変更される。各々の特定の状況における有効量の決定は、医師の技能の範囲内である。従って、様々な態様において、ＣＤ２０抗体は、０．１、０．５、１、５、１０、１５、２０、２５、３０、４０、５０、７５、１００、１２５、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、５００、１０００、１５００、又は２０００mgの用量で投与することができる。自己免疫又は自己免疫関連疾病の処置の効力又は成功を評価するためのパラメータは、適切な疾病についての技能を有する医師により知られているだろう。一般に、技能を有する医師は、特定の疾病の兆候及び症状の減少を期待するだろう。
【０１２１】
自己免疫疾病の処置では、ＣＤ２０結合抗体の用量を調節することにより、個々の患者における疾病及び／又は容態の重度に応じて、Ｂ細胞の枯渇の程度をモジュレーションすることが望ましいだろう。従って、Ｂ細胞の枯渇は完全とすることもできるが、完全である必要はない。又は、初回の処置では全Ｂ細胞の枯渇が望ましくあり得るが、その後の処置では、部分的な枯渇だけを達成するように用量を調節し得る。１つの態様において、Ｂ細胞の枯渇は、少なくとも２０％であり、すなわち、８０％以下のＣＤ２０陽性Ｂ細胞が、処置前のベースラインレベルに比べて留まっている。他の態様において、Ｂ細胞の枯渇は、２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、又はそれ以上である。好ましくは、Ｂ細胞の枯渇は、疾病の進行を止めるのに十分であり、より好ましくは処置下での特定の疾病の兆候及び症状を軽減するのに十分であり、更により好ましくは疾病を治癒するのに十分である。部分的もしくは短期のＢ細胞枯渇が目的である場合、又は疾病が慢性ではないかもしくは重度がより低い場合、例えば２０mg、１０mg、又はそれ以下のより低用量のＣＤ２０を使用してもよい。別の態様において、本発明の低用量での処置は、本発明に従って投与された初回のより高い用量を用いての成功裏の処置の後の、維持療法において有用である。特定の態様において、完全有効量を１回の静脈内注入として最初に投与した後、最初の投与から４〜６ヶ月後に同用量の静脈内注入を行ない、この後に、典型的には４〜６カ月の間隔をおいてより低用量の維持用量を投与してもよい。
【０１２２】
１つもしくは複数の現在の標準的な治療法が無効であるか、耐容性が低いか、又は禁忌である自己免疫疾病を有する患者を、本発明の投与レジメンを使用して処置することができる。例えば、本発明は、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）阻害剤療法又は疾病修飾性抗リウマチ薬（ＤＭＡＲＤ）療法に対して不適切な応答を示したＲＡ患者のための本発明の処置法を考える。
【０１２３】
１つの態様において、本発明の用量及び投与レジメンは、関節リウマチ（ＲＡ）、例えば活動性ＲＡ、例えば中等度から重度の活動性ＲＡを処置するために使用される。
【０１２４】
ＲＡは、２００万超のアメリカ人が罹患し、罹患者の日常活動を妨げる、衰弱性の自己免疫疾病である。ＲＡは、生体の自己の免疫系が不適切に関節組織を攻撃した場合に起こり、健常組織を破壊し関節内に障害を与える慢性炎症を引き起こす。症状には、関節の炎症、腫脹、硬直、及び疼痛が挙げられる。更に、ＲＡは全身疾病であるので、他の組織（例えば、肺、眼、及び骨髄）にも影響を及ぼし得る。
【０１２５】
現在、ＲＡを治癒するものは知られていない。現在の処置には、様々なステロイド系及び非ステロイド系抗炎症薬、免疫抑制剤、疾病修飾性抗リウマチ薬（ＤＭＡＲＤｓ）、及び生物学的製剤が挙げられる。しかし、多くの患者は、このような処置に対して不適切な応答を依然として示している。
【０１２６】
ＣＤ２０抗体は、初期ＲＡ（すなわちメトトレキセート（ＭＴＸ）未処置）患者における第一選択療法として、及び単独療法として、又は、例えばＭＴＸもしくはシクロホスファミドと併用して使用することができる。又は、該抗体は、ＤＭＡＲＤ及び／もしくはＭＴＸ難治性である患者の第二選択療法として、及び単独療法として、又は、他の薬物療法（例えばＭＴＸ）と併用して使用することができる。ヒト化ＣＤ２０結合抗体は、ＲＡにおける関節損傷を予防及び制御するために、構造的損傷を遅延するために、炎症に関連した疼痛を減少させるために、一般に活動性ＲＡ（例えば中等度から重度のＲＡ）における兆候及び症状を減少させるために有用である。ＲＡ患者は、ＲＡの処置に使用される他の薬物で処置する前、処置した後、又はその処置と一緒に、ヒト化ＣＤ２０抗体で処置することができる（以下の併用療法を参照されたい）。１つの態様において、以前に疾病修飾性抗リウマチ薬で失敗したか、そして／又はメトトレキセート単独に対して不適切な応答を示した患者が、本明細書におけるヒト化ＣＤ２０結合抗体で処置される。この処置の１つの態様において、患者は、最初に、本発明の投与レジメンに従って、ヒト化ＣＤ２０結合抗体を単独で投与され、その後、ＣＤ２０抗体＋シクロホスファミド、又はＣＤ２０抗体＋メトトレキセートを投与される。
【０１２７】
ＲＡにおける処置効力を評価する１つの方法は、American College of Rheumatology（ＡＣＲ）基準に基づき、この基準は、とりわけ圧痛及び関節腫脹の改善の比率を測定する。ＲＡ患者は、例えば、全く抗体で処置しないもの（例えば、処置前のベースライン）又はプラセボで処置したものと比べて（２０％改善）ＡＣＲ２０のように、スコアリングできる。抗体による処置の効力を評価する他の方法としては、構造的損傷（例えば骨侵食及び関節腔の狭小化など）のスコアリングに使用されるＳｈａｒｐＸ線スコアなどのＸ線スコアリングが挙げられる。患者は、障害の予防又は改善について、処置期間中又は処置後に健康評価質問票（Health Assessment Questionnaire）［ＨＡＱ］スコア、ＡＩＭＳスコア、ＳＦ−３６に基づいて評価することができる。ＡＣＲ２０基準は、圧痛（痛い）関節数及び関節腫脹数の２０％の改善と、以下の５個の追加の基準の中の少なくとも３個の２０％の改善が含まれ得る：
１．視覚的アナログスケール（ＶＡＳ）による患者の疼痛の評価、
２．患者の疾病活性の全般的な評価（ＶＡＳ)、
３．医師による疾病活性の全般的な評価（ＶＡＳ)、
４．健康評価質問票により測定した患者による自己評価の障害、及び
５．急性期反応物、ＣＲＰ又はＥＳＲ。
【０１２８】
ＡＣＲ５０及び７０も、同様に定義される。好ましくは、患者に、少なくともＡＣＲ２０、好ましくは少なくともＡＣＲ３０、より好ましくは少なくともＡＣＲ５０、更により好ましくは少なくともＡＣＲ７０、最も好ましくは少なくともＡＣＲ７５、及びそれ以上のスコアを達成するのに有効な量の本発明のＣＤ２０抗体が投与される。
【０１２９】
乾癬性関節炎は、独特で明瞭なＸ線写真の特徴を有する。乾癬性関節炎において、関節侵食及び関節腔狭小化も、同様にＳｈａｒｐスコアにより評価することができる。本発明のヒト化ＣＤ２０結合抗体は、関節損傷を予防するために、並びに、疾患の兆候及び症状を減少させるために使用することができる。
【０１３０】
本発明の更に別の局面は、ＳＬＥ罹患患者に、治療有効量の本発明のヒト化ＣＤ２０抗体を投与することにより、ループス又はＳＬＥを処置する方法である。ＳＬＥ患者には、腎外徴候並びにループス腎炎を有する患者が含まれる。ＳＬＥＤＡＩスコアは、疾病活動性の数値的定量化を提供する。ＳＬＥＤＡＩは、疾病活動性に相関することが知られている２４の臨床的及び実験的パラメーターの加重指数であり、０〜１０３の数値範囲である。Bryan Gescuk & John Davis、"Novel therapeutic agent for systemic lupus erythematosus" Current Opinion in Rheumatology 2002, 14: 515-521を参照されたい。二本鎖ＤＮＡに対する抗体は、ループスの腎性発赤及び他の徴候を引き起こすと考えられている。抗体処置を受けている患者を、血清クレアチニン、尿タンパク、又は尿中血液の有意で再現可能な増加として定義される、腎性発赤までの時間についてモニターすることができる。代替的に又は加えて、患者を、抗核抗体及び二本鎖ＤＮＡに対する抗体のレベルについてモニターすることができる。ＳＬＥの処置には、高用量コルチコステロイド及び／又はシクロホスファミド（ＨＤＣＣ）が挙げられる。
【０１３１】
血管炎に関しては、全身性血管炎の患者の約７５％が、抗好中球細胞質抗体を有し、小／中サイズの血管を患う３種の容態の中の１つにクラスター化される：ウェゲナー肉芽腫症（ＷＧ）、顕微鏡的多発性血管炎（ＭＰＡ)、及びチャーグ・ストラウス症候群（ＣＳＳ)（これらはまとめてＡＮＣＡ関連血管炎（ＡＡＶ）として知られている）。
【０１３２】
脊椎関節症は、強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、及びクローン病を含む、関節疾患の一種である。処置の成功は、公認された患者及び医師の全般的評価測定ツールにより決定することができる。
【０１３３】
乾癬を処置するために様々な薬物療法が使用され；処置は、疾病の重度に直接関連して異なる。より軽度な形態の乾癬患者は、典型的には、局所処置、例えば局所ステロイド、アントラリン、カルシポトリエン、クロベタゾール、及びタザロテンを使用して疾病を管理するのに対し、一方、中等度から重度の乾癬を有する患者は、全身性（メトトレキセート、レチノイド、シクロスポリン、ＰＵＶＡ、及びＵＶＢ）療法を使用する可能性が高いようである。タールも使用される。これらの療法は、安全性の懸念、時間のかかるレジメン、又は不便な処置方法を複合して有する。更に、いくつかの場合では、高価な装置及び専用のスペースが診察室に必要とされる。全身薬物療法では、重度な副作用（高血圧、高脂血症、骨髄抑制、肝疾病、腎疾病、及び消化管の不調を含む）が引き起こされる可能性がある。また、光線療法の使用により、皮膚ガンの発生率が増加する可能性がある。局所療法の使用に伴う不便及び不快感に加えて、光線療法及び全身性処置は、患者を治療及び非治療の周期におき、その副作用のために生涯曝露をモニターする必要がある。
【０１３４】
乾癬の処置効力は、ベースラインの容態と比べた、医師による全般的な評価（ＰＧＡ）の変化、並びに乾癬領域及び重度指数（Psoriasis Area and Severity Index）（ＰＡＳＩ）スコア、乾癬症状評価（Psoriasis Symptom Assessment）（ＰＳＡ）を含む、疾病の臨床徴候及び症状における変化をモニターすることにより評価される。特定の時点において経験した痒みの程度を示すために使用される視覚的アナログスケールに関して、処置の全期間にわたり定期的に患者を測定することができる。
【０１３５】
患者は、治療抗体の初回の点滴により、点滴反応又は点滴に関連した症状を引き起こす場合がある。これらの症状の重度は多様であり、一般に医学的介入により元に戻すことができる。これらの症状には、インフルエンザ様の発熱、悪寒／寒気、吐気、蕁麻疹、頭痛、気管支痙攣、血管浮腫が含まれるがそれらに限定されるわけではない。本発明の疾病処置法における点滴反応を最小限にすることが望ましい。このような有害事象を軽減又は最小限にするために、患者には、最初に順化するための用量又は耐容性の用量の抗体を投与し、その後、治療有効量を投与してもよい。順化用量は、治療的有効量よりも低いものであり、患者をより高用量に順化させるためのものである。
【０１３６】
前記した自己免疫疾病又は自己免疫に関連した容態などの自己免疫疾病の処置において、患者を、例えば多剤併用レジメンにおいて、免疫抑制剤などの第二の治療剤と併用した１つ又は複数のＣＤ２０結合抗体を用いて処置することができる。ＣＤ２０結合抗体は、免疫抑制剤と同時に、連続して、又は交互に投与しても、あるいは他の療法で非応答後に投与してもよい。免疫抑制剤は、当該分野において示されたのと同じ用量か又はより少ない用量で投与してもよい。好ましい補助免疫抑制剤は、処置される疾患のタイプ並びに患者の病歴を含む多くの要因に依存する。
【０１３７】
本明細書で使用した補助療法における「免疫抑制剤」とは、患者の免疫系を抑制又は遮蔽するように作用する物質のことをいう。このような薬剤には、サイトカインの産生を抑制するか、自己抗原の発現をダウンレギュレーションもしくは抑制するか、又はＭＨＣ抗原を遮蔽する物質が挙げられる。このような薬剤の例には、ステロイド、例えば糖質コルチコステロイド、例えばプレドニゾン、メチルプレドニゾロン、及びデキサメタゾン；２−アミノ−６−アリール−５−置換ピリミジン（例えば米国特許第４，６６５，０７７号を参照）、アザチオプリン（又はシクロホスファミド、アザチオプリンに対して有害な反応がある場合）；ブロモクリプチン；グルタルアルデヒド（米国特許第４，１２０，６４９号に記載のように、ＭＨＣ抗原を遮蔽する）；ＭＨＣ抗原及びＭＨＣ断片に対する抗イディオタイプ抗体；シクロスポリンＡ；サイトカイン又はサイトカインレセプターアンタゴニスト（抗インターフェロン−α、−β、又は−γ抗体を含む）；抗腫瘍壊死因子−α抗体；抗腫瘍壊死因子−β抗体；抗インターロイキン−２抗体及び抗ＩＬ−２レセプター抗体；抗Ｌ３Ｔ４抗体；異種抗リンパ球グロブリン；パン（ｐａｎ）−Ｔ抗体、好ましくは抗ＣＤ３又は抗ＣＤ４／ＣＤ４ａ抗体；ＬＦＡ−３結合ドメインを含む可溶性ペプチド（９０年７月２６日に公開された国際公開公報第９０／０８１８７号）；ストレプトキナーゼ；ＴＧＦ−β；ストレプトドルナーゼ；宿主由来のＲＮＡ又はＤＮＡ；ＦＫ５０６；ＲＳ−６１４４３；デオキシスペルグアリン；ラパマイシン；Ｔ細胞レセプター（米国特許第５，１１４，７２１号）；Ｔ細胞レセプター断片（Offnerら、Science 251: 430-432 (1991); 国際公開公報第９０／１１２９４号；及び国際公開公報第９１／０１１３３号）；及び、Ｔ細胞レセプター抗体（欧州特許第３４０，１０９号）、例えばＴ１０Ｂ９などが挙げられる。
【０１３８】
関節リウマチの処置においては、患者を、ＣＤ２０結合抗体（例えばリツキシマブ又はオクレリズマブ又はその変異体）で、以下の薬物のいずれか１つ又は複数と併用して処置できる：ＤＭＡＲＤＳ（疾病修飾性抗リウマチ薬（例えばメトトレキセート））、ＮＳＡＩ又はＮＳＡＩＤ（非ステロイド系抗炎症薬）、免疫抑制剤（例えば、アザチオプリン；ミコフェノレートモフェチル（ＣｅｌｌＣｅｐｔ（登録商標）；Roche））、鎮痛薬、糖質コルチコステロイド、シクロホスファミド、ＨＵＭＩＲＡ（商標）（アダリムマブ；Abbott Laboratories）、ＡＲＡＶＡ（登録商標）（レフルノミド）、ＲＥＭＩＣＡＤＥ（登録商標）（インフリキシマブ；Centocor Inc., Malvern, Pa）、ＥＮＢＲＥＬ（エタネルセプト；Immunex, WA）、ＡＣＴＥＭＲＡ（トシリズマブ；Roch, スイス）、ＣＯＸ−２阻害剤。ＲＡにおいて一般的に使用されるＤＭＡＲＤｓは、ヒドロキシクロロキン、スルファサラジン、メトトレキセート、レフルノミド、エタネルセプト、インフリキシマブ、アザチオプリン、Ｄ−ペニシラミン、金（経口用）、金（筋肉内用）、ミノサイクリン、シクロスポリン、スタフィロコッカスプロテインＡ免疫吸着である。アダリムマブは、ＴＮＦαに結合するヒトモノクローナル抗体である。インフリキシマブは、ＴＮＦαに結合するキメラモノクローナル抗体である。エタネルセプトは、ヒトＩｇＧ１のＦｃ部分に連結させたヒト７５ｋＤ（ｐ７５）腫瘍壊死因子レセプター（ＴＮＦＲ）の細胞外リガンド結合部分からなる、「イムノアドヘシン」融合タンパク質である。アクテムラ（トシリズマブ）は、ヒト化抗ヒトインターロイキン−６（ＩＬ−６）レセプターである。ＲＡの従来の処置については、例えば、"Guidelines for the management of rheumatoid arthritis" Arthritis & Rheumatism 46(2): 328-346 (2002年2月)を参照されたい。具体的な態様において、ＲＡ患者は、メトトレキセート（ＭＴＸ）と併用した本発明のＣＤ２０抗体で処置される。ＭＴＸの例示的な用量は、約７．５〜２５mg／kg／週である。ＭＴＸは、経口投与及び皮下投与することができる。
【０１３９】
強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、及びクローン病の処置においては、患者を、例えばＲｅｍｉｃａｄｅ（登録商標）（インフリキシマブ；Centocor Inc. Malvern, Pa.の製品）、ＥＮＢＲＥＬ（エタネルセプト；Immunex, WA）と併用して、本発明のＣＤ２０結合抗体で処置することができる。
【０１４０】
ＳＬＥの処置には、高用量のコルチコステロイド及び／又はシクロホスファミド（ＨＤＣＣ）とＣＤ２０抗体の併用が含まれる。ＳＬＥ、ＡＡＶ及びＮＭＯ罹患患者は、以下のいずれかと併用した本発明のＣＤ２０結合抗体で処置することができる：コルチコステロイド、ＮＳＡＩＤｓ、鎮痛薬、ＣＯＸ−２阻害剤、糖質コルチコステロイド、従来のＤＭＡＲＤＳ（例えばメトトレキセート、スルファサラジン、ヒドロキシクロロキン、レフルノミド）、生物学的ＤＭＡＲＤＳ、例えば抗Ｂｌｙｓ（例えばベリムマブ）、抗ＩＬ６Ｒ、例えばトシリズマブ；ＣＴＬＡ４−Ｉｇ（アバタセプト）、抗ＣＤ２２（例えばエプラツズマブ）、免疫抑制剤（例えばアザチオプリン；ミコフェノレートモフェチル（ＣｅｌｌＣｅｐｔ（登録商標）；Roche））、及び細胞障害剤（例えばシクロホスファミド）。
【０１４１】
乾癬の処置においては、患者に、ＣＤ２０結合抗体を、局所処置剤、例えば局所ステロイド、アントラリン、カルシポトリエン、クロベタゾール、及びタザロテンと併用して、又はメトトレキセート、レチノイド、シクロスポリン、ＰＵＶＡ、及びＵＶＢ療法と併用して投与することができる。１つの態様において、乾癬患者は、ＣＤ２０結合抗体を用いて、シクロスポリンと一緒に連続して又は同時に処置される。
【０１４２】
毒性を最小限にするために、伝統的な全身療法を、本発明の用量のＣＤ２０結合抗体組成物と共に、ローテーションの、連続の、組合せの、もしくは断続的な処置レジメンで、又はより低い用量での併用レジメンで投与してもよい。
【０１４３】
本発明により使用されるＣＤ２０結合抗体の治療製剤は、所望の純度を有する抗体を、任意の薬学的に許容される担体、賦形剤、又は安定剤（Remington's Pharmaceutical Sciences第１６版、Osol, A.編(1980)）と混合することにより、凍結乾燥製剤又は水溶液の形態での保存用に調製される。許容される担体、賦形剤、又は安定剤は、使用される用量及び濃度においてレシピエントに対して無毒性であり、これには、リン酸、クエン酸、及び他の有機酸などの緩衝剤；抗酸化剤（アスコルビン酸及びメチオニンを含む）；保存剤（例えばオクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド；ヘキサメトニウムクロリド；ベンズアルコニウムクロリド、ベンゼトニウムクロリド；フェノール、ブチル、又はベンジルアルコール；アルキルパラベン、例えばメチル又はプロピルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３−ペンタノール；及びｍ−クレゾール）；低分子量（約１０残基より少ない）ポリペプチド；タンパク質、例えば血清アルブミン、ゼラチン、又は免疫グロブリン；親水性ポリマー、例えばポリビニルピロリドン；アミノ酸、例えばグリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、又はリジン；単糖、二糖、及び他の炭水化物（グルコース、マンノース、又はデキストリンを含む）；キレート剤、例えばＥＤＴＡ；糖、例えばショ糖、マンニトール、トレハロース、又はソルビトール；塩形成対イオン、例えばナトリウム；金属複合体（例えばＺｎ−タンパク質複合体）；及び／又は非イオン性界面活性剤、例えばＴＷＥＥＮ（商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）もしくはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）が挙げられる。
【０１４４】
ＩＩＩ．ＣＤ２０抗体の調製
本発明の製造方法及び製品は、Ｂ細胞表面マーカーに結合する抗体、特にＣＤ２０に結合する抗体を、使用するか又は取り込んでいる。従って、このような抗体の作製法が、ここに記載される。
【０１４５】
抗体の産生に又は抗体のスクリーニングに使用されるＣＤ２０抗原は、例えば、所望のエピトープを含む、可溶性形態のＣＤ２０又はその一部であり得る。代替的に又は追加的に、その細胞表面にＣＤ２０を発現している細胞を使用して、抗体を作製できたり、又は抗体についてスクリーニングできる。抗体を作製するに有用な他の形態のＣＤ２０は、当業者には明らかであろう。
【０１４６】
以下の記載は、本発明に従って使用される抗体を作製するための技術例である。
【０１４７】
（ｉ）ポリクローナル抗体
ポリクローナル抗体は、関連する抗原及びアジュバントの複数回の皮下（ｓ．ｃ．）又は腹腔内（ｉ．ｐ．）注入によって動物において惹起される。関連する抗原を、免疫化しようとする種において免疫原性であるタンパク質（例えば、キーホールリンペットヘモシアニン、血清アルブミン、ウシチログロブリン、又はダイズトリプシン阻害剤）に、二官能性の薬剤又は誘導体化剤、例えば、マレイミドベンゾイルスルホスクシンイミドエステル（システイン残基を介したコンジュゲーション）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（リジン残基を介して）、グルタルアルデヒド、無水コハク酸、ＳＯＣｌ２、又はＲ１Ｎ＝Ｃ＝ＮＲ（式中、Ｒ及びＲ１は、異なるアルキル基である）を使用してコンジュゲーションすることが有用であり得る。
【０１４８】
例えば、１００μg又は５μgのタンパク質又はコンジュゲート（それぞれウサギ又はマウスに対して）と、３容量のフロイント完全アジュバントとを混合し、その溶液を複数部位の皮内に注入することによって、抗原、免疫原性コンジュゲート、又は誘導体に対して動物を免疫化する。１カ月後、その動物に、フロイント完全アジュバント中の最初の量の１／５〜１／１０のペプチド又はコンジュゲートを、複数部位に皮下注入することによって追加免疫する。７〜１４日後、その動物から採血し、その血清を抗体力価についてアッセイする。力価がプラトーに達するまで、動物を追加免疫する。好ましくは、その動物を、同じ抗原であるが、異なるタンパク質とコンジュゲーションした、及び／又は異なる架橋試薬を介してコンジュゲーションしたコンジュゲートで追加免疫する。コンジュゲートは、タンパク質融合体として組換え細胞培養液中で作製してもよい。また、免疫応答を増強するために、ミョウバンなどの凝集剤が適切に使用される。
【０１４９】
（ｉｉ）モノクローナル抗体
モノクローナル抗体は、実質的に均一な抗体の集団から得られる。すなわち、その集団に含まれる個々の抗体は、同一であり、そして／又は同じエピトープに結合するが、ただし、モノクローナル抗体の作製中に生じ得る変異体は除き、そのような変異体は一般に少量で存在している。従って、修飾語句「モノクローナル」は、別々の抗体の混合物又はポリクローナル抗体ではない抗体の特徴のことを示す。
【０１５０】
例えば、モノクローナル抗体は、Kohlerら、Nature, 256: 495(1975)に初めて記載されたハイブリドーマ法を使用して作製してもよいし、組換えＤＮＡ法（米国特許第４，８１６，５６７号）によって作製してもよい。
【０１５１】
ハイブリドーマ法では、マウス又は他の適切な宿主動物（ハムスターなど）を本明細書で前記されているとおりに免疫化することにより、免疫に使用したタンパク質に特異的に結合する抗体を産生するか又は産生することができるリンパ球を惹起する。又は、リンパ球をインビトロにおいて免疫化してもよい。次いで、ポリエチレングリコールなどの適切な融合剤を用いて、リンパ球をミエローマ細胞と融合することにより、ハイブリドーマ細胞が形成される（Goding、Monoclonal Antibodies: Principles and Practice, pp.59-103 (Academic Press, 1986)）。
【０１５２】
このように調製されたハイブリドーマ細胞を、融合していない親ミエローマ細胞の増殖又は生存を阻害する１つ又は複数の物質を好ましくは含む、適切な培養培地中に播種し増殖させる。例えば、親ミエローマ細胞に酵素ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲＴ又はＨＰＲＴ）が欠失している場合、ハイブリドーマ用の培養培地には、典型的には、ヒポキサンチン、アミノプテリン、及びチミジン（ＨＡＴ培地）（これらの物質はＨＧＰＲＴ欠損細胞の増殖を妨げる）が含まれる。
【０１５３】
好ましいミエローマ細胞は、効率的に融合し、選択された抗体産生細胞による安定した高レベルの抗体産生を支持し、ＨＡＴ培地などの培地に感受性である細胞である。これらの中でもとりわけ好ましいミエローマ細胞株は、マウスミエローマ株、例えば、Salk Institute Cell Distribution Center、San Diego, California USAから入手可能なＭＯＰＣ−２１及びＭＰＣ−１１マウス腫瘍に由来するもの、並びに、American Type Culture Collection、Rockville, Maryland USAから入手可能なＳＰ−２又はＸ６３−Ａｇ８−６５３細胞である。ヒトミエローマ及びマウス−ヒトヘテロミエローマ細胞株も、ヒトモノクローナル抗体の作製において報告されている（Kozbor, J. Immunol., 133: 3001(1984); Brodeurら、Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications, pp. 51-63 (Marcel Dekker, Inc., New York, 1987)）。
【０１５４】
ハイブリドーマ細胞を増殖させている培養培地を、抗原に対して指向されるモノクローナル抗体の産生についてアッセイする。好ましくは、ハイブリドーマ細胞により産生されるモノクローナル抗体の結合特異性は、免疫沈降法により、又はインビトロにおける結合アッセイ、例えばラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）もしくは酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）により決定される。
【０１５５】
モノクローナル抗体の結合親和性は、例えば、Munsonら、Anal. Biochem., 107: 220 (1980)のScatchard解析により決定することができる。
【０１５６】
所望の特異性、親和性、及び／又は活性を有する抗体を産生するハイブリドーマ細胞が同定された後、そのクローンを限界希釈法によりサブクローニングし、そして標準的な方法（Goding、Monoclonal Antibodies: Principles and Practice, pp.59-103 (Academic Press, 1986)）によって増殖させ得る。この目的に適した培養培地には、例えば、Ｄ−ＭＥＮ又はＲＰＭＩ−１６４０培地が挙げられる。更に、ハイブリドーマ細胞を、動物における腹水腫瘍としてインビボにおいて増殖させてもよい。
【０１５７】
サブクローンによって分泌されたモノクローナル抗体は、従来の免疫グロブリン精製手順（例えば、プロテインＡ−ＳＥＰＨＡＲＯＳＥ（商標）、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、又はアフィニティークロマトグラフィー）により、培養培地、腹水、又は血清から適切に分離される。
【０１５８】
モノクローナル抗体をコードするＤＮＡは、従来の手順を使用して（例えば、マウス抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合することができるオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）、容易に単離され、シークエンスされる。ハイブリドーマ細胞は、そのようなＤＮＡの好ましい起源として働く。そのＤＮＡは一旦単離されると、発現ベクター内に組み込まれ、次いで、そのベクターは、免疫グロブリンタンパク質を別途産生しない宿主細胞（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ細胞、サルＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ)細胞、又はミエローマ細胞）にトランスフェクションされることにより、組換え宿主細胞においてモノクローナル抗体の合成が行われ得る。抗体をコードするＤＮＡの細菌中での組換え発現に関する概説文献としては、Skerraら、Curr. Opinion in Immunol., 5: 256-262 (1993)及びPluckthun、Immunol. Revs., 130: 151-188 (1992)が挙げられる。
【０１５９】
更なる態様において、抗体又は抗体断片は、McCaffertyら、Nature, 348: 552-554 (1990)に記載の技術を使用して作製された抗体ファージライブラリーから単離することができる。Clacksonら、Nature, 352: 624-628 (1991)及びMarksら、J. Mol. Biol., 222: 581-597 (1991)では、ファージライブラリーを使用した、それぞれマウス及びヒトの抗体の単離について記載されている。その後の刊行物では、非常に大きなファージライブラリーを構築するための戦略としての、チェインシャフリング（Marksら、Bio/Technology, 10: 779-783 (1992)）並びにコンビナトリアル感染及びインビボでの組換え（Waterhouseら、Nuc. Acids. Res., 21: 2265-2266 (1993)）による、高親和性（ｎＭ範囲）のヒト抗体の作製が記載されている。このように、これらの技術は、モノクローナル抗体を単離するための伝統的なモノクローナル抗体ハイブリドーマ技術に対する実行可能な代替手段である。
【０１６０】
例えば、相同的なマウス配列の代わりにヒト重鎖及び軽鎖定常ドメインのコード配列で置換することによって（米国特許第４，８１６，５６７号；Morrisonら、Proc. Natl Acad. Sci. USA, 81: 6851 (1984)）、又は、免疫グロブリンのコード配列に、非免疫グロブリンポリペプチドのコード配列の全部もしくは一部を共有結合することによって、ＤＮＡを改変してもよい。
【０１６１】
典型的には、そのような非免疫グロブリンポリペプチドを、抗体の定常ドメインと置換するか、又は、抗体の１つの抗原結合部位の可変ドメインと置換することにより、ある抗原に特異性を有する１つの抗原結合部位と、異なる抗原に対する特異性を有する別の抗原結合部位をと含む、キメラ二価抗体が作製される。
【０１６２】
更に、ＦｃγＲに対する親和性が高い可変Ｆｃ領域を含む抗体は、例えば、米国公開特許第２００５／００３７０００号及び国際公開公報第２００４／６３３５１号（Macrogenics, Inc.、STAVENHAGENら）に示されるように、効力の増強されたエフェクター細胞機能が望まれる疾病（例えば自己免疫疾病）を処置するために有用である。
【０１６３】
（ｉｉｉ）ヒト化抗体
非ヒト抗体をヒト化するための方法は、当技術分野において記載されている。好ましくは、ヒト化抗体は、非ヒトである起源からそれに導入された１つ又は複数のアミノ残基を有する。これらの非ヒトアミノ酸残基は、しばしば「移入」残基と呼ばれ、典型的には「移入」可変ドメインから得られる。ヒト化は、本質的には、ヒト抗体の対応する配列の超可変領域配列を置換することによる、Winter及び共同研究者の方法（Jonesら、Nature, 321: 522-525 (1986); Riechmannら、Nature, 332: 323-327 (1988); Verhoeyenら、Science, 239: 1534-1536 (1988)）に従って行うことができる。従って、このような「ヒト化」抗体は、キメラ抗体（米国特許第４，８１６，５６７号）であり、ここで、インタクトなヒト可変ドメインより実質的に少ない部分が、非ヒト種由来の対応する配列によって置換されている。実際には、ヒト化抗体は、典型的には、いくつかの超可変領域残基及びおそらくいくつかのＦＲ残基が、げっ歯類抗体の類似部位由来の残基によって置換されているヒト抗体である。
【０１６４】
ヒト化抗体を作製する際に使用するヒト可変ドメイン（軽鎖及び重鎖の両方）の選択は、抗原性を低減させるために非常に重要である。いわゆる「ベストフィット（best-fit）」法によれば、げっ歯類抗体の可変ドメイン配列を、公知のヒト可変ドメイン配列の全ライブラリーに対してスクリーニングする。次いで、げっ歯類の配列に最も近いヒト配列を、ヒト化抗体のヒトフレームワーク領域（ＦＲ）として認める（Simsら、J. Immunol., 151: 2296 (1993); Chothiaら、J. Mol. Biol., 196: 901 (1987)）。別の方法は、軽鎖又は重鎖可変領域の特定のサブグループの全てのヒト抗体のコンセンサス配列から得られた特定のフレームワーク領域を使用する。同じフレームワークを、いくつかの異なるヒト化抗体に対して使用してもよい（Carterら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89: 4285 (1992); Prestaら、J. Immunol., 151: 2623 (1993)）。
【０１６５】
抗原に対する高い親和性及び他の好ましい生物学的特性を保持したままで、抗体をヒト化することが更に重要である。この目標を達成するために、好ましい方法によれば、ヒト化抗体は、親配列及びヒト化配列の３次元モデルを使用した、親配列及び様々な概念的なヒト化産物の解析方法によって調製される。３次元免疫グロブリンモデルは、市販されており、当業者によく知られている。選択された免疫グロブリン配列候補の可能性の高い３次元コンフォメーション構造を図示及び表示するコンピュータープログラムが利用可能である。これらの表示を探索することにより、免疫グロブリン配列候補が機能する際の残基のもっともらしい役割の解析、すなわち、免疫グロブリン候補がその抗原に結合する能力に影響を及ぼす残基の解析が可能となる。このようにして、レシピエント及び移入配列からＦＲ残基が、選択されて結合され得、所望の抗体の特徴（例えば、標的抗原に対する高親和性）が達成される。一般に、抗原結合に影響を及ぼす際に、超可変領域残基は、直接的かつ最も実質的に関与している。
【０１６６】
（ｉｖ）ヒト抗体
ヒト化の代替手段として、ヒト抗体を作製してもよい。例えば、免疫化の際に、内因性の免疫グロブリンを産生することなくヒト抗体の全レパートリーを産生することができる、トランスジェニック動物（例えばマウス）を作製することが現在可能である。例えば、キメラマウス及び生殖細胞系突然変異マウスにおける抗体重鎖連結領域（ＪＨ）遺伝子のホモ接合型欠失により、内因性抗体の産生が完全に阻害されることが記載されている。このような生殖細胞系突然変異マウスにヒト生殖細胞系免疫グロブリン遺伝子アレイを移入することにより、抗原チャレンジの際にヒト抗体が産生されることになる。例えば、Jakobovitsら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90: 2551 (1993); JakobovitsらNature, 362: 255-258 (1993); Bruggermannら、Year in Immuno., 7: 33 (1993); 及び米国特許第５，５９１，６６９号、第５，５８９，３６９号及び第５，５４５，８０７号を参照されたい。
【０１６７】
又は、ファージディスプレイ技術（McCaffertyら、Nature 348: 552-553 (1990))）を使用することにより、免疫化されていないドナー由来の免疫グロブリン可変（Ｖ）ドメイン遺伝子レパートリーからインビトロにおいてヒト抗体及び抗体断片を作製することができる。この技術によれば、抗体Ｖドメイン遺伝子が、繊維状バクテリオファージ（例えばＭ１３又はｆｄ）の多数派又は少数派のコートタンパク質遺伝子のいずれかにインフレームでクローニングされ、そして、ファージ粒子の表面上に機能的な抗体断片として提示される。その繊維状粒子が、ファージゲノムの一本鎖ＤＮＡコピーを含むので、抗体の機能的特性に基づいた選択により、それらの特性を示す抗体をコードする遺伝子の選択もなされる。このようにして、ファージは、Ｂ細胞の特性のいくつかを模倣する。ファージディスプレイは、様々な様式で行うことができる；それらの概説については、例えば、Johnsonら、Current Opinion in Structural Biology 3: 564-571 (1993)を参照されたい。Ｖ遺伝子セグメントのいくつかの起源が、ファージディスプレイに使用され得る。Clacksonら、Nature, 352: 624-628 (1991)では、免疫化されたマウスの脾臓由来のＶ遺伝子の小さいランダムなコンビナトリアルライブラリーから抗オキサゾロン抗体の多様なアレイが単離された。免疫化されていないヒトドナー由来のＶ遺伝子レパートリーを作製し得、そして、抗原（自己抗原を含む）の多様なアレイに対する抗体を、Marksら、J. Mol. Biol. 222: 581-597 (1991)、又はGriffithら、EMBO J. 12: 725-734 (1993)によって記載された技術に本質的に従って単離することができる。また、米国特許第５，５６５，３３２号及び第５，５７３，９０５号を参照されたい。
【０１６８】
ヒト抗体はまた、インビトロにおいて活性化Ｂ細胞によっても作製され得る（米国特許第５，５６７，６１０号及び第５，２２９，２７５号参照）。
【０１６９】
（ｖ）抗体断片
抗体断片を作製するための様々な技術が開発されてきた。伝統的には、これらの断片は、インタクトな抗体のタンパク質分解性消化から得られていた（例えば、Morimotoら、Journal of Biochemical and Biophysical Methods 24: 107-117 (1992)及びBrennanら、Science, 229: 81 (1985)を参照）。しかし、現在では、これらの断片は、組換え宿主細胞により直接作製することができる。例えば、抗体断片は、前記で考察された抗体ファージライブラリーから単離することができる。又は、Ｆａｂ’−ＳＨ断片を、Ｅ．ｃｏｌｉから直接回収して、化学的に結合することによりＦ（ａｂ’）２断片を形成することができる（Carterら、Bio/Technology 10: 163-167 (1992)）。別のアプローチによれば、Ｆ（ａｂ’）２断片は、組換え宿主細胞培養液から直接単離することができる。抗体断片を作製するための他の技術は、当業者に明らかであろう。他の態様において、選択された抗体は、一本鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ）である。国際公開公報第９３／１６１８５号；米国特許第５，５７１，８９４号；及び米国特許第５，５８７，４５８号を参照されたい。抗体断片はまた、例えば米国特許第５，６４１，８７０号に記載されているような、例えば「鎖状抗体」であってもよい。このような鎖状抗体断片は、単一特異性又は二重特異性であり得る。
【０１７０】
（ｖｉ）二重特異性抗体
二重特異性抗体は、少なくとも２つの異なるエピトープに対して結合特異性を有する抗体である。例示的な二重特異性抗体は、ＣＤ２０抗原の２つの異なるエピトープに結合し得る。他のこのような抗体は、ＣＤ２０に結合し得、更に、第２のＢ細胞表面マーカーにも結合し得る。又は、抗ＣＤ２０結合腕は、細胞防御メカニズムをＢ細胞に集中させるために、白血球上のトリガー分子に結合する腕、例えばＴ細胞レセプター分子（例えば、ＣＤ２又はＣＤ３）又はＩｇＧに対するＦｃレセプター（ＦｃγＲ）、例えばＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩ（ＣＤ３２）及びＦｃγＲＩＩＩ（ＣＤ１６）と合体させ得る。二重特異性抗体を使用することにより、特定の薬剤をＢ細胞に集中させ得る。これらの抗体は、ＣＤ２０結合腕と、薬剤（例えばメトトレキセート）に結合する腕とを有する。二重特異性抗体は、完全長抗体又は抗体断片（例えばＦ（ａｂ’）２二重特異性抗体）として調製することができる。
【０１７１】
二重特異性抗体の作製法は、当技術分野において公知である。伝統的な完全長二重特異性抗体の作製は、２つの免疫グロブリン重鎖−軽鎖対の同時発現に基づくものであり、その２本の鎖は、異なる特異性を有する（Ｍｉｌｌｓｔｅｉｎら、Ｎａｔｕｒｅ、３０５：５３７−５３９（１９８３））。免疫グロブリン重鎖及び軽鎖の無作為な組合せであるので、これらのハイブリドーマ（クアドローマ）は、１０個の異なる抗体分子の可能性ある混合物（そのうち１つだけが正しい二重特異性構造を有する）を産生する。その正しい分子の精製は、通常、アフィニティークロマトグラフィーステップにより行われるが、これは、煩雑であり、生成物の収率は低い。類似の手順が、国際公開公報第９３／０８８２９号、及びTrauneckerら、EMBO J., 10: 3655-3659 (1991)において開示されている。
【０１７２】
異なるアプローチによると、所望の結合特異性を有する抗体可変ドメイン（抗体−抗原結合部位）が、免疫グロブリン定常ドメイン配列に融合される。この融合は、好ましくはヒンジ、ＣＨ２、及びＣＨ３領域の少なくとも一部を含む、免疫グロブリン重鎖定常ドメインを用いて行われる。軽鎖結合に必要な部位を含んでいる第１の重鎖定常領域（ＣＨ１）を有することが好ましく、これはその融合物の少なくとも１つに存在する。免疫グロブリン重鎖融合物及び所望であれば免疫グロブリン軽鎖をコードするＤＮＡは、別個の発現ベクターに挿入され、適切な宿主生物中に同時にトランスフェクトされる。これにより、その構築物において使用される３種のポリペプチド鎖の比が等しくないことによって最適な収率がもたらされる態様において、その３種のポリペプチド断片の相互の比率を調整することが非常に柔軟に行われる。しかしながら、少なくとも２種のポリペプチド鎖の等しい比での発現により高い収率がもたらされるとき、又は、その比が特に重要ではないとき、１つの発現ベクターに２種又は３種全てのポリペプチド鎖に対するコード配列を挿入することが可能である。
【０１７３】
このアプローチの好ましい態様において、二重特異性抗体は、一方の腕における第１の結合特異性を有するハイブリッド免疫グロブリン重鎖、及び、他方の腕におけるハイブリッド免疫グロブリン重鎖−軽鎖対（第２の結合特異性をもたらす）から構成される。この非対称構造により、不必要な免疫グロブリン鎖組合せから所望の二重特異性化合物を分離することが容易になることが見出された。なぜなら、二重特異性分子の半分の１本のみに免疫グロブリン軽鎖が存在することにより、分離が容易となるからである。このアプローチは、国際特許公報第９４／０４６９０号に開示されている。二重特異性抗体を作製するための更なる詳細については、例えば、Sureshら、Methods in Enzymology, 121: 210 (1986)を参照されたい。
【０１７４】
米国特許第５，７３１，１６８号に記載されている別のアプローチによれば、一対の抗体分子間の界面を、遺伝子操作することにより、組換え細胞培養液から回収されるヘテロ二量体の比率を最大にすることができる。好ましい界面は、抗体定常ドメインのＣＨ３ドメインの少なくとも一部を含む。この方法では、第１の抗体分子の界面由来の１つ又は複数の小さいアミノ酸側鎖が、より大きな側鎖（例えばチロシン又はトリプトファン）により置き換えられている。大きいアミノ酸側鎖をより小さい側鎖（例えばアラニン又はトレオニン）で置換することによって、第２抗体分子の界面に、その大きい側鎖と同一又は類似のサイズの代償的な「空洞」が作製される。これにより、ホモ二量体などの他の不必要な最終産物よりもヘテロ二量体の収量を増大させるメカニズムがもたらされる。
【０１７５】
二重特異性抗体には、架橋抗体又は「ヘテロコンジュゲート」抗体が挙げられる。例えば、ヘテロコンジュゲートにおける抗体のうちの一方は、アビジンに結合させ得、他方はビオチンに結合させ得る。このような抗体は、例えば、免疫系細胞を、不必要な細胞にターゲティングするため（米国特許第４，６７６，９８０号）、ＨＩＶ感染の処置のために（国際公開公報第９１／００３６０号、国際公開公報第９２／２００３７３号、及び欧州特許第０３０８９号）提案されている。ヘテロコンジュゲート抗体は、任意の簡便な架橋法を使用して作製され得る。適切な架橋剤は当技術分野において周知であり、多くの架橋技術と共に米国特許第４，６７６，９８０号において開示されている。
【０１７６】
抗体断片から二重特異性抗体を作製するための技術もまた文献に記載されている。例えば、二重特異性抗体は、化学結合を使用して調製することができる。Brennanら、Science, 229: 81 (1985)では、インタクトな抗体をタンパク質分解的に切断してＦ（ａｂ’）２断片を作製する手順が記載されている。これらの断片を、ジチオール錯体形成剤の亜ヒ酸ナトリウムの存在下で還元することにより、隣接するジオールを安定化し、分子内ジスルフィド形成を妨げる。次いで、生成されたＦａｂ’断片をチオニトロベンゾエート（ＴＮＢ）誘導体へと変換する。次いで、Ｆａｂ’−ＴＮＢ誘導体の１つを、メルカプトエチルアミンを用いて還元することによりＦａｂ’−チオールに再変換し、等モル量の他のＦａｂ’−ＴＮＢ誘導体と混合することにより二重特異性抗体が形成される。この生成された二重特異性抗体は、酵素を選択的に固定化するための薬剤として使用され得る。
【０１７７】
組換え細胞培養液から直接的に二重特異性抗体断片を作製し、単離するための様々な技術もまた記載されている。例えば、二重特異性抗体は、ロイシンジッパーを使用して作製される。Kostelnyら、J. Immunol., 148(5): 1547-1553 (1992)。Ｆｏｓ及びＪｕｎタンパク質由来のロイシンジッパーペプチドを、遺伝子融合によって２つの異なる抗体のＦａｂ’部分に連結した。抗体ホモダイマーをヒンジ領域において還元することにより、モノマーが形成され、次いで、再度酸化されることにより、抗体ヘテロ二量体が形成された。この方法はまた抗体ホモ二量体の作製にも使用できる。Hollingerら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90: 6444-6448 (1993)により記載された「ダイアボディ」技術により、二重特異性抗体断片を作製するための代替的なメカニズムがもたらされた。その断片は、同一鎖上の２つのドメイン間で対を成すためには短すぎるリンカーによって軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に接続された重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む。従って、１つの断片のＶＨドメイン及びＶＬドメインは、別の断片の相補的なＶＬ及びＶＨドメインと対を成さざるをえず、これにより２つの抗原結合部位が形成される。一本鎖Ｆｖ（ｓＦｖ）二量体を使用することによって二重特異性抗体断片を作製するための別の戦略も報告されている。Gruberら、J. Immunol., 152: 5368 (1994)を参照されたい。
【０１７８】
２より多い結合価を有する抗体も考えられる。例えば、三重特異性抗体を調製することができる。Tuttら、J. Immunol. 147: 60 (1991)。
【０１７９】
（ｖｉｉ）抗体のコンジュゲート及び他の改変
抗体の改変が、本明細書において考えられる。従って、１つの態様において、例えば、抗体の半減期もしくは安定性を増加するために、又は別途抗体の薬物動態を改善するために、抗体を別の分子にコンジュゲートさせてもよい。例えば、抗体は、種々の非タンパク質性ポリマー（例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ)、ポリプロピレングリコール、ポリオキシアルキレン、又はポリエチレングリコールとポリプロピレングリコールの共重合体）の１つと連結され得る。１つ又は複数のＰＥＧ分子と連結された抗体断片（例えばＦａｂ’）は、本発明の特に好ましい態様である。
【０１８０】
本明細書において開示される抗体はまたリポソームとして製剤化され得る。抗体を含むリポソームは、EpsteinらProc. Natl. Acad. Sci. USA, 82: 3688 (1985); Hwangら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 77: 4030 (1980); 米国特許第４，４８５，０４５号及び第４，５４４，５４５号；及び１９９７年１０月２３日に公開された国際公開公報第９７／３８７３１号に記載されているような、当技術分野において公知の方法により調製される。循環時間が延長されたリポソームが、米国特許第５，０１３，５５６号に開示されている。
【０１８１】
特に有用なリポソームは、ホスファチジルコリン、コレステロール、及びＰＥＧ誘導体化ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥＧ−ＧＥ）を含む脂質組成物を用いた逆相蒸発法によって作製することができる。リポソームは、規定の孔サイズのフィルターを通して押し出すことにより、所望の直径を有したリポソームが得られる。本発明の抗体のＦａｂ’断片は、Martinら、J. Biol. Chem. 257: 286-288 (1982)に記載されているようにジスルフィド交換反応を介してリポソームにコンジュゲートさせることができる。
【０１８２】
本明細書において記載されるタンパク質又はペプチド抗体のアミノ酸改変が考えられる。例えば、抗体の結合親和性及び／又は他の生物学的特性を改善することが望ましくあり得る。抗体のアミノ酸配列変異体は、適切なヌクレオチド変化を抗体核酸に導入することにより、又はペプチド合成によって調製される。そのような改変には、例えば、抗体のアミノ酸配列内の残基からの欠失、及び／又は抗体のアミノ酸残基への挿入、及び／又は抗体のアミノ酸残基の置換が挙げられる。欠失、挿入、及び置換の任意の組合せがなされることにより、最終的な構築物に至るが、ただし、その最終的な構築物は、所望の特徴を有するものである。そのアミノ酸変化はまた、抗体の翻訳後の方法を変化させ得る（例えば、グリコシル化部位の数又は位置を変化させ得る）。
【０１８３】
突然変異誘発に好ましい位置である抗体の特定の残基又は領域を同定するのに有用な方法は、Cunningham及びWells、Science, 244: 1081-1085 (1989)により記載されているように「アラニンスキャニング突然変異誘発」と呼ばれている。ここでは、ターゲット残基の１残基又は１群の残基が同定され（例えば、荷電残基、例えばａｒｇ、ａｓｐ、ｈｉｓ、ｌｙｓ、及びｇｌｕ）、アミノ酸と抗原の相互作用に影響を及ぼすように、中性又は負に荷電したアミノ酸（最も好ましくはアラニン又はポリアラニン）により置換される。次いで、その置換部位において又は置換部位のために更なる変異又は他の変異を導入することによって、置換に対して機能的感受性を示すそれらのアミノ酸の位置を絞る。このようにして、アミノ酸配列変異を導入するための部位を予め決定するが、突然変異の性質自体は予め決定する必要はない。例えば、所定の部位における突然変異の成績を解析するために、標的コドン又は領域においてアラニンスキャニング又は無作為突然変異を行ない、発現される抗体変異体を所望の活性についてスクリーニングする。
【０１８４】
アミノ酸配列挿入には、１残基からポリペプチド（１００以上の残基を含む）までの範囲の長さの、アミノ末端及び／又はカルボキシル末端への融合、並びに、１個又は複数個のアミノ酸残基の配列内への挿入が含まれる。末端挿入の例としては、Ｎ末端にメチオニル残基を有する抗体、又は、ポリペプチドもしくはポリマーに融合された抗体が挙げられる。抗体分子の他の挿入変異体としては、抗体のＮ末端もしくはＣ末端への酵素の融合、又は、抗体の血清半減期を増大させるポリペプチドへの融合が含まれる。
【０１８５】
別のタイプの変異体は、アミノ酸置換変異体である。これらの変異体は、抗体分子中に異なる残基によって置換された少なくとも１つのアミノ酸残基を有する。抗体の置換による突然変異誘発のための最も関心の高い部位としては、超可変領域が挙げられるが、ＦＲ変化もまた考えられる。保存的置換を、以下の表において「好ましい置換」という表題で示している。このような置換により生物学的活性の変化がもたらされる場合、以下の表中で「例示的な置換」と称されるか、又はアミノ酸クラスを参照して更に下記されているような、更なる実質的な変化が導入され得、そしてその生成物がスクリーニングされ得る。
【０１８６】
【表１７】
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【０１８７】
抗体の生物学的特性における実質的な改変は、（ａ）置換領域におけるポリペプチド骨格の構造、例えばシート又はヘリックスのコンフォメーション、（ｂ）ターゲット部位における分子の電荷もしくは疎水性、又は（ｃ）側鎖の容積、の維持に対する効果が有意に異なる置換を選択することによって達成される。アミノ酸は、その側鎖の特性における類似性によって分類され得る（A. L. Lehninger, in Biochemistry, second ed., pp. 73-75, Worth Publishers, New York (1975)）：
（１）非極性：Ａｌａ（Ａ）、Ｖａｌ（Ｖ）、Ｌｅｕ（Ｌ）、Ｉｌｅ（Ｉ）、Ｐｒｏ（Ｐ）、Ｐｈｅ（Ｆ）、Ｔｒｐ（Ｗ）、Ｍｅｔ（Ｍ）
（２）非荷電極性：Ｇｌｙ（Ｇ）、Ｓｅｒ（Ｓ）、Ｔｈｒ（Ｔ）、Ｃｙｓ（Ｃ）、Ｔｙｒ（Ｙ）、Ａｓｎ（Ｎ）、Ｇｌｎ（Ｑ）
（３）酸性：Ａｓｐ（Ｄ）、Ｇｌｕ（Ｅ）
（４）塩基性：Ｌｙｓ（Ｋ）、Ａｒｇ（Ｒ）、Ｈｉｓ（Ｈ）。
【０１８８】
又は、天然に存在する残基は、コンセンサスの側鎖の特性に基づいて分類され得る：
（１）疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
（２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
（４）塩基性；Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
（５）鎖配向に影響を及ぼす残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
【０１８９】
非保存的置換は、これらのクラスの中の１つのメンバーを別のクラスのメンバーと交換することを伴う。
【０１９０】
抗体の適正なコンフォメーションの維持に関与していない任意のシステイン残基もまた、分子の酸化的な安定性を改善するため、及び異常な架橋を妨げるために、一般にセリンで置換され得る。逆に、抗体の安定性を改善するためにシステイン結合を抗体に加えてもよい（特に、抗体がＦｖ断片などの抗体断片である場合）。
【０１９１】
特に好ましいタイプの置換変異体は、親抗体の１つ又は複数の超可変領域残基の置換を含む。一般に、更なる発展のために選択された変異体は、それらを生成する親抗体と比べて生物学的特性が改善されている。このような置換変異体を作製する簡便な方法は、ファージディスプレイを使用した親和性成熟である。簡潔には、いくつかの超可変領域部位（例えば６〜７部位）を突然変異させることにより、各部位において可能な全てのアミノ置換を行なう。このようにして作製された抗体変異体を、各粒子内にパッケージングされたＭ１３の遺伝子ＩＩＩ産物への融合物として繊維状ファージ粒子から一価の様式で提示する。次いで、ファージディスプレイされた変異体を、本明細書において開示されるようにその生物学的活性（例えば結合親和性）についてスクリーニングする。改変のための超可変領域の候補部位を同定するために、アラニンスキャニング突然変異誘発を行なうことにより、抗原結合に有意に寄与している超可変領域残基を同定することができる。代替的に又は追加的に、抗体と抗原の間の接触点を同定するために、抗原−抗体複合体の結晶構造を解析することが有益であり得る。このような接触残基及び隣接残基は、本明細書において詳述した技術による置換の候補である。一旦そのような変異体が作製されれば、変異体のパネルを、本明細書で記載されるようなスクリーニングにかけ、１つ又は複数の関連アッセイにおいて優れた特性を有する抗体が、更なる発展のために選択され得る。
【０１９２】
別のタイプの抗体のアミノ酸変異体では、抗体の元のグリコシル化パターンが変化している。このような変化としては、抗体中に見られる１つもしくは複数の炭水化物部分の欠失、及び／又は抗体に存在しない１つもしくは複数のグリコシル化部位の付加が挙げられる。
【０１９３】
ポリペプチドのグリコシル化は、典型的には、Ｎ結合又はＯ結合のいずれかである。Ｎ結合とは、アスパラギン残基の側鎖への炭水化物部分の付着のことをいう。トリペプチド配列であるアスパラギン−Ｘ−セリン及びアスパラギン−Ｘ−トレオニン（ここで、Ｘは、プロリン以外の任意のアミノ酸である）は、アスパラギン側鎖への炭水化物部分の酵素的な付着のための認識配列である。従って、ポリペプチド中にこれらのトリペプチド配列のいずれかが存在することにより、グリコシル化可能部位が作製される。Ｏ結合グリコシル化とは、ヒドロキシアミノ酸（最も一般的にはセリンもしくはトレオニンであるが、５−ヒドロキシプロリン又は５−ヒドロキシリジンも使用され得る）への、糖Ｎ−アセチルガラクトサミン、ガラクトース、又はキシロースのうちの１つの付着のことをいう。
【０１９４】
抗体へのグリコシル化部位の付加は、上記の１つ又は複数のトリペプチド配列を含むように、アミノ酸配列を変化させることにより簡便に達成される（Ｎ−結合グリコシル化部位の場合）。元の抗体の配列に、１つ又は複数のセリン又はトレオニン残基を付加するか、あるいはそれによって置換することにより変化を行なってもよい（Ｏ結合グリコシル化部位の場合）。
【０１９５】
抗体がＦｃ領域を含む場合、それに付着した炭水化物を変化させ得る。例えば、抗体のＦｃ領域に付着したフコースを欠失した成熟炭水化物構造を有する抗体は、米国特許出願第２００３／０１５７１０８号（Presta, L）に記載されている。また、米国公開特許第２００４／００９３６２１号（協和発酵工業株式会社）も参照されたい。抗体のＦｃ領域に付着している炭水化物中に分岐Ｎ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）を有する抗体は、国際公開公報第２００３／０１１８７８号、Jean-Mairetら、及び米国特許第６，６０２，６８４号、Umanaらにおいて言及されている。抗体のＦｃ領域に付着しているオリゴ糖中に少なくとも１つのガラクトース残基を有する抗体は、国際公開公報第１９９７／３００８７号、Patelらにおいて報告されている。また、そのＦｃ領域に付着している炭水化物を変化させた抗体に関する、国際公開公報第１９９８／５８９６４号（Raju, S.）及び国際公開公報第１９９９／２２７６４号（Raju, S.）も参照されたい。また、改変グリコシル化が行なわれた抗原結合分子に関する、米国公開特許第２００５／０１２３５４６号（Umanaら）も参照されたい。
【０１９６】
本明細書中の好ましいグリコシル化変異体は、Ｆｃ領域に付着した炭水化物構造がフコースを欠いているＦｃ領域を含む。このような変異体は、ＡＤＣＣ機能が改善されている。場合により、Ｆｃ領域は更に、ＡＤＣＣを更に改善する、Ｆｃ領域中の１つ又は複数のアミノ酸置換（例えば、Ｆｃ領域の２９８位、３３３位、及び／又は３３４位（残基のＥｕナンバリング））を含む。「脱フコシル化」又は「フコース欠損」抗体に関する刊行物の例としては、米国公開特許第２００３／０１５７１０８号；国際公開公報第２０００／６１７３９号、国際公開公報第２００１／２９２４６号；米国公開特許第２００３／０１１５６１４号；米国公開特許第２００２／０１６４３２８号；米国公開特許第２００４／００９３６２１号；米国公開特許第２００４／０１３２１４０号；米国公開特許第２００４／０１１０７０４号；米国公開特許第２００４／０１１０２８２号；米国公開特許第２００４／０１０９８６５号；国際公開公報第２００３／０８５１１９号；国際公開公報第２００３／０８４５７０号；国際公開公報第２００５／０３５５８６号；国際公開公報第２００５／０３５７７８号；国際公開公報第２００５／０５３７４２号；Okazakiら、J. Mol. Biol. 336: 1239-1249 (2004)）；Yamane-Ohnukiら、Biotech. Bioeng. 87: 614 (2004)が挙げられる。脱フコシル化された抗体を産生する細胞株の例としては、タンパク質フコシル化が欠損したＬｅｃ１３ＣＨＯ細胞（Ripkaら、Arch. Biochem. Biophys. 249: 533-545 (1986); 米国特許出願第２００３／０１５７１０８ Ａ１号、Presta, L；及び国際公開公報第２００４／０５６３１２ Ａ１号、Adamsら、特に実施例１１）、及びノックアウト細胞株、例えばα−１，６−フコシルトランスフェラーゼ遺伝子、ＦＵＴ８ノックアウトＣＨＯ細胞（Yamane-Ohnukiら、Biotech. Bioeng. 87: 614 (2004)）が挙げられる。
【０１９７】
抗体のアミノ酸配列変異体をコードする核酸分子は、当技術分野において公知の様々な方法によって調製される。これらの方法としては、天然源からの単離（天然に存在するアミノ酸配列変異体の場合）、又は抗体の以前に調製された変異体もしくは非変異体バージョンのオリゴヌクレオチド媒介性（又は部位特異性）突然変異誘発、ＰＣＲ突然変異誘発、及びカセット突然変異誘発による調製が挙げられるが、それらに限定されるわけではない。
【０１９８】
本発明の抗体を、エフェクター機能に関して、例えば抗体のＡＤＣＣ及び／又はＣＤＣを増強するように改変することが望ましい場合がある。これは、抗体のＦｃ領域に１つ又は複数のアミノ酸置換を導入することによって達成され得る。代替的に又は追加的に、Ｆｃ領域にシステイン残基を導入してもよく、これにより、この領域における鎖間のジスルフィド結合形成が可能となる。このようにして作製されたホモ二量体の抗体は、内部移行の能力が改善され得、そして／又は補体依存性細胞殺滅及びＡＤＣＣが増大され得る。Caronら、J. Exp Med. 176: 1191-1195 (1992)及びShopes、J. Immunol. 148: 2918-2922 (1992)を参照されたい。ホモ二量体抗体はまた、Wolffら、Cancer Research 53: 2560-2565 (1993)に記載されているようにヘテロ二官能性架橋剤を使用して調製してもよい。又は、二つのＦｃ領域を有し、それにより増強された補体溶解能力及びＡＤＣＣ能力を有する抗体を遺伝子工学で作製することができる。Stevensonら、Anti-Cancer Drug Design 3: 219-230 (1989)を参照されたい。
【０１９９】
国際公開公報第ＷＯ００／４２０７２号（Presta, L.）では、ヒトエフェクター細胞の存在下において改善されたＡＤＣＣ機能を有する抗体（そのＦｃ領域中にアミノ酸置換を含む）が記載されている。好ましくは、ＡＤＣＣの改善された抗体は、Ｆｃ領域の２９８位、３３３位、及び／又は３３４位に置換を含む。好ましくは、変化されたＦｃ領域は、これらの位置のうち１、２、もしくは３個の位置において置換を含む又はそれらからなるヒトＩｇＧ１Ｆｃ領域である。
【０２００】
Ｃ１ｑ結合及び／又はＣＤＣが変化した抗体は、国際公開公報第９９／５１６４２号、米国特許第６，１９４，５５１Ｂ１号、米国特許第６，２４２，１９５Ｂ１号、米国特許第６，５２８，６２４Ｂ１号、及び米国特許第６，５３８，１２４号（Idusogieら）に記載されている。その抗体は、そのＦｃ領域の２７０位、３２２位、３２６位、３２７位、３２９位、３１３位、３３３位、及び／又は３３４位のアミノ酸の１つ又はそれ以上においてアミノ酸置換を含む。
【０２０１】
抗体の血清半減期を増大させるために、例えば米国特許第５，７３９，２７７号に記載されているようにサルベージレセプター結合エピトープを抗体（特に抗体断片）に取り込んでもよい。本明細書で使用される用語「サルベージレセプター結合エピトープ」とは、ＩｇＧ分子のインビボでの血清半減期の増大に関与する、ＩｇＧ分子（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４）のＦｃ領域のエピトープのことをいう。そのＦｃ領域に置換を有し、血清半減期が増大された抗体はまた、国際公開公報第００／４２０７２号（Presta, L.）にも記載されている。
【０２０２】
３つ又はそれ以上の（好ましくは４つの）機能的抗原結合部位を有する遺伝子工学された抗体もまた、考えられている（米国特許出願第２００２／０００４５８７Ａ１号、Millerら）。
【０２０３】
ＩＶ．薬学的製剤
例示的な抗ＣＤ２０抗体製剤は、国際公開公報第９８／５６４１８号（明確に参照により本明細書に組み入れられる）に記載されている。別の製剤は、２〜８℃における貯蔵での最小有効期間が２年間である、４０mg／mLの抗ＣＤ２０抗体、２５mM酢酸塩、１５０mMトレハロース、０.９％ベンジルアルコール、０．０２％ポリソルベート２０を含む（ｐＨ５．０）複数回用量の液体の製剤である。対象の別の抗ＣＤ２０製剤は、９．０mg／mL塩化ナトリウム、７．３５mg／mLクエン酸ナトリウム二水和物、０．７mg／mLポリソルベート８０、及び注射用滅菌水中に１０mg／mLの抗体を含む（ｐＨ６．５）。更に別の水性薬学的製剤は、ｐＨ約４．８〜ｐＨ約５．５、好ましくはｐＨ５．５の１０〜３０mM酢酸ナトリウム、約０．０１〜０．１％ｖ／ｖの量の界面活性剤としてのポリソルベート、２〜１０％ｗ／ｖの量のトレハロース及び保存剤としてのベンジルアルコールを含む（米国特許第６，１７１，５８６号）。皮下投与用に適応された凍結乾燥製剤は、国際公開公報第９７／０４８０１号に記載されている。このような凍結乾燥製剤は、適切な希釈剤を用いて高タンパク質濃度に復元され得、そしてその復元された製剤は、本明細書において処置しようとする哺乳動物に皮下投与され得る。
【０２０４】
ヒト化２Ｈ７変異体のための１つの製剤は、１０mMヒスチジン、６％スクロース、０．０２％ポリソルベート２０中の１２〜１４mg／mLの抗体である（ｐＨ５．８）。
【０２０５】
具体的な態様において、２Ｈ７変異体及び特に変異体Ａは、１０mM硫酸ヒスチジン、６０mg／mlスクロース、０．２mg／mlポリソルベート２０、及び注射用滅菌水中の２０mg／mLの抗体で製剤化されている（ｐＨ５．８）。
【０２０６】
本明細書における製剤はまた、処置される特定の適応症に必要とされる１つより多い活性化合物、好ましくは互いに有害な影響を及ぼさない補助的な活性を有する化合物を含み得る。例えば、細胞障害性薬剤、化学療法剤、サイトカイン又は免疫抑制剤（例えば、Ｔ細胞に対して作用するもの、例えばシクロスポリン、又はＴ細胞に結合する抗体、例えばＬＦＡ−１に結合する抗体）を更に備えることが望ましくあり得る。このような他の薬剤の有効量は、製剤中に存在する抗体の量、疾病又は疾患又は処置のタイプ、及び上記で考察された他の因子に依存する。これらは、一般に、本明細書で記載したのと同じ用量及び投与経路で使用されるか、又はこれまで使用された用量の約１〜９９％で使用される。
【０２０７】
インビボ投与に使用される製剤は、滅菌されていなければならない。これは、滅菌されたろ過膜によるろ過によって容易に達成される。
【０２０８】
Ｖ．製品
本発明の別の態様において、自己免疫疾病の処置に有用な材料を含む製品が提供される。本発明は、特に、（ａ）アンタゴニスト（例えばＢ細胞表面マーカーに結合する抗体、例えばＣＤ２０抗体）を含む容器（好ましくは、その容器は、抗体及び薬学的に許容される担体又は希釈剤を容器内に含んでいる）；及び（ｂ）被験体において自己免疫疾病（例えば関節リウマチ）を処置するための指示書を含む添付文書、を備えた製品を提供し、ここで、その指示書は、被験体が、１回の静脈内注入として完全治療有効量のアンタゴニスト又は抗体（例えばＣＤ２０抗体）を投与されることを示している。
【０２０９】
特定の態様において、本明細書中の製品は、第２の医薬品を含む容器を更に備え、ここで、前記アンタゴニスト又は抗体は第１の医薬品であり、前記製品は、有効量の第２の医薬品で被験体を処置するための添付文書中の指示書を更に備える。第２の医薬品は、前記で示したもののうちのいずれかであり得、例示的な第２の医薬品は、前記で示したものであり、これには、抗生物質、免疫抑制剤、疾病修飾性抗リウマチ薬（ＤＭＡＲＤ）、疼痛制御剤、インテグリンアンタゴニスト、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、サイトカインアンタゴニスト、ビスホスホネート、又はホルモン、又はその組合せが挙げられ、より好ましくはＤＭＡＲＤ、ＮＳＡＩＤ、疼痛制御剤、又は免疫抑制剤である。最も好ましくは、第２の医薬品はメトトレキセートである。
【０２１０】
この局面において、添付文書は、容器上に存在するか、又は容器に付随している。適切な容器としては、例えば、瓶、バイアル、注射器などが挙げられる。容器は、種々の材料（例えばガラス又はプラスチック）から形成され得る。容器は、ターゲットとする自己免疫疾病を処置する上で効果的な組成物を保持しているか、又は含んでおり、滅菌された取り出し口を有し得る（例えば、容器は、静脈内用の溶液バッグ、又は、皮下注入用の針によって突き刺すことができる栓を有するバイアルであり得る）。組成物中の少なくとも１つの活性な薬剤は、ＣＤ２０アンタゴニスト、例えばＣＤ２０抗体である。製品は更に、薬学的に許容される希釈緩衝液（例えば静菌性の注射用水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝食塩水、リンガー液、及び／又はデキストロース溶液）を含んでいる更なる容器を備え得る。前記製品は、商業的な観点及びユーザーの観点から望ましい他の材料（他の緩衝液、希釈剤、フィルター、針、及び注射器を含む）を更に備え得る。
【０２１１】
本発明の更なる詳細は、以下のこれに限定されない実施例から明らかとなろう。
【０２１２】
参照実施例
ヒト化２Ｈ７抗体変異体を、国際公開公報第０４／０５６３１２号（その全体が参照により本明細書に組み入れられる）に記載されているように、調製し、そして生物学的機能（ヒトＣＤ２０結合親和性、エフェクター機能、及びＢ細胞枯渇を含む）についてアッセイした。マウス２Ｈ７抗体可変領域配列、並びに、マウスＶ及びヒトＣを有するキメラ２Ｈ７が、例えば、米国特許第５，８４６，８１８号及び第６，２０４，０２３号（その全体が参照により本明細書に組み入れられる）に記載されている。
【０２１３】
実施例１
活動性関節リウマチ患者に１回の静脈内注入として投与されたオクレリズマブの効力及び安全性を試験するための第Ｉ／ＩＩ相臨床試験
１回の静脈内注入（ｉ．ｖ．）として投与された、ＣＤ２０Ｂ細胞をターゲットとするヒト化モノクローナル抗体であるオクレリズマブ（ＯＣＲ）の効力を、１〜６個のＤＭＡＲＤ（生物学的薬剤を含む）で失敗した後に安定用量（１０〜２５mg／週）のメトトレキセート（ＭＴＸ）の併用投与を受けている、中程度から重度の関節リウマチ（ＲＡ）患者におけるＡＣＲ（American College of Rheumatology）応答により試験した。
【０２１４】
特に、漸増する静脈内１回量のｒｈｕＭＡｂ２Ｈ７（Ｒｏ４９６−４９１３、ＰＲＯ７０７６９）の安全性に関する多施設無作為化プラセボ対照第Ｉ／ＩＩ相試験が、安定用量のメトトレキセートの併用投与を受けているが、臨床応答が満足のいかない、中等度から重度の関節リウマチ患者において実施された。治験の目的は、中等度から重度の関節リウマチ（ＲＡ）患者において、メトトレキセート（ＭＴＸ）と併用した、漸増する静脈内（ＩＶ）１回量のｒｈｕＭＡｂ２Ｈ７の安全性及び耐容性を評価することであった。
【０２１５】
治験は、以下のプロトコールを使用して行なわれた：
【０２１６】
第Ｉ部−用量漸増
患者に、以下の用量レベルの１つの用量のｒｈｕＭＡｂ又はプラセボ等価体の１回の静脈内注入で投与する：
第１群：４００mg
第２群：１０００mg
第３群：１５００mg
【０２１７】
用量の漸増は、１つの用量レベルにつき最低１０人の患者を処置した後に行なう（８人に活性物質を；２人にプラセボを）。漸増の決断は、試験内の前の群のデータの概観に基づく。用量制限毒性の数を評価し、この数に基づいて、試験を次の用量レベルに進行させてもよいし、又は、追加の患者を同じ用量レベルに参加させてもよい。
【０２１８】
第ＩＩ部
用量漸増段階及びデータの中間解析の後に、第Ｉ部に使用された３つの用量（４００、１０００、及び１５００mgであると想定される）が、用量漸増段階中に耐容性があると実証されれば、追加の１２０人の患者（９６人に活性物質を；２４人にプラセボを）をそれらの３つの用量に無作為に割り当てる。
【０２１９】
患者の数
第Ｉ部では少なくとも４０人；第ＩＩ部では１２０人
【０２２０】
ターゲット集団
−成人患者（１８〜８０歳）
−中程度から重度のＲＡ
−１つの疾病修飾性抗リウマチ薬（ＤＭＡＲＤ）又は生物学的薬剤では失敗したが（効力がないか、又は耐容性がない）、これらの中の５つより多くの薬剤では失敗していない
−現在ＭＴＸの投与を受けているが、ＭＴＸによる処置に対する臨床応答が不満足なものである（すなわち、部分的な応答者）
【０２２１】
試験期間
−１回の静脈内注入；２４週目まで評価し、次いで、更に４８週間経過観察を行なう：全７２週間
−任意の時点で中止した患者又は７２週目の時点においても依然としてＢ細胞が枯渇している患者は、安全性のための経過観察を４８週間行なうか、あるいは、そのＢ細胞が回復するまで行なう（いずれにしても長い）
【０２２２】
有意な包含基準
活動性ＲＡを有する：
−少なくとも６カ月間ＲＡであると診断（１９８７年に改訂されたＡＣＲ基準による）
−血清リウマチ因子が陽性（２０ＩＵ／Ｌ以上）
−スクリーニング時におけるＣ反応性タンパク質１．５mg／dL以上又は赤血球沈降速度２８mm／時以上
−スクリーニング時及び無作為化時における８個以上の関節腫脹数（６６関節数）及び８個以上の圧痛関節数（６８関節数）
【０２２３】
以前の処置／バックグラウンド処置：
−外来患者を基本とした現在の処置
−１０〜２５mg／週のＭＴＸで少なくとも１２週間という現在の処置、スクリーニング前の直近４週間は安定である
−無作為化の４〜８週間前には全てのＤＭＡＲＤｓ（ＭＴＸ以外）を中止；エタネルセプト、インフリキシマブ、アダリムマブ、及びレフルノミドでは８週間前に中止（レフルノミドの投与を受けていた患者ではコレスチラミンによる薬物洗浄後）
−コルチコステロイド用量は、１０mg／日のプレドニゾン又は等価体を超えない、スクリーニング前の直近４週間は安定である
−ＮＳＡＩＤｓの投与を受けている場合、スクリーニングの２週間前には用量は安定していなければならない
−経口による葉酸の投与を受ける意思があること
【０２２４】
治験製品
用量−４００、１０００、１５００、及び２０００mgの１回量のｒｈｕＭＡｂ２Ｈ７
経路−静脈内注入（プロトコールの付録３において提供される速度で）
【０２２５】
比較「薬物」の用量／経路／レジメン
−１回のプラセボ点滴
【０２２６】
併用処置
点滴前後の処置
予防（推奨される）−予防量のアセトアミノフェン及びジフェンヒドラミン（又は他の鎮静作用のない抗ヒスタミン剤）を、ｒｈｕＭＡＢ２Ｈ７の点滴を開始する３０〜６０分前に投与することが推奨される。
【０２２７】
考えられ得る点滴中のステロイド防御−有意な点滴関連の事象が所与の用量レベルで観察される場合、及び点滴速度を低下させても点滴関連の事象の数が減らない場合、スポンサーは、その後の処置を受ける患者に、静注用コルチコステロイドの前薬投与を行なうことが推奨され得る。
【０２２８】
メトトレキセート（必要）−安定な１０〜２５mg／週の用量（経口用又は非経口用）；治験センターファーマシーにより提供
【０２２９】
コルチコステロイド（任意）−安定な最大１０mg／日までの経口用量のプレドニゾン又はプレドニゾン等価体を継続
【０２３０】
ＮＳＡＩＤｓ−安定な用量で継続
【０２３１】
再処置
臨床応答の始まりはゆっくりである可能があると予期される。それ故、可能であれば、２４週間目までバックグラウンド処置を変わらず続けるべきである。２４週間目以後は、適格な患者が、別の再処置プロトコールの下で再処置を受け得る。
【０２３２】
供給形態
ｒｈｕＭＡｂ２Ｈ７及びそれに相当するプラセボは、スポンサーにより１０mLバイアルで供給される；ｒｈｕＭＡｂ２Ｈ７は、２０mg／mLの濃度である。ｒｈｕＭＡｂ２Ｈ７は、点滴前に０．９％塩化ナトリウム中で希釈されなければならず、それにより２５０〜５００mL容量の適切な用量が提供される（希釈情報は、プロトコールの付録３において提供される）
【０２３３】
他の医薬品は、研究者により処方され、センターファーマシーにより各地で提供されるだろう。
【０２３４】
以下の評価：
−安全性
有害事象
−点滴関連反応及び用量制限毒性（定義については手順の章を参照されたい）を含む有害事象（性質、強度、重篤度、関連性、可逆性、及び処置；ＮＣＩ ＣＴＣＡＥｖ３．０を使用してグレードを付ける）の発生
血液学、臨床化学、及び尿検査
−臨床検査値の異常の発生
免疫学
−ヒト抗ｒｈｕＭＡＢ２Ｈ７抗体の発生
−リウマチ因子の濃度
−血清中免疫グロブリン濃度（ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＥ）
−血清中破傷風毒素抗体濃度
−末梢血Ｂ細胞数；Ｔ細胞数
−効力
−ＡＣＲ基準により２０％、５０％、及び７０％の臨床応答を有する患者の比率、及び、ベースラインとして１日目の点滴前のＡＣＲコアセット値を使用して２４週間目に測定したこの結果の構成要素
−２４週間目における疾病活性スコア及びＥＵＬＡＲ応答者の比率
【０２３５】
統計学的分析：
全ての分析は、調査のためのものである。患者は、実際に受ける処置に従って分類される。いずれかの試験薬物（ｒｈｕＭＡｂ２Ｈ７又はプラセボ）を受ける全ての患者が、分析目的のために含まれる。
【０２３６】
試験の最初の２４週間中にＭＴＸ用量の増量、コルチコステロイド用量の増量、追加の介入の導入、又は除外される薬物療法が必要とされる患者は、効力分析において非応答者と判断される。
【０２３７】
様々な用量レベルにおける対照（プラセボ）患者は、１つの対照群へと合わせられる。全ての結果は、対照群及び各活性用量群：４００mg、１０００mg、１５００mg、及び２０００mgについて別々に提示される。
【０２３８】
２つの亜群分析を行なう：一方は全ての参加患者に基づき、他方は、第Ｉ部の用量漸増が完了した後に試験の第ＩＩ部に無作為に割り当てられた患者に基づく。
【０２３９】
薬物動態：
患者及び用量群によるｒｈｕＭＡｂ２Ｈ７の血清中濃度及びコンピューターによる薬物動態パラメーターが列挙され、記述により要約されている（平均、標準偏差、変動係数％、最小値、最大値）。個々の濃度及び平均の濃度ｖｓ時間プロットが、等分目盛及び対数目盛の両方で提示される。薬物動態パラメーターは、非コンパートメント法を使用してコンピューター計算される。
【０２４０】
全ての計算において、アッセイの定量限界を下回る濃度は削除されるか、又は報告されているアッセイの下限に基づいた数値を割り当てる。
【０２４１】
薬物動力学：
各患者のＢ細胞枯渇プロファイルが、各用量レベルについて決定され記述により要約される。末梢血Ｂ細胞の枯渇及び充足の薬物動力学は、各用量レベルにおける枯渇の程度及び持続時間により特徴づけられる。更に、集団薬物動態モデリングを提供するために、ｒｈｕＭＡｂ２Ｈ７の薬物動態と、末梢血Ｂ細胞の枯渇及び充足の薬物動態との間の関係についての薬物動態分析／薬物動力学分析として、前向き分析計画が準備される。
【０２４２】
製剤：
ｒｈｕＭＡｂ２Ｈ７薬物製品は、静脈内投与に際して希釈するための無菌で透明で無色な保存剤を含まない液体として、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈにより製造されている。ｒｈｕＭＡｂ２Ｈ７薬物製品は、１バイアルあたり名目上１０mL（２００mg）のｒｈｕＭＡｂ２Ｈ７を含む、１０ccの１回限りの使用のバイアル中に、２０mg／mLの濃度で供給される。ｒｈｕＭＡｂ２Ｈ７薬物製品は、１０mM硫酸ヒスチジン、６０mg／mLスクロース、０．２mg／mLポリソルベート２０、及び滅菌注射用水中に製剤化される。ｐＨは、５．８に調整されている。
【０２４３】
ｒｈｕＭＡｂ２Ｈ７薬物製品は、投与前に希釈しなければならない。静脈内投与用のｒｈｕＭＡｂ２Ｈ７の溶液は、薬物製品を、０．９％塩化ナトリウムを含む点滴バッグに希釈し、最終薬物濃度を１．６〜６mg／mLとすることにより調製される。ｒｈｕＭＡｂ２Ｈ７に相当するプラセボもまた、１バイアルあたり名目上１０mLのプラセボ溶液を含む１０ccの１回限りの使用のバイアルに供給される。それはｒｈｕＭＡｂ２Ｈ７薬物製品と組成は同じであるが、ｒｈｕＭＡｂ２Ｈ７を含まない。静脈内投与用のｒｈｕＭＡｂ２Ｈ７プラセボ溶液は、ｒｈｕＭＡｂ２Ｈ７プラセボを、ｒｈｕＭＡｂ２Ｈ７薬物製品と同じ手順を使用して、０．９％塩化ナトリウムを含む点滴バッグに希釈することにより調製される。
【０２４４】
用量、投与：
試験薬物は、示される速度でゆっくりとした静脈内注入として投与されなければならない。速度は、投与される用量に依存し、２５０mL／時を超えない。それは、ＩＶプッシュ又はＩＶボーラスとして投与すべきではない。試験薬点滴は、専用ラインを通してなされるべきである。等張０．９％塩化ナトリウム溶液を点滴媒体として使用すべきである。点滴開始の３０〜６０分前に、アセトアミノフェン（１ｇ）及びジフェンヒドラミンＨＣｌ（５０mg；又は等しい用量の類似薬剤）の予防処置を患者が経口により受けることが推奨される。２０００mg以外の全ての用量が、２５０mLの容量で投与され；２０００mg（及びそれに相当するプラセボ）は、５００mLの容量で投与される。
【０２４５】
再処置実行可能性
症状が再発した患者の再処置は、活性物質による処置を受け、その最初の処置から２４週間後に少なくともＡＣＲ２０の応答を達成し、試験中に有意な有害事象を起こさなかった患者に対してのみ２４週間以後に投与してもよい。これらの患者における再処置は、症状が再発（２４週間後にＳＪＣが８個以上、ＴＪＣが８個以上により示される）した場合にはその最初のレジメンと同じ用量である。
【０２４６】
点滴スケジュール
ｒｈｕＭＡｂ２Ｈ７薬物製品は、１バイアルあたり名目上１０mL（２００mg）のｒｈｕＭＡｂ２Ｈ７を含む、１０ccの１回限りの使用のバイアル中に２０mg／mLの濃度で液体として供給される。ｒｈｕＭＡｂ２Ｈ７薬物製品と組成は同じであるがｒｈｕＭＡｂ２Ｈ７を含まない相当するプラセボもまた、１バイアルあたり名目上１０mLのプラセボ溶液を含む、１０ccの１回限りの使用のバイアル中に液体として供給される。
【０２４７】
リツキシマブ（ＭａｂＴｈｅｒａ）処方情報は、点滴に関する以下の情報を提供する：
【０２４８】
第一回目の点滴：点滴に推奨される初期速度は、５０mg／時であり；最初の３０分の後、３０分毎に５０mg／時ずつ漸増させて最大４００mg／時まで増大させることができる。過敏症もしくは点滴関連事象が生じた場合、点滴を一時的に遅めるか、又は中断し、症状が改善した場合には以前の半分の速度で継続することができる。同じ有害反応が２回目には重度に起こった場合には、処置を中止する決定を考慮すべきである。点滴速度は、症状の改善時に増加させてもよい。
【０２４９】
その後の点滴：初期速度１００mg／時で点滴し、３０分間隔で１００mg／時ずつ増加させ、最大４００mg／時まで増加させる。
【０２５０】
進行中のＡＣＴ２８４７ｇ試験は、同じ標準的な点滴速度を使用し、その最も高い用量は１０００mgであり４００mg／時まで増大させ、全体的な点滴時間は約４時間１５分である。
【０２５１】
より迅速な点滴時間を調査するために、このプロトコールは、以下のスケジュールを使用するが、第Ｉ部の最も低い用量群において、より速い点滴速度に対して耐容性がないという任意の徴候があれば、その後の用量群では速度を下げ、点滴速度の増加分（mg／時）を５０mg／時のステップの標準的な速度に下げる。
【０２５２】
【表１８】
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【０２５３】
【表１９】
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【０２５４】
【表２０】
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【０２５５】
【表２１】
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【０２５６】
活動性ＲＡは、８個以上の腫脹関節及び８個以上の圧痛関節、並びにＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）の上昇、又は赤血球沈降速度（ＥＳＲ）の上昇により定義された。患者（ｎ＝１７５）を、ＯＣＲ（４００、１０００、１５００、又は２０００mg）又はそれに相当するプラセボ（ＰＬＯ）の１回の静脈内注入の投与のいずれかに無作為に割り当てた。この試験の４つの漸増用量の第Ｉ部に参加した４０人の患者（各コホートにおいて２人がプラセボ、８人が活性物質）及びより低い３つの用量又はＰＬＯに無作為に割り当てられた１３５人の他の患者が、安全性及びＩＴＴ分析に含まれた。試験薬物（ＯＣＲ）の前には点滴前後の糖質コルチコイドは投与しなかった。臨床評価を、２週間の間隔で８週間目まで行ない、次いで４週間の間隔で２４週間目まで行なった。最初の終点は、２４週目においてＡＣＲ２０応答を達成した患者の比率であった。
【０２５７】
結果
ＯＣＲ群及びＰＬＯ群の７０％及び８９％が女性であり、ベースラインにおいて、圧痛及び腫脹関節の平均数は、それぞれ、１６と１７、及び２８と２８、ＥＳＲ４５と４９、ＣＲＰ２５と２１、ＲＦ＋９２％と９４％であった。Ｂ細胞の枯渇（１２週目においてＯＣＲでは９６％）及び臨床応答が、全てのＯＣＲ用量群において観察された。２４週目におけるＡＣＲ２０／５０／７０応答は、それぞれ、合わせたＯＣＲ群については５７％、３１％及び１５％であり、ＰＬＯ群については４０％、１０％及び３％であった。
【０２５８】
【表２２】
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【０２５９】
結論
バックグラウンドＭＴＸの投与を受けているＲＡ患者における、ヒト化抗ＣＤ２０オクレリズマブの１回の点滴を含むが点滴前後のステロイドは全く含まない処置により、全ての用量においてＢ細胞の枯渇が達成され、ＭＴＸ単独に比べて増加したＡＣＲ２０／５０／７０応答が見られた。１回の点滴で、非耐容性による中止は僅か２人であり、良好な耐容性を示した。感染の発症及び感染のタイプは、ＰＬＯ群及びＯＣＲ群において類似していた。
【０２６０】
前記の明細書は、当業者が本発明を実施するのに十分なものであると考えられる。本発明は、明記された構築物により範囲を限定されるものではない。なぜなら、明記された態様は、本発明の特定の局面の１つの説明として捉えられ、機能的に等価である任意の構築物が本発明の範囲内である。本明細書における材料の明記は、本明細書に含まれる記載が、本発明の任意の局面（その最良の形態を含む）の実践に不適切であることを認めるものでもなく、また、特許請求の範囲が、提示される具体的な例示に限定されるものでもない。実際に、本明細書において示され記載されているものに加えて、本発明の種々の改変が、前記から当業者には明らかであり、そして添付の特許請求の範囲内に該当する。
【０２６１】
本明細書における本発明の記載から、様々な等価体を使用して、その範囲から逸脱することなく本発明の概念を実施できることが明瞭である。更に、本発明は特定の態様を具体的に参照して記載されているが、当業者は、本発明の精神及び範囲から逸脱することなく、形式的に及び詳細に変更を行なうことができることを認識しているだろう。記載された態様は、全ての点において、説明的なものであって制限的なものではないと考えられる。本発明は、本明細書に記載された特定の態様に限定されないが、本発明の範囲から逸脱することなく多くの等価体、再編成、改変、及び置換を行なうことができることが理解されるべきである。従って、更なる態様が、本発明の範囲内であり、以下の特許請求の範囲内である。
【０２６２】
全ての米国特許及び特許出願；外国特許及び特許出願；科学的文献；本；並びに本明細書で記載された他の刊行物のその全体が、全体が示されているけれども、各々の個々の文書（任意の図面、図及び表を含む）が具体的に個々に参照により組み入れられているかのように、参照により本明細書に組み入れられる。
【配列表】
2011501734000001.app
【国際調査報告】
2011501734.tif 000024
2011501734.tif 000025
2011501734.tif 000026