(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｃｕ（Ｉ）触媒の存在下で、式（Ｉ）の化合物と式（ＩＩ）の化合物とを反応させて式（Ｖ）のコンジュゲートを得ることを含んでなる、ベクターの標識方法。
【化１】
0005743372.tif 000031
式中、Ｌ１はＣ１〜６０ヒドロカルビル基、カルボニル基、或いはエチレングリコールのモノマーもしくはポリマーであり、
Ｌ２はＣ１〜６０ヒドロカルビル基、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、芳香環、多核芳香環又はヘテロ芳香環、或いは１以上のエーテル、チオエーテル、スルホンアミド又はアミド官能基で置換されたアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、芳香環、多核芳香環又はヘテロ芳香環、或いはエチレングリコールのモノマーもしくはポリマー、アミノ酸又は炭水化物であり、
ベクターは、ペプチド、タンパク質、ホルモン、細胞、細菌又はウィルスであり、
Ｒ＊は放射性核種である。
【化２】
0005743372.tif 000032
式中、Ｌ１、Ｌ２、ベクター及びＲ＊は上記で定義した通りである。
【請求項２】
Ｒ＊が陽電子放出核種を含む、請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記ベクターが、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐペプチドである、請求項１又は請求項２記載の方法。
【請求項４】
前記ベクターが次式のフラグメントを含むペプチドである、請求項１乃至請求項３のいずれか１項記載の方法。
【化３】
0005743372.tif 000033
【請求項５】
前記ベクターが次の式（Ａ）のペプチドである、請求項１乃至請求項４のいずれか１項記載の方法。
【化４】
0005743372.tif 000034
式中、Ｘ７は−ＮＨ２又は次式の基である。
【化５】
0005743372.tif 000035
式中、ａは１〜１０の整数である。
【請求項６】
元素態銅をＣｕ（Ｉ）触媒の供給源として用いる、請求項１乃至請求項５のいずれか１項記載の方法。
【請求項７】
前記元素態銅が０．００１〜１ｍｍの粒径を有する、請求項６記載の方法。
【請求項８】
前記陽電子放出核種が１１Ｃ又は１８Ｆである、請求項２記載の方法。
【請求項９】
前記ベクターがペプチドである、請求項１記載の方法。
【請求項１０】
ａが１である、請求項５記載の方法。
【請求項１１】
前記元素態銅が０．１ｍｍ〜０．７ｍｍの粒径を有する、請求項７記載の方法。
【請求項１２】
前記元素態銅が０．４ｍｍの粒径を有する、請求項１１記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、放射性核種で標識した生理活性ベクターを含む放射性診断薬及び放射性治療薬に関する。本発明は、さらに、ペプチドなどのベクターの標識法及び標識試薬に関する。得られる標識コンジュゲートは、例えば放射性医薬品、さらに具体的には陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）もしくは単一光子放射型コンピュータ断層撮影（ＳＰＥＣＴ）用の診断薬又は放射線療法のための放射性医薬品として有用である。
【背景技術】
【０００２】
画像診断のための放射性標識生理活性ペプチドの用途は核医学で重要性を増しつつある。特定の細胞型と選択的に相互作用する生理活性分子は標的組織に放射能を送達するのに有用である。例えば、放射性標識ペプチドは、画像診断及び放射線療法のため腫瘍、梗塞巣部及び感染組織に放射性核種を送達するのに大きな潜在的可能性を有している。半減期約１１０分の１８Ｆは数多くの受容体イメージングに最適な陽電子放出核種である。そのため、１８Ｆ標識生理活性ペプチドは、多種多様な疾患の定量的検出及び特性決定のためのＰＥＴにおける有用性から、臨床上多大な将来性を有している。他の有用な放射性核種としては、１１Ｃ、１２５Ｉ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉのような放射性ヨウ素並びに９９ｍＴｃが挙げられる。
【０００３】
従前、ペプチド及び生体分子を標識するための迅速な汎用法がなかったため、ペプチド及び生体分子を診断薬として使用することができなかった。例えば、現在ペプチド及びタンパク質を１８Ｆで標識するのに用いられている方法は、ほとんどすべてフッ素標識シントンの活性エステルを利用するものである。ペプチド及びタンパク質は活性エステルと反応し得る官能基を多数有しているので、かかる現行法は部位特異的ではない。例えば、リジン残基を３個を含むペプチドは、標識シントンに対する反応性が全く同じアミン官能基を３個有する。そこで、放射性核種（１８Ｆなど）のような標識を特にペプチドに温和な条件下で迅速かつ化学選択的に導入して、高い放射化学純度及び収率で標識生成物を得ることのできる１８Ｆ標識補欠分子族のような標識剤並びに方法に対するニーズが依然として存在する。さらに、かかる方法であって、臨床現場での診断薬の調製を促進するための自動化に適した方法に対するニーズも存在する。
【特許文献１】国際公開第０１／７７４１５号パンフレット
【特許文献２】国際公開第０３／００６４９１号パンフレット
【特許文献３】国際公開第０３／００２１５７号パンフレット
【特許文献４】国際公開第２００５／００３１６６号パンフレット
【非特許文献１】Ａｔｈｅｒｔｏｎ，Ｅ．ａｎｄ  Ｓｈｅｐｐａｒｄ，Ｒ．Ｃ．；“Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”；ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ：Ｏｘｆｏｒｄ，１９８９
【非特許文献２】Ｈ．Ｃ．Ｋｏｌｂ  ａｎｄ  Ｋ．Ｂ．Ｓｈａｒｐｌｅｓｓ，Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｏｄａｙ，Ｖｏｌ  ８（２４），Ｄｅｃｅｍｂｅｒ  ２００３
【非特許文献３】Ｍ．Ｊ．Ｗｅｌｃｈ  ａｎｄ  Ｃ．Ｓ．Ｒｅｄｖａｎｌｙ“Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ”，ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ  ｂｙ  Ｗｉｌｅｙ
【非特許文献４】Ｅ．Ｕ．Ｔ．ｖａｎ  Ｖｅｌｚｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（１９９５）９８９−９９７
【非特許文献５】Ｇ．Ｍ．Ｃｏｐｐｏｌａ  ａｎｄ  Ｒ．Ｅ．Ｄａｍｏｎ，Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ  ２３（１９９３）２００３−２０１０
【非特許文献６】Ｚ．Ｐ．Ｄｅｍｋｏ  ａｎｄ  Ｋ．Ｂ．Ｓｈａｒｐｌｅｓｓ，Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．３（２００１）４０９１
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明は、Ｃｕ（Ｉ）触媒の存在下で、式（Ｉ）の化合物と式（ＩＩ）の化合物又は式（ＩＩＩ）の化合物と式（ＩＶ）の化合物とを反応させてそれぞれ式（Ｖ）又は（ＶＩ）のコンジュゲートを得ることを含んでなる、ベクターの標識法を提供する。
【０００５】
【化１】
0005743372.tif 000002
【０００６】
【化２】
0005743372.tif 000003
式中、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３及びＬ４は各々リンカー基であり、
Ｒ＊は放射性核種を含むリポーター部分である。
【０００７】
【化３】
0005743372.tif 000004
式中、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４及びＲ＊は上記で定義した通りである。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
リンカー基Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３及びＬ４は各々独立にＣ1〜60ヒドロカルビル基、好適にはＣ1〜30ヒドロカルビル基であって、適宜、酸素又は窒素のようなヘテロ原子を１〜３０個、好適には１〜１０個含んでいてもよい。好適なリンカー基としては、アルキル、アルケニル、アルキニル、芳香環、多核芳香環及びヘテロ芳香環が挙げられ、これらはいずれも例えば１以上のエーテル、チオエーテル、スルホンアミド又はアミド官能基で置換されてもよく、さらに、エチレングリコールのモノマー及びポリマー、アミノ酸又は炭水化物サブユニットが挙げられる。
【０００９】
「ヒドロカルビル基」という用語は、炭素と水素からなる有機置換基をいい、かかる基は、飽和、不飽和又は芳香族部分を含んでいてもよい。
【００１０】
リンカー基Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３及びＬ４は、得られる式（Ｖ）又は（ＶＩ）の化合物における好ましい排泄特性など、良好な生体内薬物動態が得られるように選択される。親油性及び／又は電荷の種々異なるリンカー基を使用することによって、診断上のニーズに応じてペプチドの生体内薬物動態を大きく変化させることができる。例えば、式（Ｖ）又は（ＶＩ）の化合物を腎排泄によって身体から排除することが望まれる場合には親水性リンカーを使用し、肝胆道排泄による排除が望ましい場合には疎水性リンカーを使用する。ポリエチレングリコール部分を含むリンカーは血液クリアランスを遅らせることが判明しており、状況によっては望ましい。
【００１１】
Ｒ＊は、陽電子放出核種のような放射性核種を含むリポーター部分である。この目的に適した陽電子放出核種としては、１１Ｃ、１８Ｆ、７５Ｂｒ、７６Ｂｒ、１２４Ｉ、８２Ｒｂ、６８Ｇａ、６４Ｃｕ及び６２Ｃｕが挙げられ、特に１１Ｃ及び１８Ｆが好ましい。他の有用な放射性核種としては、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、２１１Ａｔ、９９ｍＴｃ及び１１１Ｉｎが挙げられる。金属放射性核種は、例えば当業者に公知の直接導入法などによって、キレート剤に好適に導入される。金属性リポーターのキレート化は、Ｃｕ（Ｉ）触媒のキレート化を避けるため、好ましくは式（Ｉ）又は（ＩＶ）の化合物とそれぞれ式（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）の化合物との反応前に行われる。
【００１２】
Ｒ＊に含まれる適当なキレート剤としては次の式Ｘのものが挙げられる。
【００１３】
【化４】
0005743372.tif 000005
式中、Ｒ１Ａ、Ｒ２Ａ、Ｒ３Ａ及びＲ４Ａは各々独立にＲＡ基であり、
ＲＡ基は各々独立にＨ又はＣ１〜１０アルキル、Ｃ３〜１０アルキルアリール、Ｃ２〜１０アルコキシアルキル、Ｃ１〜１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜１０アルキルアミン、Ｃ１〜１０フルオロアルキルであるか、或いは２以上のＲＡ基がそれらに結合した原子と共に炭素環、複素環、飽和又は不飽和環を形成するものである。或いは、Ｒ＊は以下の式（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）又は（ｉｖ）のキレート剤を含むものであってもよい。
【００１４】
【化５】
0005743372.tif 000006
キレート剤の好ましい例は次の式（ｖ）で表される。
【００１５】
【化６】
0005743372.tif 000007
式Ｘのキレート剤を含む式（ＩＩ）又は（ＩＶ）の化合物は、中性ｐＨ付近の水性条件下室温で放射性標識することができ、良好な放射化学純度（ＲＣＰ）を与える。
【００１６】
式（Ｉ）及び（ＩＩＩ）並びに特記しない限り本発明の他の態様において、標識に適したベクターはペプチドであり、ペプチドとしては、オクトレオチドのようなソマトスタチン類似体、ボンベシン、血管作用性小腸ペプチド、化学走性ペプチド類似体、α−メラノサイト刺激ホルモン、ニューロテンシン、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐペプチド、ヒトプロインスリン結合ペプチド、インスリン、エンドセリン、アンジオテンシン、ブラジキニン、エンドスタチン、アンジオスタチン、グルタチオン、カルシトニン、マガイニンＩ及びＩＩ、黄体形成ホルモン放出ホルモン、ガストリン、コレシストキニン、サブスタンスＰ、バソプレッシン、ホルミル−ノルロイシル−ロイシル−フェニルアラニル−ノルロイシル−チロシル−リジン、アネキシンＶ類似体、血管作用性プロテイン−１（ＶＡＰ−１）ペプチド、カスパーゼペプチド基質が挙げられる。好ましい標識用ペプチドは、国際公開第０１／７７４１５号及び同第０３／００６４９１号に記載されているようなＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐペプチド及びその類似体、好ましくは次式のフラグメントを含むペプチドである。
【００１７】
【化７】
0005743372.tif 000008
さらに好ましくは式（Ａ）のペプチドである。
【００１８】
【化８】
0005743372.tif 000009
式中、Ｘ７は−ＮＨ２又は次式の基である。
【００１９】
【化９】
0005743372.tif 000010
式中、ａは１〜１０の整数であり、好ましくはａは１である。
【００２０】
当業者には明らかであろうが、本発明の方法は、タンパク質、ホルモン、多糖類、オリゴヌクレオチド、抗体フラグメントのような他の生体分子、並びに細胞、細菌、ウィルス及び薬物様低分子の放射性標識にも使用でき、多種多様な診断薬を与える。式（Ｉ）及び（ＩＩＩ）並びに特記しない限り本発明の他の態様において、特に好適な標識用ベクターはペプチド、タンパク質、ホルモン、細胞、細菌、ウィルス及び薬物様低分子である。
【００２１】
式（Ｉ）の化合物と式（ＩＩ）の化合物との反応又は式（ＩＩＩ）の化合物と式（ＩＶ）の化合物との反応は、適当な溶媒、例えばアセトニトリル、Ｃ１〜４アルキルアルコール、ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、ジメチルスルホキシド又はこれらいずれかの水性混合物或いは水中で、５〜１００℃の穏和な温度、好ましくは室温で実施し得る。Ｃｕ（Ｉ）触媒は、反応の進行に十分な量、通例は触媒量又は過剰量、例えば式（Ｉ）又は（ＩＩＩ）の化合物に対して０．０２〜１．５モル当量で存在する。
【００２２】
適当なＣｕ（Ｉ）触媒としては、ＣｕＩ、ＣｕＯＴｆ．Ｃ６Ｈ６、［Ｃｕ（ＮＣＣＨ３）４］［ＰＦ６］のようなＣｕ（Ｉ）塩が挙げられるが、好適にはアスコルビン酸又はその塩（例えばアスコルビン酸ナトリウムなど）、ヒドロキノン、キノン、金属銅、グルタチオン、システイン、Ｆｅ２＋又はＣｏ２＋のような還元剤の存在下で硫酸銅（ＩＩ）のようなＣｕ（ＩＩ）塩を使用してもよい。Ｃｕ（Ｉ）は元素態銅粒子の表面にも本質的に存在しており、例えば粉末又は顆粒状の元素態銅も触媒として使用し得る。今回、粒径の制御されたＣｕ（Ｉ）触媒、特に元素態銅を使用すると、放射化学収率が驚くほど向上することが判明した。そこで、本発明の一態様では、Ｃｕ（Ｉ）触媒、特に元素態銅は０．００１〜１ｍｍ、好ましくは０．１ｍｍ〜０．７ｍｍ、さらに好ましくは約０．４ｍｍの粒径を有する。
【００２３】
本発明は、ペプチド又はベクター前駆体の合成に際して標識の正確な導入部位を予め選定できる化学選択性の向上した放射性標識法を提供する。ベクターの所定の部位で起こる連結反応では、１種類の生成物しか得られない。この方法はこのように化学選択的であり、その用途は多種多様なペプチド、生体分子及び低分子量薬物に汎用的であると考えられる。さらに、アルキン官能基及びアジド官能基は共にほとんどの反応条件下で安定であり、大半の慣用ペプチド官能基とは非反応性であるので、標識合成の際に必要な保護及び脱保護工程が最小限で済む。さらに、標識反応時に形成されるトリアゾール環は加水分解せず、しかも酸化・還元に非常に安定であり、標識ベクターが高い生体内安定性を有することを意味する。トリアゾール環はアミドと同程度の大きさ及び極性であるので、標識ペプチド又はタンパク質は対応する天然物のよい模倣体となる。
【００２４】
ベクターがペプチド又はタンパク質である式（Ｉ）及び（ＩＩＩ）の化合物は、ペプチド合成の常法、例えば固相ペプチド合成、例えばＡｔｈｅｒｔｏｎ，Ｅ．ａｎｄ  Ｓｈｅｐｐａｒｄ，Ｒ．Ｃ．；“Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”；ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ：Ｏｘｆｏｒｄ，１９８９に記載の方法で調製し得る。式（Ｉ）又は（ＩＩＩ）の化合物へのアルキン又はアジド基の導入は、ペプチドのＮ末端又はＣ末端の反応、或いはペプチド配列中に含まれる他の官能基であってその修飾によってベクターの結合特性が影響されないものとの反応によって達成し得る。アルキン又はアジド基は、好ましくは、ペプチドのアミン官能基と活性化された酸との反応或いはペプチドの酸官能基とアミン官能基との反応などで形成される安定なアミド結合の形成によって式（Ｉ）又は（ＩＩＩ）の化合物に導入され、ペプチド合成中又は合成後に導入される。細胞、ウィルス、細菌のようなベクターにアルキン又はアジド基を導入する方法は、Ｈ．Ｃ．Ｋｏｌｂ  ａｎｄ  Ｋ．Ｂ．Ｓｈａｒｐｌｅｓｓ，Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｏｄａｙ，Ｖｏｌ  ８（２４），Ｄｅｃｅｍｂｅｒ  ２００３及びその引用文献に記載されている。式（Ｉ）又は（ＩＩＩ）の化合物にアルキン又はアジド基を導入するのに有用な中間体としては、以下のものがある。
【００２５】
【化１０】
0005743372.tif 000011
別の態様では、本発明は、ペプチド、タンパク質のようなベクターの、例えば上述の方法による標識に有用な新規補欠分子族を提供する。そこで、式（ＩＩ）又は（ＩＶ）の化合物を提供する。
【００２６】
【化１１】
0005743372.tif 000012
式中、Ｌ２及びＬ４は各々上記で定義したリンカー基であり、Ｒ＊は上記で定義したリポーター部分である。本発明のこの態様の一実施形態では、Ｒ＊は１８Ｆであり、補欠分子族は式（ＩＩａ）及び（ＩＶａ）のものである。
【００２７】
【化１２】
0005743372.tif 000013
式中、Ｌ２及びＬ４は各々上記で定義したリンカー基である。
【００２８】
式（ＩＶ）の好ましい化合物としては、以下のものがある。
【００２９】
【化１３】
0005743372.tif 000014
別の態様では、本発明は、式（Ｉ）又は（ＩＩＩ）の化合物を提供する。
【００３０】
【化１４】
0005743372.tif 000015
式中、Ｌ１及びＬ３は各々上記で定義したリンカー基であり、ベクターは上記で定義した通りである。本発明のこの態様では、好適には、ベクターはペプチド又はタンパク質である。式（Ｉ）及び（ＩＩＩ）の好ましい化合物は、ベクターが国際公開第０１／７７４１５号及び同第０３／００６４９１号に記載されているようなＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐペプチド及びその類似体、好ましくは次式のフラグメントを含むペプチド、さらに好ましくは式（Ａ）のペプチドであるものである。
【００３１】
【化１５】
0005743372.tif 000016
【００３２】
【化１６】
0005743372.tif 000017
式中、Ｘ７は−ＮＨ２又は次式の基である。
【００３３】
【化１７】
0005743372.tif 000018
式中、ａは１〜１０の整数であり、好ましくはａは１である。
【００３４】
別の態様では、本発明は、上記で定義した式（Ｖ）及び（ＶＩ）の標識ベクターを提供する。式（Ｖ）及び（ＶＩ）の好ましい化合物は、ベクターが国際公開第０１／７７４１５号及び同第０３／００６４９１号に記載されているようなＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐペプチド及びその類似体、好ましくは次式のフラグメントを含むペプチド、さらに好ましくは式（Ａ）のペプチドであるものである。
【００３５】
【化１８】
0005743372.tif 000019
【００３６】
【化１９】
0005743372.tif 000020
式中、Ｘ７は−ＮＨ２又は次式の基である。
【００３７】
【化２０】
0005743372.tif 000021
式中、ａは１〜１０の整数であり、好ましくはａは１である。
【００３８】
Ｒ＊が１１Ｃ放射性標識を含む式（ＩＩ）の化合物は、例えば以下の反応スキームで調製し得る。
【００３９】
【化２１】
0005743372.tif 000022
式中、−ＮｕＨは、ヒドロキシル、チオール、アミン官能基のような求核性反応中心である。
【００４０】
Ｒ＊が１８Ｆである式（ＩＩ）の化合物は求電子又は求核フッ素化反応で調製でき、例えば以下の反応で調製し得る。
【００４１】
【化２２】
0005743372.tif 000023
式（ＩＩ）の化合物の調製に適した放射性フッ素化法としては、例えば１８−クラウン−６又はＫｒｙｐｔｏｆｉｘ２．２．２などの環状ポリエーテルのような相間移動剤の存在下での、脱離基（アルキルスルホネート又はアリールスルホネート、例えばメシレート、トリフレート又はトシレート；ニトロ又はトリアルキルアンモニウム塩など）を組み込んだ前駆体と１８Ｆ−との反応がある。この反応は、当技術分野で公知の標準的条件下での液相で実施することもできるし（例えばＭ．Ｊ．  Ｗｅｌｃｈ  ａｎｄ  Ｃ．Ｓ．  Ｒｅｄｖａｎｌｙ  “Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ”（Ｗｉｌｅｙ）参照）、或いは式（ＩＩ）の化合物の精製を促進するため国際公開第０３／００２１５７号に記載の方法による固体担体を用いても実施できる。
【００４２】
式（ＩＶ）の化合物は、式（ＩＩ）の化合物の合成について説明したのと同様の方法で適当なアセチレン前駆体から調製し得る。
【００４３】
本発明は、一般式（Ｖ）又は（ＶＩ）の化合物の有効量（例えば、インビボイメージング、好適にはＰＥＴ又はＳＰＥＣＴでの使用に有効な量）を、１種以上の薬学的に許容される補助剤、賦形剤又は希釈剤と共に含んでなる放射性医薬組成物も提供する。好ましくは、式（Ｖ）又は（ＶＩ）の化合物のベクターは上述のＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐペプチド又はその類似体である。
【００４４】
本発明のさらに別の実施形態は、医療用、特にインビボイメージング（好適にはＰＥＴ又はＳＰＥＣＴによる）に使用するための、上記で定義した一般式（Ｖ）又は（ＶＩ）の化合物に関する。好ましくは、式（Ｖ）又は（ＶＩ）の化合物のベクターは上述のＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐペプチド又はその類似体である。
【００４５】
式（Ｖ）又は（ＶＩ）の標識ベクターは、インビボイメージングのため、所望の信号が得られる十分な量で患者に投与すればよく、ＰＥＴ又はＳＰＥＣＴイメージングのための典型的な放射性核種投与量は体重７０ｋｇ当たり０．０１〜１００ｍＣｉ、好ましくは０．１〜５０ｍＣｉで通常は十分である。
【００４６】
したがって、式（Ｖ）又は（ＶＩ）の標識ベクターは、当業者の技術常識に属する方法で、生理学的に許容される担体又は賦形剤を用いて投与用に製剤化すればよい。例えば、上記化合物は、適宜薬学的に許容される賦形剤を添加して、水性媒体に懸濁又は溶解し、次いで得られた溶液又は懸濁液を滅菌すればよい。
【００４７】
本発明は、別の態様では、医薬品をヒト又は動物の身体に投与してヒト又は動物の身体の少なくとも一部分の画像を生成させるインビボイメージング（好適にはＰＥＴ）法に用いられる医薬品の製造における、式（Ｖ）又は（ＶＩ）の標識ベクターの使用を提供する。
【００４８】
本発明は、さらに別の態様では、医薬品をヒト又は動物の身体（例えば脈管系）に投与して、医薬品が分配された身体の少なくとも一部分の画像をＰＥＴのようなインビボイメージング法を用いて生成させるヒト又は動物の身体の画像生成法であって、該医薬品が式（Ｖ）又は（ＶＩ）の標識ベクターを含む方法を提供する。
【００４９】
別の態様では、本発明は、ある病態に対処するための薬剤によるヒト又は動物の身体の治療効果をモニターする方法であって、式（Ｖ）又は（ＶＩ）の標識ベクターを身体に投与し、前記標識ベクターの取込みを検出し、任意ではあるが好ましくは、上記投与と検出を、例えば上記薬剤による治療の前後途中に繰り返すことを含んでなる方法を提供する。
【００５０】
本発明のさらに別の実施形態では、式（ＩＩ）又は（ＩＶ）の補欠分子族又はその前駆体と式（Ｉ）又は（ＩＩＩ）の化合物とを含む、放射性フッ素化トレーサーの調製用キットを提供する。
【００５１】
上記キットの使用に際して、前駆体化合物は上述の方法を用いて対応する式（ＩＩ）又は（ＩＶ）の化合物に変換される。式（ＩＩ）及び（ＩＶ）の化合物は未精製の状態で使用してもよいが、好ましくは、固相抽出（ＳＰＥ）カートリッジに反応混合物を流す方法、クロマトグラフィー法又は蒸留法によって、式（ＩＩ）及び（ＩＶ）の化合物を使用済反応体から分離してもよい。式（ＩＩ）及び（ＩＶ）の化合物をそれぞれ 式（Ｉ）及び（ＩＩＩ）の化合物に添加するが、これらは好適には本明細書に記載した適当な溶媒に溶解させてもよい。穏和な温度で１〜９０分間反応させた後、標識ペプチドを例えばＳＰＥで精製し、回収すればよい。
【００５２】
本明細書に記載の化学反応は、診断薬又はインビボ造影剤としてのスクリーニングに適した放射性標識ベクターのライブラリーの作製にも使用できる。例えば、式（ＩＩ）又は（ＩＶ）の補欠分子族の混合物を式（Ｉ）又は（ＩＩＩ）の１種以上の化合物と上述の方法を用いて反応させることによって、放射性標識ベクターのライブラリーを作製することができる。
【実施例】
【００５３】
以下の実施例によって本発明を例示するが、実施例では以下の略語を用いる。
【００５４】
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＥＳＩ−ＭＳ：エレクトロスプレーイオン化質量分析法
ｒｔ：室温
ＴＯＦ−ＥＳＩ−ＭＳ：飛行時間型エレクトロスプレーイオン化質量分析
ＦＴ−ＩＲ：フーリエ変換赤外
ｐｐｍ：百万分率
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＡＣＮ：アセトニトリル。
【００５５】
参照化合物の調製
【００５６】
【化２３】
0005743372.tif 000024
実施例１
化合物（２）：１−アジド，２−フルオロエタンの調製
トルエン−４−スルホン酸２−フルオロエチルエステル（化合物（１））はＥ．Ｕ．Ｔ．  ｖａｎ  Ｖｅｌｚｅｎ他，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（１９９５）９８９−９９７に記載の通り調製した。化合物（１）（１２８ｍｇ、０．５８６ｍｍｏｌ）及びアジ化ナトリウム（１１４ｍｇ、１．７５８ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（１０ｍｌ）と混合し、室温で４８時間撹拌した。反応混合物を濾過したが、生成物（２）は反応溶液から単離しなかった。
【００５７】
実施例２
化合物（３）：１−（２−フルオロエチル）−４−フェニル−１Ｈ−［１，２，３］トリアゾールの調製
ＤＭＦ（１ｍＬ）中のフェニルアセチレン（１０５μＬ、０．９７７ｍｍｏｌ）を窒素下で硫酸銅（ＩＩ）五水和物（１２ｍｇ、０．０４８９ｍｍｏｌ）とＬ−アスコルビン酸（１６ｍｇ、０．０９７７ｍｍｏｌ）の水（０．３ｍＬ）中の撹拌溶液に添加した。ＤＭＦ（５ｍＬ）中の化合物（２）（１．１７２ｍｍｏｌ）を添加した後、室温で２１時間攪拌を続けた。反応混合物を水（５ｍＬ）で希釈し、粗生成物をジクロロメタン（３×５ｍＬ）で抽出し、重炭酸ナトリウム溶液（１０％、３×１０ｍＬ）及び塩水（１×５ｍＬ）で洗浄した。硫酸ナトリウム上で乾燥した後、溶媒を減圧除去し、粗標品をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ヘキサン／酢酸エチル）を用いて精製した。
収量：３２ｍｇ（１７％）、白色結晶、ｍ．ｐ．８３〜８５℃。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ＝４．７０（ｍ，１Ｈ，ＣＨ２）、４．７６（ｍ，１Ｈ，ＣＨ２）、４．８０（ｍ，１Ｈ，ＣＨ２）、４．８９（ｍ，１Ｈ，ＣＨ２）、７．３５（ｔｔ，１．０Ｈｚ，７．５Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒ）、７．４４（ｍ，２Ｈ，ＨＡｒ）、７．８４（ｍ，２Ｈ，ＨＡｒ）、７．８９（ｄ，１Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨ−トリアゾール）ｐｐｍ。
ＧＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝１９１。
ＴＯＦ−ＥＳＩ−ＭＳ：実測値  ｍ／ｚ＝１９２．０９３５［ＭＨ］＋、Ｃ１０Ｈ１０Ｎ３Ｆの計算値［ＭＨ］＋  ｍ／ｚ＝１９２．０９３２。
【００５８】
実施例３
化合物（４）：４−［１−（２−フルオロエチル）−１Ｈ−［１，２，３］トリアゾール−４−イル］−フェニルアミンの調製
ＤＭＦ（０．７ｍＬ）中の４−エチニルアニリン（４０ｍｇ、０．３４４ｍｍｏｌ）を窒素下で硫酸銅（ＩＩ）五水和物（１２９ｍｇ、０．５１６ｍｍｏｌ）とＬ−アスコルビン酸（１８２ｍｇ、１．０３２ｍｍｏｌ）の水（１．２ｍＬ）中の撹拌溶液に添加した。ＤＭＦ（２．４５ｍＬ）中の化合物（２）（０．２８７ｍｍｏｌ）を添加した後、室温で４時間攪拌を続けた。反応混合物を水酸化ナトリウム溶液（１Ｍ、５ｍＬ）で奪活した。生成物を酢酸エチル（３×５ｍＬ）で抽出し、水（５ｍＬ）及び塩水（２ｍＬ）で洗浄した。硫酸ナトリウム上で乾燥した後、溶媒を減圧除去し、粗標品をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ヘキサン／酢酸エチル）を用いて精製した。収量：１５ｍｇ（２５％）、ベージュ結晶、ｍ．ｐ．７９〜８２℃。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ＝４．７０（ｍ，１Ｈ，ＣＨ２）、４．７２（ｍ，１Ｈ，ＣＨ２）、４．７７（ｍ，１Ｈ，ＣＨ２）、４．８８（ｍ，１Ｈ，ＣＨ２）、６．７４（ｍ，２Ｈ，ＨＡｒ）、７．６３（ｍ，２Ｈ，ＨＡｒ）、７．７４（ｄ，０．１Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨ−トリアゾール）ｐｐｍ。
ＴＯＦ−ＥＳＩ−ＭＳ：実測値  ｍ／ｚ＝２０７．１０３０［ＭＨ］＋、Ｃ１０Ｈ１１Ｎ４Ｆの計算値［ＭＨ］＋  ｍ／ｚ＝２０７．１０４０。
【００５９】
実施例４
化合物（５）：１−（２−フルオロエチル）−１Ｈ−［１，２，３］トリアゾール−４−カルボン酸ベンジルアミドの調製
Ｇ．Ｍ．Ｃｏｐｐｏｌａ  ＆  Ｒ．Ｅ．Ｄａｍｏｎ，  Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ  ２３（１９９３）２００３−２０１０に記載の方法で調製したプロピン酸ベンジルアミド（５０ｍｇ、０．３１４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１ｍＬ）中に溶解し、窒素下で硫酸銅（ＩＩ）五水和物（３．９ｍｇ、０．０１５７ｍｍｏｌ）とＬ−アスコルビン酸（１１ｍｇ、０．０６２８ｍｍｏｌ）の水（０．４ｍＬ）中の撹拌溶液に添加した。ＤＭＦ（３．２ｍＬ）中の化合物（２）（０．３７７ｍｍｏｌ）を添加した後、室温で４８時間攪拌を続けた。反応混合物を重炭酸ナトリウム（１０％、５ｍＬ）で希釈し、粗生成物をジクロロメタン（３×５ｍＬ）で抽出し、塩水（５ｍＬ）で洗浄した。硫酸ナトリウム上で乾燥した後、溶媒を減圧除去し、粗標品を酢酸エチル／ジエチルエーテルからの再結晶によって精製した。
収量：８ｍｇ（１０％）、白色結晶、ｍ．ｐ．１６５〜１６７℃。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ＝４．７０（ｍ，６Ｈ，ＣＨ２）、７．３４（ｍ，５Ｈ，ＨＡｒ）、７．４６（ｍ，１Ｈ，ＮＨ）、８．２０（ｓ，１Ｈ，ＣＨ−トリアゾール）ｐｐｍ。
ＴＯＦ−ＥＳＩ−ＭＳ：実測値  ｍ／ｚ＝２４９．１１４３［ＭＨ］＋、Ｃ１２Ｈ１３Ｎ４ＯＦの計算値［ＭＨ］＋  ｍ／ｚ＝２４９．１１４６。
【００６０】
実施例５
化合物（６）：Ｎ−ベンジル−３−［１−（２−フルオロエチル）−１Ｈ−［１，２，３］トリアゾール−４−イル］プロピオンアミドの調製
ペント−４−イン酸ベンジルアミド：この化合物は、Ｎ−スクシニミジル中間体の単離以外は、Ｇ．Ｍ．Ｃｏｐｐｏｌａ及びＲ．Ｅ．Ｄａｍｏｎに記載の方法（実施例４参照）と同様の方法を用いて合成した。
収量：１００ｍｇ（５３％）、白色針状晶、ｍ．ｐ．５０〜５５℃。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ＝１．９８（ｍ，１Ｈ，アルキン−ＣＨ）、２．４４（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２）、２．５６（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２）、４．４６（ｄ，２Ｈ，ＣＨ２Ｎ）、７．２９〜７．２５（ｍ，５Ｈ，ＨＡｒ）ｐｐｍ。
ＦＴ−ＩＲ（フィルム）：１６５１、１６２９ｃｍ−１。
ＴＯＦ−ＥＳＩ−ＭＳ：実測値  ｍ／ｚ＝１８８．１０７３［ＭＨ］＋、Ｃ１２Ｈ１３ＮＯの計算値［ＭＨ］＋  ｍ／ｚ＝１８８．１０７０。
【００６１】
Ｎ−ベンジル−３−［１−（２−フルオロエチル）−１Ｈ−［１，２，３］トリアゾール−４−イル］プロピオンアミド：メタノール（０．５ｍＬ）中のペント−４−イン酸ベンジルアミド（５０ｍｇ、０．２６７ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（２．６２ｍＬ）中の化合物（２）（０．３２０ｍｍｏｌ）、及びジイソプロピルアミン（０．２３３ｍＬ、１．３３５ｍｍｏｌ）を窒素下でヨウ化銅（Ｉ）（２５５ｍｇ、１．３３５ｍｍｏｌ）のメタノール（０．８ｍＬ）中の撹拌溶液に添加した。室温で２時間攪拌を続けた。反応混合物をリン酸水素ナトリウム（１ｇ）の水（１０ｍＬ）溶液で奪活し、セライトで濾過した。粗生成物を酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出し、塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。硫酸ナトリウム上で乾燥した後、溶媒を減圧除去し、粗標品をシリカ及び酢酸エチル／ヘキサンを用いたカラムクロマトグラフィーで精製した。
収量：１９ｍｇ（２６％）、白色結晶、ｍ．ｐ．１２７〜１３３℃。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ＝２．６６（ｔ，７．０Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２）、３．０９（ｔ，７．０Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２）、４．４０（ｄ，５．７Ｈｚ，２Ｈ，ベンジル−ＣＨ２）、４．５６（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２）、４．６１（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２）、４．７０（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２）、４．８０（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２）、６．０（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）、７．０〜７．３（ｍ，５Ｈ，ＨＡｒ）、７．４４（ｓ，１Ｈ，ＣＨ−トリアゾール）ｐｐｍ。
ＴＯＦ−ＥＳＩ−ＭＳ：実測値  ｍ／ｚ＝２７７．１４７４［ＭＨ］＋、Ｃ１２Ｈ１３Ｎ４ＯＦの計算値［ＭＨ］＋  ｍ／ｚ＝２７７．１４５９。
【００６２】
実施例６
化合物（７）：４−［１−（２−フルオロエチル）−１Ｈ−［１，２，３］トリアゾール−４−イル］安息香酸の調製
ＤＭＦ（１．５ｍＬ）中の４−エチニル安息香酸ナトリウム（５０ｍｇ、０．２９７ｍｍｏｌ）を窒素下で硫酸銅（ＩＩ）五水和物（３．７ｍｇ、０．０１４９ｍｍｏｌ）とＬ−アスコルビン酸（１０．５ｍｇ、０．０５９５ｍｍｏｌ）の水（０．２ｍＬ）中の撹拌溶液に添加した。ＤＭＦ（０．７６ｍＬ）中の化合物（２）（０．３５６ｍｍｏｌ）を添加した後、室温で１２時間攪拌を続けた。反応混合物をＨＣｌ（２０ｍＬ、１Ｍ）で希釈した。粗生成物を酢酸エチル（３×１０ｍＬ）で抽出し、塩水（１０ｍＬ）で洗浄した。硫酸ナトリウム上で乾燥した後、溶媒を減圧除去し、粗標品を酢酸エチル／ヘキサンから再結晶した。
収量：３７ｍｇ（５２％）、白色結晶、ｍ．ｐ．２３６〜２４０℃。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ＝４．７４（ｍ，１Ｈ，ＣＨ２）、４．８０（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２）、４．９０（ｍ，１Ｈ，ＣＨ２）、８．７０（ｓ，１Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨ−トリアゾール）ｐｐｍ。
ＴＯＦ−ＥＳＩ−ＭＳ：実測値  ｍ／ｚ＝２３６．０８３８［ＭＨ］＋、Ｃ１１Ｈ１０Ｎ３Ｏ２Ｆの計算値［ＭＨ］＋  ｍ／ｚ＝２３６．０８３０。
【００６３】
実施例７
化合物（８）：１−（２−フルオロエチル）−１Ｈ−［１，２，３］トリアゾール−４−カルボン酸の調製
ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中のプロピオル酸（６０μＬ、０．９７７ｍｍｏｌ）を窒素下で硫酸銅（ＩＩ）五水和物（１２ｍｇ、０．０４８９ｍｍｏｌ）とＬ−アスコルビン酸（３４ｍｇ、０．１３５ｍｍｏｌ）の水（０．４ｍＬ）中の撹拌溶液に添加した。ＤＭＦ（２．５ｍＬ）中の化合物（２）（１．１７２ｍｍｏｌ）を添加した後、室温で４時間攪拌を続けた。反応混合物をＨＣｌ（２０ｍＬ、１Ｍ）で奪活し、粗生成物を酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。塩水（５ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥した後、溶媒を減圧除去し、生成物を酢酸エチル／ヘキサンからの再結晶によって精製した。
収量：１６ｍｇ（１０％）、白色結晶、ｍ．ｐ．１６０〜１６５℃。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ＝４．７４（ｍ，１Ｈ，ＣＨ２）、４．８０（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２）、４．９０（ｍ，１Ｈ，ＣＨ２）、８．７１（ｓ，１Ｈ，ＣＨ−トリアゾール）ｐｐｍ。
ＴＯＦ−ＥＳＩ−ＭＳ：実測値  ｍ／ｚ＝１６０．０５１８［ＭＨ］＋、Ｃ５Ｈ６Ｎ３Ｏ２Ｆの計算値［ＭＨ］＋  ｍ／ｚ＝１６０．０５１７。
【００６４】
実施例８
化合物（９）：２−アセチルアミノ−３−［１−（２−フルオロエチル）−１Ｈ−［１，２，３］トリアゾール−４−イル］プロピオン酸エチルエステルの調製
メタノール（１ｍＬ）中の２−アセチルアミノペント−４−イン酸エチルエステル（２００ｍｇ、１．０９ｍｍｏｌ）を窒素下で銅粉（２００ｍｇ、４０メッシュ）に添加した後、化合物（２）（１．０９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）溶液を添加した。混合物を９０分間撹拌した後、８０℃で３時間加熱した。化合物（９）を逆相フラッシュクロマトグラフィー（アセトニトリル／水）で単離した。
収量：１４５ｍｇ（４９％）、油、４℃の保存で結晶、ｍ．ｐ．５５〜６０℃。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ＝１．１３（ｔ，３Ｈ，ＣＨ２ＣＨ３）、１．８２（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３）、２．９７（ｄｄ，２Ｊ＝１４．９Ｈｚ，３Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ，プロピオン酸−ＣＨ２）、３．０７（ｄｄ，２Ｊ＝１４．９Ｈｚ，３Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ，プロピオン酸−ＣＨ２）、４．０５（ｍ，２Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ３）、４．４７（ｍ，１Ｈ，ＣＨ）、４．４６（ｍ，１Ｈ，ＣＨ２）、４．６４（ｍ，１Ｈ，ＣＨ２）、４．７０（ｍ，１Ｈ，ＣＨ２）、４．８１（ｍ，１Ｈ，ＣＨ２）、７．８９（ｓ，１Ｈ，トリアゾール−ＣＨ）、８．３１（ｄ，１Ｈ，ＮＨ）ｐｐｍ。
ＴＯＦ−ＥＳＩ−ＭＳ：実測値  ｍ／ｚ＝２７３．１３７２［ＭＨ］＋、Ｃ１１Ｈ１７Ｎ４Ｏ３Ｆの計算値［ＭＨ］＋  ｍ／ｚ＝２７３．１３５７。
【００６５】
放射化学
【００６６】
【化２４】
0005743372.tif 000025
実施例９
化合物（１１）：［１８Ｆ］１−アジド−２−フルオロエタンの調製
１８Ｆフッ化物は、濃縮［１８Ｏ］Ｈ２Ｏターゲットの１９ＭｅＶプロトン照射による１８Ｏ（ｐ，ｎ）１８Ｆ核反応を用いたサイクロトロンで生成した。照射後、Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ（登録商標）（５ｍｇ）、炭酸カリウム（１ｍｇ）及びアセトニトリル（１ｍＬ）の混合物を１８Ｆ水（１ｍＬ）に添加した。窒素気流下（１００ｍＬ／分）で８０℃に加熱して、溶媒を除去した。しかる後、アセトニトリル（０．５ｍＬ）を添加し、加熱・窒素気流下で蒸発させた。この操作を２回繰り返した。室温に冷却後、化合物（１０）（１．５μｌ：Ｚ．Ｐ．Ｄｅｍｋｏ  ａｎｄ  Ｋ．Ｂ．Ｓｈａｒｐｌｅｓｓ，Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．３（２００１）４０９１に記載の方法で調製）の無水アセトニトリル（０．２ｍＬ）溶液を添加した。反応混合物を８０℃で３０分間撹拌した。化合物（１１）を、４０±１４％（ｎ＝７）の崩壊補正放射化学収率で蒸留（効率７６±８％（ｎ＝７））によって単離した。
【００６７】
実施例１０
化合物（１２）〜（１６）：［１８Ｆ］１−（２−フルオロエチル）−１Ｈ−［１，２，３］トリアゾール類の調製
【００６８】
【化２５】
0005743372.tif 000026
アルキン試薬（０．０１５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（０．１ｍＬ）溶液を窒素下で硫酸銅（ＩＩ）（５当量）とＬ−アスコルビン酸（２０当量）の混合物に添加した。化合物（１１）のアセトニトリル（０．２ｍＬ）溶液を添加した。８０℃で３０分間攪拌した後、反応混合物をＨＰＬＣで分析した。
【００６９】
実施例１１
化合物（１８）：［１８Ｆ］（Ｓ）−６−アミノ−２−（２−｛（Ｓ）−２−［２−（（Ｓ）−６−アミノ−２−｛［４−（２−フルオロエチル）−［１，２，３］トリアゾール−１−カルボニル］アミノ｝ヘキサノイルアミノ）アセチルアミノ］−３−フェニルプロピオニルアミノ｝アセチルアミノ）ヘキサン酸の調製
【００７０】
【化２６】
0005743372.tif 000027
化合物（１７）（１ｍｇ、１．７μｍｏｌ）をリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．０、０．２５Ｍ、０．０５ｍＬ）中に溶解した。アセトニトリル（０．０５ｍＬ）中の化合物（１１）（１７５μＣｉ、６．５ＭＢｑ）を添加し、さらに銅顆粒（４００ｍｇ、１０〜４０メッシュ）を添加した。混合物を８０℃で５分間加熱した。ＨＰＬＣ分析の結果、放射性標識ペプチド（１８）は８６％であった。
【００７１】
実施例１２
化合物（２０）の調製
【００７２】
【化２７】
0005743372.tif 000028
（ｉ）化合物１９：Ｃｙｓ２−６；ｃ［ＣＨ２ＣＯ−Ｌｙｓ（ＤＬ−Ｐｒａ−Ａｃ）−Ｃｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ］−ＣＣＸ６−ＮＨ２の調製
Ａｃ−ＤＬ−Ｐｒａ−ＯＨ（３１ｍｇ）、（７−アザベンゾトリアゾール−１−イロキシ）トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＡＯＰ）（１０４ｍｇ）及びＮ−メチルモルホリン（ＮＭＭ）（８８μＬ）をジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中に溶解し、混合物を５分撹拌した後、国際公開第２００５／００３１６６号に記載の通り調製してＤＭＦ（４ｍＬ）に溶解したＣｌＣＨ２ＣＯ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ（ｔＢｕ）−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−ＰＥＧ−ＮＨ２（１２６ｍｇ）を添加した。反応混合物を４５分間撹拌した。追加のＣｌＣＨ２ＣＯ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ（ｔＢｕ）−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−ＰＥＧ−ＮＨ２（１３２ｍｇ）及びＮＭＭ（４４μＬ）を添加し、４５分間攪拌を続けた。次いでＤＭＦを真空下で蒸発させ、残渣（５ｍＬ）を１０％アセトニトリル（ＡＣＮ）／水（１００ｍＬ）で希釈し、分取ＨＰＬＣで生成物を精製した。
【００７３】
精製及び特性決定
分取ＨＰＬＣ（勾配：Ａ＝Ｈ２Ｏ／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝ＡＣＮ／０．１％ＴＦＡの場合に１０〜４０％Ｂを６０分、流速：５０ｍＬ／分、カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ５μ  Ｃ１８（２）２５０×５０ｍｍ、検出：ＵＶ  ２１４ｎｍ、生成物保持時間：３１．３分）による希釈残渣の精製で、純粋ＡＨ−１１２１４５を１７０ｍｇ得た。
【００７４】
純粋生成物を分析ＨＰＬＣで分析した（勾配：Ａ＝Ｈ２Ｏ／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝ＡＣＮ／０．１％ＴＦＡの場合に１０〜４０％Ｂを１０分、流速：０．３ｍＬ／分、カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ３μ  Ｃ１８（２）５０×２ｍｍ、検出：ＵＶ  ２１４ｎｍ、生成物保持時間：６．３２分）。生成物をさらにエレクトロスプレー質量分析法で特性決定した（ＭＨ＋計算値：１３９５．５、ＭＨ＋実測値：１３９５．７）。
【００７５】
（ｉｉ）化合物２０の調製
化合物（１９）（０．５ｍｇ、０．３５μｍｏｌ）をリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．０、５０ｍＭ）中に溶解し、化合物（１１）（２５μｌ、７２８μＣｉ／２５ＭＢｑ）の溶液及び銅粉（２００ｍｇ、４０メッシュ）と混合した。７０℃、１５分間加熱後、混合物を放射性ＨＰＬＣで分析する。
【００７６】
コンジュゲート生成物（２０）は、半分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）、１００×１０ｍｍ、流速：２．０ｍｌ／分、溶媒Ａ：水（０．０８５％リン酸ｖ／ｖ）、溶媒Ｂ：水（３０％エタノールｖ／ｖ）、勾配：１５分で５０％Ｂから１００％Ｂまで）を用いて単離した。標識ペプチド（２０）は、１０％の崩壊補正放射化学収率及び＞９９％の放射化学純度で得られた。放射活性生成物ピーク（ｋ’＝２．０３）の同一性は、化合物（２０）の標準試料との同時注入によって確認した。
【００７７】
実施例１３
化合物（２０）を調製するための反応パラメーターの最適化
一般的手順：緩衝液（５０μｌ、緩衝液Ａ：リン酸ナトリウム、ｐＨ６．０、５０ｍＭ；緩衝液Ｂ：炭酸ナトリウム、ｐＨ９．３、５０ｍＭ）中の化合物（１９）（０．５ｍｇ、０．３５μｍｏｌ）の溶液に、アセトニトリル（１００μｌ）中の化合物（１１）（０．１ｍＣｉ、３．７ＭＢｑ）を添加した後、銅触媒（触媒１：銅顆粒１０〜４０メッシュ、触媒２：銅粉約４０メッシュ、触媒３：銅粉、樹枝状、３μｍ）を添加する。混合物を８０℃、１５分間インキュベートした後、ＨＰＬＣで分析した。
【００７８】
【表１】
0005743372.tif 000029
【００７９】
【表２】
0005743372.tif 000030
本明細書及び特許請求の範囲に記載された発明の技術的範囲は本明細書に開示した特定の実施形態に限定されるものではない。これらの実施形態は本発明の幾つかの態様の例示にすぎないからである。均等な実施形態も本発明の技術的範囲に属する。実際、本明細書の以上の記載から当業者には本明細書に例示し記載した変更例以外の変更例も明らかであろう。かかる変更例も特許請求の範囲に記載された技術的範囲に属する。