(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
タモギタケの生育方法であって、
タモギタケ菌糸体を量子水の存在下で培養することを含み、
前記量子水は、量子水を製造する量子水転換器に通した水であり、ここで、前記量子水転換器は、液体の流入口と流出口を有する容器と、該容器の中に設置された複数の素片からなる液体処理装置であり、さらに、前記素片は、オーステナイト系ステンレス鋼又はマルテンサイト系ステンレス鋼を材質とした正六角柱状であり、素片の底面と表面を貫通する断面が円形の穴を有し、かつ、前記穴の内周面を一周以上周回する螺旋溝を有するものを加熱処理を施したものであり、前記素片は、正六角柱の６つの側面に平行であり、正六角柱の両端面と直交する中心軸その中心軸が相互に平行になるように配列されるように前記流入口と前記流出口の間に位置づけられている、そして、
前記生育は、ＡＴＰ（アデノシン三リン酸）の合成効率を向上させることを特徴とする、前記タモギタケの生育方法。
【請求項２】
前記タモギタケ菌糸体を液体培地内で培養することを特徴とする、請求項１に記載のタモギタケの生育方法。
【請求項３】
前記タモギタケ菌糸体を固体培地内で培養することを特徴とする、請求項１に記載のタモギタケの生育方法。
【請求項４】
前記量子水は、１行程４０〜５０ｍｍの前記量子水転換器に水を１〜２０回、繰り返し通して得た水であることを特徴とする、請求項１〜３のいずれかに記載のタモギタケの生育方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、タモギタケの生育方法に関し、より詳細にはタモギタケ菌糸体を効率的に培養することを含む前記方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
タモギタケは、ヒラタケ科ヒラタケ属に属する食用キノコである。ロシア東部、中国北部、日本の本州より以北、特に北海道や東北地方のトチノキ等の枯れ木や倒木に自生する。タモギタケは、メチオニン、セリン、アラニン、バリン、γ−アミノ酪酸、オルニチン等の有用アミノ酸、リンゴ酸、コハク酸、ピログルタミン酸等の有機酸、マンニトール、グリセロール、アラビトール等の糖を含むことが知られている。タモギタケやそのエキスには、血糖低下効果、肥満や糖尿病等の生活習慣病の予防又は改善、老化防止作用、血圧上昇抑制作用、抗腫瘍作用があると報告されている。
【０００３】
タモギタケは、抗酸化作用や抗老化作用が有するエルゴチオネイン（非特許文献１及び２）を他のキノコと比較して多く含むことも知られている。エルゴチオネインは、シワ防止、皮膚老化防止、真皮コラーゲン減少抑制、ＭＭＰ−１活性抑制、育毛等の機能を有する化粧品、医薬品、食品等の有効成分として使用が期待されるところ、エルゴチオネインは体内で合成されない。そこで、特許文献１のように、エルゴチオネインを含有するタモギタケ等のキノコから抽出することが行なわれている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００７−３００９１６
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】岡野由利、「希少アミノ酸エルゴチオネインは皮膚の老化を抑制する」、Ｆｒａｇｒａｎｃｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ２００８−３、ｐｐ８１−８５
【非特許文献２】Ｄｏｎｇ ＫＫ， ｅｔ．ａｌ．“Ａ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｖｅ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｐｏｔｅｎｃｙ ｏｆ Ｌ−ｅｒｇｏｔｈｉｏｎｅｉｎｅ ａｎｄ ｉｄｅｂｅｎｏｎｅ” Ｊ Ｃｏｓｍｅｔ Ｄｅｒｍａｔｏｌ． ２００７ Ｓｅｐ；６（３）：１８３−８
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、タモギタケを効率よく育成する新規な方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者は、上記課題を鋭意検討したところ、量子水の存在下でタモギタケ菌糸体を培養すると、細胞の増加速度が変化することを発見し、本発明を完成させた。すなわち、本発明は、量子水の存在下でタモギタケ菌糸体を培養することを含む、タモギタケの生育方法を提供する。本明細書において、「タモギタケ」という用語は、タモギ体菌糸体（一次菌糸）、及びタモギタケ子実体（キノコ）を含む意味で使用する。前記量子水とは、本明細書において、液体の流入口と流出口を有する容器と、当該容器の中に設置された複数の素片からなる液体処理装置であって、素片は、オーステナイト系ステンレス鋼又はマルテンサイト系ステンレス鋼を材質とし、当該素片は、正六角柱状であり、当該素片は、当該素片の底面と表面を貫通する穴であって、断面が円形の穴を有し、かつ、当該穴の内周面に、当該内周面を一周以上周回する螺旋溝を有する素片に、加熱処理を施した素片であり、当該素片を、当該素片の中心軸（正六角柱の６つの側面に平行であり、正六角柱の両端面と直交する中心軸をいう）が相互に平行になるように配列し、その配列を保持したものであり、当該配列された複数の素片が、当該流入口と当該流出口の間に位置づけられている液体処理装置に水を通過させることにより得られる水を意味する。
【発明の効果】
【０００８】
上記量子転換器を構成する材質の磁性と放電力、及び形状から発生する磁気との相乗効果によって電磁場が形成される。転換器内を通過する水は、電気的及び磁気的作用により、特性や作用が変化する。具体的には、量子水は、水素結合がゆるくなり、自由度の高い酸素や水素が気体の状態で溶存する。また、水の酸化還元電位も低下する。水のクラスターが小さくなって、界面活性力が高まる。量子水の最も知られた効果は、制菌作用である。
【０００９】
本発明の育成方法における量子水の作用効果は、タモギタケ菌糸体の収量や培養効率が向上すること、及び、菌体１ｍｇ当たりのＡＴＰ（アデノシン三リン酸）生成量（ＡＴＰ合成効率という）が向上することである。ＡＴＰは、生体内に広く分布し、燐酸１分子が離れたり結合したりすることで、エネルギーの放出と貯蔵、又は物質の代謝と合成を繰り返す役目を担うヌクレオチドである。
【００１０】
ＡＴＰ合成効率は、エルゴチオネインの合成効率とパラレルに推移する傾向がある。したがって、本発明のタモギタケの生育方法は、外から栄養源を添加することなく、エルゴチオネインの合成効率を高めることにもなる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】本発明の方法に従って、タモギタケ菌糸体を液体培養した際の、培地のＡＴＰ含有量を示す図である。量子水の存在下で培養した実施例１は、イオン交換水の存在下で培養した比較例１と比べて、菌体重量が顕著に増大した。さらに、量子転換器への通水回数を増した量子水で調製した液体培地では、タモギタケの生育促進効果が向上した。
【図２】図１の液体培養において、タモギタケの細胞数に及ぼす量子水の影響を示す図である。図２の横軸は通水回数であり、縦軸は、タモギタケの菌体１ｍｇ当たりのＡＴＰ合成効率（＝ＡＴＰ含有量／菌体重量）である。量子水によってＡＴＰ合成効率が著しく増加し、それは通水回数の増加に伴って向上することがわかる。
【図３】本発明の方法に従って、タモギタケ菌糸体を固体培養した際のＡＴＰ合成効率を示す。図３の横軸は通水回数であり、縦軸は菌そう直径である。図から、量子水によってタモギタケの合成が促進され、それは通水回数を重ねるにつれて向上することがわかる。
【図４】特許第４０６３７６８号公報の図３に示す量子水転換器の構造の一例を示す一部切欠き斜視図である。図中の参照符号の説明は以下である。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下に、本発明の一実施の形態を説明する。本発明のタモギタケの培養方法は、タモギタケ菌糸体を量子水の存在下で培養することを含むことを必須とする。
量子水は、外部から電気などのエネルギー供給を必要とせずに自然に電磁場を発生形成させる量子転換器により得られる。量子転換器の構造の詳細を以下に示す。
【００１３】
量子転換器の構造は、図４に示すように、液体の流入口と流出口を有する容器２２と、当該容器の中に設置された複数の素片１からなる液体処理装置２１であって、素片は、オーステナイト系ステンレス鋼又はマルテンサイト系ステンレス鋼を材質とし、当該素片は、正六角柱状であり、当該素片は、当該素片の底面と表面を貫通する穴であって、断面が円形の穴を有し、かつ、当該穴の内周面に、当該内周面を一周以上周回する螺旋溝を有する素片に、加熱処理を施した素片であり、当該素片を、当該素片の中心軸（正六角柱の６つの側面に平行であり、正六角柱の両端面と直交する中心軸をいう）が相互に平行になるように配列し、その配列を保持したものであり、当該配列された複数の素片が、当該流入口と当該流出口の間に位置づけられている液体処理装置である。
【００１４】
量子水転換器の構成の詳細は、特許第４０６３７６８号公報に開示され、この特許第４０６３７６８を参照のために本明細書に参入する。量子水転換器の大きさは、通常、φ２０〜３００ｍｍ×行程５０〜４００ｍｍである。この量子水転換器を複数連結してもよい。なお、特許第４０６３７６８には、量子水転換器の用途として、豚の飲料水や滅菌用途が記載されているが、本発明のようにタモギタケの培養に有用であることは記載されていない。量子転換器は、市販のものでもよく、例えば製品名υＧ７（（株）ウエルネス製）を特に制限なく使用可能である。
【００１５】
上記量子水転換器に初回に通す水は、菌糸体培養に用いる水であれば特に制限されないが、イオン交換水であることが好ましい。
【００１６】
ＡＴＰ合成効率に対する量子水の効果を、通常のイオン交換水やナノバブル水と比較すると、以下の序列：
イオン交換水  ＜  ナノバブル水  ＜  量子水
となる。ナノバブル水とは、機能水の一種であり、特許第４１４４６６９号に開示される酸素をナノレベルの気泡として安定化させた水である。
【００１７】
菌子体の培養効率及びＡＴＰ合成効率は、前記量子水転換器への水の通水回数の増加に伴って増大する。例えば、１行程４０〜５０ｍｍの量子水転換器に水を繰り返し通す数（サイクル数）は、通常、１〜２０回でよく、好ましくは２〜１２回である。
【００１８】
上記量子水をタモギタケ菌糸体の培養やタモギタケの栽培に用いる。具体的には、タモギタケ菌糸体を食菌する培地や菌床の調製に使用する水を量子水に変更する。
【００１９】
タモギタケ菌糸体の培養は、水に量子水を使用する以外は常法を用いることができる。培養は、液体培養及び固体培養のいずれでもよい。
【００２０】
タモギタケの菌株は特に制限されないが、例えば北海道に自生する野生種より分離し、継代したもの（合同会社クリエーション保有）等が挙げられる。タモギタケの菌株は、ＰＤＡ培地、酵母エキス寒天培地、麦芽エキス寒天培地等で平面培養したものを保存菌株とする。
【００２１】
上記保存菌株を平面培養した菌そうからタモギタケ菌糸体を抜き取り、グルコース、ペプトン、酵母エキス、麦芽エキス等を含有する液体培地又は固体培地の表面に接種する。液体培地の具体例としては、ポテト・デキストロース・ブロス（ＰＤＢ）培地、ＦＧＭ培地、酵母エキス培地、麦芽エキス培地等が挙げられる。固体培地の具体例として、ポテト・デキストロース・寒天（ＰＤＡ）培地、酵母エキス寒天培地、麦芽エキス寒天培地等が挙げられる。これらの培地には、適宜、リン、マンガン、マグネシウム、カルシウム、鉄、バナジウム等のミネラル成分を含有させる。振とう培養したものをホモゲナイザー等で撹拌することにより種菌を得る。
【００２２】
量子水を用いてＰＤＢ培地やＰＤＡ培地（ｐＨ４〜９）を調製後、例えば１２０℃の温度で１５分間、蒸気殺菌する。上記種菌を、例えば１２０℃の温度で１５分間、蒸気殺菌し、放冷したものを、上記培地に植菌する。タモギタケ菌糸体の植菌量は、通常、１〜１００ｍｇでよい。植菌した培地を、通常、２０〜３０℃、好ましくは２３〜２７℃の温度で、通常、５〜６０日間、好ましくは１０〜３０日間の一次培養を行う。
【００２３】
一次培養後、適宜、メチオニン、ヒスチジン、システイン、シスチン、タウリン等の栄養成分を添加し、２０〜３０℃、好ましくは２３〜２７℃の温度で、さらに５〜２０日間、好ましくは１２〜１７日間の二次培養を行う。ここで、メチオニン等の添加濃度は、通常、０．５ｍＭ以上でよく、好ましくは０．５ｍＭ以上であり、さらに好ましくは１ｍＭ以上、特に好ましくは５ｍＭ以上である。
【００２４】
二次培養後、培地から菌糸体を採取する。菌糸体の採取及び保存方法（乾燥等）は、常法に基づく。さらに、タモギタケ菌糸体から、エルゴチオネイン等の有用成分を抽出してもよい。その抽出方法は、常法に基づく。
【００２５】
タモギタケ菌糸体（一次菌糸）からタモギタケ子実体（キノコ）を発生させてもよい。その方法は、常法に基づく。例えば、キノコ栽培用培地は、オガクズ、米ヌカ、フスマ、オカラ、綿実粕、豆皮、量子水等からなる培床原料を高圧蒸気殺菌する。上記原料をポットや袋に詰めた後、培地の表面に上記タモギタケ菌糸体を接種し、通常、１５℃〜３０℃の温度の無菌室内で、通常、１５日〜３０日間静置する。菌掻き後、点灯下、温度１０℃〜２０℃、湿度７０〜９９％の条件で、通常、５日〜１５日間、静置することでキノコを栽培する。
【００２６】
さらに、収穫したタモギタケ子実体から、エルゴチオネイン等の有用成分を抽出してもよい。その抽出方法は、常法に基づく。
【実施例】
【００２７】
〔実施例１〕液体培地での菌体培養試験
タモギタケ菌糸生育に及ぼす量子水の影響を試験するため、市販の量子水転換器を用いて製造した量子水の存在下で、タモギタケ菌糸体の培養試験を行った。具体的な実験手順は、以下のとおりである。
【００２８】
（１）菌株の準備
タモギタケ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ  ｃｏｒｎｕｃｏｐｉａｅ  ｖａｒ．  ｃｉｔｒｉｎｏｐｉｌｅａｔｕｓ  （ＫＳ−５５））を、ＰＤＡ培地で平面培養したものを保存菌株とした。
【００２９】
（２）量子水の製造
量子水は、市販の量子水転換器（製品名：υＧ７、（株）ウエルネス）にイオン交換水を用いて製造した。量子水転換器の詳細な仕様を、以下に示す。
型番：υＳＵＮ君ＤＸ
寸法：φ３５ｍｍ×行程９０ｍｍ
本体：ＡＢＳ樹脂製、コア１７１×２連
【００３０】
上記量子水転換器にイオン交換水を通し、通過した量子水をビーカーで受けた。量子転換器は２連キットであるため、この量子水は、通水処理を２回行なったことになる。この量子水を２回処理の量子水という。同様にして、イオン交換水を上記量子水転換器に３回及び６回通すことにより、それぞれ、６回処理の量子水及び１２回処理の量子水を準備した。得られた２、６及び１２回処理の量子水を、それぞれタモギタケ菌糸体の培養に供した。
【００３１】
（３）培養
液体培養をＰＤＢ培地で行った。各量子水でＰＤＢ培地を調製後、１２０℃で１５分蒸気滅菌した。放冷後、予めＰＤＡ培地で平面培養しておいた菌そうから直径５ｍｍのディスクを抜き取り、液体培地の表面に接種した。２５℃で３０日間培養後、菌糸の生育量を測定した。ろ過して１０５℃で乾燥することにより、菌体重量を求めた。結果を、図１に示す。
【００３２】
図１に示すように、量子水を用いて液体培養した実施例１の菌体重量は、イオン交換水で培養した比較例１のものよりも増していた。このことから、量子水によるタモギタケ菌糸体の培養促進効果が認められた。さらに、量子水の通水処理数が増すごとに、菌体重量が増すことも判明した。
【００３３】
（４）ＡＴＰ測定
ルシフェラーゼによる発光量（ＵＲＬ）を測定することで、ＡＴＰ含有量（ルシフェラーゼによる相対発光量（ＲＵＬ））を知ることができる。そこで、タモギタケの３０日間液体培養した培地のＡＴＰ含有量を、ルミテスター（製品名：ＰＤ−２０，ルシパックＰｅｎ、キッコーマンバイオケミファ株式会社製）で測定した。液体培地のＡＴＰ含有量を表１に示す。
【００３４】
【表１】
0005704671.tif 000002
【００３５】
表１に示すように、量子水の通水回数の増加に伴って、液体培地のＡＴＰ含有量が多くなっている。このことから、量子水を用いてタモギタケを液体培養すると、タモゴタケの生育活性を上昇させると考えられる。
【００３６】
図２に、タモギタケの細胞数に及ぼす量子水の影響を示す。図２は、表１のＡＴＰ含有量を菌体重量で除することにより、ＡＴＰ合成効率を求めたものである。通水回数０回は、イオン交換水を使用した比較例１である。図２から、量子水によってタモギタケの菌体１ｍｇ当たりのＡＴＰ合成効率が著しく増加し、通水回数を重ねるにつれて増加する傾向も認められる。
【００３７】
〔実施例２〕固体培地での菌体培養試験
実施例１において、液体培地を固体培地に変えた以外は、実施例１と同様の手順でタモギタケ菌糸体を培養した。
【００３８】
具体的には、固体培養は、ＰＤＡ培地を使用した。予めＰＤＡ培地で平面培養しておいた菌そうから直径５ｍｍのディスクを抜き取り、ＰＤＡ培地の表面に接種した。２５℃で１４日間培養後、菌そう直径を測定した。結果を図３に示す。
【００３９】
図３に示すように、量子水によってタモギタケ菌糸体の菌そう直径が増大し、通水回数を重ねるにつれて増加する傾向も認められる。したがって、量子水で調製したＰＤＡ培地では、タモギタケの生育速度が高まる傾向があることが明らかになった。
【００４０】
実施例１及び２から、量子水を用いたタモギタケの生育試験では、液体培地及び固体培地のいずれでも、プラス効果が認められた。さらに、通水回数を増すごとに効果が増大することも明らかになった。また、ＡＴＰの含有量が多くなっていることから、生理的に有効に作用しているものと思われる。
【符号の説明】
【００４１】
１：素片、
２１：液体処理装置、
２２：正六角柱状中空ケース、
２３：底板、
２４：周辺部分、
２５：上板、
２６：周辺部分
【要約】
【課題】タモギタケを効率よく生産する新規な方法を提供する。
【解決手段】この方法は、タモギタケ菌糸体を量子水中で培養することを含む。タモギタケ菌糸体を液体培地又は固体培地内で培養される。量子水は、量子水を製造する量子転換器に通した水を再度、量子転換器に通すことを２〜１２回、繰り返した水であることが好ましい。
【選択図】図１【図１】
0005704671.tif 000003
【図２】
0005704671.tif 000004
【図３】
0005704671.tif 000005
【図４】
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