(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
0005819195.tif 000072
｛式中、xは０であり；
ｙは１〜５の整数であり；
環Aはフェニレンであり；
環Bはフェニルであり；
Z1は-N=であり；
Z2は-N=であり；
R1及びR2は独立して水素であり；
R3は独立して、非置換C1-C10アルキルであり；
R5は独立して、ハロゲン、-CF3、ハロメチル、又は非置換C1-C8アルキルであり；
L1は結合、又は非置換C1-C3アルキレンであり；
L2は-C(O)-であり；
L3は-N(H)-であり；及び
L4は-NH-である｝
をもつ化合物。
【請求項２】
式：
【化２】
0005819195.tif 000073
をもつ、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
R1及びR2は水素であり；
R3はイソプロピルであり；
R5は独立して-CF3またはハロゲンであり；
L1は結合であり；
L3は-N(H)-であり；及び
yは2である、請求項２記載の化合物。
【請求項４】
同じ分子上の一方のR5は-CF3 であり、他方のR5 はハロゲンである、請求項３記載の化合物。
【請求項５】
式中、R1及びR2は水素であり；
L1は結合またはメチレンであり；
L3は-N(H)-であり；及び
ｙは１である、請求項２に記載の化合物。
【請求項６】
式中、R1及びR2は水素であり；
R3はメチル、エチルまたはイソプロピルであり；
R5は独立して-CF3またはハロゲンあり；
L1は結合またはメチレンであり；
L3は-N(H)-であり；及び
ｙは１または２である、請求項２に記載の化合物。
【請求項７】
式中、L1は非置換C1-C3アルキレンである、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
式中、L1はメチレンである、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
式中、L1は結合である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
式中、R3は非置換C1-C3アルキルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
式中、R3はメチル、エチルまたはイソプロピルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
式中、ｘは０であり、及びｙは１である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
式中、R5は-CX3であり、ここでXは独立してハロゲンである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
式中、R5は-CF3である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１５】
下記のいずれかの式：
【化３】
0005819195.tif 000074
【化４】
0005819195.tif 000075
をもつ化合物。
【請求項１６】
医薬的に許容可能な賦形剤および請求項１〜１５のいずれかに記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項１７】
肝癌、大腸癌、乳癌、黒色腫、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、非小細胞肺癌、消化管間質腫瘍、フィラデルフィア染色体陽性急性リンパ性白血病(Ph+ALL)、腎細胞癌、(原発性)肝細胞癌、好酸球増加症候群、または隆起性皮膚線維肉腫の処置の必要な患者において、肝癌、大腸癌、乳癌、黒色腫、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、非小細胞肺癌、消化管間質腫瘍、フィラデルフィア染色体陽性急性リンパ性白血病(Ph+ALL)、腎細胞癌、(原発性)肝細胞癌、好酸球増加症候群、または隆起性皮膚線維肉腫を処置するための医薬組成物であって、請求項１〜１５のいずれかに記載の化合物の有効量を含む、前記医薬組成物。
【請求項１８】
Srcチロシンキナーゼの活性を低下させるための組成物であって、有効量の請求項１〜１５のいずれかに記載の化合物を含む、前記組成物。
【請求項１９】
Ablチロシンキナーゼの活性を低下させるための組成物であって、有効量の請求項１〜１５のいずれかに記載の化合物を含む、前記組成物。
【請求項２０】
前記AblキナーゼがBcr-AblキナーゼまたはT1351 Bcr-Ablキナーゼである、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
T315I Bcr-Ablキナーゼの活性を低下させるための組成物であって、有効量の請求項１〜１５のいずれかに記載の化合物を含む、前記組成物。
【請求項２２】
T315I Bcr-Ablキナーゼにより仲介される疾患の処置のための医薬組成物であって、有効量の請求項１〜１５のいずれかに記載の化合物を含む、前記医薬組成物。
【請求項２３】
前記疾患が、好酸球増加症候群、隆起性皮膚線維肉腫、慢性骨髄性白血病または消化管間質腫瘍である、請求項２２に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連する出願のクロスリファレンス
本出願は、2008年10月16日出願の米国仮特許出願第61/106,137号及び2008年10月17日出願の米国仮特許出願第61/106,453号に基づく利益を請求する（本明細書中、そのいずれの内容も全体として及びその全ての目的に関して参照として含まれる）。
【０００２】
連邦政府の委託研究開発の規定による本発明の権利に関する声明
本発明は、国防総省により認められたグラント番号第W81XWH-06-1-0727号の援助を受けた。政府は本発明に一定の権利を有する。
【背景技術】
【０００３】
タンパク質キナーゼは、全治療分野にわたる薬剤標的の最大スーパーファミリーの一つを表す。キナーゼ阻害剤薬剤候補の開発における中心的な課題は、密接に関連したATP結合ポケットを含む非疾患関連キナーゼの阻害を防止しつつ、無調節キナーゼ(disregulated  kinase)をターゲットとすることである。初めて臨床的に承認されたキナーゼ阻害剤イマチニブは、転座産物Bcr-Abl(配列番号１)(Capdevilleら、2002年、Nat  Rev  Drug  Discov１：493-502頁(非特許文献１)、Sawyers、2002年、Cancer  Cell  １巻：13-15頁(非特許文献２))の非常に選択的阻害剤の顕著な例を提供した。イマチニブは慢性骨髄性白血病をおこす腫瘍遺伝子Bcr-Ablを強く阻害するが、二つのキナーゼはイマチニブが接触するATP結合ポケットを裏打ちしている(lining)殆ど完全同一アミノ酸を共有するにも拘らず、細胞質チロシンキナーゼ、c-Src(配列番号２)を阻害しない(図1A：Schindlerら、2000年、Science  289巻：1938-1942頁(非特許文献３)；Seeligerら、2007年、Structure  15巻：299-311頁(非特許文献４))。医薬品化学、構造生物学及びコンピューターによるモデル化の試みでは、Bcr-Abl及びc-Srcに対するイマチニブの様々な選択性を理解することに重点が置かれていた。
【０００４】
Kuriyan及び共同研究者らがイマチニブ-Abl共結晶構造を解明して、イマチニブの選択性の基礎に関する最初の洞察が明らかになった(Nagarら、2002年、Cancer  Research  62巻：4236-4232頁(非特許文献５)；Schindlerら、同上)。この構造から、Asp-Phe-Gly(DFG)トリアド(triad)のコンフォメーションを大きく変化させているキナーゼの活性化ループのN-末端領域のクランクシャフト様置換により画定される触媒的に不活性なコンフォメーションでイマチニブがAblを結合することを示す、従来知見されていなかったキナーゼコンフォメーションが明らかになった。このコンフォメーション変化は、続いて他のタンパク質キナーゼ-薬剤共結晶構造(Irk、Lit、Flt3、p38  Mapk及びB-Raf；Friffithら、2004年、Mol  Cell  13巻：169-178頁(非特許文献６)；Hubbardら、1994年、Nature  732巻：746-754頁(非特許文献７)；Molら、2004年、J  Biol  Chem  279巻：31655-31663頁(非特許文献８)；Pargellisら、2002年、Nat  Struct  Biol  9巻：268-272頁(非特許文献９)；Wanら、2004年、Cell  116巻：855-867頁(非特許文献１０))でも知見され、「II型」または「DFG-out」コンフォメーションと名づけられた。活性コンフォメーションでキナーゼに結合するATP競合阻害剤は、「I型」または「DFG-in」バインダーと名づけられている(図1B及び1C；Liu及びGray、2006年、Nat  Chem  Biol  2巻：358-364頁(非特許文献１１))。非常に選択性の高い阻害剤イマチニブにより結合されたAblの不活性コンフォメーションを同定することにより、選択的キナーゼ阻害剤の研究において多くの医薬品化学作戦が成功してきた(Angellら、2008年、Bioorg  Med  Chem  Lett  18巻：4433-4437頁(非特許文献１２)；Cummingら、2004年、Bioorg  Med  Chem  Lett  14巻：5389-5394頁(非特許文献１３)；Gillら、2005年、J  Med  Chem  48巻：414-426頁(非特許文献１４)；Heronら、2006年、Bioorg  Med  Chem  Lett  16巻：1320-1323頁(非特許文献１５)；Okramら、2006年、Chem  Biol  13巻：779-786頁(非特許文献１６))。
【０００５】
現在、大量のデータが、Ablのイマチニブ結合コンフォメーション(DFG-out)はイマチニブとの複合体中で熱力学的に安定であるが、そのようなコンフォメーションはc-Src複合体中でエネルギー的に好ましくない相互作用を要求するという見解を支持している(Levinsonら、2006年、PloS  Biol  4巻：e144頁(非特許文献１７)；Nagarら、2002年、同上；Seeligerら、2007年、同上；Vajpaiら、2008年、J  Biol  Chem  283巻：18292-18302頁(非特許文献１８))。イマチニブはその強力な標的Abl(Nagarら、2002年、同上；Schindlerら、2000年、同上)、並びに弱く阻害された標的、c-Src(Seeligerら、2007年、同上)の両方において結晶化された。意外にも、イマチニブは二つのタンパク質キナーゼに対しかなり異なる親和性であるにもかかわらず、イマチニブ/共結晶構造は実際には同一である。イマチニブによって強力に抑制されるべき能力をもつc-Srcの突然変異型を構築しようとする試みは部分的にしかうまくいかなかったので、Kuriyan及び共同研究者らはDFG-outコンフォメーションを採用するc-Srcの分散型熱力学的不利益を示唆した(Seeligerら、2007年、同上)。正確なアミノ酸相同性をめぐるキナーゼコンフォメーション優先傾向の重要性はイマチニブ標的受容体キナーゼ、c-Kit(配列番号３)によって研究で強調される。c-KitはATP結合ポケットを裏打ちしているアミノ酸でAbl(配列番号１１)よりもs-Srcとより密接に関連しているが、c-Kitはイマチニブによりより強力に阻害される(Deiningerら、2005年、Blood  105巻：2640-2653頁(非特許文献１９))。リガンド（ATPまたはイマチニブ）非存在下におけるc-Kitの構造研究から、このキナーゼはDFG-outコンフォメーションをとることが示されているが、このことはイマチニブが結合したコンフォメーションは、イマチニブの非存在下で安定で予備形成されていることを示唆しており、これによりそのイマチニブ感受性を説明している(Molら、2004年、同上)。
【０００６】
何らかの理論に結びつけるつもりはないが、二つの薬剤-タンパク質複合体の構造が酷似しているにもかかわらず、イマチニブの親和性が相違しているとの説明は、関連する薬剤-結合した(DFG-out/II型)コンフォメーションを二つのキナーゼが採用する相対的傾向に基づくことが主張されている：Ablはc-Srcに対してDFG-outコンフォメーションを好むと予想されており、イマチニブはキナーゼのII型コンフォメーションに結合するため、その親和性はc-SrcよりもAblに対しての方が高い。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Capdevilleら、2002年、Nat  Rev  Drug  Discov１：493-502頁
【非特許文献２】Sawyers、2002年、Cancer  Cell  １巻：13-15頁
【非特許文献３】Schindlerら、2000年、Science  289巻：1938-1942頁
【非特許文献４】Seeligerら、2007年、Structure  15巻：299-311頁
【非特許文献５】Nagarら、2002年、Cancer  Research  62巻：4236-4232頁
【非特許文献６】Friffithら、2004年、Mol  Cell  13巻：169-178頁
【非特許文献７】Hubbardら、1994年、Nature  732巻：746-754頁
【非特許文献８】Molら、2004年、J  Biol  Chem  279巻：31655-31663頁
【非特許文献９】Pargellisら、2002年、Nat  Struct  Biol  9巻：268-272頁
【非特許文献１０】Wanら、2004年、Cell  116巻：855-867頁
【非特許文献１１】Liu及びGray、2006年、Nat  Chem  Biol  2巻：358-364頁
【非特許文献１２】Angellら、2008年、Bioorg  Med  Chem  Lett  18巻：4433-4437頁
【非特許文献１３】Cummingら、2004年、Bioorg  Med  Chem  Lett  14巻：5389-5394頁
【非特許文献１４】Gillら、2005年、J  Med  Chem  48巻：414-426頁
【非特許文献１５】Heronら、2006年、Bioorg  Med  Chem  Lett  16巻：1320-1323頁
【非特許文献１６】Okramら、2006年、Chem  Biol  13巻：779-786頁
【非特許文献１７】Levinsonら、2006年、PloS  Biol  4巻：e144頁
【非特許文献１８】Vajpaiら、2008年、J  Biol  Chem  283巻：18292-18302頁
【非特許文献１９】Deiningerら、2005年、Blood  105巻：2640-2653頁
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本明細書では特定のキナーゼを阻害するための新規モダリティー及び抗癌処置を提供する。特に、特定のキナーゼ活性を低下させ、及び特定の病状を処置するなどの種々の方法で有用な融合環ヘテロアリール化合物を提供する。
【０００９】
一側面において、式：
【化１】
0005819195.tif 000002
をもつ化合物を提供する。式IV中、xは０〜４の整数であり；ｙは０〜５の整数である。環Aはアリーレンまたはヘテロアリーレンである。環Bはアリールまたはヘテロアリールである。Z1は-N=または-C(R22)=である。Z2は-N=または-C(R23)=である。R1及びR2は独立して水素、置換若しくは非置換アルキル、または置換若しくは非置換へテロアルキルである。R3、R22及びR23は独立して-CN、-CF3、-S(O)nR6、-N(O)m、-NR7R8、-C(O)R9、-NR10-C(O)R11、-NR12-C(O)-OR13、-C(O)NR14R15、-NR16S(O)2R17、-S(O)2NR18R18’、-OR19、ハロメチル、置換若しくは非置換アルキル、置換若しくは非置換へテロアルキル、置換若しくは非置換シクロアルキル、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換アリール、または置換若しくは非置換ヘテロアリールであり；ここでｎは０〜２の整数であり；及びｍは１〜２の整数である。R4及びR5は独立して、ハロゲン、-CN、-CF3、-S(O)nR6、-N(O)m、-NR7R8、-C(O)R9、-NR10-C(O)R11、-NR12-C(O)-R13、-C(O)NR14R15、-NR16S(O)2R17、-S(O)2NR18R18’、-OR19、ハロメチル、置換若しくは非置換アルキル、置換若しくは非置換へテロアルキル、置換若しくは非置換シクロアルキル、置換若しくは非置換へテロシクロアルキル、置換若しくは非置換アリール、または置換若しくは非置換ヘテロアリールであり；ここでｎは０〜２の整数であり、ｍは１〜２の整数である。L1は結合、置換若しくは非置換アルキレンまたは置換若しくは非置換ヘテロアルキレンである。L2は-S(O)-、-S(O)2-、または-C(O)-である。L3は結合、-N(R20)-、置換若しくは非置換アルキレン、または置換若しくは非置換ヘテロアルキレンである。L4は結合、-NH-または-CH2-である。R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R18’、R19及びR20は独立して水素、置換若しくは非置換アルキル、置換若しくは非置換へテロアルキル、非置換シクロアルキル、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換アリール、または置換若しくは非置換ヘテロアリールである。
【００１０】
別の側面では、式：
【化２】
0005819195.tif 000003
をもつ化合物を提供する。式VI中、wは０〜４の整数であり；ｚは０〜５の整数である。環Cはシクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレンまたはヘテロアリーレンである。環Dはアリールまたはヘテロアリールである。Z1、Z2、R1、R2、R22及びR23は上記式IVの定義の通りである。R21は-CN、-CF3、-S(O)nR6、-N(O)m、-NR7R8、-C(O)R9、-N=NH、-NR10-C(O)R11、-NR12-C(O)-OR13、-C(O)NR14R15、-NR16S(O)2R17、-S(O)2NR18R18’、-OR19、置換若しくは非置換アルキル、置換若しくは非置換へテロアルキル、置換若しくは非置換シクロアルキル、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換アリール、または置換若しくは非置換ヘテロアリールであり；ここでｎ、ｍ、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R18’、及びR19は、上記式IVの定義の通りである。R68及びR69は独立して、ハロゲン、-CN、-CF3、-S(O)nR6、-N(O)m、-NR7R8、-C(O)R9、-N=NH、-NR10-C(O)R11、-NR12-C(O)-R13、-C(O)NR14R15、-NR16S(O)2R17、-S(O)2NR18R18’、-OR19、置換若しくは非置換アルキル、置換若しくは非置換へテロアルキル、置換若しくは非置換シクロアルキル、置換若しくは非置換へテロシクロアルキル、置換若しくは非置換アリール、または置換若しくは非置換ヘテロアリールであり；ここで、ｎ、ｍ、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R18’及びR19は、上記式IVの定義の通りである。L5は結合、置換若しくは非置換アルキレンまたは置換若しくは非置換ヘテロアルキレンである。L6は-S(O)-、-S(O)2-、または-C(O)-である。L7は結合、-N(R20)-、置換若しくは非置換アルキレン、または置換若しくは非置換ヘテロアルキレンであり、ここでR20は、上記式IVの定義の通りである。L8は結合、-C(O)-、-NH-または-CH2-である。
【００１１】
別の側面では、式：
【化３】
0005819195.tif 000004
をもつ化合物を提供する。式VII中、Z1、Z2、R1、R2、R4、R5、R68、R69、ｗ、ｘ、ｙ、ｚ、環A、環B、環C、環D、L1、L2、L3、L4、L5、L6、L7及びL8は上記式V及びVIで定義したとおりである。
【００１２】
別の側面では、肝癌、大腸癌、乳癌、黒色腫、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、非小細胞肺癌、消化管間質腫瘍、フィラデルフィア染色体陽性急性リンパ性白血病(Ph+ALL)、腎細胞癌、(原発性)肝細胞癌、好酸球増加症候群、または隆起性皮膚線維肉腫を処置する方法を提供する。本方法は、上記症状の処置の必要な患者に、本明細書に開示された有効量の融合環ヘテロアリール阻害剤を投与することを含む。
【００１３】
別の側面では、Srcチロシンキナーゼの活性を低下させる方法を提供する。本方法は、Srcチロシンキナーゼと、本明細書に開示の有効量の融合環ヘテロアリール阻害剤とを接触させることを含む。
【００１４】
別の側面では、Ablチロシンキナーゼの活性を低下させる方法を提供する。本方法は、Ablチロシンキナーゼと、本明細書に開示の有効量の融合環ヘテロアリール阻害剤とを接触させることを含む。
【００１５】
別の側面では、T315I  Bcr-Ablキナーゼの活性を低下させる方法を提供する。本方法は、T315I  Bcr-Ablチロシンキナーゼと、本明細書に開示の有効量の融合環ヘテロアリール阻害剤とを接触させることを含む。
【００１６】
別の側面では、T315I  Bcr-Ablキナーゼの活性により介在された疾患の処置の必要な患者において、かかる疾患の処置法を提供する。本方法は、前記患者に、本明細書に開示の有効量の融合環ヘテロアリール阻害剤を投与することを含む。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１Ａ】c-Src(PDB  ID  2OIQ)(配列番号４)及びAbl(PDB  ID1  IEP)(配列番号５)とのその複合体中で同定されたイマチニブ接触の略図である。
【図１Ｂ】I型阻害剤、たとえばPP1(1-tert-ブチル-3-p-トリル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン)は、アデノシンポケットを占め、キナーゼとトレオニン・ゲートキーパーとのヒンジ領域で複数の水素結合を形成している。
【図１Ｃ】II型阻害剤、たとえばイマチニブは両方のヒンジ結合領域をかみ合わせ(engage)、DFPフリップにより作り出されたポケットに伸張する。
【図２】c-Src及びAblの両方に対するイマチニブ及び化合物１〜５のIC50値。
【図３】c-Srcに結合している化合物３及び５の結晶構造。図３A：化合物３との複合体中のc-Srcの図。図３B：化合物３との複合体中のc-Srcの活性部位の拡大図。図３C：化合物５との複合体中のc-Srcの図。図３D：化合物５との複合体中のc-Srcの活性部位の拡大図。
【図４】化合物３、５及びイマチニブのc-Srcへの結合中の構造相違。図４A：c-Srcとの複合体中の化合物３、及びAbl(PDB  1IEP)またはc-Src(PDB  2OIQ)との複合体中のイマチニブの構造重複像の立体図。図４B：c-Srcとの複合体中の化合物３、５及びイマチニブの立体図。
【図５】三種類の異なるII型阻害剤は、三種の異なるキナーゼの活性部位内で殆ど同一経路をたどる。
【図６】2.3Åに基づいて計算し、1.2σで等高線を示し、化合物５を中心とした複合体[2FO-FC]のシミュレーテッド・アニーリングOMIT電子密度マップ(Bhat、1988年、Journal  of  Applied  Crystallography  21巻：279-281頁)。
【図７Ａ】BaF3細胞においてBcr-ABL及びT315I  Bcr-Ablを阻害するAD57の能力を試験するための細胞ベースのアッセイ。図７A：細胞増殖は、薬剤暴露２または３日後の時間間隔でレサズリンとのインキュベーションにより定量した。
【図７Ｂ】BaF3細胞においてBcr-ABL及びT315I  Bcr-Ablを阻害するAD57の能力を試験するための細胞ベースのアッセイ。図７B：細胞増殖は、薬剤暴露２または３日後の時間間隔でレサズリンとのインキュベーションにより定量した。
【図７Ｃ】BaF3細胞においてBcr-ABL及びT315I  Bcr-Ablを阻害するAD57の能力を試験するための細胞ベースのアッセイ。図７C：細胞増殖は、薬剤暴露２または３日後の時間間隔でレサズリンとのインキュベーションにより定量した。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
I．定義
本明細書で使用した略号は、化学及び生物学の分野の通常の意味をもつ。
【００１９】
置換基が左から右へかかれた通常の化学式により特定される場合、これらは等しく、右から左へ構造を書かれたものと化学的に同一置換基を包含する、たとえば-CH2O-は-OCH2-と等価である。
【００２０】
「アルキル」なる用語はそれ自体または別の置換基の一部として、他に記載しないかぎり、直鎖(即ち、分岐でない)若しくは分岐炭素鎖、またはその組み合わせを意味し、完全飽和、一価-または多価-不飽和であり得、指定の炭素原子数(即ちC1-C10は、１〜10個の炭素原子を意味する)を持つ二価及び多価基を含み得る。飽和炭化水素基の例としては、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、t-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、シクロヘキシル、(シクロヘキシル)メチル、シクロプロピルメチル、同族体及びその異性体、たとえばn-ペンチル、n-ヘキシル、n-ヘプチル、n-オクチルなどが挙げられるが、これらに限定されない。不飽和アルキル基は、一つ以上の二重結合または三重結合をもつものがある。不飽和アルキル基の例としては、ビニル、2-プロペニル、クロチル、2-イソペンテニル、2-(ブタンジエニル)、2,4-ペンタジエニル、3-(1,4-ペンタジエニル)、エチニル、1-及び3-プロピニル、3-ブチニル並びにその同族体及び異性体が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２１】
「アルキレン」なる用語はそれ自体または別の置換基の一部として、これらに限定されないが、-CH2CH2CH2CH2-により例示されるようにアルキルから誘導される二価基を意味する。通常、アルキル(またはアルキレン)基は、1〜24個の炭素原子をもつが、本発明では10個以下の炭素原子をもつものが好ましい。「低級アルキル」または「低級アルキレン」とは、一般に8個以下の炭素原子をもつ短鎖のアルキルまたはアルキレン基である。
【００２２】
「ヘテロアルキル」なる用語はそれ自体または別の用語と組み合わせて、他に記載しない限り、O、N、P、Si及びSからなる群から選択される少なくとも1個のヘテロ原子と少なくとも1個の炭素原子とからなる、安定な直鎖若しくは分岐、または環式炭化水素基またはその組み合わせを意味し、ここで窒素及び硫黄原子は任意に酸化されていてもよく、窒素へテロ原子は任意に四級化されていてもよい。(単数または複数種類の)ヘテロ原子O、N、P、S及びSiは、アルキル基が分子の残余に結合している位置またはヘテロアルキル基の任意の内側部分に配置しえる。例としては、-CH2CH2-O-CH3、-CH2-CH2-NH-CH3、-CH2-CH2-N(CH3)-CH3、-CH2-S-CH2-CH3、-CH2-CH2、-S(O)-CH3、-CH2-CH2-S(O)2-CH3、-CH=CH-O-CH3、-Si(CH3)3、-CH2-CH=N-OCH3、-CH＝CH-N(CH3)-CH3、O-CH3、-O-CH2-CH3、及び-CNが挙げられるが、これらに限定されない。最大2個のヘテロ原子が連続することができ、たとえば、-CH2-NH-OCH3及び-CH2-O-Si(CH3)3がある。同様に「ヘテロアルキレン」なる用語はそれ自体または別の置換基の一部として、これらに限定されないが、-CH2-CH2-S-CH2-CH2-、及び-CH2-S-CH2-CH2-NH-CH2-に例示されるヘテロアルキルから誘導される二価基を意味する。ヘテロアルキレン基に関しては、ヘテロ原子は、鎖末端のどちらかまたは両方も占めることができる(たとえば、アルキレンオキシ、アルキレンジオキシ、アルキレンアミノ、アルキレンジアミノなど)。さらに、アルキレン及びヘテロアルキレン結合基に関しては、結合基の式がかかれている方向によって結合基の方向は暗示されない。たとえば、式：-C(O2)R’-は、-C(O)2R’-及び-R’C(O)2-の両方を表す。上記のように、本明細書中で使用するヘテロアルキル基としては、-C(O)R’、-C(O)NR’、-NR’R”、-OR’、-SR’及び/または-SO2R’などのヘテロ原子を介して分子の残余に結合している基も含む。「ヘテロアルキル」に続いて特定のヘテロアルキル基、たとえば-NR’R”などを列挙する場合、ヘテロアルキル及び-NR’R”の用語は、重複でも互いに排他的でもない。むしろ具体的なヘテロアルキル基は明確性を加えるために列挙される。従って、「ヘテロアルキル」なる用語は、本明細書中、-NR’R”などの具体的なヘテロアルキル基を除外するものとして解釈されるべきではない。
【００２３】
「シクロアルキル」及び「ヘテロシクロアルキル」なる用語はそれ自体または別の用語と組み合わせて、他に記載しない限り、それぞれ「アルキル」及び「ヘテロアルキル」の環式バージョンを表す。さらに、ヘテロシクロアルキルに関しては、ヘテロ原子は、その複素環が分子の残余に結合している位置を占めることができる。シクロアルキルの例としては、シクロペンチル、シクロヘキシル、1-シクロヘキセニル、3-シクロヘキセニル、シクロヘプチルなどが挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロシクロアルキルの例としては、1-(1,2,5,6-テトラヒドロピリジル)、1-ピペリジニル、2-ピペリジニル、3-ピペリジニル、4-モルホリニル、3-モルホリニル、テトラヒドロフラン-2-イル、テトラヒドロフラン-3-イル、テトラヒドロチエン-2-イル、テトラヒドロチエン-3-イル、1-ピペラジニル、2-ピペラジニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。「シクロアルキレン」及び「ヘテロシクロアルキレン」は、それぞれシクロアルキル及びヘテロシクロアルキルから誘導される二価基をさす。
【００２４】
「ハロ」または「ハロゲン」なる用語はそれ自体または別の置換基の一部として、他に記載しない限り、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素原子を意味する。さらに、「ハロアルキル」などの用語は、モノハロアルキル及びポリハロアルキルを包含するものである。たとえば、「ハロ(C1-C4)アルキル」なる用語としては、トリフルオロメチル、2,2,2-トリフルオロエチル、4-クロロブチル、3-ブロモプロピルなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２５】
「アリール」なる用語は、他に記載しない限り、互いに融合または共有結合的に結合している1個の環または複数の環(好ましくは1〜3個の環)であり得る、多価不飽和、芳香族炭化水素置換基を意味する。「ヘテロアリール」なる用語は、N、O及びSから選択される1〜4個のヘテロ原子を含むアリール基(または環)をさし、ここで窒素及び硫黄原子は任意に酸化されていてもよく、(単数または複数の)窒素原子は任意に四級化されていてもよい。ヘテロアリール基は、炭素またはヘテロ原子を介して分子の残余に結合することができる。アリール及びヘテロアリール基の非限定的な例としては、フェニル、1-ナフチル、2-ナフチル、4-ビフェニル、1-ピロリル、2-ピロリル、3-ピロリル、3-ピラゾリル、2-イミダゾリル、4-イミダゾリル、ピラジニル、2-オキサゾリル、4-オキサゾリル、2-フェニル-4-オキサゾリル、5-オキサゾリル、3-イソキサゾリル、4-イソキサゾリル、5-イソキサゾリル、2-チアゾリル、4-チアゾリル、5-チアゾリル、2-フリル、3-フリル、2-チエニル、3-チエニル、2-ピリジル、3-ピリジル、4-ピリジル、2-ピリミジル、4-ピリミジル、5-ベンゾチアゾリル、プリニル、2-ベンズイミダゾリル、5-インドリル、1-イソキノリル、5-イソキノリル、2-キノキサリニル、5-キノキサリニル、3-キノリル及び6-キノリルが挙げられる。上記アリール及びヘテロアリール環系のそれぞれの置換基は、以下に記載の許容可能な置換基の群から選択される。「アリーレン」及び「ヘテロアリーレン」は、それぞれアリール及びヘテロアリールから誘導される二価基をさす。「融合環」は、少なくとも1つの結合と二つの原子を共通してもつ二つ以上の環の環系をさす。従って「融合環アリール」及び「融合環ヘテロアリール」は、別の環と共通して少なくとも1個の結合と2個の原子を共有する、それぞれ少なくとも1個のアリール及びヘテロアリールをもつ環系をさす。
【００２６】
簡潔にするために、他の用語と組み合わせて使用する際(たとえば、アリールオキシ、アリールチオキシ、アリールアルキル)に「アリール」なる用語は、上記定義のアリール及びヘテロアリール環の両方を包含する。従って、「アリールアルキル」なる用語は、アリール基が、炭素原子(たとえばメチレン基)が酸素原子によって置換されたアルキル基(たとえばフェノキシメチル、2-ピリジルオキシメチル、3-(1-ナフチルオキシ)プロピルなど)などのアルキル基(たとえばベンジル、フェネチル、ピリジルメチルなど)に結合している基を包含するものとする。
【００２７】
本明細書中で使用する「オキソ」なる用語は、炭素原子に二重結合している酸素を意味する。
【００２８】
本明細書中で使用する「アルキルスルホニル」なる用語は、式：-S(O2)-R’｛式中、R’は上記定義のアルキル基である｝をもつ部分を意味する。R’は、指定数の炭素をもつことができる(たとえば、「C1-C4アルキルスルホニル」)。
【００２９】
上記用語(たとえば「アルキル」、「ヘテロアルキル」、「アリール」及び「ヘテロアリール」)はそれぞれ、表示された基の置換形及び非置換形の両方を包含するものとする。それぞれの基について好ましい置換基を以下に提供する。
【００３０】
アルキル及びヘテロアルキル基(アルキレン、アルケニル、ヘテロアルキレン、ヘテロアルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルケニル及びヘテロシクロアルケニルと称される基を含む)の置換基は、ゼロ〜(2m’＋1)(ここでm’はそのような基の中の総炭素数である)の間の様々な数の-OR’、＝O、＝NR’、＝N-OR’、-NR’R”、-SR’、-ハロゲン、-SiR’R”R”’、-OC(O)R’、-C(O)R’、-CO2R’、-CONR’R”、-OC(O)NR’R”、-NR”C(O)R’、-NR’-C(O)NR”R”’、-NR”C(O)2R’、-NR-C(NR’R”R”’)＝NR””、-NR-C(NR’R”)=NR”’、-S(O)R’、-S(O)2R’、-S(O)2NR’R”、-NRSO2R’、-CN及び-NO2から選択される種々の基の一つ以上であり得るが、これらに限定されない。R’、R”、R”’及びR””は好ましくはそれぞれ独立して、水素、置換若しくは非置換へテロアルキル、置換若しくは非置換シクロアルキル、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換アリール(たとえば1〜3個のハロゲンで置換されたアリール)、置換若しくは非置換アルキル、アルコキシ若しくはチオアルコキシ基、またはアリールアルキル基をさす。本発明の化合物が二つ以上のR基を含むとき、たとえばR基はそれぞれが独立してこれらの基の二つ以上が存在するときにそれぞれR’、R”、R”’及びR””基であるように選択される。R’及びR”が同一窒素原子に結合しているとき、これらは窒素原子と結合して4-、5-、6-または7-員環を形成することができる。たとえば、-NR’R”は、1-ピロリジニル及び4-モルホリニルを包含するものとするが、これらに限定されない。上記置換基の定義から、当業者は「アルキル」なる用語が水素原子以外の基に結合した炭素原子を含む基、たとえばハロアルキル(たとえば-CF3及び-CH2CF3)及びアシル(たとえば-C(O)CH3、-C(O)CF3、-C(O)CH2OCH3など)を包含するものとする。
【００３１】
アルキル基について記載された置換基と同様に、アリール及びヘテロアリール基の置換基は様々であることができ、ゼロ〜芳香環系上のあいている価(open  valence)の総数の様々な数のハロゲン、-OR’、-NR’R”、-SR’、-ハロゲン、-SiR’R”R”’、-OC(O)R’、-C(O)R’、-CO2R’、-CONR’R”、-OC(O)NR’R”、-NR”C(O)R’、-NR’-C(O)NR”R”’、-NR”C(O)2R’、-NR-C(NR’R”R”’)＝NR””、-NR-C(NR’R”)=NR”’、-S(O)R’、-S(O)2R’、-S(O)2NR’R”、-NRSO2R’、-CN及び-NO2、-R’、-N3、-CH(Ph)2、フルオロ(C1-C4)アルコキシ、及びフルオロ(C1-C4)アルキルから選択され、ここでR’、R”、R”’及びR””は好ましくはそれぞれ独立して、水素、置換若しくは非置換アルキル、置換若しくは非置換へテロアルキル、置換若しくは非置換シクロアルキル、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換アリール並びに置換若しくは非置換ヘテロアリール基から選択される。本発明の化合物が二つ以上のR基を含むとき、たとえばR基はそれぞれが独立してこれらの基の二つ以上が存在するときにそれぞれR’、R”、R”’及びR””基であるように選択される。
【００３２】
アリールまたはヘテロアリール環の隣接する原子上の置換基のうち二つは、場合により式：-T-C(O)-(CRR’)q-U-｛式中、T及びUは独立して-NR-、-O-、-CRR’-または一重結合であり、qは0〜3の整数である｝の環を形成することができる。あるいはアリールまたはヘテロアリール環の隣接する原子上の置換基のうち二つは、場合により式：-A-(CH2)r-B-｛式中、A及びBは独立して-CRR’-、-O-、-NR-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-S(O)2NR’-または一重結合であり、rは1〜4の整数である｝の置換基で置換されていてもよい。このようにして形成した新しい環の一重結合の一つは、場合により二重結合により置換されていてもよい。あるいはアリールまたはヘテロアリール環の隣接する原子上の置換基のうち二つは、場合により式：-(CRR’)s-X’-(C”R”’)d-｛式中、s及びdは独立して0〜3の整数であり、X’は-O-、-NR’-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-または-S(O)2NR’-である｝の置換基で置換されていてもよい。置換基R、R’、R”及びR”’は、好ましくは独立して水素、置換若しくは非置換アルキル、置換若しくは非置換シクロアルキル、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換アリール、及び置換若しくは非置換ヘテロアリールから選択される。
【００３３】
本明細書中で使用する場合、「ヘテロ原子」または「環へテロ原子」なる用語は、酸素(O)、窒素(N)、硫黄(S)、リン(P)、及びケイ素(Si)を包含するものとする。
【００３４】
本明細書中で使用する「置換基」とは、以下の部分から選択される基を意味する。
(A)-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、非置換アルキル、非置換へテロアルキル、非置換シクロアルキル、非置換ヘテロシクロアルキル、非置換アリール、非置換ヘテロアリール、並びに
(B)以下のものから選択される少なくとも一つの置換基で置換された、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール及びヘテロアリール：
(i)オキソ、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、ハロゲン、非置換アルキル、非置換へテロアルキル、非置換シクロアルキル、非置換ヘテロシクロアルキル、非置換アリール、非置換ヘテロアリール、及び
(ii)以下のものから選択される少なくとも一つの置換基で置換された、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール及びヘテロアリール：
(a)オキソ、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、ハロゲン、非置換アルキル、非置換へテロアルキル、非置換シクロアルキル、非置換ヘテロシクロアルキル、非置換アリール、非置換ヘテロアリール、並びに
(b)オキソ、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、ハロゲン、非置換アルキル、非置換へテロアルキル、非置換シクロアルキル、非置換ヘテロシクロアルキル、非置換アリール、及び非置換ヘテロアリールから選択される少なくとも一つの置換基で置換された、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリール。
【００３５】
本明細書中で使用する「サイズが限定された置換基(size-limited  substituent)」または「サイズが限定された置換基(size-limited  substituent  group)とは、「置換基」に関して先に記載された全ての置換基から選択される基を意味し、ここで各置換若しくは非置換アルキルは置換または非置換C1-C20-アルキルであり、各置換若しくは非置換へテロアルキルは置換若しくは非置換2〜20員のヘテロアルキルであり、各置換若しくは非置換シクロアルキルは置換若しくは非置換C3-C8シクロアルキルであり、及び各置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキルは置換若しくは非置換の3〜8員のヘテロシクロアルキルである。
【００３６】
本明細書中で使用する「低級置換基」または「低級の置換基(lower  substituent  group)」なる用語は、「置換基」に関して先に記載した全ての置換基から選択される基を意味し、ここで各置換若しくは非置換アルキルは置換または非置換C1-C8-アルキルであり、各置換若しくは非置換へテロアルキルは置換若しくは非置換2〜8員のヘテロアルキルであり、各置換若しくは非置換シクロアルキルは置換若しくは非置換C3-C8シクロアルキルであり、及び各置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキルは置換若しくは非置換の3〜8員のヘテロシクロアルキルである。
【００３７】
「ハロメチル」なる用語は、ハロゲンで置換したメチルを指し、たとえばモノハロメチル、ジハロメチルまたはトリハロメチルがある。置換しているハロゲンは同種のもの(たとえばトリフルオロメチル)または異種のもの(たとえばクロロフルオロメチル)であってもよい。代表的なハロメチル置換基としては、モノフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、モノクロロメチル、ジクロロメチル、トリクロロメチル、クロロフルオロメチルなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３８】
本発明の化合物は塩として存在することができる。本発明はそのような塩を含む。適用可能な塩形の例としては、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、メタンスルホン酸塩、硝酸塩、マレイン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩((+)-酒石酸塩、(−)-酒石酸塩若しくはラセミ混合物を含むその混合物、琥珀酸塩、安息香酸塩並びにグルタミン酸などのアミノ酸との塩が挙げられる。これらの塩は当業者に公知の方法により製造することができる。ナトリウム、カリウム、カルシウム、アンモニウム、有機アミノ、またはマグネシウム塩などの塩基付加塩あるいは同様の塩も含まれる。本発明の化合物が比較的塩基性の官能基を含む場合、酸付加塩は、ニートまたは好適な不活性溶媒中、かかる化合物の中性形と、十分量の所望の酸とを接触させることにより得ることができる。医薬的に許容可能な酸付加塩の例としては、塩酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、炭酸一水素(monohydrogencarbonic)、リン酸、リン酸一水素(monohydrogenphosphoric)、リン酸二水素(dihydrogenphosphoric)、硫酸、硫酸一水素(monohydrogensulfuric)、ヨウ化水素酸または亜リン酸などの無機酸から誘導されたもの、並びに酢酸、プロピオン酸、イソ酪酸、マレイン酸、マロン酸、安息香酸、琥珀酸、スベリン酸、フマル酸、乳酸、マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルホン酸、p-トシルスルホン酸、クエン酸、酒石酸、メタンスルホン酸などの有機酸から誘導された塩が挙げられる。アルギン酸塩などのアミノ酸の塩、及びグルクロン酸またはガラクツロン酸などの有機酸の塩も含まれる。本発明の特定の具体的な化合物は、化合物が塩基または酸付加塩のいずれかに転換されえる塩基性及び酸性官能基のいずれをも含む。
【００３９】
本化合物の中性形は好ましくは、この塩と塩基または酸とを接触させ、慣用法で親化合物を単離することによって再生する。本化合物の親形は、極性溶媒中の溶解性など特定の物理的特性における種々の塩形とは異なる。
【００４０】
本発明の特定の化合物は非溶媒和形並びに水和形などの溶媒和形で存在することができる。通常、溶媒和形は非溶媒和形と等価であり、本発明の範囲内に包含される。本発明の特定の化合物は、複数の結晶形またはアモルファス形で存在することができる。通常、全ての物理形が本発明により考えられている使用に関して等価であり、本発明の範囲内である。
【００４１】
本化合物の中性形は好ましくは、この塩と塩基または酸とを接触させ、慣用法で親化合物を単離することによって再生する。本化合物の親形は、極性溶媒中の溶解性など特定の物理的特性における種々の塩形とは異なる。
【００４２】
本発明の特定の化合物は非溶媒和形並びに水和形などの溶媒和形で存在することができる。通常、溶媒和形は非溶媒和形と等価であり、本発明の範囲内に包含される。本発明の特定の化合物は、複数の結晶形またはアモルファス形で存在することができる。通常、全ての物理形が本発明により考えられている使用に関して等価であり、本発明の範囲内である。
【００４３】
本発明の特定の化合物は、非対称炭素原子(光学中心)または二重結合をもつ；ラセミ化合物、ジアステレオマー、互変異性体、幾何異性体及び個々の異性体は本発明の範囲内に含まれる。本発明の化合物は、合成及び/または単離するのに不安定すぎることが当業界で公知であるものを含まない。
【００４４】
本発明の化合物は、かかる化合物を構築する原子の一つ以上で不自然な割合の原子同位体(atomic  isotope)を含むこともある。たとえば本化合物は、トリチウム(3H)、ヨウ素-125(125I)または炭素-14(14C)などの放射性同位体でラベル付けできる。放射性であろうとなかろうと、本発明の化合物の全同位体変種は、本発明の範囲内に含まれる。
【００４５】
本明細書中で使用される「ひとつの(a、an)」なる用語は、一つ以上を意味する。さらに本明細書中で使用される「ひとつの〜で置換された」なる用語は、特定の基が指名された置換基の任意の一つ以上または全てで置換されえることを意味する。たとえば、アルキルまたはヘテロアリール基などの基が「非置換C1-C20アルキル、または非置換2〜20員のヘテロアルキルで置換される」場合、この基は一つ以上の非置換C1-C20アルキル、及び/または一つ以上の非置換2〜20員のヘテロアルキルを含むことができる。
【００４６】
本明細書中で使用する「疾患を処置する方法」とは、病態、病態により生じる状態または病徴を処置する方法をさす。「処置する(treating、treatment)」なる用語及びその活用は疾患の予防を包含する。
【００４７】
本明細書中で使用するキナーゼの「阻害剤」とは、キナーゼの酵素活性を減少させうる化合物をさす。本明細書中に開示されたキナーゼの「活性を低下させる」方法が提供される場合、その方法は列挙されたキナーゼの酵素的キナーゼ活性を低下させる。
【００４８】
本明細書中で使用する「有効量」とは、列挙された方法(たとえば、キナーゼ活性を低下させるまたは症状を処置する)の本来の目的を達成するのに有効な量をさす。
【００４９】
「PDB」なる用語は、当業界で公知のように世界タンパク質データバンク(Workdwide  Protein  Data  Bank)のタンパク質データバンクアーカイブをさす。PDB識別番号(PDB  ID)は、PDBを形成する構造データファイルの特徴的な英数字識別子をさす。
【００５０】
ペプチドまたはタンパク質中の特徴的なアミノ酸置換は、当業界で慣用となっているように識別子「XNNNY」｛ここで「X」は天然アミノ酸一文字コードであり、「NNN」は置換の数字を用いた位置であり、「Y」は置換している残基のアミノ酸一文字コードである｝により表される。ペプチドまたはタンパク質配列中の特定のアミノ酸の位置は、当業界で慣用となっているように、アミノ酸の名称に上付き文字で識別子を先頭につける(たとえば、「123Gly」)か、または後ろに付ける(たとえば、「GLY123」)のいずれかで表される。
【００５１】
融合環ヘテロアリール阻害剤
本発明において、中でもSrcキナーゼ及び/またはAblキナーゼの活性を低下させるのに有用な特定の融合環ヘテロアリール類(即ち、融合環ヘテロアリール阻害剤)を提供する。  
【００５２】
一側面において、式：
【化４】
0005819195.tif 000005
をもつ化合物を提供する。
【００５３】
式Vにおいて、R1及びR2は独立して水素、置換若しくは非置換アルキル、置換若しくは非置換へテロアルキルである。Z1は-N=または-C(R22)=である。Z2は-N=または-C(R23)=である。R3、R21、R22及びR23は独立して-CN、-CF3、-S(O)nR6、-N(O)m、-NR7R8、-C(O)R9、-N=NH、-NR10-C(O)R11、-NR12-C(O)-OR13、-C(O)NR14R15、-NR16S(O)2R17、-S(O)2NR18R18’、-OR19、置換若しくは非置換アルキル、置換若しくは非置換へテロアルキル、置換若しくは非置換シクロアルキル、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換アリール、または置換若しくは非置換ヘテロアリールであり、ここでｎは０〜２の整数であり、及びｍは１〜２の整数である。R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R18’、及びR19は独立して水素、置換若しくは非置換アルキル、置換若しくは非置換へテロアルキル、非置換シクロアルキル、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換アリール、または置換若しくは非置換ヘテロアリールである。
【００５４】
式Vの構造をもつ化合物の幾つかの態様では、R1及びR2は独立して水素、R24-置換若しくは非置換アルキル、またはR24-置換若しくは非置換へテロアルキルである。R24は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R25-置換若しくは非置換アルキル、R25-置換若しくは非置換へテロアルキル、R25-置換若しくは非置換シクロアルキル、R25-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R25-置換若しくは非置換アリール、またはR25-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。
【００５５】
幾つかの態様では、R3は、-CN、-CF3、-S(O)nR6、-N(O)m、-NR7R8、-C(O)R9、-N=NH、-NR10-C(O)R11、-NR12-C(O)-OR13、-C(O)NR14R15、-NR16S(O)2R17、-S(O)2NR18R18’、-OR19、置換アルキル、置換へテロアルキル、置換シクロアルキル、置換ヘテロシクロアルキル、置換アリール、または置換ヘテロアリールであり、ここでｎは０〜２の整数であり、ｍは１〜２の整数である。ある態様では、R3は、-CN、-CF3、-S(O)nR6、-N(O)m、-NR7R8、-C(O)R9、-N=NH、-NR10-C(O)R11、-NR12-C(O)-OR13、-C(O)NR14R15、-NR16S(O)2R17、-S(O)2NR18R18’、-OR19、R26-置換若しくは非置換アルキル、R26-置換若しくは非置換へテロアルキル、R26-置換若しくは非置換シクロアルキル、R26-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R26-置換若しくは非置換アリール、またはR26-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。R26は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、-COOH、-COOR27、-C(O)NHR27、R27-置換若しくは非置換アルキル、R27-置換若しくは非置換へテロアルキル、R27-置換若しくは非置換シクロアルキル、R27-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R27-置換若しくは非置換アリール、またはR27-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。幾つかの態様では、R3は非置換アルキルまたは非置換へテロシクロアルキルである。
【００５６】
幾つかの態様では、R6は、R32-置換若しくは非置換アルキル、R32-置換若しくは非置換へテロアルキル、R32-置換若しくは非置換シクロアルキル、R32-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R32-置換若しくは非置換アリール、またはR32-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。R32は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R33-置換若しくは非置換アルキル、R33-置換若しくは非置換へテロアルキル、R33-置換若しくは非置換シクロアルキル、R33-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R33-置換若しくは非置換アリール、またはR33-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。
【００５７】
幾つかの態様では、R7及びR8は独立して、水素、R34-置換若しくは非置換アルキル、R34-置換若しくは非置換へテロアルキル、R34-置換若しくは非置換シクロアルキル、R34-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R34-置換若しくは非置換アリール、またはR34-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。R34は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R35-置換若しくは非置換アルキル、R35-置換若しくは非置換へテロアルキル、R35-置換若しくは非置換シクロアルキル、R35-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R35-置換若しくは非置換アリール、またはR35-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。
【００５８】
幾つかの態様では、R9は、水素、R36-置換若しくは非置換アルキル、R36-置換若しくは非置換へテロアルキル、R36-置換若しくは非置換シクロアルキル、R36-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R36-置換若しくは非置換アリール、またはR36-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。R36は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R37-置換若しくは非置換アルキル、R37-置換若しくは非置換へテロアルキル、R37-置換若しくは非置換シクロアルキル、R37-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R37-置換若しくは非置換アリール、またはR37-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。
【００５９】
幾つかの態様では、R10は、水素、R38-置換若しくは非置換アルキル、R38-置換若しくは非置換へテロアルキル、R38-置換若しくは非置換シクロアルキル、R38-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R38-置換若しくは非置換アリール、またはR38-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。R38は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R39-置換若しくは非置換アルキル、R39-置換若しくは非置換へテロアルキル、R38-置換若しくは非置換シクロアルキル、R39-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R39-置換若しくは非置換アリール、またはR39-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。
【００６０】
幾つかの態様では、R11は、水素、R40-置換若しくは非置換アルキル、R40-置換若しくは非置換へテロアルキル、R40-置換若しくは非置換シクロアルキル、R40-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R40-置換若しくは非置換アリール、またはR40-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。R40は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R41-置換若しくは非置換アルキル、R41-置換若しくは非置換へテロアルキル、R41-置換若しくは非置換シクロアルキル、R41-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R41-置換若しくは非置換アリール、またはR41-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。
【００６１】
幾つかの態様では、R12は、水素、R42-置換若しくは非置換アルキル、R42-置換若しくは非置換へテロアルキル、R42-置換若しくは非置換シクロアルキル、R42-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R42-置換若しくは非置換アリール、またはR42-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。R42は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R43-置換若しくは非置換アルキル、R43-置換若しくは非置換へテロアルキル、R43-置換若しくは非置換シクロアルキル、R43-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R43-置換若しくは非置換アリール、またはR43-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。
【００６２】
幾つかの態様では、R13は、水素、R44-置換若しくは非置換アルキル、R44-置換若しくは非置換へテロアルキル、R44-置換若しくは非置換シクロアルキル、R44-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R44-置換若しくは非置換アリール、またはR44-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。R44は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R45-置換若しくは非置換アルキル、R45-置換若しくは非置換へテロアルキル、R45-置換若しくは非置換シクロアルキル、R45-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R45-置換若しくは非置換アリール、またはR45-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。
【００６３】
幾つかの態様では、R14及びR15は独立して、水素、R46-置換若しくは非置換アルキル、R46-置換若しくは非置換へテロアルキル、R46-置換若しくは非置換シクロアルキル、R46-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R46-置換若しくは非置換アリール、またはR46-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。R46は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R47-置換若しくは非置換アルキル、R47-置換若しくは非置換へテロアルキル、R47-置換若しくは非置換シクロアルキル、R47-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R47-置換若しくは非置換アリール、またはR47-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。
【００６４】
幾つかの態様では、R16は、水素、R48-置換若しくは非置換アルキル、R48-置換若しくは非置換へテロアルキル、R48-置換若しくは非置換シクロアルキル、R48-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R48-置換若しくは非置換アリール、またはR48-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。R48は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R49-置換若しくは非置換アルキル、R49-置換若しくは非置換へテロアルキル、R49-置換若しくは非置換シクロアルキル、R49-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R49-置換若しくは非置換アリール、またはR49-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。
【００６５】
幾つかの態様では、R17は、水素、R50-置換若しくは非置換アルキル、R50-置換若しくは非置換へテロアルキル、R50-置換若しくは非置換シクロアルキル、R50-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R50-置換若しくは非置換アリール、またはR50-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。R50は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R51-置換若しくは非置換アルキル、R51-置換若しくは非置換へテロアルキル、R51-置換若しくは非置換シクロアルキル、R51-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R51-置換若しくは非置換アリール、またはR51-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。
【００６６】
幾つかの態様では、R18及びR18’は独立して、水素、R52-置換若しくは非置換アルキル、R52-置換若しくは非置換へテロアルキル、R52-置換若しくは非置換シクロアルキル、R52-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R52-置換若しくは非置換アリール、またはR52-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。R52は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R53-置換若しくは非置換アルキル、R53-置換若しくは非置換へテロアルキル、R53-置換若しくは非置換シクロアルキル、R53-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R53-置換若しくは非置換アリール、またはR53-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。
【００６７】
幾つかの態様では、R19は、水素、R54-置換若しくは非置換アルキル、R54-置換若しくは非置換へテロアルキル、R54-置換若しくは非置換シクロアルキル、R54-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R54-置換若しくは非置換アリール、またはR54-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。R54は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R55-置換若しくは非置換アルキル、R55-置換若しくは非置換へテロアルキル、R55-置換若しくは非置換シクロアルキル、R55-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R55-置換若しくは非置換アリール、またはR55-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。
【００６８】
幾つかの態様では、R21は、-CN、-CF3、-S(O)nR6、-N(O)m、-NR7R8、-C(O)R9、-N=NH、-NR10-C(O)R11、-NR12-C(O)-OR13、-C(O)NR14R15、-NR16S(O)2R17、-S(O)2NR18R18’、-OR19、置換アルキル、置換へテロアルキル、置換シクロアルキル、置換ヘテロシクロアルキル、置換アリール、または置換ヘテロアリールである。ある態様では、R21は、-CN、-CF3、-S(O)nR6、-N(O)m、-NR7R8、-C(O)R9、-N=NH、-NR10-C(O)R11、-NR12-C(O)-OR13、-C(O)NR14R15、-NR16S(O)2R17、-S(O)2NR18R18’、-OR19、R56-置換若しくは非置換アルキル、R56-置換若しくは非置換へテロアルキル、R56-置換若しくは非置換シクロアルキル、R56-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R56-置換若しくは非置換アリール、またはR56-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。R56は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R57-置換若しくは非置換アルキル、R57-置換若しくは非置換へテロアルキル、R57-置換若しくは非置換シクロアルキル、R57-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R57-置換若しくは非置換アリール、またはR57-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。
【００６９】
幾つかの態様では、R22は、-CN、-CF3、-S(O)nR6、-N(O)m、-NR7R8、-C(O)R9、-N=NH、-NR10-C(O)R11、-NR12-C(O)-OR13、-C(O)NR14R15、-NR16S(O)2R17、-S(O)2NR18R18’、-OR19、R60-置換若しくは非置換アルキル、R60-置換若しくは非置換へテロアルキル、R60-置換若しくは非置換シクロアルキル、R60-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R60-置換若しくは非置換アリール、またはR60-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。R60は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R61-置換若しくは非置換アルキル、R61-置換若しくは非置換へテロアルキル、R61-置換若しくは非置換シクロアルキル、R61-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R61-置換若しくは非置換アリール、またはR61-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。
【００７０】
幾つかの態様では、R23は、-CN、-CF3、-S(O)nR6、-N(O)m、-NR7R8、-C(O)R9、-N=NH、-NR10-C(O)R11、-NR12-C(O)-OR13、-C(O)NR14R15、-NR16S(O)2R17、-S(O)2NR18R18’、-OR19、R62-置換若しくは非置換アルキル、R62-置換若しくは非置換へテロアルキル、R62-置換若しくは非置換シクロアルキル、R62-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R62-置換若しくは非置換アリール、またはR62-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。R62は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R63-置換若しくは非置換アルキル、R63-置換若しくは非置換へテロアルキル、R63-置換若しくは非置換シクロアルキル、R63-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R63-置換若しくは非置換アリール、またはR63-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。
【００７１】
式Vの構造をもつ化合物に関する態様に加えて、R25、R27、R33、R35、R37、R39、R41、R43、R45、R47、R49、R51、R53、R55、R57、R61及びR63は、独立して-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、非置換アルキル、非置換へテロアルキル、非置換シクロアルキル、非置換へテロシクロアルキル、非置換アリール、または非置換ヘテロアリールである。
【００７２】
別の側面では、式III：
【化５】
0005819195.tif 000006
の構造をもつ化合物を提供する。
【００７３】
式III中、R1、R2、R3及びR21は式Vに関して定義したとおりである。
【００７４】
別の側面では、式IV：
【化６】
0005819195.tif 000007
の構造をもつ化合物を提供する。
【００７５】
式IV中、Z1、Z2、R1、R2及びR3は式Vに関して定義したとおりである。
【００７６】
式IVにおいて、ｘは０〜４の整数であり、ｙは０〜５の整数である。ある態様では、ｘは０である。ある態様では、ｙは０または１である。ある態様では、ｙは０である。
【００７７】
環Aはアリーレンまたはヘテロアリーレン、たとえばフェニレンである。環Bはアリールまたはヘテロアリール、たとえばフェニルである。
【００７８】
ある態様では、R4は、ハロゲン、-CN、-CF3、-S(O)nR6、-N(O)m、-NR7R8、-C(O)R9、-N=NH、-NR10-C(O)R11、-NR12-C(O)-OR13、-C(O)NR14R15、-NR16S(O)2R17、-S(O)2NR18R18’、-OR19、R28-置換若しくは非置換アルキル、R28-置換若しくは非置換へテロアルキル、R28-置換若しくは非置換シクロアルキル、R28-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R28-置換若しくは非置換アリール、またはR28-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。R28は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R29-置換若しくは非置換アルキル、R29-置換若しくは非置換へテロアルキル、R29-置換若しくは非置換シクロアルキル、R29-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R29-置換若しくは非置換アリール、またはR29-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。
【００７９】
ある態様では、R5は、ハロゲン、-CN、-CF3、-S(O)nR6、-N(O)m、-NR7R8、-C(O)R9、-N=NH、-NR10-C(O)R11、-NR12-C(O)-OR13、-C(O)NR14R15、-NR16S(O)2R17、-S(O)2NR18R18’、-OR19、ハロメチル、R30-置換若しくは非置換アルキル、R30-置換若しくは非置換へテロアルキル、R30-置換若しくは非置換シクロアルキル、R30-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R30-置換若しくは非置換アリール、またはR30-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。R30は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R31-置換若しくは非置換アルキル、R31-置換若しくは非置換へテロアルキル、R31-置換若しくは非置換シクロアルキル、R31-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R31-置換若しくは非置換アリール、またはR31-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。
【００８０】
ある態様では、L1は、結合、置換若しくは非置換アルキレンまたは置換若しくは非置換ヘテロアルキレンである。ある態様では、L1は、結合、R64-置換若しくは非置換アルキレン、またはR64-置換若しくは非置換へテロアルキレンである。R64は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R65-置換若しくは非置換アルキル、R65-置換若しくは非置換へテロアルキル、R65-置換若しくは非置換シクロアルキル、R65-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R65-置換若しくは非置換アリール、またはR65-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。ある態様では、L1はメチレンである。
【００８１】
ある態様では、L2は-S(O)-、-S(O)2-または-C(O)-である。ある態様では、L2は-S(O)-である。ある態様では、L2は-S(O)2-である。ある態様では、L2は-C(O)-である。
【００８２】
ある態様では、L3は、結合、-N(R20)-、置換若しくは非置換アルキレンまたは置換若しくは非置換ヘテロアルキレンである。ある態様では、L3は、結合、-N(R20)-、R66-置換若しくは非置換アルキレン、またはR66-置換若しくは非置換へテロアルキレンである。R66は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R67-置換若しくは非置換アルキル、R67-置換若しくは非置換へテロアルキル、R67-置換若しくは非置換シクロアルキル、R67-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R67-置換若しくは非置換アリール、またはR67-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。ある態様では、L3は-N(R20)-である。ある態様では、L3は-NH-である。
【００８３】
ある態様では、R20は、水素、置換若しくは非置換アルキル、置換若しくは非置換へテロアルキル、非置換シクロアルキル、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換アリール、または置換若しくは非置換ヘテロアリールである。ある態様では、R20は、水素、R58-置換若しくは非置換アルキル、R58-置換若しくは非置換へテロアルキル、R58-置換若しくは非置換シクロアルキル、R58-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R58-置換若しくは非置換アリール、またはR58-置換若しくは非置換へテロアリールである。R58は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R59-置換若しくは非置換アルキル、R59-置換若しくは非置換へテロアルキル、R59-置換若しくは非置換シクロアルキル、R59-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R59-置換若しくは非置換アリール、またはR59-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。
【００８４】
ある態様では、R29、R31、R59、R65及びR67は独立して、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、非置換アルキル、ヘテロアルキル、非置換シクロアルキル、非置換ヘテロシクロアルキル、非置換アリール、または非置換ヘテロアリールである。
【００８５】
ある態様では、L4は結合、-NH-または-CH2-である。ある態様では、L4は結合である。ある態様では、L4は-NH-である。ある態様では、L4は-CH2-である。
【００８６】
別の態様では、式：
【化７】
0005819195.tif 000008
をもつ化合物を提供する。
【００８７】
式Iにおいて、ｘ、ｙ、環A、環B、L1、L2、L3、R1、R2、R3、R4及びR5は、上記式IVに関して定義したとおりである。
【００８８】
式：
【化８】
0005819195.tif 000009
をもつ化合物を提供する。
【００８９】
式Iaにおいて、ｘ、ｙ、環A、環B、L2、L3、R1、R2、R3、R4及びR5は、上記式IVに関して定義したとおりである。
【００９０】
ある態様では、式Ib：
【化９】
0005819195.tif 000010
をもつ化合物を提供する。
【００９１】
式Ibにおいて、ｙ、環B、L2、L3、R1、R2、R3及びR5は、上記式IVに関して定義したとおりである。ある態様では、R1及びR2は水素である。ある態様では、R3は不飽和アルキルである。ある態様では、R3は、C1-C10アルキル、好ましくはメチル、エチル、イソプロピルまたはシクロペンチルである。ある態様では、R3は置換C1-C10アルキルである。ある態様では、R3は置換アルキルであり、たとえばベンジルまたはシクロプロピルメチルがあるが、これらに限定されない。ある態様では、R3は置換若しくは非置換ピロリジンである。ある態様では、R3は置換若しくは非置換テトラヒドロフランである。
【００９２】
ある態様では、式II：
【化１０】
0005819195.tif 000011
の構造をもつ化合物を提供する。
【００９３】
式IIにおいて、R1、R2、R3は、式I、III、IV及び/またはVにおいて定義したとおりであり；R5及びｙは式Vに関して定義したとおりであり；L1及びL3は、式I及び/またはIVにおいて定義したとおりである。ある態様では、式II中のR1及びR2は水素であり、L2は結合またはメチレンであり、L3は-N(R20)-であり、ｙは１である。ある態様では、R1及びR2は水素であり、L1はメチレンであり、L3は-N(R20)-であり、ｙは１である。ある態様では、R1及びR2は水素であり、L1はメチレンであり、L3は-NH-であり、ｙは１である。
【００９４】
式I及び/またはIVのある態様では、環Aはアリーレンであり、環Bはアリールである。さらに環Aはフェニレンであってもよく、環Bはフェニルであってもよい。
【００９５】
式I、II及び/またはIVのある態様では、L1は置換若しくは非置換C1-C3アルキレンまたは置換若しくは非置換2〜4員のヘテロアルキレンである。ある態様では、L1はR64-置換若しくは非置換C1-C3アルキレン、またはR64-置換若しくは非置換2〜4員のへテロアルキレンであり、ここでR64は式I、II及び/またはIVで定義したとおりである。L1は非置換C1-C3アルキレンまたは非置換2〜4員のヘテロアルキレンであってもよい。L1は非置換C1-C10アルキレンまたは非置換2〜10員のヘテロアルキレンであってもよい。L1はさらにメチレンであってもよい。
【００９６】
式I、II、III、IV及び/またはVの他の態様において、R1またはR2の少なくとも一つは水素であってもよい。R1及びR2は同時に両方とも水素であってもよい。R3は置換若しくは非置換アルキル、置換若しくは非置換へテロアルキル、置換若しくは非置換シクロアルキル、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換アリール、または置換若しくは非置換ヘテロアリールであってもよい。R3も置換若しくは非置換アルキルまたは置換若しくは非置換へテロアルキルであってもよい。ある態様では、R3は、R26-置換若しくは非置換アルキル、R26-置換若しくは非置換へテロアルキル、R26-置換若しくは非置換シクロアルキル、R26-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R26-置換若しくは非置換アリール、またはR26-置換若しくは非置換ヘテロアリールであり、ここでR26は式I、III、IV及び/またはIVで定義したとおりである。ある態様では、R3は非置換アルキル、非置換へテロアルキル、非置換シクロアルキル、非置換ヘテロシクロアルキル、非置換アリール、または非置換へテロアリールである。ある態様では、R3は、R26-置換若しくは非置換アルキル、またはR26-置換若しくは非置換へテロシクロアルキルである。
【００９７】
R3は、置換若しくは非置換C1-C10アルキルまたは置換若しくは非置換3〜6員のヘテロシクロアルキルであってもよい。R3は、置換若しくは非置換C1-C3アルキルであってもよい。R3は、メチル、エチルまたはイソプロピルであってもよい。R3は、非置換3〜6員のヘテロシクロアルキルであってもよい。R3はシクロペンチルであってもよい。ある態様では、R3は、R26-置換若しくは非置換C1-C10アルキル、またはR26-置換若しくは非置換3〜8員のへテロシクロアルキルであり、R26は式I、III、IV及び/またはIVの定義とおりである。ある態様では、R3は、R26-置換若しくは非置換C1-C3-アルキルである。ある態様では、R3は、R26-置換若しくは非置換3〜6員のへテロシクロアルキルである。
【００９８】
式I、II、及び/またはIVの幾つかの態様では、R5はハロメチルである。ある態様では、R5は、-Br、-Cl、-I、-NO2、-CH3、-C2H5、-SH、-OH、-OCH3、-CN、-SCH3、-NOまたは-C(O)Hであってもよい。R5は、-CF3であってもよい。他の態様では、L2は結合または-C(O)-L3-であってもよい。L3は-N(R20)-であってもよい。L3は-NH-であってもよい。L1は置換若しくは非置換C1-C10アルキレンまたは置換若しくは非置換2〜10員のヘテロアルキレンであってもよい。ある態様では、L1はR64-置換若しくは非置換C1-C10アルキレン、またはR64-置換若しくは非置換2〜10員のへテロアルキレンであり、ここでR64は式I、II及び/またはIVで定義したとおりである。記号ｘは０であってもよく、ｙは１であってもよい。
【００９９】
ある態様では、式IIa：
【化１１】
0005819195.tif 000012
をもつ化合物を提供する。
【０１００】
式IIaにおいて、R1、R2、R3は、式I、III、IV及び/またはVにおいて定義したとおりであり；R5及びｙは式Vに関して定義したとおりである。ある態様では、式IIa中のR1及びR2は水素であり、ｙは１である。ある態様では、R3は、R26-置換若しくは非置換アルキル、R26-置換若しくは非置換へテロアルキル、R26-置換若しくは非置換シクロアルキル、R26-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R26-置換若しくは非置換アリール、またはR26-置換若しくは非置換ヘテロアリールであり、ここでR26は式IVで定義したとおりである。ある態様では、R3は、R26-置換若しくは非置換アルキル、またはR26-置換若しくは非置換シクロアルキルである。ある態様では、R3はR26-置換アルキルである。ある態様では、R3はベンジルである。ある態様では、R3はシクロプロピルメチルである。ある態様では、R3は非置換アルキルまたは非置換シクロアルキルである。ある態様では、R3は非置換C1-C10アルキルまたは非置換C3-C8シクロアルキルである。ある態様では、R3は非置換C1-C3アルキルまたは非置換C3-C6シクロアルキルである。ある態様では、R3はメチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、tert-ブチル、またはシクロペンタニルである。ある態様では、R3はメチルである。ある態様では、R3はイソプロピルである。ある態様では、R3はシクロペンタニルである。ある態様では、R5は、R30-置換若しくは非置換アルキル、R30-置換若しくは非置換へテロアルキル、R30-置換若しくは非置換シクロアルキル、R30-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R30-置換若しくは非置換アリール、またはR30-置換若しくは非置換ヘテロアリールであり、ここでR30は式IVで定義したとおりである。ある態様では、R5は、R30-置換若しくは非置換アルキルである。ある態様では、R5は、R30-置換若しくは非置換C1-C10アルキルである。ある態様では、R5はR30-置換若しくは非置換C1-C3アルキルである。ある態様では、R5はR30-置換アルキルである。ある態様では、R5はハロゲン置換メチル、好ましくはトリフルオロメチルである。
【０１０１】
ある態様では、式IIb：
【化１２】
0005819195.tif 000013
の構造をもつ化合物を提供する。
【０１０２】
式IIbにおいて、R1、R2、R3は、式I、III、IV及び/またはVにおいて定義したとおりであり；R5及びｙは式Vに関して定義したとおりである。ある態様では、式IIa中のR1及びR2は水素であり、ｙは１である。ある態様では、R3は、R26-置換若しくは非置換アルキル、R26-置換若しくは非置換へテロアルキル、R26-置換若しくは非置換シクロアルキル、R26-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R26-置換若しくは非置換アリール、またはR26-置換若しくは非置換ヘテロアリールであり、ここでR26は式IVで定義したとおりである。ある態様では、R3は、R26-置換若しくは非置換アルキル、またはR26-置換若しくは非置換シクロアルキルである。ある態様では、R3はR26-置換アルキルである。ある態様では、R3はベンジルである。ある態様では、R3はシクロプロピルメチルである。ある態様では、R3は非置換アルキルまたは非置換シクロアルキルである。ある態様では、R3は非置換C1-C10アルキルまたは非置換C3-C8シクロアルキルである。ある態様では、R3は非置換C1-C3アルキルまたは非置換C3-C6シクロアルキルである。ある態様では、R3はメチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、tert-ブチル、またはシクロペンタニルである。ある態様では、R3はメチルである。ある態様では、R3はイソプロピルである。ある態様では、R3はシクロペンタニルである。ある態様では、R5は、R30-置換若しくは非置換アルキル、R30-置換若しくは非置換へテロアルキル、R30-置換若しくは非置換シクロアルキル、R30-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R30-置換若しくは非置換アリール、またはR30-置換若しくは非置換ヘテロアリールであり、ここでR30は式IVで定義したとおりである。ある態様では、R5は、R30-置換若しくは非置換アルキルである。ある態様では、R5は、R30-置換若しくは非置換C1-C10アルキルである。ある態様では、R5はR30-置換若しくは非置換C1-C3アルキルである。ある態様では、R5はR30-置換アルキルである。ある態様では、R5はハロゲン置換メチル、好ましくはトリフルオロメチルである。
【０１０３】
ある態様では、式IIc：
【化１３】
0005819195.tif 000014
の構造をもつ化合物を提供する。
【０１０４】
式IIcにおいて、R1、R2、R3は、式I、III、IV及び/またはVにおいて定義したとおりであり；R5及びｙは式Vに関して定義したとおりである。ある態様では、式IIa中のR1及びR2は水素であり、ｙは１である。ある態様では、R3は、R26-置換若しくは非置換アルキル、R26-置換若しくは非置換へテロアルキル、R26-置換若しくは非置換シクロアルキル、R26-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R26-置換若しくは非置換アリール、またはR26-置換若しくは非置換ヘテロアリールであり、ここでR26は式IVで定義したとおりである。ある態様では、R3は、R26-置換若しくは非置換アルキル、またはR26-置換若しくは非置換シクロアルキルである。ある態様では、R3はR26-置換アルキルである。ある態様では、R3はベンジルである。ある態様では、R3はシクロプロピルメチルである。ある態様では、R3は非置換アルキルまたは非置換シクロアルキルである。ある態様では、R3は非置換C1-C10アルキルまたは非置換C3-C8シクロアルキルである。ある態様では、R3は非置換C1-C3アルキルまたは非置換C3-C6シクロアルキルである。ある態様では、R3はメチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、tert-ブチル、またはシクロペンタニルである。ある態様では、R3はメチルである。ある態様では、R3はイソプロピルである。ある態様では、R3はシクロペンタニルである。ある態様では、R5は、R30-置換若しくは非置換アルキル、R30-置換若しくは非置換へテロアルキル、R30-置換若しくは非置換シクロアルキル、R30-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R30-置換若しくは非置換アリール、またはR30-置換若しくは非置換ヘテロアリールであり、ここでR30は式IVで定義したとおりである。ある態様では、R5はR30-置換若しくは非置換アルキルである。ある態様では、R5はR30-置換若しくは非置換C1-C10アルキルである。ある態様では、R5はR30-置換若しくは非置換C1-C3アルキルである。ある態様では、R5はR30-置換アルキルである。ある態様では、R5はハロゲン置換メチル、好ましくはトリフルオロメチルである。
【０１０５】
式IId：
【化１４】
0005819195.tif 000015
の構造をもつ化合物を提供する。
【０１０６】
式IIdにおいて、R1、R2、R3は、式I、III、IV及び/またはVにおいて定義したとおりであり；R5及びｙは式Vに関して定義したとおりである。ある態様では、式IIa中のR1及びR2は水素であり、ｙは１である。ある態様では、R3は、R26-置換若しくは非置換アルキル、R26-置換若しくは非置換へテロアルキル、R26-置換若しくは非置換シクロアルキル、R26-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R26-置換若しくは非置換アリール、またはR26-置換若しくは非置換ヘテロアリールであり、ここでR26は式IVで定義したとおりである。ある態様では、R3は、R26-置換若しくは非置換アルキル、またはR26-置換若しくは非置換シクロアルキルである。ある態様では、R3はR26-置換アルキルである。ある態様では、R3はベンジルである。ある態様では、R3はシクロプロピルメチルである。ある態様では、R3は非置換アルキルまたは非置換シクロアルキルである。ある態様では、R3は非置換C1-C10アルキルまたは非置換C3-C8シクロアルキルである。ある態様では、R3は非置換C1-C3アルキルまたは非置換C3-C6シクロアルキルである。ある態様では、R3はメチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、tert-ブチル、またはシクロペンタニルである。ある態様では、R3はメチルである。ある態様では、R3はイソプロピルである。ある態様では、R3はシクロペンタニルである。ある態様では、R5は、R30-置換若しくは非置換アルキル、R30-置換若しくは非置換へテロアルキル、R30-置換若しくは非置換シクロアルキル、R30-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R30-置換若しくは非置換アリール、またはR30-置換若しくは非置換ヘテロアリールであり、ここでR30は式IVで定義したとおりである。ある態様では、R5は、R30-置換若しくは非置換アルキルである。ある態様では、R5は、R30-置換若しくは非置換C1-C10アルキルである。ある態様では、R5はR30-置換若しくは非置換C1-C3アルキルである。ある態様では、R5はR30-置換アルキルである。ある態様では、R5はハロゲン置換メチル、好ましくはトリフルオロメチルである。
【０１０７】
別の側面では、式：
【化１５】
0005819195.tif 000016
をもつ化合物を提供する。式中、R1、R2、Z1及びZ2は上記定義通りである。
【０１０８】
環Cは、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンである。環Dはアリールまたはヘテロアリールである。ある態様では、環Cはヘテロアリーレンまたはヘテロシクロアルキレンである。ある態様では、環Cは窒素含有5〜6員のヘテロシクロアルキレン、たとえばピロリジン-ジイルである。ある態様では、環Dはアリールまたはヘテロアリールである。一態様において、環Dはアリール、たとえばフェニルである。
【０１０９】
式VIにおいて、ｗは０〜４の整数であり、ｚは０〜５の整数である。ある態様では、ｗは０である。ある態様では、zは０または１である。ある態様では、ｚは０である。
【０１１０】
ある態様では、R68は、ハロゲン、-CN、-CF3、-S(O)nR6、-N(O)m、-NR7R8、-C(O)R9、-N=NH、-NR10-C(O)R11、-NR12-C(O)-OR13、-C(O)NR14R15、-NR16S(O)2R17、-S(O)2NR18R18’、-OR19、R70-置換若しくは非置換アルキル、R70-置換若しくは非置換へテロアルキル、R70-置換若しくは非置換シクロアルキル、R70-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R70-置換若しくは非置換アリール、またはR70-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。R70は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R71-置換若しくは非置換アルキル、R71-置換若しくは非置換へテロアルキル、R71-置換若しくは非置換シクロアルキル、R71-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R71-置換若しくは非置換アリール、またはR71-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。
【０１１１】
ある態様では、R69は、ハロゲン、-CN、-CF3、-S(O)nR6、-N(O)m、-NR7R8、-C(O)R9、-N=NH、-NR10-C(O)R11、-NR12-C(O)-OR13、-C(O)NR14R15、-NR16S(O)2R17、-S(O)2NR18R18’、-OR19、ハロメチル、R72-置換若しくは非置換アルキル、R72-置換若しくは非置換へテロアルキル、R72-置換若しくは非置換シクロアルキル、R72-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R72-置換若しくは非置換アリール、またはR72-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。R72は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R73-置換若しくは非置換アルキル、R73-置換若しくは非置換へテロアルキル、R73-置換若しくは非置換シクロアルキル、R73-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R73-置換若しくは非置換アリール、またはR73-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。
【０１１２】
ある態様では、L5は結合、置換若しくは非置換アルキレン、または置換若しくは非置換ヘテロアルキレンである。ある態様では、L5は結合、R74-置換若しくは非置換アルキル、またはR74-置換若しくは非置換へテロアルキレンである。R74は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R75-置換若しくは非置換アルキル、R75-置換若しくは非置換へテロアルキル、R75-置換若しくは非置換シクロアルキル、R75-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R75-置換若しくは非置換アリール、またはR75-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。ある態様では、L5は結合である。ある態様では、L5は結合であり、R21は置換フェニル、好ましくはNH2-置換フェニルである。
【０１１３】
ある態様では、L6は-S(O)-、-S(O)2-、または-C(O)-である。ある態様では、L6は-S(O)-である。ある態様では、L6は-S(O)2-である。ある態様では、L6は-C(O)-である。
【０１１４】
ある態様では、L7は結合、-N(R78)-、置換若しくは非置換アルキレン、または置換若しくは非置換ヘテロアルキレンである。ある態様では、L7は結合、-N(R78)-、R76-置換若しくは非置換アルキレン、またはR76-置換若しくは非置換ヘテロアルキレンである。R76は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R77-置換若しくは非置換アルキル、R77-置換若しくはへテロアルキル、R77-置換若しくは非置換シクロアルキル、R77-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R77-置換若しくは非置換アリール、またはR77-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。
【０１１５】
ある態様では、R78は、水素、置換若しくは非置換アルキル、置換若しくは非置換へテロアルキル、非置換シクロアルキル、置換若しくは非置換へテロシクロアルキル、置換若しくは非置換アリール、または置換若しくは非置換ヘテロアリールである。ある態様では、R78は水素、R79-置換若しくは非置換アルキル、R79-置換若しくは非置換へテロアルキル、R79-置換若しくは非置換シクロアルキル、R79-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R79-置換若しくは非置換アリール、またはR79-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。R79は、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、R80-置換若しくは非置換アルキル、R80-置換若しくは非置換へテロアルキル、R80-置換若しくは非置換シクロアルキル、R80-置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル、R80-置換若しくは非置換アリール、またはR80-置換若しくは非置換ヘテロアリールである。
【０１１６】
ある態様では、R71、R73、R75、R77、及びR80は独立して、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、オキソ、ハロゲン、非置換アルキル、へテロアルキル、非置換シクロアルキル、非置換ヘテロシクロアルキル、非置換アリール、または非置換ヘテロアリールである。
【０１１７】
ある態様では、L8は結合、-C(O)-、-NH-または-CH2-である。ある態様では、L8は結合である。ある態様では、L8は-C(O)-である。ある態様では、L8は-NH-である。ある態様では、L8は-CH2-である。
【０１１８】
ある態様では、式：
【化１６】
0005819195.tif 000017
｛式中、R1、R2、R21、L5、L7、L8、環C、環D、R68、R69、ｗ及びｚは上記定義の通りである｝をもつ化合物を提供する。ある態様では、R21が置換されたアリールであり、L5及びL8は結合であり、環Cはヘテロシクロアルキレン、好ましくは窒素含有へテロシクロアルキレンであり、L7は-NH-であり、環Dはアリール、好ましくはフェニルであり、ｗは０であり、ｚは０または１である。ある態様では、ｚは１であり、R69はハロメチル、好ましくはトリフルオロメチルである。ある態様では、R21はNH2-置換フェニルである。
【０１１９】
別の側面では、式：
【化１７】
0005819195.tif 000018
｛式中、Z1、Z2、R1、R2、R4、R5、R68、R69、ｗ、ｘ、ｙ、ｚ、環A、環B、環C、環D、L1、L2、L3、L4、L5、L6、L7及びL8は上記定義の通りである｝をもつ化合物を提供する。ある態様では、R5及びR69は独立してハロメチル、好ましくはトリフルオロメチルである。
【０１２０】
ある態様では、式：
【化１８】
0005819195.tif 000019
｛式中、R1、R2、R4、R5、L1、L2、L3、L5、L7、L8、環A、環B、環C、環D、R68、R69、ｗ、ｘ、ｙ及びｚは、上記定義の通りである｝をもつ化合物を提供する。ある態様では、L1、L5及びL8は結合であり、L2は-C(O)-であり、L3及びL7は-NH-であり、環Aはアリーレン、好ましくはフェニレンであり、環B及び環Dは独立してアリール、好ましくはフェニルであり、環Cはヘテロシクロアルキレンであり、ｘ及びｗは０であり、ｙ及びｚは１であり、R5及びR69は独立してハロメチル、好ましくはトリフルオロメチルである。
【０１２１】
ある態様では、上記式のいずれかで記載された一つ以上の置換基は、少なくとも一つの置換基で置換されている。より具体的には、ある態様では、上記式中で記載された少なくとも一つの置換されたアルキル、置換されたヘテロアルキル、置換されたシクロアルキル、置換されたヘテロシクロアルキル、置換されたアリール、置換されたヘテロアリール、置換されたアルキレン、置換されたヘテロアルキレン、置換されたシクロアルキレン、置換されたヘテロシクロアルキレン、置換されたアリーレン、または置換されたヘテロアリーレンは、少なくとも一つの置換基で置換されている。他の態様では、これらの基の少なくとも一つまたは全てが、少なくとも一つのサイズが限定された置換基で置換されている。あるいは、これらの基の少なくとも一つまたは全てが少なくとも一つの低級置換基で置換されている。
【０１２２】
式の別の態様では、各置換または非置換アルキルは各置換または非置換C1-C20アルキルであり、各置換若しくは非置換へテロアルキルは置換若しくは非置換2〜20員のヘテロアルキルであり、各置換若しくは非置換シクロアルキルは置換若しくは非置換C4-C8シクロアルキルであり、各置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキルは置換若しくは非置換の4〜8員のヘテロシクロアルキルであり、各置換若しくは非置換アリールは、置換若しくは非置換C4-C8アリールであり、各置換若しくは非置換へテロアリールは置換若しくは非置換4〜8員のヘテロアリールであり、各置換若しくは非置換アルキレンは置換若しくは非置換C1-C20アルキレンであり、各置換若しくは非置換ヘテロアルキレンは置換若しくは非置換の2〜20員のヘテロアルキレンであり、各置換若しくは非置換シクロアルキレンは置換若しくはC4-C8シクロアルキレンであり、各置換若しくは非置換へテロシクロアルキレンは置換若しくは非置換4〜8員のヘテロシクロアルキレンであり、及び各置換若しくは非置換アリーレンは置換若しくは非置換C4-C8アリーレンであり、各置換若しくは非置換ヘテロアリーレンは置換若しくは非置換の4〜8員のヘテロアリーレンである。
【０１２３】
あるいは、各置換または非置換アルキルは各置換または非置換C1-C8-アルキルであり、各置換若しくは非置換へテロアルキルは置換若しくは非置換2〜8員のヘテロアルキルであり、各置換若しくは非置換シクロアルキルは置換若しくは非置換C5-C7シクロアルキルであり、各置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキルは置換若しくは非置換の5〜7員のヘテロシクロアルキルであり、各置換若しくは非置換アリールは、置換若しくは非置換C5-C7アリールであり、各置換若しくは非置換へテロアリールは置換若しくは非置換5〜7員のヘテロアリールであり、各置換若しくは非置換アルキレンは置換若しくは非置換C1-C8アルキレンであり、各置換若しくは非置換ヘテロアルキレンは置換若しくは非置換の2〜8員のヘテロアルキレンであり、各置換若しくは非置換シクロアルキレンは置換若しくはC5-C6シクロアルキレンであり、各置換若しくは非置換へテロシクロアルキレンは置換若しくは非置換5〜7員のヘテロシクロアルキレンであり、及び各置換若しくは非置換アリーレンは置換若しくは非置換C5-C7アリーレンであり、各置換若しくは非置換ヘテロアリーレンは置換若しくは非置換の5〜7員のヘテロアリーレンである。
【０１２４】
上記式のいずれにおいても、結合している部分(たとえばアルキレンまたはヘテロアルキレン)を含む置換基は、サイズが限定された置換基または低級置換基であることができる。たとえば、任意のアルキル基はC1-C10、C1-C6、またはC1-C4アルキル基であってもよい。任意のヘテロアルキル基は、2〜10員、2〜6員、または2〜4員であってもよい。任意のシクロアルキル基は、C3-C8、C5-C7、またはC5-C6シクロアルキル基であってもよい。任意のヘテロシクロアルキル基は、3〜8員、4〜7員、または5〜6員であってもよい。任意のアリール基は、C5-C8またはC5-C6アリール基であってもよい。任意のヘテロアリール基は、5〜8員または5〜6員であってもよい。
【０１２５】
ある態様では、化合物は以下の表１bに示すものである。ある態様では、化合物は以下の表１bに示すものである。
【０１２６】
【表１】
0005819195.tif 000020
【０１２７】
【表２】
0005819195.tif 000021
【０１２８】
【表３】
0005819195.tif 000022
【０１２９】
【表４】
0005819195.tif 000023
【０１３０】
【表５】
0005819195.tif 000024
【０１３１】
【表６】
0005819195.tif 000025
【０１３２】
【表７】
0005819195.tif 000026
【０１３３】
【表８】
0005819195.tif 000027
【０１３４】
【表９】
0005819195.tif 000028
【０１３５】
本明細書中に開示される融合環ヘテロアリール化合物を合成する方法は、以下の実施例区分に示されている。当業者は本明細書に開示の合成法及び公知の化学合成の一般原理を使用または工夫することにより、本発明の範囲内で融合環ヘテロアリール化合物のいずれでも合成する方法を直ちに理解するだろう。
【０１３６】
キナーゼ活性を低下させる方法
別の側面では、Srcチロシンキナーゼの活性を低下させる方法を提供する。本方法は、Srcチロシンキナーゼと有効量の式I、II、III、IVまたはVの化合物とを接触させることを含む。ある態様では、本化合物は式I、IIまたはVの化合物である。別の態様では、化合物は式Iの化合物である。
【０１３７】
本明細書中で使用するSrcチロシンキナーゼは、Srcプロトオンコジーン(proto-oncogene)チロシンキナーゼ及びオンコジーン・チロシンキナーゼのファミリーのいずれかひとつをさす。ある態様では、Srcチロシンキナーゼは、ヒトc-Src(MGC117393とも称される)(配列番号６)またはその腫瘍形成性誘導体などの細胞質Srcチロシンキナーゼ(cellular  Src  tyrosine  kinase)(c-Src)である。Matherら、J  Biol  Chem．2008年、8月15日号；282(33)巻：22709-22頁も参照されたい。
【０１３８】
インビトロ、インサイチューまたはインビボで接触させることができる。たとえばSrcチロシンキナーゼを含む細胞に化合物を暴露して、細胞内に取り込ませ、Srcチロシンキナーゼと接触させ、これによってSrcチロシンキナーゼの活性を低下させることができる。細胞は、哺乳類細胞(たとえばヒト細胞)などの任意の好適な細胞であってもよい。細胞は、組織、臓器または有機体の一部を形成していてもよい。
【０１３９】
関連するある態様では、化合物はAblチロシンキナーゼの活性も低下させることができる。Ablチロシンキナーゼは、Ablプロトオンコジーン・チロシンキナーゼのファミリーのいずれかひとつをさす。ある態様では、Ablチロシンキナーゼは細胞質Ablチロシンキナーゼ(c-Abl)またはBcr-Ablなどのその腫瘍形成性誘導体である。たとえばShaul  Y(2000年)、Cell  Death  Differ．7(1)：10-6頁；Era  T(2002年)Int．J．Hematol．76(1)：35-43頁；及びPendergast  AM(2003年)Adv．Cancer  Res．85巻：51-100頁を参照されたい。かくして、ある態様では、AblキナーゼはBcr-AblキナーゼまたはT315I  Bcr-Ablキナーゼである。本方法はさらに、Ablチロシンキナーゼと化合物とを接触させ、これによってAblチロシンキナーゼの活性を低下させることを含む。本方法がAblチロシンキナーゼと化合物との接触をさらに含む場合には、Abl及びSrcチロシンキナーゼの両方と接触させるために、通常、二種以上の化合物が必要と考えられる。従って、同一化学構造をもつ複数の化合物を使用する。
【０１４０】
上記のように、AblとSrcチロシンキナーゼとの接触は、インビトロ、インサイチューまたはインビボで行うことができる。従ってある態様では、複数の化合物を、Abl及びSrcチロシンキナーゼを含む細胞または容器と接触させる。化合物と一度接触すると、Abl及びSrcチロシンキナーゼ活性は低下する。
【０１４１】
別の側面では、Ablチロシンキナーゼの活性を低下させる方法を提供する。本方法は、Ablチロシンキナーゼと、有効量の式I、II、III、IVまたはVの化合物とを接触させることを含む。ある態様では、化合物は式I、IIまたはIVの化合物である。別の態様では、化合物は式Iの化合物である。ある態様では、Ablキナーゼは、Bcr-AblキナーゼまたはT315I  Bcr-Ablキナーゼである。上記のように、Ablチロシンキナーゼとの接触は、インビトロ、インサイチューまたはインビボで行うことができる。従って、化合物とAblチロシンキナーゼを含む細胞とを接触させ、細胞内に取り込ませ、Ablチロシンキナーゼと接触させ、これによってSrcチロシンキナーゼの活性を低下させることができる。
【０１４２】
関連するある態様では、化合物はSrcキナーゼの活性を低下させることもできる。従って、本方法はさらに、Srcチロシンキナーゼと化合物とを接触させ、これによりSrcチロシンキナーゼの活性を低下させる方法を含むことができる。上記のように、本方法がSrcチロシンキナーゼと化合物との接触をさらに含む場合には、Abl及びSrcチロシンキナーゼの両方と接触させるために、通常、二種以上の化合物が必要と考えられる。従って、同一化学構造をもつ複数の化合物を使用する。従ってある態様では、複数の化合物を、Abl及びSrcチロシンキナーゼを含む細胞または容器と接触させる。化合物と一度接触すると、Abl及びSrcチロシンキナーゼ活性は低下する。
【０１４３】
別の側面では、T315I  Bcr-Ablキナーゼの活性を低下させる方法を提供する。本方法は、T315I  Bcr-Ablキナーゼと有効量の式I、II、III、IVまたはVをもつ化合物とを接触させることを含む。ある態様では、本化合物は式I、IIまたはIVを有する。別の態様では、化合物は式Iを有する。
【０１４４】
関連するある態様では、化合物はSrcキナーゼの活性を低下させることも可能である。従って、本化合物はさらに、Srcチロシンキナーゼと本化合物とを接触させ、それによってSrcチロシンキナーゼの活性を低下させることを含む。上記のように、本方法がさらにSrcチロシンキナーゼと化合物とを接触させることを含む場合、T315I  Bcr-Ablキナーゼ及びSrcチロシンキナーゼの両方と接触させるために、通常、二種以上の化合物が必要と考えられる。従って、同一化学構造をもつ複数の化合物を使用する。従ってある態様では、複数の化合物を、T315I  Bcr-Ablキナーゼ及びSrcチロシンキナーゼを含む細胞または容器と接触させる。化合物と一度接触すると、T315I  Bcr-Ablキナーゼ及びSrcチロシンキナーゼ活性は低下する。
【０１４５】
処置方法
別の側面では、T315I  Bcr-Ablキナーゼにより介在される疾患の処置の必要な患者においてかかる疾患を処置する方法を提供する。本方法は、有効量の式I、II、III、IVまたはVの化合物を患者に投与することを含む。ある態様では、本化合物は式I、IIまたはIVの化合物である。T315I  Bcr-Ablキナーゼにより介在される疾患は、好酸球増加症候群、隆起性皮膚線維肉腫、慢性骨髄性白血病、または消化管間質腫瘍であってもよい。本化合物は、医薬的に許容可能な賦形剤と共に併用することもできる。
【０１４６】
別の側面では、肝癌、大腸癌、乳癌、黒色腫、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、非小細胞肺癌、消化管間質腫瘍、フィラデルフィア染色体陽性急性リンパ性白血病(Ph+ALL)、腎細胞癌、(原発性)肝細胞癌、好酸球増加症候群、または隆起性皮膚線維肉腫の処置の必要な患者において、肝癌、大腸癌、乳癌、黒色腫、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、非小細胞肺癌、消化管間質腫瘍、フィラデルフィア染色体陽性急性リンパ性白血病(Ph+ALL)、腎細胞癌、(原発性)肝細胞癌、好酸球増加症候群、または隆起性皮膚線維肉腫を処置する方法を提供する。本方法は、有効量の式I、II、III、IVまたはVの化合物をかかる投与の必要な患者に投与することを含む。ある態様では、化合物は式I、IIまたはIVのものである。本化合物は、医薬的に許容可能な賦形剤と共に併用することもできる。
【０１４７】
従って、本発明は、細胞中でSrc(たとえば、c-Src)及びまたはAbl(たとえばBcr-Abl若しくはT315I  Bcr-Abl)キナーゼ活性を減少させる方法を提供する。本方法は、細胞と上記融合環ヘテロアリール阻害剤(たとえば式I、II、III、IVまたはVの化合物)との接触を含む。細胞は臓器または有機体から単離しても、またはその一部を形成していてもよい。
【０１４８】
本明細書中で提供する阻害剤は、疾患または症状の処置において、Src(たとえば、c-Src)及びまたはAbl(たとえばBcr-Abl若しくはT315I  Bcr-Abl)キナーゼ活性の低下によって治療的有用性を見出す。阻害剤は、Src及び/またはAblキナーゼに対して10μM、5μM、1μM、500nM、100nM、50nM、25nM、10nM、5nM、1nM、0.5nM、または0.1nM未満のIC50またはKiを有することができる。
【０１４９】
上記病状の処置のための治療上の使用では、本発明の医薬的方法で使用する融合環ヘテロアリール類は、毎日約0.001mg/kg〜約1000mg/kgの初期投薬量で投与する。約0.1mg/kg〜約100mg/kgの日用量範囲がより典型的である。しかしながら用量は、患者の要件、処置される症状の重篤度及び使用されるモジュレータに依存して様々であり得る。特定の状況に対する正しい用量の決定は、開業医の技能の範囲内である。通常、最適用量のモジュレータよりも少ない量の用量で処置を始める。その後、その状況下で最大の効果が達成されるまで、用量を僅かに増加させることによって増やしていく。便宜上、一日の総用量は、一日の間で数回にわけて投与することができる。
【０１５０】
医薬製剤
別の側面では、本発明は医薬的に許容可能な賦形剤と組み合わせて化合物を含む医薬組成物を提供する。当業者は、医薬組成物とは、上記本発明の化合物の医薬的に許容可能な塩を含むことを理解するだろう。
【０１５１】
治療的及び/または診断用途において、本発明の化合物は、全身及び局所または局部的投与などの種々の投与モードで配合することができる。手法及び製剤は、Remington：The  Science  and  Practice  of  Pharmacy(第20版)、Lippincott、Williams  ＆  Wilkins(2000年)に知見することができる。
【０１５２】
本発明に従った化合物は、広い投与範囲で有効である。正確な用量は、化合物が投与される形状、処置すべき患者、処置すべき患者の体重並びに主治医の好み及び経験により様々である。
【０１５３】
医薬的に許容可能な塩は通常、当業者に公知であるが、たとえば酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ベシル酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、酒石酸水素塩(bitartrate)、臭化物、エデト酸カルシウム、カルンシレート(carnsylate)、クエン酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストレート(estolate)、エシレート(esylate)、フマル酸塩、グルセプテート(gluceptate)、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グルコリルアルサニレート(glycollylarsanilate)、ヘキシルレゾルシネート(hexylresorcinate)、ヒドラバミン(hydrabamine)、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエ酸、ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩(lactobionate)、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、粘液酸塩(mucate)、ナプシル酸塩(napsylate)、硝酸塩、パモ酸塩(エンボネート：embonate)、パントテン酸塩、リン酸塩/二リン酸塩、ポリガラクツロネート(polygalacturonate)、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、セバシン酸塩、琥珀酸塩、硫酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩またはテオクル酸塩(teoclate)が挙げられるが、これらに限定されない。他の医薬的に許容可能な塩は、Remington：The  Science  and  Practice  of  Pharmacy(第20版)、Lippincott、Williams  ＆  Wilkins(2000年)に知見することができる。好ましい医薬的に許容可能な塩としては、酢酸塩、安息香酸塩、ヨウ化物、炭酸塩、クエン酸塩、グルコン酸塩、臭化水素酸塩、塩酸塩、マレイン酸塩、メシル酸塩、ナプシル酸塩、パモ酸塩(エンボネート)、リン酸塩、サリチル酸塩、琥珀酸塩、硫酸塩、または酒石酸塩が挙げられる。
【０１５４】
処置される具体的な症状に依存して、かかる薬剤は、液体または固体剤形に製剤化されて、全身的にまたは局所的に投与することができる。薬剤は、当業者に公知のようにたとえば指定時刻に作動する-(timed-)または徐放性-遅い放出形(sustained-low  release  form)であってもよい。製剤及び投与手法は、Remington：The  Science  and  Practice  of  Pharmacy(第20版)、Lippincott、Williams  ＆  Wilkins(2000年)に知見することができる。好適な経路としては、経口、吸入スプレーによる頬、舌下、直腸、経皮、膣内、経粘膜、鼻腔内または腸内投与；非経口送達、たとえば筋肉内、皮下、髄内注射、並びに鞘内、直接心室内、静脈内、関節内、胸骨内、滑膜内(intra-synovial)、肝臓内、病巣内、頭蓋内、腹腔内、鼻腔内、若しくは眼球内注射または他の送達モードが挙げられる。
【０１５５】
注射に関しては、本発明の薬剤は、製造し、及び水溶液中、たとえばHank溶液、リンガー液または生理食塩水緩衝液などの生理学的に混合可能な緩衝液中で、希釈することができる。かかる経粘膜的投与に関しては、浸透すべきバリヤに好適な浸透剤を製剤中に使用する。かかる浸透剤は通常、当業界で公知である。
【０１５６】
全身投与に適した用量に、本発明の実施用に本明細書中に開示した化合物を配合するための医薬的に許容可能な不活性キャリヤは本発明の範囲内である。キャリヤ及び好適な製造実践を適切に選択すると、本発明の組成物、特に溶液として配合したものは、静脈注射などにより非経口投与することができる。化合物は、経口投与に好適な用量に、当業界で公知の医薬的に許容可能なキャリヤを使用して直ちに配合することができる。かかるキャリヤによって本発明の化合物を、処置すべき被験者(たとえば患者)により経口摂取用の錠剤、ピル、カプセル、液体、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁液などとして配合することができる。
【０１５７】
経鼻または吸入送達用には、本発明の薬剤は、当業者に公知の方法により配合することができ、たとえば可溶化、希釈または調剤物質、たとえば生理食塩水、防腐剤、たとえばベンジルアルコール、吸収促進剤及びフルオロカーボンなどを含むことができるが、これらに限定されない。
【０１５８】
本発明で使用するのに適した医薬組成物としては、活性成分がその使用目的を達成するのに有効量で含まれる組成物が挙げられる。有効量の決定は、当業者の能力の範囲内、特に本明細書に提供した詳細な開示の範囲内である。
【０１５９】
活性成分に加えて、これらの医薬組成物は、活性成分を医薬的に使用し得る製剤に処理し易い賦形剤及び助剤を含む好適な医薬的に許容可能なキャリヤを含むことができる。経口投与用に配合された製剤は、錠剤、ドラジェ、カプセル、または溶液の形状であってもよい。
【０１６０】
経口用途用の医薬製剤は、活性成分と固体賦形剤とを混合し、得られた混合物を任意に粉砕し、及び顆粒混合物を処理し、好適な助剤を添加後、所望により錠剤またはドラジェコアを得ることができる。好適な賦形剤は、特に、たとえば乳糖、蔗糖、マンニトール、若しくはソルビトールなどの糖類；とうもろこしデンプン、小麦デンプン、米デンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチル-セルロース、ナトリウムメチル-セルロース(CMC)などのセルロース製剤、及び/またはポリビニルピロリドン(PVP：ポビドン)などの充填剤である。所望により、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、若しくはアルギン酸または、アルギン酸ナトリウムなどのその塩などの崩壊剤を添加することができる。
【０１６１】
ドラジェコアには好適なコーディングを施す。この目的に関しては、濃縮糖溶液を使用することができ、任意にアラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、カルボポールゲル、ポリエチレングリコール(PEG)、及び/または二酸化チタン、ラッカー溶液及び、好適な有機溶媒または溶媒混合物を含むことができる。活性化合物用量の識別または様々な組み合わせを示すために染料または顔料を錠剤またはドラジェコーティングに加えることができる。
【０１６２】
経口的に使用できる医薬製剤は、ゼラチン製の押し込み式カプセル、並びにゼラチン及び、グリセロールまたはソルビトールなどの製密閉カプセル可塑剤が挙げられる。押し込み式カプセルは、乳糖などの充填剤、スターチなどのバインダー、及び/またはタルクまたはステアリン酸マグネシウムなどの滑剤と、場合により安定剤との混合物中に活性化合物を含むことができる。ソフトカプセルでは、活性化合物は脂肪油(fatty  oil)、液体パラフィンまたは液体ポリエチレングリコール(PEG)などの好適な液体中に溶解または懸濁させることができる。さらに安定剤を添加することができる。
【０１６３】
処置または予防すべき特定の症状または病状に従って、かかる症状を処置または予防するために通常投与される追加の治療薬を本発明の阻害剤と一緒に投与することができる。たとえば化学療法薬または他の抗増殖薬を本発明の阻害剤と組み合わせて、増殖性疾患及び癌を処置することができる。公知の化学療法薬の例としては、アドリアマイシン、デキサメタゾン、ビンクリスチン、シクロホスファミド、フルオロウラシル、トポテカン、タキソール、インターフェロン、及びプラチナ誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１６４】
本発明の化合物と混合し得る他の薬剤の例としては、抗炎症剤、たとえばコルチコステロイド、TNF遮断薬、IL-1  RA、アザチオプリン(azathioprine)、シクロホスファミド、及びスルファサラジン；免疫調節及び免疫抑制剤、たとえばシクロスポリン、タクロリムス、ラパマイシン、ミコフェノール酸モフェチル、インターフェロン、コルチコステロイド、シクロホスファミド、アザチオプリン及びスルファサラジン；神経栄養因子、たとえばアセチルコリンエステラーゼ阻害剤、MAO阻害剤、インターフェロン、抗けいれん薬、イオンチャンネル遮断薬、リルゾール(riluzole)及び抗パーキンソン薬；心臓血管疾患の処置薬、たとえばベータ遮断薬、ACE遮断薬、利尿薬、硝酸エステル(nitrate)、カルシウムチャンネル遮断薬、及びスタチン；肝臓疾患の処置薬、たとえばコルチコステロイド類、コレスチラミン、インターフェロン及び抗ウイルス薬；血液疾患の処置薬、たとえばコルチコステロイド類、抗白血病薬、及び成長因子；糖尿病治療薬、たとえばインスリン、インスリン類似体、アルファグルコシダーゼ阻害剤、ビグアニド、及びインスリン増感剤；免疫不全疾患の処置薬、たとえばガンマグロブリンが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１６５】
これらの追加の薬剤は、複数の投薬計画の一部として、組成物とな別に投与することができる。あるいは、これらの薬剤は、単一組成物中で化合物と混合して、単一剤形の一部であってもよい。
【０１６６】
本発明は、本発明の単一の側面の例示とされる例示の態様による範囲に限定されるものではない。実際、本明細書中に記載のものに加えて本発明の様々な変更は、前述の記載から当業者には明らかであろう。かかる変更は本発明の範囲内に含まれるものである。さらに、本発明の任意の態様の任意の一つ以上の特徴は、本発明の範囲から逸脱することなく、本発明の任意の他の態様の任意の一つ以上の他の特徴と組み合わせることができる。たとえば、上記本発明の化合物は、本明細書に記載の処置法及びキナーゼ活性を低下させる方法に等しく適用できる。本出願で引用された文献は当業者のレベルの例であり、既に具体的に含まれていようとなかろうと、全ての目的に関してその全体が本明細書中、参照として含まれる。
【０１６７】
アッセイ
AblまたはSrcキナーゼの活性は、P32アッセイ、蛍光アッセイ、免疫アッセイなどの種々のインビトロ、インサイチュー及びインビボアッセイを使用して評価することができる。さらに、かかるアッセイは、Abl及びSrcキナーゼの阻害剤を試験するのに使用することができる。特定の一アッセイを、「インビトロキナーゼアッセイ」なる表題の区分の実施例で開示する。Abl及びSrcキナーゼは、治療的または予防投薬計画(regimen)のターゲットである多くの疾患に関連していた。本発明の阻害剤及び方法は、上記のこれらの症状の処置に有用である。したがって、本明細書に開示の方法並びに当業界で公知の方法を使用して、当業者はキナーゼ活性を減少させる程度を評価するために本明細書に記載の融合環ヘテロアリール化合物を容易に製造及び試験することができる。
【０１６８】
典型的な合成
本発明の化合物は、一般的に公知の合成法を好適に組み合わせることによって合成する。本発明の化合物を合成するのに有用な技術は、関連する分野の当業者には容易に明らかであり、且つ利用し易い。以下の議論は、本発明の化合物を組み立てる際に使用するのに利用可能な様々な特定の方法を説明するために提供する。しかしながら、この議論は本発明の化合物を製造する際に有用な反応または反応順序の範囲を限定するものではない。
【０１６９】
たとえば、以下のスキーム1は本明細書で記載した化合物の合成で使用し得る様々な全合成戦略の一つを提供する。スキーム1の置換基は、式IVに関して本明細書中で記載した通りである。
【化１９】
0005819195.tif 000029
【０１７０】
スキーム1、段階aに関して、酸出発材料は、DMF及びCH2Cl2などの中で、塩化オキサリルと反応して、酸クロリドを提供することができる。段階bでは、酸クロリドは、THF中などでマロノニトリル及びNaHと反応して、置換されたマロノニトリルを提供することができる。段階cでは、化合物は、ジオキサン及び水などの中で、ジメチルサルフェート及びNaHCO3とさらに反応して、エノールエーテルを提供することができる。段階dでは、エノールエーテルはTHFなどの中でヒドラジンと反応して、ピラゾールを提供することができる。段階eでは、ピラゾールはさらにアミドと反応して、ピラゾロ[3,4-d]ピリミジンアミンを提供することができる。段階fでは、懸垂ナイトレートは還元されてアミンを提供することができる。最終的に段階gでは、懸垂アミンでの合成(elaboration)を使用することにより、本発明の化合物を提供することができる。
【０１７１】
場合により、本明細書及びスキーム1に記載の一つ以上の官能基は合成の間に保護し、続いて当業界で公知の方法により脱保護することができる。典型的なアミン保護基としては、カルボベンジルオキシ(Cbx)、p-メチオキシベンジルカルボニル(p-methyoxybenzyl  carbonyl)(Boz)、tert-ブチルオキシカルボニル(Boc)、9-フルオレニルメチルオキシカルボニル(FMoc)、ベンジル(Bn)、p-メトキシベンジル(PMB)、2,3-ジメトキシベンジル(DMPM)、p-メトキシフェニル(PMP)、トシル(Ts)、アリルオキシカルボニル(Alloc)などが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１７２】
アリール官能基の間などの炭素-炭素結合の形成は、当業界で公知の様々な経路により利用可能である。たとえばスキーム2に示されたSuzuki反応は、Pd錯体により触媒作用を受けた、アリール-またはビニル-ボロン酸とアリール-またはビニル-ハライドとの反応である。典型的なPd錯体としては、当業界で公知のように、テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)、及びポリマー-結合テトラキスパラジウムが挙げられるが、これらに限定されない。
【化２０】
0005819195.tif 000030
【実施例】
【０１７３】
実施例１：タンパク質発現及び精製
c-SrcまたはAblの6xHIS(配列番号７)融合物(fusion)を近年開発されたストラテジーに基づいてYopHホスファターゼとGroELシャペロンの存在下、バクテリアで発現させた(Seeligerら、2005年、Protein  Sci  14巻：3135-3139頁)。簡単にそれぞれのキナーゼをNi-NTA固定化金属アフィニティクロマトグラフィーによりバッチで精製した。6X  HisをTEV切断により除去すると、遊離したキナーゼドメインが得られた。切断後、イオン交換クロマトグラフィーを使用して、過剰量のTEVと少量の混入物質を除去した。最終段階では、タンパク質を100mM  NaCl、20mM  Tris、5％グリセロール、2mM  DTT中、ゲル濾過カラムに適用した。プールしておいた画分を濃縮し、貯蔵用に液体窒素中で急速冷凍した。タンパク質は、当業界で公知のようにウエスタンブロット分析により明らかになるように、その非リン酸化状態で単離した。タンパク質構築物の典型的な収量は、バクテリア培養物1L当たりタンパク質1〜10mgの範囲で様々であった。
【０１７４】
実施例２：インビトロキナーゼアッセイ
精製c-SrcまたはAblを約10mMの濃度にキナーゼ反応緩衝液(10mM  HEPES[pH  7.2]、10mM  MgCl2、0.2mM  DTT)中に希釈し、1mg/mL  BSA、2.5％(v/v)DMSO、133μMペプチド(Ablに関しては配列EAIYAAPFKKK(配列番号８)及びc-Srcに関してはEIYGEFKKK(配列番号９))及び種々の濃度の阻害剤でプレインキュベートした。キナーゼ活性は、5mMCiγ32P  ATPを補った100mM冷ATPを添加して開始し、室温(RT)で進行させた。10分で反応物1mLをホスホセルロースシート(P81、Whatman)上にスポットし、続いて洗浄緩衝液(1.0％(v/v)リン酸)中で浸漬した。このシートを緩衝液中で５回洗浄し、乾燥し、転移した放射能は、Typhoon(商標)スキャナ(Molecular  Dynamics)を使用してホスファーイメージング(phosphorimaging)により測定した。放射能カウント(radioactive  count)はImageQuant(商標)ソフトウエアを使用して定量し、滴定データはPrism(登録商標)ソフトウエアパッケージを使用してIC50値を導き出すためにS字状(sigmoidal)用量反応に適合した。用量反応は100mMから出発して1/3希釈を用いて12点阻害剤滴定をベースとした。実験は平均値を導くために２〜４回完了した。
【０１７５】
実施例３：結晶化及び構造決定
結晶化の前に、精製c-SrcをS200ゲル濾過カラムに適用した。プールしておいた画分を3〜10mg/mLに濃縮し、100mM  NaCl、10mM  Tris[pH7.8]、5％グリセロール、2mM  DTT、4％DMSO中、等モル量の３または５と混合した。複合体１μLを含む吊るしてある液滴を、等容積の4％PEG  4K、16％グリセロール、50mM  NaAc、100mM  MES[pH6.5]を含むウエル緩衝液と混合し、14℃で成長させると、c-Src-3及びc-Src-5結晶がいずれも得られた。20％グリセロールを補ったウエル緩衝液中で結晶を凍結防止(cryoprotect)し、急速冷凍した。回折データは−170℃で集めた。データ処理及び換算は、c-Src-5複合体に関してはHKL2000(Otwinoski及びMinor、1997年、Macromolecular  Crystallography、パートA  276巻：307-326頁)及びc-Src-3複合体に関してはXDS(Kabsch、1993年、Journal  of  Applied  Crystallography  26巻：795-800頁)を使用して実施した。両方の構造は、プログラムPHASER(Mccoyら、2007年、Journal  of  Applied  Crystallography  40巻：658-674頁)のサーチモデルとして活性化セグメント、へリックスaC及び任意のリガンドがないSrcキナーゼドメイン(PDB  ID：1YOJ)(配列番号12)のX-線結晶学的構造を使用して分子置換により解決した。分子置換ソルーション(molecular  replacement  solution)は、Coot(Emsley及びCowtan、2004年、Acta  Crystallogaphica  Section  D-Biologial  Crystallography  60巻：2126-32頁)を使用してマニュアルフィッティングの別サイクル及び[2Fo−Fc]への構築及び複合体OMIT電子密度マップ(composit  omit  electron  density  map)で変形及び精密化した。構造の精密化(refinement)は、CNS(Brungerら、1998年、Acta  Cystallographica  Section  D-Biological  Crystallography  54巻：905-921頁)におけるシミュレーテッド-アニーリング(simulated  annealing)及び最尤(maximum  likelihood)プロトコル並びにPEFMAC(Murshudovら、1997年、Acta  Crystallographica  Section  D-Biological  Crystallography  53巻：240-255頁)を使用して実施した。阻害剤のトポロジー及びパラメーターファイルは、PRODRUG(Schuttelkopf及びvan  Aalten、2004年、Acta  Crystallographica  Section  D-Biological  Crystallography  60巻：1355-1363頁)を使用して発生させた。データ収集及び精密化統計は、以下の表２に示す。Src-5複合体由来の代表的な複合体omitシミュレーテッド・アニーリング電子密度([2Fo−Fc])マップを図６に示す。全構造図はPYMOL(Delano及びLam、2005年、Abstracts  of  Papers  of  the  American  Chemical  Society  230巻：U1371-1372頁)で作成した。構造はProtein  Data  BankでIDコード3EL7(Src-3)(配列番号４)及び3EL8(Src-5)(配列番号４)のもと預託した。
【０１７６】
【表１０】
0005819195.tif 000031
【０１７７】
化学合成
出発物質は市販のものであった。反応は、薄層クロマトグラフィー(TLC)でモニターし、化合物は液体クロマトグラフィー-質量分析法(LC-MS)及び核磁気共鳴(NMR)分光測定によりキャラクタリゼーションした。本明細書中に記載した変更をして当業界で公知(Bishopら、1999年、J  American  Chemical  Society  121巻：627-631頁；Bishopら、1998年、Curr  Biol  8巻：257-266頁；Blethrowら、2004年、Curr  Protoc  Mol  Biol  Chapter  18巻：ユニット18  11；Apselら、2008年、Nat．Chem．Biol．4巻：691-699頁；Darら、2008年、Chem．Biol．20巻：1015-1022頁)のピラゾロピリミジン類合成の確立経路をベースとして、化合物１〜４は3-ニトロフェニル酢酸から出発し、化合物５は4-ニトロフェニルボロン酸から出発して合成した。
【０１７８】
実施例４：2-(1-メトキシ-2-(3-ニトロフェニル)エチリデン)マロノニトリル
本発明で記載した化合物の合成に有用な化合物、2-(1-メトキシ-2-(3-ニトロフェニル)エチリデン)マロノニトリルは、以下のスキーム3に提供するものを含む、当業界で公知の様々な経路により簡便に合成される。
【化２１】
0005819195.tif 000032
【０１７９】
2-(3-ニトロフェニル)アセチルクロリド
3-ニトロフェニル酢酸(5g，27.6mmol；Sigma-Aldrich)の溶液に、CH2Cl240mL中の塩化オキサリル(12mL，138mmol)及びDMF(0.1mL)を添加した。反応混合物を室温で６時間攪拌すると、透明黄色溶液が得られた。溶媒を真空下で除去すると、酸クロリドの黄色固体が得られ、これをCH2Cl2で３回洗浄し、次段階を直接実施した。
【０１８０】
2-(2-(3-ニトロフェニル)アセチル)マロノニトリル
酸クロリドをTHF10mLに溶解し、THF中のマロノニトリル(2.7g，41mmol)及びNaH(60％パラフィン油エマルションの3.5g，88.3mmol)の氷冷溶液を含む反応フラスコに滴下添加した。反応物を４時間攪拌し、室温に温め、その後2N  HCl25mLを添加した。水性層をEtOAcで３回抽出した。有機抽出物を合わせ、真空濃縮した。
【０１８１】
2-(1-メトキシ-2-(3-ニトロフェニル)エチリデン)マロノニトリル
2-(2-(3-ニトロフェニル)アセチル)マロノニトリルを含む粗な材料をH2O(7mL)と1,4-ジオキサン(42mL)中に溶解し、これにNaHCO3(11.5g，138mmol)とジメチルサルフェート(10.5mL，110mmol)を添加した。反応混合物を80℃に加熱し、12時間攪拌したままにした。反応混合物をEtOAc(100mL)と塩水(100mL)で希釈した。水性部分をEtOAc(3×100mL)で抽出した。合わせた有機画分をMgSO4上で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。回収した固体をシリカゲルのクロマトグラフィー(100%クロロホルム)で精製した。所望のエノールエーテルを含有する画分をプールし、濃縮し、熱MeOHに溶解した。溶液を冷却すると、一晩で細かい白色結晶が形成し、これを濾過により回収し、氷冷MeOHで洗浄すると、2-(1-メトキシ-2-(3-ニトロフェニル)エチリデン)マロノニトリルが得られた。
【化２２】
0005819195.tif 000033
【０１８２】
実施例５：1-(3-((4-アミノ-1-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)メチル)フェニル)-3-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ウレア(化合物１)
2-(1-メトキシ-2-(3-ニトロフェニル)エチリデン)マロノニトリル(0.4g，1.6mmol)を氷浴中、１時間、THF10mL中でメチルヒドラジン(0.09mL；1.6mmol，Sigma-Aldrich)と混合した。生成物を真空下で濃縮し、MeOHから再結晶すると、3-(3-ニトロベンジル)-5-アミノ-1-メチル-1H-ピラゾール-4-カルボニトリル(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：258.1，計算値：258.09)が得られた。結晶化した生成物(0.2g；0.08mmol)をホルムアミド(1.5mL)と混合し、160℃に一晩加熱した。H2Oを冷却反応物に添加し、沈殿を濾過し、乾燥すると、3-(3-ニトロベンジル-)-1-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：285.1，計算値：285.1)が得られた。沈殿した中間体(0.09g；0.33mmol)を過剰量の亜鉛末、5mL  THF、0.4mL  HOAcと室温、アルゴン下で12時間混合した。その後、反応物をセライト(登録商標)で濾過し、EtOAc抽出し、真空下で濃縮すると、3-(3-アミノベンジル)-1-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：255.3，計算値：255.13)が得られた。還元前駆体に、モル当量の3-(トリフルオロメチル)フェニルイソシアネート(Sigma-Aldrich)を氷冷CH2Cl2に滴下添加した。TLCで判断して完了するまで反応を進行させ、これを真空下で濃縮し、50：50のH2O-CH3CN中に再懸濁させ、CH3CN/H2O/0.1%TFA(1-100%勾配液)中、C18カラムで精製すると、化合物１：1-(3-((4-アミノ-1-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)メチル)フェニル)-3-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ウレア(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：442.1，計算値：442.15)が得られた。
【化２３】
0005819195.tif 000034
【０１８３】
実施例６：1-(3-((4-アミノ-1-イソプロピル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)メチル)フェニル)-3-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ウレア(化合物２)
化合物２の具体的な合成戦略を以下のスキーム４に示す。
【化２４】
0005819195.tif 000035
【０１８４】
試薬2-(1-メトキシ-2-(3-ニトロフェニル)エチリデン)マロノニトリル(1.2g；4.7mmol)を50mL  EtOH中のイソプロピルヒドラジン-HCl(0.57g；5.2mmol；Sigma-Aldrich)、1.4mLトリエチルアミンと、室温で２時間混合した。反応物を真空下で濃縮し、塩水中に再懸濁し、クロロホルム抽出した。有機層をMgSO4上で乾燥した。その後、有機懸濁液を濾過し、真空下で濃縮し、1%MeOH：CHCl3中のシリカゲルで精製すると、3-(3-ニトロベンジル)-5-アミノ-1-イソプロピル-1H-ピラゾール-4-カルボニトリル(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：286.4，計算値：286.12)が得られた。生成物をホルムアミド(1.5mL)と混合し、160℃に一晩加熱した。H2Oを冷却反応物に添加し、沈殿を濾過し、乾燥すると、3-(3-ニトロベンジル-)-1-イソプロピル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：313.4，計算値：313.13)が得られた。沈殿した中間体を過剰量の亜鉛末、5mL  THF、0.4mL  HOAcと室温、アルゴン下で12時間混合した。その後、反応物をセライト(登録商標)で濾過し、EtOAc抽出し、真空下で濃縮すると、3-(3-アミノベンジル)-1-イソプロピル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：283.11，計算値：282.16)が得られた。還元前駆体に、モル当量の3-(トリフルオロメチル)フェニルイソシアネート(Sigma-Aldrich)を氷冷CH2Cl2に滴下添加した。TLCで判断して完了するまで反応を進行させ、これを真空下で濃縮し、50：50のH2O-CH3CN中に再懸濁させ、CH3CN/H2O/0.1%TFA(1-100%勾配液)中、C18カラムで精製すると、化合物２：1-(3-((4-アミノ-1-イソプロピル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)メチル)フェニル)-3-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ウレア(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：470.5，計算値：470.18)が得られた。
【化２５】
0005819195.tif 000036
【０１８５】
実施例７：1-(3-((4-アミノ-1-シクロペンチル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)メチル)フェニル)-3-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ウレア(化合物３)
試薬2-(1-メトキシ-2-(3-ニトロフェニル)エチリデン)マロノニトリル(0.3g；1.3mmol)を5mL  EtOH中のヒドラジン一塩酸塩(0.07mL；1.4mmol；Sigma-Aldrich)と、室温で1時間混合した。反応物を真空下で濃縮すると、3-(3-ニトロベンジル)-5-アミノ-1H-ピラゾール-4-カルボニトリル(0.3g；1.3mmol；ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：244.5，計算値：244.1)が得られた。
【化２６】
0005819195.tif 000037
【０１８６】
これを続いてホルムアミド(6mL)と混合し、180℃に一晩加熱した。H2Oを冷却反応物に添加し、沈殿を濾過し、乾燥すると、3-(3-ニトロベンジル-)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(0.26g；0.96mmol，ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：271.4，計算値：271.09)が得られた。
【化２７】
0005819195.tif 000038
【０１８７】
回収した中間体(0.05g；0.18mmol)を、1mL  DMF中のブロモシクロペンタン(0.1mL；0.38mmol)、0.125g  K2CO3と混合し、アルゴン下で２時間還流した。反応物を濾過して固体K2CO3を除去し、濾液を塩水と混合して、有機層をCH2Cl2で抽出すると、3-(3-ニトロベンジル)-1-シクロペンチル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：339.5，計算値：339.15)が得られた。
【化２８】
0005819195.tif 000039
【０１８８】
この材料の還元は、化合物１のように実施すると、3-(3-アミノベンジル)-1-シクロペンチル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：309.5，計算値：309.17)が得られた。還元前駆体を3-(トリフルオロメチル)フェニルイソシアネートと結合させ、化合物１に関して記載したように精製すると、化合物３：1-(3-((4-アミノ-1-シクロペンチル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)メチル)フェニル)-3-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ウレア(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：496.4，計算値：496.2)が得られた。
【化２９】
0005819195.tif 000040
【０１８９】
実施例８：1-(3-((1-tert-ブチル-アミノ-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)メチル)フェニル)-3-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ウレア(化合物４)
試薬2-(1-メトキシ-2-(3-ニトロフェニル)エチリデン)マロノニトリル(1.2g；4.7mmol)を50mL  EtOH中のtert-ブチルヒドラジン-HCl(0.57g；5.2mmol；Sigma-Aldrich)、1.4mLトリエチルアミンと、80℃で２時間混合した。反応物を真空下で濃縮し、塩水中で再懸濁し、クロロホルム抽出した。有機層をMgSO4上で乾燥した。その後、有機懸濁液を濾過し、真空下で濃縮し、1%MeOH：CHCl3のシリカゲルで精製すると、3-(3-ニトロベンジル)-1-tert-ブチル-5-アミノ-1H-ピラゾール-4-カルボニトリル(ESI-MS  m/z[M−CH3]+、実測値：285.5，計算値：285.14)が得られた。
【化３０】
0005819195.tif 000041
【０１９０】
この生成物をホルム化合物１と同様にホルムアミドと混合すると、3-(3-ニトロベンジル-)-1-tert-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：327.4，計算値：327.15)が得られた。
【化３１】
0005819195.tif 000042
【０１９１】
この材料の還元は化合物１のように完了すると、3-(3-アミノベンジル)-1-tert-ブチル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：297.13，計算値：297.17)が得られた。還元した前駆体を3-(トリフルオロメチル)フェニルイソシアネートと結合させ、化合物１に関して記載のように精製すると、化合物４：1-(3-((1-tert-ブチル-アミノ-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)メチル)フェニル)-3-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ウレア(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：484.5，計算値：484.2)が得られた。
【化３２】
0005819195.tif 000043
【０１９２】
実施例９：1-(4-(4-アミノ-1-イソプロピル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)フェニル)-3-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ウレア(化合物５)
化合物５に関する合成戦略を以下のスキーム５に示す。
【化３３】
0005819195.tif 000044
【０１９３】
スキーム５を参照して、4-ニトロフェニルボロン酸(100mg，0.330mmol；Sigma-Aldrich)を６mLの1,2メトキシエタン、飽和炭酸ナトリウム1mL及びEtOH  1.65mL及びポリマーに結合させたテトラキスパラジウム200mg中、Suzuki反応により、3-ヨード-1-イソプロピル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(140mg，0.8248mmol；Apselら、2008年)に結合させた。反応物を室温で12時間、アルゴン下で攪拌し、Whatman紙を通して濾過してパラジウムを除去し、塩水と混合し、クロロホルム中で抽出し、生成物を続いてEtOAc中シリカ上で精製し、真空下で濃縮した。精製した固体1-イソプロピル-3-(4-ニトロフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：299.1，計算値：299.1；100mg，0.336mmol)を亜鉛末、5mL  THF、0.4mL  EtOAcと、室温、アルゴン下で12時間混合した。反応混合物をセライト(登録商標)を通して濾過し、EtOAc抽出し、真空下で濃縮すると、3-(4-アミノフェニル)-1-イソプロピル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：269.1，計算値：269.1)が得られた。この還元生成物に、モル当量の3-(トリフルオロメチル)フェニルイソシアネート(Sigma-Aldrich)を氷冷CH2Cl2中で滴下添加した。TLCで完了したと判断するまで反応を進行させ、反応物を真空下で濃縮し、50：50のH2O-CH3CN中に再懸濁させ、CH3CN/H2O/0.1%TFA(1-100%勾配液)中、C18カラムで精製すると、化合物５：1-(4-(4-アミノ-1-イソプロピル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)メチル)フェニル)-3-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ウレア(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：455.2，計算値：455.2)が得られた。
【化３４】
0005819195.tif 000045
【０１９４】
実施例１０：N-(3-((4-アミノ-1-ベンジル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)メチル)フェニル)-3-(トリフルオロメチル)ベンズアミド(BB5)
化合物BB5に関する合成戦略を以下のスキーム６に示す。
【化３５】
0005819195.tif 000046
【０１９５】
試薬2-(1-メトキシ-2-(3-ニトロフェニル)エチリデン)マロノニトリル(0.97g，4.0mmol)を10mLのEtOAc中、室温で90分間、ヒドラジン(0.3mL；6.0mmol；Sigma-Aldrich)と混合した。その後、反応物を真空下で濃縮し、塩水中に再懸濁し、クロロホルムで抽出した(3×50mL)。有機層をMgSO4上で乾燥し、次いで濾過し、真空下で濃縮すると、3-(3-ニトロベンジル)-5-アミノ-1H-ピラゾール-4-カルボニトリル(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：244.5，計算値：244.1)が得られた。生成物をホルムアミド(1.5mL)と混合し、160℃に一晩加熱した。H2Oを冷却反応物に添加し、沈殿を濾過し、乾燥すると、3-(3-ニトロベンジル-)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：271.4，計算値：271.1)が得られた。回収した固体(50mg，0.19mmol)を、臭化ベンジル(0.1mL，0.28mmol)、K2CO3(0.125g)、DMF(1.0mL)を含む溶液に添加した。反応混合物をアルゴンでパージし、80℃で一晩攪拌した。反応物を濾過して固体K2CO3を除去し、濾液を塩水と混合して、有機層をCH2Cl2で抽出(3×50mL)すると、3-(3-ニトロベンジル)-1-ベンジル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：361.4，計算値：361.1)が得られた。この沈殿した中間体を過剰量の亜鉛末、5mL  THF、0.4mL  EtOAcと、室温、アルゴン下で12時間混合した。反応混合物をセライト(登録商標)を通して濾過した後、EtOAc抽出し、真空下で濃縮すると、3-(4-アミノベンジル)-1-ベンジル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：331.5，計算値：331.2)が得られた。この還元前駆体に、モル当量の3-(トリフルオロメチル)ベンゾイルクロリド(Sigma-Aldrich)を氷冷CH2Cl2中で滴下添加した。TLCで完了したと判断するまで反応を進行させ、反応物を真空下で濃縮し、50：50のH2O-CH3CN中に再懸濁させ、CH3CN/H2O/0.1%TFA(1-100%勾配液)中、C18カラムで精製すると、化合物BB5：N-(3-((4-アミノ-1-ベンジル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)メチル)フェニル)-3-(トリフルオロメチル)ベンズアミド(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：503.4，計算値：503.2)が得られた。
【０１９６】
実施例１１：1-(3-((4-アミノ-1-ベンジル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)メチル)フェニル)-3-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ウレア(BB6)
3-(3-アミノベンジル)-1-ベンジル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミンに、モル当量の3-(トリフルオロメチル)フェニルイソシアネート(Sigma-Aldrich)を氷冷CH2Cl2中、滴下添加した。TLCで完了したと判断するまで反応を進行させ、反応物を真空下で濃縮し、50：50のH2O-CH3CN中に再懸濁させ、CH3CN/H2O/0.1%TFA(1-100%勾配液)中、C18カラムで精製すると、化合物BB6：1-(3-((4-アミノ-1-ベンジル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)メチル)フェニル)-3-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ウレア(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：518.4，計算値：518.2)が得られた。
【０１９７】
実施例１２：1-(4-(4-アミノ-1-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)フェニル)-3-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ウレア(AD59)
化合物AD59に関する合成戦略を以下のスキーム７に示す。
【化３６】
0005819195.tif 000047
【０１９８】
4-ニトロ安息香酸(5g，29.9mmol；Sigma-Aldrich)を、ジクロロメタン50mL中の塩化オキサリル(13.1mL，149.5)及びDMF(0.1mL)と混合し、室温で2時間攪拌すると、透明黄色溶液が得られた。反応物を真空下で濃縮し、ジクロロメタンで二回洗浄すると、明るい黄色固体が得られた。この固体を乾燥THFに溶解し、THF中のマロノニトリル(2.96g，44.9mmol)及びNaH(60%油エマルション8.45ｇ；95.7mmol)の冷却溶液を含む丸底フラスコに滴下添加した。反応物をゆっくりと室温に放冷し、２時間放置した。続いて2N  HCl25mLと塩水50mLを添加し、有機層をEtOAcで３回抽出した。混合した有機抽出物を(Na2SO4)上で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。この茶色固体をH2O/ジオキサン(1：8)50mL、NaHCO3(20.1mg，239mmol)及びジメチルサルフェート(14.2mL，150mmol)に溶解した。溶液を80℃で４時間加熱した。冷却後、塩水を添加し、有機層をEtOAcで３回抽出した。混合した抽出物を乾燥し、真空下で濃縮し、EtOAc-ヘキサン(50〜100％勾配液)のシリカで精製した。2-(メトキシ(4-ニトロフェニル)メチレン)マロノニトリル(100mg，0.436mmol)を含む純粋な黄色固体を、氷冷THF中のモノメチルヒドラジン（20.1mg，0.436mmol）に滴下添加した。２時間後、TLCで完了したと判断され、5-アミノ-1-メチル-3-(4-ニトロフェニル)-1H-ピラゾール-4-カルボニトリル(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：243.9，計算値：244.1)が得られた。これを真空下で濃縮し、ホルムアミド2mL中に再懸濁し、165℃で12時間加熱した。続いて、溶液を冷却し、H2O8mLを添加し、茶色固体を濾過して集めた。精製した固体1-メチル-3-(4-ニトロフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：270.9，計算値：271.1；60mg，0.222mmol)を亜鉛末(0.4g)、10mLTHF、0.25mLEtOAcと室温で12時間混合した。その後、反応混合物をセライト(登録商標)で濾過し、EtOAc抽出し、真空下で濃縮すると、3-(4-アミノフェニル)-1-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：241.0，計算値：241.1)が得られた。この還元生成物に、モル当量の3-(トリフルオロメチル)フェニルイソシアネート(Sigma-Aldrich)を氷冷CH2Cl2中で滴下添加した。TLCで完了したと判断するまで反応を進行させ、反応物を真空下で濃縮し、50：50のH2O-CH3CN中に再懸濁させ、CH3CN/H2O/0.1%TFA(1-100%勾配液)中、C18カラムで精製すると、化合物AD59：1-(4-(4-アミノ-1-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)フェニル)-3-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ウレア(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：428.0，計算値：428.1)が得られた。
【０１９９】
実施例１３：1-(4-(4-アミノ-1-シクロペンチル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)フェニル)-3-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ウレア(AD60)
化合物AD60に関する合成戦略を以下のスキーム８に示す。
【化３７】
0005819195.tif 000048
【０２００】
試薬3-ヨード-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン)(0.5g；1.9mmol；Apselら、2008年、同上)をDMF20mL中、ヨウ化シクロペンチル(0.24mL；2.1mmol)、K2CO31.06gと混合し、アルゴン下、45℃で２時間加熱した。反応物を濾過して固体K2CO3を除去し、濾液を塩水と混合し、有機生成物をCH2Cl2(3×50mL)で抽出した。混合した有機層を真空下で濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィー(MeOH/クロロホルム；5：95)で精製すると、1-シクロペンチル-3-ヨード-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：330.0，計算値：330.0)が得られた。4-ニトロフェニルボロン酸(190mg，1.1mmol；Sigma-Aldrich)を6mLの1,2メトキシエタン、1mL飽和炭酸ナトリウム、1.65mLのNaOH及びポリマーベースのテトラキスパラジウム200mg中、Suzuki反応により1-シクロペンチル-3-ヨード-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(150mg，0.456mmol)に結合させた。反応物を室温で12時間、アルゴン下で攪拌し、Whatman紙を通して濾過してパラジウムを除去し、塩水と混合し、クロロホルム中で抽出し、生成物を続いてEtOAc中シリカ上で精製し、真空下で濃縮した。精製した固体1-シクロペンチル-3-(4-ニトロフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：325.0，計算値：325.1；100mg，0.31mmol)を亜鉛末(605mg，9.25mmol)、10mL  THF、0.35mL  EtOAcと、室温、アルゴン下で12時間混合した。反応混合物をセライト(登録商標)を通して濾過し、EtOAc抽出し、真空下で濃縮すると、3-(4-アミノフェニル)-1-シクロペンチル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：295.0，計算値：295.2)が得られた。この還元生成物に、モル当量の3-(トリフルオロメチル)フェニルイソシアネート(Sigma-Aldrich)を氷冷CH2Cl2中で滴下添加した。TLCで完了したと判断するまで反応を進行させ、反応物を真空下で濃縮し、50：50のH2O-CH3CN中に再懸濁させ、CH3CN/H2O/0.1%TFA(1-100%勾配液)中、C18カラムで精製すると、化合物AD60：1-(4-(4-アミノ-1-シクロペンチル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)フェニル)-3-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ウレア(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：482.2，計算値：482.0)が得られた。
【０２０１】
実施例１４：1-(4-(4-アミノ-1-(3-ヒドロキシプロピル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)フェニル)-3-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ウレア(AD64)
段階１
【化３８】
0005819195.tif 000049
5-アミノ-3-(4-ニトロフェニル)-1H-ピラゾール-4-カルボニトリル
1000mLの丸底フラスコを氷浴中で予備冷却し、これにマロノニトリル(10.2g，0.154mmol)の溶液をTHF(100mL)中の水素化ナトリウム(6.72g，0.28mol)の懸濁液に混合した。この混合物に4-ニトロベンゾイルクロリド(26g，0.14mol；Sigma-Aldrich)をゆっくりと添加した。20分後、反応物を氷浴から外し、２時間攪拌したままにした。次いで硫酸ジメチル(16mL，0.168mol)をシリンジで添加した。反応容器を90℃の油浴に設置し、殆ど直度に黄色固体が形成し始めた。反応物を90℃で２時間放置した。反応混合物を油浴から外し、室温に放冷した。その後、ヒドラジン(7.5mL，0.154mol)を添加し、反応物を60分間攪拌したままにした。塩水200mL及び2N  HCl100mLを添加し、有機層から分離した。水性相をCH2Cl2でさらに2回抽出した。有機相を混合し、真空下で濃縮すると鮮黄色固体が得られた。固体を100mL  EtOHに懸濁し、30分間還流し、不溶性固体を濾過により集め、室温のEtOHで洗浄し、乾燥すると、5-アミノ-3-(4-ニトロフェニル)-1H-ピラゾール-4-カルボニトリル(9.1g，28%収率)が得られた。
【０２０２】
段階２
【化３９】
0005819195.tif 000050
3-(4-ニトロフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン
ホルムアミド(30mL)及び5-アミノ-3-(4-ニトロフェニル)-1H-ピラゾール-4-カルボニトリル(7.25g，32mmol)の溶液をアルゴン雰囲気下、160℃に一晩加熱した。反応物を冷却し、H2O25mLを添加した。得られた固体を濾過により回収し、冷H2Oで濯ぐと、3-(4-ニトロフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(5.9g，72%収率)が得られた。(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：257.5，計算値：257.2)。
【０２０３】
段階３
【化４０】
0005819195.tif 000051
3-(t-ブチルジメチルシリルオキシ)-保護化3-(4-アミノ-3-(4-アミノフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-1-イル)プロパン-1-オール
3-(4-ニトロフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(0.5g，1.95mmol3及びK2CO3(1.08g，7.8mmol)のDMF(20mL)中の溶液をアルゴン雰囲気下、80℃にした。3-(-t-ブチルジメチルシリルオキシ)プロピルブロミド(0.54mL，2.34mmol)をシリンジで添加した。反応混合物を３時間攪拌したままにした。反応混合物を冷却し、次いで濾過した。濾液を真空下で濃縮したが、蒸発乾涸はさせなかった。0.1クエン酸ナトリウム14mLを添加すると橙色固体が形成し、これを濾過により集めると、TBS保護化3-(4-アミノ-3-(4-ニトロフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-1-イル)プロパン-1-オール(0.79g，94%収率)が得られた。(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：429.6，計算値：429.6)。
【０２０４】
橙色固体(400mg，0.93mmol)を亜鉛粉末(1.8g，28mmol)、10mL  THF、及び1mL  HOAcと室温、アルゴン下で12時間混合した。その後、反応混合物をセライト(登録商標)で濾過し、EtOAc抽出し、真空下で濃縮するとTBS保護化3-(4-アミノ-3-(4-アミノフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-1-イル)プロパン-1-オールが得られた。(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：399.7，計算値：399.6)。
【０２０５】
段階４
【化４１】
0005819195.tif 000052
TBS保護化3-(4-アミノ-3-(4-アミノフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-1-イル)プロパン-1-オール(0.2g，0.51mmol)のCH2Cl2(10mL)中の溶液を氷浴中で冷却した。これに、3-(トリフルオロメチル)フェニルイソシアネート(0.072mL，0.5mmol)のCH2Cl2(5mL)中に希釈したものを滴下添加した。反応物を室温に放置して温め、12時間攪拌したままにした。ウレア中間体の形成はTLC及びLC-MSにより判断した(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：586.8，計算値：587.7)。次いで2N  HCl(3mL)
を反応混合物に添加した。１時間後、水(25mL)を添加し、有機相を抽出した(2×50mL  CH2Cl2)。有機相を真空下で濃縮し、シリカゲルのカラムクロマトグラフィー(EtOAc，100%)を使用して精製すると、最終化合物AD64が得られた。(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：472.6，計算値：472.4)。
【０２０６】
実施例１５：N-(4-(4-アミノ-1-(3-ヒドロキシプロピル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)フェニル)-3-(トリフルオロメチル)ベンズアミド(AD65)
【化４２】
0005819195.tif 000053
TBS-保護化-3-(4-アミノ-3-(4-アミノフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-1-イル)プロパン-1-オール(0.2g，0.51mmol)のCH2Cl2(10mL)中の溶液を氷浴中で冷却した。これに、3-(トリフルオロメチル)ベンゾイルクロリド(0.074mL，0.5mmol；Sigma-Aldrich)のCH2Cl2(5mL)中に希釈したものを滴下添加した。反応物を室温に放置して温め、3時間攪拌したままにした。ベンズアミド中間体の形成はTLC及びLC-MSにより判断した(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：571.7，計算値：571.2)。その後、2N  HCl(3mL)を直接反応混合物に添加し、1時間攪拌した。水(25mL)を添加し、有機相を抽出した(2×CH2Cl2)。有機相を真空下で濃縮し、シリカゲルのカラムクロマトグラフィー(EtOAc，100%)を使用して精製すると、最終化合物AD65が得られた。(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：457.6，計算値：457.2)。
【０２０７】
実施例１６：1-(4-(4-アミノ-1-((S)-テトラヒドロフラン-3-イル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)フェニル)-3-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ウレア(AD66)
段階１
【化４３】
0005819195.tif 000054
(R)-テトラヒドロフラン-3-イルメタンスルホネート
(R)-テトラヒドロフラン-3-オール(1.1g，12.5mmol)及びトリエチルアミン(13.6mL，97.5mmol)のCH2Cl2中の溶液を氷浴中で冷却した。これに、メタンスルホニルクロリド(3.0mL，39mmol)のCH2Cl2(10mL)中に希釈したものを滴下添加した。反応物を室温で12時間攪拌したままにした。水を添加し有機相をCH2Cl2中に抽出(3×50mL)し、これを続いてシリカ上で乾燥し、シリカゲルのカラムクロマトグラフィー(50%EtOAc：ヘキサン〜100％EtOAc勾配液)を使用して精製すると、(R)-テトラヒドロフラン-3-イルメタンスルホネート(0.97g，茶色油，47％収率)が得られた。
【０２０８】
段階２
【化４４】
0005819195.tif 000055
3-(4-アミノフェニル)-1-((S)-テトラヒドロフラン-3-イル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン
3-(4-ニトロフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(0.5g，1.95mmol)、K2CO3(1.08g，7.8mmol)、及び(R)-テトラヒドロフラン-3-イルメタンスルホネート(0.389g，2.34mmol)のDMF(20mL)中の溶液をアルゴン雰囲気下、80℃にした。反応混合物を３時間攪拌したままにして、冷却し、濾過した。濾液を真空下で濃縮したが、蒸発乾涸はさせなかった。0.1クエン酸ナトリウム20mLを添加すると橙色固体が形成し、これを濾過により集めると、1-((S)-テトラヒドロフラン-3-イル)-3-(4-ニトロフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミンが得られた。(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：327.6，計算値：327.3)。
【０２０９】
得られた固体(250mg，0.77mmol)を亜鉛粉末(1.5g，23mmol)、30mL  THF、及び0.9mL  HOAcと室温、アルゴン下で12時間混合した。その後、反応混合物をセライト(登録商標)で濾過し、EtOAc抽出し、真空下で濃縮すると3-(4-アミノフェニル)-1-((S)-テトラヒドロフラン-3-イル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミンが得られた。(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：297.2，計算値：297.1)。
【０２１０】
段階３
【化４５】
0005819195.tif 000056
3-(4-アミノフェニル)-1-((S)-テトラヒドロフラン-3-イル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(0.1mg，0.34mmol)のCH2Cl2(10mL)中の溶液を氷浴中で冷却した。これに、3-(トリフルオロ)フェニルイソシアネート(0.047mL，0.34mmol)のCH2Cl2(5mL)中に希釈したものを滴下添加した。反応物を室温で12時間攪拌したままにした。反応の完了はTLC及びLC-MSにより判断した。反応混合物を濾過し、シリカ上で乾燥し、シリカゲルのカラムクロマトグラフィー(50%EtOAc：ヘキサン〜100％EtOAc勾配液)を使用して精製すると、最終化合物AD66が得られた。(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：484.4，計算値：484.2)。
【０２１１】
実施例１７：N-(4-(4-アミノ-1-((S)-テトラヒドロフラン-3-イル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)フェニル)-3-(トリフルオロメチル)ベンズアミド(AD67)
【化４６】
0005819195.tif 000057
3-(4-アミノフェニル)-1-((S)-テトラヒドロフラン-3-イル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(0.1mg，0.34mmol)のCH2Cl2(10mL)中の溶液を氷浴中で冷却した。これに、3-(トリフルオロ)ベンゾイルクロリド(0.050mL，0.34mmol)のCH2Cl2(5mL)中に希釈したものを滴下添加した。反応物を室温で12時間攪拌したままにした。反応はTLC及びLC-MSにより判断して完了するまで進行させ、真空下で濃縮し、濾過し、50：50のH2O-CH3CN中に再懸濁させ、CH3CN/H2O/0.1%TFA(1-100%勾配液)中、C18カラムで精製すると、AD67が得られた。(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：469.4，計算値：469.2)。
【０２１２】
実施例１８：N-(4-(4-アミノ-1-((R)-テトラヒドロフラン-3-イル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)フェニル)-3-(トリフルオロメチル)ベンズアミド(AD68)
段階１
【化４７】
0005819195.tif 000058
(S)-テトラヒドロフラン-3-イルメタンスルホネート
(S)-テトラヒドロフラン-3-オール(1.0g，11mmol)及びトリエチルアミン(9.4mL，86mmol)のCH2Cl2(20mL)中の溶液を氷浴中で冷却した。これに、メタンスルホニルクロリド(3.0mL，39mmol)のCH2Cl2(10mL)中に希釈したものを滴下添加した。反応物を室温で12時間攪拌したままにした。水を添加し有機相をCH2Cl2中に抽出(3×50mL)し、これを続いてシリカ上で乾燥し、シリカゲルのカラムクロマトグラフィー(50%EtOAc：ヘキサン〜100％EtOAc勾配液)を使用して精製すると、(S)-テトラヒドロフラン-3-イルメタンスルホネート(1.52g，茶色油，83％収率)が得られた。
【０２１３】
段階２
【化４８】
0005819195.tif 000059
3-(4-アミノフェニル)-1-((R)-テトラヒドロフラン-3-イル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン
3-(4-ニトロフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(0.5g，1.95mmol)、K2CO3(1.08g，7.8mmol)、及び(S)-テトラヒドロフラン-3-イルメタンスルホネート(0.389g，2.34mmol)のDMF(20mL)中の溶液をアルゴン雰囲気下、80℃にした。反応混合物を３時間攪拌したままにして、冷却し、濾過した。濾液を真空下で濃縮したが、蒸発乾涸はさせなかった。0.1クエン酸ナトリウム20mLを添加すると橙色固体が形成し、これを濾過により集めると、1-((R)-テトラヒドロフラン-3-イル)-3-(4-ニトロフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミンが得られた。(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：327.6，計算値：327.3)。
【０２１４】
得られた固体(250mg，0.77mmol)を亜鉛粉末(1.5g，23mmol)、30mL  THF、及び0.9mL  HOAcと室温、アルゴン下で12時間混合した。その後、反応混合物をセライト(登録商標)で濾過し、真空下で濃縮すると3-(4-アミノフェニル)-1-((R)-テトラヒドロフラン-3-イル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミンが得られた。(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：297.5，計算値：297.1)。
【０２１５】
段階３
【化４９】
0005819195.tif 000060
3-(4-アミノフェニル)-1-((R)-テトラヒドロフラン-3-イル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(0.075mg，0.25mmol)のCH2Cl2(10mL)中の溶液を氷浴中で冷却した。これに、3-(トリフルオロ)ベンゾイルクロリド(0.035mL，0.25mmol)のCH2Cl2(5mL)中に希釈したものを滴下添加した。反応物を室温で12時間攪拌したままにした。反応はTLC及びLC-MSにより完了したと判断するまで進行させた。真空下で濃縮し、50：50  H2O-CH3CN中に再懸濁し、CH3CN/H2O/0.1%TFA(1〜100%勾配液)中、C18カラムで精製すると、最終化合物AD68が得られた。(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：469.4，計算値：469.2)。
【０２１６】
実施例１９：1-(4-(4-アミノ-1-((R)-テトラヒドロフラン-3-イル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)フェニル)-3-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ウレア(AD69)
【化５０】
0005819195.tif 000061
3-(4-アミノフェニル)-1-((R)-テトラヒドロフラン-3-イル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(0.075mg，0.25mmol)のCH2Cl2(10mL)中の溶液を氷浴中で冷却した。これに、3-(トリフルオロ)フェニルイソシアネート(0.035mL，0.25mmol)のCH2Cl2(5mL)中に希釈したものを滴下添加した。反応物を室温で12時間攪拌したままにした。反応はTLC及びLC-MSにより完了したと判断するまで進行させ、真空下で濃縮し、50：50のH2O-CH3CN中に再懸濁させ、CH3CN/H2O/0.1%TFA(1-100%勾配液)中、C18カラムで精製すると、AD69が得られた。ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：484.4，計算値：484.4。
【０２１７】
実施例２０：N-(4-(4-アミノ-1-((S)-ピロリジン-3-イル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)フェニル)-3-(トリフルオロメチル)ベンズアミド(AD070)
段階１
【化５１】
0005819195.tif 000062
(R)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-3-イルメタンスルホネート
(R)-tert-ブチル3-ヒドロキシピロリジン-1-カルボキシレート(1.0g，5.3mmol)及びトリエチルアミン(2.77mg，20mmol)のCH2Cl2(20mL)中の溶液を氷浴中で冷却した。これに、メタンスルホニルクロリド(1.15mL，15mmol)のCH2Cl2(10mL)中に希釈したものを滴下添加した。反応物を室温で12時間攪拌したままにした。水を添加し、有機相をCH2Cl2(3×50mL)中に抽出し、これを続いてシリカ上で乾燥し、シリカゲルのカラムクロマトグラフィー(50%EtOAc：ヘキサン〜100％EtOAc勾配液)を使用して精製すると、(R)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-3-イルメタンスルホネートが得られた(1.53g，茶色油，100%収率)。
【０２１８】
段階２
【化５２】
0005819195.tif 000063
(S)-tert-ブチル-3-(4-アミノ-3-(4-アミノフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-1-イル)ピロリジン-1-カルボキシレート
3-(4-ニトロフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(0.5g，1.95mmol)、K2CO3(1.08g，7.8mmol)、及び(R)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-3-イルメタンスルホネート(0.62g，2.34mmol)のDMF(20mL)中の溶液をアルゴン雰囲気下、80℃にした。反応混合物を６時間攪拌したままにして、冷却し、濾過した。濾液を真空下で濃縮したが、蒸発乾涸はさせなかった。0.1クエン酸ナトリウム20mLを添加すると固体が形成し、これを濾過により集めると、(S)-tert-ブチル3-(4-アミノ-3-(4-ニトロフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-1-イル)ピロリジン-1-カルボキシレート(0.43g，52%)が得られた。(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：426.7，計算値：426.2)。
【０２１９】
得られた固体(330mg，0.78mmol)を亜鉛粉末(1.5g，23mmol)、30mL  THF、及び0.9mL  HOAcと室温、アルゴン雰囲気下で12時間混合した。その後、反応混合物をセライト(登録商標)で濾過し、EtOAc抽出した。有機相を真空下で濃縮すると(S)-tert-ブチル-3-(4-アミノ-3-(4-アミノフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-1-イル)ピロリジン-1-カルボキシレートが得られた。(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：396.5，計算値：396.5)。
【０２２０】
段階３
【化５３】
0005819195.tif 000064
(S)-tert-ブチル-3-(4-アミノ-3-(4-アミノフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-1-イル)ピロリジン-1-カルボキシレート(0.075mg，0.17mmol)のCH2Cl2(10mL)中の溶液を氷浴中で冷却した。これに、3-(トリフルオロ)ベンゾイルクロリド(0.025mL，0.17mmol)のCH2Cl2(5mL)中に希釈したものを滴下添加した。反応物を室温に放置して温め、４時間攪拌したままにすると、ベンズアミド誘導体が得られた(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：568.5，計算値：568.6)。Boc-脱保護は蟻酸(5mL)と濃HCl(0.5mL)を反応混合物に直接滴下添加して完了した。反応混合物を12時間攪拌しておき、次いで真空下で濃縮し、50：50のH2O-CH3CN中に再懸濁させ、CH3CN/H2O/0.1%TFA(1-100%勾配液)中、C18カラムで精製すると、AD70が得られた。ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：468.5，計算値：468.2。
【０２２１】
実施例２１a：1-(4-(4-アミノ-1-((S)-ピロリジン-3-イル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)フェニル)-3-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ウレア(AD71a)
実施例２１b：(S)-3-(4-アミノ-3-(4-アミノフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-1-イル)-N-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ピロリジン-1-カルボキサミド(AD71b)
実施例２１c：(S)-3-(4-アミノ-3-(4-(3-(3-トリフルオロメチル)フェニル)ウレイド)フェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-1-イル)-N-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ピロリジン-1-カルボキサミド(AD71c)
【化５４】
0005819195.tif 000065
(S)-tert-ブチル-3-(4-アミノ-3-(4-アミノフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-1-イル)ピロリジン-1-カルボキシレート(0.080mg，0.17mmol)のCH2Cl2(10mL)中の溶液を氷浴中で冷却した。これに、3-(トリフルオロ)フェニルイソシアネート(0.026mL，0.19mmol)のCH2Cl2(5mL)中に希釈したものを滴下添加した。反応物を室温に放置して温め、６時間攪拌したままにした。その後、蟻酸(5mL)及び濃HCl(0.5mL)を反応混合物に直接滴下添加した。三種類の主な種がAD71a、AD71b及びAD71cに対応していることがLC-MSにより観察された。反応混合物を12時間攪拌したままにして、真空下で濃縮し、50：50のH2O-CH3CN中に再懸濁させ、CH3CN/H2O/0.1%TFA(1-100%勾配液)中、C18カラムで精製すると、AD71a(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：483.5，計算値：483.2)、AD71b(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：483.5，計算値：483.2)、及びAD71c(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：670.5，計算値：670.2)が得られた。
【０２２２】
実施例２２：N-(4-(4-アミノ-1-((R)-ピロリジン-3-イル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)フェニル)-3-(トリフルオロメチル)ベンズアミド(AD72)
段階１
【化５５】
0005819195.tif 000066
(S)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-3-イルメタンスルホネート
(S)-tert-ブチル-3-ヒドロキシピロリジン-1-カルボキシレート(1.0g，5.3mmol)及びトリエチルアミン(2.77mL，20mmol)のCH2Cl2(20mL)中の溶液を氷浴中で冷却した。これに、メタンスルホニルクロリド(1.15mL，15mmol)のCH2Cl2(10mL)中に希釈したものを滴下添加した。反応物を室温で12時間攪拌したままにした。水を添加し、有機相をCH2Cl2(3×50mL)中に抽出し、続いてこれをシリカ上で乾燥し、シリカゲルのカラムクロマトグラフィー(50%EtOAc：ヘキサン〜100％EtOAc勾配液)を使用して精製すると、(S)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-3-イルメタンスルホネートが得られた(0.97g，茶色油，70%収率)。
【０２２３】
段階２
【化５６】
0005819195.tif 000067
(R)-tert-ブチル3-(4-アミノ-3-(4-アミノフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-1-イル)ピロリジン-1-カルボキシレート
3-(4-ニトロフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-4-アミン(0.5g，1.95mmol)、K2CO3(1.08g，7.8mmol)、及び(S)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-3-イルメタンスルホネート(0.62g，2.34mmol)のDMF(20mL)中の溶液をアルゴン雰囲気下、80℃にした。反応混合物を２時間攪拌したままにして、冷却し、濾過した。濾液を真空下で濃縮したが、蒸発乾涸はさせなかった。0.1クエン酸ナトリウム20mLを添加すると固体が形成し、これを濾過により集めると、(R)-tert-ブチル3-(4-アミノ-3-(4-ニトロフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-1-イル)ピロリジン-1-カルボキシレート(0.38g，収率46%)が得られた。(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：426.5，計算値：426.2)。
【０２２４】
得られた固体(300mg，0.70mmol)を亜鉛粉末(1.4g，21mmol)、30mL  THF、及び0.8mL  HOAcと室温、アルゴン雰囲気下で12時間混合した。その後、反応混合物をセライト(登録商標)で濾過し、真空下で濃縮すると(R)-tert-ブチル-3-(4-アミノ-3-(4-アミノフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-1-イル)ピロリジン-1-カルボキシレートが得られた。(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：396.5，計算値：396.5)。
【０２２５】
段階３
【化５７】
0005819195.tif 000068
(R)-tert-ブチル-3-(4-アミノ-3-(4-アミノフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-1-イル)ピロリジン-1-カルボキシレート(0.055mg，0.14mmol)のCH2Cl2(10mL)中の溶液を氷浴中で冷却した。これに、3-(トリフルオロ)ベンゾイルクロリド(0.021mL，0.14mmol)のCH2Cl2(5mL)中に希釈したものを滴下添加した。反応物を室温に放置して温め、４時間攪拌したままにすると、ベンズアミド誘導体が得られた。Boc-脱保護は蟻酸(5mL)と濃HCl(0.5mL)を反応混合物に直接滴下添加して完了した。反応混合物を12時間攪拌しておき、次いで真空下で濃縮し、50：50のH2O-CH3CN中に再懸濁させ、CH3CN/H2O/0.1%TFA(1-100%勾配液)中、C18カラムで精製すると、AD72が得られた。ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：468.5，計算値：468.2。
【０２２６】
実施例２３a：1-(4-(4-アミノ-1-((R)-ピロリジン-3-イル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-イル)フェニル)-3-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ウレア(AD73a)
実施例２３b：(R)-3-(4-アミノ-3-(4-アミノフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-1-イル)-N-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ピロリジン-1-カルボキサミド(AD73b)
実施例２３c：(R)-3-(4-アミノ-3-(4-(3-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ウレイド)フェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-1-イル)-N-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ピロリジン-1-カルボキサミド(AD73c)
【化５８】
0005819195.tif 000069
(R)-tert-ブチル-3-(4-アミノ-3-(4-アミノフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-1-イル)ピロリジン-1-カルボキシレート(0.090mg，0.23mmol)のCH2Cl2(10mL)中の溶液を氷浴中で冷却した。これに、3-(トリフルオロ)フェニルイソシアネート(0.032mL，0.23mmol)のCH2Cl2(5mL)中に希釈したものを滴下添加した。反応物を室温に放置して温め、６時間攪拌したままにした。その後、蟻酸(5mL)及び濃HCl(0.5mL)を反応混合物に直接滴下添加した。AD73a、AD73b及びAD73cに対応する三種類の主な種がLC-MSにより観察された。反応混合物を12時間攪拌したままにして、真空下で濃縮し、50：50のH2O-CH3CN中に再懸濁させ、CH3CN/H2O/0.1%TFA(1-100%勾配液)中、C18カラムで精製すると、AD73a(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：483.5，計算値：483.2)、AD73b(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：483.5，計算値：483.2)、及びAD73c(ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：670.5，計算値：670.2)が得られた。
【０２２７】
実施例２４：(S)-tert-ブチル3-(4-アミノ-3-(4-(3-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ウレイド)フェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-1-イル)ピロリジン-1-カルボキシレート(AD78)
【化５９】
0005819195.tif 000070
(S)-tert-ブチル-3-(4-アミノ-3-(4-アミノフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-1-イル)ピロリジン-1-カルボキシレート(0.035mg，0.09mmol)のCH2Cl2(10mL)中の溶液を氷浴中で冷却した。これに、3-(トリフルオロ)フェニルイソシアネート(0.012mL，0.09mmol)のCH2Cl2(5mL)中に希釈したものを滴下添加した。反応物を室温に放置して温め、６時間攪拌したままにした。TLC及びLC-MSにより判断して完了するまで反応を進行させ、真空下で濃縮し、50：50のH2O-CH3CN中に再懸濁させ、CH3CN/H2O/0.1%TFA(1-100%勾配液)中、C18カラムで精製すると、AD78が得られた。ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：583.5，計算値：583.2。
【０２２８】
実施例２５：(R)-tert-ブチル3-(4-アミノ-3-(4-(3-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ウレイド)フェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-1-イル)ピロリジン-1-カルボキシレート(AD79)
【化６０】
0005819195.tif 000071
(R)-tert-ブチル-3-(4-アミノ-3-(4-アミノフェニル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-1-イル)ピロリジン-1-カルボキシレート(0.100g，0.25mmol)のCH2Cl2(10mL)中の溶液を氷浴中で冷却した。これに、3-(トリフルオロ)フェニルイソシアネート(0.035mL，0.25mmol)のCH2Cl2(5mL)中に希釈したものを滴下添加した。反応物を室温に放置して温め、６時間攪拌したままにした。TLC及びLC-MSにより判断して完了するまで反応を進行させ、真空下で濃縮し、50：50のH2O-CH3CN中に再懸濁させ、CH3CN/H2O/0.1%TFA(1-100%勾配液)中、C18カラムで精製すると、AD79が得られた。ESI-MS  m/z[M+H]+、実測値：583.5，計算値：583.2。
【０２２９】
実施例２６：細胞ベースアッセイ：Bcr-Abl及びT315I  Bcr-Ablの阻害
AD57のBcr-Abl及びT315I  Bcr-Ablを阻害する能力を、細胞ベースのアッセイで試験した。Bcr-AblオンコジーンをBaF3細胞に形質導入して、IL-3-非依存性とした。「IL-3」とは、当業界で公知のように、ヒトの遺伝子座5q31.1に位置するインターロイキン3をさす。組換IL-3は市販されている。BaF3は、成長及び増殖に関して通常IL-3依存性である造血細胞株である。しかしながら、活性化Bcr-Ablの発現によって細胞はIL-3非依存性状態に形質転換される。本アッセイでは、細胞増殖はBcr-Ablの活性に直接相関する。野生型Bcr-Abl、T315I  Bcr-Abl及び親のBaF3細胞を、表示濃度でAD57(化合物５)で２日間処理した。親BaF3細胞であるがBcr-Abl形質導入でない細胞は、本実験の経過中、組換IL-3の存在下で成長させた。２日間の処理後、細胞増殖は生体細胞により代謝されたときのみに蛍光的に検出可能な形に変換する染色レザズリンを使用して定量化した。
【０２３０】
図７A〜Cは、AD57(化合物５)がBcr-Abl及びT315I  Bcr-Abl細胞の成長を等しく阻害することを示す。Srcとの複合体におけるAD57(化合物５)の結晶構造によると、AD57(化合物５)のWT及びT315I  Bcr-Ablを等しく阻害する能力は、キナーゼのDFG-outコンフォメーションを認識する特徴的な能力を介して媒介されているが、薬剤をThr315位置における変異に対して鈍感にしてしまう形のようである。特にWT及びT315I  Bcr-AblにおけるAD57(化合物５)の作用は、Bcr-Ablを効果的に阻害するが、T315I変異体を阻害しないイマチニブに関しては異なる。この結果は、AD57(化合物５)はBcr-Ablに依存性の癌細胞の成長を阻害するのに有効であり、且つ非常に高頻度に見られるT315I  Bcr-Abl変異体を含む薬物抵抗性クローンの出現によって無能化しないだろうことを示唆する。イマチニブにより処置されてきた癌としては、CML、消化管間質腫瘍、好酸球増加症候群、及びPh-ポジティブ急性骨髄性白血病が挙げられる。これらの癌におけるイマチニブに対する耐性は、c-kitにおけるT670I(配列番号３)及びPDGFRにおけるT674I(配列番号１０)などの類似T315Iである位置での変異に関連していた。AD57(化合物５)はT315I  Bcr-Ablを阻害するので、本阻害剤がこれらの癌におけるBcr-Abl、c-Kit、PDGFR及びそれらのイマチニブ耐性形に対して有効であるのは納得できることである。
【０２３１】
非特異的阻害による毒性を介してBcr-Ablで形質導入されたBaF3細胞の増殖を阻害することが可能である。したがって、親BaF3細胞の成長における阻害剤の効果も測定した。AD57(化合物５)は優先的にBcr-Abl形質転換BaF3細胞を阻害するが、親のBaF3細胞は阻害しなかった(１mM阻害剤における細胞の成長を比較)。このことは、BaF3-Bcr-Abl細胞におけるAD57(化合物５)の作用が初期標的は実際Bcr-Ablであることを示唆している。また、この結果はBcr-Abl形質導入BaF3細胞におけるAD57(化合物5)の効果は、一般的に毒性のメカニズムによっては媒介されないことも示唆している。
【０２３２】
実施例２７：c-Srcに関するDFG-outバインダーの開発
Liu、Gray及び共同研究者により開拓されたアプローチを適用し、これによりII型(DFG-out)キナーゼ阻害剤は、II型阻害剤結合構造中の特徴的なDFG運動により作られたポケットに結合しえるエレメントにI型キナーゼ阻害剤のいわゆるヒンジ結合エレメントを融合することにより創出することができる(Liu及びGray、2006年、同上；Okramら、2006年、同上)。十分に特徴付けされたピラゾロピリミジンPP1由来のヒンジ結合エレメントをその目的に関して選択したが、これは両方の構造及び機能レベルにおいて調査され、選択的c-Srcファミリーチロシンキナーゼ阻害剤として最初に同定されたからである(Hankeら、1996年、J  Biol  Chem、271巻：695-701頁；Lieら、1999年、Chem  Biol  6巻：671-678頁；Schindlerら、1999年、Mol  Cell  3巻：639-648頁)。設計用にDFG-out結合エレメントを選択するために、Abl、Raf及びp38の共結晶構造を、それぞれイマチニブ、BAY43-9006、及びBIRB796；三種類の異なるキナーゼターゲットをもつ三つの化学的に異なるII型阻害剤との複合体中で調べた(Pargellisら、2002年、同上；Schindlerら、2000年、同上；Wanら、2004年、同上)。それらの化学的特徴にもかかわらず、各阻害剤は活性部位ポケット内で殆ど同一経路をたどる(図５)。観察された結合モードの重要な特徴は、へリックスαC内でのDFGモチーフと名づけられた活性化セグメントの一部と、高度に保存されたグルタミン酸残基との相互作用であり、これは阻害剤のアミド/ウレアリンカーと疎水性部分により媒介される。活性化部位におけるこれらの位置に対して約180度のフリップ(flip)によるAsp残基のoutの運動とPhe残基のin運動(したがって、「DFG-out」)は、これらの阻害剤で充填される空隙を創出する。各阻害剤の伸張部位は酷似しており、キナーゼとの相互作用は、ATPポケット内の高度に保存された残基により媒介され、一般的な阻害剤の特徴が他のキナーゼに適用できたことを示唆する。
【０２３３】
m-トリフルオロメチルフェニルウレア基をもつPP1中のフェニル環上の偏向(deviation)は、DFG-outポケットと噛み合い得る阻害剤を創出すると仮定した。PP1のピラゾロピリミジンコアは、ATPが通常位置するアデノシン環内の活性部位の一部をふさぐので、キナーゼヒンジ領域の基幹(backbone)と重要な水素結合を形成する(図1B)。c-Srcに対して厳密な(nM)結合親和性をもつ阻害剤を探求する分子モデルを合成した。
【０２３４】
このモデル形成は、ピラゾロピリミジンコアとフェニル環との間にメチレン基を加えることにより、m-トリフルオロメチルフェニルウレア置換をDFGポケット内に導く際に柔軟性を提供することを示唆した。したがって、PP1のフェニル基がベンジル官能基で置換され、ピラゾール環のN1位置が種々のアルキル基で変化を付けた化合物１〜４を合成した(図２中央)。化合物５は、ピラゾロピリミジンコアと誘導体化フェニルとの間の直接結合を提供するために創出した(図５下)。それぞれの分子は、ピラゾロピリンミジン類を生成するための既に確立された経路をベースとして製造したが(Bishopら、1999年、同上；Bishopら、1998年、同上；Blethrowら、2004年、同上)、ウレアリンカーは出発物質にニトロ基を含めることを介して付加され、これは最終合成段階では還元されて、m-トリフルオロメチルフェニルイソシアネートに結合してII型類似体を生成した。
【０２３５】
実施例２８：Src及びAblのインビトロ阻害
指定の化合物の効能を解明するために、その非リン酸化形においてバクテリアから全く同じに発現され精製されたc-Src及びAblのキナーゼドメインフラグメントを阻害するその能力を調査した。最大半量阻害濃度(half  maximal  inhibitory  concentration)(IC50)は、100mM  ATP及び種々の濃度の阻害剤の存在下においてキナーゼが合成ペプチド基質のリン酸化を触媒するインビトロアッセイを使用して測定した(図２)。この分析から、イマチニブのIC50は、それぞれc-Src及びAblに関して24,370nM及び11nMであった。これらの値は公表値とほぼ一致し、c-Srcに関してAblに対するイマチニブの固有の選択性を目立たせる(Seeligerら、2007年、同上)。
【０２３６】
化合物１は、およそ6.2μMのIC50でc-Srcを阻害することが知見されたが、ウレアリンカーがベンジル環のパラ位に置かれた対照化合物は、検出可能な阻害活性を欠いていた(データは示されていない)。１〜４に関してIC50値を測定する際に、アルキル基置換と、c-Src及びAblに関する選択性との間に興味深い相関関係が知見された(図２)。メチル誘導体１は、c-Src及びAblの両方に対して最も弱い阻害剤であり、続いてイソプロピル２及びt-ブチル３化合物が穏やかな効能を獲得し、最適誘導体はシクロペンチル置換４であり、IC50はc-Srcに関して480nMであった(図２)。奇妙なことに、このセットの殆どの化合物はc-SrcとAblを両方とも等しく阻害したが、シクロペンチル誘導体はAblよりもSrcに対して約5倍の再現可能な選択性を示した。小さいが、この軽度の選択性は、化合物１、２及び４でのc-Src及びAblの間のより小さなIC50値と比較して顕著であった。化合物５は、本出願人が確認した最も強力な阻害剤であり、c-Src及びAblそれぞれに対してIC50値は25nM及び41nMであった(図２)。興味深いことに、５の効能はAblに関してはイマチニブの効能に近づくが、c-Srcをまったく区別していない。化合物のこの試験において、二つの興味深い特徴が確認された：化合物３はc-Srcに関して予想外の選択性をもち、化合物５は、c-SrcとAblの両方に関して非常に高い効能をもつ。結合の計画モードが達成されたかどうかを調査するために、阻害剤３及び５に結合したs-Srcの共結晶構造を測定した。
【０２３７】
実施例２９：共結晶構造解析により明らかになった結合モード
３及び５との複合体中の精製c-Srcキナーゼドメインから、それぞれ2.8及び2.3オングストロームに回折した結晶が得られた。いずれの構造も分子置換により測定し、c-Src-3複合体に関してはP21結晶形中に非対称ユニット内にc-Srcの単一コピーと、c-Src-5複合体に関してはP1結晶形中にc-Srcの二つのコピーが見つかった。興味深いことに、c-Src-5複合体中にたった一つのキナーゼ分子が阻害剤を含んでいるようにみえた。この特徴は、c-Srcとイマチニブとの共結晶構造中で既に観察されていたが、その結合定数を十分超える濃度でタンパク質と阻害剤がモル当量であるにもかかわらず、非対称ユニット内にたった一つのキナーゼが薬剤複合体中にあることが判明した(Seeligerら、2007年、同上)。３及び５とのs-Src複合体中の構造を、活性部位の対応する拡大図と共に図３に示す。
【０２３８】
示されているように、両方の阻害剤のピラゾロピリミジンコアは、キナーゼのヒンジ領域によって覆われているアデノシンポケット内の深部に位置する。PP1と比較して、３及び５いずれのピラゾロピリミジン環の平面も、互いにややそれている。配置変化のため、３及び５はいずれもGlu339の主鎖カルボニルに対してたった一つの水素結合しか形成しない。化合物３は、Thr338ゲートキーパーの側鎖ヒドロキシルから離れているので、この残基とのPP1または５で見られる水素結合を形成しない。３のベンジル基と５のフェニル基のいずれもゲートキーパーに近接して位置しており；そのいずれもがピラゾロピリミジン環に対して平面から歪曲している。３及び５の両方において、ウレア伸張は、へリックスaC内のGlu310の側鎖と計画された水素結合を形成し、いずれの化合物もm-トリフルオロメチルフェニル部分は残基Leu317、Leu322、Val402、Met314、His384により覆われたポケット内に位置している。この空間を占めるため、Asp404及びPhe405は、その活性位置に対して殆ど180度反っている。c-Src-５複合体では、Asp404の側鎖カルボニルは、Gly406の主鎖アミドに対して水素結合を形成する(図3B)。DFG-outキナーゼの結晶構造ではその正確な配置は観察されていないが、分子力学シミュレーションで明らかなようにDFGフリップの間に起きるものと仮定された(Levinsonら、2006年、同上)。興味深いことに、グリシンアミドへのアスパラギン酸側鎖の配置は、ベータ屈曲の構造と酷似している(Fersht、1999年、Structure  and  Mechanism  in  Protein  Science；a  guide  to  enzyme  catalysis  and  protein  folding，New  York：W．H．Freeman  and  Co,)。従来のベータ屈曲では、主鎖に沿って回転する9個の原子がアミドドナーからのカルボニルアクセプターを離し、ドナー-アクセプター対の間に-CH2-グリシンを含むことが多い。ここでAsp404の側鎖は、カルボニルアクセプターと介在する-CH2-基の両方を供給するように見える。本明細書中で記載するc-Srcのいずれの構造においても、DFGトリアドの配置と、へリックスaCのGlu310の位置は、密接に関連する酵素HCKのPP1-結合形またはアポc-Srcのいずれかで以前知見されたものから外れる配置を採用する(Schindlerら、1999年、同上；Xuら、1997年、Nature  385巻：595-602頁)。むしろ３及び５は、イマチニブにより同様に係合しているc-SrcのDFG-out配置を認識している。
【０２３９】
そのハイブリッドデザインアプローチでは、Liu、Gray及び共同研究者によりAblに関してうまく開発されたII型阻害剤のセットは、四つの異なるI型骨格から開始した(Okamら、2006年、同上)。計画された阻害剤それぞれが、c-Srcを含むタンパク質キナーゼのパネルに対して試験されたことを記載するのは注目に値する。興味深いことに、それぞれのII型変異体は、出発物質の骨格に対してc-Srcに対して低い親和性を示したが、これらはAblに対しては効能及び選択性が増加した。これらの実験はハイブリッドデザインアプローチが実現可能であることを示唆しているが、特定のキナーゼに対して新規II型阻害剤の有効性が限定的であることも暗示していた。
【０２４０】
c-Src複合体とAbl-イマチニブ構造の間のより一層重要な差の一つは、b1-b2リンカー内のキナーゼの「GXGXXGモチーフ」により画定された領域と、ATPポケットの一番上の棚を形成するP-ループの経路にある(図4A)。特にAbl-イマチニブ複合体では、P-ループは残基Tyr253を介して薬剤結合部位を大部分密接に包囲し、これによりピリミジンコアのリップ上に折り返される。c-Src-イマチニブ複合体では、AblのTyr253により占められる領域は空いたままであるのに、c-Src-３複合体では、阻害剤それ自体のシクロペンチル基がこの空間を満たす。化合物１〜４の全結合コンフォメーションはピラゾール環のR-1位置で置換基の影響に対して感受性が低いので、このシリーズの阻害剤は、阻害剤の立体的な嵩を変動させることによってTyr253ポケットをはめ込む信頼できる評価基準となり得た。実際、この置換基を変動させると、注目すべき構造活性の関係があるので、化合物１〜４の構造及び活性はアフィニティーポケットとしてTyr253の重要な役割をベースとして説明できた。
【０２４１】
興味深いことに、c-Srcとの3-、5-及びイマチニブ複合体の間のもう一つの際立つ特徴は、これらの阻害剤のゲートキーパーポケットに向かうアプローチである(図4B)。特に、３のベンジル基及び５のフェニル環はc-Srcの薬剤の相対的親和性を反映する序列でイマチニブのo-メチル-フェニルアミノ部分に対してThr338から離れて回転する。ゲートキーパーThrからのこの必要以上の距離は、化合物１〜５が、臨床的に関連するイマチニブ耐性Abl  Thr315Ileキナーゼなどの変異体キナーゼに結合するかもしれないことを示唆する(Shahら、2002年、Cancer  Cell  2巻：117-125頁)。特定のキナーゼの好ましいコンフォメーション状態と好ましくないコンフォメーション状態との間の相対的エネルギー差は、小さな分子によって克服できるものと結論できる。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｃ】
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【配列表】
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