(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）０〜２５０ｍｍＨｇの範囲で真空圧を送達するデバイス；
ｂ）創傷を覆う半透過性であるシール；
ｃ）デバイスをシールに連結して創傷に真空圧を適用するチューブ；および
ｄ）（ｉ）創傷内で圧力の均一な分配を促進する支持体；および
（ｉｉ）支持体に支持された１０ミクロン未満の平均ファイバーサイズをもつポリ−Ｎ−アセチルグルコサミンで構成される止血作用剤
を含んでなる創傷に接触するための止血適用物
を含む、創傷治癒および止血という目的のために創傷に大気圧未満の圧力を送達するシステム。
【請求項２】
止血作用剤が、２〜４ミクロンの平均ファイバーサイズをもつポリ−Ｎ−アセチルグルコサミンで構成される、請求項１のシステム。
【請求項３】
支持体が多孔性スポンジを含む、請求項１のシステム。
【請求項４】
スポンジが１０ミクロンを超え、かつ５００ミクロン未満の孔径を有する、請求項３のシステム。
【請求項５】
ａ）０〜２５０ｍｍＨｇの範囲の真空圧下、創傷内で圧力の均一な分配を促進する支持体；および
ｂ）支持体に接着された１０ミクロン未満の平均ファイバーサイズをもつポリ−Ｎ−アセチルグルコサミンで構成される止血作用剤：
を含んでなる、創傷治癒適用物。
【請求項６】
支持体が多孔性スポンジを含む、請求項５の適用物。
【請求項７】
スポンジが１０ミクロンを超え、かつ５００ミクロン未満の孔径を有する、請求項６の適用物。
【請求項８】
ａ）０〜２５０ｍｍＨｇの範囲で真空圧を送達するデバイス；
ｂ）創傷を覆う半透過性であるシール；
ｃ）デバイスをシールに連結して創傷に真空圧を適用するチューブ；および
ｄ）創傷に接触させるための適用物であって、
（ｉ）止血性であり、
（ｉｉ）創傷治癒を改善し、そして
（ｉｉｉ）１．５未満の生物反応性評点を有する、適用物
を含む、創傷治癒および止血という目的のために創傷に大気圧未満の圧力を送達するシステム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明の優先権
本発明は、「Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ  ｔｏ  Ｓｃｒｅｅｎｓ  ｔｏ  Ｆａｃｉｌｉｔａｔｅ  Ｈｅｍｏｓｔａｓｉｓ  ａｎｄ  Ｗｏｕｎｄ  Ｈｅａｌｉｎｇ．（止血および創傷治癒を促進するためのスクリーンへのポリマー材料の適用）」と題する２００７年７月１８日提出の米国暫定出願第６０／９５９，９３２号に対する優先権を請求するものであり、これは引用によって本明細書に組み入れられている。
【０００２】
本発明は、一般に、止血および創傷治癒を促進するための方法およびデバイスに関する。特に、本発明は、止血および創傷治癒を促進する、骨組み（ｓｃａｆｆｏｌｄ）上に配置されたポリマー材料を含んでなるデバイスに関する。具体的には、本発明は、陰圧デバイスと一緒にそのような骨組みを使用することを意図している。
【背景技術】
【０００３】
診断の道具および治療における改善は、心疾患、がんおよび卒中からの罹患率の減少へと導いた（非特許文献１）けれども、糖尿病の蔓延（非特許文献２）および高齢集団（非特許文献３）は、今や、創傷ケアに対する危急の挑戦を見せつつある（非特許文献４；非特許文献５）。この集団においては抗凝血薬の使用が頻繁にある。また、炎症状態における多くの傷は、正常な凝血パラメーターの存在においてさえ有意の出血を有することがある。創傷治癒を促進するための器具および技術はこれらの患者のケアにおいては緊急性を有する。凝血および創傷治癒の両方を増進できるデバイスまたはシステムの利用は、処置における有意な進歩になるであろう。
【０００４】
吸引は、長い間、創傷治癒において価値のある道具であった。創傷処置における吸引および関連技術の使用は文献において十分に特徴づけられている。（参照、例えば非特許文献６）。例えば、吸引ドレーンが大きい外科手術空間の閉鎖を促進する間、胸部チューブは壁側胸膜と肺胸膜に接近を繰り返す。
【０００５】
創傷の処置における、吸引単独以上の近年の改善は、ＡｒｇｅｎｔａおよびＭｏｒｙｋｗａｓのＶａｃｕｕｍ  Ａｓｓｉｓｔｅｄ  Ｃｌｏｓｕｒｅ（ＶＡＣ）  ｓｙｓｔｅｍ（真空補助閉鎖システム）で例示される陰圧または大気圧未満の圧力における治療システムの導入であった。（非特許文献７）；（非特許文献８）；（特許文献１；特許文献２）。Ａｒｇｅｎｔａらは、創傷中の圧の分布をコントロールすることが創傷治癒を促進するのに重要であることを見い出した。最初の設計では、陰圧が創傷部位に直接適用された網（ｍｅｓｈ）の上に分配された。
【０００６】
ＶＡＣシステムは複雑な創傷の広い配列を処置するために多数の中心において好適な方法になった。その近年の商業的態様では、ＶＡＣは、閉塞性の（ｏｃｃｌｕｓｉｖｅ）ポリウレタン滅菌布によって覆われたポリウレタンエーテル開孔フォーム（４００−６００μｍ）に大気圧未満の圧力を送達する真空ポンプを含んでなるシステムである。それは、創傷部位に接する開孔ポリウレタンフォーム、半閉塞性滅菌布、および真空または吸引ポンプに加えて吸引チューブを含む。数種の将来的研究は、ＶＡＣシステムが、ウエットからドライへのドレッシングの交換のような慣用方法と同様に少なくとも２倍急速に、慢性創傷の治癒を増進することを示した。（非特許文献９）；（非特許文献１０）。臨床医は、全体的収縮および肉芽組織の誘導を含む、創傷における急速な変化を注目した。（非特
許文献１０）；（非特許文献１１）。
【０００７】
デバイスの商業的成功にも拘らず、それはある種の制約を有する。１つの主要な制約は、デバイスの使用前に出血が完全に止められなければ、創傷における出血が継続または増加するので、しばしばＶＡＣシステムの除去を要することである。このことは、患者の多数が、クマジン（Ｃｏｕｍａｄｉｎ）、へパリン、ロベノックス（Ｌｏｖｅｎｏｘ）、プラビックス（Ｐｌａｖｉｘ）およびアスピリンのような抗凝血薬を与えられている場合には特に問題になった。止血を得る有効な方法を有することは、選ばれた患者におけるＶＡＣデバイスにとって大きな利点であろう。したがって、止血特性を組み込んでいる陰圧創傷デバイスは創傷ケア社会にとって大きな価値をもつであろう。
【０００８】
現在、市場にはミクロファイバー状コラーゲン、酸化再生セルロースおよび凍結乾燥ゼラチンを含む、多数の止血作用剤（ａｇｅｎｔ）が存在する。これらの作用剤の各々は止血を助けることができるが、一般に臨床医は、それらが原因となり得る異物応答のために多くの創傷でこれらを使用することをしたがらない。フィブリン接着剤のような他の方法は費用がかかり、かつ少なくともウイルス伝染の理論的リスクを有する。
【０００９】
さらに、そのような応用において使用される止血作用剤それ自体が創傷治癒増進効果をもつならばそれが好ましいであろう。若干の止血作用剤は出血を制御し、そして低い異物応答（ＩＳＯ移植試験における好ましい性能によって示されるように）を有するが、それは負の創傷治癒効果をもつことがある。（例えば、Ｅｔｈｉｃｏｎ，Ｉｎｃ．によって製造される外科手術デバイス）
したがって、ＶＡＣのような陰圧創傷ケアデバイス中に組み込むことができ、またデバイスの効能を増進し（または少なくとも変えない）、そして有意な異物応答を誘導しない止血作用剤を組み入れている適用物が強く要望される。
【００１０】
高度に均質かつ純粋なポリ−Ｎ−アセチルグルコサミン（ｐＧｌｃＮＡｃ）ナノファイバーが、海洋微藻類の培養によって単離することができる。（非特許文献１２）。微藻類のナノファイバーを含有するｐＧｌｃＮＡｃパッチ（ＳｙｖｅｋＰａｔｃｈＴＭ，Ｍａｒｉｎｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｄａｎｖｅｒｓ，ＭＡ）は、カテーテル除去後の出血を制御するための止血作用剤として特徴づけられ、そして現在では、非侵入性の閉鎖デバイスとして介入心臓病学および放射線医学において使用される。（非特許文献１２）；（非特許文献１３）。
【００１１】
Ｎ−アセチルグルコサミンを含有するオリゴ糖および多糖類は、グリコサミノグリカンの重要な種類、真皮において多く代表される分子であり、そして優れた創傷治癒特性を有する。それらは既に、外科手術の接着阻止、関節痛の軽減および再構成手術における皮膚置換のために使用されている。（非特許文献１４；非特許文献１５；非特許文献１６；非特許文献１７；非特許文献１８）。
【００１２】
さらに、Ｎ−アセチルグルコサミンはキトサン、例証された止血特性をもつポリマー、において含有される。（非特許文献１９）。類似の分子に基づくけれども、ｐＧｌｃＮＡｃおよびキトサンは構造的、化学的および生物学的差異を有する；前者は高度に整えられた不溶性繊維から構成されるが、後者は不均一の可溶性構造を表す。（非特許文献２０）。これらの構造的非類似性は２種の材料間の止血性の差異をもたらす。比較すれば、ｐＧｌｃＮＡｃパッチは症例の１００％で止血を誘導したが、一方いくつかのキトサン基材のパッチはガーゼパッド制御よりも悪い性能であった。（非特許文献２０）。
【００１３】
ポリ−Ｎ−アセチルグルコサミン・ナノファイバーは、血小板、赤血球および内皮細胞と相互作用し（非特許文献２１；非特許文献２２）、そして近年例証された一連の事象を
通じて止血を加速する。（非特許文献２３；非特許文献２４；非特許文献２５）。
【００１４】
血小板はｐＧｌｃＮＡｃパッチのナノファイバーと特異的に相互作用し、そして結果的にそれらの活性化が増幅される。活性化応答は、偽足伸長、形状変化、インテグリン複合体活性化、カルシウム信号伝達の活性化、表面膜におけるホスファチジルセリン露出、血小板へのＸ因子の結合およびフィブリン重合動態（ｋｉｎｅｔｉｃｓ）の加速を含む。活性化によって、血小板は、血管収縮性物質を遊離し、そしてナノファイバーとの接触後に血餅形成を活性化して、創傷治癒に貢献する。
【００１５】
したがって、ＶＡＣのような陰圧創傷ケアデバイス中に組み込むことができる止血作用剤、好ましくは止血作用剤ｐＧｌｃＮａｃを組み込んでいる適用物（ａｐｐｌｉａｎｃｅ）は、高度に所望されるであろう。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１６】
【特許文献１】米国特許第５，６３６，６４３号
【特許文献２】米国特許第５，６４５，０８１号
【非特許文献】
【００１７】
【非特許文献１】Ｊｅｍａｌ，Ａ．，Ｗａｒｄ，Ｅ．，Ｈａｏ，Ｙ．，＆  Ｔｈｕｎ，Ｍ．Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｌｅａｄｉｎｇ  ｃａｕｓｅｓ  ｏｆ  ｄｅａｔｈ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ，１９７０−２００２．Ｊａｍａ  ２９４，１２５５−９，２００５
【非特許文献２】Ｇｅｒｓｔｅｉｎ，Ｈ．Ｃ．，＆  Ｗａｌｔｍａｎ，Ｌ．Ｗｈｙ  ｄｏｎ‘ｔ  ｐｉｇｓ  ｇｅｔ  ｄｉａｂｅｔｅｓ？  Ｅｘｐｌａｎａｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ｖａｒｉａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｄｉａｂｅｔｅｓ  ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ  ｌｉｖｉｎｇ  ｉｎ  ａ  ｄｉａｂｅｔｏｇｅｎｉｃ  ｅｎｖｉｒｏｍｅｎｔ．Ｃｍａｊ  １７４，２５−６  ２００６
【非特許文献３】Ｌａｎｅ，Ｎ．Ｅ．Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ，ｅｔｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ｏｆ  ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ．Ａｍ．Ｊ  Ｏｂｓｔｅｔ  Ｇｙｎｅｃｏｌ  １９４，Ｓ３−１１  ２００６
【非特許文献４】Ｃａｖａｎａｇｈ，Ｐ．Ｒ．，Ｌｉｐｓｋｙ，Ｂ．Ａ．，Ｂｒａｄｂｕｒｙ，Ａ．Ｗ．＆  Ｂｏｔｅｋ，Ｇ．  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｆｏｒ  ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｆｏｏｔ  ｕｌｃｅｒｓ．Ｌａｎｃｅｔ  ３６６，１７２５−３５  ２００５
【非特許文献５】Ｆａｌａｎｇａ，Ｖ．  Ｗｏｕｎｄ  ｈｅａｌｉｎｇ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｆｏｏｔ．Ｌａｎｃｅｔ  ３６６，１７３６−４３  ２００５
【非特許文献６】Ｃｈａｒｉｋａｒ  ａｎｄ  Ｊｅｔｅｒ，Ｏｒｒｉｎｇｅｒ，Ｗｏｏｄｉｎｇ−Ｓｃｏｔｔ
【非特許文献７】Ａｒｇｅｎｔａ，Ｌ．Ｃ．，Ｍｏｒｙｋｗａｓ，Ｍ．Ｊ．Ｖａｃｃｕｕｍ−ａｓｓｉｓｔｅｄ  ｃｌｏｓｕｒｅ：ａ  ｎｅｗ  ｍｅｔｈｏｄ  ｏｆ  ｗｏｕｎｄ  ｃｏｎｔｒｏｌ  ａｎｄ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ：ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅ．Ａｎｎ．Ｐｌａｓｔ．Ｓｕｒｇ．３８：５６３，１９９７
【非特許文献８】Ｍｏｒｙｋｗａｓ，Ｍ．Ｊ．，Ａｒｇｅｎｔａ，Ｌ．Ｃ．，Ｓｈｅｌｔｏｎ−Ｂｒｏｗｎ，Ｅ．Ｉ．，ｅｔ  ａｌ．Ｖａｃｕｕｍ−ａｓｓｉｓｔｅｄ  ｃｌｏｓｕｒｅ：ａ  ｎｅｗ  ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  ｗｏｕｎｄ  ｃｏｎｔｒｏｌ  ａｎｄ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ：ａｎｉｍａｌ  ｓｔｕｄｉｅｓ  ａｎｄ  ｂａｓｉｃ  ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ．Ａｎｎ．Ｐｌａｓｔ．Ｓｕｒｇ．３８：５５３，１９９７
【非特許文献９】Ｊｏｓｅｐｈ，Ｅ．，Ｈａｍｏｒｉ，Ｃ．Ａ．，Ｂｅｒｇｍａｎ，Ｓ．，ｅｔ  ａｌ．Ａ  ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ  ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ  ｔｒａｉｌ  ｏｆ  ｖａｃｕｕｍ−ａｓｓｉｓｔｅｄ  ｃｌｏｓｕｒｅ  ｖｅｒｓｕｓ  ｓｔａｎｄａｒｄ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｎｏｎｈｅａｌｉｎｇ  ｗｏｕｎｄｓ．Ｗｏｕｎｄｓ  １２：６０，２０００
【非特許文献１０】Ｅｄｉｎｇｔｏｎ，Ｍ．Ｔ．，Ｂｒｏｗｎ，Ｋ．Ｒ．，Ｓｅａｂｒｏｏｋ，Ｂ．Ｒ．，ｅｔ  ａｌ．Ａ  ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ  ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ  ｗｏｕｎｄ  ｄｒｅｓｓｉｎｇ  ｆｏｒ  ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｆｏｏｔ  ｗｏｕｎｄｓ．Ａｎｎ．Ｖａｓｃ．Ｓｕｒｇ．１７：６４５，２００３
【非特許文献１１】Ｓａｘｅｎａ，Ｖ．，Ｈｗａｎｇ，Ｃ．Ｗ．，Ｈｕａｎｇ，Ｓ．，ｅｔ  ａｌ．Ｖａｃｕｕｍ−ａｓｓｉｓｔｅｄ  ｃｌｏｓｕｒｅ：ｍｉｃｒｏｄｅｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｗｏｕｎｄｓ  ａｎｄ  ｃｅｌｌ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ．Ｐｌａｓｔ．Ｒｅｃｏｎｓｔｒ．Ｓｕｒｇ．１１４；１０８６，２００４
【非特許文献１２】Ｖｏｕｒｎａｋｉｓ  ＪＮ，Ｄｅｍｃｈｅｖａ  Ｍ，Ｗｈｉｔｓｏｎ  Ａ，Ｇｕｉｒｃａ  Ｒ，Ｐａｒｉｓｅｒ  ＥＲ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ，ａｎｄ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｏｌｙ−Ｎ−ａｃｅｔｙｌ  ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ  ｕｓｅ  ａｓ  ａ  ｈｅｍｏｓｔａｔｉｃ  ａｇｅｎｔ．Ｊ．Ｔｒａｕｍａ  ２００４，５７（１  Ｓｕｐｐｌ）：Ｓ２−６
【非特許文献１３】Ｎａｉｊａｒ  ＳＦ，Ｈｅａｌｅｙ  ＮＡ，Ｈｅａｌｅｙ  ＣＭ，ＭｃＧａｒｒｙ  Ｔ，Ｋｈａｎ  Ｂ，Ｔｈａｔｔｅ  ＨＳ，ｅｔ  ａｌ．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｏｌｙ−Ｎ−ａｃｅｔｙｌ  ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ  ａｓ  ａ  ｈｅｍｏｓｔａｔｉｃ  ａｇｅｎｔ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｕｎｄｅｒｇｏｉｎｇ  ｃａｒｄｉａｃ  ｃａｔｈｅｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ：ａ  ｄｏｕｂｌｅ  ｂｌｉｎｄ，ｒａｎｄａｍａｉｚｅｄ  ｓｔｕｄｙ．Ｊ  Ｔｒａｕｍａ  ２００４，５７（１  Ｓｕｐｐｌ）：Ｓ３８−４１
【非特許文献１４】Ｆａｚｉｏ  ＶＷ，Ｃｏｈｅｎ  Ｚ，Ｆｌｅｓｈｍａｎ  ＪＷ，ｖａｎ  Ｇｏｏｒ  Ｈ，Ｂａｕｅｒ  ＪＪ，Ｗｏｌｆｆ  ＢＧ，ｅｔ  ａｌ．Ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ａｄｈｅｓｉｖｅ  ｓｍａｌｌ−ｂｏｗｅｄ  ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｓｅｐｒａｆｉｌｍ  ａｄｈｅｓｉｏｎ  ｂａｒｒｉｅｒ  ａｆｔｅｒ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｒｅｓｅｃｔｉｏｎ．Ｄｉｓ．Ｃｏｌｏｎ  Ｒｅｃｔｕｍ  ２００６；４９（１）：１−１１
【非特許文献１５】Ｐｅｎａ  Ｅｄｅ  Ｌ，Ｓａｌａ  Ｓ，Ｒｏｖｉｒａ  ＪＣ，Ｓｃｈｍｉｄｔ  ＲＦ，Ｂｅｌｍｏｎｔｅ  Ｃ．Ｅｌａｓｔｏｖｉｓｃｏｕｓ  ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ  ｗｉｔｈ  ａｎａｌｇｅｓｉｃ  ｅｆｆｃｔｓ  ｏｎ  ｊｏｉｎｔ  ｐａｉｎ  ｒｅｄｕｃｅ  ｓｔｒｅｃｈ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｉｏｎ  ｃｈａｎｎｅｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ．Ｐａｉｎ  ２００２，９９（３）：５０１−８
【非特許文献１６】Ｏｒｇｉｌｌ  ＤＰ，Ｓｔｒａｕｓ  ＦＨ，２ｎｄ，Ｌｅｅ  ＲＣ，Ｔｈｅ  ｕｓｅ  ｏｆ  ｃｏｌｌａｇｅｎ−ＧＡＧ  ｍｅｍｂｒａｎｅｓ  ｉｎ  ｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｖｅ  ｓｕｒｇｙ．Ａｎｎ  ＮＹ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．１９９９；８８８：２３３−４８
【非特許文献１７】Ｐｉｅｔｒａｍａｇｇｉｏｒｉ，Ｇ．，Ｙａｎｇ，Ｈ．，Ｓｃｈｅｒｅｒ，Ｓ．Ｓ．，Ｋａｉｐａｉｎｅｎ，Ａ．，Ｃｈａｎ，Ｒ．Ｋ．，Ａｌｐｅｒｏｖｉｃｈ，Ｍ．，Ｎｅｗａｌｄｅｒ，Ｊ．，Ｄｅｍｃｈｅｖａ，Ｍ．，Ｖｏｕｒｍａｋｉｓ，Ｊ．Ｎ．，Ｖａｌｅｒｉ，Ｒ．Ｃ．，Ｈｅｃｈｍａｎ，Ｈ．Ｂ．，Ｏｒｇｉｌｌ，Ｄ．Ｐ．Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｐｏｌｙ−Ｎ−ａｃｅｔｙｌ  ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ（ｐＧｌｃＮＡｃ）ｐａｔｃｈ  ｏｎ  ｗｏｕｎｄ  ｈｅａｌｉｎｇ  ｉｎ  ｄｂ／ｄｂ  ｍｏｕｓｅ．Ｊ．Ｔｒａｕｍａ（２００８）６４（３）：８０３−８０８
【非特許文献１８】Ｖｏｕｒｍａｋｉｓ，Ｊ．，Ｅｌｄｒｉｄｇｅ，Ｊ．，Ｄｅｍｃｈｅｖａ  Ｍ．ａｎｄ  Ｍｕｉｓｅ−Ｈｅｌｍｅｒｉｃｋｓ，Ｒ．Ｐｏｌｙ−Ｎ−ａｃｅｔｙｌ  ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ  Ｎａｎｏｆｉｂｅｒｓ  Ｒｅｇｕｌａｔｅ  Ｅｎｄｏｔｈｅｒｉａｌ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｖｅｍｅｎｔ  ａｎｄ  Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ：Ｄｅｐｅｎｄｅｎｃｙ  ｏｎ  Ｉｎｔｅｇｒｉｎ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｅｔｓ  １．Ｊ．Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｒｅｓ，（２００８）４５：２２２−２３２
【非特許文献１９】Ｍａｌｅｔｔｅ  ＷＧ，Ｑｕｉｇｌｅｙ  ＨＪ，Ｇａｉｎｅｓ  ＲＤ，Ｊｏｈｎｓｏｎ  ＮＤ，Ｒａｉｎｅｒ  ＷＧ，Ｃｈｉｔｏｓａｎ：ａ  ｎｅｗ  ｈｅｍｏｓｔａｔｉｃ．Ａｎｎ  Ｔｈｏｒａｃ  Ｓｕｒｇ  １９８３，３６（１）：５５−８
【非特許文献２０】Ｆｉｓｃｈｅｒ  ＴＨ，Ｃｏｎｎｏｌｌｙ  Ｒ，Ｔｈａｔｔｅ  ＨＳ，Ｓｃｈｗａｉｔｚｂｅｒｇ  ＳＳ．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｏｆ  ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ａｎｄ  ｈｅｍｏｓｔａｔｉｃ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｐｏｌｙ−Ｎ−ａｃｅｔｙｌ  ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ  Ｓｙｖｅｋ  Ｐａｔｃｈ  ｗｉｔｈ  ｐｒｏｄｕｃｔｓ  ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ｃｈｉｔｏｓａｎ．Ｍｉｃｒｏｓｃ  Ｒｅｓ  Ｔｅｃｈ  ２００４，６３（３）：１６８−７４
【非特許文献２１】Ｔｈａｔｔｅ  ＨＳ，Ｚａｇａｒｉｎｓ  Ｓ，Ｋｈｕｒｉ  ＳＦ，Ｆｉｓｃｅｒ  ＴＨ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｏｆ  ｐｏｌｙ−Ｎ−ａｃｅｔｙｌ  ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ  ｐｏｌｙｍｅｒ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｈｅｍｏｓｔａｓｉｓ：ｐｌａｔｅｔ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ．Ｊ  ｔｒａｕｍａ  ２００４；５７（１  Ｓｕｐｐｌ）：Ｓ１３−２１
【非特許文献２２】Ｔｈａｔｔｅ  ＨＳ，Ｚａｇａｒｉｎｓ  ＳＥ，Ａｍｉｊｉ  Ｍ，Ｋｈｕｒｉ  ＳＦ．Ｐｏｌｙ−Ｎ−ａｃｅｔｙｌ  ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｒｅｄ  ｂｌｏｏｄ  ｃｅｌｌ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ．Ｊ  ｔｒａｕｍａ  ２００４；５７（１  Ｓｕｐｐｌ）：Ｓ７−１２
【非特許文献２３】Ｆｉｓｃｈｅｒ  ＴＨ，Ｔｈａｔｔｅ  ＨＳ，Ｎｉｃｏｌｓ  ＴＣ，Ｂｌｅｎｄｅｒ−Ｎｅａｌ  ＤＥ，Ｂｅｌｌｉｎｇｅｒ  ＡＤ，Ｖｏｕｒｎａｋｉｓ  ＪＮ．Ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃ  ｐｌａｔｅｌｅｔ  ｉｎｔｅｇｒｉｎ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ａｎｄ  ｆａｃｔｏｒ  ＸＩＩ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｐｏｌｙ−Ｎ−ａｃｅｔｙｌ  ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ  ｆｉｂｅｒ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｈｅｍｏｓｔａｓｉｓ．Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ  ２００５．２６（２７）：５４３３−４３
【非特許文献２４】Ｆｉｓｃｈｅｒ，Ｔ．Ｈ．，Ｖａｌｅｒｉ，Ｃ．Ｒ．，Ｓｍｉｔｈ，Ｃ．Ｊ．，Ｓｃｕｌｌ，Ｃ．Ｍ．，Ｍｅｒｒｉｃｋｓ，Ｅ．Ｐ．，Ｎｉｃｈｏｌｓ，Ｔ．Ｐ．，Ｄｅｍｃｈｅｖａ，Ｍ．ａｎｄ  Ｖｏｕｒｎａｋｉｓ，Ｊ．Ｎ．Ｎｏｎ−ｃｌａｓｓｉｃａｌ  Ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ  ｉｎ  Ｓｕｒｆａｃｅ  Ｈｅｍｏｓｔａｓｉｓ：Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｐｏｌｙ−Ｎ−ａｃｅｔｙｌ  ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ  Ａｌｔｅｒｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｒｅｄ  Ｂｌｏｏｄ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｈｒｏｍｂｏｇｅｎｅｃｉｔｙ．（２００８）Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ  Ｒｅｓ，ｉｎ  ｐｒｅｓｓ
【非特許文献２５】Ｓｍｉｔｈ，Ｃ．Ｊ．，Ｖｏｕｒｍａｋｉｓ，Ｊ．Ｎ．，Ｄｅｍｃｈｅｖａ，Ｍ．ａｎｄ  Ｆｉｓｃｈｅｒ，Ｔ．Ｈ．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ  ｆｏｒ  Ｓｕｒｆａｃｅ  Ｈｅｍｏｓｔａｓｉｓ  ｏｎ  Ｒｅｄ  Ｂｌｏｏｄ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ．（２００８）  Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃ  Ｒｅｓ．Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，ｉｎ  ｐｒｅｓｓ．
【発明の概要】
【００１８】
本発明は、創傷内の圧の均一な分配を促進する支持体；および支持体に接着された止血作用剤を含んでなる、陰圧とともに使用するための創傷治癒適用物を意図する。１つの実施態様では、支持体はスクリーンである。さらなる実施態様では、支持体はフォーム（ｆｏａｍ）であってもよい。止血作用剤は、フィブリン、トロンビン、酸化再生セルロース、寒冷沈降物、血小板およびＶＩＩ、ＶＩＩＩ，ＩＸ因子を含む血液凝固カスケード因子を含む、いかなる既知の止血作用剤であってもよい。好適な実施態様では、止血作用剤はコラーゲンである；その他の好適な実施態様では、止血作用剤は、ポリ−Ｎ−アセチルグルコサミンを含む。
【００１９】
また、本発明は、（ａ）創傷に対して陰圧を送達するためのシステムおよび（ｂ）止血作用剤により被覆されたスクリーンまたは他の開孔構造骨組みを含んでなる創傷治癒適用物：を含んでなる創傷治癒のためのシステムを含む。本発明の１つの態様では、止血作用剤はポリ−Ｎ−アセチルグルコサミン・ナノファイバー（ｐ−ＧｌｃＮａｃ）である。１つの実施態様では、創傷治癒適用物は、ポリ−Ｎ−アセチルグルコサミン・ナノファイバーにより活性表面上を被覆された開孔ポリウレタンフォームからなる。その他の実施態様では、創傷治癒適用物はｐＧｌｃＮａｃ被覆スクリーンである。
【００２０】
１つの態様では、本発明の創傷治癒システムは、創傷治癒適用物、例えばｐＧｌｃＮａｃ被覆スクリーンまたはフォーム、不透過性カバー、連結用チューブおよび真空給源を含む。
【００２１】
その他の態様では、本発明は、（ａ）０〜２５０ｍｍＨｇの範囲で真空圧を送達するデバイス；（ｂ）創傷を覆う半透過性であるシール；（ｃ）デバイスをシールに連結するチューブ；および（ｄ）（ｉ）創傷内で圧力の均一分布を促進する支持体；および（ｉｉ）スクリーンに接着された止血作用剤を含んでなる創傷治癒適用物：を含む、創傷治癒および止血という目的のために創傷に大気圧未満の圧力を伝えるシステムを含む。
【００２２】
１つの実施態様では、創傷治癒適用物は、約１０ミクロン未満の平均ファイバーサイズをもつポリ−Ｎ−アセチルグルコサミンを含む止血作用剤を含む。好適な実施態様では、ファイバーサイズは約２〜約４ミクロンである。創傷治癒適用物の厚さは、適用物および使用される支持体の種類にしたがって変えることができる。１つの実施態様では、ポリ−Ｎ−アセチルグルコサミンの薄膜は、それ自体の骨組みとして働き、そして創傷部位に吸収されるであろう。異なる実施態様では、ｐＧｌｃＮａｃはワイヤーメッシュ支持体を覆って配置されるであろう。
【００２３】
さらなる実施態様では、ｐＧｌｃＮａｃは、骨組み、好ましくは、細胞の増殖を可能にする多孔性スポンジのような多孔性骨組みの上または中に配置されてもよい。そのような多孔性スポンジの製造は当該技術分野において周知である。一般に、スポンジは凍結乾燥によって製造でき、そして一般に１０ミクロンを超え５００ミクロン未満の孔径、好ましくは５０〜１５０ミクロンの範囲の孔径、もっとも好ましくは約１００ミクロンの孔径を有するであろう。
【００２４】
その他の実施態様では、止血作用剤はサイズ０．０１〜５ミクロンの平均ファイバー長をもつコラーゲンからなる。さらなる実施態様では、止血作用剤はＩ型コラーゲンからなる。なおその他の実施態様では、止血作用剤はｐＨ３．２を超える溶液中に分散されたコラーゲンからなる。なおその他の実施態様では、止血作用剤は０．５〜１０日の生分解時間を有するコラーゲンからなる。なおその他の実施態様では、止血作用剤は、スクリーン上の厚さ０．０１〜１００ミクロンを有するコラーゲンからなる。
【００２５】
さらなる態様では、本発明のシステムは、フィブリン、トロンビン、酸化再生セルロース、キチン、キトサン、アルギン酸カルシウム、寒冷沈降物、血小板およびＶＩＩ、ＶＩＩＩ，ＩＸ因子を含む血液凝固カスケード因子からなる群から選ばれる材料を含む止血作用剤を含んでなってもよい。
【００２６】
その他の態様では、本発明は、０〜２５０ｍｍＨｇの範囲で真空圧を送達するデバイス；創傷を覆う半透過性であるシール；適用物をシールに連結するチューブ；および適用物が止血性であり、創傷治癒を改善し、そして１．５未満の生物反応性評点（ｂｉｏｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ  ｒａｔｉｎｇ）を有する適用物：を含む、創傷治癒および止血という目的のために創傷に大気圧未満の圧力を伝えるシステムである。好適な実施態様では、適用物は、高密度ポリエチレンまたは他の適当な対照に比較した場合、１．０未満、より好ましくは０．６未満、なおより好ましくは０．５未満、もっとも好ましくは約０．０またはそれ以下の生物反応性を有する。
【発明の詳細な記述】
【００２７】
背景
ＶＡＣシステムではフォーム接触（ＦＣ）の領域においてのみ創傷組織の微変形を惹起するので、フォームまたはスクリーンの界面が創傷に対して大気圧未満の圧力を伝達するために不可欠であるあることは、既に示されていた。（Ｓａｘｅｎａ  Ｖ，Ｈｗａｎｇ  ＣＷ，Ｈｕａｎｇ  Ｓ，Ｅｉｃｈｂａｕｍ  Ｑ，Ｉｎｇｂｅｒ  Ｄ，Ｏｒｇｉｌｌ  ＤＰ．Ｖａｃｕｕｍ−ａｓｓｉｓｔｅｄ  ｃｌｏｓｕｒｅ：ｍｉｃｒｏｄｅｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｗｏｕｎｄｓ  ａｎｄ  ｃｅｌｌ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ．Ｐｌａｓｔ．Ｒｅｃｏｎｓｔｒ  Ｓｕｒｇ．２００４；１１４（５）；１０８６−９６；ｄｉｓｃｕｓｓｉｏｎ  １０９７−８）．反対に、フォーム接触なし（ＷＦＣ）にポリウレタン滅菌布のみによって覆われた創傷域は、これらの領域が少なくとも若干の真空圧に曝露されると推測されるけれども、微変形を起こさない。さらに、ＷＦＣ組織とは異なり、ＦＣ領域は有意な肉芽組織を示す。（Ｏｒｇｉｌｌ  Ｄｐ，Ｂａｙｅｒ  ＬＲ，Ｎｅｕｗａｌｄｅｒ  Ｊ，Ｆｅｌｔｅｒ  ＲＣ．  Ｇｌｏｂａｌ  ｓｕｒｇｅｒｙ−ｆｕｔｕｒｅ  ｄｉｒｅｃｔｉｏｎｓ．Ｍｉｃｒｏｄｅｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ  ｗｏｕｎｄ  ｔｈｅｒａｐｙ−ａ  ｎｅｗ  ｅｒａ  ｉｎ  ｗｏｕｎｄ  ｈｅａｌｉｎｇ．Ｂｕｉｓｉｎｅｓｓ  Ｂｒｉｅｆｉｎｇ．２００５：２２−２５）．
【００２８】
ＶＡＣシステムおよび他の吸引デバイスは陰圧創傷療法（ＮＰＷＴ）または大気圧未満創傷療法（ＳＡＷＴ）として言及されるけれども、本発明者らは、適当に設計されたフォームは創傷表面に対して微変形を伝えるために必要であるので、むしろ微変形創傷療法（ＭＤＷＴ）という用語をとる。ＭＤＷＴが如何にして創傷閉鎖を加速するかをいくつかのメカニズムが説明できる。第１に、細胞の形状は細胞増殖のために重要であることが知られているので、創傷における微変形によって惹起される緊張が信号伝達および細胞分裂を活性化するのであろう。（Ａｒｍｓｔｒｏｎｇ，Ｄ．Ｇ．＆  Ｌａｖｅｒｙ，Ｌ．Ａ．  Ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ  ｗｏｕｎｄ  ｔｈｅｒａｐｙ  ａｆｔｅｒ  ｐａｒｔｉａｌ  ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｆｏｏｔ  ａｍｐｕｔａｔｉｏｎ：ａ  ｍｕｌｔｉｃｅｎｔｒｅ，ｒａｎｄｏｍｉｓｅｄ  ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｔｒｉａｌ．Ｌａｎｃｅｔ  ３６６，１７０４−１０  ２００５）；（Ｓａｘｅｎａ，Ｖ．ｅｔ  ａｌ．Ｖａｃｕｕｍ−ａｓｓｉｓｔｅｄ  ｃｌｏｓｕｒｅ：ｍｉｃｒｏｄｅｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｗｏｕｎｄｓ  ａｎｄ  ｃｅｌｌ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ．Ｐｌａｓｔ  Ｒｅｃｏｎｓｔｒ  Ｓｕｒｇ  １１４，１０８６−９６；ｄｉｓｃｕｓｓｉｏｎ  １０９７−８  ２００４）；（Ｕｌｂｒｅｃｈｔ，Ｊ．Ｓ．，Ｃａｖａｎａｇｈ，Ｐ．Ｒ．＆  Ｃａｐｕｔｏ，Ｇ．Ｍ．Ｆｏｏｔ  ｐｒｏｂｌｅｍｓ  ｉｎ  ｄｉａｂｅｔｅｓ：ａｎ  ｏｖｅｒｖｉｅｗ．Ｃｌｉｎ  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ  ３９  Ｓｕｐｐｌ  ２，Ｓ７３−８２  ２００４）；（Ｖｏｕｒｎａｋｉｓ，Ｊ．Ｎ．，Ｄｅｍｃｈｅｖａ，Ｍ．，Ｗｈｉｔｓｏｎ，Ａ．，Ｇｕｉｒｃａ，Ｒ．＆  Ｐａｒｉｓｅｒ，Ｅ．Ｒ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ，ａｎｄ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｏｌｙ−Ｎ−ａｃｅｔｙｌ  ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ  ｕｓｅ  ａｓ  ａ  ｈｅｍｏｓｔａｔｉｃ  ａｇｅｎｔ．Ｊ  Ｔｒａｕｍａ  ５７，Ｓ２−６  ２００４）．第２に、血液流動は動物におけるＭＤＷＴの結果として増大することが示されたが、これはヒトでは研究されなかった。（Ｎａｊｊａｒ，Ｓ．Ｆ．ｅｔ  ａｌ．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｏｌｙ−Ｎ−ａｃｅｔｙｌ  ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ  ａｓ  ａ  ｈｅｍｏｓｔａｔｉｃ  ａｇｅｎｔ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｕｎｄｅｒｇｏｉｎｇ  ｃａｒｄｉａｃ  ｃａｔｈｅｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ：ａ  ｄｏｕｂｌｅ−ｂｌｉｎｄ，ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ  ｓｔｕｄｙ．Ｊ  Ｔｒａｕｍａ  ５７，Ｓ３８−４１  ２００４）．最後に、開孔フォームは過剰な創傷浸出液の除去を容易にするであろうから、有害な酵素を排除し、そして栄養の拡散を改善する。
【図面の簡単な説明】
【００２９】
【図１】ｐＧｌｃＮａｃおよびＶＡＣ技術により処置された創傷を示す。処置７日後の創傷は、創傷治癒に寄与する高レベルの増殖中細胞を示す（Ｋｉ−６７免疫組織化学的染色、活発に増殖する細胞のためのマーカーによって示されるように）。
【図２】試験品の毒性徴候を示さない実施例１の試験動物の臨床観察の総括を示す。
【図３】実施例１における移植された種々の試験品と対照品の肉眼的評価の結果を示す。
【図４Ａ−Ｃ】使用された３頭の試験動物の各々について実施例１の試験品と対照品の顕微鏡的評価の結果である。
【発明を実施するための形態】
【００３０】
デバイス
本発明は、止血作用剤により被覆されたスクリーンまたは他の開孔構造デバイスを含む骨組みを含んでなる創傷治癒適用物を意図する。本発明の１つの態様では、骨組みはポリ−Ｎ−アセチルグルコサミン・ナノファイバー（ｐＧｌｃＮａｃ）により被覆されている。好適な実施態様では、適用物は、その活性表面上をポリ−Ｎ−アセチルグルコサミン・ナノファイバーにより被覆された開孔ポリウレタンフォームからなる。コーティング方法は、蒸着、凍結乾燥、注型（ｃａｓｔｉｎｇ）または噴霧を含んでもよい。
【００３１】
製造中に最適化できるパラメーターは、種々の溶媒の性質と濃度、コーティング機構の厚さ、止血適用物コーティングのファイバーの特性（何かあれば）ならびにデバイスが製造される際のｐＨを含む。
【００３２】
また、本発明は、ｐＧｌｃＮａｃスクリーン、不透過性カバー、連結用チューブおよび真空給源からなる創傷治癒システムを意図する。
【００３３】
本発明では、止血または凝血作用剤は、骨組みの配列中に、またはその統合される部分として使用することができる。例えば、１例では、ｐＧｌｃＮａｃファイバーが慣用のガーゼラップ上に噴霧されて、創傷内の止血を達成し、その後陰圧創傷療法が再適用される。しかしながら、外科医にとってより便利には、既に置かれた止血作用剤を用いて製作されたＶＡＣデバイスを有することであろう。製作の方法は以下に検討される。
【００３４】
製造方法
本発明の止血適用物を製造するために多数の異なる方法が存在することは認識できるであろう。特に、本発明の適用物は、止血作用剤を用いて被覆されるか、または他の方法で製作された開口セルまたは孔構造デバイスからなる。好ましくは、止血作用剤はｐＧｌｃＮａｃである。方法は、止血作用剤を支持体上に噴霧または塗布することによって、作用剤を用いてフォームまたはスクリーンのような支持体を被覆することを含む。他の製作方法は、ミクロファブリケーション（ｍｉｃｒｏｆａｂｒｉｃａｔｉｏｎ）、凍結乾燥、ミクロキャリヤー（ｍｉｃｒｏｃａｒｒｉｅｒ）による止血作用剤の添加およびナノテクノロジー技術のような技術を組み入れることもできる。
【実施例】
【００３５】
本発明のシステムおよびデバイスの種々の実施態様が考えられる。これらは、限定されるものではないが、以下の例において示されるデバイスおよびシステムを含む：
例１：サンプル移植物の生物適合性
研究の目的は、白子ウサギの筋組織中への移植後に局所的毒性効果を誘発する可能性について試験品を評価することであった。試験品、ＭＰ７１９（２−４ミクロンのポリ−Ｎ−アセチルグルコサミン・ナノファイバー；Ｍａｒｉｎｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｄａｎｖｅｒｓ，ＭＡ）が、Ｎｅｗ  Ｚｅａｌａｎｄ  Ｗｈｉｔｅウサギの脊椎傍の筋組織中に４週の期間移植された。試験品は、２種の対照品、スポンサー指定のＳｕｒｇｉｃｅｌおよび負の対照、高密度ポリエチレン（Ｎｅｇａｔｉｖｅ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｐｌａｓｔｉｃ）を使用して別々に評価された。結果は、試験品は、Ｓｕｒｇｉｃｅｌに比較した場合、４週間の移植の場合には無反応（生物反応性評点  ０．２）；そして負の対照、高密度ポリエチレン（Ｎｅｇａｔｉｖｅ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｐｌａｓｔｉｃ）に比較した場合、無反応（生物反応性評点  ０．０）であることを指示した。
【００３６】
本研究は、次に示す参考文献：ＩＳＯ  １０９９３−６，１９９４，Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｅｖｉｃｅｓ−Ｐａｒｔ  ６：Ｔｅｓｔｓ  ｆｏｒ  Ｌｏｃａｌ  Ｅｆｆｅｃｔｓ  Ａｆｔｅｒ  Ｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎ；ＩＳＯ  １０９９３−１２，２００２，Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｅｖｉｃｅｓ−Ｐａｒｔ  １２：Ｓａｍｐｌｅ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ；ＡＳＴＭ  Ｆ９８１−０４，Ｓｔａｎｄａｒｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｆｏｒ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ  ｆｏｒ  Ｓｕｒｇｉｃａｌ  Ｉｍｐｌａｎｔｓ  ｗｉｔｈ  Ｒｅｓｐｅｃｔ  ｔｏ  Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ  ｏｎ  Ｍｕｓｃｌｅ  ａｎｄ  Ｂｏｎｅ，２００４；２．４  ＡＳＴＭ  Ｆ７６３−０４，Ｓｔａｎｄａｒｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｆｏｒ  Ｓｈｏｒｔ  Ｔｅｒｍ  Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ  ｏｆ  Ｉｍｐｌａｎｔ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ，２００４；２．５  ＩＳＯ／ＩＥＣ  １７０２５，２００５，Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｃｏｍｐｅｔｅｎｃｅ  ｏｆ  Ｔｅｓｔｉｎｇ  ａｎｄ  Ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ：に基づいて実施された。
【００３７】
方法および材料
３頭の健康なニュージーランド白ウサギ（Ｏｒｙｃｔｏｌａｇｕｓ  ｃｕｎｉｃｕｌｕｓ）、体重／月齢範囲：２．９３−３．１８ｋｇ／少なくとも１２週齢（成熟）のオス２頭とメス１頭が本研究で使用された。
【００３８】
白子ウサギが本研究において使用されたが、その理由は、それらが安全性評価研究において歴史的に使用されており、そしてガイドラインが代替（非動物）法をもたないからである。動物の種、数ならびに使用された投与経路はＩＳＯ  １０９９３−６ガイドラインによって推奨されている。
【００３９】
試験品（ＭＰ７１９）は，ほぼ、幅１ｍｍで長さ１０ｍｍと測定され、そして無菌であった。２種の対照品が作成された。第１の対照、Ｓｕｒｇｉｃｅｌ（Ｃ１）は、ほぼ、幅１ｍｍで長さ１０ｍｍと測定され、そして滅菌を受けた。第２の対照、Ｎｅｇａｔｉｖｅ
Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｐｌａｓｔｉｃ（Ｃ２）は、ほぼ、幅１ｍｍで長さ１０ｍｍと測定され、そして７０％エタノール中に浸漬することによって滅菌された。
【００４０】
各動物は移植前に体重測定された。試験当日に、動物の背側が刈り込まれて柔皮が露出され、そしてばらばらの毛が真空によって除去された。各動物は適切に麻酔された。移植前に、その領域が手術用調製液により拭われた。４個の試験品小片が各ウサギの脊椎傍筋肉の各々に、中間線から約２．５ｃｍ、かつ脊柱に並行に、そして互いに約２．５ｃｍ離して外科的に移植された。試験品小片は脊柱の片側に移植された。同様に、対照品小片（Ｃ１−Ｓｕｒｇｉｃｅｌ）が各動物の対側筋肉に移植された。２個の対照小片（Ｃ２−Ｎｅｇａｔｉｖｅ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｐｌａｓｔｉｃ）が、脊柱のいずれかの側の試験品お
よびＣ１対照移植部位に対して尾部に（尾の方向に）移植された（全４個の小片）。少なくとも８個の試験品小片および８個の各対照品小片のすべてが評価のために必要とされる。
【００４１】
動物は４週の期間維持された。動物は、この期間中毎日、移植部位の適当な治癒を確認するため、そして毒性の臨床的徴候について観察された。観察は全臨床発現を含む。観察期間の終了時に、動物は体重測定された。各動物は注射用バルビツール酸塩によって犠牲にされた。組織が出血なしに切開されるために十分な時間が経過するよう考慮された。
【００４２】
試験または対照品が移植された脊椎傍筋が各動物からそっくり切り取られた。筋組織は、メスにより移植部位周囲を注意深く薄く切り取り、そして組織から取り上げて除去された。切り取られた移植組織は、組織病理学的評価のために、全体的ではあるが、この組織の完全性を破壊する過度の侵入操作を用いることなく検査された。組織は１０％中性バッファーホルマリンを含有する適当に標識された容器中に入れられた。ホルマリンにおける固定後、各移植部位は大きな組織塊から切り取られた。移植された材料を含有する移植部位は肉眼的に検査された。各部位は、炎症、被包、出血、壊死および変色の徴候について、次のスケールを使用して検査された：０＝正常；１＝弱；２＝中；３＝強。
【００４３】
肉眼的観察の後、移植材料がインサイチューに残され、そして移植部位を含有する組織の切片が処理された。ヘマトキシリンおよびエオシン染色切片の組織学的スライドが調製された。
【００４４】
生物反応の次の項目が各移植部位についての顕微鏡観察によって調査された：
１．炎症応答：
ａ．多形核白血球
ｂ．リンパ球
ｃ．好酸球
ｄ．形質細胞
ｅ．マクロファージ
ｆ．巨細胞
ｇ．壊死
ｈ．変性
２．治癒応答：
ａ．線維形成
ｂ．脂肪浸潤物
【００４５】
応答の各項目は次のスケールを用いて格付けされた：０＝正常；０．５＝微弱；１＝弱；２＝中；３＝強。関連領域（ｉｎｖｏｌｖｅｄ  ａｒｅａ）の相対的大きさは、移植／組織界面から正常組織および正常血管分布の特徴を有する非障害領域までの領域の幅を調査することによって採点された。関連領域の相対的大きさは、次のスケールを用いて採点された：
０＝０ｍｍ、部位なし
０．５＝０．５ｍｍまで、微弱
１＝０．６−１．０ｍｍ、弱
２＝１．１−２．０ｍｍ、中
３＝＞２．０ｍｍ、強。
【００４６】
各移植部位について、総スコアが決定される。各動物の試験部位の平均スコアが、その動物の対照部位の平均スコアと比較される。全動物について試験と対照間の平均差異が計
算され、そして最初の生物反応性評点が次のように選定される：
０−１．５  無反応＊
＞１．５−３．５  弱い反応
＞３．５−６．０  中度の反応
＞６．０  強い反応
＊負の計算はゼロ（０）として報告された。
【００４７】
病理観察者が生物反応性の計算レベルを審査する。全ファクター（例えば、相対的サイズ、応答のパターン、炎症対消炎）の観察に基づき、病理観察者は生物反応性評点を校正する。
【００４８】
試験材料の生物適合性に関する記述物語風の報告が病理観察者によって与えられる。研究およびその計画が、測定の不確かさおよびデータ収集と解析について偏見の調節を最小化するための方法を用いる。
【００４９】
結果
試験動物の全３頭が体重では増加した。試験動物のいずれも研究の過程にわたって毒性の徴候を全く示さなかった。臨床観察（図２、表Ｉ）。
【００５０】
試験品および対照移植部位の肉眼的評価は、４週時期には炎症、被包、出血、壊死または変色の有意な徴候を示さなかった。若干の試験部位および大多数のＳｕｒｇｉｃｅｌ対照は肉眼的には見分けられず、連続切片が顕微鏡的評価に委ねられた。（図３、表ＩＩ）。
【００５１】
試験品移植部位の顕微鏡的評価は、各対照品部位と比較して炎症、線維症、出血、壊死または変性の有意な徴候を示さなかった。４週時期の生物反応性評点（３動物の平均）は、対照移植部位のいずれとも比較して、無反応を示す０．２（Ｃ１−Ｓｕｒｇｉｃｅｌ）および０．０（Ｃ２−Ｎｅｇａｔｉｖｅ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｐｌａｓｔｉｃ）であった。病理学者は、試験材料の性質によっては、予期されなかったインサイチュー試験品の周囲に中等度の多形および組織球（マクロファージ）浸潤物が存在することに注目した（図４Ａ−Ｃ、表ＩＩＩ）。
【００５２】
例２：糖尿病マウス−肉芽組織測定
同種の一般に糖尿病の８〜１２週齢、Ｌｅｐ／ｒ−ｄｂ／ｄｂオス・マウス（種Ｃ５７ＢＬ／ＫｓＪ−Ｌｅｐｒｄｂ）が別々にケージに入れられた。食餌および水は、ＡＡＡＬＡＣ基準合格設備において承認動物プロトコールの下で自由摂取で与えられた。手術１日前に、背側の毛が刈り込まれ、脱毛された（Ｎａｉｒ(R)，Ｃｈｕｒｃｈ  ＆  Ｄｗｉｇｈｔ  Ｃｏ．，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎｅ，ＮＪ）。動物は手術前に体重測定され、６０ｍｇ／ｋｇのＮｅｍｂｕｔａｌ（Ｐｅｎｔｏｂａｒｂｉｔａｌ）により麻酔された。背部は７０％アルコールで消毒され、そして皮膚および筋肉層の１．０ｃｍ２領域が切除されて完全な厚さの背部切除傷が創られた。創傷の縁は、０．５ｃｍ幅で０．２ｃｍ厚さのＤｕｏＤＥＲＭ(R)（ＤｕｏＤＥＲＭ(R)，ＣＧＦ(R)，ＣｏｎｖａＴｅｃ，Ｓｑｕｉｂｂ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｌ．Ｌ．Ｃ．）フレームにより保護され、そして包帯の交換は２および４日目に実施された。７日目に、動物は安楽死され、そしてその周辺皮膚と下層組織を含む創傷領域がまとめて切除された。他の半分は１０％中性バッファーホルマリン溶液中でまとめて固定され、そしてパラフィン包埋まで７０％アルコール中に４℃で保存された。
【００５３】
研究群
３頭の動物が各研究群において使用された。肉芽組織応答は、
１．閉塞包帯（ＤｕｏＤＥＲＭ(R)フレーム）のみ、
２．完全ＶＡＣシステム（Ｖ．Ａ．Ｃ．，ＫＣＩ，Ｓａｎ  Ａｎｔｏｎｉｏ，ＴＸ，１２５ｍｍＨｇ吸引）、
３．Ｓｕｒｇｉｃｅｌ（Ｅｔｈｉｃｏｎ  Ｉｎｃ．，Ｓｏｍｅｒｖｉｌｌｅ，ＮＪ）、
４．ＭＰ７１９（２〜４ミクロンのポリ−Ｎ−アセチルグルコサミン・ナノファイバー；Ｍａｒｉｎｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｄａｎｖｅｒｓ，ＭＡ）、
５．ＭＰ７１９＋ＶＡＣ（１２５ｍｍＨｇ吸引）
を用いて処置された創傷について比較された。
【００５４】
肉芽組織の測定
パラフィン包埋組織が切片にされ、通常のＨｅｍａｔｏｘｙｌｉｎおよびＥｏｓｉｎ（Ｈ＆Ｅ）プロトコールにしたがって染色された。各Ｈ＆Ｅ染色された横断切片創傷のパノラマ状切片デジタル画像が、Ａｄｏｂｅ  Ｐｈｏｔｏｓｈｏｐ  ＣＳ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ（Ａｄｏｂｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ，Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，ＣＡ）を使用して作成され、処置に対してブラインドにされた２人の独立した観察者によってデジタル求積計（Ｉｍａｇｅ  Ｊ，ＮＩＨ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ）を使用して肉芽組織の面積と厚さが分析されて、各切片の中間部分における肉芽組織の面積が１０倍拡大で定量化された。
【００５５】
結果
データは以下の表Ａにおいて示される。上記実験群が閉塞包帯（ＯＤ）対照と比較される。データは、ＭＰ７１９とＶＡＣの組み合わせが、糖尿病マウス動物モデル系における創傷治癒研究の７日目には肉芽組織の増大を与えることを明白に示している。ポリ−Ｎ−アセチルグルコサミン・ナノファイバー＋ＶＡＣの組み合わせは、７日目において生成された肉芽組織の２倍を超える結果をもたらす。これは、ＶＡＣ−ポリ−Ｎ−アセチルグルコサミン・ナノファイバーの組み合わせが相乗効果をもたらすという強力な指示である。
【００５６】
【表１】
0005766439.tif 000002
【００５７】
例３：止血効果＆陰圧との相乗性
高血圧、２型糖尿病および透析を必要とする末期の腎不全を有する６３歳の女性（ＢＭＩ  ３００ポンドおよび５フィート４インチと測定）が、左の臀部および腿部の外側領域に沿って大きな塊を呈した。その時点での診断は、骨盤下方から腸骨稜まで腿部の遠位３分の１までの左外側の軟部組織を巻き込んでいる未分化肉腫であった。選択された処置のコースは、外科的切除に続く外部の光線放射を伴った。
【００５８】
外科的切除前の管理放射療法は、腫瘍体積および外科手術操作中の播種（ｓｅｅｄｉｎｇ）の減少および総生残の改善を含むいくつかの潜在的利点を提供する。しかしながら、創傷合併症の発生数は、術後放射療法と比べて術前放射後には２倍高くなると報告され、
そしてそのような合併症は患者の機能には有害な影響を有することが示された。Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｎｅｔｗｏｒｋからの現在のガイドラインは、創傷合併症のリスクを最小にするために術前放射療法と外科的切除との間には３〜６週の間隔を推奨した。
【００５９】
放射療法の５週目には、肉腫からの重篤な出血は５ｇｍ／Ｌまでのヘモグロビン減少をもたらした。放射療法は、出血を軽減する目的で処置周期を完了するために５週にわたる推奨総量５０．４ｇｒａｙ（Ｇｙ）として継続された。しかしながら、患者は、放射の最終週中に２回の出血エピソード、それぞれ同じ低レベルのヘモグロビン、を有した。
【００６０】
腿部のＣＴスキャンはその全基底部に沿って多数の大きな血管が腫瘍に栄養補給していることを示した。無制御の出血および患者の多発性共存症に因って、多くの専門医師チームと患者は、放射後に慣例の３〜６週を待つよりもむしろこの時点で外科的切除による進行に賛同した。
【００６１】
放射療法直後の四肢軟部組織（ｅｘｔｒｅｍｉｔｙ  ｓｏｆｔ  ｔｉｓｓｕｅ）肉腫の外科切除は、血栓症、出血、および創傷治癒の合併症のリスク増大のために望ましくない。
【００６２】
肉腫のエンドブロック（ｅｎｄ−ｂｌｏｃｋ）切除および表面そ径部切開の間、多産の出血が切除ベーシン（ｂａｓｉｎ）から起きた。左の臀部と腿部の間の切除ベーシンに沿って５分間適用された圧力とともに６個のポリ−Ｎ−アセチルグルコサミン（ｐＧｌｃＮＡｃ）止血パッドの配置は、外科手術分野に対して即時止血をもたらした。
【００６３】
術後の創傷は、陰圧創傷療法（Ｖ．Ａ．Ｃ．(R)，Ｋｉｎｅｔｉｃ  Ｃｏｎｃｅｐｔｓ  Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ａｎｔｏｎｉｏ，Ｔｅｘａｓ）を用いて処置された。
【００６４】
ｐＧｌｃＮＡｃ止血パッドとＶ．Ａ．Ｃ．の組み合わせは、術後にＶ．Ａ．Ｃ．の即時適用を可能にした。ｐＧｌｃＮＡｃにより覆われた創傷界面は、肉芽組織の増大および皮膚移植片のための創傷の準備（ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ）の加速をもたらした。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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