(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
腹足綱及び双殻綱のメンバーを防除するのに有効なピリフェロリドＡと不活性材料とを含み、前記ピリフェロリドＡがプセウドモナス又はプセウドモナスに由来する細胞懸濁物に由来し、前記不活性材料がカオリナイトを含む、組成物。
【請求項２】
腹足綱及び双殻綱のメンバーを防除するのに有効な１１−ヒドロキシ−１２−エン−オクタデカン酸と不活性材料とを含み、前記１１−ヒドロキシ−１２−エン−オクタデカン酸がプセウドモナス又はプセウドモナスに由来する細胞懸濁物に由来し、前記不活性材料がカオリナイトを含む、組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
限定するものではないが、活性成分としてのラクトン、ラクタム、カルバマート、アミド、並びに／若しくはカルボン酸含有化合物及び／又は微生物（例えば、プセウドモナス及び／又はエルウィニア）由来の化合物を含むイガイ及び／又はカタツムリ及び／又はナメクジなどの軟体動物を防除するための組成物及び方法。冷水条件又は固体表面の下で開放水域、発電所、及び飲用水処理施設におけるイガイ及び／又はカタツムリ及び／又はナメクジなどの軟体動物の化学的及び生物学的な防除の効力を増大させるための方法及び組成物も提供する。
【背景技術】
【０００２】
カワホトトギスガイのドレイッセナ・ポリモルファ（Ｄｒｅｉｓｓｅｎａ  ｐｏｌｙｍｏｒｐｈａ）の原産地はもともと、アジアのカスピ海やウラル川である。１９世紀に、これは西に広まり、現在、ヨーロッパの大部分、独立国家共同体（旧ソビエト連邦）の西側部分、及びトルコに見られる。２０年以上前に、カワホトトギスガイ（ドレイッセナ・ポリモルファ）やクワッガガイ（ドレイッセナ・ブゲンシス（Ｄｒｅｉｓｓｅｎａ  ｂｕｇｅｎｓｉｓ））などのイガイが北米に持ち込まれた。内水を通して広範囲に広まったため、米国の東側の大部分に及んでいる［Ｕ．Ｓ．Ａｒｍｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒ  Ｗａｔｅｒｗａｙｓ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ  Ｓｔａｔｉｏｎ．１９９５．Ｚｅｂｒａ  ｍｕｓｓｅｌｓ：Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｅｃｏｌｏｇｙ，ａｎｄ  Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ．Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  Ｎｏｔｅ．ＺＭＲ−１−０１．Ｚｅｂｒａ  Ｍｕｓｓｅｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｐｒｏｇｒａｍ，Ｖｉｃｋｓｂｕｒｇ，ＭＳ］。同様に、カワヒバリガイのリムノペルナ・フォルトゥネ（Ｌｉｍｎｏｐｅｒｎａ  ｆｏｒｔｕｎｅ）は、アジア諸国と南米諸国を襲った（カワヒバリガイ−リムノペルナ・フォルトゥネ）。タイワンシジミ（コルビクラ・フルミネア（Ｃｏｒｂｉｃｕｌａ  ｆｌｕｍｉｎｅａ））はもう少しでアジアの全ての国と米国に広まる［Ｎｏｎ−ｉｎｄｉｇｅｎｏｕｓ  ｓｐｅｃｉｅｓ  ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｂｕｌｌｅｔｉｎ：Ａｓｉａｎ  ｃｌａｍ，Ｃｏｒｂｉｃｕｌａ  ｆｌｕｍｉｎｅａ（Ｍｕｌｌｅｒ，１７７４）（Ｍｏｌｌｕｓｃａ：Ｃｏｒｂｉｃｕｌｉｄａｅ）］。イシガイ科のイガイなどの他のイガイは米国や他の国々に存在する。
【０００３】
イガイが新しい場所に素早くコロニーを形成し、速やかに高密度を達成し、かつどんな硬い基質（例えば、岩、丸太、水性植物、在来イガイの貝殻、及びザリガニの外骨格、プラスチック、コンクリート、木材、ガラス繊維、鉄やポリ塩化ビニルでできたパイプ、及び従来の塗料で覆われた表面）にも付着する能力のせいで、イガイは深刻な悪影響をもたらしている。これらの影響としては、水依存的インフラストラクチャーの被害、何百万ドルもの操業コストの増加及び生態系への相当な被害［Ｏ’Ｎｅｉｌｌ，Ｃ．Ｒ．，Ｊｒ．１９９７，Ｅｃｏｎｏｍｉｃ  ｉｍｐａｃｔ  ｏｆ  ｚｅｂｒａ  ｍｕｓｓｅｌｓ−ｒｅｓｕｌｔｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  １９９５  ｎａｔｉｏｎａｌ  ｚｅｂｒａ  ｍｕｓｓｅｌ  ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｃｌｅａｒｉｎｇ  ｈｏｕｓｅ  ｓｔｕｄｙ．Ｇｔ．Ｌａｋｅｓ  Ｒｅｓ．Ｒｅｖ．３，３５−４４；Ｋａｒａｔａｙｅｖ，Ａ．Ｙ．，Ｌ．Ｅ．Ｂｕｒｌａｋｏｖａ，Ｄ．Ｋ．，Ｐａｄｉｌｌａ，１９９７，ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  Ｄｒｅｉｓｓｅｎａ  ｐｏｌｙｍｏｒｐｈａ（Ｐａｌｌａｓ）  ｉｎｖａｓｉｏｎ  ｏｎ  ａｑｕａｔｉｃ  ｃｏｍｍｕｎａｌｉｔｉｅｓ  ｉｎ  ｅａｓｔｅｒｎ  Ｅｕｒｏｐｅ．Ｊｏｕｒｎａｌ  Ｓｈｅｌｌｆｉｓｈ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１６，１８７−２０３；ＭａｃＩｓａａｃ，Ｈ．Ｊ．，１９９６．Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ａｂｉｏｔｉｃ  ａｎｄ  ｂｉｏｔｉｃ  ｉｍｐａｃｔｓ  ｏｆ  ｚｅｂｒａ  ｍｕｓｓｅｌｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  ｉｎｌａｎｄ  ｗａｔｅｒｓ  ｏｆ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍｅｒｉｃａ．Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｚｏｏｌｏｇｙ，３６，２８９−２９９；Ｄ．Ｐ．Ｍｏｌｌｏｙ，ｔｈｅ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｆｏｒ  ｕｓｉｎｇ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｃｏｎｔｒｏｌ  ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｄｒｅｉｓｓｅｎａ  ＳＰＰ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｓｈｅｌｌｆｉｓｈ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１９９８（１７）  １７７−１８３］並びに何十億ドルもの収入減となる生産性の低下（Ｃｏｎｎｅｌｌｙ，Ｎ．Ａ．，Ｃ．Ｒ．Ｏ’Ｎｅｉｌｌ，Ｊｒ，ｅｔ  ａｌ．（２００７），“Ｅｃｏｎｏｍｉｃ  ｉｍｐａｃｔｓ  ｏｆ  Ｚｅｂｒａ  ｍｕｓｓｅｌｓ  ｏｎ  ｄｒｉｎｋｉｎｇ  ｗａｔｅｒ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ａｎｄ  ｅｌｅｃｔｒｉｃ  ｐｏｗｅｒ  ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｆａｃｉｌｉｔｉｅｓ”，  Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  ９０：１０．Ｅｃｏｎｏｍｉｃ  ｉｍｐａｃｔｓ  ｏｆ  ｚｅｂｒａ  ｍｕｓｓｅｌｓ  ｏｎ  ｄｒｉｎｋｉｎｇ  ｗａｔｅｒ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ａｎｄ  ｅｌｅｃｔｒｉｃ  ｐｏｗｅｒ  ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｆａｃｉｌｉｔｉｅｓ．Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  ４０：１０５−１１２）が挙げられる。さらに、これらの侵入性イガイの水界生態系への急激な侵入によって、生物多様性の重要な部分である、固有種のイシガイ科のイガイの豊富度や存在度の減少が生じている（Ｒｉｃｃｉａｒｄｉ，Ａ，Ｎｅｖｅｓ，Ｒ．Ｊ．，Ｒａｓｍｕｓｓｅｎ，Ｊ．Ｂ．１９９８．Ｉｍｐｅｎｄｉｎｇ  ｅｘｔｉｎｃｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  ｆｒｅｓｈｗａｔｅｒ  ｍｕｓｓｅｌｓ（Ｕｎｉｏｎｉｄａｅ）  ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ  ｔｈｅ  ���ｅｂｒａ  ｍｕｓｓｅｌ（Ｄｒｅｉｓｓｅｎａ  ｐｏｌｙｍｏｒｐｈａ）  ｉｎｖａｓｉｏｎ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｎｉｍａｌ  Ｅｃｏｌｏｇｙ  ６７：６１３−６１９）。
【０００４】
イガイの管理は、水依存的インフラストラクチャーや水の生態系の保護に極めて重要である。イガイの個体群を減らす方法はたくさんある。これらの方法としては、事前対処的な（ｐｒｅ−ａｃｔｉｖｅ）方法と対処的な（ｒｅａｃｔｉｖｅ）方法が挙げられる。対処的な除去としては、機械的除去、捕食者による除去、並びに化学的及び生化学的除去が挙げられる。例えば、魚、鳥、ザリガニ、カニ、ヒル及び哺乳動物は、イガイを捕食することが明らかになっている。しかしながら、イガイ個体群が、とりわけ、パイプ又は揚水式発電所などの人工建造物において自然な捕食によって防除される可能性は低い。
【０００５】
軟体動物駆除剤の適用は、イガイ個体群を減らすための別の有効な方法である。例えば、次亜塩素酸ナトリウムは、ヨーロッパ、米国及びカナダで一般に用いられている防除剤である。しかしながら、イガイは、貝殻を閉じることによって数日間この処理に耐えることができ、塩素は、塩素の環境毒性のために、圧力検出装置又は他の装置を含むパイプ又はダクトでしか用いることができない［Ｕ．Ｓ．Ａｒｍｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒ  Ｗａｔｅｒｗａｙｓ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ  Ｓｔａｔｉｏｎ．１９９５．Ｚｅｂｒａ  ｍｕｓｓｅｌｓ：Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｅｃｏｌｏｇｙ，ａｎｄ  Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ．Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  Ｎｏｔｅ．ＺＭＲ−１−０１．Ｚｅｂｒａ  Ｍｕｓｓｅｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｐｒｏｇｒａｍ，Ｖｉｃｋｓｂｕｒｇ，ＭＳ］。さらに、界面活性剤アンモニウム塩、塗料中のブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、Ｎ−トリフェニルメチル−モルホリンなどのような他の市販の軟体動物駆除剤がたくさんある。これらの化学薬品は、低い選択性を示すか又は水の生態系に影響を及ぼすかのどちらかである。例えば、ベイルシド（登録商標）（Ｂａｙｅｒ）として市販されている４−トリフルオロエチル−４−ニトロフェノールは、このような侵入外来種を防除するための考えられる候補である。しかしながら、このような化学薬品の毒性機構は、イガイの細胞呼吸に影響を及ぼすことになり、このことは、本来、イガイと他の水生種（例えば、魚）との間でのその選択性を制限する［Ｋａｒｅｎ  Ｐｅｒｒｙ  ＡＥ  Ｊｏｈｎ  Ｌｙｎｎ，Ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ  ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｎｄ  ｐｅｓｔｉｃｉｄｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｉｎ  ｅａｒｌｙ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ  ｓｔａｇｅｓ  ｏｆ  ｉｎｖａｓｉｖｅ  ｂｉｖａｌｖｅｓ，Ｈｙｄｒｏｂｉｏｌｏｇｉａ（２００９）  ６２８：１５３−１６４；Ｉ  Ｔａｋｏｕｇａｎｇ，Ｊ  Ｍｅｌｉ，Ｆ  Ａｎｇｗａｆｏ，Ｆｉｅｌｄ  ｔｒｉａｌｓ  ｏｆ  ｌｏｗ  ｄｏｓｅ  Ｂａｙｌｕｓｃｉｄｅ  ｏｎ  ｓｎａｉｌ  ｈｏｓｔｓ  ｏｆ  ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍｅ  ａｎｄ  ｓｅｌｅｃｔｅｄ  ｎｏｎ−ｔａｒｇｅｔ  ｏｒｇａｎｉｓｍｓ  ｉｎ  ｓａｈｅｌｉａｎ  Ｃａｍｅｒｏｏｎ，Ｍｅｍ  Ｉｎｓｔ  Ｏｓｗａｌｄｏ  Ｃｒｕｚ，Ｒｉｏ  ｄｅ  Ｊａｎｅｉｒｏ，２００６，１０１（４）：３５５−３５８］。
【０００６】
安全で、環境に優しく、かつ安価な方法で侵入性イガイを管理することが極めて重要である。これらの侵入性イガイを防除するためのより害の少ない方法を見付けるために、ニューヨーク・ステート・ミュージーアム（ＮＹＳＭ）の野外調査研究室は、カワホトトギスガイやクワッガガイに対して使用される潜在的な生物学的防除作用因子として、７００を上回る細菌分離株をスクリーニングした。結果として、この研究室は、プセウドモナス・フルオレスケンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）のＣＬ１４５Ａ株という分離株が、これらのイガイを死に至らせることを発見した（２００１年２月２７日に発行された、Ｍｏｌｌｏｙ，Ｄ．Ｐ．米国特許第６，１９４，１９４号を参照されたい）。この細菌は世界中に分布しており、北米の全水塊に存在している。本来、この細菌は、植物の根を腐敗やうどん粉病から守ることが知られている無害細菌種である。この細菌は、どこにでもいるので、普通の家庭用冷蔵庫の中の一般的な食品腐敗生物である［Ｄａｎｉｅｌ  Ｐ．Ｍｏｌｌｏｙ  ａｎｄ  Ｄｅｎｉｓｅ  Ａ．Ｍａｙｅｒ，Ｏｖｅｒｖｉｅｗ  ｏｆ  ａ  Ｎｏｖｅｌ  Ｇｒｅｅｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ：Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  ｏｆ  Ｚｅｂｒａ  ａｎｄ  Ｑｕａｇｇａ  Ｍｕｓｓｅｌｓ  ｗｉｔｈ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ，Ｖｅｒｓｉｏｎ  ６：Ｕｐｄａｔｅｄ  Ａｕｇｕｓｔ  ２４，２００７］。
【０００７】
ラクトン、ラクタム、カルバマート及びアミド
ラクトンは食品や飲料に広く分布しており、かつ動物（例えば、海綿動物）や微生物（例えば、酵母、真菌）の二次代謝物でもある。いくつかのラクトンには特別な芳香があり（例えば、γ−デカラクトン）、バイオ技術によるこれらのラクトンの製造プロセスの使用によって、食品産業において天然産物に対する需要が高まっている［Ｍｏｈａｍｅｄ  Ａｌｃｈｉｈａｂ，Ｊａｃｑｕｅｌｉｎｅ  Ｄｅｓｔａｉｎ，Ｍａｒｉｏ  Ａｇｕｅｄｏ，Ｌａｍｉａ  Ｍａｊａｄ，Ｈａｋｉｍ  Ｇｈａｌｆｉ，Ｊｅａｎ−Ｐａｕｌ  Ｗａｔｈｅｌｅｔ，Ｐｈｉｌｉｐｐｅ  Ｔｈｏｎａｒｔ，Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  γ−Ｄｅｃａｌａｃｔｏｎｅ  ｂｙ  ａ  Ｐｓｙｃｈｒｏｐｈｉｌｉｃ  ａｎｄ  ａ  Ｍｅｓｏｐｈｉｌｉｃ  Ｓｔｒａｉｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｙｅａｓｔ  Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ  ａｕｒａｎｔｉａｃａ，Ａｐｐｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ（２００９）  １５８：４１−５０］。様々なラクトンの他の機能は、抗細菌活性［Ｉｋｕｋｏ  Ｓｈｉｍｉｚｕ，Ｙａｓｕｎｏｒｉ  Ｉｓｓｈｉｋｉ，Ｈａｒｕｅ  Ｎｏｍｕｒａ，Ｋｅｉｓｕｋｅ  Ｓａｋｕｄａ，Ｋａｔｓｕｙａ  Ｓａｋｕｍａ，Ｓｅｉｉｃｈｉ  Ｋｏｎｄｏ，Ｔｈｅ  Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  Ｆｒａｇｒａｎｃｅ  Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ  ａｇａｉｎｓｔ  Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ，Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．２００９，３２（６）  １１１４−１１１７］、肝臓保護活性［Ｙｕｍｉｋｏ  Ｉｔｏｈ，Ｈｉｒｏｓｈｉ  Ｓｈｉｍｕｒａ，Ｍａｙｕｍｉ  Ｉｔｏ，Ｎａｏｈａｒｕ  Ｗａｔａｎａｂｅ，Ｍｉｃｈｉｏ  Ｙａｍａｇｉｓｈｉ，Ｍａｓａｈａｒｕ  Ｔａｍａｉ  ａｎｄ  Ｋａｚｕｎｏｒｉ  Ｈａｎａｄａ，Ｎｏｖｅｌ  ｈｅｐａｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  γ−ｌａｃｔｏｎｅ，ＭＨ−０３１，Ｉ．Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ａｎｄ  ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ｅｌｕｃｉｄａｔｉｏｎ，Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ  １９９１，８３２−８３７］、抗結核活性［Ｍａ，Ｇ．Ｙ．ｅｔ  ａｌ．ａｎｔｉ−ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ  ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  ｓｔｅｍ  ｂａｒｋ  ｏｆ  ｍｉｃｒｏｍｅｌｕｍ  ｈｉｒｓｕｔｕｍ，Ｐｌａｎｔａ  Ｍｅｄ．２００５，７１，２６１−２６７］、抗ＨＩＶ活性［Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，ｓｅｓｑｕｉｔｅｒｐｅｎｅｓ  ａｎｄ  ｂｕｔｅｎｏｌｉｄｅｓ，ｎａｔｕｒａｌ  ａｎｔｉ−ＨＩＶ  ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ  ｆｒｏｍ  Ｌｉｔｓｅ  ｖｅｒｔｉｃｉｌｌａｔａ，Ｐｌａｎｔａ  Ｍｅｄ，２００５，７１，４５２−４５７］、性フェロモン［Ｊ．Ｈ．Ｔｕｍｌｉｎｓｏｎ，Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｆｅｍａｌｅ  Ｊａｐａｎｅｓｅ  Ｂｅｅｔｌｅ  Ｓｅｘ  Ｐｈｅｒｏｍｏｎｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍａｌｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｂｙ  ａｎ  Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒ，Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９７７，１９７，７８９−７９２］、細胞傷害活性［Ｆａｎ，Ｘ．Ｎ．ｅｔ  ａｌ．Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ  ｏｆ  Ｈｅｔｅｒｏｐｌｅｘｉｓ  ｍｉｃｏｃｅｐｈａｌａ，Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．２０��９，７２，１１８４−１１９０］、シグナル分子［Ｍ．Ｋ．Ｖｉｎｓｏｎ，ｅｔ  ａｌ．Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｎ−アシル−Ｌ−ｈｏｍｏｓｅｒｉｎｅ  ｌａｃｔｏｎｅ  ｓｉｇｎａｌ  ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ｒｅｇｕｌａｔｅ  ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｖｉｒｕｌｅｎｃｅ  ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔｓ  ａｎｄ  ｓｅｃｏｎｄａｒｙ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ  ｉｎ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９９５，９２，９４２７−９４３１］及び殺虫活性［Ｊｏｈｎ  Ａ．Ｆｉｎｄｌａｙ，ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｓｅｃｔ  ｔｏｘｉｎｓ  ｆｒｏｍ  ｓｐｒｕｃｅ  ｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓ，Ｃａｎ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．２００３，８１，２８４−２９２］と関連する。
【０００８】
ラクタムはいくつかの植物や海洋生物中に存在するが、ラクタムは、多くの場合、真菌代謝物である。多くの生物学的活性（例えば、細胞傷害活性及び抗腫瘍活性、血管新生阻害、神経細胞活性、抗感染活性）が、最近の刊行物で概説された［Ｂａｓｔｉｅｎ  Ｎａｙ，Ｎａｓｓｉｍａ  Ｒｉａｃｈｅ  ａｎｄ  Ｌａｕｒｅｎｔ  Ｅｖａｎｎｏ，  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  ｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｎｏｎ−ｔｅｔｒａｍｉｃ  γ−ｈｙｄｒｏｘｙ−γ−ｌａｃｔａｍｓ  ａｎｄ  γ−ａｌｋｙｌｉｄｅｎｅ−γ−ｌａｃｔａｍｓ  ｆｒｏｍ  ｎａｔｕｒａｌ  ｓｏｕｒｃｅｓ，Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔ  ｒｅｐｏｒｔｓ，２００９，２６，１０４４−１０６２］。
【０００９】
カルバマートは、植物、微生物及び海綿動物中に存在するが、これらの化合物の多くが水溶液中で不安定であるために、ラクトン、アミドと比較して、これらの化合物についての生物学的活性の報告はほとんどない。天然のカルバマートの殺真菌活性の例が１つある［Ｒｉｃｈａｒｄ  Ｊ．Ｃｌａｒｋ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ  Ａｌｋｙｌ  Ａｍｉｎｏ  Ａｌｃｏｈｏｌｓ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  Ｔｒｏｐｉｃａｌ  Ｍａｒｉｎｅ  Ｓｐｏｎｇｅ  Ｈａｌｉｃｌｏｎａ  ｎ．ｓｐ．，Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．２００１，６４，１５６８−１５７１］。アミドは、植物、微生物及び海綿動物中に広く分布している。例えば、海洋性真菌のペニシリウム・シトリヌム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃｉｔｒｉｎｕｍ）由来のスカルサミドＡは、抗細菌活性及び抗真菌活性を示した［Ｍａｓａｓｈｉ  Ｔｓｕｄａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃａｌｕｓａｍｉｄｅｓ  Ａ−Ｃ，Ｎｅｗ  Ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ  Ａｌｋａｌｏｉｄｓ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  Ｍａｒｉｎｅ−Ｄｅｒｉｖｅｄ  Ｆｕｎｇｕｓ  Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃｉｔｒｉｎｕｍ，Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．２００５，６８，２７３−２７６］。
【００１０】
アミドの別の例は、サルメンチンと呼ばれる植物由来化合物であり、これは、多くの生体活性を示した。特許出願第６１／２２７，４１２（２００９年７月２１日）に記載されているように、サルメンチンは、１９８７年に、ピペル・サルメントスム（Ｐｉｐｅｒ  ｓａｒｍｅｎｔｏｓｕｍ）の果実から最初に単離され［Ｌｉｋｈｉｔｗｉｔａｙａｗｕｉｄ，Ｋ．，Ｒｕａｎｇｒｕｎｇｓｉ，Ｎ，Ｌａｎｇｅ，Ｇ  ａｎｄ  Ｄｅｃｉｃｃｏ，Ｃ．，Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  Ｅｌｕｃｉｄａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｎｅｗ  Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ  ｉｓｏｌａｔｅｄ  ｆｒｏｍ  Ｐｉｐｅｒ  Ｓａｍｅｎｔｏｓｕｍ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  １９８７（４３）  ３６８９−３６９４］、また、１９８８年には、ピペル・ニグルム（Ｐｉｐｅｒ  ｎｉｇｒｕｍ）からも単離され［Ｋｉｕｃｈｉ，Ｆ．，Ｎａｋａｍｕｒａ，Ｎ．，Ｔｓｕｄａ，Ｙ．，Ｋｏｎｄｏ，Ｋ  ａｎｄ  Ｙｏｓｈｉｍｕｒａ，Ｈ．Ｓｔｕｄｉｅｓ  ｏｎ  Ｃｒｕｄｅ  Ｄｒｕｇｓ  Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  ｏｎ  Ｖｉｓｃｅｒａｌ  Ｌａｒｖａ  Ｍｉｇｒａｎｓ．ＩＶ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｌａｒｖｉｃｉｄａｌ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｉｎ  Ｐｅｐｐｅｒ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ    ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ  １９８８（３６）：２４５２］、１９９５年に初めて合成された［Ｂｅｒｎａｂｅｕ，Ｍ．，Ｃｈｉｎｃｈｉｌｌａ，Ｒ．ａｎｄ  Ｎａｊｅｒａ，Ｃ．，（２Ｅ，４Ｅ）−５−Ｔｏｓｙｌ−２，４−ｐｅｎｔａｄｉｅｎａｍｉｄｅｓ：Ｎｅｗ  Ｄｉｅｎｉｃ  Ｓｕｌｆｏｎｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｓｔｅｒｅｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  （２Ｅ，４Ｅ）−Ｄｉｅｎａｍｉｄｅｓ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒ，１９９５（３６）３９０１−３９０４］。サルメンチンは、光老化皮膚を保護するインビボの皮膚酸化防止剤として作用し［Ｃｏｒｎａｃｃｈｉｏｎｅ，Ｓ．；  Ｓａｄｉｃｋ，Ｎ．Ｓ．；Ｎｅｖｅｕ，Ｍ．；Ｔａｌｂｏｕｒｄｅｔ，Ｓ．；Ｌａｚｏｕ，Ｋ．；Ｖｉｒｏｎ，Ｃ．；Ｒｅｎｉｍｅｌ，Ｉ．；ｄｅ  Ｑｕｅｒａｌ，Ｄ．；Ｋｕｒｆｕｒｓｔ，Ｒ．；Ｓｃｈｎｅｂｅｒｔ，Ｓ．；Ｈｅｕｓｅｌｅ，Ｃ．；Ａｎｄｒｅ，Ｐ．；Ｐｅｒｒｉｅｒ  Ｅ．Ｉｎ  ｖｉｖｏ  ｓｋｉｎ  ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ａ  ｎｅｗ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｂａｓｅｄ  ｏｎ  ａ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｖｉｔｉｓ  ｖｉｎｉｆｅｒａ  ｓｈｏｏｔｓ  ｅｘｔｒａｃｔ  ａｎｄ  ａ  ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｃａｌ  ｅｘｔｒａｃｔ．Ｊ．Ｄｒｕｇｓ  ｉｎ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．２００７，６Ｓ，８−１３］、抗血小板凝集活性を示し［Ｌｉ，Ｃ．Ｙ．；Ｔｓａｉ，Ｗ．；Ｄａｍｕ，Ａ．Ｇ．；Ｌｅｅ，Ｅ．Ｊ．；Ｗｕ，Ｔ．Ｓ．；Ｄｕｎｇ．Ｎ．Ｘ．；Ｔｈａｎｇ，Ｔ．Ｄ．；Ｔｈａｎｈ，Ｌ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎｔｉｐｌａｔｅｌｅｔ  ａｇｇｒｅｇａｔｏｒｙ  ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  ｌｅａｖｅｓ  ｏｆ  Ｐｉｐｅｒ  ｌｏｌｏｔ，Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．２００７，５５，９４３６−９４４２］、抗プラスモジウム活性及び抗マイコバクテリア活性を有し［Ｔｕｎｔｉｗａｃｈｗｕｔｔｉｋｕｌ，Ｐ．；Ｐｈａｎｓａ，Ｐ．；Ｐｏｏｔａｅｎｇ−ｏｎ，Ｙ．；Ｔａｙｌｏｒ，Ｗ．Ｃ．Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｒｏｏｔｓ  ｏｆ  Ｐｉｐｅｒ  Ｓａｒｍｅｎｔｏｓｕｍ，Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．２００６，５４，１４９−１５１］、かつ抗結核活性を有する［Ｒｕｋａｃｈａｉｓｉｒｉｋｕｌ，Ｔ．；Ｓｉｒｉｗａｔｔａｎａｋｉｔ，Ｐ．；Ｓｕｋｃｈａｒｏｅｎｐｈｏｌ，Ｋ．；Ｗｏｎｇｖｅｉｎ，Ｃ．；Ｒｕｔｔａｎａｗｅａｎｇ，Ｐ．；Ｗｏｎｇｗａｔｔａｎａｖｕｃｈ，Ｐ．；Ｓｕｋｓａｍｒａｒｎ，Ａ．Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ  ａｎｄ  ｂｉｏａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  Ｐｉｐｅｒ  ｓａｒｍｅｎｔｏｓｕｍ，Ｊ．Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．，２００４，９３，１７３−１７６］ことが分かっている。サルメンチンは、化粧品や医薬品中の疎水性化合物の可溶化剤として用いられる（Ｓｔｅｐｈｅｎ，Ｔ．；Ａｎｄｒｅｗ，Ｈ．Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ  ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｓｓｅｍｂｌｅｓ  ｏｆ  ｌｉｐｉｄ  ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ，ＰＣＴ刊行物ＷＯ／２００８／０６５４５１号）。特許出願第６１／２２７，４１２号（２００９年７月２１日）では、サルメンチン及びその類似体を用いて植物害虫を防除し得ることがさらに開示されている。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明は、軟体動物、特に腹足綱及び／又は双殻綱のメンバー、より特には、イガイ、カタツムリ及びナメクジを防除するための化合物、組成物及び方法に関する。本発明は、（ａ）微生物、特にプセウドモナス種、より特にはプセウドモナス・フルオレスケンス或いはプセウドモナスＡＴＣＣ  ５５７９９の識別特徴を有する生物から入手できるか又はこれらの生物に由来し、（ｂ）双殻綱、特に、イガイ（例えば、ドレイッサナ属の１種）及び／又は腹足綱、特に、カタツムリ（これには、水性カタツムリ（例えば、ビオムファラリア属の１種）及び庭カタツムリ（限定するものではないが、茶色庭カタツムリ、白色庭カタツムリ（例えば、カンタレウス属の１種、コルヌ属の１種、テバ属の１種）を含む）が含まれるが、これらに限定されない）、及び／又はナメクジ（限定するものではないが、灰色庭ナメクジ（例えば、デロケラス属の１種）、縞状（ｂａｎｄｅｄ）若しくはミツスジ（ｔｈｒｅｅ−ｂａｎｄ）ナメクジ（例えば、レマンニア属の１種）、黄褐色ナメクジ（例えば、リマクス属の１種）、及び温室ナメクジ（例えば、ミラクス属の１種）を含む）からなる群から選択される一群の軟体動物のメンバーに対して毒性があり、かつ（ｃ）液体クロマトグラフィー／質量分析（ＬＣ／ＭＳ）で測定したときに、約５４０〜５５０及び約１２８０〜１３３５からなる群から選択される分子量を有する単離された化合物に関する。これらの組成物は、軟体動物、特に、腹足綱及び／又は双殻綱のメンバー、より特には、イガイ、カタツムリ及びナメクジを防除するために使用し得る組成物に処方し得る。一実施形態では、化合物は、（ａ）微生物、特にプセウドモナス属の１種から入手でき、（ｂ）双殻綱、特に、イガイ（例えば、ドレイッサナ属の１種）及び／又は腹足綱、特に、カタツムリ（これには、水性カタツムリ（例えば、ビオムファラリア属の１種）及び庭カタツムリ（限定するものではないが、茶色庭カタツムリ、白色庭カタツムリ（例えば、カンタレウス属の１種、コルヌ属の１種、テバ属の１種）を含む）が含まれるが、これらに限定されない）、及び／又はナメクジ（限定するものではないが、灰色庭ナメクジ（例えば、デロケラス属の１種）、縞状若しくはミツスジナメクジ（例えば、レマンニア属の１種）、黄褐色ナメクジ（例えば、リマクス属の１種）、及び温室ナメクジ（例えば、ミラクス属の１種）を含む）からなる群から選択される一群の軟体動物のメンバーに対して毒性があり、（ｃ）液体クロマトグラフィー／質量分析（ＬＣ／ＭＳ）で測定したときに、約１２８０〜１３１０、より特には、１２９５という分子量を有し、（ｄ）δ９．２５，８．３６，８．０６，７．８２，７．７１，７．５２，７．４５，６．８２，６．３６，６．０８，５．４２，５．３９，５．３０，５．１４，４．６８，４．４２，４．３１，４．１６，４．１１，４．０７，３．９５−３．８６，３．８３，３．７２，３．６６，３．５３，３．４８，３．３７，３．１７，３．０６，２．５６，２．５３，２．４５，２．３２，２．２１，２．０２，１．９６，１．８４，１．７２，１．６５，１．６１，１．５１，１．４８−１．３７，１．３２，１．１２，０．９４，０．９１，０．６８とい��１Ｈ  ＮＭＲ値を有し、（ｅ）２．５ｍＬ／分の流速及び２１０ｎｍのＵＶ検出の勾配溶媒系（０〜１０分；３０−４０％水性ＣＨ３ＣＮ、１０〜２０分；４０−６０％水性ＣＨ３ＣＮ、２０〜６０分；６０−８０％水性ＣＨ３ＣＮ、６０〜６５分；８０−１００％水性ＣＨ３ＣＮ）にした水：アセトニトリル（ＣＨ３ＣＮ）を用いる逆相Ｃ−１８  ＨＰＬＣ（例えば、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｈｙｄｅｒｓｉｌ  Ｇｏｌｄ，１００×１０ｍｍ）カラムで約５０〜５５分、より具体的には約５２分、さらにより具体的には約５１．６６分という高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）保持時間を有する。
【００１２】
別の実施形態では、化合物は、以下の特徴を有する、すなわち、（ａ）微生物、特にプセウドモナス属の１種から入手でき、（ｂ）双殻綱、特に、イガイ（例えば、ドレイッサナ属の１種）及び／又は腹足綱、特に、カタツムリ（これには、水性カタツムリ（例えば、ビオムファラリア属の１種）及び庭カタツムリ（限定するものではないが、茶色庭カタツムリ、白色庭カタツムリ（例えば、カンタレウス属の１種、コルヌ属の１種、テバ属の１種）を含む）が含まれるが、これらに限定されない）、及び／又はナメクジ（限定するものではないが、灰色庭ナメクジ（例えば、デロケラス属の１種）、縞状若しくはミツスジナメクジ（例えば、レマンニア属の１種）、黄褐色ナメクジ（例えば、リマクス属の１種）、及び温室ナメクジ（例えば、ミラクス属の１種）を含む）からなる群から選択される一群の軟体動物のメンバーに対して毒性があり、（ｃ）ＬＣ／ＭＳで測定したときに、約１３１０〜１３３５、より特には、１３２１という分子量を有し、（ｄ）２．５ｍＬ／分の流速及び２１０ｎｍのＵＶ検出の勾配溶媒系（０〜１０分；３０−４０％水性ＣＨ３ＣＮ、１０〜２０分；４０−６０％水性ＣＨ３ＣＮ、２０〜６０分；６０−８０％水性ＣＨ３ＣＮ、６０〜６５分；８０−１００％水性ＣＨ３ＣＮ）にした水：アセトニトリル（ＣＨ３ＣＮ）を用いるアセトニトリル：水勾配を用いる逆相Ｃ−１８（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｈｙｄｅｒｓｉｌ  Ｇｏｌｄ，１００×１０ｍｍ）ＨＰＬＣカラムで約５５〜６０分、より特には、約６０分、さらにより特には、５９．６１分というＨＰＬＣ保持時間を有する。さらに別の実施形態では、本発明は、以下の特徴を有する、すなわち、（ａ）微生物、特にプセウドモナス属の１種から入手でき、（ｂ）双殻綱、特に、イガイ（例えば、ドレイッサナ属の１種）及び／又は腹足綱、特に、カタツムリ（これには、水性カタツムリ（例えば、ビオムファラリア属の１種）及び庭カタツムリ（限定するものではないが、茶色庭カタツムリ、白色庭カタツムリ（例えば、カンタレウス属の１種、コルヌ属の１種、テバ属の１種）を含む）が含まれるが、これらに限定されない）、及び／又はナメクジ（限定するものではないが、灰色庭ナメクジ（例えば、デロケラス属の１種）、縞状若しくはミツスジナメクジ（例えば、レマンニア属の１種）、黄褐色ナメクジ（例えば、リマクス属の１種）、及び温室ナメクジ（例えば、ミラクス属の１種）を含む）からなる群から選択される一群の軟体動物のメンバーに対して毒性があり、（ｃ）ＬＣ／ＭＳで測定したときに、約５４０〜５５０、より特には、約５４６という分子量を有し、（ｄ）１０ｍＬ／分の流速及び２１０ｎｍのＵＶ検出の水：アセトニトリル勾配溶媒系（０〜１０分；３５−４５％水性ＣＨ３ＣＮ、１０〜２０分；４５−６０％水性ＣＨ３ＣＮ、２０〜５０分；６０−８５％水性ＣＨ３ＣＮ、５０〜６０分；８５−１００％水性ＣＨ３ＣＮ、６０〜７０分；１００％ＣＨ３ＣＮ）を用いる逆相Ｃ−１８  ＨＰＬＣカラム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ，ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）１０μ，１００Å  Ａｘｉａ，Ａ２５０×３０ｍｍ）で約５０〜５５分、より特には、約５２分、さらにより特には、約５１．５４分というＨ��ＬＣ保持時間を有する単離された化合物に関する。
【００１３】
本発明はさらに、本発明の化合物を入手するための方法であって、（ａ）プセウドモナス種に由来する細胞の懸濁物を入手することと、（ｂ）該懸濁物からクロマトグラフィー法で化合物を単離することとを含む方法に関する。
【００１４】
本発明はさらに、該化合物を含む組成物、並びにＨＰＬＣによりプセウドモナス種細胞懸濁物から入手できる、約４５〜５０分という保持時間を有する、１０ｍＬ／分の流速及び２１０ｎｍのＵＶ検出の水：アセトニトリル溶媒系（０〜１０分；３５−４５％水性ＣＨ３ＣＮ、１０〜２０分；４５−６０％水性ＣＨ３ＣＮ、２０〜５０分；６０−８５％水性ＣＨ３ＣＮ、５０〜６０分；８５−１００％水性ＣＨ３ＣＮ、６０〜７０分；１００％ＣＨ３ＣＮ）による画分であって、（ａ）双殻綱、特に、イガイ（例えば、ドレイッサナ種）及び／又は腹足綱、特に、カタツムリ（これには、水性カタツムリ（例えば、ビオムファラリア種）及び庭カタツムリ（限定するものではないが、茶色庭カタツムリ、白色庭カタツムリ（例えば、カンタレウス属の１種、コルヌ属の１種、テバ属の１種）を含む）が含まれるが、これらに限定されない）、及び／又はナメクジ（限定するものではないが、灰色庭ナメクジ（例えば、デロケラス属の１種）、縞状若しくはミツスジナメクジ（例えば、レマンニア属の１種）、黄褐色ナメクジ（例えば、リマクス属の１種）、及び温室ナメクジ（例えば、ミラクス属の１種）を含む）からなる群から選択される一群の軟体動物のメンバーに対して毒性があり、（ｂ）ＬＣ／ＭＳで測定したときに、約６３０〜６６０及び約９７０〜１０００の分子量を有する少なくとも２種の化合物を含む画分を含む組成物に関する。
【００１５】
本発明は、防除が望ましい場所で１種以上の軟体動物を防除するための方法であって、該場所に（ａ）エルウィニア属の１種の細胞に由来する細胞懸濁物又は抽出物、（ｂ）１種以上の化合物（ここで、該化合物は、ラクトン、ラクタム、カルバマート、カルボン酸及び／又はアミド化合物である）、或いは該化合物を含む組成物、但し、該化合物は、γ−オクタラクトン、γ−ノナラクトン、γ−デカノラクトン、γ−ウンデカラクトン、Ｎ−シクロペンチルシンナムアミド、Ｎ−（ｔｒａｎｓ−シンナモイル）ピロリジン、Ｎ−（ｔｒａｎｓ−シンナモイル）ピペリジン及びＮ−（ｔｒａｎｓ−シンナモイル）ヘキサメチレンイミン、４−ヒドロキシドデカン酸及びドデカン酸ではなく、かつ組成物はプセウドモナス培養物、抽出物又は懸濁物ではない、（ｃ）（ｉ）プセウドモナス種から入手できるか又はこの種に由来し、（ｉｉ）双殻綱、特に、イガイ（例えば、ドレイッサナ属の１種）及び／又は腹足綱、特に、カタツムリ（これには、水性カタツムリ（例えば、ビオムファラリア属の１種）及び庭カタツムリ（限定するものではないが、茶色庭カタツムリ、白色庭カタツムリ（例えば、カンタレウス属の１種、コルヌ属の１種、テバ属の１種）を含む）が含まれるが、これらに限定されない）、及び／又はナメクジ（限定するものではないが、灰色庭ナメクジ（例えば、デロケラス属の１種）、縞状若しくはミツスジナメクジ（例えば、レマンニア属の１種）、黄褐色ナメクジ（例えば、リマクス属の１種）、及び温室ナメクジ（例えば、ミラクス属の１種）を含む）からなる群から選択される一群の軟体動物のメンバーに対して毒性があり、かつ（ｉｉｉ）液体クロマトグラフィー／質量分析（ＬＣ／ＭＳ）で測定したときに、約５４０〜５５０及び約１２８０〜１３３５からなる群から選択される分子量を有する１種以上の化合物、（ｄ）ＨＰＬＣによりプセウドモナス種細胞懸濁物から入手できる、約４５〜５０分という保持時間を有する、１０ｍＬ／分の流速及び２１０ｎｍのＵＶ検出の水：アセトニトリル溶媒系（０〜１０分；３５−４５％水性ＣＨ３ＣＮ、１０〜２０分；４５−６０％水性ＣＨ３ＣＮ、２０〜５０分；６０−８５％水性ＣＨ３ＣＮ、５０〜６０分；８５−１００％水性ＣＨ３ＣＮ、６０〜７０分；１００％ＣＨ３ＣＮ）による画分であって、（ｉ）双殻綱、特に、イガイ（例えば、ドレイッサナ属の１種）及び／又は腹足綱、特に、カタツムリ（これには、水性カタツムリ（例えば、ビオムファラリア属の１種）及び庭カタツムリ（限定するものではないが、茶色庭カタツムリ、白色庭カタツムリ（例えば、カンタレウス属の１種、コルヌ属の１種、テバ属の１種）を含む）が含まれるが、これらに限定されない）、及び／又はナメクジ（限定するものではないが、灰色庭ナメクジ（例えば、デロケラス属の１種）、縞状若しくはミツスジナメクジ（例えば、レマンニア属の１種）、黄褐色ナメクジ（例えば、リマクス属の１種）、及び温室ナメクジ（例えば、ミラクス属の１種）を含む）からなる群から選択される一群の軟体動物のメンバーに対して毒性があり、（ｉｉ）ＬＣ／ＭＳで測定したときに、約６３０〜６６０及び約９７０〜１０００の分子量を有する少なくとも２種の化合物を���む画分を含む組成物、のうちの少なくとも１つを、該場所で該軟体動物を防除するのに有効な量で導入することを含む方法に関する。この防除は、一実施形態では、該軟体動物を上で示した化合物と接触させることを含む、１種以上の軟体動物における死を誘導することによって達成し得る。軟体動物を水塊又は固体表面において接触させ得る。同様に、本発明は、ある場所で腹足綱及び／又は双殻綱などの軟体動物を防除する際に用いられる組成物を処方するための上述の化合物、懸濁物及び組成物の使用に関する。
【００１６】
関連した態様では、本発明はさらに、防除が望ましい場所で１種以上の軟体動物、特にイガイ及び／又はカタツムリ（例えば、白色及び／又は茶色庭カタツムリ、水性カタツムリ）及び／又はナメクジを防除する及び／又は該場所で１種以上の軟体動物、特にイガイ及び／又はカタツムリ（例えば、白色及び／又は茶色庭カタツムリ、水性カタツムリ）及び／又はナメクジにおける死を誘導するための組成物であって、１以上のラクトン、ラクタム、カルバマート、カルボン酸及び／又はアミドを含み、この場合も但し、該化合物は、γ−オクタラクトン、γ−ノナラクトン、γ−デカノラクトン、γ−ウンデカラクトン、Ｎ−シクロペンチルシンナムアミド、Ｎ−（ｔｒａｎｓ−シンナモイル）ピロリジン、Ｎ−（ｔｒａｎｓ−シンナモイル）ピペリジン及びＮ−（ｔｒａｎｓ−シンナモイル）ヘキサメチレンイミン、４−ヒドロキシデカン酸及びデカン酸ではなく、かつ組成物はプセウドモナス培養物、抽出物又は懸濁物ではない、組成物に関する。
【００１７】
特定の実施形態では、本発明は、１種以上の軟体動物、特にイガイ及び／又はカタツムリ（例えば、白色及び／又は茶色庭カタツムリ、水性カタツムリ）及び／又はナメクジを防除するための方法であって、（ａ）エルウィニア属の１種の細胞由来の細胞懸濁物又は抽出物を調製する工程と、（ｂ）該懸濁物又は抽出物を防除が望ましい場所に該軟体動物を防除するのに有効な量で導入する工程とを含む方法に関する。
【００１８】
エルウィニア抽出物は、ラクトンやアミドなどの、上で示した活性成分を含み得る。同様に、エルウィニア属の１種の細胞に由来する細胞懸濁物又は抽出物を、軟体動物、特に双殻綱、特に、イガイ（例えば、ドレイッサナ属の１種）及び／又は腹足綱、特に、カタツムリ（これには、水性カタツムリ（例えば、ビオムファラリア属の１種）及び庭カタツムリ（限定するものではないが、茶色庭カタツムリ、白色庭カタツムリ（例えば、カンタレウス属の１種、コルヌ属の１種、テバ属の１種）を含む）が含まれるが、これらに限定されない）、及び／又はナメクジ（限定するものではないが、灰色庭ナメクジ（例えば、デロケラス属の１種）、縞状若しくはミツスジナメクジ（例えば、レマンニア属の１種）、黄褐色ナメクジ（例えば、リマクス属の１種）、及び温室ナメクジ（例えば、ミラクス属の１種）を含む）からなる群から選択される一群の軟体動物を防除する際に用いられる組成物に処方し得る。
【００１９】
本発明はさらに、１種以上の軟体動物、特に双殻綱、特に、イガイ（例えば、ドレイッサナ属の１種）及び／又は腹足綱、特に、カタツムリ（これには、水性カタツムリ（例えば、ビオムファラリア属の１種）及び庭カタツムリ（限定するものではないが、茶色庭カタツムリ、白色庭カタツムリ（例えば、カンタレウス属の１種、コルヌ属の１種、テバ属の１種）を含む）が含まれるが、これらに限定されない）、及び／又はナメクジ（限定するものではないが、灰色庭ナメクジ（例えば、デロケラス属の１種）、縞状若しくはミツスジナメクジ（例えば、レマンニア属の１種）、黄褐色ナメクジ（例えば、リマクス属の１種）、及び温室ナメクジ（例えば、ミラクス属の１種）を含む）からなる群から選択される一群の軟体動物を防除するのに有効な少なくとも１以上の物質と、場合により１以上の軟体動物を防除する際に用いるのが好ましい不活性材料とを含む組成物に関する。さらに、本発明は、これらの物質、並びに、１種以上の軟体動物、特に双殻綱、特に、イガイ（例えば、ドレイッサナ属の１種）及び／又は腹足綱、特に、カタツムリ（これには、水性カタツムリ（例えば、ビオムファラリア属の１種）及び庭カタツムリ（限定するものではないが、茶色庭カタツムリ、白色庭カタツムリ（例えば、カンタレウス属の１種、コルヌ属の１種、テバ属の１種）を含む）が含まれるが、これらに限定されない）、及び／又はナメクジ（限定するものではないが、灰色庭ナメクジ（例えば、デロケラス属の１種）、縞状若しくはミツスジナメクジ（例えば、レマンニア属の１種）、黄褐色ナメクジ（例えば、リマクス属の１種）、及び温室ナメクジ（例えば、ミラクス属の１種）を含む）からなる群から選択される一群の軟体動物を防除するための組成物を処方する際に使用される本発明の他の化合物及び組成物の使用に関する。これらの物質は、塩素又はプセウドモナス種に由来し、より特には、プセウドモナス・フルオレスケンス或いはプセウドモナスＡＴＣＣ  ５５７９９の識別特徴を有する生物（例えば、プセウドモナス株）に由来し得る。別の特定の実施形態では、組成物は、プセウドモナス種（例えば、Ｐ．フルオレスケンス）に由来する細胞懸濁物である物質を含み得、さらにより特定の実施形態では、細胞懸濁物は、プセウドモナスＡＴＣＣ  ５５７９９の毒素産生特性を有する細胞を含み得る。さらに別の特定の実施形態では、該組成物中の物質は、プセウドモナス種に由来するか又はこの種から単離された或いはプセウドモナスＡＴＣＣ  ５５７９９の識別特徴を有する生物に由来する１以上の毒素であり得る。組成物は、代替として、上で示した本発明の方法で用いられる化合物及び上で示した本発明の化合物を含み得、かつ腹足綱及び双殻綱のメンバーを防除するために使用し得る。不活性材料は、粘土鉱物（カオリナイト、スメクタイト、アタパルジャイト）であり得る。本発明はさらに、防除が望ましい場所で１種以上の軟体動物、特に、イガイ及び／又はカタツムリ（例えば、水性カタツムリ、庭カタツムリ及び／又はナメクジ）を防除する方法であって、該場所に該軟体動物を防除するのに有効な物質と、場合により１以上の不活性材料とを、該軟体動物を含む該場所で該軟体動物を防除するのに有効な量で導入することを含む方法に関する。特に、該軟体動物を防除するための物質は、未処理の対照と比べて、少なくとも約２０％、通常、約５０〜９５％の死亡率をもたらすのに有効な量で存在し、かつ該不活性材料は、該軟体動物を防除するための該物質の死亡率を少なくとも約２０％、通常２５〜４０％増大させるのに十分な又は有効な量で存在する。特定の実施形態では、不活性材料は、該軟体動物を防除するための物質を導入する前に該場所に導入され、より特定の実施形態では、不活性材料は、この物質を導入する少なくとも約１時間前に導入される。別の特定の実施形態では、不活性材料は、上で示した軟体動物、特にイガイ、カタツムリ及び／又はナメクジを防除するための物質と同時にこの場所に導入される。
【００２０】
関連した態様では、本発明は、防除が望ましい場所で１種以上の軟体動物、特に双殻綱、特に、イガイ（例えば、ドレイッサナ属の１種）及び／又は腹足綱、特に、カタツムリ（これには、水性カタツムリ（例えば、ビオムファラリア属の１種）及び庭カタツムリ（限定するものではないが、茶色庭カタツムリ、白色庭カタツムリ（例えば、カンタレウス属の１種、コルヌ属の１種、テバ属の１種）を含む）が含まれるが、これらに限定されない）、及び／又はナメクジ（限定するものではないが、灰色庭ナメクジ（例えば、デロケラス属の１種）、縞状若しくはミツスジナメクジ（例えば、レマンニア属の１種）、黄褐色ナメクジ（例えば、リマクス属の１種）、及び温室ナメクジ（例えば、ミラクス属の１種）を含む）からなる群から選択される一群の軟体動物を防除するための１以上の物質の効力を増大させるための不活性材料の使用に関する。この場所は、液体（例えば、水塊若しくは塗料）又は、プラスチック、コンクリート、木材、ガラス繊維、鉄やポリ塩化ビニルでできたパイプ、コーティング材及び／若しくは塗料で覆われた表面などの固体表面であり得る。特に、本発明は、１以上の該軟体動物、特に、双殻綱、特に、イガイ（例えば、ドレイッサナ属の１種）及び／又は腹足綱、特に、カタツムリ（これには、水性カタツムリ（例えば、ビオムファラリア属の１種）及び庭カタツムリ（限定するものではないが、茶色庭カタツムリ、白色庭カタツムリ（例えば、カンタレウス属の１種、コルヌ属の１種、テバ属の１種）を含む）が含まれるが、これらに限定されない）、及び／又はナメクジ（限定するものではないが、灰色庭ナメクジ（例えば、デロケラス属の１種）、縞状若しくはミツスジナメクジ（例えば、レマンニア属の１種）、黄褐色ナメクジ（例えば、リマクス属の１種）、及び温室ナメクジ（例えば、ミラクス属の１種）を含む）からなる群から選択される一群の軟体動物を防除するための１以上の物質の効力を増大させるための方法であって、防除が望ましい場所に１以上の不活性材料を、該場所に導入されたときに、該物質の効力を増大させるのに有効な量で導入することを含む方法に関する。特定の実施形態では、これらの不活性材料は、該物質の効力を少なくとも約２０％増大させる。
【００２１】
さらに、本発明は、塗料担体中に抗増殖性の（ａｎｔｉｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ）、殺生物有効量の本発明の組成物及び化合物を含む防汚塗料に関する。本発明はさらに、このような防汚塗料の処方における本発明の化合物及び組成物の使用に関する。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１ａ】本発明の方法で用いられる天然産物の構造を示す。
【図１ｂ】本発明の方法で用いられる天然産物の構造を示す。
【図２】活性画分を単離するためのスキームを示す。
【図３】プセウドモナス細胞培養物から本発明の化合物を得るための精製スキームの１つの模式的な表示である。
【図４】バイオボックス（ｂｉｏｂｏｘ）の中で粘土及びＰ．フルオレスケンス由来のバイオ農薬製品で処理されたイガイの経時的な死亡率の進展を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
値の範囲が示されている場合、文脈上別の方法で明確に示されない限り、その範囲の上限と下限の間の下限の単位の十分の一までの、各々の介在値、及び任意の他の記述した値又はその記述した範囲における介在値が本発明の範囲内に包含されることが理解される。これらのより小さい範囲の上限及び下限は、記述した範囲において特に除外される限界次第で、本発明の範囲内に同じく包含されるより小さい範囲に独立に含まれ得る。記述した範囲が限界の一方又は両方を含む場合、それの含まれた限界のいずれか又は両方を除外した範囲も本発明に含まれる。
【００２４】
別途定義しない限り、本明細書で使用される全ての技術及び科学用語は、本発明が属する技術分野の専門家により一般的に理解されているものと同じ意味を有する。本明細書に記載したものと同様又は同等の任意の方法及び材料もまた、本発明の実施又は試験において用いることができるが、好ましい方法及び材料をここに記載する。
【００２５】
本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用する場合、単数形の「１つの（ａ、ａｎ）」及び「その（ｔｈｅ）」は、文脈上別の方法で明確に示されない限り、複数の指示対象を含むことに留意しなければならない。
【００２６】
本明細書で定義する場合、「イガイを防除する」とは、所与の場所でコロニー形成することができないようにイガイを死滅させるか又はイガイに障害を与えることによって、イガイの卵、幼生、ベリジャー幼生及び後期ベリジャー幼生（ｐｏｓｔ−ｖｅｌｉｇｅｒ）を防除することを意味する。
【００２７】
本明細書で定義する場合、「に由来する」とは、特定の源から直接単離されたか又は得られたこと、又は特定の源から単離されたか又は得られた物質、若しくは生物の識別特徴を有することを意味する。
【００２８】
以後使用する場合、「アルキル」という用語は、直鎖又は分岐鎖であり得る飽和炭化水素ラジカル（例えば、エチル、イソプロピル、ｔ−アミル、又は２，５−ジメチルヘキシルなど）を指す。この定義は、この用語が単独で使用される場合と化合物用語の一部として使用される場合の両方に適用される。
【００２９】
「シクロアルキル」及び「シクロアルケニル」という用語は飽和炭化水素環を指し、二環式環及び多環式環を含む。同様に、炭素環原子の代わりにヘテロ原子（例えば、Ｎ、Ｏ、又はＳ）を有するシクロアルキル基及びシクロアルケニル基を、それぞれ、「ヘテロシクロアルキル」、「ヘテロシクリル」、及び「ヘテロシクロアルキレン」と表し得る。
【００３０】
本明細書で使用される「アルケニル」という用語は、二重結合である１以上の不飽和部位を含有する上記のようなアルキル基を指す。同様に、本明細書で使用される「アルキニル」という用語は、三重結合である１以上の不飽和部位を含有する上記のようなアルキル基を指す。
【００３１】
「アルコキシという用語は、（例えば、メトキシ、エトキシ、アリールオキシ、及びｔ−ブトキシなどの）別の炭化水素ラジカルと共有結合が可能な酸素置換基も有している上記のようなアルキルラジカルを指す。
【００３２】
「アリール」という用語は、エチレン又はメチレン部分などの一般的な基に縮合しているか、共有結合しているか、又は結合している単一の環又は複数の環であり得る芳香族炭素環置換基を指す。同様に、炭素環原子の代わりにヘテロ原子（例えば、Ｎ、Ｏ、又はＳ）を有するアリール基を「ヘテロアリール」と表す。
【００３３】
「アリールアルキル」、「アリールアルケニル」、及び「アリールオキシアルキル」という用語は、それぞれ、アルキル基、アルケニル基、又はアルキル基に結合している酸素原子に直接結合したアリールラジカルを指す。簡潔には、上記のような組み合わされた用語の一部としてのアリールは、ヘテロアリールも含むことが意図される。
【００３４】
「ヘテロ原子含有アルキル基」（すなわち、「ヘテロアルキル」基）又は「ヘテロ原子含有アリール基」（すなわち、「ヘテロアリール」基）において使用されている「ヘテロ」という用語は、１以上の炭素原子が炭素以外の原子、例えば、窒素、酸素、硫黄、リン、又はケイ素と置き換えられている分子、結合、又は置換基を指す。
【００３５】
本明細書で定義する場合、「に由来する」及び「から入手できる」とは、特定の源から直接単離されたか得られたこと、又は、特定の源から単離されたか得られた物質若しくは生物の識別特徴を有することを意味する。これらの用語は、本明細書の全体を通して互換的に使用される。
【００３６】
本明細書で定義する場合、「単離された化合物」は、限定するものではないが、クロマトグラフィー法、電気泳動法をはじめとする分析的方法で測定したときに、他の化合物又は物質を本質的に含まず、例えば、少なくとも約２０％純粋、好ましくは少なくとも約４０％純粋、より好ましくは約６０％純粋、さらにより好ましくは約８０％純粋、最も好ましくは約９０％純粋、及びさらに最も好ましくは約９５％純粋である。
【００３７】
化合物
本発明の組成物及び方法で使用される化合物は、以下の３つの族のメンバーであり得る。
【００３８】
第Ｉ族の化合物
特定の実施形態では、第Ｉ族は、以下の化学構造：
【化１】
0005759981.tif 000002
を有し、
式中、Ｘは、限定するものではないが、炭素、硫黄、リンを含み、Ｙは、限定するものではないが、硫黄、酸素を含み、Ａ及びＭは、限定するものではないが、炭素、酸素、窒素、硫黄を含み、かつｎは１〜２１である。式中、（Ｒ）ｚは環上の基Ｒ上の置換基の数の数Ｚを表す。Ｒ及びＲ上の置換基は、水素、ヒドロキシル、アルキルヒドロキシル、アルケニルヒドロキシル、アルキニルヒドロキシル、アルキルオキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、芳香族、アリール基、ＮＨ−置換、又はＮ，Ｎ−置換基又は任意の他の置換基であってもよい。置換されたＲ鎖のうちの１つの長さは、１〜２５原子であることができ、好ましい長さは、７〜１７原子である。数Ｚは、ｎ＋２まで、０、１、２、３であることができ、好ましいＺは、０、１、２、３である。
【００３９】
特定の実施形態では、化合物は、プセウドモナス・フルオレスケンスに由来し、かつ５員γ−ラクトンである少なくとも１つのラクトン部分と少なくとも１つの不飽和部分と少なくとも１つアルコール基とを含む水酸化不飽和脂肪酸ラクトン構造と、コア構造中の２８５〜約３１０の分子量と、少なくとも１５個の炭素と少なくとも３個の酸素とを有し得る。より特定の実施形態では、化合物は、構造
【化２】
0005759981.tif 000003
を有していてもよく、
式中、Ｘは、各々独立に、−−Ｏ、−−ＮＲ１、又はＳであり、ここで、Ｒ１は、−−Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、ｎ＝０〜１５であり、Ｒ２〜Ｒ４は、各々独立に、−−Ｈ、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環、置換複素環、シクロアルキル，置換シクロアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、チオアルキル、置換チオアルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、アミド、カルボキシル、−−Ｃ（Ｏ）Ｈ、アシル、オキシアシル、カルバマート、スルホニル、スルホンアミド、又はスルフリルであり、ｍ＝二重結合又は三重結合である。さらに別の特定の実施形態では、Ｙ及びＭは酸素であり、Ａ及びＸは炭素であり、かつｎは２又は３であり、ＲはＣ７又はＣ８アルキルであり、かつｚは０であり、ここで、ｎが２でありかつＲがＣ７アルキルであるとき、ＲはＡに結合している。
【００４０】
さらに別の特定の実施形態では、第Ｉ族の化合物は１〜２８（図１ａ及び１ｂ）に示す化合物であり得る。これらは、天然物か、又は市販源から若しくは化学合成によって得られる化合物かのいずれかに由来する。第Ｉ族の化合物の天然源としては、限定するものではないが、植物、サンゴ、微生物、海綿動物及び動物が挙げられる。より特定の実施形態では、第Ｉ族の化合物を含む植物としては、ハマジンチョウ（Ｍｙｏｐｏｒｕｍ  ｂｏｎｔｉｏｉｄｅｓ）、ミクロメルム・ヒルストゥム（Ｍｉｃｒｏｍｅｌｕｍ  ｈｉｒｓｕｔｕｍ）などの種が挙げられるが、これらに限定されず、或いは、第Ｉ族の化合物は、ハマジンチョウ（Ｍｙｏｐｏｒｕｍ  ｂｏｎｔｉｏｉｄｅｓ）（化合物１４）［Ｍｏｅ  Ｋａｎｅｍｏｔｏ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｌｏｒｉｎｅ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ｉｒｉｄｏｉｄ  ａｎｄ  ｉｒｉｄｏｉｄ  ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ，ａｎｄ  ｏｔｈｅｒ  ｇｌｕｃｏｓｉｄｅｓ  ｆｒｏｍ  ｌｅａｖｅｓ  ｏｆ  Ｍｙｏｐｏｒｕｍ  ｂｏｎｔｉｏｉｄｅｓ，Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ６９（２００８）  ２５１７−２５２２］、ミクロメルム・ヒルストゥム（Ｍｉｃｒｏｍｅｌｕｍ  ｈｉｒｓｕｔｕｍ）（化合物１８）［Ｍａ，Ｇ．Ｙ．ｅｔ  ａｌ．ａｎｔｉ−ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ  ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  ｓｔｅｍ  ｂａｒｋ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｍｅｌｕｍ  ｈｉｒｓｕｔｕｍ，Ｐｌａｎｔａ  Ｍｅｄ．２００５，７１，２６１−２６７］などの種に由来し得、第Ｉ族の化合物はまた、限定するものではないが、アントロディア・カムホラーテ（Ａｎｔｒｏｄｉａ  ｃａｍｐｈｏｒａｔｅ）（化合物４、５）［Ｓｈａｏ，Ｙ．Ｙ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ  ｏｆ  Ａｎｔｒｏｄｉａ  ｃａｍｐｈｏｒａｔａ  ｓｕｂｍｅｒｇｅｄ  ｗｈｏｌｅ  ｂｒｏｔｈ，Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００８，２２（１３）  １１５１−１１５７］、出芽酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）（化合物２）［Ｇｏｃｈｏ，Ｓ．ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｏｌｅｉｃ  ａｃｉｄ  ｔｏ  ｏｐｔｉｃａｌｌｙ  ａｃｔｉｖｅ  γ−ｄｏｄｅｃａｌａｃｔｏｎｅ  ，Ｂｉｏｓｃｉ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９９５，５９（８）  １５７１−１５７２］、メソリゾビウム属の１種（Ｍｅｓｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍ  ｓｐ．）（化合物２、１７）［Ｗｅｉ，Ｇ．Ｈ．ｅｔ  ａｌ．，Ｒｈｉｚｏｂｉａｌｉｄｅ：Ａ  Ｎｅｗ  Ｓｔｅａｒｏｌａｃｔｏｎｅ  Ｐｒｏｄｕｃｅｄ  ｂｙ  Ｍｅｓｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍ  ｓｐ．ＣＣＮＷＧＸ０２２，ａ  Ｒｈｉｚｏｂｉａｌ  Ｅｎｄｏｐｈｙｔｅ  ｆｒｏｍ  Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｕｒａｌｅｎｓｉｓ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｄｉｖｅｒｓｉｔｙ，２００７，４，８９３−８９８］、オピオストーマ・ピリフェルム（Ｏｐｈｉｏｓｔｏｍａ  ｐｉｌｉｆｅｒｕｍ）（化合物１６）［Ｗｅｉ，Ｇ．Ｈ．ｅｔ  ａｌ．，Ｒｈｉｚｏｂｉａｌｉｄｅ：Ａ  Ｎｅｗ  Ｓｔｅａｒｏｌａｃｔｏｎｅ  Ｐｒｏｄｕｃｅｄ  ｂｙ  Ｍｅｓｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍ  ｓｐ．ＣＣＮＷＧＸ０２２，ａ  Ｒｈｉｚｏｂｉａｌ  Ｅｎｄｏｐｈｙｔｅ  ｆｒｏｍ  Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｕｒａｌｅｎｓｉｓ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｄｉｖｅｒｓｉｔｙ，２００７，４，８９３−８９８］、ストレプトミケス属の１種（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｐ．）（化合物８）［Ｋｈａｌｅｄ  Ａ．Ｓｈａａｂａｎ，Ｍｏｈａｍｅｄ  Ｓｈａａｂａｎ，Ｐｅｔｒｅａ  Ｆａｃｅｙ，Ｓｅｒｇｅ  Ｆｏｔｓｏ，Ｈｏｌｍ  Ｆｒａｕｅｎｄｏｒｆ，Ｅｌｉｓａｂｅｔｈ  Ｈｅｌｍｋｅ，Ａｒｍｉｎ  Ｍａｉｅｒ，Ｈｅｉｎｚ  Ｈ．Ｆｉｅｂｉｇ，Ｈａｒｔｍｕｔ  Ｌａａｔｓｃｈ，Ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙ  Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒａ  ｏｆ  Ｐｉｐｅｒａｚｉｍｙｃｉｎｓ  Ａ  ａｎｄ  Ｂ  ａｎｄ  γ−Ｂｕｔｙｒｏｌａｃｔｏｎｅｓ  ｆｒｏｍ  ａ  Ｍａｒｉｎｅ−ｄｅｒｉｖｅｄ  Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｐ．Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．６１（１２）：７３６−７４６，２００８］、マクロホミナ・ファセオルズナ（Ｍａｃｒｏｐｈｏｍｉｎａ  ｐｈａｓｅｏｌｚｎａ）（化合物９、１０及び１５）［Ｓｈａｓｈｉｂ，Ｍａｈａｔ  ｅｔ  ａｌ．，ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  ｐｈａｓｅｏｌｉｎｉｃ  ａｃｉｄ：ａ  ｎｅｗ  ａｃｉｄ  ｆｒｏｍ  Ｍａｃｒｏｐｈｏｍｉｎａ  ｐｈａｓｅｏｌｚｎａ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎａｔｕｒａｌ  ｐｒｏｄｕｃｔｓ，１９８７，５０（２）  ２４５−２４７］、スポルディオボルス・サルモニコロール（Ｓｐｏｒｉｄｉｏｂｏｌｕｓ  ｓａｌｍｏｎｉｃｏｌｏｒ）（化合物１、３）［Ｌａｕｒｅｎｔ  Ｄｕｆｏｓｓｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｉｒａｌｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  γ−Ｌａｃｔｏｎｅｓ  Ｐｒｏｄｕｃｅｄ  ｂｙ  Ｓｐｏｒｉｄｉｏｂｏｌｕｓ  ｓａｌｍｏｎｉｃｏｌｏｒ  Ｇｒｏｗｎ  ｉｎ  Ｔｗｏ  Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  Ｍｅｄｉａ，Ｃｈｉｒａｌｉｔｙ，１９９７，６６７−６７１］及びストレプトミケス（化合物７）［Ｓｈｏｈｅｉ  Ｓａｋｕｄａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｓｔｕｄｉｅｓ  ｏｎ  Ｖｉｒｇｉｎｉａｅ  Ｂｕｔａｎｏｌｉｄｅ  Ａ，ａ  Ｂｕｔｙｒｏｌａｃｔｏｎｅ  Ａｕｔｏｒｅｇｕｌａｔｏｒ  ｆｒｏｍ  Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ．Ｐａｒｔ  ２，Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｏｓｓｉｂｌｅ  Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅｓ  ａｎｄ  Ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ  ｉｎ  ａ  Ｃｅｌｌ−ｆｒｅｅ  Ｓｙｓｔｅｍ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ．Ｉ  １９９３，２３０９−２３１５］をはじめとする、微生物に由来し得る。
【００４１】
さらなる特定の実施形態では、第Ｉ族の化合物は、海綿動物、例えば、ハリクローナ属の１新種（Ｈａｌｉｃｌｏｎａ．ｎ  ｓｐ）（化合物２６、２７及び２８）［Ｒｉｃｈａｒｄ  Ｊ．Ｃｌａｒｋ，Ｍａｒｙ  Ｊ．Ｇａｒｓｏｎ，ａｎｄ  Ｊｏｈｎ  Ｎ．Ａ．Ｈｏｏｐｅｒ，Ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ  Ａｌｋｙｌ  Ａｍｉｎｏ  Ａｌｃｏｈｏｌｓ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  Ｔｒｏｐｉｃａｌ  Ｍａｒｉｎｅ  Ｓｐｏｎｇｅ  Ｈａｌｉｃｌｏｎａ  ｎ．ｓｐ．Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．２００１，６４，１５６８−１５７１］、アクシネルラス属の１種（Ａｘｉｎｅｌｌａｓ  ｓｐ）（化合物２５）［Ｍｉｌｌｅｒ，Ｗ．Ｆ．Ｔｉｎｔｏ，Ｊ．−Ｐ．Ｙａｎｇ，Ｓ．ＭｃＬｅａｎ  ａｎｄ  Ｗ．Ｆ．Ｒｅｙｎｏｌｄｓ，Ａｘｉｎｅｌｌａｍｉｄｅ，ａ  ｎｅｗ  ａｌｋａｌｏｉｄ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  ｍａｒｉｎｅ  ｓｐｏｎｇｅ  Ａｘｉｎｅｌｌａｓ  ｓｐ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．，１９９５，３６，５８５１］、プラコルティス・ニグラ（Ｐｌａｋｏｒｔｉｓ  ｎｉｇｒａ）（化合物１９〜２０）［Ｊｏｅｌ  Ｓ．Ｓａｎｄｌｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  β−Ｃａｒｂｏｌｉｎｅｓ  ａｎｄ  Ｃｙｃｌｉｃ  Ｐｅｒｏｘｉｄｅｓ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  Ｐａｌａｕａｎ  Ｓｐｏｎｇｅ  Ｐｌａｋｏｒｔｉｓ  ｎｉｇｒａ，Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．２００２，６５，１２５８−１２６１］及びイルキニア・ホルモサーナ（Ｉｒｃｉｎｉａ  ｆｏｒｍｏｓａｎａ）（化合物２１−２４）［Ｓｈｅｎ，Ｙ．Ｃ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎｏｖｅｌ  ｌｉｎｅａｒ  Ｃ２２−ｓｅｓｔｅｒｔｅｒｐｅｎｏｉｄｓ  ｆｒｏｍ  ｓｐｏｎｇｅ  Ｉｒｃｉｎｉａ  ｆｏｒｍｏｓａｎａ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ４７（２００６）  ４００７−４０１０］に由来し得る。化合物２６〜２８はカルバマートの例である。
【００４２】
別の特定の実施形態では、第Ｉ族の化合物は、限定するものではないが、サルコピトン・トロケリオポルム（Ｓａｒｃｏｐｈｙｔｏｎ  ｔｒｏｃｈｅｌｉｏｐｈｏｒｕｍ）及びリトピトン・アルボレトゥム（Ｌｉｔｈｏｐｈｙｔｏｎ  ａｒｂｏｒｅｔｕｍ）（化合物１１及び１３）［Ｔｏｍａｓ  Ｒｅｚａｎｋａ，ｅｔ  ａｌ．，γ−ｌａｃｔｏｎｅｓ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  ｓｏｆｔ  ｃｏｒａｌｓ  Ｓａｒｃｏｐｈｙｔｏｎ  ｔｒｏｃｈｅｌｉｏｐｈｏｒｕｍ  ａｎｄ  Ｌｉｔｈｏｐｈｙｔｏｎ  ａｒｂｏｒｅｔｕｍ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，２００１，５７，８７４３−８７４９］をはじめとする、サンゴに由来し得る。
【００４３】
さらに別の特定の実施形態では、第Ｉ族の化合物を含む昆虫は、限定するものではないが、メスのマメコガネ（Ｊａｐａｎｅｓｅ  Ｂｅｅｔｌｅ）の性フェロモン（化合物１２）［Ｊ．Ｈ．Ｔｕｍｌｉｎｓｏｎ，Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｆｅｍａｌｅ  Ｊａｐａｎｅｓｅ  Ｂｅｅｔｌｅ  Ｓｅｘ  Ｐｈｅｒｏｍｏｎｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍａｌｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｂｙ  ａｎ  Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒ，Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９７７，１９７，７８９−７９２］及び昆虫毒素（化合物６）［Ｊｏｈｎ  Ａ．Ｆｉｎｄｌａｙ，ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｓｅｃｔ  ｔｏｘｉｎｓ  ｆｒｏｍ  ｓｐｒｕｃｅ  ｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓ，Ｃａｎ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．２００３，８１，２８４−２９２］を含む昆虫に由来し得る。
【００４４】
第Ｉ族の化合物には、限定するものではないが、実施例に示すγ−ドデカラクトン、δ−トリデカラクトン、ピリフェロリドＡ及びα−ヘプチル−γ−ブチロラクトンも含まれ得る。これらは、当該技術分野で公知の手順を用いた合成法によって又は市販源から取得し得る。
【００４５】
第ＩＩ族の化合物
別の特定の実施形態では、第ＩＩ族は、以下の化学構造：
【化３】
0005759981.tif 000004
を有し、
式中、Ｘは炭素であり、Ｙは酸素であり、Ａ、Ｂ及びＭは、炭素、酸素、窒素、硫黄又は他の元素であり、ｎは１〜２１である。
【００４６】
式中、（Ｒ）ｚは、環上の基Ｒ上の置換基の数の数Ｚを表す。Ｒ及びＲ上の置換基は、水素、ヒドロキシル、アルキルヒドロキシル、アルケニルヒドロキシル、アルキニルヒドロキシル、アルキルオキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、芳香族、アリール基、ＮＨ−置換、又はＮ，Ｎ−置換基又は任意の他の置換基であってもよい。置換されたＲ鎖のうちの１つの長さは、１〜２５原子であることができ、好ましい長さは、７〜１７原子である。数Ｚは、ｎ＋２まで、０、１、２、３であることができ、好ましいＺは、０、１、２、３である。
【００４７】
特定の実施形態では、第ＩＩ族の化合物、例えば、２９〜３６及び４４の化合物（図１ａ及び１ｂ参照）は、天然源、化学合成又は市販源に由来し得る。第ＩＩ族の化合物の天然源としては、限定するものではないが、植物、サンゴ、微生物、海綿動物及び動物が挙げられる。特定の実施形態では、このような植物の例としては、限定するものではないが、以下の種、例えば、ヘテロプレクシス・ミコケパーラ（Ｈｅｔｅｒｏｐｌｅｘｉｓ  ｍｉｃｏｃｅｐｈａｌａ）（化合物３０、３１、３２及び３３）［Ｆａｎ，Ｘ．Ｎ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ  ｏｆ  Ｈｅｔｅｒｏｐｌｅｘｉｓ  ｍｉｃｏｃｅｐｈａｌａ．Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．２００９，７２，１１８４−１１９０］及びイリアンテラ（Ｉｒｙａｎｔｈｅｒａ）種（化合物３４）［Ｖｉｅｉｒａ，Ｐ．Ｃ．，ｅｔ  ａｌ．，γ−Ｌａｃｔｏｎｅｓ  ｆｒｏｍ  Ｉｒｙａｎｔｈｅｒａ  ｓｐｅｃｉｅｓ，Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９８３，２２（３）  ７１１−７１３］及びリツセ・ウェルティキルラータ（Ｌｉｔｓｅ  ｖｅｒｔｉｃｉｌｌａｔａ）（化合物４４）［Ｚｈａｎｇ，Ｈ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，ｓｅｓｑｕｉｔｅｒｐｅｎｅｓ  ａｎｄ  ｂｕｔｅｎｏｌｉｄｅｓ，ｎａｔｕｒａｌ  ａｎｔｉ−ＨＩＶ  ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ  ｆｒｏｍ  Ｌｉｔｓｅ  ｖｅｒｔｉｃｉｌｌａｔａ，Ｐｌａｎｔａ  Ｍｅｄ，２００５，７１，４５２−４５７］が挙げられる。より特定の実施形態では、第ＩＩ族の化合物を含む供給源微生物としては、限定するものではないが、以下の種、例えば、ストレプトミケス・リシリエンシス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｒｉｓｈｉｒｉｅｎｓｉｓ）Ａ−５９６９（化合物２９）［Ｙｕｍｉｋｏ  Ｉｔｏｈ，Ｈｉｒｏｓｈｉ  Ｓｈｉｍｕｒａ，Ｍａｙｕｍｉｔｏ，ＮａｏＨａｒｕ  Ｗａｔａｎａｂｅ，Ｍｉｃｈｉｏ  Ｙａｍａｇｉｓｈｉ，Ｍａｓａｈａｒｕ  Ｔａｍａｉ  ａｎｄ  Ｋａｚｕｎｏｒｉ  Ｈａｎａｄａ，ｎｏｖｅｌ  ｈｅｐａｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ７−ｌａｃｔｏｎｅ，ＭＨ−０３１，Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，Ｐｈｙｓｉｃａｌ−Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ａｎｄ  ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ｅｌｕｃｉｄａｔｉｏｎ，Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，１９９１，４４（８）  ８３２−８３７］が挙げられる。より特定の実施形態では、第ＩＩ族の化合物を含むサンゴとしては、限定するものではないが、以下の種、例えば、プテロゴルギア・アンケプス（Ｐｔｅｒｏｇｏｒｇｉａ  ａｎｃｅｐｓ）（化合物３５）［Ｇｕｏ，Ｙ．Ｗ．ｅｔ  ａｌ．，Ｔｈｒｅｅ  Ｎｅｗ  Ｂｕｔｅｎｏｌｉｄｅ  Ｌｉｐｉｄｓ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  Ｃａｒｉｂｂｅａｎ  Ｇｏｒｇｏｎｉａｎ  Ｐｔｅｒｏｇｏｒｇｉａ  ａｎｃｅｐｓ，Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．１９９９，６２，１１９４−１１９６；  Ｍａｎｕｅｌ  Ｌｏｒｅｎｚｏ  ｅｔ  ａｌ．，１３Ｃ  ＮＭＲ−Ｂａｓｅｄ  Ｅｍｐｉｒｉｃａｌ  Ｒｕｌｅｓ  ｔｏ  Ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ  ｔｈｅ  Ｃｏｎｆｉｇｕｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｆａｔｔｙ  Ａｃｉｄ  Ｂｕｔａｎｏｌｉｄｅｓ．Ｎｏｖｅｌ  γ−Ｄｉｌａｃｔｏｎｅｓ  ｆｒｏｍ  Ｐｔｅｒｏｇｏｒｇｉａ  ｓｐｐ，Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，８（２���）  ５００１−５００４］及びプテロゴルギア・キトリーネ（Ｐｔｅｒｏｇｏｒｇｉａ  ｃｉｔｒｉｎｅ）（化合物３６）［Ａｂｉｍａｅｌ  Ｄ．Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ  ｅｔ  ａｌ．，ｆｕｒｔｈｅｒ  ｂｕｔｅｎｏｌｉｄｅｓ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  Ｃａｒｉｂｂｅａｎ  ｏｃｔｏｃｏｒａｌ  Ｐｔｅｒｏｇｏｒｇｉａ  ｃｉｔｒｉｎｅ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，１９９４，５７（３）  ３３９−３４７］が挙げられる。
【００４８】
第ＩＩＩ族の化合物
別の特定の実施形態では、第ＩＩＩ族の化合物は、以下の化学構造：
【化４】
0005759981.tif 000005
を有し、
式中、Ｘは炭素であり、Ｙは酸素であり、Ｚは、水素、ヒドロキシル、アルケニルヒドロキシル、アルキニルヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロシクリル、芳香族、アリール基、ＮＨ−置換、又はＮ，Ｎ−置換基又は任意の他の置換基である。
【００４９】
式中、Ｒは、アルケニルヒドロキシル、アルキニルヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロシクリル、芳香族、アリール基、ＮＨ−置換、若しくはＮ，Ｎ−置換基又は任意の他の置換基である。Ｒ鎖の長さは、１〜５０、好ましくは７〜１７であることができる。
【００５０】
特定の実施形態では、第ＩＩＩ族の化合物、例えば、３７〜４３の化合物（図１ａ及び１ｂ参照）は、天然源若しくは市販源から又は化学合成によって得ることができる。第ＩＩＩ族の化合物の天然源としては、限定するものではないが、植物、サンゴ、微生物、海綿動物及び動物が挙げられる。より特定の実施形態では、植物源としては、限定するものではないが、ピペル属の複数の種（Ｐｉｐｅｒ  ｓｐｐ）（化合物４３）［Ｌｉｋｈｉｔｗｉｔａｙａｗｕｉｄ，Ｋ．，Ｒｕａｎｇｒｕｎｇｓｉ，Ｎ，Ｌａｎｇｅ，Ｇ  ａｎｄ  Ｄｅｃｉｃｃｏ，Ｃ．，Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  Ｅｌｕｃｉｄａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｎｅｗ  Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ  ｉｓｏｌａｔｅｄ  ｆｒｏｍ  Ｐｉｐｅｒ  Ｓａｍｅｎｔｏｓｕｍ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  １９８７（４３）  ３６８９−３６９４；  Ｋｉｕｃｈｉ，Ｆ．，Ｎａｋａｍｕｒａ，Ｎ．，Ｔｓｕｄａ，Ｙ．，Ｋｏｎｄｏ，Ｋ  ａｎｄ  Ｙｏｓｈｉｍｕｒａ，Ｈ．Ｓｔｕｄｉｅｓ  ｏｎ  Ｃｒｕｄｅ  Ｄｒｕｇｓ  Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  ｏｎ  Ｖｉｓｃｅｒａｌ  Ｌａｒｖａ  Ｍｉｇｒａｎｓ．ＩＶ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｌａｒｖｉｃｉｄａｌ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｉｎ  Ｐｅｐｐｅｒ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ  １９８８（３６）：２４５２］が挙げられる。より特定の実施形態では、サンゴとしては、限定するものではないが、プレクサウラ・フラーウァ（Ｐｌｅｘａｕｒａ  ｆｌａｖａ）（化合物４２）［Ｂ．Ｎ．Ｒａｖｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｌｉｐｉｄ  ａｎｄ  Ｔｅｒｐｅｎｏｉｄ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｇｏｒｇｏｎｉａｎ  Ｐｌｅｘａｕｒａ  ｆｌａｖａ，Ａｕｓｔ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．，１９８２，３５，１０５−１２］が挙げられる。より特定の実施形態では、第ＩＩＩ族の化合物を含む微生物としては、限定するものではないが、以下の種、例えば、リングビア・マユスクーラ（Ｌｙｎｇｂｙａ  ｍａｊｕｓｃｕｌａ）及びスキゾトリクス・カルキコーラ（Ｓｃｈｉｚｏｔｈｒｉｘ  ｃａｌｃｉｃｏｌａ）（化合物３９、４０）［Ｇｅｏｒｇｅ  Ｇ．Ｈａｒｒｉｇａｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｔｕｍｏｎｏｉｃ  Ａｃｉｄｓ，Ｎｏｖｅｌ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ  ｆｒｏｍ  ａ  Ｃｙａｎｏｂａｃｔｅｒｉａｌ  Ａｓｓｅｍｂｌａｇｅ  ｏｆ  Ｌｙｎｇｂｙａ  ｍａｊｕｓｃｕｌａ  ａｎｄ  Ｓｃｈｉｚｏｔｈｒｉｘ  ｃａｌｃｉｃｏｌａ，Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．１９９９，６２，４６４−４６７］、プセウドモナス・アエルギノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）（化合物４１）［Ｍｉｃｈａｅｌ，Ｋ．Ｗｉｎｓｏｎ．，ｅｔ  ａｌ．Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｎ−アシル−Ｌ−ｈｏｍｏｓｅｒｉｎｅ  ｌａｃｔｏｎｅ  ｓｉｇｎａｌ  ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ｒｅｇｕｌａｔｅ  ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｖｉｒｕｌｅｎｃｅ  ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔｓ  ａｎｄ  ｓｅｃｏｎｄａｒｙ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ  ｉｎ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９９５，９２，９４２７−９４３１］，エルウィニア・カロトウォーラ（Ｅｒｗｉｎｉａ  ｃａｒｏｔｏｖｏｒａ）（化合物���７）［Ｇｕ¨ｎｔｅｒ  Ｂｒａｄｅｒ，Ｓｏｌｖｅｉｇ  Ｓｊｏ¨ｂｌｏｍ，Ｈｅｉｄｉ  Ｈｙｙｔｉａ¨ｉｎｅｎ，Ｋａｒｅｎ  Ｓｉｍｓ−Ｈｕｏｐａｎｉｅｍｉ，ａｎｄ  Ｅ．Ｔａｐｉｏ  Ｐａｌｖａ，Ａｌｔｅｒｉｎｇ  Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ  Ｃｈａｉｎ  Ｌｅｎｇｔｈ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ｏｆ  ａｎ  アシルｈｏｍｏｓｅｒｉｎｅ  Ｌａｃｔｏｎｅ  Ｓｙｎｔｈａｓｅ  ｉｎ  Ｂａｃｔｅｒｉａｌ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ，Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００５，２８０（１１）  １０４０３−１０４０９］及びフォトバクテリウム・ホスホレウム（Ｐｈｏｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｐｈｏｓｐｈｏｒｅｕｍ）（化合物３８）［Ｌ．Ｒ．Ｆｌｏｄｇａａｒｄ，Ｐ．Ｄａｌｇａａｒｄ，Ｊ．Ｂ．Ａｎｄｅｒｓｅｎ，Ｋ．Ｆ．Ｎｉｅｌｓｅｎ，Ｍ．Ｇｉｖｓｋｏｖ，ａｎｄ  Ｌ．Ｇｒａｍ，Ｎｏｎｂｉｏｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｓｔｒａｉｎｓ  ｏｆ  Ｐｈｏｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｐｈｏｓｐｈｏｒｅｕｍ  ｐｒｏｄｕｃｅ  ｔｈｅ  Ｃｅｌｌ−ｔｏ−Ｃｅｌｌ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ  Ｓｉｇｎａｌ  Ｎ−（３−Ｈｙｄｒｏｘｙｏｃｔａｎｏｙｌ）ｈｏｍｏｓｅｒｉｎｅ  Ｌａｃｔｏｎｅ，Ａｐｐｌｉｅｄ  ａｎｄ  Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００５，７１（４），２１１３−２１２０］が挙げられる。
【００５１】
さらに別の特定の実施形態では、第ＩＩＩ族の化合物は、以下の構造：
【化５】
0005759981.tif 000006
を有するサルメンチン類似体であってもよく、
式中、Ｒ１は、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロシクリル、芳香族、アリール基、ＮＨ−置換、又はＮ，Ｎ−置換基であり、Ｒ１鎖の長さは、４〜２０原子、好ましくは６〜１２原子である。
【００５２】
式中、Ｒ２及びＲ３は、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、芳香族、アリールアルキル、ヘテロシクリル又はヘテロアリールであるか、或いはＲ２＋Ｒ３＋ＮはＮ含有複素環部分であることができる。
【００５３】
式中、Ｒ２＋Ｒ３＋ＮがＮ含有複素環部分であるとき、Ｒ１は、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロシクリル、ＮＨ−置換、又はＮ，Ｎ−置換基である。
【００５４】
最も特定の実施形態では、サルメンチン類似体は、Ｎ−シクロペンチルデカンアミド、Ｎ−（デカノイル）ピロリジン、Ｎ−（デカノイル）ピペリジン、Ｎ−（デカノイル）ヘキサメチレンイミン、Ｎ−シクロペンチルデセンアミド、Ｎ−（デセノイル）ピロリジン、Ｎ−（デセノイル）ピペリジン、Ｎ−（デセノイル）ヘキサメチレンイミン及びＮ−（デセノイル）ピペリジンである。
【００５５】
サルメンチン類似体は、限定するものではないが、２００９年７月２１日に出願された特許出願第６１／２２７，４１２号に示されている手順を含み得る当該技術分野で公知の手順を用いて得られてもよい。
【００５６】
さらに別の特定の実施形態では、化合物は、プセウドモナス・フルオレスケンスに由来し、かつ少なくとも１つのカルボン酸部分と少なくとも１つの不飽和部分と少なくとも１つアルコール基とを含む水酸化不飽和脂肪酸構造と、コア構造中の２８５〜約３１０の分子量と、少なくとも１５個の炭素と少なくとも３個の酸素とを有するものとして特徴付け得る。
【００５７】
本発明のより特定の実施形態では、構造
【化６】
0005759981.tif 000007
を有する化合物が提供され、
式中、Ｘは、各々独立に、−−ＯＨ、−−ＮＲ１、又はＳであり、ここで、Ｒ１は、−−Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、ｎ＝０〜１５であり、Ｒ２〜Ｒ４は、各々独立に、−−Ｈ、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環、置換複素環、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、チオアルキル、置換チオアルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、アミド、カルボキシル、−−Ｃ（Ｏ）Ｈ、アシル、オキシアシル、カルバマート、スルホニル、スルホンアミド、又はスルフリルであり、ｍ＝二重結合、三重結合である。
【００５８】
最も具体的な実施形態では、化合物は、構造
【化７】
0005759981.tif 000008
を有する。
【００５９】
製造方法
上で述べたように、本発明の化合物及び組成物は、プセウドモナス種の識別特徴を有する生物から、より特には、プセウドモナス・フルオレスケンスの株の識別特徴を有する生物から、或いは米国特許第６，１９４，１９４号に示されているプセウドモナス・フルオレスケンス分離株ＡＴＣＣ  ５５７９９の識別特徴を有する生物から得ることが可能であるか、入手できるか、又はこれらの生物に由来する。本方法は、これらの生物を培養することと、これらの生物の細胞からこれらの化合物を単離することによって本発明の化合物及び／又は組成物を得ることとを含む。
【００６０】
特に、これらの生物を当該技術分野で公知の方法を用いて栄養培地中で培養する。これらの生物を、振盪フラスコ培養や、好適な培地中、細胞増殖を可能にする条件下で行なわれる実験用又は工業用発酵槽での小規模又は大規模の発酵（限定するものではないが、連続発酵、回分発酵、流加発酵又は固相発酵を含む）によって培養し得る。培養は、当該技術分野で公知の手順を用いて、炭素源及び窒素源及び無機塩を含む好適な栄養培地中で行なわれ得る。好適な培地は、市販源から入手可能であるか、入手可能な場合があるか、又は公表されている組成に従って調製され得る。特定の実施形態は、以下の実施例及び米国特許第号６，１９４，１９４号に開示されている。
【００６１】
培養後、これら細胞を濃縮し、その後、緩衝液に懸濁して、細胞懸濁物を取得し得る。本発明の化合物及び／又は組成物をこの懸濁物から抽出し得る。この抽出物をクロマトグラフィーで分画し得る。クロマトグラフィーを、当該技術分野で公知の方法を用いて、イガイ、カタツムリ（例えば、水性及び／又は庭カタツムリ）及び／又はナメクジなどの軟体動物に対する毒性作用についてアッセイし得る。特定の一実施形態を下記の実施例に開示する。このプロセスを、同じ又は異なるクロマトグラフィー法を用いて、１回以上繰り返し得る。
【００６２】
本発明の化合物はまた、合成による方法により取得し得る。或いは、ペプチド化合物については、当該技術分野で公知の方法を用いて、これらの化合物をコードする核酸配列を組換えＤＮＡ宿主内で発現させることにより、化合物を取得し得る。
【００６３】
製剤
本発明の組成物は、軟体動物、特に、腹足綱及び／又は双殻綱のメンバー、より特には、イガイ、カタツムリ及びナメクジを防除する際に有用な化学薬品又はバイオ農薬製品を含み得る。本発明は、（ａ）微生物、例えば、プセウドモナス種、より特には、プセウドモナス・フルオレスケンス、或いはプセウドモナスＡＴＣＣ  ５５７９９の識別特徴を有する生物から入手できるか又はこれらに由来し、（ｂ）双殻綱、特に、イガイ（例えば、ドレイッサナ種）及び／又は腹足綱、特に、カタツムリ（これには、水性カタツムリ（例えば、ビオムファラリア種）及び庭カタツムリ（限定するものではないが、茶色庭カタツムリ、白色庭カタツムリ（例えば、カンタレウス種、コルヌ種、テバ種）を含む）が含まれるが、これらに限定されない）、及び／又はナメクジ（限定するものではないが、灰色庭ナメクジ（例えば、デロケラス属の１種）、縞状若しくはミツスジナメクジ（例えば、レマンニア属の１種）、黄褐色ナメクジ（例えば、リマクス属の１種）、及び温室ナメクジ（例えば、ミラクス属の１種）を含む）からなる群から選択される一群の軟体動物のメンバーに対して毒性があり、かつ（ｃ）液体クロマトグラフィー／質量分析（ＬＣ／ＭＳ）で測定したときに、約５４０〜５５０及び約１２８０〜１３３５からなる群から選択される分子量を有する単離された化合物に関する。これらの組成物を、軟体動物、特に、腹足綱及び／又は双殻綱のメンバー、より特には、イガイ、カタツムリ及びナメクジを防除するために使用し得る組成物に処方し得る。
【００６４】
例としては、限定するものではないが、塩素及び例えば、米国特許第６，１９４，１９４号に記載されているようなプセウドモナス種に由来する物質が挙げられる。さらに、上で開示されており、かつ本発明で使用される化合物を組成物（或いは「製剤」と表される）に作り上げることができ、かつ任意の形態で処方することができる。非限定的な製剤例としては、乳剤（ＥＣ）、水和剤（ＷＰ）、液剤（ＳＬ）、エアロゾル、超微量濃縮溶液（ＵＬＶ）、水溶剤（ＳＰ）、マイクロカプセル剤、顆粒水和剤、フロアブル製剤（ＦＬ）、マイクロエマルション製剤（ＭＥ）、ナノエマルション製剤（ＮＥ）などが挙げられる。本明細書に記載の任意の製剤において、活性成分のパーセントは、０．０１％から９９．９９％の範囲内である。特定の実施形態では、製剤は界面活性剤を含まなくてもよい。
【００６５】
本発明の組成物において使用し得る不活性材料の例としては、限定するものではないが、カオリン、雲母、石こう、フィロケイ酸塩、炭酸塩、硫酸塩、若しくはリン酸塩などの無機鉱物；又は木製品、コルク、粉末化したトウモロコシ穂軸、籾殻、落花生殻及びクルミ殻などの植物材料が挙げられる。特定の実施形態では、不活性材料は、約１〜２０ＮＴＵ（正規化された濁度単位）に相当する約１〜２０ｍｇ／リットルの割合で水に懸濁された粘土鉱物（カオリナイト、スメクタイト、アタパルジャイト）から得られるか又はこれらに由来することができる。イガイの吸水（ｓｉｐｈｏｎｉｎｇ）を強化するために使用される不活性材料は、固形状で又は水性溶液（好ましくは、水）中の懸濁物として、イガイを処理する水域又は場所（例えば、固体表面）に直接適用することができる。特定の実施形態では、製品の効力を高めるために、粘土、シルト、堆積物又は栄養的価値がなくかつ粒径が十分に小さい任意の他の材料などの不活性材料を、化学薬品又はバイオ農薬製品で処理する前に水に懸濁することができる。
【００６６】
使用方法
本発明の化合物及び組成物は、イガイ、カタツムリ及び／又はナメクジなどの軟体動物が集まる水塊又は表面で、軟体動物、特に、腹足綱及び／又は双殻綱のメンバー、より特には、イガイ（例えば、ドレイッサナ種）及び／又は腹足綱、特に、カタツムリ（これには、水性カタツムリ（例えば、ビオムファラリア種）及び庭カタツムリ（限定するものではないが、茶色庭カタツムリ、白色庭カタツムリ（例えば、カンタレウス種、コルヌ種、テバ種）を含む）が含まれるが、これらに限定されない）、及び／又はナメクジ（限定するものではないが、灰色庭ナメクジ（例えば、デロケラス属の１種）、縞状若しくはミツスジナメクジ（例えば、レマンニア属の１種）、黄褐色ナメクジ（例えば、リマクス属の１種）、及び温室ナメクジ（例えば、ミラクス属の１種）を含む）を防除するために或いは塗料中の防汚剤として使用し得る。塗料中の防汚剤として使用される事象では、本発明の化合物及び組成物は、抗増殖性の、殺生物有効量で存在する。イガイ、カタツムリ及び／又はナメクジなどの軟体動物が集まる表面としては、限定するものではないが、プラスチック、コンクリート、木材、ガラス繊維、鉄やポリ塩化ビニルでできたパイプ並びに塗料及び／又はコーティングで覆われた表面が挙げられる。コーティングは、色素、結合剤、添加剤、及び／又は分散媒から処方されてもよく、好ましくは表面を保護又は装飾するために薄い膜にして塗布される。（活性化合物を含む）最終的な製品は、１０〜２００ｍｇ／Ｌ、より具体的には２５〜１００ｍｇ／Ｌ（ｐｐｍ）又は２５〜１００００ｍｇ／ｋｇで使用される。これは、乾燥製品として適用するか又は水に懸濁して、特定の散布ポンプ及び混合システムを介してパイプ、ダム建造物、貯蔵タンク、及び開放水域（例えば、水路、川、湖、灌漑用水路、池及び湖）に導入される。
【００６７】
特定の実施形態では、本発明は、侵入性軟体動物、特にイガイを防除するために使用される材料のバイオ農薬活性及び農薬活性を改善するための方法であって、
１．不活性材料（例えば、粘土）を水に懸濁して、化学薬品又はバイオ農薬処理前に約１〜２４時間、吸水活性を誘発する工程と、
２．化学薬品又はバイオ農薬を所望のレベルで水に添加する工程と
を含む方法に関する。
【００６８】
本発明はまた、微生物性バイオ農薬を不活性材料（例えば、粘土）と組み合わせて投与して、取込みを高め、それによってイガイの死亡率を高める工程を含む方法に関する。
【００６９】
イガイの吸水を活性化するために、この粘土（濁度）処理を、約１〜６時間、通常、約３〜４時間、及び化学薬品／農薬で処理する約１〜２４時間、典型的には、約１４〜１８時間前に行なうべきである。或いは、濁度処理を、化学薬品又はバイオ農薬処理と同時に適用することができる。
【００７０】
本発明の一実施形態に従って、軟体動物（例えば、イガイ、カタツムリ及びナメクジ）の処理を５００−ｍＬガラスジャー又はアクリルシートから構築されたバイオボックス中で行なうことができる。ガラスジャーの中では、処理の間の通気は、ナイロンチューブに接続された水槽のエアストーンからの空気流によってもたらされる。バイオボックス中では、水は、１分間に１ガロンの割合で絶えず流れている。
【００７１】
濁度処理用及び化学薬品／バイオ農薬製品用の材料を、ピペッティングによって又は蠕動ポンプを介して水中で混合することができる。バイオボックス中では、より均一な混合は、注入の時点で擢型ミキサーを用いて達成される。本発明の組成物は、直接適用に好適な形態で又は適用前に好適な量の水若しくは他の希釈液で希釈する必要がある濃縮物若しくは一次組成物として存在することができる。
【００７２】
濁度材料の有効量は、用途、水温（水に適用する場合）、及び処理時間によって決まる。一般に、組成物は、測定された濁度が２０ＮＴＵよりも高く上昇しないように１リットル当たり約１〜約２０ｍｇの割合で、好ましくは１リットル当たり約５〜約１０ｍｇの割合で適用し得る。
【実施例】
【００７３】
以下の実施例は、本発明の好ましい実施形態及び有用性を説明するために提示されるのであって、本明細書に付随する請求項で特に記述されていない限り、本発明を限定することを意図するものではない。
【００７４】
実施例１：軟体動物駆除剤に関する研究
材料及び方法
１．クワッガガイを小さいペトリ皿の中で２４時間馴化させておく。
・イガイをペトリ皿に入れて、イガイの生死を判定する。死んだイガイと空のイガイを捨てる。
・１０匹の生きた／健康なイガイを計数する。
・１０匹の生きた／健康なイガイを、各々硬水を含む小さいペトリ皿に入れる。
・別のイガイのプレートを取っておく。これらは、他の実験プレート中で、２４時間後に、死んだ又は空のイガイを取り替えるのに用いられる「予備のイガイ」である。
・水の容量が少ない（ＤＯが高い）ので、通気は必要ない。
【００７５】
２．イガイ処理の日
・イガイをチェックする（イガイをチェックするときはいつも、ラバーポリスマンを使用する。死んだイガイを取り除くために、ピンセットのみを使用する）。
・計数して、小さいペトリ皿１枚当たりに１０匹の生きた／健康なイガイが存在することを確かめる。
・試料を準備する。
・各試料について、５０ｍｌファルコンチューブ中にて硬水で適当に希釈する。投与前に、ボルテックス処理して混合する。
・例えば、試料当たり７０ｐｐｍで２回繰り返す。３４ｍｌの硬水をファルコンチューブに添加する。５１μｌの試料を、硬水を含む同じファルコンチューブに添加する。投与前に、ボルテックス処理して混合する。
【００７６】
３．投与
・投与前に、試料をボルテックス処理する。
・２５ｍｌの血清学的ピペットを用いて、上下にピペッティングして混合する。１５ｍｌの混合物をピペッティングして、各々の小さいペトリ皿に入れる。
・２４時間、イガイをそのままにして静置しておく。時間と日付を記載する。
【００７７】
４．処理の２４時間後
・投与してから２４時間後、処理水を除去し、イガイの死亡率をチェックする。
・処理水を完全に取り除く。きれいな硬水で３回すすいだ後、各々の小さいペトリ皿に水を添加する。
・全てのペトリ皿について、このプロセスを繰り返す。
・検査後に全てのペトリ皿をオートクレーブしなければならない。オートクレーブした後、ジャーを水で洗浄する。
【００７８】
５．死亡率を計算する
・死亡率（％）＝１００＊（処理において死んだイガイの総数−ブランクにおいて死んだイガイの総数）／処理したイガイの総数
【００７９】
市販化合物を用いた研究
Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈから得られた市販化合物を最終濃度１１．１μｇ／ｍｌで調べた。結果を表１に示す。
【表１】
0005759981.tif 000009
【００８０】
合成化合物
合成した化合物を最終濃度１１．１μｇ／ｍｌでクワッガガイに対してスクリーニングした。以下の手順を用いて、化合物を得る。
【００８１】
アミドの合成：ジクロロメタン（２０ｍｌ）中の氷冷したカルボン酸（３ｍｍｏｌｅ）溶液に、１−エチル−３−（３’−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（３．３ｍｍｏｌｅ）と４−ジメチルアミノピリジン（３ｍｍｏｌｅ）とを順次添加する。５分後、アミン（３．３ｍｍｏｌｅ）を反応溶液に添加する。反応液を室温までゆっくりと温め、一晩持続させた。反応液を酢酸エチル（２００ｍＬ）で抽出する。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させる。真空下で蒸発させた後、残渣をヘキサン中の適当な比率の酢酸エチルとともにシリカゲルカラムに通す。最終生成物の収率は８５％〜９０％の範囲である。最終生成物をプロトンＮＭＲで特徴付ける。
【００８２】
Ｎ−シクロペンチルシンナムアミド（ＳＡＲ−０２３）：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）７．６２（ｄ，Ｊ＝１５．６  Ｈｚ，１Ｈ），７．５０（ｄ，Ｊ＝７．０  Ｈｚ，２Ｈ），７．３５（ｍ，３Ｈ），６．３７（ｄ，Ｊ＝１５．６，１Ｈ），５．６１（ｄ，Ｊ＝  ５．０，Ｈｚ，１Ｈ，ＮＨ），４．３５（６重項，Ｊ＝７．０  ，１Ｈ），２．０６（ｍ，２Ｈ），１．７１（ｍ，２Ｈ），１．６４（ｍ，２Ｈ），１．４６（ｍ，２Ｈ）。
【００８３】
Ｎ−（ｔｒａｎｓ−シンナモイル）ピロリジン（ＳＡＲ−０２４）：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）７．７０（ｄ，Ｊ＝１５．５  Ｈｚ，１Ｈ），７．５３（ｄ，Ｊ＝７．０  Ｈｚ，２Ｈ），７．３６（ｍ，３Ｈ），６．７４（ｄ，Ｊ＝１５．５，１Ｈ），３．６３（ｔ，Ｊ＝７．０，２Ｈ），３．６０（ｔ，Ｊ＝７．０，２Ｈ），２．０１（５重項，Ｊ＝７．０，２Ｈ），１．９１（５重項，Ｊ＝７．０，２Ｈ）。
【００８４】
Ｎ−（ｔｒａｎｓ−シンナモイル）ピペリジン（ＳＡＲ−０２５）：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）７．６４（ｄ，Ｊ＝１５．５  Ｈｚ，１Ｈ），７．５２（ｄ，Ｊ＝７．２  Ｈｚ，２Ｈ），７．３６（ｍ，３Ｈ），６．９０（ｄ，Ｊ＝１５．５，１Ｈ），３．６７（ｓ，２Ｈ），３．５９（ｓ，２Ｈ），１．６８（ｍ，２Ｈ），１．６２（ｍ，４Ｈ）。
【００８５】
Ｎ−（ｔｒａｎｓ−シンナモイル）ヘキサメチレンイミン（ＳＡＲ−０２６）：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）７．７０（ｄ，Ｊ＝１５．４  Ｈｚ，１Ｈ），７．５２（ｄ，Ｊ＝７．６  Ｈｚ，２Ｈ），７．３６（ｍ，３Ｈ），６．８８（ｄ，Ｊ＝１５．４，１Ｈ），３．６３（ｔ，Ｊ＝６．０，２Ｈ），３．６１（ｔ，Ｊ＝６．０，２Ｈ），１．７６（ｍ，４Ｈ），１．５９（ｍ，４Ｈ）。
【００８６】
Ｎ−シクロペンチルデカンアミド（ＳＡＲ−０２０）：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）５．３５（ｂｒ，１Ｈ），４．２２（６重項，Ｊ＝７．００，１Ｈ），２．１２（ｔ，Ｊ＝７．２０，２Ｈ），１．９８（ｍ，２Ｈ），１．５９−１．６７（ｍ，６Ｈ），１．２６−１．３６（ｍ，１４Ｈ），０．８８（ｔ，Ｊ＝７．００，３Ｈ）。
【００８７】
Ｎ−（デカノイル）ピロリジン（ＳＡＲ−００７）：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）３．４５（ｔ，Ｊ＝６．８０，２Ｈ），３．４０（ｔ，Ｊ＝６．８０，２Ｈ），２．２４（ｔ，Ｊ＝７．２０，２Ｈ），１．９４（５重項，Ｊ＝６．８０，２Ｈ），１．８４（５重項，Ｊ＝６．８０，２Ｈ），１．６２（５重項，Ｊ＝７．２０，２Ｈ），１．２５−１．３０（ｍ，１２Ｈ），０．８７（ｔ，Ｊ＝７．２０，３Ｈ）。
【００８８】
Ｎ−（デカノイル）ピペリジン（ＳＡＲ−０２１）：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）３．５５（ｔ，Ｊ＝５．２０，２Ｈ），３．３９（ｔ，Ｊ＝５．２０，２Ｈ），２．３１（ｔ，Ｊ＝７．６０，２Ｈ），１．５８−１．６５（ｍ，４Ｈ），１．５２−１．５７（ｍ，４Ｈ），１．２０−１．３０（ｍ，１２Ｈ），０．８７（ｔ，Ｊ＝７．２０，３Ｈ）。
【００８９】
Ｎ−（デカノイル）ヘキサメチレンイミン（ＳＡＲ−０２２）：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）３．５２（ｔ，Ｊ＝６．００，２Ｈ），３．４２（ｔ，Ｊ＝６．００，２Ｈ），２．３０（ｔ，Ｊ＝７．８０，２Ｈ），１．６６−１．７４（ｍ，４Ｈ），１．６０−１．６６（ｍ，２Ｈ），１．５０−１．６．０（ｍ，４Ｈ），１．２０−１．３０（ｍ，１２Ｈ），０．８７（ｔ，Ｊ＝７．２０，３Ｈ）。
【００９０】
Ｎ−シクロペンチルデセンアミド（ＳＡＲ−０２７）：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）６．８２（ｄｔ，Ｊ１＝１５．２０，Ｊ２＝７．２０，１Ｈ），５．７１（ｄ，Ｊ＝１５．２０，１Ｈ），５．３３（ｂｒ，１Ｈ），４．２７（６重項，Ｊ＝７．００，１Ｈ），２．１５（ｍ，２Ｈ），２．１０（ｍ，２Ｈ），１．６７（ｍ，２Ｈ），１．６０（ｍ，２Ｈ），１．４０（ｍ，４Ｈ），１．２８（ｍ，８Ｈ），０．８８（ｔ，Ｊ＝７．００，３Ｈ）。
【００９１】
Ｎ−（デセノイル）ピロリジン（ＳＡＲ−０３０）：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）６．９０（ｄｔ，Ｊ１＝１５．２０，Ｊ２＝７．００，１Ｈ），６．０７（ｄ，Ｊ＝１５．２０，１Ｈ），３．５２（ｔ，Ｊ＝６．３０，２Ｈ），３．５０（ｔ，Ｊ＝６．３０，２Ｈ），２．１９（ｍ，２Ｈ），１．９６（５重項，Ｊ＝７．００，２Ｈ），１．８５（５重項，Ｊ＝７．００，２Ｈ），１．４４（ｍ，２Ｈ），１．２８（ｍ，８Ｈ），０．８８（ｔ，Ｊ＝７．００，３Ｈ）。
【００９２】
Ｎ−（デセノイル）ピペリジン（ＳＡＲ−０３１）：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）６．８２（ｄｔ，Ｊ１＝１５．２０，Ｊ２＝７．００，１Ｈ），６．２３（ｄ，Ｊ＝１５．２０，１Ｈ），３．５９（ｔ，Ｊ＝６．３０，２Ｈ），３．４７（ｔ，Ｊ＝６．３０，２Ｈ），２．１７（ｍ，２Ｈ），１．６４（５重項，Ｊ＝５．６０，２Ｈ），１．５６（５重項，Ｊ＝５．６０，４Ｈ），１．４４（５重項，Ｊ＝７．００，２Ｈ），１．２８（ｍ，８Ｈ），０．８８（ｔ，Ｊ＝７．００，３Ｈ）．
【００９３】
Ｎ−（デセノイル）ヘキサメチレンイミン（ＳＡＲ−０３２）：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）６．９１（ｄｔ，Ｊ１＝１５．２０，Ｊ２＝７．００，１Ｈ），６．２１（ｄ，Ｊ＝１５．２０，１Ｈ），３．５７（ｔ，Ｊ＝６．００，２Ｈ），３．４９（ｔ，Ｊ＝６．００，２Ｈ），２．１７（ｍ，２Ｈ），１．７３（ｍ，４Ｈ），１．５６（ｍ，４Ｈ），１．４５（ｍ，２Ｈ），１．２８（ｍ，８Ｈ），０．８８（ｔ，Ｊ＝７．００，３Ｈ）．
【００９４】
Ｎ−（デセノイル）ピペリジン（ＳＡＲ−０３３）：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）６．８２（ｄｔ，Ｊ１＝１５．２０，Ｊ２＝７．００，１Ｈ），６．２３（ｄ，Ｊ＝１５．２０，１Ｈ），３．５９（ｔ，Ｊ＝６．３０，２Ｈ），３．４７（ｔ，Ｊ＝６．３０，２Ｈ），２．１７（ｍ，２Ｈ），１．６４（５重項，Ｊ＝５．６０，２Ｈ），１．５６（５重項，Ｊ＝５．６０，４Ｈ），１．４４（５重項，Ｊ＝７．００，２Ｈ），１．２８（ｍ，８Ｈ），０．８８（ｔ，Ｊ＝７．００，３Ｈ）。
【００９５】
これらの結果を表２に示す。
【表２】
0005759981.tif 000010
【００９６】
実施例２．エルウィニア抽出物
エルウィニア・カロトウォラをＬＢブロス（１リットル当たり：トリプトン１０ｇ、酵母抽出物５ｇ、ＮａＣｌ  １０ｇ、ｐＨ＝７．５）で増殖させる。グリセロールストックからＴＳＡ（トリプティック大豆寒天）プレートにストリークすることにより、種菌を増殖させる。コロニー形態の目視検査で培養物の純度を確認する。滅菌した１０μＬループを用いて、コロニーを寒天表面から回収し、５０ｍｌのＬＢブロスを含む２５０ｍｌのバッフルなしのスクリューキャップ付きエルレンマイヤーフラスコに再懸濁する。液体培養物を２００ｒｐｍ及び２５℃で４８〜７２時間インキュベートする。
【００９７】
７２時間後、全ブロスを酢酸エチルで抽出する。有機相を真空下で乾燥させる。乾燥した抽出物を５．０ｍｇ／ｍＬのジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）溶液にする。次に、このような溶液（１００μＬ）を４５ｍＬの硬水に添加する。酢酸エチル抽出物の最終濃度は１１．１ｐｐｍである。
【００９８】
表３に示すデータは、ＬＢ培地中で増殖させたときに、クワッガガイに対する生体活性化合物がエルウィニア・カロトウォラで産生されることを示している。上記の化合物３７（図１ｂ）は、ＬＢ培地中で増殖したＥ．カロトウォラにより産生されるラクトンのうちの１つである［Ｇｕ¨ｎｔｅｒ  Ｂｒａｄｅｒ，Ｓｏｌｖｅｉｇ  Ｓｊｏ¨ｂｌｏｍ，Ｈｅｉｄｉ  Ｈｙｙｔｉａ¨ｉｎｅｎ，Ｋａｒｅｎ  Ｓｉｍｓ−Ｈｕｏｐａｎｉｅｍｉ，ａｎｄ  Ｅ．Ｔａｐｉｏ  Ｐａｌｖａ，Ａｌｔｅｒｉｎｇ  Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ  Ｃｈａｉｎ  Ｌｅｎｇｔｈ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ｏｆ  ａｎ  Ａｃｙｌｈｏｍｏｓｅｒｉｎｅ  Ｌａｃｔｏｎｅ．Ｓｙｎｔｈａｓｅ  ｉｎ  Ｂａｃｔｅｒｉａｌ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ，Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００５，２８０（１１）  １０４０３−１０４０９］。
【表３】
0005759981.tif 000011
【００９９】
実施例３：プセウドモナスからの軟体動物駆除化合物の単離
研究Ａ
化合物の分画
洗浄したプセウドモナス・フルオレスケンスＣＬ−１４５Ａの細胞から抽出された化合物の分画のために、以下の手順を用いる。
【０１００】
ＦＭ２増殖培地中のＰ．フルオレスケンスＣＬ  １４５Ａ（ＡＴＣＣ  ５５７９９）の１０Ｌ発酵から得られる細胞ペレットを希釈緩衝液に懸濁し、この細胞懸濁物を樹脂とともに２２５ｒｐｍにて室温で２時間振盪させることによって、アンバーライトＸＡＤ−７樹脂で抽出する（Ａｓｏｌｋａｒ，Ｒ．Ｎ．，Ｊｅｎｓｅｎ，Ｐ．Ｒ．，Ｋａｕｆｆｍａｎ，Ｃ．Ａ．，Ｆｅｎｉｃａｌ，Ｗ．２００６．Ｄａｒｙａｍｉｄｅｓ  Ａ−Ｃ，Ｗｅａｋｌｙ  Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  Ｐｏｌｙｋｅｔｉｄｅｓ  ｆｒｏｍ  ａ  Ｍａｒｉｎｅ−Ｄｅｒｉｖｅｄ  Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｇｅｎｕｓ  Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｔｒａｉｎ  ＣＮＱ−０８５  Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．６９：１７５６−１７５９；Ｗｉｌｌｉａｍｓ，Ｐ．Ｇ．，Ｍｉｌｌｅｒ，Ｅ．Ｄ．，Ａｓｏｌｋａｒ，Ｒ．Ｎ．，Ｊｅｎｓｅｎ，Ｐ．Ｒ．，Ｆｅｎｉｃａｌ，Ｗ．２００７．Ａｒｅｎｉｃｏｌｉｄｅｓ  Ａ−Ｃ，２６−  Ｍｅｍｂｅｒｅｄ  Ｒｉｎｇ  Ｍａｃｒｏｌｉｄｅｓ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  Ｍａｒｉｎｅ  Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅ  Ｓａｌｉｎｉｓｐｏｒａ  ａｒｅｎｉｃｏｌａ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．７２：５０２５−５０３４）。チーズクロスに通して濾過することにより樹脂と細胞塊を回収し、ＤＩ水で洗浄して塩を取り除く。次に、樹脂、細胞塊、及びチーズクロスをアセトン中に２時間浸漬し、その後、アセトンを濾過し、ロータリーエバポレーターを用いて真空下で乾燥させて、粗抽出物を得る。次に、粗抽出物を、逆相Ｃ１８真空液体クロマトグラフィー（Ｈ２Ｏ／ＣＨ３ＯＨ；勾配９０：２０から０：１００％）を用いて分画して、７つの画分を得る。次に、これらの画分をロータリーエバポレーターを用いて濃縮乾固させ、得られる乾燥残渣を、クワッガガイを用いる生きたイガイのジャーテストバイオアッセイと淡水産カタツムリ胚細胞株（ビオムファラリア・グラブラータ（Ｂｉｏｍｐｈａｌａｒｉａ  ｇｌａｂｒａｔａ）を用いる細胞ベースのアッセイの両方を用いて生物学的活性についてスクリーニングする。バイオアッセイは、実施例＃２及び＃３により詳細に記載されている。次に、活性画分を逆相／順相ＨＰＬＣ（Ｓｐｅｃｔｒａ  Ｓｙｓｔｅｍ  Ｐ４０００（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ））にかけて、純粋な化合物を得る。次に、これを上述のバイオアッセイでスクリーニングして、活性化合物を決定／同定する。化合物の正体を確認するために、ＬＣ／ＭＳやＮＭＲなどのさらなる分光分析データを記録する。
【０１０１】
使用した方法の略図を図３に示す。生きたイガイとカタツムリ細胞の両方のアッセイに基づくと、画分＃４と＃５が活性化合物を含んでいる。２．５ｍＬ／分の流速及び２１０ｎｍのＵＶ検出のＨＰＬＣ（Ｃ−１８カラム、水：アセトニトリル勾配溶媒系（０〜１０分；３０−４０％水性ＣＨ３ＣＮ、１０〜２０分；４０−６０％水性ＣＨ３ＣＮ、２０〜６０分；６０−８０％水性ＣＨ３ＣＮ、６０〜６５分；８０−１００％水性ＣＨ３ＣＮ））で分離された全ての化合物のうち、ピーク番号２０（保持時間５１．６６分）、２１（保持時間５２．５６分）、及び２２Ａ（保持時間５９．６１分）が、バイオアッセイでカタツムリ細胞の増殖を阻害する（例えば、ＯＤ６００値が低い）。
【０１０２】
質量分析法による活性ピークの分析は、ＬＣＱ  ＤＥＣＡ  ＸＰｐｌｕｓ質量分析計（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎ  Ｃｏｒｐ．，Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，ＣＡ）にてフルスキャンモード（ｍ／ｚ  １００〜１５００Ｄａ）でポジティブとネガティブ両方のイオン化モードを用いるＴｈｅｒｍｏ  Ｆｉｎｎｉｇａｎ  ＬＣＱ  Ｄｅｃａ  ＸＰ  Ｐｌｕｓエレクトロスプレー（ＥＳＩ）装置で行なう。Ｔｈｅｒｍｏ製の高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）装置は、Ｆｉｎｎｉｇａｎ  Ｓｕｒｖｅｙｏｒ  ＰＤＡ  ｐｌｕｓ検出器、オートサンプラーｐｌｕｓ、ＭＳポンプ及び４．６ｍｍ×１００ｍｍ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８  ５μｍカラム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ）を備えている。溶媒系は、水（溶媒Ａ）及びアセトニトリル（溶媒Ｂ）からなる。移動相は１０％溶媒Ｂから始まり、２０分かけて１００％溶媒Ｂまで直線的に増加させた後、４分間保持され、最終的に３分かけて１０％溶媒Ｂに戻され、３分間保持される。流速は０．５ｍＬ／分である。注入容量は１０μＬであった。試料は、オートサンプラー中で室温に保持する。化合物をＬＣ及び逆相クロマトグラフィーを用いるＬＣ−ＭＳで分析する。質量分析法による本化合物の分析は以下の条件下で行なう。窒素ガスの流速は、シース及びａｕｘ／スイープガス流速について、それぞれ、３０及び１５ａｒｂで固定した。エレクトロスプレーイオン化は、スプレー電圧を５０００Ｖに設定し、キャピラリー電圧を３５．０Ｖにして行なわれた。キャピラリー温度は４００℃に設定された。データはＸｃａｌｉｂｕｒソフトウェアで解析した。ピーク＃２０中の活性化合物の分子質量は、ポジティブイオン化モードで１２９４．７５である。別の活性化合物（ピーク＃２２Ａ）のＬＣ−ＭＳクロマトグラムからは、ポジティブイオン化モードで１３２０．８３の分子質量が示唆される。
【０１０３】
構造を解明するために、活性ピーク＃２０由来の部分精製化合物を６００ＭＨｚ  ＮＭＲ装置を用いてさらに分析すると、これは、ＣＤＣｌ３中、δ９．２５，８．３６，８．０６，７．８２，７．７１，７．５２，７．４５，６．８２，６．３６，６．０８，５．４２，５．３９，５．３０，５．１４，４．６８，４．４２，４．３１，４．１６，４．１１，４．０７，３．９５−３．８６，３．８３，３．７２，３．６６，３．５３，３．４８，３．３７，３．１７，３．０６，２．５６，２．５３，２．４５，２．３２，２．２１，２．０２，１．９６，１．８４，１．７２，１．６５，１．６１，１．５１，１．４８−１．３７，１．３２，１．１２，０．９４，０．９１，０．６８のδ値を有する。ＮＭＲデータは、この化合物がアミノ基、エステル基、カルボン酸基、フェニル基、インドール基、脂肪族メチル基、エチル基、メチレン基、オキシメチレン基、メチン基、ｏ−メチル基、オキシメチン基及び硫黄基を含むことを示す。
【０１０４】
同様に、バイオアッセイで導かれる分画を用いた活性画分＃４の、１０ｍＬ／分の流速及び２１０ｎｍのＵＶ検出のＣ−１８カラム及びアセトニトリル：水溶媒系（０〜１０分；３５−４５％水性ＣＨ３ＣＮ、１０〜２０分；４５−６０％水性ＣＨ３ＣＮ、２０〜５０分；６０−８５％水性ＣＨ３ＣＮ、５０〜６０分；８５−１００％水性ＣＨ３ＣＮ、６０〜７０分；１００％ＣＨ３ＣＮ）を用いるＨＰＬＣ分析により、生きたイガイとカタツムリ胚細胞の両方に対する活性を有する多数のピークが得られた。活性のほとんどは、ピーク＃２７（保持時間４７．７３分）及び＃３０（保持時間５１．５２分）に濃縮されている。
【０１０５】
ピーク＃２７及び＃３０をＬＣ／ＭＳでさらに分析する。これらの結果に基づくと、ピーク＃２７は、およそ６４３及び９８４という質量を有する２つの主成分を含む多数の化合物を含む。ピーク＃３０はより少ない化合物を含み、質量分析により、ピーク下の主成分についておよそ５４６という分子質量が示唆される。
【０１０６】
イガイのバイオアッセイ試験
この生きたイガイのバイオアッセイ試験を用いて、ＨＰＬＣ及びＬＣ−ＭＳを分析ツールとして用いた試料分画によって活性化合物の同定を導く。
【０１０７】
新たに採集したクワッガガイ２０匹を室温の脱塩素水道水２５０ｍＬを含むジャーに入れる。ジャーを室温に保持し、バブリングにより一定の給気をもたらす連結管に接続する。ＤＭＳＯに溶解させた各試験対象（ＨＰＬＣ画分又はピーク）をピペッティングして、１〜５ｍｇの濃度で個別にジャーに入れ、イガイを試験対象とともに２４時間インキュベートする。インキュベーション期間の後、各ジャーの水を捨て、イガイを新鮮な水ですすぎ、１０日間の観察期間中、フタのないガラスペトリ皿に移す。イガイの死亡率を毎日チェックし、死んだイガイを取り除いて捨てる。各処理を３つ複製して実施し、１０日間のインキュベーション期間の最後に、各処理について死亡率％を計算する。
【０１０８】
細胞ベースのアッセイ
別法として、この細胞ベースのアッセイをツールとして用いて、発酵後のＰ．フルオレスケンス細胞中の活性化合物の単離及び同定を容易にする。
【０１０９】
淡水産カタツムリ（ビオムファラリア・グラブラータ、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−１４９４）の胚細胞を、Ｐ．フルオレスケンス生物毒素に感受性があることが知られているイガイ消化腺上皮細胞のモデル系として用いる。このアッセイのために、ショウジョウバエ（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ）培地、胎仔ウシ血清、ｄ−ガラクトース、及びラクトアルブミンを含む完全増殖培地中の活発に増殖している細胞２００μＬを、滅菌した９６ウェルプレートの各ウェルに添加する。ＤＭＳＯに溶解させた試験化合物（２０ｍｇ／ｍＬのＨＰＬＣ画分又はピーク）を各ウェルに添加し、プレートにカバーをして、２３℃及び５％ＣＯ２の制御環境でインキュベートする。ＳｏｆｔＭａｘ  Ｐｒｏソフトウェアが入ったＳｐｅｃｔｒａＭａｘプレートリーダーを用いて活性（増殖阻害＝低濁度）を６００ｎｍで測定し、純粋なＤＭＳＯを試験化合物として含む陰性対照と比較する。各処理を４つ複製して行ない、１つの複製された陽性対照処理を各プレートに含める。
【０１１０】
研究Ｂ
方法及び材料
プセウドモナス・フルオレスケンスの細胞培養物から抽出した化合物の精製に以下の手順を用い、この手順を図３にまとめる。具体的には、ＦＭ２増殖培地中のＰ．フルオレスケンスＣＬ  １４５Ａ（ＡＴＣＣ  ５５７９９）の１０Ｌ発酵から得られる細胞ペレットを希釈緩衝液に懸濁し、この細胞懸濁物を樹脂とともに２２５ｒｐｍにて室温で２時間振盪させることによって、アンバーライトＸＡＤ−７樹脂で抽出する（Ａｓｏｌｋａｒ，Ｒ．Ｎ．，Ｊｅｎｓｅｎ，Ｐ．Ｒ．，Ｋａｕｆｆｍａｎ，Ｃ．Ａ．，Ｆｅｎｉｃａｌ，Ｗ．２００６．Ｄａｒｙａｍｉｄｅｓ  Ａ−Ｃ，Ｗｅａｋｌｙ  Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  Ｐｏｌｙｋｅｔｉｄｅｓ  ｆｒｏｍ  ａ  Ｍａｒｉｎｅ−Ｄｅｒｉｖｅｄ  Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｇｅｎｕｓ  Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｔｒａｉｎ  ＣＮＱ−０８５  Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．６９：１７５６−１７５９  ａｎｄ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ，Ｐ．Ｇ．，Ｍｉｌｌｅｒ，Ｅ．Ｄ．，Ａｓｏｌｋａｒ，Ｒ．Ｎ．，Ｊｅｎｓｅｎ，Ｐ．Ｒ．，Ｆｅｎｉｃａｌ，Ｗ．２００７．Ａｒｅｎｉｃｏｌｉｄｅｓ  Ａ−Ｃ，２６−Ｍｅｍｂｅｒｅｄ  Ｒｉｎｇ  Ｍａｃｒｏｌｉｄｅｓ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  Ｍａｒｉｎｅ  Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅ  Ｓａｌｉｎｉｓｐｏｒａ  ａｒｅｎｉｃｏｌａ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．７２：５０２５−５０３４）。チーズクロスに通して濾過することにより樹脂と細胞塊を回収し、ＤＩ水で洗浄して塩を取り除く。次に、樹脂、細胞塊、及びチーズクロスをアセトン中に２時間浸漬し、その後、アセトンを濾過し、ロータリーエバポレーターを用いて真空下で乾燥させて、粗抽出物を得る。次に、粗抽出物を、逆相Ｃ１８真空液体クロマトグラフィー（Ｈ２Ｏ／ＣＨ３ＯＨ；勾配９０：２０から０：１００％）を用いて分画して、７つの画分を得る。次に、これらの画分をロータリーエバポレーターを用いて濃縮乾固させ、得られる乾燥残渣を、クワッガガイを用いる生きたイガイのジャーテストバイオアッセイと淡水産カタツムリ胚細胞株（ビオムファラリア・グラブラータ）を用いる細胞ベースのアッセイの両方を用いて生物学的活性についてスクリーニングする。次に、活性画分を逆相ＨＰＬＣ（Ｓｐｅｃｔｒａ  Ｓｙｓｔｅｍ  Ｐ４０００（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ））にかけて、純粋な化合物を得る。次に、これを上述のバイオアッセイでスクリーニングして、活性化合物を決定／同定する。化合物の正体を確認するために、ＬＣ／ＭＳやＮＭＲなどのさらなる分光分析データを記録する。
【０１１１】
活性画分４をＳｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ  ２０サイズ排除クロマトグラフィーを用いてさらに亜分画して、７つの亜画分を得る。ピリフェロリドＡ及び１１−ヒドロキシ−１２−エン−オクタデカン酸の精製は、活性ピーク番号２１（保持時間４５．５９分）、及び２３（保持時間４８．５３分）に対して８ｍＬ／分の流速及び２１０ｎｍのＵＶ検出のＨＰＬＣ（Ｃ−１８カラム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ，Ｌｕｎａ  １０ｕ  Ｃ１８（２）１００Ａ，２５０×３０）、水：アセトニトリル勾配溶媒系（０〜１０分；５０−６０％水性ＣＨ３ＣＮ、１０〜２０分；６０−７５％水性ＣＨ３ＣＮ、２０〜４５分；７５−１００％水性ＣＨ３ＣＮ、４５〜５５分；１００％ＣＨ３ＣＮ、５５〜７０分；１００−５０％水性ＣＨ３ＣＮ））を用いて行なう。
【０１１２】
質量分析法による活性ピークの分析は、ＬＣＱ  ＤＥＣＡ  ＸＰｐｌｕｓ質量分析計（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎ  Ｃｏｒｐ．，Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，ＣＡ）にてフルスキャンモード（ｍ／ｚ  １００〜１５００Ｄａ）でポジティブとネガティブ両方のイオン化モードを用いるＴｈｅｒｍｏ  Ｆｉｎｎｉｇａｎ  ＬＣＱ  Ｄｅｃａ  ＸＰ  Ｐｌｕｓエレクトロスプレー（ＥＳＩ）装置で行なう。Ｔｈｅｒｍｏ製の高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）装置は、Ｆｉｎｎｉｇａｎ  Ｓｕｒｖｅｙｏｒ  ＰＤＡ  ｐｌｕｓ検出器、オートサンプラーｐｌｕｓ、ＭＳポンプ及び４．６ｍｍ×１００ｍｍ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８  ５μｍカラム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ）を備えている。溶媒系は、水（溶媒Ａ）及びアセトニトリル（溶媒Ｂ）からなっていた。移動相は１０％溶媒Ｂから始まり、２０分かけて１００％溶媒Ｂまで直線的に増加させた後、４分間保持され、最終的に３分かけて１０％溶媒Ｂに戻され、３分間保持される。流速は０．５ｍＬ／分である。注入容量は１０μＬであった。試料は、オートサンプラー中で室温に保持する。化合物をＬＣ及び逆相クロマトグラフィーを用いるＬＣ−ＭＳで分析する。質量分析法による本化合物の分析は以下の条件下で行なう。窒素ガスの流速は、シース及びａｕｘ／スイープガス流速について、それぞれ、３０及び１５ａｒｂで固定した。エレクトロスプレーイオン化は、スプレー電圧を５０００Ｖに設定し、キャピラリー電圧を３５．０Ｖにして行なわれた。キャピラリー温度は４００℃に設定された。データはＸｃａｌｉｂｕｒソフトウェアで解析した。活性化合物ピリフェロリドＡの分子質量は、ネガティブイオン化モードで２９５．６５ある。別の活性化合物のＬＣ−ＭＳクロマトグラムからは、ポジティブイオン化モードで２９７．７４の分子質量が示唆される。
【０１１３】
構造を解明するために、分子量２９６の精製化合物ピリフェロリドＡを５００ＭＨｚ  ＮＭＲ装置を用いてさらに分析する。基準を内部標準テトラメチルシラン（ＴＭＳ、０．００ｐｐｍ）に設定する。この化合物は、５．６２，５．４２，４．５５，３．９７，２．５８，２．３５，２．０４，１．８８，１．７３，１．６４，１．５４，１．３９，０．９２の１Ｈ  ＮＭＲ  δ値を有し、かつδ１７９．１，１３３．３，１３１．３，８１．９，７２．６，３７．３，３５．４，３２．１，３１．３，２９．５，２９．４，２９．０，２８．６，２７．８，２５．４，２５．３，２２．５，１３．３という１３Ｃ  ＮＭＲ値を有する。詳細な１Ｄ及び２Ｄ  ＮＭＲ分析により、この化合物の構造が既知化合物としてのピリフェロリドＡであると確認される。
【０１１４】
分子量２９８の第２の精製化合物を５００ＭＨｚ  ＮＭＲ機器を用いてさらに分析すると、５．６１，５．４１，３．９６，２．２７，２．０４，１．６９，１．５１，１．４２，１．３２，０．９２の１Ｈ  ＮＭＲ  δ値を有し、かつδ１７６．６，１３３．２，１３２．６，７３．５，３７．５，３３．９，３２．４，３１．６，２９．８，２９．７，２９．６，２９．４，２９．３，２９．１，２５．７，２４．９，２２．８，１４．３という１３Ｃ  ＮＭＲ値を有する。詳細な１Ｄ及び２Ｄ  ＮＭＲ分析により、微生物源については報告されていない化合物；分子式Ｃ１８Ｈ３４Ｏ３に対する構造が確認される。この化合物１１−ヒドロキシ−１２−エン−オクタデカン酸の構造を下に示す。
【化８】
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【０１１５】
プセウドモナス細胞培養物から単離された化合物の効力を上記の手順を用いて試験する。結果を下記の表４に示す。
【表４】
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【０１１６】
実施例５：カオリン効果
Ｐ．フルオレスケンス細菌に基づく微生物性バイオ農薬の効力に対するカオリン粘土の効果を１１．８℃で行なわれるバイオボックス研究で試験する。実験第１日目に、バイオボックス中の最終的な濁度が約２０ＮＴＵ（正規化した濁度単位）となるように、カオリン粘土を蠕動ポンプを介して濃縮ストック溶液からバイオボックスに適用する。クワッガガイ５０匹を、両末端をナイロンメッシュで閉じた１フィート長のアクリルチューブに入れ、チューブを処理用のバイオボックスの底に置いた。粘土適用の持続時間は６時間とし、６時間後、アクリルチューブ中のイガイをバイオボックス中で新鮮な流水に１８時間さらした。翌日、余分な粘土をバイオボックスの底から除去し、最終濃度が２００ｐｐｍになるまで蠕動ポンプを介して水性懸濁物中のバイオ農薬を適用した。６時間のバイオ農薬処理後、チューブ中のイガイを、１分間に１ガロンの割合の新鮮な流水とともにバイオボックス中でインキュベートする。イガイを観察し、死亡率％を決定するために５週間毎週計数する。対照処理には、未処理対照、カオリン粘土のみによる（バイオ農薬なしの）処理及びバイオ農薬のみによる（粘土による前処理なしの）処理が含まれた。処理は全て３つ複製して行なう。
【０１１７】
表５及び図４に示す結果は、粘土による前処理のないイガイと比較した、バイオ農薬処理する前に１８時間カオリン粘土にさらしたイガイの死亡率の顕著な増加を示している。この現象は、生物学的活性が低い間に採取され、冷たい（１１．８℃）水で処理されたイガイの吸水活性の増加によって説明することができる。この吸水の増加によって、より多くの農薬製品の取込みが生じ、それによって、イガイ死亡率の増加がもたらされる。
【表５】
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【０１１８】
実施例６：カタツムリに対するγ−ドデカラクトン及びＮ−デセノイルピロリジンの効果
カタツムリ実験：適当な量の試験化合物をまずアセトン（２ｍＬ）に溶解させる。この溶液を２．５グラムのトウモロコシデンプンに添加し、よく混合した。得られた混合物をペトリ皿（Φ２５ｍｍ）に移す。次に、自然乾燥させるためにペトリ皿をフード内に置く。乾燥後、水（２ｍＬ）をペトリ皿に添加して、ペーストを作る。
【０１１９】
茶色庭カタツムリ（カンタレウス・アスペルスス（Ｃａｎｔａｒｅｕｓ  ａｓｐｅｒｓｕｓ））を家の庭から採集し、キャベツ又は赤ニンジンを用いて実験室で少なくとも１日育てる。サイズがよく似た５匹の個体を各処理用に選び、１Ｌビーカーに移す。カタツムリを活発にするために、ハンドスプレーを用いて、カタツムリに対して、及びビーカー中に少しの水を噴霧する。水を噴霧した後、化学薬品を含むトウモロコシデンプンの入ったペトリ皿をビーカーの中に置き、このビーカーの上をアルミ箔で覆う。２４時間での摂食行動、トウモロコシデンプンの消費量及び死亡率を記録する。
【０１２０】
（表６に示す）データから、トウモロコシデンプン１グラム当たり１００ｍｇのγ−ドデカラクトン（ＳＡＲ−０１４）が茶色庭カタツムリを強く寄せ付けないことが示される。しかしながら、トウモロコシデンプン１グラム当たり１００ｍｇのＮ−デセノイルピロリジン（ＳＡＲ−０３０）は、食べた後に全ての茶色庭カタツムリを殺す。
【表６】
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【０１２１】
本発明は、特定の実施形態に関して記載されているが、様々な等価物、変更及び修飾を使用することができ、かつこれらもまた本発明の範囲内であることができることが明白であるので、特定の実施形態の詳細は限定的であるとみなされるべきではない。
【０１２２】
様々な参考文献が本明細書の全体を通じて引用されており、これらは各々、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【図１ａ】
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【図１ｂ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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