(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
放物面反射装置と、
光ビームを前記放物面反射装置の焦点の方へと導くように構成される光源であって、前記放物面反射装置が、前記放物面反射装置の放物面の深さの約１／９から前記放物面の全深さまでの範囲内の焦点距離を有する光源と、
前記放物面の前記焦点で前記光ビームの光路と交差するように前記放物面反射装置の前記焦点を通る流体流管であって、流体流を内包するように構成される流体流管と、
前記流管を通る前記流体中の微生物から発せられる蛍光を検出する第１の検出器と、
前記流管を通る前記流体中の粒子からのミー散乱光を検出する第２の検出器と、
ミー散乱光と蛍光とを分離するように構成されるダイクロイックビームスプリッタと、
光電子増倍管を含む前記第１の検出器上に前記蛍光を集束させる第１のレンズと、
フォトダイオードを含む前記第２の検出器上に前記ミー散乱光を集束させる第２のレンズと、
前記ダイクロイックビームスプリッタの中心付近、または前記第２のレンズの中心付近に配置されて、前記光源から発せられる光の非散乱部分を遮断するビーム遮断器と
を含む、微生物検出装置。
【請求項２】
（ａ）前記流管が光透過性材料を含み、光の入射及び散乱光の出射を可能にすることと、
（ｂ）前記流管が、
（ｉ）空気中に浮遊する微生物の検出のために流体が前記流管内に引き込まれると共に前記流管を介して流れることを可能にするように構成されるか、又は（ｉｉ）水又は液体中に浮遊する微生物の検出のために、水又はその他の液体が前記流管内に引き込まれると共に前記流管を介して流れることを可能にするように構成されることと、
（ｃ）前記流体中の前記粒子の前記検出された蛍光及びミー散乱情報を用いて微生物と不活性粒子とが区別されること
のうち１つを特徴とする、請求項１に記載の微生物検出装置。
【請求項３】
前記光源から発せられる励起光波長を遮断する干渉フィルタ
を更に含み、
前記光源がレーザーを含み、
前記放物面反射装置が穴を含み、該穴が、前記光源からの光の入射を可能にすると共に前記流管が前記放物面反射装置を貫通することを可能にし、
前記放物面反射装置の対称軸が、前記レーザービームの光路と一致すると共に同じ方向に延在する、請求項１又は２に記載の微生物検出装置。
【請求項４】
前記光源が発光ダイオード（ＬＥＤ）を含む、請求項３に記載の微生物検出装置。
【請求項５】
前記放物面反射装置の対称軸に沿って配置されて励起光波長を遮断する干渉フィルタ
を更に含み、
前記光源がレーザーを含み、
前記放物面反射装置が穴を含み、該穴が、前記光源からの光の入射と散乱光の出射を可能にすると共に、前記流管が前記放物面反射装置を貫通することを可能にし、
前記光源が、前記放物面反射装置の前記対称軸に対して垂直を成す光路に沿って光が発せられるように配置される、請求項１又は２に記載の微生物検出装置。
【請求項６】
前記光源が発光ダイオード（ＬＥＤ）を含む、請求項５に記載の微生物検出装置。
【請求項７】
流体流を運ぶように構成される流体流管と、
光ビームを前記流管の方へと導くように構成される光源と、
前記光源からの光との相互作用時に前記流体中の微生物から発せられる蛍光を反射する放物面反射装置であって、前記放物面反射装置が、前記放物面反射装置の放物面の深さの約１／９から前記放物面の全深さまでの範囲内の焦点距離を有する放物面反射装置と、
前記流管を通る前記流体中の微生物から発せられる蛍光を検出する第１の検出器と、
前記流管を通る前記流体中の粒子からのミー散乱光を検出する第２の検出器と、
前記放物面反射装置の対称軸に沿って配置されて励起光波長を遮断する干渉フィルタと、
光電子増倍管を含む前記第１の検出器上に前記蛍光を集束させる第１のレンズと、
フォトダイオードを含む前記第２の検出器上に前記ミー散乱光を集束させる第２のレンズと
を含み、
ビーム遮断器が前記第２のレンズの中心付近に配置され、前記光源から発せられる光の非散乱部分を遮断し、
前記光ビームの光路と前記流管が前記放物面反射装置の焦点で交差し、
前記放物面反射装置が穴を含み、該穴が、前記光源からの光の入射を可能にすると共に、前記流管が前記放物面反射装置を貫通することを可能にし、
前記光源が、前記放物面反射装置の前記対称軸に対して斜角を成す光路に沿って光が発せられるように配置される、微生物検出装置。
【請求項８】
前記光源が発光ダイオード（ＬＥＤ）又はレーザーを含む、請求項７に記載の微生物検出装置。
【請求項９】
流体流を運ぶように構成される流体流管と、
光を前記流管の方へと導くように構成される鏡の方に光ビームを導くように構成される光源であって、前記光源から発せられる光ビームが前記流管に到達する前に前記鏡に反射する光源と、
前記光源からの光との相互作用時に前記流体中の微生物から発せられる蛍光を反射する放物面反射装置であって、前記鏡により反射された光が、前記放物面反射装置の焦点に向かって内向きに進むと共に、前記放物面反射装置の対称軸に対して斜角を成して前記焦点を通過し、前記放物面反射装置が、前記放物面反射装置の放物面の深さの約１／９から前記放物面の全深さまでの範囲内の焦点距離を有する放物面反射装置と、
前記流管を通る前記流体中の微生物から発せられる蛍光を検出する第１の検出器と、
前記流管を通る前記流体中の粒子からのミー散乱光を検出する第２の検出器と、
前記放物面反射装置の対称軸に沿って配置されて励起光波長を遮断する干渉フィルタと、
光電子増倍管を含む前記第１の検出器上に前記蛍光を集束させる第１のレンズと、
フォトダイオードを含む前記第２の検出器上に前記ミー散乱光を集束させる第２のレンズと
を含み、
ビーム遮断器が前記第２のレンズの中心付近に配置され、前記光源から発せられる光の非散乱部分を遮断し、
前記鏡により反射された前記光ビームと前記流管が、前記放物面反射装置の前記焦点で交差し、
前記鏡が前記干渉フィルタの中心付近に配置され、
前記放物面反射装置が穴を含み、該穴が、前記光源からの光の出射を可能にすると共に、前記流管が前記放物面反射装置を貫通することを可能にし、
前記鏡によって反射した光が前記放物面反射装置の前記焦点に向かって内向きに進み、前記焦点を通過する、微生物検出装置。
【請求項１０】
（ａ）前記光源が発光ダイオード（ＬＥＤ）又はレーザーを含むことと、
（ｂ）前記鏡が平面状の反射鏡であることと、
（ｃ）前記鏡が、前記放物面反射装置の前記焦点の方へと前記光を反射するプリズム角を有するプリズムを含むことと、
（ｄ）前記流管が、
（ｉ）空気中に浮遊する微生物の検出のために流体が前記流管内に引き込まれると共に前記流管を介して流れることを可能にするように構成されるか、又は（ｉｉ）水又は液体中に浮遊する微生物の検出のために、水又はその他の液体が前記流管内に引き込まれると共に前記流管を介して流れることを可能にするように構成されることのうち１つを特徴とする、請求項９に記載の微生物検出装置。
【請求項１１】
放物面反射装置の焦点を通る流管を介して流体流を供給するステップであって、前記放物面反射装置が、前記放物面反射装置の放物面の深さの約１／９から前記放物面の全深さまでの範囲内の焦点距離を有するステップと、
前記放物面反射装置の焦点で前記流管と交差する光ビームを前記流管の方へと導くステップであって、前記光ビームが前記放物面反射装置の対称軸に対して垂直あるいは斜角を成す方向に沿って発せられるステップと、
前記光ビームとの相互作用時に前記流体中の微生物から発せられる蛍光を前記放物面反射装置により反射するステップと、
光電子増倍管を含む第１の検出器上に前記蛍光を集束させる第１のレンズを設けるステップと、
前記発せられる蛍光を前記第１の検出器を用いて検出するステップと、
フォトダイオードを含む第２の検出器上にミー散乱光を集束させる第２のレンズを設けるステップであって、光源から発せられる光の非散乱部分を遮断するためにビーム遮断器が前記第２のレンズの中心付近に配置されているステップと、
前記光ビームと前記流体中の粒子の相互作用の結果として生じる前記ミー散乱光を前記第２の検出器を用いて検出するステップと
を含む、微生物検出方法。
【請求項１２】
（ａ）前記放物面反射装置の対称軸に沿って配置されて励起光波長を遮断する干渉フィルタを設けるステップ
を更に含むことと、
（ｂ）前記光ビームが、前記放物面反射装置の前記対称軸に対して斜角を成す光路に沿って発せられることと、
（ｃ）前記光ビームが、前記放物面反射装置の前記対称軸と一致すると共に同じ方向に延在する光路に沿って発せられることと、
（ｄ）前記光ビームはレーザービームを含むことと、
（ｅ）前記光ビームが、前記放物面反射装置の前記対称軸に対して垂直を成す光路に沿って発せられることと、
（ｆ）前記流体が環境空気を含むことと、
（ｇ）前記流体が水又は別の液体を含むことのうち１つを特徴とする、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
光を前記流管の方に反射するように構成される鏡を設けるステップであって、前記鏡が前記干渉フィルタの中心付近に配置されるステップを更に含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
（ａ）前記鏡により反射された光が、前記放物面反射装置の前記焦点に向かって内向きに進むと共に、前記放物面反射装置の前記対称軸に対して斜角を成して前記焦点を通過することと、
（ｂ）前記鏡が平面状の反射鏡であることと、
（ｃ）前記鏡が、前記放物面反射装置の前記焦点の方へと前記光を反射するプリズム角を有するプリズムを含むこと
のうち１つを特徴とする、請求項１３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【関連出願の相互参照】
【０００１】
本出願は、２０１１年４月６日に出願された特許文献１の優先権を主張する。
【技術分野】
【０００２】
本発明は一般に微生物検出に関し、特に微生物細胞からの蛍光を検出することにより空気中及び液体中に浮遊する微生物（例えば細菌及び真菌類）を検出する装置及び方法に関する。本発明は、汚染抑制のための環境微生物の検出において特に有用性を有するが、その他の用途も考えられる。
【背景技術】
【０００３】
多くの製造環境では、塵粒と細菌との両方を含む汚染物質の存在を厳密に抑制することが必要である。公衆衛生関連産業において、例えば、医薬品及び医療用具製造環境では、空気中の粒子の数だけではなく細菌及び真菌類の数も抑制することが必要である。微生物汚染によって、何ロットもの医薬品が患者にとって有害なものになってしまうこともある。更に、医薬品又は医療用具の製造設備において、汚染事象が生物学的なものか又は非生物学的なものかに関する即時的情報を含む汚染事象の実時間検出を達成することが有利である。このような汚染物質の実時間検出は、公衆衛生、空気質監視、水処理、及び飲料産業においても有用である。
【０００４】
これらの多くの用途では、環境空気及び液体（水及び液体の形態の最終製品）のいずれについても、存在する微生物の量を監視することが必要である。
【０００５】
従来の微生物検出方法は、空気中に浮遊する細菌を捕集すると共に、或る期間（通常的に数日）にわたって培養する増殖培地の使用を必要とする。捕集と検出の間の遅延が製造工程に問題を引き起こす。最近、環境中の細菌を実時間検出するための新手法が業界に導入された。例えば、光学検出器は、細菌の細胞の内側の代謝化合物（例えばＮＡＤＨ及びリボフラビン）からの蛍光を検出するように設計された。これらの光学検出器は、細菌汚染の結果を実時間で得られるという利点を有する。細菌の実時間検出は保健医療関連の産業に有益である。
【０００６】
細菌の細胞から発せられる蛍光の量は一般に極めて少なく、実時間検出器における検出時間が短いため、蛍光測定感度は効果的な細菌検出器の重要な基準となる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】米国仮特許出願第６１／４７２，６１４号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
したがって、当該産業において、これまで対処されなかった上記の欠点及び不備に対処することが必要である。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明の実施形態は、微生物検出装置と微生物検出方法とを提供する。簡単に説明すると、構造において、微生物検出装置の一実施形態は、とりわけ、以下のように実施可能である。この微生物検出装置は、放物面反射装置を含む。光源は、光ビームを放物面反射装置の焦点の方へと導くように構成される。光ビームの光路と流管が放物面の焦点で交差するように放物面反射装置の焦点を通る流体流管が含まれる。流体流管は、流体流を内包するように構成される。流管を通る流体中の微生物から発せられる蛍光を検出する第１の検出器が含まれる。流管を通る流体中の粒子からのミー散乱光を検出する第２の検出器が含まれる。
【００１０】
別の実施形態において、流体流を運ぶように構成される流体流管を含む微生物検出装置を提供する。光源は、光ビームを流管の方へと導くように構成される。光源からの光との相互作用時に流体中の微生物から発せられる蛍光を反射する放物面反射装置が含まれる。第１の検出器は、流管を通る流体中の微生物から発せられる蛍光を検出する。第２の検出器は、流管を通る流体中の粒子からのミー散乱光を検出する。干渉フィルタが放射面反射装置の対称軸に沿って配置されて、励起光波長を遮断する。蛍光を第１の検出器上に集束させる第１のレンズが含まれ、第１の検出器は光電子増倍管を含む。ミー散乱光を第２の検出器上に集束させる第２のレンズが含まれ、第２の検出器はフォトダイオードを含む。ビーム遮断器が第２のレンズの中心付近に配置されて、光源から発せられる光の非散乱部分を遮断する。光ビーム路と流管は、放物面反射装置の焦点で交差する。放物面反射装置は穴を含み、この穴は、光源からの光の入射を可能にすると共に、流管が放物面反射装置を貫通することを可能にする。光源は、光が放物面反射装置の対称軸に対して斜角を成す光路に沿って発せられるように配置される。
【００１１】
また別の実施形態において、流体流を運ぶように構成される流体流管を含む微生物検出装置を提供する。光源は光ビームを鏡の方へと導くように構成され、鏡は光を流管の方へと導くように構成される。光源からの光との相互作用時に流体中の微生物から発せられる蛍光を反射する放物面反射装置が含まれる。第１の検出器は、流管を通る流体中の微生物から発せられる蛍光を検出する。第２の検出器は、流管を通る流体中の粒子からのミー散乱光を検出する。干渉フィルタが放物面反射装置の対称軸に沿って配置され、励起光波長を遮断する。蛍光を第１の検出器上に集束させる第１のレンズが含まれ、第１の検出器は光電子増倍管を含む。ミー散乱光を第２の検出器上に集束させる第２のレンズが含まれ、第２の検出器はフォトダイオードを含む。ビーム遮断器が第２のレンズの中心付近に配置され、光源から発せられる光の非散乱部分を遮断する。鏡により反射される光ビームと流管は、放物面反射装置の焦点で交差する。鏡は干渉フィルタの中心付近に配置される。放物面反射装置は穴を含み、この穴は、光源からの光の出射を可能にすると共に、流管が放物面反射装置を貫通することを可能にする。鏡により反射された光は、放物面反射装置の焦点に向かって内向きに進み、この焦点を通過する。
【００１２】
また別の実施形態において、放物面反射装置の焦点を通る流管を介して流体流を供給するステップと、放物面反射装置の焦点で流体流と交差する光ビームを流管の方へと導くステップと、光ビームとの相互作用時に流体中の微生物から発せられる蛍光を放物面反射装置により反射するステップと、第１の検出器を用いて、発せられた蛍光を検出するステップと、第２の検出器を用いて、光ビームと流体中の粒子との相互作用によって生じるミー散乱光を検出するステップとを含む微生物検出方法を提供する。
【００１３】
本発明の目的は、放物面反射装置を蛍光増幅装置として最適に用いる方法及び設計を提供することである。本発明により得られる方法及び装置は、特に、この設計手法を反射装置に実際に適用することを可能にする、最近利用可能になった光学特性反射面の迅速なプロトタイプ作製に関する。
【００１４】
適切な励起波長を用いると、細菌の細胞内の或る特定の代謝補因子及びその他の生化学物質が内部蛍光を発し、この内部蛍光を生物マーカーとして用いて環境中の微生物と不活性粒子とを区別することができる。本発明によって得られる微生物検出装置及び方法の目的は、光源により適切に励起された細菌細胞からの内部蛍光を効率的に測定することにある。
【００１５】
環境（例えば空気又は液体）中の微生物は、適切な導管又は流管（空気ノズル又は液体管）を介して検出装置内に導入される。光ビーム（例えばレーザーによる）は、放物面反射装置の焦点と一致する限定的な点で微生物の流路と交差する。適切な波長を有する光が代謝産物からの蛍光と微生物からのその他の生化学物質とを励起する。放物反射面の焦点から発出する微生物の蛍光が集光されると共に、放物面反射装置の軸に対して平行を成す平行ビームとして放物面反射装置から出射する。干渉フィルタは一般に平行光ビームにおいて最も効果的に機能することから、適切な光フィルタ（例えば干渉フィルタ）システムを反射装置の手前で出射光ビームの平行部分に配置して、蛍光と励起光とを分離することができる。フィルタシステムの後に、今度は適切に選択されたレンズシステムが蛍光を光検出器（例えば光電子増倍管（ＰＭＴ））の感応部上に集束させて計測を行う。同時に、流管内の粒子（例えば微生物）との相互作用によって散乱するミー散乱光が検出され、粒径が判定される。
【００１６】
放物面反射装置の形状及び断面は、集光効率を最適化し、且つ関連ある機能に必要な検出器のその他の要素（流体流管、励起光の入射孔等）を収容できるように設計される。
【００１７】
本発明のその他のシステム、方法、特徴、及び利点は、以下の図面と詳細な説明を考察することによって、当業者には明らかであるか又は明らかになるであろう。このような全てのその他のシステム、方法、特徴、及び利点は、本明細書に含まれると共に、本発明の範囲内に含まれ、且つ、添付の特許請求の範囲により保護されることを意図している。
【００１８】
以下の図面を参照することにより、本発明の多くの態様をよりよく理解できる。図面中の要素は、必ずしも縮尺通りに示されているわけではなく、寧ろ本発明の原理を明快に示すことに重点を置いている。更に、図面において、同様の参照符号は、複数の図面全体にわたって、対応する部分を示す。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】放物面反射装置の図である。
【図２】本発明に係る放物面反射装置最適化技術を示す図である。
【図３】本発明の第１の実施例に係る微生物検出器の略図である。
【図４】本発明の第２の実施例に係る微生物検出器の略図である。
【図５】本発明の第３の実施例に係る微生物検出器の略図である。
【図６】本発明の第４の実施例に係る微生物検出器の略図である。
【図７】本発明の実施形態に係る微生物検出方法を示す流れ図である。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
図１は、放物面反射装置１０の図である。反射装置１０の焦点Ｆから出射する光は、放物面反射装置１０の反射面によって反射されて平行ビーム（Ｑ１、Ｑ２、Ｑ３）となる。
【００２１】
下式に示すように、放物面反射装置１０の対称軸が、（０、０）を頂点としてｙ軸に平行である場合、点（０、ｆ）、即ちＦから出射する光が放物面反射装置１０によって反射され、ｙ軸に対して平行を成す平行光ビーム（Ｑ１，Ｑ２，Ｑ３）となる焦点Ｆが存在する。
ｙ＝ａｘ２      （１）
【００２２】
焦点距離ｆ（即ち焦点Ｆから（０、０）の頂点までの距離）は、式（２）で表される。
ｆ＝１／４ａ      （２）
【００２３】
放射面反射装置１０の形状は、式（１）のパラメータａによって決まる。
【００２４】
下記のステップを行って、放物面反射装置１０の設計を、特に実時間の光学的微生物検出装置における蛍光測定とその他の計測上の問題に関して最適化することができる：
（Ａ）反射装置用の放物面の適切な形状の計算及び選択
（Ｂ）集光効率及びその他の計測上の要素の最適化
（Ｃ）完全な微生物検出システムに必要なその他の特徴の組込み。
【００２５】
図２に放物面反射装置１０が示されており、ａ＝０．０２５である。図２に示すように、ａ＝０．０２５のとき、焦点距離ｆは１０ｍｍとなる。
【００２６】
焦点Ｆの配置の考察：
（１）反射装置１０の表面は可能な限り焦点Ｆから出射する蛍光をカバーする。このため、焦点Ｆは、可能な限り大きい立体角をカバーするために、好ましくは放物面の頂点に接近して配置される。
（２）反射装置１０に穴を切削し、例えばレーザービームを反射装置の空間内に入射させ、流体管（例えば空気ノズル又は液体管）を挿入することができる。焦点Ｆ（蛍光の発出点でもある）が放物面の頂点に接近している場合は、これらの穴による光の損失が増大する。このため、焦点Ｆは、好ましくは、実質的な光が穴によって失われるほどには、過度に接近して配置されない。
（３）焦点距離ｆの適切な位置は、好ましくは、放物面の深さ（放物面反射装置の口部から頂点までの寸法）の１／９から放物面の全深さまでの範囲内とする。焦点Ｆは、好ましくは放物面の頂点に実際的に可能な限り接近して（流管及びレーザー孔と抵触せずに）配置される。
【００２７】
以下の例証的な数値計算において、放物面反射装置１０の寸法は図２に示す通りである。
【００２８】
光検出器（例えば、８ｍｍの検出部直径を有する光電子増倍管（ＰＭＴ））が蛍光源（図２のＦ）から８０ｍｍに配置されるとする。装置がカバーする立体角は、放物面反射装置を有する場合と有さない場合について、以下のように計算できる：
（ａ）反射装置を有さない場合：
ＰＭＴから見た時の平面角：θ１＝ａｒｃｔａｎ（４／８０）＝２．９度
カバーされる立体角：Ω１＝２π（１−ｃｏｓθ１）＝７．８ｘ１０−３
（ｂ）放物面反射装置を有する場合：
反射装置のカバー範囲の平面角：θ２＝１１３度
（ここで、θ２＝１８０°−θ）
カバーされる立体角：Ω２＝２π（１−ｃｏｓθ２）＝８．７４
放物面反射装置による向上率：Ω２／Ω１＝８．７４／７．８ｘ１０−３＝１１２０
【００２９】
したがって、本発明に係る放物面反射装置を用いることにより、有意な蛍光集光効率が得られる。
【００３０】
次に、放物面反射装置の立体角カバー範囲の計算式を導出する。
【００３１】
放物線式：ｙ＝ａｘ２
平面角θ＝ａｒｃｔａｎ（ｘ／（ｙ−ｆ））＝ａｒｃｔａｎ［ｘ／（ａｘ２−ｌ／（４ａ））］＝ａｒｃｔａｎ［４ａｘ／（４（ａｘ）２−ｌ）］
ｔ＝ａｘ      （３）
とすると、
θ＝ａｒｃｔａｎ［４ｔ／（４ｔ２−１）］      （４）
立体角：Ω＝２π（ｌ＋ｃｏｓθ）＝２π（ｌ＋ｃｏｓ（ａｒｃｔａｎ［４ｔ／（４ｔ２−１）］））      （５）
焦点距離：ｆ＝１／４ａ
となる。
【００３２】
設計目的で、ｘ（放物面反射装置の口部の直径）の数値を適切な測定値に固定することができる。放物線パラメータａを調節することにより、式（３）及び（５）から、放物面反射装置１０の立体角カバー範囲（反射装置の集光効率を示す）の様々な値を得ることができる。放物面反射装置の最適化は、このパラメータの適正な調節によって達成される。
【００３３】
微生物の内部蛍光の検出に加えて、本発明の実施形態を用いて、検出器により採取される粒子の大きさを測定できる。粒子の大きさを測定することにより、更なる分類のための情報が得られ、偽陽性を減らすことができる。粒径測定は、ミー散乱原理に従って粒子からの散乱光を測定することによって達成される。光学検出器を放物面反射装置１０から下流に設け、粒径を測定することができる。
【００３４】
図３に、本発明の第１の実施形態に係る微生物検出器３００の略図を示す。微生物検出器３００は、流管３３０内の流体中の微生物から発せられる蛍光を集光するための放物面反射装置３１０を含む。反射装置３１０は、例えば光源３２０（例えばレーザービームであってよい）の入射と流管３３０の挿入とを可能にするために１個以上の穴３１１を含んでよい。流管３３０は、流体流（例えば空気又は液体）を運ぶが、この流体流中に微生物が存在することがあって、この微生物は微生物検出器３００により検出される。流管３３０と光源３２０との交点３２３は、放物面反射装置３１０の焦点に配置される。放物面反射装置３１０と光源３２０の軸は互いに一致する。
【００３５】
ダイクロイックビームスプリッタ３４０は、ミー散乱光３４６と蛍光３４８とを分離する。励起光ビーム（即ち、光源３２０からの光）は、ビームスプリッタ３４０の中心にあるビーム遮断器３４１により遮断される。微生物検出器３００は更に干渉フィルタ３５０を含み、励起光波長を遮断することができる。
【００３６】
第１のレンズ３６０は、微生物検出器３００に含まれ、光を集束させるいかなる光学レンズであってもよい。第１のレンズ３６０は、平行蛍光ビーム３４８を第１の光検出器３７０上に集束させる。第１の光検出器３７０は、図３に示す光電子増倍管（ＰＭＴ）を含めて、蛍光測定用のいかなる種類の光検出器であってもよい。
【００３７】
第２のレンズ３６２は、微生物検出器３００に含まれ、光を集束させるいかなる光学レンズであってもよい。第２のレンズ３６２は、ミー散乱光３４６を第２の光検出器３７２上に集束させる。第２の光検出器３７２は、図３に示すフォトダイオードを含めて、粒径測定用のいかなる種類の光検出器であってもよい。
【００３８】
図３の実施形態において、放物面反射装置３１０の幾何学形状が式（２）及び（５）により最適化され、最適な集光効率が達成される一方で、検出器のその他の構成要素を適切に設置することが可能になる。ダイクロイックビームスプリッタ３４０は、ミー散乱式粒径測定（例えば、ミー散乱光３４６を別途の光検出器３７０により検出させることによる）の実施を簡単にすることと、同時にミー散乱光３４６（弾性散乱）と蛍光３４８（非弾性散乱）とをそれらの波長の相違に従って分離すること、の２つの役割を果たす。干渉フィルタ３５０は、平行光ビームで作用させるのが最も効果的であるため、干渉フィルタ３５０を放物面反射装置３１０とダイクロイックビームスプリッタ３４０との後に蛍光ビーム３４８の平行部分に配置することにより、残存する弾性散乱光の効果的な排除が促進される。ビーム遮断器３４１は、光源３２０によるグレアを減少させる。
【００３９】
図４に、本発明の第２の実施例に係る微生物検出器４００の略図を示す。微生物検出器４００は、流管４３０内の流体中の微生物から発せられる蛍光を集光するための放物面反射装置４１０を含む。反射装置４１０は、例えば光源４２０（例えばレーザービームであってよい）の入射と散乱光の出射（例えば光検出器４７２へと向かう）と流管４３０の挿入とを可能にするために１個以上の穴４１１を含んでよい。流管４３０は、流体流（例えば空気又は液体）を運ぶが、この流体流中に微生物が存在することがあって、この微生物は微生物検出器４００により検出される。流管４３０と光源４２０の交点４１３は、放物面反射装置４１０の焦点に配置される。放物面反射装置４１０と光源４２０の軸は互いに対して垂直を成す。
【００４０】
干渉フィルタ４５０は、放物面反射装置４１０により反射する蛍光４４８の光路内に、例えば放物面反射装置４１０の軸の方向に配置されてよい。干渉フィルタ４５０は励起光（即ち、光源４２０からの光）の波長を遮断する。
【００４１】
第１のレンズ４６０は、流管４３０内の流体中の微生物から発せられる平行蛍光ビーム４４８を第１の光検出器４７０上に集束させる。第１の光検出器４７０は、図４に示す光電子増倍管（ＰＭＴ）を含めて、蛍光測定用のいかなる種類の光検出器であってもよい。
【００４２】
ビーム遮断器４４１は、光源４２０の光路内に配置され、光源４２０からの光を遮断すると共にミー散乱光４４６を通過させる。ビーム遮断器４４１は、第２のレンズ４６２の中心付近に配置されてよい。流管４３０内の粒子によって散乱したミー散乱光４４６は、第２のレンズ４６２により第２の光検出器４７２上に集束する。第２の光検出器４７２は、図４に示すフォトダイオードを含めて、粒径測定用のいかなる種類の光検出器であってもよい。
【００４３】
図４の実施形態において、放物面反射装置４１０の幾何学形状が式（２）及び（５）により最適化され、最適な集光効率が達成される一方で、検出器のその他の構成要素を適切に設置することが可能になる。放物面反射装置４１０は、好ましくは、流管４３０と光源４２０の光路を好都合に構成できる位置に配置された焦点４１３を有するように構成されるべきである。光源４２０と放物面反射装置４１０の軸を互いに対して垂直にすることの利点は、光源４２０（例えばレーザー）から蛍光検出チャネル（例えば蛍光４４８の光路）に迷光が送り込まれることを防ぐことにより、このチャネルにおけるバックグラウンドノイズを減少させることができるところにある。このような設計の別の利点は、放物面反射装置４１０から蛍光検出用光検出器４７０（例えばＰＭＴ）までの距離を短縮することにより、より小型の検出器パッケージが得られると共に、蛍光検出チャネルの集光能力を向上させることができるところにある。更に、図４の実施形態により、ビームスプリッタが不要になる。
【００４４】
図５に、本発明の第３の実施例に係る微生物検出器５００の略図を示す。微生物検出器５００は、流管５３０内の流体中の微生物から発せられる蛍光を集光するための放物面反射装置５１０を含む。反射装置５１０は、例えば光源５２０（例えばレーザービームであってよい）の入射と流管５３０の挿入とを可能にするために１個以上の穴５１１を含んでよい。流管５３０は流体流（例えば空気又は液体）を運び、この流体流中に微生物が存在することがあって、微生物検出器５００により検出される。流管５３０と光源５２０の交点５１３は、放物面反射装置５１０の焦点に配置される。放物面反射装置５１０と光源５２０の軸は互いに対して斜角（即ち直角又は直角の倍数ではない）θを成す。
【００４５】
干渉フィルタ５５０は、蛍光５４８の光路内に、例えば放物面反射装置５１０の軸の方向に配置されてよい。干渉フィルタ５５０は励起光（即ち光源４２０からの光）の波長を遮断する。
【００４６】
第１のレンズ５６０は、流管４３０内の流体中の微生物から発せられると共に放物面反射装置５１０により反射された平行蛍光ビーム５４８を第１の光検出器５７０上に集束させる。第１の光検出器５７０は、図５に示す光電子増倍管（ＰＭＴ）を含めて、蛍光測定用のいかなる種類の光検出器であってもよい。
【００４７】
ビーム遮断器５４１は、光源５２０の光路内に配置されて、光源５２０からの光を遮断すると共にミー散乱光５４６を通過させる。ビーム遮断器５４１は、第２のレンズ５６２の中心付近に配置されてよい。流管４３０内の粒子によって散乱したミー散乱光５４６は、第２のレンズ５６２により第２の光検出器５７２上に集束する。第２の光検出器５７２は、図５に示すフォトダイオードを含めて、粒径測定用のいかなる種類の光検出器であってもよい。
【００４８】
図５の実施形態において、放物面反射装置５１０の幾何学形状が式（２）及び（５）により最適化され、最適な集光効率が達成される一方で、検出器のその他の構成要素を適切に設置することが可能になる。放物面反射装置５１０は、好ましくは、流管５３０と光源５２０の光路を好都合に構成できるような位置に配置された焦点５１３を有するように構成されるべきである。光源５２０と放物面反射装置５１０の軸を互いに対して斜角にすることの利点は、光源５２０（例えばレーザー）から蛍光検出チャネル（例えば蛍光５４８の光路）に迷光が送り込まれることを防ぐことによって、このチャネルにおけるバックグラウンドノイズを減少させることができることである。このような設計の別の利点は、放物面反射装置５１０から蛍光検出用光検出器５７０（例えばＰＭＴ）までの距離を短縮することにより、より小型の検出器パッケージが得られると共に、蛍光検出チャネルの集光能力を向上させることができることである。更に、図５の実施形態により、ビームスプリッタの必要性をなくす（図３の実施形態と対照的に）ことができる。
【００４９】
更に、ミー散乱光の光路５４６及び／又はミー散乱検出装置（即ち、光検出器５７２と第２のレンズ５６２とビーム遮断器５４１）を、図５に示すように、放物面反射装置５１０の領域の外側に配置できるような態様に、軸間の斜角θを選択して実施することができる。その場合には、例えば反射装置の表面上にミー散乱チャネルの出射穴として必要である筈の追加の穴を放物面反射装置５１０に創出（例えば図４の実施形態に示すように）しなくてもよくなるので、反射装置の集光力を高めることができる。
【００５０】
図６に、本発明の第４の実施例に係る微生物検出器６００の略図を示す。微生物検出器６００は、流管６３０内の流体中の微生物から発せられる蛍光を集光するための放物面反射装置６１０を含む。反射装置６１０は、例えば光源６２０（例えばレーザービームであってよい）の出射と流管６３０の挿入とを可能にするために１個以上の穴６１１を含んでよい。流管６３０は流体流（例えば空気又は液体）を運ぶが、この流体流中に微生物が存在することがあって、この微生物は微生物検出器６００により検出される。
【００５１】
光源６２０は、鏡６８０により反射されると共に流管６３０の方へと導かれる光を生じる。流管６３０と光源６２０の交点６１３は、放物面反射装置６１０の焦点に配置される。放物面反射装置６１０と光源６２０との軸は互いに一致するが、逆方向を成す。即ち、光源６２０からの光は、鏡６８０と相互作用した後に、放物面反射装置６１０の頂点の方へと向かうと共にこの頂点を通過するが、放物面反射装置６１０の軸は頂点から外方に延在すると考えられる。
【００５２】
干渉フィルタ６５０は、蛍光６４８の光路内に、例えば放物面反射装置６１０の軸の方向に配置されてよい。干渉フィルタ６５０は励起光（即ち光源６２０からの光）の波長を遮断する。鏡６８０は、干渉フィルタ６５０の中心又は中心付近に配置されてよい。
【００５３】
第１のレンズ６６０は、流管６３０内の流体中の微生物から発せられると共に放物面反射装置６１０により反射される平行蛍光ビーム６４８を、第１の光検出器６７０上に集束させる。第１の光検出器６７０は、図６に示す光電子増倍管（ＰＭＴ）を含めて、蛍光測定用のいかなる種類の光検出器であってもよい。
【００５４】
流管６３０内の粒子によって散乱したミー散乱光６４６は、第２のレンズ６６２により第２の光検出器６７２上に集束する。第２の光検出器６７２は、図６に示すフォトダイオードを含めて、粒径測定用のいかなる種類の光検出器であってもよい。
【００５５】
図６の実施形態において、放物面反射装置６１０の幾何学形状が式（２）及び（５）により最適化され、最適な集光効率が達成される一方で、検出器のその他の構成要素を適切に設置することが可能になる。放物面反射装置６１０は、好ましくは、流管６３０と光源６２０の光路を好都合に構成できるような位置に配置された焦点６１３を有するように構成されるべきである。光源６２０と放物面反射装置６１０との軸を一致させつつこれらが逆方向を成すようにすることの利点は、光源６２０から蛍光検出チャネル（例えば蛍光５４８の光路）に迷光が送り込まれることを防ぐことによって、このチャネルにおけるバックグラウンドノイズを低減可能なことである。図６の実施形態によって得られる別の利点は、反射装置６１０の表面上に光源又はレーザービーム６２０の入射穴を切削することが不要になるので、反射装置の集光力を高められることにある。
【００５６】
なお、放物面反射装置６１０と光源６２０（例えばレーザービーム）の軸は一致しなくてもよい。例えば、本実施形態の利点を失わずに、レーザービームを放物面の軸に対して斜角を成して流管６３０の方へと導くことができる。
【００５７】
図７は、本発明の実施形態に係る微生物検出方法を示す流れ図７００である。流れ図のあらゆるプロセス記述又はブロックは、そのプロセスにおいて特定の論理的機能を実施するための１つ以上の命令を含むモジュール、セグメント、コード部分、又はステップを表すものと理解されるべきであり、当業者には理解されるように、含まれる機能によっては実質的に同時に逆の順序で実行されることを含めて、図面又は説明に示す順序とは異なる順序で実行され得るまた別の実施形態も、本発明の範囲内に含まれることに留意されたい。
【００５８】
ブロック７０２に示すように、流体流は流管を介して供給される。流管は放物面反射装置の焦点を通る。ブロック７０４において、光ビームが流管の方へと導かれる。光ビームは、放物面反射装置の焦点において流管と交差する。ブロック７０６において、光ビームとの相互作用時に流体中の微生物から発せられる蛍光が放物面反射装置により反射される。ブロック７０８において、発せられた蛍光を第１の検出器が検出する。ブロック７１０において、第２の検出器がミー散乱光を検出する。
【００５９】
本発明の上記の実施形態、特に、あらゆる「好適な」実施形態は、本発明の原理を明確に理解するために示された可能な実施形態の例にすぎないことを強調しておく。本発明の本質及び範囲から実質的に逸脱することなく、本発明の上記の実施形態に多くの変更及び改変を加えることができる。こうした全ての改変及び変更は、本発明及び本開示の範囲内に含まれ、添付の特許請求の範囲によって保護されることを意図している。
【図１】
0005787390.tif 000002
【図２】
0005787390.tif 000003
【図３】
0005787390.tif 000004
【図４】
0005787390.tif 000005
【図５】
0005787390.tif 000006
【図６】
0005787390.tif 000007
【図７】
0005787390.tif 000008