(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、マロン酸、マレイン酸、酒石酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸およびトルエンスルホン酸からなる群から選択される一つの酸と、（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オンと、からなる塩の結晶。
【請求項２】
粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１０．１°に回折ピークを有する、（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一マレイン酸塩の結晶。
【請求項３】
粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）９．１°、１０．１°および１１．１°に回折ピークを有する、（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一マレイン酸塩の結晶。
【請求項４】
１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおいて、化学シフト（ｐｐｍ）１３．３、６１．９、１１４．３、１３８．９および１７２．０にピークを有する、（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一マレイン酸塩の結晶。
【請求項５】
粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）９．９°に回折ピークを有する、（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一ベンゼンスルホン酸塩の結晶。
【請求項６】
粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）９．９°、１３．７°および１４．６°に回折ピークを有する、（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一ベンゼンスルホン酸塩の結晶。
【請求項７】
１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおいて、化学シフト（ｐｐｍ）１６．８、６７．９、１１４．０、１３７．７および１６０．７にピークを有する、（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一ベンゼンスルホン酸塩の結晶。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか一項に記載の結晶を有効成分として含有する医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ホスホジエステラーゼ９（ＰＤＥ９）の阻害活性を有するピラゾロキノリン誘導体の塩およびその結晶に関する。
【背景技術】
【０００２】
細胞内で二次情報伝達物質として働く環状グアノシン一リン酸（以下、ｃＧＭＰという。）は、学習記憶行動を初めとする様々な生理機能に重要な役割を果たすことが知られている。【０００３】
脳内神経回路のシナプス後部にて、一酸化窒素合成酵素により生合成された一酸化窒素（以下、ＮＯという。）は、ｃＧＭＰ合成酵素であるグアニル酸シクラーゼを活性化する。活性化されたグアニル酸シクラーゼは、グアノシン三リン酸よりｃＧＭＰを生合成する。ｃＧＭＰは様々なシナプス可塑性に関与するタンパク質をリン酸化するｃＧＭＰ依存性蛋白質リン酸化酵素（以下、ＰＫＧという。）を活性化する。このＮＯ／ｃＧＭＰ／ＰＫＧカスケードの活性化は、学習記憶行動の神経基盤と考えられている海馬のシナプス可塑性（Ｌｏｎｇ  Ｔｅｒｍ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｔｉｏｎ；以下、ＬＴＰという。）の誘起に関与することが知られている（例えば、非特許文献１を参照）。このカスケードのシグナル伝達を活性化する薬剤が海馬のＬＴＰや動物の学習行動を改善することが知られている一方で、このカスケードを阻害する薬剤は、前記の改善作用とは逆の作用を示すことが知られている（非特許文献２）。したがって、これらの知見より、脳内でｃＧＭＰを上昇させることは、学習記憶行動の改善につながると期待される。【０００４】
ｃＧＭＰはホスホジエステラーゼ（以下、ＰＤＥという。）によりＰＫＧ活性化作用を有しない５’−ＧＭＰに代謝される。ＰＤＥには１１種のファミリーが知られており、ＰＤＥ９は、ｃＧＭＰを特異的に代謝し、脳や脾臓、小腸等に発現していることが知られている（例えば、非特許文献３を参照）。つまり、ＰＤＥ９を阻害することにより、脳内でｃＧＭＰが増加することが期待される。実際にＰＤＥ９阻害剤は、海馬ＬＴＰを亢進すること、動物にて新奇物体認識試験・受動的回避学習試験等で学習記憶行動を改善することが報告されている（非特許文献４）。また、臨床上、アルツハイマー病患者では、その上部側頭皮質において、グアニル酸シクラーゼ活性が低下しており、ｃＧＭＰレベルが減少している可能性が示唆されている（非特許文献５）。したがって、ＰＤＥ９は、アレキサンダー病、アルパーズ病、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ；ルー・ゲーリック病または運動ニューロン疾患として知られている）、毛細血管拡張性運動失調、バッテン病（シュピールマイヤー−フォークト−シェーグレン−バッテン病としても知られている）、ビンスヴァンガー認知症（皮質下動脈硬化性脳障害）、双極性障害、ウシ海綿状脳症（ＢＳＥ）、キャナバン病、化学療法誘発認知症、コケイン症候群、大脳皮質基底核変性症、クロイツフェルト−ヤコブ病、鬱病、ダウン症候群、前頭側頭葉変性症（前頭側頭型認知症、語義認知症および進行性非流暢性失語症を包含）、ゲルストマン−シュトラウスラー−シャインカー病、緑内障、ハンチントン病（舞踏病）、ＨＩＶ関連認知症、多動、ケネディ病、コルサコフ症候群（健忘―作話症候群）、クラッベ病、レーヴィ小体認知症、進行性ｌｏｇｏｐｅｎｉｃ失語症、マチャド−ジョセフ病（３型脊髄小脳失調）、多発性硬化症、多発性萎縮症（オリーブ橋小脳萎縮症）、重症筋無力症、パーキンソン病、ペリツェウス−メルツバッハー病、ピック病、初老期認知症（軽度認知障害）、原発性側索硬化症、原発性進行性失語症、放射性誘発認知症、レフサム病（フィタン酸蓄積症）、サンドホフ病、シルダー病、統合失調症、語義認知症、老人性認知症、シャイ−ドレーガー症候群、脊髄小脳失調、棘筋萎縮症、スティール−リチャードソン−オルスセフスキー病（進行性核上麻痺）、血管アミロイドーシスおよび血管性認知症（多発梗塞性認知症）などの神経変性疾患および精神疾患、特に、アルツハイマー病における認知機能障害等の病理学に多くの密接な関係をもっている可能性がある。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Domek-Lopacinskaet al., “Cyclic GMP metabolism and its role in brain physiology”, J. Physiol. Pharmacol., vol. 56, Suppl 2:pp.15-34, 2005.
【非特許文献２】WangX., “Cyclic GMP-dependent protein kinase and cellular signaling in the nervoussystem”, J. Neurochem., vol. 68, pp. 443-456, 1997.
【非特許文献３】Fisheret al., "Isolation and characterization of PDE9A, a novel human cGMP-specificphosphodiesterase”, J. Biol. Chem., vol. 273: pp. 15559-15564, 1998.
【非特許文献４】van derStaay et al., “The novel selective PDE9 inhibitor BAY 73-6691 improves learningand memory in rodents”, Neuropharmacology, vol. 55: pp. 908-918, 2008.
【非特許文献５】Bonkaleet al., “Reduced nitric oxide responsive soluble guanylyl cyclase activity inthe superior temporal cortex of patients with Alzheimer’s disease”, Neurosci.Lett., vol 187, pp. 5-8, 1995.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
ＰＤＥ９阻害作用を有する新たな化合物として、下記式（Ｉ）
【化１】
0005666755.tif 000002
で表される化合物（（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン；以下、化合物（Ｉ）という。）が見出され、それらの発明について特許出願された（ＰＣＴ／ＪＰ２０１２／０７５７４８）。【０００７】
一般的に、医薬品として利用可能な化合物については、その塩またはその塩の結晶の物性は、薬物のバイオアベイラビリティー、原薬の純度、製剤の処方などに大きな影響を与える。【０００８】
したがって、本発明の目的は、医薬品の原薬として利用可能性を有する、溶出性および経口吸収性を改善した化合物（Ｉ）の塩またはその結晶を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、化合物（Ｉ）について、上記課題を解決すべく、精力的に検討を行った結果、化合物（Ｉ）の塩またはその結晶を見出し、本発明を完成した。【００１０】
すなわち、本発明は、
［１］塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、マロン酸、マレイン酸、酒石酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸およびトルエンスルホン酸からなる群から選択される一つの酸と、（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オンと、からなる塩；
［２］（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一マレイン酸塩；
［３］（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一ベンゼンスルホン酸塩；
［４］［１］記載の塩の結晶；
［５］粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１０．１°に回折ピークを有する、（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一マレイン酸塩の結晶；
［６］粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）９．９°に回折ピークを有する、（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一ベンゼンスルホン酸塩の結晶；
［７］［１］記載の塩を有効成分として含有する医薬組成物；
［Ｐ１］無機酸、有機カルボン酸および有機スルホン酸からなる群から選択される一つの酸と（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オンとからなる塩；
［Ｐ２］酸が、有機カルボン酸である、［Ｐ１］記載の塩；
［Ｐ３］有機カルボン酸が、マロン酸、マレイン酸または酒石酸である、［Ｐ２］記載の塩；
［Ｐ４］酸が、有機スルホン酸である、［Ｐ１］記載の塩；
［Ｐ５］有機スルホン酸が、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸またはトルエンスルホン酸である、［Ｐ４］記載の塩；
［Ｐ６］酸が、無機酸である、［Ｐ１］記載の塩；
［Ｐ７］無機酸が、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸またはリン酸である、［Ｐ６］記載の塩；
［Ｐ８］（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一マレイン酸塩；
［Ｐ９］（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一ベンゼンスルホン酸塩；
［Ｐ１０］［Ｐ１］記載の塩の結晶；
［Ｐ１１］酸が、マロン酸、マレイン酸、酒石酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸またはリン酸である、［Ｐ１０］記載の結晶；
［Ｐ１２］粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１０．１°に回折ピークを有する、（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一マレイン酸塩の結晶；
［Ｐ１２．１］粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）９．１°および１０．１°に回折ピークを有する、（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一マレイン酸塩の結晶；
［Ｐ１２．２］粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）９．１°、１０．１°および１１．１°に回折ピークを有する、（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一マレイン酸塩の結晶；
［Ｐ１２．３］粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）９．１°、１０．１°、１１．１°、１８．２°および２５．８°に回折ピークを有する、（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一マレイン酸塩の結晶；
［Ｐ１２．４］粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）９．１°、１０．１°、１１．１°、１６．２°、１７．６°、１８．２°、２２．０°、２２．４°、２３．８°および２５．８°に回折ピークを有する、（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一マレイン酸塩の結晶；
［Ｐ１２．５］１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおいて、化学シフト（ｐｐｍ）１３．３、６１．９、１１４．３、１３８．９および１７２．０にピークを有する、（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一マレイン酸塩の結晶；
［Ｐ１３］粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）９．９°に回折ピークを有する、（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一ベンゼンスルホン酸塩の結晶；
［Ｐ１３．１］粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）９．９°および１４．６°に回折ピークを有する、（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一ベンゼンスルホン酸塩の結晶；
［Ｐ１３．２］粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）９．９°、１３．７°および１４．６°に回折ピークを有する、（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一ベンゼンスルホン酸塩の結晶；
［Ｐ１３．３］粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）６．６°、９．９°、１３．７°、１４．６°および２５．７°に回折ピークを有する、（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一ベンゼンスルホン酸塩の結晶；
［Ｐ１３．４］粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）６．６°、９．９°、１３．７°、１４．６°、１９．０°、１９．６°、２０．５°、２１．７°、２３．５°および２５．７°に回折ピークを有する、（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一ベンゼンスルホン酸塩の結晶；
［Ｐ１３．５］１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおいて、化学シフト（ｐｐｍ）１６．８、６７．９、１１４．０、１３７．７および１６０．７にピークを有する、（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一ベンゼンスルホン酸塩の結晶；
［Ｐ１４］［Ｐ１］記載の塩を有効成分として含有する医薬組成物；
［Ｐ１４．１］［Ｐ８］または［Ｐ９］記載の塩を有効成分として含有する医薬組成物；
［Ｐ１４．２］［Ｐ１２］、［Ｐ１２．１］、［Ｐ１２．２］、［Ｐ１２．３］、［Ｐ１２．４］または［Ｐ１２．５］記載の結晶を有効成分として含有する医薬組成物；および
［Ｐ１４．３］［Ｐ１３］、［Ｐ１３．１］、［Ｐ１３．２］、［Ｐ１３．３］、［Ｐ１３．４］または［Ｐ１３．５］記載の結晶を有効成分として含有する医薬組成物に関する。
【発明の効果】
【００１１】
本発明により提供される、化合物（Ｉ）の塩およびその結晶は、溶出性および経口吸収性を改善し、医薬品の原薬として利用可能性を有する。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】図１は、実施例１で得られた化合物（Ｉ）・一マレイン酸塩の結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。横軸は回折角（２θ）、縦軸はピーク強度を示す。
【図２】図２は、実施例２で得られた化合物（Ｉ）・一ベンゼンスルホン酸塩の結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。横軸は回折角（２θ）、縦軸はピーク強度を示す。
【図３】図３は、実施例３で得られた化合物（Ｉ）・塩酸塩の結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。横軸は回折角（２θ）、縦軸はピーク強度を示す。
【図４】図４は、実施例４で得られた化合物（Ｉ）・臭化水素酸塩の結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。横軸は回折角（２θ）、縦軸はピーク強度を示す。
【図５】図５は、実施例５で得られた化合物（Ｉ）・ｐ−トルエンスルホン酸塩の結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。横軸は回折角（２θ）、縦軸はピーク強度を示す。
【図６】図６は、実施例６で得られた化合物（Ｉ）・硝酸塩の結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。横軸は回折角（２θ）、縦軸はピーク強度を示す。
【図７】図７は、実施例７で得られた化合物（Ｉ）・硫酸塩の結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。横軸は回折角（２θ）、縦軸はピーク強度を示す。
【図８】図８は、実施例８で得られた化合物（Ｉ）・メタンスルホン酸塩の結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。横軸は回折角（２θ）、縦軸はピーク強度を示す。
【図９】図９は、実施例９で得られた化合物（Ｉ）・リン酸塩の結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。横軸は回折角（２θ）、縦軸はピーク強度を示す。
【図１０】図１０は、実施例１０で得られた化合物（Ｉ）・Ｌ−酒石酸塩の結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。横軸は回折角（２θ）、縦軸はピーク強度を示す。
【図１１】図１１は、実施例１１で得られた化合物（Ｉ）・マロン酸塩の結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。横軸は回折角（２θ）、縦軸はピーク強度を示す。
【図１２】図１２は、化合物（Ｉ）、実施例１で得られた化合物（Ｉ）・一マレイン酸塩および実施例２で得られた化合物（Ｉ）・一ベンゼンスルホン酸塩について行った溶出試験の結果を示すグラフである。横軸は時間（分）、縦軸は化合物（Ｉ）に換算した濃度（μｇ／ｍＬ）を示す。
【図１３】図１３は、化合物（Ｉ）および実施例１で得られた化合物（Ｉ）・一マレイン酸塩を犬に経口投与した際の、化合物（Ｉ）の血漿中濃度推移を示すグラフである。横軸は時間（時間）、縦軸は化合物（Ｉ）に換算した化合物濃度（μｇ／ｍＬ）を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
次に、本発明の塩、結晶およびそれらの製造方法について詳細に説明する。
【００１４】
本明細書において、「塩」とは、ＰＤＥ９阻害作用を有する化合物（Ｉ）と薬剤学的に許容される酸とを含む、「通常用いられる意味の塩」または共結晶を意味する。「通常用いられる意味の塩」とは、化合物（Ｉ）の塩基の陽性成分と酸の陰性成分とからなる化合物をいう。また、共結晶とは、化合物（Ｉ）と酸の分子が結晶格子の中に一定の比率かつ一定の配置で組み込まれた結晶性の複合体をいう。
【００１５】
具体的には、本発明の塩は、化合物（Ｉ）の、有機カルボン酸、有機スルホン酸および無機酸からなる群から選択される一つの酸とを含む、通常用いられる意味の塩または共結晶である。
【００１６】
有機カルボン酸としては、好ましくは、例えば酢酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、フマル酸、クエン酸、マロン酸塩などを、より好ましくは、例えばマレイン酸、酒石酸、マロン酸などを挙げることができる。
【００１７】
有機スルホン酸としては、好ましくは、例えばメタンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、カンファースルホン酸などを、より好ましくは、例えばメタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸などを挙げることができる。
【００１８】
無機酸としては、好ましくは、例えばフッ化水素酸、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、過塩素酸、リン酸、炭酸、重炭酸などを、より好ましくは、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などを挙げることができる。
【００１９】
本発明の塩は、溶媒和物でもよい。本明細書において、化合物（Ｉ）の塩の溶媒和物とは、化合物（Ｉ）の塩と溶媒分子とが一緒になって形成する固体をいう。溶媒和物の溶媒としては、たとえば、アセトン、２−ブタノン、シクロヘキサノンなどのケトン系溶媒；酢酸メチル、酢酸エチル等のエステル系溶媒；１，２−ジメトキシエタン、ｔ−ブチルメチルエーテルのようなエーテル系溶媒；メタノール、エタノール、１−プロパノール、イソプロパノール等のアルコール系溶媒、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド等の極性溶媒；水が挙げられる。
【００２０】
本明細書において、「結晶」とは、化合物（Ｉ）の塩の結晶を指す。したがって、たとえば化合物（Ｉ）・一マレイン酸塩の結晶とは、化合物（Ｉ）とマレイン酸とで形成される通常用いられる意味の塩の結晶または化合物（Ｉ）とマレイン酸とで形成される共結晶を意味する。
【００２１】
本明細書において、好ましい結晶としては、粉末Ｘ線回折において、
回折角度（２θ±０．２°）１０．１°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）・一マレイン酸塩の結晶；
回折角度（２θ±０．２°）９．１°および１０．１°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）・一マレイン酸塩の結晶；
回折角度（２θ±０．２°）９．１°、１０．１°および１１．１°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）・一マレイン酸塩の結晶；
回折角度（２θ±０．２°）９．１°、１０．１°、１１．１°、１８．２°および２５．８°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）・一マレイン酸塩の結晶；
回折角度（２θ±０．２°）９．１°、１０．１°、１１．１°、１６．２°、１７．６°、１８．２°、２２．０°、２２．４°、２３．８°および２５．８°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）・一マレイン酸塩の結晶；
回折角度（２θ±０．２°）９．９°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）・一ベンゼンスルホン酸塩の結晶；
回折角度（２θ±０．２°）９．９°および１４．６°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）・一ベンゼンスルホン酸塩の結晶；
回折角度（２θ±０．２°）９．９°、１３．７°および１４．６°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）・一ベンゼンスルホン酸塩の結晶；
回折角度（２θ±０．２°）６．６°、９．９°、１３．７°、１４．６°および２５．７°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）・一ベンゼンスルホン酸塩の結晶；
回折角度（２θ±０．２°）６．６°、９．９°、１３．７°、１４．６°、１９．０°、１９．６°、２０．５°、２１．７°、２３．５°および２５．７°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）・一ベンゼンスルホン酸塩の結晶；または、
１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおいて、化学シフト（ｐｐｍ）１３．３、６１．９、１１４．３、１３８．９および１７２．０にピークを有することを特徴とする、化合物（Ｉ）・一マレイン酸塩の結晶；
１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおいて、化学シフト（ｐｐｍ）１６．８、６７．９、１１４．０、１３７．７および１６０．７にピークを有することを特徴とする、化合物（Ｉ）・一ベンゼンスルホン酸塩の結晶などを挙げることができる。
【００２２】
上記記載の粉末Ｘ線回折におけるピークは、化合物（Ｉ）・一マレイン酸塩の結晶または化合物（Ｉ）・一ベンゼンスルホン酸塩の結晶にそれぞれ特有なものである。
【００２３】
一般に、粉末Ｘ線回折における回折角度（２θ）は±０．２°の範囲内で誤差が生じ得るから、上記の回折角度の値は±０．２°程度の範囲内の数値も含むものとして理解される必要がある。したがって、粉末Ｘ線回折におけるピークの回折角度が完全に一致する結晶だけでなく、ピークの回折角度が±０．２°程度の誤差で一致する結晶も本発明に含まれる。
【００２４】
従って、本明細書において、例えば、「回折角度（２θ±０．２°）１０．１°に回折ピークを有する」とは、「回折角度（２θ）９．９°〜１０．３°に回折ピークを有する」ということを意味し、その他の回折角度の場合も同様である。
【００２５】
本明細書において、「化学シフト（ｐｐｍ）１３．３、６１．９、１１４．３、１３８．９および１７２．０にピークを有する」とは、「通常の測定条件または本明細書と実質的に同一の条件にて１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトル測定を行い、それぞれ、化学シフト（ｐｐｍ）１３．３、６１．９、１１４．３、１３８．９および１７２．０と実質的に同等なピークを有すること」を意味する。
【００２６】
「実質的に同等なピークを有する」か否かの判断に際して、一般に、１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおける化学シフト（ｐｐｍ）は、±０．５ｐｐｍの範囲内で誤差が生じ得るから、上記の化学シフトの値は、±０．５ｐｐｍ程度の範囲内の数値も含むものとして理解される必要がある。したがって、１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおける化学シフトが完全に一致する結晶だけでなく、化学シフトが±０．５ｐｐｍ程度の誤差で一致する結晶も本発明に含まれる。それ故に、本明細書において、例えば、「化学シフト（ｐｐｍ）１３．３にピークを有する」とは、「化学シフト（ｐｐｍ）１２．８〜１３．８にピークを有する」ことを意味し、その他の１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおける化学シフトの場合も同様である。
【００２７】
以下に、本発明の一実施形態である化合物（Ｉ）の塩またはその結晶等の製造方法について説明する。
【００２８】
化合物（Ｉ）の製造
本発明にかかる化合物（Ｉ）は、後述する参考例１に具体的に記載されているように、３−オキソテトラヒドロフラン、２−フルオロ−５−メチルピリジンおよび４−ブロモ−２−フルオロ安息香酸を出発原料として合成することができる。
【００２９】
化合物（Ｉ）の塩の製造方法
化合物（Ｉ）の塩は、通常の塩を製造する方法により得ることができる。具体的には、例えば、化合物（Ｉ）を溶媒に、必要に応じて加温して、懸濁または溶解させ、次いで、得られる懸濁液または溶液に、有機カルボン酸、有機スルホン酸および無機酸からなる群から選択される一つの酸を加え、室温下あるいは氷浴で冷却しながら数分から数日間撹拌することにより、または室温下あるいは氷浴で冷却しながら数分から数日間放置することにより、製造することができる。これらの製造方法により、化合物（Ｉ）の塩を、結晶または非晶質として得ることができる。ここで使用する溶媒としては、例えばエタノール、１−プロパノール、イソプロパノール等のアルコール系溶媒；アセトニトリル；アセトン、２−ブタノン等のケトン系溶媒；酢酸エチル等のエステル系溶媒；ヘキサン、ヘプタン等の飽和炭化水素系溶媒；ｔ−ブチルメチルエーテル等のエーテル系溶媒または水を挙げることができる。これらの溶媒は単独で使用してもよく、２種以上を混合して使用してもよい。
【００３０】
化合物（Ｉ）の塩は、前記した化合物（Ｉ）の製造方法において、化合物（Ｉ）を合成後に、引き続き、上記した方法を採用することにより製造することもできる。
【００３１】
化合物（Ｉ）の塩の結晶の製造方法
化合物（Ｉ）の塩の結晶は、上述の化合物（Ｉ）の塩の製造方法により、または化合物（Ｉ）の塩を、溶媒中で加熱溶解し、攪拌下冷却して晶析することにより、製造することができる。
【００３２】
晶析に使用する化合物（Ｉ）の塩は、どのような形態であってもよく、水和物でも無水物でもよく、非晶質でも結晶質（複数の結晶多形からなるものを含む）でもよく、これらの混合物でもよい。
【００３３】
晶析に使用する溶媒は、例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール、１−プロパノール等のアルコール系溶媒；アセトニトリル；Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド等のアミド系溶媒；酢酸エチル等のエステル系溶媒；ヘキサン、ヘプタン等の飽和炭化水素系溶媒；アセトン、２−ブタノン等のケトン系溶媒；ｔ−ブチルメチルエーテル等のエーテル系溶媒または水を挙げることができる。また、これらの溶媒は単独で使用してもよく、２種以上を混合して使用してもよい。
【００３４】
溶媒の使用量は、化合物（Ｉ）のフリー体またはその塩が加熱により溶解する量または懸濁液が撹拌可能となる量を下限とし、結晶の収量が著しく低下しない量を上限として適宜選択することができる。
【００３５】
上記の方法により得られた結晶は単一の結晶形となる。この結晶形は安定であって、容易に他の結晶形や非晶質に転移することがなく、良好な物性を有しており、製剤化にも適している。
【００３６】
晶析において、種結晶（所望の化合物（Ｉ）の塩の結晶など）を加えても、加えなくてもよい。種結晶を加える温度は、特に限定されないが、好ましくは０〜６０℃である。
【００３７】
化合物（Ｉ）の塩を加熱して溶解する場合の温度は、溶媒に応じて化合物（Ｉ）が溶解する温度を適宜選択すればよいが、好ましくは再結晶溶媒が還流を開始する温度から５０℃の範囲であり、より好ましくは６５〜５５℃である。
【００３８】
晶析時の冷却は、急冷すると態様の異なる結晶（多形）を含むものを与えうるので、結晶の品質や粒度等への影響を考慮して適宜冷却速度を調整して実施することが望ましく、好ましくは、たとえば４０〜５℃／時間の速度での冷却である。より好ましくは、たとえば２５〜５℃／時間の速度での冷却である。
【００３９】
また、最終的な晶析温度は、結晶の収量と品質等から適宜選択することができるが、好ましくは３０〜−２５℃である。
【００４０】
晶析した結晶を通常のろ過操作で分離し、必要に応じてろ別した結晶を溶媒で洗浄し、さらにこれを乾燥して、目的の結晶を得ることができる。結晶の洗浄に使用する溶媒には、晶析溶媒と同様のものを使用できる。好ましくは、例えば、アセトン、２−ブタノン、酢酸エチル、ｔ−ブチルメチルエーテル、ヘキサン／２−ブタノン（容量比で２：３）の混合溶媒である。
【００４１】
ろ過操作で分離した結晶は、適宜、大気下若しくは窒素気流下に放置することにより、または加熱によって乾燥することができる。
【００４２】
乾燥時間は、残留溶媒が所定の量を下回るまでの時間を製造量、乾燥装置、乾燥温度等に応じて適宜選択すればよい。また、乾燥は通風下でも減圧下でも行うことができる。減圧度は、製造量、乾燥装置、乾燥温度等に応じて適宜選択すればよい。得られた結晶は、乾燥後、必要に応じて大気中に放置することもできる。
【００４３】
上記した結晶は、上述した化合物（Ｉ）の製造方法において、化合物（Ｉ）を合成後に引き続き、更に上述した化合物（Ｉ）の塩の製造方法、必要に応じて化合物（Ｉ）の塩の結晶の製造方法を採用することにより製造することもできる。
【００４４】
以上に説明した製造方法によって得られる化合物（Ｉ）の塩およびその結晶は、後述の薬理試験例における活性データに示されているように、ＰＤＥ９阻害作用を有することにより、脳内におけるｃＧＭＰ濃度を上昇させることが期待できる。ＰＤＥ９阻害作用や脳内におけるｃＧＭＰの上昇は、学習記憶行動の改善につながり、アルツハイマー病における認知機能障害等の治療剤としての利用可能性を有している。
【００４５】
化合物（Ｉ）の塩またはその結晶は、常法により製剤化が可能であり、剤形としては、例えば、経口剤（錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤、シロップ剤等）、注射剤（静脈内投与用、筋肉内投与用、皮下投与用、腹腔内投与用等）、外用剤（経皮吸収製剤（軟膏剤、貼付剤等）、点眼剤、点鼻剤、坐剤等）とすることができる。
【００４６】
経口用固形製剤を製造する場合には、化合物（Ｉ）の塩またはその結晶に、必要に応じて、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤等の添加剤を添加し、常法により錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤を製造することができる。また、錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等は、必要に応じて、コーティングを施してもよい。
【００４７】
賦形剤としては、例えば、乳糖、コーンスターチ、結晶セルロース等を、結合剤としては、例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース等が挙げられる。崩壊剤としては、例えば、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム等を、滑沢剤としては、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム等を挙げられる。また、着色剤としては、例えば、酸化チタン等を、コーティング剤としては、例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース等を挙げられる。使用できる添加剤は、これらに限定される訳ではない。
【００４８】
これらの錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤等の固形製剤は、通常、０．００１〜９９．５重量％、好ましくは０．０１〜９０重量％等の化合物（Ｉ）の塩またはその結晶を含むことができる。
【００４９】
注射剤（静脈内投与用、筋肉内投与用、皮下投与用、腹腔内投与用等）を製造する場合には、化合物（Ｉ）の塩またはその結晶に、必要に応じて、ｐＨ調整剤、緩衝剤、懸濁化剤、溶解補助剤、抗酸化剤、保存剤（防腐剤）、等張化剤等を添加し、常法により注射剤を製造することができる。また、凍結乾燥して、用時溶解型の凍結乾燥製剤としてもよい。
【００５０】
ｐＨ調整剤および緩衝剤としては、例えば、有機酸または無機酸および／またはその塩等を使用することができる。また、懸濁化剤としては、例えば、メチルセルロース、ポリソルベート８０、カルボキシメチルセルロースナトリウム等を使用することができ、溶解補助剤としては、例えば、ポリソルベート８０、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート等を使用することができる。抗酸化剤としては、例えば、α−トコフェロール等を使用することができ、保存剤としては、例えば、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル等を使用することができ、等張化剤としては、例えば、ブドウ糖、塩化ナトリウム、マンニトール等を使用することができる。ｐＨ調整剤、緩衝剤、懸濁化剤、溶解補助剤、抗酸化剤、保存剤（防腐剤）、等張化剤は、もちろんこれらに限定される訳ではない。
【００５１】
これらの注射剤は、通常、注射剤の全質量に対して、０．０００００１〜９９．５質量％、好ましくは０．００００１〜９０質量％等の化合物（Ｉ）の塩またはその結晶を含むことができる。
【００５２】
外用剤を製造する場合には、化合物（Ｉ）の塩またはその結晶に、基剤原料を添加し、必要に応じて、例えば、保存剤、安定剤、ｐＨ調整剤、抗酸化剤、着色剤等を加えて、常法により、例えば、経皮吸収製剤（軟膏剤、貼付剤等）、点眼剤、点鼻剤、坐剤等を製造することができる。
【００５３】
使用する基剤原料としては、例えば、医薬品、医薬部外品、化粧品等に通常使用される各種原料を用いることが可能である。具体的には、例えば、動植物油、鉱物油、エステル油、ワックス類、乳化剤、高級アルコール類、脂肪酸類、シリコン油、界面活性剤、リン脂質類、アルコール類、多価アルコール類、水溶性高分子類、粘土鉱物類、精製水等の原料を挙げることができる。
【００５４】
これらの外用剤は、通常０．０００００１〜９９．５重量％、好ましくは０．００００１〜９０重量％等の化合物（Ｉ）の塩またはその結晶を含むことができる。
【００５５】
化合物（Ｉ）の塩またはその結晶の投与量は、症状の程度、年齢、性別、体重、投与形態、塩の種類、疾患の具体的な種類等に応じて異なるが、通常、成人の場合は１日あたり経口投与で約３０μｇ〜１０ｇ、好ましくは１００μｇ〜５ｇ、さらに好ましくは１００μｇ〜１ｇを、注射投与で約３０μｇ〜１ｇ、好ましくは１００μｇ〜５００ｍｇ、さらに好ましくは１００μｇ〜３００ｍｇをそれぞれ１回又は数回に分けて投与する。
【実施例】
【００５６】
以下、参考例および実施例を挙げて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらの参考例および実施例に限定されるものではない。【００５７】
以下の参考例および実施例においては下記の略号を使用する。
ＣＤＩ：１，１’−カルボニルジイミダゾール
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＭＦ−ＤＭＡ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール
ＤＭＦ：Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＤＴＴ：ジチオスレイトール
ＩＰＡ：イソプロピルアルコール
ＫＴＢ：カリウム  ｔｅｒｔ−ブトキシド
ＭＴＢＥ：ｔ−ブチルメチルエーテル
ＮＢＳ：Ｎ−ブロモスクシンイミド
Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２：１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンジクロロパラジウム（ＩＩ）
Ｐｄ（ＰＰｈ３）４：テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）
ＴＥＡ：トリエチルアミン
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
Ｔｒｉｓ：トリスヒドロキシメチルアミノメタン【００５８】
１Ｈ−ＮＭＲ（プロトン核磁気共鳴）スペクトルの化学シフトは、テトラメチルシランに対するδ単位（ｐｐｍ）で記録され、カップリング定数はヘルツ（Ｈｚ）で記録されている。分裂パターンの略号は以下の通りである。ｓ：シングレット、ｄ：ダブレット、ｔ：トリプレット、ｑ：カルテット、ｍ：マルチプレット、ｂｒｓ：ブロードシングレット、ｂｒｄ：ブロードダブレット。【００５９】
以下の実施例において製造された結晶の粉末Ｘ線結晶回折は、得られた結晶を、粉末Ｘ線回折装置の試料台に載せ、下記の条件で分析した。【００６０】
測定条件
サンプルホルダー：アルミニウム
ターゲット：銅
検出器：シンチレーションカウンター
管電圧：５０ｋＶ
管電流：３００ｍＡ
スリット：ＤＳ  ０．５  ｍｍ（Ｈｅｉｇｈｔ  ｌｉｍｉｔｉｎｇ  ｓｌｉｔ  ２  ｍｍ），ＳＳ  Ｏｐｅｎ,  ＲＳ  Ｏｐｅｎ
走査速度：１０°／分
サンプリング間隔：０．０２°
走査範囲：５〜３５°
ゴニオメーター：水平ゴニオメーター【００６１】
結晶の１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルは以下の条件で測定した。
測定条件
使用装置：ＡＶＡＮＣＥ４００（ＢＲＵＫＥＲ社製）
測定温度：室温（２２℃）
基準物質：グリシン（外部基準：１７６．０３ｐｐｍ）
測定核：１３Ｃ（１００．６２４８４２５ＭＨｚ）
パルス繰り返し時間：３秒
パルスモード：ＴＯＳＳ測定【００６２】
参考例１
（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オンの合成
【化２】
0005666755.tif 000003
【００６３】
（１）ベンジル  ２−［ジヒドロフラン−３（２Ｈ）−イリデン］ヒドラジンカルボキシレートの合成
３−オキソテトラヒドロフラン（５．７０ｇ）をメタノール（１５０ｍＬ）に溶解し、ベンジル  カルバゼート（１０ｇ）をこの溶液に加えた。混合物を室温にて１２時間撹拌した。反応液を濃縮した。１４．８ｇの残渣を粗生成物として得た。これ以上精製せずに次の反応に用いた。【００６４】
（２）（±）−ベンジル  ２−（テトラヒドロフラン−３−イル）ヒドラジンカルボキシレートの合成
ベンジル  ２−［ジヒドロフラン−３（２Ｈ）−イリデン］ヒドラジンカルボキシレート（１４．８ｇ）を水（９６ｍＬ）に懸濁した。この懸濁液に酢酸（４２．１ｍＬ）を室温にて加えた。この混合物を室温にて１時間撹拌した。懸濁液が溶液になった。この溶液にシアノ水素化ホウ素ナトリウム（４．０ｇ）を少しずつ加えた。この混合液を室温にて２時間撹拌した。反応液を０℃に冷却した。５Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加え中和した。この混合物をクロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、ろ過した。ろ液を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール／酢酸エチル，５％）で精製した。標記化合物（１３．９ｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：１．７３−１．８０（ｍ，１Ｈ）、１．９２−２．０６（ｍ，１Ｈ）、３．６６−３．８２（ｍ，３Ｈ）、３．８２−４．０３（ｍ，２Ｈ）、５．１４（ｓ，２Ｈ）、７．３１−７．４０（ｍ，５Ｈ）．【００６５】
（３）（−）−ベンジル  ２−（テトラヒドロフラン−３−イル）ヒドラジンカルボキシレートおよび（＋）−ベンジル  ２−（テトラヒドロフラン−３−イル）ヒドラジンカルボキシレートの合成
（±）−ベンジル  ２−（テトラヒドロフラン−３−イル）ヒドラジンカルボキシレート（１１．５ｇ）のＭＴＢＥ（１１０ｍＬ）溶液へ、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（３０ｍＬ）を加え、室温で１０分間撹拌後、有機層を分離した。得られた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム、飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、乾燥剤をろ過して除去した。ろ液を減圧下に濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン，２５〜５０％）で精製し、目的画分を濃縮した。残渣へジエチルエーテル（３０ｍＬ）とヘキサン（１５ｍＬ）を加えた。析出した固体をろ取し、減圧下に乾燥して、純粋な（±）−ベンジル  ２−（テトラヒドロフラン−３−イル）ヒドラジンカルボキシレート（６．１７ｇ）を得た。
この物を、エタノールに溶解し、ミリポアフィルターを通して、ろ過した。得られたろ液を２条件で光学分割した。
条件１：ＤＡＩＣＥＬ社製ＣＨＩＲＡＬＣＥＬ（登録商標）  ＯＤ−Ｈ（２０ｍｍφ×２５０ｍｍＬ），２０％ＩＰＡ／ヘキサン，２５ｍＬ／分。
条件２：ＤＡＩＣＥＬ社製ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）  ＡＤ−Ｈ（２０ｍｍφ×２５０ｍｍＬ），２０％ＩＰＡ／ヘキサン、２４ｍＬ／分。
目的画分を濃縮して、短保持時間で（−）の旋光性を有する標記化合物（２．６０ｇ，＞９９％ｅｅ［ＯＤ−Ｈ，２０％ＩＰＡ／へキサン、保持時間：１１．２分］）および長保持時間で（＋）の旋光性を有する標記化合物（２．５９ｇ，９７．２％ｅｅ［ＯＤ−Ｈ，２０％ＩＰＡ／へキサン、保持時間：１２．４分］）を得た。【００６６】
（４）（Ｓ）−（テトラヒドロフラン−３−イル）ヒドラジン・塩酸塩の合成
（−）−ベンジル  ２−（テトラヒドロフラン−３−イル）ヒドラジンカルボキシレート（５０ｇ）をメタノール（５００ｍＬ）に溶解し、ジ−ｔ−ブチル  ジカルボネート（９２．４ｇ）とパラジウム炭素（５０％ｗｅｔ）（５ｇ）を加え、水素雰囲気下、２５℃で１５ｐｓｉで４８時間撹拌した。反応液をろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。得られた残渣をジイソプロピルエーテル（３００ｍＬ）に溶解した。０℃に冷却した後、この溶液に塩酸／ジイソプロピルエーテル（５００ｍＬ）加えた。この混合物を１０℃で１４時間撹拌した。析出した固体をろ取した。（−）−ベンジル  ２−（テトラヒドロフラン−３−イル）ヒドラジンカルボキシレート（７０ｇ）から同様の操作を９回行い、（−）−ベンジル  ２−（テトラヒドロフラン−３−イル）ヒドラジンカルボキシレート（５０ｇ）から同様の操作を１回行った。得られた固体をＤＣＭ／エタノール（１０／１）（１Ｌ）で２時間トリチュレートした。析出した固体をろ取した。得られた固体を減圧下乾燥し、標記化合物（２３５ｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：１．８７−２．０９（ｍ，２Ｈ）、３．５５−３．７１（ｍ，２Ｈ）、３．７１−３．８４（ｍ，３Ｈ）．
なお、得られた標記化合物の絶対配置はＸ線結晶構造解析により（Ｓ）−体であると確認した。【００６７】
（５）２−フルオロ−３−ヨード−５−メチルピリジンの合成
ＴＨＦ（１．２Ｌ）にジイソプロピルアミン（９２ｍＬ）を加え、窒素雰囲気下、−１８℃に冷却した。この溶液に２．６９Ｍ  ｎ−ブチルリチウム  へキサン溶液（２２４ｍＬ）を滴下した。滴下終了後、この混合物を撹拌しながら２０分かけて−５℃まで昇温した。反応液を−７３℃に冷却した。この反応液に２−フルオロ−５−メチルピリジン（６１ｇ）のＴＨＦ溶液（２４０ｍＬ）を滴下した。反応混合物を−７５℃にて３時間半撹拌した。この反応液にヨウ素（１３９ｇ）のＴＨＦ溶液（２４ｍＬ）を滴下した。反応混合物を−７５℃にて１時間５５分撹拌した。反応終了後、同温度で水（２２０ｍＬ）を反応液に加えた。混合物を５分間同温で撹拌した。反応液を室温に戻した後、水（１．２Ｌ）を加えた。この混合物に、チオ硫酸ナトリウム五水和物（１３６ｇ）水溶液（３００ｍＬ）と水（３００ｍＬ）を加え、１０分間撹拌した。この混合物をＭＴＢＥ（１．２Ｌ）で抽出した。有機層を飽和食塩水（５００ｍＬ）で洗浄した。合わせた水層をＭＴＢＥ（１Ｌ）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤をろ過して除き、ろ液を減圧下濃縮した。残渣にｎ−ヘプタンを加え、冷却した。析出した固体をろ取した。ｎ−ヘプタンで洗浄した。ろ液を冷却し、析出した固体をろ取した。この操作を５回繰り返すことで、標記化合物（１０９．６９ｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：２．２９−２．３１（ｍ，３Ｈ），７．９３−８．１４（ｍ，２Ｈ）．
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ２３８［Ｍ＋Ｈ］＋【００６８】
（６）２−フルオロ−４−ヨード−３，５−ジメチルピリジンの合成
ＴＨＦ（１．２Ｌ）にジイソプロピルアミン（８８ｍＬ）を加え、窒素雰囲気下、−１８℃に冷却した。この溶液に２．６９Ｍ  ｎ−ブチルリチウム  へキサン溶液（２１５ｍＬ）を滴下した。滴下終了後、この混合物を撹拌しながら３０分かけて−５℃まで昇温した。反応液を−７２℃に冷却した。この反応液に２−フルオロ−３−ヨード−５−メチルピリジン（１０９．６９ｇ）のＴＨＦ溶液（２４０ｍＬ）を滴下した。反応混合物を−７４℃にて１時間半撹拌した。この反応液にヨウ化メチル（３６ｍＬ）のＴＨＦ溶液（１６０ｍＬ）を滴下した。反応混合物を−７０℃〜−７４℃にて２時間撹拌した。反応終了後、同温度で水（２００ｍＬ）を反応液に加えた。混合物を２分間同温で撹拌した。反応液を室温に戻した後、水（１．２Ｌ）を加えた。この混合液を３分間撹拌した。更に水（３００ｍＬ）を加えた。この混合物をＭＴＢＥ（１．２Ｌ）で抽出した。有機層を飽和食塩水（５００ｍＬ）で洗浄した。合わせた水層をＭＴＢＥ（１Ｌ）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤をろ過して除き、ろ液を減圧下濃縮した。残渣にｎ−ヘプタン（１００ｍＬ）を加え、冷却した。析出した固体をろ取した。ｎ−ヘプタンで洗浄した。ろ液を冷却し、析出した固体をろ取した。この操作を２回繰り返すことで、標記化合物（８６．９ｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：２．３９−２．４０（ｍ，６Ｈ）、７．８０−７．８２（ｍ，１Ｈ）．
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ２５２［Ｍ＋Ｈ］＋【００６９】
（７）４−ヨード−２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジンの合成
２−フルオロ−４−ヨード−３，５−ジメチルピリジン（９７．４ｇ）のＴＨＦ（９５４ｍＬ）溶液に、２０℃で、２８％ナトリウムメトキシド  メタノール溶液（１８５ｍＬ）を加えた。この混合物を５５℃〜６５℃にて２時間撹拌した。反応液を冷却した後、ＭＴＢＥ（１Ｌ）と水（１Ｌ）を加えて分離した。有機層を飽和食塩水で洗浄した。合わせた水層をＭＴＢＥ（５００ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。ろ過して乾燥剤を除き、ろ液を減圧下濃縮した。残渣にｎ−ヘプタン（５０ｍＬ）を加え、０℃にて１時間撹拌した。析出した固体をろ取した。冷やしたｎ−ヘプタン（１０ｍＬ）で固体を洗浄した。標記化合物（４２．６ｇ）を得た。ろ液を減圧下濃縮した。残渣にｎ−ヘプタン（５ｍＬ）を加え、０℃にて３０分間撹拌した。析出した固体をろ取した。冷やしたｎ−ヘプタン（２ｍＬ）で固体を洗浄し、標記化合物（２０．２ｇ）を得た。ろ液を減圧下濃縮した。残渣にｎ−ヘプタン（５ｍＬ）を加え、０℃にて３０分間撹拌した。析出した固体をろ取した。冷やしたｎ−ヘプタン（２ｍＬ）で固体を洗浄した。標記化合物（１０．７ｇ）を得た。合わせて標記化合物（７３．５ｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：２．３３−２．３４（ｍ，３Ｈ）、２．３６−２．３８（ｍ，３Ｈ）、３．９２（ｓ，３Ｈ）、７．７６（ｓ，１Ｈ）．
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ２６４［Ｍ＋Ｈ］＋【００７０】
（８）エチル  ３−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−３−オキソプロパノエートの合成
４−ブロモ−２−フルオロ安息香酸（ＣＡＳ  Ｎｏ．１１２７０４−７９−７）（１０ｇ）のＤＣＭ（９７ｍＬ）懸濁液へ、ＣＤＩ（８．８８ｇ）を加え、室温にて３．５時間撹拌した。この溶液を「溶液１」とする。
別のフラスコ中、カリウム  エチルマロネート（１５．５ｇ）のアセトニトリル（３０３ｍＬ）懸濁液へ、ＴＥＡ（１５．９ｍＬ）、次いで塩化マグネシウム（１０．９ｇ）を加え、室温で３時間１０分間撹拌した。この反応混合物へ、先に調製した「溶液１」を２５分間かけて滴下した後、反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応液を減圧下に半量まで濃縮した。得られた残渣を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、氷冷下に５Ｎ塩酸（２５０ｍＬ）を加えた後、室温にて１時間撹拌した。有機層を分離した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下に濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ｎ−ヘプタン，５〜２０％）で精製し、標記化合物（１２．８ｇ）を得た。
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ２９１［Ｍ＋Ｈ］＋【００７１】
（９）エチル  ５−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−１−［（Ｓ）−テトラヒドロフラン−３−イル］−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキシレートの合成
エチル  ３−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−３−オキソプロパノエート（４５ｇ）のＤＭＦ−ＤＭＡ（１６５ｍＬ）溶液を、５０℃で２時間１５分間撹拌した。反応液を減圧下に濃縮した。残渣にトルエン（２００ｍＬ）を加え、再び減圧下濃縮した。残渣にエタノール（９５０ｍＬ）を加え５０℃に加温した。その溶液へ（Ｓ）−（テトラヒドロフラン−３−イル）ヒドラジン塩酸塩（２１．６ｇ）の水溶液（６０ｍＬ）を３５分間かけて滴下で加えた。得られた反応混合物を、５０℃で２時間１０分間撹拌した。反応液を室温まで冷却した後、減圧下に半分量まで濃縮した。残渣へ水（２００ｍＬ）を加え、減圧下にエタノールを留去した。得られた残渣に酢酸エチル（５００ｍＬ）を加え、有機層を分離した。水層を酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下に濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ｎ−ヘプタン，１０％〜１５％）で精製し、次いでショートパスＮＨシリカゲル（富士シリシア化学株式会社製のプロピルアミンコーティングシリカゲル）カラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ｎ−ヘプタン，３３％）で精製し、標記化合物（４３．１ｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：１．１９（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）、２．１９−２．４９（ｍ，２Ｈ）、３．８７−４．０７（ｍ，３Ｈ）、４．１１−４．２５（ｍ，３Ｈ）、４．５８−４．６５（ｍ，１Ｈ）、７．１７−７．２６（ｍ，１Ｈ）、７．３９−７．４７（ｍ，２Ｈ）、８．０６（ｓ，１Ｈ）．
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ４０７［Ｍ＋Ｎａ］＋【００７２】
（１０）エチル  ５−［２−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル］−１−［（Ｓ）−テトラヒドロフラン−３−イル］−１Ｈ−ピラゾ−ル−４−カルボキシレートの合成
エチル  ５−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−１−［（Ｓ）−テトラヒドロフラン−３−イル］−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキシレート（４３．１ｇ）、ビス（ピナコラト）ジボロン（３４．３ｇ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２・ＤＣＭ錯体（４．５９ｇ）および酢酸カリウム（３３．１ｇ）の混合物を、真空ポンプ減圧下に１時間乾燥した。乾燥残渣のＤＭＦ（４３０ｍＬ）溶液を、８０℃で３時間１０分間撹拌した。反応液を室温に戻した後、セライトＴＭろ過した。ろ液を減圧下に濃縮した。残渣へ酢酸エチル（４３０ｍＬ）と飽和食塩水（２００ｍＬ）を加え、５分間撹拌した。不溶物をセライトＴＭを通してろ去した。ろ液から有機層を分配した。水層を酢酸エチル（５０ｍＬ）で再抽出した。あわせた有機層を無水硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧下に濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ｎ−ヘプタン，１０〜１５％）で精製し、標記化合物（５１．９ｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：１．１６（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）、１．３７（ｓ，１２Ｈ）、２．１５−２．４９（ｍ，２Ｈ）、３．８５−４．０６（ｍ，３Ｈ）、４．１４（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）、４．２０（ｄｄ，Ｊ＝１５．６，８．４Ｈｚ，１Ｈ）、４．５７−４．６６（ｍ，１Ｈ）、７．３０（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，０．５Ｈ）、７．３５（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，０．５Ｈ）、７．６３（ｄｄ，Ｊ＝５．６、２．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．７０（ｄｄ，Ｊ＝７．２，２．０Ｈｚ，１Ｈ）、８．０６（ｓ，１Ｈ）．【００７３】
（１１）エチル  ５−［２−フルオロ−４−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）フェニル］−１−［（Ｓ）−テトラヒドロフラン−３−イル］−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキシレートの合成
エチル  ５−［２−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル］−１−［（Ｓ）−テトラヒドロフラン−３−イル］−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキシレート（５１．９ｇ）の１，４−ジオキサン（５００ｍＬ）溶液へ、水（１７０ｍＬ）、４−ヨード−２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン（３５．６ｇ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（６．５２ｇ）および炭酸セシウム（１１０ｇ）を加え、反応混合物を１１０℃で６時間反応した。反応液を室温に戻した後、有機層を分離した。有機層を減圧下濃縮した。得られた残渣へ、水層、酢酸エチル（７００ｍ）および水（１００ｍＬ）を加え、有機層を分離した。水層を酢酸エチル（５０ｍＬ）で再抽出した。あわせた有機層を、水および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、減圧下に濃縮した。残渣をＮＨシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ｎ−ヘプタン，５〜１４％）で精製した。ついで、再度ＮＨシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ｎ−ヘプタン，２〜１０％）で精製し、標記化合物（４３．５ｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：１．１６（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１．５Ｈ）、１．１７（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１．５Ｈ）、１．９７（ｓ，１．５Ｈ）、１．９８（ｓ，１．５Ｈ）、１．９９（ｓ，１．５Ｈ）、２．００（ｓ，１．５Ｈ）、２．２５−２．５５（ｍ，２Ｈ）、３．９２−４．２７（ｍ，６Ｈ）、３．９９（ｓ，１．５Ｈ）、４．００（ｓ，１．５Ｈ）、４．６５−４．７５（ｍ，１Ｈ）、７．０１（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．０５（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．３９（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，０．５Ｈ）、７．４５（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，０．５Ｈ）、７．９３（ｓ，１Ｈ）、８．１２（ｓ，１Ｈ）．
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ４４０［Ｍ＋Ｈ］＋【００７４】
（１２）５−［２−フルオロ−４−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）フェニル］−１−［（Ｓ）−テトラヒドロフラン−３−イル］−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の合成
エチル  ５−［２−フルオロ−４−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）フェニル］−１−［（Ｓ）−テトラヒドロフラン−３−イル］−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキシレート（４３．２ｇ）のエタノール（５７４ｍＬ）溶液へ、室温で５Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（７９ｍＬ）を加え、反応混合物を６０℃で２時間１０分間撹拌した。反応液を室温まで冷却した後、減圧下に半量まで濃縮した。残渣へ水（３００ｍＬ）を加え、減圧下にエタノールを留去した。得られた残渣にＭＴＢＥ（１３０ｍＬ）を加え、水層を分配した。有機層を水（３０ｍＬ）で抽出した。あわせた水層を，氷冷下に５Ｎ塩酸（７８ｍＬ）にて酸性化後、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下に濃縮して標記化合物（３９．０ｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：１．９１（ｓ，１．５Ｈ）、１．９４（ｓ，１．５Ｈ）、１．９８（ｓ，１．５Ｈ）、２．０１（ｓ，１．５Ｈ）、２．２５−２．５６（ｍ，２Ｈ）、３．９２−４．１７（ｍ，３Ｈ）、３．９６（ｓ，１．５Ｈ）、４．００（ｓ，１．５Ｈ）、４．２３（ｄｄ，Ｊ＝１６．０，８．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．６５−４．７７（ｍ，１Ｈ）、６．９９（ｂｒｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．０３（ｂｒｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．３８（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，０．５Ｈ）、７．４４（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，０．５Ｈ）、７．９０（ｓ，０．５Ｈ）、７．９４（ｓ，０．５Ｈ）、８．１４（ｓ，１Ｈ）．
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ４３４［Ｍ＋Ｎａ］＋【００７５】
（１３）５−［２−フルオロ−４−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）フェニル］−１−［（Ｓ）−テトラヒドロフラン−３−イル］−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドの合成
５−［２−フルオロ−４−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）フェニル］−１−［（Ｓ）−テトラヒドロフラン−３−イル］−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（３８．７ｇ）のＤＭＦ（２９０ｍＬ）溶液へ、室温下にＣＤＩ（２１．４ｇ）を一度に加え、室温で９５分間撹拌した。この反応混合物へ、２８％アンモニア水（９５ｍＬ）を加え、室温で３５分間撹拌した。反応液へ再度２８％アンモニア水（９５ｍＬ）を加え、室温で９０分間撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮した。得られた残渣へクロロホルム（２５０ｍＬ）と水（８０ｍＬ）を加え、有機層を分離した。水層をクロロホルム（５０ｍＬ）で再抽出した。合わせた有機層を、飽和塩化アンモニウム水溶液（６０ｍＬ、３回）および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。ろ液を、シリカパッド（ＮＨ−シリカゲル）に通過させた。ろ液を減圧下に濃縮して、標記化合物（３７．２ｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：１．９８（ｂｒｓ，６Ｈ）、２．２４−２．６０（ｍ，２Ｈ）、３．９０−４．２０（ｍ，３Ｈ）、３．９９（ｓ，３Ｈ）、４．２３（ｄｄ，Ｊ＝１６．０，８．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．６２−４．７１（ｍ，１Ｈ）、５．３２（ｂｒｓ，２Ｈ）、７．０５（ｂｒｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．１０（ｄｄ，Ｊ＝７．６，１．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．４２−７．５６（ｍ，１Ｈ）、７．９４（ｂｒｓ，１Ｈ）、８．０３（ｓ，１Ｈ）．
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ４１１［Ｍ＋Ｈ］＋【００７６】
（１４）（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オンの合成
５−［２−フルオロ−４−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）フェニル］−１−［（Ｓ）−テトラヒドロフラン−３−イル］−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド（３７．２ｇ）のＤＭＳＯ（１８６ｍＬ）溶液へ、室温下に、水酸化ナトリウム粉末（９．４３ｇ）を一度に加えた。反応混合物を、同温で５０分間、次いで７０℃で４５分間撹拌した。水冷下に、反応液へ水（６００ｍＬ）を滴下で加え、次いで氷酢酸（１３．５ｍＬ）を滴下で加えた。析出した粉末をろ取した。ろ取した物を水およびＭＴＢＥで洗浄後、減圧下に乾燥して、標記化合物（３４．０ｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：１．９２−１．９４（ｍ，３Ｈ）、１．９４−１．９６（ｍ，３Ｈ）、２．５５−２．６６（ｍ，１Ｈ）、２．７６−２．８６（ｍ，１Ｈ）、４．００（ｓ，３Ｈ）、４．０９−４．１６（ｍ，１Ｈ）、４．２４−４．３７（ｍ，２Ｈ）、４．３９−４．４５（ｍ，１Ｈ）、５．６１−５．６８（ｍ，１Ｈ）、７．０４（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．０８（ｄｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．９４（ｓ，１Ｈ）、８．１３（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、８．３１（ｓ，１Ｈ）、８．８６（ｓ，１Ｈ）．
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ３９１［Ｍ＋Ｈ］＋
なお、標記化合物は（−）の旋光性を示し、その光学純度は９９％ｅｅ以上［ＡＤ−Ｈ，  １００％エタノール、保持時間：９．７分］であった。【００７７】
参考例２
（−）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オンの合成
【化３】
0005666755.tif 000004
【００７８】
（±）−５−（２，４−ジメトキシベンジル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−７−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オンの合成【００７９】
（１）エチル  ３−（４−ブロモ−２−クロロフェニル）−３−オキソプロピオネートの合成
４−ブロモ−２−クロロ安息香酸（１ｇ）をＤＣＭ（１０ｍＬ）に懸濁した。その懸濁液に、ＣＤＩ（９６０ｍｇ）を加え室温にて４時間撹拌した。この溶液を「溶液１」とする。別のフラスコに、窒素雰囲気下、カリウム  エチルマロネート（１．１ｇ）をアセトニトリル（２０ｍＬ）に懸濁し、ＴＥＡ（１．５ｍＬ）を加えた。この溶液を０℃に冷却し、塩化マグネシウム（８０５ｍｇ）を少しずつ加えた後、室温にて２時間撹拌した。この反応液を０℃に冷却し、先に調製した「溶液１」を滴下した。滴下終了後、室温にて１７時間撹拌した。さらに５０℃で９時間撹拌した。反応液を減圧下濃縮しＤＣＭを除去した。得られた残渣を０℃に冷却し、酢酸エチル（５０ｍＬ）と２Ｎ塩酸（２０ｍＬ）を加え、室温にて１時間撹拌した。有機層を分離した。水層を酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤をろ去し、ろ液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ｎ−ヘプタン，０〜１０％）で精製し、標記化合物（１．２ｇ）を得た。
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ３０７［Ｍ＋Ｈ］＋【００８０】
（２）（±）−エチル  ５−（４−ブロモ−２−クロロフェニル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキシレートの合成
エチル  ３−（４−ブロモ−２−クロロフェニル）−３−オキソプロピオネート（２．００ｇ）をＤＭＦ−ＤＭＡ（６．９６ｍＬ）に溶解し、室温にて１．５時間撹拌した。反応液を減圧下濃縮し、残渣をエタノール（４０ｍＬ）に溶解した。その溶液に（±）−（テトラヒドロフラン−３−イル）ヒドラジン・塩酸塩（９９８ｍｇ）を加え、２時間加熱還流した。反応液を室温に冷却した後、減圧下濃縮した。残渣を酢酸エチルで抽出し、有機層をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ｎ−ヘプタン，１０〜３０％）で精製し、標記化合物（１．０５ｇ）を得た。
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ４０１［Ｍ＋Ｈ］＋【００８１】
（３）（±）−５−（４−ブロモ−２−クロロフェニル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の合成
（±）−エチル  ５−（４−ブロモ−２−クロロフェニル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキシレート（１．０５ｇ）および５Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（１．５８ｍＬ）の混合物をエタノール（２０ｍＬ）と水（５ｍＬ）の混合溶媒中、６０℃にて３時間撹拌した。反応液を室温に冷却した後、減圧下濃縮した。残渣に５Ｎ塩酸を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、乾燥剤をろ過した。ろ液を減圧下濃縮することで、標記化合物（１ｇ）を得た。
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ３７１［Ｍ＋Ｈ］＋【００８２】
（４）（±）−５−（４−ブロモ−２−クロロフェニル）−Ｎ−（２，４−ジメトキシベンジル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドの合成
（±）−５−（４−ブロモ−２−クロロフェニル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（１ｇ）をＤＣＭ（２０ｍＬ）に溶解し、ＣＤＩ（６１１ｍｇ）を加え、室温にて１時間撹拌した。反応液に２，４−ジメトキシベンジルアミン（０．８０９ｍＬ）を加え、室温にて２時間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、ＤＣＭで抽出した。有機層を減圧下濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ｎ−ヘプタン，１０〜４０％）で精製し、標記化合物（１．２６ｇ）を得た。
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ５２２［Ｍ＋Ｈ］＋【００８３】
（５）（±）−７−ブロモ−５−（２，４−ジメトキシベンジル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オンの合成
（±）−５−（４−ブロモ−２−クロロフェニル）−Ｎ−（２，４−ジメトキシベンジル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド（１．２６ｇ）をＴＨＦ（２５ｍＬ）に溶解し、０℃にてＫＴＢ（５９７ｍｇ）を加え、少しずつ室温に昇温させながら１２時間撹拌した。反応液を０℃に冷却し、水を加え、ろ過した。ろ取した物を別途保管した。ろ液を酢酸エチルで抽出し、有機層を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ｎ−ヘプタン，１０〜７０％）で精製した。得られたフラクションを先ほど得られた濾物と合わせて濃縮することで、標記化合物（４８８ｍｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：２．５０−２．６２（ｍ，１Ｈ）、２．７２−２．８２（ｍ，１Ｈ）、３．７６（ｓ，３Ｈ）、４．０２（ｓ，３Ｈ）、４．０７−４．１５（ｍ，１Ｈ）、４．１９−４．３２（ｍ，２Ｈ）、４．３５−４．４２（ｍ，１Ｈ）、５．４６−５．５７（ｍ，３Ｈ）、６．３４（ｄｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２．２Ｈｚ，１Ｈ）、６．５２（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ）、６．９９（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．３８（ｄｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．８２（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．８９（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）、８．３２（ｓ，１Ｈ）．
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ５０６［Ｍ＋Ｎａ］＋【００８４】
（６）（±）−５−（２，４−ジメトキシベンジル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−７−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オンの合成
（±）−７−ブロモ−５−（２，４−ジメトキシベンジル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン（３００ｍｇ）、ビス（ピナコラト）ジボロン（２０４ｍｇ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２・ＤＣＭ錯体（１３．６ｍｇ）および酢酸カリウム（１８２ｍｇ）の混合物を１，４−ジオキサン（１５ｍＬ）とＤＭＳＯ（１ｍＬ）の混合溶媒中にて、マイクロウェーブ反応装置を用い、１３０℃にて３時間反応させた。反応液を室温に冷却した後、減圧下濃縮した。残渣を酢酸エチルで抽出し、有機層を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルパッドに供し、酢酸エチルで溶出することで標記化合物（４２８ｍｇ）を粗生成物として得た。
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ５３２［Ｍ＋Ｈ］＋【００８５】
（７）３，５−ジブロモ−２−メトキシピリジン−４−アミンの合成
２−メトキシ−ピリジン−４−イルアミン（１５ｇ）とＮＢＳ（４７．３ｇ）の混合物を酢酸（１５０ｍＬ）溶媒中、室温にて３時間撹拌した。反応液を減圧下濃縮し、残渣に０℃にて５Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（２００ｍＬ）を加え、ジエチルエーテルで抽出した。有機層をそのままシリカゲルパッド（酢酸エチル／ｎ−ヘプタン，１０％）で精製し、標記化合物（３２．４ｇ）を得た。
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ２８３［Ｍ＋Ｈ］＋【００８６】
（８）２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−アミンの合成
３，５−ジブロモ−２−メトキシピリジン−４−アミン（１６ｇ）、トリメチルボロキシン（１９．８ｍＬ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２・ＤＣＭ錯体（４．１５ｇ）および炭酸カリウム（２３．５ｇ）の混合物を、１，４−ジオキサン（３２０ｍＬ）および水（３２ｍＬ）の混合溶媒中で１２時間加熱還流した。反応液を室温に冷却した後、減圧下濃縮した。残渣に水と酢酸エチルを加え、セライトＴＭを用いてろ過した。ろ液を酢酸エチルで抽出し、有機層をシリカゲルパッド（ＮＨ−シリカゲル）に供し、酢酸エチルで溶出した。得られた溶液にＮＨ−シリカゲル（３０ｇ）を加え、減圧下濃縮した。残渣をＮＨシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ｎ−ヘプタン，０〜３０％）で精製し、標記化合物（４．４３ｇ）を得た。
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  １５３［Ｍ＋Ｈ］＋【００８７】
（９）４−ブロモ−２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジンの合成
臭化銅（Ｉ）（１２．１ｇ）と亜硝酸ｔ−ブチル（７．０７ｍＬ）の混合物をアセトニトリル（８０ｍＬ）溶媒中、７０℃にて１０分撹拌した。その反応液に同温度にて２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−アミン（３．９ｇ）のアセトニトリル（４０ｍＬ）溶液を滴下し、７０℃にて１時間撹拌した。反応液を室温に冷却した後、減圧下濃縮した。残渣に酢酸エチルおよび飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、室温にて３０分撹拌した。反応液をセライトＴＭを用いてろ過し、ろ液を酢酸エチルで抽出した。有機層を減圧下濃縮し、残渣をＮＨシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘプタン，１００％、続いてＮＨ−シリカゲルパッド，ｎ−ヘプタン，１００％、）で精製し、標記化合物（４．３ｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：２．２８−２．２９（ｍ，３Ｈ）、２．２９−２．３１（ｍ，３Ｈ）、３．９３（ｓ，３Ｈ）、７．７７−７．８４（ｍ，１Ｈ）． 
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ２１６［Ｍ＋Ｈ］＋【００８８】
（１０）（±）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オンの合成
（±）−５−（２，４−ジメトキシベンジル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−７−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン（２１９ｍｇ）、４−ブロモ−２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン（１３４ｍｇ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（２３．８ｍｇ）および炭酸セシウム（４０３ｍｇ）の混合物を１，４−ジオキサン（８ｍＬ）および水（２ｍＬ）の混合溶媒中、マイクロウェーブ反応装置を用い１３０℃にて７０分間反応させた。反応液を室温に冷却した後、そのままシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ｎ−ヘプタン，１０％〜９０％）で精製した。得られたカップリング体をＴＦＡ（４ｍＬ）に溶解し、７０℃にて２時間撹拌した。反応液を室温に冷却した後、減圧下濃縮した。残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を減圧下濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ，１００％，続いて、酢酸エチル／ｎ−ヘプタン，５０％〜１００％）で精製することで標記化合物（７８ｍｇ）を得た。
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ３９１［Ｍ＋Ｈ］＋【００８９】
（１１）（＋）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オンおよび（−）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オンの合成
（±）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オンのキラルカラム分析［ＡＤ−Ｈ（０．４６ｃｍφ×１５ｃｍ）、移動層：１００％エタノール］を行い、(＋)−体を７．８分、（−）−体を９．７分確認し、光学分割可能であることを確認した。（±）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン（７８ｍｇ）をエタノール（１２ｍＬ）およびメタノール（１２ｍＬ）の混合溶媒に溶解し、綿栓ろ過した。ろ液をキラルカラムクロマトグラフィー［ＤＡＩＣＥＬ社製キラルカラム：ＡＤ−Ｈカラム，溶出溶媒：１００％−エタノール，流速：１０ｍＬ／分，溶出時間：８０分／回，インジェクション：２ｍＬ／回，短保持時間：（＋）−体，長保持時間：（−）−体]で光学分割することで、標記化合物（＋）−体（２６．４ｍｇ）および（−）−体（２５．２ｍｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：１．９２−１．９４（ｍ，３Ｈ）、１．９４−１．９６（ｍ，３Ｈ）、２．５５−２．６６（ｍ，１Ｈ）、２．７６−２．８６（ｍ，１Ｈ）、４．００（ｓ，３Ｈ）、４．０９−４．１６（ｍ，１Ｈ）、４．２４−４．３７（ｍ，２Ｈ）、４．３９−４．４５（ｍ，１Ｈ）、５．６１−５．６８（ｍ，１Ｈ）、７．０４（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．０８（ｄｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．９４（ｓ，１Ｈ）、８．１３（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、８．３１（ｓ，１Ｈ）、８．８６（ｓ，１Ｈ）．
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ３９１［Ｍ＋Ｈ］＋【００９０】
上記参考例１に準じて合成した（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オンを以下の塩の合成に用いた。【００９１】
実施例１
（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一マレイン酸塩の合成
（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン（５７６．３２ｍｇ）にマレイン酸（２４３．９７ｍｇ）とｔ−ブチルメチルエーテル（６ｍＬ）を加え、懸濁液を室温で２日間撹拌した。固体をろ取して、室温で減圧乾燥することにより、表題化合物（７１３．０４ｍｇ）を白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：１．８７（ｓ，３Ｈ）、１．９１（ｓ，３Ｈ）、２．５２−２．５６（ｍ，２Ｈ）、３．８９（ｓ，３Ｈ）、３．９３（ｄｄｄ，Ｊ＝８，７，６Ｈｚ，１Ｈ）、４．０３（ｄｄｄｄ，Ｊ＝８，８，７，２Ｈｚ，１Ｈ）、４．１６（ｄｄｄ，Ｊ＝９，５，３Ｈｚ，１Ｈ）、４．２１（ｄｄ，Ｊ＝９，６  Ｈｚ，１Ｈ）、５．８５−５．８９（ｍ，１Ｈ）、６．２５（ｓ，２Ｈ）、７．０９（ｄｄ，Ｊ＝８，１Ｈｚ，１Ｈ）、７．２１（ｄ，Ｊ＝１Ｈｚ，１Ｈ）、７．９６（ｓ，１Ｈ）、８．１８（ｓ，１Ｈ）、８．３５（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ）、１１．５１（ｓ，１Ｈ）．
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ｓｏｌｉｄ  ｓｔａｔｅ）δ（ｐｐｍ）：１３．３、１６．１、１６．７、２９．５、３５．９、５７．２、５８．０、６１．９、６７．４、６９．７、７４．６、１１１．８、１１４．３、１２２．５、１２３．２、１２５．７、１２６．９、１２７．９、１３２．７、１３３．８、１３６．０、１３８．９、１５４．８、１５６．２、１５７．８、１５８．９、１６２．０、１６３．４、１６４．７、１７２．０
粉末Ｘ線回折ピーク（２θ±０．２°）：９．１°、１０．１°、１１．１°、１６．２°、１７．６°、１８．２°、２２．０°、２２．４°、２３．８°、２５．８°．【００９２】
上記方法により得られた（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一マレイン酸塩の結晶の粉末Ｘ線回折パターンを図１に示す。【００９３】
実施例２
（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一ベンゼンスルホン酸塩の合成
（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン（９９１．７ｍｇ）に２−ブタノン（１０ｍＬ）とベンゼンスルホン酸一水和物（７０８．０ｍｇ）を加え、懸濁液を室温で２日間撹拌した。固形物をろ取して、減圧下室温で乾燥することにより、表題化合物（１３９３．９ｍｇ）を白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：１．８７（ｓ，３Ｈ）、１．９１（ｓ，３Ｈ）、２．５２−２．５６（ｍ，２Ｈ）、３．８９（ｓ，３Ｈ）、３．９３（ｄｄｄ，Ｊ＝８，７，６Ｈｚ，１Ｈ）、４．０１−４．０５（ｍ，１Ｈ）、４．１６（ｄｄｄ、Ｊ＝９，５，３Ｈｚ，１Ｈ）、４．２１（ｄｄ，Ｊ＝９，６Ｈｚ，１Ｈ）、５．８５−５．８９（ｍ，１Ｈ）、７．０９（ｄｄ，Ｊ＝８，１Ｈｚ，１Ｈ）、７．２２（ｄ，Ｊ＝１Ｈｚ，１Ｈ）、７．３２−７．２６（ｍ，３Ｈ）、７．５９−７．５７（ｍ，２Ｈ）、７．９６（ｓ，１Ｈ）、８．１８（ｓ，１Ｈ）、８．３５（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ）、１１．５１（ｓ，１Ｈ）．
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ｓｏｌｉｄ  ｓｔａｔｅ）δ（ｐｐｍ）：１２．８、１６．８、３１．３、３５．２、５９．１、６１．０、６１．６、６２．０、６７．９、７０．１、７０．６、７４．７、１１１．６、１１４．０、１１７．５、１２２．７、１２５．４、１２６．８、１２８．８、１３０．１、１３７．７、１３９．２、１４６．４、１５７．８、１５９．６、１６０．７
粉末Ｘ線回折ピーク（２θ±０．２°）：６．６°、９．９°、１３．７°、１４．６°、１９．０°、１９．６°、２０．５°、２１．７°、２２．７°、２３．５°、２５．７°．【００９４】
上記方法により得られた（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一ベンゼンスルホン酸塩の結晶の粉末Ｘ線回折パターンを図２に示す。【００９５】
実施例３
（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・塩酸塩の合成
（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン（９８４．６ｍｇ）にアセトン（２０ｍＬ）と５Ｎ塩酸（６２０μＬ）を加え、懸濁液を室温で２日間撹拌した。固形物をろ取して、減圧下室温で乾燥することにより、表題化合物（１１００．２１ｍｇ）を白色固体として得た。
粉末Ｘ線回折ピーク（２θ±０．２°）：１１．２°、１２．４°、１２．７°、１７．１°、２３．５°、２６．５°、２９．４°．【００９６】
上記方法により得られた（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・塩酸塩の結晶の粉末Ｘ線回折パターンを図３に示す。【００９７】
実施例４
（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・臭化水素酸塩の合成
（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン（６１４．４５ｍｇ）にアセトン（６ｍＬ）と４７％臭化水素酸（２２０μＬ）を加え、懸濁液を室温で一晩撹拌した。固形物をろ取して、減圧下室温で乾燥することにより、表題化合物（７１９．２３ｍｇ）を白色固体として得た。
粉末Ｘ線回折ピーク（２θ±０．２°）：５．６°、１１．１°、１２．３°、１８．５°、１９．３°、２２．９°、２３．４°、２６．３°、２９．２°．【００９８】
上記方法により得られた（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・臭化水素酸塩の結晶の粉末Ｘ線回折パターンを図４に示す。【００９９】
実施例５
（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・ｐ−トルエンスルホン酸塩の合成
（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン（１００．６ｍｇ）に２−ブタノン（４ｍＬ）とｐ−トルエンスルホン酸（６５．１ｍｇ）を加え、懸濁液を室温で一晩撹拌した。固形物をろ取して、減圧下室温で乾燥することにより、表題化合物（１５３．１５ｍｇ）を白色固体として得た。
粉末Ｘ線回折ピーク（２θ±０．２°）：６．５°、９．８°、１３．９°、１４．４°、１５．３°、１８．５°、１９．３°、２０．３°、２２．８°、２３．３°、２５．４°、２８．２°．【０１００】
上記方法により得られた（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・ｐ−トルエンスルホン酸塩の結晶の粉末Ｘ線回折パターンを図５に示す。【０１０１】
実施例６
（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・硝酸塩の合成
（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン（２２．８０ｍｇ）に酢酸エチル（３００μＬ）と６０％硝酸（５．３μＬ）を加え、懸濁液を室温で一晩撹拌した。固形物をろ取して、減圧下室温で乾燥することにより、表題化合物（１４．９７ｍｇ）を白色固体として得た。
粉末Ｘ線回折ピーク（２θ±０．２°）：１１．１°、１１．７°、１４．８°、１５．３°、１６．４°、１９．２°、２３．６°、２４．２°、２５．８°．【０１０２】
上記方法により得られた（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・硝酸塩の結晶の粉末Ｘ線回折パターンを図６に示す。【０１０３】
実施例７
（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・硫酸塩の合成
（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン（２３．５３ｍｇ）に２−ブタノン（３００μＬ）と９５％硫酸（４μＬ）を加え、懸濁液を室温で一晩撹拌した。固形物をろ取して、減圧下室温で乾燥することにより、表題化合物（２７．３４ｍｇ）を白色固体として得た。
粉末Ｘ線回折ピーク（２θ±０．２°）：１０．７°、１４．０°、１４．５°、１６．２°、１９．１°、２０．０°、２２．８°、２３．６°、２５．３°．【０１０４】
上記方法により得られた（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・硫酸塩の結晶の粉末Ｘ線回折パターンを図７に示す。【０１０５】
実施例８
（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・メタンスルホン酸塩の合成
（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン（２２．５２ｍｇ）に２−ブタノン（３００μＬ）とメタンスルホン酸（４．５μＬ）を加え、懸濁液を室温で一晩撹拌した。固形物をろ取して、減圧下室温で乾燥することにより、表題化合物（２８．６９ｍｇ）を白色固体として得た。
粉末Ｘ線回折ピーク（２θ±０．２°）：１２．７°、１４．８°、１７．８°、１８．７°、２３．４°、２９．８°．【０１０６】
上記方法により得られた（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・メタンスルホン酸塩の結晶の粉末Ｘ線回折パターンを図８に示す。【０１０７】
実施例９
（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・リン酸塩の合成
（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン（２２．２９ｍｇ）に２−ブタノン（３００μＬ）とリン酸（４．６μＬ）を加え、懸濁液を室温で一晩撹拌した。さらにヘキサン（２００μＬ）添加して撹拌後、固形物をろ取して、減圧下室温で乾燥することにより、表題化合物（２３．０９ｍｇ）を白色固体として得た。
粉末Ｘ線回折ピーク（２θ±０．２°）：９．５°、１１．３°、１５．２°、１６．７°、１８．４°、２３．５°、２４．０°．【０１０８】
上記方法により得られた（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・リン酸塩の結晶の粉末Ｘ線回折パターンを図９に示す。【０１０９】
実施例１０
（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・Ｌ−酒石酸塩の合成
（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン（２７．４２ｍｇ）にアセトン（３００μＬ）とＬ−酒石酸（２０．１８ｍｇ）を加え、懸濁液を室温で３日間撹拌した。固形物をろ取して、減圧下室温で乾燥することにより、表題化合物（３４．８９ｍｇ）を白色固体として得た。
粉末Ｘ線回折ピーク（２θ±０．２°）：１０．１°、１４．１°、１６．７°、１７．４°、１８．２°、２０．６°、２３．４°、２４．０°、２４．３°、２６．５°．【０１１０】
上記方法により得られた（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・Ｌ−酒石酸塩の結晶の粉末Ｘ線回折パターンを図１０に示す。【０１１１】
実施例１１
（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・マロン酸塩の合成
（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン（２７．７０ｍｇ）にアセトン（３００μＬ）とマロン酸（２６．６５ｍｇ）を加え、懸濁液を室温で３日間撹拌した。固形物をろ取して、減圧下室温で乾燥することにより、表題化合物（３０．４９ｍｇ）を白色固体として得た。
粉末Ｘ線回折ピーク（２θ±０．２°）：１０．５°、１６．８°、１７．４°、１７．８°、１８．３°、１８．９°、２１．７°、２２．８°、２４．２°、２５．２°、２６．４°．【０１１２】
上記方法により得られた（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・マロン酸塩の結晶の粉末Ｘ線回折パターンを図１１に示す。【０１１３】
実施例１２
（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン・一マレイン酸塩の合成
（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン（５００ｍｇ）に酢酸エチル（２ｍＬ）を加え２５℃にて２０分間撹拌した。マレイン酸（２２３．０ｍｇ）を酢酸エチル（７．５ｍＬ）にて完全溶解させた溶液を先の懸濁液に加え２５℃にて７日間撹拌した。固体をろ取して、酢酸エチル（１ｍＬ）にて結晶洗浄し、４０℃にて減圧乾燥することにより、表題化合物（３６６．９ｍｇ）を白色固体として得た。
得られた標記化合物は、実施例１と同一の粉末Ｘ線回折ピークを示した。【０１１４】
［試験例］
ＰＤＥ９阻害活性試験
１）ヒトリコンビナントＰＤＥ９タンパク質の調製
ＧｅｎＢａｎｋデータベースに登録されているｈｓＰＤＥ９Ａ１の塩基配列（Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．：ＡＦ０４８８３７）を基に、以下の配列（北海道システム・サイエンス社）をプライマーとして、また、Ｈｕｍａｎ  ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ  ｃＤＮＡライブラリー（ＣＬＯＮＴＥＣＨ社）を鋳型ＤＮＡとして、Ｐｆｕ５０  ＤＮＡ  ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）を用いて、以下の条件のポリメラーゼチェーンリアクション（ＰＣＲ）によりｈｓＰＤＥ９Ａ１ｃＤＮＡフラグメントを増幅した。
ｈＰＤＥ９−１プライマー：ＡＧＧＡＴＧＧＧＡＴＣＣＧＧＣＴＣＣＴＣＣＡ（配列番号１）
ｈＰＤＥ９Ａ−３プライマー：ＣＡＧＧＣＡＣＡＧＴＣＴＣＣＴＴＣＡＣＴＧ（配列番号２）
ＰＣＲの条件：［９６℃、５分］×１サイクル、［（９６℃、１０秒）、（５７℃、５秒）、（７２℃、２分）］×３０サイクル。【０１１５】
得られたｈｓＰＤＥ９Ａ１ｃＤＮＡフラグメントをＴＯＰＯ−ＴＡ  ｃｌｏｎｉｎｇ  ｖｅｃｔｏｒ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）に組込み、塩基配列を確認した後、ｐｃＤＮＡ３．１／ｍｙｃ  Ｈｉｓ−ｔａｇ  ｖｅｃｔｏｒ（ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）に導入し、哺乳動物細胞用ヒトＰＤＥ９発現ベクターとした。哺乳動物細胞用ヒトＰＤＥ９発現ベクターをＬＩＰＯＦＥＴＡＭＩＮＥ  ２０００  Ｒｅａｇｅｎｔ（ＧＩＢＣＯ社）を用いてＨＥＫ２９３細胞に一過性発現導入した。この細胞でＰＤＥ９Ａが発現していることをＷｅｓｔｅｒｎ  ｂｌｏｔ法で確認した後、ヒトＰＤＥ９Ａ１ｃＤＮＡフラグメントをｐＹＮＧ  ｖｅｃｔｏｒ（片倉工業株式会社）に導入し昆虫細胞発現ベクターとした。カイコにより大量発現されたカイコ破砕上清をバッファーＡ（２０ｍｍｏｌ／Ｌ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ  ｐＨ８．０、１ｍｍｏｌ／Ｌ  ＤＴＴ、１０ｍｍｏｌ／Ｌ  イミダゾール）にて平衡化したＮｉカラムにて精製した。上清とＮｉカラムを１時間混和後、バッファーＢ（２０ｍｍｏｌ／Ｌ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ  ｐＨ８．０、１ｍｍｏｌ／Ｌ  ＤＴＴ）にて洗浄し、バッファーＣ（２０ｍｍｏｌ／Ｌ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ  ｐＨ８．０、１ｍｍｏｌ／Ｌ  ＤＴＴ、１００ｍｍｏｌ／Ｌ  イミダゾール）にて溶出を行った。溶出画分を分取しＰＤＥ９酵素溶液を得た。【０１１６】
２）ＰＤＥ９阻害作用の測定
［３Ｈ］−ｃＧＭＰ（１ｍＣｉ／ｍＬ）を０．５μＣｉ／ｍＬの濃度で含むバッファーＤ（４０ｍｍｏｌ／Ｌ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．４、１０ｍｍｏｌ／Ｌ  ＭｇＣｌ２、１ｍＭ  ＤＴＴ、２μＭ  ｃＧＭＰ）溶液１００μＬに、氷冷下にて評価化合物溶液（化合物をＤＭＳＯに溶解し、ＤＭＳＯ濃度が５％となるように希釈したもの）１０μＬ及び上記で調製したＰＤＥ９酵素溶液をバッファーＥ（４０ｍｍｏｌ／Ｌ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ  ｐＨ７．４、１０ｍｍｏｌ／Ｌ  ＭｇＣｌ２、１ｍＭ  ＤＴＴ、１ｍｍｏｌ／Ｌ  ＥＧＴＡ）にて希釈した溶液９０μＬを加えた。この混合溶液を３０℃にて１０分間インキュベートした後、沸騰水中で２分間加熱することにより、ＰＤＥ９の酵素反応を停止させた。次に、室温に戻して、５０μＬの５’−Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄａｓｅ（ＢＩＯＭＯＬ社、１０ｕｎｉｔｓ／ｍＬ）を加え、３０℃にて１０分間インキュベートすることにより、先の反応で生成した［３Ｈ］−５’−ＧＭＰを［３Ｈ］−グアノシンに変換した。この反応液に、陰イオン交換樹脂（Ｂｉｏ−Ｒａｄ  ＡＧ１−Ｘ２  ｒｅｓｉｎ、ｍｅｓｈ  ｓｉｚｅ  ２００−４００、Ｈ２Ｏ：ｒｅｓｉｎ＝２：１）を５００μＬ添加し、１０分間の放置後に遠心分離（２０００ｒｐｍ、１０分）し、［３Ｈ］−グアノシンの存在する上清をＬｕｍａＰｌａｔｅ（パーキンエルマー社）に移し、放射活性をＴｏｐＣｏｕｎｔ  ＮＸＴマイクロプレートシンチレーション・ルミネッセンスカウンター（パーキンエルマー社）で測定した。【０１１７】
評価化合物のＰＤＥ９抑制率は、評価化合物を含まないコントロールの放射活性を（Ａ）、酵素を含まないブランクの放射活性を（Ｂ）及び評価化合物の放射活性を（Ｃ）とし、以下の式を用いて算出した。
抑制率＝１００−｛［（Ｃ）−（Ｂ）］／［（Ａ）−（Ｂ）］｝×１００（％）
また、評価化合物のＰＤＥ９に対するＩＣ５０値は、種々の濃度における抑制率より求めた。参考例２に準じて合成した化合物（Ｉ）のＰＤＥ９に対するＩＣ５０値は、０．００９４３μＭであった。【０１１８】
げっ歯類脳脊髄液ｃＧＭＰに対する作用
ＩＣＲ系雄性マウス（日本チャールズリバー社）、Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅy（ＳＤ）系雄性ラット（日本チャールズリバー社）、またはＬｏｎｇ−Ｅｖａｎｓ（ＬＥ）系雄性ラット（（財）動物繁殖研究所）に評価化合物投与後、ペントバルビタール麻酔下に脳脊髄液を採取し、−２０℃にて保管した。脳脊髄液中のｃＧＭＰの測定はｃＧＭＰ ＥＩＡキット（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社）のＡｃｅｔｙｌａｔｉｏｎ  ＥＩＡ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ、またはｃＧＭＰ  ＥＩＡキット（Ｃａｙｍａｎ社）のＮｏｎ−ａｃｅｔｙｌａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅにしたがって行った。結果はｖｅｈｉｃｌｅ投与群のｃＧＭＰ量（Ａ）に対しての評価化合物投与群のｃＧＭＰ量（Ｂ）の増加量（Ｃ）とし、以下の式を用いて算出した。
ｃＧＭＰ増加量（Ｃ）＝［（Ｂ）−（Ａ）］／（Ａ）  ｘ  １００（％）
参考例１に準じて合成した化合物（Ｉ）のｃＧＭＰ増加量はＬＥ系ラットに１０ｍｇ／ｋｇ投与したとき１時間後に２７４％であった。【０１１９】
げっ歯類海馬ｃＧＭＰに対する作用
ＳＤ系雄性ラット（日本チャールズリバー社）、またはＬＥ系雄性ラット（（財）動物繁殖研究所）に評価化合物投与後、ペントバルビタール麻酔下にマイクロウェーブ処置をおこない海馬を摘出し湿重量を測定後、液体窒素にて凍結し−８０℃にて保管した。海馬中ｃＧＭＰの測定では、湿重量をもとに５％（ｗ／ｖ）となるように０．５Ｍ過塩素酸／１ｍＭ  ＥＤＴＡ溶液を添加し破砕した。破砕後、遠心分離（１００００ｒｐｍ、１５分）をおこない、上清を採取した。採取した上清を２Ｍ炭酸水素カリウム溶液により中和し、遠心分離（１３０００ｒｐｍ、１０分）をおこなった。上清中のｃＧＭＰ濃度をｃＧＭＰ ＥＩＡキット（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社）のＮｏｎ−ａｃｅｔｙｌａｔｉｏｎ  ＥＩＡ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅにしたがって行った。結果はｖｅｈｉｃｌｅ投与群のｃＧＭＰ量（Ａ）に対しての評価化合物投与群のｃＧＭＰ量（Ｂ）の増加量（Ｃ）とし、以下の式を用いて算出した。
ｃＧＭＰ増加量（Ｃ）＝［（Ｂ）−（Ａ）］／（Ａ）  ｘ  １００（％）
参考例１に準じて合成した化合物（Ｉ）のｃＧＭＰ増加量はＬＥ系ラットに１０ｍｇ／ｋｇ投与したとき１時間後に５８％であった。【０１２０】
溶出試験
化合物（Ｉ）（５０ｍｇ）、実施例１の化合物（３０ｍｇ）、実施例２の化合物（３０ｍｇ）をそれぞれ等重量のラクトース一水和物とともにヒドロキシプロピルメチルセルロースカプセルに充填した。溶出試験器にはＡｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社製７０８‐ＤＳに小型撹拌パドルと小型ベッセルを装着したものを用いた。それぞれの薬物充填カプセルを３７℃に加温した５０ｍＬの絶食下ヒト小腸シミュレート液（ｆａｓｔｅｄ  ｓｔａｔｅ  ｓｉｍｕｌａｔｅｄ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｆｌｕｉｄ、０．７５ｍＭのレシチンと３ｍＭのタウロコール酸ナトリウムを含むｐＨ６．５のリン酸緩衝液）に投入し、撹拌パドルを５０ｒｐｍの速度で回転させて薬物を溶出させた。経時的に溶出液をサンプリングし、ＨＰＬＣにより薬物濃度を測定した。このような絶食下ヒト小腸シミュレート液を使用した溶出試験は薬物の溶解性および吸収性の評価によく用いられている（たとえば、Ｔａｋａｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｏｒａｌ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｏｏｒｌｙ  ｗａｔｅｒ−ｓｏｌｕｂｌｅ  ｄｒｕｇｓ：  ｃｏｍｐｕｔｅｒ  ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｆｒａｃｔｉｏｎ  ａｂｓｏｒｂｅｄ  ｉｎ  ｈｕｍａｎｓ  ｆｒｏｍ  ａ  ｍｉｎｉｓｃａｌｅ  ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ  ｔｅｓｔ”，  Ｐｈａｒｍ  Ｒｅｓ．，  ｖｏｌ．  ２３，ｐｐ．１１４４−１１５６，  ２００６．）。結果を表１に、グラフを図１２に示す。化合物（Ｉ）を用いた場合の化合物濃度に対して、実施例２の化合物を用いた場合は化合物濃度が約２倍、実施例１の化合物を用いた場合は化合物濃度が約４〜５倍高い値を示した。
【表１】
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【０１２１】
イヌ経口吸収性試験
化合物（Ｉ）（１００ｍｇ）、実施例１の化合物（１３０ｍｇ：一マレイン酸塩、フリー体換算で１００ｍｇ）をそれぞれヒドロキシプロピルメチルセルロースカプセルに充填したものを投与検体とした。４頭のビーグル犬に対してカプセル剤を少量の水と共に投与後、０．５、１、２、４、６、８、２４時間の時点で血液を採取した。遠心分離により得た血漿中の薬物濃度はＬＣ−ＭＳ／ＭＳにより測定した。一週間の休薬期間を置き、同一個体に対して化合物（Ｉ）および実施例１の化合物についてそれぞれクロスオーバーで投与を行い、血漿中の薬物濃度の推移を比較した。結果を表２に、グラフを図１３に示す。ＢＱＬは定量限界以下を、ＮＣは未計算を意味する。血漿中薬物濃度−時間曲線下面積（ＡＵＣ）の値を表３に示す。化合物（Ｉ）を投与した場合の平均ＡＵＣ値は１．８８±０．９５μｇ・ｈ／ｍＬであったのに対し、実施例１の化合物を投与した場合の平均ＡＵＣ値は４．００±０．４５μｇ・ｈ／ｍＬであり、実施例１の化合物の方が吸収率が高く、数値のばらつきも小さかった。
したがって、本発明の塩・結晶は医薬品の原料として好ましい溶出性および経口吸収性が示された。
【表２】
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【０１２２】
【表３】
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【要約】
本発明は、医薬品の原薬として利用可能性を有する、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、マロン酸、マレイン酸、酒石酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸およびトルエンスルホン酸からなる群から選択される一つの酸と、（Ｓ）−７−（２−メトキシ−３，５−ジメチルピリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロフラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オンと、からなる塩またはその結晶を提供する。【図１２】
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【図１３】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【配列表】
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