(57)【要約】【課題】  本発明は、化学式１の新規なベンゾフェノンチアゾール誘導体、その異性体、薬学的に許容されるその塩、その水和物又はその溶媒和物、それを含有する医薬組成物、それらの治療剤としての用途及びその製造方法に関する。【解決手段】  本発明のベンゾフェノンチアゾール誘導体は、微小管の形成に対する阻害活性を有し、悪性腫瘍の活性的な増殖細胞を殺滅するので悪性腫瘍の一般的な増殖状態の治療において使用できる。化学式１における、Ｒ、Ｒ１及びＲ２は本発明の詳細な説明で定義されている通りである。【選択図】図２
2011515461.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の式１：
【化４】
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（式中の、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立して、水素(Ｈ)又はメチル(ＣＨ３)であり；
Ｒは水素、メチル、エチル、又はＲ１及びＲ２が互いに連結して環を形成している、下記の残基から選ばれる一つである
【化５】
2011515461.tif 000015
）：で表される化合物、又はその異性体、薬学的に許容されるその塩、その水和物若しくはその溶媒和物。
【請求項２】
化合物が、次の化合物：
化合物６１５
Ｎ−(４−(３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）フェニル）チアゾール−２−イル）−２−アミドアセトアミド；
化合物６２４
（Ｓ）−Ｎ−（４−（３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）フェニル）チアゾール−２−イル）−２−アミノ−３−メチルブタンアミド；
化合物６２５
（Ｓ）−Ｎ−（４−（３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）フェニル）チアゾール−２−イル）−２−アミノ−３−フェニルプロパンアミド；
化合物６３１
Ｎ−（４−（３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）フェニル）チアゾール−２−イル）−２−（ジメチルアミノ)アセトアミド；
化合物６４６
（Ｓ）−Ｎ−（４−（３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）フェニル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボキシアミド；
化合物６４７
（Ｓ）−Ｎ−（４−（３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）フェニル）チアゾール−２−イル）−２−アミノ−４−メチルペンタンアミド；
化合物６４８
（Ｓ）−Ｎ−（４−（３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）フェニル）チアゾール−２−イル）−２−アミノ−３−シクロヘキシルプロパンアミド；
化合物６５２
Ｎ−（４−（３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）フェニル）チアゾール−２−イル）−２−アミノ−３−メチルブタンアミド；
化合物６５３
（Ｒ）−Ｎ−（４−（３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）フェニル）チアゾール−２−イル）−２−アミノ−３−メチルブタンアミド：
から選ばれる、請求項１に記載の化合物、又はその異性体、薬学的に許容されるその塩、その水和物若しくはその溶媒和物
【請求項３】
化合物が、（Ｓ）−Ｎ−（４−（３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）フェニル）チアゾール−２−イル）−２−アミノ−３−メチルブタンアミドである、請求項１に記載の化合物、又はその異性体、薬学的に許容されるその塩、その水和物若しくはその溶媒和物。
【請求項４】
化合物が、（Ｓ）−Ｎ−（４−（３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）フェニル）チアゾール−２−イル）−２−アミノ−３−フェニルプロパンアミドである、請求項１に記載の化合物、又はその異性体、薬学的に許容されるその塩、その水和物若しくはその溶媒和物。
【請求項５】
請求項１に記載の化合物、又はその異性体、薬学的に許容されるその塩、その水和物若しくはその溶媒和物を有効成分として、及び薬学的に許容される賦形剤又は担体を含んでなる、微小管の形成を阻害するための医薬組成物。
【請求項６】
組成物が、悪性腫瘍、ウィルス及び細菌感染、再発性血管閉塞、炎症性疾患、自己免疫疾患又は乾癬の治療に有用である、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
化合物５１６[｛４−（２−アミノチアゾール−４−イル）−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）フェニル｝（３，４，５−トリメトキシフェニル)メタノン]を式３又は５で表される化合物と反応させることを含んでなる、式６で表される化合物を製造する方法。
【化６】
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【化７】
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【化８】
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【化９】
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（式中の、Ｒ１'はＦｍｏｃ（Ｎ−ａ−９−フルオレニルメトキシカルボニル）基又はＣＨ３であり；Ｒ２はＨ又はＣＨ３であり；及び、Ｒは水素、メチル、エチル、又は下記の残基から選ばれる一つである）。
【化１０】
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【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は微小管形成阻害剤として有用なチアゾールを含有するベンゾフェノン誘導体、その異性体、薬学的に許容されるその塩、その水和物又はその溶媒和物、これを含有する医薬組成物、その治療剤としての用途及びその製造方法に係る。本発明のベンゾフェノンチアゾール誘導体は微小管の形成を阻害し、悪性腫瘍の活性的な増殖細胞を殺滅して、一般的な細胞増殖を制御する。
【背景技術】
【０００２】
本出願人は、韓国特許出願第１０−２００６−００９４０１９号（２００６年９月２７日出願)、その優先権主張出願である韓国特許出願第１０−２００７−００８３８５６号（２００７年８月２１日出願)及びＰＣＴ国際出願ＰＣＴ／ＫＲ２００７／００４６２５号（２００７年９月２１日出願)において、微小管形成阻害活性を有する新規なベンゾフェノン誘導体を開示した。
【０００３】
ＰＣＴ／ＫＲ２００７／００４６２５号に開示されている化合物のうち、特に化合物５１６［｛４−（２−アミノチアゾール−４−イル）−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）フェニル｝（３，４，５−トリメトキシフェニル)メタノン]は強力な有糸分裂阻害活性と細胞毒性を示すことが分かったが、動物実験の結果、その低い溶解度による組織における沈着によって毒性が引き起こされることが明らかになった。
【０００４】
それ故に、本発明者らは、ベンゾフェノン誘導体の溶解度改善を通じて一層優れた薬効と低い毒性を有する化合物を開発するために努力してきたところ、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明は、化合物５１６[｛４−（２−アミノチアゾール−４−イル）−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）フェニル｝（３，４，５−トリメトキシフェニル)メタノン]の誘導体として、効果的な有糸分裂阻害活性と優れた抗癌活性、及び改善された溶解度そしてそれによる著しく減少した毒性を有する、新規なベンゾフェノンチアゾール化合物を提供する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】韓国特許出願第１０−２００６−００９４０１９号
【特許文献２】韓国特許出願第１０−２００７−００８３８５６号
【特許文献３】ＰＣＴ国際出願ＰＣＴ／ＫＲ２００７／００４６２５号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
従って、本発明は前述した問題点を解決するために案出されたもので、本発明の１つの目的は、直接又は間接的に活性な有糸分裂細胞に対して毒性があり、悪性腫瘍、ウィルス及び細菌感染、再発性血管閉塞、炎症性疾患、自己免疫疾患及び乾癬の治療に有用な化合物を提供することである。
【０００７】
従って、本発明は、微小管の形成を阻害するのに有用な新規なベンゾフェノンチアゾール誘導体、又はその異性体、薬学的に許容されるその塩、その水和物又はその溶媒和物を提供する。
【０００８】
本発明の他の目的は、微小管の形成を阻害するのに有用なチアゾールを含有するベンゾフェノン誘導体、その異性体、薬学的に許容されるその塩、その水和物又はその溶媒和物を有効成分として含む医薬組成物を提供することである。
【０００９】
本発明のさらに他の目的は、微小管の形成を阻害するのに有用なチアゾールを含有するベンゾフェノン誘導体、その異性体、薬学的に許容されるその塩、その水和物又はその溶媒和物の製造方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明によると、前述の及びその他の目的は、式１で表される化合物、その異性体、薬学的に許容されるその塩、その水和物又はその溶媒和物を提供することによって達成される。
【００１１】
【化１】
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【００１２】
上記式において、Ｒ１及びＲ2は、それぞれ独立して、水素(Ｈ)又はメチル(ＣＨ3)である。Ｒは水素、メチル、エチル、又は、Ｒ１及びＲ2が互いに連結して環を形成している、下記の残基で示される化合物から選ばれるものである。
【００１３】
【化２】
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【００１４】
式１で表される好ましい化合物の例を次の表１に示す。
【００１５】
【表１】
2011515461.tif 000005
【００１６】
本発明の他の態様によれば、式１の化合物、その異性体、薬学的に許容されるその塩、その水和物又はその溶媒和物を有効成分とし、薬学的に許容される賦形剤又は担体を含む、微小管の形成を阻害するための医薬組成物を提供する。
以下、本発明の化合物の製造方法を詳細に説明する。
【００１７】
式１の化合物は各種の文献に知られている方法（Nguyen-Hai Nam et al., Bioorg. Med. Chem. 2003, 11, 1021; Rebecca Braslau et al., Org. Lett. 2000, 10, 1399; Akira Oku et al., J. Org. Chem. 1986, 19, 3732; Francois Clemence et al., J. Med. Chem. 1988, 7, 1453; Yu Su et al., Org. Lett. 2005, 7, 367）に従って製造することができる。式１の化合物を製造する方法を次の反応式Ｉを参照して詳細に説明する。
【００１８】
【化３】
2011515461.tif 000006
【００１９】
前記反応式Ｉにおいて、
ＦｍｏｃはＮ−ａ−９−フルオレニルメトキシカルボニル基であり、
ＤＩＰＥＡはジイソプロピルエチルアミン(diisopropylethylamine)であり、
ＭＣは塩化メチレン(methylene chloride)であり、
Ｐｈはフェニル(phenyl)であり、
ＤＭＦはＮ，Ｎ−ジメチルフォルムアミド(N,N-dimethylformamide)であり、
Ｒ、Ｒ１及びＲ2は前記で定義した通りである。
【００２０】
前記反応式Ｉによれば、出発物質である式２の化合物又は式４の化合物に、それぞれ、塩化チオニル(SOCl2)又は塩化オキサリル(oxalyl chloride)を加えて、式３の化合物又は式５の化合物を製造し、式３又は５の化合物を、化合物５１６[｛４−（２−アミノチアゾール−４−イル）−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）フェニル｝（３，４，５−トリメトキシフェニル)メタノン]と反応させることによって、式６の化合物を製造し、次いで脱保護反応を実施する。
【発明の効果】
【００２１】
前述から明らかなように、本発明のベンゾフェノンチアゾール誘導体は、微小管の形成を阻害して、悪性腫瘍の活性的な増殖細胞を殺滅するので、悪性腫瘍、ウィルス及び細菌感染、再発性血管閉塞、炎症性疾患、自己免疫疾患及び乾癬の治療剤として有用である。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
本発明の上記及びその他の目的、特徴及びその他の利点は、添付の図面を併用して以下の詳細な説明から明確に理解できるであろう。
【図１】図１は、ヒト由来結腸直腸癌細胞株(ＣＸ-１)を用いた化合物５１６の薬効実験の結果であって、化合物５１６の各投与日における腫瘍体積を示したグラフである。
【図２】図２は、ヒト由来結腸直腸癌細胞株(ＣＸ-１)を用いた化合物６２４、６２５及び６３１の薬効実験結果であって、化合物６２４、６２５及び６３１の各投与日における腫瘍体積を示したグラフである。
【図３】図３は、ヒト由来結腸直腸癌細胞株(ＨＣＴ-１５)を用いた化合物６２４の薬効実験結果であって、化合物６２４の各投与日における腫瘍体積を示したグラフである。
【図４】図４は、ヒト由来肺がん細胞株（Ａ５４９）を用いた化合物６２４の薬効実験結果であって、化合物６２４の各投与日における腫瘍体積を示したグラフである。
【図５】図５は、ヒト由来胃がん細胞株（ＭＫＮ４５）を用いた化合物６２４の薬効実験結果であって、化合物６２４の各投与日における腫瘍体積を示したグラフである。
【図６】図６は、ヒト由来非小細胞肺がん細胞株（ｃａｌｕ−６）を用いた化合物６２４の薬効実験結果であって、化合物６２４の各投与日における腫瘍体積を示したグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
以下、実施例、製造例及び実験例を参照して本発明をさらに詳述する。但し、これら例は本発明の例示に過ぎず、本発明の範囲及び精神がこれらだけに限定されるものではない。
【実施例】
【００２４】
実施例１：化合物６１５の合成
Ｎ−（４−（３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）フェニル）チアゾール−２−イル）−２−アミノアセトアミドの合成
Ｆｍｏｃ−グリシン（０．９４ｇ、３．１６ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド(１滴)を塩化メチレン（５ｍＬ）に溶かし、室温で塩化チオニル（ＳＯＣｌ２）（０．３ｍＬ）を加えて、得られた混合物を１時間還流攪拌した。反応終了後、反応溶液を室温に下げ、減圧乾燥して溶媒を除去し、得られた化合物（１ｇ）を、塩化メチレン（１０ｍＬ）とピリジン（０．１３ｍＬ）に溶解した化合物５１６（０．４５ｇ、１．０７ｍｍｏｌ）の溶液に加えて、得られた混合物を室温で一晩攪拌した。反応終了後、得られた生成物を減圧乾燥して溶媒を除去し、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２；ＭＣ／ＭｅＯＨ ４０／１〜１０／１）で精製して、固体の化合物  （０．５４ｇ、７１．６％）を得た。得られた化合物（０．４６ｇ、０．６４ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルフォルムアミド（３ｍＬ）に溶かし、室温でピペリジン（７６μＬ）を加えて、得られた混合物を室温で２時間攪拌した。反応終了後、得られた溶液を減圧乾燥して溶媒を除去した後、得られた生成物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２；ＭＣ／ＭｅＯＨ ２０／１〜５／１）で精製して、白色固体の化合物６１５（２４６．６ｍｇ、７７．９％）を得た。
【００２５】
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、アセトン)δ：８．７９０（ｓ，１Ｈ）、８．３７２（ｄ，Ｊ＝１．４８Ｈｚ，１Ｈ）、８．３１５（ｄｄ，Ｊ＝８．０，１．６Ｈｚ，１Ｈ），  ７．９６９（ｓ，１Ｈ）、７．８９３（ｓ，１Ｈ）、７．７７５（ｄ，Ｊ＝８．１２Ｈｚ，１Ｈ）、３．８２９−３．８１５（ｓ，９Ｈ）、３．７１１（ｓ，２Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４９５（Ｍ＋＋Ｈ）。
【００２６】
実施例２：化合物６２４の合成
（Ｓ）−Ｎ−（４−（３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）フェニル）チアゾール−２−イル）−２−アミノ−３−メチルブタンアミドの合成
前記化合物６１５の合成と同じ方法によって白色固体の化合物６２４（２．２５ｇ、５３．２％）を得た。
【００２７】
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ：８．３３８（ｓ，１Ｈ）、８．１７２（ｄ，Ｊ＝１．５２Ｈｚ，１Ｈ）、８．０３５（ｄｄ，Ｊ＝８．０８，１．４０Ｈｚ，１Ｈ）、７．９３７（ｓ，１Ｈ）、７．６５３（ｄ，Ｊ＝８．０８Ｈｚ，１Ｈ）、７．３８１（ｓ，１Ｈ）、６．９８５（ｓ，２Ｈ）、３．８１９（ｓ，６Ｈ）、３．５５６（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．４８１（ｍ，１Ｈ）、１．０９２（ｄ，Ｊ＝６．９６Ｈｚ，３Ｈ）、０．９０９（ｄ，Ｊ＝６．９２Ｈｚ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５３７  （Ｍ＋＋Ｈ）。
【００２８】
実施例３：化合物６２５の合成
（Ｓ）−Ｎ−（４−（３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）フェニル）チアゾール−２−イル）−２−アミノ−３−フェニルプロパンアミドの合成
化合物６１５の合成と同じ方法によって、白色固体の化合物６２５（１３．６ｍｇ、２１．２％）を得た。
【００２９】
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ：８．３３３（ｓ，１Ｈ）、８．１６５（ｄ，Ｊ＝１．５２Ｈｚ，１Ｈ）、７．９３５（ｄｄ，Ｊ＝８．０４，１．５２Ｈｚ，１Ｈ）、７．６５４（ｄ，Ｊ＝８．０４Ｈｚ，１Ｈ）、７．４０５−７．２４５（ｍ，６Ｈ）、６．９８５（ｓ，２Ｈ）、３．９０３（ｍ，４Ｈ）、３．８１９（ｓ，６Ｈ）、３．３８９（ｄｄ，Ｊ  ＝１３．８，３．７２Ｈｚ，１Ｈ）、２．８２７（ｍ，１Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５８５（Ｍ＋＋Ｈ）。
【００３０】
実施例４：化合物６３１の合成
Ｎ−（４−（３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）フェニル）チアゾール−２−イル）−２−（ジメチルアミノ)アセトアミドの合成
Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン（４４６．８ｍｇ、４．３３ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド(１滴)を塩化メチレン（５ｍＬ）に溶かし、室温で塩化チオニル（ＳＯＣｌ２）（０．４１ｍＬ）を加えて、得られた混合物を７０℃で１時間攪拌した。反応が終結した後、反応溶液を室温まで冷却して、減圧乾燥で溶媒を除去して、中間体である化合物５を得た。化合物５１６(９４．６ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ)を塩化メチレン（５ｍＬ）及びピリジン（２６．２μＬ）に溶かし、化合物５（６８．３ｍｇ）を加えて、室温で一晩攪拌した。反応が終結した後、反応溶液を減圧乾燥して溶媒を除去した後、得られた生成物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２，ＭＣ／ＭｅＯＨ  ４０／１〜５／１）で精製して、褐色の化合物６３１（２４．１ｍｇ、２１．３％）を得た。
【００３１】
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、アセトン）δ：８．７６０（ｓ，１Ｈ）、８．３０２（ｄ，Ｊ＝１．２８Ｈｚ，１Ｈ）、８．２３１（ｄｄ，Ｊ＝８．０，１．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．８７１（ｓ，２Ｈ）、７．７１８（ｄ，Ｊ＝８．１２Ｈｚ，１Ｈ）、６．９９５（ｓ，２Ｈ）、３．７９６（ｓ，６Ｈ）、３．７８５（ｓ，３Ｈ）、３．０００（ｓ，２Ｈ），２．４３０（ｓ，６Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５２３（Ｍ＋＋Ｈ）。
【００３２】
実施例５：化合物６４６の合成
（Ｓ）−Ｎ−（４−（３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）フェニル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボキシアミドの合成
化合物６１５の合成と同じ方法によって、白色固体の化合物６４６（７．８ｍｇ、２５．１％）を得た。
【００３３】
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＭｅＯＤ）δ：８．８１７（ｓ，１Ｈ）、８．２６８（ｍ，２Ｈ）、７．９４０（ｓ，１Ｈ）、７．８４５（ｓ，１Ｈ）、７．７４４（ｍ，１Ｈ）、６．９７０（ｓ，２Ｈ）、４．０６８−４．０３７（ｍ，１Ｈ）、３．８２６（ｓ，３Ｈ）、３．７８９（ｓ，６Ｈ）、３．１８１（ｍ，１Ｈ）、２．６８６−２．６１７（ｍ，１Ｈ）、２．３４４−２．２６３（ｍ，１Ｈ）、２．３４４（ｍ，１Ｈ）、２．００５−１．８４１（ｍ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５３５（Ｍ＋＋Ｈ）。
【００３４】
実施例６：化合物６４７の合成
（Ｓ）−Ｎ−（４−（３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）フェニル）チアゾール−２−イル）−２−アミノ−４−メチルペンタンアミドの合成
化合物６１５の合成と同じ方法によって、白色固体の化合物６４７（８．５ｍｇ、２３．６％）を得た。
【００３５】
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ：８．３１１（ｓ，１Ｈ）、８．１０５−８．０５５（ｍ，２Ｈ）、７．９４２（ｓ，１Ｈ）、７．６４９（ｄ，Ｊ＝７．９６Ｈｚ，１Ｈ）、７．４３９（ｓ，１Ｈ）、６．９７８（ｓ，２Ｈ）、３．８９２（ｓ，３Ｈ）、３．８１４（ｓ，６Ｈ）、３．７４２−３．７２５（ｍ，１Ｈ）、１．９９９−１．９２５（ｍ，２Ｈ）、１．５０８−１．４６２（ｍ，１Ｈ）、１．０１８（ｔ，Ｊ＝５．９６Ｈｚ，６Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５５１（Ｍ＋＋Ｈ）。
【００３６】
実施例７：化合物６４８の合成
（Ｓ）−Ｎ−（４−（３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）フェニル）チアゾール−２−イル）−２−アミノ−３−シクロヘキシルプロパンアミドの合成
化合物６１５の合成と同じ方法によって、白色固体の化合物６４８（４６．８ｍｇ、３６％）を得た。
【００３７】
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ：８．３０５（ｓ，１Ｈ）、８．０９９−８．０４９（ｍ，２Ｈ）、７．９３６（ｓ，１Ｈ）、７．６４３（ｄ，Ｊ＝８．０４Ｈｚ，１Ｈ）、７．４３４（ｓ，１Ｈ）、７．２５７（ｓ，１Ｈ）、６．９７２（ｓ，２Ｈ）、３．８８６（ｓ，３Ｈ）、３．７８３−３．７４８（ｍ，７Ｈ）、２．０４４−１．３０９（ｍ，１３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６３１（Ｍ＋＋４０）。
【００３８】
実施例８：化合物６５２の合成
Ｎ−（４−（３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）フェニル）チアゾール−２−イル）−２−アミノ−３−メチルブタンアミドの合成
前記化合物６１５の合成と同じ方法によって、Ｆｍｏｃ−バリン(ラセミ型異性体)を用いて、白色固体の化合物６５２（２５８．２ｍｇ、６３．１％）を得た。
【００３９】
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ：８．３３８（ｓ，１Ｈ）、８．１７２（ｄ，Ｊ＝１．５２Ｈｚ，１Ｈ）、８．０３５（ｄｄ，Ｊ＝８．０８，１．４０Ｈｚ，１Ｈ）、７．９３７（ｓ，１Ｈ）、７．６５３（ｄ，Ｊ＝８．０８Ｈｚ，１Ｈ）、７．３８１（ｓ，１Ｈ），６．９８５（ｓ，２Ｈ）、３．８１９（ｓ，６Ｈ）、３．５５６（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．４８１（ｍ，１Ｈ）、１．０９２（ｄ，Ｊ＝６．９６Ｈｚ，３Ｈ）、０．９０９（ｄ，Ｊ＝６．９２Ｈｚ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５３７（Ｍ＋＋Ｈ）。
【００４０】
実施例９：化合物６５３の合成
（Ｒ）−Ｎ−（４−（３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）フェニル）チアゾール−２−イル）−２−アミノ−３−メチルブタンアミドの合成
前記化合物６１５の合成と同じ方法によって、Ｆｍｏｃ−Ｄ−バリンを用いて白色固体の化合物６５３（２．２５ｇ，５３．２％）を得た。
【００４１】
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ：８．３３８（ｓ，１Ｈ）、８．１７２（ｄ，Ｊ＝１．５２Ｈｚ，１Ｈ）、８．０３５（ｄｄ，Ｊ＝８．０８，１．４０Ｈｚ，１Ｈ）、７．９３７（ｓ，１Ｈ）、７．６５３（ｄ，Ｊ＝８．０８Ｈｚ，１Ｈ）、７．３８１（ｓ，１Ｈ）、６．９８５（ｓ，２Ｈ）、３．８１９（ｓ，６Ｈ）、３．５５６（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．４８１（ｍ，１Ｈ）、１．０９２（ｄ，Ｊ＝６．９６Ｈｚ，３Ｈ）、０．９０９（ｄ，Ｊ  ＝６．９２Ｈｚ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５３７（Ｍ＋＋Ｈ）。
【００４２】
試験例１：水に対する溶解度の測定
本発明に係る化合物は、動物実験で確認したように、化合物５１６の低い溶解度に起因する組織への沈着による毒性を克服しようと開発されたものである。これを考慮して、これらの化合物の水に対する溶解度を測定した。
【００４３】
１．実験方法
（１）検量線の作成
化合物を濃度が１ｍｇ／ｍＬになるようにアセトニトリルに溶解して、移動相によって、５、１２.５、２５、５０、１００μｇ／ｍＬの濃度になるように希釈した。
【００４４】
（２）検体の調製
１． 化合物を蒸留水に加えてそれぞれの検体の濃度が１０ｍｇ／ｍＬになるように調節して、恒温攪拌器 (２５℃、２００ｒｐｍ)で約７日間攪拌し、ろ過して、適正濃度になるように、移動相によって希釈した。
【００４５】
２． 化合物を蒸留水に加えて、それぞれの検体の濃度が１０ｍｇ／ｍＬになるように調節して、３０分間超音波処理し、５分間攪拌し、ろ過し、再び３０分間超音波処理して、適正濃度になるように移動相によって希釈した。
【００４６】
２．ＨＰＬＣ条件
ＵＶ：２１５ｎｍ
流速：１ｍＬ／ｍＬ
注入量：１０μＬ
カラム温度：２５℃
カラム: Kromasil Ｃ８（４．６×１５０ｍｍ、５μｍ）
移動相：２０ｍＭ酢酸アンモニウム、ｐＨ５．０／ＡＣＮ（６０／４０）
【００４７】
３．試験結果
本発明の化合物の溶解度を化合物５１６の溶解度と比較して、得られた結果を次の表２に示す。
【００４８】
【表２】
2011515461.tif 000007
【００４９】
表２から分るように、化合物５１６が０．５ｍｇ／ｍＬの極めて低い溶解度を示した一方、本発明の化合物は１０ｍｇ／ｍＬ又はそれ以上の高い溶解度を示した。これは現在入手可能な対照薬物ＡＣ７７００と同等又はそれ以上である（Anticancer Drug Des.1999,Dec;14(6):539-48 を参照されたい)。
【００５０】
試験例２：本発明の化合物のマウスに対する薬学的効果
１．実験動物
Central Lab Animal Inc.から入手した雄性ＢＡＬＢ／ｃヌードマウス（４週齢）をヒト異種移植実験に使用した。隔離された無菌飼育ケージで、マウスに滅菌飼料及び飲水を自由自在に供給して、ケージの温度を２３±０．５℃に維持した。
【００５１】
２．細胞株
異種移植試験のためのヒト癌モデル、ＣＸ−１（ヒト結腸腺癌）をＤＫＦＺ（German Cancer Research Center）から入手し、そしてＨＣＴ−１５（ヒト結腸直腸腺癌）、ＣＣＬ−２２５）及びＡ５４９（ヒト肺癌、ＣＣＬ−１８５）をＡＴＣＣ（American Type Culture Collection, Rockville, MD, USA）から入手した。ヒト癌細胞、ＭＫＮ４５（ヒト胃腺癌、＃８０１０３）及びｃａｌｕ−６（ヒト肺癌、＃３００５６）はＫＣＬＢ（Korean Cell Line Bank)から入手した。
【００５２】
ＣＸ−１を１０％熱不活性化ウシ胎仔血清（Gibco）と１％Antibiotics-Antymycotics（Gibco）を補完したＤＭＥＭ（Dulbecco's Modified Eagle's Medium, Gibco）を使用して、培養器（３７℃、５％ＣＯ2、９５％空気）で培養した。その他の細胞株は１０％ 熱不活性化ウシ胎仔血清（Gibco）と１％Antibiotics-Antymycotics（Gibco）を補完したＲＰＭ１６４０（Gibco BRL）培地を使用して、培養器（３７℃、５％ＣＯ2、９５％空気）で培養した。
【００５３】
３．インビボ抗がん活性
インビボでのヒト異種移植試験を以下の方法で実施した。インビトロで増殖したヒト由来癌細胞株（ＣＸ−１，ＨＣＴ−１５，Ａ５４９，ＭＫＮ４５，ｃａｌｕ−６）をＢＡＬＢ／ｃヌードマウスの腹部に皮下注射してインビボで増殖させた。２０〜２５日目に、マウスを頸椎脱臼法で致死させ、マウスで増殖した固形癌を無菌的に分離して、結合或いは壞死組織又は皮膚を除去した新鮮な癌細胞を採取した。腫瘍の断片をＢＡＬＢ／ｃヌードマウスに移植した。
【００５４】
ヒト由来癌細胞株をＢＡＬＢ／ｃヌードマウスに移植した後１５〜３０日目に、所定のサイズに癌細胞が増殖したマウスを集めて実験に使用した。癌移植後に腫瘍細胞のサイズが１００〜２００ｍｍ３に成長したとき、それぞれの実験群に、投与スケジュールに合わせて薬物をマウス１０ｇ当たり０.１ｍＬの用量で注射した。
【００５５】
投与後、抗腫瘍活性を、最終日に測定した腫瘍体積を対照群の腫瘍体積と比較して得られた腫瘍生育（tumor growth）の抗腫瘍抑制率（inhibition rate,ＩＲ％）で評価した。対照薬物として、現在臨床第ＩＩＩフェーズが進行中の Sanofi-Aventis社のＡＣ７７００を用いた。
腫瘍サイズ ＝（短径）2×（長径）／２
Ｉ．Ｒ．（％）＝［１−（薬物投与群の平均腫瘍サイズ）／（対照群の平均腫瘍サイズ）］×１００
【００５６】
（１）ヒト由来結腸直腸癌モデル（ＣＸ-１）を用いた化合物５１６の薬効試験の結果を次の表３と図１に示す。図１は化合物５１６の各投与日における腫瘍体積を示したグラフである。
【００５７】
【表３】
2011515461.tif 000008
【００５８】
前記表３及び図１から分かるように、ＣＸ-１異種移植モデルの結果において、化合物５１６は対照薬物、ＡＣ７７００と比較して著しく優れた薬効を示したが、インビボにおける強い毒性によって６日目及び７日目に２匹の動物が死亡し、化合物５１６が極めて狭い安全域を有していることを示している。
【００５９】
（２）ヒト由来結腸直腸癌モデル（ＣＸ-１）を用いた化合物６２４、６２５及び６３１の薬効試験の結果を次の表４及び図２に示す。図２は化合物６２４、６２５及び６３１の各投与日における腫瘍体積を示したグラフである。
【００６０】
【表４】
2011515461.tif 000009
【００６１】
前記表４及び図２から分かるように、ＣＸ-１異種移植モデルの結果において、化合物６２４、６２５及び６３１は対照薬物、ＡＣ７７００と比較して著しく優れた薬効を示し、化合物５１６と比較して体重減少もなく、死亡動物もなかった。これはこれらの化合物が顕著に改善された安全性を有していることを示している。特に、化合物６２４は対照薬物の２倍の薬効を示した。
【００６２】
（３）ヒト由来結腸直腸癌モデル（ＨＣＴ-１５）を用いた化合物６２４の薬効試験の結果を次の表５及び図３に示す。図３は化合物６２４の各投与日における腫瘍体積を示したグラフである。
【００６３】
【表５】
2011515461.tif 000010
【００６４】
前記表５及び図３から分かるように、さらに実施したＨＣＴ-１５異種移植モデルの結果においても、化合物６２４は対照薬物と比較して著しく優れた薬効を示した。 
【００６５】
（４）ヒト由来肺癌モデル（Ａ５４９）を用いた化合物６２４の薬効試験の結果を次の表６及び図４に示す。図４は化合物６２４の各投与日における腫瘍体積を示したグラフである。
【００６６】
【表６】
2011515461.tif 000011
【００６７】
前記表６及び図４から分かるように、さらに実施したＡ５４９異種移植モデルの結果においても、化合物６２４は対照薬物と比較して著しく優れた薬効を示した。
【００６８】
（５）ヒト由来胃癌モデル（ＭＫＮ４５）を用いた化合物６２４の薬効試験の結果を次の表７及び図５に示す。図５は化合物６２４の各投与日における腫瘍体積を示したグラフである。
【００６９】
【表７】
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【００７０】
前記表７及び図５から分かるように、さらに実施したＭＫＮ４５異種移植モデルの結果においても、化合物６２４は対照薬物と比較して著しく優れた薬効を示した。
【００７１】
（６）ヒト由来非小細胞肺癌モデル（ｃａｌｕ−６）を用いた化合物６２４の薬効試験の結果を次の表８及び図６に示す。図６は化合物６２４の各投与日にける腫瘍体積を示したグラフである。
【００７２】
【表８】
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【００７３】
前記表８及び図６から分かるように、さらに実施したｃａｌｕ−６異種移植モデルの結果においても、化合物６２４は対照薬物と比較して著しく優れた薬効を示した。
【産業上の利用可能性】
【００７４】
本発明は悪性腫瘍、ウィルス及び細菌感染、再発性血管閉塞、炎症性疾患、自己免疫疾患及び乾癬の治療剤に適用可能である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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