(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
転座した混合系統白血病に基づいた急性骨髄性白血病；転座した混合系統白血病に基づいた急性リンパ性白血病；急性骨髄性白血病、赤白血病、および慢性骨髄性白血病から選択される非ＭＬＬに基づいた慢性骨髄増殖性疾患；または非ＭＬＬに基づいた急性リンパ性白血病を治療するための医薬を調製するための７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物の使用。
【請求項２】
前記白血病は、転座した混合系統白血病に基づいた急性骨髄性白血病である、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記白血病は、転座した混合系統白血病に基づいた急性リンパ性白血病である、請求項１に記載の使用。
【請求項４】
前記非ＭＬＬに基づいた慢性骨髄増殖性疾患は、慢性骨髄性白血病である、請求項１に記載の使用。
【請求項５】
前記非ＭＬＬに基づいた慢性骨髄増殖性疾患は、急性骨髄性白血病である、請求項１に記載の使用。
【請求項６】
前記非ＭＬＬに基づいた慢性骨髄増殖性疾患は、赤白血病である、請求項１に記載の使用。
【請求項７】
前記白血病は、非ＭＬＬに基づいた急性リンパ性白血病である、請求項１に記載の使用。
【請求項８】
転座した混合系統白血病に基づいた急性骨髄性白血病；転座した混合系統白血病に基づいた急性リンパ性白血病；急性骨髄性白血病、赤白血病、および慢性骨髄性白血病から選択される非ＭＬＬに基づいた慢性骨髄増殖性疾患；または非ＭＬＬに基づいた急性リンパ性白血病の治療に使用するための、化合物７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物を含む医薬組成物。
【請求項９】
前記白血病は、転座した混合系統白血病に基づいた急性骨髄性白血病である、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
前記白血病は、転座した混合系統白血病に基づいた急性リンパ性白血病である、請求項８に記載の組成物。
【請求項１１】
前記白血病は、非ＭＬＬに基づいた急性骨髄性白血病である、請求項８に記載の組成物。
【請求項１２】
前記白血病は、非ＭＬＬに基づいた慢性骨髄性白血病である、請求項８に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、造血器新生物の化学療法に関する。
【背景技術】
【０００２】
白血病の骨髄、リンパおよび混合系統は、少なくとも１つの染色体異常の結果として生じるクローン新生物である。それらの異常は遺伝子構造および機能の変化を生じる。治療計画は、一般に、併用して、または連続して投与されるいくつかの化学療法剤を含む。メシル酸イマチニブ、ニロチニブおよびダサチニブなどの近年の進歩により、慢性骨髄性白血病患者における進行する時間および全生存が改善されてきている。これらの進歩にも関わらず、特定の薬剤、または薬剤の組み合わせの治療有効性は、しばしば、さらなる遺伝的異常および／または後成的異常が獲得されるので、維持されない。慢性骨髄性白血病および他の造血器悪性腫瘍を治療するためのより有効な化学療法剤が望まれる。
【０００３】
グリコーゲン合成酵素キナーゼ３（ＧＳＫ３）は、正常な静止細胞におけるセリン／トレオニンキナーゼ構成的活性であり、その活性の阻害により調節される。ＧＳＫ３は、種々の細胞機能を調節することが知られている種々のシグナル変換ネットワークに関与する。調節因子としてＧＳＫ３を使用する経路の異常は疾患の病因に関与し、これにより、インスリン非依存性糖尿病、アルツハイマー病および他の神経変性疾患、および発達障害などの種々の治療用途のためにＧＳＫ３特異的阻害剤を開発する試みが促進されている。複数の経路におけるその関与に起因して、ＧＳＫ３阻害の適切な有効性は、治療用途のための阻害剤の開発において重要な要因である。
【０００４】
最近、特定のＧＳＫ３阻害剤が、特定の固形腫瘍種類において特定の化学療法剤の効果を増強することが報告されているが、それ自体で有用な抗腫瘍活性を欠いている（特許文献１）。
【０００５】
ＧＳＫ３は、遺伝的に規定された転座した混合系統白血病（ＭＬＬ白血病）を維持する役割を果たすこともまた開示されている（非特許文献１）。この同じ報告はまた、特定のＧＳＫ３阻害剤化合物によって遺伝的に規定された転座したＭＬＬ白血病におけるＧＳＫ３阻害を開示している。ＧＳＫ−３阻害剤［（３−（２，４−ジクロロフェニル）−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（ＳＢ２１６７６３）、およびＧＳＫ−３阻害剤ＩＸ、（２’Ｚ，３’Ｅ）−６−ブロモインジルビン−３’−オキシム（「ＧＳＫ３−ＩＸ」）は、証明されている陽性結果と述べられている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】国際公開第２００９／００６０４３号パンフレット
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｗａｎｇら，Ｎａｔｕｒｅ，４５５，１２０５−１２１０（２００８）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
それ自体、治療活性を示し、特定の種類の白血病を罹患している白血病患者の治療における効果を改善する、白血病に選択的な化学療法剤についての必要性が存在している。ＧＳＫ３β阻害剤７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］−ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニル−カルボニル）ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンは、選択的であり、それ自体が治療活性を有し、いくつかの種類の白血病に対して、ＳＢ２１６７６３およびＧＳＫ３−ＩＸより効果を向上させることが証明されている。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明の第１の態様は、混合系統白血病；転座した混合系統白血病；転座した混合系統白血病に基づいた急性骨髄性白血病；転座した混合系統白血病に基づいた急性リンパ性白血病；非ＭＬＬに基づいた慢性骨髄増殖性疾患；または非ＭＬＬに基づいた急性リンパ性白血病を罹患している患者を治療する方法であって、そのような治療を必要とする白血病患者に、有効量の７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物を投与する工程を含む、方法を提供する。
【００１０】
本発明の第２の態様は、混合系統白血病；転座した混合系統白血病；転座した混合系統白血病に基づいた急性骨髄性白血病；または転座した混合系統白血病に基づいた急性リンパ性白血病を罹患している患者を治療する方法であって、そのような治療を必要とする白血病患者に、有効量の７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物を投与する工程を含む、方法を提供する。
【００１１】
本発明の第３の態様は、混合系統白血病を罹患している患者を治療する方法であって、そのような治療を必要とする白血病患者に、有効量の７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物を投与する工程を含む、方法を提供する。
【００１２】
本発明の第４の態様は、転座した混合系統白血病を罹患している患者を治療する方法であって、そのような治療を必要する白血病患者に、有効量の７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物を投与する工程を含む、方法を提供する。
【００１３】
本発明の第５の態様は、転座した混合系統白血病に基づいた急性骨髄性白血病を罹患している患者を治療する方法であって、そのような治療を必要とする白血病患者に、有効量の７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物を投与する工程を含む、方法を提供する。
【００１４】
本発明の第６の態様は、転座した混合系統白血病に基づいた急性リンパ性白血病を罹患している患者を治療する方法であって、そのような治療を必要とする白血病患者に、有効量の７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物を投与する工程を含む、方法を提供する。
【００１５】
本発明の第７の態様は、非ＭＬＬに基づいた慢性骨髄性増殖性疾患を罹患している患者を治療する方法であって、そのような治療を必要とする白血病患者に、有効量の７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物を投与する工程を含む、方法を提供する。
【００１６】
本発明の第８の態様は、非ＭＬＬに基づいた急性骨髄性白血病；赤白血病；または慢性骨髄性白血病を罹患している患者を治療する方法であって、そのような治療を必要とする白血病患者に、有効量の７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物を投与する工程を含む、方法を提供する。
【００１７】
本発明の第９の態様は、非ＭＬＬに基づいた赤白血病を罹患している患者を治療する方法であって、そのような治療を必要とする白血病患者に、有効量の７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物を投与する工程を含む、方法を提供する。
【００１８】
本発明の第１０の態様は、非ＭＬＬに基づいた慢性骨髄性白血病を罹患している患者を治療する方法であって、そのような治療を必要とする白血病患者に、有効量の７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物を投与する工程を含む、方法を提供する。
【００１９】
本発明の第１１の態様は、非ＭＬＬに基づいた急性骨髄性白血病を罹患している患者を治療する方法であって、そのような治療を必要とする白血病患者に、有効量の７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物を投与する工程を含む、方法を提供する。
【００２０】
本発明の第１２の態様は、非ＭＬＬに基づいた急性リンパ性白血病を罹患している患者を治療する方法であって、そのような治療を必要とする患者に、有効量の７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物を投与する工程を含む、方法を提供する。
【００２１】
本発明の第１３の態様は、非ＭＬＬに基づいたＪＡＫ２（＋）慢性骨髄増殖性疾患を罹患している患者を治療する方法であって、そのような治療を必要とする白血病患者に、有効量の７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物を投与する工程を含む、方法を提供する。
【００２２】
本発明の第１４の態様は、非ＭＬＬに基づいたフィラデルフィア陽性慢性骨髄性白血病を罹患している患者を治療する方法であって、そのような治療を必要とする患者に、有効量の７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物を投与する工程を含む、方法を提供する。
【００２３】
本発明の第１５の態様は、混合系統白血病、転座した混合系統白血病；転座した混合系統白血病に基づいた急性骨髄性白血病；転座した混合系統白血病に基づいた急性リンパ性白血病；非ＭＬＬに基づいた慢性骨髄増殖性疾患；または非ＭＬＬに基づいた急性リンパ性白血病の治療のための医薬を調製するための７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物の使用を提供する。
【００２４】
本発明の第１６の態様は、混合系統白血病、転座した混合系統白血病；転座した混合系統白血病に基づいた急性骨髄性白血病；または転座した混合系統白血病に基づいた急性リンパ性白血病の治療のための医薬を調製するための７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物の使用を提供する。
【００２５】
本発明の第１７の態様は、混合系統白血病の治療のための医薬を調製するための７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物の使用を提供する。
【００２６】
本発明の第１８の態様は、転座した混合系統白血病の治療のための医薬を調製するための７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物の使用を提供する。
【００２７】
本発明の第１９の態様は、転座した混合系統白血病に基づいた急性骨髄性白血病の治療のための医薬を調製するための７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物の使用を提供する。
【００２８】
本発明の第２０の態様は、転座した混合系統白血病に基づいた急性リンパ性白血病の治療のための医薬を調製するための７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物の使用を提供する。
【００２９】
本発明の第２１の態様は、非ＭＬＬに基づいた慢性骨髄増殖性疾患の治療のための医薬を調製するための７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物の使用を提供する。
【００３０】
本発明の第２２の態様は、非ＭＬＬに基づいた急性骨髄性白血病；赤白血病；または慢性骨髄性白血病の治療のための医薬を調製するための７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物の使用を提供する。
【００３１】
本発明の第２３の態様は、非ＭＬＬに基づいた赤白血病の治療のための医薬を調製するための７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物の使用を提供する。
【００３２】
本発明の第２４の態様は、非ＭＬＬに基づいた慢性骨髄性白血病の治療のための医薬を調製するための７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物の使用を提供する。
【００３３】
本発明の第２５の態様は、非ＭＬＬに基づいた急性骨髄性白血病の治療のための医薬を調製するための７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物の使用を提供する。
【００３４】
本発明の第２６の態様は、非ＭＬＬに基づいたＪＡＫ２（＋）慢性骨髄増殖性疾患の治療のための医薬を調製するための７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物の使用を提供する。
【００３５】
本発明の第２７の態様は、非ＭＬＬに基づいたフィラデルフィア陽性慢性骨髄性白血病の治療のための医薬を調製するための７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物の使用を提供する。
【００３６】
本発明の第２８の態様は、非ＭＬＬに基づいた急性リンパ性白血病の治療のための医薬を調製するための７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物の使用を提供する。
【００３７】
本発明の第２９の態様は、混合系統白血病；転座した混合系統白血病；転座した混合系統白血病に基づいた急性骨髄性白血病；転座した混合系統白血病に基づいた急性リンパ性白血病；非ＭＬＬに基づいた慢性骨髄増殖性疾患；または非ＭＬＬに基づいた急性リンパ性白血病の治療に使用するための化合物７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物を提供する。特定の実施形態において、白血病は、転座した混合系統白血病に基づいた急性骨髄性白血病；転座した混合系統白血病に基づいた急性リンパ性白血病；非ＭＬＬに基づいた急性骨髄性白血病、赤白血病、または慢性骨髄性白血病から選択される非ＭＬＬに基づいた慢性骨髄増殖性疾患；非ＭＬＬに基づいた急性骨髄性白血病；あるいは非ＭＬＬに基づいた慢性骨髄性白血病である。
【発明を実施するための形態】
【００３８】
化合物７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニル−カルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンは、国際公開第０３／０７６４４２号パンフレットにおいてＧＳＫ−３βの阻害剤であることが教示されており、その文献において、３−（９−フルオロ−６−（ピペリジン−１−イル）カルボニル）−６，７−ジヒドロ−６Ｈ−［１，４］ジアゼピノ−［６，７，１−ｈｉ］インドール−１−イル）−４−（イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル）−２，５−ジオキソピロール（実施例３６５、１１３ページ）と称されている。上記の２つの命名法は同義語であるとみなされ、各々は以下の構造：
【化１】
0005699129.tif 000002
と同一であるとみなされている。
【００３９】
化合物１は塩基であり、従って、複数の無機酸および有機酸のいずれかと反応して、薬学的に受容可能な酸付加塩を形成し得る。本発明の化合物の薬学的に受容可能な酸付加塩およびそれらを調製するための一般的な方法論は当該技術分野において周知である。例えば、Ｐ．Ｓｔａｈｌら，Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｕｓｅ，（ＶＣＨＡ／Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，２００２）；Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅら，「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌ．６６，Ｎｏ．１，１９７７年１月を参照のこと。好ましい薬学的に受容可能な酸としては、ＨＣｌ、ＨＢｒ、硫酸およびメタンスルホン酸が挙げられる。
【００４０】
化合物１は、例えば、水（水和物および二水和物）、メタノール、およびエタノールとともに溶媒和物を形成する。好ましい溶媒和物はエタノールとともに形成されるものである。
【００４１】
本明細書に使用される場合、用語「患者」とは哺乳動物を意味し；「哺乳動物」とは、高等脊椎動物の哺乳類の分類を意味し；用語「哺乳動物」には、限定されないが、ヒトが含まれる。好ましい患者はヒトである。
【００４２】
本明細書に使用される場合、用語「骨髄」および「骨髄性」は、交換可能に使用される。同様に、「リンパ」および「リンパ性」は、交換可能に使用される。
【００４３】
また本明細書に使用される場合、用語「それ自体」とは、独立した治療有効性を意味する。白血病治療の効果を得るか、または促進するために第２の活性な腫瘍化学療法剤を同時投与する必要はないが、そのような同時投与が所望されてもよい。
【００４４】
癌ゲノムが染色体レベルにおいて異常である程度にかなりのばらつきがある。一部の癌は、単一の特徴的な染色体異常により特徴付けられるが、他の癌は、多数の異常および非常に複雑な核型を有する。上皮派生などの固形腫瘍において、細胞遺伝学的解析により、多くの構造的染色体異常が確認されている。これは、比較的少数が原因として関連し、再発する、造血器悪性腫瘍と対照的である。大部分の再発性染色体異常は、固形腫瘍と対照的である造血器悪性腫瘍に見出される。欠失および増幅は、造血器悪性腫瘍と対照的に、進行性の遺伝的不安定性および複合的な一揃いのゲノム異常の獲得と共に、固形腫瘍により特徴的である。
【００４５】
「非ＭＬＬに基づいた慢性骨髄増殖性疾患」は、造血幹細胞の獲得されたクローン異常であり、真性赤血球増加症、骨髄線維症、本態性血小板血症、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群および急性骨髄性白血病を含み、ならびに赤白血病を含む。幹細胞が、骨髄性細胞、赤血球細胞、および血小板細胞を生じさせるので、定性的および定量的変化が、多能性幹細胞から専用の細胞型の前駆幹細胞までの成熟課程において異常が生じる場所に応じて１つ、２つまたは全てのそれらの細胞株に見られ得る。一部の疾患（例えば、慢性骨髄性白血病）において、特定の特徴的な染色体変化が見られる。慢性骨髄増殖性疾患は、定義された臨床および検査上の特徴を有する特徴的な症候群を生み出す。
【００４６】
非ＭＬＬに基づいた真性赤血球増加症は、全ての３つの造血細胞株、最も顕著には赤血球系細胞の過剰産生を引き起こす。赤血球産生はエリスロポエチンと無関係である。Ｊａｎｕｓキナーゼ２、染色体バンド９ｐ２４、（ＪＡＫ２（＋））、細胞シグナル伝達分子における変異は、発症に関与すると考えられ、診断の基準である。
【００４７】
非ＭＬＬに基づいた骨髄線維症は、骨髄の線維症、脾腫、および涙滴状異型赤血球増加を有する白血赤芽球末梢血像によって特徴付けられる。骨髄線維症に応答して、髄外造血が、肝臓、脾臓およびリンパ節において生じる。ＪＡＫ２（ＪＡＫ２（＋））およびそのシグナル伝達経路の異常は、発症に関与すると考えられる。
【００４８】
非ＭＬＬに基づいた本態性血小板血症は、高い血小板数を生じる骨髄における巨核球の著しい増殖により特徴付けられる。高い頻度のＪＡＫ２変異（ＪＡＫ２（＋））は患者において見られ、発症に関与すると考えられる。
【００４９】
非ＭＬＬに基づいた慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）は、骨髄性細胞の過剰産生により特徴付けられる。これらの骨髄性細胞は分化についての能力を保持し、正常な骨髄機能は初期段階の間保持される。ＣＭＬは、高い頻度で、特定の染色体異常および特定の分子異常により特徴付けられる。フィラデルフィア染色体は、第９番染色体長腕と第２２番染色体長腕との間の相互転座である。２２ｑの大きい部分は９ｑに転座され、９ｑの小さい部分は２２ｑに移動される。転座される９ｑの部分は、ａｂｌ、アベルソンマウス白血病ウイルスの細胞ホモログである癌原遺伝子を含む。ａｂｌ遺伝子は、２２ｑ、切断点クラスター（ｂｃｒ）上の特定の部位で受容される。融合遺伝子ｂｃｒ／ａｂｌは、チロシンキナーゼ活性を有するという点で、ａｂｌ遺伝子の正常な転写産物とは異なる新規タンパク質を産生する。ｂｃｒ／ａｂｌ融合遺伝子が病原の原因となる証拠は、ほとんど常に白血病を生じる遺伝子を導入したトランスジェニックマウスモデルにより与えられる。この転座の存在は、フィラデルフィア陽性と称される。初期のＣＭＬ（慢性期）において、正常な骨髄機能が保持され、白血球が分化し、一部の質的異常にも関わらず、好中球が感染に正常に抵抗する。しかしながら、ＣＭＬは、本質的に不安定であり、治療しないと、加速期、次いで従来の急性骨髄性白血病から形態学的に区別できない急性期または急性転化期まで進行する。この進行は、付加的な遺伝的異常および／または後成的異常の獲得に関連付けられる。
【００５０】
非ＭＬＬに基づいた骨髄異形成症候群は、造血幹細胞の後天性クローン性疾患の群である。それらは、血球減少、過形成骨髄、ならびに多くの形態学的異常および細胞学的異常により特徴付けられる。典型的に、形態学的異常は２つ以上の造血幹細胞に存在する。それらの疾患は、典型的に、特発性であるが、細胞毒性を有する化学療法の後に見られ得る。単一の特定の染色体異常は骨髄異形成に見られないが、第５番染色体長腕ならびに第５番染色体と第７番染色体の欠失に関する頻繁な異常が存在する。増殖性症候群を有する非ＭＬＬに基づいた骨髄異形成は、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）と呼ばれる。
【００５１】
非ＭＬＬに基づいた急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）は、ＭＬＬ白血病誘発に基づかない１つ以上の骨髄性造血前駆細胞の悪性腫瘍である。これらの細胞は、制御されていない形式で増殖し、正常な骨髄要素と置き換わる。ほとんどの場合、はっきりした原因がないが、放射線および一部の毒素が白血病誘発性である。加えて、多くの化学療法剤が白血病を引き起こす場合がある。多くの場合、毒素または化学療法曝露が、第５染色体と第７染色体または染色体１１ｑ２３における異常と関連付けられた後、白血病が見られる。最も一般的な細胞遺伝学的異常は、原因として、非ＭＬＬに基づいたＡＭＬが、ＡＭＬ１／ＥＴＯ融合遺伝子を産出するｔ（８；２１）（ｑ２２；ｑ２２）；ＣＢＦβ／ＭＹＨ１１融合遺伝子を産出するＩｎｖ（１６）（ｐ１３ｑ２２）；種々のＲＡＲα含有融合遺伝子を産出するｔ（１６；１６）（ｐ１３；ｑ２２）、ｔ（１５；１７）（ｑ２１；ｑ１１）、ｔ（１１；１７）（ｑ２３；ｑ１１）、ｔ（５；１７）（ｑ３５；ｑ１２−２１）、ｔ（１１；１７）（ｑ１３；ｑ２１）、およびｔ（１７；１７）（ｑ１１；ｑ２１）；５／５ｑ−；−７／７ｑ−；１７ｐ  ａｂｎまたはｉ（１７ｑ）；ｄｅｌ（２０ｑ）；ｄｍｉｎｓ  ｈｓｒｓ；＋１３；Ｒｉｂｏｐｈｏｒｉｎ／ＥＶＩ１融合遺伝子を産出するＩｎｖ（３）（ｑ２１ｑ２６）、およびｔ（３；３）（ｑ２１；ｑ２６）であることが関係している。アウエル小体、細胞質に含まれる好酸球針状は、特徴的な非ＭＬＬに基づいた急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である。白血病細胞は、それらが由来するか、または基づいている系統の性質を保持する。ＡＭＬ細胞は、通常、ＣＤ１３またはＣＤ３３などの骨髄抗原を発現する。
【００５２】
非ＭＬＬに基づいた急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）は、ＭＬＬ白血病誘発に基づかないリンパ性造血前駆細胞の悪性腫瘍である。上記のように、白血病細胞は、それらが由来するか、または基づいている系統の性質を保持する。Ｂ系統の非ＭＬＬに基づいたＡＬＬ細胞は、全てのＢ細胞に共通のＣＤ１９などのリンパ性抗原を発現し、ほとんどの場合、共通のＡＬＬ抗原としても知られているＣＤ１０も発現する。Ｔ系統の非ＭＬＬに基づいたＡＬＬ細胞は、通常、ＣＤ３、４、または８などの成熟Ｔ細胞マーカーを発現しないが、ＣＤ２、５、および７の一部の組み合わせを発現し、表面免疫グロブリンを発現しない。非ＭＬＬに基づいたＡＬＬ細胞は、頻繁に、末端デオキシヌクレオチド転移酵素（ＴｄＴ）を発現する。最も頻度の高い再発性遺伝子サブタイプとしては、ＴＥＬ−ＡＭＬ１；ＢＣＲ−ＡＢＬ；Ｅ２Ａ／ＰＢＸ１；ＩｇＨ／ＭＹＣ；ＴＣＲ  ａｂ（７ｑ３５）またはＴＣＲ  ｇｄ（１４ｑ１１）ｌｏｃｉに関する多数の転座；ｌｑ欠失；ＳＩＬ−ＳＣＬおよびＮＯＴＣＨ変異が挙げられる。
【００５３】
非ＭＬＬに基づいたＡＭＬは、いくつかの方法で特徴付けられている。ＦＡＢ（Ｆｒｅｎｃｈ，Ａｍｅｒｉｃａｎ，Ｂｒｉｔｉｓｈ）分類は、骨髄形態および以下のような組織化学に基づく：急性未分化白血病（Ｍ０）、急性骨髄芽球性白血病（Ｍ１）、分化状態の急性骨髄芽球性白血病（Ｍ２）、急性前骨髄球性白血病（ＡＰＬ）（Ｍ３）、急性骨髄単球性白血病（Ｍ４）、急性単芽球性白血病（Ｍ５）、赤白血病（Ｍ６）、および巨核芽球性白血病（Ｍ７）。世界保健機構は、細胞遺伝学、分子、および免疫表現型の情報を組み込んでいる白血病および他の血液悪性腫瘍の分類を提供している（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ  ｆｏｒ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，第３版，Ｐｅｒｃｙら，２０００）。
【００５４】
非ＭＬＬに基づいたＡＬＬは、以下：一般的なＢ細胞、およびＴ細胞のような免疫学的表現型によって分類され得る。非ＭＬＬに基づいたＡＭＬと同様に、特定の毒素、放射線および化学療法剤が、非ＭＬＬに基づいたＡＬＬを引き起こし得る。
【００５５】
混合系統白血病（骨髄性リンパ性白血病；ＭＬＬ）は、非ＭＬＬに基づいたＡＭＬおよび非ＭＬＬに基づいたＡＬＬの両方の特徴を有する。ＭＬＬは、非ＭＬＬに基づいたＡＬＬおよび非ＭＬＬに基づいたＡＭＬとは異なった遺伝子発現プロファイルを特定する（Ａｒｍｓｔｒｏｎｇら，Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，３０，４１−４７（２００２））。ＭＬＬは、バンドｑ２３（ＭＬＬ遺伝子）にて第１１番染色体における再発性染色体異常、転座され得るか、または１１ｑ２３が内部複製され得る、異なる染色体領域由来の遺伝子を有するバンドｑ２３にて第１１番染色体長腕（ｑ）に関する染色体融合から生じ得る。ＭＬＬ融合を発現する白血病は、高い頻度で悪性であり、化学療法に対して抵抗性がある。これらの融合は、再配列されるＭＬＬ遺伝子を生じるように転座させ得る。ＭＬＬの転座した遺伝子融合は、転座したＭＬＬに基づいたＡＭＬまたは転座したＭＬＬに基づいたＡＬＬのいずれかを引き起こし得る。例えば、ＭＬＬ−ＡＦ９の転座した遺伝子融合は、限定されないが、頻繁に、ＡＭＬ（転座したＭＬＬに基づいたＡＭＬ）を引き起こす。他の転座したＭＬＬに基づいたＡＭＬに関連するＭＬＬの転座した遺伝子融合は、ＭＬＬ−ＡＦ１０およびＭＬＬ−ＥＬＬを含む。転座したＭＬＬに基づいたＡＬＬに関連する転座したＭＬＬ遺伝子融合はＭＬＬ−ＡＦ４である。
【００５６】
ヒトの癌における細胞遺伝学的異常の広範な目録が蓄積され、維持され、定期的にオンラインで更新されている（米国国立癌研究所（ＮＣＩ）癌ゲノム解析プロジェクト（ＣＧＡＰ）の癌における染色体異常のミッテルマンデータベースのウェブサイト：ｈｔｔｐ：／／ｃｇａｐ．ｎｃｉ．ｎｉｈ．ｇｏｖを参照のこと）。そのデータベースは、本発明の造血器悪性腫瘍についての染色体異常を含む。ウェルカムトラストサンガーインスティチュート癌ゲノムプロジェクト（Ｔｈｅ  Ｗｅｌｌｃｏｍｅ  Ｔｒｕｓｔ  Ｓｎａｇｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｐｒｏｊｅｃｔ）は、原因として腫瘍形成が関係している、全てのヒト遺伝子の詳細なオンラインの「癌遺伝子調査」（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｓａｎｇｅｒ．ａｃ．ｕｋ／ｇｅｎｅｔｉｃｓ／ＣＧＰ／Ｃｅｎｓｕｓを参照のこと）、およびヒトの癌における体細胞変異のＣＯＳＭＩＣ（癌における体細胞変異の目録）データベース（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｓａｎｇｅｒ．ａｃ．ｕｋ／ｇｅｎｅｔｉｃｓ／ＣＧＰ／ｃｏｓｍｉｃを参照のこと）を維持している。原因として白血病が関係している細胞遺伝学的変化に関する豊富な情報を含むさらなるソースは、腫瘍学および血液学における遺伝学および細胞遺伝学のアトラス（ｈｔｔｐ：／／ａｔｌａｓｇｅｎｅｔｉｃｓｏｎｃｏｌｏｇｙ．ｏｒｇ／／Ａｎｏｍａｌｉｅｓ／Ａｎｏｍｌｉｓｔｅ．ｈｔｍｌ＃ＭＤＳ）である。それらのデータベースはまた、本発明の造血器悪性腫瘍についての染色体異常を含む。癌遺伝子調査データベースの代替のソースは、Ｈｏｌｌａｎｄ−Ｆｒｅｉ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，第７版，（２００６），表８−１（骨髄疾患における最も高い頻度の再発性染色体異常について表８−４、ならびにＢおよびＴ細胞全ての最も高い頻度の再発性遺伝子サブタイプについて表８−５も参照のこと）であり、ＣＯＳＭＩＣデータベースは、Ｆｏｒｂｅｓら，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，２００６，９４（２），３１８−２２である。
【００５７】
完全な血球数、骨髄穿刺および生検、免疫表現型検査ならびに他の検査による造血器悪性腫瘍の診断は公知であり、慣例的に使用されている。高分割染色体バンドおよび進歩した染色体画像化技術に加えて、造血器悪性腫瘍の擬似患者における染色体異常は、蛍光インサイチュハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）、染色体分析、分光による染色体分析（ＳＫＹ）、多重ＦＩＳＨ（Ｍ−ＦＩＳＨ）、比較ゲノムハイブリダイゼーション（ＣＧＨ）、単一ヌクレオチド多型アレイ（ＳＮＰ  Ｃｈｉｐｓ）ならびに当業者によって知られており、使用されている他の診断および分析検査などの細胞遺伝学的解析により決定され得る。
【００５８】
上述の遺伝的染色体異常以外に、白血病の各々はまた、ＤＮＡメチル化、ゲノムインプリンティングを含むゲノムの後成的修飾、およびアセチル化、メチル化、またはリン酸化によるヒストン修飾を含み得る。後成的修飾は、悪性腫瘍において重要な役割を果たし得る。
【００５９】
用語「有効量の７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニルカルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンまたはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物」は、標的白血病細胞を破壊するか、または患者における白血病の進行を遅延もしくは停止するかのいずれかに必要な化合物１またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物の投与量を意味するものである。化合物１またはその薬学的に受容可能なもしくは溶媒和物の予測される投与量は、５〜６００ｍｇ／患者／日の範囲である。好ましい投与量は、５０〜４００ｍｇ／患者／日の範囲であると予測される。最も好ましい投与量は、１００〜４００ｍｇ／患者／日の範囲であると予測される。患者を治療するのに必要な正確な投与量は、疾患の段階および重症度ならびに個々の患者の特定の必要性および反応を考慮して医師により決定される。
【００６０】
以下のインビトロおよびインビボでの研究は、種々の特定の白血病細胞株に対する化合物１のそれ自体の治療活性および改善された効果を実証する。
【実施例】
【００６１】
インビトロでの有効性の実施例
アポトーシスまたはプログラム細胞死は、生化学反応のセットにより特徴付けられ、そのうちの１つはカスパーゼの誘導である。活性化カスパーゼは、細胞恒常性および修復を担う重要な酵素を無効にする切断事象のカスケードに関与するプロテアーゼである。カスパーゼ３および７は、アポトーシスにおいて重要なエフェクターの役割を果たし、蛍光生化学アッセイによって検出および測定され得る。細胞におけるカスパーゼ−３／７活性の増加は、アポトーシス活性に直接相関する（Ｄ．Ｗ．Ｎｉｃｈｏｌｓｏｎら，Ｎａｔｕｒｅ，３７６，３７−４３（１９９５））。Ｐｒｏｍｅｇａ  Ａｐｏ−ＯＮＥホモジニアスカスパーゼ−３／７アッセイキットを使用する（カタログ番号Ｇ７７９１）。３０ｍＭのＨＥＰＥＳ（Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−Ｎ’−（２−エタンスルホン酸）ｐＨ７．４、１５０ｍＭのＮａＣｌ、５０ｍＭのＫＣｌ、１０ｍＭのＭｇＣｌ２、０．４ｍＭのＥＧＴＡ（エチレングリコール四酢酸）、０．５％のＮｏｎｉｄｅｔ  Ｐ４０（オクチルフェノールポリ（エチレングリコールエーテル））、０．１％のＣＨＡＰＳ（３−［（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−１−プロパンスルホネート水和物および１０％のスクロースからなるアッセイバッファーは、培養細胞およびプロフルオレセントローダミン１１０に結合された、カスパーゼ３／７基質、Ｚ−ＤＥＶＤ（Ｚ−Ａｓｐ（ＯＭｅ）−Ｇｌｕ（ＯＭｅ）−Ｖａｌ−Ａｓｐ（ＯＭｅ））を溶解／透過する。バッファー−基質混合物が試験サンプルに加えられると、カスパーゼ３／７活性によるＤＥＶＤペプチドの切断およびその後の除去により、４９０ｎｍにおける励起により検出される、ローダミン１１０離脱基の強い蛍光が得られる。蛍光産物の量は、サンプル中のカスパーゼ３／７切断活性の量に比例する。
【００６２】
試験化合物のアポトーシス効果を測定するために、腫瘍細胞を、９６ウェルプレートにおいて１×１０４個の細胞／ウェルにて播種し、５％ＣＯ２を用いて３７℃にて一晩インキュベートする。腫瘍細胞を、未処理／陰性対照ウェルを含む、三連で所望の濃度にて試験化合物で処理する。アッセイプレートを４８時間、再びインキュベートする。インキュベーション時間の終わりに、アッセイバッファーと基質の混合物を各サンプルウェルに加える。各ウェルにおける蛍光を、４８０＋／−２０ｎｍの励起波長および５３０＋／−２５ｎｍの発光波長にて測定する。処理した細胞におけるカスパーゼ活性の増加％を、未処理の対照に対して算出する。
【００６３】
細胞生存率を、代謝的に活性な細胞におけるＡＴＰの定量に基づいて生存細胞数を算出する方法である、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）発光細胞生存アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ，カタログ番号Ｇ７５７０）により決定する。細胞を溶解した後、基質ルシフェリンの一原子酸素添加が、Ｍｇ２＋、ＡＴＰおよび分子酸素の存在下で酵素ルシフェラーゼにより触媒され、アッセイウェルにおける生存細胞の数に比例する発光信号の生成を生じる。
【００６４】
化合物での処理後の細胞の生存率を測定するために、腫瘍細胞を、９６ウェルプレートにおいて２×１０４／ウェルにて播種し、５％ＣＯ２を用いて３７℃にて一晩インキュベートする。腫瘍細胞を、未処理／陰性対照細胞を含む、三連で所望の濃度にて試験化合物で処理する。アッセイプレートを４８時間、再びインキュベートする。インキュベーション時間の終わりに、溶解アッセイバッファーと基質の混合物を各サンプルウェルに加える。各ウェルにおける発光を、マイクロタイタープレート照度計を用いて測定する。
【００６５】
ＭＶ４；１１は、ＭＬＬおよびＡＦ４遺伝子からなる融合転写産物の存在によって、ならびにＦＬＴ−３遺伝子の膜近傍領域における遺伝子内縦列重複の存在によって特徴付けられるヒト急性骨髄性白血病株である。ＲＳ４；１１は、ＭＬＬおよびＡＦ４遺伝子からなる融合転写産物の存在によって特徴付けられるヒト急性リンパ性白血病細胞株である。ＲＥＨは、ＴＥＬおよびＡＭＬ１遺伝子からなる融合転写産物の存在により特徴付けられるヒト急性リンパ性白血病（非Ｔ；非Ｂ）細胞株である。Ｋａｓｕｍｉ  １は、ＡＭＬ１およびＥＴＯ遺伝子からなる融合転写産物の存在により特徴付けられるヒト急性骨髄性白血病株である。Ｋ５６２は、ＢｃｒおよびＡｂｌ遺伝子からなる融合転写産物の存在により特徴付けられるヒト慢性骨髄性白血病細胞株である。ＨＥＬ  ９２．１．７は、ＪＡＫ２遺伝子におけるＶ６１７Ｆ変異の存在により特徴付けられるヒト赤白血病細胞株である。Ｊｕｒｋａｔｔは、ヒト急性Ｔ細胞白血病細胞株である。細胞株の各々は、アメリカンタイプカルチャーコレクション（ＡＴＣＣ）から得られる。以下の表において、用語「化合物１」または「Ｃｍｐｄ１」は、７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニル−カルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンを意味する。ＧＳＫ−３阻害剤［（３−（２，４−ジクロロフェニル）−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（ＳＢ２１６７６３）、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈは、一部の実験において陽性比較対照として使用される。化合物ＧＳＫ−３阻害剤ＩＸ、（２’Ｚ，３’Ｅ）−６−ブロモインジルビン−３’−オキシム（「ＧＳＫ３−ＩＸ」）カルビオケムは、一部の実験において陽性対照として使用される。ＳＢ２１６７６３およびＧＳＫ３−ＩＸの両方は、証拠となる陽性の結果として、Ｗａｎｇら，Ｎａｔｕｒｅ，４５５，１２０５−１２１０（２００８）論文に記載されている。表１のデータは、他に記載されない限り、未処理の対照に対するカスパーゼ３活性の増加％として示す。
【００６６】
【表１】
0005699129.tif 000003
【００６７】
表１のデータは、試験された全ての細胞株に対する、および特に非ＭＬＬに基づいたＡＭＬ、ＣＭＬ、赤白血病およびＡＬＬに対する化合物１によるそれ自体の活性を証明する。そのデータはまた、試験された全ての細胞株に対するＳＢ２１６７６３より化合物１の改善された効果を証明する。
【００６８】
表２のデータは、化合物１またはＳＢ２１６７６３での処理後の５０％（ＥＣ５０）の細胞生存率の減少に必要とされる算出濃度として表す。
【００６９】
【表２】
0005699129.tif 000004
【００７０】
表２のデータは、試験された全ての細胞株に対する、および特に非ＭＬＬに基づいたＡＭＬ、ＣＭＬ、赤白血病およびＡＬＬに対する化合物１によるそれ自体の活性のさらなる証明を与える。そのデータはまた、試験された全ての細胞株に対するＳＢ２１６７６３およびＧＳＫ３−ＩＸより化合物１の改善された効果を証明する。
【００７１】
インビボでの有効性の実験
培養した細胞（ＡＴＣＣ）を、ベンダーから受け取った後、動物施設において１週間順応された雌のＣＤ−１  ｎｕ／ｎｕ株マウスのひ腹に皮下移植する。マウスを、１群当たり１０匹のマウスの群に無作為化し、平均腫瘍体積が約１００ｍｍ３に到達した場合に処置を開始する。化合物１をＩＶ投与する。腫瘍を、増殖曲線をプロットするために電気カリパスにより１週間につき２回測定する。動物をまた、体重および生存の変動についてモニターする。
【００７２】
３サイクルの５ｍｇ／ｋｇの化合物１（ＩＶ注射）を動物に与え、各サイクルを７日空ける。また、動物に、０．１ｍｇ／ｋｇおよび１ｍｇ／ｋｇにて６サイクルの化合物１（ＩＶ注射）を与え、各サイクルを３．５日空ける。３０ｍｇ／ｋｇの代謝拮抗物質アラビノシルシトシン（ＩＰ注射）を、比較対照として１４日間連続して毎日動物に与える。各処置群についてのｐ値を、Ｃａｐｔｉｓｏｌビヒクル対照群との比較により決定する。
【００７３】
【表３】
0005699129.tif 000005
【００７４】
表３のデータは、インビトロでのデータにおいて化合物１が、代謝拮抗物質アラビノシルシトシン（ＩＰ注射）と比較してこの試験において、それ自体活性であり、改善された効果を実証することを証明し、インビボにおいても同様に見られる。
【００７５】
７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニル−カルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンならびにその薬学的に受容可能な塩および溶媒和物の合成は、国際公開第２００９／００６０４３号に実質的に記載されている。以下に記載するように、合成は、当業者に公知の一般的な有機化学技術による。
【００７６】
調製例１
２−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−アセトアミド
４，４−ジメトキシ−ブト−２−エン酸エチルエステル
炭酸カリウム（１６．５ｇ，１２０ｍｍｏｌ）を、２１０ｍＬのテトラヒドロフランおよび３０ｍＬの水中のジメトキシアセトアルデヒド（水中に６０％ｗｔ）（１５ｍＬ，１００ｍｍｏｌ）およびホスホノ酢酸トリエチル（２０ｍＬ，１００ｍｍｏｌ）の溶液に加える。混合物を室温で４時間攪拌する。反応混合物をジエチルエーテル（２００ｍＬ）に注ぎ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して、黄色の油状物として所望の化合物（１５．８ｇ，９０％）を得る。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ６．７７（ｄｄ，Ｊ＝１５．９，４．０Ｈｚ，１Ｈ），６．１３（ｄｄ，Ｊ＝１５．９，１．４Ｈｚ，１Ｈ），４．９５（ｄｄ，Ｊ＝４．０，１．４Ｈｚ，１Ｈ），４．２２（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），３．３４（ｓ，６Ｈ），１．３０（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）。
【００７７】
イミダゾ［１，２−α］ピリジン−３−イル−酢酸エチルエステル
アセトニトリル（２４０ｍＬ）および水（１５ｍＬ）中の４，４−ジメトキシ−ブト−２−エン酸エチルエステル（４３．５ｇ，２５０ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸（４．７６ｇ，２５ｍｍｏｌ）の混合物を、還流にて２時間加熱する。反応混合物を室温まで冷し、２−アミノピリジン（１８．８ｇ，２００ｍｍｏｌ）を加える。混合物を還流にて１６時間加熱し、次いで室温まで冷やす。反応混合物を酢酸エチル（１２００ｍＬ）で希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（６００ｍＬ×３）および飽和塩化ナトリウム水溶液（６００ｍＬ×２）で連続して洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して、茶色の油状物として所望の化合物（３０ｇ，７３％）を得る。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ８．０６（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ），７．６３（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ），７．５６（ｓ，１Ｈ），７．２０（ｄｄ，Ｊ＝８．９，６．８Ｈｚ，１Ｈ），６．８４（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，１Ｈ），４．１７（ｑ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ），３．９３（ｓ，２Ｈ），１．２５（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３Ｈ）。
【００７８】
アミド生成
ＮＨ３／ＭｅＯＨ（７Ｎの溶液、２５０ｍＬ）中のイミダゾ［１，２−α］ピリジン−３−イル酢酸エチルエステル（３０ｇ，１４７ｍｍｏｌ）の溶液を、８５℃にて１５時間、密閉チューブ中で加熱する。反応混合物を室温まで冷し、減圧下で濃縮する。残留物をジクロロメタンで処理し、超音波処理し、得られた沈殿物を濾過して、黄色の固体として所望の化合物（８．９ｇ，３５％）を得る。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ８．３０（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ），７．６２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），７．５４（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），７．４２（ｓ，１Ｈ），７．２１（ｄｄ，Ｊ＝７．７，６．７Ｈｚ，１Ｈ），７．１８（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），６．９１（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），３．８１（ｓ，２Ｈ）。
【００７９】
調製例２
９−フルオロ−７−メトキシオキサリル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−［１，４］ジアゼピノ［６，７，１−ｈｉ］インドール−２−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
２−ジブトキシメチル−４−フルオロ−１−ニトロ−ベンゼン
トルエン（２００ｍＬ）中の５−フルオロ−２−ニトロ−ベンズアルデヒド（１０ｇ，５９．１７ｍｍｏｌ）、ブタノール（２０ｍＬ，２１９ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸（６００ｍｇ，３．１５ｍｍｏｌ）の溶液を、ディーンスタークトラップを備えたフラスコ中で、還流にて２時間加熱する。反応混合物を室温まで冷し、酢酸エチル（４００ｍＬ）で希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（３００ｍＬ×３）および飽和塩化ナトリウム水溶液（３００ｍＬ×２）で連続して洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して、淡黄色の油状物として所望の化合物（１７ｇ，９６％）を得る。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．９１（ｄｄ，Ｊ＝８．９，４．９Ｈｚ，１Ｈ），７．５３（ｄｄ，Ｊ＝９．３，２．９Ｈｚ，１Ｈ），７．１５−７．０９（ｍ，１Ｈ），６．０４（ｓ，１Ｈ），３．６７−３．５０（ｍ，４Ｈ），１．６３−１．５４（ｍ，４Ｈ），１．４４−１．３２（ｍ，４Ｈ），０．９２（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，６Ｈ）。
【００８０】
５−フルオロ−１Ｈ−インドール−７−カルバルデヒド
ビニルマグネシウムブロミド（テトラヒドロフラン中に１Ｍ，８５．２ｍＬ，８５．２ｍｍｏｌ）を、−７８℃にて、テトラヒドロフラン（２５０ｍＬ）中の２−ジブトキシメチル−４−フルオロ−１−ニトロ−ベンゼン（８．５ｇ，２８．４ｍｍｏｌ）の溶液に滴下して加える。反応混合物を、３０分間、−４５℃〜−５０℃まで加温し、−７８℃に冷却し、ビニルマグネシウムブロミド（テトラヒドロフラン中に１Ｍ，８５．２ｍＬ，８５．２ｍｍｏｌ）を滴下して加える。反応混合物を、２０分間、−４５℃〜−５０℃まで加温し、次いで飽和塩化アンモニウム水溶液（３００ｍＬ）を加える。混合物を室温まで加温し、ジエチルエーテル（２００ｍＬ×２）で抽出する。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液（４００ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮する。残留物をテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）に溶解し、０．５ＮのＨＣｌ（１０ｍＬ）を加え、２０分間攪拌する。混合物をジエチルエーテル（２００ｍＬ）で希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２００ｍＬ×３）および飽和塩化ナトリウム水溶液（２００ｍＬ×２）で連続して洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮する。残留物を、ヘキサン中の５％〜１０％の酢酸エチルで溶出する、シリカゲルクラマトグラフィーに供して、淡黄色の固体として所望の化合物（２．６ｇ，５６％）を得る。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１０．０７（ｓ，１Ｈ），１０．０５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），７．６２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．４２−７．３９（ｍ，２Ｈ），６．６０（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）。
【００８１】
２−［（５−フルオロ−１Ｈ−インドール−７−イルメチル）−アミノ］−エタノール
２−アミノエタノール（１．９３ｍＬ，３２．０ｍｍｏｌ）、続いて酢酸（２．０１ｍＬ，４８．０ｍｍｏｌ）を、１，２−ジクロロエタン（４０ｍＬ）中の５−フルオロ−１Ｈ−インドール−７−カルバルデヒド（２．６ｇ，１６．０ｍｍｏｌ）の溶液に加える。室温にて１５分間攪拌する。トリアセトキシボロヒドリド（４．０７ｇ，１９．２ｍｍｏｌ）を少しずつ加える。反応混合物を、室温にて３時間攪拌する。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）、続いて１ＮのＮａＯＨを加えて、ｐＨを約９にする。酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出する。有機相を、飽和塩化ナトリウム水溶液（２００ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して、淡黄色の固体として所望の化合物（３．２ｇ，９６％）を得る。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ９．７１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），７．２４（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），７．１９（ｄｄ，Ｊ＝９．５，２．３Ｈｚ，１Ｈ），６．７９（ｄｄ，Ｊ＝９．８，２．２Ｈｚ，１Ｈ），６．４９（ｄｄ，Ｊ＝３．１，２．２Ｈｚ，１Ｈ），４．１５（ｓ，２Ｈ），３．７７（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ），２．８４（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ）。
【００８２】
（５−フルオロ−１Ｈ−インドール−７−イルメチル）−（２−ヒドロキシ−エチル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
テトラヒドロフラン（４０ｍＬ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（３．６３ｇ，１６．６５ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃にて、テトラヒドロフラン（６０ｍＬ）中の２−［（５−フルオロ−１Ｈ−インドール−７−イルメチル）−アミノ］−エタノール（３．１５ｇ，１５．１４ｍｍｏｌ）の溶液に滴下して加える。反応混合物を、室温にて２時間攪拌する。酢酸エチル（２００ｍＬ）を加え、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して、淡黄色の油状物として所望の化合物（４．９ｇ，＞１００％）を得る。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１０．１７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），７．２７−７．２３（ｍ，２Ｈ），６．８１（ｄｄ，Ｊ＝９．４，２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．５０（ｄｄ，Ｊ＝２．９，２．２Ｈｚ，１Ｈ），４．６７（ｓ，２Ｈ），３．７２（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），３．３３（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，２Ｈ），１．５０（ｓ，９Ｈ）。
【００８３】
メタンスルホン酸２−［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−（５−フルオロ−１Ｈ−インドール−７−イルメチル）−アミノ］−エチルエステル
トリエチルアミン（４．６４ｍＬ，３３．３ｍｍｏｌ）、続いてメタンスルホニルクロリド（１．２９ｍＬ，１６．６５ｍｍｏｌ）を、０℃にて、ジクロロメタン（７０ｍＬ）中の（５−フルオロ−１Ｈ−インドール−７−イルメチル）−（２−ヒドロキシエチル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（４．９ｇ，推定１５．１４ｍｍｏｌ）の溶液に加える。反応混合物を０℃にて３０分間攪拌する。酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２００ｍＬ×３）および飽和塩化ナトリウム水溶液（２００ｍＬ×２）で連続して洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して、黄褐色の油状物として所望の化合物（５．９ｇ，＞１００％）を得る。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１０．０７（ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），７．２８−７．２（ｍ，２Ｈ），６．８３（ｄｄ，Ｊ＝９．３，２．３Ｈｚ，１Ｈ），６．５０（ｄｄ，Ｊ＝２．９，２．２Ｈｚ，１Ｈ），４．６７（ｓ，２Ｈ），４．１７（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ），３．５１（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），２．７９（ｓ，３Ｈ），１．５１（ｓ，９Ｈ）。
【００８４】
９−フルオロ−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−［１，４］ジアゼピノ［６，７，１−ｈｉ］インドール−２−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
水素化ナトリウム（６０％）（６６６ｍｇ，１６．６５ｍｍｏｌ）を、０℃にて、ジメチルホルムアミド（４０ｍＬ）中のメタンスルホン酸２−［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−（５−フルオロ−１Ｈ−インドール−７−イルメチル）−アミノ］−エチルエステル（５．９ｇ，推定１５．１４ｍｍｏｌ）の溶液に一度に加える。反応混合物を０℃にて１０分間、次いで室温にて３０分間、攪拌する。水（２００ｍＬ）をゆっくりと加える。濾過し、得られた黄色の沈殿物を乾燥させて、所望の化合物（４．１４ｇ，９４％）を得る。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．１５（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ），７．０７（ｓ，１Ｈ），６．７８（ｄｄ，Ｊ＝１４．７，８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．４９（ｄ，Ｊ＝３．１Ｈｚ，１Ｈ），４．８１（ｓ，１Ｈ），４．７６（ｓ，１Ｈ），４．２５−４．２３（ｍ，２Ｈ），３．９４−３．８３（ｍ，２Ｈ），１．４９（ｓ，９Ｈ）。
【００８５】
９−フルオロ−７−メトキシオキサリル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−［１，４］ジアゼピノ［６，７，１−ｈｉ］インドール−２−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
塩化オキサリル（１．６２ｍＬ，１８．５６ｍｍｏｌ）を、−５℃にて、メチルｔｅｒｔ−ブチルエステル（１００ｍＬ）中の９−フルオロ−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−［１，４］ジアゼピノ［６，７，１−ｈｉ］インドール−２−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（４．１４ｇ，１４．２８ｍｍｏｌ）の溶液に加える。反応混合物を１．５時間にわたって室温まで加温し、次いで−５℃まで冷却する。メタノール（１１．６ｍＬ，２８６ｍｍｏｌ）を加え、−５℃にて３０分間攪拌する。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出する。合わせた有機相を、飽和炭酸水素ナトリウム（２００ｍＬ×３）および飽和塩化ナトリウム水溶液（２００ｍＬ×２）で連続して洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、次いで減圧下で濃縮して、黄色の固体として標題の化合物（５．１３ｇ，９３％）を得る。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ８．３８（ｓ，１Ｈ），８．０４（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），６．８９（ｄｄ，Ｊ＝１９．７，８．６Ｈｚ，１Ｈ），４．９０（ｓ，１Ｈ），４．８１（ｓ，１Ｈ），４．４５−４．４３（ｍ，２Ｈ），４．０５−３．９３（ｍ，２Ｈ），３．９５（ｓ，３Ｈ），１．４２（ｓ，９Ｈ）。
【００８６】
調製例３
３−（９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−［１，４］ジアゼピノ［６，７，１−ｈｉ］インドール−７−イル）−４−イミダゾール［１，２−ａ］−ピリジン−３−イル−ピロール−２，５−ジオン二塩酸塩
カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（４．５８ｇ，４０．９２ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（８０ｍＬ）中の９−フルオロ−７−メトキシオキサリル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−［１，４］ジアゼピノ［６，７，１−ｈｉ］インドール−２−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（５．１３ｇ，１３．６４ｍｍｏｌ）および２−イミダゾール［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−アセトアミド（２．３９ｇ，１３．６４ｍｏｌ）の溶液に一度に加える。反応混合物を室温にて３時間攪拌する。飽和塩化アンモニウム水溶液（２００ｍＬ）を加え、酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出する。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液（２００ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮する。残留物をジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解し、ジオキサン（４０ｍＬ）中の４ＮのＨＣｌを滴下して加え、次いで室温にて４時間攪拌する。得られた沈殿物を濾過し、ジエチルエーテルで洗浄して、赤色の固体として標題の化合物（４．４ｇ，６８％）を得る。
ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝４０２［Ｃ２２Ｈ１６ＦＮ５Ｏ２＋Ｈ］＋。
【００８７】
実施例１
７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニル−カルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピン
ピペラジン−１−カルボニルクロリド（０．５ｍＬ，４．０ｍｍｏｌ）を、メタノール（８０ｍＬ）中の３−（９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−［１，４］ジアゼピノ［６，７，１−ｈｉ］インドール−７−イル）−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−ピロール−２，５−ジオン（１．４２ｇ，３．０ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（２．０９ｍＬ，１５．０ｍｍｏｌ）の溶液に加える。室温で一晩攪拌する。トリエチルアミン（１．０４ｍＬ，７．５ｍｍｏｌ）およびピペリジン−１−カルボニルクロリド（０．５ｍＬ，４．０ｍｍｏｌ）を加える。室温にて５時間攪拌する。酢酸エチル（５００ｍＬ）を加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（３００ｍＬ×３）および飽和塩化ナトリウム水溶液（２００ｍＬ）で連続して洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮する。残留物を、酢酸エチル中の０％〜３％のメタノールで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーに供して、赤色の固体として標題の化合物（７００ｍｇ，４５％）を得る。
ｍ．ｐ．＝１８８−１９０°Ｃ。
ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝５１３［Ｃ２８Ｈ２５ＦＮ６Ｏ３＋Ｈ］＋。
【００８８】
実施例２
７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニル−カルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンメタンスルホネート
メタノール（２．５ｍＬ）中の７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニル−カルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピン（５００ｍｇ，０．９７６ｍｍｏｌ）のスラリーを、６４℃まで加熱する。メタノール（１．０ｍＬ）中のメタンスルホン酸（６４μＬ，０．９７６ｍｍｏｌ）の溶液を、５分にわたって加える。混合物を６４℃にて１５分間攪拌し、次いで３０分にわたってイソプロパノール（５．０ｍＬ）を加える。得られたスラリーを１時間にわたって室温まで冷やし、次いで室温にて４時間攪拌する。スラリーを濾過し、イソプロパノールで洗浄し、４２℃にて減圧下で乾燥させて、橙色の油状物として標題の化合物を得る（４７８ｍｇ，８８．５％（出発物質において９．９％の揮発性物質および生成物において１．０％の揮発性物質に調整した）。
ｍ．ｐ．＝２８２．３℃（ＤＳＣ）
【００８９】
実施例３
７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニル−カルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンエタノレート
エタノール（３０ｍＬ）中の７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニル−カルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピン（２．０ｇ，３．９ｍｍｏｌ）のスラリーを、７０℃まで加熱する。５ＭのＨＣｌ（０．７３ｍＬ）を一度に全て加える。混合物を７０℃にて１０分間攪拌し、次いで１ＮのＮａＯＨ（３．６３ｍＬ）を３分にわたって加える。混合物を７０℃にて２時間攪拌する。得られたスラリーを、１時間にわたって室温まで冷やし、次いで室温にて３．５時間攪拌する。スラリーを濾過し、エタノールで洗浄し、４２℃にて減圧下で乾燥させて、橙色の油状物として標題の化合物を得る（１．８４ｇ，９２％（出発物質において７．５％の揮発性物質および生成物において７．７％の揮発性物質に調整した））。
ｍ．ｐ．＝１７９．４℃（ＤＳＣ）
粉末Ｘ線主要ピーク（°２θ、強度）：８．９８９°，１００％；９．７８７°，４８．７％；１２．８４６°，２０．０％；および７．４４４°，１７．５％。
【００９０】
実施例４
７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニル−カルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピン水和物Ｉ
水（１０ｍＬ）中の７−（２，５−ジヒロド−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニル−カルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンエタノレート（１９８．５ｍｇ）のスラリーを、２．７５時間、８０℃まで加熱する。３．１１ｍＬの１ＮのＨＣｌを加える。温度が８０℃に戻ると、迅速に３．１１ｍＬの１ＮのＮａＯＨを加える。温度を約１５分間８０℃に維持し、次いで懸濁液を室温まで冷やす。ワットマン＃１紙を通す真空濾過を用いて固体を回収し、一晩、軽く蓋をして乾燥させる。
粉末Ｘ線主要ピーク（°２θ、強度）：１２．０８９°，１００％；１０．４８５°，８３．６％；１３．２２７°，５６．０％；および７．６６０°，８．０％。
【００９１】
実施例５
７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニル−カルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピン水和物ＩＩ
水（２５ｍＬ）中の７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニル−カルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンエタノレート（２００．６ｍｇ）のスラリーを、０．５時間、７５℃まで加熱する。０．７２ｍＬの１ＮのＨＣｌを加え、０．７５時間加熱し続ける。迅速に０．７２ｍＬの１ＮのＮａＯＨを加える。懸濁液を室温まで冷やす。ワットマン＃１紙を通す真空濾過を用いて固体を回収し、２０ｍＬの純粋でリンスし、２日間、軽く蓋をして乾燥させる。
粉末Ｘ線主要ピーク（°２θ、強度）：６．８７８°，１００％；５．７３２°，５８．７％；１１．５５０°，８２．８％；１８．４２６°，２０．７％；および１０．８５６°，４４．２％。
【００９２】
実施例６
７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニル−カルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピン二水和物
水（２５ｍＬ）中の７−（２，５−ジヒドロ−４−イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−９−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−（１−ピペリジニル−カルボニル）−ピロロ［３，２，１−ｊｋ］［１，４］ベンゾジアゼピンエタノレート（２００．８ｍｇ）のスラリーを、０．６７時間、７５℃まで加熱する。０．７２ｍＬの１ＮのＨＣｌを加え、１．７５時間加熱し続ける。０．１ＮのＮａＯＨを１ｍＬずつ、７．２ｍＬ加えるまで、５分ごとに加える。最後の添加後、懸濁液を０．６７時間、７５℃に維持し、次いで懸濁液を室温まで冷やす。ワットマン＃１紙を通す真空濾過を用いて固体を回収し、２０ｍＬの純粋でリンスし、２日間、軽く蓋をして乾燥させる。
粉末Ｘ線主要ピーク（°２θ、強度）：５．４９８°，１００％；２２．１４９°，１００％；１４．９２１°，３２．９％；１１．３９９°，３６．７％；および１１．０１９°，２０．５％。
【００９３】
化合物１は、好ましくは、患者に投与する前に薬学的組成物として製剤化される。有用な製剤は、化合物１またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物およびＳＢＥ７−β−ＣＤを含む。化合物ＳＢＥ７−β−ＣＤは、米国特許第５，１３４，１２７号に記載されているβ−シクロデキストリンのスルホブチルエーテルである。それは、商標名ＣＡＰＴＩＳＯＬ（登録商標）で販売されている。特定の製剤は以下の製剤実施例に記載されている。
【００９４】
有用な薬学的組成物は、２−ピロリドン（ＳＯＬＵＰＨＯＲ（登録商標）−Ｐ）に化合物１またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物（５０ｍｇ／ｍＬ）を溶解することによって調製され得る。次いで、この溶液を、ＳＢＥ７−β−ＣＤ（３０容量％）およびポロキサマー１８８（Ｌｕｔｒｏｌ（登録商標）−Ｆ６８）（１０容量％）の水溶液で希釈する。
【００９５】
製剤実施例１
３０．０ｇのＳＢＥ７−β−ＣＤを７１．２５ｍＬの水に加えることによって第１の溶液を調製し、完全に溶解するまで攪拌またはかき混ぜる。１０．０ｇのポロキサマー１８８を加え、完全に溶解するまで攪拌し続ける。化合物１エタノレートを、以下の式に従って２−ピロリドンに加えることによって第２の溶液を調製する：２−ピロリドンのｍＬ＝（実際の化合物１エタノレートｗｔ（ｍｇ）／５０ｍｇ／ｍＬ）×０．５。第１の溶液を第２の溶液に加える。得られた溶液を、０．２μＭのＳＵＰＯＲ（登録商標）（親水性ポリエーテルスルホン）フィルター（Ｐａｌｌ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を通して、ほこりのない容器に濾過する。
【００９６】
さらなる薬学的組成物の実施形態は、等モル量の水中の薬学的に受容可能な酸中で化合物１またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物を混合することによって調製する。次いで、この混合物を、水溶液として少なくとも１モル当量のＳＢＥ７−β−ＣＤと混合する。好ましい薬学的に受容可能な酸としては、ＨＣｌ、ＨＢｒ、硫酸およびメタンスルホン酸が挙げられる。ＨＣｌの使用が特に好ましい。
【００９７】
製剤実施例２
２０．０ｇのＳＢＥ７−β−ＣＤを８０．０ｍＬの水に加えることによって第１の溶液を調製し、完全に溶解するまで攪拌またはかき混ぜる。この溶液を、以下の式に従って化合物１エタノレートに加える：第１の溶液のｍＬ＝（実際の化合物Ｉエタノレートｗｔ（ｍｇ）／２０ｍｇ／ｍＬ）−（実際の化合物１エタノレートｗｔ（ｍｇ）／１２００ｍｇ／ｍＬ）−（実際の化合物１エタノレートｗｔ（ｍｇ）×０．００１９５１０７ｍＬの１ＮのＨＣｌ／ｍｇの化合物１エタノレート）。以下の計算に従って１ＮのＨＣｌを加える：加える１ＮのＨＣｌのｍＬ＝（実際の化合物１エタノレートｗｔ（ｍｇ）×０．００１９５１０７ｍＬの１ＮのＨＣｌ／ｍｇ化合物１エタノレート）。全ての化合物が溶解するまで、攪拌または溶液槽で超音波処理する。
【００９８】
好ましい薬学的組成物の実施形態は、１モル当量の化合物１またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物を、必要に応じて薬学的に受容可能なバッファーの存在下で、５．５（開始溶液のｐＨ）以下のｐＨで、少なくとも１モル当量のＳＢＥ７−β−ＣＤの水溶液に加え、化合物１またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物が溶解するまで混合することによって調製される。次いで、ｐＨを、薬学的に受容可能な塩基を用いて２．５から３．５の間（最終溶液のｐＨ）に調整する。この得られた溶液製剤は、患者に直接投与されてもよいか、またはその溶液は好ましくは、水で再構成できる固形製剤を与えるように凍結乾燥されてもよい。
【００９９】
ＳＢＥ７−β−ＣＤは、１日に患者に１３．４ｇｍ以下のＳＢＥ７−β−ＣＤを投与するのに必要とされる量まで１モル当量の範囲で存在してもよい。好ましい量のＳＢＥ７−β−ＣＤは、化合物Ｉに対して、１．０〜４．０モル当量であり、より好ましくは２．０〜３．０モル当量であり、２．５〜２．７モル当量であることが特に好ましい。
【０１００】
ｐＨ５．５以下の任意の開始溶液が受容可能であるが、ｐＨ３．０以下の開始溶液が好ましく、１．０〜２．０の範囲のｐＨの開始溶液がより好ましく、１．２から１．４の間のｐＨの開始溶液が最も好ましい。標的の開始溶液のｐＨは、５．５未満のｐＨに溶液のｐＨを調整できる任意の薬学的な酸を加えることによって達成される。塩酸の使用が好ましい。
【０１０１】
製剤は、必要に応じて、薬学的に受容可能なバッファーを含んでもよい。薬学的に受容可能なバッファーは、最終溶液のｐＨを特定のｐＨ範囲に安定化させるために、薬学的製剤の分野において当業者に利用されるそれらの化合物である。薬学的に受容可能なバッファーとしては、リン酸バッファーならびにクエン酸、グリシン、および酒石酸またはその薬学的に受容可能な塩が挙げられる。それらの酸の薬学的に受容可能な塩としては、ナトリウム塩およびカリウム塩が挙げられる。薬学的に受容可能なバッファーは製剤中に存在することが好ましい。酒石酸が好ましい薬学的に受容可能なバッファーである。
【０１０２】
化合物１は、ｐＨが最終溶液のｐＨに調整される前に完全に溶解することが重要である。溶解は、任意の機械的混合手段によって、または必要もしくは所望の場合、溶液の温度を調節することによって補助されてもよい。室温で溶液を攪拌することが好ましい。
【０１０３】
最終溶液のｐＨは、溶液のｐＨを２．５〜３．５の範囲のｐＨに調節できる任意の薬学的に受容可能な塩基を添加することによって達成される。水酸化ナトリウムの使用が好ましい。最終溶液のｐＨは２．５〜３．５の範囲であってもよいが、好ましくは、２．５〜３．１の範囲である。２．７〜３．１の範囲の最終溶液のｐＨが最も好ましい。最終溶液のｐＨが達成されると、必要または所望の場合、水での再構成に適切な固形の薬学的組成物を与えるために、標準的な凍結乾燥条件下で溶液は凍結乾燥されてもよい。
【０１０４】
製剤実施例３
７０ｍＬの水中に０．１５ｇの酒石酸および１２ｇ（５．５５ｍｍｏｌ）のＳＢＥ７−β−ＣＤの溶液を調製する。５ｍＬの１．０ＮのＨＣｌを加え、室温で混合する。１．１ｇ（２．１５ｍｍｏｌ）の化合物１エタノレートを加え、溶解するまで室温で攪拌する。１Ｎの水酸化ナトリウムを加えて約２．９のｐＨにする。十分な水を加えて、１００ｍＬの最終体積にする。この溶液を凍結乾燥して、無定形の橙赤色の固体を得る。