(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の化学構造であり、
【化１】
0005746615.tif 000039
ここで、Ａは、次の化学構造による抗体結合部分（ＡＢＴ）であり；
【化２】
0005746615.tif 000040
ここで、Ｙ’は、Ｈ又はＮＯ2であり；
Ｘは、Ｏ、ＣＨ2、ＮＲ1、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）2、−Ｓ（Ｏ）2Ｏ、−ＯＳ（Ｏ）2、又はＯＳ（Ｏ）2Ｏであり；
Ｒ1は、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ3のアルキル基、又は−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1〜Ｃ3）の基であり；
Ｂは、前記患者における細胞の細胞表面の前立腺特異的膜抗原に結合可能な次の化学構造による細胞結合部分（ＣＢＴ）であり；
【化３】
0005746615.tif 000041
ここで、Ｘ1及びＸ2は、それぞれ独立に、ＣＨ2、Ｏ、ＮＨ又はＳであり；
Ｘ3は、Ｏ、ＣＨ2、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）2、−Ｓ（Ｏ）2Ｏ、−ＯＳ（Ｏ）2又はＯＳ（Ｏ）2Ｏであり；
Ｒ1は、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ3のアルキル基、又は−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1〜Ｃ3）の基であり；
ｋは、１〜１０の整数であり；
Ｌは、［ＣＯＮ］を分子におけるＡ又はＢに結合する次の化学式によるリンカーであり；
【化４】
0005746615.tif 000042
又は１〜１００のグリコール単位を有するポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、若しくはポリエチレングリコール−ポリプロピレングリコールの共存に基づくリンカーであり；
ここで、Ｒaは、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ3のアルキル基若しくはアルカノール、又はＲ3（プロリン）と共に環を形成し、そしてＲ3は、アミノ酸に由来する側鎖であり；
ｍは、１〜１５の整数であり；
［ＣＯＮ］は、次の化学構造による部分であり；
【化５】
0005746615.tif 000043
分子中の各ｎは、独立して１〜３の整数である、
化合物又はその医薬的に許容可能な塩、溶媒和物若しくは多形体。
【請求項２】
Ａは、
【化６】
0005746615.tif 000044
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記患者における細胞の細胞表面の前立腺特異的膜抗原に結合可能な前記細胞結合部分（ＣＢＴ）は、次の化学構造であり、
【化７】
0005746615.tif 000045
ここで、ｋは、２、３、４、５、又は６である、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
前記リンカーは、次の化学式による基であり、
【化８】
0005746615.tif 000046
ここで、Ｒaは、Ｈ、又はＲ3と環を形成し、そしてＲ3は、アミノ酸に由来する側鎖であり；
ｍは、１〜１５の整数であり、
ｎは１である、
請求項１から３のいずれかに記載の化合物。
【請求項５】
前記リンカーは、１〜１０のグリコール単位を有するポリエチレングリコールに基づくリンカーである、請求項１から４のいずれかに記載の化合物。
【請求項６】
前記リンカーは、次の化学式による基であり、
【化９】
0005746615.tif 000047
ここで、ｍは、１〜１０の整数である、請求項１から４のいずれかに記載の化合物。
【請求項７】
Ａは、
【化１０】
0005746615.tif 000048
であり、
Ｘは、Ｏ又はＮＨであり；
Ｌは、１〜１０のエチレングリコール単位を有するポリエチレングリコールに基づくリンカーであり；
［ＣＯＮ］は、リンカーＬを介してＡ又はＢに結合される、請求項１から３、５のいずれかに記載の化合物。
【請求項８】
次の化学式の化合物であって、
【化１１】
0005746615.tif 000049
ここで、ｎは１〜１０の整数であり、
ｋは２、３、４、５、又は６である、
請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
次の化学式の化合物であって、
【化１２】
0005746615.tif 000050
ここで、ｎは２、３、４、５、又は８である、
請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
医薬的に許容可能なキャリア、添加物又は賦形剤と組み合わされた、請求項１から９のいずれかに記載のキメラ化合物の有効量を含む医薬組成物。
【請求項１１】
追加の抗癌剤の有効量をさらに含む、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記追加の抗癌剤は、代謝拮抗剤、トポイソメラーゼＩ及びＩＩの阻害剤、アルキル化剤、微小管阻害剤又はこれらの混合物である、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記抗癌剤は、アルデスロイキン；アレムツズマブ；アリトレチノイン；アロプリノール；アルトレタミン；アミホスチン；アナストロゾール；三酸化ヒ素；アスパラギナーゼ；生ＢＣＧ；ベキサロテンカプセル；ベキサロテンゲル；ブレオマイシン；静注ブスルファン；経口ブスルファン；カルステロン；カペシタビン；カルボプラチン；カルムスチン；ポリフェプロサン２０インプラントを有するカルムスチン；セレコキシブ；クロラムブシル；シスプラチン；クラドリビン；シクロホスファミド；シタラビン；シタラビンリポソーマル；ダカルバジン；ダクチノマイシン；アクチノマイシンＤ；ダルベポエチン  アルファ；ダウノルビシンリポソーマル；ダウノルビシン；ダウノマイシン；デニロイキン  ディフティトックス；デクスラゾキサン；ドセタキセル；ドキソルビシン；ドキソルビシンリポソーマル；プロピオン酸ドロモスタノロン；エリオットＢ溶液；エピルビシン；エポエチン  アルファ  エストラムスチン；リン酸エトポシド；エトポシド（ＶＰ−１６）；エキセメスタン；フィルグラスチム；フロクスリジン（動脈内）；フルダラビン；フルオロウラシル（５−ＦＵ）；フルベストラント；ゲムツズマブ  オゾガマイシン；酢酸ゴセレリン；ヒドロキシウレア；イブリツモマブ  チウキセタン；イダルビシン；イフォスファミド；メシル酸イマチニブ；インターフェロン  アルファ−２ａ；インターフェロン  アルファ−２ｂ；イリノテカン；レトロゾール；ロイコボリン；レバミソール；ロムスチン（ＣＣＮＵ）；メクロレタミン（ナイトロジェンマスタード）；酢酸メゲストロール；メルファラン（Ｌ−ＰＡＭ）；メルカプトプリン（６−ＭＰ）；メスナ；メトトレキサート；メトクスサレン；マイトマイシンＣ；ミトタン；ミトキサントロン；フェンプロピオン酸ナンドロロン；ノフェツモマブ；ＬＯｄｄＣ；オプレルベキン；オキサリプラチン；パクリタキセル；パミドロネート；ペガデマーゼ；ペガスパルガーゼ；ペグフィルグラスチム；ペントスタチン；ピポブロマン；プリカマイシン；ミトラマイシン；ポルフィマーナトリウム；プロカルバジン；キナクリン；ラスブリカーゼ；リツキシマブ；サルグラモスチム；ストレプトゾシン；タルブビジン（ＬＤＴ）；タルク；タモキシフェン；テモゾロミド；テニポシド（ＶＭ−２６）；テストラクトン；チオグアニン（６−ＴＧ）；チオテパ；トポテカン；トレミフェン；トシツモマブ；トラスツズマブ；トレチノイン（ＡＴＲＡ）；ウラシルマスタード；バルルビシン；バルトルシタビン（モノバルＬＤＣ）；ビンブラスチン；ビノレルビン；ゾレドロネート；及びこれらの混合物である、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
少なくとも１つの抗アンドロゲン化合物をさらに含む、請求項１０から１３のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１５】
少なくとも１つのＧＮＲｈモジュレータをさらに含む、請求項１０から１４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１６】
フルタミド、ビカルタミド、ニルタミド、酢酸シプロテロン、ケトコナゾール、アミノグルテチミド、アバレリックス、ロイプロリド、ゴセレリン、トリプトレリン、ブセレリン、酢酸アビラテロン、ソラフェニブ及びこれらの混合物からなる群から選択される少なくとも１つの薬剤をさらに含む、請求項１０から１５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前立腺肥大用剤、オイレキシン、フルタミド、ゴセレリン、ロイプロリド、ルプロン、ニランドロン、ニルタミド、ゾラデックス及びこれらの混合物からなる群から選択される少なくとも１つの薬剤をさらに含む、請求項１０から１５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１８】
経口の投与形態である、請求項１０から１７のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１９】
薬剤の製造における請求項１から９のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項２０】
患者における癌の治療のための薬剤の製造における請求項１０から１３のいずれかに記載の医薬組成物の使用。
【請求項２１】
必要とする患者における前立腺癌の治療のための薬剤の製造における請求項１０から１７のいずれかに記載の医薬組成物の使用。
【請求項２２】
前記前立腺癌は転移性前立腺癌である、請求項２１に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、癌細胞、特に前立腺癌細胞又は転移性前立腺癌細胞に抗体を動員するために用いられる化合物に関する。本発明による化合物は、リンカー及び任意であるが好ましくは連結分子により、細胞結合末端（ＣＢＴ）に共有結合された抗体結合末端（ＡＢＴ）部分を有する。また、タンパク質標的が多くの非前立腺癌細胞の新生血管に存在するならば、本発明における化合物は、他の癌の種類についての抗脈管形成療法としての機能も果たす。
【０００２】
関連出願及び助成金支援
本願は、２００８年５月１３日に出願した米国仮出願番号ＵＳ６１／１２７，５３９号、発明の名称「Ｃｈｉｍｅｒｉｃ  Ｓｍａｌｌ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｒｅｃｒｕｉｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｔｏ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌｓ」について優先権の利益を主張し、その全内容が本願に援用される。
【０００３】
本発明は、国立衛生研究所からの助成金、助成番号１ＤＰ２ＯＤ００２９１３−０１により支援された。したがって、政府は、本発明について所定の権利を保有する。
【背景技術】
【０００４】
アメリカ人男性の６人に１人が生涯に前立腺癌を発症すると予測されている。非特許文献１参照のこと。前立腺癌の検出及び治療の両方における近年の進歩にもかかわらず、依然としてアメリカ人男性での癌に関連する死亡の主な原因のひとつである。
【０００５】
抗ＤＮＰ抗体は、ヒトの血流中に高濃度で容易に存在する。非特許文献２参照。癌に関係する抗体に指向する多数の小分子が合成されてきた。非特許文献３〜６参照。
【０００６】
本発明は、内因性の抗ジニトロフェニル（ＤＮＰ）抗体を前立腺癌細胞に選択的に再指向可能であり、抗体介在性の細胞媒介性細胞障害を引き起こすことが可能な新規の小分子の設計及び合成を対象とする。
【０００７】
転移する前に前立腺癌が診断されると、患者は９９％以上の生存可能性を有する。この段階での前立腺癌を治療する最も有効な手段は、前立腺全摘出術である。残念ながら、この手術は、生殖器及び膀胱に関連した神経及び血管を切断する危険があり、インポテンス又は失禁をもたらす可能性がある。放射線療法は、インポテンスの危険を伴う一般的に用いられるさらに別の治療である。前立腺癌に対する放射線療法を受ける患者の半数が、２年の治療の間にインポテンスとなる。これらの治療に関連した副作用に加え、それらは、診断で癌が既に非局在化又は転移した患者では極めて効果が少ない。そのような場合、患者は、一般的にホルモン療法や化学療法などのより侵襲的な治療を受ける。残念ながら、多くの患者は、最終的にホルモン療法への反応が止まってしまい、最も効果的な化学療法であるタキソテールでも、進行した前立腺癌患者の寿命を平均で２．５ヶ月延ばすに過ぎない。
【０００８】
他の代替治療として、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）に基づく免疫療法は、生活の良好な質を維持しつつ、癌患者に臨床上有用であることが証明されている。これらの抗体は、シグナル伝達の操作を介して癌細胞の増殖を制御すること、又は細胞毒性を促進させることができる。ＦＤＡで承認済みのｍＡｂを基礎とした抗癌剤は、ハーセプチン及びリツキサン（リツキシマブ）であって、これらはそれぞれ、現在、乳癌及び非ホジキンリンパ腫の治療に用いられている。前立腺癌患者が現在利用可能なｍＡｂを基礎とした治療は存在しないが、ｍＡｂを基礎とした免疫療法に関する進行した臨床試験は、進行した前立腺癌を含む前立腺癌の治療に有望であることを示している。ｍＡｂを基礎とした免疫療法に大きな利点があるにもかかわらず、その可能性を制限するかもしれない大きな危険がある。一般的に、ｍＡｂを基礎とした治療は、かなりの費用がかかり（ハーセプチンの治療全体では、７０，０００ドル）、経口での生体利用性がなく、重度の、そしてしばしば命にかかわる副作用をもたらす可能性がある。例えば、ハーセプチンは、心臓の問題に関連し、心臓に関する合併症のために、癌患者の約１０％に投与できない。リツキサンは、腎不全、感染症、並びに免疫及び肺毒性を含む複数の副作用を生じる可能性がある。
【０００９】
未だ初期段階であるが、ヒト免疫応答を鋳型とした小分子を用いる概念は、現実的な潜在性を示してきた。近年の報告では、小分子が乳癌細胞、メラノーマ細胞及び鼻咽頭表皮癌細胞などの癌細胞に抗体を指向させるのに使用されていることが明らかになっている。動物実験では、これらの分子がマウスにおいて腫瘍拒絶及び抗腫瘍免疫を促進し得ることが示されている。この方法は、内因性の抗体を選択的に関与のある細胞に指向させ得ることから、外因性の抗体を投与することに関連する費用及び副作用を抑えると同時に、ｍＡｂを基礎とした治療の能力を利用する潜在性を有する。抗ＤＮＰ抗体を前立腺癌細胞に動員する同様の方法を開発することで、前立腺癌の全ての形態のための新しい治療法を作り出すと同時に、提案された研究がこの分野を拡大する助けとなるであろう。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｏｃｉｅｔｙ、Ｃａｎｃｅｒ  Ｆａｃｔｓ  ａｎｄ  Ｆｉｇｕｒｅｓ、２００８年、アトランタ
【非特許文献２】Ｏｒｔｅｇａ、Ｅ．；Ｋｏｓｔｏｖｅｔｚｋｙ、Ｍ．；Ｌａｒｒａｌｄｅ、Ｃ．著、Ｍｏｌ．  Ｉｍｍｕｎ．、１９８４年、２１巻、８８３頁
【非特許文献３】Ｌｕら著、Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．、２００４年、５６巻、１１６１頁
【非特許文献４】Ｌｕら著、Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ．、２００７年、４巻、６９５頁
【非特許文献５】Ｃａｒｌｓｏｎら著、ＡＣＳ  Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏ．、２００７年、２巻、１１９頁
【非特許文献６】Ｐｏｐｋｏｖ、Ｍ．；Ｇｏｎｚａｌｅｚ、Ｂ．；Ｓｉｎｈａ、Ｓ．Ｃ．：Ｂａｒｂａｓ、Ｃ．Ｆ．，ＩＩＩ著、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、２００９年、１
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は、特に前立腺癌及び転移性前立腺癌を含む、あらゆる癌を実際に治療するために用いられ得るキメラ化合物を提供することを目的とする。
【００１２】
本発明は、追加の生物活性剤又は癌の治療の助けとなる薬剤、特に転移性前立腺癌を含む前立腺癌の治療の助けとなる薬剤を含む医薬組成物などの医薬組成物を提供するのに用いられ得るキメラ化合物を提供することを更なる目的とする。
【００１３】
本発明は、転移性前立腺癌を含む前立腺癌などの癌を治療する方法を提供することを更に別の目的とする。
【００１４】
本発明は、特に転移性前立腺癌を含む、癌の転移を阻止する方法を提供することを、また更なる目的とする。
【００１５】
本発明のこれら及び／又は他の目的は、本願で述べられる発明の説明から容易に集められるであろう。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明の態様は、キメラ分子が、特に前立腺癌を含め、さらに転移性前立腺癌を含め、ほぼどのような癌であっても罹患する患者の免疫療法を補助するように、前立腺特異的膜抗原（ＰＭＳＡ）に結合し、抗体を引き付けるキメラ抗体動員分子を提供することである。
【００１７】
本発明の第一の態様において、キメラ抗体動員分子は、次の式で示されるもの、又は医薬的に許容可能な塩、溶媒和物若しくは多形体である。
【００１８】
【化１】
0005746615.tif 000002
【００１９】
ここで、Ａは、患者において抗体に結合可能なハプテンを含む抗体結合部分であり；
Ｂは、この患者における細胞の細胞表面の前立腺特異的膜抗原に結合可能な細胞結合部分であり、
Ｌは、分子において、［ＣＯＮ］をＡ又はＢに結合するリンカー分子であり、
［ＣＯＮ］は、リンカー分子をＡ又はＢに結合する結合又は連結分子であり、
分子中の各ｎは、独立して１〜１５、１〜１０、１〜５、１〜３、２〜３、２〜５の整数である。
【００２０】
本発明の追加の態様において、医薬組成物は、上述のキメラ化合物の有効量を、任意かつ好ましくは、医薬的に許容可能なキャリア、添加物又は賦形剤と組み合わせて含む。代替の態様において、医薬的な組み合わせ組成物は、上述のキメラ化合物の有効量を、前立腺癌、特に転移性前立腺癌を含む癌を治療するのに、又は癌、特に前立腺癌の二次的な状態若しくは影響（例えば、本願の他で述べられるような、骨痛、過形成、骨粗鬆など）を治療するのに用いられる少なくとも１つの追加の薬剤と組み合わせて含む。
【００２１】
本発明の更なる態様において、本発明による化合物は、必要としている患者における癌の治療、特に男性患者の前立腺癌の治療に使用される。癌細胞の治療方法は、本願で述べるキメラ化合物の有効量を、医薬的に許容可能なキャリア、添加剤又は賦形剤と組み合わせ、特に任意で前立腺癌、転移癌を含む癌、又はその二次的な状態若しくは影響の１つ以上を治療するのに有効な少なくとも１つの追加の薬剤と組み合わせて、必要とする患者に投与することを含む。
【００２２】
本発明はまた、特に骨、リンパ（リンパ節）系、膀胱、輸精管、腎、肝、肺及び脳を含む、患者の人体のその他の組織への癌の広がり又は転移を減少又は阻害するための前立腺癌を阻害する方法に関する。
【００２３】
本発明はまた、ＰＳＭＡを保持する非癌性細胞の破壊が、治療、特に癌療法で役立つ事実に関する。例えば、ＰＳＭＡが非前立腺癌細胞の多くの新生血管にあるが、通常の新生血管にはない場合、本発明は、これらの癌の新生血管を標的とすることで、他の形態の癌への抗脈管形成療法に使用され得る。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】小分子を鋳型とした免疫療法の概略図であるスキーム１を示す。
【図２】（Ａ）は、ＰＳＭＡの結合ポケットにおける細胞結合末端の計算モデルを示す。（Ｂ）は、ＰＳＭＡ−小分子−抗ＤＮＰ抗体の三重複合体を示す。
【図３】本発明の前立腺癌抗体動員分子であるＰＣ−ＡＲＭ（３）を示す。
【図４】図３の前立腺癌抗体動員分子の合成を示す。Ｃｂｚで保護されたリジン及びｔ−ブチルで保護されたグルタミン酸をトリホスゲンで結合し、続いてＣｂｚの脱保護及びアジド形成を行うことによる３ステップで、アジドで官能基化した細胞結合末端を合成した（スキーム２）。オクタエチレングリコールから５ステップの過程で、ヘテロ二官能性ＰＥＧ１０を合成した（スキーム２）。これらの中間体は、マイクロ波で補助した銅触媒によるヒュスゲン付加環化により結合され、マイクロ波で補助したＴＦＡの脱保護を用いて脱保護され（スキーム３）、これにより本発明の前立腺癌抗体動員分子ＰＣ−ＡＲＭ（３）をもたらした。
【図５】（Ａ）は、ＰＳＭＡ発現ＬＮＣａＰ細胞に結合する小分子３の抗ＤＮＰ抗体依存性を説明する代表的なフローサイトメトリーのヒストグラムを示す。３（５０ｎＭ）でＬＮＣａＰ細胞をプレインキュベートし、その後Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ４８８結合の抗ＤＮＰ抗体でインキュベートした。（Ｂ）は、ＰＳＭＡ陰性ＤＵ−１４５細胞に結合する小分子３の非抗ＤＮＰ抗体依存性を説明する代表的なフローサイトメトリーのヒストグラムを示す。３（５０ｎＭ）でＤＵ−１４５細胞をプレインキュベートし、その後Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ４８８結合の抗ＤＮＰ抗体でインキュベートした。
【図６】ＰＣ−ＡＲＭ（３）（図ではＰ−ＡＲＭ８と示される）で引き起こされた細胞死の百分率の変化を示す。簡単に説明すると、ＬＮＣａＰ細胞及びＰＢＭＣｓを、抗ＤＮＰ抗体ＩｇＧ１、ＩｇＧ３及び抗ＤＮＰ抗体を有すると知られている通常のヒトＩｇＧの試料の存在下で、２４時間３７℃でインキュベートした。細胞死の百分率の変化は、５０ｎＭのＰ−ＡＲＭ８（３）の添加に関係した増加を示す。データは、１２個で採られ、平均±ＳＥＭとして示す。また、各実験を、本来の小分子で引き起こされる細胞死をスクリーニングするため、５０ｎＭのＰ−ＡＲＭ８単独で平行して行った。
【図７】本発明の例示化合物を示す。
【図８】本発明の更なる例示化合物を示す。
【図９】標的となる合成に使用される分岐的合成スキーム１ａを示す。
【図１０】本発明の化合物合成に用いられるプロパルギル中間体の合成であるスキーム２ａを示す。
【図１１】中間体１５の合成、及びクリックケミストリーで使用されるアジド中間体１６の入手案に関するスキーム３ａを示す。
【図１２】ビスｄｉ−ＤＮＰリジン２１の合成法を説明するスキーム４ａを示す。
【図１３】図８の化合物３又は類似の化合物を製造するためにビスジＤＮＰリジン２１と縮合するのに使用され得る、トリスアジジド化類似体の合成法を説明するスキーム５ａを示す。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
以下の用語は、本発明を説明するのに用いられる。用語がここで定義されない場合には、その用語は、文脈においてその用語を本発明の説明での使用に適用して、当業者により認識される技術的な意味を有するものである。
【００２６】
本願で用いられる用語「化合物」は、特に示さない限り、本願に開示される特定の化合物のいずれかを指し、その互変異性体、位置異性体、幾何異性体、及び適用可能である場合には光学異性体（鏡像異性体）、並びにその医薬的に許容可能な塩及び誘導体（プロドラッグの形態を含む）を含む。文脈中で使用される範囲内では、用語化合物は通常、単一化合物を指すが、立体異性体、位置異性体及び／又は光学異性体（ラセミ混合物を含む）などのその他の化合物、並びに開示の化合物の特定の鏡像異性体又は鏡像異性体が濃縮された混合物を含んでもよい。この用語はまた、文脈において、活性部位への投与及び送達を促進するように変更された化合物のプロドラッグの形態も指す。本発明の化合物の説明では、特に種々の置換体、リンカー及び連結分子、並びにそれに関連する変化体が説明されることが特筆される。本願に記載の分子は、以下で一般的に記述されるように、安定な化合物であることが当業者に理解される。
【００２７】
用語「患者」又は「対象」は、明細書の全体を通じて文脈中で、本発明による組成物で予防的な治療（予防）を含む治療が提供される動物、一般的に哺乳類、好ましくはヒトを述べるために使用される。ヒトの患者などの特定の動物、又はヒトの男性患者などの特定の性別の患者に特異的な感染、状態又は疾病の治療については、用語患者は、特定の動物を指す。本発明による化合物は、特に前立腺癌、とりわけ転移性前立腺癌を含め、癌の治療に有用である。
【００２８】
用語「有効」は、本願において、特に示さない限り、文脈において、意図された結果を生み出すか又はもたらすために使用される化合物又は組成物の量を述べるのに使用され、その結果は、本願で他に述べるような、対象における毒性物質の影響の阻害、又は二次的な状態、疾病状態若しくは毒性物質への曝露の兆候についての対象の治療に関係する。この用語は、本願において他に記載される、その他の全ての有効量又は有効濃度の用語（用語「治療的に有効な」も含む）を包含する。
【００２９】
本願で用いられる用語「治療する」、「治療している」及び「治療」等は、前立腺癌又は前立腺癌の転移の危険にある患者に恩恵を与えるあらゆる行為を指し、特に、癌増殖の阻害、癌細胞又は組織の減少、癌の転移が進行することの阻止又は遅延、癌に対して二次的に起こる疾病状態発症の阻止又は遅延、又は癌の鎮静若しくは治癒の少なくとも１つの症状の減少又は抑制を通して状態を改善することを含む。本願で用いる治療は、予防的治療及び治癒的治療の両方を包含する。用語「予防」が使用される場合、上記で別に述べられたように、癌の転移を含む癌の治療の文脈中で、発生の可能性又は発生の重症度を減少させることを意味する。
【００３０】
用語「腫瘍」又は「癌」は、明細書の全体を通じて、癌性又は悪性の新生物、すなわち、細胞増殖により成長し、通常よりもしばしばより急速に成長し、新たな成長を開始した刺激の停止後に成長を継続する異常組織の形成及び成長をもたらす病的過程を指すために使用される。悪性の新生物は、通常の組織との構造的な組織化及び機能的な連動性の部分的又は完全な欠如を示してほぼ周囲組織を侵し、複数の部位に転移し、そして排除が試みられた後に再発し治療が十分でない場合に患者の死亡を招く可能性がある。本願で用いられるように、用語腫瘍は、全ての癌性の病態を記載するのに用いられ、悪性造血性の、腹水の及び固形の腫瘍に関連する病的過程を包含する。代表的な癌は、例えば、前立腺癌、転移性前立腺癌、胃癌、結腸癌、直腸癌、肝癌、脾臓癌、肺癌、乳癌、子宮頸癌、子宮体癌、卵巣癌、精巣癌、膀胱癌、腎臓癌、脳腫瘍／ＣＮＳ癌、頭部癌、首部癌、咽喉癌、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、白血病、黒色腫、非黒色腫の皮膚癌、急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、ユーイング肉腫、小細胞肺癌、絨毛腫、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、神経芽細胞腫、ヘアリー細胞白血病、口腔癌／咽頭癌、食道癌、喉頭癌、腎癌及びリンパ腫であり、本発明の１つ以上の化合物で治療される。抗血管新生化合物としての本発明の化合物の活性のため、本発明は、あらゆる組織におけるあらゆる癌を現実的に治療する一般的適用性を有し、従って、本発明の化合物、組成物及び方法は、癌の治療に一般的に適用可能である。タンパク質標的が、多くの非前立腺の癌細胞の新生血管上にあれば、本発明における化合物は、その他の癌の種類のための抗血管新生療法としての機能も果たし得る。
【００３１】
本発明のある特定の態様において、治療される癌は、前立腺癌又は転移性前立腺癌である。別に、転移性前立腺癌は、疾病の末期において、癌患者の実質的に全ての組織で見つかるかもしれず、一般的には、転移性前立腺癌は、精嚢、リンパ系／節（リンパ腫）、骨、膀胱組織、腎組織、肝組織、及び脳（脳の癌／腫瘍）を含めた実質的に全ての組織で見つかる。したがって、本発明は、一般的に適用可能であり、病因にかかわらず、あらゆる組織でのあらゆる癌を治療するのに用いられ得る。
【００３２】
用語「前立腺癌」は、男性の生殖器官の腺である前立腺において癌が発症する疾病を述べるのに用いられる。これは、前立腺の細胞が変異し制御不能に増殖を開始する時に発生する。これらの細胞は、前立腺から身体のほぼあらゆる他の部分、特に、その他の組織の中でも骨若しくはリンパ節、腎、膀胱及び脳でさえも転移する可能性がある（転移性前立腺癌）。前立腺癌は、痛み、排尿の困難性、性行での問題、勃起障害を引き起こす可能性がある。その他の症状は、疾病の末期の間に潜在的に進行進展する可能性がある。
【００３３】
前立腺癌の検出率は、世界中で大きく異なり、南及び東アジアでは、ヨーロッパ、特にアメリカと比較して発見頻度が低い。前立腺癌は、５０歳過ぎの男性で最も頻繁に発症し、男性で最も高頻度に見られる癌の種類の１つである。しかし、前立腺癌の発症する多くの男性は、症状を有さず、治療を受けることなく、最終的にその他の原因で死に至る。これは、前立腺の癌は、多くの場合、進行が遅く、病気になった人の多くは、６０歳を越えているためである。したがって、前立腺癌とは無関係な原因でしばしば死亡する。遺伝及び食事などの多くの因子が、前立腺癌の発症に関係している。前立腺癌の存在は、症状、健康診断、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）又は生検により示される場合がある。ＰＳＡ検査の正確性及びスクリーニングにおけるその有用性については、懸念がある。疑いのある前立腺癌は、前立腺の生検を採取し顕微鏡でこれを検査することにより、通常は確認される。ＣＴスキャン及び骨スキャンなどの更なる検査は、前立腺癌が広がっているかどうかを検討するために行われてもよい。
【００３４】
治癒目的での前立腺癌に対する治療の選択肢は、初めは外科手術及び放射線療法である。ホルモン療法、化学療法、光子治療、凍結外科手術、高密度焦点式超音波（ＨＩＦＵ）などのその他の治療もまた、臨床シナリオ及び所望の結果に応じて存在する。
【００３５】
男性の年齢及び元の健康状態、転移の程度、顕微鏡での状況、及び初期治療に対する癌の反応性は、疾病の転帰を決定するのに重要である。治癒の意図をもって局部的な前立腺癌（前立腺内に含まれる腫瘍）を治療するかどうかを決定することは、患者の生存及び生活の質の観点における期待される恩恵と弊害との間での患者の妥協である。
【００３６】
前立腺癌を評価する重要な部分は、病期、又は癌が広がっている程度を決定することである。病期を知ることは、予後を定める助けとなり、治療法を選択する際に有用である。最も一般的な分類は、４期のＴＮＭ（腫瘍／節／転移の略称）分類である。この構成要素は、腫瘍の寸法、関与するリンパ節の数、及び他の転移の存在を含む。
【００３７】
いかなる病期分類によってもなされる最も重要な差異は、癌がまだ前立腺内に留まっているか、又は転移性であるかである。ＴＮＭ分類では、臨床のＴ１及びＴ２の癌は、前立腺のみで見つかり、一方Ｔ３及びＴ４の癌は、他の場所に広がっており、その他の組織に転移している。いくつかの検査が、広がりの証拠を探すために使われ得る。これらは、骨盤への広がりを評価するコンピュータ断層撮影、骨への広がりを探索する骨スキャン、並びに前立腺被膜及び精嚢を詳しく評価する直腸コイル磁気共鳴影像法を含む。骨スキャンは、転移する多くのその他の癌に見られるのとは反対に、骨の転移の領域における増加した骨密度による骨芽細胞の外見をしばしば明らかにする。コンピュータ断層撮影（ＣＴ）及び磁気共鳴映像法（ＭＲＩ）は、現在、メタ分析による前立腺癌を患う患者でのリンパ節転移の可能性の評価において、重要な情報を何も追加しない。
【００３８】
前立腺癌は、早期に発見されれば治療が比較的容易である。前立腺の生検の後、病理医は、顕微鏡で試料を検査する。癌が存在すれば、病理医は、腫瘍の悪性度を報告する。悪性度は、腫瘍組織が通常の前立腺組織と異なる程度を示し、腫瘍の成長の早さを示唆する。グリソン分類は、前立腺の腫瘍を２〜１０に等級付けするのに使用され、グリソンスコアが１０である場合、最も異常の程度が高いことを示す。病理医は、顕微鏡で観察された最も一般的な形態について１〜５の数を割り当て、そして２番目の最も一般的な形態に関して同様に行う。これらの２つの数の合計が、グリソンスコアである。ホイットモア−ジェーエット病期は、時に用いられる別の方法である。腫瘍の悪性度は、治療法の提案を決定するのに使用される主な因子の一つであることから、腫瘍の適切な等級付けは重要である。
【００３９】
早期の前立腺癌は通常、無症状である。しばしば、定期健診で分かったＰＳＡの上昇に関しての検査で診断される。しかし、時に前立腺癌は、良性の前立腺肥大などの疾病の症状としばしば同様の症状を発症する。これらは、頻尿、夜間での排尿増加、尿の安定な流れを開始し維持することの困難性、血尿、及び痛みを伴う排尿を含む。前立腺癌は、前立腺が尿道前立腺部を取り囲んでいることから、泌尿器の機能障害に関係する。したがって、前立腺内部の変化は、泌尿器の機能に直接影響を与える。輸精管は、尿道前立腺部に精液を届け、前立腺自体からの分泌物が精液成分に含まれることから、前立腺癌はまた、勃起障害又は痛みを伴う射精などの性機能及び性的能力での問題をもたらす可能性がある。
【００４０】
進行した前立腺癌は、身体の他の部位に広がることがあり、これは更なる症状をもたらす可能性がある。最も一般的な症状は、しばしば椎骨（脊椎骨）、骨盤又は肋骨で起こる骨痛である。大腿骨などのその他の骨への癌の広がりは、通常、骨の近位部についてである。脊椎における前立腺癌もまた、脊髄を圧迫し、下肢の脱力、尿失禁及び便失禁を起こすことがある。
【００４１】
前立腺癌の具体的な原因は、未だ不明である。前立腺癌を発症する男性の危険性は、その年齢、遺伝子、人種、食事、生活様式、医薬、及びその他の要因に関係する。主な危険要因は、年齢である。前立腺癌は、４５歳未満の男性では一般的ではないが、加齢に伴い一般的となる。診断時の平均年齢は７０である。しかし、多くの男性は、前立腺癌であることを全く分からない。
【００４２】
男性の遺伝的背景は、前立腺癌を発症させる危険の一因となる。このことは、特定の人種集団、前立腺癌を患う男性の一卵性双生児、及び特定の遺伝子を有する男性に見られる前立腺癌の発症率増加により示唆される。前立腺癌を患う兄弟又は父親を有する男性は、前立腺癌発症の通常の危険性の２倍の危険性を有する。スカンジナビアにおける双子の研究で示唆されるように、前立腺癌の危険性の４０％は、遺伝的因子により説明され得る。しかし、前立腺癌の原因である単一の遺伝子は見出されておらず、多くの異なる遺伝子が関与している。女性における卵巣癌及び乳癌の重大な危険因子である２つの遺伝子（ＢＲＣＡ１及びＢＲＣＡ２）もまた、前立腺癌に関与している。
【００４３】
特定の食物、ビタミン及びミネラルの規定量は、前立腺癌の危険の一因となる。前立腺癌の危険を増加させるおそれのある食事要因は、ビタミンＥ、ミネラルのセレン、緑茶及びビタミンＤの摂取量の低さなどである。大規模な研究が、乳製品、特にパルミチン酸ビタミンＡが添加された低脂肪牛乳及びその他の乳製品について行われている。合成ビタミンＡのこの形態は、亜鉛及びタンパク質と反応して非吸収性の複合体を形成することから、前立腺癌に関連している。また、前立腺癌は、特定の乳製品におけるウシ成長ホルモンの含有にも関係している。
【００４４】
また、前立腺癌と、医薬、医療及び医学的状態との間にもいくらかの関係がある。アスピリン、イブプロフェン又はナプロキセンなどの抗炎症剤の日常的な使用は、前立腺癌の危険を減少させるようである。スタチン類として公知のコレステロール降下剤の使用もまた、前立腺癌の危険を減少させるようである。前立腺の感染又は炎症（前立腺炎）は、前立腺癌の可能性を増加させるようであり、またクラミジア、淋病又は梅毒などの性感染症の感染は、危険性を増加させるようである。肥満、及びテストステロンの血中濃度の上昇は、前立腺癌の危険を増大させるようである。
【００４５】
前立腺癌は、通常の精液を分泌する前立腺細胞が癌細胞に変異した場合に開始する、アデノカルシノーマ又は腺癌として分類される。アデノカルシノーマが最も一般的である前立腺の領域は、辺縁部である。病初では、癌細胞の小塊は、他の正常な前立腺に留められており、上皮内癌又は前立腺上皮内腫瘍（ＰＩＮ）として知られる状態である。ＰＩＮが癌の前駆体であるという証明はないが、癌と密接に関連する。時間と共に、これらの癌細胞は増殖し始め、周囲の前立腺組織（間質）に広がり、腫瘍を形成する。最終的には、腫瘍は、精嚢若しくは直腸などのすぐ近くの器官を冒すのに十分大きく成長することがあり、又は腫瘍細胞は、血流やリンパ系を移動する能力を得ることがある。身体の他の部位を冒し得る細胞の塊であることから、前立腺癌は、悪性の腫瘍と考えられる。他の器官へのこの浸潤は、転移と称される。前立腺癌は、骨、リンパ節、直腸及び膀胱に最も一般的に転移する。
【００４６】
前立腺癌において、正常な前立腺の正常な腺は、異常な腺及び細胞の塊に取って代わられる。男性が前立腺の症状を有する場合、又はスクリーニング検査が癌の危険性の増大を示す場合、より浸襲的精査が提供される。前立腺癌の診断を完全に確認し得る唯一の検査は、顕微鏡観察のために前立腺の小片を取る生検である。しかし、生検に先立って、前立腺及び尿路についてのより多くの情報を収集するのに複数の他の手段が用いられる場合がある。膀胱鏡検査法は、尿道の下方から挿入された薄く柔軟性のある撮像管を用いて、膀胱の内部から尿路を見せる。経直腸的超音波断層法は、直腸におけるプローブからの音波を用いて前立腺の像を生成する。
【００４７】
生検の後、組織試料は、次に顕微鏡で検査され、癌細胞が存在するかどうかを明らかにし、そして見られた癌の顕微鏡的特徴（又はグレソンスコア）を評価する。また、組織試料は、転移した悪性細胞の出所を明らかにするために、ＰＳＡの存在及び他の腫瘍のマーカーのために染色されてもよい。早期前立腺抗原−２（ＥＰＣＡ−２）及びプロスタソーム分析など、前立腺癌の診断のための複数の他の可能性のある手法が行われている。
【００４８】
本発明による化合物を用いた治療に加えて、前立腺癌のための治療（予防的治療を含む）は、食事性セレン、ビタミンＥ、リコピン、大豆食品、ビタミンＤ、緑茶、オメガ３脂肪酸及び植物エストロゲンで、前立腺癌を減少させる役割を支持する。選択的エストロゲン受容体モジュレータであるトレミフェンは、初期試験において有望である。テストステロンのジヒドロテストステロンへの変換を阻害する（及び細胞成長傾向を低下させる）２つの医薬、フィナステリド及びデュタステリドは、有用であることが示されている。アブラナ科の野菜（カリフラワー及びブロッコリー）に見られる植物化学物質のインドール−３−カルビノール及びジインドリルメタンは、好ましい抗アンドロゲン特性及び免疫調節特性を有する。前立腺癌の危険性は、菜食主義者の食生活で低下される。
【００４９】
前立腺癌の治療は、ホルモン療法のみならず、積極的監視、外科手術（前立腺切除又は睾丸摘出）、小線源療法（前立腺癌小線源療法）を含む放射線療法及び外部ビーム放射を含んでもよい。下記を含む複数のホルモン療法の形態があり、それぞれが本発明の化合物と組み合わされてもよい。
【００５０】
・前立腺癌細胞内においてテストステロン及びＤＨＴの作用を直接阻害するフルタミド、ビカルタミド、ニルタミド、及び酢酸シプロテロンなどの抗アンドロゲン剤。
・ＤＨＥＡなどの副腎アンドロゲンの産生を阻害するケトコナゾール及びアミノグルテチミドなどの薬剤。これらの薬剤は、精巣において産生される９５％のアンドロゲンを阻害することができる他の方法と組み合わせてのみ一般的に使用される。これらの組み合わされた方法は、完全アンドロゲン除去療法（ＴＡＢ）と呼ばれ、抗アンドロゲン剤を用いても達成され得る。
・作動薬及び拮抗薬を含む、ＧｎＲＨモジュレータ。ＧｎＲＨ拮抗薬は、ＬＨの産生を直接抑制し、一方でＧｎＲＨ作動薬は、初期刺激作用の後に下方制御の過程によってＬＨを抑制する。アバレリックスは、ＧｎＲＨ拮抗薬の例であり、一方でＧｎＲＨ作動薬としては、ロイプロリド、ゴセレリン、トリプトレリン及びブセレリンが挙げられる。
・酢酸アビラテロンは、７０％の患者でＰＳＡ値及び悪性の末期前立腺癌における腫瘍の寸法を減少させるのに使用され得る。ソラフェニブもまた、転移性前立腺癌を治療するのに使用されてもよい。
【００５１】
上記の各治療は、特定の状況においてその使用を制限するという欠点を有する。ＧｎＲＨ作動薬は、最終的に睾丸摘出と同様の副作用を発症するが、治療の初期においてより悪い症状を発症することがある。ＧｎＲＨ作動薬が最初に使用される時、テストステロンの急上昇が転移性癌による骨痛の増加をもたらす可能性があり、そのため抗アンドロゲン剤又はアバレリックスが、これらの副作用を弱めるようにしばしば添加される。エストロゲンは、心臓血管疾患及び血栓に対する危険を増加させることから、一般的に使用されない。抗アンドロゲンは、一般的にインポテンスを発症せず、通常は骨及び筋肉の減少が少ない。ケトコナゾールは、長期使用で肝障害を発症する可能性があり、アミノグルテチミドは、皮膚発疹を発症する可能性がある。
【００５２】
進行した段階の前立腺癌のための緩和ケアは、延命、及び転移性疾患の症状の軽減に重点が置かれる。上述したように、酢酸アビラテロンは、ソラフェニブのように進行した段階の前立腺癌を治療するのに有望である。化学療法は、疾病の進行を遅らせ、かつ症状を先送りするように提供されてもよい。最も一般的に用いられる投薬計画は、化学療法薬のドセタキセルを、プレドニゾンなどの副腎皮質ステロイドと組み合わせる。ゾレドロン酸などのビスホスホネートは、骨折などの骨格合併症、又は耐ホルモン性の転移性前立腺癌を患う患者での放射線療法の必要性を遅らせることが示されている。アルファラジンは、骨の転移を標的にして使用されてもよい。第二相の試験は、患者の生存期間を長期化させ、痛みを減少させ、かつ生活の質を向上させることを示す。
【００５３】
転移性の疾患による骨痛は、モルヒネ及びオキシコドンなどのオピオイド系鎮痛剤で治療される。骨の転移に対する外部ビーム放射線療法は、痛みの緩和をもたらす場合がある。ストロンチウム８９、リン３２又はサマリウム１５３などの特定の放射性同位元素の注射もまた、骨の転移を標的にして、痛みを緩和する一助となる場合がある。
【００５４】
積極的監視及び決定的治療法に対する代わりとして、代替的な治療法もまた、前立腺癌の処置に使用されてもよい。ＰＳＡは、完全菜食主義の食事（魚は許容）、習慣的な運動及びストレスの減少を利用して、明らかな限局性前立腺癌を患う男性において低下されることが示されている。ザクロ果汁や種々のマメ科植物に見られるイソフラボンであるゲニステインなど、多くの他の単剤は、短期試験において、ＰＳＡを減少させ、ＰＳＡの倍加期間を遅延させ、又は短期間の試験において局在化された癌を患う男性における二次的マーカーに対して同様の効果を有することが示されている。
【００５５】
転移性及び進行性の前立腺癌の兆候、二次的状態又は影響は、特に、貧血、骨髄抑制、体重減少、病的骨折、脊髄圧迫、痛み、血尿、尿管及び／又は膀胱出口閉塞、尿閉、慢性腎不全、尿失禁、並びに骨又は軟部組織の転移に関連する症状である。
【００５６】
本発明によるキメラ抗体動員化合物と組み合わせて使用されてもよい追加の前立腺の薬としては、例えば、前立腺肥大用薬／薬剤、並びにエウレキシン、フルタミド、ゴセレリン、ロイプロリド、ルプロン、ニランドロン、ニルタミド、ゾラデックス及びこれらの混合物が挙げられる。上記の前立腺肥大用薬／薬剤としては、例えば、アムベニル、アムボフェン、アムゲナル、アトロセプト、ボロマニル、ブロモジフェンヒドラミン−コデイン、ブロモツス−コデイン、カルデュラ、クロロフェニラミンヒドロコドン、シクロピロックス、クロトリマゾール−ベタメタゾン、ドルセド、デュタセリド、フィナステリド、フロマックス、ゲシル、ヘキサロール、ラミシル、ラナセド、ロプロックス、ロトリゾン、メテナミン、メテン−ベラ−メト  Ｂｌ−フェンサル、ｍｅｔｈ−ｈｙｏｓ−ａｔｒｐ−Ｍ  Ｂｌｕｅ−ＢＡ−ｐｈｓａｌ、ＭＨＰ−Ａ、ミバニル、プロセド／ＤＳ、Ｒｏ−Ｓｅｄ、Ｓ−Ｔ  Ｆｏｒｔｅ、タムスロシン、テルビナフィン、トラク、ツシオネックス、ｔｙ−メテート、ウラミン、ウラチン、ウレトロン、ウリドン、ｕｒｏ−ｖｅｓ、ウルスタット、ウセプト及びこれらの混合物が挙げられる。
【００５７】
用語「腫瘍」は、悪性又は良性の成長又は腫脹を述べるのに使用される。
【００５８】
用語「抗体結合末端部分」、「抗体結合末端」又は「抗体結合部分」は、少なくとも１つの小分子又はハプテンを含む本発明によるキメラ化合物の部分を述べるのに使用される。用語「ハプテン」は、単独では抗原性を有しないが、キャリアタンパク質（アルブミン等）などの他の分子と結合されたとき又は本発明の場合において、その化合物の細胞結合末端部分が抗原性を有する低分子量の無機又は有機分子を述べるのに使用される；そして、ハプテン（一般的にハプテンは、キャリアと結合又は複合化する）に対する抗体は、ハプテン単独と反応することとなる。
【００５９】
好ましくは、抗体結合末端は、本発明の化合物による治療を開始する前に患者において前もって存在し、治療計画の一部として分離される必要のない内因性抗体と反応する（結合する）ハプテンを有する。したがって、下記のようにジ−又はトリニトロフェニル基を有するハプテン、又はジガラクトースハプテン（Ｇａｌ−Ｇａｌ−Ｚ、好ましくは、Ｇａｌ−Ｇａｌ−糖、好ましくは、Ｇａｌ−Ｇａｌ−Ｇｌｕ）が好ましい。また、本発明において、ハプテンとして次の一般構造による化合物を用いてもよい。
【００６０】
【化２】
0005746615.tif 000003
【００６１】
ここで、Ｘ’’は、Ｏ、ＣＨ2、ＮＲ1、Ｓであり；
Ｒ1は、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ3のアルキル基、又は−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1〜Ｃ3）の基である。
【００６２】
さらに本発明において、ハプテン（ＡＢＴ）として、次の化学構造による部分を用いてもよい。
【００６３】
【化３】
0005746615.tif 000004
【００６４】
ここで、Ｘbは、結合、Ｏ、ＣＨ2、ＮＲ1又はＳである。
【００６５】
本発明において使用されるジ−又はトリニトロフェニルハプテン（ＡＢＴ）は、次の式により示されるものであってもよい。
【００６６】
【化４】
0005746615.tif 000005
【００６７】
ここで、Ｙ’は、Ｈ又はＮＯ2であり；
Ｘは、Ｏ、ＣＨ2、ＮＲ1、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）2、−Ｓ（Ｏ）2Ｏ、−ＯＳ（Ｏ）2、又はＯＳ（Ｏ）2Ｏであり；
Ｒ1は、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ3のアルキル基、又は−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1〜Ｃ3）の基である。
【００６８】
（Ｇａｌ−Ｇａｌ−Ｚ）ハプテンは、次の化学式で示される。
【００６９】
【化５】
0005746615.tif 000006
【００７０】
ここで、Ｘ’は、ＣＨ2、Ｏ、Ｎ−Ｒ1'又はＳ、好ましくはＯであり；
Ｒ1'は、Ｈ又はＣ1〜Ｃ3のアルキル基であり；
ここで、Ｚは、結合、単糖、二糖、オリゴ糖、糖タンパク又は糖脂質、好ましくは糖基、より好ましくは、アルドース及びケトースを含む単糖、並びに下記に述べる二糖を含む二糖から選択される糖基である。単糖のアルドースは、アルドトリオース（特に、Ｄ−グリセルアルデヒド）、アルドテトロース（特に、Ｄ−エリスロース及びＤ−スレオース）、アルドペントース（特に、Ｄ−リボース、Ｄ−アラビノース、Ｄ−キシロース、Ｄ−リキソース）、アルドヘキソース（特に、Ｄ−アロース、Ｄ−アルトロース、Ｄ−グルコース、Ｄ−マンノース、Ｄ−グロース、Ｄ−イドース、Ｄ−ガラクトース及びＤ−タロース）などの単糖を含み、単糖のケトースは、ケトトリオース（特に、ジヒドロキシアセトン）、ケトテトロース（特に、Ｄ−エリスルロース）、ケトペントース（特に、Ｄ−リブロース及びＤ−キシルロース）、ケトヘキソース（特に、Ｄ−サイコン、Ｄ−フルクトース、Ｄ−ソルボース、Ｄ−タガトース）、特にガラクトサミン、シアル酸、Ｎ−アセチルグルコサミンを含むアミノ糖、特にスルホキノボースを含むスルホ糖などの単糖を含む。本発明で使用される例示の二糖は、特に、スクロース（任意にＮ−アセチル化されたグルコースを有してもよい）、ラクトース（任意にＮ−アセチル化されたガラクトース及び／又はグルコースを有してもよい）、マルトース（任意にＮ−アセチル化されたグルコース残基の一方又は両方を有してもよい）、トレハロース（任意にＮ−アセチル化されたグルコース残基の一方又は両方を有してもよい）、セルビオース（任意にＮ−アセチル化されたグルコース残基の一方又は両方を有してもよい）、コージビオース（任意にＮ−アセチル化されたグルコース残基の一方又は両方を有してもよい）、ニゲロース（任意にＮ−アセチル化されたグルコース残基の一方又は両方を有してもよい）、イソマルトース（任意にＮ−アセチル化されたグルコース残基の一方又は両方を有してもよい）、β，β−トレハロース（任意にＮ−アセチル化されたグルコース残基の一方又は両方を有してもよい）、ソホロース（任意にＮ−アセチル化されたグルコース残基の一方又は両方を有してもよい）、ラミナリビオース（任意にＮ−アセチル化されたグルコース残基の一方又は両方を有してもよい）、ゲンチオビオース（任意にＮ−アセチル化されたグルコース残基の一方又は両方を有してもよい）、ツラノース（任意にＮ−アセチル化されたグルコース残基を有してもよい）、マルツロース（任意にＮ−アセチル化されたグルコース残基を有してもよい）、パラチノース（任意にＮ−アセチル化されたグルコース残基を有してもよい）、ゲンチオビルオース（任意にＮ−アセチル化されたグルコース残基を有してもよい）、マンノビオース、メリビオース（任意にＮ−アセチル化されたグルコース残基及び／又はガラクトース残基を有してもよい）、メリビウロース（任意にＮ−アセチル化されたガラクトース残基を有してもよい）、ルチノース（任意にＮ−アセチル化されたグルコース残基を有してもよい）、ルチヌロース及びキシロビオースを含む。Ｚとして本発明に用いるオリゴ糖は、上述された個々の糖（糖類）単位（すなわち、あらゆる順序での、上述のいずれか１つ以上の��単位、特に、上述のグルコース及び／又はガラクトース単位を含む）の３つ又はそれ以上（約１００まで）のいかなる糖、すなわち例えば、フルクト−オリゴ糖、ガラクトオリゴ糖及び大きさにおいて３から１０〜１５の範囲の糖単位のマンナン−オリゴ糖を含むことができる。本発明に用いる糖タンパク質は、例えば、特に、ムチン、コラーゲン、トランスフェリン、セルロプラスミン、主要組織適合性複合タンパク質（ＭＨＣ）、酵素、レクチン及びセレクチン、カルネキシン、カルレチクリン、並びにインテグリン糖タンパク質ＩＩｂ／ＩＩａを含むＮ−グリコシル化及びＯ−グリコシル化糖タンパク質を含む。本発明に用いる糖脂質は、例えば、特に、グリセロ糖脂質（ガラクトリピッド、スルフォリピッド）、セレブロシドなどのグリコスフィンゴリピッド、ガラクトセレブロシド、グルコセレブロシド（グルコビカラナテオエツを含む）、ガングリオシド、グロボシド、スルファチド、グリコホスホフィンゴリピッド及びグリコカリクスを含む。
【００７１】
好ましくは、Ｚは、結合（Ｇａｌ−Ｇａｌの二糖類をリンカー又は連結分子に結合する）、又はグルコース若しくはグルコサミン（特に、Ｎ−アセチルグルコサミン）である。Ｚは、Ｇａｌ−Ｇａｌのガラクトースの水酸基又はアミン基を介して、好ましくは水酸基を介して、ガラクトース残基に結合される。好ましいハプテンは、次の構造により示されるＧａｌ−Ｇａｌ−Ｇｌｕである。
【００７２】
【化６】
0005746615.tif 000007
【００７３】
用語「細胞結合末端部分」、「細胞結合末端」又は「細胞結合部分」は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に特異的に結合できる少なくとも１つの小分子又は部分を含む本発明によるキメラ化合物の部分を述べるのに用いられる。
【００７４】
本発明で用いる好ましいＣＢＴ基は、下に記されるもの、又はその塩である。
【００７５】
【化７】
0005746615.tif 000008
【００７６】
ここで、Ｘ1及びＸ2は、それぞれ独立に、ＣＨ2、Ｏ、ＮＨ又はＳであり；
Ｘ3は、Ｏ、ＣＨ2、ＮＲ1、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）2、−Ｓ（Ｏ）2Ｏ、−ＯＳ（Ｏ）2又はＯＳ（Ｏ）2Ｏであり；
Ｒ1は、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ3のアルキル基、又は−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1〜Ｃ3）の基であり；
ｋは、０〜２０、８〜１２、１〜１５、１〜１０、１〜８、１〜６、１、２、３、４、５又は６の整数である。
【００７７】
用語「リンカー」は、任意で連結部分により共有結合を介して、抗体結合末端（ＡＢＴ）部分を細胞結合末端（ＣＢＴ）部分に連結する化学物質を指す。抗体結合末端（ＡＢＴ）及び細胞結合末端（ＣＢＴ）である、分子の２つの活性部分の間のリンカーは、長さが約５Å〜約５０Å以上、長さが約６Å〜約４５Å、長さが約７Å〜約４０Å、長さが約８Å〜約３５Å、長さが約９Å〜約３０Å、長さが約１０Å〜約２５Å、長さが約７Å〜約２０Å、長さが約５Å〜約１６Å、長さが約５Å〜約１５Å、長さが約６Å〜約１４Å、長さが約１０Å〜約２０Å、長さが約１１Å〜約２５Åなどの範囲である。エチレングリコール単位に基づき長さが８〜１２グリコール単位のリンカーが好ましい。本願に開示された長さのリンカーを有することにより、ＡＢＴ部分及びＣＢＴ部分は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）及び本発明の化合物が結合される細胞へ誘引する内因性抗体に結合した本発明の化合物の生物学的活性を有利に活用するようにして配置され、ＰＳＭＡを有し、本発明の化合物が存在するいかなる組織であっても、これらの細胞の選択的かつ標的化された細胞死をもたらす。リンカー成分の選択は、実証された生体適合性、水媒体及び有機媒体での溶解性、並びに低い免疫原性／抗原性の特性に基づく。本願に記載されるような多数のリンカーが使用され得るが、これらの分子の化学的及び生物学的特性により、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）結合、ポリプロピレングリコール結合又はポリエチレングリコール−ポリプロピレン共オリゴマー（約１００単位以下、約１〜１００、約１〜７５、約１〜６０、約１〜５０、約１〜３５、約１〜２５、約１〜２０、約１〜１５、約１〜１０、約８〜１２、約１〜８等）に基づくリンカーが好ましい。ポリエチレン（ＰＥＧ）結合を用いることが好ましい。
【００７８】
好ましいリンカーは、次の化学構造のものを含み、又は、１〜１００のグリコール単位を有するポリプロピレングリコールリンカー若しくはポリプロピレン−ポリエチレングリコール共リンカーである。
【００７９】
【化８】
0005746615.tif 000009
【００８０】
ここで、Ｒaは、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ3のアルキル基若しくはアルカノール、又はＲ3（プロリン）と共に環を形成し、そしてＲ3は、アミノ酸に由来する側鎖であり、好ましくはアラニン（メチル）、アルギニン（プロピレングアニジン）、アスパラギン（メチレンカルボキシアミド）、アスパラギン酸（エタン酸）、システイン（チオール、還元又は酸化ジチオール）、グルタミン（エチルカルボキシアミド）、グルタミン酸（プロパン酸）、グリシン（Ｈ）、ヒスチジン（メチレンイミダゾール）、イソロイシン（１−メチルプロパン）、ロイシン（２−メチルプロパン）、リジン（ブチレンアミン）、メチオニン（エチルメチルチオエーテル）、フェニルアラニン（ベンジル）、プロリン（Ｒ3が、Ｒa及び隣接する窒素基と環を形成し、ピロリジン基を形成する）、セリン（メタノール）、スレオニン（エタノール、１−ヒドロキシエタン）、トリプトファン（メチレンインドール）、チロシン（メチレンフェノール）又はバリン（イソプロピル）からなる群から選択され；
ｍは、１〜１００、１〜７５、１〜６０、１〜５５、１〜５０、１〜４５、１〜４０、２〜３５、３〜３０、１〜１５、１〜１０、１〜８、１〜６、１、２、３、４又は５の整数である。
【００８１】
あるいは、次の化学式によるリンカーである。
【００８２】
【化９】
0005746615.tif 000010
【００８３】
ここで、Ｚ及びＺ’は、それぞれ独立して、結合、−（ＣＨ2）i−Ｏ、−（ＣＨ2）i−Ｓ、−（ＣＨ2）i−Ｎ−Ｒ、
【００８４】
【化１０】
0005746615.tif 000011
であり、
上記の−（ＣＨ2）i基は、Ｚ又はＺ’に存在する場合、連結子、ＡＢＴ又はＣＢＴと結合され；
各Ｒは、Ｈ、又はＣ1〜Ｃ3のアルキル基若しくはアルカノール基であり；
各Ｒ2は、独立に、Ｈ又はＣ1〜Ｃ3のアルキル基であり；
各Ｙは、独立に、結合、Ｏ、Ｓ又はＮ−Ｒであり；
各ｉは、独立に、１〜１００、１〜７５、１〜６０、１〜５５、１〜５０、１〜４５、１〜４０、２〜３５、３〜３０、１〜１５、１〜１０、１〜８、１〜６、１、２、３、４又は５であり；
Ｄは、
【００８５】
【化１１】
0005746615.tif 000012
結合であり、ただし、Ｚ、Ｚ’及びＤが、それぞれ同時に結合でないことを条件とし；
ｊは、１〜１００、１〜７５、１〜６０、１〜５５、１〜５０、１〜４５、１〜４０、２〜３５、３〜３０、１〜１５、１〜１０、１〜８、１〜６、１、２、３、４又は５であり；
ｍ’は、１〜１００、１〜７５、１〜６０、１〜５５、１〜５０、１〜４５、１〜４０、２〜３５、３〜３０、１〜１５、１〜１０、１〜８、１〜６、１、２、３、４又は５であり；
ｎは、１〜１００、１〜７５、１〜６０、１〜５５、１〜５０、１〜４５、１〜４０、２〜３５、３〜３０、１〜１５、１〜１０、１〜８、１〜６、１、２、３、４又は５であり；
Ｘ1は、Ｏ、Ｓ又はＮ−Ｒであり；
Ｒは、上述の通りであり、
又は、その医薬的に許容可能な塩である。
【００８６】
［ＣＯＮ］の記号で表される用語「連結子」は、本願の他で述べられるような、活性されたＡＢＴ−リンカーとＣＢＴ部分（好ましくは、やはり活性化されている）との反応生成物又はＡＢＴ部分と活性されたリンカー−ＣＢＴとの反応生成物から形成される、本発明によるキメラ化合物に任意に含まれる化学的部分を述べるのに使用される。連結基は、本発明によるキメラ化合物を生成するために、他で述べられるように連結基を提供できる反応基を含む２つの別々の化学的断片の簡易な縮合から形成される、結果として生じる部分である。連結子は、本発明によるキメラ化合物をもたらすのに用いられる特定の化学的構造の結果であるという点で、リンカーと区別でき、これらの基の反応生成物は、本願の他で述べるようなリンカー基と区別し得る同定可能な連結基をもたらすことが特筆される。連結基及びリンカー基の記述の間に、特に本願の他で述べるアミド基、酸素（エーテル）、イオウ（チオエーテル）、又はアミノ結合、尿素、炭酸塩の−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−基などのより一般的な連結基に関しては、いくらかの重複があるかもしれないことが特筆される。連結子（又はリンカー）は、次の記号を用いて他の基に結合されるとして示される位置において、ＡＢＴ、リンカー又はＣＢＴに結合できることがさらに特筆される。
【００８７】
【化１２】
0005746615.tif 000013
２つ以上のそのような基が、リンカー又は連結子に存在する場合、ＡＢＴ、リンカー又はＣＢＴのいずれかが、そのような基と結合できる。
【００８８】
本発明に用いられる一般的な連結基は、次の化学基を含む。
【００８９】
【化１３】
0005746615.tif 000014
【００９０】
ここで、Ｘ2は、Ｏ、Ｓ、ＮＲ4、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）2、−Ｓ（Ｏ）2Ｏ、−ＯＳ（Ｏ）2又はＯＳ（Ｏ）2Ｏであり；
Ｘ3は、Ｏ、Ｓ、ＮＲ4であり；
Ｒ4は、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ3のアルキル基若しくはアルカノール基、又は−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1〜Ｃ3）の基である。
【００９１】
用語「医薬的に許容可能な塩」又は「塩」は、本明細書を通じて、化合物の溶解及び生物学的利用能を促進するために、非経口投与のための生理食塩水又は患者の胃腸管の胃液において化合物の溶解性を増加させるようにしてある、本願における１つ以上の組成物の塩の形態を述べるのに使用される。医薬的に許容可能な塩は、医薬的に許容可能な無機又は有機の塩基及び酸に由来するものを含む。適当な塩は、医薬の分野において公知の多数の酸の中でも特に、カリウム及びナトリウムなどのアルカリ金属、カルシウム、マグネシウム及びアンモニウム塩などのアルカリ土類金属に由来するものなどである。ナトリウム塩及びカリウム塩は、本発明での組成物を含むカルボン酸及び遊離リン酸の中和塩として好ましい。用語「塩」は、本発明での化合物の使用と合致するあらゆる塩を意味する。化合物が転移性前立腺癌を含む前立腺癌の治療を含む医薬的適応において使用される場合、用語「塩」は、医薬品としての化合物の使用と合致する、医薬的に許容可能な塩を意味する。
【００９２】
用語「同時投与」は、２つ以上の化合物のそれぞれの有効量又は有効濃度が、所定の時間において患者に見出されるように、少なくとも２つの化合物又は組成物が同時に患者に投与されることを意味する。本発明による化合物は、同時に患者に同時投与されるであろうが、この用語は、全ての同時投与される化合物又は組成物の有効濃度が所定の時間において対象に見られるならば、２つ以上の薬剤が同時に又は異なった時間に投与されることの両方を含む。本発明によるキメラ抗体動員化合物は、癌、特に転移性前立腺癌を含む前立腺癌の症状を治療し又は改善するのに使用される１つ以上の追加の抗癌剤又はその他の剤と共に投与されてもよい。本発明による１つ以上のキメラ化合物と組み合わせて同時投与できる例示の抗癌剤は、例えば、代謝拮抗剤、トポイソメラーゼＩ及びＩＩの阻害剤、アルキル化剤、並びに微小管阻害剤（例えば、タキソール）などである。本発明において用いる特定の抗癌化合物は、例えば、特に、アルデスロイキン；アレムツズマブ；アリトレチノイン；アロプリノール；アルトレタミン；アミホスチン；アナストロゾール；三酸化ヒ素；アスパラギナーゼ；生ＢＣＧ；ベキサロテンカプセル；ベキサロテンゲル；ブレオマイシン；静注ブスルファン；経口ブスルファン；カルステロン；カペシタビン；カルボプラチン；カルムスチン；ポリフェプロサン２０インプラントを有するカルムスチン；セレコキシブ；クロラムブシル；シスプラチン；クラドリビン；シクロホスファミド；シタラビン；シタラビンリポソーマル；ダカルバジン；ダクチノマイシン；アクチノマイシンＤ；ダルベポエチン  アルファ；ダウノルビシンリポソーマル；ダウノルビシン；ダウノマイシン；デニロイキン  ディフティトックス；デクスラゾキサン；ドセタキセル；ドキソルビシン；ドキソルビシンリポソーマル；プロピオン酸ドロモスタノロン；エリオットＢ溶液；エピルビシン；エポエチン  アルファ  エストラムスチン；リン酸エトポシド；エトポシド（ＶＰ−１６）；エキセメスタン；フィルグラスチム；フロクスリジン（動脈内）；フルダラビン；フルオロウラシル（５−ＦＵ）；フルベストラント；ゲムツズマブ  オゾガマイシン；酢酸ゴセレリン；ヒドロキシウレア；イブリツモマブ  チウキセタン；イダルビシン；イフォスファミド；メシル酸イマチニブ；インターフェロン  アルファ−２ａ；インターフェロン  アルファ−２ｂ；イリノテカン；レトロゾール；ロイコボリン；レバミソール；ロムスチン（ＣＣＮＵ）；メクロレタミン（ナイトロジェンマスタード）；酢酸メゲストロール；メルファラン（Ｌ−ＰＡＭ）；メルカプトプリン（６−ＭＰ）；メスナ；メトトレキサート；メトクスサレン；マイトマイシンＣ；ミトタン；ミトキサントロン；フェンプロピオン酸ナンドロロン；ノフェツモマブ；ＬＯｄｄＣ；オプレルベキン；オキサリプラチン；パクリタキセル；パミドロネート；ペガデマーゼ；ペガスパルガーゼ；ペグフィルグラスチム；ペントスタチン；ピポブロマン；プリカマイシン；ミトラマイシン；ポルフィマーナトリウム；プロカルバジン；キナクリン；ラスブリカーゼ；リツキシマブ；サルグラモスチム；ストレプトゾシン；タルブビジン（ＬＤＴ）；タルク；タモキシフ��ン；テモゾロミド；テニポシド（ＶＭ−２６）；テストラクトン；チオグアニン（６−ＴＧ）；チオテパ；トポテカン；トレミフェン；トシツモマブ；トラスツズマブ；トレチノイン（ＡＴＲＡ）；ウラシルマスタード；バルルビシン；バルトルシタビン（モノバルＬＤＣ）；ビンブラスチン；ビノレルビン；ゾレドロネート；及びこれらの混合物などである。
【００９３】
抗癌剤に加えて、複数の他の剤が、癌、特に転移性前立腺癌を含む前立腺癌の治療に、本発明によるキメラ化合物と同時投与されてもよい。これらは、活性剤、ミネラル、ビタミン及び栄養剤など、前立腺癌組織又はその成長を阻害する一定の有効性を示すもの、又は前立腺癌の治療にその他有用であるものを含む。例えば、食事性セレン、ビタミンＥ、リコピン、大豆食品、ビタミンＤ、緑茶、リコピン、オメガ３脂肪酸及びベータシトステロールを含む食物エストロゲンの１つ以上が、前立腺癌を治療するために、本発明の化合物と組み合わせて利用されてもよい。
【００９４】
また、これまでの抗癌剤以外の活性剤は、前立腺癌の治療に一定の利用性を示している。選択的なエストロゲン受容体モジュレータであるトレミフェンは、癌、特に転移性前立腺癌を含む前立腺癌を治療するために本発明の化合物と組み合わせて用いられてもよい。さらに、テストステロンのジヒドロテストステロンへの変換を阻害する２つの医薬であるフィナステリド及びデュタステリドもまた、本発明による化合物と同時投与される場合、前立腺癌の治療に有用である。植物化学物質のインドール−３−カルビノール及びジインドリルメタンもまた、前立腺癌を治療するこれらの効果のために本発明の化合物と同時投与されてもよい。本発明による化合物と組み合わされてもよい更なる薬剤は、例えば、フルタミド、ビカルタミド、ニルタミド及び酢酸シプロテロンなどの抗アンドロゲン、並びにケトコナゾール及びアミノグルテチミドなどの副腎アンドロゲン（例えば、ＤＨＥＡ）の産生を減少させる薬剤などである。本発明による化合物と組み合わされてもよいその他の活性剤は、例えば、作動薬及び拮抗薬を含むＧｎＲＨモジュレータなどである。ＧｎＲＨ拮抗薬は、ＬＨの産生を直接抑制し、一方ＧｎＲＨ作動薬は、初期刺激作用の後に下方制御の過程によって、ＬＨを抑制する。アバレリックスは、ＧｎＲＨ拮抗薬の例であり、ＧｎＲＨ作動薬は、特にロイプロリド、ゴセレリン、トリプトレリン及びブセレリンなどである。これらの剤は、有効量の本発明による化合物と組み合わされてもよい。また、酢酸アビラテロンもまた、前立腺癌、特に転移性前立腺癌の治療において、本発明による化合物の１つ以上と組み合わされてもよい。
【００９５】
本発明による１つ以上の化合物と組み合わせることができる他の薬剤は、転移性前立腺癌を有する患者に発症する骨折などの骨格合併症を遅らせるゾレドロン酸などのビスホスホネートなどである。他の薬剤であるアルファラジンは、骨の転移を標的とするように、本発明の化合物と組み合わされてもよい。また、転移性前立腺癌による骨痛は、特に、本発明の化合物と組み合わせることができる、モルヒネ及びオキシコドンなどのオピオイド系の鎮痛剤で治療されてもよい。
【００９６】
本発明は、好ましくは、次の一般式での化合物、又はその医薬的に許容可能な塩、溶媒和物若しくは多形体に関する。
【００９７】
【化１４】
0005746615.tif 000015
【００９８】
ここで、Ａは、次の式による抗体結合部分である。
【００９９】
【化１５】
0005746615.tif 000016
【０１００】
ここで、Ｙ’は、Ｈ又はＮＯ2であり；
Ｘは、Ｏ、ＣＨ2、ＮＲ1、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）2、−Ｓ（Ｏ）2Ｏ、−ＯＳ（Ｏ）2、又はＯＳ（Ｏ）2Ｏであり；
Ｒ1は、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ3のアルキル基、又は−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1〜Ｃ3）の基であり；
Ｘ’は、ＣＨ2、Ｏ、Ｎ−Ｒ1'又はＳ、好ましくはＯであり；
Ｒ1'は、Ｈ又はＣ1〜Ｃ3のアルキル基であり；
Ｚは、結合、単糖、二糖、オリゴ糖、糖タンパク又は糖脂質であり；
Ｘbは、結合、Ｏ、ＣＨ2、ＮＲ1又はＳであり；
Ｘ’’は、Ｏ、ＣＨ2、ＮＲ1であり；
Ｒ1は、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ3のアルキル基、又は−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1〜Ｃ3）の基であり；
Ｂは、次の化学式による細胞結合末端である。
【０１０１】
【化１６】
0005746615.tif 000017
【０１０２】
ここで、Ｘ1及びＸ2は、それぞれ独立に、ＣＨ2、Ｏ、ＮＨ又はＳであり；
Ｘ3は、Ｏ、ＣＨ2、ＮＲ1、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）2、−Ｓ（Ｏ）2Ｏ、−ＯＳ（Ｏ）2又はＯＳ（Ｏ）2Ｏであり；
Ｒ1は、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ3のアルキル基、又は−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1〜Ｃ3）の基であり；
ｋは、０〜２０、８〜１２、１〜１５、１〜１０、１〜８、１〜６、１、２、３、４、５又は６の整数であり；
Ｌは、次の化学式によるリンカー
【０１０３】
【化１７】
0005746615.tif 000018
、又は１〜１００の間のグリコール単位（１〜７５、１〜６０、１〜５５、１〜５０、１〜４５、１〜４０、２〜３５、３〜３０、１〜１５、１〜１０、１〜８、１〜６、１、２、３、４又は５２、５０、３及び４５）を有する、ポリプロピレングリコールリンカー又はポリプロピレン−ポリエチレングリコール共リンカーであり；
ここで、Ｒaは、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ3のアルキル基若しくはアルカノール、又はＲ3（プロリン）と共に環を形成し、そしてＲ3は、アミノ酸に由来する側鎖であり、好ましくはアラニン（メチル）、アルギニン（プロピレングアニジン）、アスパラギン（メチレンカルボキシアミド）、アスパラギン酸（エタン酸）、システイン（チオール、還元又は酸化ジチオール）、グルタミン（エチルカルボキシアミド）、グルタミン酸（プロパン酸）、グリシン（Ｈ）、ヒスチジン（メチレンイミダゾール）、イソロイシン（１−メチルプロパン）、ロイシン（２−メチルプロパン）、リジン（ブチレンアミン）、メチオニン（エチルメチルチオエーテル）、フェニルアラニン（ベンジル）、プロリン（Ｒ3が、Ｒa及び隣接する窒素基と環を形成し、ピロリジン基を形成する）、セリン（メタノール）、スレオニン（エタノール、１−ヒドロキシエタン）、トリプトファン（メチレンインドール）、チロシン（メチレンフェノール）又はバリン（イソプロピル）からなる群から選択され；
ｍは、１〜１００、１〜７５、１〜６０、１〜５５、１〜５０、１〜４５、１〜４０、２〜３５、３〜３０、１〜１５、１〜１０、１〜８、１〜６、１、２、３、４又は５の整数である。
【０１０４】
または、Ｌは、次の化学式によるリンカーである。
【０１０５】
【化１８】
0005746615.tif 000019
【０１０６】
ここで、Ｚ及びＺ’は、それぞれ独立して、結合、−（ＣＨ2）i−Ｏ、−（ＣＨ2）i−Ｓ、−（ＣＨ2）i−Ｎ−Ｒ、
【０１０７】
【化１９】
0005746615.tif 000020
であり、
上記−（ＣＨ2）i基は、Ｚ又はＺ’ に存在する場合、もし存在するならば［ＣＯＮ］、ＡＢＴ又はＣＢＴに結合され；
各Ｒは、独立に、Ｈ、又はＣ1〜Ｃ3のアルキル基若しくはアルカノール基であり；
各Ｒ2は、独立に、Ｈ又はＣ1〜Ｃ3のアルキル基であり；
各Ｙは、独立に、結合、Ｏ、Ｓ又はＮ−Ｒであり；
各ｉは、独立に、１〜１００、１〜７５、１〜６０、１〜５５、１〜５０、１〜４５、１〜４０、２〜３５、３〜３０、１〜１５、１〜１０、１〜８、１〜６、１、２、３、４又は５であり；
Ｄは、
【０１０８】
【化２０】
0005746615.tif 000021
であり、ただし、Ｚ、Ｚ’及びＤは、それぞれが同時に結合でないことを条件とし；
ｊは、１〜１００、１〜７５、１〜６０、１〜５５、１〜５０、１〜４５、１〜４０、２〜３５、３〜３０、１〜１５、１〜１０、１〜８、１〜６、１、２、３、４又は５であり；
ｍ’は、１〜１００、１〜７５、１〜６０、１〜５５、１〜５０、１〜４５、１〜４０、２〜３５、３〜３０、１〜１５、１〜１０、１〜８、１〜６、１、２、３、４又は５であり；
ｎ’は、１〜１００、１〜７５、１〜６０、１〜５５、１〜５０、１〜４５、１〜４０、２〜３５、３〜３０、１〜１５、１〜１０、１〜８、１〜６、１、２、３、４又は５であり；
Ｘ1は、Ｏ、Ｓ又はＮ−Ｒであり；
Ｒは、上述の通りであり；
連結部分［ＣＯＮ］は、結合又は次の化学構造による部分であり、
【０１０９】
【化２１】
0005746615.tif 000022
【０１１０】
ここで、Ｘ2は、Ｏ、Ｓ、ＮＲ4、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）2、−Ｓ（Ｏ）2Ｏ、−ＯＳ（Ｏ）2又はＯＳ（Ｏ）2Ｏであり；
Ｘ3は、ＮＲ4、Ｏ又はＳであり；
Ｒ4は、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ3のアルキル基若しくはアルカノール基、又は−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1〜Ｃ3）の基である。
【０１１１】
本発明の好ましい態様では、抗体結合末端（ＡＢＴ）は、次のものである。
【０１１２】
【化２２】
0005746615.tif 000023
【０１１３】
ここで、Ｙ’は、ＮＯ2であり；
Ｘ’は、Ｏであり；
Ｚは、結合、単糖又は二糖である。
【０１１４】
本発明の好ましい態様では、ＣＢＴは、次のものである。
【０１１５】
【化２３】
0005746615.tif 000024
【０１１６】
ここで、ｋは、０〜２０、１〜２０、より好ましくは８〜１２の整数である。
【０１１７】
他の好ましい態様では、連結部分［ＣＯＮ］は、次の基であり、
【０１１８】
【化２４】
0005746615.tif 000025
本願の他で記載される化合物をもたらすように、ＡＢＴ基、ＣＢＴ基、又はあるいはリンカー基と、次の表記
【０１１９】
【化２５】
0005746615.tif 000026
で共有結合され得る。
【０１２０】
さらに他の好ましい態様では、リンカー基は、次の構造のオリゴ又はポリエチレングリコール部分である。
【０１２１】
【化２６】
0005746615.tif 000027
【０１２２】
ここで、ｍは、１〜１００、又は本願の他で記載されているものであり、好ましくは約８〜１２である。ポリプロピレングリコールリンカー又はポリエチレン−ポリプロピレングリコール共リンカーは、本発明の化合物ではＰＥＧ基と置換されてもよいことが特筆される。
【０１２３】
複数の好ましい化合物２０、２１、２２、２３、２４及び２５が、添付の図７に記される。
【０１２４】
医薬的に有効量のキャリア、添加物又は賦形剤と組み合わせ、本発明による少なくとも１つのキメラ抗体動員化合物の有効量と、本願の他で述べるすべて有効量である１つ以上の化合物との組み合わせを有する医薬組成物は、本発明のさらなる態様である。
【０１２５】
本発明の組成物は、１つ以上の医薬的に許容可能なキャリアを用いて、従来の方法により処方されることができ、放出制御製剤で投与されてもよい。これらの医薬組成物に用いられ得る医薬的に許容可能なキャリアは、限定されないが、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、ヒト血清アルブミンなどの血清タンパク質、リン酸などの緩衝物質、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、食物性飽和脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、硫酸プロラミンなどの塩又は電解質、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイドシリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース系の物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリル酸、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレンブロック重合体、ポリエチレングリコール及び羊毛脂などである。
【０１２６】
本発明の組成物は、経口、非経口、吸入スプレー、局所、経直腸、経鼻、経頬、経膣、又は埋め込み式リザーバー経由で投与できる。本願で用いる用語「非経口」は、皮下、静脈内、筋肉内、関節内、滑液嚢内、胸骨内、髄腔内、肝臓内、病巣内及び頭蓋内の注射、又は点滴方法を含む。好ましくは、組成物は、経口、腹腔内又は静注で投与される。
【０１２７】
本発明の組成物の無菌注射の形態は、水性又は油性の懸濁液にすることができる。これらの懸濁液は、適当な分散剤又は湿潤剤及び懸濁化剤を用いて、当技術分野で公知の方法によって処方されてもよい。無菌注射調合剤はまた、例えば、１，３−ブタンジオール溶液などの、非毒性の非経口で受け入れられる希釈剤又は溶媒での無菌注射溶液又は懸濁液であってもよい。用いられる許容可能なビヒクル及び溶媒は、特に、水、リンガー溶液及び生理食塩液である。また、無菌の固定油が、溶媒又は懸濁媒体として従来から使用されている。このために、合成のモノ−又はジ−グリセリドを含め、いかなる無菌性の固定油を使用してもよい。オレイン酸及びそのグリセリド誘導体などの脂肪酸や、オリーブ油又はヒマシ油、特にそのポリオキシエチレン化されたものなどの天然の医薬的に許容可能な油は、注射製剤に有用である。これらの油剤又は懸濁液は、Ｐｈ．Ｈｅｌｖ又は同様のアルコールなどの、長鎖のアルコール系希釈剤又は分散剤を含有してもよい。
【０１２８】
本発明の医薬組成物は、限定されないが、カプセル、錠剤、水性懸濁液又は溶液などのあらゆる経口で受容可能な投与形態で、経口で投与されてもよい。経口使用のための錠剤の場合、一般的に用いられるキャリアは、ラクトース及びコーンスターチなどである。ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤もまた、一般的に添加される。カプセル形態での経口投与のために有用な希釈剤は、ラクトース及び乾燥コーンスターチなどである。経口使用のための水性懸濁液が必要な場合、活性成分は、乳化剤及び懸濁剤と組み合わされる。必要に応じて、特定の甘味剤、香料添加剤又は着色剤を添加してもよい。
【０１２９】
あるいは、本発明の医薬組成物は、直腸投与のための坐剤の形態で投与されてもよい。これらは、薬剤を、室温では固形であり直腸温度では液体である適当な非刺激の賦形剤と混合して調製でき、その結果、直腸において溶解して薬剤を放出する。そのような材料としては、ココアバター、蜜ろう及びポリエチレングリコールなどである。
【０１３０】
本発明の医薬組成物は、皮膚癌、乾癬、又は皮膚中若しくは皮膚上で発症するその他の疾病を特に治療するために、局所的に投与されてもよい。適当な局所製剤は、これらの領域又は器官のそれぞれのために容易に調製される。下部腸管のための局所適用は、直腸用の坐薬製剤（上記参照）又は適当な浣腸製剤でもたらされ得る。局所的に受け入れられる経皮パッチを使用してもよい。
【０１３１】
局所適用のために、医薬組成物は、１つ以上のキャリア中に懸濁又は溶解された活性成分を含有する適当な軟膏で処方されてもよい。本発明の化合物の局所投与用のキャリアは、限定されないが、鉱油、流動ワセリン、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン化合物、乳化ろう及び水などである。
【０１３２】
あるいは、医薬組成物は、１つ以上の医薬的に許容可能なキャリアに懸濁又は溶解された活性成分を含有する適当なローション又はクリームで処方されてもよい。適当なキャリアは、限定されないが、鉱油、モノステアリン酸ソルビタン、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、セテアリルアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコール及び水などである。
【０１３３】
眼科用途のため、医薬組成物は、塩化ベンジルアルコニウムなどの保存料を有する若しくは有しない、等張のｐＨ調整無菌食塩水中での微粒懸濁液として、又は、好ましくは、等張のｐＨ調整無菌食塩水中での溶液として、処方されてもよい。あるいは、眼科用途のため、医薬組成物は、ワセリンなどの軟膏で処方されてもよい。
【０１３４】
本発明の医薬組成物は、経鼻エアロゾル又は吸入剤によって投与されてもよい。そのような組成物は、医薬製剤分野において公知の方法によって調製され、ベンジルアルコール又はその他の適当な保存料、生物学的利用能を促進するための吸収促進剤、フッ化炭素、及び／又はその他従来の溶解化剤又は分散剤を用いて、生理食塩水中の溶液として調製されてもよい。
【０１３５】
単回投与形態を製造するためにキャリア材料と組み合わせられる本発明の医薬組成物における化合物の量は、治療される宿主及び疾病、投与の特定の様式に応じて変化する。好ましくは、組成物は、約０．０５ｍｇ〜約７５０ｍｇ以上、より好ましくは約１ｍｇ〜約６００ｍｇ、さらにより好ましくは約１０ｍｇ〜約５００ｍｇの活性成分を、単独、或いは癌、前立腺癌、転移性前立腺癌、又はそれらの二次的な影響若しくは状態を治療するのに使用される少なくとも１つの追加の非抗体誘因化合物と組み合わせて、処方される。
【０１３６】
やはり当然ながら、いずれの個々の患者についての特定の投与及び治療計画も、使用される特定の化合物の活性、年齢、体重、全体的な健康状態、性別、食事、投与期間、排せつ率、薬物の組み合わせ、治療する医師の判断、並びに治療される特定の疾病又は状態の重症度を含む種々の要因に依存する。
【０１３７】
癌を患う患者又は対象（例えば、ヒト男性）は、その医薬的に許容可能な塩、溶媒和物又は多形体を含めた本発明によるキメラ抗体動員化合物の有効量を、任意で医薬的に許容可能なキャリア若しくは希釈剤のいずれか一方で、又は他の公知の抗癌剤又は医薬品、好ましくは転移性前立腺癌を含む前立腺癌の治療を補助し得る若しくは前立腺癌に関連する二次的影響及び状態を改善し得る薬剤と組み合わせて、患者（対象）に投与することにより治療され得る。この治療はまた、放射線治療又は外科手術などの他の従来の癌治療と組み合わせて、投与されてもよい。
【０１３８】
これらの化合物は、あらゆる適当な経路、例えば、経口、非経口、経静脈、経皮、皮下又は局所により、液体、クリーム、ゲル若しくは固形の形態又はエアロゾルの形態より投与され得る。
【０１３９】
活性化合物は、治療される患者において重篤な毒性作用を発症させずに、所望の適応のための治療上の効果量を患者に送達するのに十分な量で、医薬的に許容可能なキャリア又は希釈剤中に含有される。本願で述べられる状態の全てに関する活性化合物の好ましい投与量は、約１０ｎｇ／ｋｇ〜３００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは１日当たり０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ、より一般的には、一日当たり受容者／患者の体重１ｋｇ当たり０．５〜約２５ｍｇの範囲である。一般的な局所投与量は、適当なキャリア中で０．０１〜３％ｗｔ／ｗｔの範囲である。
【０１４０】
化合物は、あらゆる適当な単回投与形態で都合良く投与され、限定されないが、単位投与形態当たり１ｍｇ未満、１ｍｇ〜３０００ｍｇ、好ましくは５〜５００ｍｇの活性成分を含有するものなどである。約２５〜２５０ｍｇの経口投与量が、多くの場合使い易い。
【０１４１】
活性成分は、約０．００００１〜３０ｍＭ、好ましくは約０．１〜３０μＭの活性化合物のピーク血漿濃度を達成するように好ましく投与される。これは、例えば、活性成分の溶液又は製剤の静脈内注射により、任意で生理食塩水若しくは水性媒体中で、又は活性成分の急速静注として投与されて、達成されてもよい。経口投与もまた、活性剤の有効な血漿濃度をもたらすのに適している。
【０１４２】
薬物組成物における活性化合物の濃度は、薬物の吸収、分布、不活性化及び排せつ率、並びに当技術分野の当業者に公知の他の要因に依存するであろう。投与値はまた、緩和される状態の重症度に応じて変わることが特筆される。更に、特定の対象に関して、特定の投与計画は、個々の必要性、及び投与又は組成物の投与を監督する人の専門定な判断によって時間と共に調節されるべきであり、そして本願で記される濃度範囲は、単なる例示であって、特許請求の範囲に記載の組成物の範囲及び実施を限定することを意図するものではないことが理解されるべきである。活性成分は、一度で投与されてもよく、又は種々の時間間隔で投与される複数の少ない投与量に分割されてもよい。
【０１４３】
経口組成物は、不活性希釈剤又は可食性キャリアを一般的に含む。これらは、ゼラチンカプセルに封入され、又は錠剤に圧縮されてもよい。経口の治療投与のために、活性化合物又はそのプロドラッグ誘導体は、賦形剤によって取り込まれ、錠剤、トローチ又はカプセルの形態で用いられ得る。医薬的に適合する結合剤及び／又はアジュバント材料は、組成物の一部として含まれ得る。
【０１４４】
錠剤、ピル、カプセル、トローチ等は、次の成分又は同様の性質の化合物のいずれであっても含有し得る：微結晶性セルロース、トラガカントゴム又はゼラチンなどの結合剤；スターチ又はラクトースなどの賦形剤；アルギン酸、プリモゲル又はコーンスターチなどの分散剤；ステアリン酸マグネシウム又はステローツなどの潤滑剤；コロイド状の二酸化珪素などの流動促進剤；スクロース又はサッカリンなどの甘味剤；ペパーミント、サリチル酸メチル又はオレンジ香料などの香料添加剤。投与単位形態がカプセルである場合、上記のタイプの材料に加えて、脂肪油などの液体キャリアを含有し得る。また、投与単位形態は、例えば、糖衣コーティング、セラック又は腸溶剤などの投与単位の物理的形態を改変する種々の他の材料を含有し得る。
【０１４５】
活性化合物又はその医薬的に許容可能な塩は、エリキシル、懸濁液、シロップ、ウエハース、チューインガムなどの成分として投与され得る。シロップは、活性化合物に加えて、甘味剤としてのスクロース、特定の保存料、染料、着色剤及び香味料を含有してもよい。
【０１４６】
活性化合物又はその医薬的に許容可能な塩はまた、所望の作用を損なわない他の活性材料、又は他の抗癌剤、抗生物質、抗真菌剤、抗炎症剤若しくは抗ウィルス化合物などの所望の作用を補完する材料と混合され得る。本発明の特定の好ましい態様において、本発明での１つ以上のキメラ抗体動員化合物は、本願の他で述べるように、他の抗癌剤及び／又は他の生物活性剤と同時投与される。
【０１４７】
非経口、経皮、皮下又は局所適用のために使用される溶液又は懸濁液は、次の成分を含み得る：注射用水、生理食塩水、固定油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール又は他の合成溶剤などの無菌希釈剤；ベンジルアルコール又はメチルパラベンなどの抗菌剤；アスコルビン酸又は亜硫酸水素ナトリウムなどの抗酸化剤；エチレンジアミン四酢酸などのキレート剤；酢酸、クエン酸又はリン酸などの緩衝剤；及び塩化ナトリウム又はデキストロースなどの等張化のための剤。非経口の調製物は、アンプル、使い捨て注射器又はガラス製若しくはプラスティック製の複数回使用バイアル内に封入され得る。
【０１４８】
静脈内に投与される場合、好ましいキャリアは、生理的食塩水又はリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）である。
【０１４９】
１つの実施例では、活性化合物は、植え込み及びマイクロカプセル化した送達システムなどの放出制御製剤のように、身体からの急速な排出に対して化合物を保護するキャリアで調製される。エチレンビニル酢酸、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル及びポリ乳酸などの生分解性の生体適合性ポリマーが使用され得る。そのような製剤の調製方法は、当技術分野の当業者に明らかであろう。
【０１５０】
リポソーム懸濁液もまた、医薬的に許容可能なキャリアになり得る。これらは、例えば、米国特許第４，５２２，８１１号（その全内容が参照により本願に援用される）に記載されたような、当技術分野における当業者に公知の方法により調製できる。例えば、リポソーム製剤は、無機溶媒中に適当な脂質（ステアロイルホスファチジルエタノールアミン、ステアロイルホスファチジルコリン、アラコドイルホスファチジルコリン及びコレステロールなど）を溶解し、その後蒸留して、容器の表面に乾燥脂質の薄膜を残すことにより調製される。そして、活性化合物の水溶液が、容器に注入される。容器は、その後、容器の側方から脂質材料を放し、脂質凝集物を分散させるようにして手で回転され、これにより、リポソーム懸濁液を形成する。
【０１５１】
（一般的化学合成）
本発明によるキメラ抗体動員化合物は、必要であれば適当な保護基と共に、リンカー並びに細胞結合末端（ＣＢＴ）及び抗体結合末端（ＡＢＴ）との間の標準的な化学結合性を用いて、容易に合成される。この手法は、リンカーを介して細胞結合部分を抗体結合部分に結合するために、標準的な官能基化学反応を用い、好ましい態様では、ＣＢＴがリンカーを介してＡＢＴ抗体結合へ共有結合（連結）される場合に形成される任意の連結部分（官能基、使用する反応等に依存して、リンカーとＡＢＴとの間、又はリンカーとＣＢＴとの間）をもたらす。ここで、連結部分それ自体は必要ではなく、本願の他で述べられるように、リンカーは、特定の連結部分を形成することなく、ＣＢＴ及び／又はＡＢＴに直接共有結合されてもよいという事実が特筆される。本発明において、好ましくは本発明のキメラ抗体動員化合物に含まれる連結部分は、本願の他で開示されるように、その形成が、キメラ化合物を提供する望ましい合成化学を反映したものであることを示す。
【０１５２】
下記の一般スキームで示すように、Ｌ−Ａなどのカルボン酸は、塩酸オキサリル又は塩化チオニルなどによる酸塩化物への変化に続くアミン／アルコールの添加により、Ｃ−Ａなどのアミン又はアルコールのいずれかに結合されて、塩基及び触媒アミン（ＤＭＡＰ、イミダゾール）と共に標準的なカルボジイミドの条件（ＤＣＣ、ＥＤＣ、ＤＩＣ）下でエステル又はアミドを生成することができる。
【０１５３】
また、例えば、Ａ−Ａなどのアミン又はアルコールは、Ｃ−Ｅなどのイソシアネート又はイソチオシアネートに結合されて、尿素、チオ尿素、又は対応する炭酸物若しくはチオカルボネートを生成することができる。
【０１５４】
さらに別の手法において、トリアゾールは、Ｃ−Ｂなどのアジドと、Ｌ−Ｃなどのアルキンとの間の付加環化反応によって、合成されてもよい。これは、完全な反応を促進するように、アスコルビン酸と共に、硫酸銅などの銅により触媒され得る。
【０１５５】
また、さらなる手法において、例えば、ヘテロリンカーは、Ａ−Ａなどの求核剤を、Ｌ−Ｅなどの適当な離脱基で処理することによって、製造されてもよい。離脱基としては、臭素などのハロゲン、又はトリフラート若しくはトシラートなどのスルホン酸塩などである。
【０１５６】
【化２７】
0005746615.tif 000028
【０１５７】
（化合物）
複数の高い親和性を有するリガンドは、ＰＳＭＡを選択的に標的化するように開発された。Ｓｌｕｓｈｅｒら著、Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、１９９９年、５巻、１３９６頁参照。図１は、本発明によるキメラ抗体動員化合物の原理機序を示すと一般的に理解される小分子の鋳型免疫治療を示す。ＰＣ−ＡＲＭ（３、図３）は、非常に高い親和性（２、Ｋｉ＝０．９ｎＭ）を有する尿素ベースのテトラゾールを含有するリガンドにより刺激を与えられ（Ｋｏｚｉｋｏｗｓｋｉ著、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２００４年、４７巻、１７２９頁参照）、溶媒に暴露された付属肢を受容するように分子モデリングで精製された（図２Ａ）。この全体に三重複合体のモデル（図２Ｂ）は、かなり大きな繋がりの長さ（８〜１２のポリエチレングリコール単位）が必要であることを示唆した。
【０１５８】
アジドで官能化された細胞結合末端は、Ｃｂｚで保護されたリジン及びｔ−ブチルで保護されたグルタミン酸を、トリホスゲンで結合し（Ｋｏｚｉｋｏｗｓｋｉら著、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２００４年、４７巻、１７２９頁参照）、続いてＣｂｚの脱保護及びアジドの形成により、３ステップで合成された（スキーム２、図４）。Ｌｉｎｋら著、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、２００４年、１２６巻、１０５９８頁。ヘテロ二官能基性ＰＥＧ１０は、オクタエチレングリコールから５ステップの過程で合成された（スキーム２、図４）。Ｎａｔａｒａｊａｎら著、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍ．、２００７年、７巻、６９５頁。これらの中間体は、マイクロ波で補助され、銅で触媒されたヒュスゲン付加環化（Ｂｏｕｉｌｌｏｎら著、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、２００６年、７１巻、４７００頁）により結合され、マイクロ波で補助されたＴＦＡの脱保護を用いて脱保護され（スキーム３、図４）、ＰＣ−ＡＲＭ（３）を得た。この特異的な合成は、一般化され、単に以下に記載される実験の項に従って、本発明による多数の化合物を製造するのに適用できる。ヒトの組み換えＰＳＭＡ（Ｒ＆Ｄリサーチ）に対する阻害実験は、この長く繋がった分子は、高親和性（Ｋｉ＝０．９±０．３ｎＭ）でＰＳＭＡに結合し得ることを間接的に確認した。
【０１５９】
本発明者の小分子の抗体動員能力を確認するため、生細胞の動員分析が、ＰＳＭＡ発現ＬＮＣａＰ細胞、及びＡｌｅｘａｆｌｕｏｒ４８８共役抗ＤＮＰ抗体で行われた。抗ＤＮＰ抗体の存在下では、おそらく非特異的結合によって、小さなシフトのみが観察された。しかし、キメラ分子３を添加すると、所望の三重複合体の形成を示す蛍光発光の増加が観察された（図５Ａ）。実際に、蛍光発光のこの増加は、ピコモル濃度範囲に及ぶ濃度で観察され、並外れた活性であることを示す。２−ホスホノメチルペンタンジオン酸（Ｓｌｕｓｈｅｒら著、Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、１９９９年、５巻、１３９６頁）又はジ−ＤＮＰリジンのいずれかの添加で観察された蛍光発光の低下は、動員が、細胞結合端及び抗体結合末端の両方の結果であったことを確認した。また、ＰＳＭＡを発現しない細胞は、蛍光発光が顕著に増加しなかった（図５Ｂ）。
【０１６０】
さらに、本発明者の分子が細胞死を引き起こす能力を検討した。抗ＤＮＰ抗体の存在下で補体依存性の細胞毒性試験を用いたところ、小分子（３）が引き起こす細胞死の増加は観察されず、又は少量（＜２０％）であったが、予備的な抗体依存性細胞媒介毒性試験では、著しい細胞死の増加が観察された。３の５０ｎＭと一緒での抗ＤＮＰ抗体の種類ＩｇＧ１及びＩｇＧ３の存在下で、試験は、ＬＮＣａＰ細胞は、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣｓ）によって、抗ＤＮＰ抗体単独を上回って、約４０％死亡したことを示唆した（図６）。さらに、抗ＤＮＰ抗体を含む種々のＩｇＧを含有するヒトＩｇＧの混合物の存在下で、７０％の細胞毒性への増加が観察され、ＰＢＭＣｓの非存在下で、基礎の細胞毒性が約１０％であることが観察された。これらの結果は、ＡＤＣＣを引き起こすがＣＤＣ反応を引き起こさないＰＳＭＡに対しての素のモノクローナル抗体の報告と一致する。Ｄｅｏら著による国際公開第２００３／０６４６０６号明細書。現在の研究成果は、これらの結果を確認し、細胞死を媒介する特定のエフェクター細胞などの作用機序をより良く理解すべく、進行中である。
【０１６１】
代替の化合物
あるいは、上記の一般的な手法に依拠して、分子（４）（図９）が容易に合成され、本発明による二量体化合物の化学合成のシントンとして使用されてもよい。プロパルギルの結合を有する化合物４又は同様の合成で扱える分子は、クリック化学に用いられ得る（スキーム１ａ、図９）。Ｓｈａｒｐｌｅｓｓ及びＭａｎｅｔｓｃｈ著、Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｏｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、２００６年、１巻、５２５〜５３８頁参照。この分子を種々の長さを有するポリエチレングリコール単位を有するアジド５及び６に処理することで、異なる結合長のキメラ動員分子の群に迅速に入ることができる。鎖長を変更する柔軟性を有することは、最適なＣＢＴ−ＡＢＴ距離を確認することを支援するのに重要である。
【０１６２】
アルキン４に対する努力は、本発明者に臭化物中間体１２をもたらし、これは、公知のリン酸１３を用いたアルブゾーフ反応により本発明者の標的を生成した（スキーム２ａ、図１０）。Ｊａｃｋｓｏｎら著、Ｊ．Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．、２００１年、４４巻、４１７０〜４１７５頁参照。７及び８の薗頭カップリングにより、リンカーに対して炭素骨格を与え（Ｌｉｕ及びＳｔａｈｌ著、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、２００７年、１２９巻、６３２８〜６３３５頁）、ＬＡＨ還元条件により、適当なトランス置換配置で１０を生成し（Ｌｕｏら著、Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍ．、２００７年、２１３６〜３１３８頁）、アシル基を脱保護する。この新規に脱保護されたフェノールは、炭酸カリウムを備えたホモアリルアルコールによって選択的に脱プロトン化され、臭化プロパルギルで捕捉されて、１１を生成する。その後、残存するアルコールは、三臭化リンを用いて臭化アルキルに変換されることができる。
【０１６３】
アジドカップリングパートナーの合成も提供する。スキーム３、図１１参照。ポリエチレングリコールリンカーに結合されたビス−ＤＮＰリジンが、抗ＤＮＰ抗体に対して顕著な親和性を示すことから、アジド１５について焦点を当てた。Ｂａｉｒｄら著、Ｂｉｏｃｈｅｍ．、２００３年、４２巻、１２７３９〜１２７４８頁参照。３のポリエチレングリコール単位を有するこの特定のアジドは、市販のビス（２，４−ジニトロフェニル）−リジン及び１１−アジド−３，６，９−トリオキサウンデカン−１−アミンからワンポット法で合成された。これは、ショッテン・バウマンプロトコルで達成され、最適化されていない４０％の収率で所望の生成物をもたらした。Ｄｅｍｋｏら著、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、２００１年、６６巻、７９４５〜７９５０頁。スキーム３ａ、図１１。あるいは、モノＤＮＰアジド１６は、求核性芳香族置換により容易に調製されてもよい。
【０１６４】
多価誘導体の合成
多価誘導体は、上記に提案された中間体から、分岐の方法で合成され得る。合成的に相補なビス−アルキニル及びトリス−アジジル化合物は公知であり、この研究において非常に効果的に用いられ得る。ビス−アルキニル２０は、クリック条件下で長鎖のＰＥＧ−由来アジド−ＤＮＰ１９を用いて変換され、所望のビス−ジＤＮＰ類似体２１を生成することができる（スキーム４ａ、図１２）。
【０１６５】
トリス−アジジル化された類似体は、公知のトリアジド２３から同様の方法で合成され得る。スキーム５ａ、図１３参照。Ｋａｌｅら著、Ｂｉｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．、２００７年、１７巻、２４５９〜２４６４頁参照。このトリアジドは、保護された中間体２２を用いてクリック化学法を経て、三量体の２−ＰＭＰＡ類似体２４をもたらすことができる。これらの手持ちの合成片（シントン）を用いて、最終な分子が標準的なペプチドカップリングにより結合され、その後にＴＦＡ脱保護が続く。最終の化合物が、図８に示される（化合物３）。
【０１６６】
ここで実施され、示された実験は、前立腺特異的膜抗原に選択的に結合する小分子抗体動員分子が、抗体をＰＳＭＡ発現細胞に動員し、細胞死を引き起こすことができることを示す。この小分子で媒介された反応は、癌に対する新たな治療を示す。
【０１６７】
本発明は、下記の例を表示する方法によりさらに述べられる。これらの例は、本発明の例示として解釈されるべきであり、それらは決して限定するものではない。
【実施例】
【０１６８】
一般的事項
他で述べる事項を除き、全ての反応は、窒素雰囲気下で、炎で乾燥したガラス製品中で行われる。全ての試薬は、市販業者から購入され、次に記載する場合を除いて更なる精製を行わずに用いた：トリエチルアミンは、水素化カルシウムで蒸留された。ＣＨ2Ｃｌ2、ＰｈＭｅ、ＤＭＦ及びＴＨＦは、溶媒調剤システムを用いて精製された。水は、ミリＱ精製システムを用いて精製された。
【０１６９】
赤外（ＩＲ）スペクトル帯は、ブロード（ｂｒ）、強（ｓ）、中（ｍ）及び弱（ｗ）と特徴付けられる。1Ｈ  ＮＭＲの化学シフトは、内部標準（ＣＤＣｌ3δ７．２６ｐｐｍ又はＣＤ3ＯＤδ３．３１ｐｐｍ）として溶媒残渣ピークについて報告される。データは、次の通り報告される：化学シフト、積分、多重度（ｓ＝一重項、ｄ＝二重項、ｔ＝三重項、ｑ＝四重項、ｂｒ＝ブロード、ｍ＝多重項）、及び結合定数（Ｈｚ）。13Ｃ  ＮＭＲの化学シフトは、内部参照（ＣＤＣｌ3δ７７．２ｐｐｍ）として溶媒についてｐｐｍで報告される。
【０１７０】
合成
【０１７１】
【化２８】
0005746615.tif 000029
【０１７２】
１−アジド−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４−オクタオキサヘプタコス−２６−イン（アジド−ＰＥＧ８−イン）：
【０１７３】
【化２９】
0005746615.tif 000030
【０１７４】
２３−アジド−３，６，９，１２，１５，１８，２１−ヘプタオキサトリコサン−１−オール（アジド−ＰＥＧ８−オール）（１．１ｇ、３．１７ミリモル、１．０当量）を、Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド（６ｍＬ）に溶解し、水酸化ナトリウム（１５２ｍｇ、６．３４ミリモル、２．０当量）を添加し、続いて臭化プロパルギル（ＰｈＭｅ中で８０％、６８３μＬ、６．３４ミリモル、２．０当量）を添加した。反応を４時間室温で行い、その時点で、ＮＭＲにより完全であることが確認された。反応物を、ＣＨ2Ｃｌ2（２５ｍＬ）中に採取し、飽和塩化アンモニウム水溶液（２５ｍＬ）で洗浄した。水溶液をジクロロメタン（２×１０ｍＬ）で逆抽出し、組み合わせた有機物をＭｇＳＯ4で乾燥し、茶色の油状物に濃縮した。クロマトグラフィー（３ｃｍ×２０ｃｍシリカゲル、３％ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2）でアジド−ＰＥＧ８−インを生成した（９６０ｍｇ、収率７８％）。ＩＲ（薄膜／ＮａＣｌ）２８７４（ｍ）、２１１０（ｍ）、１１６０（ｓ）、１１０５（ｓ）ｃｍ-1；1ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ４．２０（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，２Ｈ），３．５８（ｍ，３０Ｈ），３．３９（ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，２Ｈ），２．４３（ｔ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），１．８２（ｓ，１Ｈ）；13ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ７９．８２，７４．７２，７０．７５，７０２２，６８．２７，５８．６２，５０．８４；ＨＲＭＳ（ＥＳ＋）  計算値Ｃ19Ｈ35Ｎ3Ｏ8（Ｍ＋Ｎａ）ｍ／ｚ４５６．２３１６３７。実測値４５６．２３１８２。
【０１７５】
３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４−オクタオキサヘプタコス−２６−イン−１−アミン（９）：
【０１７６】
【化３０】
0005746615.tif 000031
【０１７７】
２３−アジド−３，６，９，１２，１５，１８，２１−ヘプタオキサトリコサン１−オール（アジド−ＰＥＧ８−イン）（９６０ｍｇ、２．５２ミリモル、１当量）、トリフェニルホスフィン（９９２ｍｇ、３．７８ミリモル、１．５当量）、及び水（６８μＬ、３．７８ミリモル、１．５当量）を、ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解し、１２時間攪拌した。反応物を濃縮し、クロマトグラフィーを行い（３ｃｍ×２０ｃｍシリカ、ＣＨ2Ｃｌ2、その後８０：２０：１  ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ：Ｅｔ3Ｎに勾配）、濃縮して、透明な油状物として、３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４−オクタオキサヘプタコス−２６−イン−１−アミン（９）を得た（８１５ｍｇ、収率９１％）。ＩＲ（薄膜、ＮａＣｌ）３１０５（ｂｒ）、２９１４（ｍ）、１７８１（ｍ）、１６３８（ｍ）、１１６９（ｓ）ｃｍ-1。1Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ４．１７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝２．４），３．６６−３．５７（ｍ，２８Ｈ），３．５４（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．３Ｈｚ），２．８８（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．０Ｈｚ），２．４１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝２．４Ｈｚ），２．１８（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）。13Ｃ  ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ７９．５２，７４．５９，７２．５４，７０．４１，７０．３８，７０．３８，７０．３５，７０．３１，７０．２０，７０．０６，６８．９０，５８．２０，４１．４４。ＨＲＭＳ（ＥＳ＋）計算値Ｃ19Ｈ37ＮＯ8（Ｍ＋Ｈ）ｍ／ｚ４０８．２５９１９４。実測値４０８．２５７１２。
【０１７８】
Ｎ−（２，４−ジニトロフェニル）−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４−オクタオキサヘプタコス−２６−イン−１−アミン（１０）：
【０１７９】
【化３１】
0005746615.tif 000032
【０１８０】
３，６，９，１２−テトラオキサペンタデク−１４−イン−１−アミン（８１５ｍｇ、２．２７ミリモル、１当量）をＥｔＯＨ（１０ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（６６６μＬ、０．７２６ミリモル、１．５当量）及び１−クロロ−２，４−ジニトロベンゼン（５０５ｍｇ、２．５ミリモル、１．５当量）を添加した。反応フラスコを還流濃縮器に取り付け、反応物を加熱して４８時間還流し、冷却して、黄色の油状物に濃縮した。粗混合物をフラッシュクロマトグラフィー（３ｃｍ×２０ｃｍシリカ、３％ＭｅＯＨ：ＣＨ2Ｃｌ2）により精製して、黄色の固定物として、Ｎ−（２，４−ジニトロフェニル）−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４−オクタオキサヘプタコス−２６−イン−１−アミン（１０）を得た（１．１５ｇ、収率＞９５％）。ＩＲ（薄膜／ＮａＣｌ）３３６３（ｗ）、２８７１（ｓ）、１６２１（ｓ）、１３３７（ｍ）、１１０３（ｓ）ｃｍ-1；1Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ９．０８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），８．７７（ｂｓ，１Ｈ），８．２１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６，Ｊ＝９．５Ｈｚ），６．９４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．５Ｈｚ），４．１６（６，２Ｈ，Ｊ＝２．４Ｈｚ），３．７８（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．０Ｈｚ），３．６４（ｍ，３２Ｈ），３．５８（ｑ，２Ｈ），２．４１（ｔ，１Ｈ，２．３８Ｈｚ）；13Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ１４８．５，１３６．１，１３０．５，１３０．２９，１２４．３，１１４．３，７９．８，７４．６，７０．７，７０．６，７０．５，６９．２，６８．７，５８．５，４３．３；ＨＲＭＳ（ＥＩ）  計算値Ｃ25Ｈ39Ｎ3Ｏ12（Ｍ＋Ｈ）ｍ／ｚ５７４．２６０６５０。実測値５７４．２６１０６。
【０１８１】
【化３２】
0005746615.tif 000033
【０１８２】
（９Ｓ，１３Ｓ）−トリ−ｔｅｒｔ−ブチル３，１１−ジオキソ−１−フェニル−２−オキサ−４，１０，１２−トリアザペンタデカン−９，１３，１５−トリカルボン酸（１２）：
【０１８３】
【化３３】
0005746615.tif 000034
【０１８４】
１１（１．０ｇ、３．３８ミリモル、１．０当量）及びトリエチルアミン（１．５４ｍＬ、１１．０９ミリモル、３．２８当量）をジクロロメタン（３０ｍＬ）に溶解し、−７８℃に冷却した。ジクロメタン（１０ｍＬ）中のトリホスゲン（３４１ｍｇ、１．１５ミリモル、０．３４当量）を、反応混合物に滴下で添加した。完全に添加した後、室温に加熱して反応させて、３０分間攪拌した。１２（７５７ｍｇ、２．０３ミリモル、０．６当量）を添加し、続いてトリエチルアミン（２８３μＬ、２．０３ミリモル、０．６当量）を添加した。室温で攪拌して一晩１６時間反応させた。反応物をその後ジクロロメタン（５０ｍＬ）で希釈し、水（１００ｍＬ×２）で洗浄した。粗混合物をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、減圧下で濃縮した。カラムクロマトグラフィー（シリカ、１．５：１ヘキサン：酢酸エチル）で、次のスペクトルの特徴を有する無色の油状物として４を得た（１．０９ｇ、８６％）。ＩＲ（薄膜／ＫＢｒ）３３４２、２９７６、１７３１、１６５０、１５５２、１４５４、１３６８、１２５５及び１１５３ｃｍ-1；1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ７．３５（ｄ，Ｊ＝３．７５Ｈｚ，４Ｈ），７．３３−７．３０（ｍ，１Ｈ），５．１０（ｄ，Ｊ＝４．５５Ｈｚ，２Ｈ），５．０６−５．０１（ｍ，２Ｈ），４．９９（ｓ，１Ｈ），４．３４−４．３１（ｍ，２Ｈ），３．２０−３．１８（ｍ，２Ｈ），２．３６−２．２３（ｍ，２Ｈ），２．１０−２．０３（ｍ，１Ｈ），１．８８−１．７５（ｍ，２Ｈ），１．６５−１．５７（ｍ，１Ｈ），１．５７−１．４５（ｍ，２Ｈ），１．４５３（ｓ，９Ｈ），１．４４６（ｓ，９Ｈ），１．４３（ｓ，９Ｈ），１．４０−１．３０（ｍ，２Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ１７２．６，１７２．５，１７２．２，１３６．８，１２８．６，１２８．５，１２８．２，８２．２，８２．０，８０．７，６６．７，５３．４，５３．２，４０．７，３２．８，３１．７，２９．４，２８．５，２８．２，２８．１，２２．３；ＨＲＭＳ（ＥＩ＋）ｍ／ｚ６２２．３６９５［計算値Ｃ32Ｈ51Ｎ3Ｏ9（Ｍ＋Ｈ）＋６２２．３６９８］。
【０１８５】
（Ｓ）−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル２−（３−（（Ｓ）−６−アミノ−１−ｔｅｒｔ−ブトキシ−１−オキソヘキサン−２−イル）ウレイド）ペンタンジオエート（１２）：
【０１８６】
【化３４】
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【０１８７】
Ｘ（２．３５ｇ、３．７８ミリモル、１．０当量）をメタノール（３７．８ｍＬ）に溶解し、乾燥１０％Ｐｄ／Ｃ（４７５ｍｇ）を含む激しく攪拌した反応フラスコに滴下で添加した。Ｈ2をこの溶液を通して１〜２分バブリングし、その後Ｈ2のバルーン下に１３時間継続した。ＴＬＣ（Ｒｆ＝０．４８、１０％ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2中）により反応が完全であることを判断し、セライトで充填し、濃縮して粘性の油状物を得たが、さらなる精製を行わなかった。
【０１８８】
（Ｓ）−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル２−（３−（（Ｓ）−６−アジド−１−ｔｅｒｔ−ブトキシ−１−オキソヘキサン−２−イル）ウレイド）ペンタンジオエート（１４）：
【０１８９】
【化３５】
0005746615.tif 000036
【０１９０】
アジ化ナトリウム（２．６２９ｇ、４０．７５ミリモル、１０．０当量）を水（７．６３ｍＬ）に溶解し、ジクロロメタン（１２．９１ｍＬ）を添加した。反応混合物を０℃に冷却し、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（１．３６ｍＬ、８．０９ミリモル、２．０当量）を添加した。溶液を室温で３時間攪拌し、有機層を水層から分離した。水層をジクロロメタン（３×４ｍＬ）で抽出した。有機層を組み合わせ、水性Ｎａ2ＣＯ3(aq)で洗浄して、２５ｍＬの０．３９１ＭのＴｆＮ3を得た。アミン１３（１．９７ｇ、４．０４ミリモル、１．０当量）を水（１４．３７ｍＬ）及びメタノール（２８．７４ｍＬ）に溶解した。この溶液に、ＣｕＳＯ4−５Ｈ2Ｏ（１０．１ｍｇ、０．０４ミリモル、０．０１当量）及びＫ2ＣＯ3（８３７．５ｍｇ、６．０６ミリモル、１．５当量）を添加した。ＴｆＮ3の溶液（２５ｍＬ、８．０９ミリモル、２当量）を、１３の攪拌溶液に素早く添加し、反応物を室温で１９時間攪拌した。有機層を水層から分離し、水／メタノール層をジクロロメタンで１回抽出した。組み合わせた有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィーで精製して、白色の固形物として１４を得た（１．４４０ｇ、７１％）。１０％のＭｅＯＨ：ＣＨ2Ｃｌ2中でＲｆ＝０．６８。ＩＲ（薄膜／ＮａＣｌ）３３３５、２９８０、２９３３、２８６８、２０９７、１７３３、１６３５、１５６０、１３６８、１２５７及び１１５５ｃｍ-1；1ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ５．０１（ｄ，Ｊ＝８．２５Ｈｚ，２Ｈ），４．３４（ｍ，２Ｈ），３．２６（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ），２．３５−２．２５（ｍ，２Ｈ），２．０９−２．０５（ｍ，１Ｈ），１．８７−１．７６（ｍ，２Ｈ），１．６６−１．５５（ｍ，３Ｈ），１．４６（ｓ，１８Ｈ），１．４３（ｓ，９Ｈ），１．４５−１．３５（ｍ，２Ｈ）ｐｐｍ；13ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ１７２．６，１７２．４，１７２．２，１５６．８，８２．３，８２．１，８０．７，５３．４，５３．２，５１．３，３３．０，３１．７，２８．６，２８．５，２８．２，２８．１，２２．４ｐｐｍ；ＨＲＭＳ（ＥＩ＋）ｍ／ｚ５１４．３２２５［計算値Ｃ24Ｈ43Ｎ5Ｏ7（Ｍ＋Ｈ）＋５１４．３２３５］。
【０１９１】
【化３６】
0005746615.tif 000037
【０１９２】
（Ｓ）−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル２−（３−（（Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシ−６−（４−（１３−（２，４−ジニトロフェニルアミノ）−２，５，８，１１−テトラオキサトリデシル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−オキソヘキサン−２−イル）ウレイド）ペンタンジオエート（３）：
【０１９３】
【化３７】
0005746615.tif 000038
【０１９４】
５ｍＬマイクロ波反応管中の水（１ｍＬ）及びｔｅｒｔ−ブタノール（１ｍＬ）中の１０（７６ｍｇ、０．１４５ミリモル、１．０当量）及び１４（７４．４ｍｇ、０．１４５ミリモル、１．０当量）の混合物に、アスコルビン酸ナトリウム（７ｍｇ、０．０３６ミリモル、０．２５当量）、及び０．１Ｍの硫酸銅（ＩＩ）の水溶液（０．０７２５ｍＬ、０．００７２５ミリモル、０．０５当量）を添加した。管に蓋をし、１１０℃で１０分間マイクロ波放射を行った。その後、反応物を濃縮し、５ｍＬのマイクロ波反応管中で、トリフルオロ酢酸（２ｍＬ）及びジクロロメタン（１ｍＬ）に再溶解した。管に蓋をし、７０℃で２分間マイクロ波放射を行った。得た反応混合物を減圧下で濃縮し、ＨＰＬＣを用いたクロマトグラフィーを行い、濃縮して黄色の油状物として３（８７ｍｇ、収率５８％）を得た。ＩＲ（薄膜／ＮａＣｌ）３３５９（ｗ）、２９２５（ｓ）、１７３７（ｓ）、１６２２（ｍ）、１１７０（ｓ）ｃｍ-1；1ＨＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）δ９．０７（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），８．３３（ｄｄ，Ｊ＝２．７，９．６Ｈｚ，１Ｈ），８．０３（ｓ，１Ｈ），７．２７（ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ），４．６６（ｓ，２Ｈ），４．４５（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），４．３５−４．２８（ｍ，２Ｈ），３．８３（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），３．７３−３．６１（ｍ，３２Ｈ），２．４４−２．３６（ｍ，２Ｈ），２．１７−２．０８（ｍ，１Ｈ），１．９９−１．８２（ｍ，４Ｈ），１．７１−１．６４（ｍ，１Ｈ），１．４６−１．３８（ｍ，２Ｈ）；13ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）δ１７６．４，１７６．１，１７５．７，１６０．０，１４９．９，１４５．９，１３７．０，１３１．５，１３１．０，１２５．２，１２４．７，１１６．１，７１．６，７１．６，７１．５，７１．５，７０．９，６９．９，６４．８，５３．７，５３．５，５１．２，４４．１，３２．８，３１．１，３０．６，２８．８，２３．４ｐｐｍ；ＨＲＭＳ（ＥＳ＋）  計算値Ｃ37Ｈ58Ｎ8Ｏ19（Ｍ＋Ｈ）ｍ／ｚ９１９．３８９０９８。実測値９１９．３８８０１。
【０１９５】
ＮＡＡＬＡＤａｓｅ阻害実験
４０ｍＭのＮａＯＨ中のＮ−アセチル−アスパルチル−グルタメート（ＮＡＡＧ）の１０ｍＭ原液を、Ｔｒｉｓ緩衝液（０．１ＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．５）中で４０μＭに希釈し、３８４ウェルプレート（１ウェル当たり２５μＬ）に加えた。Ｋｍ測定及び対照のために、ＮＡＡＧの２倍の希釈（４０μＭ〜３１２ｎＭ）系列を作成し、別のウェルに添加した。ＩＣ50の測定に対して、水中の動員分子３（１ウェル当たり２μＬ、希釈系列）の溶液をウェルに添加した。他のすべてのウェルに対して２μＬの水を添加した。反応を開始するため、Ｔｒｉｓ緩衝液で希釈したｒｈＰＳＭＡ（Ｒ＆Ｄリサーチ）（２０ｐｇ／ｍＬ）を各ウェルに添加した（１ウェル当たり２５μＬ）。陰性対照に対して、Ｔｒｉｓ緩衝液を添加した（１ウェル当たり２５μＬ）。プレートを覆って１５分間インキュベートし、この時プレートを９５℃で３分間加熱することによりタンパク質を失活した。プレートを冷却した後、Ａｍｐｌｅｘ（登録商標）−Ｒｅｄのグルタミン酸／グルタミン酸オキシダーゼ試験キット（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて、グルタミン酸の放出を可視化した。Ｋｍ及びＩＣ50値は、グラフパッドプリスムソフトウェアを用いて算出し、Ｋｉは、チェン−プルソフの式を用いてこれらの値から算出した。この過程は、３つの試料で行われ、３度の実施の平均値±標準偏差として報告する。
【０１９６】
フローサイトメトリー動員実験
抗体動員フローサイトメトリー：ＬＮＣａＰ及びＤＵ１４５細胞を脱離させ、計数し、洗浄し、フローサイトメトリー緩衝液（２５ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、１．５％のＢＳＡ、５ｍＭのグルコース、１．５ｍＭのＭｇＣｌ2、ｐＨ７．２）に、２×１０5細胞／ｍＬの緩衝液の密度で再懸濁し、実験毎に各エッペンドルフ管に１ｍＬ添加した。水中の３（２μＬ、実験毎に種々の濃度）のフローサイトメトリー緩衝液の溶液を細胞に添加し、細胞を４℃で６０分間インキュベートした。細胞結合末端競合試験に関して、水中のＰＭＰＡ溶液（２μＬ、種々の濃度）をインキュベーションの前に添加した。インキュベーションに続いて、フローサイトメトリー緩衝液で細胞を３回洗浄した。１ｍｇ／ｍＬのヒトＩｇＧを有するマウス血清の２０μＬを各管に添加し、管を室温で５分間インキュベートし、Ｆｃ受容体を阻害した。２００μＬのフローサイトメトリー緩衝液を添加し、これに、２ｍｇ／ｍＬのＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ４８８共役ウサギ抗ジニトロフェニルＩｇＧ−ＫＬＨ画分２μＬを添加した。抗体結合末端競合実験に関して、ジ−ＤＮＰリジンの溶液（５ｍＭの水中の溶液２μＬ）をインキュベーションの前に添加した。管を４℃で６０分間インキュベートし、８５０μＬのフローサイトメトリー緩衝液で採取した。細胞を遠沈し、フローサイトメトリー緩衝液で洗浄した（２×１ｍＬ）。細胞を１ｍＬのＴｒｉｓ緩衝生理食塩水（２５ｍＭのＴｒｉｓＨＣｌ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、ｐＨ７．２）で採取し、５００μｇ／ｍＬのポリピジウムヨーダイド２μＬを添加し、ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ装置（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）で試料を直ちに分析した。ＦｌｏｗＪｏ（Ｔｒｅｅ  Ｓｔａｒ  Ｉｎｃ．）を用いてデータを分析し、ＦＬ−３上に生細胞をゲートでコントロールした。３を除外した実験を対照として行った。実験は、再現性を確保するため、３つの試料で繰り返された。
【０１９７】
本願で引用した全ての特許、特許出願及び刊行物並びに電子的に利用可能な材料（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ及びＲｅｆＳｅｑなどでのヌクレオチド配列提出物、ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ、ＰＩＲ、ＰＲＦ、ＰＤＢなどでのアミノ酸配列提出物、及びＧｅｎＢａｎｋ及びＲｅｆＳｅｑでの注釈付きのコード領域の翻訳物を含む）の開示全体が、参照によって援用される。参照によって援用した材料と出願当初明細書に開示の材料との間の不一致は、出願当初明細書に記載の事項を支持して解決されるべきである。上記の詳細な記載及び例は、理解を明確にするためのみに提供された。不必要な制限は、これらの事項から理解されるべきでない。本発明は、本願で示し、述べた詳細な事項に限定されるべきではなく、当技術分野における当業者に自明な変形は、特許請求の範囲により定められた発明の範囲内に含まれるものである。
【０１９８】
全ての見出しは、読み手の利便のためであり、特定されない限り、見出しに続く本文の意味を限定するように用いられるべきではない。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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