(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト患者への投与に適合した医薬処方物であって、本質的に
（ａ）１０〜２０重量％の溶媒；
（ｂ）５〜２５重量％の非イオン性界面活性剤；
（ｃ）１〜１０重量％の低分子量アルコール；
（ｄ）５０〜８０重量％の低分子量ポリエチレングリコール；及び
（ｅ）０．１〜２．０重量％の薬学的に許容可能な酸
からなる溶液に溶解した有効量の医薬グレードの高親油性カンプトテシン誘導体で構成されている医薬処方物であって、前記高親油性カンプトテシン誘導体が７−（２−トリメチルシリルエチル）カンプトテシンであり、前記溶媒がＮ−メチルピロリジノンとＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドとを含み、非イオン性界面活性剤がポリソルベートであり、低分子量アルコールがエタノールであり、低分子量ポリエチレングリコールが、ＰＥＧ２００、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００からなる群より選択される少なくとも一種であり、前記高親油性カンプトテシン誘導体の有効量が０．０１ｍｇ／ｍＬ〜０．２ｍｇ／ｍＬである医薬処方物。
【請求項２】
非イオン性界面活性剤がポリソルベート８０である請求項１に記載の医薬処方物。
【請求項３】
薬学的に許容可能な酸がクエン酸である請求項１又は２に記載の医薬処方物。
【請求項４】
Ｎ−メチルピロリジノン及びＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドが共溶媒であり、溶液中に、各々が５〜１５重量％で含まれる請求項１〜３のいずれかの項に記載の医薬処方物。
【請求項５】
投与に先立ち薬学的に許容可能な希釈剤に溶解される請求項１〜４のいずれかの項に記載の医薬処方物。
【請求項６】
希釈剤が５％デキストロース溶液である請求項５記載の医薬処方物。
【請求項７】
希釈剤が０．９％塩化ナトリウム溶液である請求項５記載の医薬処方物。
【請求項８】
本質的に以下の（ａ）〜（ｆ）からなる医薬処方物。
（ａ）０．０１ｍｇ／ｍＬ〜０．２ｍｇ／ｍＬの医薬グレードの７−（２−トリメチルシリルエチル）カンプトテシン；
（ｂ）１０〜２０重量％の共溶媒であって、Ｎ−メチルピロリジノン及びＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドを含む共溶媒；
（ｃ）５〜２５重量％のポリソルベート８０；
（ｄ）１．０〜１０．０重量％のエタノール；
（ｅ）５０〜８０重量％のＰＥＧ３００；及び
（ｆ）０．１〜２．０重量％のクエン酸
【請求項９】
エタノールが無水エタノールである請求項８記載の医薬処方物。
【請求項１０】
本質的に以下の（ａ）〜（ｆ）からなる請求項８記載の医薬処方物。
（ａ）０．０５ｍｇ／ｍＬ〜０．２ｍｇ／ｍＬの実質的に純粋な７−（２−トリメチルシリルエチル）カンプトテシン；
（ｂ）１３〜１４重量％の共溶媒であって、Ｎ−メチルピロリジノン及びＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドを含む共溶媒；
（ｃ）１３〜１４重量％のポリソルベート８０；
（ｄ）６４〜６６重量％のＰＥＧ３００；
（ｅ）６〜７重量％の無水エタノール；及び
（ｆ）１．０〜１．４重量％のクエン酸
【請求項１１】
処方物が滅菌された単回用量の容器に収容され、この単回用量容器は、無菌で密封されるとともに、光から保護されている請求項８〜１０のいずれかの項に記載の医薬処方物。
【請求項１２】
患者への投与に先立ち、薬学的に許容可能な希釈剤に希釈される請求項８〜１０のいずれかの項に記載の医薬処方物。
【請求項１３】
以下の工程で製造される請求項１〜１２のいずれかの項に記載の医薬処方物。
（ａ）所望の量の低分子量アルコールを量り、第１の調合容器に加える工程；
（ｂ）所望の量の薬学的に許容可能な酸を量り、第１の調合容器に加え、酸が完全に溶解するまで混合する工程；
（ｃ）所望の量の溶媒を、第２の調合容器に加える工程；
（ｄ）所望の量の高親油性カンプトテシン誘導体を量り、第２の調合容器に加える工程；
（ｅ）第２の調合容器の内容物を高親油性カンプトテシン誘導体が分散するまで混合し、第２の調合容器を３０〜６０℃の間で加熱する工程；
（ｆ）高親油性カンプトテシン誘導体が溶解するまで第２の調合容器の内容物を音波処理する工程；
（ｇ）非イオン性界面活性剤及び低分子量ポリエチレングリコールを、第１の調合容器に加え、３０〜６０℃の間で加熱する工程；及び
（ｈ）３０〜６０℃の間での加熱を維持しながら第２の調合容器の内容物を第１の調合容器へ移し、均一な溶液が形成されるまで混合する工程
【請求項１４】
以下の工程で製造される請求項１〜１２のいずれかの項に記載の医薬処方物。
（ａ）所望の量の低分子量アルコールを量り、第１の調合容器に加える工程；
（ｂ）所望の量の薬学的に許容可能な酸を量り、第１の調合容器に加え、酸が完全に溶解するまで混合する工程；
（ｃ）所望の量の溶媒を、第２の調合容器に加える工程；
（ｄ）所望の量の高親油性カンプトテシン誘導体を量り、第２の調合容器に加える工程；
（ｅ）第２の調合容器の内容物を高親油性カンプトテシン誘導体が分散するまで混合し、第２の調合容器を３０〜６０℃の間で加熱する工程；
（ｆ）高親油性カンプトテシン誘導体が溶解するまで第２の調合容器の内容物を音波処理する工程；
（ｇ）第２の調合容器の内容物を第１の調合容器へ移す工程；及び
（ｈ）非イオン性界面活性剤及び低分子量ポリエチレングリコールを、第１の調合容器に加え、均一な溶液が形成されるまで混合する工程
【請求項１５】
以下の工程で製造される請求項１〜１２のいずれかの項に記載の医薬処方物。
（ａ）所望の量の低分子量アルコールを量り、第１の調合容器に加える工程；
（ｂ）所望の量の薬学的に許容可能な酸を量り、第１の調合容器に加え、酸が完全に溶解するまで混合する工程；
（ｃ）所望の量の溶媒を、第１の調合容器に加える工程；
（ｄ）所望の量の高親油性カンプトテシン誘導体を量り、第１の調合容器に加える工程；
（ｅ）第１の調合容器の内容物を高親油性カンプトテシン誘導体が分散するまで混合し、第１の調合容器を４５〜５０℃の間で加熱する工程；
（ｆ）高親油性カンプトテシン誘導体が溶解するまで第１の調合容器の内容物を音波処理する工程；
（ｇ）非イオン性界面活性剤及び低分子量ポリエチレングリコールを、第２の調合容器に加え、４５〜５０℃の間で加熱する工程；及び
（ｈ）第１の調合容器の内容物を第２の調合容器へ移し、均一な溶液が形成されるまで混合する工程
【請求項１６】
請求項１３〜１５のいずれかの項に記載の医薬処方物に以下の工程を加えて製造される医薬処方物。
（ｉ）工程（ｈ）からの均一な溶液を濾過して、粒状物を除去する工程；
（ｊ）滅菌バイアルを用意し、このバイアルに所定量の濾過溶液を分配する工程；及び
（ｋ）前記滅菌バイアルを滅菌シールで密封する工程
【請求項１７】
以下の工程で製造される請求項１〜１２のいずれかの項に記載の医薬処方物。
（ａ）所望の量の低分子量アルコールを量り、第１の調合容器に加える工程；
（ｂ）所望の量の薬学的に許容可能な酸を量り、第１の調合容器に加え、酸が完全に溶解するまで混合する工程；
（ｃ）所望の量の溶媒を、第２の調合容器に加える工程；
（ｃ１）溶媒の２５〜９０％を、待機容器に移す工程；
（ｄ）所望の量の高親油性カンプトテシン誘導体を量り、第２の調合容器に加える工程；
（ｅ）第２の調合容器の内容物を高親油性カンプトテシン誘導体が分散するまで混合し、第２の調合容器を３０〜６０℃の間で加熱する工程；
（ｆ）高親油性カンプトテシン誘導体が溶解するまで第２の調合容器の内容物を音波処理する工程；
（ｇ）非イオン性界面活性剤及び低分子量ポリエチレングリコールを、第１の調合容器に加え、３０〜６０℃の間で加熱する工程； 
（ｈ）３０〜６０℃の間での加熱を維持しながら第２の調合容器の内容物を第１の調合容器へ移し、均一な溶液が形成されるまで混合する工程；及び
（ｈ１）待機容器の内容物で、第２の調合容器をすすぎ、次いで第２の調合容器の内容物を再び第１の調合容器へ移す工程
【請求項１８】
以下の工程で製造される請求項１〜１２のいずれかの項に記載の医薬処方物。
（ａ）所望の量の低分子量アルコールを量り、第１の調合容器に加える工程；
（ｂ）所望の量の薬学的に許容可能な酸を量り、第１の調合容器に加え、酸が完全に溶解するまで混合する工程；
（ｃ）所望の量の溶媒を、第２の調合容器に加える工程；
（ｃ１）溶媒の２５〜９０％を、待機容器に移す工程； 
（ｄ）所望の量の高親油性カンプトテシン誘導体を量り、第２の調合容器に加える工程；
（ｅ）第２の調合容器の内容物を高親油性カンプトテシン誘導体が分散するまで混合し、第２の調合容器を３０〜６０℃の間で加熱する工程；
（ｆ）高親油性カンプトテシン誘導体が溶解するまで第２の調合容器の内容物を音波処理する工程；
（ｇ）第２の調合容器の内容物を第１の調合容器へ移す工程； 
（ｇ１）待機容器の内容物で、第２の調合容器をすすぎ、次いで第２の調合容器の内容物を再び第１の調合容器へ移す工程；及び
（ｈ）非イオン性界面活性剤及び低分子量ポリエチレングリコールを、第１の調合容器に加え、均一な溶液が形成されるまで混合する工程
【請求項１９】
以下の工程で製造される請求項１〜１２のいずれかの項に記載の医薬処方物。
（ａ）所望の量の低分子量アルコールを量り、第１の調合容器に加える工程；
（ｂ）所望の量の薬学的に許容可能な酸を量り、第１の調合容器に加え、酸が完全に溶解するまで混合する工程；
（ｃ）所望の量の溶媒を、第１の調合容器に加える工程；
（ｃ１）第１の調合容器の内容物の２５〜９０％を、待機容器に移す工程；
（ｄ）所望の量の高親油性カンプトテシン誘導体を量り、第１の調合容器に加える工程；
（ｅ）第１の調合容器の内容物を高親油性カンプトテシン誘導体が分散するまで混合し、第１の調合容器を４５〜５０℃の間で加熱する工程；
（ｆ）高親油性カンプトテシン誘導体が溶解するまで第１の調合容器の内容物を音波処理する工程；
（ｇ）非イオン性界面活性剤及び低分子量ポリエチレングリコールを、第２の調合容器に加え、４５〜５０℃の間で加熱する工程； 
（ｈ）第１の調合容器の内容物を第２の調合容器へ移し、均一な溶液が形成されるまで混合する工程；及び
（ｈ１）待機容器の内容物で、第１の調合容器をすすぎ、次いで第１の調合容器の内容物を再び第２の調合容器へ移す工程
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、医薬処方物に関し、特に、癌治療等の疾病治療を受けているヒト患者への静脈内投与に適した高親油性（又は高脂溶性）カンプトテシン化合物（highly lipophilic camptothecin compounds）の処方物に関する。
【０００２】
（発明の背景）
カンプトテシン（ＣＰＴ）およびその誘導体の特定種は、現在行われている数多くの科学的研究の課題である強力な抗腫瘍剤である。近年、米国食品医薬品局は、ヒトが使用するために、様々な形態の固形腫瘍を治療するためのＣＰＴ誘導体２種（下記に述べられる（イリノテカン（Irinotecan）及びトポテカン（Topotecan））を初めて認可した。
【０００３】
カンプトテシンは１９６６年にウォール（Wall）およびワニ（Wani）によりカンレンボク（学名Camptotheca accuminata、英名Chinese yew）から最初に単離された。以後、ＣＰＴは、強力な抗癌活性を有することが認められ、１９７０年代後期にヒト臨床試験へ導入された。閉環したＥ−環状ラクトン型のＣＰＴの水溶性は、極めて乏しいことが示された（１ｍＬの水に対する溶解量で約１マイクログラム）。ＣＰＴをヒト臨床試験において投与するため、ＣＰＴは、まず、水酸化ナトリウムとともに処方された。この処方物では、カンプトテシン分子のラクトンＥ−環が加水分解されて、水溶性カルボン酸塩種（カルボキシレート種）が形成された。このようなＣＰＴの水酸化ナトリウム処方物により、水溶性ＣＰＴ種が開発され、臨床医は第Ｉ相および第ＩＩ相臨床試験を受ける癌患者へ、この薬物を高用量で投与し得るようになった。カルボン酸塩型ＣＰＴの抗腫瘍効力が、ラクトン型ＣＰＴの約１０分の１以下であることが見出されたのは、それからかなり先のことであった。水酸化ナトリウムとともに処方したＣＰＴの臨床試験では、重大な全身毒性が頻繁に観察されたり、抗腫瘍活性が欠如したりしたため、期待に反する結果となり、ＣＰＴの臨床研究は１９８０年代初頭に中止された。
【０００４】
カンプトテシン誘導体に関するさらなる臨床開発は、１９８０年代中期まで取り組まれることはなかった。その当時、遍在する細胞酵素トポイソメラーゼＩ（Topo I）との相互作用により、ＣＰＴがＤＮＡ合成およびＤＮＡ複製の阻害に関与する特異な作用機構を有することが報告された。ＣＰＴ誘導体の作用機構に関するこの新しい情報は、抗腫瘍剤として新規なトポイソメラーゼＩ（Topo I）阻害剤を開発する興味を再燃させ、その後、幾つかの研究グループは、癌治療のための新しいカンプトテシン誘導体を開発する試みを開始した。一般に、カンプトテシン同様、その誘導体の多くは極めて乏しい水溶性（１μｇ／ｍＬ未満）を呈することが認められた。このように水溶性が低いと、この薬物の有効用量を与えるために法外なほど大容量の液体を患者へ投与しなければならないので、この薬物の実用的な臨床的有効性が大いに制限された。水中でカンプトテシン及びその誘導体の多くが有する強力な抗腫瘍活性及び乏しい水溶性（貧水溶性）のため、水溶性の新規ＣＰＴ誘導体の生成に多大な研究努力が向けられた。このような研究を以下に述べる。
【０００５】
先に述べたように、ＣＰＴ及びその誘導体の多く（Wall and Wani Camptothecin and Taxol: Discovery to Clinic-Thirteenth Bruce F. Cain Memorial Award Lecture Cancer Research 55: 753-760; 1995）は、水溶性に乏しく、そして報告によれば、多くの薬学的に許容可能な有機溶媒に対しても同様に、溶解性に乏しい。ＣＰＴの新規に創出された水溶性誘導体については、多くの報告があり（Sawada, S. et al; Kingsbury, W. D. et al., Luzzio et al. Synthesis and Antitumor Activity of Novel Water Soluble Derivatives of Camptothecin as Specific Inhibitors of Topoisomerase I Jour. Med. Chem. 38: 395-401; 1995）、そのような誘導体は、貧水溶性（水溶性に乏しい）カンプトテシンの、癌患者への薬物投与に際し、いくつかの重大な技術的問題を克服するために合成されている。いくつかの水溶性ＣＰＴ誘導体は、乏しい水溶性及び患者への投与の困難性に対処するために合成されている。これらの水溶性ＣＰＴ誘導体のうち周知な例としては、９−ジメチルアミノメチル−１０−ヒドロキシカンプトテシン（トポテカン（Topotecan））、７−［（４−メチルピペラジノ）メチル］−１０，１１−エチレンジオキシカンプトテシン、７−［（４−メチルピペラジノ）メチル］−１０，１１−メチレンジオキシカンプトテシン、及び７−エチル−１０−［４−（１−ピペリジノ）−１−ピペリジノ］カルボニルオキシカンプトテシン（イリノテカン（Irinotecan）又はＣＰＴ−１１）が挙げられる。
【０００６】
異なる溶解性および薬理学的特性を備える他の置換カンプトテシン誘導体も、同様に合成されている。これらのカンプトテシン誘導体の例としては、９−アミノカンプトテシンおよび９−ニトロカンプトテシン（ルビテカン（Rubitecan））が挙げられる。両者とも、水性媒体および非水性媒体の両方において溶解性に乏しく、ヒトにおける試験が行われてきた。９−ニトロカンプトテシンは、９−アミノカンプトテシンのプロドラッグであり、水性媒体中、並びにマウス、イヌ及びヒトの生体内で、自発的に９−アミノカンプトテシンへと変換する（Hinz et al., Pharmacokinetics of the in vivo and in vitro Conversion of 9-Nitro-20(S)-camptothecin to 9-Amino-20(S)-camptothecin in Humans, Dogs and Mice, Cancer Research 54: 3096-3100; 1994）。
【０００７】
９−ニトロカンプトテシン及び９−アミノカンプトテシンの薬物動態学的な挙動は、これらの血漿中での半減期が、より親油性（脂溶性）のＣＰＴ誘導体よりもかなり短いという点で、水溶性カンプトテシン誘導体（トポテカン及びイリノテカン）に類似する。９−アミノカンプトテシンに関する別の主要な問題は、半合成手法を用いた９−アミノカンプトテシンの化学合成が、ＣＰＴのニトロ化、それに続くアミノ基への還元により行われるため、収量が低いことである。更に、９−アミノカンプトテシンは、光感受性、熱感受性及び酸素感受性であるため、９−アミノカンプトテシンの製造及び安定化が困難である。９−アミノカンプトテシンの化学分解反応により、ヌードマウスへ高い毒性を呈する化合物が形成され得る。その一方、純粋な９−アミノカンプトテシンは、著しく毒性が低い。
【０００８】
９−アミノカンプトテシンも、水性溶媒及び有機溶媒の双方への溶解性に乏しいため、患者への投与が困難である。９−ニトロカンプトテシンはより製造しやすく、化学的により安定であるが、報告によると、この薬物は、９−アミノカンプトテシンへの化学変換により、ＭＤＲ／ＭＲＰ媒介薬物耐性（mediated drug resistance）を起こしやすくなる。そのため、残念ながら、薬物耐性腫瘍の共通設定（common setting）での有用性はさらに限定される。薬物動態学的な挙動及び化学的特性に基づいて、９−アミノカンプトテシンは、より親油性のカンプトテシン誘導体と比べて、組織への浸透性及び組織での保持が減少することが予測される。更に、その乏しい溶解性のため、血液脳関門（blood/brain barrier）を越えることができる薬物の量を減殺する。
【０００９】
ヒトにおける臨床開発に供試されている置換カンプトテシン誘導体のこの多様な群の中でも、イリノテカン（ＣＰＴ−１１）はヒト癌患者での第Ｉ相及び第ＩＩ相臨床試験で最も広範にわたり研究された一つである。水溶性プロドラッグであるイリノテカンは、生物学的に不活性で、推定上の（putative）カルボキシルエステラーゼ酵素による活性化を必要とすることは注目に値する。イリノテカンの活性種は、ＳＮ３８としても知られる脱ピペリデニル化１０−ヒドロキシ−７−エチルカンプトテシン（１９８４年にミヤサカら（Miyasaka et al）による米国特許第４，４７３，６９２号において請求される）である。ＳＮ３８は毒性のある親油性代謝産物であり、推定上のカルボキシルエステラーゼ酵素によるイリノテカンの生体内での生体活性化により形成される。
【００１０】
ＳＮ３８は水溶性が極めて乏しく、ヒト癌患者へ直接投与されていない。近年では、ヒト患者において、ＳＮ３８が更に代謝を受けてグルクロニド種を形成することが報告されている。グルクロニド種は、抗腫瘍活性に関して不活性型であり、ヒトへの毒性（下痢、白血球減少症）を産出し、ならびに遊離代謝産物およびそのグルクロニドの薬物レベルにおける実質的な患者間変動性をもたらすことにも関与するようである。
【００１１】
イリノテカンは、米国、欧州および日本においてヒト臨床試験で研究されている。イリノテカンの薬物毒性に直接的に起因して、１００人近くの患者が死亡したことが、日本単独で報告されている。ミヤサカら（Miyasaka et al）の特許明細書（米国特許第４，４７３，６９２号及び米国特許第４，４７３，６９３号）には、彼らの発明の目的は、「抗腫瘍活性が強力であり、かつ非常に低い毒性とともに良好な生体内での吸収性を有する１０−置換カンプトテシンを提供する」こと、及び「抗腫瘍活性が強力であり、かつ良好な水溶性及び極めて低い毒性を有する新規なカンプトテシン誘導体を提供すること」にあると記載されている。
【００１２】
複数の薬物（の併用）に由来するヒトの死亡及び患者への深刻な毒性を有するため、ミヤサカらの発明は、彼らの言及する目的を達成していないことは明らかである。様々な形態の薬物レベル、薬物代謝、特定の薬物動態学的な特性及び毒性に関して、癌を患うヒト被験者へのイリノテカンの使用に際し、患者間の変動性が大きいことが報告されていることは、注目に値する。イリノテカンの非経口投与により、イリノテカンの血漿でのマイクロモル濃度を達成することができ、その代謝によりＳＮ３８を形成し、活性且つ代謝産生のＳＮ３８をナノモル濃度で産出することができる。近年、ヒト被験者においてＳＮ３８がさらに代謝され、ＳＮ３８グルクロニドを形成することが報告されている（Gupta et al. MetaboLic Fate of Irinotecan in Humans: Correlation of Glucuronidation with Diarrhea, Cancer Research 54: 3723-3725）。
【００１３】
このイリノテカンのさらなる代謝変換は重要である。なぜなら、イリノテカンのＳＮ３８への変換が大きく変動すること、及び不活性（かつ毒性）のＳＮ３８グルクロニドがＳＮ３８の代謝によりヒト被験者において形成されることは、患者間で大きく変動することも報告されているためである（Gupta et al. Metabolic Fate of Irinotecan in Humans: Correlation of Glucuronidation with Diarrhea. Cancer Research 54: 3723-3725; 1994及びOhe, Y. et al., Phase I Study and Pharmacohnetics of CPT-11 with 5-Day Continuous Infusion. JNCI 84 (12): 972-974,1992）。
【００１４】
イリノテカン及び代謝されたＳＮ３８の量は個々の患者において推定し難く、重大な臨床限界が潜み、且つこのような臨床限界は、生命を脅かす薬剤毒性の危険、及び／又は起こりうる下記５つのメカニズムに起因する薬剤不活性の危険を引き起こす：（１）より多量のイリノテカンからのＳＮ３８への変換；（２）グルクロニド化によるＳＮ３８の不活性化；（３）ＳＮ３８グルクロニドからの遊離ＳＮ３８への変換；（４）より少量のイリノテカンからのＳＮ３８への変換に起因する抗腫瘍活性の欠乏；及び（５）ＳＮ３８からのグルクロニド種へのさらに速く且つ大規模な変換による抗腫瘍活性の欠乏。遊離ＳＮ３８がナノモル濃度において抗腫瘍活性を示すため、高い効力を有するイリノテカン代謝ＳＮ３８の血漿濃度の倍増でさえ、重大な毒性を呈する可能性があることは、注目すべき重要な点である。
【００１５】
患者間の変動性及び毒性を左右する他の原因は、ＳＮ３８及び類似のＣＰＴ誘導体の生体内での脱グルクロニド化であり、この脱グルクロニド化により、薬剤の遊離活性種を産生する。Ａ−環グルクロニド化に敏感なＳＮ３８のようなＣＰＴ誘導体の脱グルクロニド化は、血漿又は局所組織における薬剤の遊離活性種（形態）の濃度を増加させ、そして患者への毒性が十分高いレベルに達する場合、患者の死亡を引き起こすかもしれない。
【００１６】
前記２つの認可薬に加え、ヒト臨床試験の様々な段階において、現在少なくとも９つのカンプトテシン誘導体が存在する。
【００１７】
１．カレニテシン（Karenitecin）（ＢＮＰ１３５０）
ＢＮＰ１３５０は、７−トリメチルシリルエチル基を有する高親油性カンプトテシン誘導体である。処方物及びその使用とともに、米国特許第５，９１０，４９１号において請求される。ＢＮＰ１３５０とＮ−メチルピロリジノン（ＮＭＰ）との処方物は、米国特許第５，７２６，１８１号及びその他において請求される。
【００１８】
２．ルルトテカン（Lurtotecan）（ＮＸ２１１）
ＮＸ２１１は、１０，１１−エチレンジオキシ基及びＣ７位に開裂可能な４−メチルピペラジノメチル基を有する水溶性カンプトテシンである。その化合物、処方物、及びその使用が、米国特許第５，５５９，２３５号及びその他で記載され、請求される。
【００１９】
３．エクサテカン（Exatecan）（ＤＸ−８９５１ｆ）
ＤＸ−８９５１ｆは、１０−メチル及び１１−フルオロ置換基を有する六環系（hexacyclic）カンプトテシン誘導体であり、Ｃ７位及びＣ９位の間で縮合した第６環（sixth ring）を有する。その化合物、処方物、及びその使用が、米国特許第５，６３７，７７０号及びその他に記載され、請求される。
【００２０】
４．ジフロモテカン（Diflomotecan）（ＢＮ８０９１５）
５．ＢＮ８０９１５は、１０，１１−ジフルオロカンプトテシンであり、７員Ｅ−環（ホモカンプトテシン）を有する。その化合物、処方物、及びその使用が、米国特許第５，９８１，５４２号及びその他に記載され、請求される。ルビテカン（Rubitecan）（９−ニトロＣＰＴ）
上述したように、９−ニトロカンプトテシンは、水性溶媒及び有機溶媒の双方に対し、貧溶解性である。そして、前記化合物は、１９８２年の特願昭５７−１６０９４４号において初めて公開された化合物であるとともに、いずれの米国特許明細書にも記載はされているが、権利請求はされていない。それ以降、この化合物の調製方法並びにその使用に関して複数の特許が発行されている。
【００２１】
６．アフェレテカン（Afeletecan）（ＣＰＴ複合糖質）
アフェレテカンは、Ｃ２０位で複合糖質化されたカンプトテシンの水溶性誘導体であり、米国特許第６，４９２，３３５号において記載され、請求される。
【００２２】
７．ギマテカン（Gimatecan）（ＳＴ１４８１）
ＳＴ１４８１は、Ｃ７位にイミノ基を有し、このイミノ基に対し、末端にｔｅｒｔ−ブトキシ基が結合する水溶性プロドラッグである。この化合物は、米国特許第６，２４２，２５７号に記載され、請求される。
【００２３】
８．ムレレテカン（Mureletecan）（ＰＮＵ１６６１４８）
ムレレテカンは、エステルを形成するように、Ｃ２０位で結合される、開裂可能なペプチド部分を有する別の水溶性プロドラッグである。
【００２４】
９．ペグベトテカン、ペグカモテカン、ペグリンキソテカン（ＰＥＧ  ＣＰＴ；プロテカン（Prothecan）（登録商標））
このプロドラッグは、Ｃ２０位でエステルを形成し、開裂可能な水溶性ポリエチレングリコール部分を含む。この化合物は、米国特許第５，８４０，９００号及びその他で記載され、請求される。
【００２５】
表１に上記化合物の分子構造を示す。
【００２６】
【表１】
0005654723.tif 000002
【００２７】
【表２】
0005654723.tif 000003
【００２８】
水溶性に乏しいカンプトテシンは、投与するために有機溶媒に溶解又は懸濁して処方することが必要である。米国特許第５，４４７，９３６号；米国特許第５，７２６，１８１号；米国特許第５，８５９，０２２号；米国特許第５，８５９，０２３号；米国特許第５，８８０，１３３号；米国特許第５，９００，４１９号；米国特許第５，９３５，９６７号；米国特許第５，９５５，４６７号；及びその他において、様々な有機溶媒中、すなわち、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）；Ｎ，Ｎ−ジメチルイソソルビド（ＤＭＩ）；及びＮ−メチルピロリジノン（ＮＭＰ）中に含まれる高親油性且つ水溶性に乏しいカンプトテシン誘導体の医薬処方物が記載される。
【００２９】
（発明の要約）
本発明は、水溶性に乏しいカンプトテシン誘導体、特にＣ７位シリル置換基を有する高親油性カンプトテシンの医薬処方物に関する。前記処方物は、様々な固形腫瘍の治療に際し、ヒト患者への静脈内経路による投与に適合する。
【００３０】
本発明は、ヒト患者への投与に適合した医薬処方物であって、本質的に以下の（ａ）〜（ｅ）からなる溶液に溶解した有効量の医薬グレードの高親油性カンプトテシン誘導体で構成されている医薬処方物を包含する。
（ａ）１０〜２０重量％の１種又は２種以上の溶媒；
（ｂ）５〜２５重量％の非イオン性界面活性剤；
（ｃ）１〜１０重量％の低分子量アルコール；
（ｄ）５０〜８０重量％の低分子量ポリエチレングリコール；及び
（ｅ）０．１〜２．０重量％の薬学的に許容可能な酸。
前記高親油性カンプトテシン誘導体は、Ｃ７位置換カンプトテシン誘導体（例えば、７−（２−トリメチルシリルエチル）カンプトテシン）であってもよい。前記高親油性カンプトテシン誘導体の有効量は、０．０１ｍｇ／ｍＬ〜０．５ｍｇ／ｍＬ程度であってもよい。
前記溶媒は、Ｎ−メチルピロリジノン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド及びジメチルイソソルビドからなる群より選択されてもよい。例えば、Ｎ−メチルピロリジノン及びＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドが共溶媒であり、溶液中に、各々が５〜１５重量％で含まれていてもよい。
前記非イオン性界面活性剤は、ポリソルベート、ソルビタンエステル及びノノキシノールからなる群より選択される少なくとも一種（例えば、ポリソルベート８０）であってもよい。
前記薬学的に許容可能な酸は、クエン酸であってもよい。
前記低分子量アルコールは、エタノール及び／又はベンジルアルコール（例えば、エタノール）であってもよい。
前記低分子量ポリエチレングリコールは、ＰＥＧ１００、ＰＥＧ２００、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ６００及びＰＥＧ８００からなる群より選択される少なくとも一種であってもよい。
前記医薬処方物は、投与に先立ち薬学的に許容可能な希釈剤（例えば、５％デキストロース溶液、０．９％塩化ナトリウム溶液など）に溶解されてもよい。
本発明は、本質的に以下の（ａ）〜（ｆ）からなる医薬処方物も包含する。
（ａ）０．０１ｍｇ／ｍＬ〜０．５０ｍｇ／ｍＬの医薬グレードの７−（２−トリメチルシリルエチル）カンプトテシン；
（ｂ）１０〜２０重量％のＮ−メチルピロリジノン；
（ｃ）５〜２５重量％のポリソルベート８０；
（ｄ）１．０〜１０．０重量％のエタノール；
（ｅ）５０〜８０重量％のＰＥＧ３００；及び
（ｆ）０．１〜２．０重量％のクエン酸。
前記エタノールは、脱水エタノールであってもよい。
前記医薬処方物は、例えば、本質的に以下の（ａ）〜（ｆ）からなっていてもよい。
（ａ）０．０５ｍｇ／ｍＬ〜０．２ｍｇ／ｍＬの実質的に純粋な７−（２−トリメチルシリルエチル）カンプトテシン；
（ｂ）１３〜１４重量％のＮ−メチルピロリジノン；
（ｃ）１３〜１４重量％のポリソルベート８０；
（ｄ）６４〜６６重量％のＰＥＧ３００；
（ｅ）６〜７重量％の脱水エタノール；及び
（ｆ）１．０〜１．４重量％のクエン酸。
前記医薬処方物において、処方物が滅菌された単回用量の容器に収容され、この単回用量容器は、無菌で密封されるとともに、光から保護されていていてもよい。
前記医薬処方物は、患者への投与に先立ち、薬学的に許容可能な希釈剤に希釈されてもよい。
また、本発明の医薬処方物は、以下の工程で製造されてもよい。
（ａ）所望の量の低分子量アルコールを量り、第１の調合容器に加える工程；
（ｂ）所望の量の薬学的に許容可能な酸を量り、第１の調合容器に加え、酸が完全に溶解するまで混合する工程；
（ｃ）所望の量の溶媒を、第２の調合容器に加える工程；
（ｄ）所望の量の高親油性カンプトテシン誘導体を量り、第２の調合容器に加える工程；
（ｅ）第２の調合容器の内容物を高親油性カンプトテシン誘導体が分散するまで混合し、第２の調合容器を３０〜６０℃の間で加熱する工程；
（ｆ）高親油性カンプトテシン誘導体が溶解するまで第２の調合容器の内容物を音波処理する工程；
（ｇ）非イオン性界面活性剤及び低分子量ポリエチレングリコールを、第１の調合容器に加え、３０〜６０℃の間で加熱する工程；及び
（ｈ）３０〜６０℃の間での加熱を維持しながら第２の調合容器の内容物を第１の調合容器へ移し、均一な溶液が形成されるまで混合する工程。
上記製造工程は、さらに以下の工程：
（ｉ）工程（ｈ）からの均一な溶液を濾過して、粒状物を除去する工程；
（ｊ）滅菌バイアルを用意し、このバイアルに所定量の濾過溶液を分配する工程；及び
（ｋ）前記滅菌バイアルを滅菌シールで密封する工程、
又は以下の工程：
（ｃ１）溶媒の２５〜９０％を、待機容器に移す工程；及び
（ｈ１）待機容器の内容物で、第２の調合容器をすすぎ、次いで第２の調合容器の内容物を再び第１の調合容器へ移す工程
を含んでいてもよい。
前記処方物は、有効成分として、有効量の高親油性カンプトテシン誘導体を含有し、典型的には、固形腫瘍の治療に用いられる。前記有効成分は、下記の溶液に対して溶解する。
ａ．１０〜２０重量％の１種又は２種以上の溶媒；
ｂ．５〜２５重量％の非イオン性界面活性剤；
ｃ．１〜１０重量％の低分子量アルコール；
ｄ．５０〜８０重量％の低分子量ポリエチレングリコール；及び
ｅ．０．１〜２．０重量％の薬学的に許容可能な酸。
【００３１】
処方物は、溶解後、単回用量（１回投与量）の形態（unit dose form）に詰められるのが好ましい。この形態は、前記有効成分を利用して治療する癌等の疾病を治療中の患者に対する非経口投与のために用いられる。
【００３２】
本発明の処方物を製造するために用いられる製法についても記載する。多くの腫瘍学的薬剤のように、有効成分の治療指数は狭小であり、効果を奏するためには、正確に測定された用量を必要とする。処方物の製造に使用される方法は、下記の工程で構成される：
ａ．所望の量の低分子量アルコールを量り、第１の調合容器に加える工程；
ｂ．所望の量の薬学的に許容可能な酸を量り、第１の調合容器に加え、酸が完全に溶解するまで混合する工程；
ｃ．所望の量の溶媒を、第２の調合容器に加える工程；
ｄ．前記溶媒の２５〜９０％を待機容器（standby vessel）へ移す工程；
ｅ．所望の量の高親油性カンプトテシン誘導体を量り、第２の調合容器に加える工程；
ｆ．第２の調合容器の内容物を高親油性カンプトテシン誘導体が溶解するまで混合し、第２の調合容器を３０〜６０℃の間で加熱する工程；
ｇ．高親油性カンプトテシン誘導体が溶解するまで第２の調合容器の内容物を音波処理（超音波処理）する工程；
ｈ．非イオン性界面活性剤及び低分子量ポリエチレングリコールを、第１の調合容器に加え、３０〜６０℃の間で加熱する工程；及び
ｉ．３０〜６０℃の間での加熱を維持しながら第２の調合容器の内容物を第１の調合容器へ移し、均一な溶液が形成されるまで混合する工程。
【００３３】
待機容器の内容物は、第２の調合容器をすすぐために用いられ、第２の調合容器の内容物が第１の調合容器へ完全に移されることを確実とする。
【００３４】
さらに、前記製造方法は、最終産物を濾過する工程、及び患者へ投与するための単回用量（１回投与量）（unit dose）の容器に、濾過された溶液を充填する工程を含んでいてもよい。好ましい処方物は、本明細書において、以下に開示されるが、特許請求の範囲に規定される本発明の範囲を限定するものではない。
【００３５】
（好ましい実施態様）
本明細書に記載される好ましい実施態様は、本発明を完全に網羅するものではなく、本発明は以下の詳細に限定されるものではない。好ましい実施態様は、本発明を例証するため、及び本発明の原理及びその応用並びに当業者への実際的な使用について説明するために、選ばれ、記載される。
【００３６】
本発明の処方物は、特にヒト患者への投与に適する。処方物は、もっとも好ましくは、静脈内投与に適合するが、いずれの好都合な非経口経路により投与されてもよい。処方物は、有効成分として、当業者に認識される高親油性カンプトテシン誘導体（ＨＬＣＤ）を含む。ＨＬＣＤは、水１ｍＬ当たり５マイクログラム未満の水溶性を有すると規定される。ＨＬＣＤは、ヒト患者への投与に適する医薬グレードであるのが好ましい。本願の目的にかなうための医薬グレードとは、少なくとも９８％の純度を有するＨＬＣＤであることを意味する。
【００３７】
処方物はまた、以下の成分を含有する：
ａ）１０〜２０重量％の１種又は２種以上の溶媒；
ｂ）５〜２５重量％の非イオン性界面活性剤；
ｃ）１〜１０重量％の低分子量アルコール；
ｄ）５０〜８０重量％の低分子量ポリエチレングリコール；及び
ｅ）０．１〜２．０重量％の薬学的に許容可能な酸。
【００３８】
処方物は、以下の基本方法により調製される：
ａ．所望の量の低分子量アルコールを量り、第１の調合容器に加える工程；
ｂ．所望の量の薬学的に許容可能な酸を量り、第１の調合容器に加え、酸が完全に溶解するまで混合する工程；
ｃ．所望の量の溶媒を、第２の調合容器に加える工程；
ｄ．所望の量の高親油性カンプトテシン誘導体を量り、第２の調合容器に加える工程；
ｅ．第２の調合容器の内容物を高親油性カンプトテシン誘導体が分散するまで混合し、第２の調合容器を３０〜６０℃の間で加熱する工程；
ｆ．高親油性カンプトテシン誘導体が溶解するまで第２の調合容器の内容物を音波処理する工程；
ｇ．非イオン性界面活性剤及び低分子量ポリエチレングリコールを、第１の調合容器に加え、３０〜６０℃の間で加熱する工程；及び
ｈ．３０〜６０℃の間での加熱を維持しながら第２の調合容器の内容物を第１の調合容器へ移し、均一な溶液が形成されるまで混合する工程。
【００３９】
好ましい処方物では、ＨＬＣＤは、Ｃ７位置換カンプトテシン誘導体であり；最も好ましいＨＬＣＤは、７−（２−トリメチルシリルエチル）カンプトテシン（ＢＮＰ１３５０；カレニテシン）である。好ましい溶媒としては、Ｎ−メチルピロリジノン（ＮＭＰ）；ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）；及び／又はジメチルイソソルビド（ＤＭＩ）が挙げられ、又は上記溶媒２種以上の組み合わせが、共溶媒（cosolvents）として用いられてもよい。最も好ましい溶媒は、ＮＭＰ、又は共溶媒としてのＮＭＰ及びＤＭＡの組み合わせである。
【００４０】
好ましい界面活性剤としては、ポリソルベート；ソルビタンエステル；ノノキシノール等が挙げられ、最も好ましい界面活性剤は、ポリソルベート８０である。好ましいアルコールとしては、エチルアルコール及びベンジルアルコールが挙げられ、最も好ましいアルコールは、エチルアルコールである。好ましい低分子量ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）としては、ＰＥＧ１００、ＰＥＧ２００、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ６００、ＰＥＧ８００が挙げられ、最も好ましいのはＰＥＧ３００である。
【００４１】
処方物は、成分を組み合わせた後に濾過及び精製され、次いで滅菌された単回用量容器へと分配される。容器は、内容物を光から保護する色を有し、充填後に滅菌シールで密封される。容器に含まれる内容物を明らかにするため、及び／又は容器内の処方物の投与法及び安全な手順のための説明書を提供するために、単回用量容器には１又は複数個のラベルを貼付する。
【００４２】
下記の実施例は、本発明の処方物を製造するために使用される方法を説明する。
【００４３】
実施例１
【００４４】
【表３】
0005654723.tif 000004
【００４５】
装置
４０Ｌカーボイ（Carboy）、９Ｌカーボイ、４Ｌメスシリンダ、テフロン（登録商標）でコートされた羽根車及び撹拌棒を備えたライトニンラブマスタ・ミキサ（Lightnin’ Labmaster Mixer）、加熱ベルト（Heat Belts）、音波処理可能な水浴
手順
全ての設備及び装置が清潔であり医薬製剤の製造における使用に適していることを確認する。４０Ｌカーボイの重さを量り、傍らに置いておく。ＵＳＰグレードの無水アルコールを２５５９．０ｍＬ量り、４Ｌメスシリンダ内に入れ、撹拌器（agitator）をシリンダ内に置き、稼働させる。ＵＳＰグレードの無水クエン酸を４００．０ｇ量り、前記無水アルコールに加える。アルコールの揮発を防ぐためにシリンダを覆い、クエン酸が完全に溶解するまで撹拌し続ける。必要であれば、前記混合物を、２５〜３０℃まで加熱して、溶解を促進してもよい。そして、前記混合物を室温まで放冷する。前記カーボイ及び溶液の重さを量り、その重さを記録する。
【００４６】
ＮＭＰ（４１４３．３ｇ）を９Ｌカーボイに加え、すすぎ液として後で使用するために５００〜６００ｍＬを別の容器に取り出す。ＢＮＰ１３５０を２８００．０ｍｇ量り、９Ｌカーボイへ加える。ラブマスタ・ミキサの軸を、カーボイ内に配置し、動かしはじめ、ＢＮＰ１３５０をＮＭＰ中に分散するために、少なくとも１０分間、５００ｒｐｍで回転する。溶液が泡立ち始めたら回転速度を減少する。加熱ベルト及び水浴を使用して、混合物を４５〜５０℃の間で温め、この混合物を、少なくとも３０分間、又は粒状物が見えなくなるまで音波処理する。その後、ラブマスタ・ミキサの軸を、カーボイから除く。
【００４７】
音波処理後、ＮＭＰとＢＮＰ１３５０との混合物を、アルコール及び酸溶液を含む４０Ｌカーボイへ加える。９Ｌカーボイを、取り出しておいたＮＭＰですすぎ、その内容物を４０Ｌカーボイへ加える。
【００４８】
次いで、ポリソルベート−８０，ＮＦを４０００．０ｇ量り、４０Ｌカーボイへ加える。ＰＥＧ−３００を、全溶液量が３０，２４０．０ｇになるまでこのカーボイへ加える。ラブマスタ・ミキサの軸を再び挿入し、低速度で回転を開始する。溶液が泡立たないように、少なくとも６０分間低速度で回転し、完全に溶液を混合する。
【００４９】
溶液の透明度及び完全性について、目視により確認し、そして５ｍＬのサンプルを取り出し、濾過に先立ってＢＮＰ１３５０の濃度（０．１ｍｇ／ｍＬ±０．００５）を分析する。
【００５０】
実施例２
バルク処方物の濾過及び単回用量容器への充填
装置
Ｐａｌｌ  ＨＤＣ  ＩＩ  Ａｂｓ０．６マイクロ滅菌前置フィルタ
Ｐａｌｌ  Ｓｏｌ−ｖｅｎｔ  ＤＣＦ  カプセル０．２マイクロ滅菌フィルタ
コハク色の５ｍＬ充填ボトル（fill bottle）、開口２０ｍｍ−滅菌
灰色の栓２０ｍｍテフロン（登録商標）４４３２／５０−滅菌
２０ｍｍ白色のフリップオフ・シール−滅菌
滅菌濾過チューブ（tubing）
手順
全ての設備及び装置が清潔であり医薬製剤の濾過及び充填の操作における使用に適していることを確認する。設備（以下、クリーンルーム）が、適切に滅菌されていることを確認した後、実施例１で得られた溶液をクリーンルームへ移す。クリーンルームでは、空中に浮遊する粒子及び一般フロラ、並びにクリーンルームの外の圧力と比較した圧力差を、継続して監視する。実施例１の溶液を有する４０Ｌカーボイに対して、加熱ベルトを適用して、３５〜４０℃の間で、この溶液を温める。溶液を前記温度で一晩放置した後、前記溶液を、０．６マイクロ滅菌前置フィルタにより濾過し、次いで０．２マイクロ滅菌フィルタにより濾過する。溶液が全てフィルタを通過したら、フィルタのバブルテストを行い、イソプロピルアルコール６０％及び水４０％の溶液を用いてフィルタを洗い流し、水泡のポイントが１１ｐｓｉに達するようにする。このテストに失敗した場合、新しいフィルタを用いて、バブルテストが成功するまで、濾過を繰り返さなければならない。溶液の５ｍＬのサンプルを取り出し、充填工程へ進む前に純度について分析する。
【００５１】
次いで、溶液をフレキシコン（Flexicon（登録商標））半自動式充填機へ移す。前記充填機により、各滅菌バイアル（ガラス瓶）中に６．０ｇ±０．１ｇを分配する。その後、各バイアルに滅菌栓をして、最後に各バイアルに滅菌シールを当てて密封する（crimped）。充填及び密封後に、２０〜４０個のバイアルを試験用に取り出す。充填したバイアルの数を記録し、そのバイアルを、検査のため隔離域（quarantine area）へ移す。バイアルの検査後、内容物、使用注意及び／又は安全情報に関する情報が印刷されたラベルを各バイアルに貼り付ける。各バイアルに含まれるＢＮＰ１３５０の濃度は０．１ｍｇ／ｍＬであり、注射用抗腫瘍剤として使用するようラベル付けされる。
【００５２】
実施例３
【００５３】
【表４】
0005654723.tif 000005
【００５４】
装置
１３Ｌカーボイ、１００ｍＬビーカー、４Ｌフラスコ、ライトニンラブマスタ・ミキサ、加熱ベルト、水浴
手順
全ての設備及び装置が清潔であり医薬製剤を製造における使用に適していることを確認する。１３Ｌカーボイの重さを量り、傍らに置いておく。ＵＳＰグレードの無水アルコールを６４４．４０ｇ量り、４Ｌフラスコ内に注ぎ入れ、マグネチックスターラをシリンダ内に置き、稼働させる。ＵＳＰグレードの無水クエン酸を１２７．９２ｇ量り、前記無水アルコールに加える。アルコールの揮発を防ぐためにシリンダを覆い、クエン酸が完全に溶解するまで撹拌し続ける。必要であれば、前記混合物を、２５〜３０℃まで加熱して、溶解を促進してもよい。そして、前記混合物を室温まで放冷する。前記フラスコ及び溶液の重さを量り、その重さを記録する。
【００５５】
８９４．７２ｇのＮＭＰ及び１１５０．４４ｇのＤＭＡをアルコール／クエン酸溶液に加え、少なくとも１０分間混合して、均一な溶液を形成する。この溶液の約３／４を、すすぎ液として後で使用するために別の容器に取り出す。ＢＮＰ１３５０を１２００．０ｍｇ量り、１００ｍＬビーカーへ加え、次いで４Ｌフラスコへ加える。ビーカーを、取り出しておいた上記溶液の一部ですすぎ、その洗浄物を４Ｌフラスコへ加える。ラブマスタ・ミキサの軸を、フラスコ内に配置し、動かしはじめ、ＢＮＰ１３５０を分散するために、少なくとも１０分間、１０００ｒｐｍで回転する。溶液が泡立ち始めたら回転速度を減少する。加熱ベルト及び水浴を使用して、混合物を４５〜５０℃の間で温め、この混合物を、少なくとも３０分間、又は粒状物が見えなくなるまで音波処理する。その後、ラブマスタ・ミキサの軸を、カーボイから除く。
【００５６】
ポリソルベート−８０，ＮＦを１６６２．１２ｇ量り、１３Ｌカーボイへ加える。このカーボイへＰＥＧ−３００を８３０７．３６ｇ加え、マグネチックスターラの上にカーボイを置き、中程度の速さで撹拌する。加熱ベルトをカーボイに当て、カーボイの温度を４５〜５０℃の間に上昇させる。カーボイが前記温度に到達した後、４Ｌフラスコの内容物を１３Ｌカーボイに移す。先に取り出しておいた溶液の残りを使用して、４Ｌフラスコをすすぎ、その内容物を１３Ｌカーボイに移す。カーボイを、最低でも６０分間、４５〜５０℃の間に維持し、撹拌速度に気をつけ、溶液が泡立たないようにする。
【００５７】
溶液の透明度及び完全性については、目視により確認し、そして５ｍＬのサンプルを取り出し、濾過に先立ってＢＮＰ１３５０の濃度（０．１±０．００５ｍｇ／ｍＬ）を分析する。
【００５８】
実施例４
バルク処方物の濾過及び単回用量容器への充填
装置
Ｐａｌｌ  ＨＤＣ  ＩＩ  Ａｂｓ０．６マイクロ滅菌前置フィルタ
Ｐａｌｌ  Ｓｏｌ−ｖｅｎｔ  ＤＣＦ  カプセル０．２マイクロ滅菌フィルタ
コハク色の５ｍＬ充填ボトル（fill bottle）、開口２０ｍｍ−滅菌
灰色の栓２０ｍｍテフロン（登録商標）４４３２／５０−滅菌
２０ｍｍ白色のフリップオフ・シール−滅菌
滅菌濾過チューブ（tubing）
手順
全ての設備及び装置が清潔であり医薬製剤の濾過及び充填の操作における使用に適していることを確認する。設備（以下、クリーンルーム）が、適切に滅菌されていることを確認した後、実施例１で得られた溶液をクリーンルームへ移す。クリーンルームでは、空中に浮遊する粒子及び一般フロラ、並びにクリーンルームの外の圧力と比較した圧力差を継続して監視する。実施例１の溶液を有する４０Ｌカーボイに対して、加熱ベルトを適用して、３５〜４０℃の間で、この溶液を温める。溶液を前記温度で一晩放置した後、前記溶液を、０．６マイクロ滅菌前置フィルタにより濾過し、次いで０．２マイクロ滅菌フィルタにより濾過する。溶液が全てフィルタを通過したら、フィルタのバブルテストを行い、イソプロピルアルコール６０％及び水４０％の溶液を用いてフィルタを洗い流し、水泡のポイントが１１ｐｓｉに達するようにする。このテストに失敗した場合、新しいフィルタを用いて、バブルテストが成功するまで、濾過を繰り返さなければならない。溶液の５ｍＬのサンプルを取り出し、充填工程へ進む前に純度について分析する。
【００５９】
次いで、溶液をフレキシコン（Flexicon（登録商標））半自動式充填機へ移す。前記充填機により、各滅菌バイアル（ガラス瓶）中に６．０ｇ±０．１ｇを分配する。その後、各バイアルに滅菌栓をして、最後に各バイアルに滅菌シールを当てて密封する（crimped）。充填及び密封後に、２０〜４０個のバイアルを試験用に取り出す。充填したバイアルの数を記録し、そのバイアルを、検査のため隔離域（quarantine area）へ移す。バイアルの検査後、内容物、使用注意及び／又は安全情報に関する情報が印刷されたラベルを各バイアルに貼り付ける。各バイアルに含まれるＢＮＰ１３５０の濃度は０．１ｍｇ／ｍＬであり、注射用抗腫瘍剤として使用するようラベル付けされる。