(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｍｐｚの構造式で表されるポルフィラジン化合物と化学療法剤とを含むポルフィラジン−化学療法剤複合体であって、当該式中、
ｐｚは、化合物２４７
【化１】
0005792066.tif 000019
または、化合物２６０
【化２】
0005792066.tif 000020
の構造を有し、
Ｍは、２Ｈ、または、Ｍｇ、ＺｎもしくはＣｕの金属イオンであり、および
当該化学療法剤が、ドキソルビシン、メトトレキサート、タモキシフェン、タキソテール、ゼローダ、および、これらの組み合わせからなる群から選択される、
ことを特徴とする、ポルフィラジン−化学療法剤複合体。
【請求項２】
治療有効量の請求項１に記載の複合体を含む、ことを特徴とする腫瘍を治療するための医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、全米科学財団によって賞を授与された取得番号No. CHE0500796によって支持されており、政府は本発明において所定の権利を有している。
【０００２】
本発明は、２００８年９月８日に出願された米国仮特許出願番号61/095,026の利益を主張し、参照によってその全体がここに取り入れられる。
【０００３】
本発明は、ポルフィラジン化合物と、画像および腫瘍の治療におけるポルフィラジン化合物の使用とに関する。ポルフィラジン化合物は、腫瘍の中で局在化することが可能であり、光学的映像化、磁気共鳴（ＭＲ）画像化などの視覚化技術による腫瘍の検出を可能とする。また、ポルフィラジンは、（光活性化なしに）単独で投与されたとき、又は化学療法薬若しくは可視若しくは近赤外光を含む放射線とともに投与されたとき、ポルフィラジンとは異なる化学療法薬に結合したときに、腫瘍サイズを小さくし、又はこれを取り除く。
【背景技術】
【０００４】
乳癌患者の生存率は、もしそれらを早い段階で発見し、続いて化学療法、手術、放射線などの治療を施せば好転し、残存癌細胞は細胞のレベルで検出され得る。乳癌の早期スクリーニングのための主たる技術、即ち、Ｘ線マンモグラフィーは効果的ではあるが不利益もある。相対的な密度に基づく正常組織と癌組織との違いは偽陽性が原因で小さく、患者を不必要で侵襲的でしばしば苦痛を伴う追加的なテストに曝すことになる。更に、Ｘ線処置に特有のイオン化放射に曝すことは、危険性の高い患者を検査する頻度が制限される。この技術の限定的な感度は、手術後に残存癌細胞の集合の識別に失敗することと同様に、小さい初期段階の腫瘍を見逃したままにする。新しく感度が高く安全な検出方法は、乳癌の診断と、乳癌患者の予後とを疾病率および死亡率のレベルを低減することにより改善する。
【０００５】
近赤外（ＮＩＲ）を使用した蛍光画像造影剤は、新規で哺乳類の組織ＮＩＲ光（約７００〜１０００ｎｍ）に対する相対的な透明性を利用する腫瘍検出に対して感度が高い。可視及びＮＩＲにおける光を吸収し発光し腫瘍組織に蓄積する造影剤は、軟組織を透して光学的に撮像し、それによって、胸部などの軟組織における表在性腫瘍に対する理想的で非侵襲性の検出方法を提供する。
【０００６】
従って、相対的な軟組織透明性のウインドウ内の可視及び近赤外（ＮＩＲ）波長における光を用いた軟組織の光学的吸収／蛍光又はリン光による画像化は、腫瘍検出の重要な画像化方法の代表であるが、他の画像化様式として効果的な造影剤が必要となる。ポルフィロイド大環状分子に分類されるポルフィラジン類（ｐｚｓ）は、それを光学的腫瘍画像化造影剤、及び光学的／磁気的共鳴（ＭＲ）デュアルモード造影剤の両方に他に類を見ない魅力的なものとする光物理的、化学的、生物学的特性を示す。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】M. J. Fuchter et al., Aust. J. Chem. 2008, 61, 235-255.
【非特許文献２】N. D. Hammer et al., J. Med. Chem. 2005, 48, 8125-8133.
【非特許文献３】B.J. Vesper et al., J. Photochem. Photobiol., B 2006, 82, 180-186.
【非特許文献４】A. Sholto et al., Photochem. Photobiol. 2008, 84, 764-773.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、ポルフィラジン化合物と、ポルフィラジン化合物の哺乳動物の腫瘍の画像化および検出における使用と、このような腫瘍のサイズの縮小および除去とを指向している。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
可視および近赤外（ＮＩＲ）光学画像化は、乳癌診断のための、そして皮膚および精巣癌を含む他の癌に対する正確で非侵襲性の手段であることが明らかになりつつある。本発明のキラールポルフィラジン化合物のような腫瘍特有の蛍光造影剤は、初期段階および治療介入後の癌検出を大きく進歩させる。従って、本発明の一実施形態は、腫瘍に局在化し得るポルフィラジン化合物を提供する。可視および近赤外の波長範囲（例えば、約７３０ｎｍ）の蛍光を発し、インビトロでの腫瘍細胞摂取を示し、無視し得るバックグラウンドで強い蛍光を表すインビボでの皮下腫瘍における腫瘍特有の蓄積および保持を示す。
【００１０】
本発明は、以下の実施形態を含む：（ａ）腫瘍を検知するための可視又はＮＩＲ光学造影剤として機能するポルフィラジン、（ｂ）腫瘍細胞に対して毒性を示し、これによって、単独で投与されたとき（光活性化あり又はなし）又は例えば化学療法、放射線及び／又は手術などの他の癌治療手段と組み合わせて、腫瘍のサイズを小さくし又は消滅させ、（ｃ）ポルフィラジン化合物は、ガドリニウム錯体のようなＭＲ造影剤に結合して、腫瘍に局在化し、付随する画像の３次元的な質の向上により腫瘍の２つの光学的／ＭＲ検出を可能とする複合体を提供し、そして、（ｄ）ポルフィラジンは、アロマシン、タモキシフェン、タキソテール、ゼローダ、メトトレキサート、ドキソルビシンなどの非ｐｚ化学療法薬に結合することができ、治療中の患者における治療薬のリアルタイムで非侵襲性の画像を提供するのと同様に、化学療法薬の効果を高めるために腫瘍に局在化する複合体を提供する。
【００１１】
本発明の他の実施形態は、視覚化のための本発明のポルフィラジン化合物の十分な量を個体に投与し、次に哺乳動物においてポルフィラジンを視覚化することによる、哺乳動物における腫瘍の検出方法を提供する。視覚化は、光学的画像化、ＮＩＲ画像化、ＰＥＴ画像化、ＭＲ画像化及び同様の画像化技術の一つ又はそれ以上であり得る。本発明のこの態様は、本発明のポルフィラジン化合物を単独で投与した後に、二つ又はそれ以上の画像化方法が使用され得る。
【００１２】
本発明の更に他の実施形態は、腫瘍を有する個体を治療する方法を提供し、ポルフィラジン化合物は、腫瘍に局在化し光活性化を伴い又は伴わずに腫瘍細胞を殺すのに十分な量で個体に投与される。更に他の実施形態では、ポルフィラジン化合物は非ｐｚ化学療法薬に結合し、結果として生じる複合体は、腫瘍サイズを小さくし、又はこれを取り除くために個体に投与され、一方で腫瘍及びそれが縮小するリアルタイムで非侵襲性の画像を提供する。
【００１３】
本発明の他の実施形態では、研究、診断及び臨床への応用のための画像化におけるキット及び使用方法を更に提供する。
【００１４】
本発明のこれら及び他の新規な形態は、好ましい実施形態についての以下の詳細な記述から明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】図１は、Ａ５４９肺癌細胞における化合物１７６のＮＩＲ蛍光の共焦点像である（倍率６３倍）。
【図２】図２は、 尾静脈への注射（２０ｎモル）後のインビボでのＭＤＡ２３１腫瘍における長時間の化合物２４７の蓄積の強度プロフィールであり、蛍光強度は、Ｋｏｄａｋ  ＭＭ４０００マルチモーダルイメージャーで同時に記録された解剖学的Ｘ線画像に対して表されており、Ａ）５時間、Ｂ）２４時間、Ｃ）３２時間、ｄ）４８時間（０〜２５５にスケールされている）である。
【図３】図３は、化合物２４７の５０μＭ、２４時間染色のＮＩＲ発光である。
【図４】図４は、化合物２４７、５０μＭのＭＴＴ試験である。
【図５】図５のＡは、ＦＶＢ／ｎ５  ＲａｇｌのＸ線画像に重ね撮りした７３０ｎｍ発光画像−／−ＰＣ３−ＥＧＦＰ細胞の注射により生成した脛骨の腫瘍を有する雄のマウス、Ｂは、皮膚を除去した切除レッグから採った腫瘍におけるＧＦＰ発現からの５３５ｎｍ発光を用いた化合物２４７の７３０ｎｍの発光の重畳画像である。
【図６】図６は、化合物２４７の２０ｎモルを注射したマウスの切除した脛骨を表し、Ａは、Ｘ線画像に重ね撮りしたＰＣ３−ＥＧＦＰ腫瘍の５３５ｎｍＧＦＰ蛍光、Ｂは、Ｘ線画像に重ね撮りした化合物２４７の７３０ｎｍＮＩＲ蛍光である。
【図７】図７は、皮下注射され赤色蛍光タンパク質（ＲＦＰ）によって安定に発現させたＭＤＡ−ＭＢ−２３１腫瘍の生きた動物と、化合物２４７との着色蛍光画像であり、尾静脈への化合物２４７の２０ｎモル注射の後４８時間で取得した画像である。Ａは、ＲＦＰ蛍光、Ｂは、化合物２４７のＮＩＲ蛍光、Ｃは、ＦＲＰと化合物２４７の画像とを合わせたものであり、腫瘍における共存を表している。
【図８】化合物２４７と、核に対してＤＡＰＩ（ＤＮＡ結合性の蛍光性色素）で対比染色した４μｍのパラフィン包埋切片である図７の右側の腫瘍からの腫瘍との共局在化を示しており、Ａは、ＤＡＰＩ（２個の光子の７２０ｎｍ励起、４３５ｎｍ発光）とＲＦＰ（５４３ｎｍ；５６５〜６１５発光）の重畳画像であり、Ｂは、ＤＡＰＩとＲＦＰ（６３３ｎｍ；６５０〜７１５発光）の重畳画像であり、Ｃは、ＤＡＰＩとＲＦＰと化合物２４７の３重画像である。
【図９】図９は、６０ｎモルの化合物２６２を注射したマウスのＮＩＲおよびＭＲ画像であり、Ａは、注射後０時間の動物全体のＮＩＲ蛍光であり、Ｂは、注射後２時間のマウスの腹部中央横断スライスＴ１−強調ＭＲ画像である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本発明は、光学的、化学的および生物学的特性の組み合わせが、光学的吸収／蛍光腫瘍造影剤としておよび複合的な光学的／ＭＲＩ造影剤として両方に一意的に魅力的なものとなるポルフィラジン類（ｐｚｓ）を指向している。試験結果は、本発明のｐｚ化合物が最適な組織侵入性を以て強い光学的吸収とＮＩＲウインドウおける蛍光を示し、腫瘍細胞および腫瘍によってインビボで選択的に取り込まれることを示している。加えて、それらの合成の柔軟なモデルは、ｐｚｓの非ｐｚ化学療法薬およびＭＲ緩和能剤とカップリングして複合体を形成することを可能とする。ここで使用されるように、「ｐｚ複合体」は、ＭＲ造影剤又は非ｐｚ化学療法薬と結合したｐｚを意味している。
【００１７】
また、本発明のｐｚｓは、単独（光活性化により又はそれなしに）又は手術、化学療法及び／又は放射線などの他の腫瘍治療方法との組み合わせにより、腫瘍のサイズを縮小させ又は除去する。更に、本発明のｐｚｓは、化学療法薬を腫瘍内に局在化させる複合体を提供するために非ｐｚ化学療法薬と結合し得、これにより、腫瘍のコントロールと治療中の直接的で非侵襲的な視覚化とが高められる。
【００１８】
従って、本発明は、ヘテロ原子官能化ｐｚｓおよびそれらの光学的およびデュアルモード光学／ＭＲ造影剤としての使用に関連し、ここで、デュアルモード造影剤は、常磁性体造影剤をヘテロ原子官能化ｐｚｓに結合することにより生成する。本発明の実施形態は、光学的／デュアルＭＲ画像化治療薬のような複合体の使用を含んでいる。また、本発明のｐｚｓは、それ自体が化学療法薬として有用であり、更に、非ｐｚ化学療法薬に結合し得て、化学療法薬を腫瘍を狙って局在化させるｐｚ化学療法薬複合体を提供する。
【００１９】
イオウ官能化ｐｚｓの研究は、それらの光学的造影剤としての潜在的使用をサポートする（非特許文献１〜４）。酸素官能化ｐｚｓがインビボでの高度な選択的腫瘍摂取を示し、正確な蛍光画像化が可能であることが初めて発見された。更に、ＮＩＲ発光に加えて高いＭＲ緩和能を示すデュアルモード光学／ＭＲ造影剤が合成された。
【００２０】
ヘテロ原子官能化ポルフィラジン類（ｐｚｓ）およびそれらの誘導体は、最近では腫瘍検出の光学的造影剤として、そして光力学的治療（ＰＤＴ）を使用する癌治療のプラットフォームとして考えられているポルフィリノイド（porphyrinoid ）大環状分子である。これらのｐｚｓは、強いＮＩＲ吸収／発光を有し、合成的に柔軟で、独立して両親媒性と細胞識別性とポルフィラジン類の腫瘍特異性の保持に影響する特性とを調整する必要があるものの、所望のＮＩＲ光学特性を有するｐｚを設計することを可能としている。
【００２１】
ポルフィラジン類（ｐｚｓ）は、メソ炭素が窒素で置き換えられているという点でポルフィリン類とは異なる芳香族大環状分子である。メソ窒素原子は強いＮＩＲ吸収および白光を与え、それによって、ｐｚｓを光学的画像を介する外見上の癌の検出に対する優れた光線感作物質にしている。本発明の化合物は、従って、ここで「ｐｚ」と省略する以下の大環状コアを有している。
【００２２】
【化１】
0005792066.tif 000002
本発明のポルフィラジン化合物は、以下の一般構造を有している。
【００２３】
【化２】
0005792066.tif 000003
ここで、ｐｚは上記に定義され、
Ｍは、２Ｈ又はピロール窒素原子と複合体を形成し得る金属イオンであり、
ｎは、１〜３であり、
Ａは、（−Ｎ（Ｒ1）2）2、（−ＯＲ1）2、又は（−ＳＲ1）2であり、
Ｂは、ｐｚに結合した、一つ又はそれ以上の−ＸＲ2基で置換されたベンゾ環であり、ここでＸはＯ又はＳであり、
Ｒ1は各々独立に、また、Ｒ2は各々独立に、ＯＨ、ＯＲ3、Ｎ（Ｒ3）2、ＣＯ2Ｒ3、又はＣＯＮ（Ｒ3）2で随意に置換されたＣ1-6アルキル、ＯＨ、ＯＲ3、Ｎ（Ｒ3）2、ＣＯ2Ｒ3、又はＣＯＮ（Ｒ3）2で随意に置換されたＣ3-6シクロアルキル、ＯＨ、ＯＲ3、Ｎ（Ｒ3）2、ＣＯ2Ｒ3、又はＣＯＮ（Ｒ3）2で随意に置換された（ＣＨ2）1-3Ｃ3-6シクロアルキル、ＯＨ、ＯＲ3、Ｎ（Ｒ3）2、ＣＯ2Ｒ3、又はＣＯＮ（Ｒ3）2で随意に置換されたＣＨ2）1-6Ｃ6Ｈ5からなる群から選択される基であり、ここで、各Ｒ3は、独立してＨ、Ｃ1-6アルキル、Ｃ3-6シクロアルキル、又は（ＣＨ2）1-3Ｃ3-6シクロアルキル；
【００２４】
【化３】
0005792066.tif 000004
ｐは０〜１０であり、ここで、
【００２５】
【化４】
0005792066.tif 000005
および
【００２６】
【化５】
0005792066.tif 000006
又は２つのＲ1基が１つになって５又は６員環を形成してもよい。
【００２７】
例えば、２つのＲ1基がつになって以下のように（Ｒ−Ｒ）となり、又はそれらの対掌体であってもよい。
【００２８】
【化６】
0005792066.tif 000007
ここで使用されているように、「アルキル」という用語は、線状又は分岐アルキルをいい、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルおよび３−メチルー２ブチル含むが、これらに限定されるものではない。
【００２９】
ここで使用されているように、ポルフィラジン類の「Ｍ」は、２Ｈ又は何れかのメタロイド又はポルフィラジンのピロール窒素原子と複合体を形成し得る金属イオンである。ポルフィラジン化合物の「Ｍ］は、従って、２つの水素原子又は一つの金属イオンであり得、これには、アルカリ金属、アルカリ土類金属、遷移金属、又は第３周期の全て、ランタニド、アクチニドが含まれるが、これらに限定されるものではない。「Ｍ」の非限定的な例示には、ニッケル、銅、２つの水素原子、マグネシウム、鉄、アルミニウム、マンガン、ガドリニウム、ロジウム、インジウム、タリウム、ルテチウム、金、コバルト、チタン、鉛、白金、パラジウム、ルテニウム、リチウム、亜鉛、イッテルビウム、ネオジム、クロム、テクネチウム、ケイ素、ゲルマニウム、錫、モリブデン、ジルコニウム、タングステン、レニウム、イリジウム、ウラン、トリウム、ガリウム、およびバナジウムが含まれる。特定の「Ｍ」が何であるかは、ポルフィラジン化合物に望まれる物理的および化学的特性に依存している。好ましいいくつかの例では、「Ｍ」は、２Ｈ、Ｍｇ、Ｚｎ、Ｃｕ、又はＭｎである。
【００３０】
本発明のｐｚ化合物は、マレオニトリル／イソインドリン誘導体の縮合により調製され、従って、ｐｚ芳香コアに直接結合した付加イオウ、酸素又は窒素のヘテロ原子との化学的柔軟性を提供する。本発明のＭ［ｐｚ（Ａn；Ｂ4-n）］のｐｚｓへの合成ルートは、腫瘍への搬送と、物理的および化学的特性と、ある場合には腫瘍細胞への固有の毒性とを独立して最適化することを可能とする。本発明の好ましいｐｚｓは、Ｍ［ｐｚ（Ａ2；Ｂ2）］の構造を有し、より好ましくは、Ｍ［ｐｚ（trans-Ａ2；Ｂ2）］の構造を有している。
【００３１】
Ｍ［ｐｚ（trans-Ａ2；Ｂ2）］の化合物は、優れた光学的特性を示し、このようなｐｚｓの広大なライブラリが用意されている。共焦点蛍光顕微鏡によって観察された細胞の摂取は、ｐｚの全体に亘る両親媒性に依存し、定性的な分析は、非腫瘍形成（例えば、ＷＩ３８ＶＡ１３）に対する腫瘍細胞（例えば、Ａ５４９）への優先的な摂取を示している。
【００３２】
以下の合成スキームは、化合物２４７と、関連するキラールなＯ−およびＳ−付加したｐｚｓの合成を示している。特に、（５Ｒ、６Ｒ）２、３−ジシアノ−５、６−ジメトキシ−５、６−ジエチルジオキシ−２−エン（１）と、４、７−ビス（イソプロピルオキシ）−１、３−ジイミノイソインドリン（２）は、文献記載の方法で調製され、マグネシウム鋳型の環化縮合が行われて、ｐｚｓ２４１−２５７（スキームＡ）が得られる。関連するキラールなイオウ結合ポルフィラジン３００−ｃＲは、スキームＢに示されている。
【００３３】
【化７】
0005792066.tif 000008
（ｉ）Ｍｇ（ＯＰｒ）2、ｎ−ＰｒＯＨ、１８時間還流；(ii)酢酸、ＣＨ2Ｃｌ2、２４時間；(iii)Ｚｎ（ＯＡｃ）2、ＭｅＯＨ、２４時間
【００３４】
【化８】
0005792066.tif 000009
以下の合成スキームは、複合ｐｚ−Ｇｄ複合体（即ち、Ｇｄ3+−付加した）の合成のための一般的な手法を示している。これらの複合体は、腫瘍のＮＩＲとＭＲの両方の画像化を可能とする。遊離塩基のｐｚアジドは、Ａ2Ｂ2−４エステルから完全なそして半化学量論的な加水分解によって、続いて求核試薬として１−アジド−３−アミノプロパン又はビス（２−アジドエチル）アミンを使用してＮＨＳエステルカップリングにより合成された（スキームＣ）。遊離塩基のｐｚ−アジドはＺｎＣｌ2によりメタル化され、Ｚｎ−ｐｚ−アジドを定量的に得た。これらのＺｎ−ｐｚ−アジドをＧｄ3+ＤＯＴＡ−アルカリキレートと結合させるのにクリックケミストリーが採用された。金属を含まないｐｚへの応用は、Ｃｕ−ｐｚを得る（例えば、スキームＤ）。最終的な複合体は、１、２、４および８付加したＧｄ3+キレートを有している。
【００３５】
【化９】
0005792066.tif 000010
(i)４当量のＬｉＯＨ、ＴＨＦ／Ｈ2Ｏ；(ii)１当量ＬｉＯＨ、ＴＨＦ／Ｈ2Ｏ；(iii)ＤＣＣ／ＮＨＳ（ジシクロカルボジイミド／Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド）、ＴＨＦ；
(iv)１−アジド−３−アミノプロパン、ＣＨ2Ｃｌ2；(v)ビス（２−アジドエチル）アミン、ＣＨ2Ｃｌ2
【００３６】
【化１０】
0005792066.tif 000011
以下の化合物は、８つのガドリニウム錯体（Ｇｄ）を含む本発明のデュアル画像化化合物を例示している。本発明のｐｚ化合物は、所望により又は必要により、１〜８のＧｄ錯体を含み得る。以下のＧｄ８−Ｍｐｚ化合物においては、Ｍは２Ｈ、Ｍｇ、Ｚｎ、又はＣｕであり、好ましくはＺｎ又はＣｕである。
【００３７】
【化１１】
0005792066.tif 000012
以下は、腫瘍に局在化し得て腫瘍細胞を画像化及び／又は殺すのを促進する特定のｐｚ化合物である。
【００３８】
【化１２】
0005792066.tif 000013
【００３９】
【化１３】
0005792066.tif 000014
腫瘍検出用の診断プローブとしての使用のための本発明の非侵襲性のｐｚ化合物は、患者の診断結果と癌再発の治療後の観察とにおける重要な改善をもたらし、これにより癌の死亡率が低下する。ここに開示したポルフィラジン類は、可視およびＮＩＲ吸収／発光を示すポルフィリンのような化合物であり、体内に生じた細胞株とは対照的に、インビトロで腫瘍細胞株に選択的に蓄積し保持される。
【００４０】
実験は、本発明のｐｚ化合物がａ）最適の組織透過性を有する可視およびＮＩＲウインドウにおいて強い光学吸収と蛍光とを示し、ｂ）腫瘍細胞によって選択的に摂取され（図１）、インビボで腫瘍に局在化する（図２）、ということを示している。ｐｚｓの合成の柔軟なモードは、ｐｚｓの非ｐｚ化学療法薬剤とのカップリングを可能とし、この非ｐｚ化学療法薬剤は、臨床評価における化合物およびＭＲ緩和剤と同様に、現在乳癌および他の癌の治療に使用されているものである。
【００４１】
特に、図１は、本発明の化合物１７６がＡ−５４９肺癌細胞に蓄積することを示している。図２は、化合物２４７（２０ｎモル）が尾静脈注射後にＭＤＡ−２３１腫瘍にインビボで長期に亘って（５〜４８時間）蓄積されることを示している。
【００４２】
化合物２４７のＮＩＲ蛍光の共焦点顕微鏡画像（図２）は、Ａ５４９肺癌細胞へのその優れた摂取と、ＷＩ３８  ＶＡ１３非腫瘍細胞へのより少ない摂取（図３）が確認される。化合物２４７に対するＭＴＴ試験は、非腫瘍細胞（ＷＩ３８  ＶＡ１３）への非毒性と、腫瘍セル（Ａ５４９）への穏やかな毒性を示している。ＭＴＴ試験は、Ｓ．Ｌｅｅ他、Ｍｅｔａｌ−Ｂａｓｅｄ  Ｄｒｕｇｓ  （２００８）、３９１−４１８頁に開示されている手法を使用して行った。
【００４３】
また、経時変化の研究は、化合物２４１、２４３、２４４、２４６、２４７、２４９、２５４、および２５５を使用し、Ａ５４９肺癌細胞と、ＷＩ３８  ＶＡ１３非腫瘍細胞を用いて行った。その研究により、本発明の腫瘍細胞におけるｐｚの蓄積と、腫瘍細胞の生存能力の低下が確認された。
【００４４】
ｐｚの動物における生体内分布を明らかにするために、担癌マウスに化合物２４７を注射したところ、図２に示すように、予期しない腫瘍局在化の結果となった。一つの実験では、ｐｚｓの画像化の４週間前に、雄のＦＶＢ／ｎ５  Ｒａｇ−１  −／−マウスに、５Ｘ１０５  ＰＣ３−ＥＧＦＰ（ＧＦＰを安定発現する人の前立腺腫瘍細胞）を脛骨に注射した。画像化に先だって、マウスは４％イソフルレンで麻酔され、２０ｎモルの化合物２４７（１５０μリットル、７．５％ＤＭＳＯ）が尾静脈の静脈内に注射された。蛍光画像は、直後、２、２４および４２時間後に撮られた。６２５ｎｍの励起バンドパスフィルターと、７００ｎｍの発光バンドパスフィルターとを使用して、ｐｚ蛍光が４時間後に肝臓に見られたが、２４時間後ではｐｚはマウスの脛骨腫瘍に高度に局在化していた（図５）。ＧＦＰ画像は、４６５ｎｍの波長の励起を使用し、５３５ｎｍで蛍光が検出された。Ｘ線画像を解剖の位置合わせとして取得した。
【００４５】
次に、マウスを安楽死させ、下肢を切除し、周囲の皮膚および筋肉なしに画像を取得した。ｐｚからの赤色蛍光と画像と、ＰＣ３−ＥＧＦＰ腫瘍細胞からの緑色蛍光の重ね撮り画は、化合物２４７からの赤色蛍光が腫瘍に局在化していることを示している。ＧＦＰおよびｐｚ蛍光が両方とも腫瘍に局在化したままで、図６のマウス２（Ｍ２）に示すように、化合物２４７の腫瘍局在化は再現可能である。図６は、２０ｎモルの化合物２４７を注射したマウスの切除した脛骨を示しており、Ｘ線を重ね合わせたＰＣ３−ＥＧＦＰ腫瘍の５３５ｎｍＧＦＰ蛍光（図６Ａ）と、Ｘ線を重ね合わせた化合物２４７の７３０ｎｍＮＩＲ蛍光（図６Ｂ）である。マウス３（Ｍ３）は、ＧＦＰがないことから分かるように、腫瘍を有していない。Ｍ３の脛骨からのＮＩＲ蛍光がないことは、ｐｚがその骨に非特異的に保持されているのではないことを示している。
【００４６】
化合物２４７が確実にそして再現性よく１つ以上の組織起源の腫瘍に局在化することを確認する第２の実験においては、安定的に赤色蛍光プロテイン（ＲＦＰ）を発現するＭＤＡ−ＭＢ−２３１−ＲＦＰ細胞がメスのＳＣＩＤマウスの皮下に注射された。図２および７を参照されたい。このアプローチは、優れた確認情報を提供し、その理由は、（ａ）非侵襲的に検出することが困難な骨腫瘍とは対照的に、触診可能な皮下腫瘍が容易に識別でき、（ｂ）画像化に先だって皮膚の除去が必要なＧＦＰ腫瘍とは対照的に、ＲＦＰ発現腫瘍は皮膚を通して見ることができ、（ｃ）腫瘍へのｐｚ局在化は、非侵襲的な動物全体の画像化の間に見ることができ、（ｄ）腫瘍は容易に採取され、固定され、組織化学的および生物学的分析のために処理されるからである。
【００４７】
５匹のマウスに２０ｎモルの化合物２４７が７．５％ＤＭＳＯ溶液で静脈内投与された。ＲＦＰ発光に使用された発光波長は５３５ｎｍであり、５６５−６１５ｎｍのバンドパスフィルタを使用して発光を検出した。化合物２４７は６２５ｎｍバンドパスを使用して励起し、７００ｎｍで発光を検出した。ＲＦＰ蛍光フィルタは化合物２４７の励起および発光の何れにも重なっていない。従って、画像化中に望ましくない信号の浸入はない。
【００４８】
ＲＦＰについての画像は、ｐｚ蛍光と同様に、５、２４、３２および４８時間後に撮像された。ｐｚ蛍光は僅か５時間後に検出可能であり、強度は４８時間の実験の間に劇的に増大し、ＲＦＰ蛍光に対し正確に共局在化を示した。加えて、他のマウスの臓器又は組織にｐｚ蛍光は存在しなかった（図２および７）。この顕著な対比から、化合物２４７はＮＩＲ蛍光腫瘍撮像装置を刺激するものとして機能する。
【００４９】
４８時間の実験の最後に、腫瘍は切除され、抗体染色のために処理された。スライスしたものが核のために染色され（ＤＡＰＩ）、不均一な３次元腫瘍内での局在化を決定された。図８の結果は、化合物２４７が腫瘍シトソルに正確に共局在化していることを示している。ＲＦＰとｐｚが組織の処理に残存することの重要な利点が記録された。
【００５０】
ＮＩＲ画像化剤としての機能に加えて、本発明のｐｚｓは多面的光学ＭＲ（磁気共鳴）造影剤のプラットフォームとしても機能する。
【００５１】
デュアルモード造影剤は、光学的およびＭＲ画像データの位置合わせを可能とするために、ｐｚ光学剤をガドリニウムベース（Ｇｄ）のＭＲ剤と結合させることにより生成された。本発明のｐｚの構造の合成的な多用途性は、多数のＭＲ画像化剤、例えばＧｄ3+キレートをｐｚ構造に付加する種々の方策を可能とする。これらの新しい多様なｐｚ−ベースの薬剤は、２つの大きな利点を有している：即ち、（ａ）高分子ベースの薬剤は単分散ではなく、１２、０００〜１７０、０００の分子量の範囲を示し、特徴付けるのが困難であり、（ｂ）ポリマーにおけるＧｄ3+キレートの緩和能は、単一のＧｄ3+キレート分子（３ｍＭ-1ｓ-1／Ｇｄ）とほぼ同じである。このことは、ポリマー全体の回転より、ポリマーに結合したＧｄ3+錯体の自由回転が、有効回転相関時間（Ｒ）、従って緩和能の制限を支配することを示している。ｐｚに付加したＧｄ3+キレートの緩和能は、１４ｍＭ-1ｓ-1／Ｇｄである（表１）。
【００５２】
Ｇｄ−ｐｚｓの調製においては、４〜８のＧｄ3+キレートをＭ［ｐｚ（Ａ2；Ｂ2）］ｐｚに付加して、上記のＧｄ８−Ｍｐｚ複合体（Ｍ＝Ｚｎ、Ｃｕ）と、そして類似のｐｚの「腕」毎に一つのキレートを有するＧｄ４−Ｍｐｚ複合体とに導くために「クリック」ケミストリーが使用された。表１に示すように、上記で論じた第１世代の高分子多重Ｇｄ剤に比較して、Ｇｄ−ｐｚｓの分子緩和能（ｒ1）は低分子量複合体については極端に高く、そして、単一のＧｄキレートのそれより非常に高い。このことは重要であり、何故なら、複合体の観測された緩和能が高いほど、インビボでのＭＲ造影剤としての効果が大きいからである。重要なのは、これらの複合体はデュアルモード造影剤として適切であるということであり、何故なら、８つものＧｄ剤の存在は、Ｍ＝Ｚｎの複合体についてはｐｚ蛍光に大きく影響することはないからである。加えて、ｐｚ−Ｇｄ複合体は水に可溶であり、ＤＭＳＯの添加なしに小動物に投与され得る。
【００５３】
【表１】
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２０ｎモルおよび６０ｎモルのＧｄ８−ＭｐｚのＦＶＢ／ｎ５  Ｒａｇｌ−／−メスのマウスへの注射は、毒性を示さないことを示した。６０ｎモルのＧｄ８−Ｍｐｚの注射後２時間のＭＲ画像は、４．７Ｔの小動物ＭＲ画像化マグネットで取得したＴ１強調画像上で、腫瘍のみならず腎臓および膀胱においてＧｄ3+によるＴ１画像の高揚を示した（図９）。Ｇｄ８−Ｍｐｚの長い保持時間は、その化合物を脈管構造への照射と、心臓血管の疾病の診断に使用することができることを示している。ＮＩＲ発光は腫瘍内のｐｚｓからのみ見られた。Ｇｄ８からのＮＩＲ蛍光は、最高濃度においても検出されなかった。
【００５４】
Ｇｄ８−Ｍｐｚは腫瘍組織にはあまりに親水性であるが故に効果的に侵入することができないことが理論化されている。従って、単一のＧｄ3+を有するｐｚ、即ち、化合物２７０が合成された。化合物２７０は、５０μＭの化合物２７０で染色されたＷＩ３８  ＶＡ１３細胞による共焦点蛍光画像に示すように、確かに培養下の生きた細胞に摂取されることが分かった。最も顕著なのは、Ｇｄキレートそれ単独では細胞には蓄積しないことである。従って、Ｇｄに付加した蛍光を発するｐｚは、ＭＲ剤の腫瘍細胞への優先的な摂取を容易にするベクターと、二重の薬剤の細胞より小さい局在化を示すレポーターとの両方の機能を果たし得る。
【００５５】
これらのｐｚ−Ｇｄ化合物のＭＲ特性を試験するために、ＷＩ３８  ＶＡ１３細胞をｐｚ２７０の０、５０および１００μモルで処理し、細胞ペレットを４．７ＴのＢｒｕｋｅｒ  Ｂｉｏｓｐｅｃ磁気共鳴画像化装置で画像化した。大きな濃度依存のＭＲコントラスト高まりが化合物２７０によって示された。ｐｚでラベルした細胞とラベルしない細胞との間のノイズ対コントラスト比（ＣＮＲ）は、５０μモル処理については２６、１００μモル処理については４０である。参考のために、臨床的に最小の検知可能なＣＮＲは、３−５であると考えられている。この結果は、多様式の造影剤としてのＧｄ−ｐｚｓを確立している。
【００５６】
光学的造影剤としての使用のための化合物２４７の両親媒性と腫瘍摂取の最適化の例として、ｐｚ２６０が調製された。化合物２６０は、化合物２７０と同じ６員環のキラールな［Ｏ−Ｒ］2を含んでいるが、フリーなヒドロキシ部分をＲ2に有している。追加的に重要なことは、化合物２６０は、Ｇｄキレートおよび化学療法薬に結合するための一つ又はそれ以上のサイトを提供していることである。インビトロの実験は、化合物２４７の腫瘍に特化した摂取性に対する、このＲによって誘起された両親媒性の変化の影響を示している。更なる改良は、以下のｐが０〜１０の場合のような置換基を採用することであるが、これに限定されるものではない。
【００５７】
【化１４】
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多様式な画像アプリケーションのために、Ｇｄ3+キレートをｐｚに付加するためのクリックケミストリーが使用され得る。クリック結合反応は手軽で高収率であり、銅触媒がフリーベース（Ｍ＝Ｈ2）ｐｚのコアを金属化する。好ましい蛍光プローブは、フリーベースｐｚ（Ｍ＝２Ｈ）であり、従って、Ｇｄ3+キレートを結合させるための代替のアプローチがスキームＥに示されている。このアプローチは、化合物２６０の末端ヒドロキシル基のトシル化を含み、続いてアミノ末端Ｇｄ3+キレートに結合される。ｐｚの半化学量論的トシル化は、種々の数（例えば、１〜４）のＧｄ3+キレートを許容する。
【００５８】
【化１５】
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Ｇｄ3+複合体の本発明のｐｚ化合物への付加に類似して、非ｐｚ化学療法薬が本発明のｐｚ化合物に結合し得る。活性な−ＣＯ2Ｈ、−ＯＨ、−ＳＨ、及び／又は−ＮＨ2基を、例えばｐｚの半分の部分に有する本発明のｐｚ化合物は、ｐｚの活性基と結合し得る−ＮＨ2又は−ＣＯ2Ｈのような官能基を有する非ｐｚ化学療法薬と結合し得る。
【００５９】
結果として生成するｐｚ−化学療法薬複合体は、ｐｚ化合物が腫瘍において化学療法薬を局在化させるので、化学療法薬の効果を高めることになる。また、腫瘍での化学療法薬の局在化は、正常な組織での副作用の重症度を減少させる。
【００６０】
この腫瘍標的方法の例は、抗癌剤、ドキソルビシンを一つ又はそれ以上の化学的に活性な基を有するｐｚ化合物に結合させることである。ｐｚをドキソルビシンのアミノ基と結合させる多くの代替の結合方法が存在する。一例は、化合物２６０からスタートし、４つの化学療法薬を化合物２６０に結合するために、スキームＥに相当する手法を使用することである。
【００６１】
【化１６】
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ｐｚに結合し得る官能基を有する追加の化学療法薬には以下のものが含まれるが、これらに限定されるものではない：メトトレキサート、アミノグルテチミド、アロマシン、クロラムブシル、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、メルファラン、プロカルバジン、チオグアニン、ゲムシタビン、イダルビシン、エピルビシン、ダウノルビシン、タモキシフェン、タキソテール、ゼローダ、およびトリメトレキサート。−ＣＯ2Ｈ、−ＯＨ、−ＮＨ2、又は−ＳＨ（又は活性化された誘導体、例えば、この分野で公知の脱離基がこれらの基の水素原子を置換したもの）を有する以下に掲げられた追加の多くの化学療法薬が本発明のｐｚと結合され得る。
【００６２】
本発明のｐｚｓは、以下を含みこれらに限定されない腫瘍の光学的および多重モード画像化への使用が見出された：即ち、胸部、肺、皮膚、精巣、および他の上気道消化器腫瘍を含み、同時に造影剤／直接的に腫瘍を破壊し光力学的治療の適用を行う抗腫瘍薬として機能する。本発明のｐｚｓは、ＭＲおよびＮＩＲ造影剤として、ＰＥＴ（ポジトロンＣＴ）造影剤として、および核造影剤としての使用が見出された。更に、本発明のｐｚｓは、治療薬としておよび造影剤／治療薬として同時に使用され、その治療効果は光活性化（光力学治療）により又はこれなしに現れ、また、化学療法薬への結合により又はこれなしに現れることが見出された。
【００６３】
一実施形態では、本発明は、癌性腫瘍の治療方法を提供し、これは、広く知られている手術、放射線治療、および化学療法の抗腫瘍手段と結合して、本発明のｐｚを（光活性化により又はこれなしに）投与することを含んでいる。治療の効果は臨床研究又はマウスにおける腫瘍モデル又は細胞培養感度試験のようなモデルシステムで測定され得る。本発明は、改善された効果と低減された毒性とをもたらす併用療法を提供する。従って、一実施形態では、本発明は、手術、放射線治療、又は化学療法と併用する本発明のｐｚの使用に関連している。また、本発明のｐｚは、癌性腫瘍の治療方法において単独で、光活性化により又はこれなしに使用され得る。好ましい一実施形態では、非ｐｚ化学療法薬は、腫瘍をターゲットとして化学療法薬を所望の作用サイトに結集し、治療とモニタリングと再発の抑制の間のリアルタイムで非侵襲的な腫瘍縮小のモニタリングを可能とするために、ｐｚに結合される。
【００６４】
本発明の併用療法が一つ又はそれ以上の付加的な抗癌剤とともに本発明のｐｚを投与することを含むとき、ｐｚおよび付加的な抗癌剤は、一人に同時に又は連続して投与することができる。また、これらの薬剤は、周期的に投与され得る。周期的な治療は、一定の期間に一又はそれ以上抗癌剤を投与し、続いて一定の期間に一つ又はそれ以上の異なる抗癌剤を投与し、この一連の投与、即ちサイクルを繰り返すことを含み、これは、投与されている一つ又はそれ以上の抗癌剤の耐性発現を低減させ、投与されている一つ又はそれ以上の抗癌剤の副作用を回避し若しくは低減させるために、及び／又は治療効果を高めるためである。
【００６５】
追加的な抗癌剤は、一連のセッションに亘って投与され、以下にリストされる追加的な抗癌剤の何れか一つ又は組み合わせが投与され得る。
【００６６】
本発明は、それを必要としている個人に本発明のｐｚと一つ又はそれ以上の追加の抗癌剤又は薬剤的に許容されるその塩とを投与することを含む癌の治療方法を含んでいる。ｐｚと一つ又はそれ以上の追加の抗癌剤は、相加的又は相乗的に機能し得る。これに限定されるものではないが、追加の抗癌剤に適するものは、ゲムシタビン、カペシタビン、メトトレキセート、タキソール、タキソテール、メルカプトプリン(mereaptopurine)、チオグアニン、ヒドロキシ尿素、シクロホスファミド、イホスファミド、ニトロソウレア類、マイトマイシン、ダカルバジン、プロカルバジン、エトポシド、テニポシド、カンパシーインス(campatheeins)、ブレオマイシン、ドキソルビシン、イダルビシン、ダウノルビシン、ダクチノマイシン、プリカマイシン、ミトキサントロン、Ｌ−アスパラギナーゼ、ドキソルビシン,エピルビシン、５−フルオロウラシル （５−ＦＵ）、タキサン類 (ドセタキセルおよびパクリタキセルなど)、ロイコボリン、レバミゾール、イリノテカン、エストラムスチン、エトポシド、ナイトロジェンマスタード類、ＢＣＮＵ、ニトロソ尿素類 (カルムスチンおよびロムスチンなど)、白金錯体類 (シスプラチン、カルボプラチンおよびオキサリプラチン など)、メシル酸イマチニブ、ヘキサメチルメラミン、トポテカン、チロシンキナーゼ阻害剤類、チルホスチ類ハービマイシンＡ， ゲニスタイン、エルブスタチン、およびラベンダスチンＡである。
【００６７】
一実施形態では、これに限定されるものではないが、抗癌剤は以下の群から選択される薬剤であり得る：アルキル化剤、ナイトロジェンマスタード、シクロホスファミド、トロホスファミド 、クロラムブシル、ニトロソ尿素類、カルムスチン (ＢＣＮＵ)、ロムスチン (ＣＣＮＵ)、スルホン酸アルキル類、ブスルファン、トレオスルファン、トリアゼン類、植物性アルカロイド類、ビンカ・アルカロイド類(ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシン、ビノレルビン)、タキソイド類、ＤＮＡ トポイソメラーゼ阻害剤類、エピポドフィリン類、９−アミノカンプトテシン、カンプトセシン、クリスナトール、マイトマイシン類、マイトマイシンＣ、代謝拮抗薬類、葉酸拮抗薬類、ＤＨＦＲ阻害剤類、トリメトレキサート、ＩＭＰデヒドロゲナーゼ阻害剤類、ミコフェノール酸、チアゾフリン、リバビリン、ＥＩＣＡＲ、リボヌクレオチドレダクターゼ阻害剤類、ヒドロキシ尿素、デフェロキサミン、ピリミジン類似体類、ウラシル類似体類、フロクスウリジン、ドキシフルリジン、ラチトレキセド、シトシン類似体類、シタラビン (ara C)、シトシンアラビノシド、フルダラビン、プリン類似体類、メルカプトプリン、チオグアニン、ＤＮＡ代謝拮抗物質類、３−ＨＰ、２’−デオキシ−５−フルオロウリジン、５−ＨＰ、α−ＴＧＤＲ、アフィジコリングリシン酸塩、ａｒａ−Ｃ、５−アザ−２’−デオキシシチジン、β−ＴＧＤＲ、サイクロシチジン、グアナゾール(イノシングリコジアルデヒド)、マセベシンＩＩ、ピラゾロイミダゾール、ホルモン治療薬類、受容体拮抗薬類、抗エストロゲン、タモキシフェン、ラロキシフェン、メゲストロール、ＬＨＲＨ アゴニスト類、ゴセレリン、リュープロライドアセテート、抗アンドロゲン類、フルタミド、ビカルタミド、レチノイド類／デルトイド類、ｃｉｓ−レチノイン酸、ビタミンＡ誘導体、全トランスレチノイン酸(ＡＴＲＡ−ＩＶ)、ビタミンＤ３類似体類、Ｅ１) １０８９、ＣＢ  １０９３、ＩＣＨ  １０６０、光線力学的治療薬類、ベルテポルフィン、ＢＰＤ−ＭＡ、フタロシアニン、光線感作物質Ｐｃ４、デメトキシ−ヒポクレリンＡ(２ＢＡ−２−ＤＭＨＡ)、サイトカイン類、インターフェロン−ａ、インターフェロン−Ｉ３、インターフェロン−ｙ、腫瘍壊死因子、血管形成阻害剤類、アンギオスタチン(プラスミノーゲンフラグメント)、抗血管形成抗トロンビンＵＩ、アンジオザイム、ＡＢＴ−６２７、Ｂａｙ１２−９５６６、ベネフィン、ベバシズマブ、ＢＭＳ−２７５２９１、軟骨由来の阻害剤 (ＣＤＩ)、ＣＡＩ、ＣＤ５９補体断片、ＣＥＰ−７０５５、Ｃｏｌ３、コンブレタスタチＡ−４、エンドスタチン(コラーゲンＸＶＩＩＩフラグメント)、フィブロネクチンフラグメント、Ｇｒｏ−ｂｅｔａ、ハロフジノン、ヘパリナーゼ類、ヘパリンヘキサ糖フラグメント、ＨＭＶ８３３、ヒト絨毛性ゴナドトロピン(ｈＣＧ)、ＩＭ−８６２、インターフェロン誘導可能なプロテイン(ＩＰ−１０)、インターロイキン−１２、クリングル５ (プラスミノーゲンフラグメント)、マリマスタット、メタロプロテイナーゼ阻害剤類 (ＵＭＰｓ),２−メトキシエストラジオール、ＭＭＩ２７０（ＣＧＳ２７０２３Ａ）、ＭｏＡｂ  ＩＭＣ−Ｉ  Ｃ１１、ネオバスタット、ＮＭ−３、パンゼム、Ｐ１−８８、胎盤RNA分解酵素阻害剤、プラスミノーゲン活性化因子阻害剤、血小板因子−４  (PF4)、プリノマスタット、プロラクチン１６１（Ｄフラグメント、プロリフェリン関連のプロテイン(ＰＲＰ)、ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５９４、レチノイド類、ソリマスタット、スクアラミン、ＳＳ３３０４、ＳＵ５４１６、ＳＵ６６６８、ＳＵ１１２４８、テトラヒドロコルチゾール−Ｓ、テトラチオモリブデート、サリドマイド、トロンボスポンジン−１(ＴＳＰ−１)、ＴＮＰ−４７０、形質転換成長因子β(ＴＧＦ−１１)、バスキュロスタチン、バソスタチン(カルレチクリンフラグメント)、ＺＤ６１２６、ＺＤ６４７４、ファメシルトランスフェラーゼ阻害剤類 (ＦＴＩ)、ビスフォスフォネート類、抗有糸分裂薬類、アロコルヒチン、ハリコンドリンＢ、コルヒチン、コルヒチン誘導体、ドルスタチン１０、マイタンシン、リゾキシン、チオコルヒチン、トリチルシステイン、イソプレニル化阻害剤類、ドーパミン作動性神経毒類、1-メチル-4-フェニルピリジニウムイオン、細胞周期阻害剤類、スタウロスポリン、アクチノマイシン類、アクチノマイシンＤ、ダクチノマイシン、ブレオマイシン類、ブレオマイシンＡ２、ブレオマイシンＢ２、ペプロマイシン、アントラサイクリン、アドリアマイシン、エピルビシン、ピラルビシン(pirarnbicin)、ゾルビシン、ミトキサントロン、ＭＤＲ阻害剤類、ベラパミル、Ｃａ２’アデノシントリホスファターゼ阻害剤類、およびタプシガルギン。
【００６８】
これに限定されるものではないが、本発明において使用される他の抗癌剤は、以下のとおりである：アシビシン；アクラルビシン；塩酸アコダゾール；アクロニン；アドゼレシン；アルデスロイキン；アルトレタミン；アンボマイシン(arnbomycin)；アメタントロンアセテート；アミノグルテチミド；アムサクリン；アナストロゾール；アントラマイシン；アスパラギナーゼ；アスペルリン；アザシチジン；アゼテパ；アゾトマイシン；バチマスタット；ベンゾデパ；ビカルタミド；ビサントレン塩酸塩；ビスナフィドジメシレート；ビゼルクシン(bizelcsin)；硫酸ブレオマイシン；ブレキナールナトリウム；ブロピリミン；ブスルファン；カクチノマイシン；カルステロン；カラセミド；カルベチマー；カルムスチン；カルビシン塩酸塩；カルゼルシン；セデフィンゴール；クロラムブシル；シロレマイシン；シスプラチン；クラドリビン；メシル酸クリスナトール；シクロホスファミド；シタラビン；ダカルバジン；ダクチノマイシン；塩酸ダウノルビシン；デシタビン；デキソルマプラチン(dexorrnaplatin)；デザグアニン；デザグアニンメシラート；ジアジクオン；ドセタキセル；塩酸ドキソルビシン；ドロロキシフェン；クエン酸ドロロキシフェン；プロピオン酸ドロモスタノロン；ジュアゾマイシン；エダトレキサート；塩酸エフロミチン；エルサミトルシン；エンロプラチン；エンプロマート；エピプロピジン；塩酸エピルビシン；エルブロゾール；エピルビシン塩酸塩；エストラムスチン；リン酸エストラムスチンナトリウム；エタニダゾール；リン酸エトポシド；エトプリン；塩酸ファドロゾール；ファザラビン；フェンレチナイド；フロクスウリジン；リン酸フルダラビン；フルオロウラシル；フルロシタビン；ホスキドン；ホストリエシンナトリウム；塩酸ゲムシタビン；ヒドロキシ尿素；塩酸イダルビシン；イホスファミド；イルモホシン；インターロイキン２(組み換え型体のインターロイキン２又はｒＩＬ２を含む), インターフェロンアルファ２ａ；インターフェロンアルファ２ｂ；インターフェロンアルファ−ｎｌ；インターフェロンアルファ−ｎ３；インターフェロンベータＩａ；インターフェロンガンマＩｂ；イプロプラチン；塩酸イリノテカン；ランレオチド酢酸塩；レトロゾール；酢酸リュープロライド；塩酸リアロゾール；ロメトレキソールナトリウム；ロムスチン；ロソキサントロン塩酸塩；マソプロコール；マイタンシン；塩酸メクロレタミン(mecchlorethamine hydrochloride)；酢酸メゲストロール；酢酸メレンゲストロール；メルファラン；メノガリル；メルカプトプリン；メトトレキサートナトリウム；メトプリン；メツレデパ ；ミチンドミド；ミトカルシン；マイトクロミン；ミトギリン ；ミトマルシン；マイトマイシン；ミツスパー(mitusper)；ミトタン；塩酸ミトキサントロン；ミコフェノール酸；ノコダゾール；ノガラマイシン；オルマプラチン；オキシスラン；ペガスパルガーゼ；ペリオマイシン；ペンタムスチン；硫酸ペプロマイシン；ペルホスファミド(perfosfarnide)；ピポブロマン；ピポスルファン；ピロキサントロン塩酸塩；プリカマイシン；プロメスタン；ポルフィマーナトリウム；ポルフィロマイシン；プレドニムスチン；プロカルバジン塩酸塩；ピューロマイシン；ピューロマイシン塩酸塩；ピラゾフリン；リボプリン；ログレチミド；サフィンゴール；サフィンゴール塩酸塩；セムスチン；シムトラゼン；スパルホサートナトリウム；スパルソマイシン(sparsornycin)；スピロゲルマニウム塩酸塩；スピロムスチン；スピロプラチン；ストレプトニグリン；ストレプトゾシン；スロフェヌル；タリソマイシン；テコガランナトリウム；テガフール；塩酸テロキサントロン；テモポルフィン；テロキシロン；テストラクトン；チアミプリン；チオグアニン；チオテパ；チアゾフリン；チラパザミン；クエン酸トレミフェン；酢酸トレストロン；リン酸トリシリビン；トリメトレキサート；グルクロン酸トリメトレキサート；トリプトレリン；塩酸ツブロゾール；ウラシルマスタード (uracit mustard)；ウレデパ；バプレオチド；ベルテポルフィン(verteporfln)；硫酸ビンブラスチン；硫酸ビンクリスチン；ビンデシン；硫酸ビンデシン；硫酸ビネピジン；硫酸ビングリシナート；硫酸ビンレウロシン；酒石酸ビノレルビン；硫酸ビンロシジン；硫酸ビンゾリジン；ボルゾルク(vorozolc)；ゼニプラチン；ジノスタチン；塩酸ゾルビシン。
【００６９】
これに限定されるものではないが、本発明に使用し得る化学療法薬は、以下のとおりである：２０−エピ−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３；５−エチニルウラシル；アビラテロン；アクラルビシン；アシルフルベン；アデシペノール；アドゼレシン；アルデスロイキン；ＡＬＬ  ＴＫ拮抗薬類；アルトレタミン；アンバムスチン；アミドックス；アルニフォスチン；アミノレブリン酸；アムルビシン；アムサクリン；アナグレリド；アナストロゾール；アンドログラホリド；血管新生阻害物質；拮抗剤Ｄ；剤Ｇ；アンタレリックス；抗背側化形成タンパク質１；抗アンドロゲン薬, 前立腺癌；抗エストロゲン剤；アンチネオプラストン；アンチセンスオリゴヌクレオチド類；アフィジコリングリシナート；アポトーシス遺伝子修飾物質類；アポトーシス調節因子類；アプリン酸；ａｒａ ＣＤＰ ＤＬ ＰＴＢＡ；アルギニンジイミナーゼ；アスラクリン；アタメスタン；アトリムスチン；アキシナスタチン１ ；アキシナスタチン２；アキシナスタチン３；アザセトロン；アザトキシン；アザチロシン；バッカチンIII 誘導体類；バラノール；バチマスタット；ＢＣＲＪＡＢＬ拮抗剤類；ベンゾクロリン類；ベンゾイルスタウロスポリン；β−ラクタム誘導体類；β−アレチン；ベタクラマイシンＢ(betaclarnycin B)；ベツリン酸；ｂＦＧＦ阻害剤；ビカルタミド；ビスアントレン；ビスアジリジニルスペルニン(bisaziridinylsperrnine)；ビスナフィド；ビストラテンＡ；ビセレシン；ブレフラート；ブロピリミン；ブドチタン；ブチオニンスルホキシミン；カルシポトリオール；カルホスチンＣ；カンプトセシン誘導体類；カナリアポックスＩＬ−２；カルボキサミドアミノトリアゾール；カルボキシアミドトリアゾール(carboxyarnidotriazole)；ＣａＲｅｓｔ  Ｍ３；ＣＡＲＮ７００；軟骨由来阻害剤；カルゼルシン；カゼインキナーゼ阻害剤類；カスタノスペルミン；セクロピンＢ；セトロレリックス；クロリン類；クロロキノキサリンスルホンアミド；シカプロスト；シス−ポルフィリン；クラドリビン；クロミフェン類似体；クロトリマゾール；コリスマイシンＡ；コリスマイシンＢ；コンブレタスタチンＡ４；コンブレタスタチン類似体；コナゲニン；クラムベシジン８１６；クリスナトール；クリプトフィシン８；クリプトフィシンＡ 誘導体類；クラシンＡ；シクロペンタンセラキノン類；シクロプラタム；サイペマイシン；シタラビンオクホスファート；細胞溶解因子；シトスタチン；ダクリズマブ；デシタビン；デヒドロジデムニンＢ；デスロレリン；デキサメサゾン；デキシホスファミド；デクスラゾキサン；デクスベラパミル；ジアジクオン；ディデムニンＢ；ジドックス；ジエチルノルスペルミン；ジヒドロ５ アザシチジン；ジヒドロタキソール，  ９；ジオキサマイシン；ジフェニルスピロムスチン；ドセタキセル；ドコサノール；ドラセトロン；ドキシフルリジン；ドロロキシフェン；ドロナビノール；ズオカルマイシンＳＡ；エブセレン；エコムスチン；エデルホシン；エドレコロマブ；エフロミチン；エレメネ；エミテフール；エピルビシン；エプリステリド；エストラムスチン類似体；エストロゲン作用薬 類；エストロゲン拮抗薬類；エタニダゾール；リン酸エトポシド；エキセメスタン；ファドロゾール；ファザラビン；フェンレチニド；フィルグラスチム；フィナステライド；フラボピリドール；フレゼラスチン；フルアステロン；フルダラビン(fltidarabine)；塩酸フルオロダウノルニイン(fluorodaunoruniein hydrochloride)；ホルフェニメクス；フォルメスタン；フォストリエシン；フォテムスチン；ガドリニウムテキサフィリン；硝酸ガリウム；ガロシタビン；ガニレリクス；ゼラチナーゼ阻害剤類；グルタチオン阻害剤類；ヘプスルファム；ヘレグリン ；ヘキサメチレンビスアセトアミド；ヒペリシン；イバンドロン酸；イダルビシン ；イドキシフェン；イドラマントン；イルモホシン；イロマスタット；イミダゾアクリドン類；イミキモド；免疫賦活薬ペプチド類；インスリン様増殖因子１受容体阻害薬；インターフェロンアゴニスト類；インターフェロン類；インターロイキン類；ヨーベングアン；ヨードドキソルビシン(iododoxorubiein)；イポメアノール，４；イロプラクト；イルソグラジン；イソベングラゾール；イソホモハリコンドリンＢ；イタセトロン；ジャスプラキノリド；カハラリドＦ；ラメラリン−Ｎトリアセテート(larnellarin N triacetate)；ランレオチド；レイナマイシン；レノグラスチム；硫酸レンチナン；レプトルスタチン；レトロゾール；白血病阻害因子；白血球アルファインターフェロン；ロイプロリド＋エストロゲン＋プロゲステロン；リュープロレリン；レバミソール；リアロゾール；線状ポリアミン類似体；親油性ジサッカライドペプチド；親油性白金錯体類；リッソクリナミド７；ロバプラチン；ロンブリシン；ロメテレキソール；ロニダミン；ロソキサントロン；ロバスタチン；ロキソリビン；ラルトテカン；ルテチウムテキサフィリン；リゾフィリン；細胞溶解性ペプチド類；メイタンシン；マンノスタチンＡ；マリマスタット；マソプロコール；マスピン；マトリライシン 阻害剤類；マトリックスメタロプロテアーゼ阻害薬,類；メノガリル；メルバロン；メテレリン；メチオニナーゼ；メトクロプラミド；ＭＩＦ阻害剤；ミフェプリストン；ミルテホシン；ミリモスチム；不適正な二本鎖ＲＮＡ,；ミトグアゾン；ミトラクトール；マイトマイシン類似体類；ミトナフィド；マイトトキシン成長因子サポリン；ミトキサントロン；モファロテロン；モルグラモスチム；モノクローナル抗体, ヒト絨毛性ゴナドトロピン；モノホスホリルリピドＡ＋マイオバクテリウム細胞壁ｓｋ；モピダモール；多剤耐性遺伝子インヒビター；多腫瘍サプレッサ1−ベース治療剤；マスタード抗癌剤；ミカペルオキシドＢ；マイコバクテリウム細胞壁抽出物；ミリアポロン；Ｎ−アセチルジナリン；Ｎ 置換ベンズアミド類；ナファレリン；ナグレスチプ；ナロキソン＋ペンタゾシン；ナパビン；ナフテルピン；ナルトグラスチム；ネダプラチン；ネモルビシン；ネリドロン酸；中性エンドペプチダーゼ；ニルタミド；ニサマイシン；一酸化窒素修飾因子類；窒素酸化物酸化防止剤；ニトルリン；ｏ(６)−ベンジルグアニン；オクトレオチド；オキセノン；オリゴヌクレオチド類；オナプリストン；オンダンセトロン；オンダンセトロン；オラシン；経口サイトカイン誘発剤；オルマプラチン；オサテロン；オキサリプラチン；オキサウノマイシン；パクリタキセル；パクリタキセル類似体類；パクリタキセル誘導体類；パラウアミン；パルミトイルリゾキシン；パミドロン酸；パナキシトリオール；パノミフェン；パラバクチン；パゼリプチン；ペグアスパルガーゼ；ペルデシン；ペントサンポリ硫酸ナトリウム；ペントスタチン；ペントロゾール；ペルフルブロン；ペルホスファミド；ペリリルアルコール；フェナジノマイシン；フェニル酢酸塩；ホスファターゼ阻害剤類；ピシバニール；塩酸ピロカルピン；ピラルビシン；ピリトレキシム；プラセチンＡ；プラセチンＢ；プラスミノーゲン活性化因子阻害因子；白金錯体；白金錯体類；プラチナトリアミン錯体；ポルフィマーナトリウム；ポルフィロマイシン；プレドニゾン；プロピルヒスチジンアクリドン(propyl his acridone)；プロスタグランジンＪ２；プロテアソーム阻害剤類；プロテインＡベース免疫調整剤；蛋白質キナーゼＣ阻害剤；蛋白質キナーゼＣ阻害剤類, 微細藻類；蛋白質チロシンホスファターゼ阻害剤類；プリンヌクレオシドホスホリラーゼ阻害剤類；プルプリン類；ピラゾロアクリジン(pyrazoloaeridine)；ピリドキシル化ヘモグロビンポリオキシエチレン抱合体；ｒａｆ拮抗薬類；ラルチトレキセド；ラモセトロン；ｒａｓファルネシル蛋白質トランスフェラーゼ阻害剤類；ｒａｓ阻害剤類；ｒａｓＧＡＰ阻害剤；脱メチルレテリプチン；レニウムRe186エチドロネート；リゾキシン；リボザイム類；ＲＨレチナミド；ログレチミド；ロヒツキン；ロムルチド；ロキニメックス；ルビギノンＢＩ；ルボキシル；サフィンゴール；サイントピン；ＳａｒＣＮＵ；サルコフィトールＡ；サルグラモスチム；Ｓｄｉ１ミメティックス；セムスチン；老化由来阻害剤１；センスオリゴヌクレオチド類；シグナル伝達阻害薬類；シグナル伝達モジュレーター類；単鎖抗原結合性プロテイン；シゾフィラン；ソブゾキサン；ボロカプテイトナトリウム；フェニル酢酸ナトリウム；ソルベロール；ソマトメジン結合蛋白質；ソネルミン；スパルフォシン酸；スピカマイシンＤ；スピロムスチン；スプレノペンチン；スポンギスタチン１；スクアラミン；幹細胞抑制因子；幹細胞分裂阻害剤類；スチピアミド；ストロメリシン阻害剤類；スルフィノシン；過度活動性血管作動性腸管ペプチドアンタゴニスト；スラジスタ；スラミン；スウェインソニン；合成グリコサミノグリカン類；タリムスチン；タモキシフェンメチオジド；タウロムスチン；タザロテン；テコガランナトリウム塩；テガフール；テルラピリリウム；テロメラーゼ阻害剤類；テモポルフィン；テモゾロミド；テニポシド；テトラクロロデカオキシド；テトラゾミン；タリブラスチン；チオコラリン；トロンボポエチン；トロンボポエチンミメティック；チマルファシン；チモポエチンレセプターアゴニスト；チモトリナン；甲状腺刺激ホルモン；エチルエチオプルプリンすず；チラパザミン；チタノセンジクロリド；トプセンチン；トレミフェン；全能性幹細胞因子；翻訳阻害剤類；トレチノイン；トリアセチルウリジン；トリシリビン；トリメトレキサート；トリプトレリン；トロピセトロン；ツロステリド；チロシンキナーゼ阻害剤類；チロホスチン類；ＵＢＣ阻害剤類；ウベニメクス；尿生殖洞由来増殖阻害因子；ウロキナーゼ受容体 拮抗剤類；バプレオチド；バリオリンＢ；ベクター系, エリトロサイト遺伝子治療剤；ベラレソール；ベラミ��；ベラジン類(verdins)；ベルテポルフィン；ビノレルビン；ビンキサルチン；ビタキシン；ボロゾール；ザノテロン；ゼニプラチン；ジラスコルブ；およびジノスタチンスチマラマー。
【００７０】
上記で開示したような反応性の官能基を有する上記で特定した化学療法薬の何れかが、本発明のｐｚに結合し得てｐｚの複合体と腫瘍に局在化し得る化学療法薬を提供する。加えて、本発明は、本発明のｐｚを、化学療法又は放射線治療が有毒、即ち許容し得ない又は耐え難い副作用を治療中の患者にもたらす単独の化学療法又は単独の放射線治療の代替としての治療方法を提供する。
【００７１】
本発明の方法では、本発明のｐｚ又はｐｚ複合体の治療効果のある、薬剤学上の実情に従って典型的に処方される量が、必要としている人間に投与される。本発明のｐｚ又はｐｚ複合体は、適切な投与法により投与される。
【００７２】
医薬組成物は、本発明のｐｚ又はｐｚ複合体がその意図する目的を達成するのに効果的な量で投与されるように十分な量で存在するようにこれらを含む。正確な処方、薬の摂取方法、および投与量は、着目する特定の腫瘍を考慮して個々の医師により決定される。本発明のｐｚｓは、意図する摂取方法および標準の薬学的上の実情に従って選択された医薬担体と混合して投与されるのが典型的である。本発明に従って使用する医療組成物は、ｐｚの処理と投与を容易にする賦形剤および補助剤を含む生理学的に許容される一つ又はそれ以上の担体を使用して通常の方法で処方される。
【００７３】
「担体」という用語は、本発明のｐｚと共に投与される希釈剤、補助剤、又は賦形剤のことをいう。このような医薬担体は、水と、石油、動物、植物、合成起源、ピーナッツオイル、大豆油、鉱油、ゴマ油などを含むオイルのような液体であり得る。これに加えて、補助剤、安定化剤、濃化剤、および潤滑剤を加えることができる。薬学的に許容し得る担体は、無菌のものである。ｐｚが静脈内投与される場合は、水が好ましい。また、生理食塩水およびデキストロース水溶液およびグリセロール溶液が、液体の担体、特に注射液として採用され得る。適切な医薬担体には、デンプン、ブドウ糖、乳糖、ショ糖、ゼラチン、麦芽、米、小麦粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、グリセロールモノステアレート、タルク、塩化ナトリウム、乾燥スキムミルク、グリセロール、プロピレン、グリコール、水、エタノールなどの賦形剤が含まれる。本発明の組成物は、所望なら、湿潤剤若しくは乳化剤又はｐＨ緩衝剤も含み得る。
【００７４】
これらの医薬組成物は、例えば、通常の混合、溶解、乳化、封入、又は凍結乾燥のプロセスにより製造され得る。適切な処方は、選択される薬の摂取方法に依存している。液体の状態で投与される場合、水のような液体の担体が加えられる。液体状態の組成物は、生理食塩水、デキストロース又は他の単糖類の溶液を更に含み得る。液体の状態で投与される場合、この組成物は、約０．１重量％〜約９０重量％、好ましくは約１重量％〜約５０重量％の本発明のｐｚを含んでいる。
【００７５】
本発明のｐｚの治療効果のある量が、静脈、皮膚又は皮下注射によって投与されるとき、この組成物はピロゲンを含まない非経口的に許容し得る水溶液の状態である。このような非経口的に許容し得る水溶液の調製は、ｐＨ、等張性、安定性などに配慮して、当該技術分野の技術的範囲内で行われる。静脈、皮膚又は皮下注射に好ましい組成物は、典型的には、等張性の媒体を含んでいる。ｐｚは、他の液体とともに１０〜３０分の時間又は数時間に亘って注入され得る。
【００７６】
本発明のｐｚは、注射、例えば急速静注又は持続点滴による非経口的投与のために処方され得る。注射用の処方は、例えば、アンプル又は複数投薬容器の単位投薬量の形式で、保存料とともに表すことができる。この組成物は、懸濁液、溶液又はオイル又は水性媒体のエマルションなどの形式を採り得、懸濁、安定化及び／又は分散剤などの調剤用薬剤を含み得る。
【００７７】
非経口的投与のための医薬組成物は、活性薬剤の水溶液を含み得る。加えて、本発明のｐｚの懸濁液は、適当な油性の注射懸濁液として調製され得る。好ましい脂溶性の溶媒又は媒体には、脂肪油又は合成脂肪酸エステルが含まれ得る。水性の注射懸濁液は、懸濁液の粘度を増加させる物質を含み得る。また、任意的に、この懸濁液は、適切な安定化剤又は化合物の溶解性を増大させて高濃度の溶液の調製を可能とする薬剤を含み得る。あるいは、本発明の組成物は、使用前に、例えば無菌のピロゲンを含まない水のような適当な媒体とともに構成するための粉体の形態であり得る。
【００７８】
追加の実施形態として、本発明は、本発明の方法を実施するためにそれらの使用を手助けするように包装された一つ又はそれ以上の化合物又は組成物を包含するキットを含んでいる。一つの単純な実施形態では、そのキットは方法の実施に有用であるとしてここに記載した化合物又は組成物（例えば、ｐｚおよび任意の第２の治療薬を含む組成物）を包み、シールされた瓶又は容器などの入れ物に包装され、本発明の方法を実施するための化合物又は組成物の使用を記載したラベルが入れ物に貼付され又はキットに入れられる。好ましくは、その化合物又は組成物は、単位投薬量の形態で包装されている。更に、そのキットには、意図された薬の摂取方法に従ってその組成物を投与するのに適した、例えば、注射器、点滴バッグ、パッチなどの器具を含めることができる。他の実施形態では、ｐｚは凍結乾燥物である。この例では、キットは更に凍結乾燥物の復元に有用な溶液を含んだ追加の容器を含み得る。
【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図２Ｄ】
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【図３】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｃ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図８Ｃ】
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【図９Ａ】
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【図９Ｂ】
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