(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
インスリン類似体若しくはインスリン誘導体、又はその薬理学的に許容しうる塩、及びメチオニンを含む注射用水性医薬製剤であって、
ここで、インスリン類似体が、Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）ヒトインスリン、Ｌｙｓ（Ｂ３），Ｇｌｕ（Ｂ２９）ヒトインスリン、Ａｓｐ（Ｂ２８）ヒトインスリン、Ｌｙｓ（Ｂ２８）Ｐｒｏ（Ｂ２９）ヒトインスリン、Ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン及び式Ｉ
【化１】
0005735960.tif 000004
（式中、
Ａ０は、Ｌｙｓ又はＡｒｇであり；
Ａ５は、Ａｓｐ、Ｇｌｎ又はＧｌｕであり；
Ａ１５は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はＧｌｎであり；
Ａ１８は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はＡｓｎであり；
Ｂ−１は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はアミノ基であり；
Ｂ０は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又は化学結合であり；
Ｂ１は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はＰｈｅであり；
Ｂ２は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はＶａｌであり；
Ｂ３は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はＡｓｎであり；
Ｂ４は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はＧｌｎであり；
Ｂ２９は、Ｌｙｓ又は化学結合であり；
Ｂ３０は、Ｔｈｒ又は化学結合であり；
Ｂ３１は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ又は化学結合であり；
Ｂ３２は、Ａｒｇ−アミド、Ｌｙｓ−アミド又はアミノ基であり、
ここで、Ａ５、Ａ１５、Ａ１８、Ｂ−１、Ｂ０、Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３及びＢ４を含む群の２つのアミノ酸残基は、同時に、互いに独立して、Ａｓｐ又はＧｌｕである）
のインスリン類似体を含む群から選ばれるか、
又は
インスリン類似体が、式II
【化２】
0005735960.tif 000005
（式中、
Ａ−１は、Ｌｙｓ、Ａｒｇ又はアミノ基であり；
Ａ０は、Ｌｙｓ、Ａｒｇ又は化学結合であり；
Ａ１は、Ａｒｇ又はＧｌｙであり；
Ａ５は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はＧｌｎであり；
Ａ１５は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はＧｌｎであり；
Ａ１８は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はＡｓｎであり；
Ａ２１は、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ又はＧｌｙであり；
Ｂ−１は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はアミノ基であり；
Ｂ０は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又は化学結合であり；
Ｂ１は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ又は化学結合であり；
Ｂ３は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はＡｓｎであり；
Ｂ４は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はＧｌｎであり；
Ｂ２９は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ又はアミノ酸Ｐｈｅ、Ａｌａ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ若しくはＡｓｐを含む群から選ばれるアミノ酸、又は化学結合であり；
Ｂ３０は、Ｔｈｒ又は化学結合であり；
Ｂ３１は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ又は化学結合であり；
Ｂ３２は、Ａｒｇ−アミド又はＬｙｓ−アミドであり、
ここで、Ａ５、Ａ１５、Ａ１８、Ｂ−１、Ｂ０、Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３及びＢ４を含む群からの１つを超えないアミノ酸残基は、同時に、互いに独立して、Ａｓｐ又はＧｌｕである）
のインスリン類似体を含む群から選ばれ、
ここで、インスリン誘導体が、Ｂ２９−Ｎ−ミリストイル−ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトイン
スリン、Ｂ２９−Ｎ−パルミトイル−ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン、Ｂ２９−Ｎ−ミリストイルヒトインスリン、Ｂ２９−Ｎ−パルミトイルヒトインスリン、Ｂ２８−Ｎ−ミリストイルＬｙｓB28ＰｒｏB29ヒトインスリン、Ｂ２８−Ｎ−パルミトイル−ＬｙｓB28ＰｒｏB29ヒトインスリン、Ｂ３０−Ｎ−ミリストイル−ＴｈｒB29ＬｙｓB30ヒトインスリン、Ｂ３０−Ｎ−パルミトイル−ＴｈｒB29ＬｙｓB30ヒトインスリン、Ｂ２９−Ｎ−（Ｎ−パルミトイル−γ−グルタミル）−ｄｅｓ（Ｂ３９）ヒトインスリン、Ｂ２９−Ｎ−（Ｎ−リトコリル−γ−グルタミル）−ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン、Ｂ２９−Ｎ−（ω−カルボキシヘプタデカノイル）−ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン、及びＢ２９−Ｎ−（ω−カルボキシヘプタデカノイル）ヒトインスリンを含む群から選ばれ、
ｐＨ４.５又はそれより小さいｐＨを有する、上記医薬製剤。
【請求項２】
インスリン類似体が、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ５），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ５），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ｇｌｕ（Ｂ４），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ｇｌｕ（Ｂ４），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ４），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ４），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ４），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ４），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ４），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ４），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ０），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ０），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ０），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ０），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ０），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ０），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ０），Ａｓｐ（Ｂ１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ０），Ａｓｐ（Ｂ１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ａｒｇ（Ｂ３０），Ａｒｇ（Ｂ３１）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ａｒｇ（Ｂ３０），Ｌｙｓ（Ｂ３１）−ＮＨ2ヒトインスリン
を含む群から選ばれる、請求項１に記載の医薬製剤。
【請求項３】
インスリン類似体が、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｌｙｓ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｌｙｓ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ
０），Ａｒｇ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ０），Ｌｙｓ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ａｒｇ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ｌｙｓ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ４），Ａｒｇ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ４），Ｌｙｓ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ４），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ４），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ０），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ０），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒト
インスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｌｙｓ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒト
インスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｌｙｓ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ａｒｇ（Ａ１），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ａｒｇ（Ａ１），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｌｙｓ（Ｂ３
０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒ
トインスリン
を含む群から選ばれる、請求項１に記載の医薬製剤。
【請求項４】
０.００１〜０.２ｍｇ／ｍｌの亜鉛、
０.１〜５.０ｍｇ／ｍｌの保存剤、及び
５.０〜１００ｍｇ／ｍｌの等張化剤を含んでなる
請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項５】
フェノール、ｍ−クレゾール、クロロクレゾール、ベンジルアルコール、及びパラベンを含む群から選ばれる保存剤を含んでなる、請求項１〜４のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項６】
マンニトール、ソルビトール、ラクトース、デキストロース、トレハロース、塩化ナトリウム、及びグリセリンを含む群から選ばれる等張化剤を含んでなる、請求項１〜５のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項７】
ｐＨ２.５〜４.５の範囲のｐＨを有する、請求項１〜６のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項８】
ｐＨ３.０〜４.０の範囲のｐＨを有する、請求項１〜７のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項９】
ｐＨ３.７５付近のｐＨを有する、請求項１〜８のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項１０】
インスリン、インスリン類似体及び／又はインスリン誘導体が、２４０〜３０００ｎｍｏｌ／ｍｌの濃度で存在する、請求項１〜９のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項１１】
２０〜３０ｍｇ／ｍｌの濃度でグリセリンを含んでなる、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項１２】
２５ｍｇ／ｍｌの濃度でグリセリンを含んでなる、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項１３】
１〜３ｍｇ／ｍｌの濃度でｍ−クレゾールを含んでなる、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項１４】
２ｍｇ／ｍｌの濃度でｍ−クレゾールを含んでなる、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項１５】
０.０１又は０.０３又は０.０８ｍｇ／ｍｌの濃度で亜鉛を含んでなる、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項１６】
エキセンジン−４又はその類似体をさらに含んでなる、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の医薬製剤であって、
ここで、エキセンジン−４の類似体が、
Ｈ−ｄｅｓＰｒｏ36−エキセンジン−４−Ｌｙｓ6−ＮＨ2、
Ｈ−ｄｅｓ（Ｐｒｏ36,37）−エキセンジン−４−Ｌｙｓ4−ＮＨ2及び
Ｈ−ｄｅｓ（Ｐｒｏ36,37）−エキセンジン−４−Ｌｙｓ5−ＮＨ2、
若しくはそれらの薬理学的に許容しうる塩を含む群から選ばれるか、
又は、
ｄｅｓＰｒｏ36［Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）、
ｄｅｓＰｒｏ36［ＩｓｏＡｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）、
ｄｅｓＰｒｏ36［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）、
ｄｅｓＰｒｏ36［Ｍｅｔ（Ｏ）14，ＩｓｏＡｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）、
ｄｅｓＰｒｏ36［Ｔｒｐ（Ｏ2）25，Ａｓｐ28］エキセンジン−２（１−３９）、
ｄｅｓＰｒｏ36［Ｔｒｐ（Ｏ2）25，ＩｓｏＡｓｐ28］エキセンジン−２（１−３９）、
ｄｅｓＰｒｏ36［Ｍｅｔ（Ｏ）14Ｔｒｐ（Ｏ2）25，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）及び
ｄｅｓＰｒｏ36［Ｍｅｔ（Ｏ）14Ｔｒｐ（Ｏ2）25，ＩｓｏＡｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）、
若しくはそれらの薬理学的に許容しうる塩を含む群から選ばれるか、
又は、
Ｈ−（Ｌｙｓ）6−ｄｅｓ Ｐｒｏ36［Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−Ｌｙｓ6−ＮＨ2
ｄｅｓ Ａｓｐ28Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38エキセンジン−４（１−３９）−ＮＨ2、
Ｈ−（Ｌｙｓ）6−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−ＮＨ2、
Ｈ−Ａｓｎ−（Ｇｌｕ）5−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−ＮＨ2、
ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−（Ｌｙｓ）6−ＮＨ2、
Ｈ−（Ｌｙｓ）6−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−（Ｌｙｓ）6−ＮＨ2、
Ｈ−Ａｓｎ−（Ｇｌｕ）5−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−（Ｌｙｓ）6−ＮＨ2、
Ｈ−（Ｌｙｓ）6−ｄｅｓ Ｐｒｏ36［Ｔｒｐ（Ｏ2）25，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−Ｌｙｓ6−ＮＨ2、
Ｈ−ｄｅｓ Ａｓｐ28 Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｔｒｐ（Ｏ2）25］エキセンジン−４（１−３９）−ＮＨ2、
Ｈ−（Ｌｙｓ）6−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｔｒｐ（Ｏ2）25、Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−ＮＨ2、
Ｈ−Ａｓｎ−（Ｇｌｕ）5−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｔｒｐ（Ｏ2）25，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−ＮＨ2、
ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｔｒｐ（Ｏ2）25，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−（Ｌｙｓ）6−ＮＨ2、
Ｈ−（Ｌｙｓ）6−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｔｒｐ（Ｏ2）25，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−（Ｌｙｓ）6−ＮＨ2、
Ｈ−Ａｓｎ−（Ｇｌｕ）5−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｔｒｐ（Ｏ2）25，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−（Ｌｙｓ）6−ＮＨ2、
Ｈ−（Ｌｙｓ）6−ｄｅｓ Ｐｒｏ36［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−Ｌｙｓ6−ＮＨ2、
ｄｅｓ Ｍｅｔ（Ｏ）14Ａｓｐ28 Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38エキセンジン−４（１−３９）−ＮＨ2、
Ｈ−（Ｌｙｓ）6−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−ＮＨ2、
Ｈ−Ａｓｎ−（Ｇｌｕ）5−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｍｅｔ（Ｏ）14，
Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−ＮＨ2、
ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−（Ｌｙｓ）6−ＮＨ2、
Ｈ−（Ｌｙｓ）6−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−Ｌｙｓ6−ＮＨ2、
Ｈ−Ａｓｎ−（Ｇｌｕ）5 −ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−（Ｌｙｓ）6−ＮＨ2、
Ｈ−（Ｌｙｓ）6−ｄｅｓ Ｐｒｏ36［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ｔｒｐ（Ｏ2）25，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−Ｌｙｓ6−ＮＨ2、
ｄｅｓ Ａｓｐ28 Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ｔｒｐ（Ｏ2）25］エキセンジン−４（１−３９）−ＮＨ2、
Ｈ−（Ｌｙｓ）6−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ｔｒｐ（Ｏ2）25，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−ＮＨ2、
Ｈ−Ａｓｎ−（Ｇｌｕ）5−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−ＮＨ2、
ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ｔｒｐ（Ｏ2）25，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−（Ｌｙｓ）6−ＮＨ2、
Ｈ−（Ｌｙｓ）6−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ｔｒｐ（Ｏ2）25，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−（Ｌｙｓ）6−ＮＨ2、
Ｈ−Ａｓｎ−（Ｇｌｕ）5−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ｔｒｐ（Ｏ2）25，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−（Ｌｙｓ）6−ＮＨ2、
若しくはそれらの薬理学的に許容しうる塩
を含む群から選ばれる、上記医薬製剤。
【請求項１７】
エキセンジン−４をさらに含んでなる、請求項１６に記載の医薬製剤。
【請求項１８】
ペプチドＬｙｓ6−ＮＨ2が、エキセンジン−４の類似体のＣ末端に結合している、請求項１６に記載の医薬製剤。
【請求項１９】
Ａｒｇ34，Ｌｙｓ26（Ｎε（γ−グルタミル（Ｎα−ヘキサデカノイル）））ＧＬＰ−１（７−３７）［リラグルチド］又はその薬理学的に許容しうる塩をさらに含んでなる、請求項１６に記載の医薬製剤。
【請求項２０】
最大で１０ｍｇ／ｍｌまでの濃度範囲のメチオニンを含んでなる、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項２１】
最大で３ｍｇ／ｍｌまでの濃度範囲のメチオニンを含んでなる、請求項１６に記載の医薬製剤。
【請求項２２】
（ａ）水溶液中に成分を導入する工程、及び
（ｂ）ｐＨを調整する工程
を含んでなる、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の製剤を調製する方法。
【請求項２３】
請求項１〜１９のいずれか１項に記載の製剤から構成される糖尿病を治療するための薬剤。
【請求項２４】
Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）ヒトインスリン及びメチオニンを含む水性医薬製剤。
【請求項２５】
Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）ヒトインスリン、Ｈ−ｄｅｓ
Ｐｒｏ36−エキセンジン−４−Ｌｙｓ6−ＮＨ2、及びメチオニンを含む水性医薬製剤。
【請求項２６】
Ｌｙｓ（Ｂ３），Ｇｌｕ（Ｂ２９）ヒトインスリン及びメチオニンを含む水性医薬製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、インスリン、インスリン類似体又はインスリン誘導体、及びメチオニンを含む水性医薬製剤；並びにまた、その調製、糖尿病を治療するための使用、並びに糖尿病を治療する薬剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
糖尿病を患う人の数は、世界中で増えている。それらの多くはＩ型糖尿病患者と称するものであって、患者にとっては、内分泌性インスリン分泌不全の代替が、今のところ唯一可能な治療である。罹患した患者は、通常１日数回、死ぬまでインスリン注射に依存する。ＩＩ型糖尿病は、インスリンの欠乏が、必ずしもあるわけではない点でＩ型糖尿病と対照的であるが、多くの場合、特に進行期には、必要に応じて、経口抗糖尿病薬と組み合わせたインスリンによる治療が、最も有益な治療形態と考えられる。
【０００３】
健常人では、膵臓によるインスリンの放出は、血糖濃度と厳密に結びついている。食後に生じるような高められた血糖レベルは、インスリン分泌の対応する上昇によって急速に補われる。絶食状態では、血漿インスリンレベルは、インスリン感受性器官及び組織へのグルコースの連続的供給を確保するため、そして夜間の肝臓グルコース産生を低く保つために十分なベースライン値（base line value）まで低下している。外因性、通常、インスリンの皮下投与による内因性インスリン分泌の代替は、上記の血糖の生理学的調節の質に近付いていない。血糖が上方又は下方へ逸脱する場合がしばしばあり、そしてその最もひどい形では、これらの場合は致命的となりうる。しかしながら、さらに、初期症状なしに数年にわたって上昇した血糖値は、相当な健康リスクとなる。米国における大規模なＤＣＣＴ研究（非特許文献１）は、慢性的に高い血糖値が後期糖尿病性合併症（late diabetic complications）を発症する原因となることを明白に示した。後期糖尿病性合併症は、網膜症、腎症又は神経障害として特定の状況で現れ、そして失明、腎不全、及び四肢の喪失に至り、そしてさらに心臓血管障害のリスク上昇に関連する微小血管及び大血管の損傷である。このことから推測することができるのは、糖尿病の改善された治療は、血糖をできるだけ生理学的範囲内の近くに保つことを主な目的にしなければならないということである。強化インスリン療法の概念によれば、これは、速効型及び遅効型インスリン製剤の１日数回の注射によって達成される。速効型処方物は、血糖の食後上昇を補うために食事時に与えられる。遅効型基礎インスリンは、低血糖にならないよう、特に夜間にインスリンの基礎供給を確保するためである。
【０００４】
インスリンは、２つのアミノ酸鎖：２１個のアミノ酸を有するＡ鎖及び３０個のアミノ酸を有するＢ鎖に分けられる５１個のアミノ酸からなるポリペプチドである。鎖は、２本のジスルフィド架橋によって結合している。インスリン製剤は、糖尿病治療において長年にわたって用いられてきた。このような製剤では、自然分泌インスリン（naturally occurring insulins）だけでなく、つい最近では、インスリン誘導体及びインスリン類似体も用いられている。
【０００５】
インスリン類似体は、自然分泌インスリン、すなわち、ヒトインスリン又は動物インスリンの類似体であり、これは、本来存在する少なくとも１つのアミノ酸残基が他のアミノ酸で置換されている及び／又は少なくとも１つのアミノ酸残基が付加／欠失していることで、その他の点では同一の対応する自然分泌インスリンとは異なる。また、当該アミノ酸は、天然に存在しないアミノ酸であってもよい。
【０００６】
インスリン誘導体は、化学修飾によって得られる、自然分泌インスリン又はインスリン類似体の誘導体である。化学修飾は、例えば、１つ又はそれ以上のアミノ酸への１つ又はそれ以上の定義された化学基の付加であってもよい。一般に、インスリン誘導体及びインスリン類似体の活性は、ヒトインスリンと比べていくらか変化している。
【０００７】
作用開始が早められたインスリン類似体は、特許文献１、特許文献２、及び特許文献３に記載されている。特許文献１は、中でも、Ｂ２７及びＢ２８の置換に関する。特許文献３は、Ｂ２９位においてグルタミン酸でなく異なるアミノ酸、好ましくはプロリンを有するインスリン類似体を記載している。特許文献２は、Ｂ２８にリシン又はアルギニンを有するインスリン類似体を包含し、それはまた、Ｂ３及び／又はＡ２１で場合により修飾されてもよい。
【０００８】
特許文献４は、Ｂ３におけるアスパラギンの修飾及びＡ５、Ａ１５、Ａ１８又はＡ２１位での少なくとも１つのさらなるアミノ酸の修飾によって化学修飾により保護されたインスリン類似体を記載している。
【０００９】
一般に、インスリン誘導体及びインスリン類似体は、ヒトインスリンと比べていくらか変化した作用を有する。
【００１０】
特許文献５は、Ｂ１〜Ｂ６位における少なくとも１つのアミノ酸がリシン又はアルギニンによって置換されたインスリン類似体を記載している。このようなインスリンは、特許文献５によれば、延長された効果を有する。また、遅延された効果は、特許文献６に記載されたインスリン類似体によって示されている。強化インスリン療法の概念は、基礎インスリンを早めに投与することで血糖値の安定な制御を目指すことによって健康に対するリスクを低下させることである。一般的な基礎インスリンの一例は、薬物ランタス（登録商標）（活性成分：インスリングラルギン＝Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）ヒトインスリン）である。一般に、新しい改善された基礎インスリンの開発における目的は、低血糖事象の数を最小限にすることである。理想的な基礎インスリンは、少なくとも２４時間、各患者において安全に作用する。理想的には、インスリン効果の開始が遅く、そしてかなり平らな時間／活性プロファイルを有し、それによって糖の短期的な供給不足のリスクを有意に最小限にし、そして食物が予め摂取されていなくても投与が可能である。基礎インスリンの供給は、インスリン活性ができるだけ長い間一貫して続く、すなわち、体に一定量のインスリンが供給されるときに有効である。その結果、低血糖事象のリスクは低くなり、そして患者に特有の及び日中に特有の（day-specific）変動性が最小限になる。そのため、理想的な基礎インスリンの薬物動態学的プロファイルは、遅延された作用開始及び遅延された作用、すなわち、長期持続性及び均一な作用を特徴としていなければならない。
【００１１】
市場にあるインスリン置換のための自然分泌インスリンの製剤は、インスリンの由来（例えば、ウシ、ブタ、ヒトインスリン）、そしてまたそれらの組成において異なるため、活性プロファイル（作用開始及び時間）は影響を受けることがある。異なるインスリン製品の組み合わせを通して任意の非常に広く多様な活性プロファイルを得、非常に広い生理学的血糖値を用いることができる。今日では、組換えＤＮＡ技術により、この種の改質インスリンの製造が可能である。それには、延長された作用時間を有するインスリングラルギン（Ｇｌｙ（Ａ２１）−Ａｒｇ（Ｂ３１）−Ａｒｇ（Ｂ３２）ヒトインスリン）が含まれる。インスリングラルギンは、透明な酸性溶液の形態で注射され、そしてその溶解性に基づいて、皮下組織の生理学的ｐＨ範囲では安定な六量体会合体として沈殿する。インスリングラルギンは、１日１回注射され、そしてその平らな血清プロファイル、及びそれに伴う夜間低血糖のリスク低下のため他の長時間活性なインスリンと比較して注目すべきである（非特許文献２）。これまで記載された製剤と対照的に、作用時間が持続するインスリングラルギンの特定製剤は、酸性ｐＨを有する透明溶液を特徴としている。しかしながら、インスリンは、特に酸性ｐＨで安定性の低下、そして熱的及び物理的機械的負荷下で凝集傾向の増加を示し、そしてそれは混濁及び沈殿の形態（粒子形成）を呈することがある（非特許文献３）。
【００１２】
このようなインスリン類似体では、インスリン類似体が、
・Ｂ鎖末端がリシン又はアルギニンアミドのようなアミド化された塩基性アミノ酸残基からなる、すなわち、Ｂ鎖末端のアミド化された塩基性アミノ酸残基において、末端アミノ酸のカルボキシル基がそのアミド化形態にあり、そして
・インスリンＡ鎖のＮ末端アミノ酸残基がリシン又はアルギニン残基であり、そして
・アミノ酸Ａ８位がヒスチジン残基によって占有されており、そして
・アミノ酸Ａ２１位がグリシン残基によって占有されており、そして
・Ａ５、Ａ１５、Ａ１８、Ｂ−１、Ｂ０、Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３、及びＢ４位のそれぞれにおいて、酸性アミノ酸による中性アミノ酸の２つの置換、負に荷電されたアミノ酸残基の２つの付加、又は１つのこのような置換及び１つのこのような付加がある
という特性を特徴とするときに、記載された所望の基礎時間／活性プロファイルとなることが見出された。
【００１３】
インスリン、インスリン類似体及びインスリン誘導体のすべて水性処方物に共通するのは、記載されたタンパク質が、化学的に完全に安定なわけではないが、その代わりに、処方物が影響を受ける時間、保存温度及び運動並びにさらに多くのものの関数として、処方物の品質にとって有害である、インスリン、インスリン類似体及びインスリン誘導体に影響を与えうるさまざまな分子過程がある。インスリン、インスリン類似体及びインスリン誘導体の化学安定性を損なう１つの物質は、酸素であり、当該処方物と酸素の接触は、特に複数回投与用のパック中の処方物の場合、空気中に酸素が存在するため不可避である。とりわけ、酸素の酸化的可能性が化学安定性に障害をもたらすと考えられる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１４】
【特許文献１】ＥＰ ０ ２１４ ８２６
【特許文献２】ＥＰ ０ ３７５ ４３７
【特許文献３】ＥＰ ０ ６７８ ５２２
【特許文献４】ＥＰ ０ ４１９ ５０４
【特許文献５】ＷＯ ９２／００３２１
【特許文献６】ＥＰ−Ａ ０ ３６８ １８７
【非特許文献】
【００１５】
【非特許文献１】The Diabetes Control and Complications Trial Research Group (1993), N. Engl. J. Med. 329, 977-986
【非特許文献２】Schubert-Zsilavecz et al., 2:125-130 (2001)
【非特許文献３】Brange et al., J. Ph. Sci 86:517-525 (1997)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１６】
さて、驚くべきことに、インスリン、インスリン類似体、及びインスリン誘導体の処方物にアミノ酸メチオニンを加えると、これらのタンパク質の一部において安定性が改善されることが見出された。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
従って、本発明はインスリン、インスリン類似体若しくはインスリン誘導体、又はその薬理学的に許容しうる塩、及びメチオニンを含む水性医薬製剤を提供する。
【００１８】
さらに、本発明は、インスリンがヒトインスリン、ブタインスリン及びウシインスリンを含む群から選ばれる、前記の医薬製剤を提供する。
【００１９】
さらに、本発明は、インスリン類似体が、Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）ヒトインスリン、Ｌｙｓ（Ｂ３），Ｇｌｕ（Ｂ２９）ヒトインスリン、Ａｓｐ（Ｂ２８）ヒトインスリン、Ｌｙｓ（Ｂ２８）Ｐｒｏ（Ｂ２９）ヒトインスリン、Ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン及び式Ｉのインスリン類似体を含む群から選ばれ、
【化１】
0005735960.tif 000002
ここで、
Ａ０は、Ｌｙｓ又はＡｒｇであり；
Ａ５は、Ａｓｐ、Ｇｌｎ又はＧｌｕであり；
Ａ１５は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はＧｌｎであり；
Ａ１８は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はＡｓｎであり；
Ｂ−１は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はアミノ基であり；
Ｂ０は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又は化学結合であり；
Ｂ１は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はＰｈｅであり；
Ｂ２は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はＶａｌであり；
Ｂ３は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はＡｓｎであり；
Ｂ４は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はＧｌｎであり；
Ｂ２９は、Ｌｙｓ又は化学結合であり；
Ｂ３０は、Ｔｈｒ又は化学結合であり；
Ｂ３１は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ又は化学結合であり；
Ｂ３２は、Ａｒｇ−アミド、Ｌｙｓ−アミド又はアミノ基であり、
ここで、Ａ５、Ａ１５、Ａ１８、Ｂ−１、Ｂ０、Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３、及びＢ４を含む群の２つのアミノ酸残基は、同時に、互いに独立して、Ａｓｐ又はＧｌｕであり、特に、ここにおいて、インスリン類似体は、
【００２０】
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ５），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ５），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ｇｌｕ（Ｂ４），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ｇｌｕ（Ｂ４），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ４），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ４），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ４），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ４），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ４），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ４），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ０），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ０），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ０），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ０），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ０），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ０），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ０），Ａｓｐ（Ｂ１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ０），Ａｓｐ（Ｂ１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ａｒｇ（Ｂ３０），Ａｒｇ（Ｂ３１）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ａｒｇ（Ｂ３０），Ｌｙｓ（Ｂ３１）−ＮＨ2ヒトインスリン
を含む群から選ばれる、前記の医薬製剤を提供する。
【００２１】
さらに、本発明は、インスリン類似体が式ＩＩのインスリン類似体を含む群から選ばれ、
【化２】
0005735960.tif 000003
ここで、
Ａ−１は、Ｌｙｓ、Ａｒｇ又はアミノ基であり；
Ａ０は、Ｌｙｓ、Ａｒｇ又は化学結合であり；
Ａ１は、Ａｒｇ又はＧｌｙであり；
Ａ５は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はＧｌｎであり；
Ａ１５は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はＧｌｎであり；
Ａ１８は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はＡｓｎであり；
Ａ２１は、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ又はＧｌｙであり；
Ｂ−１は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はアミノ基であり；
Ｂ０は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又は化学結合であり；
Ｂ１は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ又は化学結合であり；
Ｂ３は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はＡｓｎであり；
Ｂ４は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ又はＧｌｎであり；
Ｂ２９は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ又はアミノ酸Ｐｈｅ、Ａｌａ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ若しくはＡｓｐを含む群から選ばれるアミノ酸、又は化学結合であり；
Ｂ３０は、Ｔｈｒ又は化学結合であり；
Ｂ３１は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ又は化学結合であり；
Ｂ３２は、Ａｒｇ−アミド又はＬｙｓ−アミドであり、
ここで、Ａ５、Ａ１５、Ａ１８、Ｂ−１、Ｂ０、Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３及びＢ４を含む群からの１つを超えないアミノ酸残基は、同時に、互いに独立して、Ａｓｐ又はＧｌｕであり、特に、ここにおいて、インスリン類似体は、
【００２２】
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｌｙｓ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｌｙｓ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ０），Ａｒｇ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ０），Ｌｙｓ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ａｒｇ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ｌｙｓ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ４），Ａｒｇ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ４），Ｌｙｓ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｇｌｕ（Ａ５），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ａｓｐ（Ａ１８），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｇｌｕ（Ａ１５），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｓｐ（Ｂ３），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ４），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ４），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ０），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｇｌｕ（Ｂ０），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ｌｙｓ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｌｙｓ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ−１），Ａｒｇ（Ａ０），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｌｙｓ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ａｒｇ（Ａ１），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ａｒｇ（Ａ０），Ａｒｇ（Ａ１），Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ｌｙｓ（Ｂ３０）−ＮＨ2ヒトインスリン、
Ｈｉｓ（Ａ８），Ｇｌｙ（Ａ２１），Ａｒｇ（Ｂ３１），Ａｒｇ（Ｂ３２）−ＮＨ2ヒトインスリン
を含む群から選ばれる、前記の医薬製剤を提供する。
【００２３】
さらに、本発明は、インスリン誘導体が、Ｂ２９−Ｎ−ミリストイル−ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン、Ｂ２９−Ｎ−パルミトイル−ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン、Ｂ２９−Ｎ−ミリストイルヒトインスリン、Ｂ２９−Ｎ−パルミトイルヒトインスリン、Ｂ２８−Ｎ−ミリストイルＬｙｓB28ＰｒｏB29ヒトインスリン、Ｂ２８−Ｎ−パルミトイル−ＬｙｓB28ＰｒｏB29ヒトインスリン、Ｂ３０−Ｎ−ミリストイル−ＴｈｒB29ＬｙｓB30ヒトインスリン、Ｂ３０−Ｎ−パルミトイル−ＴｈｒB29ＬｙｓB30ヒトインスリン、Ｂ２９−Ｎ−（Ｎ−パルミトイル−γ−グルタミル）−ｄｅｓ（Ｂ３９）ヒトインスリン、Ｂ２９−Ｎ−（Ｎ−リトコリル−γ−グルタミル）−ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン、Ｂ２９−Ｎ−（ω−カルボキシヘプタデカノイル）−ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン、及びＢ２９−Ｎ−（ω−カルボキシヘプタデカノイル）ヒトインスリンを含む群から選ばれる前記の医薬製剤を提供する。
【００２４】
さらに、本発明は、
０．００１〜０．２ｍｇ／ｍｌの亜鉛、
０．１〜５．０ｍｇ／ｍｌの保存剤、及び
５．０〜１００ｍｇ／ｍｌの等張化剤を含み、そして
５又はそれ未満のｐＨを有する
前記の医薬製剤を提供する。
【００２５】
さらに、本発明は、フェノール、ｍ−クレゾール、クロロクレゾール、ベンジルアルコール、及びパラベンを含む群から選ばれる保存剤を含む前記の医薬製剤を提供する。
【００２６】
さらに、本発明は、マンニトール、ソルビトール、ラクトース、デキストロース、トレハロース、塩化ナトリウム、及びグリセリンを含む群から選ばれる等張化剤を含む前記の医薬製剤を提供する。
【００２７】
さらに、本発明は、ｐＨ２．５〜４．５、好ましくはｐＨ３．０〜４．０の範囲、より好ましくはｐＨ３．７５付近のｐＨを有する前記の医薬製剤を提供する。
【００２８】
さらに、本発明は、インスリン、インスリン類似体及び／又はインスリン誘導体が２４０〜３０００ｎｍｏｌ／ｍｌの濃度で存在する前記の医薬製剤を提供する。
【００２９】
さらに、本発明は、２０〜３０ｍｇ／ｍｌの濃度でグリセリンを含む前記の医薬製剤を提供する。
【００３０】
さらに、本発明は、２５ｍｇ／ｍｌの濃度でグリセリンを含む前記の医薬製剤を提供する。
【００３１】
さらに、本発明は、１〜３ｍｇ／ｍｌ、好ましくは２ｍｇ／ｍｌの濃度でｍ−クレゾールを含む前記の医薬製剤を提供する。
【００３２】
さらに、本発明は、０．０１又は０．０３又は０．０８ｍｇ／ｍｌの濃度で亜鉛を含む前記の医薬製剤を提供する。
【００３３】
さらに、本発明は、グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ１）若しくはその類似体若しくは誘導体、又はエキセンジン−３及び／若しくは−４、若しくはそれらの類似体、若しくは誘導体、好ましくはエキセンジン−４をさらに含む前記の医薬製剤を提供する。
【００３４】
さらに、本発明は、エキセンジン−４の類似体が
Ｈ−ｄｅｓＰｒｏ36−エキセンジン−４−Ｌｙｓ6−ＮＨ2、
Ｈ−ｄｅｓ（Ｐｒｏ36,37）−エキセンジン−４−Ｌｙｓ4−ＮＨ2及び
Ｈ−ｄｅｓ（Ｐｒｏ36,37）−エキセンジン−４−Ｌｙｓ5−ＮＨ2、
若しくはそれらの薬理学的に許容しうる塩を含む群から選ばれるか、又はエキセンジン−４の類似体が
ｄｅｓＰｒｏ36［Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）、
ｄｅｓＰｒｏ36［ＩｓｏＡｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）、
ｄｅｓＰｒｏ36［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）、
ｄｅｓＰｒｏ36［Ｍｅｔ（Ｏ）14，ＩｓｏＡｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）、
ｄｅｓＰｒｏ36［Ｔｒｐ（Ｏ2）25，Ａｓｐ28］エキセンジン−２（１−３９）、
ｄｅｓＰｒｏ36［Ｔｒｐ（Ｏ2）25，ＩｓｏＡｓｐ28］エキセンジン−２（１−３９）、
ｄｅｓＰｒｏ36［Ｍｅｔ（Ｏ）14Ｔｒｐ（Ｏ2）25，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）及び
ｄｅｓＰｒｏ36［Ｍｅｔ（Ｏ）14Ｔｒｐ（Ｏ2）25，ＩｓｏＡｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）、
又はそれらの薬理学的に許容しうる塩
を含む群から選ばれる前記の医薬製剤を提供する。
【００３５】
さらに、本発明は、ペプチドＬｙｓ6−ＮＨ2が、エキセンジン−４の類似体のＣ末端に結合している前記の医薬製剤を提供する。
【００３６】
さらに、本発明は、エキセンジン−４の類似体が
Ｈ−（Ｌｙｓ）6−ｄｅｓ Ｐｒｏ36［Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−Ｌｙｓ6−ＮＨ2
ｄｅｓ Ａｓｐ28Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38エキセンジン−４（１−３９）−ＮＨ2、
Ｈ−（Ｌｙｓ）6−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ａｓｐ28］エキセンジン−
４（１−３９）−ＮＨ2、
Ｈ−Ａｓｎ−（Ｇｌｕ）5−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−ＮＨ2、
ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−（Ｌｙｓ）6−ＮＨ2、
Ｈ−（Ｌｙｓ）6−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−（Ｌｙｓ）6−ＮＨ2、
Ｈ−Ａｓｎ−（Ｇｌｕ）5−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−（Ｌｙｓ）6−ＮＨ2、
Ｈ−（Ｌｙｓ）6−ｄｅｓ Ｐｒｏ36［Ｔｒｐ（Ｏ2）25，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−Ｌｙｓ6−ＮＨ2、
Ｈ−ｄｅｓ Ａｓｐ28 Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｔｒｐ（Ｏ2）25］エキセンジン−４（１−３９）−ＮＨ2、
Ｈ−（Ｌｙｓ）6−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｔｒｐ（Ｏ2）25、Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−ＮＨ2、
Ｈ−Ａｓｎ−（Ｇｌｕ）5−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｔｒｐ（Ｏ2）25，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−ＮＨ2、
ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｔｒｐ（Ｏ2）25，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−（Ｌｙｓ）6−ＮＨ2、
Ｈ−（Ｌｙｓ）6−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｔｒｐ（Ｏ2）25，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−（Ｌｙｓ）6−ＮＨ2、
Ｈ−Ａｓｎ−（Ｇｌｕ）5−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｔｒｐ（Ｏ2）25，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−（Ｌｙｓ）6−ＮＨ2、
Ｈ−（Ｌｙｓ）6−ｄｅｓ Ｐｒｏ36［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−Ｌｙｓ6−ＮＨ2、
ｄｅｓ Ｍｅｔ（Ｏ）14Ａｓｐ28 Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38エキセンジン−４（１−３９）−ＮＨ2、
Ｈ−（Ｌｙｓ）6−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−ＮＨ2、
Ｈ−Ａｓｎ−（Ｇｌｕ）5−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−ＮＨ2、
ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−（Ｌｙｓ）6−ＮＨ2、
Ｈ−（Ｌｙｓ）6−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−Ｌｙｓ6−ＮＨ2、
Ｈ−Ａｓｎ−（Ｇｌｕ）5 −ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−（Ｌｙｓ）6−ＮＨ2、
Ｈ−（Ｌｙｓ）6−ｄｅｓ Ｐｒｏ36［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ｔｒｐ（Ｏ2）25，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−Ｌｙｓ6−ＮＨ2、
ｄｅｓ Ａｓｐ28 Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ｔｒｐ（Ｏ2）25］エキセンジン−４（１−３９）−ＮＨ2、
Ｈ−（Ｌｙｓ）6−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ｔｒｐ（Ｏ2）25，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−ＮＨ2、
Ｈ−Ａｓｎ−（Ｇｌｕ）5−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−ＮＨ2、
ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ｔｒｐ（Ｏ2）25，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−（Ｌｙｓ）6−ＮＨ2、
Ｈ−（Ｌｙｓ）6−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ｔｒｐ（Ｏ2）25，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−（Ｌｙｓ）6−ＮＨ2、
Ｈ−Ａｓｎ−（Ｇｌｕ）5−ｄｅｓ Ｐｒｏ36，Ｐｒｏ37，Ｐｒｏ38［Ｍｅｔ（Ｏ）14，Ｔｒｐ（Ｏ2）25，Ａｓｐ28］エキセンジン−４（１−３９）−（Ｌｙｓ）6−ＮＨ2、
又はそれらの薬理学的に許容しうる塩
を含む群から選ばれる前記の医薬製剤を提供する。
【００３７】
さらに、本発明は、Ａｒｇ34，Ｌｙｓ26（Ｎε（γ−グルタミル（Ｎα−ヘキサデカノイル）））ＧＬＰ−１（７−３７）［リラグルチド］又はその薬理学的に許容しうる塩をさらに含む前記の医薬製剤を提供する。
【００３８】
さらに、本発明は、１０ｍｇ／ｍｌまで、好ましくは３ｍｇ／ｍｌまでの濃度範囲のメチオニンを含む前記の医薬製剤を提供する。
【００３９】
さらに、本発明は、
（ａ）水溶液中に成分を導入する工程、及び
（ｂ）ｐＨを調整する工程
を含む、前記製剤を調製する方法を提供する。
【００４０】
さらに、本発明は、糖尿病を治療するための製剤の使用を提供する。
【００４１】
本発明は、製剤から構成される糖尿病を治療するための薬剤を提供する。
【００４２】
以下、本明細書を多くの実施例に関して説明するが、それらは、なんら限定的な効果を有することを意図するものではない。
【図面の簡単な説明】
【００４３】
【図１】ラットにおける式Ｉの新たなインスリン類似体の血糖低下効果を示す図である。
【図２】イヌにおける式Ｉの新たなインスリン類似体の血糖低下効果を示す図である。
【図３】イヌにおけるＹＫＬ２０５の血糖低下効果を示す図である。
【図４】イヌにおけるＹＫＬ２０５の血糖低下効果の亜鉛依存性を示す図である。
【図５】ラットにおける本発明の式ＩＩのインスリン類似体の血糖低下効果を示す図である。
【図６】ラットにおけるインスリングラルギンの血糖低下効果を示す図である。
【実施例】
【００４４】
以下の実施例は、本発明の概念を説明することを意図しており、なんら効果を限定するものではない。
【００４５】
実施例１：窒素、酸素を用いた溶液の調剤及び標準条件下での調剤における研究
約２５％の０．１Ｍ ＨＣｌを入れ、そして０．２％のポリソルベート２０保存溶液を加えることによって溶液を調製した。続いて、ＳＡＲ１６１２７１及び塩化亜鉛保存溶液を加え、そして撹拌した。ｐＨ２のｐＨで１Ｍ ＨＣｌを加えてＳＡＲ１６１２７１を溶解した。溶液を撹拌し、次いで１Ｍ ＮａＯＨを加えてｐＨをｐＨ４．０に調整した。注射グレードの水を用いてバッチサイズの９０％まで満たした。この溶液に、撹拌しながら、連続的にグリセリン８５％及びｍ−クレゾールを加えた。注射グレードの水を用いて所望の最終質量にした。シリンジ上のフィルターアタッチメントを用いて溶液を濾過した。バッチを、ガス未処理（参照として）、窒素ガス処理及び酸素ガス処理（陽性対照として）の３つに分けた。ガス処理は、当該ガスのブランケットによって行った。
【００４６】
未処理
ＳＡＲ１６１２７１の量
１Ｍ＋５℃：３．６７ｍｇ／ｍｌ
１Ｍ＋２５℃：３．４６ｍｇ／ｍｌ
１Ｍ＋３７℃：３．４１ｍｇ／ｍｌ
不純物
１Ｍ＋５℃：３．０％
１Ｍ＋２５℃：３．６％
１Ｍ＋３７℃：５．６％
高分子量タンパク質
１Ｍ＋５℃：０．２％
１Ｍ＋２５℃：０．３％
１Ｍ＋３７℃：１．４％
【００４７】
窒素処理
ＳＡＲ１６１２７１の量
１Ｍ＋５℃：３．７３ｍｇ／ｍｌ
１Ｍ＋２５℃：３．５０ｍｇ／ｍｌ
１Ｍ＋３７℃：３．３５ｍｇ／ｍｌ
不純物
１Ｍ＋５℃：３．１％
１Ｍ＋２５℃：３．５％
１Ｍ＋３７℃：５．２％
高分子量タンパク質
１Ｍ＋５℃：０．２％
１Ｍ＋２５℃：０．３％
１Ｍ＋３７℃：１．２％
【００４８】
酸素処理
ＳＡＲ１６１２７１の量
１Ｍ＋５℃：３．５４ｍｇ／ｍｌ
１Ｍ＋２５℃：３．３４ｍｇ／ｍｌ
１Ｍ＋３７℃：３．２６ｍｇ／ｍｌ
不純物
１Ｍ＋５℃：３．２％
１Ｍ＋２５℃：３．９％
１Ｍ＋３７℃：７．２％
高分子量タンパク質
１Ｍ＋５℃：０．２％
１Ｍ＋２５℃：０．５％
１Ｍ＋３７℃：２．９％
【００４９】
窒素を用いた調剤の場合、未処理サンプルと比較して１ヵ月後に不純物における明瞭な低下がなかった。酸素を用いた調剤の場合、わずかにより高い不純物及び高分子量タンパク質が明らかに見られた。これらの結果に基づいて、標準条件下での調剤を選択した。
【００５０】
実施例２：３種の異なる抗酸化剤を用いた安定性の研究
実施例１に記載したように溶液を調製した。さらに、酸化的副生成物のレベルを低下させるために、グリセリン８５％とｍ−クレゾールの添加の間に、抗酸化剤−メチオニン又はグルタチオン又はアスコルビン酸を処方物に加えた。グルタチオン（０．１８３ｍｇ／ｍｌ）又はアスコルビン酸（０．１０５ｍｇ／ｍｌ）を含む処方物は、ちょうど３ヵ月保存後に明瞭な変色を示した。メチオニン（０．０８９ｍｇ／ｍｌ）を含む処方物は、全く変色を示さず、そして５℃で１ヵ月保存後、安定であった。
【００５１】
ＳＡＲ１６１２７１の量
１Ｍ＋５℃：３．４３ｍｇ／ｍｌ
１Ｍ＋２５℃：３．４３ｍｇ／ｍｌ
１Ｍ＋３７℃：３．５３ｍｇ／ｍｌ
不純物
１Ｍ＋５℃：２．９％
１Ｍ＋２５℃：３．４％
１Ｍ＋３７℃：５．７％
高分子量タンパク質
１Ｍ＋５℃：０．２％
１Ｍ＋２５℃：０．３％
１Ｍ＋３７℃：１．１％
【００５２】
実施例３：アミド化インスリン誘導体の処方物
実施例３〜７は、式Ｉのインスリン類似体の生物学的、薬理学的、及び物理化学的性質の測定にのみ役立ち、最初にその処方物の供給（実施例３）、次いで対応する試験の実施（実施例４〜７）が含まれる。化合物を含む溶液は、以下のように調製した：本発明のインスリン類似体を８０μｇ／ｍｌ亜鉛（塩化亜鉛として）入りの１ｍＭ塩酸中２４０±５Ｍの目標濃度で溶解した。
【００５３】
溶解媒体として用いた組成物は、以下の通りであった：
ａ）１ｍＭ塩酸
ｂ）１ｍＭ塩酸、５μｇ／ｍｌ亜鉛（塩化亜鉛又は塩酸として加えた）
ｃ）１ｍＭ塩酸、１０μｇ／ｍｌ亜鉛（塩化亜鉛又は塩酸として加えた）
ｄ）１ｍＭ塩酸、１５μｇ／ｍｌ亜鉛（塩化亜鉛又は塩酸として加えた）
ｅ）１ｍＭ塩酸、３０μｇ／ｍｌ亜鉛（塩化亜鉛又は塩酸として加えた）
ｆ）１ｍＭ塩酸、８０μｇ／ｍｌ亜鉛（塩化亜鉛又は塩酸として加えた）
ｇ）１ｍＭ塩酸、１２０μｇ／ｍｌ亜鉛（塩化亜鉛又は塩酸として加えた）
【００５４】
この目的のため、分子量及び目標濃度に基づいて必要な量より約３０％多い量の凍結乾燥物質を最初に計量した。その後、既存濃度を分析ＨＰＬＣによって測定し、次いで、８０μｇ／ｍｌ亜鉛入り５ｍＭ塩酸を用いて溶液を目標濃度の達成に必要な体積にした。必要に応じて、ｐＨを３．５±０．１に再調整した。ＨＰＬＣによる最終分析により２４０±５Ｍの目標濃度を確認した後、完成した溶液を、０．２μｍフィルターアタッチメントを有するシリンジを用いて滅菌バイアル中に移し、これを隔壁及びクリンプキャップで閉じた。本発明のインスリン誘導体の短期の単一試験では、例えば等張化剤、保存剤又は緩衝物質の添加に関して処方物の最適化を行わなかった。
【００５５】
実施例４：ラットにおける新たなインスリン類似体の血糖低下作用の評価
選ばれた新たなインスリン類似体の血糖低下効果を健康な雄血糖正常ウィスターラットにおいて試験した。雄ラットに用量９ｎｍｏｌ／ｋｇのインスリン類似体の皮下注射を行った。インスリン類似体の注射直前、そして注射後８時間までの間に一定間隔で血液サンプルを動物から採取し、そしてそれらの血糖含量を測定した。実験は、本発明のインスリン類似体が作用開始を有意に遅らせ、そして作用時間をより長く均一にすることを明らかに示している（図１参照）。
【００５６】
実施例５：イヌにおける新たなインスリン類似体の血糖低下作用の評価
選ばれた新たなインスリン類似体の血糖低下効果を健康な雄血糖正常ビーグルにおいて試験した。雄の動物に用量６ｎｍｏｌ／ｋｇのインスリン類似体の皮下注射を行った。インスリン類似体の注射直前、及び注射後４８時間までの間に一定間隔で、血液サンプルを動物から採取し、そしてそれらの血糖含量を測定した。実験は、使用した本発明のインスリン類似体が作用開始を有意に遅らせ、そして作用時間をより長く均一にすることを明らかに示している（図２参照）。
【００５７】
実施例６：２倍増加した用量でのイヌにおける血糖低下作用の評価
選ばれた新たなインスリン類似体の血糖低下効果を健康な雄血糖正常ビーグルにおいて試験した。雄の動物に用量６ｎｍｏｌ／ｋｇ及び１２ｎｍｏｌ／ｋｇのインスリン類似体の皮下注射を行った。インスリン類似体の注射直前、及び注射後４８時間までの間に一定間隔で、血液サンプルを動物から採取し、そしてそれらの血糖含量を測定した。実験は、使用した本発明のインスリン類似体が、用量依存的効果を有するが、用量を２倍増やしたにもかかわらず、効果プロファイルは平らであり、すなわち、顕著に低い点（最下点）が観察されなかったことを明らかに示している（図３参照）。このことから、本発明のインスリンは、知られているインスリンの遅延と比較して、低血糖事象が有意に少なくなることが推測されうる。
【００５８】
実施例７：処方物中の異なる亜鉛濃度でのイヌにおける血糖低下効果の評価
実施例３５に記載されたように実験を実施した。図４は結果を示す。それによれば、本発明のインスリン類似体の時間／活性曲線は、同濃度のインスリンを有する処方物において亜鉛イオンの量を通して影響を及ぼすことができ、このようなやり方では、０又は低い亜鉛含量では迅速な作用開始が観察され、そして作用が２４時間にわたって持続するのに対して、より高い亜鉛量では、平らな作用開始が観察され、そしてインスリン効果が２４時間よりかなり長く持続する。
【００５９】
実施例８：アミド化インスリン誘導体の処方物
実施例８〜１０は、式ＩＩのインスリン類似体の生物学的、薬理学的及び物理化学的性質の測定にのみ役立ち、最初にその処方物の供給（実施例８）、次いで対応する試験の実施（実施例９及び１０）が含まれる。本発明のインスリン類似体を、８０μｇ／ｍｌ亜鉛（塩化亜鉛として）入りの１ｍＭ塩酸中２４０±５Ｍの目標濃度で溶解した。この目的のため、分子量及び目標濃度に基づいて必要な量より約３０％多い量の凍結乾燥物質を最初に計量した。その後、既存濃度を分析ＨＰＬＣによって測定し、次いで、８０μｇ／ｍｌ亜鉛入りの５ｍＭ塩酸を用いて溶液を目標濃度の達成に必要な体積にした。必要に応じて、ｐＨを３．５±０．１に再調整した。ＨＰＬＣによる最終分析により２４０±５Ｍの目標濃度を確認した後、完成した溶液を、０．２μｍフィルターアタッチメントを有するシリンジを用いて滅菌バイアル中に移し、これを隔壁及びクリンプキャップで閉じた。本発明のインスリン誘導体の短期の単一試験では、例えば等張化剤、保存剤又は緩衝物質の添加に関して処方物の最適化を行わなかった。
【００６０】
実施例９：ラットにおける新たなインスリン類似体の血糖低下作用の評価
選ばれた新たなインスリン類似体の血糖低下効果を、健康な雄血糖正常ウィスターラットにおいて試験した。雄ラットに用量９ｎｍｏｌ／ｋｇのインスリン類似体の皮下注射を行った。インスリン類似体の注射直前、そして注射後８時間までの間に一定間隔で血液サンプルを動物から採取し、そしてそれらの血糖含量を測定した。実験は、本発明のインスリン類似体が作用開始を有意に遅らせ、そして作用時間をより長く均一にすることを明らかに示している（図５参照）
【００６１】
実施例１０：イヌにおける新たなインスリン類似体の血糖低下作用の評価
選ばれた新たなインスリン類似体の血糖低下効果を、健康な雄血糖正常ビーグルにおいて試験した。雄の動物に用量６ｎｍｏｌ／ｋｇのインスリン類似体の皮下注射を行った。
インスリン類似体の注射直前、及び注射後４８時間までの間に一定間隔で、血液サンプルを動物から採取し、そしてそれらの血糖含量を測定した。実験は、本発明のインスリン類似体が平らな作用開始を有意に遅らせ、そして作用時間をより長く均一にすることを明らかに示している。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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