(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸の結晶性固体形態であって、該結晶性固体形態が、６．９２±０．２０及び１５．３４±０．２０の２θ値における回折ピークを有するＸ線粉末回折パターンであって、１０．２４±０．２０、１１．４８±０．２０、１２．３２±０．２０、１３．４６±０．２０、１４．０４±０．２０、１７．３０±０．２０、１８．０６±０．２０、２０．３０±０．２０、２１．４２±０．２０、２３．４８±０．２０、２５．５４±０．２０、２６．９６±０．２０、２９．３０±０．２０及び３０．７２±０．２０から選択される２θ値における２個以上の回折ピークを有するＸ線粉末回折パターンによって特徴づけられる、結晶性固体形態。
【請求項２】
前記Ｘ線粉末回折パターンが、６．９２±０．２０、１０．２４±０．２０、１３．４６±０．２０、１５．３４±０．２０、１８．０６±０．２０及び２１．４２±０．２０から選択される２θ値における３個以上の回折ピークを含む、請求項１に記載の結晶性固体形態。
【請求項３】
請求項１に記載の結晶性固体形態であって、該結晶性固体形態が、ピーク位置が図１に示すパターンのピーク位置と実質的に一致するＸ線粉末回折パターンによって特徴づけられる、結晶性固体形態。
【請求項４】
請求項１に記載の結晶性固体形態であって、該結晶性固体形態が、温度１６２℃から１７０℃で吸熱流の最大を示す、加熱速度１０℃／分で記録される示差走査熱量測定トレースによって特徴づけられる、結晶性固体形態。
【請求項５】
請求項１に記載の結晶性固体形態であって、該結晶性固体形態が、図２に示すものと実質的に一致する示差走査熱量測定トレースによって特徴づけられる、結晶性固体形態。
【請求項６】
（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸の結晶性固体形態であって、該結晶性固体形態が、９．０５±０．２０及び１６．５２±０．２０の２θ値における回折ピークを有するＸ線粉末回折パターンであって、９．８０±０．２０、１２．４４±０．２０、１２．９２±０．２０、１４．２１±０．２０、１５．６２±０．２０、１７．２７±０．２０、１９．０４±０．２０、１９．８５±０．２０、２１．２９±０．２０、２２．４３±０．２０、２３．４８±０．２０、２３．９９±０．２０及び２６．０９±０．２０から選択される２θ値における２個以上の回折ピークを有するＸ線粉末回折パターンによって特徴づけられる、結晶性固体形態。
【請求項７】
前記Ｘ線粉末回折パターンが、９．０５±０．２０、９．８０±０．２０、１２．４４±０．２０、１２．９２±０．２０、１６．５２±０．２０、２３．９９±０．２０及び２６．０９±０．２０から選択される２θ値における２個以上の回折ピークを含む、請求項６に記載の結晶性固体形態。
【請求項８】
（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸の塩酸塩の結晶性固体形態。
【請求項９】
前記結晶性固体形態が、６．８０±０．２０、９．８０±０．２０、１２．７１±０．２０、１３．３１±０．２０、１５．１４±０．２０、１９．９７±０．２０、２１．４４±０．２０、２２．６４±０．２０、２３．２７±０．２０、２４．４４±０．２０及び２５．３７±０．２０から選択される２θ値における２個以上の回折ピークを有するＸ線粉末回折パターンによって特徴づけられる、請求項８に記載の結晶性固体形態。
【請求項１０】
薬学的に許容される担体と、請求項１から９のいずれか一項に記載の結晶性固体形態とを含む、薬学的組成物。
【請求項１１】
結晶性（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸（化合物１）を調製するプロセスであって、１０％から２０％の水を含む極性希釈剤の存在下で接触水素化分解によって（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸ベンジルエステルを脱保護して、結晶性化合物１を形成することを含む、プロセス。
【請求項１２】
結晶性（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸（化合物１）を調製するプロセスであって、
（ａ）（Ｓ）−２−シクロヘキシルメチル−４−オキソ−酪酸ベンジルエステル（４）を
【化１４】
0005650657.tif 000022
（６Ｓ，７Ｓ）−７−アミノ−８，８−ジエチル−６−メトキシ−５，６，７，８−テトラヒドロナフタレン−２−カルボン酸アミド（３）と反応させて、
【化１５】
0005650657.tif 000023
（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸ベンジルエステル（２）を提供すること、
【化１６】
0005650657.tif 000024
及び
（ｂ）１０％から２０％の水を含む極性希釈剤の存在下で接触水素化分解によって式２の該化合物を脱保護して、結晶性化合物１を提供すること
を含む、プロセス。
【請求項１３】
結晶性（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸を調製するプロセスであって、
（ａ）（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸を、３％から２０％の水を含む極性希釈剤中に分散させて、混合物を形成すること、
（ｂ）該混合物を少なくとも１２時間保持すること、及び
（ｃ）該結晶性（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸を該混合物から単離すること
を含む、プロセス。
【請求項１４】
化学名（Ｓ）−２−シクロヘキシルメチル−４−オキソ−酪酸ベンジルエステルで示される式４の化合物、
【化１７】
0005650657.tif 000025
又はその亜硫酸水素塩付加体である化学名ナトリウム（Ｓ）−３−ベンジルオキシカルボニル−４−シクロヘキシル−１−ヒドロキシ−ブタン−１−スルホナートで示される式５
【化１８】
0005650657.tif 000026
の化合物。
【請求項１５】
化学名（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸ベンジルエステルで示される式２
【化１９】
0005650657.tif 000027
の化合物、又はその塩酸塩。
【請求項１６】
（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸ベンジルエステルの結晶性塩酸塩。
【請求項１７】
（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸を調製するプロセスであって、
（ａ）（Ｓ）−２−シクロヘキシルメチル−４−オキソ−酪酸ベンジルエステル（４）を（６Ｓ，７Ｓ）−７−アミノ−８，８−ジエチル−６−メトキシ−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−カルボン酸アミド（３）と反応させて、（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸ベンジルエステル（２）を提供すること、及び
（ｂ）化合物２を接触水素化分解によって脱保護して、（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸を提供すること
を含む、プロセス。
【請求項１８】
ほ乳動物においてミューオピオイド受容体拮抗物質を用いた治療によって改善される疾患又は病状の治療に使用するための、請求項１から９のいずれか一項に記載の結晶性固体形態を含む組成物。
【請求項１９】
前記疾患又は症状がオピオイド誘導性腸管機能不全又は術後腸閉塞である、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
前記疾患又は症状が胃腸管運動低下障害である、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２１】
ほ乳動物におけるオピオイド剤の使用に付随する副作用の軽減又は予防に使用するための、請求項１から９のいずれか一項に記載の結晶性固体形態を含む組成物。
【請求項２２】
ミューオピオイド受容体拮抗物質を用いた治療によって改善される病状を有するほ乳動物を治療するための組成物であって、薬学的に許容される担体と請求項１から９のいずれか一項に記載の結晶性固体形態とを含む、組成物。
【請求項２３】
前記病状がオピオイド誘導性腸管機能不全又は術後腸閉塞である、請求項２２に記載の組成物。
【請求項２４】
ほ乳動物におけるオピオイド剤の使用に付随する副作用を軽減又は予防するための組成物であって、オピオイド剤と請求項１から９のいずれか一項に記載の結晶性固体形態とを含む、組成物。
【請求項２５】
ほ乳動物において胃腸管運動を促進するための組成物であって、薬学的に許容される担体と請求項１から９のいずれか一項に記載の結晶性固体形態とを含む、組成物。
【請求項２６】
ほ乳動物においてミューオピオイド受容体に拮抗するための組成物であって、薬学的に許容される担体と請求項１から９のいずれか一項に記載の結晶性固体形態とを含む、組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ミューオピオイド受容体拮抗物質として有用である３−カルボキシプロピル−アミノテトラリン化合物の結晶形態を対象とする。本発明は、かかる結晶性化合物を含む薬学的組成物、ミューオピオイド受容体活性によって媒介される病状を治療又は改善するためにかかる化合物を使用する方法、及びかかる化合物の調製に有用なプロセスも対象とする。
【背景技術】
【０００２】
ミューオピオイド受容体拮抗物質は、ミューオピオイド受容体活性によって媒介される病状の治療又は改善に有用であることが期待される。特に、末梢選択的ミューオピオイド受容体拮抗物質は、オピオイド誘導性腸管機能不全（ｏｐｉｏｉｄ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｂｏｗｅｌ  ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ）、術後腸閉塞などの症状の治療に有用であることが期待される。本願譲受人に譲渡された、２００７年１２月１１日に出願された米国仮特許出願第６１／００７，２２０号、及び２００８年４月３０日に出願された同６１／０４９，２１９号、及び２００８年１２月１０日に出願された米国特許出願第１２／３３１，６５９号は、３−カルボキシプロピル−アミノテトラリン化合物を開示している。特に、化合物（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸（化合物１）：
【０００３】
【化１】
0005650657.tif 000002
は、ミューオピオイド受容体拮抗活性を示すとして、これらの出願に具体的に開示されている。
【０００４】
この化合物を治療薬として有効に使用するためには、容易に製造することができ、かつ許容される化学的及び物理的安定性を有する、固体状態の形態を有することが望ましいであろう。例えば、例えば約１６０℃又は約１８０℃を超える温度で、熱的に安定であり、潮解性でなく、それによって材料の加工及び貯蔵を容易にする、物理的形態を有することが極めて望ましいであろう。結晶性固体は、製品の純度及び安定性を高めるために、非晶形態よりも一般に好ましい。
【０００５】
化合物１の結晶形態は、これまで報告されていない。したがって、潮解性でなく、好都合な熱安定性を示す、化合物１の安定結晶形態が必要である。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸（１）の２つの異なる結晶性固体形態、及び化合物１の結晶性塩酸塩を提供する。
【０００７】
驚くべきことに、結晶性化合物１の一形態は、温度約１６２℃未満で有意な熱的事象を示さず、室温で相対湿度約２％から約９０％に曝露すると約２．５％未満の重量変化を示すことが見いだされた。さらに、結晶性化合物１も化合物１の結晶性塩酸塩も、室温で最高約９０％の相対湿度に曝露しても潮解性ではない。
【０００８】
様々な用途のうちで、本発明の結晶性固体形態は、ミューオピオイド受容体活性によって媒介される病状を治療又は改善する薬学的組成物の調製に有用であることが期待される。したがって、その組成物態様の別の一態様においては、本発明は、薬学的に許容される担体と結晶性（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸又は本結晶性塩酸塩とを含む、薬学的組成物を提供する。
【０００９】
本発明は、ミューオピオイド受容体拮抗物質を用いた治療によって改善される疾患又は症状、例えば、胃腸管運動低下障害を治療又は改善する方法であって、治療有効量の結晶性（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸（１）又は化合物１の結晶性塩酸塩をほ乳動物に投与することを含む、方法も提供する。
【００１０】
本発明は、さらに、オピオイド誘導性腸管機能不全又は術後腸閉塞を治療する方法であって、治療有効量の結晶性（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸（１）又は化合物１の結晶性塩酸塩をほ乳動物に投与することを含む、方法も提供する。
【００１１】
別の一方法態様においては、本発明は、形態Ｉの結晶性化合物１を調製するプロセスであって、（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸（１）を約３％から約２０％の水を含む極性希釈剤中に分散させて、結晶化プロセス混合物を形成すること、プロセス混合物を少なくとも約１２時間保持すること、及び生成した結晶をプロセス混合物から単離することを含む、プロセスを提供する。
【００１２】
更に別の一方法態様においては、本発明は、形態Ｉの結晶性化合物１を調製するプロセスであって、保護された中間体（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸ベンジルエステルを約１０％から約２０％の水を含む極性希釈剤の存在下で接触水素化分解によって脱保護して、結晶性化合物１を形成することを含む、プロセスを提供する。
【００１３】
関連した組成物態様においては、本発明は、上記保護された化合物１前駆体の調製に有用である、（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸ベンジルエステル及び亜硫酸水素塩付加体、ナトリウム；（Ｓ）−３−ベンジルオキシカルボニル−４−シクロヘキシル−１−ヒドロキシ−ブタン−１−スルホナートを提供する。
【００１４】
本発明は、療法用の又は医薬品としての本明細書に記載の本発明の結晶性固体形態、並びに医薬品の製造における、特にほ乳動物におけるミューオピオイド受容体活性に関連する障害の治療用薬品の製造のための、本発明の結晶性固体形態の使用も提供する。
【００１５】
本発明の種々の態様を添付図面を参照して説明する。
例えば、本発明は以下を提供する。
（項目１）
（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸の結晶性固体形態、又は（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸の結晶性塩酸塩。
（項目２）
前記結晶性固体形態が結晶性（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸である、項目１に記載の結晶性固体形態。
（項目３）
前記結晶性固体形態が、６．９２±０．２０及び１５．３４±０．２０の２θ値における回折ピークを有するＸ線粉末回折パターンであって、１０．２４±０．２０、１１．４８±０．２０、１２．３２±０．２０、１３．４６±０．２０、１４．０４±０．２０、１７．３０±０．２０、１８．０６±０．２０、２０．３０±０．２０、２１．４２±０．２０、２３．４８±０．２０、２５．５４±０．２０、２６．９６±０．２０、２９．３０±０．２０及び３０．７２±０．２０から選択される２θ値における２個以上の回折ピークを有するＸ線粉末回折パターンによって特徴づけられる、項目２に記載の結晶性固体形態。
（項目４）
前記Ｘ線粉末回折パターンが、６．９２±０．２０、１０．２４±０．２０、１３．４６±０．２０、１５．３４±０．２０、１８．０６±０．２０及び２１．４２±０．２０から選択される２θ値における３個以上の回折ピークを含む、項目３に記載の結晶性固体形態。
（項目５）
前記結晶性固体形態が、ピーク位置が図１に示すパターンのピーク位置と実質的に一致するＸ線粉末回折パターンによって特徴づけられる、項目２に記載の結晶性固体形態。
（項目６）
前記結晶性固体形態が、温度約１６２℃から約１７０℃で吸熱流の最大を示す、加熱速度１０℃／分で記録される示差走査熱量測定トレースによって特徴づけられる、項目２に記載の結晶性固体形態。
（項目７）
前記結晶性固体形態が、図２に示すものと実質的に一致する示差走査熱量測定トレースによって特徴づけられる、項目２に記載の結晶性固体形態。
（項目８）
前記結晶性固体形態が、９．０５±０．２０及び１６．５２±０．２０の２θ値における回折ピークを有するＸ線粉末回折パターンであって、９．８０±０．２０、１２．４４±０．２０、１２．９２±０．２０、１４．２１±０．２０、１５．６２±０．２０、１７．２７±０．２０、１９．０４±０．２０、１９．８５±０．２０、２１．２９±０．２０、２２．４３±０．２０、２３．４８±０．２０、２３．９９±０．２０及び２６．０９±０．２０から選択される２θ値における２個以上の回折ピークを有するＸ線粉末回折パターンによって特徴づけられる、項目２に記載の結晶性固体形態。
（項目９）
前記Ｘ線粉末回折パターンが、９．０５±０．２０、９．８０±０．２０、１２．４４±０．２０、１２．９２±０．２０、１６．５２±０．２０、２３．９９±０．２０及び２６．０９±０．２０から選択される２θ値における２個以上の回折ピークを含む、項目８に記載の結晶性固体形態。
（項目１０）
前記結晶性固体形態が、（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸の結晶性塩酸塩である、項目１に記載の結晶性固体形態。
（項目１１）
前記結晶性固体形態が、６．８０±０．２０、９．８０±０．２０、１２．７１±０．２０、１３．３１±０．２０、１５．１４±０．２０、１９．９７±０．２０、２１．４４±０．２０、２２．６４±０．２０、２３．２７±０．２０、２４．４４±０．２０及び２５．３７±０．２０から選択される２θ値における２個以上の回折ピークを有するＸ線粉末回折パターンによって特徴づけられる、項目１０に記載の結晶性固体形態。
（項目１２）
薬学的に許容される担体と、項目１から１１のいずれか一項に記載の結晶性固体形態とを含む、薬学的組成物。
（項目１３）
結晶性（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸（化合物１）を調製するプロセスであって、約１０％から約２０％の水を含む極性希釈剤の存在下で接触水素化分解によって（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸ベンジルエステルを脱保護して、結晶性化合物１を形成することを含む、プロセス。
（項目１４）
結晶性（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸（化合物１）を調製するプロセスであって、
（ａ）（Ｓ）−２−シクロヘキシルメチル−４−オキソ−酪酸ベンジルエステル（４）を
【化１４】
0005650657.tif 000003
（６Ｓ，７Ｓ）−７−アミノ−８，８−ジエチル−６−メトキシ−５，６，７，８−テトラヒドロナフタレン−２−カルボン酸アミド（３）と反応させて、
【化１５】
0005650657.tif 000004
（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸ベンジルエステル（２）を提供すること、
【化１６】
0005650657.tif 000005
及び
（ｂ）約１０％から約２０％の水を含む極性希釈剤の存在下で接触水素化分解によって式２の該化合物を脱保護して、結晶性化合物１を提供すること
を含む、プロセス。
（項目１５）
結晶性（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸を調製するプロセスであって、
（ａ）（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸を、約３％から約２０％の水を含む極性希釈剤中に分散させて、混合物を形成すること、
（ｂ）該混合物を少なくとも約１２時間保持すること、及び
（ｃ）該結晶性（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸を該混合物から単離すること
を含む、プロセス。
（項目１６）
化学名（Ｓ）−２−シクロヘキシルメチル−４−オキソ−酪酸ベンジルエステルで示される式４の化合物、又はその亜硫酸水素塩付加体である
【化１７】
0005650657.tif 000006
化学名ナトリウム（Ｓ）−３−ベンジルオキシカルボニル−４−シクロヘキシル−１−ヒドロキシ−ブタン−１−スルホナートで示される式５
【化１８】
0005650657.tif 000007
の化合物。
（項目１７）
化学名（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸ベンジルエステルで示される式２
【化１９】
0005650657.tif 000008
の化合物、又はその塩酸塩。
（項目１８）
（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸ベンジルエステルの結晶性塩酸塩。
（項目１９）
（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸を調製するプロセスであって、
（ａ）（Ｓ）−２−シクロヘキシルメチル−４−オキソ−酪酸ベンジルエステル（４）を（６Ｓ，７Ｓ）−７−アミノ−８，８−ジエチル−６−メトキシ−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−カルボン酸アミド（３）と反応させて、（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸ベンジルエステル（２）を提供すること、及び
（ｂ）化合物２を接触水素化分解によって脱保護して、（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸を提供すること
を含む、プロセス。
（項目２０）
ほ乳動物においてミューオピオイド受容体拮抗物質を用いた治療によって改善される疾患又は病状の治療に使用される、項目１から１１のいずれか一項に記載の結晶性固体形態。
（項目２１）
前記疾患又は症状がオピオイド誘導性腸管機能不全又は術後腸閉塞である、項目２０に記載の結晶性固体形態。
（項目２２）
前記疾患又は症状が胃腸管運動低下障害である、項目２０に記載の結晶性固体形態。
（項目２３）
ほ乳動物におけるオピオイド剤の使用に付随する副作用の軽減又は予防に使用される、項目１から１１のいずれか一項に記載の結晶性固体形態。
（項目２４）
ミューオピオイド受容体拮抗物質を用いた治療によって改善される病状を有するほ乳動物を治療する方法であって、薬学的に許容される担体と項目１から１１のいずれか一項に記載の結晶性固体形態とを含む薬学的組成物を該ほ乳動物に投与することを含む、方法。
（項目２５）
前記病状がオピオイド誘導性腸管機能不全又は術後腸閉塞である、項目２４に記載の方法。
（項目２６）
ほ乳動物におけるオピオイド剤の使用に付随する副作用を軽減又は予防する方法であって、オピオイド剤と項目１から１１のいずれか一項に記載の結晶性固体形態とを該ほ乳動物に投与することを含む、方法。
（項目２７）
ほ乳動物において胃腸管運動を促進する方法であって、薬学的に許容される担体と項目１から１１のいずれか一項に記載の結晶性固体形態とを含む薬学的組成物を該ほ乳動物に投与することを含む、方法。
（項目２８）
ほ乳動物においてミューオピオイド受容体に拮抗する方法であって、薬学的に許容される担体と項目１から１１のいずれか一項に記載の結晶性固体形態とを含む薬学的組成物を該ほ乳動物に投与することを含む、方法。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】図１は、本発明の結晶形態Ｉ（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸のＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンである。
【図２】図２は、本発明の結晶形態Ｉ（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）トレース（右側縦軸）及び熱重量分析（ＴＧＡ）トレース（左側縦軸）である。
【図３】図３は、本発明の結晶形態Ｉ（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸の動的水分収着（ＤＭＳ）トレースである。
【図４】図４は、本発明の結晶形態ＩＩ（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸のＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンである。
【図５】図５は、本発明の結晶形態ＩＩ（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）トレースである。
【図６】図６は、本発明の（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸の結晶性塩酸塩のＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンである。
【図７】図７は、本発明の（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸の結晶性塩酸塩の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）トレース（右側縦軸）及び熱重量分析（ＴＧＡ）トレース（左側縦軸）である。
【図８】図８は、本発明の（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸ベンジルエステルの結晶性塩酸塩のＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンである。
【図９】図９は、本発明の（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸ベンジルエステルの結晶性塩酸塩の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）トレースである。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
本発明は、（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸（１）の結晶性固体形態を提供する。
【００１８】
定義
本発明の化合物、組成物及び方法を記述するときに、以下の用語は、別段の記載がない限り、以下の意味を有する。
【００１９】
「治療有効量」という用語は、治療を必要とする患者に投与するときに、治療に十分な量を意味する。
【００２０】
本明細書では「治療」という用語は、以下の行為の１つ以上を含む、ほ乳動物（特に、ヒト）などの患者における疾患、障害又は病状の治療を意味する。
【００２１】
（ａ）疾患、障害又は病状の発生を予防すること、すなわち、患者の予防処置、
（ｂ）疾患、障害又は病状を改善すること、すなわち、別の治療薬の作用を中和することを含めて、患者における疾患、障害又は病状を解消又は退行させること、
（ｃ）疾患、障害又は病状を抑制すること、すなわち、患者における疾患、障害又は病状の発生を遅延又は抑止すること、又は
（ｄ）患者における疾患、障害又は病状の症候を軽減すること。
【００２２】
本明細書及び添付の特許請求の範囲では、単数形「ａ」、「ａｎ」、「ｏｎｅ」及び「ｔｈｅ」は、特に明示しない限り、複数形も包含し得ることに留意しなければならない。
【００２３】
命名規則
化合物１は、ＡｕｔｏＮｏｍソフトウェア（ＭＤＬ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，ＧｍｂＨ，Ｆｒａｎｋｆｕｒｔ，Ｇｅｒｍａｎｙ）において実行されるＩＵＰＡＣ規則に従って、（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸と命名される。二環式１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ基は、一般名「アミノテトラリン」でも知られる。
【００２４】
本発明の結晶形態
一態様においては、本発明は、２つの異なる形態の結晶性（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸（１）を提供する。
【００２５】
一態様においては、形態Ｉの結晶性化合物１は、２θ値６．９２±０．２０及び１５．３４±０．２０における回折ピーク、並びに１０．２４±０．２０、１１．４８±０．２０、１２．３２±０．２０、１３．４６±０．２０、１４．０４±０．２０、１７．３０±０．２０、１８．０６±０．２０、２０．３０±０．２０、２１．４２±０．２０、２３．４８±０．２０、２５．５４±０．２０、２６．９６±０．２０、２９．３０±０．２０及び３０．７２±０．２０から選択される２θ値における、３個以上及び４個以上の回折ピークを含めて、２個以上の回折ピークを有するＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンによって特徴づけられる。特に、この態様においては、形態Ｉは、６．９２±０．２０、１０．２４±０．２０、１３．４６±０．２０、１５．３４±０．２０、１８．０６±０．２０及び２１．４２±０．２０から選択される２θ値における、４個以上の回折ピークを含めて、３個以上の回折ピークを有するＸ線粉末回折パターンによって特徴づけられる。結晶形態Ｉは、さらに、６．９２±０．２０、１０．２４±０．２０、１３．４６±０．２０、１５．３４±０．２０、１８．０６±０．２０及び２１．４２±０．２０の２θ値における回折ピークを有するＸ線粉末回折パターンによって特徴づけられる。
【００２６】
粉末Ｘ線回折の分野では周知のとおり、ＸＲＰＤスペクトルのピーク位置は、相対ピーク高さよりも試料調製及び機器形状の詳細などの実験の詳細に敏感ではない。したがって、一態様においては、結晶性化合物１の形態Ｉは、ピーク位置が図１に示すものに実質的に一致するＸ線粉末回折パターンによって特徴づけられる。
【００２７】
結晶形態Ｉの構造は、さらに、以下の格子パラメータを与える単結晶Ｘ線回折分析によって特徴づけられる。すなわち、単位格子は、寸法ａ＝７．５４６A、ｂ＝１７．００３A、ｃ＝２０．６２８A、格子体積（Ｖ）２６４６．７A３の斜方晶であり、計算密度は１．１５１ｇ／ｃｍ３であり、空間群はＰ２１２１２１である。生成した分子構造は、非対称単位格子が水も他の溶媒分子も含まず、上記立体化学と一致することを裏付ける。カルボキシ基のＣ−Ｏ結合距離、並びにアミン窒素周囲の結合長さ及び結合角は、双性イオン分子である結晶形態Ｉの化合物１と一致し、以下に模式的に示されるように、プロトンはカルボン酸からアミン窒素に転移した。
【００２８】
【化２】
0005650657.tif 000009
誘導される原子位置から予測されるＸ線粉末回折ピークは、観察されたＸＲＰＤパターンと良く一致する。
【００２９】
別の一態様においては、結晶形態Ｉは、高温に曝露されたときのその挙動によって特徴づけられる。図２に示すように、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）トレースは、吸熱流のピークを示し、約１６４℃から約１６８℃を含めて約１６２℃から約１７０℃の範囲の溶融転移と認められる。熱重量分析（ＴＧＡ）トレースは、融点未満の温度でさほど重量減少せず、ステッププロファイルは、融点付近の温度における化合物１  １モル当たり１モルの水の損失と一致する。水の放出は、化学分解反応に起因し得る。
【００３０】
結晶形態Ｉは、可逆的な収着／脱着プロファイルを有し、やや吸湿性の傾向があることが示された。形態Ｉは、図３に示すように、２％から９０％相対湿度の湿度範囲で室温で約２．５％未満の重量増加を示した。特に、形態Ｉは、経口製剤が典型的に製造される湿度範囲である４０％から７５％相対湿度の範囲で約１％未満の重量増加を示した。
【００３１】
別の一態様においては、本発明は、結晶形態ＩＩの化合物１を提供する。結晶形態ＩＩは、図４のＸＲＰＤパターン及び図５のＤＳＣプロファイルによって確認される。一態様においては、結晶形態ＩＩは、２θ値９．０５±０．２０及び１６．５２±０．２０における回折ピークを有し、９．８０±０．２０、１２．４４±０．２０、１２．９２±０．２０、１４．２１±０．２０、１５．６２±０．２０、１７．２７±０．２０、１９．０４±０．２０、１９．８５±０．２０、２１．２９±０．２０、２２．４３±０．２０、２３．４８±０．２０、２３．９９±０．２０及び２６．０９±０．２０から選択される２θ値における３個以上及び４個以上の回折ピークを含めて２個以上の回折ピークを有する、Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンによって特徴づけられる。特に、この態様においては、形態ＩＩは、９．０５±０．２０、９．８０±０．２０、１２．４４±０．２０、１２．９２±０．２０、１６．５２±０．２０、２３．９９±０．２０及び２６．０９±０．２０から選択される２θ値における、３個以上及び４個以上の回折ピークを含めて、２個以上の回折ピークを有するＸ線粉末回折パターンによって特徴づけられる。形態ＩＩは、さらに、９．０５±０．２０、９．８０±０．２０、１２．４４±０．２０、１２．９２±０．２０、１６．５２±０．２０、２３．９９±０．２０及び２６．０９±０．２０における回折ピークを有するＸ線粉末回折パターンによって特徴づけられる。更に別の一態様においては、結晶形態ＩＩは、ピーク位置が図４に示すものに実質的に一致するＸ線粉末回折パターンによって特徴づけられる。
【００３２】
図５に示す熱的挙動は、温度約１１４℃から１１５℃において変化する準安定形態としての結晶形態ＩＩの特性と一致し、温度約１５７℃における化学分解に付随する融点を有する。
【００３３】
更に別の一態様においては、本発明は、化合物１の結晶性塩酸塩を提供する。
【００３４】
一態様においては、本発明の結晶性塩酸塩は、６．８０±０．２０、９．８０±０．２０、１２．７１±０．２０、１３．３１±０．２０、１５．１４±０．２０、１９．９７±０．２０、２１．４４±０．２０、２２．６４±０．２０、２３．２７±０．２０、２４．４４±０．２０及び２５．３７±０．２０から選択される２θ値におれる３個以上及び４個以上の回折ピークを含めて２個以上の回折ピークを有するＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンによって特徴づけられる。別の一態様においては、化合物１の結晶性塩酸塩は、ピーク位置が図６に示すものに実質的に一致するＸ線粉末回折パターンによって特徴づけられる。
【００３５】
結晶性塩酸塩は、図７に示すように、その示差走査熱量測定（ＤＳＣ）トレースによっても特徴づけられ、約１８５℃から約１９３℃の範囲の吸熱流において溶融転移と認められる第１のピーク、及び分解現象に一致すると理解される約２２０℃から約１４０℃の範囲の第２のピークを示す。実施例８、９及び１０で調製される結晶性塩酸塩の試料は、約２％相対湿度から約９０％相対湿度の範囲の相対湿度に室温で曝露されたときにその外観及び流動性を保持した。
【００３６】
本発明の結晶形態のこれらの諸性質を以下の実施例で更に説明する。
【００３７】
合成手順及び中間体
化合物１、（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸は、下記実施例に記載の手順を使用して、又は本願の背景技術の項に示された本願譲受人に譲渡された米国特許出願に記載の手順を使用して、入手が容易な出発材料から固体非晶形態で調製することができる。
【００３８】
一調製方法においては、本発明の結晶形態Ｉは、アモルファス化合物１を極性希釈剤中に溶解させて、結晶化プロセス混合物を形成すること、及びプロセス混合物を約１２時間から約４日間保持することによって、調製される。典型的には、結晶化プロセスは、ほぼ周囲温度で実施される。適切な希釈剤としては、メタノール、イソプロパノール、１−プロパノール、アセトニトリル、これらのうちの１種類以上と水の混合物などが挙げられる。例示的希釈剤系としては、アセトニトリル、メタノール及び水、例えば、約６９％のアセトニトリル、約２１％のメタノール及び約１０％の水の混合物、１−プロパノール、アセトニトリル及び水、特に約９５％から約９７％の（２：１  １−プロパノール：アセトニトリル）と約５％から約３％の水の混合物、メタノールと水、例えば、約９０％のメタノールと約１０％の水の混合物、並びにアセトニトリルと水、例えば、約８４％のアセトニトリルと約１６％の水の混合物が挙げられる。化合物１は、典型的には、プロセス混合物中に約１５０ｍｇ／ｍＬから約７００ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。
【００３９】
水が希釈剤系中に存在しないときには、プロセス混合物をある期間上記範囲の上限で保持することが有用である（結晶化を４日間進行させた下記実施例４を参照されたい。）。したがって、結晶形態Ｉの調製に有用なプロセスは、極性希釈剤と約３％から約２０％の水を含む希釈剤に化合物１を溶解させて、プロセス混合物を形成すること、プロセス混合物を少なくとも約１２時間保持すること、及び生成した結晶を回収することを含む。
【００４０】
反応終了後、結晶形態Ｉは、ろ過、濃度、遠心分離などの任意の従来の手段によって、プロセス混合物から単離される。
【００４１】
別の一調製方法においては、結晶形態Ｉは、有利には、以下のプロセスに従って、化合物１の保護前駆体２から直接調製される。
【００４２】
【化３】
0005650657.tif 000010
スキームＡに要約したように、ベンジルで保護されたアルデヒド４をアミノテトラリン中間体３と反応させて、ベンジルで保護された前駆体２を提供する。これを脱保護して、結晶形態Ｉの化合物１を提供する。アルデヒド試薬４は、好都合には、対応する亜硫酸水素塩付加体５からｉｎ  ｓｉｔｕで調製される。
【００４３】
典型的なプロセスにおいては、不活性希釈剤中の約１から約１．５当量のアルデヒド４の溶液は、亜硫酸水素塩付加体５を同数の当量の水酸化ナトリウムで処理することによって生成される。次いで、アルデヒド４をアミノテトラリン３及び約１から約３当量のトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムなどの還元剤と接触させる。アミノテトラリン３は、酸性塩、典型的には塩酸塩として提供し得る。反応は、典型的には、温度約０℃から約３０℃で約２から約２４時間、又は反応が実質的に完結するまで実施される。保護された中間体２は、好都合には、結晶性塩酸塩として固体形態で単離される。
【００４４】
最後に、中間体２は、典型的には遷移金属触媒、例えばパラジウム又は白金を使用して、接触水素化分解によって脱ベンジル化されて、結晶形態Ｉを提供する。中間体２が塩型で提供されるときには、まず、塩基で処理することによって中間体の中性型がｉｎ  ｓｉｔｕで生成される。反応は、水素化分解に適合し、かつ結晶化の助けになるように選択された希釈剤中で実施される。水とメタノール、イソプロパノール、１−プロパノール、アセトニトリル及び／又はジメチルホルムアミドなどの別の極性希釈剤とを含む混合物は、この反応に適している。約１０％から約２０％の水を含む混合物、例えば、アセトニトリルと約１０％から約２０％の水の混合物は、脱ベンジル化反応に有利に使用される。反応生成物の結晶形態Ｉは、ろ過などの従来手段によって単離することができる。
【００４５】
したがって、一方法態様においては、他のプロセスの中でも、本発明は、化合物１の結晶形態Ｉを調製するプロセスであって、ベンジルで保護された中間体２を約１０％から約２０％の水を含む極性希釈剤の存在下で接触水素化分解によって脱保護して、結晶形態Ｉを形成するプロセスを提供する。
【００４６】
追加の一方法態様においては、本発明は、化合物１の結晶形態Ｉを調製するプロセスであって、（ａ）保護されたアルデヒド４をアミノテトラリン３と反応させて、保護された中間体２を提供すること、及び（ｂ）ベンジルで保護された中間体２を約１０％から約２０％の水を含む極性希釈剤の存在下で接触水素化分解によって脱保護して、結晶形態Ｉを形成することを含む、プロセスを提供する。
【００４７】
酢酸エチル、テトラヒドロフラン、メチル−テトラヒドロフランなど、水素化分解に適合し、結晶化を促進しない希釈剤中での中間体２の脱保護によって、必ずしも結晶形態ではないが、化合物１が調製される。更に別の一方法態様においては、本発明は、化合物１を調製するプロセスであって、（ａ）保護されたアルデヒド４をアミノテトラリン３と反応させて、保護された中間体２を提供すること、及び（ｂ）ベンジルで保護された中間体２を接触水素化分解によって脱保護して、化合物１を提供することを含む、プロセスを提供する。
【００４８】
さらに、一組成物態様においては、本発明は、化合物１の調製に有用である、ベンジルで保護されたアルデヒド４、（Ｓ）−２−シクロヘキシルメチル−４−オキソ−酪酸ベンジルエステル、及び亜硫酸水素塩付加体５、ナトリウム（Ｓ）−３−ベンジルオキシカルボニル−４−シクロヘキシル−１−ヒドロキシ−ブタン−１−スルホナートを提供する。調製８に記載のように、ベンジルで保護された亜硫酸水素塩付加体５は、その合成が調製７に記載された対応する亜硫酸水素メチルエステル、ナトリウム（Ｓ）−４−シクロヘキシル−１−ヒドロキシ−３−メトキシカルボニル−ブタン−１−スルホナートから調製することができる。あるいは、亜硫酸水素塩付加体５は、調製７のプロセスに類似したプロセスによって、類似のベンジルで保護されたカルボン酸（５ａ）及びアルコール（５ｂ）中間体を介して、調製することができる。
【００４９】
【化４】
0005650657.tif 000011
更に別の一組成物態様においては、本発明は、ベンジルで保護された前駆体２、（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−ナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸ベンジルエステル及びその塩酸塩を提供する。化合物２の結晶性塩酸塩は、図８のＸＲＰＤパターン、及び温度約２０５℃から約２１０℃において融点と一致した吸熱流におけるピークを示す図９のＤＳＣプロファイルによって特徴づけられる。結晶形態の薬学的中間体は、結晶化から生ずる典型的な精製と、貯蔵に対して非結晶性材料よりも大きな安定性が期待されることの両方で望ましい。
【００５０】
下記実施例に記載のように、結晶形態ＩＩは、アモルファス化合物１をアルコール、例えば、イソプロパノール又はイソプロパノールとアセトニトリルを濃度約１５０ｍｇ／ｍＬから約７００ｍｇ／ｍＬで含む極性希釈剤中に溶解させて、結晶化プロセス混合物を形成すること、及びプロセス混合物を約１日未満保持することによって調製される。場合によっては、抗溶媒、例えば１：１アセトニトリル：酢酸エチルを、保持期間前にプロセス混合物に添加して、溶液からの結晶化を促進することができる。
【００５１】
本発明の結晶性塩酸塩は、有利には、化合物１のアモルファス塩酸塩から調製される。化合物１のアモルファス塩は、場合によっては加熱、続いて徐冷して、酢酸エチル、ジエチレングリコールジメチルエーテルなどの中極性溶媒中に濃度約２０ｍｇ／ｍＬから約３５０ｍｇ／ｍＬで分散され、次いで約３日間から約１２日間保持される。生成する結晶は、従来のように単離することができる。
【００５２】
薬学的組成物
本発明の結晶性固体形態は、典型的には、薬学的組成物又は製剤の形で患者に投与される。かかる薬学的組成物は、経口、直腸、膣、経鼻、吸入、（経皮を含めた）局所及び非経口投与方法を含めて、ただしそれだけに限定されない任意の許容される投与経路によって患者に投与することができる。
【００５３】
したがって、その組成物態様の一つにおいては、本発明は、薬学的に許容される担体又は賦形剤と治療有効量の化合物１の結晶性固体形態又は化合物１の結晶性塩酸塩とを含む、薬学的組成物を対象とする。場合によっては、かかる薬学的組成物は、必要に応じて、別の治療薬及び／又は製剤を含むことができる。組成物を考察すると、「本発明の固体形態」という用語は、化合物１の結晶形態Ｉ及びＩＩ、並びに化合物１の結晶性塩酸塩を含むと理解される。
【００５４】
本発明の薬学的組成物は、典型的には、治療有効量の活性薬剤を含む。しかし、当業者は、薬学的組成物が、治療有効量を超える、すなわち、バルク組成物、又は治療有効量未満、すなわち、治療有効量を得るために複数回投与用に設計された個々の単位用量を含むことができることを認識するであろう。
【００５５】
典型的には、かかる薬学的組成物は、約０．１から約９５重量％の活性薬剤、好ましくは約５から約７０重量％、より好ましくは約１０から約６０重量％の活性薬剤を含むであろう。
【００５６】
任意の従来の担体又は賦形剤を本発明の薬学的組成物に使用することができる。特定の担体若しくは賦形剤又は担体若しくは賦形剤の組合せの選択は、特定の患者の治療に使用される投与方法、又は医学的症状若しくは疾患状態のタイプに依存するであろう。なお、特定の投与方法に適切な薬学的組成物の調製は、薬学分野の当業者の範囲内に十分ある。さらに、本発明の薬学的組成物に使用される担体又は賦形剤は、商業的に入手可能である。更なる説明として、従来の製剤技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２０ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｈｉｔｅ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，Ｍａｒｙｌａｎｄ（２０００）、及びＨ．Ｃ．Ａｎｓｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，７ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｈｉｔｅ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，Ｍａｒｙｌａｎｄ（１９９９）に記載されている。
【００５７】
薬学的に許容される担体として役立ち得る材料の代表例としては、以下が挙げられるが、それだけに限定されない：ラクトース、グルコース、スクロースなどの糖；コーンスターチ、ジャガイモデンプンなどのデンプン；微結晶セルロースなどのセルロース、及びカルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、酢酸セルロースなどのその誘導体；トラガカント粉末；麦芽；ゼラチン；タルク；カカオ脂、坐剤ワックスなどの賦形剤；落花生油、綿実油、サフラワー油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油、ダイズ油などの油；プロピレングリコールなどのグリコール；グリセリン、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコールなどのポリオール；オレイン酸エチル、ラウリン酸エチルなどのエステル；寒天；水酸化マグネシウム、水酸化アルミニウムなどの緩衝剤；アルギン酸；発熱物質を含まない水；等張食塩水；リンゲル液；エチルアルコール；リン酸緩衝液；並びに薬学的組成物に使用される他の無毒適合性物質。
【００５８】
薬学的組成物は、典型的には、活性薬剤を薬学的に許容される担体及び１種類以上の任意に選択される成分と徹底的に十分に混合又はブレンドすることによって調製される。次いで、生成した均一ブレンド混合物は、従来の手順及び装置を使用して、錠剤、カプセル剤、丸剤などに成形又は充填することができる。
【００５９】
本発明の薬学的組成物は、好ましくは、単位剤形としてパッケージされる。「単位剤形」という用語は、患者への投薬に適切な物理的に分離した単位を指す。すなわち、各単位は、所望の治療効果を単独で、又は１種類以上の追加の単位と組み合わせて、生ずるように計算された所定量の活性薬剤を含む。例えば、かかる単位剤形は、カプセル剤、錠剤、丸剤など、又は非経口投与に適切な単位パッケージとすることができる。
【００６０】
一実施形態においては、本発明の薬学的組成物は、経口投与に適切である。経口投与に適切な薬学的組成物は、所定量の本発明の化合物を活性成分として各々含む、カプセル剤、錠剤、丸剤、ロゼンジ剤、カシェ剤、糖衣錠剤、散剤、顆粒剤の形、又は水性若しくは非水性液体中の溶液若しくは懸濁液として、又は水中油型若しくは油中水型乳濁液として、又はエリキシル剤若しくはシロップ剤としてなどとすることができる。
【００６１】
固体剤形（すなわち、カプセル剤、錠剤、丸剤などとして）の経口投与が意図されるときには、本発明の薬学的組成物は、典型的には、活性薬剤と、クエン酸ナトリウム、リン酸二カルシウムなどの１種類以上の薬学的に許容される担体とを含む。場合によっては又はあるいは、かかる固体剤形は、デンプン、微結晶セルロース、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール及び／又はケイ酸などの充填剤又は増量剤；カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロース及び／又はアラビアゴムなどの結合剤；グリセロールなどの湿潤剤；寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモ又はタピオカデンプン、アルギン酸、ある種のシリカート、及び／又は炭酸ナトリウムなどの崩壊剤；パラフィンなどの溶解遅延剤；第四級アンモニウム化合物などの吸収促進物質；セチルアルコール及び／又はモノステアリン酸グリセロールなどの湿潤剤；カオリン及び／又はベントナイトクレイなどの吸収剤；タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、及び／又はその混合物などの潤滑剤；着色剤；並びに緩衝剤も含むことができる。
【００６２】
離型剤、湿潤剤、コーティング剤、甘味剤、香味剤、芳香剤、防腐剤及び抗酸化剤も本発明の薬学的組成物中に存在することができる。薬学的に許容される抗酸化剤の例としては、アスコルビン酸、システイン塩酸塩、硫酸水素ナトリウム、メタ重硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムなどの水溶性抗酸化剤；パルミチン酸アスコルビル、ブチルヒドロキシアニソール、ブチルヒドロキシトルエン、レシチン、没食子酸プロピル、アルファ−トコフェロールなどの油溶性抗酸化剤；及びクエン酸、エチレンジアミン四酢酸、ソルビトール、酒石酸、リン酸などの金属キレート化剤などが挙げられる。錠剤、カプセル剤、丸剤などのコーティング剤としては、酢酸フタル酸セルロース、ポリビニルアセタートフタラート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタラート、メタクリル酸−メタクリル酸エステルコポリマー、酢酸トリメリット酸セルロース、カルボキシメチルエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセタートスクシナートなどの腸溶コーティングに使用されるものなどが挙げられる。
【００６３】
本発明の薬学的組成物は、例として、異なる割合のヒドロキシプロピルメチルセルロース、又は別のポリマーマトリックス、リポソーム及び／又はミクロスフェアを使用して、活性薬剤を徐放又は制御放出するように処方することもできる。さらに、本発明の薬学的組成物は、場合によっては不透明化剤を含んでもよく、胃腸管の特定の部分において、活性成分のみを、又は活性成分を優先的に、場合によっては遅延方式で、放出するように処方することもできる。使用可能な埋め込み組成物の例としては、重合体物質及びワックスが挙げられる。活性薬剤は、適宜、上記賦形剤の１種類以上を用いてマイクロカプセル化形態とすることもできる。
【００６４】
適切な経口投与用液体剤形としては、実例として、薬学的に許容される乳濁液剤、マイクロエマルジョン剤、溶液剤、懸濁液剤、シロップ剤及びエリキシル剤が挙げられる。液体剤形は、典型的には、活性薬剤、及び例えば水などの不活性希釈剤、又はエチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、油（特に、綿実油、落花生油、トウモロコシ油、胚種油、オリーブ油、ひまし油及びゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコール、ソルビタン脂肪酸エステルなどの他の溶媒、可溶化剤及び乳化剤、並びにその混合物を含む。懸濁液は、活性成分に加えて、例えば、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトール及びソルビタンエステル、微結晶セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、寒天、トラガカントなどの懸濁剤、及びその混合物を含むことができる。
【００６５】
本発明の固体形態は、（例えば、静脈内、皮下、筋肉内又は腹腔内注射によって）非経口的に投与することもできる。非経口投与の場合、活性薬剤は、典型的には、例として、無菌水溶液、食塩水、プロピレングリコールなどの低分子量アルコール、ポリエチレングリコール、植物油、ゼラチン、オレイン酸エチルなどの脂肪酸エステルなどを含めて、適切な非経口投与用ビヒクルと混合される。非経口製剤は、１種類以上の抗酸化剤、可溶化剤、安定剤、防腐剤、湿潤剤、乳化剤又は分散剤を含むこともできる。これらの製剤は、無菌注射用媒体、殺菌剤、ろ過、照射又は熱の使用によって無菌にすることができる。
【００６６】
あるいは、本発明の薬学的組成物は、吸入投与用に処方される。適切な吸入投与用薬学的組成物は、典型的には、エアロゾル又は粉末の形である。かかる組成物は、一般に、定量吸入器、ドライパウダー吸入器、ネブライザー、類似の送達装置などの周知の送達装置を使用して投与される。
【００６７】
加圧容器を使用した吸入によって投与するときには、本発明の薬学的組成物は、典型的には、活性成分、及びジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、他の適切なガスなどの適切な噴霧剤を含む。さらに、薬学的組成物は、本発明の化合物と粉末吸入器における使用に適した粉末とを含む、（例えば、ゼラチンでできた）カプセル又はカートリッジの形とすることができる。適切な粉末基剤としては、例として、ラクトース又はデンプンが挙げられる。
【００６８】
本発明の固体形態は、公知の経皮送達系及び賦形剤を使用して経皮投与することもできる。例えば、活性薬剤は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールモノラウラート、アザシクロアルカン−２−オンなどの透過促進剤と混合することができ、貼付剤又は類似の送達系に混ぜ込むことができる。ゲル化剤、乳化剤及び緩衝剤を含めた追加の賦形剤を必要に応じてかかる経皮組成物に使用することができる。
【００６９】
必要に応じて、本発明の固体形態は、１種類以上の別の治療薬と組み合わせて投与することができる。この実施形態においては、本発明の固体形態は、別の治療薬と物理的に混合されて、両方の薬剤を含む組成物を形成する。又は各薬剤は、別々の異なる組成物中に存在し、患者に同時に又は逐次的に投与される。
【００７０】
例えば、本発明の固体形態は、従来の手順及び装置を使用して、第２の治療薬と組み合わせて、化合物１と第２の治療薬とを含む組成物を形成することができる。さらに、治療薬は、薬学的に許容される担体と組み合わせて、本発明の塩、第２の治療薬及び薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物を形成することができる。この実施形態においては、組成物の成分は、典型的には、混合又はブレンドされて、物理的混合物を生成する。次いで、物理的混合物は、本明細書に記載の経路のいずれかを使用して治療有効量で投与される。あるいは、治療薬は、患者に投与するまで分離したままとすることができる。この実施形態においては、薬剤は、投与前に物理的に混合されず、同時に、又は別々の時間に、別々の組成物として投与される。かかる組成物は、別々にパッケージすることができ、又はキットとして一緒にパッケージすることができる。キット中の２種類の治療薬は、同じ投与経路によって、又は異なる投与経路によって、投与することができる。
【００７１】
本活性薬剤に適合する任意の治療薬を第２の治療薬として使用することができる。特に、ミューオピオイド受容体拮抗作用以外の機序によって作用する運動促進薬を本化合物と併用することができる。例えば、テガセロド、レンザプリド、モサプリド、プルカロプリド、１−イソプロピル−１Ｈ−インダゾール−３−カルボン酸｛（１Ｓ，３Ｒ，５Ｒ）−８−［２−（４−アセチルピペラジン−１−イル）エチル］−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イル｝アミド、１−イソプロピル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸｛（１Ｓ，３Ｒ，５Ｒ）−８−［（Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−（メタンスルホニル−メチル−アミノ）プロピル］−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イル｝アミド、４−（４−｛［（２−イソプロピル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−４−カルボニル）アミノ］メチル｝−ピペリジン−１−イルメチル）ピペリジン−１−カルボン酸メチルエステルなどの５−ＨＴ４受容体作動物質を第２の治療薬として使用することができる。
【００７２】
追加の有用な運動促進薬としては、５−ＨＴ３受容体作動物質（例えば、プモセトラグ）、５−ＨＴ１Ａ受容体拮抗物質（例えば、ＡＧＩ００１）、アルファ−２−デルタリガンド（例えば、ＰＤ−２１７０１４）、塩素イオンチャネル開口薬（例えば、ルビプロストン）、ドパミン拮抗物質（例えば、イトプリド、メトクロプラミド、ドンペリドン）、ＧＡＢＡ−Ｂ作動物質（例えば、バクロフェン、ＡＧＩ００６）、カッパオピオイド作動物質（例えば、アシマドリン）、ムスカリン性Ｍ１及びＭ２拮抗物質（例えば、アコチアミド）、モチリン作動物質（例えば、ミテムシナール）、グアニル酸シクラーゼ活性化物質（例えば、ＭＤ−１１００）及びグレリン作動物質（例えば、Ｔｚｐ１０１、ＲＣ１１３９）が挙げられるが、それだけに限定されない。
【００７３】
さらに、本発明の固体形態は、オピオイド治療薬と組み合わせることができる。かかるオピオイド剤としては、モルフィン、ペチジン、コデイン、ジヒドロコデイン、オキシコンチン（Ｏｘｙｃｏｎｔｉｎ）、オキシコドン、ヒドロコドン、スフェンタニル、フェンタニル、レミフェンタニル、ブプレノルフィン、メサドン及びヘロインが挙げられるが、それだけに限定されない。
【００７４】
かかる治療薬の多数の追加の例は、当分野で公知であり、任意のかかる公知の治療薬を本発明の化合物と併用することができる。第２の薬剤（単数又は複数）は、含まれるときには、治療有効量で、すなわち本発明の化合物と同時投与するときに治療上有益な効果をもたらす任意の量で、存在する。本発明の化合物と組み合わせて投与される他の治療薬の適切な用量は、典型的には、約０．０５μｇ／日から約１００ｍｇ／日の範囲である。
【００７５】
したがって、本発明の薬学的組成物は、場合によっては、上記第２の治療薬を含む。
【００７６】
以下の実施例は、本発明の代表的薬学的組成物を説明するものである。
【００７７】
製剤例Ａ：経口投与用硬カプセル剤
本発明の固体形態（５０ｇ）、噴霧乾燥ラクトース（２００ｇ）及びステアリン酸マグネシウム（１０ｇ）を徹底的にブレンドする。生成した組成物を硬カプセルに充填する（組成物２６０ｍｇ／カプセル）。
【００７８】
製剤例Ｂ：経口投与用硬カプセル剤
本発明の固体形態（２０ｍｇ）、デンプン（８９ｍｇ）、微結晶セルロース（８９ｍｇ）及びステアリン酸マグネシウム（２ｍｇ）を徹底的にブレンドし、次いでＮｏ．４５メッシュＵ．Ｓ．篩に通す。生成した組成物を硬カプセルに充填する（組成物２００ｍｇ／カプセル）。
【００７９】
製剤例Ｃ：経口投与用ゼラチンカプセル剤
本発明の固体形態（１０ｍｇ）、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレアート（５０ｍｇ）及びデンプン粉末（２５０ｍｇ）を徹底的にブレンドし、次いでゼラチンカプセルに充填する（組成物３１０ｍｇ／カプセル）。
【００８０】
製剤例Ｄ：経口投与錠剤
本発明の固体形態（５ｍｇ）、デンプン（５０ｍｇ）及び微結晶セルロース（３５ｍｇ）をＮｏ．４５メッシュＵ．Ｓ．篩に通し、徹底的に混合する。ポリビニルピロリドン溶液（１０ｗｔ％水溶液、４ｍｇ）を生成粉末と混合し、次いでこの混合物をＮｏ．１４メッシュＵ．Ｓ．篩に通す。こうして生成した顆粒を５０〜６０℃で乾燥させ、Ｎｏ．１８メッシュＵ．Ｓ．篩に通す。次いで、Ｎｏ．６０メッシュＵ．Ｓ．篩にあらかじめ通した、カルボキシメチルスターチナトリウム（４．５ｍｇ）、ステアリン酸マグネシウム（０．５ｍｇ）及びタルク（１ｍｇ）を顆粒に添加する。混合後、混合物を錠剤機で圧縮して、錠剤１００ｍｇを得る。
【００８１】
製剤例Ｅ：経口投与錠剤
本発明の固体形態（２５ｍｇ）、微結晶セルロース（４００ｍｇ）、ヒュームド二酸化ケイ素（１０ｍｇ）及びステアリン酸（５ｍｇ）を徹底的にブレンドし、次いで圧縮して錠剤（組成物４４０ｍｇ／錠剤）を形成する。
【００８２】
製剤例Ｆ：単一割線入り経口投与錠剤
本発明の固体形態（１５ｍｇ）、コーンスターチ（５０ｍｇ）、クロスカルメロースナトリウム（２５ｍｇ）、ラクトース（１２０ｍｇ）及びステアリン酸マグネシウム（５ｍｇ）を徹底的にブレンドし、次いで圧縮して単一割線入り錠剤（組成物２１５ｍｇ／錠剤）を形成する。
【００８３】
製剤例Ｇ：経口投与用懸濁液剤
以下の成分を徹底的に混合して、懸濁液１０ｍＬ当たり活性成分１００ｍｇを含む経口投与用懸濁液剤を形成する。
【００８４】
【表１】
0005650657.tif 000012
製剤例Ｈ：乾燥粉末組成物
本発明の微粉化固体形態（１ｍｇ）をラクトース（２５ｍｇ）とブレンドし、次いでゼラチン吸入カートリッジに充填する。カートリッジの内容物を粉末吸入器を使用して投与する。
【００８５】
製剤例Ｊ：注射用製剤
本発明の固体形態（０．１ｇ）を０．１Ｍクエン酸ナトリウム緩衝液（１５ｍＬ）とブレンドする。生成した溶液のｐＨを１Ｎ塩酸水溶液又は１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ６に調節する。次いで、クエン酸塩緩衝剤中の無菌等張食塩溶液を添加して、総体積２０ｍＬにする。
【００８６】
特定の投与方法に適切な本発明の任意の固体形態（すなわち、結晶形態Ｉ若しくは形態ＩＩ又は結晶性塩酸塩）を上で考察した薬学的組成物に使用することができることが理解されるであろう。
【００８７】
有用性
本活性薬剤（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸は、ミューオピオイド受容体における拮抗物質であり、したがって本発明の結晶性固体形態は、ミューオピオイド受容体によって媒介される、又はミューオピオイド受容体活性に関連する病状、すなわちミューオピオイド受容体拮抗物質を用いた治療によって改善される病状の治療に有用であることが期待される。特に、本発明の固体形態は、オピオイド鎮痛薬の使用に付随する有害作用、すなわち、便秘、胃内容排出低下、腹痛、鼓脹、悪心、胃食道逆流などのオピオイド誘導性腸管機能不全と総称される症候の治療に有用であることが期待される。本固体形態は、術後腸閉塞、腹部又は他の手術後に起こる胃腸管運動低下障害の治療に有用であることも期待される。さらに、化合物１などのミューオピオイド受容体拮抗化合物を使用して、オピオイド誘導性悪心及びおう吐を後退させることができることが示唆された。
【００８８】
化合物１は、動物モデルにおいて胃腸（ＧＩ）管の運動性を増大させることが示されたので、本発明の固体形態は、ヒトを含めたほ乳動物における運動性低下に起因するＧＩ管の障害の治療に有用であることが期待される。かかるＧＩ運動障害としては、実例として、慢性便秘、便秘が主な過敏性腸症候群（Ｃ−ＩＢＳ）、糖尿病性及び特発性胃不全麻ひ、並びに機能性消化不良が挙げられる。
【００８９】
したがって、一態様においては、本発明は、ほ乳動物における胃腸管運動を増大させる方法であって、薬学的に許容される担体及び本発明の固体形態を含む、治療有効量の薬学的組成物をほ乳動物に投与することを含む、方法を提供する。
【００９０】
ＧＩ管の運動性低下障害、又はミューオピオイド受容体によって媒介される他の症状の治療に使用するときには、本発明の固体形態は、典型的には、１日１回又は１日複数回経口投与される。ただし、他の投与形態を使用することもできる。例えば、特に術後腸閉塞の治療に使用するときには、本発明の固体形態を非経口的に投与することができる。１回に投与される活性薬剤量、又は１日に投与される総量は、典型的には、治療すべき症状、選択された投与経路、投与される実際の化合物及びその相対活性、個々の患者の年齢、体重及び反応、患者の症候の重症度などを含めて、関連する状況に照らして、医師によって決定される。
【００９１】
ＧＩ管の運動性低下障害、又はミューオピオイド受容体によって媒介される他の障害の治療に適切な用量は、約０．０００７から約１．４ｍｇ／ｋｇ／日を含めて、活性薬剤約０．０００７から約２０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であろう。平均７０ｋｇのヒトの場合、これは、活性薬剤約０．０５から約１００ｍｇ／日の量であろう。
【００９２】
本発明の一態様においては、本発明の固体形態を使用して、オピオイド誘導性腸管機能不全を治療する。オピオイド誘導性腸管機能不全の治療に使用するときには、本発明の固体形態は、典型的には、１日１回又は１日複数回経口投与される。好ましくは、オピオイド誘導性腸管機能不全を治療する用量は、約０．０５から約１００ｍｇ／日の範囲であろう。
【００９３】
本発明の別の一態様においては、本発明の固体形態を使用して、術後腸閉塞を治療する。術後腸閉塞の治療に使用するときには、本発明の固体形態は、典型的には、１日１回又は１日複数回経口又は静脈内投与される。好ましくは、術後腸閉塞を治療する用量は、約０．０５から約１００ｍｇ／日の範囲であろう。
【００９４】
本発明は、ミューオピオイド受容体活性に関連する疾患又は症状を有するほ乳動物を治療する方法であって、治療有効量の本発明の固体形態又は本発明の固体形態を含む薬学的組成物をほ乳動物に投与することを含む、方法も提供する。
【００９５】
本活性薬剤は、場合によっては、別の治療薬（単数又は複数）と組み合わせて、特に、非ミューオピオイド機序によって作用する運動促進薬と組み合わせて投与される。したがって、別の一態様においては、本発明の方法及び組成物は、治療有効量の別の運動促進薬を更に含む。
【００９６】
上述したように、本発明の固体形態はミューオピオイド受容体拮抗物質である。したがって、本発明は、さらに、ほ乳動物においてミューオピオイド受容体に拮抗する方法であって、本発明の固体形態をほ乳動物に投与することを含む、方法も提供する。
【００９７】
他の諸性質の中でも、本活性薬剤は、ミューオピオイド受容体に強力に結合し、ミュー受容体機能アッセイにおいてほとんど又は全く受容体活性化作用を示さないことが見いだされた。したがって、本発明の固体形態は、強力なミューオピオイド受容体拮抗物質である。さらに、活性薬剤は、動物モデルにおいて中枢神経系活性に比べて優性に末梢活性を示した。したがって、本発明の固体形態は、痛覚消失の有益な中枢効果に干渉せずに、オピオイド誘導性ＧＩ運動性低下を後退させると予想することができる。これらの諸性質及び本発明の化合物の有用性は、当業者に周知の種々のｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏアッセイによって示すことができる。代表的アッセイを以下の実施例において更に詳述する。
【実施例】
【００９８】
以下の合成及び生物学的実施例は、本発明を説明するために提供するものであって、本発明の範囲を限定するものと決して解釈すべきではない。下記実施例において、以下の略語は、別段の記載がない限り、以下の意味を有する。以下に定義されない略語は、その一般に認められた意味を有する。
【００９９】
ＤＣＭ＝ジクロロメタン
ＤＭＦ＝Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＭｅＯＨ＝メタノール
ＭｅＴＨＦ＝２−メチルテトラヒドロフラン
ＭＴＢＥ＝ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル
ｐｓｉ＝ポンド／平方インチ
ＲＴ＝室温
試薬及び溶媒を商業的供給業者（Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｆｌｕｋａ、Ｓｉｇｍａなど）から購入し、更に精製せずに使用した。別段の記載がない限り、反応を窒素雰囲気下で実施した。反応混合物の経過を薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）及び質量分析法によってモニターした。反応混合物を各反応において具体的に記述したように調製した。一般に、それを抽出並びに温度及び溶媒依存性沈殿などの別の精製方法によって精製した。反応生成物の特性分析を質量及び１Ｈ−ＮＭＲ分光測定によって常法に従って実施した。ＮＭＲ測定では、試料を重水素化溶媒（ＣＤ３ＯＤ、ＣＤＣｌ３又はＤＭＳＯ−ｄ６）に溶解させ、１Ｈ−ＮＭＲスペクトルをＶａｒｉａｎ  Ｇｅｍｉｎｉ２０００装置（４００ＭＨｚ）を用いて標準観察条件下で測定した。化合物の質量分析同定をＡｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ（Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，ＣＡ）モデルＡＰＩ１５０  ＥＸ装置又はＡｇｉｌｅｎｔ（Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，ＣＡ）モデル１２００ＬＣ／ＭＳＤ装置を用いたエレクトロスプレーイオン化法（ＥＳＭＳ）によって実施した。含水量をＢｒｉｎｋｍａｎｎ（Ｗｅｓｔｂｕｒｙ，ＮＹ）Ｍｅｔｒｏｈｍ  Ｋａｒｌ  Ｆｉｓｃｈｅｒ  Ｍｏｄｅｌ８１３電量計を使用したＫａｒｌ−Ｆｉｓｃｈｅｒ滴定によって測定した。純度をＨＰＬＣによって以下の条件で測定した。
【０１００】
カラム：Ｚｏｒｂａｘ  ＳＢ−Ａｑ、５μｍ．４．６×２５０ｍｍ
カラム温度：４０℃
流量：１．０ｍＬ／ｍｉｎ
移動相：Ａ＝水／ＡＣＮ（９８：２）＋０．１％ＴＦＡ
Ｂ＝水／ＡＣＮ（１０：９０）＋０．１％ＴＦＡ、
注射体積：１０μＬ
検出器波長：２１４ｎｍ
化合物を水／ＡＣＮ（５０：５０）に約１ｍｇ／ｍＬで溶解させ、以下の勾配で２０分間分析した（時間（ｍｉｎ）／％Ｂ）：０／１０、２．５／２０、９／７５、１５／９０、１７／９０、１８／１０、２０／１０。
【０１０１】
調製１：７，７−ジエチル−５−ヒドロキシ−１ａ，２，７，７ａ−テトラヒドロ−１−アザ−シクロプロパ［ｂ］ナフタレン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
ａ．７−アミノ−６−ブロモ−８，８−ジエチル−５，６，７，８−テトラヒドロナフタレン−２−オール臭化水素酸塩
フラスコに７，７−ジエチル−５−メトキシ−１ａ，２，７，７ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−１−アザ−シクロプロパ［ｂ］ナフタレン（２６８ｇ、１．１６ｍｏｌ）及び臭化水素（１．９７Ｌ、１７．３８ｍｏｌ）、続いて臭化テトラ−Ｎ−ブチルアンモニウム（３８ｇ、０．１２ｍｏｌ）を添加した。反応混合物を撹拌しながら１００℃で終夜加熱し、室温に冷却し、次いで撹拌された酢酸エチル（２．５Ｌ）に注いだ。生成物をろ過によって単離し、ろ過ケーキを酢酸エチル（２×２００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させて、粗生成物（３７０ｇ）を紫がかった固体として得た。粗生成物をエタノール（１．５０Ｌ）に懸濁させ、次いで８０℃で３０分間加熱した。生成したスラリーを室温に１時間冷却し、ろ過した。フラスコ及びろ過ケーキをエタノール（２×１００ｍＬ）、次いで酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄し、終夜乾燥させて、標記化合物（２７５ｇ、約９６％純度）を得た。
【０１０２】
ｂ．７，７−ジエチル−５−ヒドロキシ−１ａ，２，７，７ａ−テトラヒドロ−１−アザ−シクロプロパ［ｂ］ナフタレン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
７−アミノ−６−ブロモ−８，８−ジエチル−５，６，７，８−テトラヒドロナフタレン−２−オール臭化水素酸塩（２０．０ｇ、５２．８ｍｍｏｌ）と酢酸エチル（２００ｍＬ）のスラリーに、１．０Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（１０６ｍＬ）を添加した。反応混合物を２５℃で２時間撹拌し、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボナート（１５ｇ、６８ｍｍｏｌ）の酢酸エチル（５ｍＬ）溶液を添加し、反応混合物を室温で２時間撹拌した。酢酸エチル（１３５ｍＬ）の２／３を除去後、ヘプタン（１３５ｍＬ）を添加し、生成したスラリーを室温で３０分間、次いで５℃で終夜撹拌した。スラリーをろ過し、ろ過ケーキを水（１００ｍＬ）でリンスし、ヘプタン（５０ｍＬ）でリンスし、減圧乾燥させて標記化合物（１４．３ｇ）を得た。
【０１０３】
調製２：トランス−（７−シアノ−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−ナフタレン−２−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル＊
ａ．トランス−（１，１−ジエチル−７−ヒドロキシ−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
７，７−ジエチル−５−ヒドロキシ−１ａ，２，７，７ａ−テトラヒドロ−１−アザ−シクロプロパ［ｂ］ナフタレン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１７０．０ｇ、５３５．６ｍｍｏｌ）とメタノール（１７００ｍＬ）のスラリーにｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウム（１３．４ｇ、５３．６ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を４０℃で４時間撹拌した。体積を回転蒸発によって約３００ｍＬに減少させると、濃白色スラリーが生成した。生成物をろ過によって単離し、ろ過ケーキを冷メタノール（５０ｍＬ）で洗浄し、３時間風乾して、標記化合物（１５０ｇ）を得た。ろ液を約５０ｍＬに減少させ、０℃で２時間撹拌し、ろ過し、乾燥させて、追加の生成物（２５ｇ）を得た。
【０１０４】
ｂ．トランス−トリフルオロ−メタンスルホン酸７−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−８，８−ジエチル−６−メトキシ−５，６，７，８−テトラヒドロナフタレン−２−イルエステル
トランス−（１，１−ジエチル−７−ヒドロキシ−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−ナフタレン−２−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１９５．０ｇ、０．５５８ｍｏｌ）、トリエチルアミン（１６０ｍＬ、１．１ｍｏｌ）及び酢酸エチル（２０００ｍＬ）の混合物を室温で１５分間撹拌し、０℃に冷却し、続いて内部温度を４℃未満に維持しながら塩化トリフルオロメタンスルホニル（１５０ｇ、０．８９ｍｏｌ）を徐々に添加した。生成したスラリーを０℃で１時間撹拌した。追加のトリエチルアミン（１６ｍＬ）、続いて追加の塩化トリフルオロメタンスルホニル（１５．０ｇ）を、温度を５℃未満に維持しながら徐々に添加した。反応混合物を室温で更に１時間撹拌した。希釈鹹水（１．０Ｌ）を添加し、反応混合物を室温で１０分間撹拌した。層分離させ、有機層を希ＮａＨＣＯ３（１．０Ｌ）で洗浄し、次いで回転蒸発によって２８℃で約３５０ｍＬに濃縮し、室温で３０分間撹拌した。ヘプタン（７００ｍＬ）を添加し、生成したスラリーを室温で３０分間撹拌し、４℃に冷却し、１時間撹拌した。固体をろ過し、ヘプタンで洗浄し、次いで減圧乾燥させて、標記化合物（１９３．０ｇ、＞９７％純度）を得た。ろ液を濃縮し、酢酸イソプロピルとヘプタンの混合物（１：３、６０ｍＬ）中で３０分間スラリーにし、ろ過し、乾燥させて、追加の生成物（４５．０ｇ、＞９７％純度）を得た。
【０１０５】
ｃ．トランス−（７−シアノ−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
トリフルオロ−メタンスルホン酸７−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−８，８−ジエチル−６−メトキシ−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−イルエステル（２３６．６ｇ、０．４９ｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８５１ｍＬ、１０．９９ｍｏｌ）及び水（２３．８ｍＬ、１．３２ｍｏｌ）に室温で溶解させた。溶液を５分間窒素パージし、次いで家庭用掃除機に５分間接続した。窒素パージと真空曝露を２回繰り返した。反応混合物にシアン化亜鉛（３４．２ｇ、０．２９ｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（４．４ｇ、４．８ｍｍｏｌ）及び１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン（５．４ｇ、９．７ｍｍｏｌ）を撹拌しながら添加した。反応混合物を５分間窒素パージし、窒素下で１１０℃で１時間加熱し、室温に冷却し、次いでセライトに通してろ過した。ろ過した反応混合物を水（３Ｌ）に徐々に添加し、撹拌しながら０℃に冷却し、０℃で３０分間撹拌し、次いでろ過した。ろ過ケーキを水（５００ｍＬ）で洗浄し、２時間風乾し、エタノール（１Ｌ）中で撹拌しながら１時間スラリーにし、次いでろ過して標記化合物を得た（１６５．０ｇ、＞９６％純度）。ろ液を乾燥させ（２１．６ｇ）、エタノール（１１０ｍＬ）に撹拌しながら１時間溶解させ、生成したスラリーをろ過し、減圧乾燥させて、追加の生成物（１０．２ｇ、＞９８％純度）を得た。
【０１０６】
＊この実施例及び以下の実施例においては、接頭辞トランスとは、（２Ｓ），（２Ｓ）ジアステレオマーと（２Ｒ），（２Ｒ）ジアステレオマーの混合物を指す。
【０１０７】
調製３：トランス−（７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
調製２の生成物（１６０．０ｇ、４４６．３ｍｍｏｌ）とメタノール（３．３Ｌ）のスラリーを５５℃で１５分間加熱し、過ホウ酸ナトリウム一水和物（２８０ｇ、２８００ｍｍｏｌ）及び水（３３０ｍＬ）を添加し、反応混合物を５５℃で終夜加熱した。追加の過ホウ酸ナトリウム一水和物（９０ｇ）を添加し、反応混合物を５５℃で終夜加熱し、次いで室温に冷却し、無機固体をろ別した。ろ液を５Ｌフラスコに移し、溶媒の大部分を回転蒸発によって除去した。生成したスラリーに水（１．１Ｌ）及び酢酸エチル（４５０ｍＬ）を添加し、反応混合物を室温で２０分間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ過ケーキを水（２００ｍＬ）、次いで酢酸エチル（２００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させて、標記化合物（１２３ｇ、約９５％純度）を得た。ろ液を濃縮乾固させ、減圧乾燥させて、追加の生成物（１８ｇ、６５％純度）を得た。
【０１０８】
調製４：トランス−７−アミノ−８，８−ジエチル−６−メトキシ−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−カルボン酸アミド
内部温度を２０℃未満に維持しながら、塩化アセチル（２７８．８ｍＬ、３９２０ｍｍｏｌ）をエタノール（３８２ｍＬ、６５３０ｍｍｏｌ）に−５℃で２時間滴下した。生成した溶液を、１０℃に冷却されたトランス−（７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−ナフタレン−２−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１２３．０ｇ、３２７ｍｍｏｌ）とエタノール（５００ｍＬ）のスラリーに、内部温度を３０℃未満に維持しながら１５分間分割添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、回転蒸発によって約２００ｍＬに濃縮した。酢酸エチル（２００ｍＬ）を添加し、生成したスラリーを０℃で３０分間撹拌し、ろ過し、乾燥させて、標記化合物の塩酸塩（１０２ｇ、＞９８％純度）を白色固体として得た。
【０１０９】
調製５：炭酸４−ニトロ−フェニルエステル（Ｒ）−１−フェニル−エチルエステル
（Ｒ）−１−フェニル−エタノール（６０．６ｇ、０．４９６ｍｏｌ）、ピリジン（４２．５ｍＬ、０．５２６ｍｏｌ）及び２−メチル−テトラヒドロフラン（６００ｍＬ）の混合物を０℃に冷却し、内部温度を５℃未満に維持しながらクロロギ酸ｐ−ニトロフェニル（１００ｇ、０．４９６ｍｏｌ）を１５分間添加した。反応混合物を室温に加温し、２時間撹拌した。反応混合物に１．０Ｍ  ＨＣｌ水溶液（３００ｍＬ）を添加した。層を分離させた。有機層を１Ｎ  ＨＣｌ（３００ｍＬ）及び鹹水（３００ｍＬ）で洗浄し、ろ過し、回転蒸発によって濃縮乾固させ、減圧乾燥させて、標記化合物（１４０ｇ）を透明黄色オイルとして得た。
【０１１０】
調製６：（６Ｓ，７Ｓ）−７−アミノ−８，８−ジエチル−６−メトキシ−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−カルボン酸アミド
ａ．（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−ナフタレン−２−イル）−カルバミン酸（Ｒ）−１−フェニル−エチルエステル
炭酸４−ニトロ−フェニルエステル（Ｒ）−１−フェニル−エチルエステル（１０２ｇ、３５７ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２００ｍＬ）及びトリエチルアミン（３２．７ｍＬ、２３５ｍｍｏｌ）の混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物にトランス−７−アミノ−８，８−ジエチル−６−メトキシ−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−カルボン酸アミド塩酸塩（１００ｇ、３２０ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３２０ｍＬ）及びトリエチルアミン（９８．０ｍＬ、７０３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を８５℃で５時間加熱し、次いで室温で終夜撹拌した。ＤＭＦ約９０％を７０℃における蒸留によって除去し、生成した濃厚な油を室温に冷却し、次いで酢酸エチル（１．５Ｌ）と希釈鹹水（５００ｍＬ）に分配した。有機層を１Ｍ  ＮａＯＨ（３×５００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４を用いて脱水した。溶媒の大部分を回転蒸発によって除去し、３体積の酢酸エチルを添加し、生成したスラリーを室温で３０分間撹拌し、ろ過し、乾燥させて、標記化合物を得た（４８ｇ、＞９９％化学及び光学純度）。
【０１１１】
ろ液を１Ｍ  ＮａＯＨ（２００ｍＬ）、次いで希釈鹹水（２×２００ｍＬ）で洗浄した。溶媒の大部分を回転蒸発によって除去して、濃厚な油を得た。これに酢酸エチル（１００ｍＬ）を添加した。標記化合物のひとつまみの種晶を添加し、反応混合物を約３０分間撹拌後、０℃で冷蔵した。生成した希薄スラリーを５分間撹拌し、ろ過した。フラスコ及びろ過ケーキを酢酸エチル（２×１５ｍＬ）で洗浄して、追加の標記化合物（４．１ｇ、９７％化学及び＞９９％光学純度、３８％総収率）を得た。
【０１１２】
ｂ．（６Ｓ，７Ｓ）−７−アミノ−８，８−ジエチル−６−メトキシ−５，６，７，８−テトラヒドロナフタレン−２−カルボン酸アミド
内部温度を３０℃未満に維持しながら、塩化アセチル（１９３ｍＬ、２７１０ｍｍｏｌ）をエタノール（２６０ｍＬ、４５００ｍｍｏｌ）に−５℃で４０分間滴下した。生成した溶液を（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−ナフタレン−２−イル）−カルバミン酸（Ｒ）−１−フェニル−エチルエステル（４９．０ｇ、１１５ｍｍｏｌ）とエタノール（２００ｍＬ）の混合物に１０℃で５分間添加した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、回転蒸発によって約１００ｍＬに濃縮した。酢酸エチル（１００ｍＬ）を添加し、生成したスラリーを０℃で３０分間撹拌し、ろ過した。ろ過ケーキを酢酸エチルで洗浄し、乾燥させて、標記化合物の塩酸塩（３０ｇ、＞９９％純度）を得た。ろ液の体積をほぼ乾燥状態に減少させた。イソプロピルアルコール（２０ｍＬ）を添加し、生成した濃厚スラリーを３０分間撹拌し、ろ過した。ろ過ケーキを酢酸エチル（２×２０ｍＬ）で洗浄し、終夜減圧乾燥させて、追加の標記化合物（５．５ｇ、＞９７％純度）を得た。
【０１１３】
【化５】
0005650657.tif 000013
調製７：ナトリウム（Ｓ）−４−シクロヘキシル−１−ヒドロキシ−３−メトキシカルボニル−ブタン−１−スルホナート
ａ：（Ｓ）−２−シクロヘキシルメチル−４−ヒドロキシ−酪酸メチルエステル
（Ｓ）−２−シクロヘキシルメチル−コハク酸１−メチルエステル（６０．０ｇ、２６３ｍｍｏｌ）とテトラヒドロフラン（６００ｍＬ）の混合物を室温で撹拌し、次いで−５℃に３０分間冷却した。内部温度を０℃未満に維持しながら、反応混合物に１．０Ｍボランのテトラヒドロフラン（５２０ｍＬ）溶液を４５分間滴下した。反応混合物にＭｅＯＨ（１００ｍＬ）を滴下して反応をクエンチした。反応混合物を回転蒸発によって約１００ｍＬに濃縮した。（トリフルオロメチル）ベンゼン（２００ｍＬ）を添加し、体積を回転蒸発によって２５ｍＬに減少させた。（トリフルオロメチル）ベンゼン（１００ｍＬ）を生成した濃厚な油に添加し、体積を約２５ｍＬに減少させて、粗製標記生成物（５６．３ｇ）を得た。
【０１１４】
ｂ．ナトリウム（Ｓ）−４−シクロヘキシル−１−ヒドロキシ−３−メトキシカルボニル−ブタン−１−スルホナート
（Ｓ）−２−シクロヘキシルメチル−４−ヒドロキシ−酪酸メチルエステル（４４．８ｇ、２０９ｍｍｏｌ）とＤＣＭ（３１０ｍＬ）の混合物を撹拌しながら５℃に冷却した。反応混合物に臭化カリウム（２．５ｇ、２１ｍｍｏｌ）と炭酸水素ナトリウム（２．４ｇ、２９ｍｍｏｌ）の蒸留水（１３０ｍＬ）溶液、次いで２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−１−オキシル（ＴＥＭＰＯ）（０．３３ｇ、２．１ｍｍｏｌ）を添加し、続いて内部温度を６〜８℃の範囲に維持しながら、次亜塩素酸ナトリウム（１４０ｍＬ、２１０ｍｍｏｌ）を速度１３０ｍＬ／ｈで添加した。反応混合物を１５分間撹拌し、ＤＣＭ（２００ｍＬ）を添加した。層分離させ、有機層を飽和鹹水（２００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４を用いて脱水した。
【０１１５】
有機層にＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）を添加し、続いて亜硫酸水素ナトリウム（２１．８ｇ、２０９ｍｍｏｌ）を添加した。反応溶液を濃縮して、ＤＣＭの半分（約１７５ｍＬ）を回転蒸発によって除去した。水（２ｍＬ）を反応溶液に添加し、それを室温で終夜撹拌した。生成したスラリーをろ過し、ろ過ケーキを終夜減圧乾燥させて、標記化合物（６１．９ｇ）を得た。
【０１１６】
【化６】
0005650657.tif 000014
調製８：ナトリウム（Ｓ）−３−ベンジルオキシカルボニル−４−シクロヘキシル−１−ヒドロキシ−ブタン−１−スルホナート
ａ．（Ｓ）−２−シクロヘキシルメチル−４，４−ジメトキシ−酪酸メチルエステル
ナトリウム（Ｓ）−４−シクロヘキシル−１−ヒドロキシ−３−メトキシカルボニル−ブタン−１−スルホナート（４００．０ｇ、１．２６ｍｏｌ）とメタノール（２Ｌ）のスラリーに４．０Ｍ  ＨＣｌの１，４−ジオキサン（４００ｍＬ）溶液を添加し、反応混合物を１５分間撹拌した。トリメトキシメタン（３４０ｍＬ、３．１１ｍｏｌ）を添加し、反応混合物を５０℃で終夜加熱し、次いで室温に冷却した。白色固体をろ別し、廃棄した。溶媒の大部分をろ液から回転蒸発によって除去した。酢酸エチル（８００ｍＬ）を添加すると、さらに沈殿が生成した。白色沈殿をろ過除去した。溶媒をろ液から回転蒸発によって、次いで高真空下で室温で終夜除去して、標記化合物（２１１ｇ）を濃厚な油として得た。
【０１１７】
【化７】
0005650657.tif 000015
ｂ．カリウム（Ｓ）−２−シクロヘキシルメチル−４，４−ジメトキシ−ブチラート
水酸化カリウム（２８９．６ｇ、２３２２ｍｍｏｌ）を前段階の生成物（２００．０ｇ、０．７７ｍｏｌ）のメタノール（７００ｍＬ）溶液に一括添加し、反応混合物を室温で２０時間撹拌した。反応混合物がｐＨ約８になるまで（緑がかった色からオレンジ色への色変化）塩化水素（１３０ｍＬ、１．５ｍｏｌ）を徐々に添加すると、微細固体の沈殿が生成した。固体をろ過除去した。溶媒をろ液から除去した。アセトニトリル（１Ｌ）を粗生成物に添加し、生成したスラリーを室温で終夜撹拌した。濃厚スラリーをろ過し、ろ過ケーキをアセトニトリル（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させて、標記化合物の第１の収量（１３３ｇ）をオフホワイト固体として得た。溶媒をろ液から除去し、次いでそれを減圧乾燥させて、ペースト状固体約１００ｇを得た。ＭＴＢＥ（５００ｍＬ）を添加し、固体を室温で終夜撹拌すると、濃厚スラリーが生成した。これをろ過し、高真空下で乾燥させて、標記化合物の第２の収量（８２ｇ）を得た。
【０１１８】
【化８】
0005650657.tif 000016
ｃ：（Ｓ）−２−シクロヘキシルメチル−４，４−ジメトキシ−酪酸ベンジルエステル
臭化ベンジル（５０．５４ｍＬ、４２４．９ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２．０Ｌ）中の前段階の生成物（１５０．０ｇ、５３１．１ｍｍｏｌ）のスラリーに一括添加し、不均一反応混合物を室温で終夜撹拌した。追加の臭化ベンジル（５．０５ｍＬ、４２．４９ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で１８時間撹拌した。固体をろ過除去した。ろ液を回転蒸発によって、次いで高真空下で終夜乾燥させて、標記化合物（１６２ｇ）を得た。
【０１１９】
【化９】
0005650657.tif 000017
ｄ．ナトリウム（Ｓ）−３−ベンジルオキシカルボニル−４−シクロヘキシル−１−ヒドロキシ−ブタン−１−スルホナート
前段階の生成物（１６０．０ｇ、４７８．４ｍｍｏｌ）とアセトニトリル（１．０Ｌ）の混合物に１．０Ｍ  ＨＣｌ水溶液（１．２Ｌ）を添加し、反応混合物を３５〜４０℃で２時間加熱した。酢酸エチル（１．２Ｌ）を添加し、相分離させ、有機層を塩水（１Ｌ）で洗浄した。亜硫酸水素ナトリウム（７４．７ｇ、７１８ｍｍｏｌ）を湿潤有機層に添加し、反応混合物を室温で終夜撹拌した。溶媒の大部分を回転蒸発によって除去し、アセトニトリル（１Ｌ）を添加し、生成したスラリーを室温で終夜撹拌した。生成した濃白色スラリーをろ過し、ろ過ケーキをアセトニトリル（２×１００ｍＬ）で洗浄し、減圧乾燥させて、標記化合物（２００ｇ、＞９８％純度）を白色固体として得た。
【０１２０】
【化１０】
0005650657.tif 000018
（実施例１）
（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸
ａ．（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸メチルエステル
ナトリウム（Ｓ）−４−シクロヘキシル−１−ヒドロキシ−３−メトキシカルボニル−ブタン−１−スルホナート（２５．８ｇ、８１．５ｍｍｏｌ）と２−メチル−テトラヒドロ−フラン（３００ｍＬ）のスラリーに１．０Ｍ  ＮａＯＨ水溶液（７６．１ｍＬ）を添加し、反応混合物を室温で２０分間撹拌した。反応混合物に（６Ｓ，７Ｓ）−７−アミノ−８，８−ジエチル−６−メトキシ−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−カルボン酸アミド塩酸塩（１７．０ｇ、５４．３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で４０分間撹拌し、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（４６．１ｇ、２１７ｍｍｏｌ）を４分割添加した。最初の２回添加後、反応混合物を室温で終夜撹拌した。水（２００ｍＬ）及びＭｅＴＨＦ（１００ｍＬ）を添加し、相分離させ、有機層を１Ｍ  ＮａＯＨ（２×２００ｍＬ）、Ｎａ２ＳＯ４を用いて脱水された希釈鹹水（２００ｍＬ）で洗浄し、溶媒を除去して、粗製標記中間体（２２ｇ）をガラス状黄色固体として得た。
【０１２１】
粗生成物をＭｉｃｒｏｓｏｒｂ  １００−１０ＢＤＳ４インチカラムを使用した逆相クロマトグラフィーによって精製した。粗生成物を１：１アセトニトリル：１Ｍ  ＨＣｌ水溶液（１５０ｍＬ）溶媒混合物に溶解させ、水（０．１％ＨＣｌ）／アセトニトリル移動相（１０〜４０％勾配）で溶出させた。純粋画分（＞９８％）を混合し、アセトニトリルの大部分を回転蒸発によって除去し、ｐＨを固体Ｎａ２ＣＯ３を用いてｐＨ約１２に調節し、精製生成物をＭｅＴＨＦ（３×１Ｌ）で抽出した。混合有機層をＮａ２ＳＯ４を用いて脱水し、溶媒を除去して、標記化合物（１６．５ｇ）を得た。
【０１２２】
ｂ．（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸
（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−ナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸メチルエステル（１２．０ｇ、２５．４ｍｍｏｌ）のメタノール溶液に５．０Ｍ  ＮａＯＨ（２５ｍＬ）を添加し、反応混合物を３０℃で８時間、次いで２５℃で終夜加熱した。メタノール溶媒の大部分を回転蒸発によって２５℃で除去し、水（１００ｍＬ）及び酢酸イソプロピル（１００ｍＬ）を添加し、生成した混合物を１５分間撹拌した。３層のうち下の２層を酢酸イソプロピル（１００ｍＬ）で抽出した。下層を−５℃に冷却し、ＭｅＴＨＦ（２００ｍＬ）を添加し、次いで濃ＨＣｌ（約１５ｍＬ）をｐＨ約２まで分割添加した。相分離させ、水層をＭｅＴＨＦ（１００ｍＬ）で洗浄し、混合有機層をＮａ２ＳＯ４を用いて脱水した。有機溶媒の大部分を回転蒸発によって除去し、酢酸エチル（２００ｍＬ）を添加し、体積を５０ｍＬに減少させた。酢酸エチル（２００ｍＬ）を添加し、生成したスラリーを室温で３時間撹拌／すりつぶした。生成物を窒素下でろ過し、４８時間減圧乾燥させて、標記化合物の塩酸塩（１１ｇ、９８．２％純度）を白色固体として得た。
【０１２３】
【化１１】
0005650657.tif 000019
（実施例２）
（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸
（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸塩酸塩（２．１８ｇ、４．４０ｍｍｏｌ）をメタノール（３０ｍＬ）及び水（３０ｍＬ）に溶解させ、１．０Ｍ  ＮａＯＨ（４．６５ｍＬ）を添加した。メタノールを回転蒸発によって除去すると、沈殿が生成した。１．０Ｍ  ＨＣｌ（０．０４５ｍＬ）を添加すると、さらに沈殿が生成した。固体をＤＣＭ：イソプロピルアルコール（４：１、３×４０ｍＬ）で抽出し、硫酸ナトリウムを用いて脱水した。水（３０ｍＬ）を添加し、有機物を回転蒸発によって除去すると、水中にゴム状沈殿が生成した。アセトニトリル（２５ｍＬ）を添加し、反応混合物を凍結乾燥させて、標記化合物をアモルファス固体として得た。（１．９９ｇ）。
【０１２４】
（実施例３）
結晶性（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸
ａ．（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸ベンジルエステル塩酸塩
ＭｅＴＨＦ（２．０Ｌ）と水（６００ｍＬ）中の調製８の生成物であるナトリウム（Ｓ）−３−ベンジルオキシカルボニル−４−シクロヘキシル−１−ヒドロキシ−ブタン−１−スルホナート（１６０ｇ、４００ｍｍｏｌ）の懸濁液に１．０Ｍ  ＮａＯＨ水溶液（４００ｍＬ）を添加し、反応混合物を室温で９０分間撹拌した。相分離させ、溶液を体積約３００ｍＬに濃縮した。
【０１２５】
生成した濃縮溶液をＤＭＦ（１Ｌ）中の（６Ｓ，７Ｓ）−７−アミノ−８，８−ジエチル−６−メトキシ−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−カルボン酸アミド塩酸塩（１００．０ｇ、３１９．７ｍｍｏｌ）のスラリーに添加した。生成したスラリーを室温で２時間撹拌し、反応混合物を０℃に冷却し、続いてトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１６９ｇ、７９９ｍｍｏｌ）を１５分間分割添加した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、１０℃に冷却し、次いで１．０Ｍ  ＮａＯＨ水溶液（３Ｌ）及び酢酸エチル（５Ｌ）を添加した。反応混合物を１０分間撹拌し、相分離させ、有機層を希釈鹹水（１：１、２Ｌ）で洗浄した。有機層に１．０Ｍ  ＨＣｌ水溶液（５２０ｍＬ、５２０ｍｍｏｌ）を添加し、酢酸エチルの大部分を回転蒸発によって除去した。水（５００ｍＬ）及びエタノール（１Ｌ）を添加し、体積を回転蒸発によって約１Ｌに徐々に減少させた。生成したオフホワイトの易流動性スラリーを室温で終夜撹拌した。生成物をろ過によって単離し、フラスコ及びろ過ケーキを水（２×２００ｍＬ）で洗浄し、次いで乾燥させて、標記化合物（１７５ｇ）を白色固体として得た（約９９％純度、アミノテトラリン試薬に基づく収率９０％）。
【０１２６】
【化１２】
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ｂ．結晶性（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−ナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸
前段階の生成物（１７５．０ｇ、２９９ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（２．５Ｌ）、水（１Ｌ）及び１．０Ｍ  ＮａＯＨ水溶液（３００ｍＬ、２９９ｍｍｏｌ）に分配した。相分離させ、有機層を希釈鹹水（１：１、２５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムを用いて脱水した。溶媒を回転蒸発によって除去し、得られた生成物を高真空下で終夜乾燥させて、遊離塩基中間体（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−ナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸ベンジルエステル（約１６０ｇ）を粘着性固体として得た。
【０１２７】
遊離塩基中間体をアセトニトリル（１．６Ｌ）と水（３００ｍＬ）の混合物に溶解させた。溶液の半分（１Ｌ）に炭素担持１０％パラジウム（１０ｇ、９ｍｍｏｌ）（ウェット）を添加した。反応混合物を窒素、次いで水素で２分間パージし、次いで１０〜１５ｐｓｉ  Ｈ２に室温で３時間曝露した。反応混合物をセライトに通してろ過し、フラスコ及びろ過ケーキをアセトニトリル（５０ｍＬ）で洗浄した。黄色がかったろ液をチオール変性シリカ（１０ｇ）と一緒に室温で２時間撹拌し、次いでセライトに通してろ過した。溶媒の大部分を回転蒸発によって２５℃で除去した。アセトニトリル（５００ｍＬ）を添加し、溶媒の大部分を回転蒸発によって除去した。追加のアセトニトリル（５００ｍＬ）を添加すると、粘着性固体の沈殿が急速に生成した。反応混合物を室温で終夜激しく撹拌すると、易流動性オフホワイトスラリーが生成した。生成物をろ過によって単離し、ろ過ケーキをアセトニトリル（２×５０ｍＬ）で洗浄し、次いで減圧乾燥させて、結晶性標記化合物（５６ｇ、９８．８％純度）を得た。含水量０．４９％（ｗ／ｗ）。
【０１２８】
【化１３】
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注記：以下の実施例の本文では、（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸を化合物１と表記する。
【０１２９】
（実施例４）
（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸の結晶化（形態Ｉ）
アモルファス化合物１（１００ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）をイソプロパノール（０．８３ｍＬ）に溶解させた。４日後、結晶が溶液中に認められた。母液の上澄みを流し、１：１アセトニトリル：酢酸エチル（０．２ｍＬ、次いで追加の０．３ｍＬ）を添加して、標記化合物のスラリーを得た。
【０１３０】
（実施例５）
（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸の結晶化（形態Ｉ）
アモルファス化合物１（３３ｍｇ、０．０７２ｍｍｏｌ）を、あらかじめ混合されたアセトニトリル（０．０４ｍＬ）、１−プロパノール（０．０６０５ｍＬ）及び水（０．００３５ｍＬ）の溶液に溶解させ、プロセス混合物を室温で終夜撹拌した。沈殿が約１時間以内に形成し始めた。固体をろ過によって収集し、３：２アセトニトリル：イソプロパノール（２ｍＬ）で洗浄し、減圧乾燥させて、標記化合物を得た。
【０１３１】
（実施例６）
（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸の結晶化（形態Ｉ）
アモルファス化合物１（８４．２ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を水（０．００３ｍＬ）とメタノール（０．０２７ｍＬ）の混合物に溶解させ、次いで水（０．０１３ｍＬ）とアセトニトリル（０．０９０ｍＬ）の混合物を添加した。結晶が２分以内に認められた。プロセス混合物を撹拌せずに３日間室温で保持した。母液の上澄みを流し、固体を減圧ろ過によって単離し、アセトニトリルで洗浄して標記化合物（５４ｍｇ、６４％収率）を得た。
【０１３２】
（実施例７）
（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸の結晶化（形態ＩＩ）
アモルファス化合物１（７０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を、あらかじめ混合されたアセトニトリル（０．１３６ｍＬ）とイソプロパノール（０．０９０ｍＬ）の溶液に溶解させ、プロセス混合物を室温で終夜撹拌した。沈殿が約１時間以内に形成し始めた。固体をろ過によって収集し、３：２アセトニトリル：イソプロパノール（２ｍＬ）で洗浄し、減圧乾燥させて、標記化合物を得た（６４ｍｇ）。
【０１３３】
（実施例８）
（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸塩酸塩の結晶化
化合物１のアモルファス塩酸塩（５６．７ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）をジエチレングリコールジメチルエーテル（ＤＥＧＤＭＥ）（０．５０ｍＬ）に分散させ、５０℃に２０分間加熱し、終夜徐々に冷却した。プロセス混合物を周囲温度で１１日間放置した。生成した結晶を単離し、ＤＥＧＤＭＥ（約０．１ｍＬ）で洗浄して、標記化合物を得た。
【０１３４】
（実施例９）
（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸塩酸塩の結晶化
化合物１のアモルファス塩酸塩（７２．２ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（１．０ｍＬ）に分散させ、１分間未満超音波処理し、５０℃に加熱し、徐々に冷却した。プロセス混合物を周囲温度で３日間放置した。生成した結晶を単離して、標記化合物を得た。
【０１３５】
（実施例１０）
（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸塩酸塩の結晶化
化合物１のアモルファス塩酸塩（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（０．５ｍＬ）に分散させ、室温で４日間撹拌した。生成した結晶を単離して、標記化合物を得た（３０ｍｇ）。
【０１３６】
実施例１１〜１５
本発明の固体形態の諸性質
実施例３及び７で調製された結晶性（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−ナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸（化合物１）の試料、及び実施例９で調製された化合物１の結晶性塩酸塩の試料、並びに実施例３ａで調製された結晶性（Ｓ）−４−（（２Ｓ，３Ｓ）−７−カルバモイル−１，１−ジエチル−３−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−ナフタレン−２−イルアミノ）−２−シクロヘキシルメチル−酪酸ベンジルエステル塩酸塩（化合物２の塩酸塩）の試料を、Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）及び熱重量分析（ＴＧＡ）によって分析した。
【０１３７】
（実施例１１）
Ｘ線粉末回折
図１、４及び６のＸ線粉末回折パターンは、Ｃｕ  Ｋα（３０．０ｋＶ、１５．０ｍＡ）照射を使用したＲｉｇａｋｕ回折計を用いて得られた。分析は、角度計を用いて、２から４０°の範囲で連続スキャンモード２°／分（図１）又は３°／分（図４、６及び８）、ステップサイズ０．０３°で運転して実施された。試料を石英試料ホルダー上で粉末材料の薄層として調製した。装置をケイ素標準を用いて較正した。図８は、Ｔｈｅｒｍｏ  ＸＴＲＡモデルＡＲＬ回折計を用いて、２から４０°の範囲で１．２２°／分、ステップサイズ０．０３°でスキャンして得られた。
【０１３８】
（実施例１２）
熱分析
示差走査熱量測定（ＤＳＣ）は、ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｍｏｄｅｌ  Ｑ−１００モジュールを使用して実施された。データは、ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｔｈｅｒｍａｌ  Ａｄｖａｎｔａｇｅ  ｆｏｒ  Ｑ  Ｓｅｒｉｅｓ（商標）ソフトウェアを使用して収集、分析された。試料約１〜１０ｍｇをふた付きアルミニウムパンに正確に計量した。試料を５℃から典型的には２６５℃まで１０℃／ｍｉｎの線形加熱勾配で評価した。ＤＳＣセルを、使用中に乾燥窒素でパージした。化合物１の結晶性塩酸塩及び化合物２の結晶性塩酸塩の結晶形態Ｉ及び形態ＩＩの試料の代表的ＤＳＣトレースをそれぞれ図２、５、７及び９に示す。
【０１３９】
熱重量分析（ＴＧＡ）をＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｍｏｄｅｌ  Ｑ−５００モジュールを使用して実施した。データは、ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｔｈｅｒｍａｌ  Ａｄｖａｎｔａｇｅ  ｆｏｒ  Ｑ  Ｓｅｒｉｅｓ（商標）ソフトウェアを使用して収集、分析された。試料約１〜５ｍｇを白金クレードル上のアルミニウムパンに入れ、周囲温度から３００℃まで線形加熱速度１０℃／ｍｉｎでスキャンした。天秤及び炉チャンバーを、使用中に窒素パージした。結晶形態Ｉ及び化合物１の結晶性塩酸塩の試料の代表的ＴＧＡトレースもそれぞれ図２及び７に示す。
【０１４０】
（実施例１３）
動的水分収着評価
動的水分収着（ＤＭＳ）評価を、ＶＴＩ大気微量天秤ＳＧＡ−１００システム（ＶＴＩ  Ｃｏｒｐ．，Ｈｉａｌｅａｈ，ＦＬ３３０１６）を使用して２５℃で実施した。試料サイズ約５〜１０ｍｇを使用し、湿度を分析開始時に周囲値に設定した。典型的なＤＭＳ分析は、３又は４スキャンからなった：５％ＲＨ／ステップのスキャン速度で周囲から２％相対湿度（ＲＨ）、２％ＲＨから９０％ＲＨ、９０％ＲＨから５％ＲＨ、及びある場合には第２の吸着２％ＲＨから９０％ＲＨ。質量を２分ごとに測定し、試料の質量が５連続ポイントで０．０２％以内で安定しているときに、ＲＨを次の値（±５％ＲＨ）に変化させた。実施例３で調製された結晶形態Ｉの試料の代表的ＤＭＳトレースを図３に示す。
【０１４１】
（実施例１４）
Ｘ線回折結晶構造分析
実施例６で調製された寸法０．２０×０．１０×０．０６ｍｍの結晶形態Ｉの針状結晶を分析した。Ｘ線回折結晶構造データを、Ｍｏ  Ｋα照射を使用したＮｏｎｉｕｓ  Ｋａｐｐａ−ＣＣＤ回折計を使用して得た。全球データをθ＝２７．５度まで温度１２０°Ｋで収集し、ＳＨＥＬＸ−９７ソフトウェアを使用して分析した。以下の格子パラメータが誘導された：単位格子は、寸法ａ＝７．５４６A、ｂ＝１７．００３A、ｃ＝２０．６２８A、格子体積（Ｖ）２６４６．７A３の斜方晶であり、計算密度は１．１５１ｇ／ｃｍ３であり、空間群はＰ２１２１２１である。誘導された原子位置から予測される粉末Ｘ線回折ピークは、目視検査によって、実験的に決定されたピーク位置とよく一致すると判定された。
【０１４２】
アッセイ１：ヒトミュー、ヒトデルタ及びモルモットカッパオピオイド受容体に対する放射性リガンド結合アッセイ
ａ．膜調製
ヒトミューオピオイド又はモルモットカッパ受容体ｃＤＮＡを安定的に移入されたＣＨＯ−Ｋ１（Ｃｈｉｎｅｓｅ  Ｈａｍｓｔｅｒ  Ｏｖａｒｙ）細胞を、３７℃の５％ＣＯ２加湿恒温器中の１０％ＦＢＳ、１００単位／ｍｌペニシリン−１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン及び８００μｇ／ｍＬ  Ｇｅｎｅｔｉｃｉｎを補充したＨａｍ’ｓ−Ｆ１２培地からなる培地中で増殖させた。受容体発現レベル（それぞれ、Ｂｍａｘ約２．０及び約０．４１４ｐｍｏｌ／ｍｇタンパク質）を、膜放射性リガンド結合アッセイにおいて［３Ｈ］−ジプレノルフィン（比活性約５０〜５５Ｃｉ／ｍｍｏｌ）を使用して測定した。
【０１４３】
細胞を８０〜９５％コンフルエント（＜２５継代培養）まで増殖させた。細胞系の継代培養では、細胞単層を室温で５分間インキュベートし、５ｍＭ  ＥＤＴＡを補充したＰＢＳ１０ｍＬ中で機械撹拌によって収集した。再懸濁後、細胞を新しい遠心分離用増殖培地４０ｍＬに１０００ｒｐｍで５分間移し、適切な分割比で新しい増殖培地に再懸濁させた。
【０１４４】
膜調製では、５ｍＭ  ＥＤＴＡのＰＢＳ溶液と一緒に穏やかに機械撹拌し、続いて遠心分離（２５００ｇ５分間）によって、細胞を収集した。ペレットをＡｓｓａｙ  Ｂｕｆｆｅｒ（５０ｍＭ  ４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−エタンスルホン酸Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−Ｎ’−（２−エタンスルホン酸）（ＨＥＰＥＳ））、ｐＨ７．４に再懸濁させ、Ｐｏｌｙｔｒｏｎ粉砕機を用いて氷上でホモジナイズした。得られた粉砕物を遠心分離し（１２００ｇ５分間）、ペレットを廃棄し、上清を遠心分離した（４０，０００ｇ２０分間）。ペレットをＡｓｓａｙ  Ｂｕｆｆｅｒ中に再懸濁させることによって１回洗浄し、続いてさらに遠心分離した（４０，０００ｇ２０分間）。最終ペレットをＡｓｓａｙ  Ｂｕｆｆｅｒに再懸濁させた（当量１  Ｔ−２２５フラスコ／１ｍＬアッセイ緩衝剤）。タンパク質濃度をＢｉｏ−Ｒａｄ  Ｂｒａｄｆｏｒｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ａｓｓａｙキットを使用して測定し、膜を必要になるまで凍結アリコートで−８０℃で貯蔵した。
【０１４５】
ヒトデルタオピオイド受容体（ｈＤＯＰ）膜をＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒから購入した。［３Ｈ］−ナトリンドール（Ｎａｔｒｉｎｄｏｌｅ）放射性リガンド結合アッセイにおける飽和分析で測定されたこれらの膜の報告されたＫｄ及びＢｍａｘは、それぞれ０．１４ｎＭ（ｐＫｄ＝９．８５）及び２．２ｐｍｏｌ／ｍｇタンパク質であった。タンパク質濃度は、Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｂｒａｄｆｏｒｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ａｓｓａｙキットを使用して測定された。膜を必要になるまで凍結アリコートで−８０℃で貯蔵した。
【０１４６】
ｂ．放射性リガンド結合アッセイ
放射性リガンド結合アッセイを、Ａｘｙｇｅｎ  １．１ｍＬディープウェル９６ウェルポリプロピレンアッセイプレート中で、０．０２５％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を補充したＡｓｓａｙ  Ｂｕｆｆｅｒ中の適切な量の膜タンパク質（ミュー、デルタ及びカッパそれぞれ約３、約２及び約２０μｇ）を含む全アッセイ体積２００μＬで実施した。放射性リガンドのＫｄ値を決定する飽和結合試験を、０．００１ｎＭ〜５ｎＭの範囲の８〜１２の異なる濃度の［３Ｈ］−ジプレノルフィンを使用して実施した。化合物のｐＫｉ値を決定する置換アッセイを、ミュー、デルタ及びカッパそれぞれ０．５、１．２及び０．７ｎＭの［３Ｈ］−ジプレノルフィンを用いて、１０ｐＭ〜１００μＭの範囲の１１の化合物濃度で実施した。
【０１４７】
１サイト競合の３パラメータモデルを使用したＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  Ｓｏｆｔｗａｒｅパッケージ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を用いた非線形回帰分析によって結合データを分析した。曲線最小値は、１０μＭナロキソンの存在下で測定して、非特異的結合の値に固定された。試験化合物のＫｉ値は、Ｐｒｉｓｍにおいて、最適ＩＣ５０値及び放射性リガンドのＫｄ値からＣｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆの式（Ｋｉ＝ＩＣ５０／（１＋（［Ｌ］／Ｋｄ））を使用して計算された。式中、［Ｌ］＝［３Ｈ］−ジプレノルフィンの濃度である。結果は、Ｋｉ値の負の十進法対数ｐＫｉとして表される。
【０１４８】
これらのアッセイにおいて高いｐＫｉ値を有する試験化合物は、ミュー、デルタ又はカッパオピオイド受容体に対して高い結合親和性を有する。化合物１は、ヒトミューオピオイド受容体においてｐＫｉ値９．４を示した。
【０１４９】
アッセイ２：ヒトミューオピオイド受容体を発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞から調製された膜におけるミューオピオイド受容体の作動物質媒介性活性化
このアッセイでは、試験化合物の効力及び固有活性値を、ヒトミューオピオイド受容体を発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞から調製された膜における受容体活性化後に存在する結合ＧＴＰ−Ｅｕ量を測定することによって求めた。
【０１５０】
ａ．ミューオピオイド受容体膜調製：
ヒトミューオピオイド受容体（ｈＭＯＰ）膜を上述したように調製し、又はＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒから購入した。［３Ｈ］−ジプレノルフィン放射性リガンド結合アッセイにおける飽和分析で測定された購入された膜の報告されたｐＫｄ及びＢｍａｘは、それぞれ１０．０６及び２．４ｐｍｏｌ／ｍｇタンパク質であった。タンパク質濃度は、Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｂｒａｄｆｏｒｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ａｓｓａｙキットを使用して測定された。膜を必要になるまで凍結アリコートで−８０℃で貯蔵した。凍結乾燥ＧＴＰ−Ｅｕ及びＧＤＰを、再蒸留Ｈ２Ｏでそれぞれ１０μＭ及び２ｍＭに希釈し、次いで混合し、室温で３０分間静置した後、−２０℃で貯蔵するために個々のアリコート試料に移した。
【０１５１】
ｂ．ヒトｍｕ  ＧＴＰ−Ｅｕヌクレオチド交換アッセイ
ＧＴＰ−Ｅｕヌクレオチド交換アッセイを、ＤＥＬＰＨＩＡ  ＧＴＰ結合キット（Ｐｅｒｋｉｎ／Ｅｌｍｅｒ）を使用し、ＡｃｒｏＷｅｌｌ９６ウェルろ板中で製造者の仕様書に従って実施した。膜を上述したように調製し、アッセイ開始前に、アリコートをＡｓｓａｙ  Ｂｕｆｆｅｒ（５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４  ２５℃）で濃度２００μｇ／ｍＬに希釈し、次いでＰｏｌｙｔｒｏｎホモジナイザーを使用して１０秒間ホモジナイズした。試験化合物をＤＭＳＯ中の１０ｍＭ原液として受け取り、０．１％ＢＳＡを含むＡｓｓａｙ  Ｂｕｆｆｅｒ中に４００μＭまで希釈し、次いで４０ｐＭ−８０μＭ−ＧＤＰ及びＧＴＰ−Ｅｕの範囲の１０種類の濃度の化合物を生成するように作製された連続（１：５）希釈物をＡｓｓａｙ  Ｂｕｆｆｅｒでそれぞれ４μＭ及び４０ｎＭに希釈した。１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、５０ｍＭ  ＮａＣｌ及び０．０１２５％ＢＳＡで希釈された膜タンパク質５μｇ、１０ｐＭ〜２０μＭ）の試験化合物、１μＭ  ＧＤＰ及び１０ｎＭ  ＧＴＰ−Ｅｕを含む総体積１００μＬでアッセイを実施した（最終アッセイ濃度）。（１２．８ｐＭ〜１μＭの範囲の）ＤＡＭＧＯ（Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−（メチル）Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−オール）濃度−反応曲線がプレートごとに含まれた。
【０１５２】
アッセイプレートを、Ａｓｓａｙ  Ｂｕｆｆｅｒ２５μＬ、試験化合物２５μＬ並びにＧＤＰ及びＧＴＰ−Ｅｕ２５μＬの添加後のアッセイ直前に調製した。アッセイを膜タンパク質２５μＬの添加によって開始し、３０分間インキュベートした。次いで、アッセイプレートを、１０〜１２ｉｎ．Ｈｇに調節された家庭用掃除機に接続されたＷａｔｅｒｓ真空マニホールドを用いてろ過し、室温ＧＴＰ  Ｗａｓｈ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（２×３００ｍＬ）で洗浄した。プレートの底部をふき取って、過剰の液体を除去した。次いで、プレートを即時に読んで、Ｐａｃｋａｒｄ  Ｆｕｓｉｏｎ  Ｐｌａｔｅ  ＲｅａｄｅｒＶｅｈｉｃｌｅ上のＴｉｍｅ  Ｒｅｓｏｌｖｅｄ  Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ  （ＴＲＦ）を測定することによって結合ＧＴＰ−Ｅｕ量を求めた。ＤＭＳＯは１％最終アッセイ濃度を超えない。
【０１５３】
結合ＧＴＰ−Ｅｕ量は、試験化合物によるミューオピオイド受容体の活性化度に比例する。百分率で表される固有活性（ＩＡ）は、試験化合物による活性化で観察された結合ＧＴＰ−Ｅｕ量と、完全作動物質（ＩＡ＝１００）であると推定されるＤＡＭＧＯによる活性化で観察された量の比として求められた。化合物１は、このアッセイで−８の固有活性を示した。したがって、本活性薬剤は、拮抗物質であることが示された。
【０１５４】
アッセイ３：Ｉｎ  Ｖｉｖｏ有効性のラットモデル
このアッセイでは、試験化合物の有効性を、末梢活性を評価する消化管通過モデルで評価した。この試験は、Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ａｔ  Ｔｈｅｒａｖａｎｃｅ，Ｉｎｃ．によって認可され、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓによって刊行されたＧｕｉｄｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌｓ（著作権１９９６）に従った。
【０１５５】
ａ．ラット胃内容排出アッセイ
試験化合物をラット胃内容排出アッセイで評価して、ロペラミドによって誘導される胃内容排出の遅延を逆転するその能力を求めた。ラットを終夜絶食させた後、試験化合物又はビヒクルを静脈内、皮下、筋肉内又は経口投与経路によって０．００１から約３０ミリグラム／キログラム（ｍｇ／ｋｇ）の用量で投与した。試験化合物の投与に続いて、用量１ｍｇ／ｋｇのロペラミド、又はビヒクルを皮下投与した。ロペラミド又はビヒクル投与５分後に、非栄養素の非吸収性の木炭の食餌を経口経管栄養によって投与した。実験の６０分間、動物に水を自由に摂らせた。次いで、動物を二酸化炭素窒息によって安楽死させ、続いて開胸し、胃を慎重に切除した。胃を下部食道括約筋及び幽門括約筋において結さつして、組織除去中の更なる排出を防止した。次いで、胃の重量を結さつ糸除去後に測定した。
【０１５６】
ｂ．データ解析及び結果
ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  Ｓｏｆｔｗａｒｅパッケージ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を使用してデータを解析した。逆転率曲線をＳ字形用量反応（可変勾配）モデルを使用した非線形回帰分析によって構築し、最適ＩＤ５０値を計算した。曲線最小値及び最大値をそれぞれ（０％逆転を示す）ロペラミド対照値及び（１００％逆転を示す）ビヒクル対照値に固定した。結果は、ロペラミドの効果の５０％逆転に必要な用量であるＩＤ５０としてミリグラム／キログラム単位で表される。経口投与された化合物１は、胃内容排出モデルにおいてＩＤ５０値が０．０９ｍｇ／ｋｇであった。
【０１５７】
本発明をその具体的実施形態に関連して記述したが、当業者は、本発明の真の精神及び範囲から逸脱することなく、種々の変更を加えることができ、等価物で置換できることを理解すべきである。さらに、多数の改変を加えて、特定の状況、材料、物質組成、プロセス、プロセスステップ（単数又は複数）を本発明の目的、精神及び範囲に適合させることができる。すべてのかかる改変は、添付した特許請求の範囲内にあるものとする。さらに、すべての上記刊行物、特許及び特許文献は、参照によって個々に援用されたかのごとく、参照により全体が本明細書に援用される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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