(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式で表わされる化合物およびその塩の抗微生物性物質としての使用（人を手術または治療するための使用を除く。）であって、
【化１】
0005683268.tif 000027
式中、Ｒ３は水素またはＲ１であり、
Ｒは水素であり、
ｍは１から１０８であり、
Ｒ１は、独立して、以下のものからなる群より選択され：
−ＣＯ２Ｒ２、−ＳＯ３Ｒ２；
Ｒ２は、水素またはＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され；
ｘは１および０の間の数であり、且つ、ｍは重合度を示し、
ただし、前記化合物がポリアニリンでない、
使用。
【請求項２】
前記化合物が、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、ピリジン、２，６−ジメチルピリジン、２，４，６−トリメチルピリジン、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（無水）、テトラヒドロフラン、およびジメチルホルムアミドからなる群より選択される溶媒に、少なくとも０．０５ｍｇ／ｍＬの溶解度を有している、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記化合物が、アニリンを式（Ｉ）の化合物およびその塩と反応させることによって形成され：
【化２】
0005683268.tif 000028
式中、Ｒは水素であり、
ｎ＝１であり、
Ｒ１は、独立して、以下のものからなる群より選択され：
−ＣＯ２Ｒ２、−ＳＯ３Ｒ２；
Ｒ２は、水素またはＣ１〜Ｃ６アルキルから選択される、
請求項１または請求項２に記載の使用。
【請求項４】
前記化合物が、３−アミノ安息香酸のホモポリマー、または３−アミノベンゼンスルホン酸のホモポリマーである、請求項１に記載の使用。
【請求項５】
前記式（Ｉ）の化合物が、３−アミノ安息香酸、２−アミノ安息香酸、３−アミノ安息香酸エチルおよびスルファニル酸からなる群より選択される、請求項３に記載の使用。
【請求項６】
前記抗微生物性物質が、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ、Ｓｈｉｇｅｌｌａ、Ｅｒｗｉｎｉａ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ、Ｖｉｂｒｉｏ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ、Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｌｉｓｔｅｒｉａ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ、Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ、Ｓｅｒｐｕｌｉｎａ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ、Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ、Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｄｅｒｍａｔｏｐｈｉｌｕｓ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ、およびＥｒｙｓｉｐｅｌｏｔｈｒｉｘからなる群より選択される細菌に対して有効である、または、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ、Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｓ、Ｃａｎｄｉｄａ、Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｅｐｉｄｅｒｍｏｐｈｙｔｏｎ、Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ、Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍ、Ｍｕｃｏｒ、Ｒｈｉｚｏｐｕｓ、Ｓｐｏｒｏｔｈｒｉｘ、Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ、Ｐａｒａｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ、Ａｂｓｉｄｉａ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ、Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉｓ、Ｔｒｉｃｈｏｓｐｏｒｏｎ、Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ、Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ、Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ、Ｆｏｎｓｅｃｅａ、およびＰｈｉａｌｏｐｈｏｒａからなる群より選択される真菌の属に対して有効である、または、Ｐａｒｖｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｉｄａｅ、Ｐｏｌｙｏｍａｖｉｒｉｄａｅ、Ａｄｅｎｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｈｅｐａｄｎａｖｉｒｉｄａｅ、Ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｉｄａｅ、Ｐｏｘｖｉｒｉｄａｅ、Ｐｉｃｏｒｎａｖｉｒｉｄａｅ、Ｃａｌｉｃｉｖｉｒｉｄａｅ、Ｒｅｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｔｏｇａｖｉｒｉｄａｅ、Ｆｌａｖｉｖｉｒｉｄａｅ、Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｉｄａｅ、Ｏｒｔｈｏｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｐａｒａｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｒｈａｂｄｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｆｉｌｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｂｕｎｙａｖｉｒｉｄａｅ、Ａｒｅｎａｖｉｒｉｄａｅ、およびＲｅｔｒｏｖｉｒｉｄａｅからなる群より選択される系統に属するＤＮＡおよびＲＮＡウイルスに対して有効である、請求項１乃至請求項５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項７】
前記抗微生物性物質が、健康産業、食品産業、包装産業、水関連産業、繊維産業、プラスチック産業、ガラス産業、紙産業、ゴム産業、セラミック産業、ペイント産業、木材産業、家禽産業、水産食品産業、スポーツ産業、および農産業において採用される対象物に用いられ、かつ、前記対象物が、包帯、尿カテーテル、内視鏡、医用機器、病院の備品、マスク、フロア、食品袋、食品加工表面および装置、ピペット、コンピューターのキーボードおよびマウス、プラスチックフィルムラップ、化粧品、ハンドル、水タンク、浄水のための膜、洗面所、ドアハンドル、排水管、給水管、イヤピース、靴の中敷き、プール、尿または便または血小板のためのバッグ、エアコンユニット、濾過設備、低温殺菌設備および備品を含む群から選択される、請求項１乃至請求項６のいずれか一項に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ポリアニリンコポリマー、ならびに抗微生物剤としての、より詳しくは抗菌剤、抗真菌剤および抗ウイルス剤としてのポリアニリンコポリマーの使用に関する。
【０００２】
本発明は主として、表面上における細菌および／または真菌および／またはウイルスの増殖を防止するために開発されたものであり、以下においてはこの使用（人を手術または治療するための使用を除く。）に関連させて記載する。しかしながら、本発明がこの特定の使用分野に限定されるものではないことは理解されたい。
【背景技術】
【０００３】
本明細書全体を通じて、従来技術を説明する場合、それが、そのような従来技術が広く知られている、あるいは当分野において共有される一般常識の一部を形成していることを容認しているとは決して考えてはならない。
【０００４】
ポリアニリン（ＰＡＮＩ）の一般的な構造は公知である。しかしながら、現在に至るまで、ポリアニリンは工業的用途において広く活用されるということはなかったが、その理由は主として、一般的な溶媒における溶解度が低くそして他のポリマーとの混和性が低いことにより、ポリアニリンが加工性に乏しいためである（非特許文献１）。ＰＡＮＩに対して顕著な溶解度を示すのは、極めて限られた種類の溶媒、たとえばＮ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）またはヘキサフルオロ−２−プロパノール（ＨＦＰ）のみである。ＨＦＰを使用しようとしても、それが比較的高価であるために、コスト的に大いに不利となる。
【０００５】
最近になって、ＰＡＮＩを含むフィルムが抗菌性物質として機能することが見出された。特許文献１には、ＰＡＮＩが、粉体としてまたはポリビニルアルコールもしくはポリエチレンとの複合フィルム中で、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉおよびブドウ球菌微生物の増殖に対する抗菌活性を有していることが開示されている。それらのフィルムは、使用されたポリビニルアルコールまたはポリエチレンの量に対して少ない量（１〜１０重量％）でＰＡＮＩを含んでいるが、このことは、加工性の問題から、より大量のＰＡＮＩを使用することができないということを示唆している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】中国特許第１８４４２４５号明細書
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｈ．サラバジオン（Ｈ．Ｓａｌａｖａｇｉｏｎｅ）ら、ジャーナル・オブ・ポリマー・サイエンス：パートＡ：ポリマー・ケミストリー（Ｊｏｕｒｎａｌ  oｆ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ：Ｐａｒｔ  Ａ：Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、第４２巻、ｐ．５５８７〜５５９９（２００４）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の目的は、従来技術の少なくとも一つの不利な点を克服もしくは改良すること、または有用な代替物を提供することである。より詳しくは、本発明の目的は、その好ましい形態において、良好な加工性を有し、さらに抗微生物活性、特に抗菌および／または抗真菌および／または抗ウイルス活性を有する、ポリアニリンのポリマーまたはコポリマーを提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本願発明者らは、置換されたアニリンを含むアニリンのコポリマーを少量たとえば０．０３〜１重量％以上で存在させると、病原菌も含めた微生物に対して迅速な抑制効果を有していることを見出した。驚くべきことには、それらのコポリマーは、容易に加工することが可能で、たとえば、フィルムもしくはゲルの中に容易に組み入れたり、あるいはエレクトロスピニング法により（ｅｌｅｃｔｏｒｏｓｐｕｎ）ナノ繊維としたりすることができる。
【００１０】
微生物（「ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ」、「ｍｉｃｒｏｂｉａｌ」）などの用語は、本明細書で使用するとき、広い意味合いで使用しており、細菌だけではなく真菌およびウイルスも含んでいる。同様にして、「抗微生物（ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ）」などの用語も、細菌、真菌、ウイルスなどにおける、減少または増殖抑制を示すために使用している。
【００１１】
第一の態様によれば、本発明は、抗微生物性物質としてのアニリンコポリマーの使用を提供する。好ましくは、そのアニリンコポリマーの使用が、抗菌性および／または抗真菌性および／または抗ウイルス性物質である。
【００１２】
第二の態様によれば、本発明は、抗微生物性物質を製造するためのアニリンコポリマーの使用を提供する。好ましくは、そのアニリンコポリマーを、抗菌性および／または抗真菌性および／または抗ウイルス性対象物を製造するために使用する。
【００１３】
前記アニリンコポリマーが、アニリンの導電性コポリマーであることが好ましい。前記アニリンコポリマーが抗酸化剤であることが好ましい。
【００１４】
前記アニリンコポリマーが、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、ピリジン、２，６−ジメチルピリジン、２，４，６−トリメチルピリジン、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（無水）、テトラヒドロフラン、ジメチルホルムアミド、ヘキサフルオロ−２−プロパノール、クロロホルム、およびジクロロメタンからなる群より選択される溶媒の中に、少なくとも０．０５ｍｇ／ｍＬの溶解度を有しているのが好ましい。
【００１５】
前記コポリマーが、ロイコエメラルジン、エメラルジン、またはペルニグラニリン構造を有しているのが好ましい。前記コポリマーがエメラルジン構造を有していれば、最も好ましい。前記コポリマーが、塩または遊離塩基の形態にあることが好ましい。エメラルジン塩の形態が、最も好ましい。
【００１６】
前記コポリマーは、アニリンを式（Ｉ）の化合物およびその塩と反応させることによって形成されるのが好ましい。
【００１７】
【化１】
0005683268.tif 000002
【００１８】
式中、Ｒは、水素またはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、
ｎ＝１、２または３であり、
Ｒ１は、独立して、以下のものからなる群より選択され：
Ｃ１〜Ｃ６アルキル、
Ｃ１〜Ｃ６アルコキシル、
ハロ、
−ＣＯ２Ｒ２、
−ＳＯ３Ｒ２、
−ＰＯ３ＨＲ２、
−ＣＯＲ４、
−ＣＨ２ＣＯＯＲ４、
−ＣＮ、
−ＣＨ２ＯＨ、
−ＣＨ２ＮＨ２、
−ＣＨ２ＣＮ、
−ＯＨ、
−ＳＯ２ＮＨ２；
Ｒ２は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アルカリ金属、アンモニウム、および置換されたアンモニウム塩から選択され；
Ｒ４は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、フェニルから選択される。
【００１９】
前記ベンゼン環は、随意に、炭素原子に代えて、１または複数の好ましくはＮ、Ｏ、Ｓから選択されるヘテロ原子、より好ましくは１、２または３の窒素原子を含んでいてもよい。
【００２０】
２のＲ１基が存在している場合には、それらが合体して環を形成していてもよく、たとえば、ｎ＝２でＲ１基が両方ともＣＯＯＨであれば、前記化合物が無水フタル酸であってもよい。
【００２１】
Ｒが水素でＲ１が−ＣＯ２Ｒ２であれば好ましく、Ｒが水素でＲ１が−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｍｅ、または−ＣＯ２Ｅｔであればより好ましい。式（Ｉ）が、３−アミノ安息香酸、２−アミノ安息香酸、および３−アミノ安息香酸エチルからなる群より選択される化合物であれば最も好ましい。
【００２２】
前記式Ｉの化合物がｎ＝２である場合、前記独立して変化可能なＲ１基が、ＮＨＲ基に対してメタ位にあることが好ましいが、必須であるという訳ではない。前記式Ｉの化合物がｎ＝３である場合、前記独立して変化可能なＲ１基が、ＮＨＲ基に対してオルト位およびパラ位にあることが好ましいが、そのことが必須であるという訳ではない。
【００２３】
また、前記コポリマーは、その中の芳香環が必ずしもベンゼノイドである必要はなく、任意の適切な芳香環、すなわち任意の数の原子、より通常には５または６の原子を有する複素環である化合物とアニリンとの反応によって形成させてもよい。すなわち、前記コポリマーは、アニリンを式（Ｉａ）の化合物と反応させることによって、前記コポリマーを形成させるのが好ましい。
【００２４】
【化２】
0005683268.tif 000003
【００２５】
式中、Ｒ、Ｒ１およびｎは先に挙げたものであり、Ａｒは、たとえばピリジン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、ピロール、ピラゾールなどのＮ含有ヘテロ環、たとえばピランもしくはフランなどのＯ含有ヘテロ環、たとえばチオフェンなどのＳ含有ヘテロ環、たとえばイソキサゾールなどの混合複素環系、またはたとえばナフタレン、キノリンもしくはキノキサリンなどの多環系である。
【００２６】
以後において、前記化合物は、単一のＲ１を担持するベンゼン環を参照しながらさらに記述されるが、それらは、混合されたＲ１基で置換された任意の適切な芳香環を有する化合物か、またはモノ−、ジ−、トリ−またはその他のＲ１置換された複数の環のいずれかまたは全部の混合物を開示しているものと理解されたい。
【００２７】
その他の好ましいコモノマーとしては、以下のものからなる１種または複数の化合物が挙げられる：３−アセチルアニリン；２−アミノベンズアルデヒド；２−アミノベンゼンスルホンアミド；２−アミノフェノール；３−アミノフェノール；２−アミノフェニル酢酸；３−アミノフェニル酢酸；２−アミノベンゾニトリル；３−アミノベンゾニトリル；２−アミノベンゾフェノン；３−アミノベンゾフェノン；２−アミノベンジルアルコール；３−アミノベンジルアルコール；２−アミノベンジルアミン；２−アミノベンジルシアニド；２−アミノ−４−ブロモ安息香酸；２−アミノ−６−クロロ安息香酸；２−アミノ−４−クロロ安息香酸；２−アミノ−４−クロロフェノール；２−アミノ−４−メチルフェノール；２−アミノ−４，６−ジヒドロキシピリミジン；２−アミノ−１，３−ジエチルベンゼン；１−アミノ−３，５−ジメチルベンゼン；２−アミノ−４，６−ジメチルピリジン；２−アミノ−４−ヒドロキシ−６−メチルピリミジン；５−アミノイソフタル酸；３−アミノ−２−メチル安息香酸；２−アミノ−３−メチルフェノール；２−アミノ−６−メチルピリジン；２−アミノ−３−ピコリン；２−アミノピリジン；および３−アミノピリジン。
【００２８】
前記抗微生物性物質は、グラム陽性菌およびグラム陰性菌から選択される細菌に対して有効であることが好ましい。
【００２９】
好ましくは、前記グラム陽性菌および前記グラム陰性菌は、以下のものからなる群より選択される属に属する：Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ、Ｓｈｉｇｅｌｌａ、Ｅｒｗｉｎｉａ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ、Ｖｉｂｒｉｏ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ、Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｌｉｓｔｅｒｉａ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ、Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ、Ｓｅｒｐｕｌｉｎａ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ、Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ、Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｄｅｒｍａｔｏｐｈｉｌｕｓ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ、およびＥｒｙｓｉｐｅｌｏｔｈｒｉｘ。
【００３０】
さらにより好ましくは、前記グラム陽性菌および前記グラム陰性菌は、以下のものからなる群より選択される：Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｅｒｉｃａ血清型エンテリチディス、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｃｉｕｒｉ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ属、およびＣａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ。
【００３１】
前記抗微生物性物質が、以下のものからなる群より選択される真菌の属に対して有効であることが好ましい：Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ、Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｓ、Ｃａｎｄｉｄａ、Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｅｐｉｄｅｒｍｏｐｈｙｔｏｎ、Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ、Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍ、Ｍｕｃｏｒ、Ｒｈｉｚｏｐｕｓ、Ｓｐｏｒｏｔｈｒｉｘ、Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ、Ｐａｒａｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ、Ａｂｓｉｄｉａ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ、Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉｓ、Ｔｒｉｃｈｏｓｐｏｒｏｎ、Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ、Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ、Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ、Ｆｏｎｓｅｃｅａ、およびＰｈｉａｌｏｐｈｏｒａ。
【００３２】
前記ウイルスは、ＤＮＡウイルスまたは、ＲＮＡウイルスであってもよい。好ましくは、前記ＤＮＡウイルスおよび前記ＲＮＡウイルスは、以下のものからなる群より選択される系統に属する：Ｐａｒｖｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｉｄａｅ、Ｐｏｌｙｏｍａｖｉｒｉｄａｅ、Ａｄｅｎｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｈｅｐａｄｎａｖｉｒｉｄａｅ、Ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｉｄａｅ、Ｐｏｘｖｉｒｉｄａｅ、Ｐｉｃｏｒｎａｖｉｒｉｄａｅ、Ｃａｌｉｃｉｖｉｒｉｄａｅ、Ｒｅｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｔｏｇａｖｉｒｉｄａｅ、Ｆｌａｖｉｖｉｒｉｄａｅ、Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｉｄａｅ、Ｏｒｔｈｏｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｐａｒａｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｒｈａｂｄｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｆｉｌｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｂｕｎｙａｖｉｒｉｄａｅ、Ａｒｅｎａｖｉｒｉｄａｅ、およびＲｅｔｒｏｖｉｒｉｄａｅ。
【００３３】
前記対象物は以下の産業において採用するのが好ましい：健康産業、食品産業、包装産業、繊維産業、プラスチック産業、ガラス産業、紙産業、ゴム産業、セラミック産業、水関連産業、ペイント産業、木材産業、家禽産業、水産食品産業、スポーツ産業、および農産業。
【００３４】
本発明の物質は、その物質の物理的性質が適していれば、微生物の抑制を必要とする広い範囲の用途において使用するのに好適な対象物を製造するために使用することができる。抗微生物性の対象物のいくつかの例としては以下のものが挙げられるが、これらに限定される訳ではない：包帯、尿カテーテル、内視鏡、医用機器、病院の備品、ピペット、マスク、手袋、フロア、ドアおよび壁面、調理器具（ｆｏｏｄ  ｕｔｅｎｓｉｌ）および食品袋（ｆｏｏｄ  ｐａｃｋｅｔ）、食品加工表面および装置、プラスチックフィルムラップおよびプラスチック容器、コンピューターのキーボードおよびマウス、化粧品、ハンドル、水タンク、浄水のための膜、洗面所、ドアハンドル、排水管、給水管、イヤピース、靴の中敷き、プール、尿または便または血小板のためのバッグ、エアコンユニット、濾過設備、低温殺菌設備および備品。
【００３５】
一つの特に好ましい実施態様においては、本発明のアニリンコポリマーは、食品貯蔵および食品包装産業において有用であるか、または創傷被覆材としてもしくは包帯のために有用な、フィルムまたはラップまたはナノ繊維の中に組み入れられる。前記アニリンコポリマーは、フィルム、ゲル、ラップまたは包帯の中に、フィルム、ゲル、ラップもしくは包帯を形成する他の成分に分散されるか、ブレンドされるか、またはアロイ化される成分として存在してもよいし、あるいはアニリンコポリマーが、その他のフィルム、ゲル、ラップまたは包帯を形成する成分に共有結合された形態で存在していてもよい。
【００３６】
第三の態様によれば、本発明は次式のアニリンコポリマーを提供する。
【００３７】
【化３】
0005683268.tif 000004
【００３８】
式中、Ｒ３＝Ｈもしくは上記のＲ１であり、Ｒは上記のものであり、
ｘは１および０の間の整数であり、且つ、ｍは重合度を示す。前記化合物は、それ自体でポリアニリンでないのが好ましい。
【００３９】
前記ベンゼン環は、随意に、炭素原子に代えて、１または複数の好ましくはＮ、Ｏ、Ｓから選択されるヘテロ原子、より好ましくは１、２または３の窒素原子を含んでいてもよい。
【００４０】
重合度のｍは、１から１０８までの間の数値とすることができる。
【００４１】
第四の態様によれば、本発明は、アニリンコポリマーを調製するためのプロセスを提供する。前記プロセスには、酸化剤を含む鉱酸の溶液中で、アニリンを式（Ｉ）の化合物またはその塩と反応させる工程を含む。
【００４２】
【化４】
0005683268.tif 000005
【００４３】
式中、Ｒは水素またはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、
ｎ＝１、２または３であり、
Ｒ１は、独立して、以下のものからなる群より選択され：
Ｃ１〜Ｃ６アルキル、
Ｃ１〜Ｃ６アルコキシル、
ハロ、
−ＣＯ２Ｒ２、
−ＳＯ３Ｒ２、
−ＰＯ３ＨＲ２、
−ＣＯＲ４、
−ＣＨ２ＣＯＯＲ４、
−ＣＮ、
−ＣＨ２ＯＨ、
−ＣＨ２ＮＨ２、
−ＣＨ２ＣＮ、
−ＯＨ、
−ＳＯ２ＮＨ２；
Ｒ２は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アルカリ金属、アンモニウム、および置換されたアンモニウム塩から選択され；
Ｒ４は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、フェニルから選択される。
【００４４】
前記ベンゼン環は、随意に、炭素原子に代えて、１または複数の好ましくはＮ、Ｏ、Ｓから選択されるヘテロ原子、より好ましくは１、２または３の窒素原子を含んでいてもよい。
【００４５】
２のＲ１基が存在している場合には、それらが合体して環を形成していてもよく、たとえば、ｎ＝２でＲ１基が両方ともＣＯＯＨであれば、前記化合物が無水フタル酸であってもよい。
【００４６】
Ｒが水素でＲ１が−ＣＯ２Ｒ２であれば好ましく、Ｒが水素でＲ１が−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｍｅ、または−ＣＯ２Ｅｔであればより好ましい。式（Ｉ）が、３−アミノ安息香酸、２−アミノ安息香酸、および３−アミノ安息香酸エチルからなる群より選択される化合物であれば最も好ましい。
【００４７】
前記式Ｉの化合物がｎ＝２である場合、前記独立して変化可能なＲ１基が、ＮＨＲ基に対してメタ位にあることが好ましいが、そのことが必須であるという訳ではない。前記式Ｉの化合物がｎ＝３である場合、前記独立して変化可能なＲ１基が、ＮＨＲ基に対してオルト位およびパラ位にあることが好ましいが、そのことが必須であるという訳ではない。
【００４８】
また、前記コポリマーは、芳香環がベンゼノイドでなく、任意の適切な芳香環、すなわち任意の数の原子、より通常には５または６の原子を有する複素環である化合物とアニリンとの反応によって形成させてもよい。すなわち、アニリンを式（Ｉａ）の化合物と反応させることによって、前記コポリマーを形成させるのが好ましい。
【００４９】
【化５】
0005683268.tif 000006
【００５０】
式中、Ｒ、Ｒ１およびｎは先に挙げたものであり、Ａｒは、たとえばピリジン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、ピロール、ピラゾールなどのＮ含有ヘテロ環、たとえばピランもしくはフランなどのＯ含有ヘテロ環、たとえばチオフェンなどのＳ含有ヘテロ環、たとえばイソキサゾールなどの混合複素環系、またはたとえばナフタレン、キノリンもしくはキノキサリンなどの多環系である。
【００５１】
さらに、前記化合物は、単一のＲ１を担持するベンゼン環を参照されているが、それらには、混合されたＲ１基でさらに置換された化合物か、またはモノ−、ジ−、トリ−またはその他のＲ１置換された複数の環のいずれかまたは全部の混合物が包含されているものと理解されたい。
【００５２】
その他の好ましいコモノマーとしては、以下のものからなる群から１または複数の化合物が挙げられる：３−アセチルアニリン；２−アミノベンズアルデヒド；２−アミノベンゼンスルホンアミド；２−アミノフェノール；３−アミノフェノール；２−アミノフェニル酢酸；３−アミノフェニル酢酸；２−アミノベンゾニトリル；３−アミノベンゾニトリル；２−アミノベンゾフェノン；３−アミノベンゾフェノン；２−アミノベンジルアルコール；３−アミノベンジルアルコール；２−アミノベンジルアミン；２−アミノベンジルシアニド；２−アミノ−４−ブロモ安息香酸；２−アミノ−６−クロロ安息香酸；２−アミノ−４−クロロ安息香酸；２−アミノ−４−クロロフェノール；２−アミノ−４−メチルフェノール；２−アミノ−４，６−ジヒドロキシピリミジン；２−アミノ−１，３−ジエチルベンゼン；１−アミノ−３，５−ジメチルベンゼン；２−アミノ−４，６−ジメチルピリジン；２−アミノ−４−ヒドロキシ−６−メチルピリミジン；５−アミノイソフタル酸；３−アミノ−２−メチル安息香酸；２−アミノ−３−メチルフェノール；２−アミノ−６−メチルピリジン；２−アミノ−３−ピコリン；２−アミノピリジン；および３−アミノピリジン。
【００５３】
任意の適切な酸化剤を使用してよい。酸化剤が、過硫酸アンモニウム、フェリシアン化カリウム、ヨウ素酸塩、および過酸化水素からなる群より選択されるのが好ましい。酸化剤がヨウ素酸カリウムであれば、最も好ましい。好ましくは、好適な鉱酸は、塩酸、硫酸、硝酸、および過塩素酸である。鉱酸が塩酸であれば、最も好ましい。ヨウ素酸塩がヨウ素酸カリウムであり、鉱酸が塩酸であることが好ましい。
【００５４】
前記アニリンの前記式（Ｉ）の化合物に対する比率が（１：２）から（２：１）までであることが好ましく、前記の比率が約（１：１）であれば、より好ましい。
【００５５】
さらに、アニリンコポリマーは、アニリンコポリマーはその中にほとんど溶解しないが、出発モノマー、中間体オリゴマーなどの除去に溶媒として機能するような化合物を用いて処理することによって精製されることが好ましい。この目的のために好ましい化合物はアセトンである。
【００５６】
本発明はさらに、先行する態様のプロセスによって調製された場合の、アニリンコポリマーも提供する。
【００５７】
第五の態様によれば、本発明はアニリンコポリマーを提供するが、ここで前記コポリマーは、アニリンを式（Ｉ）の化合物およびその塩と反応させることによって製造される。
【００５８】
【化６】
0005683268.tif 000007
【００５９】
式中、Ｒは水素またはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、
ｎ＝１、２または３であり、
Ｒ１は、独立して、以下のものからなる群より選択され：
Ｃ１〜Ｃ６アルキル、
Ｃ１〜Ｃ６アルコキシル、
ハロ、
−ＣＯ２Ｒ２、
−ＳＯ３Ｒ２、
−ＰＯ３ＨＲ２、
−ＣＯＲ４、
−ＣＨ２ＣＯＯＲ４、
−ＣＮ、
−ＣＨ２ＯＨ、
−ＣＨ２ＮＨ２、
−ＣＨ２ＣＮ、
−ＯＨ、
−ＳＯ２ＮＨ２；
Ｒ２は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アルカリ金属、アンモニウム、および置換されたアンモニウム塩から選択され；
Ｒ４は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、フェニルから選択される。
【００６０】
前記ベンゼン環は、随意に、炭素原子に代えて、１または複数の好ましくはＮ、Ｏ、Ｓから選択されるヘテロ原子、より好ましくは１、２または３の窒素原子を含んでいてもよい。
【００６１】
２のＲ１基が存在している場合には、それらが合体して環を形成していてもよく、たとえば、ｎ＝２でＲ１基が両方ともＣＯＯＨであれば、その化合物が無水フタル酸であってもよい。
【００６２】
Ｒが水素でＲ１が−ＣＯ２Ｒ２であれば好ましく、Ｒが水素でＲ１が−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｍｅ、または−ＣＯ２Ｅｔであればより好ましい。式（Ｉ）が、３−アミノ安息香酸、２−アミノ安息香酸、および３−アミノ安息香酸エチルからなる群より選択される化合物であれば最も好ましい。
【００６３】
前記式Ｉの化合物がｎ＝２である場合、前記独立して変化可能なＲ１基が、ＮＨＲ基に対してメタ位にあることが好ましいが、そのことが必須であるという訳ではない。前記式Ｉの化合物がｎ＝３である場合、前記独立して変化可能なＲ１基が、ＮＨＲ基に対してオルト位およびパラ位にあることが好ましいが、そのことが必須であるという訳ではない。
【００６４】
さらに、コポリマーは、芳香環がベンゼノイドでなく、任意の適切な芳香環、すなわち任意の数の原子、より通常には５または６の原子を有する複素環である化合物とアニリンとの反応によって形成させてもよい。すなわち、アニリンを式（Ｉａ）の化合物と反応させることによって、前記コポリマーを形成させるのが好ましい。
【００６５】
【化７】
0005683268.tif 000008
【００６６】
式中、Ｒ、Ｒ１およびｎは先に挙げたものであり、Ａｒは、たとえばピリジン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、ピロール、ピラゾールなどのＮ含有ヘテロ環、たとえばピランもしくはフランなどのＯ含有ヘテロ環、たとえばチオフェンなどのＳ含有ヘテロ環、たとえばイソキサゾールなどの混合複素環系、またはたとえばナフタレン、キノリンもしくはキノキサリンなどの多環系である。
【００６７】
さらに、前記化合物は、単一のＲ１を担持するベンゼン環を参照されているが、それらには、混合されたＲ１基でさらに置換された化合物か、またはモノ−、ジ−、トリ−またはその他のＲ１置換された複数の環のいずれかまたは全部の混合物が包含されているものと理解されたい。
【００６８】
その他の好ましいコモノマーとしては、以下のものからなる群から１または複数の化合物が挙げられる：３−アセチルアニリン；２−アミノベンズアルデヒド；２−アミノベンゼンスルホンアミド；２−アミノフェノール；３−アミノフェノール；２−アミノフェニル酢酸；３−アミノフェニル酢酸；２−アミノベンゾニトリル；３−アミノベンゾニトリル；２−アミノベンゾフェノン；３−アミノベンゾフェノン；２−アミノベンジルアルコール；３−アミノベンジルアルコール；２−アミノベンジルアミン；２−アミノベンジルシアニド；２−アミノ−４−ブロモ安息香酸；２−アミノ−６−クロロ安息香酸；２−アミノ−４−クロロ安息香酸；２−アミノ−４−クロロフェノール；２−アミノ−４−メチルフェノール；２−アミノ−４，６−ジヒドロキシピリミジン；２−アミノ−１，３−ジエチルベンゼン；１−アミノ−３，５−ジメチルベンゼン；２−アミノ−４，６−ジメチルピリジン；２−アミノ−４−ヒドロキシ−６−メチルピリミジン；５−アミノイソフタル酸；３−アミノ−２−メチル安息香酸；２−アミノ−３−メチルフェノール；２−アミノ−６−メチルピリジン；２−アミノ−３−ピコリン；２−アミノピリジン；および３−アミノピリジン。
【００６９】
さらに、前記アニリンコポリマーは、アニリンコポリマーはその中にほとんど溶解しないが、出発モノマー、中間体オリゴマーなどの除去のための溶媒として機能するような化合物を用いて処理することによって精製されることが好ましい。この目的のために好ましい化合物は、アセトンである。
【００７０】
第六の態様によれば、本発明は、アニリンコポリマーを含む抗微生物性対象物を提供する。
【００７１】
第七の態様によれば、本発明は、アニリンコポリマーを組み入れた製品を提供する。好ましくは、前記製品が食品包装において使用するのに適したフィルムであってよい。また、好ましくは前記製品が創傷被覆材であってもよい。
【００７２】
第八の態様によれば、本発明は、アニリンコポリマー好ましくは本発明のものと、少なくとも１種のその他の物質とを含む複合材料を提供する。前記複合材料は、粉体、ブレンド物の形態か、または少なくとも１種のその他の物質の上へのコーティングとして存在していてもよい。
【００７３】
好ましくは、前記少なくとも１種の他の物質は、以下のものからなる群より選択される：ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（酢酸ビニル）、ポリ（メタクリル酸メチル）もしくはアクリルポリマー、ポリ（エチレンテレフタレート）もしくはその他のポリエステル、ポリアミド、ポリエチレンおよびポリプロピレン、ポリフッ化ビニリデン、エチレン酢酸ビニルコポリマー、アクリル酸メチルコポリマー、ブタンコポリマー、ヘキサンコポリマー、ゴム、天然ゴムラテックス、アクリルラテックス、エポキシラテックス、エチルセルロース、セルロース、多糖類、およびタンパク質。
【００７４】
前記複合材料は、ｉｎ  ｓｉｔｕ重合または表面コーティングによって合成するのが好ましい。
【００７５】
前記複合材料がＭＩＣ中に存在するアニリンコポリマーを有していて、それにより前記複合材料が適切な抗微生物活性を有しているのが好ましい。
【００７６】
本発明はさらに、食品をアニリンコポリマーと接触させる工程を含む、食品を保存する方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００７７】
【図１】３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）と相互作用させた後のＥ．ｃｏｌｉ細菌のＴＥＭ画像を示す図である。
【図２】２％の３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）の存在下における、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ２５９２３の生菌数の減少をＬｏｇ１０で示すグラフである。
【図３】２％の３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）の存在下における、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＡＴＣＣ  ２５９２２の生菌数の減少をＬｏｇ１０で示すグラフである。。
【図４】２％の３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）の存在下における、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ＡＴＣＣ  ２７８５３の生菌数の減少をＬｏｇ１０で示すグラフである。
【図５】２％の３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）の存在下における、Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓの生菌数の減少をＬｏｇ１０で示すグラフである。
【図６】２％の３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）の存在下（高初期接種）における、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ２５９２３の生菌数の減少をＬｏｇ１０で示すグラフである。
【図７】２％の３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）および２０％の血漿の存在下における、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ２５９２３の生菌数の減少をＬｏｇ１０で示すグラフである。
【図８】２％の３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）および２０％の血漿の存在下における、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＡＴＣＣ  ２５９２２の生菌数の減少をＬｏｇ１０で示すグラフである。
【図９】２％の３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）および２０％の血漿の存在下における、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ＡＴＣＣ  ２７８５３の生菌数の減少をＬｏｇ１０で示すグラフである。
【図１０】２％の３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）および２０％の血漿の存在下における、Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓの生菌数の減少をＬｏｇ１０で示すグラフである。
【図１１】２％の３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）および５％の血漿の存在下における、Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓの生菌数の減少をＬｏｇ１０で示すグラフである。
【図１２】２％の３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）および１０％の血漿の存在下における、Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓの生菌数の減少をＬｏｇ１０で示すグラフである。
【図１３】２％の３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）および１６ｍｍｏｌのＮＡＣの存在下における、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ２５９２３の生菌数の減少をＬｏｇ１０で示すグラフである。
【図１４】Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ２５９２３と相互作用させた後の、ＰＭＭＡ上にコーティングしたフィルムθ４（ＰＶＡおよびＰＡＮＩ）を示す図である。
【図１５】Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ２５９２３と相互作用させた後の、ＰＭＭＡ上にコーティングしたフィルムρ２（ＰＶＡおよびＰｏｌｙ３ＡＢＡ）を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００７８】
本発明は、微生物の増殖を抑制するためのアニリンコポリマーを提供する。
【００７９】
本発明は、院内感染、特に創傷感染および医療移植に伴う感染ならびに食品および／または水の摂取にともなう感染の予防または治療において特に有用であるが、本発明は、あらゆる環境または任意のタイプの表面における微生物をターゲットとして使用してもよく、そのようなものとしては、たとえば除染されるべきヒトおよび動物の対象物または物質などが挙げられるが、これらに限定される訳ではない（ただし、人を手術または治療するための使用を除く。）。
【００８０】
非病原性の菌もまた、特にそれらが食品の腐敗および品質低下のような望ましくない影響の原因となりうるような場合には、本発明のターゲットとすることができる。
【００８１】
本発明のコポリマーはアニリンコポリマーであり、それらは、アニリンを式（Ｉ）の化合物およびその塩と反応させることによって合成することができる。
【００８２】
【化８】
0005683268.tif 000009
【００８３】
式中、Ｒは水素またはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、
ｎ＝１、２または３であり、
Ｒ１は、独立して、以下のものからなる群より選択され：
Ｃ１〜Ｃ６アルキル、
Ｃ１〜Ｃ６アルコキシル、
ハロ、
−ＣＯ２Ｒ２、
−ＳＯ３Ｒ２、
−ＰＯ３ＨＲ２、
−ＣＯＲ４、
−ＣＨ２ＣＯＯＲ４、
−ＣＮ、
−ＣＨ２ＯＨ、
−ＣＨ２ＮＨ２、
−ＣＨ２ＣＮ、
−ＯＨ、
−ＳＯ２ＮＨ２；
Ｒ２は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アルカリ金属、アンモニウム、および置換されたアンモニウム塩から選択され；
Ｒ４は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、フェニルから選択される。
【００８４】
ベンゼン環は、随意に、炭素原子に代えて、１または複数の好ましくはＮ、Ｏ、Ｓから選択されるヘテロ原子、より好ましくは１、２または３の窒素原子を含んでいてもよい。
【００８５】
２のＲ１基が存在している場合には、それらが合体して環を形成していてもよく、たとえば、ｎ＝２でＲ１基が両方ともＣＯＯＨであれば、その化合物が無水フタル酸であってもよい。
【００８６】
Ｒが水素でＲ１が−ＣＯ２Ｒ２であれば好ましく、Ｒが水素でＲ１が−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｍｅ、または−ＣＯ２Ｅｔであればより好ましい。式（Ｉ）が、３−アミノ安息香酸、２−アミノ安息香酸、および３−アミノ安息香酸エチルからなる群より選択される化合物であれば最も好ましい。
【００８７】
式Ｉの化合物がｎ＝２である場合、それらの独立して変化可能なＲ１基が、ＮＨＲ基に対してメタ位にあることが好ましいが、そのことが必須であるという訳ではない。式Ｉの化合物がｎ＝３である場合、それらの独立して変化可能なＲ１基が、ＮＨＲ基に対してオルト位およびパラ位にあることが好ましいが、そのことが必須であるという訳ではない。
【００８８】
アニリンを、その中の芳香環がベンゼノイドではなく、任意の適切な芳香環、すなわち任意の数の原子、より通常には５または６の原子を有する複素環である化合物と反応させることによって、コポリマーを形成させてもよい。すなわち、アニリンを式（Ｉａ）の化合物と反応させることによって、前記コポリマーを形成させるのが好ましい。
【００８９】
【化９】
0005683268.tif 000010
【００９０】
式中、Ｒ、Ｒ１およびｎは先に挙げたものであり、Ａｒは、たとえばピリジン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、ピロール、ピラゾールなどのＮ含有ヘテロ環、たとえばピランもしくはフランなどのＯ含有ヘテロ環、たとえばチオフェンなどのＳ含有ヘテロ環、たとえばイソキサゾールなどの混合複素環系、またはたとえばナフタレン、キノリンもしくはキノキサリンなどの多環系である。
【００９１】
いくつかの好ましいコモノマーとしては、以下のものの単独または任意の組合せが挙げられる：３−アセチルアニリン；２−アミノベンズアルデヒド；２−アミノベンゼンスルホンアミド；２−アミノフェノール；３−アミノフェノール；２−アミノフェニル酢酸；３−アミノフェニル酢酸；２−アミノベンゾニトリル；３−アミノベンゾニトリル；２−アミノベンゾフェノン；３−アミノベンゾフェノン；２−アミノベンジルアルコール；３−アミノベンジルアルコール；２−アミノベンジルアミン；２−アミノベンジルシアニド；２−アミノ−４−ブロモ安息香酸；２−アミノ−６−クロロ安息香酸；２−アミノ−４−クロロ安息香酸；２−アミノ−４−クロロフェノール；２−アミノ−４−メチルフェノール；２−アミノ−４，６−ジヒドロキシピリミジン；２−アミノ−１，３−ジエチルベンゼン；１−アミノ−３，５−ジメチルベンゼン；２−アミノ−４，６−ジメチルピリジン；２−アミノ−４−ヒドロキシ−６−メチルピリミジン；５−アミノイソフタル酸；３−アミノ−２−メチル安息香酸；２−アミノ−３−メチルフェノール；２−アミノ−６−メチルピリジン；２−アミノ−３−ピコリン；２−アミノピリジン；または３−アミノピリジン。
【００９２】
アニリンと式（Ｉ）の化合物との反応は、酸化剤の存在する鉱酸中で行われる。任意の適切な酸化剤を使用してよい。好適な酸化剤としては、過硫酸アンモニウム、フェリシアン化カリウム、ヨウ素酸カリウム、過酸化水素、硫酸セリウム（ＩＶ）、二クロム酸カリウム、およびバナジン酸ナトリウムなどが挙げられるが、これらに限定される訳ではない。好適な鉱酸としては、塩酸、硫酸、硝酸、または過塩素酸などが挙げられるが、これらに限定される訳ではない。鉱酸が塩酸であり、酸化剤がヨウ素酸カリウム、ＫＩＯ３であることが好ましい。
【００９３】
本発明のコポリマーは、一般的な有機溶媒の中で、アニリン対官能化アニリンのモル比が１：１である反応混合物を使用して合成された。その結果良好な収率が得られ、ＰＡＮＩに比較して、より溶解性の高い反応生成物が得られた。一般的な溶媒としてはたとえば、Ｎ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）、ピリジン、２，６−ジメチルピリジン、２，４，６−トリメチルピリジン、ジメチルスルホキシド、無水のＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、テトラヒドロフラン、およびジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ならびに重要度は低いが、ヘキサフルオロ−２−プロパノール（ＨＦＰ）、クロロホルムおよびジクロロメタンなどが挙げられるが、これらに限定される訳ではない。ＥＳ形またはＥＢ形の場合の、ＰＡＮＩ、３ＡＢＡＰＡＮＩ（３−アミノ安息香酸とアニリンとのコポリマー）、ＯＡＢＡＰＡＮＩ（２−アミノ安息香酸とアニリンとのコポリマー）、および３ＥＡＢＰＡＮＩ（３−アミノ安息香酸エチルとアニリンとのコポリマー）の溶解性を表１に示す。理論に拘束されるものではないが、それらのコポリマーは、溶媒たとえば、Ｎ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）およびピリジンの中では、溶媒とポリマーとの水素結合のために、より良好な溶解性を示していると考えられる。
【００９４】
【表１】
0005683268.tif 000011
＃の“レ”は、溶媒１ｍＬあたり少なくとも０．０５ｍｇの溶解度があることを示し；
“レ×”は、溶媒に部分的に溶解することを示し；
“×”は、溶媒に実質的に不溶であることを示す。
【００９５】
本発明のアニリンコポリマーは実質的に水に不溶であり、１２１℃での湿熱滅菌に対しては安定である。
【００９６】
官能化アニリンに対するアニリンの比率が低い（１：２）反応混合物から、低収率２０〜２５％の反応生成物が得られた。アニリンの官能化アニリンに対するモル比を２：１とすると、一般的な有機溶媒中への溶解性の低下が見られた。アニリンと、２−アミノ安息香酸または３−アミノ安息香酸とのいずれかに対するコモノマー反応性比は、それに対応するコポリマー鎖が、約９０％のアニリン単位と１０％の官能化アニリン単位を有することを示唆している。コポリマーにおけるアニリン単位と官能化アニリン単位との比率は、コモノマー反応性比、およびその反応混合物中のコモノマーの相対比によって支配される。
【００９７】
コポリマー鎖中の官能化アニリン単位の比率が低い（たとえば約１０％）場合であっても、たとえば有機溶媒中における溶解度のような性質は、ＰＡＮＩの場合に比較して、顕著に変化する。コポリマーが、好ましくは少なくとも約０．０１％の官能化アニリン単位を、より好ましくは少なくとも約１％の官能化アニリン単位を、最も好ましくは少なくとも約１０％の官能化アニリン単位を含む。
【００９８】
官能化アニリンのホモポリマーは多くの場合望ましくない。その理由は、それらは水中への幾分かの溶解性を通常有していて、そのことがいくつかの工業的利用では望ましくないからである。さらに、官能性アニリンはポリマー生成の際に、アニリンそのものよりも反応性が低い傾向にある。
【００９９】
反応性比の相対的な数値（アニリン＞官能化アニリン）によって、コポリマーでは、平均すると、官能化アニリン単位のシーケンスよりもアニリン単位のシーケンスの方が長い。官能化アニリンは、コポリマー鎖の中にランダムに分散されるか、それらがブロックコポリマーを形成する可能性がある。典型的には、官能化アニリンはランダムに分散される。
【０１００】
出発混合物中に存在するアニリンが１０〜１５％未満の場合、アニリンの官能化アニリンに対する比率を変化させることによって、異なった色のコポリマーを得ることができる。
【０１０１】
コポリマー鎖の中での原子の配列が変化しないが、アニリンと２−アミノ安息香酸とのコポリマーの電子構造がそのコポリマーの酸化状態に依存することは知られている。以下に示すように、ＰＡＮＩの構造は、ロイコエメラルジン（完全還元）、エメラルジン（半酸化）、およびペルニグラニリン（完全酸化）である。
【０１０２】
【化１０】
0005683268.tif 000012
【化１１】
0005683268.tif 000013
【化１２】
0005683268.tif 000014
【化１３】
0005683268.tif 000015
【０１０３】
Ｘは重合度を表し、Ａはアニオンである。
【０１０４】
エメラルジン形は、その塩の形（ＥＳ）または塩基の形（ＥＢ）として単離することができる。ＥＢ形は、塩基を添加することによって、その塩（ＥＳ）から得ることができる。好ましくは、その塩基は、１〜１５％（典型的には６％）のアンモニア溶液である。その他の好適な塩基としては、金属水酸化物たとえば水酸化ナトリウムおよび水酸化リチウムが挙げられるが、これらに限定される訳ではない。
【０１０５】
本発明のアニリンコポリマーは、抗酸化活性も示す。このことは、それらの持つ抗菌性と組み合わさって、食品包装および保存の分野においてそれらを特に有用なものとする。本発明のポリアニリンの作業性とは、密着性フィルムラップ、バッグなどの中に組み込むことが可能であるということを意味している。官能基が存在することによって、所望により、アニリンコポリマーを他の成膜性成分の中に共有結合させることがさらに可能となる。したがって、その導電性ポリマーは、食品およびゴム産業における抗酸化剤として使用される可能性を有している。酸化は、食料品の劣化の主原因である。
【０１０６】
導電性ポリマー抗酸化剤は、任意の疾患、ガン、および老化の進行において重要な、生体系における脂質、タンパク質およびＤＮＡの調節不能な酸化を抑制するために採用してもよい。
【０１０７】
フリーラジカルの捕捉は、生物学的組織の中に存在するか、またはそれと接触する化合物にとっては有益であると広く考えられている性質である。飲料、果実および野菜の中に存在している、任意のビタミンおよびポリフェノールのフリーラジカル捕捉性抗酸化剤は、現在大きな注目をあびているが、その理由は、それらが、循環器疾患およびガンのような任意の疾患に対する保護作用を有している可能性があるからである。完全に確証されている訳ではないが、それらの作用機構としては、酸化促進性金属イオンのキレート化、ならびにそれらの還元剤としての作用によって、（そうでなければ）脂質物質およびＤＮＡの酸化および分解に寄与する過剰レベルの損傷性フリーラジカルを捕捉する能力が上げられる。
【０１０８】
それらのエメラルジン塩形にあるアニリンコポリマーは、典型的には、エメラルジン塩基形のものよりも良好なラジカル捕捉性を示す。
【０１０９】
仕上がり品のゴム製品の使用要件としては、改良されたポリマー安定性が要求される。ゴムの酸化的劣化は、ゴム技術において最も重要な問題の一つである。その理由は、ゴムが少量の酸素を吸収するだけで、その物理機械的性質にかなりの変化を引き起こすからである。そのような変化は、抗酸化剤を添加することによって抑制することは可能であるが、完全に避けることはできない。ポリアニリンは、特にメトキシ−置換されたポリアニリンを使用した場合には、酸化速度を遅らせるのに効果があることが見出された。
【０１１０】
本発明のアニリンコポリマーは、病原性の種および非病原性の種のいずれも含めて、広く任意の細菌に対して有用である。アニリンコポリマーは、それらのエメラルジン塩の形にあると、エメラルジン塩基の形よりは、より良好な抗微生物活性を示す。
【０１１１】
本発明のターゲット生物体である細菌は、好気性、嫌気性、条件的嫌気性、または微好気性のいずれであってもよい。グラム陰性の好気性および微好気性の桿菌および球菌としては、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ、およびＬｅｇｉｏｎｅｌｌａの属が挙げられる。条件的嫌気性のグラム陰性桿菌としては、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ、Ｓｈｉｇｅｌｌａ、Ｅｒｗｉｎｉａ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ、Ｖｉｂｒｉｏ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ、Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ、およびＫｌｅｂｓｉｅｌｌａの属が挙げられる。本発明におけるターゲット生物体として重要な細菌の群は、グラム陽性の好気性および微好気性の桿菌および球菌であって、そのようなものとしては、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｌｉｓｔｅｒｉａ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ、およびＥｒｙｓｉｐｅｌｏｔｈｒｉｘの属が挙げられる。本発明の特にターゲットとなる細菌としては、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｅｒｉｃａ血清型エンテリチディス、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｃｉｕｒｉ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ属、およびＣａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉが挙げられる。
【０１１２】
さらなる細菌の属としては以下のものが挙げられる：Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ、Ｓｅｒｐｕｌｉｎａ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ、Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ、Ｈｅｍｏｐｈｉｌｕｓ、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ、Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｄｅｒｍａｔｏｐｈｉｌｕｓ。これら、ならびにここにリストアップされていないその他の細菌の群および属も、当業者によれば、本発明の好適なターゲット細菌であると認識されよう。
【０１１３】
本発明の組成物は、任意の細菌が原因の皮膚感染、特に表皮感染を治療するのには特に有用である。本発明のアニリンコポリマーのターゲットとなる真菌の属としては以下のものからなる群より選択される属が挙げられるが、これらに限定される訳ではない：Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ、Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｓ、Ｃａｎｄｉｄａ、Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｅｐｉｄｅｒｍｏｐｈｙｔｏｎ、Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ、Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍ、Ｍｕｃｏｒ、Ｒｈｉｚｏｐｕｓ、Ｓｐｏｒｏｔｈｒｉｘ、Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ、Ｐａｒａｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ、Ａｂｓｉｄｉａ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ、Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉｓ、Ｔｒｉｃｈｏｓｐｏｒｏｎ、Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ、Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ、Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ、Ｆｏｎｓｅｃｅａ、およびＰｈｉａｌｏｐｈｏｒａ。
【０１１４】
ＤＮＡウイルスおよびＲＮＡウイルスとしては、以下のものからなる群より選択される系統が挙げられる：Ｐａｒｖｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｉｄａｅ、Ｐｏｌｙｏｍａｖｉｒｉｄａｅ、Ａｄｅｎｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｈｅｐａｄｎａｖｉｒｉｄａｅ、Ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｉｄａｅ、Ｐｏｘｖｉｒｉｄａｅ、Ｐｉｃｏｒｎａｖｉｒｉｄａｅ、Ｃａｌｉｃｉｖｉｒｉｄａｅ、Ｒｅｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｔｏｇａｖｉｒｉｄａｅ、Ｆｌａｖｉｖｉｒｉｄａｅ、Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｉｄａｅ、Ｏｒｔｈｏｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｐａｒａｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｒｈａｂｄｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｆｉｌｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｂｕｎｙａｖｉｒｉｄａｅ、Ａｒｅｎａｖｉｒｉｄａｅ、およびＲｅｔｒｏｖｉｒｉｄａｅ。
【０１１５】
上述の細菌、真菌およびウイルスは、例として挙げた好適なターゲット生物体であるが、本発明が列記された種、属、科、目または綱に限定されると受け取ってはならない。
【０１１６】
ＥＳ形およびＥＢ形の両方の、３種類のアニリンコポリマー、３ＡＢＡＰＡＮＩ（３−アミノ安息香酸とアニリンとの１：１コポリマー）、ＯＡＢＡＰＡＮＩ（アントラニル酸とアニリンとの１：１コポリマー）、および３ＥＡＢＰＡＮＩ（３−アミノ安息香酸エチルとアニリンとの１：１コポリマー）について、それらの抗菌性の試験を行った。３種のものすべては、ＰＡＮＩそのものよりは、抗菌剤としてより優れた有効性を示す。
【０１１７】
コポリマーのＥＳ形は、同一のコポリマーのＥＢ形よりも、高い有効性を示す。３ＡＢＡＰＡＮＩおよびＯＡＢＡＰＡＮＩコポリマーは、３ＥＡＢＰＡＮＩよりも、微生物に対してより良好な抑制効果を示した。ポリマー鎖の中に酸性の官能基（すなわち、−ＣＯＯＨ）が存在すると、そのコポリマーの抗菌有効性が改良されることが見出された。理論に拘束されるものではないが、コポリマーの分子鎖の上の酸性のドーパントが細菌（またはその他関連の微生物体）に作用して、その結果それらが死滅するのかもしれない。別な考え方として、異なる極性の電荷を担持しているコポリマー分子と細菌との間で静電的な付着が起きるために、細菌の壁面が破壊され、細菌の内容物が暴露されるかまたは漏れだし、それによって細菌の死滅がもたらされるのかもしれない。
【０１１８】
アニリンコポリマーは、固体の形状として表面に、または液状の形態の中で適用することができる。
【０１１９】
アニリンコポリマーは、通常のポリマーフィルムの中に組み入れることが可能であり、それを表面に適用することができる。通常のポリマーフィルムとしては、ポリ（ビニルアルコール）、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリ（エチレンテレフタレート）、ポリフッ化ビニリデン、ブテンコポリマー、ヘキセンコポリマー、アクリル酸メチルコポリマー、およびエチレン酢酸ビニルコポリマーなどが挙げられるが、これらに限定される訳ではない。
【０１２０】
アニリンコポリマーは、抗菌性および／または抗真菌性および／または抗ウイルス性対象物を製造するのに使用することができる。そのような対象物としては、以下のようなものが挙げられるが、それらに限定される訳ではない：包帯、尿カテーテル、内視鏡、医用機器、病院の備品、マスク、フロア、食品袋、プラスチックフィルムラップ、食品加工表面および装置、ピペット、コンピューターのキーボードおよびマウス、化粧品、ハンドル、水タンク、浄水のための膜、洗面所、ドアハンドル、排水管、給水管、イヤピース、靴の中敷き、プール、尿または便または血小板のためのバッグ、エアコンユニット、濾過設備、低温殺菌設備および備品。
【０１２１】
アニリンポリマーは、当業者公知の任意の産業において使用することができる。そのような産業としては、以下のようなものが挙げられるが、それらに限定される訳ではない：健康産業、食品産業、包装産業、水関連産業、ペイント産業、繊維産業、プラスチック産業、ガラス産業、紙産業、ゴム産業、セラミック産業、木材産業、家禽産業、水産食品産業、スポーツ産業、および農産業。
【実施例】
【０１２２】
コポリマーの合成
アニリンと３−アミノ安息香酸との１：１コポリマー（３ＡＢＡＰＡＮＩ）、またはアニリンとアントラニル酸との１：１コポリマー（ＯＡＢＡＰＡＮＩ）の合成を、３．８８ｍＬのアニリン、それぞれ５．８５ｇの３−アミノ安息香酸またはアントラニル酸、８．６４ｇのヨウ素酸カリウム（ＫＩＯ３）および２４０ｍＬの１．２５Ｍ塩酸を使用して実施した。
【０１２３】
アニリンと３−アミノ安息香酸エチルとの１：１コポリマー（３ＥＡＢＰＡＮＩ）の合成を、０．９ｍＬのアニリン、１．６５ｇの３−アミノ安息香酸エチル、６２．５ｍＬの１．２５ＭのＨＣｌおよび２．２５ｇのＫＩＯ３を使用して実施した。
【０１２４】
ヨウ素酸カリウムおよび塩酸の溶液を７℃に冷却してから、アニリンおよび官能化アニリンモノマーを１：１のモル比で使用した。その溶液を７℃で５時間撹拌し、エメラルジン塩の形（ＥＳ）を得た。その反応混合物を濾過し、蒸留水を用いて完全に洗浄し、その未透過物をフラスコに移し替え、６％アンモニア溶液１５０ｍＬ（または、３ＥＡＢＰＡＮＩの場合には４６．８ｍＬ）と共に一晩撹拌し、ポリマーを脱ドープ（ｄｅｄｏｐｅ）して、エメラルジン塩基の形（ＥＢ）を得た。それぞれのコポリマーのＥＳ形の半分の量だけを使用して、ＥＢ形を調製した。濾過後、蒸留水を用いて繰り返し洗浄してから、その未透過物をアセトン７５ｍＬ（または、３ＥＡＢＰＡＮＩの場合には２３．５ｍＬ）と共に１５分間撹拌し、再度濾過した。ＥＢ形の場合と同じ条件で、それぞれのコポリマーのＥＳ形も、アセトンを用いて精製した。それぞれのコポリマー（ＥＢまたはＥＳ）の未透過物を、４０℃で一晩真空オーブン中に静置して乾燥させた。
【０１２５】
理論に束縛されることなく言えば、アセトンを用いて処理することによって、望ましくない毒性の副作用を有する可能性がある未反応または不完全に反応した出発物質（たとえば、モノマー）または中間体（たとえば、オリゴマー）が洗い出されたものと考えられる。この目的のためにはアセトンが好ましい化合物であるが、なにかその他の適切な溶媒を使用することも可能であろう。処理後に、ポリアニリンの抗微生物活性の低下は観察されなかった。
【０１２６】
３ＡＢＡＰＡＮＩ、ＯＡＢＡＰＡＮＩ、および３ＥＡＢＰＡＮＩのサンプルの抗微生物的性能および抗酸化的性能を比較する目的で、ＥＳ形のアニリンと官能化アニリン（−ＯＣＨ３、−ＣＨ３、−ＳＯ３Ｈ、−Ｃｌ）とのコポリマーを、３ＡＢＡＰＡＮＩ／ＯＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）サンプルの場合と同じ条件下で合成した。官能化アニリンのホモポリマー、３−アミノ安息香酸のホモポリマー（Ｐｏｌｙ３ＡＢＡ）、および３−アミノスルホン酸のホモポリマー（ＰｏｌｙＳＯ３Ｈ）もまた化学的に合成した。
【０１２７】
ＦＴＩＲ
ＰＡＮＩのＥＢ形は、１５８６、１４９３、１３０５、１１６２、および８２８ｃｍ−１に強い吸収ピークを有している。ＰＡＮＩのプロトン化された塩の形（ＥＳ）においては、キノイド単位に起因する１５８６ｃｍ−１および１１６２ｃｍ−１〜１５７４ｃｍ−１および１１３５ｃｍ−１への吸収帯のシフトが観察された。
【０１２８】
カルボニル基Ｃ＝Ｏによる特異的吸収帯が、すべてのコポリマーサンプルで認められたが、ＥＳ形における方が高強度であった。コポリマーのＥＳ形の中のＮＨ＋構造が、１１３５ｃｍ−１に現れる吸収帯により確認された。１２２０、１１０５、１０１０、および８３０ｃｍ−１における吸収帯は、ベンゼノイド環の１，４置換で生じた。官能化アニリンによる吸収帯も、コポリマーのＥＳ形およびＥＢ形の両方に見出された。
【０１２９】
ラマン
ラマンスペクトルは、ＰＡＮＩのＥＳ形およびＥＢ形のそれと同様の吸収帯を示した。コポリマーのＥＳ形において１３３６ｃｍ−１に現れる吸収帯は、カチオンラジカル種のＣ−Ｎ伸縮と同定された。ＥＳの場合のアミン変角吸収帯である、１４１４ｃｍ−１でのＮ−Ｈ変角もまた観察された。
【０１３０】
ＵＶ−ＶＩＳ
ＰＡＮＩ／ＮＭＰ溶液のＵＶ−ＶＩＳスペクトルには、〜３３０ｎｍのピーク（ベンゼノイドピーク；Ｂと呼ばれる）および〜６３０ｎｍの第二のピーク（キノイドピーク；Ｑと呼ばれる）の二つ特異的ピークが存在する。３ＥＡＢＰＡＮＩサンプルの方がより良好な溶解性を示す。
【０１３１】
ラジカル捕捉性能
コポリマーのＤＰＰＨフリーラジカル捕捉活性、およびそれぞれのコポリマーで捕捉されたＤＰＰＨラジカルあたりのアニリン単位の比率を表２に示す。
【０１３２】
【表２】
0005683268.tif 000016
【０１３３】
酸性の官能基を有するコポリマーは、酸性の官能基を有さないコポリマーよりも良好なラジカル捕捉性能を示す。３ＡＢＡＰＡＮＩ／ＯＡＢＡＰＡＮＩコポリマーおよび３ＥＡＢＰＡＮＩによるＤＰＰＨ捕捉量は、それぞれ３．１および１．７μｍｏｌである。３ＡＢＡＰＡＮＩ／ＯＡＢＡＰＡＮＩのＤＰＰＨ捕捉活性は、３ＥＡＢＰＡＮＩサンプルのほぼ２倍である。ポリマー鎖の中に存在する強酸性の基（−ＳＯ３Ｈ）を含むコポリマーは、より弱い酸性の−ＣＯＯＨ基を有するコポリマーと同程度のＤＰＰＨ活性を示す。さらに、−ＣＯＯＨ置換基を有するコポリマーのＤＰＰＨ活性は、その置換基の位置（オルトまたはメタ）とは無関係であった。したがって、それぞれのコポリマーについて最大の捕捉値を使用すると、３ＡＢＡＰＡＮＩ／ＯＡＢＡＰＡＮＩ／ＳＯ３ＨＰＡＮＩの場合には捕捉されるＤＰＰＨラジカルあたり３．４のアニリン単位の比率であったが、ＣｌＰＡＮＩの場合にはそれが８．２アニリン単位にまで大きくなった。
【０１３４】
細菌
本発明の化合物を、以下の細菌の菌株に対して試験した：Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ２５９２３（ＡＴＣＣ＝アメリカ培養細胞系統保存機関（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）（グラム陽性菌）、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＡＴＣＣ  ２５９２２（グラム陰性菌）、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ＡＴＣＣ  ２７８５３（グラム陰性菌）、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｅｒｉｃａ血清型エンテリチディス（２種の抗生物質耐性菌株；グラム陰性菌）、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ（バンコマイシン耐性菌株；グラム陽性菌）、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｃｉｕｒｉ（オキサシリン耐性菌株、多剤耐性；グラム陽性菌）、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ属（多剤耐性菌株；グラム陰性菌）、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ（多剤耐性菌株；グラム陰性菌）、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ（菌株Ａ；グラム陰性菌）、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ（菌株Ｂ；グラム陰性菌）、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｅｒｉｃａ血清型エンテリチディス（広域スペクトルベータラクタマーゼ陽性分離菌、多剤耐性；グラム陰性菌）、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ（広域スペクトルベータラクタマーゼ陽性分離菌及び多剤耐性；グラム陰性菌）、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ（メタロベータラクタマーゼ陽性及び多剤耐性；グラム陰性菌）、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ（メチシリン耐性、多剤耐性；グラム陽性菌）、Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ  ＡＴＣＣ  ＢＡＡ−７５１（グラム陽性菌）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ  ＡＴＣＣ  ６６３３（グラム陽性菌）、およびＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ  ＡＴＣＣ  ２９２１２（グラム陽性菌）。
【０１３５】
菌株の保存培養は、１５％グリセロールを補ったトリプティックソイブロス（仏国ビオメリュー（ｂｉｏＭｅｒｉｅｕｘ，Ｆｒａｎｃｅ）製）中、−８０℃で保存した。唯一の例外は、２種のＣａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ菌株であって、それらはフレッシュな分離菌として使用した。
【０１３６】
菌株を、保存培養から脳心臓浸出物（ＢＨＩ）寒天（ＢＤ−米国ベクトン・ディッキンソン・マイクロバオロジー・システム（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，ＵＳＡ）製）へ移し、空気雰囲気中３５℃で一晩インキュベートした。唯一の例外は、２種のＣａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ菌株であって、これらは、５％ウマ血液を補足したＢＨＩ寒天上で培養し、ジェンボックス・マイクロエア・システムズ（ＧＥＮｂｏｘ  ｍｉｃｒｏａｅｒ  ｓｙｓｔｅｍｓ）（仏国ビオメリュー製）を用いて得られる微好気性条件中３５℃で２日間インキュベートした。それらの菌株を同一条件下でもう一度継代培養し、その増殖した培養物を用い、デンシマット（Ｄｅｎｓｉｍａｔ）デンシトメーター（仏国ビオメリュー製）を使用することにより、無菌の綿棒を使用して５ｍＬの懸濁培地（仏国ビオメリュー製）の中で、０．５マックファーランド（約１０８ｃｆｕ／ｍＬ；ｃｆｕ／ｍＬ＝１ｍＬあたりのコロニー形成単位）に相当する細菌懸濁液を調製し、そして必要に応じてさらに希釈した。
【０１３７】
コポリマーの抗菌活性は、ａ）ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）フィルム中に分散させたコポリマーとして、およびｂ）純粋な粉体として、試験した。コポリマー／ＰＶＡフィルムを混合し、オートクレーブ中１２１℃、１５分間の滅菌を行い、ペトリ板の中に注入した。そのコポリマー／ＰＶＡフィルムから水を蒸発させるために、３５℃で４８時間インキュベーションした。ＰＶＡ中３ＡＢＡＰＡＮＩ（０．２重量％）について、グラム陰性のＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＡＴＣＣ  ２５９２２細菌およびグラム陽性のＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ２５９２３細菌の異なる量（１０６、１０５、１０４、および１０３ｃｆｕ／ｍＬ）を用いて試験した。細菌の懸濁液（１００μＬ）を、乾燥させたコポリマー／ＰＶＡフィルムの上に注ぎ、次いで、脳心臓浸出物寒天を用いて被覆した。そのプレートを３５℃で４８時間インキュベートした後に、結果を読み取った。
【０１３８】
酵母およびカビ
本発明の化合物を、以下の酵母およびカビ菌株に対して試験した：Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ、Ｃａｎｄｉｄａ  ｇｕｉｌｌｉｅｒｍｏｎｄｉｉ、Ｃａｎｄｉｄａ  ｐａｒａｐｓｉｌｏｓｉｓ、Ｃａｎｄｉｄａ  ｋｅｆｙｒ、Ｃａｎｄｉｄａ  ｇｌａｂｒａｔａ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｆｌａｖｕｓ、およびＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ。
【０１３９】
酵母の菌株を、保存培養からサボラウド（Ｓａｂｏｒａｕｄ）ブドウ糖寒天（ＳＤＡ）（仏国ビオメリュー製）の上に移し、空気雰囲気中３５℃で一晩インキュベートした。それらの酵母の菌株を同一条件下でもう一度継代培養し、その増殖した培養物を用い、デンシマットデンシトメーター（仏国ビオメリュー製）を使用することにより、０．５マックファーランド（１〜５×１０６ｃｆｕ／ｍＬ；ｃｆｕ／ｍＬ＝１ｍＬあたりのコロニー形成単位、すなわち１ｍＬあたりの酵母の数）に相当する酵母懸濁液を調製し、そして必要に応じてさらに希釈した。
【０１４０】
カビを、保存培養からサボラウドブドウ糖寒天（ＳＤＡ）（仏国ビオメリュー製）の上に移し、空気雰囲気中３５℃で５日間インキュベートした。カビを同一条件下でもう一度継代培養し、その培養物を用いて、５ｍＬのＴｗｅｅｎ−２０を０．１％（ｖ／ｖ）含むＢＨＩブロスを用いてＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓコロニーの表面を覆い、滅菌ループを用いてプロービングすることによって、接種懸濁液を調製した。その分生子の懸濁液を無菌のチューブに移し、ボルテックスにより激しく撹拌してから、ノイバウエル（Ｎｅｕｂａｕｅｒ）細胞数血球計数器を用いて顕微鏡的に計数することにより調整して、１〜５×１０６分生子／ｍＬの懸濁液を得た。その懸濁液を必要に応じて希釈した。
【０１４１】
最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）
コポリマー粉体についてのＭＩＣは、微量希釈試験法を用いて求めた。その方法は、ふた付きの無菌の平底９６ウェルポリスチレン非組織培養処理マイクロタイタープレート（マイクロプレート）中で、最終容積１００μＬで、以下のようにして実施した。
【０１４２】
４０ｍｇ（４０ｍｇ＝０．０４ｇ）のコポリマー、または対照物質として使用される純粋に化学的に合成したポリアニリン（ＰＡＮＩ）を化学天秤で秤量して、ガラスチューブに入れ、２ｍＬのＢＨＩブロス（仏国ビオメリュー製）を添加して、コポリマーまたはＰＡＮＩの２％懸濁液を得た。次いで、そのコポリマーまたはＰＡＮＩの懸濁液を、オートクレーブ中１２１℃で１５分間かけて滅菌した（加圧下、水−飽和蒸気を使用）。
【０１４３】
滅菌後、自動ピペットを用いて、ウェルあたり１００μＬのコポリマーまたはＰＡＮＩの懸濁液をトリプリケートで（コポリマーまたはＰＡＮＩ一つあたり三つのウェル）添加した。その後、すべての空のウェルに５０μＬのＢＨＩブロスを加え、自動ピペットにより（１００μＬのコポリマーまたはＰＡＮＩの懸濁液を含むウェルを第一のウェルとして開始して）一つのウェルから次のウェルへ５０μＬを移行させていくことによって、コポリマーまたはポリアニリンの懸濁液について全部で７回の２倍希釈を行った（２％−１％−０．５％−０．２５％−０．１２５％−０．０６２５％−０．０３１２５％）。この手順の後では、すべてのウェルに５０μＬの流体が含まれていた。
【０１４４】
０．５マックファーランド（〜１０８ｃｆｕ／ｍＬ）に相当する細菌懸濁液を、ＢＨＩブロスの中で１０倍希釈を２回行って〜１０６ｃｆｕ／ｍＬとし、その一方で、酵母およびカビの懸濁液については、ＢＨＩブロスで１０倍希釈を１回だけ行った。
【０１４５】
希釈された微生物を含む５０μＬのＢＨＩブロスを、５０μＬのＢＨＩブロスで作製したコポリマーまたはＰＡＮＩの懸濁液に添加した（すなわち、微生物の懸濁液と同様に、ポリアニリン懸濁液がもう一度２倍希釈た）。したがって、ウェルの中のコポリマーまたはＰＡＮＩの最終的な濃度は、１％−０．５％−０．２５％−０．１２５％−０．０６２５％−０．０３１２５％−０．０１５６２５％の順となったが、それに対して、最終的な細菌接種物は、〜５×１０５ｃｆｕ／ｍＬ含まれ、最終的な酵母およびカビ接種物は０．５〜２．５×１０５ｃｆｕ／ｍＬ含まれていた。（コポリマーまたはＰＡＮＩを含まず）ＢＨＩブロスと細菌および／または酵母／カビとだけを含むウェルを、増殖の対照として使用した。
【０１４６】
マイクロタイタープレートをそれぞれのふたで覆い、空気雰囲気中３５℃で２日インキュベートしてから、結果の読み取りを行った。Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ菌株を含むマイクロタイタープレートは、ジェンボックス・マイクロエア・システム（仏国ビオメリュー製）により得られる微好気性条件下でジャーの中でインキュベートした。
【０１４７】
最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）は、裸眼で観察して目に見えるような濁りの発生を防止できるアニリンコポリマーまたはポリアニリンの最低の濃度と定義した。
【０１４８】
ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）フィルム中に分散させたコポリマーの抗微生物活性の試験から得られた結果は、〜１０６ｃｆｕ／ｍＬでの純粋な粉体の試験で得られた結果と同程度であった。純粋なＰＶＡフィルムは抗菌効果を有していなかった。しかしながら、コポリマー／ＰＶＡフィルムは、ＰＶＡが水に溶解するために、ＰＶＡ中でのコポリマーの分散を均一に保つことができなかった（栄養培地の主成分は、９５〜９８重量％の水である）。表３に、それぞれのサンプルについて、それぞれのタイプの試験した細菌に対する抑制効果の結果（重量％）を示す。
【０１４９】
表４に、いくつかの置換されたポリアニリンによる、特定の細菌に対する抑制効果（重量％）を示す。
【０１５０】
Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ細菌に対してはコポリマーが最も有効であった。３ＡＢＡＰＡＮＩ、ＯＡＢＡＰＡＮＩおよび３ＥＡＢＰＡＮＩの３種のコポリマーはすべて、ＥＳ形またはＥＢ形のいずれにおいても、純粋に化学合成されたＰＡＮＩならびにコポリマーのＯＣＨ３ＰＡＮＩ、ＣＨ３ＰＡＮＩおよびＣｌＰＡＮＩよりも優れた抗菌剤としての有効性を示した。すべての場合において、コポリマーのＥＳ形の方が、同一のコポリマーのＥＢ形よりも、高い効果を示した。
【０１５１】
表５に、それぞれのサンプルについて、それぞれのタイプの試験した酵母およびカビに対する抑制効果の結果（重量％）を示す。
【０１５２】
３ＡＢＡＰＡＮＩと、ＯＡＢＡＰＡＮＩ（−ＣＯＯＨが３位または２位）との間では、抗微生物活性における差は見出されなかった。強酸性の基（ＳＯ３ＨＰＡＮＩコポリマー中の−ＳＯ３Ｈ）を有するコポリマーは、−ＣＯＯＨを有するコポリマー（３ＡＢＡＰＡＮＩ／ＯＡＢＡＰＡＮＩ）に類似の抗微生物活性を示した。３ＡＢＡＰＡＮＩ、ＯＡＢＡＰＡＮＩおよびＳＯ３ＨＰＡＮＩの抗酸化性の試験からも、同様の結果が得られた。
【０１５３】
３ＡＢＡＰＡＮＩ、ＯＡＢＡＰＡＮＩおよび３ＥＡＢＰＡＮＩの３種のコポリマーはすべて、多剤耐性細菌、バンコマイシン耐性ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓおよびメチシリン／オキサシリン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ、さらには酵母およびカビも含めて、抗生物質耐性細菌に対する活性を有していた。
【０１５４】
説明してきたアニリンコポリマーが、一般的な有機溶媒に可溶性であり、抗菌活性および抗真菌活性を有していることは明らかであろう。
【０１５５】
【表３ａ】
0005683268.tif 000017
【０１５６】
【表３ｂ】
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【０１５７】
【表３ｃ】
0005683268.tif 000019
［ＥＳ形は試験の前にアセトン洗浄を用いて精製もしたが、それらの活性は、ここに示したアセトンを用いた前精製をしなかったサンプルでの結果と違いはなかった。］
＊ＭＤＲ＝多剤耐性、すなわち作用機構の異なる３種以上の抗微生物剤に耐性あり；ＥＳＢＬ＝広域スペクトルベータラクタマーゼ；ＭＢＬ＝メタロベータラクタマーゼ；ＶＲ＝バンコマイシン耐性；ＭＲ＝メチシリン／オキサシリン耐性。
【０１５８】
【表４ａ】
0005683268.tif 000020
【０１５９】
【表４ｂ】
0005683268.tif 000021
＊ＭＤＲ＝多剤耐性、すなわち作用機構の異なる３種以上の抗微生物剤に耐性あり；ＥＳＢＬ＝広域スペクトルベータラクタマーゼ；ＭＢＬ＝メタロベータラクタマーゼ；ＶＲ＝バンコマイシン耐性；ＭＲ＝メチシリン／オキサシリン耐性。
【０１６０】
【表５ａ】
0005683268.tif 000022
【０１６１】
【表５ｂ】
0005683268.tif 000023
【０１６２】
作用機構
滅菌後、ならびにａ）グラム陰性のＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＡＴＣＣ  ２５９２２およびＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ＡＴＣＣ  ２７８５３、ならびにｂ）グラム陽性のＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ２５９２３細菌で処理した後の、３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）、３ＥＡＢＰＡＮＩ（ＥＳ）、ＯＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）、ＰＡＮＩ（ＥＳ）、ＳＯ３ＨＰＡＮＩ（ＥＳ）、３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＢ）およびＰＡＮＩ（ＥＢ）のＦＴＩＲスペクトルを記録した。その結果は、すべてのサンプルにおいて、Ｃ−Ｃ伸縮キノイドおよび脱プロトン化吸収帯が、９ｃｍ−１までシフトしていることを示している。理論に束縛されることなく言えば、これらの結果から、異なる極性の電荷を担持するポリマー分子と微生物たとえば（一例として）Ｅ．ｃｏｌｉ細菌との間の静電的付着によって、図１に見られるように、細菌の壁面が破壊され、細菌の内容物が漏れだし、それによって細菌を死滅させることが示唆されている。
【０１６３】
すべてのサンプルにおいて、細菌との相互作用の後、ＥＰＲシグナルが高くなった。これらの結果は、ポリマー鎖中のポーラロンの濃度が、細菌との相互作用の後では高くなったことを暗示しているが、このことは、アニリンコポリマーと細菌との間で静電的付着が起きたことのもう一つの証明である。
【０１６４】
寒天拡散法−タブレット法
以下の表６に示したコポリマーから、平均重量１００±５ｍｇ、直径１．５ｃｍのタブレットを作製した。Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ２５９２３について、抗微生物活性の試験をした。
【０１６５】
ＢＨＩ寒天２０ｍＬを、９０ｍｍペトリ板の中に注入した。０．５マックファーランドに相当するＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ２５９２３の懸濁液を、綿棒を用いてＢＨＩ寒天の上に接種した。次いで、その接種されたＢＨＩ寒天の表面上にタブレットを置いた。そのプレートを、空気中３５℃で一晩インキュベートした。それぞれのタブレットの周りの阻止帯の大きさ（単位ｍｍ）を測定した。
【０１６６】
【表６】
0005683268.tif 000024
【０１６７】
すべてのコポリマーサンプルにおいて、本発明のコポリマーが純粋に化学合成されたＰＡＮＩよりも、抗菌剤として優れた有効性を有していることが判った。強酸性の基を有するコポリマー、たとえば３ＡＢＡＰＡＮＩ、ＯＡＢＡＰＡＮＩ、およびＳＯ３ＨＰＡＮＩ（ＥＳ）が、強い阻止帯を示した。
【０１６８】
作用機構：抑制効果対殺菌／殺真菌効果
「静菌（ｓｔａｔｉｃ）」または「抑制」効果とは、薬剤／物質が微生物の増殖を抑制することを意味しているが、その一方で、殺菌／殺真菌／殺ウイルスという用語は、その薬剤／物質が微生物を死滅させるということを意味している。細菌のＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ２５９２３、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＡＴＣＣ  ２５９２２、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ＡＴＣＣ  ２７８５３、および酵母のＣａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓに対する３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）およびＰＡＮＩ（ＥＳ）の作用機構を調べた。
【０１６９】
３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）およびＰＡＮＩ（ＥＳ）を２％、１％、０．５％、０．２５％、および０．１２５％含む懸濁液を、ガラスチューブ中の２ｍＬのＢＨＩブロスで作製し、オートクレーブ中１２１℃で滅菌した。次いで、その懸濁液に微生物を接種し、５×１０５ｃｆｕ／ｍＬの細菌、および０．５〜２．５×１０５ｃｆｕ／ｍＬの酵母を得た。２４時間のインキュベーション後、すべてのチューブから１００μＬをＢＨＩ寒天プレートに移し、ガラス棒を用いてＢＨＩ寒天の表面上に拡げた。そのＢＨＩ寒天プレートを３５℃で４８時間インキュベートした後、微生物コロニーを計数した。初期微生物接種の微生物の０．１％以下しか生存していない（９９．９％が死滅した）場合には、そのサンプルは、殺菌性である（または、Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓの場合であれば殺真菌性である）とみなした。
【０１７０】
【表７】
0005683268.tif 000025
＊静菌効果が認められた。より高い濃度ではおそらく殺菌性であろう。
【０１７１】
この実験により、アニリンコポリマーの殺菌有効性が０．５重量％、そして殺真菌有効性はやや高くて濃度２重量％であることが確認された。
【０１７２】
抗微生物活性の動態学
本発明において最も有効なアニリンコポリマーであった３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）について、微生物の死滅速度の面から、動態学的検討を行った。ガラスチューブに、５ｍＬのＢＨＩブロスで２％３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）の懸濁液を作製し、オートクレーブ中１２１℃で滅菌した。次いで、懸濁液に微生物を播種した。ＣＦＵ滴定後ゼロ時間で、微生物の初期接種量を計算すると、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ２５９２３では３．４×１０５ｃｆｕ／ｍＬ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＡＴＣＣ  ２５９２２では３．８×１０５ｃｆｕ／ｍＬ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ＡＴＣＣ  ２７８５３では３．８×１０５ｃｆｕ／ｍＬ、そしてＣａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓでは１．４×１０５ｃｆｕ／ｍＬであった。時間間隔を置いて１００μＬのサンプルを採取し、ＢＨＩブロスを用いて段階的に１０倍希釈し、それぞれの希釈液から１００μＬを、ＢＨＩ寒天表面プレート全体の上にガラス棒を用いて拡げた。そのＢＨＩ寒天プレートを３５℃で４８時間インキュベートした後、コロニーを計数した。最小検出レベルは１００コロニーであった。
【０１７３】
結果は、増殖の減少をＬｏｇ１０として表した。×印をつけたデータポイントは、生存している細菌をもはや見つけることができなかった時期を表している。
【０１７４】
それらの実験結果を図２〜図５に示す。これらは、２％濃度における３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）の殺菌性能、さらには殺真菌性能を示している。３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）は、１％でも殺菌効果を示したが、ただし、４〜６倍長い死滅時間を必要とした。
【０１７５】
接種数がアニリンコポリマーの抗微生物活性におよぼす影響
動態学（死滅速度または死滅率）の場合とまったく同じ方法であるが、ただし接種数だけを変化させて、接種数の影響を調べた。ガラスチューブに、５ｍＬのＢＨＩブロスで２％３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）を含む懸濁液を作製し、オートクレーブ中１２１℃で滅菌した。次いで、懸濁液に微生物を播種した。ＣＦＵ滴定後ゼロ時間のところで、微生物の初期接種量を計算すると、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ２５９２３の場合で１．２×１０１０ｃｆｕ／ｍＬであった。時間間隔を置いて１００μＬのサンプルを採取し、ＢＨＩブロスを用いて段階的に１０倍希釈し、それぞれの希釈液から１００μＬを、ＢＨＩ寒天表面プレート全体の上にガラス棒を用いて拡げた。そのＢＨＩ寒天プレートを３５℃で４８時間インキュベート後、コロニーを計数した。最小検出レベルは１００コロニーであった。
【０１７６】
結果は、増殖の減少をＬｏｇ１０で表し、図６に示す。×印をつけたデータポイントは、生存している細菌をもはや見つけることができなかった時期を表している。この実験の部分から、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ２５９２３に対するコポリマーの抗微生物活性には接種数が顕著な影響を与えることがないということが明らかになった。接種数とは無関係に、３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）はその殺菌効果を維持していた。
【０１７７】
有機物担持がアニリンコポリマーの抗微生物活性におよぼす影響
有機物担持がアニリンコポリマーの抗微生物活性におよぼす影響を調べるために、接種数がアニリンコポリマーの抗微生物活性におよぼす影響を調べるために先に記載した手順を一般的に使用した。ガラスチューブにＢＨＩブロスで作製し、オートクレーブ中１２１℃で滅菌した３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）の懸濁液をヒト血漿と混合した。得られた混合物を、室温で３０分間静置した。次いで、その混合物に微生物を接種した。その最終容積は５ｍＬであり、それにはＢＨＩブロス、最終濃度２％の３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）、および最終濃度２０％、１０％または５％のヒト血漿が含まれていた。一方、ＣＦＵ滴定後ゼロ時間での微生物の初期接種量を計算すると、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ２５９２３の場合で１．２×１０１０ｃｆｕ／ｍＬ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＡＴＣＣ  ２５９２２の場合で５．７×１０１１ｃｆｕ／ｍＬ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ＡＴＣＣ  ２７８５３の場合で３．８４×１０１１ｃｆｕ／ｍＬ、そしてＣａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓの場合で８．１×１０７ｃｆｕ／ｍＬであった。時間間隔を置いて１００μＬのサンプルを採取し、ＢＨＩブロスを用いて段階的に１０倍希釈し、それぞれの希釈液から１００μＬを、ＢＨＩ寒天表面プレート全体の上にガラス棒を用いて拡げた。そのＢＨＩ寒天プレートを３５℃で４８時間インキュベート後、コロニーを計数した。最小検出レベルは１００コロニーであった。
【０１７８】
結果は、増殖の減少をＬｏｇ１０で表し、図７〜１１に示す。×印をつけたデータポイントは、生存している細菌をもはや見つけることができなかった時期を表している。
【０１７９】
極端に高い微生物接種量、極めて高い（２０％）有機物担持量（このタイプの実験では、１０％、さらにはそれ以下で使用されることが多い）、および最後に、血清ではなく血漿を使用しているという点から、これはアニリンコポリマーの抗微生物活性にとっては起こりうる最悪のシナリオである。これらの条件では、試験した細菌（２０％有機物担持でも殺菌作用は維持された）および真菌（殺真菌作用は有機物担持量５％でも、静真菌作用は２０％でも維持された）に対する、アニリンコポリマーの抗微生物活性を低下させはしたものの、停止はさせなかった。
【０１８０】
有機物担持がアニリンコポリマーの抗真菌活性におよぼす影響
ＭＢＣ（最小殺菌濃度、最小殺真菌濃度（ＭＦＣ）に同じ）を、初期微生物接種量の生存を０．１％以下（死滅が９９．９％）とするような最低の薬剤濃度と定義する。図１２に示すように、この定義を本発明の結果に対して適用すると、初期接種量がＬｏｇ１０８．９９であったものが、８時間後にＬｏｇ１０６．３２、２４時間後にはＬｏｇ１０５．４１となっているので、１０％血漿の存在下での３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）は２４時間後であっても、（静真菌性作用のみでなく）殺真菌性作用を示した。
【０１８１】
Ｎ−アセチル−Ｌ−システイン（ＮＡＣ）がアニリンコポリマーの抗微生物活性におよぼす影響
ＮＡＣがコポリマーの抗微生物活性におよぼす影響を、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ２５９２３に対しての３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）により調べた。
【０１８２】
８０ｍｍｏｌのＮＡＣ１ｍＬを２ｍＬの微生物と混合して、（ポリアニリン懸濁液と混合した後、これについては後述）最終濃度〜１０１０／ｍＬ（理論的接種量）の細菌を得た。ＣＦＵ滴定後ゼロ時間のところで、実際の初期接種量を計算した。その（ＮＡＣ＋微生物）の混合物を、室温に３０分間静置した。次いでその（ＮＡＣ＋微生物）の混合物を、ガラスチューブ内に２ｍＬの２．５強度のＢＨＩブロスで３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）（１００ｍｇ）を含む懸濁液を混合した（３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）懸濁液は、最初にオートクレーブ中１２１℃で滅菌しておいた）。すべて混合した後、最終容積が５ｍＬ、３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）の最終濃度が２％で、１６ｍｍｏｌのＮＡＣが含まれていた。
【０１８３】
時間間隔を置いて１００μＬのサンプルを採取し、０．９ｍＬのＢＨＩブロスを用いて段階的に１０倍希釈し、それぞれの希釈液から１００μＬを、ＢＨＩ寒天表面プレート全体の上にガラス棒を用いて拡げた。そのＢＨＩ寒天プレートを３５℃で４８時間インキュベート後、微生物コロニーを計数した。キャリーオーバー効果を回避する目的で、３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）およびＢＨＩの混合物からサンプルを直接採取することはしなかったので、最小検出レベルは１００コロニーであった。
【０１８４】
図１３に見られるように、３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）の抗微生物活性は、ＮＡＣによって顕著に向上した。その系（３ＡＢＡＰＡＮＩ＋ＮＡＣ）はさらに、極めて強い抗酸化性も示す。
【０１８５】
フィルムの抗微生物特性−寒天重ね合わせ（ａｇａｒ  ｏｖｅｒｌａｙ）法
ポリメタクリル酸メチル（ＰＭＭＡ）の上にコーティングしたθ４（ポリビニルアルコール−ＰＶＡおよび０．７重量％ＰＡＮＩ）のフィルムと、ＰＭＭＡの上にコーティングしたρ２（ＰＶＡおよび０．２重量％Ｐｏｌｙ３ＡＢＡ）のフィルムを切断して、約１×１ｃｍの小片とした。アニリンコポリマーまたはポリアニリンで覆われたフィルムの側が最上部になるように注意しながら、それらのフィルムを無菌のプラスチック製ペトリ皿の底部に置いた。
【０１８６】
次いで、それらのフィルムの上側を、５０μＬのＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ２５９２３懸濁液（含量、約１０３ｃｆｕ／ｍＬ）を用いて覆った。フィルムの表面上に播種された細菌細胞の実際の数は、ＢＨＩ寒天の表面上に５０μＬのＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ２５９２３を蒔くことにより求めた。一晩インキュベート後、コロニーを計数した。それぞれのフィルムの上には、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ２５９２３の３６７細胞が接種されたということが判明した。
【０１８７】
細菌懸濁液をフィルムの中央に置き、ピペットチップを用いてフィルムの表面全体に拡げた。次いで、それぞれのフィルムの小片を（予め別のペトリ皿の中に注入して固化させた培地から切り出した）ＢＨＩ寒天の小片を用いて覆った。フィルムの小片を入れたプラスチック製のペトリ皿をそれらのふたで覆って、３５℃で一晩インキュベートした。
【０１８８】
ポリメタクリル酸メチル（ＰＭＭＡ）の上にコーティングされたθ４（ＰＶＡおよび０．７重量％ＰＡＮＩ）およびＰＭＭＡの上にコーティングされたρ２（ＰＶＡおよび０．２重量％Ｐｏｌｙ３ＡＢＡ）の表面においては、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ２５９２３の増殖は完全に抑制された。たとえば、図１４および１５を参照されたい。ＰＡＮＩおよびＰｏｌｙ３ＡＢＡは、それらをＰＶＡコーティングの中に組み入れても、有効性が低下することはなかった。
【０１８９】
増殖を観察するのは容易ではないので、３５℃で全部で４８時間のインキュベーションの後に、フィルムの小片を覆っていたＢＨＩ寒天の小片を慎重に剥がし、無菌のループを用いて直接フィルムの表面からサンプルを取り出した。ＢＨＩ寒天の上にサンプルを播種し、３５℃で一晩インキュベートした。この手順によって、ポリアニリンフィルムを存在させることによって細菌の増殖が単に抑制されただけなのか、あるいは細菌が死滅したのか（静菌性か、殺菌性か）を見極めることも可能となった。ＰＭＭＡ上にコーティングされたθ４（ＰＶＡおよびＰＡＮＩ）、およびＰＭＭＡの上にコーティングされたρ２（ＰＶＡおよびＰｏｌｙ３ＡＢＡ）の、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ２５９２３に対する殺菌効果を観察した。それらのフィルムの写真を図１４および１５に示す。
【０１９０】
それらの結果から、アニリンコポリマーは、他の物質とのブレンド物または複合材料においても、アニリンコポリマー粉体におけるのと同じＭＩＣの抗微生物活性を有していることが判る。ブレンドするか、または複合材料に成形することが可能な物質の例としては、以下のものが挙げられる：ｉｎ  ｓｉｔｕ重合により合成されるか、またはその表面の上にコーティングされるかのいずれかによる、ポリマーたとえば、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（酢酸ビニル）、ポリ（メタクリル酸メチル）およびその他のアクリル酸誘導体、ポリ（エチレンテレフタレート）およびその他のポリエステル、ポリアミド、ポリエチレンおよびポリプロピレン、ポリフッ化ビニリデン、エチレン酢酸ビニルコポリマー、アクリル酸メチルコポリマー、ブタンコポリマー、ヘキサンコポリマー、ゴム、天然ゴムラテックス、アクリルラテックスおよびエポキシラテックス、エチルセルロース、セルロースおよびその他の多糖類、ならびにタンパク質。
【０１９１】
ウイルス
オートクレーブ処理したポリマーの３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）およびＰＡＮＩ（ＥＳ）の懸濁液を、細胞培養増殖培地（ＤＭＥＭ）で、２、１および０．４％（ｗ／ｖ）の濃度で調製した。ワクシニアウイルス（ＷＲ株）をＤＭＥＭ中で段階的に希釈して、最終濃度が１ｍＬあたり１０３〜１０５個の間の感染性粒子数になるようにした。ウイルスのアリコートを等容のポリマー懸濁液（およびポリマーを含まないＤＭＥＭの対照物）と混合し、室温で１時間穏やかに撹拌しながらインキュベートしてから、等容のそれぞれの懸濁液を直接添加して、ＣＶ−Ｉ細胞の単層培養物を複製させた。１時間後にその接種物を除去し、その細胞を５％のウシ胎児血清を含むＤＭＥＭで覆った。２日後にその培地を取り出し、細胞を０．５％クリスタルバイオレットで染色した。ウイルス懸濁液の感染力を、プラーク数を計数することにより求め、それぞれのポリマーの出発濃度について、（ポリマーを含まない対照との比較で）感染力の低下を求めた。
【０１９２】
３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）およびＰＡＮＩ（ＥＳ）と１時間接触させた後に生存していたワクシニアウイルスのパーセンテージを表８に示す。その結果は、ポリマーと１時間接触させた後に生存していた（感染力を維持している）ウイルスのパーセントの数字として表している。３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）では、ＰＡＮＩ（ＥＳ）とは対照的に、ウイルス感染力の顕著な抑制が得られた。０．５重量％および１重量％の３ＡＢＡＰＡＮＩ（ＥＳ）では、１０倍および１００倍の高濃度ウイルスでも、同様なパターンの感染力の低下が観察された。
【０１９３】
【表８】
0005683268.tif 000026
【０１９４】
具体例を挙げながら本発明の説明をしてきたが、多くのその他の形態においても具体化することが可能であることは、当業者には明らかであろう。特に、記載された任意の実施例の任意の一つの特徴は、記載されたその他の実施例のいずれと組み合わせた形であっても具体化することができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
0005683268.tif 000031
【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
0005683268.tif 000039
【図１２】
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【図１３】
0005683268.tif 000041
【図１４】
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【図１５】
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