(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＥＭＬ４−ＡＬＫ＋非小細胞性肺がんを処置するための医薬であって、
５−クロロ−Ｎ２−（２−イソプロポキシ−５−メチル−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）−Ｎ４−［２−（プロパン−２−スルホニル）−フェニル]−ピリミジン−２，４−ジアミンおよび６−{５−クロロ−４−［２−（プロパン−２−スルホニル）−フェニルアミノ]−ピリミジン−２−イルアミノ}−５−イソプロポキシ−２−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−２，３−ジヒドロ−イソインドール−１−オンから選択される化合物またはその薬学的に許容される塩を含む医薬。
【請求項２】
該化合物が５−クロロ−Ｎ２−（２−イソプロポキシ−５−メチル−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）−Ｎ４−［２−（プロパン−２−スルホニル）−フェニル]−ピリミジン−２，４−ジアミンまたはその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の医薬。
【請求項３】
該化合物が６−{５−クロロ−４−［２−（プロパン−２−スルホニル）−フェニルアミノ]−ピリミジン−２−イルアミノ}−５−イソプロポキシ−２−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−２，３−ジヒドロ−イソインドール−１−オンまたはその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の医薬。
【請求項４】
ＥＭＬ４−ＡＬＫ＋非小細胞性肺がんがクリゾチニブ耐性である、請求項１〜３のいずれか記載の医薬。
【請求項５】
ＥＭＬ４−ＡＬＫ＋非小細胞性肺がんを処置するための医薬の製造のための、５−クロロ−Ｎ２−（２−イソプロポキシ−５−メチル−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）−Ｎ４−［２−（プロパン−２−スルホニル）−フェニル]−ピリミジン−２，４−ジアミンおよび６−{５−クロロ−４−［２−（プロパン−２−スルホニル）−フェニルアミノ]−ピリミジン−２−イルアミノ}−５−イソプロポキシ−２−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−２，３−ジヒドロ−イソインドール−１−オンから選択される化合物、またはその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項６】
該化合物が５−クロロ−Ｎ２−（２−イソプロポキシ−５−メチル−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）−Ｎ４−［２−（プロパン−２−スルホニル）−フェニル]−ピリミジン−２，４−ジアミンまたはその薬学的に許容される塩である、請求項５に記載の使用。
【請求項７】
該化合物が６−{５−クロロ−４−［２−（プロパン−２−スルホニル）−フェニルアミノ]−ピリミジン−２−イルアミノ}−５−イソプロポキシ−２−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−２，３−ジヒドロ−イソインドール−１−オンまたはその薬学的に許容される塩である、請求項５に記載の使用。
【請求項８】
ＥＭＬ４−ＡＬＫ＋非小細胞性肺がんがクリゾチニブ耐性である、請求項５〜７のいずれか記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願との相互参照
本出願は、２０１１年２月２日付けで出願された米国特許出願番号６１／４３８，８７８の利益を主張し、その全体を引用により本出願に包含する。
【０００２】
本出願は、医薬品としてのＡＬＫ阻害剤の使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
肺がんは、西洋諸国におけるがん死亡の重要な原因のままである（Jemal et al.， CA Cancer J. Clin. 56， 106130 （2006）；非特許文献１）。非小細胞性肺がん（ＮＳＣＬＣ）は、肺がんの症例の約８０%を占め、疾患が進んだ段階で診断されることがしばしばである。慣用的な化学療法では、そのような個人の予後をわずかに改善するのみであることを考えると、彼らの平均的な生存時間は、診断後１年未満である（Schiller et al.， N. Engl. J. Med. 346， 9298 （2002）；非特許文献２）。そのため、肺がんの患者に対する新しい治療は、変わらず必要とされている。Ａｃ−ＭＥＴ／ＡＬＫ キナーゼ阻害剤であるクリゾチニブは、臨床研究において、ＥＭＬ４−ＡＬＫを有する患者において有意な活性を示した。しかしながら、再発（または獲得耐性）があることもまた報告されている。したがって、ＥＭＬ４−ＡＬＫ融合を有する患者に対するアンメットニーズは未だ存在する。 
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Jemal et al.， CA Cancer J. Clin. 56， 106130 （2006）
【非特許文献２】Schiller et al.， N. Engl. J. Med. 346， 9298 （2002）
【発明の概要】
【０００５】
本発明はＥＭＬ４−ＡＬＫ＋を介する症状、例えばＥＭＬ４−ＡＬＫ＋非小細胞性肺がん（ＮＳＣＬＣ）を処置するための化合物および医薬組成物を提供する。
【０００６】
一の局面において、本発明はＥＭＬ４−ＡＬＫ＋を介する症状、例えばＥＭＬ４−ＡＬＫ＋非小細胞性肺がん、場合によってはクリゾチニブに耐性を示すものを処置する方法であって、細胞または対象に式Ｉ
【化１】
0005837095.tif 000002
［式中、
Ｒ１はハロであり、
Ｒ２はＨであるか、または、
Ｒ１およびＲ２は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１〜２個のヘテロ原子を含む５〜６員のヘテロアリールを形成しており、
Ｒ３はＳＯ２Ｒ７であり、ここで、
Ｒ７はＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ４はＣ１〜６アルコキシであり、
Ｒ５はＣ１〜６アルキルで置換されていてもよいピペリジニルであり、
Ｒ６はＣ１〜６アルキルであるか、または、
Ｒ５およびＲ６は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１〜２個のヘテロ原子を有する５〜６員のヘテロ環を形成している。］
で表される化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む方法を提供する。
【０００７】
一の態様において、式ＩのＲ１はクロロである。他の態様において、Ｒ４はイソプロポキシである。さらに他の態様において、Ｒ５およびＲ６は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、−ＣＨ２−ＮＲ８−Ｃ（Ｏ）−を形成し、ここで、
Ｒ８は水素または、Ｃ１〜６アルキルで置換されていてもよいピペリジニルである。
【０００８】
他の態様において、本発明の化合物は、以下の群
【表１−１】
0005837095.tif 000003
【表１−２】
0005837095.tif 000004
から選択される化合物であるか、またはその薬学的に許容される塩である。
【０００９】
特定の態様において、本発明の化合物は、５−クロロ−Ｎ２−（２−イソプロポキシ−５−メチル−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）−Ｎ４−［２−（プロパン−２−スルホニル）−フェニル]−ピリミジン−２，４−ジアミンまたは６−{５−クロロ−４−［２−（プロパン−２−スルホニル）−フェニルアミノ]−ピリミジン−２−イルアミノ}−５−イソプロポキシ−２−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−２，３−ジヒドロ−イソインドール−１−オンである。
【００１０】
他の局面において、本発明は、式Ｉの化合物または化合物１〜６のいずれか１つを含む医薬組成物であって、ＥＭＬ４−ＡＬＫ＋を介する症状、例えばＥＭＬ４−ＡＬＫ＋非小細胞性肺がんの処置に用いるためのものである医薬組成物を提供する。
【００１１】
さらに他の局面では、本発明は、式Ｉの化合物または化合物１〜６のいずれか１つの使用であって、ＥＭＬ４−ＡＬＫ＋を介する症状、例えばＥＭＬ４−ＡＬＫ＋非小細胞性肺がんを処置するための医薬の製造のための使用を提供する。
【００１２】
他の態様において、本発明は、ＥＭＬ４−ＡＬＫ＋を介する症状、例えばＥＭＬ４−ＡＬＫ＋非小細胞性肺がんの処置に用いるための、式Ｉの化合物、もしくは化合物１〜６のいずれかに関する。
【００１３】
任意の、上記の方法および使用において、式Ｉの化合物は、細胞または哺乳類対象、特にヒトもしくは動物対象に投与されてよい。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】１日に一度投与した場合の、マウスＮＣＩ−Ｈ２２２８ ＮＳＣＬＣモデルにおける式Ｉの化合物の抗腫瘍作用。
【図２】クリゾチニブ耐性のＮＣＩ−Ｈ２２２８腫瘍における式Ｉの化合物の抗腫瘍増殖作用。
【図３】クリゾチニブ耐性のＮＣＩ−Ｈ２２２８腫瘍における式Ｉの化合物の抗腫瘍増殖作用。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
ＡＬＫ遺伝子座における遺伝子異常は、いくつかの癌と関連があることが報告されている。染色体配列組み換えによる、棘皮動物微小管結合タンパク質様４（ＥＭＬ４）−ＡＬＫ融合は、非小細胞性肺がん（ＮＳＣＬＣ）の患者の一群で報告された（Soda et al.， Nature 448， 561−566（2007））。ＡＬＫ遺伝子の増幅、コピー数の増加、点突然変異が、神経芽細胞腫の一群において報告されている。式Ｉの化合物は、染色体配列組み換えによるＡＬＫ融合遺伝子を有するがん患者、例えばＥＭＬ４−ＡＬＫを有するＮＳＣＬＣ患者、ＡＬＫ遺伝子の増幅、コピー数の増加、点突然変異を有するがん患者、例えば神経芽細胞腫の患者、またはＡＬＫ遺伝子の遺伝子異常や、正常組織に比べ、ＡＬＫが高発現していることを特徴とするその他の腫瘍患者の処置に用い得る。
【００１６】
一の局面において、本発明は、例えばＥＭＬ４−ＡＬＫ＋非小細胞性肺がんのようなＥＭＬ４−ＡＬＫ＋を介する症状で、クリゾチニブ耐性を示しうるものを処置する方法であって、細胞または対象に式Ｉ
【化２】
0005837095.tif 000005
［式中、
Ｒ１はハロであり;
Ｒ２はＨであるか;または、
Ｒ１およびＲ２は、それらが結合している炭素原子と一緒に、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１〜２個のヘテロ原子を含む５〜６員のヘテロアリールを形成しており;
Ｒ３はＳＯ２Ｒ７であり、ここで、
Ｒ７はＣ１〜６アルキルであり;
Ｒ４はＣ１〜６アルコキシであり;
Ｒ５はＣ１〜６アルキルで置換されていてもよいピペリジニルであり;
Ｒ６はＣ１〜６アルキルであるか;または、
Ｒ５およびＲ６は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１〜２個のヘテロ原子を含む５〜６員のヘテロ環を形成する。］
で表される化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む方法を提供する。
【００１７】
ＷＯ ２００８／０７３６８  Ａ１は、式Ｉの化合物の製造を記載している。図１で示されるように、式Ｉの化合物は、マウスＮＣＩ−Ｈ２２２８ ＮＳＣＬＣモデルにおいて、一日に一回、２５mg／kgを２週間経口投与した場合、完全な腫瘍退行（Ｔ／Ｃ＝１００%）を引き起こした。図２および図３に見られるように、式Ｉの化合物は、クリゾチニブ耐性ＮＣＩ−Ｈ２２２８において、有意な抗腫瘍増殖作用を示した。化合物Ｉは、クリゾチニブから再発した患者と、クリゾチニブ未処置の患者の両方で、臨床試験で検査されている。
【００１８】
一般的に、式Ｉの化合物は、治療上有効量で、当該分野で公知である、通常の、許容できる方法のいずれかを介して、単独で、もしくは１つ以上の治療剤との組み合わせのいずれかで投与される。治療上有効量は、疾患の重症度、対象の年齢および相対的な健康度、用いる化合物の効力、ならびに当業者には公知の他の要因により、大きく変わりうる。例えば、腫瘍性疾患と免疫系障害を処置するための必要な用量もまた、投与方法、処置する特定の症状、望む効果によっても変わりうる。
【実施例】
【００１９】
実施例１  マウスＮＣＩ−Ｈ２２２８ ＮＳＣＬＣモデルにおける抗腫瘍作用
インビトロ細胞増殖。ＮＣＩ−Ｈ２２２８細胞は、the American Type Culture Collection (ATCC） (Manassa， USA） より入手し、ウイルス感染によって、安定的にルシフェラーゼを発現するように、改変した。細胞増殖アッセイのために、１０% ウシ胎児血清 (FBS) (Gibco， Carlsbad， CA) を含有するRPMI培地 (Gibco， Carlsbad， CA) ５０μL中の、２２５０個の細胞を、μ−Fill機器 (Bio−Tek) を用いて、白色３８４−ウェルプレート (Corning， Acton， MA) に播種した。プレートを組織培養インキュベーターにて３７℃で１時間インキュベートし、その後、MiniTrak機器 (Perkin−Elmer) を用いて、化合物を添加した。化合物の、１:３希釈プレートの、５０nLをアッセイプレートに添加し、それにより最終濃度が、１００００、３３３３、１１１１、３７０、１２３、４１、１４、４.６、１.５、０.５および０.１７nMになった。化合物の添加後、プレートを組織培養インキュベーターにて、３７℃で３日間インキュベートした。３日目に、プレートを個々のウェルのルシフェラーゼ活性を測定することによって、細胞増殖についてのアッセイを行った。詳しくは、BRIGHT−GLO（登録商標） (Promega， Madison， WI) またはBRITELITETM (PerkinElmer， Waltham， Massachusetts) ２５μLを各ウェルに添加した。室温で１０分間インキュベートした後、プレートをAnalyst−GTまたはEnvision plate reader (Molecular Devices， Sunnyvale， CA)のいずれかを用いて読み取った。細胞増殖をＤＭＳＯ対照の５０％に減少させるのに必要な化合物の濃度として、ＩＣ５０を補間した。
【００２０】
ＮＣＩ−Ｈ２２２８細胞由来の異種皮下移植腫瘍モデル
移植当日、ＮＣＩ−Ｈ２２２８細胞を０.０５% トリプシン／ＥＤＴＡを用いて回収し、RPMI 1640無血清培地とマトリゲル (BD Biosciences #354234， La Jolla， CA) の１:１の混合物で再懸濁した。ＳＣＩＤベージュマウスの右ひ腹に、５ｘ１０６個の細胞を皮下移植した。腫瘍の大きさが３００〜４００mm３に達すると、腫瘍を回収し、継代皮下移植のために、培地中で１〜２mm３の小片に切り分けた。腫瘍をＳＣＩＤベージュマウス内で３回継続して皮下継代した後、該腫瘍を試験移植のための腫瘍ストックとみなした。腫瘍片を、ＳＣＩＤベージュマウスへの移植のために、湿った氷上で、RPMI 1640無血清培地およびマトリゲルの１:１混合物中で維持した。ヌードマウスへの移植：２〜３片の腫瘍を、マトリゲル混合物とともに、マウスの右ひ腹に皮下移植した。移植後、腫瘍がひとたび触知可能になると、１週間に３回腫瘍の直径を測定した。
【００２１】
Ｈ２２２８腫瘍を有するＳＣＩＤベージュマウスを、無作為に、平均腫瘍体積８５±３５mm３の５つの集団（グループごとにｎ＝４匹のマウス）に分けた。試験化合物を、経口胃管栄養法により投与した。腫瘍を持つメスのＳＣＩＤベージュマウスでの該化合物への曝露を１４日目に評価した。腫瘍増殖は、%Ｔ／Ｃによって以下のように算出した：ΔＴ＞０の場合、%Ｔ／Ｃ＝（ΔＴ／ΔＣ）×１００;またはΔＴ＜０の場合、%Ｔ／Ｃ＝（ΔＴ／ΔＴＩ）×１００。処置をうけた集団（Ｔ）と対照集団（Ｃ）のそれぞれにおける、腫瘍体積の変化（Δ体積）を、最初の処置の日（ステージング日 (staging day)）の平均腫瘍体積を特定の観察日の平均腫瘍体積から差し引いて腫瘍を計測したそれぞれの日について算出した。
【００２２】
表１に見られるように、式Ｉの化合物はＮＳＣＬＣ由来の、ＥＭＬ４−ＡＬＫを持つヒト細胞株ＮＣＩ−Ｈ２２２８のin vitroでの増殖を阻害する。
【表２】
0005837095.tif 000006
【００２３】
化合物ＩをＮＣＩ−Ｈ２２２８断片腫瘍組織を皮下移植して、マウス異種移植モデルで試験した場合、図１に示されるように、化合物１は、１日に２５mg／kgを２週間経口投与すると、完全な腫瘍退行を引き起こした。該化合物によく耐性を示し、動物の体重減少は観察されなかった。
【００２４】
実施例２
クリゾチニブ耐性腫瘍における抗腫瘍作用
ＮＣＩ−Ｈ２２２８由来のマウス異種移植腫瘍を、５０mg／kgで９日間、次に７５mg／kgで９日間、その後、１００mg／kgで３３日間、クリゾチニブで連続的に処理した。あるいは、ＮＣＩ−Ｈ２２２８由来の異種移植腫瘍を、１４日間１００mg／kgのクリゾチニブで処理した後、腫瘍が再び成長するまでクリゾチニブ処理を何日か停止した。腫瘍が再度成長すると、腫瘍がクリゾチニブ処理に耐性を示すようになるまで１００mg／kgのクリゾチニブで動物を処理した。クリゾチニブに対して耐性を示すようになると、個々の動物から腫瘍を回収した。かかる耐性腫瘍のうちのいくつかを、後述するさらなる試験のために、無作為に選択した。各耐性腫瘍を、回収時に小片に切り分け、５匹の動物に移植した; 腫瘍の大きさが５匹の動物で十分に大きくなると、腫瘍を回収し、化合物試験のために２５匹の動物に移植した。回収した腫瘍の一片はまた、ＲＮＡ抽出および、それに引き続くＥＭＬ４−ＡＬＫ転写物の配列決定にも用いた。
【００２５】
図２に示すように、（５−クロロ−Ｎ２−（２−イソプロポキシ−５−メチル−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）−Ｎ４−［２−（プロパン−２−スルホニル）−フェニル]−ピリミジン−２，４−ジアミン）（化合物１）はクリゾチニブ耐性ＮＣＩ−Ｈ２２２８において有意な抗腫瘍増殖作用を示した。他のクリゾチニブ耐性ＮＣＩ−Ｈ２２２８腫瘍において、化合物１は、１００mg／kg用量のクリゾチニブよりもすぐれた活性を示した（図３）。４週間ＧＬＰ毒性試験に基づいて、マウスにおける５０mg／kg用量に相関する式Ｉの化合物への曝露は、ヒトにおけるＭＴＤでの曝露を下回ると予測される。
【００２６】
本明細書中に記載の実施例および態様は例示目的のみのものであって、それを踏まえて様々な修正や変更をすることが、当業者には示唆されており、本出願の範囲および権限ならびに付加される特許請求の範囲の一部と考えられる。本明細書中で引用される全ての出版物、特許、および特許出願は、あらゆる目的のために、引用により本明細書に包含される。
【図１】
0005837095.tif 000007
【図２】
0005837095.tif 000008
【図３】
0005837095.tif 000009