(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
アスコルビン酸を含む安定化剤と一緒に以下の式の１種又は複数種の放射性医薬化合物：
【化１】
0005662416.tif 000010
であって、ＸがＯ、ＳまたはＮＲであり；ＹがＯ、Ｓ、ＮＲまたはＣＨ２であり；ＲがＨまたはＭｅであり；ｍが０、１、２または３であり；ｎが０、１、２または３であり；そしてＲ１およびＲ２がそれぞれ独立して水素またはＣ１−１０アルキルである、化合物
を含む組成物であって、前記組成物のｐＨが３．５〜６未満の範囲内にあり、該組成物は１ミリリットル当たり２０ｍｇを超えるアスコルビン酸を含む、組成物。
【請求項２】
前記組成物が、アスコルビン酸を含む安定剤とともに２―ｔｅｒｔ―ブチル―４―クロロ―５―［４―（２―［１８Ｆ］フルオロ―エトキシメチル）―ベンジルオキシ］―２Ｈ―ピリダジン―３―オン：
【化２】
0005662416.tif 000011
を含み、ここで、該組成物のｐＨが３．５〜６未満の範囲内にあり、かつ、該組成物は１ミリリットル当たり４０ｍｇを超えるアスコルビン酸を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記ｐＨが、５．５〜６の範囲内にあるか、または前記ｐＨは５．８である、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
前記放射性医薬化合物が、２―ｔｅｒｔ―ブチル―４―クロロ―５―［４―（２―［１８Ｆ］フルオロ―エトキシメチル）―ベンジルオキシ］―２Ｈ―ピリダジン―３―オン：
【化３】
0005662416.tif 000012
である、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記組成物が、１ミリリットル当たり３０ｍｇを超えるアスコルビン酸を含むか、または１ミリリットル当たり４０ｍｇを超えるアスコルビン酸を含むか、または１ミリリットル当たり５０ｍｇを超えるアスコルビン酸を含むか、または１ミリリットル当たり１００ｍｇを超えるアスコルビン酸を含むか、１ミリリットル当たり２００ｍｇを超えるアスコルビン酸を含むか、または１ミリリットル当たり５０〜２００ｍｇのアスコルビン酸を含むか、または１ミリリットル当たり５０〜５００ｍｇのアスコルビン酸を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記組成物が、１ミリリットル当たり４０ｍｇを超えるアスコルビン酸を含む、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記放射性医薬化合物が、２―ｔｅｒｔ―ブチル―４―クロロ―５―［４―（２―［１８Ｆ］フルオロ―エトキシメチル）―ベンジルオキシ］―２Ｈ―ピリダジン―３―オン：
【化４】
0005662416.tif 000013
であり、
前記組成物が、１ミリリットル当たり５０ｍｇのアスコルビン酸を含む、
請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
前記組成物が５．８のｐＨを有する、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
以下の式の放射性医薬化合物：
【化５】
0005662416.tif 000014
であって、ＸがＯ、ＳまたはＮＲであり；ＹがＯ、Ｓ、ＮＲまたはＣＨ２であり；ＲがＨまたはＭｅであり；ｍが０、１、２または３であり；ｎが０、１、２または３であり；そしてＲ１およびＲ２がそれぞれ独立して水素またはＣ１−１０アルキルである、化合物
を含む第一溶液を、３．５〜６未満のｐＨ範囲内のアスコルビン酸を含む第二溶液に加えて、前記化合物とアスコルビン酸とを含む前記放射性医薬組成物を作る工程を含み、
ここで、該放射性医薬組成物は、１ミリリットル当たり２０ｍｇを超えるアスコルビン酸を含む、
請求項１〜８のいずれか１項に記載の組成物を調製する方法。
【請求項１０】
前記組成物が、１ミリリットル当たり４０ｍｇを超えるアスコルビン酸を含むか、または１ミリリットル当たり５０ｍｇを超えるアスコルビン酸を含むか、または１ミリリットル当たり５０〜２００ｍｇのアスコルビン酸を含み、そして、前記方法が、前記放射性医薬組成物のｐＨを６未満に調整する工程を更に含む、請求項９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
１ミリリットル当たり４０ｍｇを超えるアスコルビン酸を含むか、または１ミリリットル当たり５０ｍｇを超えるアスコルビン酸を含むか、または１ミリリットル当たり５０〜２００ｍｇのアスコルビン酸を含む、請求項５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
前記放射性医薬化合物が、（ａ）前記第一溶液を前記第二溶液に加える前にクロマトグラフィーによって精製されるか、または（ｂ）該第一溶液を該第二溶液に加える前にクロマトグラフィーによって精製されていない、請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
被験体の画像化のための医薬の調製における、請求項１〜８および１１のいずれか１項に記載の組成物の使用。
【請求項１４】
被験体における画像化のための、請求項１〜８および１１のいずれか１項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、放射性医薬組成物の安定化と、放射線による伝播性のラジカル分解から前記組成物を保護することに関する。特に、本発明は、前記組成物を緩衝することによる、放射性医薬製剤における酸化防止剤種の使用に関する。更に、本発明は、医用画像に有用な放射性医薬組成物を安定化させ、それにより、ヒト及び他の哺乳動物の被験者に対して投与するのに適するように前記組成物を維持しながら、前記組成物の保存寿命を延長させるために、特定のｐＨ範囲おける緩衝条件下で、酸化防止剤であるアスコルビン酸を使用することに関する。
【背景技術】
【０００２】
放射性医薬品は、放射性核種を含む薬剤である。放射性医薬品は、様々な疾患の診断又は治療のために核医学で日常的に使用されている。それらは、典型的には、一定の組成を有する小さな有機又は無機の化合物である。それらは、放射性核種で化学量論的に標識さていない抗体又は抗体フラグメントのような高分子であることもできる。放射性医薬品は、様々な疾患の診断及び治療のために、化学的根拠を示す。生体内の診断情報は、放射性医薬品を静注し、そして、ガンマカメラ又はＰＥＴカメラを使用して、前記放射性医薬品の体内分布を測定することによって、得ることができる。放射性医薬品の体内分布は、典型的には、放射性標識化合物の物理化学的性質によって左右され、そして、前記分布を用いて、疾患の存在、進行及び状態に関する情報を得ることができる。
【０００３】
放射性医薬品は、一般的には、２つの主な組に分けることができる：すなわち、体内分布が、放射性医薬品の物理化学的性質によって独占的に決定される組、及び最終的な分布が、放射性医薬品の受容体結合又は他の生物学的相互作用によって決定される組。後者の組は、しばしば、標的特異的と言われる。
【０００４】
近時、陽電子放出同位体を含む画像診断のための放射性医薬品の発見及び開発に多くの努力が費やされている。陽電子放出同位体としては、特に、８２Ｒｂ、１２４Ｉ、１１Ｃ、１３Ｎ、及び１８Ｆが挙げられる。これらの同位体は、核から陽電子を放出することによって、崩壊する。陽電子は、電子と等しい質量を有するが、対応する正電荷を有する粒子である。陽電子は、核種から放出された後、電子に遭遇し、２つが反応して、その結果として質量が物理的に消滅するまで、運動する。エネルギーは５１１ｋＥｖの値で反対の方向に放出される。そして、前記消滅は、角運動量を有しておらず、光子は、ほぼ１８０度離れた消滅点から発射されるので、前記分解が起こったラインを精密に決定できる。この特性により、結果として絶妙な感度と解像度が得られ、素晴らしい画像再構成と品質を得ることができる。
【０００５】
炭素、窒素、及びフッ素の同位体の利点は、薬剤の体内分布を測定するために、ならびに、疾患の存在、非存在、又は程度を診断するために使用できる小さい有機分子、例えば公知の医薬品又は治験医薬品の中に組み込むことができる点にある。それらは、当業の技術に熟達した有機化学者及び放射化学者にとって公知の様々な方法によって、前記分子中に都合良く入れることができる。アルコール又はアミンをメチル化して対応するエーテル又はアルキルアミンを生成させる１１Ｃ―ヨウ化メチル（１１ＣＨ３Ｉ）が、治験調査において広範に使用されてきた。その場合、これらの化合物は、適当に殺菌され、配合され、そして被験者に注射される。
【０００６】
多くのＰＥＴ放射性医薬品の広範な使用の主たる欠点は、同位体の多くと関係がある比較的短い半減期である。ルビジウム―８２、炭素―１１及び窒素―１３は、それぞれ１．２７分、２０．３分、及び９．９７分の半減期を有する。ルビジウムは、８２Ｓｒ―８２Ｒｂジェネレータから塩化物塩として投与され、合成によって変性又は処理されない。窒素―１３は、適当な近傍にカメラを有するイメージングセンターに隣接しているサイクロトロンで生成されるアンモニア（１３ＮＨ３）として典型的に投与される。１１Ｃ及び１３Ｎをベースとする試薬の両方が、イメージング剤を放射標識する際に使用されてきた。有意な工学的且つロジスティックなチャレンジは、短い半減期と、薬剤の配合及び投与の前に、要求される反応及び精製を達成するための必要な時間とを与える放射性医薬品として前記化合物を使用できるようにする必要がある。
【０００７】
それに対応して、より長寿命の陽電子放出同位体を、画像化のための新規な放射性トレーサー中に組み込むことができる。これらは、それぞれ４．２日及び１０７．９分の半減期を有する前記の１３１Ｉ及び１８Ｆを含む。最近最も一般的に使用されているのは、崩壊が完全に陽電子の放出によるものであって、且つ好ましい半減期を有することから、１８Ｆである。約２時間の半減期により、分子中への合成による取り込み、精製、そしてその後の中心に配置されている放射性薬局（ｃｅｎｔｒａｌｌｙ  ｌｏｃａｔｅｄ  ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｙ）からの分配が可能となり、８２Ｓｒ―８２Ｒｂジェネレータの毎月の購入又は現場サイクロトロンのいずれかに関する必要性／投資が不要になる。
【０００８】
投与量の製造、配合、リリース、及び送達の過程中に、同位体は、典型的には、各特定の同位体の物理学に従ってゼロ次速度で崩壊する。しかしながら、この崩壊は、放射線分解によって、投与量の化学的崩壊も誘発し得る。これは、ラジカル反応を介して伝播し、組成物の品質を著しく減弱させ得る。
【０００９】
投与前又は投与中の放射性医薬組成物の分解は、ターゲティング能力を著しく減少させ、そして、治療的な放射性医薬組成物の毒性を増加させる。従って、場合によっては、放射性核種が標的部位に結合されることが保証され、且つ、ターゲティング剤の特異性が保存されることが更に保証されることが重要である。
【００１０】
放射線分解は、ヒドロキシルラジカル及びスーパーオキシドラジカルのようなフリーラジカル形成によって引き起こされる（非特許文献１）。フリーラジカルは、有機分子に対して非常に反応性である。有機分子に対するこれらのフリーラジカルの反応性は、放射性医薬組成物の溶液安定性に影響を及ぼし得る。放射性医薬組成物の安定化は標的特異的放射性医薬品の開発において繰り返されているチャレンジであり、また、ラジカルスカベンジャは、しばしば、放射性標識された分子の放射線分解を最小限に抑える安定化剤として使用される。いくつかの安定化剤は、ヒドロキシルラジカル及びスーパーオキシドラジカルと容易に反応する「ラジカル捕捉型酸化防止剤」である。放射性医薬組成物のための安定化剤は、以下の特性：すなわち、ヒトへの投与に使用される際に毒性が低いか又は実質的に毒性が無い、標的の細胞又は組織（１種もしくは複数種）に対する放射性標識化合物の送達又は受容体結合をあまり妨害しないか又は全く妨害しない、及び／又は、相当な時間（例えば、放射性医薬品の調製、リリース、保存、及び輸送の間）、放射性医薬品を安定化させる能力を有利に有することができる。
【００１１】
アスコルビン酸のようなラジカルスカベンジャを使用して、９９ｍＴｃ（ＤｅＲｏｓｃｈ  ら、特許文献１）及び１８６／１８８Ｒｅ（非特許文献２）放射性医薬品を安定化させてきた。特許文献２には、１８６Ｒｅ及び１３１Ｉで標識された抗体又は抗体フラグメントのための安定化剤として、アスコルビン酸の使用が開示されている。特許文献３及び特許文献４では、９９ｍＴｃ放射性医薬品のための酸化防止剤として、アスコルビン酸の使用が開示されている。
【００１２】
有意な損傷が生じる前に、崩壊経路を終了させるために、アスコルビン酸のような酸化防止剤を使用するいくつかの戦略が開発されてきた。アスコルビン酸は、様々な医薬組成物及び放射性医薬組成物で使用されてきた。琥珀酸及びアミノカルボキシレートのような他の緩衝剤とは違って、アスコルビン酸は、アミノ基又はカルボキシル基を含んでいない。ＰＣＴ／ＵＳ９４／０６２７６では、アスコルビン酸及びアスコルビン酸の水溶性塩とエステルのような安定化剤が開示されている。
【００１３】
特許文献５では、放射標識及び自己放射線分解の酸化的損失に対して放射性標識されたタンパク質及びペプチドを安定化させる際に、アスコルビン酸及びそれらの誘導体を使用することが開示されている。場合によっては、いくらかの必要な培養時間を含む放射標識の後にではあるが、患者への投与前に、アスコルビン酸を加える。更に、アスコルビン酸の誘導体とは、アスコルビン酸の塩、アスコルビン酸のエステル、又はそれらの混合物と定義される。
【００１４】
様々な診断用及び治療用の放射性医薬組成物のための安定化剤としてアスコルビン酸／アスコルビン酸塩を使用することが開示されてきたが（例えば、Ｄｅａｕｓｃｈ，Ｅ．Ａ．  ら／特許文献６／１９９５；Ｖａｎｄｅｒｈｅｙｄｅｎ，Ｊ．−Ｌ．ら／特許文献２／１９９５；Ｆｌａｎａｇａｎ，Ｒ．Ｊ．ａｎｄＴａｒｔａｇｌｉａ，Ｄ．／特許文献３／１９９２；Ｔａｒｔａｇｌｉａ，Ｄ．ａｎｄＦｌａｎａｇａｎ，Ｒ．Ｊ．／特許文献４／１９９４；Ｓｈｏｃｈａｔ，Ｄ．ら／特許文献７／１９９９；及びＺａｍｏｒａ，Ｐ．Ｏ．ａｎｄ  Ｍｅｒｅｋ，Ｍ．Ｊ．／特許文献８／２０００を参照されたい）、特定の範囲のｐＨでアスコルビン酸塩を使用して、臨床用途での化合物の酸化防止作用を高めることに関する開示は殆ど又は全くなかった。
【００１５】
アスコルビン酸のような酸化防止剤の有意な使用は文献で例示されてきたが、例えば、注射に適する材料に関して、低ｐＨ又はより高いｐＨでの安定性を研究するために緩衝溶液中に酸化防止剤を加えた際の酸化防止剤の状態に関しては殆ど注意は払われてこなかった。
【００１６】
ヒトに注射するのに適する材料は、注射部位における強酸性溶液と関係がある限局性刺激及び痛みの危険性を低下させるために、４．０を超えるｐＨを有するように選択することができる。典型的には、注射液は、６〜８のｐＨ範囲のリン酸塩（リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ））で緩衝されてきた。しかしながら、典型的な生物学的ｐＨ範囲（６〜８）の緩衝溶液においてアスコルビン酸／アスコルビン酸塩を使用すると、しばしば、放射性医薬品溶液を安定化させる能力は低下する。その反面、これまでの研究では、低いｐＨ値（２〜３）でアスコルビン酸を使用したときの放射性医薬品製剤の安定性は証明されているが、そのような製剤は、前記したような局所的反応の故に、動物モデル又はヒトにおける使用では一般的に適さない。更に、これまでの研究は、有用であるアスコルビン酸に関する大まかな酸性ｐＨ範囲を記載しているか、又は特定の範囲を全く明記していない。現在まで、放射性医薬品の臨床用途でアスコルビン酸を使用するとき、ｐＨを選択する場合に当業者には殆ど指標はなかったと考えられる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１７】
【特許文献１】国際公開第９５／３３７５７号
【特許文献２】米国特許第５，３９３，５１２号明細書
【特許文献３】米国特許第５，０９３，１０５号明細書
【特許文献４】米国特許第５，３０６，４８２号明細書
【特許文献５】米国特許第６，０６６，３０９号明細書
【特許文献６】米国特許第５，３８４，１１３号明細書
【特許文献７】米国特許第５，９６１，９５５号明細書
【特許文献８】米国特許第６，０６６，３０９号明細書
【非特許文献】
【００１８】
【非特許文献１】Ｇａｒｒｉｓｏｎ，Ｗ．Ｍ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．１９８７，８７，３８１−３９８
【非特許文献２】Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  １９９７，１７，１７８３−１７９６
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１９】
従って、改良された組成物及び方法が必要である。
【課題を解決するための手段】
【００２０】
本発明は、あるｐＨ範囲における安定剤としてのアスコルビン酸の使用を提供する。溶液が、好ましくは約３．５〜５．５、より好ましくは約４〜５、そして最も好ましくは約４〜４．５の酸性ｐＨ範囲であるように、薬剤及び安定剤を、エタノール水性又は水性の緩衝液において配合する。
【００２１】
このように、実施例によっては、本発明は、アスコルビン酸を含む安定化剤と一緒に１種又は複数種の放射性医薬化合物を含む組成物を提供する。前記組成物のｐＨは約３．５〜５．５の範囲内にある。本発明組成物の一部として放射性医薬化合物は、ロテノン、ピリダベン、フェナザキン、フェンピロキシメート、テブフェンピラド、ピエリシジン、及び２−置換クロモン、及びそれらの類似体から成る群より選択され得る。いくつかの実施態様では、前記放射性医薬化合物は、ピリダベン及びその類似体から成る群より選択される少なくとも１つのメンバーである。いくつかの実施態様では、前記放射性医薬化合物は、５位が置換されている親油性側鎖を有する２―アルキル―４―クロロ―２Ｈ―ピリダジン―３―オンを含む化合物から成る群より選択される少なくとも１つのメンバーである。いくつかの実施態様では、前記放射性医薬化合物は、２―ｔｅｒｔ―ブチル―４―クロロ―５――［４―（２―［１８Ｆ］フルオロ―エトキシメチル）―ベンジルオキシ］２Ｈ―ピリダジン―３―オンである。
【００２２】
いくつかの実施態様では、前記放射性医薬化合物は、１１Ｃ、１３Ｎ、１８Ｆ、８６Ｂｒ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、及び１３１Ｉから成る群より選択される放射性同位体で標識される。いくつかの実施態様では、前記放射性同位体は、１１Ｃ、１３Ｎ、及び１８Ｆから成る群より選択される。いくつかの実施態様では、前記放射性同位体は、１８Ｆである。
【００２３】
前記実施態様のいずれかにおいて、前記放射性医薬組成物は、約５〜１００ｍｇ／ｍＬ、より好ましくは約２５〜５００ｍｇ／ｍＬ、そしてより好ましくは約５０〜２００ｍｇ／ｍＬのアスコルビン酸を含む。いくつかの実施態様では、１ミリリットル当たり、約５ｍｇを超える、約１０ｍｇを超える、約２０ｍｇを超える、約３０ｍｇを超える、約４０ｍｇを超える、約５０ｍｇを超える、約１００ｍｇを超える、約２００ｍｇを超えるアスコルビン酸が存在する。
【００２４】
本発明は、放射性医薬化合物を含む第一溶液を、約３．５〜５．５、より好ましくは約４〜５、そしてより更に好ましくは約４〜４．５のｐＨ範囲内で、アスコルビン酸を含む第二溶液に加えて、前記の放射性医薬化合物とアスコルビン酸とを含む第三溶液を作る工程を含む、前記実施態様のいずれかに記載の組成物を調製する方法も提供する。いくつかの実施態様では、放射性医薬化合物を、第一溶液を第二溶液に加える前に、クロマトグラフィーによって精製する。いくつかの実施態様では、放射性医薬化合物を、第一溶液を第二溶液に加える前に、クロマトグラフィーで精製しない。いくつかの実施態様では、本方法は、第一溶液を第二溶液に加えた後、そして患者に前記組成物を使用する前に、第三溶液のｐＨを約６〜８に調整する工程を更に含む。
【００２５】
更に、本発明の一部は、アスコルビン酸を含む放射性医薬組成物を患者に投与することを含む方法である。その場合、前記組成物は、約３．５〜５．５、より好ましくは約４〜５、そしてより更に好ましくは約４〜４．５の範囲のｐＨを有する。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
アスコルビン酸を含む安定化剤と一緒に１種又は複数種の放射性医薬化合物を含み、そしてその場合、ｐＨが約３．５〜５．５の範囲内にある組成物。
（項目２）
前記ｐＨが、約４〜５の範囲内にある項目１記載の組成物。
（項目３）
前記ｐＨが、約４〜４．５の範囲内にある項目２記載の組成物。
（項目４）
前記放射性医薬化合物が、ロテノン、ピリダベン、フェナザキン、フェンピロキシメート、テブフェンピラド、ピエリシジン、及び２−置換クロモン、及びそれらの類似体から成る群より選択される少なくとも１つのメンバーである項目１記載の組成物。
（項目５）
前記放射性医薬化合物が、ピリダベン及びその類似体から成る群より選択される少なくとも１つのメンバーである項目４記載の組成物。
（項目６）
前記放射性医薬化合物が、５位が置換されている親油性側鎖を有する２―アルキル―４―クロロ―２Ｈ―ピリダジン―３―オンを含む化合物から成る群より選択される少なくとも１つのメンバーである項目５記載の組成物。
（項目７）
前記放射性医薬化合物が、２―ｔｅｒｔ―ブチル―４―クロロ―５―［４―（２―［１８Ｆ］フルオロ―エトキシメチル）―ベンジルオキシ］―２Ｈ―ピリダジン―３―オンである項目６記載の組成物。
（項目８）
前記放射性医薬化合物を、放射性同位体で標識する項目４記載の組成物。
（項目９）
前記放射性同位体を、１１Ｃ、１３Ｎ、１８Ｆ、８６Ｂｒ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、及び１３１Ｉから成る群より選択する項目８記載の組成物。
（項目１０）
前記放射性同位体を、１１Ｃ、１３Ｎ、及び１８Ｆから成る群より選択する項目９記載の組成物。
（項目１１）
前記放射性同位体が、１８Ｆである項目１０記載の組成物。
（項目１２）
前記組成物が、１ミリリットル当たり約５ｍｇを超えるアスコルビン酸を含む項目１記載の組成物。
（項目１３）
前記組成物が、１ミリリットル当たり約１０ｍｇを超えるアスコルビン酸を含む項目１記載の組成物。
（項目１４）
前記組成物が、１ミリリットル当たり約２０ｍｇを超えるアスコルビン酸を含む項目１記載の組成物。
（項目１５）
前記組成物が、１ミリリットル当たり約３０ｍｇを超えるアスコルビン酸を含む項目１記載の組成物。
（項目１６）
前記組成物が、１ミリリットル当たり約４０ｍｇを超えるアスコルビン酸を含む項目１記載の組成物。
（項目１７）
前記組成物が、１ミリリットル当たり約５０ｍｇを超えるアスコルビン酸を含む項目１記載の組成物。
（項目１８）
前記組成物が、１ミリリットル当たり約１００ｍｇを超えるアスコルビン酸を含む項目１記載の組成物。
（項目１９）
前記組成物が、１ミリリットル当たり約２００ｍｇを超えるアスコルビン酸を含む項目１記載の組成物。
（項目２０）
放射性医薬化合物を含む第一溶液を、約３．５〜５．５のｐＨ範囲内でアスコルビン酸を含む第二溶液に加えて、前記放射性医薬化合物とアスコルビン酸とを含む第三溶液を作る工程を含む、組成物を調製する方法。
（項目２１）
前記ｐＨが、約４〜５の範囲内にある項目２０記載の組成物。
（項目２２）
前記ｐＨが、約４〜４．５の範囲内にある項目２０記載の組成物。
（項目２３）
前記放射性医薬化合物を、前記第一溶液を前記第二溶液に加える前に、クロマトグラフィーによって精製する項目２０記載の方法。
（項目２４）
前記放射性医薬化合物を、前記第一溶液を前記第二溶液に加える前に、クロマトグラフィーによって精製しない項目２０記載の方法。
（項目２５）
前記第一溶液を前記第二溶液に加えた後に、前記第三溶液のｐＨを約６〜８に調整する工程を更に含む項目２０記載の方法。
（項目２６）
前記放射性医薬化合物が、ロテノン、ピリダベン、フェナザキン、フェンピロキシメート、テブフェンピラド、ピエリシジン、及び２−置換クロモン、及びそれらの類似体から成る群より選択される少なくとも１つのメンバーである項目２０記載の方法。
（項目２７）
前記放射性医薬化合物が、ピリダベン及びその類似体から成る群より選択される少なくとも１つのメンバーである項目２６記載の方法。
（項目２８）
前記放射性医薬化合物が、５位が置換されている親油性側鎖を有する２―アルキル―４―クロロ―２Ｈ―ピリダジン―３―オンを含む化合物から成る群より選択される少なくとも１つのメンバーである項目２７記載の方法。
（項目２９）
前記放射性医薬化合物が、２―ｔｅｒｔ―ブチル―４―クロロ―５―［４―（２―［１８Ｆ］フルオロ―エトキシメチル）―ベンジルオキシ］―２Ｈ―ピリダジン―３―オンである項目２８記載の組成物。
（項目３０）
前記放射性医薬化合物を、放射性同位体で標識する項目２０記載の方法。
（項目３１）
前記放射性同位体を、１１Ｃ、１３Ｎ、１８Ｆ、８６Ｂｒ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、及び１３１Ｉから成る群より選択する項目３０記載の方法。
（項目３２）
前記放射性同位体を、１１Ｃ、１３Ｎ、及び１８Ｆから成る群より選択する項目３１記載の方法。
（項目３３）
前記放射性同位体が、１８Ｆである項目３２記載の方法。
（項目３４）
前記組成物が、１ミリリットル当たり約５０ｍｇを超えるアスコルビン酸を含み、そして、前記方法が、前記第一溶液を前記第二溶液に加えた後に、前記第三溶液のｐＨを約６未満に調整する工程を更に含む項目２０記載の方法。
（項目３５）
前記組成物が約３．５〜５．５の範囲内のｐＨを有するようにアスコルビン酸を含む組成物を患者に投与する工程を含む方法。
（項目３６）
前記組成物が約６未満のｐＨを有するようにアスコルビン酸を含む組成物を患者に投与する工程を含む方法であって、前記組成物が、１ミリリットル当たり約５０ｍｇを超えるアスコルビン酸を含む方法。
（項目３７）
２―ｔｅｒｔ―ブチル―４―クロロ―５―［４―（２―［１８Ｆ］フルオロ―エトキシメチル）―ベンジルオキシ］―２Ｈ―ピリダジン―３―オンと、１ミリリットル当たり約５０ｍｇを超える量でアスコルビン酸とを含む組成物を患者に投与する工程を含む方法であって、前記組成物が約６未満のｐＨを有する方法。
（項目３８）
アスコルビン酸を含む安定剤と一緒に、２―ｔｅｒｔ―ブチル―４―クロロ―５―［４―（２―フルオロ―［１８Ｆ］エトキシメチル）―ベンジルオキシ］―２Ｈ―ピリダジン―３―オンを含み、そしてその場合、ｐＨが約４〜４．５の範囲内にあり、また、１ミリリットル当たり約５０ｍｇを超えるアスコルビン酸を含む組成物。
（項目３９）
２―ｔｅｒｔ―ブチル―４―クロロ―５―［４―（２―［１８Ｆ］フルオロ―エトキシメチル）―ベンジルオキシ］―２Ｈ―ピリダジン―３―オンを含む第一溶液を、約４〜４．５の範囲内のｐＨを有し、そして１ミリリットル当たり約５０ｍｇを超えるアスコルビン酸を含む第二溶液に加えて、２―ｔｅｒｔ―ブチル―４―クロロ―５―［４―（２―［１８Ｆ］フルオロ―エトキシメチル）―ベンジルオキシ］―２Ｈ―ピリダジン―３―オンとアスコルビン酸とを含む第三溶液を作る工程を含む、組成物を調製する方法。
【００２６】
本発明は、これらの目的、ならびに、以下に記載の他の重要な目的に指向されている。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】時間の関数として、本発明の様々な組成物の放射化学的純度のプロットを示している図である。
【図２】（ａ）４．０、（ｂ）８．２、（ｃ）６．３、（ｄ）、５．４、（ｅ）６．０、及び（ｆ）４．５のｐＨにおける、本発明の様々な組成物に関する放射化学的不純物の生成率のプロットを示している図である。
【図３】（ａ）２０ｍｇ／ｍＬ（｜ｐ｜＞０．００１）、（ｂ）５０ｍｇ／ｍＬ、（ｃ）１００ｍｇ／ｍＬ、及び（ｄ）２００ｍｇ／ｍＬの濃度のアスコルビン酸を含む一連の溶液の放射化学的純度のプロットを示している図である。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
緩衝剤としてアスコルビン酸を使用することには、いくつかの利点がある。アスコルビン酸は、医薬品及び放射性医薬品の用途での使用が承認されている。アスコルビン酸は、４．２のｐＫａを有し、そしてｐＨ３．０〜５．０で緩衝能を有する。より高い濃度（＞５０ｍｇ／ｍＬ又は０．２５Ｍ）では、アスコルビン酸は、５．５〜６．０のｐＨ範囲又はそれを超えるｐＨで、充分な緩衝能も有し得る。典型的には、アスコルビン酸は、主要な緩衝剤としても使用される。
【００２９】
本発明は、一般的に、新規の組成物（例えば、放射性医薬組成物）に関するものであり、また、特定のｐＨ範囲における、放射性医薬組成物中の酸化防止剤アスコルビン酸の酸化防止能及び安定化効果の予期外で且つ劇的な増大に関するものである。このｐＨでは、酸化防止剤の有意部分は、プロトン化されるが、溶液の酸性度は、被験者に重篤な反応を引き起こすほど高くない。本明細書記載の条件下で、製造及び保存のプロトコルを実行し、そして、被験者に投与した５分、１０分、又は１５分以内に、より高いｐＨに調整することは特に適する。いくつかの実施態様では、安定化剤及び／又は臨床ＰＥＴイメージング剤としてアスコルビン酸を利用する放射性トレーサー（例えば、１８Ｆ標識放射性トレーサー）が提供される。
【００３０】
本発明は、有利には、特定のｐＨ範囲内で安定化剤としてアスコルビン酸を利用する放射性医薬製剤を提供する。前記ｐＨ範囲は、注射時に重篤な局所的な部位反応を最小限に抑えると共に、組成物の安定性と保存寿命を高める。更に、いくつかの実施態様では、放射性医薬組成物において、標識分子、特に１８Ｆ―標識分子の調製のための安定化剤としてアスコルビン酸が利用される。場合によっては、アスコルビン酸及びその類似体は、特定のｐＨ範囲内において、特に１８Ｆのような放射性同位体で標識される化合物のために、放射性医薬組成物の調製、リリース、及び輸送中に安定化剤として役立つことができる。
【００３１】
放射性医薬組成物のｐＨは、酸化防止剤の第一ｐＫａか、又は、二塩基性イオンの場合、酸化防止剤の第二ｐＫａのいずれかのｐＫａであるように又はその近傍にあるように選択される。アスコルビン酸に関して、４．１７のｐＫであり、ｐＨは、約３．５〜５．５、約４〜５、又は４〜４．５であるように選択できる。
【００３２】
アスコルビン酸は、典型的には、本発明の放射性医薬組成物の安定化成分として、利用される。アスコルビン酸は、ビタミンＣとして公知であり、特定の放射性医薬品（国際公開第ＷＯ９５／３３７５７号；Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１９９７，１７，１７８３−１７９６；米国特許第５，０９３，１０５号，及び米国特許第５，３０６，４８２号）又は放射性標識されたペプチド（米国特許第５，３９３，５１２号；米国特許第５，３８４，１１３号及び米国特許第５，９６１，９５５号）の放射線分解を防止する酸化防止剤として使用されてきた。本明細書で使用される用語「アスコルビン酸」としては、アスコルビン酸それ自体、ならびに当業者に公知の酸の類似体及び塩が挙げられる。アスコルビン酸は、容易に利用可能なＧＲＡＳ（安全性認定）物質であり、最終製剤１ｍＬ当たり２００ｍｇものレベルで、生物学的目的のために使用される医薬組成物及び他の製剤において使用できる。酸性溶液と関連のある刺激及び痛みのリスクを低下させるために、アスコルビン酸を含む従来の組成物は、典型的には、実質的にすべての処理工程中、ならびに被験者に対する投与中、生物学的ｐＨ範囲（例えば、６〜８）内のｐＨ値であった。しかしながら、生物学的ｐＨ範囲内では、放射性医薬溶液を安定化させる緩衝溶液中のアスコルビン酸／アスコルビン酸塩の能力は、驚くほど低下する。
【００３３】
本発明で開示される放射性医薬組成物においてアスコルビン酸又はその類似体を使用することのいくつかの利点としては：（１）高収率（＞９０％）で放射性医薬組成物を調製する能力、及び（２）放射性医薬品の放射化学的純度又はＲＣＰ（＞９０％）を維持すると共に、数時間又は数日間でも、放射性医薬組成物を保存する能力、が挙げられる。
【００３４】
場合によっては、アスコルビン酸塩を製剤に加えてもよい。場合によっては、アスコルビン酸は、無電荷の形態で使用することができ、又は、より高い割合のアスコルビン酸が適当なｐＨにおいてプロトン化されている組成物で使用することもできる。いかなる特定の理論にも拘束されるものではないが、酸化防止剤の有意部分がプロトン化された形態である酸性レベルにおいて向上した安定性を有する、酸化防止剤中における水素―酸素結合の非イオン性と、酸化防止剤の有効性とは、場合によっては、直接関連があるかもしれない。いくつかの実施態様では、他の安定化剤化合物が存在していない場合、放射性医薬組成物は、安定化剤としてアスコルビン酸を含んでいてもよい。
【００３５】
本発明は、これまで記載してきたｐＨ範囲で、アスコルビン酸と一緒に、以下に記載されている心筋灌流イメージング剤又は放射性医薬化合物のうちの１種又は複数種を含む放射性医薬品製剤を企図している。
【００３６】
近時、潜在的な臨床診断用途にとって非常に望ましい特性を有するいくつかの一連の新規な心筋灌流イメージング剤が開示されてきた（Ｃａｓｅｂｉｅｒ  らによる米国特許出願第２００７０３６７１６Ａ１号；Ｐｕｒｏｈｉｔ  ＆  Ｃａｓｅｂｉｅｒによる米国特許出願第２００６０８３６８１  Ａ１号；Ｒａｄｅｋｅ  らによる米国特許出願第２００５２４４３３２Ａ１号；Ｃａｓｅｂｉｅｒ  らによる国際公開第ＷＯ２００５／０７９３９１Ａ２号）。これらの薬剤は、しばしば放射性トレーサーとして調製され、そして、放射性同位体１８Ｆのような放射性同位体でしばしば標識される。
【００３７】
本発明に役立つ若干の放射性医薬化合物は、ミトコンドリア複合体１（ＭＣ―１）の強力な阻害剤であることができ、また、潜在的な臨床的有用性を有することができる。これらの化合物は、放射性トレーサー（以下、例示として例えば１８Ｆと記載する）で放射性標識することができ、従って、放射線分解によって開始される崩壊を防止する方法で溶液を安定化することが要求され得る。以下で詳しく述べる通り、化合物のいくつかの組は、本発明の文脈内で放射性医薬化合物として有用であり得る。
【００３８】
例えば、天然物ロテノンは、公知の市販の殺虫剤であり、商業で広範に使用されている。活性の主な方式は、ＭＣ―１の抑制によるものである。前記化合物は、その有効性の故に、ならびに、環境において無害生成物へと迅速に分解するが故に、農作物用途に便利である。ロテノンのいくつかの類似体は、ＭＣ―１を阻害することが知られており、そして、いくつかの類似体は、例えばジヒドロフルオロテノン（ＤＨＦＲ）のような心筋灌流画像化法のヒトのモデルで使用されてきた。
【００３９】
【化１】
0005662416.tif 000002
心筋灌流画像化法に使用できる別の化合物の組（その溶液はアスコルビン酸によって安定化できる）は、以下に示してあるクロモン誘導体の組である。これらの化合物は、霊長類の心筋灌流で良好な有用性を示した合成化合物、特に、以下に示した特定の化合物である。
【００４０】
【化２】
0005662416.tif 000003
心筋灌流画像化法に使用できる別の化合物の組（その溶液はアスコルビン酸によって安定化できる）は、フェナザキンと呼ばれるキナゾリンの誘導体である。フェナザキンそれ自体は、ＭＣ―１の強力な阻害剤であり、殺虫剤として商業的に使用されている。フェナザキン及びその類似体の放射性標識誘導体は、霊長類及び他の哺乳類において心筋灌流を画像化する際に良好な有用性を示した。心筋灌流画像化法のための特に好ましい特定の化合物と共に、フェナザキン及びその類似体が以下に示してある。
【００４１】
【化３】
0005662416.tif 000004
同様に、他の商業的に有用なＭＣ―１阻害剤の類似体、例えばテブフェンピラド及びそれらの類似体は、以下に示してあるように、本発明において有用である。これらの化合物の親構造体は、殺虫剤として商業的に使用されているが、それらの類似体は、心筋灌流イメージング剤として使用するために放射性標識され得る。
【００４２】
【化４】
0005662416.tif 000005
同様に、他の商業的に有用なＭＣ―１阻害剤の類似体、例えばフェンピロキシメートの類似体は、以下に示してあるように、本発明において有用である。これらの化合物の親構造体は、殺虫剤として商業的に使用されているが、それらの類似体は、心筋灌流イメージング剤として使用するために放射性標識され得る。
【００４３】
【化５】
0005662416.tif 000006
更にまた、天然物ピエリシジンの類似体は、以下に示してあるように、本発明の一部としての化合物として有用である。ピエリシジンは、サブステーション（ｓｕｂｓｔａｔｉｏｎ）及び側鎖において可変性を有する化合物の組であり、一般的に、２―アルキル―４―ヒドロキシピリジンと記述できる。典型的に、ピエリシジンでは、３位、５位、及び６位も、アルキル又はアルコキシ官能価で置換される。これらの化合物及び類似体の誘導体は、心筋灌流イメージング剤として使用するために放射性標識され得る。
【００４４】
【化６】
0005662416.tif 000007
本発明での使用に適する化合物の他の組は、市販されている化合物ピリダベンをベースとしている。場合によっては、前記化合物は、例えば１８Ｆ―フッ化物のような放射性同位体に対して、親油性側鎖を介して結合されたピリダジノンヘテロ環を含む。これらの化合物は、強力な一連のミトコンドリア複合体１阻害剤を含むことができる。有効性は、カルコゲンに関する基Ｘ及びＹの置換全体にわたって保持され、そして、側鎖（基群ｍ、ｎ、及びＹ）の許容度は広く、１０個以下の鎖原子から成る分岐鎖及び直鎖の基は依然として有効性をもたらす。いくつかの実施態様では、前記化合物は、２―アルキル―４―クロル―５―［４―（２―［１８Ｆ］フルオロ―エトキシメチル）―ベンジルオキシ］―２Ｈ―ピリダジン―３―オンである。例えば、前記化合物は、２―ｔｅｒｔ―ブチル―４―クロロ―５―［４―（２―［１８Ｆ］フルオロ―エトキシメチル）―ベンジルオキシ］―２Ｈ―ピリダジン―３―オンであり得る。
【００４５】
【化７】
0005662416.tif 000008
本明細書記載の化合物は、有機放射化学の当業者と、フルオロデオキシグルコース（１８Ｆ―ＦＤＧ）のような放射性医薬品を、例えば、ヒトの画像診断用に現在唯一承認されている１８―Ｆ放射性トレーサーを製造するために使用される技術に精通している人たちとに知られている方法によって調製できる。前記化合物は、使用前に精製することができ、そして前記方法は、本出願で例証される。当業者は、他の方法を容易に利用できる。
【００４６】
場合によっては、放射性医薬化合物は、不斉中心、すなわち、非対称的に置換された原子を含み得る。非対称的に置換された原子を含む化合物は、光学活性体又はラセミ体で単離できる。例えばラセミ体の分割又は光学活性出発原料からの合成のような方法を含む、光学活性体を調製する方法は当業において公知である。オレフィン及びＣ＝Ｎ二重結合などの多くの幾何異性体は、本明細書記載の化合物中に存在することもでき、また、すべてのそのような安定な異性体は、本発明における使用が企図される。本発明化合物のシス及びトランス幾何異性体を説明する。前記幾何異性体は、異性体の混合物として又は分離された異性体型として単離できる。構造の特定の立体化学的形態又は異性体型が特に示されていない限りは、構造のすべてのキラル、ジアステレオマー、ラセミ体及びすべての幾何学的な異性体型が意図される。本発明の化合物を調製するために使用されるすべての方法及びそこで作られる中間体は、本発明で有用であると考えられる。
【００４７】
前述のように、本明細書記載の放射性医薬化合物は、アルキル置換基を含み得る。本明細書でアルキル置換基という用語が使用され得る場合、単独で又は別の基の一部として本明細書で使用され得る「アルキル」及び「アルク（ａｌｋ）」は、正鎖中に１〜２０個の炭素原子、好ましくは１〜１０個の炭素原子、更に好ましくは１〜８個の炭素原子を含む直鎖炭化水素と分岐鎖炭化水素の両方を包含し、その例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、イソブチル、ペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ヘプチル、４，４−ジメチルペンチル、オクチル、２，２，４−トリメチルペンチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、及びそれらの様々な分岐鎖異性体など、ならびに、１〜４つの置換基、例えば、ハロ、例えばＦ、Ｂｒ、Ｃｌ又はＩ又はＣＦ３、アルキル、アルコキシ、アリール、アリールオキシ、アリール（アリール）又はジアリール、アリールアルキル、アリールアルキルオキシ、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキルアルキル、シクロアルキルアルキルオキシ、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、アシル、アルカノイル、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、シクロヘテロアルキル、アリールヘテロアリール、アリールアルコキシカルボニル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルコキシ、アリールオキシアルキル、アリールオキシアリール、アルキルアミド、アルカノイルアミノ、アリールカルボニルアミノ、ニトロ、シアノ、チオール、ハロアルキル、トリハロアルキル及び／又はアルキルチオを含む前記の基が挙げられる。
【００４８】
これまで述べてきたように、本明細書において使用される放射性医薬化合物は、それらの「類似体」も含む。用語「類似体」は、言及されている構造又は化合物と、構造又は原子の結合性が実質的に同様なあらゆる化合物を含むことを意味している。類似体は、異なる原子又は異なる官能基のいずれかで、一つ又は複数の各原子が置換された化合物を含む。類似体という用語は、高度な相同性を意味しているが、そのような構造から知的に誘導される化合物を含むこともできる。而して、実例として、ピリダベンの類似体は、５位で置換された親油性側鎖を有する２―アルキル―４―クロロ―２Ｈ―ピリダジン―３―オンを含む任意の化合物と考えることができる。
【００４９】
本発明の一部としての放射性医薬化合物は、本化合物で見出される原子のすべての同位体を含むことが意図されている。同位体は、原子番号は同じであるが、質量数が異なる原子を含む。一般的な例として、限定するものではないが、水素の同位体としては、三重水素及び重水素が挙げられる。炭素の同位体としては、Ｃ―１３及びＣ―１４が挙げられる。
【００５０】
置換基への結合が、環中の２つの原子を結びつけている結合を横切るように示される時、その時、前記置換基は、環上の任意の原子に結合され得る。所定の式で表される化合物の残りに対して置換基が結合される原子を明示せずに、前記置換基がリストに記載されている時、前記置換基は、前記置換基中の任意の原子を介して結合され得る。置換基及び／又は変数の組み合わせが、安定な化合物をもたらす場合のみ、前記組み合わせが許容される。
【００５１】
ここまで説明した放射性医薬化合物は、薬学的に許容可能であると考えられる。本明細書で使用される「薬学的に許容可能な」というフレーズは、適切な医学的判断の範囲内で、過剰な毒性、刺激、アレルギー応答、又は他の問題若しくは合併症も無く、ヒト及び動物の組織と接触させて使用するのに適当であり、妥当な効果／リスク比で釣り合っている化合物、材料、組成物及び／又は剤形を指している。
【００５２】
これまで説明してきた放射性医薬化合物は、薬学的に許容可能な塩も含む。本明細書で使用される「薬学的に許容可能な塩」とは、親化合物が、それらの酸又は塩基の塩を作ることによって変性される開示化合物の誘導体を指している。薬学的に許容可能な塩の例としては、アミンのような塩基性残基の無機酸塩又は有機酸塩；カルボン酸のような酸性残基のアルカリ塩または有機塩が挙げられるが、それらに限定されない。
【００５３】
薬学的に許容可能な塩としては、例えば、無毒性の無機酸又は有機酸から形成される従来の無毒性塩又は第四級アンモニウム塩が挙げられる。例えば、この種の従来の無毒性塩としては、無機酸から、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、及び硝酸から誘導される前記無毒性塩；及び、有機酸から、例えば酢酸、プロピオン酸、琥珀酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２―アセトキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタン二スルホン酸、シュウ酸、及びイセチオン酸から調製される前記無毒性塩が挙げられる。本発明で有用な薬学的に許容可能な塩は、従来の化学法によって塩基性部分又は酸性部分を含む親放射性医薬品から合成することができる。一般的に、前記の塩は、これらの化合物の遊離の酸または塩基の形態を、水中で又は有機溶媒中で又は前記２つの混合物中で、適当な塩基又は酸の化学量論量と反応させることによって調製することができ；一般的に、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、又はアセトニトリルのような非水性媒体が好ましい。適当な塩のリストは、参照によりその開示が本明細書に組み込まれるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１７ｔｈ  ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，  Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，１９８５，ｐ．１４１８に見出される。
【００５４】
これまで説明してきたように、本明細書の放射性医薬化合物は、好ましくはＭＣ―１阻害剤である。用語「ＭＣ―１阻害剤」は、ＭＣ―１を阻害する能力を有する特定の公知の化合物、及びそれらの化合物の類似体を指している。詳しくは、適当な放射性同位体で放射性標識できる化合物であって、前記化合物を、患者に投与し、ＰＥＴ、ＳＰＥＣＴ又は平面カメラであることができる適当なカメラで患者をスキャンすることによって、心筋組織の画像を得ることができる。前記阻害剤としては、ピリダベン及びその類似体、フェナザキン及びその類似体、ロテノン及びその類似体、デグエリン及びその類似体、及び置換されたクロモン誘導体及びそれらの類似体、及び上で例示した阻害剤が挙げられるが、それらに限定されない。
【００５５】
本発明の放射性医薬化合物は、好ましくは適当な放射性同位体で標識される。用語「適当な放射性同位体」とは、生物学的有効性に悪影響を及ぼさずに分子中に共有結合で組み込むことができ、そして、崩壊パラメータ、例えば充分に長い半減期と、満足な画像を得ることができるように適当な粒子／放出エネルギーとを有する同位体を指している。このような放射性同位体としては、１１Ｃ、１３Ｎ、１８Ｆ、８６Ｂｒ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、及び１３１Ｉが挙げられるが、それらに限定されない。これらのうちで、１８Ｆは、特に本発明による使用に好ましい。
【００５６】
放射能標識は、当業者が利用できる材料及び技術を使用して達成される。例えば、フッ素による放射能標識は、適当な条件下で、［１８Ｆ―Ｆ］フッ素ガスを使用して、求電子性のフッ素化によって達成できるが、最も好ましくは、［１８Ｆ］―フッ化物イオンにより、適当な脱離基を求核置換することによって達成される。［１８Ｆ］―フッ化物イオンは、カリウム対イオンを封鎖するクリプテートを添加することによって更に反応性となる。好ましい脱離基は、当業者に公知のものから選択することができるが、好ましくは、ハロゲン、例えばヨウ化物、臭化物、塩化物、及びフッ化物が挙げられる。最も好ましくは、脱離基は、アルキル又はアリールスルホン化エステル、詳しくはトルエンスルホネートエステルである。
【００５７】
１セットの実施態様では、放射性医薬組成物は、アスコルビン酸を含む安定化剤と一緒に、２―ｔｅｒｔ―ブチル―４―クロロ―５―［４―（２―［１８Ｆ］フルオロ―エトキシメチル）―ベンジルオキシ］―２Ｈ―ピリダジン―３―オンを含み、その場合、前記組成物のｐＨは約４〜４．５の範囲内であり、そして、前記組成物は、１ミリリットル当たり約５０ｍｇを超えるアスコルビン酸を含む。
【００５８】
本発明の安定化された放射性医薬製剤は、粗（例えば、精製されていない）又は精製された放射性医薬化合物を含む第一溶液（例えば、水溶液又はエタノール溶液）を、アスコルビン酸を含む第二調製溶液に加えて、放射性医薬化合物とアスコルビン酸とを含む第三溶液を作ることによって、調製し得る。第一溶液は、水溶液又はアルコール溶液、例えばエタノール溶液であり得る。場合によっては、第二溶液は、第一溶液と接触させる前に、酸性溶液（例えば、塩酸溶液）又は塩基性溶液（例えば、水酸化ナトリウム水溶液）のいずれかを加えることによって、所望のｐＨ（例えば、３．５〜５．５のｐＨ）に調整する。
【００５９】
本発明の方法は、追加の処理工程を含み得る。例えば、第一溶液を第二溶液に加えた後、得られた第三溶液を、異なるｐＨ、例えば生物学的範囲内のｐＨ、すなわち約６〜８のｐＨに調整し得る。いくつかの実施態様では、放射性医薬組成物は、１ミリリットル当たり約５０ｍｇを超えるアスコルビン酸を含み、そして、方法は、第一溶液を第二溶液に加えた後、第三溶液のｐＨを約６未満に調整する工程を更に含む。
【００６０】
１セットの実施態様では、方法は、２―ｔｅｒｔ―ブチル―４―クロロ―５―［４―（２―［１８Ｆ］フルオロ―エトキシメチル）―ベンジルオキシ］―２Ｈ―ピリダジン―３―オン又はその１９Ｆ類似体を含む第一溶液を、約４〜４．５の範囲内のｐＨを有し、そして１ミリリットル当たり約５０ｍｇを超えるアスコルビン酸を含む第二溶液に加えて、２―ｔｅｒｔ―ブチル―４―クロロ―５―［４―（２―［１８Ｆ］フルオロ―エトキシメチル）―ベンジルオキシ］―２Ｈ―ピリダジン―３―オンとアスコルビン酸とを含む第三溶液を作る工程を含む。
【００６１】
いくつかの態様では、方法は、一つ又は複数の精製工程、例えばクロマトグラフィーによる精製工程を含み得る。例えば、方法は、すなわち、アスコルビン酸を含む溶液に添加する前に、クロマトグラフィーによって放射性医薬化合物を精製する工程を含むことができる。クロマトグラフィーは、逆相クロマトグラフィー、順相クロマトグラフィー及び／又はイオン交換クロマトグラフィーであることができる。いくつかの実施態様では、順相クロマトグラフィーは、アルミナ又はシリカゲルカラムの使用を含み得る。場合によっては、本発明の方法は、逆相ＨＰＬＣカラムの使用を含み得る。逆相クロマトグラフィーでは、ＨＰＬＣカラムは、水、アセトニトリル、緩衝液（例えば、酢酸アンモニウム緩衝液）、アルコール（例えば、メタノール、エタノール）、酸（例えば、ギ酸）、又はそれらの混合物を含む移動相を使用して溶出させ得る。場合によっては、ＨＰＬＣカラムは、逆相カラムであり、そのカラムは、酢酸アンモニウム緩衝液、アセトニトリル、エタノール、ギ酸、又はそれらの混合物を含む移動相を使用して溶出される。
【００６２】
本発明の典型的な放射性医薬組成物は、体積基準で約０〜１０％以下のエタノール及び１ミリリットル当たり約５ｍｇを超えるアスコルビン酸を含む水溶液を含む。場合によっては、前記水溶液は、剤形１ミリリットル当たり、約１０ｍｇを超える、約２０ｍｇを超える、約３０ｍｇを超える、約４０ｍｇを超える、約５０ｍｇを超える、約１００ｍｇを超える、又は場合によっては、約２００ｍｇを超えるアスコルビン酸を含む。いくつかの実施態様では、水溶液は、剤形１ミリリットル当たり、約２０ｍＣｉ以下の放射性医薬化合物（例えば、約１０〜２０ｍＣｉ）と、約５ｇ以下の放射性トレーサーの冷１９Ｆ―類似体（例えば、約１〜５ｇ）も含む。放射線分解は、典型的には、溶液中にＮａ１８Ｆを添加することによって、開始される。
【００６３】
本発明のいくつかの態様は、広範な製造、配布及び使用のために本発明に従って放射性医薬組成物を開発している間に、アスコルビン酸が、特定のｐＨ値において、放射性医薬製剤を安定化させる強化された能力を示すという発見に関連している。本明細書において記載されるｐＨ値において、放射性医薬製剤が、分解に対して有意により高い安定性を示すことを見出した。より高いｐＨ値では、これらの溶液の安定化に関して著しく効果が低かった。アスコルビン酸含有溶液のｐＨ、６時間の安定性、及びアスコルビン酸のｐＫａを比較すると、最も有効な安定化は、安定化剤上の酸化中心がプロトン化される範囲において存在する、ことが認められた。
【００６４】
場合によっては、本明細書記載の放射性医薬組成物においてアスコルビン酸又はその類似体を使用すると、放射性医薬品の実質的な総寿命中にわたって、高い放射化学的純度（例えば、＞９０％、＞９５％、＞９７％）を維持できるように、放射性医薬品を安定化させることができる。例えば、１８Ｆを含む放射性医薬品は、１時間以上、２時間以上、又は、場合によっては、５時間以上の間、高い放射化学的純度に維持できる。
【００６５】
本発明は、被験者に対して放射性医薬組成物を投与する方法も含む。場合によっては、放射性医薬組成物は、アスコルビン酸を含み、そして約３．５〜５．５の範囲内のｐＨを有する。場合によっては、放射性医薬組成物は、１ミリリットル当たり約５０ｍｇを超える量でアスコルビン酸を含み、そして約６未満のｐＨを有する。１セットの実施態様では、本発明は、２―ｔｅｒｔ―ブチル―４―クロロ―５―［４―（２―［１８Ｆ］フルオロ―エトキシメチル）―ベンジルオキシ］―２Ｈ―ピリダジン―３―オンと、１ミリリットル当たり約５０ｍｇを超える量でアスコルビン酸とを含み、且つ約６未満のｐＨを有する、放射性医薬組成物を患者に投与する方法を提供する。
【００６６】
本明細書記載の本発明組成物は、例示として、以下の方法で投与し得る：すなわち、カテーテル又はヘパリンロックラインを、被験者の静脈の中に留置し、次いで、適当な生理食塩水及び／又はヘパリン溶液でフラッシュする。投与量を、ルアーロックを介してカテーテル又はヘパリンロックラインに投与する。患者は、その場でＰＥＴカメラの中に入り、画像化を直ちに開始することができるか、又は、患者は、ＰＥＴカメラの中に入る前に、にしばらく休むことができる。あるいは、患者は、当業において公知のプロトコルと同様なプロトコルを使用して、トレッドミル又は薬剤負荷の下で、カテーテル又はヘパリンロックを介して、同様の方式で投与される。以下の実施例は、本発明の様々な実施態様を利用しているが、これらの実施例によって、本発明の範囲が限定されると解すべきでない。
【実施例】
【００６７】
放射性医薬品の集積度は、ＩＴＬＣ又は更に好ましくはＨＰＬＣを使用する放射性標識化合物の放射化学的純度（ＲＣＰ）によって測定される。ＨＰＬＣを使用することの利点は、放射線分解による崩壊（ｒａｄｉｏｌｙｔｉｃ  ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ）によって生じる放射性不純物を、特定のクロマトグラフィー条件下で、放射性医薬品から分離できる点にある。本発明の放射性医薬組成物に関する時間経過における改良された安定性は、代表時点で採取されるサンプルにおける放射性標識化合物のＲＣＰの変化を測定することによって証明できる。本発明の放射性医薬組成物は、最高１０時間、サンプルの安定性を維持する効力がある。
【００６８】
放射性医薬品の初期のＲＣＰは、放射性標識条件、例えばｐＨ、加熱温度及び時間に大きく左右される。放射性医薬品を高収率で調製し、放射性医薬組成物の安定性を、一定の時間にわたって放射性医薬品のＲＣＰの変化によって測定する。
【００６９】
酢酸（超高純度）、水酸化アンモニウム（超高純度）、及びゲンチシン酸は、Ａｌｄｒｉｃｈ又はＳｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．から購入し、そのまま使用した。Ｆｉｓｈｅｒから購入した塩酸及びＶＷＲから購入した水酸化ナトリウム（１Ｎ溶液）は、ｐＨ調整用に使用した。アスコルビン酸（５００ｍｇ／ｍＬ、ＵＳＰ注射液）は、Ｍｙｏｄｅｒｍ  Ｍｅｄｉｃａｌから購入し、必要に応じて注射用蒸留水（ＳＷＦＩ）で希釈した。
フッ化［Ｆ―１８］ナトリウム（Ｎａ１８Ｆ）は、ポリマーカラム担体上に堆積された塩として、Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ｂｉｏｍａｒｋｅｒ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓから購入した。
前記フッ化物は、炭酸カリウム（Ｋ２ＣＯ３）及びＫｒｙｐｔｏｆｉｘ［２２２］の溶液を使用して、反応フラスコ又はバイアル中へカラムから溶出させた。
【００７０】
以下のＨＰＬＣ分析法を使用し得る。ＨＰＬＣ法１では、ＵＶ／可視検出器（λ＝２２０ｎｍ）、ＩＮ―ＵＳ放射能検出器、及びＺｏｒｂａｘ  Ｃ１８カラム（４．６ｍｍ  ｘ  ２５０ｍｍ、孔径８０Å）を有するＨＰ―１１００  ＨＰＬＣシステムを使用した。流量は１ｍＬ／分であり、移動相は９２％溶媒Ａ（０．０２５Ｍの酢酸アンモニウム緩衝液、ｐＨ６．８）及び８％溶媒Ｂ（アセトニトリル）から始めて、１８分で、９０％溶媒Ａ及び８％溶媒Ｂにし、次いで、１９〜２５分、４０％溶媒Ａ及び６０％溶媒Ｂを使用してアイソクラチック洗浄を行った。
【００７１】
ＨＰＬＣ法２では、ＵＶ／可視検出器（λ＝２２０ｎｍ）、ＩＮ―ＵＳ放射能検出器、及びＺｏｒｂａｘ  Ｃ１８カラム（４．６ｍｍ  ｘ  ２５０ｍｍ、孔径８０Å）を有するＨＰ―１１００  ＨＰＬＣシステムを使用した。流量は１ｍＬ／分であり、移動相は９２％溶媒Ａ（０．０２５Ｍの酢酸アンモニウム緩衝液、ｐＨ６．８）及び８％溶媒Ｂ（アセトニトリル）から始めて、１８分で、８０％溶媒Ａ及び２０％溶媒Ｂにし、次いで、１９〜２５分、４０％溶媒Ａ及び６０％溶媒Ｂを使用してアイソクラチック洗浄を行った。
【００７２】
ＨＰＬＣ法３では、ＵＶ／可視検出器（λ＝２２０ｎｍ）、ＩＮ―ＵＳ放射能検出器、及びＺｏｒｂａｘ  Ｃ１８カラム（４．６ｍｍ  ｘ  ２５０ｍｍ、孔径８０Å）を有するＨＰ―１１００  ＨＰＬＣシステムを使用した。流量は１ｍＬ／分であり、アイソクラチック移動相は、２５分にわたって９２％溶媒Ａ（０．０２５Ｍの酢酸アンモニウム緩衝液、ｐＨ６．８）及び８％溶媒Ｂ（アセトニトリル）であり、次いで、２６〜３０分、４０％溶媒Ａ及び６０％溶媒Ｂを使用してアイソクラチック洗浄を行った。
【００７３】
ＨＰＬＣ法４では、ＥＧ＆Ｇ  Ｂｅｒｔｈｏｌｄの放射能流量検出器及びＺｏｒｂａｘ  Ｃ１８カラム（４．６ｍｍ  ｘ  ５０ｍｍ、粒径１．８μｍ）を有するＨＰ―１１００  ＨＰＬＣシステムを使用した。流量は、１ｍＬ／分であり、０．１％ギ酸中５０％アセトニトリル／５０％水の移動相で１２分間運転した。
【００７４】
以下の実施例では、１８Ｆで標識された心筋灌流画像化法放射性トレーサー（ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ  ｐｅｒｆｕｓｉｏｎ  ｉｍａｇｉｎｇ  ｒａｄｉｏｔｒａｃｅｒ）の調製及び精製を説明する。以下の一般的な手順によって、ピリダベン、フェナザキン、及びクロモンの類似体を、良好な収率で調製し、そして安定放射性医薬組成物中に配合した。
【００７５】
実施例１：ｐＨ安定化研究のための１８Ｆ心筋灌流画像化法放射性トレーサーの調製のための合成手順
炭酸カリウム（Ｋ２ＣＯ３、ＵＳＰ等級、１０ｍｇ）を、蒸留され／脱イオンされた水（Ｈ２Ｏ、１ｍＬ）の中に溶かし、そして、それを、撹拌しながら、無水アセトニトリル（ＣＨ３ＣＮ、４ｍＬ）中４，７，１３，１６，２１，２４―ヘキサオキサ―１，１０―ジアザビシクロ［８．８．８］ヘキサコサン（Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ（商標）、Ｋ２２２と呼ばれている）溶液に加え、そして、得られた溶液のアリコート（１ｍＬ）を使用して１８Ｆ含有樹脂カラムを溶出させた。カラム溶出液の放射能含量を測定し、そして、その溶出液をＥｘｐｌｏｒａ  ＲＮ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｍｏｄｕｌｅの反応器へ移した。このシステムは、ＧＩＮＡ―Ｓｔａｒソフトウェアを使用しているコンピュータで制御した。溶出した複合溶液を、乾燥（７０〜９５℃、アルゴン抽気；部分真空（２５０〜１２ｍｂａｒ）させて濃縮した。これにより、［１８Ｆ］フッ化物の比較的乾燥した高度に活性な形態が得られた。次いで、１００％アセトニトリル中に溶解された所望の放射性トレーサーの対応トルエンスルホネートエステルの溶液を、反応器に加えた。その混合物を、１０分間、９０℃で加熱した。
【００７６】
実施例２：ｐＨ安定化研究のための１８Ｆ心筋灌流画像化法放射性トレーサーの精製及び投与量の調製
反応が完了した後、アセトニトリルを蒸発させ（５５℃、アルゴン抽気；部分真空（２５０〜１５ｍｂａｒ））、そして、その反応混合物を、移動相（水中６０％アセトニトリル／４０％  ５０ｍＭ酢酸アンモニウム、１．３ｍＬ）中に懸濁させた。その混合物を、サンプルループ中に吸い込み、ＨＰＬＣカラム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  ４μ  Ｈｙｄｒｏ―ＲＰ  Ｃ１８、２５０×１０ｍｍ）上に注入した。その混合物を、アイソクラチック条件（水中６０％アセトニトリル／４０％  ５０ｍＭの酢酸アンモニウム、５ｍｌ／分、運転時間３６分）下で、クロマトグラフィーによって精製した。放射性合成モジュール（Ｅｘｐｌｏｒａ  ＲＮ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｍｏｄｕｌｅ）は、ＵＶ（２５４ｎｍ）及びガイガー―ミュラー（ＧＭ）検出器を備えている。
【００７７】
標識放射性トレーサーを含むフラクションを、バイアル中に集めた。５０ｍｇ／ｍＬ（１０〜１５ｍＬ）のアスコルビン酸濃度を有するアスコルビン酸溶液を加え、そして、その溶液をＳｅｐ―Ｐａｋ（登録商標）カートリッジ（前もって、１０ｍＬのエタノール、続いて１０ｍＬのアスコルビン酸溶液で調整した）に通した。１８Ｆ放射性標識トレーサーを、カラム上に吸着させ、水性溶出液は廃棄する。Ｓｅｐ―Ｐａｋ（登録商標）は、アスコルビン酸溶液の追加のアリコート（１０ｍＬ）で洗浄して、あらゆる追加の副生物及び残りのアセトニトリルを除去した。次いで、エタノール（０．５ｍＬ以下）で放射性トレーサーを溶出させ、９．５ｍＬのアスコルビン酸溶液を含んでいるバイアルに加えた。
【００７８】
実施例３：放射性トレーサー投与量溶液の安定化に関するｐＨ値の効果の測定
様々なｐＨ値の一連のアスコルビン酸溶液を調製した。その各溶液は、放射性医薬化合物の、すなわち２―ｔｅｒｔ―ブチル―４―クロロ―５―［４―（２―［１８Ｆ］フルエオロ―エトキシメチル）―ベンジルオキシ］―２Ｈ―ピリダジン―３―オンの冷１９Ｆ―類似体（例えば、ＢＭＳ―７４７１５８―０１（ＡＰＩ））を５μｇ／ｍＬ、エタノール／水（５／９５）、及びアスコルビン酸を５０ｍｇ／ｍＬ含む。各溶液のｐＨは、必要に応じて、塩酸又は水酸化ナトリウムの標準的な水溶液を加えることによって、調整した。溶液のリストは、表１に示してある。放射線分解は、放射性医薬化合物の冷１９Ｆ―類似体を含む溶液中にＮａ１８Ｆを加えることによって開始させ、その溶液を、（最小限）６時間にわたって、ＨＰＬＣ分析法によって、放射化学的純度についてモニターした。その溶液は、勾配移動相でＣ１８  ＲＰ―ＨＰＬＣカラムを使用して分析し、そして、その溶出プロフィルを、ＵＶ及び放射化学検出器の両方を使用して、モニターした。結果を図１に示す。
【００７９】
表１  実施例３で使用したアスコルビン酸溶液
【００８０】
【表１】
0005662416.tif 000009
図１のグラフから分かるように、保存時の得られた溶液の純度は、最初の緩衝された投与量のｐＨに直接に依存していた。より高いｐＨ値（生理的ｐＨ７〜７．５により近い）の溶液は、保存に対する安定性が、比較的より酸性の値を有する溶液に比べて、著しく安定性が低かった。これは、詳しくは５．８（溶液Ｂ）及び６．５（溶液Ｉ）の溶液ｐＨ値に関するそれぞれのプロットによって示されている。これらは、それぞれ、図１に示してあるグラフ上の２つの最も低いプロットである。
【００８１】
追加の研究では、図２に示してあるように、４．０〜８．２の範囲にわたる溶液ｐＨの関数として、放射化学的不純物の生成をモニターしている。各溶液に関して、ＨＰＬＣによって放射化学的純度の生成をモニターし、そして、放射化学的不純物に対応するクロマトグラフピークの面積を時間の関数としてプロットした。３．５〜５．５のｐＨ範囲を有する溶液は、６．０又はそれを超えるｐＨを有する溶液と比較して、より大きな安定性を示し、また、放射化学的不純物の生成速度が極めて遅いことを証明した。更に、図２に示してある結果は、危険な酸性条件下における改良された製剤安定性の効果を証明している。試験したｐＨ範囲にわたって、放射化学的不純物の生成に関して観察された一次反応速度は、１０分の１超低下する。
【００８２】
実施例４：放射性トレーサー投与量溶液の安定化に関するアスコルビン酸濃度効果の測定
本実施例は、放射化学的純度に関するアスコルビン酸濃度の効果を説明する。本実施例では、１８Ｆで標識された製剤（２―ｔｅｒｔ―ブチル―４―クロロ―５―［４―（２―［１８Ｆ］フルオロ―エトキシメチル）―ベンジルオキシ］―２Ｈ―ピリダジン―３―オン）の放射化学的純度（ＲＣＰ）を、ｐＨ５．８で２００ｍｇ／ｍＬ（飽和レベル）〜２０ｍｇ／ｍＬのアスコルビン酸濃度範囲を有する溶液についてモニターした。図３に示してある結果は、ＲＣＰレベルは、２００〜５０ｍｇ／ｍＬの範囲では有意に変化しないが、不純物（すなわち、低ＲＣＰレベル）の増加は、２０ｍｇ／ｍＬのサンプルにおいて観察された、ことを示唆している。
【００８３】
これらの実施例は、本発明の用途を例示することを意図しており、特許請求の範囲に記載してある本発明の趣旨、用途、及び有用性を決して限定しない。  
【図１】
0005662416.tif 000015
【図３】
0005662416.tif 000016
【図２】
0005662416.tif 000017