(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
単一の光ビームを発生する光源と、
浮遊媒体中の粒子を収容するチャンバと、
高い傾斜力を用いることによって光ビーム光子に前記粒子を捕獲させるように前記粒子上に光ビームを集束する高開口数トラップ対物レンズと、
前記粒子によって偏向された光子と前記粒子によって偏向されなかった光子の両方を、捕獲された前記粒子の上半球側で捕獲するように配置された単一の収集レンズであって、前記チャンバ中に前記粒子を浮遊させるための浮遊媒体の屈折率以上の開口数を有する収集レンズと、
前記収集レンズの後焦点面またはその近くに配置された、あるいは後焦点面の光学等価物に配置された光検知デバイスと
を備える、粒子に作用する光学力を測定するために光運動量変化を検知するためのシステム。
【請求項２】
前記収集レンズが１．３２から１．４０の間の開口数を有する、請求項１に記載のシステム。
【請求項３】
前記光検知デバイスが、位置検知デバイスであって、前記位置検知デバイスの上に投影された光分布の重心のｘ座標およびｙ座標に比例する２つの電気信号を生成するデュオラテラル検出器型の位置検知デバイスである、請求項２に記載のシステム。
【請求項４】
前記収集レンズが、アッベの正弦条件を満たすように設計されている、請求項３に記載のシステム。
【請求項５】
前記チャンバが出口カバーを含み、前記システムが、前記光検知デバイスまたはその近くに配置されて前記出口カバーでの反射損失を補償する透過マスクをさらに備える、請求項４に記載のシステム。
【請求項６】
前記後焦点面またはその近くの前記光分布の光学等価物を前記光検知デバイスの上に投影するリレーレンズをさらに備える、請求項５に記載のシステム。
【請求項７】
前記高開口数トラップ対物レンズが入口瞳を有し、前記システムがさらに、前記光源と前記入口瞳の間に配置された１つまたは複数のレンズを備え、前記１つまたは複数のレンズが、前記光ビームの直径を変更して前記高開口数トラップ対物レンズの入口瞳を満たすように、またはわずかにあふれさせるように構成される、請求項６に記載のシステム。
【請求項８】
前記粒子と前記収集レンズの前レンズとの間に特定の作動距離を維持するように配置されたスペーサをさらに備える、請求項７に記載のシステム。
【請求項９】
粒子に作用する光学力を測定するために光運動量変化を検知する方法であって、
チャンバ内の浮遊媒体中に前記粒子を浮遊させることと、
高開口数トラップ対物レンズを使用するとともに高い傾斜力を用いることによって、前記粒子上に単一の光ビームを集束して光ビーム光子に前記粒子を捕獲させることと、
前記粒子によって偏向された光子と前記粒子によって偏向されていない光子とを、前記浮遊媒体の屈折率以上の開口数を有する単一の収集レンズ系によって前記粒子の上半球側で捕獲することと、
前記捕獲された光子を、前記収集レンズの後焦点面またはその近くに置かれた、あるいは後焦点面の光学等価物に置かれた光検知デバイスに向けることと
を含む方法。
【請求項１０】
前記光検知デバイスの上に投影された光分布の重心のｘ座標およびｙ座標に比例する電気信号を生成することをさらに含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記チャンバが入口カバーと出口カバーとを備え、前記粒子を前記入口カバーより前記出口カバーに近いところに浮遊させる、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記後焦点面の光学的等価物を、前記収集レンズと前記光検知デバイスとの間に配置されたリレーレンズによって生成させる、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記チャンバが出口カバーを備え、前記方法が、前記後焦点面またはその近くに配置された、あるいは後焦点面の等価物に配置された非均一な透過マスクを使用することによって、前記出口カバーでの反射損失を補償することをさらに含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記高開口数トラップ対物レンズが入口瞳を有し、前記方法が、前記入口瞳に向けられる光ビームの直径を修正することによって、前記高開口数トラップ対物レンズの入口瞳を満たすか、またはわずかにあふれさせることをさらに含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記捕獲された光子を位置検知デバイスまたはカメラに向けて、前記収集レンズの後焦点面またはその近くの光学像に対応する光学像を前記位置検知デバイスまたはカメラのところに作り出す、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
チャンバの入口カバーと出口カバーの間の浮遊媒体中に浮遊する粒子を単一の光ビームを用いて捕獲するように構成されている光学顕微鏡の光学列中に設置される、請求項１から請求項６のいずれか一項に記載のシステムの使用であって、
前記顕微鏡のチャンバの前記出口カバーまたはその近くに設置される前記システムの単一の収集レンズと、
前記光検知デバイスの上に投影された光分布の重心のｘ座標とｙ座標から導出される前記粒子に作用する光学力の測定値を生成することができる前記光検知デバイスと
を備えるシステムの使用。
【請求項１７】
前記収集レンズが油浸レンズまたは水浸レンズである、請求項１６に記載のシステムの使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、顕微鏡の試料に作用する光学力を測定するシステムおよび方法に関し、より具体的には、光ピンセットアセンブリに捕獲された粒子に作用する分力を決定するシステムおよび方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
捕獲された顕微鏡の試料に作用する光学力を測定するには、本質的に「間接」および「直接」という２つの従来技術の手法がある。間接方法では一般に、単一ビームレーザを使用することが共通しており、これには、トラップ（調和ポテンシャル）および環境（低いレイノルズ数条件のもとで、均質な屈折率および粘性を有する流体）の複雑な数学モデルを使用することが、形が球形でなければならない試料に作用する力を決定するために必要になる。捕獲試料に対する力を間接的に測定する方法は、Ｓｖｏｂｏｄａ，Ｋ．＆Ｂｌｏｃｋ，Ｓ．Ｍ．の「Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｏｐｔｉｃａｌ  Ｆｏｒｃｅｓ」、Ａｎｎｕａｌ  Ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃｓ  ａｎｄ  Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  Ｖｏｌ．２３、２４７〜２８５頁（１９９４年）およびその中の参考文献、またＪ．Ｆｉｎｅｒ、Ｒ．Ｓｉｍｍｏｎｓ、Ｊ．ＳｐｕｄｉｃｈおよびＳ．Ｃｈｕの米国特許第５５１２７４５号（１９９６年）「Ｏｐｔｉｃａｌ  ｔｒａｐ  ｓｙｓｔｅｍ  ａｎｄ  ｍｅｔｈｏｄ」に開示されている。また、この測定方法の背後の理論はＧｉｔｔｅｓ、Ｆ．＆Ｓｃｈｍｉｄｔ、Ｃ．Ｆ．の「Ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ  ｍｏｄｅｌ  ｆｏｒ  ｂａｃｋ−ｆｏｃａｌ−ｐｌａｎｅ  ｄｉｓｐｌａｃｅｍｅｎｔ  ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ｏｐｔｉｃａｌ  ｔｗｅｅｚｅｒｓ」、Ｏｐｔｉｃｓ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  Ｖｏｌ．２３、７〜９頁（１９９８年）に、また光トラップの剛性定数を決定する較正手順はＫ．Ｂｅｒｇ−ＳφｒｅｎｓｅｎおよびＨ．Ｆｌｙｖｂｊｅｒｇの「Ｐｏｗｅｒ  ｓｐｅｃｔｒｕｍ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｆｏｒ  ｏｐｔｉｃａｌ  ｔｗｅｅｚｅｒｓ」、Ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｖｏｌ．７５、５９４〜６１２頁（２００４年）に開示されている。
【０００３】
「間接」単一ビームシステムには多くの欠点がある。例えば、その測定値は、実験ごとに変化する多くの実験変数に依存する（例えば、温度、試料と媒体の間の相対的屈折率、試料のサイズ、レーザ出力、対物レンズの開口数など）。実際に、これらのシステムは、使用されるごとに再較正する必要がある。これは、専用機器（ピエゾアクチュエータ）および人間の専門技術を必要とする複雑な手順であり、そのためこれらのシステムは、商業用途には非実用的なものになっている。「間接」単一ビーム方法に付随するいくつか他の問題もある。まず、非球形の試料に対する力を測定することが可能ではない。これらの試料ではミクロスフェア「ハンドル」を使用することが必要である。第２に、非ガウス分布のレーザビームを用いて測定することは、これらのビームが調和ポテンシャルを生成しないために、可能ではない。これにより、光選別に使用される周期的ポテンシャル、または回転を誘発するベッセルビームおよびラゲール−ガウスビームなどの興味のある特性を持つビームが除外される。第３に、非均質媒体中で測定をすることが可能ではなく、そのため、生体外で行われる実験の実施可能性が本質的に制限される。重要な一例は、生きている細胞内部の実験であり、これは、場所ごとにサイトゾルの光学特性が変化するので可能ではない。細胞は、単純化された形で再形成されなければならない。実際、細胞分野において光ピンセットを用いる実験の利点の一部は、この困難を克服できることにある。
【０００４】
捕獲試料に対する光学力を測定する従来技術の「直接」方法では、２つの後方励起レーザビームを必要とする。この方法は、米国特許第７，１３３，１３２号（Ｂｕｓｔａｍａｎｔｅ  他）、ならびに題名「Ｏｖｅｒｓｔｒｅｔｃｈｉｎｇ  Ｂ−ＤＮＡ：  Ｔｈｅ  Ｅｌａｓｔｉｃ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｏｆ  Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ  Ｄｏｕｂｌｅ−Ｓｔｒａｎｄｅｄ  ａｎｄ  Ｓｉｎｇｌｅ−Ｓｔｒａｎｄｅｄ  ＤＮＡ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ」、Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｖｏｌ．２７１、７９５〜７９９頁（１９９６年）、および「Ｏｐｔｉｃａｌ−Ｔｒａｐ  Ｆｏｒｃｅ  Ｔｒａｎｓｄｕｃｅｒ  Ｔｈａｔ  Ｏｐｅｒａｔｅｓ  ｂｙ  Ｄｉｒｅｃｔ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｌｉｇｈｔ  Ｍｏｍｅｎｔｕｍ」、Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、Ｖｏｌ．３６１、１３４〜１６２頁（２００３年）の２つの先行する論説に開示されている。この方法はまた、Grangeらの論説で題名「Ｏｐｔｉｃａｌ  ｔｗｅｅｚｅｒｓ  ｓｙｓｔｅｍ  ｍｅａｓｕｒｉｎｇ  ｔｈｅ  ｃｈａｎｇｅ  ｉｎ  ｌｉｇｈｔ  ｍｏｍｅｎｔｕｍ  ｆｌｕｘ」、Ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｖｏｌ．  ２３、Ｎｏ．  ６、２３０８〜２３１６頁（２００２年）、およびＳ．Ｓｍｉｔｈの博士論文「Ｓｔｒｅｔｃｈ  Ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎｓ  Ｏｂｓｅｒｖｅｄ  ｉｎ  Ｓｉｎｇｌｅ  Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  （ＤＮＡ  ｏｒ  Ｐｒｏｔｅｉｎ）  ｕｓｉｎｇ  Ｌａｓｅｒ  Ｔｗｅｅｚｅｒｓ」、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｔｗｅｎｔｅ、Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ  （１９９８年）にも記載されている。
【０００５】
捕獲試料に対する光学力を測定する従来技術の「直接」方法では、力を運動量変化により直接測定することによって測定する。これらの従来技術のトラップは、対になった特殊な光学機構（２つのレーザ、２つの顕微鏡、２つの顕微鏡対物レンズ、２つのＰＳＤ検出器など）を必要とする二重後方励起ビームに基づいており、そのため、市販の顕微鏡の光学列の中、および現在入手可能な光ピンセットシステムの中に組み込むことが実現不可能となる。
【０００６】
さらに、対になった光学構成要素を使用することで、これらのシステムは高価になり、また操作が困難になる。重要な点は、当業者の間での意見では、力を測定するための単一ビームトラップを「直接」方法を用いて使用することが不可能なことである。Ｂｕｓｔａｍａｎｔｅらは、上で論じた題名「Ｏｐｔｉｃａｌ−Ｔｒａｐ  Ｆｏｒｃｅ  Ｔｒａｎｓｄｕｃｅｒ  Ｔｈａｔ  Ｏｐｅｒａｔｅｓ  ｂｙ  Ｄｉｒｅｃｔ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｌｉｇｈｔ  Ｍｏｍｅｎｔｕｍ」の論説の１４０頁でそのように宣言している。Ｎｅｕｍａｎらは「Ｏｐｔｉｃａｌ  ｔｒａｐｐｉｎｇ  （ｒｅｖｉｅｗ  ａｒｔｉｃｌｅ）」、Ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、７５、２７８７〜２８０９頁（２００４年）の論説の２８０２頁で同じことを宣言している。Ｗｉｌｌｉａｍｓは、題名「Ｏｐｔｉｃａｌ  Ｔｗｅｅｚｅｒｓ：  Ｍｅａｓｕｒｉｎｇ  Ｐｉｃｏｎｅｗｔｏｎ  Ｆｏｒｃｅｓ」の論文の５頁で同じ見解を述べている。また、Ｇｒａｎｇｅらは題名「Ｏｐｔｉｃａｌ  ｔｗｅｅｚｅｒｓ  ｓｙｓｔｅｍ  ｍｅａｓｕｒｉｎｇ  ｔｈｅ  ｃｈａｎｇｅ  ｉｎ  ｌｉｇｈｔ  ｍｏｍｅｎｔｕｍ  ｆｌｕｘ」の２３０８頁の論説で同じことを述べており、Ｓ．Ｓｍｉｔｈは、自分の博士論文「Ｓｔｒｅｔｃｈ  Ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎｓ  Ｏｂｓｅｒｖｅｄ  ｉｎ  Ｓｉｎｇｌｅ  Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  （ＤＮＡ  ｏｒ  Ｐｒｏｔｅｉｎ）  ｕｓｉｎｇ  Ｌａｓｅｒ  Ｔｗｅｅｚｅｒｓ」の１７頁で同じ意見を述べている。
【０００７】
この意見の理由は、これらの当業者が、単一のビームトラップでは細い光のコーンが、その光のコーンが試料によって誘発された偏向にもかかわらず集光レンズによって（解析のために）捕獲されるべきである場合は、必要になると考えていることである。当業者は、高開口数レンズが代わりに使用される場合、最も外側の出て行く光線は、解析レンズによって集めることができないと考えている。その必要とされる細さの光のコーンは、反射光による散乱力が軸傾斜（捕獲）力に打ち勝つので、対象物を捕獲するのに不十分である。このジレンマを回避するために、実験の複雑さが高まることを代償として、後方励起レンズ設計を用いてトラップが作り出される。
【０００８】
捕獲試料に作用する光学力を測定するための、前に述べた問題を解決する簡略化されたシステムおよび方法が必要とされている。
【発明の概要】
【０００９】
本発明の一態様によれば、単一の光ビームを発生する光源と、浮遊媒体中の粒子を収容するチャンバと、高い傾斜力を用いることによって光ビーム光子に粒子を捕獲させるように粒子上に光ビームを集束するトラップ対物レンズと、粒子によって偏向された光子、および粒子によって偏向されなかった光子の両方を捕獲するように配置された単一の収集レンズ系と、収集レンズの後焦点面またはその近くに配置された、あるいは後焦点面の光学等価物に配置された光検知デバイスとを含むシステムが提供される。
【００１０】
本発明の別の態様によれば、単一の光ビームを発生する光源と、浮遊媒体中の粒子を収容するチャンバと、高い傾斜力を用いることによって光ビーム光子に粒子を捕獲させるように粒子上に光ビームを集束する高開口数トラップ対物レンズと、粒子によって偏向された光子、および粒子によって偏向されなかった光子の両方を、捕獲されるべき粒子の上半球中に捕獲するように配置された単一の収集レンズ系であって、収集レンズが、チャンバ中に粒子を浮遊させるための浮遊媒体の屈折率以上の開口数を有する収集レンズ系と、収集レンズの後焦点面またはその近くに配置された、あるいは後焦点面の光学等価物に配置された光検知デバイスとを含むシステムが提供される。
【００１１】
別の態様によれば、粒子に作用する光学力を測定する方法が提供され、この方法は、チャンバ内の浮遊媒体中に粒子を浮遊させることと、高い傾斜力を用いることによって、粒子上に単一の光ビームを集束して光ビーム光子に粒子を捕獲させることと、粒子によって偏向された光子、および粒子によって偏向されていない光子を、収集レンズに対する粒子の隔たりを制御し、チャンバを離れる光子の屈折を制御することによって単一の収集レンズ系で捕獲することと、捕獲された光子を、収集レンズの後焦点面またはその近くに置かれた、あるいは後焦点面の光学等価物に置かれた光検知デバイスに向けることとを含む。
【００１２】
別の態様によれば、チャンバの入口カバーと出口カバーの間の浮遊媒体中に浮遊する粒子を単一の光ビームを用いて捕獲するように構成されている光学顕微鏡の光学列中に設置されるシステムが提供され、このシステムは、顕微鏡のチャンバの出口カバーまたはその近くに設置する単一の収集レンズを備え、収集レンズの開口数は、チャンバ中に粒子を浮遊させるための浮遊媒体の屈折率以上の開口数になるように設計され、システムはさらに、収集レンズの後焦点面またはその近くに配置された、あるいは後焦点面の光学等価物に配置された光検知デバイスを備え、光検知デバイスは、光検知デバイスの上に投影された光分布の重心のｘ座標とｙ座標から導出される粒子に作用する光学力の測定値を直接または間接に生成することができる。一実施形態では、収集レンズおよび光検知デバイスは単一のデバイスに組み込まれる。
【００１３】
別の態様によれば、チャンバの入口カバーと出口カバーの間の浮遊媒体中に浮遊する粒子を単一の光ビームを用いて捕獲するように構成されている光学顕微鏡の光学列中に設置されるシステムが提供され、このシステムは、粒子によって偏向された光子、および粒子によって偏向されなかった光子を粒子の上半球中に捕獲するために顕微鏡のチャンバの出口カバーまたはその近くに設置する単一の収集レンズ系を備え、収集レンズの開口数は、チャンバ中に粒子を浮遊させるための浮遊媒体の屈折率以上の開口数になるように設計され、システムはさらに、収集レンズの後焦点面の光学等価物またはその近くに配置された光検知デバイスであって、光検知デバイスの上に投影された光分布の重心のｘ座標とｙ座標から導出される粒子に作用する光学力の測定値を直接または間接に生成することができる光検知デバイスと、収集レンズの前レンズと光検知デバイスの間に配置された、後焦点面の光学等価物を作り出すためのリレーレンズとを備える。一実施形態では、収集レンズ、リレーレンズおよび光検知デバイスは単一のデバイスに組み込まれる。
【００１４】
別の態様によれば、チャンバの入口カバーと出口カバーの間の浮遊媒体中に浮遊する粒子を単一の光ビームを用いて捕獲するように構成されている光学顕微鏡の光学列中に設置されるシステムが提供され、このシステムは、粒子によって偏向された光子、および粒子によって偏向されなかった光子を粒子の上半球中に捕獲するために顕微鏡のチャンバの出口カバーまたはその近くに設置する単一の収集レンズ系を備え、収集レンズの開口数は、チャンバ中に粒子を浮遊させるための浮遊媒体の屈折率以上の開口数になるように設計され、システムはさらに、収集レンズの後焦点面の光学等価物またはその近くに配置された光検知デバイスであって、光検知デバイスの上に投影された光分布の重心のｘ座標とｙ座標から導出される粒子に作用する光学力の測定値を直接または間接に生成することができる光検知デバイスと、収集レンズの前レンズと光検知デバイスの間に配置された、後焦点面の光学等価物を作り出すためのリレーレンズと、収集レンズの前レンズと光検知デバイスの間に配置された、光検知デバイスの飽和を防止するためのフィルタとを備える。一実施形態では、収集レンズ、リレーレンズ、フィルタおよび光検知デバイスは単一のデバイスに組み込まれる。
【００１５】
別の態様によれば、チャンバの入口カバーと出口カバーの間の浮遊媒体中に浮遊する粒子を単一の光ビームを用いて捕獲するように構成されている光学顕微鏡の光学列中に設置されるシステムが提供され、このシステムは、粒子によって偏向された光子、および粒子によって偏向されなかった光子を粒子の上半球中に捕獲するために顕微鏡のチャンバの出口カバーまたはその近くに設置する単一の収集レンズ系を備え、収集レンズの開口数は、チャンバ中に粒子を浮遊させるための浮遊媒体の屈折率以上の開口数になるように設計され、システムはさらに、収集レンズの後焦点面の光学等価物またはその近くに配置された光検知デバイスであって、光検知デバイスの上に投影された光分布の重心のｘ座標とｙ座標から導出される粒子に作用する光学力の測定値を直接または間接に生成することができる光検知デバイスと、収集レンズの前レンズと光検知デバイスの間に配置された、後焦点面の光学等価物を作り出すためのリレーレンズと、収集レンズの前レンズと光検知デバイスの間に配置された、顕微鏡のチャンバで生じた反射損失を補償する透過マスクとを備える。一実施形態では、収集レンズ、リレーレンズ、透過マスクおよび光検知デバイスは単一のデバイスに組み込まれる。
【００１６】
別の態様によれば、チャンバの入口カバーと出口カバーの間の浮遊媒体中に浮遊する粒子を単一の光ビームを用いて捕獲するように構成されている光学顕微鏡の光学列中に設置されるシステムが提供され、このシステムは、粒子によって偏向された光子、および粒子によって偏向されなかった光子を粒子の上半球中に捕獲するために顕微鏡のチャンバの出口カバーまたはその近くに設置する単一の収集レンズ系を備え、収集レンズの開口数は、チャンバ中に粒子を浮遊させるための浮遊媒体の屈折率以上の開口数になるように設計され、システムはさらに、収集レンズの後焦点面の光学等価物またはその近くに配置された光検知デバイスであって、光検知デバイスの上に投影された光分布の重心のｘ座標とｙ座標から導出される粒子に作用する光学力の測定値を直接または間接に生成することができる光検知デバイスと、収集レンズの前レンズと光検知デバイスの間に配置された、後焦点面の光学等価物を作り出すためのリレーレンズと、収集レンズの前レンズと光検知デバイスの間に配置された、光検知デバイスの飽和を防止するためのフィルタと、収集レンズの前レンズと光検知デバイスの間に配置された、顕微鏡のチャンバで生じた反射損失を補償する透過マスクとを備える。一実施形態では、収集レンズ、リレーレンズ、フィルタ、透過マスクおよび光検知デバイスは単一のデバイスに組み込まれる。
【００１７】
別の態様によれば、チャンバの入口カバーと出口カバーの間の浮遊媒体中に浮遊する粒子を単一の光ビームを用いて捕獲するように構成されている光学顕微鏡の光学列中に設置されるシステムが提供され、このシステムは、粒子によって偏向された光子、および粒子によって偏向されなかった光子を粒子の上半球中に捕獲するために顕微鏡のチャンバの出口カバーまたはその近くに設置する単一の収集レンズ系を備え、収集レンズの開口数は、チャンバ中に粒子を浮遊させるための浮遊媒体の屈折率以上の開口数になるように設計され、システムはさらに、収集レンズの後焦点面またはその近くに配置された光検知デバイスであって、光検知デバイスの上に投影された光分布の重心のｘ座標とｙ座標から導出される粒子に作用する光学力の測定値を直接または間接に生成することができる光検知デバイスと、収集レンズの前レンズと光検知デバイスの間に配置された、光検知デバイスの飽和を防止するためのフィルタとを備える。一実施形態では、収集レンズ、フィルタおよび光検知デバイスは単一のデバイスに組み込まれる。
【００１８】
別の態様によれば、チャンバの入口カバーと出口カバーの間の浮遊媒体中に浮遊する粒子を単一の光ビームを用いて捕獲するように構成されている光学顕微鏡の光学列中に設置されるシステムが提供され、このシステムは、粒子によって偏向された光子、および粒子によって偏向されなかった光子を粒子の上半球中に捕獲するために顕微鏡のチャンバの出口カバーまたはその近くに設置する単一の収集レンズ系を備え、収集レンズの開口数は、チャンバ中に粒子を浮遊させるための浮遊媒体の屈折率以上の開口数になるように設計され、システムはさらに、収集レンズの後焦点面またはその近くに配置された光検知デバイスであって、光検知デバイスの上に投影された光分布の重心のｘ座標とｙ座標から導出される粒子に作用する光学力の測定値を直接または間接に生成することができる光検知デバイスと、収集レンズの前レンズと光検知デバイスの間に配置された、顕微鏡のチャンバで生じた反射損失を補償する透過マスクとを備える。一実施形態では、収集レンズ、透過マスクおよび光検知デバイスは単一のデバイスに組み込まれる。
【００１９】
別の態様によれば、チャンバの入口カバーと出口カバーの間の浮遊媒体中に浮遊する粒子を単一の光ビームを用いて捕獲するように構成されている光学顕微鏡の光学列中に設置されるシステムが提供され、このシステムは、粒子によって偏向された光子、および粒子によって偏向されなかった光子を粒子の上半球中に捕獲するために顕微鏡のチャンバの出口カバーまたはその近くに設置する単一の収集レンズ系を備え、収集レンズの開口数は、チャンバ中に粒子を浮遊させるための浮遊媒体の屈折率以上の開口数になるように設計され、システムはさらに、収集レンズの後焦点面またはその近くに配置された光検知デバイスであって、光検知デバイスの上に投影された光分布の重心のｘ座標とｙ座標から導出される粒子に作用する光学力の測定値を直接または間接に生成することができる光検知デバイスと、収集レンズの前レンズと光検知デバイスの間に配置された、光検知デバイスの飽和を防止するためのフィルタと、収集レンズの前レンズと光検知デバイスの間に配置された、顕微鏡のチャンバで生じた反射損失を補償する透過マスクとを備える。一実施形態では、収集レンズ、フィルタ、透過マスクおよび光検知デバイスは単一のデバイスに組み込まれる。
【００２０】
本明細書および特許請求の範囲の全体を通して、「備える」およびこの語のバリエーションは、他の技術的特徴、付加物、構成要素、またはステップを排除するものではない。
【００２１】
本発明のさらなる目的、利点および特徴は、本明細書を検討することによって当業者には明らかになり、あるいは本発明を実施することによって知ることができよう。以下の諸例および図面は、例として提示されており、本発明を限定するものではない。さらに、本発明は、本明細書に記載された特定の実施形態および好ましい実施形態のすべての実現可能な組合せを包含する。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】粒子を捕獲し、捕獲された粒子に作用する光学力を測定するための本発明の一実施形態のシステムを示す図である。
【図２】レンズの後焦点面におけるコヒーレント光分布の運動量構成を示す図である。
【図３Ａ】捕獲試料によって屈折および偏向される収束光線の例を示す図である。
【図３Ｂ】捕獲試料によって屈折および偏向される収束光線の例を示す図である。
【図４】水中に浮遊させた均質ガラスミクロスフェアについて、散乱光の強度を角度の関数としてグラフ化したものである。
【図５】本発明の一実施形態の光収集システムを示す図である。
【図６】試料の上半球中に捕獲された光の百分率比を浮遊チャンバ中の試料の深さの関数として示すグラフである。
【図７】本発明の原理により生成された油浸顕微鏡コンデンサの後焦点面の像を示す図である。
【図８】異なるレーザ出力で、光トラップを作り出すための異なるトラップ対物レンズを用いて、異なる直径、屈折率の捕獲ポリスチレンミクロスフェアに既知の力を加えた実験の結果を示すグラフである。
【図９Ａ】光学顕微鏡と一体化されている本発明の一実施形態を示す図である。
【図９Ｂ】光学顕微鏡と一体化されている本発明の一実施形態を示す図である。
【図１０】浮遊チャンバ内部の媒体中に浮遊させた捕獲粒子に作用する光学力の測定を可能にするために、光学顕微鏡の光学列中に設置することができる一実施形態のシステム／デバイスを示す図である。
【図１１】浮遊チャンバ内部の媒体中に浮遊させた捕獲粒子に作用する光学力の測定を可能にするために、光学顕微鏡の光学列中に設置することができる別の実施形態のシステム／デバイスを示す図である。
【図１２】浮遊チャンバ内部の媒体中に浮遊させた捕獲粒子に作用する光学力の測定を可能にするために、光学顕微鏡の光学列中に設置することができるさらに別の実施形態のシステム／デバイスを示す図である。
【図１３】浮遊チャンバ内部の媒体中に浮遊させた捕獲粒子に作用する光学力の測定を可能にするために、光学顕微鏡の光学列中に設置することができる別の実施形態のシステム／デバイスを示す図である。
【図１４】浮遊チャンバ内部の媒体中に浮遊させた捕獲粒子に作用する光学力の測定を可能にするために、光学顕微鏡の光学列中に設置することができる別の実施形態のシステム／デバイスを示す図である。
【図１５】浮遊チャンバ内部の媒体中に浮遊させた捕獲粒子に作用する光学力の測定を可能にするために、光学顕微鏡の光学列中に設置することができるさらに別の実施形態のシステム／デバイスを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
以下の説明では、本発明の完全な理解が得られるように多数の具体的な細部を示す。しかし、本発明は、これらの具体的な細部の一部または全部がなくても実施できることが当業者には理解されよう。他の場合では、よく知られている処理操作は、本発明を不必要に不明瞭にしないように、詳細に記述していない。添付の図面は原寸に比例して描かれていないことに留意することもまた重要である。
【００２４】
図１は、本発明の一実施による、粒子１０８に作用する光学力を測定するシステム１００を示す。システム１００は、通常はガラスでできている入口カバー１０９ａと出口カバー１０９ｂの間の浮遊流体中に粒子１０８を浮遊させるためのチャンバ１０９を含む。粒子１０８の捕獲は、高開口数トラップ対物液浸レンズ１０７を使用して浮遊粒子上に光ビーム１２４を集束させることによって、高い傾斜力を用いて光ビーム光子に粒子を捕獲させるようにして実現される。図１の実施形態では、レーザビーム１２０を作り出すためにレーザ光源１０１が使用され、レーザビーム１２０は、捕獲光ビーム１２４を作り出すように操作することができる。レーザ光源１０１は、数百ミリワットから数ワットまでの定格出力を有する高出力レーザ光源が好ましい。レーザ光源１０１出口に配置されたファラデーアイソレータ１０２を使用して、出力を不安定にしうるレーザ光源１０１の方への後方反射をなくすることができる。接眼レンズ１３０および対物レンズ１３２を有する望遠鏡１０３は、レーザビーム１２０の光路内に置かれ、ここでレーザビームが対物レンズ１３２によって再平行化され広げられる。好ましい実施形態では、レンズ１３２および１３０の焦点距離は、トラップ対物レンズ１０７の入口瞳１０６を満たす、またはわずかにあふれさせる直径を有するレーザビーム１２２を作り出すように選択される。レーザビーム１２２が直線偏光、または別の非円偏光を有する場合、半波長板１０４、または他の適切なデバイスを望遠鏡対物レンズ１３２とトラップ対物レンズ１０７の間に配置して、円偏光または実質的な円偏光を有する光ビーム１２３を作り出すことができる。円偏光または実質的な円偏光でトラップ対物レンズ１０７に入る光ビームにより、トラップ対物レンズが、直角の２つの方向で実質的に等しい、または実質的に等しい半径方向剛性を持つ光トラップを作り出すことが可能になる。
【００２５】
上述のように、システム１００は、高い傾斜力を用いることによって、単一の光ビーム１２４を利用して粒子１０８を捕獲することができる。効果的に粒子を捕獲するために必要な高い傾斜力を作り出すために、高開口数トラップ対物レンズ１０７を使用して、ビームを回折が制限されたスポットになるまで粒子の上に集束する。トラップ対物レンズ１０７は一般に、入口瞳１０８、一連の内部レンズ１４０、および出口レンズ１４２を含み、出口レンズ１４２はチャンバ１０９の入口カバー１０９ａと、水または油などで、油が好ましい液浸媒体（図示せず）を介して整合する。代替実施形態では、トラップ対物レンズ１０７の開口数は、約０．９０と約１．４０の間で変化することが好ましい。入口瞳１０６を満たす、またはあふれさせることを実現するために、望遠鏡１０３は、約２．５×と約６．０×の間の倍率を有することが好ましい。
【００２６】
粒子１０８に作用する光学力の測定は、粒子によって偏向された光子、および粒子によって偏向されていない光子を、チャンバ１０９内部で粒子１０８を浮遊させる媒体の屈折率以上の開口数を有する高開口数液浸レンズ１１０を使用して捕獲することによって、実現される。収集レンズ１１０は一般に、前部レンズ１５０と、捕獲光子を平行にし、光検知デバイス１１５の方に向ける一連の内部レンズ１５２とを含む。前部レンズ１５０はチャンバ１０９の出口カバー１０９ｂと、水または油などで、油が好ましい液浸媒体（図示せず）を介して整合する。代替実施形態では、収集レンズ１１０の開口数は、約１．３２と約１．４０の間で変化することが好ましい。特に、粒子浮遊媒体の屈折率と収集レンズ液浸媒体の屈折率との間に相対的に大きな差があることが望ましい。代替実施形態では、液浸媒体と浮遊媒体の屈折率の比は、約１．１３と約１．２の間で変化し、前部レンズ１５０の直径は、約２．０ミリメートルと約２０ミリメートルの間で変化することが好ましい。
【００２７】
粒子１０８に作用する光学力の直接測定は、光場の運動量構成が収集レンズ１１０の後焦点面１１１で目に見えるようになることによって可能になる。図２および後の記述によって、この現象の背後にある理論を説明する。
【００２８】
ヘルムホルツ波式のどんな解も、次のように書き表すことができる。
0005728470.tif 000002
ここで、重み因子Ａ（α，β）は次式を満たす。
0005728470.tif 000003
【００２９】
つまり、これらは任意の平面ｚ＝０における元の場のフーリエ変換である。
【００３０】
これらの式は、物理的意味を有する。すなわち、任意の電磁場は、式２によって与えられる振幅Ａを持つ平面波の重ね合わせとして考えることができる。平面波は、方向余弦ｓ＝（α，β，γ）によって与えられる同じ方向にすべてが進む光子の束として形成されるので、最も簡単な波の種類である。ある平面波の運動量は次式によって決定されることが、本発明者らの方法に関連している。
0005728470.tif 000004
【００３１】
言い換えると、平面波は、すべてが同じ運動量ｐを有する光子からなり、したがって上式（１）は、所与の光場をその構成運動量に分解することと考えることができる。また、これらの要素平面波が保持する単位時間（および単位面積）当たりエネルギーは、ポインティングの定理により振幅Ａ（α，β）の平方（放射照度Ｉ（α，β））に比例する。すなわち、上の３つの式は、運動量ｐを有する場Ｕ（ｘ，ｙ，ｚ）における単位時間当たりの光子の数（エネルギーに比例する）は、場のフーリエ変換の大きさの平方に比例することを示す。重要なことは、コヒーレント照明のもとで、無関係の相および換算係数を無視すると、レンズの後焦点面における光分布は、レンズの前の場のフーリエ変換と一致することである。このフーリエ変換を行うレンズの能力は、広く適合する収差補正基準であるアッベの正弦条件（ｒ＝ｆ’ｓｉｎΘ、図２）を満たすようにレンズが設計されているならば、高開口数であっても有効である。
【００３２】
図２を参照すると、レンズ２００の後焦点面２０２に、平面２０１内のコヒーレント光分布の運動量構成を見ることができ、その平面内の点２０３における放射パワーは、運動量ｐ１を保持する光子の数を直接示す。光場の運動量構成がレンズの後焦点面で目に見えるようになるので、この運動量構成に変化があれば容易に検出される。これにより、場によって試料に加えられる力を評価する直接方法が得られる。ニュートンの第２法則では、物体に加えられる力は、単位時間当たりの物体の正味の運動量変化と等しいとする。また、光子によって試料に加えられる力は、試料によって光子に加えられる力と同じ大きさを有し（ニュートンの第３法則）、また光ビーム光子の運動量の変化と等しく、これは後焦点面で容易に明らかになる。光が試料に入る前と後の運動量の差を取ることにより、必要な変化が得られる。
【００３３】
次に図３Ａを参照すると、微粒子３０５に当たってこの微粒子を光学的に捕獲する収束光ビーム３０１が示されている。図３Ａでは、微粒子３０５がビーム３０１の焦点を中心にして示されている。光線光学に関して相互作用を記述すると、光は屈折３０２または反射３０３され、その結果、伝搬の方向変化が生じることになりうる。方向変化は、図３Ｂで表されるように、試料が収束光ビーム３０１に対して横に移動した場合に増大しうる。図示のように、試料が横移動すると、屈折光線３０２および反射光線３０３は、ほとんどどの方向にも伝搬することになりうる。結果として、すべての光ビーム運動量変化を解析できるようにするには、試料の周囲すべての点で、つまり４πの立体角をカバーして、光を収集することが必要になる。しかし、本発明者らによって、後方散乱光がないものとすることで生じる誤差は小さく、耐えられるものであることが確認された。図表として、図４は、水（ｎ＝１．３２）に浮遊し、集束赤外線レーザビーム（λ＝１．０６４μｍ、ＮＡ＝１）に捕獲された均質ガラスミクロスフェア（ｒ＝１μｍ、ｎ＝１．５６）について、厳密に一般化されたロレンツミー理論によって計算された分散光の強度の（任意の単位、対数目盛の）を角度の関数としてグラフ化したものを描いている。図４に示されるように、試料の下半球に入る散乱光は、合計光強度の１％未満になる。本発明はこの現象を、試料の上半球中に捕獲される光の量を最大にすることによって、かつ試料に作用する光学力を測定するときに後方散乱光を無視してよいようにすることによって、利用する。上半球中の光捕獲は、上記のように、高開口数液浸収集レンズ１１０を用いることによって最大化される。これにより多くの利点がもたらされ、かつ光を収集するのに非常に簡単な光学構成が可能になる。とりわけ、そうすることで、本発明のシステムおよび／またはデバイスを従来の光学顕微鏡の光学列の中、および既存の光トラップシステムの中に組み込むこと、または後付けすることが可能になる。
【００３４】
図５を例として参照すると、本発明の一実施形態による収集システムが表されている。前述のように、試料１０８は、水（ｎ＝１．３３３）などの浮遊媒体４０６を収容するチャンバ１０９内部にあり、入口カバー１０９ａと出口カバー１０９ｂの間に挟まれている。収集レンズ１１０の前レンズ１５０は、セダー油または合成顕微鏡油（ｎ’＝１．５１５）などの高屈折率流体４０７と接触しており、高屈折率流体４０７は、好ましい一実施形態では、出口カバー１０９ｂおよび前レンズ１５０の屈折率に対応する。図示のように、試料１０８により偏向された、光軸に対して大きな角度α（半角ε）をなして収集レンズ１１０の方向に伝搬する光は、次式のスネルの法則により、水−出口カバー１０９ｂの境界面で屈折し、
ｎ．ｓｉｎε＝ｎ’．ｓｉｎε’      （４）
小さな角β（半角ε’）をなして収集レンズ１１０の前レンズ１５０の中に、偏向されずに進行する。収集レンズ１１０の開口数は、浮遊媒体４０６の屈折率以上になるように選択されるので、屈折角ε’は次式となる。
ｎ．ｓｉｎ９０°＝ｎ＝ｎ’ｓｉｎε’≦ＮＡ＝ｎ’ｓｉｎθ→ε’≦θ      （５）
【００３５】
あるいは、言い換えると、反射光線は収集レンズの捕獲角θ内にとどまる。
【００３６】
収集システムの全開口数を利用するために、チャンバ１０９の出口カバー１０９ｂと収集レンズ１１０の前レンズ１５０の間の作動距離ｗが制御される。一実施形態では、スペーサ（図示せず）が出口カバー１０９ｂと収集レンズ１１０の間に配置されて、式（５）の有効性条件に適合するように作動距離を既定値に維持する。作動距離があまりに小さい、またはあまりに大きい場合、有効開口数が不必要に制限されて、好ましくない光損失をまねく。本発明の代替実施形態では、作動距離は、好ましくは３ミリメートル未満、好ましくは約１．０ミリメートルと約３．０ミリメートルの間、より好ましくは約１．５ミリメートルと約２．５ミリメートルの間に設定される。
【００３７】
別の重要な考慮すべき事項は、チャンバ１０９の出口カバー１０９ｂの内面に対する試料１０８の深さｈ、位置である。図６の結果は、試料の上半球中に捕獲された光の百分率比をチャンバ１０９内の試料の深さの関数として示す。データは、以下の収集レンズ１１０のパラメータを用いて計算された。（１）収集レンズの開口数（ＮＡ）＝１．４０、（２）前レンズ１５０と出口カバー１０９ｂの間の油浸の屈折率（ｎ’）＝１．５１、（３）試料浮遊媒体の屈折率（ｎ）＝１．３３、（４）前レンズの直径＝９．５０２０ｍｍ、および（５）作動距離＝１．９２ｍｍ。図６に示されるように、上半球から伝搬する光の大部分を捕獲するには、試料の深さは、好ましくは０と約２００マイクロメートルの間、より好ましくは０と約１００マイクロメートルの間、最も好ましくは０と５０マイクロメートルの間になる。これら分かったことの結果として、本発明では薄いマイクロ流体チャンバ１０９を利用して、試料１０８を収集レンズ１１０とトラップ対物レンズ１０７の両方に近接して保つ。本発明の代替実施形態によれば、チャンバ１０９の厚さは、約５０から約２００ミクロンの間が好ましい。試料１０８がチャンバ１０９の入口カバー１０９ａからより大きい距離のところで捕獲されることを可能にするために、水浸トラップ対物レンズ１０７を使用することがあり、これにより性能を低下させることなく、数百ミクロンの距離が可能になる。水浸トラップ対物レンズ１０７を使用することで、有利なことに、より厚いマイクロ流体チャンバ１０９を使用することが可能になる。
【００３８】
図１を引き続き参照すると、光検知デバイス１１５が、収集レンズ１１０の下流光路に設けられている。捕獲粒子１０８に作用する力は、光検知デバイス１１５の上に投影される光１２８中のすべての光子の個々の運動量変化を合計することによって得られる。一実施形態によれば、これは、側面効果に基づく二次元位置検知デバイス（ＰＳＤ）を収集レンズの後焦点面１１１、または光学的等価物のところに設置することによって行われる。側面効果ＰＳＤは、露光抵抗層を照明する光スポットの放射パワー、ならびに照明スポットと基準電極の間の距離の両方に比例する光電流により応答する光検出器である。すなわち、二次元ＰＳＤは少なくとも２つの信号を供給し、これらの信号により、二次元ＰＳＤで照光領域内の光スポットの位置を次式に従って測定することができる。
0005728470.tif 000005
ここで、ｋは検出器の応答性および形状によって決まる定数であり、Ｉ（ｘ，ｙ）は検知領域の（ｘ、ｙ）位置２０３における照明光の放射強度を意味する。分解レンズの後焦点面に設置された場合、座標ｘ座標とｙは、適正な尺度で光運動量の横成分を表現する。
0005728470.tif 000006
実質的には、
0005728470.tif 000007
式３により、アッベの正弦条件に従って次式のように書き表せるる。
0005728470.tif 000008
証明終わり。またｙ座標についても同様。Ｉ（ｘ，ｙ）ｄｘｄｙが点（ｘ、ｙ）における放射パワーであり、したがって横運動量（ｐｘ，ｐｙ）を有する単位時間当たりの光子の数に比例するので、式６中の積分はそれぞれ、すべての運動量のｘ成分とｙ成分の順次加算を表現している。すなわち、光が試料を通過する前および後の信号ＳｘおよびＳｙの変化は、光学力に比例する。
【００３９】
本発明の利点は、力の測定が第１の原理のみに基づきうることである。図1の実施形態では、光検知デバイスは、収集レンズ１１０の外側にあり、リレーレンズ１１４は、収集レンズ１１０の後焦点面１１１の光学的等価物を光検知デバイス１１５の上に投影するために使用される。収集レンズの後焦点面の光学的等価物を作り出すためにリレーレンズが使用される実施形態では、リレーレンズの直径は、収集レンズの後焦点面に置かれた開口絞り（図１に示されていない）より大きいか等しいことが好ましく、また光検知デバイスの直径を開口絞りの直径で割ったものに等しい倍率を有することが好ましい。
【００４０】
一代替実施形態では、光検知デバイスは、収集レンズ１１０の後焦点面１１１の光学像に対応する像を生成することができるカメラまたは他のデバイスとすることができ、その像は、粒子１０８に作用する光学力の測定値を生成するためにコンピュータで可読である。
【００４１】
ＰＳＤなどの光検知デバイス１１５の飽和を排除するために、中性光フィルタ１１３を収集レンズ１１０と光検知デバイス１１５の間の光路に設置して、トラップから来る光を減衰することがある。
【００４２】
図７は、３μｍポリスチレンミクロスフェアによって散乱された光を収集している、開口数が１．４０の油浸顕微鏡コンデンサの後焦点面の像を示しており、このポリスチレンミクロスフェアは、水中（λ＝１．０６４μｍでｎ＝１．３２）に浮遊され、開口数が１．２０の水浸顕微鏡対物レンズにより作り出された単一ビームの光トラップで捕獲され、チャンバ１０９の出口カバー１０９ｂ（ｈ＝０）と接触させられている。この平面は、既知の特性を持ついくつかの顕微鏡対物レンズの開口絞りを投影することによって、開口数に関して較正することができる。別法として、既知の波長の平行ビームによって照明された既知の周期の回折格子で光を既知の角度で回折し、この光を後焦点面で単一スポットに集束する。これらの回折次数を使用しても、焦点面を較正することができる。像は、像の右上隅および左下隅において容易に目に見えるように、収集されている光がＮＡ＝１．３２の理論的限界（水中で９０°に近い半角に対応する）に近いことを示す。実験的に決定された収集光の強度は、合計ビーム強度（試料なしでの読み取り、４π球全体に散乱した光と等価）の９５％に近い。比較として、収集レンズの有効開口数が０．９５に低減されると、光損失は、試料によって散乱される合計光のおよそ１５％〜３０％という量になる。一定した均一な（角度に依存しない）光損失は、ただ暗いだけで全く同じ光パターンを後焦点面に生成するので、力の測定に関係しないことに留意されたい。ＰＳＤからの信号は小さくなるが（しかし比例している）、下で論じるように、較正定数Ｃを使用して対処することができる。
【００４３】
一実施形態では、浮遊媒体４０６と出口カバー１０９ｂの境界面における角度依存反射損失を、レーザの波長に調整された出口カバー１０９ｂ内面の広角反射防止コーティングを用いて低減または除去することができる。別法として、振幅が反射係数の逆数に比例する非均一透過マスク（図１に示されていない）を収集レンズの後焦点面に、またはその共役面に（例えば、ＰＳＤに）設置することが、浮遊チャンバ内部の平行な光束がこれらの平面で単一点に集束されるので、可能である。
【００４４】
上で述べたように、かつ力の決定のための間接方法（モデルに基づくトラップ剛性較正など）と対照的に、本発明は第１の原理に基づいている。ＰＳＤの読取値（単位はボルト）と光学力（単位はｐＮ）の間の比例定数Ｃが見出されると、温度、屈折率、試料のサイズおよび外形、レーザ出力およびトラップ形状などの実験条件の変化を無視して測定を行うことができる。
【００４５】
図８は、異なるレーザ出力で、光トラップを作り出すための異なるトラップ対物レンズを用いて、異なる直径、屈折率の捕獲ポリスチレンミクロスフェアに既知の力を加えた実験の結果を示す。外部力は、マイクロチャンバを保持する圧電ステージを所与の速度で動かすことによって得られた浮遊流体の制御された流れで作られた。流体速度、その粘度、および粒子の半径はすべて分かっていたので、ビーズ上に誘発されたストークス力が計算された。この力は粒子に作用して、粒子をその置かれている位置から横方向に、トラップによって加えられた力が粘性抵抗を相殺するまで移動する。したがって、トラップによって加えられる実際の光学力は、これらの粒子の状態に対して決定することができる。そのグラフ化したものは、圧電ステージが正弦波信号によって駆動されたときの、本発明の方法に従うＰＳＤにおける読取値（ｙ軸）と既知の光学力（ストークス力、ｘ軸）との間の関係を示す。図８で、線形の関係、および様々な実験条件に対する平均傾きの独立性が明らかである。また、この傾きの逆数が較正定数Ｃ（単位はｐＮ／Ｖ）であり、これにより、ＰＳＤ読取値を光学力に変換することが可能になる。したがって、この実験では、測定定数Ｃを得るための方法も確立する。
【００４６】
図１を再び参照すると、第１のダイクロイックミラー１０５および第２のダイクロイックミラー１１２はそれぞれ、光トラップレーザ光を選択的に反射する一方で他の光波長を通過させることによって、光トラップが光学顕微鏡の像列内に共存できるようにシステム１００の中に組み込むことができる。例えば、ダイクロイックミラー１１２は、光学顕微鏡の照明列内に組み込むことができるのに対し、ダイクロイックミラー１０５は、顕微鏡の像列内に組み込むことができる。
【００４７】
図９Ａおよび図９Ｂに表されるように、本発明による、光を捕獲しその成分運動量に分解する収集レンズは、常用の光学顕微鏡６００に装着される液浸コンデンサとすることが、非常に都合よくできる。一方、この顕微鏡は、同時に光ピンセットを後付けして完全なシステムを形成することができる。市販の光ピンセットは、容易に入手可能であり、主要なブランドの研究用顕微鏡と適合し、またそれ自体で顕微鏡対物レンズを使用して光トラップを作り出す。
【００４８】
図９Ａおよび図９Ｂは、常用の光学顕微鏡６００が例えばＫｏｈｌｅｒ照明器の光学列の中に容易に収まるので、常用の光学顕微鏡６００との本発明の方法およびシステムの適合性を表している。図９Ａは像列を概略的に示し、図９Ｂは反転光学顕微鏡の照明列を概略的に示し、これらは、光捕獲システムと組み合わせて使用されるものと類似している。
【００４９】
図９Ｂで、ハロゲンランプ６０１からの光は、コレクタレンズ６０２によって方向を変えられ、視野絞り６０３を通り、コリメーティングレンズ６０４によってコンデンサレンズ６１０の開口絞り６０６の上に集束される。開口絞り６０６がコンデンサレンズ６１０の後焦点面に置かれているので、光はコンデンサの後で平行化され、試料６０８を照明し、対物レンズ６０７によって、その後焦点面に置かれたその開口絞り６０９の上に集束される。また、図９Ａを参照すれば、視野絞り６０３は、コリメータ６０４およびコンデンサ６１０のレンズによって試料面の上に投影される。これら２つの光学列は、一連の共役面として記述することができる。例えば、像列では、試料面６０８と視野絞り６０３は共役であり、一方、照明列では、ハロゲンランプ６０１、コンデンサ６１０の開口絞り６０６、および対物レンズ６０７の開口絞り６０９ともまた共役である。重要なことは、照明列の共役面と像列内の共役面とは、これらが中間レンズの後焦点面にあるとき、フーリエ変換関係にあると言えることである。特に、コンデンサ開口絞り６０６は、試料面６０８とフーリエ対を形成する。この構成はもちろん、本発明の測定システムを図９Ｂに示される照明列に一体化するために使用することができる。試料を浮遊させるための媒体の屈折率以上の開口数を有する高開口数レンズ６１０（例えば、修正した油浸コンデンサ）が、通常のコンデンサと置き換わって、逆に収集レンズとして働く。ダイクロイックミラー６０５を使用して、トラップから来る光の方向を、収集レンズの後焦点面に、または後焦点面の光学等価物に設置されたＰＳＤなどの光検知デバイス６１２の方へ変えることができる。照明器から来る反対方向の光は、ダイクロイックミラー６０５を通り抜け、前のように試料に達する。リレーレンズ６１４は、レンズ６１０の後焦点面を容易に使用できない場合に使用して（図９Ｂに示す）、その面をＰＳＤの上に投影することができる。このような実施形態では、顕微鏡は完全に動作可能のままであることができる。
【００５０】
図１０は、浮遊チャンバ７０１内の媒体中に浮遊させた捕獲粒子に作用する光学力の測定を可能にするために、光学顕微鏡の光学列中に設置することができる一実施形態のシステム／デバイス７００を示す。このデバイスは、顕微鏡のコンデンサレンズに取って代わるように構成される。図１０の実施形態では、このデバイスは、前レンズ７０３と、１つまたは複数の内部レンズ７０４とを有する収集レンズ７０２を含む。収集レンズ７０２の機能および構造は、光検知デバイス１１５、フィルタ１１３、およびリレーレンズ１１４が単一デバイスを好ましく形成するように収集レンズ７０２と一体化されていることを除いて、上で論じた収集レンズ１１０と類似している。図示の実施形態では、ＰＳＤまたはカメラなどの光検知デバイス１１５は、収集レンズ筐体７０５の側壁に取り付けられている。代替実施形態では、光検知デバイス１１５は、収集レンズ７０２の筐体７０５に取り付けられているが、ブラケットまたは他の適切な手段を使用して側壁からある間隔をおいて配置される。筐体７０５内に、後焦点面７０６の光場を光検知デバイス１１５の上に投影するリレーレンズ１１４が置かれる。ダイクロイックミラー１１２は、トラップから来る光を光検知デバイス１１５の中に入れるように偏向する一方で、異なる波長の光がレンズを通り抜けることを可能にする。フィルタ１１３は、ダイクロイックミラー１１２と光検知デバイス１１５の間に配置され、偏向された光を減衰して光検知デバイスの飽和を防止する。光検知デバイス１１５は、可読フォーマットの力測定値を生成するために、１つまたは複数のコネクタまたはケーブル７０８を介して、または無線伝送によって、コンピュータまたは他のデバイスと接続可能であることが好ましい。収集レンズ７０２は、水または油などの液浸媒体を介して浮遊チャンバ７０１の出口カバー７０１ａと整合するように設計され、かつチャンバ７０１内に試料を浮遊させるための媒体の屈折率以上の開口数を有するように設計される。一代替実施形態では、スペーサが、収集レンズ７０２に取外し可能に取り付けられ、あるいは、収集レンズとチャンバ７０１の出口カバー７０１ａとの間に望ましい作動距離ｗを維持する機能と共に、筐体７０５と一体化して形成される。
【００５１】
図１１は、浮遊チャンバ７０１内の媒体中に浮遊させた捕獲粒子に作用する光学力の測定を可能にするために、光学顕微鏡の光学列中に設置することができる一実施形態のシステム／デバイス７２０を示す。このデバイスは、顕微鏡のコンデンサレンズに取って代わるように構成される。図１１の実施形態では、このデバイスは、前レンズ７０３と、１つまたは複数の内部レンズ７０４とを有する収集レンズ７０２を含む。収集レンズ７０２の機能および構造は、光検知デバイス１１５、リレーレンズ１１４、および透過マスク７２１が単一デバイスを好ましく形成するように収集レンズ７０２と一体化されていることを除いて、上で論じた収集レンズ１１０と類似している。図示の実施形態では、ＰＳＤまたはカメラなどの光検知デバイス１１５は、収集レンズ筐体７０５の側壁に取り付けられている。代替実施形態では、光検知デバイス１１５は、収集レンズ７０２の筐体７０５に取り付けられているが、ブラケットまたは他の適切な手段を使用して側壁からある間隔をおいて配置される。筐体７０５内に、後焦点面７０６の光場を光検知デバイス１１５の上に投影するリレーレンズ１１４が置かれる。ダイクロイックミラー１１２は、トラップから来る光を光検知デバイス１１５の中に入れるように偏向する一方で、異なる波長の光がレンズを通り抜けることを可能にする。光検知デバイス１１５の近く、または好ましくは光検知デバイス１１５に配置される透過マスク７２１は、試料浮遊チャンバ７０１の出口カバー７０１ａで発生することが予想される反射損失を補償するために設けられる。光検知デバイス１１５は、可読フォーマットの力測定値を生成するために、１つまたは複数の接続部またはケーブル７０８を介して、または無線伝送によって、コンピュータまたは他のデバイスと接続可能であることが好ましい。収集レンズ７０２は、水または油などの液浸媒体を介して浮遊チャンバ７０１の出口カバー７０１ａと整合するように設計され、かつチャンバ７０１内に試料を浮遊させるための媒体の屈折率以上の開口数を有するように設計される。一代替実施形態では、スペーサが収集レンズに取外し可能に取り付けられ、あるいは筐体７０５と一体化して形成され、このスペーサは、収集レンズ７０２とチャンバ７０１の出口カバー７０１ａとの間に望ましい作動距離ｗを維持するように機能する。
【００５２】
図１２は、浮遊チャンバ７０１内の媒体中に浮遊させた捕獲粒子に作用する光学力の測定を可能にするために、光学顕微鏡の光学列中に設置することができる一実施形態のシステム／デバイス７３０を示す。このデバイスは、顕微鏡のコンデンサレンズに取って代わるように構成される。図１２の実施形態では、このデバイスは、前レンズ７０３と、１つまたは複数の内部レンズ７０４とを有する収集レンズ７０２を含む。収集レンズ７０２の機能および構造は、光検知デバイス１１５、フィルタ１１３、リレーレンズ１１４、および透過マスク７２１が単一デバイスを好ましく形成するように収集レンズ７０２と一体化されていることを除いて、上で論じた収集レンズ１１０と類似している。図示の実施形態では、ＰＳＤまたはカメラなどの光検知デバイス１１５は、収集レンズ筐体７０５の側壁に取り付けられている。代替実施形態では、光検知デバイス１１５は、収集レンズ７０２の筐体７０５に取り付けられているが、ブラケットまたは他の適切な手段を使用して側壁からある間隔をおいて配置される。筐体７０５内に、後焦点面７０６の光場を光検知デバイス１１５の上に投影するリレーレンズ１１４が置かれる。ダイクロイックミラー１１２は、トラップから来る光を光検知デバイス１１５の中に入れるように偏向する一方で、異なる波長の光がレンズを通り抜けることを可能にする。フィルタ１１３は、ダイクロイックミラー１１２と光検知デバイス１１５の間に配置され、偏向された光を減衰して光検知デバイスの飽和を防止する。光検知デバイス１１５の近く、または好ましくは光検知デバイス１１５に配置される透過マスク７２１は、試料浮遊チャンバ７０１の出口カバー７０１ａで発生することが予想される反射損失を補償するために設けられる。光検知デバイス１１５は、可読フォーマットの力測定値を生成するために、１つまたは複数のコネクタまたはケーブル７０８を介して、または無線伝送によって、コンピュータまたは他のデバイスと接続可能であることが好ましい。収集レンズ７０２は、水または油などの液浸媒体を介して浮遊チャンバ７０１の出口カバー７０１ａと整合するように設計され、かつチャンバ７０１内に試料を浮遊させるための媒体の屈折率以上の開口数を有するように設計される。一代替実施形態では、スペーサが、収集レンズに取外し可能に取り付けられ、あるいは、収集レンズとチャンバ７０１の出口カバー７０１ａとの間に望ましい作動距離ｗを維持する機能と共に、筐体７０５と一体化して形成される。
【００５３】
図１３は、浮遊チャンバ７０１内の媒体中に浮遊させた捕獲粒子に作用する光学力の測定を可能にするために、光学顕微鏡の光学列中に設置することができる一実施形態のシステム／デバイス７４０を示す。このデバイスは、顕微鏡のコンデンサレンズに取って代わるように構成される。図１３の実施形態では、このデバイスは、前レンズ７０３と、１つまたは複数の内部レンズ７０４とを有する収集レンズ７０２を含む。収集レンズ７０２の機能および構造は、光検知デバイス１１５、フィルタ１１３が、収集レンズ７０２の後焦点面またはその近くに光検知デバイス１１５が置かれた単一デバイスを好ましく形成するように収集レンズ７０２と一体化されていることを除いて、上で論じた収集レンズ１１０と類似している。収集レンズ筐体７０５内に置かれたダイクロイックミラー１１２は、収集レンズ７０２の後焦点面へ行く光場を光検知デバイス１１５の中に入れるように偏向する一方で、異なる波長の光がレンズを通り抜けることを可能にする。後焦点面を光検知デバイスの上に適正に平行移動させるために、鏡１１２と後焦点面７０６の間の距離「ｓ」と、鏡１１２と光検知デバイス１１５の間の距離「ｓ」とは等しくされ、または実質的に等しくされる。フィルタ１１３は、ダイクロイックミラー１１２と光検知デバイス１１５の間に配置され、偏向された光を減衰して光検知デバイスの飽和を防止する。光検知デバイス１１５は、可読フォーマットの力測定値を生成するために、１つまたは複数のコネクタまたはケーブル７０８を介して、または無線伝送によって、コンピュータまたは他のデバイスと接続可能であることが好ましい。収集レンズ７０２は、水または油などの液浸媒体を介して浮遊チャンバ７０１の出口カバー７０１ａと整合するように設計され、かつチャンバ７０１内に試料を浮遊させるための媒体の屈折率以上の開口数を有するように設計される。一代替実施形態では、スペーサが、収集レンズに取外し可能に取り付けられ、あるいは、収集レンズとチャンバ７０１の出口カバー７０１ａとの間に望ましい作動距離ｗを維持する機能と共に、筐体７０５と一体化して形成される。
【００５４】
図１４は、浮遊チャンバ７０１内の媒体中に浮遊させた捕獲粒子に作用する光学力の測定を可能にするために、光学顕微鏡の光学列中に設置することができる一実施形態のシステム／デバイス７５０を示す。このデバイスは、顕微鏡のコンデンサレンズに取って代わるように構成される。図１４の実施形態では、このデバイスは、前レンズ７０３と、１つまたは複数の内部レンズ７０４とを有する収集レンズ７０２を含む。収集レンズ７０２の機能および構造は、光検知デバイス１１５および透過マスク７２１が、収集レンズ７０２の後焦点面またはその近くに光検知デバイス１１５が置かれた単一デバイスを好ましく形成するように収集レンズ７０２と一体化されていることを除いて、上で論じた収集レンズ１１０と類似している。収集レンズ筐体７０５内に置かれたダイクロイックミラー１１２は、収集レンズ７０２の後焦点面へ行く光場を光検知デバイス１１５の中に入れるように偏向する一方で、異なる波長の光がレンズを通り抜けることを可能にする。後焦点面を光検知デバイスの上に適正に平行移動させるために、鏡１１２と後焦点面７０６の間の距離「ｓ」と、鏡１１２と光検知デバイス１１５の間の距離「ｓ」とは等しくされ、または実質的に等しくされる。光検知デバイス１１５と同じ平面に配置される透過マスク７２１は、試料浮遊チャンバ７０１の出口カバー７０１ａで発生することが予想される反射損失を補償するために設けられる。光検知デバイス１１５は、可読フォーマットの力測定値を生成するために、１つまたは複数のコネクタまたはケーブル７０８を介して、または無線伝送によって、コンピュータまたは他のデバイスと接続可能であることが好ましい。収集レンズ７０２は、水または油などの液浸媒体を介して浮遊チャンバ７０１の出口カバー７０１ａと整合するように設計され、かつチャンバ７０１内に試料を浮遊させるための媒体の屈折率以上の開口数を有するように設計される。一代替実施形態では、スペーサが、収集レンズに取外し可能に取り付けられ、あるいは、収集レンズとチャンバ７０１の出口カバー７０１ａとの間に望ましい作動距離ｗを維持する機能と共に、筐体７０５と一体化して形成される。
【００５５】
図１５は、浮遊チャンバ７０１内の媒体中に浮遊させた捕獲粒子に作用する光学力の測定を可能にするために、光学顕微鏡の光学列中に設置することができる一実施形態のシステム／デバイス７６０を示す。このデバイスは、顕微鏡のコンデンサレンズに取って代わるように構成される。図１５の実施形態では、このデバイスは、前レンズ７０３と、１つまたは複数の内部レンズ７０４とを有する収集レンズ７０２を含む。収集レンズ７０２の機能および構造は、光検知デバイス１１５、フィルタ１１３、および透過マスク７２１が、収集レンズ７０２の後焦点面またはその近くに光検知デバイス１１５が置かれた単一デバイスを好ましく形成するように収集レンズ７０２と一体化されていることを除いて、上で論じた収集レンズ１１０と類似している。収集レンズ筐体７０５内に置かれたダイクロイックミラー１１２は、収集レンズ７０２の後焦点面へ行く光場を光検知デバイス１１５の中に入れるように偏向する一方で、異なる波長の光がレンズを通り抜けることを可能にする。後焦点面を光検知デバイスの上に適正に平行移動させるために、鏡１１２と後焦点面７０６の間の距離「ｓ」と、鏡１１２と光検知デバイス１１５の間の距離「ｓ」とは等しくされ、または実質的に等しくされる。フィルタ１１３は、ダイクロイックミラー１１２と光検知デバイス１１５の間に配置され、偏向された光を減衰して光検知デバイスの飽和を防止する。光検知デバイス１１５と同じ平面に配置される透過マスク７２１は、試料浮遊チャンバ７０１の出口カバー７０１ａで発生することが予想される反射損失を補償するために設けられる。光検知デバイス１１５は、可読フォーマットの力測定値を生成するために、１つまたは複数のコネクタまたはケーブル７０８を介して、または無線伝送によって、コンピュータまたは他のデバイスと接続可能であることが好ましい。収集レンズ７０２は、水または油などの液浸媒体を介して浮遊チャンバ７０１の出口カバー７０１ａと整合するように設計され、かつチャンバ７０１内に試料を浮遊させるための媒体の屈折率以上の開口数を有するように設計される。一代替実施形態では、スペーサが、収集レンズに取外し可能に取り付けられ、あるいは、収集レンズとチャンバ７０１の出口カバー７０１ａとの間に望ましい作動距離ｗを維持する機能と共に、筐体７０５と一体化して形成される。
【００５６】
再び図１を参照すると、システム１００が備える構成要素は、描かれたあらゆる構成要素より少なくてもよいことに留意することが重要である。加えて、各素子および/または構成要素の他の組合せをあるシステムまたはデバイスに一体化して、粒子に作用する光学力を測定することが、本発明の範囲および広さから逸脱することなく可能である。一実施形態では、このシステムは、光源１０１と、チャンバ１０９と、高開口数トラップ対物レンズ１０７と、チャンバの中に粒子を浮遊させるための浮遊媒体の屈折率以上の開口数を有する収集レンズ１１０と、収集レンズの後焦点面またはその近くに配置された、あるいは後焦点面の光学等価物に配置された光検知デバイスとを備えることができる。構成要素１０２、１０４、１０５、１１２、１１４、１３０および１３２に関しては、これらは個々に、あるいは１つまたは複数の他の構成要素と組み合わせて、システムから省くことができる。例えば、システムが顕微鏡の光学列内で一体化される必要はない。このようなシステムでは、レーザ光源１０１および光検知デバイスは、トラップ対物レンズ１０７および収集レンズ１１０の光路と直列に並べることができ、それによってダイクロイックミラー１０５および１１２が不要になる。加えて、レーザ光源１０１は、構成要素１０２、１０３、１３０、１３２および１０４のうちの１つ以上を必要とせずに、トラップ対物レンズ１０７の入口瞳１０６をちょうど満たす、またはあふれさせることができる平行化および円偏波された光ビームを生成するように構築できることが企図されている。システム性能を向上するために、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく、追加の構成要素または特徴をシステム１００に組み込むことが可能なことが企図されている。
また、本発明は以下に記載する態様を含む。
（態様１）
単一の光ビームを発生する光源と、
浮遊媒体中の粒子を収容するチャンバと、
高い傾斜力を用いることによって光ビーム光子に前記粒子を捕獲させるように前記粒子上に光ビームを集束する高開口数トラップ対物レンズと、
前記粒子によって偏向された光子と前記粒子によって偏向されなかった光子の両方を、捕獲されるべき前記粒子の上半球中に捕獲するように配置された単一の収集レンズであって、前記チャンバ中に前記粒子を浮遊させるための浮遊媒体の屈折率以上の開口数を有する収集レンズと、
前記収集レンズの後焦点面またはその近くに配置された、あるいは後焦点面の光学等価物に配置された光検知デバイスと
を備えるシステム。
（態様２）
前記光源が高出力レーザ光源である、態様１に記載のシステム。
（態様３）
前記収集レンズが約１．３２から約１．４０の間の開口数を有する、態様１に記載のシステム。
（態様４）
前記対物レンズが約０．９０から約１．４０の間の開口数を有する、態様１に記載のシステム。
（態様５）
前記光源によって生成された前記光ビームが直線偏光を有し、前記システムがさらに、前記直線偏光を円偏光または実質的な円偏光に変えるために前記光源と前記トラップ対物レンズとの間に配置された半波長板を備える、態様１に記載のシステム。
（態様６）
前記光検知デバイスが位置検知デバイスまたはカメラである、態様１に記載のシステム。
（態様７）
前記位置検知デバイスが、前記位置検知デバイスの上に投影された光分布の重心のｘ座標およびｙ座標に比例する２つの電気信号を生成するデュオラテラル検出器型である、態様６に記載のシステム。
（態様８）
前記収集レンズの前レンズと前記光検知デバイスの間に配置されて、前記光検知デバイスの飽和を防止するフィルタをさらに備える、態様１に記載のシステム。
（態様９）
前記チャンバが出口カバーを含み、前記システムが、前記光検知デバイスまたはその近くに配置されて前記出口カバーでの反射損失を補償する透過マスクをさらに備える、態様１に記載のシステム。
（態様１０）
前記後焦点面またはその近くの前記光分布の光学等価物を前記光検知デバイスの上に投影するリレーレンズをさらに備える、態様１に記載のシステム。
（態様１１）
前記トラップ対物レンズが入口瞳を有し、前記システムがさらに、前記光源と前記入口瞳の間に配置された１つまたは複数のレンズを備え、前記１つまたは複数のレンズが、前記光ビームの直径を変更して前記トラップ対物レンズの入口瞳を満たすように、またはわずかにあふれさせるように構成される、態様１に記載のシステム。
（態様１２）
前記チャンバが、出口カバーでの光ビーム光子の反射を最小限にする反射防止特性を保有する前記出口カバーを含む、態様１に記載のシステム。
（態様１３）
前記反射防止特性により前記出口カバーでの反射に起因する光子の損失が、前記出口カバーの表面に沿った任意の所与の点で、前記点に当たる光子の入射角に関係なく実質的に一定になる、態様１２に記載のシステム。
（態様１４）
前記光検知デバイスが、前記光検知デバイスの上に投影された光分布の重心のｘ座標とｙ座標から導出される、前記粒子に作用する光学力の測定値を直接または間接に生成することができる、態様１に記載のシステム。
（態様１５）
前記光検知デバイスが、前記収集レンズの後焦点面の光学像に対応する像を生成することができ、前記像が、前記粒子に作用する光学力の測定値を生成するためにコンピュータで可読である、態様１に記載のシステム。
（態様１６）
前記試料と前記収集レンズの前レンズとの間に特定の作動距離を維持するように配置されたスペーサをさらに備える、態様１に記載のシステム。
（態様１７）
粒子に作用する光学力を測定する方法であって、
チャンバ内の浮遊媒体中に前記粒子を浮遊させることと、
高開口数対物レンズを使用するとともに高い傾斜力を用いることによって、前記粒子上に単一の光ビームを集束して光ビーム光子に粒子を捕獲させることと、
前記粒子によって偏向された光子と前記粒子によって偏向されていない光子とを、前記浮遊流体の屈折率以上の開口数を有する単一の収集レンズ系によって前記粒子の上半球中に捕獲することと、
前記捕獲された光子を、前記収集レンズの後焦点面またはその近くに置かれた、あるいは後焦点面の光学等価物に置かれた光検知デバイスに向けることと
を含む方法。
（態様１８）
前記光検知デバイスの上に投影された光分布の重心のｘ座標およびｙ座標に比例する電気信号を生成することをさらに含む、態様１７に記載の方法。
（態様１９）
前記粒子上に集束される光ビームに円偏光または実質的な円偏光を持たせる、態様１７に記載の方法。
（態様２０）
前記チャンバが入口カバーと出口カバーとを備え、前記粒子を前記入口カバーより前記出口カバーに近いところに浮遊させる、態様１７に記載の方法。
（態様２１）
前記後焦点面の光学的等価物を、前記収集レンズと前記光検知デバイスとの間に配置されたリレーレンズによって生成させる、態様１７に記載の方法。
（態様２２）
前記チャンバが出口カバーを備え、前記方法が、前記後焦点面またはその近くに配置された、あるいは後焦点面の等価物に配置された非均一な透過マスクを使用することによって、前記出口カバーでの反射損失を補償することをさらに含む、態様１７に記載の方法。
（態様２３）
前記チャンバが出口カバーを備え、前記方法が、前記出口カバー上に配置された、または前記出口カバー中に混合された反射防止材料を使用することによって、前記出口における反射損失を補償することをさらに含む、態様１７に記載の方法。
（態様２４）
前記チャンバが出口カバーを備え、前記方法が、前記出口カバーでの反射による光子の損失を、前記出口カバーの表面に沿った任意の所与の点において、前記点に当たる前記光子の入射角に関係なく実質的に一定に保つことをさらに含む、態様１７に記載の方法。
（態様２５）
前記トラップ対物レンズが入口瞳を有し、前記方法が、前記入口瞳に向けられる光ビームの直径を修正することによって、前記トラップ対物レンズの入口瞳を満たすか、またはわずかにあふれさせることをさらに含む、態様１７に記載の方法。
（態様２６）
前記捕獲された光子を位置検知デバイスまたはカメラに向けて、前記収集レンズの後焦点面またはその近くの前記光学像に対応する光学像を前記位置検知デバイスまたはカメラのところに作り出す、態様１７に記載の方法。
（態様２７）
チャンバの入口カバーと出口カバーの間の浮遊媒体中に浮遊する粒子を単一の光ビームを用いて捕獲するように構成されている光学顕微鏡の光学列中に設置されるシステムであって、
前記粒子によって偏向された光子と前記粒子によって偏向されなかった光子とを前記粒子の上半球中に捕獲するために前記顕微鏡のチャンバの前記出口カバーまたはその近くに設置される単一の収集レンズ系であって、前記チャンバ中に前記粒子を浮遊させるための浮遊媒体の屈折率以上になるように設計された開口数を有する前記収集レンズと、
前記収集レンズの前記後焦点面またはその近くに配置された、あるいは後焦点面の光学等価物に配置された光検知デバイスであって、前記光検知デバイスの上に投影された光分布の重心のｘ座標とｙ座標から導出される前記粒子に作用する光学力の測定値を直接または間接に生成することができる前記光検知デバイスと
を備えるシステム。
（態様２８）
前記光検知デバイスが、前記光置検知デバイスの上に投影された光分布の重心のｘ座標およびｙ座標に比例する電気信号を生成することができる、態様２７に記載のシステム。
（態様２９）
前記光検知デバイスが、前記収集レンズの後焦点面の光学像に対応する像を生成することができ、前記像が、前記力の測定値を生成するためにコンピュータで可読である、態様２７に記載のシステム。
（態様３０）
前記光検知デバイスが位置検知デバイスまたはカメラである、態様２７に記載のシステム。
（態様３１）
前記収集レンズの前レンズと前記光検知デバイスの間に配置されて前記後焦点面の光学等価物を作り出すリレーレンズをさらに備える、態様２７に記載のシステム。
（態様３２）
前記収集レンズの前レンズと前記光検知デバイスの間に配置されて前記光検知デバイスの飽和を防止するフィルタをさらに備える、態様２７に記載のシステム。
（態様３３）
前記収集レンズが約１．３２から約１．４０の間の開口数を有する、態様２７に記載のシステム。
（態様３４）
前記光検知デバイスまたはその近くに配置されて前記出口カバーで生じる反射損失を補償する透過マスクをさらに備える、態様２７に記載のシステム。
（態様３５）
前記位置検知デバイスが、前記位置検知デバイスの上に投影された光分布の重心のｘ座標およびｙ座標に比例する２つの電気信号を生成するデュオラテラル検出器型である、態様３０に記載のシステム。
（態様３６）
前記収集レンズが油浸レンズまたは水浸レンズである、態様２７に記載のシステム。
（態様３７）
前記収集レンズおよび光検知デバイスが単一のデバイスに組み込まれている、態様２７に記載のシステム。
（態様３８）
前記収集レンズ、リレーレンズおよび光検知デバイスが単一のデバイスに組み込まれている、態様２７に記載のシステム。
（態様３９）
前記収集レンズ、フィルタおよび光検知デバイスが単一のデバイスに組み込まれている、態様２７に記載のシステム。
（態様４０）
前記収集レンズ、透過マスクおよび光検知デバイスが単一のデバイスに組み込まれている、態様２７に記載のシステム。
（態様４１）
チャンバの入口カバーと出口カバーの間の浮遊媒体中に浮遊する粒子を単一の光ビームを用いて捕獲するように構成されている光学顕微鏡の光学列中に設置されるシステムであって、
前記粒子によって偏向された光子と前記粒子によって偏向されなかった光子とを前記粒子の上半球中に捕獲するために前記顕微鏡のチャンバの前記出口カバーまたはその近くに設置された単一の収集レンズ系であって、前記チャンバ中に前記粒子を浮遊させるための浮遊媒体の屈折率以上になるように設計された開口数を有する前記収集レンズと、
前記収集レンズの前記後焦点面またはその近くに配置された、あるいは後焦点面の光学等価物に配置された光検知デバイスであって、前記光検知デバイスの上に投影された光分布の重心のｘ座標とｙ座標から導出される前記粒子に作用する光学力の測定値を直接または間接に生成することができる光検知デバイスと、
前記収集レンズの前レンズと前記光検知デバイスの間に配置されて前記後焦点面の光学等価物を作り出すリレーレンズと、
前記収集レンズの前レンズと前記光検知デバイスとの間に配置されて前記光検知デバイスの飽和を防止するフィルタと
を備えるシステム。
（態様４２）
前記収集レンズ、リレーレンズ、フィルタおよび光検知デバイスが単一のデバイスに組み込まれている、態様４１に記載のシステム。
（態様４３）
チャンバの入口カバーと出口カバーとの間の浮遊媒体中に浮遊する粒子を単一の光ビームを用いて捕獲するように構成されている光学顕微鏡の光学列中に設置されるシステムであって、
前記粒子によって偏向された光子と前記粒子によって偏向されなかった光子とを前記粒子の上半球中に捕獲するために前記顕微鏡のチャンバの前記出口カバーまたはその近くに設置された単一の収集レンズ系であって、前記チャンバ中に前記粒子を浮遊させるための浮遊媒体の屈折率以上になるように設計された開口数を有する前記収集レンズ系と、
前記収集レンズの前記後焦点面またはその近くに配置された、あるいは後焦点面の光学等価物に配置された光検知デバイスであって、前記光検知デバイスの上に投影された光分布の重心のｘ座標とｙ座標から導出される前記粒子に作用する光学力の測定値を直接または間接に生成することができる光検知デバイスと、
前記収集レンズの前レンズと前記光検知デバイスとの間に配置されて前記後焦点面の光学等価物を作り出すリレーレンズと、
前記光検知デバイスまたはその近くに配置されて前記チャンバでの反射損失を補償する透過マスクと
を備えるシステム。
（態様４４）
前記収集レンズ、リレーレンズ、透過マスクおよび光検知デバイスが単一のデバイスに組み込まれている、態様４３に記載のシステム。
（態様４５）
チャンバの入口カバーと出口カバーの間の浮遊媒体中に浮遊する粒子を単一の光ビームを用いて捕獲するように構成されている光学顕微鏡の光学列中に設置されるシステムであって、
前記粒子によって偏向された光子と前記粒子によって偏向されなかった光子とを前記粒子の上半球中に捕獲するために前記顕微鏡のチャンバの前記出口カバーまたはその近くに設置された単一の収集レンズ系であって、前記チャンバ中に前記粒子を浮遊させるための浮遊媒体の屈折率以上になるように設計された開口数を有する前記収集レンズと、
前記収集レンズの前記後焦点面またはその近くに配置された、あるいは後焦点面の光学等価物に配置された光検知デバイスであって、前記光検知デバイスの上に投影された光分布の重心のｘ座標とｙ座標から導出される前記粒子に作用する光学力の測定値を直接または間接に生成することができる光検知デバイスと、
前記収集レンズの前レンズと前記光検知デバイスとの間に配置されて前記後焦点面の光学等価物を作り出すリレーレンズと、
前記収集レンズの前レンズと前記光検知デバイスとの間に配置されて前記光検知デバイスの飽和を防止するフィルタと、
前記光検知デバイスまたはその近くに配置されて前記チャンバでの反射損失を補償する透過マスクと
を備えるシステム。
（態様４６）
前記収集レンズ、リレーレンズ、フィルタ、透過マスクおよび光検知デバイスが単一のデバイスに組み込まれている、態様４５に記載のシステム。
（態様４７）
チャンバの入口カバーと出口カバーの間の浮遊媒体中に浮遊する粒子を単一の光ビームを用いて捕獲するように構成されている光学顕微鏡の光学列中に設置されるシステムであって、
前記粒子によって偏向された光子と前記粒子によって偏向されなかった光子とを前記粒子の上半球中に捕獲するために前記顕微鏡のチャンバの前記出口カバーまたはその近くに設置された単一の収集レンズ系であって、前記チャンバ中に前記粒子を浮遊させるための浮遊媒体の屈折率以上になるように設計された開口数を有する収集レンズと、
前記収集レンズの前記後焦点面またはその近くに配置された光検知デバイスであって、前記光検知デバイスの上に投影された光分布の重心のｘ座標とｙ座標から導出される前記粒子に作用する光学力の測定値を直接または間接に生成することができる光検知デバイスと、
前記収集レンズの前レンズと前記光検知デバイスとの間に配置されて前記光検知デバイスの飽和を防止するフィルタと
を備えるシステム。
（態様４８）
前記収集レンズ、フィルタおよび光検知デバイスが単一のデバイスに組み込まれている、態様４７に記載のシステム。
（態様４９）
チャンバの入口カバーと出口カバーの間の浮遊媒体中に浮遊する粒子を単一の光ビームを用いて捕獲するように構成されている光学顕微鏡の光学列中に設置されるシステムであって、
前記粒子によって偏向された光子と前記粒子によって偏向されなかった光子とを前記粒子の上半球中に捕獲するために前記顕微鏡のチャンバの前記出口カバーまたはその近くに設置された単一の収集レンズ系であって、前記チャンバ中に前記粒子を浮遊させるための浮遊媒体の屈折率以上になるように設計された開口数を有する収集レンズと、
前記収集レンズの前記後焦点面またはその近くに配置された光検知デバイスであって、前記光検知デバイスの上に投影された光分布の重心のｘ座標とｙ座標から導出される前記粒子に作用する光学力の測定値を直接または間接に生成することができる光検知デバイスと、
前記光検知デバイスまたはその近くに配置されて前記チャンバでの反射損失を補償する透過マスクと
を備えるシステム。
（態様５０）
前記収集レンズ、透過マスクおよび光検知デバイスが単一のデバイスに組み込まれている、態様４９に記載のシステム。
（態様５１）
チャンバの入口カバーと出口カバーの間の浮遊媒体中に浮遊する粒子を単一の光ビームを用いて捕獲するように構成されている光学顕微鏡の光学列中に設置されるシステムであって、
前記粒子によって偏向された光子と前記粒子によって偏向されなかった光子とを前記粒子の上半球中に捕獲するために前記顕微鏡のチャンバの前記出口カバーまたはその近くに設置された単一の収集レンズ系であって、前記チャンバ中に前記粒子を浮遊させるための浮遊媒体の屈折率以上になるように設計された開口数を有する前記収集レンズと、
前記収集レンズの前記後焦点面またはその近くに配置された光検知デバイスであって、前記光検知デバイスの上に投影された光分布の重心のｘ座標とｙ座標から導出される前記粒子に作用する光学力の測定値を直接または間接に生成することができる光検知デバイスと、
前記収集レンズの前レンズと前記光検知デバイスとの間に配置されて前記光検知デバイスの飽和を防止するフィルタと、
前記光検知デバイスまたはその近くに配置されて前記チャンバでの反射損失を補償する透過マスクと
を備えるシステム。
【図１】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９Ａ】
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【図９Ｂ】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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