(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下のものから選択される、インビボイメージング剤。
【化１】
0005730206.tif 000035
【請求項２】
請求項１記載のインビボイメージング剤の製造に有用な前駆体化合物であって、以下のものから選択される前駆体化合物。
【化２】
0005730206.tif 000036
式中、ＬＧは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、トシレート（ＯＴｓ）、メシレート（ＯＭｓ）及びトリフレート（ＯＴｆ）から選択される脱離基である。
【請求項３】
請求項１記載のインビボイメージング剤の製造方法であって、
（ｉ）請求項２記載の前駆体化合物を用意する段階、
（ｉｉ）18Ｆの適当な供給源を用意する段階、並びに
（ｉｉｉ）段階（ｉ）の前駆体化合物を段階（ｉｉ）の18Ｆの供給源と反応させて前記インビボイメージング剤を得る段階
を含んでなる方法。
【請求項４】
請求項１記載のインビボイメージング剤の自動化合成のためのカセットであって、
（ｉ）請求項２記載の前駆体化合物を含む容器、並びに
（ｉｉ）18Ｆの適当な供給源を用いて容器を溶出するための手段
を含んでなるカセット。
【請求項５】
請求項１記載のインビボイメージング剤を、哺乳動物への投与に適した形態の生体適合性キャリヤーと共に含んでなる放射性医薬組成物。
【請求項６】
被験体における末梢ベンゾジアゼピンレセプター（ＰＢＲ）発現の体内分布及び／又は程度を決定するためのインビボイメージング方法で使用するための、請求項１記載のインビボイメージング剤であって、前記インビボイメージング方法が、
（ｉ）前記インビボイメージング剤を前記被験体に投与する段階、
（ｉｉ）前記イメージング剤を前記被験体中のＰＢＲに結合させる段階、
（ｉｉｉ）前記イメージング剤の18Ｆから放出される信号をインビボイメージング技法によって検出する段階、
（ｉｖ）前記信号の位置及び／又は量を表す画像を生成する段階、並びに
（ｖ）前記被験体におけるＰＢＲ発現の分布及び程度を決定する段階であって、前記発現は前記インビボイメージング剤から放出される前記信号と直接に相関している段階
を含んでいる、インビボイメージング剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、インビボイメージング、特に末梢ベンゾジアゼピンレセプター（ＰＢＲ）のインビボイメージングに関する。高い親和性をもってＰＢＲに結合し、投与後には脳内への良好な取込みを示し、高いレベルのＰＢＲを発現する組織と優先的に結合する四環式インドール型インビボイメージング剤が提供される。本発明はまた、本発明のインビボイメージング剤の合成において有用な前駆体化合物、並びに前記前駆体化合物の使用を含む前記インビボイメージング剤の合成方法及び前記方法を実施するためのキットも提供する。インビボイメージング剤の自動化合成のためのカセットも提供される。加えて本発明は、本発明のインビボイメージング剤を含む放射性医薬組成物並びに前記インビボイメージング剤の使用方法も提供する。
【背景技術】
【０００２】
トランスロケータータンパク質（ＴＳＰＯ）としても知られる末梢ベンゾジアゼピンレセプター（ＰＢＲ）は、主として末梢組織及びグリア細胞に局在することが知られているが、それの生理学的機能はまだ明確に解明されていない。細胞レベル以下では、ＰＢＲはミトコンドリア外膜上に局在することが知られていて、これはミトコンドリア機能の調節及び及び免疫系において役割を果たす可能性を表している。さらに、ＰＢＲが細胞増殖、ステロイド生成、カルシウム流れ及び細胞呼吸に関係することも仮定されてきた。ＰＢＲは、急性及び慢性ストレス、不安、うつ病、パーキンソン病、アルツハイマー病、脳損傷、癌（Ｇａｖｉｓｈ  ｅｔ  ａｌ，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｖ．１９９９；５１：６２９）、ハンチントン病（Ｍｅｓｓｍｅｒ  ａｎｄ  Ｒｅｙｎｏｌｄｓ，Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．１９９８；２４１：５３−６）、喘息（Ｐｅｌａｉａ  ｅｔ  ａｌ，Ｇｅｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９７；２８（４）：４９５−８）、慢性関節リウマチ（Ｂｒｉｂｅｓ  ｅｔ  ａｌ，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２００２；４５２（１）：１１１−２２）、アテローム性動脈硬化症（Ｄａｖｉｅｓ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．２００４；４５：１８９８−１９０７）及び多発性硬化症（Ｂａｎａｔｉ  ｅｔ  ａｌ，２０００  Ｂｒａｉｎ；１２３：２３２１）を始めとする各種の状態と関連していた。ＰＢＲはニューロパシー性疼痛にも関連する可能性があり、Ｔｓｕｄａ  ｅｔ  ａｌはニューロパシー性疼痛をもった被験者で小グリア細胞の活性化を観察している（２００５  ＴＩＮＳ  ２８（２）ｐｐ１０１−７）。
【０００３】
ＰＢＲに対して親和性を有するリガンドは当技術分野で公知である。米国特許第６，４５１，７９５号には、ＰＢＲに対して親和性（最も活性の高い化合物に関して０．２〜０．５ｎＭのＩＣ５０値）を有する１群のインドール化合物が開示されている。この特許には、かかる化合物が末梢ニューロパシーの予防又は治療及び中枢神経変性疾患の治療のために有用であると述べられている。Ｏｋｕｂｏ  ｅｔ  ａｌ（Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００４；１２：３５６９−８０）は、ＰＢＲに対して親和性（約０．４ｎＭという低いＩＣ５０値）を有する１群の四環式インドール化合物の設計、合成及び構造を記載している。Ｏｋｕｂｏ  ｅｔ  ａｌによるこの文献には、かかる化合物の特別な用途は論議されていない。
【０００４】
ＰＢＲのインビボイメージングも当技術分野で公知である。ＰＢＲ選択性リガンドを用いる陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）イメージングでは、（Ｒ）−［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５が中枢神経系（ＣＮＳ）炎症の包括的指示薬を提供する。（Ｒ）−［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５の使用の成功にもかかわらず、それには制約がある。それは、高いタンパク質結合性及び低特異性乃至非特異性結合を有することが知られている（Ｌｏｃｋｈａｒｔ  ｅｔ  ａｌ．Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ．３０（２）：１９９−２０６）。それの放射性標識代謝産物の役割は知られておらず、結合の定量化には複雑なモデル化が要求される。ＰＢＲに対して高い親和性及び選択性を有することでＣＮＳにおけるＰＢＲ測定の向上を可能にする化合物を得るための努力が行われてきた。［１１Ｃ］ＤＡＡ１１０６及び［１８Ｆ］ＦＥＤＡＡ１１０６はアリールオキシアニリン化合物に基づくＰＥＴ放射性リガンドであり、ヒトにおいて研究されてきた（Ｉｋｏｍｏ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｃｅｒｅｂ．Ｂｌｏｏｄ  Ｆｌｏｗ  Ｍｅｔａｂ．２００７；２７：１７３−８４及びＦｕｊｉｍｕｒａ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｎｕｃ．Ｍｅｄ．２００６；４７：４３−５０）。しかし、これらの化合物の動力学的性質は理想的でなく、その用途は定量的研究に制限されることがある。これらの放射性リガンドにさらなる改良を加えようという努力の中で、Ｂｒｉａｒｄ  ｅｔ  ａｌ（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００８；５１：１７−３０）は別のアリールオキシアニリン誘導体ＰＢＲ２８を報告した。ＰＢＲ２８の１１Ｃ標識バージョンをサルに注射し、ＰＥＴを用いてその脳内動力学を評価した。［１１Ｃ］ＰＢＲ２８は、高い脳内取込み、ＰＢＲ発現組織に対する良好な特異的結合、及びインビボイメージングのために一層適した動力学的性質を示した。ＰＢＲ結合ピラゾロピリミジン化合物もまた、ＰＢＲを標的化するためのＰＥＴ放射性リガンドとして評価された。Ｊａｍｅｓ  ｅｔ  ａｌ（Ｊ．Ｎｕｃ．Ｍｅｄ．２００８；４９（５）：８１４−２２）は、ＰＥＴ放射性リガンド［１８Ｆ］−ＤＰＡ−７１４が静脈内投与後のヒヒ脳においてＰＢＲに対する高い親和性及びＰＢＲによる選択的取込みを有することを報告している。［１８Ｆ］−ＤＰＡ−７１４の脳内取込みの動力学は［１１Ｃ］ＤＡＡ１１０６及び［１８Ｆ］ＦＥＤＡＡ１１０６より遅いが、事実上はそれに類似していることが報告された。国際公開第２００７／０５７７０５号には、イメージング成分で標識された四環式インドール化合物であって、インビボイメージングのために適したものが開示されている。国際公開第２００７／０５７７０５号中に例示されたインビボイメージング剤は、ＰＢＲに対して良好な親和性を有し、［３Ｈ］−ＰＫ−１１１９５に対する競合アッセイにおけるＫｉ値が１．０ｎＭ乃至０．１ｎＭであることが示された。しかし、このたび本発明者らは、ＰＢＲ発現組織に対するこれらの化合物の選択性が中枢神経系におけるＰＢＳ発現のインビボイメージングのためには理想的でないことを見出した。
【０００５】
中枢神経系におけるＰＢＳ発現の評価のための代替インビボイメージング剤を得るためには、既知の四環式インドール化合物に改良を加える余地が存在している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】国際公開第２００７／０５７７０５号パンフレット
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、四環式インドール化合物に基づくインビボイメージング剤を提供する。四環式インドール化合物に基づく既知のインビボイメージング剤に比べて、本発明のインビボイメージング剤はインビボイメージングのための良好な性質を有している。本発明のインビボイメージング剤は、末梢ベンゾジアゼピンレセプターに対する良好な結合性を有すると共に、被験体への投与後における良好な脳内取込み及びインビボ動力学を有している。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】図１は、ＦＮＡラットの損傷（右側の）顔面神経核におけるインビボイメージング剤１の結合を示す代表的なオートラジオグラフである。
【図２】図２は、ＦＮＡから７日後のラットの顔面神経核に結合したインビボイメージング剤１の相対強度を示している。データは１頭の動物からの２４の個別切片の平均±ＳＤとして表されている。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
インビボイメージング剤
一態様では、本発明は、次の式Ｉのインビボイメージング剤或いはそれの塩又は溶媒和物であって、前記式Ｉのインビボイメージング剤の少なくとも１つの原子がインビボイメージングのために適した放射性同位体であり、前記放射性同位体が炭素の放射性同位体である場合にそれはカルボニル炭素であるインビボイメージング剤を提供する。
【００１０】
【化１】
0005730206.tif 000002
式中、
Ｑは水素又はフッ素であり、
Ｘは水素、フルオロ、ブロモ、ヨード、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ又はＣ１−６アルキルアミドであり、
ＹはＳ、ＳＯ又はＳＯ２であり、
Ｒは水素、Ｃ１−６アルキル又はＣ１−６フルオロアルキルであり、
ただしＹがＳである場合にはＱ及びＸが共に水素ではないことを条件とする。
【００１１】
本明細書中で使用する「インビボイメージング」という用語は、本発明の被験体の内部構造の全部又は一部の画像を非侵襲的に生成する技法をいう。本発明で使用するための好ましいインビボイメージング方法は、単光子放出コンピューター断層撮影（ＳＰＥＣＴ）及び陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）であり、ＰＥＴが特に好ましい。本発明の方法においてＰＥＴが好ましいのは、それが優れた感度及び分解能を有する結果、病変部における比較的小さい変化でも経時的に観察できるからである。ＰＥＴスキャナーは、日常的にピコモル範囲内の放射能濃度を測定している。現在、マイクロＰＥＴスキャナーは約１ｍｍの空間分解能に接近しているが、臨床スキャナーは約４〜５ｍｍである。
【００１２】
式Ｉの「インビボイメージング剤」は、インビボイメージングのために適した放射性同位体を含んでいる。この「インビボイメージングのために適した放射性同位体」は、式Ｉのインビボイメージング剤に関して上記に定義した原子の１つの放射性同位体形態である。本明細書で定義されるインビボイメージングのために適するには、放射性同位体はγ線放射体又は陽電子放射体であり、それによって投与後にインビボイメージング剤を被験体の外部で検出できることが好ましい。
【００１３】
本発明に係る好適な塩には、（ｉ）鉱酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、リン酸、メタリン酸、硝酸及び硫酸）から導かれるもの並びに有機酸（例えば、酒石酸、トリフルオロ酢酸、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、フマル酸、安息香酸、グリコール酸、グルコン酸、コハク酸、メタンスルホン酸及びｐ−トルエンスルホン酸）から導かれるもののような生理学的に許容される酸付加塩、並びに（ｉｉ）アンモニウム塩、アルカリ金属塩（例えば、ナトリウム塩及びカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウム塩及びマグネシウム塩）、有機塩基（例えば、トリエタノールアミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ピペリジン、ピリジン、ピペラジン及びモルホリン）との塩、及びアミノ酸（例えば、アルギニン及びリシン）との塩のような生理学的に許容される塩基塩がある。
【００１４】
本発明に係る好適な溶媒和物には、エタノール、水、食塩水、生理的緩衝液及びグリコールと共に生成されるものがある。
【００１５】
特記しない限り、単独で又は組み合わせて使用される「アルキル」という用語は、好ましくは１〜６の炭素原子、最も好ましくは１〜４の炭素原子を含む直鎖又は枝分れしたアルキル基を意味する。かかる基の例には、特に限定されないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソアミル及びヘキシルがある。
【００１６】
特記しない限り、単独で又は組み合わせて使用される「アルコキシ」という用語はアルキルエーテル基を意味し、ここでアルキルという用語は上記に定義した通りである。好適なアルキルエーテル基の例には、特に限定されないが、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ及びｔｅｒｔ−ブトキシがある。
【００１７】
「アルキルアミド」は上記に定義したアルキル基がアミドに結合したものであり、ここでアミドは−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ’Ｒ”基（式中、Ｒ’及びＲ”は独立に水素又は炭化水素基である。）である。
【００１８】
「ハロゲン」又は「ハロ」という用語は、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素から選択される置換基を意味する。「ハロアルキル」は、上記に定義したアルキル基が１以上のハロゲンで置換されたものである。
【００１９】
「ヒドロキシ」という用語は−ＯＨ基をいう。
【００２０】
好ましい実施形態では、Ｑは水素である。
【００２１】
Ｘは好ましくは水素、フルオロ、ブロモ、ヨード、ヒドロキシ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４ハロアルキル、Ｃ１−４アルコキシ又はＣ１−４アルキルアミドである。Ｘは最も好ましくは水素又はＣ１−４アルコキシである。
【００２２】
Ｙは好ましくはＳ又はＳＯ２である。Ｙは最も好ましくはＳである。
【００２３】
Ｒは好ましくは水素、Ｃ１−４アルキル又はＣ１−４フルオロアルキルである。Ｒは好ましくは水素、Ｃ１−４アルキル又はＣ１−４フルオロアルキルである。Ｒは好ましくはＣ１−４フルオロアルキルである。
【００２４】
式Ｉの好ましい実施形態では、
Ｘは水素、フルオロ、ブロモ、ヨード、ヒドロキシ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４ハロアルキル、Ｃ１−４アルコキシ又はＣ１−４アルキルアミドであり、
ＹはＳ又はＳＯ２であり、
Ｒは水素、Ｃ１−４アルキル又はＣ１−４フルオロアルキルである。
【００２５】
式Ｉの最も好ましい実施形態では、
Ｑは水素であり、
ＸはＣ１−４アルコキシであり、
ＹはＳであり、
ＲはＣ１−４フルオロアルキルである。
【００２６】
式Ｉの別の好ましい実施形態では、
Ｑはフッ素であり、
Ｘは水素であり、
ＹはＳであり、
ＲはＣ１−４フルオロアルキルである。
【００２７】
本発明のインビボイメージングのために適した好ましい放射性同位体は、γ線放出型放射性ハロゲン及び陽電子放出型放射性非金属である。
【００２８】
本発明で使用するのに適したγ線放出型放射性ハロゲンの例は、１２３Ｉ、１３１Ｉ及び７７Ｂｒである。好ましいγ線放出型放射性ハロゲンは１２３Ｉである。
【００２９】
本発明で使用するのに適した陽電子放出型放射性非金属の例は、１１Ｃ、１３Ｎ、１８Ｆ及び１２４Ｉである。好ましい陽電子放出型放射性非金属は１８Ｆである。１８Ｆは本発明のインビボイメージングのために適する最も好ましい放射性同位体である。
【００３０】
式Ｉのインビボイメージング剤に関する好ましい実施形態では、Ｘは１２３Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、１８Ｆ又はＣ１−４［１８Ｆ］−フルオロアルキルである。
【００３１】
式Ｉのインビボイメージング剤に関する別の好ましい実施形態では、ＲはＣ１−４［１８Ｆ］−フルオロアルキルである。
【００３２】
式Ｉのインビボイメージング剤に関するさらに別の好ましい実施形態では、カルボニル炭素は１１Ｃである。
【００３３】
本発明の若干の好ましいインビボイメージング剤の非限定的な例は以下の通りである。
【００３４】
【化２】
0005730206.tif 000003
上記のインビボイメージング剤のうちでは、イメージング剤２が最も好ましい。
【００３５】
これらのインビボイメージング剤を得るために使用される合成方法は、以下の実験セクションに記載されている。本発明のインビボイメージング剤のこれらの非放射性バージョンの効力は、実施例１０に記載されるように、インビトロアッセイで測定した。
【００３６】
実施例７乃至実施例９には、放射性フッ素化インビボイメージング剤１〜７を得るための方法が記載されている。当業者には知られている通り、１８Ｆを取り扱う場合、使用するスケール及び条件は安全上及び実際上の考慮事項に応じて異なる。１８Ｆ  ＰＥＴトレーサーの製造に関する総説は、“Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｏｓｉｔｒｏｎ  Ｅｍｉｓｓｉｏｎ  Ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ”（２００２  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ；Ｗａｈｌ  ａｎｄ  Ｂｕｃｈａｎａｎ，Ｅｄｓ．）の第１章及び第２章を参照されたい。かかるインビボイメージング剤を動物体内分布モデルで試験し（実施例１１）、その体内分布を（国際公開第２００７／０５７７０５号の実施例１４に従って製造した）先行技術の化合物［１８Ｆ］ＦＥ−ＰＢＲの体内分布と比較した。
【００３７】
【化３】
0005730206.tif 000004
以下の表１に、インビトロ親和性アッセイ並びにインビボ体内分布試験で得られたデータを示す。非放射性類似体をインビトロ親和性アッセイで試験し、放射性標識バージョンを体内分布アッセイで評価した。
【００３８】
【表１】
0005730206.tif 000005
かかるデータは、インビボイメージング剤１〜７の非放射性バージョンの効力が先行技術の化合物［１８Ｆ］ＦＥ−ＰＢＲの効力に比べて勝ることを示している。加えて、かかるデータは、本発明のインビボイメージング剤１〜７が［１８Ｆ］ＦＥ−ＰＢＲに比べて注射から３０分後に線条体よりＯＢ中に顕著に多く保持されることを示している。ＰＢＲはラット脳の他の領域に比べてＯＢにおいて高度に発現されることが知られているので（“Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｓｕｂｓｔａｎｃｅ  Ａｂｕｓｅ”ｂｙ  Ｔａｒｔｅｒ，Ａｍｍｅｒｍａｎ  ａｎｄ  Ｏｔｔ；Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  １９９８：３９８−９９を参照されたい）、これらのデータは意外にも、インビボイメージング剤１〜７が先に例示したインビボイメージング剤［１８Ｆ］ＦＥ−ＰＢＲよりＰＢＲに対して向上した選択性を有することを実証している。
【００３９】
以下の実施例１２に記載されるように、インビボイメージング剤１をさらにオートラジオグラフィーモデルで分析した。顔面神経核の損傷側において顕著に高いレベルの放射能が検出された（図１及び図２参照）。損傷側の平均強度は、非損傷側が３．７３±０．３６であるのに比べて７．７５±０．９５であった。両側間の比は８．２３±２．３６であった。損傷部は正常部に比べて高いＰＢＲ発現を示すので、これらのデータは、インビボイメージング剤１がＰＢＲに対して良好な選択性を有するという生体分布データからの結論を支持している。
【００４０】
したがって、本発明のインビボイメージング剤は、既知の四環式インドール型ＰＢＲ結合インビボイメージング剤に比べ、ＰＢＲのインビボイメージングのための意外に優れた性質を有している。
【００４１】
前駆体化合物
別の態様では、本発明は次の式ＩＩを有する前駆体化合物を提供する。
【００４２】
【化４】
0005730206.tif 000006
式中、Ｒ１、Ｘ１及びＺ１の１つが本明細書で好適なもの及び好ましいものとして定義した放射性同位体の適当な供給源と反応する化学基を含む結果、当該前駆体化合物を前記放射性同位体の前記適当な供給源と反応せれば、本明細書で好適なもの及び好ましいものとして定義したインビボイメージング剤が生成され、
Ｒ１が前記化学基を含まない場合、それは式ＩのＲに関して本明細書で好適なもの及び好ましいものとして定義した通りであり、任意にはさらに保護基を含み、
Ｘ１が前記化学基を含まない場合、それは式ＩのＸに関して本明細書で好適なもの及び好ましいものとして定義した通りであり、任意にはさらに保護基を含み、
Ｚ１が前記化学基を含まない場合、それは−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ−（ＣＨ２−ＣＨ３）２であり、任意にはさらに保護基を含み、
Ｑ１は式ＩのＱに関して本明細書で好適なもの及び好ましいものとして定義した通りであり、
Ｙ１は式ＩのＹに関して本明細書で好適なもの及び好ましいものとして定義した通りであり、任意にはさらに保護基を含む。
【００４３】
「前駆体化合物」は、好都合な化学形態の検出可能な標識との化学反応が部位特異的に起こり、最小数の段階（理想的にはただ１つの段階）で反応を実施でき、かつ格別の精製の必要なしに（理想的にはいかなる追加の精製も必要なしに）所望のインビボイメージング剤が得られるように設計された、放射性標識化合物の誘導体からなる。かかる前駆体化合物は合成品であり、良好な化学純度で簡便に得ることができる。前駆体化合物は、任意には前駆体化合物のある種の官能基に関して保護基を含むことができる。
【００４４】
「保護基」という用語は、望ましくない化学反応を阻止又は抑制するが、分子の残部を変質させない十分に温和な条件下で問題の官能基から脱離させ得るのに十分な反応性を有するように設計された基を意味する。脱保護後には所望の生成物が得られる。保護基は当業者にとって公知であり、アミン基に関してはＢｏｃ（ここでＢｏｃはｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルである。）、Ｆｍｏｃ（ここでＦｍｏｃはフルオレニルメトキシカルボニルである。）、トリフルオロアセチル、アリルオキシカルボニル、Ｄｄｅ［即ち、１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘキシリデン）エチル］及びＮｐｙｓ（即ち、３−ニトロ−２−ピリジンスルフェニル）から適宜に選択され、カルボキシル基に関してはメチルエステル、ｔｅｒｔ−ブチルエステル及びベンジルエステルから適宜に選択される。ヒドロキシル基に関しては、好適な保護基は、メチル、エチル又はｔｅｒｔ−ブチル、アルコキシメチル又はアルコキシエチル、ベンジル、アセチル、ベンゾイル、トリチル（Ｔｒｔ）、又はテトラブチルジメチルシリルのようなトリアルキルシリルである。さらに他の保護基の使用は、‘Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ’，Ｔｈｅｏｒｏｄｏｒａ  Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐｅｔｅｒ  Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ（Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，１９９９）に記載されている。
【００４５】
「放射性同位体の適当な供給源」という用語は、放射性同位体が前駆体化合物に共有結合するようにして前駆体化合物の置換基と反応し得る化学形態の放射性同位体を意味する。
【００４６】
以下のセクションに示される特定の放射性同位体の各々に関しては、放射性同位体の１種以上の適当な供給源が論議される。インビボイメージング剤の分野の当業者は、本発明における用途に適した放射性同位体のこれらの供給源及びその他の供給源に精通しているであろう。
【００４７】
インビボイメージング剤の放射性同位体が１８Ｆある場合、放射性フッ素原子はフルオロアルキル基又はフルオロアルコキシ基の一部をなすことができる。これは、アルキルフルオリドがインビボでの代謝に耐えるからである。別法として、放射性フッ素原子は直接共有結合によってベンゼン環のような芳香環に結合できる。
【００４８】
放射性フッ素化は、１８Ｆ−フッ化物と良好な脱離基を有する前駆体化合物（例えば、アルキルブロミド、アルキルメシレート又はアルキルトシレート）中の適当な化学基との反応を用いる直接標識によって実施できる。
【００４９】
１８Ｆはまた、１８Ｆ（ＣＨ２）３ＯＭｓ又は１８Ｆ（ＣＨ２）３ＯＢｒでヒドロキシル基をＯ−アルキル化することによっても導入できる。
【００５０】
アリール系に関しては、アリールジアゾニウム塩、アリールニトロ化合物又はアリール第四級アンモニウム塩からの１８Ｆ−フッ化物求核置換が、アリール−１８Ｆ誘導体への好適な経路である。かかる方策は、例えば、式Ｉの１〜４位又は７〜１０位に１８Ｆを導入するために適している。
【００５１】
別法として、１８Ｆによる標識は、式Ｉの誘導体からの脱離基の求核置換によって達成できる。好適な脱離基には、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、トシレート（ＯＴｓ）、メシレート（ＯＭｓ）及びトリフレート（ＯＴｆ）がある。かかる誘導体は、本発明のインビボイメージング化合物を製造するための前駆体化合物である。
【００５２】
別の方策は、上記に定義したような好適な脱離基を、前駆体化合物上に存在するアルキルアミド基上に設けることである。このようにすれば、通常は核反応１８Ｏ（ｐ，ｎ）１８Ｆからの水溶液として得られ、次いで陽性対イオンの添加及びそれに続く水の除去によって反応性にされる［１８Ｆ］−フッ化物イオン（１８Ｆ−）の適当な供給源との反応によって前駆体化合物を一段階で標識できる。この方法のためには、前駆体化合物は、放射性フッ素化が化合物上の特定の部位で起こるように選択的に化学保護されるのが普通である。好適な保護基は既に前述したものである。
【００５３】
放射性同位体が１８Ｆである場合、Ｘ１又はＲ１は以下のいずれかを含むことが好ましい。
（ｉ）求核置換のためのアルキルハライド又はアルキルスルホネート（例えば、アルキルブロミド、アルキルメシレート又はアルキルトシレート）、或いは
（ｉｉ）（例えば、１８Ｆ（ＣＨ２）３ＯＭｓ又は１８Ｆ（ＣＨ２）３ＯＢｒでヒドロキシル基をＯ−アルキル化することによる１８Ｆの導入のための）ヒドロキシル。
【００５４】
本発明の若干の１８Ｆインビボイメージング剤を得るための一般反応スキームを以下に示す。
【００５５】
【化５】
0005730206.tif 000007
式中、Ｘは式Ｉに関して定義した通りであり、ｎは０〜５である。ＲＴは室温を表し、ＯＭｓはメシレートを表す。
【００５６】
本発明の若干の１８Ｆインビボイメージング剤を得るための別の一般反応スキームを以下に示す。
【００５７】
【化６】
0005730206.tif 000008
式中、Ｘは式Ｉに関して定義した通りであり、ｎは０〜５であり、ＯＴｓはトシレートを表す。
【００５８】
１１Ｃ標識ＰＥＴトレーサー化合物は、前駆体化合物を１１Ｃ−ヨウ化メチルと反応させることで合成できる。１１Ｃの半減期は２０．４分にすぎないので、１１Ｃ−ヨウ化メチル中間体は高い比放射能を有すること、したがってできるだけ速い反応プロセスを用いてそれを製造することが重要である。かかる１１Ｃ標識技法に関する徹底的な総説を、Ａｎｔｏｎｉ  ｅｔ  ａｌ，“Ａｓｐｅｃｔｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  １１Ｃ−Ｌａｂｅｌｌｅｄ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ”ｉｎ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｅｄ．Ｍ．Ｊ．Ｗｅｌｃｈ  ａｎｄ  Ｃ．Ｓ．Ｒｅｄｖａｎｌｙ（２００３，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ）に見出すことができる。
【００５９】
本発明のインビボイメージング剤が１１Ｃで標識される場合、１１Ｃはカルボニル炭素である。したがってこれは、１１Ｃが式Ｉのカルボニル炭素の位置に存在し得るか、或いは別法としてＸがＣ１−６アルキルアミドである場合にＸの位置に存在し得ることを意味する。
【００６０】
式Ｉの１１Ｃ標識インビボイメージング剤は、以下の反応スキームを用いて得ることができる。
【００６１】
【化７】
0005730206.tif 000009
式中、式ＩＩｂ及び式ＩｄのＲ３、Ｘ３及びＹ３は、式ＩのＲ、Ｘ及びＹに関して記載した通りであり、
Ｚ３は、遷移金属触媒に適した基質（例えば、水素、ハロゲン化物、ボロン酸、ＯＴｆ又は有機スズ）である。
【００６２】
１３Ｎ標識化合物の合成方法は、Ｃｌａｒｋ  ａｎｄ  Ａｉｇｂｉｒｈｉｏ（“Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｎｉｔｒｏｇｅｎ−１３  ａｎｄ  Ｏｘｙｇｅｎ−１５”ｉｎ“Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ”；２００３  Ｗｉｌｅｙ：Ｗｅｌｃｈ  ａｎｄ  Ｒｅｄｖａｎｌｙ，Ｅｄｓ．）によって記載されている。例えば、式Ｉのインビボイメージング剤は、適当な前駆体化合物中のハロゲンを１３Ｎ標識ジエチルアミンで求核置換して所望のアミドを生成することで得ることができる。
【００６３】
イメージング成分が放射性ヨウ素である場合、好ましい前駆体化合物は、求電子又は求核ヨウ素化を受ける誘導体或いは標識アルデヒド又はケトンとの縮合を受ける誘導体を含むものである。第１のカテゴリーの例は以下の（ａ）及び（ｂ）である。
（ａ）トリアルキルスタンナン（例えば、トリメチルスタンニル又はトリブチルスタンニル）、トリアルキルシラン（例えば、トリメチルシリル）或いは有機ホウ素化合物（例えば、ボロネートエステル又はオルガノトリフルオロボレート）のような有機金属誘導体。
（ｂ）求電子ヨウ素化に向けて活性化された芳香環（例えば、フェノール類）及び求核ヨウ素化に向けて活性化された芳香環（例えば、アリールヨードニウム塩、アリールジアゾニウム塩、アリールトリアルキルアンモニウム塩又はニトロアリール誘導体）。
【００６４】
放射性ヨウ素化のために好ましくは、前駆体化合物は、（放射性ヨウ素交換を可能にするための）アリールヨージド又はブロミド、活性化前駆体化合物アリール環（例えば、フェノール基）、有機金属前駆体化合物（例えば、トリアルキルスズ、トリアルキルシリル又は有機ホウ素化合物）、或いはトリアゼンのような有機前駆体化合物又は求核置換のための良好な脱離基（例えば、ヨードニウム塩）からなる。放射性ヨウ素を有機分子中に導入するための前駆体化合物及び方法は、Ｂｏｌｔｏｎ（Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｏｍｐ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．２００２；４５：４８５−５２８）によって記載されている。放射性ヨウ素をタンパク質中に導入するための前駆体化合物及び方法は、Ｗｉｌｂｕｒ（Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．１９９２；３（６）：４３３−４７０）によって記載されている。好適なボロネートエステル有機ホウ素化合物及びその製法は、Ｋａｂａｌｋａ  ｅｔ  ａｌ（Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．２００２；２９：８４１−８４３及び２００３；３０：３６９−３７３）によって記載されている。好適なオルガノトリフルオロボレート及びその製法は、Ｋａｂａｌｋａ  ｅｔ  ａｌ（Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．２００４；３１：９３５−９３８）によって記載されている。放射性ヨウ素化用の好ましい前駆体化合物は有機金属前駆体化合物からなり、最も好ましくはトリアルキルスズからなる。
【００６５】
放射性ヨウ素を結合できるアリール基の例を以下に示す。
【００６６】
【化８】
0005730206.tif 000010
これらの基はいずれも、芳香環上への容易な放射性ヨウ素置換を可能にする置換基を含んでいる。放射性ヨウ素を含む別の置換基は、例えば次式のように、放射性ハロゲン交換による直接ヨウ素化で合成することができる。
【００６７】
【化９】
0005730206.tif 000011
放射性同位体が放射性ヨウ素である場合、式ＩＩのＸ１は、そけが結合した芳香族基と共に、
（ｉ）有機金属誘導体又は有機ホウ素化合物で置換された芳香環を形成するか、
（ｉｉ）求電子ヨウ素化に向けて活性化された芳香環（例えば、フェノール類）を形成するか、或いは
（ｉｉｉ）求核放射性ヨウ素化に向けて活性化された芳香環（例えば、アリールヨードニウム塩、アリールジアゾニウム塩、アリールトリアルキルアンモニウム塩又はニトロアリール誘導体）を形成する。
【００６８】
これらの前駆体化合物は、放射性ヨウ素置換により、本発明の放射性ヨウ素化インビボイメージング剤に容易に転化される。
【００６９】
放射性臭素化は、放射性ヨウ素化に関して上記に記載したものと同様な方法によって達成できる。Ｋａｂａｌｋａ  ａｎｄ  Ｖａｒｍａは、放射性臭素化化合物を含む放射性ハロゲン化化合物を合成するための様々な方法を総説している（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  １９８９；４５（２１）：６６０１−２１）。
【００７０】
本発明の前駆体化合物は、理想的には無菌で非発熱性の形態で供給される。したがって前駆体化合物は、インビボイメージング剤を哺乳動物への投与に適した生体適合性キャリヤーと共に含んでなる医薬組成物の製造のために使用できる。前駆体化合物はまた、かかる医薬組成物を製造するためのキット中に一成分として含めるためにも適している。
【００７１】
好ましい実施形態では、前駆体化合物はキット又は自動化合成装置で使用するように設計されたカセットの一部として溶液状態で供給される。これらの態様は、本発明の追加の態様に関連して以下に一層詳しく論議される。
【００７２】
別の好ましい実施形態では、前駆体化合物は固相に結合されている。前駆体化合物は、好ましくは固体担体マトリックスに共有結合した状態で供給される。このようにすれば、所望の生成物は溶液状態で生成される一方、出発原料及び不純物は固相に結合したままに保たれる。かかる系の例としては、１８Ｆ−フッ化物による固相求電子フッ素化用の前駆体化合物が国際公開第０３／００２４８９号に記載されており、１８Ｆ−フッ化物による固相求核フッ素化用の前駆体化合物が国際公開第０３／００２１５７号に記載されている。
【００７３】
インビボイメージング剤の製造方法
さらに別の態様では、本発明は、本発明のインビボイメージング剤の製造方法であって、
（ｉ）上記に定義した式ＩＩの前駆体化合物を用意する段階、
（ｉｉ）上記に定義した前記放射性同位体の適当な供給源を用意する段階、並びに
（ｉｉｉ）段階（ｉ）の前駆体化合物を段階（ｉｉ）の放射性同位体と反応させて本発明のインビボイメージング剤を得る段階
を含んでなる方法を提供する。
【００７４】
段階（ｉ）では、前駆体化合物は、前駆体化合物の説明において上記に記載したように、キット又は自動化合成装置で使用するのに適したカセット中に溶液状態で供給するか、或いは別法として固体担体に結合した状態で供給することができる。かかるキット及びカセットは本発明の追加の態様をなしており、以下に一層詳しく論議される。
【００７５】
放射性同位体の適当な供給源は、本発明の前駆体化合物に関連して上記に記載した通りである。
【００７６】
前駆体化合物を放射性同位体と「反応させる」段階は、できるだけ高い放射化学収率（ＲＣＹ）で所望のインビボイメージング剤を生成するのに適した反応条件下で２種の反応体を合わせることを含んでいる。本発明のインビボイメージング剤を得るための特定の合成経路は、以下の実験セクションに示される。
【００７７】
インビボイメージング剤の製造用キット
さらに別の態様では、本発明は、本発明のインビボイメージング剤を製造するためのキットを提供する。前記キットは上記に記載された式ＩＩの前駆体化合物を含む結果、放射性同位体の無菌供給源との反応により最小数の操作で所望のインビボイメージング剤が得られる。かかる考慮事項は、放射性同位体が比較的短い半減期を有する場合において、取扱いを容易にし、したがって放射線薬剤師に対する放射線量を低減させるため特に重要である。前駆体化合物は好ましくは凍結乾燥形態でキット中に存在しており、かかるキットの再構成用反応媒質は好ましくは生体適合性キャリヤーである。
【００７８】
「生体適合性キャリヤー」は、組成物が生理学的に認容され得るようにして（即ち、毒性又は過度の不快感なしに哺乳動物体に投与できるようにして）インビボイメージング剤を懸濁又は溶解するための流体（特に液体）である。生体適合性キャリヤーは、好適には、無菌のパイロジェンフリー注射用水、（有利には注射用の最終生成物が等張性又は非低張性になるように平衡させ得る）食塩水のような水溶液、或いは１種以上の張度調整物質（例えば、血漿陽イオンと生体適合性対イオンとの塩）、糖（例えば、グルコース又はスクロース）、糖アルコール（例えば、ソルビトール又はマンニトール）、グリコール（例えば、グリセロール）又は他の非イオン性ポリオール物質（例えば、ポリエチレングリコール、プロピレングリコールなど）の水溶液のような注射可能なキャリヤー液体である。生体適合性キャリヤーはまた、エタノールのような生体適合性有機溶媒を含んでいてもよい。かかる有機溶媒は、親油性の高い化合物又は配合物を可溶化するために有用である。好ましくは、生体適合性キャリヤーはパイロジェンフリー注射用水、等張食塩水又はエタノール水溶液である。静脈内注射用生体適合性キャリヤーのｐＨは好適には４．０〜１０．５の範囲内にある。
【００７９】
本発明のキットでは、前駆体化合物は好ましくは、注射器による溶液の追加及び抜取りを許しながら、無菌保全性及び／又は放射能安全性の維持、さらに任意には不活性ヘッドスペースガス（例えば、窒素又はアルゴン）の維持を可能にする密封容器に入れて供給される。好ましい密封容器は、気密クロージャーを（通例はアルミニウムからなる）オーバーシールと共にクリンプ加工した隔壁密封バイアルである。かかる密封容器は、例えばヘッドスペースガスの変更又は溶液のガス抜きのために所望される場合、クロージャーが真空に耐え得るという追加の利点を有している。
【００８０】
キット中に使用する場合、前駆体化合物の好ましい実施形態は、本明細書で記載した通りである。
【００８１】
キット中に使用するための前駆体化合物を無菌製造条件下で使用すれば、所望の無菌で非発熱性の材料を得ることができる。別法として、前駆体化合物を非無菌条件下で使用し、次いで例えばγ線照射、オートクレーブ処理、乾熱又は（例えば、エチレンオキシドによる）化学処理を用いる終末滅菌を施すこともできる。好ましくは、前駆体化合物は無菌で非発熱性の形態で供給される。最も好ましくは、無菌で非発熱性の前駆体化合物は上述したような密封容器に入れて供給される。
【００８２】
好ましくは、試験間での汚染の可能性を最小限に抑えると共に無菌性及び品質保証を確実にするため、キットのすべての構成要素は使い捨てである。
【００８３】
好ましい実施形態では、キットは、以下に一層詳しく記載されるように、適宜に改造された自動化合成装置に挿入し得るカセットを含むことができる。かかるキットは、通例はフッ化物イオンによるフッ素化のための手段を含み、また不要のフッ化物イオンを除去するためのカラムを含むことができる。合成のために必要な試薬、溶媒及び他の消耗品もまた、濃度、体積、送出時間などに関する最終ユーザーの要求条件を満たすように自動化合成装置を運転させるソフトウェアを保持したコンパクトディスクのようなデータ媒体と共に含めることができる。
【００８４】
現在、ＰＥＴイメージング用の［１８Ｆ］放射性トレーサーはしばしば自動化放射合成装置で簡便に製造されている。かかる装置には、Ｔｒａｃｅｒｌａｂ及びＦａｓｔｌａｂ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社）を始めとするいくつかの市販例が存在している。かかる装置は、通常、放射化学を実施するために（しばしば使い捨ての）「カセット」を含んでおり、これを装置に取り付けることで放射合成が実施される。普通、カセットは流体通路、反応器、及び試薬バイアルを受け入れるためのポート並びに放射合成後の清掃段階で使用される固相抽出カートリッジを含んでいる。
【００８５】
したがって本発明は、別の態様では、本明細書で前述した密封容器に入れた前駆体化合物を含んでなる自動化合成装置用カセットを提供する。本発明はまた、本明細書で定義したインビボイメージング剤の自動化合成のためのカセットであって、
（ｉ）本明細書で定義した前駆体化合物を含む容器、及び
（ｉｉ）本明細書で定義した放射性同位体の適当な供給源を用いて容器を溶出するための手段
を含んでなるカセットを提供する。
【００８６】
かかるカセットはさらに、
（ｉｉｉ）過剰の放射性標識を除去するためのイオン交換カートリッジ、及び任意には
（ｉｖ）得られた放射性標識生成物を脱保護して本明細書で定義したインビボイメージング剤を生成するためのカートリッジ
を含むことができる。
【００８７】
放射性医薬組成物
さらに別の態様では、本発明は「放射性医薬組成物」を提供するが、これは本発明のインビボイメージング剤を、哺乳動物への投与に適した形態の生体適合性キャリヤーと共に含んでいる。生体適合性キャリヤーは、本発明のキットに関連して上記に定義した通りである。
【００８８】
かかる放射性医薬組成物は非経口的に（即ち、注射によって）投与でき、最も好ましくは水溶液である。かかる組成物は、緩衝剤、薬学的に許容される可溶化剤（例えば、シクロデキストリン或いはＰｌｕｒｏｎｉｃ、Ｔｗｅｅｎ又はリン脂質のような界面活性剤）、薬学的に許容される安定剤又は酸化防止剤（例えば、アスコルビン酸、ゲンチジン酸又はパラアミノ安息香酸）のような追加成分を任意に含み得る。本発明のインビボイメージング剤が放射性医薬組成物として提供される場合、前記インビボイメージング剤の製造方法はさらに、放射性医薬組成物を得るために必要な段階（例えば、有機溶媒の除去、生体適合性緩衝剤及び任意の追加成分の添加）を含むことができる。非経口的投与のためには、放射性医薬組成物が無菌性かつ無発熱原性であることを保証するための手段を講じることも必要である。
【００８９】
インビボイメージング方法
さらに別の態様では、本発明は、被験体におけるＰＢＲ発現の体内分布及び／又は程度を決定するためのインビボイメージング方法であって、
（ｉ）本明細書で定義したインビボイメージング剤を前記被験体に投与する段階、
（ｉｉ）前記イメージング剤を前記被験体中のＰＢＲに結合させる段階、
（ｉｉｉ）前記イメージング剤の放射性同位体から放出される信号をインビボイメージング技法によって検出する段階、
（ｉｖ）前記信号の位置及び／又は量を表す画像を生成する段階、並びに
（ｖ）前記被験体におけるＰＢＲ発現の分布及び程度を決定する段階であって、前記発現は前記インビボイメージング剤から放出される前記信号と直接に相関している段階
を含んでなるインビボイメージング方法を提供する。
【００９０】
本発明のインビボイメージング方法に関しては、インビボイメージング剤は本明細書でおいて前記に定義した通りである。
【００９１】
インビボイメージング剤を「投与する」段階は、好ましくは非経口的に実施され、最も好ましくは静脈内に実施される。静脈内経路は、インビボイメージング剤を被験体の身体全域に送達するため、したがって血液脳関門（ＢＢＢ）を横切って前記被験体で発現されたＰＢＲに接触させるための最も効率的な方法である。本発明のインビボイメージング剤は、好ましくは本明細書で定義した本発明の医薬組成物として投与される。
【００９２】
投与段階後かつ検出段階前に、インビボイメージング剤をＰＢＲに結合させる。例えば、被験体がインタクトな哺乳動物である場合、インビボイメージング剤は哺乳動物の身体を通って動的に移動し、体内の様々な組織に接触する。ひとたびインビボイメージング剤がＰＢＲに接触すれば、特異的な相互作用が起こる結果、ＰＢＲをもった組織からのインビボイメージング剤のクリアランスは、ＰＢＲをもたない組織又はＰＢＲの少ない組織よりも長い時間がかかる。一定の時点に達すれば、ＰＢＲをもった組織に結合したインビボイメージング剤とＰＢＲをもたない組織又はＰＢＲの少ない組織に結合したインビボイメージング剤との比の結果として、ＰＢＲに特異的に結合したインビボイメージング剤の検出が可能となる。理想的なかかる比は約２：１である。
【００９３】
本発明の方法の「検出」段階は、放射性同位体から放出される信号を、前記信号に対して感受性を有する検出器によって検出することを含んでいる。この検出段階はまた、信号データの取得として理解することもできる。単光子放出コンピューター断層撮影（ＳＰＥＣＴ）及び陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）が、本発明の方法で使用するための最も好適なインビボイメージング技法である。ＰＥＴが、本発明の方法で使用するための好ましいインビボイメージング技法である。
【００９４】
本発明の方法の「生成」段階は、取得された信号データに再構築アルゴリズムを適用してデータセットを得るコンピューターによって実施される。次いで、このデータセットを操作することで、前記放射性同位体から放出される信号の位置及び／又は量を示す画像が生成される。放出される信号はＰＢＲの発現と直接に相関する結果、生成された画像を評価することで「決定」段階を行うことができる。
【００９５】
本発明の「被験体」は、任意のヒト又は動物被験体であり得る。好ましくは、本発明の被験体は哺乳動物である。最も好ましくは、前記被験体はインタクトな哺乳動物生体である。特に好ましい実施形態では、本発明の被験体はヒトである。かかるイメージング方法は、健常被験体或いはＰＢＲの異常発現に関連する病的状態（「ＰＢＲ状態」）を有することが知られ又は疑われる被験体においてＰＢＲを検査するために使用できる。好ましくは、前記方法はＰＢＲ状態を有することが疑われる被験体のインビボイメージングに関し、したがって前記状態の診断方法において有用である。インビボイメージングが役に立つかかる状態の例には、神経炎症が存在するパーキンソン病、多発性硬化症、アルツハイマー病及びハンチントン病のような神経疾患がある。本発明の化合物によるイメージングが有用であり得る他のＰＢＲ状態には、ニューロパシー性疼痛、関節炎、喘息、アテローム性動脈硬化症、並びに結腸直腸癌及び乳癌のような悪性疾患がある。本発明のインビボイメージング剤は、その良好な脳内取込みのため、中枢神経系（ＣＮＳ）のインビボイメージングに特に適している。
【００９６】
別の実施形態では、本発明のインビボイメージング方法は前記被験体に関する治療計画の進行中に繰り返して実施することができ、前記計画はＰＢＲ状態と戦うための薬物の投与を含んでいる。例えば、本発明のインビボイメージング方法は、ＰＢＲ状態と戦うための薬物による治療前、治療中及び治療後に実施できる。このようによすれば、前記治療の効果を経時的なモニターすることができる。この実施形態のために好ましくは、インビボイメージング技法はＰＥＴである。ＰＥＴは優れた感度及び分解能を有する結果、病変部における比較的小さい変化でも経時的に観察でき、これは治療モニタリングのために有利である。ＰＥＴスキャナーは、日常的にピコモル範囲内の放射能濃度を測定している。現在、マイクロＰＥＴスキャナーは約１ｍｍの空間分解能に接近しているが、臨床スキャナーは約４〜５ｍｍである。
【００９７】
さらに別の態様では、本発明はＰＢＲ状態の診断方法を提供する。本発明の診断方法は、上記に定義したインビボイメージング方法を、ＰＢＲ発現の分布及び程度を特定の臨床像に帰因させる追加段階（ｖｉ）（即ち、演繹的な医学的決断段階）と共に含んでいる。
【００９８】
別の態様では、本発明は、本明細書中で定義した診断方法で使用するための、本明細書中で定義したインビボイメージング剤を提供する。
【００９９】
さらに別の態様では、本発明は、本明細書中で定義した診断方法で使用するための本明細書中で定義した放射性医薬組成物の製造で使用するための、本明細書中で定義したインビボイメージング剤を提供する。
【実施例】
【０１００】
実施例の簡単な説明
すべての試薬はＳｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ社から入手した。
【０１０１】
実施例１乃至実施例６は、本発明の様々なインビボイメージング剤の非放射性バージョンの合成法を記載している。
【０１０２】
実施例７乃至実施例９は、本発明の１８Ｆ標識インビボイメージング剤を得るための方法を記載している。
【０１０３】
実施例１０は、本発明のイメージング剤のＰＢＲ親和性を測定するために使用したインビトロ効力アッセイを記載している。
【０１０４】
実施例１１は、動物体内分布試験の実施方法を記載している。
【０１０５】
実施例１２は、顔面神経軸索切断動物モデル及びオートラジオグラフィー試験におけるそれの使用を記載している。
【０１０６】
実施例中で使用される略語のリスト
ＤＣＭ      ジクロロメタン
ＤＭＦ      ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ    ジメチルスルホキシド
ＥｔＯＡｃ  酢酸エチル
ＦＮＡ      顔面神経軸索切断
ｇ          グラム
ｈ          時間
ＨＲＭＳ    高分解能質量分析法
Ｋ２２２    クリプトフィックス２．２．２
Ｍ          モル濃度＝溶質のモル数／溶液１リットル
ＭＨｚ      メガヘルツ
ｍｌ        ミリリットル
ｍｍｏｌ    ミリモル
Ｎ          規定度＝当量数／溶液１Ｌ
ＮＭＲ      核磁気共鳴
ＰＢＲ      末梢ベンゾジアゼピンレセプター
ＲＴ        室温
実施例１：（±）−１１−（２−フルオロエチル）−８−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（非放射性イメージング剤１）の製造
実施例１（ｉ）：（±）−４−オキソ−チオクロマン−２−カルボン酸ジエチルアミド
【０１０７】
【化１０】
0005730206.tif 000012
Ｔ．Ｏｋｕｂｏ  ｅｔ  ａｌ（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００４；１２：３５６９−３５８０）に記載されているようにして製造した（±）−４−オキソ−チオクロマン−２−カルボン酸（１０．４ｇ、５０ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＣＭ（１００ｍｌ）溶液を、塩化オキサリル（１２．６ｇ、１００ｍｍｏｌ）及び１滴のＤＭＦと共に窒素雰囲気下において室温で１８時間撹拌した。次いで、反応物を真空中で蒸発させてガム状にし、次いでＤＣＭ（１００ｍｌ）に再溶解し、氷浴上で０℃に冷却し、撹拌しながらＤＣＭ（２０ｍｌ）中のジエチルアミン（８．０３ｇ、１１０ｍｍｏｌ）を１時間かけて滴下することで処理した。反応物を１時間かけて室温まで放温し、１０％炭酸カリウム水溶液（１００ｍｌ）を添加し、反応混合物を激しく撹拌した。ＤＣＭ溶液を分離した。水溶液をＤＣＭの追加バッチ（１００ｍｌ）で２回抽出し、合わせた抽出液を硫酸マグネシウム上で乾燥した。ＤＣＭ溶液を真空中で濃縮して暗緑色の油状物を得たが、これは静置することで結晶化した。結晶質固体をジエチルエーテル（５０ｍｌ）でトリチュレートして濾過することで、標記化合物（８．５７ｇ、６５％）を淡緑色の固体として得た。
【０１０８】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  １．０６（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）、１．２３（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）、３．０−３．５（ｍ，６Ｈ）、４．２５（ｍ，１Ｈ）、７．１５−７．２１（ｍ，２Ｈ）、７．３２−７．３９（ｍ，１Ｈ）、８．１０−８．１４（ｍ，１Ｈ）。
【０１０９】
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  １２．９、１４．８、４０．１、４０．７、４２．３、４２．５、１２５．８、１２７．２、１２８．７、１３０．８、１３３．４、１３７．９、１６７．９、１９３．１。
【０１１０】
実施例１（ｉｉ）：（±）−８−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド
【０１１１】
【化１１】
0005730206.tif 000013
（±）−４−オキソ−チオクロマン−２−カルボン酸ジエチルアミド（１．３２ｇ、５．０ｍｍｏｌ、実施例１（ｉ））及び４−メトキシフェニルヒドラジン塩酸塩（０．８７ｇ、５．０ｍｍｏｌ）のエタノール（１０ｍｌ）溶液に、濃硫酸（０．７３ｍｌ、１．３５ｇ、１３．８ｍｍｏｌ）を窒素下で添加した。反応混合物を２４時間加熱還流した。冷却後、反応混合物を濾過し、固体をエタノールで洗浄し、（４５℃で）真空乾燥することで、標記化合物（１．０５ｇ、５７％）を淡黄色の固体として得た。
【０１１２】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ０．９７（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）、１．２８（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）、３．２５（ｍ，２Ｈ）、３．６０（ｍ，２Ｈ）、３．７４（ｓ，３Ｈ）、５．５９（ｓ，１Ｈ）、６．８０（ｍ，２Ｈ）、７．１０−７．３５（ｍ，４Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ）、１１．５２（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）。
【０１１３】
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  １０．５、１２．７、３２．７、３７．９、３９．５、５３．０、９７．６、１０３．３、１０９．８７、１０９．９２、１２０．３、１２３．５、１２３．８、１２４．３、１２４．７、１２４．９、１２７．８、１２９．４、１３１．８、１５１．３、１６６．２。
【０１１４】
ｍ／ｚ（ＥＳ＋）３６７．１（Ｍ＋Ｈ）。
【０１１５】
実施例１（ｉｉｉ）：（±）−１１−（２−フルオロエチル）−８−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド
【０１１６】
【化１２】
0005730206.tif 000014
（±）−８−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（１５０ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ、実施例１（ｉｉ））の無水ＤＭＦ（４ｍｌ）溶液に、Ｌ．Ｃｒｏｎｉｎ  ｅｔ  ａｌ（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００４；６９：５９３４−５９４６）に記載されているようにして製造した２−フルオロエチルトシレート（１６６ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）を添加し、次いで鉱油中の水素化ナトリウム６０％分散液（３４ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）を窒素下で添加した。反応混合物を８０℃で１時間加熱した。冷却後、溶媒を真空中で除去し、残留物を水（３０ｍｌ）で奪活し、ＤＣＭ（２×３０ｍｌ）で抽出し、（ＭｇＳＯ４で）乾燥し、溶媒を真空中で除去した。５〜１０％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ２Ｃｌ２を溶離剤とするシリカ上でのカラムクロマトグラフィーによって残留物を精製した。粗生成物をエーテル／石油スピリットで奪活し、濾過し、（４５℃で）真空乾燥することで、標記化合物（７７ｍｇ、４６％）を淡褐色の固体として得た。
【０１１７】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  １．１２（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、１．３６（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、３．２５−３．７０（ｍ，４Ｈ）、３．８３（ｓ，３Ｈ）、４．４５−４．７０（ｍ，２Ｈ）、４．８０（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ）、４．９６（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ）、５．０９（ｓ，１Ｈ）、６．８４−６．９３（ｍ，２Ｈ）、７．１３−７．３２（ｍ，３Ｈ）、７．４６（ｍ，１Ｈ）、７．５８（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）。
【０１１８】
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  １２．９、１４．９、３７．３、４１．１、４２．５、４５．５、４５．８、５５．９、８１．２、８３．５、１００．４、１１０．１、１１１．０９、１１１．１２、１１２．８、１２４．３１、１２４．３５、１２５．２、１２６．５、１２７．１、１２７．６、１２８．８、１３２．２、１３４．４、１３７．０、１５４．８、１６８．０。
【０１１９】
１９Ｆ  ＮＭＲ（２８２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  −２１９．４、−２１９．５、−２１９．６、−２１９．６５、−２１９．７３、−２１９．９、−２１９．９。
【０１２０】
ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４１３．１（Ｍ＋Ｈ）。
【０１２１】
実施例２：（±）−１１−（２−フルオロエチル）−１０−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（非放射性イメージング剤３）の製造
実施例２（ｉ）：（±）−１０−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド
【０１２２】
【化１３】
0005730206.tif 000015
この化合物は、４−メトキシフェニルヒドラジン塩酸塩の代わりに２−メトキシフェニルヒドラジン塩酸塩を使用した点を除き、実施例１（ｉｉ）に関して記載したようにして製造した。化合物は４０％の収率で得られた。
【０１２３】
ｍ／ｚ（ＥＳ＋）３６７．０（Ｍ＋Ｈ）。
【０１２４】
実施例２（ｉｉ）：（±）−１１−（２−フルオロエチル）−１０−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド
【０１２５】
【化１４】
0005730206.tif 000016
この化合物は、（±）−８−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミドの代わりに（±）−１０−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（実施例２（ｉ））を使用した点を除き、実施例１（ｉｉｉ）に関して記載したようにして製造した。再結晶（エーテル）後、化合物は白色の固体として１０％の収率で得られた。
【０１２６】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  １．０９（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、１．３５（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、３．２５−３．６７（ｍ，４Ｈ）、３．９５（ｓ，３Ｈ）、４．７０−４．９６（ｍ，４Ｈ）、５．０４（ｓ，１Ｈ）、６．６７（ｍ，１Ｈ）、７．０４（ｍ，２Ｈ）、７．１６（ｍ，１Ｈ）、７．２９（ｍ，１Ｈ）、７．４５（ｍ，１Ｈ）、７．７７（ｍ，１Ｈ）。
【０１２７】
ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４１３．１（Ｍ＋Ｈ）。
【０１２８】
実施例３：（±）−４−フルオロ−１１−（２−フルオロエチル）−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（非放射性イメージング剤４）の製造
実施例３（ｉ）：（±）−８−フルオロ−４−オキソ−チオクロマン−２−カルボン酸
【０１２９】
【化１５】
0005730206.tif 000017
丸底フラスコ内において、トルエン（１２ｍＬ）中の２−フルオロチオフェノール（５．０ｇ、３９．０ｍｍｏｌ、４．１６ｍＬ）及びフラン−２，５−ジオン（３．８２ｇ、３９．０ｍｍｏｌ）を５０℃で４０分間撹拌した。次いで、反応温度が６０℃を超えないようにしながら、トルエン（５ｍＬ）中のトリエチルアミン（１００μｌ）を１０分かけて添加した。次いで、反応物を７０℃で２０分間加熱した。次いで、反応物を高真空下で濃縮することで、粗生成物を油状物として得た。この物質をＤＣＭ（７５ｍＬ）に溶解し、氷浴上で冷却し、温度を１０℃未満に保つようにしながら三塩化アルミニウム（７．７８ｇ、５８．５ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えて処理した。反応物をＲＴまで温めたところ、塩化水素ガスの激しい発生が起こり、反応物は非常に粘稠になると共に赤色に変わった。ＲＴで１．５時間撹拌した後、反応混合物をＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈してその粘度を低下させ、２Ｌ三角フラスコ内の激しく撹拌した濃塩酸（３０ｍＬ）及び氷（３０ｇ）中にゆっくりと注ぎ込んだ。反応物を激しく撹拌し、追加のＤＣＭ（５００ｍＬ）及びイソプロピルアルコール（５０ｍＬ）で希釈して晶出した固体を溶解した。ＤＣＭ層を分離し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、真空中で濃縮して褐色の固体を得た。粗生成物を精製し、ジエチルエーテルでトリチュレートし、クリーム色の固体を濾過により集めて２．５ｇ（２８％）の８−フルオロ−４−オキソ−チオクロマン−２−カルボン酸を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯ−ｄ３）：δ  ３．０４−３．２０（２Ｈ，ｍ，３−Ｈ）、４．５１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４及び６Ｈｚ，２−Ｈ）、７．２６−７．３４（１Ｈ，ｍ，６−Ｈ）、７．４５−７．５２（１Ｈ，ｍ，７−Ｈ）、７．８２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１及び８Ｈｚ，５Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＤＭＳＯ−ｄ３）：δ  ４０．５、４０．７、１１９．８、１２０．１、１２３．８８、１２３．９２、１２６．０、１２６．１、１３１．９、１５６．１、１５９．２、１７１．５、１９１．２、１９１．３。
【０１３０】
実施例３（ｉｉ）：（±）−８−フルオロ−４−オキソ−チオクロマン−２−カルボン酸ジエチルアミド
【０１３１】
【化１６】
0005730206.tif 000018
乾燥ＤＣＭ（５０ｍｌ）中の８−フルオロ−４−オキソ−チオクロマン−２−カルボン酸（２．５ｇ、１１．１ｍｍｏｌ）を、反応を触媒するための塩化オキサリル（２．８１ｇ、２２．１ｍｍｏｌ、１．９３ｍＬ）及び１滴のＤＭＦと共に窒素雰囲気下において室温で１８時間撹拌した。酸は最初は不溶性であったが、反応するに従って溶解し、２時間後にはオレンジ色の透明溶液となり、次いで２４時間後には黒色に変わった。次いで、反応物を真空中で蒸発させてガム状にして過剰の塩化オキサリルを除去し、ＣＤＣｌ３中で１Ｈ  ＮＭＲ及び１３Ｃ  ＮＭＲを実施して反応の完了を確認した。次いで、反応物をＤＣＭ（５０ｍｌ）に再溶解し、氷浴上で０℃に冷却し、撹拌しながらＤＣＭ（２０ｍｌ）中のジエチルアミン（１．６６ｇ、２２．７ｍｍｏｌ、２．０５ｍＬ）を１時間かけて滴下することで処理した。反応物を１時間かけて室温まで放温した。次いで、反応物を５％炭酸カリウム溶液（１００ｍｌ）の添加によって奪活し、反応混合物を激しく撹拌した。ＤＣＭ溶液を分離し、硫酸マグネシウム上で乾燥した。ＤＣＭの追加バッチ（１００ｍｌ）を水溶液と共に振盪し、次いで分離して硫酸マグネシウム上で乾燥することを２回繰り返した。合わせたＤＣＭ溶液を真空中で濃縮して褐色の固体を得た。粗固体を酢酸エチル及びガソリンからの高温再結晶によって精製することで、１．７６ｇ（５６％）の８−フルオロ−４−オキソ−チオクロマン−２−カルボン酸ジエチルアミドを黄色の結晶として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：δ  １．０７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、１．２６（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、３．０２−３．５５（６Ｈ，ｍ，２−Ｈ及びＮ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、４．２４−４．２７（１Ｈ，ｍ，２−Ｈ）、７．１５−７．１９（２Ｈ，ｍ，６−Ｈ及び７−Ｈ）、７．９３−７．９７（１Ｈ，ｍ，５−Ｈ）。
【０１３２】
ＬＣ−ＭＳ：Ｃ１４Ｈ１６ＦＮＯ２Ｓに関するｍ／ｚ計算値、２８１．１；実測値、２８２．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１３３】
実施例３（ｉｉｉ）：（±）−４−フルオロ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド
【０１３４】
【化１７】
0005730206.tif 000019
エタノール（１０ｍＬ）及び硫酸（濃、０．８ｍＬ）中の８−フルオロ−４−オキソ−チオクロマン−２−カルボン酸ジエチルアミド（１．７ｇ、６．０ｍｍｏｌ）及びフェニルヒドラジン（０．６５ｇ、６．０ｍｍｏｌ、０．６ｍＬ）を、還流させながら一晩撹拌した。冷却後、反応物を濾過し、白色の固体を集めて１．４ｇ（８０％）の粗物質（純度９０％）を得た。粗固体（５００ｍｇ）をエタノールからの高温再結晶によって精製することで、２７７ｍｇ（１３％）の４−フルオロ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミドを白色の結晶として得た。構造は１Ｈ  ＮＭＲによって確認した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ０．９６（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、１．３０（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝９Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、３．１９−３．２５（２Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、３．５６−３．６６（２Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、５．７６（１Ｈ，ｓ，６−Ｈ）、７．０２−７．４５（６Ｈ，ｍ，ＡｒＨ）、７．６５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１及び６Ｈｚ，ＡｒＨ）、１１．８（１Ｈ，ｓ，ＮＨ）。
【０１３５】
ＬＣ−ＭＳ：Ｃ２０Ｈ１９ＦＮ２ＯＳに関するｍ／ｚの計算値、３５４．２；実測値、３５５．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１３６】
実施例３（ｉｖ）：（±）−４−フルオロ−１１−（２−フルオロエチル）−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド
【０１３７】
【化１８】
0005730206.tif 000020
（±）−４−フルオロ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（０．１０ｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を窒素下において室温で乾燥ＤＭＦ（６ｍＬ）に溶解した。フルオロエチルトシレート（０．１２ｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を添加し、次いでＮａＨ（０．０２ｇ、０．５６ｍｍｏｌ、油中６０％）を添加した。反応物を８０℃で１時間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残留物をＤＣＭに溶解し、水で洗浄した。有機物をＭｇＳＯ４上で乾燥し、濾過し、蒸発乾固させた。粗物質をメタノールから晶出させることで、３４．４ｍｇ（３０％）の４−フルオロ−１１−（２−フルオロエチル）−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミドを白色の固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ０．９４（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、１．２９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、３．１４−３．２６（２Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、３．５５−３．６５（２Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、４．６５−４．９５（４Ｈ，ｍ，ＮＣＨ２ＣＨ２Ｆ）、５．６２（１Ｈ，ｓ，６−Ｈ）、７．１２−７．３７（４Ｈ，ｍ，ＡｒＨ）、７．４８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，ＡｒＨ）、７．６１−７．６８（２Ｈ，ｍ，ＡｒＨ）。
【０１３８】
ＬＣ−ＭＳ：Ｃ２２Ｈ２２Ｆ２Ｎ２ＯＳに関するｍ／ｚの計算値、４０１．１；実測値、４０１．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１３９】
実施例４：（±）−３−フルオロ−１１−（２−フルオロエチル）−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（非放射性イメージング剤５）の製造
実施例４（ｉ）：（±）−７−フルオロ−４−オキソ−チオクロマン−２−カルボン酸
【０１４０】
【化１９】
0005730206.tif 000021
丸底フラスコ内において、トルエン（１２ｍＬ）中の３−フルオロチオフェノール（１０．０ｇ、７１．３ｍｍｏｌ、８．８５ｍＬ）及びフラン−２，５−ジオン（７．０ｇ、７１．３ｍｍｏｌ）を５０℃で４０分間撹拌した。次いで、反応温度が６０℃を超えないようにしながら、トルエン（１ｍＬ）中のトリエチルアミン（２６μｌ）を１０分かけて添加した。次いで、反応物を７０℃で２０分間加熱した。次いで、反応物を高真空下で濃縮することで、粗生成物を油状物として得た。この物質をＤＣＭ（７５ｍＬ）に溶解し、氷浴上で冷却し、温度を１０℃未満に保つようにしながら三塩化アルミニウム（７．７８ｇ、５８．５ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えて処理した。反応物をＲＴまで温めたところ、塩化水素ガスの激しい発生が起こり、反応物は非常に粘稠になると共に赤色に変わった。室温で１．５時間撹拌した後、反応混合物をＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈してその粘度を低下させ、２Ｌ三角フラスコ内の激しく撹拌した濃塩酸（３０ｍＬ）及び氷（３０ｇ）中にゆっくりと注ぎ込んだ。反応物を激しく撹拌し、追加のＤＣＭ（５００ｍＬ）及びイソプロピルアルコール（５０ｍＬ）で希釈して晶出した固体を溶解した。ＤＣＭ層を分離し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、真空中で濃縮して褐色の固体を得た。固体をジエチルエーテルでトリチュレートし、次いで濾過することで、４．２ｇ（４８％）の７−フルオロ−４−オキソ−チオクロマン−２−カルボン酸をクリーム色の固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯ−ｄ３）：δ  ３．００−３．１６（２Ｈ，ｍ，３−Ｈ）、４．４４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５及び１０Ｈｚ，２−Ｈ）、７．０８（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ１＝３及び９Ｈｚ，６−Ｈ）、７．３０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５及び１０Ｈｚ，ＡｒＨ）、８．０１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝５及び１０Ｈｚ，ＡｒＨ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＤＭＳＯ−ｄ３）：δ  ３８．０、３９．６、１１１．１、１１１．３、１１１．５、１１１．８、１２５．０、１２５．１、１２９．０、１２９．２、１３９．６、１３９．７、１６０．９、１６４．３、１６９．５、１８８．９。
【０１４１】
実施例４（ｉｉ）：（±）−７−フルオロ−４−オキソ−チオクロマン−２−カルボン酸ジエチルアミド
【０１４２】
【化２０】
0005730206.tif 000022
乾燥ＤＣＭ（５０ｍｌ）中の７−フルオロ−４−オキソ−チオクロマン−２−カルボン酸（４ｇ、１７．７ｍｍｏｌ）を、反応を触媒するための塩化オキサリル（４．４９ｇ、３５．４ｍｍｏｌ、３．１ｍＬ）及び１滴のＤＭＦと共に窒素雰囲気下において室温で１８時間撹拌した。酸は最初は不溶性であったが、反応するに従って溶解し、２時間後にはオレンジ色の透明溶液となり、次いで２４時間後には黒色に変わった。次いで、反応物を真空中で蒸発させてガム状にして過剰の塩化オキサリルを除去し、ＣＤＣｌ３中で１Ｈ  ＮＭＲ及び１３Ｃ  ＮＭＲを実施して反応の完了を確認した。次いで、反応物をＤＣＭ（５０ｍｌ）に再溶解し、氷浴上で０℃に冷却し、撹拌しながらＤＣＭ（１０ｍｌ）中のジエチルアミンを１時間かけて滴下することで処理した。反応物を１時間かけて室温まで放温した。次いで、反応物を５％炭酸カリウム溶液（５０ｍｌ）の添加によって奪活し、反応混合物を激しく撹拌した。ＤＣＭ溶液を分離し、硫酸マグネシウム上で乾燥した。ＤＣＭの追加バッチ（５０ｍｌ）を水溶液と共に振盪し、次いで分離して硫酸マグネシウム上で乾燥することを２回繰り返した。合わせたＤＣＭ溶液を真空中で濃縮して褐色の固体を得、これを静置して結晶化させることで、５．０３ｇ（クアント（ｑｕａｎｔ））の７−フルオロ−４−オキソ−チオクロマン−２−カルボン酸ジエチルアミドを得た。構造は１Ｈ  ＮＭＲによって確認した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：δ  １．０７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、１．２４（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、２．９９−３．５０（６Ｈ，ｍ，２−Ｈ及びＮ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、４．２４−４．２７（１Ｈ，ｍ，２−Ｈ）、６．８３−６．９４（２Ｈ，ｍ，６−Ｈ及び８−Ｈ）、８．１５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６及び９Ｈｚ，５−Ｈ）。
【０１４３】
ＬＣ−ＭＳ：Ｃ１４Ｈ１６ＦＮＯ２Ｓに関するｍ／ｚの計算値、２８１．１；実測値、２８２．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１４４】
実施例４（ｉｉｉ）：（±）−３−フルオロ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド
【０１４５】
【化２１】
0005730206.tif 000023
エタノール（１０ｍＬ）及び硫酸（濃、１．２ｍＬ）中の７−フルオロ−４−オキソ−チオクロマン−２−カルボン酸ジエチルアミド（２．５ｇ、８．９ｍｍｏｌ）及びフェニルヒドラジン（０．９６ｇ、８．９ｍｍｏｌ、０．９ｍＬ）を、還流させながら一晩撹拌した。粗固体をエタノールからの高温再結晶によって精製することで、１．４９ｇ（４７％）の３−フルオロ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミドを白色の結晶として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ０．９６（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、１．２９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、３．１９−３．２５（２Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、３．５５−３．６１（２Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、５．６６（１Ｈ，ｓ，６−Ｈ）、７．０３（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝１及び８Ｈｚ，ＡｒＨ）、７．０９−７．１８（２Ｈ，ｍ，ＡｒＨ）、７．２５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３及び９Ｈｚ，ＡｒＨ）、７．３５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，ＡｒＨ）、７．４１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，ＡｒＨ）、７．８１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６及び９Ｈｚ，ＡｒＨ）、１１．６８（１Ｈ，ｓ，ＮＨ）。
【０１４６】
ＬＣ−ＭＳ：Ｃ２０Ｈ１９ＦＮ２ＯＳに関するｍ／ｚの計算値、３５２．１；実測値、３５３．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１４７】
実施例４（ｉｖ）：（±）−３−フルオロ−１１−（２−フルオロエチル）−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド
【０１４８】
【化２２】
0005730206.tif 000024
（±）−３−フルオロ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（０．２０ｇ、０．５６ｍｍｏｌ）を窒素下において室温で乾燥ＤＭＦ（６ｍＬ）に溶解した。フルオロエチルトシレート（０．２５ｇ、１．１３ｍｍｏｌ）を添加し、次いでＮａＨ（０．０５ｇ、１．１３ｍｍｏｌ、油中６０％）を添加した。反応物を８０℃で１時間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残留物をＤＣＭに溶解し、水で洗浄した。有機物をＭｇＳＯ４上で乾燥し、濾過し、蒸発乾固させた。水（Ａ）及びアセトニトリル（Ｂ）を溶離剤とする半分取ＨＰＬＣ（Ｇｅｍｉｎｉ  ５μ、Ｃ１８、１１０Ａ、１５０×２１ｍｍ、２０分で５〜９５％Ｂ、２１ｍＬ／分）によって粗物質を精製することで、７９．９ｍｇ（３５％）の３−フルオロ−１１−（２−フルオロエチル）−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミドを白色の固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ０．９５（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝９Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、１．８８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝９Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、３．１４−３．２６（２Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、３．５１−３．６７（２Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、４．５８−４．９７（４Ｈ，ｍ，ＮＣＨ２ＣＨ２Ｆ）、５．５３（１Ｈ，ｓ，６−Ｈ）、７．１２−７．２７（３Ｈ，ｍ，ＡｒＨ）、７．３８−４．４７（２Ｈ，ｍ，ＡｒＨ）、７．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，ＡｒＨ）、７．８０−７．８６（１Ｈ，ｍ，ＡｒＨ）。
【０１４９】
ＬＣ−ＭＳ：Ｃ２２Ｈ２２Ｆ２Ｎ２ＯＳに関するｍ／ｚの計算値、４０１．１；実測値、４０１．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１５０】
実施例５：（±）−８−エトキシ−１１−（２−フルオロエチル）−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（非放射性イメージング剤６）の製造
実施例５（ｉ）：（±）−１１−［２−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）エチル］−８−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド
【０１５１】
【化２３】
0005730206.tif 000025
実施例１（ｉｉ）の（±）−８−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（２．０ｇ、５．４０ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（２０ｍｌ）溶液に、鉱油中の水素化ナトリウム６０％分散液（２４０ｍｇ、６．０ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を窒素下において室温で５分間撹拌した。２−（ブロモエトキシ）−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチルシラン（２．６ｇ、１０．８ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を４時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、残留物を水（３０ｍｌ）で奪活し、ＤＣＭ（２×３０ｍｌ）で抽出し、（ＭｇＳＯ４で）乾燥し、溶媒を真空中で除去した。３％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ２Ｃｌ２を溶離剤とするシリカ上でのカラムクロマトグラフィーによって残留物を精製することで、標記化合物（２．０ｇ、７０％）を黄色の固体として得た。
【０１５２】
実施例５（ｉｉ）：（±）−１１−［２−ヒドロキシエチル］−８−ヒドロキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド
【０１５３】
【化２４】
0005730206.tif 000026
（±）−１１−［２−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）エチル］−８−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（１．０ｇ、１．９１ｍｍｏｌ）の−７８℃の乾燥ＤＣＭ（６０ｍｌ）溶液に、三臭化ホウ素（１１．５ｍｌ、ＤＣＭ中１Ｍ、１１．５ｍｍｏｌ）を添加した。溶液をＲＴまで昇温させ、２４時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、メタノール（４０ｍｌ）で奪活し、１Ｍ  ＨＣｌ（１０ｍｌ）を添加し、１時間還流した。溶媒を真空中で除去し、混合物をメタノール（５ｍｌ）に溶解し、水（１００ｍｌ）で奪活し、濾過し、（４５℃で）真空乾燥することで、標記化合物（０．７７ｇ、１００％）を淡褐色の粉末として得た。
【０１５４】
実施例５（ｉｉｉ）：（±）−１１−［２−ヒドロキシエチル］−８−エトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド
【０１５５】
【化２５】
0005730206.tif 000027
（±）−１１−［２−ヒドロキシエチル］−８−ヒドロキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（４００ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）の０℃の無水ＤＭＦ（４ｍｌ）溶液に、鉱油中の水素化ナトリウム６０％分散液（４０ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を窒素下において０℃で１０分間撹拌した。臭化エチル（２１８ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ、１５０μｌ）を添加し、混合物を２４時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、残留物を水（３０ｍｌ）で奪活し、ＤＣＭ（２×３０ｍｌ）で抽出し、（ＭｇＳＯ４で）乾燥し、溶媒を真空中で除去した。４０〜６０％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ２Ｃｌ２を溶離剤とするシリカ上でのカラムクロマトグラフィーによって残留物を精製することで、標記化合物（３４０ｍｇ、７９％）を白色の固体として得た。
【０１５６】
実施例５（ｉｖ）：（±）−１１−［２−メタンスルホキシエチル］−８−エトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド
【０１５７】
【化２６】
0005730206.tif 000028
（±）−１１−［２−ヒドロキシエチル］−８−エトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（０．３４ｇ、０．８０ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（１５ｍｌ）懸濁液に、ピリジン（０．６３ｇ、８．０ｍｍｏｌ、０．６５ｍｌ）を添加した。反応物を０℃に冷却し、メタンスルホニルクロリド（０．３７ｇ、３．２ｍｍｏｌ、０．２５ｍｌ）を添加した。反応混合物をＲＴで３時間撹拌した。混合物を０５Ｍ  ＨＣｌ（２×２０ｍｌ）で洗浄し、次いで水（２×２０ｍｌ）で洗浄し、（ＭｇＳＯ４で）乾燥し、溶媒を減圧下で除去した。２０％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ２Ｃｌ２を溶離剤とするシリカ上でのカラムクロマトグラフィーによって残留物を精製した。残留物をエーテル／石油スピリットで奪活し、濾過し、（４５℃で）真空乾燥することで、標記化合物（０．３８ｇ、９５％）を淡黄色の固体として得た。
【０１５８】
実施例５（ｖ）：（±）−１１−［２−フルオロエチル］−８−エトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド
【０１５９】
【化２７】
0005730206.tif 000029
窒素下にある（±）−１１−［２−メタンスルホキシエチル］−８−エトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（１００ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）の無水アセトニトリル（５ｍｌ）溶液に、ＴＨＦ中の１．０Ｍ  ＴＢＡＦ（０．４ｍｌ、０．４ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を８０℃で２時間加熱した。溶媒を真空中で除去し、５〜１０％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ２Ｃｌ２を溶離剤とするシリカ上でのカラムクロマトグラフィーによって残留物を精製することで、標記化合物（２６ｍｇ、３１％）を黄色の固体として得た。
【０１６０】
実施例６：（±）−７−メトキシ−１１−（２−フルオロエチル）−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（非放射性イメージング剤２）及び（±）−９−メトキシ−１１−（２−フルオロエチル）−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（非放射性イメージング剤７）の製造
実施例６（ｉ）：７−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド及び９−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド
【０１６１】
【化２８】
0005730206.tif 000030
（±）−４−オキソ−チオクロマン−２−カルボン酸ジエチルアミド（３．３３ｇ、１２．６ｍｍｏｌ、実施例１（ｉ））及び３−メトキシフェニルヒドラジン塩酸塩（２．２ｇ、１２．６ｍｍｏｌ）のエタノール（３０ｍｌ）溶液に、濃硫酸（１．８３ｍｌ、３．４０ｇ、１１．５ｍｍｏｌ）を窒素下で添加した。反応混合物を２４時間加熱還流した。冷却後、反応混合物を濾過し、固体をエタノールで洗浄し、（４５℃で）真空乾燥することで、７−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド及び９−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミドの混合物（３．２ｇ、６９％）を淡白色の固体として得た。
【０１６２】
実施例６（ｉｉ）：１１−（２−フルオロエチル）−７−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド及び１１−（２−フルオロエチル）−９−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド
【０１６３】
【化２９】
0005730206.tif 000031
（実施例６（ｉ）に従って製造した）７−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド及び９−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミドの異性体混合物（１．０ｇ、２．７３ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液に、２−フルオロエチルトシレート（１．２ｇ、５．４６ｍｍｏｌ）を添加し、次いで鉱油中の水素化ナトリウム６０％分散液（１３１ｍｇ、５．４６ｍｍｏｌ）を窒素下で添加した。反応混合物を８０℃で１時間加熱した。冷却後、溶媒を真空中で除去し、残留物を水（３０ｍｌ）で奪活し、ＤＣＭ（２×３０ｍｌ）で抽出し、（ＭｇＳＯ４で）乾燥し、溶媒を真空中で除去した。５〜１０％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ２Ｃｌ２を溶離剤とするシリカ上でのカラムクロマトグラフィーによって残留物を精製することで、異性体混合物（１．０ｇ、８９％）を得た。次いで、水（Ａ）及びメタノール（Ｂ）を溶離剤とするＨＰＬＣ（Ｇｅｍｉｎｉ  ５μ、Ｃ１８、１１０Ａ、１５０×２１ｍｍ、２０分で７０〜９５％Ｂ、２１ｍＬ／分）によってこの物質（４００ｍｇ）を精製することで、２４０ｍｇの９−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミドを黄色の固体として得ると共に、１００ｍｇの７−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミドを白色の固体として得た。
【０１６４】
実施例７：１８Ｆ標識イメージング剤２及び７の製造
実施例７（ｉ）：１１−［２−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）エチル］−７−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド及び１１−［２−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）エチル］−９−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド
【０１６５】
【化３０】
0005730206.tif 000032
実施例６（ｉ）に従って製造した異性体混合物（２．０ｇ、５．４６ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（２０ｍｌ）溶液に、鉱油中の水素化ナトリウム６０％分散液（２４０ｍｇ、６．０ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を窒素下において室温で５分間撹拌した。２−（ブロモエトキシ）−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチルシラン（２．６ｇ、１０．９ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を４時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、残留物を水（３０ｍｌ）で奪活し、ＤＣＭ（２×３０ｍｌ）で抽出し、（ＭｇＳＯ４で）乾燥し、溶媒を真空中で除去した。５％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ２Ｃｌ２を溶離剤とするシリカ上でのカラムクロマトグラフィーによって残留物を精製することで、１１−［２−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）エチル］−７−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド及び１１−［２−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）エチル］−９−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミドの異性体混合物（２．５３ｇ、８８％）を黄色の固体として得た。
【０１６６】
実施例７（ｉｉ）：１１−［２−ヒドロキシエチル］−７−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド及び１１−［２−（２−ヒドロキシオキシ）エチル］−７−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド
【０１６７】
【化３１】
0005730206.tif 000033
実施例７（ｉ）に従って製造した異性体混合物（２．５ｇ、４．７６ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（４０ｍｌ）溶液に、ＴＨＦ中の１．０Ｍ  ＴＢＡＦ（９．５ｍｌ、９．５ｍｍｏｌ）を窒素下で添加した。混合物を室温で４時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、４０％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ２Ｃｌ２を溶離剤とするシリカ上でのカラムクロマトグラフィーによって残留物を精製することで、１１−［２−ヒドロキシエチル］−７−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド及び１１−［２−（２−ヒドロキシオキシ）エチル］−７−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミドの異性体混合物（１．９０ｇ、９７％）を淡黄色の固体として得た。
【０１６８】
実施例７（ｉｉｉ）：（±）−１１−［２−メタンスルホキシエチル］−７−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド及び（±）−１１−［２−メタンスルホキシエチル］−９−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド
【０１６９】
【化３２】
0005730206.tif 000034
実施例７（ｉｉ）に従って製造した異性体混合物（１．０ｇ、２．４ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（３０ｍｌ）溶液に、ピリジン（１．９ｇ、２４．０ｍｍｏｌ、１．９ｍｌ）を添加した。反応物を０℃に冷却し、メタンスルホニルクロリド（１．１ｇ、９．６ｍｍｏｌ、０．７４ｍｌ）を添加した。反応混合物をＲＴで４時間撹拌した。混合物を０５Ｍ  ＨＣｌ（２×２０ｍｌ）で洗浄し、次いで水（２×２０ｍｌ）で洗浄し、（ＭｇＳＯ４で）乾燥し、溶媒を減圧下で除去した。２０％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ２Ｃｌ２を溶離剤とするシリカ上でのカラムクロマトグラフィーによって残留物を精製することで、異性体混合物（１．０ｇ、８５％）を得た。次いで、
水（Ａ）及びメタノール（Ｂ）を溶離剤とするＨＰＬＣ（Ｇｅｍｉｎｉ  ５μ、Ｃ１８、１１０Ａ、１５０×２１ｍｍ、３０分で５〜９５％Ｂ、２１ｍＬ／分）によってこの物質（４００ｍｇ）を精製することで、１７０ｍｇの１１−［２−メタンスルホキシエチル］−７−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミドを白色の固体として得ると共に、６０ｍｇの１１−２−（メタンスルホキシエチル）−９−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミドを白色の固体として得た。
【０１７０】
実施例７（ｉｖ）：直接標識方法
実施例７（ｉｉｉ）に従って製造した前駆体化合物１１−［２−メタンスルホキシエチル］−７−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド及び１１−２−（メタンスルホキシエチル）−９−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミドを直接標識方法によって放射性標識することで、それぞれイメー
ジング剤２及び７を得た。１８Ｆ−水を反応器に添加し、次いでアセトニトリル（５００μｌ）中のＫ２２２（２ｍｇ）及びＫＨＣＯ３（０．１ｍｏｌ  ｄｍ−３、５０μｌ）を添加し、１００℃で２０〜３０分間乾燥した。アセトニトリル（１０００μｌ）中の前駆体（０．５〜１ｍｇ）を添加した。反応器を密封し、１００℃で１０分間加熱した。反応混合物を冷却し、水（１．５ｍｌ）で反応器から洗い出し、半分取ＨＰＬＣによって精製した。主な放射性生成物を含む画分を集め、Ｈ２Ｏで１０ｍｌの体積に希釈した。これをコンディショニングされたライトＣ１８  ｓｅｐ  ｐａｋ上に装填し、Ｈ２Ｏ（１×２ｍｌ）でフラッシュし、生成物をＥｔＯＨ（０．５ｍｌ）でＰ６バイアル中に溶出し、ＰＢＳ（５ｍｌ）を添加した。
【０１７１】
実施例８：１８Ｆ標識イメージング剤１、３、４及び５の製造
実施例８（ｉ）：前駆体化合物の製造
以下の前駆体化合物を製造した。
（ａ）（±）−８−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（実施例１（ｉｉ）に従って製造した）。
（ｂ）（±）−１０−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（実施例２（ｉ）に従って製造した）。
（ｃ）（±）−４−フルオロ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（実施例３（ｉｉｉ）に従って製造した）。
（ｄ）（±）−３−フルオロ−１１−（２−フルオロエチル）−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（実施例４（ｉｖ）に従って製造した）。
以下に記載する間接標識方法を用いてこれらの前駆体化合物を放射性標識することで、それぞれ１８Ｆ標識イメージング剤１、３、４及び５を得た。
【０１７２】
実施例８（ｉｉ）：間接標識方法
反応器内のＫ２２２（４ｍｇ）、Ｋ２ＣＯ３水溶液（０．１モル溶液の５０μｌ）及びアセトニトリル（５００μｌ）に１８Ｆ−／水を添加し、窒素流下において１００℃で２０〜３０分間乾燥した。アセトニトリル（１０００μｌ）中のエチル−１，２−ジトシレート（４ｍｇ）を添加し、１００℃で１０分間加熱した。反応混合物を冷却し、半分取ＨＰＬＣによって精製し、１８Ｆ−フルオロエチルトシレートを含む画分を集めた。この画分をＨ２Ｏで約２０ｍｌの体積に希釈し、コンディショニングされたライトｔ−Ｃ１８  ｓｅｐ  ｐａｋ上に装填し、Ｈ２Ｏ（１×２ｍｌ）でフラッシュした。このｓｅｐ  ｐａｋを、高流量のＮ２ライン上で２０分間乾燥した。次いで、１８Ｆ−フルオロエチルトシレートをＤＭＦ（５００μｌ）で溶出した。
【０１７３】
別途に、ＤＭＦ（２５０μｌ）中の前駆体（１３ｍｇ）を第２の反応器に添加し、Ｎ２で５分間パージした。次いで、ＤＭＦ（２×２５０μｌ）中のＮａＨ（１３ｍｇ）を窒素下で添加し、反応器を４５℃で０．５〜１時間加熱した。次いで、これに上記のようにして調製したＤＭＦ中の１８Ｆ−フルオロエチルトシレートを添加し、Ｎ２でパージした反応器内において１００℃で１０分間加熱した。反応物を冷却し、水（１ｍｌ）で反応器から洗い出した。溶液をシリンジフィルターで濾過し、分取ＨＰＬＣで精製した。主な放射性ピークを含む画分を集めた。これをＨ２Ｏで約１０ｍｌの体積に希釈し、コンディショニングされたライトＣ１８  ｓｅｐ  ｐａｋ上に装填し、Ｈ２Ｏ（１×２ｍｌ）でフラッシュし、ＥｔＯＨ（０．５ｍｌ）でＰ６バイアル中に溶出し、リン酸緩衝食塩水（５ｍｌ）を添加した。
【０１７４】
実施例９：１８Ｆ標識イメージング剤６の製造
（実施例５（ｉｖ）に従って製造した）（±）−１１−［２−メタンスルホキシエチル］−８−エトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミドを、上記実施例７（ｉｖ）に記載した直接標識方法を用いて放射性標識した。
【０１７５】
実施例１０：インビトロ効力アッセイ
Ｌｅ  Ｆｕｒ  ｅｔ  ａｌ（Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．１９８３；ＵＳＡ  ３３：４４９−５７）の方法を改変した方法を用いて、ＰＢＲに対する親和性に関する化合物のスクリーニングを行った。
【０１７６】
（１％ＤＭＳＯを含む５０ｍＭトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．４、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２に溶解した）試験すべき化合物を、ウィスター系ラットの心臓ＰＢＲとの結合に関して０．３ｎＭ［３Ｈ］−ＰＫ−１１１９５と競合させた。反応は５０ｍＭトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．４、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２中において２５℃で１５分間実施した。
【０１７７】
化合物のスクリーニングは、推定Ｋｉの周辺の３００倍の濃度範囲にわたる６種の濃度で行った。結果は上記表１に示されており、本発明の化合物の効力が先行技術の化合物の効力に比べて勝ることを実証している。
【０１７８】
実施例１１：インビボ体内分布方法
上記実施例７、実施例８及び実施例９で製造したインビボイメージング剤１〜７をインビボ体内分布モデルで試験し、その体内分布を（国際公開第２００７／０５７７０５号の実施例１４に従って製造した）先行技術の化合物［１８Ｆ］ＦＥ−ＰＢＲの体内分布と比較した。
【０１７９】
雄ウィスター系ラット成体（２００〜３００ｇ）に、側尾静脈を通して１〜３ＭＢｑの各インビボイメージング剤を注射した。注射から２分後、１０分後、３０分後又は６０分後（ｎ＝３）に、ラットを安楽死させ、液体シンチレーションカウンティングによる放射能測定のために組織又は体液の試料を採取した。
【０１８０】
［１８Ｆ］ＦＥ−ＰＢＲに比べて、本発明の化合物は高い嗅球：線条体結合比を示した（上記表１参照）。
【０１８１】
実施例１２：顔面神経軸索切断（ＦＮＡ）モデルを用いたオートラジオグラフィー
インビボ試験のためには、雄ウィスター系ラット（１８０〜２００ｇ）を使用した。イソフルラン麻酔下で、右側の耳領域から毛を除去した。耳内切開を行い、顔面神経の主幹を確認した。耳の後方において、茎乳突孔からの出口で顔面神経を切断した。切創を縫合し、動物を回復させた。手術から７日後の動物に、側尾静脈を通して約５〜１０ＭＢｑのインビボイメージング剤１を注射した。３０分後に脳幹を取り出し、イソペンタン中で凍結した。両顔面神経核を含む脳幹のクリオスタット切片（１２μｍ）をスライドガラス上にマウントし、蛍光スクリーンに一晩露光させた。
【０１８２】
次いで、Ｓｔｏｒｍ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社）蛍光イメージャー上でスクリーンを走査し、ＩｍａｇｅＱｕａｎｔ  ＴＬ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社）を用いて得られたスキャンの分析及び定量化を行った。図１及び図２は、この実験で得られたデータを示している。
【図１】
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【図２】
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