(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の一般式（Ｉ）の化合物：
【化１】
0005649647.tif 000015
［式中、
Ａｒは、Ｃ１〜６アルキル基、Ｃ１〜６チオアルキル基、１個または複数のヘテロ原子を含有し得るＣ３〜７シクロアルキル基、Ｃ１〜６アルコキシ基、Ｃ１〜６ジアルキルアミン基、Ｃ１〜６アルコキシカルボニル基、Ｃ１〜６トリアルキルアンモニウム基、ニトロ基、ヒドロキシ基、Ｃ１〜６ペルフルオロアルキル基、フッ素、塩素および臭素からなる群から独立に選択される置換基で、１個または複数の水素が置換されているフェニル基であり、
ｎは０または１であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５およびＲ６は、水素、直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜８アルキル基、フェニル基、ナフチル基、ビフェニル基もしくはビニルベンゼン基、または基Ｃから独立に選択され、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７およびＲ８は、水素または基Ｃから独立に選択され、
但し、Ｒ１からＲ８のうち１つを超えるものが基Ｃであることはなく、
Ｅは、染料、診断剤または薬学的に活性な化合物からなる群から選択される少なくとも１つのエフェクターユニットを含む部分であり、
Ｃは、血清タンパク質、抗体または抗体フラグメント、合成ポリマー、デンドリマー、ペプチド、成長因子、受容体結合リガンド、多糖、微小粒子、ナノ粒子、および担体分子と結合することができるタンパク質結合部分からなる群から選択される担体基であり、
ここで、前記担体基は、直接的にまたはリンカーを介して、フェニル環またはベンジル炭素原子と結合してもよい］。
【請求項２】
Ａｒが、下記の基：
【化２】
0005649647.tif 000016
の１つから選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ａｒが、下記の基：
【化３】
0005649647.tif 000017
の１つから選択される、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
前記部分Ｅが、エフェクターユニットとして、Ｎ−ニトロソ尿素、アントラサイクリンであるドキソルビシン、ダウノルビシン、エピルビシン、イダルビシン、２−（４−ジアセトキシブチル）ドキソルビシン；アントラキノンであるミトキサントロンおよびアメタントロン；アルキル化剤であるクロラムブシル、ベンダムスチン、メルファランおよびオキサザホスホリン；代謝拮抗物質である５−フルオロウラシル、２’−デオキシ−５−フルオロウリジン、シタラビン、クラドリビン、フルダラビン、ペントスタチン、ゲムシタビン、６−チオグアニンおよび６−メルカプトプリン；葉酸アンタゴニストであるメトトレキサート、ラルチトレキセド、ペメトレキセドおよびプレビトレキセド、タキサンであるパクリタキセルおよびドセタキセル；カンプトテシンであるトポテカン、イリノテカン（ＣＰＴ−１１）、ＳＮ−３８、１０−ヒドロキシカンプトテシン、ＧＧ２１１、ラルトテカン、９−アミノカンプトテシンおよびカンプトテシン；リグナンであるエトポシドおよびポドフィロトキシン；ビンカアルカロイドであるビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシンおよびビノレルビン；カリケアマイシン；マイタンシノイド；オーリスタチン；エポチロン；ツブリシンであるラパマイシン、サリノスポラミド、コンブレタスタチン、ブレオマイシン；ダクチノマイシン；プリカマイシン；マイトマイシンＣならびにシス配置の白金（ＩＩ）錯体からなる群から選択される少なくとも１種の細胞増殖抑制剤を含む、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
前記エフェクターユニットが、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−ＣＨ２Ｏ−または−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−ＣＨ２Ｎ−基を介して結合している、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１からＲ８の１つが担体基Ｃであり、前記基は、マレイミド基、ハロゲンアセトアミド基、ハロゲンアセテート基、ピリジルチオ基、ビニルカルボニル基、アジリジン基、ジスルフィド基、置換または非置換アセチレン基およびヒドロキシコハク酸イミドエステル基からなる群から選択されるタンパク質結合部分である、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ１からＲ８の１つが担体基Ｃであり、前記基は、血清アルブミンのシステイン−３４とｉｎ ｓｉｔｕで結合することができるタンパク質結合部分である、請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
下記の一般式（ＩＩ）：
【化４】
0005649647.tif 000018
を有する、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ１からＲ８の１つが担体基Ｃであり、前記基は、ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）、モノメトキシＰＥＧ（ｍＰＥＧ）、ポリグリセロール（ＰＧ）、ポリ（エチレンアミン）（ＰＥＩ）およびＮ−（２−ヒドロキシ）プロピルメタクリルアミド（ＨＰＭＡ）コポリマーからなる群から選択される合成ポリマーである、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８の１つが担体基Ｃであり、前記基は、下記の構造［式中、ｍは０から５までの整数である］：
【化５】
0005649647.tif 000019
の１つを有するリンカーを介してフェニル環と結合している、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
下記の構造（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）または（ＶＩＩＩ）［式中、ＰＥＧはポリ（エチレングリコール）またはモノメトキシポリ（エチレングリコール）である］：
【化６−１】
0005649647.tif 000020
【化６−２】
0005649647.tif 000021
の１つを有する、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
前記部分Ｅが、一般式（Ｉ）の化合物におけるイミン結合の開裂時に１つまたは複数のエフェクターユニットを放出するように適合される樹状系または線形系である、請求項１から１０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１３】
イミン結合がｐＨ値の変化時に開裂される、請求項１から１２のいずれか一項に記載の化合物において前記イミン結合を開裂する方法。
【請求項１４】
請求項１から１２のいずれか一項に記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項１５】
請求項１から１２のいずれか一項に記載の化合物と、薬学的に許容される担体ならびに／または薬学的に許容されるアジュバントおよび／もしくは賦形剤とを含む、請求項１４に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、酸に不安定なトリガー基としてイミン結合を含む化合物、酸に不安定なトリガー基としてのそのようなイミン結合の使用、前記化合物においてイミン結合を開裂する過程、および前記化合物を含む医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在使用されている薬物の殆どは、小分子、すなわち低分子量を持つ化合物であり、患者に全身投与されると、高い血漿クリアランスを呈する。さらに、前記低分子量化合物は、拡散によって体内組織に浸透し、均一な生体内分布をもたらす高い傾向を示す。これらが、少量の薬物しか作用部位に到達せず、身体の健常組織への分布により前記薬物が問題のある副作用を生じさせ得る２つの主な理由である。これらの不利点は、細胞毒性剤、免疫抑制剤またはウイルス静止剤（ｖｉｒｏｓｔａｔｉｃ  ａｇｅｎｔｓ）等の高い細胞障害能を有する薬物に関して特に懸念される。
【０００３】
特にがんの治療に関しては、低分子量薬物の選択性を改善するため、またそれにより、所望の組織における活性剤の濃度を増大させる一方で、副作用を低減させるために健常組織における同剤の濃度を減少させるための、いくつかの戦略が探究されてきた。この文脈において、薬物が不活性または低活性形態で生物に投与され、例えば代謝によって活性形態に変換される、プロドラッグアプローチが発展してきた。プロドラッグは、それぞれの薬物を適切な担体と共役させることによっても生成され得る。
【０００４】
例えば、抗体、ペプチドまたは合成ポリマー等の巨大分子は、そのような巨大分子が腫瘍組織中に蓄積することから、プロドラッグ開発のための薬物担体として調査されてきた（Ｋｒａｔｚ，Ｆ．、Ｍｕｌｌｅｒ，Ｉ．Ａ．、Ｒｙｐｐａ，Ｃ、Ｗａｒｎｅｃｋｅ，Ａ．、ＣｈｅｍＭｅｄＣｈｅｍ  ２００８、３、２０〜５３頁；Ｒ．Ｄｕｎｃａｎ、Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ２００３、３４７〜３６０頁）。
【０００５】
そのようなプロドラッグにおいて、薬物は、適切なクロスリンカーを介して巨大分子担体と共有結合している。前記リンカー基への予め決定された切断点の組み込みにより、部位特異的開裂時に悪性組織において薬物を放出させることが可能になる（図１ａ参照）。非経口的に投与される場合、リンカーは、ある特定の要件、すなわち、輸液中、血流中および健常組織の組織液中における高い安定性を満たすべきである。その上、そのようなリンカー基は、標的組織および標的細胞の特異的な生化学的および／または病態生理学的特徴を利用する腫瘍細胞による細胞取り込み後、腫瘍組織において有効かつ選択的に開裂されるべきである。関連のプロドラッグアプローチにおいて、薬物は、アダプターユニットを介して巨大分子担体と共有結合している（Ｓｈａｂａｔ，Ｄ．、Ａｍｉｒ，Ｒ．Ｊ．、Ｇｏｐｉｎ，Ａ．、Ｐｅｓｓａｈ，Ｎ．、Ｓｈａｍｉｓ，Ｍ．Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｄａｐｔｏｒ  ｓｙｓｔｅｍｓ．Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｅｕｒ．Ｊ．２００４、１０、２６２６〜２６３４頁）。前記アダプターユニットは、アダプターユニットに接続されているトリガー基の活性化時に分解する自壊的リンカーである（図１ｂ参照）。前記トリガー基は、上記リンカーと同じ要件、すなわち、輸液中、血流中および健常組織の組織液中における高い安定性を満たすべきである。その上、そのようなトリガー基は、腫瘍組織において有効かつ選択的に活性化され、それにより、アダプターユニットの分解および薬物の放出を招くべきである。図１ａにおいて描写されているプロドラッグアプローチと比較すると、アダプターユニットを用いるプロドラッグアプローチ（図１ｂ参照）は、追加の自壊的リンカーの組み込みが、トリガー基の開裂に対する薬物の影響を低減させることから、より可変性である。さらに、アダプターはそれぞれの薬物のアクセス可能な官能基に適合され得る、すなわち、アダプターは、化学的理由で直接結合が不可能であろう２つの分子の間、すなわち薬物とトリガー基との間に過渡的な化学結合を構築するために使用され得る。
【０００６】
巨大分子プロドラッグの部位特異的活性化実現のためのいくつかの戦略が探究されてきており、疾患関連プロテアーゼによる酵素的開裂、または還元的もしくはｐＨ依存的開裂等である。後者は、血流、細胞基質および薬物の選択的放出のための細胞内取り込み後の間におけるｐＨ値の差異を利用するものである。
【０００７】
低分子量化合物とは対照的に、巨大分子の細胞取り込みは、細胞膜を経由する拡散を介してではなくエンドサイトーシスを介して発生する。この過程中に、エンドソームにおけるｐＨ値は最初７．２〜７．４から約６．５〜５．０まで減少する。その後の一次または二次リソソームへの変換は、４前後のｐＨ値すら招き得る。その上、腫瘍組織における間質ｐＨ値は、概して、健常組織におけるそれぞれのｐＨ値と比較して０．５〜１．０ｐＨ単位低いことが示されている。しかしながら、腫瘍細胞の細胞質ｐＨ値は、概して、他の細胞のｐＨ値と違わない。したがって、腫瘍組織における細胞取り込み後のｐＨ値における前記有意な変化は、担体と薬物との間の酸に不安定な結合を発展させるために使用されてきた。公知の酸に不安定な予め決定された切断点の例は、アセタール結合、ｃｉｓ−アコニチルおよびトリチル基、ならびにアシルヒドラゾンであり、例えば、Ｆ．Ｋｒａｔｚ、Ｕ．Ｂｅｙｅｒ、ＭＴ．Ｓｃｈｕｔｔｅ、Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｔｈｅｒ．Ｄｒｕｇ  Ｃａｒｒｉｅｒ  Ｓｙｓ．１９９９、１６、２４５〜２８８頁において記載されている。
【０００８】
酸に不安定なトリガー基を含むプロドラッグは、ｐＨ値の減少が腫瘍組織の特徴的形質であることから、幅広い用途において使用され得るという利点を提供する。反対に、酵素的活性化時に開裂されるトリガー基を含むプロドラッグは、治療される腫瘍実体において標的酵素の（過剰）発現がある場合にのみ適用され得る。
【０００９】
最も一般に使用される酸に不安定な基は、アシルヒドラゾンである。ｐＨ７におけるそれらの安定性（ｔ１／２＞＞４８時間）とｐＨ５におけるそれらの安定性（ｔ１／２＜３０時間）との間に有意な差異を示す特異的なアシルヒドラゾンが開発されており、これは、ｐＨ値の減少時の腫瘍細胞におけるその開裂を考慮すると有利である。しかしながら、酸に不安定なヒドラゾン結合を介して薬物を巨大分子担体とカップリングするためには、薬物がカルボニル官能基またはアシルヒドラジド基のいずれかを含むことが必要である。アシルヒドラジド基を含む細胞増殖抑制剤は極めて稀であるが、ケト官能化アントラサイクリンであるダウノルビシンおよびドキソルビシンが巨大分子プロドラッグの開発に使用されてきた。一例は、酸に不安定なアルブミン結合ドキソルビシン誘導体ＤＯＸＯ−ＥＭＣＨ（ＩＮＮＯ−２０６）である。しかしながら、この技術は、唯一の反応基としてヒドロキシおよび／またはアミノ部分を含む細胞毒性薬物の大半に適用できない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｋｒａｔｚ，Ｆ．、Ｍｕｌｌｅｒ，Ｉ．Ａ．、Ｒｙｐｐａ，Ｃ、Ｗａｒｎｅｃｋｅ，Ａ．、ＣｈｅｍＭｅｄＣｈｅｍ  ２００８、３、２０〜５３頁
【非特許文献２】Ｒ．Ｄｕｎｃａｎ、Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ２００３、３４７〜３６０頁
【非特許文献３】Ｓｈａｂａｔ，Ｄ．、Ａｍｉｒ，Ｒ．Ｊ．、Ｇｏｐｉｎ，Ａ．、Ｐｅｓｓａｈ，Ｎ．、Ｓｈａｍｉｓ，Ｍ．Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｄａｐｔｏｒ  ｓｙｓｔｅｍｓ．Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｅｕｒ．Ｊ．２００４、１０、２６２６〜２６３４頁
【非特許文献４】Ｆ．Ｋｒａｔｚ、Ｕ．Ｂｅｙｅｒ、ＭＴ．Ｓｃｈｕｔｔｅ、Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｔｈｅｒ．Ｄｒｕｇ  Ｃａｒｒｉｅｒ  Ｓｙｓ．１９９９、１６、２４５〜２８８頁
【非特許文献５】Ｋｒａｔｚら、（２００１）：Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  ｄｒｕｇ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ  ｗｉｔｈ  ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｉａｒ  ｃａｒｒｉｅｒｓ、Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ  Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ、第２版、Ｓ．Ｄｕｍｉｔｒｉｕ、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、３２章、８５１〜８９４頁
【非特許文献６】Ｓｈａｂａｔ，Ｄ．、Ｊ．Ｐｏｌｙｍ．Ｓｃｉ．、Ｐｏｌｙｍ．Ｃｈｅｍ．２００６、４４、１５６９〜１５７８頁
【非特許文献７】Ｄ．Ｖ．ＭｃＧｒａｔｈ、Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍ．２００５、２、２５３〜２６３頁
【非特許文献８】Ａ．Ｗａｒｎｅｃｋｅ、Ｆ．Ｋｒａｔｚ、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００８、７３、１５４６〜１５５２頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
したがって、本発明の根底にある技術的問題は、プロドラッグとして適切に使用され、輸液中、血流中および健常組織の組織液中において高い安定性を有し、腫瘍による細胞取り込み後、腫瘍組織において有効かつ選択的に開裂され、薬物中におけるカルボニル官能基またはアシルヒドラジド基の存在を必要とすることなく、多種多様な薬物と組み合わせて使用され得る、酸に不安定なトリガー基を含む化合物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明によれば、上記の技術的問題は、下記の一般式（Ｉ）の化合物：
【００１３】
【化１】
0005649647.tif 000002
【００１４】
［式中、
Ａｒは、Ｃ１〜６アルキル基、Ｃ１〜６チオアルキル基、１個または複数のヘテロ原子を含有し得るＣ３〜７シクロアルキル基、Ｃ１〜６アルコキシ基、Ｃ１〜６ジアルキルアミン基、Ｃ１〜６アルコキシカルボニル基、Ｃ１〜６トリアルキルアンモニウム基、ニトロ基、ヒドロキシ基、Ｃ１〜６ペルフルオロアルキル基、フッ素、塩素および臭素からなる群から独立に選択される置換基で、１個または複数の水素が置換されているフェニル基であり、
ｎは０または１であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５およびＲ６は、水素、直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜８アルキル基、フェニル基、ナフチル基、ビフェニル基もしくはビニルベンゼン基、または基Ｃから独立に選択され、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７およびＲ８は、水素または基Ｃから独立に選択され、
但し、Ｒ１からＲ８のうち１つを超えるものが基Ｃであることはなく、
Ｅは、染料、診断剤または薬学的に活性な化合物からなる群から選択される少なくとも１つのエフェクターユニットを含む部分であり、
Ｃは、血清タンパク質、抗体または抗体フラグメント、合成ポリマー、デンドリマー、ペプチド、成長因子、受容体結合リガンド、多糖、微小粒子、ナノ粒子、および担体分子と結合することができるタンパク質結合部分からなる群から選択される担体基であり、
ここで、該担体基は、直接的にまたはリンカーを介して、フェニル環またはベンジル炭素原子と結合してもよい］
を提供することによって解決される。
【００１５】
特に、本発明は、必須の構造的形質としてアリールイミンユニットを含む化合物に関する。前記イミン結合は酸に不安定であり、ｐＨ値の低下時に加水分解され得る。イミン結合が加水分解されるｐＨ値は、基本的にアリール環の置換基によって決まり、適宜選択され得る。その上、本発明の化合物は、アリールイミンユニットの窒素原子と結合しているベンジルアルコール由来のリンカーユニット、および場合により（すなわち、ｎが１である場合）、さらなるリンカーユニットをさらに含有する。今や、驚くべきことに、トリガーユニットの活性化時（すなわち、アリールイミンのイミン結合が加水分解される際に）、１，６−ベンジル脱離反応によってリンカーユニットが分解し、少なくとも１つのエフェクターを含む部分Ｅを放出することが分かっている。これらの脱離反応を図２において例示的に示す（ｎが０である事例について）。したがって、アリールイミンに基づく新たなトリガーシステムが開発されており、該システムは、ｐ−アミノベンジルアルコールの構造に基づいてリンカーまたはアダプターユニットの分解を開始し、それにより、少なくとも１つのエフェクターを含む部分Ｅの放出を招き得る。
【００１６】
上記の式（Ｉ）において、基Ａｒは、Ｃ１〜６アルキル基、Ｃ１〜６チオアルキル基、１個または複数のヘテロ原子を含有し得るＣ３〜７シクロアルキル基、Ｃ１〜６アルコキシ基、Ｃ１〜６ジアルキルアミン基、Ｃ１〜６アルコキシカルボニル基、Ｃ１〜６トリアルキルアンモニウム基、ニトロ基、ヒドロキシ基、Ｃ１〜６ペルフルオロアルキル基、フッ素、塩素および臭素からなる群から独立に選択される置換基で、１個または複数の水素が置換されているフェニル基である。基Ａｒは、少なくとも１個の置換基を含有する、すなわち、フェニル環の水素の少なくとも１個が、水素とは異なる置換基によって置換されている。本発明の好ましい実施形態において、フェニル環は２個以上の置換基を含有し、本発明のより好ましい実施形態において、基Ａｒのフェニル環は、３、４または５個の置換基を含有する。基Ａｒは、電子供与置換基および／または電子求引置換基を含有し得る。好ましいアルキル基は、メチル、エチル、ｉｓｏ−プロピルおよびｔｅｒｔ−ブチルである。好ましいチオアルキル基は、チオメチル、チオエチル、チオ−ｉｓｏ−プロピルおよびチオ−ｔｅｒｔ−ブチルである。好ましいシクロアルキル基は、シクロペンチルおよびシクロヘキシルである。好ましいアルコキシ基は、メトキシ、エトキシ、ｉｓｏ−プロポキシおよびｔｅｒｔ−ブトキシである。好ましいジアルキルアミン基は、ジメチルアミン、ジエチルアミン、ジ−ｉｓｏ−プロピルアミン、ジブチルアミン、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルアミンおよびジヘキシルアミンである。好ましいアルコキシカルボニル基は、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｉｓｏ−プロポキシカルボニルおよびｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルである。好ましいトリアルキルアンモニウム基は、トリメチルアンモニウムおよびトリエチルアンモニウムである。好ましいペルフルオロアルキル基は、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチルおよびヘプタフルオロプロピルである。基Ａｒは、置換基として１個または複数のハロゲン原子を含有することがさらに好ましい。これらのハロゲン原子は、同じであっても異なっていてもよい。
【００１７】
本発明の特に好ましい実施形態において、Ａｒは、下記の基：
【００１８】
【化２】
0005649647.tif 000003
【００１９】
の１つから選択される。
【００２０】
好ましくは上記の基Ａｒが本発明の化合物において使用され、これは、驚くべきことに、上記のアリール基を含むアリールイミンが、生理学的条件下、すなわち約７．４のｐＨ値において高い安定性を示し、約３．５から５．５までの範囲内の低ｐＨ値において容易に加水分解されることが分かっているためである。
【００２１】
本発明によれば、本願の化合物の安定性は、ｐＨ５（酢酸緩衝液）およびｐＨ７．４（リン酸緩衝液）の緩衝水溶液中における安定性を指す。イミン加水分解の半減期は、イミン濃度の減少および／または加水分解生成物濃度の増大を、例えば、蛍光法、ＨＰＬＣ、赤外分光法および／またはＮＭＲ分光法によって計測することによって決定される。好ましい実施形態において、本発明の化合物は、７．４のｐＨにおいて少なくとも２０時間の、より好ましくは７．４のｐＨにおいて少なくとも８０時間の、より一層好ましくは７．４のｐＨにおいて少なくとも３００時間の半減期を有する。別の好ましい実施形態において、７．４のｐＨにおける半減期対５．０のｐＨにおける半減期の比（ｔ１／２（ｐＨ７．４）／ｔ１／２（ｐＨ５））は、少なくとも５０、より好ましくは少なくとも１００、より一層好ましくは少なくとも１５０である。
【００２２】
例えば、上記の基Ａｒおよび蛍光染料ＡＭＣを含む化合物（図３参照）の事例において、イミン加水分解の半減期は、モデル化合物からのＡＭＣの放出に対応する蛍光の増大を計測することによって決定される。
【００２３】
本発明の好ましい実施形態において、Ａｒは電子求引置換基のみを含有し、これは、そのような置換基が、生理学的条件下、すなわち約７．４のｐＨ値において、本発明の化合物の安定性をさらに増強することができるためである。したがって、Ａｒは、好ましくは、下記の基：
【００２４】
【化３】
0005649647.tif 000004
【００２５】
の１つから選択される。
【００２６】
本発明の化合物は、下記の構造を有するリンカーユニット：
【００２７】
【化４】
0005649647.tif 000005
【００２８】
をさらに含む。
【００２９】
本発明の化合物は、下記の構造を有する別のリンカーユニット：
【００３０】
【化５】
0005649647.tif 000006
【００３１】
をさらに含み得る。
【００３２】
後者のリンカー基の存在は、０または１であり得る指数ｎによって示される。ｎが０である場合、上記のリンカー基は本発明の化合物中に存在しない。ｎが１である場合、上記のリンカー基は本発明の化合物中に存在する。
【００３３】
アリールイミンの活性化（すなわち、イミン結合の加水分解）時、上記のリンカー基は、１，６−ベンジル脱離を介して分解する。結果として、基Ｅが放出される。
【００３４】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５およびＲ６は、水素、直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜８アルキル基、フェニル基、ナフチル基、ビフェニル基もしくはビニルベンゼン基、または基Ｃから独立に選択される。その上、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７およびＲ８は、水素または基Ｃから独立に選択される。好ましいアルキル基は、メチル、エチル、ｉｓｏ−プロピルおよびｔｅｒｔ−ブチルである。フェニル基、ナフチル基およびビフェニル基は、１個または複数のヘテロ原子を含有してもよい。しかしながら、本発明の化合物において、Ｒ１からＲ８のうち１つを超えるものが基Ｃであることはない。
【００３５】
したがって、上記のリンカー基は、アルキル基、フェニル基、ナフチル基、ビフェニル基またはビニルベンゼン基から選択される置換基を含有し得る。これは、隣接するアリールイミンのイミン結合の安定性をさらに調整することを考慮すると有利である。例えば、位置Ｒ１およびＲ２に立体的に要求の高い置換基を含むことにより、イミン結合における立体障害を提供し、イミン結合の加水分解の減速を、またそれにより、生理学的条件下における本発明の化合物のより高い安定性を招くことが可能である。その上、位置Ｒ５およびＲ６に立体的に要求の高い置換基を含むことにより、脱離反応の速度に影響を及ぼし、リンカーユニットの分解の減速を招くことがさらに可能である。
【００３６】
上記のリンカー基は、担体基Ｃも含み得る。本発明の化合物への担体基Ｃの組み込みは、その巨大分子プロドラッグとしての用途を考慮すると特に有利である。したがって、担体基Ｃが上記の化合物に含まれる場合、本発明は、図１ｂにおいて示されているプロドラッグ概念を利用する。特に、巨大分子プロドラッグとして使用される場合、エフェクター（例えば薬学的に活性な化合物）は、概して、適正な担体を用いて所望の作用部位に輸送される。種々の疾患に対する治療戦略のために本発明の化合物を使用する場合、担体基Ｃは、抗体もしくは受容体結合リガンド等の標的部分から、または例えば固形腫瘍を受動的に標的化するための先天的な標的化特性を持つ巨大分子から選択されることが特に好ましい（Ｋｒａｔｚ，Ｆ．、Ｍｕｌｌｅｒ，Ｉ．Ａ．、Ｒｙｐｐａ，Ｃ、Ｗａｒｎｅｃｋｅ，Ａ．、ＣｈｅｍＭｅｄＣｈｅｍ  ２００８、３、２０〜５３頁）。
【００３７】
したがって、担体基Ｃは、血清タンパク質、抗体または抗体フラグメント、合成ポリマー、デンドリマー、ペプチド、成長因子、受容体結合リガンド、多糖、微小粒子、ナノ粒子、および担体分子と結合することができるタンパク質結合部分からなる群から選択される。適切な血清タンパク質は、例えば、ヒト血清トランスフェリンおよび血清アルブミンである。適切な合成ポリマーは、例えば、ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）、モノメトキシＰＥＧ（ｍＰＥＧ）、ポリグリセロール（ＰＧ）、ポリ（エチレンイミン）（ＰＥＩ）およびＮ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）コポリマーである。これらの合成ポリマーは、例えば２，０００から２００，０００Ｄａまでの範囲の質量を有し得る。５，０００から５０，０００Ｄａまでの範囲の質量を有するＰＥＧを使用することが特に好ましい。
【００３８】
本発明によれば、立体的および合成的理由で、式（Ｉ）の化合物は１つを超える担体基を含有しないことが望ましいため、リンカーユニットの基Ｒ１からＲ８の１つだけが担体基Ｃであってよい。好ましくは、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８の１つが担体基Ｃである。Ｒ３およびＲ７の一方が該担体基であることが特に好ましい。しかしながら、本発明によれば、式（Ｉ）の化合物が上記の基Ｒ１からＲ８と異なる位置に担体基Ｃを含有することは除外されない。特に、本発明の一実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、部分Ｅの一部として担体基Ｃを含有する。この担体基Ｃは、位置Ｒ１からＲ８の１つにおける担体基Ｃに加えて、または位置Ｒ１からＲ８の１つにおける担体基の代わりに、存在し得る。
【００３９】
本発明の１つの好ましい実施形態において、置換基Ｒ１からＲ８の１つは担体基Ｃである。この事例において、Ｒ１からＲ８の他の置換基は水素であることが好ましい。本発明の別の好ましい実施形態において、Ｒ１からＲ８のそれぞれは水素であり、式（Ｉ）の化合物は部分Ｅ内に担体基Ｃを含有する。本発明の別の好ましい実施形態において、Ｒ１からＲ８のそれぞれは水素であり、式（Ｉ）の化合物は部分Ｅ内に担体基Ｃを含有しない。
【００４０】
担体基は、フェニル環（Ｒ１からＲ３またはＲ５からＲ７が担体基Ｃである場合）と、またはベンジル炭素原子（Ｒ４またはＲ８が担体基Ｃである場合）と、直接的にまたはリンカーを介して結合してもよい。リンカーの組み込みは、合成的理または立体的理由で必要となり得る。したがって、担体基Ｃは、本発明の化合物と結合するために、ヒドロキシ、アミノまたはチオール基等の適切な官能基を含有し得る。必要ならば、これらの基を、当業者に公知の技術を経由する化学修飾によって担体分子に導入してよい（Ｋｒａｔｚら、（２００１）：Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  ｄｒｕｇ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ  ｗｉｔｈ  ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｉａｒ  ｃａｒｒｉｅｒｓ、Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ  Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ、第２版、Ｓ．Ｄｕｍｉｔｒｉｕ、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、３２章、８５１〜８９４頁）。例えば、銅触媒によるヒュスゲン環化付加を介して、ＰＥＧをそのアジド官能化形態（ＰＥＧ−Ｎ３）でエチニル基とカップリングしてよい。
【００４１】
本発明の好ましい実施形態において、Ｒ１からＲ８の１つは担体基Ｃであり、マレイミド基、ハロゲンアセトアミド基、ハロゲンアセテート基、ピリジルチオ基、ビニルカルボニル基、アジリジン基、ジスルフィド基、置換または非置換アセチレン基およびヒドロキシコハク酸イミドエステル基からなる群から選択されるタンパク質結合部分である。本発明のさらに好ましい実施形態において、Ｒ１からＲ８の１つは担体基Ｃであり、血清アルブミンのシステイン−３４とｉｎ  ｓｉｔｕで結合することができるタンパク質結合部分である。
【００４２】
本発明の別の好ましい実施形態において、Ｒ１からＲ８の１つは担体基Ｃであり、ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）、モノメトキシＰＥＧ（ｍＰＥＧ）、ポリグリセロール（ＰＧ）、ポリ（エチレンアミン）（ＰＥＩ）およびＮ−（２−ヒドロキシ）プロピルメタクリルアミド（ＨＰＭＡ）コポリマーからなる群から選択される合成ポリマーである。ＰＥＧ共役体は再結晶によって容易に精製できるため、担体としてのＰＥＧの使用は特に好ましい。その上、ＰＥＧの導入は、水溶液系中における疎水性基（トリガー基および／またはエフェクターユニット等）の溶解性を増強する。さらに、ＰＥＧは化学的に不活性であり、ＵＶ活性ではない。したがって、例えば、ＨＰＬＣによって、担体基に干渉することなく、本発明の化合物中のＵＶ活性エフェクターユニットを検出することが可能である。好ましい実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８の１つは担体基Ｃであり、該基は、下記の構造［式中、ｍは０から５までの整数である］：
【００４３】
【化６】
0005649647.tif 000007
【００４４】
の１つを有するリンカーを介してフェニル環と結合している。
【００４５】
上記のリンカーにおいて、担体は、好ましくは「ａ」として示される位置において結合している。
【００４６】
本発明による式（Ｉ）の化合物は、部分Ｅをさらに含む。前記部分Ｅは、イミン結合の加水分解およびその後のリンカー基（複数可）の分解時に放出される。部分Ｅは、染料、診断剤または薬学的に活性な化合物からなる群から選択される少なくとも１つのエフェクターユニットを含有する。それ以外には、染料、診断剤または薬学的に活性な化合物を含む任意の適切な構造ユニットを表し得る部分Ｅに関する制限はない。異なっていても同じであってもよい１つを超えるエフェクターユニットを部分Ｅが含有することも可能である。
【００４７】
例えば、部分Ｅは、式（Ｉ）の化合物のリンカー基のベンジル酸素と直接的に結合している染料または薬学的に活性な化合物であってよい。
【００４８】
染料または薬学的に活性な化合物が部分Ｅの一部のみを表すことも可能である。本発明の好ましい実施形態において、部分Ｅは、式（Ｉ）の化合物におけるイミン結合の開裂時に１つまたは複数のエフェクターユニットを放出するように適合される樹状系または線形系である。例えば、部分Ｅは、自壊的デンドリマーであってよい。そのような自壊的デンドリマーは、プロドラッグとして開発されたものであり（Ｓｈａｂａｔ，Ｄ．、Ｊ．Ｐｏｌｙｍ．Ｓｃｉ．、Ｐｏｌｙｍ．Ｃｈｅｍ．２００６、４４、１５６９〜１５７８頁；Ｄ．Ｖ．ＭｃＧｒａｔｈ、Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍ．２００５、２、２５３〜２６３頁において総説されている）、小分子の制御放出および多重放出用に設計されている。分岐ユニットとしての自己脱離リンカー（ｓｅｌｆ−ｅｌｉｍｉｎａｔｉｎｇ  ｌｉｎｋｅｒｓ）に基づいて、自壊的デンドリマーの末端に、種々のエフェクターおよび／またはレポーター分子を充填してよい。焦点となる活性化（すなわち、化合物（Ｉ）のイミン結合の加水分解）は、いくつかのエフェクターユニットの同時放出による樹状骨格全体の崩壊を招く一連の脱離反応を開始する。代替として、部分Ｅは、モノマーユニットとしての分枝鎖自己脱離リンカーに基づく直鎖自己脱離系であってよい。加水分解を用いるイミン結合の活性化時、分子は２つの方向に分解する、すなわち、直鎖状主鎖を形成している２つのリンカー間の結合およびリンカーユニットとエフェクター分子との間の結合が、脱離反応によって開裂される（例えば、Ａ．Ｗａｒｎｅｃｋｅ、Ｆ．Ｋｒａｔｚ、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００８、７３、１５４６〜１５５２頁参照）。
【００４９】
したがって、本発明は、例えば、エフェクターユニットが式（Ｉ）の化合物の残りと直接的に結合している事例を含む。その上、本発明は、いくつかのエフェクターユニットが例えば直鎖自己脱離または樹状系に含まれる事例も含む。本発明によれば、すべての事例において、エフェクターユニットはイミン結合の加水分解時に放出されることが好ましい。
【００５０】
本発明の好ましい実施形態によれば、部分Ｅは、細胞増殖抑制剤、サイトカイン、免疫抑制剤、抗リウマチ剤、消炎剤、抗生剤、鎮痛剤、ウイルス静止剤、抗真菌剤、転写因子阻害剤、細胞周期モジュレーター、ＭＤＲモジュレーター、血管破壊剤、プロテアソームもしくはプロテアーゼ阻害剤、アポトーシスモジュレーター、酵素阻害剤、血管新生阻害剤、ホルモンもしくはホルモン誘導体、放射性物質、発光物質、または光吸収物質からなる群から独立に選択される少なくとも１つのエフェクターユニットを含む。部分Ｅが、エフェクターユニットとして、Ｎ−ニトロソ尿素、アントラサイクリンであるドキソルビシン、ダウノルビシン、エピルビシン、イダルビシン、２−（４−ジアセトキシブチル）ドキソルビシン；アントラキノンであるミトキサントロンおよびアメタントロン；アルキル化剤であるクロラムブシル、ベンダムスチン、メルファランおよびオキサザホスホリン；代謝拮抗物質である５−フルオロウラシル、２’−デオキシ−５−フルオロウリジン、シタラビン、クラドリビン、フルダラビン、ペントスタチン、ゲムシタビン、６−チオグアニンおよび６−メルカプトプリン；葉酸アンタゴニストであるメトトレキサート、ラルチトレキセド、ペメトレキセドおよびプレビトレキセド、タキサンであるパクリタキセルおよびドセタキセル；カンプトテシンであるトポテカン、イリノテカン（ＣＰＴ−１１）、ＳＮ−３８、１０−ヒドロキシカンプトテシン、ＧＧ２１１、ラルトテカン、９−アミノカンプトテシンおよびカンプトテシン；リグナンであるエトポシドおよびポドフィロトキシン；ビンカアルカロイドであるビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシンおよびビノレルビン；カリケアマイシン；マイタンシノイド；オーリスタチン；エポチロン；ツブリシンであるラパマイシン、サリノスポラミド、コンブレタスタチン、ブレオマイシン；ダクチノマイシン；プリカマイシン；マイトマイシンＣならびにシス配置の白金（ＩＩ）錯体からなる群から選択される少なくとも１種の細胞増殖抑制剤を含むことが特に好ましい。
【００５１】
エフェクターユニットは、部分Ｅの残りと、または式（Ｉ）の化合物のリンカー基と、直接的に結合していていよい。しかしながら、合成的理由で、エフェクターユニットは、直接的にではなく適切なリンカー基を介して結合していることが有利となり得る。したがって、エフェクターユニットＥは、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−ＣＨ２Ｏ−または−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−ＣＨ２Ｎ−基を介して結合していることが好ましい。
【００５２】
下記において、担体基Ｃを含まない本発明による化合物について論じる。
【００５３】
特に、本発明の好ましい実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、下記の一般式（ＩＩ）：
【００５４】
【化７】
0005649647.tif 000008
【００５５】
を有する。
【００５６】
上記の式（ＩＩ）において、ｎは０であり、Ｒ１からＲ４のそれぞれは水素である。部分Ｅは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−リンカー基を介してベンジル酸素原子と結合している染料７−アミノ−４−メチルクマリン（ＡＭＣ）を含むことが特に好ましい。前記化合物は、下記の一般式（ＩＸ）：
【００５７】
【化８】
0005649647.tif 000009
【００５８】
によって表される。
【００５９】
上記の式（ＩＸ）の化合物は、図４において示されている反応スキームによって合成できる。特に、第一のステップにおいて、それぞれのアリール化合物のベンズアルデヒドを、ｐ−アミノベンジルアルコール（ＰＡＢＡ）と反応させる。次いで、得られたイミンを、染料のイソシアネート誘導体と反応させる。置換ベンズアルデヒドは簡単に入手可能であり、それぞれのイソシアネート誘導体の合成は、当業者の知識の範囲内である。フルオロフォアＡＭＣの使用には、３９０ｎｍにおける励起時に、４６０ｎｍの波長を持つ青色光が放射されるという利点がある。アミノ基をアセチル化しさえすれば、ＡＭＣの蛍光は有意に減少する。したがって、染料の放出は、例えば蛍光プレートリーダーを用いて容易に検出され得る。したがって、本発明の化合物の放出特性は、ＡＭＣをモデルとして使用して極めてよく研究され得る。
【００６０】
下記において、担体基Ｃを含む本発明による化合物について記述する。特に、本発明の別の好ましい実施形態において、本発明の化合物は、下記の構造（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）または（ＶＩＩＩ）［式中、ＰＥＧはポリ（エチレングリコール）またはモノメトキシポリ（エチレングリコール）である］：
【００６１】
【化９−１】
0005649647.tif 000010
【００６２】
【化９−２】
0005649647.tif 000011
【００６３】
の１つを有する。
【００６４】
上記の化合物（ＩＩＩ）から（ＶＩＩＩ）において、ｎは１であり、担体基Ｃはリンカー基を介して位置Ｒ７で結合している。その上、エフェクター部分は、７−アミノ−４−メチルクマリン（式（ＩＩＩ））、ドキソルビシン（式（ＩＶ））、カンプトテシン（式（Ｖ））、パクリタキセル（式（ＶＩ））、５−フルオロウラシル（式（ＶＩＩ））および６−メルカプトプリン（式（ＶＩＩＩ））を含む。
【００６５】
上記の式（ＩＩＩ）の化合物は、図５において示されている反応スキームによって合成できる。その上、式（ＩＶ）および（ＶＩＩＩ）の化合物は、図６において示されている反応スキームによって合成でき、式（Ｖ）の化合物は、図７において示されている反応スキームによって合成できる。同様の方法によって、上記の式（ＶＩ）および（ＶＩＩ）の化合物も合成できる。
【００６６】
上記の反応スキームから分かるように、位置Ｒ７に担体基を含有する本発明の化合物は、概して、下記のビルディングブロック（Ｘ）：
【００６７】
【化１０】
0005649647.tif 000012
【００６８】
を出発材料として使用する反応スキームによって合成できる。
【００６９】
上記のビルディングブロック（Ｘ）から出発し、例えば銅触媒によるヒュスゲン環化付加を介して、アジド官能化担体をビルディングブロック（Ｘ）のエチニル基とカップリングしてよい。アリールイミンは、そのヒドロキシ官能基を介してブロック化イソシアネート（フェニルカルバメート）の位置で結合させてよい。その上、少なくとも１個のエフェクター基を含む部分Ｅは、ビルディングブロック（Ｘ）のベンジルヒドロキシル基を介してカップリングされ得る。上記のビルディングブロック（Ｘ）は、図８において示されている反応スキームによって合成できる。
【００７０】
その上、本発明は、上記で定義した化合物における、下記の構造のユニット
【００７１】
【化１１】
0005649647.tif 000013
【００７２】
［式中、ｎ、ＡｒおよびＲ１からＲ８は、上記で定義された通りである］の、ｐＨ依存的に開裂され得るトリガー基としての使用に関する。
【００７３】
特に、上記で説明した通り、本発明の化合物に含有されるアリールイミンユニットは、ｐＨ依存的に開裂され得る適切なトリガー基である。イミン結合の加水分解時、リンカー基（複数可）が分解し、少なくとも１つのエフェクターユニットを含む部分Ｅを放出する。
【００７４】
本発明は、イミン結合がｐＨ値の変化時に開裂される、上記の本発明の化合物においてイミン結合を開裂する過程にさらに関する。好ましい実施形態において、該過程は、ｐＨ値を約７．０から７．８の範囲から約６．５から３．５の範囲まで低下させるステップを含む。ｐＨ値は、約７．０から７．４の値から約４．５から５．５の範囲まで低下することが特に好ましい。別の好ましい実施形態において、ｐＨ値は、約０．５から１．０ｐＨ単位だけ低下し、これにより、本発明の化合物のイミン結合が加水分解される。好ましくは、ｐＨ値は、ＡＴＰ依存性プロトンポンプによる腫瘍細胞への本発明の化合物のエンドソーム取り込み時、またはその後の一次もしくは二次リソソームへの変換中に減少する。
【００７５】
本発明の別の態様は、上記で定義された通りの化合物と、場合により、薬学的に許容される担体ならびに／または薬学的に許容されるアジュバント（ａｄｊｕｖｅｎｔ）および／もしくは賦形剤とを含む医薬組成物に関する。
【００７６】
医薬組成物は、例えば、塩化ナトリウム溶液または任意の薬学的に許容される緩衝液を含有する溶液等の溶媒および賦形剤を含有し得る。その上、本発明の医薬組成物は、患者への投与に適した任意の形態、例えば、注射剤形態、錠剤（ｔａｂｌｅｔｔｅ）もしくはカプセル剤として、または吸入用組成物としてのものであってよい。
【００７７】
具体的な実施形態によれば、上記で定義した医薬組成物は、がん、自己免疫疾患、急性または慢性炎症性疾患、ならびにウイルスおよび／または微生物によって引き起こされる疾患からなる群から選択される疾患の治療用のものである。
【００７８】
本発明の別の態様は、がん、自己免疫疾患、急性または慢性炎症性疾患、ならびにウイルスおよび／または微生物によって引き起こされる疾患からなる群から選択される疾患に罹患している患者を治療または診断するための医薬組成物の製造における、上記で定義された通りの化合物の使用に関する。
【００７９】
さらなる具体的な実施形態によれば、上記で定義した医薬組成物は、がんの治療用のものである。
【００８０】
本発明の別の実施形態によれば、上記で定義された通りの化合物は、緩衝液または薬学的に許容される担体等の１種または複数のアジュバントをさらに含有し得るキットに含まれていてよい。
【図面の簡単な説明】
【００８１】
【図１ａ】プロドラッグ概念の代表を示す図である。
【図１ｂ】プロドラッグ概念の代表を示す図である。
【図２】本発明の化合物の１，６−ベンジル脱離反応を示す図である。
【図３】酸性ｐＨにおけるＡＭＣ含有モデル化合物の開裂の機序を示す図である。
【図４】式（ＩＸ）の化合物の合成を示す図である。
【図５】式（ＩＩＩ）の化合物の合成を示す図である。
【図６】式（ＩＶ）および（ＶＩＩＩ）の化合物の合成を示す図である。
【図７】式（Ｖ）の化合物の合成を示す図である。
【図８】式（Ｘ）の化合物の合成を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００８２】
本発明によれば、酸に不安定なトリガー基を含み、プロドラッグとして適切に使用される化合物が提供される。特に、化合物のイミン結合は露出された位置にあり、したがって簡単に加水分解可能である。その上、１（ｎが０である場合）または２（ｎが１である場合）個のリンカー基の存在により、エフェクターユニットの放出を招くリンカーの分解反応は、エフェクターユニットの化学的性質とは基本的に無関係である。したがって、考えられる幅広いエフェクターユニットにプロドラッグの特異的かつ選択的な活性化を提供することが可能である。その上、一般的な合成概念が利用可能であるため、本発明の化合物を容易に合成できる。
【００８３】
その上、本発明の化合物は、輸液中、血流中および健常組織の組織液中における高い安定性を有し、腫瘍細胞による取り込み後、腫瘍組織において有効かつ選択的に開裂され、薬物中におけるカルボニル官能基またはアシルヒドラジド基の存在を必要とすることなく、多種多様な薬物と組み合わせて使用され得る。
【００８４】
本発明を下記の実施例において例証するが、何らそれらに限定されない。
実施例：
モデル化合物の合成は、図４において示されている通り、２ステップで実施した。
４−（ベンジリデンアミノ）ベンジルアルコールの調製のための一般的な手順
それぞれのベンズアルデヒド誘導体（４．８６ｍｍｏｌ）および５μＬ（９０μｍｏｌ）の酢酸を、２０ｍｌのベンゼン中２００ｍｇ（１．６２ｍｍｏｌ）の４−アミノベンジルアルコールの撹拌懸濁液に添加する。混合物を１７時間加熱還流し、形成された水を、ディーン・スターク装置を使用して除去する。室温まで冷却後、溶媒を減圧下で除去し、生成物を、ｎ−ヘキサンおよび酢酸エチルの混合物から−２０℃で結晶化させる。
４−（ベンジリデンアミノ）ベンジルアルコール（１）
純粋生成物が２５２ｍｇ（７７％）の収率で黄色固体として得られる。1H-NMR (400.1 MHz, DMSO-d6): δ = 4.52 (d, J= 5.6 Hz, 2 H, CH2), 5.21 (t, J = 5.6 Hz, 1 H, OH), 7.24-7.26 (m, 2 H, Ar-H), 7.36-7.38 (m, 2 H, Ar-H), 7.53-7.54 (m, 3 H, Ar-H), 7.93-7.95 (m, 2 H, Ar-H), 8.64 (s, 1 H, C(N)H); 13C- NMR (100.6 MHz, DMSO-d6): δ = 63.0 (CH2), 121.2, 127.8, 129.0, 129.2, 131.8, 136.5, 140.9, 150.4, 160.5 (Ar-C, C(N)H); APCI-MS (5 uA, MeOH): m/z (%) = 212 (100) [M+ + H+]. 
４−（２，３，５，６−テトラフルオロベンジリデンアミノ）ベンジルアルコール（２）
純粋生成物が３４５ｍｇ（７５％）の収率で黄色固体として得られる。1H-NMR (400.1 MHz, DMSO- d6): δ = 4.53 (d, J= 5.7 Hz, 2 H, CH2), 5.28 (t, J= 5.7 Hz, 1 H, OH), 7.28-7.31 (m, 2 H, Ar-H), 7.39-7.41 (m, 2 H, Ar-H), 8.03-8.12 (m, 1 H, Ar-H), 8.69 (s, 1 H, C(N)H); 13C-NMR (100.6 MHz, DMSO-d6): δ = 62.4 (CH2), 109.3 (dd, J1= 19.6 Hz, J2 = 19.6 Hz, Ar-C), 116.3 (dd, J1 = 11.1 Hz, J2 = 11.1 Hz, Ar-C), 121.2, 127.8, 142.3 (Ar-C), 145.2 (m, CF), 145.8 (m, CF), 149.7, 149.8 (Ar-C, C(N)H); ESI-MS (5 kV, ACN): m/z(%) = 284 (100) [M+ + H+]. 
４−（ペルフルオロベンジリデンアミノ）ベンジルアルコール（３）
純粋生成物が４０８ｍｇ（８４％）の収率で無色固体として得られる。1H-NMR (400.1 MHz, DMSO-d6): δ = 4.53 (d, J= 5.7 Hz, 2 H, CH2), 5.25 (t, J= 5.7 Hz, 1 H, OH), 7.28-7.30 (m, 2 H, Ar-H), 7.38-7.40 (m, 2 H, Ar-H), 8.66 (s, 1 H, C(N)H): 13C-NMR (100.6 MHz, DMSO-d6): δ = 62.8 (CH2), 111.6 (ddd, J1 = 11.3 Hz, J2 = 7.1 Hz, J3 = 3.9 Hz, Ar-C), 121.2, 127.7 (Ar-C), 137.7 (m, CF), 142.3 (Ar-C), 142.1 (m, CF), 145.8 (m, CF), 149.0, 149.7 (Ar-C, C(N)H); ESI-MS (5 kV, ACN): m/z (%) = 302 (100) [M+ + H+]. 
４−（ベンジリデンアミノ）ベンジル４−メチルクマリン−７−イルカルバメートの調製のための一般的な手順
分子篩４Å（２０ｍｇ）、４−（ベンジリデンアミノ）ベンジルアルコール（４９７μｍｏｌ）、およびトルエン中ジブチルスズジラウレートの０．１Ｍ溶液２５μL（２．５μｍｏｌ）を、８ｍＬのＴＨＦ中１００ｍｇ（４９７μｍｏｌ）の７−イソシアナト−４−メチルクマリンの撹拌溶液に添加する。室温で０．５時間撹拌後、得られた固体を慎重に濾過除去し、１５ｍＬのｎ−ヘキサンで洗浄する。
４−（ベンジリデンアミノ）ベンジル４−メチルクマリン−７−イルカルバメート（４）
ジクロロメタンからの再結晶後、純粋生成物が１３５ｍｇ（６６％）の収率で白色固体として得られる。1H-NMR (400.1 MHz, DMSO-d6):δ= 2.40 (s, 3 H, CCH3), 5.23 (s, 2 H, CH2), 6.22 (s, 1 H, CH3CCH), 7.29-7.31 (m, 2 H, Ar-H), 7.43-7.57 (m, 7 H, Ar-H), 7.68-7.71 (m, 1 H, Ar-H), 7.93-7.96 (m, 2 H, Ar-H), 8.63 (s, 1 H, C(N)H), 10.18 (bs, 1 H, NH); 13C-NMR (100.6 MHz, DMSO-d6): δ = 18.3 (CH3), 66.4 (CH2), 105.1 , 112.4, 114.8, 114.9 (CH3CCH, Ar-C), 121.4, 126.3, 129.1 , 129.2, 129.7, 131.9, 134.3, 136.4, 143.2, 151.9 (Ar-C), 153.5, 153.6, 154.3, 160.4, 161.3 (C(O)NH, CCH3, Ar-C, C(N)H, C(O)CH); APCI-MS (5 uA, MeOH): m/z (%) = 413 (100) [M++ H+]. 
４−（２，３，５，６−テトラフルオロベンジリデンアミノ）ベンジル４−メチルクマリン−７−イルカルバメート（５）
純粋生成物が１９７ｍｇ（８２％）の収率で白色固体として得られる。1H-NMR (400.1 MHz, DMSO-d6): δ = 2.39 (s, 3 H, CCH3), 5.24 (s, 2 H, CH2), 6.24 (s, 1 H, CH3CCH), 7.34-7.37 (m, 2 H, Ar-H), 7.41-7.44 (m, 1 H, Ar-H), 7.53- 7.70 (m, 3 H, Ar-H), 7.69-7.71 (m, 1 H, Ar-H), 8.08-8.14 (m, 1 H, CFCH), 8.72 (s, 1 H, C(N)H), 10.32 (bs, 1 H, NH); 13C-NMR (100.6 MHz, DMSO-d6): δ = 18.4 (CCH3), 66.2 (CH2), 109.5 (dd, J1= 23.1 Hz, J2 = 23.1 Hz, CFCCF), 104.8, 112.3, 114.7, 114.8 (CH3CCH, Ar-C), 116.1 (dd, J1 = 10.8 Hz, J2= 10.8 Hz, CFCCF), 121.6, 126.5, 129.8, 135.6, 143.1 (Ar-C), 145.5 (m, CF), 146.0 (m, CF), 150.8, 151.1 , 153.5, 153.6, 154.2, 160.4 (Ar-C, C(O)NH, CCH3, C(N)H, C(O)CH); ESI-MS (5 kV, ACN): m/z (%) = 485 (100) [M+ + H+]. 
４−（ペルフルオロベンジリデンアミノ）ベンジル４−メチルクマリン−７−イルカルバメート（６）
純粋生成物が２１８ｍｇ（８７％）の収率で黄色固体として得られる。1H-NMR (400.1 MHz, DMSO-d6): δ= 2.38 (s, 3 H, CCH3), 5.23 (s, 2 H, CH2), 6.24 (s, 1 H, CH3CCH), 7.34-7.36 (m, 2 H, Ar-H), 7.40-7.41 (m, 1 H, Ar-H), 7.43-7.56 (m, 3 H, Ar-H), 7.69-7.71 (m, 1 H, Ar-H), 8.66 (s, 1 H, C(N)H), 10.32 (bs, 1 H, NH); 13C-NMR (100.6 MHz, DMSO-d6): δ = 18.4 (CCH3), 66.2 (CH2), 111.5 (m, CFCCF), 104.9, 112.4, 114.7, 114.8 (CH3CCH, Ar-C), 121.6, 126.5, 129.8, 135.6 (Ar-C), 137.7 (m, CF), 139.8 (m, CF), 143.1 (Ar-C), 146.7 (m, CF), 150.1 , 151.0, 153.5, 153.6, 154.2, 160.4 (Ar-C, C(O)NH, CCH3, C(N)H, C(O)CH); APCI-MS (5 uA, MeOH): m/z (%) = 503 (100) [M++ H+]. 
モデル化合物におけるイミン加水分解の半減期の決定
計測条件：
１ウェル当たり２００μＬの溶液、
波長：λｅｘ＝３９０ｎｍ、λｅｍ＝４６０ｎｍ、
温度：３７℃
【００８５】
【表１】
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【００８６】
データは、ベンズアルデヒド系へのフッ素置換基の導入が中性ｐＨにおいて安定性の劇的な増大を招くが、酸性条件下での開裂の速度はあまり影響を受けないままであることを示す。
【図１ａ】
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【図１ｂ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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