(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）
【化１０７】
0005675614.tif 000121
［式中、
Ｘは、ＣＨ又はＮより選択され；
Ｒ２は、Ｈ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＯＮ（Ｒ４）２；場合によりＲ３により置換されたＯ−Ｃ１−８アルキル；Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ３−１０ヘテロシクリル；Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ５−１０ヘテロアリール；並びに場合によりＲ６により置換されたＣ１−８アルキルより選択され；そしてＸがＣＨである場合に、Ｒ２は、また、Ｆ、Ｃｌ、ＳＯ２ＮＨ２であってもよく；
Ｙは、Ｃ３−８シクロアルキル及び式：
【化１１１】
0005675614.tif 000122
［式中、窒素原子は、場合により、Ｃ１−３アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１−４アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１−４アルキル、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｑ−ＯＣ１−４アルキル、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｑ−Ｎ（ＣＨ３）２、−ＳＯ２Ｃ１−３アルキル、−（ＣＨ２）ｐ−ＮＨ２、−（ＣＨ２）ｐ−ＯＨ、−（ＣＨ２）ｐ−ＯＣ（Ｏ）Ｃ１−３アルキル、−（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）ＮＨ２、−（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２；−ＣＨ２−ヘテロアリール（これは、場合により該ヘテロアリール部分で、ＮＨ２により置換されており、該ヘテロアリール部分は、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、オキサジアゾリル及びピリジニルより選択される）；場合によりＣ１−３アルキルにより置換された−Ｃ（Ｏ）−ピロリル；又は−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−モルホリノにより独立して置換されており、
ここで、ｑは、１〜３であり、ｐは、２又は３である］
のいずれか一つより選択される複素環系より選択され；
Ｒ１は、Ｈ；Ｃｌ；及び場合によりＮ（Ｒ４）２又はＦにより置換されたＣ１−８アルキルより選択され；
Ｒ３は、Ｒ３が結合しているアルキル鎖の２番目の炭素原子以降のＯＨ、ＯＲ４及びＮ（Ｒ４）２；Ｆ；ＣＯ２Ｈ；ＣＯＮ（Ｒ４）２；ＳＯ２Ｎ（Ｒ４）２；Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ３−１０ヘテロシクリル（ここで、その窒素原子は、Ｈ又はＣ１−３アルキルにより置換されていてもよい）；並びにＮ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ５−１０ヘテロアリールより選択され；
Ｒ４は、Ｈ及びＣ１−８アルキルより選択され；
Ｒ６は、Ｈ；ＯＨ；ＯＲ４；ＯＣ（Ｏ）Ｒ４；Ｎ（Ｒ４）２；Ｆ；ＣＯ２Ｈ；ＣＯＮ（Ｒ４）２；ＳＯ２Ｎ（Ｒ４）２；Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ３−１０ヘテロシクリル；並びに場合によりＣ１−３アルキル又はＮ（Ｒ４）２により置換されている、Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ５−１０ヘテロアリールより選択され；
Ｗは、Ｆ；Ｃｌ；Ｂｒ；Ｉ；ＣＮ；−（ＣＨ２）１−２ＮＲ７Ｒ８；−Ｃ（Ｓ）ＮＨ２；−ＣＯＮＲ７Ｒ８；−Ｃ（＝ＮＲ７）ＮＲ７Ｒ８；−ＣＯ２Ｒ７；及び−ＳＯ２ＮＲ７Ｒ８より選択されるか；
又はＷは、Ｒ１と一緒になって、Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含む５〜７員複素環式環を形成することができ（ここで、その窒素原子は、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ１−４アルキル、−ＣＯ−（ＣＨ２）１−２−ＮＨ２、−ＣＯ−（ＣＨ２）１−２−ＮＨ（Ｃ１−３アルキル）又は−ＣＯ−（ＣＨ２）１−２−Ｎ（Ｃ１−３アルキル）２により置換されていてもよい）；
Ｒ７は、Ｈ及びＣ１−８アルキルより選択され；
Ｒ８は、Ｈ；場合によりＲ３により置換されたＣ１−８アルキル；場合によりＣ１−３アルキルにより置換された、Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ３−１０ヘテロシクリル；並びにＮ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ５−１０ヘテロアリールより選択される］
で示される化合物、又はその互変異性体、若しくは薬学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｘが、ＣＨ又はＮであり；
Ｒ２が、Ｈ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＯＮ（Ｒ４）２、場合によりＣ１−３アルコキシにより置換されたＯ−Ｃ１−４アルキル；又はフラニルであり；そして、ＸがＣＨである場合に、Ｒ２は、またＦ、Ｃｌであってもよく；
Ｙが、Ｃ３−８シクロアルキル；或いは式：
【化１１１】
0005675614.tif 000123
［式中、窒素原子は、場合により、Ｃ１−３アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１−４アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１−４アルキル、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｑ−ＯＣ１−４アルキル、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｑ−Ｎ（ＣＨ３）２、−ＳＯ２Ｃ１−３アルキル、−（ＣＨ２）ｐ−ＮＨ２、−（ＣＨ２）ｐ−ＯＨ、−（ＣＨ２）ｐ−ＯＣ（Ｏ）Ｃ１−３アルキル、−（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）ＮＨ２、−（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２；−ＣＨ２−ヘテロアリール（これは、場合により該ヘテロアリール部分で、ＮＨ２により置換されており、該ヘテロアリール部分は、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、オキサジアゾリル及びピリジニルより選択される）；場合によりＣ１−３アルキルにより置換された−Ｃ（Ｏ）−ピロリル；又は−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−モルホリノにより独立して置換されており、
ここで、ｑは、１〜３であり、ｐは、２又は３である］
のいずれか一つより選択される複素環系より選択され；
Ｒ１が、Ｈ；又はＣ１−３アルキルであり；
Ｒ３が、Ｒ３が結合しているアルキル鎖の２番目の炭素原子以降のＯＨ、ＯＲ４及びＮ（Ｒ４）２；又はＮ、Ｓ及びＯより選択される１個又は２個のヘテロ原子を含むＣ５−７ヘテロシクリルであり（ここで、その窒素原子は、Ｈ又はＣ１−３アルキルによって置換されていてもよい）；
Ｒ４が、Ｈ又はＣ１−４アルキルであり；
Ｒ６が、Ｈ；ＯＨ；ＯＲ４；ＯＣ（Ｏ）Ｒ４；Ｎ（Ｒ４）２；Ｆ；ＣＯ２Ｈ；ＣＯＮ（Ｒ４）２；ＳＯ２Ｎ（Ｒ４）２；Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ３−１０ヘテロシクリル；又はＣ１−３アルキル又はＮ（Ｒ４）２により場合により置換された、Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ５−１０ヘテロアリールであり；
Ｗが、Ｆ；Ｃｌ；Ｂｒ；ＣＮ；−Ｃ（Ｓ）ＮＨ２；−ＣＯＮＲ７Ｒ８；−Ｃ（＝ＮＲ７）ＮＲ７Ｒ８；−ＣＯ２Ｒ７；又は−ＳＯ２ＮＲ７Ｒ８であるか；
或いはＷが、Ｒ１と一緒になって、Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含む５〜７員複素環式環を形成することができ、ここで、その窒素原子は、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ１−４アルキル、−ＣＯ−（ＣＨ２）１−２−ＮＨ２、−ＣＯ−（ＣＨ２）１−２−ＮＨ（Ｃ１−３アルキル）又は−ＣＯ−（ＣＨ２）１−２−Ｎ（Ｃ１−３アルキル）２により置換されていてもよく；
Ｒ７が、Ｈ又はＣ１−３アルキルであり；
Ｒ８が、Ｈ；場合によりＲ３により置換されたＣ１−４アルキル；場合によりＣ１−３アルキルにより置換された、Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ３−１０ヘテロシクリル；又はＮ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ５−１０ヘテロアリールである、請求項１記載の一般式（Ｉ）で示される化合物、又はその互変異性体、若しくは薬学的に許容される塩。
【請求項３】
Ｘが、ＣＨ又はＮであり；
Ｒ２が、Ｈ、ＣＮ、ＣＦ３、又はＣＯＮＨ２であり；そして、ＸがＣＨである場合に、Ｒ２が、Ｆ、Ｃｌであってもよく；
Ｙが、Ｃ３−８シクロアルキル；又は式：
【化１１１】
0005675614.tif 000124
［式中、窒素原子は、場合により、Ｃ１−３アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１−４アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１−４アルキル、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｑ−ＯＣ１−４アルキル、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｑ−Ｎ（ＣＨ３）２、−ＳＯ２Ｃ１−３アルキル、−（ＣＨ２）ｐ−ＮＨ２、−（ＣＨ２）ｐ−ＯＨ、−（ＣＨ２）ｐ−ＯＣ（Ｏ）Ｃ１−３アルキル、−（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）ＮＨ２、−（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２；−ＣＨ２−ヘテロアリール（これは、場合により該ヘテロアリール部分で、ＮＨ２により置換されており、該ヘテロアリール部分は、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、オキサジアゾリル及びピリジニルより選択される）；場合によりＣ１−３アルキルにより置換された−Ｃ（Ｏ）−ピロリル；又は−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−モルホリノにより独立して置換されており、
ここで、ｑは、１〜３であり、ｐは、２又は３である］
のいずれか一つより選択される複素環系より選択され；
Ｒ１が、Ｈ；又はＣ１−３アルキルであり；
Ｒ３が、ＯＨ、ＯＲ４、Ｎ（Ｒ４）２；又はモルホリニル若しくはピロリジニルより選択される複素環であり、ここで、その窒素原子又は該複素環は、Ｃ１−３アルキルにより置換されていてもよく；
Ｒ４が、Ｈ又はＣ１−４アルキルであり；
Ｒ６が、Ｈ；ＯＨ；ＯＲ４；ＯＣ（Ｏ）Ｒ４；Ｎ（Ｒ４）２；Ｆ；ＣＯ２Ｈ；ＣＯＮ（Ｒ４）２；ＳＯ２Ｎ（Ｒ４）２；モルホリニル；又はそれぞれ場合によりメチル若しくはＮＨ２により置換された、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、オキサジアゾリル及びピリジニルより選択されるヘテロアリール基であり；
Ｗが、Ｆ；Ｃｌ；Ｂｒ；ＣＮ；−Ｃ（Ｓ）ＮＨ２；−ＣＯＮＲ７Ｒ８；−Ｃ（＝ＮＲ７）ＮＲ７Ｒ８；−ＣＯ２Ｒ７；又は−ＳＯ２ＮＲ７Ｒ８であり；
Ｒ７が、Ｈ又はＣ１−３アルキルであり；
Ｒ８が、Ｈ；Ｃ１−４アルキル；Ｒ３により末端が置換されたＣ２−４アルキル；又は場合によりＣ１−３アルキルにより置換されたピペリジニルである、
請求項２記載の一般式（Ｉ）で示される化合物、又はその互変異性体、若しくは薬学的に許容される塩。
【請求項４】
Ｘ、Ｙ、Ｗ及びＲ２が、請求項１〜３と同義であり、
Ｒ１が、メチルである、
請求項１〜３のいずれか一項記載の一般式（Ｉ）で示される化合物、又はその互変異性体、若しくは薬学的に許容される塩。
【請求項５】
Ｘ、Ｙ及びＲ２が、請求項１〜４と同義であり、そして
Ｗが、Ｒ１及び式（Ｉ）で示されるコア構造のチエノ部分と一緒になって、式（ＩＩ）〜（ＶＩ）
【化１１２】
0005675614.tif 000125
［式中、Ｒ８は、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１−４アルキル又は−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３）２である］
より選択される環を形成する、請求項１、２、又は４のいずれか一項記載の一般式（Ｉ）で示される化合物、又はその互変異性体、若しくは薬学的に許容される塩。
【請求項６】
Ｘ、Ｙ及びＲ２が、請求項１〜４と同義であり、
Ｗが、Ｒ１及び式（Ｉ）で示されるコア構造のチエノ部分と一緒になって、式（ＩＩ）
［式中、Ｒ８は、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１−４アルキル又は−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３）２である］
で示される環を形成する、請求項５記載の一般式（Ｉ）で示される化合物、又はその互変異性体、若しくは薬学的に許容される塩。
【請求項７】
Ｘ、Ｙ、Ｒ１及びＲ２が、請求項１〜４と同義であり、そして
Ｗが、−ＣＯＮＲ７Ｒ８又は−ＣＯ２Ｒ７より選択され、
ここで、Ｒ７は、Ｈ又はメチルであり、そして
Ｒ８が、場合によりＯＨ、−Ｏ−Ｃ１−３アルキル、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−３アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−３アルキル）２、モルホリノ、ピロリジニル又はＮ−メチル−ピロリジニルにより置換されたＣ１−４アルキルである、
請求項１〜４のいずれか一項記載の一般式（Ｉ）で示される化合物、又はその互変異性体、若しくは薬学的に許容される塩。
【請求項８】
Ｘ、Ｙ、Ｒ１及びＲ２が、請求項１〜４と同義であり、
Ｗが、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２又は−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ８であり、
ここで、Ｒ８が、請求項７と同義である、
請求項７記載の一般式（Ｉ）で示される化合物、又はその互変異性体、若しくは薬学的に許容される塩。
【請求項９】
Ｙ、Ｗ及びＲ１が、請求項１〜８と同義であり、
Ｘが、ＣＨであり、そして
Ｒ２が、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ又はＣ（Ｏ）ＮＨ２である、請求項１〜８のいずれか一項記載の一般式（Ｉ）で示される化合物、又はその互変異性体、若しくは薬学的に許容される塩。
【請求項１０】
Ｙ、Ｗ及びＲ１が、請求項１〜８と同義であり、
Ｘが、Ｎであり、そして
Ｒ２が、Ｈ又はＣＮである、
請求項１〜８のいずれか一項記載の一般式（Ｉ）で示される化合物、又はその互変異性体、若しくは薬学的に許容される塩。
【請求項１１】
【化１１３】
0005675614.tif 000126
0005675614.tif 000127
0005675614.tif 000128
0005675614.tif 000129
0005675614.tif 000130
0005675614.tif 000131
0005675614.tif 000132
より選択される、請求項１記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項１２】
化合物：
【化１１４】
0005675614.tif 000133
又はその薬学的に許容される塩。
【請求項１３】
請求項１〜１２のいずれか一項記載の化合物の薬学的に許容される塩。
【請求項１４】
請求項１〜１２のいずれか一項記載の化合物又は請求項１３記載の塩と、場合により薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
【請求項１５】
追加的な治療薬をさらに含む、請求項１４記載の医薬組成物。
【請求項１６】
追加的な治療薬が、抗糖尿病剤、脂質降下剤、心血管剤、血圧降下剤、利尿剤、血小板凝集阻害剤、抗腫瘍剤又は抗肥満剤より選択される、請求項１５記載の医薬組成物。
【請求項１７】
Ｍｎｋ１若しくはＭｎｋ２（Ｍｎｋ２ａ、Ｍｎｋ２ｂ）又はその変異体のキナーゼ活性の活性阻害に使用するための、請求項１４記載の医薬組成物。
【請求項１８】
代謝性疾患、造血障害、神経変性疾患、腎障害、炎症障害及びガン並びにそれらの続発性合併症及び疾患の予防又は治療に使用するための、請求項１４記載の医薬組成物。
【請求項１９】
糖質及び／又は脂質代謝の代謝性疾患並びにそれらの続発性合併症及び障害の予防又は治療に使用するための、請求項１４記載の医薬組成物。
【請求項２０】
糖尿病の予防又は治療に使用するための、請求項１４記載の医薬組成物。
【請求項２１】
医薬組成物が、追加的な治療薬と同時又は連続的に患者に投与されうる、請求項１４記載の医薬組成物。
【請求項２２】
サイトカイン関連障害の治療又は予防に使用するための、請求項１４記載の医薬組成物。
【請求項２３】
追加的な治療薬が、ヒスタミン拮抗薬、ブラジキニン拮抗薬、セロトニン拮抗薬、ロイコトリエン、抗喘息薬、ＮＳＡＩＤ、解熱薬、コルチコステロイド、抗生物質、鎮痛、尿酸排泄促進剤、化学療法剤、抗痛風剤、気管支拡張薬、シクロオキシゲナーゼ−２阻害剤、ステロイド、５−リポキシゲナーゼ阻害剤、免疫抑制剤、ロイコトリエン拮抗薬、細胞増殖抑制剤、抗腫瘍剤、ｍＴｏｒ阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、サイトカインに対する抗体又はそのフラグメント及びサイトカインレセプターの可溶性部分（フラグメント）より選択される、請求項１５記載の医薬組成物。
【請求項２４】
医薬組成物が、経口、非経口、局所性又は局所的適用に適合している、請求項１４記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、チエノピリミジン化合物及びチエノピリミジン化合物を含む新規な医薬組成物に関するものである。
【０００２】
さらに、本発明は、Ｍｎｋ１（Ｍｎｋ１ａ又はＭｎＫ１ｂ）及び／若しくはＭｎｋ２（Ｍｎｋ２ａ又はＭｎｋ２ｂ）又はそのさらなる変異体のキナーゼ活性を阻害することによって影響されうる疾患の予防及び／又は治療のための医薬組成物を製造するための、本発明のチエノピリミジン化合物の使用に関する。特に、本発明は、糖尿病、高脂血症及び肥満などの代謝性疾患、造血障害、神経変性疾患、腎障害、炎症障害、及びガン並びにそれらの続発性合併症及びそれに関連する障害の予防及び／又は治療のための医薬組成物を製造するための、本発明のチエノピリミジン化合物の使用に関するものである。
【０００３】
代謝性疾患は、異常な代謝過程によって起こる疾患であって、酵素異常の遺伝が原因の先天性及び或いは内分泌器官の疾患又は肝臓若しくは膵臓などの代謝的に重要な器官の不全が原因の後天性のいずれかでありうる。
【０００４】
本発明は、さらに詳細には、特に脂質及び糖質代謝の代謝性疾患並びにそれに関連する続発性合併症及び障害の治療及び／又は予防を目的とする。
【０００５】
脂質障害は、血漿中の脂質及びリポタンパク質のレベル及び代謝に異常を引き起こす一群の状態を包含する。したがって、高脂血症は、アテローム性動脈硬化及び冠動脈心疾患などのその後の血管疾患の発生について重要なリスク因子となることから、特に臨床的に関連する。糖尿病は、結果として生じる器官損傷及び代謝過程の機能障害に関連する慢性高血糖として定義される。その病因に応じて、インスリンの絶対的（インスリン分泌の欠如又は減少）又は相対的欠如のいずれかが原因で、いくつかの型の糖尿病に区別される。Ｉ型糖尿病（ＩＤＤＭ、インスリン依存性糖尿病）は、一般に２０歳未満の青年に生じる。それは、自己免疫の病因により膵島炎に至り、続いてインスリン合成を担うランゲルハンス島のβ細胞が破壊されると考えられている。加えて、成人潜在性自己免疫性糖尿病（ＬＡＤＡ；Diabetes Care. 8: 1460-1467, 2001）において、β細胞は自己免疫の攻撃が原因で破壊され続けている。残りの膵島細胞により産生されるインスリンの量は低すぎ、血糖レベルの上昇（高血糖）を招く。ＩＩ型糖尿病は、一般により高齢で生じる。それは、とりわけ肝臓及び骨格筋におけるインスリン抵抗性に関連するが、ランゲルハンス島の欠損にも関連する。高い血糖レベル（及び同様に高い血中脂質レベル）が今度は、β細胞の機能障害及びβ細胞のアポトーシス増加を導く。
【０００６】
今日の一般的な抗糖尿病薬が、高血糖及び低血糖レベルの発生を完全に予防するには血糖値のコントロールが不十分であることから、糖尿病は、非常に身体障害性の疾患である。範囲外の血糖値は、有毒であり、長期合併症、例えば網膜症、腎臓病、ニューロパチー及び末梢血管疾患を引き起こす。糖尿病を有するヒトが実質的にリスクに曝される、肥満、高血圧、心疾患及び高脂血症などの関連状態の持ち主もいる。
【０００７】
肥満は、心血管疾患、高血圧、糖尿病、高脂血症などの続発疾患のリスク増加及び死亡率増加に関連する。糖尿病（インスリン抵抗性）及び肥満は、いくつかの疾患の間の連鎖として定義される「代謝症候群」（症候群Ｘ、インスリン抵抗性症候群、又は死の四重奏とも呼ばれる）の一部である。これらは、しばしば同じ患者に生じ、ＩＩ型糖尿病及び心血管疾患の発生の主要なリスク因子である。ＩＩ型糖尿病、心疾患、及び代謝症候群の他の発生を処置するために、脂質レベル及びグルコースレベルのコントロールが必要であることが示唆された（例えば、Diabetes 48: 1836-1841, 1999; JAMA 288: 2209-2716, 2002参照）。
【０００８】
本発明の一態様では、本発明の化合物及び組成物は、糖質代謝の代謝性疾患並びにその続発性合併症及び障害、例えば耐糖能障害、糖尿病（好ましくはＩＩ型糖尿病）など、糖尿病性合併症、例えば糖尿病性壊疽、糖尿病性関節症、糖尿病性骨減少症、糖尿病性糸球体硬化症（glomerosclerosis）、糖尿病性腎症、糖尿病性皮膚障害、糖尿病性ニューロパチー、糖尿病性白内障及び糖尿病性網膜症、糖尿病黄斑症、糖尿病性足症候群（diabetic feet syndrome）、ケトアシドーシスを伴うか又は伴わない糖尿病性昏睡、糖尿病性高浸透圧性昏睡、低血糖性昏睡、高血糖性昏睡、糖尿病性アシドーシス、糖尿病性ケトアシドーシス、毛細管内糸球体ネフローゼ（intracapillary glomerulonephrosis）、キンメルスチール・ウィルソン症候群、糖尿病性筋萎縮症、糖尿病性自律神経ニューロパチー、糖尿病性単ニューロパチー、糖尿病性多発ニューロパチー、糖尿病性血管障害、糖尿病性末梢血管障害、糖尿病性潰瘍、糖尿病性関節症、又は糖尿病における肥満などの治療及び／又は予防に有用である。
【０００９】
さらなる態様では、本発明の化合物及び組成物は、脂質代謝の代謝性疾患（すなわち脂質障害）並びにそれらの続発性合併症及び障害、例えば高コレステロール血症、家族性高コレステロール血症、Fredricksonの高リポタンパク血症、高βリポタンパク血症、高脂血症、低密度リポタンパク型［ＬＤＬ］高リポタンパク血症、純型高グリセリド血症、内因性高グリセリド血症、孤立高コレステロール血症、孤立高トリグリセリド血症（isolated hypertroglyceridemia）など、心血管疾患、例えば高血圧、虚血、拡張蛇行静脈、網膜静脈閉塞症、アテローム性動脈硬化、狭心症（angina pectoris）、心筋梗塞、狭心症（stenocardia）、肺高血圧、うっ血性心不全、糸球体症（glomerulopaty）、尿細管間質性障害（tubulointestitial disorder）、腎不全、血管狭窄又は脳血管障害、例えば脳卒中の治療及び／又は予防に有用である。
【００１０】
本発明のさらなる態様では、本発明の化合物及び組成物は、造血（hematopoetic）障害、例えば急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、ホジキンリンパ腫（Morbus Hodgkin）、非ホジキンリンパ腫；造血疾患、急性非リンパ性白血病（ＡＮＬＬ）、骨髄増殖性疾患、急性前骨髄性白血病（ＡＰＬ）、急性骨髄単球性白血病（ＡＭＭｏＬ）、多発性骨髄腫、真性赤血球増加症、リンパ腫、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＣＬ）、ウィルムス腫瘍、又はユーイング肉腫並びにそれらの続発性合併症及び障害の治療及び／又は予防に有用である。本発明のさらなる態様では、本発明の化合物及び組成物は、上部消化管ガン、膵ガン、乳ガン、結腸ガン、卵巣ガン、子宮頸ガン、子宮内膜ガン、脳腫瘍、精巣ガン、喉頭ガン、骨ガン、前立腺ガン、網膜芽細胞腫、肝ガン、肺ガン、神経芽細胞腫、腎ガン、甲状腺ガン、食道ガン、軟部組織肉腫、皮膚ガン、骨肉腫、横紋筋肉腫、膀胱ガン、転移性ガン、悪液質、又は疼痛などのガン並びに続発性合併症及び障害の治療及び／又は予防に有用である。
【００１１】
シスプラチンなどのある種の抗ガン剤は、腎毒性又は聴器毒性などの重篤な副作用に関連し、用量制限性でありうる。Ｍｎｋの活性化は、これらの副作用に関連していた。本発明のさらなる態様では、本発明の化合物及び組成物は、耳又は腎障害の治療及び／又は予防に、特に薬物によって誘導される耳及び腎障害の予防又は治療に有用である。
【００１２】
さらに、本発明は、サイトカイン関連疾患の予防及び／又は治療のための医薬組成物を製造するためのチエノピリミジン化合物の使用に関する。
【００１３】
そのような疾患は、一般に（i.a.）炎症性疾患、自己免疫疾患、骨破壊性障害、増殖性障害、感染症、神経変性疾患、アレルギー、又は炎症性サイトカインに関連する他の状態である。
【００１４】
急性又は慢性炎症、慢性炎症性関節炎、関節リウマチ、乾癬、ＣＯＰＤ、炎症性腸疾患、喘息及び敗血症性ショックなどのアレルギー性及び炎症性疾患並びにそれらの続発性合併症及びそれに関連する障害。
【００１５】
関節リウマチ、ＣＯＰＤなどの炎症性肺疾患、炎症性腸疾患及び乾癬などの炎症性疾患は、生涯のうち３人に１人を苦しめる。それらの疾患は、莫大な保健医療費を負わせるだけでなく、肢体不自由にし、衰弱させることが多い。
【００１６】
炎症は、下記のこれらの炎症性疾患の統一した発症過程であるものの、現在の処置アプローチは複雑であり、一般に任意の一疾患に特異的である。今日利用されている現行の治療法の多くは、疾患の症状を処置するだけであり、炎症の基礎をなす原因を処置するものではない。
【００１７】
本発明の組成物は、慢性又は急性炎症、関節の炎症、例えば慢性炎症性関節炎、関節リウマチ、乾癬性関節炎、変形性関節症、若年性関節リウマチ、ライター症候群、外傷性リウマチ様関節炎、風疹性関節炎、急性滑膜炎及び痛風性関節炎；炎症性皮膚疾患、例えば日焼け、乾癬、乾癬性紅皮症、膿疱性乾癬、湿疹、皮膚炎、急性又は慢性グラフト形成（graft formation）、アトピー性皮膚炎、接触皮膚炎、蕁麻疹及び強皮症；消化管の炎症、例えば炎症性腸疾患、クローン病及び関連状態、潰瘍性大腸炎、大腸炎，及び憩室炎；腎炎、尿道炎、卵管炎、卵巣炎、子宮内膜炎、脊椎炎、全身性エリテマトーデス及び関連障害、多発性硬化症、喘息、髄膜炎、脊髄炎、脳脊髄炎、脳炎、静脈炎、血栓静脈炎、呼吸器疾患、例えば喘息、気管支炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性肺疾患及び成人呼吸促迫症候群、及びアレルギー性鼻炎；心内膜炎、骨髄炎、リウマチ熱、リウマチ性心膜炎、リウマチ性心内膜炎、リウマチ性心筋炎、リウマチ性僧帽弁疾患、リウマチ性大動脈弁疾患、前立腺炎、前立腺膀胱炎、脊椎関節症（spondoarthropathy）強直性脊椎炎、滑膜炎、腱鞘炎（tenosynovotis）、筋炎、咽頭炎、リウマチ性多発筋痛、肩腱炎又は滑液包炎、痛風、偽痛風、血管炎、肉芽腫性甲状腺炎、リンパ球性甲状腺炎、浸潤性線維性甲状腺炎、急性甲状腺炎より選択される甲状腺の炎症性疾患；橋本甲状腺炎、川崎病、レイノー現象、シェーグレン症候群、神経炎症性疾患、敗血症、結膜炎、角膜炎、虹彩毛様体炎、視神経炎、耳炎、リンパ節炎、鼻咽頭炎（nasopaharingitis）、副鼻腔炎、咽頭炎、扁桃炎、喉頭炎、喉頭蓋炎、気管支炎、肺臓炎、口内炎、歯肉炎、食道炎、胃炎、腹膜炎、肝炎、胆石症、胆嚢炎、糸球体腎炎、グッドパスチャー病、半月体形成性糸球体腎炎、膵炎、子宮内膜炎、子宮筋層炎、子宮炎、子宮頸管炎、子宮頸管内膜炎、子宮頸管外炎（exocervicitis）、子宮傍組織炎、結核、膣炎、外陰炎、珪肺症、サルコイドーシス、塵肺、発熱、炎症性多発性関節障害、関節症性乾癬、腸線維症、気管支拡張症及び腸炎性関節症などの炎症性疾患並びに続発性合併症及び障害の治療及び／又は予防に有用である。
【００１８】
さらに、サイトカインは、また、様々な心血管障害及び脳血管障害、例えばうっ血性心疾患、心筋梗塞、アテローム性プラーク形成、高血圧、血小板凝集、アンギナ、脳卒中、アルツハイマー病、再灌流傷害、再狭窄及び末梢血管疾患を含む血管傷害、並びに例えば様々な骨代謝障害、例えば骨粗鬆症（老人性及び閉経後骨粗鬆症を含む）、パジェット病、骨転移、高カルシウム血症、副甲状腺機能亢進症、骨硬化症、骨粗鬆症及び歯周炎、並びに関節リウマチ及び変形性関節症を併発しうる骨代謝の異常変化の生成及び発生に関係していると考えられる。
【００１９】
過剰のサイトカイン生成は、また、ある種の細菌、真菌及び／又はウイルス感染合併症、例えば内毒素性ショック、敗血症性ショック及び毒素性ショック症候群の仲介、並びにＣＮＳ手術又は神経外傷及び虚血性脳卒中などの傷害のある種の合併症の仲介に関係していた。
【００２０】
そのうえ、過剰のサイトカイン生成は、軟骨又は筋肉の再吸収を伴う疾患、肺線維症、硬変、腎線維症、悪性疾患及び後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）などのある種の慢性疾患、腫瘍浸潤及び腫瘍転移に見られる悪液質並びに多発性硬化症の発生の仲介又は増悪に関係していた。これらの疾患の治療及び／又は予防は、また、本発明により考えられている。
【００２１】
追加的に、本発明の組成物は、非限定的に、全身性エリテマトーデス、アジソン病、多腺性自己免疫疾患（多腺性自己免疫症候群としても知られている）、糸球体腎炎、関節リウマチ強皮症、慢性甲状腺炎、グレーブス病、自己免疫性胃炎、糖尿病、自己免疫性溶血性貧血、糸球体腎炎、関節リウマチ自己免疫性好中球減少症、血小板減少症、アトピー性皮膚炎、慢性活動性肝炎、重症筋無力症、多発性硬化症、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、乾癬、及び移植片対宿主病を含めた自己免疫疾患に関連する炎症を処置するために使用することができる。
【００２２】
さらなる態様では、本発明の組成物は、敗血症、敗血症性ショック、細菌性赤痢、及びHelicobacter pyloriなどの感染症並びに単純ヘルペス１型（ＨＳＶ−１）、単純ヘルペス２型（ＨＳＶ−２）、サイトメガロウイルス、エプスタイン−バー、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、急性肝炎感染（Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、及びＣ型肝炎を含む）、ＨＩＶ感染及びＣＭＶ網膜炎を含めたウイルス疾患、ＡＩＤＳ又は悪性腫瘍、マラリア、ミコバクテリア感染及び髄膜炎の治療及び予防に使用することができる。これらは、また、インフルエンザウイルス、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、エプスタイン−バーウイルス、ヒトヘルペスウイルス−６（ＨＨＶ−６）、ヒトヘルペスウイルス−７（ＨＨＶ−７）、ヒトヘルペスウイルス−８（ＨＨＶ−８）、ポックスウイルス、ワクシニアウイルス、サル痘ウイルス、仮性狂犬病及び鼻気管炎によるウイルス感染が含まれる。
【００２３】
本発明の組成物は、また、関節炎症、湿疹、乾癬及び他の皮膚炎症状態、例えば日焼け；結膜炎を含めた眼炎症状態；発熱、疼痛及び炎症に関連する他の状態などの、過剰のサイトカイン産生により仲介又は増悪される局所疾患状態の治療又は予防に、局所的に使用することができる。
【００２４】
歯周病もまた、局所及び全身の両方におけるサイトカイン産生に関係していた。よって、歯肉炎及び歯周炎などの口周囲疾患におけるサイトカイン産生に関連する炎症をコントロールするための本発明の組成物の使用は、本発明の別の局面である。
【００２５】
最終的に、本発明の組成物は、また、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、前頭側頭葉型痴呆、脊髄小脳失調症、レビー小体型認知症、脳虚血又は外傷によって起こる神経変性疾患、グルタミン酸神経毒性又は低酸素症より選択される神経変性疾患を治療又は予防するために使用することができる。
【００２６】
好ましい態様では、本発明の組成物は、慢性又は急性炎症、慢性炎症性関節炎、関節リウマチ、乾癬、ＣＯＰＤ、炎症性腸疾患、敗血症性ショック、クローン病、潰瘍性大腸炎、多発性硬化症及び喘息より選択される疾患を治療又は予防するために使用することができる。
【００２７】
タンパク質キナーゼは、多数の細胞機能の調節に関与する重要な酵素である。Drosophila melanogasterのＬＫ６−セリン／トレオニン−キナーゼ遺伝子は、微小管に関連しうる短寿命キナーゼとして記載された（J. Cell Sci. 1997、110(2): 209-219）。Drosophilaの複眼の発生における遺伝子解析により、ＲＡＳシグナル経路の調節に果たす役割が示唆された（Genetics 2000 156(3): 1219-1230）。Drosophila ＬＫ６−キナーゼに最も近縁のヒトホモログは、ＭＡＰ−キナーゼ相互作用キナーゼ２（Ｍｎｋ２、例えば変異体Ｍｎｋ２ａ及びＭｎｋ２ｂ）及びＭＡＰ−キナーゼ相互作用キナーゼ１（Ｍｎｋ１）及びその変異体である。これらのキナーゼは、細胞質に大部分局在する。Ｍｎｋは、ｐ４２ ＭＡＰキナーゼであるＥｒｋ１及びＥｒｋ２並びにｐ３８−ＭＡＰキナーゼによってリン酸化される。このリン酸化は、成長因子、ホルボールエステル並びにＲａｓ及びＭｏｓなどのガン遺伝子に応答して、そしてストレスシグナル伝達分子及びサイトカインによってトリガーされる。Ｍｎｋタンパク質のリン酸化は、真核生物開始因子４Ｅ（ｅｌＦ４Ｅ）に対するそれらのキナーゼ活性を刺激する（EMBO J. 16: 1909-1920, 1997; Mol Cell Biol 19, 1871-1880, 1990; Mol Cell Biol 21, 743-754, 2001）。マウスにおいてＭｎｋ１及びＭｎｋ２遺伝子の両方を同時に破壊すると、ｅＩＦ４Ｅの基礎リン酸化及び刺激されたリン酸化が減少する（Mol Cell Biol 24, 6539-6549, 2004）。ｅｌＦ４Ｅのリン酸化は、タンパク質の翻訳調節を招く（Mol Cell Biol 22: 5500-5511, 2001）。
【００２８】
Ｍｎｋタンパク質によるタンパク質翻訳の刺激様式を説明している、様々な仮説がある。大部分の刊行物は、ＭＡＰキナーゼ相互作用キナーゼの活性化に応じたキャップ依存性タンパク質翻訳に対する正の刺激効果を記載している。したがって、Ｍｎｋタンパク質の活性化は、例えばサイトソル性ホスホリパーゼ２αに対する効果によって、タンパク質翻訳の間接的な刺激又は調節をもたらしうる（BBA 1488:124-138, 2000）。
【００２９】
国際公開公報第０３／０３７３６２号は、ヒトＭｎｋ遺伝子、特にヒトＭｎｋ２遺伝子変異体と、体重又は熱発生の調節と関連する疾患との関係を開示している。ヒトＭｎｋ遺伝子、特にＭｎｋ２変異体は、例えば肥満、摂食障害、悪液質、糖尿病、高血圧、冠動脈心疾患、高コレステロール血症、脂質異常症、変形性関節症、胆石、性器ガン及び睡眠時無呼吸を含めた代謝性疾患などの疾患並びに例えば糖尿病及びガンなどの、ＲＯＳ防御に結び付く疾患に関与すると仮定されている。さらに、国際公開公報第０３／０３７６２号は、体重又は熱発生の調節に関連する疾患の診断、予防又は治療における、ＭＡＰキナーゼ−相互作用キナーゼ（Ｍｎｋ）遺伝子ファミリーの核酸配列及びこれらをコードするアミノ酸配列の使用、並びにこれらの配列又はＭｎｋ核酸若しくはポリペプチドのエフェクター、特にＭｎｋ阻害剤及びアクチベーターの使用を開示している。
【００３０】
国際公開公報第０２／１０３３６１号は、２型糖尿病の処置に特に有用な薬理学的活性成分の同定用アッセイにおける、ヒトＭＡＰキナーゼと相互作用するキナーゼ２ａ及び２ｂ（Ｍｎｋ２ａ及びＭｎｋ２ｂ）の使用を記載している。さらに、国際公開公報第０２／１０３３６１号は、また、Ｍｎｋ２ａ又はＭｎｋ２ｂの発現又は活性のモデュレーションによるインスリン抵抗性関連疾患の予防及び／又は治療を開示している。ペプチド、ペプチド模倣体、アミノ酸、アミノ酸アナログ、ポリヌクレオチド、ポリヌクレオチドアナログ、ヌクレオチド及びヌクレオチドアナログの他に、４−ヒドロキシ安息香酸メチルエステルが、ヒトＭｎｋ２タンパク質と結合する物質として記載されている。
【００３１】
Ｍｎｋが炎症に果たす役割の最初の証拠は、炎症促進性刺激によるＭｎｋ１の活性化を実証している研究によって提供された。サイトカインＴＮＦα及びＩＬ−１βは、インビトロでＭｎｋ１の活性化をトリガーし（Fukunaga and Hunter, EMBO J 16(8): 1921-1933, 1997）、インビボでＭｎｋ特異的基質ｅＩＦ４Ｅのリン酸化を誘導する（Ueda et al., Mol Cell Biol 24(15): 6539-6549, 2004）。加えて、炎症応答の強力な刺激物質であるリポ多糖（ＬＰＳ）の投与は、マウスにおけるＭｎｋ１及びＭｎｋ２の活性化を誘導し、同時にそれらの基質であるｅＩＦ４Ｅのリン酸化が起きる（Ueda et al., Mol Cell Biol 24(15): 6539-6549, 2004）。
【００３２】
さらに、Ｍｎｋ１は、炎症性サイトカインの産生調節に関与することが示された。Ｍｎｋ１は、ケモカインＲＡＮＴＥＳの発現を高める（Nikolcheva et al., J Clin Invest 110, 119-126, 2002）。ＲＡＮＴＥＳは、単球、好酸球、好塩基球及びナチュラルキラー細胞の強力な化学誘引物質である。ＲＡＮＴＥＳは、Ｔリンパ球の増殖を活性化及び誘導し、好塩基球の脱顆粒を仲介し、好塩基球における呼吸バーストを誘導する（Conti and DiGioacchino, Allergy Asthma Proc 22(3):133-7, 2001）。
【００３３】
国際公開公報第２００５／００３８５号及びBuxade et al., Immunity  23: 177-189, August 2005は、共にＭｎｋｓとＴＮＦα生合成のコントロールとの関連を開示している。提起されたメカニズムは、ＴＮＦα ｍＲＮＡにおけるＡＵリッチ調節エレメント（ＡＲＥ）によって仲介される。Buxadeらは、ＡＲＥと結合し、ＡＲＥの機能をコントロールするタンパク質がＭｎｋ１及びＭｎｋ２によってリン酸化されることを実証している。具体的には、ＡＲＥ結合性タンパク質ｈｎＲＮＰ Ａ１のＭｎｋ介在性リン酸化は、ＴＮＦα ｍＲＮＡの翻訳を高めることが示唆された。
【００３４】
ＴＮＦαは、ＡＲＥによって調節される唯一のサイトカインではない。機能的ＡＲＥは、また、いくつかのインターロイキン、インターフェロン及びケモカインの転写に見出される（Khabar, J Interf Cytokine Res 25: 1-10, 2005）。したがって、ＡＲＥ結合タンパク質のＭｎｋ介在性リン酸化は、ＴＮＦαの生合成に加えて、サイトカインの生合成をコントロールする潜在性を有する。
【００３５】
目下の証拠は、Ｍｎｋを炎症シグナル伝達の下流のターゲット及び炎症応答の仲介物質として実証している。それらがＴＮＦα、ＲＡＮＴＥＳ、及び潜在的に追加的なサイトカインの産生に関与することは、抗炎症治療的介入の戦略としてのＭｎｋの阻害性を示唆している。
【００３６】
Ｍｎｋ１及びＭｎｋ２（全てのスプライス形を含む）は、翻訳因子ｅＩＦ４Ｅをセリン２０９でリン酸化する。Ｍｎｋ１／２ダブルノックアウトマウスは、セリン２０９でのリン酸化を完全に欠如するが、これは、Ｍｎｋキナーゼが、インビボでこの部位をリン酸化できる唯一のキナーゼであることを示している（Ueda et al., Mol Cell Biol. 2004; 24(15):6539-49）。ｅＩＦ４Ｅは、広い範囲のヒト悪性腫瘍に過剰発現し、高いｅＩＦ４Ｅ発現は、より侵襲性の高い疾患及び予後不良としばしば関連する。さらに、ｅＩＦ４Ｅは、発ガンアッセイのための標準アッセイでアッセイした場合にガン遺伝子として作用することができる（例えばRuggero et al., Nat Med. 2004 May;10(5):484-6）。ｅＩＦ４Ｅは、ＭＣＰ−１などの生存促進因子の発現を増大させることによって（Wendel et al., Genes Dev. 2007; 21(24):3232-7）、及び薬物耐性経路の正の調節を行うことによって（Wendel et al., Nature 2004; 428(6980):332-7; Graff et el., Cancer Res. 2008; 68(3):631-4; De Benedetti and Graff, Oncogene 2004; 23(18):3189-99; Barnhart and Simon, J Clin Invest. 2007; 117(9):2385-8）、ｃ−ｍｙｃ及びサイクリンＤ１などのガン遺伝子の翻訳を刺激することによって、その発ガン活性を発揮する（Culjkovic et al., J Cell Biol. 2006; 175(3):415-26）。アンチセンスオリゴヌクレオチドによるｅＩＦ４Ｅの発現抑制は、ヒト腫瘍細胞を用いた前臨床実験で有望であることが示された（Graff et al., J Clin Invest. 2007; 117(9):2638-48）。Ｓｅｒ２０９でのリン酸化が、インビトロ及びインビボでｅＩＦ４Ｅの発ガン活性に厳密に必要であることが示された（Topisirovic et al., Cancer Res. 2004; 64(23):8639-42; Wendel et al., Genes Dev. 2007; 21(24):3232-7）。したがって、Ｍｎｋ１及びＭｎｋ２の阻害は、ヒトの悪性腫瘍に有益効果を有すると期待される。
【００３７】
Ｍｎｋ阻害剤（ＣＧＰ５７３８０及びＣＧＰ０５２０８８と呼ばれる）が、記載されている（Mol. Cell. Biol. 21, 5500, 2001; Mol Cell Biol Res Comm 3, 205, 2000; Genomics 69, 63, 2000参照）。ＣＧＰ０５２０８８は、Ｍｎｋ１のインビトロキナーゼ活性阻害について７０nMのＩＣ５０を有するスタウロスポリン誘導体である。ＣＧＰ５７３８０は、Ｍｎｋ２（Ｍｎｋ２ａ若しくはＭｎｋ２ｂ）又はＭｎｋ１の選択的で細胞無毒性の低分子量阻害剤である：Ｍｎｋ２（Ｍｎｋ２ａ若しくはＭｎｋ２ｂ）又はＭｎｋ１をトランスフェクションされた、細胞培養された細胞へのＣＧＰ５７３８０の添加により、リン酸化ｅｌＦ４Ｅの強い減少が示された。
【００３８】
さらなるＭｎｋ阻害剤が記載された。例えばＭｎｋキナーゼ阻害剤として、ピラゾロピリミジン化合物を記載している国際公開公報第０６／０６６９３７号、ある種のチエノピリミジン化合物を記載している国際公開公報第０６／１３６４０２号、改変されたコア環を有するさらなるチエノピリミジン化合物を記載している国際公開公報第０７／１１５８２２号、ピロロピリミジンを記載している国際公開公報第０８／００６５４７号である、出願人の特許出願を参照されたい。
【００３９】
本発明の課題は、代謝性疾患、炎症性疾患、ガン、神経変性疾患並びにそれらの続発性合併症及び障害の処置に効果的及び安全に使用することのできる、強力で選択的なＭｎｋ１及び／又はＭｎｋ２阻害剤を提供することである。
【００４０】
今回驚くことに、ある種のチエノピリミジン化合物が、キナーゼ酵素Ｍｎｋ１及び／又はＭｎｋ２及び／又はその変異体の強力な阻害剤あって、それとしてＭｎｋ１及び／又はＭｎｋ２（Ｍｎｋ２ａ又はＭｎｋ２ｂ）及び／又はその変異体のキナーゼ活性の阻害によって影響されうる疾患の予防及び／又は治療に有用でありうることが、見出された。
【００４１】
当技術分野で公知のチエノピリミジン化合物、例えば出願者の特許出願である国際公開公報第０６／１３６４０２号及び国際公開公報第２００７／１１５８２２号に開示された化合物とは対照的に、本発明のチエノピリミジン化合物は、いくつかの利点、すなわち高い溶解度、安定な塩を形成する可能性、改善された代謝安定性、Ｍｎｋ活性の生化学アッセイ又は細胞アッセイにおける高い活性又は維持された活性、及び他のキナーゼに対する高い選択性又は維持された選択性を提供する。
【００４２】
国際公開公報第０６／１３６４０２号及び国際公開公報第０７／１１５８２２号に開示されたチエノピリミジン化合物は、Ｍｎｋ酵素アッセイにおいて高い活性及び極めて高い選択性を示すが、これらの化合物は、非常に低い溶解度を示し、大部分の場合で代謝的に不安定であって、望まれない薬物動態的性質をもたらす。
【００４３】
下記一般式（Ｉ）で示される化合物においてＷ位への極性基の導入が、驚くほどの実質的な代謝安定化に導き、本発明で示されるチエノピリミジンをインビボの薬理学的適用に有用にすることが驚くことに見出された。
【００４４】
さらに、本出願に記載された化合物は、また、改善された溶解度を示し、生化学アッセイ及び細胞アッセイにおいて強い阻害効力を有し、高度に選択性であって、全体的に大きく改善された薬理学的性質をもたらす。
【００４５】
特に詳記しない限り、本出願に述べる任意のアルキル部分は、直鎖又は分岐でありうる。
【００４６】
本発明のチエノピリミジン化合物は、一般式（Ｉ）：
【００４７】
【化１】
0005675614.tif 000002
［式中、
Ｘは、ＣＨ又はＮより選択され；
Ｒ２は、Ｈ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＯＮ（Ｒ４）２、場合によりＲ３により置換されたＯ−Ｃ１−８アルキル；Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ３−１０ヘテロシクリル；Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ５−１０ヘテロアリール；場合によりＲ６により置換されたＣ１−８アルキルより選択され、ＸがＣＨの場合に、Ｒ２は、また、Ｆ、Ｃｌ、ＳＯ２ＮＨ２であってもよく；
Ｙは、場合により一つ又は複数のＲ３により置換された直鎖又は分岐Ｃ１−８アルキル；場合により一つ又は複数のＲ９により置換されたＣ３−８シクロアルキル；或いは場合により一つ又は複数のＲ９により置換された式：
【００４８】
【化２】
0005675614.tif 000003
（式中、ｎは１〜３であり、ＵはＯ又はＮＲ５である）
のいずれか一つより選択される、複素環系より選択され；
Ｒ１は、Ｃｌ；又は場合によりＮ（Ｒ４）２若しくはＦにより置換されたＣ１−８アルキルより選択され；
Ｒ３は、２番目の炭素原子以降のＯＨ、ＯＲ４及びＮ（Ｒ４）２；Ｆ；ＣＯ２Ｈ；ＣＯＮ（Ｒ４）２；ＳＯ２Ｎ（Ｒ４）２；Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ３−１０ヘテロシクリル；又はＮ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ５−１０ヘテロアリールより選択され；
Ｒ４は、Ｈ又はＣ１−８アルキルより選択され；
Ｒ５は、Ｈ；Ｃ１−８アルキル；Ｃ２−８アルケニル；Ｃ３−１０シクロアルキル；Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ３−１０ヘテロシクリル；Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ５−１０ヘテロアリール；ＣＯＮＨ（ＣＨ２）ｍＲ６；（ＣＨ２）ｍＲ６；ＣＯ（ＣＨ２）ｍＲ６；又はＳＯ２（ＣＨ２）ｍＲ６（ここで、ｍは１〜４である）より選択され；
Ｒ６は、Ｈ；ＯＨ；ＯＲ４；Ｎ（Ｒ４）２；Ｆ；ＣＯ２Ｈ；ＣＯＮ（Ｒ４）２；ＳＯ２Ｎ（Ｒ４）２；Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ３−１０ヘテロシクリル；又はＮ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ５−１０ヘテロアリールより選択され；
Ｗは、Ｆ；Ｃｌ；Ｂｒ；Ｉ；Ｒ６により置換されたＣ１−８アルキル；−（ＣＨ２）１−２ＮＲ７Ｒ８；−ＣＯＮＲ７Ｒ８；−Ｃ（＝ＮＲ７）ＮＲ７Ｒ８；−ＣＯ２Ｒ７；−ＳＯ２ＮＲ７Ｒ８より選択されるか；又はＷは、Ｒ１と一緒になって、Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含む５〜７員複素環を形成することができ；
Ｒ７は、Ｈ又はＣ１−８アルキルより選択され；
Ｒ８は、Ｈ；場合によりＲ３により置換されたＣ１−８アルキル；Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ３−１０ヘテロシクリル；又はＮ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ５−１０ヘテロアリールより選択され；
Ｒ９は、Ｏ又はＮに結合した炭素原子以外の任意の炭素原子上のＯＨ、ＯＲ４及びＮ（Ｒ４）２；Ｆ；ＣＯ２Ｈ；ＣＯＮ（Ｒ４）２；ＳＯ２Ｎ（Ｒ４）２；（ＣＨ２）ｍＯＲ４；（ＣＨ２）ｍＮ（Ｒ４）２；Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ３−１０ヘテロシクリル；又はＮ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ５−１０ヘテロアリールより選択される］
で示される化合物又はその代謝物、プロドラッグ、若しくは薬学的に許容される塩である。
【００４９】
Ｒ１が、場合によりＮ（Ｒ４）２により置換されたＣ１−８アルキルである化合物が、好ましい。
【００５０】
さらに、Ｙが、場合により一つ又は複数のＲ９により置換された、式：
【００５１】
【化３】
0005675614.tif 000004
［式中、ｎは１〜３であり、ＵはＮＲ５である］のいずれか一つより選択される複素環系である、上記と同義の化合物が好ましい。
【００５２】
Ｗが、Ｒ１と一緒になって、式（ＩＩ）〜（ＶＩ）
【００５３】
【化４】
0005675614.tif 000005
より選択される環を形成し、Ｘが、ＣＨ又はＮであり、より好ましくはＸがＮである、上記と同義の化合物もまた好ましい。
【００５４】
一局面では、本発明は、Ｗが、−ＣＯ２Ｒ７；Ｈ、ＯＨ、ＯＲ４、Ｆ、ＣＯ２Ｈにより置換されたＣ１−８アルキル、又はＳ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ３−１０ヘテロシクリルより選択され；ここで、Ｗが、好ましくは−ＣＯ２Ｒ７である、上記と同義の化合物に関する。
【００５５】
別の局面では、本発明は、Ｗが、−（ＣＨ２）１−２ＮＲ７Ｒ８；−ＣＯＮＲ７Ｒ８；−Ｃ（＝ＮＲ７）ＮＲ７Ｒ８；−ＳＯ２ＮＲ７Ｒ８；Ｎ（Ｒ４）２、ＣＯＮ（Ｒ４）２、ＳＯ２Ｎ（Ｒ４）２により置換されたＣ１−８アルキル、又は少なくとも１個のＮ原子及び場合によりＮ、Ｓ及びＯより選択される１個又は複数個の追加的なヘテロ原子を含むＣ３−１０ヘテロシクリルより選択されか；或いはＷが、Ｒ１と一緒になって、式（ＩＩ）〜（ＶＩ）：
【００５６】
【化５】
0005675614.tif 000006
より選択される環を形成する、化合物に関する。
【００５７】
この第２の局面では、Ｗは、好ましくは−ＣＯＮＲ７Ｒ８である。
【００５８】
本発明のさらに好ましい化合物では、Ｙは、場合により一つ又は複数のＲ９により置換された
【００５９】
【化６】
0005675614.tif 000007
［式中、ＺはＮＲ４又はＯであり、ｎは１又は２であり、なおさらに好ましくは、ＺはＯである］より選択される。
【００６０】
Ｙが、場合により一つ又は複数のＲ９により置換された式：
【００６１】
【化７】
0005675614.tif 000008
［式中、ｎは１又は２である］で示されるヘテロシクリルであり、Ｗが−ＣＯＮＲ７Ｒ８である、上記と同義の化合物が特に好ましい。
【００６２】
また、Ｙが、場合により一つ又は複数のＲ９により置換された、式：
【００６３】
【化８】
0005675614.tif 000009
で示されるヘテロシクリルであり；
Ｗが、−ＣＯＮＲ７Ｒ８であり；
Ｘが、Ｎである、上記と同義の化合物が、特に好ましい。
【００６４】
別の好ましい態様では、Ｙは、場合により一つ又は複数のＲ９により置換された式：
【００６５】
【化９】
0005675614.tif 000010
で示されるヘテロシクリルであり；
Ｗは、−ＣＯＮＲ７Ｒ８であり；
Ｘは、ＣＨである。
【００６６】
Ｙが、場合により一つ又は複数のＲ９により置換された、式：
【化１０】
0005675614.tif 000011
で示されるヘテロシクリルであり；
Ｗが、−ＣＯＮＲ７Ｒ８であり；
Ｘが、Ｎである、上記と同義の化合物もまた好ましい。
【００６７】
別の好ましい態様では、Ｙは、場合により一つ又は複数のＲ９により置換された式：
【００６８】
【化１１】
0005675614.tif 000012
で示されるヘテロシクリルであり；
Ｗは、−ＣＯＮＲ７Ｒ８であり；
Ｘは、ＣＨである。
【００６９】
さらに、本発明は、一般式（Ｉ）
【００７０】
【化１２】
0005675614.tif 000013
［式中、
Ｘは、ＣＨ又はＮより選択され；
Ｒ２は、Ｈ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＯＮ（Ｒ４）２；場合によりＲ３により置換されたＯ−Ｃ１−８アルキル；Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ３−１０ヘテロシクリル；Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ５−１０ヘテロアリール；並びに場合によりＲ６により置換されたＣ１−８アルキルより選択され；ＸがＣＨである場合に、Ｒ２は、また、Ｆ、Ｃｌ、ＳＯ２ＮＨ２であってもよい］
で示される化合物に関する。
【００７１】
Ｙは、場合により一つ又は複数のＲ３により置換された直鎖又は分岐Ｃ１−８アルキル；場合により一つ又は複数のＲ９により置換されたＣ３−８シクロアルキル；及び場合により一つ又は複数のＲ９により置換された式：
【００７２】
【化１３】
0005675614.tif 000014
（ここで、ｎは、独立して１〜３であり、Ｕは、独立してＯ又はＮＲ５である）のいずれか一つより選択される複素環系より選択され；
Ｒ１は、Ｈ；Ｃｌ；及び場合によりＮ（Ｒ４）２又はＦにより置換されたＣ１−８アルキルより選択され；
Ｒ３は、Ｒ３が結合しているアルキル鎖の２番目の炭素原子以降のＯＨ、ＯＲ４及びＮ（Ｒ４）２；Ｆ；ＣＯ２Ｈ；ＣＯＮ（Ｒ４）２；ＳＯ２Ｎ（Ｒ４）２；Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ３−１０ヘテロシクリル（ここで、その窒素原子は、Ｈ又はＣ１−３アルキルにより置換されていてもよい）；及びＮ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ５−１０ヘテロアリールより選択され；
Ｒ４は、Ｈ及びＣ１−８アルキルより選択され；
Ｒ５は、Ｈ；Ｃ１−８アルキル；Ｃ２−８アルケニル；Ｃ３−１０シクロアルキル；Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ３−１０ヘテロシクリル；Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ５−１０ヘテロアリール；ＣＯＲ６；ＣＯ２Ｒ４；ＣＯＮＨ（ＣＨ２）ｍＲ６；（ＣＨ２）ｍＲ６；ＣＯ（ＣＨ２）ｍＲ６；（ＣＨ２）ｍＣ（Ｏ）Ｒ６；ＳＯ２Ｒ４；及びＳＯ２（ＣＨ２）ｍＲ６より選択され（ここで、ｍは１〜４である）；
Ｒ６は、Ｈ；ＯＨ；ＯＲ４；ＯＣ（Ｏ）Ｒ４；Ｎ（Ｒ４）２；Ｆ；ＣＯ２Ｈ；ＣＯＮ（Ｒ４）２；ＳＯ２Ｎ（Ｒ４）２；Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ３−１０ヘテロシクリル；並びに場合によりＣ１−３アルキル又はＮ（Ｒ４）２により置換された、Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ５−１０ヘテロアリールより選択され；
Ｗは、Ｆ；Ｃｌ；Ｂｒ；Ｉ；ＣＮ；−（ＣＨ２）１−２ＮＲ７Ｒ８；−Ｃ（Ｓ）ＮＨ２；−ＣＯＮＲ７Ｒ８；−Ｃ（＝ＮＲ７）ＮＲ７Ｒ８；−ＣＯ２Ｒ７；及び−ＳＯ２ＮＲ７Ｒ８より選択されるか；
又はＷは、Ｒ１と一緒になって、Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含む５〜７員複素環式環を形成することができ、ここで、その窒素原子は、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ１−４アルキル、−ＣＯ−（ＣＨ２）１−２−ＮＨ２、−ＣＯ−（ＣＨ２）１−２−ＮＨ（Ｃ１−３アルキル）又は−ＣＯ−（ＣＨ２）１−２−Ｎ（Ｃ１−３アルキル）２により置換されていてもよく；
Ｒ７は、Ｈ及びＣ１−８アルキルより選択され；
Ｒ８は、Ｈ；場合によりＲ３により置換されたＣ１−８アルキル；場合によりＣ１−３アルキルにより置換された、Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ３−１０ヘテロシクリル；並びにＮ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ５−１０ヘテロアリールより選択され；
Ｒ９は、Ｏ又はＮに結合した炭素原子以外の任意の炭素原子上のＯＨ、ＯＲ４、Ｎ（Ｒ４）２、Ｎ（Ｒ４）ＣＯＲ４、ＮＲ４ＳＯ２Ｒ４及びＮ（Ｒ４）−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ４；Ｆ；ＣＯ２Ｈ；ＣＯＮ（Ｒ４）２；ＳＯ２Ｎ（Ｒ４）２；ＳＯ２Ｒ４；（ＣＨ２）ｍＯＲ４；（ＣＨ２）ｍＮ（Ｒ４）２；Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ３−１０ヘテロシクリル；並びにＮ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ５−１０ヘテロアリールより選択される］
で示される化合物、又はその互変異性体、代謝物、プロドラッグ若しくは薬学的に許容される塩に関するが、但し、化合物エチル４−（２−メトキシフェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレートは除外する。
【００７３】
一般式（Ｉ）
［式中、
Ｘが、ＣＨ又はＮであり；
Ｒ２が、Ｈ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＯＮ（Ｒ４）２、場合によりＣ１−３アルコキシにより置換されたＯ−Ｃ１−４アルキル；又はフラニルであり；ＸがＣＨである場合に、Ｒ２は、また、Ｆ、Ｃｌであってもよく；
Ｙは、場合によりＲ３により置換された直鎖又は分岐Ｃ１−４アルキル；場合により一つ又は二つのＲ９により置換されたＣ３−８シクロアルキル；或いは場合により一つ又は複数のＲ９により置換された、式：
【００７４】
【化１４】
0005675614.tif 000015
（ここで、式中、ｎは、独立して１〜３であり、Ｕは、独立してＯ又はＮＲ５である）
のいずれか一つより選択される複素環系であり；
Ｒ１は、Ｈ；又はＣ１−３アルキルであり；
Ｒ３は、Ｒ３が結合しているアルキル鎖の２番目の炭素原子以降のＯＨ、ＯＲ４及びＮ（Ｒ４）２；又はＮ、Ｓ及びＯより選択される１個若しくは２個のヘテロ原子を含むＣ５−７ヘテロシクリルであり（ここで、その窒素原子は、Ｈ又はＣ１−３アルキルにより置換されていてもよい）；
Ｒ４は、Ｈ又はＣ１−４アルキルであり；
Ｒ５は、Ｈ；Ｃ１−４アルキル；ＣＯＲ６；ＣＯ２Ｒ４；ＳＯ２Ｒ４；Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ６；（ＣＨ２）ｍＣ（Ｏ）Ｒ６；又は（ＣＨ２）ｍＲ６であり（ここで、ｍは１〜４である）；
Ｒ６は、Ｈ；ＯＨ；ＯＲ４；ＯＣ（Ｏ）Ｒ４；Ｎ（Ｒ４）２；Ｆ；ＣＯ２Ｈ；ＣＯＮ（Ｒ４）２；ＳＯ２Ｎ（Ｒ４）２；Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ３−１０ヘテロシクリル；又は場合によりＣ１−３アルキル若しくはＮ（Ｒ４）２により置換された、Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ５−１０ヘテロアリールであり；
Ｗは、Ｆ；Ｃｌ；Ｂｒ；ＣＮ；−Ｃ（Ｓ）ＮＨ２；−ＣＯＮＲ７Ｒ８；−Ｃ（＝ＮＲ７）ＮＲ７Ｒ８；−ＣＯ２Ｒ７；又は−ＳＯ２ＮＲ７Ｒ８であるか；
或いは、Ｗは、Ｒ１と一緒になって、Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含む５〜７員複素環式環を形成することができ（ここで、その窒素原子は、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ１−４アルキル、−ＣＯ−（ＣＨ２）１−２−ＮＨ２、−ＣＯ−（ＣＨ２）１−２−ＮＨ（Ｃ１−３アルキル）又は−ＣＯ−（ＣＨ２）１−２−Ｎ（Ｃ１−３アルキル）２により置換されていてもよい）；
Ｒ７は、Ｈ又はＣ１−３アルキルであり；
Ｒ８は、Ｈ；場合によりＲ３により置換されたＣ１−４アルキル；場合によりＣ１−３アルキルにより置換された、Ｎ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ３−１０ヘテロシクリル；又はＮ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ５−１０ヘテロアリールであり；
Ｒ９は、Ｏ又はＮに結合した炭素原子以外の任意の炭素原子上の、ＯＨ、ＯＲ４、Ｎ（Ｒ４）２、Ｎ（Ｒ４）ＣＯＲ４、ＮＲ４ＳＯ２Ｒ４又はＮ（Ｒ４）−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ４；ＳＯ２Ｒ４；−（ＣＨ２）ｍ−ＯＲ４；又はＮ、Ｓ及びＯより選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含むＣ３−１０ヘテロシクリルである、一般式（Ｉ）で示される化合物又はその互変異性体、エステル、アミド若しくは薬学的に許容される塩が好ましいが、但し、化合物エチル  ４−（２−メトキシフェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレートは除外する。
【００７５】
さらに好ましいのは、一般式（Ｉ）
［式中、
Ｘは、ＣＨ又はＮであり；
Ｒ２は、Ｈ、ＣＮ、ＣＦ３、又はＣＯＮＨ２、であり；及びＸがＣＨの場合に、Ｒ２は、また、Ｆ、Ｃｌであってもよく；
Ｙは、場合によりＮ（Ｒ４）ＣＯＲ４、ＳＯ２Ｒ４、−（ＣＨ２）ｍ−ＯＲ４若しくはモルホリノにより置換されたＣ３−８シクロアルキル；又は式：
【００７６】
【化１５】
0005675614.tif 000016
（ここで、ｎは、独立して１〜３であり、Ｕは、独立してＯ又はＮＲ５である）のいずれか一つより選択される複素環系であり；
Ｒ１は、Ｈ；又はＣ１−３アルキルであり；
Ｒ３は、ＯＨ、ＯＲ４、Ｎ（Ｒ４）２；又はモルホリニル若しくはピロリジニルより選択される複素環であり、ここで、その窒素原子又は複素環は、Ｃ１−３アルキルにより置換されていてもよく；
Ｒ４は、Ｈ又はＣ１−４アルキルであり；
Ｒ５は、Ｈ；ＣＯＲ６；ＣＯ２Ｒ４；ＳＯ２Ｒ４；−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ６；（ＣＨ２）ｍＣ（Ｏ）Ｒ６；又は（ＣＨ２）ｍＲ６であり；ここで、ｍは１〜４であり；
Ｒ６は、Ｈ；ＯＨ；ＯＲ４；ＯＣ（Ｏ）Ｒ４；Ｎ（Ｒ４）２；Ｆ；ＣＯ２Ｈ；ＣＯＮ（Ｒ４）２；ＳＯ２Ｎ（Ｒ４）２；モルホリニル；又はそれぞれ場合によりメチル若しくはＮＨ２により置換された、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、チアゾリル及びピリジニルより選択されるヘテロアリール基であり；
Ｗは、Ｆ；Ｃｌ；Ｂｒ；ＣＮ；−Ｃ（Ｓ）ＮＨ２；−ＣＯＮＲ７Ｒ８；−Ｃ（＝ＮＲ７）ＮＲ７Ｒ８；−ＣＯ２Ｒ７；又は−ＳＯ２ＮＲ７Ｒ８であり；
Ｒ７は、Ｈ又はＣ１−３アルキルであり；
Ｒ８は、Ｈ；Ｃ１−４アルキル；Ｒ３により末端が置換されたＣ２−４アルキル；又は場合によりＣ１−３アルキルにより置換されたピペリジニルである］
で示される化合物又はその互変異性体、エステル、アミド若しくは薬学的に許容される塩である。
【００７７】
本発明の一局面は、Ｒ１がメチルである、一般式（Ｉ）で示される化合物又はその互変異性体、エステル、アミド若しくは薬学的に許容される塩に関するが、但し、化合物エチル４−（２−メトキシフェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレートは除外する。
【００７８】
本発明の第２の局面は、一般式（Ｉ）
［式中、Ｙは、式：
【００７９】
【化１６】
0005675614.tif 000017
（ここで、窒素原子は、場合によりＣ１−３アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１−４アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１−４アルキル、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｑ−ＯＣ１−４アルキル、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｑ−Ｎ（ＣＨ３）２、−ＳＯ２Ｃ１−３アルキル、−（ＣＨ２）ｐ−ＮＨ２、−（ＣＨ２）ｐ−ＯＨ、−（ＣＨ２）ｐ−ＯＣ（Ｏ）Ｃ１−３アルキル、−（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）ＮＨ２、−（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２；ヘテロアリール部分が場合によりＮＨ２により置換された−ＣＨ２−ヘテロアリール（そのヘテロアリール部分は、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、チアゾリル及びピリジニルより選択される）；場合によりＣ１−３アルキルにより置換された−Ｃ（Ｏ）−ピロリル；又は−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−モルホリノにより独立して置換され、ここで、ｑは、１〜３であり、ｐは、２若しくは３である）
のいずれか一つより選択される複素環系である］
で示される化合物、又はその互変異性体、エステル、アミド若しくは薬学的に許容される塩に関する。
【００８０】
本発明の第３の局面は、一般式（Ｉ）
［式中、Ｗは、Ｒ１及び式（Ｉ）で示されるコア構造のチエノ部分と一緒になって、式（ＩＩ）〜（ＶＩ）
【００８１】
【化１７】
0005675614.tif 000018
より選択される環を形成し、ここで、Ｒ８は、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１−４アルキル又は−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３）２である］
で示される化合物、又はその互変異性体、エステル、アミド若しくは薬学的に許容される塩に関する。
【００８２】
本発明の第４の局面は、一般式（Ｉ）
［式中、Ｗは、Ｒ１及び式（Ｉ）で示されるコア構造のチエノ部分と一緒になって、式（ＩＩ）で示される環を形成し、ここで、Ｒ８は、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１−４アルキル又は−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３）２である］
で示される化合物、又はその互変異性体、エステル、アミド若しくは薬学的に許容される塩に関する。
【００８３】
本発明の第５の局面は、一般式（Ｉ）
［式中、Ｗは、−ＣＯＮＲ７Ｒ８又は−ＣＯ２Ｒ７より選択され、ここで、Ｒ７は、Ｈ又はメチルであり、
Ｒ８は、場合によりＯＨ、−Ｏ−Ｃ１−３アルキル、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−３アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−３アルキル）２、モルホリノ、ピロリジニル又はＮ−メチル−ピロリジニルにより置換されたＣ１−４アルキルである］
で示される化合物、又はその互変異性体、エステル、アミド若しくは薬学的に許容される塩に関する。
【００８４】
本発明の第６の局面は、一般式（Ｉ）
［式中、Ｗは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２又は−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ８であり、
ここで、Ｒ８は、前記と同義である］
で示される化合物、又はその互変異性体、エステル、アミド若しくは薬学的に許容される塩に関する。
【００８５】
本発明の別の局面は、一般式（Ｉ）
［式中、
Ｘは、ＣＨであり、
Ｒ２は、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ又はＣ（Ｏ）ＮＨ２である］
で示される化合物、又はその互変異性体、エステル、アミド若しくは薬学的に許容される塩に関する。
【００８６】
本発明のなお別の局面は、一般式（Ｉ）
［式中、
Ｘは、Ｎであり、
Ｒ２は、Ｈ又はＣＮである］
で示される化合物、又はその互変異性体、エステル、アミド若しくは薬学的に許容される塩に関する。
【００８７】
特に好ましい化合物は：
【００８８】
【化１８】
0005675614.tif 000019
0005675614.tif 000020
0005675614.tif 000021
0005675614.tif 000022
0005675614.tif 000023
0005675614.tif 000024
0005675614.tif 000025
0005675614.tif 000026
より選択される。
【００８９】
本発明の化合物の典型的な調製方法を、下記実験の部に説明する。
【００９０】
本発明の化合物の強力な阻害効果は、実施例にさらに詳細に記載するように、インビトロ酵素アッセイにより決定することができる。
【００９１】
式（１）で示される本発明の化合物の薬学的に許容される塩は、多数の有機及び無機の酸及び塩基を用いて形成させることができる。酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、樟脳酸塩、カンファースルホン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルスルホン酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、サリチル酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、スルホン酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシル酸塩などのトルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩などの例示的な酸付加塩。
【００９２】
塩基性窒素含有部分は、メチル、エチル、プロピル、及びブチル塩化物、臭化物及びヨウ化物などのハロゲン化低級アルキル；ジメチル硫酸、ジエチル硫酸、ジブチル硫酸、及びジアミル硫酸などのジアルキル硫酸、デシル、ラウリル、ミリスチル及びステアリル塩化物、臭化物及びヨウ化物などのハロゲン化長鎖アルキル、又は臭化ベンジル及び臭化フェネチルなどのハロゲン化アラルキルなどの薬剤を用いて四級化することができる。それによって、水溶性産物又は分散性産物が得られる。
【００９３】
薬学的に許容される塩基付加塩には、非限定的に、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アルミニウム塩などのアルカリ金属及びアルカリ土類金属に基づく陽イオン、並びに非限定的にアンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミンなどを含めた無毒のアンモニウム第四級アンモニウム、及びアミン陽イオンが含まれる。塩基付加塩の形成に有用な他の代表的なアミンには、ベンズアゼチン（benzazethine）、ジシクロヘキシルアミン、ヒドラジン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミド、ｔ−ブチルアミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジンなど及びアルギニン、リシンなどのアミノ酸との塩が含まれる。
【００９４】
式（１）で示される化合物は、互変異性体として存在しうる。本発明は、全ての互変異性体形態を含む。さらにまた、本発明は、本発明による化合物の、鏡像異性体及びジアステレオマーを含めた全ての立体異性体を含む。本発明による化合物の個別の立体異性体は、他の異性体のない純粋な状態で、その混合物で又はラセミ体として又は選択された立体異性体として、実質的に存在しうる。
【００９５】
本明細書に使用するときの用語「代謝物」は、（ｉ）中間体及び産物を含めた代謝産物、（ｉｉ）代謝に関与する任意の物質（代謝産物として、又は代謝に必要であるとして）、又は（ｉｉｉ）代謝時に産生又は使用される任意の物質を表す。特に、この用語は、代謝後に残る最終産物を表す。
【００９６】
本明細書に使用するときの用語「プロドラッグ」は、（ｉ）体内における代謝過程が利用可能型若しくは活性型に変換後に、その効果を発揮する不活性型薬物、又は（ｉｉ）それ自体は活性ではないが（すなわち不活性型前駆物質）、薬理学的活性代謝物を生成する物質を表す。
【００９７】
用語「プロドラッグ」又は「プロドラッグ誘導体」は、薬理学的効果を示す前に少なくとも何らかの生体変換を受ける親化合物又は活性薬物の共有結合性誘導体又は担体を意味する。一般に、そのようなプロドラッグは、代謝的に切断可能な基を有し、例えば血中での加水分解によりインビボで迅速に変換されて親化合物が得られ、プロドラッグには、一般的に親化合物のエステル及びアミドアナログが含まれる。プロドラッグは、化学安定性の改善、患者許容性及びコンプライアンスの改善、バイオアベイラビリティーの改善、作用時間延長、器官選択性の改善、製剤改善（例えば水溶性の増加）、及び／又は副作用（例えば毒性）減少の目的で製剤化される。一般に、プロドラッグ自体は、弱又は無生体活性を有し、通常条件で安定である。プロドラッグは、A Textbook of Drug Design and Development, Krogsgaard-Larsen and H. Bundgaard (eds.), Gordon & Breach, 1991、特にChapter 5: “Design and Applications of Prodrugs”; Design of Prodrugs, H. Bundgaard (ed.), Elsevier, 1985; Prodrugs: Topical and Ocular Drug Delivery, K.B. Sloan (ed.), Marcel Dekker, 1998; Methods in Enzymology, K. Widder et al. (eds.), Vol. 42, Academic Press, 1985の特にpp. 309-396; Burger’s Medicinal Chemistry and Drug Discovery, 5th Ed., M. Wolff (ed.), John Wiley & Sons, 1995の特にVol. 1及びpp. 172-178及びpp. 949-982; Pro-Drugs as Novel Delivery Systems, T. Higuchi and V. Stella (eds.), Am. Chem. Soc., 1975; Bioreversible Carriers in Drug Design, E.B. Roche (ed.), Elsevier, 1987（これらのそれぞれは、その全体が参照により本明細書に組み入れられる）に記載された方法のような当技術分野で公知の方法を使用して、親化合物から容易に調製することができる。
【００９８】
本明細書に使用するときの用語「薬学的に許容されるプロドラッグ」は、健全な医学的判定の範囲内で、ヒト及び下等動物の組織と接触した使用に適するが、過度の毒性、刺激、アレルギー反応などを有さず、合理的な利益／リスク比に釣り合い、意図された使用に関して有効な、本発明の化合物のプロドラッグ及び可能であれば双性イオン形態を意味する。
【００９９】
本明細書に使用するときの用語「Ｃ３−１０シクロアルキル」又は「Ｃ３−８シクロアルキル」は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロブテニル、シクロペンテニル、シクロペンタジエニル、シクロヘキセニル、シクロヘキサジエニル、シクロヘプテニル、シクロヘプタジエニル、シクロヘプタトリエニル過水和（perhydrated）ナフタレン又はインデン、アダマンチル又はノルボナニルなどの、それぞれ３〜１０個又は３〜８個の環原子を有する、単環式又は多環式炭素環アルキル置換基又は基を表す。単独又はアルコキシにおけるように、他の用語と組み合わせて本明細書に使用するときの用語「Ｃ１−８アルキル」は、メチル、エチル、プロピル（イソ−、ｎ−）、ブチル（イソ−、ｎ−、sec−、tert−）、ペンチル、ヘキシル、メトキシ、エトキシ、プロポキシ（イソ−、ｎ−）、ブトキシ（イソ−、ｎ−、sec−、tert−）、ペントキシ、ヘキソキシなどの、Ｃ１−８、好ましくはＣ１−４の直鎖又は分岐アルキル／アルコキシ基を表し、さらに、用語「Ｃ１−８アルキル」には、また、鎖に酸素を有してもよいアルキル基であって、ハロゲンで置換されてエーテル又はハロゲン化エーテル基を形成しうるアルキル基が含まれる。
【０１００】
用語「Ｃ２−８アルケニル」は、それ自体で、又は別の基の一部として、直鎖中に炭素２〜８個、好ましくは炭素２〜６個の、直鎖中に１個又は複数個の二重結合を含む、ビニル、２−プロペニル、３−ブテニル、２−ブテニル、４−ペンテニル、３−ペンテニル、２−ヘキセニル、３−ヘキセニル、２−へプテニル、３−へプテニル、４−へプテニル、３−オクテニルなどの直鎖又は分岐アルケニル基を表す。
【０１０１】
用語「ヘテロシクリル」は、Ｎ、Ｓ及びＯより選択される１〜４個のヘテロ原子を有する基であって、環原子の残りが炭素原子であり、好ましくは３〜１０個の環原子合計数を有する、モルホリノ、ピペラジニル、ピペリジニル、ピリジル、ピリミジニル、チアゾリル、インドリル、イミダゾリル、オキサジアゾリル、テトラゾリル、ピラジニル、トリアゾリル、チオフェニル又はフラニルなどの単環式飽和又は不飽和ヘテロシクリル基を表す。
【０１０２】
用語「ヘテロアリール」は、Ｎ、Ｓ及びＯより選択される１〜４個のヘテロ原子を有する基であって、環原子の残りが炭素原子であり、好ましくは５〜１０個の環原子合計数を有する、単環又は二環式芳香族基を表す。非限定的なヘテロアリール基の例は、ベンゾフラニル、フリル、チエニル、ベンゾチエニル、チアゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、ベンゾチアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、ピロリル、ピラニル、テトラヒドロピラニル、ピラゾリル、ピリジル、キノリニル、イソキノリニル、プリニル、カルバゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンズアミダゾリル、インドリル、イソインドリル、ピラジニル、ジアジニル、ピラジン、トリアジニルトリアジン、テトラジニル、テトラゾリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾピリジル及びベンズイミダゾリルなどである。
【０１０３】
さらなる局面では、本発明は、本発明のチエノピリミジン化合物及び場合により薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。
【０１０４】
本発明による医薬組成物は、さらに追加的な治療薬を含みうる。特に好ましいのは、追加的な治療薬が、インスリン、長時間及び短時間作用型インスリンアナログ、スルホニル尿素、ビグアニド、ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤、ＳＧＬＴ２阻害剤、１１β−ＨＳＤ阻害剤、グルコキナーゼ活性化剤、ＡＭＰＫ活性化剤、Ｇｌｐ−１レセプター作動薬、ＧＩＰレセプター作動薬、ＤＧＡＴ阻害剤、ＰＰＡＲγ作動薬、ＰＰＡＲδ作動薬などの抗糖尿病薬、及びチアゾリジンジオン由来の他の抗糖尿病薬、スタチン、フィブラート、イオン交換樹脂ニコチン酸誘導体、又はＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤などの脂質低下剤、硝酸エステルなどの心血管治療薬、β−ブロッカー、ＡＣＥ阻害剤、Ｃａ−チャネルブロッカー、アンジオテンシンＩＩレセプター拮抗薬、利尿薬などの降圧剤、血小板凝集阻害剤、又はアルカロイド、アルキル化剤、抗生物質若しくは代謝拮抗薬などの抗腫瘍剤、又は抗肥満剤である組成物である。さらに好ましい組成物は、追加的な治療薬が、ヒスタミン拮抗薬、ブラジキニン拮抗薬、セロトニン拮抗薬、ロイコトリエン、抗喘息薬、ＮＳＡＩＤ、解熱薬、コルチコステロイド、抗生物質、鎮痛薬、尿酸排泄促進剤、化学療法剤、抗痛風剤、気管支拡張薬、シクロオキシゲナーゼ−２阻害剤、ステロイド、５−リポキシゲナーゼ阻害剤、免疫抑制剤、ロイコトリエン拮抗薬、細胞増殖抑制剤、抗腫瘍剤、ｍＴｏｒ阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、サイトカインに対する抗体又はそのフラグメント及びサイトカインレセプターの可溶性部分（フラグメント）より選択される組成物である。
【０１０５】
さらに特に好ましいのは、ヒトＮＰＨインスリン、ヒトレンテ又はウルトラレンテインスリン、インスリンリスプロ、インスリンアスパルト、インスリングルリジン、インスリンデテミル又はインスリングラルギン、メトホルミン、フェンホルミン、アカルボース、ミグリトール、ボグリボース、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン、リボグリタゾン、アレグリタザール（aleglitazar）、アログリプチン、サキサグリプチン、シタグリプチン、ビルダグリプチン、エキセナチド、リラグルチド、アルビグルチド、プラムリンチド、カルブタミド、クロルプロパミド、グリベンクラミド（グリブリド）、グリクラジド、グリメピリド、グリピジド、グリキドン、トラザミド、トルブタミド、アテノロール、ビソプロロール、メトプロロール、エスモロール、セリプロロール、タリノロール、オクスプレノロール、ピンドロール、プロパノロール、ブプロパノロール（bupropanolol）、ペンブトロール、メピンドロール、ソタロール、セルテオロール（certeolol）、ナドロール、カルベジロール、ニフェジピン、ニトレンジピン、アムロジピン、ニカルジピン、ニソルジピン、ジルチアゼム、エナラプリル、ベラパミル、ガロパミル、キナプリル、カプトプリル、リシノプリル、ベナゼプリル、ラミプリル、ペリドプリル（peridopril）、ホシノプリル、トランドラプリル、イルベサタン、ロサルタン、バルサルタン、テルミサルタン、エプロサルタン、オルメサルタン、ヒドロクロロチアジド、ピレタニド、クロロタリドン、メフルシド、フロセミド、ベンドロフルメチアジド、トリアムテレン、デヒドララジン（dehydralazine）、アセチルサリチル酸、チロフィバン−ＨＣｌ、ジピラミドール（dipyramidol）、トリクロピジン（triclopidin）、イロプロスト−トロメタノール（trometanol）、エプチフィバチド（eptifibatide）、クロピドグレル、ピラテカム（piratecam）、アブシキシマブ、トラピジル、シンバスタチン（simvastatine）、ベザフィブラート、フェノフィブラート、ゲムフィブロジル、エトフィリン、クロフィブラート、エトフィブラート、フルバスタチン（fluvastatine）、ロバスタチン（lovastatine）、プラバスタチン、コレスチラミド（colestyramide）、コレスチポール−ＨＣｌ、ニコチン酸キサンチノール、ニコチン酸イノシトール（inositol nicotinat）、アシピモックス、ネビボロール、硝酸グリセロール、一硝酸イソソルビド、二硝酸イソソルビド、四硝酸ペンタエリスリトール、インダパミド、シラゼプリル（cilazepril）、ウラピジル、エプロサルタン、ニルバジピン、メトプロロール、ドキサゾシン、モルシドルミン（molsidormin）、モキサベリン、アセブトロール、プラゾシン（prazosine）、トラピジル、クロニジン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビンなどのビンカアルカロイド及びアナログ、ポドフィロトキシン（podophyllotoxine）誘導体、エトポシド、テニポシド、アルキル化剤、ニトロソ尿素、Ｎ−ロストアナログ（N-lost analogue）、シクロプロンファミド（cycloplonphamid）、エスタムスチン（estamustin）、メルファラン、イホスファミド、ミトキサントロン、イダルビシン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、マイトマイシン、ダクチノマイシン、ダプトマイシン、ドセタキセル、パクリタキセル、カルボプラチン、シスプラチン���オキサリプラチン、ＢＢＲ３４６４、サトラプラチン、ブスルファン、トレオスルファン、プロカルバジン、ダカルバジン、テモゾロミド、クロラムブシル、クロルメチン、シクロホスファミド、イホスファミド、メルファラン、ベンダムスチン、ウラムスチン、チオテパ、カンプトテシン、トポテカン、イリノテカン、ルビテカン（rubitecan）、エトポシド、テニポシド、セツキシマブ、パニツムマブ、トラスツズマブ、リツキシマブ、トシツモマブ、アレムツズマブ、ベバシズマブ、ゲムツズマブ、アミノレブリン酸、アミノレブリン酸メチル、ポルフィマーナトリウム、ベルテポルフィン、アキシチニブ、ボスチニブ、セジラニブ、ダサチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ、ラパチニブ、レストールチニブ、ニロチニブ、セマキサニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、バンデタニブ、レチノイド（アリトレチノイン、トレチノイン）、アルトレタミン、アムサクリン、アナグレリド、三酸化ヒ素、アスパラギナーゼ（ペグアスパルガーゼ）、ベキサロテン、ボルテゾミブ、デニロイキンジフチトクス、エストラムスチン、イクサベピロン、マソプロコール、ミトタン、テストラクトン、チピファルニブ、アベチムス、デフォロリムス（deforolimus）、エベロリムス、グスペリムス、ピメクロリムス、シロリムス、タクロリムス、テムシロリムス、シタラビン、フルオロウラシル、フルオロアラビン（fluoroarabin）、ゲムシタビン、チオグアニン、カペシタビンなどの代謝拮抗薬、アドリアマイシン／ダウノルビシン、シトシンアラビノシド／シタラビンなどの合剤、４−ＨＣ、又は他のホスファミドなどの化合物である。
【０１０６】
他の特に好ましい化合物は、クレマスチン、ジフェンヒドラミン、ジメンヒドリネート、プロメタジン、セチリジン、アステミゾール、レボカバスチン、ロラチジン（loratidine）、テルフェナジン、アセチルサリチル酸、サリチル酸ナトリウム（sodoum salicylate）、サルサレート、ジフルニサル、サリチルサリチル酸、メサラジン、スルファサラジン、オサラジン（osalazine）、アセトアミノフェン、インドメタシン、スリンダク、エトドラク、トルメチン、ケトロラク、べタメタゾン（bethamethason）、ブデソニド、クロモグリシニン酸（chromoglycinic acid）、ジメチコン、シメチコン（simeticone）、ドンペリドン、メトクロプラミド、アセメタシン（acemetacine）、オキサセプロール、イブプロフェン、ナプロキセン、ケトプロフェン、フルブリプロフェン（flubriprofen）、フェノプロフェン、オキサプロジン、メフェナム酸、メクロフェナム酸、フェイルブタゾン（pheylbutazone）、オキシフェンブタゾン、アザプロパゾン、ニメスリド、メタミゾール、レフルナミド（leflunamide）、エフォリコキシブ（eforicoxib）、ロナゾラク、ミソプロストール、パラセタモール、アセクロフェナク、バルデコキシブ、パレコキシブ、セレコキシブ、プロピフェナゾン、コデイン、オキサポジン（oxapozin）、ダプソン（dapson）、プレドニゾン、プレドニゾロン、トリアムシノロン、デクスイブプロフェン、デキサメタゾン、フルニソリド、アルブテロール、サルメテロール、テルブタリン、テオフィリン、カフェイン、ナプロキセン、硫酸グルコサミン、エタネルセプト、ケトプロフェン、アダリムマブ、ヒアルロン酸、インドメタシン（indometacine）、プログルメタシンジマレエート（proglumetacine dimaleate）、ヒドロキシクロロキン、クロロキン、インフリキシマブ、エトフェナメート、オーラノフィン、金、［２２４Ｒａ］塩化ラジウム、チアプロフェン酸、デクスケトプロフェン（トロメタモール）、クロプレドノール、金チオリンゴ酸ナトリウム、金チオグルコース、コルヒチン、アロプリノール、プロベネシド、スルフィンピラゾン、ベンズブロマロン、カルバマゼピン、ロルノキシカム、フルオルコルトロン（fluorcortolon）、ジクロフェナク、エファリズマブ、イダルビシン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、マイトマイシン、ダクチノマイシン、ダプトマイシン、シタラビン、フルオロウラシル、フルオロアラビン（fluoroarabin）、ゲムシタビン、チオグアニン、カペシタビン、アドリアマイジン（adriamydin）／ダウノルビシン、シトシンアラビノシド／シタラビン、４−ＨＣ、又は他のホスファミド、ペニシラミン、ヒアルロン酸調製物、アルテパロン（arteparon）、グルコサミン、ＭＴＸ、ＴＮＦ−レセプター可溶性フラグメント（エタネルセプト（Enbrel）など）及び抗ＴＮＦ抗体（インフリキシマブ（Remicade）、ナタリズマブ（Tysabri）及びアダリムマブ（Humira）などの化合物である。
【０１０７】
当業者は、本発明の化合物及び追加的な治療薬は、１個の１回量剤形に製剤化することができるし、又は別々の剤形で存在することができ、同時的（すなわち同時に）又は連続的のいずれかで投与することができることを認識しているであろう。
【０１０８】
本発明の医薬組成物は、意図された投与方法に適した任意の形態でありうる。
【０１０９】
本発明の化合物は、経口的に、気管支肺、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内、髄腔内、経皮、経粘膜、硬膜下、局所性又は局所的にイオン導入により、舌下、吸入スプレーにより、エアロゾル又は直腸的などの非経口的に、場合により従来の薬学的に許容される賦形剤を含む１回量剤形で投与することができる。
【０１１０】
本発明の医薬組成物の製剤に使用することのできる賦形剤は、担体、ビヒクル、希釈剤、溶媒、例えばエタノール、イソプロパノールなどの一価アルコール及びグリコールなどの多価アルコールなどのアルコール、及びダイズ油、ヤシ油、オリーブ油、ベニバナ油、綿実油などの食用油、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピルなどの油状エステル；結合剤、佐剤、溶解補助剤、粘稠化剤、安定化剤、崩壊剤、流動促進剤、滑沢剤、緩衝剤、乳化剤、湿潤剤、懸濁化剤、甘味料、着色料、香味料、コーティング剤、保存料、抗酸化剤、加工剤、薬物デリバリー調節剤及び増強剤、例えばリン酸カルシウム、マグネシウム状態、タルク、単糖、二糖、デンプン、ゼラチン、セルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、デキストロース、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、ポリビニルピロリドン、低融点ろう、イオン交換樹脂を含む。
【０１１１】
他の適切な薬学的に許容される賦形剤は、Remington's Pharmaceutical Sciences, 15th Ed., Mack Publishing Co., New Jersey (1991)に記載されている。
【０１１２】
経口投与用剤形には、錠剤、カプセル剤、トローチ剤、丸剤、カシェ剤、顆粒剤、経口液、例えばシロップ剤、懸濁剤、液剤、乳剤、再構成用散剤が含まれる。
【０１１３】
非経口投与用剤形には、輸液用に水性若しくは油性（olageous）の液剤若しくは乳剤、注射用予備充填シリンジ用の水性若しくは油性の液剤、懸濁第若しくは乳剤、及び／又は再構築用の散剤が含まれる。
【０１１４】
局所性／局所的投与用剤形は、吹入、エアロゾル、定量エアロゾル、経皮治療システム、薬用パッチ、直腸坐剤、及び／又は膣坐剤を含む。
【０１１５】
１回量剤形を製剤化するために賦形剤と組み合わせることのできる、本発明の化合物の量は、処置されるホスト及び特定の投与様式に応じて変動するであろう。
【０１１６】
本発明の医薬組成物は、例えばRemington's Pharmaceutical Sciences, 15th Ed., Mack Publishing Co., New Jersey (1991)に記載されているような、当業者に公知の方法で製造することができる。
【０１１７】
本発明のさらなる局面では、Ｍｎｋ１若しくはＭｎｋ２（Ｍｎｋ２ａ、Ｍｎｋ２ｂ）又はそのさらなる変異体のキナーゼ活性の活性を阻害するための、特に代謝性疾患、造血障害、ガン並びにそれらの続発性合併症及び障害の予防又は治療のための医薬組成物を製造するための、本発明のチエノピリミジン化合物の使用が提供される。ここで、糖質及び／又は脂質代謝の代謝性疾患の予防及び治療が好ましい。
【０１１８】
Ｍｎｋ１及び／又はＭｎｋ２（Ｍｎｋ２ａ又はＭｎｋ２ｂ）及び／又はそのさらなる変異体のキナーゼ活性の阻害によって影響される本発明の疾患には、代謝性疾患の調節に関係する疾患、例えば肥満、摂食障害、悪液質、糖尿病、代謝症候群、高血圧、冠動脈心疾患、高コレステロール血症、脂質異常症、変形性関節症、胆石及び／又は睡眠時無呼吸、並びに活性酸素化合物（ＲＯＳ防御）に関係する疾患、例えば糖尿病、神経変性疾患及びガンが含まれる。
【０１１９】
本発明の医薬組成物は、肥満、糖尿病及び上記のような糖質及び脂質代謝の他の代謝性疾患、特に糖尿病及び肥満の予防及び治療に特に有用である。
【０１２０】
したがって、本発明のさらに好ましい態様では、代謝性疾患の予防又は治療のための医薬組成物を製造するための、チエノピリミジン化合物の使用が提供される。
【０１２１】
本発明のさらなる局面では、炎症性疾患などのサイトカイン介在性障害の治療又は予防のための医薬組成物を製造するための、本発明のチエノピリミジン化合物の使用が提供される。
【０１２２】
したがって、本発明の医薬組成物は、炎症性疾患、特に慢性又は急性炎症、慢性炎症性関節炎、関節リウマチ、乾癬性関節炎、変形性関節症、若年性関節リウマチ、痛風性関節炎；乾癬、乾癬紅皮症、膿疱性乾癬、炎症性腸疾患、クローン病及び関連状態、潰瘍性大腸炎、大腸炎、憩室炎、腎炎、尿道炎、卵管炎、卵巣炎、子宮内膜炎、脊椎炎、全身性エリテマトーデス及び関連障害、多発性硬化症、喘息、髄膜炎、脊髄炎、脳脊髄炎、脳炎、静脈炎、血栓静脈炎、慢性閉塞性疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性肺疾患、アレルギー性鼻炎、心内膜炎、骨髄炎、リウマチ熱、リウマチ性心膜炎、リウマチ性心内膜炎、リウマチ性心筋炎、リウマチ性僧帽弁疾患、リウマチ性大動脈弁疾患、前立腺炎、前立腺膀胱炎、脊椎関節症  強直性脊椎炎、滑膜炎、腱鞘炎、筋炎、咽頭炎、リウマチ性多発筋痛、肩腱炎又は滑液包炎、痛風、偽痛風、血管炎、肉芽腫性甲状腺炎、リンパ球性甲状腺炎、浸潤性線維性甲状腺炎、急性甲状腺炎より選択される甲状腺の炎症性疾患；橋本甲状腺炎、川崎病、レイノー現象、シェーグレン症候群、神経炎症性疾患、敗血症、結膜炎、角膜炎、虹彩毛様体炎、視神経炎、耳炎、リンパ節炎、鼻咽頭炎、副鼻腔炎、咽頭炎、扁桃炎、喉頭炎、喉頭蓋炎、気管支炎、肺臓炎、口内炎、歯肉炎、食道炎、胃炎、腹膜炎、肝炎、胆石症、胆嚢炎、糸球体腎炎、グッドパスチャー病、半月体形成性糸球体腎炎、膵炎、皮膚炎、子宮内膜炎、子宮筋層炎、子宮炎、子宮頸管炎、子宮頸管内膜炎、子宮頸管外炎、子宮傍組織炎、結核、膣炎、外陰炎、珪肺症、サルコイドーシス、塵肺、炎症性多発性関節障害、関節症性乾癬、腸線維症、気管支拡張症及び腸炎性関節症の予防又は治療に有用である。
【０１２３】
すでに上記に述べたように、本発明の組成物は、特に、慢性又は急性炎症、慢性炎症性関節炎、関節リウマチ、乾癬、ＣＯＰＤ、炎症性腸疾患、敗血症性ショック、クローン病、潰瘍性大腸炎、多発性硬化症及び喘息より選択される疾患を治療又は予防するために有用である。
【０１２４】
したがって、本発明のさらに好ましい態様では、慢性又は急性炎症、慢性炎症性関節炎、関節リウマチ、乾癬、ＣＯＰＤ、炎症性腸疾患、敗血症性ショック、クローン病、潰瘍性大腸炎、多発性硬化症及び喘息より選択される炎症性疾患の予防又は治療のための医薬組成物を製造するためのチエノピリミジン化合物の使用が、提供される。
【０１２５】
本発明のなおさらなる局面では、ガン、ウイルス疾患又は神経変性疾患を治療又は予防するための医薬組成物を製造するための、本発明のチエノピリミジン化合物の使用が提供される。
【０１２６】
本発明のために、治療有効薬用量は、一般に、単回又は多回投与されうる約１〜２０００mg/日、好ましくは約１０〜約１０００mg/日、そして最も好ましくは約１０〜約５００mg／日であろう。
【０１２７】
しかし、任意の特定の患者に関する本発明の化合物の特異的用量レベルは、年齢、性別、体重、全身健康状態、食事、処置される患者の個別の応答、投与時間、処置される疾患の重症度、適用される特定の化合物の活性、剤形、適用様式及び併用薬などの様々な要因に依存するであろうということが理解されよう。所与の状態についての治療有効量は、日常的な実験によって容易に決定されようし、通常の臨床家又は医師の技術及び判断の範囲内である。
【０１２８】
実施例
実施例１：本発明の化合物の調製の実施例
下記実施例に提供されたＨＰＬＣデータは、次のように得られた：
１０cm ａｐｃｉ（ギ酸性）及び１０cm ＥＳＩ（ギ酸性）の条件：
ＨＰＬＣカラム：Phenomenex Luna 5μ C18(2)、１００mm×４．６mm内径（Plusガードカートリッジ付き）、流速２mL/min。
０．１％(v/v)ギ酸Ｈ２Ｏ溶液が９５％から０．１％(v/v)ギ酸のＭｅＣＮ溶液が９５％まで５．５分間の勾配。
【０１２９】
１０cm esci BICARBの条件：
ＨＰＬＣカラム：Waters Xterra MS ５μm C18、１００mm×４．６mm内径（ガードカートリッジ付き）、流速２mL/min。
１０mM重炭酸アルミニウムＨ２Ｏ溶液が９５％からＭｅＣＮが９５％まで５．５分間の勾配。
全条件についてＨＰ又はWaters DADによるＵＶ検出:
開始レンジ：２１０nm；終了レンジ：４００nm；レンジ間隔：４．０nm；
【０１３０】
下記実施例に提供された逆相調製用ＨＰＬＣデータは、以下のように得られた:
Trilutionの標準条件
ＨＰＬＣカラム：Waters Sunfire C18、１００mm×１９mm内径（ガードカートリッジ付き）、流速１０mL/min。
０．１％(v/v)ギ酸Ｈ２Ｏ溶液が９５％から１０分間にわたる０．１％(v/v)ギ酸Ｈ２Ｏ溶液が８０％まで３３分間の勾配、そして０．１％(v/v)ギ酸ＭｅＣＮ溶液が１００％まで１２分間にわたり増加させる。０．１％(v/v)ギ酸ＭｅＣＮ溶液が１００％となるようにこの勾配を３分間保ってからカラムを再平衡化する。
【０１３１】
極性保持条件（１５cm apci Synergy（ギ酸性）又は１５cm esci Synergy（ギ酸性）)
ＨＰＬＣの設定
溶媒：  −  ０．１％(V/V)ギ酸を有するアセトニトリル（遠ＵＶ等級）
０．１％ギ酸を有する水（PureLab Optionユニットによる高純度）
カラム：  −  Phenomenex Synergy Hydro 4μ-RP80A、１５０×４．６mm。
流速：  −２ml/min
勾配：  −  Ａ：水／ギ酸          Ｂ：ＭｅＣＮ／ギ酸
時間          Ａ％                  Ｂ％
０．００      ９８                  ２
５．００      ９８                  ２
１０．０      ７０                ３０
１２．０      ５０                ５０
１３．０      １０                ９０
１３．１      ９８                  ２
１５          ９２                  ２
典型的なインジェクション量：２〜７μl
【０１３２】
ＨＰ又はWaters DADによるＵＶ検出
開始レンジ（nm）  ２１０    終了レンジ（nm）  ４００    レンジ間隔（nm）  ４．０
他の波長の痕跡はＤＡＤデータから除外する。
Polymer Labs ELS-1000を使用して随意のＥＬＳ検出。
【０１３３】
ＭＳ検出：Micromass ZQシングル四重極ＬＣ−ＭＳ装置。
フロースプリッターにより質量分析機に約３００μl/minを供給。
ＭＳデータ（ｍ／ｚ）についてのスキャンレンジ
開始（ｍ／ｚ）      １００
終了（ｍ／ｚ）      ６５０又は必要に応じて１０００
＋ｖｅ／−ｖｅスイッチングを行う
【０１３４】
イオン化は、化合物の種類に応じてエレクトロスプレー又はＡＰＣＩのいずれかである（１台のＺＱには、１回の測定からＥＳＩ及びＡＰＣＩデータの両方を与えることができるＥＳＣＩオプションがある）。
【０１３５】
典型的なＥＳＩ電圧及び温度は：
電源１２０〜１５０Ｃ  ３．５KV キャピラリー電圧    ２５Ｖコーン電圧
【０１３６】
ＨＰＬＣ条件  −  ２５cm Bicarb Xterra25 HPLC
ＨＰＬＣの設定
溶媒：  −  アセトニトリル（遠ＵＶ等級）
１０mM重炭酸アルミニウム（炭酸水素アルミニウム）を有する水（PureLab Optionユニットによる高純度）
カラム：  −  Waters Xterra ５μ Ｃ１８（２）、２５０×４．６mm。
流速：  −  １ml/min
勾配：  −  Ａ：水／ギ酸      Ｂ：ＭｅＣＮ／ギ酸
時間          Ａ％              Ｂ％
０．００      ９５                ５
１．００      ９５                ５
３０．０        ０            １００
４０．０        ０            １００
４０．５      ９５                ５
４５          ９５                ５
【０１３７】
典型的なインジェクション量：２〜７μl
機器：Agilent 1100、バイナリーポンプ、Agilentサンプラー及びAgilent DAD検出器
【０１３８】
ＨＰＬＣ条件  −  １５cmギ酸性低速Sunfire HPLC
ＨＰＬＣの設定
溶媒：  −  ０．１％(V/V)ギ酸を有するアセトニトリル（遠ＵＶ等級）
０．１％ギ酸を有する水（PureLab Ultraユニットによる高純度）
カラム：  −  Waters Sunfire ５μ Ｃ１８、１５０×４．６mm。
流速：  −  １ml/min
勾配：  −  Ａ：水／ギ酸      Ｂ：ＭｅＣＮ／ギ酸
時間          Ａ％              Ｂ％
０．００      ９８              ２
４．００      ９８              ２
２０．０        ０          １００
２２．０        ０          １００
２２．５      ９８              ２
２４          ９８              ２
【０１３９】
典型的なインジェクション量：２〜７μl
機器：Agilent 1100、バイナリーポンプ、Agilent Sampler及びAgilent DAD検出器
Gilson Dual Wavelength DetectorによるＵＶ検出
下記実施例に提供されたＭＳデータは、次のように得られた：
質量スペクトル：Micromass ZQシングル四重極ＬＣ−ＭＳ装置（ＥＳＩ又はＡＰＣＩ）。
下記実施例に提供されるＮＭＲデータは、以下のように得られた：
１Ｈ−ＮＭＲ：Bruker DPX ４００MHz。
マイクロ波の化学測定は、Personal Chemistry製の単一モードマイクロ波リアクターSmith Creator（商標）で行った。
【０１４０】
略語：
ＨＡＴＵ  （２−（７−アザ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）
ＤＣＭ  ジクロロメタン
ＤＭＦ  Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＥｔＯＡｃ  酢酸エチル
ＴＨＦ  テトラヒドロフラン
ＭｅＯＨ  メタノール
ＭｅＣＮ  アセトニトリル
【０１４１】
本発明の化合物、それらの誘導体及び前駆物質の一般的な合成方法
以下に一般的な合成方法をいくつか記載する。
【０１４２】
【化１９】
0005675614.tif 000027
【０１４３】
３−フルオロ−４−ニトロ−ベンズアミドの調製
【０１４４】
【化２０】
0005675614.tif 000028
【０１４５】
アセトン／水（４：１）１００mL中の３−フルオロ−４−ニトロベンゾニトリル（１５ｇ、９０．３mmol）及びＫ２ＣＯ３（２５．０３ｇ、１８１．１mmol）の撹拌した溶液に、過酸化水素尿素付加物（１６．９９ｇ、１８０．６mmol）を加え、反応物を周囲温度で一晩撹拌した。ＤＣＭ（１００mL）及び水（５００mL）を反応混合物に加え、溶液を分配し、そして有機層を分離した。水層をＤＣＭ（３×１００mL）で抽出し、有機部分を合わせ、ブライン（１００mL）で洗浄し、セライトを通して濾過し、そしてＰＴＦＥ分離フリットを通過させた。溶媒を真空下で濃縮し、ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（４０〜６０℃）から再結晶化した後、標記化合物を橙色の固体（１０ｇ、収率６０％）として得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.35 (br s, 1H), 8.01 (dd, 1H), 7.92 (dd, 1H), 7.89 (br s, 1 H)。
【０１４６】
３−エトキシ−４−ニトロ−ベンズアミドの調製
【０１４７】
【化２１】
0005675614.tif 000029
【０１４８】
エタノール（０．８mL、１３．８mmol）を、無水ＴＨＦ（１５mL）中の水素化ナトリウム（油中６０％分散液、０．５５０ｇ、１３．８mmol）の撹拌した懸濁液に０℃で滴下し、得られた溶液を０．５時間撹拌した。この溶液に、無水ＴＨＦ（１５mL）中の３−フルオロ−４−ニトロベンズアミド（２．１１ｇ、１１．５mmol）を滴下した。添加完了後、溶液を０℃で０．５時間撹拌し、その後、周囲温度に温めた。反応物を周囲温度で１８時間撹拌し、水（３０mL）でクエンチし、そして水層をＤＣＭ（３×５０mL）で抽出した。有機層を合わせ、ブライン（５０mL）で洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させ、濾過し、そして真空下で濃縮した。ＭｅＯＨから再結晶化した後、標記化合物を黄色の固体（１．６９４ｇ、収率７０％）として得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.25 (br s, 1H), 7.96 (d, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.65 (br s, 1H), 7.58 (d, 1H), 4.31 (q, 2H), 1.39 (t, 3H)。
【０１４９】
４−アミノ−３−エトキシ−ベンズアミドの調製
【０１５０】
【化２２】
0005675614.tif 000030
【０１５１】
パラジウム担持炭（５％、０．５１０ｇ）を、ＭｅＯＨ（２５mL）中の３−エトキシ−４−ニトロ−ベンズアミド（１．６９４ｇ、８．０６mmol）及びギ酸アンモニウム（２．１７ｇ、３４．４mmol）の溶液に周囲温度で加えた。溶液を１時間撹拌し、セライトを通して濾過し、そしてＭｅＯＨで洗浄した。濾液を真空下で濃縮し、ジエチルエーテルから粉砕して、白色の固体（１．４５ｇ、１００％）を得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): 8.45 (s, 1H), 7.62 (br s, 1H), 7.30- 7.34 (m, 2H), 6.92 (br s, 1H), 6.62 (d, 1H), 5.24 (br s, 2H), 4.06 (q, 2H), 1.39 (t, 3H)。
【０１５２】
実施例１
４−（４−カルバモイル−２−エトキシフェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル
【０１５３】
【化２３】
0005675614.tif 000031
【０１５４】
４−アミノ−３−エトキシ−ベンズアミド（０．０４５ｇ、０．２５mmol）、４−クロロ−５−メチル−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（０．０６１ｇ、０．２５mmol、Fluorochem Ltd.）及びパラ−トルエンスルホン酸（０．００５ｇ、０．０２５mmol）を、無水１，４−ジオキサン（１．５mL）中で１６時間加熱還流した。溶液を周囲温度に冷却し、水酸化アンモニウム／水（１：４、５mL）を加え、沈殿物を回収し、そして水及びジエチルエーテルで連続して洗浄した。標記化合物を、ＭｅＯＨから再結晶化した後、黄色の固体（０．０５７ｇ、５９％）として得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.81 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 7.95 (br s, 1H), 7.62 (m, 2H), 7.33 (br s, 1H), 4.25 (q, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.13 (s, 3H), 1.47 (t, 3H)。MS (ESI+): 418 (M+H)。HPLC (10cm_apci_formic): 保持時間３．５０分（ＨＰＬＣ純度９７％）。
【０１５５】
実施例２
４−（４−カルバモイル−２−エトキシフェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
【０１５６】
【化２４】
0005675614.tif 000032
【０１５７】
７N アンモニア／ＭｅＯＨ（３．５mL）中の４−（４−カルバモイル−２−エトキシフェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（０．０２５ｇ、０．０６mmol）及び塩化アンモニウム（０．２５０ｇ、４．６７mmol）を、密閉管中で１００℃にて１４日間加熱した。溶液を冷却し、残留物を濾過した。沈殿物を水で洗浄して、白色の固体（０．０１５ｇ、６３％）を得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.81 (d, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.68 (s, 1H), 7.75- 8.00 (m, 3H), 7.63 (m, 2H), 7.34 (br s, 1H), 4.27 (q, 2H), 3.01 (s, 3H), 1.49 (t, 3H)。MS (ESI+): 372 (M+H)。HPLC (10cm_apci_formic): 保持時間２．５１分（ＨＰＬＣ純度９７％）。
【０１５８】
実施例３
４−（４−カルバモイル−２−エトキシフェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸
【０１５９】
【化２５】
0005675614.tif 000033
【０１６０】
水酸化アンモニウム（１．５mL）中の４−（４−カルバモイル−２−エトキシフェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（０．０２５ｇ、０．０６mmol）の懸濁液を、密閉管中で１５０℃にて１６時間加熱した。水酸化アンモニウムを真空下で濃縮し、残留物をジメチルスルホキシドに再溶解した。試料を逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、白色の固体（０．００７ｇ、２９％）を得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 13.70 (br s, 1H), 8.82 (d, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 7.98 (br s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.34 (br s, 1H), 3.17 (s, 3H), 2.70 (q, 2H), 1.49 (t, 3H)。MS (ESI+): 373 (M+H)。HPLC (10cm_apci_formic): 保持時間２．８４分（ＨＰＬＣ純度９７％）。
【０１６１】
【化２６】
0005675614.tif 000034
【０１６２】
４−（５−フルオロ−２−ニトロフェノキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピランの調製
【０１６３】
【化２７】
0005675614.tif 000035
【０１６４】
アゾジカルボン酸 ジ−tert−ブチル（１７．６ｇ、７６．４mmol）を、無水ＤＣＭ（１２０mL）中の５−フルオロ−２−ニトロフェノール（１０ｇ、６３．７mmol）、テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−オール（７．３mL、７６．４mmol）及びトリフェニルホスフィン（２０ｇ、７６．４mmol）の溶液に０℃で加えた。溶液を周囲温度に一晩温め、真空下で濃縮し、そして粗生成物をｎ−ペンタン／ジエチルエーテル（×２）で粉砕し、トリフェニルホスフィンオキシド（１６．５ｇ）副生成物を除去した。試料をフラッシュカラムクロマトグラフィー（５：１  石油エーテル（４０〜６０℃）／ＥｔＯＡｃ）により精製して、黄色の油状物を得、これを次の工程において直接使用した。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.03 (dd, 1H), 7.48 (d, 1H), 7.00 (dd, 1H), 4.90-4.94 (m, 1H), 3.81-3.86 (m, 2H), 3.53-3.58 (m, 2H), 1.98-1.99 (m, 2H), 1.65-1.69 (m, 2H)。
【０１６５】
４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）アニリンの調製
【０１６６】
【化２８】
0005675614.tif 000036
【０１６７】
ギ酸アンモニウム（１．１１ｇ、１７．６mmol）を、ＭｅＯＨ（１０mL）中の４−（５−フルオロ−２−ニトロフェノキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン（１ｇ、４．１４mmol）及びパラジウム担持炭（５％、０．２５０ｇ）の懸濁液に周囲温度で加えた。溶液を０．５時間撹拌し、セライトを通して濾過し、そしてＭｅＯＨで洗浄した。濾液を真空下で濃縮し、ジエチルエーテルから粉砕して、ギ酸アンモニウム副生成物を除去した。試料を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（５：１  石油エーテル（４０〜６０℃）／ＥｔＯＡｃ→１：１  石油エーテル（４０〜６０℃）／ＥｔＯＡｃ）により精製して、黄色の油状物（０．６６６ｇ、７６％）を得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 6.84 (d, 1H), 6.62-6.60 (m, 1H), 6.54 (app t, 1H), 4.52-4.57 (m, 3H), 3.86-3.92 (m, 2H), 3.47-3.52 (m, 2H), 1.95-1.98 (m, 2H), 1.60-1.69 (m, 2H)。
【０１６８】
実施例４
４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル
【０１６９】
【化２９】
0005675614.tif 000037
【０１７０】
４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）アニリン（３．４７ｇ、１６．４mmol）、４−クロロ−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（３．９９ｇ、１６．４mmol）及びパラ−トルエンスルホン酸（０．３１３ｇ、１．６４mmol）を、無水１，４−ジオキサン（３０mL）中で１．５時間加熱還流した。溶液を周囲温度に冷却し、沈殿物を回収し、冷１，４−ジオキサンで洗浄して、標記化合物を黄色の固体（６．１７ｇ、９０％）として得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.60 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.41 (t, 1H), 7.22 (d, 1H), 6.88 (t, 1H), 4.79 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.84 (m, 2H), 3.50 (m, 2H), 3.15 (s, 3H), 2.05 (2H, m), 1.62 (m, 2H)。MS (ESI+): 418 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間４．３６分（ＨＰＬＣ純度９９％）。
【０１７１】
実施例５
４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸
【０１７２】
【化３０】
0005675614.tif 000038
【０１７３】
４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（９．０ｇ、２１．６mmol）を、ＴＨＦ／水（１：１；２００mL）に懸濁した。この溶液に、水酸化リチウム一水和物（５．３１ｇ、１２６．５mmol）を加え、反応物を周囲温度で一晩撹拌した。溶液を氷浴中で冷却し、濃塩酸を、溶液がｐＨ４に達するまで加えた。沈殿物を回収し、水で洗浄し、Ｐ２Ｏ５で乾燥させて、オフホワイトの固体（８．６４２ｇ、９９％）を得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 13.70 (br s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.47-8.51 (m, 2H), 7.23 (d, 1H), 6.88 (app t, 1H), 4.74-4.81 (m, 1H), 3.84-3.89 (m, 2H), 3.47-3.53 (m, 2H), 3.13 (s, 3H), 2.06-2.09 (m, 2H), 1.60-1.69 (m, 2H)。MS (ESI+): 404 (M+H)。HPLC (10cm_apci_formic): 保持時間３．６８分（ＨＰＬＣ純度９５％）。
【０１７４】
実施例６
４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−Ｎ−（２−メトキシエチル）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
【０１７５】
【化３１】
0005675614.tif 000039
【０１７６】
ＨＡＴＵ（０．０５２ｇ、０．１３８mmol）を、ＤＭＦ（２．０mL）中の４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（０．０５０ｇ、０．１２５mmol）とHuenig塩基（２２μL、０．１２５mmol）の混合物に０℃で加えた。反応混合物を０℃で０．５時間撹拌した。２−メトキシエチルアミン（５４．３μL、０．６２５mmol）を加え、冷却剤を除去した。反応混合物を周囲温度で一晩撹拌した。生成物を逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、白色の固体（０．０２９ｇ、５０％）を得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.50 (m, 3H), 8.41 (s, 1H), 7.21 (d, 1H), 6.85 (t, 1H), 4.78 (m, 1H), 3.86 (m, 2H), 3.48 (m, 6H), 3.36 (s, 3H), 2.95 (s, 3H), 2.05 (m, 2H), 1.65 (2H, m)。MS (ESI+): 461 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間３．４７分（ＨＰＬＣ純度９９％）。
【０１７７】
実施例７
Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル−アミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
【０１７８】
【化３２】
0005675614.tif 000040
【０１７９】
ＨＡＴＵ（０．０５２ｇ、０．１３８mmol）を、ＤＭＦ（２．０mL）中の４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（０．０５０ｇ、０．１２５mmol）とHuenig塩基（２２μL、０．１２５mmol）の混合物中に０℃で加えた。反応混合物を０℃で０．５時間撹拌した。Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミン（６９μL、０．６２５mmol）を加え、冷却剤を除去した。反応混合物を周囲温度で一晩撹拌した。生成物を逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、得られたギ酸塩をＭｅＯＨ中のポリマー支持炭酸ナトリウムで撹拌することにより遊離塩基化した後、白色の固体（０．０３１ｇ、５１％）を得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.56 (s, 1H), 8.50 (t, 1H), 8.39 (m, 2H), 7.22 (d, 1H), 6.89 (t, 1H), 4.28 (m, 1H), 3.85 (m, 2H), 3.50 (t, 2H), 3.39 (t, 2H), 2.96 (s, 3H), 2.46 (t, 2H), 2.23 (s, 6H), 2.06 (m, 2H), 1.63 (m, 2H)。MS (ESI+): 474 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間２．２９分（ＨＰＬＣ純度９９％）。
【０１８０】
実施例８
Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル−アミノ）−Ｎ，５−ジメチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
【０１８１】
【化３３】
0005675614.tif 000041
【０１８２】
ＨＡＴＵ（０．０５２ｇ、０．１３８mmol）を、ＤＭＦ（２．０mL）中の４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（０．０５０ｇ、０．１２５mmol）とHuenig塩基（２２μL、０．１２５mmol）の混合物中に０℃で加えた。反応混合物を０℃で０．５時間撹拌した。Ｎ，Ｎ，Ｎ’−トリメチルエチレンジアミン（８１μL、０．６２５mmol）を加え、冷却剤を除去した。反応混合物を周囲温度で一晩撹拌した。生成物を逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、得られたギ酸塩をＭｅＯＨ中のポリマー支持炭酸ナトリウムで撹拌することにより遊離塩基化した後、白色の固体（０．０３１ｇ、５１％）を得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.52 (s, 1H), 8.42 (t, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.09 (d, 1H), 6.82 (t, 1H), 4.77 (m, 1H), 3.86 (m, 2H), 3.64 (t, 2H), 3.51 (m, 2H), 3.07 (s, 3H), 2.73 (s, 5H), 2.37 (s, 6H),, 2.06 (m, 2H), 1.67 (m, 2H)。MS (ESI+): 488 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間２．３１分（ＨＰＬＣ純度９８％）。
【０１８３】
実施例９
Ｎ−（３−（ジメチルアミノ）プロピル）−４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル−アミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
【０１８４】
【化３４】
0005675614.tif 000042
【０１８５】
ＨＡＴＵ（０．０５２ｇ、０．１３８mmol）を、ＤＭＦ（２．０mL）中の４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（０．０５０ｇ、０．１２５mmol）とHuenig塩基（２２μL、０．１２５mmol）の混合物中に０℃で加えた。反応混合物を０℃で０．５時間撹拌した。３−ジメチルアミノ−１−プロピルアミン（６９μL、０．６２５mmol）を加え、冷却剤を除去した。反応混合物を周囲温度で一晩撹拌した。生成物をＤＭＳＯから再結晶化して、オフホワイトの固体（０．０３１ｇ、５１％）を得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.58 (t, 1H), 8.49 (s, 1H), 7.01 (d, 1H), 6.74 (t, 1H), 4.71 (m, 1H), 3.93 (m, 2H), 3.56 (t, 2H), 3.43 (t, 2H), 2.99 (s, 3H), 2.51 (t, 2H), 2.32 (s, 6H), 2.15 (m, 2H), 1.85 (m, 2H), 1.73 (m, 2H)。MS (ESI+): 488 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間２．３３分（ＨＰＬＣ純度９５％）。
【０１８６】
実施例１０
４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチル−Ｎ−（２−モルホリノエチル）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
【０１８７】
【化３５】
0005675614.tif 000043
【０１８８】
ＨＡＴＵ（０．０５２ｇ、０．１３８mmol）を、ＤＭＦ（２．０mL）中の４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（０．０５０ｇ、０．１２５mmol）とHuenig塩基（２２μL、０．１２５mmol）の混合物中に０℃で加えた。反応混合物を０℃で０．５時間撹拌した。４−（２−アミノエチル）モルホリン（８２μL、０．６２５mmol）を加え、冷却剤を除去した。反応混合物を周囲温度で一晩撹拌した。生成物をＤＭＳＯから結晶化して、白色の固体（０．０４０ｇ、６２％）を得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.51 (m, 2H), 8.40 (m, 2H), 7.21 (d, 1H), 6.85 (t, 1H), 4.79 (m, 1H), 3.85 (m, 2H), 3.62 (m, 4H), 3.50 (m, 6H), 2.99 (s, 3H), 2.49 (m, 4H), 2.05 (m, 2H), 1.62 (m, 2H)。MS (ESI+): 516 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間２．３４分（ＨＰＬＣ純度９９％）。
【０１８９】
実施例１１
４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−Ｎ，５−ジメチル−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
【０１９０】
【化３６】
0005675614.tif 000044
【０１９１】
ＨＡＴＵ（０．０５２ｇ、０．１３８mmol）を、ＤＭＦ（２．０mL）中の４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（０．０５０ｇ、０．１２５mmol）とHuenig塩基（２２μL、０．１２５mmol）の混合物中に０℃で加えた。反応混合物を０℃で０．５時間撹拌した。メチルアミン（ＴＨＦ中２M、１．０mL、２．０mmol）を加え、冷却剤を除去した。反応混合物を周囲温度で一晩撹拌した。生成物をＭｅＯＨで粉砕して、白色の固体（０．０２４ｇ、収率４６％）を得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.56 (s, 1H), 8.49 (t, 1H), 8.40 (m, 2H), 7.22 (d, 1H), 6.86 (t, 1H), 4.78 (m, 1H), 3.85 (m, 2H), 3.50 (t, 2H), 2.95 (s, 3H), 2.83 (s, 3H), 2.05 (m, 2H), 1.61 (m, 2H)。MS (ESI+): 417 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間３．３８分（ＨＰＬＣ純度９８％）。
【０１９２】
実施例１２
４−［４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルオキシ）−フェニルアミノ］−５−メチル−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミド
【０１９３】
【化３７】
0005675614.tif 000045
【０１９４】
ＨＡＴＵ（０．０５２ｇ、０．１３８mmol）を、ＤＭＦ（２．０mL）中の４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（０．０５０ｇ、０．１２５mmol）とHuenig塩基（２２μL、０．１２５mmol）の混合物中に０℃で加えた。反応混合物を０℃で０．５時間撹拌した。ジメチルアミン（ＴＨＦ中２M、１．０mL、２．０mmol）を加え、冷却剤を除去した。反応混合物を周囲温度で一晩撹拌した。溶媒を真空下で濃縮し、生成物を逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、白色の固体（０．０１７ｇ、３０％）を得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.55 (m, 2H), 8.33 (s, 1H), 7.22 (d, 1H), 6.88 (t, 1H), 4.78 (m, 1H), 3.85 (m, 2H), 3.49 (m, 2H), 3.02 (br s, 6H), 2.70 (s, 3H), 2.08 (m, 2H), 1.63 (m, 2H)。MS (ESI+): 431 (M+H)。HPLC (10cm_esci_BICARB): 保持時間３．１８分（ＨＰＬＣ純度９９％）。
【０１９５】
実施例１３
４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
【０１９６】
【化３８】
0005675614.tif 000046
【０１９７】
ＴＨＦ／ＤＭＦ（９．０mL；８：１）中の４−［４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）−フェニルアミノ］−５−メチル−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸（０．５ｇ、１．２４mmol）の撹拌した懸濁液に、塩化オキサリル（０．３３mL、３．７mmol）を加え、混合物を１８時間撹拌した。溶媒を濃縮し、残留物をトルエンで共蒸発させた。残留物に、ジオキサン（０．５M、２０mL）中のアンモニアの溶液を加え、混合物を１８時間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（５０mL）中の１０％ ＭｅＯＨで希釈し、シリカに吸収させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ中３％ ＭｅＯＨ）によるクロマトグラフィーに付して、生成物を淡黄色の固体（０．２７８ｇ、５５．７％）として得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.56 (s, 1H), 8.50 (dd, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.82 (bs, 2H), 7.25 (dd, 1H), 6.88 (dt, 1H), 4.78 (sept, 1H), 3.86 (dt, 2H), 3.50 (dt, 2H), 2.98 (s, 3H), 2.06 (d, 2H), 1.67-1.62 (m, 2H)。MS (ESI+): 403 (M+H)。HPLC (10cm_esci_BICARB): 保持時間３．０２分（ＨＰＬＣ純度９７％）。
【０１９８】
実施例１４
Ｎ−（３−アミノプロピル）−４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
【０１９９】
【化３９】
0005675614.tif 000047
【０２００】
ＨＡＴＵ（０．０７３ｇ、０．１９３mmol）を、ＤＭＦ（２．０mL）中の４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（０．０７ｇ、０．１７５mmol）とHuenig塩基（３０μL、０．１７５mmol）の混合物中に０℃で加えた。反応混合物を０℃で０．５時間撹拌した。３−アミノプロピルカルバミン酸tert−ブチル（０．１５２ｇ、０．８７５mmol）を加え、冷却剤を除去し、そして反応物を周囲温度で一晩撹拌した。生成物をＥｔＯＡｃから再結晶化して、無色の固体を得た。固体をＤＣＭ（２．０mL）に溶解し、トリフルオロ酢酸（０．５０mL）で処理し、反応物を周囲温度で２時間撹拌した。反応混合物をＳＣＸカートリッジにアプライし、ＭｅＯＨ（３０mL）、続いてＭｅＯＨ中のアンモニアで溶離して、生成物を溶離した。適切な画分を蒸発させて、生成物を無色の固体（０．０４９ｇ、６０％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 8.75 (dd, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 6.78-6.67 (m, 2H), 4.56-4.50 (m, 1H), 4.02 (dt, 2H), 3.63-3.51 (m, 4H), 3.06 (s, 3H), 2.97 (t, 2H), 2.14 (d, 2H), 1.85-1.74 (m, 4H)。MS (ES-): 458 (M-H)。  HPLC (10cm_esci_BICARB): 保持時間２．６８（ＨＰＬＣ純度９８％）。
【０２０１】
実施例１５
４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチル−Ｎ−（３−（メチルアミノ）プロピル）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
【０２０２】
【化４０】
0005675614.tif 000048
【０２０３】
ＨＡＴＵ（０．０７３ｇ、０．１９３mmol）を、ＤＭＦ（２．０mL）中の４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（０．０７ｇ、０．１７５mmol）とHuenig塩基（３０μL、０．１７５mmol）の混合物中に０℃で加えた。反応混合物を０℃で０．５時間撹拌した。３−アミノプロピル（メチル）カルバミン酸tert−ブチル（０．１６４ｇ、０．８７５mmol）を加え、冷却剤を除去し、そして反応物を周囲温度で一晩撹拌した。生成物をＥｔＯＡｃから再結晶化して、無色の固体を得た。固体をＤＣＭ（２．０mL）に溶解し、トリフルオロ酢酸（０．５０mL）で処理し、そして反応物を周囲温度で２時間撹拌した。反応混合物をＳＣＸカートリッジにアプライし、ＭｅＯＨ（３０mL）、続いてＭｅＯＨ中のアンモニアで溶離した。適切な画分を蒸発させて、生成物を無色の固体（０．０４２ｇ、５０％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 8.75 (dd, 1H), 8.58 (s, 2H), 8.27 (s, 1H), 6.79-6.68 (m, 2H), 4.57-4.49 (m, 1H), 4.02 (dt, 2H), 3.60-3.47 (m, 4H), 3.08 (s, 3H), 2.85 (t, 2H), 2.49 (s, 3H), 2.15 (d, 2H), 1.87-1.73 (m, 4H)。MS (ES-): 472 (M-H)。HPLC (10cm_esci_BICARB): 保持時間２．６９（ＨＰＬＣ純度９８％）。
【０２０４】
実施例１６
Ｎ−（４−アミノブチル）−４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
【０２０５】
【化４１】
0005675614.tif 000049
【０２０６】
ＨＡＴＵ（０．０７３ｇ、０．１９３mmol）を、ＤＭＦ（２．０mL）中の４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（０．０７ｇ、０．１７５mmol）とHuenig塩基（３０μL、０．１７５mmol）の混合物中に０℃で加えた。反応混合物を０℃で０．５時間撹拌した。４−アミノブチルカルバミン酸tert−ブチル（０．１６４ｇ、０．８７５mmol）を加え、冷却剤を除去し、反応物を周囲温度で一晩撹拌した。生成物をＥｔＯＡｃから再結晶化して、無色の固体を得た。固体をＤＣＭ（２．０mL）に溶解し、トリフルオロ酢酸（０．５０mL）で処理し、そして反応物を周囲温度で２時間撹拌した。反応混合物をＳＣＸカートリッジにアプライし、ＭｅＯＨ（３０mL）、続いてＭｅＯＨ中のアンモニアで溶離した。適切な画分を蒸発させて、生成物を無色の固体（０．０２４ｇ、２９％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 8.76 (dd, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 6.78-6.68 (m, 2H), 4.56-4.50 (m, 1H), 4.06-3.99 (m, 2H), 3.59-3.42 (m, 4H), 3.07 (s, 3H), 2.81 (t, 2H), 2.15 (d, 2H), 1.85-1.69 (m, 4H), 1.59 (m, 2H)。MS (ES-): 472 (M-H)。HPLC (10cm_esci_BICARB): 保持時間２．７３（ＨＰＬＣ純度９８％）。
【０２０７】
実施例１７
４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチル−Ｎ−（４−（メチルアミノ）ブチル）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
【０２０８】
【化４２】
0005675614.tif 000050
【０２０９】
ＨＡＴＵ（０．０７３ｇ、０．１９３mmol）を、ＤＭＦ（２．０mL）中の４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（０．０７ｇ、０．１７５mmol）とHuenig塩基（３０μL、０．１７５mmol）の混合物中に０℃で加えた。反応混合物を０℃で０．５時間撹拌した。４−アミノブチル（メチル）カルバミン酸tert−ブチル（０．１７７ｇ、０．８７５mmol）を加え、冷却剤を除去し、そして反応物を周囲温度で一晩撹拌した。生成物をＥｔＯＡｃから再結晶化して、無色の固体を得た。固体をＤＣＭ（２．０mL）に溶解し、トリフルオロ酢酸（０．５０mL）で処理し、そして反応物を周囲温度で２時間撹拌した。反応混合物をＳＣＸカートリッジにアプライし、ＭｅＯＨ（３０mL）、続いてＭｅＯＨ中のアンモニアで溶離した。適切な画分を蒸発させて、生成物を無色の固体（０．０４２ｇ、４９％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 8.76 (dd, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 6.79-6.68 (m, 2H), 4.57-4.49 (m, 1H), 4.03 (dt, 2H), 3.60-3.42 (m, 4H), 3.06 (s, 3H), 2.69 (t, 2H), 2.44 (s, 3H), 2.15 (d, 2H), 1.95-1.61 (m, 6H)。MS (ES-): 486 (M-H)。HPLC (10cm_esci_BICARB): 保持時間２．７６（ＨＰＬＣ純度９９％）。
【０２１０】
実施例１８
Ｎ−（４−（ジメチルアミノ）ブチル）−４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル−アミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
【０２１１】
【化４３】
0005675614.tif 000051
【０２１２】
ＨＡＴＵ（０．０７３ｇ、０．１９３mmol）を、ＤＭＦ（２．０mL）中の４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（０．０７ｇ、０．１７５mmol）とHuenig塩基（３０μL、０．１７５mmol）の混合物中に０℃で加えた。反応混合物を０℃で０．５時間撹拌した。Ｎ１，Ｎ１−ジメチルブタン−１，４−ジアミン（０．１７７ｇ、０．８７５mmol）を加え、冷却剤を除去し、そして反応物を周囲温度で一晩撹拌した。粗反応混合物をＳＣＸカートリッジにアプライし、ＭｅＯＨ（３０mL）、続いてＭｅＯＨ中のアンモニアで溶離した。生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（１０％ ＭｅＯＨ／ＤＣＭ→１５％ ＭｅＯＨ／ＤＣＭ／０．５％ ＮＨ４ＯＨ）により精製して、標記化合物をロウ状の無色の固体（０．０１２ｇ、３７％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 8.76 (dd, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 6.79-6.69 (m, 2H), 4.54 (dd, 1H), 4.03 (dt, 2H), 3.60-3.52 (m, 2H), 3.45 (q, 2H), 3.07 (s, 3H), 2.38 (t, 2H), 2.24 (s, 6H), 2.15 (d, 2H), 1.87-1.63 (m, 6H)。MS (ESI+): 502 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間２．１８（ＨＰＬＣ純度９７％）。
【０２１３】
実施例１９
４−（４−フルオロ−２−イソ−プロポキシフェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル
【０２１４】
【化４４】
0005675614.tif 000052
【０２１５】
一般ルート１に記載のものと類似の方法で、４−フルオロ−２−イソ−プロポキシアニリン及び４−クロロ−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチルから調製した。収率（０．２５ｇ、５３％）
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 8.62-8.56 (m, 1H), 7.14 (d, 1H), 6.87 (t, 1H), 4.82 (sept, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.15 (s, 3H), 1.36 (d, 6H)。MS (ESI+): 376 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間４．４９（ＨＰＬＣ純度９８％）。
【０２１６】
実施例２０
４−（４−フルオロ−２−イソ−プロポキシフェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸
【０２１７】
【化４５】
0005675614.tif 000053
【０２１８】
一般ルート１に記載のものと類似の方法で調製した。収率（０．１４ｇ、７２％）。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 13.60 (bs, 1H), 8.65-8.53 (m, 3H), 7.15 (dd, 1H), 6.87 (dt, 1H), 4.84 (sept, 1H), 3.14 (s, 3H), 1.36 (d, 6H)。MS (ESI+): 362 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間３．９０分（ＨＰＬＣ純度９８％）。
【０２１９】
４−クロロチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチルの調製
【０２２０】
【化４６】
0005675614.tif 000054
【０２２１】
ＴＨＦ（５０mL）及びHuenig塩基（２．１４mL、１５．２mmol）の溶液を−７８℃に冷却し、ｎ−ＢｕＬｉ（ヘキサン類中２．５M、５．７mL、１４．１mmol）を滴下した。溶液を０℃に１０分間温め、−７８℃に再冷却し、そして４−クロロチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン（２．０ｇ、１１．７mmol）を加えた。アニオンを−７８℃で１０分間撹拌し、クロロギ酸メチル（１．０mL、１２．９mmol）を滴下し、そして反応物を−７８℃で０．５時間保持した。反応物を周囲温度に温めた。１時間後、混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液（５０mL）に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（４×５０mL）で抽出した。合わせた有機層を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させ、濾過し、そして真空下で濃縮した。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（１００％ ＤＣＭ）により精製して、黄色の固体（０．２５６ｇ、１０％）を得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 9.13 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 3.99 (s, 3H)。
【０２２２】
実施例２１
４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル
【０２２３】
【化４７】
0005675614.tif 000055
【０２２４】
４−クロロチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（０．２５６ｇ、１．１２mmol）、４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）アニリン（０．２３６ｇ、１．１２mmol）及びパラ−トルエンスルホン酸（０．０２１ｇ、０．０１mmol）を、無水１，４−ジオキサン（６mL）中で４時間加熱還流した。溶液を冷却し、真空下で濃縮し、そして粗生成物をシリカに吸収させた。試料を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（１００％ ＤＣＭ→１０％ ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により精製して、ＭｅＯＨから再結晶化した後、標記化合物（０．２２０ｇ、４９％）を得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 9.64 (s, 1H), 8.60 (br s, 1H), 8.44 (s, 1H), 4.49 (dd, 1H), 7.16 (d, 1H), 6.87 (app t, 1H), 4.63-4.65 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.39-3.44 (m, 2H), 1.85-1.89 (m, 2H), 1.45-1.49 (m, 2H)。MS (ESI+): 404 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間３．４２分（ＨＰＬＣ純度９６％）。
【０２２５】
実施例２２
４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸
【０２２６】
【化４８】
0005675614.tif 000056
【０２２７】
水酸化リチウム一水和物（０．０６２ｇ、１．４９mmol）を、ＴＨＦ／水（１：１；１．０mL）中の４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（０．１００ｇ、０．２５mmol）の懸濁液中に加え、反応物を周囲温度で１６時間撹拌した。混合物を氷浴中で冷却し、溶液がｐＨ５に達するまで１N塩酸を滴下した。沈殿物を回収し、水で洗浄し、Ｐ２Ｏ５で乾燥させて、オフホワイトの固体（０．０６０ｇ、６２％）を得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 13.70 (br s, 1 H), 9.56 (br s, 1H), 8.46 (br s, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.50 (dd, 1H), 7.17 (dd, 1H), 6.86 (dd, 1H), 4.64-4.69 (m, 1H), 3.61-3.66 (m, 2H), 3.40-3.45 (m, 2H), 1.87-1.90 (m, 2H), 1.45-1.54 (m, 2H)。MS (ESI+): 390 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間２．９０分（ＨＰＬＣ純度９５％）。
【０２２８】
実施例２３
Ｎ−（３−（ジメチルアミノ）プロピル）−４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル−アミノ）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド モノギ酸塩
【０２２９】
【化４９】
0005675614.tif 000057
【０２３０】
ＨＡＴＵ（０．０５４ｇ、０．１４mmol）を、無水ＤＭＦ（１．０mL）中の４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸（０．０５０ｇ、０．１３mmol）及びHuenig塩基（２２μL、０．１３mmol）の溶液中に０℃で加えた。０．５時間後、３−ジメチルアミノ−１−プロピルアミン（７１μL、０．６４mmol）を加え、溶液を周囲温度に一晩温めた。反応物を真空下で濃縮し、残留物をジメチルスルホキシドに再溶解した。試料を逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、モノ−ギ酸塩としてオフホワイトの固体（０．００７ｇ、１１％）を得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 8.86 (br s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.34 (dd, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.91 (br s, 1H), 6.71-6.79 (m, 2H), 4.49-4.53 (m, 1H), 3.92-3.98 (m, 2H), 3.61 (br s, 2H), 3.55 (app dt, 2H), 3.07 (app t , 2H), 2.72 (s, 3H), 2.72 (s, 3H), 2.04-2.11 (m, 2H), 1.84-1.91 (m, 2H)。MS (ESI+): 474 (M+H)。HPLC (10cm_esci_bicarb): 保持時間２．９３分（ＨＰＬＣ純度９９％）。
【０２３１】
【化５０】
0005675614.tif 000058
【０２３２】
３−ニトロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジンの調製
【０２３３】
【化５１】
0005675614.tif 000059
【０２３４】
無水ＴＨＦ（２０mL）中のテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−オール（２．５ｇ、２４．５mmol）の撹拌した溶液に、水素化ナトリウム（油中６０％分散液、０．９３８ｇ、２４．５mmol）を０℃で加え、混合物を０℃で０．５時間撹拌した。無水ＴＨＦ（５mL）中の２−フルオロ−３−ニトロ−ピリジン（３．３ｇ、２３．２mmol）の溶液を撹拌しながら滴下し、溶液を５時間かけて周囲温度に温めた。反応物を氷浴中で冷却し、水（５０mL）を加えた。混合物をＥｔＯＡｃ（２×１００mL）で抽出し、合わせた有機層をブライン（５０mL）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過し、そして真空下で濃縮した。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（２０％ イソ−ヘキサン／ＤＣＭ→ＤＣＭ）により精製して、標記化合物を淡黄色の油状物（２．６７ｇ、収率４８％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 8.35 (dd, 1H), 8.23 (dd, 1H), 7.02 (m, 1H), 5.50 (m, 1H), 4.00 (m, 2H), 3.65 (m, 2H), 2.07 (m, 2H), 1.91 (m, 2H)。
【０２３５】
２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−アミンの調製
【０２３６】
【化５２】
0005675614.tif 000060
【０２３７】
無水ＭｅＯＨ（２０mL）中の３−ニトロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン（２．３１ｇ、１０．３mmol）の溶液に、ギ酸アンモニウム（１．２ｇ、１９．１mmol）及び水酸化パラジウム担持炭（２０％、０．４０ｇ）を加えた。混合物を周囲温度で８時間撹拌し、その時点でギ酸アンモニウム（１．０ｇ）のさらなるアリコートを加えた。混合物を５０℃で４時間加熱し、溶液をギ酸でｐＨ８に調整し、その後、さらに５０℃で１時間加熱した。反応物を、セライトを通して濾過し、触媒残留物をＭｅＯＨで洗浄した。溶媒を真空下で濃縮して、濃紫色の固体を得た。粗生成物を、イオン交換クロマトグラフィー（塩酸／ＭｅＯＨ→アンモニア／ＭｅＯＨで溶離するＳＣＸ−２）により精製した。生成物を白色の固体（１．８ｇ、９０％）として結晶化した。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 7.53 (dd, 1H), 6.88 (dd, 1H), 6.70 (dd, 1H), 5.28 (m, 1H), 3.99 (m, 2H), 3.77 (br s, 2H), 3.62 (m, 2H), 2.1 (m, 2H), 1.78 (m, 2H)。
【０２３８】
実施例２４
５−メチル−４−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−イルアミノ）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチルの調製
【０２３９】
【化５３】
0005675614.tif 000061
【０２４０】
２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−アミン（０．９９ｇ、５．１０mmol）、４−クロロ−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（１．２３７ｇ、５．１０mmol）及びパラ−トルエンスルホン酸（０．０９７ｇ、０．５１mmol）を、無水１，４−ジオキサン（２０mL）中で１６時間加熱還流した。溶液を周囲温度に冷却し、水酸化アンモニウム／水（１：４）の撹拌した溶液中に注いだ。沈殿物を濾別し、水、ジエチルエーテルで洗浄し、そして乾燥させた。生成物を逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、灰色の固体（０．９６３ｇ、４７％）を得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.83 (d, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.10 (t, 1H), 5.31 (m, 1H), 3.90 (m, 5H), 3.55 (m, 2H), 3.17 (s, 3H), 2.10 (m, 2H), 1.72 (m, 2H)。MS (ESI+): 401 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間４．１８分（ＨＰＬＣ純度９６％）。
【０２４１】
実施例２５
５−メチル−４−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−イルアミノ）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸の調製
【０２４２】
【化５４】
0005675614.tif 000062
【０２４３】
５−メチル−４−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−イルアミノ）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（０．９２１ｇ、２．３０mmol）を、ＭｅＯＨ（８mL）及び２M水酸化ナトリウム水溶液（２．０mL）の溶液中に加えた。反応物を６０℃で２時間撹拌した。混合物を周囲温度に冷却し、濃塩酸で酸性化した。ＤＣＭの添加により沈殿物が形成され、これを回収し、そして水で洗浄した。生成物を逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、オフホワイトの固体を得、これを更に精製することなしに次の工程において使用した。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.89 (d, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 7.91 (d, 1H), 7.10 (m, 1H), 5.30 (m, 1H), 3.90 (m, 2H), 3.53 (m, 2H), 3.18 (s, 3H), 2.10 (m, 2H), 1.75 (m, 2H)。MS (ESI+): 387 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間３．３９分（ＨＰＬＣ純度９２％）。
【０２４４】
実施例２６
Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−５−メチル−４−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−イルアミノ）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミドの調製
【０２４５】
【化５５】
0005675614.tif 000063
【０２４６】
ＨＡＴＵ（０．１０５ｇ、０．２８mmol）を、ＤＭＦ（２．０mL）中の５−メチル−４−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−イルアミノ）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸（０．０９７ｇ、０．２５mmol）とHuenig塩基（４４μL、０．２５mmol）の混合物中に０℃で加えた。反応混合物を０℃で０．５時間撹拌した。Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミン（１３７μL、１．２５mmol）を加え、冷却剤を除去した。反応混合物を周囲温度で一晩撹拌した。溶媒を真空下で濃縮し、生成物を逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、オフホワイトの固体（０．０２６ｇ、２２％）を得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.88 (d, 1H, d), 8.65 (s, 1H), 8.55 (t, 1H), 8.50 (s, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.10 (m, 1H), 3.90 (m, 2H), 5.32 (m, 1H), 3.53 (m, 4H), 2.90-3.01 (m, 5H), 2.62 (s, 6H), 2.10 (m, 2H), 1.71 (m, 2H)。MS (ESI+): 457 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間２．０６分（ＨＰＬＣ純度９７％）。
【０２４７】
実施例２７
Ｎ−（３−（ジメチルアミノ）プロピル）−５−メチル−４−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−イルアミノ）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミドの調製
【０２４８】
【化５６】
0005675614.tif 000064
【０２４９】
ＨＡＴＵ（０．１０５ｇ、０．２８mmol）を、ＤＭＦ（２．０mL）中の５−メチル−４−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−イルアミノ）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸（０．０９７ｇ、０．２５mmol）とHuenig塩基（４４μL、０．２５mmol）の混合物中に０℃で加えた。反応混合物を０℃で０．５時間撹拌した。３−ジメチルアミノ−１−プロピルアミン（１３８μL、１．２５mmol）を加え、冷却剤を除去した。反応混合物を周囲温度で一晩撹拌した。溶媒を真空下で濃縮し、生成物を逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、オフホワイトの固体（０．０２９ｇ、２４％）を得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.89 (d, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.61 (t, 1H), 8.50 (s, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.10 (m, 1H), 5.32 (m, 1H), 3.90 (m, 2H), 3.55 (m, 2H), 3.35 (m, 2H), 3.00 (s, 3H), 2.79 (m, 2H), 2.55 (s, 6H), 2.10 (m, 2H), 1.55 (m, 2H), 1.71 (m, 2H)。MS (ESI+): 471 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間２．０２分（ＨＰＬＣ純度９８％）。
【０２５０】
実施例２８
５−メチル−Ｎ−（２−（メチルアミノ）エチル）−４−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−イルアミノ）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミドの調製
【０２５１】
【化５７】
0005675614.tif 000065
【０２５２】
ＨＡＴＵ（０．１５７ｇ、０．４１mmol）を、ＤＭＦ（２．０mL）中の５−メチル−４−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−イルアミノ）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸（０．１４５ｇ、０．３８mmol）とHuenig塩基（６５μL、０．３８mmol）の混合物中に０℃で加えた。反応混合物を０℃で０．５時間撹拌した。Ｎ−ｂｏｃ−Ｎ−メチルエチレンジアミン（３３５μL、１．８８mmol）を加え、冷却剤を除去し、そして反応混合物を周囲温度で一晩撹拌した。溶媒を真空下で濃縮し、粗生成物をＤＣＭに溶解した。有機層を水で洗浄し、真空下で濃縮し（１０mL）、そしてトリフルオロ酢酸を加えた（３．０mL）。混合物を周囲温度で一晩撹拌し、真空下で濃縮し、そしてイオン交換クロマトグラフィー（塩酸／ＭｅＯＨ→アンモニア／ＭｅＯＨで溶離するＳＣＸ−２）により精製した。フラッシュ−カラムクロマトグラフィー（１００％ ＤＣＭ→１０％ アンモニア／ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）によりさらに精製して、標記化合物を淡黄色の固体（０．０４３ｇ、２５％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 9.08 (d, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.83 (d, 1H), 6.98 (m, 1H), 6.59 (m, 1H), 5.34-5.40 (m, 1H), 4.03 (dt, 2H), 3.62 (m, 2H), 3.52 (m, 2H), 3.07 (s, 3H), 2.85 (m, 2H), 2.46 (m, 3H), 2.20 (d, 2H), 1.77-1.87 (m, 2H)。MS (ESI+): 443 (M+H)。HPLC (10cm_esci_BICARB): 保持時間２．５６分（ＨＰＬＣ純度９５％）。
【０２５３】
実施例２９
Ｎ−（２−アミノエチル）−５−メチル−４−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−イルアミノ）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミドの調製
【０２５４】
【化５８】
0005675614.tif 000066
【０２５５】
ＨＡＴＵ（０．１５７ｇ、０．４１mmol）を、ＤＭＦ（２．０mL）中の５−メチル−４−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−イルアミノ）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸（０．１４５ｇ、０．３８mmol）とHuenig塩基（６５μL、０．３８mmol）の混合物中に０℃で加えた。反応混合物を０℃で０．５時間撹拌した。tert−ブチル−Ｎ−（２−アミノエチル）カルバマート（２９６μL、１．８８mmol）を加え、冷却剤を除去した。反応混合物を周囲温度で一晩撹拌した。溶媒を真空下で濃縮し、粗生成物をＤＣＭに溶解した。有機層を水で洗浄し、真空下で濃縮し（１０mL）、そしてトリフルオロ酢酸を加えた（３．０mL）。混合物を周囲温度で一晩撹拌し、真空下で濃縮し、そしてイオン交換クロマトグラフィー（塩酸／ＭｅＯＨ→アンモニア／ＭｅＯＨで溶離するＳＣＸ−２）により精製した。フラッシュ−カラムクロマトグラフィー（１００％ ＤＣＭ→１０％ アンモニア／ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）によりさらに精製して、標記化合物を淡黄色の固体（０．０６３ｇ、３９％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 9.09 (d, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.83 (d, 1H), 6.97 (t, 1H), 6.56 (t, 1H), 5.38 (m, 1H), 4.04 (m, 2H), 3.59 (m, 2H), 3.51 (q, 2H), 3.06 (s, 3H), 2.98 (t, 2H), 2.18 (m, 2H), 1.81 (m, 2H), 1.26 (m, 2H)。MS (ESI+): 427 (M+H)。HPLC (10cm_esci_BICARB): 保持時間２．４７分（ＨＰＬＣ純度９８％）。
【０２５６】
実施例３０
５−メチル−Ｎ−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−イルアミノ）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミドの調製
【０２５７】
【化５９】
0005675614.tif 000067
【０２５８】
ＨＡＴＵ（０．１０５ｇ、０．２８mmol）を、ＤＭＦ（２．０mL）中の５−メチル−４−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−イルアミノ）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸（０．０９７ｇ、０．２５mmol）とHuenig塩基（４４μL、０．２５mmol）の混合物中に０℃で加えた。反応混合物を０℃で０．５時間撹拌した。１−（２−アミノエチル）−ピロリジン（１５７μL、１．２５mmol）を加え、冷却剤を除去した。反応混合物を周囲温度で一晩撹拌した。溶媒を真空下で濃縮し、粗物質を水（１０mL）中に加え、そして水層をＤＣＭ中に抽出した。生成物を、フラッシュ−カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ→１０％ アンモニア／ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により精製して、標記化合物をオフホワイトの固体（０．０５１ｇ、収率４２％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 9.08 (d, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.81 (d, 1H), 6.96 (t, 1H), 6.73 (t, 1H), 5.36 (m, 1H), 4.00 (m, 2H), 3.52- 3.65 (m, 4H), 3.05 (s, 3H), 2.72 (t, 2H), 2.58 (m, 4H), 2.18 (m, 2H), 1.80 (m, 6H)。MS (ESI+): 483 (M+H)。HPLC (10cm_esci_BICARB): 保持時間２．９４分（ＨＰＬＣ純度９８％）。
【０２５９】
実施例３１
４−（２−イソ−プロポキシピリジン−３−イルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸の調製のためのプロトコール
【０２６０】
【化６０】
0005675614.tif 000068
【０２６１】
ａ）  ２−イソ−プロポキシ−３−ニトロ−ピリジンの調製
【０２６２】
【化６１】
0005675614.tif 000069
【０２６３】
イソ−プロパノール（１．４１mL、１８．４８mmol）を、無水ＴＨＦ（２０mL）中の水素化ナトリウム（油中６０％分散液、０．７３９ｇ、１８．４８mmol）の撹拌した懸濁液中に０℃で滴下し、得られた溶液を０．５時間撹拌した。この溶液に無水ＴＨＦ（１０mL）中の２−フルオロ−３−ニトロピリジン（２．５０ｇ、１７．６０mmol）を滴下した。添加完了後、溶液を０℃で０．５時間撹拌し、その後周囲温度に温めた。反応物を周囲温度で１８時間撹拌し、水（５０mL）でクエンチし、水層をジエチルエーテル（３×５０mL）で抽出した。有機層を合わせ、ブライン（５０mL）で洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させ、濾過し、そして真空下で濃縮した。標記化合物を黄色の固体（１．９７５ｇ、収率６１％）として得た後、フラッシュ−カラムクロマトグラフィー（石油エーテル（４０〜６０℃）／ＤＣＭ）により精製した。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 8.36 (d, 1H), 8.18 (d, 1H), 6.97 (t, 1H), 5.51 (m, 1H), 1.41 (d, 6H)。MS (ESI+): 質量イオンは観察されず。HPLC (10cm_esci_BICARB): 保持時間３．４３分（ＨＰＬＣ純度９４％）。
【０２６４】
ｂ）  イソ−プロポキシピリジン−３−アミンの調製
【０２６５】
【化６２】
0005675614.tif 000070
【０２６６】
水酸化パラジウム担持炭（２０％、０．０７６ｇ、０．５４mmol）を、エタノール（１００mL）中の２−イソ−プロポキシ−３−ニトロ−ピリジン（１．９７ｇ、１０．８mmol）及びギ酸アンモニウム（３．４０ｇ、５４．０mmol）の溶液中に周囲温度で加えた。溶液を９０℃で２時間撹拌し、周囲温度に冷却し、セライトを通して濾過し、そしてＭｅＯＨで洗浄した。濾液を真空下で濃縮し、ジエチルエーテルから粉砕して、褐色の油状物を得、これを更に精製することなしに次の工程において使用した。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 7.56 (d, 1H), 7.26 (d, 1H), 6.65 (m, 1H), 5.33 (m, 1H), 3.65 (br s, 2H), 1.35 (d, 6H)。MS (ESI+): 153 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間２．２４分（ＨＰＬＣ純度９９％）。
【０２６７】
ｃ）  ４−（２−イソ−プロポキシピリジン−３−イルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチルの調製
【０２６８】
【化６３】
0005675614.tif 000071
【０２６９】
イソ−プロポキシピリジン−３−アミン（１．３０ｇ、８．６０mmol）を、脱ガスした１，４−ジオキサン（４０mL）中の４−クロロ−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（２．２９５ｇ、９．４６mmol）、XANTPHOS（０．９９５ｇ、１．７２mmol）及び炭酸セシウム（３．９２２ｇ、１２．０４mmol）の溶液中に加えた。混合物を、超音波処理下で脱ガスし、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０．３９４ｇ、０．４３０mmol）を加え、そして混合物をさらに超音波処理した。反応容器を密閉し、９０℃で３．０時間加熱し、冷却し、濾過し、そして固体を冷１，４−ジオキサンで洗浄した。濾液を水酸化アンモニウム溶液に注ぎ、沈殿物を回収して、標記化合物を暗黄色の固体（２．０５ｇ、６６％）として得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.89 (d, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.59 (br s, 1H), 7.93 (d, 1H), 7.08 (m, 1H), 5.37 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.16 (s, 3H), 1.41 (d, 6H)。MS (ESI+): 359 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間４．６０分（ＨＰＬＣ純度８７％）。
【０２７０】
ｄ）  ４−（２−イソ−プロポキシピリジン−３−イルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸の調製
【０２７１】
【化６４】
0005675614.tif 000072
【０２７２】
４−（２−イソ−プロポキシピリジン−３−イルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（２．０４ｇ、５．７mmol）をＭｅＯＨ（２４mL）に懸濁した。この溶液中に、２M水酸化ナトリウム（６．０mL、１２mmol）の水溶液を加え、反応物を６０℃で１時間撹拌した。溶液を氷浴中で冷却し、濃塩酸を、溶液がｐＨ５に達するまで加えた。沈殿物を回収し、水で洗浄し、そして乾燥させて、オフホワイトの固体（１．５０ｇ、７６％）として得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 13.75 (br s, 1H), 8.92 (d, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.09 (m, 1H), 5.36 (m, 1H), 3.16 (s, 3H), 1.42 (d, 6H)。MS (ESI+): 345 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間３．８１分（ＨＰＬＣ純度９８％）。
【０２７３】
実施例３２
３−（３−（２−（メトキシカルボニル）−３−メチルベンゾ［ｂ］チオフェン−４−イルアミノ）ピリジン−２−イルオキシ）アゼチジン−１−カルボン酸tert−ブチルの調製に関するプロトコール
【０２７４】
【化６５】
0005675614.tif 000073
【０２７５】
ａ）  ３−（３−ニトロピリジン−２−イルオキシ）アゼチジン−１−カルボン酸tert−ブチルの調製
【０２７６】
【化６６】
0005675614.tif 000074
【０２７７】
水素化ナトリウム（油中６０％分散液、２．３０ｇ、５７．６４mmol）を、無水ＴＨＦ（１１０mL）中の１−Ｂｏｃ−３−（ヒドロキシ）アゼチジン（９．９４ｇ、５７．６４mmol）の溶液中に０℃で少量ずつ加え、０．５時間撹拌した。無水ＴＨＦ（１５mL）中の２−フルオロ−３−ニトロ−ピリジン（７．８０ｇ、５４．９mmol）の溶液を滴下し、混合物を周囲温度に一晩温めた。混合物を氷浴中で冷却し、水（５０mL）を加えた。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し、水、ブラインで洗浄し、そして乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させた。生成物を、フラッシュ−カラムクロマトグラフィー（石油エーテル（４０〜６０℃）／ＤＣＭ）により精製して、標記化合物を黄色の固体（４．３７ｇ、２７％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 8.36 (m, 1H), 8.30 (d, 1H), 7.09 (m, 1H), 5.45 (m, 1H), 4.35 (m, 2H), 4.06 (m, 2H), 1.45 (s, 9H)。MS (ESI+): 296 (M+H)。HPLC (10cm_esci_BICARB): 保持時間３．４７分（ＨＰＬＣ純度９３％）。
【０２７８】
ｂ）  ３−（３−アミノピリジン−２−イルオキシ）アゼチジン−１−カルボン酸tert−ブチルの調製
【０２７９】
【化６７】
0005675614.tif 000075
【０２８０】
水酸化パラジウム担持炭（２０％、０．０７１ｇ、０．５１mmol）を、エタノール（１００mL）中の３−（３−ニトロピリジン−２−イルオキシ）アゼチジン−１−カルボン酸tert−ブチル（３．０ｇ、１０．２mmol）及びギ酸アンモニウム（３．２０ｇ、５０．８mmol）の溶液中に加えた。溶液を周囲温度で１８時間撹拌し、セライトを通して濾過し、そして真空下で濃縮した。粗生成物をクロロホルム（×３）で抽出し、合わせた有機画分を真空下で濃縮して、淡褐色の固体（２．４８ｇ、９２％）を得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 7.33 (m, 1H), 6.92 (d, 1H), 6.74 (m, 1H), 5.27 (m, 1H), 5.07 (s, 2H), 4.26 (m, 2H), 3.86 (m, 2H), 1.42 (s, 9H)。MS (ESI+): 266 (M+H)。HPLC (10cm_esci_BICARB): 保持時間３．０９分（ＨＰＬＣ純度９０％）。
【０２８１】
ｃ）  ３−（３−（２−（メトキシカルボニル）−３−メチルベンゾ［ｂ］チオフェン−４−イルアミノ）ピリジン−２−イルオキシ）アゼチジン−１−カルボン酸tert−ブチルの調製
【０２８２】
【化６８】
0005675614.tif 000076
【０２８３】
３−（３−アミノピリジン−２−イルオキシ）アゼチジン−１−カルボン酸tert−ブチル（１．５６ｇ、５．９０mmol）を、脱ガスした１，４−ジオキサン（５０mL）中の４−クロロ−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（１．５７ｇ、６．４９mmol）、XANTPHOS（０．６８３ｇ、１．１８mmol）及び炭酸セシウム（２．６９ｇ、８．２６mmol）の溶液中に加えた。混合物を超音波処理下で脱ガスし、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０．２７０ｇ、０．３０mmol）を加え、そしてさらに混合物を超音波処理した。反応容器を密閉し、９０℃で一晩加熱し、そして真空下で濃縮した。生成物をフラッシュ−カラムクロマトグラフィー（石油エーテル（４０〜６０℃）→１：１  石油エーテル（４０〜６０℃）／ＥｔＯＡｃ）、ＭｅＣＮからの粉砕及び逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、標記化合物を黄色の固体として得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.73 (d, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 7.91 (d, 1H), 7.13 (t, 1H), 5.42 (m, 1H), 4.31 (m, 2H), 3.92 (m, 5H), 3.16 (s, 3H), 1.43 (s, 9H)。MS (ESI+): 470 (M+H)。HPLC (10cm_esci_BICARB): 保持時間４．３３分（ＨＰＬＣ純度９８％）。
【０２８４】
【化６９】
0005675614.tif 000077
【０２８５】
３−ニトロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジンの調製
【０２８６】
【化７０】
0005675614.tif 000078
【０２８７】
無水ＴＨＦ（５．０mL）中の３−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−２（１Ｈ）−ピリドン（WO 2001/96338に従って調製、０．２０８ｇ、１．００mmol）及びトリフェニルホスフィン（０．３１４ｇ、１．２０mmol）の溶液に、アゾジ炭酸ジ−tert−ブチル（０．２７５mL、１．２０mmol）を加えた。反応混合物を１時間撹拌した。得られた懸濁液にテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−オール（０．１１４mL、１．２０mmol）を加え、そして得られた溶液を周囲温度で１７時間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、残留物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（１００％ イソ−ヘキサン→６０：１０  イソ−ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）により精製して、標記化合物をオフホワイトの固体（０．２６６ｇ、９１％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 8.39 (d, 1H), 7.40 (m ,1H), 5.56-5.50 (m, 1H), 4.02-3.96 (m, 2H), 3.71-3.66 (m, 2H), 2.15-2.08 (m, 2H), 1.95-1.87 (m, 2H)。
【０２８８】
２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−アミンの調製
【０２８９】
【化７１】
0005675614.tif 000079
【０２９０】
２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）−５−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−アミンに関して記載したように調製して、標記化合物を油状物（０．１９５ｇ、８４％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 7.10 (d, 1H), 6.89 (d, 1H), 5.36-5.30 (m, 1H), 4.10 (br s, 2H), 4.01-3.96 (m, 2H), 3.67-3.61 (m, 2H), 2.17-2.10 (m, 2H), 1.87-1.77 (m, 2H)。
【０２９１】
実施例３３
４−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル
【０２９２】
【化７２】
0005675614.tif 000080
【０２９３】
４−（６−クロロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−イルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチルに関して記載したように調製して、標記化合物を赤色の固体（０．１５９ｇ、４８％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 9.27 (d, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.54 (br s, 1H), 7.38 (d, 1H), 5.45-5.40 (1H, m), 4.08-4.03 (m, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.68-3.62 (m, 2H), 3.19 (s, 3H), 2.26-2.22 (m, 2H), 1.90-1.80 (m, 2H)。MS (ESI+): 469 (M+H)。 HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間４．６４分（ＨＰＬＣ純度９９％）。
【０２９４】
実施例３４
４−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イルアミノ）−Ｎ−（３−（ジメチルアミノ）プロピル）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
【０２９５】
【化７３】
0005675614.tif 000081
【０２９６】
ＥｔＯＨ／ＴＨＦ（５mL；３：２）中の４−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）−６−（トリフルオロメチル）−ピリジン−３−イルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（０．１３９ｇ、０．２９mmol）の懸濁液に、水酸化ナトリウム水溶液（２M、０．６２５mL、１．２５mmol）を加え、反応混合物を周囲温度で２４時間撹拌した。混合物をＤＣＭ及び１０％ ＫＨＳＯ４水溶液で希釈し、混合物を分離した。有機相をブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、そして溶媒を真空下で除去した。残留物をＤＭＦ（２．０mL）で希釈し、氷水で冷却した。Huenig塩基（４４  L、０．２５mmol）及びＨＡＴＵ（０．１０５ｇ、０．２８mmol）を加え、混合物をこの温度で２０分間撹拌し、その時点で３−（ジメチルアミノ）−プロピルアミン（０．１３６mL、１．２４mmol）を加えた。冷却剤を除去し、反応物を周囲温度で１８時間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水、そしてブライン（×２）で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過し、そして溶媒を真空下で除去した。残留物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（１００％ イソ−ヘキサン→１００％ ＤＣＭ→２５０：１０：１  ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ）により精製し、続いてジエチルエーテルを用いて主要な成分を粉砕して、標記化合物をオフホワイトの固体（０．０１ｇ、８％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 9.29 (d, 1H), 9.09 (s, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.55 (br s, 1H), 7.37 (d, 1H), 5.43-5.37 (m, 1H), 4.05-4.01 (m, 2H), 3.67-3.56 (m, 4H), 3.14 (s, 3H), 2.56-2.54 (m, 2H), 2.32 (s, 6H), 2.24-2.21 (m, 2H), 1.89-1.76 (m, 4H)。MS (ESI+): 539 (M+H)。 HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間２．４３分（ＨＰＬＣ純度９８％）。
【０２９７】
【化７４】
0005675614.tif 000082
【０２９８】
６−（フラン−３−イル）−３−ニトロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジンの調製
【０２９９】
【化７５】
0005675614.tif 000083
【０３００】
１，４−ジオキサン／水（５mL、４：１）中の６−クロロ−３−ニトロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン（０．２５９ｇ、１．００mmol）、フラン−３−ボロン酸（０．１２３ｇ、１．１０mmol）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０５８ｇ、０．０５mmol）及び炭酸カリウム（０．２７６ｇ、２．００mmol）の溶液を、窒素で脱ガスし、次に８０℃で１８時間加熱した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、溶媒を真空下で除去した。残留物をｎ−ヘキサンで粉砕して、標記化合物をオフホワイトの固体（０．１９７ｇ、６６％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ  8.33-8.31 (m, 1H), 8.06-8.05 (m, 1H), 7.65 (m, 1H), 7.13-7.11 (m, 1H), 6.85-6.84 (m, 1H), 5.60-5.55 (m, 1H), 4.06-4.02 (m ,2H), 3.73-3.67 (m, 2H), 2.16-2.09 (m, 2H), 1.99-1.91 (m, 2H)。
【０３０１】
６−（フラン−３−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−アミンの調製
【０３０２】
【化７６】
0005675614.tif 000084
【０３０３】
２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）−５−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−アミンに関して記載したように調製して、標記化合物を油状物（０．１６２ｇ、９４％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 7.81 (m, 1H), 7.42 (m, 1H), 6.90 (s, 2H), 6.75 (m, 1H), 5.39-5.35 (m, 1H), 4.03-3.98 (m, 2H), 3.78 (br s, 2H), 3.68-3.62 (m, 2H), 2.16-2.12 (m, 2H), 1.89-1.81 (m, 2H)。
【０３０４】
実施例３５
４−（６−（フラン−３−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−イルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル
【０３０５】
【化７７】
0005675614.tif 000085
【０３０６】
４−（６−クロロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−イルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチルに関して記載したように調製して、標記化合物を赤色の固体（０．１５５ｇ、５６％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 9.08 (d, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.48 (m, 1H), 7.15 (d, 1H), 6.82 (m, 1H), 5.48-5.42 (m, 1H), 4.09-4.04 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.69-3.63 (m, 2H), 3.18 (s, 3H), 2.26-2.23 (m, 2H), 1.92-1.83 (m, 2H)。MS (ESI+): 467 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間４．６３分（ＨＰＬＣ純度９９％）。
【０３０７】
実施例３６
Ｎ−（３−（ジメチルアミノ）プロピル）−４−（６−（フラン−３−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−イルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
【０３０８】
【化７８】
0005675614.tif 000086
【０３０９】
ＥｔＯＨ／ＴＨＦ（５mL、３：２）中の４−（６−（フラン−３−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−イルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（０．１５５ｇ、０．３３mmol）の懸濁液に、水酸化ナトリウム水溶液（２M、０．７１４mL、１．４３mmol）を加え、反応混合物を周囲温度で２４時間撹拌した。混合物をＤＣＭ及び１０％ ＫＨＳＯ４水溶液で希釈し、有機層を分離した。有機相をブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、そして溶媒を真空下で除去した。残留物をＤＭＦ（２．０mL）で希釈し、氷水で冷却した。Huenig塩基（３２ L、０．１８mmol）及びＨＡＴＵ（０．０７６ｇ、０．２０mmol）を加え、混合物をこの温度で２０分間撹拌し、その時点で３−（ジメチルアミノ）−プロピルアミン（０．１００mL、０．９１mmol）を加えた。冷却剤を除去し、反応物を周囲温度で１８時間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水及びブライン（×２）で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過し、そして溶媒を真空下で除去した。残留物を、ＳＣＸ−２イオン交換クロマトグラフィーにより精製して、標記化合物をオフホワイトの固体（０．０２ｇ、１１％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 9.08 (d, 1H), 8.95 (br s, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.92 (m, 1H), 7.48 (m, 1H), 7.15 (d, 1H), 6.82 (m, 1H), 5.45-5.38 (m, 1H), 4.07-4.02 (m, 2H), 3.68-3.49 (m, 4H), 2.59-2.56 (m, 2H), 2.34 (s, 6H), 2.26-2.21 (m, 2H), 1.91-1.76 (m, 4H)。MS (ESI+): 537 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間２．３９分（ＨＰＬＣ純度９６％）。
【０３１０】
６−（３−メトキシプロポキシ）−３−ニトロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジンの調製
【０３１１】
【化７９】
0005675614.tif 000087
【０３１２】
ＤＭＦ（３．０mL）中の６−クロロ−３−ニトロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン（０．２５９ｇ、１．００mmol）、Ｋ２ＣＯ３（０．２７６ｇ、２．００mmol）及び３−メトキシ−１−プロパノール（０．１９１mL、２．００mmol）の混合物を６０℃で６時間加熱し、次に１００℃で２４時間加熱した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水及びブライン（×２）で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過し、そして溶媒を真空下で除去した。残留物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（１００％イソ−ヘキサン→７５％イソ−ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）により精製して、油状物（０．１７ｇ、５４％）を得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 8.33 (d, 1H), 6.36 (d, 1H), 5.45 (m, 1H), 4.41 (t, 2H), 4.04-3.99 (m, 2H), 3.70-3.65 (m, 2H), 3.53 (t, 2H), 3.36 (s, 3H), 2.08-2.05 (m, 4H), 1.94-1.91 (m, 2H)。
【０３１３】
６−（３−メトキシプロポキシ）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−アミンの調製
【０３１４】
【化８０】
0005675614.tif 000088
【０３１５】
２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）−５−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−アミンに関して記載したように調製して、標記化合物を油状物（０．１３５ｇ、９０％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 6.96 (d, 1H), 6.18 (d, 1H), 5.22 (m, 1H), 4.21 (t, 2H), 4.00-3.96 (m, 2H), 3.65-3.59 (m, 2H), 3.55-3.51 (m, 2H), 3.39 (br s, 2H), 3.33 (s, 3H), 2.11-1.99 (m, 4H), 1.84-1.79 (m, 2H)。
【０３１６】
実施例３７
４−（６−（３−メトキシプロポキシ）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−イルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル
【０３１７】
【化８１】
0005675614.tif 000089
【０３１８】
４−（６−クロロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−イルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチルに関して記載したように調製して、標記化合物をオフホワイトの固体（０．０５３ｇ、２５％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 8.91 (d, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.04 (br s, 1H), 6.42 (d, 1H), 5.32-5.27 (m, 1H), 4.32-4.29 (t, 2H), 4.04-3.99 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.65-3.59 (m, 2H), 3.55 (t, 2H), 3.37 (s, 3H), 3.15 (s, 3H), 2.19-2.15 (m, 2H), 2.08-2.02 (m, 2H), 1.88-1.78 (m, 2H)。MS (ESI+): 489 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間４．４０分（ＨＰＬＣ純度９９％）。
【０３１９】
実施例３８
４−（６−（３−メトキシプロポキシ）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−イルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸
【０３２０】
【化８２】
0005675614.tif 000090
【０３２１】
ＮａＯＨ水溶液（２M、０．１７５mL）を、４−（６−（３−メトキシプロポキシ）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−イルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（０．０３４ｇ、０．０７mmol）の懸濁液中に加え、反応混合物を周囲温度で１８時間撹拌した。溶液を、１０％ ＫＨＳＯ４水溶液を使用してｐＨ２に調整し、得られた懸濁液を濾過した。固体を水、ジエチルエーテルで洗浄し、そして真空下、Ｐ２Ｏ５で乾燥させて、オフホワイトの固体（０．０２４ｇ、７３％）を得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃) 13.0 (br s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.48 (d, 1H), 8.32 (br s, 1H), 6.49 (d, 1H), 5.25-5.19 (m, 1H), 4.32-4.29 (m, 2H), 3.84-3.79 (m, 2H), 3.57-3.46 (m, 4H), 3.29 (s, 3H), 3.11 (s, 3H), 2.09-1.96 (m, 4H), 1.74-1.66 (m, 2H)。MS (ESI+): 475 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間３．６６分（ＨＰＬＣ純度９９％）。
【０３２２】
実施例３９
４−（６−（２−メトキシエトキシ）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−イルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸
【０３２３】
【化８３】
0005675614.tif 000091
【０３２４】
最初の工程において２−メトキシエタノールを３−メトキシプロパン−１−オールの代わりに使用した以外は、４−（６−（３−メトキシプロポキシ）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−イルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸に関して記載したように調製した。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃) 13.5 (br s, 1H), 8.50 (d, 1H), 8.32 (br s, 1H), 6.51 (d, 1H), 5.24-5.19 (m, 1H), 4.38-4.36 (m, 2H), 3.84-3.79 (m, 2H), 3.71-3.69 (m, 2H), 3.57-3.51 (m, 2H), 3.34 (s, 3H), 3.11 (s, 3H), 2.08-2.05 (m, 2H), 1.74-1.66 (m, 2H)。MS (ESI+): 461 (M+H)。 HPLC (10cm_ESI_slow_formic): 保持時間４．６１分（ＨＰＬＣ純度９１．５％）。
【０３２５】
実施例４０
４−［４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）−フェニルアミノ］−５，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［４’，３’：４，５］チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸tert−ブチルエステル
【０３２６】
【化８４】
0005675614.tif 000092
【０３２７】
１，４−ジオキサン（２mL）中の４−クロロ−５，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［４’，３’：４，５］チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸tert−ブチルエステル（WO 2007/109279に従って調製、０．１４１ｇ、０．４３mmol）、４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）アニリン（０．０９２ｇ、０．４４mmol）及びパラ−トルエンスルホン酸（０．０８ｇ、０．０４mmol）の溶液を、窒素でパージし、次に１２０℃で５時間加熱した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、１０％ Ｋ２ＣＯ３水溶液及びブラインで洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過し、そして真空下で濃縮した。残留物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（１００％イソ−ヘキサン→６６％イソ−ヘキサン／ＥｔＯＡｃ→１００％ ＥｔＯＡｃ）により精製し、続いてＭｅＯＨで粉砕して、標記化合物を白色の固体（０．０４２ｇ、２０％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃) 8.74-8.71 (m, 1H), 8.54 (s, 1H), 7.76 (br s, 1H), 6.78-6.69 (m, 2H), 4.72 (br s, 2H), 4.54 (m, 1H), 4.07-4.02 (m, 2H), 3.87-3.84 (m, 2H), 3.60-3.54 (m, 2H), 3.18 (m, 2H), 2.18-2.15 (m, 2H), 1.82-1.77 (m, 2H), 1.52 (s, 9H)。MS (ESI+): 501 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_slow_formic): 保持時間４．４２分（ＨＰＬＣ純度９９％）。
【０３２８】
実施例４１
［４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）−フェニル］−（５，６，７，８−テトラヒドロ−ピリド［４’，３’：４，５］チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−アミンの調製
【０３２９】
【化８５】
0005675614.tif 000093
【０３３０】
トリフルオロ酢酸（０．５０mL）を、ＤＣＭ（１mL）中の４−［４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）−フェニルアミノ］−５，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［４’，３’：４，５］チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸tert−ブチルエステル（０．０３１ｇ、０．０６mmol）の溶液中に加え、反応混合物を周囲温度で２時間撹拌した。反応混合物をＤＣＭで希釈し、２M ＮａＯＨで洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過し、そして真空下で濃縮した。残留物をヘキサンで洗浄して、標記化合物を白色の固体（０．０１６ｇ、６５％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CHCl3; 25℃) 8.78-8.74 (m, 1H), 8.53 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 6.79-6.68 (m, 2H), 4.57-4.50 (m, 1H), 4.14-4.13 (m, 2H), 4.07-4.02 (m, 2H), 3.60-3.54 (m, 2H), 3.33-3.30 (m, 2H), 3.14-3.11 (m, 2H), 2.19-2.14 (m, 2H), 1.83-1.74 (m, 2H), 1.59 (br s, 1H)。MS (ESI+): 401 (M+H)。HPLC (10cm_ESCI_bicarb): 保持時間３．５２分（ＨＰＬＣ純度９９％）。
【０３３１】
実施例４２
２−ジメチルアミノ−１−｛４−［４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）−フェニルアミノ］−５，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［４’，３’：４，５］チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル｝−エタノンの調製
【０３３２】
【化８６】
0005675614.tif 000094
【０３３３】
ＨＡＴＵ（０．２８５ｇ、０．７５mmol）を、ＤＭＦ（１．０mL）中のHuenig塩基（０．１３mL、０．７５mmol）及びＮ，Ｎ−ジメチルグリシン（０．０７７ｇ、０．７５mmol）の撹拌した溶液中に加え、混合物を周囲温度で２０分間撹拌した。［４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）−フェニル］−（５，６，７，８−テトラヒドロ−ピリド［４’，３’：４，５］チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−アミン（０．１０ｇ、０．２５mmol）を加え、混合物を１８時間撹拌した。水（５mL）を加え、混合物を２０分間撹拌した。沈殿した固体を濾過により回収し、水（１０mL）、ジエチルエーテル（１０mL）で洗浄し、そして真空下で乾燥させて、無色の固体（０．０４９ｇ、４０％）を得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 125℃): δ 8.50 (s, 1H), 8.39 (t, 1H), 7.82 (bs, 1H), 7.09 (dd, 1H), 6.84 (dt, 1H), 4.89 (s, 2H), 4.80-4.70 (m, 1H), 4.30 (s, 2H), 3.99-3.90 (m, 2H), 3.89-3.84 (m, 2H), 3.60-3.50 (m, 2H), 3.35-3.30 (2H, m), 2.97 (s, 6H), 2.15-2.05 (m, 2H), 1.75-1.70 (m, 2H)。MS (ESI+): 486 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間２．１５分（ＨＰＬＣ純度９８％）。
【０３３４】
実施例４３
［４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）−フェニル］−（５，７，−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３’，４’：４，５］チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−アミンの調製
【０３３５】
【化８７】
0005675614.tif 000095
【０３３６】
１，４−ジオキサン（２mL）中の４−クロロ−５，７−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３’，４’：４，５］チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ベンジルエステル（４−クロロ−５，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［４’，３’：４，５］チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸tert−ブチルエステル、WO 2007/109279と類似の方法で調製、０．１３５ｇ、０．３９mmol）、４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）アニリン（０．０９０ｇ、０．３９mmol）及びパラ−トルエンスルホン酸（０．０８ｇ、０．０４mmol）の溶液を窒素でパージし、１２０℃で２１時間加熱した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、１０％ Ｋ２ＣＯ３水溶液及びブラインで洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過し、そして真空下で濃縮した。残留物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（１００％イソ−ヘキサン→１００％ ＤＣＭ→３％ ＭｅＯＨ／ＤＣＭ→２００：１０：１  ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ）により精製して、標記化合物を白色の固体（０．０１５ｇ、１０％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CHCl3; 25℃) 8.76-8.72 (m, 1H), 8.55 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 6.79-6.87 (m, 2H), 4.56-4.49 (m, 3H), 4.40-4.38 (m, 2H), 4.08-4.03 (m, 2H), 3.59-3.53 (m, 2H), 2.18-2.15 (m, 2H), 1.84 (br s, 1H), 1.87-1.78 (m, 2H)。MS (ESI+): 387 (M+H)。 HPLC (10cm_ESCI_bicarb): 保持時間３．１３分（ＨＰＬＣ純度９８．４％）。
【０３３７】
【化８８】
0005675614.tif 000096
【０３３８】
４−（５−フルオロ−２−ニトロフェノキシ）ピペリジン−１−カルボン酸tert−ブチルの調製
【０３３９】
【化８９】
0005675614.tif 000097
【０３４０】
ＤＣＭ（１０mL）中のアゾジカルボン酸ジ−tert−ブチル（５．２７ｇ、２３．０mmol）を、無水ＤＣＭ（４０mL）中の５−フルオロ−２−ニトロフェノール（１０ｇ、６３．７mmol）、４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボン酸tert−ブチル（４．２２ｇ、２１．０mmol）及びトリフェニルホスフィン（６．０ｇ、２３．０mmol）の溶液中に０℃で加えた。溶液を周囲温度に一晩温め、真空下で濃縮し、そして粗生成物をｎ−ペンタン／ジエチルエーテル（×２）で粉砕してトリフェニルホスフィンオキシド副生成物を除去した。試料を、乾燥フラッシュクロマトグラフィー（１：１０→１：１  ＥｔＯＡｃ／イソ−ヘキサン）により精製して、黄色の油状物（２．６ｇ、４０％）を得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 7.93 (1H, dd), 6.78-6.71 (2H, m), 4.67-4.63 (1H, m), 3.59-3.52 (4H, m), 1.92-1.87 (4H, m), 1.47 (s, 9H)。
【０３４１】
４−（２−アミノ−５−フルオロフェノキシ）ピペリジン−１−カルボン酸tert−ブチルの調製
【０３４２】
【化９０】
0005675614.tif 000098
【０３４３】
ギ酸アンモニウム（１．２ｇ、１９．１mmol）を、ＭｅＯＨ（３０mL）中の４−（５−フルオロ−２−ニトロフェノキシ）ピペリジン−１−カルボン酸tert−ブチル（２．０ｇ、５．８mmol）及びパラジウム担持炭（５％、０．４ｇ）の懸濁液中に周囲温度で加えた。溶液を０．５時間撹拌し、セライトを通して濾過し、そしてＭｅＯＨで洗浄した。濾液を真空下で濃縮し、ジエチルエーテルから粉砕してギ酸アンモニウム副生成物を除去した。試料を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（１：１０→１：１  ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ）により精製して、無色の油状物を得、これをジエチルエーテル／石油エーテル（４０〜６０℃）から結晶化して無色の固体（１．６ｇ、８７％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 6.62-6.55 (m, 3H), 4.43-4.39 (m, 1H), 3.82-3.75 (m, 2H), 3.34-3.29 (m, 2H), 1.97-1.93 (m, 2H), 1.79-1.75 (m, 2H), 1.47 (s, 9H)。
【０３４４】
実施例４４
４−（２−（１−（tert−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イルオキシ）−４−フルオロフェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチルの調製
【０３４５】
【化９１】
0005675614.tif 000099
【０３４６】
４−（２−アミノ−５−フルオロフェノキシ）ピペリジン−１−カルボン酸tert−ブチル（０．８６５ｇ、２．８mmol）、４−クロロ−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（０．６７５ｇ、２．８mmol）及びパラ−トルエンスルホン酸（０．０２６ｇ、０．１４mmol）を、無水１，４−ジオキサン（８mL）中で９０℃にて１．５時間加熱した。溶液を周囲温度に冷却し、水（２mL）で希釈し、そしてｐＨ１０に調整した（４：１  水／水酸化アンモニウム溶液）。沈殿物を回収し、水及びジエチルエーテルで洗浄して、標記化合物を黄色の固体（０．９５ｇ、６５％）として得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.58 (s, 1H), 8.50 (bs, 1H), 8.37 (dd, 1H), 7.21 (dd, 1H), 6.89 (dt, 1H), 4.75-4.72 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.72-3.67 (m, 2H), 3.15-3.09 (m, 5H), 2.10-1.89 (m, 2H), 1.55-1.49 (m, 2H), 1.43 (s, 9H)。
【０３４７】
実施例４５
４−（４−フルオロ−２−（ピペリジン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル
【０３４８】
【化９２】
0005675614.tif 000100
【０３４９】
ＤＣＭ（４mL）中の４−（２−（１−（tert−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イルオキシ）−４−フルオロフェニル−アミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸（０．８ｇ、１．５mmol）の懸濁液に、トリフルオロ酢酸（４．０mL）を０℃で加え、混合物を４時間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、残留物をＤＣＭに再懸濁し、そして溶液を、２N炭酸ナトリウム溶液でｐＨ９に調整した。混合物をＰＴＦＥ分離フリットを通過させ、濾液を真空下で濃縮して、ベージュ色の固体（０．７２ｇ、９６％）を得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.62 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.49 (bs, 2H), 8.29 (dd, 1H), 7.23 (dd, 1H), 6.90 (dt, 1H), 4.82-4.78 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.30-3.20 (m, 2H), 3.12 (s, 3H), 3.10-3.00 (m, 2H), 2.20-2.10 (m, 2H), 1.90-1.75 (m, 2H)。MS (ESI+): 417 (M+H)。HPLC (10cm_esci_bicarb): 保持時間３．６８分（ＨＰＬＣ純度９３％）。
【０３５０】
実施例４６
４−（４−フルオロ−２−（ピペリジン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸
【０３５１】
【化９３】
0005675614.tif 000101
【０３５２】
水（１．０mL）中の水酸化リチウム一水和物（０．０５ｇ、１．２mmol）を、ＴＨＦ（３mL）中の４−（４−フルオロ−２−（ピペリジン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（０．１０ｇ、０．２mmol）の撹拌した懸濁液中に加え、反応物を周囲温度で一晩撹拌した。溶液を氷浴中で冷却し、２N塩酸を、溶液がｐＨ５に達するまで加えた。沈殿物を回収し、水で洗浄し、そしてＰ２Ｏ５で乾燥させて、無色の固体（０．０５６ｇ、５８％）を得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.72 (dd, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.39 (bs, 1H), 7.24 (dd, 1H), 6.89 (dt, 1H), 4.85- 4.81 (m, 1H), 3.60-3.30 (m, 2H), 3.19 (s, 3H), 3.08 (t, 2H), 2.29- 2.27 (m, 2H), 2.12-2.04 (m, 2H)。MS (ESI+): 404 (M+H)。HPLC (10cm_esci_bicarb): 保持時間２．４０分（ＨＰＬＣ純度９８％）。
【０３５３】
実施例４７
４−（４−フルオロ−２−（ピペリジン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
【０３５４】
【化９４】
0005675614.tif 000102
【０３５５】
ＭｅＯＨ（６mL）中の７Ｎアンモニア中の４−（４−フルオロ−２−（ピペリジン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチル（０．１ｇ、０．２mmol）の懸濁液を、密閉管中で１２０℃にて１８時間加熱した。周囲温度に冷却した後、沈殿した固体を濾過により回収し、冷ＭｅＯＨで洗浄し、そして真空下で乾燥させて、ベージュ色の固体（０．０３５ｇ、３６％）を得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.56 (s, 1H), 8.53 (dd, 1H), 8.43 (bs, 1H), 7.91 (bs, 1H), 7.89 (bs, 1H), 7.20 (dd, 1H), 6.87 (dt, 1H), 4.85- 4.81 (m, 1H), 3.60-3.30 (m, 2H), 3.19 (s, 3H), 3.08 (t, 2H), 2.29- 2.27 (m, 2H), 2.12-2.04 (m, 2H)。MS (ESI+): 402 (M+H)。HPLC (10cm_esci_bicarb): 保持時間２．８１分（ＨＰＬＣ純度９４％）。
【０３５６】
実施例４８
４−（２−（１−（（１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）メチル）ピペリジン−４−イルオキシ）−４−フルオロフェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
【０３５７】
【化９５】
0005675614.tif 000103
【０３５８】
ＤＭＦ（２．０mL）中のメチル ４−（４−フルオロ−２−（ピペリジン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（０．０６ｇ、０．１５mmol）の懸濁液に、Huenig塩基（０．０６mL、０．３５mmol）及び３−（クロロメチル）−１，２，４−オキサジアゾール（０．０３５ｇ、０．３mmol）を加え、混合物を６０℃に１８時間温めた。周囲温度に冷却した後、水（２mL）を加え、そして混合物を０．５時間撹拌した。沈殿した固体を濾過により回収し、沸騰しているＭｅＣＮから粉砕した。固体を濾過により回収し、真空下で乾燥させて、ベージュ色の固体（０．０４６ｇ、６３％）を得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 9.58 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.48 (t, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.40 (bs, 2H), 7.18 (d, 1H), 6.86 (t, 1H), 4.58-4.53 (m, 1H), 3.75 (s, 2H), 2.98 (s, 3H), 2.87-2.80 (m, 2H), 2.42 (t, 2H), 2.12-2.05 (m, 2H), 1.75-1.69 (m, 2H)。MS (ESI+): 484 (M+H)。HPLC (10cm_esci_bicarb): 保持時間２．８７分（ＨＰＬＣ純度９５％）。
【０３５９】
実施例４９
４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボニトリル
【０３６０】
【化９６】
0005675614.tif 000104
【０３６１】
ＤＣＭ／ピリジン（２．５mL；４：１）中の４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（０．１ｇ、０．２５mmol）の撹拌した懸濁液に、トリフルオロ酢酸無水物（０．１３８mL、１．０mmol）を０℃で加え、混合物を４時間撹拌した。反応物を氷でクエンチし、飽和炭酸水素ナトリウム溶液でｐＨ７に調整した。混合物をＤＣＭ（１０mL）と水（１０mL）に分配した。水相をＤＣＭ（１０mL）で洗浄し、合わせた有機層を乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過し、そして真空下で濃縮した。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ→４９：１  ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）により精製し、標記化合物を、ＭｅＯＨから結晶化した後、淡黄色の固体（０．０６５ｇ、６８％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 8.73 (dd, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.13 (bs, 1H), 6.78-6.70 (m, 2H), 4.62-4.50 (m, 1H), 4.06 (dt, 2H), 3.56 (dt, 2H), 2.95 (s, 3H), 2.22-2.15 (d, 2H), 1.82-1.79 (m, 2H)。 MS (ESI+): 385 (M+H)。HPLC (10cm_esci_BICARB): 保持時間４．０１分（ＨＰＬＣ純度９９％）。
【０３６２】
実施例５０
Ｎ−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル）−５−メチル−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−アミン
【０３６３】
【化９７】
0005675614.tif 000105
【０３６４】
ＤＭＦ（１．０mL）中の４−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボニトリル（０．０３６ｇ、０．０９３mmol）の撹拌した溶液に、アジ化ナトリウム（０．０１２ｇ、０．１８mmol）及び塩化アンモニウム（０．０１ｇ、０．１８mmol）を加え、混合物を１２５℃で１．５時間加熱した。溶媒を真空下で濃縮し、残留物をトルエンで共蒸発させた。粗生成物をＤＣＭ中の１０％ ＭｅＯＨに溶解し、不溶性物質を濾過により除去した。残留物をＭｅＣＮから粉砕し、固体を回収し、そして真空下で乾燥させた。固体を逆相分取ＨＰＬＣにより精製し、凍結乾燥した後、生成物をベージュ色の固体として得た（０．０２１ｇ、５４％）。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.61 (dd, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.47 (bs, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.82-4.79 (m, 1H), 3.91 (dt, 2H), 3.50 (dt, 2H), 3.21 (s, 3H), 2.10 (d, 2H), 1.72-1.61 (m, 2H)。MS (ESI+): 428 (M+H)。HPLC (10cm_esci_BICARB): 保持時間２．８７分（ＨＰＬＣ純度９８％）。
【０３６５】
実施例５１
４−（４−カルバモイル−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸
【０３６６】
【化９８】
0005675614.tif 000106
【０３６７】
一般ルート２に記載のものと類似の方法で、４−（４−カルバモイル−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチルから調製した。収率（０．１１２ｇ、５７％）
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.82-8.79 (m, 2H), 8.70 (s, 1H), 8.47 (bs, 1H), 8.04 (bs, 1H), 7.68 (bs, 1H), 7.63 (dd, 1H), 7.41 (bs, 1H), 4.87-4.82 (m, 1H), 3.94 (dt, 2H), 3.53 (t, 2H), 3.17 (s, 3H), 2.17-2.11 (m, 2H), 1.73-1.68 (m, 2H)。MS (ESI+): 429 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_Formic): 保持時間２．５４分（ＨＰＬＣ純度９２％）。
【０３６８】
実施例５２
６−クロロ−Ｎ−（４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）フェニル）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−アミン
【０３６９】
【化９９】
0005675614.tif 000107
【０３７０】
４−フルオロ−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）アニリン（０．０５７ｇ、０．２７mmol）、４，６−ジクロロ−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン（０．０６ｇ、０．２７mmol、CA56844-14-5）及びパラ−トルエンスルホン酸（０．００５ｇ、０．０３mmol）を、無水１，４−ジオキサン（１．５mL）中で９０℃にて１８時間加熱した。溶液を周囲温度に冷却し、水（２mL）で希釈し、そしてｐＨ１０に調整した（４：１  水／水酸化アンモニウム溶液）。沈殿物を回収し、水及びジエチルエーテルで洗浄して、標記化合物を黄色の固体（０．０１２ｇ、１１％）として得た。
1H NMR (400 MHz; CDCl3; 25℃): δ 8.75-8.70 (m, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 6.75-6.70 (m, 2H), 4.57-4.48 (m, 1H), 4.09-4.01 (m, 2H), 3.59-3.50 (m, 2H), 2.71 (s, 3H), 2.19-2.10 (m, 2H), 1.83-1.78 (m, 2H)。MS (ESI+): 394 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_Formic): 保持時間４．５５分（ＨＰＬＣ純度９７％）。
【０３７１】
実施例５３
Ｎ−（３−（ジメチルアミノ）プロピル）−４−（４−フルオロ−２−イソ−プロポキシフェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
【０３７２】
【化１００】
0005675614.tif 000108
【０３７３】
一般ルート１に記載のものと類似の方法で、４−（４−フルオロ−２−イソ−プロポキシフェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸から調製した。収率（０．１２５ｇ、６５％）
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.65-8.53 (m, 3H), 8.45 (bs, 1H), 7.14 (dd, 1H), 6.87 (dt, 1H), 4.86-4.82 (m, 1H), 3.35-3.28 (2H, m), 2.96 (s, 3H), 2.32 (t, 2H), 2.18 (s, 6H), 1.75-1.68 (m, 2H), 1.36 (d, 6H)。MS (ESI+): 446 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_formic): 保持時間２．２９分（ＨＰＬＣ純度９６％）。
【０３７４】
【化１０１】
0005675614.tif 000109
【０３７５】
５−メチル−４−オキソ−３，４−ジヒドロチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−スルホニルクロリドの調製
【０３７６】
【化１０２】
0005675614.tif 000110
【０３７７】
５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン（２ｇ、１２mmol）を、内部温度を０℃未満に保持して、クロロスルホン酸（８．０mL、１２０mmol）に少量ずつ加えた。添加後、反応物を１０分間撹拌し、塩化チオニル（４．４mL、６０mmol）を滴下し、混合物を周囲温度で０．５時間撹拌し、次に還流下で２時間撹拌した。溶液を砕氷に注ぎ、沈殿した固体を濾過により回収し、氷水で洗浄し、真空下で乾燥させて、クリーム色の固体（１．１ｇ、３４％）を得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 12.40 (br s, 1H), 8.07 (s, 1H), 2.61 (s, 3H)。
【０３７８】
Ｎ−（３−（ジメチルアミノ）プロピル）−５−メチル−４−オキソ−３，４−ジヒドロチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−スルホンアミドの調製
【０３７９】
【化１０３】
0005675614.tif 000111
【０３８０】
ＤＣＭ（１０mL）中の５−メチル−４−オキソ−３，４−ジヒドロチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−スルホニルクロリド（１．０ｇ、１２mmol）の撹拌した懸濁液に、Huenig塩基（０．７９mL、４．５mmol）、続いてＮ１，Ｎ１−ジメチルプロパン−１，３−ジアミン（０．５２mL、４．２mmol）を０℃で加え、溶液を周囲温度で２時間撹拌した。懸濁液を、２N塩酸でｐＨ８に調整し、沈殿物を濾過により回収し、水、ジエチルエーテルで洗浄し、そして真空下で乾燥させて、生成物をオフホワイトの固体（１．１２ｇ、８９％）として得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 12.50 (bs, 1H), 8.32 (bs, 1H), 8.25 (s, 1H), 3.07-2.95 (m, 4H), 2.76 (s, 3H), 2.71 (s, 6H), 1.92-1.85 (m, 2H)。
【０３８１】
４−クロロ−Ｎ−（３−（ジメチルアミノ）プロピル）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−スルホンアミド塩酸塩の調製。
【０３８２】
【化１０４】
0005675614.tif 000112
【０３８３】
Ｎ−（３−（ジメチルアミノ）プロピル）−５−メチル−４−オキソ−３，４−ジヒドロチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−スルホンアミド（０．６ｇ、１．８mmol）に、オキシ塩化リン（５．０mL、３６mmol）を加え、懸濁液を１．５時間加熱還流した。反応物を周囲温度に冷却し、過剰量のオキシ塩化リンを真空下で除去した。残留物を、クロロホルムで数回共蒸発させた。真空下で乾燥させて、吸湿性でクリーム色の固体を得、これを更に精製することなしに使用した（０．６５ｇ、９２％）。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 9.07 (s, 1H), 8.70 (t, 1H), 3.15-3.05 (m, 4H), 2.90 (s, 3H), 2.76 (s, 6H), 1.93-1.87 (m, 2H)。
【０３８４】
実施例５４
Ｎ−（３−（ジメチルアミノ）プロピル）−４−（４−フルオロ−２−イソ−プロポキシフェニルアミノ）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−スルホンアミド
【０３８５】
【化１０５】
0005675614.tif 000113
【０３８６】
４−フルオロ−２−イソ−プロポキシアニリン（０．０４９ｇ、０．２８mmol）及び４−クロロ−Ｎ−（３−（ジメチルアミノ）プロピル）−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−スルホンアミド塩酸塩（０．１ｇ、０．２８mmol）を、無水１，４−ジオキサン（１．５mL）中で７０℃にて４時間加熱した。溶液を周囲温度に冷却し、水（２．０mL）で希釈し、そしてｐＨ９に調整した（４：１  水／水酸化アンモニウム溶液）。沈殿物を回収し、水及びジエチルエーテルで洗浄して、標記化合物をベージュ色の固体（０．０３９ｇ、２８％）として得た。
1H NMR (400 MHz; d6-DMSO; 25℃): δ 8.60 (s, 1H), 8.55-8.50 (m, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.30 (bs, 1H), 7.13 (dd, 1H), 6.87 (dt, 1H), 4.85-4.80 (m, 1H), 3.00 (s, 3H), 2.99-2.93 (m, 2H), 2.25 (t, 2H), 2.10 (s, 6H), 1.59-1.55 (m, 2H), 1.35 (d, 6H)。MS (ESI+): 482 (M+H)。HPLC (10cm_ESI_Formic): 保持時間２．４１分（ＨＰＬＣ純度９８％）。
【０３８７】
前記合成手順により、以下の実施例化合物を調製した：
【０３８８】
【表１】
0005675614.tif 000114
0005675614.tif 000115
0005675614.tif 000116
0005675614.tif 000117
【０３８９】
実施例２．  キナーゼ蛍光分極アッセイ
アッセイの原理：Ｍｎｋ１、Ｍｎｋ２ａ及び他のキナーゼに対する化合物の阻害効力を、間接的（競合）蛍光分極として当業者に公知の形式に基づくアッセイで評価した。アッセイ検出システムは、リン特異的抗体に結合した小型フルオロフォア標識リン−ペプチド（リガンドと名付ける）を含む。キナーゼ反応により発生した産物は、抗体結合のためのリガンドと競合する。結合したリガンドが、より大きな分子体積であり、溶液中でより低い回転速度を招くことに基づき、それからの発光は、遊離リガンドからの発光よりも高度の分極を有する。
【０３９０】
特異的均一系キナーゼアッセイの説明
実施例２ａ．  Ｍｎｋ１及びＭｎｋ２ａのインビトロキナーゼアッセイ
酵素原として、ヒトＭｎｋ１及びヒトＭｎｋ２ａをE. coliにおいてＧＳＴ融合タンパク質として発現させ、グルタチオンアフィニティークロマトグラフィーにより＞８０％均一になるまで精製し、予備活性化ＥＲＫ２でインビトロで活性化させた。簡潔には、それぞれフォワード／リバースプライマー対
【０３９１】
【表２】
0005675614.tif 000118
（下線部の制限部位を利用）を使用してｃＤＮＡからヒトＭｎｋ１及びＭｎｋ２ａのオープンリーディングフレームを増幅させ、ベクターｐＧＥＸ−４Ｔ１（Amersham, Sweden、カタログ番号27-4580-01）のＢａｍＨＩ及びＳａｌＩ部位にクローニングした。これらの構築物は、Ｎ−末端グルタチオンＳ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）タグを有する融合タンパク質（ＧＳＴ−Ｍｎｋ１又はＧＳＴ−Ｍｎｋ２ａと呼ぶ）として原核生物にＭｎｋ１又はＭｎｋ２ａを発現させる。以下の発現及び精製手順は、ＧＳＴ−Ｍｎｋ１及びＧＳＴ−Ｍｎｋ２ａ（これらは、二つのアイソフォームを区別しない場合に、一般にＧＳＴ−Ｍｎｋと呼ぶ）と同一である。ＧＳＴ−Ｍｎｋの発現は、E. coli BL21（Merck Biosciences, Germany、カタログ番号69449）で行った。１００μg/mlアンピシリン（Sigma, Germany、カタログ番号A9518）を補充したLB-Bouillon（Merck, Germany、カタログ番号1.10285）中で３７℃で細胞を成長させた。培養物が０．８のＡ６００に対応する密度に達したときに、等体積の氷冷ＬＢ／アンピシリンを添加し、培養物を２５℃にし、１mMイソプロピルチオガラクトシド（ＩＰＴＧ、Roth, Germany、カタログ番号2316.4）で４時間誘導した。遠心分離により回収した細胞を、細胞ペレット湿重量１ｇあたり１０mlの溶解用緩衝液（５０mMトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩酸塩（Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ、Sigma, Germany、カタログ番号T5941）（ｐＨ７．５）、３００mM塩化ナトリウム（ＮａＣｌ、Sigma, Germany、カタログ番号S7653）、５％（w/v）グリセロール（Sigma、Germany、カタログ番号G5516）、３mM ＤＴＴジチオスレイトール（ＤＴＴ、Sigma, Germany、カタログ番号D9779）に再懸濁した。超音波装置を用いた細胞破砕及び３８０００ｇで４５分間４℃で遠心分離することによるその後の透明化により、溶解液を調製した。
【０３９２】
溶解緩衝液で平衡化したGSTPrep FF16/10カラム(Amersham, Sweden、カタログ番号17-5234-01）に溶解液を適用した。３カラム容（ＣＶ）の溶解緩衝液で未結合の物質を除去した。溶出は、２ＣＶの溶出緩衝液（５０mM Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ、ｐＨ７．５、３００mM ＮａＣｌ、５％(w/v)グリセロール、２０mMグルタチオン（Sigma, Germany、カタログ番号G4251））を用いて行った。ピーク画分をプールし、ＰＤ１０脱塩カラム（Amersham, Sweden、カタログ番号17-0851-01）を用いたゲルろ過により、タンパク質を貯蔵用緩衝液（５０mM Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ、ｐＨ７．５、２００mM ＮａＣｌ、０．１mMエチレングリコール-ビス（２−アミノエチルエーテル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸（ＥＧＴＡ、Aldrich, Germany、カタログ番号23,453-2）、１mM ＤＴＴ、１０％(w/v)グリセロール、０．５Ｍスクロース（Sigma, Germany、カタログ番号S0389）に移行させた。一定分量を液体窒素中で急速凍結させ、−８０℃で貯蔵した。
【０３９３】
Ｍｎｋ１及びＭｎｋ２ａの活性化は、２０mM Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−Ｎ’−（２−エタンスルホン酸）（ＨＥＰＥＳ、Fluka, Germany、カタログ番号54459）／水酸化カリウム（ＫＯＨ、Roth, Germany、カタログ番号6751.1）（ｐＨ７．４）、１０mM塩化マグネシウム（ＭｇＣｌ２、Sigma, Germany、カタログ番号M2670）、０．２５mM ＤＴＴ、０．０５％(w/v)ポリオキシエチレン２０ステアリルエーテル（Brij 78、Sigma, Germany、カタログ番号P4019）（ＨＭＤＢ緩衝液）を含む緩衝液への１５０nM予備活性化ＮＨｉｓ−ＥＲＫ２（調製のためのＥＲＫ２アッセイ参照）及び５０μMアデノシン三リン酸（ＡＴＰ、Sigma、カタログ番号A2699）と共に３０℃で４５分間インキュベーションすることにより、２．５μM濃度の精製ＧＳＴ−Ｍｎｋ１又はＧＳＴ−Ｍｎｋ２ａのいずれかで行った。インキュベーション後に、調製物を１回用試料に分割し、液体窒素中で瞬間凍結させ、−８０℃で保存し、下記に詳述するようにＭｎｋ１又はＭｎｋ２ａキナーゼアッセイに利用した。Ｍｎｋ活性アッセイを妨害しないように、活性化キナーゼの存在を試験した。
【０３９４】
基質：真核生物翻訳開始因子４Ｅ（ｅＩＦ４Ｅ）のセリン２０９周辺のアミノ酸配列から得られた、配列
配列番号：５  ＴＡＴＫＳＧＳＴＴＫＮＲ
を有するカルボキシ末端アミド化１２残基ペプチドを合成し、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）（Thermo, Germany）により＞９５％まで精製した。Ｍｎｋキナーゼによってリン酸化されたセリン残基に下線を付す。
【０３９５】
リガンド：アミド化カルボキシ末端を含み、アミノ末端が下記オキサジン由来フルオロフォアと結合しているペプチドＴＡＴＫＳＧ−ｐＳ−ＴＴＫＮＲを合成し、リガンドとして使用した。
【０３９６】
【化１０６】
0005675614.tif 000119
【０３９７】
抗体：標準的なプロトコールにより、SPF New Zealand Whiteウサギに、スカシ貝ヘモシアニン（ＫＬＨ）と結合したペプチドＮＨ２−ＣＴＡＴＫＳＧ−ｐＳ−ＴＴＫＮＲ−ＣＯＮＨ２を免疫処置した。当技術において公知の技法により、追加免疫した動物の血清から免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）画分を精製した。簡潔には、血清をプロテインＡアフィニティークロマトグラフィーに供した。溶出した物質を冷５０％飽和硫酸アンモニウムで沈殿させ、ペレットを溶解させ、脱塩した。結果として得られた物質は、さらなる抗原特異的精製を行わずに下記アッセイにおける使用に適した。
【０３９８】
アッセイの設定：Ｍｎｋ１及びＭｎｋ２ａのキナーゼ活性阻害を、それぞれ予備活性化ＧＳＴ−Ｍｎｋ１又はＧＳＴ−Ｍｎｋ２ａを使用して同じアッセイ系で評価した。キナーゼ反応物は、３０μM基質ペプチド、２０μM ＡＴＰ、６０nMリガンド及び２５nM予備活性化Ｍｎｋ１又は２．５ｎＭ予備活性化Ｍｎｋ２ａのいずれかの一方を含有する。反応緩衝液条件は、１６mM ＨＥＰＥＳ／ＫＯＨ、ｐＨ７．４、８mM ＭｇＣｌ２、０．４mM ＤＴＴ、０．０８％(w/v)ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ、Sigma, Germany、カタログ番号A3059）、０．００８％(w/v)Pluronic F127（Sigma, Germany、カタログ番号P2443）、３％(v/v) ＤＭＳＯ（Applichem, Germany、カタログ番号A3006）である。キナーゼ反応は、３０℃で４０分間である。キナーゼ反応は、０．６７反応体積の２０mM ＨＥＰＥＳ／ＫＯＨ（ｐＨ７．４）、５０mMエチレンジアミン四酢酸二ナトリウム塩（ＥＤＴＡ、Sigma, Germany、カタログ番号E5134）、０．５mM ＤＴＴ、０．０５％(w/v)ポリオキシエチレン−ソルビタンモノラウレート（Tween 20、Sigma, Germany、カタログ番号P7949）中の１μM抗体の添加により終止する。１時間の室温での平衡化後に、試料を蛍光分極測定に供する。DLRP650ダイクロイックミラー（Omega Opticals, Brattleboro, VT, USA、カタログ番号XF2035）、励起側に630AF50バンドパスフィルター（Omega Opticals, Brattleboro, VT, USA、カタログ番号XF1069）及び発光側に695AF55バンドパスフィルター（Omega Opticals, Brattleboro, VT, USA、カタログ番号XF3076）を備えるAnalyst ADマルチモードリーダ（Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA）で、蛍光分極の読み取り値を発生させた。
【０３９９】
Ｍｎｋタンパク質の活性は、また、他のインビトロキナーゼアッセイ形式によりアッセイすることができる。例えば、適切なキナーゼアッセイは、Knauf et al., Mol Cell Biol. 2001 Aug;21(16):5500-11又はScheper et al., Mol Cell Biol. 2001 Feb;21(3):743-54における文献に記載されている。一般に、Ｍｎｋキナーゼアッセイは、下にさらに記載するような改変その他を含むか又は含まないことがある、タンパク質又はペプチドなどのＭｎｋ基質などが、インビトロで酵素活性を有するＭｎｋタンパク質によってリン酸化されるように行うことができる。次に、候補薬剤の活性は、それがＭｎｋタンパク質の酵素活性を減少させる能力により決定することができる。キナーゼ活性は、リン酸化による基質の化学、物理又は免疫学的性質の変化により検出することができる。
【０４００】
一例では、キナーゼ基質は、基質のリン酸化状態の分析に適するシグナルを発生させるために、その結合又は検出を容易にするように設計されたか又は内在する特性を有しうる。これらの特性は、非限定的にビオチン分子又はその誘導体、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ部分、６個以上の連続ヒスチジン残基の部分、アミノ酸配列又はエピトープのタグとして機能するハプテン、蛍光色素、酵素又は酵素フラグメントでありうる。キナーゼ基質は、立体障害を避けるために分子スペーサーアームを有するこれら又は他の特徴に結び付いていることがある。
【０４０１】
別の例では、キナーゼ基質をフルオロフォアでラベルすることができる。溶液中のラベル化基質への試薬の結合は、文献に記載されているように蛍光分極技法に従うことができる。この実施例の変形では、蛍光トレーサー分子は、間接的蛍光分極として当業者に公知の技法によってキナーゼ活性を検出するための、分析物についての基質と競合しうる。
【０４０２】
なお別の例では、キナーゼ反応に放射性γ−ＡＴＰを使用し、被験基質への放射性リン酸の取込みに被験薬剤が及ぼす効果を、対照条件と比較して決定する。
【０４０３】
本発明の特定の好ましい化合物は、Ｍｎｋ１及び／又はＭｎｋ２キナーゼ活性の阻害について実施例２ａに記載するような、インビトロ生物学的スクリーニングアッセイにおいて、１マイクロモル濃度未満のＩＣ５０値を有することが示された。以下の表は、例示的な化合物についての試験結果を含む。
【０４０４】
【表３】
0005675614.tif 000120
【配列表】
0005675614000001.app