(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）アミノ酸シーケンス
ＨＸ１ＱＧＴＦＴＳＤＸ２ＳＸ３ＹＬＤＸ４Ｘ５Ｘ６ＡＸ７ＤＦＶＱＷＬＸ８ＮＴＫＸ９Ｘ１０（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１０）
（式中、
Ｘ１は、Ｄ−セリン、α−アミノイソ酪酸（ａｉｂ）、１−アミノ−１−シクロブタンカルボン酸（Ａｃｂ）残基、１−アミノ−１−シクロヘキサンカルボン酸（Ａｃｘ）；アルファ−アミノ酪酸（Ａｂｕ）；Ｄ−アルファ−アミノ酪酸（Ｄ−Ａｂｕ）；アミノ吉草酸（Ｎｖａ）；ベータ−シクロプロピル−アラニン（Ｃｐａ）；プロパルギルグリシン（Ｐｒｇ）；アリルグリシン（Ａｌｇ）；２−アミノ−２−シクロヘキシル−プロピオン酸（２−Ｃｈａ）；Ｄ−ｔｅｒｔブチルグリシン（Ｄ−ｔｂｇ）；ビニルグリシン（Ｖｇ）；１−アミノ−１−シクロプロパンカルボン酸（Ａｃｐ）；又は１−アミノ−１−シクロペンタンカルボン酸（Ａｃｐｅ）残基であり；
Ｘ２は、チロシン（Ｙ）又はリシン（Ｋ）残基であり；
Ｘ３は、セリン（Ｓ）又はリシン（Ｋ）残基であり；
Ｘ４は、セリン（Ｓ）、α−アミノイソ酪酸（ａｉｂ）、又はグルタミン酸（Ｅ）残基であり；
Ｘ５は、アルギニン（Ｒ）又はグルタミン酸（Ｅ）残基であり；
Ｘ６は、アルギニン（Ｒ）又はアラニン（Ａ）残基であり；
Ｘ７は、グルタミン（Ｑ）又はリシン（Ｋ）残基であり；
Ｘ８は、メチオニン（Ｍ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、メチオニンスルホキシド（ｍ）、又はＯ−メチル−Ｌ−ホモセリン（ｏ）残基であり；
Ｘ９は、ガンマ−グルタミン酸（γＧｌｕ）残基であり；
Ｘ１０は、ガンマ−グルタミン酸（γＧｌｕ）残基又は不存在である。）
を有するペプチドであるＰ、及び
（ii）Ｍ、ここにおいて、Ｍは、（ｉ）親水性リンカーによりコレステロール部位に共有結合的に連結されたシステイン残基、（ii）１以上のガンマグルタミン酸残基からなるスペーサーにより脂質部位に共有結合的に連結されたリシン残基、又は（iii）脂質部位であって、Ｍは１以上のガンマグルタミン酸残基を含むスペーサーによりＰのＣ−末端又は内部アミノ酸に共有結合的に連結されている、
からなり；さらに
任意に、Ｚ１及びＺ２、
ここにおいて、Ｚ１は、もし存在するならＰのＮ−末端アミノ基に結合された、任意に存在する保護基であり；
Ｚ２は、もし存在するならＰのＣ−末端カルボキシル基に連結された任意に存在する保護基である
を有するペプチド類似体；及びその医薬的に受容可能な塩であって、
該ペプチド類似体およびその塩は、６．０未満のｐＩを有し、またデュアルＧＬＰ−１受容体アゴニスト及びグルカゴン受容体アゴニストであることを特徴とするペプチド類似体及びその医薬的に受容可能な塩。
【請求項２】
Ｍが、親水性リンカーを用いてコレステロール部位に共有結合的に連結されたシステイン残基であり、該システイン残基はＰのＣ−末端に連結されている、請求項１のペプチド類似体。
【請求項３】
Ｍが、１以上のガンマ−グルタミン酸残基を含むスペーサーにより脂質部位に共有結合的に連結されたリシン残基であり、該リシン残基はＰのＣ−末端に連結されている、請求項１のペプチド類似体。
【請求項４】
Ｍが、１以上のガンマ−グルタミン酸残基を含むスペーサーにより脂質部位に共有結合的に連結されたリシン残基であり、該リシン残基はＰのＸ２又はＸ７位置にある、請求項１のペプチド類似体。
【請求項５】
親水性リンカーが１〜２４のエトキシ単位を含むエトキシポリマーである、請求項１のペプチド類似体。
【請求項６】
親水性リンカーが４つのエトキシ単位を包含するエトキシポリマーである、請求項１のペプチド類似体。
【請求項７】
脂質部位がパルミトイル部位である、請求項１のペプチド類似体。
【請求項８】
ペプチド類似体が、ＯＸＭ３１７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０）、ＯＸＭ３１８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６１）、又はＯＸＭ３２９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６７）である、請求項１のペプチド類似体。
【請求項９】
ペプチド類似体が、ＯＸＭ３４５（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６９）；ＯＸＭ３５５（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７０）；ＯＸＭ３５７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７１）；ＯＸＭ３５９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２）；ＯＸＭ３６１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７３）；ＯＸＭ３７３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７４）；ＯＸＭ３７４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７５）；ＯＸＭ３８０（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６）；ＯＸＭ３８１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７）；ＯＸＭ３８３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８）；ＯＸＭ３８８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９）；ＯＸＭ３９２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０）；ＯＸＭ３９５（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１）；ＯＸＭ３９８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２）；ＯＸＭ３９９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３）；ＯＸＭ４００（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８４）；ＯＸＭ４０１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８５）；ＯＸＭ４０４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８６）；ＯＸＭ４０６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７）；ＯＸＭ４０７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８）；ＯＸＭ４０８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８９）；ＯＸＭ４１２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９３）；ＯＸＭ４１４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９５）；ＯＸＭ４１５（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９６）；ＯＸＭ４１８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９９）；ＯＸＭ４１９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１００）；ＯＸＭ４２０（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０１）；又はＯＸＭ４２１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０２）である、請求項１のペプチド類似体。
【請求項１０】
アミノ酸シーケンス
ＨＳＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０９）
において、
（Ａ）ペプチドのＮ−末端から第二のアミノ酸は、Ｄ−セリン；α−アミノイソ酪酸（ａｉｂ）；１−アミノ−１−シクロブタンカルボン酸（Ａｃｂ）残基；１−アミノ−１−シクロヘキサンカルボン酸（Ａｃｘ）；アルファ−アミノ酪酸（Ａｂｕ）；Ｄ−アルファ−アミノ酪酸（Ｄ−Ａｂｕ）；アミノ吉草酸（Ｎｖａ）；ベータ−シクロプロピル−アラニン（Ｃｐａ）；プロパルギルグリシン（Ｐｒｇ）；アリルグリシン（Ａｌｇ）；２-アミノ−２−シクロヘキシル−プロピオン酸（２−Ｃｈａ）；Ｄ−ｔｅｒｔブチルグリシン（Ｄ−ｔｂｇ）；ビニルグリシン（Ｖｇ）；１−アミノ−１−シクロプロパンカルボン酸（Ａｃｐ）；又は１−アミノ−１−シクロペンタンカルボン酸（Ａｃｐｅ）からなる群から選ばれたアミノ酸で置換されており；
（Ｂ）ペプチドは、１以上のガンマ−グルタミン酸残基を有するスペーサーによってペプチドに共有結合的に連結された脂質またはコレステロール部位を有し；
（Ｃ）ペプチドは、２位での置換に加え１から３のアミノ酸置換を任意に包含し；また
（Ｄ）ペプチドは、もし存在すればペプチドのＣ−末端カルボン酸基に連結されている、保護基を任意に含む、
アミノ酸シーケンスを含むペプチド類似体であって、
該ペプチド類似体は、６．０未満のｐＩを有し、またデュアルＧＬＰ−１受容体アゴニスト及びグルカゴン受容体アゴニストであることを特徴とするペプチド類似体、並びにそれらの医薬的に受容可能な塩。
【請求項１１】
Ｎ−末端から第二のアミノ酸に対し置換されたアミノ酸が、Ｄ−セリン、α−アミノイソ酪酸、及び１−アミノ−１−シクロブタンカルボン酸からなる群から選ばれる、請求項１０のペプチド類似体。
【請求項１２】
ペプチド類似体が、１以上のガンマ−グルタミン酸残基を含むスペーサーによりペプチド類似体のＣ−末端でリシン残基のε−アミノ基に共有結合的に連結されているシステイン残基のチオール基に共有結合的に連結されたコレステロール部位を有する、請求項１０のペプチド類似体。
【請求項１３】
前記コレステロール部位が、親水性リンカーによりチオール基に共有結合的に連結されている、請求項１２のペプチド類似体。
【請求項１４】
前記親水性リンカーが、１から１２のエトキシ単位を含むエトキシポリマーである、請求項１３のペプチド類似体。
【請求項１５】
前記親水性リンカーが、４つのエトキシ単位を含むエトキシポリマーである、請求項１３のペプチド類似体。
【請求項１６】
ペプチド類似体が、リシン残基のε−アミノ基に共有結合的に連結された脂質部位を有する、請求項１０のペプチド類似体。
【請求項１７】
脂質部位がパルミトイル基である、請求項１６のペプチド類似体。
【請求項１８】
脂質部位が、１以上のガンマ−グルタミン酸残基によりリシン残基のε−アミノ基に共有結合的に連結されている、請求項１６のペプチド類似体。
【請求項１９】
脂質部位が、１以上のガンマ−グルタミン酸残基によりＣ−末端でリシン残基のε−アミノ基に共有結合的に連結されている、請求項１６のペプチド類似体。
【請求項２０】
脂質部位が、１以上のガンマ−グルタミン酸残基によりリシン残基の、また１以上のガンマ−グルタミン酸残基によりＣ−末端でリシン残基に連結されたリシン残基のε−アミノ基に共有結合的に連結されている、請求項１６のペプチド類似体。
【請求項２１】
ペプチド類似体は、さらに、１０位、１２位、１６位、１７位、１８位及び２７位からなる群から選ばれたアミノ酸位での１以上のアミノ酸置換を含む、請求項１０のペプチド類似体。
【請求項２２】
ペプチド類似体は、さらに、１０位でチロシンに対しリシン、１２位でリシンに対しセリン、１６位でセリンに対しグルタミン酸又はａ−アミノイソ酪酸、１７位でアルギニンに対しグルタミン酸、１８位でアルギニンに対しアラニン、２０位でグルタミンに対しリシン、及び２７位でメチオニンに対しノルロイシン又はＯ−メチル−Ｌ−ホモセリンからなる群から選ばれた１以上のアミノ酸置換を含む、請求項１０のペプチド類似体。
【請求項２３】
１０位でチロシンがリシンで置換され、また脂質部位が１以上のガンマ−グルタミン酸残基によりリシン残基のε−アミノ基に共有結合的に連結されている、請求項２２のペプチド類似体。
【請求項２４】
２０位でのグルタミンがリシンで置き換えられ、また脂質部位が１以上のガンマ−グルタミン酸残基によりリシンのε−アミノ基に共有結合的に連結されている、請求項２２のペプチド類似体。
【請求項２５】
ペプチド類似体が、さらに、Ｃ−末端に共有結合的に連結された１以上のガンマ−グルタミン酸残基を含む、請求項２３のペプチド類似体。
【請求項２６】
ペプチド類似体が、さらに、Ｃ−末端に共有結合的に連結されたガンマ−グルタミン酸残基を含む、請求項２４のペプチド類似体。
【請求項２７】
請求項１−２６のいずれか１項に記載されたペプチド類似体の代謝疾患治療用医薬製造の際における使用。
【発明の詳細な説明】
【関連出願へのクロスレファレンス】
【０００１】
本出願は、２００９年２月１９出願の国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０３４４４８の部分継続出願であり、その内容はここに組み入れられる。
【背景技術】
【０００２】
（１）発明の分野
本発明は、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ−ＩＶ）による切断および不活性化に抵抗性を有し、ペプチド類似体のインビホ（ｉｎ  ｖｉｖｏ）での半減期を延ばし、かつペプチド類似体がデュアルＧＬＰ−１／グルカゴン受容体（ＧＣＧＲ）アゴニストとして働くことができるよう修飾された、オキシントモジュリン（ＯＸＭ、グルカゴン３７）ペプチド誘導体、及び該ペプチド類似体の、糖尿病や肥満症のような代謝障害の治療のための使用に関する。
【０００３】
（２）関連技術の記載
ホルモンであるオキシントモジュリン（ＯＸＭ、グルカゴン−３７）は、腸及び中枢神経系（ＣＮＳ）におけるプレプログルカゴンプロセシングの翻訳後産物であり、摂食に応じて腸管のＬ−細胞から分泌される。１９８３年に発見されたが、ＯＸＭは、摂食及びエネルギー消費の調節と関係づけられてきた（ジャロウス（Ｊａｒｒｏｕｓｅ）他、エンドクリノロジー（Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．）、１９８４年、第１１５巻、１０２−１０５頁、シュジョルダガー（Ｓｃｈｊｏｌｄａｇｅｒ）他、ユアロピアン  ジャーナル  オブ  クリニカル  インベスティゲイション（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．）、１９８８年、第１８巻、４８８−５０３頁）。ラットでのＯＸＭの中枢又は末梢投与は、胃内容物排出にほとんど影響を与えることなく、短期間に摂食減少を引き起す（デイキン（Ｄａｉｋｉｎ）他、エンドクリノロジー、２００１年、第１４２巻、４２４４−４２５０頁、デイキン他、エンドクリノロジー、２００４年、第１４５巻、２６８７−２６９５頁）。ラットにおけるＯＸＭの反復脳血管内投与は、結果として、同時飼育の動物に比較して、コア温度の上昇及び体重増加の減少を生じ、このことはカロリー摂取及びエネルギー消費の双方に対する効果を示唆している（デイキン他、アメリカン・ジャーナル・オブ・フィジオロジー、エンドクリノロジー・アンド・メタボリズム（Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．）、２００２年、第２８３巻、Ｅ１１７３−Ｅ１１７７）。
【０００４】
関連する研究においては、ＯＸＭの抹消投与は、迅速に誘発され又暗期間での摂食を用量依存的に抑制するが、ＧＬＰ−１と異なり、胃の内容物排出に関しての効果は有していなかった。ＯＸＭはまた、弓状核（ＡＲＣ）中において、空腹グレリンのレベルを低下し、シーフォス（ｃ−ｆｏｓ）免疫反応物を増加した。ＯＸＭの７日間のＩＰ繰り返し投与は、ラットにおいては体重増加率及び体脂肪貯蓄率の減少を引き起こした（デイキン他、エンドクリノロジー、２００４年、第１４５巻、２６８７−２６９６頁参照）。
【０００５】
マウスにおけるＯＸＭ作用の研究では、ＯＸＭはグルカゴン及びＧＬＰ−１受容体の両者を活性化することができるが、ｉｃｖＯＸＭがグルカゴン欠損マススでの食物摂取を抑制するように、ＯＸＭの食欲減退作用はＧＬＰ−１受容体のみを要求することが証明されている。しかし、ＯＸＭの食欲減退効果は、ＧＬＰ−１受容体欠損マウスには全くない。また、ＯＸＭではないが、エキセンディン・フォー（ｅｘｅｎｄｉｎ−４）は、マウスにおけるエネルギー消費を調整する。このため、ＯＸＭは、薬理学的濃度で用いられる場合、ＧＬＰ−１受容体への弱いアゴニストであると考えられている（バギオ（Ｂａｇｇｉｏ）他、ガストロエンテロロジー（Ｇａｓｔｅｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．）、２００４年、第１２７巻、５４６−５８頁参照）。ＯＸＭはまた、高脂肪代謝肥育されたマウスにおいてグルコース過敏症を改善し（デイキン他、アメリカン・ジャーナル・オブ・フィジオロジー、エンドクリノロジー・アンド・メタボリズム（Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．）、２００８年、第２９７巻、Ｅ１４２−Ｅ１４７）、またＧＬＰ−１受容体非依存マウスの内因性心拍数を増大することが判明した（ソウデン（Ｓｏｗｄｅｎ）他、アメリカン・ジャーナル・オブ・フィジオロジー−レギュラトリー、インテギュラティブ  アンド  フィジオロジー（Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｉｎｔｅｇｒ．Ｃｏｍｐ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．）、２００７年、第２９２巻、Ｒ９６２−Ｒ９７０）。また、ＯＸＭは、ＧＬＰ−１受容体βアレスチン補強及びＧタンバク質αサブユニット（Ｇａｌｐｈａ）を通してのシグナリングに別異に影響を及ぼすこと（ジョルゲンセン他、ジャーナル  ファーマコロジー  アンド  エクスペリメンタル  テラポイティックス（Ｊ．Ｐｈａｒｍａ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔ．２００７年、第３２２巻、１４８−１５４頁）、またＯＸＭの抹消注入後、視床下部神経単位活性に別異に影響を及ぼすこと（クドゥリ（Ｃｈｏｕｄｈｒｉ）他、バイオケミカル  アンド  バイオフィジカル  リサーチ  コミュニケーションズ（Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｓ，Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ，）、２００６年、第３５０巻、２９８−３０６頁）が示された。
【０００６】
ヒトでは、健康な正常体重の被験者におけるＯＸＭの単回の９０分間の静脈内注入が、ハンガースコア及び立食における摂食を約１９％まで低減した。これに続いての１２時間のカロリー摂取は、何らの嘔気又は食物嗜好性の変化の報告なしに、約１１％まで低減された（コーエン（Ｃｏｈｅｎ）他、ジャーナル  オブ  クリニカル  エンドリリノロジー  アンド  メタボリズム（Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．）、２００３年、第８８巻、４６９６−４７０１頁、リッケガード（Ｌｙｋｋｅｇａａｒｄ）他、ＡＤＡ  サイエンティフィック  セッションズ、アブストラクト＃１５０６−Ｐ（２００３））。より最近では、肥満で健康なボランティア（ＢＭＩ約３３）における４週間にわたるＯＸＭの食事前注射は、処置の第１日目に有意なカロリー摂取の低減（約２５％）をもたらし、それは研究の期間にわたって維持された（４週間後、３５％減少）（ワイン（Ｗｙｎｎｅ）他、ダイアビーティーズ（Ｄｉａｂｅｔｅｓ）、２００５年、第５４巻、２３９０−２３９５頁）。処置された被験者では、研究の最後に強い体重減少が観察された（１．９％、プラセボ補正）。ＯＸＭの血漿レベルは、注入研究において観察されたものと同様であった（ピーク濃度〜９５０ｐＭ）。インビボでのＯＸＭの不十分な安定性（血漿ｔ１／２＜１２分間）により必要とされる比較的高い用量にもかかわらず、何らタキフィラキシーがなく、また軽度かつ一過性の嘔気の発生率が低いこと（約３％）から、このホルモンは、ヒト検証及び魅力的な耐薬側面の双方を備えた数少ない肥満症ターゲットの１つとされている。
【０００７】
ＯＸＭは、非常に短い半減期をもち、細胞表面ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（以降ＤＰＰ−ＩＶ）により迅速に不活性化される（ズー他、ジャーナル  オブ  バイオロジカル  ケミストリー（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．）、２００２年、第２７８巻、２２４１８−２２４２３頁）。しかしながら、ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤は、臨床では体重に対し中立であり、生理的を超えたレベルのＯＸＭ（９００〜１０００ｐＭ）が、ヒトの体重減少を達成するために必要かもしれないことを示唆している。ヒトにおける体重減少を引き起こすためのＯＸＭペプチド類似体は、国際公開公報ＷＯ０３／０２２３０４、ＷＯ２００４／０６２６８５、ＷＯ２００６／１３４３４０の目的物である。
【０００８】
ＯＸＭは、それ故、糖尿病及び肥満症のような代謝障害の治療剤としての可能性を示す。しかしながら、ＯＸＭはインビボでの安定性が十分でないことから、糖尿病及び肥満症のような代謝性疾患の治療のために、安全かつ有効に投与されうるＯＸＭ誘導体を開発することが必要である。もし、安定性及び薬物動態を改善する部位への結合により修飾された、より具体的にはＤＰＰ−ＩＶ切断に対し抵抗性を与える修飾により修飾された類似体又は誘導体が開発されるならさらに望ましいであろう。さらに、デュアルＧＬＰ−１受容体／グルカゴン受容体アゴニストとして作用することのできるＯＸＭ類似体を提供することが望ましいであろう。
【発明の概要】
【０００９】
本発明は、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ−ＩＶ）による切断および不活性化に抵抗性であり、ペプチド類似体のインビボでの半減期を増大するとともに、ペプチド類似体がデュアルＧＬＰ−１／グルカゴン受容体（ＧＣＧＲ）アゴニストとして働くことができるように修飾された、オキシントモジュリン（ＯＸＭ、グルカゴン３７）ペプチド誘導体、及びそのようなペプチド類似体の糖尿病及び肥満症のような代謝性疾患の治療のための使用を提供する。特に、本明細書に記載された類似体は摂食及び体重を低減させ、代謝率を増大し、膵臓からのグルコース依存性インスリン分泌（ＧＤＩＳ）を媒介し、グルコース許容量を改善し、これによりメタボリックシンドローム、肥満症、糖尿病、メタボリックシンドロームＸ、高血糖症、空腹時高血糖障害、脂質代謝異常症、アテローム性動脈硬化症、及び他の前糖尿病状態のような代謝性障害に悩んでいる患者への治療選択肢を与える。
【００１０】
それ故、本発明は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１で示されるヒトオキシントモジュリン（ＯＸＭ）のアミノ酸シーケンスからなるペプチドであって、Ｎ−末端からの第二アミノ酸は、ジペプチジルペプチダーゼＩＶによる切断及び不活性化に抵抗性のペプチドにするアミノ酸で置換されており；このペプチドは、このペプチドに共有結合的に連結された脂質又はコレステロール部位を含み；このペプチドは、２位での置換に加え、１〜３のアミノ酸置換を任意に含み；このペプチドは、もし存在する場合にはこのペプチドのＣ−末端カルボキシ基に結合されている保護基を任意に含み；さらに、このペプチドはデュアルＧＬＰ−１受容体及びグルカゴン受容体アゴニストとして働くことができ、ヒトＯＸＭの血清半減期より大きい血清半減期を有するペプチド、及び医薬的に受容可能なそれらの塩を提供する。さらなる態様において、Ｎ−末端からの第２アミノ酸に置換されたアミノ酸は、Ｄ−セリン及びα−アミノイソ酪酸からなる群から選ばれる。
【００１１】
また、本発明は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１で示されるヒトオキシントモジュリン（ＯＸＭ）のアミノ酸シーケンスからなるペプチドであって、Ｎ−末端からの第二アミノ酸がＤ−セリン及びα−アミノイソ酪酸からなる群から選ばれたアミノ酸で置換され；ペプチドのＣ−末端は、システイン残基のチオール基が親水性リンカー（ｌｉｎｋｅｒ）によりコレステロール部位に共有結合的に連結されているシステイン残基を含み；このペプチドは、２位での置換に加え、１〜３のアミノ酸置換を任意に含み；このペプチドは、もし存在する場合にはこのペプチドのＣ−末端カルボキシ基に結合されている、保護基を任意に含み；このペプチドはデュアルＧＬＰ−１受容体及びグルカゴン受容体アゴニストとして働くことができ、ヒトＯＸＭの血清半減期より大きい血清半減期を有するペプチド、及び医薬的に受容可能なそれらの塩を提供する。
【００１２】
また、本発明は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１で示されるヒトオキシントモジュリン（ＯＸＭ）のアミノ酸シーケンスからなるペプチドであって、Ｎ−末端からの第二アミノ酸は、ペプチドをジペプチジルペプチダーゼＩＶによる切断及び不活性化に抵抗性にするアミノ酸で置換されており；このペプチドは、このペプチドに共有結合的に連結された脂質又はコレステロール部位を含み；このペプチドは、さらに、１７位、１８位及び２７位からなる群から選ばれたアミノ酸位置で置換された１以上のアミノ酸置換を含み；またこのペプチドは、もし存在する場合にはこのペプチドのＣ−末端カルボキシ基に結合されている、保護基を任意に含み；さらにこのペプチドは、デュアルＧＬＰ−１受容体及びグルカゴン受容体アゴニストとして働くことができ、ヒトＯＸＭの血清半減期より大きい血清半減期を有するペプチド、及び医薬的に受容可能なそれらの塩を提供する。さらなる態様において、１以上のアミノ酸置換は、１７位でのアルギニンに対するグルタミン酸、１８位でのアルギニンに対するアラニン、２７位でのメチオニンに対するノルロイシン又はＯ−メチル−Ｌ−ホモセリンからなる群から選ばれる。
【００１３】
また、本発明は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１で示されるヒトオキシントモジュリン（ＯＸＭ）のアミノ酸シーケンスからなるペプチドであって、Ｎ−末端からの第二アミノ酸は、ペプチドをジペプチジルペプチダーゼＩＶによる切断及び不活性化に抵抗性にするアミノ酸で置換されており；このペプチドは、このペプチドに共有結合的に連結された脂質又はコレステロール部位を含み；このペプチドは、２位での置換に加え、１〜３のアミノ酸置換を任意に含み；このペプチドは、アミノ酸シーケンスＲＮＲＮＮＩＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０４）を欠いており；またこのペプチドは、もし存在する場合にはこのペプチドのＣ−末端カルボキシ基に結合されている、保護基を任意に含み、さらに、このペプチドはデュアルＧＬＰ−１受容体及びグルカゴン受容体アゴニストとして働き、ヒトＯＸＭの血清半減期より大きい血清半減期を有するペプチド、及び医薬的に受容可能なそれらの塩を提供する。
【００１４】
さらなる態様において、２位でのアミノ酸置換は、Ｄ−セリン及びα−アミノイソ酪酸からなる群から選ばれたアミノ酸であり、コレステロール部位は、親水性リンカーによりシステインのチオール基に共有結合的に連結され、システイン残基は、ペプチド結合によりペプチドのＣ−末端に共有結合的に連結される。さらなる態様において、ペプチドは、さらに、１７位、１８位及び２７位からなる群から選ばれたアミノ酸位置で、１以上のアミノ酸置換を含む。さらなる態様において、ペプチドは、さらに、１７位でのグルタミン酸へのアルギニン、１８位でのアラニンへのアルギニン、２７位でのノルロイシン又はＯ−メチル−Ｌ−ホモセリンへのメチオニンからなる群から選ばれた１以上のアミノ酸置換を含む。
【００１５】
上記ペプチドのいずれか１種のさらなる態様において、ペプチドは、ペプチドのＣ−末端でシステイン残基のチオール基に共有結合的に連結されたコレステロール部位を含む。具体的態様においては、コレステロール部位は、親水性リンカーにより、チオール基に共有結合的に連結される。この親水性リンカーは、ペプチド又は１〜１０のエトキシ単位を含むエトキシポリマーのようなポリマーであることができる。さらなる態様において、親水性リンカーは、４つのエトキシ単位を含むエトキシポリマーである。ペプチドの他の態様において、ペプチドは、このペプチドのＣ−末端に共有結合的に連結されたリシン残基のε−アミノ基に共有結合的に連結された脂質部位、特定の実施態様ではパルミトイルである、を含む。さらなる実施態様において、リシン残基は、リンカー部位によりペプチドのＣ−末端に連結されている。特定の態様において、リンカー部位は、１以上のガンマ−グルタミン酸残基を含み、また他の態様において、リンカー部位は、１−アミノ−４，７，１０−トリオキサ−１３−トリデカンアミンコハク酸を含む。
【００１６】
また、本発明は、表１及び表２に紹介されたペプチド類似体から選ばれたＯＸＭペプチド類似体、及び代謝性障害の治療用薬剤の製造の際における表１及び表２に紹介される１以上のＯＸＭペプチド類似体の使用を提供する。
【００１７】
また、本発明は、構造
Ｚ１−Ｐ−Ｌ１−Ｚ２
〔式中、Ｐは、アミノ酸シーケンス
ＨＸ１ＱＧＴＦＴＳＤＹＳＸ２ＹＬＤＸ３Ｘ４Ｘ５ＡＸ６ＤＦＶＱＷＬＸ７ＮＴＫ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０６）
【００１８】
（式中、Ｘ１は、Ｄ−セリン，α−アミノイソ酪酸（ａｉｂ）、１−アミノ−１−シクロブタンカルボン酸（Ａｃｂ）残基、１−アミノ−１−シクロヘキサンカルボン酸（Ａｃｘ）；アルファ−アミノ酪酸（Ａｂｕ）；Ｄ−アルファ−アミノ酪酸（Ｄ−Ａｂｕ）；アミノ吉草酸（Ｎｖａ）；ベータ−シクロプロピル−アラニン（Ｃｐａ）；プロパルギルグリシン（Ｐｒｇ）；アリルグリシン（Ａｌｇ）；２−アミノ−２−シクロヘキシル−プロピオン酸（２−Ｃｈａ）；Ｄ−ｔｅｒｔブチルグリシン（Ｄ−ｔｂｇ）；ビニルグリシン（Ｖｇ）；１−アミノ−１−シクロプロパンカルボン酸（Ａｃｐ）；又は１−アミノ−１−シクロペンタンカルボン酸（Ａｃｐｅ）であり；Ｘ２は、Ｓｅｒ（Ｓ）又はＬｙｓ（Ｋ）であり；Ｘ３は、Ｓｅｒ（Ｓ）又はＧｌｕ（Ｅ）であり；Ｘ４は、アルギニン（Ｒ）又はグルタミン酸（Ｅ）残基であり；Ｘ５は、アルギニン（Ｒ）又はアラニン（Ａ）残基であり；Ｘ６は、Ｇｌｎ（Ｑ）又はＬｙｓ（Ｋ）であり；Ｘ７は、メチオニン（Ｍ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、メチオニンスルホキサイド（ｍ）又はＯ−メチル−Ｌ−ホモセリン（ｏ）残基である。）を有するペプチドであり；
【００１９】
Ｚ１は、もし存在する場合Ｎ−末端アミノ基に結合された、任意に存在する保護基であり、Ｌ１は任意であるが、存在する場合、アミノ酸シーケンスＲＮＲＮＮＩＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０４）又はリンカー部位であり；Ｚ２は任意であるが、存在する場合、リシン（Ｋ）残基、脂質部位に共有結合的に連結されたリシン残基、コレステロール部位に共有結合的に連結されたリシン残基、システイン（Ｃ）残基、脂質部位に共有結合的に連結されたシステイン残基；コレステロール部位に共有結合的に連結されたシステイン残基であり；又Ｐ又はＺ２は、もし存在する場合Ｃ−末端カルボキシル基に連結された、保護基を任意に包含する。〕
からなるペプチド類似体；及び医薬的に受容可能なそれらの塩を提供する。Ｌ１−Ｚ２は、ＰのＣ−末端アミノ酸、又はＰの内部アミノ酸に連結されることができる。
【００２０】
上記ペプチドのさらなる態様において、Ｚ２は、特定の実施態様においては、そのチオール基によりコレステロール部位または脂質部位に共有結合的に連結されることのできるシステイン残基である。他の態様においては、このコレステロール部位及び脂質部位は、親水性リンカーによりシステインのチオール基に共有結合的に連結される。特定の態様においては、この親水性リンカーは、１〜２４のエトキシ単位を含むエトキシポリマーであるか、さらに具体的態様においては、該親水性リンカーは、４つのエトキシ単位を含むエトキシポリマーである。
【００２１】
上記ペプチドの更なる態様において、Ｚ２は、リシン残基であり、このリシン残基は、特定の実施態様においては、該リシンのε−アミノ基が共有結合的にコレステロール部位又は脂質部位に、直接に又は親水性リンカーにより共有結合的に連結されている。特定の実施態様においては、該脂質部位はパルミトイルである。
【００２２】
上記ペプチドの更なる態様において、Ｌ１はリンカー部位である。特定の態様においては、該リンカー部位は、親水性リンカー部位である。更なる態様において、該リンカー部位は１以上のガンマ−グルタミン酸残基を包含し、他の態様において、該リンカー部位は、１−アミノ−４，７，１０−トリオキサ−１３−トリデカンアミンコハク酸である。
【００２３】
上記ペプチドの特定の実施態様において、ペプチドは、ＯＸＭ７０（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２）；ＯＸＭ１１０（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９）；ＯＸＭｌ１５（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１）；ＯＸＭ１７７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４）；ＯＸＭ２１２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７）；ＯＸＭ２１３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８）；ＯＸＭ２１６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９）；ＯＸＭ２９０（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４６）；ＯＸＭ３０１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５１）；又はＯＸＭ３２５（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６５）から選ばれた構造からなる。上記ペプチドのさらに他の実施態様において、ペプチドは、ＯＸＭ２３７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１）；ＯＸＭ２３８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２）；ＯＸＭ２５９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３）；ＯＸＭ２６０（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４）；ＯＸＭ２６１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５）；ＯＸＭ２６２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３６）；ＯＸＭ２６３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７）；ＯＸＭ２６４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８）；ＯＸＭ２６５（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３９）；ＯＸＭ２６６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４０）；ＯＸＭ２６７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１）；ＯＸＭ２６８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４２）；ＯＸＭ３０６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４３）；ＯＸＭ３０７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４４）；及びＯＸＭ３０８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５）から選ばれた構造からなる。
【００２４】
ペプチドがＲＮＲＮＮＩＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０４）を欠く場合における上記ペプチドの特定の実施態様において、ペプチドは、ＯＸＭ２９１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４７）；ＯＸＭ２９２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４８）；ＯＸＭ２９３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９）；ＯＸＭ２９４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５０）；ＯＸＭ３０２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５２）；ＯＸＭ３０３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３）；ＯＸＭ３０４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５４）；ＯＸＭ３０５（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５５）；０ＸＭ３１１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５６）；ＯＸＭ３１２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５７）；ＯＸＭ３１４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５８）；ＯＸＭ３１３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５９）；ＯＸＭ３１７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０）；ＯＸＭ３１８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６１）；ＯＸＭ３１９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６２）；ＯＸＭ３２３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４）；ＯＸＭ３２７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６６）；又はＯＸＭ３２９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６７）から選ばれた構造からなる。
【００２５】
ペプチドがＲＮＲＮＮＩＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０４）を欠く場合における上記ペプチドの更なる特定の実施態様において、ペプチドは、ＯＸＭ３４５（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６９）；ＯＸＭ３５５（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７０）；ＯＸＭ３５７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７１）；ＯＸＭ３５９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２）；ＯＸＭ３６１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７３）；ＸＭ３７３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７４）；ＯＸＭ３７４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７５）；ＯＸＭ３８０（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６）；ＯＸＭ３８１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７）；ＯＸＭ３８３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８）；ＯＸＭ３８８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９）；ＯＸＭ３９２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０）；ＯＸＭ３９５（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１）；ＯＸＭ３９８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２）；ＯＸＭ３９９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３）；ＯＸＭ４００（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８４）；ＯＸＭ４０１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８５）；ＯＸＭ４０４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８６）；ＯＸＭ４０６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７）；ＯＸＭ４０７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８）；ＯＸＭ４０８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８９）；ＯＸＭ４１０（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９１）；０ＸＭ４１１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９２）；ＯＸＭ４１２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９３）；ＯＸＭ４１４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９５）；ＯＸＭ４１５（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９６）；ＯＸＭ４１６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９７；ＯＸＭ４１７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９８）；ＯＸＭ４１８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９９；ＯＸＭ４１９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１００）；ＯＸＭ４２０（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０１）；又はＯＸＭ４２１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０２）から選ばれた構造からなる。
【００２６】
また、本発明は、下記構造
Ｚ１−Ｐ−Ｌ１−Ｚ２
〔式中Ｐは、アミノ酸シーケンス
ＨＸ１ＱＧＴＦＴＳＤＹＳＸ２ＹＬＤＸ３Ｘ４Ｘ５ＡＸ６ＤＦＶＱＷＬＸ７ＮＴＫ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０６）
【００２７】
（式中、Ｘ１は、Ｄ−セリン，α−アミノイソ酪酸（ａｉｂ）、１−アミノ−１−シクロブタンカルボン酸（Ａｃｂ）残基、１−アミノ−１−シクロヘキサンカルボン酸（Ａｃｘ）；アルファ−アミノ酪酸（Ａｂｕ）；Ｄ−アルファ−アミノ酪酸（Ｄ−Ａｂｕ）；アミノ吉草酸（Ｎｖａ）；ベータ−シクロプロピル−アラニン（Ｃｐａ）；プロパルギルグリシン（Ｐｒｇ）；アリルグリシン（Ａｌｇ）；２−アミノ−２−シクロヘキシル−プロピオン酸（２−Ｃｈａ）；Ｄ−ｔｅｒｔブチルグリシン（Ｄ−ｔｂｇ）；ビニルグリシン（Ｖｇ）；１−アミノ−１−シクロプロパンカルボン酸（Ａｃｐ）；又は１−アミノ−１−シクロペンタンカルボン酸（Ａｃｐｅ）であり；Ｘ２は、Ｓｅｒ（Ｓ）又はＬｙｓ（Ｋ）であり；Ｘ３は、Ｓｅｒ（Ｓ）又はＧｌｕ（Ｅ）であり；Ｘ４は、アルギニン（Ｒ）又はグルタミン酸（Ｅ）残基であり；Ｘ５は、アルギニン（Ｒ）又はアラニン（Ａ）残基であり；Ｘ６は、Ｇｌｎ（Ｑ）又はＬｙｓ（Ｋ）であり；Ｘ７は、メチオニン（Ｍ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、メチオニンスルホキサイド（ｍ）又はＯ−メチル−Ｌ−ホモセリン（ｏ）残基である。）を有するペプチドであり；
【００２８】
Ｚ１は、もし存在する場合Ｎ−末端アミノ基に結合されている、任意に存在する保護基であり、Ｌ１は任意であるが、もし存在する場合、リンカー基であり；Ｚ２は任意であるが、もし存在する場合、リシン（Ｋ）残基、脂質部位に共有結合的に連結されたリシン残基、コレステロール部位に共有結合的に連結されたリシン残基、システイン（Ｃ）残基、脂質部位に共有結合的に連結されたシステイン残基；コレステロール部位に共有結合的に連結されたシステイン残基であり；又Ｐ又はＺ２は、もし存在する場合Ｃ−末端カルボキシ基に連結されている、保護基を任意に包含する。〕
を包含するペプチド類似体；及び医薬的に受容可能なそれらの塩を提供する。Ｌ１−Ｚ２は、ＰのＣ−末端アミノ酸、又はＰの内部アミノ酸に連結されることができる。
【００２９】
上記ペプチドの更なる態様において、Ｚ２は、システイン残基であり、特定の実施態様においては、そのチオール基によって、コレステロール部位又は脂質部位に共有結合的に連結されることのできるシステイン残基である。他の実施態様においては、該コレステロール部位又は脂質部位は、親水性リンカーにより、システインのチオール基に共有結合的に連結される。特定の態様においては、該親水性リンカーは、１〜２４のエトキシ単位を含むエトキシポリマーであるか、さらに具体的な態様においては、該親水性リンカーは、４つのエトキシ単位を含むエトキシポリマーである。
【００３０】
上記ペプチドの更なる態様においては、Ｚ２は、特定の実施態様においては、リシンのε−アミノ基が共有結合的にコレステロール部位又は脂質部位に、直接に又は親水性リンカーの手段により連結されている、リシン残基である。特定の実施態様においては、該脂質部位はパルミトイルである。
【００３１】
上記ペプチドの更なる態様において、Ｌ１はリンカー部位である。特定の態様においては、このリンカー部位は親水性リンカー部位である。更なる態様においては、このリンカー部位は１以上のガンマ−グルタミン酸残基からなり、また別の態様においては、このリンカー部位は、１−アミノ−４，７，１０−トリオキサ−１３−トリデカンアミンコハク酸である。
【００３２】
上記ペプチドの特定の実施態様において、ペプチドは、ＯＸＭ２９１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４７）；ＯＸＭ２９２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４８）；ＯＸＭ２９３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９）；ＯＸＭ２９４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５０）；ＯＸＭ３０２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５２）；ＯＸＭ３０３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３）；ＯＸＭ３０４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５４）；ＯＸＭ３０５（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５５）；ＯＸＭ３１１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５６）；ＯＸＭ３１２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５７）；ＯＸＭ３１４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５８）；ＯＸＭ３１３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５９）；ＯＸＭ３１７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０）；ＯＸＭ３１８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６１）；ＯＸＭ３１９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６２）；ＯＸＭ３２３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４）；ＯＸＭ３２７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６６）；又はＯＸＭ３２９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６７）から選ばれた構造からなる。
【００３３】
更なる特定の実施態様において、ペプチドは、ＯＸＭ３４５（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６９）；ＯＸＭ３５５（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７０）；ＯＸＭ３５７（ＳＥＱ  ＩＤ  Ｎ０：７１）；ＯＸＭ３５９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２）；ＯＸＭ３６１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７３）；ＯＸＭ３７３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７４）；ＯＸＭ３７４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７５）；ＯＸＭ３８０（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６）；ＯＸＭ３８１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７）；ＯＸＭ３８３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８）；ＯＸＭ３８８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９）；ＯＸＭ３９２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０）；ＯＸＭ３９５（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１）；ＯＸＭ３９８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２）；ＯＸＭ３９９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３）；ＯＸＭ４００（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８４）；ＯＸＭ４０１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８５）；ＯＸＭ４０４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８６）；ＸＭ４０６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７）；ＯＸＭ４０７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８）；ＯＸＭ４０８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８９）；ＯＸＭ４１０（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９１）；ＯＸＭ４１１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９２）；ＯＸＭ４１２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９３）；ＯＸＭ４１４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９５）；ＯＸＭ４１５（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９６）；ＯＸＭ４１６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９７；ＯＸＭ４１７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９８）；ＯＸＭ４１８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９９）；ＯＸＭ４１９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１００）；ＯＸＭ４２０（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０１）；又はＯＸＭ４２１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０２）から選ばれた構造からなる。
【００３４】
また、本発明は、構造
Ｚ１−Ｐ−Ｌ１−Ｚ２
〔式中、Ｐは、アミノ酸シーケンス
ＨＸ１ＱＧＴＦＴＳＤＹＳＸ２ＹＬＤＸ３Ｘ４Ｘ５ＡＸ６ＤＦＶＱＷＬＸ７ＮＴＫＲＮＲＮＮＩＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０７）
【００３５】
（式中、Ｘ１は、Ｄ−セリン，α−アミノイソ酪酸（ａｉｂ）、１−アミノ−１−シクロブタンカルボン酸（Ａｃｂ）残基、１−アミノ−１−シクロヘキサンカルボン酸（Ａｃｘ）；アルファ−アミノ酪酸（Ａｂｕ）；Ｄ−アルファ−アミノ酪酸（Ｄ−Ａｂｕ）；アミノ吉草酸（Ｎｖａ）；ベータ−シクロプロピル−アラニン（Ｃｐａ）；プロパルギルグリシン（Ｐｒｇ）；アリルグリシン（Ａｌｇ）；２−アミノ−２−シクロヘキシル−プロピオン酸（２−Ｃｈａ）；Ｄ−ｔｅｒｔブチルグリシン（Ｄ−ｔｂｇ）；ビニルグリシン（Ｖｇ）；１−アミノ−１−シクロプロパンカルボン酸（Ａｃｐ）；又は１−アミノ−１−シクロペンテンカルボン酸（Ａｃｐｅ）であり；Ｘ２は、Ｓｅｒ（Ｓ）又はＬｙｓ（Ｋ）であり；Ｘ３は、Ｓｅｒ（Ｓ）又はＧｌｕ（Ｅ）であり；Ｘ４は、アルギニン（Ｒ）又はグルタミン酸（Ｅ）残基であり；Ｘ５は、アルギニン（Ｒ）又はアラニン（Ａ）残基であり；Ｘ６は、Ｇｌｎ（Ｑ）又はＬｙｓ（Ｋ）であり；Ｘ７は、メチオニン（Ｍ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、メチオニンスルホキサイド（ｍ）又はＯ−メチル−Ｌ−ホモセリン（ｏ）残基である。）を有するペプチドであり；
【００３６】
Ｚ１は、もし存在する場合Ｎ−末端アミノ基に連結されている、任意に存在する保護基であり、Ｌ１は任意であり、存在する場合、リンカー部位であり；Ｚ２は任意で、存在する場合、リシン（Ｋ）残基、脂質部位に共有結合的に連結されたリシン残基、コレステロール部位に共有結合的に連結されたリシン残基、システイン（Ｃ）残基、脂質部位に共有結合的に連結されたシステイン残基、コレステロール部位に共有結合的に連結されたシステイン残基であり；又Ｐ又はＺ２は、もし存在する場合Ｃ−末端カルボキシル基に結合されている、保護基を任意に包含する。〕を含むペプチド類似体；及び医薬的に受容可能なそれらの塩を提供する。Ｌ１−Ｚ２は、ＰのＣ−末端アミノ酸、又はＰの内部アミノ酸に結合されることができる。
【００３７】
上記ペプチドの更なる態様において、Ｚ２はシステイン残基であり、特定の実施態様においては、そのチオール基によって、コレステロール部位又は脂質部位に共有結合的に連結されることのできるシステイン残基である。他の実施態様においては、該コレステロール部位又は脂質部位は、親水性リンカーにより、システインのチオール基に共有結合的に連結される。特定の態様においては、該親水性リンカーは、１〜２４のエトキシ単位を含むエトキシポリマーであるか、さらに具体的な態様においては、該親水性リンカーは、４つのエトキシ単位を含むエトキシポリマーである。
【００３８】
上記ペプチドの更なる態様において、Ｚ２はリシン残基であり、特定の実施態様においては、該リシンのε−アミノ基は、共有結合的にコレステロール部位又は脂質部位に、直接又は親水性リンカーのいずれかにより連結されている。特定の実施態様においては、該脂質部位はパルミトイルである。
【００３９】
上記ペプチドの更なる態様において、Ｌ１はリンカー部位である。特定の態様において、該リンカー部位は親水性リンカー部位である。更なる態様において、該リンカー部位は１以上のガンマ−グルタミン酸残基からなり、他の態様においては、リンカー部位は、１−アミノ−４，７，１０−トリオキサ−１３−トリデカンアミンコハク酸である。
【００４０】
上記ペプチドの特定の実施態様においては、該ペプチドは、ＯＸＭ２９０（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４６）；ＯＸＭ３０１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５１）；ＯＸＭ３２１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６３）；ＯＸＭ３２５（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６５）；又はＯＸＭ３３０（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８）から選ばれた構造からなる。
【００４１】
上記ペプチドの更なる特定の実施態様においては、ペプチドは、ＯＸＭ７０（ＳＥＱ  ＩＤ  Ｎ０：１２）；ＯＸＭｌ１０（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９）；ＯＸＭＩｌ５（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１）；ＯＸＭ１７７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４）；ＯＸＭ２１２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７）；ＯＸＭ２１３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８）；又はＯＸＭ２１６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９）から選ばれた構造からなる。
【００４２】
上記ペプチドの更なる特定の実施態様においては、ペプチドは、ＯＸＭ２３７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１）；ＯＸＭ２３８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２）；ＯＸＭ２５９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ；３３）；ＯＸＭ２６０（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４）；ＯＸＭ２６１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５）；ＯＸＭ２６２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３６）；ＯＸＭ２６３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７）；ＯＸＭ２６４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８）；ＯＸＭ２６５（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３９）；ＯＸＭ２６６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４０）；ＯＸＭ２６７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１）；ＯＸＭ２６８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４２）；ＯＸＭ３０６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４３）；ＯＸＭ３０７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４４）；及びＯＸＭ３０８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５）から選ばれた構造からなる。
【００４３】
また、本発明は、デュアルＧＬＰ−１受容体アゴニスト／グルカゴン受容体（ＧＣＧＲ）アゴニストであり、６．０未満のｐＩを有するペプチド類似体を提供する。コレステロール又は脂肪酸部位を包含し、６未満のＰＩを有するペプチド類似体は、ヒト肥満細胞株ＬＡＤ２を用いたインビボでのカウンタースクリーニングアッセイにより決定された際に、肥満細胞の脱顆粒活性化能力を低減させることが見出されている。それ故、本発明は、また、そのペプチドのＮ−末端からの第２アミノ酸が、ジペプチジルペプチダーゼＩＶによる切断及び不活性化に対しペプチドを抵抗性とするアミノ酸で置換されたアミノ酸シーケンスＨＳＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０９）からなるペプチド類似体であり；このペプチドは、１以上のガンマ−グルタミン酸残基からなるスペーサーによってペプチドに共有結合的に連結された脂質またはコレステロール部位を含み；このペプチドは、２位での置換に加え、１から３のアミノ酸置換を任意に含み；また、このペプチドは、もし存在すればペプチドのＣ−末端カルボン酸基に連結された、保護基を任意に含み、さらにこのペプチド類似体は、６．０未満のｐＩを有するとともに、デュアルＧＬＰ−１受容体アゴニスト及びグルカゴン受容体アゴニストであり、またそれらの医薬的に受容可能な塩を提供する。特定の態様においては、該ペプチド類似体は、４〜６のｐＩ、又は約５．０のｐＩ、例えば約５．４のｐＩを有する。
【００４４】
さらなる態様においては、該ペプチド類似体のＮ−末端からの第二アミノ酸に対し置換されたアミノ酸は、Ｄ−セリン、α−アミノイソ酪酸、及び１−アミノ−１−シクロブタンカルボン酸からなる群から選ばれる。
【００４５】
特定の態様においては、このペプチド類似体は、１以上のガンマ−グルタミン酸残基からなるスペーサーによりペプチド類似体のＣ−末端でリシン残基のε−アミノ基に共有結合的に連結されているシステイン残基のチオール基に共有結合的に連結されているコレステロール部位を包含する。さらなる実施態様においては、このコレステロール部位は、親水性リンカーによりチオール基に共有結合的に連結されており、さらなる実施態様においては、該リンカーは、１〜２０のエトキシ単位を含むエトキシポリマー、例えば、４つのエトキシ単位を含むエトキシポリマーである親水性リンカーによりチオール基に共有結合的に連結されている。
【００４６】
特定の態様においては、ペプチド類似体は、リシン残基のε−アミノ基に共有結合的に連結された脂質部位を含み；特定の実施態様においては、該脂質部位は、パルミトイル、ミリストイル、またはステアロイル部位のような脂肪酸である。さらなる実施態様においては、該脂質部位は、１以上のガンマ−グルタミン酸残基によりリシン残基のε−アミノ基に共有結合的に連結されている。さらなる実施態様において、該脂質部位は、１以上のガンマ−グルタミン酸残基によりＣ−末端でリシン残基のε−アミノ基に共有結合的に連結されている。さらなる実施態様においては、該脂質部位は、１以上のガンマ−グルタミン酸残基のε−アミノ基に及び１以上のガンマ−グルタミン酸残基によりＣ−末端でリシン残基に結合されたリシン残基のε−アミノ基に共有結合的に連結されている。
【００４７】
さらなる態様において、ペプチド類似体は、さらに、１０位、１２位、１６位、１７位、１８位及び２７位からなる群から選ばれたアミノ酸位置において、１以上のアミノ酸置換を包含する。特定の実施態様において、該ペプチド類似体は、１０位でチロシンに替えてのリシン、１２位でリシンに替えてのセリン、１６位でセリンに替えてのグルタミン酸又はα−アミノイソ酪酸、１７位でアルギニンに替えてのグルタミン酸、１８位でアルギニンに替えてのアラニン、２０位でグルタミンに替えてのリシン、及び２７位でメチオニンに替えてのノルロイシン又はＯ−メチル−Ｌ−ホモセリンから選ばれた１以上のアミノ酸置換を包含する。
【００４８】
さらなる実施態様においては、ペプチド類似体の１０位でのチロシンがリシンで置換され、また脂質部位は１以上のガンマ−グルタミン酸残基によりリシン残基のε−アミノ基に共有結合的に連結される。他の実施態様では、ペプチド類似体の２０位でのグルタミンはリシンで置き換えられ、また脂質部位は１以上のガンマ−グルタミン酸残基によりリシンのε−アミノ基に共有結合的に連結される。いずれかの実施態様においては、ペプチド類似体は、さらに、Ｃ−末端に共有結合的に連結された１以上のガンマ−グルタミン酸残基を包含する。
【００４９】
さらに、本発明は、６．０未満のｐＩを有し、またデュアルＧＬＰ−１受容体アゴニスト及びグルカゴン受容体アゴニストである、下記構造を含むペプチド類似体；及びその医薬的に受容可能な塩を提供する。
Ｚ１−Ｐ−Ｍ−Ｚ２
〔式中Ｐは、アミノ酸シーケンス
ＨＸ１ＱＧＴＦＴＳＤＸ２ＳＸ３ＹＬＤＸ４Ｘ５Ｘ６ＡＸ７ＤＦＶＱＬＸ８ＮＴＫＸ９Ｘ１０（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１０）
【００５０】
（式中、Ｘ１は、Ｄ−セリン，α−アミノイソ酪酸（ａｉｂ）、１−アミノ−１−シクロブタンカルボン酸（Ａｃｂ）残基、１−アミノ−１−シクロヘキサンカルボン酸（Ａｃｘ）；アルファ−アミノ酪酸（Ａｂｕ）；Ｄ−アルファ−アミノ酪酸（Ｄ−Ａｂｕ）；アミノ吉草酸（Ｎｖａ）；ベータ−シクロプロピル−アラニン（Ｃｐａ）；プロパルギルグリシン（Ｐｒｇ）；アリルグリシン（Ａｌｇ）；２−アミノ−２−シクロヘキシル−プロピオン酸（２−Ｃｈａ）；Ｄ−ｔｅｒｔブチルグリシン（Ｄ−ｔｂｇ）；ビニルグリシン（Ｖｇ）；１−アミノ−１−シクロプロパンカルボン酸（Ａｃｐ）；又は１−アミノ−１−シクロペンタンカルボン酸（Ａｃｐｅ）残基であり；Ｘ３は、チロシン（Ｙ）又はリシン（Ｋ）残基であり；Ｘ３は、セリン（Ｓ）又はリシン（Ｋ）残基であり；Ｘ４は、セリン（Ｓ）、α−アミノイソ酪酸（ａｉｂ）、又はグルタミン酸（Ｅ）残基であり；Ｘ５は、アルギニン（Ｒ）又はグルタミン酸（Ｅ）残基であり；Ｘ６は、アルギニン（Ｒ）又はアラニン（Ａ）残基であり；Ｘ７は、グルタミン（Ｑ）又はリシン（Ｋ）残基であり；Ｘ８は、メチオニン（Ｍ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、メチオニンスルホキシド（ｍ）、又はＯ−メチル−Ｌ−ホモセリン（ｏ）残基であり；Ｘ９は、ガンマ−グルタミン酸（γＧｌｕ）残基であり；Ｘ１０は、ガンマ−グルタミン酸（γＧｌｕ）残基又は不存在である。）を有するペプチドであり；Ｚ１は、もし存在する場合Ｎ−末端アミノ基に結合された、任意に存在する保護基であり、Ｍは、（ｉ）親水性リンカーによりコレステロール部位に共有結合的に連結されたシステイン残基、（ii）１以上のガンマグルタミン酸残基からなるスペーサーにより脂質部位に共有結合的に連結されたリシン残基、又は（iii）脂質部位であり、Ｍは、１以上のガンマグルタミン酸残基からなるスペーサーによりＰのＣ−末端又は内部アミノ酸に共有結合的に連結されており；またＺ２は、もし存在する場合Ｃ−末端カルボキシ基に連結された任意に存在する保護基である。〕特定の態様では、このペプチド類似体は、４〜６のｐＩ、又は約５．０、５．１、５．２、５．３、５，４、５．５、５．６、５．７、５．８又は５．９のｐＩ、又は約５．４〜５．５のｐＩを有する
【００５１】
このペプチド類似体のさらなる態様においては、Ｍは親水性リンカーでコレステロール部位に共有結合的に連結されたシステイン残基であり、該システイン残基は、ＰのＣ−末端に連結されている。さらなる実施態様においては、該親水性リンカーは、１〜２４のエトキシ単位を含み、特定の態様においては例えば4つのエトキシ単位を含むことができるエトキシポリマーである。
【００５２】
さらなる態様においては、Ｍは１以上のガンマ−グルタミン酸残基からなるペーサーにより脂質部位に共有結合的に連結されたリシン残基であり、また該リシン残基はＰのＣ−末端に連結されている、又はＭは、１以上のガンマ−グルタミン酸残基からなるペーサーにより脂質部位に共有結合的に連結されたリシン残基であり、該リシン残基はＰのＸ３又はＸ７位にある。特定の態様においては、該脂質部位は、パルミトイル、ミリストイル、又はステアロイル部位である。
【００５３】
特定の態様においては、このペプチド類似体は、ＯＸＭ３１７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０）；ＯＸＭ３１８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６１）；ＯＸＭ３１９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６２）；ＯＸＭ３２３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４）；ＯＸＭ３２７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６６）；又はＯＸＭ３２９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６７）である。更なる態様においては、このペプチド類似体は、ＯＸＭ３４５（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６９）；ＯＸＭ３５５（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７０）；ＯＸＭ３５７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７１）；ＯＸＭ３５９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２）；ＯＸＭ３６１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７３）；ＯＸＭ３７３（ＳＥＱ  ＩＤＮＯ：７４）；ＯＸＭ３７４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７５）；ＯＸＭ３８０（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６）；ＯＸＭ３８１（ＳＥＱ  ＩＤ  Ｎ０：７７）；ＯＸＭ３８３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８）；ＯＸＭ３８８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９）；ＯＸＭ３９２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０）；ＯＸＭ３９５（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１）；ＯＸＭ３９８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２）；ＯＸＭ３９９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３）；ＯＸＭ４００（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８４）；ＯＸＭ４０１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８５）；ＯＸＭ４０４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８６）；ＯＸＭ４０６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７）；ＯＸＭ４０７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８）；ＯＸＭ４０８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８９）；ＯＸＭ４１０（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９１）；ＯＸＭ４１１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９２）；ＯＸＭ４１２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９３）；ＯＸＭ４１４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９５）；ＯＸＭ４１５（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９６）；ＯＸＭ４１６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９７）；ＯＸＭ４１７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９８）；ＯＸＭ４１８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９９）；ＯＸＭ４１９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１００）；ＯＸＭ４２０（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０１）；又はＯＸＭ４２１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０２）である。
【００５４】
また、本発明は、代謝性疾患の治療のための医薬の製造の際における、上記ペプチド類及びそれらの医薬的に受容可能な塩のいずれか１つの使用を提供する。
【００５５】
定義
ＧＬＰ−１アゴニストは、ＧＬＰ−１受容体に結合する、ペプチド、小さな分子、または化学的化合物であり、ＧＬＰ−１が行うのと同じ生物学活性を誘発する。一実施態様において、ＧＬＰ−１受容体用のアゴニストは、天然のＧＰＬ−１と少なくとも１％の類似性を有する受容体に結合する。他の実施態様では、ＧＬＰ−１受容体用アゴニストは、天然のＧＰＬ−１と同じかそれより大きい類似性を有する受容体に結合する。
【００５６】
グルカゴンアゴニストは、グルカゴン受容体に結合する、ペプチド、小さな分子、または化学的化合物であり、グルカゴンが行うとのと同じ生物学活性を誘発する。一実施態様において、グルカゴン受容体用のアゴニストは、天然のグルカゴンと少なくとも１％の類似性を有する受容体に結合する。他の実施態様では、グルカゴン受容体用のアゴニストは、天然のグルカゴンと同じかそれより大きい類似性を有する受容体に結合する。
【００５７】
本明細書において用いられているように、「デュアルＧＬＰ１／グルカゴン受容体アゴニスト」は、グルカゴン受容体及びＧＬＰ１受容体の両者で活性を示す、「ＧＬＰ１受容体／グルカゴン共アゴニスト分子」である。一般的には、デュアルＧＬＰ１受容体アゴニスト及びグルカゴン受容体アゴニストは、天然のグルカゴンに対し少なくとも約１０％のグルカゴン受容体での活性を示し、また天然のＧＬＰ−１に対し少なくとも約１０％のＧＬＰ−１受容体での活性を示す。
【図面の簡単な説明】
【００５８】
図１は、天然のＯＸＭとＯＸＭ（Ｑ３Ｅ）のグリコーゲン分解を比べたエクスビボ（ｅｘ  ｖｉｖｏ）アッセイの結果を示す。図は、天然のＯＸＭは用量依存型でグリコーゲン分解を引き起こし、１．５ｎＭでフルのグリコーゲン分解を引き起こし、ほぼ０．５ｎＭのＥＣ５０を有するのに対し、ＯＸＭ−Ｑ３Ｅは、貧弱なＧＣＧＲアゴニスト能力のために、３００ｎＭで約５８％のみを引き起こしたにすぎないことを示している。
【００５９】
図２は、１．５ｍｐｋでのグルカゴン（ＧＣＧ）が８４％のＧＣＧＲ占有率（ｏｃｃｐａｎｃｙ）を与え、３ｍｐｋＯＸＭは３１％のＧＣＧＲ占有率を与えたが、ＯＸＭ−Ｑ３Ｅは０％のＧＣＧＲ占有率を与えたことを示す、インビボＧＣＲ受容体占有率試験の結果を示す。
【００６０】
図３Ａ及び３Ｂは、ＯＸＭ及びＯＸＭ−Ｑ３Ｅのそれぞれに対応しての血中グルコースレベルとグルコース注入速度（ｒａｔｅ）を示す。
【００６１】
図４は、ＯＸＭ及びＯＸＭ−Ｑ３Ｅの皮下（ｓ．ｃ．）投与に対する、痩せたマウスにおける腹腔内グルコース耐性試験（ＩＰＧＴＴ）の結果を示す。
【００６２】
図５Ａは、ＯＸＭ７０、ＯＸＭ１１０、ＯＸＭ１７７、ＯＸＭ１１５、及びＯＸＭ２１６の存在下での灌流肝臓中のグリコーゲン分解のエクスビボ測定を示す。
【００６３】
図５Ｂは、野性タイプマウスにおけるコンペティションアッセイでの、天然のＯＸＭに比較してのＯＸＭ７０、ＯＸＭ１１０、ＯＸＭ１７７、ＯＸＭ１１５、及びＯＸＭ２１６の皮下（ｓ．ｃ．）又は静脈内（ｉ．ｖ．）投与後のＧＧＣＲ占有率を示す。
【００６４】
図６は、確立されたＤＩＯマウスにおける、摂食及び体重低減に関するＯＸＭ７０の急性インビボ効力をまとめて示したものである。摂食は約２時間後及び１８時間後に測定された。また、１８時間（一晩）での体重変化は、＊Ｐ＜０．０５対ベヒクル、群当たりｎ＝５−６、で測定された。
【００６５】
図７は、確立されたＤＩＯマウスにおける、摂食及び体重低減に関するＯＸＭ１１０及びＯＸＭ１７７の急性インビボ効力をまとめて示したものである。摂食は約２時間後及び１８時間後に測定された。また、１８時間（一晩）での体重変化は、＊Ｐ＜０．０５対ベヒクル、群当たりｎ＝５−６、で測定された。
【００６６】
図８は、確立されたＤＩＯマウスにおける、摂食及び体重低減に関するＯＸＭ２１６、ＯＸＭ１１５、及びＯＸＭ１７７の急性インビボ効力をまとめて示したものである。摂食は約２時間後及び１８時間後に測定された。また、１８時間（一晩）での体重変化は、＊Ｐ＜０．０５対ベヒクル、群当たりｎ＝５−６、で測定された。
【００６７】
図９Ａ−Ｄは、ＯＸＭペプチド類似体ＯＸＭ１１０、ＯＸＭ１７７、及びＯＸＭ１１５に対するＤＩＯマウスにおける、長期の体重及び摂食研究の薬理学的終点を示す。図９Ａは、摂食における累積変化を示す。図９Ｂは、累積体重変化を示す。図９Ｃは、研究の数日間を通しての基礎的なグルコールレベルを示す。図９Ｄは、研究の１３日目におけるＩＰＧＴＴを示す。
【００６８】
図１０は、ＯＸＭ７０の皮下投与に対する痩せたマウスにおける腹腔内グルコース耐性試験（ＩＰＧＴＴ）の結果を示す。
【００６９】
図１１は、ＯＸＭ１１０の皮下投与に対する痩せたマウスにおける腹腔内グルコース耐性試験（ＩＰＧＴＴ）の結果を示す。
【００７０】
図１２は、ＯＸＭ１７７の皮下投与に対する痩せたマウスにおける腹腔内グルコース耐性試験（ＩＰＧＴＴ）の結果を示す。
【００７１】
図１３は、ＯＸＭ１１５の皮下投与に対する痩せたマウスにおける腹腔内グルコース耐性試験（ＩＰＧＴＴ）の結果を示す。
【００７２】
図１４Ａは、時間を追ってのＤＩＯマウスにおけるＯＸＭ１１５の代謝率効果を示す。
図１４Ｂは、ＤＩＯマウスにおけるＯＸＭ１１５によって引き起こされる代謝率のパーセント変化を示す。
【００７３】
図１５は、確立されたＤＩＯマウスにおける摂食及び体重減少における数種の＋／＋ペプチドの急性インビボ効力をまとめて示したものである。
【００７４】
図１６は、確立されたＤＩＯマウスにおける摂食及び体重減少に関しての、摂食における数種の＋／＋ペプチドの単回投与量を示す。
【発明の詳細な説明】
【００７５】
ＯＸＭによる治療は、肥満症及び、これについてはまだ注意深く検証されるべきであるが、糖尿病を改善する際に付随する効果の両方に好ましいインパクトを与える可能性を持っている。ＯＸＭの末梢性投与の際の体重低減効力及び摂食の低減は、ヒトにおいて十分に検証されている（ワイン（Ｗｙｎｎｅ）他、ダイアビーティーズ（Ｄｉａｂｅｔｅｓ）、２００５年、第５４巻、２３９０−２３９５頁）。最近では、ＯＸＭは、肥満の被験者において、代謝率並びに具体的な活動関連エネルギー消費を増大することが示されている（ワイン（Ｗｙｎｎｅ）他、インターナテョナル  ジャーナル  オブ  オベシティ（Ｉｎｔ．Ｊ．Ｏｂｅｓ．）、２００６年、第３０巻、１７２９−１７３６頁、アドバンス  オンライン  パブリケイション、２００６年４月１８日；ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓｊ−ｉｊｏ．０８０３３４４）。また、ＯＸＭは、ヒトにおいて体重を低減することも、すでに示されている（例えば、国際公開公報ＷＯ０３／０２２３０４、ＷＯ２００４／０６２６８５、及びＷＯ２００６／１３４３４０参照）；しかし、体重低減と独立する血糖管理における、ＯＸＭペプチド及びこの類似物におけるデュアルＧＬＰ−１受容体／グルカゴン受容体（ＧＬＰ−１Ｒ／ＧＣＧＲ）アゴニストの効力については、未だ系統的な研究はなされていない。ＯＸＭがグルカゴン受容体及びＧＬＰ−１受容体の両方でアゴニスト活性を有する可能性は、ＯＸＭを、代謝疾患を治療するための、該治療はグルカゴン受容体及びＧＬＰ−１受容体と肯定的に相互作用することが好ましいが、魅力的な候補にしている。
【００７６】
ＯＸＭ（及びＧＬＰ−１）は、非常に短い半減期をもち、細胞表面ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ−ＩＶ）により迅速に不活性化される。ペプチドをＤＰＰ−ＩＶ切断に対し抵抗性にするため、ＯＸＭペプチドに変異を組み込むことができる；しかし、これら変異の多くは、天然のペプチドを不活性化するか或いはグルカゴン受容体（ＧＣＧＲ）又はＧＬＰ−１受容体（ＧＬＰ−１Ｒ）と相互作用するペプチドの可能性に負の影響を与えることも分かっている（国際公開公報ＷＯ２００７／１００５３５参照、これは、本明細書にそのまま組み入れられる。）。ＯＸＭ（及びＧＬＯ−１）は、また、腎臓により迅速に排出される。ポリエチレングリコールのようなバルキーな置換基とペプチドを結合することにより、ペプチドの腎臓排出を減少させることができる；しかし、これらバルキーな置換基がＯＸＭペプチドに結合された場合、得られたＯＸＭペプチド類似体の多くは、グルカゴン受容体との効果的な相互作用を行う効果が少なくなるか全くなくなることが分かっている。ＯＸＭペプチドを投与することに基づく代謝性疾患の効果的な治療が進められる前に、安定性並びに薬物動態学と結び付けられる問題が解決されることが必要である。
【００７７】
本明細書に記載されたＯＸＭペプチド類似体は、これらの問題を解決する。
第一に、ＤＰＰ−ＩＶによる切断による天然のＯＸＭ及びＧＬＰ−１の限定されたインビボでの安定性及び迅速な腎臓排出（これは、ヒトにおける高投与量での、頻繁な投与（ＯＸＭのｔ．ｉ．ｄ．ｓ．ｃ．注入、連続的な点滴）を必要とする）は、ＤＰＰ−ＩＶ切断サイト（Ｎ−末端のペナルチメート（最後から２番目の）残基）を変異させ、またインビボでの半減期（ｔ１／２）を増大するべくＯＸＭペプチドを脂質化することにより解決することができる。ヒトにおける（アシル化或いはコレステロール部位と結合されるような）脂質化されたＯＸＭペプチド類似体のｔ１／２は、少なくとも一回の日々の投与に適しているであろうことが予想される。本明細書に記載されたＯＸＭペプチド類似体は、ｔ．ｉ．ｄ．投与を必要とする天然のＯＸＭに比べ、治療目的により便利である。
第二に、本発明のポリペプチドの許容的な面は、エクセナチド及びリナグルチドのような従来のＧＬＰ−１類似品のものより優れているヒト天然ＯＸＭのそれと同様であることが期待される。それ故、本明細書に記載されたＯＸＭ類似体を使い続ける際の効能は、吐き気及び嘔吐が最小限となるよう投与量が制限されていた、バイエッツ（Ｂｙｅｔｔｓ）ＴＭ（アミィン  ファーマソイティカルズ）のような従来のＧＬＰ−１模倣品に比べ優れている。後者のものと異なり、吐き気を和らげるための薬剤投与は本発明のポリペプチドには要求されない。
【００７８】
第三に、グルコースコントロールを改善するための可能性を評価するための系統的な研究はなされてこなかった。ＯＸＭは、グリコーゲン受容体の有力なアゴニストであるので、長期投与はグルコースコントロールを損なうこと（高血糖症）になることが予想されていた。しかし、予想に反して、本明細書に記載されたＯＸＭ類似体は、バランスのとれたＧＬＰ−１受容体及びＧＣＧＲの共アゴニストであることから、長期投与で摂食と体重につて大幅な低減が図れ、改善されたグルコース耐性が得られる。デュアルＧＬＰ−１受容体（ＧＬＰ−１Ｒ）及びグルカゴン受容体（ＧＣＧＲ）アゴニスト活性を有するＯＸＭペプチド類似体は、本明細書では、（＋／＋）と表示される。また、ＧＬＰ−１アゴニストのみであるＯＸＭペプチド類似体は、本明細書では、（＋／０）と表示される。
【００７９】
長期にわたり作用するＯＸＭペプチド類似体を製造することは、ストレートに進められてきたわけではなかった。我々の初期の研究では、ペプチド全体に亘っての有望な位置において、バルキーなポリエチレングリコール（ＰＥＧ）置換基を部位特異的に結合することが行われた。驚くべきことに、試験が行われた全ての位置でのＰＥＧ付加では、ＧＣＧＲ及び／又はＧＬＰ−１Ｒ有効性が著しく低下する結果となった。それ故、我々は、ＧＣＧＲ活性を保持しながら薬物動態特性を改善するための他の方法を探査した。ペプチドの種々の位置に結合されたコレステロール付加においては、Ｃ−末端結合が最も有用な方法であることが示された。しかし、インビボ或いはインビトロでの研究では、コレステロール化によって効力が著しく血清シフトとなり、インビトロでの効果が減少するという結果となった。このため、さらなる探査においては、ペプチドとコレステロール基の間に非自明の親水性リンカーを包含させること又はアシル鎖をＣ−末端残基に直接付加させることとなった。
【００８０】
本明細書に記載されたＯＸＭ類似体を用いることのできる第一の適応症は、肥満症及び／又は糖尿病の治療である。第二の適応症は、メタボリックシンドローム、高血糖症、空腹時高血糖、及びその他の前糖尿病状態である。更なる適応症は、過敏性腸症候群、腸の他の吸収性疾患、虚血症、卒中、及び不安症、意識障害、及びアルツハイマー症などの神経疾患のようなＧＬＰ−１に対するすべての適応症を包含する。
【００８１】
既に発表されたＯＸＭを用いてのヒトに関する研究に基づけば、本明細書に記載されるＯＸＭ類似体は、オルリスタット（キセニカルＴＭ（ロッシュ）、リパーゼ抑制剤）やシブトラミン（メリディアＴＭ（アボット  ラボラトリーズ）、セラトニン／ノレピネフェリン再取り込み抑制剤）のような、現在用いられている抗肥満薬、これらにはＧＩ非耐性（下痢、鼓腸）や高血圧が一般的な副作用として存在する、に比べ、もし優れた効果が無いとしても、少なくとも同等であり、安全面では優れている。
【００８２】
特定の態様においては、このＯＸＭペプチド類似体は、Ｎ−末端アミノ基に共有結合的に連結された保護基を任意に包含する。該ペプチドのＮ−末端アミノ基に共有結合的に連結された保護基は、インビボ状態下においてアミノ末端の反応性を低減させる。アミノ保護基は、−Ｃ１−１０アルキル、−Ｃ１−１０置換アルキル、−Ｃ２−１０アルケニル、−Ｃ２−１０置換アルケニル、アリール、−Ｃ１−６アルキルアリール、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１−６−ＣＯＯＨ、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキル、−Ｃ（Ｏ）−アリール、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ１−６アルキル、又は−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−アリールを包含する。特定の実施態様においては、該アミノ末端保護基は、アセチル、プロピル、サクシニル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル、及びｔ−ブチルオキシカルボニルからなる群から選ばれる。Ｎ−末端アミノ酸の脱アミノ化は、インビボ状態下でのアミノ末端の反応性を低減させることを意図する他の変法である。
【００８３】
ＯＸＭペプチド類似体は、インビボ状態下でカルボキシ末端の反応性を低減させる、Ｃ−末端カルボキシル基に共有結合的に連結された保護基を有するように変えられてもよい。例えば、カルボキシ末端又は側鎖にあるペプチドのカルボン酸基は、薬理学的に受容可能なカチオンの塩の形態とされてもよいし、Ｃ１−６エステルを形成するようエステル化されてもよいし、式ＮＲＲ２（式中、ＲおよびＲ２は、各々独立にＨ又はＣ１−６のアルキルである。）のアミドに変換されてもよいし、５−又は６−員環のような複素環式環を形成するよう結合されてもよい。カルボキシ末端保護基は、好ましくは、最終アミノ酸のα−カルボニル基に結合される。カルボキシ末端保護基の例としては、アミド、メチルアミド、及びエチルアミドが挙げられるが、これに限定されるものではない。Ｎ−末端又は側鎖にあるペプチドのアミノ基は、例えばＨＣｌ、ＨＢｒ、酢酸、安息香酸、トルエンスルホン酸、マレイン酸、酒石酸、及び他の有機酸の塩のような、薬理学的に受容可能な酸付加塩の形態であってもよいし、Ｃ１−６アルキル又はジアルキルアミノに変性されてもよいし、さらにアミドに転換されてもよい。
【００８４】
デュアルＧＬＰ−１及びグルカゴンアゴニストとして働くことのできるＯＸＭペプチド類似体は、そのＮ−末端からの第二アミノ酸が、ペプチドをジペプチジルペプチダーゼＩＶによる切断及び不活性化に対する抵抗性を与えるアミノ酸で置換されているか；脂質又はコレステロール部位が、ＯＸＭペプチド類似体に共有結合的に連結されているか；２位での置換に加え、必要に応じて、１〜３のアミノ酸が置換されているか；及びもし存在する場合ペプチドのＣ−末端カルボキシ基に結合された保護基を任意に有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１で示されるヒトオキシントモジュリン（ＯＸＭ）のアミノ酸シーケンスからなる。更なる実施態様においては、ペプチド類似体はまた、アミノ酸シーケンスＲＮＲＮＮＩＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０４）を欠いている。一般的に、上記構造を有するＯＸＭペプチド類似体は、デュアルＧＬＰ−１及びグルカゴンアゴニストとして働き、また天然のヒトＯＸＭの漿液半減期より大きい血清半減期を有する。
【００８５】
さらに具体的な実施態様においては、ＯＸＭペプチド類似体は、構造
Ｚ１−Ｐ−Ｌ１−Ｚ２
〔式中、Ｐは、アミノ酸シーケンス
ＨＸ１ＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＸ２Ｘ３ＡＱＤＦＶＱＷＬＸ４ＮＴＫ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０３）
【００８６】
（式中、Ｘ１は、Ｄ−セリン又はα−アミノイソ酪酸（ａｉｂ）残基であり；Ｘ２は、アルギニン（Ｒ）又はグルタミン酸（Ｅ）残基であり；Ｘ３は、アルギニン（Ｒ）又はアラニン（Ａ）残基であり；Ｘ４は、メチオニン（Ｍ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、又はＯ−メチル−Ｌ−ホモセリン（ｏ）残基である。）
を有するペプチドであり；
【００８７】
Ｚ１は、もし存在する場合Ｎ−末端アミノ基に結合されている、任意に存在する保護基であり、Ｌ１は任意であるが、存在する場合、アミノ酸シーケンスＲＮＲＮＮＩＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０４）又はリンカー部位であり；Ｚ２は、任意で、もし存在する場合、リシン（Ｋ）残基、脂質部位に共有結合的に連結されたリシン残基、コレステロール部位に共有結合的に連結されたリシン残基、システイン（Ｃ）残基、脂質部位に共有結合的に連結されたシステイン残基；コレステロール部位に共有結合的に連結されたシステイン残基であり；またＰ又はＺ２は、もし存在する場合Ｃ−末端カルボキシ基に連結された保護基を任意に包含する。〕により示されもの；及び医薬的に受容可能なそれらの塩を示す。Ｌ１−Ｚ２は、ＰのＣ−末端アミノ酸又はＰの内部アミノ酸に連結されることができる。
【００８８】
更なる実施態様においては、ＯＸＭペプチド類似体は、構造
Ｚ１−Ｐ−Ｌ１−Ｚ２
〔式中、Ｐは、アミノ酸シーケンス
ＨＸ１ＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＸ２Ｘ３ＡＱＤＦＶＱＷＬＸ４ＮＴＫ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０３）
（式中、Ｘ１は、Ｄ−セリン、又はα−アミノイソ酪酸（ａｉｂ）残基であり；Ｘ２は、アルギニン（Ｒ）又はグルタミン酸（Ｅ）残基であり；Ｘ３は、アルギニン（Ｒ）又はアラニン（Ａ）残基であり；Ｘ４は、メチオニン（Ｍ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、又はＯ−メチル−Ｌ−ホモセリン（ｏ）残基である。）
を有するペプチドであり；
【００８９】
Ｚ１は、もし存在する場合Ｎ−末端アミノ基に結合されている、任意に存在する保護基であり、Ｌ１は任意であるが、存在する場合、リンカー部位であり；Ｚ２は、任意であるが、もし存在する場合、リシン（Ｋ）残基、脂質部位に共有結合的に連結されたリシン残基、コレステロール部位に共有結合的に連結されたリシン残基、システイン（Ｃ）残基、脂質部位に共有結合的に連結されたシステイン残基；コレステロール部位に共有結合的に連結されたシステイン残基であり；またＰ又はＺ２は、もし存在する場合、Ｃ−末端カルボキシ基に連結された保護基を任意に包含する。〕により示されるもの；及び医薬的に受容可能なそれらの塩である。Ｌ１−Ｚ２は、ＰのＣ−末端アミノ酸又はＰの内部アミノ酸に連結されることができる。
【００９０】
さらなる実施態様においては、ＯＸＭペプチド類似体は、構造
Ｚ１−Ｐ−Ｌ１−Ｚ２
〔式中、Ｐは、アミノ酸シーケンス
ＨＸ１ＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＸ２Ｘ３ＡＱＤＦＶＱＷＬＸ４ＮＴＫＲＮＲＮＮＩＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０５）
【００９１】
（式中、Ｘ１は、Ｄ−セリン，α−アミノイソ酪酸（ａｉｂ）、１−アミノ−１−シクロブタンカルボン酸（Ａｃｂ）残基、１−アミノ−１−シクロヘキサンカルボン酸（Ａｃｘ）；アルファ−アミノ酪酸（Ａｂｕ）；Ｄ−アルファ−アミノ酪酸（Ｄ−Ａｂｕ）；アミノ吉草酸（Ｎｖａ）；ベータ−シクロプロピル−アラニン（Ｃｐａ）；プロパルギルグリシン（Ｐｒｇ）；アリルグリシン（Ａｌｇ）；２−アミノ−２−シクロヘキシル−プロピオン酸（２−Ｃｈａ）；Ｄ−ｔｅｒｔブチルグリシン（Ｄ−ｔｂｇ）；ビニルグリシン（Ｖｇ）；１−アミノ−１−シクロプロパンカルボン酸（Ａｃｐ）；又は１−アミノ−１−シクロペンタンカルボン酸（Ａｃｐｅ）であり；Ｘ２は、アルギニン（Ｒ）又はグルタミン酸（Ｅ）残基であり；Ｘ３は、アルギニン（Ｒ）又はアラニン（Ａ）残基であり；Ｘ４は、メチオニン（Ｍ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、又はＯ−メチル−Ｌ−ホモセリン（ｏ）残基である。）
を有するペプチドであり；
【００９２】
Ｚ１は、もし存在する場合Ｎ−末端アミノ基に結合された、任意に存在する保護基であり、Ｌ１は任意であるが、もし存在する場合、アミノ酸シーケンスＲＮＲＮＮＩＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０４）又はリンカー部位であり；Ｚ２は、任意であるが、もし存在する場合、リシン（Ｋ）残基、脂質部位に共有結合的に連結されたリシン残基、コレステロール部位に共有結合的に連結されたリシン残基、システイン（Ｃ）残基、脂質部位に共有結合的に連結されたシステイン残基；コレステロール部位に共有結合的に連結されたシステイン残基であり；またＰ又はＺ２は、もし存在する場合Ｃ−末端カルボキシ基に連結された保護基を任意に包含する。〕により示されるもの；及び医薬的に受容可能なそれらの塩である。Ｌ１−Ｚ２は、ＰのＣ−末端アミノ酸又はＰの内部アミノ酸に連結されることができる。
【００９３】
更なる具体的実施態様においては、ＯＸＭペプチド類似体は、構造
Ｚ１−Ｐ−Ｌ１−Ｚ２
〔式中、Ｐは、アミノ酸シーケンス
ＨＸ１ＱＧＴＦＴＳＤＹＳＸ２ＹＬＤＸ３Ｘ４Ｘ５ＡＸ６ＤＦＶＱＷＬＸ７ＮＴＫ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０６）
【００９４】
（式中、Ｘ１は、Ｄ−セリン，α−アミノイソ酪酸（ａｉｂ）、１−アミノ−１−シクロブタンカルボン酸（Ａｃｂ）残基、１−アミノ−１−シクロヘキサンカルボン酸（Ａｃｘ）；アルファ−アミノ酪酸（Ａｂｕ）；Ｄ−アルファ−アミノ酪酸（Ｄ−Ａｂｕ）；アミノ吉草酸（Ｎｖａ）；ベータ−シクロプロピル−アラニン（Ｃｐａ）；プロパルギルグリシン（Ｐｒｇ）；アリルグリシン（Ａｌｇ）；２−アミノ−２−シクロヘキシル−プロピオン酸（２−Ｃｈａ）；Ｄ−ｔｅｒｔブチルグリシン（Ｄ−ｔｂｇ）；ビニルグリシン（Ｖｇ）；１−アミノ−１−シクロプロパンカルボン酸（Ａｃｐ）；又は１−アミノ−１−シクロペンタンカルボン酸（Ａｃｐｅ）であり；Ｘ２は、Ｓｅｒ（Ｓ）又はｌｙｓ（Ｋ）であり；Ｘ３は、Ｓｅｒ（Ｒ）又はＧｌｕ（Ｅ）であり；Ｘ４は、アルギニン（Ｒ）又はグルタミン酸（Ｅ）残基であり；Ｘ５は、アルギニン（Ｒ）又はアラニン（Ａ）残基であり；Ｘ６は、Ｇｌｎ（Ｑ）又はＬｙｓ（Ｋ）であり；Ｘ７は、メチオニン（Ｍ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、メチオニンスルホキシド、又はＯ−メチル−Ｌ−ホモセリン（ｏ）残基である。）
を有するペプチドであり；
【００９５】
Ｚ１は、もし存在する場合Ｎ−末端アミノ基に結合された、任意に存在する保護基であり、Ｌ１は任意であるが、もし存在する場合、アミノ酸シーケンスＲＮＲＮＮＩＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０４）又はリンカー部位であり；Ｚ２は、任意であるが、もし存在する場合、リシン（Ｋ）残基、脂質部位に共有結合的に連結されたリシン残基、コレステロール部位に共有結合的に連結されたリシン残基、システイン（Ｃ）残基、脂質部位に共有結合的に連結されたシステイン残基；コレステロール部位に共有結合的に連結されたシステイン残基であり；またＰ又はＺ２は、もし存在する場合Ｃ−末端カルボキシ基に連結された保護基を任意に包含する。〕により示されるもの；及び医薬的に受容可能なそれらの塩である。Ｌ１−Ｚ２は、ＰのＣ−末端アミノ酸、又はＰの内部アミノ酸に連結されることができる。
【００９６】
更なる実施態様においては、ＯＸＭペプチド類似体は、構造
Ｚ１−Ｐ−Ｌ１−Ｚ２
〔式中、Ｐは、アミノ酸シーケンス
ＨＸ１ＱＧＴＦＴＳＤＹＳＸ２ＹＬＤＸ３Ｘ４Ｘ５ＡＸ６ＤＦＶＱＷＬＸ７ＮＴＫ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０６）
【００９７】
（式中、Ｘ１は、Ｄ−セリン，α−アミノイソ酪酸（ａｉｂ）、１−アミノ−１−シクロブタンカルボン酸（Ａｃｂ）残基、１−アミノ−１−シクロヘキサンカルボン酸（Ａｃｘ）；アルファ−アミノ酪酸（Ａｂｕ）；Ｄ−アルファ−アミノ酪酸（Ｄ−Ａｂｕ）；アミノ吉草酸（Ｎｖａ）；ベータ−シクロプロピル−アラニン（Ｃｐａ）；プロパルギルグリシン（Ｐｒｇ）；アリルグリシン（Ａｌｇ）；２−アミノ−２−シクロヘキシル−プロピオン酸（２−Ｃｈａ）；Ｄ−ｔｅｒｔブチルグリシン（Ｄ−ｔｂｇ）；ビニルグリシン（Ｖｇ）；１−アミノ−１−シクロプロパンカルボン酸（Ａｃｐ）；又は１−アミノ−１−シクロペンタンカルボン酸（Ａｃｐｅ）であり；Ｘ２は、Ｓｅｒ（Ｓ）又はｌｙｓ（Ｋ）であり；Ｘ３は、Ｓｅｒ（Ｒ）又はＧｌｕ（Ｅ）であり；Ｘ４は、アルギニン（Ｒ）又はグルタミン酸（Ｅ）残基であり；Ｘ５は、アルギニン（Ｒ）又はアラニン（Ａ）残基であり；Ｘ６は、Ｇｌｎ（Ｑ）又はＬｙｓ（Ｋ）であり；Ｘ７は、メチオニン（Ｍ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、メチオニンスルホキシド（ｍ）、又はＯ−メチル−Ｌ−ホモセリン（ｏ）残基である。）
を有するペプチドであり；
【００９８】
Ｚ１は、もし存在する場合Ｎ−末端アミノ基に結合された、任意に存在する保護基であり、Ｌ１は任意であるが、もし存在する場合、リンカー部位であり；Ｚ２は、任意であるが、もし存在する場合、リシン（Ｋ）残基、脂質部位に共有結合的に連結されたリシン残基、コレステロール部位に共有結合的に連結されたリシン残基、システイン（Ｃ）残基、脂質部位に共有結合的に連結されたシステイン残基；コレステロール部位に共有結合的に連結されたシステイン残基であり；またＰ又はＺ２は、もし存在する場合Ｃ−末端カルボキシ基に連結された保護基を任意に包含する。〕で示されるもの；及び医薬的に受容可能なそれらの塩である。Ｌ１−Ｚ２は、ＰのＣ−末端アミノ酸又はＰの内部アミノ酸に連結されることができる。
【００９９】
更なる実施態様において、ＯＸＭペプチド類似体は、構造
Ｚ１−Ｐ−Ｌ１−Ｚ２
〔式中Ｐは、アミノ酸シーケンス
ＨＸ１ＱＧＴＦＴＳＤＹＳＸ２ＹＬＤＸ３Ｘ４Ｘ５ＡＸ６ＤＦＶＱＷＬＸ７ＮＴＫＲＮＲＮＮＩＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０７）
【０１００】
（式中、Ｘ１は、Ｄ−セリン，α−アミノイソ酪酸（ａｉｂ）、１−アミノ−１−シクロブタンカルボン酸（Ａｃｂ）残基、１−アミノ−１−シクロヘキサンカルボン酸（Ａｃｘ）；アルファ−アミノ酪酸（Ａｂｕ）；Ｄ−アルファ−アミノ酪酸（Ｄ−Ａｂｕ）；アミノ吉草酸（Ｎｖａ）；ベータ−シクロプロピル−アラニン（Ｃｐａ）；プロパルギルグリシン（Ｐｒｇ）；アリルグリシン（Ａｌｇ）；２−アミノ−２−シクロヘキシル−プロピオン酸（２−Ｃｈａ）；Ｄ−ｔｅｒｔブチルグリシン（Ｄ−ｔｂｇ）；ビニルグリシン（Ｖｇ）；１−アミノ−１−シクロプロパンカルボン酸（Ａｃｐ）；又は１−アミノ−１−シクロペンタンカルボン酸（Ａｃｐｅ）であり；Ｘ２は、Ｓｅｒ（Ｓ）又はｌｙｓ（Ｋ）であり；Ｘ３は、Ｓｅｒ（Ｒ）又はＧｌｕ（Ｅ）であり；Ｘ４は、アルギニン（Ｒ）又はグルタミン酸（Ｅ）残基であり；Ｘ５は、アルギニン（Ｒ）又はアラニン（Ａ）残基であり；Ｘ６は、Ｇｌｎ（Ｑ）又はＬｙｓ（Ｋ）であり；Ｘ７は、メチオニン（Ｍ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、メチオニンスルホキシド（ｍ）、又はＯ−メチル−Ｌ−ホモセリン（ｏ）残基である。）
を有するペプチドであり；
【０１０１】
Ｚ１は、もし存在する場合Ｎ−末端アミノ基に結合された、任意に存在する保護基であり、Ｌ１は任意であるが、もし存在する場合、リンカー部位であり；Ｚ２は、任意であるが、もし存在する場合、リシン（Ｋ）残基、脂質部位に共有結合的に連結されたリシン残基、コレステロール部位に共有結合的に連結されたリシン残基、システイン（Ｃ）残基、脂質部位に共有結合的に連結されたシステイン残基；コレステロール部位に共有結合的に連結されたシステイン残基であり；またＰ又はＺ２は、もし存在する場合Ｃ−末端カルボキシ基に連結された保護基を任意に包含する。〕により示されるもの；及び医薬的に受容可能なそれらの塩である。Ｌ１−Ｚ２は、ＰのＣ−末端アミノ酸又はＰの内部アミノ酸に連結されることができる。
【０１０２】
さらに他の具体的実施態様においては、ＯＸＭペプチド類似体は、構造
Ｚ１−Ｐ−Ｌ１−Ｚ２
〔式中Ｐは、アミノ酸シーケンス
ＨＸ１ＱＧＴＦＴＳＤＸ２ＳＸ３ＹＬＤＸ４Ｘ５Ｘ６ＡＸ７ＤＦＶＱＷＬＸ８ＮＴＫＸ９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０８）
【０１０３】
（式中、Ｘ１は、Ｄ−セリン，α−アミノイソ酪酸（ａｉｂ）、１−アミノ−１−シクロブタンカルボン酸（Ａｃｂ）残基、１−アミノ−１−シクロヘキサンカルボン酸（Ａｃｘ）；アルファ−アミノ酪酸（Ａｂｕ）；Ｄ−アルファ−アミノ酪酸（Ｄ−Ａｂｕ）；アミノ吉草酸（Ｎｖａ）；ベータ−シクロプロピル−アラニン（Ｃｐａ）；プロパルギルグリシン（Ｐｒｇ）；アリルグリシン（Ａｌｇ）；２−アミノ−２−シクロヘキシル−プロピオン酸（２−Ｃｈａ）；Ｄ−ｔｅｒｔブチルグリシン（Ｄ−ｔｂｇ）；ビニルグリシン（Ｖｇ）；１−アミノ−１−シクロプロパンカルボン酸（Ａｃｐ）；又は１−アミノ−１−シクロペンタンカルボン酸（Ａｃｐｅ）であり；Ｘ２は、Ｔｙｒ又はＬｙｓであり；Ｘ３は、Ｓｅｒ（Ｓ）又はｌｙｓ（Ｋ）であり；Ｘ４は、Ｓｅｒ（Ｒ）又はＧｌｕ（Ｅ）であり；Ｘ５は、アルギニン（Ｒ）又はグルタミン酸（Ｅ）残基であり；Ｘ６は、アルギニン（Ｒ）又はアラニン（Ａ）残基であり；Ｘ７は、Ｇｌｎ（Ｑ）又はＬｙｓ（Ｋ）であり；Ｘ８は、メチオニン（Ｍ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、メチオニンスルホキシド、又はＯ−メチル−Ｌ−ホモセリン（ｏ）残基であり、Ｘ９は、任意であるが、存在する場合、１以上のガンマグルタミン酸残基である。）
を有するペプチドであり；
【０１０４】
Ｚ１は、もし存在する場合Ｎ−末端アミノ基に結合された、任意に存在する保護基であり、Ｌ１は任意であるが、存在する場合、アミノ酸シーケンスＲＮＲＮＮＩＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０４）又はリンカー部位であり；Ｚ２は、任意であるが、もし存在する場合、リシン（Ｋ）残基、脂質部位に共有結合的に連結されたリシン残基、コレステロール部位に共有結合的に連結されたリシン残基、システイン（Ｃ）残基、脂質部位に共有結合的に連結されたシステイン残基；コレステロール部位に共有結合的に連結されたシステイン残基であり；またＰ又はＺ２は、もし存在する場合Ｃ−末端カルボキシ基に連結された保護基を任意に包含する。〕により示されるもの；及び医薬的に受容可能なそれらの塩である。Ｌ１−Ｚ２は、ＰのＣ−末端アミノ酸又はＰの内部アミノ酸に連結されることができる。
【０１０５】
上記実施態様のそれぞれにおいて、脂質又はコレステロール部位は、直接又は間接的にアミノ酸の側鎖に連結されることができる。脂質又はコレステロール部位が間接的にアミノ酸側鎖に連結される場合、脂質又はコレステロール部位は、リンカー部位によりアミノ酸側鎖に連結される。特定の態様では、脂質又はコレステロールは、アミノ酸の側鎖に直接連結され、次いでアミノ酸はリンカー部位（Ｌ１）によりＯＸＭペプチド類似体に結合される。
【０１０６】
本明細書に記載されたＯＸＭペプチド類似体の具体的実施態様では、残基１６及び２０がそれぞれＧｌｕ及びＬｙｓである場合、該残基の側鎖は前記ＧｌｕとＬｙｓ残基間のラクタムブリッジに関与することができる。
【０１０７】
多くの実施態様においては、リンカー部位は親水性リンカーである。リンカー部位の化学構造は、それが主にスペーサーとして働く限り、どのようなものであってもよい。しかし、ある実施態様においては、リンカー部位は、それ自身がＯＸＭペプチド類似体に対し改善された特性を与えてもよい。リンカー部位の例としては、アミノ酸及びペプチド；−ＮＨ−（ＣＨ２）ｓ−Ｃ（Ｏ）−（式中、ｓ＝２−２０）のようなアルキルリンカーで、これらアルキルリンカーは、さらに低級アルキル（例えば、Ｃ１−６）、低級アシル、ハロゲン（例えば、Ｃｌ、Ｂｒ）、ＣＮ、ＮＨ２、フェニルなどのような任意の非立体障害性基により置換されていてもよい；１〜１２のエトキシ単位を包含するエトキシポリマー；Ｔｔｄｓ（１−アミノ−４，７，１０−トリオキサ−１３−トリデカンアミン−コハク酸；及び１、２、３あるいは４以上のガンマグルタミン酸残基が挙げられるが、これに限定されるものではない。
【０１０８】
一般的には、リンカー部位はペプチド（Ｐ）のＣ−末端アミノ酸に共有結合的に連結され、Ｚ２はリンカー部位に共有結合的に連結される。特定の態様においては、リンカー部位はＰの内部アミノ酸に共有結合的に連結され、Ｚ２はリンカー部位に共有結合的に連結される。更なる態様においては、Ｌ１−Ｚ２は、Ｐの内部アミノ酸に共有結合的に連結される場合、Ｘ９は１以上のガンマグルタミン酸残基を包含することができる。
【０１０９】
ＯＸＭペプチド類似体は、ジアステレオマー並びにそのラセミ体及びエナンチオメトリーに分割された純粋形体を包含する。一般的には、アミノ酸はＬ−体であるが、特定のアミノ酸はＤ−体である。当業界で知られているように、個々のアミノ酸は、以下のように示すことができる。Ａ＝Ａｌａ＝アラニン；Ｃ＝Ｃｙｓ＝システイン；Ｄ＝Ａｓｐ＝アスパラギン酸；Ｅ＝Ｇｌｕ＝グルタミン酸；Ｆ＝Ｐｈｅ＝フェニルアラニン；Ｇ＝Ｇｌｙ＝グリシン；Ｈ＝Ｈｉｓ＝ヒスチジン；Ｉ＝Ｉｌｅ＝イソロイシン；Ｋ＝Ｌｙｓ＝リシン；Ｌ＝Ｌｅｕ＝ロイシン；Ｍ＝Ｍｅｔ＝メチオニン；Ｎ＝Ａｓｎ＝アスパラギン：Ｐ＝Ｐｒｏ＝プロリン；Ｑ＝Ｇｌｎ＝グルタミン；Ｒ＝Ａｒｇ＝アルギニン；Ｓ＝Ｓｅｒ＝セリン；Ｔ＝Ｔｈｒ＝スレオニン；Ｖ＝Ｖａｌ＝バリン；Ｗ＝Ｔｒｐ＝トリプトファン；及びＹ＝Ｔｒｙ＝チロシン。
【０１１０】
表１は、グルカゴン受容体及びＧＬＰ−１受容体の両方に活性を有する（＋／＋）、全長ＯＸＭ分子に基づくＯＸＭペプチド類似体の表示ナンバーに対応する構造を示す。ＯＸＭペプチド類似体ＯＸＭ２９、２０８、２０９及び２２９は、ブロモ−コレステロールとの共役反応に用いられるペプチド類似体プレカーサー（チオール化ペプチド）である。
【０１１１】
【表１】
0005756961.tif 000002
【０１１２】
0005756961.tif 000003
【０１１３】
0005756961.tif 000004
【０１１４】
ＯＸＭペプチド類似体ＯＸＭ３６及びＯＸＭ１１５は、天然のヒトＯＸＭペプチドを含むが、アミノ酸位２にＤ−セリン及びＣ−末端でのペプチド結合中にシステイン残基を有し、且つＣ−末端カルボキシ基はアミド化されているＯＸＭ２２９から製造された。ＯＸＭ３６は、下記構造を有する。
ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫＲＮＲＮＮＩＡＣ４−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８）
【０１１５】
式中、Ｃ４は、以下に示されるように、コレスト−５−エン−３−イル｛［（２Ｒ）−３−アミノ−２−（アミノ）−３−オキソプロピル］チオ｝アセテートが共有結合的に連結された、システイン残基である。
【０１１６】
【化１】
0005756961.tif 000005
【０１１７】
ＯＸＭ１１５は、構造
ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫＲＮＲＮＮＩＡＣ７−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１）
を有する。式中、Ｃ７は、下記に示されるように、コレスト−５−エン−３−イル  １−｛［（２Ｒ）−３−アミノ−２−（アミノ）−３−オキソプロピル］チオ｝−２−オキソ−６，９，１２，１５−テトラオキサ−３−アザオクタデカン−１８−オエート（又はＣｙｓ（オキサ４−コレステロール））である。
【０１１８】
【化２】
0005756961.tif 000006
【０１１９】
Ｃ７は、コレステロール基とシステイン部位との間に４個のエチレングリコールの繰り返し（エトキシ単位）により形成された親水性スペーサーを有する点において、Ｃ４と異なる。Ｃ７基は、得られたペプチド−コレステロール結合の溶解性を増大する。さらに、血清血漿の存在において、ペプチド−Ｃ７結合は、ペプチド−Ｃ４結合に比べ、少ない血清シフトを示す。これは、２つの受容体、ＧＬＰ−１及びグルカゴン受容体について最適の均衡のとれた活性を維持するために重要であることが見出されている。実施例で示される結果は、これを例証している。
【０１２０】
ＯＸＭペプチド類似体ＯＸＭ７０及びＯＸＭ２１６は、天然のヒトＯＸＭペプチドを含むが、アミノ酸位２にα−アミノイソ酪酸を持ち、Ｃ−末端でペプチド結合中にシステイン残基を持ち、Ｃ−末端カルボキシ基がアミド化されたＯＸＭ２９から製造された。ＯＸＭ７０は、構造
ＨαＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫＲＮＲＮＮＩＡＣ４−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２）
（式中、Ｃ４は、ＯＸＭ３６に対し示されたように、コレスト−５−エン−３−イル｛［（２Ｒ）−３−アミノ−２−（アミノ）−３−オキソプロピル］チオ｝アセテートである。）
を包含するＯＸＭ２９から製造される。
【０１２１】
ＯＸＭ２１６は、構造：
ＨαＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫＲＮＲＮＮＩＡＣ７−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９）
（式中、Ｃ７は、ＯＸＭ１１５に対し示されたように、コレスト−５−エン−３−イル  １−｛［（２Ｒ）−３−アミノ−２−（アミノ）−３−オキソプロピル］チオ｝−２−オキソ−６，９，１２，１５−テトラオキサ−３−アザオクタデカン−１８−オエート（又はＣｙｓ（オキサ４−コレステロール）である。）
を有する。
【０１２２】
ＯＸＭペプチド類似体ＯＸＭ２１２は、天然のヒトＯＸＭペプチドであるが、アミノ酸位２にα−アミノイソ酪酸、２７位にメチオニン残基の代わりにノルロイシンを有し、Ｃ−末端でのペプチド結合においてシステイン残基を持ち、Ｃ−末端カルボキシ基がアミド化されているＯＸＭ２０８から製造された。ＯＸＭ２１２は、構造
ＨαＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬｎＮＴＫＲＮＲＮＮＩＡＣ４−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６）
（式中、Ｃ４は、ＯＸＭ３６に対し示されたように、コレスト−５−エン−３−イル｛［（２Ｒ）−３−アミノ−２−（アミノ）−３−オキソプロピル］チオ｝アセテートである。）
を有する。
【０１２３】
ＯＸＭペプチド類似体ＯＸＭ２１３は、ヒトＯＸＭペプチドを有するが、アミノ酸位２にα−アミノイソ酪酸、２７位にメチオニン残基の代わりにＯ−メチル−Ｌ−ホモセリン、Ｃ−末端でペプチド結合中にシステインを有し、Ｃ−末端カルボキシ基はアミド化されているＯＸＭ２０９から製造された。ＯＸＭ２１３は、構造
ＨαＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＹＮＴＫＲＮＲＮＮＩＡＣ４−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８）
（式中、Ｃ４は、ＯＸＭ３６に示されたように、コレスト−５−エン−３−イル｛［（２Ｒ）−３−アミノ−２−（アミノ）−３−オキソプロピル］チオ｝アセテートである。）
を有する。
【０１２４】
ＯＸＭペプチド類似体ＯＸＭ２３７は、構造
ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬｍＮＴＫＲＮＲＮＮＩＡＣ７−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１）
を有する。これは、２位にＤ−Ｓｅｒ（ｓ）、２７位でＭｅｔ（Ｏ）、３８位置でＣｙｓ（オキサ４−コレステロール）を含むようデザインされている。
【０１２５】
ＯＸＭペプチド類似体ＯＸＭ２３８は、２位にＤ−Ｓｅｒ（ｓ）、２７位でＭｅｔ（Ｏ）、３８位置でＣｙｓ（アセトアミド）を含むようデザインされている。このペプチドは、ＯＸＭ２３７と同じペプチドシーケンスを有し、コレステロールを持たないが、アセトアミドでブロックされたシステインチオールを有するコントロールペプチドである。
【０１２６】
（表１に示されるように）ＯＸＭ２５９−ＯＸＭ２６８及びＯＸＭ３０６−３０８は、ＯＸＭのアミノ酸シーケンスを有するが、２位におけるアミノ酸は、ＤＰＰ４触媒活性に抵抗性を与えるアミノ酸置換を明らかにすべく非天然アミノ酸で置換されている。
【０１２７】
アミノ酸シーケンスＲＮＲＮＮＩＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５５）を欠くＯＸＭペプチド類似体は、ＧＬＰ−１及びグルカゴン受容体に対し十分なアゴニスト活性も示すことができる。全長ＯＸＭペプチドに基づくある付加ペプチドを有するこれらＯＸＭペプチド類似体は、表２に示されている。これら切断されたＯＸＭペプチド類似体は、われわれの所有する国際公開番号、ＷＯ２００７１００５３５に記載されたペプチドのグルカゴンＫ（ＧｃｇＫ）属の変異体である。ＧｃｇＫペプチドは、ＯＸＭシーケンスがＣ−末端で７つのアミノ酸残基を排出するべくＣ末端で切断されたペプチドである。得られたペプチドは、Ｃ−末端でエキストラリシン残基を有するグルカゴンの１つである。このＧｃｇＫペプチドは、ペプチドがＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲの両者にナノモル以下の有効性を示す、＋／＋パターンと同等である。これに対し、天然のＯＸＭは、前記２つの受容体にはナノモルの有効性を示す。ＧｃｇＫペプチドの他の利点は、Ｃ−末端の２つのベーシックなアルギニン残基が排除されていることである。これは、デュアルＧＬＰ−１／ＧＣＧＲアゴニスト活性を有する、脂質化（アシル化又はコレステリル化）されたペプチド類似体の構築の際に重要である。我々のデータは、ＯＸＭシーケンスに基づく約７のｐＩを有する脂質化されたペプチド類似体は、肥満細胞脱顆粒を活性化するのに対し、約５のｐＩを有する脂質化されたペプチド類似体は、肥満細胞脱顆粒を活性化しないことを示している（実施例１１参照）。このように我々の結果に基づけば、肥満細胞脱顆粒を活性化するペプチドのリスクを減らすため、脂質化されたベースペプチド類似体に対するｐＩは５近辺であるべきである。それ故、特定の態様においては、脂質化されたペプチド類似体は、６．０未満のｐＩを有する。さらなる態様においては、脂質化されたペプチド類似体は、４．５と６．０の間のｐＩを有する。さらなる態様では、脂質化されたペプチド類似体は、約５．４のｐＩを有する。ｐＩの減少は、次の３つの異なる方法；１）ペプチド中の残基の置換、２）Ｃ−末端でのカルボキシレート基の導入、３）スペーサーとして、１以上のガンマ−カルボキシ−グルタミン酸残基のようなネガティブ残基の導入、を用いることにより行われる。
【０１２８】
それ故、６．０未満のｐＩを有するＯＸＭペプチド類似体の一態様においては、アシル又はコレステロール基は、２つのガンマ−カルボキシ−グルタミン酸残基を含むスペーサー手段によりペプチドに共有結合的に連結される。これらのペプチド類似体の例は、表２に示されるペプチド類似体を包含する。例えば、約５．４のｐＩを有するペプチドは、ＯＸＭ３４５、ＯＸＭ３８０、ＯＸＭ３８１、ＯＸＭ３９２、ＯＸＭ３９５、ＯＸＭ３９８、ＯＸＭ３９９、ＯＸＭ４００、ＯＸＭ４０１を包含するが、これに限定されるものではない。６．０未満のｐＩを有するＯＸＭペプチド類似体の他の態様においては、アシル又はコレステロール基は、１つ又は２つのガンマ−カルボキシ−グルタミン酸残基を含むスペーサー手段によりペプチド中の内部アミノ酸に共有結合的に連結され、またこのペプチドは、Ｃ−末端でリシン残基に共有結合的に連結された１つ又は２つのガンマ−カルボキシ−グルタミン酸残基をさらに包含する。これらのペプチド類似体の例としては、ＯＸＭ４０７、ＯＸＭ４０８、ＯＸＭ４１４、ＯＸＭ４１８が挙げられるが、これに限定されるものではない。６．０未満のｐＩを有するＯＸＭペプチド類似体の他の態様においては、アシル又はコレステロール基は、１つのガンマ−カルボキシ−グルタミン酸残基を含むスペーサー手段によりペプチドのＣ−末端に共有結合的に連結され、またこのペプチドは、ペプチドのｐＩを減少させるため、１以上のアミノ酸置換をさらに含む。ＯＸＭ３７４は、そのようなペプチド類似体の例である。
【０１２９】
それ故、本発明は、さらに、ペプチドのＮ−末端からの第二アミノ酸は、ペプチドをジペプチジルペプチダーゼＩＶによる切断および不活性化に抵抗性にするアミノ酸で置換されており；ペプチドは、１以上のガンマグルタミン酸残基からなるスペーサーによってペプチドに共有結合的に連結された脂質又はコレステロール部位を含み；ペプチドは、２位での置換に加え１から３のアミノ酸置換を任意に包含し；またペプチドは、もし存在する場合ペプチドのＣ−末端カルボキシ基に連結された保護基を任意に含み；ペプチド類似体は、６．０未満のｐＩを有し、またデュアルＧＬＰ−１受容体アゴニスト及びグルカゴン受容体アゴニストである、アミノ酸シーケンス
ＨＳＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０９）
からなるペプチド類似体；及びそれらの医薬的に受容可能な塩を提供する。特定の実施態様において、ペプチド類似体は、４及び６の間のｐＩ、又は約５．０のｐＩ、例えば、約５．４のｐＩを有する。
【０１３０】
さらなる態様においては、このペプチド類似体のＮ−末端から第２のアミノ酸に対し置換されたアミノ酸は、Ｄ−セリン、α−アミノイソ酪酸、及び１−アミノ−１−シクロブタンカルボン酸からなる群から選ばれる。
【０１３１】
特定の態様においては、このペプチド類似体は、１以上のガンマ−グルタミン酸残基を含むペーサーによりペプチド類似体のＣ−末端でリシン残基のε−アミノ基に共有結合的に連結されたシステイン残基のチオール基に共有結合的に連結されたコレステロール部位を包含する。さらなる実施態様においては、コレステロール部位が、親水性リンカー、特定の実施態様においては、１〜１２のエトキシ単位を含むエトキシポリマー、例えば、４つのエトキシ単位を含むエトキシポリマーである、親水性リンカーによりチオール基に共有結合的に連結されている。
【０１３２】
特定の態様においては、このペプチド類似体は、リシン残基のε−アミノ基に共有結合的に連結された脂質部位を包含し；特定の実施態様においては、脂質部位は、パルミトイル、ミリストイル、又はステアロイル部位のような脂肪酸である。さらなる実施態様においては、脂質部位は、１以上のガンマ−グルタミン酸残基によりリシン残基のε−アミノ基に共有結合的に連結されている。さらなる実施態様においては、脂質部位は、１以上のガンマ−グルタミン酸残基によりＣ−末端でリシン残基のε−アミノ基に共有結合的に連結される。さらなる実施態様においては、脂質部位は、１以上のガンマ−グルタミン酸残基によりリシン残基のε−アミノ基に共有結合的に連結され、また該リシン残基は、１以上のガンマ−グルタミン酸残基によりＣ−末端でリシン残基に連結される。
【０１３３】
さらなる態様においては、このペプチド類似体は、さらに、１０、１２、１６、１７、１８及び２７位からなる群から選ばれたアミノ酸位置での１以上のアミノ酸置換を含む。特定の実施態様においては、このペプチド類似体は、１０位でチロシンに対しリシン、１２位でリシンに対しセリン、１６位でセリンに対しグルタミン酸又はα−アミノイソ酪酸、１７位でアルギニンに対しグルタミン酸、１８位でアルギニンに対しアラニン、２０位でグルタミンに対しリシン、及び２７位でメチオニンに対しノルロイシン又はＯ−メチル−Ｌ−ホモセリンからなる群から選ばれた１以上のアミノ酸置換を含む。
【０１３４】
さらなる実施態様においては、ペプチド類似体中の１０位でのチロシンがリシンで置換され、また脂質部位が１以上のガンマ−グルタミン酸残基により該リシン残基のε−アミノ基に共有結合的に連結される。他の実施態様においては、ペプチド類似体中の２０位でのグルタミンはリシンで置き換えられ、また脂質部位が１以上のガンマ−グルタミン酸残基により該リシンのε−アミノ基に共有結合的に連結される。いずれかの実施態様において、ペプチド類似体は、さらに、Ｃ−末端に共有結合的に連結された１以上のガンマ−グルタミン酸残基を含む。
【０１３５】
さらに、本発明は、６．０未満のｐＩを有し、またデュアルＧＬＰ−１受容体アゴニスト及びグルカゴン受容体アゴニストである、下記構造を有するペプチド類似体及びその医薬的に受容可能な塩を提供する。
Ｚ１−Ｐ−Ｍ−Ｚ２
〔式中、Ｐは、アミノ酸シーケンス
ＨＸ１ＱＧＴＦＴＳＤＸ２ＳＸ３ＹＬＤＸ４Ｘ５Ｘ６ＡＸ７ＤＦＶＱＷＬＸ８ＮＴＫＸ９Ｘ１０（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１０）
【０１３６】
（式中、Ｘ１は、Ｄ−セリン、α−アミノイソ酪酸（ａｉｂ）、１−アミノ−１−シクロブタンカルボン酸（Ａｃｂ）残基、１−アミノ−１−シクロヘキサンカルボン酸（Ａｃｘ）；アルファ−アミノ酪酸（Ａｂｕ）；Ｄ−アルファ−アミノ酪酸（Ｄ−Ａｂｕ）；アミノ吉草酸（Ｎｖａ）；ベータ−シクロプロピル−アラニン（Ｃｐａ）；プロパルギルグリシン（Ｐｒｇ）；アリルグリシン（Ａｌｇ）；２−アミノ−２−シクロヘキシル−プロピオン酸（２−Ｃｈａ）；Ｄ−ｔｅｒｔブチルグリシン（Ｄ−ｔｂｇ）；ビニルグリシン（Ｖｇ）；１−アミノ−１−シクロプロパンカルボン酸（Ａｃｐ）；又は１−アミノ−１−シクロペンタンカルボン酸（Ａｃｐｅ）残基であり；Ｘ２は、チロシン（Ｙ）又はリシン（Ｋ）残基であり；Ｘ３は、セリン（Ｓ）又はリシン（Ｋ）残基であり；Ｘ４は、セリン（Ｓ）、α−アミノイソ酪酸（ａｉｂ）、又はグルタミン酸（Ｅ）残基であり；Ｘ５は、アルギニン（Ｒ）又はグルタミン酸（Ｅ）残基であり；Ｘ６は、アルギニン（Ｒ）又はアラニン（Ａ）残基であり；Ｘ７は、グルタミン（Ｑ）又はリシン（Ｋ）残基であり；Ｘ８は、メチオニン（Ｍ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、メチオニンスルホキシド（ｍ）、又はＯ−メチル−Ｌ−ホモセリン（ｏ）残基であり；Ｘ９は、ガンマ−グルタミン酸（γＧｌｕ）残基であり；Ｘ１０は、ガンマ−グルタミン酸（γＧｌｕ）残基又は不存在である。）を有するペプチドであり；Ｚ１は、もし存在する場合Ｎ−末端アミノ基に結合された、任意に存在する保護基であり、Ｍは、（ｉ）親水性リンカーによりコレステロール部位に共有結合的に連結されたシステイン残基、（ii）１以上のガンマグルタミン酸残基を含むスペーサーにより脂質部位に共有結合的に連結されたリシン残基、又は（iii）脂質部位であり、またＭは、１以上のガンマグルタミン酸残基を含むスペーサーによりＰのＣ−末端又は内部アミノ酸に共有結合的に連結されており；及びＺ２は、任意に存在する保護基であって、もし存在する場合Ｃ−末端カルボキシ基に連結されている。〕特定の態様において、ペプチド類似体は、４及び６の間のｐＩ、又は約５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５，７、５．８、又は５．９のｐＩ、又は約５．４〜５．５のｐＩを有する。
【０１３７】
このペプチド類似体のさらなる態様において、Ｍは、親水性リンカーを用いてコレステロール部位に共有結合的に連結されたシステイン残基であり、該システイン残基はＰのＣ−末端に連結されている。さらなる実施態様においては、該親水性リンカーは、１〜２４のエトキシ単位を包含し、特定の態様においては、例えば４つのエトキシ単位を包含することができる、エトキシポリマーである。
【０１３８】
さらなる態様においては、Ｍは、１以上のガンマ−グルタミン酸残基からなるペーサーにより脂質部位に共有結合的に連結されたリシン残基であり、該リシン残基はＰのＣ−末端に連結されている、又はＭは１以上のガンマ−グルタミン酸残基からなるペーサーにより脂質部位に共有結合的に連結されたリシン残基であり、該リシン残基はＰのＸ３又はＸ７の位置にある。特定の態様においては、脂質部位は、パルミトイル、ミリストイル、又はステアロイル部位である。これらのペプチド類似体の例は、表２に示される。
【０１３９】
【表２】
0005756961.tif 000007
【０１４０】
0005756961.tif 000008
【０１４１】
0005756961.tif 000009
【０１４２】
0005756961.tif 000010
【０１４３】
0005756961.tif 000011
【０１４４】
ペプチドＯＸＭ２９０は、ＯＸＭ３０１に対するプレカーサーであり、ＯＸＭ２９１〜２９４は表２中に示された残余のペプチド類似体に対するプレカーサーである。ＯＸＭ３０１は、ＤＰＰＩＶ抵抗性のためアミノ酸位置２でＤ−Ｓｅｒ、Ａｒｇ１７及びＡｒｇ１８残基に対する各々Ｇｌｕ及びＡｌａの置換、及びインビボでの薬物動力学特性を改善するためＣ（オキサ４−コレステロール）基（Ｃ７）を有する類似体である。Ａｒｇ１７及びＡｒｇ１８での置換は、これらの残基が主要なプロトン性切断サイトであることから、インビボ安定性を増大するためになされる。
【０１４５】
ＯＸＭ３０２は、Ｃ−末端でアミノ酸シーケンスＲＮＲＮＮＩＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９６）を欠くペプチド類似体である（一般に所有された国際公開番号ＷＯ２００７／１００５３５参照、これは参照により本明細書に組み込まれる）。このように、ＯＸＭ３０２は、Ｃ−末端で１つのリシン残基だけグルカゴンペプチドより長い１つのアミノ酸である。構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫＣ７−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５２）を有するＯＸＭ３０２中には、ＤＰＰＩＶ抵抗性のためアミノ酸位置２にＤ−Ｓｅｒが、またインビボでの薬物動力学特性改善のためＣ（オキサ４−コレステロール）基（Ｃ７）が存在する。
【０１４６】
ＯＸＭ３０３は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＥＡＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫＣ７−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３）を有する。アミノ酸位置２におけるＤ−Ｓｅｒは、ＤＰＰＩＶ抵抗性を付与し、Ｇｌｕ及びＡｌａそれぞれのＡｒｇ１７及びＡｒｇ１８残基に対する置換は、安定性を改善し、またＣ（オキサ４−コレステロール）基（Ｃ７）は、インビボでのペプチド類似体の薬物動力学特性を改善する。
【０１４７】
ＯＸＭ３０４は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＥＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫＣ７−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５４）を有する。２位にあるＤ−ＳｅｒはＤＰＰＩＶ抵抗性を与え、ＧｌｕのＡｒｇ１７残基に対する置換は、安定性を改善し、Ｃ（オキサ４−コレステロール）基（Ｃ７）は、インビボでのペプチド類似体の薬物動力学特性を改善する。
【０１４８】
ＯＸＭ３０５は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＥＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫＣ７−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５５）を有する。２位にあるＤ−ＳｅｒはＤＰＰＩＶ抵抗性を与え、ＡｌａのＡｒｇ１８残基に対する置換は、安定性を改善し、Ｃ（オキサ４−コレステロール）基（Ｃ７）は、インビボでのペプチド類似体の薬物動力学特性を改善する。
【０１４９】
ＯＸＭ３１１は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−Ｋ（パルミトイル）−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５６）を有する。アミノ酸位置２におけるＤ−ＳｅｒはＤＰＰＩＶ抵抗性を与え、Ｋ（パルミトイル）基は、インビボでのペプチド類似体の薬物動力学特性を改善する。
【０１５０】
ＯＸＭ３１２は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＥＡＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫＫ（パルミトイル）−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５７）を有する。アミノ酸位置２におけるＤ−ＳｅｒはＤＰＰＩＶ抵抗性を与え、Ｇｌｕ及びＡｌａそれぞれのＡｒｇ１７及びＡｒｇ１８残基に対する置換は、安定性を改善し、Ｋ（パルミトイル）基は、インビボでのペプチド類似体の薬物動力学特性を改善する。
【０１５１】
ＯＸＭ３１４は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−Ｔｔｄｓ−Ｋ（パルミトイル）−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５８）を有する。アミノ酸位置２におけるＤ−ＳｅｒはＤＰＰＩＶ抵抗性を与え、Ｋ（パルミトイル）基は、インビボでのペプチド類似体の薬物動力学特性を改善する。Ｔｔｄｓ（１−アミノ−４，７，１０−トリオキサ−１３−トリデカンアミンコハク酸）は、ペプチドシーケンスとＫ（パルミトイル）基の間の、フレキシブルで親水性のスペーサーとして働くリンカーである。
【０１５２】
ＯＸＭ３１３は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＥＡＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−Ｔｔｄｓ−Ｋ（パルミトイル）−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５９）を有する。アミノ酸位置２におけるＤ−ＳｅｒはＤＰＰＩＶ抵抗性を与え、Ｇｌｕ及びＡｌａそれぞれのＡｒｇ１７及びＡｒｇ１８残基に対する置換は、安定性を改善し、Ｔｔｄｓ−Ｋ（パルミトイル）基は、インビボでのペプチド類似体の薬物動力学特性を改善する。
【０１５３】
ＯＸＭ３１７は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−Ｃ４−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０）を有する。ペプチド中には、ＤＰＰＩＶ抵抗性のためにアミノ酸位置２にＤ−Ｓｅｒ、またインビボでの薬物動力学特性を改善するためにコレスト−５−エン−３−イル｛［（２Ｒ）−３−アミノ−２−（アミノ）−３−オキソプロピル］チオ｝アセテート（Ｃ４）に連結されたガンマグルタミン酸残基が存在する。ガンマグルタミン酸残基（γＥ）は、ペプチドシーケンスとＣ４基の間のフレキシブルなスペーサーとして働くリンカーである。
【０１５４】
ＯＸＭ３１８は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＥＡＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−Ｃ４−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６１）を有する。アミノ酸位置２におけるＤ−ＳｅｒはＤＰＰＩＶ抵抗性を与え、Ｇｌｕ及びＡｌａそれぞれのＡｒｇ１７及びＡｒｇ１８残基に対する置換は、安定性を改善し、γＥ−Ｃ４基は、インビボでのペプチド類似体の薬物動力学特性を改善する。
【０１５５】
ＯＸＭ３１９は、構造  ＨαＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＥＡＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−Ｃ７−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６２）を有する。ペプチド中には、ＤＰＰＩＶ抵抗性のためアミノ酸位置２にＡｉｂがあり、またＣ（オキサ４−コレステロール）基（Ｃ７）は、インビボでの薬物動力学特性を改善する。
【０１５６】
ＯＸＭ３２１は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＥＡＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫＲＮＲＮＮＩＡ−γＥ−Ｃ４−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６３）を有する。これは、ＤＰＰＩＶ抵抗性のためのアミノ酸位置２にＤ−Ｓｅｒ、及びＧｌｕ及びＡｌａそれぞれのＡｒｇ１７及びＡｒｇ１８残基に対する置換を有する類似体であり、またＣ（−コレステロール）基（Ｃ４）はインビボでの薬物動力学特性を改善する。Ａｒｇ１７及びＡｒｇ１８での置換は、これらの残基が主要なプロトン性切断サイトであることから、インビボでの安定性を増すためになされた。ガンマグルタミン酸残基（γＥ）は、ペプチドシーケンスとＣ４基の間の、フレキシブルなスペーサーとして働くリンカーである。
【０１５７】
ＯＸＭ３２３は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＥＡＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫＲ−Ｃ７−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４）を有する。アミノ酸位置２におけるＤ−ＳｅｒはＤＰＰＩＶ抵抗性を与え、Ｇｌｕ及びＡｌａそれぞれのＡｒｇ１７及びＡｒｇ１８残基に対する置換は、安定性の改善されたペプチドを与え、Ｃ（オキサ４−コレステロール）基（Ｃ７）は、インビボでのペプチド類似体の薬物動力学特性を改善するペプチドを与える。
【０１５８】
ＯＸＭ３２５は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＥＡＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫＲＮＲＮＮＩＡＣ７−ＣＯ２Ｈ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６５）を有する。これは、ＤＰＰＩＶ抵抗性のためアミノ酸位置２にＤ−Ｓｅｒ、Ｇｌｕ及びＡｌａそれぞれのＡｒｇ１７及びＡｒｇ１８残基に対する置換を有する類似体であり、またＣ（オキサ４−コレステロール）基（Ｃ７）は、インビボでの薬物動力学特性を改善する。Ａｒｇ１７及びＡｒｇ１８での置換は、これら残基が主要なプロトン性切断サイトであることから、インビボ安定性を増すためになされた。
【０１５９】
ＯＸＭ３２７は、構造  ＨαＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＥＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫＣ７−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６６）を有する。アミノ酸位置２におけるＡｉｂはＤＰＰＩＶ抵抗性を与え、ＧｌｕのＡｒｇ１７残基に対する置換は、改善された安定性を有するペプチドを与え、Ｃ（オキサ４−コレステロール）基（Ｃ７）は、インビボでのペプチド類似体の改善された薬物動力学特性を与える。
【０１６０】
ＯＸＭ３２９は、構造  ＨαＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−Ｃ４−ＣＯ２Ｈ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６７）を有する。アミノ酸位置２におけるＡｉｂはＤＰＰＩＶ抵抗性を与え、Ｃ（オキサ４−コレステロール）基（Ｃ７）は、インビボでのペプチド類似体の改善された薬物動力学特性を有するペプチドを与える。ガンマグルタミン酸残基（γＥ）は、ペプチドシーケンスとＣ４基の間のフレキシブルなスペーサーとして働くリンカーである。
【０１６１】
ＯＸＭ３３０は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＥＡＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫＲＮＲＮＮＩＡ−γＥ−Ｋ（Ｐａｍ）−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８）を有する。これは、ＤＰＰＩＶ抵抗性のためアミノ酸位置２にＤ−Ｓｅｒ、Ｇｌｕ及びＡｌａそれぞれのＡｒｇ１７及びＡｒｇ１８残基に対する置換を有する類似体であり、またα−Ｋ（パルミトイル）基は、インビボでの薬物動力学特性を改善する類似体を与える。ガンマグルタミン酸残基（γＥ）は、ペプチドシーケンスとＫ（パルミトイル）基の間のフレキシブルなスペーサーとして働くリンカーである。Ａｒｇ１７及びＡｒｇ１８での置換は、これらの残基が主要なプロトン性切断サイトであることから、インビボ安定性を増すためになされた。
【０１６２】
ＯＸＭ３４５は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−γＥ−Ｃ４−ＣＯＯＨ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６９）を有する。これは、２位にＤ−Ｓｅｒ（ｓ）、ペプチドシーケンスとコレステロール基との間のスペーサーとして３１及び３２位に２つのガンマグルタミン酸、３３位に１つのＣｙｓ（コレステロール）（Ｃ４）を含むようにデザインされた。
【０１６３】
ＯＸＭ３５５は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＳＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−Ｃ４−ＣＯＯＨ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７０）を有する。これは、２位にＤ−Ｓｅｒ（ｓ）、Ｌｙｓ１２Ｓｅｒ置換、ペプチドシーケンスとコレステロールとの間のスペーサーとして、３１位に１つのガンマグルタミン酸、３２位に１つのＣｙｓ（コレステロール）（Ｃ４）を含むようにデザインされた。１２位のセリンは、ＧＬＰ−１ペプチドシーケンス中に存在する。それ故、少なくともＧＬＰ−１Ｒでコンパチブルな効能を有することが予想される。置換Ｌｙｓ１２Ｓｅｒは、約５のｐＩとなる正荷電を排除する。
【０１６４】
ＯＸＭ３５７は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＡＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−Ｃ４−ＣＯＯＨ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７１）を有する。これは、２位にＤ−Ｓｅｒ（ｓ）、Ｌｙｓ１２Ｓｅｒ置換、ペプチドシーケンスとコレステロールとの間のスペーサーとして３１位に１つのガンマグルタミン酸、３２位に１つのＣｙｓ（コレステロール）（Ｃ４）を含むようにデザインされた。ＯＸＭ３５７は、ＯＸＭ３４５が２つのγＧｌｕを有するのに対し、ただ１つのγＧｌｕを有する点で、ＯＸＭ３４５と異なる。
【０１６５】
ＯＸＭ３５９は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＳＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−Ｃ７−ＣＯＯＨ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２）を有する。これは、２位にＤ−Ｓｅｒ（ｓ）、Ｌｙｓ１２Ｓｅｒ置換、ペプチドシーケンスとコレステロールとの間のスペーサーとして３１位に１つのガンマグルタミン酸、３２位に１つのＣｙｓ（オキサ４−コレステロール）（Ｃ７）を含むようにデザインされた。このように、ＯＸＭ３５９は、Ｃ４（エチレングリコールスペーサーを持たないコレステロール）の代わりにＣ７（テトラエチレングリコールスペーサーを有するコレステロール基）を有する点で、ＯＸＭ３５５と異なる。
【０１６６】
ＯＸＭ３６１は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＡＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−Ｃ７−ＣＯＯＨ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７３）を有する。これは、２位にＤ−Ｓｅｒ（ｓ）、Ａｒｇ１８Ａｌａ置換、ペプチドシーケンスとコレステロールとの間のスペーサーとして、３１位に１つのガンマ−グルタミン酸、３２位に１つのＣｙｓ（オキサ４−コレステロール）（表中のＣ７）を含むようにデザインされた。Ａｒｇ１８Ａｌａ置換は、最適ｐＩ値の５への調整のために重要な正荷電を排除する。
【０１６７】
ＯＸＭ３７３は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＥＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−Ｃ４−ＣＯＯＨ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７４）を有する。これは、２位にＤ−Ｓｅｒ（ｓ）、Ｓｅｒ１６Ｇｌｕ置換、ペプチドシーケンスとコレステロールとの間のスペーサーとして、３１位に１つのガンマ−グルタミン酸、３２位に１つのＣｙｓ（コレステロール）（Ｃ４）を含むようにデザインされた。１６位でのＧｌｕは、エキセンヂン−４ペプチド中に存在し、この置換は、ＧＬＰ−１Ｒ活性化と少なくともコンパチブルであることが予想される。
【０１６８】
ＯＸＭ３７４は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＥＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−Ｃ７−ＣＯＯＨ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７５）を有する。これは、２位にＤ−Ｓｅｒ（ｓ）、Ｓｅｒ１６Ｇｌｕ置換、ペプチドシーケンスとコレステロールとの間のスペーサーとして３１位に１つのガンマ−グルタミン酸、３２位に１つのＣｙｓ（オキサ４−コレステロール）（Ｃ７）を含むようにデザインされた。このように、ＯＸＭ３７３とＯＸＭ３７４の違いは、ＯＸＭ３７４中のコレステロール基に結合されたテトラエチレングリコールスペーサーの存在にある。
【０１６９】
ＯＸＭ３８０は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−γＥ−Ｃ７−ＣＯＯＨ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７６）を有する。これは、２位にＤ−Ｓｅｒ（ｓ）、ペプチドシーケンスとコレステロールとの間のスペーサーとして３１位及び３２位に２つのガンマ−グルタミン酸、３３位に１つのＣｙｓ（オキサ４−コレステロール）（Ｃ７）を含むようにデザインされた。ＯＸＭ３８０は、ＯＸＭ３４５と同じペプチドシーケンスを持つが、コレステロール基に連結されたオキサ４スペーサーの点で異なる。
【０１７０】
ＯＸＭ３８１は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−γＥ−Ｃ９−ＣＯＯＨ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７７）を有する。これは、２位にＤ−Ｓｅｒ（ｓ）、ペプチドシーケンスとコレステロールとの間のスペーサーとして３１位及び３２位に２つのガンマ−グルタミン酸、３３位に１つのＣｙｓ（マレイミド−オキサ１２−コレステロール）（Ｃ９）を含むようにデザインされた。ＯＸＭ３８１は、ＯＸＭ３４５及びＯＸＭ３８０と同じペプチドシーケンスを持つが、コレステロールに連結されたマレイミド−オキサ１２スペーサーの点で異なる。Ｃ９の構造を以下に示す。
【０１７１】
【化３】
0005756961.tif 000012
【０１７２】
ＯＸＭ３８３は、構造  ＨαＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−γＥ−Ｃ７−ＣＯＯＨ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７８）を有する。これは、２位にＡｉｂ（α）、ペプチドシーケンスとコレステロールとの間のスペーサーとして３１位及び３２位に２つのガンマ−グルタミン酸、３３位に１つのＣｙｓ（オキサ４−コレステロール）（Ｃ７）を含むようにデザインされた。ＯＸＭ３８３は、２位におけるアミノ酸についてのみＯＸＭ３８０と異なる。
【０１７３】
ＯＸＭ３８８は、構造  Ｈ−Ａｃｂ−ＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−γＥ−Ｃ７−ＣＯＯＨ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７９）を有する。これは、２位にＡｃｂ、ペプチドシーケンスとコレステロールとの間のスペーサーとして３１位及び３２位に２つのガンマ−グルタミン酸、３３位に１つのＣｙｓ（オキサ４−コレステロール）（Ｃ７）を含むようにデザインされた。ＯＸＭ３８８は、２位におけるアミノ酸についてのみＯＸＭ３８０及び３８３と異なる。
【０１７４】
ＯＸＭ３９２は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＥＲＲＡＫＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−γＥ−Ｃ１０−ＣＯＯＨ（ＥとＫの間のラクタムブリッジ）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８０）を有する。これは、２位にＳｅｒ（ｓ）、Ｓｅｒ１６Ｇｌｕ及びＧｌｕ２０Ｌｙｓ置換（Ｇｌｕ１６及びＬｙｓ２０は、側鎖上のラクタムブリッジで連結されている。）、ペプチドシーケンスとコレステロールとの間のスペーサーとして３１位及び３２位における２つのガンマ−グルタミン酸、３３位に１つのＣｙｓ（オキサ１２−コレステロール）（Ｃ１０）を含むようにデザインされた。ラクタムブリッジは、位置ｉ（１６）とｉ＋４（２０）間であり、ペプチドのアルファ−螺旋構造を安定化し、またたんぱく質分解に対しペプチドを安定化することが意図されている。
【０１７５】
Ｃ１０基は、システインチオール基をオキサ１２−コレステロールに結合するチオエーテル結合のためのＣ９基とは異なる。Ｃ９には、マレイミドチオエーテル結合があるが、Ｃ１０には、アセトアミドチオエーテルがある。Ｃ１０の構造を以下に示す。
【０１７６】
【化４】
0005756961.tif 000013
【０１７７】
ＯＸＭ３９５は、構造  ＨαＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＥＲＲＡＫＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−γＥ−Ｃ１０−ＣＯＯＨ（ＥとＫの間のラクタムブリッジ）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８１）を有する。これは、２位にＡｉｂ（α）、Ｓｅｒ１６Ｇｌｕ及びＧｌｕ２０Ｌｙｓ置換（Ｇｌｕ１６及びＬｙｓ２０は、側鎖間をラクタムブリッジで連結される。）、ペプチドシーケンスとコレステロールとの間のスペーサーとして３１位及び３２位に２つのガンマ−グルタミン酸残基、３３位に１つのＣｙｓ（オキサ１２−コレステロール）（Ｃ１０）を含むようにデザインされた。ラクタムブリッジは、位置１６（ｉ）と２０（ｉ＋４）との間にあり、ペプチドのアルファ−螺旋構造を安定化し、またたんぱく質分解に対しペプチドを安定化することが意図されている。
【０１７８】
ＯＸＭ３９８は、構造  Ｈ−Ａｃｂ−ＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＥＲＲＡＫＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−γＥ−Ｃ１０−ＣＯＯＨ（ＥとＫの間のラクタムブリッジ）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８２）を有する。これは、２位にＡｃｂ、Ｓｅｒ１６Ｇｌｕ及びＧｌｕ２０Ｌｙｓ置換（Ｇｌｕ１６及びＬｙｓ２０は、側鎖間のラクタムブリッジで連結されている。）、ペプチドシーケンスとコレステロールとの間のスペーサーとして３１位及び３２位に２つのガンマ−グルタミン酸残基、３３位に１つのＣｙｓ（オキサ１２−コレステロール）（Ｃ１０）を含むようにデザインされた。ラクタムブリッジは、位置１６（ｉ）と２０（ｉ＋４）間にあり、ペプチドのアルファ−螺旋構造を安定化し、またたんぱく質分解に対しペプチドを安定化することが意図されている。
【０１７９】
ＯＸＭ３９２、３９５及び３９８は、２位にあるアミノ酸においてのみ異なる。
【０１８０】
ＯＸＭ３９９は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−γＥ−Ｃ１０−ＣＯＯＨ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８３）を有する。これは、２位にＤ−Ｓｅｒ（ｓ）、ペプチドシーケンスとコレステロールとの間のスペーサーとして３１位及び３２位に２つのガンマ−グルタミン酸、３３位に１つのＣｙｓ（オキサ１２−コレステロール）（Ｃ１０）を含むようにデザインされた。ＯＸＭ３９９は、ＯＸＭ３９２とは、ＯＸＭ３９９がＯＸＭ３９２に存在するラクタムブリッジを欠く点でのみ異なる。
【０１８１】
ＯＸＭ４００は、構造  ＨαＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−γＥ−Ｃ１０−ＣＯＯＨ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８４）を有する。これは、２位にＡｉｂ（α）、ペプチドシーケンスとコレステロールとの間のスペーサーとして３１位及び３２位に２つのガンマ−グルタミン酸残基、３３位に１つのＣｙｓ（オキサ１２−コレステロール）（Ｃ１０）を含むようにデザインされた。ＯＸＭ４００は、ＯＸＭ３９５とは、ＯＸＭ３９５に存在するラクタムブリッジを欠く点でのみ異なる。
【０１８２】
ＯＸＭ４０１は、構造  Ｈ−Ａｃｂ−ＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−γＥ−Ｃ１０−ＣＯＯＨ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８５）を有する。これは、２位にＡｃｂ、ペプチドシーケンスとコレステロールとの間のスペーサーとして３１位及び３２位に２つのガンマ−グルタミン酸、３３位に１つのＣｙｓ（オキサ１２−コレステロール）（Ｃ１０）を含むようにデザインされた。ＯＸＭ４０１は、ＯＸＭ３９８とは、ＯＸＭ３９８に存在するラクタムブリッジを欠く点でのみ異なり、ＯＸＭ３９９、ＯＸＭ４００、及びＯＸＭ４０１は２位のアミノ酸において互いに異なる。
【０１８３】
ＯＸＭ４０４は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−γＥ−Ｋ（γＥ−パルミトイル）−Ｃ１０−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８６）を有する。これは、２位にＤ−Ｓｅｒ（ｓ）、ペプチドシーケンスとパルミトイル基との間のスペーサーとして３１位及び３２位に２つのガンマ−グルタミン酸、３３位に１つのＬｙｓ（γＥ−パルミトイル）を含むようにデザインされた。この実施態様のペプチドは、Ｃ−末端でアミド化されている。
【０１８４】
ＯＸＭ４０６は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＥＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−γＥ−Ｃ１０−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８７）を有する。これは、２位にＤ−Ｓｅｒ（ｓ）、Ｓｅｒ１６Ｇｌｕ置換、ペプチドシーケンスとコレステロールとの間のスペーサーとして３１位及び３２位に２つのガンマ−グルタミン酸、３３位に１つのＣｙｓ（オキサ１２−コレステロール）（Ｃ１０）を含むようにデザインされた。この実施態様のペプチドは、Ｃ−末端でアミド化されている。
【０１８５】
ＯＸＭ４０７は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＫ（γＥ−パルミトイル）ＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥγＥ−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８８）を有する。これは、２位にＤ−Ｓｅｒ（ｓ）、ペプチドシーケンスとパルミトイル基との間のスペーサーとして３１位及び３２位に２つのガンマ−グルタミン酸残基、２０位に１つのＬｙｓ（γＥ−パルミトイル）を含むようにデザインされた。この実施態様のペプチドは、Ｃ−末端でアミド化されている。
【０１８６】
ＯＸＭ４０８は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＫ（γＥ−γＥ−パルミトイル）ＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８９）を有する。これは、２位にＤ−Ｓｅｒ（ｓ）、３１位に１つのガンマ−グルタミン酸、及び２０位に２つのγ−グルタミン酸残基及びリシンの側鎖アミノ基に連結されたパルミトイル基［Ｌｙｓ（γＥ−γＥ−パルミトイル）］を含むようにデザインされた。この実施態様のペプチドは、Ｃ−末端でアミド化されている。
【０１８７】
ＯＸＭ４０９は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＫ（γＥ−γＥ−パルミトイル）ＳＫＹＬＤＳＲＲＡＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９０）を有する。これは、２位にＤ−Ｓｅｒ（ｓ）、及び１０位に２つのγ−グルタミン酸残基及びリシンの側鎖アミノ基に連結されたパルミトイル基［Ｌｙｓ（γＥ−γＥ−パルミトイル）］を含むようにデザインされた。この実施態様のペプチドは、Ｃ−末端でアミド化されている。
【０１８８】
ＯＸＭ４１０は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＥＲＲＡＫ（γＥ−γＥ−パルミトイル）ＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９１）を有する。これは、２位にＤ−Ｓｅｒ（ｓ）、Ｓｅｒ１６Ｇｌｕ置換、及び２０位に２つのγ−グルタミン酸残基及びリシンの側鎖アミノ基に連結されたパルミトイル基［Ｌｙｓ（γＥ−γＥ−パルミトイル）］を含むようにデザインされた。この実施態様のペプチドは、Ｃ−末端でアミド化されている。
【０１８９】
ＯＸＭ４１１は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＫ（γＥ−γＥ−パルミトイル）ＳＫＹＬＤＥＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９２）を有する。これは、２位にＤ−Ｓｅｒ（ｓ）、Ｓｅｒ１６Ｇｌｕ置換、及び１０位に２つのγ−グルタミン酸残基及びリシンの側鎖アミノ基に連結されたパルミトイル基［Ｌｙｓ（γＥ−γＥ−パルミトイル）］を含むようにデザインされた。この実施態様のペプチドは、Ｃ−末端でアミド化されている。
【０１９０】
ＯＸＭ４１２は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−γＥ−Ｃ１１−ＣＯＯＨ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９３）を有する。これは、２位にＤ−Ｓｅｒ（ｓ）、ペプチドシーケンスとコレステロールとの間のスペーサーとして３１位及び３２位に２つのガンマ−グルタミン酸残基、３３位に１つのＣｙｓ（オキサ２４−コレステロール）（Ｃ１１）を含むようにデザインされた。ＯＸＭ４１２は、コレステロール基へ連結されたオキサスペーサーの長さでＯＸＭ３９９と異なる。Ｃ１１の構造を以下に示す。
【０１９１】
【化５】
0005756961.tif 000014
【０１９２】
ＯＸＭ４１３は、構造：ＨαＤＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＫ（ＤＯＴＡ）ＷＬｍＮＴＫ−γＥ−γＥ−Ｃ１０−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９４）を有する。これは、インビボでのＧＬＰ−１Ｒを標的とすることをイメージするためのペプチドとしてデザインされた。このシーケンスは、２位にＡｉｂ、ＧＬＰ−１Ｒに関し選択制を与えるため３位にＡｓｐ、２４位にＬｙｓ（ＤＯＴＡ）、２７位にＭｅｔ（Ｏ）、ペプチドシーケンスとコレステロールとの間のスペーサーとして３１位及び３２位に２つのガンマ−グルタミン酸残基、３３位に１つのＣｙｓ（オキサ１２−コレステロール）（Ｃ１０）を含むようにデザインされた。この実施態様のペプチドは、Ｃ−末端でアミド化されている。Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（ＤＯＴＡ）−ＯＨの構造を以下に示す。
【０１９３】
【化６】
0005756961.tif 000015
【０１９４】
ＯＸＭ４１４は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＫ（γＥ−パルミトイル）ＳＫＹＬＤＥＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９５）を有する。これは、２位にＤ−Ｓｅｒ（ｓ）、３１位に１つのγ−グルタミン酸、Ｓｅｒ１６Ｇｌｕ置換、及び１０位にリシンの側鎖アミノ基に連結されたパルミトイル基［Ｌｙｓ（パルミトイル）］を含むようにデザインされた。この実施態様のペプチドは、Ｃ−末端でアミド化されている。
【０１９５】
ＯＸＭ４１５は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＫ（パルミトイル）ＳＫＹＬＤＥＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−γＥ−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９６）を有する。これは、２位にＤ−Ｓｅｒ（ｓ）、３１位に１つのγ−グルタミン酸、Ｓｅｒ１６Ｇｌｕ置換及び１０位に１つのγ−グルタミン酸残基及びリシンの側鎖アミノ基に連結されたパルミトイル基［Ｌｙｓ（γＥ−パルミトイル）］を含むようにデザインされた。この実施態様のペプチドは、Ｃ−末端でアミド化されている。
【０１９６】
ＯＸＭ４１６は、構造  ＨαＱＧＴＦＴＳＤＫ（γＥ−γＥ−パルミトイル）ＳＫＹＬＤＥＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９７）を有する。これは、２位にＡｉｂ（α）、Ｓｅｒ１６Ｇｌｕ置換、及び１０位に２つのγ−グルタミン酸残基及びリシンの側鎖アミノ基に連結されたパルミトイル基［Ｌｙｓ（γＥ−γＥ−パルミトイル）］を含むようにデザインされた。この実施態様のペプチドは、Ｃ−末端でアミド化されている。
【０１９７】
ＯＸＭ４１７は、構造  Ｈ−Ａｃｂ−ＱＧＴＦＴＳＤＫ（γＥ−γＥ−パルミトイル）ＳＫＹＬＤＥＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９８）を有する。これは、２位にＡｃｂ、Ｓｅｒ１６Ｇｌｕ置換、及び１０位に２つのγ−グルタミン酸残基及びリシンの側鎖アミノ基に連結されたパルミトイル基［Ｌｙｓ（γＥ−γＥ−パルミトイル）］を含むようにデザインされた。この実施態様のペプチドは、Ｃ−末端でアミド化されている。
【０１９８】
ＯＸＭ４１８は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＫ（γＥ−γＥ−パルミトイル）ＳＫＹＬＤαＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９９）を有する。これは、２位にＤ−Ｓｅｒ（ｓ）、３１位に１つのガンマ−アミノ酸、Ｓｅｒ１６Ａｉｂ（α）置換、及び１０位に２つのγ−グルタミン酸残基及びリシンの側鎖アミノ基に連結されたパルミトイル基［Ｌｙｓ（γＥ−γＥ−パルミトイル）］を含むようにデザインされた。この実施態様のペプチドは、Ｃ−末端でアミド化されている。
【０１９９】
ＯＸＭ４１９は、構造  ＨαＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−γＥ−Ｋ（γＥ−パルミトイル）−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１００）を有する。これは、２位にＡｉｂ（α）、３１位及び３２位に、ペプチドシーケンスとパルミトイル基の間のスペーサーとしてしての２つのガンマ−アミノ酸、３３位に１つのＬｙｓ（γＥ−パルミトイル）を含むようにデザインされた。この実施態様のペプチドは、Ｃ−末端でアミド化されている。
【０２００】
ＯＸＭ４２０は、構造  Ｈ−Ａｃｂ−ＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−γＥ−Ｋ（γＥ−パルミトイル）−ＣＯＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０１）を有する。これは、２位にＡｃｂ、３１位及び３２位に、ペプチドシーケンスとパルミトイル基の間のスペーサーとしての２つのガンマ−アミノ酸、３３位に１つのＬｙｓ（γＥ−パルミトイル）を含むようにデザインされた。この実施態様のペプチドは、Ｃ−末端でアミド化されている。
【０２０１】
ＯＸＭ４２１は、構造  ＨｓＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫ−γＥ−γＥ−Ｃ１２−ＣＯＯＨ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０２）を有する。これは、２位にＤ−Ｓｅｒ（ｓ）、ペプチドシーケンスとコレステロールとの間のスペーサーとして３１位及び３２位に２つのガンマ−グルタミン酸残基、３３位に１つのＣｙｓ（オキサ１２−Ｏ−コレステロール）（Ｃ１２）を含むようにデザインされた。Ｃｙｓ（オキサ１２−Ｏ−コレステロール）は、オキサ１２スペーサーにエーテル結合を介して連結されたコレステロールを有する点でＣｙｓ（オキサ１２−コレステロール）と異なる。Ｃ１１の構造を以下に示す。このエーテル結合は、Ｃｙｓ（オキサ１２−コレステロール）又はＣ１１に存在するエステル結合にさらなる安定性を与えることができる。Ｃｙｓ（オキサ１２−Ｏ−コレステロール）の構造を以下に示す。
【０２０２】
【化７】
0005756961.tif 000016
【０２０３】
医薬組成物
さらに、本発明は、本明細書に記載された１以上のＯＸＭ類似体の医薬的に効果的な量を含む、代謝性疾患を有する患者の治療のための医薬組成物を提供する。このような疾患の例としては、肥満症、メタボリックシンドローム又はシンドロームＸ、タイプII糖尿病や、網膜症、高血圧症、脂質代謝異常症、心血管疾患、胆石症、骨関節症、及びある形態の癌のような糖尿病合併症が挙げられるが、疾患の例はこれに限定されない。肥満症関連疾患は、肥満と結び付けられる、あるいは肥満により起こる、あるいは肥満の結果である。
【０２０４】
「肥満症」は過剰の体脂肪がある状態である。肥満症の運用基準は、体重を身長（メーター）の２乗で割ることにより計算される肥満度指数（ＢＭＩ）（ｋｇ／ｍ２）に基づいている。「肥満症」は、ある意味健康的な患者が、３０ｋｇ／ｍ２以上の肥満度指数（ＢＭＩ）を有する状態、又は少なくとも１つの余病を持つ患者が２７ｋｇ／ｍ２以上のＭＢＩを有する状態を指す。「肥満症患者」は、３０ｋｇ／ｍ２以上の肥満度指数（ＢＭＩ）を有するある意味健康的な患者、又は２７ｋｇ／ｍ２以上のＭＢＩを有する少なくとも１つの余病を持つ患者である。「肥満症のリスクを有する患者」は、２５ｋｇ／ｍ２〜３０ｋｇ／ｍ２未満のＢＭＩを有するある意味健康的な患者、又は２５ｋｇ／ｍ２〜２７ｋｇ／ｍ２未満のＢＭＩを有する少なくとも１つの余病を持つ患者である。
【０２０５】
肥満症についての増大したリスクは、アジア人ではより低い肥満度指数（ＢＭＩ）で起こる。日本を含むアジアの国々では、「肥満症」は、体重減少が必要とされる、少なくとも１つの肥満症誘発又は肥満症関連合併症を有する患者が、２５ｋｇ／ｍ２以上のＢＭＩを持つ状態を指す。日本を含むアジアの国々では、「肥満症患者」は、体重減少が必要とされる又は体重減少で改善される、少なくとも１つの肥満症誘発又は肥満症関連合併症を有する患者を指す。アジアの国々では、「肥満症のリスクを有する患者」は、２３ｋｇ／ｍ２より大きく、２５ｋｇ／ｍ２未満のＢＭＩを有する患者である。
【０２０６】
本明細書で用いられているように、「肥満症」の用語は、上記肥満症の定義の全てを包むものである。
【０２０７】
肥満症誘発又は肥満症関連合併症の例としては、糖尿病、非インスリン依存性糖尿病−タイプ２、グルコース耐性障害、空腹時高血糖障害、インスリン抵抗性症候群、脂質異常症、高血圧症、高尿酸血症、痛風、冠状動脈疾患、心筋こうそく、狭心症、睡眠時無呼吸症候群、ピックウィック症候群、脂肪肝、脳梗塞、脳血栓症、一過性脳虚血発作、矯正障害、変形性関節炎、ランボディニア、月経異常、及び不妊症が挙げられるが、肥満症誘発又は肥満症関連合併症がこれに限定されるものではない。特に、合併症としては、高血圧、高脂質症、脂質異常症、グルコース過敏症、心血管障害、睡眠時無呼吸症、糖尿病、及び肥満症関連状態が挙げられる。
【０２０８】
（肥満症及び肥満症関連疾患の）「治療（Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、本発明の化合物を投与し、肥満症患者の体重を低減又は維持することを指す。治療のひとつの成果は、本発明の化合物投与直前の体重に比べ肥満被験者の体重を減少する。他の治療成果は、ダイエット、運動、及び薬物療法の結果として従前に減らした体重の再復活を防止する。他の治療成果は、肥満症関連病の発生及び／又はつらさを低減する。治療により、適宜に、総食物摂取の低減又は炭水化物或いは脂肪のような特定の食品成分の摂取の低減を含む、被験者による食物或いはカロリー摂取における低減；及び／又は栄養分吸収の抑制；及び／又は代謝率の減少の抑制；及びそれらの必要に応じての患者における体重減少の結果が得られる。また、治療により、代謝率の低減の抑制よりもむしろ、又は代謝率の低減の抑制に加えて代謝率の増大のような代謝率の変更；及び／又は体重減少に通常起因する代謝抵抗性の低減化の結果も得られる。
【０２０９】
（肥満症及び肥満症関連疾患の）「予防」は、肥満症のリスクにある被験者の体重を低減する或いは維持するための本発明の化合物の投与を指す。予防の一つの成果は、本発明の化合物投与直前の被験者の体重に対し肥満症のリスクにある被験者の体重を減らす。予防の他の成果は、ダイエット、運動、及び薬物療法の結果として以前に減らした体重の再復活を防止する。予防の他の成果は、もし治療が肥満症のリスクにある被験者が肥満症となる前に行われれば、肥満症関連の病気の発生及び／又はつらさを低減する。さらに、もし治療が既に肥満症である被験者に開始される場合、このような治療により、これに限定されるものではないが、動脈硬化症、タイプII糖尿病、多嚢包性卵巣、心臓血管性疾患、骨関節炎、皮膚科疾患、高血圧症、インスリン耐性、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、胆石症のような肥満症関連疾患の発生、進行又はつらさを防ぐことができるかもしれない。
【０２１０】
本明細書において肥満関連疾患は、肥満症と結びついているか、これにより引き起こされるか、これに由来するものである。肥満関連疾患の例としては、過食及び大食症、高血圧、糖尿病、高血漿インスリン濃度症、インスリン耐性、脂質異常症、高脂質症、子宮癌、乳癌、前立腺癌、結腸癌、骨関節炎、閉塞型睡眠時無呼吸症、胆石症、胆石、心臓病、異常心臓リズム及び不整脈、心筋梗塞、うっ血性心不全、突然死、発作、多嚢胞性卵巣、頭蓋咽頭腫、プラダー・ウイリー症候群、フローリッシュ症候群、ＧＨ−欠乏患者、正常変異低身長、ターナー症候群、及び減少された代謝活性或いは総除脂肪体重のパーセンテージとして安静時エネルギー消費量の減少を示す他の病的状況、例えば、急性リンパ芽球性白血病の子供が挙げられる。また、肥満関連疾患の例としては、シンドロームＸとしても知られたメタボリックシンドローム、インスリン耐性症候群、不妊症、男性の性機能低下及び女性の多毛症のような性的又は生殖機能不全、肥満関連性逆流性食道炎のような消化管運動障害、肥満性低換気症候群（ピックウイック症候群）のような呼吸窮迫症、心血管病、血管系の全身性炎症のような炎症、動脈硬化、高コレステロール血症、高尿酸血症、腰痛、胆嚢炎、痛風及び腎臓癌がある。本発明の化合物は、左室肥大のリスクを減少させるような肥満の二次的影響を減少させるためにも有用である。
【０２１１】
本明細書で用いられる「糖尿病」の用語は、インスリン依存性糖尿病（ＩＤＤＭ、タイプＩ糖尿病としても知られている）及び非インスリン依存性糖尿病（ＮＩＤＤＭ、タイプII糖尿病としても知られている）の両者を含む。タイプＩ糖尿病或いはインスリン依存性糖尿病は、グルコースの利用を規制するホルモン、インスリンの完全な欠乏の結果である。タイプII糖尿病又はインスリンに依存しない糖尿病（すなわち、非インスリン依存性糖尿病）は、通常の又は高いインスリンレベルであるにもかかわれず、しばしば起り、インスリンに適宜に依存する組織の能力欠如の結果であると思われる。タイプIIの糖尿病患者のほとんどは肥満症でもある。本発明の化合物は、タイプＩ及びタイプIIの糖尿病の何れの治療においても大きな効果を有する。本発明の化合物は、妊娠性糖尿病の治療及び／又は予防にも有用である。
【０２１２】
米国特許第６，８５２，６９０号明細書、これはそのまま本明細書に組み込まれる、には、栄養的に効果を有する量の１種以上の栄養素又はこれらの組み合わせと１種以上のインスリン分泌性のペプチドからなる薬剤処方を非糖尿病患者に投与することからなる、栄養素の代謝作用を強化する方法が記載されている。この明細書に記載されているＯＸＭペプチド類似体は、インスリン分泌性であり、インスリン耐性のような阻害されたグルコース代謝を有するが糖尿病ではない患者、並びに何らかの理由で消化管を通して栄養を採ることができない患者に投与されることができる。このような患者には、外科患者、こん睡状態の患者、ショック状態の患者、胃腸病の患者、消化ホルモン病の患者などが含まれる。特に、肥満患者、アステローム性の動脈硬化症患者、血管病の患者、妊娠性の糖尿病患者、肝硬変のような肝臓病患者、先端巨大症患者、コルチゾール処置又はクッシング病のようなグルコールチコイド過剰患者、事故及び手術などの後に起こる外傷、活性化型の対抗制御ホルモン患者、高グリセリド血症患者、慢性病の患者は、本発明によって低血糖又は高血糖とされることなく容易且つ好適に栄養を与えられることができる。特に、そのような患者への投与は、約１６０〜１８０ミリグラム／デシリットルの血中グルコースのいわゆる腎閾値以下の血漿グルコースを維持しながら、患者への栄養並びにカロリー要求をできるだけ早く届ける療法を提供することを目的としている。該腎閾値以下のグルコースレベルを有さない通常の患者も、上記したように本発明にしたがって治療されることもできるが、血漿グルコースレベルが腎閾値より大きい高血糖症患者のような阻害されたグルコース代謝を有する患者も、かれらの状態に適した療法を見出す。特に、このような、間欠的な周期で腎閾値より低い高血糖の程度を有する患者は、以下の治療法式のいずれかにしたがって、栄養素  プラス  インスリン分泌性ペプチドの組み合わせ治療を受けることができる。このような高血糖の恐れの無い通常の患者も、本明細書に記載のペプチド類似体を用いて治療されることができる。
【０２１３】
本明細書に記載されるＯＸＭ類似体は、医薬的に受容可能なキャリアと組み合わされて医薬組成物中に用いられる。このような組成物は、治療上効果的な量の本明細書に記載される１以上のＯＸＭ類似体と、医薬的に受容可能なキャリアを含む。このような組成物は、（本明細書に記載されるＯＸＭ類似体に加え）希釈剤、フィラー、塩、バッファー、安定剤、可溶化剤、及び当業界で周知の他の材料を含んでいてもよい。本明細書に記載されるＯＸＭ類似体を含む組成物は、もし望むのであれば、塩が医薬的に受容可能であることを条件として、塩の形態で投与することができる。塩は、合成有機化学の分野の当業者に知られた標準的な方法を用いることにより製造することができる。
【０２１４】
「患者」の用語は、ヒト及び犬、猫、馬などの愛玩動物あるいは家畜を含むことを意味する。それ故、組成Ｉからなる組成物は、猫や犬における肥満や肥満関連疾患を治療する又は予防するためにも有用である。しかるが故に、「哺乳動物」の用語は、猫や犬のような愛玩動物を含む。
【０２１５】
用語「医薬的に受容可能な塩」は、無機又は有機塩基及び無機又は有機酸を含む、医薬的に受容可能な非毒性塩基又は酸から製造された塩を指す。無機塩基から誘導された塩としては、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、第二鉄、第一鉄、リチウム、マグネシウム、マンガン酸塩、亜マンガン、カリウム、ナトリウム、亜鉛などの塩が挙げられる。特に好ましいのは、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、カリウム、及びナトリウム塩である。医薬的に受容可能な有機非毒性塩基から誘導される塩としては、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リシン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン類、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミンなどのような、第一級、第二級、及び第三級アミン、天然起源の置換アミンを含む置換アミン、環状アミン、及び、塩基性イオン交換樹脂が含まれる。さらに、用語「医薬的に受容可能な塩」は、溶解性又は水解特性を変更するために剤形として用いられる、又は徐放性又はプロドラッグ製剤において用いられる、アセテート、ラクトビオネート、ベンゼンスルホネート、ラウレート、ベンゾエート、マレート、ビカルボネート、マレエート、ビスルフェート、マンデレート、ビタートレート、メシレート、ボレート、メチルブロマイド、ブロマイド、メチルニトレート、カルシウムエデテート、メチルスルフェート、カムシレート、ムケート、カルボネート、ナプシレート、クロライド、ニトレート、クラブラネート、Ｎ−メチルグルカミン、シトレート、アンモニウム塩、ジヒドロクロライド、オレエート、エデテート、オキサレート、エジシレート、パモエート（エンボネート）、エストレート、パルミテート、エシレート、パントテネート、フマレート、ホスフェート／ジホスフェート、グルセプテート、ポリガラクトロネート、グルコネート、サリシレート、グルタメート、ステアレート、グリコリルアルサニレート、スルフェート、ヘキシルレゾルシネート、サバセネート、ヒドラバミン、スクシネート、ヒドロブロミド、タンネート、ヒドロクロリイド、タータレイト、ヒドロナフトエート、テオクレート、ヨーダイド、トシレート、イソチオネート、トリエチオダイド、ラクテート、パノエート、バレエートなどを含む。本明細書において用いられているように、本明細書に記載されているＯＸＭ類似体への言及は、医薬的に受容可能な塩をも含むことを意味することは理解されるであろう。
【０２１６】
本明細書において用いられているように、用語「医薬的に受容可能な」は、活性成分の生物学上の活性効果を妨げず、動物、特にはヒトに使用するため、連邦又は州政府の監督機関により承認された、又は米国薬局方又は他の一般的に認められている薬局方に載せられている、非毒性物質を意味する。用語「キャリア」は、これを用いて治療薬が投与される、希釈剤、補助剤、賦形剤、又はベヒクルを指し、これに限定されるものではないが、水及び油のような無菌の液体を含む。キャリアの特性は、投与のルートに依存する。本明細書に記載されたＯＸＭ類似体は、多量体（マルチマー）（例えば、ヘテロダイマー又はホモダイマー）、又はそれ自身での又は他のペプチドとの複合体であってもよい。結果として、本発明の医薬的組成物は、このような多量体又は複合体形の、本明細書に記載された１以上のＯＸＭ類似体からなってもよい。
【０２１７】
本明細書において用いられているように、用語「医薬効果量」は、有意義な患者利益、例えば、関連する医療状態の治療、癒し、予防又は回復、又はそのような状態の治療、癒し、予防又は回復速度の増大、を示すに十分な医薬組成物又は方法の各活性成分の総量を意味する。単独で投与される個々の活性成分に適用される場合、この用語は、該成分単独の量を意味する。組み合わせて用いられる場合、この用語は、組み合わせで、連続的に投与されるか又は同時に投与されるかにかかわらず、治療効果が得られる活性成分の組み合わせ量を意味する。
【０２１８】
医薬組成物は、本明細書に記載された１種以上のＯＸＭ類似体と代謝性疾患を治療するための１種以上の他の剤とからなることができ；又は本明細書に記載された１種以上のＯＸＭ類似体からなる医薬組成物は、代謝性疾患を治療するための剤からなる薬理学的組成物と共に用いられることができる。このような疾患は、これに限定されるものではないが、肥満症、メタボリックシンドローム又はシンドロームＸ、タイプII糖尿病、糖尿病併発症、高血圧、脂質代謝異常症、心血管疾患、胆石、骨関節炎、及びある形態の癌を含む。
【０２１９】
該薬理学的組成物が代謝疾患を治療するための他の剤を含む、又は第二の薬理学的組成物が代謝疾患を治療するための他の剤を含む場合、この剤は、これに限定されるものではないが、カンナビノイド（ＣＢ１）受容体アンタゴニスト、グルカゴン様ペプチド（ＧＬＰ−１）受容体アゴニスト、リバーゼ抑制剤、レプチン、テトラヒドロリプスタチン、２−４−ジニトロフェノール、アカルボース、シブトラミン、フェンタミン、脂肪吸収ブロッカー、シムバスタチン、メバスチン、エゼチミブ、アトルバスタチン、シタグリプチン、メトフォルミン、オリスタット、クネクサ（Ｑｎｅｘａ）、トピラメート、ナルトレクソン、ブプリオピオン、フェンテルミン、ロサルタン、ヒドロクロロチアゾール付加ロサルタンなどを含む。
【０２２０】
本発明の化合物との組み合わせでの使用に適した剤としては、これに限定されるものではないが、次のようなものが挙げられる。
【０２２１】
（ａ）国際出願公開番号ＷＯ２００７／１０９１３５に記載されているような、ニューロメジンＵ受容体アゴニスト、
【０２２２】
（ｂ）次に示すような抗糖尿病薬：（１）グリタゾン（例えば、シグリタゾン；ダーグリタゾン、エングリタゾン、イサグルタゾン（ＭＣＣ−５５５）：ピオグリタゾン（ＡＣＴＯＳ）；ロシグリタゾン（ＡＶＡＮＤＩＡ）；トログリタゾン、リボグリタゾン、ＢＲＬ４９６５３；ＣＬＸ−０９２１；５−ＢＴＺＤ、ＧＷ−０２０７、ＬＧ−１００６４１、Ｒ４８３、及びＬＹ−３００５１２など、及びＷＯ９７／１０８１３、９７／２７８５７、９７／２８１１５、９７／２８１３７、９７／２７８４７、０３／０００９８５、及び０３／０２７１１２に記載されている化合物、及びＴ１３１（アムゲン）、ＦＫ６１４（藤沢）、ネトグリタゾン及びメアグリダセンのようなＳＰＰＡＲＭＳ（選択性ＰＰＡＲガンマモジュレーター）のようなＰＰＡＲγアゴニスト；（２）ブホルミン；メトホルミン；及びフェノホルミンなどのビグアニド剤；（３）ＩＳＩＳ  １１３７１５、Ａ−４０１６７４、Ａ−３６４５０４、ＩＤＤ−３、ＩＤＤ  ２８４６、ＫＰ−４００４６、ＫＲ６１６３９、ＭＣ５２４４５、ＭＣ５３４５３、Ｃ７、ＯＣ−０６００６２、ＯＣ−８６８３９、ＯＣ２９７９６、ＴＴＰ−２７７ＢＣ１のようなプロテインチロシンホスファターゼ−１Ｂ（ＰＴＰ−１Ｂ）抑制剤、及びＷＯ０４／０４１７９９、０４／０５０６４６、０２／２６７０７、０２／２６７４３、０４／０９２１４６、０３／０４８１４０、０４／０８９９１８、０３／００２５６９、０４／０６５３８７、０４／１２７５７０、及びＵＳ２００４／１６７１８３に記載されているこのような剤；（４）アセトヘキサミド；クロルプロパミド；ジアビネーゼ；グリベンクラミド；グリピジド；グリブリド；グリメピリド；グリクラジド；グリペンチド；グリキドン；グリソラミド；トラザミド；及びトルブタミドなどのようなスルホニルウレア類；（５）レパグリニド、メチグリニド（ＧＬＵＴＡＳＴ）、及びナテグリニドなどのようなメグリチニド類；（６）アカルボーゼ；アジポジン；カミグリボーゼ；エミグリテイト；ミグリトール；ボグリボーゼ；プラヂマイシン−Ｑ；サルボスタチン；ＣＫＤ−７１１；ＭＤＬ−２５，６３７；ＭＤＬ−７３，９４５；及びＭＯＲ  １４などのようなアルファグルコシドヒドロラーゼ抑制剤；（７）テンダミスタット、トレスタチン、及びＡｌ−３６８８などのようなアルファ−アミラーゼ抑制剤；（８）リノグリリド、ナテグリニド（ＧＬＵＦＡＳＴ）、ＩＤ１１０１  Ａ−４１６６などのようなインスリン分泌促進剤；（９）クロモキシル及びエトモキシルなどのような脂肪酸酸化抑制剤；（１０）ミダグリゾール；イサグリドール；デリグリドール；イダゾキサン；エアロキサン；及びフルパロキサンなどのようなＡ２アンタゴニスト；（１１）ビオタ、ＬＰ−１００、ノバラピド、インスリンデテミイル、インスリンリスプロ、インスリングラルジン、インスリン亜鉛サスペンジョン（レンテ及びウルトラェンテ）；Ｌｙｓ−Ｐｒｏインスリン、ＧＬＰ−１（１７−３６）、ＧＬＰ−１（７３−７）（インスリントロピン）；ＧＬＰ−１（７−３６）−ＮＨ２）エクセナチド／エクセンジン−４、エクセナチドＬＡＲ、リナグルチド、ＡＶＥ００１０、ＣＪＣ１１３１、ＢＩＭ５１０７７、ＣＳ��７２、ＴＨＯ３１８、ＢＡＹ−６９４３２６、ＧＰ０１０、アルブゴン（アルブミンに融解されたＧＬＰ−１）、ＨＧＸ−００７（エパックアゴニスト）、Ｓ−２３５２１、及びＷＯ０４／０２２００４、ＷＯ０４／３７８５９に記載されている化合物などのようなインスリン又はインスリン類似薬；（１２）ＪＴ−５０１、及びファルグリタザール（ＧＷ−２５７０／ＧＩ−２６２５７９）などのような非チアゾリジンヂオン類；（１３）ＡＶＥ０８４７、ＣＬＸ−０９４０、ＧＷ−１５３６、ＧＷ１９２９、ＧＷ−２４３３、ＫＲＰ−２９７、Ｌ−７９６４４９、ＬＢＭ−６４２、ＬＲ−９０、ＬＹ５１０９１９、ＭＫ−０７６７、ＯＮＯ５１２９、ＳＢ２１９９９４、ＴＡＫ−５５９、ＴＡＫ−６５４、６７７９５４（グラクソスミスクライン）、Ｅ−３０３０（エイザイ）、ＬＹ５１０９２９（リリー）、ＡＫ１０９（アサヒ）、ＤＲＦ２６５５（ドクター  レデイ）、ＤＲＦ８３５１（ドクター  レデイ）、ＭＣ３００２（マクソコア）、ＴＹ５１５０１（東亜栄養）、ナベグリタザール、ムラグリチザール、ペリグリタザール、テサグリタザール（ガリダ）、レグリタザール（ＪＴＴ−５０１）、チグリタザール、及びＷＯ９９／１６７５８、ＷＯ９９／１９３１３、ＷＯ９９／２０６１４、ＷＯ９９／３８８５０、ＷＯ００／２３４１５、ＷＯ００／２３４１７、ＷＯ００／２３４４５、ＷＯ００／５０４１４、ＷＯ０１／００５７９、ＷＯ０１／７９１５０、ＷＯ０２／０６２７９９、ＷＯ０３／０３３４８１、ＷＯ０３／０３３４５０、ＷＯ０３／０３３４５３に記載されているもののようなＰＰＡＲα／γデュアルアゴニスト；及び（１４）他のインスリン感作薬；（１５）ＶＰＡＣ２受容体アゴニスト；（１６）ＰＳＮ１０５、ＲＯ２８１６７５、ＲＯ２７４３７５、及びＷＯ０３／０１５７７４、ＷＯ０３／０００２６２、ＷＯ０３／０５５４８２、ＷＯ０４／０４６１３９、ＷＯ０４／０４５６１４、ＷＯ０４／０６３１７９、ＷＯ０４／０６３１９４、ＷＯ０４／０５０６４５などに記載されているもののようなＧＬＫ修飾薬；（１７）ＷＯ０３／０００２４９に記載されているもののようなレチノイド修飾薬；（１８）４−［２−（２−ブロモフェニル）−４−（４−フルオロフェニル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル］ピリジン、ＣＴ２１０２２、ＣＴ２００２６、ＣＴ−９８０２３、ＳＢ−２１６７６３、ＳＢ４１０１１１、ＳＢ−６７５２３６、ＣＰ−７０９４９、ＸＤ４２４１のようなＧＳＫ３ベータ／ＧＳＫ３抑制剤及びＷＯ０３／０３７８６９、０３／０３８７７、０３／０３７８９１、０３／０２４４４７，０５／０００１９２、０５／０１９２１８などに記載されているこれら化合物；（１９）ＡＶＥ５６８８、ＰＳＮ３５７、ＧＰｉ−８７９、ＷＯ０３／０３７８６４、ＷＯ０３／０９１２１３、ＷＯ０４／０９２１５８、ＷＯ０５／０１３９７５、ＷＯ０５／０１３９８１、ＵＳ２００４／０２２０２２９、及びＪＰ２００４−１９６７０２に記載されているもの、などのようなグリコーゲンホスホリラーゼ（ＨＧＬＰａ）抑制剤；（２０）ＷＯ０３／００７９９０に記載されているもののようなＡＴＰ消費促進剤；（２１）アバンダメットのようなＰＰＡＲγアゴニスト及びメト���ルミンの一定割合での組み合わせ薬；（２２）ＧＳＫ６７７９５４のようなＰＰＡＲパンアゴニスト（２３）ＢＧ７００及びＷＯ０４／０４１２６６、０４／０２２５５１、０３／０９９７９３に記載されているもののようなスノルフ５５とも呼ばれるＧＰＲ４０（Ｇ−タンパク質共役受容体）；（２４）ＲＵＰ３、ＨＧＰＲＢＭＹ２６、ＰＦＩ００７、ＳＮＯＲＦ２５のようなＧＰＲ１１９（ＲＵＰ３；ＳＮＯＲＦ２５とも呼ばれる）；（２５）ＡＴＬ−６１８、ＡＴＩ−８０２、Ｅ３０８０などのようなアデノシン受容体２Ｂアンタゴニスト；（２６）ＳＴ１３２７及びＳＴ１３２６などのようなカルニチンパルミトイルトランスファラーゼ抑制剤；（２７）ＣＳ−９１７、ＭＢ７８０３などのようなフラクトース  １，６−ビスホスファターゼ抑制剤；（２８）ＡＴ７７０７７、ＢＡＹ６９４３２６、ＧＷ４１２３Ｘ、ＮＮ２５０１、及びＷＯ０３／０６４４０４、ＷＯ０５／００７８１、ＵＳ２００４／０２０９９２８、ＵＳ２００４／０２９９４３などに記載されているもののようなグルカゴンアンタゴニスト；（３０）グルコース−６−ホスファーゼ抑制剤；（３１）ホスホエノルピルベイト  カルボキシキナーゼ（ＰＥＰＣＫ）抑制剤；（３２）ピルベイト  デヒドロゲナーゼ  キナーゼ（ＰＤＫ）活性剤；（３３）ＭＣ１０３６、ＣＳ０００１８、ＪＮＪ１０１６６８０６のような、及びＷＯ０４／０８９９１６、ＵＳ６７５９５４９、などに記載されているＲＸＲアゴニスト；（３４）ＡＶＥ２２６８、ＫＧＴ１２５１、Ｔ１０９５／ＲＷＪ３９４７１８のようなＳＧＬＴ抑制剤；（３５）ＢＬＸ−１００２；
【０２２３】
（ｃ）次に示すような脂質低化剤：（１）コレスチルアミン、コレセベレム、コレスチポール、架橋されたデキストランのジアルキルアミノアルキル誘導体；コレスチドＴＭ；ロコレスチドＴＭ及びクエストランＴＭなどのような胆汁酸捕捉剤；（２）アトルバスタチン、イタバスタチン、ピタバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、プラバスタチン、リバスタチン、ロスバスタチン、シムバスタチン、ロスバスタチン（ＺＤ−４５２２）など、特にシムバスタチン、のようなＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素抑制剤；（３）ＨＭＧ−ＣｏＡ合成酵素抑制剤；（４）ＦＭＶＰ４（フォーブス  Ｍｅｄｉ−Ｔｅｃｈ）、ＫＴ６−９７１（寿製薬）、ＦＭ−ＶＡ１２（フォーブス  Ｍｅｄｉ−Ｔｅｃｈ）、ＦＭ−ＶＰ−２４（フォーブス  Ｍｅｄｉ−Ｔｅｃｈ）、スタノールエステル類、ベータ−シトステロール、チクエシドのようなステロールグリコシド類；及びエゼチミベのようなアゼチヂノン；及びＷＯ０４／００５２４７などに記載されているもののようなコレステロール吸収抑制剤；（５）アバシミベ、エフルシミベ、パクチミベ（ＫＹ５０５）、ＳＭＰ７９７（住友）、ＳＭ３２５０４（住友）、及びＷＯ０３／０９１２１６などに記載されているもののようなアシル  コエンザイム  Ａ−コレステロール  アシル  トランスファラーゼ（ＡＣＡＴ）抑制剤；（６）ＪＴＴ７０５（日本たばこ）、トルセトラピブ、ＣＰ５３２，６３２、ＢＡＹ６３−２１４９（バイエル）、ＳＣ５９１、ＳＣ７９５などのようなＣＥＴＰ抑制剤：（７）スクワレン合成酵素抑制剤；（８）プロブコールなどのような抗酸化剤；（９）ベクロフィブラート、ベンザフィブラート、シプロフィブラート、クロフィブラート、エトフィブラート、フェノフィブラート、ゲムカルベン、及びゲムフィブロジル、ＧＷ７６４７、ＢＭ１７０７４４（興和）、ＬＹ５１８６７４（リリー）、ＧＷ５９０７３５（グラクソスミスクライン）、ＫＲＰ−１０１（杏林）、ＤＲＦ１０９４５（ドクター  レディー）、ＮＳ−２２０／Ｒ１５９３（日本新薬／ロシュ）、ＳＴ１９２９（シグマ  タウ）、ＭＣ３００１／ＭＣ３００４（マクソコア  ファーマソイチカルズ）、ゲムカベン  カルシウム、アトロミドＴＭ、ロピドＴＭ及びトリコールＴＭのような他のフィブリン酸、及びＵＳ６，５４８，５３８などに記載されているもののようなＰＰＡＲαアゴニスト；（１０）ＧＷ４０６４（グラクソスミスクライン）、ＳＲ１０３９１２、ＯＲＸ４０１、ＬＮ−６６９１（ライオン  バイオサイエンス）、及びＷＯ０２／０６４１２５、ＷＯ０４／０４５５１１などに記載されているもののようなＦＸＲ受容体修飾薬；（１１）ＧＷ３９６５（グラクソスミスクライン）、Ｔ９０１３１３７、およびＸＴＣＯ１７９６２８（Ｘ−セプター  セラポイチックス／サンヨー）、及びＷＯ０３／０３１４０８、ＷＯ０３／０６３７９６、ＷＯ０４／０７２０４１などに記載されているもののようなＬＸＲ受容体修飾薬；（１２）ニアシンのようなリポタンパク質合成抑制剤；（１３）レニンアンギオテンシン系抑制剤；（１４）ＷＯ０３／０２４３９５に記載されているもののようなＰＰＡＲδ部分アゴニスト；（１５）ＢＡＲＩ  １４５３、ＳＣ４３５、ＰＨＡ３８４６４０、Ｓ���９２１、ＡＺＤ７７０６などのような胆汁酸再吸収抑制剤；及びコレセベラン（ウエルコール／コレスタゲル）のような胆汁酸捕捉剤；（１６）ＧＷ５０１５１６（リガンド、ＧＳＫ）、ＧＷ５９０７３５、ＧＷ−０７４２（グラクソスミスクライン）、Ｔ６５９（アムゲン／ツラリック）、ＬＹ９３４（リリー）、ＮＮＣ６１００５０（ノボ  ノルディスク）、及びＷＯ９７／２８１４９、ＷＯ０１／７９１９７、ＷＯ０２／１４２９１、ＷＯ０２／４６１５４、ＷＯ０２／４６１７６、ＷＯ０２／０７６９５７、ＷＯ０３／０１６２９１、ＷＯ０３／０３３４９３、ＷＯ０３／０３５６０３、ＷＯ０３／０７２１００、ＷＯ０３／０９７６０７、ＷＯ０４／００５２５３、ＷＯ０４／００７４３９、及びＪＰ１０２３７０４９などに記載されたもののようなＰＰＡＲγアゴニスト；（１７）トリグリセリド合成抑制剤；（１８）インプリタピド、ＬＡＢ６８７、ＪＴＴ１３０（日本たばこ）、ＣＰ３４６０８６、及びＷＯ０３／０７２５３２などに記載されているもののようなミクロソームトリグリセリド輸送（ＭＴＴＰ）抑制剤；（１９）転写修飾薬；（２０）スクワランエポキシダーゼ抑制剤；（２１）低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）受容体誘発剤；（２２）血小板凝集抑制剤；（２３）５−ＬＯ又はＦＬＡＰ抑制剤；及び（２４）ＨＭ７４Ａ受容体アゴニストを含むニアシン受容体アゴニスト；（２５）ＷＯ０１／２５１８１、ＷＯ０１／７９１５０、ＷＯ０２／７９１６２、ＷＯ０２／０８１４２８、ＷＯ０３／０１６２６５、ＷＯ０３／０３３４５３に記載されているもののようなＰＰＡＲ修飾薬；（２６）ＷＯ０３／０３９５３５に記載されているようなニアシン結合クロミウム；（２７）ＷＯ０３／０４０１１４に記載されている、置換された酸誘導体類；（２８）ＬＵＶ／ＥＴＣ−５８８（ファイザー）、ＡＰＯ−Ａ１  ミラノ／ＥＴＣ２１６（ファイザー）、ＥＴＣ−６４２（ファイザー）、ＩＳＩＳ３０１０１２、Ｄ４Ｆ（ブルイン製薬）、合成三量体アポＡ１、泡沫細胞に向けられたバイオラル  アポ  Ａ１、などのような注入（ｉｎｆｕｓｅｄ）ＨＤＬ；（２９）ＢＡＲＩ１４３／ＨＭＲ１４５Ａ（サノフィ−アベンティス、ＰＨＡ３８４６４０Ｅ（ファイザー）、Ｓ８９２１（塩野義）、ＡＺＤ７８０６（アストロゼネカ）、ＡＫ１０５（旭化成）、などのＩＢＡＴ抑制剤；（３０）ＳＢ４８０８４８（グラクソスミスクライン）、６５９０３２（グラクソスミスクライン）、６７７１１６（グラクソスミスクライン）、などのＬｐ−ＰＬＡ２抑制剤；（３１）ＥＴＣ１００１／ＥＳＰ３１０１５（ファイザー）、ＥＳＰ−５５０１６（ファイザー）、ＡＧＩ  １０６７（アセロジェニックス）、ＡＣ３０５６（アミリン）、ＡＺＤ４６１９（アストロゼネカ）を含む脂質組成物に作用する他の剤；及び
【０２２４】
（ｄ）次に示すような高血圧剤：（１）クロルタリドン、クロルチアジド、ジクロロフェナミド、ヒドロフルメチアジド、インダパミド、及びヒドロクロロチアジドを含むチアジドのような利尿剤；ブメタニド、エタクリニック酸、フロセミド、及びトルセミドのようなループ利尿剤；アミロリド、トリアムテレンのようなカリウム節約剤、及びスピロノラクトン、エピレノン、などのようなアルドステロンアンタゴニスト；（２）アセブトロール、アテノロール、ベタクソロール、ベバントロール、ビソプロロール、ボピンドロール、カルテオロール、カルベジロール、セリプロロール、エスモロール、インデノロール、メタプロロール、ナドロール、ネビボロール、ペンブトロール、ピンドロール、プロパノロール、ソタロール、テルタトロール、チリソロール、などのようなベータ−アドレナリン作用遮断薬；（３）アムロジピン、アラニジピン、アゼルニジピン、バルニジピン、ベニジピン、ベプリジル、シナルジピン、クレビジピン、ジルチアゼム、エホニジピン、フェロジピン、ガロパミル、イスラジピン、ラシジピン、レミルジピン、レカニジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニルバジピン、ニモデピン、ニソルジピン、ニトレンジピン、マニジピン、プラニジピン、及びベラパミルなどのようなカルシウムチャネル遮断剤；（４）ベナゼプリル；カプトプリル；シラザプリル；デラプリル；エナラプリル；フォシノプリル；イミダプリル；ロシノプリル；モエキシプリル；キナプリル；キナプリラト；ラミプリル；ペリンドプリル；ペリンドロプリル；キアニプリル；スピラプリル；テノカプリル、トランドラプリル；及びゾフェノプリルなどのようなアンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）抑制剤；（５）オマパトリリラット、カドクサトリル、及びエカドトリル、フォシドトリル、サンパトリラット、ＡＶＥ７６８８、ＥＲ４０３０、などのような中性エンドペプチダーゼ抑制剤；（６）テゾセンタン、Ａ３０８１６５、及びＹＭ６２８９９、などのようなエンドテリンアンタゴニスト；（７）ヒドララジン、クロニジン、ミノキシジル、及びニコチニルアルコール、などのバサジラトール；（８）カンデサルタン、エプロサルタン、イルベサルタン、ロサルタン、プラトサルタン、タソサルタン、テルミサルタン、バルサルタン、ＥＸＰ−３１３７、Ｆ１６８２８Ｋ，及びＲＮＨ６２７０、などのようなアンギオテンシンII受容体アンタゴニスト；（９）ニプラジロール、アロチノロール、アモスラロールなどのようなα／βアドレナリンブロッカー；（１０）テラゾシン、ウラピジル、プラゾシン、ブナゾシン、トリマゾシン、ドキサゾシン、ナフトピジル、インドラミン、ＷＨＩＰ１６４、及びＸＥＮ１０、などのようなアルファ  １  ブロッカー；（１１）ロフェキシジン、チアメニジン、モクソニジン、リルメニジン及びグアノベンツ、などのようなアルファ  ２  アゴニスト；（１２）アルデステロン抑制剤など；（１３）ＷＯ０３／０３０８３３に記載されているもののようなアンギオポイエチン−２−結合剤；及び
【０２２５】
（ｅ）次に示すような抗肥満症薬：（１）パロキセチン、フルオキセチン、フェンフルラミン、フルボキサミン、セルトラィン、及びイミプラミン、及びＷＯ０３／００６６３に記載されているもの、のような５ＨＴ（セロトニン）トランスポーター抑制剤並びにシブトラミン（メリジア／レダクチル）のようなセロトニン／ノルアドレナリン再摂取抑制剤及びラダファキシンヒドロクロライド、３５３１６２（グラクソスミスクライン）のようなドーパミン摂取抑制剤／ノレペネフリン摂取抑制剤、など；（２）ＧＷ３２０６５９、デスピラミン、タルスプラム、及びノミフェンシンのようなＮＥ（ノレピネフリン）トランスポーター抑制剤；（３）リモナバント（アコンプリア  サノフィ  シンセラボ）、ＳＲ−１４７７７８（サノフィ  シンセラボ）、ＡＶＥ１６２５（サノフィ−アベンティス）、ＢＡＹ６５−２５２０（バイエル）、ＳＬＶ３１９（ソルバイ）、ＳＬＶ３２６（ソルバイ）、ＣＰ９４５５９８（ファイザー）、Ｅ−６７７６（エステブ）、Ｏ１６９１（オルガニックス）、ＯＲＧ１４４８１（オルガノン）、ＶＥＲ２４３４３（ベルナリス）、ＮＥＳＳ０３２７（サッサリ大学／カリアリ大学）、及び米国特許番号４，９７３，５８７、５，０１３，８３７、５，０８１，１２２、５，１１２，８２０、５，２９２，７３６、５，５３２，２３７、５，６２４，９４１、６，０２８，０８４、及び６，５０９，３６７；及びＷＯ９６／３３１５９、ＷＯ９７／２９０７９、ＷＯ９８／３１２２７、ＷＯ９８／３３７６５、ＷＯ９８／３７０６１、ＷＯ９８／４１５１９、ＷＯ９８／４３６３５、ＷＯ９８／４３６３６、ＷＯ９９／０２４９９、ＷＯ００／１０９６７、ＷＯ００／１０９６８、ＷＯ０１／０９１２０、ＷＯ０１／５８８６９、ＷＯ０１／６４６３２、ＷＯ０１／６４６３３、ＷＯ０１／６４６３４、ＷＯ０１／７０７００、ＷＯ０１／９６３３０、ＷＯ０２／０７６９４９、ＷＯ０３／００６００７、ＷＯ０３／００７８８７、ＷＯ０３／０２０２１７、ＷＯ０３／０２６６４７、ＷＯ０３／０２６６４８、ＷＯ０３／０２７０６９、ＷＯ０３／０２７０７６、ＷＯ０３／０２７１１４、ＷＯ０３／０３７３３２、ＷＯ０３／０４０１０７、ＷＯ０４／０９６７６３、ＷＯ０４／１１１０３９、ＷＯ０４／１１１０３３、ＷＯ０４／１１１０３４、ＷＯ０４／１１１０３８、ＷＯ０４／０１３１２０、ＷＯ０５／０００３０１、ＷＯ０５／０１６２８６、ＷＯ０５／０６６１２６、及びＥＰ−６５８５４６に記載されたもののようなＣＢ１（カンナビノイド−１受容体）アンタゴニスト／インバースアゴニスト、など；（４）ＢＶＴ８１−９７（バイオ  ビトラム）、ＲＣ１２９１（レジュベノン）、ＳＲＤ−０４６７７（住友）、非アシル化グレリン（テラ  テクノロジーズ）、及びＷＯ０１／８７３３５、ＷＯ０２／０８２５０、ＷＯ０５／０１２３３１に記載されているもののようなグレリンアゴニスト／アンタゴニスト、など；（５）チオペラミド、３−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）プロピル  Ｎ−（４−ペンテニル）カルバメート）、クロベンプロピット、ヨードフェンプロピット、イモプロキシファン、ＧＴ２３９４（グリアテック）、及びＡ３３１４４０、及びＷＯ０２／１５９０５に記載されているもの；及びＯ−［３−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）プロパノール］カルバメート（キエック−コノノビエッツ（Ｋｉｅｃ−Ｋｏｎｏｎｏｗｉｅｚ），Ｋ．他，ファルマチエ（Ｐｈａｒｍａｚｉｅ）、２０００年、第５５巻、３４９−５５頁）、ピペリジン含有ヒスタミンＨ３受容体アンタゴニスト（ラゼスカ（Ｌａｚｅｗｓｋａ），Ｄ．他、ファルマジエ、２００１年、第５６巻、９２７−３２頁）、ベンゾフェノン誘導体及び関連化合物（サッセ（Ａａｓｓｅ）），Ａ．他，Ａｒｃｈ．Ｐｈａｍ．（Ｗｅｉｎｈｅｉｍ）３３４：４５−５２（２００１））、置換されたフェニルカルバメート（レイドメイスター（Ｒｅｉｄｅｍｅｉｓｔｅｒ），Ｓ．他，ファルマチエ、２０００年、第５５巻、８３−６頁）、及びプロキシファン誘導体（サッセ（Ａａｓｓｅ）），Ａ．他，ジャーナル  オブ  メディカル  ケミストリー（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．）、２００年、第４３巻、３３３５−４３頁）のような、Ｈ３（ヒスタミン  Ｈ３）アントゴニスト／インバースアゴニスト及びＷＯ０３／０２４９２８及びＷＯ０３／０２４９２９に記載されているもののようなヒスタミンＨ３受容体モジュレータ；（６）Ｔ−２２６２９６（武田）、Ｔ７１（武田／アムゲン）、ＡＭＧＮ−６０８４５０、ＡＭＧＮ−５０３７９６（アムゲン）、８５６４６４（グラクソスミスクライン）、Ａ２２４９４０（アボット）、Ａ７９８（アボット）、ＡＴＣ０１７５／ＡＲ２２４３４９（アレナ  ファーマソイティカルズ）、ＧＷ８０３４３０（グラクソスミスクライン）、ＮＢＩ−１Ａ（ニューロクリン  バイオサイエンシイズ）、ＮＧＸ−１（ノイロゲン）、ＳＮＰ−７９４１（シナプチック）、ＳＮＡＰ９８４７（シナプチック）、Ｔ−２２６２９３（シェリング  プロウ）、ＴＰＩ−１３６１−１７（埼玉医科大学／カルフォルニア、アーバイ大学）、及びＷＯ０１／２１１６９、ＷＯ０１／８２９２５、ＷＯ０１／８７８３４、ＷＯ０２／０５１８０９、ＷＯ０２／０６２４５、ＷＯ０２／０７６９２９、ＷＯ０２／０７６９４７、ＷＯ０２／０４４３３、ＷＯ０２／５１８０９、ＷＯ０２／０８３１３４、ＷＯ０２／０９４７９９、ＷＯ０３／００４０２７、ＷＯ０３／１３５７４、ＷＯ０３／１５７６９、ＷＯ０３／０２８６４１、ＷＯ０３／０３５６２４、ＷＯ０３／０３３４７６、ＷＯ０３／０３３４８０、ＷＯ０４／００４６１１、ＷＯ０４／００４７２６、ＷＯ０４／０１１４３８、ＷＯ０４／０２８４５９、ＷＯ０４／０３４７０２、ＷＯ０４／０３９７６４、ＷＯ０４／０５２８４８、ＷＯ０４／０８７６８０；及び日本出願公開番号ＪＰ１３２２６２６９、ＪＰ１４３７０５９、ＪＰ２００４３１５５１１などに記載されているもののようなメラミン濃縮ホルモン１受容体（ＭＣＨ１Ｒ）アンタゴニスト；（７）ＭＣＨ２Ｒ（メラミン濃縮ホルモン２Ｒ）アゴニスト／アンタゴニスト；（８）ＢＭＳ２０５７４９、ＢＩＢＰ３２２６、Ｊ−１１５８１４、ＢＩＢＯ３３０４、ＬＹ−３５７８９７、ＣＰ−６７１９０６、及びＧＩ−２６４８７９Ａ；及び米国特許６，００１，８３６；ＷＯ９６／１４３０７、ＷＯ０１／２３３８７、ＷＯ９９／５１６００、ＷＯ０１／８５６９０、ＷＯ０１／８���０９８、ＷＯ０１／８５１７３、及びＷＯ０１／８９５２８に記載されているもののようなＮＰＹ１（ノイロペプチドＹ  Ｙ１）アンタゴニスト；（９）１５２，８０４、Ｓ２３６７（塩野義）、Ｅ−６９９９（エステブ）、ＧＷ−５６９１８０Ａ、ＧＷ−５９４８８４Ａ（グラクソスミスクライン）、ＧＷ−５８７０８１Ｘ、ＧＷ−５４８１１８Ｘ；ＦＲ２３５，２０８；ＦＲ２２６９２８、ＦＲ２４０６６２、ＦＲ２５２３８４；１２２９Ｕ９１、ＧＩ−２６４８７９Ａ、ＣＧＰ７１６８３Ａ、Ｃ−７５（ファスゲン）、ＬＹ−３７７８９７、ＬＹ３６６３７７、ＰＤ−１６０１７０、ＳＲ−１２０５６２Ａ、ＳＲ−１２０８１９Ａ、Ｓ２３６７（塩野義）、ＪＣＦ−１０４、及びＨ４０９／２２；及び米国特許６，１４０，３５４、６，１９１，１６０、６，２５８，８３７、６，３１３，２９８、６，３２６，３７５、６，３２９，３９５、６，３３５，３４５、６，３３７，３３２、６，３２９，３９５、及び６，３４０，６８３；及びＥＰ−０１０１０６９１、ＥＰ−０１０４４９７０、及びＦＲ２５２３８４；及びＰＣＴ公開番号ＷＯ９７／１９６８２、ＷＯ９７／２０８２０、ＷＯ９７／２０８２１、ＷＯ９７／２０８２２、ＷＯ９７／２０８２３、ＷＯ９８／２７０６３、ＷＯ００／１０７４０９、ＷＯ００／１８５７１４、ＷＯ００／１８５７３０、ＷＯ００／６４８８０、ＷＯ００／６８１９７、ＷＯ００／６９８４９、ＷＯ０１／０９１２０、ＷＯ０１／１４３７６、ＷＯ０１／８５７１４、ＷＯ０１／８５７３０、ＷＯ０１／０７４０９、ＷＯ０１／０２３７９、ＷＯ０１／０２３７９、ＷＯ０１／２３３８８、ＷＯ０１／２３３８９、ＷＯ０１／４４２０１、ＷＯ０１／６２７３７、ＷＯ０１／６２７３８、ＷＯ０１／０９１２０、ＷＯ０２／２０４８８、ＷＯ０２／２２５９２、ＷＯ０２／４８１５２、ＷＯ０２／４９６４８、ＷＯ０２／０５１８０６、ＷＯ０２／０９４７８９、ＷＯ０３／００９８４５、ＷＯ０３／０１４０８３、ＷＯ０３／０２２８４９、ＷＯ０３／０２８７２６、Ｗ０５／０１４５９２、ＷＯ０５／０１４９３；及びノーマン他、ジャーナル  オブ  メディカル  ケミストリー（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．）、２００年、第４３巻、４２８８−４３１２頁に記載されているもののようなＮＰＹ５（ノイロペプチドＹ  Ｙ５）アンタゴニスト；（１０）組み換え型のヒトレプチン（ＰＥＧ−ＯＢ、ホフマン  ラ  ロッシュ）及び組み換え型のメチオニンヒトレプチン（アムゲン）のようなレプチン；（１１）特許番号５，５５２，５２４；５，５５２，５２３；５，５５２，５２２；５，５２１，２８３；及びＷＯ９６／２３５１３；ＷＯ９６／２３５１４；ＷＯ９６／２３５１５；ＷＯ９６／２３５１６；ＷＯ９６／２３５１７；ＷＯ９６／２３５１８；ＷＯ９６／２３５１９；及びＷＯ９６／２３５２０に記載されているもののようなレプチン誘導体；（１２）ナルメフェン（レヴェックスＴＭ）、３−メトキシナルトレキソン、ナロキソン、及びナルトレキソン；及びＷＯ００／２１５０９に記載されているもののようなオピオイドアンタゴニスト；（１３）ＳＢ−３３４８６７−Ａ（グラクソスミスクライン）；及びＷＯ０１／９６３０２、０１／６８６０９、０２／４４１��２、０２／５１２３２、０２／５１８３８、０２／０８９８００、０２／０９０３５５、０３／０２３５６１、０３／０３２９９１、０３／０３７８４７、０４／００４７３３、０４／０２６８６６、０４／０４１７９１、０４／０８５４０３などに記載されているもののようなオレキシンアンタゴニスト；（１４）ＢＲＳ３（ボンベシン受容体サブタイプ３）アゴニスト；（１５）ＡＲ−Ｒ１５８４９、ＧＩ  １８１７７１、ＪＭＶ−１８０、Ａ−７１３７８、Ａ−７１６２３、ＰＤ１７０２９２、ＰＤ１４９１６４、ＳＲ１４６１３１、ＳＲ１２５１８０、ブタビンジド、及びＵＳ５，７３９，１０６に記載されているもののようなＣＣＫ−Ａ（コレシストキニン−Ａ）アゴニスト；（１６）ＧＩ−１８１７７１（グラクソ−スミスクライン）；ＳＲ１４６１３１（サノフィ  シンセラボ）；ブタビンジド；及びＰＤ１７０，２９２、ＰＤ１４９１６４（ファイザー）のようなＣＮＴＦ（毛様体神経栄養因子）；（１７）アクソキン（レジェネロン）；及びＷＯ９４／０９１３４、ＷＯ９８／２２１２８、及びＷＯ９９／４３８１３に記載されているもののようなＣＮＴＦ誘導体；（１８）ＮＮ７０３、ヘキサレリン、ＭＫ−０６７７、ＳＭ−１３０６８６、ＣＰ−４２４，３９１、Ｌ−６９２，４２９、Ｌ−１６３，２５５、及び米国特許６３５８９５１、米国特許出願公開２００２／０４９１９６及び２００２／０２２６３７；及びＷＯ０１／５６５９２、ＷＯ０２／３２８８８に記載されているもののようなＧＨＳ（成長ホルモン分泌促進物質受容体）アゴニスト；（１９）ＡＰＤ３５４６／ＡＲ１０Ａ（アレナ  ファーマソイティカルズ）、ＡＴＨ８８６５１（アテルシス）、ＡＴＨ８８７４０（アテルシス）、ＢＶＴ９３３（バイオビトラム／ＧＳＫ）、ＤＰＣＡ３７２１５（ＢＭＳ）、ＩＫ２６４；ＬＹ４４８１００（リリー）、ＰＮＵ２２３９４；ＷＡＹ４７０（ワイエス）、ＷＡＹ６２９（ワイエス）、ＷＡＹ１６１５０３（バイオビトラム）、Ｒ−１０６５、ＶＲ１０６５（ベルナリス／ロシュ）、ＹＭ３４８；及び米国特許３，９１４，２５０；及びＰＣＴ公開０１／６６５４８、０２／３６５９６、０２／４８１２４、０２／１０１６９、０２／４４１５２；０２／５１８４４、０２／４０４５６、０２／４０４５７、０３／０５７６９８、０５／０００８４９などに記載されているもののような５ＨＴ２ｃ（セロトニン
受容体２ｃ）アゴニスト；（２０）Ｍｃ３ｒ（メラノコルチン３受容体）アゴニスト；（２１）ＣＨＩＲ８６０３６（カイロン）、ＣＨＩＲ９１５（カイロン）；ＭＥ−１０１４２（メラキュア）、ＭＥ−１０１４５（メラキュア）、ＨＳ−１３１（メラキュア）、ＮＢＩ７２４３２（ノイロクリン  バイオサイエンシーズ）、ＮＮＣ７０−６１９（ノボ  ノリディスク）、ＴＴＰ２４３５（トランステック）及びＰＣＴ公開ＷＯ９９／６４００２、００／７４６７９、０１／９９１７５２、０１／０１２５１９２、０１／５２８８０、０１／７４８４４、０１／７０７０８、０１／７０３３７、０１／９１７５２、０１／０１０８４２、０２／０５９０９５、０２／０５９１０７、０２／０５９１０８、０２／０５９１１７、０２／０６２７６６、０２／０６９０９５、０２／１２１６６、０２／１１７１５、０２／１２１７８、０２／１５９０９、０２／３８５４４、０２／０６８３８７、０２／０６８３８８、０２／０６７８６９、０２／０８１４３０、０３／０６６０４、０３／００７９４９、０３／００９８４７、０３／００９８５０、０３／０１３５０９、０３／０３１４１０、０３／０９４９１８、０４／０２８４５３、０４／０４８３４５、０４／０５０６１０、０４／０７５８２３，０４／０８３２０８、０４／０８９９５１、０５／０００３３９、及びＥＰ１４６００６９、及びＵＳ２００５０４９２６９、及びＪＰ２００５０４２８３９などに記載されているもののようなＭｃ４ｒ（メラノコルチン４受容体）アゴニスト；（２２）シブトラトミン（メリディアＴＭ／レダクチルＴＭ）及びその塩、及び米国特許４，７４６，６８０、４，８０６，５７０、及び５，４３６，２７２、及び米国特許公開２００２／０００６９６４、及びＷＯ０１／２７０６８、ＷＯ０１／６２３４１に記載されているもののようなモノアミン再取り込み抑制剤；（２３）デクスフェンフルラミン、フルオキセチン、及び米国特許第６，３６５，６３３、ＷＯ０１／２７０６０、及びＷＯ０１／１６２３４１に記載されているもののようなセロトニン再取り込み抑制剤；（２４）ＧＬＰ−１（グルカゴン様ペプチド  １）アゴニスト；（２５）トピラメート（トピマックスＴＭ）；（２６）フィトファルム化合物５７（ＣＰ６４４，６７３）；（２７）ＡＣＣ２（アセチル−コＡ  カルボキシラーゼ−２）抑制剤；（２８）ラフェベルグロン／ＡＤ９６７７／ＴＡＫ６７７（大日本／武田）、ＣＬ−３１６，２４３、ＳＢ４１８７９０、ＢＲＬ−３７３４４、Ｌ−７９６５６８、ＢＭＳ−１９６０８５、ＢＲＬ−３５１３５Ａ、ＣＧＰ１２１７７Ａ、ＢＴＡ−２４３、ＧＲＣ１０８７（グレンマーク  ファーマソイティカルズ）、ＧＷ４２７３５３（ソァベグロン  ハイドロクロライド）、トレカドリン、ゼネカＤ７１１４、Ｎ−５９８４（日清  杏林）、ＬＹ−３７７６０４（リリー）、ＫＴ０７９２４（キッセイ）、ＳＲ５９１１９Ａ、及び米国特許５，７０５，５１５、５，４５１，６７７；及びＷＯ９４／１８１６１、ＷＯ９５／２９１５９、ＷＯ９７／４６５５６、ＷＯ９８／０４５２６、ＷＯ９８／３２７５３、ＷＯ０１／７４７８２、ＷＯ０２／３２８９７、ＷＯ０３／０１４１１３、ＷＯ０３／０１６２７６、ＷＯ０���／０１６３０７、ＷＯ０３／０２４９４８、ＷＯ０３／０２４９５３、ＷＯ０３／０３７８８１、ＷＯ０４／１０８６７４に記載されているβ３（ベータ  アドネレネルジック受容体３）アゴニストなど；（２９）ＤＧＡＴ１（ジアシルグリセロール  アシルトランスファラーゼ１）抑制剤；（３０）ＤＧＡＴ２（ジアシルグリセロール  アシルトランスファラーゼ２）抑制剤；（３１）セルレニン及びＣ７５のようなＦＡＳ（脂肪酸シンターゼ）抑制剤；（３２）セオフィルリン、ペントキシフィルリン、ザプリナスト、シルデナフィル、アムリノン、ミルリノン、シロスタミド、ロリプラン、及びシロミラスト、並びにＷＯ０３／０３７４３２、ＷＯ０３／０３７８９９に記載されているもののようなＰＤＥ（ホスホジエステラーゼ）抑制剤；（３３）ＫＢ−２６１１（カロバイオＢＭＳ）、及びＷＯ０２／１５８４５；及び日本特許公開ＪＰ２０００２５６１９０に記載されているもののような甲状腺ホルモンβアゴニスト；（３４）フィタン酸、４−［（Ｅ）−２−（５，６，７，８−テロラヒドロ−５，５，８，８−テロラメチル−２−ナフタレニル）−１−プロペニル］安息香酸（ＴＴＮＰＢ）及びレチノイン酸；及びＷＯ９９／００１２３に記載されているもののようなＵＣＰ−１（脱共役タンパク質１）、２、又は３活性剤；（３５）デル  マル−グラサ（ｄｅｌ  Ｍａｒ−Ｇｒａｓａ）、Ｍ他、オベシティ  リサーチ（Ｏｂｅｓｉｔｙ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、２００１年、第９巻、２０２−９頁に記載されているオレオイル−エストロンのようなアシル−エストロゲン；（３６）ＣＰ４７２５５５（ファイザー）、ＫＢ３３０５、及びＷＯ０４／０００８６９、ＷＯ０４／０７５８６４などに記載されているもののようなグルココルチコイド受容体アンタゴニスト；（３７）ＢＶＴ３４９８（ＡＭＧ３３１）、ＢＶＴ２７３３、３−（１−アダマンチル）−４−エチル−５−（エチルチオ）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール、３−（１−アダマンチル）−５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−４−メチル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール、３−アダマンタニル）−４，５，，６，７，８，９，１０，１１，１２，３ａ−デカヒドロ−１，２，４−トリアゾロ［４，３−ａ］［１１］アニュレン、及びＷＯ０１／９００９１、０１／９００９０、０１／９００９２、０２／０７２０８４、０４／０１１４１０、０４／０３３４２７、０４／０４１２６４、０４／０２７０４７、０４／０５６７４４、０４／０６５３５１、０４／０８９４１５，０４／０３７２５１などに記載されているもののような１１βＨＳＤ−１（１１−ベータヒドロキシステロイド脱水素酵素  タイプ１）抑制剤；（３８）ＳＣＤ−１（ステアロイル−コＡ  デサツラーゼ−１）抑制剤；（３９）イソロイシン、チアゾリディッド、バリンピロリディッド、シタグリプチン、サキサグリプチン、ＮＶＰ−ＤＰＰ７２８、ＬＡＦ２３７（ビルダグリプチン）、Ｐ９３／０１、ＴＳＬ２２５、ＴＭＣ−２Ａ／２Ｂ／２Ｃ、ＦＥ９９９０１１、Ｐ９３１０／Ｋ３６４、ＶＩＰ０１７７、ＳＤＺ２７４−４４４、ＧＳＫ８２３０９３、Ｅ３０２４、ＳＹＲ３２２、ＴＳ０２１、ＳＳＲ１６２３６９、ＧＲＣ８２００、Ｋ５７９、ＮＮ７２０１、Ｃ���１４０２３、ＰＨＸ１００４、ＰＨＸ１１４９、ＰＴ−６３０、ＳＫ−０４０３；及びＷＯ０２／０８３１２８、ＷＯ０２／０６２７６４、ＷＯ０２／１４２７１、ＷＯ０３／０００１８０、ＷＯ０３／０００１８１、ＷＯ０３／０００２５０、ＷＯ０３／００２５３０、ＷＯ０３／００２５３１、ＷＯ０３／００２５５３、ＷＯ０３／００２５９３、ＷＯ０３／００４４９８、ＷＯ０３／００４４９６、ＷＯ０３／００５７６６、ＷＯ０３／０１７９３６、Ｗ０３／０２４９４２、ＷＯ０３／０２４９６５、ＷＯ０３／０３３５２４、ＷＯ０３／０５５８８１、ＷＯ０３／０５７１４４、ＷＯ０３／０３７３２７、ＷＯ０４／０４１７９５、ＷＯ０４／０７１４５４、ＷＯ０４／０２１４８７０、ＷＯ０４／０４１２７３、ＷＯ０４／０４１８２０、ＷＯ０４／０５０６５８、ＷＯ０４／０４６１０６、ＷＯ０４／０６７５０９、ＷＯ０４／０４８５３２、ＷＯ０４／０９９１８５、ＷＯ０４／１０８７３０、ＷＯ０５／００９９５６、ＷＯ０４／０９８０６、ＷＯ０５／０２３７６２、ＵＳ２００５／０４３２９２、及びＥＰ１２５８４７６に記載されている化合物のようなデペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ−４）抑制剤；（４０）テトラヒドロリプスタチン（オルリサット／ゼニカル）、ＡＴＬ９６２（アリザイム／武田）、ＧＴ３８９２５５（ジェンザイム／ペプチムミューン）トリトンＷＲ１３３９、ＲＨＣ８０２６７、リプスタチン、テアサポニン、及びジエチルアンベリフェリルフォスフェート、ＦＬ−３８６、ＷＡＹ−１２１８９８、Ｂａｙ−Ｎ−３１７６、バリラクトン、エステラシン、エベラクトンＡ、エベラクトンＢ、及びＲＨＣ８０２６７、及びＷＯ０１／７７０９４、ＷＯ０４／１１１００４、及び米国特許４，５９８，０８９、４，４５２，８１３、５，５１２、５６５、５，３９１，５７１、５，６０２，１５１、４，４０５，６４４、４，１８９，４３８、及び４，２４２，４５３に記載されているもののようなリパーゼ抑制剤など；（４１）脂肪酸トランスポーター抑制剤；（４２）ジカルボキシレートトランスポーター抑制剤；（４３）グルコーストランスポーター抑制剤；及び（４４）フォスフェートトランスポーター抑制剤；（４５）１４２６（アベンティス）及び１９５４（アベンティス）、及びＷＯ００／１８７４９、ＷＯ０１／３２６３８、ＷＯ０１／６２７４６、ＷＯ０１／６２７４７、ＷＯ０３／０１５７６９に記載されている化合物のような食欲減退性ビシクリック化合物；（４６）ＰＹＹ３３６（ナステック／メルク）、ＡＣ１６２３５２（ＩＣ  イノベーションズ／キュリス／アミリン）、ＴＭ３０３３５／ＴＭ３０３３８（７ＴＭファーマ）、ＰＹＹ３３６（エミスフェアー  テクノロジーズ）、ＰＥＧ化ペプチドＹＹ３−３６、ＷＯ０３／０２６５９１、０４／０８９２７９などに記載されているもののようなペプチドＹＹ及びＰＹＹアゴニスト、（４７）マスリン酸、エリスロジオール、ウルソール酸ウバオール、ベツリン酸、ベツリンなど、及びＷＯ０３／０１１２６７に記載されている化合物のような脂質代謝モジュレーター；（４８）ＷＯ０３／０２６５７６に記載されているもののような転写因子モジュレーター；（４９）ＷＯ９７／１９９５２、ＷＯ００／１５８２６、ＷＯ００／１５７９０、ＵＳ２００３００９２０４１などに記載されているものなどのようなＭｃ５ｒ（メラノコルチン５受容体）モジュレーター；（５０）脳由来向神経性因子（ＢＤＮＦ）；（５１）ＬＫ−１８４（プロクター＆ギャンブル）などのようなＭｃ１ｒ（メラノコルチン１受容体）モジュレーター；（５２）ＢＶＴ７４３１６（バイオビトラム）、ＢＶＴ５１８２ｃ（バイオビトラム）、Ｅ−６７９５（エステブ）、Ｅ−６８１４（エステブ）、ＳＢ３９９８８５（グラクソスミスクライン）、ＳＢ２７１０４６（グラクソスミスクライン）、ＲＯ−０４６７９０（ロシュ）などのような５ＨＴ６アンタゴニスト；（５３）脂肪酸トランスポータープロテイン４（ＦＡＴＰ４）；（５４）ＣＰ６４０１８６、ＣＰ６１０４３１、ＣＰ６４０１８８（ファイザー）のようなアセチル−コＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）抑制剤；（５５）ＡＯＤ９６０４（モナッシュ大学／メタボリック  ファーマソイティカルズ）などのＣ−末端成長ホルモンフラグメント；（５６）オキシントモジュリン；（５７）ＷＯ０４／０８３２１８などに記載されたもののような神経ペプチドＦＦ受容体アンタゴニスト；（５８）シムリン／プラムリンチド／ＡＣ１３７（アミリン）のようなアミリンアゴニスト；（５９）フーディア及びトリコカウロン抽出物；（６０）ＢＶＴ７４７１３及び他の腸内脂質食欲抑制剤；（６１）ブプロピオン（ウエルブトリン／グラクソスミスクライン）のようなドーパミンアゴニスト：（６２）ゾニサミド（ゾネグラン／大日本／エラン）、など。
【０２２６】
本明細書に記載されたＯＸＭ類似体との組み合わせにおいて使用可能な具体的化合物としては、Ｎ−［３−（４−クロロフェニル）−２（Ｓ）−フェニル−１（Ｓ）−メチルプロピル］−２−（４−トリフルオロメチル−２−ピリミジルオキシ）−２−メチルプロパンアミド、Ｎ−［３−（４−クロロフェニル）−２−（３−シアノフェニル）−１−メチルプロピル］−２−（５−トリフルオロメチル−２−ピリジルオキシ）−２−メチルプロパンアミド、Ｎ−［３−（４−クロロフェニル）−２−（５−クロロ−３−ピリジル）−１−メチルプロピル］−２−（５−トリフルオロメチル−２−ピリジルオキシ）−２−メチルプロパンアミド、及び医薬的に受容可能なそれらの塩を含む、ＷＯ０３／０７７８４７に記載されたもの；並びに以下の、３−｛１−［ビス（４−クロロフェニル）メチル］アゼチジン−３−イリデン｝−３−（３，５−ジフルオロフェニル）−２，２−ジメチルプロパンニトリル、１−｛１−［１−（４−クロロフェニル）ペンチル］アゼチジン−３−イル｝−１−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−メチルプロパン−２−オール、３−（（Ｓ）−（４−クロロフェニル）｛３−［（１Ｓ）−１−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−ヒドロキシ−２−メチルプロピル］アゼチジン−１−イル｝メチル）ベンゾニトリル、３−（（Ｓ）−（４−クロロフェニル）｛３−［（１Ｓ）−１−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−フルオロ−２−メチルプロピル］アゼチジン−１−イル｝メチル）ベンゾニトリル、３−（（４−クロロフェニル）｛３−［１−（３，５−ジフルオロフェニル）−２、２−ジメチルプロピル］アゼチジン−１−イル｝メチル）ベンゾニトリル、３−（（１Ｓ）−１−｛１−［（Ｓ）−（３−シアノフェニル）（４−シアノフェニル）メチル］アゼチジン−３−イル｝−２−フルオロ−２−メチルプロピル）−５−フルオロベンゾニトリル、３−［（Ｓ）−（４−クロロフェニル）（３−｛（１Ｓ）−２−フルオロ−１−［３−フルオロ−５−（４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−４−イル）フェニル］−２−メチルプロピル｝アゼチジン−１−イル）メチル］ベンゾニトリル、及び５−（（４−クロロフェニル）｛３−［（１Ｓ）−１−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−フルオロ−２−メチルプロピル］アゼチジン−１−イル｝メチル）チオフェン−３−カルボニトリル、及び医薬的に受容可能なそれらの塩を含む、ＷＯ０５／０００８０９に記載されたもの；並びに３−［（Ｓ）−（４−クロロフェニル）（３−｛（１Ｓ）−２−フルオロ−１−［３−フルオロ−５−（５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェニル］−２−メチルプロピル｝アゼチジン−１−イル）メチル］ベンゾニトリル、３−［（Ｓ）−（４−クロロフェニル）（３−｛（１Ｓ）−２−フルオロ−１−［３−フルオロ−５−（１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェニル］−２−メチルプロピル｝アゼチジン−１−イル）メチル］ベンゾニトリル、３−［（Ｓ）−（３−｛（１Ｓ）−１−［３−（５−アミノ−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−５−フルオロフェニル］−２−フルオロ−２−メチルプロピル｝アゼチジン−１−イル）（４−クロロフェニル）メチル］ベンゾニトリル、３−［（Ｓ）−（４−シアノフェニル）（３−｛（１Ｓ）−２−フルオロ−１−［３−フルオロ−５−（５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェニル］−２−メチルプロピル｝アゼチジン−１−イル）メチル］ベンゾニトリル、３−［（Ｓ）−（３−｛（１Ｓ）−１−［３−（５−アミノ−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−５−フルオロフェニル］−２−フルオロ−２−メチルプロピル｝アゼチジン−１−イル）（４−シアノフェニル）メチル］ベンゾニトリル、３−［（Ｓ）−（４−シアノフェニル）（３−｛（１Ｓ）−２−フルオロ−１−［３−フルオロ−５−（１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェニル］−２−メチルプロピル｝アゼチジン−１−イル）メチル］ベンゾニトリル、３−［（Ｓ）−（４−クロロフェニル）（３−｛（１Ｓ）−２−フルオロ−１−［３−フルオロ−５−（１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）フェニル］−２−メチルプロピル｝アゼチジン−１−イル）メチル］ベンゾニトリル、３−［（１Ｓ）−１−（１−｛（Ｓ）−（４−シアノフェニル）［３−（１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）フェニル］−メチル｝アゼチジン−３−イル）−２−フルオロ−２−メチルプロピル］−５−フルオロベンゾニトリル、５−（３−｛１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］−２−フルオロ−２−メチルプロピル｝−５−フルオロフェニル）−１Ｈ−テトラゾール、５−（３−｛１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］−２−フルオロ−２−メチルプロピル｝−５−フルオロフェニル）−１−メチル−１Ｈ−テトラゾール、５−（３−｛１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］−２−フルオロ−２−メチルプロピル｝−５−フルオロフェニル）−２−メチル−２Ｈ−テトラゾール、３−［（４−クロロフェニル）（３−｛２−フルオロ−１−［３−フルオロ−５−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェニル］−２−メチルプロピル｝アゼチジン−１−イル）メチル］ベンゾニトリル、３−［（４−クロロフェニル）（３−｛２−フルオロ−１−［３−フルオロ−５−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェニル］−２−メチルプロピル｝アゼチジン−１−イル）メチル］ベンゾニトリル、３−［（４−シアノフェニル）（３−｛２−フルオロ−１−［３−フルオロ−５−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェニル］−２−メチルプロピル｝アゼチジン−１−イル）メチル］ベンゾニトリル、３−［（４−シアノフェニル）（３−｛２−フルオロ−１−［３−フルオロ−５−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェニル］−２−メチルプロピル｝アゼチジン−１−イル）メチル］ベンゾニトリル、５−｛３−［（Ｓ）−｛３−［（１Ｓ）−１−（３−ブロモ−５−フルオロフェニル］−２−フルオロ−２−メチルプロピル］アゼチジン−１−イル｝（４−クロロフェニル）メチル］フェニル｝−１，３，４−オキサジアゾール−２（３Ｈ）−オン、３−［（１Ｓ）−１−（１−｛（Ｓ）−（４−クロロフェニル）［３−（５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェニル］メチル｝アゼチジン−３−イル）−２−フルオロ−２−メチルプロピル］−５−フルオロベンゾニトリル、３−［（１Ｓ）−１−（１−｛（Ｓ）−（４−シアノフェニル）［３−（５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェニル］メチル｝アゼチジン−３−イル）−２−フルオロ−２−メチルプロピル］−５−フルオロベンゾニトリル、３−［（１Ｓ）−１−（１−｛（Ｓ）−（４−シアノフェニル）［３−（１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェニル］メチル｝アゼチジン−３−イル）−２−フルオロ−２−メチルプロピル］−５−フルオロベンゾニトリル、３−［（１Ｓ）−１−（１−｛（Ｓ）−（４−クロロフェニル）［３−（１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェニル］メチル｝アゼチジン−３−イル）−２−フルオロ−２−メチルプロピル］−５−フルオロベンゾニトリル、３−［（１Ｓ）−１−｛１−［（Ｓ）−［３−（５−アミノ−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェニル］（４−クロロフェニル）メチル］アゼチジン−３−イル｝−２−フルオロ−２−メチルプロピル］−５−フルオロベンゾニトリル、３−［（１Ｓ）−１−｛１−［（Ｓ）−［３−（５−アミノ−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェニル］（４−シアノフェニル）メチル］アゼチジン−３−イル｝−２−フルオロ−２−メチルプロピル）−５−フルオロベンゾニトリル、３−［（１Ｓ）−１−（１−｛（Ｓ）−（４−シアノフェニル）［３−（１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）フェニル］メチル｝アゼチジン−３−イル）−２−フルオロ−２−メチルプロピル］−５−フルオロベンゾニトリル、３−［（１Ｓ）−１−（１−｛（Ｓ）−（４−クロロフェニル）［３−（１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）フェニル］メチル｝アゼチジン−３−イル）−２−フルオロ−２−メチルプロピル］−５−フルオロベンゾニトリル、５−［３−（（Ｓ）−（４−クロロフェニル）｛３−［（１Ｓ）−１−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−フルオロ−２−メチルプロピル］アゼチジン−１−イル｝メチル）フェニル］−１，３，４−オキサジアゾール−２（３Ｈ）−オン、５−［３−（（Ｓ）−（４−クロロフェニル）｛３−［（１Ｓ）−１−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−フルオロ−２−メチルプロピル］アゼチジン−１−イル｝メチル）フェニル］−１，３，４−オキサジアゾール−２（３Ｈ）−オン、４−｛（Ｓ）−｛３−［（１Ｓ）−１−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−フルオロ−２−メチルプロピル］アゼチジン−１−イル｝［３−（５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェニル］メチル｝−ベンゾニトリル、ＡＣＯＭＰＬＩＡ（リモナバント、Ｎ−（１−ピペリジニル）−５−（４−クロロフェニル）−１−（２，４−ヂクロロフェニル）−４−メチルピラゾール−３−カルボキサミド、ＳＲ１４１７１６Ａ）、３−（４−クロロフェニル−Ｎ’−（４−クロロフェニル）スルホニル−Ｎ−メチル−４−フェニル−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾール−１−カルボキサミド（ＳＬＶ−３１９）、テラナバント、Ｎ−（１Ｓ，２Ｓ）−３−（４−クロロフェニル）−２−（３−シアノフェニル）−１−メチルプロピル］−２−メチル−２−［[５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジニル]オキシ］プロパンアミド、及び医薬的に受容可能なそれらの塩を包含する具体的なＣＢ１アンタゴニスト／インバースアゴニストが挙げられる。
【０２２７】
本明細書に記載されるＯＸＭ類似体との組み合わせで用いることのできるＮＰＹ５アゴニストの具体例としては、３−オキソ−Ｎ−（５−フェニル−ピラジニル）−スピロ［イソベンゾフラン−１（３Ｈ），４’−ピペリジン］−１’−カルボキサミド、３−オキソ−Ｎ−（７−トリフルオロメチルピリド［３，２−ｂ］ピリジン−２−イル）スピロ−［イソベンゾフラン−１（３Ｈ），４’−ピペリジン］−１’−カルボキサミド、Ｎ−［５−（３−フルオロフェニル）−２−ピリミジニル］−３−オキソスピロ−［イソベンゾフラン−１（３Ｈ），４’−ピペリジン］−１’−カルボキサミド、トランス−３’−オキソ−Ｎ−（５−フェニル−２−ピリミジニル）スピロ［シクロヘキサン−１，１’（３’Ｈ）−イソベンゾフラン］−４−カルボキサミド、トランス−３’−オキソ−Ｎ−［１−（３−キノリル）−４−イミダゾリル］スピロ［シクロヘキサン−１，１’（３’Ｈ）−イソベンゾフラン］−４−カルボキサミド、トランス−３−オキソ−Ｎ−（５−フェニル−２−ピラジニル）スピロ［４−アザイソ−ベンゾフラン−１（３Ｈ），１’−シクロヘキサン］−４’−カルボキサミド、トランス−Ｎ−［５−（３−フルオロフェニル）−２−ピリミジニル］−３−オキソスピロ−［５−アザイソベンゾフラン−１（３Ｈ），１’−シクロヘキサン］−４’−カルボキサミド、トランス−Ｎ−［５−（２−フルオロフェニル）−２−ピリミジニル］−３−オキソスピロ［５−アザイソベンゾフラン−１（３Ｈ），１’−シクロヘキサン］−４’−カルボキサミド、トランス−Ｎ−［１−（３，５−ジフルオロフェニル）−４−イミダゾリル］−３−オキソスピロ［７−アザイソベンゾフラン−１（３Ｈ），１’−シクロヘキサン］−４’−カルボキサミド、トランス−３−オキソ−Ｎ−（１−フェニル−４−ピラゾリル）スピロ［４−アザイソベンゾフラン−１（３Ｈ），１’−シクロヘキサン］−４’−カルボキサミド、トランス−Ｎ−［１−（２−フルオロフェニル）−３−ピラゾリル］−３−オキソスピロ［６−アザイソベンゾフラン−１（３Ｈ），１’−シクロヘキサン］−４’−カルボキサミド、トランス−３−オキソ−Ｎ−（１−フェニル−３−ピラゾリル）スピロ［６−アザイソベンゾフラン−１（３Ｈ），１’−シクロヘキサン］−４’−カルボキサミド、トランス−３−オキソ−Ｎ−（２−フェニル−１，２，３−トリアゾール−４−イル］スピロ［６−アザイソベンゾフラン−１（３Ｈ），１’−シクロヘキサン］−４’−カルボキサミド、及び医薬的に受容可能なそれらの塩及びエステルが包含される。
【０２２８】
本明細書に記載されるＯＸＭ類似体との組み合わせで用いることのできるＡＣＣ−１／２阻害剤の具体例としては、１’−［（４，８−ジメトキシキノリン−２−イル）カルボニル］−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）スピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−４−オン；（５−｛１’−［（４，８−ジメトキシキノリン−２−イル）カルボニル］−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル｝−２Ｈ−テトラゾール−２−イル）メチルピバレート、（５−｛１’−［（８−シクロプロピル−４−メトキシキノリン−２−イル）カルボニル］−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル｝ニコチン酸；１’−（８−メトキシ−４−モルホリン−４−イル−２−ナフトイル）−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）スピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−４−オン、及び１’−［（４−エトキシ−８−エチルキノリン−２−イル）カルボニル］−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）スピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−４−オン、及び医薬的に受容可能なそれらの塩が包含される。
【０２２９】
本明細書に記載されるＯＸＭ類似体との組み合わせで用いることのできるＭＣＨ１Ｒアンタゴニストの具体例としては、１−｛４−［（１−エチルアゼチジン−３−イル）オキシ］フェニル｝−４−［（４−フルオロベンジル）オキシ］ピリジン−２（１Ｈ）−オン、４−［（４−フルオロベンジル）オキシ］−１−｛４−［（１−イソプロピルアゼチジン−３−イル）オキシ］フェニル｝ピリジン−２（１Ｈ）−オン、１−［４−（アゼチジン−３−イルオキシ）フェニル］−４−［（５−クロロピリジン−２−イル）メトキシ］ピリジン−２（１Ｈ）−オン、４−［（５−クロロピリジン−２−イル）メトキシ］−１−｛４−［（１−エチルアゼチジン−３−イル）オキシ］フェニル｝ピリジン−２（１Ｈ）−オン、４−［（５−クロロピリジン−２−イル）メトキシ］−１−｛４−［（１−プロピルアゼチジン−３−イル）オキシ］フェニル｝ピリジン−２（１Ｈ）−オン、及び４−［（５−クロロピリジン−２−イル）メトキシ］−１−（４−｛［（（２Ｓ）−１−エチルアゼチジン−２−イル）メトキシ］フェニル｝ピリジン−２（１Ｈ）−オン、又は医薬的に受容可能なそれらの塩が包含される。
【０２３０】
本明細書に記載されるＯＸＭ類似体との組み合わせで用いることのできるＤＰＰ−ＩＶ阻害剤の具体例としては、７−［（３Ｒ）−３−アミノ−４−（２，４，５−トリフルオロフェニル）ブタノイル］−３−（トリフルオロメチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−１，２，４−トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン、又は医薬的に受容可能なそれらの塩が包含される。
【０２３１】
本明細書に記載されるＯＸＭ類似体との組み合わせで用いることのできるＨ３（ヒスタミンＨ３）の具体例としては、ＷＯ０５／０７７９０５に記載されているもの、例えば３−｛４−［（１−シクロブチル−４−ピペリジニル）オキシ］フェニル｝−２−エチルピリド［２，３−ｄ］−ピリミジン−４（３Ｈ）−オン、３−｛４−［（１−シクロブチル−４−ピペリジニル）オキシ］フェニル｝−２−メチルピリド［４，３−ｄ］−ピリミジン−４（３Ｈ）−オン、２−エチル−３−｛４−｛３−［（３Ｓ）−３−メチルピペリジン−１−イル］プロポキシ｝フェニル｝ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン、２−メチル−３−｛４−｛３−［（３Ｓ）−３−メチルピペリジン−１−イル］プロポキシ｝フェニル｝ピリド［４、３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン、３−｛４−［（１−シクロブチル−４−ピペリジニル）オキシ］フェニル｝−２，５−ジメチル−４（３Ｈ）−キナゾリノン、３−｛４−［（１−シクロブチル−４−ピペリジニル）オキシ］フェニル｝−２−メチル−５−トリフルオロメチル−４（３Ｈ）−キナゾリノン、３−｛４−［（１−シクロブチル−４−ピペリジニル）オキシ］フェニル｝−５−メトキシ−２−メチル−４（３Ｈ）−キナゾリノン、３−｛４−［（１−シクロブチルピペリジン−４−イル）オキシ］フェニル｝−５−フルオロ−２−メチル−４（３Ｈ）−キナゾリノン、３−｛４−［（１−シクロブチルピペリジン−４−イル）オキシ］フェニル｝−７−フルオロ−２−メチル−４（３Ｈ）−キナゾリノン、３−｛４−［（１−シクロブチルピペリジン−４−イル）オキシ］フェニル｝−６−メトキシ−２−メチル−４（３Ｈ）−キナゾリノン、３−｛４−［（１−シクロブチルピペリジン−４−イル）オキシ］フェニル｝−６−フルオロ−２−メチル−４（３Ｈ）−キナゾリノン、３−｛４−［（１−シクロブチルピペリジン−４−イル）オキシ］フェニル｝−８−フルオロ−２−メチル−４（３Ｈ）−キナゾリノン、３−｛４−［（１−シクロペンチル−４−ピペリジニル）オキシ］フェニル｝−２−メチルピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン、３−｛４−［（１−シクロブチルピペリジン−４−イル）オキシ］フェニル｝−６−フルオロ−２−メチルピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン、３−｛４−［（１−シクロブチル−４−ピペリジニル）オキシ］フェニル｝−２−エチルピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン、６−メトキシ２−メチル−３−｛４−｛３−（１−ピペリジニル）プロポキシ｝フェニル｝ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン、６−メトキシ２−メチル−３−｛４−｛３−（１−ピロリジニル）プロポキシ｝フェニル｝ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン、２，５−ジメチル−３−｛４−［３−（１−ピロリジニル）プロポキシ］フェニル｝−４（３Ｈ）−キナゾリノン、２−メチル−３−｛４−［３−（１−ピロリジニル）プロポキシ］フェニル｝−５−トリフルオロメチル−４（３Ｈ）−キナゾリノン、５−フルオロ−２−メチル−３−｛４−［３−（１−ピペリジニル）プロポキシ］フェニル｝−４（３Ｈ）−キナゾリノン、６−メトキシ−２−メチル−３−｛４−｛３−［（１Ｓ）−ピペリジン］プロポキシ｝フェニル｝−４（３Ｈ）−キナゾリノン、５−メトキシ−２−メチル−３−｛４−｛３−［（３Ｓ）−３−メチルピペリジン−１−イル］プロポキシ］フェニル｝−４（３Ｈ）−キナゾリノン、７−メトキシ−２−メチル−３−｛４−｛３−［（３Ｓ）−３−メチルピペリジン−１−イル］プロポキシ］フェニル｝−４（３Ｈ）−キナゾリノン、２−メチル−３−｛４−｛３−［（３Ｓ）−３−メチルピペリジン−１−イル］プロポキシ］フェニル｝ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン、５−フルオロ−２−メチル−３−｛４−｛３−［２Ｒ）−２−メチルピロリジン−１−イル］プロポキシ］フェニル｝−４（３Ｈ）−キナゾリノン、２−メチル−３−｛４−｛３−［（２Ｒ）−２−メチルピロリジン−１−イル］プロポキシ］フェニル｝ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン、６−メトキシ−２−メチル−３−｛４−｛３−［２Ｒ）−２−メチルピロリジン−１−イル］プロポキシ］フェニル｝−４（３Ｈ）−キナゾリノン、６−メトキシ−２−メチル−３−｛４−｛３−［２Ｓ）−２−メチルピロリジン−１−イル］プロポキシ］フェニル｝−４（３Ｈ）−キナゾリノン、及び医薬的に受容可能なそれらの塩が包含される。
【０２３２】
本明細書に記載されるＯＸＭ類似体との組み合わせで用いることのできるＣＣＫ１Ｒの具体例としては、３−（４−｛［１−（３−エトキシフェニル）−２−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］カルボニル）−１−ピペラジニル）−１−ナフトエ酸；３−（４−｛［１−（３−エトキシフェニル）−２−（２−フルオロ−４−メチルフェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］カルボニル｝−１−ピペラジニル）−１−ナフトエ酸；３−（４−｛［１−（３−エトキシフェニル）−２−（４−フルオロフェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］カルボニル｝−１−ピペラジニル）−１−ナフトエ酸；３−（４−｛［１−（３−エトキシフェニル）−２−（２，４−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］カルボニル｝−１−ピペラジニル）−１−ナフトエ酸；及び３−（４−｛［１−（２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾジオキシン−６イル）−２−（４−フルオロフェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］カルボニル｝−１−ピペラジニル）−１−ナフトエ酸；及び医薬的に受容可能なそれらの塩が包含される。
【０２３３】
本明細書に記載されるＯＸＭ類似体との組み合わせで用いることのできるＭＣ４Ｒアゴニストの具体例としては、１）（５Ｓ）−１’−｛［（３Ｒ，４Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル−３−（２，３，４−トリフルオロフェニル）ピペリジン−４−イル］カルボニル｝−３−クロロ−２−メチル−５−［１−メチル−１−（１−メチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）エチル］−５Ｈ−スピロ［フロ［３，４−ｂ］ピリジン−７，４’−ピペリジン］；２）（５Ｒ）−１’−｛［（３Ｒ，４Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル−３−（２，３，４−トリフルオロフェニル）−ピペリジン−４−イル］カルボニル｝−３−クロロ−２−メチル−５−［１−メチル−１−（１−メチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）エチル］−５Ｈ−スピロ［フロ［３，４−ｂ］ピリジン−７，４’−ピペリジン］；３）２−（１’−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピロリジン−３−イル］カルボニル｝−３−クロロ−２−メチル−５Ｈ−スピロ［フロ［３，４−ｂ］ピリジン−７，４’−ピペリジン］−５−イル）−２−メチルプロパンニトリル；４）１’−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピロリジン−３−イル］カルボニル｝−３−クロロ−２−メチル−５−［１−メチル−１−（１−メチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）エチル］−５Ｈ−スピロ［フロ［３，４−ｂ］ピリジン−７，４’−ピペリジン］；５）Ｎ−［（３Ｒ，４Ｒ）−３−（｛３−クロロ−２−メチル−５−［１−メチル−１−（１−メチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）エチル］−１’Ｈ，５Ｈ−スピロ［フロ−［３，４−ｂ］ピリジン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル｝カルボニル）−４−（２，４−ジフルオロフェニル）−シクロペンチル］−Ｎ−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−アミン；６）２−（３−クロロ−１’−（｛（１Ｒ，２Ｒ）−２−（２，４−ジフルオロフェニル）−４−［メチル（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アミノ］−シクロペンチル｝−カルボニル）−２−メチル−５Ｈ−スピロ［フロ［３，４−ｂ］ピリジン−７，４’−ピペリジン］−５−イル）−２−メチル−プロパン−ニトリル；及び医薬的に受容可能なそれらの塩が包含される。
【０２３４】
さらに、インクレチンホルモングルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ−１）の他のペプチド類似体及び模倣物が、本明細書に記載されるＯＸＭ類似体との組み合わせで用いられてもよい。
【０２３５】
本明細書に記載される１以上のＯＸＭ類似体を含む薬理学的組成物を患者に投与する方法は、これに限られるものではないが、皮内、筋肉内、腹膜内、静脈内、皮下、鼻腔内、硬膜外、及び経口を含む。組成物は、従来の経路、例えば、点滴又はボーラス注射、により、上皮内又は粘膜皮膚層（例えば、口腔内粘膜、直腸及び腸管粘膜など）、眼などを通しての吸収により、投与することができるし、他の生物学的に活性な製剤と共に投与することもできる。投与は、全身でもよいし局部であってもよい。また、組成物は、適宜の経路、例えば脳室内及び鞘内注入により中枢神経系に投与することが好ましい。脳室内注入は、リザーバ（例えば、オンマヤーリザーバ）に取り付けられた脳室内カテーテルにより容易に行うことが出来る。肺投与は、吸入器又はネブライザーの使用及びエアゾール化剤を用いた処方によって行われてもよい。また、治療の必要なエリアに、本明細書に記載される１以上のＯＸＭ類似体を局所的に投与することも望ましいもので；これに限定されるものではないが、これは、例えば、手術中の局部注入、注射、カテーテル、座薬、又はインプラントによる局所適用により行われてもよい。
【０２３６】
種々の送達システムが知られており、これに限定されるものではないが、リポソーム中のカプセル化、微粒子、マイクロカプセル、ミニセル、ポリマー、カプセル、錠剤などを含む送達システムを、本明細書に記載されているＯＸＭ類似体を投与するために用いることができる。一態様としては、本明細書に記載されたＯＸＭ類似体は、賦形薬中、特にリポソーム中で送達されることができる。リポソームおいては、本明細書に記載されたＯＸＭ類似体は、他の医薬的に受容可能なキャリアに加え、水性溶液中にミセル、不溶性単一層、液晶又は層状構造の層として凝集した形で存在する脂質のような両親媒性薬剤とともに混ぜ合わされる。リポソーム処方に適した脂質は、これに限定されるものではないが、モノグリセリド、ジグリセリド、スルファチド、リソレシチン、ホスホリピッド、サポニン、胆汁酸などを含む。このようなリポソーム処方の製造は、例えば米国特許４，８３７、０２８及び米国特許４，７３７，３２３６に記載されているように、当該技術レベルの範囲内のものである。他の態様としては、本明細書に記載されたＯＸＭ類似体は、これに限定されるものではないが、デリバリーポンプ（例えば、サウデック（Ｓａｕｄｅｋ）他、ニュー  イングランド  ジャーナル  オブ  メディシン（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ，）、１９８９年、第３２１巻、５７４頁及び半透性重合物質（例えば、ハワード（Ｈｏｗａｒｄ）他、ジャーナル  オブ  ニューロサージェリー（Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．）、１９８９年、第７１巻、１０５頁参照））を含むコントロールされた放出システムで送達されることができる。また、コントロールされた放出システムは、治療ターゲット（例えば、脳）の付近に置くことができ、これは少量の全身投与のみを要求するものである。例えば、グッドソン、イン：メディカル  アプリケーション  オブ  コントロールド  リリース、１９８４（ＣＲＣ出版、ボッカ  ラトン、フロリダ）参照。
【０２３７】
特定の疾患或いは病状の治療に効果的である、本明細書に記載の１種以上のＯＸＭ類似体からなる組成物の量は、疾患や病状の性状により、また当該技術分野の平均的な技術を有する者による標準的な臨床テクニックにより決定される。また、インビボアッセイが最少の投与量確認のために必要に応じ採用されてもよい。処方中で採用されるべき正確な投与量は、投与のルートや病気や疾患の総体的な深刻度にも依るもので、医師の判断及び個々の患者の状況によって決められるべきである。最終的には、担当医が各個の患者を治療する際に組成物の量を決定するであろう。まず、担当医は、組成物の低い投与量を処方し、患者の反応を観察する。最適の治療効果が患者に得られるまで組成物の投与量は増大され、最適の治療効果が患者に得られた時点で投与量の増大は止められる。一般的には、日々の投与量範囲は、１回又は分割投与量で、哺乳動物ｋｇ体重当たり約０．００１ｍｇ〜約１００ｍｇ、好ましくはｋｇ当たり０．０１ｍｇ〜約５０ｍｇ、最も好ましくはｋｇ当たり０．１〜１０ｍｇである。他方、ある場合には、この範囲の量を超えて投与することも必要である。しかし、本明細書に記載された１種以上のＯＸＭ類似体を含む組成物の静脈内投与の適当な投与量範囲は、一般的には、キログラム（Ｋｇ）体重当たり、活性化合物約５〜５００ミクロングラム（μｇ）である。鼻腔内投与の適切な投与量は、一般的には、約０．０１ｐｇ／ｋｇ体重〜１ｍｇ／ｋｇ体重である。効果的な投与量は、インビトロ又は動物モデル試験システムから導き出される、投与量−応答曲線から外挿されてもよい。座薬は、一般的には、活性成分を０．５重量％〜１０重量％含有し；経口製剤は、好ましくは、１０％〜９５％の活性成分を含有する。最終的には、担当医は、本明細書に記載の１種以上のＯＸＭ類似体からなる組成物を用いる治療の最適期間を決めるであろう。投与量は、個々の患者の年齢、体重及び効き目によっても異なることになる。
【０２３８】
また、本発明は、１種以上の医薬組成物成分と本明細書に記載のＯＸＭ類似体とが詰められた１以上の容器からなる医薬パック又はキットを提供する。任意ではあるが、このような容器には、当局によるヒト治療に対する製造、使用又は販売の承認を示す、医薬品又は生物学的製品の製造、使用又は販売を統制する政府機関により定められた形式での告知が付されてもよい。
【０２３９】
ここに記載された全ての引用は、記載により本明細書に組み込まれる。
以下の例は、本発明のさらなる理解を促進するためのものである。
【実施例】
【０２４０】
実施例１
オキシントモジュリン（ＯＸＭ）類似体の合成は、具体的には次のように行われた。下記表２に示されるペプチドＯＸＮ類似体は、Ｆｍｏｃ／ｔ−Ｂｕ化学を用い、４０ウェル反応ブロックを用いるペプチドマルチシンセサイザーＡＰＥＸ３９６（アドバンスド・ケムテック）にて固相で合成された。各ペプチドは、単一のウェル中で合成された。ペプチドアミドのために、修飾されたリンク（Ｒｉｎｋ）リンカーｐ−［（Ｒ，Ｓ）−α−［９Ｈ−フルオレン−９−イル−メトキシホルムアミド］−２，４−ジメトキシベンジル−フェノキシ酢酸（リンク  エッチ（Ｒｉｎｋ，Ｈ）、テトラヘドロン・レターズ（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．）、１９８７年、第２８巻、３７８７−３７８９頁、ベルナトビッツ  エム  エス（Ｂｅｒｎａｔｏｗｉｃｚ，Ｍ．Ｓ．）他、テトラヘドロン・レターズ、１９８９年、第３０巻、４６４５−４６６７頁）を用いて誘導された、０．１ｇの、アミノメチル化ポリスチレンＬＬ（１００−２００メシュ、０．４１ｍｍｏｌ／ｇ）（ノババイオケミカル）樹脂が用いられた。全てのアミノ酸を、０．５Ｍ  ＨＯＢｔ（ヒドロキシベンゾトリアゾール）ＤＭＦ溶液に、０．５Ｍの濃度で溶解した。アシル化反応は、樹脂フリーアミノ基の６倍過剰の活性化アミノ酸を用いて、４５分間行なわれた。アミノ酸は、等モル量のＨＢＴＵ（２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）及び２倍モル過剰のＤＩＥＡ（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン）により活性化された。
【０２４１】
別に、ペプチドが、Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ化学を用いて、パイオニアペプチドシンセサイザー（アプライド・バイオシステムズ）を用いて合成された。この場合、全てのアシル化反応は、０．１ｇの１％架橋された樹脂Ｆｍｏｃ−Ｌｉｎｋｅｒ  ＡＭ−Ｃｈａｍｐｉｏｎ（バイオサーチ  テクノロジーズ  インク．）及び修飾されたリンクリンカーｐ−［（Ｒ，Ｓ）−α−［９Ｈ−フルオレン−９−イル−メトキシホルムアミド］−２，４−ジメトキシベンジル−フェノキシ酢酸（リンク  エッチ（Ｒｉｎｋ，Ｈ）、テトラヘドロン・レターズ（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．）、１９８７年、第２８巻、３７８７−３７８９頁、ベルナトビッツ  エム  エス（Ｂｅｒｎａｔｏｗｉｃｚ，Ｍ．Ｓ．）他、テトラヘドロン・レターズ、１９８９年、第３０巻、４６４５−４６６７頁）を用いて誘導された、ＰＥＧ−ＰＳ系樹脂が用いられた。全てのアシル化反応は、シンセサイザーでのペプチドアセンブリーの終了後、樹脂フリーアミノ基の４倍過剰の活性化アミノ酸を用いて、６０分間行なわれ、Ｎ−末端Ａｉｂ及びＨｉｓのためにダブルカップリングがなされた。
【０２４２】
側鎖保護基は、Ａｓｐに対してはＯＭｐｅ（Ｏ−３−メチル−ペント−３−イル）；Ｇｌｕ、Ｓｅｒ、Ｄ−Ｓｅｒ、Ｔｈｒ及びＴｙｒに対してはｔｅｒｔ−ブチル；Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ及びＨｉｓに対してはトリチル；Ｌｙｓ、Ｔｒｐに対してはｔｅｒｔ−ブトキシ−カルボニル；Ａｒｇに対しては２，２，４，６，７−ペンタメチルジヒドロベンゾフラン−５−スルホニルであった。
【０２４３】
ＯＸＭ１１０及びＯＸＭ１７７のため、リシンパルミトイルが、等モル量のＨＢＴＵ（２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）及び２倍モル過剰のＤＩＥＡ（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン）との反応により手工的にアシル化された。アシル化反応は、樹脂フリーアミノ基の３倍過剰の活性化されたアシル化剤を用い、１２０分行われた。
【０２４４】
合成の終わりに、乾燥ペプチド樹脂は、２０ｍＬの切断混合物、８８％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、５％フェノール、２％トリイソプロピルシラン、及び５％水（ソール  エヌ  エー及びジー  バラニー（Ｓｏｌｅ、Ｎ．Ａ．＆Ｇ．Ｂａｒａｎｙ）、ザ・ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．）、１９９２年、第５７巻、５３９９−５４０３頁）を用いて、室温で１．５時間夫々処理された。各樹脂を濾過し、ペプチドを沈澱させるため、溶液を冷メチル−ｔ−ブチルエーテルに加えた。遠心分離後、ペプチドペレットを、新鮮な冷メチル−ｔ−ブチルエーテルで洗浄して有機スカベンジャーを除去した。この工程を２回繰返した。最終ペレットを乾燥し、２０％アセトニトリル水溶液中に再懸濁し、凍結乾燥した。
【０２４５】
粗ペプチドを、分取用ウォーターズ（Ｗａｔｅｒｓ）ＲＣＭ  ＤｅｌｔａＰａｋＴＭＣ−４カートリッジ（４０ｘ２００ｍｍ、１５μｍ）を用い、溶出液として（Ａ）０．１％ＴＦＡ水溶液及び（Ｂ）０．１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液を用いる、逆相ＨＰＬＣにより、精製した。溶出液（Ｂ）では次の濃度勾配が使用された：ＯＸＭ２２９（ＯＸＭ３６及びＯＸＭ１１５のペプチドチオール化プレカーサー）、ＯＸＭ２９（ＯＸＭ７０及びＯＸＭ２１６のチオール化プレカーサー）、ＯＸＭ２０８（ＯＸＭ２１２のペプチドチオール化プレカーサー）及びＯＸＭ２０９（ＯＸＭ２１３のペプチドチオール化プレカーサー）に対し、５分間にわたり２０％−２０％、さらに２０分間にわたり２０％−３５％。
【０２４６】
ペプチドＯＸＭ１１０及び１７７に対しては、次の溶出液（Ｂ）の濃度勾配が使用された：５分間にわたり３２％−３２％、２０分間にわたり３２％−４２％、流速８０ｍＬ／分。分析的ＨＰＬＣは、溶剤として、０．１％ＴＦＡ水溶液及（Ａ）び０．１％ＴＦＡのＣＨ３ＣＮ溶液（Ｂ）を用い、流量１ｍＬ／分で、次のリニヤー勾配：２０％−２０％Ｂ(５分間)−３５％Ｂ（２０分間）−８０％Ｂ（２分間）で、ＡＣＥ  Ｃ−４（３００Ａ）、３μｍカラム、１５０ｘ４．６ｍｍ、（ＣＰＳ分析論ｐ／ｎ  ＡＣＥ−２１３−１５４６）を有するアライアンス  ウオーターズ  クロマトグラフで、４５℃で行われた。精製されたペプチドは、マイクロマス（Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ）ＬＣＺプラットフォーム上でエレクトロスプレーマススペクトルにより確認された。
【０２４７】
実施例２
オキシントモジュリン（ＯＸＭ）コレステリル化類似体ＯＸＭ３６、ＯＸＭ７０、ＯＸＭ１１５、ＯＸＭ２１２、ＯＸＭ２１３、及びＯＸＭ２１６の合成は、次のように行われた。
【０２４８】
反応は、チオエーテル結合の形成が可能となる条件下に行われた。コレステリル化ＯＸＭペプチドは次いで逆相ＨＰＬＣを用いて分離され、マイクロマスＬＣＺプラットフォーム上で確認された。類似体ＯＸＭ３６、７０、２１２及び２１３は、夫々、チオール含有ＯＸＭペプチドプレカーサーＯＸＭ２２９、ＯＸＭ２０８、及び２０９から、構造：
【化８】
0005756961.tif 000017
【０２４９】
を有するブロモ誘導体、コレスト−５−エン−３−イルブロモアセテートとの反応により合成され、チオール結合を介して結合された接合体が形成された。簡単に述べると、３０ｍｇのペプチドプレカーサーを１ｍＬのＤＭＳＯ（濃度３０ｍｇ／ｍＬ）に溶解し、ＴＨＦ中に溶解された(濃度２０ｍｇ／ｍＬ)１モル過剰のコレスト−５−エン−３−イルブロモアセテートを加えた。次いで、この混合物に１容量％のＤＩＰＥＡ（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピル−エチルアミン）を加え、３０分間のインキュベーション後、このペプチド溶液をＲＦ−ＨＰＣＬにより精製し、マイクロマスＬＣＺプラットフォーム上で確認した。
【０２５０】
ペプチドＯＸＭ１１５及び２１６は、チオエーテル結合を介して結合された接合体を製造するため、ブロム誘導体、コレスト−５−エン−３−イル  １−ブロモ−２−オキソ−６，９，１２，１５−テトラオキサ−３−アザオクタデカン−１８−オエート
【０２５１】
【化９】
0005756961.tif 000018
【０２５２】
との反応により、チオール含有ＯＸＭペプチドプレカーサーＯＸＭ２２９及びＯＸＭ２９から合成され、類似体が製造された。簡単に述べると、３０ｍｇのペプチドプレカーサーを１ｍＬのＤＭＳＯ（濃度３０ｍｇ／ｍＬ）に溶解し、ＴＨＦに溶解された１モル過剰のコレスト−５−エン−３−イル  １−ブロモ−２−オキソ−６，９，１２，１５−テトラオキサ−３−アザオクタデカン−１８−オエート (濃度２０ｍｇ／ｍＬ)が加えられた。次いで、３容量％のＤＩＰＥＡ（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピル−エチルアミン）をこの混合物に加え、３０分のインキュベーション後、このペプチド溶液をＲＦ−ＨＰＣＬにより精製し、マイクロマスＬＣＺプラットフォーム上で確認した。
【０２５３】
実施例３
ＰＥＧ化反応が、チオエステル結合形成が可能な条件で行われた。次いで、ＰＥＧ化されたＯＸＭペプチドは、逆相ＨＰＬＣあるいはイオン交換クロマトグラフィー及びサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）を用いて分離された。ＰＥＧ化されたＯＸＭペプチドは、ＲＰ−ＨＰＬＣ、ＨＰＬＣ−ＳＥＣ及びＭＡＬＤＩ−Ｔｏｆマススペクトロメトリーを用いて確認された。
【０２５４】
ＯＸＭ３３、３５、３６及び５４は、チオエーテル結合を介して共有結合で結合されたＰＥＧを有する類似体を製造するため、チオール含有ＯＸＭペプチドプレカーサーＯＸＭ２２９から合成された。
【０２５５】
ＯＸＭ３３の合成
１０ｍｇのペプチドプレカーサー（２．２μモル）を、０．２ｍＬのＨＥＰＥＳ  ０．１Ｍ、ｐＨ７．３、塩化グアニジニウム６Ｍ、２ｍＭ  ＥＤＴＡに溶解した。この溶液に、０．４ｍＬのＨＥＰＥＳ  ０．１Ｍ、ｐＨ７．３、に溶解された２２ｍｇのＭＰＥＧ−ＭＡＬ−５００（ＮＥＫＴＡＲ  ２Ｆ２ＭＯＨ０１）（４．４μモル）（ペプチド対ＰＥＧ比が１：２モル／モル）を加えた。１時間のインキュベーション後、このＰＥＧ化されたペプチドをＲＰ−ＨＰＬＣにより精製し、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦにより確認した。
【０２５６】
ＯＸＭ３４の合成
１０ｍｇのペプチドプレカーサー（２．２μモル）を０．２ｍＬのＨＥＰＥＳ  ０．１Ｍ、ｐＨ７．３、塩化グアニジニウム  ６Ｍ、２ｍＭ  ＥＤＴＡに溶解した。この溶液に、０．５ｍＬのＨＥＰＥＳ  ０．１Ｍ、ｐＨ７．３、に溶解された８０ｍｇのＭＰＥＧ−ＭＡＬ−２０Ｋ（ＮＥＫＴＡＲ２  ２ＦＭ０Ｐ０１）（４．０μモル）（ペプチド対ＰＥＧ比が１：１．８モル／モル）を加えた。１時間のインキュベーション後、このＰＥＧ化されたペプチドをＲＰ−ＨＰＬＣにより精製し、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦにより確認した。
【０２５７】
ＯＸＭ３５の合成
１０ｍｇのペプチドプレカーサー（０．９２μモル）を０．４ｍＬのＨＥＰＥＳ  ０．１Ｍ、ｐＨ７．３、塩化グアニジニウム  ６Ｍ、２ｍＭ  ＥＤＴＡに溶解した。この溶液に、０．８ｍＬのＨＥＰＥＳ  ０．１Ｍ、ｐＨ７．３に溶解された７０ｍｇのＭＰＥＧ２−ＭＡＬ−４０Ｋ（ＮＥＫＴＡＲ  ２Ｄ３Ｙ０Ｔ０１）（１．７μモル）（ペプチド対ＰＥＧ比が１：１．８モル／モル）を加えた。１時間のインキュベーション後、このＰＥＧ化されたペプチドをＲＰ−ＨＰＬＣにより精製し、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦにより確認した。
【０２５８】
コントロールペプチドＯＸＭ５４は、チオール含有ペプチドプレカーサーを、０．１ＭトリスＨＣｌ、ｐＨ７．５、６Ｍ塩化グアニジニウム中の１０当量のヨードアトアタミドとインキュベーションすることにより製造した。３０分間のインキュベーション後、このペプチドをＲＰ−ＨＰＬＣにより精製し、エレクトロスプレーマススペクトルにより確認した。
【０２５９】
ＯＸＭ１０３、ＯＸＭ１０５、ＯＸＭ１０７、ＯＸＭ１１３の合成
１０ｍｇの対応するペプチドプレカーサー（２．２６μモル）を２ｍＬの尿素  ８Ｍ，ＨＥＰＥＳ  ０．１Ｍ、ｐＨ７．３、２ｍＭ  ＥＤＴＡに溶解した。この溶液に、水に溶解された１０９ｍｇのＭＰＥＧ２−ＭＡＬ−４０Ｋ（ＮＥＫＴＡＲ  ２Ｄ３Ｙ０Ｔ０１）（２．７１μモル）（ペプチド対ＰＥＧ比が１：１．２モル／モル）を加えた。１時間のインキュベーション後、このＰＥＧ化されたペプチド溶液を１％酢酸に酸性化し、酢酸ナトリウム５０ｍＭ、ｐＨ４．８中のリニヤな傾斜のＮａＣｌを用いる、ＴＳＫ  ＣＭ−６５０Ｓでのカチオン交換クロマトグラフィー（ＩＸＣ）により精製した。ＩＸＣで精製されたＰＥＧ化されたペプチドを、さらにＳＥＣにより精製し、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦにより確認した。
【０２６０】
ＯＸＭ１０９の合成
１０ｍｇの対応するペプチドプレカーサー（２．２５μモル）を２ｍＬの尿素  ８Ｍ、ＨＥＰＥＳ  ０．１Ｍ、ｐＨ７．３、２ｍＭ  ＥＤＴＡに溶解した。この溶液に、２ｍＬの水に溶解された１０８ｍｇのＭＰＥＧ２−ＭＡＬ−４０Ｋ（ＮＥＫＴＡＲ  ２Ｄ３Ｙ０Ｔ０１）（２．７μモル）（ペプチド対ＰＥＧ比が１：１．２モル／モル）を加えた。１時間のインキュベーション後、このＰＥＧ化されたペプチド溶液を１％酢酸に酸性化し、酢酸ナトリウム５０ｍＭ、ｐＨ４．８中のリニヤな傾斜のＮａＣｌを用いる、ＴＳＫ  ＣＭ−６５０Ｓでのカチオン交換クロマトグラフィー（ＩＸＣ）により精製した。ＩＸＣで精製されたＰＥＧ化されたペプチドを、さらにＳＥＣにより精製し、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦにより確認した。
【０２６１】
実施例４
ＧＬＰ−１及びグルカゴン受容体に関し十分なアゴニスト活性を示す、表２に示されるＯＸＭペプチド類似体を次のようにして合成した。
ＯＸＭ３０１、ＯＸＭ３０２、ＯＸＭ３０３、ＯＸＭ３０４、ＯＸＭ３０５の前駆体であるペプチドＯＸＭ２９０、２９１、２９２、２９３及び２９４（表２参照）を、ペプチドマルチシンセサイザー  シンホニー  プロテイン  テクノロジー  インク．（Ｓｉｍｐｈｏｎｙ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｃ．）でＦｍｏｃ／ｔ−Ｂｕ化学を用いて、固相で合成した。ペプチドアミドのため、修飾されたリンク（Ｒｉｎｋ）リンカーｐ−［（Ｒ，Ｓ）−α−［９Ｈ−フルオレン−９−イル−メトキシホルムアミド］−２，４−ジメトキシベンジル］−フェノキシ酢酸（リンク、テトラへドロン・レターズ，２８，３７８７−３７８９（１９８７）、ベルナトビッツ他、テトラヘドロン・レターズ，３０，４６４５−４６６７（１９８９））を用いて誘導された樹脂である、樹脂アミノメチル化ポリスチレンＬＬ（１００−２００メッシュ、０．４１ｍモル／ｇ）（ノババイオケミカル）０．５ｇを用いた。アミノ酸全ては、０．５Ｍ濃度で、０．５Ｍ  ＨＯＢｔ（ヒドロキシベンゾトリアゾール）ＤＭＦ溶液に溶解された。アシル化反応は、樹脂フリーアミノ基の８倍過剰の活性化アミノ酸を用いて、６０分間行なわれた。アミノ酸は、ＤＭＦ中の０．５Ｍ溶液の等モル量のＨＢＴＵ（２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）、及びＮＭＰ中の２Ｍ溶液の２倍モル過剰のＤＩＥＡ（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン）により活性化された。
【０２６２】
側鎖保護基は、ＡｓｐにはＯＭｐｅ（Ｏ−３−メチル−ペント−３−イル）；Ｇｌｕ、Ｓｅｒ、Ｄ−Ｓｅｒ、Ｔｈｒ及びＴｙｒにはｔｅｒｔ−ブチル；Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ及びＨｉｓにはトリチル；Ｌｙｓ、Ｔｒｐにはｔｅｒｔ−ブトキシ−カルボニル；Ａｒｇには２，２，４，６，７−ペンタメチルジヒドロベンゾフラン−５−スルホニルであった；Ｂｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨが合成において用いられた。
【０２６３】
合成の終わりに、乾燥ペプチド樹脂は、２５ｍＬの切断混合物、８２．５％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、５％フェノール、５％チオアニソール、２．５％エタンジチオール、及び５％水を用い、室温で１．５時間夫々処理された。各樹脂を濾過し、溶液の容量を減少させ、次いで、ペプチドを沈澱させるため、溶液を冷メチル−ｔ−ブチルエーテルに加えた。遠心分離後、ペプチドペレットを、新鮮な冷メチル−ｔ−ブチルエーテルで洗浄して有機スカベンジャーを除去した。この工程を２回繰返した。最終ペレットを乾燥し、２０％アセトニトリル水溶液中に再懸濁し、凍結乾燥した。
【０２６４】
粗ペプチドを、逆相ＨＰＬＣにより、分取用ウォーターズ（Ｗａｔｅｒｓ）ＲＣＭデルタＰａｋＴＭＣ４カートリッジ（４０ｘ２００ｍｍ、１５μｍ）を用い、溶出液として、（Ａ）０．１％ＴＦＡ水溶液、及び（Ｂ）０．１％ＴＦＡアセトニトリル溶液を用いて精製した。次の溶出液Ｂの勾配が使用された：ＯＸＭ３０１プレカーサーのため５分間にわたり２２％−２２％、さらに２０分間にわたり２２％−３２％、ＯＸＭ３０２プレカーサーのためには、５分間にわたり２２％−２２％、さらに２０分間にわたり２２％−３５％、ＯＸＭ３０３プレカーサーのためには、５分間にわたり２５％−２５％、さらに２０分間にわたり２５％−４０％、ＯＸＭ３０４プレカーサー及びＯＸＭ３０５プレカーサーのためには、５分間にわたり２５％−２５％、さらに２０分間にわたり２５％−３５％、流速８０ｍＬ／分、波長２１４ｎｍ。分析ＨＰＬＣは、溶剤として、０．１％ＴＦＡ水溶液（Ａ）及び０．１％ＴＦＡのＣＨ３ＣＮ溶液（Ｂ）、また次のリニヤー勾配：２５％−２５％Ｂ(５分間)−４０％Ｂ（２０分間）−８０％Ｂ（２分間）、流速１ｍＬ／分、を用いて、ＡＣＥ  Ｃ−４（３００Ａ）、３μｍカラム、１５０ｘ４．６ｍｍ、（ＣＰＳ分析論ｐ／ｎ  ＡＣＥ−２１３−１５４６）を有するアライアンス  ウオーターズ  クロマトグラフにて、４５℃で、行われた。精製されたペプチドは、マイクロマス（Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ）ＬＣＺプラットフォーム上でエレクトロスプレーマススペクトルにより確認された。
【０２６５】
Ｃ７接合体（ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ）の合成は、次のように行われた。ペプチドＯＸＭ３０１、ＯＸＭ３０２、ＯＸＭ３０３、ＯＸＭ３０４、ＯＸＭ３０５は、Ｃ−末端でシステイン残基のチオエーテル基を経由して共有結合的に結合されたＣ７基を有する誘導体を製造するため、チオール含有ＯＸＭペプチド前駆体ＯＸＭ２９０〜２９４から合成された。前駆体の誘導体化の例として、４０ｍｇのペプチド前駆体が、１３３ｍＬのＤＭＳＯ（濃度３０ｍｇ／ｍＬ）に溶解され、ＴＨＦに溶解された２．１モル過剰のコレスト−５−エン−３−イル  １−ブロモ−２−オキソ−６，９，１２，１５−テトラオキサ−３−アザオクタデカン−１８−オエート（濃度３０ｍｇ／ｍＬ）が加えられた。次いで、この混合物に、５容量％のＤＩＰＥＡ（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピル−エチルアミン）を加え、３０分のインキュベーション後、液が濁るまで酢酸アンモニウム（１Ｍ水溶液）を滴下することによりクエンチされた。
【０２６６】
次いで、この溶液は、溶出液として、水中の０．５Ｍ酢酸アンモニウム、２０％ＭｅｔＯＨ、２５％アセトニトリル、ｐＨ７．８、を用い、５ｍＬ／分で、逆相ウオーターズＲＣＭ  Ｄｅｌｔａ−ＰａｋＴＭＣ〜４カートリジ（２０ｘ２００ｍｍ、１５μｍ、３００Ａ）に直接かけられた。無勾配の溶出液が、このバッファーを用い、１５分間、３０ｍＬ／分で流された。次いで、溶出液は、（Ａ）水中の０．２％酢酸、２０％ＭｅｔＯＨ、（Ｂ）アセトニトリル中の０．２％酢酸，２０％ＭｅｔＯＨに変更され、次の濃度勾配：２５％（Ｂ）−３５％（Ｂ）（５分で）−７０％（Ｂ）（２０分で）−８０％（Ｂ）（２分で）−８０％（Ｂ）（３分間）が、流速３０ｍＬ／分、波長２３０ｎｍで流された。
【０２６７】
最終のペプチド溶液は、溶剤として、Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ（Ａ）及びＣＨ３ＣＮ、０．１％ＴＦＡ（Ｂ）を用い、次のリニヤー勾配：４０％−４０％Ｂ(５分で)−７０％Ｂ（２０分で）−８０％Ｂ（２０分で）、流速１ｍＬ／分で、ＡＣＥ  Ｃ−４（３００Ａ）、３ｕｍカラム、１５０ｘ４．６ｍｍ（ＣＰＳ分析論ｐ／ｎ  ＡＣＥ−２１３−１５４６）を有するアライアンス  ウオーターズ  クロマトグラフにて、４５℃で確認された。このペプチドは、マイクロマス（Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ）ＬＣＺプラットフォーム上でエレクトロスプレーマススペクトルにより確認された。
【０２６８】
実施例５
ペプチドＯＸＭ２３７−ＯＸＭ３０８及びＯＸＭ３４５−ＯＸＭ４１４が、ペプチドマルチシンセサイザー  シンホニー  プロテイン  テクノロジー  インク．（Ｓｉｍｐｈｏｎｙ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｃ．）のＦｍｏｃ／ｔ−Ｂｕ化学を用いて、固相で合成された。ペプチドアミドのため、変性リンク（Ｒｉｎｋ）リンカーｐ−［（Ｒ，Ｓ）−α−［９Ｈ−フルオレン−９−イル−メトキシホルムアミド］−２，４−ジメトキシベンジル］−フェノキシ酢酸（リンク  エイチ、１９８７，テトラへドロン・レターズ，２８，３７８７−３７８９、ベルナトビッツ  エム  エス他、１９８９，テトラヘドロン・レターズ，３０，４６４５−４６６７）を用いて誘導された樹脂である、樹脂アミノメチル化チオエーテルズＬＬ（１００−２００メッシュ、０．４１ｍモル／ｇ）（ノババイオケミカル）０．５ｇを用いた。ペプチド酸のため、４−ヒドロキシメチルフェノキシ酢酸を用いて誘導された樹脂である、樹脂アミノメチル化チオエーテルズＬＬ（１００−２００メッシュ、０．４１ｍモル／ｇ）（ノババイオケミカル）０．５ｇが用いられた。アミノ酸全ては、０．５Ｍ濃度で、ＤＭＦ中の０．５Ｍ  ＨＯＢt（ヒドロキシベンゾトリアゾール）に溶解された。アシル化反応が、樹脂フリーアミノ基に対し８倍過剰の活性化アミノ酸を用いて６０分間行われた。アミノ酸の活性化は、等モル量のＨＢＴＵ（２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＤＭＦ中の０．５Ｍ溶液、及び２倍モル過剰のＤＩＥＡ（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン）、ＮＭＰ中の２Ｍ溶液、を用い行われた。
【０２６９】
側鎖保護基は、Ａｓｐに対してはＯｍｐｅ（Ｏ−３−メチル−ペント−３−イル）；Ｇｌｕ、Ｓｅｒ、Ｄ−Ｓｅｒ、Ｔｈｒ及びＴｙｒに対してはｔｅｒｔ−ブチル；Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ及びＨｉｓに対してはトリチル；Ｌｙｓ、Ｔｒｐに対してはｔｅｒｔ−ブトキシ−カルボニル；Ａｒｇに対しては２，２，４，６，７−ペンタメチルジヒドロベンゾフラン−５−スルホニルであり、合成の際にＢｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨが用いられた。
【０２７０】
ペプチドＯＸＭ３９２、３９５に対して、Ｇｌｕ１６及びＬｙｓ２０が、Ｇｌｕ（Ｏａｌｌ）及びＬｙｓ（Ａｌｌｏｃ）として組み入れられた。組み立ての最後で、樹脂は乾燥され、Ｇｌｕ（Ｏａｌｌ）及びＬｙｓ（Ａｌｌｏｃ）の保護基は除去され、樹脂を５モル過剰のＨＢＴU及び１０モル過剰のＤＩＰＥＡを用いてインクベーションすることにより、ラクタム架橋が形成された。
【０２７１】
ＯＸＭ４０４、４０７、４０８、４１０、４１１、４１４、４１５、４１６、４１７、４１８、４１９、４２０のような脂質化されたペプチドに対しては、側鎖上に誘導されるべきリシンがＬｙｓ（Ａｌｌｏｃ）として組み入れられた。組み立ての最後に、Ａｌｌｏｃ保護基は除去され、活性剤としてＨＢＴＵ及びＤＩＰＥＡを用いるγ−カルボキシグルタミン酸残基とパルミチン酸の縮合により合成は完結された。
【０２７２】
合成の最後に、これら乾燥ペプチドは、夫々、２５ｍＬの切断混合物、８２．５％のトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、５％フェノール、５％チオアニソール、２．５％エタンジチオール及び５％水を用いて、１．５時間室温で処理された。各樹脂は濾過され、溶液の容量が減らされ、次いでペプチドを沈殿させるため、冷メチル−ｔ−ブチルエーテルに加えられた。遠心分離後、ペプチドペレットを、新鮮な冷メチル−ｔ−ブチルエーテルで洗浄し、有機スカベンジャーを除去した。この工程を２回繰返した。最終ペレットを乾燥し、Ｈ２Ｏ、２０％アセトニトリル中に再懸濁し、凍結乾燥した。
【０２７３】
この粗ペプチドを、分取用ウォーターズ（Ｗａｔｅｒｓ）ＲＣＭＤｅｌｔａ  ＰａｋＴＭＣ−４カートリッジ（４０ｘ２００ｍｍ、１５μｍ）を用い、溶出液として、（Ａ）水中の０．１％ＴＦＡ、及び（Ｂ）アセトニトリル中の０．１％ＴＦＡを用いて、逆相ＨＰＬＣにより精製した。分析ＨＰＬＣは、溶剤として、Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ（Ａ）及びＣＨ３ＣＮ、０．１％ＴＦＡ（Ｂ）を用い、ＡＣＥ  Ｃ−４（３００Ａ）、３ｕｍカラム、１５０ｘ４．６ｍｍ（ＣＰＳ分析論ｐ／ｎ  ＡＣＥ−２１３−１５４６）を備えたアライアンス  ウオーターズ  クロマトグラフにて行われた。精製されたペプチドは、マイクロマス（Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ）ＬＣＺプラットフォーム上でエレクトロスプレーマススペクトルにより確認された。
【０２７４】
Ｃ５接合体の合成は、以下のとおりに行われた。ペプチドＯＸＭ２３８は、Ｃ−末端でシステインのチオエーテル残基を経由して共有結合的に接合されたアセトアミドを有する誘導体を製造するため、チオール含有ＯＸＭペプチド前駆体から合成された。前駆体の誘導体化の例としては、５０ｍｇのペプチド前駆体がトリスＨＣｌバッファー０．２５Ｍ、ＥＤＴＡ２ｍＭ、尿素６Ｍ、ｐＨ８．３(濃度３０ｍｇ／ｍＬ)に溶解され、ＤＭＳＯに溶解された１０モル過剰のヨードアセトアミド(濃度３０ｍｇ／ｍＬ)が加えられた。３０分後、反応は完結した。溶液は酢酸を用いて酸性とされ、分取ＨＰＬＣにて精製された。
【０２７５】
Ｃ４接合体の合成は、以下のとおりに行われた。ペプチドＯＸＭ３４５、ＯＸＭ３５５、ＯＸＭ３５７、ＯＸＭ３７３は、夫々、Ｃ−末端でシステインのチオエーテル基を経由して共有結合的に接合されたコレステロール基を有する誘導体を製造するため、チオール含有ＯＸＭペプチド前駆体から合成された。前駆体の誘導体化の例としては、４０ｍｇのペプチド前駆体が、ＤＭＳＯに溶解され(濃度３０ｍｇ／ｍＬ)、ＴＨＦに溶解された２．１モル過剰のコレスト−５−エン−３−イル  １−ブロモ−２−オキソ−６，９，１２，１５−テトラオキサ−３−アザオクタデカン−１８−オエート（濃度３０ｍｇ／ｍＬ）が加えられた。次いで、この混合物に、５容量％のＤＩＰＥＡ（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピル−エチルアミン）が加えられ、３０分のインキュベーション後、液が濁るまで酢酸アンモニウム（１Ｍ水溶液）を滴加することによりクエンチされた。
【０２７６】
次いで、この溶液は、溶出液として、水中の０．５Ｍ酢酸アンモニウム、２０％ＭｅｔＯＨ、２５％アセトニトリル、ｐＨ７．８、を用い、５ｍＬ／分で、逆相ウォーターズ（Ｗａｔｅｒｓ）ＲＣＭ  Ｄｅｌｔａ−ＰａｋＴＭＣ−４カートリッジ（４０ｘ２００ｍｍ、１５μｍ、３００Ａ）に直接かけられた。無勾配の溶出液が、このバッファーを用い、１５分間、３０ｍＬ／分で流された。次いで、溶出液は、（Ａ）水中の０．２％酢酸、２０％ＭｅｔＯＨ（Ｂ）アセトニトリル中の０．２％酢酸、２０％ＭｅｔＯＨに変更された。
【０２７７】
最終ペプチドは、溶剤として、Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ（Ａ）及びＣＨ３ＣＮ、０．１％ＴＦＡ（Ｂ）を用い、ＡＣＥ  Ｃ−４（３００Ａ）、３μｍカラム、１５０ｘ４．６ｍｍ、（ＣＰＳ分析論ｐ／ｎ  ＡＣＥ−２１３−１５４６）を有するアライアンス  ウオーターズ  クロマトグラフにて、４５℃で確認された。このペプチドは、マイクロマス（Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ）でエレクトロスプレーマススペクトルにより確認された。
【０２７８】
Ｃ７接合体の合成は、以下のとおりである。ペプチドＯＸＭ３５９、ＯＸＭ３６１、ＯＸＭ３７４、ＯＸＭ３８０、ＯＸＭ３８３及びＯＸＭ３８８は、夫々、Ｃ−末端でシステイン残基にチオエーテル基を経由して共有結合的に接合されたオキサ４−コレステロールを有する誘導体を製造するため、チオール含有ＯＸＭペプチド前駆体から合成された。前駆体の誘導体化の例としては、２５ｍｇのペプチド前駆体が、１．３３ｍＬのＤＭＳＯに溶解され（濃度３０ｍｇ／ｍＬ）、ＴＨＦに溶解された１．１モル過剰のコレスト−５−エン−３−イル  １−ブロモ−２−オキソ−６，９，１２，１５−テトラオキサ−３−アザオクタデカン−１８−オエート（濃度３０ｍｇ／ｍＬ）が加えられた。次いで、５容量％のＤＩＰＥＡ（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピル−エチルアミン）がこの混合物に加えられ、３０分のインキュベーション後、液が濁るまで酢酸アンモニウム（１Ｍ水溶液）を滴加することによりクエンチされた。
【０２７９】
次いで、この溶液は、溶出液として、水中の０．５Ｍ酢酸アンモニウム、２０％ＭｅｔＯＨ、２５％アセトニトリル、ｐＨ７．８を用い、５ｍＬ／分で逆相ウォーターズＲＣＭ  Ｄｅｌｔａ−ＰａｋＴＭＣ−４カートリッジ（２０ｘ２００ｍｍ、１５μｍ、３００Ａ）に直接かけられた。１５分間、無勾配溶出液がこのバッファーを用いて通された。次いで、溶出液は、（Ａ）水中の０．２％酢酸、２０％ＭｅｔＯＨ、（Ｂ）アセトニトリル中の０．２％酢酸、２０％ＭｅｔＯＨに変更され、次いで、次の濃度勾配：２５％（Ｂ）−３５％（Ｂ）（５分で）−７０％（Ｂ）（２０分で）−８０％（Ｂ）（２分で）−８０％（Ｂ）（３分間）が、流速３０ｍＬ／分、波長２３０ｎｍで流された。
【０２８０】
最終ペプチドは、溶剤として、Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ（Ａ）及びＣＨ３ＣＮ、０．１％ＴＦＡ（Ｂ）を用い、ＡＣＥ  Ｃ−４（３００Ａ）、３μｍカラム、１５０ｘ４．６ｍｍ、（ＣＰＳ分析論ｐ／ｎ  ＡＣＥ−２１３−１５４６）を有するアライアンス  ウオーターズ  クロマトグラフにて、４５℃で確認された。このペプチドは、マイクロマス（Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ）ＬＣＺプラットフォームでエレクトロスプレーマススペクトルにより確認された。
【０２８１】
Ｃ９接合体（コンジュゲート）の合成は、以下のとおりであった。ペプチドＯＸＭ３８１は、Ｃ−末端でシステイン残基にマレイミドチオエーテル結合を経由して共有結合的に接合されたオキサ１２−コレステロールを有する誘導体を製造するべく、チオール含有ＯＸＭペプチド前駆体から合成された。前駆体の誘導体化の例としては、２５ｍｇのペプチド前駆体が、ＤＭＳＯに溶解され(濃度３０ｍｇ／ｍＬ)、ＴＨＦに溶解された１．５モル過剰のコレスト−５−エン−３−イル  Ｎ−［４３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−４１−オキソ−４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７−ドデカオキサ−４０−アザトリテトラコンタン−１−オイル］グリシネート（濃度２０ｍｇ／ｍＬ）が加えられた。次いで、２容量％のＤＩＰＥＡ（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピル−エチルアミン）がこの混合物に加えられ、４−６時間のインキュベーション後、氷酢酸を用いて反応はクエンチされ、直接逆層ＨＰＬＣにかけられ、精製された。最終ペプチドは、溶剤として、Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ（Ａ）及びＣＨ３ＣＮ、０．１％ＴＦＡ（Ｂ）を用い、ＡＣＥ  Ｃ−４（３００Ａ）、３μｍカラム、１５０ｘ４．６ｍｍ、（ＣＰＳ分析論ｐ／ｎ  ＡＣＥ−２１３−１５４６）を有するアライアンス  ウオーターズ  クロマトグラフにて、４５℃で確認された。このペプチドは、マイクロマス（Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ）ＬＣＺプラットフォームでエレクトロスプレーマススペクトルにより確認された。
【０２８２】
Ｃ１０接合体の合成は、以下のとおりであった。ペプチドＯＸＭ３９２、３９５、３９８、３９９、４００、及び４０１は、Ｃ−末端でシステイン残基にチオエーテル結合を経由して共有結合的に接合されたオキサ１２−コレステロールを有する誘導体を製造するべく、チオール含有ＯＸＭペプチド前駆体から合成された。前駆体の誘導体化の例としては、２５ｍｇのペプチド前駆体が、ＤＭＳＯに溶解され(濃度３０ｍｇ／ｍＬ)、ＴＨＦ中の１．５モル過剰のコレスト−５−エン−３−イル  １−ブロモ−２−オキソ−６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９−ドデカオキサ−３−アザドテトラコンタン−４２−オエート（濃度２０ｍｇ／ｍＬ）が加えられた。次いで、２容量％のＤＩＰＥＡ（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピル−エチルアミン）がこの混合物に加えられ、４−６時間のインキュベーション後、氷酢酸を用いて反応はクエンチされ、直接、逆層ＨＰＬＣにかけられ、精製された。最終ペプチドは、溶剤として、Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ（Ａ）及びＣＨ３ＣＮ、０．１％ＴＦＡ（Ｂ）を用い、ＡＣＥ  Ｃ−４（３００Ａ）、３μｍカラム、１５０ｘ４．６ｍｍ、（ＣＰＳ分析論ｐ／ｎ  ＡＣＥ−２１３−１５４６）を有するアライアンス  ウオーターズ  クロマトグラフにて、４５℃で確認された。このペプチドは、マイクロマス（Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ）ＬＣＺプラットフォームでエレクトロスプレーマススペクトルにより確認された。
【０２８３】
Ｃ１１接合体の合成は、以下のとおりであった。ペプチドＯＸＭ４１２は、Ｃ−末端でシステイン残基にチオエーテル結合を経由して共有結合的に接合されたオキサ２４−コレステロールを有する誘導体を製造するべく、チオール含有ＯＸＭペプチド前駆体から合成された。前駆体の誘導体化の例としては、２５ｍｇのペプチド前駆体が、ＤＭＳＯに溶解され(濃度３０ｍｇ／ｍＬ)、ＴＨＦ中の１．５モル過剰のコレスト−５−エン−３−イル  １−ブロモ−２−オキソ−６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７，６０，６３，６６，６９，７２，７５−テトラコサオキサ−３−アザオクタヘプタコンタン−７８−オエート（濃度２０ｍｇ／ｍＬ）が加えられた。次いで、２容量％のＤＩＰＥＡ（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピル−エチルアミン）がこの混合物に加えられ、４−６時間のインキュベーション後、氷酢酸を用いて反応はクエンチされ、直接、逆層ＨＰＬＣにかけられ、精製された。
【０２８４】
最終ペプチドは、溶剤として、Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ（Ａ）及びＣＨ３ＣＮ、０．１％ＴＦＡ（Ｂ）を用い、ＡＣＥ  Ｃ−４（３００Ａ）、３μｍカラム、１５０ｘ４．６ｍｍ、（ＣＰＳ分析論ｐ／ｎ  ＡＣＥ−２１３−１５４６）を有するアライアンス  ウオーターズ  クロマトグラフにて、４５℃で確認された。このペプチドは、マイクロマスＬＣＺプラットフォームでエレクトロスプレーマススペクトルにより確認された。
【０２８５】
Ｃ１２接合体の合成は、以下のとおりであった。ペプチドＯＸＭ４２１は、Ｃ−末端でシステイン残基にチオエーテル結合を経由して共有結合的に接合されたオキサ１２−Ｏ−コレステロールを有する誘導体を製造するべく、チオール含有ＯＸＭペプチド前駆体から合成された。前駆体の誘導体化の例としては、２５ｍｇのペプチド前駆体が、ＤＭＳＯに溶解され(濃度３０ｍｇ／ｍＬ)、ＴＨＦ中の１．５モル過剰のコレスト−５−エン−３−イル  １−ブロモ−２−オキソ−６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６−ウンデカオキサ−３−アザオクタトリアコント−７８−オエート（濃度２０ｍｇ／ｍＬ）が加えられた。次いで、２容量％のＤＩＰＥＡ（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピル−エチルアミン）がこの混合物に加えられ、４−６時間のインキュベーション後、氷酢酸を用いて反応はクエンチされ、直接、逆層ＨＰＬＣにかけられ、精製された。
【０２８６】
最終ペプチドは、溶剤として、Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ（Ａ）及びＣＨ３ＣＮ、０．１％ＴＦＡ（Ｂ）を用い、ＡＣＥ  Ｃ−４（３００Ａ）、３μｍカラム、１５０ｘ４．６ｍｍ、（ＣＰＳ分析論ｐ／ｎ  ＡＣＥ−２１３−１５４６）を有するアライアンス  ウオーターズ  クロマトグラフにて、４５℃で確認された。このペプチドは、マイクロマスＬＣＺプラットフォームでエレクトロスプレーマススペクトルにより確認された。
【０２８７】
実施例６
表３に、天然ＯＸＭと本明細書に記載されたＯＸＭ類似体を示す。
【０２８８】
【表３】
0005756961.tif 000019
【０２８９】
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【０２９０】
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【０２９１】
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【０２９２】
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【０２９３】
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【０２９４】
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【０２９５】
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【０２９６】
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【０２９７】
実施例７
ＧＬＰ−１Ｒ／ＧＣＧＲ−コ−アゴニストの体重及び摂食低減、及び血糖コントロールの改善能力が論証される。
最初に、我々は、組み換えヒトＧＬＰ−ＩＲ又はヒトＧＣＧＲのいずれかを安定的に発現するＣＨＯセルラインを用いて、環状−ＡＭＰ（ｃＡＭＰ）の産生を測定する蛍光セルに基づく検定により、ペプチドをスクリーニングした。マウス及びヒトＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲアゴニスト活性の決定は、次のように行われた。マウス及びヒトＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲを安定的に発現するＣＨＯセルは、酵素フリーの分離培地（ＥＦＤＭ、特殊培地）を用いて集菌する前の３〜４日間、イスコフ改変ダルベッコ培地（ＩＭＤＭ）、１０％ＦＢＳ、ＩｍＭ  Ｌ−グルタミン、ペニシリン−ストレプトマイシン（１００μ／ｍＬ）及び７５０μｇ  Ｇ４１８／ｍＬで生育された。ＧＬＰ−ＩＲ活性及びＧＣＧＲ活性を決定するために、ＯＸＭ及びＯＸＭ−Ｑ３Ｅは、アッセイバッファー中に希釈され、１０％マウス血漿の存在下又は不存在下に、室温で３０分、それぞれセルを用いて培養された。このアッセイは、メーカーの説明にしたがって、ランス（ＬＡＮＣＥ）キット検出バッファーを用いて終結された。プレートは室温でさらに１時間保持され、次いでｃＡＭＰレベルの増大が、エンビジョン（ＥｎＶｉｓｉｏｎ）カウンター（パーキンエルマー）でメーカー説明にしたがっての標準ｃＡＭＰカーブとの比較での測定により、ＴＲ−ＦＲＥＴシグナルの低下として検出された。データは、直線又は非直線回帰分析ソフトウエア、グラフパッドプリズム（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ）を用いて解析された。
【０２９８】
デュアルＧＬＰ−１Ｒ／ＧＣＧＲ  コ−アゴニスト（ＯＸＭミメティック）対ＧＬＰ−ＩＲ選択アゴニスト（ＧＬＰ−１ミメティック）の有用性の評価は、以下の通りに行われた。まず、デュアルＧＬＰ−１Ｒ／ＧＣＧＲコ−アゴニスト（又はＯＸＭミメティック）の医薬有用性を評価するため、ＧＬＰ−１受容体（又はＧＬＰ−１ミメティック）のみのために選択されるが、天然のＯＸＭとただ１つのアミノ酸で異なる、マッチしたペプチドが確認された。このペプチドは、３位においてグルタミン（Ｑ）に替えてグルタミン酸（Ｅ）残基を有する点において天然のＯＸＭと異なるものであった。当該Ｑの位置にアスパラギン酸（Ｄ）を有する第二のＧＬＰ−１ミメティックが、確認された。齧歯動物での代謝コントロールにおけるＧＬＰ−１ミメティックとＯＸＭミメティックの有用性が比較された。これらのペプチド及びヒトＯＸＭは、ＧＬバイオケム（上海）エルティーディー（Ｌｔｄ）で合成され、精製された。
【０２９９】
表４には、天然のＯＸＭ及びＯＸＭ−Ｑ３Ｅ及びＯＸＭ−Ｑ３Ｄペプチドのインビトロでの有効性及び受容体結合親和力が示されている。ニュートラルＱから酸残基、例えばＤ又はＥへの第三の残基の変更は、天然のオキシントモジュリンのグリコーゲン受容体を結合する効力を著しく減少させ、またＧＬＰ−１受容体に対しほとんど効力を有さないものとなる。
【０３００】
【表４】
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【０３０１】
我々は、さらに、ＧＣＧＲのインビボ及びエクスビボでのグリコーゲン分解試験及びインビボでのＧＣＧＲ受容体アッセイに相互に影響する、天然のＯＸＭとＯＸＭ−Ｑ３Ｅ（ＧＬＰ−１ミメティック）の能力についても評価した。ペプチドのインビボでの効果の論証が不十分な薬物動態学特性により往々にして混乱されるように、対象の灌流された肝臓試験においては、機能性臓器の活性のための試験ペプチド評価には別のエクスビボ法が必要とされる。
【０３０２】
インビボ試験で用いる動物
痩せた又は食餌療法により肥満とされた１０〜１２週齢のオスのＣ５７ＢＬ／６マウスが、トコニックファームズ（Ｔｏｃｏｎｉｃ  Ｆａｒｍｓ）（ジャーマンタウン、ニューヨーク州）から購入され、従来のＳＰＦ施設内のそれぞれのテクニプラストケージに収容された。マウスは、もし他に言及がなければ、１２時間は明るく、１２時間は暗くしたサイクル下において、水へは自由にアクセスができる状態で、通常の餌（テクラッド７０１２：脂肪から１３．４％ｋｃａｌ；ハーラン  テクラッド）又は高脂肪食（Ｄｌ２４９２；脂肪から６０％ｋｃａｌ；リサーチ  ダイエッツ，インク．）のいずれかで飼育された。腹腔内グルコース負荷試験。オスのＣ５７ＢＬ／６Ｎマウスは、体重別に投与群（ｎ＝６／グループ）に分類された。試験の朝に、餌は取り除かれ、グルコース刺激の１０分前に、ベヒクル（殺菌水）ＯＸＭ又はＯＸＭ−Ｑ３Ｅを用い、０．０１、０．０３、０．１、０．３、１又は３ｍｇ／ｋｇでそれぞれ独立にｓ．ｃ．投与された。血中グルコース濃度は、Ｔ＝−１０分及びＴ＝０分（基準線）で決定された。次いで、マウスは、即座にＤ−グルコース（２ｇ／ｋｇ）を用いて腔腸内にて刺激された。ベヒクル処置されたマウスの１群は、ネガティブコントロールとして、０．９％生理的食塩水を用いて刺激された。血中グリコーゲンレベルは、Ｄ−グルコース刺激の後２０、４０、及び６０分後に採取された尾の血液から決定された。Ｔ＝０からＴ＝６０分までの血中グルコース変異プロフィールは、各処理に対するカーブの下部領域（ＡＵＣ）を積分するために用いられた。各処理に対するパーセント阻害は、生理的食塩水刺激コントロールに対し規格化されたＡＵＣデータから作成された。グルコースに対するカーブの下部領域（ＡＵＣ）は、台形法を用いて算出された。統計値。統計的分析は、不対の２−テイルド  スチューデント  ｔ  テスト（２−ｔａｉｌｅｄ  Ｓｔｕｄｅｎｔ'ｓ  ｔ  ｔｅｓｔ）を用いて行われた。０．０５未満のＰ値は、有意として報告された。
【０３０３】
肝臓グリコーゲン分解アッセイ
ヒト化ＧＣＧＲマウス（Ｃ５７Ｂ／６Ｎ）は、暗サイクルの中間において麻酔（ネムブタール  ＩＰ、５０ｍｇ／ｋｇ）をかけられた。次いで、門脈がカニュレ処置され、肝臓は、切除され、前酸素負荷されたクレブズ−ヘンセレイト（Ｋｒｅｂｓ−Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ）重炭酸塩バッファー溶液を用いて５〜１０分灌流された。この灌流は、最初はいかなる内在性基質をも洗浄除去するため再循環されなかった。次いで、肝臓は２０ｍｍ  ＮＭＲチューブ内に置かれ、最初のクレブズ液は、クレブズ−ＢＳＡ灌流液（約７２ｍｌ、２．５％ＢＳＡ）に交換され、灌流された。肝臓の活力を評価するためのＡＴＰ及び無機リン酸塩（Ｐｉ）レベルを調べるため、３１ｐ  ＮＭＲ分光法がまず行われた。次いで、グリコーゲンの１３Ｃ  ＮＭＲ−可視プールが、糖新生基質［２−１３Ｃ］ピルビン酸塩及びアンモニウムクロライド（各々、〜７ｍＭ及び１ｍＭ）の灌流液への添加により作り出され、肝臓に含まれる１３Ｃグリコーゲンの量が、グリコーゲン中のグルコシル単位のＣｌ共鳴を介してリアルタイムでモニターされた。４５分後、ＯＸＭ５、ＯＸＭ−Ｑ３Ｅ、グルカゴン又はベヒクルは灌流され、続いてのグリコーゲンレベルの応答は、ＧＣＧＲ活性化を評価するために用いられた（ベルガンス（Ｂｅｒｇａｎｓ）他、ＮＭＲ  Ｂｉｏｍｅｄ．１６：３６−４６，（２００３））。グリコース依存インスリン分泌（ＧＤＩＳ）。ＧＤＩＳを測定するため、マウス膵島は、膵臓導管カニューレ挿入及び密度勾配精製の手順を用いるコラゲナーゼ法により分離され（ムー（Ｍｕ）他、ダイアビーティーズ  ５５；１６９５−７０４，（２００６））、２又は１６ｍｍｏｌ／Ｌグリコースを用いて培養された。インスリンは、市販のキット（ＡＬＰＣＯ診断薬、ウイダム（Ｗｉｎｄｈａｍ）、ＮＨ）を用い、酵素結合イムノソルベント測定により培養バッファーの一定分取量において測定された。動物実験実施要領は、ニュジャージー州ラーウエイのメルク  リサーチ  ラボラトリイーズ  インスティテューショナル  アニマル  ケア  アンド  ユース  コミィティーにより論評され、承認された。
【０３０４】
１３Ｃ  ＮＭＲ分光法は、グリコーゲン及びグリコースレベルを、新規オキシントモジュリン類似体を用いての急性処置に応答してリアルタイムで非間欠的にモニターするために用いられた。ヒトＧＣＧＲを発現するマウスは、暗サイクルのほぼ中間において麻酔（ネムブタール  ＩＰ、５０ｍｇ／ｋｇ）をかけられた。次いで、門脈がカニュレ処置され、固定解除され、肝臓が切除された。次いで、肝臓は２０ｍｍ  ＮＭＲチューブ内に置かれ、最初のクレブズ液は、クレブズ−ＢＳＡ灌流液（約７２ｍｌ、２．５％ＢＳＡ）に交換され、クレブズ−ＢＳＡ灌流液は灌流された。最初に、肝臓の活力を評価するために用いられる肝臓でのＡＴＰ及び無機リン酸塩（Ｐｉ）レベルを調べるために、３１ｐ  ＮＭＲ分光法が行われた。次いで、グリコーゲンの１３Ｃ  ＮＭＲ−可視プールは、糖新生基質［２−１３Ｃ］ピルビン酸塩＋ＮＨ４Ｃｌの添加により作り出され、肝臓に含まれるグリコーゲンの量が、グリコーゲン中のグルコシル単位のＣｌ共鳴を介してリアルタイムでモニターされた。約４５分後、ＯＸＭ又はＯＸＭペプチド類似体は灌流され、グリコーゲンレベルの続いての応答が、ヒトＧＣＧＲ活性化を評価するために用いられた。ＯＸＭペプチド類似体、５０ｐＭグルカゴン又は媒質のいずれかを受けた肝臓に対するグリコーゲン中のグリコシル単位のＣｌ共鳴のエリアが、時間中図１にプロットされる。以下にみられるように、天然のＯＸＭは、添加量依存性のグリコーゲン分解を誘発し、１．５ｎＭでフルのグリコーゲン分解を誘発し、０．５ｎＭの近似ＥＣ５０を有する。これに対し、ＯＸＭ−Ｑ３Ｅは、その低いＧＣＧＲアゴニスト効力に対応して、３００ｎＭでほんの約５８％を誘発したに過ぎない。
【０３０５】
強いグリコーゲン分解応答を刺激するためのＯＸＭの能力を与えるために、われわれは野生型マウスにを用いてコンペティションアッセイを行い、ＯＸＭ及びＯＸＭ−Ｑ３ＥのインビボＧＣＧＲ受容体占有をさらに試験した。マウスの３つの群に、ベヒクル（全量）、ベヒクル及び冷グルカゴン（非特定結合）又はＯＸＭ−Ｑ３Ｅを用いて皮下投与を行った。投与後約１５分後に、１２５Ｉ−グルカゴンを、静脈内に投与し、約１５分後、肝臓を集め、総放射能を分析した。図２に示されるように、１．５ｍｐｋでグルカゴン（ＧＣＧ）は８４％ＧＣＧＲ占有を与え、３ｍｐｋＯＸＭは３１％ＧＣＧＲ占有を与え、ＯＸＭ−Ｑ３Ｅは０％ＧＣＧＲ占有を与えた。
【０３０６】
調和がとれたペプチドである、ＯＸＭ、ＯＸＭ−Ｑ３Ｅを使用することにより、われわれは、長期にわたる高血糖性クランプ及び長期にわたる摂食（ＦＩ）及び体重（ＢＷ）研究（表５）においての、また急性腹腔内グルコース耐性試験（ＩＰＧＴＴ、図３）においての両受容体のコ−アゴニストの急性及び長期にわたる薬理学的効果を探査した。両ペプチドはグルコース抵抗性を効果的に改善するが、痩せた及び代謝起因の肥満（ＤＩＯ）マウスモデルにおけるグルコース可動域（ｅｘｃｕｒｓｉｏｎ）の減少において、ＯＸＭ−Ｑ３Ｅは天然ＯＸＭを上回った。しかし、天然ペプチドは、ＤＩＯマウスにおいて、摂食並びに体重減少で優れた効果を与え（ΔＢＷ：５ｍｇ／ｋｇで、ＯＸＭに対し−６％対０ＸＭ−Ｑ３Ｅに対し−２．４％）、効果はＧＣＧＲのコ−アゴニストによるものであった。急性及び長期のパラダイムの両方において、天然ＯＸＭは増大したグルコース可動域を引き起こさなかった。
.  
【０３０７】
【表５】
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【０３０８】
高血糖クランプ研究
ＤＩＯマウス（高脂肪代謝での１６週）を、キシラジン及びケタミンで麻酔し、インビボ研究の３日前に右内頚静脈を通してカテーテル処置した。２５％のグルコースを投与し、高血糖を保持すべき実験期間に対し順応させた。ペプチドが短期半減期（両者ともジペプチジルペプチダーゼＩＶにより迅速に不活性化され、腎臓で排出される（ズー他、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ，２７８：２２４１８−２３，（２００３）））ことから、ベヒクル、ＯＸＭ（〜１６μｇ／ｋｇ／分）及びＯＸＭ−Ｑ３Ｅ（〜１６μｇ／ｋｇ／分）は、研究の最後の６０分の間静脈内に投与された。静脈カテーテルが投与のために用いられ、血液サンプルは尾の静脈から採取された。各動物は、完全な回復を確保するため、手術後の摂食及び体重取得が監視された。高血糖クランプは、前述したように、意識があり、抑制されておらず、カテーテル処理されたマウスについて行われた（ポカイ他、ネイチャー、第４３巻、１０２６−３１頁（２００５））。簡単には、血漿グルコースはワンタッチグリコメータにより、２時間の間１０分ごとに測定された。２５％グルコース（Ｄ−グルコース、シグマ）がｉ．ｖ投与され、血漿グルコースレベル（〜２０ｍＭ）にクランプするため速度は定期的に調整された。投与開始から１時間後、ＯＸＭ（〜１６μｇ／ｋｇ／分）、ＯＸＭ−Ｑ３Ｅ（〜１６μｇ／ｋｇ／分）及びベヒクル（無菌の生理的食塩水）が期間の停止のため投与された。グルコース投与速度は、体重に合わせられた。
【０３０９】
高血糖クランプアッセイの結果を、図３Ａ及び３Ｂに示す。血中グルコースレベルは、クランプ中、約２０ｍｍｏｌ／Ｌに保持された。ＯＸＭ−Ｑ３Ｅ処置された動物では、ベヒクル処置されたマウス高血糖を維持するために、グルコース注入においての迅速で強い増加（ＧＩＲ、グルコース注入速度）が要求された（ＧＩＲ０−６０  ５５±４対６±２μｇ／ｋｇ／分；ＯＸＭ−Ｑ３Ｅ対ベヒクル；ｐ＜０．０５）。ＯＸＭも、高血糖を維持するためにグルコース注入速度を増大することが必要とされた（ＧＩＲ０−６０＝４０±４対６±２ｍｇ／ｋｇ／分；ＯＸＭ−Ｑ３Ｅ対ベヒクル；ｐ＜０．０５）が、ＧＩＲにおける増加は、ＯＸＭ−Ｑ３Ｅグループにおける場合より約３０％低かった（ＧＩＲ０−６０＝４０±４対５５±４ｍｇ／ｋｇ／分；ＯＸＭ対ＯＸＭ−Ｑ３Ｅそれぞれ；ｐ＜０．０５）。また、グルコース低減効果は、ＯＸＭ−Ｑ３Ｅ処置されたマウス、＊Ｐ＜０．０５対ベヒクル、に比べ（約１０分だけ）遅延された。
【０３１０】
Ｃ５７ＢＬ／６Ｎの痩せたマウスにおけるグルコース可動域に関するＯＸＭ又はＯＸＭ−Ｑ３Ｅの効果が比較された。図４は、天然及びＯＸＭペプチド類似体は共にグルコース可動域を減少させることを示している。腹腔内グルコース耐性試験（ＩＰＧＴＴ）におけるデキストロースチャレンジの前（血漿Ｃｍａｘ）のいずれかのペプチドの皮下投与は、用量依存法において血中グルコース可動域を有意に低減した。最少効果投与量の比較では、ＯＸＭ−Ｑ３Ｅがグルコース低減において天然ペプチドより約１０倍効果的であった（インビボＥＣ５０  それぞれ０．０５５ｎＭ及び０．３８ｎＭ）ことが示された。
【０３１１】
実施例８
天然ＯＸＭは、ヒト中で約８〜１２分のインビボ半減期（ｔ１／２）を有することから、持続した薬理学的療法に適していない。それゆえ、われわれは、腎臓排出を低減させるため、バルキーな置換基の付加を調査した。
【０３１２】
種々の分子量のＰＥＧ部位又はＮ−エチルマレイミドが、分子全体を通しての種々の位置で、導入されたシステイン残基の側鎖への結合により、ＯＸＭペプチドに結合された。Ｃｙｓ−Ｎ−エチルマレイミド又はＣｙｓ−ＰＥＧ部位のいずれかとの結合のため調査された位置は、ＯＸＭ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の下記アミノ酸シーケンス中に下線が引かれた位置か、ＯＸＭのＣ−末端とされた。
ＨＳＱＧＴ  ＦＴＳＤＹ  ＳＫＹＬＤ  ＳＲＲＡＱ  ＤＦＶＱＷ  ＬＭＮＴＫ  ＲＮＲＮＮ  ＩＡ
【０３１３】
予期に反して、ＰＥＧ化（５〜８ｋＤａ）は、ＧＣＧＲ又はＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲの両者を活性化するペプチド類似体の可能性をきびしく減らすことを示した。いくつかのケースでは、Ｎ−エチルマレイミド−付加システイン残基の導入により、活性が著しく低減された。結果を表６に示す。
.  
【０３１４】
【表６】
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【０３１５】
実施例９
ＰＥＧ化の変形として、われわれは、薬物動態学的側面での改善のため、数種の脂質化ＯＸＭペプチド類似体を評価した。
【０３１６】
われわれは、まず、システイン側鎖を経由したコレステロールをペプチドに共有結合させ、ＧＬＰ−１Ｒ及びＣＣＧＲ形質移入された細胞系におけるｃＡＭＰ産生を活性化するための能力を再度測定した。Ｃ−末端共有結合が共有結合のために最も適した位置であり、また低ナノモル受容体力価（ｐｏｔｅｎｃｙ）を有するＯＸＭ類似体が確認された。予期に反して、エクスビボ肝臓灌流グリコーゲン分解アッセイでのこれらペプチドの分析から、インビトロＧＣＧＲアゴニストポテンシーは肝臓中におけるＧＣＧＲ活性化に正確には反映しないことが示された（図５のＯＸＭ７０参照）。インビトロ細胞アッセイに加えられた１０〜２０％血漿中のアゴニストポテンシーの測定は、４０倍を超えて分子のポテンシーを効果的に減少させるという、著しい「漿液シフト」を明らかにした（表７参照）。これはコレステロール化された分子が血漿中の脂質又はプロテインに結合し、有効濃度を下げることを示唆している。
【０３１７】
【表７】
0005756961.tif 000031
【０３１８】
図５Ａは、ＯＸＭ７０、ＯＸＭ１１０、ＯＸＭ１７７、ＯＸＭｌ１５、及びＯＸＭ２１６の存在下での灌流された肝臓中のエクスビボ測定を示す。図５Ｂは、野生型マウスにおけるコンペティションアッセイでの天然ＯＸＭに比べてのＯＸＭ７０、ＯＸＭ１１０、ＯＸＭ１７７、ＯＸＭｌ１５、及びＯＸＭ２１６の皮下（ｓ．ｃ．）又は静脈内（ｉ．ｖ．）投与後のＧＣＧＲ占有率を示す。
【０３１９】
実施例１０
受容体結合に関する血漿結合効果を和らげるために、われわれは、ペプチドとコレステロール基の間に親水性リンカーを組み入れることにより薬物動態を改善するという修正方法を採用した。コレステロール基とペプチドの間のテトラ−エトキシリンカー（Ｏｘａ４）の付加により、血漿をセルベースアッセイに加えたとき上記効果が有意に低減された、すなわち、表８に示されるように「漿液シフト」は２倍少なく減少された。さらに、アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）又はＤ−セリン（Ｄ−ＳＥＲ）のいずれかをアミノ酸位置で置換した場合、二つはまたＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲ両者の親和力を改善した。われわれは、エクスビボグリコーゲン分解アッセイ及びＧＣＧＲ受容体結合アッセイの両者において、これらインビトロでの観察を確認し（表８参照）、親水性に結合されたコレステロール基又はアシル鎖の結合が、分子を効率よく結びつけ、またＧＣＧＲを活性化するという分子の確認の結果となることを確認する結果を得た。
【０３２０】
【表８】
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【０３２１】
選択された類似体の薬力学的分析。  われわれは、体重、摂食を減少させ（ＤＩＯマウス）、血糖コントロールを改善する（痩せたマウス）ため、短期及び長期管理後に種々の脂質化ペプチドを評価した。図６〜９に示されるように、単回の皮下投与後、脂質化された分子は、激しくかつ持続した効果で、摂食及び体重共に顕著に減少した。インビボ分析から断定したように、アシル基又は親水性リンカーのいずれかを含む類似体は、このモデルにおいて摂食と体重の減少において、他の部位特異性ＯＸＭより有意に効き目があった。
【０３２２】
図６に、確立したＤＩＯマウスにおいての摂食及び体重の減少におけるＯＸＭ７０の著しいインビボ効果を概括的に示す。図７に、確立したＤＩＯマウスにおいての摂食及び体重の減少におけるＯＸＭ１１０及びＯＸＭ１７７の著しいインビボ効果を概括的に示す。図８に、確立したＤＩＯマウスにおいての摂食及び体重の減少におけるＯＸＭ２１６、ＯＸＭ１１５及びＯＸＭ１７７の著しいインビボ効果を概括的に示す。３つの試験全てにおいて、自由に餌を食べたＤＩＯオスＣ５７ＢＬ／６マウス（夫々約５１ｇ）について体重を測定し、暗くする３０分前に、ベヒクル（水）又はＯＸＭ類似体ＯＸＭ７０、ＯＸＭ１１０、ＯＸＭ１７７、ＯＸＭ２１６又はＯＸＭｌ１５のいずれかを用い腹腔内投与を行った。摂食は、約２時間後と１８時間後に測定された。１８時間（一晩）の体重変化は、＊Ｐ＜０．０５対ベヒクル（ｎ＝５−６／グループ）も測定された。
【０３２３】
長期の摂食及び体重効果
エネルギー及びグルコース代謝に関する類似体の長期間の効果を決定するために、確立された代謝誘発された肥満（ＤＩＯ）マウスモデルで検討が行われた。自由に餌を食べたＤＩＯオスＣ５７ＢＬ／６Ｎ野生型マウス（ｎ＝６／グループ、平均体重〜５０ｇ）は、連続する１４日の検討期間中、１日おき（Ｑ２Ｄ）に３又は１０ｍｇ／ｋｇのベヒクル、ＯＸＭ１１５、ＯＸＭ１７７、ＯＸＭ１１０が投与された。体重、摂食及び基礎グルコースレベルは、毎日測定された。図９Ａ及び９Ｂに示されるように、脂質化された類似体を用いての長期間の処置は、検討期間中を通しての用量依存方法で有意に体重と摂食を減少させた。図９Ｃは、種々のペプチドに対応する、検討期間中の基礎グルコースを示す。
【０３２４】
試験された全ての脂質化ペプチドは、長期検討期間の０日及びベヒクル処置された同じ日の動物（ｐ＜０．０５）と比べ、検討期間中を通じての用量依存法において基礎グルコースを有意に減少させた。ＩＰＧＴＴは１３日目に行われ、グルコース耐性が、脂質化類似体の用量依存法での長期投与後改善されたことが示された（図９Ｄ）。
【０３２５】
グルコース耐性の改善
図１０〜１３に示されるように、Ｃ５７ＢＬ／６Ｎ痩せたオスのマウスのＩＰＧＴＴにおいて、血漿Ｃｍａｘにほぼ相当する時間毎のデキストロースチャレンジに先立ってのＯＸＭペプチド類似体の皮下投与は、試験された全ての脂質化類似体に対し、用量依存法において、血中グルコース変動域を有意に減少させた。
【０３２６】
代謝率（Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  Ｒａｔｅ）効果
テトラ−エトキシ−結合されたコレステロール化ＯＸＭ１１５類似体の投与が代謝率を与えるかどうかを確定するために、単回のＯＸＭ１１５の注入で、長期試験が行われた。オスのＢ６ＤＩＯマウス（平均スタート時体重５５ｇ）は、熱中性（Ｔ２９℃）で餌を与えることなく代謝率チャンバに順応された。午前６：００〜９：００の３時間は、レスティング代謝率を算出するために使用された。３時間経過後の明期間（９：００）に入り、ベヒクル（ｄＨ２Ｏ）、３又は１０ｍｇ／ｋｇでのＯＸＭ１１５が皮下に投与された。１６ケージのそれぞれに対し、７０秒のセトリング（整定）時間、及び１０秒の測定期間並びに６０秒の整定時間及び１０秒の測定時間を有する参照読み取りからなる総サイクル時間が、２０分にセットされた。図１４Ａ及びＢに示される結果は、ＯＸＭ１１５の投与は、ＤＩＯマウスにおける急性代謝率を用量依存的に増大したことを示す。
【０３２７】
図１５は、確立されたＤＩＯマウスにおいての摂食と体重減少に関し、ＯＸＭ３０３、ＯＸＭ３０４、及びＯＸＭ３０５の急性インビボ効力を概括的に示し、またＯＸＭ３０５が摂食減少と体重減少で特に効果的であることを示している。自由に餌を食べたＤＩＯオスＣ５７ＢＬ／６マウス（それぞれ約５０ｇ）は、暗期間の開始３０分前に体重測定され皮下にベヒクル(水)又はＯＸＭ類似体が投与された。摂食は、２時間、１８時間及び４２時間後に測定された。１８時間及び４２時間（一夜）での体重変化も測定された（＊Ｐ＜０．０５対ベヒクル、ｎ＝５−６／グループ）。
【０３２８】
図１６は、確立されたＤＩＯマウスにおいての摂食と体重減少に関し、ＯＸＭ３９５、ＯＸＭ３９９、ＯＸＭ４００及びＯＸＭ４０１の急性インビボ効力を概要的に示す。ＯＸＭ４０１は、シーケンス  ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬｍＮＴＫ−γＥγＥ−Ｃ（オキサ１２Ｃｈｏｌ）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９９）を有する、０／＋コントロールペプチドである。確立されたＤＩＯマウス（それぞれ〜５２ｇ）は、暗期間の開始約３０分前にベヒクル（３０％ＨＢＣ）又はペプチド１ｍｇ／ｋｇでの皮下投与が行われた。摂食及び体重変化は、４日間の期間を通して測定された（＊Ｐ＜０．０５対ベヒクル、ｎ＝５／グループ）。
【０３２９】
実施例１１
この例は、ＯＸＭシーケンスに基づく７超過のｐＩを有する脂質化ペプチドは、肥満細胞の脱粒を促すのに対し、約５のｐＩを有するペプチドは肥満細胞の脱粒を示さないことを示す。
【０３３０】
オキシントモジュリンのヒスタミン離脱ポテンシャルを評価するために、我々は、ヒト肥満細胞系ＬＡＤ２を用いて、インビトロでのカウンタースクリーニングアッセイを確立した。ＬＡＤ２細胞（５０，０００細胞／ウエル、９６−ウエルプレート）は、３０分間コンパウンドを用いてインキュベートされた。ＬＡＤ２細胞の脱粒は、４−メチルウンベリフェリル−Ｎ−アセチル−β−Ｄ−グルコサミニドの加水解後の上澄み液中及び細胞溶解質中に放出されたβ−ヘキソサミニダーゼの定量化によって決定された。結果は、全含有量のパーセントとして計算された、β−ヘキソサミニダーゼ放出パーセンテージとして表わされた。表９は、ＬＡＤ２細胞中のＯＸＭ類似体の脱粒ポテンシー（ＥＣ５０）を概括的に表わす。結果は、肥満細胞の脱粒を促す可能性を減らすため、脂質化ベース類似体に対するｐＩはおよそ５であるべきであることを示唆している。
【０３３１】
【表９】
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【０３３２】
本例では、ヒトＧＬＰ−１受容体（ｈＧＬＰ−１Ｒ）及びヒトグリコーゲン受容体（ｈＧＣＧＲ）での種々のペプチド類似体のインビトロポテンシーを示す表を提出する。表１０又は表１１に示されるインビトロポテンシーは、上記本明細書に記載（表１０）の細胞ベースのｃＡＭＰ又は国際公開公報ＷＯ２００８１０１０１７、これはその記載により本明細書に組み入れられる、に記載された細胞ベースのｃＡＭＰ、特に、そこ(表１１)に記載の細胞ベースのｃＡＭＰと類似したアッセイの結果から決定された。
【０３３３】
【表１０】
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【０３３４】
【表１１】
0005756961.tif 000035
【０３３５】
本発明は、例示された実施態様に関して本明細書に記載されたが、本発明がこれに限定されないことは理解されるべきである。当該分野における通常の技術を持ちまた本明細書での教示に接する者は、更なる変形及び態様を彼らの観点の範囲内で認識するであろう。それゆえ、本発明は本明細書に添付された特許請求の範囲によってのみ限定されるものである。
【図１】
0005756961.tif 000036
【図２】
0005756961.tif 000037
【図３】
0005756961.tif 000038
【図４】
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【図５】
0005756961.tif 000040
【図６】
0005756961.tif 000041
【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
0005756961.tif 000046
【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
0005756961.tif 000050
【図１６】
0005756961.tif 000051
【配列表】
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