(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）式Ｉ
【化１】
0005722871.tif 000047
（式中、Ｒ１は少なくとも１つのＮを有して任意に置換される５−、６−、または１０員環ヘテロアリールであり、またはＲ１は任意に置換される６−または１０員環アリールである）の化合物、または薬学的に許容できるその塩またはエステル；
（ｂ）シクロデキストリン；および
（ｃ）単糖を有する増量剤と界面活性剤とからなる群から選択される少なくとも１つの部材
を有する、凍結乾燥ケーク。
【請求項２】
前記薬剤が、化合物１
【化２】
0005722871.tif 000048
または薬学的に許容できるそのエステルである、請求項１に記載の凍結乾燥ケーク。
【請求項３】
前記薬剤が化合物１である、請求項２に記載の凍結乾燥ケーク。
【請求項４】
増量剤を有する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の凍結乾燥ケーク。
【請求項５】
界面活性剤を有する、請求項４に記載の凍結乾燥ケーク。
【請求項６】
前記凍結乾燥ケークが、約９０秒以内に戻されて粒子状物質を含まない透明溶液を提供する、請求項４に記載の凍結乾燥ケーク。
【請求項７】
ｐＨ調節剤をさらに有する、請求項４に記載の凍結乾燥ケーク。
【請求項８】
前記凍結乾燥ケークのｐＨが約４以下のｐＨに調節される、請求項７に記載の凍結乾燥ケーク。
【請求項９】
前記凍結乾燥ケークが、加速条件下で６ヶ月間にわたる保存後に約１％以下の薬剤純度低下を示す、請求項６に記載の凍結乾燥ケーク。
【請求項１０】
（ａ）シクロデキストリン、単糖を有する増量剤、および水を有する第１の混合物を提供する工程と；
（ｂ）界面活性剤と前記第１の混合物の一部とを混合する工程であって、第２の混合物を形成する、前記混合する工程と；
（ｃ）式Ｉ
【化３】
0005722871.tif 000049
（式中、Ｒ１は少なくとも１つのＮを有して任意に置換される５−、６−、または１０員環ヘテロアリールであり、またはＲ１は任意に置換される６−または１０員環アリールである）の化合物、またはその塩またはエステルと、前記第２の混合物とを合わせる工程であって、薬剤混合物を形成する、前記合わせる工程と；
（ｄ）前記第１の混合物の残部を前記薬剤混合物と混合する工程であって、凍結乾燥前溶液を形成する、前記混合する工程と；
（ｅ）前記凍結乾燥前溶液を凍結乾燥する工程と
を有する、凍結乾燥ケークを製造する方法。
【請求項１１】
（ａ）シクロデキストリン、単糖を有する増量剤、および水を含有する第１の混合物を提供する工程と；
（ｂ）式Ｉ
【化４】
0005722871.tif 000050
（式中、Ｒ１は少なくとも１つのＮを有して任意に置換される５−、６−、または１０員環ヘテロアリールであり、またはＲ１は任意に置換される６−または１０員環アリールである）の化合物、またはその塩またはエステルと、ｔｅｒｔ−ブタノールとを含有する薬剤混合物を提供する工程と；
（ｃ）前記第１の混合物と前記薬剤混合物とを合わせる工程であって、凍結乾燥前溶液を提供する、前記合わせる工程と；
（ｄ）前記凍結乾燥前溶液を凍結乾燥する工程と
を有する、凍結乾燥ケークを製造する方法。
【請求項１２】
前記薬剤混合物が化合物１０を含有する、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記凍結乾燥前溶液のｐＨを約４以下のｐＨに調節する工程をさらに有する、請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
多発性骨髄腫を治療するための薬剤の製造における、請求項４に記載の凍結乾燥ケークの使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
プロテアソーム阻害薬の凍結乾燥ケーク、ならびにそれらを調製して使用する方法が記載される。
【背景技術】
【０００２】
がんなどの衰弱性疾患を治療するのに高度に効果的であることが知られている、多数の医薬品がある。残念ながらこれらの医薬品の多くは、２３℃（環境室温）を超える温度および／または周囲よりも高い相対湿度を含むかもしれない、商業的輸送および保存条件において不安定である。医薬品の完全性を保つ努力の一環として、非定型の輸送および保存条件が時折採用される。例えば医薬品は、冷蔵温度で不活性雰囲気下において輸送および保存され、および／またはそれは受取りのわずか数日以内の使用または廃棄を促す説明書と共に提供される。頻繁に、医薬品は、輸送および保存過程で十分な完全性が保たれなかったがために廃棄されなくなくてはならない。これらのデリケートな医薬品は、一般に多額の費用で開発製造されるため、これは望ましくない。
凍結乾燥または「凍結乾燥法」は、医薬品の製造において使用される方法である。商業的に実現可能な凍結乾燥工程の開発では、例えば適切な棚温度、製品温度、真空レベル、凍結、一次乾燥パラメーター、および二次乾燥パラメーターの同定などの多数の技術的挑戦を克服しなくてはならない。これに加えて医薬品は、典型的に水の使用を伴う凍結乾燥工程に対して、通常は感応性である。さらに凍結乾燥には、通常、増量剤などの医薬品賦形剤の添加が伴う。特定医薬品の賦形剤に対する感受性は一般に未知であり、徹底的に評価されなくてはならない。
適切な凍結乾燥工程の同定における別の要素は、製造される凍結乾燥「ケーク」の特性の評価である。ケークは、保存および輸送条件に対して、十分な時間にわたり安定していなくてはならない。さらに医薬品が注射用であれば、凍結乾燥ケークは、注射用塩化ナトリウム、無菌注射用水、マンニトールＩ．Ｖ．などの適切な静脈注射用溶液で容易に戻されて、微粒子を含まない注射用溶液を形成しなくてはならない。実際、粒子状物質が皆無かそれに近い透明溶液を容易に形成しない凍結乾燥ケークは、廃棄しなくてはならない。
この出願の発明に関連する先行技術文献情報としては、以下のものがある（国際出願日以降国際段階で引用された文献及び他国に国内移行した際に引用された文献を含む）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】  米国特許出願公開第２００２／１６９１１４号明細書
【特許文献２】  国際公開第２００５／０２１５５８号
【特許文献３】  国際公開第２００６／０６３１５４号
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】  ＳＴＥＬＬＡ  ＥＴ  ＡＬ："Ｐｒｏｄｒｕｇ  ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ  ｔｏ  ｏｖｅｒｃｏｍｅ  ｐｏｏｒ  ｗａｔｅｒ  ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ"，ＡＤＶＡＮＣＥＤ  ＤＲＵＧ  ＤＥＬＩＶＥＲＹ  ＲＥＶＩＥＷＳ，ＥＬＳＥＶＩＥＲ  ＢＶ，ＡＭＳＴＥＲＤＡＭ，ＮＬ，ｖｏｌ．５９，ｎｏ．７，２４  Ａｕｇｕｓｔ  ２００７（２００７−０８−２４），ｐａｇｅｓ  ６７７−６９４
【非特許文献２】  ＰＩＶＡ  Ｒ  ＥＴ  ＡＬ："ＣＥＰ−１８７７０：Ａ  ｎｏｖｅｌ，ｏｒａｌｌｙ  ａｃｔｉｖｅ  ｐｒｏｔｅａｓｏｍｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｗｉｔｈ  ａ  ｔｕｍｏｒ−ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃ  ｐｒｏｆｉｌｅ  ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ  ｗｉｔｈ  ｂｏｒｔｅｚｏｍｉｂ"，ＢＬＯＯＤ  ２００８０３０１  ＵＳ，ｖｏｌ．１１１，ｎｏ．５，１  Ｍａｒｃｈ  ２００８（２００８−０３−０１），ｐａｇｅｓ  ２７６５−２７７５
【非特許文献３】  ＤＡＬＬＥ  ＢＥＬＬＡ  Ｍ  ＥＴ  ＡＬ："ＣＹＣＬＯＤＥＸＴＲＩＮＳ"，ＤＲＵＧＳ  ＯＦ  ＴＨＥ  ＦＵＴＵＲＥ，ＰＲＯＵＳ  ＳＣＩＥＮＣＥ，ＥＳ，ｖｏｌ．８，ｎｏ．５，１  Ｊａｎｕａｒｙ  １９８３（１９８３−０１−０１），ｐａｇｅｓ  ３９１−３９４
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
したがって安定性であり水で容易に戻せる凍結乾燥プロテアソーム阻害薬を製造するための凍結乾燥条件、および方法が必要である。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、（ａ）式Ｉ、式ＩＩ、
【０００７】
【化１】
0005722871.tif 000002
【０００８】
の化合物（式中、Ｒ１は少なくとも１つのＮを有して任意に置換される５−、６−、または１０員環ヘテロアリールであり、またはＲ１は任意に置換される６−または１０員環アリールである）、または薬学的に許容できるその塩またはエステルである薬剤；（ｂ）シクロデキストリン；および（ｃ）増量剤と界面活性剤からなる群から選択される少なくとも１つの部材を含んでなる凍結乾燥ケークを対象とする。本発明の凍結乾燥ケークを調製して使用する方法もまた記載される。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
前述のプロテアソーム阻害薬の凍結乾燥ケークへのシクロデキストリン添加が、安定性であり容易に再現性良く戻されてヒトへの注射に適した溶液を形成するケークをもたらすことが発見された。前述のプロテアソーム阻害薬で使用するのに適した凍結乾燥工程もまた発見された。
【００１０】
式Ｉ、
【００１１】
【化２】
0005722871.tif 000003
【００１２】
（式中、Ｒ１は少なくとも１つのＮを有して任意に置換される５−、６−、または１０員環ヘテロアリールであり、またはＲ１は任意に置換される６−または１０員環アリールである）を有するものなどのプロテアソーム阻害薬について記載されている。あらゆる目的のためにその内容全体を本明細書に援用する、Ｃｅｐｈａｌｏｎ，Ｉｎｃ．，Ｆｒａｚｅｒ，ＰＡに譲渡された、２００６年２月２日に出願された米国特許出願第１１／３５１，１９３号明細書を参照されたい。このような化合物は、慢性リンパ球性白血病、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫または乳がんの治療において有用であることが実証されている。特に、本明細書で化合物１と称される式Ｉ、
【００１３】
【化３】
0005722871.tif 000004
【００１４】
の一化合物は、生体外で強力な抗血管新生活性を実証し、ＲＡＮＫＬ−誘発性破骨細胞形成を抑制する。Ｐｉｖａ，Ｒ．Ｒ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，１  Ｍａｒｃｈ  ２００８，ｖｏｌ  １１１，Ｎｏ．５，ｐ  ２７６５−２７７５。化合物１はまた、正常なヒト上皮細胞、骨髄原体、および骨髄由来間質細胞に対する好ましい細胞毒性プロフィールも示す。同著書。しかし化合物１は不安定であり、空気および／または光に曝されると分解を受け、化合物１のいくつかのバッチは５℃程度に低い温度における保管で分解する。
【００１５】
化合物１は、目下、臨床試験中である。化合物は溶液中で不安定であるので、それは本発明以前には冷凍配合で臨床医に提供され、それは流通および使用に不便である。
【００１６】
本発明で使用することが想定される式Ｉの化合物としては、例えば以下の立体化学を有する化合物が挙げられる。
【００１７】
【化４】
0005722871.tif 000005
【００１８】
好ましい実施態様では、Ｒ１は、任意に置換されるピラジニル、ピリジル、フェニル、チアゾリル、ナフチル、またはキノリニルである。好ましくはＲ１は置換されている。最も好ましい実施態様では、Ｒ１はフェニルで置換された５員環ヘテロアリール、フェニルで置換された６員環ヘテロアリール、またはフェニルで置換されたフェニルである。
【００１９】
式Ｉの好ましい化合物例としては、次が挙げられる。
【００２０】
【化５】
0005722871.tif 000006
【００２１】
【化６】
0005722871.tif 000007
【００２２】
式Ｉの化合物のエステルの好ましい例としては、次が挙げられる。
【００２３】
【化７】
0005722871.tif 000008
【００２４】
一般にボルテゾミブ、ＰＳ−３４１、またはＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標）として知られる、式ＩＩ、
【００２５】
【化８】
0005722871.tif 000009
【００２６】
の化合物は、米国で再発性多発性骨髄腫およびマントル細胞リンパ腫の治療のために認可されたプロテアソーム阻害薬である。ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標）完全処方情報を参照されたい。現在のところ、ボルテゾミブは、臨床医によって０．９％塩化ナトリウムで戻される、マンニトールを増量剤として含有する凍結乾燥粉末として提供される。同著書。本処方情報によれば、無色透明でなくまたは粒子状物質を含有するいかなる戻された製品も廃棄しなくてはならない。
【００２７】
式ＩＩの化合物の好ましいエステルの例としては、次が挙げられる。
【００２８】
【化９】
0005722871.tif 000010
【００２９】
好ましくは薬剤は、式Ｉまたは式ＩＩの化合物である。好ましくは薬剤は、式Ｉの化合物である。例示的実施態様では、薬剤は、化合物１、化合物１０、化合物１１、化合物１２、化合物１３、化合物１４、化合物１５、およびボルテゾミブから選択される。例示的実施態様では、薬剤は、化合物１、化合物１０、化合物１１、化合物１２、化合物１３、化合物１４、および化合物１５から選択される。好ましくは薬剤は、化合物１、化合物１０、化合物１１、化合物１３、化合物１４、およびボルテゾミブから選択される。好ましくは薬剤は、化合物１、化合物１０、化合物１１、化合物１３、および化合物１４から選択される。好ましくは薬剤は、化合物１、化合物１０、化合物１１、化合物１３、およびボルテゾミブから選択される。好ましくは薬剤は、化合物１、化合物１０、化合物１１、および化合物１３から選択される。好ましくは薬剤は、化合物１、化合物１０、化合物１３、およびボルテゾミブから選択される。好ましくは薬剤は、化合物１、化合物１０、および化合物１３から選択される。好ましくは薬剤は、化合物１およびボルテゾミブから選択される。好ましくは薬剤は、化合物１および化合物１０から選択される。特定の実施態様では、薬剤は化合物１である。特定の実施態様では、薬剤はボルテゾミブである。特定の実施態様では、薬剤は化合物１０である。特定の実施態様では、薬剤は化合物１３である。
【００３０】
本明細書での用法では、「アリール」とは、例えばフェニル、ナフチル、アントラセニル、フェナントレニルなどの単環または多環式芳香族炭化水素をはじめとする、芳香族炭素環式基を指す。いくつかの実施態様では、アリール基は６〜約１８個の炭素原子を有する。
【００３１】
本明細書での用法では、「ヘテロアリール」基とは、芳香族ヘテロ炭素環式基（すなわち環式炭化水素基の環形成炭素原子の１つ以上が、Ｏ、Ｓ、またはＮなどのヘテロ原子によって置換された環式炭化水素基）であり、例としてはイオウ、酸素、または窒素などの少なくとも１つのヘテロ原子環員を有する、単環および多環式芳香族炭化水素が挙げられる。ヘテロアリール基としては、ピリジル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアジニル、フリル、キノリル、イソキノリル、チエニル、イミダゾリル、チアゾリル、インドリル、ピロリル、オキサゾリル、ベンゾフリル、ベンゾチエニル、ベンズチアゾリル、イソオキサゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリルインダゾリル、１，２，４−チアジアゾリル、イソチアゾリル、ベンゾチエニル、プリニル、カルバゾリル、ベンゾイミダゾリルなどが制限なしに挙げられる。いくつかの実施態様ではヘテロアリール基は１〜約２０個の炭素原子を有し得て、さらに別の実施態様では約３〜約２０個の炭素原子を有し得る。いくつかの実施態様では、ヘテロアリール基は１〜約４、１〜約３、または１〜２個のヘテロ原子を有する。
【００３２】
本明細書での用法では、「置換された」とは、化学基の少なくとも１つの水素原子が非水素部分によって置換されていることを示唆する。置換基の例としては、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６、アルキニル、アリール、ハロアルキル、ＮＲＥＲＦ、Ｎ３、ＮＯ２、ＣＮ、ＣＮＯ、ＣＮＳ、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＥ、ＲＥＣＯ、ＲＥＣ（＝Ｏ）Ｏ、ＲＥＣＯＮＲＥ、ＲＥＲＦＮＣＯ、ウレイド、ＯＲＥ、ＳＲＥ、ＳＯ２−アルキル、ＳＯ２−アリール、およびＳＯ２−ＮＲＥＲＦが挙げられ、式中、ＲＥおよびＲＦは、それぞれ独立して、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルである。本明細書で化学基が「置換された」場合、得られる化合物が安定化合物または安定構造であれば、それは最大原子価までの置換を有してもよい。例えばメチル基は１、２、または３個の置換基で置換されてもよく、メチレン基は１または２個の置換基で置換されてもよく、フェニル基は１、２、３、４、または５個の置換基で置換されてもよい。
【００３３】
本発明はまた、式Ｉおよび式ＩＩの化合物の薬学的に許容できる塩に応用できる。本明細書での用法では、「薬学的に許容できる塩」とは開示される化合物の誘導体を指し、それらの酸または塩基塩類を作ることにより、親化合物が修飾されている。薬学的に許容できる塩の例としては、アミンなどの塩基性残基の無機または有機酸塩、およびボロン酸またはカルボン酸などの酸性残基のアルカリまたは有機塩などが挙げられるがこれに限定されるものではない。薬学的に許容できる塩としては、例えば無毒の無機または有機酸から形成された、親化合物の従来の無毒の塩または四級アンモニウム塩が挙げられる。例えばこのような従来の無毒の塩としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸などの無機酸から誘導される塩；酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２−アセトキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イセチオン酸などの有機酸から調製される塩などが挙げられる。
【００３４】
本発明の薬学的に許容できる塩は、従来の化学的手法によって式ＩまたはＩＩの化合物から調製し得る。一般にこのような塩は、これらの化合物の遊離酸または塩基形態と、理論量の適切な塩基または酸とを水または有機溶剤中、または両者の混合物中で反応させて調製し得る。一般にエーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、またはアセトニトリルのような非水性媒体が好ましい。適切な塩の一覧は、その開示を参照によって本明細書に援用する、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ'ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１７ｔｈ  ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，１９８５，ｐ．１４１８にある。
【００３５】
本発明はまた、式Ｉおよび式ＩＩの化合物の薬学的に許容できるエステルにも応用できる。本明細書での用法では、「薬学的に許容できるエステル」とは、式ＩまたはＩＩの化合物がそのエステルを作成することによって修飾された、開示される化合物を指す。薬学的に許容できるエステルの例としては、例えばボロン酸エステル、すなわちボロン酸化合物のエステル誘導体、および環式ボロン酸エステルが挙げられる。環式ボロン酸エステルの例としては、ジエタノールアミンボロン酸エステル、ジイソプロパノールアミンボロン酸エステル、アミノ二酢酸ボロン酸エステル、ピナンジオールボロン酸エステル、ピナコールボロン酸エステル、１，２−エタンジオールボロン酸エステル、１，３−プロパンジオールボロン酸エステル、１，２−プロパンジオールボロン酸エステル、２，３−ブタンジオールボロン酸エステル、１，１，２，２−テトラメチルエタンジオールボロン酸エステル、１，２−ジイソプロピルエタンジオールボロン酸エステル、５，６−デカンジオールボロン酸エステル、１，２−ジシクロヘキシルエタンジオールボロン酸エステル、ビシクロヘキシル−１，１'−ジオール、および１，２−ジフェニル−１，２−エタンジオールボロン酸エステルが挙げられるがこれに限定されるものではない。好ましくはボロン酸エステルは、環式ボロン酸エステルである。好ましくは環式ボロン酸エステルは、ジエタノールアミンボロン酸エステル、ジイソプロパノールアミンボロン酸エステル、またはアミノ二酢酸ボロン酸エステルであり、より好ましくはジエタノールアミンボロン酸エステルである。例えば化合物１０、化合物１１、化合物１２、化合物１３、化合物１４、または化合物１５。
【００３６】
本発明の薬学的に許容できるエステルは、従来の化学的手法によって式ＩまたはＩＩのボロン酸から調製し得る。一般にこのようなエステルは、酸と理論量のアルコールまたはジオールとを水、有機溶剤、または両者の混合物中で反応させることで調製し得る。
【００３７】
本発明の実施態様は、シクロデキストリンと組み合わさった式Ｉまたは式ＩＩの化合物の凍結乾燥ケークを対象とする。「シクロデキストリン」とは、典型的に６個以上のα−Ｄ−グルコピラノシド単位を含有する環式オリゴ糖類のファミリーを指す。本発明のシクロデキストリンは、天然のシクロデキストリンおよびそれらの誘導体を含み得る。天然のシクロデキストリンとしては、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、およびγ−シクロデキストリンが挙げられる。誘導体は典型的に、外側または親水性側に位置するシクロデキストリンの水酸基を修飾することで調製される。修飾のタイプおよび程度、ならびにそれらの調製については、当該技術分野で良く知られている。例えばその内容全体を本明細書に援用する、Ｓｚｅｊｔｌｉ，Ｊ．，Ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｉｒ  Ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ  Ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ，Ａｋａｄｅｍｉａｉ  Ｋｉａｄｏ：Ｂｕｄａｐｅｓｔ，１９８２；米国特許第５，０２４，９９８号明細書；米国特許第５，８７４，４１８号明細書、および米国特許第５，６６０，８４５号明細書、およびそこに含まれる参考文献を参照されたい。
【００３８】
天然のシクロデキストリンのいずれでも誘導体化し得る。シクロデキストリン誘導体としては、好ましくはメチル−、ジメチル−、トリメチル−、およびエチル−β−シクロデキストリンである、アルキル化シクロデキストリン；ヒドロキシエチル−、ヒドロキシプロピル−、およびジヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンをはじめとするヒドロキシアルキル化シクロデキストリン；エチルカルボキシメチルシクロデキストリン；好ましくはβ−シクロデキストリンスルフェート、β−シクロデキストリンスルホネート、およびβ−シクロデキストリンスルホブチルエーテルである、スルフェート、スルホネートおよびスルホアルキルシクロデキストリン；ならびにポリマー性シクロデキストリンが挙げられる。その他のシクロデキストリン誘導体は、グルコシル−およびマルトシル−β−シクロデキストリンなどの糖類によるヒドロキシ基の置換によって作成し得る。
【００３９】
好ましいシクロデキストリンとしては、天然シクロデキストリン、メチル−β−シクロデキストリン、ジメチル−β−シクロデキストリン、トリメチル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシメチル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、３−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、β−シクロデキストリンスルフェート、β−シクロデキストリンスルホネート、またはβ−シクロデキストリンスルホブチルエーテルが挙げられる。これらのほとんどはＡｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ、およびＷａｃｋｅｒ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｎｅｗ  Ｃａｎａａｎ，Ｃｏｎｎｅｃｔｉｃｕｔなどの供給元から市販される。好ましいシクロデキストリンとしては、β−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、およびβ−シクロデキストリンスルホブチルエーテルが挙げられる。好ましくはシクロデキストリンは、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリン、スルホブチルエーテルβ−シクロデキストリン、またはその混合物である。好ましいシクロデキストリンとしては、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、およびβ−シクロデキストリンスルホブチルエーテルが挙げられる。最も好ましい実施態様では、シクロデキストリンはヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンである。特に好ましい１つのシクロデキストリンは、Ｒｏｑｕｅｔｔｅ  Ｆｒｅｒｅｓ，Ｆｒａｎｃｅから入手できるＫＬＥＰＴＯＳＥ（登録商標）ＨＰＢである。
【００４０】
好ましくはシクロデキストリンは、凍結乾燥中および／または後に薬剤を安定化するのに効果的な量で存在する。シクロデキストリンは、典型的に凍結乾燥ケークの約９９％ｗ／ｗまでの量で存在する。好ましくはシクロデキストリンは、凍結乾燥ケークの約２０％〜約９０％ｗ／ｗの量で存在する。好ましい実施態様では、シクロデキストリンは、凍結乾燥ケークの約４０％〜約７０％ｗ／ｗの量で存在する。なおもより好ましいのは、シクロデキストリンが凍結乾燥ケークの約４５％〜約６５％ｗ／ｗの量で存在する実施態様である。最も好ましい実施態様は、４０％、４５％、または５５％ｗ／ｗのシクロデキストリンを含んでなる。
【００４１】
本発明の凍結乾燥ケークはまた、１つ以上の薬学的に許容できる賦形剤も含む。例えば本発明の凍結乾燥ケークは、１つ以上の増量剤、１つ以上の界面活性剤、または１つ以上の増量剤と１つ以上の界面活性剤との組み合わせを含有してもよい。
【００４２】
米国食品医薬品局（ＦＤＡ）から「一般的に安全とみなされている」（ＧＲＡＳ）増量剤は、医薬品凍結乾燥の技術分野で良く知られており、得られる凍結乾燥ケークの構造を強化する傾向がある。増量剤としては、好ましくは単糖類またはオリゴ糖類、糖アルコール、およびそれらの混合物である糖類が挙げられる。さらに具体的には、本発明で使用される増量剤としては、スクロース、デキストロース、マルトース、乳糖、ソルビトール、グリシン、およびデキストランが挙げられる。最も好ましい増量剤はマンニトールである。
【００４３】
増量剤は、典型的に凍結乾燥ケークの約９９％ｗ／ｗまでの量で存在する。好ましくは増量剤は、凍結乾燥ケークの約２０％〜約９０％ｗ／ｗを構成する。好ましい実施態様では、増量剤は凍結乾燥ケークの約３０％〜約６０％ｗ／ｗを構成する。別の実施態様では、増量剤は凍結乾燥ケークの約３５％または約４５％ｗ／ｗを構成する。
【００４４】
適切な界面活性剤としては、ＦＤＡによるＧＲＡＳにかなうあらゆる薬学的に許容できる界面活性剤が挙げられる。例としては、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル（ポリソルベート）、ソルビタンエステル、ポリエチレングリコールエーテル、飽和ポリグルコール化グリセリド、ポリエチレングリコールの脂肪酸エステル、ヒドロキシル化レシチン、中鎖モノグリセリド、中鎖脂肪酸エステル、ポリエチレン／プロピレングリコール共重合体、ポリエチレングリコールステアラート、およびｄ−α−トコフェリルポリエチレングリコールスクシナートが挙げられるが、これに限定されるものではない。
【００４５】
その他の有用な界面活性剤の例は、モノ−、ジ−、またはトリグリセリドからなる飽和ポリグルコール化グリセリド；例えばＧｅｌｕｃｉｒｅ（登録商標）４４／１４などのポリエチレングリコールのジ脂肪酸エステル；例えばＣｅｎｔｒｏｌｅｎｅ（登録商標）Ａなどのヒドロキシル化レシチン；例えばモノカプリル酸グリセリル（Ｉｍｗｉｔｏｒ（登録商標）３０８、Ｃａｐｍｕｌ（登録商標）ＭＣＭ  Ｃ−８）などの中鎖モノグリセリド；例えばカプリル酸／カプリン酸グリセリル（Ｃａｐｍｕｌ（登録商標）ＭＣＭ）などの中鎖モノグリセリドおよびジグリセリド；ポリエチレン／プロピレングリコール共重合体；酸化エチレンと酸化プロピレンのブロック共重合体（例えばＰｏｌｏｘａｍｅｒ  １８８、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ−６８など）；エトキシル化ヒマシ油（例えばＣｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）ＥＬなど）；およびマクロゴール１５ヒドロキシステアレート（例えばＳｏｌｕｔｏｌ（登録商標）ＨＳ  １５など）である。例えばＰｏｌｏｘａｍｅｒ  １８８、モノカプリル酸グリセリル、およびＧｅｌｕｃｉｒｅ（登録商標）４４／１４などのいくつかの界面活性剤は、室温で固体または半固体である。追加的界面活性剤は、本分野における一般的な参考書であり、その内容全体を参照によって本明細書に援用する、Ｔｈｅ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，２ｎｄ  Ｅｄ．，Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ，ＬｏｎｄｏｎおよびＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎによる出版（１９９４）にある。
【００４６】
好ましい界面活性剤の例としては、ポリオキシプロピレンポリオキシエチレンブロック共重合体、ポリソルベート、マクロゴール１５ヒドロキシステアレート（例えばＳｏｌｕｔｏｌ（登録商標））、ポリオキシル３５ヒマシ油（例えばＣｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）ＥＬ）、ポリエトキシ化ヒマシ油など、ならびにそれらの混合物が挙げられる。好ましくは界面活性剤は、ポリソルベート、すなわちポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、特にポリソルベート２０（ＴＷＥＥＮ２０）またはポリソルベート８０（ＴＷＥＥＮ８０）である。
【００４７】
界面活性剤の添加は、凍結乾燥前溶液の調製において、式Ｉまたは式ＩＩの化合物、またはその塩またはエステルの可溶化を助ける。多数の実施態様では、界面活性剤は不要であり使用されない。典型的に、界面活性剤が使用される実施態様では、凍結乾燥前溶液を調製する際に少なくとも２％ｗ／ｗの界面活性剤が有益であることが分かった。理想的には界面活性剤は、凍結乾燥前溶液中に約２％〜約１０％ｗ／ｗの界面活性剤の量で存在すべきである。好ましくは本発明の凍結乾燥前溶液は、約２％〜約５％ｗ／ｗ、最も好ましくは約２％〜約３％ｗ／ｗの界面活性剤を含有する。凍結乾燥後、凍結乾燥ケークは典型的に、約１０％〜約４０％ｗ／ｗの界面活性剤を含んでなる。好ましい実施態様は、凍結乾燥ケーク中に約１５％〜約２０％ｗ／ｗの界面活性剤を含んでなる。その他の好ましい実施態様は、凍結乾燥ケーク中に約１５％〜約３０％ｗ／ｗの界面活性剤を含んでなる。
【００４８】
その他の賦形剤もまた、本発明の凍結乾燥ケーク中で使用してもよい。このような賦形剤としては、抗酸化剤、抗菌剤、冷凍安定剤、ｐＨ調節剤などが挙げられる。特定の実施態様では、凍結乾燥ケークはｐＨ調節剤を含有する。ｐＨ調節剤の包含は、式ＩまたはＩＩの化合物のエステルを使用して凍結乾燥ケークを調製する場合に特に好ましい。代表的なｐＨ調節剤としては、酸、塩基およびそれらの混合物（例えば緩衝液）が挙げられる。例としては、塩酸およびリン酸などの鉱酸が挙げられる。追加的な例としては、酢酸、硫酸、アスコルビン酸、クエン酸、乳酸、酒石酸、コハク酸、およびマレイン酸が挙げられる。緩衝液としては、リン酸緩衝液、酢酸緩衝液、クエン酸緩衝液、タルトレート緩衝液、乳酸緩衝液、スクシナート緩衝液、マレアート緩衝液、ＴＲＩＳ緩衝液、グリシン緩衝液、およびヒスチジン緩衝液が挙げられる。好ましいｐＨ調節剤はリン酸である。
【００４９】
特に式ＩまたはＩＩの化合物のエステルを使用して凍結乾燥ケークを調製する場合、凍結乾燥ケークのｐＨは、好ましくは約１〜７のｐＨなどの約７以下のｐＨに調節される。より好ましくは凍結乾燥ケークのｐＨは、約２〜６のｐＨなどの約６以下のｐＨに調節される。より好ましくは凍結乾燥ケークのｐＨは、約３〜５のｐＨなどの約５以下のｐＨに調節される。より好ましくは凍結乾燥ケークのｐＨは、約４のｐＨなどの約４以下のｐＨに調節される。凍結乾燥ケークのｐＨは、凍結乾燥前溶液のｐＨを調節することで調節されてもよい。
【００５０】
特定の実施態様では、凍結乾燥前溶液は、薬学的に許容できる有機溶剤を用いて調製される。アルコールの添加は、凍結乾燥前溶液を調製する際に、式Ｉまたは式ＩＩの化合物、またはその塩またはエステルの可溶化を助けるかもしれない。特定の実施態様では、凍結乾燥前溶液は、約７５％ｖ／ｖまで、約６０％ｖ／ｖまで、または約４０％ｖ／ｖまでなどの約９０％ｖ／ｖまでの有機溶剤を含んでなる。好ましくは凍結乾燥前溶液は、約１０％〜約７０％ｖ／ｖなどの約５％〜約７５％ｖ／ｖの有機溶剤を含んでなる。好ましい実施態様では、凍結乾燥前溶液は、約３０％〜約５０％ｖ／ｖなどの約２０％〜約６０％ｖ／ｖの有機溶剤を含んでなる。好ましくは凍結乾燥前溶液は、約４０％ｖ／ｖの有機溶剤を含んでなる。
【００５１】
適切な有機溶剤としては、水と混和性で凍結乾燥によって除去される溶剤が挙げられる。例としては、好ましくはエタノール、プロパノール、ｔ−ブタノール、およびプロピレングリコールなどのＣ１〜６アルコールであるアルコールと、ジメチルスルホキシドなどの極性非プロトン性溶剤とが挙げられる。好ましい有機溶剤はｔｅｒｔ−ブタノールである。典型的に約３％ｗ／ｗ以下の有機溶剤が、本発明の凍結乾燥ケーク中に存在する。好ましくは有機溶剤は、凍結乾燥ケークの約１％ｗ／ｗ以下の量で存在する。
【００５２】
好ましい本発明の凍結乾燥ケークとしては、以下を含んでなるものが挙げられる。（ａ）式Ｉ、式ＩＩの化合物、または薬学的に許容できるその塩またはエステル、より好ましくは式Ｉ、式ＩＩの化合物、または薬学的に許容できるそのエステル、より好ましくは式Ｉまたは式ＩＩの化合物、より好ましくは式Ｉの化合物、より好ましくは化合物１、化合物１０、化合物１１、化合物１２、化合物１３、化合物１４、化合物１５、またはボルテゾミブ、より好ましくは化合物１、化合物１０、化合物１１、化合物１３、化合物１４、またはボルテゾミブ、より好ましくは化合物１、化合物１０、化合物１３、またはボルテゾミブ、より好ましくは化合物１またはボルテゾミブ、より好ましくは化合物１または化合物１０、より好ましくは化合物１；（ｂ）シクロデキストリン、好ましくはヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン；および（ｃ）界面活性剤、好ましくはポリソルベート２０。特に好ましい本発明の凍結乾燥ケークとしては、以下を含んでなるものが挙げられる。（ａ）式Ｉ、式ＩＩの化合物、または薬学的に許容できるその塩またはエステル、より好ましくは式Ｉ、式ＩＩの化合物、または薬学的に許容できるそのエステル、より好ましくは式Ｉまたは式ＩＩの化合物、より好ましくは式Ｉの化合物、より好ましくは化合物１、化合物１０、化合物１１、化合物１２、化合物１３、化合物１４、化合物１５、またはボルテゾミブ、より好ましくは化合物１、化合物１０、化合物１１、化合物１３、化合物１４、またはボルテゾミブ、より好ましくは化合物１、化合物１０、化合物１３、またはボルテゾミブ、より好ましくは化合物１またはボルテゾミブ、より好ましくは化合物１または化合物１０、より好ましくは化合物１；（ｂ）シクロデキストリン、好ましくはヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン；および（ｃ）増量剤、好ましくはマンニトール。その他の好ましい本発明の凍結乾燥ケークとしては、以下を含んでなるものが挙げられる。（ａ）式Ｉ、式ＩＩの化合物、または薬学的に許容できるその塩またはエステル、より好ましくは式Ｉ、式ＩＩの化合物、または薬学的に許容できるそのエステル、より好ましくは式Ｉまたは式ＩＩの化合物、より好ましくは式Ｉの化合物、より好ましくは化合物１、化合物１０、化合物１１、化合物１２、化合物１３、化合物１４、化合物１５、またはボルテゾミブ、より好ましくは化合物１、化合物１０、化合物１１、化合物１３、化合物１４、またはボルテゾミブ、より好ましくは化合物１、化合物１０、化合物１３、またはボルテゾミブ、より好ましくは化合物１またはボルテゾミブ、より好ましくは化合物１または化合物１０、より好ましくは化合物１；（ｂ）シクロデキストリン、好ましくはヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン；（ｃ）増量剤、好ましくはマンニトール；および（ｄ）界面活性剤、好ましくはポリソルベート２０。本発明のいずれの凍結乾燥ケークも、Ｃ１〜６アルコール、好ましくはｔｅｒｔ−ブタノールなどの有機溶剤を好ましくは凍結乾燥ケークの約３％ｗ／ｗ未満の量でさらに含んでなってもよい。いずれの凍結乾燥ケークも、好ましくはリン酸である鉱酸などのｐＨ調節剤を好ましくはｐＨを約６以下、好ましくは約１〜６、より好ましくは約２〜５、より好ましくは約４以下、より好ましくは約３〜４、より好ましくは約４などの約７以下に調節するのに十分な量で、さらに含んでなってもよい。
【００５３】
本発明の凍結乾燥ケークの特定の利点は、それらが約１８０秒以内に容易に戻されて、ヒトへの注射に適した変色のない（すなわち無色またはほぼ無色）および／または粒子状物質を含まない、透明でほぼ無色の溶液を形成することである。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは容易に戻されて、約１８０秒以内にヒトへの注射に適した粒子状物質を含まない無色透明溶液を形成する。特定の好ましい実施態様では、凍結乾燥ケークは約１２０秒以内に戻されて、ヒトへの注射に適した粒子状物質を含まない無色透明溶液を形成する。好ましくは凍結乾燥ケークは約９０秒以内に戻されて、ヒトへの注射に適した粒子状物質を含まない無色透明溶液を形成する。より好ましくは凍結乾燥ケークは約６０秒以内に戻されて、ヒトへの注射に適した粒子状物質を含まない無色透明溶液を形成する。より好ましくは凍結乾燥ケークは約３０秒以内に戻されて、ヒトへの注射に適した粒子状物質を含まない無色透明溶液を形成する。より好ましくは凍結乾燥ケークは約１０秒以内に戻されて、ヒトへの注射に適した粒子状物質を含まない無色透明溶液を形成する。
【００５４】
本発明の凍結乾燥ケークの別の利点は、それらが高度に望ましい貯蔵安定性プロフィールを示すことである。保存条件は変動し得て、例えば約５℃〜約４０℃などの温度変動、および例えば約１０％ＲＨ〜約７５％ＲＨなどの相対湿度（ＲＨ）変動を含み得る。本明細書の目的で、５℃＋／−３℃および環境ＲＨは「冷蔵条件」と称され、２５℃＋／−２℃および６０％ＲＨ＋／−５％ＲＨは「室温条件」と称され、３０℃＋／−２℃および６５％ＲＨ＋／−５％ＲＨは「強化された室温条件」と称され、４０℃＋／−２℃および７５％ＲＨ＋／−５％ＲＨは「加速条件」と称される。保存条件はまた、保存期間の変動を含み得る。例えば本発明の凍結乾燥ケークは、約１ヶ月間、約２ヶ月間、約３ヶ月間、約６ヶ月間、約１年以上保存し得る。凍結乾燥ケークの分析は、例えばＨＰＬＣ、ＧＣなどの当該技術分野で知られているあらゆる技術を使用して実施し得る。
【００５５】
好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、冷蔵条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約５％ｗ／ｗ未満、より好ましくは約３％ｗ／ｗ未満の分解不純物を含有する。「分解不純物」とは、保存中の薬剤分解の結果としてのケーク中の不純物（すなわち凍結乾燥ケークが形成された後に起きた薬剤分解）を意味する。換言すれば、分解不純物は、最初の製造時にケーク中に存在する不純物（例えば凍結乾燥前に薬剤中に存在する不純物、または凍結乾燥工程で発生する不純物）を含まない。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、冷蔵条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約２％ｗ／ｗ未満、より好ましくは約１％ｗ／ｗ未満の分解不純物を含有する。より好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、冷蔵条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．５％ｗ／ｗ以下、より好ましくは約０．２％ｗ／ｗ以下、最も好ましくは約０．１％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、室温条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約５％ｗ／ｗ未満、より好ましくは約３％ｗ／ｗ未満の分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、室温条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約２％ｗ／ｗ未満、より好ましくは約１％ｗ／ｗ未満の分解不純物を含有する。より好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、室温条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．５％ｗ／ｗ以下、より好ましくは約０．２％ｗ／ｗ以下、最も好ましくは約０．１％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、強化された室温条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約５％ｗ／ｗ未満、より好ましくは約３％ｗ／ｗ未満の分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、強化された室温条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約２％ｗ／ｗ未満、より好ましくは約１％ｗ／ｗ未満の分解不純物を含有する。より好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、強化された室温条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．５％ｗ／ｗ以下、より好ましくは約０．２％ｗ／ｗ以下、最も好ましくは約０．１％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、加速条件下で３ヶ月間にわたるケーク保存後に、約５％ｗ／ｗ未満、より好ましくは約３％ｗ／ｗ未満の分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、加速条件下で３ヶ月間にわたるケーク保存後に、約２％ｗ／ｗ未満、より好ましくは約１％ｗ／ｗ未満の分解不純物を含有する。より好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは加速条件下で３ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．５％ｗ／ｗ以下、より好ましくは約０．２％ｗ／ｗ以下、最も好ましくは約０．１％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、加速条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約５％ｗ／ｗ未満、より好ましくは約３％ｗ／ｗ未満の分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、加速条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約２％ｗ／ｗ未満、より好ましくは約１％ｗ／ｗ未満の分解不純物を含有する。より好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、加速条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．５％ｗ／ｗ以下、より好ましくは約０．２％ｗ／ｗ以下、最も好ましくは約０．１％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する。特許請求されるケークの分析は、例えばＨＰＬＣ、ＧＣなどの当該技術分野で知られているあらゆる技術を使用して実施し得る。サンプル中の分解不純物の含量は、０時間のそして保存後のサンプルのＨＰＬＣクロマトグラム中の全ピークの総面積と比較した、クロマトグラム中の不純物ピークの総相対面積を計算し（（例えば［不純物の総ピーク面積］／［サンプルの総ピーク面積］×１００％）、次に保存後の不純物から０時間の不純物を差し引いて判定され得る（例えば［保存後不純物］−［初期不純物］＝分解不純物）。
【００５６】
好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、冷蔵条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に、約５％ｗ／ｗ未満、より好ましくは約３％ｗ／ｗ未満の分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、冷蔵条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に、約２％ｗ／ｗ未満、より好ましくは約１％ｗ／ｗ未満の分解不純物を含有する。より好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、冷蔵条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．５％ｗ／ｗ以下、より好ましくは約０．２％ｗ／ｗ以下、最も好ましくは約０．１％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、室温条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に、約５％ｗ／ｗ未満、より好ましくは約３％ｗ／ｗ未満の分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、室温条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に、約２％ｗ／ｗ未満、より好ましくは約１％ｗ／ｗ未満の分解不純物を含有する。より好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、室温条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．５％ｗ／ｗ以下、より好ましくは約０．２％ｗ／ｗ以下、最も好ましくは約０．１％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、強化された室温条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に、約５％ｗ／ｗ未満、より好ましくは約３％ｗ／ｗ未満の分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、強化された室温条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に、約２％ｗ／ｗ未満、より好ましくは約１％ｗ／ｗ未満の分解不純物を含有する。より好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、強化された室温条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．５％ｗ／ｗ以下、より好ましくは約０．２％ｗ／ｗ以下、最も好ましくは約０．１％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、加速条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に、約５％ｗ／ｗ未満、より好ましくは約３％ｗ／ｗ未満の分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、加速条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に、約２％ｗ／ｗ未満、より好ましくは約１％ｗ／ｗ未満の分解不純物を含有する。より好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、加速条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．５％ｗ／ｗ以下、より好ましくは約０．２％ｗ／ｗ以下、最も好ましくは約０．１％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する。
【００５７】
好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、冷蔵条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約１％ｗ／ｗ以下のいずれかの個別分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、室温条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約１％ｗ／ｗ以下のいずれかの個別分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、強化された室温条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約１％ｗ／ｗ以下のいずれかの個別分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、加速条件下で３ヶ月間にわたるケーク保存後に、約１％ｗ／ｗ以下のいずれかの個別分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、加速条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約１％ｗ／ｗ以下のいずれかの個別分解不純物を含有する。サンプル中のあらゆる個別分解不純物の含量は、０時間のそして保存後のサンプルのＨＰＬＣクロマトグラム中の全ピーク総面積と比較したクロマトグラム中の不純物ピークの相対面積を計算し（例えば［個別分解不純物のピーク面積］／［サンプルの総ピーク面積］×１００％）、次に保存後の不純物含量から０時間の不純物含量を差し引いて判定され得る（例えば［保存後個別不純物含量］−［初期個別不純物含量］＝個別分解不純物含量）。
【００５８】
好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、冷蔵条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．５％ｗ／ｗ以下のいずれかの個別分解不純物を含有する。より好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、冷蔵条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．２％ｗ／ｗ以下、より好ましくは約０．１％以下のいずれかの個別分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、室温条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．５％ｗ／ｗ以下のいずれかの個別分解不純物を含有する。より好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、室温条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．２％ｗ／ｗ以下、より好ましくは約０．１％以下のいずれかの個別分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、強化された室温条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．５％ｗ／ｗ以下のいずれかの個別分解不純物を含有する。より好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、強化された室温条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．２％ｗ／ｗ以下、より好ましくは約０．１％以下のいずれかの個別分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、加速条件下で３ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．５％ｗ／ｗ以下のいずれかの個別分解不純物を含有する。より好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、加速条件下で３ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．２％ｗ／ｗ以下、より好ましくは約０．１％以下のいずれかの個別分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、加速条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．５％ｗ／ｗ以下のいずれかの個別分解不純物を含有する。より好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、加速条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．２％ｗ／ｗ以下、より好ましくは約０．１％以下のいずれかの個別分解不純物を含有する。
【００５９】
好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、冷蔵条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．５％ｗ／ｗ以下のいずれかの個別分解不純物を含有する。より好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、冷蔵条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．２％ｗ／ｗ以下、より好ましくは約０．１％以下のいずれかの個別分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、室温条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．５％ｗ／ｗ以下のいずれかの個別分解不純物を含有する。より好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、室温条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．２％ｗ／ｗ以下、より好ましくは約０．１％以下のいずれかの個別分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、強化された室温条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．５％ｗ／ｗ以下のいずれかの個別分解不純物を含有する。より好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、強化された室温条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．２％ｗ／ｗ以下、より好ましくは約０．１％以下のいずれかの個別分解不純物を含有する。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、加速条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．５％ｗ／ｗ以下のいずれかの個別分解不純物を含有する。より好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、加速条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．２％ｗ／ｗ以下、より好ましくは約０．１％以下のいずれかの個別分解不純物を含有する。
【００６０】
好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、冷蔵条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約２％以下、好ましくは約１％以下の薬剤純度低下を示す。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、室温条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約２％以下、好ましくは約１％以下の薬剤純度低下を示す。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、加速条件下で３ヶ月間にわたるケーク保存後に、約２％以下、好ましくは約１％以下の薬剤純度低下を示す。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、加速条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約２％以下、好ましくは約１％以下の薬剤純度低下を示す。サンプル中の薬剤の純度は、サンプルのＨＰＬＣクロマトグラム中の全ピークの総面積と比較したクロマトグラム中の薬剤ピークの相対面積から（例えば［薬剤のピーク面積］／［サンプルの総ピーク面積］×１００％）判定され得て、純度低下は［初期純度］−［純度保存後］＝薬剤純度低下、として計算され得る。
【００６１】
好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、冷蔵条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．５％以下の薬剤純度低下を示す。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、室温条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．５％以下の薬剤純度低下を示す。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、加速条件下で３ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．５％以下の薬剤純度低下を示す。好ましくは本発明の凍結乾燥ケークは、加速条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に、約０．５％以下の薬剤純度低下を示す。
【００６２】
本発明の凍結乾燥ケークは、当業者に知られている技術のいずれかを使用して調製されてもよい。本発明のこれらの実施態様では、式ＩまたはＩＩの化合物または薬学的に許容できるその塩またはエステル、シクロデキストリン、増量剤、および界面活性剤を含んでなり、好ましい一方法は、シクロデキストリン、増量剤、および水を含んでなる第１の混合物を調製するステップを含む。好ましい第１の混合物は、シクロデキストリンとしてヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、増量剤としてマンニトールを含む。この第１の混合物の一部を界面活性剤、好ましくはポリソルベート２０と混合して、第２の混合物を形成する。式Ｉまたは式ＩＩの化合物または薬学的に許容できるその塩またはエステル、好ましくは化合物１またはボルテゾミブを第２の混合物と合わせて、薬剤混合物を形成する。いくつかの実施態様では、第１の混合物または薬剤混合物のどちらかまたは双方に、好ましくはｔｅｒｔ−ブタノールである有機溶剤を添加し得る。次に第１の混合物の残部を薬剤混合物と混合して、凍結乾燥前溶液を形成する。いくつかの実施態様では、例えば滅菌濾過などの当該技術分野で知られている技術を使用して、凍結乾燥前溶液を滅菌する。次に凍結乾燥当該技術分野で知られている技術を使用して、凍結乾燥前溶液を凍結乾燥する。
【００６３】
別の実施態様では、好ましくはヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンであるシクロデキストリンを水と合わせて第１の混合物を形成する。式ＩまたはＩＩの化合物または薬学的に許容できるその塩またはエステル、好ましくは化合物１またはボルテゾミブを界面活性剤と合わせて薬剤混合物を形成する。いくつかの実施態様では、好ましくはｔｅｒｔ−ブタノールである有機溶剤が、第１の混合物、薬剤混合物、または双方に添加される。第１の混合物と薬剤混合物とを合わせて、凍結乾燥前溶液を形成する。いくつかの実施態様では、例えば滅菌濾過などの当該技術分野で知られている技術を使用して、凍結乾燥前溶液を滅菌する。次に当該技術分野で知られている凍結乾燥技術を使用して、凍結乾燥前溶液を凍結乾燥する。
【００６４】
式ＩまたはＩＩの化合物または薬学的に許容できるその塩またはエステル、シクロデキストリン、および増量剤を含んでなる、本発明のこれらの実施態様では、好ましい一方法は、シクロデキストリン、増量剤、および水を含有する第１の混合物を調製するステップを含む。好ましい第１の混合物は、シクロデキストリンとしてヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、増量剤としてマンニトールを含む。式Ｉまたは式ＩＩの化合物または薬学的に許容できるその塩またはエステル、好ましくは化合物１またはボルテゾミブ、および好ましくはｔｅｒｔ−ブタノールである有機溶剤を含有する薬剤混合物を調製する。第１の混合物を薬剤混合物と合わせて、凍結乾燥前溶液を提供する。いくつかの実施態様では、例えば滅菌濾過などの当該技術分野で知られている技術を使用して凍結乾燥前溶液を滅菌する。次に当該技術分野で知られている凍結乾燥技術を使用して、凍結乾燥前溶液を凍結乾燥する。
【００６５】
上の各実施態様において、凍結乾燥前のいかなる時点でもｐＨ調節剤によってｐＨを調製し得る。好ましくはｐＨ調節剤を凍結乾燥前溶液に添加して、ｐＨを調節する。
【００６６】
本発明は、
（ａ）式Ｉ、式ＩＩ
【００６７】
【化１０】
0005722871.tif 000011
【００６８】
（式中、Ｒ１は少なくとも１つのＮを有して任意に置換される５−、６−、または１０員環ヘテロアリールであり、またはＲ１は任意に置換される６−または１０員環アリールである）の化合物、または薬学的に許容できるその塩またはエステルから選択される、薬剤；
（ｂ）シクロデキストリン；および
（ｃ）増量剤と界面活性剤からなる群から選択される少なくとも１つの部材
を含有する混合物を凍結乾燥するステップを含んでなる、凍結乾燥ケークを製造する方法を提供する。好ましい薬剤、シクロデキストリン、増量剤、界面活性剤、およびその他の成分は、前述のとおりである。
【００６９】
本発明の凍結乾燥ケークは、がんの治療で使用し得ることが想定される。例えば本発明の凍結乾燥ケークは、慢性リンパ球性白血病、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫または乳がんを治療するのに使用し得る。好ましくは凍結乾燥ケークは、多発性骨髄腫を治療するために使用される。
【００７０】
大抵の場合、本発明の凍結乾燥ケークは、ケークを（例えば０．９％ＮａＣｌまたは５％マンニトールの無菌注射用水で）戻し、得られる溶液を注射することで投与される。しかし凍結乾燥ケークはまた、任意にその他の賦形剤との混和材料中での経口投与にも適する。
【００７１】
本発明のいくつかの実施態様では、記載される凍結乾燥ケークは、別の抗新生物薬と連続的または同時のどちらかで投与され得ることが想定される。商業用途で、臨床評価で、そして臨床前開発において、利用できる多数の抗新生物薬があり、複合薬化学療法による新生物形成の治療のために選択できる。このような抗新生物薬はいくつかの主要なカテゴリー、すなわち抗生物質タイプ薬剤、共有結合ＤＮＡ結合剤、代謝拮抗剤、プレドニゾンやデキサメタゾンなどのグルココルチコイドをはじめとするホルモン剤、免疫学的薬剤、インターフェロンタイプ薬剤、レチノイドなどの分化誘導薬、アポトーシス促進剤、およびアンチセンスや低分子干渉ＲＮＡなどの化合物をはじめとする種々雑多な薬剤のカテゴリ−などに分類される。代案としては、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）阻害薬、ＳＯＤ模倣薬、またはａｌｐｈａｖｂｅｔａ３阻害薬などのその他の抗新生物薬を使用してもよい。
【００７２】
以下の実施例は例証的な目的で提供され、本発明をどのようにも制限することは意図されない。当業者は、変更または改変し得て本質的に同じ結果を生じる、多様な重要でないパラメーターを容易に認識するであろう。
【実施例】
【００７３】
ＨＰＬＣ分析は、例えば３５℃でＴｈｅｒｍｏ  ＢｅｔａＢａｓｉｃ  Ｃ１８（内径１５０ｍｍ×４．６ｍｍ、５μｍ）カラムまたはＷａｔｅｒｓ  Ｓｙｍｍｅｔｒｙ  Ｃ１８（１５０ｍｍ×４．６ｍｍ、３．５μｍ）カラムを使用して、２５４ｎｍのＵＶ検出を使用し、流速１ｍＬ／分、注入量８μＬまたは１０μＬ、および実行働時間４２分（実行時間＝３５分、再平衡時間＝７分）で実施し得る。以下の勾配移動相が、好ましい勾配系である。
【００７４】
【表１】
0005722871.tif 000012
【００７５】
％純度は、当該技術分野で知られている技術を使用して計算し得る。例えばＨＰＬＣを使用して測定される化合物１の純度は、次のように計算し得る。
（［化合物１の面積］÷［注入サンプルの総面積］）×１００％＝化合物１純度％
【００７６】
ＨＰＬＣ分析のためのサンプルは、例えば約４ｍＬのＤＩ（脱イオン）水またはＳＷＦＩ（無菌注射用水）を使用して、発明の凍結乾燥ケークを戻すことで調製し得る。水を添加した後、各バイアルを約１０秒間、または全固形物が溶解するまで、振盪または超音波処理する。分析のためにおよそ１ｍＬの戻した溶液を取り出して、ＨＰＬＣバイアルに入れ得る。
【００７７】
配合１．（１Ｒ）−１−［（３ａＳ、４Ｓ、６Ｓ、７ａＲ）−ヘキサヒドロ−３ａ，５，５−トリメチル−４，６−メタノ−１，３，２−ベンゾジオキサボロール−２−イル］−３−メチルブチルアミン塩酸塩の調製
塔頂撹拌機、窒素掃引、温度読み取り付き熱電対、１Ｌの添加漏斗、表面下気体分散管、および補助加熱装置／冷却装置を装着した２０ＬのＣｈｅｍｇｌａｓｓ（登録商標）ジャケット付き反応装置に、８．０Ｌの無水メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルを装填した。冷却装置は−４０℃に設定した。溶剤を撹拌しながら−３１．３℃に冷却した。次に温度を−２５．７〜−１０．０℃に保ちながら、１．７５時間かけて７１４．４ｇ（１９．７１ｍｏｌ、５．０ｅｑ）のＨＣｌ（ｇ）を表面下に添加した。次に１．６２３５ｋｇ（３．９６４ｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ビス（トリメチルシリル）−（１Ｒ）−１−［（３ａＳ，４Ｓ，６Ｓ，７ａＲ）−ヘキサヒドロ−３ａ，５，５−トリメチル−４，６−メタノ−１，３，２−ベンゾジオキサボロール−２−イル］−３−メチルブチルアミン（米国特許公開第２００５／０２４００４７号明細書（Ｐｉｃｋｅｒｓｇｉｌｌら）で開示されるのと同様の方法によって得られる）を２．１Ｌのメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルに溶解した。次に反応温度を−２５〜−１０℃に保ちながら、４０分間かけて溶液をＨＣｌ溶液に添加した。添加完了後、反応を周囲温度に加温して冷却装置を停止させた。反応を周囲温度に暖まらせて、一晩撹拌した。翌朝のＧＣ分析は、反応が完了したことを示した。次に反応を回転蒸発器上で１〜２Ｌの体積に濃縮した。３Ｌのヘプタンを混合物に添加して蒸留を継続し、３Ｌの留出物をさらに除去した。次に１Ｌの留出物を除去しながら、６Ｌのヘプタンを小分けしてさらに添加した。前述のとおりに装備を施した２０ＬのＣｈｅｍｇｌａｓｓ（登録商標）ジャケット付き反応装置に生成混合物を移し、周囲温度で緩慢に一晩撹拌した。翌朝混合物を−１５および−１０℃に冷却し、１時間撹拌した。１号Ｗｈａｔｍａｎ（登録商標）濾紙を装着した中型焼結ガラス濾過用漏斗を通して、生成物を濾過した。生成ケークを２Ｌの冷（０℃）ヘプタンで洗浄し、窒素パージした真空下（２９ｍｍＨｇ）オーブン内において３５℃で乾燥させた。収率は９９６．０ｇ（８４％）で純度は９３．９Ａ％であり、ジアステレオマー比は９８．７５：１．２５（ｄ．ｅ．＝９７．５％）であった。
【００７８】
配合２．６−（２Ｓ，３Ｒ）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（１，３，６，２−ジオキサザボロカン−２−イル）−３−メチルブチル}−３−ヒドロキシ−２−{（６−フェニルピリジン−２−イル）ホルムアミド］ブタンアミド（すなわち化合物１０）の調製
工程Ａ．６−フェニル−ピリジン−２−塩化カルボニルの調製
塔頂撹拌機、熱電対、デジタル式温度調節器付き加熱マントル、冷却管、および窒素出入口を装着した２Ｌの三つ口丸底フラスコに、１００．０ｇ（０．５０２ｍｏｌ）の６−フェニル−２−ピリジンカルボン酸および１５００ｍＬのトルエン（Ｋｆ<０．０２重量％）を装填し、次に４０℃に加温した。次に添加漏斗を通じて２０分間かけて、塩化チオニル（１１０ｍＬ；１．５１ｍｏｌ、３ｅｑ）を薄いスラリーに添加した。薄いスラリーを７５℃に加熱して、それが透明溶液になるまで一晩撹拌した（典型的に１０〜１６時間）。反応をメチルエステル誘導体としての変換について、ＨＰＬＣでアッセイした。反応混合物を室温に冷却した後、溶剤および過剰な塩化チオニルを次のようにして真空内で除去した。４０℃（浴温）完全真空下で反応混合物を元の体積のおよそ１／３に揮散し（約５００ｍｌ）、次に（１０００ｍｌ）の新鮮なトルエンを添加した。濃縮を継続し、元の体積の１／３（約５００ｍｌ）に再度揮散して、１０００ｍｌの新鮮なトルエンを用いた再希釈がそれに続いた。除去されたトルエンの総量は、約２０００ｍＬであった。
【００７９】
工程Ｂ．（２Ｓ，３Ｒ）−３−ヒドロキシ−２−［オキソ−２−（６−フェニル−ピリジン−２−イル）−エチル}−酪酸の調製
３Ｌの三つ口丸底フラスコに、塔頂撹拌機、熱電対、分圧均一化滴下漏斗、窒素出入口、および氷／水冷却槽を装着した。６２．８ｇ（０．５３ｍｏｌ）のＬ−スレオニンを入れて、１１７ｇ（１．１ｍｏｌ）の炭酸ナトリウムおよび１５００ｍＬの脱イオン水がそれに続いた。水溶液を１０．０℃に冷却した。この間に、工程Ａで調製した酸塩化物／トルエン溶液を添加漏斗に装填した。このトルエン溶液を約１０℃でおよそ１０分間かけて水性反応に滴下して添加した。追加が完了したら反応を室温（約２２〜２５℃）に加温して、それがＨＰＬＣ分析によって完了したことが示されるまで激しく撹拌した（典型的に約３時間）。次に反応混合物を分液漏斗に移し、２層を分離させた。次に下の水相を反応フラスコに装填した。次にメタノール（８００ｍＬ）を混合物に添加して、温度を１５〜２０℃に保ちながら２．５ＭのＨＣｌ（約８５０ｍＬ）によるｐＨ調節（標的ｐＨ＝１〜２）がそれに続いた。約ｐＨ＝５でいくらかのガス放出が起き、ｐＨ＝３での生成物沈殿がそれに続いた。ｐＨ調節後にスラリーを室温で３０分間撹拌した。真空濾過によって白色固形物を収集し（母液の損失<２ｍｇ／ｍＬ）、脱イオン水（２×５００ｍｌ）で洗浄して、次に窒素掃引した真空オーブン内において４０℃で恒量に乾燥させ、ＨＰＬＣ純度９９Ａ％（９５重量％）の１４１ｇ（０．４７１ｍｏｌ、９４％）の標題化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）δ１２．９（ｓ，１Ｈ，ｂ），８．７１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．１６Ｈｚ），８．２３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．２４Ｈｚ），８．１（ｍ，３Ｈ），８．０３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），７．５５（ｍ，３Ｈ），５．３４（ｓ，１Ｈ，ｂ），４．４６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．５２，９．１６Ｈｚ），４．３４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．９２，６．２４Ｈｚ），１．１５（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．４Ｈｚ）。
【００８０】
工程Ｃ．Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−１［［［（１Ｒ）−１−１［（３ａＳ，４Ｓ，６Ｓ，７ａＲ）−ヘキサヒドロ−３ａ，５，５−トリメチル−４，６−メタノ−１，３，２−ベンゾジオキサボロール−２−イル］−３−メチルブチル］アミノ］カルボニル］２−ヒドロキシプロピル］−６−フェニル−２−ピリジンカルボキサミドの調製
熱電対、インペラ付き撹拌軸、添加漏斗、および低温再循環槽を装着した１０Ｌのジャケット付き反応容器に、１５６．１ｇ（０．５２ｍｏｌ、１．０ｅｑ）の（２Ｓ，３Ｒ）−３−ヒドロキシ−２−［オキソ−２−（６−フェニル−ピリジン−２−イル）−エチル}−酪酸（工程Ｂで調製された）、２１８．８ｇ（０．５７５ｍｏｌ、１．１ｅｑ）のＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ'Ｎ'−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロリン酸塩（ＨＡＴＵ）、１５７．７ｇ（０．５２２ｍｏｌ、１．０ｅｑ）の（１Ｒ）−１−［（３ａＳ、４Ｓ、６Ｓ、７ａＲ）−ヘキサヒドロ−３ａ，５，５−トリメチル−４，６−メタノ−１，３，２−ベンゾジオキサボロール−２−イル］−３−メチルブチルアミン塩酸塩（配合１として調製された）（イソブチルジアステレオマー（Ｒ：Ｓ）の９８．８：１．２混合物）］、および２３５５ｍＬのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を装填した。撹拌を開始し、固形物が溶解してから反応混合物を<−２５．０℃に冷却した。ジイソプロピルエチルアミン（２１８．６ｍＬ、１６２．２ｇ、１．２５ｍｏｌ、２．４ｅｑ）を添加漏斗に装填し、次に−２５℃〜−３０℃で約３０分間かけて、反応混合物に滴下して添加した。追加が完了したら、反応を−３０℃で６時間撹拌した。塔頂撹拌機および熱電対を装着した別の２２Ｌの四つ口反応フラスコに、３９２５ｍＬのＤＩ水および３９２５ｍＬの酢酸エチルを装填した。室温で５分間かけて、反応混合物をこのフラスコに移した。下の水層を分離して廃棄した。３９２５ｍＬのＤＩ水中の３９３ｇのリン酸一ナトリウム一水和物の溶液を調製し、有機相をこの溶液で洗浄した。下の水相を再度除去して廃棄した。４７１０ｍＬのＤＩ水中の３７６．９ｇの炭酸水素ナトリウムの溶液を調製し、有機層をこの溶液で洗浄して２つの部分に分離させた。再度下の水相を分離して廃棄した。３１４０ｍＬのＤＩ水中で４８１．４ｇの塩化ナトリウムを使用して飽和塩化ナトリウム溶液を調製し、有機層をこの溶液で洗浄して層を分離させ、下の水相を廃棄した。Ｎｏｒｉｔ  ＧＡＣ  １２４０＋カーボン（１５７ｇ）を有機相に添加して、懸濁液を室温で一晩撹拌した（１３．８時間）。Ｗｈａｔｍａｎ  ＧＦ／Ｃガラス繊維濾紙を通して真空濾過によりカーボンを除去し、次に３５０ｍＬの酢酸エチルで洗浄した。濾液を真空下の回転蒸発器上において浴温３３〜４４℃で濃縮して気泡にし、２３１．５ｇ（０．４２２ｍｏｌ、８０．９％）の標題化合物を化学純度９６．４％の気泡として得た。スレオニン異性体のレベルは１．１６Ａ％であった。１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）δ８．９８（ｄ，ｂ，１Ｈ，Ｊ＝２．９９Ｈｚ），８．７６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５５Ｈｚ），８．２（ｍ，３Ｈ），８．１１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．７１Ｈｚ），８．０２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５４Ｈｚ），７．５４（ｍ，３Ｈ），５．２６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．９５Ｈｚ），４．４９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．２２，８．５２Ｈｚ），４．１３（ｍ，２Ｈ），２．６（ｍ，ｂ，１Ｈ），２．１９（ｍ，ｂ，１Ｈ），２．０２（ｍ，ｂ，１Ｈ），１．８３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．３８Ｈｚ），１．７５（ｓ，ｂ，１Ｈ），１．６���（ｍ，ｂ，１Ｈ），１．６２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１３．９Ｈｚ），１．３６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．０５Ｈｚ），１．３（ｍ，ｂ，３Ｈ），１．２２（ｄ，６Ｈ，Ｊ＝１１．６５Ｈｚ），１．１２（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．２６Ｈｚ），０．８４（ｄ，６Ｈ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ），０．７９（ｓ，３Ｈ）。
【００８１】
工程Ｄ．６−（２Ｓ，３Ｒ）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（１，３，６，２−ジオキサザボロカン−２−イル）−３−メチルブチル}−３−ヒドロキシ−２−{（６−フェニルピリジン−２−イル）ホルムアミド］ブタンアミド（すなわち化合物１０）の調製
オプション１：二段階工程
１２Ｌの四つ口丸底フラスコに塔頂撹拌機、熱電対、および窒素出口を装着してから、２３１０ｍＬのメタノール中の２２９．８ｇ（０．４２ｍｏｌ、１ｅｑ）のＮ−［（１Ｓ，２Ｒ）−１［［［（１Ｒ）−１−１［（３ａＳ，４Ｓ，６Ｓ，７ａＲ）−ヘキサヒドロ−３ａ，５，５−トリメチル−４，６−メタノ−１，３，２−ベンゾジオキサボロール−２−イル］−３−メチルブチル］アミノ］カルボニル］２−ヒドロキシプロピル］−６−フェニル−２−ピリジンカルボキサミド（工程Ｃで調製された）溶液を装填した。これに３４６５ｍＬのｎ−ヘプタンと、１０８ｇ（１．０６ｍｏｌ、２．５ｅｑ）の（２−メチルプロピル）ボロン酸と、３５３ｍＬのＤＩ水中の７０ｍＬ（８４ｇ、０．８５ｍｏｌ、２．０ｅｑ）の３７％塩酸溶液とを添加した。撹拌を開始し、二相混合物を室温で１６時間撹拌した。反応混合物を４Ｌの分液漏斗に小分けして移し、下のメタノール相を分離して反応フラスコに戻した。上のヘプタン層は廃棄した。３４６５ｍＬのｎ−ヘプタンの新鮮な装填を反応に添加し、反応を室温でさらに２時間撹拌した。撹拌を停止して相を分離し、下のメタノール層をｎ−ヘプタン（２×４６００ｍＬ）で抽出した。ヘプタン相を廃棄し、メタノール相を真空内において浴温４０℃で濃縮した。酢酸エチル（４６２０ｍＬ）を蒸発フラスコに装填して粘着性の黄色残渣を溶解してから、１２Ｌの反応フラスコに移した。７６５０ｍＬのＤＩ水中の６６５．４ｇの炭酸水素ナトリウム溶液を調製して使用し、酢酸エチル層を２回に分けて洗浄した（１×４０００ｍＬおよび１×３８５０ｍＬ）。２７００ｍＬのＤＩ水中の１０５９．７ｇの塩化ナトリウム溶液を調製して、酢酸エチル相を洗浄するのに使用した。
【００８２】
層の分離後、酢酸エチル層を４７．３ｇ（０．４５ｍｏｌ、１．１ｅｑ）のジエタノールアミンで処理した。混合物を室温で一晩撹拌した。密閉濾過フラスコを使用して沈殿固形物を真空濾過により収集し、湿潤ケークを５００ｍＬの酢酸エチルで洗浄した。密封濾過用漏斗をグローブボックスに移し、そこで開封して４８１．８ｇの湿潤ケークを２つのパイレックス（登録商標）乾燥トレーに移し、次にそれを真空オーブンに入れた。生成物を５０℃、２３．５Ｈｇで２７時間かけて恒量に乾燥させ、化学純度９８．６％でキラル純度９８．８％ｄｅの１７９．７ｇ（０．３７２ｍｏｌ、８８．８％）の標題化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）δ８．８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５２Ｈｚ），８．２（ｍ，３Ｈ），８．１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．６８Ｈｚ），８．０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．７，０．９Ｈｚ），７．５（ｍ，３Ｈ），７．２（ｄ，１Ｈ），６．５（ｔ，ｂ，１Ｈ），５．１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．９２Ｈｚ），４．５（ｄｄ，１Ｈ），４．２（ｍ，１Ｈ），３．６（ｍ，２Ｈ），３．５（ｍ，２Ｈ），３．１（ｍ，１Ｈ），３．０（ｍ，２Ｈ），２．７（ｍ，２Ｈ），１．６（ｍ，１Ｈ），１．３（ｍ，１Ｈ），１．２（ｍ，１Ｈ），１．１（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．３２Ｈｚ），０．８（２ｄ，６Ｈ，Ｊ＝６．６８，６．５２Ｈｚ）。
【００８３】
オプション２：一段階工程
５０ｍＬの三つ口丸底フラスコに熱電対、撹拌棒、窒素出入口、加熱マントル、および温度調節器を装着した。フラスコに２．０ｇ（３．６５ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）のＮ−［（１Ｓ，２Ｒ）−１［［［（１Ｒ）−１−１［（３ａＳ，４Ｓ，６Ｓ，７ａＲ）−ヘキサヒドロ−３ａ，５，５−トリメチル−４，６−メタノ−１，３，２−ベンゾジオキサボロール−２−イル］−３−メチルブチル］アミノ］カルボニル］２−ヒドロキシプロピル］−６−フェニル−２−ピリジンカルボキサミド（工程Ｃで調製された）および２０ｍＬのＭＴＢＥを装填した。全ての固形物が溶解するまで、反応混合物をおよそ１０分間撹拌した。シリンジを通じて、ジエタノールアミン（０．４４ｍＬ、０．４８ｇ、４．５７ｍｍｏｌ、１．２５ｅｑ）を２滴のメタンスルホン酸と共に淡黄色の溶液に装入し、混合物を５０℃に加熱した。およそ３０分後、白色沈殿物が形成し始めた。撹拌を一晩継続してから室温に冷却した。固形物を真空濾過によって収集し、ＭＴＢＥ（１×２０ｍＬ）で洗浄し、次に真空下において６０℃で一晩乾燥させて、０．９２ｇ（１．９ｍｍｏｌ、５２％）の標題化合物を化学純度９１．９％およびキラル純度>９９．５％ｄｅの白色固体として得た。
【００８４】
工程Ｅ（任意）．６−（２Ｓ，３Ｒ）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（１，３，６，２−ジオキサザボロカン−２−イル）−３−メチルブチル}−３−ヒドロキシ−２−{（６−フェニルピリジン−２−イル）ホルムアミド］ブタンアミド（すなわち化合物１０）の精製
２Ｌの四つ口丸底フラスコに塔頂撹拌機、熱電対、冷却管、加熱マントル、温度調節器、および窒素出口を装着してから、１７５ｇ（０．３６３ｍｏｌ）の６−（２Ｓ，３Ｒ）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（１，３，６，２−ジオキサザボロカン−２−イル）−３−メチルブチル}−３−ヒドロキシ−２−{（６−フェニルピリジン−２−イル）ホルムアミド］ブタンアミド（工程で調製されたＤ）および１４００ｍＬ（８×容積）の９５％エタノールを装填した。撹拌を開始して、得られた懸濁液を７５．７℃で２１分間加熱した。温度に達したら、溶液を７４．９〜７５．８℃で８０分間撹拌してから２．７℃で８０分間冷却した。次に反応スラリーを２．２〜６．０℃で一晩（１７時間）撹拌して、生成物を完全に結晶化させた。沈殿した固形物を密閉濾過フラスコを使用して真空濾過によって収集し、湿潤ケークを３５０ｍＬの９５％エタノールで洗浄した。密封した濾過用漏斗をグローブボックスに移し、そこで開封して２０３．８ｇの湿潤ケークをパイレックス（登録商標）乾燥トレーに移し、次にそれを真空オーブンに入れた。生成物を５０℃、２３．５のＨｇで１９時間かけて恒量に乾燥させ、化学純度９９．７６％および光学的純度>９９．８％ｄｅの１４７．３ｇ（０．３０６ｍｏｌ、８４．２％）の標題化合物を得た。
【００８５】
配合３．［（１Ｒ）−１−［［（２Ｓ，３Ｒ）−３−ヒドロキシ−２−［［（６−フェニルピリジン−２−イル）カルボニル］アミノ］−１−オキソブチル］アミノ］−３−メチルブチル］ボロン酸（すなわち化合物１）の調製
熱電対、撹拌棒、および窒素出口を装着した５０ｍＬの三つ口丸底フラスコに、１．６５ｇ（３．４ｍｍｏｌ）の化合物１０（化学純度＝９９．５％、キラル純度>９９．５％ｄｅ）、１７ｍＬのメチルイソブチルケトン、および１．７ｍＬの２Ｎ塩酸を装填した。混合物を一晩撹拌した。反応層を分離させ、有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過して乾燥するまで真空内で蒸発させた。残渣をペンタン中で研和して、得られた白色固形物を真空濾過により収集してから、真空オーブン内で６０℃で一晩乾燥し１．２６ｇ（３．１ｍｍｏｌ、９０％）の標題化合物を得た。ＨＰＬＣは９９．６Ａ％の純度を示す。キラル純度>９９．５％ｄｅ。１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ４−ＭｅＯＤ，４００ＭＨｚ）δ８．１７（ｍ，２Ｈ），８．１３（ｍ，１Ｈ），８．０５（ｍ，２Ｈ），７．５（ｍ，３Ｈ），４．７５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．０４Ｈｚ），４．４２（ｄｑ，１Ｈ，Ｊ＝２．９２，６．４），２．７（ｔ，ｂ，１Ｈ），１．６１（ｍ，１Ｈ），１．３５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．４８Ｈｚ），１．２９（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．３６Ｈｚ），０．８９（ｄ，６Ｈ，Ｊ＝６．５２Ｈｚ）。
【００８６】
配合４．（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（１，３，６，２−ジオキサザボロカン−２−イル）−３−メチルブチル］−３−フェニル−２−（ピラジン−２−イルホルムアミド）プロパンアミド（すなわち化合物１３）の調製
工程Ａ．ピラジン−２−塩化カルボニルの調製
撹拌棒、熱電対、デジタル式温度調節器付き加熱マントル、冷却管、および窒素出入口を装着した５００ｍｌの三つ口丸底フラスコに、１５ｇ（０．１２ｍｏｌ）のピラジンカルボン酸、２２５ｍＬのトルエン（Ｋｆ<０．０２重量％）、および２６．４ｍｌ（４３ｇ、０．３６ｍｏｌ）の塩化チオニルを装填した。薄いスラリーを７５℃に加熱して、一晩撹拌した（１０〜１６時間）。反応混合物を室温に冷却後、溶剤および過剰な塩化チオニルを次のようにして真空内で除去した。完全真空下において６０℃（浴温）で反応混合物を元の体積のおよそ１／３に揮散し、次に（１７５ｍｌ）の新鮮なトルエンを添加した。濃縮を継続し、元の体積の１／３に再度揮散して、２２５ｍｌの新鮮なトルエンを用いた再希釈がそれに続き、トルエン溶液中のピラジン酸塩化物を得た。
【００８７】
工程Ｂ．（Ｓ）−３−フェニル−２−［（ピラジン−２−カルボニル）−アミノ］−プロピオン酸の調製
第２の５００ｍｌ三つ口丸底フラスコに撹拌棒、熱電対、分圧均一化滴下漏斗、窒素出入口、および氷／水冷却槽を装着した。２０．２ｇ（０．１２２ｍｏｌ）のＬ−フェニルアラニンを添加し、２８．２ｇ（０．２６６ｍｏｌ）の炭酸ナトリウムおよび２２５ｍＬの脱イオン水がそれに続いた。水溶液を１０．０℃に冷却した。この間に、工程Ａで調製した酸塩化物／トルエン溶液（約１２５ｍＬ）を添加漏斗に装填した。このトルエン溶液を約１０℃でおよそ１０分間かけて水性反応に滴下して添加した。追加が完了したら反応を室温（約２２〜２５℃）に加温して、３時間にわたり激しく撹拌した。次に反応混合物を分液漏斗に移し、２層を分離させた。次に下の水相を反応フラスコに装填した。次にメタノール（１２５ｍＬ）を赤い溶液に添加して、温度を１５〜２０℃に保ちながら３．０ＭのＨＣｌ（約１７５ｍＬ）によるｐＨ調節（標的ｐＨ＝１〜２）がそれに続いた。約ｐＨ＝５でいくらかのガス放出が起き、ｐＨ＝３での生成物沈殿がそれに続いた。ｐＨ調節後に、スラリーを周囲温度で室温で３０分間撹拌した。得られたピンク色の固形沈殿物を真空濾過によって収集し（母液の損失<２ｍｇ／ｍＬ）、脱イオン水（１×５０ｍｌ）で洗浄して、次に窒素掃引した真空オーブン内において４０℃で恒量に乾燥させ、ＨＰＬＣ純度９９Ａ％の１１．９２ｇ（０．４３．９ｍｍｏｌ、３６％）の標題化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）δ１３．０４（ｓ，１Ｈ），９．１４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．４４Ｈｚ），８．８８（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝２．４８，６．１６Ｈｚ），８．７５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．５２，２．４Ｈｚ），７．２５（ｍ，４Ｈ），７．１８（ｍ，１Ｈ），４．７５（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．４８，８．０８Ｈｚ），３．２（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝１．７９，５．３２Ｈｚ）。
【００８８】
工程Ｃ．Ｎ−［（１Ｓ）−１［［［（１Ｒ）−１−［３ａＳ，４Ｓ，６Ｓ，７ａＲ）−ヘキサヒドロ−３ａ，５，５−トリメチル−４，６−メタノ−１，３，２−ベンゾジオキサボロール−２−イル］−３−メチルブチル］アミノ］カルボニル］−２−ベンジル］２−ピラジンカルボキサミドの調製
撹拌棒、添加漏斗、熱電対、窒素出入口および冷却槽を装着した５００ｍｌの三つ口丸底フラスコに、１１ｇ（９９．９ｍｍｏｌ）の（Ｓ）−３−フェニル−２−［（ピラジン−２−カルボニル）−アミノ］−プロピオン酸（工程Ｂの生成物）、１５．５．０ｇ（４０．６ｍｍｏｌ）のＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ'Ｎ'−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロリン酸塩（ＨＡＴＵ）、１２．２ｇ（４０．６ｍｍｏｌ）の（１Ｒ）−１−［（３ａＳ、４Ｓ、６Ｓ、７ａＲ）−ヘキサヒドロ−３ａ，５，５−トリメチル−４，６−メタノ−１，３，２−ベンゾジオキサボロール−２−イル］−３−メチルブチルアミン塩酸塩（イソブチルジアステレオマー（Ｒ：Ｓ）の８７：１３混合物）、および１６５ｍＬのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を装填した。淡黄色の反応溶液を−３５℃に冷却し、１２．６ｇ（１７ｍＬ、９７．３ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジ−イソプロピルエチルアミンを−３４℃〜−３５℃で６分間かけて滴下して添加した。次に得られた溶液を−４０〜−１１℃で一晩撹拌した。反応混合物を６００ｍＬの１：１冷水／酢酸エチル混合物上でクエンチした。分液漏斗に移した後、層が分離した。次に有機相を１０％水性リン酸水素ナトリウム（１×２００ｍＬ）、８％水性炭酸水素ナトリウム（２×２００ｍＬ）、および飽和塩化ナトリウム（１×２００ｍＬ）で連続的に洗浄した。生成物溶液を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、次に濾過した。濾液を真空内で乾燥するまで蒸発させて、１９．５７ｇ（３７．７ｍｍｏｌ、９３％）の標題化合物をＨＰＬＣ純度９２Ａ％の淡褐色の気泡として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）δ９．１５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．４４Ｈｚ），８．８７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４８Ｈｚ），８．７（ｍ，３Ｈ），７．２５（ｍ，４Ｈ），７．１８（ｍ，１Ｈ），４．８９（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝６．８８，１５．４Ｈｚ），４．１３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８，８．５６Ｈｚ），３．１５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．８８Ｈｚ），２．７（ｍ，ｂ，１Ｈ），２．２２（ｍ，ｂ，１Ｈ），２．０５（ｍ，ｂ，１Ｈ），１．８７（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．４０Ｈｚ），１．８１（ｓ，ｂ，１Ｈ），１．６７（ｄ，ｂ，１Ｈ），１．５２（ｍ，ｂ，１Ｈ），１．１３−１．３３（ｍ，９Ｈ），０．８３（ｄｄ，６Ｈ，Ｊ＝２．４８，６．５６Ｈｚ），０．８０（ｓ，３Ｈ）。
【００８９】
工程Ｄ．（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（１，３，６，２−ジオキサザボロカン−２−イル）−３−メチルブチル］−３−フェニル−２−（ピラジン−２−イルホルムアミド）プロパンアミド（すなわち化合物１３）の調製
１Ｌの四つ口丸底フラスコに塔頂撹拌機、熱電対、および窒素出入口を装着し、次に１９．０ｇ（３６．６ｍｍｏｌ）のＮ−［（１Ｓ）−１［［［（１Ｒ）−１−［（３ａＳ，４Ｓ，６Ｓ，７ａＲ）−ヘキサヒドロ−３ａ，５，５−トリメチル−４，６−メタノ−１，３，２−ベンゾジオキサボロール−２−イル］−３−メチルブチル］アミノ］カルボニル］−２−ベンジル］２−ピラジンカルボキサミド（工程Ｃで調製された）、９．３２ｇ（９１．５ｍｍｏｌ）のイソブチルボロン酸、１９０ｍＬのメタノール、３４．７ｍＬ（６９．４ｍｍｏｌ）の２Ｍ水性塩酸、および２８５ｍＬのヘプタンを装填した。ＩＰＣが面積で<２％の出発原料が残留することを示すまで、二相反応を室温で一晩撹拌した。反応混合物を分液漏斗に移し、層を分離させた。下のメタノール層をヘプタン（２×２５０ｍＬ）で洗浄してから、１Ｌの丸底フラスコに取り出して乾燥するまで真空内で蒸発させた。得られた残渣を３００ｍＬの酢酸エチルで溶解し、それを８％水性炭酸水素ナトリウム（２×２００ｍＬ）および鹹水（１×３００ｍＬ）で洗浄してから、前述のとおりに装備を施した清潔な１Ｌの三つ口丸底フラスコに移した。
【００９０】
酢酸エチル溶液に４．１ｇ（３８．４ｍｍｏｌ）のジエタノールアミンを添加して、混合物を室温で週末にかけて撹拌した。得られた固形物を真空濾過により収集して酢酸エチル（１×３０ｍＬ）で洗浄し、次に真空オーブン内で５０℃で一晩乾燥させて、標題化合物を白色固形物（１５．８ｇ、３４．９ｍｍｏｌ、９５．２％）として得て、それはＨＰＬＣによって９１：９のジアステレオマー混合物（すなわち８２％ｄｅ）であることが示された。
【００９１】
工程Ｅ（任意）．（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（１，３，６，２−ジオキサザボロカン−２−イル）−３−メチルブチル］−３−フェニル−２−（ピラジン−２−イルホルムアミド）プロパンアミド（すなわち化合物１３）の精製
工程Ｄで調製された（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（１，３，６，２−ジオキサザボロカン−２−イル）−３−メチルブチル］−３−フェニル−２−（ピラジン−２−イルホルムアミド）プロパンアミドを撹拌棒、熱電対、加熱マントル、調節器、冷却管、および窒素出入口を装着した２５０ｍｌの三つ口丸底フラスコに装填した。次にエタノール（無水、１２８ｍＬ）をフラスコに装填して、加熱して還流させた。固形物の全部は溶解せず、これらは真空濾過によって除去され、後に望まれない異性体に富むことが示された（２：８）。濾液を丸底フラスコに戻し、室温に冷却して生成物を結晶化して真空濾過により単離し、冷無水エタノール（１×５０ｍｌ）で洗浄して、真空オーブン内で５０℃で一晩乾燥させて、１１．６ｇ（２５．６ｍｍｏｌ、７０％）の標題化合物をジアステレオマー（すなわち８８％ｄｅ）の９４：６混合物として得た。化学純度は>９９．９Ａ％であった。１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）δ９．１０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．４Ｈｚ），８．８８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４８Ｈｚ），８．８３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８４Ｈｚ），８．７５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．５２，２．３２Ｈｚ），７．３（ｍ，５Ｈ），６．５５（ｓ，ｂ，１Ｈ），４．７５（ｍ，１Ｈ），３．６５（ｍ，２Ｈ），３．５５（ｍ，１Ｈ），３．４５（ｍ，１Ｈ），２．９−３．２（ｍ，４Ｈ），２．８（ｍ，１Ｈ），２．７（ｍ，２Ｈ），１．５６（ｍ，１Ｈ），１．３３（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝４．０４，１３．８０Ｈｚ），１．１８（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝３．４８，９．８８Ｈｚ），０．８（ｄｄ，６Ｈ，Ｊ＝６．６４，１２．５６Ｈｚ）。
【００９２】
配合５．ボルテゾミブの調製
１００ｍｌの三つ口丸底フラスコに撹拌棒、熱電対、および窒素出入口を装着し、次に５．０ｇ（１０．４ｍｍｏｌ）の（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（１，３，６，２−ジオキサザボロカン−２−イル）−３−メチルブチル］−３−フェニル−２−（ピラジン−２−イルホルムアミド）プロパン−アミド（すなわち化合物１３）、５０ｍｌのメタノール、および１０．４ｍｌの２Ｎ水性塩酸を装填した。反応を室温で一晩撹拌してから、真空内において４０℃で溶剤を除去した。得られた残渣を５０ｍＬの酢酸エチルに溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム（１×５０ｍＬ）で洗浄してから、真空内で乾燥するまで有機体を再度濃縮した。次に残渣を窒素下で５０ｍＬのペンタンにより室温で一晩研和した。得られた易流動性固形物を真空濾過によって収集し、ペンタン（１×２０ｍｌ）で洗浄して、次に真空オーブン内でにおいて３０℃で一晩乾燥させ、３．２９ｇ（８．５６ｍｍｏｌ、８２．３％）の標題化合物を白色固形物として得た。ＨＰＬＣ分析は、化学純度>９９．８Ａ％および９３．５：６．５のジアステレオマー比（すなわち８７％ｄｅ）を示した。１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ４−ＭｅＯＨ，４００ＭＨｚ）δ９．１５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．３６Ｈｚ），８．７７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４８Ｈｚ），８．６８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．５２，２．４４Ｈｚ），７．２７（ｍ，４Ｈ），７．２１（ｍ，１Ｈ），５．０５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．６８Ｈｚ），３．２（ｍ，２Ｈ），２．６６（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．５６Ｈｚ），１．３９（ｍ，１Ｈ），１．１７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．１２Ｈｚ），０．８３（ｄｄ，６Ｈ，Ｊ＝５．３２，６．４０Ｈｚ）。
【００９３】
配合６．６−フェニル−ピリジン−２−カルボン酸{（１Ｓ，２Ｒ）−１−［（Ｒ）−１−（４，８−ジメチル−［１，３，６，２−ジオキサボロカン−２−イル）−３−メチルブチルカルバモイル}−２−２−ヒドロキシプロピル}アミド（すなわち化合物１１）の調製
５０ｍＬの四つ口丸底フラスコに撹拌棒、熱電対、温度調節器付き加熱マントル、冷却管、および窒素入口を装着し、次に２．０ｇ（３．６５ｍｍｏｌ）のＮ−［（１Ｓ，２Ｒ）−１［［［（１Ｒ）−１−１［（３ａＳ，４Ｓ，６Ｓ，７ａＲ）−ヘキサヒドロ−３ａ，５，５−トリメチル−４，６−メタノ−１，３，２−ベンゾジオキサボロール−２−イル］−３−メチルブチル］アミノ］カルボニル］２−ヒドロキシプロピル］−６−フェニル−２−ピリジンカルボキサミド（化学純度＝９５．７％、キラル純度は約９７．５％ｄｅ（Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−１［［［（１Ｒ）−１−１［（３ａＳ，４Ｓ，６Ｓ，７ａＲ）−ヘキサヒドロ−３ａ，５，５−トリメチル−４，６−メタノ−１，３，２−ベンゾジオキサボロール−２−イル］−３−メチルブチル］アミノ］カルボニル］２−ヒドロキシプロピル］−６−フェニル−２−ピリジンカルボキサミドを作成するのに使用された、（１Ｒ）−１−［（３ａＳ、４Ｓ、６Ｓ、７ａＲ）−ヘキサヒドロ−３ａ，５，５−トリメチル−４，６−メタノ−１，３，２−ベンゾジオキサボロール−２−イル］−３−メチルブチルアミンは、９７．５％ｄｅを有したという事実に基づく））、３０ｍＬのｔ−ブチルメチルエーテル（ＭＴＢＥ）、および０．６１ｇ（９４．５６ｍｍｏｌ、１．２５ｅｑ）のジイソプロパノールアミンを装填した。得られた黄色溶液を２０〜２５℃で１６時間撹拌し、その時点で少量の固形物のみが形成した。追加的な１．２ｇ（９ｍｍｏｌ、２．５ｅｑ）のジイソプロパノールアミンを装填し、混合物を４０℃で１６時間加熱してから、室温に冷却した。白色固形物を真空濾過により収集して１５ｍＬのＭＴＢＥで洗浄し、次に真空下において３３℃で一晩乾燥させて、１Ｈ  ＮＭＲに基づいて１．３１ｇ（２．５５ｍｍｏｌ、７０％）の所望の生成物を得た。ＨＰＬＣによる化学純度は９６．８Ａ％であり、ジアステレオマーは検出されなかった（>９９．８％ｄｅ）。
【００９４】
実施例１：配合１の凍結乾燥ケークの調製
表１は、この実施例で使用された成分の代表的な量を示す。無菌注射用水中のマンニトールとヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＫＬＥＰＴＯＳＥ（登録商標）ＨＰ）の溶液を調製した。化合物１の完全な溶解（外観検査）が起きるまで、ポリソルベート２０、ｔｅｒｔ−ブタノール、および化合物１を周囲温度で撹拌した。いかなる可視微粒子もない無色透明な溶液が得られたら、マンニトール／シクロデキストリン溶液を添加した。得られた溶液が均質になるまで撹拌し、次に０．２２μｍのＰＶＤＦフィルター（ＳＴＥＲＩＣＵＰ（登録商標）、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）を用いる使い捨ての無菌装置を使用して濾過した。濾過した溶液を凍結乾燥のために、１０ｍＬの透明ガラスタイプＩバイアルに充填した。実施例７に記載される手順に従って溶液を凍結乾燥し、凍結乾燥ケークを得た。
【００９５】
実施例２：配合２の凍結乾燥ケークの調製
表１は、この実施例で使用された成分の代表的な量を示す。無菌注射用水中のヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＫＬＥＰＴＯＳＥ（登録商標）ＨＰ）溶液を調製した。別の密閉容器内で、化合物１の完全な溶解（外観検査）が起きるまで、ｔｅｒｔ−ブタノールおよび化合物１を周囲温度で撹拌した。いかなる可視微粒子もない無色透明な溶液が得られたら、シクロデキストリン溶液を添加した。得られた溶液が均質になるまで撹拌し、次に０．２２μｍのＰＶＤＦフィルター（ＳＴＥＲＩＣＵＰ（登録商標）、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）を用いる使い捨ての無菌装置を使用して濾過した。濾過された溶液を凍結乾燥のために、１０ｍＬの透明ガラスタイプＩバイアルに４ｍＬ満たした。実施例７に記載される手順に従って溶液を凍結乾燥し、凍結乾燥ケークを得た。
【００９６】
実施例３：配合３の凍結乾燥ケークの調製
表１は、この実施例で使用された成分の代表的な量を示す。無菌注射用水中のマンニトールの溶液を調製した。別の密閉容器内で、化合物１の完全な溶解（外観検査）が起きるまで、ｔｅｒｔ−ブタノールおよび化合物１を周囲温度で撹拌した。いかなる可視微粒子もない無色透明な溶液が得られたら、マンニトール溶液を添加した。得られた溶液が均質になるまで撹拌し、次に０．２２μｍのＰＶＤＦフィルター（ＳＴＥＲＩＣＵＰ（登録商標）、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）を用いる使い捨ての無菌装置を使用して濾過した。濾過された溶液を凍結乾燥のために、１０ｍＬの透明ガラスタイプＩバイアルに４ｍＬ満たした。実施例７に記載される手順に従って溶液を凍結乾燥し、凍結乾燥ケークを得た。
【００９７】
実施例４：配合４の凍結乾燥ケークの調製
表１は、この実施例で使用された成分の代表的な量を示す。無菌注射用水中のマンニトールとヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＫＬＥＰＴＯＳＥ（登録商標）ＨＰ）の溶液を調製した。別の密閉容器内で、化合物１の完全な溶解（外観検査）が起きるまで、ｔｅｒｔ−ブタノールおよび化合物１を周囲温度で撹拌した。いかなる可視微粒子もない無色透明な溶液が得られたら、マンニトール／シクロデキストリン溶液を添加した。得られた溶液が均質になるまで撹拌し、次に０．２２μｍのＰＶＤＦフィルター（ＳＴＥＲＩＣＵＰ（登録商標）、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）を用いる使い捨ての無菌装置を使用して濾過した。濾過された溶液を凍結乾燥のために、１０ｍＬの透明ガラスタイプＩバイアルに満たした。実施例７に記載される手順に従って溶液を凍結乾燥し、凍結乾燥ケークを得た。
【００９８】
実施例５：配合５の凍結乾燥ケークの調製
表１は、この実施例で使用された成分の代表的な量を示す。無菌注射用水中のヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＫＬＥＰＴＯＳＥ（登録商標）ＨＰ）の溶液を調製した。別の密閉容器内で、ポリソルベート２０、ｔｅｒｔ−ブタノール、および化合物１を化合物１の完全な溶解（外観検査）が起きるまで周囲温度で撹拌した。いかなる可視微粒子もない無色透明な溶液が得られたら、シクロデキストリン溶液を添加した。得られた溶液が均質になるまで撹拌し、次に０．２２μｍのＰＶＤＦフィルター（ＳＴＥＲＩＣＵＰ（登録商標）、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）を用いる使い捨ての無菌装置を使用して濾過した。濾過された溶液を凍結乾燥のために、１０ｍＬの透明ガラスタイプＩバイアルに４ｍＬ満たした。実施例７に記載される手順に従って溶液を凍結乾燥し、凍結乾燥ケークを得た。
【００９９】
実施例６：配合６の凍結乾燥ケークの調製
表１は、この実施例で使用された成分の代表的な量を示す。無菌注射用水中のマンニトールおよびヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＫＬＥＰＴＯＳＥ（登録商標）ＨＰ）の溶液を調製した。ポリソルベート２０、化合物１、およびマンニトール／シクロデキストリン溶液の約１／１０を化合物１の完全な溶解（外観検査）が起きるまで約３５℃で撹拌した。いかなる可視微粒子もない無色透明な溶液が得られたら、残りのマンニトール／シクロデキストリン溶液を添加した。得られた溶液が均質になるまで撹拌し、次に０．２２μｍのＰＶＤＦフィルター（ＳＴＥＲＩＣＵＰ（登録商標）、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）を用いる使い捨ての無菌装置を使用して濾過した。濾過された溶液を凍結乾燥のために、１０ｍＬの透明ガラスタイプＩバイアルに４ｍＬ満たした。実施例７に記載される手順に従って溶液を凍結乾燥し、凍結乾燥ケークを得た。
【０１００】
【表２】
0005722871.tif 000013
【０１０１】
実施例７：凍結乾燥工程−方法Ａ
この実施例は、本明細書に記載される配合で使用するのに適した１つの好ましい凍結乾燥サイクルについて記載する。ＬＡＢＣＯＮＣＯ  ＴＲＩＡＤ（登録商標）凍結乾燥機を使用して、溶液を約０℃の棚温度で装入し、次に約−４０℃の凝結温度にする。凍結乾燥工程の第１の区域では棚温度を−３０℃（５℃／分）に上昇させ、圧力を１００μバールにして０．２時間保持する。凍結乾燥工程の第２の区域では、棚温度を２０℃（２℃／分）に上昇させて４時間保持する。凍結乾燥工程の第３の区域では、棚温度３０℃（２℃／分）に上昇させて１８時間保持する。凍結乾燥工程の終わりに、バイアルを真空下で密閉した。凍結乾燥機から取出した後、ゴム栓の上にアルミニウムシールを圧着させた。
【０１０２】
実施例８：凍結乾燥工程−方法Ｂ
例えばポリソルベートなどの界面活性剤を含有する配合では、以下の凍結乾燥工程を使用し得る。溶液を約−４０℃で凍結し、約５時間保持する。一次乾燥では、約８０μｍで真空にして約２５℃に上昇させて１８時間保持する。二次乾燥は約２５℃で実施し、１０時間保持する。
【０１０３】
実施例９：凍結乾燥工程−方法Ｃ
ｔｅｒｔ−ブタノールを含有する配合では、以下の凍結乾燥工程を使用し得る。溶液を約−４０℃で凍結し、約４時間保持する。約−１１℃に上昇させて約４時間保持し、次に約−４０℃に上昇させて約４時間保持する。一次乾燥では、約８０μｍで真空にして約２５℃に上昇させ、約１８時間保持する。二次乾燥では約３０℃に上昇させて、約２０時間保持する。
【０１０４】
実施例１０：凍結乾燥法前の配合２、３、および４の評価
配合２、３、および４について凍結乾燥前の溶液の分析をｔ０および２５℃および６０％相対湿度で４８時間の保存後に実施した。結果を下の表２に示す。２、３、および４の各配合は、無色透明溶液であった。保存期間中の純度の変化は実験誤差内であり、顕著と見なされなかった。
【０１０５】
【表３】
0005722871.tif 000014
【０１０６】
実施例１１：凍結乾燥した配合２の評価
凍結乾燥ケークを４０℃および相対湿度７５％で１５日間、１ヶ月間、２ヶ月間、および３ヶ月間にわたり保存した後の水戻しプロフィールおよび安定性について、配合２を評価した。サンプルを３．８ｍＬの脱イオン水で戻した。凍結乾燥後、配合２は溶解が非常に困難な白色粉末であった。激しく手で振盪しても微粒子が溶液中に残るのが観察された。０．４５ｍｍフィルターを通して溶液を濾過し、ＨＰＬＣによって分析した。結果を表３Ａに示す。
【０１０７】
【表４】
0005722871.tif 000015
【０１０８】
実施例１２：凍結乾燥した配合３の評価
凍結乾燥ケークを４０℃および相対湿度７５％で１５日間、１ヶ月間、２ヶ月間、および３ヶ月間にわたり保存した後の水戻しプロフィールおよび安定性について、配合３を評価した。サンプルを３．８ｍＬの脱イオン水で戻した。凍結乾燥後、配合３は溶解が非常に困難な白色粉末であった。激しく手で振盪しても微粒子が溶液中に残るのが観察された。０．４５ｍｍフィルターを通して溶液を濾過し、ＨＰＬＣによって分析した。結果を表３Ｂに示す。
【０１０９】
【表５】
0005722871.tif 000016
【０１１０】
実施例１３：配合４の評価
凍結乾燥ケークを４０℃および相対湿度７５％で１５日間、１ヶ月間、２ヶ月間、および３ヶ月間にわたり保存した後の水戻しプロフィールおよび安定性について、配合４を評価した。サンプルを３．６４ｍＬの脱イオン水で戻した。シクロデキストリンのみを含有する配合２、およびマンニトールのみを含有する配合３とは対照的に、シクロデキストリンとマンニトールの双方を含有する配合４は凍結乾燥後に、３０秒以内に容易かつ迅速に溶解して、無色透明で微粒子を含まない溶液を形成する白色粉末であった。さらに加速条件下における３ヶ月間にわたる保存後、配合２および３の凍結乾燥ケーク中の薬剤純度は１％を超えて低下したが、配合４の凍結乾燥ケーク中の薬剤純度は安定しており、薬剤純度低下を示さなかった。結果を表３Ｃに示す。
【０１１１】
【表６】
0005722871.tif 000017
【０１１２】
実施例１４：配合１、５、および６の水戻し時の評価
配合１、５、および６をそれらの水戻しプロフィールについて評価した。各配合のサンプルは無菌注射用水で戻した。１〜６の各配合で９０秒以内に溶解が起き、無色透明の微粒子を含まない溶液が生じた。水戻しに際して、沈殿する固形物は観察されなかった。配合５は約２分で溶解して、微粒子を含まない無色透明溶液を生じた。
【０１１３】
実施例１５：配合４の凍結乾燥後の残留ｔｅｒｔ−ブタノールの測定
ガスクロマトグラフィーヘッドスペース法を使用して、ｔｅｒｔ−ブタノールのレベルを測定した。配合４の凍結乾燥後に、約２．７３％ｗ／ｗ〜約２．８５％ｗ／ｗが凍結乾燥ケーク中に検出されると判定された。
【０１１４】
実施例１６：配合１の６ヶ月間貯蔵安定性データ
凍結乾燥した配合１について６ヶ月間安定性研究を実施した。環境相対湿度で約５℃、約６０％相対湿度で約２５℃、および約７５％相対湿度で約４０℃の３つの保存条件を評価した。表４はこの安定性研究の結果を示す。６ヶ月間にわたる保存後、配合１の凍結乾燥ケーク中の薬剤純度は冷蔵条件下で変化せず、室温条件下で０．１％低下し、加速条件下で１．０％低下した。
【０１１５】
【表７】
0005722871.tif 000018
【０１１６】
実施例１７：配合４の６ヶ月間貯蔵安定性データ
凍結乾燥した配合４について６ヶ月間安定性研究を実施した。環境相対湿度で約５℃、約６０％相対湿度で約２５℃、および約７５％相対湿度で約４０℃の３つの保存条件を評価した。表５はこの安定性研究の結果を示す。６ヶ月間にわたる保存後、配合４の凍結乾燥ケーク中の薬剤純度は冷蔵条件下および室温条件下で変化せず、加速条件下で０．５％低下した。
【０１１７】
【表８】
0005722871.tif 000019
【０１１８】
実施例１８：配合５の６ヶ月間貯蔵安定性データ
凍結乾燥した配合５について６ヶ月間安定性研究を実施した。環境相対湿度で約５℃、約６０％相対湿度で約２５℃、および約７５％相対湿度で約４０℃の３つの保存条件を評価した。表６はこの安定性研究の結果を示す。６ヶ月間にわたる保存後、配合５の凍結乾燥ケーク中の薬剤純度は冷蔵条件下で０．２％低下し、室温条件下で１％低下し、加速条件下で８．７％低下した。
【０１１９】
【表９】
0005722871.tif 000020
【０１２０】
実施例１９：配合６の６ヶ月間貯蔵安定性データ
凍結乾燥した配合６について６ヶ月間安定性研究を実施した。環境相対湿度で約５℃、約６０％相対湿度で約２５℃、および約７５％相対湿度で約４０℃の３つの保存条件を評価した。表７はこの安定性研究の結果を示す。６ヶ月間にわたる保存後、配合６の凍結乾燥ケーク中の薬剤純度は冷蔵条件下で０．２％低下し、室温条件下で０．９％低下し、加速条件下で８．１％低下した。
【０１２１】
【表１０】
0005722871.tif 000021
【０１２２】
先行する実施例によって実証されるように、シクロデキストリンと界面活性剤（すなわち配合１、５、および６）またはシクロデキストリンと増量剤（すなわち配合４）を含む配合は、２分以内で戻されて無色透明の微粒子を含まない溶液を提供する。シクロデキストリン（すなわち配合２）または増量剤（すなわち配合３）のどちらかのみを含む配合は、水戻しに際して微粒子を含まない溶液を生成せず、これらの配合が静脈内用途に不適であることが示唆された。
【０１２３】
さらに先行する実施例は、有機溶剤および増量剤を使用して調製された配合が、これらの成分のいずれもなしに調製されたものよりも安定性が高くあり得ることを実証する（配合１と配合５および６とを比較されたい）。さらに界面活性剤を含めることは、安定性を増大させないようであった（配合１と４とを比較されたい）。
【０１２４】
とりわけ配合４は、試験された各研究期間にわたって優れた安定性を実証し、水戻しして３０秒以内に無色透明で微粒子を含まない溶液を提供した。これらの性質が、配合４を注射用途にふさわしいものにする。
【０１２５】
実施例２０：配合４の凍結乾燥ケークの調製のための大規模工程
バッチＡ
無菌注射用水中のマンニトールおよびヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＫＬＥＰＴＯＳＥ（登録商標）ＨＰ）の溶液を調製した。別の密閉容器内で、化合物１の完全な溶解（外観検査）が起きるまで、ｔｅｒｔ−ブタノールおよび化合物１を周囲温度で撹拌した。約１６０ｇの総バッチサイズの溶解には約１．５時間を要した。いかなる可視微粒子もない無色透明な溶液が得られたら、マンニトール／シクロデキストリン溶液を添加した。得られた溶液が均質になるまで撹拌し、次に０．２２μｍのＰＶＤＦフィルター（ＳＴＥＲＩＣＵＰ（登録商標）、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）を用いる使い捨ての無菌装置を使用して濾過した。濾過した溶液を凍結乾燥のために、１０ｍＬの透明ガラスタイプＩバイアルに４ｍＬ充填した。実施例７に記載される手順に従って溶液を凍結乾燥した。
【０１２６】
バッチＢ
一般方法
全工程は、無菌手順を用いて適切なクリーンルームで実施する。配合をＩＳＯ  ５処理スイートに充填する。専用使い捨て用具を用いて、専用容器内でバルク溶液を配合する。配合を滅菌濾過する前に、使用される全ての使い捨てアイテムおよび容器を予備滅菌し、または無菌注射用水ですすぐ。
【０１２７】
工程１
化合物１をｔｅｒｔ−ブチルアルコールに添加し、適切な容器内で透明溶液が形成するまで混合して、ｔｅｒｔ−ブチルアルコール（１．３１ｋｇ）中の化合物１（４．２ｇ）の溶液を調製する。
【０１２８】
工程２
マンニトールとＨＰβＣＤを無菌注射用水（２．５１５ｋｇ）に添加し、透明溶液が形成するまで混合して、マンニトール（１６４．６ｇ）とヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰβＣＤ；２０５．８ｇ）の溶液を調製する。
【０１２９】
工程３
工程２で調製した溶液（マンニトール／ＨＰβＣＤ溶液）を工程１で調製した溶液（ｔｅｒｔ−ブチルアルコール／化合物１）に緩慢に添加し、適切な容器内で透明溶液が形成するまで混合する。
【０１３０】
工程４
工程３からの完成溶液（凍結乾燥前溶液）を無菌濾過して無菌の受入容器に入れ、遮光する。
【０１３１】
工程５
無菌の濾過溶液を１，０５０個の洗浄済み滅菌２０ｍＬタイプＩガラス管バイアル（４ｇ／バイアル）に分注する。
【０１３２】
工程６．
滅菌栓を部分的に挿入し、充填バイアルを無菌凍結乾燥機チャンバー内のトレーにのせる。次にバイアルを凍結乾燥する。凍結乾燥工程が完了したら、凍結乾燥機内において窒素雰囲気真空下でバイアルに栓をしてアルミニウムクリンプシールで密封する。
【０１３３】
表８〜１１は、冷蔵、室温、強化された室温、および加速条件下における、バッチＢの凍結乾燥ケークの貯蔵安定性データを提供する。ＨＰＬＣによる総不純物含量（面積％）が提供される。あらゆる条件において０．１％を超えて存在する個別不純物についてのＨＰＬＣによる純度もまた提供される（すなわち不純物Ａ、Ｂ、およびＣ；下の構造を参照されたい）。
【０１３４】
【表１１】
0005722871.tif 000022
【０１３５】
凍結乾燥ケークの不純物含量は１２ヶ月間にわたり一定のままであり、３、６、９または１２ヶ月間にわたる冷蔵条件下での保存後に、凍結乾燥ケークが分解不純物を含有しないことが示唆された。不純物Ｂの量は保存中に増大したが、増分は化合物１が分解したためではなく不純物Ａの分解に起因した。
【０１３６】
【表１２】
0005722871.tif 000023
【０１３７】
凍結乾燥ケークの不純物含量は１２ヶ月間にわたり一定のままであり、３、６、９または１２ヶ月間にわたる室温条件下での保存後に、凍結乾燥ケークが分解不純物を含有しないことが示唆された。不純物Ｂの量は保存中に増大したが、増分は不純物Ａの分解に起因し、化合物１が分解したためではなかった。
【０１３８】
【表１３】
0005722871.tif 000024
【０１３９】
凍結乾燥ケークの不純物含量は１２ヶ月間にわたり一定のままであり、強化された室温条件下での６または１２ヶ月間にわたる保存後に、凍結乾燥ケークが分解不純物を含有しないことが示唆された。不純物ＢおよびＣの量は保存中に増大したが、増分は不純物ＡおよびＢの分解にそれぞれ起因し、化合物１が分解したためではなかった。
【０１４０】
【表１４】
0005722871.tif 000025
【０１４１】
凍結乾燥ケークの不純物含量は、３ヶ月後に約０．２％、６ヶ月後に０．３％、１２ヶ月後に０．４％増大し、凍結乾燥ケークが加速条件下で１２ヶ月間にわたる保存後に０．５％ｗ／ｗ未満の分解不純物を含有したことが示唆された。不純物ＢおよびＣの量は保存中に増大したが、増分は不純物ＡおよびＢの分解にそれぞれ起因し、化合物１が分解したためではなかった。
【０１４２】
【化１１】
0005722871.tif 000026
【０１４３】
実施例２１．配合７および８の凍結乾燥ケークの調製
マンニトール（３９．２ｍｇ）およびＫｌｅｐｔｏｓｅ（登録商標）ＨＰ（ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン；４９ｍｇ）を無菌注射用水（５９９ｍｇ）に室温で溶解する。遮光して室温で１０分間にわたる磁気撹拌によって、化合物１０（１．１６７ｍｇ）をｔｅｒｔ−ブタノール（３１２ｍｇ）中に分散させる。化合物１０を可溶化するために、数ｍＬのマンニトール／Ｋｌｅｐｔｏｓｅ（登録商標）溶液を化合物１０分散体中に注ぐ。溶液の形成後に、残りのマンニトール／Ｋｌｅｐｔｏｓｅ（登録商標）溶液を添加する。溶液を遮光しながら数分間撹拌する。配合７では、リン酸（２Ｍ）でｐＨを調製してｐＨを４．０±０．２に低下させる。配合８ではｐＨは約８であり、調節されない。０．２２μｍの無菌使い捨てＰＶＤＦフィルター（Ｓｔｅｒｉｃｕｐ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（登録商標））を通して凍結乾燥前溶液を濾過し、透明溶液を形成する。４ｍＬの濾過凍結乾燥前溶液を１０ｍＬのボトルに移し、次に凍結乾燥する。化合物１０は水溶液中で容易に加水分解するので、得られた凍結乾燥ケークは>３．９９ｍｇの化合物１および<０．０１ｍｇの化合物１０を含有する。
【０１４４】
実施例２２：凍結乾燥法前の配合７および８の評価
配合７および８の凍結乾燥前溶液の分析をＴ０および２５℃で４８時間の保存後に実施した。化合物１０は水溶液中で化合物１に変換することが分かっているので、化合物１を分析した。結果を下の表１２に示す。リン酸の添加によってｐＨを調節した配合（配合７）は、２５℃で４８時間の保存後にいかなる純度変化もなく安定していた。しかしｐＨを調節しなかったｐＨ約８の配合（配合８）は安定性に劣り、２５℃で４８時間の保存後に約２％の純度を失った。
【０１４５】
【表１５】
0005722871.tif 000027
【０１４６】
実施例２３：配合７および８の凍結乾燥ケークの評価
２〜８℃、２５℃／６０％ＲＨ、および４０℃／７５％ＲＨでの１〜６ヶ月間にわたる保存後の水戻しプロフィールおよび安定性について、配合７および８の凍結乾燥ケークを評価した。サンプルを１ｍｇ／ｍＬの化合物１の標的濃度に水で戻した。戻した溶液を濾過し、ＨＰＬＣによって分析した。結果を表１３〜１８に示す。
【０１４７】
表に示すように、その凍結乾燥ケークのｐＨがｐＨ４．１に調節された配合７は、少なくとも６ヶ月間にわたって良好な安定性を示した。２〜８℃では化合物１の純度の低下は観察されなかった。２５℃／６０％ＲＨでは、薬剤純度は３ヶ月間にわたり変化せず、６ヶ月後に０．１％だけ低下した。４０℃／７５％ＲＨでは、薬剤純度は３ヶ月後に０．４％だけ低下し、６ヶ月後に０．６％低下した。
【０１４８】
その凍結乾燥ケークがｐＨ８．１を有した配合８は、わずか１ヶ月後にいくらかの分解傾向を示した。１ヶ月間にわたる保存後、２５℃／６０％ＲＨおよび４０℃／７５％ＲＨで、それぞれ０．３％および０．９％の薬剤純度低下が観察された。６ヶ月後、薬剤純度低下はそれぞれ０．７％および５．２％であった。
【０１４９】
【表１６】
0005722871.tif 000028
【０１５０】
【表１７】
0005722871.tif 000029
【０１５１】
【表１８】
0005722871.tif 000030
【０１５２】
【表１９】
0005722871.tif 000031
【０１５３】
【表２０】
0005722871.tif 000032
【０１５４】
【表２１】
0005722871.tif 000033
【０１５５】
実施例２４．配合９〜１３の凍結乾燥前溶液の調製および評価
表１９に示すようにｐＨを調節して、配合７および８と同様の方法で配合９〜１３の凍結乾燥前溶液を調製した。凍結乾燥前溶液は９９．７％の初期薬剤純度（ＨＰＬＣによる化合物１）を有した。凍結乾燥前溶液を５０℃のストレス条件下で１週間保存して、薬剤純度を再度ＨＰＬＣによって分析した。結果を表１９に示す。
【０１５６】
【表２２】
0005722871.tif 000034
【０１５７】
結果はｐＨを８未満に保つことの利点を示し、より低いｐＨで溶液安定性はより大きく、そして試験した最低のｐＨで最良の溶液安定性が得られた。
【０１５８】
代表的な実施態様
本発明の代表的な実施態様としては、次が挙げられる。
実施態様番号１：
（ａ）式Ｉ、式ＩＩ
【０１５９】
【化１２】
0005722871.tif 000035
【０１６０】
（式中、Ｒ１は少なくとも１つのＮを有して任意に置換される５−、６−、または１０員環ヘテロアリールであり、またはＲ１は任意に置換される６−または１０員環アリールである）の化合物、または薬学的に許容できるその塩またはエステルである、薬剤；
（ｂ）シクロデキストリン；および
（ｃ）増量剤と界面活性剤からなる群から選択される少なくとも１つの部材
を含んでなる凍結乾燥ケーク。
【０１６１】
実施態様番号１Ａ：
（ａ）式Ｉ、式ＩＩ
【０１６２】
【化１３】
0005722871.tif 000036
【０１６３】
（式中、Ｒ１は少なくとも１つのＮを有して任意に置換される５−、６−、または１０員環ヘテロアリールであり、またはＲ１は任意に置換される６−または１０員環アリールである）の化合物、または薬学的に許容できるその塩またはエステルから選択される、薬剤；
（ｂ）シクロデキストリン；および
（ｃ）増量剤と界面活性剤からなる群から選択される少なくとも１つの部材
を含んでなる混合物を凍結乾燥するステップを含んでなる、凍結乾燥ケークを製造する方法。
【０１６４】
実施態様番号１Ｂ：
（ａ）式Ｉ、式ＩＩ
【０１６５】
【化１４】
0005722871.tif 000037
【０１６６】
（式中、Ｒ１は少なくとも１つのＮを有して任意に置換される５−、６−、または１０員環ヘテロアリールであり、またはＲ１は任意に置換される６−または１０員環アリールである）の化合物、または薬学的に許容できるその塩またはエステルである、薬剤；
（ｂ）シクロデキストリン；および
（ｃ）増量剤
を含んでなる凍結乾燥ケーク。
【０１６７】
実施態様番号２：
シクロデキストリンが凍結乾燥後に薬剤を安定化するのに効果的な量で存在する、実施態様１の凍結乾燥ケークまたは実施態様１Ａの方法。
【０１６８】
実施態様番号３：
薬剤が、式、
【０１６９】
【化１５】
0005722871.tif 000038
【０１７０】
の化合物または薬学的に許容できるその塩またはエステルである、実施態様１の凍結乾燥ケークまたは実施態様１Ａの方法。
【０１７１】
実施態様番号３Ａ：
薬剤が、式、
【０１７２】
【化１６】
0005722871.tif 000039
【０１７３】
の化合物または薬学的に許容できるその塩またはエステルである、実施態様１の凍結乾燥ケークまたは実施態様１Ａの方法。
【０１７４】
実施態様番号３Ｂ：
薬剤が、式、
【０１７５】
【化１７】
0005722871.tif 000040
【０１７６】
の化合物または薬学的に許容できるその塩またはエステルである、実施態様１の凍結乾燥ケークまたは実施態様１Ａの方法。
【０１７７】
実施態様番号４：
薬剤が、式Ｉ、式ＩＩの化合物、または薬学的に許容できるそのエステルである、実施態様１の凍結乾燥ケークまたは実施態様１Ａの方法。
【０１７８】
実施態様番号４Ａ：
薬剤が式Ｉの化合物または薬学的に許容できるそのエステルである、実施態様１の凍結乾燥ケークまたは実施態様１Ａの方法。
【０１７９】
実施態様番号４Ｂ：
薬剤が式ＩＩの化合物または薬学的に許容できるそのエステルである、実施態様１の凍結乾燥ケークまたは実施態様１Ａの方法。
【０１８０】
実施態様番号５：
薬剤が式Ｉまたは式ＩＩの化合物である、実施態様１の凍結乾燥ケークまたは実施態様１Ａの方法。
【０１８１】
実施態様番号５Ａ：
薬剤が式Ｉの化合物である、実施態様１の凍結乾燥ケークまたは実施態様１Ａの方法。
【０１８２】
実施態様番号５Ｂ：
薬剤が式ＩＩの化合物である、実施態様１の凍結乾燥ケークまたは実施態様１Ａの方法。
【０１８３】
実施態様番号６：
Ｒ１が任意に置換されるピラジニル、ピリジル、フェニル、チアゾリル、ナフチル、またはキノリニルである、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０１８４】
実施態様番号７：
Ｒ１が置換されている、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０１８５】
実施態様番号８：
Ｒ１が、フェニルで置換された５員環ヘテロアリール、フェニルで置換された６員環ヘテロアリール、またはフェニルで置換されたフェニルである、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０１８６】
実施態様番号９：
薬剤が、
【０１８７】
【化１８】
0005722871.tif 000041
【０１８８】
【化１９】
0005722871.tif 000042
【０１８９】
または薬学的に許容できるその塩またはエステルである、実施態様１の凍結乾燥ケークまたは実施態様１Ａの方法。
【０１９０】
実施態様番号９Ａ：
薬剤が、化合物１、化合物２、化合物３、化合物４、化合物５、化合物６、化合物７、化合物８、化合物９、または薬学的に許容できるそのエステルである、実施態様１の凍結乾燥ケークまたは実施態様１Ａの方法。
【０１９１】
実施態様番号９Ｂ：
薬剤が、化合物１、化合物２、化合物３、化合物４、化合物５、化合物６、化合物７、化合物８、または化合物９である、実施態様１の凍結乾燥ケークまたは実施態様１Ａの方法。
【０１９２】
実施態様番号１０：
薬剤が、式、
【０１９３】
【化２０】
0005722871.tif 000043
【０１９４】
の化合物、または薬学的に許容できるその塩またはエステルである、実施態様１の凍結乾燥ケークまたは実施態様１Ａの方法。
【０１９５】
実施態様番号１０Ａ：
薬剤が、化合物１、化合物１０、化合物１１、化合物１２、化合物１３、化合物１４、化合物１５、またはボルテゾミブである、実施態様１の凍結乾燥ケークまたは実施態様１Ａの方法。
【０１９６】
実施態様番号１０Ｂ：
薬剤が、化合物１、化合物１０、化合物１１、化合物１３、またはボルテゾミブである、実施態様１の凍結乾燥ケークまたは実施態様１Ａの方法。
【０１９７】
実施態様番号１０Ｃ：
薬剤が、化合物１、化合物１０、化合物１３、またはボルテゾミブである、実施態様１の凍結乾燥ケークまたは実施態様１Ａの方法。
【０１９８】
実施態様番号１０Ｄ：
薬剤が、化合物１、化合物１０、または化合物１３である、実施態様１の凍結乾燥ケークまたは実施態様１Ａの方法。
【０１９９】
実施態様番号１０Ｅ：
薬剤が化合物１または化合物１０である、実施態様１の凍結乾燥ケークまたは実施態様１Ａの方法。
【０２００】
実施態様番号１０Ｆ：
薬剤が化合物１０である、実施態様１の凍結乾燥ケークまたは実施態様１Ａの方法。
【０２０１】
実施態様番号１０Ｇ：
薬剤が化合物１またはボルテゾミブである、実施態様１の凍結乾燥ケークまたは実施態様１Ａの方法。
【０２０２】
実施態様番号１０Ｈ：
薬剤が化合物１である、実施態様１の凍結乾燥ケークまたは実施態様１Ａの方法。
【０２０３】
実施態様番号１０Ｉ：
薬剤がボルテゾミブである、実施態様１の凍結乾燥ケークまたは実施態様１Ａの方法。
【０２０４】
実施態様番号１１：
薬剤が式ＩＩの化合物または薬学的に許容できるその塩またはエステルである、実施態様１の凍結乾燥ケークまたは実施態様１Ａの方法。
【０２０５】
実施態様番号１２：
凍結乾燥ケークが少なくとも１つの増量剤を含んでなる、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２０６】
実施態様番号１３：
凍結乾燥ケークが約９９％ｗ／ｗまでの増量剤を含んでなる、実施態様１２に記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２０７】
実施態様番号１４：
凍結乾燥ケークが約２０％〜約９０％ｗ／ｗの増量剤を含んでなる、実施態様１２に記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２０８】
実施態様番号１５：
凍結乾燥ケークが約３０％〜約６０％ｗ／ｗの増量剤を含んでなる、実施態様１２に記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２０９】
実施態様番号１６：
凍結乾燥ケークが約３５％の増量剤を含んでなる、実施態様１２に記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２１０】
実施態様番号１７：
凍結乾燥ケークが約４５％ｗ／ｗの増量剤を含んでなる、実施態様１２に記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２１１】
実施態様番号１８：
増量剤が、単糖類、オリゴ糖類、糖アルコール、アミノ酸、またはその混合物である、実施態様１２〜１７のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２１２】
実施態様番号１９：
増量剤が、スクロース、デキストロース、マルトース、デキストラン、またはその混合物を含んでなる、実施態様１８に記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２１３】
実施態様番号２０：
増量剤がマンニトールを含んでなる、実施態様１８に記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２１４】
実施態様番号２０Ａ：
凍結乾燥ケークが界面活性剤を含有しない、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２１５】
実施態様番号２１：
凍結乾燥ケークが少なくとも１つの界面活性剤を含んでなる、実施態様１〜２０のいずれかに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２１６】
実施態様番号２２：
凍結乾燥ケークが少なくとも約１０％〜約４０％ｗ／ｗの界面活性剤を含んでなる、実施態様２１に記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２１７】
実施態様番号２３：
凍結乾燥ケークが少なくとも約１５％〜約３０％ｗ／ｗの界面活性剤を含んでなる、実施態様２１に記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２１８】
実施態様番号２４：
凍結乾燥ケークが少なくとも約１５％〜約２０％ｗ／ｗの界面活性剤を含んでなる、実施態様２１に記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２１９】
実施態様番号２５：
界面活性剤が、ポリオキシエチレンステアラート；ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体；ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル；ソルビタンエステル；ポリエチレングリコールエーテル；飽和ポリグルコール化グリセリド；ポリエチレングリコールの脂肪酸エステル；ヒドロキシル化レシチン；中鎖モノグリセリド；中鎖脂肪酸エステル；ポリエチレン／プロピレングリコール共重合体；ポリエチレングリコールステアラート；ｄ−α−トコフェリルポリエチレングリコールスクシナート；ポリオキシルステアラート；ポリオキシルヒマシ油；モノ−、ジ−、またはトリグリセリドからなる飽和ポリグルコール化グリセリド；ポリエチレングリコールのジ脂肪酸エステル；ヒドロキシル化レシチン；中鎖モノグリセリド、中鎖モノグリセリド、およびジグリセリド；ポリエチレン／プロピレングリコール共重合体；酸化エチレンと酸化プロピレンのブロック共重合体；エトキシル化ヒマシ油；エトキシル化ヒドロキシステアリン酸；またはその混合物である、実施態様２１〜２４のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２２０】
実施態様番号２６：
界面活性剤が、ポリオキシプロピレンポリオキシエチレンブロック共重合体、ポリソルベート、Ｓｏｌｕｔｏｌ（登録商標）マクロゴール１５ヒドロキシステアラート、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）ポリオキシル３５ヒマシ油、ポリオキシルヒマシ油、プロピレングリコール、またはその混合物である、実施態様２１〜２４のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２２１】
実施態様番号２７：
界面活性剤がポリソルベートである、実施態様２６に記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２２２】
実施態様番号２８：
ポリソルベートがポリソルベート２０である、実施態様２６に記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２２３】
実施態様番号２９：
凍結乾燥ケークが少なくとも１つの増量剤および少なくとも１つの界面活性剤を含んでなる、実施態様１〜２０または２１〜２８のいずれかに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２２４】
実施態様番号３０：
シクロデキストリンが、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、またはその混合物である、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２２５】
実施態様番号３１：
シクロデキストリンが、アルキル化シクロデキストリン、ヒドロキシルアルキル化シクロデキストリン、スルホアルキルシクロデキストリン、糖類置換シクロデキストリン、またはその混合物である、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２２６】
実施態様番号３２：
シクロデキストリンが、メチル−β−シクロデキストリン、ジメチル−β−シクロデキストリン、トリメチル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシメチル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、３−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、β−シクロデキストリンスルフェート、β−シクロデキストリンスルホネート、β−シクロデキストリンスルホブチルエーテル、またはその混合物である、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２２７】
実施態様番号３３：
シクロデキストリンが、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリン、スルホブチルエーテルβシクロデキストリン、またはその混合物である、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２２８】
実施態様番号３４：
シクロデキストリンが、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエーテルβシクロデキストリン、またはその混合物である、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２２９】
実施態様番号３５：
シクロデキストリンがヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンである、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２３０】
実施態様番号３６：
シクロデキストリンが凍結乾燥ケークの約９９％ｗ／ｗまでの量で存在する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２３１】
実施態様番号３７：
シクロデキストリンが凍結乾燥ケークの約２０％〜約９０％ｗ／ｗの量で存在する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２３２】
実施態様番号３８：
シクロデキストリンが凍結乾燥ケークの約４０％〜約７０％ｗ／ｗの量で存在する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２３３】
実施態様番号３９：
シクロデキストリンが凍結乾燥ケークの約４５％〜約６５％ｗ／ｗの量で存在する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２３４】
実施態様番号４０：
シクロデキストリンが凍結乾燥ケークの約４０％ｗ／ｗの量で存在する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２３５】
実施態様番号４１：
シクロデキストリンが凍結乾燥ケークの約４５％ｗ／ｗの量で存在する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２３６】
実施態様番号４２：
シクロデキストリンが凍結乾燥ケークの約５５％ｗ／ｗの量で存在する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２３７】
実施態様番号４３：
凍結乾燥ケークが薬学的に許容できる有機溶剤をさらに含んでなる、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２３８】
実施態様番号４４：
有機溶剤が、ジメチルスルホキシド、エタノール、プロパノール、ｔｅｒｔ−ブタノール、またはその混合物である、実施態様４３に記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２３９】
実施態様番号４５：
有機溶剤がｔｅｒｔ−ブタノールである、実施態様４３に記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２４０】
実施態様番号４６：
ｔｅｒｔ−ブタノールが約３％ｗ／ｗ以下の量で存在する、実施態様４５に記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２４１】
実施態様番号４７：
ｔｅｒｔ−ブタノールが約１％ｗ／ｗ以下の量で存在する、実施態様４５に記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２４２】
実施態様番号４８：
凍結乾燥ケークがｐＨ調節剤をさらに含んでなる、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２４３】
実施態様番号４８Ａ：
ｐＨ調節剤が酸を含んでなる、実施態様４８に記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２４４】
実施態様番号４８Ｂ：
ｐＨ調節剤が鉱酸または有機酸を含んでなる、実施態様４８に記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２４５】
実施態様番号４８Ｃ：
ｐＨ調節剤が鉱酸を含んでなる、実施態様４８に記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２４６】
実施態様番号４８Ｄ：
ｐＨ調節剤が有機酸を含んでなる、実施態様４８に記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２４７】
実施態様番号４８Ｅ：
ｐＨ調節剤が、塩酸、リン酸、酢酸、硫酸、アスコルビン酸、クエン酸、乳酸、酒石酸、コハク酸、およびマレイン酸から選択される酸を少なくとも含んでなる、実施態様４８に記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２４８】
実施態様番号４８Ｆ：
ｐＨ調節剤がリン酸を含んでなる、実施態様４８に記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２４９】
実施態様番号４８Ｇ：
凍結乾燥ケークのｐＨが約７以下のｐＨに調節される、実施態様４８Ａ〜４８Ｆのいずれかに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２５０】
実施態様番号４８Ｈ：
凍結乾燥ケークのｐＨが約６以下のｐＨに調節される、実施態様４８Ａ〜４８Ｆのいずれかに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２５１】
実施態様番号４８Ｉ：
凍結乾燥ケークのｐＨが約５以下のｐＨに調節される、実施態様４８Ａ〜４８Ｆのいずれかに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２５２】
実施態様番号４８Ｊ：
凍結乾燥ケークのｐＨが約４以下のｐＨに調節される、実施態様４８Ａ〜４８Ｆのいずれかに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２５３】
実施態様番号４８Ｋ：
凍結乾燥ケークのｐＨがｐＨ約３〜５に調節される、実施態様４８Ａ〜４８Ｆのいずれかに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２５４】
実施態様番号４８Ｌ：
凍結乾燥ケークのｐＨが約４のｐＨに調節される、実施態様４８Ａ〜４８Ｆのいずれかに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２５５】
実施態様番号４９：
凍結乾燥ケークが約１８０秒以内に戻されて粒子状物質を含まない透明溶液を提供する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２５６】
実施態様番号４９Ａ：
凍結乾燥ケークが約９０秒以内に戻されて粒子状物質を含まない透明溶液を提供する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２５７】
実施態様番号４９Ｂ：
凍結乾燥ケークが約３０秒以内に戻されて粒子状物質を含まない透明溶液を提供する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２５８】
実施態様番号５０：
戻された溶液が無色である、実施態様４９〜４９Ｂのいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２５９】
実施態様番号５１：
凍結乾燥ケークが冷蔵条件下での保存中に少なくとも６ヶ月間にわたり安定している、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２６０】
実施態様番号５２：
凍結乾燥ケークが室温条件下での保存中に少なくとも６ヶ月間にわたり安定している、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２６１】
実施態様番号５３：
凍結乾燥ケークが加速条件下での保存中に少なくとも６ヶ月間にわたり安定している、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２６２】
実施態様番号５４：
凍結乾燥ケークが冷蔵条件下で６ヶ月間にわたる保存後に約１％以下の薬剤純度低下を示す、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２６３】
実施態様番号５５：
凍結乾燥ケークが室温条件下で６ヶ月間にわたる保存後に約１％以下の薬剤純度低下を示す、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２６４】
実施態様番号５６：
凍結乾燥ケークが加速条件下で６ヶ月間にわたる保存後に約１％以下の薬剤純度低下を示す、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２６５】
実施態様番号５７：
凍結乾燥ケークが冷蔵条件下で６ヶ月間にわたる保存後に約０．５％以下の薬剤純度低下を示す、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２６６】
実施態様番号５８：
凍結乾燥ケークが室温条件下で６ヶ月間にわたる保存後に約０．５％以下の薬剤純度低下を示す、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２６７】
実施態様番号５９：
凍結乾燥ケークが加速条件下で６ヶ月間にわたる保存後に約０．５％以下の薬剤純度低下を示す、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２６８】
実施態様番号６０：
凍結乾燥ケークが冷蔵条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に約０．５％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２６９】
実施態様番号６０Ａ：
凍結乾燥ケークが冷蔵条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に約０．２％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２７０】
実施態様番号６０Ｂ：
凍結乾燥ケークが冷蔵条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に約０．１％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２７１】
実施態様番号６０Ｃ：
凍結乾燥ケークが冷蔵条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に約０．５％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２７２】
実施態様番号６０Ｄ：
凍結乾燥ケークが冷蔵条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に約０．２％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２７３】
実施態様番号６０Ｅ：
凍結乾燥ケークが冷蔵条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に約０．１％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２７４】
実施態様番号６０Ｆ：
凍結乾燥ケークが室温条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に約０．５％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２７５】
実施態様番号６０Ｇ：
凍結乾燥ケークが室温条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に約０．２％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２７６】
実施態様番号６０Ｈ：
凍結乾燥ケークが室温条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に約０．１％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２７７】
実施態様番号６０Ｉ：
凍結乾燥ケークが室温条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に約０．５％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２７８】
実施態様番号６０Ｊ：
凍結乾燥ケークが室温条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に約０．２％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２７９】
実施態様番号６０Ｋ：
凍結乾燥ケークが室温条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に約０．１％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２８０】
実施態様番号６０Ｌ：
凍結乾燥ケークが強化された室温条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に約０．５％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２８１】
実施態様番号６０Ｍ：
凍結乾燥ケークが強化された室温条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に約０．２％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２８２】
実施態様番号６０Ｎ：
凍結乾燥ケークが強化された室温条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に約０．１％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２８３】
実施態様番号６０Ｏ：
凍結乾燥ケークが強化された室温条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に約０．５％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２８４】
実施態様番号６０Ｐ：
凍結乾燥ケークが強化された室温条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に約０．２％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２８５】
実施態様番号６０Ｑ：
凍結乾燥ケークが強化された室温条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に約０．１％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２８６】
実施態様番号６０Ｒ：
凍結乾燥ケークが加速条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に約０．５％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２８７】
実施態様番号６０Ｓ：
凍結乾燥ケークが加速条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に約０．２％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２８８】
実施態様番号６０Ｔ：
凍結乾燥ケークが加速条件下で６ヶ月間にわたるケーク保存後に約０．１％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２８９】
実施態様番号６０Ｕ：
凍結乾燥ケークが加速条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に約０．５％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２９０】
実施態様番号６０Ｖ：
凍結乾燥ケークが加速条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に約０．２％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２９１】
実施態様番号６０Ｗ：
凍結乾燥ケークが加速条件下で１２ヶ月間にわたるケーク保存後に約０．１％ｗ／ｗ以下の分解不純物を含有する、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２９２】
実施態様番号６１：
少なくとも１つの追加的抗新生物薬をさらに含んでなる、先行する実施態様のいずれか１つに記載の凍結乾燥ケークまたは方法。
【０２９３】
実施態様番号６２：
（ａ）シクロデキストリン、増量剤、および水を含んでなる第１の混合物を提供するステップと；
（ｂ）界面活性剤と第１の混合物の一部とを混合して第２の混合物を形成するステップと；
（ｃ）式Ｉまたは式ＩＩの化合物、またはその塩またはエステルを第２の混合物と合わせて薬剤混合物を形成するステップと；
（ｄ）第１の混合物の残部と薬剤混合物とを混合して凍結乾燥前溶液を形成するステップと；
（ｅ）凍結乾燥前溶液を凍結乾燥するステップ
を含んでなる、凍結乾燥ケークを製造する方法。
【０２９４】
実施態様番号６３：
シクロデキストリンがヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを含んでなり、増量剤がマンニトールを含んでなる、実施態様６２に記載の方法。
【０２９５】
実施態様番号６４
界面活性剤がポリソルベートである、実施態様６２に記載の方法。
【０２９６】
実施態様番号６５：
凍結乾燥前溶液を滅菌するステップをさらに含んでなる、実施態様６２〜６４のいずれか１つに記載の方法。
【０２９７】
実施態様番号６６：
滅菌するステップが濾過を含んでなる、実施態様６５に記載の方法。
【０２９８】
実施態様番号６７：
（ａ）シクロデキストリン、増量剤、および水を含有する第１の混合物を提供するステップと；
（ｂ）式Ｉまたは式ＩＩの化合物、またはその塩またはエステル、およびｔｅｒｔ−ブタノールを含有する薬剤混合物を提供するステップと；
（ｃ）第１の混合物を薬剤混合物と合わせて凍結乾燥前溶液を提供するステップと；
（ｄ）凍結乾燥前溶液を凍結乾燥するステップと
を含んでなる、凍結乾燥ケークを製造する方法。
【０２９９】
実施態様番号６８：
シクロデキストリンがヒドロキシプロピルβシクロデキストリンであり、増量剤がマンニトールを含んでなる、実施態様６７に記載の方法。
【０３００】
実施態様番号６９：
凍結乾燥前溶液を滅菌するステップをさらに含んでなる、実施態様６７または６８に記載の方法。
【０３０１】
実施態様番号７０：
滅菌するステップが濾過を含んでなる、実施態様６９に記載の方法。
【０３０２】
実施態様番号７１：
薬剤混合物が、式Ｉ、式ＩＩの化合物、または薬学的に許容できるそのエステルを含有する、実施態様６２〜７０のいずれかに記載の方法。
【０３０３】
実施態様番号７２：
薬剤混合物が式Ｉの化合物または薬学的に許容できるそのエステルを含有する、実施態様６２〜７０のいずれかに記載の方法。
【０３０４】
実施態様番号７３：
薬剤混合物が式ＩＩの化合物または薬学的に許容できるそのエステルを含有する、実施態様６２〜７０のいずれかに記載の方法。
【０３０５】
実施態様番号７４：
薬剤混合物が式Ｉまたは式ＩＩの化合物を含有する、実施態様６２〜７０のいずれかに記載の方法。
【０３０６】
実施態様番号７５：
薬剤混合物が式Ｉの化合物を含有する、実施態様６２〜７０のいずれかに記載の方法。
【０３０７】
実施態様番号７６：
薬剤混合物が式ＩＩの化合物を含有する、実施態様６２〜７０のいずれかに記載の方法。
【０３０８】
実施態様番号７７：
Ｒ１が、任意に置換されるピラジニル、ピリジル、フェニル、チアゾリル、ナフチル、またはキノリニルである、実施態様６２〜７６のいずれかに記載の方法。
【０３０９】
実施態様番号７８：
Ｒ１が置換されている、実施態様６２〜７７のいずれかに記載の方法。
【０３１０】
実施態様番号７９：
Ｒ１がフェニルで置換された５員環ヘテロアリール、フェニルで置換された６員環ヘテロアリール、またはフェニルで置換されたフェニルである、実施態様６２〜７６のいずれかに記載の方法。
【０３１１】
実施態様番号８０：
薬剤混合物が、
【０３１２】
【化２１】
0005722871.tif 000044
【０３１３】
【化２２】
0005722871.tif 000045
【０３１４】
または薬学的に許容できるその塩またはエステルを含有する、実施態様６２〜７０のいずれかに記載の方法。
【０３１５】
実施態様番号８１：
薬剤混合物が、化合物１、化合物２、化合物３、化合物４、化合物５、化合物６、化合物７、化合物８、化合物９、または薬学的に許容できるそのエステルを含有する、実施態様６２〜７０のいずれかに記載の方法。
【０３１６】
実施態様番号８２：
薬剤混合物が、化合物１、化合物２、化合物３、化合物４、化合物５、化合物６、化合物７、化合物８、または化合物９を含有する、実施態様６２〜７０のいずれかに記載の方法。
【０３１７】
実施態様番号８３：
薬剤混合物が、式、
【０３１８】
【化２３】
0005722871.tif 000046
【０３１９】
の化合物、または薬学的に許容できるその塩またはエステルを含有する、実施態様６２〜７０のいずれかに記載の方法。
【０３２０】
実施態様番号８４：
薬剤混合物が、化合物１、化合物１０、化合物１１、化合物１２、化合物１３、化合物１４、化合物１５、またはボルテゾミブを含有する、実施態様６２〜７０のいずれかに記載の方法。
【０３２１】
実施態様番号８５：
薬剤混合物が、化合物１、化合物１０、化合物１１、化合物１３、またはボルテゾミブを含有する、実施態様６２〜７０のいずれかに記載の方法。
【０３２２】
実施態様番号８６：
薬剤混合物が、化合物１、化合物１０、化合物１３、またはボルテゾミブを含有する、実施態様６２〜７０のいずれかに記載の方法。
【０３２３】
実施態様番号８７：
薬剤混合物が、化合物１、化合物１０、または化合物１３を含有する、実施態様６２〜７０のいずれかに記載の方法。
【０３２４】
実施態様番号８８：
薬剤混合物が化合物１または化合物１０を含有する、実施態様６２〜７０のいずれかに記載の方法。
【０３２５】
実施態様番号８９：
薬剤混合物が化合物１０を含有する、実施態様６２〜７０のいずれかに記載の方法。
【０３２６】
実施態様番号９０：
薬剤混合物が化合物１またはボルテゾミブを含有する、実施態様６２〜７０のいずれかに記載の方法。
【０３２７】
実施態様番号９１：
薬剤混合物が化合物１を含有する、実施態様６２〜７０のいずれかに記載の方法。
【０３２８】
実施態様番号９２：
薬剤混合物がボルテゾミブを含有する、実施態様６２〜７０のいずれかに記載の方法。
【０３２９】
実施態様番号９３：
薬剤混合物が式ＩＩの化合物または薬学的に許容できるその塩またはエステルを含有する、実施態様６２〜７０のいずれかに記載の方法。
【０３３０】
実施態様番号９４：
凍結乾燥前溶液のｐＨをｐＨ調節剤で調節するステップをさらに含んでなる、実施態様６２〜９３のいずれかに記載の方法。
【０３３１】
実施態様番号９５：
ｐＨ調節剤が酸を含んでなる、実施態様９４に記載の方法。
【０３３２】
実施態様番号９６：
ｐＨ調節剤が鉱酸または有機酸を含んでなる、実施態様９４に記載の方法。
【０３３３】
実施態様番号９７：
ｐＨ調節剤が鉱酸を含んでなる、実施態様９４に記載の方法。
【０３３４】
実施態様番号９８：
ｐＨ調節剤が有機酸を含んでなる、実施態様９４に記載の方法。
【０３３５】
実施態様番号９９：
ｐＨ調節剤が、塩酸、リン酸、酢酸、硫酸、アスコルビン酸、クエン酸、乳酸、酒石酸、コハク酸、およびマレイン酸から選択される酸を少なくともを含んでなる、実施態様９４に記載の方法。
【０３３６】
実施態様番号１００：
ｐＨ調節剤がリン酸を含んでなる、実施態様９４に記載の方法。
【０３３７】
実施態様番号１０１：
凍結乾燥前溶液のｐＨが約７以下のｐＨに調節される、実施態様９５〜１００のいずれかに記載の方法。
【０３３８】
実施態様番号１０２：
凍結乾燥前溶液のｐＨが約６以下のｐＨに調節される、実施態様９５〜１００のいずれかに記載の方法。
【０３３９】
実施態様番号１０３：
凍結乾燥前溶液のｐＨが約５以下のｐＨに調節される、実施態様９５〜１００のいずれかに記載の方法。
【０３４０】
実施態様番号１０４：
凍結乾燥前溶液のｐＨが約４以下のｐＨに調節される、実施態様９５〜１００のいずれかに記載の方法。
【０３４１】
実施態様番号１０５：
凍結乾燥前溶液のｐＨが約３〜５のｐＨに調節される、実施態様９５〜１００のいずれかに記載の方法。
【０３４２】
実施態様番号１０６：
凍結乾燥前溶液のｐＨが約４のｐＨに調節される、実施態様９５〜１００のいずれかに記載の方法。
【０３４３】
実施態様番号１０７：
がんを治療する薬剤を製造するための実施態様１〜６１のいずれかに記載の凍結乾燥ケークの使用。
【０３４４】
実施態様番号１０８
慢性リンパ球性白血病、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫または乳がんを治療する薬剤を製造するための実施態様１〜６１のいずれかに記載の凍結乾燥ケークの使用。
【０３４５】
実施態様番号１０９
多発性骨髄腫を治療する薬剤を製造するための実施態様１〜６１のいずれかに記載の凍結乾燥ケークの使用。
【０３４６】
当業者は理解するであろうように、上の教示に照らして本発明の多数の修正と変更が可能である。したがって添付の特許請求の範囲内で、本発明を本明細書に具体的に記載されるのとは別のやり方で実施してよいものと理解され、本発明の範囲はこのような全てのバリエーションを包含することが意図される。
【０３４７】
本明細書で言及した全ての出版物は、その内容全体をあらゆる目的のために参照によって援用する。