(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
分子複合体を介して、標識分子を担体に固相化してなる固相化担体であって、
前記分子複合体は、ゲスト分子構造と、該ゲスト分子構造に一端部が結合された直鎖状構造とを含む第１の分子と、
シクロデキストリン構造を含み、該シクロデキストリン構造が有する空孔を前記第１の分子の前記直鎖状構造が貫通した状態で、該直鎖状構造の鎖長方向の途中に位置する少なくとも１つの第２の分子と、
空孔内に前記ゲスト分子構造を包接して、前記第２の分子の前記シクロデキストリン構造が前記第１の分子から離脱するのを阻止するキュカービチュリル構造を含む第３の分子とを備え、
前記第１の分子の前記直鎖状構造の他端部および前記第２の分子の前記シクロデキストリン構造のいずれか一方が前記担体に結合され、他方が前記標識分子に結合されていることを特徴とする固相化担体。
【請求項２】
前記第１の分子の前記直鎖状構造の他端部が前記担体に結合され、かつ、前記第２の分子の前記シクロデキストリン構造が前記標識分子に結合された状態となっている請求項１に記載の固相化担体。
【請求項３】
前記第１の分子の前記直鎖状構造が、複数の前記第２の分子の各前記シクロデキストリン構造の空孔を貫通している請求項２に記載の固相化担体。
【請求項４】
前記第２の分子の前記シクロデキストリン構造が前記担体に結合され、かつ、前記第１の分子の前記直鎖状構造の他端部が前記標識分子に結合され、
前記第２の分子は、さらに、前記シクロデキストリン構造と前記担体とを接続する接続構造を含む請求項１に記載の固相化担体。
【請求項５】
前記第１の分子の前記ゲスト分子構造は、前記第２の分子の前記シクロデキストリン構造に対する親和性より、前記第３の分子の前記キュカービチュリル構造に対する親和性の方が高い請求項１ないし４のいずれかに記載の固相化担体。
【請求項６】
前記第２の分子の前記シクロデキストリン構造を構成するグルコース単位の数をＡとし、前記第３の分子の前記キュカービチュリル構造を構成するグライコウリル単位の数をＢとしたとき、Ｂ／Ａが０．７〜１．３なる関係を満足する請求項５に記載の固相化担体。
【請求項７】
前記第３の分子の前記キュカービチュリル構造は、これを構成するグライコウリル単位の数が７である請求項５または６に記載の固相化担体。
【請求項８】
前記第１の分子の前記ゲスト分子構造は、アダマンチル構造である請求項７に記載の固相化担体。
【請求項９】
請求項１ないし８のいずれかに記載の固相化担体の製造方法であって、
前記第１の分子および前記第２の分子のいずれか一方が結合された前記担体と、他方が結合された前記標識分子とを用意する工程と、
前記第１の分子と前記第２の分子とを接触させることにより、前記シクロデキストリン構造で前記ゲスト分子構造を包接した包接状態を形成する工程と、
該包接状態の前記第１および第２の分子に、前記第３の分子を接近させることにより、前記シクロデキストリン構造と前記キュカービチュリル構造との前記ゲスト分子構造に対する親和性の差を利用して、前記キュカービチュリル構造で前記シクロデキストリン構造を前記第１の分子の前記直鎖状構造の他端部側に押しやるとともに、前記ゲスト分子構造を包接することにより前記分子複合体を形成し、前記固相化担体を得る工程とを有することを特徴とする固相化担体の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、固相化担体および固相化担体の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
シクロデキストリンは、内部の疎水性空間（空孔）内に、ゲスト分子を包接することができる環状化合物であり、化学修飾も比較的容易であることから、有機合成分野、食品分野、医薬品分野、化粧品分野等の各種分野で利用されるに至っている（例えば、特許文献１参照）。
【０００３】
しかしながら、シクロデキストリンとゲスト分子との相互作用（親和性）は、外部の阻害要因に影響を受け易く、ゲスト分子がシクロデキストリンから容易に離脱する場合がある。
【０００４】
したがって、生化学分野のように、シクロデキストリン（シクロデキストリン構造）とゲスト分子（ゲスト分子構造）との間に、比較的強力な相互作用が要求される分野においては、その利用が制限されるという問題がある。
【０００５】
例えば、標識分子を結合させたシクロデキストリン構造で、担体に結合させたゲスト分子構造を包摂し、標識分子を担体に固相化した場合には、標識分子が担体から容易に離脱して、担体が使用に適さなくなるという問題がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２０００−３１９２８０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の目的は、標識分子が安定的に担体に固相化された固相化担体、および、かかる固相化担体を容易かつ低コストで製造し得る固相化担体の製造方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
このような目的は、下記（１）〜（９）に記載の本発明により達成される。
（１）  分子複合体を介して、標識分子を担体に固相化してなる固相化担体であって、
前記分子複合体は、ゲスト分子構造と、該ゲスト分子構造に一端部が結合された直鎖状構造とを含む第１の分子と、
シクロデキストリン構造を含み、該シクロデキストリン構造が有する空孔を前記第１の分子の前記直鎖状構造が貫通した状態で、該直鎖状構造の鎖長方向の途中に位置する少なくとも１つの第２の分子と、
空孔内に前記ゲスト分子構造を包接して、前記第２の分子の前記シクロデキストリン構造が前記第１の分子から離脱するのを阻止するキュカービチュリル構造を含む第３の分子とを備え、
前記第１の分子の前記直鎖状構造の他端部および前記第２の分子の前記シクロデキストリン構造のいずれか一方が前記担体に結合され、他方が前記標識分子に結合されていることを特徴とする固相化担体。
【０００９】
（２）  前記第１の分子の前記直鎖状構造の他端部が前記担体に結合され、かつ、前記第２の分子の前記シクロデキストリン構造が前記標識分子に結合された状態となっている上記（１）に記載の固相化担体。
【００１０】
（３）  前記第１の分子の前記直鎖状構造が、複数の前記第２の分子の各前記シクロデキストリン構造の空孔を貫通している上記（２）に記載の固相化担体。
【００１１】
（４）  前記第２の分子の前記シクロデキストリン構造が前記担体に結合され、かつ、前記第１の分子の前記直鎖状構造の他端部が前記標識分子に結合され、
前記第２の分子は、さらに、前記シクロデキストリン構造と前記担体とを接続する接続構造を含む上記（１）に記載の固相化担体。
【００１２】
（５）  前記第１の分子の前記ゲスト分子構造は、前記第２の分子の前記シクロデキストリン構造に対する親和性より、前記第３の分子の前記キュカービチュリル構造に対する親和性の方が高い上記（１）ないし（４）のいずれかに記載の固相化担体。
【００１３】
（６）  前記第２の分子の前記シクロデキストリン構造を構成するグルコース単位の数をＡとし、前記第３の分子の前記キュカービチュリル構造を構成するグライコウリル単位の数をＢとしたとき、Ｂ／Ａが０．７〜１．３なる関係を満足する上記（５）に記載の固相化担体。
【００１４】
（７）  前記第３の分子の前記キュカービチュリル構造は、これを構成するグライコウリル単位の数が７である上記（５）または（６）に記載の固相化担体。
【００１５】
（８）  前記第１の分子の前記ゲスト分子構造は、アダマンチル構造である上記（７）に記載の固相化担体。
【００１６】
（９）  上記（１）ないし（８）のいずれかに記載の固相化担体の製造方法であって、
前記第１の分子および前記第２の分子のいずれか一方が結合された前記担体と、他方が結合された前記標識分子とを用意する工程と、
前記第１の分子と前記第２の分子とを接触させることにより、前記シクロデキストリン構造で前記ゲスト分子構造を包接した包接状態を形成する工程と、
該包接状態の前記第１および第２の分子に、前記第３の分子を接近させることにより、前記シクロデキストリン構造と前記キュカービチュリル構造との前記ゲスト分子構造に対する親和性の差を利用して、前記キュカービチュリル構造で前記シクロデキストリン構造を前記第１の分子の前記直鎖状構造の他端部側に押しやるとともに、前記ゲスト分子構造を包接することにより前記分子複合体を形成し、前記固相化担体を得る工程とを有することを特徴とする固相化担体の製造方法。
【発明の効果】
【００１７】
本発明の固相化担体の構成とすることで、標識分子が安定的に担体に固相化された固相化担体とすることができる。
【００１８】
また、本発明の固相化担体の製造方法によれば、標識分子を容易かつ安定的に担体に固相化することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】本発明の固相化担体の第１実施形態の構成を示す概念図である。
【図２】図１に示す固相化担体の製造方法を説明するための概念図である。
【図３】本発明の固相化担体の第２実施形態の構成を示す概念図である。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
以下、本発明の固相化担体および固相化担体の製造方法を添付図面に示す好適な実施形態に基づいて詳細に説明する。
【００２１】
＜第１実施形態＞
図１は、本発明の固相化担体の第１実施形態の構成を示す概念図、図２は、図１に示す固相化担体の製造方法を説明するための概念図である。
【００２２】
図１に示す固相化担体１は、分子複合体２を介して、標識分子１０を担体１００に固相化してなるものである。
【００２３】
標識分子１０としては、例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡのような核酸、抗原、抗体、酵素のようなタンパク質およびペプチド、アミノ酸等の生理活性物質や、その他、グルコース、セルロースのような糖、Ｃｙ３、Ｃｙ５のような蛍光色素等が挙げられる。
【００２４】
一方、担体１００としては、例えば、カラムの充填剤として用いる粒子、マイクロプレート、基板上に設けられた電極、樹脂基板、スライドガラス、遠沈管、マイクロチューブ等の容器表面、金属およびポリマーマトリックス等が挙げられる。
【００２５】
具体的には、このような固相化担体１は、例えば、基板上に設けられた電極にＤＮＡを固相化したものは、ＤＮＡチップとして、マイクロプレートのウェル内に抗体を固相化したものは、放射免疫測定法（ＲＩＡ）や酵素結合免疫吸着法（ＥＬＩＳＡ）用の試験器具として用いることができる。
【００２６】
分子複合体２は、標識分子１０を担体１００に固定するためのものであり、本発明では、担体１００に結合された第１の分子３と、標識分子１０が結合された第２の分子４と、第２の分子４が第１の分子３から離脱するのを阻止する第３の分子５とで構成されている。
【００２７】
第１の分子３は、ゲスト分子構造３１と、このゲスト分子構造３１に一端部が結合された直鎖状構造３２とを含んでおり、直鎖状構造３２の他端部が担体１００に結合されている。
【００２８】
ゲスト分子構造３１は、後述する第２の分子４のシクロデキストリン（Ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ）構造４１および第３の分子５のキュカービチュリル（Ｃｕｃｕｒｂｉｔｕｒｉｌ）構造５１によって包摂され得る化学構造である。
【００２９】
このゲスト分子構造３１としては、シクロデキストリン構造４１およびキュカービチュリル構造５１の双方に包摂可能な構造であれば、特に限定されず、図１に示したアダマンチル構造の他、例えば、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２００５、１２７（４５）、１５９５９−１５９６７に記載されているような糖構造、芳香族構造、芳香族多環構造および縮合環化構造等が挙げられる。これらの中でも、ゲスト分子構造３１としては、アダマンチル構造が好ましい。アダマンチル構造は、シクロデキストリン構造４１およびキュカービチュリル構造５１の双方に認識され易く、かつ、シクロデキストリン構造４１に対する親和性（相互作用）より、キュカービチュリル構造５１に対する親和性の方が高いことから、本発明に好適に用いることができる。
【００３０】
また、一端部がゲスト分子構造３１に結合された直鎖状構造３２は、図１に示すように、その他端部が担体１００の表面に結合されている。
【００３１】
図１に示す構成の第１の分子３は、例えば、ハロゲン基を導入したゲスト分子構造３１と、一端部にアミノ基を導入した直鎖状構造３２とを反応させることにより得ることができる。具体的には、特開２０１０−３１２８４号公報等に開示された方法を利用することができる。
【００３２】
一方、直鎖状構造３２の他端部には、カルボキシル基を導入しておき、これにより、表面にアミノ基を有する担体１００との間でアミド結合を形成することで、第１の分子３を担体１００に結合させている。なお、例えば、担体１００が金電極である場合、直鎖状構造３２の他端部にチオール基を導入しておけば、第１の分子３は、金電極との間に強固な金チオール結合を形成する。
【００３３】
直鎖状構造３２としては、図１に示すエチレングリコール単位を有する構造の他、例えば、飽和炭化水素構造、不飽和炭化水素構造等が挙げられる。また、炭化水素構造および不飽和炭化水素構造は、その鎖の途中に、例えば、酸素原子、硫黄原子、窒素原子等を含んでいてもよく、また、一部の水素原子が置換基によって置換されていてもよい。
【００３４】
ただし、図１に示すような、直鎖状構造３２がエチレングリコール単位を有する構造の場合、第１の分子３全体として水への親和性が高くなる。また、後述するように、第２の分子４および第３の分子５も水への親和性が高いため、固相化担体１の製造を、水系溶媒を用いて行うことができるようになり、その製造が容易となるとともに、コストの削減にも寄与する。
【００３５】
また、直鎖状構造３２の鎖長は、直鎖状（直線状）に結合された原子の数で表すことができ、かかる原子の数は、特に限定されないが、５〜４０程度であるのが好ましく、１０〜２０程度であるのがより好ましい。かかる範囲とすることにより、図１に示すように、シクロデキストリン構造４１を直鎖状構造３２の鎖長方向の途中に確実に位置させることができる。また、この場合、固相化担体１の製造過程において、直鎖状構造３２が途中で屈曲または湾曲して、ゲスト分子構造３１が担体１００の表面に付着（例えば、吸着、結合等）するのを防止することができ、結果として、固相化担体１を確実に得ることができる。
【００３６】
また、直鎖状構造３２の鎖長を長くすれば、直鎖状構造３２の鎖長方向の途中に、複数のシクロデキストリン構造４１（第２の分子４）を位置させることができるようになる。この場合、担体１００に固相化する標識分子１０の数を増大させることができるので、固相化担体１を用いたより精度（感度）の高い試験を行うことができる。なお、直鎖状構造３２が図１に示すように、エチレングリコール単位を有する構成の場合、エチレングリコール単位の数を設定することにより、直鎖状構造３２の鎖長の設定が可能である。
【００３７】
以上のような構成の第１の分子３の直鎖状構造３２の鎖長方向の途中には、図１に示すように、第２の分子４が位置している。
【００３８】
この第２の分子４は、本実施形態では、シクロデキストリン構造４１を含み、このシクロデキストリン構造４１に標識分子１０が結合されている。
【００３９】
シクロデキストリン構造４１（シクロデキストリン）は、複数のグルコース単位が環状に結合してなる化合物である。図１では、シクロデキストリン構造４１を、円錐台形状をなす図形で表してある。このシクロデキストリン構造４１は、その内側の疎水性の空孔内に、ゲスト分子構造３１を包摂することができる。
【００４０】
本実施形態では、図１に示すように、シクロデキストリン構造４１の空孔を第１の分子３の直鎖状構造３２が貫通した状態となっている。
【００４１】
シクロデキストリン構造４１を構成するグルコース単位の数は、ゲスト分子構造３１のサイズに応じて選択されるものであり、特に限定されないが、６〜１０であるのが好ましい。これにより、シクロデキストリン構造４１がゲスト分子構造３１を包摂する機能を有しつつ、この空孔にゲスト分子構造３１を貫通させて、直鎖状構造３２が貫通した状態とさせることができる。
【００４２】
なお、ゲスト分子構造３１がアダマンチル構造である場合、グルコース単位の数は、７（β−シクロデキストリン構造）または８（γ−シクロデキストリン構造）であるのが好ましい。かかるシクロデキストリン構造４１は、アダマンチル構造に対する適度な結合定数（相互作用）を有するためである。
【００４３】
このシクロデキストリン構造４１に、図１に示す構成では、標識分子１０としてＣｙ３（蛍光色素）が結合されている。
【００４４】
なお、図１に示す構成の第２の分子４は、アミノ基を導入したシクロデキストリンと、Ｃｙ３とを反応させることにより得ることができる。具体的には、特開２０１０−３１２８４号公報等に開示された方法を利用することができる。
【００４５】
第１の分子３のゲスト分子構造３１は、第３の分子５により包摂（キャップ）されている。このため、第３の分子５が障害となって、第２の分子４のシクロデキストリン構造４１が、第１の分子３の直鎖状構造３２の担体１００と反対側（一端部側）への移動が規制さる。その結果、第２の分子４が第１の分子３から離脱するのが阻止されている。これにより、第２の分子４に結合された標識分子１０を担体１００に確実に固相化（固定化）することができる。
【００４６】
本実施形態において、この第３の分子５は、キュカービチュリル構造５１で構成されている。
【００４７】
キュカービチュリル構造５１（キュカービチュリル）は、複数のグライコウリル単位が環状に結合してなる化合物である。図１では、キュカービチュリル構造５１を、樽状をなす図形で表してある。このキュカービチュリル構造５１は、その内側の疎水性の空洞（空孔）内に、ゲスト分子構造３１を包摂することができる。
【００４８】
キュカービチュリル構造５１のゲスト分子構造３１に対する選択性および親和性（結合定数）は、シクロデキストリン構造４１のゲスト分子構造３１に対する選択性および親和性より高いため、シクロデキストリン構造４１がゲスト分子構造３１を包摂していても、このシクロデキストリン構造４１を押し退け、キュカービチュリル構造５１が優先的にゲスト分子構造３１を包摂することができる。
【００４９】
このような関係は、シクロデキストリン構造４１とキュカービチュリル構造５１との構造の違いのみならず、それらのサイズの違いにも依存すると推察される。このため、シクロデキストリン構造４１を構成するグルコース単位の数をＡとし、キュカービチュリル構造５１を構成するグライコウリル単位の数をＢとしたとき、Ｂ／Ａが０．７〜１．３なる関係を満足するのが好ましい。かかる関係を満足することにより、キュカービチュリル構造５１がさらに優先的にゲスト分子構造３１を包摂することができるようになる。具体的なグライコウリル単位の数は、５〜１０が好ましい。
【００５０】
なお、ゲスト分子構造３１がアダマンチル構造である場合、前記Ｂ／Ａは、１．０〜１．２なる関係を満足するのが好ましく、具体的なグライコウリル単位の数は、７であるのが好ましい。かかるキュカービチュリル構造５１は、アダマンチル構造に対して特に優れた結合定数（相互作用）を有するものとなる。
【００５１】
このような固相化担体１は、例えば、次のようにして製造することができる。
［１］  まず、図２（ａ）に示すように、第１の分子３が結合された担体１００と、標識分子１０が結合された第２の分子４とを用意する。
【００５２】
［２］  次に、第１の分子３と第２の分子４とを接触させる。これにより、図２（ｂ）に示すように、第２の分子４のシクロデキストリン構造４１で、第１の分子３のゲスト分子構造３１を包摂し、包摂状態（第１の包摂化合物）を形成する。
【００５３】
本工程［２］は、例えば、担体１００が粒子の場合、第２の分子４を溶解した溶液に担体１００を浸漬する方法、担体１００がマイクロプレートである場合、前記溶液をウェル内に供給する方法等を用いて行うことができる。
【００５４】
なお、第２の分子４は、複数の水酸基が露出するシクロデキストリン構造４１を有するため、水への溶解性が高く、図１に示す第１の分子３も、直鎖状構造３２にエチレングリコール単位を有するため、水への溶解性が高い。
【００５５】
したがって、第２の分子４を溶解する溶媒としては、水系溶媒を用いることができ、具体的には、例えば、蒸留水、イオン交換水、ＲＯ水のような水、メタノール、エタノールのような低級アルコール、アセトンのような極性溶媒等のうちの１種または２種以上を組み合わせて用いることができる。また、かかる水系溶媒には、電解質が含まてていてもよい。
【００５６】
また、本工程［２］では、インキュベーションを行うようにしてもよい。この際の加熱条件は、例えば、温度１０〜８０℃×時間０．５〜３時間程度とすることができる。
【００５７】
さらに、次工程［３］に先立って、担体１００を、例えば、前述のような水系溶媒を用いて、洗浄するようにしてもよい。
【００５８】
［３］  次に、包摂状態の第１および第２の分子３、４に、第３の分子５を接近させる。前述したように、キュカービチュリル構造５１のゲスト分子構造３１に対する相互作用は、シクロデキストリン構造４１のゲスト分子構造３１に対する相互作用よりも強い。このため、図２（ｃ）に示すように、キュカービチュリル構造５１は、シクロデキストリン構造４１を第１の分子３の直鎖状構造３２側へ押しやり、自身がゲスト分子構造３１を包摂する。これにより、分子複合体２が形成される。
【００５９】
本工程［３］も、例えば、担体１００が粒子の場合、第３の分子５を溶解した溶液に担体１００を浸漬する方法、担体１００がマイクロプレートである場合、前記溶液をウェル内に供給する方法等を用いて行うことができる。
【００６０】
第３の分子５のキュカービチュリル構造５１も、非共有電子対を持つ酸素原子および窒素原子を多く含むため、水への溶解性が高い。したがって、第３の分子５を溶解する溶媒としても、前述したような水系溶媒を用いることができる。
【００６１】
また、本工程［３］でも、インキュベーションを行うようにしてもよい。この際の加熱条件は、例えば、温度１０〜８０℃×時間０．５〜３時間程度とすることができる。
【００６２】
以上のようにして、固相化担体１が得られる。得られた固相化担体１は、例えば、前述のような水系溶媒を用いて、洗浄するようにしてもよい。
【００６３】
ところで、固相化担体１を、このような構成とするのは、次のような理由による。
すなわち、シクロデキストリン構造４１（シクロデキストリン）は、化学修飾が比較的容易である。このため、標識分子１０を、直接シクロデキストリン構造４１に導入（化学修飾）した分子を作成（合成）し、かかる分子で担体１００に結合させた第１の分子３のゲスト分子構造３１を包摂することにより、固相化担体とすることも考えられる。
【００６４】
しかしながら、シクロデキストリン構造４１とゲスト分子構造３１との相互作用（親和性）は、外部の阻害要因に影響を受け易いため、シクロデキストリン構造４１がゲスト分子構造３１から容易に離脱することがある。すなわち、標識分子１０を担体１００に安定的に固相化することが困難である。
【００６５】
一方で、キュカービチュリル構造５１（キュカービチュリル）は、シクロデキストリン構造４１（シクロデキストリン）と比較して、ゲスト分子構造３１に対する選択性および相互作用（親和性）が高い。このため、標識分子１０を、直接キュカービチュリル構造５１に導入（化学修飾）した分子を作成（合成）し、かかる分子で担体１００に結合させた第１の分子３のゲスト分子構造３１を包摂することにより、固相化担体とすることも考えられる。
【００６６】
しなしながら、標識分子１０を、直接キュカービチュリル構造５１に導入（化学修飾）するのは、シクロデキストリン構造４１と比較して容易ではなく、また、複雑な工程を経る必要があるという問題がある。すなわち、固相化担体の製造コストが高くつく。
【００６７】
これに対して、本願発明では、シクロデキストリン構造４１に標識分子１０を導入し、このシクロデキストリン構造４１を第１の分子３で串刺の状態（貫通させた状態）として、その開放端を第３の分子５（無修飾のキュカービチュリル構造５１）でキャップする。
【００６８】
これにより、標識分子１０を担体１００に対して確実かつ安定的に固相化することができる。また、製造にコストを要する標識分子１０を導入したキュカービチュリル構造５１を製造（合成）する必要がないので、固相化担体１を容易かつ低コストで製造することができる。
【００６９】
＜第２実施形態＞
図３は、本発明の固相化担体の第２実施形態の構成を示す概念図である。
【００７０】
以下、本発明の第２実施形態について説明するが、前記第１実施形態との相違点を中心に説明し、同様の事項については、その説明を省略する。
【００７１】
図３に示すように、第２実施形態の固相化担体１は、分子複合体２の構成が異なり、それ以外は、第１実施形態の固相化担体１と同様である。
【００７２】
すなわち、第２実施形態では、第１の分子３の直鎖状構造３２の他端部に、標識分子１０が結合され、第２の分子４のシクロデキストリン構造４１が接続構造４２を介して担体１００に結合されている。
【００７３】
第２の分子４の接続構造４２としては、前記第１実施形態で挙げた第１の分子３の直鎖状構造３２と同様とすることができる。かかる第２の分子４も、特開２０１０−３１２８４号公報等に開示された方法を利用して合成することができる。
【００７４】
第２実施形態では、担体１００に結合されたシクロデキストリン構造４１の空孔を、第１の分子３の直鎖状構造３２が貫通した状態となっており、この直鎖状構造３２の一端部に結合されたゲスト分子構造３１が第３の分子５で包摂（キャップ）され、他端部には標識分子１０が結合（キャップ）されている。
【００７５】
これにより、第１の分子３の直鎖状構造３２は、いずれの方向からもシクロデキストリン構造４１を通過することが阻止される。すなわち、第１の分子３が第２の分子４から離脱するのが防止される。これにより、標識分子１０が確実に担体１００に固相化される。
【００７６】
このような第２実施形態の固相化担体１においても、前記第１実施形態と同様の作用、効果が得られる。
なお、かかる固相化担体１も、前記第１実施形態と同様にして製造することができる。
【００７７】
以上、本発明の固相化担体および固相化担体の製造方法を図示の実施形態について説明したが、本発明は、これに限定されるものではなく、固相化担体を構成する各部は、同様の機能を発揮し得る任意の構成のものと置換することができる。また、任意の構成が付加されていてもよい。
また、固相化担体の製造方法には、任意の工程が追加されてもよい。
【実施例】
【００７８】
次に、本発明の具体的な実施例について説明する。
１．固相化基板（固相化担体）の製造
アダマンタン誘導体（第１の分子）の基板（担体）への固定化
まず、３ｍｇ／ｍＬのアダマンタン誘導体水溶液１ｍＬと、０．２Ｍの１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＷＳＣ）水溶液１ｍＬとを混合し、リン酸緩衝液（ｐＨ９．０）１ｍＬを添加した。
【００７９】
次に、この溶液を、表面にアミノ基を有する樹脂製基板にスポットし、８０℃で１時間インキュベートした。その後、ＰＢＳＴ溶液で３回洗浄した後、乾燥させた。
【００８０】
β−シクロデキストリンの蛍光標識化
まず、３Ａ−アミノ−３Ａ−デオキシ−（２ＡＳ，３ＡＳ）−β−シクロデキストリン水和物３００ｍｇをジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）に溶解し、この溶液に、シアン  ３  単官能ヘキサン酸色素  サクシニミジルエステルを溶解したＤＭＦを添加し、室温で２４時間攪拌した。
【００８１】
次に、減圧下に、得られた反応液から溶媒を除去し、真空乾燥した後、蒸留水に溶解し、カラム精製を行った。溶出液から溶媒を除去し、真空乾燥することにより、蛍光標識化されたβ−シクロデキストリン（ＣＤ−Ｃｙ３：第２の分子）を得た。
【００８２】
（実施例）
アダマンタン誘導体が固定された基板を、５．７ｍＭのＣＤ−Ｃｙ３水溶液１００μＬに浸漬し、室温で１時間インキュベートした後、１０ｍＭのキュカービット［７］ウリル（Ｃｕｃｕｒｂｉｔ［７］ｕｒｉｌ：ＣＢ［７］：第３の分子）水溶液１００μＬを添加し、さらに室温で１時間インキュベートした。その後、基板を超純水で洗浄した後、乾燥した。
これにより、実施例の固相化基板を得た。
【００８３】
（比較例）
アダマンタン誘導体が固定された基板を、５．７ｍＭのＣＤ−Ｃｙ３水溶液１００μＬに浸漬し、室温で２時間インキュベートした。その後、基板を超純水で洗浄した後、乾燥した。
これにより、比較例の固相化基板を得た。
【００８４】
２．固相化基板の評価
マイクロアレイ用スキャナ（Ｐａｃｋａｒｄ ＢｉｏＣｈｉｐ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社製マイクロアレイスキャナー「ＳｃａｎＡｒｒａｙ」）を用いて、実施例および比較例で得られた固相化基板のスポットの蛍光を検出した。
【００８５】
その結果、比較例の固相化基板では、蛍光強度が１０００程度と、蛍光がほとんど観察されなかった。これは、ＣＤ−Ｃｙ３と基板に固定化されたアダマンタン誘導体との相互作用がほとんどなく、ＣＤ−Ｃｙ３がアダマンタン誘導体から離脱してしまったことが要因であると考えられる。
【００８６】
一方、実施例の固相化基板では、蛍光強度が１００００程度と、蛍光が観察された。これは、ＣＢ［７］がアダマンタン誘導体と相互作用することにより、ＣＤ−Ｃｙ３のアダマンタン誘導体からの離脱を阻止しているものと考えられる。
【００８７】
なお、前記実施例および比較例と同様にして、図３に示すような構成の固相化基板を製造したが、前記と同様の結果が得られた。
【符号の説明】
【００８８】
１            固相化担体
２            分子複合体
３            第１の分子
３１          ゲスト分子構造
３２          直鎖状構造
４            第２の分子
４１          シクロデキストリン構造
４２          接続構造
５            第３の分子
５１          キュカービチュリル構造
１０          標識分子
１００        担体
【図１】
0005703129.tif 000002
【図２】
0005703129.tif 000003
【図３】
0005703129.tif 000004