(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の式Ｉのインビボ造影剤。
【化１】
0005651163.tif 000020
式中、
Ｒ1はＣ1〜3アルキル又はＣ1〜3フルオロアルキルであり、
Ｒ2は水素、ヒドロキシル、ハロ、シアノ、Ｃ1〜3アルキル、Ｃ1〜3アルコキシ、Ｃ1〜3フルオロアルキル又はＣ1〜3フルオロアルコキシであり、
Ｒ3及びＲ4は独立にＣ1〜3アルキル、Ｃ7〜10アラルキルであるか、或いはＲ3及びＲ4はそれらと結合した窒素と共に含窒素Ｃ4〜6脂肪族環を形成するもので、適宜、窒素、酸素及び硫黄から選択される追加の１個のヘテロ原子を含んでいてもよく、
Ｙ1はＣＨ2であり、
Ｙ2はＣＨ2、ＣＨ2−ＣＨ2、ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2又はＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2であり、
上記の式Ｉは、インビボイメージングに適した放射性同位体である原子を含む。
【請求項２】
次の式Ｉａのものである、請求項１記載のインビボ造影剤。
【化２】
0005651163.tif 000021
式中、
Ｒ2aは水素、ハロ又はＣ1〜3アルコキシであり、
Ｒ3a及びＲ4aは独立にメチル、エチル又はベンジルであるか、或いはそれらに結合した窒素と共にピロリジニル、ピペリジニル、アゼパニル若しくはモルホリニル環を形成するものであり、
Ｙ2aはＣＨ2、ＣＨ2−ＣＨ2、ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2又はＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2であり、
ｎは１、２又は３である。
【請求項３】
Ｒ3a及びＲ4aが共にエチルであるか、或いはＲ3aがメチルであってＲ4aがベンジルであるか、或いはそれらに結合した窒素と共にアゼパニル環を形成するものであり、
Ｒ2aが水素、メトキシ又はフルオロであり、
Ｙ2aがＣＨ2−ＣＨ2又はＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2であり、
ｎが２である、請求項２記載のインビボ造影剤。
【請求項４】
以下の化学構造を有する、請求項３記載のインビボ造影剤。
【化３】
0005651163.tif 000022
【請求項５】
請求項１乃至請求項４のいずれか１項記載のインビボ造影剤の調製のための前駆体化合物であって、次の式ＩＩの前駆体化合物。
【化４】
0005651163.tif 000023
式中、Ｒ11及びＲ12の一方は、請求項１記載の放射性同位体の適切な供給源と反応して、当該前駆体化合物と放射性同位体の適切な供給源との反応によって前記インビボ造影剤を形成する化学基であって、Ｃｌ、Ｂｒ、メシレート、トシレート、トリフレート、ヒドロキシル、ジアゾニウム塩、ニトロ、第４級アンモニウム塩、トリアルキルスタンナン、トリアルキルシリル及び有機ホウ素化合物から選択される化学基を含んでおり、Ｒ11及びＲ12の他方は、それぞれＲ1及びＲ2について請求項１で定義した通りであり、
Ｒ13〜14及びＹ11〜12は、請求項１において、それぞれＲ3〜4及びＹ1〜2について定義した通りである。
【請求項６】
Ｒ11がＣ1〜3アルキレン−ＬＧであり、ＬＧが、メシレート、トシレート及びトリフレートから選択される脱離基である、請求項５記載の前駆体化合物。
【請求項７】
次の式ＩＩａの化合物である、請求項６記載の前駆体化合物。
【化５】
0005651163.tif 000024
式中、
ＬＧは、請求項６で定義した通りであり、
Ｒ12a〜14a、Ｙ12a及びｍは、それぞれＲ2a〜4a、Ｙ2a及びｎについて請求項２で定義した通りである。
【請求項８】
次の式ＩＩｂの化合物である、請求項５記載の前駆体化合物。
【化６】
0005651163.tif 000025
式中、
Ｒ11bは、Ｃｌ、Ｂｒ、メシレート、トシレート及びトリフレートから選択され、
Ｒ12b〜14bは、Ｒ12〜14について請求項５で定義した通りであり、但しＲ12bはクロロではなく、
Ｙ11b〜12bは、Ｙ11〜12について請求項５で定義した通りである。
【請求項９】
請求項８記載の式ＩＩｂの前駆体化合物の調製方法であって、下記の式ＩＩｃの化合物とＺｎＣｌ2との反応によって、下記の式ＩＩｄの化合物を形成する段階を含んでいて、上記反応がジエチルエーテルを含む溶媒系中で実施される、方法。
【化７】
0005651163.tif 000026
（式中、Ｒ12c、Ｙ11c及びＹ12cは、それぞれＲ12、Ｙ11及びＹ12について請求項５で定義した通りであり、ＰＧcは−Ｏ−ベンジルである。）
【化８】
0005651163.tif 000027
（式中、Ｒ12d、Ｙ11d、Ｙ12d及びＰＧdは、それぞれＲ12c、Ｙ11c、Ｙ12c及びＰＧcについて定義した通りである。）
【請求項１０】
請求項１乃至請求項４のいずれか１項記載のインビボ造影剤を調製する方法であって、請求項５乃至請求項８のいずれか１項記載の前駆体化合物を、インビボイメージングに適した放射性同位体と反応させて、前記インビボ造影剤を得ることを含む、方法。
【請求項１１】
自動化された、請求項１０記載の方法。
【請求項１２】
請求項１１記載の方法を実施するためのカセットであって、
（ｉ）請求項５乃至請求項８のいずれか１項記載の前駆体化合物を含有する容器と、
（ｉｉ）前記段階（ｉ）の容器を、インビボイメージングに適した放射性同位体で溶出するための手段と
を含む、カセット。
【請求項１３】
哺乳動物への投与に適した形態の生体適合性の担体と一緒に、請求項１乃至請求項４のいずれか１項記載のインビボ造影剤を含む、放射性医薬組成物。
【請求項１４】
対象における末梢性ベンゾジアゼピン受容体（ＰＢＲ）発現の分布及び／又は程度を決定するためのインビボイメージング法に用いられる請求項１乃至請求項４のいずれか１項記載のインビボ造影剤を含む放射性医薬組成物であって、前記インビボイメージング法が、
（ｉ）前記対象に、前記放射性医薬組成物を投与する段階と、
（ｉｉ）前記インビボ造影剤を前記対象のＰＢＲと結合させる段階と、
（ｉｉｉ）インビボイメージング手順によって、前記インビボ造影剤の放射性同位体から放出されたシグナルを検出する段階と、
（ｉｖ）前記シグナルの位置及び／又は量の代表的な画像を作成する段階と、
（ｖ）前記インビボ造影剤によって放出された前記シグナルと直接相関する、前記対象におけるＰＢＲ発現の分布及び程度を決定する段階と
を含んでいる、放射性医薬組成物。
【請求項１５】
請求項１４記載のインビボイメージング法を、末梢性ベンゾジアゼピン受容体（ＰＢＲ）発現の分布及び程度を特定の臨床像に帰因させる追加の段階（ｖｉ）と一緒に含む、ＰＢＲが上方制御されている状態を診断する方法に使用するための、請求項１乃至請求項４のいずれか１項記載のインビボ造影剤を含む放射性医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、インビボイメージング、特に末梢性ベンゾジアゼピン受容体（ＰＢＲ）のインビボイメージングに関する。ＰＢＲと高い親和性で結合し、投与後に脳に良好に取り込まれ、ＰＢＲとの良好な選択的結合を有するインドール系インビボ造影剤を提供する。本発明はまた、本発明のインビボ造影剤の合成において有用な前駆体化合物、並びに前記前駆体化合物の合成方法を提供する。本発明の他の態様は、本発明の前駆体化合物の使用を含む本発明のインビボ造影剤の合成方法、前記方法を実施するためのキット、及び自動化された前記方法を実施するためのカセットを含む。さらに本発明は、本発明のインビボ造影剤を含む放射性医薬組成物、並びに前記インビボ造影剤の使用方法を提供する。
【背景技術】
【０００２】
末梢性ベンゾジアゼピン受容体（ＰＢＲ）は、主に末梢組織及びグリア細胞内に局在することが知られているが、その生理的機能は未だ解明されていない。ＰＢＲは、細胞内ではミトコンドリア外膜上に局在することが知られており、ミトコンドリア機能の調節及び免疫系において潜在的な役割を示す。さらにＰＢＲは、細胞増殖、ステロイド産生、カルシウム流及び細胞呼吸に関与すると想定されている。
【０００３】
異常なＰＢＲ発現は、多発性硬化症（Ｂａｎａｔｉ  ｅｔ  ａｌ，２００１  Ｎｅｕｒｏｒｅｐｏｒｔ；１２（１６）：３４３９−４２；Ｄｅｂｒｕｙｎｅ  ｅｔ  ａｌ，２００２  Ａｃｔａ  Ｎｅｕｒｏｌ  Ｂｅｌｇ；１０２（３）：１２７−３５）、ラスムッセン脳炎（Ｂａｎａｔｉ  ｅｔ  ａｌ，１９９９  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ；５３（９）：２１９９−２０３）、脳血管炎（Ｇｏｅｒｒｅｓ  ｅｔ  ａｌ，２００１  Ａｍ  Ｊ  Ｒｏｅｎｔｇｅｎｏｌ；１７６（４）：１０１６−８）、ヘルペス脳炎（Ｃａｇｎｉｎ  ｅｔ  ａｌ，２００１  Ｂｒａｉｎ；１２４（Ｐｔ  １０）：２０１４−２７）、及びＡＩＤＳ関連認知症（Ｈａｍｍｏｕｄ  ｅｔ  ａｌ，２００５  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｖｉｒｏｌ；１１（４）：３４６−５５）を含む、中枢神経系（ＣＮＳ）の炎症性病状に関連するとされている。
【０００４】
またＣＮＳでは、パーキンソン病（Ｇｅｒｈａｒｄ  ｅｔ  ａｌ，２００６  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ  Ｄｉｓ；２１（２）：４０４−１２；Ｏｕｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ，２００５  Ａｎｎ  Ｎｅｕｒｏｌ；５７（２）：１６１−２）、大脳皮質基底核変性症（Ｇｅｒｈａｒｄ  ｅｔ  ａｌ，２００４  Ｍｏｖ  Ｄｉｓｏｒｄ；１９（１０）：１２２１−６）、進行性核上性麻痺（Ｇｅｒｈａｒｄ  ｅｔ  ａｌ，２００６  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ  Ｄｉｓ；２１（２）：４０４−１２）、多系統萎縮症（Ｇｅｒｈａｒｄ  ｅｔ  ａｌ，２００３  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ；６１（５）：６８６−９）、ハンチントン病（Ｐａｖｅｓｅ  ｅｔ  ａｌ，２００６  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ；６６（１１）：１６３８−４３；Ｔａｉ  ｅｔ  ａｌ，２００７  Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ  Ｂｕｌｌ；７２（２−３）：１４８−５１）、筋萎縮性側索硬化症（Ｔｕｒｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ，２００４  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ  Ｄｉｓ；１５（３）：６０１−９）、及びアルツハイマー病（Ｃａｇｎｉｎ  ｅｔ  ａｌ，２００１  Ｌａｎｃｅｔ；３５８（９２８３）：７６６；Ｙａｓｕｎｏ  ｅｔ  ａｌ，２００８  Ｂｉｏｌ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ；６４（１０）：８３５−４１）などの変性疾患において、ＰＢＲとの関係が報告されている。
【０００５】
いくつかのＣＮＳ虚血状態は、虚血性脳卒中（Ｇｅｒｈａｒｄ  ｅｔ  ａｌ，２００５  Ｎｅｕｒｏｉｍａｇｅ；２４（２）：５９１−５）、末梢神経損傷（Ｂａｎａｔｉ  ｅｔ  ａｌ，２００１  Ｎｅｕｒｏｒｅｐｏｒｔ；１２（１６）：３４３９−４２）、てんかん（Ｓａｕｖａｇｅａｕ  ２００２  Ｍｅｔａｂ  Ｂｒａｉｎ  Ｄｉｓ；１７（１）：３−１１；Ｋｕｍａｒ  ｅｔ  ａｌ，２００８  Ｐｅｄｉａｔｒ  Ｎｅｕｒｏｌ；３８（６））を含む異常なＰＢＲ発現に関係することが示されている。ＰＢＲは、外傷性脳損傷における損傷の程度を決定するためのバイオマーカーと想定されており（Ｔｏｙａｍａ  ｅｔ  ａｌ，２００８  Ａｎｎ  Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ；２２（５）：４１７−２４）、外傷性脳損傷の動物モデルにおいて、ＰＢＲ発現の増大が報告された（Ｖｅｎｎｅｔｉ  ｅｔ  ａｌ，２００７  Ｅｘｐ  Ｎｅｕｒｏｌ；２０７（１）：１１８−２７）。興味深いことに、急性ストレスは、脳内のＰＢＲ発現の増大に相関するとされており、慢性ストレスは、ＰＢＲの下方制御と相関するとされている（Ｌｅｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ，１９９９  Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ；８５１（１−２）：１４１−７）。ＰＢＲを結像するために［11Ｃ］ＰＫ１１１９５を使用して、神経膠腫の境界を描写できることが報告されている（Ｊｕｎｃｋ  ｅｔ  ａｌ，１９８９  Ａｎｎ  Ｎｅｕｒｏｌ；２６（６）：７５２−８）。神経障害性疼痛を有する対象において活性化したミクログリアを観測したＴｓｕｄａらによれば、ＰＢＲは神経障害性疼痛にも関連し得る（２００５  ＴＩＮＳ  ２８（２）  ｐｐ１０１−７）。
【０００６】
末梢では、ＰＢＲ発現は、肺炎症（Ｂｒａｎｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ，２００８  Ｎｕｃｌ．  Ｍｅｄ．  Ｂｉｏｌ；３５（８）：９０１−９）、慢性閉塞性肺疾患及び喘息（Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ，２００３  Ｅｕｒ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｊ；２１（４）：５６７−７３）、炎症性腸疾患（Ｏｓｔｕｎｉ  ｅｔ  ａｌ，Ｉｎｆｌａｍｍ  Ｂｏｗｅｌ  Ｄｉｓ；２０１０  ｏｎｌｉｎｅ  ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ）、関節リウマチ（ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｌａｋｅｎ  ｅｔ  ａｌ，２００８  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ；５８（１１）：３３５０−５）、原発性線維筋痛症（Ｆａｇｇｉｏｌｉ  ｅｔ  ａｌ，２００４  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ；４３（１０）：１２２４−１２２５）、神経損傷（Ｄｕｒｒｅｎｂｅｒｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ，２００４  Ｊ  Ｐｅｒｉｐｈｅｒ  Ｎｅｒｖ  Ｓｙｓｔ；９（１）：１５−２５）、アテローム性動脈硬化症（Ｆｕｊｉｍｕｒａ  ｅｔ  ａｌ，２００８  Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ；２０１（１）：１０８−１１１）、結腸、前立腺及び乳癌（Ｄｅａｎｅ  ｅｔ  ａｌ，２００７  Ｍｏｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ；５（４）：３４１−９；Ｍｉｅｔｔｉｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ，１９９５  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ；５５（１２）：２６９１−５；Ｈａｎ  ｅｔ  ａｌ，２００３  Ｊ  Ｒｅｃｅｐｔ  Ｓｉｇｎａｌ  Ｔｒａｎｓｄｕｃｔ  Ｒｅｓ；２３（２−３）：２２５−３８）、腎炎（Ｔａｍ  ｅｔ  ａｌ，１９９９  Ｎｅｐｈｒｏｌ  Ｄｉａｌ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ；１４（７）：１６５８−６６；Ｃｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ，１９９９  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ；５５（４）：１３１９−２６）、並びに虚血再灌流障害（Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ，２００６  Ｊ  Ａｍ  Ｃｏｌｌ  Ｓｕｒｇ；２０３（３）：３５３−６４）に関係するとされている。
【０００７】
ＰＢＲ選択的リガンドである（Ｒ）−［11Ｃ］ＰＫ１１１９５を使用する陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）イメージングは、中枢神経系（ＣＮＳ）炎症の一般的な指標を提供する。しかし、（Ｒ）−［11Ｃ］ＰＫ１１１９５は、タンパク質結合性が高く、特異性の低い結合を有するものから非特異的な結合を有するものがあることが知られている。さらに、放射性標識したその代謝産物の役割は知られておらず、結合の定量化には、複雑なモデリングを必要とする。
【０００８】
三環系インドール化合物は、当技術分野で公知である。Ｄａｖｉｅｓ  ｅｔ  ａｌ（Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  １９９８；４１（４）：４５１−６７）には、ある種の三環系インドール化合物が教示されており、それらをメラトニン作動薬及び拮抗薬として特徴づけている。Ｎａｐｐｅｒ  ｅｔ  ａｌ（Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ２００５；４８：８０４５−５４）には、ヒストン及び他のタンパク質のリシン残基からアセチル基を除去する酵素ファミリーの一員である酵素ＳＩＲＴ１の選択的阻害に関連して、ある種の三環系インドール化合物の構造と活性の関係について教示・議論されている。米国特許第６４５１７９５号には、別の種類の三環系インドール化合物が開示されており、この化合物はＰＢＲ関連病状の治療に有用なものとして論じられている。米国特許第６４５１７９５号には、最も活性な化合物について０．２ｎＭ〜５．０ｎＭのＩＣ50値を開示しており、その化合物が末梢神経障害の予防又は治療、及び中枢神経変性疾患の治療にとって有用であると記載されている。
【０００９】
Ｏｋｕｂｕ  ｅｔ  ａｌ，（Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２００４  １２  ３５６９−８０）には、四環系インドール化合物群の設計、合成及び構造、並びにＰＢＲに対するそれらの親和性（ＩＣ50値は約０．４ｎＭに過ぎない）を記載している。本発明の出願人に譲渡された国際公開第２００７／０５７７０５号には、様々なインビボイメージング部分で標識した四環系インドール誘導体が開示されている。国際公開第２００７／０５７７０５号に開示された好ましいインビボイメージング部分は、陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）又は単一光子放出断層撮影（ＳＰＥＣＴ）イメージング、最も好ましくはＰＥＴに適した部分である。
【００１０】
さらに、同時係属注の国際出願ＰＣＴ／ＥＰ２００９／０６２８２７には、国際公開第２００７／０５７７０５号の造影剤に類似の四環系インドール由来のインビボ造影剤が記載されている。
【００１１】
国際公開第２００７／０５７７０５号及び同時係属の国際出願ＰＣＴ／ＥＰ２００９／０６２８２７に記載の四環系インドール誘導体は、ＰＢＲ受容体に対して良好な親和性を有し、注入の６０分後における脳内の高い割合の放射活性は、親インビボ造影剤の活性を表している。これらの四環系インドール誘導体はまた、体内分布研究においてラットの脳内で妥当な初期濃度を達成するが、その取込みはやはり相対的に低く、改善の余地がある。本発明者らは、これらの従来技術の四環系インドール誘導体の嗅球（最高濃度のＰＢＲ受容体を有する脳領域）における相対的な保持が、インビボイメージングにとって望ましいものに満たないことも見出した。したがって、上述の従来技術の四環系インドールインビボ造影剤の有利な特性を保持するＰＢＲインビボ造影剤にも、脳内取込みが改善され、ＰＢＲ受容体との特異的結合が改善される余地がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】国際公開第００／４４７５１号
【発明の概要】
【００１３】
本発明は、インビボ造影剤としての使用に適した新規な三環系インドール化合物を提供する。本発明はまた、本発明のインビボ造影剤の合成において有用な前駆体化合物、並びに前記前駆体化合物の合成方法を提供する。本発明の前駆体化合物の使用を含む、インビボ造影剤の調製方法も提供する。さらに、本発明のインビボ造影剤を含む医薬組成物に加えて、医薬組成物の容易な調製に適したキットを提供する。さらなる一態様では、異常なＰＢＲ発現に関連する状態のインビボイメージングのためのインビボ造影剤の使用を提供する。本発明のインビボ造影剤は、末梢性ベンゾジアゼピン受容体に対する改善された脳内取込み及び特異性と共に、公知の四環系インビボ造影剤の有利な特性を保持する。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】造影剤５と非放射性造影剤５の共溶出を示す図。
【図２】造影剤６と非放射性造影剤６の共溶出を示す図。
【図３】造影剤７と非放射性造影剤７の共溶出を示す図。
【図４】造影剤９と非放射性造影剤９の共溶出を示す図。
【図５】造影剤１０（上）及び７−フルオロ−９−（２−［18Ｆ］フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（中間）及び７−フルオロ−９−（２−［19Ｆ］フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（下）を示す図。
【図６】造影剤１１と非放射性造影剤１１の共溶出を示す図。
【図７】四環系造影剤の脳内での体内分布プロファイルを示す図。
【図８】造影剤５の脳内での体内分布プロファイルを示す図。
【図９】造影剤６の脳内での体内分布プロファイルを示す図。
【図１０】造影剤７の脳内での体内分布プロファイルを示す図。
【図１１】造影剤９の脳内での体内分布プロファイルを示す図。
【図１２】造影剤１０の脳内での体内分布プロファイルを示す図。
【図１３】造影剤１１の脳内での体内分布プロファイルを示す図。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
造影剤
一態様では、本発明は、次の式Ｉのインビボ造影剤を提供する。
【００１６】
【化１】
0005651163.tif 000002
式中、
Ｒ1はＣ1〜3アルキル又はＣ1〜3フルオロアルキルであり、
Ｒ2は水素、ヒドロキシル、ハロ、シアノ、Ｃ1〜3アルキル、Ｃ1〜3アルコキシ、Ｃ1〜3フルオロアルキル又はＣ1〜3フルオロアルコキシであり、
Ｒ3及びＲ4は独立にＣ1〜3アルキル、Ｃ7〜10アラルキルであるか、或いはＲ3及びＲ4はそれらと結合した窒素と共に含窒素Ｃ4〜6脂肪族環を形成するもので、適宜、窒素、酸素及び硫黄から選択される追加の１個のヘテロ原子を含んでいてもよく、
Ｙ1はＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ2又はＣＨ2であり、
Ｙ2はＣＨ2、ＣＨ2−ＣＨ2、ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2又はＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2であり、
上記の式Ｉは、インビボイメージングに適した放射性同位体である原子を含む。
【００１７】
「インビボ造影剤」は、本発明の文脈では、インビボイメージングに適した放射性標識合物である。用語「インビボイメージング」は、本明細書で使用される場合、対象の内面のすべて又は一部の画像を非侵襲的に作成する技術を指す。
【００１８】
別途記載しない限り、単独又は組合せにおける用語「アルキル」は、好ましくは１〜３個の炭素原子を含有する直鎖又は枝分れアルキル基を意味する。かかる基の例としては、メチル、エチル及びプロピルが挙げられる。
【００１９】
別途記載しない限り、用語「アルコキシ」は、エーテル結合を含む上記で定義したアルキル基を意味し、用語「エーテル結合」は、基−Ｃ−Ｏ−Ｃ−を指す。適切なアルキルエーテル基の例としては、メトキシ、エトキシ及びプロポキシが挙げられる。
【００２０】
用語「ハロゲン」又は「ハロ−」は、フッ素、塩素、臭素又はヨウ素から選択される置換基を意味する。「ハロアルキル」及び「ハロアルコキシ」は、それぞれ１つ以上のハロゲンで置換されている上記で定義したアルキル及びアルコキシ基である。ハロアルキル及びハロアルコキシ置換基の場合、適切には、ハロゲンは、基の末端の水素を置き換え、すなわち−アルキレン−ハロゲン又は−アルコキシレン−ハロゲンとなる。用語「アルキレン」は、ｎが１〜３である二価の基−（ＣＨ2）n−を指し、用語「アルコキシレン」は、エーテル結合を含むアルキレン基を指し、エーテル結合は上記で定義した通りである。
【００２１】
用語「シアノ」は、基−ＣＮを指す。
【００２２】
用語「ヒドロキシル」は、基−ＯＨを指す。
【００２３】
用語「アラルキル」は、基−アルキレン−フェニルを指し、アルキレンは上記で定義した通りである。
【００２４】
「含窒素Ｃ4〜6脂肪族環」は、窒素ヘテロ原子を含む飽和Ｃ4〜6アルキル環である。その例としては、ピロリジニル、ピペリジニル及びモルホリニル環が挙げられる。
【００２５】
用語「インビボイメージングに適した放射性同位体である原子を含む」とは、上記で定義した式Ｉにおいて、原子の１つの同位体が、インビボイメージングに適した放射性同位体であることを意味する。インビボイメージングに適したものとなるには、放射性同位体が、前記対象への投与後に外部から検出できることが必要である。
【００２６】
キラル中心又は別の形態の異性体中心が、本発明のインビボ造影剤に存在する場合、鏡像異性体及びジアステレオ異性体を含むかかる異性体のすべての形態が本発明に包含される。キラル中心を含有する本発明のインビボ造影剤は、ラセミ混合物若しくは鏡像異性体に富んだ混合物として使用することができ、又は周知の技術を使用してラセミ混合物を分離することができ、個々の鏡像異性体を単独で使用することもできる。
【００２７】
好ましい造影剤
Ｒ1は、好ましくはメチル又はＣ2〜3フルオロアルキルであり、最も好ましくは−エチレン−Ｆ（すなわち−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｆ）である。
【００２８】
Ｒ2は、好ましくは水素、ハロ、Ｃ1〜3アルコキシ又はＣ1〜3フルオロアルコキシである。Ｒ2は、最も好ましくは水素、ハロ又はＣ1〜3アルコキシであり、特に最も好ましくは水素、フルオロ又はメトキシである。Ｒ2が置換基である場合、５位又は６位にあるのが好ましく、最も好ましくは５−メトキシ、６−メトキシ、５−フルオロ及び６−フルオロから選択される。
【００２９】
Ｒ3及びＲ4は、好ましくは独立に、メチル、エチル又はベンジルであり、最も好ましくは共にエチルである。
【００３０】
或いは好ましくは、Ｒ3及びＲ4は、それらに結合した窒素と共に含窒素Ｃ5〜6脂肪族環を形成する。
【００３１】
Ｙ1は、好ましくはＣＨ2である。
【００３２】
本発明の最も好ましいインビボ造影剤では、Ｙ2はＣＨ2−ＣＨ2である。
【００３３】
本発明の好ましいインビボ造影剤は、単光子放射断層撮影（ＳＰＥＣＴ）又は陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）を使用するイメージングに適している。ＳＰＥＣＴでは、適切な放射性同位体は、γ線を放射する放射性ハロゲンである。本発明における使用に適したγ線を放射する放射性ハロゲンの例は、123Ｉ、131Ｉ及び77Ｂｒである。γ線を放射する好ましい放射性ハロゲンは123Ｉである。インビボ造影剤の放射性同位体が123Ｉである場合、Ｒ2が123Ｉであることが好ましい。ＰＥＴでは、適切な放射性同位体は、陽電子を放出する放射性非金属である。本発明における使用に適した陽電子を放出する放射性非金属の例は、11Ｃ、18Ｆ及び124Ｉである。陽電子を放出する好ましい放射性非金属は、11Ｃ及び18Ｆである。11Ｃの場合、Ｒ1が11Ｃメチルであることが好ましい。放射性同位体が18Ｆである場合、Ｒ1がＣ2〜3［18Ｆ］フルオロアルキルであることが好ましく、最も好ましくは−エチレン−18Ｆである。
【００３４】
本発明のインビボ造影剤がＰＥＴイメージングに適していることが好ましく、18Ｆは、ＰＥＴイメージングに適した好ましい放射性同位体である。本発明の方法においてＰＥＴが好ましいのは、その優れた感受性及び分解能に起因するものであり、したがって病変の相対的に小さい変化も、経時的に観測することができる。ＰＥＴスキャナーは、ピコモル範囲の放射能濃度を定期的に測定する。マイクロＰＥＴスキャナーは、現在約１ｍｍの空間分解及び約４〜５ｍｍの臨床的スキャナーにアプローチするものである。
【００３５】
式Ｉの好ましいインビボ造影剤は、次の式Ｉａのものである。
【００３６】
【化２】
0005651163.tif 000003
式中、
Ｒ2aは水素、ハロ又はＣ1〜3アルコキシであり、
Ｒ3a及びＲ4aは独立にメチル、エチル若しくはベンジルであるか、或いはそれらに結合した窒素と共にピロリジニル、ピペリジニル、アゼパニル若しくはモルホリニル環を形成するものであり、
Ｙ2aはＣＨ2、ＣＨ2−ＣＨ2、ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2又はＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2であり、
ｎは１、２又は３である。
【００３７】
式Ｉａでは、Ｒ3a及びＲ4aは、好ましくは共にエチルであるか、或いはＲ3aはメチルであってＲ4aはベンジルであるか、或いはそれらに結合した窒素と共にアゼパニル環を形成するものである。
【００３８】
Ｒ2aは、好ましくは水素、メトキシ又はフルオロである。
【００３９】
Ｙ2aは、好ましくはＣＨ2−ＣＨ2又はＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2である。
【００４０】
ｎは好ましくは２である。
【００４１】
式Ｉａの好ましいインビボ造影剤では、
Ｒ3a及びＲ4aは共にエチルであるか、或いはＲ3aがメチルであってＲ4aがベンジルであるか、或いはそれらに結合した窒素と共にアゼパニル環を形成するものであり、
Ｒ2aは水素、メトキシ又はフルオロであり、
Ｙ2aはＣＨ2−ＣＨ2又はＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2であり、
ｎは２である。
【００４２】
式Ｉａのインビボ造影剤の非限定的な例は、以下の通りである。
【００４３】
【化３】
0005651163.tif 000004
上記のインビボ造影剤１〜１１の中でも、インビボ造影剤５、６、７、９、１０及び１１が好ましく、インビボ造影剤５及び１０が最も好ましく、インビボ造影剤５が特に好ましい。本発明の任意のインビボ造影剤では、鏡像異性的に純粋な形態が特に好ましい。
【００４４】
前駆体化合物
別の態様では、本発明は、本発明のインビボ造影剤の調製のための前駆体化合物を提供し、前駆体化合物は、次の式ＩＩの化合物である。
【００４５】
【化４】
0005651163.tif 000005
式中、Ｒ11及びＲ12の一方は、本発明のインビボ造影剤について上記で定義した放射性同位体の適切な供給源と反応して、前駆体化合物と放射性同位体の適切な供給源との反応によって本発明のインビボ造影剤を形成する化学基であり、Ｒ11及びＲ12の他方は、それぞれＲ1及びＲ2について本明細書に定義した通りであり、適宜保護基を含んでおり、
Ｒ13〜14及びＹ11〜12は、それぞれＲ3〜4及びＹ1〜2について本明細書に定義した通りであり、適宜保護基を含んでいる。
【００４６】
「前駆体化合物」は、好都合な化学的形態の検出可能な標識との化学反応が部位特異的に生じ、最小数の段階（理想的には単一段階）で著しい精製の必要なしに（理想的にはさらなる精製せずに）実施されて、所望のインビボ造影剤を生成し得るように設計された、放射性標識合物の非放射性誘導体を含む。かかる前駆体化合物は、合成することができ、好都合には良好な化学的純度で得ることができる。
【００４７】
用語「保護基」は、望ましくない化学反応を阻害又は抑制するが、分子の残りを修飾しない穏やかな条件下で、問題の官能基から開裂して所望の生成物をもたらし得るのに十分な反応性を有するように設計されている基を意味する。保護基は、当業者に周知であり、’Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ’，Ｔｈｅｏｒｏｄｏｒａ  Ｗ．  Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐｅｔｅｒ  Ｇ．  Ｍ．  Ｗｕｔｓ，（Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，１９９９）に記載されている。
【００４８】
用語「放射性同位体の適切な供給源」は、前駆体化合物の置換基と反応性であり、したがって放射性同位体が前駆体化合物と共有結合するような化学的形態の放射性同位体を意味する。以下の部分に提示したそれぞれ特定の放射性同位体では、放射性同位体の１つ以上の適切な供給源を論じる。インビボ造影剤の当業者には、本発明における適用に適した放射性同位体のこれら及び他の供給源が周知であろう。
【００４９】
以下のスキーム１は、前駆体化合物としてそれ自体使用することができ、又は少数のさらなる段階を用いて前駆体化合物に変換することができる化合物を得る方法を示す一般的な反応スキームである。スキーム１のＲ11〜14及びＹ11〜12は、式ＩＩについて上記で定義した通りである。
【００５０】
【化５】
0005651163.tif 000006
或いは、前駆体化合物のＲ12が環の一番上の位置にある場合、以下のスキームＩａに示した一般的な合成経路を使用することができる。
【００５１】
【化６】
0005651163.tif 000007
上記のスキーム１ａでは、−Ｒ11a−ＰＧは、保護されたＲ11基を表し、Ｒは、適切には本明細書に定義したものであることが好ましい。Ｒ11がヒドロキシである場合、−Ｒ11a−ＰＧは、例えば−Ｏ−ベンジルであってよい。Ｒ12〜14及びＹ11〜12は、適切には上記の式ＩＩについて提示したものであることが好ましく、但しＲ12はクロロではない。この合成経路では、環の一番下の位置の塩素によって、唯一の異性体が生成されるような唯一の方法で、強制的に環化が生じる。類似の方法は、国際公開第２００３／０１４０８２号に開示されている。しかし、本発明者らが本発明の前駆体化合物を得るために国際公開第２００３／０１４０８２号の教示を適用すると、その収率は低かった（実施例２（ｄ）参照）。この問題は、環化段階で使用する溶媒系を変更することによって克服した。国際公開第２００３／０１４０８２号では、環化段階をトルエン中で実施しているが、本発明者らは、トルエンの代わりにジエチルエーテルを使用すると最適な収率が得られることを見出した。環化段階の生成物はジエチルエーテルに溶解するが、非環化出発化合物は溶解しない。したがって、非環化出発化合物は反応容器の底部にＺｎＣｌ2と共に残存し、環化生成物は反応容器の上部のジエチルエーテル中に移動する。
【００５２】
したがって別の一態様では、本発明は、次の式ＩＩｂの前駆体化合物の調製方法であって、
【００５３】
【化７】
0005651163.tif 000008
（式中、
Ｒ11bは、スキームＩａでＲ11aについて定義した通りであり、
Ｒ12b〜14bは、式ＩＩのＲ12〜14について定義した通りであり、但しＲ12bはクロロではなく、
Ｙ11b〜12bは、式ＩＩのＹ11〜12について定義した通りである。）
下記の式ＩＩｃの化合物とＺｎＣｌ2との反応によって、下記の式ＩＩｄの化合物を形成する段階を含んでいて、上記の反応を、ジエチルエーテルを含む溶媒系中で実施する方法を提供する。
【００５４】
【化８】
0005651163.tif 000009
（式中、Ｒ12c、Ｙ11c及びＹ12cは、適切にはそれぞれＲ12、Ｙ11及びＹ12について本明細書に定義した通りであることが好ましく、ＰＧcは保護基である。）
【００５５】
【化９】
0005651163.tif 000010
（式中、Ｒ12d、Ｙ11d、Ｙ12d及びＰＧdは、それぞれＲ12c、Ｙ11c、Ｙ12c及びＰＧcについて定義した通りである。）
好ましくは、前記保護基のＰＧc、ＰＧdは、−ベンジルである。式ＩＩｂの前駆体化合物は、式ＩＩの好ましい前駆体化合物を表す。
【００５６】
インビボ造影剤の放射性同位体が18Ｆである場合、18Ｆによる標識は、前駆体化合物の脱離基の求核置換によって達成され得る。
【００５７】
適切な脱離基にはＣｌ、Ｂｒ、Ｉ、トシレート（ＯＴｓ）、メシレート（ＯＭｓ）及びトリフレート（ＯＴｆ）が挙げられる。もう１つの戦略は、前駆体化合物に存在するアルキルアミド基上の所定位置に適切な脱離基を有することである。いずれの場合も前駆体化合物は、普通は核反応18Ｏ（ｐ，ｎ）18Ｆから水溶液として得られ、カチオン性対イオンの付加及びその後の水の除去によって反応性になる［18Ｆ］フッ化物イオン（18Ｆ-）の適切な供給源と反応することによって、一段階で標識することができる。18Ｆは、前駆体化合物のヒドロキシル基を18Ｆ（ＣＨ2）3−ＬＧ（ＬＧは上記で定義した脱離基を表す）でＯ−アルキル化することによって導入することもできる。或いは放射性フッ素原子は、ベンゼン環などの芳香族環との直接共有結合を介して結合することができる。アリール系では、アリールジアゾニウム塩、アリールニトロ化合物又はアリール第４級アンモニウム塩の18Ｆ−フッ化物求核置換が、アリール−18Ｆ誘導体に適した経路である。
【００５８】
以下のスキーム２に示す通り、上記のスキーム１又はスキーム１ａのいずれかを継続して、本発明の18Ｆインビボ造影剤を得るのに適した前駆体化合物に達することができる。
【００５９】
【化１０】
0005651163.tif 000011
出発化合物及び中間体は、市販されており、又は刊行された学術論文、例えばＮａｐｐｅｒ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  ２００５；４８：８０４５−５４；Ｄａｖｉｅｓ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  １９９８；４１：４５１−４６７から公知である。
【００６０】
18Ｆを含むインビボ造影剤を得るための、式ＩＩの好ましい前駆体化合物では、Ｒ11はＣ1〜3アルキレン−ＬＧであり、ＬＧは脱離基を表す。最も好ましいかかる前駆体化合物は、式ＩＩａ
【００６１】
【化１１】
0005651163.tif 000012
（式中、
ＬＧは、メシレート、トシレート及びトリフレートから選択され、
Ｒ12a〜14a、Ｙ12a及びｍは、適切にはそれぞれ式ＩａのＲ2a〜4a、Ｙ2a及びｎについて上記で定義した通りであることが好ましい］
の化合物である。
【００６２】
式ＩＩａの好ましい前駆体化合物の非限定的な例は、以下の通りである。
【００６３】
【化１２】
0005651163.tif 000013
上記の前駆体化合物１〜１１の中でも、前駆体化合物５、６、７、９、１０及び１１が好ましく、前駆体化合物５及び１０が最も好ましく、前駆体化合物５が特に好ましい。
【００６４】
11Ｃで標識したＰＥＴトレーサー化合物は、前駆体化合物を11Ｃヨウ化メチルと反応させることによって合成することができる。11Ｃの半減期はわずか２０．４分なので、中間体11Ｃヨウ化メチルが高い特異的活性を有し、その結果、可能な限り急速な反応過程を使用して中間体11Ｃヨウ化メチルを生成することが重要である。かかる11Ｃによる標識技術の詳しい総説は、Ａｎｔｏｎｉ  ｅｔ  ａｌ，“Ａｓｐｅｃｔｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  １１Ｃ−Ｌａｂｅｌｌｅｄ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ”  ｉｎ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｅｄ．  Ｍ．Ｊ．  Ｗｅｌｃｈ  ａｎｄ  Ｃ．Ｓ．  Ｒｅｄｖａｎｌｙ（２００３，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ）に見ることができる。
【００６５】
本発明の11Ｃで標識したインビボ造影剤は、以下のスキーム３に示す通り上記のスキーム１を継続することによって得ることができる。
【００６６】
【化１３】
0005651163.tif 000014
イメージング部分が放射性ヨウ素である場合、好ましい前駆体化合物は、求電子性ヨウ素化を受ける誘導体を含む化合物である。この例は、トリアルキルスタンナン（例えば、トリメチルスタンニル又はトリブチルスタンニル）などの有機金属誘導体、又はトリアルキルシラン（例えば、トリメチルシリル）、又は有機ホウ素化合物（例えば、ボロン酸エステル又は有機三フッ化ホウ素）である。
【００６７】
求電子性の放射性ヨウ素標識では、前駆体化合物は、好ましくは活性化有機金属前駆体化合物（例えば、トリアルキルスズ、トリアルキルシリル又は有機ホウ素化合物）を含む。放射性ヨウ素を有機分子に導入する前駆体化合物及び方法は、Ｂｏｌｔｏｎ（Ｊ．  Ｌａｂ．  Ｃｏｍｐ．  Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．  ２００２；４５：４８５−５２８）に記載されている。適切なボロン酸エステルである有機ホウ素化合物及びそれらの調製は、Ｋａｂａｌａｋａ  ｅｔ  ａｌ（Ｎｕｃｌ．  Ｍｅｄ．  Ｂｉｏｌ．，２００２；２９：８４１−８４３  ａｎｄ  ２００３；３０：３６９−３７３）に記載されている。適切な有機三フッ化ホウ素及びそれらの調製は、Ｋａｂａｌａｋａ  ｅｔ  ａｌ（Ｎｕｃｌ．  Ｍｅｄ．  Ｂｉｏｌ．，２００４；３１：９３５−９３８）に記載されている。放射性ヨウ素標識にとって好ましい前駆体化合物は、有機金属前駆体化合物、最も好ましくはトリアルキルスズを含む。
【００６８】
放射性ヨウ素で標識した本発明のインビボ造影剤は、以下のスキーム４に示す通り上記のスキーム１を継続することによって得ることができる。
【００６９】
【化１４】
0005651163.tif 000015
放射性臭素標識は、放射性ヨウ素標識について前述の方法と類似の方法によって達成することができる。Ｋａｂａｌｋａ及びＶａｒｍａは、放射性臭素標識化合物を含む放射性ハロゲン標識化合物の合成のための様々な方法を総説した（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  １９８９年；４５（２１）：６６０１〜２１頁）。
【００７０】
本発明の前駆体化合物は、理想的には非発熱性の滅菌形態で提供される。したがって前駆体化合物は、インビボ造影剤を哺乳動物への投与に適した生体適合性の担体と一緒に含む医薬組成物の調製のために使用することができる。前駆体化合物はまた、かかる医薬組成物の調製のためのキット又はカセットの成分として含まれるのに適している。これらの態様を、以下により詳細に論じる。
【００７１】
別の好ましい実施形態では、前駆体化合物は固相と結合している。前駆体化合物は、好ましくは、固体支持マトリックスと共有結合した状態で供給される。この方法では、所望の生成物は溶液の形態であり、出発材料及び不純物は固相に結合したままである。かかる系の一例として、18Ｆ−フッ化物による固相求電子性フッ素化のための前駆体化合物は、国際公開第０３／００２４８９号に記載されており、18Ｆ−フッ化物による固相求核フッ素化のための前駆体化合物は、国際公開第０３／００２１５７号に記載されている。
【００７２】
調製方法
さらなる一態様では、本発明は、
（ｉ）本発明の前駆体化合物を提供する段階と、
（ｉｉ）本明細書に定義の前記放射性同位体の適切な供給源を提供する段階と、
（ｉｉｉ）段階（ｉ）の前駆体化合物を、段階（ｉｉ）の放射性同位体と反応させて、本発明のインビボ造影剤を得る段階と
を含む、本発明のインビボ造影剤を調製する方法を提供する。
【００７３】
段階（ｉ）では、前駆体化合物は、前駆体化合物の説明で前述した通り、自動合成装置との併用に適したキット又はカセット内の溶液として、或いは固体支持体に結合した状態で提供することができる。キット及びカセットは、本発明のさらなる態様を形成するものであり、これらを以下により詳細に論じることにする。
【００７４】
前駆体化合物を放射性同位体と「反応させる」段階は、可能な限り高い放射化学的収率（ＲＣＹ）で所望のインビボ造影剤を形成するのに適した反応条件下で、２つの反応物を一緒にすることを含む。本発明のインビボ造影剤を得るためのいくつかの特定の合成経路を、以下の実験部分に提示する。
【００７５】
本発明の調製方法について、インビボ造影剤、前駆体化合物及び放射性同位体の適切な好ましい実施形態は、既に本明細書に提示した通りである。
【００７６】
キット及びカセット
またさらなる一態様では、本発明は、本発明のインビボ造影剤を調製するためのキットを提供し、前記キットは、本発明の前駆体化合物を含み、したがって放射性同位体の滅菌供給源との反応によって、最小限の操作数で所望のインビボ造影剤を得るようにされている。かかる考察は、放射性同位体が相対的に短い半減期を有する場合に特に重要であり、放射線技師（ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｉｓｔ）にとっての取扱いを容易にし、したがって放射線量を低減するのに重要である。前駆体化合物は、好ましくは凍結乾燥形態でキット内に存在し、かかるキットの再構成のための反応媒体は、好ましくは生体適合性の担体である。
【００７７】
「生体適合性の担体」は、インビボ造影剤を懸濁又は溶解することによって組成物が生理的に容認できるものとなる、すなわち毒性又は過度の不快感なしに哺乳動物の身体に投与することができる流体、特に液体である。生体適合性の担体は、適切には、発熱物質を含まない注入用の滅菌水；生理食塩水（注入用の最終生成物が、等張性であるように、又は低張性にならないように平衡化できることが有利である）などの水溶液；１つ以上の浸透圧調節物質（例えば、血漿カチオンと生体適合性の対イオンの塩）、糖類（例えば、グルコース又はスクロース）、糖アルコール（例えば、ソルビトール又はマンニトール）、グリコール（例えば、グリセロール）又は他の非イオン性ポリオール材料（例えば、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール等）の水溶液などの注入可能な担体液体である。生体適合性の担体は、エタノールなどの生体適合性の有機溶媒を含むこともできる。かかる有機溶媒は、より親油性が高い化合物又は配合物を可溶化するのに有用である。好ましくは、生体適合性の担体は、発熱物質を含まない注入用の水、等張食塩水又はエタノール水溶液である。静脈内注入のための生体適合性の担体のｐＨは、適切には４．０〜１０．５の範囲である。
【００７８】
本発明のキットでは、前駆体化合物は、好ましくは滅菌上の完全性及び／又は放射性の安全性と、任意選択により不活性なヘッドスペースガス（例えば、窒素又はアルゴン）の維持を可能にすると同時に、シリンジによる溶液の添加及び除去を可能にする封止容器中に存在する。好ましい封止容器は、セプタムで封止したバイアルであり、その場合気密にする蓋は、オーバーシール（一般にアルミニウム製）で圧着される。かかる封止容器は、その蓋が所望に応じて真空に耐えて、例えばヘッドスペースガスを取り替え、又は溶液を脱気することができるというさらなる利点を有する。
【００７９】
キットで使用される場合、前駆体化合物の好ましい実施形態は、既に本明細書に記載した通りである。
【００８０】
キットで使用するための前駆体化合物は、所望の非発熱性の滅菌材料を得るために、無菌の製造条件下で使用することができる。或いは、前駆体化合物を非滅菌条件下で使用し、その後、例えばγ照射、高圧蒸気殺菌法、乾熱又は化学的処理（例えば、エチレンオキシドを用いる）を使用して最終滅菌にかけることができる。好ましくは、前駆体化合物は、非発熱性の滅菌形態で提供される。最も好ましくは、非発熱性の滅菌前駆体化合物は、前述の封止容器で提供される。
【００８１】
キットのすべての成分は、実施と実施の間の汚染の可能性を最小限に抑え、無菌性及び品質の保持を確実にするために使い捨てできることが好ましい。
【００８２】
現在、特に［18Ｆ］放射性トレーサーは、好都合には自動化放射合成（ｒａｄｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）装置で調製されることが多い。Ｔｒａｃｅｒｌａｂ（商標）及びＦａｓｔｌａｂ（商標）（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｔｄ）を含む、かかる装置の市販で利用可能ないくつかの例がある。かかる装置は一般に、放射合成を実施するための装置に備え付けられる、しばしば使い捨ての「カセット」を含み、そのカセットの中では放射化学が行われる。カセットは、普通は、流体経路、反応容器、及び試薬のバイアルを入れるポート、並びに放射合成後の除去段階で使用する任意の固相抽出カートリッジを含む。
【００８３】
したがって本発明は、別の態様では、
（ｉ）本明細書に定義の前駆体化合物を含有する容器と、
（ｉｉ）その容器を、本明細書に定義のインビボイメージングに適した前記放射性同位体の適切な供給源を用いて溶出するための手段と
を含む、本明細書に定義のインビボ造影剤の自動合成のためのカセットを提供する。
【００８４】
本発明のカセットについて、前駆体化合物及び放射性同位体の適切な供給源の適切な好ましい実施形態は、既に本明細書に定義した通りである。
【００８５】
カセットは、
（ｉｉｉ）過剰の放射性同位体を除去するためのイオン交換カートリッジと、任意選択により
（ｉｖ）前駆体化合物が１つ以上の保護基を含む場合、得られた放射性標識生成物を脱保護して本明細書に定義のインビボ造影剤を形成するためのカートリッジと
をさらに含むことができる。
【００８６】
放射性医薬組成物
別のさらなる一態様では、本発明は、哺乳動物への投与に適した形態の生体適合性の担体と一緒に本発明のインビボ造影剤を含む、「放射性医薬組成物」を提供する。生体適合性の担体は、本発明のキットに関して上記で定義した通りである。本発明の放射性医薬組成物について、インビボ造影剤の適切な好ましい実施形態は、既に本明細書に定義した通りである。
【００８７】
放射性医薬組成物は、非経口によって、すなわち注入によって投与することができ、最も好ましくは水溶液である。かかる組成物は、任意選択により緩衝液；薬学的に許容される可溶化剤（例えば、シクロデキストリン又はＰｌｕｒｏｎｉｃ、Ｔｗｅｅｎ若しくはリン脂質などの界面活性剤）；薬学的に許容される安定剤又は抗酸化剤（アスコルビン酸、ゲンチシン酸又はパラアミノ安息香酸など）などのさらなる成分を含有することができる。本発明のインビボ造影剤が放射性医薬組成物として提供される場合、前記インビボ造影剤の調製方法は、放射性医薬組成物を得るために必要な段階、例えば有機溶媒の除去、生体適合性の緩衝液の添加、及び任意の場合によるさらなる成分の添加をさらに含むことができる。非経口投与では、放射性医薬組成物が滅菌され、非発熱性であることを確実にする段階を含む必要もある。
【００８８】
使用方法
またさらなる一態様では、本発明は、
（ｉ）前記対象に、本発明のインビボ造影剤を投与する段階と、
（ｉｉ）前記インビボ造影剤を前記対象のＰＢＲと結合させる段階と、
（ｉｉｉ）インビボイメージング手順によって、前記インビボ造影剤の放射性同位体から放出されたシグナルを検出する段階と、
（ｉｖ）前記シグナルの位置及び／又は量の代表的な画像を作成する段階と、
（ｖ）前記インビボ造影剤によって放出された前記シグナルと直接相関する、前記対象におけるＰＢＲ発現の分布及び程度を決定する段階と
を含む、対象におけるＰＢＲ発現の分布及び／又は程度を決定するためのインビボイメージング法を提供する。
【００８９】
本発明のインビボイメージング法について、インビボ造影剤の適切な好ましい実施形態は、既に本明細書に定義した通りである。
【００９０】
インビボ造影剤の「投与」は、好ましくは非経口により、最も好ましくは静脈内により実施される。静脈内経路は、インビボ造影剤を対象の身体にわたって送達し、したがって血液脳関門（ＢＢＢ）にも通過させ、前記対象の中枢神経系（ＣＮＳ）に発現したＰＢＲと接触させるための最も効率的な方法である。さらに、静脈内投与は、実質的な身体的介入又は実質的な健康上の危険性を示さない。本発明のインビボ造影剤は、好ましくは本明細書に定義の本発明の医薬組成物として投与される。本発明のインビボイメージング法は、本発明のインビボ造影剤を予め投与した対象に対して実施される上記で定義した段階（ｉｉ）〜（ｖ）を含むと理解することもできる。
【００９１】
投与段階の後、検出段階の前に、インビボ造影剤をＰＢＲと結合させる。例えば、対象が無傷哺乳動物である場合、インビボ造影剤は、哺乳動物の身体中を動的に移動し、その様々な組織と接触することになる。インビボ造影剤がＰＢＲと接触すると特異的な相互反応が生じ、その結果、ＰＢＲを有する組織からのインビボ造影剤のクリアランスは、ＰＢＲのない、又はＰＢＲの少ない組織からのクリアランスよりも長くかかる。ＰＢＲを有する組織と結合したインビボ造影剤と、ＰＢＲのない、又はＰＢＲの少ない組織において結合したインビボ造影剤との間の比の結果、ＰＢＲに特異的に結合したインビボ造影剤の検出が可能となるある時点に達することになる。かかる理想的な比は、約２：１である。
【００９２】
本発明の方法の「検出」段階は、前記シグナルに感受性のある検出器を用いて放射性同位体が放出するシグナルを検出することを含む。この検出段階は、シグナルデータの取得と理解することもできる。単光子放射型断層撮影（ＳＰＥＣＴ）及び陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）は、本発明の方法における使用に最も適したインビボイメージング手順である。ＰＥＴは、本発明の方法における使用に好ましいインビボイメージング手順である。
【００９３】
本発明の方法の「作成」段階は、取得したシグナルデータに再構成アルゴリズムを適用してデータセットを得るコンピューターによって実施される。次いで、このデータセットを操作して、前記放射性同位体が放出するシグナルの位置及び／又は量を示す画像を作成する。放出されたシグナルは、ＰＢＲの発現と直接相関し、したがって、作成した画像を評価することによって「決定」段階を行うことができる。
【００９４】
本発明の「対象」は、任意のヒト又は動物対象であってよい。好ましくは、本発明の対象は哺乳動物である。最も好ましくは、前記対象は、インビボの無傷哺乳動物の身体である。特に好ましい一実施形態では、本発明の対象はヒトである。インビボイメージング法は、健康な対象において、又はＰＢＲの異常発現に関連する病理学的状態（以下「ＰＢＲ状態」）を有することが公知の、若しくはその疑いのある対象においてＰＢＲを試験するために使用することができる。好ましくは、前記方法は、ＰＢＲ状態を有することが公知の、又はその疑いのある対象におけるインビボイメージングに関し、したがって前記状態の診断方法において有用性がある。
【００９５】
インビボイメージングが役立つかかるＰＢＲ状態の例としては、多発性硬化症、ラスムッセン脳炎、脳血管炎、ヘルペス脳炎、ＡＩＤＳ関連認知症、パーキンソン病、大脳皮質基底核変性症、進行性核上性麻痺、多系統萎縮症、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、アルツハイマー病、虚血性脳卒中、末梢神経損傷、てんかん、外傷性脳損傷、急性ストレス、慢性ストレス、神経障害性疼痛、肺炎症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、炎症性腸疾患、関節リウマチ、原発性線維筋痛症、神経損傷、アテローム性動脈硬化症、腎炎、虚血再灌流障害、及び癌、特に結腸、前立腺又は乳房の癌が挙げられる。本発明のインビボ造影剤は、特に、脳へのそれらの良好な取込みに起因して、ＣＮＳのインビボイメージングに適している。
【００９６】
代替の一実施形態では、本発明のインビボイメージング法は、前記対象のための治療投与計画の過程中、反復して実施することができ、前記投与計画は、ＰＢＲ状態に対抗するための薬物を投与する段階を含む。例えば、本発明のインビボイメージング法は、ＰＢＲ状態に対抗するための薬物を用いる治療の前、その最中、及びその後に実施することができる。この方法では、前記治療の作用を経時的にモニタすることができる。好ましくはこの実施形態では、インビボイメージング手順はＰＥＴである。ＰＥＴは、優れた感受性及び分解能を有し、したがって病変における相対的に小さい変化も経時的に観察することができ、このことは治療モニタリングにとって特に有利である。
【００９７】
さらなる一態様では、本発明は、ＰＢＲ状態の診断方法を提供する。本発明の診断方法は、上記で定義したインビボイメージング法を、ＰＢＲ発現の分布及び程度が特定の臨床像に帰するさらなる段階（ｖｉ）、すなわち演繹的な医学的決定段階と一緒に含む。
【００９８】
別の態様では、本発明は、本明細書に定義の診断方法において使用するための、本明細書に定義のインビボ造影剤を提供する。
【００９９】
またさらなる一態様では、本発明は、本明細書に定義の診断方法において使用する本明細書に定義の放射性医薬組成物の製造に使用するための、本明細書に定義のインビボ造影剤を提供する。
【０１００】
本発明を、ここで一連の非限定的な例によって例示する。
【実施例】
【０１０１】
実施例の簡単な説明
実施例１は、前駆体化合物５及び造影剤５の合成を記載する。
【０１０２】
実施例２は、造影剤５の非放射性類似体の合成を記載する。
【０１０３】
実施例３は、前駆体化合物６及び造影剤６の合成を記載する。
【０１０４】
実施例４は、造影剤６の非放射性類似体の合成を記載する。
【０１０５】
実施例５は、前駆体化合物７及び造影剤７の合成を記載する。
【０１０６】
実施例６は、造影剤７の非放射性類似体の合成を記載する。
【０１０７】
実施例７は、前駆体化合物９及び造影剤９の合成を記載する。
【０１０８】
実施例８は、造影剤９の非放射性類似体の合成を記載する。
【０１０９】
実施例９は、前駆体化合物１０及び造影剤１０の合成を記載する。
【０１１０】
実施例１０は、造影剤１０の非放射性類似体の合成を記載する。
【０１１１】
実施例１１は、前駆体化合物１１及び造影剤１１の合成を記載する。
【０１１２】
実施例１２は、造影剤１１の非放射性類似体の合成を記載する。
【０１１３】
実施例１３は、前駆体化合物５の鏡像異性体分離を記載する。
【０１１４】
実施例１４は、非放射性造影剤５の鏡像異性体分離を記載する。
【０１１５】
実施例１５は、ＰＢＲに対する親和性を試験するために使用したインビトロ効力アッセイを記載する。
【０１１６】
実施例１６は、インビボでの本発明の造影剤の性能を試験するために使用した体内分布法を記載する。
【０１１７】
実施例１７は、過去の四環系インドール造影剤の非放射性類似体の合成を記載する。
【０１１８】
実施例１８は、過去の四環系インドール造影剤の合成を記載する。
【０１１９】
実施例で使用した略語一覧
ａｑ          水性
ＤＣＭ        ジクロロメタン
ＤＭＡＰ      ４−ジメチルアミノピリジン
ＤＭＦ        ジメチルホルムアミド
ＥＤＣ        １−エチル−３−［３−ジメチルアミノプロピル］カルボジイミド塩酸塩
ＥＯＳ        合成の終了
ＥｔＯＡｃ    酢酸エチル
ＩＰＡ        イソプロピルアルコール
ＬＣ−ＭＳ    液体クロマトグラフィー−質量分析
ＮＭＲ        核磁気共鳴
ＯＢｎ        ベンジルオキシ
ＯＭｓ        メシレート
ＯＴｓ        トシレート
ＲＴ          室温
ＴＬＣ        薄層クロマトグラフィー
Ｔｏｌ        トルエン
実施例
実施例１：メタンスルホン酸２−（４−ジエチルカルバミル−５−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル）エチルエステル（前駆体化合物５）及び９−（２−［18Ｆ］フルオロ−エチル）−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（造影剤５）の合成
実施例１（ａ）：塩化ベンジルオキシアセチル（１）
ジクロロメタン（５０ｍＬ）中ベンジルオキシ酢酸（１０．０ｇ、６０．０ｍｍｏｌ、８．６ｍＬ）に、塩化オキサリル（９．１ｇ、７２．０ｍｍｏｌ、６．０ｍＬ）及びＤＭＦ（３０．０ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ、３２．０μＬ）を添加し、ＲＴで３時間撹拌した。最初、反応が進行するにつれてガスが急速に発生したが、反応が完了すると発生は停止した。ジクロロメタン溶液を真空中で濃縮してガムを得た。このガムを、さらなる塩化オキサリル（４．５ｇ、３５．７ｍｍｏｌ、３．０ｍＬ）、ジクロロメタン（５０ｍＬ）及び一滴のＤＭＦで処理した。ガスが急速に発生し、反応物をさらに２時間撹拌した。次いで、反応物を真空中で濃縮して、塩化ベンジルオキシアセチル（１）１１．０ｇ（定量的）をガムとして得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δC７３．６，７４．８，１２８．１，１２８．４，１２８．６，１３０．０及び１７１．９によって確認した。
【０１２０】
実施例１（ｂ）：２−ベンジルオキシ−Ｎ−（２−クロロ−５−メトキシ−フェニル）アセトアミド（２）
ジクロロメタン（１００ｍＬ）中塩化ベンジルオキシアセチル（１）（１１．０ｇ、６０．０ｍｍｏｌ）及び２−クロロ−５−メトキシアニリン塩酸塩（１１．７ｇ、６０．２ｍｍｏｌ）を０℃で撹拌し、トリエチルアミン（１３．０ｇ、１２６．０ｍｍｏｌ、１８．０ｍＬ）を１５分かけてゆっくり添加した。撹拌した反応物を、ＲＴにして１８時間かけて温めた。トリエチルアミン塩酸塩の大量の沈殿が生じた。ジクロロメタン溶液を１０％炭酸カリウム水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、２−ベンジルオキシ−Ｎ−（２−クロロ−５−メトキシ−フェニル）アセトアミド（２）１８．９ｇ（定量的）をガムとして得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δC５５．６，６９．６，７３．６，１０６．２，１１１．１，１１４．１，１２７．７，１２８．３，１２８．６，１２９．２，１３４．６，１３６．５，１５８．９及び１６７．７によって確認した。
【０１２１】
実施例１（ｃ）：（２−ベンジルオキシ−エチル）−（２−クロロ−５−メトキシフェニル）アミン（３）
ＴＨＦ（１００ｍＬ）中２−ベンジルオキシ−Ｎ−（２−クロロ−５−メトキシ−フェニル）アセトアミド（２）（１８．９ｇ、６２．０ｍｍｏｌ）を撹拌し、水素化アルミニウムリチウム（４．９ｇ、１３０．０ｍｍｏｌ）を１５分かけてゆっくり添加した。最初に水酸化アルミニウムリチウムを添加すると、水素ガスが急速に発生した。次いで、反応物を４時間加熱還流し、週末にかけてＲＴで静置した。次いで、撹拌した溶液に水（５０ｍＬ）を滴下添加することによって、反応物をクエンチした。水素が強烈に発生して、反応混合物が還流した。次いで、反応物を真空中で濃縮してスラリーを得た。水（２００ｍＬ）及び酢酸エチル（２００ｍＬ）を添加し、混合物を激しく振とうした。次いで、セライトを介して反応物を濾過して、沈殿した水酸化アルミニウムを除去し、酢酸エチル溶液を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、（２−ベンジルオキシ−エチル）−（２−クロロ−５−メトキシフェニル）アミン（３）１８．４ｇ（定量的）をガムとして得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δC４３．３，５５．３，６８．２，７３．０，９８．１，１０１．８，１１１．６，１２７．６，１２７．７，１２８．４，１２９．３，１３７．９，１４４．８及び１５９．５によって確認した。
【０１２２】
実施例１（ｄ）：３−ブロモ−２−ヒドロキシ−シクロヘキセ−１−エンカルボン酸エチルエステル（４）
２−オキソシクロヘキサンカルボン酸エチル（３０ｇ、１７６ｍｍｏｌ、２８ｍＬ）をジエチルエーテル（３０ｍＬ）に溶解し、窒素下で０℃に冷却した。臭素（２８ｇ、１７６ｍｍｏｌ、９．０ｍＬ）を１５分かけて滴下添加し、反応混合物をＲＴにして９０分かけて温めた。混合物を、氷冷した飽和炭酸カリウム水溶液（２５０ｍＬ）にゆっくり注ぎ、酢酸エチル（３×２００ｍＬ）で抽出した。混合有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮し、真空ラインで１８時間乾燥させて、３−ブロモ−２−ヒドロキシ−１−エンカルボン酸エチルエステル（４）４１．４ｇ（９４％）を黄色油として得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δC１４．１，１７．７，２１．８，３２．０，６０．０，６０．８，９９．７，１６６．３及び１７２．８によって確認した。
【０１２３】
実施例１（ｅ）：３［（２−ベンジルオキシ−エチル）−（２−クロロ−５−メトキシ−フェニル）−アミノ］−２−ヒドロキシ−シクロヘキセ−１−エンカルボン酸エチルエステル（５）
（２−ベンジルオキシ−エチル）−（２−クロロ−５−メトキシフェニル）アミン（３）（１０．０ｇ、３４．２ｍｍｏｌ）を、乾燥ＴＨＦ（１００ｍＬ）中、窒素下において−４０℃で撹拌し、カリウムビス（トリメチルシリル）アミド（トルエン中０．５Ｍ溶液１４３．０ｍＬ、７２．０ｍｍｏｌ）を３０分かけて添加した。次いで、乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）中３−ブロモ−２−ヒドロキシシクロヘキセ−１−エンカルボン酸エチルエステル（４）（８．５ｇ、３４．２ｍｍｏｌ）を添加し、ＲＴにして１．５時間かけて温めた。酢酸（１０．０ｇ、１６６ｍｍｏｌ、１０．０ｍＬ）を添加し、真空中で濃縮してＴＨＦを除去した。酢酸エチル（２００ｍＬ）及び１０％炭酸カリウム水溶液（１００ｍＬ）を添加し、混合物を激しく振とうした。酢酸エチル溶液を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、３［（２−ベンジルオキシ−エチル）−（２−クロロ−５−メトキシ−フェニル）−アミノ］−２−ヒドロキシ−シクロヘキセ−１−エンカルボン酸エチルエステル（５）１６．５ｇ（定量的）をガムとして得、それを次の段階で粗生成物として使用した。粗反応混合物のＨＰＬＣ（Ｇｅｍｉｎｉ  １５０×４．６ｍｍ、２０分間５０〜９５％のメタノール／水）、１８．９分（３８％）、１９．２分（２５％）、２３．１分（２８％）。
【０１２４】
反応物の一成分を単離した13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δC１４．３，２０．６，２１．８，２６．４，３８．６，４３．０，５５．８，６０．５，６８．７，７３．３，９３，４，１０６．３，１０８．２，１１９．３，１２１．５，１２７．５，１２７．６，１２８．３，１３５．７，１３７．０，１３７．９，１５５．７及び１７５．０。
【０１２５】
実施例１（ｆ）：９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸エチルエステル（６）
塩化亜鉛（７．１ｇ、５２．０ｍｍｏｌ）を、乾燥ジエチルエーテル（１５０ｍＬ）中３［（２−ベンジルオキシ−エチル）−（２−クロロ−５−メトキシ−フェニル）−アミノ］−２−ヒドロキシ−シクロヘキセ−１−エンカルボン酸エチルエステル（５）（８．０ｇ、１７．０ｍｍｏｌ）に窒素下で添加し、５．５時間加熱還流した。反応物を還流すると、反応物中に高密度の褐色油が形成した。次いで反応物を冷却し、上清であるジエチルエーテルをデカントで除去し、酢酸エチル（１００ｍＬ）を添加し、２ＮのＨＣｌ（５０ｍＬ）及び１０％炭酸カリウム水溶液（５０ｍＬ）で洗浄した。ジエチルエーテル層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮して油（２．０ｇ）を得た。粗材料を、シリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）：酢酸エチル（Ｂ）（１０〜４０％の（Ｂ）、３４０ｇ、２２ＣＶ、１５０ｍＬ／分）で溶出して精製して、９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸エチルエステル（６）１．８ｇを得た。高密度の褐色層を、酢酸エチル（１００ｍＬ）及び２ＮのＨＣｌ（５０ｍＬ）で処理した。酢酸エチル溶液を分離し、１０％炭酸カリウム水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮して油（５．２ｇ）を得た。ジエチルエーテル（１００ｍＬ）及び無水塩化亜鉛（７．０ｇ）を添加した。混合物を、さらに５日間加熱還流した。エーテル層を暗色ガムからデカントで除去し、２ＮのＨＣｌ（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮してガム（２．８ｇ）を得た。このガムを、シリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）：酢酸エチル（Ｂ）（５〜３５％の（Ｂ）、３４０ｇ、１５０ｍＬ／分）で溶出して精製して、９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸エチルエステル（６）２．１ｇを得た。得られたすべての材料は、９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸エチルエステル（６）４．１ｇ（５０％）であった。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δC１４．４，２０．５，２２．３，２７．５，４０．２，４３．９，５５．０，６０．２，７０．７，７３．３，１００．２，１０７．５，１０８．４，１２０．１，１２２．８，１２７．４，１２７．５，１２８．２，１３２．０，１３７．４，１３８．１，１５２．６及び１７５．８によって確認した。
【０１２６】
実施例１（ｇ）：９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸（７）
エタノール（５０ｍＬ）中９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸エチルエステル（６）（２．０ｇ、４．１ｍｍｏｌ）に、水酸化ナトリウム（１．１ｇ、２７．１ｍｍｏｌ）及び水（５ｍＬ）を添加し、８０℃で１８時間加熱した。次いで、エタノールを真空中で蒸発することによって除去し、残渣をジエチルエーテル（５０ｍＬ）と水（５０ｍＬ）に分離した。ジエチルエーテル層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮してガム（７１．０ｍｇ）を得た。水層を、２ＮのＨＣｌ（２０ｍＬ）でｐＨ１の酸性にし、ジクロロメタン（２×１００ｍＬ）で抽出した。ジクロロメタン層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸（７）１．６ｇ（８７％）を気泡として得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ3）：δC２０．２，２２．２，２７．１，３９．７，４４．０，５５．１，７０．７，７３．３，１００．６，１０６．３，１０８．９，１２３．０，１２７．４，１２７．５，１２８．３，１３２．０，１３８．０及び１５２．０によって確認した。
【０１２７】
実施例１（ｈ）：９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボニル塩化物（８）
９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸（７）（１．５ｇ、３．７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解し、塩化オキサリル（７００ｍｇ、５．５ｍｍｏｌ、４７０μＬ）及びＤＭＦ（１滴）を添加し、反応物を２０℃で２時間撹拌した。反応が進行するにつれて、約３０分間ガスが穏やかに発生した。次いで、反応物を真空中で濃縮して、９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボニル塩化物（８）をガムとして得、それを精製せずに次の段階で使用した。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ3）：δC  ２０．８，２２．１，２６．４，４４．２，５１．８，５５．１，７０．７，７３．３，１００．７，１０６．０，１０８．６，１１９．５，１２３．４，１２７．３，１２７．７，１２８．３，１３１．９，１３８．０，１３８．２，１５２．０．及び１７６．３によって確認した。
【０１２８】
実施例１（ｉ）：９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（９）
９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボニル塩化物（８）（１．６ｇ、３．７ｍｍｏｌ）を、次いでジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却し、撹拌し、ジエチルアミン（８１０ｍｇ、１１．０ｍｍｏｌ、１．１ｍＬ）を滴下添加した。反応物を、室温にして１８時間かけて温めた。次いで、反応混合物を１０％炭酸カリウム水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮してガムを得た。粗材料を、ジエチルエーテルから結晶化させて、９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（９）１．２ｇ（７１％）を白色結晶固体として得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ3）：δC  １３．０，１４．５，１９．８，２２．２，２７．９，３６．４，４０．４，４１．９，４３．８，５５．０，７０．８，７３．３，１００．２，１０８．５，１０８．６，１１９．９，１２２．５，１２７．４，１２７．５，１２８．３，１３１．５，１３７．８，１３８．２，１５２．４及び１７４．５によって確認した。
【０１２９】
実施例１（ｊ）：９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミン（１０）
メタノール（１００ｍｌ）中９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−８−クロロ−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（９）（１．０ｇ、２．１ｍｍｏｌ）を、木炭上１０％パラジウム（１．０ｇ）、トリエチルアミン（２．９ｍｇ、２．９ｍｍｏｌ、４μＬ）と共に、水素ガス雰囲気下において５５℃で１８時間振とうした。次いで、セライトパッドを介して反応物を濾過し、濾液を真空中で濃縮してガム（９０８ｍｇ）を得た。次いで、ガムをジクロロメタン（１００ｍｌ）に溶解し、５％炭酸カリウム水溶液（５０ｍｌ）で洗浄した。次いで、ジクロロメタン溶液を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮してガムを得た。次いで、ガムをジエチルエーテル（５０ｍｌ）から結晶化させ、結晶を濾過によって収集して、９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミン（１０）５２３ｍｇ（５７％）を得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ3）：δC１３．１，１４．６，２０．１，２２．０，２８．１，３６．４，４０．５，４２．０，４３．０，５４．７，６８．８，７３．３，９９．４，１０２．４，１０７．８，１１６．４，１２１．２，１２７．６，１２７．６，１２８．３，１３５．６，１３７．８，１３８．０  １５３．６及び１７５．０によって確認した。
【０１３０】
実施例１（ｋ）：９−（２−ヒドロキシエチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミン（１１）
メタノール（５０ｍｌ）中９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミン（１０）（１．０ｇ、２．１ｍｍｏｌ）を、木炭上１０％パラジウム（３００ｍｇ）及び過剰の水素ガスを用いて５５℃で１８時間振とうした。次いで、セライトパッドを介して反応物を濾過し、濾液を真空中で濃縮して、９−（２−ヒドロキシエチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミン（１１）５７８ｍｇ（１００％）を気泡として得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ3）：δC１３．０，１４．４，２０．０，２２．０，２８．０，３６．４，４０．６，４２．０，５４．７，６０．６，９９．２，１０２．６，１０７．０，１１６．７，１２１．１，１３６．１，１３７．５，１３８．０  １５３．５及び１７５．７によって確認した。
【０１３１】
実施例１（ｌ）：メタンスルホン酸２−（４−ジエチルカルバミル−５−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル）エチルエステル（前駆体化合物５）
ジクロロメタン（３０ｍｌ）中９−（２−ヒドロキシエチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミン（１１）（４７８ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）を０℃に冷却し、塩化メタンスルホニル（４７７ｍｇ、４．２ｍｍｏｌ、３２４μＬ）及びトリエチルアミン（４２０ｍｇ、４．２ｍｍｏｌ、５７８μＬ）を添加し、ＲＴにして終夜温めた。反応物を５％炭酸カリウム水溶液で洗浄した。層を分離した。混合有機物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮してガム（６９６ｍｇ）を得た。粗材料を、シリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）：酢酸エチル（Ｂ）（７５〜１００％のＢ、２２ＣＶ、１２０ｇ、８５ｍＬ／分）で溶出して精製して、メタンスルホン酸２−（４−ジエチルカルバミル−５−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル）エチルエステル（前駆体化合物５）をガムとして得、それをジエチルエーテルから結晶化させて、無色固体３４６ｍｇ（５９％）を得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ3）：δC１３．１，１４．５，２０．０，２１．９，２８．０，３６．３，３６．７，４０．３，４１．８，４１．９，５４．７，６８．１，１００．０，１０２．０，１０９．０，１１６．４，１２２．０  １３５．１，１３７．３，１５３．８及び１７４．６によって確認した。
【０１３２】
実施例１（ｍ）：９−（２−［18Ｆ］フルオロ−エチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（造影剤５）
ＧＥ  ＨｅａｌｔｈｃａｒｅからＧＥ  ＰＥＴｒａｃｅサイクロトロンにより［18Ｆ］フッ化物が供給された。Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ  ２．２．２（２ｍｇ、５μｍｏｌ）、重炭酸カリウム（０．１ｍｏｌ  ｄｍ-3、０．１ｍｌ、５ｍｇ、５μｍｏｌ）及びアセトニトリル（０．５ｍｌ）を、ＣＯＣ反応容器中［18Ｆ］Ｆ-／Ｈ2Ｏ（約４００ＭＢｑ、０．１〜０．３ｍｌ）に添加した。混合物を、１００℃で２０〜２５分間、窒素流の下で加熱することによって乾燥させた。乾燥後、冷却なしにアセトニトリル（１ｍｌ）中前駆体化合物５（０．５〜１ｍｇ、１．２〜２．４μｍｏｌ）をＣＯＣ反応容器に添加し、１００℃で１０分間加熱した。冷却後、反応混合物を除去し、ＣＯＣ反応容器を水（１．５ｍｌ）ですすぎ、主な粗反応物に添加した。
【０１３３】
この後、粗生成物に、半分取ＨＰＬＣ：ＨＩＣＨＲＯＭ  ＡＣＥ５  Ｃ１８カラム（１００×１０ｍｍ  ｉ．ｄ．）、粒径５μｍ；移動相Ａ：水、移動相Ｂ：メタノール；流速勾配（ｆｌｏｗ  ｇｒａｄｉｅｎｔ）：３ｍｌ／分；０〜１分、４０％Ｂ；１〜２０分、４０〜９５％Ｂ；波長２５４ｎｍ；ｔR造影剤５、１６分を適用した。ＨＰＬＣの精製ピークである造影剤５を、水で体積１０ｍｌに希釈し、ｔＣ１８  Ｓｅｐ−Ｐａｋ（ｌｉｔｅ）カートリッジに吸着させた。カートリッジを水（２ｍｌ）で洗浄し、無水エタノール（０．５ｍｌ）で溶出し、その後ダルベッコリン酸緩衝食塩水（４．５ｍｌ）で溶出した。放射化学的収率３０±７％（ｎ＝４）減衰補正なし、時間９０〜１２０分、放射化学的純度≧９９％。
【０１３４】
分析的ＨＰＬＣ：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（１５０×４．６ｍｍ  ｉ．ｄ．）、粒径５μｍ；移動相Ａ：水、移動相Ｂ：メタノール；流速勾配：１ｍｌ／分；０〜１分、４０％Ｂ；１〜２０分、４０〜９５％Ｂ；波長２３０ｎｍ；ｔR造影剤５、１６分。図１は、造影剤５と非放射性造影剤５の共溶出を示す。
【０１３５】
実施例２：９−（２−フルオロ−エチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（非放射性造影剤５）の合成
実施例２（ａ）：フルオロエチルトシレート（１２）
２−フルオロエタノール（６４０ｍｇ、１０ｍｍｏｌ、０．６ｍＬ）を、窒素下でピリジン（１０ｍＬ）に溶解した。溶液を０℃で撹拌し、塩化トシル（４．２ｇ、２１．８ｍｍｏｌ）を、５℃未満の温度を維持しながら３０分かけて溶液に少しずつ添加した。反応物を０℃で３時間撹拌した。氷をゆっくり添加し、その後水（２０ｍＬ）を添加した。反応混合物を酢酸エチルに抽出し、水で洗浄した。水層が酸性になるまで１ＮのＨＣｌ溶液で洗浄することによって、過剰のピリジンを除去した。過剰の塩化トシルを、１Ｍの炭酸ナトリウム水溶液で洗浄することによって除去した。有機層をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、フルオロエチルトシレート（１２）２．１ｇ（９８％）を無色油として得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δC２１．６（ＣＣＨ3），６８．５（ｄ，ＪCF＝１７３Ｈｚ，ＯＣＨ2ＣＨ2Ｆ），８０．６（ｄ，ＪCF＝１７３Ｈｚ，ＯＣＨ2ＣＨ2Ｆ），１２８．０，１２９．９，１３２．６及び１４５．１によって確認した。
【０１３６】
実施例２（ｂ）：２−クロロ−５−メトキシ−フェニル）（２−フルオロエチル）アミン（１３）
２−クロロ−５−メトキシアニリン塩酸塩（５．０ｇ、２６．０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５０ｍＬ）に溶解し、水素化ナトリウム（２．３ｇ、油中６０％、５７．０ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を窒素下においてＲＴで３０分間撹拌した。ＤＭＦ（５ｍＬ）中フルオロエチルトシレート（１２）（６．７ｇ、３１．０ｍｍｏｌ）を滴下添加し、反応物をＲＴで２時間撹拌した。次いで、反応物を１００℃で１８時間加熱した。反応物を冷却し、溶媒を減圧下で除去した。残渣を酢酸エチル（１００ｍＬ）に溶解し、水（２×１００ｍＬ）で洗浄した。有機物を収集し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮して褐色油を得、それをシリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）：酢酸エチル（Ｂ）（５〜３０％（Ｂ）、３３０ｇ、１８．１ＣＶ、１２０ｍＬ／分）で溶出して精製して、２−クロロ−５−メトキシ−フェニル）（２−フルオロエチル）アミン（１３）１．３ｇ（２５％）を黄色油として得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ3）：δC４３．８（ｄ，ＪCF＝２３Ｈｚ），５５．３，８２．０（ｄ，ＪCF＝１６５Ｈｚ），９８．１，１０２．２，１１１．６，１２９．５，１４４．１及び１５９．５によって確認した。
【０１３７】
実施例２（ｃ）：３−［（２−クロロ−５−メトキシ−フェニル）−（２−フルオロエチル）アミノ］−２−ヒドロキシ−シクロヘキシル−１−エンカルボン酸エチルエステル（１４）
２−クロロ−５−メトキシ−フェニル）（２−フルオロエチル）アミン（１３）（６．１ｇ、３０．０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１７０ｍＬ）溶液を−４０℃に冷却した。カリウムビス（トリメチルシリル）アミド（トルエン中０．５Ｍ溶液１２６．０ｍＬ、６３．０ｍｍｏｌ）を滴下添加し、反応物を−４０℃で３０分間撹拌した。ＴＨＦ（３０ｍＬ）中３−ブロモ−２−ヒドロキシ−シクロヘキセ−１−エンカルボン酸エチルエステル（４；実施例１（ｄ）に従って調製した）（７．４ｇ、３０．０ｍｍｏｌ）を、−４０℃で滴下添加した。冷却浴を除去し、反応物をＲＴで４時間撹拌した。反応物をブライン（３００ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（２×４００ｍＬ）で抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、３−［（２−クロロ−５−メトキシ−フェニル）−（２−フルオロエチル）アミノ］−２−ヒドロキシ−シクロヘキシル−１−エンカルボン酸エチルエステル（１４）１２．０ｇ（定量的）を褐色油として得、それを次の段階で粗生成物として使用した。異性体混合物としての構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δH１．０８（０．８Ｈ，ｔ，Ｊ＝９Ｈｚ，ＣＯ2ＣＨ2ＣＨ3），１．２２−１．３３（２．２  Ｈ，ｍ，ＣＯ2ＣＨ2ＣＨ3），１．４０−２．６０（７Ｈ，ｍ，４−，５−及び６−ＣＨ2，ＣＨＮ），３．２０−４．５０（１０Ｈ，ｍ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ，ＯＣＨ3，ＣＨＣＯ2ＣＨ2ＣＨ3），６．５０−６．７０（１Ｈ，ｍ，ＣＨＣ（ＯＣＨ3）ＣＨＣＨ），６．９５（０．５Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３及び６Ｈｚ，ＣＨＣ（ＯＣＨ3）ＣＨＣＨ），７．０８（０．５Ｈ，ｄ，Ｊ＝３Ｈｚ，ＣＨＣ（ＯＣＨ3）ＣＨＣＨ）及び７．２０−７．３０（１Ｈ，ｍ，ＣＨＣ（ＯＣＨ3）ＣＨＣＨ）によって確認した。
【０１３８】
実施例２（ｄ）：８−クロロ−９−（２−フルオロエチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸エチルエステル（１５）
８−クロロ−９−（２−フルオロ−エチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸エチルエステル（１５）の合成を、まず国際公開第２００３／０１４０８２号に記載の条件を使用して試みた。２−クロロ−５−メトキシ−フェニル）（２−フルオロエチル）アミン（１３；実施例２（ｂ）に従って調製した）（６００ｍｇ、３．８ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液を氷浴で冷却し、カリウムビス（トリメチルシリル）アミド（トルエン中０．５Ｍ溶液１６ｍＬ、８．０ｍｍｏｌ）で処理した。３０分後、ＴＨＦ（４ｍＬ）中３−ブロモ−２−ヒドロキシ−シクロヘキセ−１−エンカルボン酸エチルエステル（４；実施例１（ｄ）に従って調製した）（１．０４ｇ、４．２ｍｍｏｌ）を添加し、反応物をＲＴにして２時間かけて温めた。反応物を飽和塩化アンモニウム溶液でクエンチし、エーテルで２回抽出した。抽出物を、水、ブラインで洗浄し、乾燥させ、真空中で濃縮した。粗材料を、シリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）及び酢酸エチル（Ｂ）（２．５〜５０％のＢ、５０ｇ、２５ＣＶ、４０ｍＬ／分）で溶出して精製した。主な点は、３つの化合物の混合物であった。この混合物を、トルエン（２０ｍＬ）中、乾燥塩化亜鉛（１．７ｇ、１２．６ｍｍｏｌ）と共に終夜還流した。反応物を真空中で濃縮し、残渣を１ＮのＨＣＬ（２５ｍＬ）と酢酸エチル（２５ｍＬ）に分離し、次いで酢酸エチルで再度抽出した。有機層を水及びブラインで洗浄し、乾燥させ、真空中で濃縮して褐色油を得た。１Ｈ  ＮＭＲは、これがいくつかの化合物の混合物であったことを示した。様々な溶媒におけるシリカによるＴＬＣでは、この混合物を別個の点に分離することができなかった。混合物の1Ｈ  ＮＭＲと標準品の1Ｈ  ＮＭＲの比較によって、混合物が推定２５％の８−クロロ−９−（２−フルオロ−エチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸エチルエステル（１５）を含有していることが示された。
【０１３９】
次いで、修正を加えた方法を実施した。３−［（２−クロロ−５−メトキシ−フェニル）−（２−フルオロエチル）アミノ］−２−ヒドロキシ−シクロヘキシル−１−エンカルボン酸エチルエステル（１４）（１２．２ｇ、３０．０ｍｍｏｌ）をジエチルエーテル（２５０ｍＬ）に溶解し、塩化亜鉛（１６．４ｇ、１２０．０ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を１６時間加熱還流した。酢酸エチル（５００ｍＬ）を添加してすべてを溶解し、２ＮのＨＣｌ（２００ｍＬ）、水（２００ｍＬ）、１０％炭酸カリウム水溶液（２００ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。粗材料を、シリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）：酢酸エチル（Ｂ）（５〜２０％のＢ、１２ＣＶ、１０ｇ、１００ｍＬ／分）で溶出して精製して、８−クロロ−９−（２−フルオロエチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸エチルエステル（１５）５．３ｇ（２段階にわたって５０％）を黄色固体として得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δC１４．４，２０．４，２２．２，２７．４，４０．１，４４．２（ｄ，ＪCF＝２３Ｈｚ），５５．１，６０．２，８３．９（ｄ，ＪCF＝１７３Ｈｚ），１００．６，１０７．９，１０８．２，１１９．８，１２３．１，１３１．９，１３７．２，１５２．７及び１７５．７によって確認した。
【０１４０】
実施例２（ｅ）：９−（２−フルオロエチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸エチルエステル（１６）
８−クロロ−９−（２−フルオロエチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸エチルエステル（１５）（５．３ｇ、１５．０ｍｍｏｌ）をメタノール（１８０ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（１．８ｇ、１８．０ｍｍｏｌ、２．５ｍＬ）及び１０％Ｐｄ／Ｃ（メタノール（２０ｍＬ）中２ｇ）を添加した。混合物をＰａｒｒ水素化装置（ｈｙｄｒｏｇｅｎａｔｏｒ）に入れ、水素雰囲気下で１８時間振とうした。反応物を、セライトパッドを介して濾過し、メタノールで洗浄し、溶媒を真空中で除去した。残渣を酢酸エチル（３００ｍＬ）に溶解し、１０％炭酸カリウム水溶液（２００ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、９−（２−フルオロエチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸エチルエステル（１６）４．２ｇ（８８％）を淡褐色固体として得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δC１４．３，２０．６，２１．８，２７．６，４０．３，４３．３（ｄ，ＪCF＝２３Ｈｚ），５４．９，６０．１，８２．０（ｄ，ＪCF＝１６５Ｈｚ），９９．８，１０２．１，１０７．３，１１７．２，１２１．８，１３４．９，１３７．６，１５３．８及び１７６．０によって確認した。
【０１４１】
ＨＰＬＣ（Ｇｅｍｉｎｉ  １５０×４．６ｍｍ、２０分間５０〜９５％のメタノール／水）１３．６分（９４％）。
【０１４２】
実施例２（ｆ）：９−（２−フルオロエチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸（１７）
８−クロロ−９−（２−フルオロエチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸エチルエステル（１６）（３８０ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）をエタノール（４ｍＬ）に溶解した。水６ｍＬに溶解した水酸化ナトリウム溶液（５８０ｍｇ、１４．５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を、終夜加熱還流した。溶媒を真空中で除去し、粗混合物を水で希釈し、酸性になるまで２ＮのＨＣｌで酸性にし、ジクロロメタンで洗浄した。有機物を混合し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、９−（２−フルオロエチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸（１７）３４７ｍｇ（定量的）をオフホワイト色の固体として得、それを次の段階で粗生成物として使用した。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ3）：δC２０．４，２１．９，２７．２，３９．９，４３．３（ｄ，ＪCF＝２３Ｈｚ），５５．１，８１．９（ｄ，ＪCF＝１７３Ｈｚ），１００．３，１０２．８，１０６．２，１１７．１，１２２．２，１３５．６，１３７．８，１５３．３及び１８０．８によって確認した。
【０１４３】
実施例２（ｇ）：９−（２−フルオロエチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボニル塩化物（１８）
９−（２−フルオロエチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸（１７）（３４７ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）の乾燥ジクロロメタン（２ｍＬ）溶液を窒素下で撹拌した。塩化オキサリル（４５３ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ、３００μＬ）を添加し、その後一滴のＤＭＦを添加し、反応混合物を窒素下においてＲＴで２時間撹拌し、次いで真空中で蒸発させて、９−（２−フルオロエチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボニル塩化物３７１ｍｇ（定量的）をガムとして得、それを精製せずに次の段階で使用した。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δC２０．２，２１．７，２６．４，４３．３（ｄ，ＪCF＝２３Ｈｚ），５４．９，８０．５，８３．１，１００．２，１０２．２，１０５．８，１１６．７，１２２．４，１３５．５，１３７．４，１５３．５及び１７６．６によって確認した。
【０１４４】
実施例２（ｈ）：９−（２−フルオロエチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（非放射性造影剤５）
９−（２−フルオロエチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボニル塩化物（１８）（３７１ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却した。次いでジエチルアミン（１７７ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ、２５０μＬ）を添加し、反応物を終夜ＲＴで撹拌した。１０％炭酸カリウム水溶液（２ｍＬ）を用いて反応物をクエンチした。ジクロロメタン層を相分離機によって収集し、次いで真空中で濃縮した。粗材料を、シリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）：酢酸エチル（Ｂ）（５０〜１００％の（Ｂ）、５０ｇ、３５．２ＣＶ、４０ｍＬ／分）で溶出して精製して、薄黄色固体を得た。次に、固体を最小量のジエチルエーテルで倍散して、９−（２−フルオロエチル）−５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（非放射性造影剤５）２４０ｍｇ（５８％）を得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δC１３．０，１４．６，１９．９，２１．９，２８．０，３６．３，４０．５，４１．９，４３．１（ｄ，ＪCF＝２３Ｈｚ），５４．７，８２．０（ｄ，ＪCF＝１７３Ｈｚ），９９．７，１０２．１，１０８．３，１１７．０，１２１．５，１３５．３，１３７．４，１５３．３及び１７４．８によって確認した。
【０１４５】
実施例３：メタンスルホン酸２−［４−（ピペリジン−１−カルボニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル］−エチルエステル（前駆体化合物６）及び［９−（２−［18Ｆ］フルオロエチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−イル］−ピペリジン−１−イル−メタノン（造影剤６）の合成
実施例３（ａ）：２−（ピペリジン−１−カルボニル）−シクロヘキサノン（１９）
トルエン（１００ｍＬ）中２−オキソシクロヘキサン−カルボン酸エチル（５．３ｇ、３１ｍｍｏｌ、５．０ｍＬ）、ＤＭＡＰ（１．０５ｇ、９．４ｍｍｏｌ）及びピペリジン（５．３ｇ、６３ｍｍｏｌ、６．２ｍＬ）を４日間加熱還流した。反応物を冷却し、反応物を真空中で濃縮した。粗材料を、シリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）及び酢酸エチル（Ｂ）（２０〜８０％（Ｂ）、１００ｇ、８ＣＶ、８５ｍＬ／分）で溶出して精製して、２−（ピペリジン−１−カルボニル）−シクロヘキサノン（１９）６．２６ｇ（９６％）を白色固体として得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δC２３．５，２４．５，２５．５，２６．２，２７．１，３０．４，４１．９，４２．９，４６．８，５４．２，１６７．６，２０７．６によって確認した。
【０１４６】
実施例３（ｂ）：２−ブロモ−６−（ピペリジン−１−カルボニル）−シクロヘキサノン（２０）
２−（ピペリジン−１−カルボニル）−シクロヘキサノン（１９）（４．０ｇ、１９ｍｍｏｌ）をジエチルエーテル（５ｍＬ）に溶解し、Ｎ2下で０℃に冷却した。臭素（５．９ｇ、１９ｍｍｏｌ、１．０ｍＬ）を１５分かけて滴下添加し、反応混合物を室温にして９０分かけて温めた。固体を濾過によって収集して、２−ブロモ−６−（ピペリジン−１−カルボニル）−シクロヘキサノン（２０）５．８６ｇ（定量的）を白色固体として得、それを精製せずに次の段階で使用した。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δC１７．３，２４．２，２５．３，２５．８，３２．５，４４．０，５１．６，１０８．３，１４５．５，１６７．８によって確認した。
【０１４７】
実施例３（ｃ）：（２−ベンジルオキシ−エチル）−フェニル−アミン（２１）
丸底フラスコ中、アニリン（２．０ｇ、２１．５ｍｍｏｌ、２．０ｍＬ）、２，６−ルチジン（２．３０ｇ、２１．５ｍｍｏｌ）及びベンジル２−ブロモエチルエーテル（４．６ｇ、２１．５ｍｍｏｌ、３．４ｍＬ）を、ＤＭＦ（１０ｍＬ）中で混合し、１００℃で終夜撹拌した。反応物を冷却し、次いで酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈した。これを水（３×２０ｍＬ）で洗浄し、有機物を乾燥させ、真空中で濃縮した。粗材料を、シリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）及び酢酸エチル（Ｂ）（０〜５０％のＢ、１００ｇ、１９．５ＣＶ、８５ｍＬ／分）で溶出して精製して、（２−ベンジルオキシ−エチル）−フェニル−アミン（２１）２．２２ｇ（３７％）を黄色油として得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δC４３．６，６８．６，７３．２，１１３．１，１１７．５，１２７．５，１２７．７，１２８．４，１２９．１，１３８．２，１４８．１によって確認した。
【０１４８】
実施例３（ｄ）：［９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−イル］−ピペリジン−１−イル−メタノン（２２）
２−ブロモ−６−（ピペリジン−１−カルボニル）−シクロヘキサノン（２０）（１．５ｇ、５．２ｍｍｏｌ）及び（２−ベンジルオキシ−エチル）−フェニル−アミン（２１）（３．２ｇ、１０．４ｍｍｏｌ）の混合物を、Ｎ2下において５０℃で３時間撹拌すると、反応物が褐色になった。得られた混合物をプロパン−２−オール（５ｍＬ）に溶解し、乾燥塩化亜鉛（２．１３ｇ、１５．６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を、Ｎ2下で１６時間加熱還流し、次いで真空中で濃縮した。残渣を酢酸エチル（１００ｍＬ）に溶解し、２ＮのＨＣｌ（３０ｍＬ）、水（２×３０ｍＬ）及び炭酸カリウム水溶液（２×３０ｍＬ）で洗浄し、次いで乾燥させ、真空中で濃縮した。粗材料を、ＳＣＸカートリッジ及び次いでシリカゲルクロマトグラフィーによって、石油（Ａ）及び酢酸エチル（Ｂ）（３０〜１００％のＢ、１２ｇ、４１ＣＶ、３０ｍＬ／分）で溶出して精製して、［９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−イル］−ピペリジン−１−イル−メタノン（２２）６００ｍｇ（２７％）を油として得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δC２１．５，２１．７，２４．５，２５．．７，２６．３，２７３，３７．７，４２．８，４３．１，４６．７，６０．２，６８．７，７３．１，１０８．２，１０８．７，１１７．８，１１８．９，１２０．５，１２６．４，１２７．３，１２７．４，１２８．１，１３６．２，１３７．８，１７２．９によって確認した。
【０１４９】
実施例３（ｅ）：［９−（２−ヒドロキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−イル］−ピペリジン−１−イル−メタノン（２３）
［９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−イル］−ピペリジン−１−イル−メタノン（２２）（６００ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）のメタノール（１５ｍＬ）溶液に、メタノール（１０ｍＬ）中Ｐｄ／Ｃ（２００ｍｇ）のスラリーを添加した。混合物をＰａｒｒ水素化装置に入れ、水素雰囲気下で２４時間振とうした。反応物を、セライトパッドを介して濾過し、メタノールで洗浄し、真空中で濃縮した。粗材料を研和して、［９−（２−ヒドロキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−イル］−ピペリジン−１−イル−メタノン（２３）３３２ｍｇ（７１％）を白色固体として得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δC２１．２，２１．９，２４．７，２７．４，３６．４，４３．４，４５．０，４７．０，６０．９，１０７．８，１０９．０，１１７．７，１１９．０，１２０．７，１２６．６，１３６．２，１３７．２，１７３．５によって確認した。
【０１５０】
実施例３（ｆ）：メタンスルホン酸２−［４−（ピペリジン−１−カルボニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル］−エチルエステル（前駆体化合物６）
［９−（２−ヒドロキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−イル］−ピペリジン−１−イル−メタノン（２３）（２６０ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１５ｍＬ）溶液に、ピリジン（６３３ｍｇ、８．０ｍｍｏｌ、０．６５ｍＬ）を添加した。反応物を０℃に冷却し、塩化メタンスルホニル（４５８ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ、０．３１ｍＬ）を添加した。反応物を室温にして終夜温めた。混合物を、２ＮのＨＣｌ（２×５０ｍＬ）及び水（２×５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ、真空中で濃縮した。粗材料をジエチルエーテルで倍散して、メタンスルホン酸２−［４−（ピペリジン−１−カルボニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル］−エチルエステル（前駆体化合物６）２６３ｍｇ（８２％）を白色固体として得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δC２１．４，２１．８，２４．７，２５．９，２６．９，２７．４，３６．６，３６．８，４１．７，４３．３，４７．０，６７．９，１０８．５，１０９．５，１１８．４，１１９．７，１２１．３，１２６．９，１３６．２，１７２．７によって確認した。
【０１５１】
実施例３（ｇ）：［９−（２−［18Ｆ］フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−イル］−ピペリジン−１−イル−メタノン（造影剤６）
18Ｆによる前駆体化合物６の標識を、実施例１（ｆ）に記載の通り実施した。
【０１５２】
半分取ＨＰＬＣ：ＨＩＣＨＲＯＭ  ＡＣＥ５  Ｃ１８カラム（１００×１０ｍｍ  ｉ．ｄ．）、粒径５μｍ；移動相Ａ：水、移動相Ｂ：メタノール；流速勾配：３ｍｌ／分；０〜１分、５０％のＢ；１〜２０分、５０〜９５％のＢ；波長２５４ｎｍ；ｔR造影剤６、１７分。
【０１５３】
分析的ＨＰＬＣ：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（１５０×４．６ｍｍ  ｉ．ｄ．）、粒径５μｍ；移動相Ａ：水、移動相Ｂ：メタノール；流速勾配：１ｍｌ／分；０〜１分、５０％のＢ；１〜２０分、５０〜９５％のＢ；波長２３０ｎｍ；ｔR造影剤６、１６分。放射化学的収率２３±２％（ｎ＝３）減衰補正なし、時間９０〜１２０分、放射化学的純度≧９９％。図２は、造影剤６と非放射性造影剤６の共溶出を示す。
【０１５４】
実施例４：［９−（２−フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−イル］−ピペリジン−１−イル−メタノン（造影剤６の非放射性類似体）の合成
実施例４（ａ）：（２−フルオロ−エチル）−フェニル−アミン（２４）
丸底フラスコ中、アニリン（０．５ｇ、５．４ｍｍｏｌ）、２，６−ルチジン（０．５８ｇ、５．４ｍｍｏｌ）及び２−フルオロエチルトシレート（１２；実施例２（ａ）に従って調製した）（１．１７ｇ、５．４ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（２．５ｍＬ）中で混合し、１００℃で終夜撹拌した。反応物を冷却し、次いで酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈した。これを水（３×２０ｍＬ）で洗浄し、有機物を乾燥させ、真空中で濃縮した。粗材料を、シリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）及び酢酸エチル（Ｂ）（１００ｇ、０〜１００％のＢ、１８ＣＶ、８５ｍＬ／分）で溶出して精製して、（２−フルオロ−エチル）−フェニル−アミン（２４）４３５ｍｇ（６０％）を黄色油として得た。構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δH３．４１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝３Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ），３．５０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝３Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ），３．９３（１Ｈ，ｓ，ｂｒ），４．５４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝３Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ），４．７１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝３Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ），６．６５−６．８２（３Ｈ，ｍ，２×ＮＣＣＨ，ＮＣＣＨＣＨＣＨ），７．１４−７．２８（２Ｈ，ｍ，２×ＮＣＣＨＣＨＣＨ）によって確認した。
【０１５５】
実施例４（ｂ）：［９−（２−フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−イル］−ピペリジン−１−イル−メタノン（非放射性造影剤６）
２−ブロモ−６−（ピペリジン−１−カルボニル）−シクロヘキサノン（２０；実施例３（ｂ）に従って調製した）（５００ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）及び（２−フルオロ−エチル）−フェニル−アミン（２４）（８９０ｍｇ、３．５ｍｍｏｌ）の混合物を、Ｎ2下において５０℃で３時間撹拌すると、反応物が褐色になった。得られた混合物をプロパン−２−オール（２ｍＬ）に溶解し、乾燥塩化亜鉛（６８２ｍｇ、５ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を、Ｎ2下で１６時間加熱還流し、次いで真空中で濃縮した。残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解し、２ＮのＨＣｌ（２０ｍＬ）、水（２×２０ｍＬ）及び炭酸カリウム水溶液（２×２０ｍＬ）で洗浄し、次いで乾燥させ、真空中で濃縮した。粗材料をジエチルエーテルで倍散して、［９−（２−フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−イル］−ピペリジン−１−イル−メタノン（非放射性造影剤６）１５１ｍｇ（２７％）を白色固体として得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δC２１．６，２１．８，２４．７，２６．５，２６．９，２７．４，３７．３，４３．１（ｄ，ＪCF＝４５Ｈｚ），４７．０，８２．１（ｄ，ＪCF＝１７３Ｈｚ），１０８．５，１０８．９，１１８．６，１１９．４，１２１．０，１２６．８，１３６．２，１７２．７によって確認した。
【０１５６】
実施例５：メタンスルホン酸２−［４−（ベンジル−メチル−カルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル］−エチルエステル（前駆体化合物７）及び９−（２−［18Ｆ］フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ベンジル−メチル−アミド（造影剤７）の合成
実施例５（ａ）：９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸エチルエステル（２５）
（２−ベンジルオキシ−エチル）−フェニル−アミン（２１；実施例３（ｃ）に従って調製した）（８．０ｇ、２６ｍｍｏｌ）及び３−ブロモ−２−ヒドロキシ−シクロヘキセ−１−エンカルボン酸エチルエステル（４；実施例１（ｄ）に従って調製した）（３．２ｇ、１３ｍｍｏｌ）の混合物を、Ｎ2下において５０℃で３時間撹拌すると、反応物が褐色になった。得られた混合物をプロパン−２−オール（３０ｍＬ）に溶解し、乾燥塩化亜鉛（１０．６ｇ、７８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をＮ2下で１６時間加熱還流し、次いで真空中で濃縮した。残渣を酢酸エチル（３００ｍＬ）に溶解し、２ＮのＨＣｌ（１００ｍＬ）、水（２×１００ｍＬ）及び炭酸カリウム水溶液（２×１００ｍＬ）で洗浄し、次いで乾燥させ、真空中で濃縮した。粗材料を、シリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）及び酢酸エチル（Ｂ）（２．５〜４０％のＢ、１７ＣＶ、３３０ｇ、１００ｍＬ／分）で溶出して精製して、９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸エチルエステル（２５）３．４９ｇ（７２％）を油として得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δC１４．２，２０．５，２１．８，２６．５，３８．６，４２．９，６０．４，６８．７，７３．２，１０６．４，１０８．８，１１８．７，１２０．７，１２７．４，１２７．５，１２８．３，１３６．２，１３６．９，１３７．８，１７５．０によって確認した。
【０１５７】
実施例５（ｂ）：９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸（２６）
９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸エチルエステル（２５）（３５ｇ、９．３ｍｍｏｌ）をエタノール（９ｍＬ）に溶解し、次いで水（１５ｍＬ）中ＮａＯＨ（１．５６ｇ）を添加した。反応物を、２時間加熱還流した。反応物を真空中で濃縮し、残渣を水で希釈し、ジクロロメタン（２×１５０ｍＬ）で洗浄した。水層を２ＮのＨＣｌ（１５０ｍＬ）に滴下添加し、次いでジクロロメタン（３×１５０ｍＬ）に抽出した。有機物を乾燥させ、真空中で濃縮して、９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸（２６）２．４８ｇ（９２％）を黄色固体として得、それを精製せずに次の段階で使用した。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δC２０．４，２１．８，２６．４，３８．３，４２．９，６８．７，７３．３，１０５．７，１０８．８，１１８．７，１１９．３，１０２．９，１２７．４，１２７．６，１２８．３，１３６．２，１３７．１，１３７．８，１０８．９によって確認した。
【０１５８】
実施例５（ｃ）：９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ベンジル−メチル−アミド（２７）
９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸（２６）（６００ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）を、窒素下で乾燥ＤＣＭ（８ｍＬ）に溶解し、塩化オキサリル（３９３ｍｇ、３．１ｍｍｏｌ、０．２６ｍＬ）を添加した。反応物を室温で３時間撹拌すると、ガスが激しく発生した。反応物を真空中で濃縮し、次いでジクロロメタン（８ｍＬ）に再溶解し、０℃に冷却し、Ｎ−ベンジルメチルアミン（４１２ｍｇ、３．４ｍｍｏｌ、０．４４ｍＬ）を添加した。反応物を室温にして終夜温めた。反応物を５％炭酸カリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ、真空中で濃縮して褐色油を得た。粗材料を、シリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）及び酢酸エチル（Ｂ）（３０％のＢ、１０ｇ）で溶出して精製して、９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ベンジル−メチル−アミド（２７）２４６ｍｇ（６４％）を黄色油として得た。構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δH１．６０−２．３０（４Ｈ，ｍ，ＣＨＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2），２．７０−２．９０（２Ｈ，ｍ，ＣＨＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2），３．１０（１．５Ｈ，ｓ，Ｎ（ＣＨ3）ＣＨ2Ｐｈ），３．１３（１．５Ｈ，ｓ，Ｎ（ＣＨ3）ＣＨ2Ｐｈ），３．７３（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｏ），４．１０−４．３０（３Ｈ，ｍ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｏ，ＣＨＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2），４．４２（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨ2Ｐｈ），４．４４（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨ2Ｐｈ），４．８０（１Ｈ，ｓ，Ｎ（ＣＨ3）ＣＨ2Ｐｈ），４．８１（１Ｈ，ｓ，Ｎ（ＣＨ3）ＣＨ2Ｐｈ），６．９０−７．５０（１４Ｈ，ｍ）によって確認した。
【０１５９】
実施例５（ｄ）：９−（２−ヒドロキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ベンジル−メチル−アミド（２８）
９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ベンジル−メチル−アミド（２７）（２４６ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）のメタノール（１５ｍＬ）溶液に、メタノール（１０ｍＬ）中Ｐｄ／Ｃ（２００ｍｇ）のスラリーを添加した。混合物をＰａｒｒ水素化装置に入れ、水素雰囲気下で２４時間振とうした。反応物を、セライトパッドを介して濾過し、メタノールで洗浄し、真空中で濃縮して、９−（２ヒドロキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ベンジル−メチル−アミド（２８）３６ｍｇ（２０％）を緑色油として得、それを精製せずに次の段階で使用した。構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（CDCl3) δH 1.80-2.20 (4Ｈ，ｍ), 2.70-3.00 (2Ｈ，ｍ), 3.20-4.30 (10Ｈ，ｍ), 6.90-7.50 (9Ｈ，ｍ)によって確認した。
【０１６０】
実施例５（ｅ）：メタンスルホン酸２−［４−（ベンジル−メチル−カルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル］−エチルエステル（前駆体化合物７）
９−（２−ヒドロキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ベンジル−メチル−アミド（２８）（３６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２ｍＬ）溶液に、ピリジン（７．９１ｇ、１．０ｍｍｏｌ、８．１ｍＬ）を添加した。反応物を０℃に冷却し、塩化メタンスルホニル（５７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ、０．０４ｍＬ）を添加した。反応物を室温にして終夜温めた。混合物を、２ＮのＨＣｌ（２×１０ｍＬ）及び水（２×１０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ、真空中で濃縮した。粗材料を、シリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）及び酢酸エチル（Ｂ）（２０〜８０％のＢ、４ｇ、４５ＣＶ、１８ｍＬ／分）で溶出して精製して、メタンスルホン酸２−［４−（ベンジル−メチル−カルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル］−エチルエステル（前駆体化合物７）１４ｍｇ（３２％）を黄色油として得た。構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δH１．１０−２．４０（５Ｈ，ｍ），２．５１（１．５Ｈ，ｓ，ＯＳＯ2ＣＨ3），２．５４（１．５Ｈ，ｓ，ＯＳＯ2ＣＨ3），２．７０−２．９０（２Ｈ，ｍ），３．０８（１．５Ｈ，ｓ，ＮＣＨ3），３．１５（１．５Ｈ，ｓ，ＮＣＨ3），３．４０−３．７０（１Ｈ，ｍ），４．１０−４．８０（４Ｈ，ｍ），７．００−７．５０（９Ｈ，ｍ）によって確認した。
【０１６１】
実施例５（ｆ）：９−（２−［18Ｆ］フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ベンジル−メチル−アミド（造影剤７）
18Ｆによる前駆体化合物７の標識を、実施例１（ｆ）に記載の通り実施した。半分取ＨＰＬＣ：ＨＩＣＨＲＯＭ  ＡＣＥ５  Ｃ１８カラム（１００×１０ｍｍ  ｉ．ｄ．）、粒径５μｍ；移動相Ａ：水、移動相Ｂ：メタノール；流速勾配：３ｍｌ／分；０〜１分、５０％のＢ；１〜２０分、５０〜９５％のＢ；波長２５４ｎｍ；ｔR造影剤７、１７分。
【０１６２】
分析的ＨＰＬＣ：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（１５０×４．６ｍｍ  ｉ．ｄ．）、粒径５μｍ；移動相Ａ：水、移動相Ｂ：メタノール；流速勾配：１ｍｌ／分；０〜１分、５０％のＢ；１〜２０分、５０〜９５％のＢ；波長２３０ｎｍ；ｔR造影剤７、１６分。放射化学的収率２３±２％（ｎ＝３）減衰補正なし、時間９０〜１２０分、放射化学的純度≧９９％。図３は、造影剤７と非放射性造影剤７の共溶出を示す。
【０１６３】
実施例６：９−（２−フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ベンジル−メチル−アミド（非放射性造影剤７）
実施例６（ａ）：３−ブロモ−２−ヒドロキシ−シクロヘキセ−１−エンカルボン酸エチルエステル（２９）
２−オキソシクロヘキサンカルボン酸エチル（５．０ｇ、２９ｍｍｏｌ、４．７ｍＬ）をジエチルエーテル（５ｍＬ）に溶解し、Ｎ2下で０℃に冷却した。臭素（４．６ｇ、２９ｍｍｏｌ、４．２ｍＬ）を１５分かけて滴下添加し、反応混合物を室温にして９０分かけて温めた。混合物を、氷冷した飽和炭酸ナトリウム水溶液（４０ｍＬ）にゆっくり注ぎ、酢酸エチル（３×４０ｍＬ）で抽出した。混合有機層を乾燥させ、真空中で濃縮して、３−ブロモ−２−ヒドロキシ−シクロヘキセ−１−エンカルボン酸エチルエステル（２９）５．９６ｇ（８１％）を薄黄色油として得、それを次の段階で精製せずに使用した。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δC１４．１４，１７．６５，２１．７７，３２．０２，５９．９５，６０．８３，９９．７０，１６６．３３，１７２．８１によって確認した。
【０１６４】
実施例６（ｂ）：９−（２−フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸エチルエステル（３０）
（２−フルオロ−エチル）−フェニル−アミン（２４；実施例４（ａ）に従って調製した）（５６０ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）及び３−ブロモ−２−ヒドロキシ−シクロヘキセ−１−エンカルボン酸エチルエステル（２９）（５００ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）の混合物を、Ｎ2下において５０℃で３時間撹拌すると、反応物が褐色になった。得られた混合物をプロパン−２−オール（４ｍＬ）に溶解し、乾燥塩化亜鉛（８２０ｍｇ、６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を、Ｎ2下で１６時間加熱還流し、次いで真空中で濃縮した。生成物を酢酸エチル／エーテル（３０ｍＬ／１５０ｍＬ）に溶解し、２ＮのＨＣｌ（４０ｍＬ）、水（２×１００ｍＬ）及び炭酸カリウム水溶液（２×１００ｍＬ）で洗浄し、次いで乾燥させ、濃縮して、９−（２−フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸エチルエステル（３０）４４７ｍｇ（９１％）を黄色油として得、それを次の段階で精製せずに使用した。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δC１４．３，２０．４，２１．７，２６．４，３８．５，４３．１（ｄ，ＪCF＝１５Ｈｚ），６０．６，７６．６，７７．０，７７．４，８２．１（ｄ，ＪCF＝１７３Ｈｚ），１０６．９，１０８．５，１１８．９，１１９．４，１２１．１，１２７．１，１３６．２，１３６．７，１７４．９によって確認した。
【０１６５】
実施例６（ｃ）：９−（２−フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸（３１）
９−（２−フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸エチルエステル（３０）（３８０ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）をエタノール（３ｍＬ）に溶解し、次いで水（５ｍＬ）中ＮａＯＨ（５２０ｍｇ）を添加した。反応物を、２時間加熱還流した。反応物を真空中で濃縮し、残渣を水で希釈し、ジクロロメタン（２×５０ｍＬ）で洗浄した。水層を２ＮのＨＣｌ（５０ｍＬ）に滴下添加し、次いでジクロロメタン（３×５０ｍＬ）に抽出した。有機物を乾燥させ、真空中で濃縮して、９−（２−フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸（３１）１３０ｍｇ（３７％）を黄色固体として得、それを次の段階で精製せずに使用した。構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ  １．９０−２．４２（４Ｈ，ｍ，２−及び３−ＣＨ2），２．６０−２．９１（２Ｈ，ｍ，１−ＣＨ2），３．９４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ，４−ＣＨ），４．３０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ），４．３７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ），４．５９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ），４．７４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ），７．０５−７．２６（３Ｈ，ｍ，ＡｒＨ），７．５９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，ＡｒＨ）によって確認した。
【０１６６】
実施例６（ｄ）：９−（２−フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボニル塩化物（３２）
乾燥ジクロロメタン（６ｍＬ）中９−（２−フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸（３１）（０．５ｇ、１．９１ｍｍｏｌ）を、窒素雰囲気下で、塩化オキサリル（４９０ｍｇ、３．８ｍｍｏｌ、０．３４ｍＬ）及び一滴のＤＭＦと共に室温で撹拌した。反応物を真空中で濃縮して、９−（２−フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボニル塩化物（３２）５４５ｍｇ（定量的）を得、それを次の段階で精製せずに使用した。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δC２０．２，２１．６，２６．７，４３．１，４３．４，５０．６，８０．９，８３．１，１０５．３，１０８．８，１１８．３，１２０．０，１２１．６，１２６．５，１３６．２，１３７．５，１７６．１によって確認した。
【０１６７】
実施例６（ｅ）：９−（２−フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ベンジル−メチル−アミド（非放射性造影剤７）
９−（２−フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボニル塩化物（３２）（１１０ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却した。次いで、Ｎ−ベンジルメチルアミン（９２ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ、９８μＬ）を添加し、反応物を終夜ＲＴで撹拌した。反応物を１０％炭酸カリウム水溶液（２ｍＬ）でクエンチした。ジクロロメタン層を相分離機によって収集し、次いで真空中で濃縮した。粗材料を、シリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）及び酢酸エチル（Ｂ）（２０〜１００％のＢ、１２ｇ、３０ＣＶ、３０ｍＬ／分）で溶出して精製して、９−（２−フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ベンジル−メチル−アミド（非放射性造影剤７）３９ｍｇ（２８％）を得た。構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δH１．７５−２．３２，（４Ｈ，ｍ，２−及び３−ＣＨ2），２．６８−２．８６（２Ｈ，ｍ，１−ＣＨ2），３．１０（１Ｈ，ｓ，ＮＣＨ3），３．１４（２Ｈ，ｓ，ＮＣＨ3），４．１７−４．３９（３Ｈ，ｍ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ及び４−ＣＨ2），４．５２−４．８７（４Ｈ，ｍ，ＮＣＨ2Ｐｈ及びＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ），６．９６−７．４２（９Ｈ，ｍ，ＡｒＨ）によって確認した。
【０１６８】
実施例７：メタンスルホン酸２−（４−ジエチルカルバモイル−６−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル）−エチルエステル（前駆体化合物９）及び６−フルオロ−９−（２−［18Ｆ］フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（造影剤９）の合成
実施例７（ａ）：２−ベンジルオキシ−Ｎ−（４−フルオロ−フェニル）−アセトアミド（３３）
ベンジルオキシ酢酸（４．６ｇ、２８．０ｍｍｏｌ、４．０ｍＬ）のＤＣＭ（５２ｍＬ）溶液に、塩化オキサリル（７．７ｇ、６１ｍｍｏｌ、５．３ｍＬ）及び一滴のＤＭＦを添加した。反応混合物を室温で４時間撹拌した。過剰の塩化オキサリルを真空中で除去して、ベンジルオキシ−塩化アセチルを得た。粗塩化アシルをＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈し、トリエチルアミン（５．３ｍＬ、４１．６ｍｍｏｌ、４．２ｇ）を添加し、その後４−フルオロアニリン（３．５ｇ、３２ｍｍｏｌ、３．０ｍＬ）を添加した。反応混合物を終夜ＲＴで撹拌した。次いで、反応物を１ＭのＨＣｌ水溶液（１００ｍＬ）でクエンチし、乾燥させ、真空中で濃縮して、２−ベンジルオキシ−Ｎ−（４−フルオロ−フェニル）−アセトアミド（３３）７．１ｇ（９５％）を黄色油として得、それを次の段階で精製せずに使用した。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δC６９．２，７３．５，１１５．４（ｄ，ＪCF＝２２Ｈｚ），１２１．４（ｄ，ＪCF＝７Ｈｚ），１２７．９，１２８．２，１２８．５，１３２．５（ｄ，ＪCF＝３Ｈｚ），１３６．３，１５７．６，１６０．８及び１６７．５によって確認した。
【０１６９】
実施例７（ｂ）：（２−ベンジルオキシ−エチル）−（４−フルオロ−フェニル）−アミン（３４）
ＬＡＨ（１．２５ｇ、２７ｍｍｏｌ）の乾燥ジエチルエーテル（１００ｍＬ）懸濁液に、２−ベンジルオキシ−Ｎ−（４−フルオロ−フェニル）−アセトアミド（３３）（６．９ｇ、２７ｍｍｏｌ）の乾燥ジエチルエーテル（１００ｍＬ）溶液を滴下添加した。還流が維持されるように添加を実施した。添加が終了したら、反応混合物を４時間加熱還流し、次いで氷水に注ぎ、ＤＣＭを添加した。アルミニウム塩を分解するために、強塩基のｐＨが得られるまで２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液を添加した。層を分離し、水層をＤＣＭで洗浄し、乾燥させ、真空中で濃縮した。粗材料を、シリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）及び酢酸エチル（Ｂ）（５〜５０％のＢ、１００ｇ、１２ＣＶ、６０ｍＬ／分）で溶出して精製して、（２−ベンジルオキシ−エチル）−（４−フルオロ−フェニル）−アミン（３４）５．５ｇ（８４％）を黄色油として得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δC４４．０，６８．３，７２．８，１１３．７（ｄ，ＪCF＝７Ｈｚ），１１５．３（ｄ，ＪCF＝２２Ｈｚ），１２７．５，１２７．６（ｄ，ＪCF＝３Ｈｚ），１２８．３，１３７．８，１４４．５，１５４．１及び１５７．２によって確認した。
【０１７０】
実施例７（ｃ）：３−ブロモ−２−オキソ−シクロヘキサンカルボン酸ジエチルアミド（３５）
２−シクロヘキサン（ｃｙｃｌｏｈｅｘｏｎｅ）−カルボン酸エチル（７．５０ｍＬ、４７．０ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１．７２ｇ、１４．１ｍｍｏｌ）及びジエチルアミン（９．７７ｍＬ、９４．０ｍｍｏｌ）を、トルエン（１００ｍＬ）中で７２時間加熱還流した。反応物を冷却し、トルエンを減圧下で除去した。粗油を、シリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）及び酢酸エチル（Ｂ）（１：１、１００ｇ、ＳｉＯ2）で溶出して精製して、２−オキソ−シクロヘキサンカルボン酸ジエチルアミン６．８ｇ（７３％）を橙色油として得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ１１．１，１２．７，２１．３，２４．９，２８．５，３９．４，３９．６，５１．７，１６６．５，２０５．９によって確認した。
【０１７１】
２−オキソ−シクロヘキサンカルボン酸ジエチルアミン（３．５６ｍＬ、１９．３ｍｍｏｌ）をジエチルエーテル（５ｍＬ）に溶解し、Ｎ2下で撹拌しながら０℃に冷却した。臭素（０．９９ｍＬ、１９．３ｍｍｏｌ）を１５分かけて滴下添加し、反応混合物を室温にして３時間かけて温めた。反応物から固体が沈殿した。それを濾過によって収集し、エーテルで洗浄して、３−ブロモ−２−オキソ−シクロヘキサンカルボン酸ジエチルアミド（３５）５．８５ｇ（１０９％）を薄黄色固体として得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ１１．２，１２．８，２２．７，２８．８，３７．６，３７．９，３９．４，５１．０，５５．７，１６５．５，１９７．２によって確認した。
【０１７２】
実施例７（ｄ）：９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−６−フルオロ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（３６）
２−ベンジルオキシ−Ｎ−（４−フルオロ−フェニル）−アセトアミド（３３）（５．３ｇ、２２ｍｍｏｌ）及び３−ブロモ−２−オキソ−シクロヘキサンカルボン酸ジエチルアミド（３５）（３．０ｇ、１３ｍｍｏｌ））の混合物を、Ｎ2下において５０℃で３時間撹拌すると、反応物が褐色になった。得られた混合物をプロパン−２−オール（３０ｍＬ）に溶解し、乾燥塩化亜鉛（９．０ｇ、６６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を、Ｎ2下で１６時間加熱還流し、次いで真空中で濃縮した。残渣を酢酸エチル（３００ｍＬ）に溶解し、２ＮのＨＣｌ（１００ｍＬ）、水（２×１００ｍＬ）及び炭酸カリウム水溶液（２×１００ｍＬ）で洗浄し、次いで乾燥させ、真空中で濃縮した。粗材料を、シリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）及び酢酸エチル（Ｂ）（１０〜５０％のＢ、１００ｇ）で溶出して精製して、９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−６−フルオロ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（３６）１９６ｍｇ（１１％）を白色固体として得た。構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δH１．１４（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2），１．３０（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2），１．６０−２．６０（４Ｈ，ｍ，２−及び３−ＣＨ2），２．７０−２．８５（２Ｈ，ｍ，１−ＣＨ2），３．１０−３．６５（４Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2及びＮＣＨ2ＣＨ2ＯＢｎ），３．６６−３．７５（１Ｈ，ｍ，４−ＣＨ），４．００−４．２５（２Ｈ，ｍ，ＮＣＨ2ＣＨ2ＯＢｎ），４．４１（２Ｈ，ｓ，ＯＣＨ2Ｐｈ），６．７５−６．９５（２Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＨＣＦＣＨ），７．０５−７．１５（１Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＨＣＦＣＨ）及び７．１６−７．２５（５Ｈ，ｍ，Ｐｈ）によって確認した。
【０１７３】
実施例７（ｄ）：６−フルオロ−９−（２−ヒドロキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（３７）
９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−６−フルオロ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（３６）（６００ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）のメタノール（４０ｍＬ）溶液に、メタノール（５ｍＬ）中Ｐｄ／Ｃ（１００ｍｇ）のスラリーを添加した。混合物をＰａｒｒ水素化装置に入れ、水素雰囲気下で２４時間振とうした。反応物を、セライトパッドを介して濾過し、メタノールで洗浄し、真空中で濃縮して、６−フルオロ−９−（２−ヒドロキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（３７）４６０ｍｇ（８０％）を黄色油として得、それを次の段階で精製せずに使用した。構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ−ｄ3）δH１．１８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝９Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2），１．３５（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝９Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2），１．８０−２．２０（４Ｈ，ｍ，２−及び３−ＣＨ2），２．６９−３．８８（２Ｈ，ｍ，１−ＣＨ2），３．４０−３．８６（６Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2及びＮＣＨ2ＣＨ2ＯＨ），４．０３−４．２２（３Ｈ，ｍ，ＮＣＨ2ＣＨ2ＯＨ及び４−ＣＨ），６．７５−６．９５（２Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＨＣＦＣＨ）及び７．０５−７．１５（１Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＨＣＦＣＨによって確認した。
【０１７４】
実施例７（ｅ）：メタンスルホン酸２−（４−ジエチルカルバモイル−６−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル）−エチルエステル（前駆体化合物９）
６−フルオロ−９−（２−ヒドロキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（３７）（４６０ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）溶液に、ピリジン（１．１１ｇ、１４．０ｍｍｏｌ、１．１ｍＬ）を添加した。反応物を０℃に冷却し、塩化メタンスルホニル（７２２ｍｇ、６．３ｍｍｏｌ、０．５ｍＬ）を添加した。反応物を室温にして終夜温めた。混合物を、２ＮのＨＣｌ（２×３０ｍＬ）及び水（２×３０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ、真空中で濃縮した。粗材料を、シリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）及び酢酸エチル（Ｂ）（０〜１００％（Ｂ）、１０ｇ、４５ＣＶ、３０ｍＬ／分）で溶出して精製し、次いでジエチルエーテルで倍散して、メタンスルホン酸２−（４−ジエチルカルバモイル−６−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル）−エチルエステル（前駆体化合物９）１６６ｍｇ（３０％）を白色固体として得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δC１２．９，１５．０，２１．１，２７．７，３６．１，３６．７，４０．６，４１．７，６７．８，１０３．３（ｄ，ＪCF＝２３Ｈｚ），１０８．７，１０９．０，１０９．１，１０９．４（ｄ，ＪCF＝５Ｈｚ），１２６．９（ｄ，ＪCF＝１０Ｈｚ），１３２．４，１３８．４，１５６．１，１５９．２及び１７３．３によって確認した。
【０１７５】
実施例７（ｆ）：６−フルオロ−９−（２−［18Ｆ］フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（造影剤９）
18Ｆによる前駆体化合物９の標識を、実施例１（ｆ）に記載の通り実施した。
【０１７６】
半分取ＨＰＬＣ：ＨＩＣＨＲＯＭ  ＡＣＥ５  Ｃ１８カラム（１００×１０ｍｍ  ｉ．ｄ．）、粒径５μｍ；移動相Ａ：水、移動相Ｂ：メタノール；流速勾配：３ｍｌ／分；０〜１分、４０％のＢ；１〜２０分、４０〜９５％のＢ；波長２５４ｎｍ；ｔR造影剤９、１５分。
【０１７７】
分析的ＨＰＬＣ：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（１５０×４．６ｍｍ  ｉ．ｄ．）、粒径５μｍ；移動相Ａ：水、移動相Ｂ：メタノール；流速勾配：１ｍｌ／分；０〜１分、５０％のＢ；１〜２０分、５０〜９５％のＢ；波長２３０ｎｍ；ｔR造影剤９、１４分。放射化学的収率２６±８％（ｎ＝４）減衰補正なし、時間９０〜１２０分、放射化学的純度≧９９％。図４は、造影剤９と非放射性造影剤９の共溶出を示す。
【０１７８】
実施例８：６−フルオロ−９−（２−フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（非放射性造影剤９）の合成
実施例８（ａ）：（２−フルオロ−エチル）−（４−フルオロ−フェニル）−アミン（３８）
丸底フラスコ中、４−フルオロアニリン（１．３ｇ、１１．６ｍｍｏｌ、１．６ｍＬ）、２，６−ルチジン（１．２４ｇ、１１．６ｍｍｏｌ）及び２−フルオロエチルトシレート（１２；実施例２（ａ）に従って調製した）（２．５ｇ、１１．６ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（５ｍＬ）中で混合し、１００℃で終夜撹拌した。反応物を冷却し、次いで酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈した。これを水（３×４０ｍＬ）で洗浄し、有機物を乾燥させ、真空中で濃縮した。粗材料を、シリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）及び酢酸エチル（Ｂ）（１０％のＢ、１００ｇ、１２ＣＶ、６０ｍＬ／分）で溶出して精製して、（２−フルオロ−エチル）−（４−フルオロ−フェニル）−アミン（３８）３８３ｍｇ（２０％）を黄色油として得た。構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δH３．３０−３．３５（１Ｈ，ｍ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ），３．４０−３．４５（１Ｈ，ｍ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ），３．９０（１Ｈ，ｓ，ｂｒ，ＮＨ），４．５３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝３Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ），４．６９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝３Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ），６．５１−６．７２（２Ｈ，ｍ，２  ｘ  ＮＣＣＨ），６．８５−７．０５（２Ｈ，ｍ，２  ｘ  ＮＣＣＨＣＨ）によって確認した。
【０１７９】
実施例８（ｂ）：６−フルオロ−９−（２−フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（非放射性造影剤９）
３−ブロモ−２−オキソ−シクロヘキサンカルボン酸ジエチルアミド（３５；実施例７（ｃ）に従って調製した）（３３６ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）及び（２−フルオロ−エチル）−（４−フルオロ−フェニル）−アミン（３８）（３８３ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）の混合物を、Ｎ2下において５０℃で３時間撹拌すると、反応物が褐色になった。得られた混合物をプロパン−２−オール（２ｍＬ）に溶解し、乾燥塩化亜鉛（４９１ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を、Ｎ2下で１６時間加熱還流し、次いで真空中で濃縮した。残渣を酢酸エチル（２０ｍＬ）に溶解し、２ＮのＨＣｌ（１０ｍＬ）、水（２×１０ｍＬ）及び炭酸カリウム水溶液（２×５ｍＬ）で洗浄し、次いで乾燥させ、真空中で濃縮した。粗材料をジエチルエーテルで倍散して、６−フルオロ−９−（２−フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（非放射性造影剤９）４０ｍｇ（１０％）を白色固体として得た。構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δH１．１３（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝９Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2），１．３０（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝９Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2），１．５５−２．１４（４Ｈ，ｍ，２−及び３−ＣＨ2），２．７８−２．８６（２Ｈ，ｍ，１−ＣＨ2），３．３６−３．６７（４Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2），４．００−４．１０（１Ｈ，ｍ，４−ＣＨ），４．３０（２Ｈ，ｄｍ，Ｊ＝２１Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ），４．６０（２Ｈ，ｄｍ，Ｊ＝４１Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ），６．７５−６．９５（２Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＨＣＦＣＨ）及び７．０５−７．１５（１Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＨＣＦＣＨによって確認した。
【０１８０】
実施例９：メタンスルホン酸２−（４−ジエチルカルバモイル−５−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル）−エチルエステル（前駆体化合物１０）及び５−フルオロ−９−（２−［18Ｆ］フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（造影剤１０）の合成
実施例９（ａ）：２−ベンジルオキシ−Ｎ−（３−フルオロ−フェニル）−アセトアミド（３９）
ベンジルオキシ酢酸（４．６５ｇ、２８ｍｍｏｌ、４．０ｍＬ）のＤＣＭ（５２ｍＬ）溶液に、塩化オキサリル（７．７ｇ、６１ｍｍｏｌ、５．３ｍＬ）及び一滴のＤＭＦを添加した。反応混合物を室温で４時間撹拌した。過剰の塩化オキサリルを真空中で除去し、粗塩化アシルをＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈し、トリエチルアミン（５．３ｍＬ、４１．６ｍｍｏｌ、４．２ｇ）を添加し、その後３−フルオロアニリン（３．５ｇ、３２ｍｍｏｌ、３．０ｍＬ）を添加した。反応混合物を終夜ＲＴで撹拌した。次いで、反応物を１ＭのＨＣｌ水溶液（１００ｍＬ）でクエンチし、乾燥させ、真空中で濃縮して、２−ベンジルオキシ−Ｎ−（３−フルオロ−フェニル）−アセトアミド（３９）７．１０ｇ（９５％）を黄色油として得、それを次の段階で精製せずに使用した。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δC６９．２，７３．５，１０６．９，１０７．２，１１１．０（ｄ，ＪCF＝２４Ｈｚ），１１４．９（ｄ，ＪCF＝３Ｈｚ），１２７．８，１２８．２，１２８．５，１２９．７（ｄ，ＪCF＝９Ｈｚ），１３６．２及び１６７．６によって確認した。
【０１８１】
実施例９（ｂ）：（２−ベンジルオキシ−エチル）−（３−フルオロ−フェニル）−アミン（４０）
ＬＡＨ（１．２５ｇ、２７ｍｍｏｌ）の乾燥ジエチルエーテル（１００ｍＬ）懸濁液に、２−ベンジルオキシ−Ｎ−（３−フルオロ−フェニル）−アセトアミド（３９）（７．０ｇ、２７ｍｍｏｌ）の乾燥ジエチルエーテル（１００ｍＬ）溶液を滴下添加した。還流が維持されるように添加を実施した。添加が終了したら、反応混合物を４時間加熱還流し、次いで氷水に注ぎ、ＤＣＭを添加した。アルミニウム塩を分解するために、強塩基のｐＨが得られるまで２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液を添加した。層を分離し、水層をＤＣＭで洗浄し、乾燥させ、真空中で濃縮した。粗材料を、シリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）及び酢酸エチル（Ｂ）（５〜５０％のＢ、１００ｇ、１２ＣＶ、６０ｍＬ／分）で溶出して精製して、（２−ベンジルオキシ−エチル）−（３−フルオロ−フェニル）−アミン（４０）４．１ｇ（８４％）を黄色油として得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δC４３．３，６８．２，７３．０，９９．４（ｄ，ＪCF＝２４Ｈｚ），１０３．５，１０３．８，１０８．８，１２７．４（ｄ，ＪCF＝３Ｈｚ），１２７．６，１２８．４，１３０．０（ｄ，ＪCF＝９Ｈｚ）及び１３８．８によって確認した。
【０１８２】
実施例９（ｃ）：９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−５−フルオロ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（４１）
３−ブロモ−２−オキソ−シクロヘキサンカルボン酸ジエチルアミド（３５；実施例７（ｃ）に従って調製した）（２．３ｇ、１０ｍｍｏｌ）及び（２−ベンジルオキシ−エチル）−（３−フルオロ−フェニル）−アミン（４０）（４．１ｇ、１７ｍｍｏｌ）の混合物を、Ｎ2下において５０℃で３時間撹拌すると、反応物が褐色になった。得られた混合物をプロパン−２−オール（１０ｍＬ）に溶解し、乾燥塩化亜鉛（４．０９ｇ、３０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を、Ｎ2下で１６時間加熱還流し、次いで真空中で濃縮した。残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）に溶解し、２ＮのＨＣｌ（５０ｍＬ）、水（２×５０ｍＬ）及び炭酸カリウム水溶液（２×５０ｍＬ）で洗浄し、次いで乾燥させ、真空中で濃縮した。粗材料を、シリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）及び酢酸エチル（Ｂ）（５〜１００％のＢ、１００ｇ、２８ＣＶ、６０ｍＬ／分）で溶出して精製して、９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−５−フルオロ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（４１）１．３ｇ（３０％）を、異性体９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−７−フルオロ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミドと一緒に混合物として得、それを次の段階で精製せずに使用した。９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−５−フルオロ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（４１）の構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δH１．１０−１．４０（６Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2），１．６０−２．６０（４Ｈ，ｍ，２−及び３−ＣＨ2），２．７０−２．８５（２Ｈ，ｍ，１−ＣＨ2），３．１０−３．６５（４Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2及びＣＨ2ＣＨ2ＯＢｎ），４．００−４．３０（３Ｈ，ｍ，ＣＨ2ＣＨ2ＯＢｎ及び４−ＣＨ），４．４３（２Ｈ，ｓ，ＯＣＨ2Ｐｈ），６．５５−６．６５（１Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＨＣＨＣＦ），６．９０−７．０５（１Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＨＣＨＣＦ），７．０５−７．１５（１Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＨＣＨＣＦ）及び７．１６−７．２５（５Ｈ，ｍ，Ｐｈ）によって確認した。
【０１８３】
９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−７−フルオロ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミドの構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δH１．１０−１．４０（６Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2），１．６０−２．６０（４Ｈ，ｍ，２−及び３−ＣＨ2），２．７０−２．８５（２Ｈ，ｍ，１−ＣＨ2），３．１０−３．６５（４Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2及びＮＣＨ2ＣＨ2ＯＢｎ），４．００−４．３０（３Ｈ，ｍ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｏｂｎ及び４−ＣＨ），４．５５（２Ｈ，ｓ，ＯＣＨ2Ｐｈ），６．７０−６．８０（１Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＦＣＨＣＨ）及び７．００−７．４０（７Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＦＣＨＣＨ及びＰｈ）によって確認した。
【０１８４】
実施例９（ｄ）：５−フルオロ−９−（２−ヒドロキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（４２）
９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−５−フルオロ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（４１）及び９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−７−フルオロ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（１．３ｇ、３．０ｍｍｏｌ）の混合物のメタノール（７５ｍＬ）溶液に、メタノール（１０ｍＬ）中Ｐａ／Ｃ（２００ｍｇ）のスラリーを添加した。混合物をＰａｒｒ水素化装置に入れ、水素雰囲気下で２４時間振とうした。反応物を、セライトパッドを介して濾過し、メタノールで洗浄し、真空中で濃縮して、５−フルオロ−９−（２−ヒドロキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（４２）及び７−フルオロ−９−（２−ヒドロキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミドの混合物７４３ｍｇ（８０％）を黄色油として得、それを次の段階で精製せずに使用した。５−フルオロ−９−（２−ヒドロキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（５５）の構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δH１．１０−１．４０（６Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2），１．６０−２．６０（４Ｈ，ｍ，２−及び３−ＣＨ2），２．７０−２．８５（２Ｈ，ｍ，１−ＣＨ2），３．１０−３．６５（４Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2及びＣＨ2ＣＨ2ＯＨ），４．００−４．３０（３Ｈ，ｍ，ＣＨ2ＣＨ2ＯＨ，４−ＣＨ），６．５５−６．６５（１Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＨＣＨＣＦ），６．９０−７．０５（１Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＨＣＨＣＦ）及び７．０５−７．１５（１Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＨＣＨＣＦ）によって確認した。
【０１８５】
７−フルオロ−９−（２−ヒドロキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミドの構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δH１．１０−１．４０（６Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2），１．６０−２．６０（４Ｈ，ｍ，２−及び３−ＣＨ2），２．７０−２．８５（２Ｈ，ｍ，１−ＣＨ2），３．１０−３．６５（４Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2及びＣＨ2ＣＨ2ＯＨ），４．００−４．３０（３Ｈ，ｍ，ＮＣＨ2ＣＨ2ＯＨ，４−ＣＨ），６．７０−６．８０（１Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＦＣＨＣＨ）及び７．００−７．４０（２Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＦＣＨＣＨ）によって確認した。
【０１８６】
実施例９（ｅ）：メタンスルホン酸２−（４−ジエチルカルバモイル−５−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル）−エチルエステル（前駆体化合物１０）
５−フルオロ−９−（２−ヒドロキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（４２）及び７−フルオロ−９−（２−ヒドロキシ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（７４３ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）の混合物のジクロロメタン（３０ｍＬ）溶液に、ピリジン（１．７４ｇ、２２．０ｍｍｏｌ、１．８ｍＬ）を添加した。反応物を０℃に冷却し、塩化メタンスルホニル（１．０１ｇ、８．８ｍｍｏｌ、０．７ｍＬ）を添加した。反応物を室温にして終夜温めた。混合物を２ＮのＨＣｌ（２×５０ｍＬ）及び水（２×５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ、真空中で濃縮した。粗材料を、半分取ＨＰＬＣによって水（Ａ）及びメタノール（Ｂ）（Ｇｅｍｉｎｉ  ５ｕ、Ｃ１８、１１０Ａ、１５０×２１ｍｍ、２０分間５０〜９５％のＢ、２１ｍＬ／分）で溶出して精製して、メタンスルホン酸２−（４−ジエチルカルバモイル−７−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル）−エチルエステル１０ｍｇ（１％）を白色固体として得、メタンスルホン酸２−（４−ジエチルカルバモイル−７−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル）−エチルエステル及びメタンスルホン酸２−（４−ジエチルカルバモイル−５−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル）−エチルエステル（前駆体化合物１０）の混合物３０ｍｇ（９％）を白色固体として得た。これらの精製条件を使用すると、メタンスルホン酸２−（４−ジエチルカルバモイル−５−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル）−エチルエステル（前駆体化合物１０）を、単一成分として単離することができなかった。メタンスルホン酸２−（４−ジエチルカルバモイル−７−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル）−エチルエステルの構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δH１．１８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2），１．３９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2）  １．７０−２．３０（４Ｈ，ｍ，２−及び３−ＣＨ2），２．５８（３Ｈ，ｓ，ＯＳＯ2ＣＨ3），２．６０−２．８０（２Ｈ，ｍ，１−ＣＨ2），３．４０−３．６５（４Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2），４．０２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ，４−ＣＨ），４．２０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2ＯＭｓ），４．３５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2ＯＭｓ），６．７０−６．８５（１Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＦＣＨＣＨ），６．９０−７．００（１Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＦＣＨＣＨ）及び７．０５−７．１５（２Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＦＣＨＣＨ）によって確認した。
【０１８７】
メタンスルホン酸２−（４−ジエチルカルバモイル−５−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル）−エチルエステル（前駆体化合物１０）の構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δH１．１８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2），１．３９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2）  １．７０−２．３０（４Ｈ，ｍ，２−及び３−ＣＨ2），２．５８（３Ｈ，ｓ，ＯＳＯ2ＣＨ3），２．６０−２．８０（２Ｈ，ｍ，１−ＣＨ2），３．４０−３．６５（４Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2），４．１５（１Ｈ，ｍ，４−ＣＨ），４．２０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2ＯＭｓ），４．３５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2ＯＭｓ），６．５５−６．６５（１Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＨＣＨＣＦ），６．９０−７．０５（１Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＨＣＨＣＦ）及び７．０５−７．１５（１Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＨＣＨＣＦ）によって確認した。
【０１８８】
実施例９（ｆ）：５−フルオロ−９−（２−［18Ｆ］フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（造影剤１０）
前駆体化合物１０及びメタンスルホン酸２−（４−ジエチルカルバモイル−７−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル）−エチルエステルの混合物を、反応物の放射性標識に使用した。18Ｆによる標識を、実施例１（ｆ）に記載の通り実施した。７−フルオロ−９−（２−［18Ｆ］フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミドの造影剤１０を得た。
【０１８９】
半分取ＨＰＬＣ：ＨＩＣＨＲＯＭ  ＡＣＥ５  Ｃ１８カラム（１００×１０ｍｍ  ｉ．ｄ．）、粒径５μｍ；移動相Ａ：水、移動相Ｂ：メタノール；流速勾配：３ｍｌ／分；０〜１分、５０％のＢ；１〜２０分、５０〜９５％のＢ；波長２５４ｎｍ；ｔR造影剤１０、１５分；ｔR７−フルオロ−９−（２−［18Ｆ］フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド、１４分。
【０１９０】
分析的ＨＰＬＣ：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（１５０×４．６ｍｍ  ｉ．ｄ．）、粒径５μｍ；移動相Ａ：水、移動相Ｂ：メタノール；流速勾配：１ｍｌ／分；０〜１分、５０％のＢ；１〜２０分、５０〜９５％のＢ；波長２３０ｎｍ；ｔR造影剤１０、１６分；ｔR７−フルオロ−９−（２−［18Ｆ］フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド、１４分。造影剤１０の放射化学的収率８．７±１％（ｎ＝３）減衰補正なし、時間９０〜１２０分、放射化学的純度≧９９％。図５は、造影剤１０（上）及び７−フルオロ−９−（２−［18Ｆ］フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（中間）及び７−フルオロ−９−（２−［19Ｆ］フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（下）を示す。
【０１９１】
実施例１０：５−フルオロ−９−（２−フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸−ジエチルアミド（非放射性造影剤１０）の合成
実施例１０（ａ）：（２−フルオロ−エチル）−（３−フルオロ−フェニル）−アミン（４３）
３−フルオロアニリン（１．４ｇ、１１．６ｍｍｏｌ、１．２ｍＬ）及び２−フルオロエチルトシレート（１２；実施例２（ａ）に従って調製した）（２．５ｇ、１１．６ｍｍｏｌ）及びルチジン（１．２４ｇ、１１．６ｍｍｏｌ）を撹拌し、ＤＭＦ（５ｍＬ）中、１００℃で終夜加熱した。反応物を冷却し、次いで酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈した。これを水（３×４０ｍＬ）で洗浄し、有機物を乾燥させ、真空中で濃縮した。粗材料を、シリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）及び酢酸エチル（Ｂ）（１０％のＢ、１００ｇ、１２ＣＶ、６０ｍＬ／分）で溶出して精製して、（２−フルオロ−エチル）−（３−フルオロ−フェニル）−アミン（４３）１８４ｍｇ（１０％）を黄色油として得た。構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δH３．３７（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝６Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ），３．４６（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝６Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ），４．１２（１Ｈ，ｓ，ｂｒ，ＮＨ），４．５４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝３Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ），４．６９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝３Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ），６．３  １−６．５０（３Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＨＣＨ），７．１０−７．２５（１Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＦ）によって確認した。
【０１９２】
実施例１０（ｂ）：５−フルオロ−９−（２−フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（非放射性造影剤１０）
３−ブロモ−２−オキソ−シクロヘキサンカルボン酸ジエチルアミド（３５；実施例７（ｃ）に従って調製した）（１６１ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）及び（２−フルオロ−エチル）−（３−フルオロ−フェニル）−アミン（４３）（１８４ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）の混合物を、Ｎ2下において５０℃で３時間撹拌すると、反応物が褐色になった。得られた混合物をプロパン−２−オール（１ｍＬ）に溶解し、乾燥塩化亜鉛（２４５ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を、Ｎ2下で１６時間加熱還流し、次いで真空中で濃縮した。残渣を酢酸エチル（１０ｍＬ）に溶解し、２ＮのＨＣｌ（５ｍＬ）、水（２×５ｍＬ）及び炭酸カリウム水溶液（２×５ｍＬ）で洗浄し、次いで乾燥させ、真空中で濃縮した。粗材料を、半分取ＨＰＬＣによって水（Ａ）及びメタノール（Ｂ）（Ｇｅｍｉｎｉ  ５ｕ、Ｃ１８、１１０Ａ、１５０×２１ｍｍ、２０分間５０〜９５％のＢ、２１ｍＬ／分）で溶出して精製して、７−フルオロ−９−（２−フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド２０ｍｇ（６％）を白色固体として得、５−フルオロ−９−（２−フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（非放射性造影剤１０）１０ｍｇ（３％）を白色固体として得た。７−フルオロ−９−（２−フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミドの構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δH１．１４（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2），１．３３（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2），１．８０−２．１５（４Ｈ，ｍ，２−及び３−ＣＨ2），２．７０−２．８０（２Ｈ，ｍ，１−ＣＨ2），３．５０−３．８０（４Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2），４．２０−４．３５（１Ｈ，ｍ，４−ＣＨ），４．４０（２Ｈ，ｄｍ，Ｊ＝２１Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ），４．６０（２Ｈ，ｄｍ，Ｊ＝４１Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ），６．７０−６．８０（１Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＦＣＨＣＨ）及び７．００−７．１０（２Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＦＣＨＣＨ）によって確認した。
【０１９３】
５−フルオロ−９−（２−フルオロ−エチル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（非放射性造影剤１０）の構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δH１．１４（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2），１．３３（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2），１．８０−２．１５（４Ｈ，ｍ，２−及び３−ＣＨ2），２．７０−２．８０（２Ｈ，ｍ，１−ＣＨ2），３．５０−３．８０（４Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2），４．２０−４．３５（１Ｈ，ｍ，４−ＣＨ），４．４０（２Ｈ，ｄｍ，Ｊ＝２１Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ），４．６０（２Ｈ，ｄｍ，Ｊ＝４１Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ），６．５５−６．６５（１Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＨＣＨＣＦ），６．９０−７．０５（１Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＨＣＨＣＦ）及び７．０５−７．１５（１Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＨＣＨＣＦ）によって確認した。
【０１９４】
実施例１１：メタンスルホン酸２−（４−ジエチルカルバモイル−２−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル）−エチルエステル（前駆体化合物１１）及び９−（２−［18Ｆ］フルオロ−エチル）−２−メチル−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（造影剤１１）
実施例１１（ａ）：４−（４−メチル−シクロヘキセ−１−エニル）−モルホリン（４４）
ディーンスタークを備えたフラスコ中、４−メチルシクロヘキサノン（２０．１ｇ、１７９．３ｍｍｏｌ、２２ｍＬ）及びモルホリン（３１．３ｇ、３５９．０ｍｍｏｌ、３１．４ｍＬ）の溶液を、ベンゼン（５５ｍＬ）中で２６時間還流した。ベンゼンを真空下で除去し、粗生成物を減圧下で蒸留によって精製して、４−（４−メチル−シクロヘキセ−１−エニル）−モルホリン（４４）２３ｇ（７０％）を油として得た（１０ｍｍＨｇにおいてｂ．ｐ．１２０℃）。構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δH０．９４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，ＣＨ3），１．１５−１．３５（１Ｈ，ｍ，ＣＨ2ＣＨ＝ＣＮ），１．５０−１．８０（３Ｈ，ｍ，ＣＨ2ＣＨ2ＣＨＣＨ3），２．００−２．２５（４Ｈ，ｍ，ＣＨ2ＣＨ＝ＣＮ及びＣＨ2ＣＨ2ＣＨＣＨ3），２．６５−２．９５（４Ｈ，ｍ，ＯＣＨ2ＮＣＨ2），３．７３（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，ＯＣＨ2ＮＣＨ2）及び４．６０−４．６５（１Ｈ，ｍ，ＣＨ2ＣＨ＝ＣＮ）によって確認した。
【０１９５】
実施例１１（ｂ）：５−メチル−２−オキソ−シクロヘキサンカルボン酸エチルエステル（４５）
４−（４−メチル−シクロヘキセ−１−エニル）−モルホリン（４４）（２３ｇ、１２７．０ｍｍｏｌ）のベンゼン（５５ｍＬ）溶液に、クロロギ酸エチル（７．５ｇ、６９．０ｍｍｏｌ、６．６ｍＬ）を窒素下で添加すると同時に、エナミン溶液を急速に撹拌した。１８時間還流した後、溶液を冷却し、濾過した。エナミン塩酸塩の沈殿物を乾燥エーテルで洗浄した。濾液及び洗浄物を反応フラスコに戻し、１０％ＨＣｌ水溶液（４０ｍＬ）を添加した。混合物を、１５〜３０分間激しく撹拌した。層を分離し、水層を酢酸エチル（２×１００ｍＬ）で抽出し、混合有機層を真空中で濃縮した。粗材料を、減圧下で蒸留によって精製して、５−メチル−２−オキソ−シクロヘキサンカルボン酸エチルエステル（４５）１２．５ｇ（５３％）を油として得た（１０ｍｍＨｇにおいてｂ．ｐ．８５℃〜９０℃）。構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δH０．８５−０．９５（３Ｈ，ｍ，ＣＨ3），１．１７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，ＯＣＨ2ＣＨ3），１．２５−２．００（５Ｈ，ｍ，５−ＣＨ，４−及び６−ＣＨ2），２．１５−２．４０（３Ｈ，ｍ，１−ＣＨ及び３−ＣＨ2）及び４．００−４．２０（２Ｈ，ｍ，ＯＣＨ2ＣＨ3）によって確認した。
【０１９６】
実施例１１（ｃ）：５−メチル−２−オキソ−シクロヘキサンカルボン酸ジエチルアミド（４６）
トルエン（９０ｍＬ）中５−メチル−２−オキソ−シクロヘキサンカルボン酸エチルエステル（４５）（５．９ｇ、３２ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１．１２ｇ、１０ｍｍｏｌ）及びジエチルアミン（４．７ｇ、６５ｍｍｏｌ、６．７ｍＬ）を、４日間加熱還流した。反応物を冷却し、トルエンを減圧下で除去して、黄色油を得た。粗材料を、シリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）及び酢酸エチル（Ｂ）（２０〜５０％のＢ、８０ｇ）で溶出して精製して、５−メチル−２−オキソ−シクロヘキサンカルボン酸ジエチルアミド（４６）４．４ｇ（６５％）を黄色油として得た。構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δH０．８−１．０５（９Ｈ，ｍ，ＣＨ3及びＮ（ＣＨ2ＣＨ3）2），１．０５−２．１０（５Ｈ，ｍ，５−ＣＨ及び４−及び６−ＣＨ2），２．１５−２．８０（２Ｈ，ｍ，３−ＣＨ2），２．９５−３．５５（５Ｈ，ｍ，１−ＣＨ及びＮ（ＣＨ2ＣＨ3）2）によって確認した。
【０１９７】
実施例１１（ｄ）：３−ブロモ−２−ヒドロキシ−５−メチル−シクロヘキセ−１−エンカルボン酸ジエチルアミド（４７）
５−メチル−２−オキソ−シクロヘキサンカルボン酸ジエチルアミド（４６）（４．４ｇ、２１ｍｍｏｌ）をジエチルエーテル（５ｍＬ）に溶解し、Ｎ2下で０℃に冷却した。臭素（３．３２ｇ、２１ｍｍｏｌ、１．１ｍＬ）を１５分かけて滴下添加し、反応混合物を室温にして９０分かけて温めた。混合物を、氷冷した飽和炭酸ナトリウム水溶液（４０ｍＬ）にゆっくり注ぎ、酢酸エチル（３×４０ｍＬ）で抽出した。混合有機層を乾燥させ、真空中で濃縮して、３−ブロモ−２−ヒドロキシ−５−メチル−シクロヘキセ−１−エンカルボン酸ジエチルアミド（４７）６．１ｇ（定量的）をオフホワイト色の固体として得た。構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δH０．８−１．２０（９Ｈ，ｍ，ＣＨ3及びＮ（ＣＨ2ＣＨ3）2），１．８０−２．４０（５Ｈ，ｍ，ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2），３．１５−３．５５（４Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2），４．６５−４．７４（１Ｈ，ｍ，ＣＨＢｒ）及び１２．０４（１Ｈ，ｓ，ＯＨ）によって確認した。
【０１９８】
実施例１１（ｅ）：９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−２−メチル−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（４８）
３−ブロモ−２−ヒドロキシ−５−メチル−シクロヘキセ−１−エンカルボン酸ジエチルアミド（４７）（４．０ｇ、１４ｍｍｏｌ）及び（２−ベンジルオキシ−エチル）−フェニル−アミン（２１；実施例３（ｃ）に従って調製した）（６．３ｇ、２８ｍｍｏｌ）の混合物を、Ｎ2下において５０℃で３時間撹拌すると、反応物が褐色になった。得られた混合物をプロパン−２−オール（１４ｍＬ）に溶解し、乾燥塩化亜鉛（５．７２ｇ、４２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を、Ｎ2下で１６時間加熱還流し、次いで真空中で濃縮した。残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）に溶解し、２ＮのＨＣｌ（５０ｍＬ）、水（２×５０ｍＬ）及び炭酸カリウム水溶液（２×５０ｍＬ）で洗浄し、次いで乾燥させ、真空中で濃縮した。粗混合物を、ＳＣＸカートリッジ（４０ｍＬ）及び次いでシリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）及び酢酸エチル（Ｂ）（１０〜５０％のＢ、１００ｇ、１２ＣＶ、８５ｍＬ／分）で溶出して精製して、９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−２−メチル−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（４８）４６７ｍｇ（８％）を白色固体として得た。構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δH１．２０−１．４０（９Ｈ，ｍ，ＣＨ3及びＮ（ＣＨ2ＣＨ3）2），１．９０−２．２０（３Ｈ，ｍ，２−ＣＨ及び３−ＣＨ2），２．３５−２．４５（１Ｈ，ｍ，１−ＣＨ2），２．８５−２．９５（１Ｈ，ｍ，１−ＣＨ2），３．４０−３．７０（４Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2），３．７０−３．８０（１Ｈ，ｍ，４−ＣＨ），４．１０−４．３０（４Ｈ，ｍ，ＮＣＨ2ＣＨ2ＯＢｎ），４．４３（２Ｈ，ｓ，ＯＣＨ2Ｐｈ）及び７．００−７．３０（９Ｈ，ｍ，ＣＨＣＨＣＨＣＨ及びＰｈ）によって確認した。
【０１９９】
実施例１１（ｆ）：９−（２−ヒドロキシ−エチル）−２−メチル−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（４９）
９−（２−ベンジルオキシ−エチル）−２−メチル−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（４８）（４６０ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）のメタノール（２５ｍＬ）溶液に、メタノール（５ｍＬ）中Ｐｄ／Ｃ（１００ｍｇ）のスラリーを添加した。混合物をＰａｒｒ水素化装置に入れ、水素雰囲気下で２４時間振とうした。反応物を、セライトパッドを介して濾過し、メタノールで洗浄し、真空中で濃縮して、９−（２−ヒドロキシ−エチル）−２−メチル−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（４９）２５０ｍｇ（７９％）を黄色油として得、それを次の段階で精製せずに使用した。構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δH１．２０−１．４０（９Ｈ，ｍ，ＣＨ3及びＮ（ＣＨ2ＣＨ3）2），１．９０−２．２０（３Ｈ，ｍ，２−ＣＨ及び３−ＣＨ2），２．３５−２．４５（１Ｈ，ｍ，１−ＣＨ2），２．８５−２．９５（１Ｈ，ｍ，１−ＣＨ2），３．４０−３．７０（４Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2），３．７０−３．８０（１Ｈ，ｍ，４−ＣＨ），４．１０−４．３０（４Ｈ，ｍ，ＮＣＨ2ＣＨ2ＯＨ），６．９１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，ＮＣＣＨＣＨＣＨＣＨ），７．００（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，ＮＣＣＨＣＨＣＨＣＨ），７．１２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，ＮＣＣＨＣＨＣＨＣＨ）及び７．１５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，ＮＣＣＨＣＨＣＨＣＨ）によって確認した。
【０２００】
実施例１１（ｇ）：メタンスルホン酸２−（４−ジエチルカルバモイル−２−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル）−エチルエステル（前駆体化合物１１）
９−（２−ヒドロキシ−エチル）−２−メチル−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（４９）（２５０ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）溶液に、ピリジン（６３３ｍｇ、８．０ｍｍｏｌ、０．６ｍＬ）を添加した。反応物を０℃に冷却し、塩化メタンスルホニル（３６７ｍｇ、３．２ｍｍｏｌ、０．２ｍＬ）を添加した。反応物を室温にして終夜温めた。混合物を、２ＮのＨＣｌ（２×２０ｍＬ）及び水（２×２０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ、真空中で濃縮した。粗材料を、シリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）及び酢酸エチル（Ｂ）（０〜１００％のＢ、１０ｇ、３４ＣＶ、３０ｍＬ／分）で溶出して精製し、次いでジエチルエーテルで倍散して、メタンスルホン酸２−（４−ジエチルカルバモイル−２−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル）−エチルエステル（前駆体化合物１１）２５０ｍｇ（８０％）を白色固体として得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δC１２．９，１３．０，１５．２，２２．０，２９．７，３０．２，３６．７，３６．８，４０．８，４１．６，４２．０，６７．８，１０８．６，１０９．５，１１８．６，１１９．６，１２１．２，１２６．４，１３６．２，１３６．４，１７３．７によって確認した。
【０２０１】
実施例１１（ｈ）：９−（２−［18Ｆ］フルオロ−エチル）−２−メチル−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（造影剤１１）
18Ｆによる前駆体化合物１１の標識を、実施例１（ｆ）に記載の通り実施した。
【０２０２】
半分取ＨＰＬＣ：ＨＩＣＨＲＯＭ  ＡＣＥ５  Ｃ１８カラム（１００×１０ｍｍ  ｉ．ｄ．）、粒径５μｍ；移動相Ａ：水、移動相Ｂ：メタノール；流速勾配：３ｍｌ／分；０〜２６分、５０％のＢ；波長２５４ｎｍ；ｔR造影剤１１、１５分。
【０２０３】
分析的ＨＰＬＣ：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（１５０×４．６ｍｍ  ｉ．ｄ．）、粒径５μｍ；移動相Ａ：水、移動相Ｂ：メタノール；流速勾配：１ｍｌ／分；０〜１分、４０％のＢ；１〜２０分、４０〜９５％のＢ；波長２３０ｎｍ；ｔR造影剤１１、１７分。放射化学的収率１４±１３％（ｎ＝３）減衰補正なし、時間９０〜１２０分、放射化学的純度≧９９％。図６は、造影剤１１と非放射性造影剤１１の共溶出を示す。
【０２０４】
実施例１２：９−（２−フルオロ−エチル）−２−メチル−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（非放射性造影剤１１）の合成
３−ブロモ−２−ヒドロキシ−５−メチル−シクロヘキセ−１−エンカルボン酸ジエチルアミド（４７；実施例１１（ｄ）に従って調製した）（２．０ｇ、７ｍｍｏｌ）及び（２−フルオロ−エチル）−フェニル−アミン（２４；実施例４（ａ）に従って調製した）（１．９ｇ、１４ｍｍｏｌ）の混合物を、Ｎ2下において５０℃で３時間撹拌すると、反応物が褐色になった。得られた混合物をプロパン−２−オール（７ｍＬ）に溶解し、乾燥塩化亜鉛（２．８６ｇ、２１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を、Ｎ2下で１６時間加熱還流し、次いで真空中で濃縮した。残渣を酢酸エチル（１００ｍＬ）に溶解し、２ＮのＨＣｌ（３０ｍＬ）、水（２×３０ｍＬ）及び炭酸カリウム水溶液（２×３０ｍＬ）で洗浄し、次いで乾燥させ、真空中で濃縮した。粗混合物を、ＳＣＸカートリッジ（４０ｍＬ）及び次いでシリカゲルクロマトグラフィーによって石油（Ａ）及び酢酸エチル（Ｂ）（０〜１００％のＢ、１００ｇ、１２ＣＶ、８５ｍＬ／分）で溶出して精製して、９−（２−フルオロ−エチル）−２−メチル−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−４−カルボン酸ジエチルアミド（非放射性造影剤１１）４００ｍｇ（１７％）を白色固体として得た。構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δH１．１０−１．３５（９Ｈ，ｍ，ＣＨ3及びＮ（ＣＨ2ＣＨ3）2），１．９５−２．１０（２Ｈ，ｍ，３−ＣＨ2），２．３０−２．５０（１Ｈ，ｍ，２−ＣＨ），２．７０−２．８０（２Ｈ，ｍ，１−ＣＨ2），３．４０−３．７０（４Ｈ，ｍ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2），４．０５−４．１５（１Ｈ，ｍ，４−ＣＨ），４．３０（２Ｈ，ｄｍ，Ｊ＝２１Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ），４．６５（２Ｈ，ｄｍ，Ｊ＝４１Ｈｚ，ＮＣＨ2ＣＨ2Ｆ）及び７．００−７．３０（４Ｈ，ｍ，ＮＣＣＨＣＨＣＨＣＨによって確認した。
【０２０５】
実施例１３：前駆体化合物５の鏡像異性体分離
【０２０６】
【化１５】
0005651163.tif 000016
前駆体化合物５（実施例１に記載の通り得た）を、超臨界流体（ＣＯ2）キラルクロマトグラフィーを使用して、Ｋｒｏｍａｓｉｌ  Ａｍｙｃｏａｔ、２５０×１０ｍｍ、５μｍ、１００Åカラムにて４０℃において３０％ＩＰＡを用いて、毎分１３ｍｌの実施時間６分でその鏡像異性体に分離した。前駆体化合物５（６０ｍｇ）を１，４−ジオキサン（２ｍｌ）に溶解し、実施ごとに注入する場合、１度に２００μｌまでとした。２つの鏡像異性体間のベースライン分離を達成した。Ｃｈｉｒａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ製のＩＣ、２５０×４．６ｍｍ、５μｍ、均一溶媒による実施（ｒｕｎ  ｉｓｏｃｒａｔｉｃ）、８０：２０−ＭｅＯＨ：ＩＰＡ、０．５ｍｌ／分及び室温で、分離した２つの鏡像異性体の鏡像異性体純度を分析的ＨＰＬＣによって測定すると、鏡像異性体のそれぞれについて９９．５％の鏡像異性体純度を示した。
【０２０７】
実施例１４：非放射性造影剤５の鏡像異性体分離
【０２０８】
【化１６】
0005651163.tif 000017
非放射性造影剤５（実施例２に記載の通り得た）を、超臨界流体（ＣＯ2）キラルクロマトグラフィーを使用して、Ｋｒｏｍａｓｉｌ  Ａｍｙｃｏａｔ、２５０×１０ｍｍ、５μｍ、１００Åカラムにて４０℃において２０％ＩＰＡを用いて、毎分１４ｍｌの実施時間６分でその鏡像異性体に分離した。化合物５（１００ｍｇ）を１，４−ジオキサン（２．５ｍｌ）に溶解し、実施ごとに注入する場合、１度に２００μｌまでとした。時間ごとに画分をカットして、混合画分が収集されないようにした。Ｃｈｉｒａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ製のＩＣ、２５０×４．６ｍｍ、５μｍ、均一溶媒による実施、８０：２０−ＭｅＯＨ：ＩＰＡ、０．５ｍｌ／分及び室温で、分離した２つの鏡像異性体の鏡像異性体純度を分析的ＨＰＬＣによって測定すると、鏡像異性体のそれぞれについて９９．５％の鏡像異性体純度を示した。
【０２０９】
実施例１５：インビトロ効力アッセイ
ＰＢＲに対する親和性を、Ｌｅ  Ｆｕｒ  ｅｔ  ａｌ，（Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．  １９８３；ＵＳＡ  ３３：４４９−５７）に記載された方法を使用してスクリーニングした。本発明のインビボ造影剤の非放射性類似体を、過去の四環系インドール造影剤の非放射性類似体（同時係属の特許出願ＰＣＴ／ＥＰ２００９／０６２８２７のもの；以下の実施例１７に記載の合成）と一緒に試験した。
【０２１０】
各試験化合物（５０ｍＭトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．４、１％ＤＭＳＯを含有する１０ｍＭのＭｇＣｌ2に溶解した）は、Ｗｉｓｔａｒラット心臓のＰＢＲとの結合について、０．３ｎＭの［3Ｈ］ＰＫ−１１１９５と競合した。反応を、５０ｍＭトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．４、１０ｍＭのＭｇＣｌ2中で２５℃において１５分間実施した。各試験化合物を、６つの異なる濃度で、推定Ｋｉ値周辺の３００倍の範囲濃度にわたってスクリーニングした。以下のデータが観測された。
【０２１１】
【表１】
0005651163.tif 000018
実施例１６：インビボ体内分布法
本発明の造影剤を、過去の四環系造影剤（同時係属の特許出願ＰＣＴ／ＥＰ２００９／０６２８２７のもの；以下の実施例１８に記載の合成）と一緒に、インビボ体内分布モデルで試験した。
【０２１２】
成体雄性Ｗｉｓｔａｒラット（２００〜３００ｇ）に、側尾静脈を介して試験化合物１〜３ＭＢｑを注入した。注入の２、１０、３０又は６０分後（ｎ＝３）、ラットを安楽死させ、組織又は体液を、γ計数器で放射性を測定するために試料採取した。
【０２１３】
以下の記録データが観測された。
【０２１４】
【表２】
0005651163.tif 000019
図７〜１３は、それぞれ四環系造影剤並びに造影剤５〜７及び９〜１１の脳内の体内分布プロファイルを示す。本発明のインビボ造影剤は、四環系造影剤と比較して、脳に良好に取り込まれ、ＰＢＲ発現組織における特異的取込みが改善していることがわかる。
【０２１５】
実施例１７：（±）−１１−（２−フルオロエチル）−８−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（非放射性四環系インドール造影剤）の調製
１７（ａ）：（±）−４−オキソ−チオクロマン−２−カルボン酸ジエチルアミド（５０）
乾燥ＤＣＭ（１００ｍｌ）中、Ｔ．  Ｏｋｕｂｏ  ｅｔ  ａｌ，（Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ２００４；１２：３５６９−３５８０）に記載の通り調製した（±）−４−オキソ−チオクロマン−２−カルボン酸（１０．４ｇ、５０ｍｍｏｌ）を、塩化オキサリル（１２．６ｇ、１００ｍｍｏｌ）及び一滴のＤＭＦと共に窒素雰囲気下において室温で１８時間撹拌した。次いで、反応物を真空中で蒸発させてガムを得、次いでＤＣＭ（１００ｍｌ）に再溶解し、氷浴で０℃に冷却し、撹拌し、ＤＣＭ（２０ｍｌ）中ジエチルアミン（８．０３ｇ、１１０ｍｍｏｌ）を用いて１時間かけて滴下処理した。反応物を室温にして１時間かけて温め、１０％炭酸カリウム水溶液（１００ｍｌ）を添加し、反応混合物を激しく撹拌した。ＤＣＭ溶液を分離した。ＤＣＭの２つのさらなるバッチ（１００ｍｌ）で水溶液を抽出し、混合抽出物を硫酸マグネシウムで乾燥させた。ＤＣＭ溶液を真空中で濃縮して暗緑色油を得、それを静置して結晶化させた。結晶固体をジエチルエーテル（５０ｍｌ）で倍散し、濾過して、標記化合物（５０）（８．５７ｇ、６５％）を薄緑色固体として得た。構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ  １．０６（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），１．２３（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），３．０−３．５（ｍ，６Ｈ），４．２５（ｍ，１Ｈ），７．１５−７．２１（ｍ，２Ｈ），７．３２−７．３９（ｍ，１Ｈ），８．１０−８．１４（ｍ，１Ｈ）によって確認した。
【０２１６】
１７（ｂ）：（±）−８−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（５１）
（±）−４−オキソ−チオクロマン−２−カルボン酸ジエチルアミド（５０）（１．３２ｇ、５．０ｍｍｏｌ）及び４−メトキシフェニルヒドラジン塩酸塩（０．８７ｇ、５．０ｍｍｏｌ）のエタノール（１０ｍｌ）溶液に、濃硫酸（０．７３ｍｌ、１．３５ｇ、１３．８ｍｍｏｌ）を窒素下で添加した。反応混合物を還流下で２４時間加熱した。冷却後、反応混合物を濾過し、固体をエタノールで洗浄し、真空中で乾燥させて（４５℃）、標記化合物（５１）（１．０５ｇ、５７％）を薄黄色固体として得た。構造を、13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ  １０．５，１２．７，３２．７，３７．９，３９．５，５３．０，９７．６，１０３．３，１０９．８７，１０９．９２，１２０．３，１２３．５，１２３．８，１２４．３，１２４．７，１２４．９，１２７．８，１２９．４，１３１．８，１５１．３，１６６．２によって確認した。
【０２１７】
１７（ｃ）：（±）−１１−（２−フルオロエチル）−８−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（過去の四環系インドール造影剤の非放射性類似体）
（±）−８−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（５１）（１５０ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ；実施例１７（ｂ）に従って調製した）の無水ＤＭＦ（４ｍｌ）溶液に、Ｌ．Ｃｒｏｎｉｎら（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００４年；６９：５９３４〜５９４６頁）に記載の通り調製した２−フルオロエチルトシレート（１６６ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）を添加し、その後鉱油（３４ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）中水素化ナトリウム６０％分散液を窒素下で添加した。反応混合物を８０℃で１時間加熱した。冷却後、溶媒を真空中で除去し、残渣を水（３０ｍｌ）でクエンチし、ＤＣＭ（２×３０ｍｌ）で抽出し、乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、溶媒を真空中で除去した。残渣を、シリカカラムクロマトグラフィーによって５〜１０％のＥｔＯＡｃ／ＣＨ2Ｃｌ2で溶出して精製した。粗固体を、エーテル／ミネラルスピリットでクエンチし、濾過し、真空中で乾燥させて（４５℃）、標記化合物（非放射性四環系インドール造影剤）（７７ｍｇ、４６％）を薄褐色固体として得た。構造を、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ  １．１２（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ），１．３６（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ），３．２５−３．７０（ｍ，４Ｈ），３．８３（ｓ，３Ｈ），４．４５−４．７０（ｍ，２Ｈ），４．８０（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．９６（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），５．０９（ｓ，１Ｈ），６．８４−６．９３（ｍ，２Ｈ），７．１３−７．３２（ｍ，３Ｈ），７．４６（ｍ，１Ｈ），７．５８（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）によって確認した。
【０２１８】
実施例１８：（±）−１１−（２−［18Ｆ］フルオロエチル）−８−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（四環系インドール造影剤）の合成
18Ｆ-／水を、反応容器中、Ｋ２２２（４ｍｇ）、Ｋ2ＣＯ3水溶液（０．１モル溶液５０μｌ）及びアセトニトリル（５００μｌ）に添加し、窒素流の下で１００℃において２０〜３０分間乾燥させた。アセトニトリル（１０００ｕｌ）中エチル−１，２−ジトシレート（４ｍｇ）を添加し、１００℃で１０分間加熱した。反応混合物を冷却し、半分取（ｐｒｅｐｅｒａｔｉｖｅ）ＨＰＬＣによって精製し、18Ｆ−フルオロエチルトシレートを含有する画分を収集した。この画分を、Ｈ2Ｏで体積約２０ｍｌに希釈し、コンディショニングしたｌｉｇｈｔ  ｔ−Ｃ１８  ｓｅｐ  ｐａｋに搭載し、Ｈ2Ｏ（１×２ｍｌ）でフラッシュした。ｓｅｐ  ｐａｋを大流量のＮ2ラインで２０分間乾燥させた。次いで、18ＦフルオロエチルトシレートをＤＭＦ（５００μｌ）で溶出した。
【０２１９】
ＤＭＦ（２５０ｕｌ）中前駆体化合物（±）−８−メトキシ−６，１１−ジヒドロ−５−チア−１１−アザ−ベンゾ［ａ］フルオレン−６−カルボン酸ジエチルアミド（５１；実施例１７（ｂ）に従って調製した）（１３ｍｇ）を、第２の反応容器に添加し、Ｎ2で５分間パージした。次いで、ＤＭＦ（２×２５０ｕｌ）中ＮａＨ（１．３ｍｇ）を窒素下で添加し、反応容器を４５℃で０．５〜１時間加熱した。次いでこれに、上記で調製したＤＭＦ中18Ｆフルオロエチルトシレートを添加し、Ｎ2でパージした反応容器中、１００℃で１０分間加熱した。反応物を冷却し、水（１ｍｌ）で反応容器から洗浄した。シリンジフィルターによって溶液を濾過し、分取ＨＰＬＣで精製した。主な放射性ピークを含有する画分を収集した。これを、Ｈ2Ｏで体積約１０ｍｌに希釈し、コンディショニングしたｌｉｇｈｔ  ｔ−Ｃ１８  ｓｅｐ  ｐａｋに搭載し、Ｈ2Ｏ（１×２ｍｌ）でフラッシュし、ＥｔＯＨ（０．５ｍｌ）でＰ６バイアルに溶出し、リン酸緩衝食塩水（５ｍｌ）を添加した。
【図１】
0005651163.tif 000028
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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