(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｃ−Ｍｅｔに対する抗体アンタゴニストまたはその機能的断片と、アミノヘテロアリール化合物とを含んでなる癌の治療に用いるための医薬組成物であって、
アミノヘテロアリール化合物が、下記式Ｉｂの化合物であり、
【化１】
0005677949.tif 000008
かつ、
ｃ−Ｍｅｔに対する抗体アンタゴニストまたはその機能的断片が、
配列番号１、２および３のアミノ酸配列をそれぞれ含んでなるＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２およびＣＤＲ−Ｈ３を含む重鎖と、配列番号１０、１１および１２のアミノ酸配列をそれぞれ含んでなるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２およびＣＤＲ−Ｌ３を含む軽鎖とを含んでなる、抗体またはその機能的断片、
配列番号４、５および６のアミノ酸配列をそれぞれ含んでなるＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２およびＣＤＲ−Ｈ３を含む重鎖と、配列番号１３、１１および１４のアミノ酸配列をそれぞれ含んでなるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２およびＣＤＲ−Ｌ３を含む軽鎖とを含んでなる、抗体またはその機能的断片、
配列番号７、８および９のアミノ酸配列をそれぞれ含んでなるＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２およびＣＤＲ−Ｈ３を含む重鎖と、配列番号１５、１６および１７のアミノ酸配列をそれぞれ含んでなるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２およびＣＤＲ−Ｌ３を含む軽鎖とを含んでなる、抗体またはその機能的断片、および
配列番号４７、４８および４９のアミノ酸配列をそれぞれ含んでなるＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２およびＣＤＲ−Ｈ３を含む重鎖と、配列番号５０、５１および５２のアミノ酸配列をそれぞれ含んでなるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２およびＣＤＲ−Ｌ３を含む軽鎖とを含んでなる、抗体またはその機能的断片、
からなる群から選択される、医薬組成物。
【請求項２】
同時、個別または逐次使用のための、
ｉ）１つのｃ−Ｍｅｔに対する抗体アンタゴニストまたはその機能的断片、および
ｉｉ）アミノヘテロアリール化合物
を少なくとも含んでなる、キット形態の癌の治療に用いるための組合せ製品であって、
アミノヘテロアリール化合物が、下記式Ｉｂの化合物であり、
【化２】
0005677949.tif 000009
かつ、
ｃ−Ｍｅｔに対する抗体アンタゴニストまたはその機能的断片が、
配列番号１、２および３のアミノ酸配列をそれぞれ含んでなるＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２およびＣＤＲ−Ｈ３を含む重鎖と、配列番号１０、１１および１２のアミノ酸配列をそれぞれ含んでなるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２およびＣＤＲ−Ｌ３を含む軽鎖とを含んでなる、抗体またはその機能的断片、
配列番号４、５および６のアミノ酸配列をそれぞれ含んでなるＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２およびＣＤＲ−Ｈ３を含む重鎖と、配列番号１３、１１および１４のアミノ酸配列をそれぞれ含んでなるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２およびＣＤＲ−Ｌ３を含む軽鎖とを含んでなる、抗体またはその機能的断片、
配列番号７、８および９のアミノ酸配列をそれぞれ含んでなるＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２およびＣＤＲ−Ｈ３を含む重鎖と、配列番号１５、１６および１７のアミノ酸配列をそれぞれ含んでなるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２およびＣＤＲ−Ｌ３を含む軽鎖とを含んでなる、抗体またはその機能的断片、および
配列番号４７、４８および４９のアミノ酸配列をそれぞれ含んでなるＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２およびＣＤＲ−Ｈ３を含む重鎖と、配列番号５０、５１および５２のアミノ酸配列をそれぞれ含んでなるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２およびＣＤＲ−Ｌ３を含む軽鎖とを含んでなる、抗体またはその機能的断片、
からなる群から選択される、組合せ製品。
【請求項３】
ｃ−Ｍｅｔに対する抗体アンタゴニストまたはその機能的断片が、
配列番号１８のアミノ酸配列を含んでなる重鎖と、配列番号２１のアミノ酸配列を含んでなる軽鎖とを含んでなる、抗体またはその機能的断片、
配列番号１９のアミノ酸配列を含んでなる重鎖と、配列番号２２のアミノ酸配列を含んでなる軽鎖とを含んでなる、抗体またはその機能的断片、
配列番号２０のアミノ酸配列を含んでなる重鎖と、配列番号２３のアミノ酸配列を含んでなる軽鎖とを含んでなる、抗体またはその機能的断片、および
配列番号５３のアミノ酸配列を含んでなる重鎖と、配列番号５４のアミノ酸配列を含んでなる軽鎖とを含んでなる、抗体またはその機能的断片、
からなる群から選択される、請求項１または２に記載の医薬組成物または組合せ製品。
【請求項４】
ｃ−Ｍｅｔに対する抗体アンタゴニストまたはその機能的断片が、Ｃｏｌｌｅｃｉｏｎ
Ｎａｔｉｏｎａｌｅ  ｄｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅｓ  ｄｅ  Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｅｓ（ＣＮＣＭ，Ｉｎｓｔｉｔｕｔ  Ｐａｓｔｅｕｒ，Ｒｕｅ  ｄｕ  Ｄｏｃｔｅｕｒ  Ｒｏｕｘ，Ｐａｒｉｓ，Ｆｒａｎｃｅ）に、２００７年３月１４日に番号Ｉ−３７２４、Ｉ−３７３１、Ｉ−３７３２として、および２００７年７月６日に番号Ｉ−３７８６として寄託されたハイブリドーマにより分泌されるモノクローナル抗体、からなる群から選択される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の医薬組成物または組合せ製品。
【請求項５】
ｃ−Ｍｅｔに対する抗体アンタゴニストが、ＣＮＣＭに２００７年３月１４日に番号Ｉ−３７３１として寄託されたハイブリドーマにより分泌される、２２４Ｇ１１と呼ばれるモノクローナル抗体であるか、または、
少なくとも配列番号１、２、３、１０、１１および１２の配列を有する６つのＣＤＲ、もしくは、
少なくとも配列番号１８のアミノ酸配列を含んでなる重鎖および配列番号２１のアミノ酸配列を含んでなる軽鎖
を含んでなる前記２２４Ｇ１１抗体から誘導された、抗体またはその機能的断片である、請求項４に記載の医薬組成物または組合せ製品。
【請求項６】
請求項２〜５のいずれか一項に記載のｃ−Ｍｅｔに対する抗体アンタゴニストまたはその機能的断片とアミノヘテロアリール化合物とを少なくとも含んでなる、同時、個別または時差的な使用のための、請求項２に記載の組合せ製品の、癌の治療のための薬剤の調製のための、使用。
【請求項７】
癌が、ｃ−Ｍｅｔを過剰発現する癌、および／または自己リン酸化されたｃ−Ｍｅｔを示す癌より選択される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬組成物または組合せ製品。
【請求項８】
癌が、前立腺癌、骨肉腫、肺癌、乳癌、子宮内膜癌、膠芽腫または結腸癌から選択される癌である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬組成物または組合せ製品。
【請求項９】
ほ乳類における癌の治療に用いるための、請求項１〜５、７および８のいずれか一項に記載の医薬組成物または組合せ製品。
【請求項１０】
ヒトにおける癌の治療に用いるための、請求項１〜５、７および８のいずれか一項に記載の医薬組成物または組合せ製品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ｃ−Ｍｅｔに対する抗体アンタゴニストとアミノヘテロアリール化合物とを含んでなる組成物、特に医薬としての組成物に関する。本発明は、同時、個別または逐次使用のための組合せ製品として、前記抗ｃ−Ｍｅｔ抗体と前記アミノヘテロアリール化合物とを含んでなる医薬組成物も含む。本発明は、ほ乳類における癌の治療のための本発明の組成物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ｃ−Ｍｅｔは、ＲＯＮおよびＳＥＡも含まれるＲＴＫサブファミリーの典型的なメンバーである。ｃ−ＭｅｔＲＴＫファミリーは、他のＲＴＫファミリーとは構造的に異なっており、分散因子（ＳＦ）とも呼ばれる肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）に対する高親和性受容体として知られている唯一のものである(D.P. Bottaro et al., Science 1991, 251: 802-804; L. Naldini et al., Eur. Mol. Biol. Org. J. 1991, 10:2867-2878)。ｃ−ＭｅｔおよびＨＧＦは、様々な組織で広く発現し、これらの発現は、通常、上皮および間葉起源の細胞に、それぞれ限定される（M.F. Di Renzo et al., Oncogene 1991, 6:1997-2003; E. Sonnenberg et al., J. Cell. Biol. 1993, 123:223-235）。これらは、両方とも通常のほ乳類の発生に不可欠であり、細胞遊走、形態形成分化および三次元環状構造の組織化ならびに成長および血管形成において、特に重要であることが示されている(F. Baldt et al., Nature 1995, 376:768-771; C. Schmidt et al., Nature. 1995:373:699-702; Tsarfaty et al., Science 1994, 263:98-101)。ｃ−ＭｅｔおよびＨＧＦの制御された調節が、ほ乳類の発生、組織維持および修復において重要であることが示されている (Nagayama T, Nagayama M, Kohara S, Kamiguchi H, Shibuya M, Katoh Y, Itoh J, Shinohara Y., Brain Res. 2004, 5;999(2):155-66; Tahara Y, Ido A, Yamamoto S, Miyata Y, Uto H, Hori T, Hayashi K, Tsubouchi H., J Pharmacol Exp Ther. 2003, 307(1):146-51) とともに、これらの調節異常が癌の進行に関わっている。
【０００３】
ｃ−Ｍｅｔの不適切な活性化によりおこる異常なシグナル伝達は、ヒトの癌で観察される最も頻繁な変化の１つであり、腫瘍形成および移転において重要な役割を担っている(Birchmeier et al., Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2003, 4:915-925; L. Trusolino and Comoglio P. M., Nat Rev. Cancer. 2002, 2(4):289-300)。
【０００４】
ｃ−Ｍｅｔ活性化は、ｉ）リガンド結合、ｉｉ）自発的なリガンド非依存的二量体化（spontaneous ligand independent dimerization）を引き起こす受容体過剰発現、またはｉｉｉ）ｃ−Ｍｅｔ細胞内領域で主に起こり、増加したおよび持続するｃ−Ｍｅｔのリン酸化または本質的な受容体活性化をもたらす突然変異、を含む様々なメカニズムの結果として生じる( J. G. Christensen, Burrows J. and Salgia R., Cancer Letters. 2005, 226:1-26)。
【０００５】
活性化されたｃ−Ｍｅｔは、細胞質ドメインに位置するマルチドッキングサイトにシグナル伝達エフェクターを補充し、Ｒａｓ−ＭＡＰＫ、ＰＩ３Ｋ、ＳｒｃおよびＳｔａｔ３を包含するいくつかの重要なシグナル伝達経路の活性化をもたらす(Gao CF, Vande Woude GF, Cell Res. 2005, 15(1):49-51; Furge KA, Zhang YW, Vande Woude GF, Oncogene. 2000, 19(49):5582-9)。これらの経路は、腫瘍細胞の増殖、湿潤、血管形成およびアポトーシスの回避に重要である(Furge KA, Zhang YW, Vande Woude GF, Oncogene, 2000, 19(49):5582-9; Gu H, Neel BG, Trends Cell Biol. 2003 Mar, 13(3):122-30; Fan S, Ma YX, Wang JA, Yuan RQ, Meng Q, Cao Y, Laterra JJ, Goldberg ID, Rosen EM, Oncogene. 2000 Apr 27, 19(18):2212-23)。さらに、他のＲＴＫと比べてｃ−Ｍｅｔシグナル伝達のユニークな一面は、その報告された、焦点接着複合体（focal adhesion complexes）と、α６β４インテグリン(Trusolino L, Bertotti A, Comoglio PM, Cell. 2001, 107:643-54)、ＣＤ４４ｖ６(Van der Voort R, Taher TE, Wielenga VJ, Spaargaren M, Prevo R, Smit L, David G, Hartmann G, Gherardi E, Pals ST, J Biol Chem. 1999, 274(10):6499-506)、Ｐｌｅｘｉｎ Ｂ１またはセマフォリン(Giordano S, Corso S, Conrotto P, Artigiani S, Gilestro G, Barberis D, Tamagnone L, Comoglio PM, Nat Cell Biol. 2002, 4(9):720-4; Conrotto P, Valdembri D, Corso S, Serini G, Tamagnone L, Comoglio PM, Bussolino F, Giordano S, Blood. 2005, 105(11):4321-9; Conrotto P, Corso S, Gamberini S, Comoglio PM, Giordano S, Oncogene. 2004, 23:5131-7)などの非キナーゼ結合パートナーとの相互作用であり、それは該受容体による細胞機能調節の複雑性にさらに加えうる。最後に、最近のデータは、ｃ−Ｍｅｔが、ゲフィチニブまたはエルロチニブに耐性のある腫瘍に含まれることがあることを示しており、ＥＧＦＲとｃ−Ｍｅｔとの両方を標的とする化合物の組合せが極めて重要であることを示唆している (Engelman JA at al., Science, 2007, 316:1039-43)。
【０００６】
ｃ−Ｍｅｔ ＲＴＫのうち２０を超える突然変異が発見されている(Ma P. C. et al. Cancer and metastasis rev. 2003, 22:309-25)。突然変異の大部分は、チロシンキナーゼドメイン内の、ｃ−Ｍｅｔの細胞内部分に位置するミスセンス変異であり、そして該チロシンキナーゼドメインを標的とする治療化合物の親和性または結合能力を損なうことがある。このように、ｃ−Ｍｅｔの突然変異は、多かれ少なかれ治療抑制に反応することがある。例えば、ＳＵ１１２７４（ｃ−Ｍｅｔに対する低分子のチロシンキナーゼインヒビター）の前臨床試験では、ある突然変異の該物質の作用に対する感受性および耐性が識別された(Schmidt L. et al. Nat Genet. 1997, 16:68-73; Zhuang Z. et al. Nat Genet. 1998, 20:66-9)。Ｍ１２６８ＴおよびＨ１１１２Ｙは、細胞増殖および運動性の減少がみられる感受性のある突然変異であった。Ｌ１２１３ＶおよびＹ１２４８などの他の突然変異は、ＳＵ１１２７４に対して耐性がありその影響を受けないことがわかった(Hahn O. et al. Hematol Oncol Clin N Am. 2005, 19:343-67)。これらの研究は、ｃ−Ｍｅｔを標的とする治療における特定の突然変異の直接的な影響を示している。しかしながら、リガンドの存在または非存在下におけるｃ−Ｍｅｔのオリゴマー化には、ＡＴＰとチロシン含有ペプチド基質に対するキナーゼの結合親和性および結合動態を調節する必要がある(Hays J.l., Watowich SJ, Biochemistry. 2004, 43:10570-8)。
【０００７】
この数年で、ガン細胞系統においてｃ−Ｍｅｔシグナル伝達を減弱するために多くの戦略が開発されてきた。これらの戦略は、ｉ）ｃ−ＭｅｔまたはＨＧＦ／ＳＦに対する中和抗体(Cao B, Su Y, Oskarsson M, Zhao P, Kort EJ, Fisher RJ, Wang LM, Vande Woude GF, Proc Natl Acad Sci U S A. 2001, 98(13):7443-8; Martens T, Schmidt NO, Eckerich C, Fillbrandt R, Merchant M, Schwall R, Westphal M, Lamszus K, Clin Cancer Res. 2006, 12(20):6144-52)またはｃ−Ｍｅｔへのリガンドの結合を防ぐためのＮＫ４に対するＦＧＦ／ＳＦの使用(Kuba K, Matsumoto K, Date K, Shimura H, Tanaka M, Nakamura T, Cancer Res., 2000, 60:6737-43)、ｉｉ）キナーゼ活性を遮断するｃ−Ｍｅｔに対する小さなＡＴＰ結合部位インヒビター(Christensen JG, Schreck R, Burrows J, Kuruganti P, Chan E, Le P, Chen J, Wang X, Ruslim L, Blake R, Lipson KE, Ramphal J, Do S, Cui JJ, Cherrington JM, Mendel DB, Cancer Res. 2003, 63:7345-55)、ｉｉｉ）マルチドッキング部位への接近を妨げる改変ＳＨ２ドメインポリペプチドおよび受容体またはリガンドの発現を減少させるＲＮＡｉまたはリボザイム、を包含する。これらのアプローチのほとんどは、腫瘍阻害をもたらし、ｃ−Ｍｅｔが癌における治療的介入に重要となりうることを示すｃ−Ｍｅｔの選択的阻害を示す。
【０００８】
ｃ−Ｍｅｔ標的法のために作出された分子のうち、いくつかは抗体である。
最も広く記載されているものの１つは、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ(WO96/38557)により作出された抗ｃ−Ｍｅｔ ５Ｄ５抗体であり、これは、種々のモデルに単独で加えた場合には強力なアゴニストとして、かつ、Ｆａｂフラグメントとして用いた場合にはアンタゴニストとして挙動する。ｃ−Ｍｅｔを標的とする別の抗体は、Ｐｆｉｚｅｒにより「主にｃ−Ｍｅｔアンタゴニストとして、場合によってはｃ−Ｍｅｔアゴニストとして」働く抗体として記載されている(WO2005/016382)。
【発明の概要】
【０００９】
本発明者は、本明細書に記載され、また２００７年７月１２日に出願された特許出願ＥＰ０７３０１２３１．２および２００８年１月１１日に出願されたＵＳ６１／０２０，６３９にも記載されている、２２４Ｇ１１、２２７Ｈ１、２２３Ｃ４および１１Ｅ１と呼ばれるｃ−Ｍｅｔに対する抗体アンタゴニスト、またはその機能的断片が、ｃ−Ｍｅｔの二量体化を阻害する特性を有し、インビボ（in vivo）で活性化することを明らかにしている。
【００１０】
そこで、本発明により解決される課題は、具体的かつ想定されるだけでない、癌の治療に有益な組合せを提供することと考えられることができる。
【００１１】
より詳しくは、本発明の目的は、前記記載のｃ−Ｍｅｔ活性化に関連する全ての因子に影響できる新規な予測できない組合せを提供することにある。
【００１２】
一般的態様では、本発明は、ｃ−Ｍｅｔに対するアンタゴニストとアミノヘテロアリール化合物とを含んでなる活性成分の組合せの治療上の有効量を、前記ほ乳類に投与することを含んでなる、ほ乳類における癌の治療方法に関する。
【００１３】
もう一つの一般的態様では、本発明は、ｃ−Ｍｅｔに対する抗体アンタゴニストまたはその機能的断片と、アミノヘテロアリール化合物とを含んでなる組成物、好ましくは医薬としてのその使用のための組成物に向けられている。
【００１４】
本発明は、さらに、同時、個別、逐次使用のための組合せ製品としての、
ｉ）１つのｃ−Ｍｅｔに対する抗体アンタゴニストまたはその機能的断片、および
ｉｉ）アミノヘテロアリール化合物
を少なくとも含んでなる、医薬組成物に向けられている。
【発明の具体的な説明】
【００１５】
「同時使用」とは、本発明による組成物の２種類の成分を単一かつ同一の医薬品形態で投与することを意味するものと理解される。
「個別使用」とは、本発明による組成物の２種類の成分を、同時に、個別の医薬品形態で投与することを意味するものと理解される。
「逐次使用」とは、本発明による組成物の２種類の成分を、それぞれ個別の医薬品形態で、継続的に投与することを意味するものと理解される。
【００１６】
本発明によると、組合せは、好ましくは賦形剤および／または薬学上許容されるビヒクルと混合される。
【００１７】
また、医薬としての、本発明による組成物についても、記載および特許請求される。
【００１８】
もう一つの実施形態では、本発明の組合せは、パーツのキット（kit of parts）の形としてもよい。そのため、本発明は、ｃ−Ｍｅｔに対する抗体アンタゴニストまたはこれらの機能的断片の１つと、アミノヘテロアリール化合物とを含む製品を包含し、好ましくは、それを必要とするほ乳類における癌の治療のための同時、個別または逐次送達のための結合製剤としての、上記記載のｃ−Ｍｅｔプロテインキナーゼ活性を阻害しうる製品を包含する。一つの実施形態では、製品は、それを必要とするほ乳類における癌の治療のための同時、個別または逐次使用のための結合製剤としての、上記記載のｃ−Ｍｅｔに対する抗体アンタゴニストまたはその機能的断片と、アミノヘテロアリール化合物とを含む。
【００１９】
一つの実施形態では、本発明は、個々のほ乳類ごとのための抗ガン治療の過程を含む医薬パック（phamaceutical pack）であって、ａ）少なくとも１単位のｃ−Ｍｅｔに対する抗体アンタゴニストと、ｂ）少なくとも１単位のアミノヘテロアリール化合物とを単位投与形態で含むパックを提供する。
【００２０】
より具体的な態様では、本発明は、ｃ−Ｍｅｔに対する抗体アンタゴニストまたはその機能的断片と、アミノヘテロアリール化合物とを含んでなる本発明による活性成分の組合せの治療上の有効量を前記ほ乳類に投与することを含んでなる、ほ乳類における癌の治療の方法を扱う。
【００２１】
さらに、より具体的な態様では、本発明は、癌の治療のための、好ましくはほ乳類、より好ましくはヒトにおける癌の治療のための、本発明によるｃ−Ｍｅｔに対する抗体アンタゴニストまたはその機能的断片と、アミノヘテロアリール化合物とを含んでなる組成物を扱う。前記抗癌治療は、本発明の組成物の治療上の有効量を、前記ほ乳類に投与することを含んでなる。好ましくは、前記組成物は、薬学上許容されるキャリアおよび／または賦形剤をさらに含んでなる。
【００２２】
好ましい実施形態では、前記アミノヘテロアリール化合物は、ｃ−Ｍｅｔプロテインキナーゼを阻害しうるものである。より好ましくは、アミノヘテロアリール化合物は、同じアッセイ手順条件においてＰＦ−０２３４１０６６と名付けられたアミノヘテロアリール化合物に対して示される活性を阻害するｃ−Ｍｅｔプロテインキナーゼを、少なくとも２５％、好ましくは４０％、５０％、６０％、７５％および８５％有するものである（ＰＦ―０２３４１０６６化合物の完全な構造は、本明細書を参照すること）。
【００２３】
前記アミノヘテロアリール化合物の存在下でｃ−Ｍｅｔプロテインキナーゼの活性レベルを測定するのに用いることができるアッセイ手順の中では、番号ＷＯ２００６／０２１８８４として公開されたＰＣＴ特許出願の１００ページから記載された「ＨＧＦＲ連続−連結分光光度分析（HGFR continuous-coupled spectrophotometric assay）」と名付けられた手順アッセイを引用することができる。
【００２４】
「抗体（antibody）」、「抗体（antibodies）」または「免疫グロブリン」という用語は、広い意味で、同じ意味で用いられ、そしてモノクローナル抗体（例えば、完全長または完全なモノクローナル抗体）、ポリクローナル抗体、多価抗体または多重特異性抗体（例えば、所望の生物活性を示す二重特異性抗体）を包含する。
【００２５】
より詳しくは、前記分子は、ジスルフィド結合により相互接続した少なくとも２本の重（Ｈ）鎖と２本の軽（Ｌ）鎖を含んでなる糖タンパク質である。各重鎖は、重鎖可変領域（またはドメイン）（本明細書ではＨＣＶＲまたはＶＨと省略する）と、重鎖定常領域とを含んでなる。重鎖定常領域は、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３という３つのドメインを含んでなる。各軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書ではＬＣＶＲまたはＶＬと省略する）と軽鎖定常領域とを含んでなる。軽鎖定常領域は、ＣＬという１つのドメインを含んでなる。ＶＨおよびＶＬ領域はさらに、相補性決定領域（ＣＤＲ）と称され、より高度に保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）と称する領域が組み入れられた、超可変性の領域に細分化することができる。各ＶＨおよびＶＬは、アミノ末端からカルボキシ末端まで、次の順序で並んだ３つのＣＤＲおよび４つのＦＲを含んでなる：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４。重鎖および軽鎖の可変領域は、抗原に相互作用する結合ドメインを有する。抗体の定常領域は、免疫系の様々な細胞（例えば、エフェクター細胞）および古典補体系の補体第一成分（Ｃ１ｑ）を包含する免疫グロブリンが宿主組織または因子に結合することを媒介することができる。
【００２６】
これらはさらに、起源または免疫グロブリンの型（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＡなど）に関わらず、所望の特異的かつ親和的結合を示す、本明細書でより詳細に記載される、その一定の抗体機能的断片も包含してもよい。
【００２７】
一般的に、モノクローナル抗体またはその機能的断片の作成のためには、特にネズミ由来のものには、「抗体」マニュアルに詳細に記載された方法(Harlow and Lane, Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor NY, pp. 726, 1988)または、ＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎにより記載されたハイブリドーマから作成する方法(Nature, 256:495-497, 1975)を参照することができる。
【００２８】
「アンタゴニスト」という用語は、直接または間接的に、ｃ−Ｍｅｔの生物活性を妨げ、低下させ、阻害することができる化合物として理解されるべきである。
【００２９】
一般的に、「治療上の有効量」とは、化合物、または病気の症状を防ぎ、緩和し、減少し、改善し、または治療を受けている患者の生存期間を延長する効果のある化合物の最低濃度または量をいう。より詳しくは、癌の治療については、治療上の有効量とは、（１）腫瘍の大きさを小さくする（好ましくは除去する）、（２）腫瘍移転を阻止する（それが、ある程度遅くする、好ましくは止める）、（３）腫瘍増殖をある程度阻止する（それが、ある程度遅くする、好ましくは止める）、および／または、（４）１つまたはそれ以上の癌に関する症状をある程度回復する（好ましくは取り除く）効果を有する量をいう。
【００３０】
より詳しくは、前記ｃ−Ｍｅｔに対する抗体アンタゴニストまたはその機能的断片が、
配列番号１、２および３のアミノ酸配列をそれぞれ含んでなるＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２およびＣＤＲ−Ｈ３を含む重鎖と、配列番号１０、１１および１２のアミノ酸配列をそれぞれ含んでなるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２およびＣＤＲ−Ｌ３を含む軽鎖とを含んでなる、抗体（２２４Ｇ１１抗体より誘導された）またはその機能的断片、
配列番号４、５および６のアミノ酸配列をそれぞれ含んでなるＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２およびＣＤＲ−Ｈ３を含む重鎖と、配列番号１３、１１および１４のアミノ酸配列をそれぞれ含んでなるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２およびＣＤＲ−Ｌ３を含む軽鎖とを含んでなる、抗体（２２７Ｈ１抗体より誘導された）またはその機能的断片、
配列番号７、８および９のアミノ酸配列をそれぞれ含んでなるＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２およびＣＤＲ−Ｈ３を含む重鎖と、配列番号１５、１６および１７のアミノ酸配列をそれぞれ含んでなるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２およびＣＤＲ−Ｌ３を含む軽鎖とを含んでなる、抗体（２２３Ｃ４抗体より誘導された）、および
配列番号４７、４８および４９のアミノ酸配列をそれぞれ含んでなるＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２およびＣＤＲ−Ｈ３を含む重鎖と、配列番号５０、５１および５２のアミノ酸配列をそれぞれ含んでなるＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２およびＣＤＲ−Ｌ３を含む軽鎖とを含んでなる、抗体（１１Ｅ１抗体より誘導された）、
からなる群から選択されるものである。
【００３１】
より好ましい実施形態では、前記ｃ−Ｍｅｔに対する抗体アンタゴニストまたはその機能的断片が、
配列番号１８のアミノ酸配列を含んでなる重鎖と、配列番号２１のアミノ酸配列を含んでなる軽鎖とを含んでなる、抗体（２２４Ｇ１１抗体より誘導された）またはその機能的断片、
配列番号１９のアミノ酸配列を含んでなる重鎖と、配列番号２２のアミノ酸配列を含んでなる軽鎖とを含んでなる、抗体（２２７Ｈ１抗体より誘導された）またはその機能的断片、
配列番号２０のアミノ酸配列を含んでなる重鎖と、配列番号２３のアミノ酸配列を含んでなる軽鎖とを含んでなる、抗体（２２３Ｃ４抗体より誘導された）、および
配列番号５３のアミノ酸配列を含んでなる重鎖と、配列番号５４のアミノ酸配列を含んでなる軽鎖とを含んでなる、抗体（１１Ｅ１抗体より誘導された）、
からなる群から選択されるものである。
【００３２】
もう一つの特定の態様では、前記ｃ−Ｍｅｔに対する抗体アンタゴニストまたはその機能的断片が、前記２２４Ｇ１、２２７Ｈ１、２２３Ｃ４または１１Ｅ１抗体より誘導されたリコンビナント、キメラもしくはヒト化抗体、またはその断片である（誘導されたとは、少なくとも６つのＣＤＲまたは少なくともこれらの抗体のどれかに対する上記記載の軽鎖と重鎖とを含んでなる、抗体またはその断片を指定することを意図している）。
【００３３】
より詳しくは、好ましい実施形態では、本発明は、前記ｃ−Ｍｅｔに対する抗体アンタゴニストが、２２４Ｇ１１、２２７Ｈ１、２２３Ｃ４および１１Ｅ１より選択される、本発明による方法または組成物に関する。
【００３４】
これらモノクローナル抗体の全ては、ＣＮＣＭに２００７年３月１４日に、ＣＮＣＭ  Ｉ−３７２４（１１Ｅ１に相当する）、Ｉ−３７３１（２２４Ｇ１１に相当する）、Ｉ−３７３２（２２７Ｈ１に相当する）および２００７年７月６日にＩ−３７８６（２２３Ｃ４に相当する）として寄託された、ハイブリドーマにより分泌される。これらのハイブリドーマは、ミエローマ細胞系列（Ｓｐ２０  Ａｇ１４）と免疫したマウス脾細胞との細胞融合で生じるマウスハイブリドーマである。
【００３５】
ＣＤＲ領域またはＣＤＲにより、ＩＧＭＴにより定義される免疫グロブリンの重鎖および軽鎖の超可変性領域を示すことが意図されている。
【００３６】
ＩＧＭＴ独自ナンバリングは、抗原受容体、鎖型または種が何であれ、可変ドメインを比較するために定義されている(Lefranc M.-P., Immunology Today 18, 509 (1997); Lefranc M.-P., The Immunologist, 7, 132-136 (1999); Lefranc, M.-P., Pommie, C., Ruiz, M., Giudicelli, V., Foulquier, E., Truong, L., Thouvenin-Contet, V. and Lefranc, Dev. Comp. Immunol., 27, 55-77 (2003))。ＩＭＧＴ独自ナンバリングでは、保存されたアミノ酸は常に同じ位置にあり、例えば、システイン２３（１ｓｔ−ＣＹＳ）、トリプトファン４１（ＣＯＮＳＥＲＶＥＤ−ＴＲＰ）、疎水性アミノ酸８９、システイン１０４（２ｎｄ−ＣＹＳ）、フェニルアラニンまたはトリプトファン１１８（Ｊ−ＰＨＥまたはＪ−ＴＲＰ）などである。ＩＧＭＴ独自ナンバリングは、フレームワーク領域（ＦＲ１−ＩＭＧＴ：１〜２６番、ＦＲ２−ＩＭＧＴ：３９〜５５番、ＦＲ３−ＩＭＧＴ：６６〜１０４番およびＦＲ４−ＩＭＧＴ：１１８〜１２８番）および相補性決定領域：ＣＤＲ１−ＩＭＧＴ：２７〜３８番、ＣＤＲ２−ＩＭＧＴ：５６〜６５番およびＣＤＲ３−ＩＭＧＴ：１０５〜１１７番の標準化限界（standardized delimitation）を提供する。ギャップは非占有位置に相当するので、ＣＤＲ−ＩＭＧＴ長さ（括弧の中に示され、ドットで区切られる、例えば、［８．８．１３］）は、非常に重要な情報となる。ＩＭＧＴ独自ナンバリングは、ＩＭＧＴ  ｃｏｌｌｉｅｒｓ  ｄｅ  Ｐｅｒｌｅｓ(Ruiz, M. and Lefranc, M.-P., Immunogenetics, 53, 857-883 (2002); Kaas, Q. and Lefranc, M.-P., Current Bioinformatics, 2, 21-30 (2007))として指定された２Ｄグラフィック表示で、およびＩＭＧＴ／３Ｄｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−ＤＢ(Kaas, Q., Ruiz, M. and Lefranc, M.-P., T cell receptor and MHC structural data. Nucl. Acids. Res., 32, D208-D210 (2004))により３Ｄ構造で、用いられる。
【００３７】
３つの重鎖ＣＤＲと３つの軽鎖ＣＤＲがある。ＣＤＲとＣＤＲｓの用語は、場合により、抗原または抗体が認識するエピトープに対する抗体の親和性によって結合することに関与する大部分のアミノ酸残基を含む、これらの領域の１つ、またはこれらの領域のいくつか、もしくはさらに全部を示すために、本明細書では用いられる。
【００３８】
以下の表１は、好ましい抗体に関する要素を再分類したものである。
【００３９】
【表１】
0005677949.tif 000002
【００４０】
本発明による方法または組成物のもう一つの好ましい実施形態では、前記ｃ−Ｍｅｔに対する抗体アンタゴニストが、２２４Ｇ１１（少なくとも配列番号１、２、３、１０、１１および１２の６つのＣＤＲ、または少なくとも配列番号１８および２１を含んでなる）と呼ばれる抗体から誘導された抗体またはこれらの機能性断片の１つである。
【００４１】
２００６年３月２日に公開された特許出願ＷＯ２００６／０２１８８４の記載によると、（その教示は、参照することにより本発明に組み込まれる）アミノヘテロアリール化合物は、ｃ−Ｍｅｔ阻害剤として知られており、タンパク質チロシンキナーゼ活性を示す。
【００４２】
驚くべき結果として、本出願の出願人は、公開された特許出願ＷＯ２００６／０２１８８４に記載されているようなアミノヘテロアリール化合物と、上記に記載されているｃ−Ｍｅｔに対するモノクローナル抗体アンタゴニストとの組合せの関連性のある相乗効果を示す結果を、初めて示している。
【００４３】
本発明は、上記記載のｃ―Ｍｅｔに対する抗体アンタゴニストと、アミノへテロアリール化合物、好ましくは公開された特許出願ＷＯ２００６／０２１８８４に記載されたアミノヘテロアリール化合物から選択されたアミノヘテロアリール化合物とを少なくとも含んでなる有効成分の組合せの治療上の有効量を前記ほ乳類に投与することを含んでなる、ほ乳類における癌の治療のための方法または組成物に関する。
【００４４】
好ましい例としては、本発明の組成物のアミノへテロアリール化合物は、鏡像異性的に純粋な式Ｉの化合物、または、その薬学上許容される塩、水和物もしくは溶媒和物である。
【００４５】
【化１】
0005677949.tif 000003
【００４６】
式中：
Ｙは、ＮまたはＣＲ１２；
Ｒ１は、水素、ハロゲン、Ｃ６−１２アリール、５−１２員ヘテロアリール、Ｃ３−１２シクロアルキル、３−１２員ヘテロ脂環式基（heteroalicyclic）、−Ｏ（ＣＲ６Ｒ７）ｎＲ４、−Ｃ（Ｏ）Ｒ４、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ４、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｓ（Ｏ）ｍＲ４、−ＳＯ２ＮＲ４Ｒ５、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）Ｒ５、−Ｃ（＝ＮＲ６）ＮＲ４Ｒ５、Ｃ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニルおよびＣ２−８アルキニルより選択され；かつ、Ｒ１の各水素は、１つまたはそれ以上のＲ３基により任意に置換されており；
【００４７】
Ｒ２は、水素、ハロゲン、Ｃ１−１２アルキル、Ｃ２−１２アルケニル、Ｃ２−１２アルキニル、Ｃ３−１２シクロアルキル、Ｃ６−１２アリール、３−１２員ヘテロ脂環式基、５−１２員ヘテロアリール、−Ｓ（Ｏ）ｍＲ４、−ＳＯ２ＮＲ４Ｒ５、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ４、−ＮＯ２、−ＮＲ４Ｒ５、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＯＲ４、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ４、−Ｏ（ＣＲ６Ｒ７）ｎＲ４、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）Ｒ５、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＣ（Ｏ）ＯＲ４、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＮＣＲ４Ｒ５、−Ｃ（＝ＮＲ６）ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ６、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）ＰＲ５または−Ｃ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５であり、かつ、Ｒ２の各水素は、Ｒ８により任意に置換されており；  
【００４８】
各Ｒ３は、独立して、ハロゲン、Ｃ１−１２アルキル、Ｃ２−１２アルケニル、Ｃ２−１２アルキニル、Ｃ３−１２シクロアルキル、Ｃ６−１２アリール、３−１２員ヘテロ脂環式基、５−１２員ヘテロアリール、−Ｓ（Ｏ）ｍＲ４、−ＳＯ２ＮＲ４Ｒ５、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ４、−ＮＯ２、−ＮＲ４Ｒ５、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＯＲ４、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ４、−Ｏ（ＣＲ６Ｒ７）ｎＲ４、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）Ｒ５、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＣ（Ｏ）ＯＲ４、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＯＲ４、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＮＣＲ４Ｒ５、−Ｃ（＝ＮＲ６）ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ６、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）ＰＲ５または−Ｃ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５であり、Ｒ３の各水素は、Ｒ８により任意に置換されており、かつ、隣接原子のＲ３基を結合させて、Ｃ６−１２アリール、５−１２員ヘテロアリール、Ｃ３−１２シクロアルキルまたは３−１２員ヘテロ脂環式基を形成するために結合してもよく；
【００４９】
各Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、独立して、水素、ハロゲン、Ｃ１−１２アルキル、Ｃ２−１２アルケニル、Ｃ２−１２アルキニル、Ｃ３−１２シクロアルキル、Ｃ６−１２アリール、３−１２員ヘテロ脂環式基、５−１２員ヘテロアリールであり；または、同じ窒素原子に結合したＲ４、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７のうちいずれか２つを、それらが結合した窒素と一緒に、結合させて、Ｎ、ＯおよびＳより選択される、１〜３の付加的なヘテロ原子を任意に含む３−１２員のヘテロ脂環式基または５−１２員のヘテロアリール基を形成してもよく；もしくは、同じ窒素原子に結合するＲ４、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７のいずれかを２つを結合させてＣ３−１２シクロアルキル、Ｃ６−１２アリール、３−１２員ヘテロ脂環式基または５−１２員ヘテロアリール基を形成してもよく；かつ、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７の各水素は、Ｒ８により任意に置換されており；
【００５０】
各Ｒ８は、独立して、ハロゲン、Ｃ１−１２アルキル、Ｃ２−１２アルケニル、Ｃ２−１２アルキニル、Ｃ３−１２シクロアルキル、Ｃ６−１２アリール、３−１２員ヘテロ脂環式基、５−１２員ヘテロアリール、−ＮＨ２、−ＣＮ、−ＯＨ、−Ｏ−Ｃ１−１２アルキル、−Ｏ−（ＣＨ２）ｎＣ３−１２シクロアルキル、−Ｏ−（ＣＨ２）ｎＣ６−１２アリール、−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ（３−１２員ヘテロ脂環式基）または−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ（５−１２員ヘテロアリール）であり；かつ、Ｒ８の各水素は、Ｒ１１により任意に置換されており；
【００５１】
各Ｒ９およびＲ１０は、独立して、水素、ハロゲン、Ｃ１−１２アルキル、Ｃ３−１２シクロアルキル、Ｃ６−１２アリール、３−１２員ヘテロ脂環式基、５−１２員ヘテロアリール、−Ｓ（Ｏ）ｍＲ４、−ＳＯ２ＮＲ４Ｒ５、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ４、−ＮＯ２、−ＮＲ４Ｒ５、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＯＲ４、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ４、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）Ｒ５、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＣ（Ｏ）ＯＲ４、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＮＣＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ６、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）ＰＲ５または−Ｃ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５であり；Ｒ９またはＲ１０は、Ａの環原子またはＡの置換基と結合して、Ａに結合した、Ｃ３−１２シクロアルキル、３−１２員ヘテロ脂環式基、Ｃ６−１２アリールまたは５−１２員環ヘテロアリール環を形成してもよく；かつ、Ｒ９およびＲ１０の各水素は、Ｒ３により任意に置換されており；
【００５２】
各Ｒ１１は、独立して、ハロゲン、Ｃ１−１２アルキル、Ｃ１−１２アルコキシ、Ｃ３−１２シクロアルキル、Ｃ６−１２アリール、３−１２員ヘテロ脂環式基、５−１２員ヘテロアリール、−Ｏ−Ｃ１−１２アルキル、−Ｏ−（ＣＨ２）ｎＣ３−１２シクロアルキル、−Ｏ−（ＣＨ２）ｎＣ６−１２アリール、−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ（３−１２員ヘテロ脂環式基）、−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ（５−１２員ヘテロアリール）または−ＣＮであり、かつ、Ｒ１１の各水素は、ハロゲン、−ＯＨ、−ＣＮ、一部または全部がハロゲン化された−Ｃ１−１２アルキル、一部または全部がハロゲン化された−Ｏ−Ｃ１−１２アルキル、−ＣＯ、−ＳＯまたは−ＳＯ２により任意に置換されており；
【００５３】
Ｒ１２は、水素、ハロゲン、Ｃ１−１２  アルキル、Ｃ２−１２  アルケニル、Ｃ２−１２アルキニル、Ｃ３−１２シクロアルキル、Ｃ６−１２アリール、３−１２員ヘテロ脂環式基、５−１２員ヘテロアリール、−Ｓ（Ｏ）ｍＲ４、−ＳＯ２ＮＲ４Ｒ５、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ４、−ＮＯ２、−ＮＲ４Ｒ５、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＯＲ４、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ４、−Ｏ（ＣＲ６Ｒ７）ｎＲ４、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）Ｒ５、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＣ（Ｏ）ＯＲ４、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＮＣＲ４Ｒ５、−Ｃ（＝ＮＲ６）ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ６、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）ＰＲ５または−Ｃ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５であり、かつ、Ｒ１２の各水素は、Ｒ３により任意に置換されており；  
【００５４】
各Ｒ１３は、独立して、ハロゲン、Ｃ１−１２アルキル、Ｃ２−１２アルケニル、Ｃ２−１２アルキニル、Ｃ３−１２シクロアルキル、Ｃ６−１２アリール、３−１２員ヘテロ脂環式基、５−１２員ヘテロアリール、−Ｓ（Ｏ）ｍＲ４、−ＳＯ２ＮＲ４Ｒ５、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ４、−ＮＯ２、−ＮＲ４Ｒ５、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＯＲ４、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ４、−Ｏ（ＣＲ６Ｒ７）ｎＲ４、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）Ｒ５、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＣ（Ｏ）ＯＲ４、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＯＲ４、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＮＣＲ４Ｒ５、−Ｃ（＝ＮＲ６）ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ６、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）ＰＲ５、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎ（３−１２員ヘテロ脂環式基）、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎ（Ｃ３−１２シクロアルキル）、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎ（Ｃ６−１２アリール）、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎ（５−１２員ヘテロアリール）、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５または−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＣ（Ｏ）Ｒ４であり、隣接原子のＲ１３基を結合させて、Ｃ６−１２アリール、５−１２員ヘテロアリール、Ｃ３−１２シクロアルキルまたは３−１２員ヘテロ脂環式基を形成してもよく、かつ、Ｒ１３の各水素は、Ｒ３により任意に置換されており；
各ｍは、独立して、０、１または２であり；
各ｎは、独立して、０、１、２、３または４であり；
各ｐは、独立して、１または２である。
【００５５】
もう一つの好ましい例では、前記アミノヘテロアリール化合物は、鏡像異性的に純粋な式Ｉａの化合物または、その薬学上許容される塩、水和物もしくは溶媒和物である。
【００５６】
【化２】
0005677949.tif 000004
【００５７】
式中、
ＹはＮまたはＣＨであり；
Ｒ１は、フラン、チオフェン（thiopene）、ピロール、ピロリン、ピロリジン、ジオキソラン、オキサゾール、チアゾール、イミダゾール、イミダゾリン、イミダゾリジン、ピラゾール、ピラゾリン、ピラゾリジン、イソオキザゾール、イソチアゾール、オキサジアゾール、トリアゾール、チアジアゾール、ピラン、ピリジン、ピペリジン、ジオキサン、モノホリン、ジチアン、チオモノホリン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、ピペラジン、トリアジン、トリチアミン、アジチジン（azitidine）またはフェニル基であり；かつ、Ｒ１の各水素は、Ｒ３により任意に置換されており；
【００５８】
各Ｒ３は、独立して、ハロゲン、Ｃ１−１２アルキル、Ｃ２−１２アルケニル、Ｃ２−１２アルキニル、Ｃ３−１２シクロアルキル、Ｃ６−１２アリール、３−１２員ヘテロ脂環式基、５−１２員ヘテロアリール、−Ｓ（Ｏ）ｍＲ４、−ＳＯ２ＮＲ４Ｒ５、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ４、−ＮＯ２、−ＮＲ４Ｒ５、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＯＲ４、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ４、−Ｏ（ＣＲ６Ｒ７）ｎＲ４、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）Ｒ５、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＣ（Ｏ）ＯＲ４、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＯＲ４、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＮＣＲ４Ｒ５、−Ｃ（＝ＮＲ６）ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ６、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）ｐＲ５または−Ｃ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５であり、Ｒ３の各水素はＲ８により任意に置換されており、かつ隣接原子のＲ３基を結合させて、Ｃ６−１２アリール、５−１２員ヘテロアリール、Ｃ３−１２シクロアルキルまたは３−１２員ヘテロ脂環式基を形成してもよく；
【００５９】
各Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、独立して、水素、ハロゲン、Ｃ１−１２アルキル、Ｃ２−１２アルケニル、Ｃ２−１２アルキニル、Ｃ３−１２シクロアルキル、Ｃ６−１２アリール、３−１２員ヘテロ脂環式基、５−１２員ヘテロアリールであり；または、同じ窒素原子に結合したＲ４、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７のいずれか２つを、それらが結合した窒素と一緒に、結合させて、Ｎ、ＯおよびＳより選択される、１〜３の付加的なヘテロ原子を任意に含む３−１２員ヘテロ脂環式基または５−１２員ヘテロアリール基を形成してもよく；もしくは同じ炭素原子に結合するＲ４、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７のいずれか２つを結合させて、Ｃ３−１２シクロアルキル、Ｃ６−１２アリール、３−１２員ヘテロ脂環式基または５−１２員ヘテロアリール基を形成してもよく；かつ、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７の各水素は、Ｒ８により任意に置換されており；
【００６０】
各Ｒ８は、独立して、ハロゲン、Ｃ１−１２アルキル、Ｃ２−１２アルケニル、Ｃ２−１２アルキニル、Ｃ３−１２シクロアルキル、Ｃ６−１２アリール、３−１２員ヘテロ脂環式基、５−１２員ヘテロアリール、−ＮＨ２、−ＣＮ、−ＯＨ、−Ｏ−Ｃ１−１２アルキル、−Ｏ−（ＣＨ２）ｎＣ３−１２シクロアルキル、−Ｏ−（ＣＨ２）ｎＣ６−１２アリール、−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ（３−１２員ヘテロ脂環式基）または−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ（５−１２員ヘテロアリール）であり；かつ、Ｒ８の各水素は、Ｒ１１により任意に置換されており；
【００６１】
各Ｒ９およびＲ１０は、独立して、水素、ハロゲン、Ｃ１−１２アルキル、Ｃ３−１２シクロアルキル、Ｃ６−１２アリール、３−１２員ヘテロ脂環式基、５−１２員ヘテロアリール、−Ｓ（Ｏ）ｍＲ４、−ＳＯ２ＮＲ４Ｒ５、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ４、−ＮＯ２、−ＮＲ４Ｒ５、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＯＲ４、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ４、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）Ｒ５、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＣ（Ｏ）ＯＲ４、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＮＣＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ６、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）ＰＲ５または−Ｃ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５であり；Ｒ９またはＲ１０をＡの環原子またはＡの置換基と結合して、Ａに結合した、Ｃ３−１２シクロアルキル、３−１２員ヘテロ脂環式基、Ｃ６−１２アリールまたは５−１２員ヘテロアリール環を形成してもよく；かつ、Ｒ９およびＲ１０の各水素は、Ｒ３により任意に置換されており；
【００６２】
Ｒ１１は、独立して、ハロゲン、Ｃ１−１２アルキル、Ｃ１−１２アルコキシ、Ｃ３−１２シクロアルキル、Ｃ６−１２アリール、３−１２員ヘテロ脂環式基、５−１２員ヘテロアリール、−Ｏ−Ｃ１−１２アルキル、−Ｏ−（ＣＨ２）ｎＣ３−１２シクロアルキル、−Ｏ−（ＣＨ２）ｎＣ６−１２アリール、−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ（３−１２員ヘテロ脂環式基）、−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ（５−１２員ヘテロアリール）または−ＣＮであり、かつＲ１１の各水素は、ハロゲン、−ＯＨ、−ＣＮ、一部または全部がハロゲン化された−Ｃ１−１２  アルキル、一部または全部がハロゲン化された−Ｏ−Ｃ１−１２アルキル、−ＣＯ、−ＳＯまたは−ＳＯ２により任意に置換されており；
【００６３】
各Ｒ１３は、独立して、ハロゲン、Ｃ１−１２アルキル、Ｃ２−１２アルケニル、Ｃ２−１２アルキニル、Ｃ３−１２シクロアルキル、Ｃ６−１２アリール、３−１２員ヘテロ脂環式基、５−１２員ヘテロアリール、−Ｓ（Ｏ）ｍＲ４、−ＳＯ２ＮＲ４Ｒ５、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ４、−ＮＯ２、−ＮＲ４Ｒ５、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＯＲ４、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ４、−Ｏ（ＣＲ６Ｒ７）ｎＲ４、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）Ｒ５、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＣ（Ｏ）ＯＲ４、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＯＲ４、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＮＣＲ４Ｒ５、−Ｃ（＝ＮＲ６）ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ６、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）ＰＲ５、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎ（３−１２員ヘテロ脂環式基）、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎ（Ｃ３−１２シクロアルキル）、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎ（Ｃ６−１２アリール）、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎ（５−１２員ヘテロアリール）、−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５または−（ＣＲ６Ｒ７）ｎＣ（Ｏ）Ｒ４であり、隣接原子のＲ１３基を結合させてＣ６−１２アリール、５−１２員ヘテロアリール、Ｃ３−１２シクロアルキルまたは３−１２員ヘテロ脂環式基を形成してもよく、かつ、Ｒ１３の各水素は、Ｒ３により任意に置換されており；
各ｍは、独立して、０、１または２であり；
各ｎは、独立して、０、１、２、３または４であり；
各ｐは、独立して、１または２である。
【００６４】
より詳しくは、本発明の好ましいアミノヘテロアリール化合物は、アミノピリジンまたはアミノピラジン化合物より選択される。
【００６５】
前記アミノヘテロアリール化合物は、好ましくは、本発明の１つの実施形態によれば、５−ブロモ−３−［（Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−ピラジン−２−イラミン；５−イオド−３−［（Ｒ）１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−ピリジン−２−イラミン；５−ブロモ−３−［１（Ｒ）−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−ピリジン−２−イラミン；４−｛５−アミノ−６−［（Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−ピラジン−２−イル｝−安息香酸；（４−｛５−アミノ−６−［（Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−ピラジン−２−イル｝−フェニル）−ピペラジン−１−イル−メタノン；４−（４−｛５−アミノ−６−［（Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−ピラジン−２−イル｝−ベンゾイル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル；３−［（１Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ］−５−［４−（ピペラジン−ｉ−イルカルボニル）フェニル］ピリジン−２−アミン；４−｛６−アミノ−５−［（１Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ］ピリジン−３−イル｝−Ｎ−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−Ｎ−メチルベンザミド；（４−｛６−アミノ−５−［（１Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ］ピリジン−３−イル｝フェニル）メタノール；４−｛６−アミノ−５−［（１Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ］ピリジン−３−イル｝−Ｎ−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−Ｎ−メチルベンザミド；ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−｛６−アミノ−５−［（１Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ］ピリジン−３−イル｝ベンゾイル）ピペラジン−１−カルボキシレート；３−［（Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−５−［１−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ピリジン−２−イラミン；１−［４−（４−｛６−アミノ−５−［（Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−ピリジン−３−イル｝−ピラゾール−１−イル）−ピペリジン−１−イル］−２−ハイドロキシ−エタノン；３−［（Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−５−（１−ピペリジン−４−イル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ピリジン−２−イラミン；３−［（Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−５−（１−ピペリジン−４−イル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ピリジン−２−イラミン；３−［（Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−５−（１−ピペリジン−４−イル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ピラジン−２−イラミン；３−［（Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−５−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ピラジン−２−イラミン；１−［４−（４−｛５−アミノ−６−［（Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−ピラジン−２−イル｝−ピラゾール−１−イル）−ピペリジン−１−イル］−２−ハイドロキシ−エタノン；３−［（Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−５−［１−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ピラジン−２−イラミン；１−［４−（４−｛５−アミノ−６−［（Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−ピラジン−２−イル｝−ピラゾール−１−イル）−ピペリジン−１−イル］−２−ジメチルアミノ−エタノン；３−［（Ｒ）−１−（２−クロロ−３，６−ジフルオロ−フェニル）−エトキシ］−５−（１−ピペリジン−４−イル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ピリジン−２−イラミン；または、その薬学上許容される塩、溶媒和物もしくは水和物、からなる群より選択される。
【００６６】
本発明のもう一つの好ましい実施形態では、アミノヘテロアリール化合物は、３−［（Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−５−（１−ピペリジン−４−イル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ピリジン−２−イラミンである。この化合物に対して与えられたもう一つの名前は、ＰＦ−０２３４１０６６（ＰＦ−２３４１０６６とも記載される）である。
【００６７】
この特定の化合物は、公開された特許出願ＷＯ２００６／０２１８８４の例１３に詳細に記載されており、その製造プロセスは、下記に記載の手順６２に記載されている。
【００６８】
【化３】
0005677949.tif 000005
【００６９】
無水ＤＭＦ（１００ｍＬ）中の５−ブロモ−３−［（Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−ピリジン−２−イラミン（１２．８３ｇ、３３．７６ｍｍｏｌ）の溶液に対し、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（２１．２５ｇ、９７．３５ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミ（ピ）オプリジン（4-dimethylami[pi]opyridine）（０．７９３ｇ、６．４９ｍｍｏｌ）を加えた。反応は、窒素下で１８時間、室温で撹拌させた。混合物に対し、ＮａＨＣＯ３の飽和溶液（３００ｍＬ）を加え、そして酢酸エチル（EtOAc）（３ｘ２５０ｍＬ）を用いて抽出した。化合した抽出物は、水（５ｘ１００ｍＬ）、飽和炭酸水素ナトリウム（sat.NaHCO3）およびブライン（brine）を用いて洗浄し、その後硫酸ナトリウム上で乾燥させた。濾過、蒸発、および高圧乾燥後、ｄｉ−ｂｏｃ保護した５−ブロモ−３−［（Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−ピリジン−２−イラミンは、オフホワイトの泡状の固体（１９．５９ｇ、１００％収率）として得られた。１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）δ８．１８（ｄ，１Ｈ），７．８３（ｄ，１Ｈ），７．５９（ｄｄ，１Ｈ），７．４８（ｔ，１Ｈ），６．２５（ｑ，１Ｈ），１．７５（ｄ，３Ｈ），１．３９（ｓ，９Ｈ），１．１９（ｓ，９Ｈ）。
【００７０】
ＤＭＳＯ（６８ｍＬ）中の、ｄｉ−ｂｏｃ保護した５−ブロモ−３−［（Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−ピリジン−２−イラミン（１９．５８ｇ、３３．７６ｍｍｏｌ）の溶液に対して、酢酸カリウム（１１．２６ｇ、１１４．７８ｍｍｏｌ）およびビス（ピナコラート）ジボロン（bis(pinacolato)diboron）（１０．２９ｇ、４０．５１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物は、３回、脱気かつ窒素充填し、その後Ｐｄ（ｄｐｐｆ）ＣＩ２．ＣＨ２ＣＩ２（１．３８ｇ、１．６９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物は、３回、脱気かつ窒素充填し、そしてその後１２時間、窒素下で、８０℃のオイルバスで、撹拌した。反応は、室温に冷され、酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、そして酢酸エチルで洗浄したセライトパッドを通して濾過した。化合した酢酸エチル溶液（７００ｍＬ）は、水（５ｘ１００ｍＬ）、ブライン（１００ｍＬ）を用いて洗浄し、そして硫酸ナトリウム上で乾燥した。濾過および濃縮後、その残渣を、ｄｉ−ｂｏｃ保護した３−［（Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−ピリジン−２−イラミンを泡状の固体（２０．５９ｇ、９７％収率）として提供するために、酢酸エチル／ヘキサン（EtOAc/Hexane）（０％−５０％）を用いて溶出するシリカゲルカラムにより精製した。１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）δ８．２０（ｄ，１Ｈ），７．７０（ｄ，１Ｈ），７．６３（ｄｄ，１Ｈ）１７．４７（ｔ，１Ｈ），６．２０（ｑ，１Ｈ），１．７３（ｄ，３Ｈ），１．５０−１．１３（ｍ，３０Ｈ）。
【００７１】
ジクロロメタン（CH2Cl2）（８０ｍＬ）中のｄｉ−ｂｏｃ保護した３−［（Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−ピリジン−２−イラミン（２０．３４ｇ、３２．４２ｍｍｏｌ）の溶液に対して、ジオキサン（dioxane）中のｄｒｙＨＣＬ（４Ｎ、４０．５ｍＬ、１６２ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。反応液は、１２時間窒素下において、４０℃オイルバスで撹拌された。反応混合物は、室温まで冷され、ＥｔＯＡｃ（４００ｍｌ）で希釈し、その後、水層が塩基性（ｐＨ＞８）になるまで、飽和炭酸水素ナトリウムを用いて丁寧にかつ素早く洗浄した。有機層は、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥した。濾過、蒸発、および高圧乾燥後、３−［（Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−ピリジン−２−イラミンは、オフホワイトの泡状固体（１３．４８ｇ、９７％収率）として得られた。１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）δ８．０１（ｄ，１Ｈ），７．２７（ｄｄ，１Ｈ），７．１７（ｄ，１Ｈ），７．０３（ｔ，１Ｈ），６．１２（ｑ，１Ｈ），５．０８（ｂｓ，２Ｈ），１．８１（ｄ，３Ｈ），１．３０（ｓ，６Ｈ），１．２８（ｓ，６Ｈ）。
【００７２】
ＤＭＥ（４０ｍＬ）中の、３−［（Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−ピリジン−２−イラミン（４．２７１１ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）および４−（４−ブロモ−ピラゾール−１−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３．９６２８ｇ、１２．０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に対して、水（１０ｍＬ）中の炭酸ナトリウム（Ｎａ２ＣＯ３）（３．１７８７ｇ、３０．０ｍｍｏｌ）溶液を加えた。溶液は、３回、脱気かつ窒素充填した。溶液に対して、Ｐｄ（ＰＰｈ３）２ＣＩ２（３５１ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を加えた。反応溶液は、さらに３回、脱気かつ窒素充填した。反応溶液は、約１６時間（またはボランピナコールエステルの消費まで）、８７℃のオイルバスで撹拌し、室温まで冷やし、そしてＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で希釈した。反応混合物は、セライトパッドを通して濾過し、そしてＥｔＯＡｃで洗浄した。ＥｔＯＡｃ溶液は、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、および濃縮した。粗生成物は、Ｒｆ値０．１５（５０％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘａｎｅｓ）の４−（４−｛６−アミノ−５−［（Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−ピリジン−３−イル｝−ピラゾール−１−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３．４１６７ｇ、６５％収率、−９５％純度）を提供するために、ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘａｎｅ系（ＥｔＯＡｃ０％−ＥｔＯＡｃ１００％）を用いて溶出するシリカゲルカラムにより精製した。ＭＳｍ／ｅ５５０（Ｍ＋１）＋。
【００７３】
メタノール（５ｍＬ）またはジクロロメタ（ピ）エ（dichlorometha[pi]e）（３０ｍＬ）中の４−（４−｛６−アミノ−５−［（Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−ピリジン−３−イル｝−ピラゾール−１−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（５６６．７ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）の溶液に対して、４ＮＨＣＩ／ジオキサン（１５ｍＬ）を加えた。溶液は、約１時間または脱保護が完了するまで撹拌した。溶媒は蒸発させ、そして残渣はメタノールに溶解され、リニアグラジエントを用いて、アセトニトリル／５％〜３０％の０．１％酢酸入りの水で溶出する逆相Ｃ−１８分取ＨＰＬＣにより精製された。凍結乾燥後、３−［（Ｒ）−１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロ−フェニル）−エトキシ］−５−（１−ピペリジン−４−イル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ピリジン−２−イラミン酢酸塩が、白い固体として得られた（４１０ｍｇ、７８％収率、１００％ＨＰＬＣ純度、９６．４％ｅｅ）。１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）δ７．８４（ｓ，１Ｈ），７．６８（ｄ，１Ｈ），７．５０（ｄｄ，１Ｈ），７．４６（ｓ，１Ｈ），７．３７（ｔ，１Ｈ），６．８３（ｄ，１Ｈ），６．０２（ｑ，１Ｈ），５．５７（ｂｓ，２Ｈ），４．０９（ｍ，１Ｈ），２．９８（ｍ，２Ｈ），２．５３（ｍ，２Ｈ），１．８８（ｍ，２Ｈ），１．８２（ｓ，３Ｈ），１．７３（ｄ，３Ｈ），１．７０（ｍ，２Ｈ）。ＭＳｍ／ｅ４５０（Ｍ＋１）＋。
【００７４】
本発明の特定の態様では、前記アミノヘテロアリール化合物は、式Ｉｂの化合物である、本発明の組成物が想定されている：
【化４】
0005677949.tif 000006
【００７５】
もう一つの態様では、本発明は、前記癌がｃ−Ｍｅｔを過剰発現する癌、および／または自己リン酸化されたｃ−Ｍｅｔを表示する癌より選択される、方法に関する。
【００７６】
より詳しくは、前記癌は、前立腺癌、骨肉腫、肺癌、乳癌、子宮内膜癌、膠芽腫（glyoblastoma）または結腸癌から選択される癌である。
【００７７】
好ましい実施形態では、本発明は、上記に説明された組成物であって、前記ｃ−Ｍｅｔに対する抗体アンタゴニストが、２２４Ｇ１１、２２７Ｈ１、２２３Ｃ４および１１Ｅ１の誘導抗体、またはその機能的断片から選択されたものに関する。
【００７８】
より詳しくは、前記ｃ−Ｍｅｔに対する抗体アンタゴニストは、２２４Ｇ１１抗体より誘導されたものである。
【００７９】
さらに、本発明のもう一つの実施形態では、本発明は、本明細書に記載されている組成物であって、前記アミノヘテロアリール化合物が、アミノピリジンまたはアミノピラジン化合物から選択されたものである。
【００８０】
より詳しくは、前記アミノヘテロアリール化合物は、式Ｉｂの化合物である：
【化５】
0005677949.tif 000007
【００８１】
本発明は、本願に記載の組成物の、ほ乳類における癌の治療のための使用にも関する。
【００８２】
より詳しい好ましい実施形態では、前記癌は、ｃ−Ｍｅｔを過剰発現する癌、および／または自己リン酸化されたｃ−Ｍｅｔを表示する癌より選択される癌である。より詳しくは、前記癌は、前立腺癌、骨肉腫、肺癌、乳癌、子宮内膜癌、膠芽腫または結腸癌から選択される癌である。
【００８３】
本発明は、以下の実施例を読むことにより良く理解されるものである。
【図面の簡単な説明】
【００８４】
【図１】図１は、ＮＣＩ−Ｈ４４１  ＮＳＣＬＣにおける２２４Ｇ１のインビボ活性およびＰＦ−２３４１０６６のインビボ活性を示し、また
【図２】図２は、ＮＣＩ−Ｈ４４１  ＮＳＣＬＣにおける２２４Ｇ１とＰＦ−２３４１０６６との組合せのインビボ活性の相互作用を示す。
【実施例】
【００８５】
例１：単独処置での２２４Ｇ１１およびＰＦ−０２３４１０６６のインビボ活性
実験室で入手可能なＮＣＩ−Ｈ４４１インビボモデルが、２２４Ｇ１１抗体およびＰＦ−２３４１０６６化合物の双方に対して感受性があることを検証するため、ＮＣＩ−Ｈ４４１を皮下に移植した免疫不全マウスを用いた。暫時、ＡＴＣＣ由来のＮＣＩ−Ｈ４４１  ＮＳＣＬＣ細胞を、ＲＰＭＩ１６４０培地、１０％ＦＣＳ、１％Ｌ―グルタミンの中で培養した。細胞は、細胞が指数増殖期になるように、移植の２日前に継代（split）した。１０００万個のＮＣＩ−Ｈ４４１細胞を、胸腺欠損ヌードマウスに皮下注射で注射した。移植後５日目に、腫瘍は測定可能となり、動物を同程度の大きさの腫瘍を持つ、６匹のマウスのグループに分類した。抗体治療のため、マウスに２２４Ｇ１１  Ｍａｂを負荷投与量２ｍｇ／マウスで腹腔内に処置し、そのあと週に２回抗体１ｍｇ／マウスで処置した。５０ｍｇ／ｋｇのＰＦ−０２３４１０６６を、１週間毎日経口（強制経口）投与し、そのあと週に５日投与して、５日目の日には２倍量を投与した（then 5 days a week with a double dose the fifth day）。治療は全ての試験の間続けられた。腫瘍体積は、週に２回測定し、式：π／６×長さ×幅×高さにより算定した。
【００８６】
図１に記載した結果は、２２４Ｇ１１およびＰＦ−０２３４１０６６の双方で処置したマウスの腫瘍増殖における有意差を示した。本試験では、２２４Ｇ１１およびＰＦ２３４１０６６は、同程度の抗腫瘍活性を示した。
【００８７】
例２：２２４Ｇ１１およびＰＦ−０２３４１０６６の組合せのインビボ活性
ＡＴＣＣ由来のＮＣＩ−Ｈ４４１細胞を、ＰＲＭＩ１６４０培地、１０％ＦＣＳ、１％Ｌグルタミンの中で、常法で培養した。細胞は、細胞が指数増殖期になるように、移植の２日前に継代した。１０００万個のＮＣＩ−Ｈ４４１細胞を、胸腺欠損マウスに移植した。移植後５日目に、腫瘍は測定可能となり、動物を同程度の大きさの腫瘍を持つ、６匹のマウスのグループに分類した。抗体治療のため、マウスに２２４Ｇ１１  Ｍａｂを負荷投与量２ｍｇ／マウスで腹腔内に処置し、そのあと週に２回抗体１ｍｇ／マウスで処置した。５０ｍｇ／ｋｇのＰＦ−０２３４１０６６を、１週間毎日経口（強制経口）投与し、そのあと週に５日投与して、５日目の日には２倍量を投与した。２２４Ｇ１１およびＰＦ−２３４１０６６の双方を受けるマウスのグループは、それぞれの化合物について上記に記載された方法と同じ方法にしたがって、処置された。腫瘍体積は、週に２回測定し、式：π／６×長さ×幅×高さにより算定し、動物の体重は治療が終わるまで毎日測定した。
【００８８】
統計解析は、Ｍａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ試験を用いて、測定時ごとに行った。本試験では、コントーロール群のマウスは５３日目に倫理的理由のために犠牲とした。１回目の注射後５３日目に、単独方法で処置した群の腫瘍体積の平均は、２２４Ｇ１１、ＰＦ−２３４１０６６および２２４Ｇ１１＋ＰＦ−２３４１０６６に対して、それぞれ６４％、７３％および９３％と減少した。５３日目に、組合せ治療は、単独治療と比べて有意に改善し（ＰＦ−２３４１０６６のみと比較するとｐ≦０．００２および２２４Ｇ１１のみと比較するとｐ≦０．００２）、組合せ治療群においては、腫瘍の無いマウスが６匹中１匹いた。２つの単独方法治療の間には、有意差は観察されなかった。
【００８９】
図２に示したこれらの結果は、組合せ治療をうけた群の腫瘍体積は、単独方法治療された群の腫瘍体積より有意に低いままであり、組合せ治療を受けたマウスの１６％はまだ腫瘍がなかったという治療最終日（６７日目）の後１４日間、確認された。
【図１】
0005677949.tif 000010
【図２】
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【配列表】
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