(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉａ）：
【化２０】
0005764151.tif 000025
で示される光学的に純粋な化合物の合成方法であって、
式（Ｘ）：
【化２１】
0005764151.tif 000026
で示される、ラセミ酸又は他の光学的に純粋でない酸の、
アルコールＲＯＨ［ここで、Ｒは、直鎖状又は分岐鎖状Ｃ１−Ｃ６アルキル基を表す］と有機共溶媒との混合物中、
溶媒混合物の１リットルあたり式（Ｘ）の化合物の５〜５００g/Lの濃度で、
１０／１〜１／１００のＥ／Ｓ比で、
２５℃〜４０℃の温度で、カンジダ・アンタークティカ（Candida antarctica）又はシュードモナス・フルオレッセンス（Pseudomonas fluorescens）のリパーゼを用いる、
エナンチオ選択的酵素エステル化による、合成方法。
【請求項２】
Ｅ／Ｓ比が、１／５〜１／１０である、請求項１記載の合成方法。
【請求項３】
アルコールＲＯＨがメタノールであり、そして共溶媒がアセトニトリルである、請求項１又は２記載の合成方法。
【請求項４】
アセトニトリル／メタノールの比が、８／２〜９／１である、請求項３記載の合成方法。
【請求項５】
酵素的エステル化方法中にリサイクルするために、下記：
【化２２】
0005764151.tif 000027
で示される反応の二次生成物である、配置（Ｒ）のエステルを、塩基の作用によって加水分解して、式（Ｘ）のラセミ酸を形成する、請求項１〜４のいずれか一項記載の合成方法。
【請求項６】
塩基がＫＯＨである、請求項５記載の合成方法。
【請求項７】
加水分解／ラセミ化工程が、インサイチューで実施される、請求項５又は６記載の合成方法。
【請求項８】
式（Ｉａ）の酸が、酵素的エステル化の１回以上のサイクルの後で単離される、請求項１〜７のいずれか一項記載の合成方法。
【請求項９】
式（Ｉｂ）：
【化２３】
0005764151.tif 000028
［式中、Ｒは、直鎖状又は分岐鎖状Ｃ１−Ｃ６アルキル基を表す］で示される光学的に純粋な化合物の合成方法であって、
式（ＸＩ）：
【化２４】
0005764151.tif 000029
［式中、Ｒは、直鎖状又は分岐鎖状Ｃ１−Ｃ６アルキル基を表す］で示される、ラセミエステル又は他の光学的に純粋でないエステルの、
水中、ｐＨ＝５〜８の緩衝液中、又は有機溶媒と水もしくはｐＨ＝５〜８の緩衝液との混合物中、
溶媒又は溶媒混合物の１リットルあたり式（ＸＩ）の化合物の１〜２００g/Lの濃度で、
１０／１〜１／１００のＥ／Ｓ比で、
２５℃〜４０℃の温度で、カンジダ・アンタークティカ（Candida antarctica）又はシュードモナス・フルオレッセンス（Pseudomonas fluorescens）のリパーゼを用いる、
エナンチオ選択的酵素加水分解により、そして
続く、式（Ｉｂ）のエステルの単離による、合成方法。
【請求項１０】
Ｅ／Ｓ比が、１／５〜１／１０である、請求項９記載の合成方法。
【請求項１１】
Ｒが、メチル基である、請求項９又は１０記載の合成方法。
【請求項１２】
反応が、アセトニトリルとｐＨ＝７の緩衝液との混合物中で実施される、請求項９又は１０記載の合成方法。
【請求項１３】
アセトニトリル／緩衝液（ｐＨ＝７）の比率が、８／２〜９／１である、請求項１２記載の合成方法。
【請求項１４】
酵素加水分解方法中にリサイクルするために、下記：
【化２５】
0005764151.tif 000030
で示される反応の二次生成物である、配置（Ｒ）の酸を、
塩基の作用によりラセミ化し、そして次にそれにより得たラセミ酸をアルキル化して、式（ＸＩ）のラセミエステルを形成する、請求項９〜１３のいずれか一項記載の合成方法。
【請求項１５】
配置（Ｒ）の酸を、高温状態でのＫＯＨの作用によりラセミ化する、請求項１４記載の合成方法。
【請求項１６】
酵素加水分解方法中にリサイクルするために、下記：
【化２６】
0005764151.tif 000031
で示される反応の二次生成物である、配置（Ｒ）の酸を、
最初にアルキル化し、そして次にそれにより得た配置（Ｒ）のエステルを塩基の作用によりラセミ化する、請求項９〜１５のいずれか一項記載の合成方法。
【請求項１７】
配置（Ｒ）のエステルを、高温状態でのＤＢＵの作用によるか、又は周囲温度でのＫＯＨの作用により、ラセミ化する、請求項１６記載の合成方法。
【請求項１８】
式（ＩＩＩ）：
【化２７】
0005764151.tif 000032
で示される化合物の合成方法であって、式（ＩＶ）：
【化２８】
0005764151.tif 000033
で示されるニトリルから出発し、これを加水分解して、式（Ｘ）：
【化２９】
0005764151.tif 000034
で示されるラセミ酸を形成し、
これの請求項１〜８のいずれか一項による酵素的エステル化により、式（Ｉａ）：
【化３０】
0005764151.tif 000035
で示される光学的に純粋な酸を生成し、次にこれを、式（ＸＩＩ）：
【化３１】
0005764151.tif 000036
で示される光学的に純粋なアミドに変換し、これの還元により、式（ＩＩＩ）で示される化合物を得る、合成方法。
【請求項１９】
式（ＩＩＩ）：
【化３２】
0005764151.tif 000037
で示される化合物の合成方法であって、式（ＩＶ）：
【化３３】
0005764151.tif 000038
で示されるニトリルから出発し、これを加水分解して、式（Ｘ）：
【化３４】
0005764151.tif 000039
で示されるラセミ酸を形成し、そして次にアルキル化して、式（ＸＩ）：
【化３５】
0005764151.tif 000040
［式中、Ｒは、直鎖状又は分岐鎖状Ｃ１−Ｃ６アルキル基を表す］で示されるラセミエステルを形成し、
これの請求項９〜１７のいずれか一項による酵素加水分解により、式（Ｉｂ）：
【化３６】
0005764151.tif 000041
［式中、Ｒは、直鎖状又は分岐鎖状Ｃ１−Ｃ６アルキル基を表す］で示される光学的に純粋なエステルを生成し、これを、式（ＸＩＩ）：
【化３７】
0005764151.tif 000042
で示される光学的に純粋なアミドに変換し、これの還元により、式（ＩＩＩ）で示される化合物を得る、合成方法。
【請求項２０】
式（ＩＩＩ）の化合物を形成するための式（ＸＩＩ）の化合物の還元を、ＢＨ３、ＮａＢＨ４又はＬｉＡｌＨ４により実施する、請求項１８又は１９記載の合成方法。
【請求項２１】
式（ＩＩＩ）の化合物をその次に、
式（ＸＩＩＩ）：
【化３８】
0005764151.tif 000043
［式中、Ｘは、ハロゲン原子を表す］で示される化合物とカップリングするか、或いは、
式（ＸＩＶ）：
【化３９】
0005764151.tif 000044
［式中、Ｒ２は、ＣＨＯ及びＣＨＲ３Ｒ４より選択される基を表し、ここで、Ｒ３及びＲ４は、各々、直鎖状もしく分岐鎖状（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基を表すか、又はそれらを担持する炭素原子と一緒になって、１，３−ジオキサン、１，３−ジオキソランもしくは１，３−ジオキセパン環を形成する］で示される化合物と、還元剤の存在下、還元的アミノ化反応に供するかのいずれかにより、
イバブラジンを生成し、次にこれを薬学的に許容しうる酸との付加塩（該塩は、無水又は水和物の形態である）に変換する、
請求項１８〜請求項２０のいずれか一項に記載の合成方法。
【請求項２２】
Ｘがヨウ素原子である、請求項２１記載の合成方法。
【請求項２３】
式（ＩＩＩ）の化合物を、還元的アミノ化反応において、その塩酸塩の形態で使用して、イバブラジンを塩酸塩の形態で得る、請求項２１記載の合成方法。
【請求項２４】
式（ＸＩＶ）の化合物との還元的アミノ化反応を、パラジウム担持炭素によって触媒される二水素の存在下で実施する、請求項２１又は２３記載の合成方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、式（Ｉ）：
【化１】
0005764151.tif 000002
［式中、Ｒ１は、水素原子又はＣ１−Ｃ６アルキル基、好ましくはメチルを表す］で示される化合物の酵素的合成の方法に関し、そしてまた、式（ＩＩ）：
【化２】
0005764151.tif 000003
で示されるイバブラジン、すなわち３−｛３−［｛［（７Ｓ）−３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−イル］メチル｝（メチル）アミノ］−プロピル｝−７，８−ジメトキシ−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン、薬学的に許容しうる酸とのその付加塩及びそれらの水和物の合成におけるその適用に関する。
【０００２】
イバブラジン、及び薬学的に許容しうる酸とのその付加塩、ならびにより特別にはその塩酸塩は、非常に有益な薬理学的及び治療的特性、特に徐脈特性を有しており、これらの特性により、それらの化合物は、狭心症、心筋梗塞及び関連する律動障害のような心筋虚血の種々の臨床症状の治療又は予防において、ならびに律動障害、特に上室性律動障害が関与する種々の病理学において、及び心不全において有用となっている。
【０００３】
イバブラジン及び薬学的に許容しうる酸とのその付加塩、ならびにより特別にはその塩酸塩の調製及び治療的使用は、欧州特許明細書 EP 0 534 859に記載されている。
【０００４】
前記特許明細書は、式（ＩＩＩ）：
【化３】
0005764151.tif 000004
で示される化合物、すなわち（７Ｓ）−１−（３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−イル）Ｎ−メチルメタンアミンから出発する、イバブラジン塩酸塩の合成について記載している。
【０００５】
式（ＩＩＩ）の化合物は、イバブラジン及びその薬学的に許容しうる塩の合成において重要な中間体である。
【０００６】
従来技術は、式（ＩＩＩ）の化合物を得るための幾つかの方法を開示している。
【０００７】
特許明細書 EP 0 534 859は、式（ＩＩＩ）の化合物の合成であって、
式（ＩＶ）：
【化４】
0005764151.tif 000005
で示されるラセミニトリルのテトラヒドロフラン中のＢＨ３による還元、
続く、塩酸の付加により、式（Ｖ）：
【化５】
0005764151.tif 000006
で示されるラセミアミンの塩酸塩を生成し、
これを、クロロギ酸エチルと反応させて、式（ＶＩ）：
【化６】
0005764151.tif 000007
で示されるカルバメートを生成し、
これのＬｉＡｌＨ４による還元により、式（ＶＩＩ）：
【化７】
0005764151.tif 000008
で示されるラセミメチル化アミンを生成し、
これのカンファースルホン酸を使用する分割により、式（ＩＩＩ）の化合物を得る、
式（ＩＩＩ）の化合物の合成について記載している。
【０００８】
この方法は、式（ＩＶ）のラセミニトリルから出発して、式（ＩＩＩ）の化合物を２〜３％のわずかな低収率でしか得られない欠点を有している。この非常な低収率は、式（ＶＩＩ）の第二級アミンの分割工程の低収率（４〜５％）が原因である。
【０００９】
特許明細書 EP 1 598 333は、式（ＩＩＩ）の化合物を得ることであって、
式（Ｖ）のラセミ第一級アミンを、式（ＶＩＩＩ）：
【化８】
0005764151.tif 000009
で示される光学的に活性なアミンに、
Ｎ−アセチル−Ｌ−グルタミン酸を使用する分割により、
続く、上記と同じ反応順序（カルバメートへの変換、続く還元）を使用するメチル化により、式（ＩＩＩ）の化合物を得ることについて記載している。分割工程の収率は、３９％である。
【００１０】
特許明細書 EP 2 166 004は、式（ＩＩＩ）の化合物を得ることであって、
キラルクロマトグラフィーでの式（ＩＶ）のラセミニトリルの光学分割により、式（ＩＸ）：
【化９】
0005764151.tif 000010
で示される光学的に純粋なニトリルを生成し、
これをＮａＢＨ４で還元して、式（ＶＩＩＩ）の第一級アミンを生成して、次にこれを、上記と同じ反応順序（カルバメートへの変換、続く還元）を使用するメチル化により、式（ＩＩＩ）の化合物を得ることについて記載している。分割工程の収率は、４５％である。
【００１１】
本発明の課題は、特に良好な収率を、より特別には分割工程のために有する、効果的な方法を使用し、式（ＩＩＩ）の化合物を得ることであった。
【００１２】
キラル分子を得ることを可能にする生体触媒の使用は、従来の有機合成に代わるものとしてますます有益なものになってきたようである。実際、化学−、位置−及び立体−選択性のような固有の自然特性を有する酵素の使用は、環境を尊重するグリーンケミストリー（環境に優しい化学）における試薬として酵素が使用されることを可能にしている。
【００１３】
本明細書に記載される事例において、リパーゼ（酵素の国際分類番号：EC 3.1.1.3）又はエステラーゼ（EC 3.1.1.1）のように補助因子なしで機能する加水分解酵素（ヒドロラーゼ）の使用は、キラル化合物（薬学的活性成分の合成における重要な中間体）を高い鏡像体過剰率及び良好な収率で得ることを可能にする。
【００１４】
より具体的には、本発明は、式（Ｉａ）：
【化１０】
0005764151.tif 000011
で示される光学的に純粋な化合物の合成方法であって、
式（Ｘ）：
【化１１】
0005764151.tif 000012
で示される、ラセミ酸又は他の光学的に純粋でない酸の、
アルコールＲＯＨ［ここで、Ｒは、直鎖状又は分岐鎖状Ｃ１−Ｃ６アルキル基を表す］と有機共溶媒との混合物中、
５〜５００g/L、好ましくは溶媒混合物の１リットルあたり式（Ｘ）の化合物の１００ｇ〜２００ｇの濃度で、
１０／１〜１／１００、好ましくは１／５〜１／１０のＥ／Ｓ比で、
２５℃〜４０℃の温度で、リパーゼ又はエステラーゼを用いる、
エナンチオ選択的酵素エステル化による、合成方法に関する。
【００１５】
本発明による酵素的エステル化方法において使用し得るリパーゼ及びエステラーゼには、いかなる限定もするわけではないが、カンジダ・アンタークティカ（Candida antarctica）、シュードモナス・フルオレッセンス（Pseudomonas fluorescens）、シュードモナス・セパシア（Pseudomonas cepacia）、リゾプス・オリゼ（Rhizopus oryzae）、アスペルギルス・ニガー（Aspergillus niger）、ムコ−ル・ジャバニカス（Mucor javanicus）、アスペルギルス・オリザエ（Aspergillus oryzae）及びペニシリウム・カメンベルティ（Penicillium camemberti）のリパーゼ、及びリゾプス・オリゼ（Rhizopus oryzae）、ムコ−ル・ミエヘイ（Mucor miehei）及びリゾプス・ニヴェウス（Rhizopus niveus）のエステラーゼを挙げることができる。
【００１６】
本発明による好ましいリパーゼは、カンジダ・アンタークティカのリパーゼ及びシュードモナス・フルオレッセンスのリパーゼである。
【００１７】
カンジダ・アンタークティカのリパーゼには、例として、ポリマー・マトリクス、特にアクリル樹脂に固定化したリパーゼ、例えばNovozym（登録商標）435（Novozymes社製）又はSPRIN adsorbed CALB（登録商標）（Sprin Technologies社製）；又はポリスチレン樹脂に固定化したリパーゼ、例えばSPRIN actiplus CALB（登録商標）、SPRIN acti CALB（登録商標）又はSPRIN lipo CALB（登録商標）（Sprin Technologies社製）；或いは、アクリルエポキシ樹脂に固定化したリパーゼ、例えばSPRIN epobond CALB（登録商標）（Sprin Technologies社製）を挙げることができる。
【００１８】
アルコールＲＯＨは、好ましくはメタノール又はエタノールである。共溶媒は、好ましくはアセトニトリル、トルエン、ＭＴＢＥまたはｎ-ヘプタンである。好ましい共溶媒／ルコールの比は、８／２〜９／１である。本発明による酵素的エステル化スキームは、下記のとおりである：
【化１２】
0005764151.tif 000013
【００１９】
有利には、反応の二次生成物である、配置（Ｒ）のエステルは、酵素的エステル化方法中にリサイクルするために、塩基、好ましくはＫＯＨ、ＤＢＵ、トリエチルアミン、ＤＡＢＣＯ、ＴＢＤ、ナトリウムエトキシド、ナトリウムメトキシド又はＫ２ＣＯ３の作用によって加水分解して、式（Ｘ）のラセミ酸を形成することができる。加水分解／ラセミ化工程をインサイチューで実施する場合、本発明による方法は、動的速度論的分割（ＤＫＲ）方法であり、これにより、式（Ｉａ）のＳ酸をｅｅ≧９８％及び収率≧６５％で得ることを可能にする。
【００２０】
式（Ｉａ）の酸は、好ましくは、酵素的エステル化の１回以上のサイクルの後で反応混合物から単離する。
【００２１】
本発明の別の態様は、式（Ｉｂ）：
【化１３】
0005764151.tif 000014
［式中、Ｒは、直鎖状又は分岐鎖状Ｃ１−Ｃ６アルキル基、好ましくはメチル又はエチルを表す］で示される光学的に純粋な化合物の合成方法であって、
式（ＸＩ）：
【化１４】
0005764151.tif 000015
［式中、Ｒは、直鎖状又は分岐鎖状Ｃ１−Ｃ６アルキル基を表す］で示される、ラセミエステル又は他の光学的に純粋でないエステルの、
水中、ｐＨ＝５〜８の緩衝液中、又は有機溶媒と水もしくはｐＨ５〜８の緩衝液との混合物中、
１〜２００g/L、好ましくは溶媒又は溶媒混合物の１リットルあたり式（ＸＩ）の化合物約１００ｇの濃度で、
１０／１〜１／１００、好ましくは１／５〜１／１０のＥ／Ｓ比で、
２５℃〜４０℃の温度で、リパーゼ又はエステラーゼを用いる、
エナンチオ選択的酵素加水分解により、そして
続く、式（Ｉｂ）のエステルの単離による、合成方法に関する。
【００２２】
本発明による酵素加水分解方法において使用し得るリパーゼ及びエステラーゼには、いかなる限定もするわけではないが、カンジダ・アンタークティカ（Candida antarctica）、シュードモナス・フルオレッセンス（Pseudomonas fluorescens）、シュードモナス・セパシア（Pseudomonas cepacia）、リゾプス・オリゼ（Rhizopus oryzae）、アスペルギルス・ニガー（Aspergillus niger）、ムコ−ル・ジャバニカス（Mucor javanicus）、アスペルギルス・オリザエ（Aspergillus oryzae）及びペニシリウム・カメンベルティ（Penicillium camemberti）のリパーゼ、及びリゾプス・オリゼ（Rhizopus oryzae）、ムコ−ル・ミエヘイ（Mucor miehei）及びリゾプス・ニヴェウス（Rhizopus niveus）のエステラーゼを挙げることができる。
【００２３】
本発明のこの態様による好ましいリパーゼは、カンジダ・アンタークティカのリパーゼ及びシュードモナス・フルオレッセンスのリパーゼである。
【００２４】
カンジダ・アンタークティカのリパーゼには、例として、ポリマー・マトリクス、特にアクリル樹脂に固定化したリパーゼ、例えばNovozym（登録商標）435（Novozymes社製）又はSPRIN adsorbed CALB（登録商標）（Sprin Technologies社製）；又はポリスチレン樹脂に固定化したリパーゼ、例えばSPRIN actiplus CALB（登録商標）、SPRIN acti CALB（登録商標）又はSPRIN lipo CALB（登録商標）（Sprin Technologies社製）；或いは、アクリルエポキシ樹脂に固定化したリパーゼ、例えばSPRIN epobond CALB（登録商標）（Sprin Technologies社製）を挙げることができる。
【００２５】
反応が有機溶媒の存在下で実施される場合、後者は、好ましくはアセトニトリル、トルエン、ＭＴＢＥ又はｎ−ヘプタンである。好ましい有機溶媒／水又は緩衝液の比率の範囲は、８／２〜９／１である。
【００２６】
本発明による酵素加水分解スキームは、下記のとおりである：
【化１５】
0005764151.tif 000016
【００２７】
有利には、反応の二次生成物である、配置（Ｒ）の酸は、酵素加水分解方法中にリサイクルするために、塩基の作用により、好ましくは高温状態でＫＯＨの作用により、ラセミ化することができ、そして次にそれにより得たラセミ酸をアルキル化して、式（ＸＩ）のラセミエステルを形成することができる。
或いは、反応の二次生成物である、配置（Ｒ）の酸は、酵素加水分解方法中にリサイクルするために、最初にアルキル化することができ、そして次にそれにより得た配置（Ｒ）のエステルを、塩基の作用により、好ましくはＤＢＵ、ＫＯＨ、トリエチルアミン、ＤＡＢＣＯ、ＴＢＤ、ナトリウムエトキシド、ナトリウムメトキシド又はＫ２ＣＯ３の作用により、ラセミ化することができる。
【００２８】
ラセミ化を高温状態で実施する場合、温度は、好ましくは５０〜８０℃である。
【００２９】
定義
光学的に純粋な化合物とは、９０％より大きい又は等しい鏡像体過剰率を有する化合物であると理解される。
【００３０】
光学的に純粋ではない酸又はエステルは、９０％未満の鏡像体過剰率を有する酸又はエステルであると理解される。
【００３１】
ラセミ酸又はラセミエステルは、５５：４５〜４５：５５の比率の２つの鏡像異性体の混合物の形態の酸又はエステルであると理解される。
【００３２】
ラセミ酸、又は他の光学的に純粋でない酸のエナンチオ選択的エステル化は、混合物の鏡像異性体のうちの１つの優先的エステル化であると理解される。
【００３３】
ラセミエステル、又は他の光学的に純粋でないエステルのエナンチオ選択的加水分解は、混合物の鏡像異性体のうちの１つの優先的加水分解であると理解される。
【００３４】
本発明の別の態様は、式（ＩＩＩ）の化合物の合成方法であって、式（ＩＶ）のニトリルから出発し、これを加水分解して、式（Ｘ）のラセミ酸を形成し、本発明によるこれの酵素的エステル化により、式（Ｉａ）の光学的に純粋な酸を生成し、次にこれを、式（ＸＩＩ）：
【化１６】
0005764151.tif 000017
で示される光学的に純粋なアミドに変換し、これの、好ましくはＢＨ３、ＮａＢＨ４又はＬｉＡｌＨ４による還元により、式（ＩＩＩ）の化合物を得る、合成方法に関する。
【００３５】
本発明の別の態様は、式（ＩＩＩ）の化合物の合成方法であって、式（ＩＶ）のニトリルから出発し、これを加水分解して、式（Ｘ）のラセミ酸を形成し、そして次にアルキル化して、式（ＸＩ）のラセミエステルを形成し、本発明によるこれの酵素加水分解により、式（Ｉｂ）の光学的に純粋なエステルを生成し、これを、式（ＸＩＩ）：
【化１７】
0005764151.tif 000018
で示される光学的に純粋なアミドに変換し、これの、好ましくはＢＨ３、ＮａＢＨ４又はＬｉＡｌＨ４による還元により、式（ＩＩＩ）の化合物を得る、合成方法に関する。
【００３６】
式（ＩＩＩ）の化合物をその次に、
式（ＸＩＩＩ）：
【化１８】
0005764151.tif 000019
［式中、Ｘは、ハロゲン原子、好ましくはヨウ素原子を表す］で示される化合物とカップリングするか、或いは、
式（ＸＩＶ）：
【化１９】
0005764151.tif 000020
［式中、Ｒ２は、ＣＨＯ及びＣＨＲ３Ｒ４より選択される基を表し、ここで、Ｒ３及びＲ４は、各々、直鎖状もしく分岐鎖状（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基を表すか、又はそれらを担持する炭素原子と一緒になって、１，３−ジオキサン、１，３−ジオキソランもしくは１，３−ジオキセパン環を形成する］で示される化合物と、還元剤の存在下、還元的アミノ化反応に供するかのいずれかにより、
イバブラジンを生成し、次にこれを薬学的に許容しうる酸との付加塩（該塩は、無水又は水和物の形態である）に変換する。
【００３７】
式（ＩＩＩ）の化合物はまた、還元的アミノ化反応において、薬学的に許容しうる酸とのその付加塩、好ましくはその塩酸塩の形態で使用し得る。その場合、イバブラジンは、塩酸塩の形態で直接得る。
【００３８】
薬学的に許容しうる酸としては、いかなる限定もするわけではないが、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、乳酸、ピルビン酸、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、フマル酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、アスコルビン酸、シュウ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸及びカンファー酸を挙げることができる。
【００３９】
式（ＩＩＩ）の化合物と式（ＸＩＶ）の化合物との間の還元的アミノ化反応に使用し得る還元剤には、いかなる限定もするわけではないが、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムもしくはシアノ水素化ホウ素ナトリウムのような水素化ドナー化合物、及び特に担体形態又は酸化物形態の、パラジウム、白金、ニッケル、ルテニウム、ロジウム又はその化合物のような触媒の存在下での二水素を挙げることができる。式（ＩＩＩ）の化合物と式（ＸＩＶ）の化合物との還元的アミノ化反応に好ましい還元剤は、パラジウム担持炭素によって触媒される二水素である。
【００４０】
本明細書に下記の実施例は本発明を例証する。
【００４１】
略語
ＴＦＡ              トリフルオロ酢酸
ＴＬＣ              薄層クロマトグラフィー
ＤＡＢＣＯ          １，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン
ＤＢＵ              ジアザビシクロウンデセン
ＤＫＲ              動的速度論的分割
Ｅ                  エナンチオ選択的係数
ｅｅ                鏡像体過剰率
ｅｑ                モル当量
ＨＰＬＣ            高速液体クロマトグラフィー
ＭｅＯＨ            メタノール
ＭＴＢＥ            メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル
ｏｐ                光学純度又はエナンチオマー純度
Ｅ／Ｓ比            酵素／基質の比（g/g）
ＮＭＲ              核磁気共鳴（分光分析）
ＭＳ                質量分析
ＴＢＤ              １，５，７−トリアザビシクロ［４．４．０］デカ−５−エン
ＴＨＦ              テトラヒドロフラン
ＴＭＳ              テトラメチルシラン
【実施例】
【００４２】
実施例１：  ３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボン酸
３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボニトリル（１１ｇ、５８．１mmol）を、１N 水酸化ナトリウム溶液（７０mL）に懸濁し、反応混合物を２時間還流（１１０℃）した。周囲温度に戻し、次に濃塩酸を用いて混合物を酸性化した。沈殿が観察された。生成物をジクロロメタン２００mLに溶解し、次に水相を抽出した。ＭｇＳＯ４で乾燥させ、蒸発させて、標記生成物（１１．６ｇ）を収率９５．９％で得た。
【００４３】
実施例２：  （７Ｓ）−３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボン酸
実施例１で得たラセミ酸０．５ｇ（ｃ（濃度）＝２００g/L）を、アセトニトリル／メタノールの８／２の混合物２．５mLに溶解した。次にカンジダ・アンタークティカのリパーゼ NOVOZYM 435（登録商標）（Novozymes Denmark）０．１ｇ（ｃ＝４０g/L）を混合物（Ｅ／Ｓ比  １／５）に加えた。反応混合物を３０℃で、２２０rpmで回転撹拌しながら４８時間保持した。エステル及び酸の両方の鏡像体過剰率を測定できる条件下で、反応をキラル相ＨＰＬＣによりモニタリングした：
Chiralpak(登録商標) IC 250*4.6 カラム
３０％無水エタノール＋０．１％ＴＦＡ＋７０％ヘプタン＋０．１％ＴＦＡ
１mL/分、２５℃、２８８nm
【００４４】
【表１】
0005764151.tif 000021
【図面の簡単な説明】
【００４５】
【図１】ラセミ化合物のキラル相ＨＰＬＣクロマトグラムを示す。
【図２】４８時間後の生成物のキラル相ＨＰＬＣクロマトグラムを示す。
【００４６】
４８時間後、５０／５０に近い酸／エステルの最適な比率で光学的に純粋なエステル及び酸の存在が確認された。反応混合物を濾過し、酵素をメタノール５mLで洗浄し、次に濾液を減圧下で蒸発させた。光学的に純粋なＳ酸及びＲエステルを、シリカカラムのクロマトグラフィー（溶離剤：ジクロロメタン／メタノール ９８／１）により分離した。
（Ｓ）酸：０．２２ｇ（４４％）；光学純度＞９６％；５８９nmで［α］２０Ｄ：＋５７．１°（ＭｅＯＨ中５mg/mL）
（Ｒ）エステル：０．２４ｇ；光学純度＞９６％；５８９nmで［α］２０Ｄ：−６２．７°（ＭｅＯＨ中５mg/mL）
総収率（Ｓ＋Ｒ）：９２％。
【００４７】
実施例３：  ３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボン酸メチル
イソプロパノール（２．５mL）に（７Ｒ）−３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボン酸メチル（４４５mg）（ｅｅ＞９６％）を懸濁し、ジアザビシクロウンデセン（５８μL、１．５当量）を加えた。反応混合物を６５℃で２時間加熱した。エステルの反応の２時間の終わりに、ラセミ化の完了が観察された。
分析条件：
Chiralpak(登録商標)IC 250*4.6 カラム
３０％無水エタノール＋０．１％ＴＦＡ＋７０％ヘプタン＋０．１％ＴＦＡ
１mL/分、２５℃、２８８nm
【００４８】
実施例４：  ３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボン酸
（７Ｒ）−３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボン酸メチル（５０mg）（ｅｅ＞９６％）をメタノール（１mL）に懸濁し、水酸化カリウム（５６．１）（２５mg、２当量）を加えた。反応混合物を６５℃で６時間加熱した。ラセミ酸へのエステルの加水分解が観察された。
分析条件：
Chiralpak(登録商標)IC 250*4.6 カラム
３０％無水エタノール＋０．１％ＴＦＡ＋７０％ヘプタン＋０．１％ＴＦＡ
１mL/分、２５℃、２８８nm
【００４９】
実施例５：  （７Ｓ）−３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボン酸
ラセミ ３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボン酸２ｇ（ｃ＝２００g/L）を、アセトニトリル／メタノールの混合物（９／１）２０mLに溶解した。次にカンジダ・アンタークティカのリパーゼ SPRIN actiplus CALB（登録商標）（Sprin Technologies）０．４ｇ（ｃ＝２０g/L）を混合物に加えた。反応混合物を、２２０rpmで２４時間、回転撹拌しながら３０℃で保持した。酵素を濾別し、次にメタノールで洗浄した。次にＫＯＨ（２当量）０．５ｇを混合物（濾液）に加え、撹拌を３０℃で６時間保持した。次に混合物を減圧下で蒸発させた。これにより、Ｓ酸をラセミ化することなく、Ｒエステルのラセミ化及び加水分解を完了することができた。残留物を酢酸エチルに取り、次に１０％クエン酸溶液で洗浄した。酢酸エチルでの抽出が十分ではなかったので、水溶性酸をブタン−１−オール溶液で再抽出した。抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させて、蒸発の後、７５：２５（Ｓ：Ｒ）の比率を有する酸１．９ｇを得た。この鏡像異性体富化酸を、リパーゼ０．２ｇの存在下、第２酵素反応で使用した。３０℃で２４時間後、酵素を濾別し、次にメタノールで洗浄した。蒸発後、残留物をシリカカラムのクロマトグラフィー（溶離剤：ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ ９９／１〜９９／２）に付して、以下の生成物を得た：
（Ｓ）酸：１．３３ｇ；ｏｐ＞９６％；酸の収率（理論的７５％）：６７％
（Ｒ）エステル：０．４２ｇ；ｏｐ＞９６％；エステルの収率（理論的２５％）：２１％
反応の総収率は、約８８％であった。
【００５０】
酸のＮＭＲ及びＭＳの特徴付け
1H NMR (DMSO-d6, ppm / TMS): 3.17 (dd; 1H; 13.6Hz; 2.4Hz); 3.27 (dd; 1H; 13.6Hz; 5.3Hz); 4.13 (dd; 1H); 3.71 (s;3H); 6.78 (s; 1H); 6.80 (s; 1H); 12.40 (s; 1H).
MS(EI+)分子イオンM+、m/z 208
【００５１】
エステルのＮＭＲ及びＭＳの特徴付け
1H NMR (DMSO-d6, ppm / TMS) = 3.19 (dd; 1H; 13.6Hz; 2.4 Hz); 3.33 (dd; 1H; 13.6Hz; 5.5Hz); 3.65 (s; 3H); 3.71 (s; 6H); 4.23 (dd; 1H); 6.79 (s; 1H); 6.82 (s;1H).
MS(EI+)分子イオンM+、m/z 222
【００５２】
反応の進行を、エステル及び酸の両方の鏡像体過剰率が測定できる条件下で、キラル相ＨＰＬＣによりモニタリングした：
Chiralpak(登録商標)IC 250*4.6 カラム
３０％無水エタノール＋０．１％ＴＦＡ＋７０％ヘプタン＋０．１％ＴＦＡ
１mL/分、２５℃、２８８nm
【００５３】
実施例６：  ３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボン酸メチル
メタノールに３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボン酸（３ｇ、１４．４mmol）を溶解し、アセチルクロリド（１．６５ｇ、２１．１mmol）を加えた。反応混合物を２時間還流した。ＴＬＣ（溶離剤：ジクロロメタン）による分析は、ラセミ酸の出発物質の非存在を示した。反応混合物を蒸発させ、残留物を酢酸エチルに取り、有機相をＮａＨＣＯ３で洗浄した。蒸発乾固して、標記生成物を収率９７％で得た。
【００５４】
実施例７：  （７Ｓ）−３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボン酸メチル
ラセミ３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボン酸メチル２ｇ（ｃ＝１００g/L）を、アセトニトリル／緩衝液（ｐＨ＝７）の８０／２０の混合物２０mLに溶解した。次にカンジダ・アンタークティカのリパーゼNOVOZYM 435（登録商標）（Novozymes Denmark）０．４ｇ（ｃ＝２０g/L）を、混合物（Ｅ／Ｓ比  １／５）に加えた。反応混合物を、２３０rpmで回転撹拌しながら３０℃に保持した。４時間の反応（ｐＨ＝５．８）の後、ｐＨを７．２に調整した。２４時間後、酵素を濾別し、メタノール中で撹拌により洗浄した。すべての濾液を回収し、蒸発させ、凍結乾燥させた。凍結乾燥物を酢酸エチルに取り、撹拌を一晩保持し、次に反応混合物を濾過し、濾液を蒸発させた。残留物をシリカカラム（溶離剤：ジクロロメタン／メタノール）で精製して、標記生成物（７Ｓ）のエステル０．８１ｇを、すなわち収率４１％で得た。
５８９nmで［α］２０Ｄ：＋６４．７°（ＭｅＯＨ中５mg/mL）
【００５５】
酸を含有している画分を酢酸エチルに取って、（７Ｒ）酸０．７２ｇを、すなわち収率３６％で得た。
５８９nmで［α］２０Ｄ：−５８．８°（ＭｅＯＨ中５mg/mL）
【００５６】
実施例８：  （７Ｓ）−３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボン酸メチル
ラセミ３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボン酸メチル（１mg；ｃ＝１g/L）を、リン酸緩衝液（ｐＨ＝７）／トルエンの９０／１０の混合物１mLに溶解した。次にシュードモナス・フルオレッセンスのリパーゼ５mg（ｃ＝５g/L）を、混合物（Ｅ／Ｓ比  ５／１）に加えた。反応混合物を２２０rpmで４８時間、回転撹拌しながら２８℃に保持した。反応混合物を逆相ＨＰＬＣにより分析し、残留エステルのエナンチオ選択性（ｅｅ）を、下記の方法に従ってキラル相ＨＰＬＣによりモニタリングした。
【００５７】
逆相ＨＰＬＣによる反応混合物の分析条件：
Kinetex(登録商標) 2.6μm C18 50*2.1、４０℃、０．６mL/分
５分間かけて１００％Ａ→１００％Ｂ。
Ａ（１０００ 水＋２５ ＡＣＮ＋１ ＴＦＡ）
Ｂ（１０００ ＡＣＮ＋２５ 水＋１ ＴＦＡ）
【００５８】
キラル相ＨＰＬＣによるエナンチオ選択性の分析条件：
Chiralpak(登録商標)IC 250*4.6 カラム
１００％無水エタノール
１mL/分、２５℃、２８８nm
【表２】
0005764151.tif 000022
反応混合物の分析は、良好な加水分解活性を示した（残留エステルのパーセンテージ：２５％）。
エナンチオ選択性の分析は、エステル（７Ｓ）に対して９０％のｅｅを示した。
【００５９】
実施例９：  ３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボン酸
（７Ｒ）−３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボン酸（５０mg、ｅｅ＞９５％）を、メタノール（１mL）に懸濁し、水酸化カリウム（２０mg）を加えた。反応混合物を６５℃で２４時間加熱した。酸のラセミ化の完了が観察された。
分析条件：
Chiralpak(登録商標)IC 250*4.6 カラム
３０％無水エタノール＋０．１％ＴＦＡ＋７０％ヘプタン＋０．１％ＴＦＡ
１mL/分、２５℃、２８８nm
【００６０】
実施例１０：  （７Ｓ）−３，４−ジメトキシ−Ｎ−メチルビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボキサミド
実施例５で得た（７Ｓ）−３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボン酸（３００mg）を、ＴＨＦ（３mL）に周囲温度で懸濁し、次にトリエチルアミン（２００μL）を加えた。クロロギ酸エチル（１５０μL）を混合物にゆっくりと加えた。反応混合物が沈殿した（混合物Ｉ）。別のフラスコ中で、メチルアミン（ＴＨＦ中の２M 溶液（２．２５mL）として）を水（１mL）及びトリエチルアミン（３００μL）と一緒に撹拌した。撹拌を２０分間保持し、得られた混合物を次に混合物Ｉに加え、周囲温度で一晩撹拌した。次に反応混合物を蒸発させ、分取ＨＰＬＣにより精製した。（７Ｓ）−３，４−ジメトキシ−Ｎ−メチルビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボキサミドを、収率６０％で得た。
1H NMR (DMSO-d6, ppm / TMS) = 2.61 (m; 3H); 3.16 (m; 2H); 3.71 (s; 6H); 4.05 (m; 1H); 6.78 (s; 1H); 6.81 (s; 1H); 7.78 (s; 1H).
【００６１】
実施例１１：  （７Ｓ）−３，４−ジメトキシ−Ｎ−メチルビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボキサミド
（７Ｓ）−３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボン酸メチル（５００mg）を水に懸濁し、次に無水エタノール中の３３％メチルアミン溶液２０mLを周囲温度でゆっくり加えた。３時間の撹拌の後、反応混合物を蒸発させた。得られた残留物を分取ＨＰＬＣ（溶離剤：水／アセトニトリル／トリフルオロ酢酸 ９８／２／０．２〜２０／８０／０．２）により３０分間かけて精製して、標記生成物を収率７０％で得た。
【００６２】
実施例１２：（７Ｓ）−３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−イル］−Ｎ−メチル−メタンアミン
（７Ｓ）−３，４−ジメトキシ−Ｎ−メチルビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボキサミド（４５０mg）をテトラヒドロフラン（２０mL）に懸濁し、次にテトラヒドロフラン中の２M ＬｉＡｌＨ４溶液１．６mLを反応混合物に周囲温度でゆっくりと加えた。著しいガスの発生が観察され、反応混合物は清澄になった。反応混合物を還流温度で３０分間加熱した。周囲温度に戻した後、加水分解し、次に酢酸エチルで抽出した。ＭｇＳＯ４で乾燥させ、次に蒸発させた。得られた残留物を、分取ＨＰＬＣ（溶離剤：水／アセトニトリル／トリフルオロ酢酸 ９８／２／０．２〜２０／８０／０．２）により３０分間かけて精製して、標記生成物を収率４６％で得た。
1H NMR (DMSO-d6, ppm / TMS) = 2.60 (m; 3H); 2.85 (m; 1H); 3.15 (m; 1H); 3.25 (dd; 1H); 3.30 (m; 1H); 3.62 (m; 1H); 3.70 (s; 6H); 6.82 (s; 1H); 6.89 (s; 1H); 8.48 (s; 1H).
【００６３】
実施例１３：  （７Ｓ）−３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−イル］−Ｎ−メチル−メタンアミン塩酸塩
テトラヒドロフラン中のＢＨ３のモル規定液２０mLを、テトラヒドロフラン４５mL中の（７Ｓ）−３，４−ジメトキシ−Ｎ−メチルビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボキサミド２．２ｇ（１０mmol）の混合物に周囲温度で加えた。１時間の撹拌の後、テトラヒドロフラン中のＢＨ３の溶液１０mLを加えた。周囲温度で一晩撹拌した後、エタノール２０mLを滴下し、ガスの発生がなくなるまで混合物を撹拌した（約１時間）。次にエタノール中の塩酸溶液２０mLを滴下した。４時間の撹拌の後、得られた沈殿物（標記生成物の１．２ｇ）を濾別した。濾液を濃縮し、濾液を酢酸エチル／エタノールの８０／２０の混合物中で固体にすることによって、更なる標記生成物０．６５ｇを得た。２つの沈殿物を合わせて、標記生成物１．８５ｇ（収率：７７％）を得た。
【００６４】
実施例１４：  イバブラジン塩酸塩
３−［２−（１，３−ジオキソラン−２−イル）エチル］−７，８−ジメトキシ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン５．５kg、エタノール２７．５リットル及びパラジウム担持炭素５５０ｇをオートクレーブに入れた。窒素で、次に水素でパージし、５５℃に加熱し、次に水素の理論量が吸収されるまで、その温度で水素圧５bars下、水素化した。次に周囲温度に戻した後、オートクレーブを減圧した。次に（７Ｓ）−３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−イル］−Ｎ−メチルメタンアミン塩酸塩４kg、エタノール１１リットル、水５．５リットル及びパラジウム担持炭素１kgを加えた。窒素で、そして次に水素でパージし、８５℃に加熱し、次に水素の理論量が吸収されるまで、その温度で水素圧３０bars下、水素化した。次に周囲温度に戻し、オートクレーブの圧力を開放し、次に反応混合物を濾過した；溶媒を留去し、次にトルエン／１−メチル−２−ピロリジノンの混合物から結晶化により、イバブラジン塩酸塩を単離した。それにより、イバブラジン塩酸塩を、収率８５％及び化学純度９９％超で得た。
【００６５】
比較実施例：  ３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボン酸メチルの酵素加水分解に対するリパーゼ及びエステラーゼのスクリーニング
ラセミ３，４−ジメトキシビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエン−７−カルボン酸メチル（１mg；ｃ＝１g/L）を、リン酸緩衝液（ｐＨ＝７）／トルエンの９０／１０の混合物１mLに溶解した。次に被試験リパーゼ又はエステラーゼ５mg（ｃ＝５g/L）を媒体（Ｅ／Ｓ比  ５／１）に加えた。反応混合物を２２０rpmで４８時間、回転撹拌しながら、２８℃に保持した。反応混合物を逆相ＨＰＬＣにより分析し、残留エステルのエナンチオ選択性（ｅｅ）を、本明細書の下記の方法に従って、キラル相ＨＰＬＣによりモニタリングした。
【００６６】
逆相ＨＰＬＣによる反応混合物の分析の条件：
Kinetex(登録商標)2.6μm C18 50*2.1、４０℃、０．６mL/分
５分間かけて１００％Ａ→１００％Ｂ
Ａ（１０００ 水＋２５ ＡＣＮ＋１ ＴＦＡ）
Ｂ（１０００ ＡＣＮ＋２５ 水＋１ ＴＦＡ）
【００６７】
キラル相ＨＰＬＣによるエナンチオ選択性の分析の条件：
Chiralpak(登録商標) IC 250*4.6 カラム、
１００％無水エタノール、
１mL/分、２５℃、２８８nm
【表３】
0005764151.tif 000023
【００６８】
結果を以下の表にまとめた。
【表４】
0005764151.tif 000024
ａ鏡像体過剰率ｅｅ（％表示）＝％エナンチオＥ２−％エナンチオＥ１／％エナンチオＥ２＋％エナンチオＥ１（エナンチオＥ２は、優勢な鏡像異性体）
ｂエナンチオ選択的係数Ｅ＝ｌｎ［（１−ｃ）（１−ｅｅ（Ｓ）］／ｌｎ［（１−ｃ）（１＋ｅｅ（Ｓ）］；ｃ＝変換のレベル＝ｅｅ（エステル）／ｅｅ（エステル）＋ｅｅ（酸）
【図１】
0005764151.tif 000045
【図２】
0005764151.tif 000046