(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
0005815746.tif 000070
［式中
Ｒ１は水素、メチルおよびフルオロより選択され；
Ｒ２は水素およびメチルより選択され；
Ｒ３およびＲ４は、各々、水素であるか；または
Ｒ３およびＲ４は、それらが結合する炭素原子と一緒になって、シクロプロピル環を形成し；および
Ｒ５は水素およびメチルより選択される］
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２】
Ｒ１が水素である、請求項１記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項３】
Ｒ１がフルオロである、請求項１記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項４】
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４の各々が水素であり；および
Ｒ５がメチルである、請求項３記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項５】
Ｒ１がメチルである、請求項１記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項６】
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４の各々が水素であり；および
Ｒ５がメチルである、請求項５記載の化合物。
【請求項７】
【化２】
0005815746.tif 000071
より選択される化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項８】
【化３】
0005815746.tif 000072
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項９】
【化４】
0005815746.tif 000073
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１０】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩、および医薬的に許容される担体を含む、組成物。
【請求項１１】
抗−ＨＣＶ活性を有する１、２または３種の付加的な化合物をさらに含む、請求項１０記載の組成物。
【請求項１２】
付加的な化合物のうち少なくとも１つがインターフェロンまたはリバビリンである、請求項１１記載の組成物。
【請求項１３】
インターフェロンが、インターフェロン・アルファ２Ｂ、ペグ化インターフェロン・アルファ、コンセンサスインターフェロン、インターフェロン・アルファ２Ａ、インターフェロン・ラムダ、およびリンパ芽球様インターフェロン・タウより選択される、請求項１２記載の組成物。
【請求項１４】
付加的な化合物のうち少なくとも１つが、インターロイキン２、インターロイキン６、インターロイキン１２、１型ヘルパーＴ細胞応答の発生を強化する化合物、干渉ＲＮＡ、アンチセンスＲＮＡ、イミキモド、リバビリン、イノシン５’−モノホスフェート脱水素酵素阻害剤、アマンタジンおよびリマンタジンより選択される、請求項１１記載の組成物。
【請求項１５】
付加的な化合物のうち少なくとも１つが、ＨＣＶメタロプロテアーゼ、ＨＣＶセリンプロテアーゼ、ＨＣＶポリメラーゼ、ＨＣＶヘリカーゼ、ＨＣＶ  ＮＳ４Ｂタンパク質、ＨＣＶエントリー、ＨＣＶアセンブリー、ＨＣＶエグレス、ＨＣＶ  ＮＳ５Ａタンパク質、およびＨＣＶ感染の治療用のＩＭＰＤＨより選択される標的の機能を阻害するのに効果的である、請求項１１記載の組成物。
【請求項１６】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩を有効成分として含む、ＨＣＶ感染を治療するための医薬組成物。
【請求項１７】
抗−ＨＣＶ活性を有する１、２または３種の付加的な化合物を、請求項１６に記載の医薬組成物を投与する前に、後に、または同時に、投与することを特徴とする、請求項１６記載の医薬組成物。
【請求項１８】
付加的な化合物のうち少なくとも１つがインターフェロンおよびリバビリンである、請求項１７記載の医薬組成物。
【請求項１９】
インターフェロンが、インターフェロン・アルファ２Ｂ、ペグ化インターフェロン・アルファ、コンセンサスインターフェロン、インターフェロン・アルファ２Ａ、インターフェロン・ラムダ、およびリンパ芽球様インターフェロン・タウより選択される、請求項１８記載の医薬組成物。
【請求項２０】
付加的な化合物のうち少なくとも１つが、インターロイキン２、インターロイキン６、インターロイキン１２、１型ヘルパーＴ細胞応答の発生を強化する化合物、干渉ＲＮＡ、アンチセンスＲＮＡ、イミキモド、リバビリン、イノシン５’−モノホスフェート脱水素酵素阻害剤、アマンタジンおよびリマンタジンより選択される、請求項１７記載の医薬組成物。
【請求項２１】
付加的な化合物のうち少なくとも１つが、ＨＣＶメタロプロテアーゼ、ＨＣＶセリンプロテアーゼ、ＨＣＶポリメラーゼ、ＨＣＶヘリカーゼ、ＨＣＶ  ＮＳ４Ｂタンパク質、ＨＣＶエントリー、ＨＣＶアセンブリー、ＨＣＶエグレス、ＨＣＶ  ＮＳ５Ａタンパク質、およびＨＣＶ感染の治療用のＩＭＰＤＨより選択される標的の機能を阻害するのに効果的である、請求項１７記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本願は２０１１年３月２５日出願の米国仮出願番号６１／４６７，６０２および２０１１年２月７日出願の米国仮出願番号６１／４４０，０８６の利益を主張する。
【０００２】
（発明の分野）
本開示は、一般に、抗ウイルス性化合物を対象とし、より具体的にはＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）によりコードされるＮＳ５Ａ蛋白の機能を阻害しうる化合物を、かかる化合物を含む組成物を、およびＮＳ５Ａ蛋白の機能を阻害する方法を対象とする。
【背景技術】
【０００３】
ＨＣＶは、世界中で推計一億七千万人が感染している、主要なヒト病原体であり、その数はヒト免疫不全ウイルス１型に感染した数のざっと５倍である。これらのＨＣＶに感染した個体が、かなりの割合で、肝硬変および肝細胞癌を含め、重度の進行性肝疾患を発症する。
【０００４】
ペグ化インターフェロンとリバビリンとを併用する、ＨＣＶに対する現行の標準的な治療では、ウイルス応答の持続を達成するにおいて、最適な成功割合が得られず、多くの副作用を惹起する。かくして、この満たされていない医療ニーズに対処する効果的な治療法を開発することについて明確かつ長年にわたる切実な要求がある。
【０００５】
ＨＣＶはプラス一本鎖ＲＮＡウイルスである。５’−非翻訳領域における推定アミノ酸配列を比較し、その広域に及ぶ類似性に基づいて、ＨＣＶはフラビウイルス科の独立した属として分類された。フラビウイルス科のメンバーはすべて、一本鎖の連続したオープン・リーディング・フレームを翻訳することで、既知のあらゆるウイルス特異的蛋白をコードする、プラス一本鎖ＲＮＡゲノムを含有するウイルス粒子を包み込んでいる。
【０００６】
コード化されるＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼは校正能を欠き、エラー率が高いため、ＨＣＶゲノムを通して、かなりの数の異種がヌクレオチドおよびコード化されるアミノ酸の配列中に見受けられる。少なくとも６種の主たる遺伝子型が特徴付けられており、５０種より多くの亜型が世界中に分布して記載されている。ＨＣＶの遺伝的異種は、その臨床的有意性にて、単独療法による治療の間に変異を惹起する傾向を示しており、かくして治療用の付加的な選択肢が望ましい。発症機序および治療に対する遺伝子型の可能性のある修飾因子の作用は分かりにくいままである。
【０００７】
一本鎖ＨＣＶ  ＲＮＡゲノムは長さがおよそ９５００個のヌクレオチドであり、約３０００個のアミノ酸の単一ラージポリタンパク質をコードする単一のオープン・リーディング・フレーム（ＯＲＦ）を有する。感染細胞にて、このポリタンパク質は細胞およびウイルスプロテアーゼにより複数の部位で切断され、構造および非構造（ＮＳ）タンパク質を産生する。ＨＣＶの場合には、成熟した非構造タンパク質（ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ｂ、ＮＳ５ＡおよびＮＳ５Ｂ）の生成は２つのウイルスプロテアーゼにより行われる。第一のプロテアーゼはメタロプロテアーゼであると考えられ、ＮＳ２−ＮＳ３の接合部を切断し；第二のプロテアーゼはＮＳ３のＮ−末端領域内に含まれるセリンプロテアーゼ（本願明細書にてＮＳ３プロテアーゼとも称される）であり、ＮＳ３の下流にある、ＮＳ−ＮＳ４Ａ切断部位でシスにて、および残りのＮＳ４Ａ−ＮＳ４Ｂ、ＮＳ４Ｂ−ＮＳ５Ａ、ＮＳ５Ａ−ＮＳ５Ｂ部位についてトランスの両方にて、その後のすべての切断を媒介する。ＮＳ４Ａタンパク質は、ＮＳ３プロテアーゼに対するコファクターとして機能し、ならびにＮＳ３および他のウイルスレプリカーゼ成分の膜への局在を助成することにより、複数の機能に供するようである。ＮＳ３−ＮＳ４Ａ複合体の形成は、切断事象のタンパク質分解効率の増加をもたらす、適切なプロテアーゼ活性に不可欠である。ＮＳ３タンパク質はまた、ヌクレオシドトリホスファターゼおよびＲＮＡヘリカーゼ活性を示す。ＮＳ５Ｂ（本明細書にてＨＣＶポリメラーゼとも称される）は、ＨＣＶゲノムの、レプリカーゼ複合体におけるＮＳ５Ａを含む他のＨＣＶタンパク質との複製に関与するＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼである。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
ＨＣＶ感染患者の治療に有用であり、ＨＣＶウイルスの複製を選択的に阻害する化合物が望ましい。特に、ＮＳ５Ａタンパク質の機能を阻害するのに効果的である化合物が望ましい。ＨＣＶ  ＮＳ５Ａタンパク質は、例えば、以下の文献：S. L. Tanら、Virology, 284: 1-12 (2001)；K.-J. Parkら、J. Biol. Chem., 30711-30718 (2003)；T. L. Tellinghuisenら、Nature, 435, 374 (2005)；R. A. Loveら、J. Virol, 83, 4395 (2009)；N. Appelら、J. Biol. Chem., 281, 9833 (2006)；L. Huang、J. Biol. Chem., 280, 36417 (2005)；C. Riceら、ＷＯ２００６０９３８６７に記載されている。
【０００９】
Bachandらは、２００８年２月２１日公開のＷＯ２００８／０２１９２７にて、Ｃ型肝炎ウイルスの治療に有用な一連のビフェニル化合物を開示する。本開示の新規な化合物はＷＯ２００８／０２１９２７の式で示される定義の範囲内にあるが、Bachandらは該化合物を開示も記載もしていない。意外にも、これらの化合物は、該化合物をＣ型肝炎ウイルスの治療に有用とする、独特な属性を有することが見出された。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
第一の態様にて、本開示は、式（Ｉ）：
【化１】
0005815746.tif 000002
［式中
Ｒ１は水素、メチルおよびフルオロより選択され；
Ｒ２は水素およびメチルより選択され；
Ｒ３およびＲ４は、各々、水素であるか；または
Ｒ３およびＲ４は、それらが結合する炭素原子と一緒になって、シクロプロピル環を形成し；および
Ｒ５は水素およびメチルより選択される］
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【００１１】
第一の態様の第一の実施態様において、本開示は、Ｒ１が水素である、式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【００１２】
第一の態様の第二の実施態様において、本開示は、Ｒ１がフルオロである、式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容される塩を提供する。第三の実施態様において、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、各々、水素であり、Ｒ５はメチルである。
【００１３】
第一の態様の第四の実施態様において、本開示は、Ｒ１がメチルである、式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容される塩を提供する。第五の実施態様において、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、各々、水素であり、Ｒ５はメチルである。
【００１４】
第二の態様において、本開示は、
【化２】
0005815746.tif 000003
より選択される化合物またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【００１５】
第三の態様にて、本開示は、式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容される塩、および医薬的に許容される担体を含む、組成物を提供する。第三の態様の第一の実施態様にて、該組成物は抗ＨＣＶ活性を有する１、２または３種の付加的な化合物をさらに含む。第三の態様の第二の実施態様にて、付加的な化合物のうち少なくとも１つはインターフェロンまたはリバビリンである。第三の実施態様にて、インターフェロンはインターフェロン・アルファ２Ｂ、ペグ化インターフェロン・アルファ、コンセンサスインターフェロン、インターフェロン・アルファ２Ａ、インターフェロン・ラムダ、およびリンパ芽球様インターフェロン・タウより選択される。
【００１６】
第三の態様の第四の実施態様にて、本開示は、式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容される塩、医薬的に許容される担体、および抗ＨＣＶ活性を有する１または２種の付加的な化合物を含む組成物であって、付加的な化合物のうち少なくとも１つがインターロイキン２、インターロイキン６、インターロイキン１２、１型ヘルパーＴ細胞応答の発生を亢進する化合物、干渉ＲＮＡ、アンチセンスＲＮＡ、イミキモド、リバビリン、イノシン５’−モノホスフェート脱水素酵素阻害剤、アマンタジンおよびリマンタジンより選択される、組成物を提供する。
【００１７】
第三の態様の第五の実施態様にて、本開示は、式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容される塩、医薬的に許容される担体、および抗ＨＣＶ活性を有する１または２種の付加的な化合物を含む組成物であって、付加的な化合物のうち少なくとも１つが、ＨＣＶメタロプロテアーゼ、ＨＣＶセリンプロテアーゼ、ＨＣＶポリメラーゼ、ＨＣＶヘリカーゼ、ＨＣＶ  ＮＳ４Ｂタンパク質、ＨＣＶエントリー、ＨＣＶアセンブリー、ＨＣＶエグレス、ＨＣＶ  ＮＳ５Ａタンパク質、およびＨＣＶ感染の治療用のＩＭＰＤＨより選択される標的の機能を阻害するのに効果的である、組成物を提供する。
【００１８】
第四の態様にて、本開示は、治療上の有効量の式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容される塩を患者に投与することを特徴とする、該患者でのＨＣＶ感染を治療する方法を提供する。第四の態様の第一の実施態様にて、該方法は、式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容される塩を投与する前に、後に、または同時に抗ＨＣＶ活性を有する１、２または３種の付加的な化合物を投与することを特徴とする。第四の態様の第二の実施態様にて、付加的な化合物のうち少なくとも１つはインターフェロンまたはリバビリンである。第四の態様の第三の実施態様にて、インターフェロンは、インターフェロン・アルファ２Ｂ、ペグ化インターフェロン・アルファ、コンセンサスインターフェロン、インターフェロン・アルファ２Ａ、インターフェロン・ラムダ、およびリンパ芽球様インターフェロン・タウより選択される。
【００１９】
第四の態様の第四の実施態様にて、本開示は、治療上の有効量の式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容される塩を患者に投与し、式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容される塩を投与する前に、後に、または同時に抗ＨＣＶ活性を有する１または２種の付加的な化合物を投与することを特徴とする、その患者におけるＨＣＶ感染を治療する方法であって、付加的な化合物のうち少なくとも１つは、インターロイキン２、インターロイキン６、インターロイキン１２、１型ヘルパーＴ細胞応答の発生を亢進する化合物、干渉ＲＮＡ、アンチセンスＲＮＡ、イミキモド、リバビリン、イノシン５’−モノホスフェート脱水素酵素阻害剤、アマンタジンおよびリマンタジンより選択される、方法を提供する。
【００２０】
第四の態様の第五の実施態様にて、本開示は、治療上の有効量の式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容される塩を患者に投与し、式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容される塩を投与する前に、後に、または同時に抗ＨＣＶ活性を有する１または２種の付加的な化合物を投与することを特徴とする、その患者におけるＨＣＶ感染を治療する方法であって、該付加的な化合物のうち少なくとも１つがＨＣＶメタロプロテアーゼ、ＨＣＶセリンプロテアーゼ、ＨＣＶポリメラーゼ、ＨＣＶヘリカーゼ、ＨＣＶ  ＮＳ４Ｂタンパク質、ＨＣＶエントリー、ＨＣＶアセンブリー、ＨＣＶエグレス、ＨＣＶ  ＮＳ５Ａタンパク質、およびＨＣＶ感染の治療用のＩＭＰＤＨより選択される標的の機能を阻害するのに効果的である、方法を提供する。
【００２１】
もう一つ別の態様にて、本開示は、
【化３】
0005815746.tif 000004
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【００２２】
もう一つ別の態様にて、本開示は、
【化４】
0005815746.tif 000005
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【００２３】
本開示の他の実施態様は、本願明細書に開示の２またはそれ以上の実施態様および／または態様の適当な組み合わせを含む。
【００２４】
本開示のさらに別の実施態様および態様は以下の記載より明らかであろう。
【００２５】
本開示の化合物はまた互変異性体としても存在し、したがって本開示はすべての互変異性体型を包含する。
【００２６】
本願明細書における本開示の記載は化学結合の原理および原則と適合して解釈されるべきである。
【００２７】
本発明の開示により包含される化合物は、適当には、医薬品として使用するのに安定している化合物であると認識されるべきである。
【００２８】
本明細書にて引用されているすべての特許、特許出願および参考文献はその内容を出典明示により本明細書の一部とする。不一致のある場合、定義を含め、本開示が優先するであろう。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
本明細書にて使用される場合、以下の用語は表示される意味を有する：
【００３０】
本明細書で使用される場合、「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」の単数形は、その文脈にて明らかに排除されない限り、複数の関連性を包含する。
【００３１】
不斉中心が本開示の化合物にて存在する。これらの中心は、キラル炭素原子の周りの置換基の配置に応じて、記号「Ｒ」または「Ｓ」で称される。該開示は、ＮＳ５Ａの阻害能を有する、すべての立体化学異性体またはその混合物を包含する。化合物の個々の立体異性体は、キラル中心を含有する市販の出発物質より合成して、あるいは立体異性生成物の混合物を調製し、つづいてジアステレオマーの混合物に変換し、その後で分離または再結晶するなどの分離に付し、クロマトグラフィー操作に供するか、あるいはキラルクロマトグラフィーカラムで直接分離することにより調製され得る。個々の立体化学の出発化合物は市販されているか、または当業者に既知の方法により製造または分割され得る。
【００３２】
本開示の特定の化合物はまた、分離が可能な異なる安定した立体配座形にて存在しうる。非対称単結合の周りの制限回転による、例えば立体障害または環歪みが原因の、ねじり非対称は、異なる立体配座異性体の分離を可能としうる。本開示はこれら化合物の各立体配座異性体およびその混合物を包含する。
【００３３】
「本開示の化合物」およびその等価的表現は、式（Ｉ）の化合物、およびその医薬的に許容されるエナンチオマー、ジアステレオマーおよび塩を包含するように意図される。同様に、中間体への言及は、その事情が許す限り、その塩を包含するように意図される。
【００３４】
本開示は本発明の化合物中にある原子のすべての同位体を包含するように意図される。同位体は原子番号は同じであるが、質量数の異なるそれらの原子を包含する。限定するものではなく、一般的な例として、水素の同位体は、重水素および三重水素を包含する。炭素の同位体は１３Ｃおよび１４Ｃを包含する。同位体標識された本発明の化合物は、一般に、当業者に既知の慣用的方法により、あるいは標識されていない試薬を利用する代わりに同位体標識された適当な試薬を用いて、本願明細書に記載の方法と類似する方法により調製され得る。かかる化合物は、生物学的活性の決定において、例えば標体および試薬として使用する種々の可能性を有する。同位体が安定している場合には、かかる化合物は、生物学的、薬理学的または薬物動態的特性を好ましく修飾する可能性がある。
【００３５】
本開示の化合物は医薬的に許容される塩として存在しうる。本明細書にて使用される「医薬的に許容される塩」なる語は、水または油溶性あるいは分散性であり、妥当な医薬的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激性、アレルギー応答、あるいは他の問題または利益／危険の合理的割合に見合う複雑な関係がなく、患者の組織と接触して使用するのに適し、その意図する使用に効果的である、本開示の化合物の塩または両性イオンの形態を表す。該塩は、化合物を最後に単離かつ精製する間に、あるいは別々に、適当な窒素原子を適当な酸と反応させることにより調製され得る。代表的な酸付加塩は、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、クエン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩；ジグルコン酸塩、ジ臭化水素酸塩、ジ塩酸塩、ジヨウ化水素酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メシチレンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフチレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、トリクロロ酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、リン酸塩、グルタミン酸塩、重炭酸塩、パラトルエンスルホン酸塩およびウンデカン酸塩を包含する。医薬的に許容される塩を形成するのに使用され得る酸の例として、塩酸、臭化水素酸、硫酸およびリン酸などの無機酸、およびシュウ酸、マレイン酸、クエン酸およびコハク酸などの有機酸が挙げられる。
【００３６】
治療に用いるのに、治療上の有効量の式（Ｉ）の化合物ならびにその医薬的に許容される塩が原料として投与されることが可能である場合、該活性生物を医薬組成物として提供することが可能である。したがって、本開示はさらには、治療上の有効量の式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容される塩、および一または複数の医薬的に許容される担体、希釈剤または賦形剤を含む、医薬組成物を提供する。本明細書にて使用される「治療上の有効量」なる語は、患者にとって有意義な利益、例えば、ウイルス負荷の減少を示すのに十分である、各活性成分の合計量をいう。単独で投与される個々の活性成分に適用される場合、該用語はその成分単独での量をいう。併用療法に適用される場合、該用語は、組み合わせて、連続してまたは同時に投与されるかのいずれかにて、治療効果をもたらす活性成分を合わせた量をいう。式（Ｉ）の化合物およびその医薬的に許容される塩は上記されているとおりである。担体（複数でも可）、希釈剤（複数でも可）または賦形剤（複数でも可）は、製剤の他の成分と適合し、その受容者に対して有害でない、という意味で許容されなければならない。本開示のもう一つ別の態様によれば、式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容される塩を、一または複数の医薬的に許容される担体、希釈剤または賦形剤と混合することを含む、医薬製剤の調製方法も提供される。本明細書にて使用される「医薬的に許容される」なる語は、妥当な医薬的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激性、アレルギー応答、あるいは他の問題または利益／危険の合理的割合に見合う複雑な関係がなく、患者の組織と接触して使用するのに適し、その意図する使用に効果的である、化合物、材料、組成物および／または剤形について言う。
【００３７】
医薬製剤は単位用量に付き所定量の活性成分を含有する単位投与形にて提供されてもよい。ＨＣＶ介在疾患を予防または治療するためには、単剤療法にて、本開示の化合物の投与量レベルが、一日に体重当たり約０.０１〜約２５０ミリグラム／キログラム（「ｍｇ／ｋｇ」）、好ましくは一日に体重当たり約０.０５〜約１００ｍｇ／ｋｇであるのが典型的である。典型的には、本開示の医薬組成物は、一日に約１〜約５回、あるいはまた連続注入により投与されるであろう。かかる投与は慢性または急性療法として用いられ得る。単一剤形を生成するのに担体材料と併せうる活性成分の配合量は、治療される症状、該症状の重篤度、投与回数、投与経路、利用される化合物の排出速度、治療期間、ならびに患者の年齢、性別、体重および状態に応じて変化するであろう。好ましい単位投与製剤は、活性成分を、上記されるような一日用量またはそれ以下の用量、あるいはその適当なフラクションにて含有する製剤である。治療は該化合物の最適用量よりも実質的に少ない投与量で開始されてもよい。その後、その状況下で最適効果に達するまで、投与量を少しずつ増加させる。一般に、該化合物は、有害なまたは悪影響を及ぼす副作用を惹起することなく、一般に、抗ウイルス作用として効果的な結果をもたらす濃度レベルで投与されるのが最も望ましい。
【００３８】
本開示の組成物が本開示の化合物および一または複数の付加的な治療または予防薬を組み合わせて含む場合、該化合物および付加的な薬剤は共に、単剤療法にて通常投与される投与量の約１０〜１５０％、より好ましくは約１０〜８０％の投与量レベルで提供されるのが一般である。
【００３９】
医薬製剤は、いずれか適当な経路、例えば経口（バッカルまたは舌下を含む）、直腸、経鼻、局所（バッカル、舌下または経皮を含む）、膣または非経口（皮下、皮内、筋肉内、関節内、滑膜内、胸骨内、くも膜下腔内、病巣内、静脈内あるいは皮内注射または注入）経路による投与に適用され得る。かかる製剤は、製薬の分野にて公知の方法により、例えば活性成分を担体（複数でも可）または賦形剤（複数でも可）と会合させることにより調製され得る。経口投与または注射による投与が好ましい。
【００４０】
経口投与に適用される医薬製剤は、カプセルまたは錠剤；粉末または顆粒；水性または非水性液体の液剤または懸濁液；可食性フォームまたはホイップ；あるいは水中油型液体乳濁液または油中水型乳濁液などの不連続単位として提供されてもよい。
【００４１】
例えば、錠剤またはカプセルの形態にて経口投与される場合、活性な薬物成分は、エタノール、グリセロール、水等などの経口で非毒性の医薬的に許容される不活性な担体と合わせられ得る。化合物を適当な細かさに粉砕し、可食性炭水化物などの同様に粉末状にされた医薬担体、例えば澱粉またはマンニトール等と混合することにより粉末が調製される。フレーバー、保存剤、分散剤および着色剤も配合され得る。
【００４２】
カプセルは、上記したように粉末の混合物を調製し、それを成形されたゼラチンシースに充填することで製造される。充填操作の前に、コロイド状シリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムまたは固形ポリエチレングリコールなどの流動促進剤および滑沢剤が該粉末混合物に添加され得る。寒天−寒天、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウムなどの崩壊剤または可溶化剤を添加し、カプセルが摂取される時の薬物の利用能を改善することもできる。
【００４３】
その上、所望により、または必要に応じて、適当な結合剤、滑沢剤、崩壊剤および着色剤が該混合物に配合され得る。適当な結合剤は、デンプン、ゼラチン、グルコースまたはベータ−ラクトースなどの天然糖、コーン甘味剤、アカシア、トラガントまたはアルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール等などの天然および合成ガムを包含する。これらの剤形に使用される滑沢剤は、オレイン酸ナトリウム、塩化ナトリウム等を包含する。崩壊剤は、限定されないが、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガム等を包含する。錠剤は、例えば、粉末の混合物を調製し、顆粒化またはスラグ形成し、滑沢剤および崩壊剤を添加し、錠剤に圧縮することにより製剤化される。粉末混合物は、適宜粉砕された化合物を、上記した稀釈剤または塩基と混合し、所望により、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゲル化剤またはポリビニルピロリドンなどの結合剤、パラフィンなどの溶液遅延剤、第四級塩などの吸収促進剤および／またはベントナイト、カオリンまたはリン酸二カルシウムなどの吸収剤と混合することにより調製される。該粉末混合物は、シロップ、デンプンペースト、アラビアガム粘液、あるいはセルロースまたはポリマー材料の溶液などの結合剤で湿らせ、スクリーンに強制的に通すことにより顆粒化され得る。顆粒化する別法として、粉末混合物を打錠機に通し、その結果得られるものは完全なスラグを形成しておらず、壊れて顆粒になる。ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルクまたは鉱油を添加することにより、該顆粒を滑りやすくし、錠剤形成ダイへの粘着が防止され得る。次に、その滑りやすくされた混合物を錠剤に圧縮する。本開示の化合物はまた、易流動性不活性担体と合わせられ、顆粒化またはスラグ形成工程を介することなく、錠剤に直接圧縮され得る。セラックの密封コート、糖またはポリマー材料のコーティング、ワックスのつや出しコーティングからなる清澄または混濁した保護コーティングが提供され得る。これらのコーティングに染料を加え、異なる単位剤形を区別することができる。
【００４４】
液剤、シロップおよびエリキシルなどの経口流動体は、その所定量が一定量の化合物を含有するように投与単位形にて調製され得る。シロップは適宜フレーバー処理した水溶液に該化合物を溶解させることで調製され得るのに対して、エリキシルは非毒性ベヒクルの使用を介して調製される。エトキシ化イソステアリルアルコールおよびポリオキシエチレンソルビトールエーテルなどの可溶化剤および乳化剤、保存剤、ペパーミント油または天然甘味剤などのフレーバー添加剤、あるいはサッカリンまたは他の人工甘味剤等も添加され得る。
【００４５】
必要に応じて、経口投与用の投与単位製剤はマイクロカプセル化され得る。該製剤は、例えばコーティングすること、あるいは粒子をポリマー、ワックス等に埋め込むことなどで、その放出を長期化または持続させるように調製され得る。
【００４６】
式（Ｉ）の化合物およびその医薬的に許容される塩はまた、小型単層ベシクル、大型単層ベシクルおよび多層ベシクルなどのリポソーム送達系にて投与され得る。リポソームはコレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリンなどの種々のリン脂質より形成され得る。
【００４７】
式（Ｉ）の化合物およびその医薬的に許容される塩はまた、個々の担体としてモノクローナル抗体を用い、それにその化合物の分子を連結させることにより送達され得る。該化合物はまた、標的設定可能な薬物担体としての可溶性ポリマーと連結されてもよい。かかるポリマーは、ポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミドフェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルタミドフェノール、またはポリトイル残基で置換されているポリエチレンオキシドポリジンを包含しうる。さらには、該化合物は、薬物の制御放出を達成するのに有用な一連の生分解性ポリマー、例えば、ポリ乳酸、ポルエプシロンカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレート、およびヒドロゲルの架橋または両親媒性ブロックコポリマーに連結されていてもよい。
【００４８】
経皮投与に適応させた医薬製剤は、長期間にわたって受容者の表皮と密に接触したままとすることを意図とする別個のパッチとして提供されてもよい。例えば、活性成分は、Pharmaceutical Research 1986, 3 (6), 318に概説されるように、イオントフォレシスにより該パッチから送達されてもよい。
【００４９】
局所投与に適応させた医薬製剤は、軟膏、クリーム、懸濁液、ローション、散剤、液剤、ペースト、ゲル、スプレー、エアロゾルまたはオイルとして製剤化されてもよい。
【００５０】
直腸投与に適応させた医薬製剤は、坐剤または浣腸として提供されてもよい。
【００５１】
担体が固体である、経鼻投与に適応させた医薬製剤は、粒径が、例えば２０〜５００ミクロンの範囲にある、一連の粉末を包含し、それはコカインを摂取する方法にて、すなわち鼻に近づけて保持された粉末容器から鼻孔を介して迅速に吸入することで投与される。担体が液体である、経鼻スプレーまたは点鼻剤としての投与に適する製剤は、活性成分の水性または油性溶液を包含する。
【００５２】
吸入による投与に適応させた医薬製剤は、種々の型の用量計量式加圧エアロゾル、ネブライザーまたは吸入器により発生され得る、微粒子ダストまたはミストを包含する。
【００５３】
膣投与に適応させた医薬製剤は、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォームまたはスプレー製剤として提供されてもよい。
【００５４】
非経口投与に適応させた医薬製剤は、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤および該製剤を意図する受容者の血液と等張にする溶質を含有してもよい、水性および非水性滅菌注射溶液；沈殿防止剤および増粘剤を含んでもよい、水性および非水性滅菌懸濁液を包含する。該製剤は、単位用量または複数回用量の容器、例えば密封したアンプルおよびバイアルにて提供されてもよく、フリーズドライ（凍結乾燥）の状態で貯蔵されてもよく、その場合には、ただ単に使用直前に滅菌液体担体、例えば注射用水を添加することが要求される。即席ではあるが、注射用溶液および懸濁液は、滅菌した散剤、顆粒剤および錠剤より調製されてもよい。
【００５５】
特に上記した成分に加えて、該製剤は問題になっている製剤の型を考慮する分野にて慣用的に使用される他の薬剤を含んでもよく、例えば、経口投与に適する製剤は香料を含んでもよいことを理解すべきである。
【００５６】
「患者」なる語は、ヒトおよび他の哺乳動物の両方を包含する。
【００５７】
「治療する」なる語は：（ｉ）疾患、障害および／または症状に罹りやすいかもしれないが、未だに罹患していると診断されない患者にて疾患、障害または症状の発症を予防すること；（ｉｉ）疾患、障害または症状を阻害すること、すなわちその進行を阻むこと；および（ｉｉｉ）疾患、障害または症状を緩和すること、すなわち疾患、障害および／または症状の退縮を生じさせること、をいう。
【００５８】
本開示の化合物はまた、サイクロスポリン、例えば、サイクロスポリンＡまたは同様の作用機構を通して作用する他のアナログと一緒に投与され得る。サイクロスポリンＡは臨床試験にてＨＣＶに対して活性であることが明らかにされている（Hepatology 2003, 38, 1282；Biochem. Biophys. Res. Commun. 2004, 313, 42；J. Gastroenterol. 2003, 38, 567）。
【００５９】
次の表１は、本開示の化合物と一緒に投与され得る化合物のいくつかの説明に役立つ例を列挙する。該開示の化合物は、併用療法にて他の抗−ＨＣＶ活性化合物と一緒にまたは別々に、あるいは該化合物を組成物に合わせることにより投与することができる。
【００６０】
【表１−１】
0005815746.tif 000006
【表１−２】
0005815746.tif 000007
【表１−３】
0005815746.tif 000008
【表１−４】
0005815746.tif 000009
【表１−５】
0005815746.tif 000010
【表１−６】
0005815746.tif 000011
【００６１】
本開示の化合物はまた実験用試薬として使用されてもよい。化合物は、ウイルス複製アッセイを設計し、動物アッセイシステムを検証し、構造生物学を研究して、ＨＣＶ疾患の作用機序の認識をさらに向上させる、リサーチ・ツールを提供するのに役立つかもしれない。さらには、本開示の化合物は、例えば、競合的阻害によって、他の抗ウイルス性化合物の結合部位を確立または決定するのに有用である。
【００６２】
本開示の化合物はまた、材料のウイルス汚染を治療または予防し、したがってかかる材料、例えば、血液、組織、手術器具および手術着、実験装置および実験着、ならびに血液採集または輸血装置および材料と接触する実験または医療関係者あるいは患者のウイルス感染の危険性を減らすのに使用されてもよい。
【００６３】
本開示は、ヒトまたは動物の体内（インビボ）にて起こるプロセスあるいはインビトロにて起こるプロセスを含め、合成プロセスにより、または代謝プロセスにより調製される場合の式（Ｉ）の化合物を含めることを意図とする。
【００６４】
本願にて使用される略語、特に以下に記載の実施例にて使用される略語は当業者に周知である。使用される略語のいくつかは次のとおりである：時間についてはｈ、ｈｒまたはｈｒｓ；酢酸エチルについてＥｔＯＡｃ；ヘキサンについてＨｅｘ；ジクロロメタンについてＤＣＭ；アゾジカルボン酸ジエチルについてＤＥＡＤ；トリフェニルホスフィンについてＰｈ３Ｐ；ジエチルエーテルについてＥｔ２Ｏ；テトラヒドロフランについてＴＨＦ；リチウムヘキサメチルジシラジドについてＬｉＨＭＤＳ；フェニルについてＰｈ；ジイソプロピルエチルアミンについてＤＩＥＡまたはＤＩＰＥＡまたはｉＰｒ２ＥｔＮ；エタノールについてＥｔＯＨ；メタノールについてＭｅＯＨ；ジメチルスルホキシドについてＤＭＳＯ；室温または保持時間についてＲＴまたはＲｔまたはｒｔ（文脈で示す）；一夜についてＯＮまたはｏ／ｎ；分についてｍｉｎ；ジクロロメタンについてＤＣＭ；Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェートについてＨＡＴＵ；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドについてＤＭＦ；トリフルオロ酢酸についてＴＦＡ；ヒドロキシベンゾトリアゾールについてＨＯＢｔまたはＨＯＢＴ；１，２−ジメトキシエタンについてＤＭＥ；およびＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンについてＤＭＡＰ。
【００６５】
Ｃａｐ−１
【化５】
0005815746.tif 000012
【００６６】
Ｃａｐ−１，工程ａ
【化６】
0005815746.tif 000013
【００６７】
２，６−ジメチル−４Ｈ−ピラン−４−オン（１５ｇ、１２１ミリモル）をエタノール（３００ｍＬ）に溶かし、１０％Ｐｄ／Ｃ（１.２８ｇ、１.２１ミリモル）を加えた。該混合物をＨ２（７０ｐｓｉ）下、室温で７２時間、パール振盪器にて水素化した。反応混合物を珪藻土（セライト（登録商標））パッドを介して濾過し、エタノールで洗浄した。濾液を真空下で濃縮し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（１０％〜３０％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）を介して精製した。透明な油状物の２つのフラクションを単離した。先に溶出するフラクションは（２Ｒ，４r，６Ｓ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−オール（Ｃａｐ−１，工程ａ）と（２Ｒ，４ｓ，６Ｓ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−オール（１.２ｇ）の混合物であるのに対して、後に溶出するフラクションはＣａｐ−１，工程ａ（１０.７３ｇ）だけに相当した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ３.６９−３.７８（１Ｈ，ｍ）、３.３６−３.４７（２Ｈ，ｍ）、２.１０（１Ｈ，ｂｒ．ｓ．）、１.８８（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２.０５、４.７３Ｈｚ）、１.１９（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６.１０Ｈｚ）、１.１０（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝１０.７０Ｈｚ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１２６ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ７１.４４（２Ｃ）、６７.９２（１Ｃ）、４２.５９（２Ｃ）、２１.７１（２Ｃ）。
【００６８】
Ｃａｐ−１，工程ｂ
【化７】
0005815746.tif 000014
【００６９】
ＤＥＡＤ（１６６ｍＬ、３３０ミリモル）をＣａｐ−１，工程ａ（１０.７３ｇ、８２ミリモル）、４−ニトロ安息香酸（４８.２ｇ、２８８ミリモル）およびＰｈ３Ｐ（８６ｇ、３３０ミリモル）のベンゼン（７５０ｍＬ）中溶液に滴下した。発熱が検出され、得られた琥珀色溶液を外界温度で１８時間攪拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をＥｔ２Ｏ（２００ｍＬ）でトリチュレートし、トリフェニルホスフィンオキシド（１０ｇ）を除去した。残りの混合物をＢｉｏｔａｇｅ（登録商標）（０〜５％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ；３００ｇカラムｘ４）を介して精製した。Ｃａｐ−１，工程ｂ（１９.３６ｇ）に相当する白色固体を単離した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ８.２７−８.３２（２Ｈ，ｍ）、８.２０−８.２４（２Ｈ，ｍ）、５.４５（１Ｈ，五重項，Ｊ＝２.８２Ｈｚ）、３.９２（２Ｈ，ｄｑｄ，Ｊ＝１１.９０、６.１０、１.５３Ｈｚ）、１.９１（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１４.８０、２.２９Ｈｚ）、１.５７（２Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１４.６５、３.０５Ｈｚ）、１.２２（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６.１０Ｈｚ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１２６ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  １６３.８１（１Ｃ）、１５０.５５（１Ｃ）、１３５.９４（１Ｃ）、１３０.６４（２Ｃ）、１２３.５８（２Ｃ）、７０.２０（１Ｃ）、６８.４５（２Ｃ）、３６.９５（２Ｃ）、２１.８４（２Ｃ）。ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ］＋Ｃ１４Ｈ１７ＮＯ５として：計算値  ２７９.１１；測定値  ２７９.１２
【００７０】
Ｃａｐ−１，工程ｃ
【化８】
0005815746.tif 000015
【００７１】
ＬｉＯＨ（８.３０ｇ、３４７ミリモル）の水（３００ｍＬ）中溶液をＣａｐ−１，工程ｂ（１９.３６ｇ、６９.３ミリモル）のＴＨＦ（１０００ｍＬ）中溶液に加え、得られた混合物を外界温度で１６時間攪拌した。ＴＨＦを減圧下で除去し、水層をさらなる水（２００ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３ｘ２００ｍＬ）で稀釈した。有機層を合わせて、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過し、減圧濃縮させた。油状残渣を白色固体と共に回収した。該混合物をヘキサンでトリチュレートし、固体を濾過で除去し、Ｃａｐ−１，工程ｃ（８.０３ｇ）に相当する清澄な油状物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ４.２１（１Ｈ，五重項，Ｊ＝２.８２Ｈｚ）、３.８７−３.９５（２Ｈ，ｍ）、１.７２（１Ｈ，ｂｒ．ｓ.）、１.６３（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１４.３４、２.１４Ｈｚ）、１.３９−１.４７（２Ｈ，ｍ）、１.１７（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６.４１Ｈｚ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１２６ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ６７.５３（２Ｃ）、６４.７１（１Ｃ）、３９.９９（２Ｃ）、２１.８２（２Ｃ）。
【００７２】
Ｃａｐ−１，工程ｄ
【化９】
0005815746.tif 000016
【００７３】
ｐ−トシルクロリド（２３.５２ｇ、１２３ミリモル）をＣａｐ−１，工程ｃ（８.０３ｇ、６１.７ミリモル）およびピリジン（１９.９６ｍＬ、２４７ミリモル）のＣＨ２Ｃｌ２（７５０ｍＬ）中溶液に室温で添加し、３６時間攪拌した。反応が完了するまでに至らなかったので、ＣＨ２Ｃｌ２を減圧下で除去し、さらに４８時間攪拌を続けた。ついで、該混合物をＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）に加え、外界温度で２時間攪拌した。該混合物を分離し、有機層を１Ｎ水性ＨＣｌ（２ｘ５０ｍＬ）で十分に洗浄した。次に、有機層を乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過して濃縮した。Ｃａｐ−１，工程ｄ（１４.１５ｇ）に相当する黄色油状物を単離し、それをオフホワイトの固体として減圧下で固化させた。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ７.８０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８.２４Ｈｚ）、７.３５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７.９３Ｈｚ）、４.８８（１Ｈ，五重項，Ｊ＝２.８２Ｈｚ）、３.７９−３.８７（２Ｈ，ｍ）、２.４６（３Ｈ，s）、１.７６（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１４.５０、２.５９Ｈｚ）、１.３６（２Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１４.３４、１１.６０、２.７５Ｈｚ）、１.１２（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６.１０Ｈｚ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１２６ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  １４４.６４（１Ｃ）、１３４.２４（１Ｃ）、１２９.８２（２Ｃ）、１２７.６１（２Ｃ）、７７.３４（１Ｃ）、６７.６８（２Ｃ）、３７.４５（２Ｃ）、２１.６１（１Ｃ）、２１.５７（２Ｃ）。ＬＣ／ＭＳ：［２Ｍ＋Ｈ］＋Ｃ２８Ｈ４１Ｏ８Ｓ２として：計算値  ５６９.２２；測定値  ５６９.３
【００７４】
Ｃａｐ−１，工程ｅ
【化１０】
0005815746.tif 000017
【００７５】
ＬｉＨＭＤＳ（２９.７ｍＬ、２９.７ミリモル、ＴＨＦ中１Ｍ）をＣａｐ−１，工程ｄ（７.０５ｇ、２４.８ミリモル）およびベンジル２−（ジフェニルメチレンアミノ）アセテート（８.５７ｇ、２６.０ミリモル）のトルエン（８０ｍＬ）中溶液に室温で圧縮管にて添加し、次に得られた混合物を１００℃で５時間攪拌した。反応物を水（１００ｍＬ）でクエンチさせ、ＥｔＯＡｃで抽出し、水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾液し、真空下で濃縮させた。残渣をＢｉｏｔａｇｅ（登録商標）（０％〜１５％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ；２４０ｇカラム）を介して精製し、Ｃａｐ−１，工程ｅ（８.７６ｇ）に相当する黄色油状物をラセミ混合物として単離した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ７.６２−７.７１（２Ｈ，ｍ）、７.３０−７.４５（１１Ｈ，ｍ）、７.０５（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７.６５、１.６３Ｈｚ）、５.１３−５.２２（２Ｈ，ｍ）、３.８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６.７８Ｈｚ）、３.４６（２Ｈ，ｄｑ，Ｊ＝１１.２７、５.９０、２.０１Ｈｚ）、２.３４−２.４５（１Ｈ，ｍ）、１.５８−１.６６（１Ｈ，ｍ）、１.３４−１.４３（１Ｈ，ｍ）、１.１９（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６.０２Ｈｚ）、１.０３−１.１６（４Ｈ，ｍ）、０.８３−０.９７（１Ｈ，ｍ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  １７０.８４（１Ｃ）、１７０.６８（１Ｃ）、１３９.０１（１Ｃ）、１３５.９６（１Ｃ）、１３５.５１（１Ｃ）、１３０.０４（１Ｃ）、１２８.４９（２Ｃ）、１２８.２０（１Ｃ）、１２８.０９（４Ｃ）、１２７.９７（２Ｃ）、１２７.８５（１Ｃ）、１２７.６７（２Ｃ）、１２７.４７（２Ｃ）、７２.７６（１Ｃ）、７２.４６（１Ｃ）、６９.７７（１Ｃ）、６５.９９（１Ｃ）、３９.１１（１Ｃ）、３５.９０（１Ｃ）、３５.０１（１Ｃ）、２１.７４（１Ｃ）、２１.６５（１Ｃ）。ＬＣ／ＭＳ；［２Ｍ＋Ｎａ］＋Ｃ５８Ｈ６２Ｎ２ＮａＯ６として：計算値  ９０５.４５；測定値  ９０５.４２
【００７６】
Ｃａｐ−１，工程ｆ
【化１１】
0005815746.tif 000018
【００７７】
Ｃａｐ−１，工程ｅ（８.７６ｇ、１９.８４ミリモル）をＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶かし、水中２Ｎ  ＨＣｌ（４９.６ｍＬ、９９ミリモル）で処理した。得られた清澄溶液を外界温度で４時間攪拌し、ついでＴＨＦを減圧下で除去させた。残りの水層をＥｔＯＡｃ（３ｘ３０ｍＬ）で抽出し、減圧濃縮して対応する粗製アミンを得た。残渣をＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）に溶かし、ＤＩＥＡ（１１.８ｍＬ、６７.６ミリモル）およびクロロギ酸メチル（１.９６２ｍＬ、２５.３ミリモル）をチャージした。得られた溶液を外界温度で２時間攪拌した。反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）で稀釈し、水（１００ｍＬ）および食塩水（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過して濃縮させた。残渣をＢｉｏｔａｇｅ（登録商標）（１５％〜２５％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ；８０ｇカラム）を介して精製した。ラセミＣａｐ−１，工程ｆに相当する清澄な無色の油状物（５.２７ｇ）を回収した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ７.３２−７.４１（５Ｈ，ｍ）、５.１３−５.２８（３Ｈ，ｍ）、４.３６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８.１６、４.６４Ｈｚ）、３.６９（３Ｈ，s）、３.３０−３.４７（２Ｈ，ｍ）、２.００−２.１６（１Ｈ，ｍ）、１.５２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２.５５Ｈｚ）、１.３３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２.３０Ｈｚ）、１.１５（６Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６.０２、５.０２Ｈｚ）、０.８８−１.０７（２Ｈ，ｍ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  １７１.３９（１Ｃ）、１５６.７２（１Ｃ）、１３５.２０（２Ｃ）、１２８.６０（２Ｃ）、１２８.５７（１Ｃ）、１２８.５２（２Ｃ）、７２.７７（１Ｃ）、７２.７４（１Ｃ）、６７.１６（１Ｃ）、５７.８１（１Ｃ）、５２.４０（１Ｃ）、３８.８５（１Ｃ）、３５.５６（１Ｃ）、３４.２５（１Ｃ）、２１.９４（２Ｃ）。ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋Ｃ１８Ｈ２６ＮＯ５として：計算値  ３３６.１８；測定値  ３３６.３
【００７８】
ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＡＳ−Ｈカラム（５０ｘ５００ｍｍ、２０μｍ）（波長＝２２０ｎｍ、流速＝１００ｍＬ／分で２２分間、溶媒Ａ＝ヘプタン中０.１％ジエチルアミン、溶媒Ｂ＝ＥｔＯＨ）の修飾剤として２０％エタノールを用いることでラセミ混合物を分離するキラル方法が開発された。２つの分離された異性体は（Ｓ）−ベンジル２−（（２Ｒ，４r，６Ｓ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−（（メトキシカルボニル）アミノ）アセテート（Ｃａｐ−１，工程ｆ.１）（Ｒt＝９.８分、２.２ｇ）および（Ｒ）−ベンジル２−（（２Ｒ，４r，６Ｓ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−（（メトキシカルボニル）アミノ）アセテート（Ｃａｐ−１，工程ｆ.２）（Ｒt＝１６.４分、２.１ｇ）に相当し、それらは、各々、対応する混合物と同じ分析データを示した（上記参照）。
【００７９】
Ｃａｐ−１
（Ｓ）−ベンジル２−（（２Ｒ，４r，６Ｓ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−（（メトキシカルボニル）アミノ）アセテート（Ｃａｐ−１，工程ｆ.１）（２.２ｇ、６.６ミリモル）をパール瓶のＭｅＯＨ（５０ｍＬ）に溶かし、１０％Ｐｄ／Ｃ（０.３４９ｇ、０.３２８ミリモル）をチャージした。次に、該懸濁液をパール振盪器に入れ、該混合物にＮ２をフラッシュさせ（３ｘ）、４０ｐｓｉのＨ２下に置き、室温で１５時間振盪させた。触媒を珪藻土（セライト（登録商標））のパッドを通して濾過し、溶媒を減圧下で除去し、Ｃａｐ−１に相当する琥珀色固体（１.６ｇ）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １２.７４（１Ｈ，ｂｒ．ｓ．）、７.３５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６.１０Ｈｚ）、３.８５（１Ｈ，ｂｒ．ｓ.）、３.５３（３Ｈ，ｓ）、３.３５（２Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１５.９５、９.９９、６.１０Ｈｚ）、１.９７（１Ｈ，ｂｒ．ｓ．）、１.４８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝１３.２８Ｈｚ）、１.０６（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６.１０Ｈｚ）、０.８２−１.００（２Ｈ，ｍ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １７６.９３（１Ｃ）、１５６.７２（１Ｃ）、７２.１０（１Ｃ）、７１.９２（１Ｃ）、５８.５４（１Ｃ）、５１.３５（１Ｃ）、３６.８８（１Ｃ）、３５.８２（１Ｃ）、３４.７１（１Ｃ）、２１.９０（２Ｃ）。
留意点：Ｃａｐ−１の絶対立体化学は、Ｃａｐ−１および（Ｓ）−フェネタノールより調製されるエステルアナログを単結晶Ｘ−線解析に付して決定された。
【００８０】
Ｃａｐ−２
【化１２】
0005815746.tif 000019
【００８１】
Ｃａｐ−２，工程ａ
【化１３】
0005815746.tif 000020
【００８２】
三フッ化ホウ素エテレート（３.８１ｍＬ、３０.５ミリモル）を、窒素下、（Ｅ）−（４−メトキシブタ−１，３−ジエン−２−イルオキシ）トリメチルシラン（５.０ｇ、２９ミリモル）およびアセトアルデヒド（３.２８ｍＬ、５８.０ミリモル）のジエチルエーテル（１００ｍＬ）中の攪拌かつ冷却（−７８℃）した溶液に滴下した。反応液を−７８℃で２.５時間攪拌し、ついで飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（４０ｍＬ）でクエンチさせ、室温に加温し、一夜攪拌させた。層を分離し、水層をジエチルエーテル（２ｘ５０ｍＬ）で抽出させた。有機層を合わせ、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過し、濃縮して黄色／橙色油状物に濃縮させた。該粗製油状物をＢｉｏｔａｇｅ（登録商標）Ｈｏｒｉｚｏｎ（１１０ｇ  ＳｉＯ２、２５−４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製し、ラセミ２−メチル−２Ｈ−ピラン−４（３Ｈ）−オン（Ｃａｐ−２，工程ａ）（２.２ｇ）を黄色油状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ７.３５（ｄ，Ｊ＝６.０Ｈｚ，１Ｈ）、５.４１（ｄｄ，Ｊ＝６.０、１.０Ｈｚ，１Ｈ）、４.５１−４.６２（ｍ，１Ｈ）、２.４１−２.５７（ｍ，２Ｈ）、１.４７（ｄ，Ｊ＝６.３Ｈｚ，３Ｈ）
【００８３】
Ｃａｐ−２，工程ｂ
【化１４】
0005815746.tif 000021
【００８４】
ジエチルエーテル中１．６Ｍメチルリチウム溶液（２０.９ｍＬ、３３.４ミリモル）を０℃、窒素下にてジエチルエーテル（３０ｍＬ）中のヨウ化銅（Ｉ）（４.２５ｇ、２２.３０ミリモル）の攪拌スラリーに添加した。反応液を０℃で２０分間攪拌し、ついでジエチルエーテル（１２.０ｍＬ）中のラセミ２−メチル−２Ｈ−ピラン−４（３Ｈ）−オン（１.２５ｇ、１１.２ミリモル）を１０分かけて添加した。反応物を室温にまで加温させ、２時間攪拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（水性）に注ぎ、２０分間攪拌した。該溶液をジエチルエーテル（４ｘ６０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を食塩水（約８０ｍＬ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過し、濃縮させてラセミ（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４（３Ｈ）−オン（Ｃａｐ−２，工程ｂ）（１.３４ｇ）を橙色油状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ４.２８−４.３９（ｍ，２Ｈ）、２.５５（ｄｄｄ，Ｊ＝１４.１、４.８、１.５Ｈｚ，２Ｈ）、２.２４（ｄｄｄ，Ｊ＝１４.１、６.５、１.５Ｈｚ，２Ｈ）、１.２８（ｄ，Ｊ＝６.３Ｈｚ，６Ｈ）
【００８５】
Ｃａｐ−２，工程ｃ
【化１５】
0005815746.tif 000022
【００８６】
水素化ホウ素ナトリウム（０.３５４ｇ、９.３６ミリモル）を０℃のラセミ（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４（３Ｈ）−オン（Ｃａｐ−２，工程ｂ）（１.２ｇ、９.４ミリモル）のＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中攪拌溶液に少しずつ添加した。該溶液を０℃で１０分間攪拌し、室温に加温し、１時間攪拌した。該反応物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（約５０ｍＬ）中に注ぎ、２０分間攪拌し、次にある程度まで（約１／２容量に）濃縮させた。沈殿物が形成され、均質になるまで水を加え、ついで該溶液をＤＣＭ（３ｘ６０ｍＬ）で抽出した。水層を１Ｎ  ＨＣｌで酸性にし、次にＤＣＭ（３ｘ６０ｍＬ）で抽出させた。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して混濁した黄色油状物（１.０８ｇ）を形成させた。粗製油状物をＤＣＭ（８.０ｍＬ）に溶かし、ついでｐ−トシル−Ｃｌ（２.６８ｇ、１４.０ミリモル）およびピリジン（１.５１ｍＬ、１８.７ミリモル）を加え、反応物を室温で２.５日間攪拌させた。該反応物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（約６０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３ｘ３０ｍＬ）で抽出させた。合わせた有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過し、褐色油状物に濃縮した。油状物をＢｉｏｔａｇｅ（登録商標）Ｈｏｒｉｚｏｎ（８０ｇ  ＳｉＯ２、１０−２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）に付して精製し、ラセミ（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル  ４−メチルベンゼンスルホネート（Ｃａｐ−２，工程ｃ）（１.６３ｇ）を粘稠性清澄無色油状物として得た。ＬＣ−ＭＳ保持時間  ３.３２１分；ｍ／ｚ  ２８４.９８  ［Ｍ＋Ｈ］＋。ＬＣデータは２２０ｎｍの検出器の波長でＳＰＤ−１０ＡＶ  ＵＶ−Ｖｉｓ検出器を用いてＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ−Ｌｕｎａ３μＣ１８  ２．０ｘ５０ｍｍカラムを備えた島津製ＬＣ−１０ＡＳ液体クロマトグラフィーに記録した。溶出条件は０.８ｍＬ／分の流速、１００％溶媒Ａ／０％溶媒Ｂ〜０％溶媒Ａ／１００％溶媒Ｂのグラジエント、４分間のグラジエント時間、１分間の維持時間、および５分間の分析時間を利用し、ここで溶媒Ａは５％ＭｅＯＨ／９５％Ｈ２Ｏ／１０ｍＭ酢酸アンモニウムであり、溶媒Ｂは５％Ｈ２Ｏ／９５％ＭｅＯＨ／１０ｍＭ酢酸アンモニウムであった。ＭＳデータはエレクトロスプレーモードのＬＣについてＭｉｃｒｏｍａｓｓ  Ｐｌａｔｆｏｒｍを用いて測定した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ７.８１（ｄ，Ｊ＝８.３Ｈｚ，２Ｈ）、７.３６（ｄ，Ｊ＝８.０Ｈｚ，２Ｈ）、４.８１−４.９２（ｍ，１Ｈ）、４.１７−４.２６（ｍ，１Ｈ）、３.７８−３.８７（ｍ，１Ｈ）、２.４７（ｓ，３Ｈ）、１.９１−１.９９（ｍ，１Ｈ）、１.７８−１.８６（ｍ，１Ｈ）、１.６５−１.７２（ｍ，１Ｈ）、１.４６（ｄｄｄ，Ｊ＝１２.９、９.４、９.３Ｈｚ，１Ｈ）、１.２０（ｄｄ，Ｊ＝６.５、４.８Ｈｚ，６Ｈ）
【００８７】
ラセミ混合物は、キラル分取性ＳＦＣ精製操作（ＣｈｉｒａｌｐａｋＡＤ−Ｈ分取性カラム、３０ｘ２５０ｍｍ、５μｍ、ＣＯ２中１０％  １：１  ＥｔＯＨ／ヘプタン、７０ｍＬ／分で１０分間）を用い、複数のインジェクションにて、個々のエナンチオマーに分離され、（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル  ４−メチルベンゼンスルホネート（Ｃａｐ−２，工程ｃ.１）（５７７ｍｇ）を第一溶出ピークとして、および（２Ｓ，６Ｓ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル  ４−メチルベンゼンスルホネート（Ｃａｐ−２，工程ｃ.２）（５８８ｍｇ）を第二溶出ピークとして得た。各エナンチオマーを清澄な無色油状物として単離し、それを放置して白色固体に固化させた。
【００８８】
Ｃａｐ−２，工程ｄ
【化１６】
0005815746.tif 000023
【００８９】
４８ｍＬの圧力管にて、（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル  ４−メチルベンゼンスルホネート（Ｃａｐ−２，工程ｃ.１）（５７５ｍｇ、２.０２ミリモル）およびベンジル２−（ジフェニルメチレンアミノ）アセテート（７３３ｍｇ、２.２２ミリモル）をＴＨＦ（２ｍＬ）およびトルエン（１０ｍＬ）中に攪拌した。清澄な無色溶液に窒素をフラッシュさせ、次にＬｉＨＭＤＳ（ＴＨＦ中１.０Ｍ）（２.２２ｍＬ、２.２２ミリモル）を加え、該容器を密封し、１００℃で８時間加熱した。反応物を室温に冷却し、１／２飽和のＮＨ４Ｃｌ（水性）（約５０ｍＬ）に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（３ｘ３０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過し、粗製橙色油状物に濃縮した。該油状物をＢｉｏｔａｇｅ（登録商標）Ｈｏｒｉｚｏｎ（４０ｇ  ＳｉＯ２、１０−２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製し、不純物の混ざった所望の生成物（５０１ｍｇ）を橙色油状物として得た。この材料をＢｉｏｔａｇｅ（登録商標）Ｈｏｒｉｚｏｎ（２５ｇ  ＳｉＯ２、６−１２％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で再び精製させ、ジアステレオマー（Ｃａｐ−２，工程ｄ）（３０６ｍｇ）の約１：１混合物を粘稠性橙色油状物として得た。
【００９０】
混合物は、キラル分取性ＳＦＣ精製操作（ＣｈｉｒａｌｃｅｌＯＪ−Ｈ分取性カラム、３０ｘ２５０ｍｍ、５μｍ、ＣＯ２中１０％  １：１  ＥｔＯＨ／ヘプタン、１５０バールで、７０ｍＬ／分で１０分間）を用い、複数のインジェクションにて、個々のジアステレオマーに分離し、（Ｒ）−ベンジル  ２−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−（ジフェニルメチレンアミノ）アセテート（Ｃａｐ−２，工程ｄ.１）（１２４ｍｇ）を第一溶出ピークとして、および（Ｓ）−ベンジル  ２−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−（ジフェニルメチレンアミノ）アセテート（Ｃａｐ−２，工程ｄ.２）（１２９ｍｇ）を第二溶出ピークとして得た。各ジアステレオマーを粘稠性黄色油状物として得た。
【００９１】
（Ｒ）−ベンジル  ２−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−（ジフェニルメチレンアミノ）アセテート（Ｃａｐ−２，工程ｄ.１）についての分析データは次のとおりであった：１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ４−ＭｅＯＨ）  δ  ｐｐｍ  ７.５７−７.６１（ｍ，２Ｈ）、７.４１−７.４８（ｍ，４Ｈ）、７.３３−７.４０（ｍ，７Ｈ）、７.０３−７.０８（ｍ，２Ｈ）、５.２２（ｄ，Ｊ＝１２.１Ｈｚ，１Ｈ）、５.１６（ｄ，Ｊ＝１２.１Ｈｚ，１Ｈ）、４.０９−４.１９（ｍ，１Ｈ）、３.８４（ｄ，Ｊ＝６.８Ｈｚ，１Ｈ）、３.７５−３.８３（ｍ，１Ｈ）、２.５３−２.６４（ｍ，１Ｈ）、１.５８−１.６５（ｍ，１Ｈ）、１.３３−１.４３（ｍ，１Ｈ）、１.２６−１.３２（ｍ，１Ｈ）、１.２４（ｄ，Ｊ＝７.０Ｈｚ，３Ｈ）、１.１０（ｄ，Ｊ＝６.０Ｈｚ，３Ｈ）、０.９８−１.０８（ｍ，１Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ保持時間  ４.２８分；ｍ／ｚ  ４４２.１６  ［Ｍ＋Ｈ］＋。ＬＣデータは２２０ｎｍの検出器の波長でＳＰＤ−１０ＡＶ  ＵＶ−Ｖｉｓ検出器を用いてＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ−Ｌｕｎａ３μＣ１８  ２．０ｘ５０ｍｍカラムを備えた島津製ＬＣ−１０ＡＳ液体クロマトグラフィーに記録した。溶出条件は０.８ｍＬ／分の流速、１００％溶媒Ａ／０％溶媒Ｂ〜０％溶媒Ａ／１００％溶媒Ｂのグラジエント、４分間のグラジエント時間、１分間の維持時間、および５分間の分析時間を利用し、ここで溶媒Ａは５％ＭｅＯＨ／９５％Ｈ２Ｏ／１０ｍＭ酢酸アンモニウムであり、溶媒Ｂは５％Ｈ２Ｏ／９５％ＭｅＯＨ／１０ｍＭ酢酸アンモニウムであった。ＭＳデータはエレクトロスプレーモードのＬＣについてＭｉｃｒｏｍａｓｓ  Ｐｌａｔｆｏｒｍを用いて測定した。
【００９２】
（Ｓ）−ベンジル  ２−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−（ジフェニルメチレンアミノ）アセテート（Ｃａｐ−２，工程ｄ.２）の分析データは次のとおりであった：１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ４−ＭｅＯＨ）  δ  ｐｐｍ  ７.５７−７.６１（ｍ，２Ｈ）、７.４１−７.５０（ｍ，４Ｈ）、７.３３−７.４０（ｍ，７Ｈ）、７.０４−７.０８（ｍ，２Ｈ）、５.２２（ｄ，Ｊ＝１２.１Ｈｚ，１Ｈ）、５.１６（ｄ，Ｊ＝１２.１Ｈｚ，１Ｈ）、４.２０（ｑｄ，Ｊ＝６.４、６.３Ｈｚ，１Ｈ）、３.８６（ｄ，Ｊ＝６.５Ｈｚ，１Ｈ）、３.７４−３.８３（ｍ，１Ｈ）、２.５３−２.６４（ｍ，１Ｈ）、１.６０（ｔｄ，Ｊ＝１２.７、５.６Ｈｚ，１Ｈ）、１.３８−１.５１（ｍ，２Ｈ）、１.２６（ｄ，Ｊ＝７.０Ｈｚ，３Ｈ）、１.０４（ｄ，Ｊ＝６.０Ｈｚ，３Ｈ）、０.７９−０.８９（ｍ，１Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ保持時間  ４.２７分；ｍ／ｚ  ４４２.１７  ［Ｍ＋Ｈ］＋。ＬＣデータは２２０ｎｍの検出器の波長でＳＰＤ−１０ＡＶ  ＵＶ−Ｖｉｓ検出器を用いてＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ−Ｌｕｎａ３μＣ１８  ２．０ｘ５０ｍｍカラムを備えた島津製ＬＣ−１０ＡＳ液体クロマトグラフィーに記録した。溶出条件は０.８ｍＬ／分の流速、１００％溶媒Ａ／０％溶媒Ｂ〜０％溶媒Ａ／１００％溶媒Ｂのグラジエント、４分間のグラジエント時間、１分間の維持時間、および５分間の分析時間を利用し、ここで溶媒Ａは５％ＭｅＯＨ／９５％Ｈ２Ｏ／１０ｍＭ酢酸アンモニウムであり、溶媒Ｂは５％Ｈ２Ｏ／９５％ＭｅＯＨ／１０ｍＭ酢酸アンモニウムであった。ＭＳデータはエレクトロスプレーモードのＬＣについてＭｉｃｒｏｍａｓｓ  Ｐｌａｔｆｏｒｍを用いて測定した。
【００９３】
Ｃａｐ−２，工程ｅ
【化１７】
0005815746.tif 000024
【００９４】
（Ｓ）−ベンジル  ２−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−（ジフェニルメチレンアミノ）アセテート（Ｃａｐ−２，工程ｄ.２）（１２９.６ｍｇ、０.２９４ミリモル）をＴＨＦ（２ｍＬ）に溶かし、ついで水中２Ｎ  ＨＣｌ（１.０ｍＬ、２.１ミリモル）で処理した。反応液を２時間攪拌し、ついで窒素流の下で一夜濃縮させた。粗製残渣をＤＣＭ（２ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（０.２１ｍＬ、１.２ミリモル）に溶かし、次にクロロギ酸メチル（０.０３２ｍＬ、０.４１ミリモル）で処理し、室温で４時間攪拌した。該反応物を水（約２.５ｍＬ）で稀釈し、ＤＣＭ（４ｘ２ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を窒素流下で一夜濃縮させ、残渣をＢｉｏｔａｇｅ（登録商標）Ｈｏｒｉｚｏｎ（４ｇ  ＳｉＯ２、１０−５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を用いて精製し、（Ｓ）−ベンジル  ２−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−（メトキシカルボニルアミノ）アセテート（Ｃａｐ−２，工程ｅ）（５６ｍｇ）を無色針状晶として得た。ＬＣ−ＭＳ保持時間  ３.３３８分；ｍ／ｚ  ３３５.９９  ［Ｍ＋Ｈ］＋。ＬＣデータは２２０ｎｍの検出器の波長でＳＰＤ−１０ＡＶ  ＵＶ−Ｖｉｓ検出器を用いてＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ−Ｌｕｎａ３μＣ１８  ２．０ｘ５０ｍｍカラムを備えた島津製ＬＣ−１０ＡＳ液体クロマトグラフィーに記録した。溶出条件は０.８ｍＬ／分の流速、１００％溶媒Ａ／０％溶媒Ｂ〜０％溶媒Ａ／１００％溶媒Ｂのグラジエント、４分間のグラジエント時間、１分間の維持時間、および５分間の分析時間を利用し、ここで溶媒Ａは５％ＭｅＯＨ／９５％Ｈ２Ｏ／１０ｍＭ酢酸アンモニウムであり、溶媒Ｂは５％Ｈ２Ｏ／９５％ＭｅＯＨ／１０ｍＭ酢酸アンモニウムであった。ＭＳデータはエレクトロスプレーモードのＬＣについてＭｉｃｒｏｍａｓｓ  Ｐｌａｔｆｏｒｍを用いて測定した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ４−ＭｅＯＨ）  δ  ｐｐｍ  ７.２９−７.４２（ｍ，５Ｈ）、５.２８（ｄ，Ｊ＝１２.０Ｈｚ，１Ｈ）、５.０９（ｄ，Ｊ＝１２.０Ｈｚ，１Ｈ）、４.１０−４.２０（ｍ，２Ｈ）、３.６８−３.７８（ｍ，１Ｈ）、３.６５（ｓ，３Ｈ）、２.２２−２.３６（ｍ，１Ｈ）、１.４２−１.５４（ｍ，２Ｈ）、１.２９−１.３８（ｍ，１Ｈ）、１.１７（ｄ，Ｊ＝６.８Ｈｚ，３Ｈ）、１.０４（ｄ，Ｊ＝６.０Ｈｚ，３Ｈ）、０.８９−１.００（ｍ，１Ｈ）
【００９５】
Ｃａｐ−２
（Ｓ）−ベンジル  ２−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−（メトキシカルボニルアミノ）アセテート（Ｃａｐ−２，工程ｅ）（５６ｍｇ、０.１６７ミリモル）をＭｅＯＨ（４ｍＬ）に溶かし、ついで１０％Ｐｄ／Ｃ（１２ｍｇ、０.０１２ミリモル）で処理した。反応混合物を窒素（４ｘ）で、次に水素（４ｘ）で真空下フラッシュに付し、水素のバルーンの下で一夜攪拌した。反応物をセライト（登録商標）を介して濾過し、濃縮して（Ｓ）−２−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−（メトキシカルボニルアミノ）酢酸（Ｃａｐ−２）（４１ｍｇ）を無色油状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ４−ＭｅＯＨ）  δ  ｐｐｍ  ４.２２（五重項，Ｊ＝６.４Ｈｚ，１Ｈ）、４.０４−４.１１（ｍ，１Ｈ）、３.７８−３.８７（ｍ，１Ｈ）、３.６６（ｓ，３Ｈ）、２.２６−２.３９（ｍ，１Ｈ）、１.６３（ｄ，Ｊ＝１３.１Ｈｚ，１Ｈ）、１.５１−１.６０（ｍ，１Ｈ）、１.４２−１.４９（ｍ，１Ｈ）、１.２７（ｄ，Ｊ＝７.０Ｈｚ，３Ｈ）、１.１１（ｄ，Ｊ＝６.３Ｈｚ，３Ｈ）、０.９７−１.０８（ｍ，１Ｈ）
留意点：Ｃａｐ−２の絶対立体化学は、Ｃａｐ−２のエピマー（（Ｒ）−２−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−（（メトキシカルボニル）アミノ）酢酸）および（Ｓ）−１−（ナフタレン−２−イル）エタナミンより調製されるアミドアナログを単結晶Ｘ−線解析に付して決定された。
【００９６】
Ｃａｐ−２の別の合成がスキーム−１にて説明される。（Ｒ）−２−メチル−２Ｈ−ピラン−４（３Ｈ）−オンをもたらす最初の４工程は、（Anderson, K.Rら、Org. Proc. Res. Dev. 2010、14、58）にて報告されている操作を適合させてなされた。（Ｒ）−２−メチル−２Ｈ−ピラン−４（３Ｈ）−オンの（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４（３Ｈ）−オンへの変換は（Reddy, D. S.ら、J. Org. Chem. 2004, 69, 1716）にて報告されている操作を適合させることでなされた。さらに詳細な説明は以下に提供される。
【００９７】
【化１８】
0005815746.tif 000025
【００９８】
【化１９】
0005815746.tif 000026
【００９９】
ｔｅｒｔ−ブチルクロロジメチルシラン（５４７ｇ、３.６３モル）を、窒素下、０℃にて、（Ｒ）−エチル  ３−ヒドロキシブタノエート（４００ｇ、３.０３モル）のＤＣＭ（８００ｍＬ）中攪拌溶液に添加した。イミダゾール（４１２ｇ、６.０５モル）を該反応混合物に２０分間にわたって少しずつ添加し、その間に該混合物は粘性の白色スラリーとなった。さらなるＤＣＭ（１７５ｍＬ）を添加し、該混合物を室温にまで加温させ、１６時間攪拌した。白色固体を濾過により除去し、ＤＣＭ（５００ｍＬ）ですすぎ、水（１Ｌ）とＤＣＭ（５００ｍＬ）の間に分配させ、水層を付加的なＤＣＭ（５００ｍＬ）でさらに抽出した。濾液を有機層と合わせ、水（５００ｍＬ）および食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過した。生成物を濃縮し、高真空下で乾燥させ、未同定の不純物を含有する、（Ｒ）−エチル  ３−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）ブタノエート（７７７.５ｇ）を得た。粗生成物の分析データは文献に報告されているデータに適合した。該物質をさらに精製することなく使用した。
【０１００】
【化２０】
0005815746.tif 000027
【０１０１】
２Ｍ塩化イソプロピルマグネシウムのＴＨＦ中溶液（８００ｍＬ、１.６０モル）を、（Ｒ）−エチル  ３−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）ブタノエート（１３１ｇ、５３２ミリモル）およびＮ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン／ＨＣｌ（８０ｇ、８２４ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（８５０ｍＬ）中攪拌溶液に、その内部温度を−３０℃〜−２０℃に維持しながらカニューレを介して６０分間にわたって滴下した。該懸濁液を−２０〜−１０℃の間で３時間にわたって攪拌させ、冷却しながら塩化アンモニウム飽和水溶液（４００ｍＬ）でクエンチさせた。反応混合物を水（２００ｍＬ）とジエチルエーテル（５００ｍＬ）の間に分配させ、水相をジエチルエーテル（１Ｌ）でさらに抽出させた。合わせた有機相を食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮し、高真空下で乾燥させて（Ｒ）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルブタナミドを得た。該反応を６回繰り返し、合計で７１７ｇの物質を得た。分析データは文献に報告されているデータに適合した。該物質をさらに精製することなく使用した。
【０１０２】
【化２１】
0005815746.tif 000028
【０１０３】
ピペリジン−１−アミン（７５４ｍＬ、６.９９モル）を０℃に維持したアセトアルデヒド（３０４ｍＬ、５.３８モル）に窒素下にて攪拌しながら６０分間にわたって滴下した。［注意：添加により発熱が生じる。この規模では、ピペリジン−１−アミン含有の滴下ロートは、気化し、該滴下ロートにて液化したアセトアルデヒドが原因で熱くなった］。０℃で１時間、および室温で１時間経過した後、該反応フラスコに１６インチ還流冷却器を備え、４０℃に加温し、２０時間攪拌した。反応混合物を室温に冷却し、ジエチルエーテル（７００ｍＬ）と食塩水（３００ｍＬ）の間に分配させた。有機層を水で洗浄し、水層をジエチルエーテル（２ｘ５００ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮し、高真空下で８時間乾燥させ、（Ｅ）−Ｎ−エチリデンピペリジン−１−アミン（７７２ｇ）（不純物含有）を黄色油状物として得た。分析データは文献に報告されているデータに適合した。該物質をさらに精製することなく使用した。
【０１０４】
【化２２】
0005815746.tif 000029
【０１０５】
ヘキサン中のｎ−ＢｕＬｉ（２.５Ｍ、６４４ｍＬ、１.６１モル）を４０分間にわたってジイソプロピルアミン（２４５ｍＬ、１.７２モル）の乾燥ＴＨＦ（２.３Ｌ）中攪拌溶液に窒素下０℃にて添加した。該混合物を０℃で３０分間攪拌し、次に（Ｅ）−Ｎ−エチリデンピペリジン−１−アミン（２０３ｇ、１.６１モル）の乾燥ＴＨＦ（１００ｍＬ）中溶液を滴下した。該反応混合物を０℃で２時間攪拌し、該懸濁液を−７８℃に冷却し、（Ｒ）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルブタナミド（２８０.４ｇ、１.０７３モル）の乾燥ＴＨＦ（１００ｍＬ）中溶液で滴下処理した。該反応混合物を−７８℃で３時間攪拌し、ゆっくりと室温にまで加温し、ついで１６時間攪拌した。反応混合物を水（６００ｍＬ）とジエチルエーテル（１.５Ｌ）の間に分配し、水層をジエチルエーテルでさらに抽出した。有機層を合わせて、食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して琥珀色油状物を得た。該粗製油状物をショートカラムを介して精製し（４Ｌ焼結ガラスロート中の３Ｌシリカゲルを５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンと予め平衡にし、次に粗製油状物を５０ｍＬのＤＣＭ／ヘキサン（１：５）に溶かし、該シリカゲルの頂部にローディングし、最後に該カラムを５−４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出し）、（Ｅ）−５−（（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−１−（ピペリジン−１−イルイミノ）ヘキサン−３−オンを得た。不純物のフラクションを合わせ、濃縮し、Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）Ｈｏｒｉｚｏｎ（３００ｇ  ＳｉＯ２、１５−４５％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で再び精製し、さらなる生成物（合計で２３０ｇ）を得た。分析データは文献に報告されているデータに適合した。該物質をさらに精製することなく使用した。
【０１０６】
【化２３】
0005815746.tif 000030
【０１０７】
Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ−１５（１２２ｇ、３７２ミリモル）（乾燥形態、淡褐色ビーズ、Alfa Aesar、ストック番号８９０７９またはＬ１４１４６）を、（Ｅ）−５−（（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−１−（ピペリジン−１−イルイミノ）ヘキサン−３−オン（１２１ｇ、３７２ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（１.２Ｌ）中攪拌溶液に一度に添加した。該混合物を２.５時間還流させ、冷却し、濾過し、琥珀色液体にまで濃縮した。該粗製液体をショートカラムを介して精製し（該粗生成物を３０ｍＬの５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンに溶かし、５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで予め平衡にした４Ｌの焼結ガラスロートの１.５Ｌのシリカゲルの頂部にローディングし）、エノン（Ｒ）−２−メチル−２Ｈ−ピラン−４（３Ｈ）−オンを得た。注意：ロータリーエバポレーターを用いて注意して溶媒を除去したが（浴温度は外界温度以下であった）、所望の生成物のいくらかは回収トラップにて検出された。この物質は蒸留ヘッドを備えた２０インチのＶｉｇｒｅｕｘカラムを用いて濃縮され、溶媒を除去し、最初の物質と合わせた。所望のすべての生成物を蒸留に付してさらに精製し、１０ｍｍＨｇで沸点が６８−７０℃の無色油状物（１７.８ｇ）を得た。旋光度：＋２１２.８、ｃ＝０.４６ｇ／１００ｍＬ  ＣＨＣｌ３。
【０１０８】
【化２４】
0005815746.tif 000031
【０１０９】
ジエチルエーテル中メチルリチウム（１.６Ｍ、２１８ｍＬ、３４９ミリモル）を約１０ｍＬずつ２０分間にわたって、窒素下、０℃に冷却したヨウ化銅（Ｉ）（４４.３ｇ、２３３ミリモル）のジエチルエーテル（３５０ｍＬ）中攪拌スラリーに添加した。反応混合物を０℃で３０分間攪拌し、ついでジエチルエーテル（１５０ｍＬ）中の（Ｒ）−２−メチル−２Ｈ−ピラン−４（３Ｈ）−オン（１３.５ｇ、１１６ミリモル）を３０分間にわたって滴下した。冷却浴を除去し、反応混合物を室温に加温し、３時間攪拌した。反応混合物をゆっくりと（約５分間にわたって）ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液（約７５０ｍＬ）および氷の攪拌溶液に添加した。付加的なジエチルエーテル（約５００ｍＬ）および水（約１５０ｍＬ）を添加し、灰色沈殿物を含有する溶液を一夜攪拌した。層を分離し、水層をジエチルエーテル（５００ｍＬ）およびＤＣＭ（５００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、橙色油状物に濃縮した（ロータリーエバポレーター浴温度は外界温度以下に保持した）。粗油状物はＢｉｏｔａｇｅ（登録商標）Ｈｏｒｉｚｏｎ（２４０ｇ  ＳｉＯ２、ＤＣＭ中１−４％ジエチルエーテル、カラムはＤＣＭを用いて平衡にされた）を用いて精製され、（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４（３Ｈ）−オン（１３.４ｇ、１Ｈ−ＮＭＲによれば８６％純度）を淡黄色油状物として得た。［注意：該物質を注意して濃縮し、それは１Ｈ−ＮＭＲによれば１０％ｗ／ｗのＤＣＭを含有した。１Ｈ−ＮＭＲ分析はまた、該物質には前の反応からキャリーオーバーした約２.５％のＴＢＤＭＳＯＨおよび１.６％の（２Ｒ，６Ｓ）−２，６−ジメチルジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４（３Ｈ）−オンが混入している。］該生成物の分析データは文献に報告されているデータと適合し、該物質を付加的に精製することなく用いた。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ４.４１−４.２５（ｍ，２Ｈ）、２.５５（ｄｄｄ，J＝１４.１、４.８、１.４Ｈｚ，２Ｈ）、２.２４（ｄｄｄ，J＝１４.１、６.５、１.５Ｈｚ，２Ｈ）、１.２８（ｄ，J＝６.５Ｈｚ，６Ｈ）
【０１１０】
【化２５】
0005815746.tif 000032
【０１１１】
酸化第一銅（２.２１ｇ、１５.４ミリモル）をエチル２−イソシアノアセテート（１２.７ｍＬ、１１６ミリモル）のジエチルエーテル（３００ｍＬ）中攪拌溶液に加え、該スラリーを１０分間激しく攪拌した。ジエチルエーテル（１００ｍＬ）中の（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４（３Ｈ）−オン（１５.２ｇ、１０３ミリモル、１３％ｗ／ｗのＤＣＭを含め純度８７％）を１５分間にわたって添加し、該反応混合物を室温で２時間攪拌した。反応混合物を０℃に冷却し、ＴＨＦ中１Ｍ  ＫＯ−ｔＢｕ（１１６ｍＬ、１１６ミリモル）を１０ｍＬずつ約１５分間にわたって添加して処理し、ついで０℃で１時間攪拌した。酢酸（６.６６ｍＬ、１１６ミリモル）のＤＣＭ（６０ｍＬ）中溶液を加え、該反応混合物を室温に加温させ、２時間攪拌した。粗反応混合物を水（約３００ｍＬ）とジエチルエーテル（約３００ｍＬ）の間に分配させ、水層をＤＣＭ（３００ｍＬ）でさらに抽出した。合わせた有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過し、暗赤色油状物に濃縮し、それを減圧下で固化させた。粗物質をＢｉｏｔａｇｅ（登録商標）Ｈｏｒｉｚｏｎクロマトグラフィー（３００ｇ  ＳｉＯ２；最小量のＤＣＭを用いてカラムにローディングし；４倍のカラム容量については４０％に保持する、４０−６０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出した）に付して精製した。所望の生成物の初期フラクションはまた、標的生成物のシス−立体異性体のバージョンを不純物として含有した。これらの不純物のフラクションを合わせ、濃縮し、８.９ｇの淡黄色油状物を得、それをＢｉｏｔａｇｅ（登録商標）Ｈｏｒｉｚｏｎクロマトグラフィー（２４０ｇ  シリカゲル；５倍のカラム容量については４０％に保持する、４０−６５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出する）に付して再び精製した。両方の精製工程からの、ＴＬＣにより測定された、所望の清澄な生成物のフラクションをすべて合わせ、濃縮し、エチル  ２−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチル−２Ｈ−ピラン−４（３Ｈ，５Ｈ，６Ｈ）−イリデン）−２−ホルムアミドアセテート（１８.８ｇ）を、＜１％（ＨＰＬＣ）のシス−ジメチル異性変異体の混雑した淡黄色固体として得た。
【０１１２】
純粋な物質の１Ｈ−および１３Ｃ−ＮＭＲデータは、アミド回転異性体の２：１の混合物を提示する：１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ８.２４（ｄ，J＝１.３Ｈｚ，０.６６Ｈ）、７.９８（ｄ，J＝１１.５Ｈｚ，０.３３Ｈ）、６.７１（ｂｒ．ｓ.、０.６６Ｈ）、６.５６（ｄ，J＝１２.０Ｈｚ，０.３３Ｈ）、４.３２−４.００（ｍ，４Ｈ）、３.０５（ｄｄ，J＝１４.３、４.３Ｈｚ，０.３３Ｈ）、２.９２（ｄ，J＝５.３Ｈｚ，１.３３Ｈ）、２.８２（ｄｄ，J＝１４.３、６.５Ｈｚ，０.３３Ｈ）、２.６２（ｄｄ，J＝１３.９、３.９Ｈｚ，０.３３Ｈ）、２.４５（ｄｄ，J＝１４.１、３.８Ｈｚ，０.６６Ｈ）、２.２４（ｄｄ，J＝１３.８、７.３Ｈｚ，０.３３Ｈ）、２.１４−２.０４（ｍ，０.６６Ｈ）、１.３７−１.２９（ｍ，３Ｈ）、１.２８−１.１８（ｍ，６Ｈ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  １６４.５（０.６６Ｃ）、１６３.９（０.３３Ｃ）、１６３.８（０.３３Ｃ）、１５９.３（０.６６Ｃ）、１４７.５（０.３３Ｃ）、１４７.０（０.６６Ｃ）、１２０.３（０.３３Ｃ）、１１８.６（０.６６Ｃ）、６８.１（０.６６Ｃ）、６７.８（０.３３Ｃ）、６７.４（０.３３Ｃ）、６６.８（０.６６Ｃ）、６１.１（０.３３Ｃ）、６０.９（０.６６Ｃ）、３８.２（０.６６Ｃ）、３７.４（０.３３Ｃ）、３６.２（０.３３Ｃ）、３６.０（０.６６Ｃ）、２０.５（０.６６Ｃ）、２０.１（０.３３Ｃ）、１９.５（０.３３Ｃ）、１９.２（０.６６Ｃ）、１３.８（ｓ，１Ｃ）。ＬＣ−ＭＳ保持時間  １.８５分；ｍ／ｚ  ２４２.４５（Ｍ＋Ｈ）＋。ＬＣデータは２２０ｎｍの検出器の波長でＳＰＤ−１０ＡＶ  ＵＶ−Ｖｉｓ検出器を用いてＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ−Ｌｕｎａ３μＣ１８  ２．０ｘ５０ｍｍカラムを備えた島津製ＬＣ−１０ＡＳ液体クロマトグラフィーに記録した。溶出条件は０.８ｍＬ／分の流速、１００％溶媒Ａ／０％溶媒Ｂ〜０％溶媒Ａ／１００％溶媒Ｂのグラジエント、４分間のグラジエント時間、１分間の維持時間、および５分間の分析時間を利用した。溶媒Ａは１０％アセトニトリル／９０％Ｈ２Ｏ／０．１％トリフルオロ酢酸であり、溶媒Ｂは１０％Ｈ２Ｏ／９０％アセトニトリル／０．１％トリフルオロ酢酸であった。ＭＳデータはエレクトロスプレーモードのＬＣについてＭｉｃｒｏｍａｓｓ  Ｐｌａｔｆｏｒｍを用いて測定した。
【０１１３】
【化２６】
0005815746.tif 000033
【０１１４】
窒素を、２．５Ｌのパール水素添加容器にある、エチル  ２−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチル−２Ｈ−ピラン−４（３Ｈ，５Ｈ，６Ｈ）−イリデン）−２−ホルムアミドアセテート（１７.０ｇ、７０.５ミリモル）のＭｅＯＨ（４８０ｍＬ）中溶液に１０分間にわたって通気した。次に、（−）−１，２−ビス（（２Ｓ，５Ｓ）−２，５−ジメチルホスホラノ）エタン（シクロオクタジエン）−ロジウム（Ｉ）テトラフルオロボラート（０.７０６ｇ、１.２７ミリモル）を加え、該反応容器を密封し、窒素（４ｘ）で真空フラッシュに付し、ついで水素（４ｘ）で真空フラッシュに付した。該反応溶液を６０ｐｓｉの水素の下で３日間振盪させ、振盪器を取り外し、暗赤色油状物に濃縮した。該粗油状物をＢｉｏｔａｇｅ（登録商標）Ｈｏｒｉｚｏｎクロマトグラフィー（３００ｇ  ＳｉＯ２、５０−７５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製し、（Ｓ）−エチル  ２−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−ホルムアミドアセテート（１７.４ｇ、１Ｈ−ＮＭＲによれば５.９％ｗ／ｗ溶媒（ＥｔＯＡｃおよびＤＣＭ）を含有する）を淡黄色粘性油状物として得た。１Ｈ−ＮＭＲデータは２種のアミド回転異性体の１０：１混合物を示す。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ８.２６（ｓ，０.９Ｈ）、８.０１（ｄ，J＝１１.８Ｈｚ，０.１Ｈ）、６.１５（ｄ，J＝８.５Ｈｚ，０.９Ｈ）、５.９６−５.８４（ｍ，０.１Ｈ）、４.６８（ｄｄ，J＝９.０、５.０Ｈｚ，０.９Ｈ）、４.３３−４.１７（ｍ，３Ｈ）、３.８７（ｄｄ，J＝１０.２、６.４Ｈｚ，０.１Ｈ）、３.７５（ｄｑｄ，J＝１１.５、６.０、２.０Ｈｚ，１Ｈ）、２.４１−２.２９（ｍ，０.９Ｈ）、２.２９−２.１９（ｍ，０.１Ｈ）、１.７２−１.２８（ｍ，３Ｈ）、１.２８−１.２３（ｍ，６Ｈ）、１.１７−１.１０（ｍ，３Ｈ）、１.０９−０.９６（ｍ，１Ｈ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  １７０.６、１６０.３、６８.１、６４.０、６１.４、５４.２、３６.０、３３.１、３０.６、２１.９、１６.７、１３.９。ＬＣ−ＭＳ保持時間  １.６４分；ｍ／ｚ  ２４４.２５（Ｍ＋Ｈ）＋。ＬＣデータは２２０ｎｍの検出器の波長でＳＰＤ−１０ＡＶ  ＵＶ−Ｖｉｓ検出器を用いてＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ−Ｌｕｎａ３μＣ１８  ２．０ｘ５０ｍｍカラムを備えた島津製ＬＣ−１０ＡＳ液体クロマトグラフィーに記録した。溶出条件は０.８ｍＬ／分の流速、１００％溶媒Ａ／０％溶媒Ｂ〜０％溶媒Ａ／１００％溶媒Ｂのグラジエント、４分間のグラジエント時間、１分間の維持時間、および５分間の分析時間を利用した。溶媒Ａは１０％アセトニトリル／９０％Ｈ２Ｏ／０．１％トリフルオロ酢酸であり、溶媒Ｂは１０％Ｈ２Ｏ／９０％アセトニトリル／０．１％トリフルオロ酢酸であった。ＭＳデータはエレクトロスプレーモードのＬＣについてＭｉｃｒｏｍａｓｓ  Ｐｌａｔｆｏｒｍを用いて測定した。
【０１１５】
【化２７】
0005815746.tif 000034
【０１１６】
隔壁で栓をされ、針で通気された、冷却器を備えた１Ｌフラスコにて、（Ｓ）−エチル  ２−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−ホルムアミドアセテート（１７.６ｇ、７２.３ミリモル）のエタノール（４０９ｍＬ）および１.５Ｎ  ＨＣｌ（水性）（４０９ｍＬ）中溶液を予め平衡にした油浴中に５２℃で７.５時間加熱した。揮発性成分を減圧下で除去し、残渣をＥｔＯＨ（２ｘ５０ｍＬ）と共に共沸蒸留に付し、減圧下で一夜乾燥させ、白色泡沫体を得た。該白色泡沫物をＤＣＭ（４０９ｍＬ）に溶かし、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３８.０ｍＬ、２１８ミリモル）を１０分間にわたって滴下し、つづいてクロロ炭酸メチル（８.４０ｍＬ、１０９ミリモル）も１０分間にわたって滴下した。反応混合物を外界温度で４.５時間攪拌し、ついで１Ｎ  ＨＣｌ（１００ｍＬ）で注意してクエンチさせた。層を分離し、有機層を１Ｎ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）で洗浄し、ついで塩基性水溶液（５０ｍＬの水＋２ｍＬの飽和ＮａＨＣＯ３）で洗浄した。有機層を乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過して濃縮した。残渣をＢｉｏｔａｇｅ（登録商標）に付して精製し（３００ｇ  ＳｉＯ２；サンプルを少量のクロロホルムと共にカラム上にローディングし、３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出し）、（Ｓ）−エチル  ２−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−（メトキシカルボニル−アミノ）アセテート（１３.８ｇ）を粘性黄色油状物として得た。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ５.２３（ｄ，J＝８.８Ｈｚ，１Ｈ）、４.３４−４.１５（ｍ，４Ｈ）、３.８１−３.７２（ｍ，１Ｈ）、３.７０（ｓ，３Ｈ）、２.３５−２.２３（ｍ，１Ｈ）、１.６３−１.５１（ｍ，２Ｈ）、１.３４−１.２７（「ｍ」＆「ｔ」の重複，J＝７.０Ｈｚ，１Ｈ＆３Ｈ）、１.２５（ｄ，J＝６.８Ｈｚ，３Ｈ）、１.１４（ｄ，J＝６.０Ｈｚ，３Ｈ）、１.１１−０.９９（ｍ，１Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ保持時間  ２.８９分；ｍ／ｚ  ２９６.２３（Ｍ＋Ｎａ）＋。ＬＣデータは２２０ｎｍの検出器の波長でＳＰＤ−１０ＡＶ  ＵＶ−Ｖｉｓ検出器を用いてＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ−Ｌｕｎａ３μＣ１８  ２．０ｘ５０ｍｍカラムを備えた島津製ＬＣ−１０ＡＳ液体クロマトグラフィーに記録した。溶出条件は０.８ｍＬ／分の流速、１００％溶媒Ａ／０％溶媒Ｂ〜０％溶媒Ａ／１００％溶媒Ｂのグラジエント、４分間のグラジエント時間、１分間の維持時間、および５分間の分析時間を利用した。溶媒Ａは１０％ＭｅＯＨ／９０％Ｈ２Ｏ／０．１％トリフルオロ酢酸であり、溶媒Ｂは１０％Ｈ２Ｏ／９０％ＭｅＯＨ／０．１％トリフルオロ酢酸であった。ＭＳデータはエレクトロスプレーモードのＬＣについてＭｉｃｒｏｍａｓｓ  Ｐｌａｔｆｏｒｍを用いて測定した。
【０１１７】
補注：上記した生成物は加水分解工程に付す前にＳＦＣクロマトグラフィー（１８０ｍｇ／注入、７.２ｇ／時間のスループット）に供して精製し、同定されない不純物を除去した。
条件：
カラム：ＣｈｉｒａｌＰａｋ  ＡＤ−Ｈ  ２５ｘ３ｃｍ、５μ
カラム温度：２５℃
流速：１５０ｍＬ／分
移動相：ＣＯ２／ＭｅＯＨ＝９３／７
注入容量：１.０ｍＬ（１８０ｍｇ／ｍＬ）
注入モデル：積層型（注入／ランタイム（分）＝１.４７／３.０）
検出器波長：２２０ｎｍ 
サンプル溶媒：ＣＨ３ＯＨ／ＣＨ３ＣＮ＝１：１（ｖ／ｖ）
【０１１８】
【化２８】
0005815746.tif 000035
【０１１９】
水酸化リチウム・水和物（８.５１ｇ、２０３ミリモル）／Ｈ２Ｏ（２７０ｍＬ）を、（Ｓ）−エチル  ２−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−（メトキシカルボニル−アミノ）アセテート（２７.７ｇ、１０１ミリモル）のＴＨＦ（４０５ｍＬ）中攪拌溶液に、内部温度を＜５℃に維持しながら、６５分間にわたって滴下した。反応混合物を氷浴にて４０分間、ついで水浴にて室温で５時間攪拌した。反応混合物を部分的に濃縮し、ＴＨＦを除去し、次に水（２５０ｍＬ）とＤＣＭ（２５０ｍＬ）の間に分配させた。水層をｐＨ＝２に１Ｎ  ＨＣｌ（２０５ｍＬ）で調整し、ついで酢酸イソプロピル（７ｘ２５０ｍＬ）で抽出させた。合わせた抽出物を食塩水（１ｘ６００ｍＬ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過して濃縮させた。得られた粘性油状物をトルエン（１００ｍＬ）およびエーテル（７５ｍＬ）で処理し、蒸発させ、減圧下で乾燥させ、Ｃａｐ−２（２５.８ｇ、０.３３当量のトルエンを含む）を白色泡沫体として得た。キラルＳＦＣ純度＞９９.９％（ＣｈｉｒａｌＰａｋ  ＡＤ−Ｈ（２５ｘ０.４６ｃｍ、５μｍ）、ＣＯ２中５％ＥｔＯＨ、３ｍＬ／分、３５℃、２２０ｎｍ、１００バール）。ＨＰＬＣ純度  ９５.６％（カラム：Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ８  ７５ｘ４.６ｍｍ  ＩＤ；２.５μｍ；４０℃；移動相：Ａ＝水ｗ／０.１％ギ酸；Ｂ＝ＣＨ３ＣＮｗ／０.１％ギ酸）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳ＋）  ２２８.１（Ｍ＋Ｈ−Ｈ２Ｏ）＋。１Ｈ−ＮＭＲによれば、該物質は約０.３３当量のトルエンを含有した。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ５.２９（ｄ，J＝８.６Ｈｚ，１Ｈ）、４.４６−４.２５（ｍ，２Ｈ）、３.８２（ｄｄ，J＝９.７、５.９Ｈｚ，１Ｈ）、３.７４（ｓ，３Ｈ）、２.４６−２.３０（ｍ，１Ｈ）、１.７６−１.５５（ｍ，２Ｈ）、１.５１−１.３５（ｍ，１Ｈ）、１.２９（ｄ，J＝６.８Ｈｚ，３Ｈ）、１.１８（ｄ，J＝６.２Ｈｚ，３Ｈ）、１.１８−１.０６（ｍ，１Ｈ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  １７４.１、１５６.７、６８.３、６４.４、５７.５、５２.２、３５.８、３２.６、３０.３、２１.６、１６.７
【０１２０】
実施例１
【化２９】
0005815746.tif 000036
【０１２１】
実施例１，工程ａ
【化３０】
0005815746.tif 000037
【０１２２】
上記の化合物を、文献記載のプロトコル（J. Med. Chem., 2006, 49, 3520）に従い、次の精製修飾を用いて合成した：該粗物質を外界温度でＥｔＯＡｃ／ヘキサンより再結晶化させ、実施例１，工程ａを白色結晶として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ４.３２（ｂｒ  ｍ，１Ｈ）、３.８９（ｂｒ  ｍ，１Ｈ）、２.４０（ｂｒ  ｍ，１Ｈ）、２.００（ｍ，２Ｈ）、１.６５（ｍ，１Ｈ）、１.４５（ｓ，９Ｈ）、１.２０（ｄ，J＝５.６，３Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｎａ］＋Ｃ１１Ｈ２０ＮＯ４Ｎａとして：計算値  ２５２.１２；測定値  ２５２.２１
【０１２３】
実施例１，工程ｂ
【化３１】
0005815746.tif 000038
【０１２４】
実施例１，工程ａ（７.１２ｇ、３１.１ミリモル）および１，１’−（ビフェニル−４，４’−ジイル）ビス（２−ブロモエタノン）（６.０ｇ、１５ミリモル）のアセトニトリル（１００ｍＬ）中混合物に、ｉ−Ｐｒ２ＥｔＮ（５.５６ｍＬ、３１.８ミリモル）を滴下し、該反応物を室温で３時間攪拌した。揮発成分を減圧下で除去し、残渣をＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）とＮａＨＣＯ３飽和水溶液（１００ｍＬ）の間に分配させた。有機層を分離し、水および食塩水で洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させ、濾過し、減圧下で濃縮し、実施例１，工程ｂを白色泡沫物（９.８３ｇ）として得、それをさらに精製することなく次工程に用いた。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ｐｐｍ  ８.０１（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝７.３２Ｈｚ）、７.７３（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝６.７１Ｈｚ）、５.１８−５.６６（４Ｈ，ｍ）、４.５１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７.１７Ｈｚ）、４.４２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７.３２Ｈｚ）、４.０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３.３６Ｈｚ）、３.９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５.１９Ｈｚ）、２.２７−２.３７（４Ｈ，ｍ）、２.０１−２.１７（２Ｈ，ｍ）、１.６７−１.８２（２Ｈ，ｍ）、１.３９−１.５２（１８Ｈ，ｍ）、１.３２（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝６.５６Ｈｚ）。ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋Ｃ３８Ｈ４９Ｎ２Ｏ１０として  計算値  ６９３.３４；測定値  ６９３.３４
【０１２５】
実施例１，工程ｃ
【化３２】
0005815746.tif 000039
【０１２６】
実施例１，工程ｂ（９.８３ｇ、１４.１９ミリモル）および酢酸アンモニウム（１０.９４ｇ、１４２ミリモル）のキシレン（１６０ｍＬ）中混合物を圧力管中にて１４０℃で４時間加熱した。揮発成分を減圧下で除去し、残渣をＣＨ２Ｃｌ２（１４０ｍＬ）と水（１００ｍＬ）の間に分配させた。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させ、減圧下で濃縮させた。得られた粗物質をＢｉｏｔａｇｅ（登録商標）（２０％〜５０％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ；３００ｇ  カラム）を介して精製し、実施例１，工程ｃを明褐色固体（４.３ｇ）として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １１.７３（２Ｈ，ｂｒ．ｓ.）、７.８３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７.６３Ｈｚ）、７.６２−７.７６（５Ｈ，ｍ）、７.２７−７.５５（２Ｈ，ｍ）、４.８２（２Ｈ，ｂｒ．ｓ.）、３.８９（２Ｈ，ｂｒ．ｓ.）、２.１０（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５.２６Ｈｚ）、１.５８−１.８９（２Ｈ，ｍ）、１.１１−１.５２（２４Ｈ，ｍ）。ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋Ｃ３８Ｈ４９Ｎ６Ｏ４として：計算値  ６５３.３７；測定値  ６５３.６０
【０１２７】
別法：実施例１，工程ｂ（１５７ｇ、２２７ミリモル）、酢酸アンモニウム（３３２ｇ、４３１０ミリモル）およびイミダゾール（５４.１ｇ、７９５ミリモル）のトルエン（１.２Ｌ）中混合物を、上部空間を窒素で一掃しながら、８０℃で１時間加熱した。温度を８５℃まで上げ、反応混合物を１８時間攪拌した。溶媒を除去し、残渣をＤＣＭ（２Ｌ）に溶かし、水（１Ｌ）および飽和ＮａＨＣＯ３（３Ｌ）で洗浄し、ついで乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過して濃縮した。残渣をＭｅＯＨ（４Ｌ）に溶かし、約９００ｍＬに濃縮し、室温で放置させた。２時間後、沈殿固体を濾過により回収し、ＭｅＯＨで洗浄し、乾燥させ、白色固体を得た。この物質をメタノールから再結晶し（４Ｌのメタノールに溶かし、次に約０.９Ｌに減縮させ）、乾燥させて実施例１，工程ｃを白色固体（９９.５ｇ）として得た。母液からの粗化合物をシリカゲルクロマトグラフィー（３００ｇのＳｉＯ２、２０−５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）に付して精製し、さらなる生成物を白色の固体（１３.０ｇ）として得た。
【０１２８】
実施例１，工程ｄ
【化３３】
0005815746.tif 000040
【０１２９】
ジオキサン中４Ｎ  ＨＣｌ（８.２３ｍＬ、３２.９ミリモル）を実施例１，工程ｃ（４.３ｇ、６.６ミリモル）のＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）溶液に滴下し、反応混合物を室温で３時間攪拌した。揮発成分を減圧下で除去し、実施例１，工程ｄのＨＣｌ塩を黄色固体（３.６ｇ）として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １０.５５（２Ｈ，ｂｒ．ｓ.）、９.７３（２Ｈ，ｂｒ．ｓ.）、８.１２−８.２６（２Ｈ，ｍ）、８.０３（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝８.０３Ｈｚ）、７.９２（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝６.０２Ｈｚ）、５.０７（２Ｈ，ｍ，Ｊ＝７.５３Ｈｚ）、３.８２（２Ｈ，ｂｒ．ｓ.）、２.５３−２.６５（４Ｈ，ｍ）、２.２７（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２.４２、６.４０Ｈｚ）、１.８５−１.９９（２Ｈ，ｍ）、１.４５（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６.２７Ｈｚ）。ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋Ｃ２８Ｈ３３Ｎ６として：計算値  ４５３.２８；測定値  ４５３.２１
【０１３０】
上記の脱保護された生成物の純度は、以下の再結晶操作を適用することにより強化され得る：２−プロパノール（２４２ｍＬ）を滴下ロートを介して１５分間にわたって実施例１，工程ｄ（６０.５ｇ、９８.９％のＨＰＬＣ純度）の水（１２１ｍＬ）中溶液に、内部温度を５０℃〜６０℃に維持しながら、６０℃で攪拌して添加した。該溶液をさらに５分間攪拌し、加熱マントルを取り外し、該混合物を外界温度で一夜攪拌した。沈殿固体を濾過により回収し、２−プロパノールで洗浄し、ハウスバキューム下で一夜乾燥させ、黄色固体（５４.４ｇ）を９９.７％のＨＰＬＣ純度で得た（カラム：ＢＥＨ  Ｃ１８  １５０ｍｍ（Ｌ）ｘ２.１ｍｍ（ＩＤ）、１.７μｍ、移動相：Ａ：水中０.０５％ＴＦＡ；Ｂ：ＡＣＮ中０.０５％ＴＦＡ）。ＫＦ１５.３重量％（６.０モルのＨ２Ｏ）。
【０１３１】
実施例１
ＨＡＴＵ（１.６０ｇ、４.２１ミリモル）を実施例１，工程ｄのＨＣｌ塩（１.２ｇ、２.０ミリモル）、Ｃａｐ−１（１.０１ｇ、４.１１ミリモル）およびＤＩＥＡ（２.１ｍＬ、１２ミリモル）のＤＭＦ（２０ｍＬ）中溶液に加え、得られた黄色溶液を室温で３時間攪拌した。該混合物をＥｔＯＡｃ（７５ｍＬ）で稀釈し、水（１００ｍＬ）で洗浄した。水層をＥｔＯＡｃ（７５ｍＬ）で逆抽出し、有機層を合わせ、ＮａＨＣＯ３の５０％飽和水溶液（１００ｍＬ）、水（１００ｍＬ）および食塩水（１００ｍＬ）で洗浄した。ついで、それを乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過し、濃縮させた。残渣をＣＨ３ＯＨで希釈し、それを逆相ＨＰＬＣ精製［溶媒Ａ：５％ＭｅＣＮ／９５％水／１０ｎＭ  ＮＨ４ＯＡｃ；溶媒Ｂ：９５％ＭｅＣＮ／５％水／１０ｎＭ  ＮＨ４ＯＡｃ；カラム：Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  ５０ｘ３００ｍｍ  １０μ；波長：２２０nｍ；流速：１５０ｍｌ／分；グラジエント：２５分間にわたって０％Ｂ→７０％Ｂとし、５分間の維持時間］に供した。減圧下で濃縮し、ジメチル  （４，４’−ビフェニルジイルビス（１Ｈ−イミダゾール−４，２−ジイル（（２Ｓ，５Ｓ）−５−メチル−２，１−ピロリジンジイル）（（１Ｓ）−１−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−オキソ−２，１−エタンジイル）））ビスカルバメート（実施例１）をオフホワイト色泡沫物（１.２ｇ）として得た。ＥｔＯＡｃ／石油エーテルから結晶化させ、非晶質のオフホワイト色固体を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（ＴＦＡ塩）  δ  ７.９２（ｂｒ．ｓ.，８Ｈ）、７.５９（ｄ，Ｊ＝７.９Ｈｚ，２Ｈ）、５.０３（ｔ，Ｊ＝８.５Ｈｚ，２Ｈ）、４.６９−４.６０（ｍ，２Ｈ）、４.００（ｔ，Ｊ＝８.４Ｈｚ，２Ｈ）、３.５５（ｓ，６Ｈ）、３.３６（ｂｒ．ｓ.，１Ｈ）、３.３３−３.２６（ｍ，２Ｈ）、３.２１（ｂｒ．ｓ.，２Ｈ）、２.３７（ｂｒ．ｓ.，１Ｈ）、２.２６（ｄ，Ｊ＝１１.３Ｈｚ，１Ｈ）、１.９５−１.８１（ｍ，３Ｈ）、１.６５（ｄ，Ｊ＝１０.７Ｈｚ，２Ｈ）、１.４８（ｄ，Ｊ＝６.４Ｈｚ，６Ｈ）、１.２８−１.２３（ｍ，４Ｈ）、１.１０−０.９９（ｍ，１６Ｈ）、０.９０−０.７５（ｍ，４Ｈ）
【０１３２】
ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋Ｃ５０Ｈ６７Ｎ８Ｏ８として：計算値  ９０７.５１；測定値  ９０７.８    Ｒｔ＝３.９９分  ＆  ＞９５％の均質性指標を以下のＬＣ条件下で示す−−カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ−Ｌｕｎａ  ２.０ｘ５０ｍｍ  ３μｍ；開始％Ｂ＝０；最終％Ｂ＝１００；グラジエント時間＝１０分間；流速＝４ｍＬ／分；波長＝２２０；溶媒Ａ＝Ｈ２Ｏ：ＡＣＮ  ９５％：５％  １０ｍＭの酢酸アンモニウム；溶媒Ｂ＝Ｈ２Ｏ：ＡＣＮ  ５％：９５％  １０ｍＭの酢酸アンモニウム
【０１３３】
実施例２
【化３４】
0005815746.tif 000041
【０１３４】
ＨＡＴＵ（６３.６ｍｇ、０.１６７ミリモル）を（Ｓ）−２−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−（メトキシカルボニルアミノ）酢酸（Ｃａｐ−２）（４１ｍｇ、０.１７ミリモル）および実施例１，工程ｄ（４５.５ｍｇ、０.０７６ミリモル）のＨＣｌ塩のＤＭＦ（０.９ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（０.１１ｍＬ、０.６１ミリモル）中攪拌溶液に添加した。反応混合物を室温で４時間攪拌し、ついで窒素流下で濃縮した。残渣をＭｅＯＨに溶かし、濾過し、Ｐｒｅｐ  ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  １００ｘ３０ｍｍ、１０μ；ＭｅＯＨ／水ｗ／ＴＦＡバッファー）に付して精製し、ジメチル  （４，４’−ビフェニルジイルビス（１Ｈ−イミダゾール−４，２−ジイル（（２Ｓ，５Ｓ）−５−メチル−２，１−ピロリジンジイル）（（１Ｓ）−１−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−オキソ−２，１−エタンジイル）））ビスカルバメート（実施例２）のＴＦＡ塩（６２.５ｍｇ）を淡黄色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲは回転異性体の混合物が存在することを示す；主たる回転異性体について：１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＨ−d４）  δ  ８.０２−７.９３（ｍ，３Ｈ）、７.８８（ｂｒ  ｓ，７Ｈ）、５.１８（ｄｄ，Ｊ＝１０.７、７.２Ｈｚ，２Ｈ）、４.７７（五重項，Ｊ＝６.６Ｈｚ，２Ｈ）、４.２７−４.１７（ｍ，２Ｈ）、４.１５（ｄ，Ｊ＝９.３Ｈｚ，２Ｈ）、３.７２−３.６６（ｍ，２Ｈ）、３.６７（ｓ，６Ｈ）、２.７２−２.５０（ｍ，２Ｈ）、２.４８−２.１６（ｍ，６Ｈ）、１.９９（ｄｄ，Ｊ＝１２.２、５.６Ｈｚ，２Ｈ）、１.７６−１.５９（ｍ，２Ｈ）、１.５７（ｄ，Ｊ＝６.５Ｈｚ，６Ｈ）、１.５２−１.４０（ｍ，２Ｈ）、１.３０（ｄｄ，Ｊ＝９.７、６.７Ｈｚ，２Ｈ）、１.２２（ｄ，Ｊ＝６.８Ｈｚ，６Ｈ）、１.０６（ｄ，Ｊ＝６.０Ｈｚ，６Ｈ）、０.９７（ａｐｐ  ｑ，Ｊ＝１２.０Ｈｚ，２Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ保持時間  ３.８４分；ｍ／ｚ  ９０５.３８（Ｍ−Ｈ）−。ＬＣデータは２２０ｎｍの検出器の波長でＳＰＤ−１０ＡＶ  ＵＶ−Ｖｉｓ検出器を用いてＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ−Ｌｕｎａ３μＣ１８  ２．０ｘ５０ｍｍカラムを備えた島津製ＬＣ−１０ＡＳ液体クロマトグラフィーに記録した。溶出条件は０.８ｍＬ／分の流速、１００％溶媒Ａ／０％溶媒Ｂ〜０％溶媒Ａ／１００％溶媒Ｂのグラジエント、４分間のグラジエント時間、１分間の維持時間、および５分間の分析時間であって、溶媒Ａは５％ＭｅＯＨ／９５％Ｈ２Ｏ／１０ｍＭ酢酸アンモニウムであり、溶媒Ｂは５％Ｈ２Ｏ／９５％ＭｅＯＨ／１０ｍＭ酢酸アンモニウムを利用した。ＭＳデータはエレクトロスプレーモードのＬＣについてＭｉｃｒｏｍａｓｓ  Ｐｌａｔｆｏｒｍを用いて測定した。
【０１３５】
別法として、実施例２は次のように調製され得る：
（Ｓ）−２−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−（メトキシカルボニルアミノ）酢酸（Ｃａｐ−２）（２５.１ｇ、９１.０ミリモル）、２−ヒドロキシピリジン１−オキシド（１０.１２ｇ、９１ミリモル）およびＥＤＣ（１９.０ｇ、９９.０ミリモル）のＤＭＳＯ（４００ｍＬ）中混合物を室温で１時間攪拌した。該溶液に、実施例１，工程ｄ（ＨＣｌ塩；２９.２ｇ、４１.４ミリモル）を添加し、得られた黄色溶液を水／氷浴で１０℃に冷却した。ついで、ｉ−Ｐｒ２ＥｔＮ（２６.７ｇ、２０７ミリモル）を該反応混合物に加え、添加終了後に、該氷浴を取り外した。反応混合物を外界温度で２５.５時間攪拌し、ついで氷（１６００ｇ）および水（４００ｍＬ）の混合物に注ぐことでクエンチさせた。該混合物を外界温度で３時間攪拌した。白色固体を濾過によりビュヒナーロートに集め、ついでハウス減圧下で窒素流を濾過ロートの頂部に通して一夜乾燥させ、湿った固体（１２４ｇ）を得た。この湿った固体をＤＣＭ（５００ｍＬ）に溶かし、水（３ｘ２５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過し、濃縮して淡褐色固体（３９.５ｇ）を得た。この物質をもう一つ別のバッチからの同様の物質と合わせ（合計４４.４ｇ）、ＩＳＣＯ装置（２ｘ３３０ｇのシリカゲル、０−３０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）を用いるクロマトグラフィーにより精製し、実施例−２（３８.１ｇ）をＨＰＬＣ純度が９８.６％の褐色固体として得た。該物質を次のように脱色した：４３.１ｇの物質をＥｔＯＨ（５００ｍＬ）に溶かし、次に活性炭（８.６ｇ）で処理した。該混合物を５０℃で１時間加熱し、濾過（３層の濾紙）により活性炭を除去し、フィルターケーキを付加的なＥｔＯＨ（３００ｍＬ）でチェイスした。濾液を蒸発乾固させ、温水浴を用いて減圧下で乾燥させ、オフホワイト固体（４３.０ｇ）を得た。生成物はＳＦＣプロトコルを利用することでさらに精製され得る：
【０１３６】
ＳＦＣ精製条件：
スループット：１.２ｇ／時間
注入当たりの重量：３０ｍｇ
カラム：Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ  ＣＮ  ２５ｘ３ｃｍ、５μ
カラム温度：４５℃
流速：２００ｍＬ／分
移動相：ＣＯ２／［ＭｅＯＨ／ＤＣＭ＝１：１（容量／容量）］＝８０／２０
注入容量：２.５ｍＬ（１２ｍｇ／ｍＬ）
注入モデル：積層型（注入／ランタイム（分）＝１.５／３.２）
検出器波長：３１６ｎｍ
サンプル溶媒：ＣＨ３ＯＨ／ＤＣＭ＝１：１（ｖ／ｖ）
【０１３７】
実施例３
【化３５】
0005815746.tif 000042
【０１３８】
実施例３，工程ａ
【化３６】
0005815746.tif 000043
【０１３９】
４−ブロモ−２−メチル安息香酸（１０ｇ、４６.５ミリモル）のＤＭＦ（１５０ｍＬ）中溶液に、室温でＮ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン・塩酸塩（５.４４ｇ、５５.８ミリモル）を、つづいてＨＯＢＴ（８.５５ｇ、５５.８ミリモル）を添加した。ついで、ＥＤＣ（１０.７ｇ、５５.８ミリモル）を、つづいてＤＩＰＥＡ（２４.４ｍＬ、１４０ミリモル）を加え、該反応混合物を室温で１２時間攪拌させた。次に、該反応混合物をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）で稀釈し、水（３ｘ２５０ｍＬ）および食塩水（１５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、粗実施例３，工程ａ（９.５ｇ）を得、それをそのまま次工程に供した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δ＝７.２６ｐｐｍ，４００ＭＨｚ）：  δ  ７.３７（ｄ，J＝１.６Ｈｚ，１Ｈ）、７.３４（ｄｄ，J＝８.０、１.６Ｈｚ，１Ｈ）、７.１４（ｄ，J＝８.０Ｈｚ，１Ｈ）、３.４７（ｓ，３Ｈ）、３.３０（ｓ，３Ｈ）、２.３１（ｓ，３Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋Ｃ１０Ｈ１３８１ＢｒＮＯ２として：計算値  ２６０.０１；測定値  ２６０.０
【０１４０】
実施例３，工程ｂ
【化３７】
0005815746.tif 000044
【０１４１】
実施例３，工程ａ（９.５ｇ、３６.８ミリモル）をジエチルエーテル（１５０ｍＬ）に溶かし、０℃に冷却した。次に、ヨウ化メチルマグネシウム（ジエチルエーテル中３.０Ｍ、２４.５４ｍＬ、７３.６ミリモル）を１０分間にわたって滴下した。該反応物を４０℃で６時間攪拌し、ついで室温にし、１２時間攪拌した。該反応混合物を０℃に冷却し、氷で、次に１.５Ｎ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）でクエンチした。有機層を分離し、水層をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２ｘ１００ｍＬ）で抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。該粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、６０−１２０、ＥｔＯＡｃ：石油エーテル、２：９８）に付して精製し、実施例３，工程ｂ（６.２５ｇ）を淡黄色液体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δ＝７.２６ｐｐｍ，４００ＭＨｚ）：  δ  ７.５５（ｄ，J＝８.０Ｈｚ，１Ｈ）、７.４１（ｓ，１Ｈ）、７.４０（ｄ，J＝８.０Ｈｚ，１Ｈ）、２.５５（ｓ，３Ｈ）、２.５０（ｓ，３Ｈ）。
【０１４２】
実施例３，工程ｃ
【化３８】
0005815746.tif 000045
【０１４３】
４−アセチルフェニルボロン酸（５.３９ｇ、３２.９ミリモル）を実施例３，工程ｂ（７.０ｇ、３２.９ミリモル）／ＭｅＯＨ（７５.０ｍＬ）を含有する密封した試験管に加え、該反応混合物を窒素で１０分間パージした。次に、Ｋ２ＣＯ３（９.０８ｇ、６５.７ミリモル）を、つづいてＰｄ（Ｐｈ３Ｐ）４（１.１３９ｇ、０.９８６ミリモル）を添加し、該反応混合物を窒素でさらに１０分間パージした。該反応混合物を７５℃で１２時間加熱した。ついで、反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で稀釈し、水（２ｘ１００ｍＬ）、食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮させた。残渣をコンビフラッシュ（Ｓｉｌｉｃｙｃｌｅ、ＳｉＯ２、１０−１５％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル）に付して精製し、実施例３，工程ｃ（６.５ｇ）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，δ＝７.２６ｐｐｍ，４００ＭＨｚ）：  δ  ８.０６−８.０４（ｍ，２Ｈ）、７.８１（ｄ，J＝８.０Ｈｚ，１Ｈ）、７.７２−７.７０（ｍ，２Ｈ）、７.５４−７.４９（ｍ，２Ｈ）、２.６５（ｓ，３Ｈ）、２.６３（ｓ，６Ｈ）。
【０１４４】
実施例３，工程ｄ
【化３９】
0005815746.tif 000046
【０１４５】
臭素（１.１２ｍＬ、２１.８ミリモル）（１０ｍＬのジオキサンに稀釈された）を（１０分間にわたって）実施例３，工程ｃ（２.７５ｇ、１０.９０ミリモル）のジオキサン（５０ｍＬ）中溶液に１０℃にてゆっくりと添加し、該混合物を室温で２時間攪拌した。該反応物を１０％ＮａＨＣＯ３（２５ｍＬ）でクエンチし、ＤＣＭ（５０ｍＬ）で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮し、粗実施例３，工程ｄ（５.０ｇ）を得、それを精製することなくそのまま次工程に使用した。ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋Ｃ１７Ｈ１５７９／８１Ｂｒ２Ｏ２として：計算値  ４１０.９４；測定値  ４１１.０
【０１４６】
実施例３，工程ｅ
【化４０】
0005815746.tif 000047
【０１４７】
粗実施例３，工程ｄ（５.１ｇ、１２ミリモル）のアセトニトリル（７５ｍＬ）中溶液に、（２Ｓ，５Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−メチルピロリジン−２−カルボン酸（実施例１，工程ａ）（５.７０ｇ、２４.９ミリモル）を、つづいてＤＩＰＥＡ（８.６９ｍＬ、４９.７ミリモル）を０℃で添加した。１０分後、温度を室温にまで上げ、２時間攪拌した。次に、該反応混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で稀釈し、１０％ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）、食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をコンビフラッシュ（Silicycle、ＳｉＯ２、２５−３０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル）に付して精製し、実施例３，工程ｅ（５.８ｇ）を淡黄色油状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，δ＝７.２６ｐｐｍ，４００ＭＨｚ）：  δ  ８.００（ａｐｐ  ｂｄ，２Ｈ）、７.７１（ａｐｐ  ｄ，３Ｈ）、７.５３−７.５１（ｍ，２Ｈ）、５.６１−５.３４（ｍ，２Ｈ）、５.２９−５.０４（ｍ，２Ｈ）、４.５１−４.３６（ｍ，２Ｈ）、４.０９−３.９１（ｍ，２Ｈ）、２.５９（ｓ，３Ｈ）、２.３５−２.２１（ｍ，４Ｈ）、２.１５−２.０４（ｍ，２Ｈ）、１.８０−１.６３（ｍ，２Ｈ）、１.４７／１.４４（ｓ，１８Ｈ）、１.３５−１.２７（ｍ，６Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ−Ｈ］−Ｃ３９Ｈ４９Ｎ２Ｏ１０として：計算値  ７０５.３５；測定値  ７０５.３０
【０１４８】
実施例３，工程ｆ
【化４１】
0005815746.tif 000048
【０１４９】
実施例３，工程ｅ（５.６ｇ、７.９２ミリモル）のキシレン（７５ｍＬ）中溶液に、ＮＨ４ＯＡｃ（１２.２１ｇ、１５８ミリモル）を添加し、反応混合物を窒素で１０分間パージした。１３０℃で１８時間加熱した後、該反応混合物を室温に冷却し、揮発性成分を減圧下で除去した。次に、反応混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で稀釈し、１０％ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）、食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をコンビフラッシュ（Ｒｅｄｉ  Ｓｅｐ、Ｃ−１８カラム、３０−４０％アセトニトリル：１０ｍＭ炭酸水素アンモニウム）に付して精製し、実施例３，工程ｆ（２.３ｇ）を淡黄色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，δ＝２.５０ｐｐｍ，４００ＭＨｚ）：  δ  １２.２７／１２.０／１１.７７／１１.７１（ｓ，２Ｈ）、７.９２−７.６３（ｍ，５Ｈ）、７.５８−７.４７（ｍ，３Ｈ）、 ７.２４（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）、４.９０−４.７５（ｍ，２Ｈ）、３.９２−３.８４（ｍ，２Ｈ）、２.５４（ｓ，３Ｈ）、２.２０−２.０１（ｍ，６Ｈ）、１.７３−１.６５（ｍ，２Ｈ）、１.４８−１.１２（ｍ，２４Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ−Ｈ］−Ｃ３９Ｈ４９Ｎ６Ｏ４として：計算値  ６６５.３９；測定値  ６６５.４
【０１５０】
【化４２】
0005815746.tif 000049
【０１５１】
実施例３，工程ｇ（１.５５ｇ、２.３２ミリモル）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中溶液に、ＨＣｌ／ＭｅＯＨ（４Ｎ、５８.１ｍＬ）を添加し、室温で２時間攪拌した。揮発性成分を減圧下で除去し、残渣を乾燥ＤＣＭ（３ｘ２５ｍＬ）と共に蒸発させた。得られた個体を高真空に暴露し、実施例３，工程ｇのＨＣｌ塩（１.３ｇ）を淡黄色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＭｅＯＤ，δ＝３.３４ｐｐｍ，４００ＭＨｚ）：  δ  ８.０６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、７.９８（ｄ，J＝８.４Ｈｚ，２Ｈ）、７.９０（ｄ，J＝８.４Ｈｚ，２Ｈ）、７.８６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、７.７８（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、７.７４（ｄ，J＝８.４Ｈｚ，１Ｈ）、７.７１（ｄ，J＝８.４Ｈｚ，１Ｈ）、 ５.２７−５.２０（ｍ，２Ｈ）、４.０４−４.００（ｍ，２Ｈ）、２.８０−２.６７（ｍ，４Ｈ）、２.５９（ｓ，３Ｈ）、２.５５−２.４６（ｍ，２Ｈ）、２.１５−２.０６（ｍ，２Ｈ）、１.６０（ｄ，J＝６.４、６Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋Ｃ２９Ｈ３５Ｎ６として：計算値  ４６７.２８；測定値  ４６７.２
【０１５２】
実施例３
ＨＡＴＵ（６０.５ｍｇ、０.１５９ミリモル）を（Ｓ）−２−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−（メトキシカルボニルアミノ）酢酸（Ｃａｐ−２）（３９ｍｇ、０.１６ミリモル）および実施例３，工程ｇのＨＣｌ塩（４４.３ｍｇ、０.０７２ミリモル）のＤＭＦ（０.９ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（０.１０ｍＬ、０.５８ミリモル）中攪拌溶液に添加した。反応混合物を室温で２時間攪拌し、窒素流の下で一夜濃縮した。残渣をＭｅＯＨで稀釈し、濾過し、Ｐｒｅｐ  ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  １００ｘ３０ｍｍ、１０μ；ＭｅＯＨ／水ｗ／ＴＦＡバッファー）に付して精製し、ジメチル  （（３−メチル−４，４’−ビフェニルジイル）ビス（１Ｈ−イミダゾール−４，２−ジイル（（２Ｓ，５Ｓ）−５−メチル−２，１−ピロリジンジイル）（（１Ｓ）−１−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−オキソ−２，１−エタンジイル）））ビスカルバメート（実施例３）のＴＦＡ塩（６０.２ｍｇ）をオフホワイト色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＨ−ｄ４）  δ  ８.０１−７.８４（ｍ，５Ｈ）、７.７８−７.５４（ｍ，４Ｈ）、５.７５（ｄ，Ｊ＝６.０Ｈｚ，０.４Ｈ）、５.１９（ｄｄｄ，Ｊ＝１０.７、６.９、４.０Ｈｚ，１.６Ｈ）、４.８４−４.７２（ｍ，２Ｈ）、４.３６−４.１２（ｍ，４Ｈ）、３.８５−３.５８（ｍ，８Ｈ）、２.６９−１.９５（ｍ，１３Ｈ）、１.７５−１.４０（ｍ，１０Ｈ）、１.３７−１.０２（ｍ，１４Ｈ）、０.９６（ａｐｐ  ｑ，Ｊ＝１２.２Ｈｚ，２Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ保持時間  ４.０５０分；ｍ／ｚ  ４６１.３１［１／２Ｍ＋Ｈ］＋。ＬＣデータは２２０ｎｍの検出器の波長でＳＰＤ−１０ＡＶ  ＵＶ−Ｖｉｓ検出器を用いてＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ−Ｌｕｎａ３μＣ１８  ２．０ｘ５０ｍｍカラムを備えた島津製ＬＣ−１０ＡＳ液体クロマトグラフィーに記録した。溶出条件は０.８ｍＬ／分の流速、１００％溶媒Ａ／０％溶媒Ｂ〜０％溶媒Ａ／１００％溶媒Ｂのグラジエント、４分間のグラジエント時間、１分間の維持時間、および５分間の分析時間を利用し、溶媒Ａは５％ＭｅＯＨ／９５％Ｈ２Ｏ／１０ｍＭ酢酸アンモニウムであり、溶媒Ｂは５％Ｈ２Ｏ／９５％ＭｅＯＨ／１０ｍＭ酢酸アンモニウムであった。ＭＳデータはエレクトロスプレーモードのＬＣについてＭｉｃｒｏｍａｓｓ  Ｐｌａｔｆｏｒｍを用いて測定した。
【０１５３】
実施例４
【化４３】
0005815746.tif 000050
【０１５４】
実施例４，工程ａ
【化４４】
0005815746.tif 000051
【０１５５】
氷水浴中、０℃での１−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）エタノン（５.０ｇ、２３ミリモル）のジオキサン（１５０ｍＬ）およびエーテル（１５０ｍＬ）中溶液に、臭素（１.１８ｍＬ、２３.０ミリモル）を滴下した。該反応物を１時間攪拌し、室温に加温させ、１６時間攪拌した。該混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）と飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）の間に分配させ、有機層を水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。揮発性成分を減圧下で蒸発させ、固体を減圧下で一夜乾燥させ、実施例４，工程ａ（６.９４ｇ）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，δ＝２.５ｐｐｍ，４００ＭＨｚ）：７.８７−７.７９（ｍ，２Ｈ）、７.６２−７.６０（ｍ，１Ｈ）、４.８４（ｓ，２Ｈ）
【０１５６】
実施例４，工程ｂ
【化４５】
0005815746.tif 000052
【０１５７】
実施例４，工程ａ（２.５８ｇ、８.７２ミリモル）および（２Ｓ，５Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−メチルピロリジン−２−カルボン酸（２.００ｇ、８.７２ミリモル）のアセトニトリル（５０ｍＬ）中溶液に、ＤＩＥＡ（２.２８５ｍＬ、１３.０８ミリモル）を添加し、該混合物を室温で６４時間攪拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）と水（３０ｍＬ）の間で分配させた。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３および食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で蒸発させ、実施例４，工程ｂ（３.８ｇ）を黄色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）：７.８７（ｍ，１Ｈ）、７.４４（ｍ，２Ｈ）、５.４２−５.０９（ｍ，２Ｈ）、４.５３−４.４０（ｍ，１Ｈ）、４.１０−３.９５（ｍ，１Ｈ）、２.３１（ｍ，２Ｈ）、２.０９（ｍ，１Ｈ）、１.７５（ｍ，１Ｈ）、１.４９−１.４６（２つの一重項、９Ｈ）、１.３３（ｍ，３Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｎａ］＋Ｃ１９Ｈ２４ＢｒＮＮａＯ５として：計算値  ４６６.０６；測定値  ４６６.０３
【０１５８】
実施例４，工程ｃ
【化４６】
0005815746.tif 000053
【０１５９】
実施例４，工程ｂ（３.８ｇ、８.６ミリモル）のキシレン（４０ｍＬ）中溶液を含有する圧力管に、酢酸アンモニウム（６.５９ｇ、８６ミリモル）を加え、該反応容器に蓋をし、１４０℃で６時間加熱した。揮発性成分を減圧下で蒸発させ、残渣をＤＣＭ（８０ｍＬ）と水（５０ｍＬ）の間に分配させた。有機層を分離し、飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を減圧下で除去して紅色油状物を得、それをフラッシュクロマトグラフィー（０−４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）に付して精製し、実施例４，工程ｃ（２.３ｇ）を褐色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、δ＝２.５ｐｐｍ，４００ＭＨｚ）：７.９８（ａｐｐ  ｔ，J＝８.４Ｈｚ，１Ｈ）、７.６５（ｄｄ，J＝１１、１.９Ｈｚ，１Ｈ）、７.４５（ｄｄ，J＝８.３、２Ｈｚ，１Ｈ）、７.３６（ｍ，１Ｈ）、４.８５（ｍ，１Ｈ）、３.９０（ｍ，１Ｈ）、２.１５−２.０７（ｍ，３Ｈ）、１.７３（ｍ，１Ｈ）、１.４０−１.１７（ｍ，１２Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｎａ］＋Ｃ１９Ｈ２３７９ＢｒＦＮ３ＮａＯ２として：計算値  ４４６.０９；測定値  ４４６.００
【０１６０】
実施例４，工程ｄ
【化４７】
0005815746.tif 000054
【０１６１】
２−ブロモ−１−（４−ブロモフェニル）エタノン（２.４２５ｇ、８.７２ミリモル）および（２Ｓ，５Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−メチルピロリジン−２−カルボン酸（２ｇ、８.７２ミリモル）のアセトニトリル（５０ｍＬ）中溶液に、ＤＩＥＡ（１.５２４ｍＬ、８.７２ミリモル）を加え、該混合物を室温で１６時間攪拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）と水（３０ｍＬ）の間に分配させた。有機相を飽和ＮａＨＣＯ３および食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。揮発性成分を減圧下で除去し、実施例４，工程ｄ（１.７４ｇ）を明黄色固体として得、それをさらに精製することなく使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，δ＝２.５ｐｐｍ，４００ＭＨｚ）：７.９５−７.９０（ｍ，２Ｈ）、７.８１（ｍ，１Ｈ）、７.７９（ｍ，１Ｈ）、５.６３−５.４４（ｍ，２Ｈ）、４.３６（ｍ，１Ｈ）、３.９９（ｍ，１Ｈ）、２.２７（ｍ，１Ｈ）、２.０９（ｍ，２Ｈ）、１.６３（ｍ，１Ｈ）、１.４１−１.３７（２つの一重項，９Ｈ）、１.１９（ｍ，３Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｎａ］＋Ｃ１９Ｈ２４ＢｒＮＮａＯ５として：計算値  ４４８.０７；測定値  ４４８.０６
【０１６２】
実施例４，工程ｅ
【化４８】
0005815746.tif 000055
【０１６３】
実施例４，工程ｄ（３.４ｇ、８.０ミリモル）のキシレン（４０ｍＬ）中溶液を含有する圧力管に、酢酸アンモニウム（６.１５ｇ、８０ミリモル）を加え、該混合物を１４０℃で６時間加熱した。揮発性成分を減圧下で除去し、残渣をＤＣＭ（６０ｍＬ）と飽和ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）の間に注意して分配させ、有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を減圧下で除去して赤色固体を得、それをフラッシュクロマトグラフィー（５−５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）に付して精製し、実施例４，工程ｅ（２.６５ｇ）を明褐色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，δ＝２.５ｐｐｍ，４００ＭＨｚ）：７.７３−７.７１（ｍ，２Ｈ）、７.５９−７.５０（ｍ，３Ｈ）、４.８０（ｍ，１Ｈ）、３.８９（ｍ，１Ｈ）、２.１０（ｍ，３Ｈ）、１.７１（ｍ，１Ｈ）、１.４０−１.１７（ｍ，１２Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｎａ］＋Ｃ１９Ｈ２４ＢｒＮ３ＮａＯ２として：計算値  ４２８.０９；測定値  ４２８.０７
【０１６４】
実施例４，工程ｆ
【化４９】
0005815746.tif 000056
【０１６５】
実施例４，工程ｅ（２.６４ｇ、６.５０ミリモル）および４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（３.３０ｇ、１３.０ミリモル）のジオキサン（４０ｍＬ）中溶液に、酢酸カリウム（１.５９４ｇ、１６.２４ミリモル）を添加した。窒素を１０分間通気することで該混合物を脱気し、Ｐｄ（Ｐｈ３Ｐ）４（０.３７５ｇ、０.３２５ミリモル）を添加し、脱気をさらに１５分間続けた。次に、反応容器を密封し、８０℃で１６時間加熱した。揮発性成分を減圧下で蒸発させ、残渣をＤＣＭ（１００ｍＬ）と半飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）の間に分配させた。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で蒸発させ、粗赤色油状物を得、それをフラッシュクロマトグラフィー（１０−９０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）に付して精製した。実施例４，工程ｆ（２.７ｇ）を黄色泡沫体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、δ＝２.５ｐｐｍ，４００ＭＨｚ）：７.７７（ｄ，J＝８.３Ｈｚ，２Ｈ）、７.６４−７.５３（ｍ，３Ｈ）、４.８０（ｍ，１Ｈ）、３.８８（ｍ，１Ｈ）、２.０９（ｍ，３Ｈ）、１.７３（ｍ，１Ｈ）、１.４３−１.０８（ｍ，２４Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋Ｃ２５Ｈ３７ＢｒＢＮ３Ｏ４として：計算値  ４５４.２９；測定値：４５４.２３
【０１６６】
実施例４，工程ｇ
【化５０】
0005815746.tif 000057
【０１６７】
実施例４，工程ｆ（２.７０ｇ、５.９６ミリモル）および実施例４，工程ｃ（２.３０ｇ、５.４２ミリモル）のＤＭＥ（７０ｍＬ）中溶液を含有する圧力管に、水（１７.５０ｍＬ）および炭酸水素ナトリウム（２.２７ｇ、２７.１ミリモル）を添加した。窒素を１５分間通気することで該混合物を脱気し、Ｐｄ（Ｐｈ３Ｐ）４（０.３１３ｇ、０.２７１ミリモル）を加え、脱気を付加的に１５分間続けた。該反応容器を密封し、８０℃で１５時間加熱した。溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣をＤＣＭ（１００ｍＬ）と水（５０ｍＬ）の間に分配させた。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、揮発性成分を減圧下で除去し、得られた赤色粗固体をフラッシュクロマトグラフィー（３０−１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）に付して精製した。実施例４，工程ｇ（１.９５ｇ）が黄色固体として得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、δ＝２.５ｐｐｍ，４００ＭＨｚ）：８.１０（ｍ，１Ｈ）、７.８７−７.７１（ｍ，４Ｈ）、７.６１−７.５５（ｍ，３Ｈ）、７.３７（ｍ，１Ｈ）、４.８５（ｍ，２Ｈ）、３.９１（ｍ，２Ｈ）、２.１１（ｍ，６Ｈ）、１.７６（ｍ，２Ｈ）、１.４２−１.０８（ｍ，２４Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋Ｃ３５Ｈ４８ＦＮ６Ｏ４として：計算値  ６７１.３７；測定値  ６７１.３５
【０１６８】
実施例４，工程ｈ
【化５１】
0005815746.tif 000058
【０１６９】
実施例４，工程ｇ（１.９５ｇ、２.９１ミリモル）のジオキサン（１０ｍＬ）中懸濁液に、ジオキサン中４Ｎ  ＨＣｌ（９.７２ｍＬ、３２０ミリモル）を加え、該混合物を室温で６時間攪拌した。メタノール（１ｍＬ）を加え、攪拌を１時間続けた。該揮発性成分を減圧下で除去し、残渣を減圧下で一夜乾燥させた。実施例４，工程ｈのＨＣｌ塩（１.７ｇ）を黄色固体として回収した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，δ＝２.５ｐｐｍ，４００ＭＨｚ）：１０.３４／１０.２９／９.４３／９.０８（４つのブロードなＳ、約４Ｈ）、８.１６（ｔ，J＝８.３Ｈｚ，１Ｈ）、８.１０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、８.００（ｄ，J＝８.３Ｈｚ，２Ｈ）、７.９２（ｄ，J＝８.３Ｈｚ，２Ｈ）、７.７８−７.７２（ｍ，３Ｈ）、４.９９−４.８９（ｍ，２Ｈ）、３.８０（ｍ，２Ｈ）、２.５３−２.４２（ｍ，４Ｈ）、２.２５（ｍ，２Ｈ）、１.８７（ｍ，２Ｈ）、１.４４（ｄ，J＝６.５，３Ｈ）、１.４３（ｄ，J＝６.５，３Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋Ｃ２８Ｈ３２ＦＮ６として：計算値  ４７１.２７；測定値  ４７１.１７
【０１７０】
実施例４
ＨＡＴＵ（５９.４ｍｇ、０.１５６ミリモル）を、（Ｓ）−２−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−（（メトキシカルボニル）アミノ）酢酸（Ｃａｐ−２）（３８.３ｍｇ、０.１５６ミリモル）および実施例４，工程ｈのＨＣｌ塩（４３.８ｍｇ、０.０７１ミリモル）のＤＭＦ（０.９ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（０.１０ｍＬ、０.５７ミリモル）中攪拌溶液に添加した。反応溶液を室温で２時間攪拌し、窒素流の下で一夜濃縮した。残渣をＭｅＯＨ（３ｍＬ）に溶かし、濾過し、Ｐｒｅｐ  ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  １００ｘ３０ｍｍ、１０ミクロン；ＭｅＯＨ／水ｗ／ＴＦＡバッファー）に付して精製し、ジメチル（（３−フルオロ−４，４’−ビフェニルジイル）ビス（１Ｈ−イミダゾール−４，２−ジイル（（２Ｓ，５Ｓ）−５−メチル−２，１−ピロリジンジイル）（（１Ｓ）−１−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−オキソ−２，１−エタンジイル）））ビスカルバメート（実施例４）のＴＦＡ塩（６７.２ｍｇ）をオフホワイト色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＨ−ｄ４）  δ  ８.１０−７.８４（ｍ，７Ｈ）、７.７７−７.６９（ｍ，２Ｈ）、５.７８−５.７１（ｍ，０.４Ｈ）、５.１９（ｔｄ，Ｊ＝１０.６、７.２Ｈｚ，１.６Ｈ）、４.８３−４.７４（ｍ，２Ｈ）、４.３６−４.１２（ｍ，４Ｈ）、３.８５−３.６２（ｍ，８Ｈ）、２.７２−１.９５（ｍ，１０Ｈ）、１.７６−１.４０（ｍ，１０Ｈ）、１.３５−１.０２（ｍ，１４Ｈ）、０.９６（ａｐｐ  ｑ，Ｊ＝１２.２Ｈｚ，２Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ保持時間  ４.０３１分；ｍ／ｚ  ４６３.２８［１／２Ｍ＋Ｈ］＋。ＬＣデータは２２０ｎｍの検出器の波長でＳＰＤ−１０ＡＶ  ＵＶ−Ｖｉｓ検出器を用いてＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ−Ｌｕｎａ３μＣ１８  ２．０ｘ５０ｍｍカラムを備えた島津製ＬＣ−１０ＡＳ液体クロマトグラフィーに記録した。溶出条件は０.８ｍＬ／分の流速、１００％溶媒Ａ／０％溶媒Ｂ〜０％溶媒Ａ／１００％溶媒Ｂのグラジエント、４分間のグラジエント時間、１分間の維持時間、および５分間の分析時間を利用し、溶媒Ａは５％ＭｅＯＨ／９５％Ｈ２Ｏ／１０ｍＭ酢酸アンモニウムであり、溶媒Ｂは５％Ｈ２Ｏ／９５％ＭｅＯＨ／１０ｍＭ酢酸アンモニウムであった。ＭＳデータはエレクトロスプレーモードのＬＣについてＭｉｃｒｏｍａｓｓ  Ｐｌａｔｆｏｒｍを用いて測定した。
【０１７１】
実施例５
【化５２】
0005815746.tif 000059
【０１７２】
実施例５，工程ａ
【化５３】
0005815746.tif 000060
【０１７３】
上記のエステルを、Tetrahedon Letters, 2003, 3203-3205に記載の操作に従って、（Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル  ２−メチル  ５−オキソピロリジン−１，２−ジカルボン酸よりジアステレオマー混合物として調製した。
【０１７４】
実施例５，工程ｂ
【化５４】
0005815746.tif 000061
【０１７５】
実施例５，工程ａ（４.７５ｇ、１８.５ミリモル）の冷却（−５０℃）したトルエン（４５ｍＬ）溶液に、スーパーヒドリド（１９.２０ｍＬ、１Ｍ／ＴＨＦ、１９.２０ミリモル）を１０分間にわたって滴下した。ヒューニッヒ塩基（１３.６ｍＬ、７８ミリモル）を加え、１０分間攪拌し；ＤＭＡＰ（０.１２２ｇ、０.９９７ミリモル）を固体として添加し、１５分間攪拌し；トリフルオロ酢酸無水物（２.９８ｍＬ、２１.１ミリモル）を１５分間にわたって滴下し、冷却槽を取り外し、室温にまで加温させながら、攪拌を４時間続けた。反応混合物を水（５０ｍＬ）、飽和ＮａＣｌ（３０ｍＬ）で洗浄し、有機相を減圧下で濃縮した。得られた粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（８−６０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製し、実施例５，工程ｂを黄色油状物（２.８５ｇ）として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：６.３６（ｓ，０.５Ｈ）、６.２５（ｓ，０.５Ｈ）、４.７０−４.５７（ｍ，１Ｈ）、３.７８（ｓ，３Ｈ）、２.９６（ｍ，１Ｈ）、２.５４（ｍ，１Ｈ）、１.７０（ｓ，３Ｈ）、１.５０（ｓ，４.５Ｈ）、１.４４（ｓ，４.５Ｈ）
【０１７６】
実施例５，工程ｃ
【化５５】
0005815746.tif 000062
【０１７７】
ジエチル亜鉛（トルエン中１.１Ｍ、５９.１ｍＬ、６５.０ミリモル）を、実施例５，工程ｂ（５.２３ｇ、２１.７ミリモル）の冷却（−２３℃）したトルエン（６０ｍＬ）溶液に２０分間にわたって滴下し、１０分間攪拌した。クロロヨードメタン（９.４４ｍＬ、１３０ミリモル）を１０分間にわたって滴下し、該反応混合物を−２１℃で１６時間攪拌した。飽和ＮａＨＣＯ３（６０ｍＬ）を該反応混合物に添加し、冷却槽を取り外し、該混合物を１０分間攪拌した。それを次に濾過し、濾過ケーキをトルエン（５０ｍＬ）で洗浄した。濾液を分配し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮させた。得られた粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（２−１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）に付して精製し、実施例５，工程ｃ.１（第一溶出物；無色油状物；２.８８ｇ）および実施例５，工程ｃ.２（第二溶出物；無色油状物；１.０１ｇ）を得た。ＮＯＥ実験に基づき、相対的立体化学帰属を行った。実施例５，工程ｃ.１：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：４.６５−４.５２（ｍ，１Ｈ）、３.７２（ｓ，３Ｈ）、３.２８−３.１７（ｍ，１Ｈ）、２.４４−２.３２（ｍ，１Ｈ）、２.１６−２.１０（ｍ，１Ｈ）、１.５１−１.４２（２つのｓ，９Ｈ）、１.２４（ｓ，３Ｈ）、１.０７（ｍ，１Ｈ）、０.６９−０.６０（ｍ，１Ｈ）。実施例５，工程ｃ.２：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）：４.０（ｍ，１Ｈ）、３.７６（ｓ，３Ｈ）、３.３２−３.１６（ｍ，１Ｈ）、２.４３（ｍ，１Ｈ）、２.０１（ｍ，１Ｈ）、１.４４（ｓ，９Ｈ）、１.３５（ｓ，３Ｈ）、０.７６−０.６６（ｍ，２Ｈ）
【０１７８】
実施例５，工程ｄ
【化５６】
0005815746.tif 000063
【０１７９】
実施例５，工程ｃ.１（２.８８ｇ、１１.３ミリモル）のエタノール（２０ｍＬ）中溶液に、ＬｉＯＨ（０.３２４ｇ、１３.５ミリモル）の水（１０.００ｍＬ）中溶液を添加し、該反応混合物を室温で６時間攪拌した。大半の揮発性成分を減圧下で除去し、残渣を水（２０ｍＬ）とエーテル（２０ｍＬ）の間に分配させた。水層を氷水浴中で冷却し、１Ｎ  ＨＣｌでｐＨ領域を２の酸性とし、ＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ、４ｘ）で抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で蒸発させ、実施例５，工程ｄ.１を粘性固体（２.５５ｇ）として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：４.６４（ｍ，１Ｈ）、３.２５（ａｐｐ  ｓ，１Ｈ）、２.７０−２.４０（ｍ，１Ｈ）、２.１４（ｍ，１Ｈ）、１.５４−１.４４（ｍ，９Ｈ）、１.２７（ｓ，３Ｈ）、１.１０−０.８０（ｍ，１Ｈ）、０.６７（ｍ，１Ｈ）。実施例５，工程ｃ.２から同様にして実施例５，工程ｄ.２を調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：４.１３（ａｐｐ  ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、３.０６（ａｐｐ  ｓ，１Ｈ）、２.５５／２.４１（重複するａｐｐ  ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、１.５１（ｓ，９Ｈ）、１.２７（ｓ，３Ｈ）、０.７６（ａｐｐ  ｔ，J＝５.６Ｈｚ，１Ｈ）、０.６０（ａｐｐ  ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０１８０】
実施例５，工程ｅ
【化５７】
0005815746.tif 000064
【０１８１】
実施例５，工程ｄ.２（１.０９ｇ、４.５２ミリモル）および１，１’−（ビフェニル−４，４’−ジイル）ビス（２−ブロモエタノン）（０.８６９ｇ、２.１９ミリモル）のアセトニトリル（４０ｍＬ）中懸濁液に、ＤＩＥＡ（０.７８９ｍＬ、４.５２ミリモル）を添加し、該混合物を室温で４時間攪拌した。揮発性成分を減圧下で除去し、残渣をＥｔＯＡｃ（７０ｍＬ）と水（５０ｍＬ）の間に分配させた。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で蒸発させ、真空下で乾燥させて実施例５，工程ｅ（１.５４ｇ）を白色泡沫体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，δ＝２.５ｐｐｍ，４００ＭＨｚ）：８.１３（ｄ，Ｊ＝８.３Ｈｚ，４Ｈ）、７.９９（ｄ，Ｊ＝８.５Ｈｚ，４Ｈ）、５.７０−５.５４（ｍ，４Ｈ）、４.１７（ｍ，２Ｈ）、３.１３−３.１１（ｍ，２Ｈ）、２.５８−２.４６（ｍ，２Ｈ）、２.１９（ｍ，２Ｈ）、１.４２−１.３７（２つのｓ，１８Ｈ）、１.２４（ｓ，６Ｈ）、０.７６−０.７０（ｍ，４Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｎａ］＋Ｃ４０Ｈ４８Ｎ２ＮａＯ１０として：計算値  ７３９.３２；測定値  ７３９.５２
【０１８２】
実施例５，工程ｆ
【化５８】
0005815746.tif 000065
【０１８３】
実施例５，工程ｅ（１.５４ｇ、２.１５ミリモル）のキシレン（４０ｍＬ）中溶液を含有する圧力管に、酢酸アンモニウム（１.６５６ｇ、２１.４８ミリモル）を加え、容器に蓋をし、１４０℃で５時間加熱した。揮発性成分を減圧下で除去し、残渣をＤＣＭ（５０ｍＬ）と水（５０ｍＬ）の間に注意して分配させ、その一方で分配の最後に、水相が中性または塩基性であるように、十分なＮａＨＣＯ３飽和溶液を添加した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で蒸発させ、得られた粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（１０−１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）に付して精製し、実施例５，工程ｆ（０.６５ｇ）を褐色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，δ＝２.５ｐｐｍ，４００ＭＨｚ）：７.８４−７.６５（ｍ，８Ｈ）、７.５５−７.５４（ｍ，１.７Ｈ）、７.３２−７.３０（ｍ，０.３Ｈ）、４.６０（ｍ，２Ｈ）、３.２０（ｍ，２Ｈ）、２.４８−２.４３（ｍ，２Ｈ）、２.１２（ｍ，２Ｈ）、１.４５−１.０７（ｍ，２４Ｈ）、０.７７（ｍ，２Ｈ）、０.６９（ｍ，２Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋Ｃ４０Ｈ４９Ｎ６Ｏ４として：計算値  ６７７.３８；測定値  ６７７.４５
【０１８４】
実施例５，工程ｇ
【化５９】
0005815746.tif 000066
【０１８５】
実施例５，工程ｆ（０.６５ｇ、０.９６０ミリモル）のジオキサン（５ｍＬ）中溶液に、ジオキサン中４Ｎ  ＨＣｌ（５.８４ｍＬ、１９２ミリモル）を添加し、該混合物を室温で６時間攪拌した。揮発性成分を減圧下で除去し、減圧下で一夜乾燥させ、実施例５，工程ｇのＨＣｌ塩（０.６ｇ）を褐色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，δ＝２.５ｐｐｍ，４００ＭＨｚ）：１０.５−１０（ｂｒ  ｓ，約３.２Ｈ）、７.９９（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、７.９５（ｄ，J＝８.５，４Ｈ）、７.８５（ｄ，J＝８.５Ｈｚ，４Ｈ）、４.７６（ｍ，２Ｈ）、３.１８（ｍ，２Ｈ）、２.６１−２.４６（ｍ，４Ｈ；溶媒シグナルとの重複）、１.３５（ｓ，６Ｈ）、１.３０（ｍ，２Ｈ）、０.８２（ａｐｐ  ｂｒ  ｔ，J＝７.１，２Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋Ｃ３０Ｈ３３Ｎ６として：計算値  ４７７.２８；測定値  ４７７.２２
【０１８６】
実施例５
ＨＡＴＵ（６８.２ｍｇ、０.１７９ミリモル）を（Ｓ）−２−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−（（メトキシカルボニル）アミノ）酢酸（Ｃａｐ−２）（４４ｍｇ、０.１８ミリモル）および実施例５，工程ｇのＨＣｌ塩（５０.８ｍｇ、０.０８３ミリモル）のＤＭＦ（０.８ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（０.１２ｍＬ、０.６７ミリモル）中攪拌溶液に添加した。反応溶液を室温で３時間攪拌し、窒素流の下で一夜濃縮した。残渣をＭｅＯＨ（約２.５ｍＬ）に溶かし、濾過し、Ｐｒｅｐ  ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  １００ｘ３０ｍｍ、１０ミクロン；ＭｅＯＨ／水ｗ／ＴＦＡバッファー）に付して精製し、ジメチル  （４，４’−ビフェニルジイルビス（１Ｈ−イミダゾール−４，２−ジイル（（１Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）−５−メチル−２−アザビシクロ［３.１.０］ヘキサン−３，２−ジイル）（（１Ｓ）−１−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−オキソ−２，１−エタンジイル）））ビスカルバメート（実施例５）のＴＦＡ塩（４９.５ｍｇ）を黄色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＨ−ｄ４）  δ  ７.９３（ｓ，２Ｈ）、７.９０−７.８２（ｍ，８Ｈ）、５.０２（ｔ，Ｊ＝８.５Ｈｚ，２Ｈ）、４.４８（ｄ，Ｊ＝８.０Ｈｚ，２Ｈ）、４.２６−４.１８（ｍ，２Ｈ）、３.８０−３.７１（ｍ，２Ｈ）、３.６８（ｓ，６Ｈ）、３.６０（ｄ，Ｊ＝３.３Ｈｚ，２Ｈ）、２.７７（ｄｄ，Ｊ＝１３.４、９.２Ｈｚ，２Ｈ）、２.２８（ｄｄ，Ｊ＝１３.１、７.８Ｈｚ，４Ｈ）、１.５６−１.４４（ｍ，６Ｈ）、１.４２（ｓ，６Ｈ）、１.２５（ｄ，Ｊ＝６.８Ｈｚ，６Ｈ）、１.０９（ｄ，Ｊ＝６.０Ｈｚ，６Ｈ）、１.０６−０.９１（ｍ，６Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ保持時間  ３.９００分；ｍ／ｚ  ４６６.２９［１／２Ｍ＋Ｈ］＋。ＬＣデータは２２０ｎｍの検出器の波長でＳＰＤ−１０ＡＶ  ＵＶ−Ｖｉｓ検出器を用いてＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ−Ｌｕｎａ３μＣ１８  ２．０ｘ５０ｍｍカラムを備えた島津製ＬＣ−１０ＡＳ液体クロマトグラフィーに記録した。溶出条件は０.８ｍＬ／分の流速、１００％溶媒Ａ／０％溶媒Ｂ〜０％溶媒Ａ／１００％溶媒Ｂのグラジエント、４分間のグラジエント時間、１分間の維持時間、および５分間の分析時間を利用し、溶媒Ａは５％ＭｅＯＨ／９５％水／１０ｍＭ酢酸アンモニウムであり、溶媒Ｂは５％水／９５％ＭｅＯＨ／１０ｍＭ酢酸アンモニウムであった。ＭＳデータはエレクトロスプレーモードのＬＣについてＭｉｃｒｏｍａｓｓ  Ｐｌａｔｆｏｒｍを用いて測定した。
【０１８７】
実施例６
【化６０】
0005815746.tif 000067
【０１８８】
ＨＡＴＵ（８１ｍｇ、０.２１２ミリモル）を、４，４’−ビス（２−（（Ｓ）−ピロリジン−２−イル）−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）−１，１’−ビフェニル（ＷＯ２００８／０２１９２７にて調製）のＨＣｌ塩（５６.２ｍｇ、０.０９９ミリモル）および（Ｓ）−２−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−（（メトキシカルボニル）アミノ）酢酸（Ｃａｐ−２）（５２ｍｇ、０.２１ミリモル）のＤＭＦ（１.０ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（０.１４ｍＬ、０.７９ミリモル）中攪拌溶液に添加した。反応溶液を室温で３時間攪拌し、次に窒素流の下で濃縮させた。残渣をＭｅＯＨ（約５ｍＬ）に溶かし、濾過し、Ｐｒｅｐ  ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  １００ｘ３０ｍｍ、１０ミクロン；ＭｅＯＨ／水ｗ／ＴＦＡバッファー）に付して精製し、ジメチル  （４，４’−ビフェニルジイルビス（１Ｈ−イミダゾール−４，２−ジイル（２Ｓ）−２，１−ピロリジンジイル（（１Ｓ）−１−（（２Ｒ，６Ｒ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−オキソ−２，１−エタンジイル）））ビスカルバメート（実施例６）のＴＦＡ塩（８３ｍｇ）を淡黄色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＨ−ｄ４）  δ  ７.９６（ｓ，２Ｈ）、７.９１−７.８４（ｍ，８Ｈ）、５.２６（ｔ，Ｊ＝７.５Ｈｚ，２Ｈ）、４.２４−４.０９（ｍ，６Ｈ）、３.９３−３.８４（ｍ，２Ｈ）、３.７４−３.６８（ｍ，２Ｈ）、３.６７（ｓ，６Ｈ）、２.６３−２.５５（ｍ，２Ｈ）、２.３９−２.１２（ｍ，８Ｈ）、１.５７（ｄ，Ｊ＝１１.０Ｈｚ，２Ｈ）、１.５１−１.４１（ｍ，２Ｈ）、１.３２−１.２５（ｍ，２Ｈ）、１.２２（ｄ，Ｊ＝７.０Ｈｚ，６Ｈ）、１.０５（ｄ，Ｊ＝６.０Ｈｚ，６Ｈ）、０.９８（ａｐｐ  ｑ，Ｊ＝１２.３Ｈｚ，２Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ保持時間  １.６６０分；ｍ／ｚ  ８７９.８［Ｍ＋Ｈ］＋。ＬＣデータは２２０ｎｍの検出器の波長でＳＰＤ−１０ＡＶ  ＵＶ−Ｖｉｓ検出器を用いてＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ−Ｌｕｎａ３μＣ１８  ２．０ｘ５０ｍｍカラムを備えた島津製ＬＣ−１０ＡＳ液体クロマトグラフィーに記録した。溶出条件は０.８ｍＬ／分の流速、１００％溶媒Ａ／０％溶媒Ｂ〜０％溶媒Ａ／１００％溶媒Ｂのグラジエント、４分間のグラジエント時間、１分間の維持時間、および５分間の分析時間を利用した。溶媒Ａは１０％アセトニトリル／９０％水／０．１％トリフルオロ酢酸であり、溶媒Ｂは１０％水／９０％アセトニトリル／０．１％トリフルオロ酢酸であった。ＭＳデータはエレクトロスプレーモードのＬＣについてＭｉｃｒｏｍａｓｓ  Ｐｌａｔｆｏｒｍを用いて測定した。
【０１８９】
生物学的活性
本開示にてＨＣＶレプリコンアッセイが利用され、それを共同出願のＰＣＴ／ＵＳ２００６／０２２１９７およびO’Boyleら、Antimicrob Agents Chemother、2005 Apr；49（4）：1346-53に記載されるように、調製し、実施し、かつ実証した。ルシフェラーゼレポーターを包含する推奨されているアッセイ方法も、商業的供給源（Apath.com）より記載されるように使用される。
【０１９０】
ＮＳ５Ａ領域にて耐性置換体を含有するＨＣＶ−ネオレプリコン細胞およびレプリコン細胞を用いて、これまでに記載の一連の化合物を試験した。該化合物は、野生型細胞に対する阻害能と比べて、変異した細胞ではその対応する阻害活性の減少の程度が異なることが判明した。かくして、本開示の化合物は、ＨＣＶ  ＮＳ５Ａ蛋白の機能を阻害するのに効果的であるとすることができ、ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０２２１９７出願および共同出願したＷＯ／０４０１４８５２に記載されるように併用にて効果的であると理解される。当然のことながら、本開示の化合物は複数の遺伝子型のＨＣＶを阻害し得ると認識される。表２は、本開示の代表的な化合物の、ＨＣＶ遺伝子型１ｂ野生型、ＨＣＶ遺伝子型１ｂＬＶ／ＹＨ二重耐性変異体、ＨＣＶ遺伝子型１ａ、および遺伝子型１ａＹＨ単一耐性変異体に対するＥＣ５０（効果的な５０％阻害濃度）値を示す。
【０１９１】
本開示の化合物は、ＮＳ５Ａ阻害に加えて、あるいはそれ以外の作用機序によりＨＣＶを阻害しうる。一の実施態様において、本開示の化合物はＨＣＶレプリコンを阻害し、もう一つ別の実施態様において、本開示の化合物はＮＳ５Ａを阻害する。本開示の化合物はＮＳ５Ａ配列にて複数の変異体を含有する複数の遺伝子型のＨＣＶを阻害しうる。
【０１９２】
ラットにおけるＩＶおよびＰＯ単回投与薬物動態的実験
実施例１〜６および化合物−Ａ（ＷＯ２００８／０２１９２７）の薬物動態をスプレーグドーリラット（２６０−３１０ｇ）にて特徴付けた（表２を参照のこと）。これらの実験にて、２群の動物（一群につきＮ＝３）に、１００％ＰＥＧ４００のベヒクル、または９０：５：５のＰＥＧ４００：エタノール：ＴＰＧＳのベヒクル中、化合物を、各々、頸静脈を介する静脈内（ＩＶ）注入（２ｍｇ／ｋｇ、１０分間にわたる）、または強制経口投与（５ｍｇ／ｋｇ）のいずれかで投与した。経口投与した群のラットは一夜絶食させた。投与した０.１７（ＩＶのみ）、０.２５、０.５、０.７５、１、２、４、６、８および２４時間後に一連の血液サンプルを得た。血液サンプル（約０.３ｍＬ）を頸静脈よりＫ３ＥＤＴＡ含有の試験管にて集め、次に４℃（１５００−２０００ｘｇ）で遠心分離に付し、血漿を得た。血漿サンプルをＬＣ／ＭＳ／ＭＳで分析するまで、−２０℃で貯蔵した。
【０１９３】
液体クロマトグラフィーによる分離を、つづいてタンデム式質量分析検出（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）を利用する生物学的分析法が、ラット血漿中の化合物を分析するために開発された。検出は選択された反応をモニター観察することにより行われた。先駆体（Ｍ＋Ｈ）＋種を示すイオンは四重極１にて選択され、Ｎ２との衝突によって解離され、特定の生成物のイオンを産生し、それはその後で四重極３によりモニターされた。標準曲線を雄ラットの血漿にて作成し、試験サンプルと同様にして処理し、定量データを得た。
【０１９４】
薬物動態的パラメーター値をキネチカ（Kinetica）による非コンパートメント法を用いて計算した。定量下限（ＬＬＯＱ）より下の値は計算に使用しなかった。曲線下面積（ＡＵＣ）を線形大計公式を用いて計算した。
【０１９５】
【化６１】
0005815746.tif 000068
【０１９６】
【表２】
0005815746.tif 000069