(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
プランテオースを食品１００ｇ当り１ｇ以上含有してなることを特徴とする発酵食品。
【請求項２】
発酵菌として酵母菌のみを用いて製造してなる発酵食品であることを特徴とする、請求項１に記載の発酵食品。
【請求項３】
発酵食品の製造に用いる酵母菌が、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅであることを特徴とする請求項１又は２に記載の発酵食品。
【請求項４】
パン類、清酒類、ビール類、ワイン類から選ばれる少なくともひとつであることを特徴とする請求項１〜３のいずれか１項に記載の発酵食品。
【請求項５】
抗う蝕機能を有することを特徴とする請求項１〜４のいずれか１項に記載の発酵食品。
【請求項６】
ビフィズス菌増殖機能を有することを特徴とする請求項１〜４のいずれか１項に記載の発酵食品。
【請求項７】
プランテオースを添加した後に、発酵菌として酵母菌のみを用いて製造することを特徴とするプランテオースを食品１００ｇ当り１ｇ以上含有する発酵食品の製造方法。
【請求項８】
酵母菌が、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅであることを特徴とする請求項７に記載の製造方法。
【請求項９】
パン類、清酒類、ビール類、ワイン類から選ばれる少なくともひとつの製造方法であることを特徴とする請求項７又は８に記載の製造方法。
【請求項１０】
プランテオースを有効成分として含有することを特徴とする抗う蝕剤。
【請求項１１】
経口投与により、１日あたりプランテオースとして０．２〜５００ｍｇ／ｋｇ・体重の量で用いられることを特徴とする請求項１０に記載の剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、プランテオースを含有する食品組成物及びその製造方法、プランテオースを有効成分として含有する医薬品等に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
近年の健康志向を背景に、ヒトなどに有益な生理作用をもたらす天然成分（いわゆる機能性成分）が注目されており、その代表格として挙げられるのが機能性糖質素材である。機能性糖質素材とは、生活習慣病（高血圧、糖尿病など）予防治療、腸内環境改善、抗ストレス、虫歯予防治療などの作用を有する単糖、オリゴ糖、多糖類、糖アルコールなどを指す。
【０００３】
このうち、機能性糖質素材の虫歯予防治療用途としての抗う蝕効果については、いくつかの具体的な報告がされている。例えば、オリゴ糖であるパラチノースの抗う蝕効果（非特許文献１）やジフルクトース・ジアンヒドリドの抗う蝕効果（特許文献１）、糖アルコールであるキシリトールの抗う蝕効果などが報告され、これらを添加した機能性食品や、これらを有効成分とした医薬品などが開発されている。
【０００４】
また、機能性糖質素材の腸内環境改善用途としてのビフィズス菌増殖効果については、オリゴ糖であるラフィノースのビフィズス菌増殖効果（非特許文献２）などが具体的に報告されている。そして、ラフィノース等を添加した機能性食品や、これらを有効成分とした医薬品なども同様に開発されている。
【０００５】
なお、機能性糖質素材の多くは元来植物等に含まれているものであるが、その含有量はごくわずかであるため、通常そのような植物等をそのまま摂取しても十分な効果を得ることは難しい。また、ラフィノースのように末端にフラクトシル基がβ２，１結合で結合した機能性糖質素材は酵母菌などの発酵菌により資化されるため、例えば発酵食品において、このような機能性糖質素材を含有させたものを製造する際には、通常、単に素材を添加するだけでは当該発酵食品中に有効量を残存させることは困難であり、当該糖質素材を有効成分とする機能性発酵食品を得ること自体が困難であった。よって、微生物を利用する食品等での機能性糖質素材の利用においては、発酵菌などの利用微生物の資化性を勘案して製造する必要があった。このような背景から、当業界において、より幅広く利用しやすい新規な機能性糖質素材の開発が常に期待されている。
【０００６】
一方、最近、低カロリーな新規糖質素材としてプランテオースが見いだされ、その製造方法などが報告されている（特許文献２）。このプランテオース（α−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→６）−β−Ｄ−ｆｒｕｃｔｏｆｕｒａｎｏｓｙｌ  α−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ）は、ガラクトースとスクロースのフラクトシル基が１，６結合した構造を有するα−ガラクトオリゴ糖であり、オオバコ属植物、タバコ、ゴマ、サルビアの種子などに含まれている。
【０００７】
しかし、プランテオースについては、標品が試薬として市販されていないため、その生理機能の詳細について未だ具体的な報告はない。また、プランテオースの酵母菌、ビフィズス菌、う蝕原性細菌等による資化性についても詳細は確認されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開２００４−２８４９８５号公報
【特許文献２】特開２００９−１４８１８９号公報
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】小児歯科科学雑誌，２３（３），６７８（１９８５）
【非特許文献２】Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉａ  Ｍｉｃｒｏｆｌｏｒａ，６，５９−６３（１９８７）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明は、低カロリーな機能性糖質素材を有効成分とした、ヒト及びヒトを除く動物に有用な生理作用を発揮する食品組成物及びその製造方法、有用な医薬品等を提供することを目的とする。また、この機能性糖質素材の添加量（有効量）が維持された発酵食品及びその簡便な製造方法の提供を副次的な目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
上記目的を達成するため、本発明者らは、純度の高いプランテオースを酵素合成法によって量的に得ることに成功し、その生理機能の詳細について鋭意研究の結果、所定量のプランテオースを有効成分として添加することで抗う蝕作用及び／又はビフィズス菌増殖作用を発揮する食品組成物及び医薬品を提供できることを見いだした。さらに、本発明者らは、プランテオースが耐イースト性を有することも見いだし、酵母菌による発酵食品の製造時にプランテオースを添加しても、製品中に添加したプランテオースがほぼ残存することも明らかにした。そして、プランテオースの添加により、抗う蝕作用及び／又はビフィズス菌増殖作用の発揮が可能な発酵食品を簡便かつ効率的に提供できることを見いだした。
【００１２】
すなわち、本発明の実施形態は次のとおりである。
（１）プランテオースを食品１００ｇ当り１ｇ以上（好ましくは２ｇ以上）含有してなることを特徴とする食品組成物。
（２）発酵食品であることを特徴とする（１）に記載の食品組成物。
（３）発酵菌として酵母菌（特に、パン酵母及び／又は酒精酵母）のみを用いて製造してなる発酵食品であることを特徴とする、（２）に記載の食品組成物。
（４）発酵食品の製造に用いる酵母菌が、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅであることを特徴とする（２）又は（３）に記載の食品組成物。
（５）パン類、清酒類、ビール類、ワイン類から選ばれる少なくともひとつであることを特徴とする（２）〜（４）のいずれか１つに記載の食品組成物。
（６）抗う蝕機能を有することを特徴とする（１）〜（５）のいずれか１つに記載の食品組成物。
（７）ビフィズス菌増殖機能を有することを特徴とする（１）〜（５）のいずれか１つに記載の食品組成物。
（８）プランテオースを添加した後に、発酵菌として酵母菌（特に、パン酵母及び／又は酒精酵母）のみを用いて製造することを特徴とするプランテオースを食品１００ｇ当り１ｇ以上（好ましくは２ｇ以上）含有する発酵食品の製造方法。
（９）酵母菌が、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅであることを特徴とする（８）に記載の製造方法。
（１０）パン類、清酒類、ビール類、ワイン類から選ばれる少なくともひとつの製造方法であることを特徴とする（８）又は（９）に記載の製造方法。
（１１）プランテオースを有効成分として含有することを特徴とする抗う蝕剤。
（１２）プランテオースを有効成分として含有することを特徴とするビフィズス菌増殖剤。
（１３）経口投与により、１日あたりプランテオースとして０．２〜５００ｍｇ／ｋｇ・体重、好ましくは１〜２５０ｍｇ／ｋｇ・体重、更に好ましくは１０〜１５０ｍｇ／ｋｇ・体重の量で用いられることを特徴とする（１１）又は（１２）に記載の剤。
【発明の効果】
【００１３】
本発明によれば、プランテオースを有効成分として含有する抗う蝕作用及び／又はビフィズス菌増殖作用を有する食品組成物及び医薬品を提供できる。そして、酵母菌を用いて発酵製造した発酵食品にプランテオースを添加しても、当該成分について安定的に有効量（添加量）を残存させることができ、抗う蝕作用及び／又はビフィズス菌増殖作用の発揮が可能な発酵食品を簡便かつ効率的に製造できる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】各種糖質素材含有液へのＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓ  ＭＴ８１４８株添加時のｐＨ変化グラフを示す。なお、図中のＳｕｃはスクロース、Ｐｌａはプランテオース、ＤＦＡＩＩＩはジフルクトース・ジアンヒドリドＩＩＩ、Ｒａｆはラフィノース、Ｘｙｌ−ＯＨはキシリトールを示す。
【図２】各種糖質素材含有液へのＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓ  ６７１５株添加時のｐＨ変化グラフを示す。なお、図中のＳｕｃはスクロース、Ｐｌａはプランテオース、ＤＦＡＩＩＩはジフルクトース・ジアンヒドリドＩＩＩ、Ｒａｆはラフィノース、Ｘｙｌ−ＯＨはキシリトールを示す。
【図３】プランテオース及びラフィノースの耐イースト性確認試験結果（イースト資化処理による残存率）を示すグラフである。
【図４】プランテオース（Ｐｌａ）、スクロース（Ｓｕｃ）、ラフィノース（Ｒａｆ）の酸性条件における熱安定性試験結果（１００℃、３０ｍｉｎ処理後の残存率）を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本発明においては、プランテオースを有効成分として使用する。プランテオース（α−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→６）−β−Ｄ−ｆｒｕｃｔｏｆｕｒａｎｏｓｙｌ  α−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ）は、オオバコ属植物、タバコ、ゴマ、サルビアの種子などから抽出して得た抽出物、その精製物などが使用できるが、スクロースとガラクトースを含む原料から微生物由来の酵素等によって合成して得たものなどの合成品を用いても良い。また、試薬レベルの純品を用いることも差し支えない。これらを食品又は医薬品に有効量添加する。
【００１６】
まず、医薬品の場合、その形態としては例えば錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、シロップ剤等をあげることができる。これらの各種製剤は、常法にしたがって有効成分であるプランテオースを賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、矯味矯臭剤、溶解補助剤、懸濁剤、コーティング剤などの医薬の製剤技術分野において通常使用しうる既知の補助剤等を用いて製剤化することができる。
また、食品組成物の形態についても限定はなく、プランテオースを添加できる形態であれば固体状（粉末、顆粒状その他）、ゲル状、ペースト状、液状ないしは懸濁状などどのような形態でも良く、さらにはこれらを通常の食品（飲料、発酵食品、乳製品や畜肉加工品等の動物性加工食品、小麦粉製品や豆加工品等の植物性加工食品など）に添加、混合するなど、適宜選択することができる
【００１７】
本発明に係る医薬品は、ヒト又はヒトを除く動物に経口投与を行う。投与量は、例えば１日あたりプランテオースとして０．２〜５００ｍｇ／ｋｇ・体重、好ましくは１〜２５０ｍｇ／ｋｇ・体重、更に好ましくは１０〜１５０ｍｇ／ｋｇ・体重の量で用いるのが有効である。一部のヒトを除く動物などにおいては、ヒトへの投与量等から常用される所定の換算を行って、適宜投与量を設定、変更してもよい。
医薬品へのプランテオース配合量は、上記投与量にしたがって適宜設定すればよい。なお、プランテオースは非常に安全性の高い天然成分であるため、上記投与量を超えて設計してもその安全性に問題はない。
【００１８】
本発明に係る食品組成物は、プランテオースを食品１００ｇ当り１ｇ以上（好ましくは２〜３ｇ以上）含有させる。これにより、天然の植物などには見られない濃度のプランテオースを含有した食品組成物を提供できる。なお、発酵食品の場合には、プランテオースを添加した後に酵母菌によって発酵させて製造するのがプランテオースの特性利用や簡便性という点で好適である。しかし、発酵後にプランテオースを添加する方法も選択できる。酵母菌としては、パン酵母及び／又は酒精酵母を使用するのが好ましく、特に、サッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）を使用するのが好ましいが、これらに限定されるものではない。
【００１９】
本発明に係る発酵食品は、製造に利用する発酵菌（主にアルコール発酵）として酵母菌のみを用いて製造してなることが特徴であり、限定されるものでないが、パン類、清酒類、ビール類、ワイン類が例示される。なお、本発明の「酵母菌のみ」とは、発酵菌としてではなく、原料中の澱粉類の糖化などの目的で麹菌等の酵母菌以外の微生物を利用する発酵食品も含まれるし、製造に利用する微生物が酵母菌だけの発酵食品（つまり、微生物として酵母菌だけを利用して製造する発酵食品）も本発明の範囲に含まれる。また、いわゆる発酵食品でなくとも、酵母菌のアルコールや炭酸ガス産生作用等を利用する食品も除外されない。
【００２０】
上記のような酵母菌以外の微生物を利用する発酵食品の例としては、麹菌を利用する清酒類が挙げられる。清酒製造においては、最初にプランテオースを添加して製造することもできるが、もろみ仕込み工程を経た後、発酵工程直前にプランテオースを添加するのがより好ましい。
【００２１】
このようにして得られる本発明のプランテオースを有効成分とする食品組成物又は医薬品を給与又は投与（特に経口投与）することにより、ヒト又はヒトを除く動物に対してビフィズス菌増殖促進作用（腸内環境改善作用）及び／又は抗う蝕作用（虫歯予防治療作用）という有益な生理作用をもたらすことができる。
したがって、プランテオースを有効成分として配合することで、有用な虫歯予防治療医薬品・食品、腸内環境改善医薬品・食品等が提供できる。
【００２２】
以下、本発明の実施例について述べるが、本発明はこれらの実施例のみに限定されるものではなく、本発明の技術的思想内においてこれらの様々な変形が可能である。
【実施例１】
【００２３】
（う蝕原性細菌の各種糖質素材資化性確認）
う蝕は、う蝕原性細菌（虫歯菌）が糖質素材を資化して生成する有機酸が歯のエナメル質を脱灰することで起こる。そこで、う蝕原性細菌の各種糖質素材の資化性について確認するため、以下の試験を実施した。
【００２４】
う蝕原性細菌としては、独立行政法人  理化学研究所  バイオリソースセンターより入手したＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓ  ＭＴ８１４８株（ＪＣＭ５１７５）及びＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓ  ６７１５株（ＪＣＭ５１７６）を使用した。また、糖質素材としてはスクロース、プランテオース、ジフルクトース・ジアンヒドリドＩＩＩ、ラフィノース、キシリトール、パラチノースを使用した。なお、ジフルクトース・ジアンヒドリドＩＩＩ及びラフィノースは日本甜菜製糖株式会社製品を用い、プランテオースは酵素縮合反応により調製した凍結乾燥品（純度９５％）を使用し、その他は試薬グレードの精製品を使用した。
【００２５】
まず、上記のう蝕原性細菌をそれぞれＮＵＴＲＩＥＮＴ液体培地（関東化学株式会社製品）３００μＬにて懸濁した。そして、この菌体懸濁液２００μＬをＢＬＡＩＮ  ＨＥＡＲＴ  ＩＮＦＵＳＩＯＮ液体培地（ＢＨＩ液体培地，関東化学株式会社製品）５ｍＬに加え、３７℃で２４時間静置培養した。同じ操作をもう一度行って継代培養し、培養液をＢＨＩ液体培地１００ｍＬに加えて３７℃で２４時間攪拌しながら本培養を行った。
【００２６】
上記本培養液を容器に移し、７０００ｒｐｍで１０分間遠心分離を行い、上清を分離除去したあと５ｍＭ濃度のＰＢＳ（リン酸生理食塩水）で２回洗浄処理した。得られた菌体をＰＢＳにてＯＤ５５０が１０〜１５となるように調製し、試験に使用する菌液とした。
【００２７】
上記の７種糖質素材をそれぞれ５％溶液（１０ｍＬ）となるように調製し、これらを３７℃でインキュベートし、菌液２ｍＬを加えてから最初５分間は１分おきに、その後は５分おきにガラス電極のｐＨメーターでｐＨの経時変化を測定した。なお、純水に菌液を添加したものをコントロールとした。
【００２８】
測定結果を図１及び図２に示した。Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓ  ＭＴ８１４８株及びＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓ  ６７１５株のいずれについてもプランテオース添加でのｐＨ変化はほとんどなく、いずれの菌株もプランテオースを資化せず有機酸を産生しないことが示された。
【実施例２】
【００２９】
（ビフィズス菌の各種糖質素材資化性確認）
ビフィズス菌のグルコース、ラフィノース、プランテオース資化性について確認するため、以下の試験を実施した。
【００３０】
ビフィズス菌としては、独立行政法人  理化学研究所  バイオリソースセンターより入手したＢｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ（ＪＣＭ１２７５Ｔ）、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｌｏｎｇｕｍ（ＪＣＭ１２７７Ｔ）、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｂｒｅｖｅ（ＪＣＭ１１９２Ｔ）、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｂｉｆｉｄｕｍ（ＪＣＭ１２５５Ｔ）、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｐｓｅｕｄｏｃａｔｅｎｕｌａｔｕｍ（ＪＣＭ１２００Ｔ）、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｃａｔｅｎｕｌａｔｕｍ（ＪＣＭ１１９４Ｔ）を使用した。
【００３１】
まず、糖分解試験用ＧＡＭ半流動培地（日水製薬株式会社製品）に０．２％ブロモクレゾールパープルを２０ｍＬ／Ｌの割合で添加し、これに上記糖質素材を各０．５％添加した。これを試験管に２．５ｍＬずつ分注後、高圧滅菌（１１５℃１５分）したものを試験培地とした。なお、グルコースは試薬グレードの精製品を、ラフィノースは日本甜菜製糖株式会社製品を用い、プランテオースは酵素縮合反応により調製した凍結乾燥末品（純度９５％）を使用した。
【００３２】
各ビフィズス菌はＢＬ培地（日水製薬株式会社製品）で嫌気培養し、発育したコロニーをシステイン・ＨＣｌチオグリコール液に懸濁して試験培地の底部に０．０２ｍＬ／２．５ｍＬの割合で摂取した。これを３７℃で３日間培養し、ｐＨの変化を調べた。
【００３３】
各ビフィズス菌の培地の色調変化を表１に示した。ラフィノースは一部菌株で資化できないものが見られたが、プランテオースはグルコースと同様にほぼ全ての菌株で資化性が見られた。よって、プランテオースは、ビフィズス菌増殖作用を有することが示された。
【００３４】
【表１】
0005805464.tif 000002
【実施例３】
【００３５】
（プランテオースの耐イースト性確認試験）
プランテオース等のイーストによる資化の有無（耐イースト性）を確認する目的で、以下の試験を実施した。
【００３６】
糖質素材としては、プランテオース及びラフィノース（いずれも日本甜菜製糖株式会社製品）を使用した。イーストは、パン酵母（スーパーカメリアドライイースト、日清フーズ株式会社製品）を使用した。
まず、Ｂｘ４０に調整したプランテオース又はラフィノースの糖溶液各１．３ｇに、イーストを０．１３ｇ加えて６０℃で反応させた。そして、その反応液を経時的にサンプリングし、ＨＰＬＣ（パルスドアンペロメトリー法）にて糖液を分析した。
【００３７】
結果を図３に示した。ラフィノースは反応開始後徐々に加水分解され、メリビオースとフルクトースにまで分解された。そして、反応開始後１５分にはラフィノースは残存率０％となった。これに対し、プランテオースは全く加水分解されず、耐イースト性を有することが明らかとなった。
【実施例４】
【００３８】
（プランテオースの酸性条件における熱安定性確認試験）
プランテオースを含む各種糖質素材の酸性条件における熱安定性を確認するため、以下の試験を実施した。
【００３９】
糖質素材としてはスクロース、プランテオース、ラフィノースを使用した。なお、ラフィノースは日本甜菜製糖株式会社製品を用い、その他は試薬グレードの精製品を使用した。
まず、各糖を１％含む水溶液１０ｍＬを撹拌しながら１Ｎ塩酸を加え、ガラス電極のｐＨメーターでｐＨを測定しながらｐＨ１、２、３、４、５に調整し、各ｐＨで７００μＬサンプリングした。そして、このサンプルを１００℃で３０分間作用させた後、直ちに氷冷し、ＨＰＬＣ（ＫＳ−８０１カラム法）にて各糖の残存率を求めた。
【００４０】
結果を図４に示した。酸性条件における熱安定性（糖残存率）は、プランテオース、ラフィノース及びスクロースの順であった。プランテオースは、ｐＨ３〜５付近での安定性はラフィノースやスクロースより高いが、ｐＨ１〜２での安定性はラフィノースやスクロースとあまり変わらなかった。
【実施例５】
【００４１】
（プランテオース含有製剤及び食品組成物の製造）
製剤としては、プランテオース８０重量部、コーンスターチ２０重量部を混合し、得られた混合物をヒドロキシプロピルメチルセルロースの５％水溶液で流動層造粒し、プランテオースを主成分とする細粒剤を得た。
【００４２】
また、食品組成物としては、強力粉２００ｇに塩、砂糖、イーストフード等を適量添加したものにプランテオースを対粉３％添加し、これに１３６ｇ加水して混捏しパン生地を作製した後、市販パン酵母（スーパーカメリアドライイースト，日清フーズ株式会社製品）を用いて定法により発酵させ、プランテオースを約３％含有する食パン（発酵食品）を得た。
【００４３】
本発明を要約すれば、以下の通りである。
【００４４】
本発明は、低カロリーな機能性糖質素材を有効成分として含有する、ヒト及びヒトを除く動物に有用な生理作用を発揮する食品組成物及びその製造方法、有用な医薬品等を提供することを目的とする。
【００４５】
そして、プランテオースを１％以上含有する食品組成物を製造することで、抗う蝕作用及び／又はビフィズス菌増殖作用が期待できる食品組成物を簡便かつ効率的に提供し、また、プランテオースを有効成分として含有させることで、抗う蝕作用及び／又はビフィズス菌増殖作用を発揮する医薬品を提供する。
【図１】
0005805464.tif 000003
【図２】
0005805464.tif 000004
【図３】
0005805464.tif 000005
【図４】
0005805464.tif 000006