(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化４７】
0005656288.tif 000067
の化合物、または医薬として許容されるその塩であって、
Ｒ１は−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ２〜６アルケニル、−Ｃ３〜９シクロアルキル、およびヘテロアリールから選択され；Ｒ２はアリールおよびヘテロアリールから選択され；Ｒ３はＨおよび−Ｃ０〜１アルキレン−ＯＨから選択される、またはＲ３はＲ１と二重結合を形成するか；或いは−ＣＲ１Ｒ２Ｒ３は、式：
【化４８】
0005656288.tif 000068
の基であって、Ａは結合、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＮＨ−、および−Ｎ（ＣＨ３）−から選択され；Ｒ４はＨ、ハロ、−ＯＨ、−Ｃ１〜８アルキル、および−Ｃ１〜８アルコキシから選択される基を一緒に形成し；
Ｘは結合であり、Ｙは−ＣＨ２−であり、Ｙ’は−Ｎ−であり、Ｙ”は−ＣＨ２−であり；
Ｒ５はフルオロおよび−Ｃ１〜４アルキルから選択され；ａは０か、または１から３までの整数であり、
Ｒ６およびＲ７は、Ｈおよび−Ｃ１〜４アルキルから独立に選択され、さらにＲ６またはＲ７のうち1つは−ＮＨ２であってもよく；
ＺはＨ、−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ１〜３アルキレン−Ｑ、および−ＮＨ−Ｃ０〜１アルキレン−Ｑから選択され；Ｑは−Ｃ３〜７シクロアルキル、アリール、およびヘテロアリールから選択され；Ｑはハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、シアノ、−Ｃ０〜２アルキレン−ＣＯＯＨ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、−ＣＯＮＲ８ａＲ８ｂ、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜４アルキル、−Ｎ−ジ−Ｃ１〜４アルキル、および−Ｎ＋（Ｏ）Ｏから独立に選択された１〜５個のＲ８基で任意に置換されており；Ｒ８ａおよびＲ８ｂは、Ｈおよび−Ｃ１〜４アルキルから独立に選択され；
Ｒ１およびＲ２は、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、−Ｃ３〜６シクロアルキル、シアノ、ハロ、−ＯＲｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｂ、−ＳＲｂ、−Ｓ（Ｏ）Ｒｂ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｂ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｄ，および−ＮＲｃＲｄから独立に選択された１から５個までのＲａ基で任意に置換されており；各Ｒｂは、Ｈ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、および−Ｃ３〜６シクロアルキルから独立に選択され；各ＲｃおよびＲｄは、Ｈ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、および−Ｃ３〜６シクロアルキルから独立に選択され、
Ｒａ〜ｄ、Ｒ４〜８およびＺにおける各アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アルキレン基、およびシクロアルキル基は、１から５個までのフルオロ原子で任意に置換されている基であって、Ｒａ〜ｄにおける各シクロアルキルは、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、シアノ、ハロ、−Ｏ（Ｃ１〜４アルキル）、−Ｓ（Ｃ１〜４アルキル）、−Ｓ（Ｏ）（Ｃ１〜４アルキル）、−Ｓ（Ｏ）２（Ｃ１〜４アルキル）、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜４アルキル）、および−Ｎ（Ｃ１〜４アルキル）２から独立に選択された１から３個までの置換基で任意に置換されており、各アルキル基、アルケニル基およびアルキニル基は、１から５個までのフルオロ置換基で任意に置換されており；Ｚにおける前記アルキレン基は、−Ｃ１〜２アルキルおよび−ＯＨから独立に選択された１または２個の置換基で任意に置換されている、
化合物、または医薬として許容されるその塩。
【請求項２】
Ｒ１はイソブチル、シクロペンチル、またはチオフェニルである、請求項１に記載の化合物、または医薬として許容されるその塩。
【請求項３】
Ｒ２はフェニルまたはチオフェニルである、請求項１に記載の化合物、または医薬として許容されるその塩。
【請求項４】
Ｒ３は−ＯＨであるか、または−ＣＲ１Ｒ２Ｒ３は一緒に：
【化４９】
0005656288.tif 000069
を形成する、請求項１に記載の化合物、または医薬として許容されるその塩。
【請求項５】
ａは０である、請求項１に記載の化合物、または医薬として許容されるその塩。
【請求項６】
Ｒ６はＨまたは−Ｃ１〜４アルキルであり、Ｒ７はＨである、請求項１に記載の化合物、または医薬として許容されるその塩。
【請求項７】
Ｑはシクロヘキシル、シクロヘプチル、フェニル、ベンゾジオキソリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、フラニル、インドリル、ピラゾリル、ピリジニル、チアゾリル、またはチオフェニルである、請求項１に記載の化合物、または医薬として許容されるその塩。
【請求項８】
Ｑはハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、シアノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、および−ＣＯＮＨ２から独立に選択された１〜２個のＲ８基で任意に置換されている、請求項１に記載の化合物、または医薬として許容されるその塩。
【請求項９】
Ｒ１はイソブチル、シクロペンチル、またはチオフェニルであり；Ｒ２はフェニルまたはチオフェニルであり；Ｒ３は−ＯＨであるか；または−ＣＲ１Ｒ２Ｒ３は一緒に式：
【化５０】
0005656288.tif 000070
の基を形成し；ａは０であり；Ｒ６はＨまたは−Ｃ１〜４アルキルであり；Ｒ７はＨであり；ＺはＨ、−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ１〜３アルキレン−Ｑ、または−ＮＨ−Ｃ０〜１アルキレン−Ｑであり；Ｑはシクロヘキシル、シクロヘプチル、フェニル、ベンゾジオキソリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、フラニル、インドリル、ピラゾリル、ピリジニル、チアゾリル、またはチオフェニルであり；Ｑはハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、シアノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキルおよび−ＣＯＮＨ２から独立に選択された１〜２個のＲ８基で任意に置換されており；Ｒ８における前記アルキル基は１から５個のフルオロ原子で任意に置換されている、請求項１に記載の化合物、または医薬として許容されるその塩。
【請求項１０】
Ｒ１はシクロペンチルまたはチオフェニルであり、Ｒ２はフェニルまたはチオフェニルであり；Ｒ３は−ＯＨであり；Ｒ６はＨまたは−Ｃ１〜２アルキルであり；Ｒ７はＨであり；Ｚは−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ１〜３アルキレン−Ｑ、または−ＮＨ−Ｃ０〜１アルキレン−Ｑであり；Ｑはシクロヘキシル、シクロヘプチル、フェニル、ベンゾジオキソリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、フラニル、インドリル、ピラゾリル、ピリジニル、チアゾリル、またはチオフェニルであり；Ｑはハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、シアノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、および−ＣＯＮＨ２から独立に選択された１〜２個のＲ８基で任意に置換されており、Ｒ８における前記アルキル基は、１から５個のフルオロ原子で任意に置換されている、請求項１に記載の化合物、または医薬として許容されるその塩。
【請求項１１】
式：
【化５２】
0005656288.tif 000071
を有する、請求項１に記載の化合物、または医薬として許容されるその塩。
【請求項１２】
Ｒ６はＨまたは−Ｃ１〜２アルキルであり；Ｚは−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ１〜３アルキレン−Ｑ、または−ＮＨ−Ｃ０〜１アルキレン−Ｑであり；Ｑはシクロヘキシル、シクロヘプチル、フェニル、ベンゾジオキソリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、フラニル、インドリル、ピラゾリル、ピリジニル、チアゾリル、またはチオフェニルであり；Ｑはハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、シアノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、および−ＣＯＮＨ２から独立に選択された１〜２個のＲ８基で任意に置換されており；Ｒ８における前記アルキル基は、１から５個のフルオロ原子で任意に置換されている、請求項１１に記載の化合物、または医薬として許容されるその塩。
【請求項１３】
式：
【化５３】
0005656288.tif 000072
を有する、請求項１に記載の化合物、または医薬として許容されるその塩。
【請求項１４】
Ｑはシクロヘキシル、シクロヘプチル、フェニル、ベンゾジオキソリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、フラニル、インドリル、ピラゾリル、ピリジニル、チアゾリル、またはチオフェニルであり；Ｑはハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、シアノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、および−ＣＯＮＨ２から独立に選択された１〜２個のＲ８基で任意に置換されており、Ｒ８における前記アルキル基は、１から５個のフルオロ原子で任意に置換されている、請求項１３に記載の化合物、または医薬として許容されるその塩。
【請求項１５】
Ｑはフラニルまたはチオフェニルである、請求項１４に記載の化合物、または医薬として許容されるその塩。
【請求項１６】
４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−フラン−２−イルメチルピペラジン−１−カルボキサミジン；および
４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−チオフェン−２−イルメチルピペラジン−１−カルボキサミジン
から選択される、請求項１５に記載の化合物、または医薬として許容されるその塩。
【請求項１７】
（ａ）化合物（１）および化合物（２）を、アミド結合を形成する条件下で結合させ、生成物を脱保護して化合物（３）：
【化５６】
0005656288.tif 000073
を形成するステップであって、Ｐはアミノ保護基であるステップ；
（ｂ）化合物（３）を化合物（６）と反応させて化合物（７）：
【化５８】
0005656288.tif 000074
を形成するステップ；および
（ｃ）化合物（７）および化合物（８）を反応させて式Ｉ：
【化５９】
0005656288.tif 000075
の化合物を提供するステップ
を備える、請求項１から１６のいずれか１項に記載の化合物を調製するための方法。
【請求項１８】
請求項１７に記載の方法によって調製される化合物。
【請求項１９】
請求項１から１６のいずれか１項に記載の化合物または医薬として許容されるその塩、および医薬として許容されるキャリアを含む医薬組成物。
【請求項２０】
第２の治療薬をさらに含む、請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
前記第２の治療薬は、β２アドレナリン受容体アゴニスト、ステロイド系抗炎症薬、ホスホジエステラーゼ−４阻害剤、およびそれらの組み合わせから選択される、請求項２０に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
前記組成物は、β２アドレナリン受容体アゴニスト、およびステロイド系抗炎症薬を含む、請求項２１に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
薬物を製造するための請求項１から１６のいずれか１項に記載の化合物または医薬として許容されるその塩の使用。
【請求項２４】
前記薬物は、慢性閉塞性肺疾患または喘息を治療するために有用である、請求項２３に記載の使用。
【請求項２５】
前記薬物は、気管支拡張を発生させるために有用である、請求項２３に記載の使用。
【請求項２６】
請求項１から１６のいずれか１項に記載の化合物または医薬として許容されるその塩を含む医薬組成物。
【請求項２７】
慢性閉塞性肺疾患または喘息を治療するための請求項２６に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
気管支拡張を発生させるための請求項２６に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ムスカリン受容体アンタゴニストまたは抗コリン活性を有するグアジニン含有化合物に関する。本発明は、これらの化合物を備える医薬組成物、それらを調製するためのプロセス、および肺障害を治療するための使用方法にも関する。
【背景技術】
【０００２】
慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ：ｃｈｒｏｎｉｃ  ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ  ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  ｄｉｓｅａｓｅ）および喘息のような肺または呼吸器の障害は、世界中の何百万もの人々を苦しめており、かかる障害は罹病および死亡の主要原因となっている。
【０００３】
ムスカリン受容体アンタゴニストは、気管支保護効果を提供することが知られており、それ故に、かかる化合物はＣＯＰＤおよび喘息のような呼吸器障害の治療に役立つ。かかる障害の治療に用いるとき、ムスカリン受容体アンタゴニストは、一般に吸入によって投与される。しかしながら、吸入によって投与されたときでさえ、ムスカリン受容体アンタゴニストのかなりの量は、しばしば体循環中に吸収され、口渇、散瞳、および心血管性副作用のような全身性の副作用を招く。
【０００４】
加えて、吸入されたムスカリン受容体アンタゴニストの多くは、作用持続時間が比較的短く、１日に数回投与される必要がある。このように毎日複数回投薬を行う療法は、不便なだけでなく、頻繁に投薬が必要なスケジュールを患者が遵守しないことに起因して治療が不十分になるという著しい危険を生み出す。
【０００５】
それ故に、新しいムスカリン受容体アンタゴニストが必要とされる。特に、吸入によって投与したときに作用強度が高く、全身性の副作用が少なく、作用持続時間が長いために毎日１回、或いは毎週１回の投薬さえ可能にする新しいムスカリン受容体アンタゴニストが必要である。加えて、受容体への親和性が高く、受容体の半減期が長いムスカリン受容体アンタゴニストが必要である。かかる化合物は、ＣＯＰＤおよび喘息のような肺障害の治療に特に有効であると同時に、口渇および便秘のような副作用を低減ないし解消することが期待される。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、ムスカリン受容体アンタゴニストまたは抗コリン活性を有する新規なグアニジン含有化合物を提供する。本発明の化合物は、他の特性について関連化合物と比較した場合、ｈＭ２およびｈＭ３ムスカリン受容体サブタイプに対して改善された結合親和性を有すること、受容体の半減期が長いこと、治療域が広いか、或いは作用強度が高いことがわかっている。従って、本発明の化合物は、肺障害を治療するための治療薬として役立ち、有利であると期待される。
【０００７】
本発明の一様態は、化学式Ｉ：
【０００８】
【化１】
0005656288.tif 000002
において、
Ｒ１は−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ２〜６アルケニル、−Ｃ３〜９シクロアルキル、およびヘテロアリールから選択され；Ｒ２はアリールおよびヘテロアリールから選択され；Ｒ３はＨおよび−Ｃ０〜１アルキレン−ＯＨから選択される、またはＲ３はＲ１と二重結合を形成するか；或いは−ＣＲ１Ｒ２Ｒ３は、化学式：
【０００９】
【化２】
0005656288.tif 000003
の基であって、Ａは結合、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＮＨ−、および−Ｎ（ＣＨ３）−から選択され；Ｒ４はＨ、ハロ、−ＯＨ、−Ｃ１〜８アルキル、および−Ｃ１〜８アルコキシから選択される基を形成し；
Ｘは結合、−Ｏ−、および−Ｏ−ＣＨ２−から選択され；Ｘが結合であるとき、Ｙは−ＣＨ２−であり、Ｙ’は−Ｎ−であり、Ｙ”は−ＣＨ２−であり；Ｘが−Ｏ−または−Ｏ−ＣＨ２−であるとき、Ｙ’は−ＣＨ−であり、Ｙは結合でありＹ”は−ＣＨ２−または−（ＣＨ２）２−であるか、或いはＹは−ＣＨ２−でありＹ”は−ＣＨ２−であり；
Ｒ５はフルオロおよび−Ｃ１〜４アルキルから選択され；ａは０か、または１から３までの整数であり；
Ｒ６およびＲ７は、Ｈおよび−Ｃ１〜４アルキルから独立に選択され、さらにＲ６またはＲ７のうち1つは−ＮＨ２であってもよく；
ＺはＨ、−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ１〜３アルキレン−Ｑ、および−ＮＨ−Ｃ０〜１アルキレン−Ｑから選択され；Ｑは−Ｃ３〜７シクロアルキル、アリール、およびヘテロアリールから選択され；Ｑは、ハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、シアノ、−Ｃ０〜２アルキレン−ＣＯＯＨ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、−ＣＯＮＲ８ａＲ８ｂ、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜４アルキル、−Ｎ−ジ−Ｃ１〜４アルキル、および−Ｎ＋（Ｏ）Ｏから独立に選択された１〜５個のＲ８基で随意的に置換されており；Ｒ８ａおよびＲ８ｂは、Ｈおよび−Ｃ１〜４アルキルから独立に選択された；化学式Ｉの化合物であって、
Ｒ１およびＲ２は、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、−Ｃ３〜６シクロアルキル、シアノ、ハロ、−ＯＲｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｂ、−ＳＲｂ、−Ｓ（Ｏ）Ｒｂ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｂ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｄ，および−ＮＲｃＲｄから独立に選択された１から５個までのＲａ基で随意的に置換されており；各ＲｂはＨ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、および−Ｃ３〜６シクロアルキルから独立に選択され、各ＲｃおよびＲｄは、Ｈ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、および−Ｃ３〜６シクロアルキルから独立に選択され；
Ｒａ〜ｄ、Ｒ４〜８、およびＺにおける各アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アルキレン基、およびシクロアルキル基は、１から５個までのフルオロ原子で随意的に置換されている基であって；Ｒａ〜ｄにおける各シクロアルキルは、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、シアノ、ハロ、−Ｏ（Ｃ１〜４アルキル）、−Ｓ（Ｃ１〜４アルキル）、−Ｓ（Ｏ）（Ｃ１〜４アルキル）、−Ｓ（Ｏ）２（Ｃ１〜４アルキル）、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜４アルキル）、および−Ｎ（Ｃ１〜４アルキル）２から独立に選択された１から３個までの置換基で随意的に置換されており、各アルキル基、アルケニル基およびアルキニル基は、１から５個のフルオロ置換基で随意的に置換されており；Ｚにおけるアルキレン基は、−Ｃ１〜２アルキルおよび−ＯＨから独立に選択された１または２個の置換基で随意的に置換されている、化合物、または医薬として許容されるその塩に関する。
【００１０】
化学式Ｉの化合物のうち、特に注目される化合物は、Ｍ３受容体サブタイプへの結合に関する阻害解離定数（Ｋｉ）が１００ｎＭ以下を有する；特に５０ｎＭ以下のＫｉを有する；さらに特に１０ｎＭ以下のＫｉを有する；なおさらに特に１.０ｎＭ以下のＫｉを有するものである。
【００１１】
本発明の別の様態は、医薬として許容されるキャリアおよび本発明の化合物を備える医薬組成物に関する。かかる組成物は、ステロイド系抗炎症薬（例えば、コルチコステロイド）、β２アドレナリン受容体アゴニスト、ホスホジエステラーゼ−４阻害剤、およびその組み合わせのような他の治療薬を随意的に含んでもよい。従って、本発明のまた別の様態において、医薬組成物は、本発明の化合物、第２の活性薬剤、および医薬として許容されるキャリアを備える。本発明の別の様態は、本発明の化合物および第２の活性薬剤を備える、活性薬剤の組み合わせに関する。本発明の化合物は、付加的な薬剤（単数または複数）と一緒に、或いは別に製剤されてもよい。別に製剤されるとき、付加的な薬剤（単数または複数）を医薬として許容されるキャリアに含むことができる。かくして、本発明のまた別の様態は医薬組成物の組み合わせに関し、該組合せは、本発明の化合物および第１の医薬として許容されるキャリアを備える第１の医薬組成物；および第２の活性薬剤および第２の医薬として許容されるキャリアを備える第２の医薬組成物を備える。本発明は、例えば第１および第２の医薬組成物が別の医薬組成物である、かかる医薬組成物を含むキットにも関する。
【００１２】
本発明の化合物は、ムスカリン受容体アンタゴニスト活性を有し、それ故にムスカリン受容体を塞ぐことによって治療される疾患または障害に苦しむ患者を治療するための治療薬として役立つと期待される。かくして、本発明の一様態は、患者における気管支拡張を発生させる方法に関し、気管支拡張を発生させる量の本発明の化合物を患者に投与することを備える。本発明は、慢性閉塞性肺疾患または喘息のような肺障害を治療する方法にも関し、治療に有効な量の本発明の化合物を患者に投与することを備える。本発明の別の様態は、哺乳動物のムスカリン受容体をアンタゴナイズするための方法に関し、ムスカリン受容体をアンタゴナイズする量の本発明の化合物を哺乳動物に投与することを備える。
【００１３】
本発明の化合物は、ムスカリン受容体アンタゴニスト活性を有するため、かかる化合物は研究手段としても役立つ。従って、本発明の一様態は、本発明の化合物を研究手段として用いる方法に関し、該方法は、本発明の化合物を用いてバイオアッセイを行なうことを備える。本発明の化合物は、新しい化合物を評価するためにも用いることができる。かくして本発明の別の様態は、（ａ）テスト化合物を用いてバイオアッセイを行ない、第１の分析値を提供するステップ；（ｂ）本発明の化合物を用いてバイオアッセイを行ない、第２の分析値を提供するステップであって、ステップ（ａ）は、ステップ（ｂ）の前、後または同時のいずれかに行なわれる、ステップ；および（ｃ）ステップ（ａ）からの第１の分析値をステップ（ｂ）からの第２の分析値と比較するステップ、を備えるバイオアッセイにおけるテスト化合物の評価方法に関する。例となるバイオアッセイは、哺乳動物におけるムスカリン受容体結合アッセイおよび気管支保護アッセイを含む。本発明のさらに別の様態は、ムスカリン受容体を備える生物システムまたはサンプルを研究する方法に関し、該方法は、（ａ）生物システムまたはサンプルを本発明の化合物と接触させること；および（ｂ）本化合物によって生物システムまたはサンプルに生じる効果を測定することを備える。
【００１４】
本発明は、本発明の化合物を調製するために役立つプロセスおよび中間生成物にも関する。従って、本発明の別の様態は、本発明の化合物を調製するプロセスに関し、（ａ）化合物（１）および化合物（２）を、アミド結合を形成する条件下で結合させ、生成物を脱保護して化合物（３）を形成するステップ、または化合物（１）および化合物（４）の光延カップリングまたはエステル転移反応、並びに生成物の脱保護により化合物（５）を形成するステップ；（ｂ）化合物（３）または化合物（５）を化合物（６）と反応させて化合物（７）を形成するステップ；および（ｃ）化合物（７）および化合物（８）を反応させて化学式Ｉの化合物を提供するステップを備え、化合物（１）から（９）は、本明細書で定義される通りである。他の様態において、本発明は、本明細書に記載されるプロセスのいずれかによって調製された生成物に関する。
【００１５】
本発明のまた別の様態は、本発明の化合物を薬物の製造、特に哺乳動物における肺障害を治療するため、或いはムスカリン受容体をアンタゴナイズするために役立つ薬物の製造に用いることに関する。本発明のさらに別の様態は、本発明の化合物を研究手段として用いることに関する。本発明の他の様態および実施形態が本明細書に開示される。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
式Ｉ：
【化６０】
0005656288.tif 000004
の化合物であって、
Ｒ１は−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ２〜６アルケニル、−Ｃ３〜９シクロアルキル、およびヘテロアリールから選択され；Ｒ２はアリールおよびヘテロアリールから選択され；Ｒ３はＨおよび−Ｃ０〜１アルキレン−ＯＨから選択される、またはＲ３はＲ１と二重結合を形成するか；或いは−ＣＲ１Ｒ２Ｒ３は、式：
【化６１】
0005656288.tif 000005
の基であって、Ａは結合、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＮＨ−、および−Ｎ（ＣＨ３）−から選択され；Ｒ４はＨ、ハロ、−ＯＨ、−Ｃ１〜８アルキル、および−Ｃ１〜８アルコキシから選択される基を一緒に形成し；
Ｘは結合、−Ｏ−、および−Ｏ−ＣＨ２−から選択され；Ｘが結合であるとき、Ｙは−ＣＨ２−であり、Ｙ’は−Ｎ−であり、Ｙ”は−ＣＨ２−であり；Ｘが−Ｏ−または−Ｏ−ＣＨ２−であるとき、Ｙ’は−ＣＨ−であり、Ｙは結合でありＹ”は−ＣＨ２−または−（ＣＨ２）２−であるか、或いはＹは−ＣＨ２−でありＹ”は−ＣＨ２−であり；
Ｒ５はフルオロおよび−Ｃ１〜４アルキルから選択され；ａは０か、または１から３までの整数であり、
Ｒ６およびＲ７は、Ｈおよび−Ｃ１〜４アルキルから独立に選択され、さらにＲ６またはＲ７のうち1つは−ＮＨ２であってもよく；
ＺはＨ、−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ１〜３アルキレン−Ｑ、および−ＮＨ−Ｃ０〜１アルキレン−Ｑから選択され；Ｑは−Ｃ３〜７シクロアルキル、アリール、およびヘテロアリールから選択され；Ｑはハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、シアノ、−Ｃ０〜２アルキレン−ＣＯＯＨ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、−ＣＯＮＲ８ａＲ８ｂ、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜４アルキル、−Ｎ−ジ−Ｃ１〜４アルキル、および−Ｎ＋（Ｏ）Ｏから独立に選択された１〜５個のＲ８基で任意に置換されており；Ｒ８ａおよびＲ８ｂは、Ｈおよび−Ｃ１〜４アルキルから独立に選択された；式Ｉの化合物であって、
Ｒ１およびＲ２は、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、−Ｃ３〜６シクロアルキル、シアノ、ハロ、−ＯＲｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｂ、−ＳＲｂ、−Ｓ（Ｏ）Ｒｂ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｂ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｄ，および−ＮＲｃＲｄから独立に選択された１から５個までのＲａ基で任意に置換されており；各Ｒｂは、Ｈ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、および−Ｃ３〜６シクロアルキルから独立に選択され；各ＲｃおよびＲｄは、Ｈ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、および−Ｃ３〜６シクロアルキルから独立に選択され、
Ｒａ〜ｄ、Ｒ４〜８およびＺにおける各アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アルキレン基、およびシクロアルキル基は、１から５個までのフルオロ原子で任意に置換されている基であって、Ｒａ〜ｄにおける各シクロアルキルは、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、シアノ、ハロ、−Ｏ（Ｃ１〜４アルキル）、−Ｓ（Ｃ１〜４アルキル）、−Ｓ（Ｏ）（Ｃ１〜４アルキル）、−Ｓ（Ｏ）２（Ｃ１〜４アルキル）、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜４アルキル）、および−Ｎ（Ｃ１〜４アルキル）２から独立に選択された１から３個までの置換基で任意に置換されており、各アルキル基、アルケニル基およびアルキニル基は、１から５個までのフルオロ置換基で任意に置換されており；Ｚにおける前記アルキレン基は、−Ｃ１〜２アルキルおよび−ＯＨから独立に選択された１または２個の置換基で任意に置換されている、
化合物、または医薬として許容されるその塩。
（項目２）
Ｒ１はイソブチル、シクロペンチル、またはチオフェニルである、項目１に記載の化合物。
（項目３）
Ｒ２はフェニルまたはチオフェニルである、項目１に記載の化合物。
（項目４）
Ｒ３は−ＯＨであるか、または−ＣＲ１Ｒ２Ｒ３は一緒に：
【化６２】
0005656288.tif 000006
を形成する。
（項目５）
ａは０である、項目１に記載の化合物
（項目６）
Ｒ６はＨまたは−Ｃ１〜４アルキルであり、Ｒ７はＨである、項目１に記載の化合物。
（項目７）
Ｑはシクロヘキシル、シクロヘプチル、フェニル、ベンゾジオキソリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、フラニル、インドリル、ピラゾリル、ピリジニル、チアゾリル、またはチオフェニルである、項目１に記載の化合物。
（項目８）
Ｑはハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、シアノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、および−ＣＯＮＨ２から独立に選択された１〜２個のＲ８基で任意に置換されている、項目１に記載の化合物。
（項目９）
Ｒ１はイソブチル、シクロペンチル、またはチオフェニルであり；Ｒ２はフェニルまたはチオフェニルであり；Ｒ３は−ＯＨであるか；または−ＣＲ１Ｒ２Ｒ３は一緒に式：
【化６３】
0005656288.tif 000007
の基を形成し；ａは０であり；Ｒ６はＨまたは−Ｃ１〜４アルキルであり；Ｒ７はＨであり；ＺはＨ、−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ１〜３アルキレン−Ｑ、または−ＮＨ−Ｃ０〜１アルキレン−Ｑであり；Ｑはシクロヘキシル、シクロヘプチル、フェニル、ベンゾジオキソリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、フラニル、インドリル、ピラゾリル、ピリジニル、チアゾリル、またはチオフェニルであり；Ｑはハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、シアノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキルおよび−ＣＯＮＨ２から独立に選択された１〜２個のＲ８基で任意に置換されており；Ｒ８における前記アルキル基は１から５個のフルオロ原子で任意に置換されている、項目１に記載の化合物。
（項目１０）
式：
【化６４】
0005656288.tif 000008
を有する、項目１に記載の化合物。
（項目１１）
Ｒ１はシクロペンチルまたはチオフェニルであり、Ｒ２はフェニルまたはチオフェニルであり；Ｒ３は−ＯＨであり；Ｒ６はＨまたは−Ｃ１〜２アルキルであり；Ｒ７はＨであり；Ｚは−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ１〜３アルキレン−Ｑ、または−ＮＨ−Ｃ０〜１アルキレン−Ｑであり；Ｑはシクロヘキシル、シクロヘプチル、フェニル、ベンゾジオキソリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、フラニル、インドリル、ピラゾリル、ピリジニル、チアゾリル、またはチオフェニルであり；Ｑはハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、シアノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、および−ＣＯＮＨ２から独立に選択された１〜２個のＲ８基で任意に置換されており、Ｒ８における前記アルキル基は、１から５個のフルオロ原子で任意に置換されている、項目１０に記載の化合物。
（項目１２）
式：
【化６５】
0005656288.tif 000009
を有する、項目１０に記載の化合物。
（項目１３）
Ｒ６はＨまたは−Ｃ１〜２アルキルであり；Ｚは−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ１〜３アルキレン−Ｑ、または−ＮＨ−Ｃ０〜１アルキレン−Ｑであり；Ｑはシクロヘキシル、シクロヘプチル、フェニル、ベンゾジオキソリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、フラニル、インドリル、ピラゾリル、ピリジニル、チアゾリル、またはチオフェニルであり；Ｑはハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、シアノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、および−ＣＯＮＨ２から独立に選択された１〜２個のＲ８基で任意に置換されており；Ｒ８における前記アルキル基は、１から５個のフルオロ原子で任意に置換されている、項目１２に記載の化合物。
（項目１４）
式：
【化６６】
0005656288.tif 000010
を有する、項目１０に記載の化合物。
（項目１５）
Ｑはシクロヘキシル、シクロヘプチル、フェニル、ベンゾジオキソリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、フラニル、インドリル、ピラゾリル、ピリジニル、チアゾリル、またはチオフェニルであり；Ｑはハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、シアノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、および−ＣＯＮＨ２から独立に選択された１〜２個のＲ８基で任意に置換されており、Ｒ８における前記アルキル基は、１から５個のフルオロ原子で任意に置換されている、項目１４に記載の化合物。
（項目１６）
Ｑはフラニルまたはチオフェニルである、項目１５に記載の化合物。
（項目１７）
４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−フラン−２−イルメチルピペラジン−１−カルボキサミジン；および
４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−チオフェン−２−イルメチルピペラジン−１−カルボキサミジン
から選択される、項目１６に記載の化合物。
（項目１８）
式：
【化６７】
0005656288.tif 000011
を有する、項目１に記載の化合物。
（項目１９）
Ｒ１はシクロペンチルであり；Ｒ２はフェニルであり；Ｒ３は−ＯＨであり；Ｒ６およびＲ７はＨであり；Ｚは−Ｃ１〜３アルキレン−Ｑであり；Ｑはフェニル、ベンゾフラニル、フラニル、ピリジニル、またはチオフェニルであり；Ｑにおける前記フェニルは、ハロおよび−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨから独立に選択された１〜２個のＲ８基で任意に置換されている、項目１８に記載の化合物。
（項目２０）
式：
【化６８】
0005656288.tif 000012
を有する、項目１に記載の化合物。
（項目２１）
Ｒ１はイソブチルまたはシクロペンチルであり；Ｒ２はフェニルであり；Ｒ３は−ＯＨであり；Ｒ６およびＲ７はＨであり；Ｚは−Ｃ１〜６アルキルまたは−Ｃ１〜３アルキレン−Ｑであり；Ｑはフェニル、フラニル、ピリジニル、またはチオフェニルであり；Ｑはハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、および−Ｏ−Ｃ１〜４アルキルから独立に選択された１〜２個のＲ８基で任意に置換されており；Ｒ８における前記アルキル基は、１から５個までのフルオロ原子で任意に置換されている、項目２０に記載の化合物。
（項目２２）
（ａ）化合物（１）および化合物（２）を、アミド結合を形成する条件下で結合させ、生成物を脱保護して化合物（３）：
【化６９】
0005656288.tif 000013
を形成するステップ、または化合物（１）および化合物（４）の光延カップリングまたはエステル転移反応、並びに生成物の脱保護により化合物（５）：
【化７０】
0005656288.tif 000014
を形成するステップであって、Ｐはアミノ保護基であるステップ；
（ｂ）化合物（３）または化合物（５）を化合物（６）と反応させて化合物（７）：
【化７１】
0005656288.tif 000015
を形成するステップ；および
（ｃ）化合物（７）および化合物（８）を反応させて式Ｉ：
【化７２】
0005656288.tif 000016
の化合物を提供するステップ
を備える、項目１から２１のいずれか１つのものの調製のためのプロセス。
（項目２３）
項目２２のプロセスによって調製される化合物。
（項目２４）
項目１から２１のいずれか１つ、および医薬として許容されるキャリアを含む医薬組成物。
（項目２５）
第２の治療薬をさらに含む、項目２４に記載の医薬組成物。
（項目２６）
前記第２の治療薬は、β２アドレナリン受容体アゴニスト、ステロイド系抗炎症薬、ホスホジエステラーゼ−４阻害剤、およびそれらの組み合わせから選択される、項目２５に記載の医薬組成物。
（項目２７）
前記組成物は、β２アドレナリン受容体アゴニスト、およびステロイド系抗炎症薬を含む、項目２６に記載の医薬組成物。
（項目２８）
薬物を製造するための項目１から２１のいずれか１項に記載の化合物の使用。
（項目２９）
前記薬物は、慢性閉塞性肺疾患または喘息を治療するために有用である、項目２８に記載の使用。
（項目３０）
前記薬物は、気管支拡張を発生させるために有用である、項目２８に記載の使用。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
一様態において、本発明は、化学式Ｉ：
【００１７】
【化３】
0005656288.tif 000017
を有する化合物、または医薬として許容されるその塩に関する。この化学式は、次のようにも表現することができる。
【００１８】
【化４】
0005656288.tif 000018
本明細書では、用語「本発明の化合物」は、化学式Ｉによって包含されるすべての化合物、例えば化学式ＩＩ〜ＶＩＩＩで具体的に示される種を含む。加えて、本発明の化合物が塩基性基または酸性基（例えば、アミノ基またはカルボキシル基）を含むとき、該化合物は、遊離塩基、遊離酸として、または様々な塩の形態で存在することができる。すべてのかかる塩の形態は、本発明の範囲内に含まれる。従って、別の指示がなければ、本明細書における化合物への言及、例えば、「本発明の化合物」または「化学式Ｉの化合物」への言及は、化学式Ｉの化合物、並びに医薬として許容されるその化合物の塩も含むことを当業者は認識するであろう。さらに、化学式Ｉの化合物の溶媒和物が本発明の範囲内に含まれる。
【００１９】
本発明の化合物は、１つまたはそれ以上のキラル中心を含むことができ、それ故に多くの立体異性体として存在することができる。かかるキラル中心が存在する場合、別の指示がなければ、本発明は、ラセミ混合物、純粋な立体異性体（すなわち、鏡像異性体またはジアステレオマー）、立体異性体が濃縮された混合物などに関する。化学構造が立体化学なしに表現されているとき、かかる構造は、すべての可能な立体異性体を包含されるものと理解する。それ故に、例えば、用語「化学式Ｉの化合物」は、該化合物のすべての可能な立体異性体を含むことが意図される。同様に、本明細書に特定の立体異性体が示されるか、または指定される場合、別の指示がなければ、本発明の組成物にわずかな量の他の立体異性体が、かかる他の異性体の存在によって組成物全体としての効能が消失しないことを前提に、存在してもよいことを当業者は理解するであろう。個々の鏡像異性体は、適切なキラル固定相または担体を用いたキラル・クロマトグラフィーを含む当分野でよく知られた多数の方法によって、または、それらをジアステレオマーに化学変換して、該ジアステレオマーをクロマトグラフィーまたは再結晶化のような従来の手段で分離し、次にもとの鏡像異性体に再生することによって得ることができる。加えて、適用可能な場合、別の指定がなければ、本発明の化合物のすべてのシス−トランスすなわちＥ／Ｚ異性体（幾何異性体）、互変異性体およびトポイソマーの形態が本発明の範囲内に含まれる。
【００２０】
特に、化学式Ｉの化合物は、Ｒ１Ｃ５〜９シクロアルキル部分がシクロペンチルであり、Ｒ２アリール部分がフェニルであり、Ｒ３が−ＯＨであるとして図示した（明確さのために随意的な置換基を省いた）次の部分的な化学式：
【００２１】
【化５】
0005656288.tif 000019
において、記号*で示される炭素原子にキラル中心を含む。本発明の一実施形態において、記号*によって示される炭素原子は（Ｒ）配置をもつ。この実施形態において、化学式Ｉの化合物は、記号*で示される炭素原子において（Ｒ）配置をもつか、或いはこの炭素原子において（Ｒ）配置をもつ立体異性体が濃縮されている。別の実施形態において、記号*で示される炭素原子は（Ｓ）配置をもつ。この実施形態において、化学式Ｉの化合物は、記号*で示される炭素原子において（Ｓ）配置をもつか、或いはこの炭素原子において（Ｓ）配置をもつ立体異性体が濃縮されている。
【００２２】
本発明の化合物、並びにその合成に用いられる化合物は、同位体で標識された、すなわち、自然に主に存在する原子質量とは異なった原子質量をもつ１つまたはそれ以上の原子が濃縮された化合物も含むことができる。化学式Ｉの化合物に取り込むことができる同位体の例は、例えば、限定されることなしに、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｏおよび１７Ｏを含む。
【００２３】
本発明の化合物は、ムスカリン受容体アンタゴニスト活性を有することが見出された。他の特性のうちでは、本発明の化合物が、関連化合物と比較してｈＭ２およびｈＭ３ムスカリン受容体サブタイプに対して改善された結合親和性を有し、受容体の半減期が長く、かつ作用強度が高いことがわかっており、肺障害を治療するための治療薬として役立つことが期待される。
【００２４】
本発明の化合物を指定するために本明細書で用いられる命名法は、本明細書の実施例に示される。この命名法は、市販のＡｕｔｏＮｏｍソフトウェア（ＭＤＬ，サンレアンドロ，カリフォルニア州）に由来する。
【００２５】
代表的な実施形態
次の置換基および値は、本発明の様々な様態および実施形態の代表的な例を提示する意図をもつ。これらの代表的な値は、かかる様態および実施形態をさらに明確にして例示する意図をもち、他の実施形態を除外し、或いは本発明の範囲を限定する意図はもたない。これに関して、特定の値または置換基が好ましいとの表明は、特に指示がなければ、いかなる意味においても他の値または置換基を本発明から除外する意図をもたない。
【００２６】
Ｒ１は未置換か、または１から５個のＲａ基で置換された−Ｃ１〜６アルキル基、−Ｃ２〜６アルケニル基、−Ｃ３〜９シクロアルキル基、ヘテロアリール基とすることができる。Ｒａは−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、−Ｃ３〜６シクロアルキル、シアノ、ハロ、−ＯＲｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｂ、−ＳＲｂ、−Ｓ（Ｏ）Ｒｂ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｂ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｄ、および−ＮＲｃＲｄから独立に選択される。各ＲｂはＨ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニルおよび−Ｃ３〜６シクロアルキルから独立に選択される。各Ｒｃ基およびＲｄ基は、Ｈ、−Ｃ１〜4アルキル、−Ｃ２〜4アルケニル、−Ｃ２〜4アルキニル、および−Ｃ３〜６シクロアルキルから独立に選択される。一実施形態において、Ｒ１は−Ｃ３〜９シクロアルキルである；別の実施形態において、−Ｃ３〜６シクロアルキル、すなわちシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルまたはシクロヘキシル；また別の実施形態において、Ｒ１は−Ｃ５シクロアルキル、すなわちシクロペンチルである。一実施形態において、Ｒ１は−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２のような−Ｃ１〜６アルキル基である。別の実施形態において、Ｒ１は−ＣＨ２ＣＨＣＨ２のような−Ｃ２〜６アルケニル基である。一実施形態において、Ｒ１は未置換である。別の実施形態において、Ｒ１は（チオフェン−２−イルおよびチオフェン-3-イルを含めて）チオフェニルのようなヘテロアリールである。
【００２７】
Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、およびＲｄにおける各アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アルキレン基、およびシクロアルキル基は、１から５個のフルオロ原子で置換されていてもよい。加えて、Ｒａ〜ｄにおける各シクロアルキルは、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、シアノ、ハロ、−Ｏ（Ｃ１〜４アルキル）、−Ｓ（Ｃ１〜４アルキル）、−Ｓ（Ｏ）（Ｃ１〜４アルキル）、−Ｓ（Ｏ）２（Ｃ１〜４アルキル）、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜４アルキル）および−Ｎ（Ｃ１〜４アルキル）２から独立に選択された１から３個の置換基で置換されていてもよく、ここで各アルキル基、アルケニル基およびアルキニル基は、１から５個のフルオロ置換基で随意的に置換されていてもよい。
【００２８】
Ｒ２は未置換か、または１から５個の先に定義されたＲａ基で置換された、アリール基であってもよい。一実施形態において、Ｒ２はフェニルである。別の実施形態において、Ｒ２は未置換のフェニルである。別の実施形態において、Ｒ２は（チオフェン−２−イルおよびチオフェン−3−イルを含めて）チオフェニルのようなヘテロアリールである。
【００２９】
Ｒ３はＨまたは−Ｃ０〜１アルキレン−ＯＨであってもよく、或いはＲ１と次のように表現できる二重結合を形成してもよい：
【００３０】
【化６】
0005656288.tif 000020
特定の一実施形態において、Ｒ３は−ＯＨである。加えて、−ＣＲ１Ｒ２Ｒ３は一緒に次の化学式：
【００３１】
【化７】
0005656288.tif 000021
の基を形成してもよく、ここでＡは結合、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＮＨ−、または−Ｎ（ＣＨ３）−であり、Ｒ４はＨ、ハロ、−ＯＨ、−Ｃ１〜８アルキル、および−Ｃ１〜８アルコキシから選択される。Ｒ４におけるアルキル基は、１から５個のフルオロ原子で置換されていてもよい。特定の一実施形態において、−ＣＲ１Ｒ２Ｒ３は一緒に次の構造を形成する：
【００３２】
【化８】
0005656288.tif 000022
この実施形態において、図に示されるようにＡは−Ｏ−であり、Ｒ４はＨである。
【００３３】
一実施形態において、Ｘは結合であり、Ｙは−ＣＨ２−であり、Ｙ’は−Ｎ−であり、Ｙ”は−ＣＨ２−であり、以下のようにこれを表現できる：
【００３４】
【化９】
0005656288.tif 000023
別の実施形態において、Ｘが−Ｏ−または−Ｏ−ＣＨ２−であるとき、Ｙ’は−ＣＨ−であり、Ｙは結合でありＹ”は−ＣＨ２−または−（ＣＨ２）２−であり、以下のようにそれぞれを表現できる。
【００３５】
【化１０】
0005656288.tif 000024
別の実施形態において、Ｘが−Ｏ−または−Ｏ−ＣＨ２−であるとき、Ｙ’は−ＣＨ−であり、ＹおよびＹ”は両方ともに−ＣＨ２−であり、以下のようにこれを表現できる。
【００３６】
【化１１】
0005656288.tif 000025
Ｒ５は、フルオロおよび−Ｃ１〜４アルキルから選択される。ａの値は０か、または１から３までの整数である。特定の一実施形態において、ａは０である。Ｒ５におけるアルキル基は、１から５個のフルオロ原子で置換されていてもよい。
【００３７】
Ｒ６およびＲ７は、Ｈおよび−Ｃ１〜４アルキルから独立に選択される。加えて、Ｒ６またはＲ７のうち１つは、−ＮＨ２であってもよい。特定の一実施形態において、Ｒ６は水素または−Ｃ１〜４アルキルである。別の実施形態において、Ｒ７は水素である。また別の特定の実施形態において、Ｒ６およびＲ７は両方ともに水素である。Ｒ６およびＲ７におけるアルキル基は、フルオロ原子で置換されていてもよい。例えば、Ｒ６および／またはＲ７は、−ＣＨ３、並びに−ＣＦＨ２，−ＣＦ２Ｈ或いは−ＣＦ３とすることができる。
【００３８】
Ｚは水素、−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ１〜３アルキレン−Ｑ、および−ＮＨ−Ｃ０〜１アルキレン−Ｑから選択される。一実施形態において、Ｚは−ＣＨ２−Ｑである。別の実施形態において、Ｚは−（ＣＨ２）２−Ｑである。さらに別の実施形態において、Ｚは−（ＣＨ２）３−Ｑである。さらに別の実施形態において、Ｚは−ＮＨ−Ｑである。また別の実施形態において、Ｚは−ＮＨ−ＣＨ２−Ｑである。別の実施形態において、Ｚは水素または−Ｃ１〜６アルキルである。例となる−Ｃ１〜６アルキル基は、メチル、プロピル、ブチル、およびペンチルを含む。Ｚにおけるアルキル基およびアルキレン基は、１から５個のフルオロ原子で置換されていてもよい。さらにまた、Ｚにおけるアルキレン基は、−Ｃ１〜２アルキルおよび−ＯＨから独立に選択された１または２個の置換基で置換されていてもよい。例えば、一実施形態において、Ｚは−ＣＨ（ＣＨ３）−である。
【００３９】
Ｑは−Ｃ３〜７シクロアルキル基、アリール基、またはヘテロアリール基である。例となる−Ｃ３〜７シクロアルキル基は、シクロプロピル、シクロヘキシル、およびシクロヘプチルを含む。例となるアリール基は、フェニルおよびナフチルを含む。一実施形態において、Ｑはフェニルである。例となるヘテロアリール基は、ピロリル基、イミダゾリル基、チアゾリル基、オキサゾリル基、フラニル基、チオフェニル基、トリアゾリル基、ピラゾリル基、イソオキサゾリル基、イソチアゾリル基、ピリジニル基、ピラジニル基、ピリダジニル基、ピリミジニル基、トリアジニル基、インドリル基、ベンゾフラニル基、ベンゾピラニル基、ベンゾチオフェニル基、ベンゾイミダゾリル基、ベンゾチアゾリル基、ベンゾジオキソリル基、キノリル基、イソキノリル基、キナゾリニル基、およびキノキサリニル基を含む。特に注目されるのは、チアゾリル（例えば、チアゾール−２−イルおよびチアゾール−４−イル）基、フラニル（例えば、フラン−２−イルおよびフラン−３−イル）基、チオフェニル（例えば、チオフェン−２−イルおよびチオフェン−3−イル）基、ピラゾリル（例えば、１Ｈ−ピラゾール−３−イル）基、ピリジニル（例えば、ピリジン−２−イル）基、インドリル（例えば、１Ｈ−インドール−２−イル、１Ｈ−インドール−４−イルおよび１Ｈインドール−５−イル）基、ベンゾフラニル（例えば、ベンゾフラン−５−イル）基、ベンゾチオフェニル（例えば、ベンゾ[ｂ]チオフェン−２−イルおよびベンゾ[ｂ]チオフェン−５−イル）基、およびベンゾジオキソリル（例えば、ベンゾ[１，３]ジオキソール−５−イル）基である。
【００４０】
Ｑはハロ（例えば、ＣｌおよびＦ）、−Ｃ１〜４アルキル（例えば、−ＣＨ３）、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ（例えば、−ＯＨおよび−ＣＨ２ＯＨ）、シアノ、−Ｃ０〜２アルキレン−ＣＯＯＨ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル（例えば、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ＣＨ３）、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル（例えば、−ＯＣＨ３）、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル（例えば、−Ｓ−ＣＨ３）、−ＣＯＮＲ８ａＲ８ｂ、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜４アルキル、−Ｎ−ジ−Ｃ１〜４アルキル、および−Ｎ＋（Ｏ）Ｏから独立に選択された１から５個のＲ８基で置換されていてもよく、ここでＲ８ａおよびＲ８ｂは、Ｈおよび−Ｃ１〜４アルキルから独立に選択される。Ｒ８における各アルキル基およびアルキレン基は、１から５個のフルオロ原子で置換されていてもよい。例えば、Ｒ８は、−ＣＦ３のようなフルオロ置換基された−Ｃ１〜４アルキル基、または−ＯＣＦ３のようなフルオロ置換基された−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル基とすることができる。
【００４１】
一実施形態において、Ｑはハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、シアノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、および−ＣＯＮＲ８ａＲ８ｂから選択された１つのＲ８基で置換されており、ここで各アルキル基は、１から３個のフルオロ原子で随意的に置換されている。別の実施形態において、Ｑはハロ基である（同じか、または異なってもよい）２個のＲ８基で置換されている。一実施形態において、Ｑは未置換の−Ｃ３〜７シクロアルキル基である。一実施形態において、Ｑは未置換のアリール基である。別の実施形態において、Ｑはハロ、−Ｃ１〜４アルキル、シアノ、−Ｃ０〜２アルキレン−ＣＯＯＨ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、−ＣＯＮＲ８ａＲ８ｂから選択された１つのＲ８基をもつアリール基であり、ここで各アルキル基は、１から３個のフルオロ原子で随意的に置換されている。さらに別の実施形態において、Ｑはハロ基である２個のＲ８基をもつアリール基である。一実施形態において、Ｑは未置換のヘテロアリール基である。別の実施形態において、Ｑは−Ｃ１〜４アルキル基である1個のＲ８基をもつヘテロアリール基である。
【００４２】
一実施形態において、本発明は、化学式Ｉを有する化合物に関し、ここでＲ１はイソブチル、シクロペンチル、またはチオフェニルであり；Ｒ２はフェニルまたはチオフェニルであり；Ｒ３は−ＯＨであるか；或いは−ＣＲ１Ｒ２Ｒ３は一緒に化学式：
【００４３】
【化１２】
0005656288.tif 000026
の基を形成し；ａは０であり；Ｒ６はＨまたは−Ｃ１〜４アルキルであり；Ｒ７はＨであり；ＺはＨ、−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ１〜３アルキレン−Ｑ、または−ＮＨ−Ｃ０〜１アルキレン−Ｑであり；Ｑはシクロヘキシル、シクロヘプチル、フェニル、ベンゾジオキソリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、フラニル、インドリル、ピラゾリル、ピリジニル、チアゾリル、またはチオフェニルであり；Ｑはハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、シアノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、および−ＣＯＮＨ２から独立に選択された１〜２個のＲ８基で随意的に置換されており；Ｒ８におけるアルキル基は、１から５個のフルオロ原子で随意的に置換されている。
【００４４】
別の実施形態において、本発明は、化学式ＩＩ：
【００４５】
【化１３】
0005656288.tif 000027
を有する化合物、または医薬として許容されるその塩に関し、ここでＲ１〜３、Ｒ６〜７、およびＺは、化学式Ｉにおいて定義された通りである。特定の一実施形態において、本発明は、化学式ＩＩの化合物に関し、ここでＲ１はシクロペンチルまたはチオフェニルであり；Ｒ２はフェニルまたはチオフェニルであり；Ｒ３は−ＯＨであり；Ｒ６はＨまたは−Ｃ１〜２アルキルであり；Ｒ７はＨであり；Ｚは−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ１〜３アルキレン−Ｑ、または−ＮＨ−Ｃ０〜１アルキレン−Ｑであり；Ｑはシクロヘキシル、シクロヘプチル、フェニル、ベンゾジオキソリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、フラニル、インドリル、ピラゾリル、ピリジニル、チアゾリル、またはチオフェニルであり；Ｑはハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、シアノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、および−ＣＯＮＨ２から独立に選択された1〜２個のＲ８基で随意的に置換されており；Ｒ８におけるアルキル基は、１から５個のフルオロ原子で随意的に置換されている。
【００４６】
本発明のまた別の様態は、化学式ＩＩａ：
【００４７】
【化１４】
0005656288.tif 000028
を有する化合物、または医薬として許容されるその塩に関し、ここでＲ６およびＺは、化学式Ｉにおいて定義された通りである。特定の一実施形態において、本発明は、化学式ＩＩａの化合物に関し、ここでＲ６はＨまたは−Ｃ１〜２アルキルであり；Ｚは−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ１〜３アルキレン−Ｑ、または−ＮＨ−Ｃ０〜１アルキレン−Ｑであり；Ｑはシクロヘキシル、シクロヘプチル、フェニル、ベンゾジオキソリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、フラニル、インドリル、ピラゾリル、ピリジニル、チアゾリル、またはチオフェニルであり；Ｑはハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、シアノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、および−ＣＯＮＨ２から独立に選択された１〜２個のＲ８基で随意的に置換されており；Ｒ８におけるアルキル基は、１から５個のフルオロ原子で随意的に置換されている。
【００４８】
本発明のさらに別の様態は、化学式ＩＩｂ：
【００４９】
【化１５】
0005656288.tif 000029
を有する化合物、または医薬として許容されるその塩に関し、ここでＱは化学Ｉにおいて定義された通りである。特定の一実施形態において、本発明は、化学式ＩＩｂの化合物に関し、ここでＱはシクロヘキシル、シクロヘプチル、フェニル、ベンゾジオキソリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、フラニル、インドリル、ピラゾリル、ピリジニル、チアゾリル、またはチオフェニルであり；Ｑはハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、シアノ、Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、および−ＣＯＮＨ２から独立に選択された１〜２個のＲ８基で随意的に置換されており；Ｒ８におけるアルキル基は、１から５個のフルオロ原子で随意的に置換されている。別の実施形態において、本発明は、化学式ＩＩｂの化合物に関し、ここでＱはフラニルまたはチオフェニルである。
【００５０】
本発明のさらに別の様態は、化学式ＩＩｃ：
【００５１】
【化１６】
0005656288.tif 000030
を有する化合物、または医薬として許容されるその塩に関し、ここでＺは化学式Ｉにおいて定義された通りである。特定の一実施形態において、本発明は、化学式ＩＩｃの化合物に関し、ここでＱはフェニル、フラニル、またはチオフェニルであり；Ｑにおけるフェニルは、ハロおよび−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨから独立に選択された１〜２個のＲ８基で随意的に置換されている。
【００５２】
また別の実施形態において、本発明は、化学式III：
【００５３】
【化１７】
0005656288.tif 000031
を有する化合物、または医薬として許容されるその塩に関し、ここでＲ１〜３、Ｒ６〜７、およびＺは、化学式Ｉにおいて定義された通りである。特定の一実施形態において、本発明は、化学式ＩＩＩの化合物に関し、ここでＲ１はシクロペンチルであり；Ｒ２はフェニルであり；Ｒ３は−ＯＨであり；Ｒ６およびＲ７はＨであり；Ｚは−Ｃ１〜３アルキレン−Ｑであり；Ｑはフェニル、ベンゾフラニル、フラニル、ピリジニル、またはチオフェニルであり；Ｑにおけるフェニルは、ハロおよび−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨから独立に選択された１〜２個のＲ８基で随意的に置換されている。
【００５４】
さらに別の実施形態において、本発明は、化学式ＩＶ：
【００５５】
【化１８】
0005656288.tif 000032
を有する化合物、または医薬として許容されるその塩に関し、ここでＲ１〜３、Ｒ６〜７、およびＺは、化学式Ｉにおいて定義された通りである。特定の一実施形態において、本発明は、化学式ＩＶの化合物に関し、ここでＲ１はイソブチルまたはシクロペンチルであり；Ｒ２はフェニルであり；Ｒ３は−ＯＨであり；Ｒ６およびＲ７はＨであり；Ｚは−Ｃ１〜６アルキルまたは−Ｃ１〜３アルキレン−Ｑであり；Ｑはフェニル、フラニル、ピリジニル、またはチオフェニルであり；Ｑはハロ、Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、および−Ｏ−Ｃ１〜４アルキルから独立に選択された１〜２個のＲ８基で随意的に置換されており；Ｒ８におけるアルキル基は、１から５個のフルオロ原子で随意的に置換されている。
【００５６】
化学式Ｉの化合物の特定の群は、２００７年９月７日に出願された米国特許仮出願第６０／９６７,９１４号に開示されたものである。この群は、化学式（Ｉ’）：
【００５７】
【化１９】
0005656288.tif 000033
において、Ｒ１は−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ２〜６アルケニル、および−Ｃ３〜９シクロアルキルから選択され；Ｒ２はアリールであり；Ｒ３はＨおよび−Ｃ０〜１アルキレン−ＯＨから選択される、またはＲ１と二重結合を形成するか；或いは−ＣＲ１Ｒ２Ｒ３は、化学式：
【００５８】
【化２０】
0005656288.tif 000034
の基であって、Ａは結合、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＮＨ−、または−Ｎ（ＣＨ３）−であり；Ｒ４はＨ，ハロ、−ＯＨ、−Ｃ１〜８アルキル、および−Ｃ１〜８アルコキシから選択される基を形成し；Ｘは結合、−Ｏ−または−Ｏ−ＣＨ２−であり；Ｘが結合であるとき、Ｙは−ＣＨ２−であり、Ｙ’は−Ｎ−であり、Ｙ”は−ＣＨ２−であり；Ｘが−Ｏ−または−Ｏ−ＣＨ２−であるとき、Ｙ’は−ＣＨ−であり、Ｙは結合でありＹ”は−ＣＨ２−または−（ＣＨ２）２−であるか、或いはＹは−ＣＨ２−でありＹ”は−ＣＨ２−であり；Ｒ５はフルオロおよび−Ｃ１〜４アルキルから選択され；ａは０か、または１から３までの整数であり；Ｒ６およびＲ７は、Ｈおよび−Ｃ１〜４アルキルから独立に選択され、さらにＲ６またはＲ７のうち１つは−ＮＨ２であってもよく；ＺはＨ、−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ１〜３アルキレン−Ｑ、および−ＮＨ−Ｃ０〜１アルキレン−Ｑから選択され、Ｑは−Ｃ３〜７シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールから選択され、ハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、シアノ、−Ｃ０〜２アルキレン−ＣＯＯＨ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、−ＣＯＮＲ８ａＲ８ｂ、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜４アルキル、−Ｎ−ジ−Ｃ１〜４アルキル、および−Ｎ＋（Ｏ）Ｏから独立に選択された１〜５個のＲ８基で随意的に置換されており、Ｒ８ａおよびＲ８ｂは、Ｈおよび−Ｃ１〜４アルキルから独立に選択された、化学式Ｉ’の化合物であって、Ｒ１およびＲ２は、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、−Ｃ３〜６シクロアルキル、シアノ、ハロ、−ＯＲｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｂ、−ＳＲｂ、−Ｓ（Ｏ）Ｒｂ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｂ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｄおよび−ＮＲｃＲｄから選択された１から５個までのＲａ基で随意的に置換されており；各Ｒｂは、Ｈ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、および−Ｃ３〜６シクロアルキルから独立に選択され；各ＲｃおよびＲｄは、Ｈ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、および−Ｃ３〜６シクロアルキルから独立に選択され；Ｒa〜d、Ｒ４〜８、およびＺにおける各アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アルキレン基、およびシクロアルキル基は、１から５個までのフルオロ原子で随意的に置換されている基であって、Ｒa〜dにおける各シクロアルキルは、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、シアノ、ハロ、−Ｏ（Ｃ１〜４アルキル）、−Ｓ（Ｃ１〜４アルキル）、−Ｓ（Ｏ）（Ｃ１〜４アルキル）、−Ｓ（Ｏ）２（Ｃ１〜４アルキル）、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜４アルキル）および−Ｎ（Ｃ１〜４アルキル）２から独立に選択された１から３個までの置換基で随意的に置換されており、各アルキル基、アルケニル基およびアルキニル基は、１から５個までのフルオロ置換基で随意的に置換されており；Ｚにおけるアルキレン基は、−Ｃ１〜２アルキルおよび−ＯＨから選択された１または２個の置換基で随意的に置換されている；化合物、または医薬として許容されるその塩を含��。
【００５９】
加えて、本発明において注目される特定の化合物は、以下の実施例に示されるもの、並びに医薬として許容されるその塩を含む。
【００６０】
定義
本発明の化合物、組成物、方法およびプロセスが記載される場合、別の指示がなければ、以下の用語は以下の意味をもつ。加えて、本明細書において単数形「1つの（ａ）」、「1つの（ａｎ）」および「前記、該（ｔｈｅ）」は、使用される文脈が明らかに別のことを指示しなければ、対応する複数形を含む。用語「備える」、「含む」、および「有する」は、包含的である意図をもち、リストアップされた要素以外の付加的な要素がありうることを意味する。成分の量、分子量のような性質、反応条件などを表現する本明細書で用いられるすべての数は、別の指示がなければ、すべての例において用語「約」によって変更されると理解すべきである。従って、本明細書に示される数字は、本発明が得ようとする所望の特性に依存して変化しうる近似値である。少なくとも、各々の数字は、請求項の範囲への均等論の適用を制限する試みとしてではなく報告された有効数字の観点から、かつ通常の四捨五入を適用することによって少なくとも解釈されるべきである。
【００６１】
用語「アルキル」は、直鎖であっても分岐していてもよい一価の飽和炭化水素基を意味する。別の定義がなされなければ、かかるアルキル基は、典型的に１から１０個までの炭素原子を含み、例えば−Ｃ１〜２アルキル、−Ｃ１〜４アルキル、および−Ｃ１〜６アルキルを含む。代表的なアルキル基は、例として、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル、ｎ−デシルなどを含む。
【００６２】
本明細書に用いられる特定の用語に炭素原子の具体的な数が必要なとき、炭素原子の数は、該用語に先行する下付き文字として示される。例えば、用語「−Ｃ１〜４アルキル」は、１から４個までの炭素原子をもつアルキル基を意味し、用語「−Ｃ５〜９シクロアルキル」は、５から９個までの炭素原子をもつシクロアルキル基を意味しており、ここで炭素原子は、許容される任意の配置にある。
【００６３】
用語「アルキレン」は、直鎖であっても分岐していてもよい二価の飽和炭化水素基を意味する。別の定義がなされなければ、かかるアルキレン基は、典型的に０から１０個までの炭素原子を含み、例えば、−Ｃ０〜１アルキレン−、−Ｃ０〜２アルキレン−、−Ｃ０〜４アルキレン−、−Ｃ０〜５アルキレン−、−Ｃ１〜４アルキレン−、−Ｃ１〜２アルキレン−、−Ｃ２〜４アルキレン−、−Ｃ２〜５アルキレン−、および−Ｃ３〜６アルキレン−を含む。代表的なアルキレン基は、例として、メチレン、エタン−１，２−ジイル（「エチレン」）、プロパン−１，２−ジイル、プロパン−１，３−ジイル、ブタン−１，４−ジイル、ペンタン−１，５−ジイルなどを含む。アルキレンの用語が−Ｃ０〜１アルキレン−または−Ｃ０〜５アルキレン−のように炭素ゼロを含む場合、かかる用語は、炭素原子が存在しないことを含む意図をもつ、すなわち、アルキレンの用語によって分離されている基を付着させる共有結合以外にアルキレン基が存在しないものと理解する。
【００６４】
用語「アルケニル」は、直鎖であっても分岐していてもよく、少なくとも１個、典型的に１、２または３個の炭素−炭素二重結合をもつ、一価の不飽和炭化水素基を意味する。別の定義がなされなければ、かかるアルケニル基は、典型的に２から１０までの炭素原子を含み、例えば、−Ｃ２〜４アルケニルおよび−Ｃ２〜６アルケニルを含む。代表的なアルケニル基は、例として、エテニル、ｎ−プロペニル、イソプロペニル、ｎ−ブタ−２−エニル、ｎ−ヘキサ−３−エニルなどを含む。用語「アルケニレン」は、二価のアルケニル基を意味し、例となるアルケニレン基は、−Ｃ２〜３アルケニレン−を含む。
【００６５】
用語「アルコキシ」は、化学式−Ｏ−アルキルの一価基を意味し、ここでアルキルは本明細書に定義された通りである。別な定義がなされなければ、かかるアルキレン基は、典型的に１から１０個までの炭素原子を含み、例えば、−Ｃ１〜４アルコキシおよび−Ｃ１〜８アルコキシを含む。代表的なアルコキシ基は、例として、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、イソブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシなどを含む。
【００６６】
用語「アルキニル」は、直鎖であっても分岐していてもよく、少なくとも１個、典型的に１、２または３個の炭素−炭素三重結合をもつ、一価の不飽和炭化水素基を意味する。別の定義がなされなければ、かかるアルキニル基は、典型的に２から１０個までの炭素原子を含み、例えば、−Ｃ２〜４アルキニルおよび−Ｃ２〜６アルキニルを含む。代表的なアルキニル基は、例として、エチニル、ｎ−プロピニル、ｎ−ブタ−２−イニル、ｎ−ヘキサ−３−イニルなどを含む。
【００６７】
用語「アリール」は、単一の芳香環（すなわち、フェニル）または縮合環（すなわち、ナフタレン）をもつ一価の芳香族炭化水素を意味する。別の定義がなされなければ、かかるアリール基は、典型的に６から１０個までの炭素環原子を含み、例えば、−Ｃ６〜１０アリールを含む。代表的なアリール基は、例として、フェニルおよびナフタレン−１−イル、ナフタレン−２−イルなどを含む。
【００６８】
用語「シクロアルキル」は、一価の炭素環式飽和炭化水素基を意味する。別の定義がなされなければ、かかるシクロアルキル基は、典型的に３から１０個までの炭素原子を含み、例えば、−Ｃ３〜６シクロアルキル、−Ｃ３〜７シクロアルキル、および−Ｃ５〜９シクロアルキルを含む。代表的なシクロアルキル基は、例として、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどを含む。
【００６９】
用語「二価の炭化水素基」は、主として炭素および水素原子から構成され、随意的に１個またはそれ以上のヘテロ原子を含む二価の炭化水素基を意味する。かかる二価の炭化水素基は、分岐または非分岐、飽和または不飽和、非環式または環式、脂肪族または芳香族、或いはその組み合わせであってもよい。二価の炭化水素基は、炭化水素鎖中に取り込まれているか、或いは炭化水素鎖に付着した置換基として随意的にヘテロ原子を含むことができる。
【００７０】
用語「ハロ」はフルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードを意味する。
【００７１】
本明細書では、語句「化学式を有する」または「構造を有する」は限定的である意図をもたず、用語「備える」が一般に用いられるのと同じように用いられる。
【００７２】
用語「ヘテロアリール」は、単一の芳香環または２つの縮合環を有し、窒素、酸素または硫黄から選択された少なくとも１個のヘテロ原子（典型的に１から３個までのヘテロ原子）を環のなかに含む、一価の芳香族基を意味する。別の定義がなされなければ、かかるヘテロアリール基は、典型的に合計５から１０個までの環原子を含み、例えば、−Ｃ２〜９ヘテロアリールを含む。代表的なヘテロアリール基は、例として、ピロリル、イミダゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、フラニル、チオフェニル、トリアゾリル、ピラゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、ピリジニル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、トリアジニル、インドリル、ベンゾフラニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオフェニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾジオキソリル、キノリル、イソキノリル、キナゾリニル、キノキサリニルなどを含み、ここで付着点は利用しうる任意の炭素または窒素環原子である。
【００７３】
用語「随意的に置換されている」は、問題の基が、未置換であってもよく、或いは１から３回または１から５回のように、1から数回置換されていてもよいことを意味する。例えば、１から５個のフルオロ原子で「随意的に置換されている」アルキル基は、未置換であってもよく、或いは１、２、３、４、または５個のフルオロ原子を含んでもよい。
【００７４】
用語「医薬として許容される」は、本発明において、生物学的に、或いは他の点で許容される物質を指す。例えば、用語「医薬として許容されるキャリア」は、許容できない生物学的な影響を生じたり、或いは組成物の他成分と許容できない相互作用をしたりせずに、組成物に取り込んで患者に投与できる物質を指す。かかる医薬として許容される物質は、典型的に毒性および製造テストにおける必要基準を満たしており、米国食品医薬品局により適切な不活性成分として確認された物質を含む。
【００７５】
用語「医薬として許容される塩」は、患者、例えば哺乳動物への投与が許容される塩基または酸から調製された塩（例えば、所定の投薬療法において許容される哺乳動物への安全性を有する塩）を意味する。しかしながら、本発明が取り上げる塩は、患者への投与が意図されない中間化合物の塩のように、医薬として許容される塩である必要はないものと理解する。医薬として許容される塩は、医薬として許容される無機または有機塩基から、および医薬として許容される無機または有機酸から得ることができる。加えて、化学式Ｉの化合物が塩基性部分および酸性部分の両方を含む場合、双生イオンが形成されることがあり、本明細書に用いる用語「塩」はこれを含む。医薬として許容される無機塩基から得られる塩は、アンモニウム塩、カルシウム塩、銅塩、三価鉄塩、二価鉄塩、リチウム塩、マグネシウム塩、三価マンガン塩、二価マンガン塩、カリウム塩、ナトリウム塩、および亜鉛塩などを含む。医薬として許容される有機塩基から得られる塩は、置換アミン類、環状アミン類、自然発生アミン類など、例えば、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン（ｐｉｐｅｒａｚｉｎｅ）、ピペラジン（ｐｉｐｅｒａｄｉｎｅ）、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン類、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミンなどを含めて、一級、二級および三級アミンの塩を含む。医薬として許容される無機酸から得られる塩は、ほう酸塩、炭酸塩、ハロゲン化水素酸（臭化水素酸、塩酸、ふっ酸またはよう化水素酸）塩、硝酸塩、りん酸塩、スルファミン酸塩および硫酸塩を含む。医薬として許容される有機酸から得られる塩は、脂肪族ヒドロキシ酸類（例えば、くえん酸、グルコン酸、グリコール酸、乳酸、ラクトビオン酸、りんご酸および酒石酸）、脂肪族モノカルボン酸類（例えば、酢酸、酪酸、ぎ酸、プロピオン酸およびトリフルオロ酢酸）、アミノ酸類（例えば、アスパラギン酸およびグルタミン酸）、芳香族カルボン酸類（例えば、安息香酸、ｐ−クロロ安息香酸、ジフェニル酢酸、ゲンチシン酸、馬尿酸、およびトリフェニル酢酸）、芳香族ヒドロキシ酸類（例えば、ｏ−ヒドロキシ安息香酸、ｐ−ヒドロキシ安息香酸、１−ヒドロキシナフタレン−２−カルボン酸および３−ヒドロキシナフタレン−２−カルボン酸）、アスコルビン酸、ジカルボン酸類（例えば、フマル酸、マレイン酸、しゅう酸およびこはく酸）、グルクロン酸、マンデル酸、粘液酸、ニコチン酸、オロチン酸、パモン酸、パントテン酸、スルホン酸類（例えば、ベンゼンスルホン酸、カンファースルホン酸、エジシル（ｅｄｉｓｙｌｉｃ）酸、エタンスルホン酸、イセチオン酸、メタンスルホン酸、ナフタリンスルホン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、ナフタレン−２，６−ジスルホン酸およびｐ−トルエンスルホン酸）、キシナホ（ｘｉｎａｆｏｉｃ）酸などの塩を含む。
【００７６】
用語「治療に有効な量」は、治療を必要とする患者に投与されたときに治療を有効にするために十分な量、すなわち、所望の治療効果を得るのに必要な薬物量を意味する。例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）の治療のための、治療に有効な量は、（ＣＯＰＤ）の症状を、例えば、低減、抑制、解消、または予防するか、或いは（ＣＯＰＤ）の根底にある原因を治療するために必要な化合物量である。他方、「有効な」量は、所望の結果を得るために必要な量であり、必ずしも治療に有効な量でなくてもよい。例えば、ムスカリン受容体をアンタゴナイズすることを備えるシステムを研究する場合、「有効な量」は、受容体をアンタゴナイズするために必要な量であってもよい。
【００７７】
本明細書では、「治療すること」または「治療」は、哺乳動物（特にヒト）のような患者における（ＣＯＰＤのような）疾患または医学的状態を治療することまたは治療を意味し、（ａ）疾患または医学的状態の発生を予防すること、すなわち、患者の予防的治療；（ｂ）疾患または医学的状態を改善すること、すなわち、患者における疾患または医学的状態を解消するか、または後退させること；（ｃ）疾患または医学的状態を抑制すること、すなわち、患者における疾患または医学的状態の進行を遅らせるか、または止めること；或いは、（ｄ）患者における疾患または医学的状態の症状を軽減することを含む。例えば、用語「ＣＯＰＤを治療すること」は、ＣＯＰＤの発生を予防すること、ＣＯＰＤを改善すること、ＣＯＰＤを抑制すること、およびＣＯＰＤの症状を軽減することを含むことになろう。用語「患者」は、治療または疾患の予防が必要なヒト、特定の疾患または医学的状態の疾患予防または治療のために現在治療を受けているヒト、並びに本発明の化合物を評価する、或いはアッセイに用いるテスト対象、例えば動物モデルのような動物を含む意図をもつ。
【００７８】
本明細書に用いられるすべての他の用語は、本分野に属する当業者によって理解される通常の意味をもつことが意図される。
【００７９】
一般的な合成手順
本発明の化合物は、入手が容易な出発物質から、次の一般的な方法、実施例に示される手順を用いて、或いは当業者に知られた他の方法、試薬、および出発物質を用いて調製することができる。以下の手順により本発明の特定の実施形態を説明することができるが、同一または同様の方法を用いて、或いは当業者に知られた他の方法、試薬および出発物質を用いることによって、本発明の他の実施形態も同様に調製できると考えられる。同じく当然のことながら、典型的な、或いは好ましいプロセス条件（すなわち、反応温度、時間、反応物のモル比、溶媒、圧力など）が示されるところでは、別の記述がなければ、他のプロセス条件を用いることもできる。最適な反応条件は、一般に様々な反応パラメータ、例えば特定の反応剤、溶媒および使用量などに依存して変化するであろうが、当業者は、日常的な最適化手順を用いて容易に適切な反応条件を決定することができる。
【００８０】
加えて、当業者に明らかであろうように、望ましくない反応がある種の官能基に生じることを防ぐために、従来の保護基が必要ないし望ましいことがある。特定の官能基に適した保護基の選択、並びにかかる官能基の防護および脱保護に適した条件および試薬は、当分野でよく知られている。望ましくない反応を防ぐために保護できる官能基は、例として、カルボキシ基、アミノ基、ヒドロキシル基、チオール基、カルボニル基などを含む。代表的なカルボキシ保護基は、限定されることなしに、メチル、エチル、ｔ−ブチル、ベンジル（Ｂｎ）、ｐ−メトキシベンジル（ＰＭＢ）、９−フルロエニルメチル（Ｆｍ）、トリメチルシリル（ＴＭＳ）、ｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＳ）、ジフェニルメチル（ベンズヒドリル、ＤＰＭ）などのようなエステル類；アミド類およびヒドラジド類を含む。代表的なヒドロキシル保護基は、限定されることなしに、トリメチルシリル（ＴＭＳ）、トリエチルシリル（ＴＥＳ）、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＳ）などのようなトリＣ１〜６アルキルシリル基を含むシリル基、フォルミル、アセチルなどのようなＣ１〜６アルカノイル基を含むエステル類（アシル基）；ベンジル（Ｂｎ），ｐ−メトキシベンジル（ＰＭＢ）、９−フルオレニルメチル（Ｆｍ）、ジフェニルメチル（ベンズヒドリル、ＤＰＭ）などのようなアリールメチル基；およびエーテル類を含む。チオール基のための代表的な保護基は、チオエーテル類およびチオエステル類を含む。カルボニル基のための代表的な保護基は、アセタール類およびケタール類を含む。必要に応じて、本明細書に記載されたもの以外の保護基を用いることができる。例えば、多数の保護基、並びにそれらの導入および除去は、Ｔ．Ｗ．ＧｒｅｅｎおよびＧ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，第３版、Ｗｉｌｅｙ，ニューヨーク、１９９９およびそこに引用された参考文献に記載されている。より具体的に、次の略語および試薬が、以下に提示されるスキームに用いられる。
【００８１】
Ｐは「アミノ保護基」、アミノ基における望ましくない反応を防ぐのに適した保護基を意味するために本明細書に用いる用語を表す。代表的なアミノ保護基は、限定されることなしに、ｔ−ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）、トリチル（Ｔｒ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、フォルミル、トリメチルシリル（ＴＭＳ）、ｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）などを含む。標準的な脱保護技術が、Ｐ１基を除去するために用いられる。例えば、Ｎ−ＢＯＣ基の脱保護に塩酸、または４Ｍ塩酸の１,４−ジオキサン溶液のような試薬を用いることができる。
【００８２】
これらのスキームで用いるのに適した塩基は、例として限定なしに、炭酸カリウム、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、トリエチルアミン、ピリジン、１，８−ジアザビシクロ−［５.４.０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、カリウムｔ−ブトキシド，および金属水素化物を含む。
【００８３】
これらのスキームで用いるのに適した不活性な希釈液または溶媒は、例として限定なしに、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、アセトニトリル（ＭｅＣＮ）、トルエン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、クロロホルム、四塩化炭素（ＣＨＣｌ３）、１,４−ジオキサン、メタノール、エタノール、水などを含む。
【００８４】
適切なカルボン酸／アミンカップリング試薬は、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（ＨＯＢｔ）、ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウム・ヘキサフルオロホスファート（ＰｙＢＯＰ）、Ｏ−(７−アザベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’テトラメチルウロニウム・ヘキサフルオロホスファート（ＨＡＴＵ）、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＤＣ）；Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド（ＥＤＣＩ）、カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）などを含む。カップリング反応は、塩基の存在下において不活性な希釈液中で行われ、アミド結合を形成する従来の条件下で実施される。
【００８５】
すべての反応は、典型的に約−７８℃から１００℃までの範囲内の温度、例えば室温で行なわれる。典型的に、反応は、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、および／またはＬＣＭＳの使用により完了までモニターされる。反応は、数分で完了することもあり、或いは数時間、典型的に１〜２時間から４８時間までかかることもある。完了時点で、所望の生成物を得るために混合物をさらに処理することができる。例えば、混合物は次の手順の１つまたはそれ以上を経ることができる：除去または分配（例えば、酢酸エチルおよび水間、或いは５％ＴＨＦの酢酸エチル溶液および１Ｍりん酸間）；抽出（例えば、酢酸エチル、ＣＨＣｌ３、ＤＣＭ、ＫＯＨ／クロロホルムを用いる）；洗浄（例えば、ＮａＣｌの飽和水溶液、飽和ＮａＨＣＯ３、Ｎａ２ＣＯ３（５％）、ＣＨＣｌ３、ＨＣｌまたはＮａＯＨを用いる）；乾燥（例えば、ＭｇＳＯ４またはＮａＳＯ４上）；溶媒除去（例えば、真空中）；濾過；濃縮（例えば、真空中）；および／または精製（例えば、シリカゲルクロマトグラフィー、フラッシュクロマトグラフィー、または逆相ＨＰＬＣ）。
【００８６】
例として、化学式Ｉの化合物は、例となる次のプロセスの１つまたはそれ以上によって調製することができる。反応物はすべて市販されている、および／または当分野でよく知られた技術により容易に合成することができる。
【００８７】
Ｘが結合である頭部基の形成
【００８８】
【化２１】
0005656288.tif 000035
化合物（１）および（２）を、アミド結合を形成する従来の条件下でカップリングさせ、それに続く脱保護ステップによって化合物（３）が形成される。
【００８９】
化合物（１）の例は、（Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（Ｒ１はシクロペンチルであり、Ｒ２はフェニルでありＲ３はヒドロキシである）を含む。化合物（２）の例は、ｔ−ブチル−１−ピペラジンカルボキシラート（ａは０であり、Ｐ１はＢＯＣである）を含む．
Ｘが−Ｏ−である頭部基の形成
【００９０】
【化２２】
0005656288.tif 000036
化合物（５）は、光延カップリング反応によって形成される（ＭｉｔｕｎｏｂｕおよびＹａｍａｄａ（１９６７）Ｍ．Ｂｕｌｌ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．ＪＰＮ．４０：２３８０-２３８２）。化合物（１）および化合物（４）をトリフェニルホスピンのようなホスフィン触媒、およびジエチルアゾジカルボキシラートまたはジイソプロピルアゾジカルボキシラートのようなアゾジカルボキシラートの存在下で反応させ、それに続く脱保護ステップによって化合物（５）が得られる。化合物（５）は、エステル転移反応によっても調製することができる。
【００９１】
化合物（１）の例は、（Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（Ｒ１はシクロペンチルであり、Ｒ２はフェニルでありＲ３はヒドロキシである）を含む。化合物（４）の例は、（Ｒ）−３−ヒドロキシピロリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（ａは０であり、Ｐ１はＢＯＣであり、Ｙは結合であり、Ｙ’は−ＣＨ−でありＹ”は−ＣＨ２−である）、４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（ａは０であり、Ｐ１はＢＯＣであり、Ｙは−ＣＨ２−であり、Ｙ’は−ＣＨ−であり、Ｙ”は−ＣＨ２−である）、または（Ｒ）−３−ヒドロキシピペリジン−１−カルボン酸ｔ‐ブチルエステル（ａは０であり、Ｐ１はＢＯＣであり、Ｙは結合であり、Ｙ’は−ＣＨ−でありＹ”は−（ＣＨ２）２−である）を含む。
【００９２】
頭部基へのグアニジン部分の付加−
第１ベンゾトリアゾール部分の置換
【００９３】
【化２３】
0005656288.tif 000037
適切な溶媒中において化合物（３）または化合物（５）にＤＩＰＥＡを加える。次に化合物（６）、グアニジン付加剤を加え、反応が完了するまで室温で典型的に３０分から数時間攪拌して化合物（７）を生じさせて、次のステップにこれを直接用いる。化合物（６）は、Ｋａｔｒｉｔｚｋｙら（２０００）Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．６５（２３）：８０８０-８０８２に記載された方法により容易に調製される。化合物（６）の例は、Ｃ−（ビス−ベンゾトリアゾール−１−イル）メチレンアミン（Ｒ６はＨ）である。
【００９４】
置換されたグアニジンの形成
（トリまたはテトラ置換されたグアニジンの形成）
【００９５】
【化２４】
0005656288.tif 000038
化合物（７）を化合物（８）に加え、混合物を室温で、または（約６０℃に）加熱して、完了まで典型的に約１４〜２４時間保持する。次に、必要に応じて、反応を室温まで冷却して、溶媒を除去する。未精製の物質を次に精製して、化学式Ｉの化合物を供する。化合物（８）の例は、２−チオフェンメチルアミン、４−ヒドロキシベンジルアミン、およびベンジルアミンを含む。
【００９６】
本発明の代表的な化合物、またはその中間生成物を調製するための具体的な反応条件および他の手順に関するさらなる詳細は、以下に示す実施例に記載される。
【００９７】
効能
本発明の化合物は、ムスカリン受容体アンタゴニスト活性、および一実施形態においては、ナノモルの作用強度を有する。一実施形態において、本発明の化合物は、Ｍ２ムスカリン受容体サブタイプの活性以上に、Ｍ３ムスカリン受容体サブタイプの活性を選択的に阻害する。別の実施形態において、本発明の化合物は、Ｍ１、Ｍ４、Ｍ５ムスカリン受容体サブタイプの活性以上に、Ｍ３およびＭ２ムスカリン受容体サブタイプの活性を選択的に阻害する。加えて、本発明の化合物は、望ましい作用持続時間を有することが期待される。従って、別の特定の実施形態において、本発明は、約２４時間より長い作用持続期間をもつ化合物に関する。さらに、本発明の化合物は、吸入によって投与されたとき、（チオトロピウムのような）吸入によって投与される他の知られた受容体アンタゴニストと比較して、有効な用量における口渇のような副作用が低減されることも期待される。
【００９８】
Ｍ３受容体サブタイプに対する化合物の親和性に関する１つの尺度は、受容体への結合に対する阻害解離定数（Ｋｉ）である。本発明の化合物は、例えば、インビトロの放射性リガンド置換アッセイによって測定されるように、Ｍ３受容体サブタイプに対して１００ｎＭ以下のＫｉを有することが期待される。特に注目される化合物は、５０ｎＭ以下のＫｉを有するものを含み、別の実施形態において、該化合物は１０ｎＭ以下のＫｉを有し、また別の実施形態において、該化合物は１．０ｎＭ以下のＫｉを有する。なおさらに特に注目される化合物は、５００ｐＭ以下のＫｉを有するものを含み、別の実施形態において、該化合物は２００ｐＭ以下のＫｉを有する。いくつかの場合に、本発明の化合物が弱いムスカリン受容体アンタゴニスト活性を有してもよいことを付記しておく。かかる場合に、当業者は、これらの化合物が研究手段としてなお効能を有することを認識するであろう。
【００９９】
やはり特に注目されるのは、投薬の２４時間後に１００μｇ／ｍＬ以下のＩＤ５０を有する化合物、さらに特に投薬の２４時間後に３０μｇ／ｍＬ以下のＩＤ５０を有する化合物である。
【０１００】
ムスカリン受容体をアンタゴナイズする活性のような、本発明の化合物の特性を測定するための例となるアッセイは、実施例に記載されており、例として限定なしに、（例えば、アッセイ１に記載されるような）ｈＭ１、ｈＭ２、ｈＭ３、ｈＭ４、およびｈＭ５ムスカリン受容体における結合を測定するアッセイを含む。ムスカリン受容体をアンタゴナイズする本発明の化合物の活性を測定するのに役立つ機能アッセイは、例として限定なしに、リガンド介在による細胞内環状アデノシン一リン酸（ｃＡＭＰ：ｃｙｃｌｉｃ  ａｄｅｎｏｓｉｎｅ  ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ）の変化；リガンド介在による（ｃＡＭＰを合成する）酵素アデニリルシクラーゼ活性の変化；リガンド介在による、受容体により触媒されたグアノシン５’−Ｏ−（γ−チオ）三リン酸（[３５Ｓ]ＧＴＰγＳ：ｇｕａｎｏｓｉｎｅ  ５’−Ｏ−（γ−ｔｈｉｏ）  ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ）とＧＤＰとの交換を通しての単離膜への[３５Ｓ]ＧＴＰγＳ取り込みの変化；リガンド介在による、自由な細胞内カルシウムイオンの（例えば、蛍光結合イメージングプレートリーダー、すなわちＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ社のＦＬＩＰＲ（登録商標）（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ−ｌｉｎｋｅｄ  ｉｍａｇｉｎｇ  ｐｌａｔｅ  ｒｅａｄｅｒ）を用いて測定される）変化などを測定するアッセイを含む。例となるアッセイは、アッセイ２に記載される。本発明の化合物は、上記にリストアップされたアッセイのいずれか、または同様の特質をもつアッセイにおいてムスカリン受容体の活性をアンタゴナイズするか、または減少させることが期待され、これらの検討において約０．１〜１００ナノモルの濃度範囲が一般に用いられることになる。かくして、前述のアッセイは、治療の効能、例えば、本発明の化合物の気管支拡張活性を測定するのに役立つ。
【０１０１】
当業者によく知られる様々なインビトロおよびインビボアッセイを用いて、本発明の化合物の他の特性および効能を測定することができる。例えば、本発明の化合物のインビボでの作用強度は、Ｅｉｎｔｈｏｖｅｎモデルのような動物モデルにおいて測定することができる。端的には、化合物の気管支拡張活性薬としての活性は、麻酔された動物（Ｅｉｎｔｈｏｖｅｎモデル）において評価され、気道抵抗の代理手段として換気圧力が用いられる。例えば、Ｅｉｎｔｈｏｖｅｎ（１８９２）  Ｐｆｕｇｅｒｓ  Ａｒｃｈ．５１：３６７-４４５；およびＭｏｈａｍｍｅｄら（２０００）  Ｐｕｍｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｈｅｒ．１３（６）：２８７-９２、並びにラットのＥｉｎｔｈｏｖｅｎモデルについて記載するアッセイ３を参照。一実施形態において、ラットのＥｉｎｔｈｏｖｅｎモデルに１００μｇ／ｍｌの用量が投与された本発明の化合物は、気管支収縮薬への反応が２４時間後に３５％以上阻害されることを示し、別の実施形態において、２４時間後に７０％以上阻害されることを示す。別の有用なインビボアッセイは、（例えば、アッセイ４に記載されるような）ラットの抗唾液分泌促進アッセイである。
【０１０２】
本発明の化合物は、ムスカリン受容体が介在する医学的状態を治療するための治療薬として役立つことが期待される。それ故に、ムスカリン受容体を塞ぐことによって治療される疾患または障害に苦しむ患者は、治療に有効な量の本発明のムスカリン受容体アンタゴニストを投与することによって治療できることが期待される。かかる医学的状態は、慢性閉塞性肺疾患（例えば、慢性で呼吸が困難な気管支炎および気腫）、喘息、肺線維症、アレルギー性鼻炎、鼻漏などのような、可逆性気道閉塞に関連付けられるものを含めて、例として肺障害または疾患を含む。ムスカリン受容体アンタゴニストを用いて治療することができる他の医学的状態は、過活動膀胱または排尿筋活動過多およびその症状のような泌尿生殖器系障害；過敏性腸症候群、憩室疾患、アカラシア、胃腸運動過剰障害および下痢のような胃腸管障害；洞性徐脈のような心臓不整脈；パーキンソン病；アルツハイマー病のような認知障害；月経困難症などである。
【０１０３】
一回に投与される活性薬剤の量は、規定のこともあり、或いは患者の状態の特質および重症度、治療状況、年齢、体重、および患者の全般的な健康状態、活性薬剤に対する患者の耐性、投与経路、投与される活性薬剤および任意の第２の薬剤の活性、効力、薬物動態および毒性プロファイルのような薬理学的考慮などを含む多数の要因を考慮に入れることによって、個々の患者に基づいて決められることもある。（ＣＯＰＤのような）疾患または医学的状態に苦しむ患者の治療は、規定の投薬量、または治療に当たる医師によって決められる投薬量から始めることができ、疾患または医学的状態の症状を予防、改善、抑制、または軽減するために必要な期間続くことになる。かかる治療を受けている患者は、治療の有効性を決定するために、通常は日常的にモニタリングされることになる。例えば、ＣＯＰＤの治療では、（１秒間に測定される）努力呼気肺活量の有意な改善から治療の有効性を決定することができる。本明細書に記載される他の疾患および状態に関する同様の指標が当業者によく知られており、治療に当たる医師は容易に利用することができる。医師による連続的なモニタリングは、いかなるときも活性薬剤の最適量が投与されること、並びに治療期間の決定を容易にすることを保証するであろう。第２の薬剤も投与されているときには、その選択、投薬量、および治療期間も調整が必要となりうるので、これは特に価値がある。このように、所望の有効性を示す活性薬剤の最低量が投与され、さらにその投与が、疾患または医学的状態を首尾よく治療するために必要な間のみ継続されるように、治療の過程にわたって治療計画および投薬スケジュールを調整することができる。
【０１０４】
従って、一実施形態において、本発明の化合物は、ヒトおよび他のペット（例えば、イヌ、ネコなど）を含む哺乳動物における平滑筋障害を治療するために役立つ。かかる平滑筋障害は、例として、過活動膀胱、慢性閉塞性肺疾患および過敏性腸症候群を含む。典型的に、平滑筋障害、またはムスカリン受容体が介在する他の障害の治療に適する用量は、約０.１５μｇ／ｋｇ／日から約５ｍｇ／ｋｇ／日までを含んで、約０.１４μｇ／ｋｇ／日から約７ｍｇ／ｋｇ／日までの活性薬剤の範囲となるであろう。平均７０ｋｇのヒトに対して、これは１日に約１０μｇから１日に約５００ｍｇまでの範囲の活性薬剤量になるであろう。
【０１０５】
特定の実施形態において、本発明の化合物は、治療に有効な量の化合物を患者に投与することによって、ヒトを含む哺乳動物におけるＣＯＰＤまたは喘息のような肺または呼吸器の障害を治療するために役立つ。一般に、肺障害を治療するための用量は、約１０〜１５００μｇ／日の範囲であろう。用語「ＣＯＰＤ」が、Ｂａｒｎｅｓ（２０００）Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４３：２６９-７８、およびそこに引用された参考文献の教えが例示するように、慢性閉塞性気管支炎および気腫を含めて様々な呼吸器の状態を含むことは、当業者によって理解される。肺障害を治療するために用いられるとき、本発明の化合物は、随意的にβ２−アドレナリン受容体アゴニスト；コルチコステロイド、非ステロイド系抗炎症薬、またはその組み合わせのような他の治療薬と組み合わせて投与される。
【０１０６】
吸入によって投与されたとき、本発明の化合物は、典型的に気管支拡張を発生させる効果を有する。従って、方法に関する別の様態において、本発明は、患者における気管支拡張を発生させる方法に関し、気管支拡張を発生させる量の本発明の化合物を患者に投与することを備える。一般に、気管支拡張を発生させる治療に有効な用量は、約１０〜１５００μｇ／日の範囲であろう。
【０１０７】
別の実施形態において、本発明の化合物は、過活動膀胱を治療するために用いられる。過活動膀胱を治療するために用いられるとき、典型的な用量は、約１.０〜５００ｍｇ／日の範囲であろう。また別の実施形態において、本発明の化合物は、過敏性腸症候群を治療するために用いられる。過敏性腸症候群を治療するために用いられるとき、本発明の化合物は、一般に経口投与または直腸内投与され、典型的な用量は、約１.０〜５００ｍｇ／日の範囲であろう。
【０１０８】
本発明の化合物は、ムスカリン受容体アンタゴニスト活性を有するため、かかる化合物は、ムスカリン受容体を有する生体システムまたは試料を調査または研究するための研究手段としても役立つ。Ｍ１、Ｍ２、Ｍ３、Ｍ４および／またはＭ５ムスカリン受容体を有する任意の適切な生体システムまたは試料をインビトロまたはインビボのいずれかで行うことができるかかる研究に用いることができる。かかる研究に適する代表的な生体システムまたは試料は、限定されることなしに、細胞、細胞抽出物、細胞質膜、組織試料、摘出臓器、（マウス、ラット、モルモット、ウサギ、イヌ、ブタ、ヒトなどのような）哺乳動物などを含み、哺乳動物が特に注目される。本発明の特定の一実施形態において、哺乳動物におけるムスカリン受容体は、ムスカリン受容体をアンタゴナイズする量の本発明の化合物を投与することによってアンタゴナイズされる。本発明の化合物は、かかる化合物を用いてバイオアッセイを行うことにより、研究手段としても用いることができる。
【０１０９】
研究手段として用いるとき、一般に、ムスカリン受容体を備える生物システムまたは試料を、ムスカリン受容体をアンタゴナイズする量の本発明の化合物と接触させる。ムスカリン受容体をアンタゴナイズする効果は、生物システムまたは試料を化合物に曝露した後、従来の手順および機器を用いて、例えば、放射性リガンド結合アッセイにおける結合、または機能アッセイにおけるリガンド介在による変化を測定することによって、或いは哺乳動物の気管支保護アッセイにおいて化合物がもたらす気管支保護の量を測定することによって測定する。曝露は、細胞または組織を化合物に接触させること、哺乳動物に、例えば、腹腔内または静脈内投与によって、化合物を投与することなどを包含する。この測定ステップは、反応を測定すること、すなわち定量的な分析を備えてもよく、或いは観測、すなわち定性的な分析を備えてもよい。反応を測定することは、例えば、放射性リガンド結合アッセイのような従来の手順および機器を用いて、生物システムまたは試料に対する化合物の効果を決定すること、および機能アッセイにおいてリガンド介在による変化を測定することを含む。アッセイの結果は、活性レベル、並びに所望の結果を達成するために必要な化合物量、すなわち、ムスカリンをアンタゴナイズする量を決定するために用いることができる。典型的に、決定ステップは、ムスカリン受容体におけるリガンド介在効果の決定を含むであろう。
【０１１０】
加えて、本発明の化合物は、他の化合物を評価する研究手段としても用いることができ、それ故に、例えば、ムスカリン受容体結合活性を有する新しい化合物を発見するスクリーニングアッセイにも役立つ。このように、本発明の化合物をアッセイの標準物質として用い、テスト化合物および本発明の化合物で得られた結果を比較して、もし存在するならば、ほぼ等しいか、或いはより優れた結合を有するテスト化合物を同定することができる。例えば、テスト化合物またはテスト化合物群に対する（例えば、インビトロ放射性リガンド置換アッセイで測定した）ムスカリン受容体結合データを本発明の化合物に対するムスカリン受容体結合データと比較し、もし存在するならば、所望の特性を有するテスト化合物、例えば、本発明の化合物とほぼ等しいか、或いはより優れた結合を有するテスト化合物を同定する。代わりに、例えば、哺乳動物の気管支保護アッセイにおいてテスト化合物および本発明の化合物の気管支保護効果を測定し、このデータを比較して、ほぼ等しいか、或いはより優れた気管支保護効果を提供するテスト化合物を同定することができる。本発明のこの様態は、注目すべきテスト化合物を同定するために（然るべきアッセイを用いて）比較データを生成すること、およびテストデータを分析することの両方を別々の実施形態として含む。かくして、テスト化合物は、（ａ）テスト化合物を用いてバイオアッセイを行ない、第１の分析値を提供するステップ；（ｂ）本発明の化合物を用いてバイオアッセイを行ない、第２の分析値を提供するステップであって、ステップ（ａ）はステップ（ｂ）の前、後または同時のいずれかに行われる、ステップ；および（ｃ）ステップ（ａ）からの第１の分析値をステップ（ｂ）からの第２の分析値と比較するステップ、を備える方法により、バイオアッセイにおいて評価であることができる。例となるバイオアッセイは、ムスカリン受容体結合アッセイを含む。
【０１１１】
医薬組成物および製剤
本発明の化合物は、一般に医薬組成物または製剤の形態で患者に投与される。かかる医薬組成物は、限定されることなしに、吸入、経口、経鼻、（経皮を含む）局所的および非経口的投与モードを含む任意の許容される投与手段によって、患者に投与することができる。さらに、本発明の化合物は、例えば経口により、１日当たり複数回の用量、毎日1回または毎週１回の用量を投与することができる。当然のことながら、特定の投与モードに適した本発明の化合物のいずれかの形態（すなわち、遊離塩基、医薬として許容される塩、溶媒和物など）を、本明細書で議論される医薬組成物中に用いることができる。
【０１１２】
それ故に一実施形態において、本発明は、医薬として許容されるキャリアおよび本発明の化合物を備える医薬組成物に関する。該組成物は、望ましければ他の治療薬および／または調合剤を含むことができる。「本発明の化合物」は、本明細書において「活性薬剤」と呼称されることもある。
【０１１３】
本発明の医薬組成物は、治療に有効な量の本発明の化合物を典型的に含む。しかしながら、当業者は、医薬組成物が、治療に有効な量より多量を含んでもよい、すなわちバルク組成物か、或いは治療に有効な量より少量、すなわち、複数回投与によって治療に有効な量に達するように設計された個々の単位用量を含んでもよいことを認識するであろう。一実施形態において、該組成物は、約０.０１〜１０ｗｔ％のように、約０.０１〜３０ｗｔ％を含んで、約０.０１〜９５ｗｔ％の活性薬剤を含み、実際の量は、製剤そのもの、投与経路、投薬頻度などに依存することになろう。別の実施形態において、吸入に適した組成物は、例えば、約０.０１〜３０ｗｔ％または活性薬剤を備え、また別の実施形態は、約０.０１〜１０ｗｔ％の活性薬剤を備える。
【０１１４】
任意の従来のキャリアまたは賦形剤を本発明の医薬組成物に用いることができる。特定のキャリアまたは賦形剤、或いはキャリアまたは賦形剤の組み合わせの選択は、特定の患者、或いは医学的状態または病状のタイプを治療するために用いる投与モードに依存するであろう。これに関して、特定の投与モードに適する組成物の調製は、十分に製薬分野の当業者の範囲内である。加えて、かかる組成物に用いるキャリアまたは賦形剤は市販されている。さらなる例として、従来の製剤技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，第２０版，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｈｉｔｅ，ボルティモア，メリーランド州（２０００）；およびＨ．Ｃ．Ａｎｓｅｌら，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，第７版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｈｉｔｅ，ボルティモア，メリーランド州（１９９９）に記載されている。
【０１１５】
医薬として許容されるキャリアの機能を果たす物質の代表的な例は、限定されることなしに、次のものを含む：ラクトース、グルコースおよびスクロースのような糖類；コーンスターチおよびジャガイモ澱粉のような澱粉類；微晶質セルロースのようなセルロース、およびその誘導体、例えば、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、エチルセルロースおよび酢酸セルロース；粉末トラガカント；モルト；ゼラチン；タルク；ココアバターおよび座薬ワックスのような賦形剤；落花生油、綿実油、サフラワー油、胡麻油、オリーブ油、コーン油および大豆油のようなオイル類；プロピレングリコールのようなグリコール類；グリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエテレングリコールのようなポリオール類；オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチルのようなエステル類；寒天；水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウムのような緩衝化剤；アルギン酸；発熱物質のない水；等張食塩水；リンゲル液；エチルアルコール；りん酸緩衝液；クロロフルオロカーボンおよびヒドロフルオロカーボンのような圧縮された推進剤ガス；および医薬組成物に用いられており、毒性がなく混合可能な他の物質。
【０１１６】
医薬組成物は、一般に活性薬剤を、医薬として許容されるキャリアおよび1つまたはそれ以上の随意的な成分と徹底的かつ密接に混合または調合することによって調製される。次に、結果として生じた一様に調合された混合物は、従来の手順および機器を用いて、錠剤、カプセル、丸薬、キャニスター、カートリッジ、ディスペンサーなどに成形または充填することができる。
【０１１７】
一実施形態において、本医薬組成物は、吸入による投与に適している。吸入による投与に適した組成物は、典型的にエアロゾルまたは粉末形態であろう。かかる組成物は、噴霧吸入器、乾燥粉末吸入器、または定量吸入器のような、以下にその例が記載されるよく知られた送達機器を用いて投与される。
【０１１８】
本発明の特定の実施形態において、活性薬剤を備える組成物は、噴霧吸入器を用いた吸入によって投与される。一般にかかる噴霧機器は高速気流を発生させ、組成物を患者の気道に運ぶミストとして噴霧する。従って、噴霧吸入器用に製剤する場合、通常は活性薬剤を適切なキャリアに溶解させて溶液を形成する。代わりに、活性薬剤を微粉末化して適切なキャリアと混ぜ合わせ、呼吸可能なサイズに微粉末化した粒子の懸濁剤を形成することもできる。ここで、微粉末化されたとは一般に、粒子のうち少なくとも約９０パーセントが約１０μｍより小さい質量中央径をもつ粒子からなるとして定義される。用語「質量中央径」は、粒子の質量の半分がより大きい直径をもつ粒子に含まれ、半分がより小さい直径をもつ粒子に含まれるような直径を意味する。
【０１１９】
適切な噴霧機器は、Ｒｅｓｐｉｍａｔ（登録商標）Ｓｏｆｔ  Ｍｉｓｔ（商標）Ｉｎｈａｌｅｒ（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、ＡＥＲｘ（登録商標）Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｒａｄｉｇｍ社）、およびＰＡＲＩ  ＬＣ  Ｐｌｕｓ  Ｒｅｕｓａｂｌｅ  Ｎｅｂｕｌｉｚｅｒ（Ｐａｒｉ  ＧｍｂＨ）を含む。噴霧吸入器に用いるための例となる組成物は、約０.０５μｇ／ｍＬから約１０ｍｇ／ｍＬまでの本発明の化合物を含む等張水溶液を備える。一実施形態において、かかる溶液は約４〜６のｐＨをもつ。
【０１２０】
本発明の別の特定の実施形態において、活性薬剤を備える組成物は、乾燥粉末吸入器（ＤＰＩ：ｄｒｙ  ｐｏｗｄｅｒ  ｉｎｈａｌｅｒ）を用いた吸入によって投与される。一般にかかるＤＰＩは、吸気の間に患者の気流に分散された自由流動性の粉末として活性薬剤を投与する。自由流動性の粉末を得るために、活性薬剤は、一般にラクトース、澱粉、マンニトール、ブドウ糖、多乳酸、ラクチド・グリコリド共重合体、およびその組み合わせのような適切な賦形剤を用いて製剤される。典型的に、活性薬剤を微粉末化し、賦形剤と混ぜ合わせて、吸入に適した混合物を形成する。従って、本発明の一実施形態において、活性薬剤は微粉末化された形態にある。例えば、ＤＰＩ用の代表的な組成物は、約１μｍから約１００μｍの間の粒径をもつ乾燥ラクトース（例えば、乾式粉砕ラクトース）、および微粉末化された活性薬剤粒子を備える。かかる乾燥粉末製剤は、例えば、ラクトースと活性薬剤を混ぜ合せ、次に成分を乾式調合することによって作製できる。代わりに、望ましい場合、賦形剤なしに活性薬剤を製剤することもできる。次に組成物を一般にＤＰＩに、或いはＤＰＩで用いる吸入カートリッジまたはカプセルに充填する。ＤＰＩは当業者によく知られ、多くのかかる機器が市販されており、代表的な機器は、Ａｅｒｏｌｉｚｅｒ（登録商標）（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ａｉｒｍａｘ（商標）（ＩＶＡＸ）、ＣｌｉｃｋＨａｌｅｒ（登録商標）（Ｉｎｎｏｖａｔａ  Ｂｉｏｍｅｄ）、Ｄｉｓｋｈａｌｅｒ（登録商標）（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、Ｄｉｓｋｕｓ（登録商標）またはＡｃｃｕｈａｌｅｒ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、Ｅａｓｙｈａｌｅｒ（登録商標）（Ｏｒｉｏｎ  Ｐｈａｒｍａ）、Ｅｃｌｉｐｓｅ（商標）（Ａｖｅｎｔｉｓ）、ＦｌｏｗＣａｐｓ（登録商標）（Ｈｏｖｉｏｎｅ）、Ｈａｎｄｉｈａｌｅｒ（登録商標）（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、Ｐｕｌｖｉｎａｌ（登録商標）（Ｃｈｉｅｓｉ）、Ｒｏｔａｈａｌｅｒ（登録商標）（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、ＳｋｙｅＨａｌｅｒ（商標）またはＣｅｒｔｉｈａｌｅｒ（商標）（ＳｋｙｅＰｈａｒｍａ）、Ｔｗｉｓｔｈａｌｅｒ（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ）、Ｔｕｒｂｕｈａｌｅｒ（登録商標）（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、Ｕｌｔｒａｈａｌｅｒ（登録商標）（Ａｖｅｎｔｉｓ）などを含む。
【０１２１】
本発明のまた別の特定の実施形態において、活性薬剤を備える組成物は、定量噴霧式吸入器（ＭＤＩ：ｍｅｔｅｒｅｄ‐ｄｏｓｅ  ｉｎｈａｌｅｒ）を用いた吸入によって投与される。一般にかかるＭＤＩは、圧縮された推進剤ガスを用いて、測定された量の活性薬剤を放出する。かくして、定量吸入製剤は、クロロフルオロカーボンがオゾン層に影響を与える懸念の故にヒドロフルオロアルカン（ＨＦＡ：ｈｙｄｒｏｆｌｕｏｒｏａｌｋａｎｅ）が一般に好ましいとはいえ、液化された推進剤、例えば、ＣＣｌ３Ｆのようなクロロフルオロカーボン、または１，１，１，２−テトラフルオロエタン（ＨＦＡ  １３４ａ）および１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロ−ｎ−プロパン（ＨＦＡ  ２２７）のようなＨＦＡのなかに活性薬剤の溶液または懸濁剤を一般に備える。ＨＦＡ製剤に追加される随意的な成分は、エタノールまたはペンタンのような助溶剤、およびソルビタントリオレアート、オレイン酸、レシチンおよびグリセリンのような界面活性剤を含む。例えば、Ｐｕｒｅｗａｌらの米国特許第５,２２５,１８３号、欧州特許第０７１７９８７  Ａ２号（Ｍｉｎｎｅｓｏｔａ  Ｍｉｎｉｎｇ  ａｎｄ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、および国際公開第９２/２２２８６号（Ｍｉｎｎｅｓｏｔａ  Ｍｉｎｉｎｇ  ａｎｄ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ）を参照。ＭＤＩ用の代表的な組成物は、約０．０１〜５ｗｔ％の活性薬剤；約０〜２０ｗｔ％のエタノール；および約０〜５ｗｔ％の界面活性剤を備え、残りはＨＦＡ推進剤である。かかる組成物は、一般に活性薬剤、（もし存在すれば）エタノールおよび（もし存在すれば）界面活性剤を含んだ適切な容器に、冷却または加圧されたヒドロフルオロアルカンを加えることによって調製される。懸濁剤を調製するためには、活性薬剤を微粉末化し、続いて推進剤と混ぜ合せる。次に、ＭＤＩの一部分を成すエアロゾル・キャニスターに製剤を充填する。ＭＤＩは、当業者によく知られ、多くのかかる機器が市販されており、代表的な機器は、ＡｅｒｏＢｉｄ  Ｉｎｈａｌｅｒ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｆｏｒｅｓｔ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、Ａｔｒｏｖｅｎｔ  Ｉｎｈａｌａｔｉｏｎ  Ａｅｒｏｓｏｌ（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、Ｆｌｏｖｅｎｔ（登録商標）（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、Ｍａｘａｉｒ  Ｉｎｈａｌｅｒ（３Ｍ）、Ｐｒｏｖｅｎｔｉｌ（登録商標）（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ）、Ｓｅｒｅｖｅｎｔ（登録商標）Ｉｎｈａｌａｔｉｏｎ  Ａｅｒｏｓｏｌ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）などを含む。代わりに、懸濁製剤は、活性薬剤の微粉末粒子上における界面活性剤のコーティングを吹き付け乾燥させることによって調製することもできる。例えば、国際公開第９９／５３９０１号（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ社）および国際公開第００／６１１０８号（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ社）を参照。
【０１２２】
呼吸できる粒子を調製するプロセス、および吸入投薬に適した製剤および機器の付加的な例は、Ｂｒｉｇｇｎｅｒらの米国特許第５,８７４,０６３号；Ｔｒｏｆａｓｔらの第５,９８３,９５６号；Ｊａｋｕｐｏｖｉｃらの第６,２２１,３９８号；Ｇａｏらの第６,２６８,５３３号；Ｂｉｓｒａｔらの第６,４７５,５２４号；およびＣｏｏｐｅｒの第６,６１３,３０７号に記載されている。
【０１２３】
別の実施形態において、本医薬組成物は、経口投与に適する。経口投与に適する組成物は、カプセル、錠剤、丸薬、ロゼンジ、カシェ剤、糖衣錠、粉末、粒剤；水または非水液体の溶液または懸濁液；水中油または油中水乳濁液；エリキシル剤またはシロップなどの形態とすることができ、各々は所定量の活性薬剤を含む。
【０１２４】
固体剤形（すなわち、カプセル、錠剤、丸薬などとして）の経口投与が意図されるとき、組成物は、典型的に活性薬剤、並びにクエン酸ナトリウムまたはりん酸水素カルシウムのような医薬として許容される１つまたはそれ以上のキャリアを備えるであろう。固体剤形は、澱粉、微晶質セルロース、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、および／または珪酸のような充填剤または増量剤；カルボキシメチルセルロース、アルギナート、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロース、および／またはアカシアのような結合剤；グリセロールのような湿潤剤；寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモまたはタピオカ澱粉、アルギン酸、ある種の珪酸塩、および／または炭酸ナトリウムのような崩壊剤；パラフィンのような溶解遅延剤；四級アンモニウム化合物のような吸収促進剤；セチルアルコールおよび／またはモノステアリン酸グリセロールのような湿潤剤；カオリンおよび／またはベントナイト粘土のような吸収剤；滑石、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール類、ラウリル硫酸ナトリウム、および／またはその混合物のような潤滑剤；彩色剤；および緩衝剤も備えることができる。
【０１２５】
放出剤、湿潤剤、コーティング剤、甘味剤、香味剤および芳香剤、保存剤並びに酸化防止剤も医薬組成物中に存在することができる。錠剤、カプセル、丸薬などのための例となるコーティング剤は、セルロースアセテートフタレート、ポリビニルアセテートフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、メタクリル酸−メタクリル酸エステル共重合体、セルロースアセテートトリメリテート、カルボキシメチルエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネートなどのような腸溶コーティング用のものを含む。医薬として許容される酸化防止剤の例は、アスコルビン酸、塩酸システイン、硫酸水素ナトリウム、メタ硫酸水素ナトリウム  亜硫酸水素ナトリウムなどのような水溶性の酸化防止剤；アスコルビルパルミタート、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、レシチン、没食子酸プロピル、α−トコフェロールなどのような油溶性の酸化防止物；およびクエン酸、エチレンジアミン四酢酸、ソルビトール、酒石酸、りん酸などのような金属キレート化剤を含む。
【０１２６】
例として様々な比率のヒドロキシプロピルメチルセルロースまたは他のポリマーマトリックス、リポソームおよび／またはミクロスフェアを用いて組成物を製剤し、活性薬剤の徐放または制御放出を提供することもできる。加えて、本発明の医薬組成物は乳白剤を含むことができ、活性薬剤が、消化管のある部分においてのみまたは選択的に、随意的に遅れて放出されるように製剤することもできる。使用できる埋包成分の例は、ポリマー物質およびワックスを含む。適切な場合には、上述の賦形剤の１つまたはそれ以上を用いて、活性薬剤をマイクロカプセル形態にすることもできる。
【０１２７】
経口投与に適した液体剤形は、例として、医薬として許容される乳濁液、マイクロエマルション、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシル剤を含む。液体剤形は、典型的に活性薬剤、および例えば、水または他の溶媒のような不活性な希釈剤、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、オイル類（例えば、綿実油、落花生油、コーン油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステル、並びにその混合物のような可溶化剤および乳化剤を備える。懸濁液は、例えば、エトキシレート化イソステアリルアルコール類、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微晶質セルロース、メタアルミン酸、ベントナイト、寒天およびトラガカント、並びにその混合物のような懸濁化剤を含むことができる。
【０１２８】
経口投与を意図するとき、本発明の医薬組成物は、単位剤形にパッケージングすることができる。用語「単位剤形」は、患者への投薬に適する物理的に分離した単位、すなわち、単独、或いは１つまたはそれ以上の付加的な単位との組み合わせのいずれかで所望の治療効果を生み出すように計算された、所定量の活性薬剤を含む各単位を指す。例えば、かかる単位剤形は、カプセル、錠剤、丸薬などとすることができる。
【０１２９】
本発明の化合物は、（例えば、皮下、静脈内、筋肉内、または腹腔内注射によって）非経口的に投与することもできる。かかる投与のためには、活性薬剤が無菌の溶液、懸濁液、または乳濁液中に提供される。かかる製剤を調製するための例となる溶媒は、水、生理食塩水、プロピレングリコール、ポリエテレングリコールのような低分子量アルコール類、オイル類、ゼラチン、オレイン酸エチルのような脂肪酸エステル類などを含む。典型的な非経口製剤は、無菌でｐＨ４〜７の活性薬剤の水溶液である。非経口的な製剤は、１つまたはそれ以上の溶解化剤、安定剤、保存剤、湿潤剤、乳化剤および分散剤も含むことができる。これらの製剤は、無菌の注入媒質、殺菌剤、濾過、照射、または熱を用いることにより無菌化することができる。
【０１３０】
本発明の化合物は、公知の経皮送達システムおよび賦形剤を用いて経皮的に投与することもできる。例えば、本化合物は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールモノラウレート、アザシクロアルカン−２−オン類などのような透過促進剤と混合して、パッチまたは同様の送達システムに取り込むことができる。望ましい場合、かかる経皮組成物中にゲル化剤、乳化剤および緩衝液を含む追加的な賦形剤を用いることができる。
【０１３１】
望ましい場合、本発明の化合物を１つまたはそれ以上の他の治療薬と組み合わせて投与することができる。かくして、一実施形態において、本発明の組成物は、本発明の化合物とともに投与される他の薬物を随意的に含むことができる。例えば、本組成物は、他の気管支拡張薬（例えば、ＰＤＥ３阻害薬、アデノシン２ｂ修飾薬およびβ２アドレナリン受容体アゴニスト）；抗炎症薬（例えば、コルチコステロイド類およびグルココルチコイド類のようなステロイド系抗炎症薬；および非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）；並びにＰＤＥ４阻害薬）；他のムスカリン受容体アンタゴニスト（すなわち、抗クロリン作用剤）；抗感染症剤（例えば、グラム陽性およびグラム陰性抗生物質、および抗ウイルス剤）；抗ヒスタミン剤；プロテアーゼ阻害薬；求心性神経遮断剤（例えば、Ｄ２アゴニストおよびニューロキニン修飾薬）；並びにその組み合わせの群から選択された（「第２の薬剤（単数または複数）」とも呼称する）１つまたはそれ以上の薬物をさらに備えることができる。かかる治療薬の多数の例が当分野でよく知られており、以下に例が記載される。ある場合には２つの組成物の投与により、およびある場合には本活性薬剤および第２の薬剤を含んだ単一の組成物の投与により、本発明の化合物を第２の薬剤と組み合わせることによって、２薬併用、すなわちムスカリン受容体アンタゴニスト活性、および第２の薬剤（例えば、β１アドレナリン受容体アゴニスト）に係る活性を達成することができる。従って、本発明のまた別の様態において、医薬組成物は、本発明の化合物、第２の活性薬剤、および医薬として許容されるキャリアを備える。第３、第４などの活性薬剤を組成物に含むこともできる。例えば、組成物は、本発明の化合物；コルチコステロイド、β２アドレナリン受容体アゴニストから選択された第２の薬剤；ホスホジエステラーゼ−４阻害剤およびその組み合わせ；並びに医薬として許容されるキャリアを備えることができる。特定の実施形態において、該組成物は、本発明の化合物、β２アドレナリン受容体アゴニスト、およびステロイド系抗炎症薬を備える。併用療法において、投与される本発明の化合物量、および第２の薬剤量は、単剤療法において典型的に投与される量に比べて少ないこともある。
【０１３２】
本発明の化合物は第２の活性薬剤と物理的に混合して、両方の薬剤を含む組成物を形成してもよく；或いは、各薬剤は別に分かれた組成物中に存在し、患者に対して同時または順次に投与されてもよい。例えば、本発明の化合物は、従来の手順および装置を用いて第２の活性薬剤と組み合わせ、本発明の化合物および第２の活性薬剤を備える活性薬剤の組み合わせを形成してもよい。加えて、活性薬剤を医薬として許容されるキャリアと組み合わせ、本発明の化合物、第２の活性薬剤および医薬として許容されるキャリアを備える、医薬組成物を形成してもよい。この実施形態においては、組成物の成分が典型的に混合または調合されて物理的な混合物がつくり出される。該物理的な混合物は、次に本明細書に記載される経路のいずれかを用いて治療に有効な量が投与される。
【０１３３】
代わりに、活性薬剤は、患者への投与前には、別に分かれたままであってもよい。この実施形態において、薬剤は投与前には物理的に混合されておらず、同時に投与されるか、或いは別の時間に別の組成物として投与される。かかる組成物は、個別にパッケージングすることもでき、或いはキット中に一緒にパッケージングしてもよい。別の時間に投与される場合、第２の薬剤は、本発明の化合物の投与後、典型的に２４時間以内に投与されることになろう。他の実施形態において、この時間の関係は、１２時間以内、８時間以内、６時間以内、４時間以内、３時間以内、１時間以内、３０分以内、１０分以内、１分以内、または本発明の化合物の投与直後である。これは、順次投与とも呼ばれる。かくして、本発明の化合物は、各活性薬剤用に別の区画（例えば、ブリスター・パック）を使った吸入送達機器を用いて吸入により、別の活性薬剤と同時または順次に投与することができる。ここで順次とは、本発明の化合物の投与直後、またはある所定の時間後（例えば、１時間後または３時間後）の投与を意味することができる。代わりに、別々の送達機器、すなわち薬剤毎に１つの送達機器を用いて、この組み合わせを投与してもよい。加えて、これらの薬剤を異なった投与経路、すなわち一方は吸入により、他方は経口投与により送達することもできる。
【０１３４】
一実施形態において、キットは、本発明の化合物を備える第１の剤形、および本明細書に示される第２の薬剤の1つまたはそれ以上を備える少なくとも１つの付加的な剤形を、本発明の方法を実施するのに十分な量備える。患者における疾患または医学的状態の治療または予防のために、第１の剤形および第２（または第３など）の剤形は、治療に有効な量の活性薬剤をともに備える。
【０１３５】
第２の薬剤（単数または複数）は、含まれる場合、治療に有効な量が存在する、すなわち、本発明の化合物とともに投与されたときに治療に有利な効果を生み出す量が典型的に投与される。第２の薬剤は、医薬として許容される塩、溶媒和物、光学的に純粋な立体異性体などの形態とすることができる。それ故に、以下にリストアップされる第２の薬剤は、すべてのかかる形態を含むことが意図されており、市販されているか、または従来の手順および試薬を用いて調製することができる。第２の薬剤の適切な用量は、典型的に約０.０５μｇ／日から約５００ｍｇ／日の範囲にある。
【０１３６】
特定の実施形態において、本発明の化合物は、β２アドレナリン受容体アゴニストと組み合わせて投与される。代表的なβ２アドレナリン受容体アゴニストは、限定されることなしに、アルブテロール、ビトルテロール、フェノテロール、フォルモテロール、インダカテロール、イソエタリン、レバルブテロール、メタプロテレノール、ピルブテロール、サルブタモール、サルメファモール、サルメテロール、テルブタリンなどを含む。本発明の化合物と組み合わせて用いることができる他のβ２アドレナリン受容体アゴニストは、限定されることなしに、３−（４−｛［６−（｛（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−[４−ヒドロキシ−３−（ヒドロキシメチル）−フェニル]エチル｝アミノ）−ヘキシル]オキシ}−ブチル)ベンゼンスルホンアミドおよび３−（３−｛［７−（｛（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−[４−ヒドロキシ−３−（ヒドロキシメチル）フェニル]エチル｝−アミノ）ヘプチル]オキシ}−プロピル)ベンゼンスルホンアミド、および国際公開第０２／０６６４２２号（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ社）に開示された関連化合物；３−[３−（４−｛[６−（[（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−[４−ヒドロキシ−３−（ヒドロキシメチル）フェニル]エチル｝アミノ）ヘキシル]オキシ]ブチル）フェニル]イミダゾリジン−２，４−ジオン、および国際公開第０２／０７０４９０号（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ社）に開示された関連化合物；３−（４−{［６−（｛（２Ｒ）−２−[３−(ホルミルアミノ）−４−ヒドロキシフェニル]−２−ヒドロキシエチル}アミノ）−ヘキシル]オキシ}ブチル）ベンゼンスルホンアミド、３−（４−{［６−（{（２Ｓ）−２−［３−（ホルミルアミノ）−４−ヒドロキシ−フェニル］−２−ヒドロキシエチル}アミノ）ヘキシル］オキシ}ブチル）ベンゼンスルホンアミド、３−（４−｛［６−（｛（２Ｒ／Ｓ）−２−［３−（ホルミルアミノ）−４−ヒドロキシフェニル］−２−ヒドロキシエチル｝アミノ）ヘキシル］オキシ｝ブチル）ベンゼンスルホンアミド、Ｎ−（ｔ−ブチル）−３−（４−｛［６−（｛（２Ｒ）−２−［３−（ホルミルアミノ）−４−ヒドロキシフェニル］−２−ヒドロキシエチル｝アミノ）ヘキシル］オキシ｝ブチル）ベンゼンスルホンアミド、Ｎ−（ｔ−ブチル）−３−（４−｛［６−（{（２Ｓ）−２−［３−（ホルミルアミノ）−４−ヒドロキシフェニル］−２−ヒドロキシエチル}アミノ）ヘキシル］オキシ}ブチル）ベンゼンスルホンアミド、Ｎ−（ｔ−ブチル）−３−（４−{［６−（{（２Ｒ／Ｓ）−２−［３−（ホルミルアミノ）−４−ヒドロキシフェニル］−２−ヒドロキシエチル}アミノ）ヘキシル］オキシ}ブチル）ベンゼンスルホンアミド、および国際公開第０２／０７６９３３号（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ社）に開示された関連化合物；４−{（１Ｒ）−２−[（６−{２−[２，６−ジクロロベンジル）−オキシ]エトキシ}ヘキシル）アミノ]−１−ヒドロキシエチル}−２−（ヒドロキシメチル）フェノール、および国際公開第０３／０２４４３９号（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ社）に開示された関連化合物；Ｎ−{２−[４−（（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル]エチル}−（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−（３−ホルムアミド−４−ヒドロキシフェ���ル）−エチルアミン、およびＭｏｒａｎらの米国特許第６,５７６,７９３号に開示された関連化合物；Ｎ−{２−[４−（３−フェニル−４−メトキシフェニル）アミノフェニル]エチル}−（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−（８−ヒドロキシ−２（１Ｈ）−キノリノン−５−イル）エチルアミン、およびＭｏｒａｎらの米国特許第６,６５３,３２３号に開示された関連化合物を含む。特定の実施形態において、β２−アドレナリン受容体アゴニストは、Ｎ−{２−[４−（（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルエチルアミノ）−フェニル]エチル}−（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−（３−ホルムアミド−４−ヒドロキシフェニル）エチルアミンの結晶性一塩酸塩である。典型的に、β２−アドレナリン受容体アゴニストは、用量当たり約０．０５〜５００μｇを供するのに十分な量が投与されることになろう。
【０１３７】
特定の実施形態において、本発明の化合物は、ステロイド系抗炎症薬と組み合わせて投与される。代表的なステロイド系抗炎症薬は、限定されることなしに、ジプロピオン酸ベクロメタゾン；ブデソニド；プロピオン酸ブチキソコルト；２０Ｒ−１６α，１７α−［ブチリデンビス（オキシ）］−６α，９α−ジフロオロ−１１β−ヒドロキシ−１７β−（メチルチオ）アンドロスタ−４−エン−３−オン（ＲＰＲ−１０６５４１）；シクレソニド；デキサメサゾン；６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソアンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−フルオロメチルエステル；６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−１７α−［（４−メチル−１，３−チアゾール−５−カルボニル）オキシ］−３−オキソアンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−フルオロメチルエステル；６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−１７α−プロピオニルオキソアンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸（Ｓ）−（２−オキソテトラヒドロフラン−３Ｓ−イル）エステル；フルニソリド；プロピオン酸フルチカゾン；メチルプレドニゾロン；モメタゾンフロアート；プレドニゾロン；プレドニゾン；ロフレポニド；ＳＴ‐１２６；トリアムシノロンアセトニドなどを含む。典型的に、ステロイド系抗炎症薬は、用量当たり薬０．０５〜５００μｇを供するのに十分な量が投与されることになろう。
【０１３８】
例となる組み合わせは、β２アドレナリン受容体アゴニストとしてサルメテロール、およびステロイド系抗炎症薬としてプロピオン酸フルチカゾンと一緒に投与される本発明の組成物である。別の例となる組み合わせは、β２−アドレナリン受容体アゴニストとしてＮ−{２−[４−（（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル]エチル}−（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−（３−ホルムアミド−４−ヒドロキシフェニル）−エチルアミンの結晶性一塩酸塩、およびステロイド系抗炎症薬として６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）−オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソアンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−フルオロ−メチルエステルと一緒に投与される本発明の化合物である。
【０１３９】
他の適切な組み合わせは、例えば、他の抗炎症薬、例えば、ＮＳＡＩＤ（クロモグリク酸ナトリウム；ネドクロミルナトリウム；ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）阻害剤（例えば、テオフィリン、ＰＤＥ４阻害剤またはＰＤＥ３／ＰＤＥ４混合阻害剤）；ロイコトリエン・アンタゴニスト（例えば、モンテルカスト）；ロイコトリエン合成の阻害剤；ｉＮＯＳ阻害剤；トリプターゼおよびエラスターゼ阻害剤のようなプロテアーゼ阻害剤；ベータ−２−インテグリン・アンタゴニストおよびアデノシン受容体アゴニストまたはアンタゴニスト（例えば、アデノシン２ａアゴニスト）；サイトカイン・アンタゴニスト（例えば、インターロイキン抗体（αＩＬ抗体）、特に、αＩＬ−４治療、αＩＬ−１３治療、またはその組み合わせ）のようなケモカイン・アンタゴニスト）；またはサイトカイン合成の阻害剤を含む。
【０１４０】
特定の実施形態において、本発明の化合物は、ホスホジエステラーゼ−４（ＰＤＥ４阻害剤またはＰＤＥ３／ＰＤＥ４混合阻害剤と組み合わせて投与される。代表的なＰＤＥ４またはＰＤＥ３／ＰＤＥ４混合阻害剤は、限定されることなしに、ｃｉｓ４−シアノ−４−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシフェニル）シクロヘキサン−１−カルボン酸、２−カルボメトキシ−４−シアノ−４−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−フェニル）シクロヘキサン−１−オン；ｃｉｓ−［４−シアノ−４−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−フェニル）シクロヘキサン−１−オール］；ｃｉｓ−４−シアノ−４−［３−（シクロペンチルオキシ）−４−メトキシフェニル］−シクロヘキサン−１−カルボン酸など、または医薬として許容されるその塩を含む。他の代表的なＰＤＥ４またはＰＤＥ４／ＰＤＥ３混合阻害剤は、ＡＷＤ１２‐２８１（ｅｌｂｉｏｎ）；ＮＣＳ‐６１３（ＩＮＳＥＲＭ）；Ｄ‐４４１８（ＣｈｉｒｏｓｃｉｅｎｃｅおよびＳｃｈｅｒｉｎｇ‐Ｐｌｏｕｇｈ）；ＣＩ‐１０１８またはＰＤ‐１６８７８７（Ｐｆｉｚｅｒ）；国際公開第９９／１６７６６号（協和発酵）に開示されたベンゾジオキソール化合物；Ｋ‐３４（協和発酵）；Ｖ‐１１２９４Ａ（Ｎａｐｐ）；ロフルミラスト（Ｂｙｋ‐Ｇｕｌｄｅｎ）；国際公開第９９／４７５０５号（Ｂｙｋ‐Ｇｕｌｄｅｎ）に開示されたフタラジノン化合物；プマフェントリン（Ｂｙｋ‐Ｇｕｌｄｅｎ、現在Ａｌｔａｎａ）；アロフィリン（Ａｌｍｉｒａｌｌ‐Ｐｒｏｄｅｓｆａｒｍａ）；ＶＭ５５４／ＵＭ５６５（Ｖｅｒｎａｌｉｓ）；Ｔ‐４４０（田辺製薬）；およびＴ２５８５（田辺製薬）を含む。
【０１４１】
特定の実施形態において、本発明の化合物は、ムスカリン・アンタゴニスト（すなわち、抗コリン作用剤）と組み合わせて投与される。代表的なムスカリン・アンタゴニストは、限定されることなしに、アトロピン、硫酸アトロピン、酸化アトロピン、硝酸メチルアトロピン、ホマトロピン臭化水素酸塩、ヒヨスシアミン（ｄ、ｌ）臭化水素酸塩、スコポラミン臭化水素酸塩、臭化イプラトロピウム、臭化オキシトロピウム、臭化チオトロピウム、メタンテリン、臭化プロパンテリン、臭化メチルアニソトロピン、臭化クリジニウム、コピロラート（Ｒｏｂｉｎｕｌ）、よう化イソプロパミド、臭化メペンゾラート、トリジヘキセチルクロリド（Ｐａｔｈｉｌｏｎｅ）、ヘキソシクリウムメチルサルファート、シクロペントラート塩酸塩、トロピカミド、トリヘキシフェニジル塩酸塩、ピレンゼピン、テレンゼピン、ＡＦ‐ＤＸ１１６およびメトクトラミンなどを含む。
【０１４２】
特定の実施形態において、本発明の化合物は、抗ヒスタミン剤（すなわち、Ｈ１受容体アンタゴニスト）と組み合わせて投与される。代表的な抗ヒスタミン剤は、限定されることなしに、マレイン酸カルビノキサミン、フマル酸クレマスチン、ジフェニルヒドラミン塩酸塩およびジメンヒドリナートのようなエタノールアミン類；ピリラミンアムレアート、トリペレンナミン塩酸塩およびトリペレンナミンシトラートのようなエチレンジアミン類；クロルフェニラミンおよびアクリバスチンのようなアルキルアミン類；ヒドロキシジン塩酸塩、ヒドロキシジンパモアート、シクリジン塩酸塩、シクリジン乳酸塩、メクリジン塩酸塩およびセチリジン塩酸塩のようなピペラジン類；アステミゾール、レボカバスチン塩酸塩、ロラタジンおよびその脱カルボエトキシ類似体、テルフェナジンおよびフェキソフェナジン塩酸塩のようなピペリジン類；アゼラスチン塩酸塩などを含む。
【０１４３】
次の製剤は、本発明の代表的な医薬組成物を示す。
【０１４４】
ＤＰＩによる投与のための例となる組成物
本発明の化合物（０.２ｍｇ）を微粉末化し、次にラクトース（２５ｍｇ）と調合する。この調合された混合物を次にゼラチンの吸入カートリッジに充填する。カートリッジの内容物を例えばＤＰＩを用いて投与する。
【０１４５】
微粉末化した本発明の化合物（１００ｍｇ）を、粉砕したラクトース（２５ｇ）（例えば、粒子のうち約８５％以下が約６０μｍから約９０μｍまでのＭＭＤをもち、粒子のうち約１５％以上が１５μｍより小さいＭＭＤをもつラクトース）と調合する。次に、用量当たり約１０μｇから約５００μｇまでの本発明の化合物を供するのに十分な量のこの調合された混合物を、剥がすことができるブリスター・パックの個々のブリスターに充填する。ブリスターの内容物をＤＰＩを用いて投与する。
【０１４６】
代わりに、微粉末化した本発明の化合物（１ｇ）を粉砕したラクトース（２００ｇ）と調合して、化合物対粉砕したラクトースの重量比が１：２００のバルク組成物を形成する。調合した組成物を、用量当たり約１０μｇから約５００μｇまでの本発明の化合物を送達することができるＤＰＩに充填する。
【０１４７】
代わりに、微粉末化した本発明の化合物（１００ｍｇ）、および微粉末化したβ２アドレナリン受容体アゴニスト（５００ｍｇ）を粉砕したラクトース（３０ｇ）と調合する。次に、用量当たり約１０μｇから約５００μｇまでの本発明の化合物を供するのに十分な量の調合した混合物を、剥がすことができるブリスター・パックの個々のブリスター中に充填する。ブリスターの内容物をＤＰＩを用いて投与する。
【０１４８】
ＭＤＩに用いるための例となる組成物
微粉末化した本発明の化合物（１０ｇ）を、脱イオン水（２００ｍＬ）にレシチン（０.２ｇ）を溶解させて調製した溶液に分散させる。結果として生じた懸濁液を吹き付け乾燥して、次に微粉末化し、平均粒径が約１.５μｍより小さい粒子を含む微粉末化した組成物を形成する。次に、ＭＤＩで投与したときに用量当たり約１０μｇから約５００μｇまでの本発明の化合物を供するのに十分な量の微粉末化した組成物を、加圧された１，１，１，２−テトラフルオロエタンを含むＭＤＩカートリッジに充填する。
【０１４９】
代わりに、鉱質除去水１００ｍｌにトレハロース０.５ｇおよびレシチン０.５ｇを溶解させて作製したコロイド溶液中に、本発明の化合物５ｇを平均サイズが１０μｍより小さい微粉末化した粒子として分散させることによって、５ｗｔ％の本発明の化合物、０.５ｗｔ％のレシチン、および０.５ｗｔ％のトレハロースを含む懸濁液を調製する。この懸濁液を吹き付け乾燥させ、結果として生じた物質を１.５μｍより小さい平均粒径をもつ粒子に微粉末化する。加圧された１，１，１，２−テトラフルオロエタンを含むキャニスターにこの粒子を充填する。
【０１５０】
噴霧吸入器に用いるための例となる組成物
本発明の化合物（２５ｍｇ）をクエン酸緩衝（ｐＨ５）等張食塩水（１２５ｍｌ）に溶解させる。混合液を攪拌し、化合物が溶解するまで超音波処理する。溶液のｐＨを確認し、必要であれば、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を徐々に加えることによってｐＨ５に調整する。用量当たり約１０μｇから約５００μｇまでの本発明の化合物を供する噴霧器を用いて、この溶液を投与する。
【０１５１】
経口投与のための例となる硬いゼラチンカプセル
本発明の化合物（５０ｇ）、吹き付け乾燥したラクトース（４４０ｇ）およびステアリン酸マグネシウム（１０ｇ）を十分に調合する。結果として生じた組成物を、次に硬いゼラチンカプセルに充填する（カプセル当たり組成物５００ｍｇ）。
【０１５２】
経口投与のための例となる懸濁液
次の成分を混合して、懸濁液１０ｍＬ当たり１００ｍｇの化合物を含む懸濁液を作製する：
【０１５３】
【表１】
0005656288.tif 000039
注射による投与のための例となる注射可能な製剤
本発明の化合物（０.２ｇ）を０.４Ｍ酢酸ナトリウム緩衝溶液（２.０ｍＬ）と調合する。結果として生じた溶液に、必要に応じて、０.５Ｎ塩酸水溶液または０.５Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加えてｐＨ４に調整し、次に注用に十分な水を加えて総量２０ｍＬを得る。次に、無菌フィルター（０.２２ミクロン）を通してこの混合物を濾過し、注射による投与に適した無菌溶液を供する。
【実施例】
【０１５４】
次の調製および実施例は、本発明の具体的な実施形態を例示するために示される。しかしながら、これらの具体的な実施形態は、特に指示のない限り、いかなる意味においても本発明の範囲を限定する意図をもたない。
【０１５５】
次の略語は、別の指示がない限り、次の意味をもち、本明細書に用いられるが定義されない任意の他の略語は、標準的な意味をもつ：
ＡＣ  アデニリルシクラーゼ
ＢＳＡ  ウシ血清アルブミン
ｃＡＭＰ  ３’−５’環状アデノシン一リン酸
ＣＨＯ  チャイニーズハムスター卵巣
ｃＭ５  クローン化されたチンパンジーＭ５受容体
ＤＣＭ  ジクロロメタン（すなわち、塩化メチレン）
ＤＩＰＥＡ  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ｄＰＢＳ  ダルベッコりん酸緩衝食塩水
ＤＭＦ  Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＥＤＣＩ  Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド
ＥＤＴＡ  エチレンジアミン四酢酸
ＥｔＯＡｃ  酢酸エチル
ＦＢＳ  ウシ胎児血清
ＦＬＩＰＲ  蛍光イメージングプレートリーダー
ＨＢＳＳ  ハンクス緩衝塩類溶液
ＨＥＰＥＳ  ４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸
ｈＭ１  クローン化されたヒトＭ１受容体
ｈＭ２  クローン化されたヒトＭ２受容体
ｈＭ３  クローン化されたヒトＭ３受容体
ｈＭ４  クローン化されたヒトＭ４受容体
ｈＭ５  クローン化されたヒトＭ５受容体
ＨＯＢｔ  １−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物
ＭＣｈ  メチルコリン
ＭｅＯＨ  メタノール
ＴＦＡ  トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ  テトラヒドロフラン
本明細書に用いられるが定義されない任意の他の略語は、一般に受け入れられた標準的な意味をもつ。別の指摘がなければ、試薬、出発物質および溶媒などすべての物質は、（Ｓｉｇｍａ‐Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｆｌｕｋａ  Ｒｉｅｄｅｌ‐ｄｅ  Ｈａｅｎのような）供給業者から購入し、さらなる精製なしに用いた。別の指摘がなければ、反応は窒素雰囲気下で行った。反応混合物の進行状況は、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ：ｔｈｉｎ  ｌａｙｅｒ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｙ）、分析的高速液体クロマトグラフィー（ａｎａｌ．ＨＰＬＣ：ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  ｈｉｇｈ  ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）、および質量分析法によってモニターし、その詳細は、反応に関する以下の具体的な実施例に別々に示される。反応混合物は、各々の反応について具体的に記載されるように用意した；一般に、これらの精製に抽出、並びに温度および溶媒に依存した結晶化および沈澱のような他の精製方法を用いた。加えて、調製用の高速液体クロマトグラフィーによって反応混合物を日常的に精製した。
【０１５６】
調製１
（Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸
【０１５７】
【化２５】
0005656288.tif 000040
（２Ｒ，５Ｒ）−２−ｔ−ブチル−５−フェニル−１，３−ジオキソラン−４−オン（１ａ）：（Ｒ）−マンデル酸（２０ｇ、１３０ｍｍｏｌ）を無水ペンタン（２００ｍＬ、１.７ｍｏｌ）に溶解させた。ピバルアルデヒド（１３.６ｇ、１５３ｍｍｏｌ）、続いてトリフルオロメタンスルホン酸（４８８μＬ、５.４ｍｍｏｌ）を加えた。窒素下において３６°Ｃで反応を還流させた。５.５時間後に、混合物を室温まで冷却させた後、２００ｍＬの８ｗｔ％ＮａＨＣＯ３溶液中で１０分間攪拌した。過剰なペンタンを回転蒸発によって除去した。固体を濾過により収集し、真空濾過を行う間にすすいだ（水１００ｍＬ）。高真空下で固体を一晩乾燥させ、中間生成物（１a)を白い固体（２３.８ｇ、８８％純度）として得た。
【０１５８】
（２Ｒ，５Ｓ）−２−ｔ−ブチル−５−（１−ヒドロキシシクロペンチル）−５−フェニル−１，３−ジオキソラン−４−オン（１ｂ）：ヘキサメチルジシラザンリチウム（０.８ｇ、４.７ｍｍｏｌ；１.０Ｍヘキサン溶液４.７ｍＬ）を−７８℃で無水ＴＨＦ（５.３ｍＬ、６５ｍｍｏｌ）に加えた。無水ＴＨＦ５.３ｍＬ中の中間生成物（１ａ）（８００ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）をこの溶液に１５分にわたって滴下により加えた。３０分後に、シクロペンタノン（４５１μＬ、５.１ｍｍｏｌ）を１分以下にわたり滴下により加えた。２時間後にＮａ２ＨＰＯ４の飽和水溶液０.８ｍＬを加え、混合物を室温で５分間攪拌した。混合物を塩化アンモンの飽和水溶液８ｍＬに加えた。水層を洗い（２×８０ｍＬ  ＥｔＯＡｃ）、有機層を混ぜ合わせてＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過および濃縮した。粗生成物（７８０ｍｇ）を（ヘキサンを用い、５〜１５％のＥｔＡｃ勾配で３０分にわたる）フラッシュクロマトグラフィーによって精製し、中間生成物（１ｂ）を得た。
【０１５９】
（２Ｒ，５Ｓ）−２−ｔ−ブチル−５−シクロペント−１−エニル−５−フェニル−１，３−ジオキソラン−４−オン（１ｃ）：中間生成物（１ｂ)（６５０ｍｇ、２.１ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ６．８ｍＬに溶解させて、溶液を０℃に冷却した。塩化チオニル（４３６μＬ、６ｍｍｏｌ）を滴下により加え、続いてピリジン（７７７μＬ、９.６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を０℃で１時間攪拌した。塩化アンモニウムの飽和水溶液（１４ｍＬ）を加え、混合物を室温まで温める間５分間攪拌した。層を分離させて、水層を洗った（２×１００ｍＬ  ＥｔＯＡｃ）。有機層を混ぜ合わせて、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過および濃縮して、中間生成物（１ｃ）を淡黄色のオイル（５４０ｍｇ）として生じさせ、さらなる精製なしにこれを次のステップに用いた。
【０１６０】
（Ｓ）−シクロペント−１−エニル−ヒドロキシフェニル酢酸（１ｄ）：中間生成物（１ｃ）（５４０ｍｇ、１.９ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（９２７μＬ、２２.９ｍｍｏｌ）に溶解させた。水（１.８４ｍｌ、１０２ｍｍｏｌ）を加え、続いてＫＯＨ（１.１ｇ、１８.８ｍｍｏｌ）を加えた。反応を１３０℃で３時間還流させた。混合物を、飽和塩化アンモニウムを用いて２５０ｍＬに希釈し、次に洗った（２×ヘキサン  １００ｍＬ）。残った水性乳濁液を洗った（２×２５０ｍＬ  ＥｔＯＡｃ）。ＥｔＯＡｃ層を混ぜ合わせて、ＮａＣｌの飽和水溶液５０ｍＬで洗い、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させて、濾過および濃縮し、中間生成物（１ｄ）を黄褐色の固体（２９０ｍｇ）として得た。
【０１６１】
中間生成物（１ｄ）（２８０ｍｇ、１.３ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（２.５０ｍＬ、６１.７ｍｍｏｌ）に溶解させ、反応フラスコを窒素でフラッシュした後、２８ｍｇの１０％  Ｐｄ／Ｃを混合物に加えた。混合物を１  ａｔｏｍの水素下において室温で撹拌し、出発物質が消化されるまで（約２４時間）、ＨＰＬＣによって反応をモニターした。反応容器を窒素でフラッシュし、次に混合物をセライトを通して濾過し、その後ＭｅＯＨですすいだ。濾液を真空下で濃縮し、標記の化合物を黄色がかった固体（２８４ｍｇ）として得た。
【０１６２】
調製２
（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニル−１−ピペラジン−１−イルエタノン
【０１６３】
【化２６】
0005656288.tif 000041
攪拌した（Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（１０.０ｇ、４５.４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ溶液（２００ｍＬ）にｔ−ブチル  １−ピペラジンジカルボキシラート（８.５ｇ、４５.４ｍｍｏｌ）を加えた。この反応にＤＩＰＥＡ（２３.７ｍＬ、１３.６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１０.４ｇ、６８.１ｍｍｏｌ）、続いてＥＤＣＩ（１０.４ｇ、５４.５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１２時間攪拌した。その後、混合物を１ＮのＮＡＯＨ（３００ｍＬ）、１ＮのＨＣｌ（３００ｍＬ）、次いでＮａＣｌの飽和水溶液（３００ｍＬ）で洗った。続いて有機層を除去し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、続いて濾過した。溶媒を減圧下で除去した。未精製の物質に２０％  ＴＦＡ／ＤＣＭの溶液を加え、結果として生じた混合物を室温で２時間攪拌した。溶媒を減圧下で除去した。ＤＣＭ（３００ｍＬ）を加え、混合物を飽和炭酸水素ナトリウム（３００ｍＬ）で洗った。次に有機層を除去し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させて濾過した。未精製の物質をシリカゲルクロマトグラフィー（１０％  ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、ｗ／１％  ＮＨ３（ａｑ））を通じて精製し、標記の化合物を白色粉末（９.０ｇ、３１.２ｍｍｏｌ）として供した。
【０１６４】
（実施例１）
４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−チオフェン−２−イルメチルピペラジン−１−カルボキサミジン
【０１６５】
【化２７】
0005656288.tif 000042
攪拌した（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニル−１−ピペラジン−１−イルエタノン（３.９ｇ  １３.７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（２００ｍＬ）に、ＤＩＰＥＡ（４.８ｍＬ、２７.３ｍｍｏｌ）、および次にＣ−（ビス−ベンゾトリアゾール−１−イル）メチレンアミン（３.６ｇ、１３.７ｍｍｏｌ）を加えた。これを室温で３０分攪拌し、続いてＣ−チオフェン−２−イル−メチルアミン（２.８ｍＬ、２７.３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を６０℃で約１４時間加熱した。反応を室温まで冷却し、減圧下で溶媒を除去した。未精製の物質を逆相ＨＰＬＣによって精製し、標記の化合物をＴＦＡ塩（０.７ｇ、１.３ｍｍｏｌ）として供した。Ｃ２３Ｈ３０Ｎ４Ｏ２Ｓに対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４２７.２１、測定値４２７．２。
【０１６６】
代わりの合成
ＤＩＰＥＡ（７.３ｍＬ、４１.６ｍｍｏｌ）を、エタノール（９０ｍＬ、２ｍｏｌ）に溶解させた（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニル−１−ピペラジン−１−イルエタノン（６.０ｇ、２０.８ｍｍｏｌ）に加えた。Ｃ−（ビス−ベンゾトリアゾール−１−イル）−メチレンアミン（６.０ｇ、２２.９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で３０分間攪拌した。Ｃ−チオフェン−２−イル−メチルアミン（４.９ｇ、４１.６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を５５℃で一晩攪拌した。混合物を濃縮して、生成物をＨＰＬＣで精製し、標記の化合物をＴＦＡ塩（７.３ｇ、９８％純度）として供した。Ｃ２３Ｈ３０Ｎ４Ｏ２Ｓに対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４２７.２１、測定値４２７．４。
【０１６７】
（実施例２）
４−（（Ｒ)−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（４−ヒドロキシベンジル）ピペラジン−１−カルボキサミジン
【０１６８】
【化２８】
0005656288.tif 000043
撹拌された（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニル−１−ピペラジン−１−イルエタノン（５.００ｇ  １７.３ｍｍｏｌ；調製１に記載されたように調製)のＤＭＦ溶液（２００ｍＬ）に、ＤＩＰＥＡ（１０.６ｍＬ、６０.７ｍｍｏｌ）、および次にＣ−（ビス−ベンゾトリアゾール−１−イル）−メチレンアミン（５.４８ｇ、２０.８ｍｍｏｌ）を加えた。これを室温で３０分間攪拌し、続いて４−ヒドロキシベンジルアミン（１２.０ｇｍＬ、９７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を６０℃で約１４時間加熱した。反応を室温まで冷却し、溶媒を減圧によって除去した。未精製の物質を逆相ＨＰＬＣで精製し、標記の化合物をＴＦＡ塩（１.７ｇ、３.１ｍｍｏｌ）として供した。Ｃ２５Ｈ３２Ｎ４Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４３７.２５、測定値４３７．２。
【０１６９】
（実施例３）
４−（（Ｒ)−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−フラン−２−イルメチルピペラジン−１−カルボキサミジン
【０１７０】
【化２９】
0005656288.tif 000044
（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニル−１−ピペラジン−１−イルエタノン（２.０ｇ、６.９ｍｍｏｌ）、およびＣ−（ビス−ベンゾトリアゾール−１−イル）メチレンアミン（２.０ｇ、７.６ｍｍｏｌ）をエタノール（４０.０ｍＬ、６８５ｍｍｏｌ）に加え、続いてＤＩＰＥＡ（２.４ｍＬ、１３.９ｍｍｏｌ）を加えた。結果として生じた混合物をすべての固体が溶解するまで室温で約１時間撹拌し、中間生成物を形成した。フルフリルアミン（１.２ｍＬ、１３.９ｍｍｏｌ）を加え、３５℃で反応が完了するまで（約２２時間）反応混合物を攪拌した。調製用のＨＰＬＣによる精製により標記の化合物をＴＦＡ塩（３２９ｍｇ、６.９ｍｍｏｌ、９７.５％純度）として供した。Ｃ２３Ｈ３０Ｎ４Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４１１.２３、測定値４１１．２。
【０１７１】
（実施例４）
先述の実施例に記載された手順に従い、かつ然るべき出発物質および試薬に置き換えて、次を有する化合物４-１から４-５２もＴＦＡ塩として調製した。
【０１７２】
【化３０】
0005656288.tif 000045
【０１７３】
【表２−１】
0005656288.tif 000046
【０１７４】
【表２−２】
0005656288.tif 000047
（４‐１）  ４−（２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（（Ｒ）−１−フェニルエチル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２６Ｈ３４Ｎ４Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４３５.２７、測定値４３５．２；
（４‐２）  ４−（２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（３，４−ジフルオロベンジル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２５Ｈ３０Ｆ２Ｎ４Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４５７.２３、測定値４５７．２；
（４‐３）  ４−（２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（４−メトキシベンジル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２６Ｈ３４Ｎ４Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４５１.２６、測定値４５１．２；
（４‐４）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−チオフェン−３−イルメチル−ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２３Ｈ３０Ｎ４Ｏ２Ｓに対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４２７.２１、測定値４２７．４；
（４‐５）  Ｎ−ベンジル−４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２５Ｈ３２Ｎ４Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４２１.２５、測定値４２１．２；
（４‐６）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（３−フルオロベンジル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２５Ｈ３１ＦＮ４Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４３９.２４、測定値４３９．２；
（４‐７）  ４−（（Ｒ)−２シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−フェネチルピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２６Ｈ３４Ｎ４Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４３５.２７、測定値４３５．２；
（４‐８）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−ピリジン−２−イルメチル−ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２４Ｈ３１Ｎ５Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４２２.２５、測定値４２２．２；
（４‐９）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（３−ヒドロキシベンジル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２５Ｈ３２Ｎ４Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４３７.２５、測定値４３７．２；
（４‐１０）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（４−フルオロベンジル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２５Ｈ３１ＦＮ４Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４３９.２４、測定値４３９．２；
（４‐１１）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（２−フルオロベンジル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２５Ｈ３１ＦＮ４Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４３９.２４、測定値４３９．２；
（４‐１２）  Ｎ−シクロヘキシルメチル−４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２５Ｈ３８Ｎ４Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４２７.３０、測定値４２７．２；
（４‐１３）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（３−メトキシベンジル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２６Ｈ３４Ｎ４Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４５１.２６、測定値４５１．２；
（４‐１４）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（３，５−ジフルオロベンジル）−ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２５Ｈ３０Ｆ２Ｎ４Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４５７.２３、測定値４５７．２；
（４‐１５）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−チアゾール−２−イルメチル−ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２２Ｈ２９Ｎ５Ｏ２Ｓに対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４２８.２０、測定値４２８．２；
（４‐１６）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（１Ｈ−ピラゾール−３−イルメチル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２２Ｈ３０Ｎ６Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４１１.２４、測定値４１１．２；
（４‐１７）  ４−（（Ｒ)−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（フェニルアミノ）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２４Ｈ３１Ｎ５Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４２２.２５、測定値４２２．２；
（４‐１８）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−フラン−３−イルメチルピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２３Ｈ３０Ｎ４Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４１１.２３、測定値４１１.２；
（４‐１９)  ４−（（Ｒ)−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（２−メチルチアゾール−４−イルメチル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２３Ｈ３１Ｎ５Ｏ２Ｓに対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４４２.２２、測定値４４２.２；
（４‐２０）  Ｎ−ブチル−４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２２Ｈ３４Ｎ４Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値３８７.２７、測定値３８７.２；
（４‐２１）  ４−（（Ｒ)−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−ペンチルピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２３Ｈ３６Ｎ４Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４０１.２８、測定値４０１.２；
（４‐２２）  ４−（（Ｒ)−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−ヘキシルピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２４Ｈ３８Ｎ４Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４１５.３０、測定値４１５.２；
（４‐２３）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（２−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２４Ｈ３０ＦＮ５Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４４０.２４、測定値４４０.２；
（４‐２４）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（２−クロロフェニル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２４Ｈ３０ＣｌＮ５Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４５６.２１、測定値４５６.２；
（４‐２５）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（３−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２４Ｈ３０ＦＮ５Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４４０.２４、測定値４４０.２；
（４‐２６）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２４Ｈ３０ＣｌＮ５Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４５６.２１、測定値４５６.２；
（４‐２７）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（４−メチルフェニル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２５Ｈ３３Ｎ５Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４３６.２６、測定値４３６.２；
（４‐２８）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２４Ｈ３０ＦＮ５Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４４０.２４、測定値４４０.２；
（４‐２９）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（４−クロロフェニル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２４Ｈ３０ＣｌＮ５Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４５６.２１、測定値４５６.２；
（４‐３０）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（４−メトキシフェニル）−ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２５Ｈ３３Ｎ５Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４５２.２６、測定値４５２.２；
（４‐３１）  ４−（{［４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）ピペラジン−１−カルボキシミドイル］アミノ}メチル）安息香酸メチルエステル。Ｃ２７Ｈ３４Ｎ４Ｏ４に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４７９.２６、測定値４７９.２；
（４‐３２）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（１Ｈ−インドール−２−イルメチル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２７Ｈ３３Ｎ５Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４６０.２６、測定値４６０.２；
（４‐３３）  Ｎ−シクロヘプチルメチル−４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２６Ｈ４０Ｎ４Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４４１.３２、測定値４４１.２；
（４‐３４）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（２−ヒドロキシベンジル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２５Ｈ３２Ｎ４Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４３７.２５、測定値４３７.２；
（４‐３５）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（４−トリフルオロメトキシベンジル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２６Ｈ３１Ｆ３Ｎ４Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値５０５.２４、測定値５０５.２；
（４‐３６）  ４−（{［４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）ピペラジン−１−カルボキシミドイル］アミノ}メチル）ベンズアミド。Ｃ２６Ｈ３３Ｎ５Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４６４.２６、測定値４６４.２；
（４‐３７）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（４−ヒドロキシメチルベンジル）−ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２６Ｈ３４Ｎ４Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４５１.２６、測定値４５１.２；
（４‐３８）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（１Ｈ−インドール−５−イルメチル）−ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２７Ｈ３３Ｎ５Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４６０.２６、測定値４６０.２；
（４‐３９）  Ｎ−ベンゾフラン−５−イルメチル−４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２７Ｈ３２Ｎ４Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４６１.２５、測定値４６１.２；
（４‐４０）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（４−メチルベンジル）−ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２６Ｈ３４Ｎ４Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４３５.２７、測定値４３５.２；
（４‐４１）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（４−メチルスルファニルベンジル）−ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２６Ｈ３４Ｎ４Ｏ２Ｓに対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４６７.２、測定値４６７.２；
（４‐４２）  Ｎ−（３−シアノベンジル）−４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２６Ｈ３１Ｎ５Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４４６.２５、測定値４４６.２；
（４‐４３）  ３−（{［４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−ピペラジン−１−カルボキシミドイル］アミノ}メチル）ベンズアミド。Ｃ２６Ｈ３３Ｎ５Ｏ３に対するＭ  Ｓｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４６４.２６、測定値４６４.２；
（４‐４４）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（２−メチルベンジル）−ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２６Ｈ３４Ｎ４Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４３５.２７、測定値４３４.２；
（４‐４５）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（３−メチルベンジル）−ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２６Ｈ３４Ｎ４Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４３５.２７、測定値４３４.２；
（４‐４６）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（１Ｈ−インドール−４−イルメチル）−ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２７Ｈ３３Ｎ５Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４６０.２６、測定値４６０.２；
（４‐４７）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（３−メチルスルファニルベンジル）−ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２６Ｈ３４Ｎ４Ｏ２Ｓに対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４６７.２４、測定値４６７.２；
（４-４８）  Ｎ−ベンゾ[ｂ]チオフェン−５−イルメチル−４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２７Ｈ３２Ｎ４Ｏ２Ｓに対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４７７.２２、測定値４７７.２；
（４‐４９）  Ｎ−ベンゾ［１，３]ジオキソール−５−イルメチル−４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２６Ｈ３２Ｎ４Ｏ４に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４６５.２４、測定値４６５.２；
（４‐５０）  Ｎ−ベンゾ［ｂ]チオフェン−２−イルメチル−４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２７Ｈ３２Ｎ４Ｏ２Ｓに対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４７７.２２、測定値４７７.２；
（４‐５１）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルメチル）ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２３Ｈ３２Ｎ６Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４２５.２６、測定値４２５.２；
（４‐５２）  ４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ−シクロペンチルメチル−ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２４Ｈ３６Ｎ４Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４１３.２８、測定値４１３.２。
【０１７５】
（実施例５）
先述の実施例に記載された手順に従い、かつ然るべき出発物質および試薬に置き換えて、次を有する化合物５‐１および５‐２もＴＦＡ塩として調製した。
【０１７６】
【化３１】
0005656288.tif 000048
（５‐１）  Ｎ−ベンジル−４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ’−メチル−ピペラジン−１−カルボキサミジン（Ｒ６＝−ＣＨ３）。Ｃ２６Ｈ３４Ｎ４Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４３５.２７、測定値４３５.２；
（５‐２）  Ｎ−ベンジル−４−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセチル）−Ｎ’−エチルピペラジン−１−カルボキサミジン（Ｒ６＝−ＣＨ２ＣＨ３）。Ｃ２７Ｈ３６Ｎ４Ｏ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４４９.２８、測定値４４９.２。
【０１７７】
調製３
（Ｒ）−３−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセトキシ）ピロリジン−１−カルボン酸ｔ-ブチルエステル
【０１７８】
【化３２】
0005656288.tif 000049
室温において、ジイソプロピルアゾジカルボキシラート（９８０μｌ、５ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ  １０ｍｌ中の（Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（１.１ｇ、５ｍｍｏｌ）、（Ｒ）−３−ヒドロキシピロリジン−１−カルボン酸ｔ-ブチルエステル（１.０ｇ、５.５ｍｍｏｌ）、およびトリフェニルホスフィン（１.３ｇ、５ｍｍｏｌ）の混合物にゆっくりと加えた。次に反応混合物を室温において一晩攪拌した。
【０１７９】
溶媒を除去し、１００ｍｌのＥｔＯＡｃを加えた。有機層を炭酸水素ナトリウム溶液（５０ｍｌ×３）、次にＮａＣｌの飽和水溶液で洗い、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を除去して未精製の生成物４ｇを供し、これをフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、標記の化合物（１.５ｇ、９９％純度）を得た。
【０１８０】
調製４
（Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（Ｒ）−ピロリジン−３−イルエステル
【０１８１】
【化３３】
0005656288.tif 000050
（Ｒ）−３−（（Ｒ）−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセトキシ）ピロリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（１.３ｇ）の１，４−ジオキサン溶液８ｍｌを４Ｍ  ＨＣｌの１，４−ジオキサン溶液４ｍｌに加え、室温で一晩攪拌して、標記の化合物をＨＣｌ塩（１ｇ）として得た。
【０１８２】
（実施例６）
（Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（Ｒ）−１−（Ｎ−ベンジルカルバミミドイル）ピロリジン−３−イルエステル
【０１８３】
【化３４】
0005656288.tif 000051
（Ｒ）−３−（（Ｒ，−２−シクロペンチル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセトキシ）ピロリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（９７.５ｍｇ、０.３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液３ｍｌをＤＩＰＥＡ（１３０μｌ、７５０μｍｏｌ）に加え、続いてＣ−（ビス−ベンゾトリアゾール−１−イル）−メチレンアミン（８７ｍｇ、３３０μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２時間攪拌し、続いてベンジルアミン（３９μｌ、３６０μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で一晩攪拌した。溶媒を除去して、溶質を逆相クロマトグラフィーによって精製し、標記の化合物をＴＦＡ塩（７８.２ｍｇ、９９.５％純度）として得た。Ｃ２５Ｈ３１Ｎ３Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４２２.２４、測定値４２２.２。
【０１８４】
（実施例７）
先述の実施例に記載された手順に従い、かつ然るべき出発物質および試薬に置き換えて、次の化学式を有する化合物７‐１から７‐１８もＴＦＡ塩として調製した。
【０１８５】
【化３５】
0005656288.tif 000052
【０１８６】
【表３】
0005656288.tif 000053
（７‐１）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸１−（Ｎ−ベンジルカルバミミドイル）−ピロリジン−３−イルエステル。Ｃ２５Ｈ３１Ｎ３Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４２２.２４、測定値４２２.４；
（７‐２）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（Ｒ）−１−（Ｎ−チオフェン−２−イルメチル−カルバミミドイル）ピロリジン−３−イルエステル。Ｃ２３Ｈ２９Ｎ３Ｏ３Ｓに対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４２８.１９、測定値４２８.４；
（７‐３）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（Ｒ）−１−［Ｎ−（２−ヒドロキシベンジル）−カルバミミドイル］ピロリジン−３−イルエステル。Ｃ２５Ｈ３１Ｎ３Ｏ４に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４３８.２３、測定値４３８.５；
（７‐４）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（Ｒ）−１−［Ｎ−（３−ヒドロキシベンジル）−カルバミミドイル］ピロリジン−３−イルエステル。Ｃ２５Ｈ３１Ｎ３Ｏ４に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４３８.２３、測定値４３８.５；
（７‐５）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（Ｒ）−１−［Ｎ−（４−ヒドロキシベンジル）−カルバミミドイル］ピロリジン−３−イルエステル。Ｃ２５Ｈ３１Ｎ３Ｏ４に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４３８.２３、測定値４３８.３；
（７‐６）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（Ｒ）−１−（Ｎ−フラン−２−イルメチル−カルバミミドイル）ピロリジン−３−イルエステル。Ｃ２３Ｈ２９Ｎ３Ｏ４に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４１２.２２、測定値４１２.２；
（７‐７）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（Ｒ）−１−（Ｎ−フラン−３−イルメチル−カルバミミドイル）ピロリジン−３−イルエステル。Ｃ２３Ｈ２９Ｎ３Ｏ４に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４１２.２２、測定値４１２.２；
（７‐８）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（Ｒ）−１−［Ｎ−（２−フルオロ−ベンジル）−カルバミミドイル］ピロリジン−３−イルエステル  Ｃ２５Ｈ３０ＦＮ３Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４４０.２３、測定値４４０.３；
（７‐９）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（Ｒ）−１−［Ｎ−（３−フルオロ−ベンジル）−カルバミミドイル］ピロリジン−３−イルエステル。Ｃ２５Ｈ３０ＦＮ３Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４４０.２３、測定値４４０.４；
（７‐１０）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（Ｒ）−１−［Ｎ−（４−フルオロベンジル）−カルバミミドイル］ピロリジン−３−イルエステル。Ｃ２５Ｈ３０ＦＮ３Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４４０.２３、測定値４４０.４；
（７‐１１）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（Ｒ）−１−［Ｎ−（２，６−ジフルオロベンジル）−カルバミミドイル］ピロリジン−３−イルエステル。Ｃ２５Ｈ２９Ｆ２Ｎ３Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４５８.２２、測定値４５８.２；
（７‐１２）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（Ｒ）−１−［Ｎ−（３，４−ジフルオロベンジル）−カルバミミドイル］ピロリジン−３−イルエステル。Ｃ２５Ｈ２９Ｆ２Ｎ３Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４５８.２２、測定値４５８.２；
（７‐１３）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（Ｒ)−１−［Ｎ−（３,５−ジフルオロベンジル）−カルバミミドイル］ピロリジン−３−イルエステル。Ｃ２５Ｈ２９Ｆ２Ｎ３Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４５８.２２、測定値４５８.２；
（７−１４）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（Ｒ）−１−［Ｎ−（４−トリフルオロメトキシベンジル）−カルバミミドイル］ピロリジン−３−イルエステル。Ｃ２６Ｈ３０Ｆ３Ｎ３Ｏ４に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値５０６.２２、測定値５０６.２；
（７‐１５）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（Ｒ）−１−［Ｎ−（５−メチル−フラン−２−イルメチル）カルバミミドイル］ピロリジン−３−イルエステル。Ｃ２４Ｈ３１Ｎ３Ｏ４に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４２６.２３、測定値４２６.２；
（７‐１６）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（Ｒ）−１−（Ｎ−ピリジン−２−イルメチル−カルバミミドイル）ピロリジン−３−イルエステル。Ｃ２４Ｈ３０Ｎ４Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４２３.２３、測定値４２３.２；
（７‐１７）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（Ｒ）−１−［Ｎ−（３−フェニルプロピル）−カルバミミドイル］ピロリジン−３−イルエステル。Ｃ２７Ｈ３５Ｎ３Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４５０.２７、測定値４５０.２；
（７‐１８）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（Ｒ）−１−（Ｎ−フェネチルカルバミミドイル）−ピロリジン−３−イルエステル。Ｃ２６Ｈ３３Ｎ３Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４３６.２５、測定値４３６.２。
【０１８７】
（実施例８）
先述の実施例に記載された手順に従い、かつ然るべき出発物質および試薬に置き換えて、次の化学式を有する化合物８-１から８-１３もＴＦＡ塩として調製した。
【０１８８】
【化３６】
0005656288.tif 000054
【０１８９】
【表４】
0005656288.tif 000055
（８‐１）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸１−（Ｎ−ベンジルカルバミミドイル）ピリジン−４−イルエステル。Ｃ２６Ｈ３３Ｎ３Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４３６.２５、測定値４３６.５；
（８‐２）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸１−（Ｎ−チオフェン−２−イルメチル−カルバミミドイル）ピペリジン−４−イルエステル。Ｃ２４Ｈ３１Ｎ３Ｏ３Ｓに対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４４２.２１、測定値４４２.４；
（８‐３）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸１−（Ｎ−フラン−２−イルメチル−カルバミミドイル）ピペリジン−４−イルエステル。Ｃ２４Ｈ３１Ｎ３Ｏ４に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４２６.２３、測定値４２６.２；
（８‐４）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸１−（Ｎ−フラン−３−イルメチル−カルバミミドイル）ピペリジン−４−イルエステル。Ｃ２４Ｈ３１Ｎ３Ｏ４に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４２６.２３、測定値４２６.２；
（８‐５）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸１−［Ｎ−（２−ヒドロキシベンジル）−カルバミミドイル］ピペリジン−４−イルエステル。Ｃ２６Ｈ３３Ｎ３Ｏ４に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４５２.２５、測定値４５２.２；
（８‐６）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸１−［Ｎ−（３−ヒドロキシベンジル）−カルバミミドイル］ピペリジン−４−イルエステル。Ｃ２６Ｈ３３Ｎ３Ｏ４に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４５２.２５、測定値４５２.２；
（８‐７）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸１−［Ｎ−（４−ヒドロキシベンジル）−カルバミミドイル］ピペリジン−４−イルエステル。Ｃ２６Ｈ３３Ｎ３Ｏ４に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４５２.２５、測定値４５２.２；
（８‐８）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸１−［Ｎ−（３−メトキシベンジル）−カルバミミドイル］ピペリジン−４−イルエステル。Ｃ２７Ｈ３５Ｎ３Ｏ４に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４６６.２６、測定値４６６.２。
（８‐９）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸１−［Ｎ−（２−フルオロベンジル）−カルバミミドイル］ピペリジン−４−イルエステル。Ｃ２６Ｈ３２ＦＮ３Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４５４.２４、測定値４５４.２；
（８‐１０）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸１−［Ｎ−（３−フルオロベンジル）−カルバミミドイル］ピペリジン−４−イルエステル。Ｃ２６Ｈ３２ＦＮ３Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４５４.２４、測定値４５４.２；
（８‐１１）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸１−［Ｎ−（４−フルオロベンジル）−カルバミミドイル］ピペリジン−４−イルエステル。Ｃ２６Ｈ３２ＦＮ３Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４５４.２４、測定値４５４.２；
（８‐１２）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸１−（Ｎ−ピリジン−２−イルメチル−カルバミミドイル）ピペリジン−４−イルエステル。Ｃ２５Ｈ３２Ｎ４Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４３７.２５、測定値４３７.２；
（８‐１３）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸１−（Ｎ−ベンゾフラン−５−イルメチル−カルバミミドイル）ピペリジン−４−イルエステル。Ｃ２８Ｈ３３Ｎ３Ｏ４に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４７６.２５、測定値４７６.４。
【０１９０】
（実施例９）
先述の実施例に記載された手順に従い、かつ然るべき出発物質および試薬に置き換えて、（Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（Ｒ）−１−（Ｎ−ベンジルカルバミミドイル）ピペリジン−３−イルエステルもＴＦＡ塩として調製した。
【０１９１】
【化３７】
0005656288.tif 000056
Ｃ２６Ｈ３３Ｎ３Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４３６.２５、測定値４３６.５。
【０１９２】
（実施例１０）
先述の実施例に記載された手順に従い、かつ然るべき出発物質および試薬に置き換えて、（Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸１−［Ｎ−（３−フェニルプロピル）カルバミミドイル］ピペリジン−４−イルエステルもＴＦＡ塩として調製した。
【０１９３】
【化３８】
0005656288.tif 000057
Ｃ２８Ｈ３７Ｎ３Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４６４.２８、測定値４６４.４。
【０１９４】
（実施例１１）
先述の実施例に記載された手順に従い、かつ然るべき出発物質および試薬に置き換えて、次の化学式を有する化合物１１-１、および１１-２もＴＦＡ塩として調製した。
【０１９５】
【化３９】
0005656288.tif 000058
（１１‐１）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（Ｒ）−１−（Ｎ−メチルカルバミミドイル）−ピロリジン−３−イルエステル（Ｚ＝−ＣＨ３）。Ｃ１９Ｈ２７Ｎ３Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値３４６.２１、測定値３４６.２；
（１１‐２）  （Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸（Ｒ）−１−（Ｎ−ブチルカルバミミドイル）−ピロリジン−３−イルエステル（Ｚ＝−（ＣＨ２）３ＣＨ３）。Ｃ２２Ｈ３３Ｎ３Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値３８８.２５、測定値３８８.２。
【０１９６】
（実施例１２）
先述の実施例に記載された手順に従い、かつ然るべき出発物質および試薬に置き換えて、（Ｒ）−シクロペンチルヒドロキシフェニル酢酸１−カルバミミドイル−ピペリジン−４−イルエステルもＴＦＡ塩として調製した。
【０１９７】
【化４０】
0005656288.tif 000059
Ｃ１９Ｈ２７Ｎ３Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値３４６.２１、測定値３４６.１。
【０１９８】
（実施例１３）
先述の実施例に記載された手順に従い、かつ然るべき出発物質および試薬に置き換えて、次の化学式を有する化合物１３-１から１３-２もＴＦＡ塩として調製した。
【０１９９】
【化４１】
0005656288.tif 000060
（１３‐１）  ２−ヒドロキシ−４−メチル−２−フェニルペンタン酸（Ｒ）−１−（Ｎ−ベンジルカルバミミドイル）−ピロリジン−３−イルエステル（Ｑ＝フェニル）。Ｃ２４Ｈ３１Ｎ３Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４１０.２４、測定値４１０.２；
（１３‐２）  ２−ヒドロキシ−４−メチル−２−フェニルペンタン酸（Ｒ）−１−［Ｎ−（４−ヒドロキシベンジル）−カルバミミドイル］ピロリジン−３−イルエステル（Ｑ＝４−ヒドロキシフェニル）。Ｃ２４Ｈ３１Ｎ３Ｏ４に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４２６.２３、測定値４２６.２。
【０２００】
（実施例１４）
先述の実施例に記載された手順に従い、かつ然るべき出発物質および試薬に置き換えて、次の化学式を有する化合物１４-１から１４-４もＴＦＡ塩として調製した。
【０２０１】
【化４２】
0005656288.tif 000061
【０２０２】
【表５】
0005656288.tif 000062
（１４‐１）  Ｎ−ベンジル−４−（２−ヒドロキシ−２，２−ジ−チオフェン−２−イルアセチル）−ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２２Ｈ２４Ｎ４Ｏ２Ｓ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４４１.１３、測定値４４１.０；
（１４‐２）  ４−（２−ヒドロキシ−２，２−ジ−チオフェン−２−イルアセチル）−Ｎ−チオフェン−２−イルメチル−ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２０Ｈ２２Ｎ４Ｏ２Ｓ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４４７.０９、測定値４４７.０；
（１４‐３）  Ｎ−（４−ヒドロキシベンジル）−４−（２−ヒドロキシ−２，２−ジ−チオフェン−２−イル−アセチル）−ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２２Ｈ２４Ｎ４Ｏ３Ｓ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４５７.１３、測定値４５７.０；
（１４‐４）  Ｎ−フラン−２−イルメチル−４−（２−ヒドロキシ−２，２−ジ−チオフェン−２−イル−アセチル）−ピペラジン−１−カルボキサミジン。Ｃ２０Ｈ２２Ｎ４Ｏ３Ｓ２に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４３１.１１、測定値４３１.０。
【０２０３】
（実施例１５）
先述の実施例に記載された手順に従い、かつ然るべき出発物質および試薬に置き換えて、次の化学式を有する化合物１５-１から１５-２もＴＦＡ塩として調製した。
【０２０４】
【化４３】
0005656288.tif 000063
（１５‐１）  ９Ｈ−キサンテン−９−カルボン酸１−［Ｎ−（３−フェニルプロピル）カルバミミドイル］ピペリジン−４−イルエステル（Ｚ＝−（ＣＨ２）３−フェニル）。Ｃ２９Ｈ３１Ｎ３Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４７０.２４、測定値４７０.４；
（１５‐２）  ９Ｈ−キサンテン−９−カルボン酸（Ｒ）−１−（Ｎ−ベンジルカルバミミドイル）ピロリジン−３−イルエステル（Ｚ＝−ＣＨ２−フェニル）。Ｃ２６Ｈ２５Ｎ３Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値４２８.１９、測定値４２８.５。
【０２０５】
（実施例１６）
先述の実施例に記載された手順に従い、かつ然るべき出発物質および試薬に置き換えて、９Ｈ−キサンテン−９−カルボン酸（Ｓ）−１−カルバミミドイルピペリジン−３−イルメチルエステルもＴＦＡ塩として調製した。
【０２０６】
【化４４】
0005656288.tif 000064
Ｃ２１Ｈ２３Ｎ３Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値３６６.１７、測定値３６６.２。
【０２０７】
（実施例１７）
先述の実施例に記載された手順に従い、かつ然るべき出発物質および試薬に置き換えて、９Ｈ−キサンテン−９−カルボン酸（Ｒ）−１−カルバミミドイルピロリジン−３−イルメチルエステルもＴＦＡ塩として調製した。
【０２０８】
【化４５】
0005656288.tif 000065
Ｃ２０Ｈ２１Ｎ３Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値３５２.１６、測定値３５２.２。
【０２０９】
（実施例１８）
先述の実施例に記載された手順に従い、かつ然るべき出発物質および試薬に置き換えて、９Ｈ−キサンテン−９−カルボン酸−１−カルバミミドイル−ピペリジン−４−イルメチルエステルもＴＦＡ塩として調製した。
【０２１０】
【化４６】
0005656288.tif 000066
Ｃ２１Ｈ２３Ｎ３Ｏ３に対するＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ]＋の計算値３６６.１７、測定値３６６.２。
【０２１１】
アッセイ１
放射性リガンド結合アッセイ
ｈＭ１、ｈＭ２、ｈＭ３およびｈＭ４ムスカリン受容体サブタイプを発現する細胞からの膜の調製
クローン化されたヒトｈＭ１、ｈＭ２、ｈＭ３およびｈＭ４ムスカリン受容体サブタイプを安定に発現するＣＨＯ細胞株を、１０％  ＦＢＳおよび２５０μｇ／ｍｌジェネテシンを補充したＨＡＭのＦ‐１２からなる培地においてそれぞれ近い培養密度に増殖させた。細胞を５％  ＣＯ２、３７℃のインキュベータで増殖させ、２ｍＭ  ＥＤＴＡのｄＰＢＳ溶液を用いて取り上げた。６５０×ｇで５分の遠心分離により細胞を収集し、細胞ペレットを−８０℃で冷凍保存するか、或いはすぐに膜を調製した。膜を調製するためには、細胞ペレットを溶解用緩衝液に再懸濁し、ポリトロンＰＴ‐２１００組織破砕器（Ｋｉｎｅｍａｔｉｃａ  ＡＧ；２０秒×２回）を用いてホモジナイズした。未精製の膜を４℃において１５分間、４０,０００×ｇで遠心分離した。次に、膜ペレットを再懸濁用緩衝液に再懸濁し、ポリトロン組織破砕器を用いて再びホモジナイズした。膜懸濁液のタンパク質濃度は、Ｌｏｗｒｙ，Ｏ．ら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １９３：２６５（１９５１）に記載された方法によって測定した。すべての膜は、アリコットとして−８０℃で冷凍保存するか、或いはすぐに使用した。調製済ｈＭ５受容器膜のアリコットはＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒから直接に購入し、使用まで−８０℃で保存した。
【０２１２】
ムスカリン受容体に関する放射性リガンド結合アッセイ
サブタイプｈＭ１、ｈＭ２、ｈＭ３、ｈＭ４およびｈＭ５
放射性リガンド結合アッセイは、９６ウェルのマイクロタイタープレート中で行い、アッセイ総量は１０００μＬであった。ｈＭ１、ｈＭ２、ｈＭ３、ｈＭ４またはｈＭ５ムスカリン・サブタイプのいずれかを安定に発現するＣＨＯ細胞膜を、アッセイ緩衝液中で以下のの特定の目標タンパク質濃度（μｇ／ウェル）まで希釈した：ｈＭ１  １０μｇ、ｈＭ２  １０〜１５μｇ、ｈＭ３  １０〜２０μｇ、ｈＭ４  １０〜２０μｇ、およびｈＭ５  １０〜１２μｇ。アッセイプレートへの添加に先だって短時間（１０秒）、ポリトロン組織破砕器を用いて膜をホモジナイズした。放射性リガンドのＫＤ値を決定するための飽和結合の検討は、Ｌ−［Ｎ−メチル−３Ｈ］スコポラミンメチルクロリド（［３Ｈ］−ＮＭＳ：［Ｎ−ｍｅｔｈｙｌ−３Ｈ］ｓｃｏｐｏｌａｍｉｎｅ  ｍｅｔｈｙｌ  ｃｈｌｏｒｉｄｅ）（ＴＲＫ６６６、８４.０  Ｃｉ／ｍｍｏｌ、Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ、バッキンガムシャー州、英国）を０.００１ｎＭから２０ｎＭの濃度範囲で用いて行った。テスト化合物のＫｉ値を決定するための置換アッセイは、１ｎＭの［３Ｈ］‐ＮＭＳ、および１１の異なった濃度のテスト化合物を用いて行った。テスト化合物を最初に４０μＭの濃度で希釈緩衝液に溶解させた後、希釈緩衝液で順次５倍希釈して、最終濃度を４００ｆＭから４μＭの範囲とした。アッセイプレートへの添加順および量は以下の通りである：０.１％ＢＳＡを含むアッセイ緩衝液８２５μＬ、放射性リガンド２５μＬ、希釈されたテスト化合物１００μＬ、および膜５０μＬ。アッセイプレートは、３７℃で６時間インキュベートした。結合反応は、０.３％ポリエチレンイミン（ＰＥＩ）中で前処理したＧＦ／Ｂグラスファイバー製フィルタープレート（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ社、ウェルズリー、マサチューセッツ州）における迅速な濾過によって終結させた。フィルタープレートを洗浄緩衝液（１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ）で３回すすぎ、放射性の未結合物を除去した。プレートを風乾させ、各ウェルに５０μＬのＭｉｃｒｏｓｃｉｎｔ‐２０シンチレーション液体（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ社、ウェルズリー、マサチューセッツ州）を添加した。次に、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒトップカウント液体シンチレーションカウンター（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ社、ウェルズリー、マサチューセッツ州）を用いてプレートを計数した。結合データは、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアパッケージ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ社、サンディエゴ、カリフォルニア州）により、一部位競争モデルを用いて非線形回帰分析を行った。テスト化合物のＫｉ値は、観測されたＩＣ５０値および放射性リガンドのＫＤ値から、Ｃｈｅｎｇ‐Ｐｒｕｓｏｆｆの式（Ｃｈｅｎｇ．Ｙ；Ｐｒｕｓｏｆｆ  Ｗ．Ｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ２２（２３）：３０９９-１０８（１９７３））を用いて計算した。相乗平均および９５％信頼区間を決定するために、Ｋｉ値をｐＫｉ値に変換した。次に、データ報告のためにこれらの要約統計データをＫｉ値に戻した。
【０２１３】
このアッセイにおいて、より低いＫｉ値は、テスト化合物が、試験された受容体に対してより高い結合親和性を有することを示唆する。このアッセイでテストした本発明の例となる化合物は、本アッセイのＭ３ムスカリン受容体サブタイプに対して約１００ｎＭより小さいＫｉ値を有することがわかった。より典型的に、これらの化合物は約５０ｎＭより小さいＫｉ値を有し、いくつかの化合物では約１０ｎＭより小さいか、または約１.０ｎＭより小さいＫｉ値を有することがわかった。
【０２１４】
アッセイ２
ムスカリン受容体に対する機能的作用強度アッセイ
アゴニスト介在によるｃＡＭＰ蓄積阻害に対する阻止
このアッセイでは、ｈＭ２受容体を発現するＣＨＯ‐Ｋ１細胞において、フォルスコリン介在によるｃＡＭＰの蓄積がオキソトレモリンによって阻害されることを阻止する、テスト化合物の能力を測定することによって、テスト化合物の機能的作用強度を測定する。
【０２１５】
ｃＡＭＰアッセイは、製造者の使用説明書に従って１２５Ｉ‐ｃＡＭＰを用いたフラッシュプレート・アデニリルシクラーゼ活性化アッセイシステム（ＮＥＮ  ＳＭＰ００４Ｂ、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ社、ボストン、マサチューセッツ州）を使用してラジオイムノアッセイ形式で行なう。
【０２１６】
細胞をｄＰＢＳで一度すすぎ、アッセイ１に記載されたように、トリプシン‐ＥＤＴＡ溶液（０.０５％トリプシン／０．５３ｍＭ  ＥＤＴＡ）を用いて取り上げる。分離した細胞を、５０ｍＬのｄＰＢＳ中における５分間、６５０×ｇの遠心分離により２度洗う。次に、細胞ペレットを１０ｍＬのｄＰＢＳに再懸濁し、Ｃｏｕｌｔｅｒ  Ｚ１  Ｄｕａｌ  Ｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｃｏｕｎｔｅｒ（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ、フラトン、カリフォルニア州）を用いて細胞を計数する。細胞を再び６５０×ｇで５分間遠心分離して、刺激用緩衝液に１.６×１０６〜２.８×１０６細胞／ｍＬのアッセイ濃度で再懸濁する。
【０２１７】
テスト化合物を、最初に希釈緩衝液（１ｍｇ／ｍＬのＢＳＡ（０.１％）を補充したｄＰＢＳ）に４００μＭの濃度で溶解させ、次に１００：Ｍから０．１ｎＭの最終モル濃度範囲まで希釈緩衝液で順次希釈する。オキソトレモリンも同様のやり方で希釈する。
【０２１８】
ＡＣ活性のオキソトレモリンによる阻害を測定するために、フォルスコリン２５μＬ（ｄＰＢＳ中に希釈され、最終濃度が２５μＭ）、希釈されたオキソトレモリン２５μＬ、および細胞５０μＬをアゴニストアッセイ・ウェルに加える。ＡＣ活性のオキソトレモリンによる阻害を阻止するテスト化合物の能力を測定するために、フォルスコリンおよびオキソトレモリン各２５μＬ（ｄＰＢＳ中に希釈され、最終濃度がそれぞれ２５μＭおよび５μＭ）、希釈されたテスト化合物２５μＬ、および細胞５０μＬを残りのアッセイウェルに加える。
【０２１９】
反応を３７℃で１０分間インキュベートし、氷冷の検出緩衝液１００μＬを添加することによって停止させる。プレートをシールして一晩室温でインキュベートし、翌朝にＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒトップカウント液体シンチレーションカウンター（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ社、ウェルズリー、マサチューセッツ州）上で計数を行う。生成されたｃＡＭＰ量（ｐｍｏｌ／ウェル）は、試料およびｃＡＭＰ標準サンプルで観測されたカウント数に基づいて、製造者のユーザーマニュアルに記載されたように計算する。データ分析は、非線形回帰、一部位競争の式を利用するＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアパッケージ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ社、サンディエゴ、カリフォルニア州）を用いて非線形回帰分析により行う。オキソトレモリンの濃度‐反応曲線におけるＥＣ５０、およびオキソトレモリンアッセイ濃度をそれぞれＫＤおよび[Ｌ]として用い、Ｃｈｅｎｇ‐Ｐｒｕｓｏｆｆ式を利用してＫｉを計算する。相乗平均および９５％信頼区間を決定するために、Ｋｉ値をｐＫｉ値に変換する。次に、データ報告のためにこれらの要約統計データをＫｉ値に戻す。
【０２２０】
このアッセイにおいて、より低いＫｉ値は、テスト化合物が、試験された受容体においてより高い機能的活性を有することを示唆する。本発明の例となる化合物は、ｈＭ２受容体を発現するＣＨＯ‐Ｋ１細胞において、フォルスコリン介在によるｃＡＭＰの蓄積をオキソトレモリンが阻害することを阻止するための、約１００ｎＭより小さいＫｉ値を有することが期待される。
【０２２１】
アゴニスト介在による［３５Ｓ]ＧＴＰγＳ結合に対する阻止
第２の機能アッセイでは、ｈＭ２受容体を発現するＣＨＯ‐Ｋ１細胞において、オキソトレモリンにより刺激された[３５Ｓ]ＧＴＰγＳの結合を阻止するための化合物の能力を測定することによって、テスト化合物の機能的作用強度を決定することができる。
【０２２２】
使用時に凍結した膜を解凍し、次に最終的な組織濃度目標であるウェル当たりのタンパク質５〜１０μｇにアッセイ緩衝液で希釈する。ポリトロンＰＴ‐２１００組織破砕器を用いて膜を短時間ホモジナイズし、その後アッセイプレートに加える。
【０２２３】
アゴニストであるオキソトレモリンの［３５Ｓ]ＧＴＰγＳ結合に対する刺激作用についてＥＣ９０値（９０％最大反応に対する有効濃度）を各実験で測定する。
【０２２４】
オキソトレモリンの刺激による［３５Ｓ]ＧＴＰγＳ結合を阻止するテスト化合物の能力を決定するために、９６ウェルプレートの各ウェルに次の添加を行う：［３５Ｓ]ＧＴＰγＳ（０．４ｎＭ）を含むアッセイ緩衝液２５μＬ、オキソトレモリン（ＥＣ９０）およびＧＤＰ（３μＭ）各２５μＬ、希釈されたテスト化合物２５μＬ、およびｈＭ２受容体を発現するＣＨＯ細胞膜２５μＬ。アッセイプレートを次に３７℃で６０分間インキュベートする。ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒの９６ウェル・ハ−ベスターを用い、１％ＢＳＡで前処理したＧＦ／Ｂフィルター上でアッセイプレートを濾過する。氷冷の洗浄緩衝液でプレートを３秒×３回すすぎ、次に空乾または真空乾燥する。各ウェルにＭｉｃｒｏｓｃｉｎｔ‐２０シンチレーション液体（５０μＬ）を添加し、各プレートをシールして、トップカウンタ−（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）上で放射能を計数する。データ分析は、非線形回帰、一部位競争の式を利用するＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアパッケージ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ社、サンディエゴ、カリフォルニア州）を用いて非線形回帰分析により行う。テスト化合物に関する濃度‐反応曲線のＩＣ５０値、およびアッセイにおけるオキソトレモリン濃度をそれぞれＫＤおよび[Ｌ]として用い、Ｃｈｅｎｇ‐Ｐｒｕｓｏｆｆ式を利用してＫｉを計算する。
【０２２５】
このアッセイにおいて、より低いＫｉ値は、テスト化合物が、試験された受容体においてより高い機能的活性を有することを示唆する。本発明の例となる化合物は、ｈＭ２受容体を発現するＣＨＯ‐Ｋ１細胞において、オキソトレモリンによって刺激される［３５Ｓ]ＧＴＰγＳ結合を阻止するための、約１００ｎＭより小さいＫｉ値を有することが期待される。
【０２２６】
ＦＬＩＰＲアッセイを用いたアゴニスト介在によるカルシウム放出の阻止
Ｇｑタンパク質と共役するムスカリン受容体サブタイプ（Ｍ１、Ｍ３およびＭ５受容体）は、アゴニストが受容体に結合した時点でホスホリパーゼＣ（ＰＬＣ：ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ  Ｃ）経路を活性化する。結果として活性化したＰＬＣは、ホスファチルイノシトール二りん酸（ＰＩＰ２）をジアシルグリセロール（ＤＡＧ）およびホスファチジル−１，４，５三りん酸（ＩＰ３）に加水分解し、次には細胞内の貯蔵部、すなわち、小胞体および筋小胞体からカリウムを放出させる。ＦＬＩＰＲ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ、サニーベール、カリフォルニア州）アッセイは、細胞内カルシウムにおけるこの増加を利用しており、自由なカルシウムが結合したときに蛍光を発するカリシウム感受性色素（Ｆｌｕｏ‐４ＡＭ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ、ユージーン、オレゴン州）が用いられる。ヒトのＭ１およびＭ３、並びにチンパンジーのＭ５受容体でクローン化した細胞の単層における蛍光の変化を検出するＦＬＩＰＲによって、この蛍光事象は、リアルタイムで測定される。アンタゴニストとしての作用強度は、アゴニスト介在による細胞内カルシウムの増加を阻害するアンタゴニストの能力によって決まる。
【０２２７】
ＦＬＩＰＲカルシウム刺激作用アッセイのために、ｈＭ１、ｈＭ３およびｃＭ５受容体を安定に発現するＣＨＯ細胞をアッセイ前夜に９６ウェルのＦＬＩＰＲプレートに播く。播いた細胞をＣｅｌｌｗａｓｈ(ＭＴＸ  Ｌａｂｓｙｓｔｅｍｓ社）を用いてＦＬＩＰＲ緩衝液（ＨＥＰＥＳ  １０ｍＭ、ｐＨ７.４、塩化カルシウム２ｍＭ、プロベネシド２．５ｍＭのカルシウムおよびグネシウムのないＨＢＳＳ溶液）で２回洗い、増殖培地を除去して、５０μＬ／ウェルのＦＬＩＰＲ緩衝液を残す。５０μＬ／ウェルの４μＭ  ＦＬＵＯ‐４ＡＭ（２倍溶液を作製）を用いて、細胞を３７℃、５％二酸化炭素で４０分間インキュベートする。色素インキュベーション時間に続いて、細胞をＦＬＩＰＲ緩衝液で２回洗い、最終量５０μＬ／ウェルを残す。
【０２２８】
アンタゴニストの作用強度を決定するためにＥＣ９０濃度におけるオキソトレモリンの刺激作用に対するアンタゴニストの作用強度を後ほど測定できるように、まず細胞内Ｃａ２＋放出に対するオキソトレモリンの刺激作用の用量依存性を測定する。最初に、化合物の希釈緩衝液で細胞を２０分間インキュベートする。続いてアゴニストを加えるが、これはＦＬＩＰＲによって行う。オキソトレモリンに対するＥＣ９０値は、ＦＬＩＰＲ測定およびデータ整理ついて後述する部分に詳しく説明する方法と式ＥＣＦ＝（（Ｆ／１００−Ｆ）Λ１／Ｈ）*ＥＣ５０を併せて発生させる。ＥＣ９０濃度のオキソトレモリンが、アンタゴニスト阻害アッセイプレートの各ウェルに加えられるように、３×ＥＣＦのオキソトレモリン濃度を刺激作用プレートに調製する。
【０２２９】
ＦＬＩＰＲに用いるパラメータは、曝露の長さ０．４秒、レーザー強度０．５ワット、励起波長４８８ｎｍ、および放出波長５５０ｎｍである。基準値は、アゴニストの添加前に１０秒間、蛍光の変化を測定することによって決定する。アゴニストによる刺激に続く蛍光の変化をＦＬＩＰＲが０.５から１秒毎に１.５分間連続的に測定し、蛍光の最大変化を捕える。
【０２３０】
蛍光の変化は、各ウェルに対して最大蛍光値引く基準蛍光値として表現する。生データの分析は、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ社、サンディエゴ、カリフォルニア州）を用いた非線形回帰により薬物濃度の対数に対して行い、Ｓ字型の用量‐反応曲線に関する組み込みモデルを利用する。アンタゴニストのＫｉ値は、オキソトレモリンのＥＣ５０値をＫＤとし、かつオキソトレモリンのＥＣ９０をリガンド濃度に対して用いてＣｈｅｎｇ‐Ｐｒｕｓｏｆｆの式（Ｃｈｅｎｇ  ＆  Ｐｒｕｓｏｆｆ，１９７３）に照らしてＰｒｉｓｍによって決定する。
【０２３１】
このアッセイにおいて、より低いＫｉ値は、テスト化合物が、試験された受容体においてより高い機能的活性を有することを示唆する。本発明の例となる化合物は、ｈＭ３を安定に発現するＣＨＯ細胞において、アゴニスト介在によるカルシウム放出を阻止するための約１００ｎＭより小さいＫｉ値を有することが期待される。
【０２３２】
アッセイ３
ラットのＥｉｎｔｈｏｖｅｎアッセイ
このインビボアッセイは、ムスカリン受容体アンタゴニスト活性を示すテスト化合物の気管支保護効果を評価するために用いられる。
【０２３３】
すべてのテスト化合物を滅菌水で希釈し、吸入経路（ＩＨ：ｉｎｈａｌａｔｉｏｎ  ｒｏｕｔｅ）を通じて投与する。ラット（Ｓｐｒａｇｕｅ‐Ｄａｗｌｅｙ、オス、２５０〜３５０ｇ）を、ＬＣ  Ｓｔａｒ噴霧器セットから発生し混合気体（ＣＯ２５％／大気９５％）により送り出されたエアロゾルに曝す。各テスト化合物の溶液を、６匹のラットを維持できるパイ型の投薬チャンバーに１０分間にわたって噴霧する。化合物の吸入後、所定の時間ポイントでＥｉｎｔｈｏｖｅｎアッセイを行う。
【０２３４】
肺評価を開始する３０分前に、動物をイナクチン（チオブタバルビタール、１２０ｍｇ／ｋｇ  腹腔内）で麻酔する。生理食塩水を満たしたポリエチレンカテーテル（ＰＥ‐５０）を頸静脈に挿入してＭＣｈを注入するために用いる。次に気管を解剖して、１４Ｇ針でカニューレ処置を行い、肺評価の間ラットに酸素を供給するために用いる。手術が完了した時点で、ピストンレスピレーターセットを用い、１ｍｌ／体重１００ｇで２．５ｍｌ容量を超えない1回拍出量、および毎分９０回の拍出速度でラットに酸素を供給する。
【０２３５】
各呼吸で生じる圧力変化を測定する。基準値を少なくとも２.５分間収集し、次に気管支収縮薬ＭＣｈを２倍づつ増加させて（５、１０、２０、４０および８０μｇ／ｍｌ）、非累積的にラットにチャレンジする。ＭＣｈは２ｍＬ／ｋｇ／分の速度でシリンジポンプから２.５分間注入する。動物は検査が完了した時点で安楽死させる。
【０２３６】
治療を受けた動物の換気圧力（ｃｍ  Ｈ２０）の変化は、対照動物との比較におけるＭＣｈ反応の阻害パーセンテージとして表現する。このアッセイにおいて、より高いパーセント阻害値は、テスト化合物が、気管支保護効果を有することを示す。本アッセイにおいて１００μｇ／ｍｌの用量でテストした本発明の例となる化合物は、３５％より大きい阻害を示すことが期待され、いくつかは７０％より大きい阻害を示すことが期待され、さらにいくつかは９０％より大きい阻害を示すことが期待される。
【０２３７】
１．５時間におけるＩＤ５０の決定
標準的なムスカリン・アンタゴニストの評価を、投薬の１.５時間後にラットのＥｉｎｔｈｏｖｅｎアッセイで行った。テストした５つの標準的な物質に対する作用強度（ＩＤ５０）の順位は次のように測定された：イプラトロピウム（４.４μｇ／ｍｌ）＞チオトロピウム（６μｇ／ｍｌ）＞デス−メチル−チオトロピウム（１２μｇ／ｍｌ）＞グリコピロレート（１５μｇ／ｍｌ）＞ＬＡＳ‐３４２３７（２４μｇ／ｍｌ）。テスト化合物の作用強度を投薬の１.５時間後に同様に測定した。
【０２３８】
６および２４時間におけるＩＤ５０の決定
投薬の２４時間および／または６時間後にも、標準的な物質チオトロピウムおよびイプラトロピウムをＥｉｎｔｈｏｖｅｎアッセイで評価した。イプラトロピウム（１０および３０μｇ／ｍｌ）の作用強度は、投薬の１.５時間後と比較して、６時間後には約３分の１倍であった。この時間ポイント（６時間）で観測された活性の損失は、病院で作用持続時間が比較的短いことと辻褄があう。チオトロピウムは、効果の発現が遅く、投薬の６時間後に気管支保護がピークを示した。６時間および２４時間における作用強度値は、相互に著しくは相違せず、１.５時間と比較して約２倍の作用強度であった。６および２４時間における作用強度値のみならず、テスト化合物の作用発現も同様に測定される。
【０２３９】
アッセイ４
ラットの抗唾液分泌促進アッセイ
ラット（Ｓｐｒａｇｕｅ‐Ｄａｗｌｅｙ、オス、２５０〜３５０ｇ）に投薬し、アッセイ３に記載されたように麻酔およびカニューレ処置を行う。所定の時間ポイントにおいて、かつ手術後に、動物の頭部が傾斜の下方に来るように２０°傾けて仰向けに配置する。予め秤量したガーゼパッドを動物の口に挿入し、ムスカリン・アゴニストのピロカルピン（ＰＩＬＯ）（３ｍｇ／ｋｇ、静脈内）を投与する。ＰＩＬＯ前後のガーゼパッドの重さを測定することによって、ＰＩＬＯ後１０分の間に生じた唾液の重量を測定する。抗唾液分泌促進効果は、対照動物との比較における唾液分泌の阻害パーセンテージとして表現する。
【０２４０】
１．６および２４時間におけるＩＤ５０の決定
ラットの抗唾液分泌促進アッセイは、テスト化合物の全身曝露を評価して肺選択指数（ＬＳＩ：ｌｕｎｇ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎｄｅｘ）を計算するために開発された。このモデルでは、標準的な物質チオトリピウムを投薬の１、６、２４時間後に評価した。チオトロピウムは、ピロカルピンによって誘発される唾液分泌を阻害する作用強度が、投薬の６時間後にもっとも高いことが見出された。この知見は、Ｅｉｎｔｈｏｖｅｎアッセイで観測された効果のピークと辻褄が合う。
【０２４１】
このモデルは、Ｒｅｃｈｔｅｒ，“Ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎｔｉｃｈｏｌｉｎｅｒｇｉｃ  ｄｒｕｇ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｉｎ  ｍｉｃｅ  ｂｙ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ  ａｇａｉｎｓｔ  ｐｉｌｏｃａｒｐｉｎｅ‐ｉｎｄｕｃｅｄ  ｓａｌｉｖａｔｉｏｎ”  Ａｔａ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｏｘｉｃｏｌ  ２４：２４３-２５４（１９９６）に記載された手順の改良版である。各々の前治療時間に媒体で治療された動物の平均唾液重量を算定し、対応する前治療時間、各用量における唾液分泌の阻害パーセンテージを計算するために用いる。
【０２４２】
本アッセイでテストした本発明の例となる化合物は、１００μｇ／ｍｌ（２４時間における測定）より小さいＩＤ５０値を示すことが期待され、いくつかの化合物は３０μｇ／ｍｌより小さい、いくつかは２０μｇ／ｍｌより小さい、さらにいくつかは１５μｇ／ｍｌより小さいＩＤ５０値を示すことが期待される。
【０２４３】
抗唾液分泌促進ＩＤ５０の気管支保護ＩＤ５０に対する比率は、テスト化合物の見掛けの肺選択指数を計算するために用いられる。一般に、約５より大きい見掛けの肺選択指数を有する化合物が望ましい。
【０２４４】
本発明は、特定の様態またはその実施形態に関連して記載されてきたが、本発明の本来の精神および範囲から逸脱することなく、様々な変化を与えることができ、或いは等価物で置き換えることができることを当業者は理解するであろう。加えて、適用可能な特許像および規則が許す範囲で、本明細書に引用されるすべての出版物、特許および特許出願は、あたかも各文献が参照により本明細書に個別に組み込まれたかのように、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。