(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
相互に連通する孔を有する、組織修復用の三次元スキャフォールドであって、
該スキャフォールドは、
組織の前記スキャフォールドの構造支持のためのスキャフォールド本体であって、前記スキャフォールド本体を規定し且つ０．４ＭＰａを超えるスキャフォールド本体の圧縮強さを提供するために、相互に結合されたスキャフォールド本体の構成要素を含む、スキャフォールド本体を含んでおり、前記スキャフォールド本体の構成要素は、繊維、中空繊維、チューブ、リボン、中実球、中空球、粒子、及びそれらの組み合わせの少なくとも１以上の形態を有し、
体液の取り込みのためにスキャフォールド中へ流体の流れをもたらすため前記スキャフォールド本体は１５〜９０容量％の多孔率を有し、
前記スキャフォールド本体の構成要素は、重量％で
Ｂ２Ｏ３      ４０〜９０
Ｎａ２Ｏ      ０〜２５
Ｌｉ２Ｏ      ０〜２５
Ｋ２Ｏ        ０〜２５
Ｒｂ２Ｏ      ０〜２５
ＣａＯ        ０〜４０
ＭｇＯ        ０〜２５
ＳｒＯ        ０〜４０
ＢａＯ        ０〜５０
Ｐ２Ｏ５      ０〜１０
ＳｉＯ２      ０〜１８
Ａｌ２Ｏ３    ０〜３
Ｆ            ０〜４
遷移金属元素  累積で０〜１０
を含む構成要素材料から形成されており、
Ｌｉ２Ｏ、Ｎａ２Ｏ、Ｋ２ＯおよびＲｂ２Ｏの１種以上は、１〜５０重量％の累積濃度で存在し、
ＭｇＯ、ＳｒＯ、ＢａＯおよびＣａＯの１種以上は１〜５０重量％の累積濃度で存在することを特徴とするスキャフォールド。
【請求項２】
Ｂ２Ｏ３濃度が５０〜９０重量％であることを特徴とする請求項１に記載のスキャフォールド。
【請求項３】
Ｂ２Ｏ３濃度が６０〜８２重量％であることを特徴とする請求項１に記載のスキャフォールド。
【請求項４】
前記スキャフォールド本体の構成要素が、ＭｇＯを１〜２５重量％の濃度で含むことを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載のスキャフォールド。
【請求項５】
前記スキャフォールド本体の構成要素が、Ｋ２Ｏを１〜２５重量％の濃度で含み、ＭｇＯを１〜２５重量％の濃度で含むことを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載のスキャフォールド。
【請求項６】
前記構成要素材料中におけるＣａ濃度が５重量％未満であることを特徴とする請求項１〜５のいずれかに記載のスキャフォールド。
【請求項７】
前記構成要素材料中におけるＣａ濃度が０．１重量％未満であることを特徴とする請求項１〜５のいずれかに記載のスキャフォールド。
【請求項８】
前記構成要素材料が、Ｌｉ２Ｏ、Ｎａ２Ｏ、Ｋ２ＯおよびＲｂ２Ｏから選ばれる２種以上の酸化物を５〜２５重量％の累積濃度で含むことを特徴とする請求項１〜７のいずれかに記載のスキャフォールド。
【請求項９】
前記構成要素材料が、Ｌｉ２Ｏ、Ｎａ２Ｏ、Ｋ２ＯおよびＲｂ２Ｏから選ばれる２種以上の酸化物を５〜２５重量％の累積濃度で含み、ＭｇＯ、ＳｒＯ、ＢａＯおよびＣａＯから選ばれる２種以上の酸化物を１〜４５重量％の累積濃度で含むことを特徴とする請求項１〜８のいずれかに記載のスキャフォールド。
【請求項１０】
前記構成要素材料が、さらに、Ｚｎ、Ｃｕ、Ｆｅ、Ｍｎ、Ｓｉ、Ｓｒ、Ｎｉ、ＭｏおよびＳｅからなる群から選ばれる１種以上の元素を、１元素あたり０．０１〜１０重量％で且つ累積して２５重量％未満の量で含むことを特徴とする請求項１〜９のいずれかに記載のスキャフォールド。
【請求項１１】
前記構成要素材料が、さらに、０．０１〜１０重量％のＣｕを酸化銅として含むことを特徴とする請求項１〜１０のいずれかに記載のスキャフォールド。
【請求項１２】
前記スキャフォールド本体の構成要素は、互いに異なる組成を有する第１および第２の構成要素材料を含み、前記第１および第２の構成要素材料の各組成は、請求項１に記載の組成から選択されており、
前記スキャフォールド本体の構成要素の少なくとも１０重量％が、前記第１の構成要素材料を含み、
前記スキャフォールド本体の構成要素の少なくとも１０重量％が、前記第２の構成要素材料を含むことを特徴とする請求項１〜１１のいずれかに記載のスキャフォールド。
【請求項１３】
前記構成要素材料の５重量％未満が結晶質材料であることを特徴とする請求項１〜１２のいずれかに記載のスキャフォールド。
【請求項１４】
前記本体の構成要素がガラス繊維を含むことを特徴とする請求項１〜１３のいずれかに記載のスキャフォールド。
【請求項１５】
前記スキャフォールド本体の構成要素が、４０〜９０重量％のＢ２Ｏ３、１〜２５重量％のＮａ２Ｏ、１〜２５％のＫ２Ｏ、１〜４０重量％のＣａＯ、１〜２５重量％のＭｇＯ、および１〜１０重量％のＰ２Ｏ５から成ることを特徴とする請求項１に記載のスキャフォールド。
【請求項１６】
前記スキャフォールド本体の構成要素が、４０〜９０重量％のＢ２Ｏ３、１〜２５重量％のＬｉ２Ｏ、および１〜４０重量％のＣａＯから成ることを特徴とする請求項１に記載のスキャフォールド。
【請求項１７】
前記スキャフォールド本体の構成要素が、４０〜９０重量％のＢ２Ｏ３、１〜２５重量％のＮａ２Ｏ、および１〜４０重量％のＣａＯから成ることを特徴とする請求項１に記載のスキャフォールド。
【請求項１８】
前記スキャフォールド本体の構成要素が、４０〜９０重量％のＢ２Ｏ３、１〜２５重量％のＮａ２Ｏ、および１〜４０重量％のＢａＯから成ることを特徴とする請求項１に記載のスキャフォールド。
【請求項１９】
前記スキャフォールド本体の構成要素が、４０〜９０重量％のＢ２Ｏ３、１〜２５重量％のＬｉ２Ｏ、および１〜２５重量％のＭｇＯから成ることを特徴とする請求項１に記載のスキャフォールド。
【請求項２０】
前記スキャフォールド本体の構成要素が、４０〜９０重量％のＢ２Ｏ３、１〜２５重量％のＬｉ２Ｏ、および１〜４０重量％のＢａＯから形成されることを特徴とする請求項１に記載のスキャフォールド。
【請求項２１】
前記スキャフォールド本体の構成要素が、４０〜９０重量％のＢ２Ｏ３、０．１〜５％のＣｕＯ、１〜２５重量％のＮａ２Ｏ、１〜２５重量％のＫ２Ｏ、１〜２５重量％のＭｇＯおよび１〜１０重量％のＰ２Ｏ５から成ることを特徴とする請求項１に記載のスキャフォールド。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、組織の修復、再生および増殖を促進するための、哺乳類への移植用の生体適合性スキャフォールドに関する。
【背景技術】
【０００２】
Dayらの米国特許第６，７０９，７４４号には、
Ｎａ２Ｏ - ２０〜３５重量％
ＣａＯ - ２０〜３５重量％
Ｐ２Ｏ５ - ０〜１０重量％
Ｂ２Ｏ３ - ３０〜５０重量％
を含有するホウ酸塩系のガラスまたはセラミック材料を含んでいる移植用の生体適合性材料が記載されている。具体例は、約２２．９重量％のＮａ２Ｏ、約２２．９重量％のＣａＯ、約５．６重量％のＰ２Ｏ５、および約４８．６重量％のＢ２Ｏ３を含むガラスである。これらの材料は、生体内（in vivo）または移植前にリンを含む流体にさらされた場合に、ヒドロキシアパタイトの形成を促進するために、高濃度のＣａＯを含む。これらの材料は、例えば、ホストへ放出するためのガラス製キャピラリーチューブ内に緩やかに詰められた緩い（ルーズな）粒子の形態にされている。Liangら、Bioactive Borate Glass Scaffold for Bone Tissue Engineering, J. Non-Crystalline Solids 354 (2008), p. 1690-96；およびYaoら、In-Vitro Bioactive Characteristics of Borate-Based Glasses with Controllable Degradation Behavior, J. Am. Cer. Soc. 90 (2007), p. 303-306 にも、そのようなヒドロキシアパタイトの形成を促進するために高濃度のＣａＯを含んで処方(formulated)されたホウ酸塩系のガラスが開示されている。例えば、Yaoらにより記載されている、０Ｂ、１Ｂ、２Ｂおよび３Ｂガラスは、０重量％、１７．７重量％、３５．４重量％および５３重量％のホウ酸塩を含んでいる。
【発明の概要】
【０００３】
従って、簡潔に述べると、本発明は、組織の修復のための相互に連通した孔を備えた三次元スキャフォールド（scaffold：足場）であって、組織スキャフォールドの構造的な支持のためのスキャフォールド本体を含むものを対象としており、ここでスキャフォールド本体は、スキャフォールド本体を規定し且つ０．４ＭＰａを超えるスキャフォールド本体の圧縮強さを提供するために、相互に結合されたスキャフォールド本体の要素(scaffold body components)を含んでおり、スキャフォールド本体の要素は、約４０〜約９０重量％のＢ２Ｏ３および以下に記載された他の酸化物の中から２種以上の酸化物を含む要素材料(component material)から成り、スキャフォールド本体は約１５〜約９０容量％の多孔率を有する。
【０００４】
他の目的および本発明の特徴は、一部は明らかであり、一部は以下に指摘される。
【図面の簡単な説明】
【０００５】
【図１Ａ】図１Ａは、本発明のスキャフォールドの調製に用いられるガラス繊維の写真である。
【図１Ｂ】図１Ｂは、本発明のスキャフォールドの調製に用いられる型(mold)の写真である。
【図１Ｃ】図１Ｃは、本発明のスキャフォールドの写真である。
【図２】図２は、本発明のスキャフォールドの断面の写真である。
【図３】図３は、本発明のスキャフォールドの断面のＳＥＭ顕微鏡写真である。
【図４】図４は、本発明のスキャフォールドの断面のＳＥＭ顕微鏡写真である。
【図５】図５は、組織染色に付した本発明のスキャフォールドの断面の光学顕微鏡写真である。
【図６】図６は、組織染色に付した本発明のスキャフォールドの断面の光学顕微鏡写真である。
【図７】図７は、組織染色に付した本発明のスキャフォールドの断面の光学顕微鏡写真である。
【図８】図８は、組織染色に付した本発明のスキャフォールドの断面の光学顕微鏡写真である。
【図９】図９は、組織染色に付した従来技術のスキャフォールド材料を使用しているスキャフォールドの断面の光学顕微鏡写真である。
【図１０】図１０は、組織染色に付した従来技術のスキャフォールド材料を使用しているスキャフォールドの断面の光学顕微鏡写真である。
【図１１】図１１は、以下の実施例に記載されたスキャフォールドのＸ線回折プロファイルである。
【図１２】図１２Ａ〜１２Ｆは、実施例のスキャフォールドの写真である。
【図１３】図１３は、図１２のスキャフォールドの移植後の写真である。
【図１４】図１４は、図１２のスキャフォールドの移植後の写真である。
【発明を実施するための形態】
【０００６】
＜好適な実施形態の説明＞
本発明の組織スキャフォールドは、１つの態様において、繊維、中空繊維、チューブ、リボン、中実球、中空球、粒子、およびそれらの組合せの１つ以上の形態の構造要素を使用する。要素は、ホウ酸塩系の要素材料で、ガラス、結晶、またはガラスと結晶との組合せであるものから形成されており、ヒドロキシアパタイトまたは他のリン酸カルシウム化合物の生成を促進するためのＣａＯは含んでも含まないでもよい。
【０００７】
スキャフォールド本体の構造要素は、スキャフォールド本体を規定し且つ０．４ＭＰａを超えるスキャフォールド本体の圧縮強さを提供するために、典型的には加熱によって、相互に結合されている。所望の圧縮強さは、構成要素が決して流動しないように、および、個々の本体要素に分解せずにスキャフォールド本体を取り扱うことができるように、選ばれる。所望の圧縮強さはまた、耐力本体部(load-bearing body part)または非耐力部(non-load-bearing part)の修復のためであろうとなかろうと、衝撃または著しい動きにさらされるもののため、移植後に全体を保持するのに必要な強度を提供するように選ばれる。いくつかの好ましい実施形態では、スキャフォールド本体の圧縮強さは少なくとも約５ＭＰａであり、さらに、より大きな剛性が必要とされる他の実施形態では、圧縮強さは少なくとも約２０ＭＰａ、例えば約２０〜約２００ＭＰａである。
【０００８】
好ましい実施形態において、材料は、
Ｂ２Ｏ３        ４０〜９０
Ｎａ２Ｏ      ０〜２５
Ｌｉ２Ｏ      ０〜２５
Ｋ２Ｏ        ０〜２５
Ｒｂ２Ｏ      ０〜２５
ＣａＯ        ０〜４０
ＭｇＯ        ０〜２５
ＳｒＯ        ０〜４０
ＢａＯ        ０〜５０
Ｌｉ２Ｏ＋Ｎａ２Ｏ＋Ｋ２Ｏ＋Ｒｂ２Ｏ    累積で０〜５０
ＭｇＯ＋ＳｒＯ＋ＢａＯ＋ＣａＯ        累積で０〜５０
Ｐ２Ｏ５        ０〜１０
ＳｉＯ２        ０〜１８
Ａｌ２Ｏ３      ０〜３
Ｆ            ０〜４
遷移金属元素  累積で０〜１０
を含み、特記しない限り、記載された全てのパーセンテージは重量基準である。これらの実施形態で特定のものにおけるＫ２ＯおよびＭｇＯの濃度は、それぞれ約１〜約２５重量％である。大部分の実施形態において、Ｌｉ２Ｏ、Ｎａ２Ｏ、Ｋ２ＯおよびＲｂ２Ｏの１種以上は、累積濃度(cumulative concentration)で約１〜約５０重量％存在し、そして、ＭｇＯ、ＳｒＯ、ＢａＯおよびＣａＯの１種以上は累積濃度で約１〜約５０重量％存在する。
【０００９】
大部分の実施形態において、スキャフォールドは、これらの組成に関する要件または本明細書に記載されたその他のより狭い記載事項を満足する要素のみから、または本質的に当該要素から形成されている。しかしながら一般的に言って、いくつかの実施形態には、これらの記載事項を満足しない他の材料をスキャフォールドに取り込んでもよい。
【００１０】
本明細書の範囲内にある典型的なスキャフォールド要素の材料は、以下の成分を重量％で含む。
【００１１】
【表１】
0005805083.tif 000002
【００１２】
当然のことながら、スキャフォールドは、４０〜９０重量％のＢ２Ｏ３または５０〜９０重量％のＢ２Ｏ３、場合によっては本明細書に記載されたより狭い範囲Ｂ２Ｏ３を、１〜２５重量％のＮａ２Ｏ、１〜２５％のＫ２Ｏ、１〜４０重量％のＣａＯ、１〜２５重量％のＭｇＯ、および１〜１０重量％のＰ２Ｏ５と組み合わせて含有する要素材料を含んでいる。または、要素材料は、４０〜９０重量％のＢ２Ｏ３、１〜２５重量％のＬｉ２Ｏおよび１〜４０重量％のＣａＯを含むことができる。または、それらは、４０〜９０重量％のＢ２Ｏ３、１〜２５重量％のＮａ２Ｏおよび１〜４０重量％のＣａＯを含むことができる。または、それらは、４０〜９０重量％のＢ２Ｏ３、１〜２５重量％のＮａ２Ｏおよび１〜４０重量％のＢａＯを含むことができる。または、それらは、４０〜９０重量％のＢ２Ｏ３、１〜２５重量％のＬｉ２Ｏおよび１〜２５重量％のＭｇＯを含むことができる。または、それらは、４０〜９０重量％のＢ２Ｏ３、１〜２５重量％のＬｉ２Ｏおよび１〜４０重量％のＢａＯを含むことができる。本明細書のスキャフォールド要素の材料は種々の酸化物を重量％で含むと記載しているが、当業者であれば、最終的なガラスまたはガラス／結晶の組成物中で、酸素、バリウム、ホウ素などの個々の元素の大部分が解離していること、そして特定の酸化物（例えばＢ２Ｏ３など）が単、独で同定可能はなく必ずしも単独で存在するわけではないことを理解する。それにもかかわらず、最終組成物を、個々の酸化物を所定の％(割合)で含む、と称することは技術分野における慣習であり、従って本明細書でもそのようにする。よって、この観点から、本願明細書の組成物は等価ベース(equivalent basis)である。
【００１３】
本発明のスキャフォールド要素の材料は、約４０〜約９０重量％のＢ２Ｏ３、例えば約５０〜約９０重量％のＢ２Ｏ３を含むので、ホウ酸塩系(borate-based)である。ホウ酸塩ガラスは、生物学的使用においていくつかの重要な利点、例えば、調製が容易であること、比較的低い温度にて結晶化せずにガラスの粒子、微小球体または繊維にできること、そして、特に、生体適合性および高い生理活性などの利点を有する。本願明細書に開示したホウ酸塩ガラスは、ケイ酸塩ガラスに比べて、著しく速い反応速度、低い溶融温度、結晶化に対する耐性を有し、そして、シリカが存在しない特定の場合には、体内でゆっくりと分解する。本明細書の多くの他の好ましい実施形態のうち特定の実施形態は約１８重量％までのＳｉＯ２を使用するが、スキャフォールドは、０．１重量％未満でケイ酸塩を含むまたはケイ酸塩をまったく含まない「ケイ酸塩フリー」である。ホウ酸塩ガラスは生体内（in vivo）で反応すると中空糸を形成するが、ケイ酸塩ガラスは形成しない。そしてそれらの中空糸は生体内での血管形成を容易にする。また、本願明細書に記載のホウ酸塩材料は、体液と反応したときに生体内（in vivo）でホウ素を放出するが、ホウ素は骨密度を高め、ＭｇおよびＣａ（これは、自然骨の成分である）の生物学的機能をサポートすることが報告されているので、ホウ酸塩ガラスは骨の修復／再生に付加的な作用をもたらすことができる。
【００１４】
本明細書の実施例および図面に記載されたホウ酸塩ガラス繊維の自己結合スキャフォールド(self-bonded scaffolds)は、体液と急速に反応し、４週間未満で、初期重量の６０％まで減って、血管新生した軟組織で完全に含浸された(impregnated with)。ホウ酸塩ガラスの生体内（in vivo）での反応速度（後述の実施例９での計算によって近似することができる）が速いほど、その人工材料が体内に存在する時間は短縮され、より速く完全な欠損の治癒を促進することができる。事前の生体内実験では、ホウ酸塩ガラスは、市販の生理活性ケイ酸塩ガラス組成物よりも、著しく軽度な免疫反応を引き起こすようである。
【００１５】
特定の用途において特定の優先度(specific preference)を有する１つの実施形態が存在し、そこではスキャフォールド本体の要素の材料中にあるＣａ（元素として、ＣａＯ中に、または他の化合物として）の濃度は、約５重量％未満に制御される。特定の好ましい実施形態では、Ｃａ濃度は約０．５重量％未満（例えば０．２重量％未満、さらには０．１重量％未満）に厳密に制御される。この実施形態においてＣａ濃度を厳密に制御する利点は、生理的リン含有流体にさらされたときにアパタイトおよび関連する化合物が形成されるのを回避できることである。そのようなアパタイト化合物は、ヒドロキシアパタイト Ｃａ５（ＰＯ４）３（ＯＨ）、フルオロアパタイト Ｃａ５（ＰＯ４）３Ｆ、アモルファスリン酸カルシウム （ＡＣＰ）を含む。特定の用途では、Ｃａ−アパタイト化合物は、例えば類似のＢａ化合物に比べて比較的低い放射線不透過性を有するので、Ｃａ−アパタイト化合物の形成を回避することが有利である。特定の状況では、より急速に、あるいはよりゆっくりと分解する化合物を形成するために、Ｃａ−アパタイト化合物を回避することが有利である。また、粘度、溶融温度および／または結晶化傾向などの溶融特性(melt characteristics)を制御するためにＣａを回避することも有利であろう。
【００１６】
１つの実施形態において、Ｃａフリー材料から形成された本発明のスキャフォールドは、アルカリ酸化物およびアルカリ土類酸化物から選ばれた残部を含む約４０〜約９０重量％のＢ２Ｏ３と、以下に記載されている他の任意成分とを含むことが好ましい。例えば、このスキャフォールド材料は、重量％で
Ｂ２Ｏ３        ４０〜９０
Ｎａ２Ｏ        ０〜２５
Ｌｉ２Ｏ        ０〜２５
Ｋ２Ｏ          ０〜２５
Ｒｂ２Ｏ        ０〜２５
ＭｇＯ        ０〜２５
ＳｒＯ        ０〜４０
ＢａＯ        ０〜２５
Ｌｉ２Ｏ＋Ｎａ２Ｏ＋Ｋ２Ｏ＋Ｒｂ２Ｏ    累積で０〜５０
ＭｇＯ＋ＳｒＯ＋ＢａＯ                累積で０〜５０
Ｐ２Ｏ５        ０〜１０
ＳｉＯ２      ０〜１８
Ａｌ２Ｏ３      ０〜３
Ｆ            ０〜４
遷移金属元素  累積で０〜１０
を含む。
これらの実施形態のいくつかは、上述したように低レベルのＣａを含むが、その一方、他の実施形態は実質的にＣａフリーであり、Ｃａを本質的に含まないか、またはＣａを０．１重量％未満で含む。
【００１７】
１つの好ましい実施形態では、材料は、約５０〜約８０重量％のＢ２Ｏ３と、約５〜約２０重量％の、Ｌｉ２Ｏ、Ｎａ２Ｏ、Ｋ２Ｏ、Ｒｂ２Ｏおよびそれらの組合せからなる群から選ばれるアルカリ酸化物成分と、約５〜約４０％の、ＭｇＯ、ＳｒＯ、ＢａＯおよびそれらの組合せからなる群から選ばれるアルカリ土金属酸化物成分と、場合によりＰ２Ｏ５、ＳｉＯ２、Ａｌ２Ｏ３、Ｆおよび遷移金属元素を含む。ランタニドは、特定の好ましい実施例からは、とりわけ厳密に除外される。いくつかの実施形態において、スキャフォールド材料は、本質的には、約５０〜約８０重量％のＢ２Ｏ３と、約５〜約２０重量％の、Ｌｉ２Ｏ、Ｎａ２Ｏ、Ｋ２Ｏ、Ｒｂ２Ｏおよびそれらの組合せからなる群から選ばれるアルカリ酸化物成分と、約５〜約４０重量％の、ＭｇＯ、ＳｒＯ、ＢａＯおよびそれらの組合せからなる群から選ばれるアルカリ土金属酸化物成分と、から成る。
【００１８】
典型的なホウ酸塩系のスキャフォールド要素のＣａフリー材料は、重量％で、以下のものを含む。
【００１９】
【表２】
0005805083.tif 000003
【００２０】
本発明の特定の実施形態において、スキャフォールド要素の材料は、Ｌｉ２Ｏ、Ｎａ２Ｏ、Ｋ２Ｏおよび／またはＲｂ２Ｏのうちの少なくとも２種のアルカリ酸化物を約５〜約２５重量％、例えば約８〜２０重量％の累積濃度で含むように選ばれる。結晶化傾向を低減させるために２種以上のそのようなアルカリ化合物を含むことは有利であり、それは最終的には、スキャフォールドを作成するためのガラスの加工性および製造可能性を向上させる、ということが見出された。１種以上のアルカリ（すなわち混合アルカリ）を使用することによって、ガラスのコストを低減でき、体液との反応速度を変更でき、そして骨の成長および再生に有益な追加の元素を提供できる。
【００２１】
本発明の特定の実施形態の更なる特徴は、ＭｇＯ、ＳｒＯ、ＢａＯ、ＣａＯおよびそれらの組合せからなる群からのアルカリ土類酸化物の累積的濃度が１〜約５０重量％、例えば約１〜３０重量％、さらには約８〜２５重量％の範囲であることである。これらの実施形態のうち特定のものは、２種以上のそのようなアルカリ土類酸化物を累積的に１〜４５重量％、例えば５〜２５重量％の範囲で含んでいる。
【００２２】
混合アルカリ酸化物を含有するスキャフォールド材料を使用するこれらのスキャフォールドの実施形態は、約４０〜約９０重量％のＢ２Ｏ３を含む。これらの実施形態の特定のものは、本質的には、約４０〜９０重量％のＢ２Ｏ３と、Ｌｉ２Ｏ、Ｎａ２Ｏ、Ｋ２ＯおよびＲｂ２Ｏからなる群から選ばれる混合アルカリ酸化物と、ＭｇＯ、ＳｒＯ、ＢａＯまたはＣａＯのうち１種と、から成る。他の実施形態は、本質的には、約４０〜約９０重量％のＢ２Ｏ３と、Ｌｉ２Ｏ、Ｎａ２Ｏ、Ｋ２ＯおよびＲｂ２Ｏからなる群から選ばれる２種以上のアルカリ酸化物と、ＭｇＯ、ＳｒＯ、ＢａＯおよびＣａＯからなる群からの２種以上のアルカリ土類酸化物と、から成る。例えば、表Ｉの組成Ａは、本質的には、約４０〜約９０重量％のＢ２Ｏ３と、累積して５〜２５重量％の、Ｌｉ２Ｏ、Ｎａ２Ｏ、Ｋ２ＯおよびＲｂ２Ｏからなる群から選ばれる２種以上の混合アルカリ酸化物、および累積して８〜２５重量％の、ＭｇＯ、ＳｒＯ、ＢａＯおよびＣａＯからなる群から選ばれるから２種以上から成る。他の実施形態は、任意で、１種以上のＰ２Ｏ５、ＳｉＯ２、Ａｌ２Ｏ３、Ｆおよび遷移金属元素を含む。
【００２３】
本発明は、特に高いＢ２Ｏ３組成、すなわち約６０〜約９０重量％、好ましくは約６０〜約８２重量％、更に好ましくは約７０〜約８０重量％のＢ２Ｏ３組成を含むスキャフォールド材料を使用しているスキャフォールドの実施形態を含む。これらの実施形態は、Ｌｉ２Ｏ、Ｎａ２Ｏ、Ｋ２Ｏ、Ｒｂ２Ｏおよびそれらの組み合わせからなる群から選ばれるアルカリ酸化物を、累積して約１〜約５０重量％、例えば約５〜約２５重量％、さらには約８〜約２０重量％と、任意で２種以上のそのような酸化物を、累積してこの範囲で使用する。これらはまた、任意で、ＭｇＯ、ＳｒＯ、ＢａＯ、ＣａＯおよびそれらの組合せからなる群からのアルカリ土類酸化物を、累積して約１〜約５０重量％、例えば約１〜３０重量％、さらには約８〜２５重量％と、さらに２種以上のそのような酸化物を、累積してこの範囲で使用する。これらの実施形態の特定のもの、例えば表IIの組成II、III、IVおよびVIIは、本質的にはこれらの成分から成るが、他の実施形態は、任意で、Ｐ２Ｏ５、ＳｉＯ２、Ａｌ２Ｏ３、Ｆおよび遷移金属元素の１種以上を含む。
【００２４】
前述の混合アルカリおよび高ホウ酸塩の実施形態では、Ｃａ濃度を約５重量％未満（０．５重量％未満（例えば０．２重量％未満または０．１重量％未満）を含む）に厳密に制御することによって、Ｃａ化合物の生成を回避することができる。代わりに、ヒドロキシアパタイト、他のリン酸カルシウム化合物、またはアモルファスリン酸カルシウムの形成を容易にするために、さらにＣａＯを約４０重量％以下で含有している２種以上のアルカリ酸化物を含む実施形態が存在する。
【００２５】
本発明の別の特定の実施形態は、Ｚｎ、Ｃｕ、Ｆｅ、Ｍｎ、Ｓｉ、Ｆ、Ｓｒ、Ｎｉ、ＭｏおよびＳｅからなる群から選ばれる１種以上の元素を、１元素あたり約０．０１〜１０重量％で且つ累積して２５重量％未満の量で含有する。これらは、酸化物または他の化合物の形態でガラスに提供される。これら種々の任意の元素の添加は、特定の用途に対して特定の機能および効果を提供する。これらの範囲内にあるこれらの元素の１種以上は、任意で、上述した実施形態、即ち、Ｌｉ２Ｏ、Ｎａ２Ｏ、Ｋ２Ｏ、Ｒｂ２Ｏおよびそれらの組み合わせからなる群からの種々のアルカリ酸化物の累積濃度が約０〜約３０重量％の範囲に維持される実施形態、およびＣａ濃度が約０．２重量％未満、例えば０．１重量％未満に厳密に制御される実施形態にも含まれてもよい。微量元素は、酸化物として、スキャフォールド材料に取り込まれてもよい。
【００２６】
ニッケルは内皮細胞の運動性を向上させ、それは血管形成のために重要なステップである。細胞の運動性は、刺激物質（この場合は微量元素Ｎｉの存在）に起因するセルの遊走（migration）である。
【００２７】
セレンは、微生物病原体およびウイルスを殺すおよび滅ぼすために過剰な活性酸素種を生成する自然な免疫反応に関連した酸化的ストレスから、身体を保護することができる酸化防止剤として機能する。本質的に、セレンは、体細胞および組織へのネガティブな反応が存在しないように、活性酸素種を抑制する。セレンが不足した動物は、正常に機能しない免疫反応を示し、抗原と戦うことのできない食作用性の好中球およびマクロファージをもたらす。動物モデルでのセレンの補給は、いくつかの免疫機能（これに限定されないが、好中球遊走、Ｔ細胞の増殖および機能、細胞障害性Ｔ細胞活性、Ｔ細胞反応、リンホカイン活性化キラー細胞の活性およびマラリアおよびポリオに対するワクチン導入性の免疫を含む）の増大を示した。これらの免疫機能の大部分は、創傷の治癒過程において自然なことであり、これらの細胞活性を増強または促進により創傷の治癒が促進される。従って、Ｓｅを本発明の要素に取り込むことにより、軟質組織の治癒および再生のために必要な自然な生物学的免疫反応が促進され、刺激される。
【００２８】
亜鉛は、骨組織で見られる酵素のアルカリホスファターゼの形成に必要な補因子である。骨中での最大量のＺｎは、石灰化前の類骨層(layer of osteoid)にある。亜鉛はマグネシウムの補因子なので、いずれか一方の利益を得るためには両者とも存在しなくてはらない。亜鉛はヒドロキシアパタイトに取り込まれていることが見いだされており、さらにＦも存在していると、ＺｎおよびＺｎ−Ｆ錯体がアパタイトの結晶化度を向上させるだろう。
【００２９】
銅は、不足すると、骨の成長が阻害され、骨粗鬆症と関連した変化が増加する。銅は、赤血球凝集抗体（HA、hemagglutinating antibody）に取り込まれず、骨芽細胞および破骨細胞によって使用される。欠乏すると、骨芽細胞（骨形成体: bone formers）および破骨細胞（骨吸収体: bone resorbers）の活動が低下する。骨粗鬆症は、破骨細胞に比べて、骨芽細胞がより多く減少することによって誘発される。銅は、血管形成に有用になりうる内皮細胞遊走に影響を及ぼすということも示されており、硬質組織および軟質組織の組織再生にとって潜在的に重要である。ガラスに対するＣｕ源は、例えば、ＣｕＯもしくはＣｕ２Ｏなどの酸化銅、または硝酸銅もしくは硫酸銅など他の銅化合物であってもよい。１つの実施形態において、Ｃｕは約０．０５〜約５重量％、例えば約０．１〜約２．５重量％の濃度でガラスに取り込まれる。約１重量％〜約２重量％の銅化合物、例えば約１重量％〜約２重量％のＣｕＯを使用する好ましい実施形態が存在する。
【００３０】
鉄は、コラーゲンを生成する酵素への信号として作用する。Ｆｅの除去または欠乏は、基本的に酵素をオフにする。
【００３１】
マンガンは、糖転移酵素（ヌクレオチド二リン酸エステル糖から受容体分子(acceptor molecule)へと糖を移入する）の補因子として作用する。マンガンは、グリコサミノグリカン・コンドロイチン硫酸のいくつかの生成段階において重要である。コンドロイチン硫酸は、結合組織（例えば血管、骨および軟骨）の主要な構成要素である。
【００３２】
ケイ素は、正常な骨基質形成と、おそらく骨石灰化にとって不可欠である。Ｓｉが不足すると、頭蓋骨、長骨および全体の骨構造に関連する成長低下異常(depressed growth, abnormalities)の条件が生じる可能性がある。骨内のケイ素は、主として骨芽細胞のミトコンドリア内に位置しており、その細胞は、新規な結合組織マトリックス物質の形成に関与する。
【００３３】
フッ素は、ヒドロキシアパタイト結晶化において、ヒドロキシイオンを交換して結晶の安定性を改善することによって影響を及ぼすことができる。Ｆは、形成された骨の中には拡散しないので、骨が形成される際に骨に取り込まれている必要であることに注意することが重要である。骨格系は、骨芽細胞（骨形成細胞）の数を増加させることによってＦに応答し、従って、より多くの骨が形成される。骨細胞の増加は、骨細胞分裂促進因子（細胞分裂を促進するタンパク質）の活性を向上させることによって骨細胞前駆細胞の増殖を増加させる、Ｆに起因する。
【００３４】
ストロンチウムは、骨形成への代謝効果を有すると考えられている。ストロンチウムは、いくつかの動物モデルにおいて、破骨細胞にいかなる毒性作用も及ぼすことなく、破骨細胞（骨吸収細胞）の活性を低下させることが示された。前骨芽細胞の複製の増加は、Ｓｒの添加によって確認されており、骨基質合成の増加をもたらした。ストロンチウムは、骨粗鬆症の将来の治療のための成分であると考えられている。
【００３５】
したがって、例えば下記の実施例７のような本発明のいくつかの典型的なスキャフォールドは、スキャフォールド本体の要素（例えば、概ね４０〜９０重量％のＢ２Ｏ３と、０．１〜５％のＣｕＯと、Ｎａ２Ｏ、Ｋ２Ｏ、ＭｇＯおよびＰ２Ｏ５とを含む繊維など）から構成される。より具体的な例は、４０〜９０重量％のＢ２Ｏ３、０．１〜５％のＣｕＯ、１〜２５重量％のＮａ２Ｏ、１〜２５重量％のＫ２Ｏ、１〜２５重量％のＭｇＯおよび１〜１０重量％のＰ２Ｏ５を含むかまたは本質的にこれらから成る。
【００３６】
スキャフォールド要素の材料は、本質的に、ガラス質、ガラスセラミックまたはセラミックであってよい。しかしながら、一般的に言って、ガラス質の材料は、同じ組成の結晶質または部分的に結晶質の同等物に比べて、より強くかつ化学的により均一なので、本発明ではガラス質の状態が好ましい。従って、スキャフォールド本体の要素の材料は、要素の材料の約５重量％未満、より好ましくは１重量％未満が結晶質である実質的にガラス質であるのが好ましい。より詳細には、材料を２０℃／分の平均昇温速度で８００℃に加熱し、その温度に１０分間保持され、そして室温および大気圧の標準状態（STP conditions）にさらすことによって室温まで冷却した場合に、結晶化度が５重量％未満、好ましくは１重量％未満であることが好ましい。より好ましくは、２０℃／分の傾斜率（ramp rate）で５７５℃まで加熱され、その温度に２０分間保持され、そして標準条件（STP conditions）にさらすことによって室温まで冷却した後、ガラスは、５重量％未満、さらに好ましくは１重量％未満の結晶化度を含むだろう。
【００３７】
本発明のスキャフォールド本体の要素は、中実繊維、中空繊維、リボン、中実球、中空球、粒子、およびそれらの組合せの形態にされている。多くの用途にとって特に好適な実施形態では、スキャフォールド本体の要素は繊維を含み、そのような実施形態では、スキャフォールド本体は、繊維である要素から本質的に形成されている。繊維は、長さ：横断寸法（例えば、直径）が少なくとも２：１、より典型的には５：１、例えば１０：１のアスペクト比を有する。本発明の特定の１つの実施形態において、スキャフォールド本体の要素は、主に１つの形態（例えば繊維）を、前述の選択可能な形態（例えば微小球体）からの第２の形の微量成分と組み合わせている。
【００３８】
本発明の選択肢には、特定の特性を戦略的に付与するための、独特の成分組成を使用するものもある。例えば、スキャフォールド本体は、上記の表Ｉおよび表IIから選ばれた組成を有する要素を１０〜９０重量％と、それらの表からの別の組成の要素を１０〜９０重量％とを使用する。或いは、２種以上のそのようなタイプの要素を使用してもよい。すなわち、スキャフォールドは、予定された組成のうちの第１の要素材料を少なくとも１０重量％含有するスキャフォールド本体の成分と、予定された組成のうちの第２の要素材料を少なくとも１０重量％含有するスキャフォールド本体の成分と、を含むことができ、第１の要素材料と第２の要素材料とは互いに異なる組成を有し得る。このことは、いくつか例を挙げると、反応の速い繊維を反応の遅い繊維と組み合せる選択、またはＣａ含有繊維をＣａフリーの繊維と組み合わせる選択、または微量元素を含有する繊維を微量元素を含有しない繊維と組み合わせる選択などの選択を可能にする。従って、標準的組成の要素と非標準的な組成の要素とを組み合わせて、提示された用途のためのスキャフォールドまたはホストの特定のニーズのためのスキャフォールドを、効果的にカスタマイズすることまたはドープすることができる。代わりとして、ホストに送達するための成長因子または薬剤を含む中空球を、例えば繊維などの他の構造要素に取り込むこともできる。
【００３９】
スキャフォールドは、取り扱いおよび移植のための充分な強さを維持しつつ、体液の取り込みを容易にするためにスキャフォールド中への流体の流れをもたらすよう選択された多孔率を有するように、形成されている。多孔率は、約１５容量％〜約９０容量％である。多孔率には異なるレベル、例えば約１５〜約３０容量％、または約３０〜約６０容量％、または約６０〜約９０％などのレベルがあり、これらは異なる用途で好まれる。多孔率は、例えば、繊維の方向、粒子または微小球体の形状、および元素(または要素：element)を一体に結合するために用いられる熱処理（時間／温度）などの多くのファクターに依存し、または当該多くのファクターによって制御される。このバルクの多孔率とは独立して、相互接続性（interconnectivity）は本発明のスキャフォールドにおいても重要である。組織修復は、スキャフォールドの中への体液の流れによって強く影響されるので、スキャフォールド内部の細孔が高いレベルで相互接続性を有し、低いレベルで閉鎖細孔を有することが好ましい。すなわち、大部分の細孔が他の細孔に連絡していること、そして、大部分の細孔からスキャフォールドの外側表面まで直接的または間接的な経路があることが重要である。ある実施形態では、スキャフォールドの細孔容積の少なくとも約８０容量％、例えば少なくとも約９０％は、スキャフォールド外部から他の細孔を通じて直接的または間接的にアクセス可能であり、従って、体液にアクセス可能である。
【００４０】
スキャフォールド要素の材料を製造する方法は、本発明にとってそれほど重要という訳ではない。例えば、スキャフォールド要素材料を調製する際には、分析用試薬級の個々の成分を、計量し、十分に混合し、１０５０℃にて白金ルツボ中で約１時間の時間で溶融させる。溶融物は、その後、例えば、鋼または銅プレート上で急冷されてガラス質が形成され、所望の寸法の粒状物へと粉砕される。粒状物は、球状化されて、選ばれた直径の微小球体に形成することができる。溶融物の形態にあるときの好適な組成物の材料は、容易に繊維に形成することができる。ホウ酸塩ガラスの繊維を製造する場合、それらは溶融物から手で直接的に引くか、または、ブッシュを通して回転ドラムによって引くことができる。
【００４１】
要素は、炉内で粒状物の集合を単に加熱して繊維／粒子／球体を軟化させ相互に接着させることによって、自己結合させて、三次元スキャフォールドを形成することができる。所定の温度での設定された時間の後、構成物（生成物）を炉から取り出して、室温まで冷やす。従来技術における多くの生体活性ガラス、例えば４５Ｓ５は、ガラスの結晶化のため自己結合が困難である。従って、本発明のホウ酸塩ガラスの自己結合能力は、今日使用されている他の生体活性材料に対して、明確な利点である。
【実施例１】
【００４２】
図１Ａに示すガラス繊維から本発明のスキャフォールドを作成したが、繊維は、平均して長さ約３ｍｍであり、直径は約１００〜約３００ミクロンであった。繊維の組成は、Ｂ２Ｏ３が５３重量％、Ｎａ２Ｏが６重量％、Ｋ２Ｏが１２重量％、ＭｇＯが５重量％、ＣａＯが２０重量％、およびＰ２Ｏ５が４重量％であった。繊維は、直径が７ｍｍであって、図１Ｂのスキャフォールド型（ムライト管）に置かれ、そして、高さ２ｍｍのスキャフォールドを作るために十分な繊維（７０ｍｇ）が型に置かれた。繊維がランダムな向きに入れられている型を炉の中に入れ、周囲圧力の空気雰囲気で、５７５℃にて４５分間加熱した。５７５℃までの昇温速度は約１００℃／分であった。その後炉からスキャフォールドを取り出し、型を室温にて空冷した。その後、スキャフォールドを型から取り出して、図１Ｃに示す。
【実施例２】
【００４３】
本発明のホウ酸塩系のガラス繊維スキャフォールドを、実施例１に記載したような方法で作成し、エポキシに埋設した。断面を形成して、光学顕微鏡写真を撮影し、図２に示す。明るい領域はエポキシであり、一方、暗い丸い形状はガラス繊維である。それらは、スキャフォールドの繊維がランダム配向であるため、不規則な形状を有している。２つ以上の丸みを帯びた形状が結合している部位では、実質的に自己結合が生じていることは明らかである。この図から、多孔質の相互接続性が高度であることも明らかである。
【実施例３】
【００４４】
実施例１および２のタイプの自己接合したホウ酸塩ガラススキャフォールドを、ラットの背部の皮下に移植した。４週間後、スキャフォールドを取り出し、走査電子顕微鏡観察（ＳＥＭ）によって観察した。顕微鏡写真を撮影すると（図３）、繊維を軟質組織が取り囲んでいることが示された。これは、スキャフォールドの中へ生理的流体が取り込まれたことおよびスキャフォールドの中で軟質組織が成長したことを示す。図のように、多くの繊維に形成された中空コアは、ガラス繊維と生理的流体とが反応したことを示している。このことは、図２に示す移植前の繊維が中実な性質を有することと、対照的である。図４Ａ、Ｂ、ＣおよびＤは、図３からの繊維の１つについて、連続的により高く倍率を上げた顕微鏡写真である。図４Ｃおよび４Ｄにおいて観察される多孔質の反応層は、ヒドロキシアパタイト形成の兆候である。このことは、Ｃａ１０（ＰＯ４）６（ＯＨ）２に一致するパターンを示している、図１１のスキャフォールドのＸ線回折分析によって確認される。
【実施例４】
【００４５】
４週間の皮下移植後にラットから取り出された図３に示すものと同様の断面を、組織染色（Ｈ＆Ｅ）に付し、図５に示す。これは、組織とスキャフォールドとの間の生物学的親和性と、赤血球凝集抗体（HA）および／またはアモルファスリン酸カルシウム（ACP）の中空繊維を形成したガラスと体液との反応と、スキャフォールド全体および反応した繊維の中空孔中への組織の浸入と、を示している。反応した繊維の長手方向の中心軸と平行な方向において更に断面を撮影し、図６に示す。顕微鏡写真の中央部は、断面化された繊維の中に赤血球および軟質組織が実質的に存在することを示している。図７は、繊維の中央軸と直角をなす方向における断面積の更なる顕微鏡写真である。赤血球、血管および軟質組織は、反応したガラス繊維の中空コアの中に見ることができる。
【実施例５】
【００４６】
従来技術のガラスと比較した、本発明のホウ酸塩ガラスの免疫反応は、各スキャフォールドの断面の組織染色（Ｈ＆Ｅ）および観察によって調べた。図８の断面は、ラットの背部の皮下に移植して２週間後の本発明のスキャフォールドについて撮影したものである。これらの断面は、健康な軟質組織がガラス繊維の間に成長してそれらに付着したことを示している。繊維の近くには、目視できる巨細胞は存在していない。良好な血管新生を有する領域があり、それは新たな組織の成長にとって重要である。１３−９３として知られている従来技術のケイ酸塩系の生体活性ガラスの染色した部分を図９に示しており、ほとんどすべての繊維（例えば図９Ｂの符号Ｆ）は、それらに付着してそれらを取り囲んでいる巨細胞を有している。繊維に侵入した軟質組織は健康に見えるが、繊維を取り囲んでいる巨細胞は異物反応を表している。図１０に示すように、従来技術の４５Ｓ５ガラス繊維でも、１３−９３ガラス繊維と同様の反応が生じている。４５Ｓ５繊維のほとんどすべては、異物反応を表す巨細胞によって取り囲まれている。図８〜１０に示す結果は、本発明の材料が、軟質組織に対して著しい免疫反応を有さず、ケイ酸塩系の生体活性ガラスと比べてはるかに早い速度でヒドロキシアパタイトへ転化し得ることを示している。これは、本発明のスキャフォールドが、体液を含む組織と接触するように配置されると、中空コアを有する多孔性のヒドロキシアパタイト材料を形成し、それは（周囲の組織に応じて）硬質および軟質組織、血管、またはおそらくは身体の他の組織などの生物学的材料で満たされ得ることを示している。皮下の軟質組織部位への移植後の組織学的評価では、周囲のおよび侵入した軟質組織に対して最小の免疫反応を示した。また、４５Ｓ５および１３−９３などのケイ酸塩系生体活性ガラスと比べて、より小さい異物反応を生じるように観察される。
【実施例６】
【００４７】
以下のＣａフリーのホウ酸塩系ガラス（重量％での組成）の反応生成物および反応速度を測定するために、生体外(in vitro)実験を行った。
【００４８】
【表３】
0005805083.tif 000004
【００４９】
右端の列に記載した化合物は、Ｋ２ＨＰＯ４の０．２５モル溶液中で各ガラスの粒状物を、３７℃にて１０８〜１３０時間で反応させた後の反応生成物である。
【実施例７】
【００５０】
微量のＣｕ、Ｓｒ、ＺｎおよびＦｅを、以下の濃度に従って、酸化物として種々の量で含む、いくつかのホウ酸塩系ガラスを調製した。
【００５１】
【表４】
0005805083.tif 000005
【００５２】
ガラス０、１、２、３、４、および５からスキャフォールドを調製して、図１２Ａ〜Ｆにそれぞれ示す。これらをラットの背部の皮下に移植して、血管新生について調べた。図１３Ａ〜Ｆは２週間後の、および、図１４Ａ〜Ｆは４週間後の、それぞれガラス０〜５についての血管新生の程度を示している。血管新生の増大に関するＣｕ含量増加の効果は明らかである。
【実施例８】
【００５３】
２種の異なる組成の繊維の５０：５０混合物（重量基準）から混合繊維スキャフォールドを調製した。
【００５４】
【表５】
0005805083.tif 000006
【実施例９】
【００５５】
生体内（in vivo）でのホウ酸の溶解を計算する。５３重量％のＢ２Ｏ３ガラスを用いた０．０７０ｇの典型的なスキャフォールドであり、Ｂ２Ｏ３の重量は０．０３７１ｇである。Ｂ２Ｏ３は体液に溶解して、ＢＯ３イオンとして存在する。しかしながら、文献値との比較のために、ここではＨ３ＢＯ３を基礎として計算する。Ｈ３ＢＯ３に対するＢ２Ｏ３の重量係数は１．７８であるので、０．０３７１ｇのＢ２Ｏ３は０．０６６ｇのＨ３ＢＯ３に溶解し、これは１．０７Ｅ−３モルのＨ３ＢＯ３に相当する。生体内（in vivo）での観察に基づいて、このサイズのＢ２Ｏ３ベースのスキャフォールドが完全に反応するには４週間かかると仮定した。これは、１．０７Ｅ−３／２８日＝３．８１４Ｅ−５モル／日  Ｈ３ＢＯ３の収率に相当する。従来の観察も、およそ０．０５ｇの新しい組織重量がこのサイズのスキャフォールドの中に成長したことを示す。従来の観察も、概略で、組織１グラムあたり、約０．１（最小）〜約０．４（最大）ｍｌ／分の血流がスキャフォールドの中を流れることを示している。最初に、最小流量であると仮定すると、Ｈ３ＢＯ３収量は５．２９ｍＭの濃度を有すると算出される。すなわち、１４４０分／日（０．１ｍｌ／分*ｇ）（１日）（０．０５ｇ）＝７．２ｍｌ＝０．００７２Ｌとなり、３．８１４Ｅ−５モル／日 Ｈ３ＢＯ３／０．００７２Ｌ＝５．２９Ｅ−３ｍｏｌ／Ｌ＝５．２９ｍＭ Ｈ３ＢＯ３となる。次に、最大流量であると仮定すると、Ｈ３ＢＯ３収量は１．３２ｍＭの濃度を有すると算出される。すなわち、１４４０分／日（０．４ｍｌ／分／グラム）＝２８．８ｍｌ＝０．０２８８Ｌとなり、３．８１４Ｅ−５モル／日 Ｈ３ＢＯ３／０．０２８８Ｌ＝１．３２Ｅ−３ｍｏｌ／Ｌ＝１．３２ｍＭ Ｈ３ＢＯ３となる。「Action of Boron at the Molecular Level」, Bio. Trace Ele. Res., 85, 2002, で得られるデータに基づけば、この濃度のＨ３ＢＯ３はＲＮＡ取り込みを刺激し得る。従って、ケイ酸塩系のスキャフォールドとは際立って対照的に、本発明のスキャフォールドは、溶解の際に、治癒を促進する成長因子として機能することが報告されている物質を自然に産生するのである。
【００５６】
以上より、本発明のいくつかの目的が達成され、および、他の有利な結果が実現されることが判るであろう。
【００５７】
本発明のまたはその好適な実施形態の要素を導入する場合に、冠詞「a」、「an」、「the」および「said」は１つ以上の要素が存在することを意味することを目的とする。用語「comprising（含む）」、「including（含む）」および「having（有する）」は、包含的であることを意図しており、挙げられた要素以外の追加の要素が存在し得ることを意味する。
【００５８】
上述の組成物および方法については、本発明の範囲から逸脱しない限り、種々の変更をすることができるので、上述の説明に含まれており、および、添付の図面に示されているすべての事項は説明のためのものであることを意図しているのであって、本発明はこれらに限定されるものではない。
【図１Ａ】
0005805083.tif 000007
【図１Ｂ】
0005805083.tif 000008
【図１Ｃ】
0005805083.tif 000009
【図２】
0005805083.tif 000010
【図３Ａ】
0005805083.tif 000011
【図３Ｂ】
0005805083.tif 000012
【図４Ａ】
0005805083.tif 000013
【図４Ｂ】
0005805083.tif 000014
【図４Ｃ】
0005805083.tif 000015
【図４Ｄ】
0005805083.tif 000016
【図５】
0005805083.tif 000017
【図６】
0005805083.tif 000018
【図７】
0005805083.tif 000019
【図８Ａ】
0005805083.tif 000020
【図８Ｂ】
0005805083.tif 000021
【図８Ｃ】
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【図８Ｄ】
0005805083.tif 000023
【図９Ａ】
0005805083.tif 000024
【図９Ｂ】
0005805083.tif 000025
【図９Ｃ】
0005805083.tif 000026
【図９Ｄ】
0005805083.tif 000027
【図１０Ａ】
0005805083.tif 000028
【図１０Ｂ】
0005805083.tif 000029
【図１０Ｃ】
0005805083.tif 000030
【図１０Ｄ】
0005805083.tif 000031
【図１１】
0005805083.tif 000032
【図１２Ａ】
0005805083.tif 000033
【図１２Ｂ】
0005805083.tif 000034
【図１２Ｃ】
0005805083.tif 000035
【図１２Ｄ】
0005805083.tif 000036
【図１２Ｅ】
0005805083.tif 000037
【図１２Ｆ】
0005805083.tif 000038
【図１３Ａ】
0005805083.tif 000039
【図１３Ｂ】
0005805083.tif 000040
【図１３Ｃ】
0005805083.tif 000041
【図１３Ｄ】
0005805083.tif 000042
【図１３Ｅ】
0005805083.tif 000043
【図１３Ｆ】
0005805083.tif 000044
【図１４Ａ】
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【図１４Ｂ】
0005805083.tif 000046
【図１４Ｃ】
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【図１４Ｄ】
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【図１４Ｅ】
0005805083.tif 000049
【図１４Ｆ】
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