(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
シス若しくはトランス配置の、式（Ｂ）：
【化１】
0005690731.tif 000019
〔式中、Ｒ１は、以下の式：
【化２】
0005690731.tif 000020
｛式中、Ｒ４およびＲ５は、いずれの場合にも、独立して、Ｈ、直鎖、分岐鎖若しくは環状のＣ１−６アルキル、直鎖、分岐鎖若しくは環状のＣ２−６アルケニル、Ｃ６−１４アリール、またはＯ、Ｎ、およびＳから選択される１〜３個のヘテロ原子を含有する５〜１０員の芳香族複素環であり、
Ｒ６は、水素、ヒドロキシメチル、トリフルオロメチル、直鎖、分岐鎖若しくは環状のＣ１−６アルキル、直鎖、分岐鎖若しくは環状のＣ２−６アルケニル、臭素、塩素、フッ素、またはヨウ素である。｝
から選択される基であり、
Ｒ２は、水素または−Ｃ（Ｏ）−Ｒ３であり、
Ｒ３は、水素、直鎖若しくは分岐鎖のアルキル、アルコキシアルキル、アラルキル、アリールオキシアルキル、アリールまたは置換ジヒドロピリジニルである。〕
の化合物の単一の鏡像異性体、またはその医薬的に許容される塩の製造方法であって、前記方法は、
酸を用いて、式（Ｂ）の化合物のラセミ混合物または鏡像異性体的に富化された混合物のコングロマリット塩を形成させる工程であって、得られたコングロマリット塩が、
（−）結晶および（＋）結晶の１：１混合物である前記ラセミ化合物の塩のＩＲスペクトルが、前記単一の鏡像異性体のそれぞれと同一であり、
前記ラセミ化合物の塩が、双方の単一の鏡像異性体のものよりも低い融点を有する、という特性を有するものである、工程と、
結晶化によって前記混合物を分割する工程と、
を含む、方法。
【請求項２】
前記結晶化方法は、優先的結晶化である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記結晶化方法は、エントレインメントまたは周期的エントレインメントである、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
Ｒ３は、水素、直鎖若しくは分枝鎖のアルキル、アルコキシアルキル、アラルキル、アリールオキシアルキル、アリールまたは置換ジヒドロピリジニルである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
Ｒ３は、水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｔ−ブチル、ｎ−ブチル、メトキシメチル、ベンジル、フェノキシメチル、フェニル、ハロゲン、Ｃ１−４アルキルまたはＣ１−４アルコキシによって置換されたフェニルまたはＮ−メチルジヒドロピリジニルである、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
Ｒ３は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｔ−ブチル、ｎ−ブチル、メトキシメチル、ベンジル、フェノキシメチル、フェニル、またはハロゲン、Ｃ１−４アルキルまたはＣ１−４アルコキシによって置換されたフェニルである、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
トランス配置の式（Ｂ）の単一の鏡像異性体が製造される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
シス配置の式（Ｂ）の単一の鏡像異性体が製造される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記コングロマリット塩の前記単一の鏡像異性体は、極性溶媒中で前記コングロマリット塩のラセミ化合物よりもはるかに低い溶解性を示す、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記鏡像異性体混合物の鏡像異性体分離は、所望の単一の鏡像異性体を、前記コングロマリット塩の過飽和溶液に播種することによって行われる、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
Ｒ１は、シトシンまたは５−フルオロシトシンである、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
Ｒ１はシトシンである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
Ｒ１は５−フルオロシトシンである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
前記酸は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、テトラフルオロホウ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ｐ−アミノベンゼンスルホン酸、ｐ−クロロベンゼンスルホン酸、ｐ−ヒドロキシベンゼンスルホン酸、クロロ酢酸、ジクロロ酢酸、トリクロロ酢酸、グリコール酸、ピルビン酸、コハク酸、アジピン酸、マレイン酸、フマル酸、クエン酸、またはそれらの混合物である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記酸は、ｐ−トルエンスルホン酸、マレイン酸、またはそれらの混合物である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
形成された前記コングロマリット塩は、シス２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンである、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
シス２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンのコングロマリット塩が形成され、ここでその単一の鏡像異性体が前記極性溶媒中で前記ラセミ化合物よりも低い溶解性を示す、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
シス２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンの前記コングロマリット塩は、約１８５℃〜１８７℃の共晶点を有する２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンのｐ−トルエンスルホン酸塩である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
シス２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンの前記コングロマリット塩は、約１７１℃〜１７３℃の共晶点を有する２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンのマレイン酸塩である、請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
前記単一の鏡像異性体は、１％以下の量で、式（Ｂ）の化合物の第２の異性体をさらに含む、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
シス−２−ヒドロキシメチル−４−（シトシン−１’−イル）−１，３−オキサチオランまたはその塩を分割するための方法であって、
ａ）アキラル酸と、前記シス−２−ヒドロキシメチル−４−（シトシン−１’−イル）−１，３−オキサチオランとを反応させて、シス−２−ヒドロキシメチル−４−（シトシン−１’−イル）−１，３−オキサチオラン・アキラル酸塩を産生する工程と、
ｂ）０を越える鏡像異性体過剰率を有するシス−２−ヒドロキシメチル−４−（シトシン−１’−イル）−１，３−オキサチオラン・アキラル酸塩の溶液を製造する工程と、
ｃ）結晶化を開始するのに十分な量の（＋）または（−）−シス−２−ヒドロキシメチル−４−（シトシン−１’−イル）−１，３−オキサチオラン・アキラル酸塩を前記溶液に添加する工程と、
ｄ）前記（＋）または（−）−シス−２−ヒドロキシメチル−４−（シトシン−１’−イル）−１，３−オキサチオラン・アキラル酸塩のうちの実質的に１つを回収する工程と、
ｅ）前記（＋）または（−）−シス−２−ヒドロキシメチル−４−（シトシン−１’−イル）−１，３−オキサチオラン・アキラル酸塩を、前記（＋）または（−）−シス−２−ヒドロキシメチル−４−（シトシン−１’−イル）−１，３−オキサチオランまたは塩に変換する工程と、
を含む、方法。
【請求項２２】
前記アキラル酸は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、テトラフルオロホウ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ｐ−アミノベンゼンスルホン酸、ｐ−クロロベンゼンスルホン酸、ｐ−ヒドロキシベンゼンスルホン酸、クロロ酢酸、ジクロロ酢酸、トリクロロ酢酸、グリコール酸、ピルビン酸、コハク酸、アジピン酸、マレイン酸、フマル酸、クエン酸、またはそれらの混合物である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記酸はｐ−トルエンスルホン酸である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２４】
約１８５℃〜１８７℃の共晶点を有する、シス２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンのトルエンスルホン酸コングロマリット塩。
【請求項２５】
約１７１℃〜１７３℃の共晶点を有する、シス２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンのマレイン酸コングロマリット塩。
【請求項２６】
請求項１に記載の式（Ｂ）の単一の鏡像異性体またはその医薬的に許容される塩の製造方法であって、前記鏡像異性体は、２ｐｐｍ以下の量でメチルトシレートを含み、前記方法は、
（ａ）トシル酸を用いて、請求項１に記載の式（Ｂ）の化合物のラセミ混合物または鏡像異性体的に富化された混合物のコングロマリット塩を形成させる工程と、
（ｂ）結晶化によって、前記鏡像異性体の塩の鏡像異性体的に富化された混合物を得る工程と、
（ｃ）前記鏡像異性体的に富化された混合物の遊離塩基を得る工程と、
を含む、方法。
【請求項２７】
前記トシル酸はｐ−トルエンスルホン酸である、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記式（Ｂ）の化合物は２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンである、請求項２６または請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記鏡像異性体は、シス配置である、請求項２６〜２８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０】
前記鏡像異性体は、１％以下の量で、式（Ｂ）の化合物の第２の異性体をさらに含む、請求項２６〜２９のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、式（Ａ）：
【化１】
0005690731.tif 000002
〔式中、Ｒ１は、ピリミジン塩基またはその医薬的に許容される誘導体である。〕
のシスヌクレオシドまたはヌクレオシド類似体および誘導体の（−）異性体および（＋）異性体を産生するための新規方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
式（Ａ）の化合物のクラス、特に、２，４−二置換１，３−オキサチオランピリミジンヌクレオシドおよびその誘導体は、強力な抗ウイルス活性を有することが見出されている。特に、これらの化合物は、当該技術分野で公知の化合物よりも細胞毒性の副作用が少なく、Ｔ−リンパ球におけるＨＩＶ−１複製の強力な阻害剤として長期間にわたって作用することが見出されている（Ｂｅｌｌｅａｕ  ｅｔ  ａｌ（１９９３）Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．Ｖｏｌ．３，Ｎｏ．８，ｐｐ．１７２３−１７２８を参照のこと）。これらの化合物はまた、３ＴＣ耐性ＨＩＶ株に対して活性であることも見出されている（Ｔａｙｌｏｒ  ｅｔ  ａｌ（２０００）Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｃｈｅｍ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．Ｖｏｌ  １１，Ｎｏ．４，ｐｐ．２９１−３０１、Ｓｔｏｄｄａｒｔ  ｅｔ  ａｌ（２０００）Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．Ｖｏｌ．４４，Ｎｏ．３，ｐｐ．７８３−７８６を参照のこと）。さらに、式（Ａ）の化合物はまた、Ｂ型肝炎ウイルス感染症の予防および治療にも有用である。
【０００３】
これらの化合物の製造方法は、国際公開第９２／０８７１７号、第９５／２９１７６号、第０２／１０２７９６号、並びにＢｅｌｌｅａｕ  ｅｔ  ａｌ（１９９３）Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．Ｖｏｌ．３，Ｎｏ．８，ｐｐ．１７２３−１７２８、Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ（１９９４）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．Ｖｏｌ．３５，Ｎｏ．２７，ｐｐ．４７３９−４７４２、Ｍａｎｓｏｕｒ  ｅｔ  ａｌ，（１９９５）Ｊ．ｏｆ  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｖｏｌ．３８，Ｎｏ．１，ｐｐ．１−４、およびＣａｐｕｔｏ  ｅｔ  ａｌ  ｉｎ  Ｅｕｒ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．Ｖｏｌ．６，ｐｐ．１４５５−１４５８（１９９９）による刊行物に開示されている。
【０００４】
これらの方法の生成物は、多くの場合、ラセミ化合物である。これらのラセミ化合物は、純粋な鏡像異性体を得るためにさらなる処理を必要とする。単一の鏡像異性体の産生のための好ましい方法は、直接的優先結晶化、ジアステレオマー塩の結晶化、速度論的分割、酵素的分割、選択吸収、および不斉合成等によるラセミ化合物の分割である。例えば、欧州特許第ＥＰ０５１５１５６号、第ＥＰ０５１５１５７号、第ＥＰ０５６０７９４号、第ＥＰ０７５６５９５号、第ＥＰ０７５７６８４号、第ＥＰ１１５３９２４号、第ＥＰ１３６１２２７号、第ＥＰ１４０６８９６号、第ＥＰ１４７３２９４号、第ＥＰ１６３２４９０号、米国特許第ＵＳ５，６６３，３２０号、第ＵＳ５，６９３，７８７号、第ＵＳ６，６００，０４４号、第ＵＳ２００６／０１９９７８６号、国際公開第９２／２０６６９号、第９２／２０６９６号、第２００６／０９６９５４号を参照のこと。
【０００５】
例えば、Ｃｉｍｐｏｉａら（米国特許第ＵＳ２００６／０１９９７８６号）は、シス−オキサチオラン化合物とキラル酸とを反応させて２種のジアステレオマー塩を形成させること、ジアステレオマー塩の１つを回収すること、および回収したジアステレオマー塩を塩基化合物の鏡像異性体に戻すように変換することによって、光学的に活性なシス−２−ヒドロキシメチル−４−（シトシン−１’−イル）−１，３−オキサチオランおよびその誘導体を製造する方法を開示する。
【０００６】
ラセミ化合物が、「真の」ラセミ化合物である場合、２種の鏡像異性体のうちの均一な固相は、同一の単位格子に共存する。これらの物質は、ジアステレオマー結晶化を介して分離され得、これは、一般的に、光学的に純粋な酸または塩基（すなわち、分割剤）とラセミ化合物とを反応させて、ジアステレオマー塩の混合物を形成させることを含む。これらの混合物は、優先的結晶化によって分離され得る。しかしながら、いくつかのラセミ化合物は、コングロマリットの形態で存在し得る。コングロマリットにおいて、個々の鏡像異性体はそれぞれ、単一の結晶格子として結晶化する。したがって、コングロマリット塩は、実際には、各一つが異性体である２つの別個の結晶型の物理的混合物である。しかし、コングロマリットは、一般に、全てのラセミ化合物の２０％未満で認められる。例えば、Ｌｏｒｅｎｚ，Ｈ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．ｏｆ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｖ．ｏｆ  Ｃｈｅｍ．Ｔｅｃｈ．ａｎｄ  Ｍｅｔａｌｌｕｒｇｙ，（２００７），４２（１），５−１６［ラセミ化合物の５〜１０％がコングロマリット形成群に属する］を参照のこと。
【０００７】
コングロマリットは、原理上は、機械的に分離できる、２つの結晶性鏡像異性体の等モル混合物として定義することができる。コングロマリットの相図は、５０％および５０％の混合物で、鏡像異性体混合物の共晶点である明瞭な最低温度を示す。優先的結晶化の成功は、この事実に依存する。
【０００８】
優先的結晶化またはエントレインメントによる分割としても知られている、コングロマリット塩の形成によってあるラセミ化合物を分割するための方法は、例えば、Ｔｕｎｇら（米国特許第ＵＳ４，９９４，６０４号）、Ｍａｎｉｍａｒａｎら（米国特許第ＵＳ５，３０２，７５１号）、およびＣｏｑｕｅｒｅｌら（米国特許第ＵＳ６，０２２，４０９号）に記載され、これらの全開示は、参照することによって本明細書に組み込まれる。
【０００９】
コングロマリット化合物は、結晶格子において、単一の鏡像異性体として結晶化される、すなわち、各結晶格子は、単一の鏡像異性体で構成されている。したがって、コングロマリットであるためには、（−）結晶および（＋）結晶の１：１混合物であるラセミコングロマリット塩のＩＲスペクトルが、単一の鏡像異性体のスペクトルと同一でなければならない。コングロマリット挙動の別の特性は、ラセミコングロマリット塩は、通常、双方の単一の鏡像異性体の融点よりも低い融点を有することである。
【００１０】
コングロマリットが得られる場合、最も可溶性の組成物がラセミ化合物であるため、鏡像異性体過剰率の増加のために使用され得る。概して、コングロマリットが、１種の鏡像異性体を過剰に有する場合、その過剰分は回収され得る、すなわち、Ｘ％の鏡像異性体過剰率のコングロマリットは、ラセミ液を残して単一の鏡像異性体の収率Ｘ％を与える。
【００１１】
ラセミ形態のコングロマリットはまた、ラセミ溶液に単一の鏡像異性体を播種して、その鏡像異性体の優先的な速度論的沈殿をもたらすエントレインメント方法において使用され得る。例えば、Ｌｏｒｅｎｚ，Ｈ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．ｏｆ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｖ．ｏｆ  Ｃｈｅｍ．Ｔｅｃｈ．ａｎｄ  Ｍｅｔａｌｌｕｒｇｙ，（２００７），４２（１），５−１６を参照のこと。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
上記の手順は、式（Ａ）： 
【化２】
0005690731.tif 000003
〔式中、Ｒ１は、ピリミジン塩基またはその医薬的に許容される誘導体である。〕
のシスヌクレオシドまたはヌクレオシド類似体および誘導体の単一の異性体を得るための有効な手段を提供するが、一方、より単純かつより経済的な方法が必要とされる。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明は、特定のコングロマリット塩を用いる直接結晶化の手法によって、鏡像異性体を直接的かつ効率的に分離することを可能にする方法の発見に基づくものである。
したがって、本発明の方法の局面によれば、シス配置の式（Ｂ）：
【００１４】
【化３】
0005690731.tif 000004
〔式中、Ｒ１は、ピリミジン塩基またはその医薬的に許容される誘導体であり、
Ｒ２は、水素、カルボキシル官能性−Ｃ（Ｏ）−Ｒ３であるか、またはそれが結合している酸素原子と一体となって多官能性の酸（リン酸または２個以上のカルボキシル基を含有するカルボン酸、例えば、式ＨＯ２Ｃ（ＣＨ２）１−１０ＣＯ２Ｈのジカルボン酸）に由来するエステルを形成し、
Ｒ３は、水素、直鎖若しくは分岐鎖（例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｔ−ブチル、ｎ−ブチル）、または非置換若しくは置換の１〜３０個の炭素原子を有する環状アルキル、非置換若しくは置換の２〜３０個の炭素原子を有するアルコキシアルキル（例えば、メトキシメチル）、非置換若しくは置換の７〜１８個の炭素原子を有するアラルキル（例えば、ベンジル）、非置換若しくは置換の７〜１８個の炭素原子を有するアリールオキシアルキル（例えば、フェノキシメチル）、非置換若しくは置換の６〜１４個の炭素原子を有するアリール（例えば、ハロゲン、Ｃ１−４アルキル若しくはＣ１−４アルコキシによって任意に置換されたフェニル）、置換ジヒドロピリジニル（例えば、Ｎ−メチルジヒドロピリジニル）、Ｃ１−６−アルキル−若しくはＣ７−１８−アラルキルスルホニル等のスルホン酸エステル（例えば、メタンスルホニル）、硫酸エステル、アミノ酸エステル（例えば、Ｌ−バリル若しくはＬ−イソロイシル）、並びに一、二若しくは三リン酸エステルから選択される。〕
の化合物の単一の鏡像異性体並びにその医薬的に許容される塩およびエステルの製造方法であって、該方法は、
酸を用いて、式（Ｂ）の化合物のラセミ混合物または鏡像異性体的に富化された混合物のコングロマリット塩を形成させる工程であって、得られたコングロマリット塩が、
（−）結晶および（＋）結晶の１：１混合物である該ラセミ化合物の塩のＩＲスペクトルが、単一の鏡像異性体のそれぞれのものと同一であり、
該ラセミ化合物の塩が、双方の単一の鏡像異性体のものよりも低い融点を有する、という特性を有するものである、工程と、
結晶化によって鏡像異性体の塩の鏡像異性体的に富化された混合物を得る工程と、
標準的な方法（すなわち、塩を遊離塩基に変換すること）によって、鏡像異性体的に富化された混合物の遊離塩基を得る工程と、
を含む、方法が提供される。
【００１５】
該コングロマリット塩の形成後、これらの鏡像異性体は、Ｔｕｎｇら（米国特許第ＵＳ４，９９４，６０４号）、Ｍａｎｉｍａｒａｎら（米国特許第ＵＳ５，３０２，７５１号）、およびＣｏｑｕｅｒｅｌら（米国特許第ＵＳ６，０２２，４０９号）に記載されるような優先的結晶化によって分離することができる。これらの鏡像異性体はまた、エントレインメント法または周期的エントレインメント法によって分離することもできる。
【００１６】
本発明において、式Ｂのシスヌクレオシドの溶液は、所望の単一の鏡像異性体の結晶を播種し、播種した異性体を過剰に有するさらに大きい結晶を成長させることによって、および母液中に濃縮された逆の異性体を残すことによって、エントレインメントし得る。式Ｂのシスヌクレオシドの単一の鏡像異性体の産生に有用であるエントレインメントの結晶化手順については、得られた鏡像異性体的に富化されたヌクレオシドは、再結晶または一連の再結晶を通して鏡像異性的に純粋に成長させ得ることが望ましい。逆の異性体的に富化された母液は、さらに処理され得る。逆の異性体は、同様の再結晶化を介して抽出され得るか、またはラセミ化され得る。そして、上記の播種方法は、母液中の全ての物質が必要とされるシス異性体に向けられるように繰り返される。したがって、本発明の方法は、式Ｂのシスヌクレオシドの所望の異性体の、より高い鏡像異性体過剰率（ｅｅ）の結晶を提供する。これにより、本発明を式Ｂのシスヌクレオシドの低いｅｅを最初に生成する方法（許容できないｅｅの物質を生成する不斉合成の方法等）と組み合わせて、所望の生成物のはるかに高いｅｅを有する最終生成物を得ることが可能である。
【００１７】
また、この方法を使用して、トランス構造の式（Ｂ）の化合物の単一の鏡像異性体も製造し得る。
【００１８】
本発明の代替的な実施形態において、シス２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンのコングロマリット塩を形成する。その単一の鏡像異性体は、極性溶媒中でそのラセミ化合物よりもはるかに低い溶解性を示す。
【００１９】
本発明は、管理条件下で、所望の単一の鏡像異性体２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンコングロマリット塩を、２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンコングロマリット塩の過飽和溶液に播種することによって、分割剤を必要とせずに、シス２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンの鏡像異性体混合物または２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンのシス／トランスの組み合わせを、直接鏡像異性体分離することを含む。
【００２０】
本発明はまた、式（Ｂ）の化合物の単一の鏡像異性体またはその医薬的に許容される塩若しくはエステルの製造方法であって、該鏡像異性体は、２ｐｐｍ以下の量でメチルトシレートを含み、該方法は、
（ａ）トシル酸を用いて、式（Ｂ）の化合物のラセミ混合物または鏡像異性体的に富化された混合物のコングロマリット塩を形成させる工程と、
（ｂ）結晶化によって、該鏡像異性体の塩の鏡像異性体的に富化された混合物を得る工程と、
（ｃ）２ｐｐｍ以下の量でメチルトシレートを含む該鏡像異性体的に富化された混合物の遊離塩基を得る工程と
を含む、方法を含む。
【００２１】
本発明はまた、２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンの単一の鏡像異性体またはその医薬的に許容される塩若しくはエステルを含む組成物も含み、該鏡像異性体は、２ｐｐｍ以下の量でメチルトシレートを含む。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
本発明の様々な特徴および付随する利点は、添付図に関して考慮することによって、より完全に理解され、より理解が深まるであろう。
【図１】化合物（１）のｐ−トルエンスルホン酸塩の相図である。
【図２】実施例２に示される結晶化方法の紫外線および旋光度のモニタリングを例示する。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
したがって、本発明の第１の態様において、シス配置の式（Ｂ）：
【化４】
0005690731.tif 000005
〔式中、Ｒ１およびＲ２は、上記に定義される通りである。〕
の化合物の単一の鏡像異性体、およびその医薬的に許容される塩およびエステルを、酸を用いて式（Ｂ）の化合物のラセミ混合物または鏡像異性体的に富化された混合物のコングロマリット塩を形成させることによって製造する方法であって、得られたコングロマリット塩は、（−）結晶および（＋）結晶の１：１混合物であるラセミ化合物の塩のＩＲスペクトルが、単一の鏡像異性体のそれぞれのものと同一であり、該ラセミ化合物の塩が、双方の単一の鏡像異性体の融点よりも低い融点を有するという特性を有する、方法を提供する。
【００２４】
好ましい実施形態において、この単一の鏡像異性体は、１％以下の量で式（Ｂ）の化合物の第２の異性体をさらに含む。例えば、単一の鏡像異性体が（−）シス異性体の場合には、第２の異性体は、（＋）シス異性体、（−）トランス異性体、（＋）トランス異性体、およびそれらの混合物から選択され得ることが理解されよう。
【００２５】
酸は、好ましくは、マレイン酸、トシル酸等のアキラル酸、およびそれらの混合物から選択される。
【００２６】
本発明は、式（Ｂ）〔式中、Ｒ１は、ピリミジン塩基またはその医薬的に許容される誘導体であり、Ｒ２は、水素であるか、またはそれが結合している酸素原子と一体となって多官能性の酸のエステルを形成するか、またはカルボキシル官能性の−Ｃ（Ｏ）−Ｒ３であり、ここでエステル基の非カルボニル部分Ｒ３は、水素、直鎖若しくは分枝鎖のアルキル（例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｔ−ブチル、ｎ−ブチル）、Ｃ３−８環状アルキル、アルコキシアルキル（例えば、メトキシメチル）、アラルキル（例えば、ベンジル）、アリールオキシアルキル（例えば、フェノキシメチル）、アリール（例えば、ハロゲン、Ｃ１−４アルキル若しくはＣ１−４アルコキシによって任意に置換されたフェニル）、置換ジヒドロピリジニル（例えば、Ｎ−メチルジヒドロピリジニル）、アルキル−若しくはアラルキルスルホニル等のスルホン酸エステル（例えば、メタンスルホニル）、硫酸エステル、アミノ酸エステル（例えば、Ｌ−バリル若しくはＬ−イソロイシル）、並びに一、二若しくは三リン酸エステルから選択される。〕の２−置換４−置換１，３−オキサチオランのコングロマリット塩の形成に基づくものである。
【００２７】
好ましくは、Ｒ１は、以下の式：
【化５】
0005690731.tif 000006
〔式中、Ｒ４およびＲ５は、いずれの場合にも、独立して、Ｈ、直鎖、分岐鎖若しくは環状のＣ１−６アルキル、直鎖、分岐鎖若しくは環状のＣ２−６アルケニル、Ｃ６−１４アリール、または１〜３個のヘテロ原子を含有するＣ５−１０芳香族複素環であり、ここで、各へテロ原子は、Ｏ、Ｎ、およびＳのヘテロ原子であり、
Ｒ６は、水素、ヒドロキシメチル、トリフルオロメチル、直鎖、分岐鎖若しくは環状のＣ１−６アルキル、直鎖、分岐鎖若しくは環状のＣ２−６アルケニル、臭素、塩素、フッ素、またはヨウ素である。〕
から選択される。
【００２８】
Ｒ１は、例えば、シトシンまたは５−フルオロシトシンであり得る。
Ｒ２はまた、２個以上のカルボキシル基を含有するカルボン酸、例えば、ジカルボン酸ＨＯ２Ｃ（ＣＨ２）ｎＣＯ２Ｈ〔式中、ｎは１〜１０の整数である。〕（例えば、コハク酸）またはリン酸などの多官能性の酸に由来するエステルも含む。例えば、Ｒ２は、式ＨＯ２Ｃ（ＣＨ２）ｎＣＯ−Ｏ−〔式中、ｎは１〜１０である。〕のものであり得る。このようなエステルを製造するための方法は、公知である。例えば、Ｅ．Ｈａｈｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  ｄｉｍｅｒｓ  ａｓ  ａｎｔｉ−ｈｕｍａｎ  ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｖｉｒｕｓ  ａｇｅｎｔｓ”，Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ａｎａｌｏｇｕｅｓ  Ａｓ  Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ａｇｅｎｔｓ，Ｊ．Ｃ．Ｍａｒｔｉｎ，Ｅｄ．Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ  ＃４０１，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ，ｐｐ．１５６−１５９（１９８９）およびＭ．Ｂｕｓｓｏ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  ｄｉｍｅｒｓ  ｓｕｐｐｒｅｓｓ  ＨＩＶ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ”，ＡＩＤＳ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓｅｓ，４（６），ｐｐ．４４９−４５５（１９８８）を参照のこと。
【００２９】
本発明は、シス２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンのコングロマリット塩の形成を含む。その単一の鏡像異性体は、極性溶媒中でラセミ化合物よりもはるかに低い溶解性を示す。管理条件下で、単一の鏡像異性体を、ラセミ化合物の過飽和溶液に播種することによって、分割剤を必要とせずに、直接鏡像異性体分離を達成することができる。この分離はまた、その任意の誘導体においても達成し得る。
【００３０】
本発明の一実施形態は、シス−２−ヒドロキシメチル−４−（シトシン−１’−イル）−１，３−オキサチオランまたはその誘導体若しくは塩を分割するための方法を含み、
ａ）アキラル酸と、該シス−２−ヒドロキシメチル−４−（シトシン−１’−イル）−１，３−オキサチオランとを反応させて、シス−２−ヒドロキシメチル−４−（シトシン−１’−イル）−１，３−オキサチオラン・アキラル酸塩を産生する工程と、
ｂ）０を越える鏡像異性体過剰率を有するシス−２−ヒドロキシメチル−４−（シトシン−１’−イル）−１，３−オキサチオラン・アキラル酸塩の溶液を製造する工程と、
ｃ）結晶化を開始するのに十分な量の（＋）または（−）−シス−２−ヒドロキシメチル−４−（シトシン−１’−イル）−１，３−オキサチオラン・アキラル酸塩を該溶液に添加する工程と、
ｄ）該（＋）または（−）−シス−２−ヒドロキシメチル−４−（シトシン−１’−イル）−１，３−オキサチオラン・アキラル酸塩のうちの実質的に１つを回収する工程と、
ｅ）該（＋）または（−）−シス−２−ヒドロキシメチル−４−（シトシン−１’−イル）−１，３−オキサチオラン・アキラル酸塩を、該（＋）または（−）−シス−２−ヒドロキシメチル−４−（シトシン−１’−イル）−１，３−オキサチオランまたは塩に変換する工程と、
を含む。
【００３１】
コングロマリット塩の形成に有用なアキラル酸の例には、とりわけ、塩酸（ＨＣｌ）、臭化水素酸（ＨＢｒ）、硫酸（Ｈ２ＳＯ４）、テトラフルオロホウ酸（ＨＢＦ４）、メタンスルホン酸（ＣＨ３ＳＯ３Ｈ）、ベンゼンスルホン（ＢＳ）酸（Ｃ６Ｈ５ＳＯ３Ｈ）、ｐ−トルエンスルホン酸（ｐ−ＣＨ３Ｃ６Ｈ４ＳＯ３Ｈ）、ｐ−アミノＢＳ酸（ｐ−ＮＨ２Ｃ６Ｈ４ＳＯ３Ｈ）、ｐ−クロロＢＳ酸（ｐ−ＣｌＣ６Ｈ４ＳＯ３Ｈ）、ｐ−ヒドロキシＢＳ酸（ｐ−ＨＯＣ６Ｈ４ＳＯ３Ｈ）、クロロ酢酸（ＣｌＣＨ２ＣＯＯＨ）、ジクロロ酢酸（Ｃｌ２ＣＨＣＯＯＨ）、トリクロロ酢酸（Ｃｌ３ＣＨＣＯＯＨ）、グリコール酸（ＨＯＣＨ２ＣＯＯＨ）、ピルビン酸（ＣＨ３ＣＯＣＯＯＨ）、コハク酸（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）２ＣＯＯＨ）、アジピン酸（ＨＯＯＣ（ＣＨ２）４ＣＯＯＨ）、マレイン酸（シス−ＨＯＯＣＣＨ＝ＣＨＣＯＯＨ）、フマル酸（Ｔｒ−ＨＯＯＣＣＨ＝ＣＨＣＯＯＨ）、クエン酸（ＨＯＣ（ＣＯ２Ｈ）（ＣＨ２ＣＯ２Ｈ）２）、およびそれらの混合物等が含まれる。
【００３２】
本発明の別の態様に従って、式（Ｂ）の化合物の単一の鏡像異性体またはその医薬的に許容される塩若しくはエステルの製造方法であって、該鏡像異性体は、２ｐｐｍ以下の量でメチルトシレートを含み、該方法は、
（ａ）トシル酸を用いて、式（Ｂ）の化合物のラセミ混合物または鏡像異性体的に富化された混合物のコングロマリット塩を形成する工程と、
（ｂ）結晶化によって、該鏡像異性体の塩の鏡像異性体的に富化された混合物を得る工程と、
（ｃ）２ｐｐｍ以下の量でメチルトシレートを含む該鏡像異性体的に富化された混合物の遊離塩基を得る工程と、
を含む、方法が提供される。
【００３３】
好ましくは、トシル酸は、ｐ−トルエンスルホン酸であり、式（Ｂ）の化合物は、２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンであり、この鏡像異性体は、シス配置である。
【００３４】
さらに別の態様に従って、本発明は、２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンの単一の鏡像異性体またはその医薬的に許容される塩若しくはエステルを含む組成物であって、該鏡像異性体は、２ｐｐｍ以下の量でメチルトシレートを含む、組成物を提供する。好ましくは、該鏡像異性体は、シス配置である。
【００３５】
「誘導体」という用語は、式（Ｂ）の化合物の医薬的に許容される塩、エステル、またはこのようなエステルの塩である化合物、またはレシピエントに投与した際、式（Ｂ）の化合物またはその抗ウイルス活性の代謝産物または残渣物を（直接的または間接的に）提供することが可能である、任意の他の化合物である。式（Ｂ）の化合物は、塩基部分の官能基で、その医薬的に許容される誘導体を提供するために修飾され得ることが当業者により理解されよう。
【００３６】
本明細書で使用される「アルキル」という用語は、別途特定されない限り、１〜３０個の炭素原子、好ましくは、１〜６個の炭素原子を有する、飽和直鎖、分岐鎖若しくは環状の、一級、二級若しくは三級炭化水素を指し、これらは非置換であるか、またはヒドロキシ、Ｎ３、ＣＮ、ＳＨ、アミノ、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ６−１２−アリール、Ｃ１−６−アルキル、Ｃ２−１２−アルコキシアルキル、またはニトロによって任意に一置換若しくは二置換される。具体的には、メチル、エチル、シクロプロピル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、シクロペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、シクロヘキシル、シクロヘキシルメチル、３−メチルペンチル、２，２−ジメチルブチル、および２，３−ジメチルブチルを含む。
【００３７】
したがって、Ｒ２は、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロプロピルメチル、シクロペンチルメチル、シクロヘキシルメチル、３−メチルペンチル、２，２−ジメチルブチル、２，３−ジメチルブチル、ハロゲン化Ｃ１−６−アルキル、Ｃ１−６−ヒドロキシアルキル、またはＣ１−６−アミノアルキルであり得る。
【００３８】
本明細書で使用される「アルケニル」という用語は、別途特定されない限り、１つ若しくは複数の−ＣＨ２−ＣＨ２−基が、各場合において、−ＣＨ＝ＣＨ−によって置換されている本明細書で定義されるアルキルラジカルを示す。該アルケニル基は、アルキル基についての上記の様式で置換することができる。
【００３９】
本明細書に使用されるアルコキシアルキルは、最大３０個の炭素原子、好ましくは最大６個の炭素原子を有するアルキル−Ｏ−アルキル基を指し、これらは各場合において、非置換であるか、またはヒドロキシ、Ｎ３、ＣＮ、ＳＨ、アミノ、またはハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）によって任意に一置換若しくは二置換される。具体的には、メトキシメチル、エトキシメチル、プロポキシメチル、およびブトキシメチルを含む。
【００４０】
「アリール」という用語は、非置換であるか、またはヒドロキシ、Ｎ３、ＣＮ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、および／若しくはハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）によって１回若しくは複数回置換され、少なくとも１つのベンゼノイド型環を含む、芳香族部分を表す。アリール基は、６〜１４個の炭素原子（例えば、フェニルおよびナフチル）、特に、６〜１０個の炭素原子を含む。
【００４１】
「アラルキル」という用語は、アルキル基によって隣接する原子に結合したアリール部分を表す。アラルキルのアリール部分は、ヒドロキシ、Ｎ３、ＣＮ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、および／若しくはハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）によって１回若しくは複数回任意に置換され、少なくとも１つのベンゼノイド型環を含む。
【００４２】
「アリールオキシアルキル」という用語は、酸素原子によってアルキル基に結合したアリール部分、すなわち、アリール−Ｏ−アルキルを表す。アリールオキシアルキルのアリール部分は、ヒドロキシ、Ｎ３、ＣＮ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、および／若しくはハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）によって１回若しくは複数回任意に置換され、少なくとも１つのベンゼノイド型環を含む。
【００４３】
本明細書で使用される「保護された」という用語は、別途定義されない限り、酸素、窒素、またはリン原子のさらなる反応を防止するために、または他の目的のために、酸素、窒素、またはリン原子に付加される基を指す。多種多様な酸素および窒素保護基が、有機合成の当業者に知られている。好適な保護基は、例えば、Ｇｒｅｅｎｅ，ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，”Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９１に記載されており、参照することにより本明細書に組み込まれる。
【００４４】
本発明の実施形態によれば、
Ｒ１は、以下の式：
【化６】
0005690731.tif 000007
から選択され、
Ｒ２は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ３であり、
Ｒ３は、メチル、エチル、シクロプロピル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、シクロペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、シクロヘキシル、シクロヘキシルメチル、３−メチルペンチル、２，２−ジメチルブチル、２，３−ジメチルブチル、メトキシメチル、フェニル、ハロゲン、Ｃ１−４６アルキルまたはＣ１−４アルコキシによって置換されたフェニル、ベンジル、またはフェノキシメチルであり、
Ｒ４およびＲ５は、いずれの場合にも、独立して、Ｈ、直鎖、分岐鎖若しくは環状のＣ１−６アルキル、直鎖、分岐鎖若しくは環状のＣ２−６アルケニル、Ｃ６−１４アリール、または１〜３個のＯ、Ｎ、またはＳのヘテロ原子を含有するＣ５−１０芳香族複素環であり、
Ｒ６は、水素、ヒドロキシメチル、トリフルオロメチル、直鎖、分岐鎖若しくは環状のＣ１−６アルキル、直鎖、分岐鎖若しくは環状のＣ２−６アルケニル、臭素、塩素、フッ素、またはヨウ素である。
【００４５】
本発明の別の実施形態によれば、
Ｒ１は、シトシンまたは５−フルオロシトシンであり、
Ｒ２は、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ３であり、
Ｒ３は、メチル、エチル、シクロプロピル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、シクロペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、シクロヘキシル、シクロヘキシルメチル、３−メチルペンチル、２，２−ジメチルブチル、２，３−ジメチルブチル、メトキシメチル、フェニル、ハロゲン、Ｃ１−４６アルキルまたはＣ１−４アルコキシによって置換されたフェニル、ベンジル、またはフェノキシメチルであり、
【００４６】
本発明は、所望の鏡像異性体の種結晶の使用を必要とせずに、所望の鏡像異性体的に富化された結晶性シス２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンを形成させることを含む。
【００４７】
本発明はまた、所望の鏡像異性体の種結晶を用いて、結晶性シス２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンを形成させることも含む。
【００４８】
本発明はまた、２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンのシス／トランス混合物から出発する結晶性シス２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンの形成も含み、ここでシス／トランス比は、約１／１〜約５／１である。
【００４９】
本発明はまた、エントレインメント方法も含む。第１に、ラセミシス２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンまたは誘導体の飽和溶液を、所定温度で製造する。特に対象となるのは、式（Ｂ）の化合物の結晶化を支持する溶媒である。好適な溶媒には、水、メタノール、エタノール、トルエン、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、イソプロパノール、ｎ−プロパノール、アセトン、およびそれらの組み合わせが含まれる。
【００５０】
本発明の実施形態において、シス２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンのラセミ混合物またはその誘導体の量は、好適な溶媒中で溶解または懸濁される。加熱を使用して、溶解を完了し得る。飽和点を超える濃度が使用され得る。塩を形成するために、２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンまたはその誘導体の溶液または懸濁液に、過剰のマレイン酸を添加することによって、コングロマリットが形成される。使用したアキラル酸の量は、約１当量を超えるものである。アキラル酸の量は、約１〜約３当量であり得る。このコングロマリット塩は、従来の手段によって結晶化され得る。このコングロマリット塩の融点は、単一の鏡像異性体塩の融点よりも約２０℃低い。２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンのｐ−トルエンスルホン酸塩の共晶点は、約１８５℃〜１８７℃である。２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンのマレイン酸塩の共晶点は、約１７１℃〜１７３℃である。
【００５１】
コングロマリット塩が形成されると、反応混合物に、所望の単一の鏡像異性体塩の結晶を播種することができるか、またはその混合物を従来の手段によって進行させて、結晶化させることができる。その後、播種された若しくは未播種の混合物を冷却し、結晶化が起こると、沈殿生成物が収集される。この沈殿生成物は、所望の単一の鏡像異性体塩の重量をはるかに超えたことを示す。母液は、過剰の鏡像異性体（播種を使用した場合、播種に使用されるものとは反対）を示す。
【００５２】
この沈殿生成物は、好適な再結晶化溶媒中で沈殿生成物を再懸濁することによって再結晶化され得る。好適な再結晶化溶媒には、メタノール、エタノール、イソプロパノール等のアルコール、アセトン、およびそれらの組み合わせが含まれ得る。
【００５３】
遊離塩基を得るために、該沈殿生成物は、好適な溶媒中で再懸濁される。好適な再結晶化溶媒には、メタノール、エタノール、イソプロパノール等のアルコール、アセトン、およびそれらの組み合わせが含まれる。必要に応じて、混合物が塩基性（ｐＨ≧７）であるようにｐＨを調節する。塩基を使用して、酸を除去する。塩基は、トリエチルアミン、ジエチルシクロヘキシルアミン、ジエチルメチルアミン、ジメチルエチルアミン、ジメチルイソプロピルアミン、ジメチルブチルアミン、ジメチルシクロヘキシルアミン、トリブチルアミン、ジエチルメチルアミン、ジメチルイソプロピルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等の遊離アミン、またはそれらの組み合わせ、あるいはアニオン交換樹脂等の固定化塩基、さらにはアンモニアであり得る。樹脂を使用する場合、濾過によって樹脂を除去することができる。遊離塩基を冷却し、得られた沈殿物を乾燥させる。得られた結晶性シス２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンを、所望の鏡像異性体に富化する。添加した塩基の量は、酸性対イオンの全てを除去するのに十分であるべきである。
【００５４】
ｐ−トルエンスルホン酸等のトシル酸を利用して、コングロマリット塩を形成する際、得られた鏡像異性体は、好ましくは、２ｐｐｍ以下の量でメチルトシレートを含む。
【００５５】
上記の手順から得られる母液は、逆の鏡像異性体を用いて播種することによって上記の手順に再度供し得る、過度の一鏡像異性体を含む。逆の鏡像異性体を用いて交互に播種する結晶化の反復方法（周期的エントレインメント）によって、原理上は、完全にラセミ２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンの量を、その鏡像異性体の成分に分離することが可能である。
【００５６】
本発明の鏡像異性体富化率（ｅｅ）の手順において、再結晶化は、様々な溶媒中で行われ得る。これらの溶媒を選択することができ、過飽和溶液の形成をもたらす従来の技術によって結晶化方法を引き起こす。このような従来の技術の例には、飽和溶液の冷却、飽和溶液からの溶媒蒸発、またはシス−２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジン等の所望の最終生成物の溶解性が低い、対イオン溶媒を利用することによるものを含む。
【００５７】
さらに、本発明は、２−置換４−置換１，３−オキサチオランのシス／トランス混合物を用いて上記のコングロマリット塩を製造することを含み、ここでそのシス／トランス比（Ｃ／Ｔ）は、約１／４〜約４／１、例えば、１．６／１〜３．５／１、特に、２／１〜３／１である。
【００５８】
一般に、式（Ｂ）の化合物の鏡像異性体的に富化された混合物またはシス／トランスの組み合わせ（ここで、Ｃ／Ｔ＞１）が分離される場合、この方法は、以下の工程で進行し得る：１）コングロマリット塩の形成、２）鏡像異性体的に富化された沈殿した塩の単離、３）適切な塩基と該塩との反応によって、沈殿した塩から鏡像異性体的に富化された遊離塩基（式（Ｂ）の化合物）の単体分離、４）鏡像異性体的に富化された式（Ｂ）の化合物の沈殿物の単離。
【００５９】
本発明の一実施形態は、（−）−シス−２−ヒドロキシメチル−４−（シトシン−１’−イル）−１，３−オキサチオランを産生する方法であって、
ａ）０ではない鏡像異性体過剰率を有するシス−２−ヒドロキシメチル−４−（シトシン−１’−イル）−１，３−オキサチオラン・アキラル酸塩の溶液を製造する工程と、
ｂ）（−）−シス−２−ヒドロキシメチル−４−（シトシン−１’−イル）−１，３−オキサチオラン・アキラル酸塩を実質的に結晶化する工程と、
ｃ）該（−）−シス−２−ヒドロキシメチル−４−（シトシン−１’−イル）−１，３−オキサチオラン・アキラル酸塩を回収する工程と、
ｄ）該（−）−シス−２−ヒドロキシメチル−４−（シトシン−１’−イル）−１，３−オキサチオラン・アキラル酸塩を、該（−）−シス−２−ヒドロキシメチル−４−（シトシン−１’−イル）−１，３−オキサチオランまたはその医薬的に許容される塩に変換する工程と、
を含む、方法である。
【００６０】
本発明の別の実施形態は、約１８５℃〜１８７℃の共晶点を有する２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンのｐ−トルエンスルホン酸塩である。
【００６１】
本発明の別の実施形態は、約１７１℃〜１７３℃の共晶点を有する２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンのマレイン酸塩である。
【００６２】
上述および下述に参照した、全ての特許出願、特許、および刊行物の全開示は、参照することによって本明細書に組み込まれる。
【実施例】
【００６３】
実施例１
【化７】
0005690731.tif 000008
化合物（１）を、国際公開第０２／１０２７９６号に記載されるように製造した。ナトリウムメトキシド（０．１当量）を、室温で、化合物１（１．０当量）のメタノール懸濁液（７０ｍＬ）に一度に添加した。反応混合物を、室温で２時間撹拌した。ＴＬＣ分析（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ：１／９）は、出発物質の消失およびさらに極性の脱保護物（１）の出現を示した。ｐ−トルエンスルホン酸（１．１４当量）を、室温でこの溶液に一度に添加した。反応混合物を、室温で一晩撹拌した。反応混合物を、０℃〜５℃に冷却した。懸濁液を、この温度で、１時間撹拌し、その後、濾過した。固体を乾燥させ、白色固体として、純粋な化合物（２）および（３）を得た。
【００６４】
鏡像異性体およびラセミ化合物の両方のｐ−ＴＳＡ塩を製造し、メタノール／水／ＩＰＡから再結晶した。同一の溶媒系を用いて、マレイン酸塩を得た。そのＩＲスペクトルおよび示差走査熱量測定（ＤＳＣ）の結果を、表１、表２、および図１に示す。
【００６５】
【表１】
0005690731.tif 000009
同様の方法で、マレイン酸塩を製造した。
【００６６】
【表２】
0005690731.tif 000010
【００６７】
実施例２
化合物（２）および（３）溶液の１３重量％のラセミ混合物を、７００ｍｌの水中の１０４．６０ｇのラセミ化合物に溶解することによって製造した。４．３６ｇの化合物（２）をこの混合物に添加することによって、４％のｅｅを得た。５０℃でスラリーを加熱することによって、固体を溶解した。温溶液を２０℃まで急速冷却し、その後、この温度で、さらに１時間攪拌して、その安定性を確保した。次に、過飽和溶液に、２０２ｍｇの微粉砕した化合物（２）（２５ｍｇ／１００ｇ  溶液）を播種した。温度は、一定に攪拌しながら、２０±１℃で一定に維持した。結晶化の経過は、２７８ｎｍでの紫外線および偏光分析法によって監視した（下の図２を参照のこと）。
【００６８】
出発点での過飽和溶液の旋光度は、−０．４４°であった。３時間の誘導期間は、結晶化が発生する前に記録された。結晶化を開始して約２０分間、溶液の旋光度は、０まで低下した。さらに、旋光度は、符号を変え、結晶化してから５０分後、最大の＋０．５６°に達した。上清液の旋光度の符号の変化は、エントレインメントおよび分割が生じたことを示す。固体を濾過し、光学純度を決定した。単離した固体は、初期の過飽和溶液よりも高い光学純度を有した。
【００６９】
実施例３
【化８】
0005690731.tif 000011
ナトリウムメトキシド（０．１当量）を、室温で、化合物（４）（１．０当量、Ｃ／Ｔ＝３．０４／１、９５％  ｅｅ、９６．６％純度）のメタノール懸濁液に一度に添加した。反応混合物を、室温で２時間撹拌した。ＴＬＣ分析（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ：１／９）は、出発物質（Ｒｆ０．１０（トランス）および０．１６（シス））の消失、並びにさらに極性の脱保護した化合物（４）（Ｒｆ０．００）の出現を示した。ｐ−トルエンスルホン酸（１．１４当量）を、室温でこの溶液に一度に添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌し、その後、濾過した。固体を真空内で乾燥させ、白色固体として、化合物（２）塩を得た（６２／１  シス／トランス：９８％  ｅｅ、８５％  修正済みのシス収率）。
【００７０】
実施例４
【化９】
0005690731.tif 000012
ナトリウムメトキシド（０．１当量）を、室温で、化合物（６）（１．０当量、Ｃ／Ｔ＝２．７／１、９５％  ｅｅ、９６．６％純度）のメタノール懸濁液に一度に添加した。反応混合物を、室温で２時間撹拌した。ＴＬＣ分析（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ：１／９）は、出発物質（Ｒｆ０．１０（トランス）および０．１６（シス））の消失、並びにさらに極性の脱保護した化合物（４）（Ｒｆ０．００）の出現を示した。ｐ−トルエンスルホン酸（１．１３当量）を、室温でこの溶液に一度に添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌し、その後、濾過した。沈殿物を真空内で乾燥させ、白色固体として、化合物（３）塩を得た（６２／１  シス／トランス：９９％  ｅｅ、８６％  修正済みのシス収率）。
【００７１】
実施例５
【化１０】
0005690731.tif 000013
化合物（２）（９．７６ｍｍｏｌ、１．０当量）を、４０℃で、メタノール中で懸濁した。樹脂ＤＯＷＥＸ  ５５０Ａ−ＯＨ（１４０％ｗ／ｗ）を、４０℃で懸濁液に一度に添加した。反応混合物を、４０℃で２時間撹拌した。この溶液のｐＨが、塩基性（ｐＨ≧７）であることを確認し、試料を１Ｈ  ＮＭＲによって分析し、ｐ−トルエンスルホン酸の消失を示した。反応混合物を濾過した。樹脂は、４０℃で、メタノールで洗浄した。ＭｅＯＨを蒸留し、３容量に容量を調節した。この溶液を冷却し、沈殿が生じた。さらなる沈殿が観察されなくなるまで、懸濁液を撹拌し、その後、濾過した。固体を乾燥させ、白色固体として、化合物（５）を得た（９９．７％  ｅｅ、８２％  シス収率）。
【００７２】
実施例６
【化１１】
0005690731.tif 000014
化合物（２）（９９．１％  ｅｅ、Ｃ／Ｔ＝２７／１）、シスの６．２３ｍｍｏｌ、１．０当量）を、２５℃で、エタノール中に懸濁した。トリエチルアミン（９．３３ｍｍｏｌ、１．５当量）を、２５℃で、懸濁液に一度で添加した。反応混合物を４０℃で加熱し、この温度で１時間撹拌した。この溶液のｐＨが、塩基性（ｐＨ≧７）であることを確認した。この溶液を冷却し、沈殿が生じた。さらなる沈殿が観察されなくなるまで、懸濁液を撹拌し、その後、濾過した。固体は、低温エタノールで洗浄した。固体を乾燥させ、白色固体として、化合物（５）を得た（９９．４％  ｅｅ、８０％  シス収率）。
【００７３】
実施例７
化合物（５）を、以下のＨＰＬＣ条件を用いて、Ｃ１８カラム（長さ１５ｃｍ、直径４．６ｍｍ、粒径３μｍ）で分析した。
等張溶出
移動相：４３％  アセトニトリル、５７％  水＋リン酸１／１０００
流速：２ｍＬ／分
停止時間：１０分間
注入量：２０μＬ
波長：２２５ｎｍ
オーブン温度：４０℃
【００７４】
化合物（５）の各バッチにおける検出されたメチルトシレートおよびイソプロピルトシレートの量（ｐｐｍ）を表３に示す。
【００７５】
【表３】
0005690731.tif 000015
ＬＯＱは、定量の限度である。
ＬＯＤは、検出の限度である。
【００７６】
実施例８
シス２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンのコングロマリットのスクリーニング
【００７７】
シス２’−デオキシ−３’−オキサ−４’−チオシチジンのアミン官能基を、アキラル酸を用いた塩の形成によって誘導体化した。コングロマリット挙動を示す候補であり得る塩を同定するために、４種の主要な酸基をスクリーニングした：
・無機酸（例えば、ＨＣｌ、ＨＢｒ、Ｈ２ＳＯ４、ＨＢＦ４）、
・スルホン酸（例えば、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ｐ−ヒドロキシトルエンスルホン酸、スルファニル酸、ｐ−クロロベンゼンスルホン酸）、
・置換酢酸（例えば、グリコール酸、クロロ酢酸、ジクロロ酢酸、トリクロロ酢酸）、および
・ポリカルボン酸およびオキシ酸（例えば、コハク酸、アジピン酸、マレイン酸、フマル酸、クエン酸、ピルビン酸）。
【００７８】
いずれの場合にも、ラセミ混合物および単一の鏡像異性体の塩は、ヌクレオシドが完全に溶解されるまで、水中で酸とヌクレオシドとを反応させることによって生成された。必要に応じて、透明な溶液が得られるまで、混合物を加熱した。水溶液の減圧濃縮、次いで、イソプロパノールの添加によって、塩を沈殿させた。塩の形成は、１Ｈ  ＮＭＲで確認した。ＨＣｌおよびＨＢｒ塩のいずれの場合にも、硝酸銀滴定を行った。固体を得た場合、ＩＲスペクトルを得た。
【００７９】
コングロマリット化合物は、結晶格子において、単一の鏡像異性体として結晶化される。これは、コングロマリット化合物については、ラセミ化合物（鏡像異性体の１：１混合物）のＩＲスペクトルが、単一の鏡像異性体のものと同一であり得ることを意味する。コングロマリット挙動の別の特性は、ラセミ塩が、双方の単一の鏡像異性体塩よりも少なくとも２５℃低い融点を有するものである。
【００８０】
スクリーニングした塩について、各固体（下表４を参照のこと）のＤＳＣデータを得、二成分融点の図表を生成した。
【００８１】
【表４】
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【００８２】
ＤＳＣデータは、コングロマリットとしてｐ−トルエンスルホナート塩を確認し、ラセミ化合物の融点は、鏡像異性体塩のものよりも２７．６〜２８．６℃（１８６．６℃）低かった（下記参照のこと）。水およびメタノール中の溶解性試験は、ラセミｐ−トルエンスルホナート塩（約１３ｍＬ／ｇ）の溶解性が、鏡像異性体塩（約２５ｍＬ／ｇ）のものよりも著しく高いことを示した。同様に、メタノール中において、鏡像異性体塩の溶解性が６５ｍＬ／ｇである一方、ラセミｐ−トルエンスルホナート塩は、３７ｍＬ／ｇの溶解性を有した。ＩＲ一致を確認した。
【００８３】
【表５】
0005690731.tif 000017
＊修正した値
【００８４】
他の候補物質は、メタノール／水／ＩＰＡおよびメタノール／水の混合物から再結晶化した。ラセミマレイン酸塩に対して得た結果は、不確定である。ＩＲスペクトルは一致し、融点の差異は顕著である（下記を参照のこと）。他の候補物質は、非コングロマリットとして確認された。
【００８５】
【表６】
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【００８６】
前述の実施例は、一般的または具体的に記載される反応物質、および／または本発明の操作条件を、前述の実施例において使用されるものと置換することによって、同様の成功をもって繰り返すことができる。
【００８７】
以上の説明から、当業者は、本発明の本質的特性を容易に確認することができ、その趣旨および範囲から逸脱することなく、本発明の様々な変更および修正を行い、それを様々な使用法および条件に適応させることができる。
【図１】
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【図２】
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