(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
おから９０５重量部、米糠８６重量部及び大豆かす９重量部からなるサナギタケ子実体の培養培地を、滅菌した後、サナギタケの菌糸培養液を前記滅菌培地に接種し、
培養環境条件を、空中湿度６０％以上、温度２０−２５℃及び暗条件として、サナギタケ菌糸体を培養し、
前記サナギタケ菌糸体が前記滅菌培地の略全体に蔓延した後、
培養環境条件を、空中湿度８０％以上、１５℃以上２０℃より低くい温度及び８０−２５０Ｌｕｘの光強度の間欠若しくは連続的な光照射に切り替え、サナギタケ子実体の芽を発育させ、
前記サナギタケ子実体の芽が出た後、
培養環境条件を、空中湿度８０％以上、温度２０−２５℃、間欠的な換気、及び１５０Ｌｕｘ以上の光強度の間欠若しくは連続的な照射に切り替え、サナギタケ子実体を育成することを特徴とする
サナギタケ子実体の人工培養方法。
【請求項２】
前記サナギタケが、Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ属に属する菌であることを特徴とする請求項１に記載のサナギタケの人工培養方法。
【請求項３】
請求項１又は請求項２に記載のサナギタケ子実体の人工培養方法で培養したサナギタケ子実体及び／又はそれから抽出した生理活性成分を含むことを特徴とするサプリメントの製造方法。
【請求項４】
請求項１又は請求項２に記載のサナギタケ子実体の人工培養方法で発生した菌糸体を含むことを特徴とする菌床の製造方法。
【請求項５】
請求項４に記載の菌床の製造方法で得られた菌糸体を含む菌床を用いて作成されたことを特徴とする家畜飼料の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、食品工業副産物を利用したサナギタケ子実体の培養培地、さらに野生のサナギタケ子実体と同様の生理活性成分を含有させつつ、容易、低廉かつ迅速に培養し、健康食品、医薬品、化粧品等に用いることができるサナギタケ子実体の人工培養方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
サナギタケ（蛹茸  学名：Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ  ｍｉｌｉｔａｒｉｓ（Ｖｕｉｌｌ．）Ｆｒ．）は、冬虫夏草属に属する菌類の一種であり、野生ではチョウ目の幼虫や蛹に菌が感染し、体内に菌糸体が蔓延し、その菌糸体から子実体（キノコ部）が発生する。サナギタケ子実体はオレンジ色の棍棒状である。
【０００３】
サナギタケ子実体には、抗腫瘍性を示すコルジセピンをはじめ、血管拡張作用を有するとされるＤ−マンニトール、免疫賦活作用があるとされるβ−グルカン、活性酸素を消去するＳＯＤなどの生理活性成分が豊富に含まれていることが知られている。
【０００４】
そのため、昨今、絶滅状態にあった冬虫夏草（Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｂｅｒｋｅｌｅｙ）  Ｓａｃｃａｒｄｏ）の代用品として世界中に注目されている。
【０００５】
サナギタケ子実体を人工的に形成させる研究は、米国などの各国で成功例が報告されており、特に中国では人工的に形成したサナギタケ子実体を漢方薬剤として使用する研究が活発になされ、現在では実用段階にある。また、韓国内でも人工サナギタケ子実体を形成する研究が近年活発になされており、既に商業的目的で利用するための多様な研究が進行中である。
【０００６】
しかしながら、特許文献１、２等で開示されているように、人工的なサナギタケ子実体の培養培地の構成が複雑で、コストが高く、これまでのサナギタケ子実体の人工培養方法は普及していない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２００３−１１６５２２号公報
【特許文献２】特開２００５−２８７４８８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
そこで、本発明は、食品工業副産物を利用したサナギタケ子実体の培養培地、野生のサナギタケ子実体と同様の生理活性成分を含有させつつ、容易、低廉かつ迅速に培養し、健康食品、医薬品、化粧品等に用いることができるサナギタケ子実体の人工培養方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
上述の課題を解決するため本発明の構成は、
（１）
おからを主成分とし、さらに少なくとも、穀物の糠、油粕を含むことを特徴とするサナギタケ子実体の培養培地。
（２）
おからを主成分とし、さらに少なくとも、穀物の茎の粉末、油粕を含むことを特徴とするサナギタケ子実体の培養培地。
（３）
おから５０〜９０重量部と、
穀物の糠又は穀物の茎の粉末４０〜９重量部と、
油粕１０〜１重量部からなることを特徴とする
サナギタケ子実体の培養培地。
（４）
（１）〜（３）の何れかに記載のサナギタケ子実体の培養培地を、滅菌した後、サナギタケの菌糸培養液を前記滅菌培地に接種し、
培養環境条件を、空中湿度６０％以上、温度２０−２５℃及び暗条件として、サナギタケ菌糸体を培養し、
前記サナギタケ菌糸体が前記滅菌培地の略全体に蔓延した後、
培養環境条件を、空中湿度８０％以上、１５℃以上２０℃より低くい温度及び８０−２５０Ｌｕｘの光強度の間欠若しくは連続的な光照射に切り替え、サナギタケ子実体の芽を発育させ、
前記サナギタケ子実体の芽が出た後、
培養環境条件を、空中湿度８０％以上、温度２０−２５℃、間欠的な換気、及び１５０Ｌｕｘ以上の光強度の間欠若しくは連続的な照射に切り替え、サナギタケ子実体を育成することを特徴とする
サナギタケ子実体の人工培養方法。
（５）
前記サナギタケが、Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ属に属する菌であることを特徴とする（４）に記載のサナギタケの人工培養方法。
（６）
（４）又は（５）に記載のサナギタケ子実体の人工培養方法で培養したサナギタケ子実体及び／又はそれから抽出した生理活性成分を含むことを特徴とするサプリメント。
（７）
（４）又は（５）に記載のサナギタケ子実体の人工培養方法で発生したことを特徴とする菌糸体を含む菌床。
（８）
（７）に記載の菌糸体を含む菌床を用いて作成されたことを特徴とする家畜飼料。
とした。
【発明の効果】
【００１０】
本発明であるはサナギタケ子実体の人工培養方法では、食品工業由来のおから、さらには、少なくとも穀物の糠又は穀物の茎の粉末、及び油粕の内から選ばれる１種または２種以上を含む培地を滅菌し、サナギタケの菌糸培養液を接種し、菌糸体培養工程、芽出し工程、育成工程を経てサナギタケ子実体を培養するもので、既存の人工培養方法（例えば：特許文献１、２）よりも容易、低廉かつ迅速にサナギタケ子実体を培養することができる。
【００１１】
本発明によれば、野生のサナギタケと同様の形態の子実体を培養することができる。また、野生のサナギタケ子実体と同様の生理活性成分量を含有するサナギタケ子実体を効率よく安価に得ることができる。この人工培養サナギタケ子実体をそのまま粉砕し加工したり、必要に応じて、生理活性成分を抽出したりして、医薬品、サプリメントなどの健康食品、化粧品などに利用することができる。
【００１２】
さらには、菌糸体（菌糸塊）にも、多糖類、フェノール類、ＳＯＤ様物質などのサナギタケの特有の生理活性成分、その他機能生物質が含有するため、培養残渣である培地菌糸体を含み、家畜を対象とした飼料の添加物に応用することもできる。
【００１３】
つまり、本発明は、食品工業副産物を利用してサナギタケ子実体を培養することで食品廃棄物を減少させることができるとともに、培養済みの菌糸体を含む培地は家畜飼料にすることで、培地を廃棄物とすることのない、環境にやさしいサナギタケ子実体の人工培養方法を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】実施例のサナギタケ菌糸体１の培養工程の実物写真である。培養培地に菌糸体が蔓延して培地が白色に見える。
【図２】実施例のサナギタケ子実体３の芽出し工程の実物写真である。白色の菌糸体の一部がオレンジ色に変色し、米粒状のサナギタケ子実体原基２が確認できる。
【図３】実施例のサナギタケ子実体３の育成工程の実物写真である。各ガラス瓶４中の培養培地から棍棒状でオレンジ色のサナギタケ子実体３が多数本生育していることが確認できる。
【図４】実施例のサナギタケ子実体の生理活性成分含有量と市販のサナギタケ子実体の生理活性成分含有量の比較表である。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
以下、本発明を実施するための形態を実施例及び図面に基づいて具体的に説明する。なお、本発明はそれら実施形態に限定されるものではない。
【実施例】
【００１６】
実施の一例であるサナギタケ子実体の人工培養方法は、以下の手順で行った。
【００１７】
１）［試管培地の作製］
・試管培地組成
グルコース            ２０ｇ
寒天                  ２０ｇ
ペプトン              １０ｇ
ポテトエキス            ４ｇ
ＫＨ２ＰＯ４              ３ｇ
ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  １．５ｇ
蒸留水            １０００ｍｌ
【００１８】
グルコース、寒天、ペプトン、ポテトエキス、ＫＨ２ＰＯ４、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏは市販品を用いた（以下同じ）。
【００１９】
・試管培地調整
前記試管培地の組成物を攪拌した（ｐＨ調整なし）。これを１２１℃に設定した殺菌釜で２０分間加熱殺菌（オートクレーブ）し、前記組成を１５ｍｌほど試験管に流し込み、水平から約１０°に傾けたまま冷却ゲル化させ、固形の試管培地を得た。なお、培地の殺菌は、オートクレーブ以外の方法であってもよい（以下同様）。
【００２０】
２）［試管種菌（菌母）の作製］
市販の種菌（スラント培地培養の菌糸状種菌）を、前記１）［試管培地の作製］で作製した試管培地（ゲル）に移植して菌糸体を培養し、試管種菌（菌母）を完成させる。
【００２１】
３）［培養種菌の作製］
・種菌培養液体培地（以下「菌糸培養液」という）組成
グルコース            ２０ｇ
ペプトン              １０ｇ
ポテトエキス            ４ｇ
ＫＨ２ＰＯ４              ３ｇ
ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  １．５ｇ
蒸留水          １０００ｍｌ
【００２２】
・菌糸培養液の調整
前記菌糸培養液組成を攪拌した（ｐＨ調整なし）。これを１２１℃に設定した殺菌釜で２０分間加熱殺菌（オートクレーブ）し、クリーンベンチに移し替えて室温まで冷却し、菌糸培養液を作製した。
【００２３】
この菌糸培養液に、前記２）［試管種菌（菌母）の作製］で作成し、菌母を接種して菌糸体が十分に回って白変した試管培地を移し入れる。その分量は菌糸培養液１０００ｍｌに対して試管種菌１本（１５ｍｌ／ゲル）の割合とした。その後、温度を２３℃に設定して電磁攪拌培養した。約１週間が経過する頃、菌糸培養液中に球状の菌糸体（培養種菌）の広がりが確認できた。
【００２４】
４）［サナギタケ子実体の培養培地の作製］
・培養培地組成
おから                  ９０５ｇ（約９０％）
米糠                      ８６ｇ（約９％）
大豆かす                    ９ｇ（約１％）
合計１０００ｇ（１００％）
【００２５】
おからは豆腐店から入手した。米糠は穀物の糠の例として、精米所から若しくは市販品を入手した。大豆かすは油粕の例として、市販品を入手した。おからと米糠は乾燥せず、そのまま使用した。大豆かすは乾燥して、粉砕して使用した。米糠の他、他の穀物糠も使用でき、さらに穀物の茎の粉末であってもよい。穀物の茎の粉末であれば、米糠などのような他の食品等へ利用が全くない未利用バイオマスであるので、極めて安価に入手でき、培養コストの抑制に繋がり好ましい。また大豆かすを他の油粕に置換してもよい。
【００２６】
・培養培地の調整
前記の培養培地組成成分を混合し、ガラス瓶４（容量：３６８ｍｌ、直径：７１ｍｍ、高さ：１２２ｍｍ）に、混合培養培地を５０ｇ入れ、通気性を有するキャップ５を被着し、１２１℃に設定した殺菌釜で２０分間加熱殺菌した。その後、容器を殺菌釜から取り出してクリーンベンチに運び入れ、前記キャップ５を開けて、紫外線ランプ照射下で、培養培地を自然的に冷却した。
【００２７】
・種菌接種
培養培地の温度が２５℃を下回ったことを確認してから、前記３）で作製した培養種菌（培地重量比５％−１０％）を培養培地に接種した。
【００２８】
５）［培養］
・菌糸体培養工程
培養種菌を接種した培養培地を温度２０−２５℃、湿度６０％以上に設定した培養室で、暗条件下で培養した。暗条件下で培養すると、菌糸体が培養培地全体に蔓延し、茶色の培養培地が乳白色に変化する。
【００２９】
・芽出し工程
培地の表面に米粒状の突起（子実体原基）が確認できたら、１５℃以上２０℃より低くい温度で８０−２５０Ｌｕｘの照明を１２時間間欠若しくは連続的に照射して子実体の発芽を促進させ、突起がオレンジ色に変化する発芽を確認した。光源として、ＬＥＤ、蛍光ランプ若しくは自然光などが例示できる。
【００３０】
・子実体育成工程
発芽した後、空中湿度８０％以上、温度２０−２５℃、毎日３０分間の換気、毎日１２時間の１５０Ｌｕｘ以上の間欠若しくは連続的な照射条件に切り替え、培養を継続した。
【００３１】
６）［成熟／収穫（培養終了）］
サナギタケ子実体の成熟は、子実体と子嚢殻の形成が確認された時点とし、その前後に収穫を行った。
【００３２】
収穫したサナギタケ子実体の生理活性物質を測定し、従来の培地（比較例３、２）、野生採取（比較例１）の含有量と比較した結果を図４に示した。実施例では、アデノシンにおいては比較例３の３．５−４倍、コルジセピンにおいては比較例１の約３倍、比較例２、３の約１０倍に及ぶものもあった。
【００３３】
多糖類においては、野生型の半分程度であるものの、比較例２と同等、比較例３の約５倍の含有量であった。
【産業上の利用可能性】
【００３４】
本発明は、食品工業副産物のおから等の再利用、さらに機能性物質の生産に貢献できる。
【符号の説明】
【００３５】
１  サナギタケ菌糸体
２  子実体原基
３  サナギタケ子実体
４  ガラス瓶
５  キャップ  
【要約】
【課題】食品工業副産物を利用したサナギタケ子実体の培養培地、さらにサナギタケ子実体の人工培養方法を提供する。
【解決手段】本発明に係るサナギタケ子実体の培養培地は、おからを主成分とし、さらに少なくとも、穀物の糠、油粕を含むことを特徴とするサナギタケ子実体の培養培地とした。また、本発明に係るサナギタケ子実体の人工培養方法は、食品工業由来のおからを主成分とする滅菌した培養培地に、サナギタケの菌糸培養液を接種し、それぞれ異なる培養環境である、菌糸体培養工程、芽出し工程、子実体育成工程を経てサナギタケの子実体を培養する方法である。
【選択図】図１【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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