(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物のインスリン抵抗性を治療するための医薬の製造における、ＩＬ−１７Ａおよび／またはＩＬ−１７Ｆアンタゴニストである抗体又はその抗原結合断片の使用であって、前記抗体は、抗ＩＬ−１７Ａ、抗ＩＬ−１７Ｆ、抗ＩＬ−１７Ａ／Ｆ、抗ＩＬ−１７Ｒｃ、および抗ＩＬ−１７ＲＡ抗体から成る群から選択される、使用。
【請求項２】
前記医薬が前記哺乳動物に全身投与される、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記哺乳動物がヒトである、請求項１又は２に記載の使用。
【請求項４】
前記哺乳動物が、非インスリン依存性真性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）、肥満、卵巣アンドロゲン過剰、および高血圧から選択される疾患を有する、請求項１から３の何れか一項に記載の使用。
【請求項５】
前記抗体は、モノクローナル抗体である、請求項１から４の何れか一項に記載の使用。
【請求項６】
前記抗体は、キメラ、ヒト化、またはヒト抗体である、請求項１から５の何れか一項に記載の使用。
【請求項７】
前記抗体は、二重特異性、多特異性、または交差反応性抗体である、請求項１から６の何れか一項に記載の使用。
【請求項８】
前記医薬が、有効量の、インスリン抵抗性を治療するための更なる薬剤をさらに含む、請求項１から７の何れか一項に記載の使用。
【請求項９】
前記更なる薬剤は、インスリン、ＩＧＦ−１、スルホニル尿素、又はＤｉｃｋｋｏｐｆ−５（Ｄｋｋ−５）である、請求項８に記載の使用。
【請求項１０】
哺乳動物のインスリン抵抗性を治療するための医薬であって、ＩＬ−１７Ａおよび／またはＩＬ−１７Ｆアンタゴニストである抗体又はその抗原結合断片を含む医薬であって、前記抗体は、抗ＩＬ−１７Ａ、抗ＩＬ−１７Ｆ、抗ＩＬ−１７Ａ／Ｆ、抗ＩＬ−１７Ｒｃ、および抗ＩＬ−１７ＲＡ抗体から成る群から選択される、医薬。
【請求項１１】
前記医薬が前記哺乳動物に全身投与される、請求項１０に記載の医薬。
【請求項１２】
前記哺乳動物がヒトである、請求項１０又は１１に記載の医薬。
【請求項１３】
前記哺乳動物が、非インスリン依存性真性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）、肥満、卵巣アンドロゲン過剰、および高血圧から選択される疾患を有する、請求項１０から１２の何れか一項に記載の医薬。
【請求項１４】
前記抗体は、モノクローナル抗体である、請求項１０から１３の何れか一項に記載の医薬。
【請求項１５】
前記抗体は、キメラ、ヒト化、またはヒト抗体である、請求項１０から１４の何れか一項に記載の医薬。
【請求項１６】
前記抗体は、二重特異性、多特異性、または交差反応性抗体である、請求項１０から１５の何れか一項に記載の医薬。
【請求項１７】
前記医薬が、インスリン抵抗性を治療するための更なる薬剤をさらに含む、請求項１０から１６の何れか一項に記載の医薬。
【請求項１８】
前記更なる薬剤は、インスリン、ＩＧＦ−１、スルホニル尿素、又はＤｉｃｋｋｏｐｆ−５（Ｄｋｋ−５）である、請求項１７に記載の医薬。
【請求項１９】
薬学的に許容される賦形剤と混合した、請求項１及び５から７の何れか一項に定義のＩＬ−１７Ａおよび／またはＩＬ−１７Ｆアンタゴニストである抗体又はその抗原結合断片を含む、哺乳動物のインスリン抵抗性の治療に使用するための薬学的組成物。
【請求項２０】
前記哺乳動物が、非インスリン依存性真性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）、肥満、卵巣アンドロゲン過剰、および高血圧から選択される疾患を有する、請求項１９に記載の薬学的組成物。
【請求項２１】
哺乳動物のインスリン抵抗性を治療するためのキットであって、（ａ）請求項１及び５から７の何れか一項に定義のＩＬ−１７Ａおよび／またはＩＬ−１７Ｆアンタゴニストである抗体又はその抗原結合断片を含む容器と、（ｂ）前記抗体を投与して前記インスリン抵抗性を治療するためのラベルまたは説明書を含む、キット。
【請求項２２】
前記哺乳動物が、非インスリン依存性真性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）、肥満、卵巣アンドロゲン過剰、および高血圧から選択される疾患を有する、請求項２１に記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、インスリン抵抗性疾患の治療に関する。具体的には、本発明は、ＩＬ−１７、例えば、ＩＬ−１７Ａおよび／もしくはＩＬ−１７Ｆアンタゴニスト、例えば、抗ＩＬ−１７Ａおよび／もしくはＩＬ−１７Ｆおよび／もしくはＩＬ−１７Ｒｃ抗体、または抗体フラグメントの投与による、インスリン抵抗性疾患の治療に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＩＬ−１７ファミリー
インターロイキン１７Ａ（ＩＬ−１７Ａ）は、上皮、内皮、および線維芽細胞を刺激して、ＩＬ−６、ＩＬ−８、Ｇ−ＣＳＦ、およびＭＣＰ−１を含む他の炎症性サイトカインおよびケモカインを産生する、Ｔ細胞由来の炎症促進性分子である（Ｙａｏ，Ｚ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１２２（１２）：５４８３−５４８６（１９９５）、Ｙａｏ，Ｚ．ｅｔ  ａｌ，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，３（６）：８１１−８２１（１９９５）、Ｆｏｓｓｉｅｚ，Ｆ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１８３（６）：２５９３−２６０３（１９９６）、Ｋｅｎｎｅｄｙ，Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｒｅｓ．，１６（８）：６１１−７（１９９６）、Ｃａｉ，Ｘ．Ｙ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｌｅｔｔ，６２（１）：５１−８（１９９８）、Ｊｏｖａｎｏｖｉｃ，Ｄ．Ｖ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１６０（７）：３５１３−２１（１９９８）、Ｌａａｎ，Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１６２（４）：２３４７−５２（１９９９）、Ｌｉｎｄｅｎ，Ａ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｊ，１５（５）：９７３−７（２０００）、およびＡｇｇａｒｗａｌ，Ｓ．ａｎｄ  Ｇｕｒｎｅｙ，Ａ．Ｌ．，Ｊ  Ｌｅｕｋｏｃ  Ｂｉｏｌ．７１（１）：１−８（２００２）を参照）。またＩＬ−１７は、ＴＮＦ−αおよびＩＬ−１βを含む他のサイトカインと相乗作用して、ケモカイン発現をさらに誘導する（Ｃｈａｂａｕｄ，Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６１（１）：４０９−１４（１９９８））。ＩＬ−１７Ａは、様々な種類の細胞上で多面的な生物活性を呈する。ＩＬ−１７Ａは、ＩＣＡＭ−１表面発現、Ｔ細胞の増殖、ならびにＣＤ３４＋ヒト前駆細胞の好中球への成長および分化を誘導する能力も有する。ＩＬ−１７Ａは、骨代謝にも関与するとされ、活性化Ｔ細胞およびＴＮＦ−α産物の存在を特徴とする病的状態、例えば、リウマチ関節炎および骨インプラントの緩みにおいて重要な役割を果たすことが示唆されている（Ｖａｎ  Ｂｅｚｏｏｉｊｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｏｎｅ  Ｍｉｎｅｒ．Ｒｅｓ．，１４：１５１３−１５２１（１９９９））。関節リウマチ患者から得られる滑膜組織の活性化Ｔ細胞は、健常者または変形性関節症患者から得られるものよりも多量のＩＬ−１７Ａを分泌することが認められた（Ｃｈａｂａｕｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ．，４２：９６３−９７０（１９９９））。この炎症促進性サイトカインが、関節リウマチの滑膜炎に積極的に関与することが示唆された。その炎症を促進する役割とは別に、ＩＬ−１７Ａは、さらに別の機序によって、関節リウマチの病理に関与すると見られる。例えば、ＩＬ−１７Ａは、骨芽細胞において破骨細胞分化因子（ＯＤＦ）ｍＲＮＡの発現を誘発することが示された（Ｋｏｔａｋｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，１０３：１３４５−１３５２（１９９９））。ＯＤＦは、前駆細胞の、骨吸収に関与する細胞である破骨細胞への分化を刺激する。ＩＬ−１７Ａのレベルは、関節リウマチ患者の滑膜液中で著しく増加するため、ＩＬ−１７Ａにより誘導された破骨細胞形成は、関節リウマチにおける骨吸収に極めて重���な役割を果たすと見られる。ＩＬ−１７Ａは、多発性硬化症（Ｍａｔｕｓｅｖｉｃｉｕｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｕｌｔ．Ｓｃｌｅｒ．，５：１０１−１０４（１９９９）、Ｋｕｒａｓａｗａ，Ｋ．，ｅｔ  ａｌ．，Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕ  ４３（１１）：２４５５−６３（２０００））、ならびに乾癬（Ｔｅｕｎｉｓｓｅｎ，Ｍ．Ｂ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ  １１１（４）：６４５−９（１９９８）、Ａｌｂａｎｅｓｉ，Ｃ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ  １１５（１）：８１−７（２０００）、およびＨｏｍｅｙ，Ｂ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４（１２：６６２１−３２（２０００））等の特定の他の自己免疫疾患において主要な役割を果たすとも考えられる。
【０００３】
ＩＬ−１７Ａはさらに、細胞内シグナル伝達によって、ヒトマクロファージにおけるＣａ２＋の流入および［ｃＡＭＰ］ｉの還元を刺激することが示されている（Ｊｏｖａｎｏｖｉｃ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１６０：３５１３（１９９８））。ＩＬ−１７Ａで処理された線維芽細胞は、ＮＦκＢの活性化を誘導するが（Ｙａｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，３：８１１（１９９５），Ｊｏｖａｎｏｖｉｃ  ｅｔ  ａｌ．，上記）、それで処理されたマクロファージは、ＮＦ−κＢおよびマイトジェン活性化タンパク質キナーゼを活性化する（Ｓｈａｌｏｍ−Ｂａｒｅｋ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７３：２７４６７（１９９８））。さらに、ＩＬ−１７Ａは、骨および軟骨の成長に関与する、哺乳類サイトカイン様因子７と配列相同性も共有する。ＩＬ−１７Ａポリペプチドが配列相同性を共有する他のタンパク質は、ヒト胚性インターロイキン関連因子（ＥＤＩＲＦ）およびインターロイキン２０である。
【０００４】
ＩＬ−１７Ａの広範な効果と一致して、ＩＬ−１７Ａの細胞表面受容体は、多くの組織および細胞型において広く発現することが見出された（Ｙａｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｙｔｏｋｉｎｅ，２：７９４（１９９７））。ヒトＩＬ−１７Ａ受容体（ＩＬ−Ｒ）のアミノ酸配列（８６６アミノ酸）は、単一膜貫通ドメインおよび長い５２５アミノ酸細胞内ドメインを有するタンパク質を予測するが、受容体配列は固有であり、サイトカイン／成長因子受容体ファミリーからの受容体のうちのいずれかのそれと類似していない。他の知られているタンパク質に対するＩＬ−１７Ａ自体の類似性の欠如に加えて、これは、ＩＬ−１７Ａおよびその受容体が、シグナル伝達タンパク質および受容体の新規ファミリーの一部であり得ることを示す。ＩＬ−１７Ａ活性は、その固有の細胞表面受容体に対する結合を通して媒介されることが示されており（本明細書ではヒトＩＬ−１７Ｒと表される）、以前の研究は、Ｔ細胞を可溶型のＩＬ−１７Ａ受容体ポリペプチドと接触させることは、ＰＨＡ、コンカナバリンＡおよび抗ＴＣＲモノクローナル抗体によって誘導されるＴ細胞の増殖およびＩＬ−２の産生を阻害したことが示された（Ｙａｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５５：５４８３−５４８６（１９９５））。そのようなものとして、知られているサイトカイン受容体、特にＩＬ−１７Ａ受容体に対して相同性を有する、新規ポリペプチドを識別および特性化することに高い関心がある。
【０００５】
インターロイキン１７Ａは、現在、サイトカインの新生ファミリーの原型メンバーとして認識されている。ヒトおよび他の脊椎動物ゲノムの大規模なシークエンシングは、明らかにＩＬ−１７Ａに関連するタンパク質をコードする追加の遺伝子の存在を明らかにし、したがって、サイトカインの新規ファミリーを画定する。ヒトおよびマウスにおいて、ＩＬ−１７ファミリーの少なくとも６メンバーが存在し、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｂ、ＩＬ−１７Ｃ、ＩＬ−１７Ｄ、ＩＬ−１７ＥおよびＩＬ−１７Ｆならびに新規受容体ＩＬ−１７ＲＨ１、ＩＬ−１７ＲＨ２、ＩＬ−１７ＲＨ３およびＩＬ−１７ＲＨ４を含む（２００１年６月２８日に公開されたＷＯ０１／４６４２０を参照）。１つのそのようなＩＬ−１７メンバー（ＩＬ−１７Ｆと表される）は、ヒトＩＬ−１７受容体（ＩＬ−１７Ｒ）に結合することが証明された（Ｙａｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｙｔｏｋｉｎｅ，９（１１）：７９４−８００（１９９７））。初期特性化は、ＩＬ−１７Ａと同様に、これらの新規に識別された分子のうちのいくつかが、免疫機能を調整する能力を有することを示唆した。これらの因子のうちのいくつかに対して識別された強力な炎症作用および主要なヒト疾患との新たな関連性は、これらのタンパク質が、炎症過程において重要な役割を有し得ること、および治療介入の機会を提供し得ることを示唆する。
【０００６】
ヒトＩＬ−１７Ｆをコードする遺伝子は、ＩＬ−１７Ａに隣接して位置付けられる（Ｈｙｍｏｗｉｔｚ，Ｓ．Ｇ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｅｍｂｏ  Ｊ，２０（１９）：５３３２−４１（２００１））。ＩＬ−１７ＡおよびＩＬ−１７Ｆは、約４４％のアミノ酸同一性を共有するが、ＩＬ−１７ファミリーの他のメンバーは、より制限された１５−２７％のアミノ酸同一性を共有し、ＩＬ−１７ＡおよびＩＬ−１７Ｆが、ＩＬ−１７ファミリー内で個別のサブグループを形成することを示唆している（Ｓｔａｒｎｅｓ，Ｔ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６７（８）：４１３７−４０（２００１）、Ａｇｇａｒｗａｌ，Ｓ．ａｎｄ  Ｇｕｒｎｅｙ，Ａ．Ｌ．，Ｊ．Ｌｅｕｋｏｃ  Ｂｉｏｌ，７１（１）：１−８（２００２））。ＩＬ−１７Ｆは、ＩＬ−１７Ａと同様の生物活性を有すると考えられ、幅広い多様な細胞からのＩＬ−６、ＩＬ−８、およびＧ−ＣＳＦの産生を促進することができる。ＩＬ−１７Ａと同様に、軟骨基質の放出を誘導し、新しい軟骨基質の合成を阻害することができる（２００２年１１月２８日に公開された第ＵＳ２００２−０１７７１８８−Ａ１号を参照）。したがって、ＩＬ−１７Ａと同様に、ＩＬ−１７Ｆは、潜在的に、炎症性疾患の病理に寄与し得る。ＩＬ−１７ＡおよびＩＬ−１７Ｆはいずれも、インターロイキン２３（ＩＬ−２３）の作用によって、Ｔ細胞中で誘導されることが報告された（Ａｇｇａｒｗａｌ，Ｓ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７８（３）：１９１０−４（２００３））。より具体的に、ＩＬ−１７ＡおよびＩＬ−１７Ｆはいずれも、ヒト疾患のヒトおよびマウスモデルにおいて、多様な炎症性および自己免疫疾患の進行および病理に寄与する薬剤として関与している。実際に、ＩＬ−１７Ａおよびそれ程ではないにせよＩＬ−１７Ｆは、炎症反応を誘起するエフェクタサイトカインとして関与し、それによって、多発性硬化症（ＭＳ）関節リウマチ（ＲＡ）、および炎症性腸疾患（ＩＢＤ）を含む多数の自己炎症性（自己免疫）疾患に寄与する。この系統は、Ｔｈ１７と呼ばれ、これらの細胞の数は、ヒト自己免疫疾患のマウスモデルにおいて、疾患の進行および重篤度と明らかに相関する。炎症性疾患におけるＩＬ−１７ＡおよびＩＬ−１７Ｆの関与は明らかであると思われるが（例えば、Ｋｏｌｌｓ，Ｊ．Ｋ．，Ａ．Ｌｉｎｄｅｎ．
Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２１：４６７−４７６（２００４）を参照）、これらのサイトカインの標的細胞は、ＩＬ−１７Ｆの受容体が識別されていないという事実に部分的に起因して、識別されていない。ＩＬ−１７Ａは、ＩＬ−１７ＲＡに対する親和性を有する。ヒトＩＬ−１７ＲＡのアミノ酸配列は、ＮＣＢＩ  ＧｅｎＢａｎｋ受入番号ＮＰ＿０５５１５４．３に基づいて入手可能である。今日では、ＩＬ−１７ＲＡ（ＩＬ−１７Ｒｈ１、ＩＬ−１７Ｒｃ、ＩＬ−１７ＲＤ、およびＩＬ−１７ＲＥ）に対する配列相同性に基づいて、ＩＬ−１７Ｒファミリーにおいて、少なくとも４つの追加の受容体が識別されており、特に、ＩＬ−１７Ｒｃは、ＩＬ−１７ＲＡとの物理的関連性が示され、ＩＬ−１７Ｒ複合体における機能成分であり得ることを示唆している（Ｔｏｙ，Ｄ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７７：３６−３９（２００６））。最近では、ＩＬ−１７Ｒｃが、ＩＬ−１７ＡおよびＩＬ−１７Ｆ両方の受容体であることが報告された（Ｐｒｅｓｎｅｌｌ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７９（８）：５４６２−７３（２００７））。
【０００７】
炎症および肥満症
肥満に関する我々の理解において最近の重要な進展は、炎症および糖尿病が、慢性の軽度炎症の状態によって特性化されるという概念の出現である。この見解の根拠は、炎症のいくつかのマーカー、炎症性サイトカインおよび急性期タンパク質両方の高い血中濃度が、肥満において上昇することであり、これらのマーカーは、ＩＬ−６、ＴＮＦα系、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）およびハプトグロビンを含む。しかしながら、全身性か、または局所性かの炎症自体の部位に関する意味は不明である。
【０００８】
所定用量のインスリンに対して予測される生物学的反応よりも小さいと定義されるインスリン抵抗性は、肥満の普遍的な関連要因である。実際に、肥満の病理的帰結の多くは、インスリン抵抗性を伴うと考えられる。これらには、高血圧、高脂質血症、および最も注目すべきは、非インスリン依存性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）が挙げられる。大部分のＮＩＤＤＭ患者は肥満であり、ＮＩＤＤＭの進行における中心的かつ初期の成分は、インスリン抵抗性である（Ｍｏｌｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｗ  Ｅｎｇ．Ｊ．Ｍｅｄ．，３２５：９３８（１９９１））。この疾患の初期中のインスリン受容体の下方制御に加えて、後受容体の異常が、インスリン抵抗の経過中に進行することが証明された（Ｏｌｅｆｓｋｙ  ｅｔ  ａｌ．，ｉｎ  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｍｅｌｌｉｔｕｓ，Ｒｉｆｋｉｎ  ａｎｄ  Ｐｏｒｔｅ，Ｊｒ．，Ｅｄｓ．（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ｅｄ．４，１９９０），ｐｐ．１２１−１５３）。
【発明の概要】
【０００９】
本発明は、少なくとも部分的に、ＩＬ−１７ファミリーメンバー、具体的にＩＬ−１７ＡおよびＩＬ−１７Ｆが、肥満、インスリン抵抗、および肥満と関連付けられる他の疾患、例えば、高脂質血症および代謝症候群において役割を果たすこと、およびＩＬ−１７アンタゴニスト、特にＩＬ−１７ＡおよびＩＬ−１７Ｆアンタゴニストを使用して、これらの状態を治療することができるという発見に基づく。
【００１０】
一態様において、本発明は、哺乳類において、インスリン抵抗性疾患を治療する方法に関し、有効量のＩＬ−１７Ａおよび／またはＩＬ−１７Ｆアンタゴニストを、それを必要とする哺乳類に投与することを含む。
【００１１】
別の態様において、本発明は、薬学的に許容される賦形剤との混和物中に、ＩＬ−１７Ａおよび／またはＩＬ−１７Ｆアンタゴニストを含む、インスリン抵抗性疾患の治療のための薬学的組成物に関する。
【００１２】
さらなる態様において、本発明は、インスリン抵抗性疾患の治療におけるＩＬ−１７Ａおよび／またはＩＬ−１７Ｆアンタゴニストの使用に関する。
【００１３】
さらに別の態様において、本発明は、インスリン抵抗性疾患を治療するためのキットに関し、該キットは、（ａ）ＩＬ−１７Ａおよび／またはＩＬ−１７Ｆアンタゴニストを含む容器と、（ｂ）該抗体を投与して、該疾患を治療するためのラベルまたは説明書と、を含む。
【００１４】
すべての態様において、一実施形態では、疾患は、非インスリン依存性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）、肥満、卵巣アンドロゲン過剰、および高血圧から成る群から選択される。別の実施形態において、疾患は、ＮＩＤＤＭまたは肥満である。
【００１５】
さらなる実施形態において、哺乳類はヒトであり、かつ、投与は全身性である。
【００１６】
さらに別の実施形態において、ＩＬ−１７Ａおよび／またはＩＬ−１７Ｆアンタゴニストは、抗体またはそのフラグメントであり、例えば、抗体は、抗ＩＬ−１７Ａ、抗ＩＬ−１７Ｆ、抗ＩＬ−１７Ａ／Ｆ、抗ＩＬ−１７Ｒｃおよび抗ＩＬ−１７ＲＡ抗体、またはそれらのフラグメントから成る群から選択される。
【００１７】
好ましくは、抗体は、モノクローナル抗体であり、キメラ、ヒト化、またはヒト抗体、二重特異性、多特異性、または交差反応性抗体を含む。
【００１８】
さらに別の実施形態において、方法は、有効量のインスリン抵抗性治療薬、例えば、インスリン、ＩＧＦ−１、またはスルホニル尿素の投与を含む。
【００１９】
さらなる実施形態において、方法は、該インスリン抵抗性疾患を治療することができる、有効量の追加薬剤、例えば、Ｄｉｃｋｋｏｐｆ−５（Ｄｋｋ−５）の投与を含む。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】天然配列ヒトＩＬ−１７Ａ  ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号１）を示す図である。
【図２】図１に示される配列番号１のコード配列に由来する天然配列ヒトＩＬ−１７Ａのアミノ酸配列（配列番号２）を示す図である。
【図３】天然配列ヒトＩＬ−１７Ｆ  ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号３）を示す図である。
【図４】図３に示される配列番号３のコード配列に由来する天然配列ヒトＩＬ−１７Ｆのアミノ酸配列（配列番号４）を示す図である。
【図５】図５は、天然配列ヒトＩＬ−１７受容体Ｃ（ＩＬ−１７Ｒｃ）ポリペプチドをコードし、「ＤＮＡ１６４６２５−２８９０」と表されるクローンとしても知られる、ヌクレオチド配列（配列番号５）を示す図である。
【図６】図６は、天然配列ヒトＩＬ−１７Ｒｃポリペプチドのアミノ酸配列（配列番号６）を示す図である（ＩＬ−１７ＲＨ２受容体としても知られる）。
【図７】ＩＬ−１７Ｒｃ  ＫＯマウスを使用した高脂肪食（ＨＦＤ）モデル研究の実験計画を示す図である。
【図８】ＩＬ−１７Ｒｃ  ＫＯマウスを使用した高脂肪食（ＨＦＤ）モデル研究の８週目の結果を示す図sである。
【図９Ａ】対照群および高脂肪食群における野生型およびＩＬ−１７Ｒｃ  ＫＯマウスの血糖値を示す図である。ＩＬ−１７Ｒｃ  ＫＯマウスは、高脂肪食（ＨＦＤ）誘導性インスリン抵抗に耐性がある。
【図９Ｂ】対照群および高脂肪食群における野生型およびＩＬ−１７Ｒｃ  ＫＯマウスの血糖値を示す図である。ＩＬ−１７Ｒｃ  ＫＯマウスは、高脂肪食（ＨＦＤ）誘導性インスリン抵抗に耐性がある。
【図１０】１０週目の曲線下面積を示す図である。
【図１１】体重結果を示す図である。
【図１２】抗ＩＬ−１７および抗ＩＬ−１７Ｆ  ｍＡｂがインスリン抵抗性ＨＦＤモデルに及ぼす影響を示す図である。
【図１３】９週間の投与期間後のグルコース負荷試験（ＧＴＴ）を示す図である。
【図１４】プラスミドＤＮＡの注入に続くグルコース負荷試験（ＧＴＴ）によるＩＬ−１７Ａの異所性発現。ＩＬ−１７の過剰発現がＧＴＴにより評価されたインスリン耐性状態に及ぼす影響を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
Ａ． 定義
用語「ＩＬ−１７」は、概して、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７、ＩＬ−１７Ｂ、ＩＬ−１７Ｃ、ＩＬ−１７Ｄ、ＩＬ−１７Ｅ、ＩＬ−１７Ｆ、およびＩＬ−１７Ａ／Ｆを含む、ＩＬ−１７ファミリーのメンバーを指すように使用される。好適なＩＬ−１７は、本明細書において、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ、およびＩＬ−１７Ａ／Ｆである。
【００２２】
「天然配列ＩＬ−１７ポリペプチド」は、自然に由来する対応ＩＬ−１７ポリペプチドと同一のアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む。そのような天然配列ＩＬ−１７ポリペプチドは、自然から単離され得るか、または組み換えまたは合成手段によって産生され得る。用語「天然配列ＩＬ−１７ポリペプチド」は、特定のＩＬ−１７ポリペプチドの自然発生する切断または分泌形態（例えば、細胞外ドメイン配列）、自然発生する異型（例えば、選択的にスプライスされた形態）、およびポリペプチドの自然発生する対立遺伝子多型を包含する。本発明の様々な実施形態において、本明細書に開示される天然配列ＩＬ−１７ポリペプチドは、図２および図４（配列番号２および４）に示される完全長アミノ酸配列を含む、成熟または完全長天然配列ヒトＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ、およびＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドである。開始および停止コドンは、図面において太字および下線付きで示される。
【００２３】
用語「天然配列ＩＬ−１７Ｒｃポリペプチド」または「天然配列ＩＬ−１７Ｒｃ」は、自然に由来する対応ＩＬ−１７Ｒｃポリペプチドと同一のアミノ酸配列を有するポリペプチドを指す。そのような天然配列ＩＬ−１７Ｒｃポリペプチドは、自然から単離され得るか、または組み換えまたは合成手段によって産生され得る。用語「天然配列ＩＬ−１７Ｒｃポリペプチド」は、特に、特定のＩＬ−１７Ｒｃポリペプチドの自然発生する切断または分泌形態、自然発生する異型（例えば、選択的にスプライスされた形態）、およびポリペプチドの自然発生する対立遺伝子多型を包含する。本発明の様々な実施形態において、本明細書に開示される天然配列ＩＬ−１７Ｒｃポリペプチドは、図６（配列番号６）に示される完全長アミノ酸配列を含む、完全長天然配列ヒトＩＬ−１７Ｒｃである。
【００２４】
「単離された」は、本明細書に開示される様々なポリペプチドを説明するために使用される場合、その自然環境の成分から識別および分離ならびに／または回復されたポリペプチドを意味する。その自然環境の汚染物質成分は、典型的に、ポリペプチドの診断または治療用途を干渉するであろう物質であり、酵素、ホルモン、および他のタンパク性または非タンパク性溶質を含み得る。好適な実施形態において、ポリペプチドは、（１）回転カップシークエネータの使用によって、Ｎ末端または内部アミノ酸配列の少なくとも１５残基を得るために十分な程度、または（２）非還元または還元条件下で、クマシーブルーまたは好ましくは銀染色を使用して、ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって均一になるまで精製される。ＩＬ−１７ポリペプチド自然環境の少なくとも１つの成分が存在しないため、単離されたポリペプチドは、組み換え細胞内の原位置にポリペプチドを含む。しかしながら、通常、単離されたポリペプチドは、少なくとも１つの精製ステップによって調製される。
【００２５】
本明細書で使用される、「肥満」は、哺乳動物が、体重（ｋｇ）／身長２（メートル）として計算されるか、または少なくとも２５．９である、体格指数（ＢＭＩ）を有する状態を指す。通常、正常体重の個人は、１９．９〜２５．９未満のＢＭＩを有する。インスリン抵抗性と関連付けられる肥満は、特にこの定義に含まれる。
【００２６】
「インスリン抵抗」または「インスリン抵抗疾患」あるいは「インスリン抵抗活性」は、外因性インスリンの作用に対する末梢組織の正常な代謝反応の不全（不感受性）によって生じる疾患、状態、または障害であり、すなわち、インスリンの存在が、正常以下の生物反応をもたらす状態である。臨床用語において、インスリン抵抗は、正常または上昇したインスリン値に対して、正常または上昇した血糖値が持続する場合に存在する。本質的に、それはグリコーゲン合成の阻害を表し、これによって基礎またはインスリン刺激によるグリコーゲン合成のいずれか、または両方が、正常値よりも低下する。２型糖尿病に存在する高血糖は、明らかに、インスリンに対する末梢組織の感受性を回復するのに十分な食事または体重減少によって好転し得る場合が多いという事実によって証明されるように、インスリン抵抗は、２型糖尿病において主要な役割を果たす。用語は、異常な耐糖能、ならびにインスリン抵抗が主な役割を果たす多くの疾患、例えば、肥満、真性糖尿病、卵巣アンドロゲン過剰、および高血圧を含む。
【００２７】
「真性糖尿病」は、慢性的な高血糖の状態、すなわち、インスリン作用の相対的または絶対的欠如の結果として起こる血中の糖が過剰になることを指す。真性糖尿病には、Ｉ型またはインスリン依存性真性糖尿病（ＩＤＤＭ）、ＩＩ型または非インスリン依存性真性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）、およびＡ型インスリン抵抗の３つの基本型があるが、Ａ型は比較的希である。Ｉ型またはＩＩ型糖尿病のいずれかのある患者は、多様な機序を通して、外因性インスリンの効果に不感受性となり得る。Ａ型インスリン抵抗は、インスリン受容体遺伝子の変異、または糖代謝に重要な作用の後受容体部位の欠陥のいずれかによって生じる。糖尿病対象は、医師によって容易に認識され得、高血糖、耐糖能障害、グリコシル化ヘモグロビン、およびいくつかの例において、外傷または疾病と関連付けられるケトアシドーシスを特徴とする。
【００２８】
「非インスリン依存性真性糖尿病」または「ＮＩＤＤＭ」は、ＩＩ型糖尿病を指す。ＮＩＤＤＭ患者は、絶食時に異常に高い血糖濃度を有し、食後またはグルコース負荷試験として知られる診断試験後に糖の細胞摂取が遅延する。ＮＩＤＤＭは、認められている基準に基づいて診断される（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｉｎｓｕｌｉｎ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ（Ｔｙｐｅ  Ｉ）Ｄｉａｂｅｔｅｓ，１９８８、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｎｏｎ−Ｉｎｓｕｌｉｎ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ（Ｔｙｐｅ  ＩＩ）Ｄｉａｂｅｔｅｓ，１９８８）。
【００２９】
本明細書に定義されるように、疾患として治療される糖尿病の症状および合併症は、高血糖、不十分な血糖管理、ケトアシドーシス、インスリン耐性、上昇した成長ホルモン値、上昇したグリコシル化ヘモグロビンおよび進行性グリコシル化最終産生物（ＡＧＥ）の値、曙現象、不十分な脂質プロファイル、血管疾患（例えば、アテローム性動脈硬化）、微小血管疾患、網膜疾患（例えば、増殖性糖尿病網膜症）、腎疾患、神経障害、妊娠合併症（例えば、未完熟終了および出生異常）等を含む。治療の定義において、例えば、インスリン感受性の増加、血糖管理を維持しながらインスリン用量の減少、ＨｂＡ１ｃの減少、血糖管理の改善、血管、腎臓、神経、網膜、および他の糖尿病合併症の低減、「曙現象」の回避または低減、脂質プロファイルの改善、妊娠合併症の低減、およびケトアシドーシスの低減等の終点が含まれる。
【００３０】
本明細書で使用される、「治療組成物」または「組成物」は、Ｄｋｋ−５および薬学的に許容される担体、例えば、水、ミネラル、タンパク質、および当業者に知られている他の賦形剤を含むものとして定義される。
【００３１】
治療の目的で、用語「哺乳動物」は、哺乳動物として分類される任意の動物を指し、ヒト、齧歯動物、競技用、動物園、愛玩、および家畜または農場動物、例えば、イヌ、ネコ、ウシ、ヒツジ、ブタ、ウマ、および非ヒト霊長類、例えば、サルを含むが、これらに限定されない。好ましくは、齧歯動物はマウスまたはラットである。好ましくは、哺乳動物はヒトであり、本明細書では患者とも呼ばれる。
【００３２】
本明細書で使用される、「治療」は、インスリン抵抗、真性糖尿病、高インスリン血症、低インスリン血症、または肥満を含むが、これらに限定されない、本発明に従って標的とされる疾患または状態のうちのいずれかに対抗する目的で、哺乳動物の管理およびケアを説明し、症状または合併症の発症を回避するか、または標的とされる疾患または状態を排除するための投与を含む。
【００３３】
本発明の目的で、インスリン抵抗を低下させるための有益または所望の臨床「治療」結果は、インスリン抵抗と関連付けられる症状の緩和、インスリン抵抗の症状の程度の縮小、インスリン抵抗の症状の安定化（すなわち、非悪化）（例えば、インスリン必要量の減少）、膵細胞障害を回避するためのインスリン感受性および／またはインスリン分泌の増加、およびインスリン抵抗の進行、例えば、糖尿病の進行の遅延または減速を含むが、これらに限定されない。
【００３４】
肥満に関して、「治療」は、概して、哺乳動物のＢＭＩを約２５．９未満に低下させること、および体重を少なくとも６ヶ月間維持することを指す。治療は、哺乳動物による食物またはカロリー摂取の低下を適切にもたらす。さらに、この文脈において治療は、治療が肥満状態の発症に先立って投与される場合に、肥満の発生を回避することを指す。治療は、肥満哺乳動物における脂質生成、すなわち、ヒトおよび動物肥満の主要な特徴の１つである、脂肪細胞中の脂質の過剰蓄積の阻害および／または完全な抑制、ならびに総体重の減少を含む。
【００３５】
「治療を必要とする」者は、既に疾患を有している哺乳動物、ならびに疾患が回避される哺乳動物を含む、疾患を有し易い哺乳動物を含む。
【００３６】
「インスリン抵抗治療薬」は、インスリン抵抗を治療するために使用される、例えば、Ｄｉｃｋｋｏｐｆ−５（Ｄｋｋ−５）等のＩＬ−１７のアンタゴニスト以外の薬剤（例えば、米国出願公開第２００５／０１７０４４０号を参照）、および血糖降下薬である。そのような治療薬の例として、インスリン（１つまたは複数の異なるインスリン）、小分子インスリン等のインスリン模倣体、例えば、Ｌ−７８３，２８１、インスリン類似体（例えば、ＨＵＭＡＬＯＧ（登録商標）インスリン（Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙ  Ｃｏ．）、ＬｙｓＢ２８インスリン、ＰｒｏＢ２９インスリン、もしくはＡｓｐＢ２１インスリンもしくは例えば、米国特許第５，１４９，７７７号および第５，５１４，６４６号に記載されるもの、またはそれらの生理活性フラグメント、インスリン関連ペプチド（Ｃ−ペプチド、ＧＬＰ−１、インスリン様成長因子−Ｉ（ＩＧＥ−１）、もしくはＩＧＦ−１／ＩＧＦＢＰ−３複合体）またはそれらの類似体もしくはフラグメント、エルゴセット、プラムリンチド、レプチン、ＢＡＹ−２７−９９５５、Ｔ−１０９５、インスリン受容体チロシンキナーゼ阻害剤に対するアンタゴニスト、ＴＮＦ−α機能に対するアンタゴニスト、成長ホルモン放出剤、アミリンまたはアミリンに対する抗体、インスリン増感剤、例えば、米国特許第５，７５３，６８１号に記載されるもの、例えば、トログリタゾン、ピオグリタゾン、エングリタゾン、および関連化合物を含むグリタゾンファミリーの化合物、リナロール単独またはビタミンＥ含有（米国特許第６，１８７，３３３号）、インスリン分泌増強剤、例えば、ナテグリニド（ＡＹ−４１６６）、カルシウム（２Ｓ）−２−ベンジル−３−（シス−ヘキサヒドロ−２−イソインドリニルカルボニル）プロピオン酸二水和物（ミチグリニド、ＫＡＤ−１２２９）、およびレパグリニド、スルホニル尿素薬、例えば、アセトヘキサミド、クロロプロパミド、トラザミド、トルブタミド、グリクロピラミド、およびそのアンモニウム塩、グリベンクラミド、グリボムリド、グリクラジド、１−ブチル−３−メタニル尿素、カルブタミド、グリピジド、グリキドン、グリソキセピド、グリブチアゾール、グリブゾール、グリヘキサミド、グリミジン、グリピンアミド、フェンブタミド、トルシクルミド、グリメピリド等、ビグアニド（例えば、フェンフォルミン、メトフ
ォルミン、ブフォルミン等）、α−グルコシダーゼ阻害剤（例えば、アカルボース、ボグリボース、ミグリトール、エミグリテート等）、および膵臓移植または自己免疫試薬としてのそのような非典型的治療が挙げられる。
【００３７】
「減量剤」は、肥満の治療または予防に有用な分子を指す。そのような分子には、例えば、ホルモン（カテコールアミン、グルカゴン、ＡＣＴＨ、およびＩＧＦ−１と結合される成長ホルモン）、Ｏｂタンパク質、クロフィブラート、ハロゲン化物、シンコカイン、クロルプロマジン、マジンドールおよびフェネチルアミンの誘導体などのノルアドレナリン神経伝達物質に作用する食欲抑制薬、例えば、フェニルプロパノールアミン、ジエチルプロピオン、フェンテルミン、フェンジメトラジン、ベンズフェタミン、アンフェタミン、メタンフェタミン、およびフェンメトラジン等、セロトニン神経伝達物質に作用する薬物、例えば、フェンフルアミン、トリプトファン、５−ヒドロキシトリプトファン、フルオキセチン、およびセルトラリン、中枢作用性薬、例えば、ナロキソン、ニューロペプチド−Ｙ、ガラニン、コルチコトロピン放出ホルモン、およびコレシストキニン、コリン作動性アゴニスト、例えば、ピリドスチグミン、スフィンゴリピド、例えば、リソスフィンゴリピドまたはその誘導体、熱発生薬、例えば、甲状腺ホルモン、エフェンドリン、β−アドレナリン作動薬、酵素阻害剤などの胃腸管に作用する薬物、例えば、テトラヒドロリポスタチン、消化の悪い食べ物、例えば、ポリエステルスクロース、および胃内容排出阻害剤、例えば、トレオ−クロロクエン酸またはその誘導体、β−アドレナリン作動アゴニスト、例えば、イソプロテレノールおよびヨヒンビン、ヨヒンビンのβ−アドレナリン作動様効果を増加させるアミノフィリン、例えば、クロニジン単独または成長ホルモン放出ペプチドと組み合わされるα２−アドレナリン遮断薬、腸吸収を干渉する薬物、例えば、メトフォルミンおよびフェンフォルミン等のビグアニド、バルクフィルタ、例えば、メチルセルロース、代謝遮断薬、例えば、ヒドロキシクエン酸塩、プロゲステロン、コレシストキニンアゴニスト、ケト酸を模倣する小分子、コルチコトロピン放出ホルモンに対するアゴニスト、体脂肪の蓄積を低減するエルゴット関連プロラクチン阻害化合物（１９８８年１１月８日に発行された米国特許第４，７８３，４６９号）、β−３アゴニスト、ブロモクリプチン、オピオイドペプチドに対するアンタゴニスト、ニューロペプチドＹに対するアンタゴニスト、グルココルチコイド受容体アンタゴニスト、成長ホルモンアゴニスト
、それらの組み合わせ等が挙げられる。
【００３８】
本明細書で使用される「インスリン」は、インスリン作用を有する任意およびすべての物質を指し、例えば、ウシまたはブタ膵臓から抽出される動物インスリン、ブタ膵臓から抽出されたインスリンから酵素的に合成される半合成ヒトインスリン、および通常、大腸菌または酵母菌等を使用する遺伝子工学技術によって合成されるヒトインスリンによって例示される。さらに、インスリンは、約０．４５〜０．９（ｗ／ｗ）％の亜鉛、塩化亜鉛、硫酸プロタミン、およびインスリンから産生されるプロタミン−インスリン−亜鉛等を含有するインスリン−亜鉛複合体を含み得る。インスリンは、そのフラグメントまたは誘導体の形態、例えば、ＩＮＳ−１であってもよい。インスリンは、インスリン様物質、例えば、Ｌ８３２８１およびインスリンアゴニストを含んでもよい。インスリンは、超即効作用型、即効作用型、二面作用型、中間作用型、長時間作用型等の多様な種類で入手可能であるが、これらの種類は、患者の状態に従って適切に選択され得る。
【００３９】
本明細書で使用される、「治療組成物」は、ＩＬ−１７（ＩＬ−１７ＡおよびＩＬ−１７Ｆアンタゴニストを含む）アンタゴニストおよび薬学的に許容される担体、例えば、水、ミネラル、タンパク質、および当業者に知られている他の賦形剤を含むものとして定義される。
【００４０】
表現「アンタゴニスト」、「ＩＬ−１７（Ａおよび／またはＦ）に対するアンタゴニスト」、「ＩＬ−１７（Ａおよび／またはＦ）アンタゴニスト」等は、本発明の範囲内で、治療される適応症に応じて、何らかの手段によって、ＩＬ−１７、例えば、ＩＬ−１７Ａおよび／またはＩＬ−１７Ｆの機能を干渉するか、またはＩＬ−１７、（例えば、ＩＬ−１７Ａおよび／またはＦ）の関連活性を遮断または中和する、任意の分子を含むことを意味する。ＩＬ−１７（ＩＬ−１７およびＩＬ−１７Ｆを含む）と１つまたは複数のその受容体との間の相互作用を回避し得る。そのような薬剤は、様々な方法でこの効果を達成する。例えば、ＩＬ−１７活性を「中和する」アンタゴニストのクラスは、十分な親和性および特異性を有する、ＩＬ−１７またはＩＬ−１７の受容体に結合し、以下に定義されるように、ＩＬ−１７を干渉する。ＩＬ−１７を「結合する」抗体、またはＩＬ−１７の受容体（例えば、ＩＬ−１７Ｒｃ）は、ＩＬ−１７またはＩＬ−１７受容体を発現する細胞を標的とする際に、抗体が治療薬として有用となるように、十分な親和性を有する抗原を結合できるものである。用語「ＩＬ−１７アンタゴニスト」は、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ、およびＩＬ−１７Ａ／Ｆアンタゴニストのいずれか、およびすべてを指すように使用される。
【００４１】
このアンタゴニスト群には、例えば、ＩＬ−１７またはその部分に対して配向され、ＩＬ−１７と反応性のある抗体、またはＩＬ−１７Ａおよび／もしくはＩＬ−１７ＦおよびＩＬ−１７Ｒｃに対する抗体を特異的に含む、ＩＬ−１７受容体もしくはその部分が含まれる。用語は、ＩＬ−１７Ａおよび／もしくはＩＬ−１７Ｆの過剰産生を干渉するか、または少なくとも１つのＩＬ−１７（例えば、ＩＬ−１７Ａおよび／もしくはＩＬ−１７Ｆ）受容体、例えば、ＩＬ−１７Ｒｃに拮抗する、任意の薬剤も含む。そのようなアンタゴニストは、薬剤の機能を担体タンパク質と組み合わせて治療薬の血清半減期を増加させるか、または異種間耐性を付与するために有用なキメラハイブリッドの形態であってもよい。したがって、そのようなアンタゴニストの例には、生体有機分子（例えば、ペプチド模倣体）、抗体、タンパク質、ペプチド、糖タンパク質、糖ペプチド、糖脂質、多糖、オリゴ糖、核酸、薬物およびそれらの代謝物、転写および翻訳制御配列等が挙げられる。好適な実施形態において、アンタゴニストは、ＩＬ−１７Ａおよび／またはＩＬ−１７Ｆに結合し、受容体、好ましくはＩＬ−１７Ｒｃとのその相互作用を回避する、所望の特性を有する抗体である。
【００４２】
用語「抗体」は、広義に使用され、所望の生物活性または免疫活性を呈する限り、例えば、単一抗ＩＬ−１７Ａ／Ｆまたは抗ＩＬ１７Ａもしくは抗ＩＬ−１７Ｆモノクローナル抗体（アゴニスト、アンタゴニスト、および中和抗体を含む）、ポリエピトープ特異性を有する対応する抗体組成物、ポリクローナル抗体、単鎖抗体、および抗体フラグメント（以下を参照）を特異的に網羅する。
【００４３】
基本４鎖抗体単位は、２つの同一軽鎖（Ｌ）および２つの同一重鎖（Ｈ）で構成されるヘテロ四量体糖タンパク質である（ＩｇＭ抗体は、Ｊ鎖と呼ばれる追加ポリペプチドとともに５つの基本ヘテロ四量体単位で構成され、したがって、１０抗原結合部位を含むが、分泌されたＩｇＡ抗体は、ポリマー化して、Ｊ鎖とともに２〜５の基本４鎖単位を含む、多価集団を形成することができる）。ＩｇＧの場合、４鎖単位は、概して、約１５０，０００ダルトンである。各Ｌ鎖は、１つの共有ジスルフィド結合によってＨ鎖に結合されるが、２つのＨ鎖は、Ｈ鎖のアイソタイプに応じて、１つまたは複数のジスルフィド結合によって相互に結合される。各ＨおよびＬ鎖は、規則的間隔の鎖間ジスルフィド橋も有する。各Ｈ鎖は、Ｎ末端において、αおよびγ鎖のそれぞれに対して可変ドメイン（ＶＨ）に続いて３つの定常ドメイン（ＣＨ）、μおよびεアイソタイプに対して４つのＣＨドメインを有する。各Ｌ鎖は、Ｎ末端において可変ドメイン（ＶＬ）を有し、その他端において定常ドメイン（ＣＬ）が続く。ＶＬは、ＶＨと整列され、ＣＬは、重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨ１）と整列される。特定のアミノ酸残基は、軽鎖および重鎖可変ドメインの間にインターフェースを形成すると考えられる。ＶＨおよびＶＬの対は、一緒に単一の抗原結合部位を形成する。異なるクラスの抗体の構造および特性については、例えば、Ｂａｓｉｃ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，８ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｄａｎｉｅｌ  Ｐ．Ｓｔｉｔｅｓ，Ａｂｂａ  Ｉ．Ｔｅｒｒ  ａｎｄ  Ｔｒｉｓｔｒａｍ  Ｇ．Ｐａｒｓｌｏｗ（ｅｄｓ．），Ａｐｐｌｅｔｏｎ  ＆  Ｌａｎｇｅ，Ｎｏｒｗａｌｋ，Ｃｏｎｎ．，１９９４，ｐａｇｅ  ７１  ａｎｄ  Ｃｈａｐｔｅｒ  ６を参照されたい。
【００４４】
任意の脊椎動物種からのＬ鎖は、それらの定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、κおよびλと呼ばれる２つの明らかに異なる型のうちの１つに割り当てられ得る。それらの重鎖の定常ドメイン（ＣＨ）のアミノ酸配列に応じて、免疫グロブリンは、異なるクラスまたはアイソタイプに割り当てられ得る。これらは、それぞれα、δ、ε、γおよびμと指定される重鎖を有する、免疫グロブリンの５つのクラスＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、およびＩｇＭである。γおよびαクラスは、ＣＨ配列および機能の比較的マイナーな差異に基づいて、さらにサブクラスに分割され、例えば、ヒトは、以下のサブクラスＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、およびＩｇＡ２を発現する。
【００４５】
用語「可変」は、抗体間で、可変ドメインの特定のセグメントが、配列において広範囲に異なるという事実を指す。Ｖドメインは、抗原結合を媒介し、その特定抗原に対する特定抗体の特異性を定義する。しかしながら、変動性は、可変領域の１１０アミノ酸範囲に渡って均一に分散されない。代わりに、Ｖ領域は、それぞれ９〜１２アミノ酸長である「超可変領域」と呼ばれる、極度変動性の短い領域によって分離される、１５〜３０アミノ酸のフレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる比較的不変のストレッチで構成される。天然の重鎖および軽鎖の可変ドメインは、それぞれ４つのＦＲを含み、ループ結合を形成し、いくつかの例においてはβシート構造の一部を形成する、３つの超可変領域によって結合される、主にβシート構造を適合する。各鎖の超可変領域は、ＦＲによって、他の鎖からの超可変領域と一緒に近接して保持され、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１）を参照）。定常ドメインは、抗原への抗体の結合に直接関与しないが、様々なエフェクタ機能、例えば、抗体依存細胞性細胞毒性（ＡＤＣＣ）における抗体の関与を呈する。
【００４６】
用語「超可変領域」は、本明細書において使用されるとき、抗原結合に関与する抗体のアミノ酸残基を指す。超可変領域は、概して、「補体性決定領域」または「ＣＤＲ」からのアミノ産残基を含む（例えば、ＶＬ中に残基約２４−３４（Ｌ１）、５０−５６（Ｌ２）、および８９−９７（Ｌ３）およびＶＨ中に約１−３５（Ｈ１）、５０−６５（Ｈ２）、および９５−１０２（Ｈ３）、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１））および／または「超可変ループ」からのそれらの残基（例えば、ＶＬ中に残基２６−３２（Ｌ１）、５０−５２（Ｌ２）、および９１−９６（Ｌ３）およびＶＨ中に２６−３２（Ｈ１）、５３−５５（Ｈ２）および９６−１０１（Ｈ３）、Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ  Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７（１９８７））。
【００４７】
本明細書で使用される、用語「モノクローナル抗体」は、実質的に均一な抗体の集団から得られる抗体、すなわち、少量で存在し得る自然発生する変異の可能性を除いて同一である集団を含む個別の抗体を指す。モノクローナル抗体は、極めて特異的であり、単一の抗原部位に対して配向されている。さらに、異なる決定因子（エピトープ）に対して配向される異なる抗体を含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の単一決定因子に対して配向される。それらの特異性に加えて、モノクローナル抗体は、それらが他の抗体によって汚染されずに合成され得る点で有利である。そのようなモノクローナル抗体は、通常、標的を結合する可変領域を含む抗体を含み、抗体は、複数の抗体から抗体を選択することを含む過程によって得られる。例えば、選択過程は、複数のクローン、例えば、ハイブリドーマクローン、ファージクローン、または組み換えＤＮＡクローンのプールから固有のクローンを選択することであり得る。選択された抗体は、例えば、標的に対する親和性を向上させ、抗体をヒト化し、細胞培養におけるその産生を高め、インビボでのその免疫原性を低下させ、多特異性抗体を形成する等のためにさらに変更することができること、および変更された可変領域配列を含む抗体は、本発明のモノクローナル抗体でもあることを理解されたい。それらの特異性に加えて、モノクローナル抗体調製物は、通常、それらが他の免疫グロブリンによって汚染されないという点で有利である。修飾語「モノクローナル」は、実質的に均質な抗体集団から得られるものとして抗体の特徴を示し、任意の特定方法による抗体の産生を必要とすると解釈されるものではない。例えば、本発明に従って使用されるモノクローナル抗体は、ハイブリドーマ法（例えば、Ｋｏｈｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５（１９７５）、Ｈａｒｌｏｗ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，２ｎｄ  ｅｄ．１９８８）、Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，ｉｎ：Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｔ−Ｃｅｌｌ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ  ５６３−６８１，（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎ．Ｙ．，１９８１）を参照）、組み換えＤＮＡ
法（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号を参照）、ファージ表示技術（例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４−６２８（１９９１）、Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１−５９７（１９９１）、Ｓｉｄｈｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９−３１０（２００４）、Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３−１０９３（２００４）、Ｆｅｌｌｏｕｓｅ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １０１（３４）：１２４６７−１２４７２（２００４）、およびＬｅｅ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２８４（１−２）：１１９−１３２（２００４）を参照）、およびヒト免疫グロブリン配列をコードするヒト免疫グロブリン座または遺伝子の一部またはすべてを有する動物からヒトまたはヒト様抗体を産生するための技術（例えば、国際特許第ＷＯ９８／２４８９３号、第ＷＯ／９６３４０９６号、第ＷＯ／９６３３７３５号、および第ＷＯ／９１１０７４１号、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：２５５１（１９９３）、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３６２：２５５−２５８（１９９３）、Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｙｅａｒ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏ．，７：３３（１９９３）、米国特許第５，５４５，８０６号、第５，５６９，８２５号、第５，５９１，６６９号（すべてＧｅｎＰｈａｒｍ）、第５，５４５，８０７号、第ＷＯ９７／１７８５２号、米国特許第５，５４５，８０７号、第５，５４５，８０６号、第５，５６９，８２５号、第５，６２５，１２６号、第５，６３３，４２５号、および第５，６６１，０１６号、およびＭａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１０：７７９−７８３（１９９２）、Ｌｏｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３６８：８５６−８５９（１９９４）、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ，３６８：８１２−８１３（１９９４）、Ｆｉｓｈｗｉｌｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１４：８４５−８５１（１９９６）、Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１４：８２６（１９９６）、およびＬｏｎｂｅｒｇ  ａｎｄ  
Ｈｕｓｚａｒ，Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３：６５−９３（１９９５）を参照）を含む、多様な技術によって形成されてもよい。
【００４８】
本明細書において、モノクローナル抗体は、「キメラ抗体」を含み、重鎖および／もしくは軽鎖の一部分は、特定の種に由来するか、もしくは特定の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体内の対応する配列に一致するか、または相同するが、１つまたは複数の鎖の残りは、所望の生物活性を呈する限り、別の種に由来するか、もしくは別の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体内の対応配列、ならびにそのような抗体のフラグメントに一致するか、または相同する（米国特許第４，８１６，５６７号、およびＭｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１−６８５５（１９８４）を参照）。本明細書において関心対象のキメラ抗体は、非ヒト霊長類に由来する可変ドメイン抗原結合配列を含む、「霊長類化」抗体（例えば、旧世界ザル、類人猿等）、およびヒト定常領域配列を含む。
【００４９】
「正常な」抗体は、抗原結合部位ならびにＣＬおよび少なくとも重鎖定常ドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３を含むものである。定常ドメインは、天然配列定常ドメイン（例えば、ヒト天然配列定常ドメイン）またはそのアミノ酸配列変異型であり得る。好ましくは、正常な抗体は、１つまたは複数のエフェクタ機能を有する。
【００５０】
「抗体フラグメント」は、正常な抗体の一部分、好ましくは、正常な抗体の抗原結合または可変領域を含む。抗体フラグメントの例には、Ｆａｂ、Ｆａｂ′、Ｆ（ａｂ′）２、およびＦｖフラグメント、二重特異性抗体、線形抗体（米国特許第５，６４１，８７０号、実施例２、Ｚａｐａｔａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．８（１０）：１０５７−１０６２［１９９５］を参照）、単鎖抗体分子、および抗体フラグメントから形成される多特異性抗体が挙げられる。好適な実施形態において、フラグメントは「機能的」であり、すなわち、対応する正常な抗体が、標的ＩＬ−１７ＡおよびＩＬ−１７Ｆポリペプチドに結合する能力を定性的に維持し、正常な抗体が、ＩＬ−１７Ａ／Ｆ生物活性または機能も阻害する場合は、そのような特性も同様に定性的に維持する。定性的維持は、同種の活性が維持されるが、結合親和性および／または活性の程度が異なり得ることを意味する。
【００５１】
抗体のパパイン消化は、「Ｆａｂ」フラグメントおよび残基「Ｆｃ」フラグメントと呼ばれる２つの同一抗原結合フラグメントを産生し、名称は容易に結晶化する能力を反映している。Ｆａｂフラグメントは、Ｈ鎖の可変領域ドメイン（ＶＨ）を伴う全体Ｌ鎖、および１つの重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨ１）で構成される。各Ｆａｂフラグメントは、抗原結合に関して一価であり、すなわち、単一の抗原結合部位を有する。抗体のペプシン処理は、二価抗原結合活性を有する２つのジスルフィド結合されたＦａｂフラグメントにほぼ対応しながら、依然として抗原を架橋することができる、単一の大きいＦ（ａｂ′）２フラグメントをもたらす。Ｆａｂ′フラグメントは、抗体ヒンジ領域からの１つまたは複数のシステインを含むＣＨ１ドメインのカルボキシ末端において、追加のいくつかの残基を有することにより、Ｆａｂフラグメントとは異なる。Ｆａｂ′−ＳＨは、本明細書においてＦａｂ′の名称であり、定常ドメインのシステイン残基は、遊離チオール基を含む。Ｆ（ａｂ′）２抗体フラグメントは、本来、それらの間にヒンジシステインを有する、Ｆａｂ′フラグメントの対として産生された。抗体フラグメントの他の化学的結合も知られている。
【００５２】
Ｆｃフラグメントは、ジスルフィドによって一緒に保持される両方のＨ鎖のカルボキシ末端部分を含む。抗体のエフェクタ機能は、Ｆｃ領域内の配列によって決定され、この領域は、特定型の細胞上で見出されるＦｃ受容体（ＦｃＲ）によって認識される部分でもある。
【００５３】
「Ｆｖ」は、完全な抗原認識および結合部位を含有する、最小抗体フラグメントである。このフラグメントは、堅固な非共有会合にある、１つの重鎖および１つの軽鎖可変領域ドメインの二量体で構成される。これら２つのドメインの折り畳みから、抗原結合のためのアミノ酸残基に寄与し、抗体に対する抗原結合特異性を付与する、６つの超可変ループ（ＨおよびＬ鎖からそれぞれ３ループ）が生じる。しかしながら、単一可変ドメイン（または抗原に特異的な３つのＣＤＲのみを含むＦｖの半分）であっても、抗原を認識および結合する能力を有するが、全体結合部位よりも親和性が低い。
【００５４】
「ｓＦｖ」または「ｓｃＦｖ」とも省略される「単鎖Ｆｖ」は、単一ポリペプチド鎖に結合されるＶＨおよびＶＬ抗体ドメインを含む、抗体フラグメントである。好ましくは、ｓＦｖポリペプチドは、ｓＦｖに抗原結合のための所望の構造を形成させることができる、ＶＨおよびＶＬドメインの間にポリペプチドリンカをさらに含む。ｓＦｖの概説については、以下、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ  ｉｎ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ  ａｎｄ  Ｍｏｏｒｅ  ｅｄｓ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ｐｐ．２６９−３１５（１９９４）、Ｂｏｒｒｅｂａｅｃｋ  １９９５を参照されたい。
【００５５】
用語「二重特異性抗体」は、Ｖドメインの鎖内ではなく鎖間対合が達成され、二価フラグメント、すなわち、２つの抗原結合部位を有するフラグメントを生じるように、ＶＨおよびＶＬドメインの間に短いリンカー（約５〜１０残基）を備えた（前述の）ｓＦｖフラグメントを構成することによって調製される、小抗体フラグメントを指す。二重特異性抗体は、２つの「交差」ｓＦｖフラグメントのヘテロ二量体であり、２つの抗体のＶＨおよびＶＬドメインは、異なるポリペプチド鎖上に存在する。二重特異性抗体は、例えば、欧州特許第ＥＰ４０４，０９７号、国際特許第ＷＯ９３／１１１６１号、およびＨｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：６４４４−６４４８（１９９３）においてより完全に説明されている。
【００５６】
非ヒト（例えば、齧歯動物）抗体の「ヒト化」形態は、非ヒト抗体に由来する最小配列を含有するキメラ抗体である。大部分の場合、ヒト化抗体は、ヒト免疫グロブリン（受容体抗体）であり、受容体の超可変領域からの残基は、マウス、ラット、ウサギ、または所望の抗体特異性、親和性、および能力を有する非ヒト霊長類等の非ヒト種（ドナー抗体）の超可変領域からの残基によって置換される。いくつかの例において、ヒト免疫グロブリンのフレームワーク領域（ＦＲ）は、対応する非ヒト残基によって置換される。さらに、ヒト化抗体は、受容体抗体またはドナー抗体において見出されない残基を含んでもよい。これらの修飾は、抗体性能をさらに改善するために行う。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、および通常２つの可変ドメインの実質的にすべてを含み、超可変ループのすべてまたは実質的にすべては、非ヒト免疫グロブリンのそれらに対応し、ＦＲのすべてまたは実質的にすべては、ヒト免疫グロブリン配列のそれである。ヒト化抗体は、任意で、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部分、通常、ヒト免疫グロブリンのそれを含む。さらなる詳細については、Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２−５２５（１９８６）、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２９（１９８８）、およびＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３−５９６（１９９２）を参照されたい。
【００５７】
用語「多特異的抗体」は、広意義で使用され、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む抗体を特異的に網羅し、ＶＨＶＬ単位は、ポリエピトープ特異性を有する（すなわち、１つの生物分子上で２つの異なるエピトープに結合するか、または異なる生物分子上で各エピトープに結合することができる）。そのような多特異的抗体には、完全長抗体、２つ以上のＶＬおよびＶＨドメインを有する抗体、Ｆａｂ、Ｆｖ、ｄｓＦｖ、ｓｃＦｖ、二重特異性抗体、二重特異性抗体、および三重特異性抗体等の抗体フラグメント、共役的または非共役的に結合された抗体フラグメントが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５８】
「ポリエピトープ特異性」は、同一または異なる１つまたは複数の標的上で２つ以上の異なるエピトープに特異的に結合する能力を指す。
【００５９】
「単特異的」は、１つのエピトープのみに結合する能力を指す。一実施形態に従って、ＩｇＧ１形態の多特異的抗体は、５μＭ〜０．００１ｐＭ、３μＭ〜０．００１ｐＭ、１μＭ〜０．００１ｐＭ、０．５μＭ〜０．００１ｐＭ、または０．１μＭ〜０．００１ｐＭの親和性を有する各エピトープに結合する。
【００６０】
「交差反応性抗体」は、複数の抗原上で同一または類似のエピトープを認識する抗体である。したがって、本発明の交差反応性抗体は、ＩＬ−１７ＡおよびＩＬ−１７Ｆの両方に存在する同一または類似のエピトープを認識する。特定の実施形態において、交差反応性抗体は、同一または本質的に同一のパラトープを使用して、ＩＬ−１７ＡおよびＩＬ−１７Ｆの両方に結合する。好ましくは、交差反応性抗体は、本明細書において、ＩＬ−１７ＡおよびＩＬ−１７Ｆ機能（活性）も両方遮断する。
【００６１】
用語「パラトープ」は、本明細書において、標的抗原に結合する抗体の一部を指すように使用される。
【００６２】
「種依存性抗体」、例えば、哺乳動物抗ＩＬ−１７Ａ／Ｆ抗体は、第１の哺乳動物種からの抗原に対して、第２の哺乳動物種からの抗原の相同体に対して有するよりも強い結合親和性を有する抗体である。通常、種依存性抗体は、ヒト抗原に「特異的に結合する」（すなわち、わずか約１ｘ１０−７Ｍ、好ましくはわずか約１ｘ１０−８Ｍ、および最も好ましくはわずか約１ｘ１０−９Ｍの結合親和性（Ｋｄ）値を有する）が、第２の非ヒト哺乳動物種からの抗原の相同体に対して、ヒト抗原に対するその結合親和性よりも、少なくとも約５０倍、もしくは少なくとも約５００倍、または少なくとも約１０００倍弱い結合親和性を有する。種依存性抗体は、上述されるように、様々な種類の抗体のうちのいずれかであり得るが、好ましくは、ヒト化またはヒト抗体である。
【００６３】
関心対象の抗原を「結合する」抗体は、抗原を発現する細胞または組織を標的する際に、抗体が診断および／または治療薬として有用であるために十分な親和性を有する抗原を結合し、他のタンパク質と有意に相互反応しないものである。そのような実施形態において、「非標的」タンパク質に対する抗体の結合の程度は、蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）分析または放射性免疫沈降（ＲＩＡ）によって決定されるように、その特定標的タンパク質への抗体の結合の約１０％未満となる。標的分子への抗体の結合に関して、用語「特異的結合」もしくは「特異的に結合する」または特定のポリペプチドもしくは特定のポリペプチド標的上のエピトープ「に特異的である」は、非特異的相互作用とはある程度異なる結合を意味する。特異的結合は、例えば、対照分子の結合と比較して、概して、結合活性を有しない類似構造の分子である、分子の結合を決定することによって測定され得る。例えば、特異的結合は、標的に類似する対照分子との競合、例えば、過剰の非標識標的によって決定され得る。この場合、特異的結合は、プローブへの標識標的の結合が、過剰な非標識標的によって競合的に阻害される場合に示される。本明細書で使用される、用語「特異的結合」、または「特異的に結合する」、もしくは特定のポリペプチドまたは特定のポリペプチド標的上のエピトープ「に特異的な」は、例えば、少なくとも約１０−４Ｍ、代替的に少なくとも約１０−５Ｍ、代替的に少なくとも約１０−６Ｍ、代替的に少なくとも約１０−７Ｍ、代替的に少なくとも約１０−８Ｍ、代替的に少なくとも約１０−９Ｍ、代替的に少なくとも約１０−１０Ｍ、代替的に少なくとも約１０−１１Ｍ、代替的に少なくとも約１０−１２Ｍ、またはそれ以上の標的に対するＫｄを有する分子によって示され得る。一実施形態において、用語「特異的結合」は、分子が、任意の他のポリペプチドまたはポリペプチドエピトープに実質的に結合することなく、特定のポリペプチドまたは特定のポリペプチド上のエピトープに結合する、結合を指す。好適な実施形態において、特異的結合親和性は、少なくとも約１０−１０Ｍである。
【００６４】
抗体「エフェクタ機能」は、抗体のＦｃ領域（天然配列Ｆｃ領域またはアミノ酸配列異型Ｆｃ領域）に起因する、それらの生物活性を指し、抗体のアイソタイプによって異なる。抗体効果または機能の例には、Ｃ１ｑ結合および補体依存性細胞毒性、Ｆｃ受容体結合、抗体依存性細胞媒介細胞毒性（ＡＤＣＣ）、食作用、細胞表面受容体の下方制御（例えば、Ｂ細胞受容体）、およびＢ細胞活性化が挙げられる。
【００６５】
「抗体依存性細胞媒介細胞毒性」または「ＡＤＣＣ」は、特定の細胞毒性細胞（例えば、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、好中球、およびマクロファージ）上に存在する、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）上に結合される分泌Ｉｇが、これらの細胞毒性エフェクタ細胞を、抗原を有する標的細胞に特異的に結合させて、実質的に細胞毒性を有する標的細胞を殺傷することができる、細胞毒性の形態を指す。抗体は、細胞毒性細胞を「作動可能にする」ため、そのような殺傷に確実に必要とされる。ＡＤＣＣを媒介するための主要な細胞、ＮＫ細胞は、ＦｃγＲＩＩＩのみを発現するが、単球は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、およびＦｃγＲＩＩＩを発現する。造血細胞上のＦｃＲ発現は、Ｒａｖｅｔｃｈ  ａｎｄ  Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４５７−９２（１９９１）の４６４ページ、表３に要約されている。関心対象の分子のＡＤＣＣ活性を評価するために、インビトロＡＤＣＣ検定は、米国特許第５，５００，３６２号または第５，８２１，３３７号に記載されるように行われてもよい。そのような検定に有用なエフェクタ細胞には、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）およびナチュラルキラー（ＮＫ）細胞が挙げられる。代替または追加的に、関心対象の分子のＡＤＣＣ活性は、Ｃｌｙｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９５：６５２−６５６（１９９８）に開示されるように、インビボで、例えば、動物モデルにおいて評価されてもよい。
【００６６】
「Ｆｃ受容体」または「ＦｃＲ」は、抗体のＦｃ領域に結合する受容体を説明する。好適なＦｃＲは、天然配列ヒトＦｃＲである。さらに、好適なＦｃＲは、ＩｇＧ抗体（γ受容体）を結合するものであり、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、およびＦｃγＲＩＩＩサブクラスの受容体を含み、これらの受容体の対立遺伝子多型および選択的にスプライスされた形態を含む。ＦｃγＲＩＩ受容体は、主にその細胞質ドメインにおいて異なる類似のアミノ酸配列を有する、ＦｃγＲＩＩＡ（「活性化受容体」）およびＦｃγＲＩＩＢ（「阻害受容体」）を含む。活性化受容体ＦｃγＲＩＩＡは、その細胞質ドメインに、免疫受容体チロシン系活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を含有する。阻害受容体ＦｃγＲＩＩＢは、その細胞質ドメインに、免疫受容体チロシン系阻害モチーフ（ＩＴＩＭ）を含有する（Ｄａｅｒｏｎ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５：２０３−２３４（１９９７）のレビューＭを参照）。ＦｃＲｓは、Ｒａｖｅｔｃｈ  ａｎｄ  Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４５７−４９２（１９９１）、Ｃａｐｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ  ４：２５−３４（１９９４）、およびｄｅ  Ｈａａｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．１２６：３３０−４１（１９９５）において概説されている。今後識別されるものを含む他のＦｃＲｓは、本明細書において、用語「ＦｃＲ」によって包含される。用語は、胎児への母体ＩｇＧの移行に関与する、新生児受容体も含む（Ｇｕｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１７：５８７（１９７６）およびＫｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：２４９（１９９４））。
【００６７】
「ヒトエフェクタ細胞」は、１つまたは複数のＦｃＲを発現し、エフェクタ機能を行う白血球である。好ましくは、細胞は、少なくともＦｃγＲＩＩＩを発現し、かつ、ＡＤＣＣエフェクタ機能を行う。ＡＤＣＣを媒介するヒト白血球の例には、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、単球、細胞毒性Ｔ細胞、および好中球が挙げられ、ＰＢＭＣおよびＮＫ細胞が好適である。エフェクタ細胞は、天然供給源、例えば、血液から単離されてもよい。
【００６８】
「補体依存性細胞毒性」または「ＣＤＣ」は、補体の存在下における標的細胞の溶解を指す。古典的補体経路の活性化は、補体系（Ｃ１ｑ）の第１の成分を、それらの同種抗原に結合される（適切なサブクラスの）抗体に結合することによって開始される。補体の活性化を評価するために、ＣＤＣ検定を、例えば、Ｇａｚｚａｎｏ−Ｓａｎｔｏｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２０２：１６３（１９９６）に記載されるように行ってもよい。
【００６９】
用語「中和する」および「活性を中和する」は、本明細書において、例えば、任意の機序によって、ＩＬ−１７（例えば、ＩＬ−１７Ａおよび／もしくはＩＬ−１７Ｆ）の活性を遮断、回避、低減、反作用するか、または無効にすることを意味するように使用される。したがって、アンタゴニストは、ＩＬ−１７の活性に必要な結合イベントを回避し得る。
【００７０】
「中和抗体」は、ＩＬ−１７（ＩＬ−１７Ａおよび／もしくはＩＬ−１７Ｆを含む）のエフェクタ機能を遮断するか、または有意に低減させることができると本明細書に定義されるように、抗体分子を意味する。例えば、中和抗体は、ＩＬ−１７（例えば、ＩＬ−１７Ａおよび／もしくはＩＬ−１７Ｆ）の活性を阻害または低減して、ＩＬ−１７受容体、例えば、ＩＬ−１７Ｒｃと相互作用し得る。代替的に、中和抗体は、ＩＬ−１７の能力を阻害または低減して、ＩＬ−１７受容体シグナル伝達経路を遮断し得る。また中和抗体は、ＩＬ−１７活性の免疫測定法において、ＩＬ−１７に免疫特異的に結合し得る。インビトロおよびインビボ状況において、その機能的活性を維持することは、本発明の「中和抗体」の特徴である。
【００７１】
Ｂ．   詳細な説明
１．  治療用途
インスリン抵抗は、インスリンの存在が、正常以下の生物反応をもたらす状態である。臨床用語において、インスリン抵抗は、正常または上昇したインスリン値に対して、正常または上昇した血糖値が持続する場合に存在する。本質的に、それはグリコーゲン合成の阻害を表し、これによって基礎またはインスリン刺激によるグリコーゲン合成のいずれか、または両方が、正常値よりも低下する。２型糖尿病に存在する高血糖は、明らかに、インスリンに対する末梢組織の感受性を回復するのに十分な食事または体重減少によって好転し得る場合があるという事実によって証明されるように、インスリン抵抗は、２型糖尿病において主要な役割を果たす。
【００７２】
本発明は、ＩＬ−１７Ａおよび／もしくはＩＬ−１７Ｆアンタゴニストの投与によるインスリン抵抗または２型糖尿病の治療に関する。前述されるように、ＩＬ−１７Ａおよび／もしくはＩＬ−１７Ｆアンタゴニストは、治療されている適応症に応じて、なんらかの手段によって、ＩＬ−１７Ａおよび／もしくはＩＬ−１７Ｆの機能を干渉するか、またはＩＬ−１７Ａおよび／もしくはＩＬ−１７Ｆの関連活性を遮断または中和する、任意の分子であり得る。ＩＬ−１７Ａおよび／またはＩＬ−１７Ｆと、１つまたは複数のその受容体、特にＩＬ−１７Ｒｃの間の相互作用を回避し得る。そのような薬剤は、様々な方法でこの効果を達成する。例えば、ＩＬ−１７Ａおよび／もしくはＩＬ−１７Ｆの活性を中和するアンタゴニストのクラスは、ＩＬ−１７Ａおよび／もしくはＩＬ−１７ＦまたはＩＬ−１７Ａおよび／もしくはＩＬ−１７Ｆの受容体、特にＩＬ−１７Ｒｃに結合し、ＩＬ−１７Ａおよび／またはＩＬ−１７Ｆを干渉するための十分な親和性および特異性を有する。
【００７３】
２．  投与および製剤
ＩＬ−１７アンタゴニストは、任意の適切な経路によって投与されてもよく、静脈内（ＩＶ）、筋肉内（ＩＭ）、皮下（ＳＣ）、および腹腔内（ＩＰ）、ならびに経皮、口腔、舌下、直腸内、鼻腔内、および吸入経路であるが、これらに限定されない非経口投与経路を含む。ＩＶ、ＩＭ、ＳＣ、およびＩＰ投与は、ボーラスまたは持続注射によって行われてもよく、ＳＣの場合は、徐放性埋め込み型装置によって行われてもよく、ポンプ、徐放製剤、および機械装置を含むが、これらに限定されない。好ましくは、投与は全身性である。
【００７４】
ＩＬ−１７アンタゴニストの投与のための特に好適な一方法は、特に、定量注入器、例えば、ポンプを使用する皮下注射による。そのようなポンプは、再利用または使い捨て可能であり、埋め込みまたは外部搭載可能であり得る。この目的で通常用いられる薬物注入ポンプは、例えば、米国特許第５，６３７，０９５号、第５，５６９，１８６号、および第５，５２７，３０７号に開示されるポンプを含む。組成物は、そのような装置から連続的または断続的に投与され得る。
【００７５】
保管に適したＩＬ−１７アンタゴニストの治療製剤は、所望の純度を有するアンタゴニストと、薬学的に許容される担体、賦形剤、または安定剤との混合物を（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  １６ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０））、凍結乾燥製剤または水溶液の形態で含む。許容される担体、賦形剤、または安定剤は、用いられる用量および濃度において、受容者に非毒性であり、リン酸、クエン酸、および他の有機酸等の緩衝液、アスコルビン酸およびメチオニンを含む抗酸化剤、保存剤（例えば、オクタデシルジメチルベンジル塩化アンモニウム、塩化ヘキサメトニウム、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、フェノール、ブチル、もしくはベンジルアルコール、アルキルパラベン、例えば、メチルもしくはプロピルパラベン、カテコール、レゾルシノール、シクロヘキサノール、３−ベンタノール、およびｍ−クレゾール）、低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド、タンパク質、例えば、血清アルブミン、ゼラチン、もしくは免疫グロブリン、親水性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドン、アミノ酸、例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、もしくはリシン、単糖、二糖、およびグルコース、マンノース、またはデキストリンを含む他の炭水化物、キレート剤、例えば、ＥＤＴＡ、糖類、例えば、スクロース、マンニトール、トレハロース、もしくはソルビトール、塩形成対イオン、例えば、ナトリウム、金属複合体（例えば、Ｚｎ−タンパク質複合体）、および／もしくは非イオン性界面活性剤、例えば、ＴＷＥＥＮＴ（商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）、またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含む。好適な凍結乾燥された抗ＩＬ−１７抗体製剤は、第ＷＯ９７／０４８０１号に記載されている。これらの組成物は、好ましくは、可溶性形態で、活性アンタゴニストの約０．１〜９０重量％、より一般的には、約１０〜３０重量％を含有するＩＬ−１７に対するアンタゴニストを含む。
【００７６】
活性成分は、例えば、コアセルベーション技術または界面ポリマー化によって調製される、マイクロカプセル、例えば、それぞれヒドロキシメチルセルロースまたはゼラチンマイクロカプセルおよびポリ（メチルメタクリレート）マイクロカプセル、コロイド薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミン小球体、マイクロエマルション、ナノ粒子、およびナノカプセル）、またはマクロエマルションにそれぞれ捕捉されてもよい。そのような技術は、上記Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓに開示されている。
【００７７】
ＩＬ−１７Ａおよび／またはＩＬ−１７Ｆアンタゴニスト、例えば、本明細書に開示される抗ＩＬ−１７抗体は、免疫リポソームとして製剤されてもよい。抗体を含有するリポソームは、例えば、Ｅｐｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８２：３６８８（１９８５）、Ｈｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７７：４０３０（１９８０）、米国特許第４，４８５，０４５号ならびに第４，５４４，５４５号、および１９９７年１０月２３日に公開された国際特許第ＷＯ９７／３８７３１号に記載されるように、該技術分野において知られている方法によって調製される。拡張された循環時間を有するリポソームは、米国特許第５，０１３，５５６号に開示されている。
【００７８】
特に有用なリポソームは、逆相蒸発法によってホスファチジルコリン、コレステロール、およびＰＥＧ誘導体化ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥＧ−ＰＥ）を含む脂質組成物を用いて生成され得る。リポソームは、定義された孔径のフィルタを通して押し出され、所望の直径を有するリポソームを生じる。本発明の抗体のＦａｂ′フラグメントは、Ｍａｒｔｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２５７：２８６−２８８（１９８２）に記載されるように、ジスルフィド交換反応を介してリポソームと共役され得る。
【００７９】
徐放性調製物が調製されてもよい。徐放性調製物の適切な例には、抗体を含有する固形疎水性ポリマーの半透過性基質が挙げられ、この基質は、成形品の形態であり、例えば、フィルムまたはマイクロカプセルである。徐放性基質の例には、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）、またはポリ（ビニルアルコール））、ポリラクチド（米国特許第３，７７３，９１９号）、Ｌ−グルタミン酸およびｙエチル−Ｌ−グルタミン酸塩のコポリマー、非分解性エチレン−酢酸ビニル、分解性乳酸−グリコール酸コポリマー、例えば、ＬＵＰＲＯＮ  ＤＥＰＯＴ（商標）（乳酸−グリコール酸コポリマーおよび酢酸ロイプロリドで構成される注射用ミクロスフェア）、およびポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシブチル酸が挙げられる。
【００８０】
特定のアンタゴニストのいずれかは、担体タンパク質に結合されて、治療用アンタゴニストの血清半減期を増加させ得る。例えば、本明細書に記載されるような可溶性免疫グロブリンキメラは、米国特許第５，１１６，９６４号に記載されるように、それぞれ特定のＩＬ−１７アンタゴニストまたはそのアンタゴニスト部分に対して得ることができる。免疫グロブリンキメラは、ＩｇＧ結合タンパク質Ａ−セファロースクロマトグラフィを通して容易に精製される。キメラは、随伴性の高親和性および血清半減期を有する免疫グロブリン様二量体を形成する能力を有する。
【００８１】
インビボ投与に使用される製剤は、滅菌されなければならない。これは、滅菌ろ過膜を通すろ過によって容易に達成される。
【００８２】
本明細書における製剤は、治療される特定の適応症に必要な複数の活性成分、好ましくは、相互に悪影響を及ぼさない補体活性を有するものを含んでもよい。またそのような活性成分は、治療される哺乳動物に個別に投与され得る。
【００８３】
例えば、それらの適応症に対するインスリン抵抗治療薬をさらに提供することが望ましい場合がある。さらに、食事および体重減少に応答しない２型糖尿病は、ＩＬ−１７アンタゴニストとともに、スルホニル尿素による治療に応答し得る。スルホニル尿素薬のクラスは、アセトヘキサミド、クロロプロパミド、トラザミド、トルブタミド、グリベンクラミンド、グリボムリド、グリクラジド、グリピジド、グリキドン、およびグリミジンを含む。この目的の他の薬剤は、自己免疫試薬、インスリン増感剤、例えば、グリタゾン系の化合物、米国特許第５，７５３，６８１号に記載されるもの、例えば、トログリタゾン、ピオグリタゾン、エングリタゾン、および関連化合物、インスリン受容体チロシンキナーゼ阻害剤に対するアンタゴニスト（米国特許第５，９３９，２６９号および第５，９３９，２６９号）、ＩＧＦ−１／ＩＧＦＢＰ−３複合体（米国特許第６，０４０，２９２号）、ＴＮＦ−α機能に対するアンタゴニスト（米国特許第６，０１５，５５８号）、成長ホルモン放出剤（米国特許第５，９３９，３８７号）、およびアミリンに対する抗体（米国特許第５，９４２，２２７号）を含む。使用され得る他の化合物は、インスリン（１つまたは複数の異なるインスリン）、インスリン模倣体、例えば、小分子インスリン、上記のようなインスリン類似体もしくはその生理活性フラグメント、上記のようなインスリン関連ペプチド、またはその類似他体もしくはフラグメントを含む。薬剤は、上記の定義においてさらに特定される。
【００８４】
低インスリン血症を治療するために、例えば、インスリンは、ＩＬ−１７に対するアンタゴニストと一緒に投与され得るか、または別個に投与されてもよい。
【００８５】
そのような追加分子は、適切に存在するか、または意図される目的に有効な量、通常、それらがＩＬ−１７に対するアンタゴニストなしに単独で投与される場合に使用される量未満で、併せて投与される。それらが一緒に製剤化される場合、例えば、適応症の種類、対象、対象の年齢および体重、現在の臨床状態、投与回数、投与形態、投与方法等に従って決定される量で製剤され得る。例えば、併用薬は、好ましくは、本明細書において、ＩＬ−１７に対するアンタゴニストの１重量部分に対して、約０．０００１〜１０，０００重量部分の比で使用される。
【００８６】
ＩＬ−１７に対するアンタゴニストをインスリンと併用することは、インスリン単独を投与するときの用量と比較して、インスリン用量の低減を可能にする。したがって、いずれもインスリンの大量投与に伴う問題となり得る、血管合併症および低血糖誘導のリスクが低い。成人糖尿病患者にインスリンを投与する場合（体重約５０ｋｇ）、例えば、１日当りの用量は、通常、約１０〜１００Ｕ（単位）、好ましくは、１０〜８０Ｕであるが、これは、医師によって決定されるように、それ未満でもよい。同一種の患者にインスリン分泌増強剤を投与する場合、例えば、１日当りの用量は、好ましくは、約０．１〜１０００ｍｇ、より好ましくは、約１〜１００ｍｇである。同一種の患者にビグアニドを投与する場合、例えば、１日当りの用量は、好ましくは約１０〜２５００ｍｇ、より好ましくは、約１００〜１０００ｍｇである。同一種の患者にグルコシダーゼ阻害剤を投与する場合、例えば、１日当りの用量は、好ましくは、約０．１〜４００ｍｇ、より好ましくは、約０．６〜３００ｍｇである。そのような患者に対するエルゴセット、プラムリンチド、レプチン、ＢＡＹ−２７−９９５５、またはＴ−１０９５の投与は、好ましくは、約０．１〜２５００ｍｇ、より好ましくは、約０．５〜１０００ｍｇの用量で行われ得る。上記用量のすべては、１日に１回から数回投与され得る。
【００８７】
ＩＬ−１７アンタゴニストは、膵臓移植等のインスリン抵抗に適した非薬物治療と併せて投与されてもよい。
【００８８】
インスリン抵抗または低インスリン血症の哺乳動物に投与されるアンタゴニストの用量は、哺乳動物の状態、アンタゴニストの種類、適応症の種類、および選択される投与経路を含む、関連状況に照らして、医師によって決定される。用量は、好ましくは、任意の有意な程度の体重増加をもたらさないために十分低いレベルであり、医師は、そのレベルを決定することができる。ヒト２型糖尿病の治療に対して承認されたグリタゾン（ロシグリタゾン／アバンジアおよびピオグリタゾン／アクトス）は、ある程度の体重増加をもたらすが、それらの治療指数によって有益であることが証明されているため、副作用があるにも関わらず、それらは使用されている。本明細書に提示される用量範囲は、いかなる方法においても本発明の範囲を制限することを意図しない。本明細書における目的で、低インスリン血症およびインスリン抵抗に「治療上有効な」量は、上記因子によって決定されるが、概して、約０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重／日である。好適な用量は、約０．１〜５０ｍｇ／ｋｇ／日、より好ましくは、約０．１〜２５ｍｇ／ｋｇ／日である。なおもさらに好ましくは、ＩＬ−１７アンタゴニストは、毎日投与され、ヒトに対する静脈内または筋肉内用量は、約０．３〜１０ｍｇ／ｋｇ体重／日、より好ましくは、約０．５〜５ｍｇ／ｋｇである。皮下投与の場合、用量は、静脈内または筋肉内投与される治療当量よりも多いことが好ましい。好ましくは、ヒトに対する１日の皮下投与量は、両適応症に対して、約０．３〜２０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは、約０．５〜５ｍｇ／ｋｇである。
【００８９】
本発明は、多様な投与計画を検討する。本発明は、連続的な投与計画を包含し、ＩＬ−１７アンタゴニストは、実質的な中断なしに規則的に（用量および投与形態に応じて、１日１回、１週間に１回、または１ヶ月に１回）投与される。好適な連続投与計画は、ＩＬ−１７アンタゴニストが各日に注入される毎日の持続注入、およびＩＬ−１７アンタゴニストが少なくとも１日１回、ボーラス注入もしくは吸入または鼻腔内経路によって投与される、連続ボーラス投与を含む。本発明は、断続的投与計画も含む。断続的投与計画の正確なパラメータは、製剤、送達方法、および治療される哺乳動物の臨床ニーズに従って異なる。例えば、ＩＬ−１７アンタゴニストが注入によって投与される場合、投与計画は、第１の投与期間に続いて、第２の期間を含み得、第１の期間よりも多いか、等しいか、または少ないＩＬ−１７アンタゴニストが投与されない。
【００９０】
投与がボーラス注入、特に徐放製剤のボーラス注入による場合、投与計画は、連続的であってもよく、ＩＬ−１７アンタゴニストは、各日投与されるか、または上述されるように、断続的であり得、第１および第２の期間を有する。
【００９１】
任意の方法による連続的および断続的投与計画は、例えば、第１の期間の開始時に低用量であるが第１の期間の最後までに増加する、第１の期間中、最初は高用量であるが減少する、最初は低用量であるが、ピークレベルに増加し、次に第１の期間の最後に向かって減少するように、用量が第１の期間を通して調整される、投与計画、およびそれらの任意の組み合わせも含む。
【００９２】
ＩＬ−１７アンタゴニストの投与がインスリン抵抗に及ぼす影響は、該技術分野において知られている多様な検定によって測定され得る。最も一般的に、糖尿病の影響の軽減は、（血糖値の連続試験によって測定されるように）血糖管理の改善、良好な血糖管理を維持するためのインスリン要件の低減、グリコシル化ヘモグロビンの低下、進行性グリコシル化最終生成物（ＡＧＥ）の血中濃度の減少、「曙現象」の低下、ケトアシドーシスの低下、および脂質プロファイルの改善をもたらす。代替的に、ＩＬ−１７アンタゴニストの投与は、血糖値の低下、インスリン要件の低減、グリコシル化ヘモグロビンおよび血中ＡＧＥの低下、血管、腎臓、神経、および網膜合併症の低下、妊娠合併症の低下、および脂質プロファイルの増加によって示されるように、糖尿病の症状の安定化をもたらし得る。
【００９３】
ＩＬ−１７アンタゴニストの血糖降下作用は、投与前および後の対象における静脈血血漿中のグルコースまたはＨｂ（ヘモグロビン）Ａ１ｃ濃度を決定し、次に、得られた濃度を投与前と投与後とで比較することによって評価することができる。ＨｂＡ１ｃは、グリコシル化ヘモグロビンを意味し、血糖濃度に対応して徐々に産生される。したがって、ＨｂＡ１ｃは、糖尿病患者における急速な血糖値の変化に容易に影響されない血糖管理の指数として重要であると考えられる。
【００９４】
低インスリン血症を治療する証拠は、例えば、患者におけるインスリンの血中濃度の増加によって示される。
【００９５】
筋肉修復および再生のための用量は、患者の状態、所望される筋肉修復の特定型等に応じて、通常、約０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは、１〜１０ｍｇ／ｋｇである。投与計画は、この領域の医師によって使用される標準的計画に従う。筋肉修復または再生の証拠は、該技術分野においてよく知られている様々な測定試験によって示され、筋肉細胞の増殖および分化のための検定およびポリメラーゼ連鎖反応試験を含む（例えば、定量的逆転写ポリメラーゼ連鎖反応を使用して、ウサギ骨格筋肉を治癒する際に、筋芽細胞および線維芽細胞に由来する遺伝子産生物のｍＲＮＡ値の変化の分析を提供する、Ｂｅｓｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｔｈｏｐ．Ｒｅｓ．，１９：５６５−５７２（２００１）を参照）。
【００９６】
３．  製造品およびキット
本発明は、インスリン抵抗および低インスリン血症の治療のため、および筋肉の修復および再生のためのキットも提供する。本発明のキットは、ＩＬ−１７アンタゴニスト、好ましくは抗体の１つまたは複数の容器を、インスリン抵抗または低インスリン血症の治療のため、またはインスリン抵抗と関連付けられる任意の他の標的疾患のためのＩＬ−１７アンタゴニストの使用および用量に関する一式の説明書、一般に書面での説明書とともに含む。キットに含まれる説明書は、一般に、インスリン抵抗または低インスリン血症等の標的疾患の治療のための用量、投与計画、および投与経路に関する情報を含む。ＩＬ−１７アンタゴニストの容器は、ユニット用量、バルクパッケージ（例えば、複数投与パッケージ）、またはサブユニット用量であり得る。
【００９７】
製造品は、容器および容器に関するか、または関連付けられるラベルまたはパッケージ挿入物を含む。適切な容器は、例えば、ボトル、バイアル、シリンジ等を含む。容器は、ガラスまたはプラスチック等の多様な物質から形成されてもよい。容器は、状態を治療するために有効な組成物を保持し、滅菌アクセスポートを有し得る（例えば、容器は、皮下注射針によって穿孔可能なストッパーを有する点滴バッグまたはバイアルであってもよい）。組成物中の少なくとも１つの活性剤は、本発明のＩＬ−１７アンタゴニストである。ラベルまたはパッケージ挿入物は、組成物が特定の状態を治療するために使用されることを示す。ラベルまたはパッケージ挿入物は、抗体組成物を患者に投与するための説明書をさらに含む。本明細書に記載される複合治療を含む製造品およびキットも検討される。
【００９８】
パッケージ挿入物は、適応症、用途、用量、投与、禁忌に関する情報、および／またはそのような治療薬品の使用に関する警告を含む、治療薬品の商用パッケージに習慣的に含まれる説明書を指す。
【００９９】
追加として、製造品は、薬学的に許容される緩衝液、例えば、注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝食塩水、リンガー液およびデキストロース液を含む、第２の容器をさらに含んでもよい。他の緩衝液、希釈液、フィルタ、針、およびシリンジを含む、商用およびユーザの見地から望ましい他の物質をさらに含んでもよい。
【０１００】
４．  抗体の調製
モノクローナル抗体
モノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５（１９７５）によって最初に記載されたハイブリドーマ法を使用して形成され得るか、または組み換えＤＮＡ法によって形成されてもよい（米国特許第４，８１６，５６７号）。ハイブリドーマ法において、マウスまたは他の適切な宿主動物、例えば、ハムスターまたはマカクザルは、本明細書において上述されるように免疫付与され、免疫付与に使用されるタンパク質に特異的に結合する抗体を産生するか、または産生することができるリンパ球を溶出する。代替的に、リンパ球は、インビトロで免疫付与され得る。リンパ球は、次に、適切な融合剤、例えば、ポリエチレングリコールを使用して、骨髄腫細胞と融合され、ハイブリドーマ細胞を形成する（Ｇｏｄｉｎｇ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，ｐｐ．５９−１０３（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，１９８６））。
【０１０１】
そのように調製されたハイブリドーマ細胞は、好ましくは、非融合の親骨髄腫細胞の成長または生存を阻害する、１つまたは複数の物質を含有する、適切な培地において播種および成長される。例えば、親骨髄腫細胞が酵素ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲＴまたはＨＰＲＴ）を欠失する場合、ハイブリドーマの培地は、通常、ヒポキサンチン、アミノプテリン、およびチミジン（ＨＡＴ媒体）を含み、これらの物質は、ＨＧＰＲＴ欠損細胞の成長を回避する。
【０１０２】
好適な骨髄腫細胞は、十分に融合し、選択された抗体産生細胞によって抗体の安定した高レベル産生を支持し、ＨＡＴ媒体等の媒体に感受性のあるものである。これらの中で、好適な骨髄腫細胞株は、マウス骨髄種細胞株、例えば、Ｓａｌｋ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｃｅｌｌ  Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  Ｃｅｎｔｅｒ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆ．ＵＳＡから入手可能なＭＯＰＣ−２１およびＭＰＣ−１１マウス腫瘍に由来するもの、およびＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，Ｍｄ．ＵＳＡから入手可能なＳＰ−２またはＸ６３−Ａｇ８−６５３細胞に由来するものである。ヒト骨髄腫およびマウス−ヒトヘテロ骨髄腫細胞株は、ヒトモノクローナル抗体の産生についても説明されている（Ｋｏｚｂｏｒ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３３：３００１（１９８４）、Ｂｒｏｄｅｕｒ  ｅｔ  ａｌ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ．５１−６３（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８７））。
【０１０３】
ハイブリドーマ細胞が成長している培地は、抗原に対して配向されるモノクローナル抗体の産生について検定される。好ましくは、ハイブリドーマ細胞によって産生されるモノクローナル抗体の結合特異性は、免疫沈降またはインビトロ結合検定、例えば放射免疫測定（ＲＩＡ）または酵素結合免疫吸着測定（ＥＬＩＳＡ）によって決定される。
【０１０４】
所望の特異性、親和性、および／または活性の抗体を産生するハイブリドーマ細胞が識別された後、希釈手順を限定することによって、クローンをサブクローン化し、標準的な方法によって成長されてもよい（Ｇｏｄｉｎｇ，ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，ｐｐ．５９−１０３（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，１９８６））。この目的のための適切な培地は、例えば、Ｄ−ＭＥＭまたはＲＰＭＩ−１６４０倍地を含む。さらに、ハイブリドーマ細胞は、動物における腹水腫瘍として、インビボで成長され得る。
【０１０５】
サブクローンによって分泌されるモノクローナル抗体は、従来の免疫グロブリン精製手順、例えば、タンパク質Ａ−セファロース、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィ、ゲル電気泳動、透析、または親和性クロマトグラフィによって、培地、腹水、または血清から適切に分離される。
【０１０６】
モノクローナル抗体をコードするＤＮＡは、従来の手順を使用して、容易に単離および配列決定される（例えば、モノクローナル抗体の重鎖および軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合することができるオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）。ハイブリドーマ細胞は、そのようなＤＮＡの好適な供給源としての役割を果たす。一旦単離されると、ＤＮＡは、発現ベクターに置かれてもよく、次に、そうでなければ免疫グロブリンタンパク質を産生しない、大腸菌細胞、サルＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、または骨髄腫細胞等の宿主細胞にトランスフェクトされて、組み換え宿主細胞中のモノクローナル抗体の合成物を得る。抗体の組み換え産生は、以下でさらに詳細に説明される。
【０１０７】
さらなる実施形態において、抗体または抗体フラグメントは、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３４８：５５２−５５４（１９９０）に記載される技術を使用して生成される抗体ファージライブラリから単離され得る。
【０１０８】
Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４−６２８（１９９１）およびＭａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１−５９７（１９９１）は、それぞれファージライブラリを使用するマウスおよびヒト抗体の単離について説明する。後次の発行物は、鎖シャッフルによるヒト抗体の高親和性（ｎＭ範囲）の産生（Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１０：７７９−７８３（１９９２））、ならびに極めて大きいファージライブラリを構成するための方法としての組み合わせ感染およびインビボ組み換えについて説明している（Ｗａｔｅｒｈｏｕｓｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃ．Ａｃｉｄｓ．Ｒｅｓ．，２１：２２６５−２２６６（１９９３））。したがって、これらの技術は、モノクローナル抗体の単離に対する伝統的なモノクローナル抗体ハイブリドーマ技術の実行可能な代替案である。
【０１０９】
ＤＮＡは、例えば、同種マウス配列の代わりに、ヒト重鎖および軽鎖定常ドメインのコード配列を置き換えることによって（米国特許第４，８１６，５６７号、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１（１９８４））または非免疫グロブリンポリペプチドのコード配列のすべてまたは一部を免疫グロブリンコード配列に共有結合することによって修飾されてもよい。
【０１１０】
通常、そのような非免疫グロブリンポリペプチドは、抗体の定常ドメインと置換されるか、またはそれらは、抗体の１つの抗原結合部位の可変ドメインと置換されて、抗原に対して特異性を有する１つの抗原結合部位および異なる抗原に対して特異性を有する別の抗原結合部位を含むキメラ二価抗体を形成する。
【０１１１】
ヒト化およびヒト抗体
ヒト化抗体は、非ヒトである供給源からそれに導入される、１つまたは複数のアミノ酸残基を有する。これらの非ヒトアミノ酸残基は、典型的に、「インポート」可変ドメインから取られる、「インポート」残基と称される場合が多い。ヒト化は、本質的に、Ｗｉｎｔｅｒおよび共働者の方法に従って（Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３２１：５２２−５２５（１９８６）、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３３２：３２３−３２７（１９８８）、Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２３９：１５３４−１５３６（１９８８））、齧歯動物ＣＤＲまたはＣＤＲ配列をヒト抗体の対応する配列と置換することによって行われる。したがって、そのような「ヒト化」抗体は、キメラ抗体であり（米国特許第４，８１６，５６７号）、実質的に正常ではないヒト可変ドメインは、非ヒト種からの対応する配列によって置換された。実際に、ヒト化抗体は、通常、ヒト抗体であり、いくつかのＣＤＲ残基および恐らくいくつかのＦＲ残基は、齧歯動物抗体における類似体部位からの残基によって置換される。
【０１１２】
ヒト化抗体を形成する際に使用されるヒト可変ドメインの選択は、軽鎖および重鎖のいずれも、抗原性を低下させるために極めて重要である。いわゆる「最適な」方法に従って、齧歯動物抗体の可変ドメインの配列は、知られているヒト可変ドメイン配列の全体ライブラリに対してスクリーニングされる。齧歯動物のそれに最も近いヒト配列は、次に、ヒト化抗体のヒトフレームワーク（ＦＲ）として認められる（Ｓｉｍｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５１：２２９６（１９９３）、Ｃｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９６：９０１（１９８７））。別の方法は、軽鎖または重鎖の特定亜群のすべてのヒト抗体のコンセンサス配列に由来する、特定のフレームワークを使用する。同一のフレームワークを、いくつかの異なるヒト化抗体に使用してもよい（Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ  Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８９：４２８５（１９９２）、Ｐｒｅｓｔａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｎｏｌ．，１５１：２６２３（１９９３））。
【０１１３】
抗原に対する高い親和性の保持および他の好ましい生物特性によって抗体をヒト化することがさらに重要である。この目的を達成するために、好適な方法に従って、ヒト化抗体は、親およびヒト化配列の３次元モデルを使用し、親配列および様々な概念的ヒト化生成物の分析の過程によって調製される。３次元免疫グロブリンモデルは、一般に入手可能であり、当業者によく知られている。選択される候補免疫グロブリン配列の潜在的な３次元立体配座構造を説明および表示する、コンピュータプログラムが入手可能である。この表示の検査は、候補免疫グロブリン配列の機能における残基の推定される役割の分析、すなわち、候補免疫グロブリンがその抗原に結合する能力に影響する残基の分析を許可する。このようにして、ＦＲ残基は、受容体およびインポート配列から選択および結合して、所望の抗体特性、例えば、標的抗原の親和性の増加が達成されるようにすることができる。一般に、ＣＤＲ残基は、抗原結合への影響に直接およびほぼ実質的に関与する。
【０１１４】
代替的に、ここで、免疫化の際に、内因性免疫グロブリン産生の不在下で、ヒト抗体の完全レパートリーを産生することができる、トランスジェニック動物（例えば、マウス）を産生することが可能である。例えば、キメラおよび生殖細胞変異マウスにおける抗体重鎖結合領域（Ｊ．ｓｕｂ．Ｈ）遺伝子のホモ接合体欠失は、内因性抗体産生の完全な阻害をもたらすことが説明されている。そのような生殖細胞変異マウスにおけるヒト生殖細胞遺伝子配列の導入は、抗原投与時にヒト抗体の産生をもたらす。例えば、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ  ｅｔ  ａｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：２５５１（１９９３）、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３６２：２５５−２５８（１９９３）、Ｂｒｕｇｇｅｒｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｙｅａｒ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏ．，７：３３（１９９３）、およびＤｕｃｈｏｓａｌ  ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  ３５５：２５８（１９９２）を参照されたい。ヒト交抗体は、ファージ表示ライブラリにも由来し得る（Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１（１９９１）、Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．ＭｏＬ  Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１−５９７（１９９１）、Ｖａｕｇｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  １４：３０９（１９９６））。抗体ファージ表示ライブラリからのヒト抗体の生成は、以下でさらに説明される。
【０１１５】
抗体フラグメント
抗体フラグメントの産生に対して、様々な技術が開発されている。伝統的に、これらのフラグメントは、正常な抗体のタンパク質分解消化を介して生成された（例えば、Ｍｏｒｉｍｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２４：１０７−１１７（１９９２）およびＢｒｅｎｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２２９：８１（１９８５）を参照）。しかしながら、これらのフラグメントは、現在、組み換え宿主細胞によって直接産生され得る。例えば、抗体フラグメントは、上述される抗体ファージライブラリから単離され得る。代替的に、Ｆａｂ′−ＳＨフラグメントは、大腸菌から直接回復され、化学的に結合されてＦ（ａｂ′）２フラグメントを形成することができる（Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：１６３−１６７（１９９２））。以下の実施例に記載される別の実施形態において、Ｆ（ａｂ′）２は、ロイシンジッパーＧＣＮ４を使用して形成され、Ｆ（ａｂ′）２分子の集合を促進する。別のアプローチに従って、Ｆ（ａｂ′）２フラグメントは、組み換え宿主細胞培養から直接単離され得る。抗体フラグメントの産生のための他の技術は、熟練した実践者に明らかとなるであろう。他の実施形態において、選択された抗体は、単鎖Ｆｖフラグメント（ｓｃＦｖ）である。国際特許第ＷＯ９３／１６１８５号を参照されたい。
【０１１６】
多特異的抗体
多特異的抗体は、少なくとも２つの異なるエピトープに対して結合特異性を有し、エピトープは、通常、異なる抗原に由来する。そのような分子は、通常、２つの異なるエピトープ（すなわち、二重特異性抗体、ＢｓＡｂ）を結合するに過ぎないが、追加の特異性を有する抗体、例えば、三重特異性抗体は、本明細書において使用される場合、この表現に包含される。二重特異性抗体を形成するための方法は、当業者に知られている。完全長二重特異性抗体の伝統的産生は、２つの免疫グロブリン重鎖−軽鎖対の共発現に基づき、２つの鎖は、異なる特異性を有する（Ｍｉｌｌｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３０５：５３７−５３９（１９８３））。免疫グロブリン重鎖および軽鎖のランダム分類に起因して、これらのハイブリドーマ（クアドローマ）は、１０個の異なる抗体分子の潜在的な混合物を産生し、それらのうちの１つのみが適切な二重特異性構造を有する。通常、親和性クロマトグラフィステップによって行われる適切な分子の精製は、むしろ面倒であり、生産収率は低い。同様の手順は、国際特許第ＷＯ９３／０８８２９号、およびＴｒａｕｎｅｃｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．，１０：３６５５−３６５９（１９９１）に開示される。異なるアプローチに従って、所望の結合特異性を有する抗体可変ドメイン（抗体−抗原結合部位）は、免疫グロブリン定常ドメイン配列に融合される。融合は、好ましくは、ヒンジ、ＣＨ２、およびＣＨ３領域の少なくとも一部を含む、免疫グロブリン重鎖定常ドメインを用いる。融合の少なくとも１つに存在する、軽鎖結合に必要な部位を含む、第１の重鎖定常領域（ＣＨ１）を有することが好ましい。免疫グロブリン重鎖融合、および必要に応じて免疫グロブリン軽鎖をコードするＤＮＡは、個別の発現ベクターに挿入され、適切な宿主有機体に共トランスフェクトされる。これは、実施形態において、組成物中で使用される３つのポリペプチド鎖の不均等率が最適な収率を提供する場合に、３つのポリペプチドフラグメントの相互比率を調整する際に優れた柔軟性を提供する。しかしながら、少なくとも２つのポリペプチド鎖の等比の発現が高い収率をもたらす場合、または比率が特に重要でない場合、１つの発現ベクターに２つまたは３つのポリペプチド鎖すべてのコード配列を挿入することが可能である。
【０１１７】
本アプローチの好適な実施形態において、二重特異性抗体は、一方のアームに第１の結合特異性を有するハイブリッド免疫グロブリン重鎖、および他方のアームにハイブリッド免疫グロブリン重鎖−軽鎖対（第２の結合特異性を提供する）で構成される。二重特異性分子の半分のみにおける免疫グロブリン軽鎖の存在が、容易な分離方法を提供するため、この非対称構造は、望ましくない免疫グロブリン鎖の結合からの所望の二重特異性化合物の分離を促進することが分かった。このアプローチは、国際特許第ＷＯ９４／０４６９０号に開示される。二重特異性抗体の生成に関するさらなる詳細は、例えば、Ｓｕｒｅｓｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，１２１：２１０（１９８６）を参照されたい。
【０１１８】
国際特許第ＷＯ９６／２７０１１号に記載される別のアプローチに従って、抗体分子対の間のインターフェースを操作して、組み換え細胞培養から回復される、ヘテロ二量体のパーセンテージを最大化することができる。好適なインターフェースは、抗体定常ドメインのＣＨ３ドメインの少なくとも一部を含む。この方法において、第１の抗体分子のインターフェースからの１つまたは複数の小アミノ酸側鎖は、より大きい側鎖（例えば、チロシンまたはトリプトファン）と置換される。大側鎖と同一または類似する大きさの相補「空洞」は、大アミノ酸側鎖を小さいもの（例えば、アラニンまたはトレオニン）と置換することによって、第２の抗体分子のインターフェース上で形成される。これは、ホモ二量体等の他の望ましくない最終生成物に関してヘテロ二量体の収率を増加させるための機序を提供する。
【０１１９】
二重特異性抗体は、架橋または「ヘテロ共役」抗体を含む。例えば、ヘテロ共役における抗体の１つはアビジンに結合され、もう１つはビオチンに結合され得る。そのような抗体は、例えば、望ましくない細胞に対する標的免疫系細胞（米国特許第４，６７６，９８０号）、およびＨＩＶ感染の治療（国際特許第ＷＯ９１／００３６０号、第ＷＯ９２／２００３７３号）に対して提案されている。ヘテロ共役抗体は、任意の便利な架橋方法を使用して形成されてもよい。適切な架橋剤は、当業者によく知られており、多数の架橋技術とともに、米国特許第４，６７６，９８０号に開示される。
【０１２０】
二重特異性抗体を抗体フラグメントから生成する技術も文献に記載されている。例えば、二重特異性抗体は、化学結合を使用して調製することができる。Ｂｒｅｎｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２９：８１（１９８５）は、正常な抗体がタンパク質分解により開裂されて、Ｆ（ａｂ′）２を生成する手順を説明している。これらのフラグメントは、ジチオール錯化剤亜ヒ酸ナトリウムの存在下で還元され、隣接ジチオールを安定化し、分子間ジスルフィド形成を回避する。生成されるＦａｂ′フラグメントは、次に、チオニトロベンゾエート（ＴＮＢ）誘導体に変換される。Ｆａｂ′−ＴＮＢ誘導体の１つは、次に、メルカプトエチルアミンで還元することによってＦａｂ′−チオールに再変換され、等モル量の他のＦａｂ′−ＴＮＢ誘導体と混合されて、二重特異性抗体を形成する。産生される二重特異性抗体は、酵素の選択的固定のための薬剤として使用され得る。
【０１２１】
Ｆａｂ′−ＳＨフラグメントは、大腸菌から直接回復することもでき、化学的に結合されて、二重特異性抗体を形成し得る。Ｓｈａｌａｂｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１７５：２１７−２２５（１９９２）は、完全にヒト化した二重特異性抗体Ｆ（ａｂ′）２分子の産生を説明している。各Ｆａｂ′フラグメントは、大腸菌から個別に分泌され、二重特異性抗体を形成するように、インビトロで化学結合を方向づけるように供される。
【０１２２】
二重特異性抗体フラグメントを組み換え細胞培養から直接形成および単離するための様々な技術も説明されている。例えば、二重特異性抗体は、ロイシンジッパーを使用して産生されている（Ｋｏｓｔｅｌｎｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４８（５）：１５４７−１５５３（１９９２））。ＦｏｓおよびＪｕｎタンパク質からのロイシンジッパーペプチドは、遺伝子融合によって、２つの異なる抗体のＦａｂ′部分に結合された。抗体ホモ二量体は、ヒンジ領域において還元されて単量体を形成し、次に、再酸化されて抗体ヘテロ二量体を形成する。この方法は、抗体ホモ二量体の産生に利用することもできる。Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｉ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：６４４４−６４４８（１９９３）によって説明される「二重特異性抗体」技術は、二重特異性抗体フラグメントを形成するための代替機序を提供した。フラグメントは、短すぎて同一鎖上の２つのドメイン間を対にできないリンカーによって、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に結合される、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む。したがって、１つのフラグメントのＶＨおよびＶＬドメインは、別のフラグメントの相補ＶＬおよびＶＨドメインと強制的に対になり、それによって、２つの抗原結合部位を形成する。単鎖Ｆｖ（ｓＦｖ）二量体の使用によって、二重特異性抗体フラグメントを形成するための別の戦略も報告されている。Ｇｒｕｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ，１５２：５３６８（１９９４）を参照されたい。
【０１２３】
２つより多い原子価を有する抗体が検討される。例えば、三重特異性抗体を調製することができる（Ｔｕｆｔ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０（１９９１））。
【０１２４】
エフェクタ機能工学
抗体の有効性を強化するように、エフェクタ機能に関して本発明の抗体を修飾することが望ましい場合がある。例えば、１つまたは複数のシステイン残基は、Ｆｃ領域に導入されてもよく、それによって、この領域における鎖間ジスルフィド結合形成を可能にする。したがって、生成されるホモ二量体は、内在化能力を向上させ、および／または相補媒介性細胞殺傷および抗体依存性細胞性細胞毒性（ＡＤＣＣ）を高める場合がある。Ｃａｒｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ  Ｍｅｄ．１７６：１１９１−１１９５（１９９２）およびＳｈｏｐｅｓ，Ｂ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８：２９１８−２９２２（１９９２）を参照されたい。強化された抗腫瘍活性を有するホモ二量抗体は、Ｗｏｌｆｆ  ｅｔ  ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ５３：２５６０−２５６５（１９９３）に記載されるように、ヘテロ二官能性架橋剤を使用して調製されてもよい。代替的に、二重Ｆｃ領域を有する抗体を操作することができ、それによって、相補溶解およびＡＤＣＣ能力を強化し得る。Ｓｔｅｖｅｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ  Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  ３：２１９−２３０（１９８９）を参照されたい。
【０１２５】
抗体−温存受容体結合エピトープ融合
本発明の特定の実施形態において、正常な抗体よりも、抗体フラグメントを使用することが望ましい場合がある。この場合、その血清半減期を増加させるために、抗体フラグメントを修飾することが望ましい場合がある。これは、例えば、温存受容体結合エピトープを抗体フラグメントに組み込むことによって達成されてもよい（例えば、抗体フラグメントにおける適切な領域の変異またはエピトープを、次に末端または中間のいずれかにおいて、抗体フラグメントに融合されるペプチドタグに組み込むことによって、例えば、ＤＮＡまたはペプチド合成によって）。
【０１２６】
温存受容体結合エピトープは、好ましくは、Ｆｃドメインの１つまたは複数のループからの１つまたは複数のアミノ酸残基が、抗体フラグメントの類似部分に転移される領域を構成する。さらにより好ましくは、Ｆｃドメインの１つまたは２つのループからの３つ以上の残基が転移される。さらにより好ましくは、エピトープは、Ｆｃ領域（例えば、ＩｇＧ）のＣＨ２ドメインから取られ、抗体のＣＨ１、ＣＨ３、もしくはＶ．ｓｕｂ．Ｈ領域、または複数のそのような領域に転移される。代替的に、エピトープは、Ｆｃ領域のＣＨ２ドメインから取られ、抗体フラグメントのＣＬ領域もしくはＶＬ領域、または両方に転移される。
【０１２７】
他の抗体の共有結合修飾
抗体の共有結合修飾は、本発明の範囲内に含まれる。それらは、化学合成によって、または該当する場合は、抗体の酵素または化学開裂によって形成され得る。抗体の他の種の共有結合修飾は、抗体の標的アミノ酸残基を、選択された側鎖またはＮもしくはＣ末端残基と反応することができる、有機誘導体化剤と反応させることによって、分子に導入される。共有結合修飾の例は、米国特許第５，５３４，６１５号に記載され、特に、参照することにより本明細書に組み込まれる。好適な種の抗体の共有結合修飾は、第４，６４０，８３５号、第４，４９６，６８９号、第４，３０１，１４４号、第４，６７０，４１７号、第４，７９１，１９２号、または第４，１７９，３３７号に記載される方法で、抗体を多様な非タンパク質性ポリマー、例えば、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、またはポリオキシアルキレンのうちの１つに結合することを含む。
【０１２８】
合成抗体ファージライブラリからの抗体の生成
好適な実施形態において、本発明は、固有のファージ表示アプローチを使用して、新規の抗体を生成および選択するための方法を提供する。アプローチは、単一のフレームワークテンプレート、可変ドメイン内の十分な多様性の設計、多様な可変ドメインを有するポリペプチドの表示、抗原を標的とするために高い親和性を有する候補抗体の選択、および選択された抗体の単離に基づく、合成抗体ファージライブラリの生成を伴う。
【０１２９】
ファージディスプレイ方法の詳細は、例えば、２００３年１２月１１日に公開された第ＷＯ０３／１０２１５７号において見出され、その開示全体は、参照することにより本明細書に明示的に組み込まれる。
【０１３０】
一態様において、本発明で使用される抗体ライブラリは、抗体可変ドメインの少なくとも１つのＣＤＲにおいて、溶媒接触可能および／または多様性に富む位置を変異させることによって生成され得る。ＣＤＲの一部またはすべてを、本明細書に提供される方法を使用して変異させることができる。いくつかの実施形態において、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、およびＣＤＲＨ３における位置を変異させて単一ライブラリを形成するか、もしくはＣＤＲＬ３およびＣＤＲＨ３における位置を変異させて単一ライブラリを形成するか、またはＣＤＲＬ３ならびにＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２およびＣＤＲＨ３における位置を変異させて単一ライブラリを形成することによって、多様な抗体ライブラリを生成することが好ましい場合がある。
【０１３１】
抗体可変ドメインのライブラリは、例えば、溶媒接触可能および／または多様性に富むＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、およびＣＤＲＨ３の位置に変異を有して生成され得る。別のライブラリは、ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、およびＣＤＲＬ３において変異を有して生成され得る。これらのライブラリは、所望の親和性の結合体を生成するように、相互に併用することもできる。例えば、標的抗原に結合するための重鎖ライブラリの選択を１回または複数回行った後、軽鎖ライブラリは、さらなる選択のために重鎖結合体の集団に置換されて、結合体の親和性を高め得る。
【０１３２】
好ましくは、ライブラリは、元のアミノ酸を重鎖配列の可変領域のＣＤＲＨ３領域における可変アミノ酸と置換することによって形成される。得られるライブラリは、多数の抗体配列を含むことができ、配列多様性は、主に、重鎖配列のＣＤＲＨ３領域にある。
【０１３３】
一態様において、ライブラリは、ヒト化抗体４Ｄ５配列、またはヒト化抗体４Ｄ５配列のフレームワークアミノ酸の配列の文脈において形成される。好ましくは、ライブラリは、重鎖の少なくとも残基９５〜１００ａを、ＤＶＫコドンセットによりコードされたアミノ酸と置換することによって形成され、ＤＶＫコドンセットは、これらの位置のすべてに対する一式の可変アミノ酸をコードするように使用される。これらの置換を形成するために有用なオリゴヌクレオチドの実施例は、配列（ＤＶＫ）７を含む。いくつかの実施形態において、ライブラリは、残基９５〜１００ａを、ＤＶＫおよびＮＮＫコドンセットの両方によってコードされるアミノ酸と置換することによって形成される。これらの置換を形成するために有用なオリゴヌクレオチドセットの例は、配列（ＤＶＫ）６（ＮＮＫ）を含む。別の実施形態において、ライブラリは、少なくとも残基９５〜１００ａを、ＤＶＫおよびＮＮＫコドンセットの両方によってコードされるアミノ酸と置換することによって形成される。これらの置換に有用なオリゴヌクレオチドセットの例は、配列（ＤＶＫ）５（ＮＮＫ）を含む。これらの置換に有用なオリゴヌクレオチドセットの別の例は、配列（ＮＮＫ）６を含む。適切なオリゴヌクレオチド配列の他の例は、本明細書に記載される基準に従って、当業者によって決定され得る。
【０１３４】
別の実施形態において、高親和性結合体を単離し、多様なエピトープの結合体を単離するように、異なるＣＤＲＨ３設計が利用される。このライブラリで生成されるＣＤＲＨ３の長さの範囲には、１１〜１３アミノ酸であるが、これとは異なる長さも生成され得る。Ｈ３多様性は、ＮＮＫ、ＤＶＫ、およびＮＶＫコドンセットを使用することによって拡張され得ると同時に、Ｎおよび／またはＣ末端において多様性はさらに限定される。
【０１３５】
多様性は、ＣＤＲＨ１およびＣＤＲＨ２においても生成され得る。ＣＤＲ−Ｈ１およびＨ２多様性の設計は、以前の設計よりも自然多様性により密接に適合された多様性に焦点を当てた修飾に関して記載されるように、模倣天然抗体レパートリーに対する標的方法に従う。
【０１３６】
ＣＤＲＨ３の多様性の場合、異なる長さのＨ３を用いて、複数のライブラリが個別に構成され、次に、結合されて、抗原を標的とするために結合体に対して選択され得る。複数のライブラリは、前述および本明細書において以下に記載されるように、固相担体選択および溶液分類方法を使用してプールおよび分類され得る。複数の分類方法を用いてもよい。例えば、１つの変異は、個体に結合される標的に関する分類、次に、融合ポリペプチド（例えば、抗ｇＤタグ）上に存在し得るタグの分類、および次に固体に結合される標的に関する別の分類を伴う。代替的に、ライブラリは、固体表面に結合される標的に関して最初に分類され得、次に、溶出した結合体は、標的抗原の漸減濃度を有する液相結合を使用して分類される。異なる分類方法の組み合わせを利用すると、高度に発現した配列の選択の最小化を提供し、多数の異なる高親和性クローンの選択を提供する。
【０１３７】
標的抗原の高親和性結合体は、ライブラリから単離され得る。Ｈ１／Ｈ２領域の多様性を限定することは、縮退を約１０４〜１０５倍減少させ、さらなるＨ３多様性を可能にし、より高い親和性結合体を提供する。ＣＤＲＨ３において異なる種の多様性を有するライブラリを利用すること（例えば、ＤＶＫまたはＮＶＴを利用すること）は、標的抗原の異なるエピトープに結合し得る結合体の単離を提供する。
【０１３８】
上述されるように、プールされたライブラリから単離された結合体の親和性は、軽鎖において制限された多様性を提供することによってさらに向上し得ることが発見された。軽鎖の多様性は、本実施形態において、以下のように生成される。ＣＤＲＬ１において、アミノ酸２８位がＲＤＴによってコードされる。アミノ酸２９位がＲＫＴによってコードされる。アミノ酸３０位が、ＲＶＷによってコードされる。アミノ酸３１位がＡＮＷによってコードされる。アミノ酸３２位がＴＨＴによってコードされる。任意で、アミノ酸３３位がＣＴＧによってコードされる。ＣＤＲＬ２において、アミノ酸５０位が、ＫＢＧによってコードされる。アミノ酸５３位が、ＡＶＣによってコードされる。および任意で、アミノ酸５５位が、ＧＭＡによってコードされる。ＣＤＲＬ３において、アミノ酸９１位が、ＴＭＴもしくはＳＲＴまたは両方によってコードされる。アミノ酸９２位が、ＤＭＣによってコードされる。アミノ酸９３位が、ＲＶＴによってコードされる。アミノ酸９４位が、ＮＨＴによってコードされる。およびアミノ酸９６位が、ＴＷＴもしくはＹＫＧまたは両方によってコードされる。
【０１３９】
別の実施形態において、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、およびＣＤＲＨ３領域において多様性を有する１つまたは複数のライブラリが生成される。この実施形態において、ＣＤＲＨ３の多様性は、多様なＨ３領域の長さを使用し、主にコドンセットＸＹＺおよびＮＮＫまたはＮＮＳを使用して生成される。ライブラリは、個別のオリゴヌクレオチドを使用して形成およびプールされ得るか、またはオリゴヌクレオチドは、プールされてライブラリのサブセットを形成し得る。本実施形態のライブラリは、固体に結合される標的に対して分類され得る。複数の分類から単離されるクローンは、ＥＬＩＳＡ検定を使用して、特異性および親和性をスクリーニングすることができる。特異性に関して、クローンは、所望の標的抗原ならびに非標的抗原に対してスクリーニングされ得る。標的抗原に対するそれらの結合体は、次に、溶液結合競合ＥＬＩＳＡ検定またはスポット競合検定において、親和性をスクリーニングすることができる。高親和性結合体は、上述されるように調製される、ＸＹＺコドンセットを利用して、ライブラリから単離され得る。これらの結合体は、細胞培養において、抗体または抗原結合フラグメントとして、高い収率で容易に産生され得る。
【０１４０】
いくつかの実施形態において、ＣＤＲＨ３領域の長さにおいて優れた多様性を有するライブラリを生成することが望ましい場合がある。例えば、約７〜１９アミノ酸の範囲のＣＤＲＨ３領域を有するライブラリを生成することが望ましい場合がある。
【０１４１】
これらの実施形態のライブラリから単離された高親和性結合体は、細菌および真核細胞培養において、高い収率で容易に産生される。ベクターは、ｇＤタグ、ウイルス外被タンパク質成分配列等の配列を容易に除去し、および／または定常領域配列に追加して、高い収率の完全長の抗体または抗原結合フラグメントの産生を提供するように設計され得る。
【０１４２】
ＣＤＲＨ３において変異を有するライブラリは、他のＣＤＲの変異型、例えば、ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、ＣＤＲＬ３、ＣＤＲＨ１および／またはＣＤＲＨ２を含むライブラリと結合され得る。したがって、例えば、一実施形態において、ＣＤＲＨ３ライブラリは、既定のコドンセットを使用して、２８、２９、３０、３１、および／または３２位において、可変アミノ酸を有するヒト化４Ｄ５抗体配列の文脈において形成される、ＣＤＲＬ３ライブラリと結合される。別の実施形態において、ＣＤＲＨ３に対する変異を有するライブラリは、可変ＣＤＲＨ１および／またはＣＤＲＨ２重鎖可変ドメインを含むライブラリと結合され得る。一実施形態において、ＣＤＲＨ１ライブラリは、２８、３０、３１、３２および３３位において、可変アミノ酸を有するヒト化抗体４Ｄ５配列を用いて形成される。ＣＤＲＨ２ライブラリは、既定のコドンセットを使用して、５０、５２、５３、５４、５６および５８位において、可変アミノ酸を有するヒト化抗体４Ｄ５の配列を用いて形成され得る。
【０１４３】
前述の記載は、当業者が本発明を実践するために十分であると考えられる。以下の実施襟は、単なる例証目的で提供され、いかなる方法においても本発明の範囲を制限することを意図しない。実際に、本発明の様々な修正は、本明細書に示され、記載されるものに加えて、前述の記載から当業者に明らかとなり、添付の請求項の範囲内に含まれる。
【０１４４】
実施例において参照され市販の試薬は、他に指定のない限り、製造者の指示に従って使用した。以下の実施齢において、明細書全体を通して、ＡＴＣＣ受入番号によって識別されるそれらの細胞の供給源は、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡである。他に指定のない限り、本発明は、組み換えＤＮＡ技術の標準手順、例えば、本明細書において上述されるもの、および以下のテキストに記載されるものを使用する。Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，上記、Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｇｒｅｅｎ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎ．Ｙ．，１９８９）、Ｉｎｎｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＣＲ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ：Ａ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．Ｎ．Ｙ．，１９９０）、Ｈａｒｌｏｗ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｒｅｓｓ：Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，１９８８）、Ｇａｉｔ，Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ：Ｏｘｆｏｒｄ，１９８４）、Ｆｒｅｓｈｎｅｙ，Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ，１９８７、Ｃｏｌｉｇａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１９９１を使用する。
【０１４５】
本発明のさらなる詳細は、以下の非限定的な実施例において提供される。
【０１４６】
開示全体で引用されるすべての参照文献は、それら全体を参照することにより本明細書に明示的に組み込まれる。
【０１４７】
実施例１
糖尿病およびインスリン抵抗におけるＩＬ−１７ファミリーメンバーの役割
ＩＬ−１７Ｒｃ  ＫＯマウスおよび高脂質食モデルの研究
８週齢の雄ＩＬ−１７Ｒｃ（ＵＮＱ６１１８．ＫＯ．ｌｅｘ）ノックアウトおよび同腹子野生型（ＷＴ）対照マウスに、普通のキャベツ食または６０％高脂質食（ＨＦＤ）のいずれかを与えた。
【０１４８】
１群：高脂質食のＩＬ−１７Ｒｃノックアウト（ＫＯ）マウス（５匹）
２群：高脂質食のＩＬ−１７Ｒｃ、ＷＴ同腹子対照（５匹）
３群：普通食のＩＬ−１７Ｒｃ  ＫＯマウス（３匹）
４群：普通食のＩＬ−１７Ｒｃ  ＷＴ同腹子対照（３匹）
【０１４９】
実験計画は、図７に示される。
【０１５０】
マウスは、グルコース負荷試験（ＧＴＴ）に供され、それらのインスリン抵抗状態に到達した。
【０１５１】
ＧＴＴは、以下の方法を使用して行った。
【０１５２】
血糖値およびインスリン測定：血液試料は、伏在静脈出血によって採取し、グルコメータを使用して、即時に糖濃度を分析した（Ｌｉｆｅｓｃａｎ，ＵＳＡ製ＯｎｅＴｏｕｃｈ  Ｇｌｕｃｏｍｅｔｅｒ）。血清インスリンは、ＥＬＩＳＡ方法を使用して測定した。
【０１５３】
グルコース負荷試験（ＧＴＴ）：一晩の絶食（１４時間）後の朝、午前９：００に動物を試験した。血糖値は、各動物の１．５ｍｇ／体重ｇでグルコースを腹腔内注射する前、ならびにグルコース投与後３０、６０、１２０および１５０分後に、伏在静脈出血から得られた試料上で測定した。値は、グルコースのｍｇ／ｄＬとして計算した。
【０１５４】
ＧＴＴは、ベースライン（高脂質食を与えられる前）、ならびに高脂質食後８週、１０週、１２週、および１４週の群に対して行った。普通のキャベツ食を与えられたマウスは、対照群として使用した。残りの条件は、ノックアウトおよび野生型（ＷＴ）同腹子対照マウスにおいて同様とした。
【０１５５】
動物のＧＴＴ総体重に加えて、空腹時血清インスリンおよびグルコース値を毎週監視した。
【０１５６】
結果は、図８〜１１に示される。
【０１５７】
ＩＬ−１７Ｒｃ  ＷＴ同腹子対照マウスは、有意な体重増を示し、かつ、インスリン抵抗発現型を発現させたが、ＩＬ−１７Ｒｃノックアウトマウスは、それらのＷＴ同腹子対照よりも有意に細く、はるかに良好にグルコースをクリアした。高脂質食を１２週間よりも長く与えた後であっても、ノックアウトマウスは、体重が増加しなかった。両群は、同様の空腹時循環インスリン値を示した。対照食を与えた群において、ＫＯマウスとＷＴマウスとの間に有意差は認められなかった。
【０１５８】
ＩＬ−１７Ｒｃ  ＫＯマウスを使用する上述の実験に加えて、２つの個別の研究を行い、糖尿病およびインスリン抵抗における炎症促進性サイトカインＩｌ−１７ＡおよびＩＬ−１７Ｆの役割を検討した。
【０１５９】
実施例２
抗ＩＬ−１７および抗ＩＬ−１７Ｆ  ｍＡｂがインスリン抵抗高脂質食モデルマウスに及ぼす影響
本研究の目的は、予防的および確立されたインスリン抵抗モデルにおける抗ＩＬ−１７および抗ＩＬ−１７Ｆ  ｍＡｂの有用性を調査すること、およびｍｕＴＮＦＲＩＩ−Ｆｃの治療効果と比較することである。
【０１６０】
実験計画および群：
１群：１００μＬ生理食塩水中６ｍｇ／ｋｇのブタクサ、腹腔内に３回／週を１０週間（ｎ＝１０）。
２群：１００μＬ生理食塩水中４ｍｇ／ｋｇのＭｕＴＮＦＲＩＩ−ＩｇＧ２ａ、３回／週を１０週間（ｎ＝１０）。
３群：１００μＬ生理食塩水中６ｍｇ／ｋｇのＭｕＡｎｔｉ−ＩＬ−１７、腹腔内に３回／週を１０週間（ｎ＝１０）。
４群：１００μＬ生理食塩水中６ｍｇ／ｋｇのＭｕＡｎｔｉ−ＩＬ−１７＋ＭｕＡｎｔｉ−ＩＬ−１７Ｆ  ｍＡｂ、腹腔内に３回／週を１０週間（ｎ＝１０）。
５群：１８週および２４週において、ＭｕＴＮＦＲＩＩ−Ｆｃ  ４ｍｇ／ｋｇ＝６ｍｇ／ｋｇのＭｕＡｎｔｉ−ＩＬ−１７６＋６ｍｇ／ｋｇのＭｕＡｎｔｉ−ＩＬ１７ＦｍＡｂ（１０匹）。
【０１６１】
すべての群に、高脂質食を与えた。マウスのインスリン抵抗状態を評価するために、ＨＦＤおよび抗体投与から２週間後毎に、グルコース負荷試験（ＧＴＴ）を行った。
【０１６２】
プロトコルは、図１２に例証される。抗ＩＬ−１７Ａおよび抗ＩＬ−１７Ｆ  ＭＡｂが投与の９週間後の糖耐能に及ぼす影響は、図１３に示される。
【０１６３】
実施例３
ＩＬ−１７の過剰発現がＧＴＴにより評価されるインスリン抵抗状態に及ぼす影響
研究は、正常および高脂質食を与えられたマウスにおける天然マウスＩＬ−１７ＡおよびＩＬ−１７Ｆタンパク質の発現のためのプラスミドＤＮＡの流体力学的尾静脈（ＨＴＶ）注射に基づいて、インスリン抵抗におけるその役割を研究するために、マウスにおいて高レベルの炎症促進性サイトカインマウスＩＬ−１７ＡおよびＩＬ−１７Ｆを発現させた。
【０１６４】
１群：プラスミドなし
２群：ｐＲＫベクター単独
３群：ｐＲＫ−ＩＬ−１７Ａ
４群：ｐＲＫ−ＩＬ−１７Ｆ
【０１６５】
各群内で、様々な時点（ＤＮＡ摂取後０時間、２時間、６時間、２４時間、および７２時間）に５つのマウス亜群に注射して血液を採取し、血清中の循環サイトカイン値を測定した。一旦これが確立されると、ＩＬ−１７ＡおよびＩＬ−１７Ｆは、高脂質食（ＨＦＤ）マウスにおいて過剰発現し、インスリン抵抗状態の変化に到達した。
【０１６６】
尾静脈注射実験：
１）ＤＮＡ構成（ｐＲＫベクターまたはｐＲＫ−ＩＬ−１７ＡおよびｐＲＫ−ＩＬ−１７Ｆ）を生理食塩水中で（リンガー液が好ましい）、５０μｇ／マウス／注射の最終用量をもたらす濃度に希釈した。
２）各マウスの尾静脈に、生理食塩水またはリンガー液中にＤＮＡを含有する約１．６ｍｌの溶液を経静脈的に注射した。
３）用量は、ボーラス静脈内注射（尾静脈）として、最大ＤＮＡ摂取のために４〜５秒（最大８秒）をかけて投与した。
【０１６７】
結果は、図１４に示される。Ａ）８週齢のｃ５７ＢＬ／６マウスに、５０μｇのプラスミドＤＮＡ（ｐＲＫ−ＩＬ−１７Ａ）またはｐＲＫベクターを単独で注射した。４８時間後、血清を両群から採取し、血清中のＩｌ−１７値をＥＬＩＳＡによって測定した。Ｂ）３つのマウス群を一晩絶食させ、腹腔内ＧＴＴに供し、グルコース注射後の時間とともに結果をプロットする（＊ｐ＞０．０５）。
【０１６８】
本発明は、特定の実施形態であると考えられるものを参照して説明されたが、本発明は、そのような実施形態に限定されないことを理解されたい。反対に、本発明は、付属の請求項の精神および範囲内に含まれる、様々な修飾および相当物を網羅することが意図される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９Ａ】
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【図９Ｂ】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【配列表】
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